(57)【要約】本発明は、ジホスフェートまたはトリホスフェート部位模倣体および、任意で糖修飾および/または塩基修飾を含む、ヌクレオシド二リン酸模倣体およびヌクレオシド三リン酸模倣体に関する。薬学的に許容される塩、薬学的に許容されるプロドラッグ、または薬学的処方の形態の、本発明のヌクレオチド模倣体は抗ウイルス剤、抗菌剤、および抗癌剤として有用である。本発明は、ウイルス感染、微生物感染、および増殖障害の治療方法を提供する。また、本発明は、任意で他の薬学的に有効な薬剤と組み合わせた、本発明の化合物を含む薬学的組成物に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
D-またはL-ヌクレオチドであってもよい式（I）の化合物：
2005525358.tif 000079
［式中、
AはO、S、CY2、NHまたはNRであり；
R4’は-L-R5であり、
LはO、S、NH、NR、CY2O、CY2S、CY2NH、CY2、CY2CY2、CY2OCY2、CY2SCY2およびCY2NHCY2からなる群より選択され、ここでYはH、F、Cl、Br、アルキル、アルケニルおよびアルキニルからなる群より選択され、アルキル、アルケニルおよびアルキニルは、各々、選択的に、一つまたは複数のヘテロ原子を含有してもよく；
R5は式（II）：
2005525358.tif 000080
のジ-またはトリ-ホスフェート部位であり、
X2、X3およびX4は、独立して、O、S、Se、NHおよびNRからなる群より選択され；
X5およびX6は、独立して、O、S、Se、O2、CY2CO、CHOH、C（OH）2、CH2O、CH2CH2、CH2CHNH2、CH2CH2CHNH2、CY2OCY2、CY2、CRY、CY2CY2、CHR、CC、HC＝CH、NH、NR、NOH、NOR、NNH2およびNNHRからなる群より選択され；
X7、X8、X9およびX10は、独立して、H、F、OH、SH、NH2、NHOH、NHOR、NHNH2、NHNHR、CN、N3、-BH3M＋、R、OR、SR、SeH、SeR、NHR、NR2およびR＊からなる群より選択され、ここでR＊はプロドラッグ置換基であり；
ここでX7、X8、X9およびX10の少なくとも1つはR＊であり；
R＊は一つまたは複数のX7〜X10位置に結合することができ；
Rはアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アシルおよびアラルキルからなる群より選択され、各々は、選択的に、一つまたは複数のヘテロ原子を含有してもよく；
M＋はカチオンであり；
nは0または1であり；
R1、R2、R2’、R3、R3’およびR4は、独立して、H、F、Cl、Br、OH、SH、NH2、NHOH、N3、NO2、CHO、COOH、CN、CONH2、COOR、R、OR、SR、SSR、NHRおよびNR2からなる群より選択され；または、R2およびR2’は一緒になって、ならびにR3およびR3’は一緒になって、独立して、＝O、＝Sまたは＝J-Qであり、ここでJはN、CH、CF、CClまたはCBrであって、QはH、F、Cl、Br、N3またはRであり；
Dは式（III）または（IV）：
2005525358.tif 000081
のヌクレオチド塩基であり；
Z1、Z2およびZ3は、独立して、N、CHまたはC-G3であり；ならびに
G1、G2およびG3は、独立して、H、F、Cl、Br、I、OH、SH、NH2、NHOH、NHNH2、N3、NO、NO2、CHO、COOH、CN、CONH2、CONHR、C（S）NH2、C（S）NHR、COOR、R、OR、SR、NHRおよびNR2からなる群より選択され；G3のうちの2つが分子上に存在する場合、それらは相互に同一または異なってもよい］
【請求項２】
式（V）の請求項1記載の化合物：
2005525358.tif 000082
［式中、
LはO、S、NH、CY2、CY2CY2およびCH2CY2からなる群より選択され、ここでYはH、F、ClまたはBrであり；
X2、X3、およびX4はO、S、Seであり；
X5およびX6は、独立して、O、S、NH、NR、CY2からなる群より選択され；ならびに
X7、X8、X9およびX10は、独立して、H、F、OH、SH、NH2、NHOH、-BH3M＋、R、R＊、OR、SRおよびNHRからなる群より選択される」
【請求項３】
式（VI）の請求項1記載の化合物：
2005525358.tif 000083
［式中、
X0はO、SまたはNHであり；
X2、X3およびX4はOまたはSであり；
X5およびX6は、独立して、O、S、NH、NRおよびCY2からなる群より選択され；
X7、X8、X9およびX10は、独立して、H、F、OH、SH、NH2、NHOH、-BH3M＋、R、R＊、OR、SRおよびNHRからなる群より選択される］
【請求項４】
式（VII）の請求項1記載の化合物：
2005525358.tif 000084
［式中、
X2はOまたはSであり；
X6はNHまたはCY2であり；
X7はH、F、SH、NH2、NHOH、-BH3M＋、R、R＊、SRおよびNHRからなる群より選択され；ならびに
X9およびX10は、独立して、OH、SH、NH2、NHOH、-BH3M+、R、R＊、OR、SRおよびNHRからなる群より選択される］
【請求項５】
X2がOであり；および
X7がSH、NH2、-BH3M+、アルキル、アリール、アルキルアミノまたはアリールアミノである
請求項4記載の化合物。
【請求項６】
X2がOであり；および
X7がSH、NH2、-BH3M+、RおよびNHRからなる群より選択される
請求項4記載の化合物。
【請求項７】
式（VIII）の請求項1記載の化合物：
2005525358.tif 000085
［式中、X9およびX10は、独立して、OH、SH、アルキル、アルコキシ、アリールおよびアリールオキシからなる群より選択される］
【請求項８】
式（VIII）の請求項1記載の化合物：
2005525358.tif 000086
［式中、X9およびX10は、独立して、アシルチオエトキシ、アシルオキシメトキシ、1,2-O-ジアシルグリセロキシ、1,2-O-ジアルキルグリセロキシおよび1-O-アルキル-2-O-アシルグリセロキシからなる群より選択される］
【請求項９】
式（VIII）の請求項1記載の化合物：
2005525358.tif 000087
［式中、
X9およびX10は、独立して、OH、アルコキシ、アシルチオエトキシ、アシルオキシメトキシ、1,2-O-ジアシルグリセリルオキシおよび1-O-アルキル-2-O-アシルグリセリルオキシからなる群より選択され；ならびに
X6はNH、CHF、CCl2およびCF2からなる群より選択される］
【請求項１０】
X9およびX10の少なくとも1つが1,2-O-ジアルキルグリセリルオキシである請求項8記載の化合物。
【請求項１１】
式（IX）の請求項1記載の化合物：
2005525358.tif 000088
［式中、X9およびX10は、独立して、OH、アルコキシおよびアリールオキシからなる群より選択される］
【請求項１２】
式（IX）の請求項1記載の化合物：
2005525358.tif 000089
［式中、X9およびX10は、独立して、アシルチオエトキシ、アシルオキシメトキシ、1,2-O-ジアシルグリセリルオキシ、1,2-O-ジアルキルグリセリルオキシおよび1-O-アルキル-2-O-アシルグリセリルオキシからなる群より選択される］
【請求項１３】
式（X）の請求項1記載の化合物： 
2005525358.tif 000090
［式中、
R2はメチル、エチル、ビニル、エチニルまたはヒドロキシメチルであり；
R2’はH、F、OHもしくはOMe、アルキル、メトキシエトキシまたはNH2であり；
R3’はH、F、OHまたはN3であり；
G1はOHまたはNH2であり；
G2はHまたはMeであり；
X9およびX10は、独立して、OH、アルコキシおよびアリールオキシからなる群より選択される］
【請求項１４】
式（X）の請求項1記載の化合物：
2005525358.tif 000091
［式中、
R2’はH、F、OHもしくはOMe、アルキル、メトキシエトキシまたはNH2であり；
R3’はH、F、OHまたはN3であり；
G1はOHまたはNH2であり；
G2はHまたはMeであり；
X9およびX10は、独立して、アシルチオエトキシ、アシルオキシメトキシ、1,2-O-ジアシルグリセリルオキシ、1,2-O-ジアルキルグリセリルオキシおよび1-O-アルキル-2-O-アシルグリセリルオキシからなる群より選択される］
【請求項１５】
式（XI）の請求項1記載の化合物：
2005525358.tif 000092
［式中、
R2’はH、F、OHまたはOMeであり：
R3はメチル、エチル、ビニル、エチニルまたはヒドロキシメチルであり；
R3’はH、F、OHまたはN3であり；
G1はOHまたはNH2であり；
G2はHまたはMeであり；ならびに
X9およびX10は、独立して、OH、アルコキシ、およびアリールオキシからなる群より選択される］
【請求項１６】
式（XI）の請求項1記載の化合物：
2005525358.tif 000093
［式中、
R2’はH、F、OHまたはOMeであり；
R3はメチル、エチル、ビニル、エチニルまたはヒドロキシメチルであり；
R3’はH、F、OHまたはN3であり；
G1はOHまたはNH2であり；
G2はHまたはMeであり；ならびに
X9およびX10は、独立して、アシルチオエトキシ、アシルオキシメトキシ、1,2-O-ジアシルグリセリルオキシ、1,2-O-ジアルキルグリセリルオキシおよび1-O-アルキル-2-O-アシルグリセリルオキシからなる群より選択される］
【請求項１７】
式（XII）の請求項1記載の化合物：
2005525358.tif 000094
［式中、
R2’はH、F、OHまたはOMeであり；
R3’はH、F、OHまたはN3であり；
R4はメチル、エチル、ビニル、エチニルまたはヒドロキシメチルであり；
G1はOHまたはNH2であり：
G2はHまたはMeであり；ならびに
X9およびX10は、独立して、OH、アルコキシおよびアリールオキシからなる群より選択される］
【請求項１８】
式（XII）の請求項1記載の化合物：
2005525358.tif 000095
［式中、
R2’はH、F、OHまたはOMeであり；
R3’はH、F、OHまたはN3であり；
R4はメチル、エチル、ビニル、エチニルまたはヒドロキシメチルであり；
G1はOHまたはNH2であり；
G2はHまたはMeであり；ならびに
X9およびX10は、独立して、アシルチオエトキシ、アシルオキシメトキシ、1,2-O-ジアシルグリセリルオキシ、1,2-O-ジアルキルグリセリルオキシおよび1-O-アルキル-2-O-アシルグリセリルオキシからなる群より選択される］
【請求項１９】
式（XIII）の請求項1記載の化合物：
2005525358.tif 000096
［式中、
R2はメチル、エチル、ビニル、エチニル、ヒドロキシメチルまたはハロアルキルであり；
R2’はH、F、OH、OCH3またはメトキシエトキシであり；
R3’はH、F、OH、N3、NH2またはCH2OHであり；
G1はOH、NH2、Cl、OMe、 NH-シクロプロピル、SHまたはS-アルキルであり；
G2はH、NH2、NHR、F、Cl、BrまたはIであり；
Z1はNまたはCHであり；ならびに
X9およびX10は、独立して、OH、アルコキシおよびアリールオキシからなる群より選択される］
【請求項２０】
式（XIII）の請求項1記載の化合物：
2005525358.tif 000097
［式中、
R2はメチル、エチル、ビニル、エチニル、ヒドロキシメチルまたはハロアルキルであり；
R2’はH、F、OH、OCH3またはメトキシエトキシであり；
R3’はH、F、OH、N3、NH2またはCH2OHであり；
G1はOH、NH2、Cl、OMe、NH-シクロプロピル、SHまたはS-アルキルであり；
G2はH、NH2、NHR、F、Cl、BrまたはIであり；
Z1はNまたはCHであり；ならびに
X9およびX10は、独立して、アシルチオエトキシ、アシルオキシメトキシ、1,2-O-ジアシルグリセリルオキシ、1,2-O-ジアルキルグリセリルオキシおよび1-O-アルキル-2-O-アシルグリセリルオキシからなる群より選択される］
【請求項２１】
式（XIV）の請求項1記載の化合物：
2005525358.tif 000098
［式中、
R2’はH、F、OHまたはOCH3であり；
R3はメチル、エチル、ビニル、エチニルまたはヒドロキシメチルであり；
R3’はH、F、OHまたはN3であり；
G1はOHまたはNH2であり；
G2はHまたはNH2であり；
Z1はNまたはCHであり；ならびに
X9およびX10は、独立して、OH、アルコキシおよびアリールオキシからなる群より選択される］
【請求項２２】
式（XIV）の請求項1記載の化合物：
2005525358.tif 000099
［式中、
R2’はH、F、OHまたはOCH3であり；
R3はメチル、エチル、ビニル、エチニルまたはヒドロキシメチルであり；
R3’はH、F、OHまたはN3であり；
G1はOHまたはNH2であり；
G2はHまたはNH2であり；
Z1はNまたはCHであり；ならびに
X9およびX10は、独立して、アシルチオエトキシ、アシルオキシメトキシ、1,2-O-ジアシルグルセリルオキシ、1,2-O-ジアルキルグリセリルオキシおよび1-O-アルキル-2-O-アシルグリセリルオキシからなる群より選択される］
【請求項２３】
式（XV）の請求項1記載の化合物：
2005525358.tif 000100
［式中、
R2’はH、F、OHまたはOCH3であり；
R3’はH、F、OHまたはN3であり；
R4はメチル、エチル、ビニル、エチニルまたはヒドロキシメチルであり；
G1はOHまたはNH2であり；
G2はHまたはNH2であり；
Z1はNまたはCHであり；ならびに
X9およびX10は、独立して、OH、アルコキシおよびアリールオキシからなる群より選択される］
【請求項２４】
式（XV）の請求項1記載の化合物：
2005525358.tif 000101
［式中、
R2’はH、F、OHまたはOCH3であり；
R3’はH、F、OHまたはN3であり；
R4はメチル、エチル、ビニル、エチニルまたはヒドロキシメチルであり；
G1はOHまたはNH2であり；
G2はHまたはNH2であり；
Z1はNまたはCHであり；ならびに
X9およびX10は、独立してアシルチオエトキシ、アシルオキシメトキシ、1,2-O-ジアシルグリセリルオキシ、1,2-O-ジアルキルグリセリルオキシおよび1-O-アルキル-2-O-アシルグリセリルオキシからなる群より選択される］
【請求項２５】
式（XVI）の化合物：
2005525358.tif 000102
［式中、
X0、X5およびX6は、独立してO、S、NHおよびCY2からなる群より選択され；
YはH、F、Cl、Br、アルキル、アキケニルおよびアルキニルからなる群より選択され、ここでアルキル、アルケニルおよびアルキニルは、各々、選択的に一つまたは複数のへテロ原子を含有してもよく：
X2、X3およびX4は、独立して、O、SおよびSeからなる群より選択され；
X7、X8、X9およびX10は、独立して、H、F、OH、SH、NH2、NHOH、CN、N3、-BH3M+、R、R＊、OR、SR、SeH、SeR、NHRおよびNR2からなる群より選択され；
X7、X8、X9およびX10の少なくとも1つは、R＊であり；
Nuは天然ヌクレオシド、糖修飾ヌクレオシド、塩基修飾ヌクレオシド、ならびに糖および塩基双方で修飾したヌクレオシドからなる群より選択され；
NuはNuの糖部位のCH2を介してX0に結合しており；ならびに
Rはアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アシル、およびアラルキルからなる群より選択され、各々は、選択的に、一つまたは複数のへテロ原子を含有していてもよく；
但し、X7〜X10のうちの1つはR＊から選択され、ここでR＊はプロドラッグ置換基である］
【請求項２６】
Nuが、
アデノシン、
シチジン、
グアノシン、
ウリジン、
2’-デオキシアデノシン、
2’-デオキシシチジン、
2’-デオキシグアノシン、
チミジン、
イノシン、
9-（β-D-アラビノフラノシル）アデニン、
1-（β-D-アラビノフラノシル）シトシン、
9-（β-D-アラビノフラノシル）グアニン、
1-（β-D-アラビノフラノシル）ウラシル、
9-（β-D-アラビノフラノシル）ヒポキサンチン、
1-（β-D-アラビノフラノシル）チミン、
3’-アジド-3’-デオキシチミジン、
3’-アジド-2’,3’-ジデオキシウリジン、
3’-アジド-2’,3’-ジデオキシシチジン、
3’-アジド-2’,3’-ジデオキシアデノシン、
3’-アジド-2’,3’-ジデオキシグアノシン、
3’-アジド-2’,3’-ジデオキシイノシン、
3’-デオキシチミジン、
2’,3’-ジデオキシウリジン、
2’,3’-ジデオキシイノシン、
2’,3’-ジデオキシアデノシン、
2’,3’-ジデオキシシチジン、
2’,3’-ジデオキシグアノシン、
9-（2,3-ジデオキシ-1-β-D-リボフラノシル）-2,6-ジアミノプリン、
3’-デオキシ-2’,3’-ジデヒドロチミジン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシウリジン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシシチジン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシアデノシン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシグアノシン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシイノシン、
3-デアザアデノシン、
3-デアザグアノシン、
3-デアザイノシン、
7-デアザアデノシン、
7-デアザグアノシン、
7-デアザイノシン、
6-アザウリジン、
6-アザチミジン、
6-アザシチジン、
5-アザシチジン、
9-（β-D-リボフラノシル）-6-チオプリン、
6-メチルチオ-9-（β-D-リボフラノシル）プリン、
2-アミノ-9-（β-D-リボフラノシル）-6-チオプリン、
2-アミノ-6-メチルチオ-9-（β-D-リボフラノシル）プリン、
5-フルオロシチジン、
5-ヨードシチジン、
5-ブロモシチジン、
5-クロロシチジン、
5-フルオロウリジン、
5-ヨードウリジン、
5-ブロモウリジン、
5-クロロウリジン、
2’-C-メチルアデノシン、
2’-C-メチルシチジン、
2’-C-メチルグアノシン、
2’-C-メチルイノシン、
2’-C-メチルウリジン、
2’-C-メチルチミジン、
2’-デオキシ-2’-フルオロアデノシン、
2’-デオキシ-2’-フルオロシチジン、
2’-デオキシ-2’-フルオログアノシン、
2’-デオキシ-2’-フルオロウリジン、
2’-デオキシ-2’-フルオロイノシン、
2’-α-フルオロチミジン、
2’-デオキシ-2’-フルオロアラビノアデノシン、
2’-デオキシ-2’-フルオロアラビノシチジン、
2’-デオキシ-2’-フルオロアラビノグアノシン、
2’-デオキシ-2’-フルオロアラビノウリジン、
2’-デオキシ-2’-フルオロアラビノイノシン、
2’-β-フルオロチミジン、
2’-O-メチルアデノシン、
2’-O-メチルシチジン、
2’-O-メチルグアノシン、
2’-O-メチルイノシン、
2’-O-5-ジメチルウリジン、
2’-C-エチニルシチジン、
2’-C-エチニルグアノシン、
2’-C-エチニルウリジン、
2’-C-エチニルイノシン、
2’-C-エチニル-5-メチルウリジン、
3’-C-エチニルアデノシン、
3’-C-エチニルシチジン、
3’-C-エチニルグアノシン、
3’-C-エチニルウリジン、
3’-C-エチニルイノシン、
3’-C-エチニル-5-メチルウリジン、
3’-デオキシアデノシン、
3’-デオキシシチジン、
3’-デオキシグアノシン、
3’-デオキシウリジン、
3’-デオキシイノシン、
4’-C-エチニルアデノシン、
4’-C-エチニルシチジン、
4’-C-エチニルグアノシン、
4’-C-エチニルウリジン、
4’-C-エチニルイノシン、
4’-C-エチニルチミジン、
4’-C-メチルアデノシン、
4’-C-メチルシチジン、
4’-C-メチルグアノシン、
4’-C-メチルウリジン、
4’-C-メチルイノシン、
4’-C-メチルチミジン、
2’-C-メチル-7-デアザアデノシン、
2’-C-メチル-7-デアザグアノシン、
2’-C-メチル-3-デアザアデノシン、
2’-C-メチル-3-デアザグアノシン、
2’-O-メチル-7-デアザアデノシン、
2’-O-メチル-7-デアサグアノシン、
2’-O-メチル-3-デアザアデノシン、
2’-O-メチル-3-デアザグアノシン、
2’-C-メチル-6-アザウリジン、
2’-C-メチル-5-フルオロウリジン、
2’-C-メチル-5-フルオロシチジン、
2’-C-メチル-2-クロロアデノシン、
2’-デオキシ-7-デアザアデノシン、
2’-デオキシ-3-デアザアデノシン、
2’-デオキシ-7-デアサグアノシン、
2’-デオキシ-3-デアザグアノシン、
2’-デオキシ-6-アザウリジン、
2’-デオキシ-5-フルオロウリジン、
2’-デオキシ-5-フルオロシチジン、
2’-デオキシ-5-ヨードウリジン、
2’-デオキシ-5-ヨードシチジン、
2’-デオキシ-2-クロロアデノシン、
2’-デオキシ-2-フルオロアデノシン、
3’-デオキシ-7-デアザアデノシン、
3’-デオキシ-7-デアザグアノシン、
3’-デオキシ-3-デアザアデノシン、
3’-デオキシ-3-デアザグアノシン、
3’-デオキシ-6-アザウリジン、
3’-デオキシ-5-フルオロウリジン、
3’-デオキシ-5-ヨードウリジン、
3’-デオキシ-5-フルオロシチジン、
3’-デオキシ-2-クロロアデノシン、
2’,3’-ジデオキシ-7-デアザアデノシン、
2’,3’-ジデオキシ-7-デアザグアノシン、
2’,3’-ジデオキシ-3-デアザアデノシン、
2’,3’-ジデオキシ-3-デアザグアノシン、
2’,3’-ジデオキシ-6-アザウリジン、
2’,3’-ジデオキシ-5-フルオロウリジン、
2’,3’-ジデオキシ-5-フルオロウリジン、
2’,3’-ジデオキシ-5-ヨードシチジン、
2’,3’-ジデオキシ-2-クロロアデノシン、
2’,3’-ジデオキシ-β-L-シチジン、
2’,3’-ジデオキシ-β-L-アデノシン、
2’,3’-ジデオキシ-β-L-グアノシン、
3’-デオキシ-β-L-チミジン、
2’,3’-ジデオキシ-5-フルオロ-β-L-シチジン、
β-L-チミジン、
2’-デオキシ-β-L-シチジン、
2’-デオキシ-β-L-アデノシン、
2’-デオキシ-β-L-グアノシン、
2’-デオキシ-β-L-イノシン、
β-L-シチジン、
β-L-アデノシン、
β-L-グアノシン、
β-L-ウリジン、
β-L-イノシン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシ-β-L-シチジン、
2’,3’-ジデヒドロ-3’-ジデオキシ-β-L-チミジン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシ-β-L-アデノシン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシ-β-L-グアノシン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシ-β-L-5-フルオロシチジン、
2’-デオキシ-2’,2’-ジフルオロシチジン、
9-（β-D-アラビノフラノシル）-2-フルオロアデニン、
2’-デオキシ-2’（E）-フルオロメチレンシチジン、
2’-デオキシ-2’（Z）-フルオロメチレンシチジン、
（−）-2’,3’-ジデオキシ-3’-チアシチジン、
（＋）-2’,3’-ジデオキシ-3’-チアシチジン、
1-β-D-リボフラノシル-1,2,4-トリアゾール-3-カルボキシアミド、
1-β-L-リボフラノシル-1,2,4-トリアゾール-3-カルボキシアミド、
1-β-D-リボフラノシル-1,3-イミダゾリウム-5-オレート、
1-β-L-リボフラノシル-1,3-イミダゾリウム-5-オレート、
1-β-D-リボフラノシル-5-エチニルイミダゾール-4-カルボキシアミド、
1-β-L-リボフラノシル-5-エチニルイミダゾール-4-カルボキシアミド、
1-（2-デオキシ-2-フルオロ-β-D-アラビノフラノシル）-5-ヨードウラシル、
1-（2-デオキシ-2-フルオロ-β-D-アラビノフラノシル）-5-ヨードシトシン、
1-（2-デオキシ-2-フルオロ-β-L-アラビノフラノシル）-5-メチルウラシル、
1-β-D-アラビノフラノシル-E-5-（2-ブロモビニル）ウラシル、
E-5-（2-ブロモビニル）-2’-デオキシウリジン、
5-トリフルオロメチルチミジン、
1-β-D-アラビノフラノシル-5-プロピニルウラシル、
1-（2-デオキシ-2-フルオロ-1-β-D-アラビノフラノシル）-5-エチルウラシル、
2’,3’-ジデオキシ-3’-フルオログアノシン、
3’-デオキシ-3’-フルオロチミジン、
（±）-（1α,2β,3α）-9-［2,3-ビス（ヒドロキシメチル）-1-シクロブチル］アデニン、
（±）-（1α,2β,3α）-9-［2,3-ビス（ヒドロキシメチル）-1-シクロブチル］グアニン、
（±）-（1β,2α,3β）-9-［2,3-ビス（ヒドロキシメチル）-1-シクロブチル］グアニン、
（±）-（1β,2α,3β）-9-［2,3-ビス（ヒドロキシメチル）-1-シクロブチル］アデニン、
（1R,3S,4R）-9-（3-ヒドロキシ-4-ヒドロキシメチルシクロペント-1-イル）グアニン、
（1S,2R,4R）-9-（1-ヒドロキシ-2-ヒドロキシメチルシクロペント-4-イル）グアニン、
（2R,4R）-9-（2-ヒドロキシメチル-1,3-ジオキソラン-4-yl）-2,6-ジアミノプリン、
（2R,4R）-1-（2-ヒドロキシメチル-1,3-ジオキソラン-4-yl）シトシン、
（2R,4R）-9-（2-ヒドロキシメチル-1,3-ジオキソラン-4-yl）グアニン、
（2R,4R）-1-（2-ヒドロキシメチル-1,3-ジオキソラン-4-yl）-5-フルオロシトシン、
（1R,2S,4S）-9-（4-ヒドロキシ-3-ヒドロキシメチル-2-メチレンシクロペント-4-イル）グアニンおよび
（1S,3R,4S）-9-（3-ヒドロキシ-4-ヒドロキシメチル-5-メチレンシクロペント-1-イル）グアニン
からなる群より選択される請求項25記載の化合物。
【請求項２７】
式（XVII）の請求項25記載の化合物：
2005525358.tif 000103
［式中、
X0およびX6は、独立して、O、S、NH、CH2、CHCl、CHBr、CHF、CCl2、CBr2およびCF2からなる群より選択され；
X2はOまたはSであり；
X7はOH、F、SH、NH2、NHOH、-BH3M＋、R、SRおよびNHRからなる群より選択され；ならびに
X9およびX10は、独立して、OH、SH、NH2、NHOH、-BH3M＋、R、R＊、OR、SRおよびNHRからなる群より選択される］
【請求項２８】
式（XVII）の請求項25記載の化合物：
2005525358.tif 000104
［式中、
X0およびX6は、独立して、O、S、NH、CH2、CHCl、CHBr、CHF、CCl2、CBr2およびCF2からなる群より選択され；
X2はOまたはSであり；
X7はOH、F、SH、NH2、NHOH、-BH3M＋、R、SRおよびNHRからなる群より選択され；ならびに
X9およびX10は、独立して、アシルチオエトキシ、アシルオキシメトキシ、1,2-O-ジアシルグリセリルオキシ、1,2-O-ジアルキルグリセリルオキシ、および1-O-アルキル-2-O-アシルグリセリルオキシからなる群より選択される］
【請求項２９】
Nuが、
アデノシン、
シチジン、
グアノシン、
ウリジン、
2’-デオキシアデノシン、
2’-デオキシシチジン、
2’-デオキシグアノシン、
チミジン、
イノシン、
9-（β-D-アラビノフラノシル）アデニン、
1-（β-D-アラビノフラノシル）シトシン、
9-（β-D-アラビノフラノシル）グアニン、
1-（β-D-アラビノフラノシル）ウラシル、
9-（β-D-アラビノフラノシル）ヒポキサンチン、
1-（β-D-アラビノフラノシル）チミン、
3’-アジド-3’-デオキシチミジン、
3’-アジド-2’,3’-ジデオキシウリジン、
3’-アジド-2’,3’-ジデオキシシチジン、
3’-アジド-2’,3’-ジデオキシアデノシン、
3’-アジド-2’,3’-ジデオキシグアノシン、
3’-アジド-2’,3’-ジデオキシイノシン、
3’-デオキシチミジン、
2’,3’-ジデオキシウリジン、
2’,3’-ジデオキシイノシン、
2’,3’-ジデオキシアデノシン、
2’,3’-ジデオキシシチジン、
2’,3’-ジデオキシグアノシン、
9-（2,3-ジデオキシ-1-β-D-リボフラノシル）-2,6-ジアミノプリン、
3’-デオキシ-2’,3’-ジデヒドロチミジン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシウリジン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシシチジン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシアデノシン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシグアノシン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシイノシン、
3-デアザアデノシン、
3-デアザグアノシン、
3-デアザイノシン、
7-デアザアデノシン、
7-デアザグアノシン、
7-デアザイノシン、
6-アザウリジン、
6-アザチミジン、
6-アザシチジン、
5-アザシチジン、
9-（β-D-リボフラノシル）-6-チオプリン、
6-メチルチオ-9-（β-D-リボフラノシル）プリン、
2-アミノ-9-（β-D-リボフラノシル）-6-チオプリン、
2-アミノ-6-メチルチオ-9-（β-D-リボフラノシル）プリン、
5-フルオロシチジン、
5-ヨードシチジン、
5-ブロモシチジン、
5-クロロシチジン、
5-フルオロウリジン、
5-ヨードウリジン、
5-ブロモウリジン、
5-クロロウリジン、
2’-C-メチルアデノシン、
2’-C-メチルシチジン、
2’-C-メチルグアノシン、
2’-C-メチルイノシン、
2’-C-メチルウリジン、
2’-C-メチルチミジン、
2’-デオキシ-2’-フルオロアデノシン、
2’-デオキシ-2’-フルオロシチジン、
2’-デオキシ-2’-フルオログアノシン、
2’-デオキシ-2’-フルオロウリジン、
2’-デオキシ-2’-フルオロイノシン、
2’-α-フルオロチミジン、
2’-デオキシ-2’-フルオロアラビノアデノシン、
2’-デオキシ-2’-フルオロアラビノシチジン、
2’-デオキシ-2’-フルオロアラビノグアノシン、
2’-デオキシ-2’-フルオロアラビノウリジン、
2’-デオキシ-2’-フルオロアラビノイノシン、
2’-β-フルオロチミジン、
2’-O-メチルアデノシン、
2’-O-メチルシチジン、
2’-O-メチルグアノシン、
2’-O-メチルイノシン、
2’-O-5-ジメチルウリジン、
2’-C-エチニルシチジン、
2’-C-エチニルグアノシン、
2’-C-エチニルウリジン、
2’-C-エチニルイノシン、
2’-C-エチニル-5-メチルウリジン、
3’-C-エチニルアデノシン、
3’-C-エチニルシチジン、
3’-C-エチニルグアノシン、
3’-C-エチニルウリジン、
3’-C-エチニルイノシン、
3’-C-エチニル-5-メチルウリジン、
3’-デオキシアデノシン、
3’-デオキシシチジン、
3’-デオキシグアノシン、
3’-デオキシウリジン、
3’-デオキシイノシン、
4’-C-エチニルアデノシン、
4’-C-エチニルシチジン、
4’-C-エチニルグアノシン、
4’-C-エチニルウリジン、
4’-C-エチニルイノシン、
4’-C-エチニルチミジン、
4’-C-メチルアデノシン、
4’-C-メチルシチジン、
4’-C-メチルグアノシン、
4’-C-メチルウリジン、
4’-C-メチルイノシン、
4’-C-メチルチミジン、
2’-C-メチル-7-デアザアデノシン、
2’-C-メチル-7-デアザグアノシン、
2’-C-メチル-3-デアザアデノシン、
2’-C-メチル-3-デアザグアノシン、
2’-O-メチル-7-デアザアデノシン、
2’-O-メチル-7-デアサグアノシン、
2’-O-メチル-3-デアザアデノシン、
2’-O-メチル-3-デアザグアノシン、
2’-C-メチル-6-アザウリジン、
2’-C-メチル-5-フルオロウリジン、
2’-C-メチル-5-フルオロシチジン、
2’-C-メチル-2-クロロアデノシン、
2’-デオキシ-7-デアザアデノシン、
2’-デオキシ-3-デアザアデノシン、
2’-デオキシ-7-デアサグアノシン、
2’-デオキシ-3-デアザグアノシン、
2’-デオキシ-6-アザウリジン、
2’-デオキシ-5-フルオロウリジン、
2’-デオキシ-5-フルオロシチジン、
2’-デオキシ-5-ヨードウリジン、
2’-デオキシ-5-ヨードシチジン、
2’-デオキシ-2-クロロアデノシン、
2’-デオキシ-2-フルオロアデノシン、
3’-デオキシ-7-デアザアデノシン、
3’-デオキシ-7-デアザグアノシン、
3’-デオキシ-3-デアザアデノシン、
3’-デオキシ-3-デアザグアノシン、
3’-デオキシ-6-アザウリジン、
3’-デオキシ-5-フルオロウリジン、
3’-デオキシ-5-ヨードウリジン、
3’-デオキシ-5-フルオロシチジン、
3’-デオキシ-2-クロロアデノシン、
2’,3’-ジデオキシ-7-デアザアデノシン、
2’,3’-ジデオキシ-7-デアザグアノシン、
2’,3’-ジデオキシ-3-デアザアデノシン、
2’,3’-ジデオキシ-3-デアザグアノシン、
2’,3’-ジデオキシ-6-アザウリジン、
2’,3’-ジデオキシ-5-フルオロウリジン、
2’,3’-ジデオキシ-5-フルオロウリジン、
2’,3’-ジデオキシ-5-ヨードシチジン、
2’,3’-ジデオキシ-2-クロロアデノシン、
2’,3’-ジデオキシ-β-L-シチジン、
2’,3’-ジデオキシ-β-L-アデノシン、
2’,3’-ジデオキシ-β-L-グアノシン、
3’-デオキシ-β-L-チミジン、
2’,3’-ジデオキシ-5-フルオロ-β-L-シチジン、
β-L-チミジン、
2’-デオキシ-β-L-シチジン、
2’-デオキシ-β-L-アデノシン、
2’-デオキシ-β-L-グアノシン、
2’-デオキシ-β-L-イノシン、
β-L-シチジン、
β-L-アデノシン、
β-L-グアノシン、
β-L-ウリジン、
β-L-イノシン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシ-β-L-シチジン、
2’,3’-ジデヒドロ-3’-ジデオキシ-β-L-チミジン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシ-β-L-アデノシン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシ-β-L-グアノシン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシ-β-L-5-フルオロシチジン、
2’-デオキシ-2’,2’-ジフルオロシチジン、
9-（β-D-アラビノフラノシル）-2-フルオロアデニン、
2’-デオキシ-2’（E）-フルオロメチレンシチジン、
2’-デオキシ-2’（Z）-フルオロメチレンシチジン、
（−）-2’,3’-ジデオキシ-3’-チアシチジン、
（＋）-2’,3’-ジデオキシ-3’-チアシチジン、
1-β-D-リボフラノシル-1,2,4-トリアゾール-3-カルボキシアミド、
1-β-L-リボフラノシル-1,2,4-トリアゾール-3-カルボキシアミド、
1-β-D-リボフラノシル-1,3-イミダゾリウム-5-オレート、
1-β-L-リボフラノシル-1,3-イミダゾリウム-5-オレート、
1-β-D-リボフラノシル-5-エチニルイミダゾール-4-カルボキシアミド、
1-β-L-リボフラノシル-5-エチニルイミダゾール-4-カルボキシアミド、
1-（2-デオキシ-2-フルオロ-β-D-アラビノフラノシル）-5-ヨードウラシル、
1-（2-デオキシ-2-フルオロ-β-D-アラビノフラノシル）-5-ヨードシトシン、
1-（2-デオキシ-2-フルオロ-β-L-アラビノフラノシル）-5-メチルウラシル、
1-β-D-アラビノフラノシル-E-5-（2-ブロモビニル）ウラシル、
E-5-（2-ブロモビニル）-2’-デオキシウリジン、
5-トリフルオロメチルチミジン、
1-β-D-アラビノフラノシル-5-プロピニルウラシル、
1-（2-デオキシ-2-フルオロ-1-β-D-アラビノフラノシル）-5-エチルウラシル、
2’,3’-ジデオキシ-3’-フルオログアノシン、
3’-デオキシ-3’-フルオロチミジン、
（±）-（1α,2β,3α）-9-［2,3-ビス（ヒドロキシメチル）-1-シクロブチル］アデニン、
（±）-（1α,2β,3α）-9-［2,3-ビス（ヒドロキシメチル）-1-シクロブチル］グアニン、
（±）-（1β,2α,3β）-9-［2,3-ビス（ヒドロキシメチル）-1-シクロブチル］グアニン、
（±）-（1β,2α,3β）-9-［2,3-ビス（ヒドロキシメチル）-1-シクロブチル］アデニン、
（1R,3S,4R）-9-（3-ヒドロキシ-4-ヒドロキシメチルシクロペント-1-イル）グアニン、
（1S,2R,4R）-9-（1-ヒドロキシ-2-ヒドロキシメチルシクロペント-4-イル）グアニン、
（2R,4R）-9-（2-ヒドロキシメチル-1,3-ジオキソラン-4-yl）-2,6-ジアミノプリン、
（2R,4R）-1-（2-ヒドロキシメチル-1,3-ジオキソラン-4-yl）シトシン、
（2R,4R）-9-（2-ヒドロキシメチル-1,3-ジオキソラン-4-yl）グアニン、
（2R,4R）-1-（2-ヒドロキシメチル-1,3-ジオキソラン-4-yl）-5-フルオロシトシン、
（1R,2S,4S）-9-（4-ヒドロキシ-3-ヒドロキシメチル-2-メチレンシクロペント-4-イル）グアニンおよび
（1S,3R,4S）-9-（3-ヒドロキシ-4-ヒドロキシメチル-5-メチレンシクロペント-1-イル）グアニン
からなる群より選択される請求項27記載の化合物。
【請求項３０】
式（XVIII）の請求項25記載の化合物：
2005525358.tif 000105
［式中、
X6はNH、CH2、CHCl、CHBr、CHF、CCl2、CBr2およびCF2からなる群より選択され；ならびに
X9およびX10は、独立して、OH、SH、アルキル、アルコキシ、アリールおよびアリールオキシからなる群より選択される］
【請求項３１】
式（XVIII）の請求項25記載の化合物：
2005525358.tif 000106
［式中、X6はNH、CH2、CHCl、CHBr、CHF、CCl2、CBr2およびCF2からなる群より選択され；ならびに
X9およびX10は、独立して、アシルチオエトキシ、アシルオキシメトキシ、1,2-O-ジアシルグリセロキシ、1,2-O-ジアルキルグリセロキシ、および1-O-アルキル-2-O-アシルグリセロキシからなる群より選択される］
【請求項３２】
Nuが、
アデノシン、
シチジン、
グアノシン、
ウリジン、
2’-デオキシアデノシン、
2’-デオキシシチジン、
2’-デオキシグアノシン、
チミジン、
イノシン、
9-（β-D-アラビノフラノシル）アデニン、
1-（β-D-アラビノフラノシル）シトシン、
9-（β-D-アラビノフラノシル）グアニン、
1-（β-D-アラビノフラノシル）ウラシル、
9-（β-D-アラビノフラノシル）ヒポキサンチン、
1-（β-D-アラビノフラノシル）チミン、
3’-アジド-3’-デオキシチミジン、
3’-アジド-2’,3’-ジデオキシウリジン、
3’-アジド-2’,3’-ジデオキシシチジン、
3’-アジド-2’,3’-ジデオキシアデノシン、
3’-アジド-2’,3’-ジデオキシグアノシン、
3’-アジド-2’,3’-ジデオキシイノシン、
3’-デオキシチミジン、
2’,3’-ジデオキシウリジン、
2’,3’-ジデオキシイノシン、
2’,3’-ジデオキシアデノシン、
2’,3’-ジデオキシシチジン、
2’,3’-ジデオキシグアノシン、
9-（2,3-ジデオキシ-1-β-D-リボフラノシル）-2,6-ジアミノプリン、
3’-デオキシ-2’,3’-ジデヒドロチミジン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシウリジン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシシチジン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシアデノシン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシグアノシン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシイノシン、
3-デアザアデノシン、
3-デアザグアノシン、
3-デアザイノシン、
7-デアザアデノシン、
7-デアザグアノシン、
7-デアザイノシン、
6-アザウリジン、
6-アザチミジン、
6-アザシチジン、
5-アザシチジン、
9-（β-D-リボフラノシル）-6-チオプリン、
6-メチルチオ-9-（β-D-リボフラノシル）プリン、
2-アミノ-9-（β-D-リボフラノシル）-6-チオプリン、
2-アミノ-6-メチルチオ-9-（β-D-リボフラノシル）プリン、
5-フルオロシチジン、
5-ヨードシチジン、
5-ブロモシチジン、
5-クロロシチジン、
5-フルオロウリジン、
5-ヨードウリジン、
5-ブロモウリジン、
5-クロロウリジン、
2’-C-メチルアデノシン、
2’-C-メチルシチジン、
2’-C-メチルグアノシン、
2’-C-メチルイノシン、
2’-C-メチルウリジン、
2’-C-メチルチミジン、
2’-デオキシ-2’-フルオロアデノシン、
2’-デオキシ-2’-フルオロシチジン、
2’-デオキシ-2’-フルオログアノシン、
2’-デオキシ-2’-フルオロウリジン、
2’-デオキシ-2’-フルオロイノシン、
2’-α-フルオロチミジン、
2’-デオキシ-2’-フルオロアラビノアデノシン、
2’-デオキシ-2’-フルオロアラビノシチジン、
2’-デオキシ-2’-フルオロアラビノグアノシン、
2’-デオキシ-2’-フルオロアラビノウリジン、
2’-デオキシ-2’-フルオロアラビノイノシン、
2’-β-フルオロチミジン、
2’-O-メチルアデノシン、
2’-O-メチルシチジン、
2’-O-メチルグアノシン、
2’-O-メチルイノシン、
2’-O-5-ジメチルウリジン、
2’-C-エチニルシチジン、
2’-C-エチニルグアノシン、
2’-C-エチニルウリジン、
2’-C-エチニルイノシン、
2’-C-エチニル-5-メチルウリジン、
3’-C-エチニルアデノシン、
3’-C-エチニルシチジン、
3’-C-エチニルグアノシン、
3’-C-エチニルウリジン、
3’-C-エチニルイノシン、
3’-C-エチニル-5-メチルウリジン、
3’-デオキシアデノシン、
3’-デオキシシチジン、
3’-デオキシグアノシン、
3’-デオキシウリジン、
3’-デオキシイノシン、
4’-C-エチニルアデノシン、
4’-C-エチニルシチジン、
4’-C-エチニルグアノシン、
4’-C-エチニルウリジン、
4’-C-エチニルイノシン、
4’-C-エチニルチミジン、
4’-C-メチルアデノシン、
4’-C-メチルシチジン、
4’-C-メチルグアノシン、
4’-C-メチルウリジン、
4’-C-メチルイノシン、
4’-C-メチルチミジン、
2’-C-メチル-7-デアザアデノシン、
2’-C-メチル-7-デアザグアノシン、
2’-C-メチル-3-デアザアデノシン、
2’-C-メチル-3-デアザグアノシン、
2’-O-メチル-7-デアザアデノシン、
2’-O-メチル-7-デアサグアノシン、
2’-O-メチル-3-デアザアデノシン、
2’-O-メチル-3-デアザグアノシン、
2’-C-メチル-6-アザウリジン、
2’-C-メチル-5-フルオロウリジン、
2’-C-メチル-5-フルオロシチジン、
2’-C-メチル-2-クロロアデノシン、
2’-デオキシ-7-デアザアデノシン、
2’-デオキシ-3-デアザアデノシン、
2’-デオキシ-7-デアサグアノシン、
2’-デオキシ-3-デアザグアノシン、
2’-デオキシ-6-アザウリジン、
2’-デオキシ-5-フルオロウリジン、
2’-デオキシ-5-フルオロシチジン、
2’-デオキシ-5-ヨードウリジン、
2’-デオキシ-5-ヨードシチジン、
2’-デオキシ-2-クロロアデノシン、
2’-デオキシ-2-フルオロアデノシン、
3’-デオキシ-7-デアザアデノシン、
3’-デオキシ-7-デアザグアノシン、
3’-デオキシ-3-デアザアデノシン、
3’-デオキシ-3-デアザグアノシン、
3’-デオキシ-6-アザウリジン、
3’-デオキシ-5-フルオロウリジン、
3’-デオキシ-5-ヨードウリジン、
3’-デオキシ-5-フルオロシチジン、
3’-デオキシ-2-クロロアデノシン、
2’,3’-ジデオキシ-7-デアザアデノシン、
2’,3’-ジデオキシ-7-デアザグアノシン、
2’,3’-ジデオキシ-3-デアザアデノシン、
2’,3’-ジデオキシ-3-デアザグアノシン、
2’,3’-ジデオキシ-6-アザウリジン、
2’,3’-ジデオキシ-5-フルオロウリジン、
2’,3’-ジデオキシ-5-フルオロウリジン、
2’,3’-ジデオキシ-5-ヨードシチジン、
2’,3’-ジデオキシ-2-クロロアデノシン、
2’,3’-ジデオキシ-β-L-シチジン、
2’,3’-ジデオキシ-β-L-アデノシン、
2’,3’-ジデオキシ-β-L-グアノシン、
3’-デオキシ-β-L-チミジン、
2’,3’-ジデオキシ-5-フルオロ-β-L-シチジン、
β-L-チミジン、
2’-デオキシ-β-L-シチジン、
2’-デオキシ-β-L-アデノシン、
2’-デオキシ-β-L-グアノシン、
2’-デオキシ-β-L-イノシン、
β-L-シチジン、
β-L-アデノシン、
β-L-グアノシン、
β-L-ウリジン、
β-L-イノシン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシ-β-L-シチジン、
2’,3’-ジデヒドロ-3’-ジデオキシ-β-L-チミジン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシ-β-L-アデノシン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシ-β-L-グアノシン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシ-β-L-5-フルオロシチジン、
2’-デオキシ-2’,2’-ジフルオロシチジン、
9-（β-D-アラビノフラノシル）-2-フルオロアデニン、
2’-デオキシ-2’（E）-フルオロメチレンシチジン、
2’-デオキシ-2’（Z）-フルオロメチレンシチジン、
（−）-2’,3’-ジデオキシ-3’-チアシチジン、
（＋）-2’,3’-ジデオキシ-3’-チアシチジン、
1-β-D-リボフラノシル-1,2,4-トリアゾール-3-カルボキシアミド、
1-β-L-リボフラノシル-1,2,4-トリアゾール-3-カルボキシアミド、
1-β-D-リボフラノシル-1,3-イミダゾリウム-5-オレート、
1-β-L-リボフラノシル-1,3-イミダゾリウム-5-オレート、
1-β-D-リボフラノシル-5-エチニルイミダゾール-4-カルボキシアミド、
1-β-L-リボフラノシル-5-エチニルイミダゾール-4-カルボキシアミド、
1-（2-デオキシ-2-フルオロ-β-D-アラビノフラノシル）-5-ヨードウラシル、
1-（2-デオキシ-2-フルオロ-β-D-アラビノフラノシル）-5-ヨードシトシン、
1-（2-デオキシ-2-フルオロ-β-L-アラビノフラノシル）-5-メチルウラシル、
1-β-D-アラビノフラノシル-E-5-（2-ブロモビニル）ウラシル、
E-5-（2-ブロモビニル）-2’-デオキシウリジン、
5-トリフルオロメチルチミジン、
1-β-D-アラビノフラノシル-5-プロピニルウラシル、
1-（2-デオキシ-2-フルオロ-1-β-D-アラビノフラノシル）-5-エチルウラシル、
2’,3’-ジデオキシ-3’-フルオログアノシン、
3’-デオキシ-3’-フルオロチミジン、
（±）-（1α,2β,3α）-9-［2,3-ビス（ヒドロキシメチル）-1-シクロブチル］アデニン、
（±）-（1α,2β,3α）-9-［2,3-ビス（ヒドロキシメチル）-1-シクロブチル］グアニン、
（±）-（1β,2α,3β）-9-［2,3-ビス（ヒドロキシメチル）-1-シクロブチル］グアニン、
（±）-（1β,2α,3β）-9-［2,3-ビス（ヒドロキシメチル）-1-シクロブチル］アデニン、
（1R,3S,4R）-9-（3-ヒドロキシ-4-ヒドロキシメチルシクロペント-1-イル）グアニン、
（1S,2R,4R）-9-（1-ヒドロキシ-2-ヒドロキシメチルシクロペント-4-イル）グアニン、
（2R,4R）-9-（2-ヒドロキシメチル-1,3-ジオキソラン-4-yl）-2,6-ジアミノプリン、
（2R,4R）-1-（2-ヒドロキシメチル-1,3-ジオキソラン-4-yl）シトシン、
（2R,4R）-9-（2-ヒドロキシメチル-1,3-ジオキソラン-4-yl）グアニン、
（2R,4R）-1-（2-ヒドロキシメチル-1,3-ジオキソラン-4-yl）-5-フルオロシトシン、
（1R,2S,4S）-9-（4-ヒドロキシ-3-ヒドロキシメチル-2-メチレンシクロペント-4-イル）グアニンおよび
（1S,3R,4S）-9-（3-ヒドロキシ-4-ヒドロキシメチル-5-メチレンシクロペント-1-イル）グアニン
からなる群より選択される請求項31記載の化合物。
【請求項３３】
式（XIX）の請求項25記載の化合物：
2005525358.tif 000107
［式中、X9およびX10は、独立して、OH、SH、アルキル、アルコキシ、アリールおよびアリールオキシからなる群より選択される］
【請求項３４】
式（XIX）の請求項25記載の化合物：
2005525358.tif 000108
［式中、X9およびX10は、独立して、アシルチオエトキシ、アシルオキシメトキシ、1,2-O-ジアシルグリセリルオキシ、1,2-O-ジアルキルグリセリルオキシ、および1-O-アルキル-2-O-アシルグリセリルオキシからなる群より選択される］
【請求項３５】
D-またはL-ヌクレオチドであってよい式（I）の化合物：
2005525358.tif 000109
［式中、
AはO、S、CY2、NHまたはNRであり；
R4’は-L-R5であり、
LはO、S、NH、NR、CY2O、CY2S、CY2NH、CY2、CY2CY2、CY2OCY2、CY2SCY2およびCY2NHCY2、CY2SCY2からなる群より選択され、ここでYはH、F、Cl、Br、アルキル、アルケニル、およびアルキニルからなる群から選択され、アルキル、アルケニル、およびアルキニルは、選択的に、一つまたは複数のへテロ原子を含有してもよく；
R5は式（II）：
2005525358.tif 000110
のジ-またはトリ-ホスフェート部位であり；
NはOまたは1であり；
X2、X3およびX4は、独立して、O、S、Se、NHおよびNRからなる群より選択され；
X5およびX6は、独立して、O、S、Se、O2、CY2CO、CHOH、C（OH）2、CH2O、CH2CH2、CH2CHNH2、CH2CH2CHNH2、CY2OCY2、CY2、CRY、CY2CY2、CHR、CC、HC＝CH、NH、NR、NOH、NOR、NNH2およびNNHRからなる群より選択され；
X7、X8、X9およびX10は、独立して、H、F、OH、SH、NH2、NHOH、NHOR、NHNH2、NHNHR、CN、N3、-BH3M＋、R、OR、SR、SeH、SeR、NHRおよびNR2からなる群より選択され；
ここでnは0または1であり；
R1、R2、R2’、R3、R3’およびR4は、独立して、H、F、Cl、Br、OH、SH、NH2、NHOH、N3、NO2、CHO、COOH、CN、CONH2、COOR、R、OR、SR、SSR、NHRおよびNR2からなる群より選択され；または、R2およびR2’は一緒になって、およびR3およびR3’は一緒になって独立して、＝O、＝S、または＝J-Qであり、ここでJはN、CH、CF、CClまたはCBrであって、QはH、F、Cl、Br、N3またはRであり；
Dは式（III）または（IV）：
2005525358.tif 000111
のヌクレオシド塩基であり；
Z1、Z2およびZ3は、独立して、N、CHまたはC-G3であり；
G1、G2およびG3は、独立して、H、F、Cl、Br、I、OH、SH、NH2、NHOH、NHNH2、N3、NO、NO2、CHO、COOH、CN、CONH2、CONHR、C（S）NH2、C（S）NHR、COOR、R、OR、SR、NHR、およびNR2からなる群より選択され；G3のうちの2つが分子上に存在する場合、それらは相互に同一または異なってよく；ならびに
Rはアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アシルおよびアラルキルからなる群より選択され、各々、選択的に、一つまたは複数のヘテロ原子を含有してよく；
但し、
（1）LがCH2Oであって、Oを介してPに結合している場合、もしX7〜X10のうち一つまたは複数がSH、F、SR、R、OR、NH2、NHRおよびNR2から選択されれば、X2〜X6、および残りのX7〜X10は全てがOまたはOHというわけではなく；
（2）LがCH2Oであって、Oを介してPに結合し、かつX7〜X10がOHまたはORである場合、全てのX2〜X4がOというわけではなく；
（3）LがCH2Oであって、Oを介してPに結合する場合、もしX2〜X4のうちの1つがS、NH、NR、NHから選択されれば、X5〜X10は全てがOまたはOHというわけではなく、X5〜X10のうちの1つは、X5〜X10の残りがOまたはOHである場合には、Sとはなり得ず；
（4）LがCH2Oであって、Oを介してPに結合する場合、もし以下のX6-X5の対がCY2-O、CH2O-O、CH2-S、CHMe-O、CHCH2NH2、CO-O、CHOH-O、C（OH）2-O、NH-O、NH-S、NMe-O、NMe-NMe、Nアリール-O、NH-NH、CH2-CH2、CF2-CF2、OCH2O-O、O-CH2、O-CF2、O-NH、O-NMe、O-S、S-O、OO-O、O-SS、CC-O、C＝C-O、またはO2-Oであれば、X2〜X4、およびX7〜X10は全てがOまたはOHというわけではなく、X7〜X10は、X2〜X4、および残りのX7〜X10がOまたはOHである場合には、一つまたは複数のFまたはSEtではなく；
（5）LがCH2Oであって、Oを介してPに結合する場合、もしX2＝P-X7がO＝P（O）2BH3-、O＝P（O）2NHR、S＝P（O）2BH3、Se＝P（O）2OH、S＝P（O）2SH、S＝P（O）2NHRおよびSe＝P（O）2SHから選択されれば、X3〜X6、X8〜X10の少なくとも1つはOまたはOHではなく；
（6）LがCH2OまたはCH2Sであって、各々、OまたはSを介してPに結合している場合、X2〜X10のうちの一つまたは複数はSとはなり得ず；
（7）LがCH2Oであって、Oを介してPに結合し、かつX7〜X10のうちの1つがSHである場合、X2〜X6、および残りのX7〜X10は全てがOまたはOHというわけではなく；
（8）LがCH2Oであって、Oを介してPに結合し、かつもし以下のX6-X5対がCH2-O、O-CH2、NH-O、またはCH2-CH2であれば、X2〜X4の少なくとも1つはOまたはSではなく；またはX7〜X10の少なくとも1つはO、SまたはMeではなく；ならびに
（9）LがCH2Oであって、CH2を介してPに結合し、かつもしAがOまたはCH2であって、X10がアルキル、アリール、アルコキシ、アリールオキシ、アルキルアミノ、アリールアミノ、またはグリセロールオキシであれば、X6はメチレンおよび置換メチレンではない］
【請求項３６】
式（VI）の請求項35記載の化合物：
2005525358.tif 000112
［式中、
X0はO、SまたはNHであり；
X2、X3およびX4はOまたはSであり；
X5およびX6は、独立して、O、S、NH、NR、およびCY2からなる群より選択され；
X7、X8、X9およびX10は、独立して、H、F、OH、SH、NH2、NHOH、-BH3M＋、R、OR、SRおよびNHRからなる群より選択される］
【請求項３７】
式（VII）の請求項35記載の化合物：
2005525358.tif 000113
［式中、
X2はOまたはSであり；
X6はNHまたはCY2であり；
X7はH、F、SH、NH2、NHOH、-BH3M＋、R、SRおよびNHRからなる群より選択され；ならびに
X9およびX10は、独立して、OH、SH、NH2、NHOH、-BH3M＋、R、OR、SRおよびNHRからなる群より選択される］
【請求項３８】
X2がOであって；ならびに
X7がSH、NH2、-BH3M＋、アルキル、アリール、アルキルアミノ、およびアリールアミノからなる群より選択される請求項37記載の化合物。
【請求項３９】
X2がOであって、
X7がSH、NH2、-BH3M＋、RおよびNHRからなる群より選択される
請求項37記載の化合物。
【請求項４０】
式（VIII）の請求項35記載の化合物：
2005525358.tif 000114
［式中、X9およびX10は、独立して、OH、SH、アルキル、アルコキシ、アリールおよびアリールオキシからなる群より選択される］
【請求項４１】
式（IX）の請求項35記載の化合物：
2005525358.tif 000115
［式中、X9およびX10は、独立して、OH、アルコキシおよびアリールオキシからなる群より選択される］
【請求項４２】
式（X）の請求項35記載の化合物：
2005525358.tif 000116
［式中、
R2はメチル、エチル、ビニル、エチニルまたはヒドロキシメチルであり；
R2’はH、F、OH、またはOMe、アルキル、メトキシエトキシまたはNH2であり；
R3’はH、F、OHまたはN3であり；
G1はOHまたはNH2であり；
G2はHまたはMeであり；ならびに
X9およびX10は、独立して、OH、アルコキシおよびアリールオキシからなる群より選択される］
【請求項４３】
式（XI）の請求項35記載の化合物：
2005525358.tif 000117
［式中、
R2’はH、F、OH、またはOMeであり；
R3はメチル、エチル、ビニル、エチニル、またはヒドロキシメチルであり；
R3’はH、F、OHまたはN3であり；
G1はOHまたはNH2であり；
G2はHまたはMeであり；ならびに
X9およびX10は、独立して、OH、アルコキシ、およびアリールオキシからなる群より選択される］
【請求項４４】
式（XII）の請求項35記載の化合物：
2005525358.tif 000118
［式中、
R2’はH、F、OHまたはOMeであり；
R3’はH、F、OHまたはN3であり；
R4はメチル、エチル、ビニル、エチニル、またはヒドロキシメチルであり；
G1はOHまたはNH2であり；
G2はHまたはMeであり；ならびに
X9およびX10は、独立して、OH、アルコキシ、およびアリールオキシからなる群より選択される］
【請求項４５】
式（XIII）の請求項35記載の化合物：
2005525358.tif 000119
［式中、
R2はメチル、エチル、ビニル、エチニル、ヒドロキシメチル、またはハロアルキルであり；
R2’は、H、F、OH、OCH3、またはメトキシエトキシであり；
R3’はH、F、OH、N3、NH2、またはCH2OHであり；
G1はOH、NH2、Cl、OMe、NH-シクロプロピル、SH、またはS-アルキルであり；
G2はH、NH2、NHR、F、Cl、BrまたはIであり；
Z1はNまたはCHであり；ならびに
X9およびX10は、独立して、OH、アルコキシおよびアリールオキシからなる群より選択される］
【請求項４６】
式（XIV）の請求項35記載の化合物：
2005525358.tif 000120
［式中、
R2’はH、F、OHまたはOCH3であり；
R3はメチル、エチル、ビニル、エチニル、またはヒドロキシメチルであり；
R3’はH、F、OHまたはN3であり；
G1はOHまたはNH2であり；
G2はHまたはNH2であり；
Z1はNまたはCHであり；ならびに
X9およびX10は、独立して、OH、アルコキシおよびアリールオキシからなる群より選択される］
【請求項４７】
式（XV）の請求項35記載の化合物：
2005525358.tif 000121
［式中、
R2’はH、F、OHまたはOCH3であり；
R3’はH、F、OHまたはN3であり；
R4はメチル、エチル、ビニル、エチニルまたはヒドロキシメチルであり；
G1はOHまたはNH2であり；
G2はHまたはNH2であり；
Z1はNまたはCHであり；ならびに
X9およびX10は、独立して、OH、アルコキシおよびアリールオキシからなる群より選択される］
【請求項４８】
式（XVI）の化合物：
2005525358.tif 000122
［式中、
X0、X5およびX6は、独立して、O、S、NH、およびCY2からなる群より選択され；
X2、X3、およびX4は、各々、独立して、O、SまたはSeであり；
X7、X8、X9およびX10は、独立して、H、F、OH、SH、NH2、NHOH、CN、N3、-BH3M＋、R、OR、SR、SeH、SeR、NHRおよびNR2からなる群より選択され；
ここでnは0または1であり；
Nuは天然ヌクレオシド、糖修飾ヌクレオシド、塩基修飾ヌクレオシド、および糖および塩基の双方で修飾されたヌクレオシドからなる群より選択され；
Nuは、Nuの糖部位のCH2を介してX0に結合し；ならびに
Rはアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アシル、およびアラルキルからなる群より選択され、各々は、選択的に、一つまたは複数のヘテロ原子を含有してもよく；
但し、
（1）LがCH2Oであって、Oを介してPに結合する場合、もしR7〜X10のうちの一つまたは複数がSH、F、SR、R、OR、NH2、NHR、およびNR2から選択されれば、X2〜X6および残りのX7〜X10は全てがOまたはOHであるわけではなく；
（2）LがCH2Oであって、Oを介してPに結合し、かつX7〜X10OHまたはORである場合、全てのX2〜X4がOであるわけではなく；
（3）LがCH2Oであって、Oを介してPに結合する場合、もしX2〜X4のうちの1つがS、NH、NR、NHから選択されれば、X5〜X10は全てがOまたはOHであるわけではなく、X5〜X10のうちの1つは、残りのX5〜X10がOまたはOHである場合には、Sにはなり得ず；
（4）LがCH2Oであって、Oを介してPに結合する場合、もし以下のX6-X5対がCY2-O、CH2O-O、CH2-S、CHMe-O、CHCH2NH2、CO-O、CHOH-O、C（OH）2-O、NH-O、NH-S、NMe-O、NMe-NMe、Nアリール-O、NH-NH、CH2-CH2、CF2-CF2、OCH2O-O、O-CH2、O-CF2、O-NH、O-NMe、O-S、S-O、OO-O、O-SS、CC-O、C＝C-O、またはO2-Oであれば、X2〜X4、およびX7〜X10は全てがOまたはOHであるわけではなく、X7〜X10は、X2〜X4、および残りのX7〜X10がOまたはOHである場合、一つまたは複数のFまたはSEtではなく；
（5）LがCH2Oであって、Oを介してPに結合する場合、もしX2＝P-X7がO＝P（O）2BH3-、O＝P（O）2NHR、S＝P（O）2BH3、Se＝P（O）2OH、S＝P（O）2SH、S＝P（O）2NHR、およびSe＝P（O）2SHから選択されれば、X3〜X6、X8〜X10の少なくとも1つはOまたはOHではなく；
（6）LがCH2OまたはCH2Sであって、各々、OまたはSを介してPに結合する場合、X2〜X10のうちの一つまたは複数はSにはなり得ず；
（7）LがCH2Oであって、Oを介してPに結合し、かつX7〜X10のうちの1つがSHである場合、X2〜X6、および残りのX7〜X10は全てがOまたはOHというわけではなく；
（8）LがCH2Oであって、Oを介してPに結合する場合、もし以下のX6-X5の対がCH2-O、O-CH2、NH-O、またはCH2-CH2であれば、X2〜X4の少なくとも1つはOまたはSではなく；またはX7〜X10の少なくとも1つはO、SまたはMeではなく；ならびに
（9）LがCH2Oであって、CH2を介してPに結合する場合、もしAがOまたはCH2であって、X10がアルキル、アリール、アルコキシ、アリールオキシ、アルキルアミノ、アリールアミノ、またはグリセロールオキシであれば、X6はメチレンおよび置換メチレンではない］
【請求項４９】
Nuが、
アデノシン、
シチジン、
グアノシン、
ウリジン、
2’-デオキシアデノシン、
2’-デオキシシチジン、
2’-デオキシグアノシン、
チミジン、
イノシン、
9-（β-D-アラビノフラノシル）アデニン、
1-（β-D-アラビノフラノシル）シトシン、
9-（β-D-アラビノフラノシル）グアニン、
1-（β-D-アラビノフラノシル）ウラシル、
9-（β-D-アラビノフラノシル）ヒポキサンチン、
1-（β-D-アラビノフラノシル）チミン、
3’-アジド-3’-デオキシチミジン、
3’-アジド-2’,3’-ジデオキシウリジン、
3’-アジド-2’,3’-ジデオキシシチジン、
3’-アジド-2’,3’-ジデオキシアデノシン、
3’-アジド-2’,3’-ジデオキシグアノシン、
3’-アジド-2’,3’-ジデオキシイノシン、
3’-デオキシチミジン、
2’,3’-ジデオキシウリジン、
2’,3’-ジデオキシイノシン、
2’,3’-ジデオキシアデノシン、
2’,3’-ジデオキシシチジン、
2’,3’-ジデオキシグアノシン、
9-（2,3-ジデオキシ-1-β-D-リボフラノシル）-2,6-ジアミノプリン、
3’-デオキシ-2’,3’-ジデヒドロチミジン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシウリジン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシシチジン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシアデノシン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシグアノシン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシイノシン、
3-デアザアデノシン、
3-デアザグアノシン、
3-デアザイノシン、
7-デアザアデノシン、
7-デアザグアノシン、
7-デアザイノシン、
6-アザウリジン、
6-アザチミジン、
6-アザシチジン、
5-アザシチジン、
9-（β-D-リボフラノシル）-6-チオプリン、
6-メチルチオ-9-（β-D-リボフラノシル）プリン、
2-アミノ-9-（β-D-リボフラノシル）-6-チオプリン、
2-アミノ-6-メチルチオ-9-（β-D-リボフラノシル）プリン、
5-フルオロシチジン、
5-ヨードシチジン、
5-ブロモシチジン、
5-クロロシチジン、
5-フルオロウリジン、
5-ヨードウリジン、
5-ブロモウリジン、
5-クロロウリジン、
2’-C-メチルアデノシン、
2’-C-メチルシチジン、
2’-C-メチルグアノシン、
2’-C-メチルイノシン、
2’-C-メチルウリジン、
2’-C-メチルチミジン、
2’-デオキシ-2’-フルオロアデノシン、
2’-デオキシ-2’-フルオロシチジン、
2’-デオキシ-2’-フルオログアノシン、
2’-デオキシ-2’-フルオロウリジン、
2’-デオキシ-2’-フルオロイノシン、
2’-α-フルオロチミジン、
2’-デオキシ-2’-フルオロアラビノアデノシン、
2’-デオキシ-2’-フルオロアラビノシチジン、
2’-デオキシ-2’-フルオロアラビノグアノシン、
2’-デオキシ-2’-フルオロアラビノウリジン、
2’-デオキシ-2’-フルオロアラビノイノシン、
2’-β-フルオロチミジン、
2’-O-メチルアデノシン、
2’-O-メチルシチジン、
2’-O-メチルグアノシン、
2’-O-メチルイノシン、
2’-O-5-ジメチルウリジン、
2’-C-エチニルシチジン、
2’-C-エチニルグアノシン、
2’-C-エチニルウリジン、
2’-C-エチニルイノシン、
2’-C-エチニル-5-メチルウリジン、
3’-C-エチニルアデノシン、
3’-C-エチニルシチジン、
3’-C-エチニルグアノシン、
3’-C-エチニルウリジン、
3’-C-エチニルイノシン、
3’-C-エチニル-5-メチルウリジン、
3’-デオキシアデノシン、
3’-デオキシシチジン、
3’-デオキシグアノシン、
3’-デオキシウリジン、
3’-デオキシイノシン、
4’-C-エチニルアデノシン、
4’-C-エチニルシチジン、
4’-C-エチニルグアノシン、
4’-C-エチニルウリジン、
4’-C-エチニルイノシン、
4’-C-エチニルチミジン、
4’-C-メチルアデノシン、
4’-C-メチルシチジン、
4’-C-メチルグアノシン、
4’-C-メチルウリジン、
4’-C-メチルイノシン、
4’-C-メチルチミジン、
2’-C-メチル-7-デアザアデノシン、
2’-C-メチル-7-デアザグアノシン、
2’-C-メチル-3-デアザアデノシン、
2’-C-メチル-3-デアザグアノシン、
2’-O-メチル-7-デアザアデノシン、
2’-O-メチル-7-デアサグアノシン、
2’-O-メチル-3-デアザアデノシン、
2’-O-メチル-3-デアザグアノシン、
2’-C-メチル-6-アザウリジン、
2’-C-メチル-5-フルオロウリジン、
2’-C-メチル-5-フルオロシチジン、
2’-C-メチル-2-クロロアデノシン、
2’-デオキシ-7-デアザアデノシン、
2’-デオキシ-3-デアザアデノシン、
2’-デオキシ-7-デアサグアノシン、
2’-デオキシ-3-デアザグアノシン、
2’-デオキシ-6-アザウリジン、
2’-デオキシ-5-フルオロウリジン、
2’-デオキシ-5-フルオロシチジン、
2’-デオキシ-5-ヨードウリジン、
2’-デオキシ-5-ヨードシチジン、
2’-デオキシ-2-クロロアデノシン、
2’-デオキシ-2-フルオロアデノシン、
3’-デオキシ-7-デアザアデノシン、
3’-デオキシ-7-デアザグアノシン、
3’-デオキシ-3-デアザアデノシン、
3’-デオキシ-3-デアザグアノシン、
3’-デオキシ-6-アザウリジン、
3’-デオキシ-5-フルオロウリジン、
3’-デオキシ-5-ヨードウリジン、
3’-デオキシ-5-フルオロシチジン、
3’-デオキシ-2-クロロアデノシン、
2’,3’-ジデオキシ-7-デアザアデノシン、
2’,3’-ジデオキシ-7-デアザグアノシン、
2’,3’-ジデオキシ-3-デアザアデノシン、
2’,3’-ジデオキシ-3-デアザグアノシン、
2’,3’-ジデオキシ-6-アザウリジン、
2’,3’-ジデオキシ-5-フルオロウリジン、
2’,3’-ジデオキシ-5-フルオロウリジン、
2’,3’-ジデオキシ-5-ヨードシチジン、
2’,3’-ジデオキシ-2-クロロアデノシン、
2’,3’-ジデオキシ-β-L-シチジン、
2’,3’-ジデオキシ-β-L-アデノシン、
2’,3’-ジデオキシ-β-L-グアノシン、
3’-デオキシ-β-L-チミジン、
2’,3’-ジデオキシ-5-フルオロ-β-L-シチジン、
β-L-チミジン、
2’-デオキシ-β-L-シチジン、
2’-デオキシ-β-L-アデノシン、
2’-デオキシ-β-L-グアノシン、
2’-デオキシ-β-L-イノシン、
β-L-シチジン、
β-L-アデノシン、
β-L-グアノシン、
β-L-ウリジン、
β-L-イノシン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシ-β-L-シチジン、
2’,3’-ジデヒドロ-3’-ジデオキシ-β-L-チミジン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシ-β-L-アデノシン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシ-β-L-グアノシン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシ-β-L-5-フルオロシチジン、
2’-デオキシ-2’,2’-ジフルオロシチジン、
9-（β-D-アラビノフラノシル）-2-フルオロアデニン、
2’-デオキシ-2’（E）-フルオロメチレンシチジン、
2’-デオキシ-2’（Z）-フルオロメチレンシチジン、
（−）-2’,3’-ジデオキシ-3’-チアシチジン、
（＋）-2’,3’-ジデオキシ-3’-チアシチジン、
1-β-D-リボフラノシル-1,2,4-トリアゾール-3-カルボキシアミド、
1-β-L-リボフラノシル-1,2,4-トリアゾール-3-カルボキシアミド、
1-β-D-リボフラノシル-1,3-イミダゾリウム-5-オレート、
1-β-L-リボフラノシル-1,3-イミダゾリウム-5-オレート、
1-β-D-リボフラノシル-5-エチニルイミダゾール-4-カルボキシアミド、
1-β-L-リボフラノシル-5-エチニルイミダゾール-4-カルボキシアミド、
1-（2-デオキシ-2-フルオロ-β-D-アラビノフラノシル）-5-ヨードウラシル、
1-（2-デオキシ-2-フルオロ-β-D-アラビノフラノシル）-5-ヨードシトシン、
1-（2-デオキシ-2-フルオロ-β-L-アラビノフラノシル）-5-メチルウラシル、
1-β-D-アラビノフラノシル-E-5-（2-ブロモビニル）ウラシル、
E-5-（2-ブロモビニル）-2’-デオキシウリジン、
5-トリフルオロメチルチミジン、
1-β-D-アラビノフラノシル-5-プロピニルウラシル、
1-（2-デオキシ-2-フルオロ-1-β-D-アラビノフラノシル）-5-エチルウラシル、
2’,3’-ジデオキシ-3’-フルオログアノシン、
3’-デオキシ-3’-フルオロチミジン、
（±）-（1α,2β,3α）-9-［2,3-ビス（ヒドロキシメチル）-1-シクロブチル］アデニン、
（±）-（1α,2β,3α）-9-［2,3-ビス（ヒドロキシメチル）-1-シクロブチル］グアニン、
（±）-（1β,2α,3β）-9-［2,3-ビス（ヒドロキシメチル）-1-シクロブチル］グアニン、
（±）-（1β,2α,3β）-9-［2,3-ビス（ヒドロキシメチル）-1-シクロブチル］アデニン、
（1R,3S,4R）-9-（3-ヒドロキシ-4-ヒドロキシメチルシクロペント-1-イル）グアニン、
（1S,2R,4R）-9-（1-ヒドロキシ-2-ヒドロキシメチルシクロペント-4-イル）グアニン、
（2R,4R）-9-（2-ヒドロキシメチル-1,3-ジオキソラン-4-yl）-2,6-ジアミノプリン、
（2R,4R）-1-（2-ヒドロキシメチル-1,3-ジオキソラン-4-yl）シトシン、
（2R,4R）-9-（2-ヒドロキシメチル-1,3-ジオキソラン-4-yl）グアニン、
（2R,4R）-1-（2-ヒドロキシメチル-1,3-ジオキソラン-4-yl）-5-フルオロシトシン、
（1R,2S,4S）-9-（4-ヒドロキシ-3-ヒドロキシメチル-2-メチレンシクロペント-4-イル）グアニン、および
（1S,3R,4S）-9-（3-ヒドロキシ-4-ヒドロキシメチル-5-メチレンシクロペント-1-イル）グアニン
からなる群より選択される請求項48記載の化合物。
【請求項５０】
式（XVII）の請求項48記載の化合物：
2005525358.tif 000123
［式中、
X0およびX6は、独立して、O、S、NHおよびCY2からなる群より選択され；
X2はOまたはSであり；
X7はOH、F、SH、NH2、NHOH、-BH3M＋、R、SR、およびNHRからなる群より選択され；ならびに
X9およびX10は、独立して、OH、SH、NH2、NHOH、-BH3M＋、R、OR、SRおよびNHRからなる群より選択される］
【請求項５１】
Nuが、
アデノシン、
シチジン、
グアノシン、
ウリジン、
2’-デオキシアデノシン、
2’-デオキシシチジン、
2’-デオキシグアノシン、
チミジン、
イノシン、
9-（β-D-アラビノフラノシル）アデニン、
1-（β-D-アラビノフラノシル）シトシン、
9-（β-D-アラビノフラノシル）グアニン、
1-（β-D-アラビノフラノシル）ウラシル、
9-（β-D-アラビノフラノシル）ヒポキサンチン、
1-（β-D-アラビノフラノシル）チミン、
3’-アジド-3’-デオキシチミジン、
3’-アジド-2’,3’-ジデオキシウリジン、
3’-アジド-2’,3’-ジデオキシシチジン、
3’-アジド-2’,3’-ジデオキシアデノシン、
3’-アジド-2’,3’-ジデオキシグアノシン、
3’-アジド-2’,3’-ジデオキシイノシン、
3’-デオキシチミジン、
2’,3’-ジデオキシウリジン、
2’,3’-ジデオキシイノシン、
2’,3’-ジデオキシアデノシン、
2’,3’-ジデオキシシチジン、
2’,3’-ジデオキシグアノシン、
9-（2,3-ジデオキシ-1-β-D-リボフラノシル）-2,6-ジアミノプリン、
3’-デオキシ-2’,3’-ジデヒドロチミジン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシウリジン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシシチジン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシアデノシン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシグアノシン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシイノシン、
3-デアザアデノシン、
3-デアザグアノシン、
3-デアザイノシン、
7-デアザアデノシン、
7-デアザグアノシン、
7-デアザイノシン、
6-アザウリジン、
6-アザチミジン、
6-アザシチジン、
5-アザシチジン、
9-（β-D-リボフラノシル）-6-チオプリン、
6-メチルチオ-9-（β-D-リボフラノシル）プリン、
2-アミノ-9-（β-D-リボフラノシル）-6-チオプリン、
2-アミノ-6-メチルチオ-9-（β-D-リボフラノシル）プリン、
5-フルオロシチジン、
5-ヨードシチジン、
5-ブロモシチジン、
5-クロロシチジン、
5-フルオロウリジン、
5-ヨードウリジン、
5-ブロモウリジン、
5-クロロウリジン、
2’-C-メチルアデノシン、
2’-C-メチルシチジン、
2’-C-メチルグアノシン、
2’-C-メチルイノシン、
2’-C-メチルウリジン、
2’-C-メチルチミジン、
2’-デオキシ-2’-フルオロアデノシン、
2’-デオキシ-2’-フルオロシチジン、
2’-デオキシ-2’-フルオログアノシン、
2’-デオキシ-2’-フルオロウリジン、
2’-デオキシ-2’-フルオロイノシン、
2’-α-フルオロチミジン、
2’-デオキシ-2’-フルオロアラビノアデノシン、
2’-デオキシ-2’-フルオロアラビノシチジン、
2’-デオキシ-2’-フルオロアラビノグアノシン、
2’-デオキシ-2’-フルオロアラビノウリジン、
2’-デオキシ-2’-フルオロアラビノイノシン、
2’-β-フルオロチミジン、
2’-O-メチルアデノシン、
2’-O-メチルシチジン、
2’-O-メチルグアノシン、
2’-O-メチルイノシン、
2’-O-5-ジメチルウリジン、
2’-C-エチニルシチジン、
2’-C-エチニルグアノシン、
2’-C-エチニルウリジン、
2’-C-エチニルイノシン、
2’-C-エチニル-5-メチルウリジン、
3’-C-エチニルアデノシン、
3’-C-エチニルシチジン、
3’-C-エチニルグアノシン、
3’-C-エチニルウリジン、
3’-C-エチニルイノシン、
3’-C-エチニル-5-メチルウリジン、
3’-デオキシアデノシン、
3’-デオキシシチジン、
3’-デオキシグアノシン、
3’-デオキシウリジン、
3’-デオキシイノシン、
4’-C-エチニルアデノシン、
4’-C-エチニルシチジン、
4’-C-エチニルグアノシン、
4’-C-エチニルウリジン、
4’-C-エチニルイノシン、
4’-C-エチニルチミジン、
4’-C-メチルアデノシン、
4’-C-メチルシチジン、
4’-C-メチルグアノシン、
4’-C-メチルウリジン、
4’-C-メチルイノシン、
4’-C-メチルチミジン、
2’-C-メチル-7-デアザアデノシン、
2’-C-メチル-7-デアザグアノシン、
2’-C-メチル-3-デアザアデノシン、
2’-C-メチル-3-デアザグアノシン、
2’-O-メチル-7-デアザアデノシン、
2’-O-メチル-7-デアサグアノシン、
2’-O-メチル-3-デアザアデノシン、
2’-O-メチル-3-デアザグアノシン、
2’-C-メチル-6-アザウリジン、
2’-C-メチル-5-フルオロウリジン、
2’-C-メチル-5-フルオロシチジン、
2’-C-メチル-2-クロロアデノシン、
2’-デオキシ-7-デアザアデノシン、
2’-デオキシ-3-デアザアデノシン、
2’-デオキシ-7-デアサグアノシン、
2’-デオキシ-3-デアザグアノシン、
2’-デオキシ-6-アザウリジン、
2’-デオキシ-5-フルオロウリジン、
2’-デオキシ-5-フルオロシチジン、
2’-デオキシ-5-ヨードウリジン、
2’-デオキシ-5-ヨードシチジン、
2’-デオキシ-2-クロロアデノシン、
2’-デオキシ-2-フルオロアデノシン、
3’-デオキシ-7-デアザアデノシン、
3’-デオキシ-7-デアザグアノシン、
3’-デオキシ-3-デアザアデノシン、
3’-デオキシ-3-デアザグアノシン、
3’-デオキシ-6-アザウリジン、
3’-デオキシ-5-フルオロウリジン、
3’-デオキシ-5-ヨードウリジン、
3’-デオキシ-5-フルオロシチジン、
3’-デオキシ-2-クロロアデノシン、
2’,3’-ジデオキシ-7-デアザアデノシン、
2’,3’-ジデオキシ-7-デアザグアノシン、
2’,3’-ジデオキシ-3-デアザアデノシン、
2’,3’-ジデオキシ-3-デアザグアノシン、
2’,3’-ジデオキシ-6-アザウリジン、
2’,3’-ジデオキシ-5-フルオロウリジン、
2’,3’-ジデオキシ-5-フルオロウリジン、
2’,3’-ジデオキシ-5-ヨードシチジン、
2’,3’-ジデオキシ-2-クロロアデノシン、
2’,3’-ジデオキシ-β-L-シチジン、
2’,3’-ジデオキシ-β-L-アデノシン、
2’,3’-ジデオキシ-β-L-グアノシン、
3’-デオキシ-β-L-チミジン、
2’,3’-ジデオキシ-5-フルオロ-β-L-シチジン、
β-L-チミジン、
2’-デオキシ-β-L-シチジン、
2’-デオキシ-β-L-アデノシン、
2’-デオキシ-β-L-グアノシン、
2’-デオキシ-β-L-イノシン、
β-L-シチジン、
β-L-アデノシン、
β-L-グアノシン、
β-L-ウリジン、
β-L-イノシン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシ-β-L-シチジン、
2’,3’-ジデヒドロ-3’-ジデオキシ-β-L-チミジン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシ-β-L-アデノシン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシ-β-L-グアノシン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシ-β-L-5-フルオロシチジン、
2’-デオキシ-2’,2’-ジフルオロシチジン、
9-（β-D-アラビノフラノシル）-2-フルオロアデニン、
2’-デオキシ-2’（E）-フルオロメチレンシチジン、
2’-デオキシ-2’（Z）-フルオロメチレンシチジン、
（−）-2’,3’-ジデオキシ-3’-チアシチジン、
（＋）-2’,3’-ジデオキシ-3’-チアシチジン、
1-β-D-リボフラノシル-1,2,4-トリアゾール-3-カルボキシアミド、
1-β-L-リボフラノシル-1,2,4-トリアゾール-3-カルボキシアミド、
1-β-D-リボフラノシル-1,3-イミダゾリウム-5-オレート、
1-β-L-リボフラノシル-1,3-イミダゾリウム-5-オレート、
1-β-D-リボフラノシル-5-エチニルイミダゾール-4-カルボキシアミド、
1-β-L-リボフラノシル-5-エチニルイミダゾール-4-カルボキシアミド、
1-（2-デオキシ-2-フルオロ-β-D-アラビノフラノシル）-5-ヨードウラシル、
1-（2-デオキシ-2-フルオロ-β-D-アラビノフラノシル）-5-ヨードシトシン、
1-（2-デオキシ-2-フルオロ-β-L-アラビノフラノシル）-5-メチルウラシル、
1-β-D-アラビノフラノシル-E-5-（2-ブロモビニル）ウラシル、
E-5-（2-ブロモビニル）-2’-デオキシウリジン、
5-トリフルオロメチルチミジン、
1-β-D-アラビノフラノシル-5-プロピニルウラシル、
1-（2-デオキシ-2-フルオロ-1-β-D-アラビノフラノシル）-5-エチルウラシル、
2’,3’-ジデオキシ-3’-フルオログアノシン、
3’-デオキシ-3’-フルオロチミジン、
（±）-（1α,2β,3α）-9-［2,3-ビス（ヒドロキシメチル）-1-シクロブチル］アデニン、
（±）-（1α,2β,3α）-9-［2,3-ビス（ヒドロキシメチル）-1-シクロブチル］グアニン、
（±）-（1β,2α,3β）-9-［2,3-ビス（ヒドロキシメチル）-1-シクロブチル］グアニン、
（±）-（1β,2α,3β）-9-［2,3-ビス（ヒドロキシメチル）-1-シクロブチル］アデニン、
（1R,3S,4R）-9-（3-ヒドロキシ-4-ヒドロキシメチルシクロペント-1-イル）グアニン、
（1S,2R,4R）-9-（1-ヒドロキシ-2-ヒドロキシメチルシクロペント-4-イル）グアニン、
（2R,4R）-9-（2-ヒドロキシメチル-1,3-ジオキソラン-4-yl）-2,6-ジアミノプリン、
（2R,4R）-1-（2-ヒドロキシメチル-1,3-ジオキソラン-4-yl）シトシン、
（2R,4R）-9-（2-ヒドロキシメチル-1,3-ジオキソラン-4-yl）グアニン、
（2R,4R）-1-（2-ヒドロキシメチル-1,3-ジオキソラン-4-yl）-5-フルオロシトシン、
（1R,2S,4S）-9-（4-ヒドロキシ-3-ヒドロキシメチル-2-メチレンシクロペント-4-イル）グアニンおよび
（1S,3R,4S）-9-（3-ヒドロキシ-4-ヒドロキシメチル-5-メチレンシクロペント-1-イル）グアニン
からなる群より選択される請求項50記載の化合物。
【請求項５２】
式（XVIII）の請求項48記載の化合物：
2005525358.tif 000124
［式中、
X6はNHまたはCY2であり；ならびに
X9およびX10は、独立して、OH、SH、アルキル、アルコキシ、アリールおよびアリールオキシからなる群より選択される］
【請求項５３】
Nuが、
アデノシン、
シチジン、
グアノシン、
ウリジン、
2’-デオキシアデノシン、
2’-デオキシシチジン、
2’-デオキシグアノシン、
チミジン、
イノシン、
9-（β-D-アラビノフラノシル）アデニン、
1-（β-D-アラビノフラノシル）シトシン、
9-（β-D-アラビノフラノシル）グアニン、
1-（β-D-アラビノフラノシル）ウラシル、
9-（β-D-アラビノフラノシル）ヒポキサンチン、
1-（β-D-アラビノフラノシル）チミン、
3’-アジド-3’-デオキシチミジン、
3’-アジド-2’,3’-ジデオキシウリジン、
3’-アジド-2’,3’-ジデオキシシチジン、
3’-アジド-2’,3’-ジデオキシアデノシン、
3’-アジド-2’,3’-ジデオキシグアノシン、
3’-アジド-2’,3’-ジデオキシイノシン、
3’-デオキシチミジン、
2’,3’-ジデオキシウリジン、
2’,3’-ジデオキシイノシン、
2’,3’-ジデオキシアデノシン、
2’,3’-ジデオキシシチジン、
2’,3’-ジデオキシグアノシン、
9-（2,3-ジデオキシ-1-β-D-リボフラノシル）-2,6-ジアミノプリン、
3’-デオキシ-2’,3’-ジデヒドロチミジン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシウリジン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシシチジン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシアデノシン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシグアノシン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシイノシン、
3-デアザアデノシン、
3-デアザグアノシン、
3-デアザイノシン、
7-デアザアデノシン、
7-デアザグアノシン、
7-デアザイノシン、
6-アザウリジン、
6-アザチミジン、
6-アザシチジン、
5-アザシチジン、
9-（β-D-リボフラノシル）-6-チオプリン、
6-メチルチオ-9-（β-D-リボフラノシル）プリン、
2-アミノ-9-（β-D-リボフラノシル）-6-チオプリン、
2-アミノ-6-メチルチオ-9-（β-D-リボフラノシル）プリン、
5-フルオロシチジン、
5-ヨードシチジン、
5-ブロモシチジン、
5-クロロシチジン、
5-フルオロウリジン、
5-ヨードウリジン、
5-ブロモウリジン、
5-クロロウリジン、
2’-C-メチルアデノシン、
2’-C-メチルシチジン、
2’-C-メチルグアノシン、
2’-C-メチルイノシン、
2’-C-メチルウリジン、
2’-C-メチルチミジン、
2’-デオキシ-2’-フルオロアデノシン、
2’-デオキシ-2’-フルオロシチジン、
2’-デオキシ-2’-フルオログアノシン、
2’-デオキシ-2’-フルオロウリジン、
2’-デオキシ-2’-フルオロイノシン、
2’-α-フルオロチミジン、
2’-デオキシ-2’-フルオロアラビノアデノシン、
2’-デオキシ-2’-フルオロアラビノシチジン、
2’-デオキシ-2’-フルオロアラビノグアノシン、
2’-デオキシ-2’-フルオロアラビノウリジン、
2’-デオキシ-2’-フルオロアラビノイノシン、
2’-β-フルオロチミジン、
2’-O-メチルアデノシン、
2’-O-メチルシチジン、
2’-O-メチルグアノシン、
2’-O-メチルイノシン、
2’-O-5-ジメチルウリジン、
2’-C-エチニルシチジン、
2’-C-エチニルグアノシン、
2’-C-エチニルウリジン、
2’-C-エチニルイノシン、
2’-C-エチニル-5-メチルウリジン、
3’-C-エチニルアデノシン、
3’-C-エチニルシチジン、
3’-C-エチニルグアノシン、
3’-C-エチニルウリジン、
3’-C-エチニルイノシン、
3’-C-エチニル-5-メチルウリジン、
3’-デオキシアデノシン、
3’-デオキシシチジン、
3’-デオキシグアノシン、
3’-デオキシウリジン、
3’-デオキシイノシン、
4’-C-エチニルアデノシン、
4’-C-エチニルシチジン、
4’-C-エチニルグアノシン、
4’-C-エチニルウリジン、
4’-C-エチニルイノシン、
4’-C-エチニルチミジン、
4’-C-メチルアデノシン、
4’-C-メチルシチジン、
4’-C-メチルグアノシン、
4’-C-メチルウリジン、
4’-C-メチルイノシン、
4’-C-メチルチミジン、
2’-C-メチル-7-デアザアデノシン、
2’-C-メチル-7-デアザグアノシン、
2’-C-メチル-3-デアザアデノシン、
2’-C-メチル-3-デアザグアノシン、
2’-O-メチル-7-デアザアデノシン、
2’-O-メチル-7-デアサグアノシン、
2’-O-メチル-3-デアザアデノシン、
2’-O-メチル-3-デアザグアノシン、
2’-C-メチル-6-アザウリジン、
2’-C-メチル-5-フルオロウリジン、
2’-C-メチル-5-フルオロシチジン、
2’-C-メチル-2-クロロアデノシン、
2’-デオキシ-7-デアザアデノシン、
2’-デオキシ-3-デアザアデノシン、
2’-デオキシ-7-デアサグアノシン、
2’-デオキシ-3-デアザグアノシン、
2’-デオキシ-6-アザウリジン、
2’-デオキシ-5-フルオロウリジン、
2’-デオキシ-5-フルオロシチジン、
2’-デオキシ-5-ヨードウリジン、
2’-デオキシ-5-ヨードシチジン、
2’-デオキシ-2-クロロアデノシン、
2’-デオキシ-2-フルオロアデノシン、
3’-デオキシ-7-デアザアデノシン、
3’-デオキシ-7-デアザグアノシン、
3’-デオキシ-3-デアザアデノシン、
3’-デオキシ-3-デアザグアノシン、
3’-デオキシ-6-アザウリジン、
3’-デオキシ-5-フルオロウリジン、
3’-デオキシ-5-ヨードウリジン、
3’-デオキシ-5-フルオロシチジン、
3’-デオキシ-2-クロロアデノシン、
2’,3’-ジデオキシ-7-デアザアデノシン、
2’,3’-ジデオキシ-7-デアザグアノシン、
2’,3’-ジデオキシ-3-デアザアデノシン、
2’,3’-ジデオキシ-3-デアザグアノシン、
2’,3’-ジデオキシ-6-アザウリジン、
2’,3’-ジデオキシ-5-フルオロウリジン、
2’,3’-ジデオキシ-5-フルオロウリジン、
2’,3’-ジデオキシ-5-ヨードシチジン、
2’,3’-ジデオキシ-2-クロロアデノシン、
2’,3’-ジデオキシ-β-L-シチジン、
2’,3’-ジデオキシ-β-L-アデノシン、
2’,3’-ジデオキシ-β-L-グアノシン、
3’-デオキシ-β-L-チミジン、
2’,3’-ジデオキシ-5-フルオロ-β-L-シチジン、
β-L-チミジン、
2’-デオキシ-β-L-シチジン、
2’-デオキシ-β-L-アデノシン、
2’-デオキシ-β-L-グアノシン、
2’-デオキシ-β-L-イノシン、
β-L-シチジン、
β-L-アデノシン、
β-L-グアノシン、
β-L-ウリジン、
β-L-イノシン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシ-β-L-シチジン、
2’,3’-ジデヒドロ-3’-ジデオキシ-β-L-チミジン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシ-β-L-アデノシン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシ-β-L-グアノシン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシ-β-L-5-フルオロシチジン、
2’-デオキシ-2’,2’-ジフルオロシチジン、
9-（β-D-アラビノフラノシル）-2-フルオロアデニン、
2’-デオキシ-2’（E）-フルオロメチレンシチジン、
2’-デオキシ-2’（Z）-フルオロメチレンシチジン、
（−）-2’,3’-ジデオキシ-3’-チアシチジン、
（＋）-2’,3’-ジデオキシ-3’-チアシチジン、
1-β-D-リボフラノシル-1,2,4-トリアゾール-3-カルボキシアミド、
1-β-L-リボフラノシル-1,2,4-トリアゾール-3-カルボキシアミド、
1-β-D-リボフラノシル-1,3-イミダゾリウム-5-オレート、
1-β-L-リボフラノシル-1,3-イミダゾリウム-5-オレート、
1-β-D-リボフラノシル-5-エチニルイミダゾール-4-カルボキシアミド、
1-β-L-リボフラノシル-5-エチニルイミダゾール-4-カルボキシアミド、
1-（2-デオキシ-2-フルオロ-β-D-アラビノフラノシル）-5-ヨードウラシル、
1-（2-デオキシ-2-フルオロ-β-D-アラビノフラノシル）-5-ヨードシトシン、
1-（2-デオキシ-2-フルオロ-β-L-アラビノフラノシル）-5-メチルウラシル、
1-β-D-アラビノフラノシル-E-5-（2-ブロモビニル）ウラシル、
E-5-（2-ブロモビニル）-2’-デオキシウリジン、
5-トリフルオロメチルチミジン、
1-β-D-アラビノフラノシル-5-プロピニルウラシル、
1-（2-デオキシ-2-フルオロ-1-β-D-アラビノフラノシル）-5-エチルウラシル、
2’,3’-ジデオキシ-3’-フルオログアノシン、
3’-デオキシ-3’-フルオロチミジン、
（±）-（1α,2β,3α）-9-［2,3-ビス（ヒドロキシメチル）-1-シクロブチル］アデニン、
（±）-（1α,2β,3α）-9-［2,3-ビス（ヒドロキシメチル）-1-シクロブチル］グアニン、
（±）-（1β,2α,3β）-9-［2,3-ビス（ヒドロキシメチル）-1-シクロブチル］グアニン、
（±）-（1β,2α,3β）-9-［2,3-ビス（ヒドロキシメチル）-1-シクロブチル］アデニン、
（1R,3S,4R）-9-（3-ヒドロキシ-4-ヒドロキシメチルシクロペント-1-イル）グアニン、
（1S,2R,4R）-9-（1-ヒドロキシ-2-ヒドロキシメチルシクロペント-4-イル）グアニン、
（2R,4R）-9-（2-ヒドロキシメチル-1,3-ジオキソラン-4-yl）-2,6-ジアミノプリン、
（2R,4R）-1-（2-ヒドロキシメチル-1,3-ジオキソラン-4-yl）シトシン、
（2R,4R）-9-（2-ヒドロキシメチル-1,3-ジオキソラン-4-yl）グアニン、
（2R,4R）-1-（2-ヒドロキシメチル-1,3-ジオキソラン-4-yl）-5-フルオロシトシン、
（1R,2S,4S）-9-（4-ヒドロキシ-3-ヒドロキシメチル-2-メチレンシクロペント-4-イル）グアニンおよび
（1S,3R,4S）-9-（3-ヒドロキシ-4-ヒドロキシメチル-5-メチレンシクロペント-1-イル）グアニン
からなる群より選択される請求項52記載の化合物。
【請求項５４】
式（XIX）の請求項48記載の化合物：
2005525358.tif 000125
［式中、X9およびX10は、独立して、OH、SH、アルキル、アルコキシ、アリールおよびアリールオキシからなる群より選択される］
【請求項５５】
選択的に、一つまたは複数の他の有効成分と、および/または薬学的に許容される担体と組み合わせてもよい、治療上有効量の請求項1〜34のいずれか一項記載の化合物、その薬学的に許容される塩を含む薬学的組成物。
【請求項５６】
選択的に、一つまたは複数の他の有効成分と、および/または薬学的に許容される担体と組み合わせてもよい、治療上有効量の請求項35〜54のいずれか一項記載の化合物、その薬学的に許容される塩、またはその薬学的に許容されるプロドラッグを含む薬学的組成物。
【請求項５７】
治療上有効量の請求項1〜54のいずれか一項記載の化合物を投与する段階を含む、微生物感染の治療方法。
【請求項５８】
治療上有効量の請求項1〜54のいずれか一項記載の化合物を投与する段階を含む、増殖障害を治療する方法。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
本出願は、参照としてその全体が本明細書に組み入れられる、2002年2月28日に出願された米国特許仮出願第60/360,699号および2002年2月28日に出願された米国特許仮出願第60/360,915号に対する優先権を主張する。
【０００２】
ウィルス感染はヒトの健康にとってかなりの脅威であり、多くの深刻な感染病を占める。ウィルス性肝炎の主な原因であるC型肝炎ウィルス（HCV）は、世界中で2億人を超えて感染している。HCV感染に対する現在の治療はインターフェロン-α単独、またはヌクレオシドアナログであるリバビリンと組み合わせた免疫療法に限られる。この治療は患者の約半分においてのみ効果的である。B型肝炎ウィルス（HBV）は世界中のヒトの人口のほとんど1/3に急性感染し、感染者の約5％はウイルスの慢性キャリアーである。慢性HBV感染は肝臓に損傷を引き起こし、これは、しばしば、人生の晩年において肝硬変および肝臓癌まで進行する。効果的な科学療法およびワクチンの利用可能性および広い使用にもかかわらず、慢性キャリアーの数は世界中で4億人に近づいている。
【０００３】
ヒト免疫不全ウイルス（HIV）は免疫系の進行的変性を引き起こし、これはAIDSの発症に導く。HIVヌクレオシドおよび非ヌクレオシド逆転写酵素阻害剤およびプロテアーゼ阻害剤を含めた多数の薬物が臨床的に使用されてきた。現在、ウィルス負荷および薬物体性の出現を低下させるために、組合わせ療法がAIDSの治療の認められた標準である。抗HIV薬物の開発の進歩にもかかわらず、AIDSは依然として主要な流行病の1つである。従って、新しいより効果的なHCV、HBVおよびHIV薬物に対する緊急な必要性が依然として存在する。HSV、CMV、インフルエンザウイルス、ウェストナイルウイルス、天然痘、EBV、VZVおよびRSVのような他のウイルスによって引き起こされたウイルス感染の治療も良好な医薬をやはり必要としている。
【０００４】
細菌感染は、長い間、多くの感染病の源であった。抗生物質の普及した使用の結果、薬物体性の生命を脅かす細菌の出現をもたらす。真菌感染はもう1つのタイプの感染病であり、そのいくつかはやはり生命を脅かす。細菌および真菌感染の治療に対する要望は増大している。新しい作用メカニズムおよび新しい化学クラスに基づく抗微生物薬物は特に重要である。
【０００５】
細胞増殖障害は、主な病気状態をもたらす多数の病気の原因であり、病気状態は数十年の間広く調べられてきた。今日、癌は合衆国において死亡の第二の主な原因であり、500,000人を超える人々が毎年この増殖障害で死亡している。身体の種々の細胞型の全ては良性または悪性腫瘍細胞に形質転換され得る。正常な細胞の癌細胞への形質転換は複雑なプロセスであり、従って、十分には理解されていない。癌の治療は、通常は、手術、放射線および化学療法よりなる。化学療法は全てのタイプの癌を治療することができるが、手術および放射線療法は、身体のある部位における成長の種々の段階におけるある種の癌に制限される。臨床的に広く用いられる多数の抗癌薬剤がある。それらの中には、シスプラチンのようなアルキル化剤、および5-フルオロウラシル、ゲンシタビン、シタラビン、フルダラビンおよびクラダラビンのような抗代謝剤がある。手術、放射線および化学療法は癌患者を治療するのに利用できるが、現時点で癌に対する治癒はない。癌研究は、依然として、医学および薬学組織における最も重要な努力のうちの1つである。
【０００６】
ヌクレオシドアナログは、数十年の間、ウィルス感染および増殖障害の治療のために臨床的に用いられてきた。ヌクレオシド薬物のほとんどは抗代謝剤として分類される。それらが細胞に入った後、ヌクレオシドアナログは順次リン酸化されて、ヌクレオシド5’-一リン酸、5’-二リン酸、および5’-三リン酸となる。ほとんどの場合、ヌクレオシド三リン酸、例えば、3’-アジド-3’-デオキシチミジン（AZT、抗HIV薬物）三リン酸およびアラビノシルシトシン（シタラビン、抗癌薬剤）三リン酸は、ポリメラーゼの競合的阻害を介して、または修飾されたヌクレオチドのDNAまたはRNA配列への取り込みを介して、DNAまたはRNA合成を阻害する化学物質である。ヌクレオシドはその二リン酸としての作用し得る。例えば、2’-デオキシ-2’、2’-ジフルオロシチジン（ゲンシタビン、抗癌薬剤）5’-三リン酸は、ヒト・リボヌクレオチドレダクターゼを阻害することが示されている。現在臨床的に用いられるヌクレオシド薬物は、主として、ヌクレオシドキナーゼ（ヌクレオシドからヌクレオチド）およびヌクレオチドキナーゼ（ヌクレオチドからジ-およびトリ-ヌクレオチド）による細胞活性化に依存する。各ステップにおける効果的なリン酸化が、ヌクレオシドが効果的な薬物となるために必要とされる。
【０００７】
非天然ヌクレオシドの細胞リン酸化の通常の欠乏を克服するために、ヌクレオチドそれ自体が抗代謝薬物と考えられてきた。しかしながら、複数荷電ヌクレオチドは効果的に細胞膜を貫通せず、しばしば、ある種の細胞外酵素によって加水分解される。過去20年間、ヌクレオシド一リン酸プロドラッグが別の薬物形態として広く調査されてきた（Wagnerら、Med.Res.Rev.2000、20、417-451；Jonesら、Antiviral Res.1995、27、1-17；Perigaudら、Adv.in Antiviral Drug Des.1995、2、147-172；Huynh-Dinh、Curr.Opin.Invest.Drugs、1993、2、905-915）。現在はかなり親油性である、可逆的な化学的修飾によってリン酸上の負の電荷をマスクするヌクレオシド一リン酸プロドラッグは、細胞膜を通過し、ヌクレオシド一リン酸を細胞内で遊離させることが希望された。ヌクレオシド一リン酸からのプロドラッグ部位の開裂は、エステラーゼのような種々の普遍的な非特異的酵素を介して酵素的に、あるいは加水分解的に進行するであろう。しばしば、非天然ヌクレオシドでの3工程の最も困難である第一のキナーゼ工程を今や迂回したので、より高い濃度の必要な活性種のヌクレオシド三リン酸が期待された。ヌクレオチドリン酸プロドラッグの領域における進歩がなされた。例えば、抗HIVヌクレオシドのある種のリン酸プロドラッグは、抗ウイルス薬物としてのその使用が探求されてきた。3'-デオキシ-3’-アジドチミジン（AZT）および2’、3’-ジデヒドロ-2’、3’-ジデオキシチミジン（D4T）の二および三リン酸はそのアシルプロドラッグに変換された（Bonnaffeら、J.Org.Chem.1996、61、895-902）。AZT二-および三-リン酸プロドラッグはAZTそれ自体と同様のHIV-感染細胞の阻害を示し、他方、対応するD4T二-および三-リン酸プロドラッグはより低いが依然として有意な抗HIV活性を呈した。プロドラッグのアシルホスフェート部位は化学加水分解に感受性であるので、前記プロドラッグはそれが細胞に入る前にAZTおよびD4Tに変換されると推定された。リン脂質もまたヌクレオシド一-および二-リン酸のマスキング部位としてであった。チオエーテル脂質と連結したAZT二-リン酸はHIV-感染CEM細胞の優れた阻害を示した（Hongら、J.Med.Chem.1996、39、1771-1777）。他の脂質-連結ヌクレオシド二-および三-リン酸も研究されてきた（Hostetlerら、J.Biol.Chem.1990、265、6112-6117）。また、いくつかの抗腫瘍ヌクレオシドが抗腫瘍活性を増強することを目的とした対応するヌクレオチドプロドラッグに変換された。脂質-連結Ara-C二-リン酸での処置は、Ara-Cそれ自体よりもp388-感染マウスのより長い寿命を示した（Hongら、J.Med.Chem.1986、29、2038-2044；1990、33、1380-1386）。2つの弱い細胞傷害性剤である8-アザ-2-デオキシアデノシンおよび8-ブロモ-2-デオキシアデノシンはその5’-ビス（ピバルオキシメチル）ホスフェートプロドラッグに変換され、これは、かなり改良された細胞傷害性を呈した（Roseら、J.Med.Chem.2002、ウェブ公開）。
【０００８】
天然リン酸を担うヌクレオチドのプロドラッグはある種のインビトロおよびインビボ活性を呈したが、いくつかの主な障害は克服すべく残っている。最も明白なバリアーは、細胞酵素に対する天然リン酸の固有の不安定性である。ヌクレオチドプロドラッグは、ある場合には、負に荷電したヌクレオチドを親ヌクレオチドよりも良好に細胞に送達するが、酵素的および加水分解的分解に対してはかなり安定だというのではない。加えて、天然リン酸を担うヌクレオシドリン酸は、細胞内でそのプロドラッグから放出されると、必要な活性種（ヌクレオシド二-または三-リン酸）に同化されないが、逆に異化されて不活性な親ヌクレオシドとなり、これはリン酸化に対して抵抗性である。いくつかの場合において、効果的な治療効果を融合するのに十分な濃度で形成されない活性種であるのみならず、その代わり、形成される中間体ヌクレオシドリン酸は毒性種であり得る。適切な場合として、AZT一リン酸は細胞に蓄積する。なぜならば、ヌクレオシド一リン酸はチミジレートキナーゼに対する貧弱な基質であり、細胞傷害性の原因と考えられるからである。
【０００９】
ヌクレオチドを安定化するためには、二-リン酸または三-リン酸模倣体（mimic）を担ういくつかのヌクレオシドリン酸が調製されており、そのいくつかは種々の生物学的アッセイ法で評価されている。多くのヌクレオチド模倣体またはそれらの生物学的使用は開示されている（1974年11月に発行されたEcksteinらの米国特許第3,846,402号；1981年5月に発行されたHorwitzらの米国特許第4,266,048号；1992年6月に発行されたSchinaziらの米国特許第5,118,672号；1998年2月に発行されたIngelsらの米国特許第5,721,219号；2001年10月に発行されたBottaroらの米国特許第6,303,774号；2000年11月に発行されたBoucherらの米国特許第6,143,279号；Johanssonの欧州特許第0357571号、7/1990；Lebeauらの国際公開公報第9600733号、1/1996；Vladimirovichらの国際公開公報第9820017号、5/1998；Watanabeの国際公開公報第0179246号、4/2001；Yerxaらの国際公開公報第0145691号、6/2001；Petersonの国際公開公報第0187913号、11/2001）。ヌクレオチド模倣体の化学および生物学的評価についての初期の仕事はレビューされている（Scheit、K.H.、Nucleotide Analogs、John Wiley＆Sons、NewYork 1980）；Engel、R.、Chem.Rev.1977、77、349-467；Yount、R.G.、Adv.in Enzymol.1975、43、1-56）。
【００１０】
ヌクレオシド二-および三-リン酸模倣体の1つのタイプはヌクレオシド二リン酸および三リン酸のブリッジング位置において修飾を有する（
2005525358.tif 000002
）。これらのリン酸模倣体の中にはβ、γ-イミド三リン酸、β、γ-メチルイミド三リン酸、α、β-イミド三リン酸、α、β：β、γ-ジイミド三リン酸、α、β-メチレン三リン酸、β、γ-メチレン三リン酸、α、β：β、γ-ビスメチレン三リン酸、β、γ-ジハロメチレン三リン酸、α、β-ジハロメチレン三リン酸、β、γ-ハロメチレン三リン酸、およびα、β-ハロメチレン三リン酸がある。これらのリン酸模倣体は、通常、細胞酵素による加水分解に対するヌクレオチドの安定性を高める。メチレンおよびハロメチレンは、ヌクレオシド二-および三-リン酸模倣体を化学的および酵素的加水分解双方に対してかなりより安定とする。
【００１１】
もう1つのタイプのヌクレオシド二リン酸および三リン酸模倣体は、一つまたは複数のリン酸非ブリッジング酸素の他のヘテロ原子または官能基での置換である（
2005525358.tif 000003
）。これらのリン酸模倣体の中にはα-O-アルキル三リン酸、α-O-アリール三リン酸、α-P-アルキル三リン酸、α-P-アリール三リン酸、α-P-アルキルアミノ三リン酸、α-P-チオ三リン酸、α-P-ボラノ三リン酸、γ-O-アルキル三リン酸、γ-O-アリール三リン酸、γ-P-アルキル三リン酸、γ-P-アリール三リン酸、γ-P-アルキルアミノ三リン酸、γ-P-チオ三リン酸がある。α-またはβ-リンに対するこのタイプの修飾は、通常、キラルリン中心の形成によるジアステレオマーを生じる。これらのヌクレオシドリン酸模倣体は、一般に、天然ヌクレオシドリン酸よりも細胞ヌクレアーゼに対してより安定である。
【００１２】
他のヌクレオシド二および三リン酸模倣体は、ヌクレオシドの5’-位置に修飾を含む。例えば、5’-酸素がメチレンで置き換えられた3’-アジド-3’、5’-ジデオキシ-5’-メチレンチミジン5’-C-三リン酸が合成され、抗HIV活性につき評価された（Freemanら、J.Med.Chem.1992、35、3192-3196）。5’-酸素が硫黄またはアミノによって置換されたヌクレオチド模倣体も報告された（Trowbridgeら、J.Am.Chem.Soc.1972、94、3816-3824；Letsingerら、J.Am.Chem.Soc.1972、94、292-293；Scheitら、J.Carbohydr.Nucleosides Nucleotides 1974、1、485-490）。2以上のリン酸修飾の組合せを含むヌクレオチド模倣体は非常に少ない。これまで、α、β：β、γ-ジイミド三リン酸、α、β：β、γ-ビスメチレン三リン酸、およびα-P-ボラノ-アルファ-P-チオ三リン酸を含有するヌクレオチド模倣体のみが報告されており、これは各々2つの修飾を含む。報告された仕事におけるヌクレオチド模倣体の調製のための親ヌクレオシドは、一般に、天然ヌクレオシドおよびAZT、D4Tおよび3’-デオキシチミジンのような周知の抗ウイルスヌクレオシドから選択される。
【００１３】
これらのヌクレオチド模倣体のいくつかはその生物学的活性につき評価されている。AZT  5’-α-P-ボラノ三リン酸およびD4T  5’-α-P-ボラノ三リン酸はHIV逆転写酵素（RT）の非常に優れた阻害を呈し、ホモポリマー鋳型を用いるアッセイ法においてKi値は低いnM範囲にある。また、AZT  5’-β、γ-ジフルオロメチレン三リン酸およびAZT  5’-β、γ-イミド三リン酸はDNAポリメラーゼまたはHIV RTの有意な阻害を呈した。負に荷電したヌクレオチド模倣体は細胞によって無傷で取り入れられるようではなく、ジ-およびトリ-ヌクレオチド模倣体についての重要な細胞-ベースの抗ウィルスデータは公表されていない。細胞フリー生化学アッセイ法で活性なこれらのヌクレオチド模倣体は、三リン酸ブリッジング位置において、または単純にリン酸酸素の置換としての、各々1つのみの修飾を含み、従って、酵素加水分解に対する準備のできた基質である。従って、模倣体は迅速に細胞外で分解されて、親ヌクレオシドを提供する。いずれかの生物学的活性は、細胞に摂取され、活性なヌクレオチドに同化された親ヌクレオシドに由来する。
【００１４】
細胞酵素に対して抵抗性であって、有意な生物学的活性を呈するヌクレオチド二および三リン酸模倣体は開示されたことがない。いくつかの公知のヌクレオチド模倣体は、アデノシンのような天然ヌクレオシドから、またはAZTのような公知の生物学的活性ヌクレオシドから構築される。さらに、酵素分解に抵抗性である新規なヌクレオシド二および三リン酸模倣体は、効果的な細胞内輸送を可能とするために一つまたは複数のプロドラッグを保有することが必須である。付着されたプロドラッグを持つヌクレオシド二および三リン酸模倣体は文献に開示されていない。
【発明の開示】
【００１５】
発明の概要
同化酵素活性化を必要としない効果的なヌクレオチド薬物に対する要望が存在する。1つの局面において、本発明は、その二-および三-リン酸としてのヌクレオシドを提供することによって、活性なヌクレオチド種へのヌクレオシドの同化酵素活性化に対する必要性を克服する。この場合、二‐および三-リン酸部位は、分解酵素に対して抵抗性である新規なヌクレオチド模倣体を提供するために一または複数回以上修飾した。
【００１６】
従って、本発明のこの局面において、加水分解、リン分解および他の可能な反応タイプを介する化学的および酵素的分解に対して安定な修飾された二-または三-リン酸模倣体を含む新規なヌクレオチド模倣体が提供される。さらに、本発明のもう1つの局面において、新規なヌクレオシド二-および三-リン酸はプロドラッグに変換されて、細胞への薬物吸収および/または薬物送達を高める。本発明のもう1つの局面は、最初の2つの局面の組合せを提供するものであり、細胞への薬物吸収および/または薬物送達を高めるための新規なヌクレオチド模倣体のプロドラッグを提供するものである。
【００１７】
本発明のもう1つの局面は、新規なヌクレオシドおよび二-または三-リン酸模倣体の組合せである新規なヌクレオチド模倣体を提供する。
【００１８】
本発明のさらなる局面は、ウイルス感染、微生物感染、寄生虫感染、および細胞増殖障害の治療のための療法的使用用の組成物としての新規なヌクレオチド模倣体を提供する。
【００１９】
本発明のさらなる局面は、本発明のヌクレオチド模倣体またはそのプロドラッグを投与する段階を含む、ウイルス感染、微生物感染、寄生虫感染および増殖障害の治療方法を提供する。
【００２０】
本発明のそのような化合物は、D-またはL-ヌクレオチドであってもよい式（I）の化合物のようなプロドラッグを含む（すなわち、X7〜10Xのうちの1つはプロドラッグ置換基R＊でなければならない）：
2005525358.tif 000004
［式中、
AはO、S、CY2、NHまたはNRであり；
R4’は-L-R5であり、
LはO、S、NH、NR、CY2O、CY2S、CY2NH、CY2、CY2CY2、CY2OCY2、CY2SCY2およびCY2NHCY2からなる群より選択され、ここに、YはH、F、Cl、Br、アルキル、アルケニルおよびアルキニルからなる群より選択され、ここに、アルキル、アルケニルおよびアルケニルは、各々、選択的に、一つまたは複数のヘテロ原子を含有してもよく；
R5は式（II）：
2005525358.tif 000005
のジ-またはトリ-ホスフェート部位であり、
X2、X3およびX4は、独立して、O、S、Se、NHおよびNRからなる群より選択され；
X5およびX6は、独立して、O、S、Se、O2、CY2CO、CHOH、C（OH）2、CH2O、CH2CH2、CH2CHNH2、CH2CH2CHNH2、CY2OCY2、CY2、CRY、CY2CY2、CHR、CC、HC＝CH、NH、NR、NOH、NOR、NNH2およびNNHRからなる群より選択され；
X7、X8、X9およびX10は、独立して、H、F、OH、SH、NH2、NHOH、NHOR、NHNH2、NHNHR、CN、N3、-BH3M＋、R、OR、SR、SeH、SeR、NHR、NR2およびR＊からなる群より選択され、ここに、R＊はプロドラッグ置換基であり；
ここに、X7、X8、X9およびX10の少なくとも1つはR＊であり；
R＊は一つまたは複数のX7〜X10位置に結合することができ；
Rはアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アシルおよびアラルキルからなる群より選択され、各々は、選択的に、一つまたは複数のヘテロ原子を含有してもよく；
M＋はカチオンであり；
nは0または1であり；
R1、R2、R2’、R3、R3’およびR4は、独立して、H、F、Cl、Br、OH、SH、NH2、NHOH、N3、NO2、CHO、COOH、CN、CONH2、COOR、R、OR、SR、SSR、NHRおよびNR2からなる群より選択され；または、R2およびR2’は一緒になって、R3およびR3’は一緒になって、独立して、＝O、＝Sまたは＝J-Qであり、ここに、JはN、CH、CF、CClまたはCBrであって、QはH、F、Cl、Br、N3またはRであり；
Dは式（III）または（IV）：
2005525358.tif 000006
のヌクレオチド塩基であり；
Z1、Z2およびZ3は、独立して、N、CHまたはC-G3であり；ならびに
G1、G2およびG3は、独立して、H、F、Cl、Br、I、OH、SH、NH2、NHOH、NHNH2、N3、NO、NO2、CHO、COOH、CN、CONH2、CONHR、C（S）NH2、C（S）NHR、COOR、R、OR、SR、NHRおよびNR2からなる群より選択され；G3のうちの2つが分子上に存在する場合、それらは相互に同一または異なってもよい］
【００２１】
また、本発明のそのようなプロドラッグは、式（XVI）の化合物を含む（すなわち、X7〜X10のうちの1つはプロドラッグ置換基R＊でなければならない）：
2005525358.tif 000007
［式中、
X0、X5およびX6は、独立して、O、S、NH、およびCY2からなる群より選択され；
YはH、F、Cl、Br、アルキル、アルケニルおよびアルキニルからなる群より選択され、ここに、アルキル、アルケニルおよびアルキニルは、各々、選択的に、一つまたは複数のヘテロ原子を含むことができ；
X2、X3およびX4は、独立して、O、SおよびSeからなる群より選択され；
X7、X8、X9およびX10は、独立して、H、F、OH、SH、NH2、NHOH、CN、N3、-BH3M＋、R、R＊、OR、SR、SeH、SeR、NHRおよびNR2からなる群より選択され；
X7、X8、X9およびX10の少なくとも1つはR＊であり；
nは0または1であり；
Nuは天然ヌクレオシド、糖修飾ヌクレオシド、塩基修飾ヌクレオシド、および糖および塩基双方の修飾がされたヌクレオシドからなる群より選択され；
ここに、Nuは、Nuの糖部位のCH2を介してX0に結合し；ならびに
Rはアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アシル、およびアラルキルからなる群より選択され、各々は、選択的に、一つまたは複数のヘテロ原子を含んでもよい］
【００２２】
加えて、本発明のヌクレオチド模倣体（すなわち、X7〜X10はプロドラッグ置換基R＊の存在を必要としない）は、D-またはL-ヌクレオチドであってよい式（I）の化合物を含む：
2005525358.tif 000008
［式中、
AはO、S、CY2、NHまたはNRであり；
R4’は-L-R5であり、
LはO、S、NH、NR、CY2O、CY2S、CY2NH、CY2、CY2CY2、CY2OCY2、CY2SCY2、およびCY2NHCY2、CY2SCY2からなる群より選択され、ここに、YはH、F、Cl、Br、アルキル、アルケニル、およびアルキニルからなる群から選択され、ここに、アルキル、アルケニル、およびアルキニルは、選択的に、一つまたは複数のへテロ原子を含有してもよい；
R5は式（II）：
2005525358.tif 000009
のジ-またはトリ-ホスフェート部位であり；
X2、X3およびX4は、独立して、O、S、Se、NHおよびNRからなる群より選択され；
X5およびX6は、独立して、O、S、Se、O2、CY2CO、CHOH、C（OH）2、CH2O、CH2CH2、CH2CHNH2、CH2CH2CHNH2、CY2OCY2、CY2、CRY、CY2CY2、CHR、CC、HC＝CH、NH、NR、NOH、NOR、NNH2およびNNHRからなる群より選択され；
X7、X8、X9およびX10は、独立して、H、F、OH、SH、NH2、NHOH、NHOR、NHNH2、NHNHR、CN、N3、-BH3M＋、R、OR、SR、SeH、SeR、NHRおよびNR2からなる群より選択され；
nは0または1であり；
R1、R2、R2’、R3、R3’およびR4は、独立して、H、F、Cl、Br、OH、SH、NH2、NHOH、N3、NO2、CHO、COOH、CN、CONH2、COOR、R、OR、SR、SSR、NHRおよびNR2からなる群より選択され；または、R2およびR2’は一緒になって、およびR3およびR3’は一緒になって独立して、＝O、＝S、または＝J-Qであり、ここに、JはN、CH、CF、CClまたはCBrであって、QはH、F、Cl、Br、N3またはRであり；
Dは式（III）または（IV）：
2005525358.tif 000010
のヌクレオシド塩基であり；
Z1、Z2およびZ3は、独立して、N、CHまたはC-G3であり；
G1、G2およびG3は、独立して、H、F、Cl、Br、I、OH、SH、NH2、NHOH、NHNH2、N3、NO、NO2、CHO、COOH、CN、CONH2、CONHR、C（S）NH2、C（S）NHR、COOR、R、OR、SR、NHR、およびNR2からなる群より選択され；G3のうちの2つが分子上に存在する場合、それらは相互に同一または異なってよく；ならびに
Rはアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アシルおよびアラルキルからなる群より選択され、各々、選択的に、一つまたは複数のヘテロ原子を含有してよく；
但し、
（1）LがCH2Oであって、Oを介してPに結合している場合、もしX7〜X10のうち一つまたは複数が-BH3M＋、SH、F、SR、R、OR、NH2、NHRおよびNR2から選択されれば、X2〜X6、および残りのX7〜X10は全てがOまたはOHというわけではなく；またはLがCH2Oであって、Oを介してPに結合している場合、もしX7〜X10のうち一つまたは複数がSH、F、SR、R、OR、NH2、NHRおよびNR2から選択されれば、X2〜X6、および残りのX7〜X10は全てがOまたはOHというわけではなく；
（2）LがCH2Oであって、Oを介してPに結合し、かつX7〜X10がOHまたはORである場合、全てのX2〜X4がOというわけではなく；
（3）LがCH2Oであって、Oを介してPに結合する場合、もしX2〜X4のうちの1つまたは複数がS、NH、NR、NHから選択されれば、X5〜X10は全てがOまたはOHというわけではなく、X5〜X10のうちの1つは、X5〜X10の残りがOまたはOHである場合には、Sとはなり得ず；またはLがCH2Oであって、Oを介してPに結合する場合、もしX2〜X4のうちの1つがS、NH、NR、NHから選択されれば、X5〜X10は全てがOまたはOHというわけではなく、X5〜X10のうちの1つは、X5〜X10の残りがOまたはOHである場合には、Sとはなり得ず；またはLがCH2Oであって、Oを介してPに結合する場合、もしX2〜X4のうちの2つがS、NH、NR、NHから選択されれば、X5〜X10は全てがOまたはOHというわけではなく、X5〜X10のうちの1つは、X5〜X10の残りがOまたはOHである場合には、Sとはなり得ず；
（4）LがCH2Oであって、Oを介してPに結合する場合、もし以下のX6-X5の対がCY2-O、CH2O-O、CH2-S、CHMe-O、CHCH2NH2、CO-O、CHOH-O、C（OH）2-O、NH-O、NH-S、NMe-O、NMe-NMe、Nアリール-O、NH-NH、CH2-CH2、CF2-CF2、OCH2O-O、O-CH2、O-CF2、O-NH、O-NMe、O-S、S-O、OO-O、O-SS、CC-O、C＝C-O、またはO2-Oであれば、X2〜X4、およびX7〜X10は全てがOまたはOHというわけではなく、X7〜X10は、X2〜X4、および残りのX7〜X10がOまたはOHである場合には、一つまたは複数のFまたはSEtであり；
（5）LがCH2Oであって、Oを介してPに結合する場合、もしX2＝P-X7がO＝P（O）2BH3-、O＝P（O）2NHR、S＝P（O）2BH3、Se＝P（O）2OH、S＝P（O）2SH、S＝P（O）2NHRおよびSe＝P（O）2SHから選択されれば、X5またはX6の少なくとも1つはOではなく；またはLがCH2Oであって、Oを介してPに結合する場合、もしX2＝P-X7がO＝P（O）2BH3-、O＝P（O）2NHR、S＝P（O）2BH3、Se＝P（O）2OH、S＝P（O）2SH、S＝P（O）2NHRおよびSe＝P（O）2SHから選択されれば、X3〜X6、X8〜X10の少なくとも1つはOまたはOHではなく；
（6）LがCH2OまたはCH2Sであって、各々、OまたはSを介してPに結合している場合、X2〜X10のうちの一つまたは複数はSとはなり得ず；
（7）LがCH2Oであって、Oを介してPに結合し、かつX7〜X10のうちの1つまたは複数がSHである場合、X2〜X4は全てがOまたはOHというわけではなく；またはLがCH2Oであって、Oを介してPに結合し、かつX7〜X10のうちの1つがSHである場合、X2〜X6、および残りのX7〜X10は全てがOまたはOHというわけではなく；またはLがCH2Oであって、Oを介してPに結合し、かつX7〜X10のうちの2つがSHである場合、X2〜X6、および残りのX7〜X10は全てがOまたはOHというわけではなく；
（8）LがCH2Oであって、Oを介してPに結合する場合、もし以下のX6-X5対がCH2-O、O-CH2、NH-O、またはCH2-CH2であれば、X2〜X4、およびX7〜X10は全てがOまたはOHではあり得ず、もしX2〜X4、およびX7〜X10の残りがOまたはOHであれば、X2〜X4、およびX7〜X10は一つまたは複数のSではあり得ず、かつもしX2〜X4、およびX7〜X10の残りがOまたはOHであれば、X2〜X4、およびX7〜X10は一つまたは複数のMeではあり得ず、あるいはLがCH2Oであって、Oを介してPに結合し、かつもし以下のX6-X5対がCH2‐O、O-CH2、NH-O、またはCH2-CH2であれば、X2〜X4の少なくとも1つはOまたはSではなく；あるいはX7〜X10の少なくとも1つはO、SまたはMeではなく；ならびに
（9）LがCH2Oであって、CH2を介してPに結合し、かつもしAがOまたはCH2であって、X10がアルキル、アリール、アルコキシ、アリールオキシ、アルキルアミノ、アリールアミノ、またはグリセロールオキシであれば、X6はメチレンおよび置換メチレンではない］
【００２３】
さらに、本発明のヌクレオチド模倣体（すなわち、X7〜X10はR＊の存在を必要としない）は、式（XVI）の化合物を含む：
2005525358.tif 000011
［式中、
X0、X5およびX6は、独立して、O、S、NH、CY2からなる群より選択され；
X2、X3およびX4は、各々、独立して、O、SまたはSeであり；
X7、X8、X9およびX10は、独立して、H、F、OH、SH、NH2、NHOH、CN、N3、-BH3M＋、R、OR、SR、SeH、SeR、NHR、およびNR2からなる群より選択され；
nは0または1であり；
Nuは天然ヌクレオシド、糖修飾ヌクレオシド、塩基修飾ヌクレオシド、および糖および塩基双方で修飾されたヌクレオシドからなる群より選択され；
ここに、Nuは、Nuの糖部位のCH2を介してX0に結合し；ならびに
Rはアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アシル、およびアラルキルからなる群より選択され、各々、選択的に、一つまたは複数のヘテロ原子を含み；
但し、
（1）LがCH2Oであって、Oを介してPに結合している場合、もしX7〜X10のうち一つまたは複数が-BH3M＋、SH、F、SR、R、OR、NH2、NHR、およびNR2から選択されれば、X2〜X6、および残りのX7〜X10は全てがOまたはOHというわけではなく；あるいはLがCH2Oであって、Oを介してPに結合する場合、もしX7〜X10のうち一つまたは複数がSH、F、SR、R、OR、NH2、NHRおよびNR2から選択されれば、X2〜X6、および残りのX7〜X10は全てがOまたはOHというわけではなく；
（2）LがCH2Oであって、Oを介してPに結合し、かつX7〜X10がOHまたはORである場合、全てのX2〜X4がOというわけではなく；
（3）LがCH2Oであって、Oを介してPに結合する場合、もしX2〜X4のうちの一つまたは複数がS、NH、NR、NHから選択されれば、X5〜X10は全てがOまたはOHというわけではなく、X5〜X10のうちの1つは、X5〜X10の残りがOまたはOHである場合には、Sとはなり得ず；あるいはLがCH2Oであって、Oを介してPに結合する場合、もしX2〜X4のうちの1つが、S、NH、NR、NHから選択されれば、X5〜X10は全てがOまたはOHというわけではなく、かつX5〜X10のうちの1つは、残りのX5〜X10がOまたはOHである場合、Sとはなり得ず；あるいはLがCH2Oであって、Oを介してPに結合する場合、もしX2〜X4のうちの2つがS、NH、NR、NHから選択されれば、X5〜X10は全てがOまたはOHというわけではなく、かつX5〜X10のうちの1つは、残りのX5〜X10がOまたはOHである場合、Sとはなり得ず；
（4）LがCH2Oであって、Oを介してPに結合する場合、もし以下のX6-X5の対がCY2-O、CH2O-O、CH2-S、CHMe-O、CHCH2NH2、CO-O、CHOH-O、C（OH）2-O、NH-O、NH-S、NMe-O、NMe-NMe、Nアリール-O、NH-NH、CH2-CH2、CF2-CF2、OCH2O-O、O-CH2、O-CF2、O-NH、O-NMe、O-S、S-O、OO-O、O-SS、CC-O、C＝C-O、またはO2-Oであれば、X2〜X4、およびX7〜X10は全てがOまたはOHというわけではなく、X7〜X10は、X2〜X4、および残りのX7〜X10がOまたはOHである場合には、一つまたは複数のFまたはSEtではなく；
（5）LがCH2Oであって、Oを介してPに結合する場合、もしX2＝P-X7がO＝P（O）2BH3-、O＝P（O）2NHR、S＝P（O）2BH3、Se＝P（O）2OH、S＝P（O）2SH、S＝P（O）2NHRおよびSe＝P（O）2SHから選択されれば、X5またはX6の少なくとも1つはOではなく；あるいはLがCH2Oであって、Oを介してPに結合する場合、もしX2＝P-X7がO＝P（O）2BH3-、O＝P（O）2NHR、S＝P（O）2BH3、Se＝P（O）2OH、S＝P（O）2SH、S＝P（O）2NHRおよびSe＝P（O）2SHから選択されれば、X3〜X6、X8〜X10の少なくとも1つはOまたはOHではなく；
（6）LがCH2OまたはCH2Sであって、各々、OまたはSを介してPに結合している場合、X2〜X10のうちの一つまたは複数はSとはなり得ず；
（7）LがCH2Oであって、Oを介してPに結合し、かつX7〜X10のうちの一つまたは複数がSHである場合、X2〜X4の全てがOまたはOHというわけではなく；あるいはLがCH2Oであって、Oを介してPに結合し、かつX7〜X10のうちの1つがSHである場合、X2〜X6および残りのX7〜X10は全てがOまたはOHというわけではなく；あるいはLがCH2Oであって、Oを介してPに結合し、かつX7〜X10のうちの2つがSHである場合、X2〜X6、および残りのX7〜X10は全てがOまたはOHというわけではなく；
（8）LがCH2Oであって、Oを介してPに結合する場合、もし以下のX6-X5対がCH2-O、O-CH2、NH-O、またはCH2-CH2であれば、X2〜X4、およびX7〜X10は全てがOまたはOHにはなり得ず、X2〜X4、およびX7〜X10は、もし残りのX2〜X4、およびX7〜X10がOまたはOHであれば、一つまたは複数のSとはなり得ず、かつX2〜X4、およびX7〜X10は、もし残りのX2〜X4、およびX7〜X10がOまたはOHであれば、一つまたは複数のMeとはなり得ず；あるいはLがCH2Oであって、Oを介してPに結合する場合、もし以下のX6-X5対がCH2-O、O-CH2、NH-O、またはCH2-CH2であれば、X2〜X4の少なくとも1つはOまたはSではなく；あるいはX7〜X10の少なくとも1つはO、SまたはMeではなく；ならびに
（9）LがCH2Oであって、CH2を介してPに結合する場合、もしAがOまたはCH2であって、X10がアルキル、アリール、アルコキシ、アリールオキシ、アルキルアミノ、アリールアミノ、またはグリセロールオキシであれば、X6はメチレンおよび置換メチレンではない］
【００２４】
発明の詳細な説明
前記した式（I）のプロドラッグの好ましい態様は以下の式のプロドラッグを含む。
【００２５】
式（V）：
2005525358.tif 000012
［式中、
LはO、S、NH、CY2、CY2CY2、およびCH2CY2からなる群より選択され、ここに、YはH、F、ClまたはBrであり；
X2、X3およびX4はO、SまたはSeであり；
X5およびX6は、独立して、O、S、NH、NR、およびCY2からなる群より選択され；ならびに
X7、X8、X9およびX10は、独立して、H、F、OH、SH、NH2、NHOH、-BH3M＋、R、R＊、OR、SRおよびNHRからなる群より選択される］
【００２６】
式（VI）：
2005525358.tif 000013
［式中、
X0はO、SまたはNHであり；
X2、X3およびX4はOまたはSであり；
X5およびX6は、独立して、O、S、NH、NRおよびCY2からなる群より選択され；
X7、X8、X9およびX10は、独立して、H、F、OH、SH、NH2、NHOH、-BH3M＋、R、R＊、OR、SRおよびNHRからなる群より選択される］
【００２７】
式（VII）：
2005525358.tif 000014
［式中、
X2はOまたはSであり；
X6はNHまたはCY2であり；
X7はH、F、SH、NH2、NHOH、-BH3M＋、R、R＊、SR、およびNHRからなる群より選択され；ならびに
X9およびX10は、独立して、OH、SH、NH2、NHOH、-BH3M＋、R、R＊、OR、SR、およびNHRからなる群より選択され、好ましくはX2はOであって、X7はSH、NH2、-BH3M＋、R、NHR、アルキル、アリール、アルキルアミノまたはアリールアミノである。
【００２８】
式（VIII）：
2005525358.tif 000015
［式中、X9およびX10は、独立して、OH、SH、アルキル、アルコキシ、アリールおよびアリールオキシからなる群より選択され、ここに、X9およびX10は、独立して、OH、アルコキシ、アシルチオエトキシ、アシルオキシメトキシ、1,2-O-ジアシルグリセリルオキシ、および1-O-アルキル-2-O-アシルグリセリルオキシからなる群より選択され；ならびにX6はNH、CHF、CCl2およびCF2からなる群より選択され、最も好ましくは、X9またはX10の少なくとも1つは1,2-O-ジアルキルグリセリルオキシである］
【００２９】
式（IX）：
2005525358.tif 000016
［式中、
X9およびX10は、独立して、OH、アルコキシ、およびアリールオキシからなる群より選択されるか、あるいは
X9およびX10は、独立して、OH、アルコキシ、アシルチオエトキシ、アシルオキシメトキシ、1,2-O-ジアシルグリセリルオキシおよび1-O-アルキル-2-O-アシルグリセリルオキシからなる群より選択され；ならびに
X6はNH、CHF、CCl2およびCF2からなる群より選択される］
【００３０】
式（X）：
2005525358.tif 000017
［式中、
R2はメチル、エチル、ビニル、エチニル、またはヒドロキシメチルであり；
R2’はH、F、OH、OMe、アルキル、メトキシエトキシ、またはNH2であり；
R3’はH、F、OH、またはN3であり；
G1はOHまたはNH2であり；
G2はHまたはMeであり；
X9およびX10は、独立して、OH、アルコキシ、およびアリールオキシからなる群より選択され、あるいはX9およびX10は、独立して、アシルチオエトキシ、アシルオキシメトキシ、1,2-O-ジアシルグリセリルオキシ、1,2-O-ジアルキルグリセリルオキシおよび1-O-アルキル-2-O-アシルグリセリルオキシからなる群より選択される］
【００３１】
式（XI）：
2005525358.tif 000018
［式中、
R2’はH、F、OH、またはOMeであり；
R3はメチル、エチル、ビニル、エチニル、またはヒドロキシメチルであり；
R3’はH、F、OH、またはN3であり；
G1はOHまたはNH2であり；
G2はHまたはMeであり；ならびに
X9およびX10は、独立して、OH、アルコキシ、およびアリールオキシからなる群より選択されるか、あるいはX9およびX10は、独立して、アシルチオエトキシ、アシルオキシメトキシ、1,2-O-ジアシルグリセリルオキシ、1,2-O-ジアルキルグリセリルオキシ、および1-O-アルキル-2-O-アシルグリセリルオキシからなる群より選択される］
【００３２】
式（XII）：
2005525358.tif 000019
［式中、
R2’はH、F、OH、またはOMeであり；
R3’はH、F、OH、またはN3であり；
R4はメチル、エチル、ビニル、エチニル、またはヒドロキシメチルであり；
G1はOHまたはNH2であり；
G2はHまたはMeであり；ならびに
X9およびX10は、独立して、OH、アルコキシ、およびアリールオキシからなる群より選択されるか、あるいはX9およびX10は独立して、アシルチオエトキシ、アシルオキシメトキシ、1,2-O-ジアシルグリセリルオキシ、1,2-O-ジアルキルグリセリルオキシおよび1-O-アルキル-2-O-アシルグリセリルオキシからなる群より選択される］
【００３３】
式（XIII）：
2005525358.tif 000020
［式中、
R2はメチル、エチル、ビニル、エチニル、ヒドロキシメチルまたはハロアルキルであり；
R2’はH、F、OH、OCH3、またはメトキシエトキシであり；
R3’はH、F、OH、N3、NH2、またはCH2OHであり；
G1はOH、NH2、Cl、OMe、NH-シクロプロピル、SH、またはS-アルキルであり；
G2はH、NH2、NHR、F、Cl、BrまたはIであり；
Z1はNまたはCHであり；ならびに
X9およびX10は、独立して、OH、アルコキシおよびアリールオキシからなる群より選択されるか、あるいはX9およびX10は、独立して、アシルチオエトキシ、アシルオキシメトキシ、1,2-O-ジアシルグリセリルオキシ、1,2-O-ジアルキルグリセリルオキシ、および1-O-アルキル-2-O-アシルグリセリルオキシからなる群より選択される］
【００３４】
式（XIV）：
2005525358.tif 000021
［式中、
R2’はH、F、OHまたはOCH3であり；
R3はメチル、エチル、ビニル、エチニル、またはヒドロキシメチルであり；
R3’はH、F、OH、またはN3であり；
G1はOHまたはNH2であり；
G2はHまたはNH2であり；
Z1はNまたはCHであり；ならびに
X9およびX10は、独立して、OH、アルコキシおよびアリールオキシからなる群より選択されるか、あるいはX9およびX10は、独立して、アシルチオエトキシ、アシルオキシメトキシ、1,2-O-ジアシルグリセリルオキシ、1,2-O-ジアルキルグリセリルオキシ、および1-O-アルキル-2-O-アシルグリセリルオキシからなる群より選択される］
【００３５】
式（XV）：
2005525358.tif 000022
［式中、
R2’はH、F、OHまたはOCH3であり；
R3’はH、F、OH、またはN3であり；
R4はメチル、エチル、ビニル、エチニル、またはヒドロキシメチルであり；
G1はOHまたはNH2であり；
G2はHまたはNH2であり；
Z1はNまたはCHであり；ならびに
X9およびX10は、独立して、OH、アルコキシおよびアリールオキシからなる群より選択されるか、あるいはX9およびX10は、独立して、アシルチオエトキシ、アシルオキシメトキシ、1,2-O-ジアシルグリセリルオキシ、1,2-O-ジアルキルグリセリルオキシ、および1-O-アルキル-2-O-アシルグリセリルオキシからなる群より選択される］
【００３６】
式（XVI）の化合物の好ましい態様は以下の式のプロドラッグを含む。
【００３７】
式（XVII）：
2005525358.tif 000023
［式中、
X0およびX6は、独立して、O、S、NH、CH2、CHCl、CHBr、CHF、CCl2、CBr2およびCF2からなる群より選択され；
X2はOまたはSであり；
X7はOH、F、SH、NH2、NHOH、-BH3M＋、R、SR、およびNHRからなる群より選択され；ならびに
X9およびX10は、独立して、OH、SH、NH2、NHOH、-BH3M＋、R、R＊、OR、SRおよびNHRからなる群より選択される］
【００３８】
式（XVII）：
2005525358.tif 000024
［式中、
X0およびX6は、独立して、O、S、NH、CH2、CHCl、CHBr、CHF、CCl2、CBr2、およびCF2からなる群より選択され；
X2はOまたはSであり；
X7はOH、F、SH、NH2、NHOH、-BH3M＋、R、SR、およびNHRからなる群より選択され；ならびに
X9およびX10は、独立して、アシルチオエトキシ、アシルオキシメトキシ、1,2-O-ジアシルグリセリルオキシ、1,2-O-ジアルキルグリセリルオキシおよび1-O-アルキル-2-O-アシルグリセリルオキシからなる群より選択される］
【００３９】
式（XVIII）：
2005525358.tif 000025
［式中、
X6はNH、CH2、CHCl、CHBr、CHF、CCl2、CBr2、およびCF2からなる群より選択され；ならびに
X9およびX10は、独立して、OH、SH、アルキル、アルコキシ、アリールおよびアリールオキシからなる群より選択される］
【００４０】
式（XVIII）：
2005525358.tif 000026
［式中、
X6はNH、CH2、CHCl、CHBr、CHF、CCl2、CBr2、およびCF2からなる群より選択され；ならびに
X9およびX10は、独立して、アシルチオエトキシ、アシルオキシメトキシ、1,2-O-ジアシルグリセロキシ、1,2-O-ジアルキルグリセロキシ、および1-O-アルキル-2-O-アシルグリセロキシからなる群より選択される］
【００４１】
式（XIX）：
2005525358.tif 000027
［式中、X9およびX10は、独立して、OH、SH、アルキル、アルコキシ、アリール、およびアリールオキシからなる群より選択されるか、あるいはX9およびX10は、独立して、アシルチオエトキシ、アシルオキシメトキシ、1,2-O-ジアシルグリセリルオキシ、1,2-O-ジアルキルグリセリルオキシおよび1-O-アルキル-2-O-アシルグリセリルオキシからなる群より選択される］
【００４２】
式（XVI）〜（XIX）のいずれにおいても、Nuは、好ましくは、
アデノシン、
シチジン、
グアノシン、
ウリジン、
2’-デオキシアデノシン、
2’-デオキシシチジン、
2’-デオキシグアノシン、
チミジン、
イノシン、
9-（β-D-アラビノフラノシル）アデニン、
1-（β-D-アラビノフラノシル）シトシン、
9-（β-D-アラビノフラノシル）グアニン、
1-（β-D-アラビノフラノシル）ウラシル、
9-（β-D-アラビノフラノシル）ヒポキサンチン、
1-（β-D-アラビノフラノシル）チミン、
3’-アジド-3’-デオキシチミジン、
3’-アジド-2’,3’-ジデオキシウリジン、
3’-アジド-2’,3’-ジデオキシシチジン、
3’-アジド-2’,3’-ジデオキシアデノシン、
3’-アジド-2’,3’-ジデオキシグアノシン、
3’-アジド-2’,3’-ジデオキシイノシン、
3’-デオキシチミジン、
2’,3’-ジデオキシウリジン、
2’,3’-ジデオキシイノシン、
2’,3’-ジデオキシアデノシン、
2’,3’-ジデオキシシチジン、
2’,3’-ジデオキシグアノシン、
9-（2,3-ジデオキシ-1-β-D-リボフラノシル）-2,6-ジアミノプリン、
3’-デオキシ-2’,3’-ジデヒドロチミジン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシウリジン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシシチジン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシアデノシン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシグアノシン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシイノシン、
3-デアザアデノシン、
3-デアザグアノシン、
3-デアザイノシン、
7-デアザアデノシン、
7-デアザグアノシン、
7-デアザイノシン、
6-アザウリジン、
6-アザチミジン、
6-アザシチジン、
5-アザシチジン、
9-（β-D-リボフラノシル）-6-チオプリン、
6-メチルチオ-9-（β-D-リボフラノシル）プリン、
2-アミノ-9-（β-D-リボフラノシル）-6-チオプリン、
2-アミノ-6-メチルチオ-9-（β-D-リボフラノシル）プリン、
5-フルオロシチジン、
5-ヨードシチジン、
5-ブロモシチジン、
5-クロロシチジン、
5-フルオロウリジン、
5-ヨードウリジン、
5-ブロモウリジン、
5-クロロウリジン、
2’-C-メチルアデノシン、
2’-C-メチルシチジン、
2’-C-メチルグアノシン、
2’-C-メチルイノシン、
2’-C-メチルウリジン、
2’-C-メチルチミジン、
2’-デオキシ-2’-フルオロアデノシン、
2’-デオキシ-2’-フルオロシチジン、
2’-デオキシ-2’-フルオログアノシン、
2’-デオキシ-2’-フルオロウリジン、
2’-デオキシ-2’-フルオロイノシン、
2’-α-フルオロチミジン、
2’-デオキシ-2’-フルオロアラビノアデノシン、
2’-デオキシ-2’-フルオロアラビノシチジン、
2’-デオキシ-2’-フルオロアラビノグアノシン、
2’-デオキシ-2’-フルオロアラビノウリジン、
2’-デオキシ-2’-フルオロアラビノイノシン、
2’-β-フルオロチミジン、
2’-O-メチルアデノシン、
2’-O-メチルシチジン、
2’-O-メチルグアノシン、
2’-O-メチルイノシン、
2’-O-5-ジメチルウリジン、
2’-C-エチニルシチジン、
2’-C-エチニルグアノシン、
2’-C-エチニルウリジン、
2’-C-エチニルイノシン、
2’-C-エチニル-5-メチルウリジン、
3’-C-エチニルアデノシン、
3’-C-エチニルシチジン、
3’-C-エチニルグアノシン、
3’-C-エチニルウリジン、
3’-C-エチニルイノシン、
3’-C-エチニル-5-メチルウリジン、
3’-デオキシアデノシン、
3’-デオキシシチジン、
3’-デオキシグアノシン、
3’-デオキシウリジン、
3’-デオキシイノシン、
4’-C-エチニルアデノシン、
4’-C-エチニルシチジン、
4’-C-エチニルグアノシン、
4’-C-エチニルウリジン、
4’-C-エチニルイノシン、
4’-C-エチニルチミジン、
4’-C-メチルアデノシン、
4’-C-メチルシチジン、
4’-C-メチルグアノシン、
4’-C-メチルウリジン、
4’-C-メチルイノシン、
4’-C-メチルチミジン、
2’-C-メチル-7-デアザアデノシン、
2’-C-メチル-7-デアザグアノシン、
2’-C-メチル-3-デアザアデノシン、
2’-C-メチル-3-デアザグアノシン、
2’-O-メチル-7-デアザアデノシン、
2’-O-メチル-7-デアサグアノシン、
2’-O-メチル-3-デアザアデノシン、
2’-O-メチル-3-デアザグアノシン、
2’-C-メチル-6-アザウリジン、
2’-C-メチル-5-フルオロウリジン、
2’-C-メチル-5-フルオロシチジン、
2’-C-メチル-2-クロロアデノシン、
2’-デオキシ-7-デアザアデノシン、
2’-デオキシ-3-デアザアデノシン、
2’-デオキシ-7-デアサグアノシン、
2’-デオキシ-3-デアザグアノシン、
2’-デオキシ-6-アザウリジン、
2’-デオキシ-5-フルオロウリジン、
2’-デオキシ-5-フルオロシチジン、
2’-デオキシ-5-ヨードウリジン、
2’-デオキシ-5-ヨードシチジン、
2’-デオキシ-2-クロロアデノシン、
2’-デオキシ-2-フルオロアデノシン、
3’-デオキシ-7-デアザアデノシン、
3’-デオキシ-7-デアザグアノシン、
3’-デオキシ-3-デアザアデノシン、
3’-デオキシ-3-デアザグアノシン、
3’-デオキシ-6-アザウリジン、
3’-デオキシ-5-フルオロウリジン、
3’-デオキシ-5-ヨードウリジン、
3’-デオキシ-5-フルオロシチジン、
3’-デオキシ-2-クロロアデノシン、
2’,3’-ジデオキシ-7-デアザアデノシン、
2’,3’-ジデオキシ-7-デアザグアノシン、
2’,3’-ジデオキシ-3-デアザアデノシン、
2’,3’-ジデオキシ-3-デアザグアノシン、
2’,3’-ジデオキシ-6-アザウリジン、
2’,3’-ジデオキシ-5-フルオロウリジン、
2’,3’-ジデオキシ-5-フルオロウリジン、
2’,3’-ジデオキシ-5-ヨードシチジン、
2’,3’-ジデオキシ-2-クロロアデノシン、
2’,3’-ジデオキシ-β-L-シチジン、
2’,3’-ジデオキシ-β-L-アデノシン、
2’,3’-ジデオキシ-β-L-グアノシン、
3’-デオキシ-β-L-チミジン、
2’,3’-ジデオキシ-5-フルオロ-β-L-シチジン、
β-L-チミジン、
2’-デオキシ-β-L-シチジン、
2’-デオキシ-β-L-アデノシン、
2’-デオキシ-β-L-グアノシン、
2’-デオキシ-β-L-イノシン、
β-L-シチジン、
β-L-アデノシン、
β-L-グアノシン、
β-L-ウリジン、
β-L-イノシン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシ-β-L-シチジン、
2’,3’-ジデヒドロ-3’-ジデオキシ-β-L-チミジン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシ-β-L-アデノシン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシ-β-L-グアノシン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシ-β-L-5-フルオロシチジン、
2’-デオキシ-2’,2’-ジフルオロシチジン、
9-（β-D-アラビノフラノシル）-2-フルオロアデニン、
2’-デオキシ-2’（E）-フルオロメチレンシチジン、
2’-デオキシ-2’（Z）-フルオロメチレンシチジン、
（−）-2’,3’-ジデオキシ-3’-チアシチジン、
（＋）-2’,3’-ジデオキシ-3’-チアシチジン、
1-β-D-リボフラノシル-1,2,4-トリアゾール-3-カルボキシアミド、
1-β-L-リボフラノシル-1,2,4-トリアゾール-3-カルボキシアミド、
1-β-D-リボフラノシル-1,3-イミダゾリウム-5-オレート、
1-β-L-リボフラノシル-1,3-イミダゾリウム-5-オレート、
1-β-D-リボフラノシル-5-エチニルイミダゾール-4-カルボキシアミド、
1-β-L-リボフラノシル-5-エチニルイミダゾール-4-カルボキシアミド、
1-（2-デオキシ-2-フルオロ-β-D-アラビノフラノシル）-5-ヨードウラシル、
1-（2-デオキシ-2-フルオロ-β-D-アラビノフラノシル）-5-ヨードシトシン、
1-（2-デオキシ-2-フルオロ-β-L-アラビノフラノシル）-5-メチルウラシル、
1-β-D-アラビノフラノシル-E-5-（2-ブロモビニル）ウラシル、
E-5-（2-ブロモビニル）-2’-デオキシウリジン、
5-トリフルオロメチルチミジン、
1-β-D-アラビノフラノシル-5-プロピニルウラシル、
1-（2-デオキシ-2-フルオロ-1-β-D-アラビノフラノシル）-5-エチルウラシル、
2’,3’-ジデオキシ-3’-フルオログアノシン、
3’-デオキシ-3’-フルオロチミジン、
（±）-（1α,2β,3α）-9-［2,3-ビス（ヒドロキシメチル）-1-シクロブチル］アデニン、
（±）-（1α,2β,3α）-9-［2,3-ビス（ヒドロキシメチル）-1-シクロブチル］グアニン、
（±）-（1β,2α,3β）-9-［2,3-ビス（ヒドロキシメチル）-1-シクロブチル］グアニン、
（±）-（1β,2α,3β）-9-［2,3-ビス（ヒドロキシメチル）-1-シクロブチル］アデニン、
（1R,3S,4R）-9-（3-ヒドロキシ-4-ヒドロキシメチルシクロペント-1-イル）グアニン、
（1S,2R,4R）-9-（1-ヒドロキシ-2-ヒドロキシメチルシクロペント-4-イル）グアニン、
（2R,4R）-9-（2-ヒドロキシメチル-1,3-ジオキソラン-4-yl）-2,6-ジアミノプリン、
（2R,4R）-1-（2-ヒドロキシメチル-1,3-ジオキソラン-4-yl）シトシン、
（2R,4R）-9-（2-ヒドロキシメチル-1,3-ジオキソラン-4-yl）グアニン、
（2R,4R）-1-（2-ヒドロキシメチル-1,3-ジオキソラン-4-yl）-5-フルオロシトシン、
（1R,2S,4S）-9-（4-ヒドロキシ-3-ヒドロキシメチル-2-メチレンシクロペント-4-イル）グアニンおよび
（1S,3R,4S）-9-（3-ヒドロキシ-4-ヒドロキシメチル-5-メチレンシクロペント-1-イル）グアニン
から選択される。
【００４３】
また、本発明は、選択的に、一つまたは複数の他の有効成分と、および/または薬学的に許容される担体と組み合わせてもよい、治療上有効量の前記化合物のいずれか、またはその薬学的に許容される塩を含む薬学的組成物に関する。さらに、前記化合物のいずれも、治療上有効量の前記化合物のいずれかをそれを必要とする対象に投与する段階を含む、微生物感染または増殖障害治療方法で用いることができる。
【００４４】
特許請求された発明のもう1つの態様において、式（I）の化合物の好ましいヌクレオチド模倣体は以下のものを含む。
【００４５】
式（VI）：
2005525358.tif 000028
[式中、
X0はO、SまたはNHであり；
X2、X3およびX4はOまたはSであり
X5およびX6は、独立して、O、S、NH、NR、およびCI2からなる群より選択され；
X7、X8、X9およびX10は、独立して、H、F、OH、SH、NH2、NHOH、-BH3M+、R、OR、SRおよびNHRからなる群より選択される］
【００４６】
式（VII）：
2005525358.tif 000029
[式中、
X2はOまたはSであり；
X6はNHまたはCI2であり；
X7はH、F、SH、NH2、NHOH、-BH3M+、R、SR、およびNHRからなる群より選択され；ならびに
X9およびX10は、独立して、OH、SH、NH2、NHOH、-BH3M+、R、OR、SR、およびNHRからなる群より選択され、好ましくはX2はOであり；ならびに
好ましくは、X7はSH、NH2、-BH3M+、アルキル、アリール、アルキルアミノ、およびアリールアミノからなる群より選択されるか、あるいはX7はSH、NH2、-BH3M+、R、およびNHRからなる群より選択される］
【００４７】
式（VIII）：
2005525358.tif 000030
[式中、X9およびX10は、独立して、OH、SH、アルキル、アルコキシ、アリール、およびアリールオキシからなる群より選択される］
【００４８】
式（IX）：
2005525358.tif 000031
[式中、X9およびX10は、独立して、OH、アルコキシおよびアリールオキシからなる群より選択される］
【００４９】
式（X）：
2005525358.tif 000032
[式中、
R2はメチル、エチル、ビニル、エチニル、またはヒドロキシメチルであり；
R2’はH、F、OH、OMe、アルキル、メトキシエトキシ、またはNH2であり；
R3’はH、F、OH、またはN3であり；
G1はOHまたはNH2であり；
G2はHまたはMeであり；ならびに
X9およびX10は、独立して、OH、アルコキシ、およびアリールオキシからなる群より選択される］
【００５０】
式（XI）：
2005525358.tif 000033
[式中、
R2’はH、F、OH、またはOMeであり；
R3はメチル、エチル、ビニル、エチニル、またはヒドロキシメチルであり；
R3’はH、F、OH、またはN3であり；
G1はOHまたはNH2であり；
G2はHまたはMeであり；ならびに
X9およびX10は、独立して、OH、アルコキシ、およびアリールオキシからなる群より選択される］
【００５１】
式（XII）：
2005525358.tif 000034
[式中、
R2’はH、F、OH、またはOMeであり；
R3’はH、F、OH、またはN3であり；
R4はメチル、エチル、ビニル、エチニル、またはヒドロキシメチルであり；
G1はOHまたはNH2であり；
G2はHまたはMeであり；ならびに
X9およびX10は、独立して、OH、アルコキシ、およびアリールオキシである］
【００５２】
式（XIII）：
2005525358.tif 000035
[式中、
R2はメチル、エチル、ビニル、エチニル、ヒドロキシメチル、またはハロアルキルであり；
R2’はX、F、OH、OCH3、またはメトキシエトキシであり；
R3’はH、F、OH、N3、NH2、またはCH2OHであり；
G1はOH、NH2、Cl、OMe、NH-シクロプロピル、SH、またはS-アルキルであり；
G2はH、NH2、NHR、F、Cl、Br、またはIであり；
Z1はNまたはCHであり；ならびに
X9およびX10は、独立して、OH、アルコキシおよびアリールオキシからなる群より選択される］
【００５３】
式（XIV）：
2005525358.tif 000036
[式中、
R2'はH、F、OHまたはOCH3であり；
R3はメチル、エチル、ビニル、エチニルまたはヒドロキシメチルであり；
R3’はH、F、OH、またはN3であり；
G1はOHまたはNH2であり；
G2はHまたはNH2であり；
Z1はNまたはCHであり；
X9およびX10は、独立して、OH、アルコキシおよびアリールオキシからなる群より選択される］
【００５４】
式（XV）；
2005525358.tif 000037
[式中、
R2'はH,F、OHまたはOCH3であり；
R3’はH、F、OH、またはN3であり；
R4はメチル、エチル、ビニル、エチニル、またはヒドロキシメチルであり；
G1はOH、NH2であり；
G2はHまたはNH2であり；
Z1はNまたはCHであり；ならびに
X9およびX10は、独立して、OH、アルコキシおよびアリールオキシからなる群より選択される］
【００５５】
特許請求する発明のもう1つの好ましい態様において、式（XVI）の化合物の好ましいヌクレオチド模倣体は以下のものを含む。
【００５６】
式（XVII）：
2005525358.tif 000038
[式中、
X0およびX6は、独立して、O、S、NH、およびCY2からなる群より選択され；
X2はOまたはSであり；
X7はOH、F、SH、NH2、NHOH、-BH3M+、R、SR、およびNHRからなる群より選択され；ならびに
X9およびX10は、独立して、OH、SH、NH2、NHOH、-BH3M+、R、OR、SRおよびNHRからなる群より選択される］
【００５７】
式（XVIII）：
2005525358.tif 000039
[式中、
X6はNHまたはCY2であり；ならびに
X9およびX10は、独立して、OH、SH、アルキル、アルコキシ、アリールおよびアリールオキシからなる群より選択される］
【００５８】
式（XIX）：
2005525358.tif 000040
[式中、X9およびX10は、独立して、OH、SH、アルキル、アルコキシ、アリールおよびアリールオキシからなる群より選択される］
【００５９】
いずれの式（XVI）〜（XIX）においても、Nuは好ましくは、
アデノシン、
シチジン、
グアノシン、
ウリジン、
2’-デオキシアデノシン、
2’-デオキシシチジン、
2’-デオキシグアノシン、
チミジン、
イノシン、
9-（β-D-アラビノフラノシル）アデニン、
1-（β-D-アラビノフラノシル）シトシン、
9-（β-D-アラビノフラノシル）グアニン、
1-（β-D-アラビノフラノシル）ウラシル、
9-（β-D-アラビノフラノシル）ヒポキサンチン、
1-（β-D-アラビノフラノシル）チミン、
3’-アジド-3’-デオキシチミジン、
3’-アジド-2’,3’-ジデオキシウリジン、
3’-アジド-2’,3’-ジデオキシシチジン、
3’-アジド-2’,3’-ジデオキシアデノシン、
3’-アジド-2’,3’-ジデオキシグアノシン、
3’-アジド-2’,3’-ジデオキシイノシン、
3’-デオキシチミジン、
2’,3’-ジデオキシウリジン、
2’,3’-ジデオキシイノシン、
2’,3’-ジデオキシアデノシン、
2’,3’-ジデオキシシチジン、
2’,3’-ジデオキシグアノシン、
9-（2,3-ジデオキシ-1-β-D-リボフラノシル）-2,6-ジアミノプリン、
3’-デオキシ-2’,3’-ジデヒドロチミジン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシウリジン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシシチジン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシアデノシン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシグアノシン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシイノシン、
3-デアザアデノシン、
3-デアザグアノシン、
3-デアザイノシン、
7-デアザアデノシン、
7-デアザグアノシン、
7-デアザイノシン、
6-アザウリジン、
6-アザチミジン、
6-アザシチジン、
5-アザシチジン、
9-（β-D-リボフラノシル）-6-チオプリン、
6-メチルチオ-9-（β-D-リボフラノシル）プリン、
2-アミノ-9-（β-D-リボフラノシル）-6-チオプリン、
2-アミノ-6-メチルチオ-9-（β-D-リボフラノシル）プリン、
5-フルオロシチジン、
5-ヨードシチジン、
5-ブロモシチジン、
5-クロロシチジン、
5-フルオロウリジン、
5-ヨードウリジン、
5-ブロモウリジン、
5-クロロウリジン、
2’-C-メチルアデノシン、
2’-C-メチルシチジン、
2’-C-メチルグアノシン、
2’-C-メチルイノシン、
2’-C-メチルウリジン、
2’-C-メチルチミジン、
2’-デオキシ-2’-フルオロアデノシン、
2’-デオキシ-2’-フルオロシチジン、
2’-デオキシ-2’-フルオログアノシン、
2’-デオキシ-2’-フルオロウリジン、
2’-デオキシ-2’-フルオロイノシン、
2’-α-フルオロチミジン、
2’-デオキシ-2’-フルオロアラビノアデノシン、
2’-デオキシ-2’-フルオロアラビノシチジン、
2’-デオキシ-2’-フルオロアラビノグアノシン、
2’-デオキシ-2’-フルオロアラビノウリジン、
2’-デオキシ-2’-フルオロアラビノイノシン、
2’-β-フルオロチミジン、
2’-O-メチルアデノシン、
2’-O-メチルシチジン、
2’-O-メチルグアノシン、
2’-O-メチルイノシン、
2’-O-5-ジメチルウリジン、
2’-C-エチニルシチジン、
2’-C-エチニルグアノシン、
2’-C-エチニルウリジン、
2’-C-エチニルイノシン、
2’-C-エチニル-5-メチルウリジン、
3’-C-エチニルアデノシン、
3’-C-エチニルシチジン、
3’-C-エチニルグアノシン、
3’-C-エチニルウリジン、
3’-C-エチニルイノシン、
3’-C-エチニル-5-メチルウリジン、
3’-デオキシアデノシン、
3’-デオキシシチジン、
3’-デオキシグアノシン、
3’-デオキシウリジン、
3’-デオキシイノシン、
4’-C-エチニルアデノシン、
4’-C-エチニルシチジン、
4’-C-エチニルグアノシン、
4’-C-エチニルウリジン、
4’-C-エチニルイノシン、
4’-C-エチニルチミジン、
4’-C-メチルアデノシン、
4’-C-メチルシチジン、
4’-C-メチルグアノシン、
4’-C-メチルウリジン、
4’-C-メチルイノシン、
4’-C-メチルチミジン、
2’-C-メチル-7-デアザアデノシン、
2’-C-メチル-7-デアザグアノシン、
2’-C-メチル-3-デアザアデノシン、
2’-C-メチル-3-デアザグアノシン、
2’-O-メチル-7-デアザアデノシン、
2’-O-メチル-7-デアサグアノシン、
2’-O-メチル-3-デアザアデノシン、
2’-O-メチル-3-デアザグアノシン、
2’-C-メチル-6-アザウリジン、
2’-C-メチル-5-フルオロウリジン、
2’-C-メチル-5-フルオロシチジン、
2’-C-メチル-2-クロロアデノシン、
2’-デオキシ-7-デアザアデノシン、
2’-デオキシ-3-デアザアデノシン、
2’-デオキシ-7-デアサグアノシン、
2’-デオキシ-3-デアザグアノシン、
2’-デオキシ-6-アザウリジン、
2’-デオキシ-5-フルオロウリジン、
2’-デオキシ-5-フルオロシチジン、
2’-デオキシ-5-ヨードウリジン、
2’-デオキシ-5-ヨードシチジン、
2’-デオキシ-2-クロロアデノシン、
2’-デオキシ-2-フルオロアデノシン、
3’-デオキシ-7-デアザアデノシン、
3’-デオキシ-7-デアザグアノシン、
3’-デオキシ-3-デアザアデノシン、
3’-デオキシ-3-デアザグアノシン、
3’-デオキシ-6-アザウリジン、
3’-デオキシ-5-フルオロウリジン、
3’-デオキシ-5-ヨードウリジン、
3’-デオキシ-5-フルオロシチジン、
3’-デオキシ-2-クロロアデノシン、
2’,3’-ジデオキシ-7-デアザアデノシン、
2’,3’-ジデオキシ-7-デアザグアノシン、
2’,3’-ジデオキシ-3-デアザアデノシン、
2’,3’-ジデオキシ-3-デアザグアノシン、
2’,3’-ジデオキシ-6-アザウリジン、
2’,3’-ジデオキシ-5-フルオロウリジン、
2’,3’-ジデオキシ-5-フルオロウリジン、
2’,3’-ジデオキシ-5-ヨードシチジン、
2’,3’-ジデオキシ-2-クロロアデノシン、
2’,3’-ジデオキシ-β-L-シチジン、
2’,3’-ジデオキシ-β-L-アデノシン、
2’,3’-ジデオキシ-β-L-グアノシン、
3’-デオキシ-β-L-チミジン、
2’,3’-ジデオキシ-5-フルオロ-β-L-シチジン、
β-L-チミジン、
2’-デオキシ-β-L-シチジン、
2’-デオキシ-β-L-アデノシン、
2’-デオキシ-β-L-グアノシン、
2’-デオキシ-β-L-イノシン、
β-L-シチジン、
β-L-アデノシン、
β-L-グアノシン、
β-L-ウリジン、
β-L-イノシン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシ-β-L-シチジン、
2’,3’-ジデヒドロ-3’-ジデオキシ-β-L-チミジン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシ-β-L-アデノシン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシ-β-L-グアノシン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシ-β-L-5-フルオロシチジン、
2’-デオキシ-2’,2’-ジフルオロシチジン、
9-（β-D-アラビノフラノシル）-2-フルオロアデニン、
2’-デオキシ-2’（E）-フルオロメチレンシチジン、
2’-デオキシ-2’（Z）-フルオロメチレンシチジン、
（−）-2’,3’-ジデオキシ-3’-チアシチジン、
（＋）-2’,3’-ジデオキシ-3’-チアシチジン、
1-β-D-リボフラノシル-1,2,4-トリアゾール-3-カルボキシアミド、
1-β-L-リボフラノシル-1,2,4-トリアゾール-3-カルボキシアミド、
1-β-D-リボフラノシル-1,3-イミダゾリウム-5-オレート、
1-β-L-リボフラノシル-1,3-イミダゾリウム-5-オレート、
1-β-D-リボフラノシル-5-エチニルイミダゾール-4-カルボキシアミド、
1-β-L-リボフラノシル-5-エチニルイミダゾール-4-カルボキシアミド、
1-（2-デオキシ-2-フルオロ-β-D-アラビノフラノシル）-5-ヨードウラシル、
1-（2-デオキシ-2-フルオロ-β-D-アラビノフラノシル）-5-ヨードシトシン、
1-（2-デオキシ-2-フルオロ-β-L-アラビノフラノシル）-5-メチルウラシル、
1-β-D-アラビノフラノシル-E-5-（2-ブロモビニル）ウラシル、
E-5-（2-ブロモビニル）-2’-デオキシウリジン、
5-トリフルオロメチルチミジン、
1-β-D-アラビノフラノシル-5-プロピニルウラシル、
1-（2-デオキシ-2-フルオロ-1-β-D-アラビノフラノシル）-5-エチルウラシル、
2’,3’-ジデオキシ-3’-フルオログアノシン、
3’-デオキシ-3’-フルオロチミジン、
（±）-（1α,2β,3α）-9-［2,3-ビス（ヒドロキシメチル）-1-シクロブチル］アデニン、
（±）-（1α,2β,3α）-9-［2,3-ビス（ヒドロキシメチル）-1-シクロブチル］グアニン、
（±）-（1β,2α,3β）-9-［2,3-ビス（ヒドロキシメチル）-1-シクロブチル］グアニン、
（±）-（1β,2α,3β）-9-［2,3-ビス（ヒドロキシメチル）-1-シクロブチル］アデニン、
（1R,3S,4R）-9-（3-ヒドロキシ-4-ヒドロキシメチルシクロペント-1-イル）グアニン、
（1S,2R,4R）-9-（1-ヒドロキシ-2-ヒドロキシメチルシクロペント-4-イル）グアニン、
（2R,4R）-9-（2-ヒドロキシメチル-1,3-ジオキソラン-4-yl）-2,6-ジアミノプリン、
（2R,4R）-1-（2-ヒドロキシメチル-1,3-ジオキソラン-4-yl）シトシン、
（2R,4R）-9-（2-ヒドロキシメチル-1,3-ジオキソラン-4-yl）グアニン、
（2R,4R）-1-（2-ヒドロキシメチル-1,3-ジオキソラン-4-yl）-5-フルオロシトシン、
（1R,2S,4S）-9-（4-ヒドロキシ-3-ヒドロキシメチル-2-メチレンシクロペント-4-イル）グアニンおよび
（1S,3R,4S）-9-（3-ヒドロキシ-4-ヒドロキシメチル-5-メチレンシクロペント-1-イル）グアニン
から選択される。
【００６０】
また、本発明は、選択的に、一つまたは複数の他の有効成分と、および/または薬学的に許容される担体と組み合わせてもよい、治療上有効量の前記ヌクレオチド模倣体化合物、その薬学的に許容される塩、またはその薬学的に許容されるプロドラッグのいずれかを含む薬学的組成物を含む。さらに、前記模倣体のいずれも、治療上有効量の前記ヌクレオチド模倣体化合物のいずれかをそれを必要とする対象に投与する段階を含む微生物感染または増殖障害の治療方法で用いることができる。
【００６１】
ある用語の定義および前記態様のさらなる記載を以下に掲げる。
【００６２】
A. 定義
用語部位は、特記しない限り、分子の部分をいう。部位は、限定されるものではないが、官能基、非環状鎖、ホスフェート模倣体、芳香族環、炭水化物、炭素環、複素環またはプロドラッグであり得る。
【００６３】
「天然」ヌクレオシドは、天然に生じるものである。本発明の目的では、以下のヌクレオシドが天然ヌクレオシドと定義される。アデノシン、シチジン、グアノシン、ウリジン、2’-デオキシアデノシン、2’-デオキシシチジン、2’-デオキシグアノシン、チミジン、およびイノシン。
【００６４】
塩基という用語は、特記しない限り、ヌクレオシドまたはヌクレオチドの塩基部位（ヌクレオベース）をいう。塩基部位は、ヌクレオシドまたはヌクレオチドの複素環部分である。式（I）または（XVI）のヌクレオチド模倣体の塩基部位はピリミジンの誘導体またはアナログ、プリンの誘導体またはアナログ、または他の複素環であり得る。ヌクレオシド塩基は2以上の水素原子を含んでもよく、一つまたは複数の末端置換基を含んでもよい。ヌクレオシド塩基は、β-D-およびβ-L-ヌクレオシドおよびヌクレオチド双方が生じ得るように、ヌクレオチド模倣体の糖部位に結合される。
【００６５】
糖という用語は、ヌクレオシドまたはヌクレオチドのデオキシリボフラノース部分のリボフラノースをいう。式（I）のヌクレオチド模倣体の糖部位は、リボフラノースのC1-、C2-、C3-、C4およびC-5-1に一つまたは複数の置換基を含むことができる。置換基はリボフラノースのα-またはβ-面いずれかに向けることができる。リボフラノースのC-1位置における置換基と考えることができるヌクレオシド塩基は、糖のβ-面に向かう。前記β-面は、天然β-D-ヌクレオシドのプリンまたはピリミジン塩基が存在するリボフラノースの側である。前記α-面は前記β-面と反対の糖の側である。本発明のヌクレオチド模倣体（XVI）の糖部位はリボフラノースおよびその誘導体に限定されず、その代わり、それは炭水化物、炭水化物アナログ、炭素環、または他のリボフラノースアナログであり得る。
【００６６】
糖修飾ヌクレオチドという用語は、修飾された糖部位を含むヌクレオシドをいう。
【００６７】
塩基修飾ヌクレオシドという用語は、天然ヌクレオシドに見出される塩基部位に対して、修飾された塩基部位を含むヌクレオシドをいう。
【００６８】
用語ホスフェート模倣体は、特記しない限り、ホスフェートアナログをいい、これはホスホネート、ホスホチオエート、ホスホセレネート、セレノホスフェート、チオホスフェート、P-ボラノホスフェート、またはホスホルアミデード、またはその組合せであり得る。用語ジホスフェート模倣体およびトリホスフェート模倣体は、具体的には、ジホスフェートアナログおよびトリホスフェートアナログを各々いい、これは、ホスフェート模倣体の少なくとも1つ、ジホスフェートおよびトリホスフェートのブリッジング部位における修飾の1つ、または非ブリッジングホスフェート酸素の置換を含む。ブリッジング部位における、すなわち、式（II）および（XVI）のX5およびX6位置における修飾は、他の原子、またはS、Se、O2、NH、NHR、NR、CH2、CHF、CHCl、CHBr、CF2、CCl2、CBr2、CHR、CYCO2、CH2O、CHOH、C（OH）2、CH2CH2、CC、CH＝CH、CH2CH2CHNH2、CH2CHNH2、CY2OCY2、CY2、CY2CY2およびCR2のような官能性によるOの置換を含む、ここに、Rはアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アシル、およびアラルキルからなる群より選択され、各々は、選択的に、一つまたは複数のヘテロ原子を含む。例えば、式（II）のX7〜X10位置における非ブリッジングホスフェート酸素は、H、F、OH、SH、NH2、NHOH、NHOR、NHNH2、NHNHR、CN、N3、-BH3M+、R、OR、SR、SeH、SeR、NHR、NR2およびR＊を含めた種々の置換基によって置換することができ、ここに、Rは前記定義の通りであり、ここに、R＊はプロドラッグ置換基である。M+はカチオン、好ましくは、Ca2+、アンモニウム、トリアルキルアンモニウムまたはテトラアルキルアンモニウム、例えば、NH4+、Et3NH+、Bu3NH+、およびBu4N+のような薬学的に許容されるカチオンである。
【００６９】
ジホスフェート模倣体およびトリホスフェート模倣体におけるα-P、β-Pおよびγ-Pは、それらがキラルリンになる場合には、独立して、RまたはSいずれかの立体配置を採ることができる。
【００７０】
本明細書中で用いるように、特記しない限り、ヌクレオチド模倣体という用語は、ヌクレオシド二リン酸模倣体および/またはヌクレオシド三リン酸模倣体をいう。それらは、各々、NDP模倣体およびNTP模倣体ということができる。
【００７１】
アルキルという用語は、特記しない限り、C1〜C18の飽和直鎖、分岐鎖または環状炭化水素をいう。アルキルは、限定されるものではないが、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、シクロプロピル、n-ブチル、イソブチル、t-ブチル、シクロブチル、n-ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、シクロペンチル、n-ヘキシル、シクロヘキシル、ドデシル、テトラデシル、ヘキサデシル、およびオクタデシルを含む。
【００７２】
アルケニルという用語は、特記しない限り、少なくとも1つの炭素-炭素二重結合を含有し、直鎖、分岐鎖または環状であり得るC2〜C18の不飽和炭化水素をいう。アルケニルは、限定されるものではないが、オレフィン、プロペニル、アリル、1-ブテニル、3-ブテニル、1-ペンテニル、4-ペンテニル、1-ヘキセニル、およびシクロヘキセニルを含むことができる。
【００７３】
アルキニルという用語は、特記しない限り、少なくとも1つの炭素-炭素三重結合を含み、直鎖、分岐鎖または環状であり得るC2〜C18の不飽和炭化水素をいう。アルキニルは、限定されるものではないが、エチニル、1-プロピニル、2-プロピニル、1-ブチニル、および3-ブチニルを含むことができる。
【００７４】
アリールという用語は、特記しない限り、芳香族またはヘテロ芳香族炭化水素部位をいう。アリールは、限定されるものではないが、選択的に一つまたは複数の置換基を含んでよいフェニル、ビフェニル、ナフチル、ピリジニル、ピロリルおよびイミダゾリルを含むことができる。置換基は、限定されるものではないが、ヒドロキシ、アミノ、チオ、ハロゲン、シアノ、ニトロ、アルコキシ、アルキルアミノ、アルキルチオ、ヒドロキシカルボニル、アルコキシカルボニル、およびカルバモイルを含むことができる。
【００７５】
アラルキルという用語は、特記しない限り、アリールおよびアルキル、アルケニル、またはアルキニル双方を含む部位をいう。アラルキルは芳香族部分または非芳香族部分いずれかを介して結合することができる。アラルキルは、限定されるものではないが、ベンジル、フェネチル、フェニルプロピル、メチルフェニル、エチルフェニル、プロピルフェニル、ブチルフェニル、フェニルエテニル、フェニルプロペニル、フェニルエチニル、およびフェニルプロピニルを含むことができる。
【００７６】
アシルという用語は、特記しない限り、アルキルカルボニルをいう。アシルは、限定されるものではないが、ホルミル、アセチル、フルオロアセチル、ジフルオロアセチル、トリフルオロアセチル、クロロアセチル、ジクロロアセチル、トリクロロアセチル、プロピオニル、ベンゾイル、トルオイル、ブチリル、イソブチリル、ピバロイル、アシルチオエトキシ、アシルオキシメトキシ、1,2-O-ジアシルグリセリルオキシ、1,2-O-ジアルキルグリセリルオキシ、および1-O-アルキル-2-O-アシルグリセリルオキシを含むことができる。
【００７７】
へテロ原子という用語は、酸素、硫黄、窒素、セレン、ボランまたはハロゲンをいう。一つまたは複数のヘテロ原子がアルキル、アルケニル、アルキニル、アシル、アリールまたはアラルキルに結合する場合、新しい官能基が生じ得る。例えば、一つまたは複数のヘテロ原子がアルキルに結合する場合、限定されるものではないが、フルオロアルキル、クロロアルキル、ブロモアルキル、ヨードアルキル、アルコキシ、ヒドロキシアルキル、アルキルアミノ、アミノアルキル、アルキルチオ、チオアルキル、アジドアルキル、シアノアルキル、ニトロアルキル、カルバモイルアルキル、カルボキシルアルキル、アシルアルキル、アシルチオエトキシ、アシルオキシメトキシ、1,2-O-ジアシルグリセリルオキシ、1,2-O-ジアルキルグリセリルオキシ、および1-O-アルキル-2-O-アシルグリセリルオキシを含めた置換アルキルが生じ得る。
【００７８】
ハロゲンまたはハロという用語は、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素をいう。
【００７９】
官能性という用語は置換基をいう。官能性は、限定されるものではないが、ヒドロキシ、アミノ、スルフヒドリル、アジド、シアノ、ハロ、ニトロ、ヒドロキシカルボニル、アルコキシカルボニル、またはカルボキシル（保護されているかまたは保護されていない）を含むことができる。
【００８０】
式（I）のR4’はリンカー部位（L）およびホスフェート部位（R5）の組合せ（-L-R5）を表わす。Lは、通常、糖およびホスフェート模倣体部位にいずれかの側を通じて結合することができる1-原子または2-原子リンカーである。R5はジホスフェート模倣体またはトリホスフェート模倣体を表わす。
【００８１】
式（I）および（XVI）のRは一価置換基であり、塩基、糖およびホスフェート模倣体部位に存在する。Rは、前記定義の、各々、選択的に、一つまたは複数のヘテロ原子を含んでもよいアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アシル、およびアラルキルからなる群より選択される。
【００８２】
R＊はプロドラッグ置換基である。用語プロドラッグとは、特記しない限り、一つまたは複数のX7〜X10がR＊である場合、式（I）または（XVI）のヌクレオチド模倣体のマスクされた（保護された）形態をいう。ヌクレオチド模倣体のプロドラッグはジホスフェート（X7、X8、X10）模倣体またはトリホスフェート（X7〜X10）模倣体部位またはホスフェート部位の負の電荷を全部または部分的にマスクすることができるか、あるいはホスフェートまたはホスフェート模倣体部位に結合したヘテロ原子置換アルキル、アリールまたはアリールアルキル（W、後記参照）をマスクして、細胞への薬物吸収および/または薬物送達を高めることができる。プロドラッグはリパーゼ、エステラーゼ、レダクターゼ、オキシダーゼ、ヌクレアーゼのような細胞酵素によって、または加水分解のような化学的切断によって遊離して、ヌクレオチド模倣体を好ましくは細胞内で放出（遊離）させることができる。プロドラッグは、しばしば、切断可能プロドラッグという。プロドラッグ置換基は、限定されるものではないが、炭素原子（ホスホネート）、窒素原子（ホスホアミデート）または酸素原子（ホスホエステル）を介してホスフェート部位またはホスフェート模倣体部位に結合したタンパク質、抗生物質（および抗生物質断片）、D-およびL-アミノ酸、炭素原子（ホスホネート）、窒素原子（ホスホアミデート）、または酸素原子（ホスホエステル）、を介してホスフェート部位またはホスフェート模倣体部位に結合したペプチド（10アミノ酸まで）、炭素原子（ホスホネート）、窒素原子（ホスホアミデート）、または酸素原子（ホスホエステル）を介してホスフェート部位またはホスフェート模倣体部位に結合した薬物部位、コレステロール、葉酸、ビタミン、ポリアミン、炭水化物、ポリエチレングリコール（PEG）、シクロサリジェニル、末端ホスフェートまたはホスフェート模倣体部位（γまたはβ）への1,3-ホスホジエステル、1,3-ホスホアミデート/ホスホエステルもしくは1,3-ホスホアミデート結合を伴う、あるいはα,βまたはβ,γホスフェート部位またはホスフェート模倣体部位の間を結合する、ヘテロ原子置換を伴うまたは伴わない置換された4〜8-員環、アシルチオエトキシ、（SATE）RCOSCH2CH2O-、RCOSCH2CH2O-W-O-、RCOSCH2CH2O-W-S-、RCOSCH2CH2O-W-NH-、RCOSCH2CH2O-W-、RCOSCH2CH2O-W-CY2-、アシルオキシメトキシ、RCOOCH2O-、RCOOCH2O-W-O-、RCOOCH2O-W-S-、RCOOCH2O-W-NH-、RCOOCH2O-W-、RCOOCH2O-W-CY2-、アルコキシカルボニルオキシメトキシ、ROCOOCH2O-、ROCOOCH2O-W-O-、ROCOOCH2O-W-S-、ROCOOCH2O-W-NH-、ROCOOCH2O-W-、ROCOOCH2O-W-CY2-、アシルチオエチルジチオエトキシ（DTE）RCOSCH2CH2SSCH2CH2O-、RCOSCH2CH2SSCH2CH2O-W-、RCOSCH2CH2SSCH2CH2O-W-O-、RCOSCH2CH2SSCH2CH2O-W-S-、RCOSCH2CH2SSCH2CH2O-W-NH-、RCOSCH2CH2SSCH2CH2O-CY2-、アシルオキシメチルフェニルメトキシ、（PAOB）RCO2-C6H4-CH2-O-RCO2-C6H4-CH2-O-W-、RCO2-C6H4-CH2-O-W-O-、RCO2-C6H4-CH2-O-W-S-、RCO2-C6H4-CH2-O-W-NH-、RCO2-C6H4-CH2-O-W-CY2-、1,2-O-ジアシル-グリセリルオキシ、RCOO-CH2-CH（OCOR）-CH2O-、1,2-O-ジアルキル-グリセリルオキシ、RO-CH2-CH（OR）-CH2O-、1,2-S-ジアルキル-グリセリルオキシ、RS-CH2-CH（SR）-CH2O-、1-O-アルキル-2-O-アシル-グリセリルオキシ、RO-CH2-CH（OCOR）-CH2O-、1-S-アルキル-2-O-アシル-グリセリルオキシ-RS-CH2-CH（OCOR）-CH2O-、1-O-アシル-2-O-アルキル-グリセリルオキシ、RCOO-CH2-CH（OR）-CH2O-、1-O-アシル-2-S-アルキル-グリセリルオキシ-RCOO-CH2-CH（SR）-CH2O-、またはジ-またはトリ-ホスフェート模倣体をインビボで遊離するヌクレオシドジ-またはトリ-ホスフェート模倣体に炭素、窒素または酸素原子を介して結合したいずれかの置換基を含む。
【００８３】
プロドラッグ部位の組合せはヌクレオシドジ-またはトリ-ホスフェート模倣体上の一つまたは複数のX7〜X10位置に結合（コンジュゲート）させることができる。Wは前記したアルキル、アリール、アラルキル、または複素環である。
【００８４】
微生物感染という用語は細菌、寄生虫、ウイルスまたは真菌によって引き起こされた感染をいう。そのような感染を引き起こす微生物の例は、アカントアメーバ、アフリカ眠り病（トリパノソーマ症）、アメーバ症、アメリカトリパノソーマ症（チャガス病）、Bilharzia（住血吸虫症）、クリプトスポリジウム症（下痢病、Cryptosporidium Parvum）、ジアルジア鞭毛虫症（下痢病、ランブル鞭毛虫）、A型、B型、C型、D型、E型肝炎、リーシュマニア症（皮膚痛みおよび内臓）、マラリア（熱帯熱マラリア原虫）、腸炎菌感染（胃痙攣、下痢および発熱）、結核（結核菌）、水痘（ニワトリ痘）、黄熱、肺炎、尿管感染（クラミジアおよびマイコプラズマ）、髄膜炎および髄膜炎細菌敗血症、皮膚および柔軟組織感染（黄色ブドウ球菌）、下部呼吸器管感染（細菌病原体またはC型肝炎）。
【００８５】
微生物によって引き起こされた通常の感染をさらに以下のチャートで解説する。
2005525358.tif 000041
【００８６】
薬学的に許容される担体という用語は、本発明の負に荷電したヌクレオチド模倣体を細胞に送達するための担体として働く薬学的処方をいう。リポソーム、ポリエチレンイミンおよびカチオン性脂質はそれらの担体の例である。
【００８７】
B. 化学的合成
本発明のヌクレオチド模倣体は、当業者によって、ヌクレオシドおよびヌクレオチド化学の実施における公知の方法を用いて調製することができる。以下の記載は、本発明のヌクレオチド模倣体の調製の代表的なものを示すために掲げる。
【００８８】
ヌクレオチド模倣体の調製用の新規なヌクレオシド
本発明のヌクレオチド模倣体を調製するのに用いられる新規なヌクレオシドは公表された公知の手法によって合成することができるか、あるいはよく確立された合成方法によって調製することができる。（Chemistry of Nucelosides and Nucleotides 第1巻、第2巻、第3巻、Townsend編、Plenum Press,1988,1991,1994）；Handbook of Nucleoside Synthesis by Vorbrueggen Ruh-Pohlenz,John Wiley & Sons,Inc.,2001；The Organic Chemistry of Nucleic Acids by Yoshihisa Mizuno,Elsevier,1986）。ヌクレオシドはその対応するジフォスフェート模倣体、トリホスフェート模倣体に確立されたリン酸化方法によって変換することができる。
【００８９】
新規なヌクレオシドの調製のための一般的なアプローチの1つは以下の通りである。1.商業的に入手できない1-、2-、3-、4-、5-置換フラノース誘導体およびアナログを含めた適切に保護された修飾糖は合成される必要がある；2.修飾された糖を適切に置換されたプリンまたはピリミジン誘導体およびアナログと縮合させて、修飾されたヌクレオシドを得る；3.塩基および/または糖部位に対する反応を介して、得られたヌクレオシドをヌクレオシドレベルでさらに誘導体化することができる。また、かなりしばしば、天然ヌクレオシドを直接的に修飾して、塩基修飾および糖修飾ヌクレオシドを得る。別のアプローチを用いて合成されなければならないであろうヌクレオシドアナログがある。最大効率のためには、ヌクレオシドは溶液または固相平行合成を介して調製することができる。以下の代表的な例（スキーム1）は前記プロセスを示すことが出来る。1-O-アセチルリブフラノースiを6-クロロ-2-ヨードプリンと縮合させてヌクレオシドiiが得られ、これをまず温和な条件下で6-クロロの求核置換に供し、次いで、激しい条件下の求核置換に付してヨードを置き換える。得られた化合物iiiを脱保護してヌクレオシドivを得る。ヌクレオチド模倣体の調製のために出発物質として用いるには、5'-位置における部分的な脱保護はより好都合であろう。従って、リボースの2’-、3’-および5'-ヒドロキシ基は異なる保護基で保護することができ、選択的な脱保護を達成することができる。ここに、R’、R’’およびR’’’は、ハロゲン、R、NHR、NR2、ORまたはSRであってよい置換基を表わし、ここに、Rは選択的に一つまたは複数のヘテロ原子を持ってよいアルキル、アルケニル、アルキニルである。
【００９０】
スキーム1
2005525358.tif 000042
【００９１】
以前の刊行物は、適切な保護および置換で、ヌクレオシド塩基との縮合で用いることができるリボフラノース誘導体、シクロペンチル誘導体、チオリボフラノース誘導体、およびアザリボフラノース誘導体を含めた種々のリボフラノース誘導体を報告している。文献におけるよく確立された手法および方法は、本発明で用いる修飾された糖の調製で用いることができる（Sanhviら、Carbohydrate Modificatios in Anitesense Research,ACS Symposium Series,No.580,American Chemical Society,Washington,DC,1994）。非常に多数の2-および3-置換リボフラノースアナログがよく記載されており、それに従って容易に合成することができる（Hattoriら、J.Med.Chem.1996,39,5005-5011；Girardetら、J.Med.Chem.2000,43,3704-3713））。多数の4-および5-置換糖も報告されており、前記手法および方法は本発明で用いる修飾された糖の調製で有用である（Gunicら、Bioorg.Med.Chem.2000,9,163-170；Wangら、Tetrahedron Lett.1997,38,2393-2396）。4-チオ糖および4-アザ糖の調製のための方法も利用できる（Rassuら、J.Med.Chem.1997,40,168-180；Leydierら、Nucleosides Nucleotides 1994,13,2035-2050）。シクロペンチル炭素環糖は炭素環ヌクレオシドを調製するのに用いられており、前記調製手法もよく記載されている（Marquez,In Advances in Antiviral Drug Design,De Clercq E.Ed.；JAI press Inc.Vol.2,1996；pp89-146）。
【００９２】
前記したリボフラノースおよびシクロペンチル糖に加え、本発明のヌクレオチド模倣体の調製用の新規なヌクレオシドを形成するのにやはり用いることができる他のタイプの新規な糖がある。従って、本発明のヌクレオチド模倣体の糖部位は、1,2-（ジヒドロメチル）-1-エチルシクロプロプ-1-イル（a,b）、3,4-（ジヒドロメチル）-2-オキサシクロブト-1-イル（c）、2,3-（ジヒドロキシメチル）シクロブト‐1-イル（d）、3-ヒドロキシメチル‐2,4-ジオキサシクロペント-1-イル（e）、3-ヒドロキシメチル-2-オキサ-4-チアシクロペント-1-イル（f）、3-ヒドロキシメチル-2-チア-4-オキサシクロペント-1-イル（g）、3-ヒドロキシメチル-2-メチレンシクロペント-1-イル（h）、4-ヒドロキシメチル-2-シクロペンテン-1-イル（i）、および2,3-ジデオキシ-2,3-ジデヒドロ-β-D-リボフラノシル（j）からなる群より選択することができる。これらの糖部位の構造は以下のチャートに示される。前記チャートにおいては、開いた結合部位が、ヌクレオシド塩基が結合する部位である。これらの糖アナログまたはこれらの糖部位を含む新規なヌクレオシドの合成は以前に報告されている（
2005525358.tif 000043
）。
2005525358.tif 000044
【００９３】
ヌクレオシド塩基としての種々のプリンアナログ、ピリミジンアナログ、および他の複素環はよく記載されている（Chemistry of Nucleosides and Nucleotides Vol 1,2,3,edited by Townsend,Plenum Press,1988,1991,1994）。ヌクレオシドを生じさせるための糖とヌクレオシド塩基との縮合はヌクレオシド化学において最も頻繁に使用させる反応である。よく確立された手法および方法が文献で見出すことができる（Vorbruggenら、Chem.Ber.1981,114,1234-1268,1279-1286；Wilsonら、Synthesis,1995,1465-1479）。1.リボヌクレオシドの調製でしばしば用いられる、1-O-アセチルリボフラノース誘導体およびシリル化ヌクレオシド塩基の間のトリメチルシリルトリフレート-触媒カップリング反応；2.2’-デオキシリボヌクレオシドを調製するのにしばしば用いられる1-O-メチルまたは1-O-アセチルリボフラノース誘導体およびシリル化ヌクレオシド塩基の間の塩化スズ-触媒カップリング反応；3.リボヌクレオシドおよび2'-デオキシリボヌクレオシド双方の調製用の水素化ナトリウムのような塩基の存在下でのヌクレオシド塩基による1-ハロ糖のSN2型置換；ならびに4.溶媒無くしての糖およびヌクレオシド塩基の間の、しばしばは用いられないが依然として有用な融合反応を含めた、広く用いられるいくつかのタイプの標準縮合反応がある。
【００９４】
非常に多数の公知のヌクレオシドが、プリンおよびピリミジンヌクレオシドの修飾から調製される。修飾は糖および/またはヌクレオシド塩基に対してなすことができる。単純な広く用いられる反応は、水酸化物、アンモニア、硫化水素、アルコキシド、アミン、アルキルチオール、ヒドラジン、ヒドロキシアミン、アジド、シアニドおよび水素化物のような種々の求核試薬によるハロプリンまたはハロピリミジン塩基の求核置換である。このタイプの反応は、2-置換プリンヌクレオシド、6-置換プリンヌクレオシド、8-置換プリンヌクレオシド、2,6-二置換プリンヌクレオシド、2,8-二置換プリンヌクレオシド、6,8-二置換プリンヌクレオシド、2,6,8-三置換プリンヌクレオシドの調製で非常に有用であり得る（Halbfingerら、J.Med.Chem.1999,42,5325-5337,Linら、J.Med.Chem.1985,28,1481-1485；Bressiら、J.Med.Chem.2000,43,4135-4150）。これらの置換反応は、7-デアザプリンヌクレオシド、7-デアザ-8-アザプリンヌクレオシド、8-アザプリンヌクレオシド、3-デアザプリンヌクレオシド、3-デアザ-8-アザプリンヌクレオシド、および3,8-ジデアザプリンヌクレオシドのようなプリンヌクレオシドアナログまで容易に拡大される。例えば、多数の7-デアザ-7-置換プリンヌクレオシドがそのような置換を介して調製されている（Ugarkarら、J.Med.Chem.2000,43,2894-2905）。同一方法が、4-置換ピリミジンヌクレオシド、5-置換ピリミジンヌクレオシド、4,5-二置換ピリミジンヌクレオシド、5-置換6-アザピリミジンヌクレオシド、5-置換6-アザピリミジンヌクレオシド、および4,5-二置換6-アザピリミジンヌクレオシドの調製で用いることができる。
【００９５】
合成されたヌクレオシドの糖部位はさらに修飾することができる。ヌクレオシドの糖部位を修飾するのに用いることができる種々の反応がある。頻繁に用いられる反応は脱酸素化、酸化/付加、置換およびハロゲン化を含む。脱酸素化は2、-デオキシ-、3、-デオキシ-、および2’,3’-ジデオキシ-ヌクレオシドの調製で有用である。広く用いられる試薬はクロロチオのギ酸フェニルであり、これはヌクレオシドのヒドロキシと反応してチオノカルボネートを生じる。チオノカルボネートの水素化トリブチルスズおよびAIBNでの処理により、脱酸素化ヌクレオシドを得る。酸化/付加は、ヒドロキシ基のカルボニル基への変換、続いての求核付加を含み、その結果、C-アルキル化ヌクレオシドおよびC-置換ヌクレオシドを得る。前記置換はアルキルによるヒドロキシプロトンの単純な置換であり得るか、ヒドロキシルの脱離基への変換、続いての求核置換であり得る。脱離基は通常はハロゲン、メシレート、トシレート、ニシレートまたはトリフレートである。種々の求核試薬を用いることができ、その結果、2-または3-置換ヌクレオシドが得られる。ハロゲン化を用いて、1’-ハロ-、2’-ハロー、3’-ハロ-、または4’-ハロヌクレオシドを調整することが出来る。塩素化およびフッ素化は通常に用いられ、重要なフルオロ糖およびクロロ-糖ヌクレオシドが得られる。
【００９６】
臨床的に用いられるヌクレオシド薬物は細胞酵素によってリン酸化することができ、塩基対の間のワトソン-クリック水素結合を維持することができる。しかしながら、合成される非常に多数の新規なヌクレオシドは細胞酵素によってリン酸化することができず、インビトロまたはインビボ生物学的活性を示さないであろう。いくつかの不活性ヌクレオシドを活性ヌクレオチド模倣体に変換し、いくつかの中程度に活性なものを優れたヌクレオチド模倣体に変換するのは非常に価値があろう。本発明で提供する1つのアプローチは、ヌクレオシドをヌクレオチドジホスフェート模倣体またはヌクレオシドトリホスフェート模倣体に変換することであり、細胞リン酸化がもはや必要でないので、それ自体は活性な化学体であり得る。
【００９７】
いくつかのヌクレオチド模倣体は炭水化物-ホスフェート模倣体と複素環との反応から調製することができるが、本発明のヌクレオチド模倣体のほとんどは、限定されるものではないが、以下の、
アデノシン、
シチジン、
グアノシン、
ウリジン、
2’-デオキシアデノシン、
2’-デオキシシチジン、
2’-デオキシグアノシン、
チミジン、
イノシン、
9-（β-D-アラビノフラノシル）アデニン、
1-（β-D-アラビノフラノシル）シトシン、
9-（β-D-アラビノフラノシル）グアニン、
1-（β-D-アラビノフラノシル）ウラシル、
9-（β-D-アラビノフラノシル）ヒポキサンチン、
1-（β-D-アラビノフラノシル）チミン、
3’-アジド-3’-デオキシチミジン、
3’-アジド-2’,3’-ジデオキシウリジン、
3’-アジド-2’,3’-ジデオキシシチジン、
3’-アジド-2’,3’-ジデオキシアデノシン、
3’-アジド-2’,3’-ジデオキシグアノシン、
3’-アジド-2’,3’-ジデオキシイノシン、
3’-デオキシチミジン、
2’,3’-ジデオキシウリジン、
2’,3’-ジデオキシイノシン、
2’,3’-ジデオキシアデノシン、
2’,3’-ジデオキシシチジン、
2’,3’-ジデオキシグアノシン、
9-（2,3-ジデオキシ-1-β-D-リボフラノシル）-2,6-ジアミノプリン、
3’-デオキシ-2’,3’-ジデヒドロチミジン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシウリジン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシシチジン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシアデノシン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシグアノシン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシイノシン、
3-デアザアデノシン、
3-デアザグアノシン、
3-デアザイノシン、
7-デアザアデノシン、
7-デアザグアノシン、
7-デアザイノシン、
6-アザウリジン、
6-アザチミジン、
6-アザシチジン、
5-アザシチジン、
9-（β-D-リボフラノシル）-6-チオプリン、
6-メチルチオ-9-（β-D-リボフラノシル）プリン、
2-アミノ-9-（β-D-リボフラノシル）-6-チオプリン、
2-アミノ-6-メチルチオ-9-（β-D-リボフラノシル）プリン、
5-フルオロシチジン、
5-ヨードシチジン、
5-ブロモシチジン、
5-クロロシチジン、
5-フルオロウリジン、
5-ヨードウリジン、
5-ブロモウリジン、
5-クロロウリジン、
2’-C-メチルアデノシン、
2’-C-メチルシチジン、
2’-C-メチルグアノシン、
2’-C-メチルイノシン、
2’-C-メチルウリジン、
2’-C-メチルチミジン、
2’-デオキシ-2’-フルオロアデノシン、
2’-デオキシ-2’-フルオロシチジン、
2’-デオキシ-2’-フルオログアノシン、
2’-デオキシ-2’-フルオロウリジン、
2’-デオキシ-2’-フルオロイノシン、
2’-α-フルオロチミジン、
2’-デオキシ-2’-フルオロアラビノアデノシン、
2’-デオキシ-2’-フルオロアラビノシチジン、
2’-デオキシ-2’-フルオロアラビノグアノシン、
2’-デオキシ-2’-フルオロアラビノウリジン、
2’-デオキシ-2’-フルオロアラビノイノシン、
2’-β-フルオロチミジン、
2’-O-メチルアデノシン、
2’-O-メチルシチジン、
2’-O-メチルグアノシン、
2’-O-メチルイノシン、
2’-O-5-ジメチルウリジン、
2’-C-エチニルシチジン、
2’-C-エチニルグアノシン、
2’-C-エチニルウリジン、
2’-C-エチニルイノシン、
2’-C-エチニル-5-メチルウリジン、
3’-C-エチニルアデノシン、
3’-C-エチニルシチジン、
3’-C-エチニルグアノシン、
3’-C-エチニルウリジン、
3’-C-エチニルイノシン、
3’-C-エチニル-5-メチルウリジン、
3’-デオキシアデノシン、
3’-デオキシシチジン、
3’-デオキシグアノシン、
3’-デオキシウリジン、
3’-デオキシイノシン、
4’-C-エチニルアデノシン、
4’-C-エチニルシチジン、
4’-C-エチニルグアノシン、
4’-C-エチニルウリジン、
4’-C-エチニルイノシン、
4’-C-エチニルチミジン、
4’-C-メチルアデノシン、
4’-C-メチルシチジン、
4’-C-メチルグアノシン、
4’-C-メチルウリジン、
4’-C-メチルイノシン、
4’-C-メチルチミジン、
2’-C-メチル-7-デアザアデノシン、
2’-C-メチル-7-デアザグアノシン、
2’-C-メチル-3-デアザアデノシン、
2’-C-メチル-3-デアザグアノシン、
2’-O-メチル-7-デアザアデノシン、
2’-O-メチル-7-デアサグアノシン、
2’-O-メチル-3-デアザアデノシン、
2’-O-メチル-3-デアザグアノシン、
2’-C-メチル-6-アザウリジン、
2’-C-メチル-5-フルオロウリジン、
2’-C-メチル-5-フルオロシチジン、
2’-C-メチル-2-クロロアデノシン、
2’-デオキシ-7-デアザアデノシン、
2’-デオキシ-3-デアザアデノシン、
2’-デオキシ-7-デアサグアノシン、
2’-デオキシ-3-デアザグアノシン、
2’-デオキシ-6-アザウリジン、
2’-デオキシ-5-フルオロウリジン、
2’-デオキシ-5-フルオロシチジン、
2’-デオキシ-5-ヨードウリジン、
2’-デオキシ-5-ヨードシチジン、
2’-デオキシ-2-クロロアデノシン、
2’-デオキシ-2-フルオロアデノシン、
3’-デオキシ-7-デアザアデノシン、
3’-デオキシ-7-デアザグアノシン、
3’-デオキシ-3-デアザアデノシン、
3’-デオキシ-3-デアザグアノシン、
3’-デオキシ-6-アザウリジン、
3’-デオキシ-5-フルオロウリジン、
3’-デオキシ-5-ヨードウリジン、
3’-デオキシ-5-フルオロシチジン、
3’-デオキシ-2-クロロアデノシン、
2’,3’-ジデオキシ-7-デアザアデノシン、
2’,3’-ジデオキシ-7-デアザグアノシン、
2’,3’-ジデオキシ-3-デアザアデノシン、
2’,3’-ジデオキシ-3-デアザグアノシン、
2’,3’-ジデオキシ-6-アザウリジン、
2’,3’-ジデオキシ-5-フルオロウリジン、
2’,3’-ジデオキシ-5-フルオロウリジン、
2’,3’-ジデオキシ-5-ヨードシチジン、
2’,3’-ジデオキシ-2-クロロアデノシン、
2’,3’-ジデオキシ-β-L-シチジン、
2’,3’-ジデオキシ-β-L-アデノシン、
2’,3’-ジデオキシ-β-L-グアノシン、
3’-デオキシ-β-L-チミジン、
2’,3’-ジデオキシ-5-フルオロ-β-L-シチジン、
β-L-チミジン、
2’-デオキシ-β-L-シチジン、
2’-デオキシ-β-L-アデノシン、
2’-デオキシ-β-L-グアノシン、
2’-デオキシ-β-L-イノシン、
β-L-シチジン、
β-L-アデノシン、
β-L-グアノシン、
β-L-ウリジン、
β-L-イノシン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシ-β-L-シチジン、
2’,3’-ジデヒドロ-3’-ジデオキシ-β-L-チミジン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシ-β-L-アデノシン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシ-β-L-グアノシン、
2’,3’-ジデヒドロ-2’,3’-ジデオキシ-β-L-5-フルオロシチジン、
2’-デオキシ-2’,2’-ジフルオロシチジン、
9-（β-D-アラビノフラノシル）-2-フルオロアデニン、
2’-デオキシ-2’（E）-フルオロメチレンシチジン、
2’-デオキシ-2’（Z）-フルオロメチレンシチジン、
（−）-2’,3’-ジデオキシ-3’-チアシチジン、
（＋）-2’,3’-ジデオキシ-3’-チアシチジン、
1-β-D-リボフラノシル-1,2,4-トリアゾール-3-カルボキシアミド、
1-β-L-リボフラノシル-1,2,4-トリアゾール-3-カルボキシアミド、
1-β-D-リボフラノシル-1,3-イミダゾリウム-5-オレート、
1-β-L-リボフラノシル-1,3-イミダゾリウム-5-オレート、
1-β-D-リボフラノシル-5-エチニルイミダゾール-4-カルボキシアミド、
1-β-L-リボフラノシル-5-エチニルイミダゾール-4-カルボキシアミド、
1-（2-デオキシ-2-フルオロ-β-D-アラビノフラノシル）-5-ヨードウラシル、
1-（2-デオキシ-2-フルオロ-β-D-アラビノフラノシル）-5-ヨードシトシン、
1-（2-デオキシ-2-フルオロ-β-L-アラビノフラノシル）-5-メチルウラシル、
1-β-D-アラビノフラノシル-E-5-（2-ブロモビニル）ウラシル、
E-5-（2-ブロモビニル）-2’-デオキシウリジン、
5-トリフルオロメチルチミジン、
1-β-D-アラビノフラノシル-5-プロピニルウラシル、
1-（2-デオキシ-2-フルオロ-1-β-D-アラビノフラノシル）-5-エチルウラシル、
2’,3’-ジデオキシ-3’-フルオログアノシン、
3’-デオキシ-3’-フルオロチミジン、
（±）-（1α,2β,3α）-9-［2,3-ビス（ヒドロキシメチル）-1-シクロブチル］アデニン、
（±）-（1α,2β,3α）-9-［2,3-ビス（ヒドロキシメチル）-1-シクロブチル］グアニン、
（±）-（1β,2α,3β）-9-［2,3-ビス（ヒドロキシメチル）-1-シクロブチル］グアニン、
（±）-（1β,2α,3β）-9-［2,3-ビス（ヒドロキシメチル）-1-シクロブチル］アデニン、
（1R,3S,4R）-9-（3-ヒドロキシ-4-ヒドロキシメチルシクロペント-1-イル）グアニン、
（1S,2R,4R）-9-（1-ヒドロキシ-2-ヒドロキシメチルシクロペント-4-イル）グアニン、
（2R,4R）-9-（2-ヒドロキシメチル-1,3-ジオキソラン-4-yl）-2,6-ジアミノプリン、
（2R,4R）-1-（2-ヒドロキシメチル-1,3-ジオキソラン-4-yl）シトシン、
（2R,4R）-9-（2-ヒドロキシメチル-1,3-ジオキソラン-4-yl）グアニン、
（2R,4R）-1-（2-ヒドロキシメチル-1,3-ジオキソラン-4-yl）-5-フルオロシトシン、
（1R,2S,4S）-9-（4-ヒドロキシ-3-ヒドロキシメチル-2-メチレンシクロペント-4-イル）グアニンまたは
（1S,3R,4S）-9-（3-ヒドロキシ-4-ヒドロキシメチル-5-メチレンシクロペント-1-イル）グアニン、
を含めたヌクレオシドから調製される。
【００９８】
ヌクレオチド模倣体
ヌクレオシドのヌノレオシド二リン酸またはヌクレオシド三リン酸への変換は、公開された手法に従って達成することができる。ある種のヌクレオシド二リン酸模倣体およびヌクレオシド三リン酸模倣体も報告されている。本発明の多くのヌクレオチド模倣体は、公表された同様のアプローチによって、または有機リン化学の周知の知識によって調製することができる。スキーム3および4は、各々、ヌクレオシド二リン酸模倣体およびヌクレオシド三リン酸模倣体の調製のための一般的方法を示す。
【００９９】
本発明のヌクレオチドジホスフェート模倣体およびヌクレオシド三リン酸模倣体のほとんどは、保護されたリボヌクレチシドvが例として用いられるスキーム2および3で示された方法を用いて調製することができる。リボヌクレオシドvは、5’-位置にヨード、トシレートまたはトリフレートのような脱離基を有するヌクレオシド誘導体viに変換される。viとピロホスフェートまたはジホスフェート模倣体のトリ-またはテトラアルキルアンモニウム塩との反応により、ヌクレオシド二リン酸模倣体viiが得られ、これは脱保護に供されて、ヌクレオシド二リン酸模倣体viiiを得る。または、viiは、ヌクレオシドのvと、メチレンジホスホネートテトラクロリデートのようなジホスフェート模倣体クロリデートとの反応、および続いての加水分解から調製することができる。スキーム3においては、化合物vはヌクレオシドホスフェートまたはホスファイトixの活性化形態に変換され、これをピロホスフェートまたはジホスフェート模倣体のトリ-またはテトラアルキルアンモニウム塩で処理して、ヌクレオシド三リン酸模倣体xを得る。または、xは、viiと、モノホスフェートまたはモノホスフェート模倣体のトリ-またはテトラアルキルアンモニウム塩との反応から調製することができる。xの脱保護により、ヌクレオシド三リン酸模倣体xiが得られる。ここに、R’はアセチル、ベンゾイル、ベンジル、イソプロピリデン、シリル基、トリチル、またはジメトキシトリチルのような保護基を表わし；X’はハロゲン、およびスルホネートを含めた脱離基であり；APはモノホスフェートイミダゾレートのような活性化されたホスフェート、ビス（ジイソプロピルアミノ酸）ホスフィンのような活性ホスフィン、または活性化ホスファイトを表わし；Y’はO、S、NH、置換されたアミノ、メチレン、エチレン、およびハロメチレンであり；Y’’はH、OH、SH、NH2、F、N3、CN、および-BH3M＋を含めた種々の一価置換基であり得、または選択により一つまたは複数のヘテロ原子を含有してもよいアルキル、アルコキシ、アルケニル、およびアルキニルから選択される。スキーム2および3で示された一般的方法に加えて、他のより頻繁には用いられていない方法があり、これも、本発明のヌクレオチド模倣体を調製するのに用いられる。方法のいくつかを以下の記載に示す。
【０１００】
スキーム2  ヌクレオチド二リン酸模倣体の調製用の一般的方法
2005525358.tif 000045
【０１０１】
スキーム3  ヌクレオチド三リン酸模倣体の調製用の一般的方法
2005525358.tif 000046
【０１０２】
ヌクレオチド模倣体およびそれらのプロドラッグの精製および分析
化合物は、10×160mm Mono Qカラム（Pharmacia）を用いるアニオン交換（AX）クロマトグラフィーによって精製した。初期条件は典型的には0〜35mM NaClであった。溶出グラジエントは、典型的には、6.5ml/分における2〜3カラム容量における0〜35mM〜350mM NaClから1M NaClへの直線グラジエントであった。50mMトリス、pH8の一定濃度を精製を通じて維持した。標的化合物を含有するアニオン交換クロマトグラフィーからの画分を収集し、10ml/分の流速で、Luna C18 250×21mmカラム（Phenomenex）を用いる逆相（RP）クロマトグラフィーによって脱塩した。溶出グラジエントは、一般に、酢酸トリエチルアンモニウムの一定濃度（50mM）における20〜60分での0〜20％から95％のメタノールであった。AX-HPLC精製を必要としない化合物は逆相HPLCのみによって精製した。しかしながら、実施例セクションにおけるほとんどのヌクレオチド模倣体は特記しない限り、単にHPLCによって示されるイオン-交換HPLCおよび逆相HPLC双方を用いて精製した。
【０１０３】
ヌクレオチド模倣体およびそれらのプロドラッグのマススペクトルおよび純度は、ThermoFinnigan（San Jose,CA）Deca XP plusでのオン-ラインHPLC質量分析を用いて測定した。Phenomenex Luna（C18（2）またはc5）、75×2mm、3-um粒子サイズをRP HPLCで用いた。10mM NNDMHA、pH7中のAcCNの0〜50％直線グラジエント（15分）を負イオン化モードでのマススペクトル検出を用い直列で行った。窒素ガスおよび空気ネブライザーを用いて電子スプレーを生じさせた。150〜1500の質量範囲を典型的にはサンプリングした。
【０１０４】
ヌクレオシド5’-二リン酸模倣体の調製
多くの場合に、種々のアプローチおよび反応を説明するために3’-アジド-3’-デオキシチミジンを例として用いる。後に示すアプローチおよび方法は一般的なものであり、本発明の他のヌクレオチド模倣体の調製に適応できるが、いくつかの場合には、ヌクレオシドは適当な保護が必要であろう。詳細な手法は実施例のセクションに掲げる。
【０１０５】
ヌクレオシド5’-二リン酸模倣体の調製は、ヌクレオシドと修飾されたジホスホテトラクロリデートCl2P（O）-X-P（O）Cl2（X＝NH、CH2、CF2、CCl2、CHFなど）との反応を介して容易に達成することができる。例えば、2’-デオキシ-2’-フルオロメチレンシチジンをトリクロロ［（ジクロロホスホリル）イミド］ホスホランおよびメチレンジホスホテトラクロリデートと反応させて、加水分解の後に、各々、2’-デオキシ-2’-フルオロメチレンシチジン5’-イミドジホスフェート（3）および2’-デオキシ-2’-フルオロメチレンシチジン5’-メチレンジホスホネート（4）を得た。同様に、ヌクレオシドエチレンジホスホネート80を調製した。2’-デオキシ-2’,2’-ジフルオロシチジン5’-ジホスフェート模倣体（5〜7,81）および3’-アジド-3’-デオキシチミジン5’-イミドジホスフェート（8）を含めた多数の他のヌクレオシド5’ジホスフェート模倣体を同様の反応を通じて調製した。
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【０１０６】
別のアプローチはヌクレオシドの5’-ヒドロキシを脱離基に変換し、これをジホスフェート模倣体のテトラブチルアンモニウム塩と反応させてヌクレオシド二リン酸模倣体を得るものである。例えば、3’-アジド-3’-デオキシチミジンを5’-トシレート9に変換し、これをジフルオロメチレンジホスホネートのテトラブチルアンモニウム塩と反応させて、3’-アジド-3’-デオキシチミジン5’-（ジフルオロメチレン）ジホスホネート（10）を得た。
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【０１０７】
3’-アジド-3’-デオキシチミジン5’-α-P-ボラノ-β-P-メチルジホスフェート（13）は活性化されたホスホルアミダイト12を介して調製した。12と過剰のメチルホスホネートモノトリブチルアンモニウム塩との反応、続いてのボランジイソプロピルエチルアミン錯体での処理、および引き続いての加水分解によりジホスフェート模倣体13を得る。このアプローチを通じ、種々のヌクレオシド5’-β-P-置換ジホスフェートを調製することができる。
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【０１０８】
ヌクレオシド三リン酸模倣体の調製
トリホスフェート模倣体はジホスフェート模倣体よりも多様であるので、ヌクレオシド三リン酸模倣体の調製に対してはより多くの合成アプローチがある。1つのアプローチはヌクレオシドの5’-位置に結合した活性化ホスフェートまたはホスファイトの調製および、引き続いて、ジホスフェート模倣体との縮合を含む。本発明の多くのヌクレオシド三リン酸模倣体はこのアプローチを通じて調製した。例えば、3’-アジド-3’-デオキシチミジンを2-クロロ-4H-1,3,2-ベンゾジオキサホスホリン-4-オンと反応させて中間体14が得られ、これをジホスフェート模倣体と縮合させて、環状トリホスフェート中間体15を形成させる。環状トリホスフェート中間体15を異なる試薬で処理して、加水分解の後に、種々のヌクレオシド三リン酸模倣体17を得る。以下のスキームは前記反応経路を示す。ここに、XはO、S、NH、メチレンまたはハロメチレンであり；YはO、S、N3、アルコキシ、アリールオキシ、アルキルアミノ、アリールアミノまたは-BH3M＋であり；R4N＋はNH4＋、Et3NH＋、Bu3NH＋、およびBu4N＋のようなアンモニウム、トリアルキルアンモニウム、またはテトラアルキルアンモニウムカチオンである。
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【０１０９】
環状中間体15をBH3-アミン錯体またはBH3-スルフィド錯体で処理し、続いて、水で加水分解すると、多数のヌクレオシド5’-α-P-ボラノトリホスフェート模倣体が調製された。この方法は一般的な方法であり、種々のヌクレオシドに適用することができるが、反応性基を担うヌクレオシドでは適当な保護が必要である。代表的な例を以下に示す。7-デアザ-2’-C-メチルアデノシン（18）を7-デアザ-2’-C-メチル-2’,3’-O-6-トリアセチルアデノシン（20）に変換し、これを前記で示した反応に供して、トリアセチルヌクレオシド三リン酸模倣体20を得た。アンモニア水またはメタノール性アンモニアでの脱保護により、ヌクレオシド三リン酸模倣体22を得た。
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【０１１０】
異なるβ,γ-ブリッジング修飾を含む他の代表的なヌクレオシド5’-α-P-ボラノトリホスフェート模倣体23〜28は同一アプローチを介して合成し、それを以下に示す。
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【０１１１】
同様に、15を元素硫黄で処理し、引き続いて水と反応させてα-P-チオトリホスフェート模倣体29を得た。また、同一方法を介して化合物30を調製した。化合物31は、15と同等の環状トリホスフェートを硫黄で処理し、引き続いて硫化リチウムと反応させて得た。同様に、化合物32は、環状トリホスフェートをボラン-ジイソプロピルエチルアミン錯体で処理し、引き続いて硫化リチウムと反応させて調製した。
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【０１１２】
または、環状トリホスフェート中間体15をヨウ素で処理し、続いて求核試薬と反応させて、種々のヌクレオシド5’-α-P-置換トリホスフェート模倣体を得ることができる。例えば、15をヨウ素と反応させ、引き続いてエチルアミンおよびアニリンで処理し、各々、α-P-アミノトリホスフェート模倣体33および34を得た。フッ化カリウム、アジ化ナトリウム、ナトリウムフェノキシド、およびナトリウムメトキシドを求核試薬として選択した場合、各々、化合物35〜38が調製された。また、求核試薬がヒドロキシアミンである場合、化合物39が形成された。
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【０１１３】
ヌクレオシド5’-γ-P-置換トリホスフェート模倣体は少数の異なるアプローチを介して調製することができる。1つのアプローチは、脱離基を担う試薬でのヌクレオシド三リン酸模倣体のアルキル化である。アルキル化試薬はブロマイドおよびヨウ化物のようなハライド、またはトシレート、ニシレート、およびトリフレートのようなスルホネートであり得る。このタイプの反応を用いて、小さな脂肪族炭化水素または脂質および他のホスフェート-マスキング部位のような大きな部位を導入することができる。例えば、ヌクレオチド模倣体27のテトラブチルアンモニウム塩をメチルトリフレートと反応させて、γ-P-メチルトリホスフェート模倣体40を得た。同様に、γ-P-パルミチルトリホスフェート模倣体41は、27とパルミチルp-ニトロベンゼンスルホネートとの反応から調製した。
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【０１１４】
化合物42および43は、各々、ヌクレオシド三リン酸模倣体27のDCCでの処理、引き続いてのフェノールおよびp-ニトロフェノールとの反応を介して調製した。この反応はヌクレオシド三リン酸模倣体のγ-P位置におけるアリールオキシ置換基の結合に対する一般的なアプローチを表わす。
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【０１１５】
ヌクレオシド5’-γ-P-置換トリホスフェート模倣体の調製のためのもう1つのアプローチは、以下に示すヌクレオシド二リン酸模倣体と置換ホスホノジクロリデートとの反応である。例えば、3’-アジド-3’-デオキシチミジン5’-（ジフルオロメチレン）ジホスホネート（10）をメチルホスホノジクロリデートで処理し、加水分解後に、トリホスフェート模倣体44を得た。同様に、γ-P-フェニル-α-β-（ジフルオロメチレン）トリホスフェートを含む化合物45を調製した。
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【０１１６】
ヌクレオシド5’-γ-P-置換トリホスフェート模倣体47の調製のためのさらなるアプローチは、ヌクレオシド5’-ホスホジクロリデート46または5’-ホスホノジクロリデートと置換ピロホスフェートまたは置換ジホスフェート模倣体との反応である。また、ヌクレオシド環状ホスフェート14を置換ピロホスフェートまたは置換ジホスフェート模倣体と反応させ、続いて硫黄、ヨウ素またはボランのような酸化試薬で、次いで、求核試薬で処理して、種々のヌクレオシド5’-γ-P-（および/またはα-P-）-置換トリホスフェート模倣体48を得ることができる。このアプローチを通じて、γ-P-アルキル、γ-P-アルキルアミノ、γ-P-アルキルチオ、γ-P-アルコキシ、γ-P-アリール、γ-P-アリールオキシ、およびγ-P-アリールアミノのような置換基を導入することができる。
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【０１１７】
また、本発明は、修飾がヌクレオチド模倣体の5’-位置にあるヌクレオシド三リン酸模倣体の調製のためのアプローチを提供する。ヌクレオチド模倣体の5’-酸素は他のヘテロ原子、メチレン、ハロメチレン、またはジハロメチレンで置き換えることができる。または、5’-酸素を脱離させることができる。以下に示す2つの例を用いてこれらの化合物の調製を説明する。最初のスキームは3’-アジド-3’-デオキシチミジン5’-デオキシ-β,γ-（ジフルオロメチレン）トリホスフェートの合成を示す。1-（2-デオキシキシロフラノシル）チミンを5’-ヨード誘導体に変換し、これをアセチル化に付した。得られた中間体49を5’-デオキシ-5’-ホスホネートエステル50に変換した。3’-アセチルを除去し、得られた中間体をメシレート51に変換した。上昇させた温度における51のアジ化ナトリウムでの処理により3’-アジド誘導体52を得た。エチル基の除去の後に、ホスホネート53のトリブチルアンモニウム塩をカルボニルジイミダゾールで処理し、得られた中間体54をジフルオロメチレンジホスホネートのトリブチルアンモニウム塩と縮合させて、3’-アジド-3’,5’-ジデオキシチミジン5’-β,γ-（ジフルオロメチレン）トリホスフェート55を得た。化合物56および57は同様の手法を介して調製した。
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【０１１８】
以下のスキームは3’,5’-ジデオキシ-5’-ジフルオロメチレンチミジン5’-β,γ-（ジフルオロメチレン）トリホスフェート（62）の合成を示す。2,3-ジデオキシ-1-O-メチルリボフラノースを5-O-トリフレート58に変換し、これをLDAで処理し、次いで、ジエチルP-ジフルオロメチルホスホネートと反応させて、5-デオキシ-5-ジフルオロメチレン誘導体59を得た。塩化スズの存在下での59のシリル化チミンとの縮合により、ヌクレオシド5’-ホスホネートエステル60を得た。TMSBrでのエチル基の除去の後、ヌクレオシド5’-ホスホネート61のトリエチルアンモニウム塩をカルボニルジイミダゾールで処理し、次いで、ジフルオロメチレンジホスホネートのトリブチルアンモニウム塩と縮合させて、3’,5’-ジデオキシ-5’-ジフルオロメチレンチミジン5’-β,γ-（ジフルオロメチレン）トリホスフェート（62）を得た。化合物63および64は同様の手法を介して調製した。
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【０１１９】
α-P-置換ヌクレオシド三リン酸の調製のためのもう1つの一般的なアプローチを本発明のヌクレオチド模倣体の調製で用いることができ、これは、活性化されたヌクレオシドモノホスホネートとピロホスフェートまたはジホスフェート模倣体との反応を含む。前記活性化は、通常、以下の例に示されるように、イミダゾールまたはモルホリノ基をホスフェートに結合させることによって達成される。3’-アジド-3’-デオキシチミジンをその5’-ホスホネート65（R＝アルキルまたはアリール）に変換し、これはカルボニルジイミダゾールでの処理によって活性化することができる。得られた中間体66をジフルオロメチレンジホスホネートのテトラブチルアンモニウム塩と縮合させて、3’-アジド-3’-デオキシチミジン5’-α-P-置換β,γ-（ジフルオロメチレン）トリホスフェート（67）を得る。
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【０１２０】
ヌクレオチド模倣体プロドラッグ
プロドラッグアプローチは、極性の負に荷電したヌクレオチド模倣体を細胞に送達するための有効な方法の1つである。ヌクレオシド5’-モノホスフェートに対する多数のプロドラッグアプローチが開発されており、潜在的に本発明のヌクレオチド模倣体に適応することができる。ヌクレオチド模倣体プロドラッグは、限定されるものではないが、アルキルホスフェートエステル、アリールホスフェートエステル、アシルチオエチルホスフェートエステル、アシルオキシメチルホスフェートエステル、1,2-O-ジアシルグリセリルホスフェートエステル、1,2-O-ジアルキルグリセリルホスフェートエステル、およびホスホルアミデートエステルを含むことができる。また、これらのマスキング基は本発明のヌクレオシド模倣体に首尾よく結合された。得られた化合物はヌクレオチド模倣体のプロドラッグとして働くことができる。
【０１２１】
ヌクレオチド模倣体プロドラッグの調製のための直接的な方法の1つは、ヌクレオチド模倣体と、脱離基を担うマスキング試薬との反応である。例えば、ヌクレオシド5’-イミドジホスフェート8をトリブチルスタニルメトキシドで処理して、ジホスフェート8を第二スズ塩に変換し、これをヨウ化ピバロキシメチルと反応させて化合物68を得た。ピバロキシメチル基（POM）は種々の細胞エステラーゼによって切断することができる。細胞中では、化合物68は化合物8に変換することができる。化合物69は、同様の手法を介して、対応するトリホスフェート27とヨウ化ピバロキシメチルとの反応から調製した。また、化合物70はこのタイプの反応を介して調製したが、前記試薬はS-ピバロイル-2-チオエチル（SATE）p-ニトロベンゼンスルホネートである。ホスフェートのマスキング基としてのS-ピバロイル-2-チオエチルおよびピバロキシメチルは広く研究されており、通常、各々、SATEおよびPOMと略される。POMのように、SATEもまた細胞エステラーゼによって容易に切断することができる。
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【０１２２】
ヌクレオチド模倣体からのプロドラッグの調製のためのもう1つのアプローチは、ヌクレオチド模倣体と、ヒドロキシル基を担うマスキング基との縮合である。例えば、化合物8を1-（メシチレン-2-スルホニル）-3-ニトロ-1,2,4-トリアゾールで処理し、次いで、S-ピバロキシ-2-チオエタノールと反応させて、化合物71および72が得られ、これをクロマトグラフィーによって分離した。
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【０１２３】
または、ある種のヌクレオチドミニックスのプロドラッグはヌクレオシドから調製することができる。例えば、2’-デオキシ-2’,2’-ジフルオロシチジン73はワン-ポット反応にてβ-O-（S-ピバロイル-2-チオエチル）-、ジ-O-（S-ピバロイル-2-チオエチル）-およびトリ-O-（S-ピバロイル-2-チオエトキシ）メチレンジホスホネート75〜77に変換した。ヌクレオチド73をまずメチレンジホスホノテトラクロリデートと反応させてトリクロロ中間体74が得られ、次いで、これを過剰なS-ピバロイル-2-チオエタノールで処理した。得られた3つのS-ピバロイル-2-チオエチル誘導体75〜77を逆相HPLCで分離した。
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【０１２４】
ヌクレオシド模倣体のプロドラッグのもう1つのタイプは脂質-マスクドヌクレオチド模倣体であり、ここに、脂質が直接的に、または生物学的に切断可能なリンカーを介してヌクレオチド模倣体の末端リンに結合する。例えば、化合物79は、ヌクレオシド三リン酸模倣体27と脂質試薬78との縮合を介して調製され、これは1,2-O-ジパルミトイルグリセロールから合成された。
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【０１２５】
C.生物学的適用および投与
本発明のヌクレオシド二リン酸模倣体およびヌクレオシド三リン酸模倣体は、限定されるものではないが、DNAまたはRNAポリメラーゼ、ヘリカーゼ、リボヌクレオチドレダクターゼ、プロテインキナーゼ、およびテロメラーゼを含めた種々の酵素の阻害で、およびG-プロテイン、P2プリン作動性受容体および種々の酵素のアロステリック部位の変調で有用であろう。
【０１２６】
本発明のヌクレオチド模倣体は、限定されるものではないが、HIV、HBV、HCV、HDV、HSV、HCMV、天然痘、ウエストナイルウイルス、インフルエンザウイルス、麻疹、ライノウイルス、RSV、VZV、EBV、ワクシニアウイルス、およびパピローマウイルスを含めたウイルスによって引き起こされる感染病の治療のためのヒト療法として有用である。
【０１２７】
本発明のヌクレオシド二リン酸模倣体およびヌクレオシド三リン酸模倣体は、細菌および真菌によって引き起こされた感染病の治療で有用である。
【０１２８】
速く分裂する癌性細胞に対して優れた細胞傷害性を有するヌクレオチド模倣体は、限定されるものではないが、肺癌、肝臓癌、前立腺癌、結腸癌、乳癌、卵巣癌、メラノーマ、および白血病を含めた増殖性障害の治療で有用である。
【０１２９】
P2受容体およびG-プロテインのリガンドならびにプロテインキナーゼの阻害剤として、本発明のヌクレオチド模倣体は、炎症病、自己免疫疾患、2型糖尿病、心血管病のような広い範囲の他の病気および障害の治療で有用である。
【０１３０】
薬物抵抗性を克服するためには、組み合わせ療法が感染病および増殖障害の治療で広く用いられている。本発明のヌクレオチド模倣体またはそれらのプロドラッグは単一薬物として治療で投与することができ、または、一つまたは複数の他の活性な化学体と組み合わせて投与して、組合せ療法を形成することができる。他の活性な化学体は小分子、ポリペプチドまたはポリヌクレオチドであり得る。
【０１３１】
本発明の薬学的組成物は、有効成分としての、式（I）および（XVI）によって表わされる化合物、またはその薬学的に許容される塩、エステルまたはプロドラッグの少なくとも1つを含む。前記組成物は経口、局所、静脈内、皮下、鼻、眼、肺および直腸投与に適したものを含む。本発明の化合物は、治療剤として、ヒトを含めた哺乳動物個体に投与することができる。
【０１３２】
例えば、本発明の化合物は抗ウイルス剤として有用である。本発明は、治療上有効抗ウイルス量の本発明の化合物を患者に投与する段階を含むウイルス感染に罹った患者の治療方法を提供する。本明細書中で用いる用語「ウイルス感染」とは、細胞のウイルス形質転換、ウイルス複製および増殖によって特徴付けられる異常な状態または疾患をいう。本発明の化合物での治療が特に有用なウイルスの感染は前記したウイルスを含む。
【０１３３】
本発明の化合物の「治療上有効量」とは、患者への単一または複数用量投与に際して、例えば、微生物または腫瘍の増殖を制御するにおいて、またはそのような治療の不存在下で期待されるものを超えた患者の生存性を延長するにおいて効果的な量をいう。本明細書中で用いるように、「増殖を制御する」とは、微生物、または細胞の増殖性形質転換、または微生物の複製および増殖を遅くし、中断し、阻止し、または停止させることをいい、例えば、微生物または腫瘍の完全な排除を必ずしも示さない。
【０１３４】
従って、本発明は、有効成分として、薬学的担体と組み合わせた本発明の化合物の少なくとも1つを含む薬学的組成物を含む。本発明の化合物は経口、非経口（筋肉内、腹腔内、静脈内（IV）または皮下注射）、局所、経皮（受動的であるか、またはイオントフォレシスまたはエレクトロポレーションの使用）、経粘膜（例えば、鼻、膣、直腸または舌下）または肺（例えば、乾燥粉末吸入を介するもの）投与経路によって、または生体侵食性インサートを用いて投与することができ、各投与経路に適切な投与形態に処方することができる。
【０１３５】
経口投与のための固体投与形態はカプセル剤、錠剤、丸剤、粉末、および顆粒を含む。そのような固体投与形態においては、活性化合物を、スクロース、ラクトースまたは澱粉のような少なくとも1つの不活性な薬学的に許容される担体と混合する。そのような投与形態は、通常のプラクティスにおけるように、不活性希釈剤以外のさらなる物質、例えば、ステアリン酸マグネシウムのような滑沢剤を含むことができる。カプセル剤、錠剤および丸剤の場合には、投与形態は緩衝剤を含むこともできる。錠剤および丸剤は、加えて、腸溶コーティングを施して調製することができる。
【０１３６】
経口投与用の液体投与形態は薬学的に許容されるエマルジョン、溶液、懸濁液、シロップを含み、エリキシルは水のような当技術分野において普通に使用される不活性希釈剤を含有する。そのような不活性希釈剤以外に、組成物は湿潤剤、乳化および懸濁化剤、および甘味剤、フレーバー剤、および香料剤などのアジュバントを含むこともできる。
【０１３７】
非経口投与用の本発明による製剤は、滅菌水性または非水性溶液、懸濁液またはエマルジョンを含む。非水性溶液または賦形剤の例はプロピレングリコール、ポリエチレングリコール、オリーブ油およびトウモロコシ油のような植物油、ゼラチン、およびオレイン酸エチルのような注射有機エステルを含む。そのような投与形態は防腐剤、湿潤剤、乳化剤および分散剤のようなアジュバントを含むこともできる。それらは、例えば、細菌保持フィルターを介する濾過によって、滅菌剤を組成物に取り込むことによって、組成物に照射することによって、または組成物を加熱することによって滅菌することができる。それらは、使用直前に、滅菌水、またはいくつかの他の滅菌注射媒体を用いて製造することもできる。
【０１３８】
直腸または膣投与用の組成物は、好ましくは、前記作用物質に加えて、カカオバターまたは坐薬ワックスのような賦形剤を含有することができる坐薬である。また、鼻または舌下投与用の組成物は当技術分野において周知の標準的な賦形剤で調製される。
【０１３９】
局所処方は、一般には、軟膏、クリーム、ローション、ゲルまたは溶液を含むであろう。軟膏は4つの認められたクラス：油溶性基剤；乳化性基剤；乳化基剤；および水溶性基剤から選択される慣用的な軟膏基剤を含むであろう。ローションは摩擦なくして皮膚または粘膜表面に適用されるべき製剤であり、典型的には、活性剤を含めた個体粒子が水またはアルコール基剤に存在する液体または半液体製剤である。ローションは、通常、固体の懸濁液であり、好ましくは、本発明の目的では、水中油型の液状油エマルジョンを含む。当技術分野において知られたクリームは粘性液体または半固体エマルジョンであり、水中油型または油中水型のいずれかである。局所処方はゲル、すなわち、半固体、懸濁液-型系の形態、または溶液の形態でもあり得る。
【０１４０】
最後に、乾燥粉末吸入剤による送達用の乾燥粉末形態のこれらの薬物の処方はもう1つの投与手段を提供する。これは経口および静脈内経路の不利の多くを克服する。
【０１４１】
本発明の組成物中の有効成分の投与量は変化させることができるが、有効成分の量は、適当な投与形態が得られることが必要である。選択された投与量は所望の治療効果、投与経路、および望まれる治療の持続に依存する。一般に、毎日の0.001〜10mg/kg体重の間の投与レベルを哺乳動物に投与する。
【０１４２】
以下の実施例は、開示し、ここに特許請求する化合物をいかにして製造し、用いるかについての完全な開示および記載を当業者に与えるためのものである。
【０１４３】
実施例
A.化学的合成
本発明のヌクレオチド模倣体の調製のための以下の実施例をこのセクションで与える。本明細書中における実施例は断じて本発明の範囲を限定する意図のものではない。本発明のヌクレオチド模倣体はヌクレオシドおよびヌクレオチド化学の当業者によって調製され得る。本発明のヌクレオチド模倣体はヌクレオチド模倣体の塩として存在する。しかしながら、実施例において以下に掲げる生成物の量はUV吸収に基づくものであり、ヌクレオチド模倣体のH-形態の分子量から計算する。
【０１４４】
実施例１
2’-デオキシ-（E）-2'-フルオロメチレンシチジン5’-イミドジホスフェート（3）
アルゴン雰囲気下、-15℃にて、トリクロロ［（ジクロロホスホリル）イミド］ホスホラン（83mg,0.39mmol）を無水リン酸トリメチル（3mL）中の2’-デオキシ-（E）-2’-フルオロメチレンシチジン（50mg,0.19mmol）に添加した。2時間攪拌した後、反応混合物を氷冷炭酸水素トリエチルアンモニウム（TEAB）溶液（pH7.0,1.0M,5mL）に注ぎ、30分間攪拌した。HPLCによる精製により9.0mgの標記化合物3を得た。
【０１４５】
実施例２
2’-デオキシ-（E）-2’-フルオロメチレンシチジン5’-メチレンジホスホネート（4）
アルゴン雰囲気下、-15℃にて、メタンホスホン酸二塩化物（98mg,0.39mmol）を無水リン酸トリメチル（3mL）中の2’-デオキシ-（E）-2’-フルオロメチレンシチジン（50mg,0.19mmol）に添加した。2時間攪拌した後、反応混合物を氷冷TEAB溶液（1.0M,5mL）に注ぎ、30分間攪拌した。HPLCによる精製により、8.6mgの標記化合物4を得た。
【０１４６】
実施例３
2’-デオキシ-2’,2’-ジフルオロシチジン-5’-メチレンジホスホネート（5）
2’-デオキシ-2’,2’-ジフルオロシチジン（0.2g,0.76mmol）を無水リン酸トリメチル（2mL）に溶解させ、アルゴン雰囲気下にて16時間モレキュラシーブと共に攪拌した。アルゴン雰囲気下で混合物を-20℃に冷却し、メチレンビス（ホスホニックジクロライド）（380mg,1.52mmol）を添加した。1時間攪拌した後、混合物を氷冷TEAB溶液（1.0M,10mL）を用いてクエンチし、30分間攪拌した。HPLCによる精製により、28.9mgの標記化合物を得た。
【０１４７】
実施例４
2’-デオキシ-2’,2’-ジフルオロシチジン5’-イミドジホスフェート（6）
2’-デオキシ-2’,2’-ジフルオロシチジン（0.2g,0.76mmol）を無水リン酸トリメチル（5mL）に溶解させ、アルゴン雰囲気下で16時間モレキュラシーブと共に攪拌した。アルゴン雰囲気下で混合物を-20℃まで冷却し、トリクロロ［（ジクロロホスホリル）イミド］ホスホラン（408mg,1.52mmol）で処理した。1時間攪拌した後、混合物を氷冷TEAB溶液（1.0M,10mL）でクエンチし、30分間攪拌した。HPLCによる精製により、57.0mgの標記化合物を得た。
【０１４８】
実施例５
2’-デオキシ-2’,2-ジフルオロシチジン5’-（ジフルオロメチレン）ジホスホネート（7）
工程1.  テトライソプロピルジフルオロメチレンジホスホネート（2.1g,5.51mmol）を二塩化メチレン（20mL）に溶解させ、臭化トリメチルシリル（3.6mL,27.6mmol）で処理した。混合物をアルゴン雰囲気下で16時間加熱還流し、冷却し、次いで真空中で蒸発させた。残渣を四塩化炭素（20mL）で共蒸発させ、四塩化炭素（20mL）に再懸濁させ、五塩化リン（2.9g,13.2mmol）に添加した。アルゴン雰囲気下で室温にて16時間攪拌した後、ジフルオロメチレンビス（ジホスホニックジクロライド）を真空蒸留（65℃,0.5mmHg）によって単離し、次の工程で直接用いた。
【０１４９】
工程2.  2’-デオキシ-2’,2-ジフルオロシチジン（276mg,1.05mmol）を無水リン酸トリメチル（5mL）に溶解させ、アルゴン雰囲気下にて16時間モレキュラシーブと共に攪拌した。アルゴン雰囲気下で-40℃にて、混合物を工程1からのジフルオロメチレンビス（ホスホニックジクロライド）（300mg,1mmol）に添加した。攪拌を2時間継続し、次いで、反応混合物を氷冷TEAB溶液（1.0M,5mL）に注ぎ、30分間攪拌した。水性部分をHPLCによって精製して、41.8mgの標記化合物を得た。
【０１５０】
実施例６
3’-デオキシ-3’-アジドチミジン5’-（ジフルオロメチレン）ジホスホネート（10）
アルゴン下、ジフルオロメチレンジホスホノニックアシッドトリ（テトラブチルアンモニウム）塩（3.855g,4.12mmol）を含有するフラスコに、アセトニトリル（2.5mL）中の3’-アジド-3’-デオキシ-5’-O-トシルチミジン（358mg,0.85mmol）の溶液に添加した。得られた溶液を室温で27時間攪拌し、水（10mL）でクエンチし、5分間攪拌した。HPLCによる精製により、160mgの標記化合物10を得た。
【０１５１】
実施例７
3’-アジド-3’-デオキシチミジン5’-α-P-ボラノ-β-P-メチルジホスフェート（13）
アルゴン下、0℃にて、無水DMF（1mL）中の3’-アジド-3’-デオキシチミジン（67mg,0.25mmol）の攪拌溶液に、トリブチルアミン（77μL,0.325mmol）、次いで、DMF（06mL）およびTHF（0.3mL）中のビス（ジイソプロピルアミノ）クロロホスフィン（74mg,0.275mmol）を添加した。反応混合物を0℃にて3時間攪拌し、氷で冷却した。DMF（1mL）中のトリブチルアミン（0.24mL,1.0mmol）およびメチルホスホン酸（72mg,0.75mmol）の溶液を添加し、得られた溶液を室温にて一晩攪拌した。ボラン-ジイソプロピルエチルアミン錯体（1.0mL）を添加し、得られた混合物を7時間攪拌した。反応混合物を氷で冷却し、水（2mL）をゆっくりと添加することによってクエンチした。混合物を室温にて一晩攪拌し、水（3mL）で希釈した。HPLCによる精製により、7.7mgの標記化合物13を得た。
【０１５２】
実施例８
3’-アジド-3’-デオキシチミジン5’-α-P-ボラノ-β,γ-（ジフルオロメチレン）トリホスフェート（27）
工程A.  テトライソプロピルジフルオロメチレンジホスホネートの調製
アルゴン下、-78℃にて、無水THF（20mL）中のテトライソプロピルジフルオロメチレンジホスホネート（4.5g,13.07mmol）の攪拌溶液に、ナトリウムビス（トリメチルシリル）アミド（THF中1.0M,28.7mL）およびN-フルオロベンゼンスルホンイミド（9.89g,31.36mmol）を添加した。反応混合物を-78℃にて1時間攪拌し、飽和塩化アンモニウム水溶液（20mL）でクエンチし、室温まで加温し、エーテルで希釈し、10％炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄し、次いで、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮した。ヘキサン中の5〜30％酢酸エチルを用いるシリカゲル上のクロマトグラフィーにより、2.18gのテトライソプロピルジフルオロメチレンジホスホネートおよび0.32gのテトライソプロピルモノフルオロメチレンジホスホネートを得た。
【０１５３】
工程B.  ジフルオロメチレンジホスホン酸ビス（トリブチルアンモニウム）塩の調製
無水アセトニトリル（30mL）中のテトライソプロピルジフルオロメチレンジホスホネート（2.0g,5.26mmol）の攪拌溶液に、臭化トリメチルシリル（4.17mL,31.58mmol）を滴下した。得られた溶液を40〜42℃にて24時間攪拌し、濃縮乾固し、無水アセトニトリルで1回共蒸発させた。残渣をアセトニトリル/水混合液に再度溶解させ、次いで、DMFで共蒸発させた。残渣をトリブチルアミン（1.93g,2.48mL,10.43mmol）のDMF溶液に溶解させ、複数の小さなフラスコに移し、濃縮乾固し、無水DMFで3回共蒸発させた。残渣を40℃にて真空オーブン中で4時間乾燥して、わずかに黄色な残渣（3.35g）を得た。
【０１５４】
工程C.  3’-アジド-3’-デオキシチミジンα-P-ボラノ-β,γ-（ジフルオロメチレン）トリホスフェート（27）の調製
アルゴン下、0℃にて、無水DMF（6mL）およびピリジン（1.5mL）中の3’-アジド-3’-デオキシチミジン（800mg,3.0mmol）の攪拌溶液に、DMF（3mL）中の2-クロロ-4H-1,3,2-ベンゾジオキサホスホリン-4-オン（728mg,3.6mmol）の溶液を添加した。反応混合物を室温にて1時間攪拌し、氷で冷却した。トリブチルアミン（1.8mL,16.5mmol）を添加し、続いて、DMF（6mL）中のジフルオロメチレンジホスホン酸ビス（トリブチルアンモニウム）塩（2.28g,3.9mmol）を添加した。反応混合物を室温にて1時間攪拌し、氷で冷却した。ボラン-ジイソプロピルエチルアミン錯体（12mL）を添加し、得られた混合物を室温にて一晩攪拌した。反応混合物を氷で冷却し、水（30mL）をゆっくりと添加することによってクエンチした。混合物を室温にて2時間攪拌し、水（30mL）で希釈し、クロロホルムで3回抽出した。水性溶液を逆相（C18）HPLCに負荷し、TEAA緩衝液（pH7.0）で溶出し、精製した生成物を反復凍結乾燥によって脱塩した。3’-アジド-3’-デオキシチミジンα-P-ボラノ-β,γ-（ジフルオロメチレン）トリフォスフェート（501mg,トリエチルアンモニウム塩、2つのジアステレオマーの混合物）を白色フォームとして得た。
【０１５５】
同HPLC条件下で2つのジアステレオマー（α-Rpおよびα-Sp）を分離して、純粋な3’‐アジド-3’‐デオキシチミジンα-（R）P-ボラノ-β,γ-（ジフルオロメチレン）トリホスフェート（より短い保持時間を有するものを異性体1と命名する、他方は異性体2と命名する）および3’‐アジドおよび3’-デオキシチミジンα-（S）-P-ボラノ-β,γ-（ジフルオロメチレン）トリホスフェートを得た。
【０１５６】
実施例９
7-デアザ-2’-C-メチルアデノシン5’-α-P-ボラノ-β,γ（ジフルオロメチレン）トリホスフェート（22）
工程A.  7‐デアザ-2’-C-メチル-2’,3’-O-N6-トリアセチルアデノシン（18）の調製
無水ピリジン（7mL）中の2’-C-メチルー7-デアザアデノシン（402mg,1.43mmol）およびクロロトリメチルシラン（9237mg,1.57mm）の溶液を室温にて一晩攪拌した。無水酢酸（1.08mL,11.44mmol）を添加し、得られた混合物を室温にて3時間攪拌した。次いで、DMAP（700mg,5.72mmol）およびトリエチルアミン（0.78mL,5.72mmol）を添加し、得られた混合物を45〜50℃にて一晩加熱した。混合物を冷却し、酢酸エチルで希釈し、水（2×）、2N HCl、次いで水（2×）、次いで10％NaHCO3で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮した。酢酸エチルを用いるシリカゲルでのクロマトグラフィーにより、7-デアザ-2’-C-メチル-5’-O-トリメチルシリル-2’,3’-O-N6-トリアセチルアデノシンを白色固体として得た。
【０１５７】
前記白色固体をTHF（5mL）に溶解させ、THF中のTBAF（1.0M,1.5mL）を添加した。得られた溶液を室温にて2時間放置し、濃縮した。塩化メチレン中の5％メタノールを用いるシリカゲル上でのクロマトグラフィーにより、211mgの7-デアザ-2’-C-メチル-2’,3’-O-N6-トリアセチルアデノシンを白色固体として得た。
【０１５８】
工程B.  7-デアザ-2’-C-メチルアデノシン5’-α-P-ボラノ-β,γ-（ジフルオロメチレン）トリホスフェート（22）の調製
アルゴン下、0℃にて、無水DMF（0.5mL）およびピリジン（0.1mL）中の7-デアザ-2’-C-メチル-2’,3’-O-N6-トリアセチルアデノシン（62mg,0.15mmol）の攪拌溶液に、2-クロロ-4H-1,3,2-ベンゾジオキサホスホリン-4-オン（39mg,0.195mmol）の溶液を添加した。反応混合物を室温にて1時間攪拌し、氷で冷却した。トリブチルアミン（0.1mL）を添加し、続いて、DMF（0.4mL）中のジフルオロメチレンジホスホン酸ビス（トリブチルアンモニウム）塩（140mg,0.24mmol）を添加した。反応混合物を室温にて1時間攪拌し、氷で冷却した。ボランジイソプロピルエチルアミン錯体（0.6mL）を添加し、得られた混合物を室温にて6時間攪拌し、氷で冷却し、水（1.5mL）をゆっくりと添加することによってクエンチした。混合物を室温にて1時間攪拌し、水（5mL）で希釈し、クロロホルムで3回抽出し、約2mLまで濃縮した。アンモニア水（30％,3mL）を添加し、得られた溶液を室温にて一晩放置した。アンモニアを蒸発させ、残存する水溶液を、TEAA緩衝液（pH7.0）を用いる逆相（C18）HPLCに負荷して、標記化合物22（異性体1：1.37mgおよび異性体2：1.98mg）を得た。
【０１５９】
実施例１０
3’-アジド-3’-デオキシチミジン5’-α-P-ボラノ-β,γ-イミドトリホスフェート（23）
アルゴン下、0℃にて、無水DMF（1mL）およびピリジン（0.25mL）中の3’-アジド-3’-デオキシチミジン（134mg,0.50mmol）の攪拌溶液に、DMF中の2-クロロ-4H-1,3,2-ベンゾジオキサホスホリン-4-オン（101mg,0.50mmol）の溶液を添加した。反応混合物を室温にて1時間攪拌し、氷で冷却した。トリブチルアミン（0.3mL）を添加し、続いて、DMF（0.5mL）中のメチレンジホスホン酸（88mg,0.50mmol）およびトリブチルアミン（0.3mL）の溶液を添加した。反応混合物を室温にて1時間攪拌し、氷で冷却した。ボランジイソプロピルエチルアミン錯体（2.0mL）を添加し、得られた混合物を室温にて6時間攪拌し、氷で冷却し、水（5mL）をゆっくりと添加することによってクエンチし、室温にて3時間攪拌した。粗製生成物を、TEAA緩衝液（pH7.0）を用いる逆相（C18）HPLCで精製して、60.3mgの標記化合物23を2つのジアステレオマーの混合物として得た。
【０１６０】
実施例１１
3’-アジド-3’-デオキシチミジン5’-α-P-ボラノ-β,γ-メチレントリホスフェート（24）
3’-アジド-3’-デオキシチミジン（134mg,0.5mmol）を、アルゴン下に維持した10mLフラスコ中の1mLの無水DMFに溶解させた。この溶液に0.25mLの無水ピリジンを添加した。無水DMF（0.5mL）中の2-クロロ-4H-1,3,2-ベンゾジオキサホスホリン-4-オン（101mg,0.495mmol）の新たに調製された溶液をシリンジを介して添加した。室温で1時間攪拌した後、トリブチルアミン（0.3mL）を添加し、続いて、0.5mLの無水DMF中のメチレンジホスホ-ン酸（88mg,0.495mmol）および3当量のトリブチルアミンの混合物を添加した。混合物を1時間攪拌し、2mLのボラン-ジイソプロピルエチルアミン錯体を添加した。室温にて6時間攪拌した後、5mLの脱イオン水を添加し、室温にて3時間攪拌した。HPLCによる精製により、46mgの標記化合物24を得た。
【０１６１】
実施例１２
3’-アジド-3’-デオキシチミジン5’-α-P-ボラノ-β,γ-（フルオロメチレン）トリホスフェート（25）
工程A.  フルオロメチレンジホスホン酸ビス（トリブチルアンモニウム）塩の調製
1,2-ジクロロエタン（5mL）中のフルオロメチレンジホスホン酸テトライソプロピル（320mg,0.88mmol）の攪拌溶液に、臭化トリメチルシリル（0.70mL,5.28mmol）を滴下した。得られた溶液を40〜42℃にて24時間攪拌し、3mLの無水トルエンを添加した。混合物を濃縮乾固し、トルエンで1回共蒸留した。残渣をDMF（3mL）/水（2mL）混合液に再度溶解させ、濃縮した。残渣をDMF（2mL）およびトリブチルアミン（0.42mL,1.76mmol）と混合し、次いで、濃縮乾燥固した。残渣を無水DMFで2回共蒸留した。得られた残渣を30℃の真空オーブン中で一晩攪拌して、わずかに黄色な残渣（460mg）を得た。
【０１６２】
工程B.  3’-アジド-3’-デオキシチミジンα-P-ボラノ-β,γ-（フルオロメチレン）トリホスフェート（25）の調製
アルゴン下、0℃にて、無水DMF（1mL）およびピリジンン（0.2mL）中の3’-アジド-3’-デオキシチミジン（78mg,0.29mmol）の攪拌溶液に、2-クロロー4H-1,3,2-ベンゾジオキサホスホリン-4‐オン（77mg,0.38mmol）の溶液を添加した。反応混合物を室温で1時間攪拌し、氷で冷却した。トリブチルアミン（0.18mL）を添加し、続いて、DMF（0.6mL）中のフルオロメチレンジホスホン酸ビス（トリブチルアンモニウム）塩（250mg,0.43mmol）を添加した。反応混合物を室温で1時間攪拌し、氷で冷却した。ボランジイソプロピルエチルアミン錯体（1.20mL）を添加し、得られた混合物を室温にて6時間攪拌し、氷で冷却し、水（3mL）をゆっくりと添加することによってクエンチした。混合物を室温で一晩攪拌し、水（10mL）で希釈し、クロロホルムで3回抽出した。
【０１６３】
TEAA緩衝液（pH7.0）を用いる逆相（C18）HPLCでの標記化合物25の4つのα-P-ボラノジアステレオマーの分離を行って異性体1：3.75mg；（他の異性体を含有する）異性体2：8.24mg；（他の異性体を含有する）異性体3：5.76mg；異性体4：2.55mgを得た。
【０１６４】
実施例１３
3’-アジド-3’-デオキシチミジン5’-α-P-ボラノ-β,γ-（ジクロロメチレン）トリホスフェート（26）
工程A.  ジクロロメチレンジホスホン酸ビス（トリブチルアンモニウム）塩の調製
ジクロロメチレンジホスホン酸二ナトリウム塩（1.0g,3.46mmol）の水溶液をDOWEX  50WX8-100イオン-交換樹脂のカラムに負荷し、水で溶出させた。トリブチルアミン（1.65mL,6.92mmol）を添加し、混合物を激しく震盪した。得られた溶液を濃縮乾固し、無水DMFで3回共蒸留した。残渣を真空下で一晩乾燥した。
【０１６５】
工程B.  3’-アジド-3’-デオキシチミジンα-P-ボラノ-β,γ-（ジクロロメチレン）トリホスフェート（26）の調製
アルゴン下、0℃にて、無水DMF（1mL）およびピリジン（0.2mL）中の3’-アジド-3’-デオキシチミジン（89mg,0.33mmol）の攪拌溶液に、2-クロロ-4H-1,3,2-ベンゾジオキサホスホリン-4-オン（83mg,0.41mmol）の溶液を添加した。反応混合物を室温にて1時間攪拌し、氷で冷却した。トリブチルアミン（0.2mL）を添加し、続いて、DMF（1mL）中のジクロロメチレンジホスホン酸ビス（トリブチルアンモニウム）塩（430mg,0.43mmol）を添加した。反応混合物を室温にて1時間攪拌し氷で1時間冷却した。ボランジイソプロピルエチルアミン錯体（1.32mL）を添加し、得られた混合物を室温にて6時間攪拌し、氷で冷却し、水（3mL）をゆっくりと添加することによってクエンチした。混合物を室温にて一晩攪拌し、水（10mL）で希釈し、クロロホルムで3回抽出した。TEAA緩衝液（pH7.0）を用いる逆相（C18）HPLCにて、2つのα-P‐ボラノジアステレオマーを分離し、精製された生成物を反復凍結乾燥によって脱塩して、標記化合物26；異性体1：8.3mgおよび異性体2：11.3mgを得た。
【０１６６】
実施例１４
3’-デオキシチミジン5’-α-P-ボラノ-β,γ（ジフルオロメチレン）トリホスフェート（28）
3’-デオキシチミジン（66.3mg,0.150mmol）を、アルゴン下に維持した10mL丸底フラスコ中の0.5mLの無水DMFに溶解させた。これに0.1mLの無水ピリジンを添加した。無水DMF（0.5mL）中の2-クロロー4H-1,3,2-ベンゾジオキサホスホリン-4-オン（36.4mg,0.180mmol）の新たに調製された溶液を0℃にてシリンジを介して添加した。室温にて1時間攪拌した後、トリブチルアミン（0.3mL）を添加し、続いて、無水DMF（1mL）中のジフルオロメチレンジホスホン酸ビス（トリ-n-ブチルアンモニウム）塩（113.5mg,0.195mmol）の溶液を添加した。混合物を室温にて1時間攪拌し、ボラン-ジイソプロピルエチルアミン錯体（0.25mL）を0℃で添加した。室温にて12時間攪拌した後、水10mLを添加し、混合物を室温にて30分間攪拌した。HPLCによる精製により、4.8mgの標記化合物28を得た。
【０１６７】
実施例１５
3’-アジド-3’-デオキシチミジン5’-α-P-チオ-β,γ-（ジフルオロメチレン）トリホスフェート（29）
3’-アジド-3’-デオキシチミジン（103.8mg,0.388mmol）を、アルゴン下に維持した10mLの丸底フラスコ中の1mLの無水DMFに溶解させた。これに0.20mLの無水ピリジンを添加した。無水DMF（1mL）中の2-クロロ-4H‐1,3,2-ベンゾジオキサホスホリン-4-オン（101.2mg,0.495mmol）の新たに調製された溶液を0℃にてシリンジを介して添加した。室温にて1時間攪拌した後、トリブチルアミン（0.3mL）を添加し、続いて、無水DMF（1mL）中のジフルオロメチレンジホスホン酸ビス（トリ-n‐ブチルアンモニウム）塩（294mg,0.504mmol）の溶液を添加した。混合物を室温にて1時間攪拌し、硫黄（24.8mg,0.776mmol）を0℃にて添加した。室温にて2時間攪拌した後、蒸留した脱イオン水（10mL）を添加し、混合物を室温にて30分間攪拌した。HPLCによる精製により、112.8mgの標記化合物29を得た。
【０１６８】
実施例１６
3’-デオキシチミジン5’-α-P-チオ-β,γ-（ジフルオロメチレン）トリホスフェート（30）
3’-デオキシチミジン（66.3mg,0.150mmol）を、アルゴン下に維持した10mLの丸底フラスコ中の0.5mLの無水（DMF）に溶解させた。これに0.1mLの無水ピリジンを添加した。無水DMF（0.5mL）中の2-クロロ-4H-1,3,2-ベンゾジオキサホスホリン-4-オン（36.4mg,0.180mmol）の新たに調製された溶液を0℃にてシリンジを介して添加した。室温にて1時間攪拌した後、トリブチルアミン（0.3mL）を添加し、続いて、無水DMF（1mL）中のジフルオロメチレンジホスホン酸ビス（トリ-n-ブチルアンモニウム）塩（113.5mg,0.195mmol）の溶液を添加した。混合物を室温にて1時間攪拌し、硫黄（9.6mg,0.300mmol）を0℃にて添加した。室温にて2時間攪拌した後、蒸留された脱イオン水（10mL）を添加し、混合物を室温にて30分間攪拌した。HPLCによる精製により、29mgの標記化合物30を得た。
【０１６９】
実施例１７
3’-デオキシチミジン5’-α,α-P-ジチオ-β,γ-（ジフルオロメチレン）トリホスフェート（31）
3’-デオキシチミジン（66.3mg,0.150mmol）を、アルゴン下に維持した10mLの丸底フラスコ中の0.5mLの無水DMFに溶解させた。これに0.1mLの無水ピリジンを添加した。無水DMF（0.5mL）中の2-クロロ-4H-1,3,2-ベンゾジオキサホスホリン-4-オン（36.4mg,0.180mmol）の新たに調製された溶液を0℃にてシリンジを介して添加した。室温にて1時間攪拌した後、トリブチルアミン（0.3mL）を添加し、無水DMF（1mL）中のジフルオロメチレンジホスホン酸ビス（トリ-n-ブチルアンモニウム）塩（113.5mg,0.195mmol）の溶液を添加した。混合物を室温にて1時間攪拌し、硫黄（9.6mg,0.300mmol）を0℃にて添加した。室温にて2時間攪拌した後、硫化リチウム（137.8mg,3.0mmol）を添加した。攪拌を12時間継続した。蒸留した脱イオン水（10mL）を添加し、混合物を室温にて30分間攪拌した。HPLCによる精製により、2.6mgの標記化合物31を得た。
【０１７０】
実施例１８
3’-デオキシチミジン5’-α-P-ボラノ-α-P-チオ-β,γ（ジフルオロメチレン）トリホスフェート（32）
3’-デオキシチミジン（42.0mg,0.186mmol）を、アルゴン下に維持した10mLの丸底フラスコ中の0.5mLの無水DMFに溶解させた。これに0.1mLの無水ピリジンを添加した。無水DMF（0.5mL）中の2-クロロ-4H‐1,3,2-ベンゾジオキサホスホリン-4‐オン（45.1mg,0.223mmol）の新たに調製された溶液を0℃にてシリンジを介して添加した。室温にて1時間攪拌した後、トリブチルアミン（0.3mL）を添加し、引き続きて、無水DMF（1mL）中のジフルオロメチレンジホスホン酸ビス（トリ-n-ブチルアンモニウム）塩（140.8mg,0.242mmol）の溶液を添加した。混合物を室温にて1時間攪拌し、ボラン-ジイソプロピルエチルアミンン錯体（0.25mL）を0℃にて添加した。室温にて12時間攪拌した後、硫化リチウム（17.09mg,0.372mmol）を添加した。攪拌を1時間継続した。蒸留した脱イオン水（10mL）を添加し、混合物を室温にて30分間攪拌した。HPLCによる精製により、4.2mgの標記化合物32を得た。
【０１７１】
実施例１９
3’-アジド-3’-デオキシチミジン5’-α-P-エチルアミノ-β,γ-（ジフルオロメチレン）トリホスフェート（33）
3’-アジド-3’-デオキシチミジン（133.6mg,0.495mmol）を、アルゴン下に維持した10mLの丸底フラスコ中の1mLの無水DMFに溶解させた。これに0.25mLの無水ピリジンを添加した。無水DMF（0.5mL）中の2‐クロロ-4H‐1,3,2-ベンゾジオキサホスホリン-4-オン（101.2mg,0.495mmol）の新たに調製された溶液をシリンジを介して添加した。室温にて1時間攪拌した後、トリブチルアミン（0.3mL）を添加し、続いて、DMF（0.5mL）中のジフルオロメチレンジホスホン酸ビス（トリ-n-ブチルアンモニウム）塩（294mg,0.5mmol）の溶液を添加した。混合物を1時間攪拌し、253mg（1mmol）のヨウ素を添加した。室温にて3.5時間攪拌した後、THF中の2mLのエチルアミンの2M溶液を添加し、室温にて2時間攪拌した。水（5mL）を添加し、混合物を室温にて一晩攪拌した。HPLCによる精製によって、54.2mgの標記化合物33を得た。
【０１７２】
実施例２０
3’-アジド-3’-デオキシチミジン5’-α-P-フェニルアミノ-β,γ-（ジフルオロメチレン）トリホスフェート（34）
3’-アジド-3’-デオキシチミジン（103.8mg,0.388mmol）を、アルゴン下に維持した10mLの丸底フラスコ中の1mLの無水DMFに溶解させた。これに0.20mLの無水ピリジンを添加した。無水DMF（1mL）中の2-クロロ-4H-1,3,2-ベンゾジオキサホスホリン-4-オン（101.2mg,0.495mmol）の新たに調製された溶液を0℃にてシリンジを介して添加した。室温にて1時間攪拌した後、トリブチルアミン（0.3mL）を添加し、続いて、無水DMF（1mL）中のジフルオロメチレンジホスホン酸ビス（トリ-n-ブチルアンモニウム）塩（294mg,0.504mmol）の溶液を添加した。混合物を室温にて1時間攪拌し、ヨウ素（197.0mg,0.776mmol）を0℃にて添加した。室温にて1時間攪拌した後、アニリン（0.554mL,3.88mmol）を添加した。攪拌を4時間継続した。蒸留した脱イオン水（10mL）を添加し、混合物を室温にて30分間攪拌した。HPLCによる精製によって、16.2mgの標記化合物34を得た。
【０１７３】
実施例２１
3’-デオキシチミジン5’-α-P-フルオロ-β,γ-（ジフルオロメチレン）トリホスフェート（35）
3’-デオキシチミジン（47.0mg,0.208mmol）を、アルゴン下に維持した10mLの丸底フラスコ中の0.5mLの無水DMFに溶解させた。これに0.125mLの無水ピリジンを添加した。無水DMF（0.5mL）中の2-クロロ-4H-1,3,2-ベンゾジオキサホスホリン-4-オン（50.6mg,0.250mmol）の新たに調製した溶液を0℃にてシリンジを介して添加した。室温にて1時間攪拌した後、トリブチルアミン（0.30mL）を添加し、続いて、無水DMF（1mL）中のジフルオロメチレンジホスホン酸ビス（トリ-n-ブチルアンモニウム）塩（157.4mg,0.270mmol）の溶液を添加した。混合物を室温にて1時間攪拌し、ヨウ素（105.6mg,0.416mmol）を0℃にて添加した。室温にて1時間攪拌した後、フッ化カリウム（120.8mg,2.08mmol）を添加した。攪拌を2時間継続した。水（10mL）を添加し、混合物を室温にて30分間攪拌した。HPLCによる精製によって、47.3mgの標記化合物35を得た。
【０１７４】
実施例２２
3’-アジド-3’-デオキシチミジン5’-α-P-アジド-β,γ-（ジフルオロメチレン）トリホスフェート（36）
3’-アジド-3’-デオキシチミジン（40.09mg,0.150mmol）を、アルゴン下に維持した10mLの丸底フラスコ中の0.5mLの無水DMFに溶解させた。これに0.10mLの無水ピリジンを添加した。無水DMF（0.5mL）中の2-クロロ‐4H-1,3,2-ベンゾジオキサホスホリン‐4-オン（33.4mg,0.165mmol）の新たに調製した溶液を0℃にてシリンジを介して添加した。室温にて1時間攪拌した後、トリブチルアミン（0.21mL）を添加し、続いて、無水DMF（1mL）中のジフルオロメチレンジホスホン酸ビス（トリ‐n‐ブチルアンモニウム）塩（104.8mg,0.180mmol）の溶液を添加した。混合物を室温にて1時間攪拌し、ヨウ素（76.1mg,0.300mmol）を0℃にて添加した。室温にて1時間攪拌した後、アジ化ナトリウム（97.5mg,1.50mmol）を添加した。攪拌を2時間継続した。蒸留した脱イオン水（10mL）を添加し、混合物を室温にて30分間攪拌した。HPLCによる精製により、16.7mgの標記化合物36を得た。
【０１７５】
実施例２３
3’-アジド‐3’-デオキシチミジン5’-α‐O-メチル‐β,γ‐（ジフルオロメチレン）トリホスフェート（37）
3’-アジド‐3’-デオキシチミジン（40.09mg,0.150mmol）を、アルゴン下に維持した10mLの丸底フラスコ中の0.5mLの無水DMFに溶解させた。これに0.10mLの無水ピリジンを添加した。無水DMF（0.5mL）中の2-クロロ‐4H-1,3,2-ベンゾジオキサホスホリン‐4-オン（33.4mg,0.165mmol）の新たに調製した溶液を0℃にてシリンジを介して添加した。室温にて1時間攪拌した後、トリブチルアミン（0.21mL）を添加し、続いて、無水DMF（1mL）中のジフルオロメチレンジホスホン酸ビス（トリ‐n‐ブチルアンモニウム）塩（104.8mg,0.180mmol）の溶液を添加した。混合物を室温にて1時間攪拌し、ヨウ素（76.1mg,0.300mmol）を0℃にて添加した。室温にて1時間攪拌した後、ナトリウムメトキシド（0.343mL,1.50mmol）を添加した。攪拌を30分間継続した。蒸留した脱イオン水（10mL）を添加し、混合物を室温にて30分間攪拌した。HPLCによる精製により、10.1mgの標記化合物37を得た。
【０１７６】
実施例２４
3’-デオキシチミジン5’-α‐O-フェニル‐β,γ‐（ジフルオロメチレン）トリホスフェート（38）
3’-デオキシチミジン（66.3mg,0.150mmol）を、アルゴン下に維持した10mLの丸底フラスコ中の0.5mLの無水DMFに溶解させた。これに0.1mLの無水ピリジンを添加した。無水DMF（0.5mL）中の2-クロロ-4H-1,3,2-ベンゾジオキサホスホリン‐4-オン（36.4mg,0.180mmol）の新たに調製した溶液を0℃にてシリンジを介して添加した。室温にて1時間攪拌した後、トリブチルアミン（0.3mL）を添加し、続いて、無水DMF（1mL）中のジフルオロメチレンジホスホン酸ビス（トリ‐n‐ブチルアンモニウム）塩（113.5mg,0.195mmol）の溶液を添加した。混合物を室温にて1時間攪拌し、ヨウ素（76.1mg,0.3mmol）を0℃にて添加した。室温にて2時間攪拌した後、ナトリウムフェノキシド（87.1mg,0.750mmol）を添加した。攪拌を12時間継続した。蒸留した脱イオン水（10mL）を添加し、混合物を室温にて30分間攪拌した。HPLCによる精製により、2.73mgの標記化合物38を得た。
【０１７７】
実施例２５
3’-アジド‐3’-デオキシチミジン5’-α‐P-ボラノ‐β,γ‐ジフルオロメチレン‐γ‐O-メチルトリホスフェート（40）
無水アセトニトリル（2mL）中の3’-アジド‐3’-デオキシチミジン5’-α‐P-ボラノ‐β,γ‐（ジフルオロメチレン）トリホスフェートのビス（テトラブチルアンモニウム）塩（0.12mmol）、トリブチルアミン（85μL,0.36mmol）およびトリフルオロメタンスルホン酸メチル（54μL,0.48mmol）の溶液を室温にて一晩放置した。反応物を0℃にて水（2mL）でクエンチし、次いで、アセトニトリルのほとんどを蒸発させた。水溶液をHPLC精製に供して、1.51mgの標記化合物40を得た。
【０１７８】
実施例２６
3’-アジド‐3’-デオキシチミジン5’-α‐P-ボラノ‐β,γ‐ジフルオロメチレン‐γ‐O-パルミチルトリホスフェート（41）
工程A.  DCM（20mL）中のパルミトール（1.0g,4.12mmol）およびDMAP（0.73g,5.9mmol）をアルゴン雰囲気下で-20℃まで冷却し、塩化p-ニトロベンゼンスルホニル（1.09g,4.9mmol）を添加し、混合物をアルゴン雰囲気下で5℃にて18時間攪拌した。反応混合物を冷炭酸水素ナトリウム溶液（飽和、20mL）に注ぎ、有機層をクエン酸（10％）、ブラインで洗浄し、MgSO4で乾燥した。懸濁液をろ過し、真空中で濃縮し、ヘキサン中の10〜50％エーテルのグラジエントで溶出するシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、1.06gの4-ニトロベンゼンスルホン酸パルミチルを得た。
【０１７９】
工程B.  3’-アジド‐3’-デオキシチミジン5’-α‐P-ボラノ‐β,γ‐（ジフルオロメチレン）トリホスフェートのビス（テトラブチルアンモニウム）塩（183mg,0.146mmol）を無水DMF（3×5mL）で共蒸発させた。第三の共蒸発では、ほぼ半分の容量のDMFを除去し、アルゴン雰囲気下で混合物を0℃まで冷却した。4-ニトロベンゼンスルホン酸パルミチル（123mg,0.29mmol）を添加した。室温にて1時間攪拌した後、混合物を氷冷TEAB溶液（1.0M,10mL）に注ぎ、30分間攪拌した。水性部分を逆相（C18）HPLCで精製して、6.8mgの標記化合物41を得た。
【０１８０】
実施例２７
3’-アジド‐3’デオキシチミジン5’-α‐P-ボラノ‐β,γ‐ジフルオロメチレン‐γ‐O‐フェニルトリホスフェート（42）
工程A.  無水DMF（10mL）中の水素化ナトリウム（320mg,8.0mmol）のスラリーを、アルゴン雰囲気下で、無水DMF（2mL）に溶解させたフェノール（0.9g,10.0mmol）で処理した。室温で1時間攪拌した後、ガスの発生が止んだ。15-クラウン‐5（1.59mL,8.0mmol）を添加し、攪拌を1時間継続した。この混合物を工程2で直ちに用いた。
【０１８１】
工程B.  3’-アジド‐3’-デオキシチミジン5’-α‐P-ボラノ‐β,γ‐（ジフルオロメチレン）トリホスフェートのトリエチルアンモニウム塩（0.21mmol）を無水DMF（3×5mL）で共蒸発させた。第三の共蒸発では、ほぼ半分の容量のDMFを除去し、無水メタノール（0.3mL）を添加し、続いてN,N’-ジシクロヘキシルカルボジイミド（200mg）を添加した。アルゴン雰囲気下で室温にて3時間攪拌した後、混合物を真空中で濃縮し、前記手法をもう1回反復した。真空中で溶媒を除去した後、残渣を無水DMF（3mL）に再度懸濁させ、工程1からのフェノキシド溶液で滴下処理した。アルゴン雰囲気下で室温にて4時間攪拌した後、反応混合物を水（20mL）で処理し、HCl溶液（1.0M）でpH6に調整し、ジエチルエーテル（3×20mL）で抽出した。水性部分を逆相（C18）HPLCで精製して、41.3mgの標記化合物42を得た。
【０１８２】
実施例２８
3’-アジド‐3’-デオキシチミジン5’-α‐P-ボラノ‐β,γ‐ジフルオロメチレン‐γ‐O-（4-ニトロフェニル）トリホスフェート（43）
3’-デオキシ‐3’-アジドチミジン5’-α‐p-ボラノ‐β、γ‐（ジフルオロメチレン）トリホスフェートのトリエチルアンモニウム塩（25μmol）の無水DMF（3×2mL）で共蒸発させた。第三の共蒸発では、ほぼ半分の容量のDMFを除去し、メタノール（30μL）を添加し、続いてN,N’-ジシクロヘキシルカルボジイミド（20mg）を添加した。アルゴン雰囲気下で室温にて3時間攪拌した後、混合物を真空中で蒸発させ、前記手法を1回反復した。真空中で溶媒を除去した後、残渣を無水DMF（2mL）を再懸濁させ、無水トリエチルアミン（0.09mL）で処理し、続いて、p‐ニトロフェノール（90mg）を添加した。アルゴン雰囲気下で室温にて4時間攪拌した後、反応混合物を水（10mL）で処理し、HCl溶液（0.1M）でpH6に調整し、ジエチルエーテル（3×10mL）で抽出した。水性部分を逆相（C18）HPLCで精製して、1.8mgの標記化合物43を得た。
【０１８３】
実施例２９
3’-アジド‐3’-デオキシチミジン5’-γ‐P-メチル‐α,β‐（ジフルオロメチレン）トリホスフェート（44）
無水アセトニトリル（0.5mL）中の1,2,4-1H-トリアゾール（18.3mg,0.265mmol）の攪拌溶液にトリエチルアミン（26.8mg,37μL,0.265mmol）を添加した。溶液を0℃まで冷却し、アセトニトリル（0.5mL）中の二塩化メチルホスホン酸（17.6mg,0.133mmol）の溶液を滴下した。室温にて40分間攪拌しつつ、反応混合物を維持し、次いで、遠心した。上澄みを、DMF（1mL）中の3’-アジド‐3’-デオキシチミジン5’-（ジフルオロメチレン）ジホスホネートのトリブチルアンモニウム塩（89.8mg,0.0884mmol）の溶液に添加した。反応混合物を1.5時間攪拌しつつ維持し、次いで、水（2mL）を添加することによってクエンチした。HPLCによる精製により、13.1mgの標記化合物44を得た。
【０１８４】
実施例３０
3’-アジド‐3’-デオキシチミジン5’-γ‐P-フェニル‐α,β‐（ジフルオロメチレン）トリホスフェート（45）
無水アセトニトリル（0.5mL）中の1,2,4-1H-トリアゾール（18.4mg,0.267mmol）の攪拌溶液にトリエチルアミン（27mg,37.2μL,0.267mmol）を添加した。溶液を0℃まで冷却し、アセトニトリル（0.5mL）中の二塩化フェニルホスホン酸（26mg,0.134mmol）を滴下した。4℃の温度にて40分間攪拌しつつ、反応混合物を維持し、次いで、遠心した。上澄みを、DMF（1mL）中の3’-アジド‐3’-デオキシチミジン5’-（ジフルオロメチレン）ジホスホネートのトリブチルアンモニウム塩（90.3mg,0.089mmol）の溶液に添加した。化合物44につき記載したのと同様な仕上げ処理および精製により、12.8mgの標記化合物45を得た。
【０１８５】
実施例３１
3’-アジド‐3’,5’-ジデオキシチミジジン5’-（β,γ‐ジフルオロメチレン）トリホスフェート（55）
工程A.  1-（3-O-アセチル‐2,5-ジデオキシ‐5-ヨード‐β‐D-threo‐ペントフラノシル）チミン（49）の調製
アルゴン下、0℃にて、無水ピリジン（50mL）中の1-（2,5-ジデオキシ‐5-ヨード‐β‐D-threo‐ペントフラノシル）チミン（調製については、文献J.Org.Chem.1964,29,2076参照）（5.1g,14.5mmol）の攪拌溶液に、無水酢酸（7.0ml,75.4mmol）を添加した。反応混合物を室温にて17時間攪拌した。反応混合物を氷浴で冷却し、水（15mL）をゆっくりと添加することによってクエンチした。反応混合物を30分間攪拌し、濃縮乾固し、無水トルエンで3回共蒸発させた。残渣をジクロロメタンに再度溶解させ、酢酸エチル中の1〜3％メタノールを用いるシリカゲルでのクロマトグラフにかけて、4.4gの1-（3-O-アセチル‐2,5‐ジデオキシ‐5-ヨード‐β‐D-threo‐ペントフラノシル）チミン（49）を得た。
【０１８６】
工程B.  1-［3-O-アセチル-2,5-ジデオキシ-5-（ジーO-エチルホスホノ）-β-D-threo-ペントフラノシル］チミジン（50）の調製
アルゴン下、新たに蒸留した亜リン酸トリエチル（50mL）中の1-（3-O-アセチル-2,5-ジデオキシ-5-ヨード-β-D-threo-ペントフラノシル）チミジン（49）（4.4g,12.5mmol）の攪拌溶液を180℃にて30時間加熱した。反応混合物を濃縮乾固し、残った残渣をジクロロメタンに再度溶解させ、ジクロロメタン中の2〜4％エタノールでのシリカゲル上のクロマトグラフにかけて、2.4gの1-［3-O-アセチル-2,5-ジデオキシ-5-（ジ-O-エチルホスホノ）-β-D-threo-ペントフラノシル］チミジン（50）を淡黄色フォームとして得た。
【０１８７】
工程C.  1-［2,5-ジデオキシ-5-（ジ-O-エチルホスホノ）-3-O-メシル-β-D-threo-ペントフラノシル］チミン（51）の調製
アルゴン下、0℃にて、無水エタノール（75mL）中の1-［3-O-アセチル-2,5-ジデオキシ-5-（ジ-O-エチルホスホノ）-β-D-thero-ペントフラノシル］チミン（50）（1.08g、2.68mmol）の攪拌溶液に、ナトリウムエトキシド（0.28g,4.03mmol）を一度に添加した。反応混合物を0℃にて2時間攪拌した。それを0℃にて1時間攪拌した後、さらにナトリウムエトキシド（47.5mg,0.67mmol）を添加した。得られた黄色溶液をDOWEX  50WX8-100イオン交換樹脂で中和した。樹脂を濾過によって除去し、無水エタノール（60mL）で洗浄した。濾液を蒸発乾固し、残った残渣をジクロロメタンに再度溶解させ、ジクロロメタン中の3〜3.5％エタノールを用いるシリカゲル上のクロマトグラフにかけて、0.62gの1-［2,5-ジデオキシ-5-（ジ-O-エチルホスホノ）-β-D-threo-ペントフラノシル］チミンを得た。
【０１８８】
アルゴン下、0℃にて、無水ピリジン（30mL）中の1-［2,5-ジデオキシ-5-（ジ-O-エチルホスホノ）-β-D-threo-ペントフラノシル］チミン（1.3g,3.69mmol）の攪拌溶液に、4-（ジメチルアミノ）ピリジン（0.225g,1.85mmol）、続いて塩化メタンスルホニル（0.42mL,5.54mmol）を添加した。反応混合物を室温にて13時間攪拌した。反応混合物を氷浴で冷却し、水（15mL）をゆっくりと添加することによってクエンチした。反応混合物を20分間攪拌し、濃縮乾固し、無水トルエンで3回共蒸発させた。残渣をジクロロメタンに再度溶解させ、ジクロロメタン中の2〜3％エタノールを用いるシリカゲル上のクロマトグラフにかけて、1.5gの1-［2,5-ジデオキシ-5-（ジ-O-エチルホスホノ）-3-O-メシル-β-D-threo-ペントフラノシル］チミン（51）を得た。
【０１８９】
工程D.  1-［3-アジド-3,5-ジデオキシ-5-（ジ-O-エチルホスホノ）-β-D-erythro-ペントフラノシル］チミン（52）の調製
アルゴン下、室温にて、無水DMF（25mL）中の1-［2,5-ジデオキシ-5-（ジ-O-エチルホスホノ）-3-O-メシル-β-D-threo-ペントフラノシル］チミン（51）（1.5g,3.41mmol）の攪拌溶液にNaN3（0.44g,6.8mmol）を添加した。反応混合物を80℃にて14時間攪拌した。反応混合物を濾過し、溶媒を蒸発させた。残渣をジクロロメタンに再度溶解させ、ジクロロメタン中の3〜3.5％エタノールを用いるシリカゲル上のクロマトグラフにかけて、0.73gの1-［3,5-ジデオキシ-3-アジド-5-（ジ-O-エチルホスホノ）-β-D-erythro-ペントフラノシル］チミン（52）を得た。
【０１９０】
工程E.  3’-アジド-3’,5’-ジデオキシチミジン-5’-ホスホン酸（53）の調製
アルゴン下、無水CH3CN（5.5mL）中の1-［3,5-ジデオキシ-3-アジド-5-（ジ-O-エチルホスホノ）-β-D-erythro-ペントフラノシル］チミン（52）（0.2g,0.52mmol）の攪拌溶液に、Me3SiBr（0.5mL,3.65mmol）を添加した。反応混合物を40℃にて4時間攪拌した。反応混合物を濃縮乾固し、無水アセトニトリルで2回共蒸発させた。次いで、残渣をMeOHで3回共蒸発させた。残った残渣を水（3.0mL）に再度溶解させ、エーテルで2回洗浄し、合わせた水性溶液を凍結乾燥して、0.181gの3’-アジド-3’,5’-ジデオキシチミジン-5’-ホスホン酸（53）が得られ、これをさらに精製することなく用いた。
【０１９１】
工程F.  3’-アジド-3’,5’-ジデオキシチミジン5’-（β,γ-ジフルオロメチレン）トリホスフェート（55）の調製
水（2.5mL）中の3’-アジド-3’,5’-ジデオキシチミジン-5’-ホスホン酸（53）（0.181g,0.55mmol）の溶液に、1.34mLの1M炭酸水素トリエチルアンモニウム緩衝液を添加し、得られた溶液を凍結乾燥して、263mgの化合物53のトリエチルアンモニウム塩を得た。化合物53のトリエチルアンモニウム塩（69.3mg,0.13mmol）をHMPA（2.5mL）に溶解させ、1,1’-カルボニルジイミダゾール（107mg,0.65mmol）を室温にて添加し、2時間攪拌した。メタノール（35μl）を添加し、攪拌を48時間継続した。HMPA（2.5mL）に溶解させたジフルオロメチレンジホスホン酸ビス（トリ-n-ブチルアンモニウム）塩（397mg,0.68mmol）を添加し、得られた溶液を室温にて4時間攪拌した。反応混合物を氷浴中で冷却し、氷/水（4mL）を添加した。HPLCによる精製により、16.6mgの標記化合物55を得た。
【０１９２】
実施例３２
3’-アジド-3’,5’-ジデオキシチミジン5’-（β,γ-ジクロロメチレン）トリホスフェート（56）
化合物53のトリエチルアンモニウム塩（59.1mg,0.11mmol）をHMPA（2mL）に溶解させ、1,1’-カルボニルジイミダゾール（93mg,0.57mmol）を室温にて添加し、2時間攪拌した。メタノール（30μl）を添加し、攪拌を55分間継続した。HMPA（2.5mL）に溶解させたジクロロメチレンジホスホン酸トリ-n-ブチルアンモニウム塩（288mg,0.51mmol）をシリンジで活性化AZTのモノホスフェートの溶液に添加し、合わせた溶液を室温にて6時間攪拌した。反応混合物を氷浴中で冷却し、氷/水（5mL）を添加した。HPLCによる精製により、8.3mgの標記化合物56を得た。
【０１９３】
実施例３３
3’-アジド-3,5’-ジデオキシチミジン5’-β,γ-イミドトリホスフェート（57）
化合物53のトリエチルアンモニウム塩（50.0mg,0.09mmol）をHMPA（2mL）に溶解させ、1,1’-カルボニルジイミダゾール（106mg,0.66mmol）を室温にて添加し、2時間攪拌した。メタノール（35μL）を添加し、攪拌を45分間継続した。HMPA（2mL）に溶解させたイミドジホスフェートのトリ-n-ブチルアンモニウム塩（427mg,0.46mmol）をシリンジで活性化AZTのモノホスフェートの溶液に添加し、合わせた溶液を室温で4時間攪拌した。反応混合物を氷浴中で冷却し、水（5mL）を添加した。HPLCによる精製により、30.6mgの標記化合物57を得た。
【０１９４】
実施例３４
1-［6,6-ジフルオロ-6-（β,γ-ジフルオロメチレン）トリホスホノ-2,3,5,6-テトラデオキシ-α/β-D-アロフラノシル］チミン（62）
工程A.  6-ジエチルホスホノ-6,6-ジフルオロ-1-O-メチル-2,3,5,6-テトラデオキシ-D-アロフラノース（59）
アルゴン下、無水CH2Cl2（100mL）中の無水トリフルオロメタンスルホン酸（2.43mL,14.4mmol）の氷冷混合物に、2.6-ジ-tert-ブチル-4-メチルピリジン（2.96g,14.4mmol）を添加した。溶液を-20℃まで冷却し、無水CH2Cl2（75mL）中の2,3-ジデオキシ-1-O-メチル-D-リボフラノース（調製については、例えば、：Can.J.Chem.1969,47：4413参照）（1.9g,14.4mmol）を滴下した。反応混合物を-15〜-5℃にて45分間攪拌し、次いで、氷冷水性NaHCO3（1％,1L）に注ぎ、激しく振盪した。層を分離し、水性層をCH2Cl2（2×75mL）で抽出した。合わせた抽出物を乾燥し（Na2SO4）、濃縮し、ヘキサンおよびヘキサン/Et2Oを溶離剤として用いるシリカゲルカラムで迅速に精製した。生成物含有画分を濃縮し、次の工程で直ちに用いた。
【０１９５】
アルゴン下、-78℃にて、無水THF（40mL）中のジイソプロピルアミン（6.05mL,43.2mmol）およびHMPA（7.52mL,43.2mmol）の溶液にn-ブチルリチウム（ヘキサン中1.6Mで27mL,43.2mmol）を添加した。混合物を0℃にて1時間攪拌し、次いで、-78℃まで冷却した。この溶液に、THF（40mL）中の（ジフルオロメチル）ホスホン酸ジエチル（6.8mL,43.2mmol）の冷（-78℃）溶液を導入針を介して滴下し、30分後に、THF（90mL）中の前記調製の前記トリフレートの冷（-78℃）溶液を滴下した。反応混合物を-78℃にて2時間攪拌し、次いで、冷（-10℃）飽和水性NH4Cl（300mL）に注ぎ、Et2O（300mL）で希釈し、層を分離した。水性層をさらにEtOAc（2×150mL）で抽出し、合わせた抽出物を乾燥し（Na2SO4）、濃縮した。溶離剤としてヘキサンおよびヘキサン/EtOAc（10：1）を用いるシリカゲルクロマトグラフィーにより、標記化合物59を無色油（1.33g；2工程で31％）として得た。
【０１９６】
工程B.  1-［6-ジエチルホスホノ-6,6-ジフルオロ-2,3,5,6-テトラデオキシ-α/β-D-アロフラノシル］チミン（60）
アセトニトリル（30mL）中の工程Aからの生成物59（1.33g,4.4mmol）をアセトニトリル中のビス（トリメチルシリル）チミンの溶液に添加した。アセトニトリル（30mL）中のビス（トリメチル）シリルアセトアミド（2.3mL；8.8mmol）と共にチミン（1.11g,8.8mmol）を15分間還流することによって後者を調製した。合わせた混合物を0℃まで冷却し、その際、SnCl4（CH2Cl2中1Mで4.4mL,4.4mmol）を滴下し、次いで、75℃にて45分間加熱した。氷浴中で冷却した後、それを氷冷水性NaHCO3（5％,200mL）に注ぎ、CH2Cl2（200＋2×100mL）で抽出した。合わせた抽出物を乾燥し（Na2SO4）、濃縮し、溶離剤としてCH2Cl2/MeOH（50：1）を用いるシリカゲルで精製して、標記化合物60をジアステレオマーの混合物（0.8g,46％；α/β  3/2）として得た。
【０１９７】
工程C.  1-［6,6-ジフルオロ-6-ホスホノ-2,3,5,6-テトラデオキシ-α/β-D-アロフラノシル］チミン（61）
アルゴン下、無水アセトニトリル（15mL）中の工程Bからの生成物60（550mg,1.6mmol）の氷冷混合物に、TMSBr（4.2mL,20当量）を滴下した。得られた混合物を室温にて1日間攪拌した。無水条件下で揮発物を真空中で除去し、残渣をトルエンと数回共蒸発させ、最後に、Et2O（20mL）および水（100mL）間に分配した。水性層をTEAB緩衝液（1M,pH8.5）で中和し、Et2O（2×20mL）で洗浄し、蒸発させて、61のトリエチルアンモニウム塩を白色固体（630mg；76％）として得た。
【０１９８】
工程D.  1-［6,6-ジフルオロ-6-（β,γ-ジフルオロメチレントリホスホノ）-2,3,5,6-テトラデオキシ-α/β-D-アロフラノシル］チミン（62）
アルゴン下、HMPA（2.5mL）中の工程Cからの生成物61（94mg,0.17mmol）の溶液に、1,1’-カルボニルジイミダゾール（110mg,4当量）を添加した。反応混合物を室温にて4時間攪拌し、その際、HMPA（2mL）中のビス［トリ（n-ブチル）アンモニウム］（ジフルオロメチレン）ビスホスホネート（400mg,4当量）を添加した。8時間後（LCMSによって判断すると56％のホスホン酸イミダゾリル中間体と混合物中の24％の標的トリホスフェート）、1M TEAB緩衝液（10mL,pH8.5）に注ぐことによって、反応物をクエンチし、混合物をHPLCによって精製して、9.2mgの標記化合物62を得た。
【０１９９】
実施例３５
1-［6,6-ジフルオロ-6-（β,γ-イミドトリホスホノ）-2,3,5,6-テトラデオキシ-α/β-D-アロフラノシル］チミン（63）
アルゴン下、HMPA（2.5mL）中の工程Cからの生成物61（94mg,0.17mmol）の溶液に、1,1’-カルボニルジイミダゾール（CDI）（138mg,5当量）を添加した。室温にて4時間攪拌した後、過剰のCDIをMeOH（27.5μL,4当量）でクエンチした。HMPA（2mL）中のイミドジホスホン酸テトラキス［トリ（n-ブチル）アンモニウム］（270mg,1.2当量）を添加し、室温での攪拌を継続した。18時間後（LCMSによって判断して41％のホスホン酸イミダゾリル中間体と共に混合物中の25％の標的トリホスフェート）、1M TEAB緩衝液（10mL,pH8.5）に注ぐことによって反応混合物をクエンチし、混合物をHPLCによって精製して、7.3mgの標記化合物63を得た。
【０２００】
実施例３６
1-［6,6-ジフルオロ-2,3,5,6-テトラデオキシ-6-トリホスホノ-α/β-D-アロフラノシル］チミン（64）
化合物63についての手法に従い、工程Cからの生成物61の102mg（0.19mmol）から出発し、ピロリン酸トリ（n-ブチル）アンモニウム（246mg）を用い、18時間後に（LCMSによって判断して41％のホスホン酸イミダゾリル中間体と共に混合物中の25％の標的トリホスフェート）、12mgの標記化合物64を単離した。
【０２０１】
実施例３７
3’-アジド-3’-デオキシチミジン5’-α,β,β-O-（トリピバロイルオキシメチル-β,γ-イミドジホスフェート（68）
工程A.  ピバル酸ヨードメチルの調製
アルゴン下、ピバル酸クロロメチル（26g,25mL,0.17mol）を無水アセトン（170mL）中のヨウ化ナトリウム（52g,0.34mol）の攪拌溶液に滴下した。室温にて24時間攪拌した後、170mLのヘキサンを添加した。沈殿した塩を濾過し、ヘキサンで洗浄した。濾液を濃縮し、170mLのヘキサンに溶解させ、5％NaHSO3で洗浄し、次いで、水で2回洗浄し、MgSO4で乾燥した。溶媒を減圧下で蒸発させて、黄色液体を得た。ヘキサンを用いるシリカ上のフラッシュクロマトグラフィーの後、ピバル酸ヨードメチルを含有する画分を合わせ、NaHSO3で洗浄してI2を除去した。乾燥および蒸発の後に、34gのピバル酸ヨードメチルが淡黄色シロップとして得られた。
【０２０２】
工程B.  3’-アジド-3’-デオキシチミジン5’-α,β,β-O-（トリピバロイルオキシメチル-β,γ-イミドジホスフェート（68）
3’-アジド-3’-デオキシチミジン5’-イミドジホスフェート（AZTの5’-O-イミドジホスフェートは文献（Maら、J.Med.Chem.1992,35,1938-1941）に従って調製した）（H＋形態,57mg,0.13mmol）およびトリブチルスタニルメトキシド（125mg,0.39mmol）のメタノール（3mL）中混合物を25℃にて30分間攪拌した。メタノールを蒸発によって除去した。メタノールを徹底的に除去するために、残渣をアセトニトリルと共に3回共蒸発させた。アセトニトリル（3mL）中の残渣に臭化テトラブチルアンモニウム（126mg,0.39mmol）およびピバル酸ヨードメチル（472mg,1.95mmol）を添加した。混合物を1時間還流し、次いで、25℃まで冷却した。混合物を減圧下で小容量（0.3mL）まで濃縮し、次いで、シリカゲルカラムに適用した。カラムをクロロホルムおよびメタノールで溶出させて、57mgの標記化合物68を得た。
【０２０３】
実施例３８
3’-アジド-3’-デオキシチミジン5’-α-P-ボラノ-γ-O-（ピバロイルオキシメチル）-β,γ-（ジフルオロメチレン）トリホスフェート（69）
アルゴン下、メタノール（5mL）中の3’-アジド-3’-デオキシチミジン5’-α-P-ボラノ-β,γ-（ジフルオロメチレン）トリホスフェート（27）のトリエチルアンモニウム塩（186mg,0.196mmol）の攪拌溶液に、トリブチルスタニルメトキシド（63mg,57μL,0.196mmol）を添加した。反応混合物を45分間攪拌し、濃縮し、アセトニトリル（3×3mL）と共に共蒸発させ、高真空下で乾燥した。残渣をアルゴン下でアセトニトリル（5mL）に溶解させ、この溶液に臭化テトラブチルアンモニウム（63.3mg,0.196mmol）およびPOM（30.7μL,0.196mmol）を添加した。室温にて5.5時間攪拌しつつ反応混合物を維持し、水（1mL）を添加することによってクエンチし、逆相HPLCで精製して、4.4mgの標記化合物69を得た。
【０２０４】
実施例３９
3’-アジド-3’-デオキシチミジン5’-α-P-ボラノ-γ-O-（S-ピバロイル-2-チオエチル）-β,γ-（ジフルオロメチレン）トリホスフェート（70）
工程A.  S-ピバロイル-2-チオエタノールの調製
無水THF（200mL）中の2-メルカプトエタノール（15.6g,14mL,0.2mol）の溶液に、室温にて磁気攪拌しつつ、NaH（8g,0.2mol,鉱油中60％分散液）をゆっくりと添加した。0℃まで冷却した後、塩化ピバロイル（28.9g,14.8mL,0.24mol）を滴下した。5時間後、CH2Cl2および水の混合物（500mL,V/V8：1）を添加することによってそれをクエンチした。有機層を分離し、水（100mL）によって2回洗浄し、MgSO4によって乾燥した。それを濾過し、減圧下で溶媒を蒸発させた。ヘキサン/EtOAc（10：1）を用いるシリカでのフラッシュクロマトグラフィーによる精製により、13.7gのS-ピバロイル-2-チオエタノールを淡黄色液体として得た。
【０２０５】
工程B.  4-ニトロベンゼンスルホン酸S-ピバロイル-2-チオエチルの調製
4-ジメチルアミノピリジン（937mg,7.67mmol）を、CH2Cl2（20mL）のS-ピバロイル-2-チオエタノール（1.038g,6.40mmol）の攪拌溶液に添加した。次いで、CH2Cl2（20mL）中の塩化4-ニトロベンゼンスルホニル（1.70g,7.67mmol）の溶液をアルゴン下にて0℃で滴下した。2時間攪拌した後、水（50mL）およびCH2Cl2（100mL）の氷冷混合物を添加することによって反応物をクエンチし、5分間攪拌した。それをCH2Cl2（200mL）で希釈し、分離した。有機相を氷冷飽和NaHSO4、ブラインによって洗浄し、MgSO4によって乾燥した。ヘキサン中の5％EtOAcを用いるシリカ上のクロマトグラフィーにより、1.09gの4-ニトロベンゼンスルホン酸S-ピバロイル-2-チオエチルを得た。
【０２０６】
工程C.  3’-アジド-3’-デオキシチミジン5’-α-P-ボラノ-γ-O-（S-ピバロイル-2-チオエチル）-β,γ-（ジフルオロメチレン）トリホスフェート（70）
無水アセトニトリル中の3’-アジド-3’-デオキシチミジン5’-α-P-ボラノ-β,γ-（ジフルオロメチレン）トリホスフェートのビス（テトラブチルアンモニウム）塩（27）（0.107mmol）の溶液に、アセトニトリル（0.5mL）中の4-ニトロベンゼンスルホン酸S-ビバロイル-2-チオエチル（74mg,0.214mmol）を添加した。得られた溶液を室温にて一晩放置し、氷で冷却し、水（3mL）でクエンチした。アセトニトリルのほとんどを蒸発させ、残りの水性溶液を逆相HPLC精製に供して、5.9mgの標記化合物70を得た。
【０２０７】
実施例４０
3’-アジド-3’-デオキシチミジン5’-β,β-O-ジ（S-ピバロイル-2-チオエチル）イミドジホスフェート（71）および3’-アジド-3’-デオキシチミジン5’-α,β,β-O-トリ（S-ピバロイル-2-チオエチル）イミドジホスフェート（72）
アルゴン下、室温にて、無水ピリジン（8mL）中の3’-アジド-3’-デオキシチミジン5’-O-イミドジホスフェート（128mg,0.3mmol）の溶液に、S-ピバロイル-2-チオエタノール（487mg,10当量）および1-（メシチレン-2-スルホニル）-3-ニトロ-1,2,4-トリアゾール（444mg,5当量）を添加した。室温にて2日間攪拌した後、反応混合物を1M水性炭酸水素トリエチルアンモニウム緩衝液（pH＝7.5）で中和し、クロロホルムで抽出した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で蒸発乾固した。粗生成物を逆相HPLC（C18）によって精製して、1.7mgの71および3.48mgの72を得た。
【０２０８】
実施例４１
2’-デオキシ-2’,2’-ジフルオロシチジン5’-β-O-（S-ピバロイル-2-チオエチル）-α,β-メチレン-ジホスホネート；2’-デオキシ-2’,2’-ジフルオロシチジン5’-ジ-α,β-O-（S-ピバロイル-2-チオエチル）-α,β-メチレンジホスホネート；および2’-デオキシ-2’,2’-ジフルオロシチジン5’-トリ-O-（S-ピバロイル-2-チオエチル）-α,β-メチレンジホスホネート（75,76および77）
2’-デオキシ-2’,2’-ジフルオロシチジン（0.5g,1.9mmol）を無水リン酸トリメチル（10mL）に溶解させ、アルゴン雰囲気下でモレキュラーシーブと共に16時間攪拌した。混合物をアルゴン雰囲気下で-20℃まで冷却し、メチレンビス（ホスホニックジクロライド）（522mg,2.09mmol）で処理した。1時間攪拌した後、白色沈殿が生じた。トリブチルアミン（6.8mL,29mmol）、続いてS-ピバリル-2-チオエタノール（3.1g,19mmol）を添加し、混合物を室温にて1時間攪拌した。氷冷TEAB溶液（1.0M,15mL）を用いて混合物をクエンチし、30分間攪拌した。逆相（C18）HPLCによる精製により、36.5mgの（75）、42.6gの（76）；および64.3gの（77）を得た。
【０２０９】
実施例４２
3’-アジド-3’-デオキシチミジン5’-α-P-ボラノ-γ-O-［（2,3-O-ジパルミトイルグリセロキシ）カルボニル-3-プロピオノキシ］2-エチル-β,γ-（ジフルオロメチレン）トリホスフェート（79）
工程A.  ［（2,3-O-ジパルミトイルグリセロキシ）カルボニル-3-プロピオノキシ］-2-エタノール
塩化メチレン（15mL）中の1,2-ジパルミトイル-rac-グリセラール（844mg,1.49mmol）の溶液を、アルゴン下、0℃にて、塩化メチレン（4mL）中の塩化スクシニル（1.38g,982μL,8.91mmol）の溶液に添加した。次いで、ピリジン（940mg,961ul,11.9mmol）を2回の添加の間が10分間隔で5回に分けて添加した。反応は1.5時間継続し、次いで、-78℃まで冷却した。エチレングリコール（1.85g,1.66mL,29.7mmol）を添加し、得られた混合物を室温まで加温し、2.5時間攪拌した。EtOAc（200mL）および水（200mL）の混合物を添加し、水性層をEtOAcで抽出した。合わせた有機相を水、飽和NaHCO3（2回）で洗浄し、MgSO4によって洗浄した。ヘキサン中の10〜20％EtOAcを用いるシリカゲルでのクロマトグラフィーにより、0.68gの［（2,3-O-ジパルミトイルグリセロキシ）カルボニル-3-プロピオノキシ］-2-エタノールを得た。
【０２１０】
工程B.  ［（2,3-O-ジパルミトイルグリセロキシ）カルボニル-3-プロピオノキシ］-2-エチルp-ニトロベンゼンスルホネート（78）
アルゴン下、塩化メチレン（5mL）中の［（2,3-O-ジパルミトイルグリセロキシ）カルボニル-3-プロピオノキシ］-2-エタノール（516mg,0.685mmol）の攪拌溶液に、4-ジメチルアミノピリジン（210mg,1.72mmol）を添加した。溶液を0℃まで冷却し、塩化メチレン（7mL）中の塩化4-ニトロベンゼンスルホニル（310mg,1.40mmol）の溶液を添加した。反応混合物を0℃にて0.5時間攪拌し、室温まで加温した。さらに1時間攪拌した後、氷冷水（6mL）を添加することによって反応物をクエンチし、5分間攪拌した。混合物を塩化メチレン（200mL）で希釈し、飽和氷冷NaHCO3で2回洗浄し（200mL,各々）、次いで、氷冷水で2回洗浄し（200mL,各々）、MgSO4で乾燥し、ヘキサン中の20％EtOAcを用いるシリカ上のクロマトグラフィーによって精製して、0.544gの標記生成物（78）を得た。
【０２１１】
工程C.  3’-アジド-3’-デオキシチミジン5’-α-P-ボラノ-γ-O-［（2,3-O-ジパルミトイルグリセロキシ）カルボニル-3-プロピオノキシ］-2-エチル）-β,γ-（ジフルオロメチレン）トリホスフェート（79）
アルゴン下、CHCl3（2.5mL）中の［（2,3-O-ジパルミトイルグリセロキシ）カルボニル-3-プロピオノキシ］-2-エチルp-ニトロベンゼンスルホネート（78）（480mg,0.527mmol）の攪拌溶液に、CHCl3（1.8mL）中の3’-アジド-3’-デオキシチミジン5’-α-P-ボラノ-β,γ-（ジフルオロメチレン）トリホスフェートのトリス（テトラ-n-ブチルアンモニウム）塩（27）（163mg,0.13mmol）を添加し、続いて、トリブチルアミン（185mg,62μL,0.259mmol）を添加した。反応混合物を24時間攪拌し、50％水/アセトニトリル（3×6mL）で抽出し、濾過し、濃縮して、部分的アセトニトリルを除去した。水性混合物は逆相HPLCによって精製して、20mgの標記化合物79を得た。
【０２１２】
実施例４３
（E）-2’-デオキシ-2’-（フルオロメチレン）シチジン5’-エチレンジホスホネート（80）
エチレンジホスホン酸（100mg,0.53mmol）を塩化オキサリル（溶媒として2mL）および無水DMF（0.1mL,触媒）で処理した。アルゴン雰囲気下で10分間加熱還流した後、溶液が得られ、さらに3時間後、反応混合物を室温まで冷却し、真空中で濃縮した。残渣を無水アセトニトリル（3×10mL）で共蒸発させた。残渣を無水リン酸トリメチル（2mL）に溶解させ、アルゴン下で-15℃まで冷却し、（E）-2’-デオキシ-2’-（フルオロメチレン）シチジン（64mg,0.25mmol）を添加した。2時間攪拌した後、反応混合物を氷冷TEAB溶液（1.0M,5mL）でクエンチし、30分間攪拌した。HPLCによる精製により、2.9mgの標記化合物80を得た。
【０２１３】
実施例４４
2’-デオキシ-2’,2’-ジフルオロシチジン5’-エチレンジホスホネート（81）
エチレンジホスホン酸（173mg,0.91mmol）を塩化オキサリル（2mL,溶媒として）および無水DMF（0.1ml,触媒）で処理した。アルゴン下で10分間加熱還流した後、溶液が得られ、さらに3時間後、反応混合物を室温まで冷却し、真空中で排気した。残渣を無水アセトニトリル（3×10ml）で共蒸発させた。残渣を無水リン酸トリメチル（2mL）に溶解させ、-15℃まで冷却し、アルゴン下で2’-デオキシ-2’,2’-ジフルオロシチジン（93mg,0.46mmol）を添加した。2時間攪拌した後、反応混合物を氷冷TEAB溶液（1.0M,5mL）でクエンチし、30分間攪拌した。HPLCによる精製により、7.8mgの標記化合物81を得た。
【０２１４】
B. 生物学的アッセイ法
実施例４５
HIV逆転写酵素阻害アッセイ法
HIV逆転写酵素（HIV RT）触媒/RNA-特異的DNA重合の阻害を測定するのに使用するアッセイ法を以下に記載する。HIV RT-触媒DNA重合の阻害剤としての本発明の化合物の有効性を以下のアッセイ法で測定した。
【０２１５】
A. HIV逆転写酵素-触媒DNA重合の阻害についてのアッセイ法（ホモポリマーRNA鋳型）
このアッセイ法を用いて、ホモポリマーRNAのDNA-起点、鋳型からの相補ストランドDNAの酵素合成を阻害する本発明のヌクレオチド模倣体の能力を測定した。このアッセイ法は公表された手法の修飾である（Sevilleら、「Fluorometric Assay for DNA Polymerases and Reverse Transcriptase」,BioTechniques 1996,21,664-72）。
手法：
アッセイ緩衝液条件：（50μL-全/反応）
50mMトリス-HCl,pH8.1
6.5mM MgCl2
100mM NaCl
10mM DTT
5μM dTTP（チミジン三リン酸）
1ug/mL 起点-ポリ（A）RNA
2nM 精製HIV逆転写酵素（タイプB,66kDaサブユニット）
【０２１６】
化合物を500μM最終濃度までの種々の濃度でテストした。DNAポリメラーゼ活性は、アッセイ緩衝液中で適当な濃度まで希釈した起点-RNA鋳型およびdTTPを含有する反応緩衝液中で測定した。本発明のヌクレオチド模倣体を緩衝液中に希釈し、96-ウェルプレートのウェルにピペットで入れた。酵素の添加によって反応を開始させ、37℃にて10分間進行させた。反応は5μLの0.2M EDTA、pH8.0の添加によってクエンチした。
【０２１７】
ブランク反応をテスト反応と平行して調製し、ここに、酵素またはdTTPを反応から省き、各々、適当な容量の酵素希釈剤またはアッセイ緩衝液によって置き換えた。
【０２１８】
200μLの希釈されたPicoGreen dsDNA Quantitation Reagent（Molecular Probes,Inc,Eugene,OR）を96-ウェルプレートの各ウェルに添加し、室温にて5分間インキュベートした。プレートウェルをマイクロプレートフルオロメーター（Molecular Devices Corp.,Sunnyvale,CA）で読んだ。ウェルを480nmで励起させ、蛍光発光強度（RFU）を520nmで測定した。阻害のパーセンテージを以下の式に従って計算した。
阻害(％)＝［1-（テスト反応におけるRFU-ブランクにおけるRFU）/（対照反応におけるRFU-ブランクにおけるRFU）］×100
【０２１９】
阻害定数（Ki）を、HIV RTホモポリマー重合アッセイ法でテストした場合に10μMにおいて≧50％阻害を呈した代表的な化合物につき決定した。各阻害剤を適当な範囲の濃度にわたって滴定し、阻害定数は以下の式を用いて決定した。
ミカエリス-メントン式：
v＝Vm［S］/（Km＋［S］）
競合阻害式：
v＝Vm［S］/（Km（1＋［I］/Ki）＋［S］）
式中、v＝初期速度、Vm＝最大速度、S＝基質、I＝阻害剤、Km＝ミカエリス定数およびKi＝阻害定数
【０２２０】
HIV RT-触媒DNA重合アッセイ法でテストした本発明の代表的な化合物は100μM未満の阻害定数を呈した。
【０２２１】
B. HIV逆転写酵素-触媒DNA重合の阻害についてのアッセイ法（ヘテロポリマーRNA鋳型）
また、本発明のある化合物をテストして、全ての4種の天然デオキシヌクレオチド三リン酸（dNTP）基質の存在下でヘテロポリマー起点-RNA鋳型に対するHIV RT-触媒DNA重合を阻害するそれらの能力を測定した。このアッセイ法は公表された手法の修飾である（Parkerら、「Mechanism of Inhibition of Human Immunodeficiency Virus Type 1 Reverse Transcriptase and Human DNA Polymerases α,β, and γ by the 5’-Triphosphates of Carbovir,3’-Azido-3’-deoxythymidine,2’-3’-Dideoxyguanosine,and 3’-Deoxytymidine」,J.Biol.Chem.1991,266（3）,1754-62）。
手法：
アッセイ緩衝液条件：（120μL-全/反応）
50mMトリス-HCl、pH8.1
6.5mM MgCl2
100mM NaCl
10mM DTT
50μM dNTP（dATP,TTP,dGTP,dCTP）
5ug/mL 起点-リボソームRNA（大腸菌）
10単位HIV逆転写酵素（精製,タイプB,66kDaサブユニット）
【０２２２】
HIV RT DNAポリメラーゼ活性は、アッセイ緩衝液中に適当な濃度まで希釈され、1.5mLミクロ遠心管にピペットで入れられた起点-リボソームRNA鋳型およびdNTPを含有する反応緩衝液中で測定した。本発明のヌクレオチド模倣体を緩衝液中に希釈し、5μM最終濃度までの種々の濃度にてテストした。反応は酵素の添加によって開始し、42℃にて60〜90分間進行させた。反応は12μLの0.2M EDTA、pH8.0の添加によってクエンチした。
【０２２３】
ブランク反応はテスト反応と平行して調製し、ここに、酵素またはdNTPは反応から省き、各々、適当な容量の酵素希釈剤またはアッセイ緩衝液で置き換えた。
【０２２４】
50μLの反応の各々を96-ウェルプレートのウェルに移した（二連）。200μLの希釈されたPicoGreen dsDNA定量試薬を96-ウェルプレートの各ウェルに添加し、室温にて5分間インキュベートした。プレートウェルをマイクロプレートフルオロメーターで読んだ。ウェルは480nmで励起し、蛍光発光強度（RFU）を520nmで測定した。阻害のパーセンテージおよび阻害定数（Ki）は、前記した代表的化合物につき決定した。
【０２２５】
（表１）ヌクレオチド模倣体によるHIV逆転写酵素の阻害
2005525358.tif 000066
【０２２６】
実施例４６
リボヌクレオチドレダクターゼ阻害アッセイ法
リボヌクレオチドレダクターゼ（RNR）活性の阻害を測定するのに使用したアッセイ法は以下に記載する。RNR酵素の阻害剤としての本発明の化合物の有効性は以下のアッセイ法を用いて測定した。
【０２２７】
A. RNR活性の阻害についてのアッセイ法
このアッセイ法を用いて、RNR酵素によって触媒される酵素反応を阻害する本発明の分子模倣体の能力を測定した。シチジン5’-ジホスフェート（CDP）〜2’-デオキシシチジン5’-ジホスフェート（dCDP）の減少において、化学量論量の酸化されたチオレドキシンが形成される。このタンパク質は、チオレドキシンレダクターゼによって触媒される反応においてNADPHによって還元される。2つの反応をカップリングさせることによって、RNA活性は、UV/VISスペクトロメーターを用いる340nmでのNADPH酸化の分光学的測定によって測定した。このアッセイ法は公表された手法の修飾である（van der Donkら、「Inactivation of Ribonucleotide Reductase by (E)-2'-Fluoromethylene-2'-deoxycytidine 5'-Diphosphate: A Paradigm for Nucleotide Mechanism-Based Inhibitors,」 Biochemistry 1996,35,8381-91）。
手法：
不可逆的不活性化条件：（50μL-全/反応）
50mM HEPES、pH7.6
15mM MgSO4
1mM EDTA
1.6mM ATP
0.5mM NADPH
20μMチオレドキシン、
0.5μMチオレドキシンレダクターゼ
1μM RNR R1
2μM RNR R2
アッセイ条件：（200μL-全/反応）
50mM HEPES、pH7.6
15mM MgSO4
1mM EDTA
1.6mM ATP
0.5mM NADPH
20μMチオレドキシン、
0.5μMチオレドキシンレダクターゼ
1mM CDP
【０２２８】
化合物は500μM最終濃度までの種々の濃度でテストした。本発明のヌクレオチド模倣体を所望の濃度で不可逆的不活性化混合物に添加した。同一対照を行い、ここに、阻害剤をH2Oで置き換えた。3分間のインキュベーションの後、20μLを不活性化混合物から除去し、活性につきアッセイした。
【０２２９】
標準RNRアッセイ法を96-ウェルプレート（Corning）で行う。不活性化混合物からのアリコットを、プレートウェルにピペットで入れた適当な容量のアッセイ緩衝液に添加した。反応は基質CDPの添加によって開始した。反応は25℃にて5分間進行させた。NADPHの酸化は、マイクロプレート分光光度計（Molecular Devices Corp,Sunnyvale,CA）にて340nmでモニタリングした。初期速度データ（mA分-1）を収集し、以下の式に適合させた。
【０２３０】
ブランク反応はテスト反応と平行して調製し、ここに、基質を反応から省き、適当な容量のH2Oによって置き換えた。
【０２３１】
阻害のパーセンテージは以下の式に従って計算した。
阻害(％)＝［1-（テスト反応におけるmA分-1-ブランクにおけるmA分-1）/（対照反応におけるmA分-1-ブランクにおけるmA分-1）］×100
【０２３２】
50％阻害を与える阻害剤濃度（IC50）は、RNR阻害アッセイ法でテストした場合に250μMにおいて≧50％阻害を呈する代表的な化合物につき測定した。各阻害剤を適当な範囲の濃度にわたって滴定し、IC50値は以下の式を用いて決定した。
IC50式：
vi/v0＝1/（1＋［I］/IC50）
式中、vi＝濃度Iにおける阻害剤の存在下での初期速度、v0＝阻害剤の不存在下での初期速度、およびIC50＝50％阻害を与える阻害剤濃度。
【０２３３】
RNR阻害アッセイ法でテストした本発明の代表的な化合物は250μM未満の阻害定数を呈した。
【０２３４】
（表２）ヌクレオチド模倣体によるリボヌクレオチドレダクターゼの阻害
2005525358.tif 000067
【０２３５】
実施例４７
チューブリンアッセイ法
チューブリン微小管タンパク質の重合および安定性を測定するのに使用したアッセイ法は以下に記載する。チューブリン微小管タンパク質動力学のモジュレーターとしての本発明の化合物の有効性は以下のアッセイ法で測定した。
【０２３６】
A. 微小管重合の阻害についてのアッセイ法
このアッセイ法を用いて、チューブリンサブユニットの重合および引き続いての微小管タンパク質の組立を阻害する本発明のヌクレオチド模倣体の能力を測定した。このアッセイ法は公表された手法の修飾である（Xuら、「Interaction of Tubulin with Guanosine 5'-O-(1-Thiotriphosphate)Diastereoisomers: Specificityof the a-Phosphate Binding Region」,Biochemistry 1994,33,11884-90）。
手法：
アッセイ緩衝液条件：（100μL-全/反応）
80mM PIPES、pH6.9
2mM MgCl2
0.5mM EGTA
10％ グリセロール
50μM GTP（グアノシン5’-トリホスフェート）
300ug 精製ウシ脳チューブリン（Cytoskeleton,Denver,CO）
【０２３７】
化合物は、500μM最終濃度までの種々の濃度にてテストした。重合アッセイ法は、GTPおよびチューブリンを含有するアッセイ緩衝液にて、96-ウェルマイクロプレート（Costar）で行った。本発明のヌクレオチド模倣体は緩衝液に希釈し、プレートウェルにピペットで入れた。プレートを37℃インキュベーターに移すことによって反応が開始されるまで、試料を氷上に保持した。重合反応は37℃にて30分間進行させ、温度-制御インキュベータ（Molecular Devices,Sunnyvale,CA）を備えたマイクロプレート分光光度計を用いて340nmでモニタリングした。初期速度データ（mA分-1）を収集し、以下の式に適合させた。
【０２３８】
ブランク反応をテスト反応と平行して調製し、ここに、チューブリンまたはGTPは反応から省き、適当な容量のアッセイ緩衝液によって置き換えた。
【０２３９】
阻害のパーセンテージは以下の式に従って計算した。
阻害(％)＝［1-（テスト反応におけるmA分-1-ブランクにおけるmA分-1）/（対照反応におけるmA分-1-ブランクにおけるmA分-1）］×100
【０２４０】
阻害定数（Ki）は、チューブリン重合アッセイ法でテストした場合に250μMにおいて＞50％阻害を呈する代表的な化合物につき測定した。各阻害剤を適当な範囲の濃度にわたって滴定し、以下の式を用いて阻害定数を決定した。
ミカエリス-メンテン式：
v＝Vm［S］/（Km＋［S］）
競合阻害式：
v＝Vm［S］/（Km（1＋［I］/Ki）＋［S］）
式中、v＝初期速度、Vm＝最大速度、S＝基質、I＝阻害剤、Km＝ミカエリス定数、およびKi＝阻害定数。
【０２４１】
チューブリン重合アッセイ法でテストした本発明の代表的な化合物は200μM未満の阻害定数を呈した。
【０２４２】
B. 微小管崩壊動力学についてのアッセイ法
このアッセイ法を用いて、重合の速度、脱重合の速度、および微小管タンパク質の安定化を含めた、正常微小管タンパク質動力学に干渉する本発明のヌクレオシド誘導体の能力を測定した。このアッセイ法はO.MonasterioおよびS.N.Timasheff「Inhibition of Tubulin Self-Assembly and Tubulin-Colchicine GTPase Activity by Guanosine 5'-(γ-Fluorotriphosphate)」,Biochemistry 26:6091-99(1987)に記載された方法の修飾である。
手法：
アッセイ緩衝液条件：（100μL-全/反応）
80mM PIPES、pH6.9
2mM MgCl2
0.5mM EGTA
10％ グリセロール
300ug 精製ウシ脳チューブリン（Cytoskeleton,Denver,CO）
【０２４３】
化合物は、500μM最終濃度までの種々の濃度にてテストした。重合アッセイ法は、チューブリンを含有するアッセイ緩衝液にて、96-ウェルマイクロプレート（Costar）で行った。本発明のヌクレオチド模倣体を緩衝液に希釈し、プレートウェルにピペットで入れた。プレートを37℃のインキュベーターに移動させることによって反応が開始されるまで、試料を氷上に維持した。重合反応を37℃にて30分間進行させ、温度-制御インキュベーター（Molecular Devices,Sunnyvale,CA）を備えたマイクロプレート分光光度計を用いて340nmでモニタリングした。
【０２４４】
微小管タンパク質の脱重合は、プレートを37℃から0〜4℃インキュベーターに20分間移すことによって達成された。次いで、プレートを37℃インキュベーターに戻し、重合の第2サイクルを15分間進行させた。双方の重合サイクルについての初期速度データ（mA分-1）を収集し、前記式に適合させた。
【０２４５】
ブランク反応をテスト反応と平行させて調製し、ここに、チューブリンを反応から省き、適当な容量のアッセイ緩衝液によって置き換えた。
【０２４６】
微小管破壊動力学の程度は、50μM GTPおよびチューブリンを含有する対照反応に対して決定した。
【０２４７】
C. チューブリン-GTP加水分解についてのホスフェートアッセイ法
このアッセイ法を用いて、チューブリンによるGTPの加水分解を阻害する本発明のヌクレオチド模倣体の能力を測定した。GTP〜GDP＋無機ホスフェート（Pi）の酵素変換は、EnzChekホスフェートアッセイキット（Molecular Probes,Inc,Eugene,OR）を用いてカップリングさせた-分光光度測定アッセイ法でモニタリングする。このアッセイ法は公表された手法の修飾である（Vandecandelaereら、「Phosphate Release during Microtubule Assembly: What Stabilizes Growing Microtubules?」,Biochemistry 1999,38,8179-88）。
手法：
アッセイ緩衝液条件：（100μL-全/反応）
80mM PIPES、pH6.9
2mM MgCl2
0.5mM EGTA
10％ グリセロール
50μM GTP
50ug 精製ウシ脳チューブリン、
【０２４８】
化合物は、500μM最終濃度までの種々の濃度にてテストした。GTP加水分解アッセイ法は、チューブリン、GTP、MESG、およびPNPを含有するアッセイ緩衝液にて、96-ウェルマイクロプレート（Costar）で行った。本発明のヌクレオチド模倣体を緩衝液に希釈し、プレートウェルにピペットで入れた。プレートを37℃インキュベーターに移動させることによって反応が開始するまで、試料を氷上に維持した。加水分解反応はGTPの添加によって開始させ、37℃にて10分間進行させた。反応は、温度-制御インキュベーター（Molecular Devices,Sunnyvale,CA）を備えたマイクロプレート分光光度計を用いて360nmにてモニタリングした。初期速度データ（mA分-1）を収集し、前記式に適合させた。
【０２４９】
ブランク反応はテスト反応と平行して調製し、ここに、GTPを反応から省き、適当な容量のアッセイ緩衝液によって置き換えた。
【０２５０】
（表３）ヌクレオチド模倣体によるチューブリン重合の阻害
2005525358.tif 000068
【０２５１】
実施例４８
哺乳動物細胞増殖阻害アッセイ法
哺乳動物細胞に対する本発明のヌクレオチド模倣体の細胞傷害性を測定するのに使用したアッセイ法を以下に記載する。
【０２５２】
哺乳動物細胞および増殖条件
ヒトCCRF-CEM細胞はAmerican Tissue Culture Collection（ATCC）から入手し、ATCC仕様に従って増殖させた。簡単に述べると、CCRF-CEM、リンパ芽球細胞系を増殖させ、2mm L-グルタミン、10mM HEPES、1mM ピルビン酸ナトリウム、4.5g/Lグルコース、1.5g/L炭酸水素ナトリウムを含有し、10％（v/v）透析熱不活化胎児ウシ血清を補足したRPMI1640培地中で浮遊培養として維持した。CEM細胞を95％湿潤化環境および5％CO2雰囲気で37℃にて増殖させた。
【０２５３】
細胞傷害性アッセイ法：MTTアッセイ法
哺乳動物細胞に対する本発明のヌクレオチド模倣体の細胞傷害性は、臭化3-（4,5-ジメチルチアゾール-2-イル）-2,5-ジフェニルテトラゾリウム（MTT）を用いて細胞生存を測定することによって決定した（Slater T.F.ら、Biochim.Biophys.Acta 1963,77,383；Mossman T.J.Immunol.Methods 1983,65,55；M.E.ら、1999,J.Biol.Chem.28505-13）。MTTは水溶性テトラゾリウム塩であり、これは、生きた細胞の活性ミトコンドリアデヒドロゲナーゼによって不溶性紫色ホルマザンに変換される。死滅細胞はこの変化を引き起こさない。非処理対照または処理細胞による不溶性ホルマザンへのMTTへの変換を540nmでモニタリングした。
【０２５４】
CCRF-CEM細胞（3×104）をRPMI培地にて96-ウェルプレートで平板培養した。翌日、細胞を異なる濃度（0〜200μM）の本発明のヌクレオチド模倣体と共に72時間インキュベートした。処理に続き、MTT（PBS中2mg/ml）色素を、最終濃度が0.5mg/mlとなるように各ウェルに添加し、次いで、37℃にて4時間インキュベートした。細胞を乱すことなく培地およびMTT色素を除去し、100％DMSOを添加して沈殿を溶解させた。室温での10分間のインキュベーションの後、Spectra Max Plusプレートリーダーを用い、光学密度値を540nmで測定した。生存は、非処理対照細胞に対する処理試料における生きた細胞のパーセンテージとして表わした。
【０２５５】
（表４）ヌクレオチド模倣体およびそれらのプロドラッグの抗増殖効果
2005525358.tif 000069
【０２５６】
実施例４９
抗微生物アッセイ法
本発明のヌクレオチド模倣体の抗微生物能力を調べるために、非常に多数の化合物のスクリーニングを同時に可能とするアッセイ法を使用した。化合物をスクリーニングするのに選択された細菌のタイプはヒト病気に関連する生物であり、その構造および代謝に基づく細菌の主なグループを表わす。
【０２５７】
菌叢スクリーニングアッセイ法：
大腸菌および黄色ブドウ球菌の細菌培養をシェーカーインキュベーター中で37℃にて一晩インキュベートした。各一晩細菌培養の菌叢は、200μlの細菌を栄養ブロスを含有する寒天プレート上で平板培養することによって作製した。平板培養直後に、滅菌ブランク紙ディスクを菌叢の頂部にのせ、化合物を各ブランク紙ディスクに適用した。次いで、プレートを一晩インキュベートし、翌日細菌増殖の阻害につき調べた。
【０２５８】
最小阻止濃度測定
指数期で増殖する細菌細胞（2×104）を96-ウェルプレートで平板培養し、異なる濃度（0〜200μg/ml）の本発明のヌクレオチド模倣体で処理した。プレートを37℃にて一晩インキュベートし、次いで、600nmにて分光測定により調べて、600nmにおける吸光度の増加がないことによって判断するように、細菌の複製を阻害した各化合物の最小濃度を決定した。
【０２５９】
（表５）ヌクレオチド模倣体およびそれらのプロドラッグの抗菌活性
2005525358.tif 000070
【０２６０】
実施例５０
血清安定性評価
ヌクレオチド模倣体の安定性は、Arzumanovら（J.Biol.Chem.1996,271（40）,24389-24394）によって概説された手法に一般的に従って胎児ウシ血清で評価した。HyClone Corporationから購入した胎児ウシ血清を、各化合物含有トリス-HCl緩衝液およびMgCl2と1：1混合した。典型的には、実験で用いた全容量は500μlであった。反応成分の最終濃度は以下の通りであった。
50mMトリス-HCl、pH7.4
0.1mM MgCl2
500μMヌクレオチド模倣体
50％（v/v胎児ウシ血清）
【０２６１】
反応混合物を作製し、37℃にてインキュベートした。適当な時点で、25μlのアリコットを取り出し、65μlの氷冷メタノールに添加した。これらの溶液を-20℃にて少なくとも1時間インキュベートし、典型的には一晩インキュベートした。インキュベーションの後、試料をミクロ遠心管中で高速にて少なくとも20分間遠心した。上澄みを透明なチューブに移し、抽出物をLabConco Centrivap Concentratorにて真空下で乾燥した。乾燥した抽出物をdH2Oに再懸濁し、濾過して、逆相HPLCでの分析前に粒状物を除去した。
【０２６２】
分析で用いた逆相HPLCカラムは、適当なガードカラムと共に用いたPhenomenex C18 Aquaカラム（2×100mm）またはPhenomenex C18 Aquaカラム（3×150mm）のいずれかであった。HPLCは以下の緩衝液系：5mM酢酸テトラブチルアンモニウム、50mMリン酸アンモニウム、および5％から60％の高さまで泳動させるアセトニトリルグラジエントにて0.2ml/分（2×100mmカラム）または0.5ml/分（3×150mmカラム）で行った。各時点における残存する親化合物の量を用いて、化合物の半減期を決定した。この時点は、もし50％を越える化合物が48時間のインキュベーションの後に依然として無傷であれば、半減期は＞48時間と表わされるように、48時間を通じてのみ採取した。未修飾ヌクレオシド三リン酸を陽性対照として用いた。これらの条件下で、未修飾ヌクレオシド三リン酸はほぼ2時間の半減期を有した。
【０２６３】
（表６）NTPおよびAZT三リン酸模倣体の血清半減期
2005525358.tif 000071
【０２６４】
（表７）AZT三リン酸模倣体プロドラッグの血清半減期
2005525358.tif 000072
【０２６５】
（表８）ゲンシチビン二リン酸模倣体およびそれらのプロドラッグの血清半減期
2005525358.tif 000073
【０２６６】
実施例５１
細胞抽出物を用いる安定性評価
細胞抽出物における化合物の安定性は以下のように調べた。
【０２６７】
細胞溶解緩衝液を細胞ペレットに添加し、ドライアイスを用いて細胞を3回凍結および解凍した。溶解緩衝液（LB）の組成は以下の、50mMトリス-HCl、pH7.4（100μl/ml  10×ストック）、20％グリセロール（200μl/ml）、および0.5％トリトンX-100（5μl/ml）であった。100μlのLBを、107凍結CEM細胞を含有する各ミクロ遠心管に添加した。細胞を溶解した後、抽出物をミクロ遠心管中にて高速で5分間遠心し、清澄化された細胞抽出物を新しい管に移した。細胞安定性反応混合物は種々の濃度の緩衝液、マグネシウム、ヌクレオチド、および細胞抽出物を以下に示すよう含有した。
50mMトリス-HCl、pH7.4
0.1mM MgCl2
500μM ヌクレオチド模倣体（または対照ヌクレオチド）
50％ 細胞抽出物（v/v）
【０２６８】
反応混合物を37℃にてインキュベートした。時点0を含めた各時点において、12.5μlのアリコットを40μlの氷冷メタノールに添加した。典型的には、30および60分、ならびに2,3,8,24および48時間後に時点をとった。試料をメタノール中で少なくとも60分間、典型的には、さらなる処理に先立って-20℃にて一晩インキュベートした。細胞抽出物を冷蔵したマイクロ遠心管中で高速にて20分間遠心し、上澄みを新しいチューブに移した。次いで、LabConco Centrivap Concentratorにて、抽出物を次いで真空下で乾燥した。次いで、試料を40または50μlのdH2Oに再懸濁し、濾過して、いずれの粒状物も除去し、逆相HPLCによって分析した。
【０２６９】
分析で用いた逆相HPLCカラムは、適当なガードカラムと共に用いたPhenomenex C18 Aquaカラム（2×100mm）またはPhenomenex C18 Aquaカラム（3×150mm）のいずれかであった。HPLC流速は、以下の緩衝液系：5mM 酢酸テトラブチルアンモニウム、50mMリン酸アンモニウム、および5％〜60％の高さまで泳動させるアセトニトリルグラジエントにて0.2ml/分（2×100mmカラム）または0.5ml/分（3×150mmカラム）のいずれかであった。各時点における残存親化合物の量を用いて、化合物の半減期を決定した。もし50％を超える化合物が48時間のインキュベーションの後に依然として無傷であるならば、半減期は＞48時間と表わせるように、時点は48時間を通じてのみ取った。未修飾ヌクレオシド三リン酸を陽性対照として用いた。これらの条件下、未修飾ヌクレオシド三リン酸はほぼ10分の半減期を有した。
【０２７０】
（表９）AZT三リン酸模倣体の細胞抽出物半減期
2005525358.tif 000074
【０２７１】
（表１０）AZT  5’-α-P-ボラノ-β,γ-（ジフルオロメチレン）トリホスフェートプロドラッグの細胞抽出物半減期
2005525358.tif 000075
【０２７２】
（表１１）ゲンシチビン5’-メチレンジホスホネートおよびそのプロドラッグの細胞抽出物半減期
2005525358.tif 000076
【０２７３】
実施例５２
細胞取込手法
CEM細胞を1×107細胞/mLにてRPMIに再懸濁させた。適当な量の各化合物をウェルに添加し、次いで、0.5mlの細胞を24-ウェルプレートの適当な数のウェルにアリコットし、37℃にて細胞をインキュベートした。インキュベーションの24時間後に細胞を収穫した。細胞を収穫するために、それをミクロ遠心管に移し、高速で1分間回転させた。1mg/ml BSAを含有するPBS中で試料を洗浄し、再遠心した。次いで、PBSを吸引し、200μLの氷冷60％メタノールを添加して、ヌクレオチドを抽出した。抽出物を-20℃にて一晩インキュベートした。翌日、試料をミクロ遠心にて高速で20分間回転させ、上澄みを透明なチューブに移し、スピードvac中で乾燥した。乾燥の後、試料を50μlに再懸濁させ、濾過し、次いで、試料をHPLCに直接注入した。ヌクレオチドを分離するためのイオン-対合剤を備えた逆相HPLCを用いてヌクレオチドを分析した。前記手法は以下の論文から適合させた。Furmanら、Proc.Natl.Acad.Sci.USA  1986,83,8333-8337。
【０２７４】
（表１２）AZTPPプロドラッグ模倣体での24時間インキュベーションからの結果
2005525358.tif 000077
【０２７５】
検出の限界は5pmol/106細胞と見積もられた。
【０２７６】
実施例５１
インビトロ抗HIV活性アッセイ法
手法は以下の論文から適合させた。Structure-Activity and Cross-Resistance Evaluations of a Series of Human Immunodeficiency Virus Type 1-Specific Compounds Related to Oxathiin Carboxanilide.Buckheit,Jr.ら、Antimicrobial Agents and Chemotherapy,1995,39,2718-2727。
【０２７７】
CEM-SS/MTS抗HIVアッセイ法
テスト化合物の抗ウイルス効率は、ほぼ0.01のMOIにてリンパ球向性ウイルス株HIV-1RFで感染させたCEM-SS細胞培養で評価した。アッセイ法の終了において、アッセイプレートを可溶性テトラゾリウム-ベースの色素MTS（CellTiter  96  Reagent,Promega）で染色して、細胞生存性を測定し、化合物の毒性を定量した。MTSは代謝的に活性な細胞のミトコンドリア酵素によって代謝して、可溶性ホルマザン生成物が得られ、細胞生存率および化合物細胞毒性の迅速な定量的分析を可能とした。
【０２７８】
CEM-SS細胞抗HIV-1細胞保護アッセイ法における効率評価
細胞調製-抗ウイルスアッセイ法で用いるに先立って、CEM-SS細胞をT-75フラスコ中で継代した。アッセイ法の前日、細胞を1：2に分けて、それらが感染時に指数増殖期にあることを確認した。全細胞および生存率定量は、ヘマサイトメーターおよびトリパンブルー排除を用いて行った。細胞生存率はアッセイ法で利用する細胞につき95％を超えた。細胞を5×104細胞/mlにて組織培養基に再懸濁し、50μlの容量にて薬物含有マイクロタイタープレートに添加した。
【０２７９】
ウイルス調製-これらのテストで用いたウイルスはリンパ球向性ウイルス株HIV-1RFであった。このウイルスはNIH AIDS Research and Reference Reagent Programから入手し、ストックウイルスプールの生産のためにCEM-SS細胞中で増殖させた。各アッセイ法では、予め力価測定したウイルスのアリコットをフリーザー（-80℃）から取り出し、生物学的安全キャビネット中でゆっくりと室温まで解凍した。ウイルスを再懸濁し、50μlの容量で各ウェルに添加したウイルスの量が、感染から6日後に85〜95％の間の細胞殺傷を与えるように決定された量となるように、組織培養基に希釈した。CEM-SS細胞における終点滴定によるTCID50の計算は、これらのアッセイ法の感染の多重度がほぼ0.01であることを示した。
【０２８０】
細胞生存率についてのMTS染色
アッセイ法の終りにおいて、アッセイプレートを可溶性テトラゾリウム-ベースの色素MTS（CellTiter Reagent Promega）で染色して、細胞生存率を決定し、化合物の毒性を定量した。MTSは代謝的に活性な細胞のミトコンドリア酵素によって代謝されて、可溶性ホルマザン生成物が得られ、細胞生存率および化合物細胞毒性の迅速な定量的分析を可能とする。MTSは、使用前に調製を必要としない可溶性溶液である。アッセイ法の終りにおいて、20μLのMTS試薬をウェル当たり添加した。次いで、マイクロタイタープレートをHIV細胞保護アッセイ法のために37℃にて4〜6時間インキュベートし；インキュベーションの間隔は、最適な色素還元のために経験的に決定された時間に基づいて選択した。接着性プレートシーラーを蓋の代わりに用い、シールされたプレートを数回逆さにして、可溶性ホルマザン生成物を混合し、Molecular Devices Vmaxプレートリーダーでプレートを490nmにて分光学的に読んだ。
【０２８１】
（表１３）抗HIVスクリーニング
2005525358.tif 000078
【国際調査報告】
2005525358.tif 000126
2005525358.tif 000127