(57)【要約】式(Ｉ)：【化１】2005506308.tif 000017[式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｔ、Ｕ、Ｘ、Ｙ、Ｖ、およびWは、明細書中に定義した通りである]の新規化合物、その薬学的に許容される塩、エナンチオマー、および ラセミ体；およびその製造方法、それらを含む組成物、および治療におけるその使用を提供する。該化合物は、一酸化窒素合成酵素の阻害剤であり、それによる炎症性疾患および痛みの処置もしくは予防に特に有用である。
2005506308.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式(Ｉ)：
【化１】
2005506308.tif 000012
[式中、
Ｘは、Ｈ、(Ｃ１−４)アルキル、(Ｃ１−４)アルコキシ、ハロゲン、ＣＮ、Ｃ≡ＣＨ、ＮＨ２、ＮＨＣＨ３、Ｎ(ＣＨ３)２、ＮＯ２、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨＯ、ＣＯＣＨ３、またはＮＨＣＨＯを表し；
該アルキルもしくはアルコキシは、所望により、１個もしくはそれ以上のフッ素原子によって さらに置換されており；
Ｙは、(Ｃ１−４)アルキル、(Ｃ１−４)アルコキシ、ハロゲン、ＣＮ、Ｃ≡ＣＨ、ＮＯ２、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨＯ、ＣＯＣＨ３、またはＮＨＣＨＯを表し；
該アルキルもしくはアルコキシは、任意に、１個もしくはそれ以上のフッ素原子によって、さらに置換されており；
Ｔ、Ｕ、およびＷは、独立に、ＣＲ７、またはＮを表し；そして
Ｒ７は、独立に、Ｈ、Ｆ、またはＣＨ３を表し；そして
ＴがＣＲ７を表す場合、Ｒ７は、さらにＯＨ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＣＮ、ＣＨ２ＯＨ、ＮＯ２、ＮＨＲ１３、ＯＲ１４、またはＯＳＯ２ＣＨ３を表し；
Ｖは、Ｏ、またはＳ(Ｏ)ｎを表し；
ｎは、０、１、または２の整数を表し；
Ｒ１は、Ｈ、またはＭｅを表し；
Ｒ２は、(Ｃ１−４)アルキル、(Ｃ２−４)アルケニル、(Ｃ２−４)アルキニル、(Ｃ３−６)シクロアルキル、または Ｏ、Ｓ、およびＮから選択される１個のヘテロ原子を含む４員環から８員環の飽和複素環を表し、何れの基も、所望により、さらに(Ｃ１−４)アルキル、(Ｃ１−４)アルコキシ、(Ｃ１−４)アルキルチオ、(Ｃ３−６)シクロアルキル、ハロゲン、またはフェニルによって置換され、該フェニル基は、所望により、さらに ハロゲン、(Ｃ１−４)アルキル、(Ｃ１−４)アルコキシ、ＣＦ３、ＯＣＦ３、ＣＮ、またはＮＯ２から選択される、１個もしくはそれ以上の置換基によって置換され；または
Ｒ２は、フェニル、または Ｏ、Ｓ、およびＮから独立に選択される、１から３個のヘテロ原子を含む、５員環もしくは６員環の芳香族複素環を表し、該フェニルまたは芳香族複素環は、所望により、ハロゲン、(Ｃ１−４)アルキル、(Ｃ１−４)アルコキシ、ＯＨ、ＣＮ、ＮＯ２、またはＮＲ９Ｒ１０から独立に選択される、１個もしくはそれ以上の置換基によって置換され、該アルキルまたはアルコキシは、所望により、さらに１個もしくはそれ以上のフッ素原子によって置換され；
Ｒ３は、Ｈ、(Ｃ１−４)アルキル、または(Ｃ３−６)シクロアルキルを表し、該アルキルは、所望により、(Ｃ１−４)アルコキシ、ハロゲン、ヒドロキシ、ＮＲ１１Ｒ１２、フェニル、または Ｏ、Ｓ、およびＮから独立に選択される、１から３個のヘテロ原子を含む、５員環もしくは６員環の芳香族もしくは飽和複素環によって置換され、該フェニルまたは芳香族複素環は、所望により、さらに ハロゲン、(Ｃ１−４)アルキル、(Ｃ１−４)アルコキシ、ＣＦ３、ＯＣＦ３、ＣＮ、またはＮＯ２によって置換され；
Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、およびＲ１４は、独立に、Ｈ、または(Ｃ１−４)アルキルを表す]の化合物、またはその薬学的に許容される塩、エナンチオマー、もしくはラセミ体。
【請求項２】
ＶがＯを表す、請求項１に記載の式(Ｉ)の化合物。
【請求項３】
ＶがＳ(Ｏ)ｎを表し、そしてｎが０を表す、請求項１に記載の式(Ｉ)の化合物。
【請求項４】
ＸとＹが、独立にＢｒ、Ｃｌ、ＣＨ３、ＣＨ２Ｆ、ＣＨＦ２、ＣＦ３、ＯＣＨ３、またはＣＮを表す、請求項１から３に記載の式(Ｉ)の化合物。
【請求項５】
ＹがＣＮを表す、請求項４に記載の化合物。
【請求項６】
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−メチル−３−ピリジンカルボニトリル；
２−[[(３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−(３−イソオキサゾリル)ブチル]チオ]−６−メチル−３−ピリジンカルボニトリル；
４−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−メチル−３−ピリジンカルボニトリル；
３−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−５−(トリフルオロメチル)−２−ピリジンカルボニトリル；
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−(ジフルオロメチル)−３−ピリジンカルボニトリル；
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−(フルオロメチル)−３−ピリジンカルボニトリル；
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−(３−ピリジニル)ブチル]オキシ]−４−クロロ−５−フルオロベンゾニトリル；
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−(２−チアゾリル)ブチル]オキシ]−４−クロロ−５−フルオロベンゾニトリル；
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−(５−イソチアゾリル)ブチル]オキシ]−４−クロロ−５−フルオロベンゾニトリル；
４−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−メトキシ−３−ピリジンカルボニトリル；
４−[[(１Ｒ,３Ｒ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−メトキシ−３−ピリジンカルボニトリル；
４−[[(１Ｓ,３Ｒ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−メトキシ−３−ピリジンカルボニトリル；
４−[[(１Ｓ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−メトキシ−３−ピリジンカルボニトリル；
４−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−(ジフルオロメトキシ)−３−ピリジンカルボニトリル；
２−[[(１Ｒ,３Ｒ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−メチル−３−ピリジンカルボニトリル；
４−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−(２Ｈ３)メトキシ−３−ピリジンカルボニトリル；
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−エチル−３−ピリジンカルボニトリル；
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−(１−メチルエチル)−３−ピリジンカルボニトリル；
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−メチル−３−ピリジンメタノール；
６−アセチル−２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−３−ピリジン カルボニトリル；
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−(ヒドロキシメチル)−３−ピリジン カルボニトリル；
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−３−ピリジンカルボニトリル；
(β１Ｓ,δ１Ｒ)−β−アミノ−δ−[(２,５−ジクロロ−４−ピリジニル)チオベンゼンブタノール]；
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−５−フルオロ−６−メトキシ−３−ピリジンカルボニトリル；
４−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−(ジメチルアミノ)−３−ピリジンカルボニトリル；
４−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−(メチルアミノ)−３−ピリジンカルボニトリル；
(β１Ｓ,δ１Ｒ)−β−アミノ−δ−[(５−ブロモ−２−メトキシ−４−ピリジニル)チオ]−ベンゼンブタノール；
(β１Ｓ,δ１Ｒ)−β−アミノ−δ−[(５−クロロ−２−メトキシ−４−ピリジニル)チオ]−ベンゼンブタノール；
４−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−エトキシ−３−ピリジンカルボニトリル；
３−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−５−(トリフルオロメチル)−２−ピリジンカルボニトリル；
３−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−１,６−ジヒドロ−５−メチル−６−オキソ−２−ピリジンカルボニトリル；
３−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−５−クロロ−２−ピリジンカルボニトリル；
６−アミノ−４−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−３−ピリジンカルボニトリル；
３−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−５−メチル−２−ピリジンカルボニトリル；
４−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−１−(２−フルオロフェニル)−４−ヒドロキシブチル]チオ]−６−メトキシ−３−ピリジンカルボニトリル；
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−１−(４−フルオロフェニル)−４−ヒドロキシブチル]オキシ]−６−トリフルオロメチル−３−ピリジンカルボニトリル；
２(２Ｓ)−アミノ−４(４Ｒ)−(３−フルオロフェニル)−４−[(４−メトキシ−２−ニトロフェニル)チオ]ブタン−１−オール；
２(２Ｓ)−アミノ−４(４Ｒ)−(３−フルオロフェニル)−４−[(４−クロロ−２−ニトロフェニル)チオ]ブタン−１−オール；
２(２Ｓ)−アミノ−４(４Ｒ)−(３−フルオロフェニル)−４−[(５−アミノ−４−クロロ−２−ニトロフェニル)チオ]ブタン−１−オール；
２(２Ｓ)−アミノ−４(４Ｒ)−(３−フルオロフェニル)−４−[(４−ヒドロキシメチル)−２−ニトロフェニル)チオ]ブタン−１−オール；
２(２Ｓ)−アミノ−４(４Ｒ)−(３−フルオロフェニル)−４−[(４−フルオロ−２−ニトロフェニル)チオ]ブタン−１−オール；
２(２Ｓ)−アミノ−４(４Ｒ)−(３−フルオロフェニル)−４−[(３,５−ジクロロ−２−ピリジル)チオ]ブタン−１−オール；
４−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−３−クロロベンゾニトリル；
４−クロロ−２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−(エチルアミノ)−４−ヒドロキシ−１−(２−チアゾリル)ブチル]オキシ]−５−フルオロ−ベンゾニトリル；
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−(５−チアゾリル)ブチル]オキシ]−５−フルオロ−ベンゾニトリル；
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−メトキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−メチル−３−ピリジンカルボニトリル；
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−４−メチル−１−フェニルペンチル]オキシ]−４−クロロ−５−フルオロベンゾニトリル；
２−[[(１Ｓ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−プロピルブチル]オキシ]−４−クロロ−５−フルオロベンゾニトリル；
２−[[(１Ｓ)−１−[(２Ｓ)−２−アミノ−３−ヒドロキシプロピル]ペンチル]チオ]−６−メチル−３−ピリジンカルボニトリル；
２−[[(１Ｓ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−(２−メチルプロピル)ブチル]チオ]−６−メチル−３−ピリジンカルボニトリル；
２−[[(３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−(５−イソオキサゾリル)ブチル]チオ]−６−メチル−３−ピリジンカルボニトリル；
２−[[(３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−(５−イソオキサゾリル)ブチル]オキシ]−６−(トリフルオロメチル)−３−ピリジンカルボニトリル；
２−[[３−(３Ｓ)−アミノ−４−ヒドロキシ−１−(１Ｒ)−(２−チエニル)ブチル]オキシ]−４−クロロ−５−フルオロベンゾニトリル；
２−[[３−(３Ｓ)−アミノ−４−ヒドロキシ−１(１Ｒ)−(３−チエニル)ブチル]オキシ]−４−クロロ−５−フルオロベンゾニトリル；
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−(３−ピリジニル)ブチル]チオ]−４−(トリフルオロメチル)ベンゾニトリル；
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−(５−ピリミジル)ブチル]チオ]−４−クロロベンゾニトリル；
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−(３−ピリジニル)ブチル]チオ]−４−クロロ−５−フルオロベンゾニトリル；
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−(３−ピリジル)ブチル]チオ]−４−ブロモベンゾニトリル；
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−(２−チアゾリル)ブチル]オキシ]−５−フルオロ−６−メチル−３−ピリジンカルボニトリル；
４−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−１−(３−フルオロ−２−チエニル)−４−ヒドロキシブチル]チオ]−６−メトキシ−３−ピリジンカルボニトリル；
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−１−(４−クロロ−５−チアゾリル)−４−ヒドロキシブチル]オキシ]−４−クロロ−５−フルオロベンゾニトリル；
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−５−ニトロベンゾニトリル；
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−５−クロロ−３−ピリジンカルボニトリル；
β−アミノ−δ−[(４−アミノ−２−ニトロフェニル)チオ]−(β１Ｓ,δ１Ｒ)−ベンゼンブタノール；
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−５−ブロモ−ベンゾニトリル；
またはその薬学的に許容される塩、エナンチオマー、もしくは ラセミ体である、請求項１に記載の式(Ｉ)の化合物。
【請求項７】
医薬として使用するための、請求項１から６の何れか１つに記載の式(Ｉ)の化合物、またはその薬学的に許容される塩、エナンチオマー、もしくは ラセミ体。
【請求項８】
薬学的に許容されるアジュバント、希釈剤、または担体と混合した、請求項１から６の何れか１つに記載の式(Ｉ)の化合物、またはその薬学的に許容される塩、エナンチオマー、もしくは ラセミ体を含む医薬組成物。
【請求項９】
一酸化窒素合成酵素活性の阻害が有益である ヒトの疾患もしくは状態を処置する または予防するための医薬の製造における、請求項１から６の何れか１つに記載の式(Ｉ)の化合物、またはその薬学的に許容される塩、エナンチオマー、もしくは ラセミ体の使用。
【請求項１０】
主として誘導型一酸化窒素合成酵素が阻害される、請求項９に記載の使用。
【請求項１１】
炎症性疾患を処置する または予防するための医薬の製造における、請求項１から６の何れか１つに記載の式(Ｉ)の化合物、またはその薬学的に許容される塩、エナンチオマー、もしくは ラセミ体の使用。
【請求項１２】
該疾患が炎症性腸疾患である、請求項１１に記載の使用。
【請求項１３】
該疾患がリウマチ性関節炎である、請求項１１に記載の使用。
【請求項１４】
該疾患が骨関節炎である、請求項１１に記載の使用。
【請求項１５】
痛みを処置する または予防するための医薬の製造における、請求項１から６の何れか１つで定義された通りの式(Ｉ)の化合物、またはその薬学的に許容される塩、エナンチオマー、もしくは ラセミ体の使用。
【請求項１６】
炎症性疾患を処置する または予防するための医薬の製造において、ＣＯＸ−２阻害剤と組み合わせた、請求項１から６の何れか１つに定義された通りの式(Ｉ)の化合物、またはその薬学的に許容される塩、エナンチオマー、もしくは ラセミ体の使用。
【請求項１７】
一酸化窒素合成酵素活性の阻害が有益である、ヒトの疾患もしくは状態に罹患している またはその危険が増大しているヒトに、請求項１から６の何れか１つに定義された通りの式(Ｉ)の化合物、またはその薬学的に許容される塩、エナンチオマー、もしくは ラセミ体を、治療上効果的な量 投与することを含む、一酸化窒素合成酵素活性の阻害が有益である ヒトの疾患もしくは状態を処置する、またはその危険を減少させる方法。
【請求項１８】
主として誘導型一酸化窒素合成酵素を阻害する、請求項１７に記載の処置方法。
【請求項１９】
炎症性疾患に罹患している またはその危険があるヒトにおいて、炎症性疾患を処置する またはその危険を減少される方法であって、該方法が、治療上効果的な量の 請求項１から６の何れか１つに定義された通りの式(Ｉ)の化合物、またはその薬学的に許容される塩、エナンチオマー、もしくは ラセミ体を、ヒトに投与することを含む方法。
【請求項２０】
該疾患が炎症性腸疾患である、請求項１９に記載の処置方法。
【請求項２１】
該疾患がリウマチ性関節炎である、請求項１９に記載の処置方法。
【請求項２２】
該疾患が骨関節炎である、請求項１９に記載の処置方法。
【請求項２３】
痛みのある またはその危険があるヒトにおいて、痛みを処置する またはその危険を減少される方法であって、該方法が、治療上効果的な量の請求項１から４の何れか１つに定義された通りの式(Ｉ)の化合物、またはその薬学的に許容される塩、エナンチオマー、もしくは ラセミ体を、ヒトに投与することを含む方法。
【請求項２４】
炎症性疾患に罹患している またはその危険があるヒトにおいて、炎症性疾患を処置する またはその危険を減少させる方法であって、該方法が、請求項１から６の何れか１つに定義された通りの式(Ｉ)の化合物、またはその薬学的に許容される塩、エナンチオマー、もしくは ラセミ体と、ＣＯＸ−２阻害剤の組み合わせを、治療上効果的な量で、ヒトに投与することを含む方法。
【請求項２５】
請求項１から６の何れか１つに定義された通りの式(Ｉ)の化合物、またはその薬学的に許容される塩、エナンチオマー、もしくは ラセミ体の製造方法であって、該方法が、
(ａ)式(II)：
【化２】
2005506308.tif 000013
[式中、Ｔ、Ｕ、Ｘ、Ｙ、およびＷは、請求項１で定義した通りであり；そして
Ｌ１は、脱離基を表す]の化合物と、式(III)：
【化３】
2005506308.tif 000014
[式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、およびＶは、請求項１で定義した通りである]の化合物との反応；または
(ｂ)式(IV)：
【化４】
2005506308.tif 000015
[式中、Ｔ、Ｕ、Ｗ、Ｘ、Ｙ、およびＶは、請求項１に定義した通りである]の化合物と、式(Ｖ)：
【化５】
2005506308.tif 000016
[式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、およびＲ６は、請求項１で定義した通りであり；そして
Ｌ２は、脱離基を表す]の化合物との反応；および
望ましい もしくは必要な場合は、
得られた式(Ｉ)の化合物 またはその塩を、薬学的に許容される塩に変換し；または
式(Ｉ)の１つの化合物を、別の式(Ｉ)の化合物に変換し；そして
望ましい場合は、
得られた式(Ｉ)の化合物をその光学異性体に変換する；
ことを含む方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明の分野
本発明は、新規アリールヘテロアルキルアミン誘導体、その製造方法、それらを含む組成物、および治療におけるそれらの使用に関する。
【０００２】
本発明の背景
一酸化窒素は、哺乳動物の細胞中で、特定の一酸化窒素合成酵素の作用によって、Ｌ−アルギニンから生成される。これらの酵素は、２つの別個のクラス、すなわち構成型ＮＯＳ(constitutive NOS)(ｃＮＯＳ)と、誘導型ＮＯＳ(inducible NOS)(ｉＮＯＳ)に分類される。現在、２つの構成型ＮＯＳと、１つの誘導型ＮＯＳが、同定されている。構成型ＮＯＳのうち、内皮型酵素(ｅｃＮＯＳ)は、平滑筋弛緩、および血圧と血流の制御に関するが、神経型酵素(ｎｃＮＯＳ)は、様々な生物学的機能、例えば大脳の虚血の制御に関すると見られている。誘導型ＮＯＳは、特に炎症性疾患の病状に関与している。従って、これらの酵素の制御は、広く様々な疾患状態の処置において、多くの可能性を提供する(J. E. Macdonald, Ann. Rep. Med. Chem., 1996, 31, 221 - 230)。
【０００３】
多くの努力が、１個もしくはそれ以上の一酸化窒素合成酵素の同形の酵素の特定の阻害剤として作用する化合物を同定するための労力に費やされている。治療における該化合物の使用もまた、広く要請されている。
【０００４】
本発明の開示
本発明に従って、式(Ｉ)：
【化１】
2005506308.tif 000003
[式中、
Ｘは、Ｈ、(Ｃ１−４)アルキル、(Ｃ１−４)アルコキシ、ハロゲン、ＣＮ、Ｃ≡ＣＨ、ＮＨ２、ＮＨＣＨ３、Ｎ(ＣＨ３)２、ＮＯ２、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨＯ、ＣＯＣＨ３、またはＮＨＣＨＯを表し；
該アルキルもしくはアルコキシは、所望により、１個もしくはそれ以上のフッ素原子によって さらに置換されており；
Ｙは、(Ｃ１−４)アルキル、(Ｃ１−４)アルコキシ、ハロゲン、ＣＮ、Ｃ≡ＣＨ、ＮＯ２、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨＯ、ＣＯＣＨ３、またはＮＨＣＨＯを表し；
該アルキルもしくはアルコキシは、任意に、１個もしくはそれ以上のフッ素原子によって、さらに置換されており；
Ｔ、Ｕ、およびＷは、独立に、ＣＲ７、またはＮを表し；そして
Ｒ７は、独立に、Ｈ、Ｆ、またはＣＨ３を表し；そして
ＴがＣＲ７を表す場合、Ｒ７は、さらにＯＨ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＣＮ、ＣＨ２ＯＨ、ＮＯ２、ＮＨＲ１３、ＯＲ１４、またはＯＳＯ２ＣＨ３を表し；
Ｖは、Ｏ、またはＳ(Ｏ)ｎを表し；
ｎは、０、１、または２の整数を表し；
Ｒ１は、Ｈ、またはＭｅを表し；
Ｒ２は、(Ｃ１−４)アルキル、(Ｃ２−４)アルケニル、(Ｃ２−４)アルキニル、(Ｃ３−６)シクロアルキル、または Ｏ、Ｓ、およびＮから選択される１個のヘテロ原子を含む４員環から８員環の飽和複素環を表し、何れの基も、所望により、さらに(Ｃ１−４)アルキル、(Ｃ１−４)アルコキシ、(Ｃ１−４)アルキルチオ、(Ｃ３−６)シクロアルキル、ハロゲン、またはフェニルによって置換され、該フェニル基は、所望により、さらに ハロゲン、(Ｃ１−４)アルキル、(Ｃ１−４)アルコキシ、ＣＦ３、ＯＣＦ３、ＣＮ、またはＮＯ２から選択される、１個もしくはそれ以上の置換基によって置換され；または
Ｒ２は、フェニル、または Ｏ、Ｓ、およびＮから独立に選択される、１から３個のヘテロ原子を含む、５員環もしくは６員環の芳香族複素環を表し、該フェニルまたは芳香族複素環は、所望により、ハロゲン、(Ｃ１−４)アルキル、(Ｃ１−４)アルコキシ、ＯＨ、ＣＮ、ＮＯ２、またはＮＲ９Ｒ１０から独立に選択される、１個もしくはそれ以上の置換基によって置換され、該アルキルまたはアルコキシは、所望により、さらに１個もしくはそれ以上のフッ素原子によって置換され；
Ｒ３は、Ｈ、(Ｃ１−４)アルキル、または(Ｃ３−６)シクロアルキルを表し、該アルキルは、所望により、(Ｃ１−４)アルコキシ、ハロゲン、ヒドロキシ、ＮＲ１１Ｒ１２、フェニル、または Ｏ、Ｓ、およびＮから独立に選択される、１から３個のヘテロ原子を含む、５員環もしくは６員環の芳香族もしくは飽和複素環によって置換され；該フェニルまたは芳香族複素環は、所望により、さらに ハロゲン、(Ｃ１−４)アルキル、(Ｃ１−４)アルコキシ、ＣＦ３、ＯＣＦ３、ＣＮ、またはＮＯ２によって置換され；
Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、およびＲ１４は、独立に、Ｈ、または(Ｃ１−４)アルキルを表す]の化合物、またはその薬学的に許容される塩、エナンチオマー、もしくはラセミ体を提供する。
【０００５】
式(Ｉ)[式中、ＵはＮを表し、そしてＴはＣＲ７を表し、そしてＲ７はＯＨを表す]の化合物は、他方の互変異体の形態、すなわち式(Ｉａ)：
【化２】
2005506308.tif 000004
で存在していてもよいと認識されるだろう。
可能性ある全ての互変異体の形態およびその混合物は、本発明の範囲内に含まれると理解されるべきである。
【０００６】
１つの具体的態様において、ＸとＹは、独立に、(Ｃ１−４)アルキル、(Ｃ１−４)アルコキシ、ハロゲン、ＣＮ、Ｃ≡ＣＨ、ＮＯ２、ＣＨＯ、ＣＯＣＨ３、またはＮＨＣＨＯを表し、該アルキルまたはアルコキシは、所望により、さらに １個もしくはそれ以上のフッ素原子によって置換され；そして
Ｔ、Ｕ、およびＷは、独立に、ＣＲ７、またはＮを表し；そして
Ｒ７は、それぞれ独立に、Ｈ、Ｆ、またはＣＨ３を表す。
【０００７】
式(Ｉ)の化合物、およびその薬学的に許容される塩、エナンチオマー、およびラセミ体は、それらが一酸化窒素合成酵素(ＮＯＳ)の阻害剤であるという利点を有する。特に、式(Ｉ)の化合物、およびその薬学的に許容される塩、エナンチオマー、およびラセミ体が、誘導型一酸化窒素合成酵素のアイソフォーム(ｉＮＯＳ)の阻害剤であるという利点を有する。
【０００８】
本発明は、さらに、式(Ｉ)の化合物、またはその薬学的に許容される塩、エナンチオマー、もしくは ラセミ体の製造方法を提供する。
【０００９】
本発明に従って、医薬として使用するための、式(Ｉ)の化合物、またはその薬学的に許容される塩、エナンチオマー、もしくは ラセミ体を提供する。
【００１０】
本発明の別の態様は、一酸化窒素合成酵素活性の阻害が有益である疾患もしくは状態を、処置する または予防するための医薬の製造における、式(Ｉ)の化合物、またはその薬学的に許容される塩、エナンチオマー、もしくは ラセミ体の使用を提供する。
【００１１】
本発明のより特定的な態様は、炎症性疾患を処置する または予防するための医薬の製造における、式(Ｉ)の化合物、またはその薬学的に許容される塩、エナンチオマー、もしくは ラセミ体の使用を提供する。
【００１２】
本発明に従って、一酸化窒素合成酵素活性の阻害が有益である疾患もしくは状態を処置する またはその危険を減少させる方法であって、該疾患または状態に罹患している もしくはその危険があるヒトに、治療上効果的な量の、式(Ｉ)の化合物、またはその薬学的に許容される塩、エナンチオマー、もしくは ラセミ体を投与することを含む方法を提供する。
【００１３】
より特定的には、炎症性疾患に罹患している もしくはその危険があるヒトにおいて、炎症性疾患を処置する またはその危険を減少させる方法であって、治療上効果的な量の、式(Ｉ)の化合物、またはその薬学的に許容される塩、エナンチオマー、もしくは ラセミ体を、ヒトに投与することを含む方法を提供する。
【００１４】
本発明の化合物はまた、第２の薬学的に活性な物質と組み合わせて、特にシクロオキシゲナーゼ阻害剤と組み合わせて、より特定的には誘導型シクロオキシゲナーゼ(ＣＯＸ−２)の選択的阻害剤と組み合わせて、有利に用いられ得る。従って、本発明のさらなる態様において、炎症、炎症性疾患、および炎症関連疾患を処置するための、ＣＯＸ−２阻害剤と組み合わせた、式(Ｉ)の化合物、またはその薬学的に許容される塩、エナンチオマー、もしくは ラセミ体の使用を提供する。そして、炎症、炎症性疾患、および炎症関連疾患に罹患している もしくはその危険があるヒトにおいて、炎症、炎症性疾患、および炎症関連疾患を処置する またはその危険を減少させる方法であって、ＣＯＸ−２阻害剤と組み合わせた、式(Ｉ)の化合物、またはその薬学的に許容される塩、エナンチオマー、もしくは ラセミ体を、治療上効果的な量でヒトに投与することを含む方法を提供する。
【００１５】
１つの具体的態様において、Ｖは、Ｓ(Ｏ)ｎを表し、そしてｎは０を表す。
別の具体的態様において、ＶはＯを表す。
別の具体的態様において、ＸとＹは、独立に、Ｂｒ、Ｃｌ、ＣＨ３、ＣＨ２Ｆ、ＣＨＦ２、ＣＦ３、ＯＣＨ３、またはＣＮを表す。さらなる別の具体的態様において、ＹはＣＮを表す。
【００１６】
１つの具体的態様において、Ｒ１はＨを表す。
別の具体的態様において、Ｒ２は、フェニル、または Ｏ、Ｓ、およびＮから独立に選択される、１から３個のヘテロ原子を含む、５員環もしくは６員環の芳香族複素環を表す。さらなる具体的態様において、Ｒ２は、フェニル、ピリジル、イソオキサゾリル、イソチアゾリル、またはチアゾリルを表す。さらなる具体的態様において、Ｒ２はフェニルを表す。
【００１７】
１つの具体的態様において、Ｒ３はＨを表す。
別の具体的態様において、Ｒ４、Ｒ５、およびＲ６は、それぞれＨを表す。
別の具体的態様において、Ｔ、Ｕ、およびＷは、独立に、Ｎ、ＣＨ、またはＣＦを表す。別の具体的態様において、Ｕは、ＮまたはＣＨを表す。さらに別の具体的態様において、Ｗは、ＮまたはＣＨを表す。
【００１８】
１つの具体的態様において、Ｔ、Ｕ、およびＷは、それぞれＣＲ７を表す。
１つの具体的態様において、Ｔ、Ｕ、およびＷのうちの１つはＮを表し、別の２つはＣＲ７を表す。
【００１９】
特定の具体的態様において、式(Ｉ)の化合物は、(１Ｒ,３Ｓ)絶対配置 立体化学を有する。
【００２０】
１つの特定の態様において、本発明は、式(Ｉ)[式中、ＶはＯまたはＳを表し；
ＸとＹは、独立に、Ｂｒ、Ｃｌ、ＣＨ３、ＣＨ２Ｆ、ＣＨＦ２、ＣＦ３、ＯＣＨ３、またはＣＮを表し；
Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、およびＲ６は、それぞれＨを表し；
Ｒ２はフェニル、ピリジル、イソオキサゾリル、イソチアゾリル、またはチアゾリルを表し；
Ｔは、Ｎ、ＣＨ、またはＣＦを表し；
Ｕは、ＮまたはＣＨを表し；
Ｗは、ＮまたはＣＨを表し；そして
該化合物が(１Ｒ,３Ｓ)絶対配置を有する]の化合物、およびその薬学的に許容される塩に関する。
【００２１】
別の特定の態様において、本発明は、式(Ｉ)[式中、Ｖは、ＯまたはＳを表し；
ＸとＹは、独立に、Ｂｒ、Ｃｌ、ＣＨ３、ＣＨ２Ｆ、ＣＨＦ２、ＣＦ３、ＯＣＨ３、またはＣＮを表し；
Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、およびＲ６は、それぞれＨを表し；
Ｒ２は、フェニル、ピリジル、イソオキサゾリル、イソチアゾリル、またはチアゾリルを表し；
Ｔ、Ｕ、およびＷのうちの１つは Ｎを表し、別の２つはＣＲ７を表し；そして
該化合物が(１Ｒ,３Ｓ)絶対配置を有する]の化合物、およびその薬学的に許容される塩に関する。
【００２２】
本発明の特定の化合物は、
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−メチル−３−ピリジンカルボニトリル；
２−[[(３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−(３−イソオキサゾリル)ブチル]チオ]−６−メチル−３−ピリジンカルボニトリル；
４−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−メチル−３−ピリジンカルボニトリル；
３−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−５−(トリフルオロメチル)−２−ピリジンカルボニトリル；
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−(ジフルオロメチル)−３−ピリジンカルボニトリル；
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−(フルオロメチル)−３−ピリジンカルボニトリル；
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−(３−ピリジニル)ブチル]オキシ]−４−クロロ−５−フルオロベンゾニトリル；
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−(２−チアゾリル)ブチル]オキシ]−４−クロロ−５−フルオロベンゾニトリル；
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−(５−イソチアゾリル)ブチル]オキシ]−４−クロロ−５−フルオロベンゾニトリル；
４−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−メトキシ−３−ピリジンカルボニトリル；
４−[[(１Ｒ,３Ｒ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−メトキシ−３−ピリジンカルボニトリル；
４−[[(１Ｓ,３Ｒ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−メトキシ−３−ピリジンカルボニトリル；
４−[[(１Ｓ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−メトキシ−３−ピリジンカルボニトリル；
４−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−(ジフルオロメトキシ)−３−ピリジンカルボニトリル；
２−[[(１Ｒ,３Ｒ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−メチル−３−ピリジンカルボニトリル；
４−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−(２Ｈ３)メトキシ−３−ピリジンカルボニトリル；
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−エチル−３−ピリジンカルボニトリル；
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−(１−メチルエチル)−３−ピリジンカルボニトリル；
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−メチル−３−ピリジンメタノール；
６−アセチル−２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−３−ピリジン カルボニトリル；
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−(ヒドロキシメチル)−３−ピリジン カルボニトリル；
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−３−ピリジンカルボニトリル；
(β１Ｓ,δ１Ｒ)−β−アミノ−δ−[(２,５−ジクロロ−４−ピリジニル)チオベンゼンブタノール]；
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−５−フルオロ−６−メトキシ−３−ピリジンカルボニトリル；
４−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−(ジメチルアミノ)−３−ピリジンカルボニトリル；
４−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−(メチルアミノ)−３−ピリジンカルボニトリル；
(β１Ｓ,δ１Ｒ)−β−アミノ−δ−[(５−ブロモ−２−メトキシ−４−ピリジニル)チオ]−ベンゼンブタノール；
(β１Ｓ,δ１Ｒ)−β−アミノ−δ−[(５−クロロ−２−メトキシ−４−ピリジニル)チオ]−ベンゼンブタノール；
４−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−エトキシ−３−ピリジンカルボニトリル；
３−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−５−(トリフルオロメチル)−２−ピリジンカルボニトリル；
３−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−１,６−ジヒドロ−５−メチル−６−オキソ−２−ピリジンカルボニトリル；
３−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−５−クロロ−２−ピリジンカルボニトリル；
６−アミノ−４−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−３−ピリジンカルボニトリル；
３−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−５−メチル−２−ピリジンカルボニトリル；
４−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−１−(２−フルオロフェニル)−４−ヒドロキシブチル]チオ]−６−メトキシ−３−ピリジンカルボニトリル；
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−１−(４−フルオロフェニル)−４−ヒドロキシブチル]オキシ]−６−トリフルオロメチル−３−ピリジンカルボニトリル；
２(２Ｓ)−アミノ−４(４Ｒ)−(３−フルオロフェニル)−４−[(４−メトキシ−２−ニトロフェニル)チオ]ブタン−１−オール；
２(２Ｓ)−アミノ−４(４Ｒ)−(３−フルオロフェニル)−４−[(４−クロロ−２−ニトロフェニル)チオ]ブタン−１−オール；
２(２Ｓ)−アミノ−４(４Ｒ)−(３−フルオロフェニル)−４−[(５−アミノ−４−クロロ−２−ニトロフェニル)チオ]ブタン−１−オール；
２(２Ｓ)−アミノ−４(４Ｒ)−(３−フルオロフェニル)−４−[(４−ヒドロキシメチル)−２−ニトロフェニル)チオ]ブタン−１−オール；
２(２Ｓ)−アミノ−４(４Ｒ)−(３−フルオロフェニル)−４−[(４−フルオロ−２−ニトロフェニル)チオ]ブタン−１−オール；
２(２Ｓ)−アミノ−４(４Ｒ)−(３−フルオロフェニル)−４−[(３,５−ジクロロ−２−ピリジル)チオ]ブタン−１−オール；
４−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−３−クロロベンゾニトリル；
４−クロロ−２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−(エチルアミノ)−４−ヒドロキシ−１−(２−チアゾリル)ブチル]オキシ]−５−フルオロ−ベンゾニトリル；
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−(５−チアゾリル)ブチル]オキシ]−５−フルオロ−ベンゾニトリル；
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−メトキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−メチル−３−ピリジンカルボニトリル；
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−４−メチル−１−フェニルペンチル]オキシ]−４−クロロ−５−フルオロベンゾニトリル；
２−[[(１Ｓ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−プロピルブチル]オキシ]−４−クロロ−５−フルオロベンゾニトリル；
２−[[(１Ｓ)−１−[(２Ｓ)−２−アミノ−３−ヒドロキシプロピル]ペンチル]チオ]−６−メチル−３−ピリジンカルボニトリル；
２−[[(１Ｓ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−(２−メチルプロピル)ブチル]チオ]−６−メチル−３−ピリジンカルボニトリル；
２−[[(３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−(５−イソオキサゾリル)ブチル]チオ]−６−メチル−３−ピリジンカルボニトリル；
２−[[(３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−(５−イソオキサゾリル)ブチル]オキシ]−６−(トリフルオロメチル)−３−ピリジンカルボニトリル；
２−[[３−(３Ｓ)−アミノ−４−ヒドロキシ−１−(１Ｒ)−(２−チエニル)ブチル]オキシ]−４−クロロ−５−フルオロベンゾニトリル；
２−[[３−(３Ｓ)−アミノ−４−ヒドロキシ−１(１Ｒ)−(３−チエニル)ブチル]オキシ]−４−クロロ−５−フルオロベンゾニトリル；
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−(３−ピリジニル)ブチル]チオ]−４−(トリフルオロメチル)ベンゾニトリル；
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−(５−ピリミジル)ブチル]チオ]−４−クロロベンゾニトリル；
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−(３−ピリジニル)ブチル]チオ]−４−クロロ−５−フルオロベンゾニトリル；
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−(３−ピリジル)ブチル]チオ]−４−ブロモベンゾニトリル；
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−(２−チアゾリル)ブチル]オキシ]−５−フルオロ−６−メチル−３−ピリジンカルボニトリル；
４−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−１−(３−フルオロ−２−チエニル)−４−ヒドロキシブチル]チオ]−６−メトキシ−３−ピリジンカルボニトリル；
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−１−(４−クロロ−５−チアゾリル)−４−ヒドロキシブチル]オキシ]−４−クロロ−５−フルオロベンゾニトリル；
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−５−ニトロベンゾニトリル；
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−５−クロロ−３−ピリジンカルボニトリル；
β−アミノ−δ−[(４−アミノ−２−ニトロフェニル)チオ]−(β１Ｓ,δ１Ｒ)−ベンゼンブタノール；
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−５−ブロモ−ベンゾニトリル；
およびその薬学的に許容される塩を含む。
【００２３】
別記しない限り、本明細書中で述べられた“(Ｃ１−４)アルキル”という用語は、１から４個の炭素原子を有する直鎖もしくは分枝鎖のアルキル基を示す。該基の例は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、ｎ−ブチル、ｉ−ブチル、およびｔ−ブチルを含む。
【００２４】
別記しない限り、本明細書中で述べられた“(Ｃ３−６)シクロアルキル”という用語は、３から６個の炭素原子を有するシクロアルキルを示す。該基の例は、シクロプロピル、シクロペンチル、およびシクロヘキシルを含む。
【００２５】
別記しない限り、本明細書中で述べられた“(Ｃ２−４)アルケニル”という用語は、２から４個の炭素原子を有する少なくとも１個の炭素−炭素二重結合を含む直鎖もしくは分枝鎖のアルキル基を示す。該基の例は、エテニル、プロペニル、およびブテニルを含む。
【００２６】
別記しない限り、本明細書中で述べられた“(Ｃ２−４)アルキニル”という用語は、２から４個の炭素原子を有する少なくとも１個の炭素−炭素三重結合を含む直鎖もしくは分枝鎖のアルキル基を示す。該基の例は、エチニル、プロピニル、およびブチニルを含む。
【００２７】
別記しない限り、本明細書中で述べられた“(Ｃ１−４)アルコキシ”という用語は、１から４個の炭素原子を有する、直鎖もしくは分枝鎖のアルコキシ基を示す。該基の例は、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、ｉ−プロポキシ、およびｔ−ブトキシを含む。
“(Ｃ１−４)アルキルチオ”という用語は、類似的に説明される。
【００２８】
別記しない限り、本明細書中で述べられた“ハロゲン”という用語は、フルオロ、クロロ、ブロモ、およびヨードを含む。
【００２９】
所望により、さらにＯ、Ｓ、またはＮから選択される １つのヘテロ原子を含む、４員環から８員環の飽和アザシクロ環の例は、ピロリジン、ピペリジン、ピペラジン、モルホリン、およびペルヒドロアゼピンを含む。
【００３０】
Ｏ、Ｓ、またはＮから選択される １つのヘテロ原子を含む、４員環から８員環の飽和複素環の例は、ピロリジン、ピペリジン、テトラヒドロフラン、およびペルヒドロアゼピンを含む。
【００３１】
Ｏ、Ｓ、およびＮから独立に選択される、１から３個のヘテロ原子を含む、５員環もしくは６員環の芳香族複素環の例は、フラン、チオフェン、ピリジン、チアゾール、イミダゾール、オキサゾール、トリアゾール、オキサジアゾール、チアジアゾール、およびピリミジンを含む。
【００３２】
Ｏ、Ｓ、およびＮから独立に選択される１から３個のヘテロ原子を含む １から３個のヘテロ原子を含む、５員環もしくは６員環の飽和複素環の例は、ピロリジン、テトラヒドロフラン、ピペリジン、およびピペラジンを含む。
【００３３】
“所望により、さらに１個もしくはそれ以上のフッ素原子で置換されている(Ｃ１−４)アルキル または(Ｃ１−４)アルコキシ”は、ＣＨ２Ｆ、ＣＨＦ２、ＣＦ３、ＣＦ３ＣＦ２、ＣＦ３ＣＨ２、ＣＨ２ＦＣＨ２、ＣＨ３ＣＦ２、ＣＦ３ＣＨ２ＣＨ２、ＯＣＦ３、およびＯＣＨ２ＣＦ３を含む。
【００３４】
本発明によると、我々は、さらに、式(Ｉ)の化合物、またはその薬学的に許容される塩、エナンチオマー、もしくは ラセミ体の製造方法であって、
(ａ)式(II)：
【化３】
2005506308.tif 000005
[式中、Ｔ、Ｕ、Ｘ、Ｙ、およびＷは、式(Ｉ)で定義した通りであり；そして
Ｌ１は、脱離基を表す]の化合物と、式(III)：
【化４】
2005506308.tif 000006
[式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、およびＶは、式(Ｉ)で定義した通りである]の化合物との反応；または
(ｂ)式(IV)：
【化５】
2005506308.tif 000007
[式中、Ｔ、Ｕ、Ｗ、Ｘ、Ｙ、およびＶは、式(Ｉ)に定義した通りである]の化合物と、式(Ｖ)：
【化６】
2005506308.tif 000008
[式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、およびＲ６は、式(Ｉ)で定義した通りであり；そして
Ｌ２は、脱離基を表す]の化合物との反応；および
望ましい もしくは必要な場合は、
得られた式(Ｉ)の化合物 またはその塩を、薬学的に許容される塩に変換し；または
式(Ｉ)の１つの化合物を、別の式(Ｉ)の化合物に変換し；そして
望ましい もしくは必要な場合は、
得られた式(Ｉ)の化合物をその光学異性体に変換する；
ことを含む方法を提供する。
【００３５】
方法(ａ)において、反応は、不活性な溶媒中で、式(III)の求核性分子を、式(II)の求電子性分子で処理することによって行われる。適切な脱離基Ｌ１は、スルホネートおよびハライド、特に フロライド もしくはクロライドを含む。反応は、一般的に、非求核性塩基、例えば水素化ナトリウムもしくは炭酸セシウムの存在下で行われる。適切な有機溶媒は、例えばＮ,Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ−メチル−２−ピロリジノン、テトラヒドロフラン、アセトニトリル、およびジメチルスルホキシドである。反応は、一般的に、０℃から溶媒の沸点の間の温度で行われる。
【００３６】
方法(ｂ)において、反応物(IV)と(Ｖ)を、適切な不活性溶媒、例えばテトラヒドロフラン中で、例えば Mitsunobu 条件を用いて、一緒にカップリングする。このように、例えば、反応物を、リン誘導体とアゾ誘導体で、適切な温度、一般的に０℃から溶媒の沸点の間の温度で処理する。適切なリン誘導体は、トリフェニルホスフィン、およびトリブチルホスフィンを含む。適切なアゾ誘導体は、ジエチル アゾジカルボキシレート、ジイソプロピル アゾジカルボキシレート、および１,１'−(アゾジカルボニル)ジピペリジンを含む。適切な脱離基Ｌ２は、ヒドロキシを含む。
【００３７】
あるいは、方法(ｂ)において、反応は、不活性溶媒中で、式 (IV)の求核性分子を、式(Ｖ)の求電子性分子で処理することによって行われる。適切な脱離基Ｌ２は、スルホネートおよびハライド、特にクロライドもしくはブロマイドを含む。反応は、一般的に、非求核性塩基、例えば水素化ナトリウム、または炭酸セシウムの存在下で行われる。適切な有機溶媒は、例えばＮ,Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ−メチル−２−ピロリジノン、テトラヒドロフラン、およびジメチルスルホキシドを含む。反応は、一般的に、０℃から溶媒の沸点の間の温度で行われる。
【００３８】
当業者にとって、上記の方法において、アミンまたはヒドロキシル、または他の可能性のある反応性の基を、保護することが望ましい もしくは必要であることは明らかであろう。適切な保護基、および保護基の付加と脱離の方法の詳細は、標準的なテキスト"Protective Groups in Organic Synthesis", 3rd Edition (1999) by Greene and Wuts を参照することによって見出される。
１つの好ましい具体的態様において、アミン基は、カルバメート誘導体、例えばｔ−ブチルオキシカルバメートとして保護される。
【００３９】
別の特定の好ましい具体的態様において、式中、Ｒ１が水素を表す化合物のアミンおよびヒドロキシルを、同時に、環状カルバメートとして 式(VI)のように、または環状ヘミアミナールとして式(VII)のように、保護する。
【化７】
2005506308.tif 000009
保護基の使用の特定の例は、実施例の章に示されている。
【００４０】
本発明は、塩の形態、特に酸付加塩の形態の式(Ｉ)の化合物を含む。適切な塩は、有機酸および無機酸で形成される塩を含む。該酸付加塩は、通常薬学的に許容されるが、薬学的に許容されない塩は、問題の化合物の製造および精製に有用であり得る。従って、望ましい塩は、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、クエン酸、酒石酸、乳酸、ピルビン酸、酢酸、コハク酸、フマル酸、マレイン酸、メタンスルホン酸、およびベンゼンスルホン酸から形成される塩を含む。
【００４１】
式(Ｉ)の化合物の塩は、遊離塩基、またはその塩、エナンチオマー、もしくはラセミ体を、１当量もしくはそれ以上の適切な酸と反応させることによって形成され得る。該反応は、塩が不溶な溶媒もしくは媒体中で または塩が可溶な溶媒中で、例えば水、ジオキサン、エタノール、テトラヒドロフラン、またはジエチルエーテル、または溶媒の混合物中で行い得、真空下で もしくは冷凍乾燥で溶媒を除去し得る。該反応はまた、複分解法で、またはイオン交換樹脂で行い得る。
【００４２】
式(III)、(Ｖ)、(VI)、および(VII)の特定の新規の中間体は、本発明の別の態様を形成する。
式 (III) の化合物は、式 (VIII)：
【化８】
2005506308.tif 000010
[式中、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、およびＲ６は、式(Ｉ)で定義した通りである]の化合物と、有機金属誘導体：Ｒ２−Ｍ [式中、Ｒ２は式(Ｉ)で定義した通りであり、そしてＭは金属性の基、例えばリチウム、またはハロゲン化マグネシウムである]との反応によって製造され得る。得られた式 (III) [式中Ｖは酸素を表す]の化合物を、次に式(III) [式中、Ｖは硫黄を表す]の化合物に変え得る。
【００４３】
あるいは、式(III)の化合物は、式(IX)：
【化９】
2005506308.tif 000011
[式中、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、およびＲ６は、式(Ｉ)で定義した通りである]のアミドと、有機金属誘導体：Ｒ２−Ｍ [式中、Ｒ２は式(Ｉ)で定義した通りであり、そしてＭは金属性の基、例えばリチウムもしくはハロゲン化マグネシウムを表す]を反応させ、次に得られたケトンを対応する式(III)のアルコールに還元することによって製造され得る。
【００４４】
式 (II)、(IV)、(VIII)、および(IX)の化合物は、既知であるか、または当業者に容易に明らかな慣用の方法によって製造され得る。
中間体化合物は、そのままで、もしくは保護された形態で用いられ得る。保護基、および脱保護の方法の詳細は、標準的なテキスト“Protective Groups in Organic Synthesis”, 3rd Edition (1999) by Greene and Wuts を参照することによって見出され得る。
【００４５】
本発明の化合物、およびその中間体は、その反応混合物から単離し、必要であれば標準的な方法を用いることによってさらに精製する。
式Ｉの化合物は、エナンチオマーの形態で存在し得る。従って、全てのエナンチオマー、ジアステレオマー、ラセミ体、およびそれらの混合物は、本発明の範囲に含まれる。様々な光学異性体は、慣用の方法、例えば分別結晶化 またはＨＰＬＣを用いて、化合物のラセミ混合物の分割によって単離され得る。
【００４６】
中間体化合物は、エナンチオマーの形態で存在し得、精製されたエナンチオマー、精製されたジアステレオマー、ラセミ体、または混合物として用いられ得る。
式(Ｉ)の化合物、およびその薬学的に許容される塩、エナンチオマー、およびラセミ体は、動物において、薬理学的活性を有するために、有用である。特に、該化合物は、一酸化窒素合成酵素のアイソフォームの阻害剤として活性がある。より特定的には、それらは、誘導型一酸化窒素合成酵素のアイソフォームの阻害剤であり、治療において、例えば抗炎症剤として有用であると予期される。それらはまた、神経型一酸化窒素合成酵素のアイソフォームの阻害剤として、有用性を有し得る。
【００４７】
本化合物、およびその薬学的に許容される塩、エナンチオマー、およびラセミ体は、一酸化窒素合成または過剰合成が寄与する部分のある疾患もしくは状態の処置もしくは予防における使用が示されている。特に、ヒトを含む哺乳動物において、炎症性状態の処置における使用が示されている。
【００４８】
特記され得る状態は、
骨関節炎、リウマチ性関節炎、リウマチ性脊椎炎、痛風性関節炎、および他の関節炎状態、炎症性関節；
湿疹、乾癬、皮膚炎、または他の炎症性皮膚状態、例えば日焼け；
ブドウ膜炎、緑内障、および結膜炎を含む炎症性眼状態；
炎症が、例えば、喘息、気管支炎、慢性閉塞性肺疾患、ハト飼育者疾患(pigeon fancier's disease)、農夫肺、急性呼吸窮迫症候群を伴う肺疾患；
菌血症、内毒血症(endotoxaemia) (敗血症ショック)、アフタ性潰瘍、歯肉炎、麻痺(pyresis)、痛み、髄膜炎、および膵炎；
炎症性腸疾患を含む胃腸管の状態、クローン病、萎縮性胃炎、変形性胃炎(gastritis varialoforme)、潰瘍性大腸炎、セリアック病、限局性回腸炎(regional ileitis)、消化性潰瘍、 過敏性腸症候群、逆流性食道炎、例えば Helicobacter pylori の感染に起因する、または非ステロイド性抗炎症剤での処置に起因する胃腸管の損傷；および
炎症を伴う他の状態；
である。
【００４９】
本化合物はまた、急性の痛み、または持続性炎症性疼痛、または神経因性疼痛、または中枢由来の痛みの、処置および緩和に有用である。
我々は、特に、炎症性腸疾患、リウマチ性関節炎、骨関節炎、慢性閉塞性肺疾患、および痛みの状態に関心を持っている。
【００５０】
式(Ｉ)の化合物 およびその薬学的に許容される塩、エナンチオマー、およびラセミ体はまた、上記に加えて、疾患もしくは状態の処置または予防に有用であり得る。例えば、本化合物は、アテローム硬化症、嚢胞性線維症、敗血症ショック および／または 毒素ショックに伴う低血圧の処置、免疫系機能障害の処置、器官移植治療における短期免疫抑制に対するアジュバントとして、糖尿病の開始の制御、糖尿病における膵臓の機能の維持、糖尿病に伴う血管のコンプライアンスの処置、およびサイトカイン、例えばＴＮＦ またはインターロイキンとの併用治療(co-therapy)において、有用であり得る。
【００５１】
式(Ｉ)の化合物はまた、例えば心停止や卒中の場合における低酸素症、例えば虚血、低酸素症、低血糖、癲癇などの疾患や 外傷(例えば脊髄損傷や頭部損傷)における 神経変性 および／または 神経壊死を含む神経変性疾患、高圧酸素痙攣および毒、痴呆、例えば初老期痴呆や アルツハイマー病や ＡＩＤＳ関連痴呆、シドナム舞踏病、パーキンソン病、トゥーレット症候群、ハンチントン舞踏病、筋萎縮性側索硬化症、多発性硬化症、筋ジストロフィー、コルサコフ病、大脳血管障害に関する虚弱、睡眠障害、 統合失調症、鬱病、痛み、自閉症、季節性情動障害、時差ぼけ、鬱病、または 月経前症候群(ＰＭＳ)や不安や敗血症ショックに伴う別の症状の処置に有用であり得る。式(Ｉ)の化合物はまた、薬物中毒または薬物抵抗性、例えばアヘン剤やジアゼピンに対する抵抗性の予防や回復、薬物中毒の処置、偏頭痛や他の血管性頭痛、神経因性炎症の処置、胃腸運動障害、癌の処置、および分娩の誘発において、活性を示すと期待され得る。
【００５２】
我々は、特に卒中、アルツハイマー病、パーキンソン病、多発性硬化症、統合失調症、偏頭痛、癌、敗血症ショック、および痛みの状態に関心がある。
【００５３】
予防は、特に以前に発症したことのあるヒトか、またはそれ以外に問題の疾患もしくは状態に罹患する危険が増大していると考えられるヒトの処置に関連すると期待される。特定の疾患もしくは状態の発症の危険があるヒトは、一般的に、その疾患もしくは状態の家族の病歴があるヒト、または特にその疾患もしくは状態にかかりやすいことが遺伝子試験もしくはスクリーニングによって分かっているヒトを含む。
【００５４】
上記の治療的適応において、用量は、用いられた化合物、投与方法、および望ましい処置に応じて、当然に変化する。しかし、一般的に、本化合物を、１日当たり１mgから２０００mgの間で、固体の形態の投与形で投与した場合に、満足のいく結果が得られる。
【００５５】
式(Ｉ)の化合物 およびその薬学的に許容される誘導体は、それ自身で、または本化合物もしくは誘導体を、薬学的に許容されるアジュバント、希釈剤、もしくは担体と混合した適切な医薬組成物の形態で用いられ得る。投与は、経腸(経口、舌下、または直腸)、鼻腔内、吸入、静脈内、局所、または他の非経腸の経路によって行われ得る。適切な医薬製剤の選択および製造のための慣用の手順は、例えば“Pharmaceuticals - The Science of Dosage Form Designs”, M. E. Aulton, Churchill Livingstone, 1988 に記載されている。医薬組成物は、式(Ｉ)の化合物 またはその薬学的に許容される塩、エナンチオマー、もしくは ラセミ体を、好ましくは８０％未満、より好ましくは５０％未満含む。
【００５６】
本発明によると、我々は、さらに、薬学的に許容されるアジュバント、希釈剤、もしくは担体と混合した、式(Ｉ)の化合物 またはその薬学的に許容される塩、エナンチオマー、もしくは ラセミ体を含む医薬組成物を提供する。
該成分を混合することを含む、該医薬組成物の製造方法もまた提供する。
【００５７】
式(Ｉ)の化合物、およびその薬学的に許容される誘導体はまた、ＣＯＸ阻害剤と組み合わせて、より特定的にはＣＯＸ−２阻害剤と組み合わせて、有利に用いられ得る。特に望ましいＣＯＸ−２阻害剤は、Celecoxib および MK-966 である。ＮＯＳ阻害剤とＣＯＸ−２阻害剤は、１回単位用量で投与するために 同じ医薬組成物に一緒に製剤化されるか、またはそれぞれの成分を個別に製剤化し、別個の投与形を同時にもしくは連続して投与するかの何れであってもよい。
【００５８】
本発明は、以下の実施例によって例示されるが、これに決して制限されない。
以下の略号を用いる。
ＤＭＳＯ  (ジメチルスルホキシド)；
ＤＭＦ  (Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド)；
ＴＨＦ  (テトラヒドロフラン)；
ＮＭＰ  (Ｎ−メチルピロリジノン).
【００５９】
実施例１
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−メチル−３−ピリジンカルボニトリル エタンジオエート
ａ)１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[(２Ｓ)−２−ヒドロキシ−２−フェニルエチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル、および １,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[(２Ｒ)−２−ヒドロキシ−２−フェニルエチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
窒素下、０℃で、乾燥ＴＨＦ(１００ml)中の１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−２,２−ジメチル−４−(２−オキソエチル)−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル(６.９ｇ)の溶液に、撹拌しながら、臭化フェニル マグネシウム(３４ml, １Ｍ ＴＨＦ溶液)を加えた。添加する間に２０℃まで発熱が起こり、混合物をこの温度で３時間保った。反応混合物を５％ クエン酸水溶液(１００ml)でクエンチし、生成物を酢酸エチル(１５０ml)で抽出した。有機抽出物を乾燥(ＭｇＳＯ４)し、濃縮し、油状物とした。ジアステレオマーの混合物を、クロマトグラフィー(シリカ, １０％ ジエチルエーテル／イソヘキサンを溶出液として)にかけ、(４Ｓ,２Ｓ)副題化合物(３.５ｇ, ３８％)を無色の固体として得た。
1H NMR 400MHz  (CDCl3) 7.4-7.2 (5H, m), 4.88 (1H, d), 4.65 (1H, m), 4.35 (1H, m), 4.0 (1H, m), 3.65 (1H, d), 2.1-2 (1H, m), 1.85-1.95 (1H, m), 1.6 (3H, s), 1.49 (12H, s).
【００６０】
さらに溶出し、(４Ｓ, ２Ｒ)副題化合物(２.５ｇ, ２７％)を無色の固体として得た。
1H NMR 400MHz  (CDCl3) 7.4-7.3 (5H, brs), 4.77-4.73 (1H, m), 4.3-3.7  (3H, m), 2.2-2 (2H, m), 1.6-1.4 (15H, m).
【００６１】
ｂ)１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[(２Ｒ)−２−(ベンゾイルチオ)−２−フェニルエチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
０℃で、乾燥ＴＨＦ中の段階(ａ)の(４Ｓ, ２Ｓ)生成物と、トリス(４−クロロフェニル)ホスフィンの溶液に、ジイソプロピル アゾジカルボン酸エステル(１.８４ml)を、５分間に渡って滴下した。添加完了後、混合物を２０分間撹拌し、次にチオ安息香酸(１.１ml)を加えた。冷却浴を除去し、終夜撹拌を続けた。混合物を濃縮し、残さをクロマトグラフィー(シリカ, １０％ ジエチルエーテル／イソヘキサンを溶出液として)によって精製し、副題化合物(１.２ｇ, ２９％)を黄色の固体として得た。
MS APCI +ve m/z 342 ([M+H-Boc]+).
【００６２】
ｃ)１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[(２Ｒ)−２−[(３−シアノ−６−メチル−２−ピリジニル)チオ]−２−フェニルエチル−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
メタノール(１０ml)中の、段階(ｂ)の生成物(４４０mg)と、２−クロロ−６−メチル−３−ピリジンカルボニトリル(２２９mg)と、炭酸ナトリウム(１５９mg)と、水(１ml)の混合物を、室温で１７時間撹拌した。混合物を水(５０ml)で希釈し、ジエチルエーテル(２×５０ml)で抽出した。合わせた抽出物を乾燥し(ＭｇＳＯ４)、濃縮して油状物とし、クロマトグラフィー(シリカ, １０％ ジエチルエーテル／イソヘキサンを溶出液として)によって精製し、保護されたアミノアルコールを得た。
MS APCI +ve m/z 454 [M+H]+.
【００６３】
ｄ)２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−メチル−３−ピリジンカルボニトリル エタンジオエート
段階(ｃ)からの全生成物を、エチレングリコール(２ml)に溶解し、ピリジニウム トシレートの結晶を加え、溶液を１９０℃で１０分間加熱した。混合物を環境温度まで冷却し、メタノール(５０ml)で希釈し、溶液をＳＣＸ樹脂と共に撹拌した。樹脂をろ過によって集め、メタノール性アンモニアで処理した。アンモニア溶液を乾固するまで濃縮し、樹脂をクロマトグラフィー(シリカ, １０％  ７Ｍジクロロメタン中メタノール性アンモニアを溶出液として)によって精製し、遊離塩基(７０mg, ２２％)を得た。エタノール中１当量のシュウ酸を用いて、アミンをエタンジオエート塩に変換し、表題化合物を得た。
MS APCI +ve m/z 314 [M+H]+.
1H NMR 400MHz  (d6-DMSO) 8.1-7.2 (7H, m), 5.33 (1H, t), 3.6-3.4 (2H, m), 2.93 (1H, br m), 2.59 (3H, s), 2.35-2.2 (2H, m).
【００６４】
実施例２
２−[[(３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−(３−イソオキサゾリル)ブチル]チオ]−６−メチル−３−ピリジンカルボニトリル エタンジオエート
ａ)(４Ｓ)−４−[２−(３−イソオキサゾリル)−２−オキソエチル]−２−オキサゾリジノン
窒素下、ジブロモエタン(０.４ｇ)を、乾燥ＴＨＦ(４ml)中の亜鉛ダスト(１.３ｇ)の懸濁液に加え、混合物を約６０℃に加熱した。すぐに室温まで冷却した後、さらにジブロモエタン(０.４ｇ)を加え、加熱／冷却サイクルを繰り返した。ＴＨＦ(５ml)と、クロロトリメチルシラン(０.２ml)を加え、混合物を２分間攪拌した。ＴＨＦ(４ml)中の(４Ｒ)−４−(ヨードメチル)−２−オキサゾリジノン(２.２６ｇ)の溶液を滴下し(僅かに発熱が観測された)、反応物を３０℃で１時間加熱した。室温まで冷却後、ＴＨＦ(６ml)を加え、懸濁液を１時間放置した。窒素下、−７８℃で、上清をカニューレによって５分間に渡って、ＴＨＦ(８ml)中の塩化リチウム(０.８４ｇ)とシアン化銅(Ｉ)(０.８８ｇ)の溶液に移した(塩は前もって室温で１０分間攪拌した)。混合物を０℃まで温め、再度−７８℃まで冷却し、ＴＨＦ(１ml)中の３−イソオキサゾールカルボニル 塩化物(０.７８ｇ)の溶液を加えた。１時間後、混合物を−１０℃まで温め、１６時間に渡ってゆっくりと室温まで温めた。反応混合物を酢酸エチルと飽和塩化アンモニウム溶液の混合物に注ぎ、混合物をセライトでろ過した。次に有機層を分離し、水と塩水で洗浄し、乾燥した(ＭｇＳＯ４)。溶媒を蒸発し、残さをクロマトグラフィー(シリカ, ２５から１００％  酢酸エチル／イソヘキサンを溶出液として)によって精製し、副題化合物を油状固体として得た(０.８２ｇ, ７０％)。
1H NMR 400MHz (d6-DMSO) 9.15 (1H, s), 7.71 (1H, s), 6.95 (1H, s), 4.50 (1H, t), 4.26 (1H, quintet), 4.03 (1H, dd), 3.44 (1H, dd), 3.30 (1H, m).
【００６５】
ｂ)(４Ｓ)−４−[２−ヒドロキシ−２−(３−イソオキサゾリル)エチル]−２−オキサゾリジノン
０℃で、ボラン(４.１６ml, １Ｍ  ＴＨＦ溶液)を、ＴＨＦ(４ml)中の(Ｒ)−２−メチル−ＣＢＳ−オキサザボロリジン(oxazaborolidine)(０.４２ml, １Ｍ トルエン溶液)の溶液に加えた。１０分後、ＴＨＦ(３ml)中の(４Ｓ)−４−[２−(３−イソオキサゾリル)−２−オキソエチル]−２−オキサゾリジノン(０.８２ｇ)の溶液を、５分間に渡って加え、得られた溶液を０℃で１時間、そして２０℃で１８時間攪拌した。メタノール(２５ml)を加え、混合物を１５分間攪拌した。混合物を蒸発し、メタノールに再度溶解し、２回以上真空下で再度濃縮した。残さをクロマトグラフィー(シリカ, 酢酸エチルを溶出液として)によって精製し、副題化合物を無色の油状物として得た(０.５５ｇ)。ＮＭＲで１.５：１のジアステレオマー混合物であった。
1H NMR 400MHz (d6-DMSO) (主要なジアステレオマー) 8.27 (1H, s), 7.83 (1H, s), 6.56 (1H, s), 5.70 (1 H, d), 4.83 (1H, m), 4.45-4.37 (1H, m), 4.00 (2H, m), 2.01-1.82 (2H, m).
【００６６】
ｃ)(４Ｓ)−４−[２−(ベンゾイルチオ)−２−(３−イソオキサゾリル)エチル]−２−オキサゾリジノン
窒素下、０℃で、ＴＨＦ(３０ml)中のトリフェニルホスフィン(１.４５ｇ)の溶液に、ジイソプロピルアゾジカルボン酸エステル(１.１５ml)を滴下した。４５分後、ＴＨＦ(１０ml)中のチオ安息香酸(０.７７ｇ)と段階(ａ)の生成物(０.５４７ｇ)の溶液を滴下した。反応物を室温まで温め、１６時間攪拌した。溶媒を蒸発し、残さをクロマトグラフィー(シリカ, ２から７５％  酢酸エチル／イソヘキサンを溶出液として)によって精製し、副題化合物(１.２ｇ)(１.５：１  ジアステレオマー混合物)を油状固体として得た。
1H NMR  400MHz (d6-DMSO) 8.91 (1H, s), 8.02-7.53 (6H, m), 6.71 (1H, s), 5.08 (1H, dd), 4.33 (1H, t), 4.01 (1H, dd), 3.76 (1H, quintet), 2.34 (1H, m), 2.17 (1H, m).
【００６７】
ｄ)２−[[１−(３−イソオキサゾリル)−２−[(４Ｓ)−２−オキソオキサゾリジニル]エチル]チオ]−６−メチル−３−ピリジンカルボニトリル
段階(ｃ)の生成物(０.６ｇ)を、メタノール(８ml)中 ７Ｍ アンモニアに溶解し、窒素下、室温で２時間攪拌し、次に溶媒を蒸発した。残さをＤＭＦ(５ml)に溶解し、炭酸セシウム(０.８５ｇ)と２−クロロ−６−メチル−３−ピリジンカルボニトリル(０.２ｇ)の混合物を加えた。３時間攪拌した後、酢酸エチルと水を加え、有機層を分離した。水層をさらに酢酸エチルで抽出した。合わせた有機抽出物を、１Ｍ 水酸化ナトリウム水溶液と塩水で洗浄し、次に乾燥した(Ｎａ２ＳＯ４)。溶媒を蒸発し、残さをクロマトグラフィー(シリカ, ４０から８０％  酢酸エチル／イソヘキサンを溶出液として)によって精製し、副題化合物(０.１５ｇ)(３：１  ジアステレオマー混合物)を、油状固体として得た。
1H NMR 400MHz (d6-DMSO) 8.92 (1H, d), 8.13 (1H, d), 8.01 (1H, bs), 7.25 (1H, d), 6.74 (1H, d), 5.45 (1H, dd), 4.30 (1H, t), 4.00 (1H, dd), 3.74 (1H, m), 2.58 (3H, s), 2.40-2.20 (2H, m).
【００６８】
ｅ)１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[２−[(３−シアノ−６−メチル−２−ピリジニル)チオ]−２−(３−イソオキサゾリル)エチル]−２−オキソ−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
ＴＨＦ(２ml)中の段階(ｄ)の生成物(０.１５ｇ)の溶液に、トリエチルアミン(０.１０ml)と、炭酸 (１,１−ジメチルエトキシ)カルボニル−１,１−ジメチルエチルエステル(０.１５ｇ)と、ジメチルアミノピリジン(１３mg)を、連続して加え、次に溶液を１６時間攪拌した。ジエチルエーテルと水を加え、有機層を分離した。有機抽出物を硫酸水素カリウム水溶液と塩水で洗浄し、次に乾燥した(Ｎａ２ＳＯ４)。溶媒を蒸発し、残さをクロマトグラフィー(シリカ, イソヘキサン中４０から５０％の酢酸エチルを溶出液として)によって精製し、副題化合物を白色固体として得た(７０mg)。
1H NMR 400MHz (d6-DMSO) (主要なジアステレオマー) 8.91 (1H, d), 8.15 (1H, d), 7.27 (1H, d), 6.74 (1H, d), 5.47 (1H, dd), 4.50-4.30 (3H, m), 2.57 (3H, s), 2.60-2.40 (2H, m), 1.44 (9H, s).
【００６９】
ｆ)１,１−ジメチルエチル [(１Ｓ)−３−[(３−シアノ−６−メチル−２−ピリジニル)チオ]−１−(ヒドロキシメチル)−３−(３−イソオキサゾリル)プロピル]カルバメート
メタノール(２.４ml)中の段階(ｅ)の生成物(７０mg)の溶液に、炭酸セシウム(０.０１ｇ)を加え、溶液を３時間攪拌した。酢酸エチルと水を加え、有機層を分離した。有機抽出物を塩水で洗浄し、乾燥し(Ｎａ２ＳＯ４)、蒸発し、残さをクロマトグラフィー(シリカ, ５０から６０％  酢酸エチル／イソヘキサンを溶出液として)によって精製し、副題化合物を白色固体として得た(５４mg)。
1H NMR 400MHz (CDCl3) (主要なジアステレオマー) 8.38 (1H, d), 7.72 (1H, d), 7.00 (1H, d), 6.43 (1H, d), 5.42 (1H, d), 5.22 (1H, s), 3.80-3.67 (2H, m), 3.61 (1H, dt), 2.66 (3H, s), 2.54 (2H, m), 2.20 (1H, m), 1.45 (9H, s).
【００７０】
ｇ)２−[[(３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−(３−イソオキサゾリル)ブチル]チオ]−６−メチル−３−ピリジンカルボニトリル エタンジオエート
段階(ｆ)の生成物(６０mg)を、ジオキサン中４Ｍ  ＨＣｌ(５ml)に溶解した。揮発性物質を除去し、残さをメタノールに溶かし、ＳＣＸ イオン交換樹脂に通し、メタノールで、次にメタノール中７Ｍ アンモニアで溶出した。溶媒を除去し、表題生成物の遊離塩基を得た(５０mg)。この物質をアセトニトリル(３ml)とメタノール(１ml)に溶かし、ジエチルエーテル中のシュウ酸(１４mg)の溶液を加えた。溶媒を除去し、酢酸エチルを加え、結晶をろ過し、乾燥し、表題化合物をクリーム色の固体として、８０：２０  (１Ｒ)：(１Ｓ)  ジアステレオマー混合物として得た(３０mg)。
MS APCI +ve  m/z 305  [M+H]+.
1H NMR 400MHz (d6-DMSO) 8.92 (1H, d), 8.16 (1H, d), 7.99 (ca. 2H, vbs), 7.29 (1H, d), 6.68 (1H, d), 5.55 (1H, t), 3.63 (1H, dd), 3.52 (1H, dd), 3.20 (1H, bs), 2.58 (3H, s), 2.40-2.20 (2H, m).
【００７１】
実施例３
４−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−メチル−３−ピリジンカルボニトリル エタンジオエート
ａ)１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[(２Ｒ)−２−[(５−シアノ−２−メチル−４−ピリジニル)チオ]−２−フェニルエチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
実施例１の段階(ｂ)の生成物(４０６mg)を、メタノール(３０ml)中 ７Ｍアンモニアで処理し、室温で６時間攪拌した。溶媒を蒸発し、残さを乾燥ＤＭＦ(２５ml)に溶解し、４−クロロ−６−メチル−３−ピリジンカルボニトリル(１５４mg)で、次に窒素下で炭酸セシウム(６００mg)で処理した。反応混合物を２４時間攪拌し、塩水と酢酸エチルに注ぎ、有機層を分離し、水(５回)で、次に塩水で洗浄し、乾燥した(ＭｇＳＯ４)。溶媒を蒸発し、残さをクロマトグラフィー(シリカ, ５％  酢酸エチル／ジクロロメタンを溶出液として)によって精製し、粘性の油状物として副題化合物を得た(１７７mg, ４２％)。
MS APCI +ve  m/z  454 [M+H]+.
【００７２】
ｂ)４−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−メチル−３−ピリジンカルボニトリル エタンジオエート
実施例３の段階(ａ)の生成物(１７７mg)を、ジオキサン(５ml)とメタノール(５ml)中 ４Ｍ  ＨＣｌ中で、１時間攪拌した。反応混合物を蒸発し、エーテルで共沸し(３回)、次にエタノール(１０ml)中の１当量のシュウ酸で処理した。透明な溶液を、完全に沈殿するまでエーテルで処理し、固体をろ過によって集め、エーテルで洗浄し、真空下、４０℃で２時間乾燥し、明褐色の固体として表題化合物を得た(７６mg, ４８％)。
MS APCI + ve m/z 314 [M+H]+.
1H NMR 300MHz (d6-DMSO) 8.7 (1H, s), 7.54 (3H, m), 7.40 (2H, m), 7.31 (1H, m), 5.15 (1H, t), 3.48 (1H, dd), 3.38 (1H, m), 2.90 (1H, br m), 2.50 (3H, s), 2.30 (1H, m), 2.14 (1H, m).
【００７３】
実施例４
３−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−５−(トリフルオロメチル)−２−ピリジンカルボニトリル エタンジオエート
ａ)１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[(２Ｒ)−２−[[２−シアノ−５−(トリフルオロメチル)−３−ピリジニル]チオ]−２−フェニルエチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
実施例１の段階(ｂ)の生成物(４１１mg)を、メタノール(３０ml)中の７Ｍ アンモニア中で６時間撹拌した。溶媒を蒸発し、残さを乾燥ＤＭＦ(２５ml)に溶解し、窒素下で、撹拌しながら３−クロロ−５−(トリフルオロメチル)−２−ピリジンカルボニトリル(２１０mg)で、次に炭酸セシウム(６１０mg)で処理した。反応混合物を、窒素下、室温で終夜撹拌し、塩水と酢酸エチルに注ぎ、有機層を分離し、水(５回)で、次に塩水で洗浄し、乾燥した(ＭｇＳＯ４)。溶媒を蒸発し、残さをクロマトグラフィー(シリカ, ５％酢酸エチル／イソヘキサンを溶出液として)によって精製し、副題化合物を粘性の油状物として得た(１９０mg, ４０％)。
MS APCI +ve  m/z 408 [M-Boc +1]+.
【００７４】
ｂ)３−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−５−(トリフルオロメチル)−２−ピリジンカルボニトリル エタンジオエート
実施例４の段階ａ)の生成物(１９０mg)を、ジオキサン(５ml)とメタノール(５ml)中の４Ｍ塩酸中で１時間撹拌した。反応混合物を蒸発し、残さを水性の炭酸水素ナトリウムと酢酸エチルで処理し、有機層を分離し、乾燥した(ＭｇＳＯ４)。溶媒を蒸発し、残さをエタノール中１当量のシュウ酸で処理した。溶液を蒸発し、残さをアセトニトリルと数滴のエーテルで処理し、無色の固体を沈澱させた。それをろ過によって集め、エーテルで洗浄し、乾燥し、表題化合物を得た(１３３mg, ７８％)。
MS APCI +ve  m/z 368 [M+H]+.
1H NMR 300MHz (d6-DMSO) 8.98 (1H, s), 8.33 (1H, s), 7.34 (5H, m), 5.04 (1H, t), 3.58 (1H, dd), 3.48 (1H, m), 3.05 (1H, m), 2.33 (1H, m), 2.18 (1H, m).
【００７５】
実施例５
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−(ジフルオロメチル)−３−ピリジンカルボニトリル (Ｅ)−ブテンジオエート
ａ)６−(ジフルオロメチル)−２−(メチルチオ)−３−ピリジンカルボニトリル
窒素下、ジクロロメタン中の６−ホルミル−２−(メチルチオ)−３−ピリジンカルボニトリル(１ｇ)の溶液に、[ビス(メトキシエチル)アミノ]硫黄三フッ化物(２ml)を、次にエタノール(０.０５ml)を加えた。１６時間後、反応混合物を注意深く飽和炭酸水素水溶液に注いだ。有機層を分離し、水層をさらにジクロロメタンで抽出した。合わせた有機層を乾燥し((硫酸ナトリウム))、溶媒を除去した。残さをメタノールに溶かし、ＳＣＸ イオン交換樹脂に通し、メタノールで溶出した。溶媒を除去し、表題化合物を黄色の固体として得た(１.２ｇ)。
1H NMR  400MHz  (CDCl3) 7.93 (1H, d), 7.38 (1H, d), 6.59 (1H, t), 2.65 (3H, s).
【００７６】
ｂ)６−(ジフルオロメチル)−２−(メチルスルホニル)−３−ピリジンカルボニトリル
０℃で、ジクロロメタン(１２ml)中の実施例５の段階(ａ)の生成物(１.２ｇ)の溶液に、３−クロロ過安息香酸(最少６.８ｇ, 純度５７％)を加えた。反応物を室温まで温め、２時間撹拌した。反応物を炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥した(Ｎａ２ＳＯ４)。溶媒を蒸発し、残さをジエチルエーテルに溶かした。有機溶液をメタ重亜硫酸ナトリウム水溶液と、氷冷した０.５Ｍ 水酸化ナトリウム水溶液と、塩水で洗浄し、乾燥した(Ｎａ２ＳＯ４)。溶媒を除去し、副題化合物を薄黄色の油状物として得た(０.５８ｇ)。
1H NMR  400MHz  (CDCl3) 8.44 (1H, d), 8.03 (1H, d), 6.72 (1H, t), 3.42 (3H, s).
【００７７】
ｃ)１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[[(２Ｒ)−２−[[３−シアノ−６−(ジフルオロメチル)−２−ピリジニル]チオ]−２−フェニルエチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
表題化合物は、実施例１の段階(ｂ)の生成物と、６−(ジフルオロメチル)−２−(メチルスルホニル)−３−ピリジンカルボニトリルを用いて、実施例４の段階(ａ)の方法によって製造し、クロマトグラフィー(シリカ, イソヘキサン中５％ 酢酸エチルを溶出液として)によって精製し、副題化合物を粘性の油状物として得た(２５２mg, ７４％)。
MS APCI +ve  m/z  390 [M-Boc +1]+.
【００７８】
ｄ)２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−(ジフルオロメチル)−３−ピリジンカルボニトリル (Ｅ)−ブテンジオエート
段階(ｃ)の生成物を、実施例４の段階(ｂ)のように脱保護し、次に１当量のフマル酸を加えることによって、(Ｅ)−ブテンジオエート塩に変え、表題化合物を、無色の泡沫として得た(１２１mg, ５１％)。
MS APCI +ve  m/z 350 [M+H]+.
1H NMR  300MHz  (d6-DMSO)  8.40 (1H, d), 7.59 (1H, d), 7.52 (2H, d), 7.31 (3H, m), 7.10 (1H, t), 6.45 (2H, s), 5.35 (1H, q), 3.38 (2H, m), 2.75 (1H, br m), 2.31 (1H, m), 2.18 (1H, m).
【００７９】
実施例６
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−(フルオロメチル)−３−ピリジンカルボニトリル (Ｅ)−ブテンジオエート
ａ)６−(フルオロメチル)−２−(メチルチオ)−３−ピリジンカルボニトリル
エタノール(１２ml)中の６−ホルミル−２−(メチルチオ)−３−ピリジンカルボニトリル(１ｇ)の溶液に、水素化ホウ素ナトリウム(０.２１２ｇ)を加えた。２時間後、揮発物質を除去し、酢酸エチルと水を加えた。有機層を分離し、水層をさらに酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を乾燥し(Ｎａ２ＳＯ４)、溶媒を除去し、６−(ヒドロキシメチル)−２−(メチルチオ)−３−ピリジンカルボニトリル(１ｇ)を、黄色の固体として得た。窒素下で、この物質をジクロロメタン(１０ml)に溶かし、ジクロロメタン(３ml)中の[ビス(メトキシエチル)アミノ]硫黄三フッ化物(１ml)を加えた。１６時間後、反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液に注意深く注いだ。有機層を分離し、乾燥し(Ｎａ２ＳＯ４)、溶媒を除去した。残さをメタノールに溶かし、ＳＣＸ イオン交換樹脂を通し、メタノールで溶出した。溶媒を除去し、副題生成物を黄色の固体として得た(０.８８ｇ)。
1H NMR  400MHz  (CDCl3) 7.85 (1H, d), 7.23 (1H, d), 5.48 (2H, d), 2.60 (3H, s).
【００８０】
ｂ)６−(フルオロメチル)−２−(メチルスルホニル)−３−ピリジンカルボニトリル
表題化合物を、実施例６の段階(ａ)の生成物と３−クロロ過安息香酸を用いて、実施例５の段階(ｂ)の方法によって製造した。生成物を、薄緑色の油状物として得た。それを放置しておくと固化した。
1H NMR  400MHz  (CDCl3) 8.33 (1H, d), 7.87 (1H, d), 5.60 (2H, d), 3.37 (3H, s).
【００８１】
ｃ)１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[[(２Ｒ)−２−[[３−シアノ−６−(フルオロメチル)−２−ピリジニル]チオ]−２−フェニルエチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
表題化合物を、実施例１の段階(ｂ)の生成物と６−(フルオロメチル)−２−(メチルスルホニル)−３−ピリジンカルボニトリルを用いて、実施例４の段階(ａ)の方法によって製造し、クロマトグラフィー(シリカ, イソヘキサン中１０から３０％ ジエチルエーテルを溶出液として)にかけ、副題化合物を灰白色の泡沫として得た(３１８mg)。
1H NMR  400MHz  (d6-DMSO)  8.26 (1H, d), 7.46 (2H, d), 7.35 (3H, m), 7.25 (1H, t), 5.76-5.44 (2H, m), 5.14 (1H, dd), 4.00-3.53 (3H, br m), 2.50-2.00 (2H, m), 1.46-1.36 (15H, m).
【００８２】
ｄ)２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−(フルオロメチル)−３−ピリジンカルボニトリル (Ｅ)−ブテンジオエート
段階(ｃ)の生成物を、実施例４の段階(ｂ)のように脱保護し、次に１当量のフマル酸を加えることによって、(Ｅ)−ブテンジオエート塩に変え、表題化合物を灰白色の泡沫として得た(２２４mg)。
MS APCI +ve  m/z 332 [M+H]+.
1H NMR  400MHz  (CD3OD)  8.07 (1H, d), 7.49 (2H, m), 7.38-7.27 (4H, m), 6.68 (2H, s), 5.62 (1H, q), 5.49 (1H, t), 3.69 (1H, dd), 3.55 (1H, dd), 3.26 (1H, m), 2.43 (1H, ddd), 2.34 (1H, ddd).
【００８３】
実施例７
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−(３−ピリジニル)ブチル]オキシ]−４−クロロ−５−フルオロベンゾニトリル二塩酸塩
ａ)１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[(２Ｒ)−２−ヒドロキシ−２−(３−ピリジニル)エチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
表題化合物を、実施例１の段階(ａ)の方法によって製造し、より極性のジアステレオマーを無色の油状物として得た。
MS APCI +ve  m/z 222 [M+H-Boc]+.
【００８４】
ｂ)１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[(２Ｒ)−２−(５−クロロ−２−シアノ−４−フルオロフェノキシ)−２−(３−ピリジニル)エチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
水素化ナトリウム(鉱油中６０％)(２４mg)を、攪拌しながら、乾燥ＤＭＦ(５ml)中の４−クロロ−２,５−ジフルオロベンゾニトリル(９０mg)と段階(ａ)の生成物(１６５mg)の溶液に注意深く加え、攪拌を２時間続けた。反応混合物を水でクエンチし、酢酸エチルで２回抽出し、抽出物を乾燥し(Ｎａ２ＳＯ４)、蒸発した。残さをクロマトグラフィー(シリカ, １０％ 酢酸エチル／ヘキサンを溶出液として)によって精製し、副題化合物を無色の泡沫として得た(２２０mg)。
MS APCI +ve  m/z 376 [M+H-Boc]+.
【００８５】
ｃ)２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−(３−ピリジニル)ブチル]オキシ]−４−クロロ−５−フルオロベンゾニトリル二塩酸塩
段階(ｂ)の生成物(２２０mg)を、メタノール(１ml)、およびジオキサン(２ml)中４Ｍ 塩酸と共に、２時間攪拌した。反応混合物を蒸発し、ジエチルエーテルでトリチュレートし、表題化合物を白色の固体として得た(１３０mg)。
MS APCI +ve  m/z 336 [M+H]+.
1H NMR  400MHz  (d6-DMSO) 8.95 (1H, s), 8.75 (1H, d), 8.27-8.21 (4H, m), 8.06 (1H, d), 7.81-7.78 (1H, t), 7.62 (1H, d), 6.23-6.20 (1H, m), 3.72-3.65 (1H, dd), 3.61-3.58 (1H, m), 3.3-3.2 (1H, br.s), 2.40-2.31 (1H, m), 2.27-2.20 (1H, m).
【００８６】
実施例８
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−(２−チアゾリル)ブチル]オキシ]−４−クロロ−５−フルオロベンゾニトリル エタンジオエート
ａ)１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[(２Ｓ)−２−ヒドロキシ−２−(２−チアゾリル)エチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル、および １,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[(２Ｒ)−２−ヒドロキシ−２−(２−チアゾリル)エチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
乾燥ジクロロメタン(２２５ml)中の(４Ｓ)−２,２−ジメチル−４−(２−オキソエチル)−３−オキサゾリジンカルボン酸 １,１−ジメチルエチルエステル(１０.７５ｇ)の溶液に、攪拌しながら、窒素下、室温で、２−(トリメチルシリル)チアゾール(１０.６ml)を加えた。次に、混合物を室温で１８時間攪拌した。反応混合物を蒸発乾固し、残さをＴＨＦ(２７ml)に溶解し、テトラブチルアンモニウム フッ化物(ＴＨＦ中１.０Ｍ, ６ml)を加えた。次に混合物を室温で２時間攪拌した。得られた混合物を蒸発乾固し、水(８０ml)を加え、混合物をジクロロメタンで４回抽出した。合わせた有機抽出物を塩水で洗浄し、乾燥し(ＭｇＳＯ４)、濃縮して油状物とした。ジアステレオマーの混合物を、クロマトグラフィー(シリカ, ２０から６０％ 酢酸エチル／イソヘキサンを溶出液として)によって精製し、(４Ｓ,２Ｓ)異性体を薄黄色の油状物として得た(７.６ｇ)。
MS APCI +ve m/z 329 [M+H]+.
1H NMR 400MHz  (CDCl3) 7.71 (1H, d), 7.28 (1H, d), 5.14 (1H, m), 5.07 (1H, m), 4.20 (1H, m), 4.05 (1H, m), 3.85 (1H, m), 2.20-2.50 (2H, m), 1.48 (15H, m).
【００８７】
さらに溶出し、(４Ｓ,２Ｒ)異性体を無色の固体として得た(６.４ｇ)。
MS APCI +ve m/z 329 [M+H]+.
1H NMR 400MHz  (CDCl3) 7.72 (1H, d), 7.28 (1H, d), 5.68 (1H, d), 4.94 (1H, m), 4.35 (1H, m), 4.04 (1H, m), 3.71 (1H, d), 2.42 (1H, m), 1.90 (1H, m), 1.62 (3H, s), 1.53 (3H, s), 1.51 (9H, s).
【００８８】
ｂ)１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[(２Ｒ)−２−(５−クロロ−２−シアノ−４−フルオロフェノキシ)−２−(２−チアゾリル)エチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
室温で、乾燥ＤＭＦ(１０ml)を含む乾燥ＴＨＦ(１００ml)中の段階(ａ)の(４Ｓ,２Ｒ)異性体(３ｇ)と４−クロロ−２,５−ジフルオロベンゾニトリル(１.５９ｇ)の溶液に、水素化ナトリウム(油中６０％, ３８５mg)を加えた。添加完了後、混合物を１８時間攪拌し、次に水(６０ml)に注ぎ、ジエチルエーテルで抽出した(３回)。合わせた有機抽出物を塩水で洗浄し、乾燥した(ＭｇＳＯ４)。混合物を蒸発乾固し、油状物を得た。それをシリカゲルで精製し、イソヘキサン中２０から２５％ 酢酸エチルで溶出した。表題化合物を黄色の油状物として単離した(４.０ｇ, ９１％)。
MS APCI +ve m/z 482/4 [M+H]+.
【００８９】
ｃ)２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−(２−チアゾリル)ブチル]オキシ]−４−クロロ−５−フルオロベンゾニトリル エタンジオエート
メタノール(１００ml)中の段階(ｂ)の生成物(４.０ｇ)の溶液に、ジオキサン中４ＭのＨＣｌ溶液を加えた。混合物を２０℃で１.５時間攪拌し、次に蒸発乾固した。残さを炭酸水素ナトリウム水溶液に溶解し、酢酸エチルで抽出した(４回)。合わせた抽出物を塩水で洗浄し、乾燥し(ＭｇＳＯ４)、クロマトグラフィー(シリカ, 酢酸エチル, 次にジクロロメタン中１０％ (メタノール中７Ｍアンモニア)を溶出液として)によって精製し、混合物を得た。それを濃縮し、エタノールとアセトニトリルの混合物に溶解した。ジエチルエーテル中のシュウ酸(７３０mg)の溶液を加え、得られた混合物を蒸発乾固し、次にエタノールとアセトニトリルとジエチルエーテルの混合物で再結晶し、表題化合物を白色の固体として得た(２.１４ｇ)。
MS APCI +ve m/z 342/4 [M+H]+.
1H NMR 400MHz   (d6-DMSO) 8.07 (1H, d), 7.89 (1H, d), 7.84 (1H, d), 7.70 (1H, d), 6.24 (1H, m), 3.67 (1H, m), 3.55 (1H, m), 3.29 (1H, m), 2.30-2.44 (2H, m).
【００９０】
実施例９
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−(５−イソチアゾリル)ブチル]オキシ]−４−クロロ−５−フルオロベンゾニトリル塩酸塩
ａ)１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[(２Ｓ)−２−ヒドロキシ−２−(５−イソチアゾリル)エチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル、および １,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[(２Ｒ)−２−ヒドロキシ−２−(５−イソチアゾリル)エチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
乾燥ＴＨＦ(５０ml)中のイソチアゾール(１.４２ｇ)の溶液を、窒素雰囲気下で−７８℃まで冷却し、−７０℃未満の温度に保ったまま、ブチル リチウム(ヘキサン中１.６Ｍ, １０.３ml)を滴下した。得られた赤色の溶液を、−７８℃で１時間攪拌し、次に乾燥ＴＨＦ(２０ml)中の１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−２,２−ジメチル−４−(２−オキソエチル)−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル(４ｇ)の溶液を、５分間に渡って加えた。添加完了後、冷却器を除き、混合物を３０分間攪拌した。反応混合物を水(１５０ml)に注ぎ、生成物をジエチルエーテル(２×１５０ml)で抽出した。合わせた抽出物を乾燥し(ＭｇＳＯ４)、濃縮し、油状物とした。クロマトグラフィー(シリカ, ジエチルエーテル中５０％ イソヘキサンを溶出液として)によって精製し、(４Ｓ,２Ｓ)副題化合物を無色の油状物として得た(６００mg)。
MS APCI +ve m/z 329 [M+H]+.
【００９１】
さらに溶出し、(４Ｓ,２Ｒ)副題化合物を無色の油状物として得た(５００mg)。
MS APCI +ve m/z 329 [M+H]+.
【００９２】
ｂ)２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−(５−イソチアゾリル)ブチル]オキシ]−４−クロロ−５−フルオロベンゾニトリル塩酸塩
乾燥ＴＨＦ(２０ml)と乾燥ＤＭＦ(２ml)の混合物中の、段階(ａ)の(４Ｓ,２Ｒ)異性体(５００mg)の溶液を、４−クロロ−２,５−ジフルオロベンゾニトリル(４１６mg)で処理した。この混合物に、窒素下で、水素化ナトリウム(鉱油中分散, ６０％, ９１mg)を加えた。次に混合物を２０℃で３時間攪拌した。反応混合物を水(１００ml)に注ぎ、生成物をジエチルエーテル(２×１００ml)で抽出した。合わせた抽出物を乾燥し(ＭｇＳＯ４)、濃縮し、油状物とした。主要な生成物をシリカゲルでのカラムクロマトグラフィー(２５％ ジエチルエーテル／イソヘキサンを溶出液として)によって単離し、メタノール(５ml)に溶解した。溶液をジオキサン中４Ｍ  ＨＣｌ(２ml)で処理し、２時間攪拌した。溶液を乾固するまで濃縮し、アセトニトリルでトリチュレートし、表題化合物を無色の固体として得た(１９０mg)。
MS APCI +ve m/z 342 [M+H]+.
1H NMR  400MHz  (d6-DMSO)  8.57 (1H,s), 8.07 (1H, d), 8.1 (3H, br s), 7.67 (1H, d), 7.54 (1H, s), 6.5 (1H, dd), 5.41 (1H, t), 3.7-3.5 (2H, m), 3.25 (1H, br m), 2.4-2.2 (2H, m).
【００９３】
実施例１０
４−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−メトキシ−３−ピリジンカルボニトリル (Ｅ)−ブテンジオエート
ａ)フェニルメチル (３Ｓ)−３−[[(１,１−ジメチルエトキシ)カルボニル]アミノ]−４−ヒドロキシ−ブタノエート
ＴＨＦ(２００ml)中の４−(フェニルメチル)−Ｎ−[(１,１−ジメチルエトキシ)カルボニル]−１−(２,５−ジオキソ−１−ピロリジニル)) Ｌ−アスパラギン酸エステル(７５.０ｇ)の溶液を、１時間に渡って、−５℃で(内部の温度を１５℃未満に保つ)、ＴＨＦ(６０ml)と水(９０ml)中の水素化ホウ素ナトリウム(６.８４ｇ)の懸濁液に加えた。さらに水素化ホウ素ナトリウム(６.８ｇ, ２バッチ)を加え、４５分間攪拌した。混合物を、攪拌しながら、冷却した半飽和塩化アンモニウム溶液(６００ml)に注ぎ、酢酸エチルで抽出した(２回)。有機層を乾燥し(ＭｇＳＯ４)、蒸発し、副題化合物をろう状固体として得た(５６.２４ｇ)。
MS APCI +ve  m/z 210 [M+H-Boc]+.
1H NMR 300MHz (CDCl3) 7.41-7.27 (5H, m), 5.24-5.10 (3H, m), 4.15-3.96 (1H, m), 3.71 (2H, d), 2.69 (2H, d), 1.44 (9H, s).
【００９４】
ｂ)フェニルメチル (４Ｓ)−３−[(１,１−ジメチルエトキシ)カルボニル]−２,２−ジメチル−４−オキサゾリジン−酢酸エステル
０℃で、２−メトキシプロペン(４６ml)を、２０分に渡って、ジクロロメタン(３００ml)中の段階ａ)の生成物(７４.８８ｇ)と２,２−ジメトキシプロパン(３０ml)とｐ−トルエンスルホン酸(１.２１ｇ)の溶液に加え、０℃で１時間、そして２０℃で１時間攪拌した。１Ｍ  ＮａＨＣＯ３を加え、混合物をジクロロメタンで抽出(３×２００ml)した。有機層を乾燥し(ＭｇＳＯ４)、蒸発し、無色の油状物を得た。それをトルエン(３００ml)に溶解し、２,２−ジメトキシプロパン(４５ml)とｐ−トルエンスルホン酸(１.２ｇ)を加え、混合物を８０℃で２時間加熱した。冷却し、Ｋ２ＣＯ３を加え、混合物を酢酸エチルで抽出した(２回)。有機層を乾燥し(ＭｇＳＯ４)、蒸発し、副題化合物を薄黄色の油状物として得た(８３.８ｇ)。
1H NMR 300MHz (CDCl3) 7.36-7.28 (5H, m), 5.12 (2H, d), 4.38-3.97 (2H, m), 3.84 (1H, d), 3.05-2.48 (2H, m), 1.62-1.50 (6H, m), 1.46 (9H, s).
【００９５】
ｃ)(４Ｓ)−３−[(１,１−ジメチルエトキシ)カルボニル]−２,２−ジメチル−４−オキサゾリジン酢酸
エタノール(２５０ml)中のパラジウム−炭素(１０％, ３.８ｇ)と段階ｂ)の生成物(８３.８ｇ)の懸濁液を、水素下(４大気圧)、３.５時間攪拌した(５.３Ｌの水素を取りこむ)。混合物をセライトでろ過し、蒸発した。酢酸エチル(１００ml)と１Ｍ  Ｋ２ＣＯ３(２００ml)を加え、有機層を分離し、さらに１Ｍ  Ｋ２ＣＯ３(４０ml)と １Ｍ  ＮａＨＣＯ３(４０ml)で抽出した。水層を酢酸エチルで洗浄し、合わせて、０℃で４Ｍ  ＨＣｌ(１３０ml)を滴下することによって酸性にした。水層を酢酸エチルで抽出し(３×２００ml)、有機層を乾燥し(ＭｇＳＯ４)、蒸発し、副題化合物を薄橙色のゴム状物質として得た。それをゆっくりと結晶化した(５６.２４ｇ)。
1H NMR 300MHz (CDCl3) 4.33-4.12 (1H, m), 4.09-4.00 (1H, m), 3.86 (1H, d), 3.02-2.77 (1H, m), 2.62-2.50 (1H, m), 1.62-1.54 (6H, m), 1.53 (9H, s).
【００９６】
ｄ)１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[２−(メトキシメチルアミノ)−２−オキソエチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
０℃で、Ｎ,Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩(２１.４ｇ)と、ＥＤＣＩ(４１.９４ｇ)と、Ｎ−メチルモルホリン(２４ml)と、ＤＭＡＰ(２６.４ｇ)を、ＣＨ２Ｃｌ２(４００ml)中の段階ｃ)の生成物(５９.２ｇ)の溶液に加え、次に２０℃で１８時間攪拌した。２Ｍ  ＨＣｌ(２００ml)を加え、有機層を分離し、水層をさらに２回抽出した。有機層を２Ｍ  ＨＣｌ(５０ml)とＮａＨＣＯ３(２×１００ml)で洗浄し、合わせて、乾燥し(ＭｇＳＯ４)、蒸発し、副題化合物を得た(６０.２ｇ)。
MS APCI +ve  m/z 303 [M+H]+.
1H NMR 300MHz (CDCl3) 4.38-4.19 (1H, m), 4.08 (1H, dd), 3.87 (1H, t), 3.70 (3H, s), 3.17 (3H, s), 3.07-2.45 (2H, m), 1.63-1.42 (15H, m).
【００９７】
ｅ)１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−２,２−ジメチル−４−(２−オキソ−２−フェニルエチル)−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
−１０から−５℃で、臭化フェニル マグネシウム(２３１ml, ＴＨＦ中１Ｍ)を、１５分に渡って、ＴＨＦ(３６０ml)中の段階ｄ)の生成物(６０.１ｇ)の溶液に加え、２時間攪拌した。さらに臭化フェニル マグネシウム(７ml, エーテル中３Ｍ)を加え、０℃で１時間攪拌し、次に飽和ＮＨ４Ｃｌ(２５０ml)と２Ｍ  ＨＣｌ(１５０ml)を添加することによってクエンチした。混合物を酢酸エチルで抽出し(３回)、有機層を塩水で洗浄し、合わせて、乾燥し(ＭｇＳＯ４)、蒸発し、副題化合物を灰白色の固体として得た(６４.８ｇ)。
1H NMR  300MHz (CDCl3) 7.98 (2H, d), 7.64-7.40 (3H, m), 4.50-4.35 (1H, m), 4.15-4.05 (1H, m), 3.88-3.65 (2H, m), 3.49-3.36, 3.25-3.01 (1H, m), 1.70-1.35 (15H, m).
【００９８】
ｆ)１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[(２Ｓ)−２−ヒドロキシ−２−フェニルエチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
ホウ素(１７６ml,ＴＨＦ中１Ｍ)を、ＴＨＦ(２０ml)中の(Ｒ)−メチル−ＣＢＳ−オキサザボロリジン(１６ml, トルエン中１Ｍ)の溶液に加え、−２０℃まで冷却した。ＴＨＦ(２００ml)中の段階ｅ)の生成物(６４.６ｇ)の溶液を、１.５時間に渡って、内部の温度を−１５℃未満に保って加え、次にこの温度で２２時間攪拌した。メタノール(４０ml)をゆっくりと加え、溶液を蒸発し、次にメタノールと共沸し、薄黄色の油状物を得た(６９ｇ)。エーテルと１Ｍ  ＫＨＳＯ４(２０ml)を加え、混合物をろ過し、蒸発した。クロマトグラフィー(シリカ, ４０−６０石油／エーテルを溶出液として)によって精製し、副題化合物を白色の固体として得た(３７.４ｇ)。それは、実施例１の段階ａ)の主要な生成物と同一であった。
さらに溶出し、(４Ｓ,２Ｒ)異性体を白色固体として得た(２０.０ｇ)。それは、実施例１の段階ａ)のより少ない生成物と同一であった。
【００９９】
ｇ)１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[(２Ｒ)−２−(ベンゾイルチオ)−２−フェニルエチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
−１０℃で、ＴＨＦ(２０ml)中のジイソプロピル アゾジカルボン酸エステル(２１.５ml)を、ＴＨＦ(２３０ml)中のトリフェニルホスフィン(２８.７３ｇ)の溶液に滴下し、白色の懸濁液を３０分間攪拌した。−１０℃で、ＴＨＦ(１００ml)中の段階ｆ)の生成物(１７.５８ｇ)とチオ安息香酸(１２.８ml)を、４５分に渡って加え、次に−１０℃から４℃で１８時間攪拌した。溶媒を真空下で除去し、エーテルを加え、沈殿が生成するまで攪拌した。混合物をろ過し、固体をイソヘキサン／エーテル(１：１)で洗浄した。溶液を水性のＮａＨＣＯ３で洗浄し、水層をエーテルで抽出した。合わせた有機層を乾燥し(ＭｇＳＯ４)、蒸発し、クロマトグラフィー(シリカ, ４０−６０  石油／ジクロロメタン(１：１、次に０：１)を溶出液として)によって精製し、固体を得た。これを−７８℃でイソヘキサンから結晶化し、白色の固体として副題化合物を得た(１４.７６ｇ)。それは、実施例１の段階ｂ)と同一であった。
1H NMR 300MHz (CDCl3) 7.93 (2H, d), 7.61-7.21 (8H, m), 4.79 (1H, dt), 4.18-3.83 (3H, m), 2.64-2.35 (1H, m), 2.23-2.09 (1H, m), 1.62-1.41 (15H, m).
【０１００】
ｈ)２−クロロ−５−(４,５−ジヒドロ−４,４−ジメチル−２−オキサゾリル)−ピリジン
塩化チオニル(３７０ml)中の２−クロロピリジン−４−カルボン酸(１００ｇ)の懸濁液を、８０℃で４時間加熱した。反応混合物を真空下で蒸発し、残さをトルエンで共沸し、次にジクロロメタン(３００ml)に溶かした。溶液を、０℃で、１時間に渡って、ジクロロメタン(３００ml)中の２−アミノ−２−メチルプロパノール(１１８.８ｇ)の溶液に滴下し、次に２０℃で１６時間撹拌した。水(５００ml)を加え、混合物をジクロロメタン(５×５００ml)で抽出した。抽出中に生成した固体の懸濁液は、必要な中間体のアミドであり、さらに抽出する必要はない。有機層を乾燥し(ＭｇＳＯ４)、蒸発し、中間体のアミドを残した(１２５.５ｇ)。これを、０℃で、ジクロロメタン(２００ml)に懸濁し、塩化チオニル(１００ml)を滴下し、１時間撹拌した。濃い沈殿物が形成し、さらにジクロロメタン(３００ml)を加え、反応物をさらに１時間撹拌した。溶媒を真空下で除去し、塩酸塩として生成物を得た(１２０ｇ)。
1H NMR 300MHz (CD3OD) 9.03 (1H, t), 8.42 (1H, dd), 7.80(1H, dd), 4.96 (2H, s), 1.68 (6H, s).
【０１０１】
固体を水(８００ml)に懸濁し、気体の発生が止むまで、固体のＮａＨＣＯ３(約７０ｇ, 少しずつ)で処理した。混合物をジクロロメタン(２×５００ml)で抽出し、乾燥し(ＭｇＳＯ４)、蒸発し、副題化合物を得た(９９.５ｇ)。
1H NMR (CDCl3) 8.90 (1H, dd), 8.17 (1H, dd), 7.37 (1H, dd), 4.14 (2H, s), 1.39 (6H, s).
【０１０２】
ｉ)５−(４,５−ジヒドロ−４,４−ジメチル−２−オキサゾリル)−２−メトキシ−ピリジン
メタノール(５００ml)中の段階ｈ)の生成物(９９.５ｇ)を、ナトリウム メトキシド(０.６１mol, ２５ｗｔ％メタノール溶液)で処理し、１２時間還流した。溶媒を減圧下で除去し、残さを水(２００ml)に溶かし、ジクロロメタン(２×３００ml)で抽出した。抽出物を乾燥し(ＭｇＳＯ４)、蒸発乾固し、副題化合物を橙色の油状物として得た(８５ｇ)。
1H NMR 300MHz (CDCl3) 8.68 (1H, dd), 8.10 (1H, dd), 6.75 (1H, dd), 4.09 (2H, s), 3.98 (3H, s), 1.37 (6H, s).
【０１０３】
ｊ)５−(４,５−ジヒドロ−４,４−ジメチル−２−オキサゾリル)−２−メトキシ−４−(メチルチオ)−ピリジン
窒素下、０℃で、ＴＨＦ中の２,２,６,６−テトラメチルピペリジン(５１.２２ｇ)に、ｎ−ＢｕＬｉ(２２７ml, １.６Ｍヘキサン溶液)を滴下し、１５分間撹拌した。反応混合物を−７８℃まで冷却し、ＴＨＦ(５０ml)中の段階ｉ)の生成物(４３.９７ｇ)を滴下した。冷却浴を除去し、反応温度が−２０℃になるまで温めた。この温度を３０分間保った。次にそれを−７８℃まで冷却し、ジメチルジスルフィド(８０ml)を滴下した。添加中、反応混合物の温度を−３０℃まで上げた。次に冷却浴を除き、反応物を室温で１２時間撹拌した。得られた赤色の溶液を水でクエンチし、約６００mlまでロータリーエバポレーターで濃縮した。水(５００ml)を加え、混合物を酢酸エチル(２×６００ml)で抽出した。合わせた有機物をクエン酸(５００ml, １Ｍ水溶液)で洗浄し、乾燥し(ＭｇＳＯ４)、蒸発し、副題化合物を薄黄色の固体として得た(５８.５ｇ)。
1H NMR 300MHz (CDCl3) 8.50 (1H, s), 6.52 (1H, s), 4.04 (2H, s), 3.97 (3H, s), 2.40 (3H, s), 1.40 (6H, s).
【０１０４】
ｋ)６−メトキシ−４−(メチルチオ)−３−ピリジンカルボニトリル
ピリジン(３５０ml)中の段階ｊ)のオキサゾリン(４５ｇ)の溶液を、撹拌しながら、オキシ塩化リン(６８ml)で処理し、混合物を、撹拌しながら４.５時間還流した。暗褐色の溶液を室温まで冷却し、注意深く氷(１ｋｇ)上に注いだ。得られた懸濁液をろ過し、固体を水(３００ml)と、２Ｍ  ＨＣｌ(１００ml)と、再度水(３００ml)で洗浄した。湿った生成物をジクロロメタン(６００ml)に溶解し、溶液を乾燥した(ＭｇＳＯ４)。活性炭(１５ｇ)を加え、懸濁液をろ過した。ろ液を濃縮し、４０−６０ 石油でトリチュレートし、副題化合物を非常に薄い桃色の固体として得た(２６ｇ)。
1H NMR 300MHz (CDCl3) 8.31 (1H, s), 6.51 (1H, s), 3.98 (3H, s), 2.52 (3H, s).
【０１０５】
ｌ)６−メトキシ−４−(メチルスルホニル)−３−ピリジンカルボニトリル
ジクロロメタン(１５０ml)中の段階ｋ)の生成物(１３ｇ)の溶液を、０℃まで冷却し、１０分に渡って、ＭＣＰＢＡ(２１.７４ｇ, 純度〜５７％)を少しずつ添加して処理した。混合物をゆっくりと２０℃まで温めた。８時間後、ＬＣ／ＭＳはスルホキシド／スルホン生成物(７２：２８)の混合物であることを示した。さらにＭＣＰＢＡ(７.２ｇ)を添加し、さらに４時間後、ＬＣ／ＭＳは生成物が５０：５０混合物であることを示した。さらにＭＣＰＢＡ(１２ｇ)を加え、さらに２時間撹拌し続けた後、反応が完了した。反応物を０℃まで冷却し、過剰のメタ重亜硫酸水素ナトリウム水溶液で処理した。有機層を飽和ＮａＨＣＯ３(３×２００ml)で洗浄し、乾燥し(ＭｇＳＯ４)、蒸発し、副題化合物を白色の固体として得た(１１.２ｇ)。
1H NMR  300MHz  (CDCl3) 8.69 (1H, s), 7.47 (1H,s), 4.09 (3H, s), 3.28 (3H, s).
【０１０６】
ｍ)１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[(２Ｒ)−２−[(５−シアノ−２−メトキシ−４−ピリジニル)チオ]−２−フェニルエチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
メタノール(７５ml)中の段階ｇ)の生成物(１０.０ｇ)の溶液を、２０℃で、メタノール中 ７Ｍ アンモニア(５０ml)で毎時８時間処理した。メタノールを蒸発し、残さを乾燥ＤＭＦ(１００ml)に溶解した。段階ｌ)の生成物(４.８ｇ)を加え、溶解させ、次に炭酸セシウム(７.３８ｇ)を加え、混合物を２０℃で１８時間撹拌した。酢酸エチル(２００ml)と水(２００ml)を加え、水層を分離し、酢酸エチル(２×１００ml)で洗浄した。合わせた酢酸エチル層を水(３×２００ml)と塩水で洗浄し、乾燥し(ＭｇＳＯ４)、ろ過し、真空下で濃縮し、粗黄色ゴム状物質を得た。クロマトグラフィー(シリカ, イソヘキサン中３０％ 酢酸エチルを溶出液として)によって精製し、副題化合物を半透明な泡沫として得た(７.４ｇ)。
MS APCI +ve m/z 470 ([M(+H)]+).
1H 300MHz (CDCl3) 8.51 (1H, s), 7.56 (2H, d), 7.37 (2H, t), 7.27 (1H, t), 6.87-6.83 (1H, m), 4.98-4.84 (1H, m), 4.14-3.60 (3H, m), 3.85  (3H, s), 2.30-1.85 (2H, m), 1.49-1.38 (15H, s).
【０１０７】
ｎ)４−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−メトキシ−３−ピリジンカルボニトリル (Ｅ)−ブテンジオエート
０℃で、メタノール(１００ml)中の段階ｍ)の生成物(７.１ｇ)の溶液に、ジオキサン(１００ml)中の４Ｍ  ＨＣｌを加えた。混合物を２０℃で２時間撹拌し、溶媒を真空下で除去した。残さを炭酸水素ナトリウム水溶液(２００ml)とジクロロメタン(２００ml)の層間に分配した。水相をジクロロメタン(２×１００ml)で抽出し、合わせた抽出物を乾燥し(ＭｇＳＯ４)、ろ過し、真空下で濃縮し、表題化合物の遊離塩基を薄黄色の油状物として得た(４.８ｇ)。
MS (APCI+ve) m/z 330 [M(+H)]+.
1H  300MHz (CDCl3)  8.27 (1H, s), 7.43 (2H, d), 7.34 (2H, t), 7.27 (1H, t), 6.65 (1H, s), 4.75 (1H, dd), 3.90 (3H, s), 3.51-3.27 (2H, m), 2.71-2.63 (1H, m), 2.12-1.88 (2H, m).
【０１０８】
２０℃で、メタノール(５０ml)中のこの化合物の溶液を、メタノール(５０ml)中のフマル酸(１.６ｇ)の溶液に加えた。溶媒を真空下で除去し、残さをアセトニトリルでトリチュレートした。沈澱物を集め、アセトニトリルで洗浄し、乾燥し、表題化合物を白色の固体として得た(５.１ｇ)。
ｍ.ｐ.  １７２−１７３℃.
MS (APCI+ve) m/z 330 [M(+H)]+.
1H  500MHz (DMSO-d6) 8.53 (1H, s), 7.55 (2H, d), 7.39 (2H, t), 7.30 (1H, t), 7.00 (1H, s), 6.45 (2H, s), 5.15 (1H, dd), 3.89 (3H, s), 3.38 (2H, ddd), 2.73-2.65 (1H, m), 2.25-2.01 (2H, m).
【０１０９】
実施例１１
４−[[(１Ｒ,３Ｒ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−メトキシ−３−ピリジンカルボニトリル (Ｅ)−ブテンジオエート
ａ)１,１−ジメチルエチル (４Ｒ)−４−(２−オキソ−２−フェニルエチル)−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
副題化合物を、４−(フェニルメチル) Ｎ−[(１,１−ジメチルエトキシ)カルボニル]−Ｄ−アスパラギン酸エステル、すなわち実施例１０の段階ａ)における出発物質のエナンチオマーから、実施例１０の段階ａ)からｅ)の方法によって製造した。
MS APCI +ve m/z 320 [M+H]+.
1H NMR 300MHz  (d6-DMSO) 7.98 (2H, d), 7.61-6.83 (3H, m), 4.69 (1H, bs), 4.10 (1H, t), 3.83-3.68 (2H ,bm), 3.15 (1H, m), 1.66-1.42 (15H, m).
【０１１０】
ｂ)１,１−ジメチルエチル (４Ｒ)−４−[(２Ｒ)−２−(ベンゾイルチオ)−２−フェニルエチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
副題化合物を、実施例１０の段階ｆ)とｇ)の方法によって、段階ａ)の生成物から製造した。キラル還元(段階ｆ)を、(Ｒ)−メチル−ＣＢＳ−オキサザボロリジンを用いて行った。
MS APCI +ve m/z 342 [M+H]+.
1H NMR 400MHz  (d6-DMSO) 7.86 (2H, d), 7.85-7.24 (8H, m), 4.77 (1H, m), 4.01-3.87 (2H, m), 3.62 (1H,bs), 2.16 (2H, m), 1.47-1.36 (15H, m).
【０１１１】
ｃ)４−[[(１Ｒ,３Ｒ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−メトキシ−３−ピリジンカルボニトリル (Ｅ)−ブテンジオエート.
表題生成物を、実施例１０の段階ｍ)からｎ)の方法によって製造した。
ｍ.ｐ.  ２２１−２２３℃.
MS APCI +ve m/z 330 [M+H]+.
1H NMR 400MHz  (d6-DMSO) (90℃)  8.54 (1H, s), 7.54 (2H, d), 7.39 (2H, t), 7.30 (1H, t), 6.87 (1H, m), 6.45 (2H, m), 5.09 (1H, m), 3.88 (3H, s), 3.61-3.55 (2H, m), 2.88 (1H, m), 2.33-2.09 (2H, m).
【０１１２】
実施例１２
４−[[(１Ｓ,３Ｒ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−メトキシ−３−ピリジンカルボニトリル (Ｅ)−ブテンジオエート
ａ)１,１−ジメチルエチル (４Ｒ)−４−[(２Ｓ)−２−(ベンゾイルチオ)−２−フェニルエチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
副題化合物を、実施例１１の段階ａ)の生成物のキラル還元において(Ｓ)−メチル−ＣＢＳ−オキサザボロリジン触媒を用いて、次に実施例１０の段階ｆ)からｇ)の方法によって製造した。
MS APCI +ve m/z 342 [M+H]+.
1H NMR 400MHz  (d6-DMSO) 7.85 (2H, d), 7.63 (1H, t), 7.50 (2H, t), 7.42 (2H, d), 7.34 (2H, t), 7.27 (1H, t), 4.80 (1H, m), 3.95 (1H, m), 3.85-3.13 (2H,m), 2.14 (2H, m), 1.45-1.36 (15H, m).
【０１１３】
ｂ)４−[[(１Ｓ,３Ｒ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−メトキシ−３−ピリジンカルボニトリル (Ｅ)−ブテンジオエート
表題化合物を、段階ａ)の生成物から、実施例１０の段階ｍ)からｎ)の方法によって製造した。
ｍ.ｐ.  １６２.５−１６３℃.
MS APCI +ve m/z 330 [M+H]+.
1H NMR 400MHz  (d6-DMSO)  8.53 (1H, s), 7.55 (2H, d), 7.38 (2H, t), 7.30 (1H, t), 7.00 (1H, s), 6.44 (1H, s), 5.12 (1H, m), 3.89 (3H, s), 3.36-3.26 (2H, m), 2.62 (1H, m), 2.22-2.08 (1H, m), 2.01-1.95 (1H, m).
【０１１４】
実施例１３
４−[[(１Ｓ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−メトキシ−３−ピリジンカルボニトリル (Ｅ)−ブテンジオエート
ａ)４−[(２Ｓ)−２−(ベンゾイルチオ)−２−フェニルエチル]−２,２−ジメチル−１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
副題化合物を、実施例１の段階ａ)のより少ない異性体から、実施例１０の段階ｇ)に従って製造した。
MS APCI +ve m/z 342 [M+H]+.
1H NMR 300MHz  (d6-DMSO) 7.91 (2H, d), 7.57-7.23 (8H, m), 4.76 (1H, m), 4.17-3.61 (3H, m), 2.50-2.18 (2H,m), 1.66-1.41 (15H, m).
【０１１５】
ｂ)４−[[(１Ｓ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−メトキシ−３−ピリジンカルボニトリル (Ｅ)−ブテンジオエート
表題化合物を、実施例１０の段階ｍ)からｎ)の方法によって、段階ａ)の生成物から製造した。
ｍ.ｐ.  ２１３−２２８℃.
MS APCI +ve m/z 330 [M+H]+.
1H NMR  400MHz  (d6-DMSO)  8.53 (1H, s), 7.53 (2H, d), 7.39 (2H, t), 7.30 (1H, t), 7.96 (1H, s), 6.43 (2H, s), 5.08 (1H, t), 3.88 (3H, s), 3.58 (2H, m), 2.86 (1H, bs), 2.25-2.28 (1H, m), 2.08 (1H, m).
【０１１６】
実施例１４
４−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−(ジフルオロメトキシ)−３−ピリジンカルボニトリル (Ｅ)−ブテンジオエート
ａ)５−(４,５−ジヒドロ−４,４−ジメチル−２−オキサゾリル)−３−(メチルチオ)−２−ピリジノール
窒素下、０℃で、ＴＨＦ中の２,２,６,６−テトラメチルピペリジン(５.７ｇ)に、ｎ−ＢｕＬｉ(１６.４ml, ２.５Ｍヘキサン溶液)を滴下し、１５分間撹拌した。反応混合物を−７８℃まで冷却し、ＴＨＦ(７５ml)中の５−(４,５−ジヒドロ−４,４−ジメチル−２−オキサゾリル)−２−ピリジノール(２.６ｇ)を滴下した。冷却浴を除き、反応温度が−２０℃になるまで温め、この温度を２時間保った。次にそれを−７８℃まで冷却し、ジメチルジスルフィド(４.９ml)を滴下した。この添加の間−３０℃まで発熱した。次に冷却浴を除き、反応物を２０℃で１２時間攪拌した。水(５０ml)を加え、得られた混合物をジクロロメタン(２×６０ml)で抽出した。合わせた有機物をクエン酸(５０ml, １Ｍ水溶液)で洗浄し、乾燥し(Ｎａ２ＳＯ４)、蒸発し、副題化合物を薄黄色の固体として得た(３.７５ｇ)。それは、ＮＭＲによると、出発試薬との５０：５０混合物であった。
MS APCI +ve m/z 239 [M+H]+.
1H NMR  300MHz  (d6-DMSO): (生成物); 7.92 (1H, s), 6.28 (1H, s), 4.06 (3H, s), 2.50 (2H, s), 1.35 (6H, s).
【０１１７】
ｂ)２−(ジフルオロメトキシ)−５−(４,５−ジヒドロ−４,４−ジメチル−２−オキサゾリル)−４−(メチルチオ)−ピリジン
ＮＭＰ(５ml)中の段階ａ)の生成物(２.６ｇ)を、水素化ナトリウム(１.７ｇ, 鉱油中６０％分散液)で処理し、５０℃で３時間加熱した。次にクロロジフルオロメタンを反応混合物に１時間バブルした。水(５０ml)を加え、得られた混合物を酢酸エチル(３×６０ml)で抽出した。合わせた有機物を、水性のＮａＨＣＯ３で、次に塩水で洗浄し、乾燥し(ＭｇＳＯ４)、蒸発し、油状物を得た。残さをクロマトグラフィー(シリカ, イソヘキサン／酢酸エチルを溶出液として)によって精製し、油状物として副題化合物を得た(０.６ｇ)。
MS APCI +ve m/z 289 [M+H]+.
1H NMR  400MHz  (d6-DMSO) 8.50 (1H, s), 7.50 (1H, t), 6.68 (1H, s), 4.06 (2H, s), 2.43 (3H, s), 1.56 (6H, s).
【０１１８】
ｃ)６−(ジフルオロメトキシ)−４−(メチルチオ)−３−ピリジンカルボニトリル
副題化合物を、実施例１０の段階ｋ)の方法によって、段階ｂ)の生成物を用いて、製造した。
1H NMR 300MHz (d6-DMSO) 8.30 (1H, s), 7.49 (1H, t), 6.68 (1H, s), 2.57 (3H, s).
【０１１９】
ｄ)６−(ジフルオロメトキシ)−４−(メチルスルホニル)−３−ピリジンカルボニトリル
アセトン(１５ml)中の段階ｃ)の生成物(０.３６ｇ)を、ＮａＨＣＯ３(１.１ｇ)で処理し、次に、水(１５ml)中のオキソン(３ｇ)の溶液を滴下し、室温で５時間攪拌した。水を加え、得られた混合物を酢酸エチル(３×５０ml)で抽出した。合わせた有機物を、水、塩水で洗浄し、乾燥し(ＭｇＳＯ４)、次に蒸発し、副題化合物を薄黄色の固体として得た(０.２５ｇ)。
1H NMR 300MHz (d6-DMSO) 8.75 (1H, s), 7.67 (1H, s), 7.51 (1H, t), 3.38 (3H, s).
【０１２０】
ｅ)４−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−(ジフルオロメトキシ)−３−ピリジンカルボニトリル (Ｅ)−ブテンジオエート
表題化合物を、実施例１０の段階ｍ)からｎ)の方法によって、段階ｄ)の生成物を用いて製造した。
ｍ.ｐ.  １４４−１４６℃.
MS APCI +ve m/z 366 [M+H]+.
1H NMR  400MHz  (d6-DMSO) 8.61 (1H, s), 7.65 (1H, t), 7.65-7.37 (7H, m), 6.54 (2H, s), 5.34 (1H, m), 3.47 (2H, m), 2.88 (1H, bs), 2.27 (2H, m).
【０１２１】
実施例１５
２−[[(１Ｒ,３Ｒ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−メチル−３−ピリジンカルボニトリル塩酸塩
ａ)１,１−ジメチルエチル (４Ｒ)−４−[(２Ｒ)−２−[(３−シアノ−６−メチル−２−ピリジニル)チオ]−２−フェニルエチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
実施例１１の段階ｂ)の生成物(１９０mg)と２−クロロ−６−メチル−３−ピリジンカルボニトリル(２２０mg)を、メタノール中７Ｍ アンモニア(５ml)に溶解し、環境温度で１８時間攪拌した。反応混合物を蒸発乾固し、残さをクロマトグラフィー(シリカ, ジクロロメタンを溶出液として)によって精製し、副題化合物をゴム状物質として得た(１１０mg)。
MS APCI +ve m/z 454 [M+H]+.
【０１２２】
ｂ)２−[[(１Ｒ,３Ｒ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−メチル−３−ピリジンカルボニトリル塩酸塩
ジオキサン中４Ｍ ＨＣｌ(２ml)中の段階ａ)の生成物(１１０mg)の溶液を２０℃で２時間攪拌した。真空下で溶媒を除去し、残さをアセトニトリルでトリチュレートし、表題化合物を白色の固体として得た(４２mg)。
MS APCI +ve m/z 314 [M+H]+.
1H NMR 300MHz  (d6-DMSO) 8.1 (1H, d), 7.54-7.28 (5H, m), 5.36 (1H, t), 5.22-5.17 (1H, m) 3.81-3.75 (1H, m), 3.62-3.54 (1H, m) 3.32 (3H, s), 2.8-2.7 (1H, m), 2.53-2.46 (1H, m).
【０１２３】
実施例１６
４−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−(２Ｈ３)メトキシ−３−ピリジンカルボニトリル (Ｅ)−２−ブテンジオエート
ａ)５−(４,５−ジヒドロ−４,４−ジメチル−２−オキサゾリル)−２−(２Ｈ３)メトキシ−ピリジン
水素化ナトリウム(８００mg)を、ＤＭＦ(５０ml)中の実施例１０の段階ｈ)の生成物(２.１ｇ)と、メチル−ｄ３−アルコール−ｄ(７２０mg)の溶液に加えた。反応混合物を６５℃で２時間加熱した。次に室温まで冷却した。混合物を水(１０００ml)に注ぎ、酢酸エチル(２回)で抽出した。合わせた有機物を乾燥し(ＭｇＳＯ４)、ろ過し、真空下で濃縮し、副題化合物を無色の油状物として得た(２.３ｇ)。
1H NMR 400MHz (CDCl3) 8.68 (1H, s), 8.10 (1H, d), 6.72 (1H, d), 4.09 (2H, s), 1.37 (6H, s).
【０１２４】
ｂ)５−(４,５−ジヒドロ−４,４−ジメチル−２−オキサゾリル)−２−(２Ｈ３)メトキシ−４−(メチルチオ)−ピリジン
副題化合物を、実施例１０の段階ｊ)の方法によって、段階ａ)の生成物を用いて製造した。
MS APCI +ve m/z 256 ([M(+H)]+).
【０１２５】
ｃ)６−(２Ｈ３)メトキシ−４−(メチルチオ)−３−ピリジンカルボニトリル
副題化合物を、実施例１０の段階ｋ)の方法によって、段階ｂ)の生成物を用いて製造した。
MS APCI +ve m/z 184 ([M(+H)]+).
【０１２６】
ｄ)６−(２Ｈ３)メトキシ−４−(メチルスルホニル)−３−ピリジンカルボニトリル
水(４０ml)中のオキソン(１１.１ｇ)の溶液を、アセトン(４０ml)中の段階ｃ)の生成物(１.１ｇ)と炭酸水素ナトリウム(４.１６ｇ)の懸濁液に加えた。次に、反応混合物を、室温で２４時間攪拌した。次に、完全な溶液となるまで、水と酢酸エチルを加えた。有機相を分離し、乾燥し(ＭｇＳＯ４)、ろ過し、濃縮し、副題化合物を無色の固体として得た(１.３ｇ)。
MS APCI +ve m/z 216 ([M(+H)]+).
【０１２７】
ｅ)１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[(２Ｒ)−２−[(２−(２Ｈ３)メトキシ−５−メチル−４−ピリジニル)チオ]−２−フェニルエチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
副題化合物を、実施例１０の段階ｍ)の方法によって、段階ｄ)の生成物を用いて製造した。
MS APCI +ve m/z 373 ([M(+H)-Boc]+).
【０１２８】
ｆ)４−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−(２Ｈ３)メトキシ−３−ピリジンカルボニトリル (Ｅ)−２−ブテンジオエート
表題化合物を、実施例１０の段階ｎ)の方法によって、段階ｅ)の生成物を用いて製造した。
ｍ.ｐ.  １８１−１８２℃.
1H NMR 400MHz (d6-DMSO) 8.53 (1H, s), 7.54 (2H, d), 7.38 (1H, t), 7.30 (1H, t), 7.00 (1H, s), 6.45 (1H, s), 5.12 (1H, m), 3.33 (3H, m), 2.64 (1H, m), 1.99 (1H, m), 1.85 (1H, m).
【０１２９】
実施例１７
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−エチル−３−ピリジンカルボニトリル エタンジオエート
ａ)２−クロロ−６−エチル−３−ピリジンカルボニトリル
窒素雰囲気下、乾燥ＤＭＦ(１０ml)中の２−クロロ−６−メチル−３−ピリジンカルボニトリル(１.５２ｇ)の溶液に、攪拌しながら、ヨードメタン(２.５ml)を加えた。次に、水素化ナトリウム(６０％分散液, ４００mg)を、攪拌しながら、溶液に加えた。始めの発熱反応がひいた後、混合物を０.５時間攪拌し、次に水(５０ml)で希釈し、生成物をジエチルエーテル(１００ml)で抽出した。乾燥(ＭｇＳＯ４)した抽出物を、乾固するまで濃縮し、残さをクロマトグラフィー(シリカ, イソヘキサン／ジエチルエーテル  ４：１)によって精製し、副題化合物を得た(７００mg)。
1H  400MHz (CDCl3)  7.8 (1H, d), 7.16 (1H, d), 2.81 (2H, q), 1.26 (3H, t).
【０１３０】
ｂ)１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[(２Ｒ)−２−[(３−シアノ−６−エチル−２−ピリジニル)チオ]−２−フェニルエチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
メタノール(１５ml)中７Ｍ アンモニア中で、段階ａ)の生成物(２００mg)と、実施例１の段階ｂ)の生成物(４４２mg)の生成物の溶液を、環境温度で２時間攪拌した。次に、混合物を乾固するまで濃縮し、残さをクロマトグラフィー(シリカ, イソヘキサン／ジエチルエーテル  ７：３)によって精製し、副題化合物を得た(２６０mg)。
MS APCI +ve  m/z 468 ([M+H]+).
【０１３１】
ｃ)２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−エチル−３−ピリジンカルボニトリル エタンジオエート
表題化合物を、段階ｂ)の生成物から、実施例８の段階ｃ)に記載された手順に従って、無色の固体として８０mg単離した。
1H 400MHz (DMSO-d6) 8.09 (1H, d), 7.5 (2H, d), 7.37-7.19 (4H, m), 5.35 (1H, t), 3.58-3.44 (2H, m), 3.09-3.04 (2H, m), 2.85 (2H, q), 2.35-2.25 (2H, m), 1.26 (3H, t).
MS APCI +ve  m/z 328 ([M+H]+).
【０１３２】
実施例１８
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−(１−メチルエチル)−３−ピリジンカルボニトリル エタンジオエート
ａ)２−[[(１Ｒ)−２−[(４Ｓ)−２,２−ジメチル−４−オキサゾリジニル]−１−フェニルエチル]チオ]−６−(１−メチルエチル)−３−ピリジンカルボニトリル
副題化合物を、２−クロロ−６−(１−メチルエチル)−３−ピリジンカルボニトリルから、実施例１７の段階ｂ)に記載された手順に従って合成した。
MS APCI +ve  m/z 382 ([M+H]+).
【０１３３】
ｂ)２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−(１−メチルエチル)−３−ピリジンカルボニトリル エタンジオエート
表題化合物を、段階ａ)の生成物から、実施例８の段階ｃ)に記載された手順に従って合成した。
MS APCI +ve  m/z 342 ([M+H]+).
1H  300MHz (DMSO-d6) 8.1 (1H, d), 7.5-7.19  (6H, m), 5.37 (1H, t), 3.6-3.4 (2H, m), 3.16-3.0 (2H, m), 2.28 (2H, t), 1.27 (3H, d), 1.23 (3H, d).
【０１３４】
実施例１９
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−メチル−３−ピリジンメタノール エタンジオエート
ａ)６−メチル−２−(メチルスルホニル)ピリジン−３−カルボン酸メチル
乾燥ＤＭＳＯ(１０ml)中の２−クロロ−６−メチルピリジン−３−カルボン酸メチル(１ｇ)とメタンスルフィン酸ナトリウム(１.６ｇ)の混合物を、１２０℃で４時間加熱した。冷却した反応混合物を水(１００ml)で希釈し、生成物を酢酸エチル(２×１００ml)で抽出した。乾燥(ＭｇＳＯ４)した抽出物を、乾固するまで濃縮し、残さをクロマトグラフィー(シリカ, ジエチルエーテル)によって精製した。副題化合物を薄桃色の油状物として単離した(６００mg)。
MS APCI +ve  m/z 230 ([M+H]+).
【０１３５】
ｂ)２−[[(１Ｒ)−２−[(４Ｓ)−３−[(１,１−ジメチルエトキシ)カルボニル]−２,２−ジメチル−４−オキサゾリジニル]−１−フェニルエチル]チオ]−６−メチル−ピリジン−３−カルボン酸メチル
副題化合物を、段階ａ)の生成物から、実施例１０の段階ｍ)に記載された手順に従って製造した。
MS APCI +ve  m/z 487 ([M+H]+).
【０１３６】
ｃ)１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[(２Ｒ)−２−[[３−(ヒドロキシメチル)−６−メチル−２−ピリジニル]チオ]−２−フェニルエチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
窒素雰囲気下、環境温度で、乾燥ＴＨＦ中の段階ｂ)の生成物(５００mg)の溶液を、水素化ホウ素リチウム(２Ｍ  ＴＨＦ溶液, ５×５ml アリコート, ３日に渡って)で処理した。５日後、混合物を水(１００ml)で希釈し、過剰の試薬をクエン酸の添加によって壊した。次に、混合物を酢酸エチル(２×７５ml)で抽出し、合わせた抽出物を乾燥し(ＭｇＳＯ４)、濃縮した。粗生成物を、クロマトグラフィー(シリカ, ジエチルエーテル／イソヘキサン  ７：３)によって精製し、表題化合物を無色のゴム状物質として得た(４００mg)。
MS APCI +ve  m/z 459 ([M+H]+).
【０１３７】
ｄ)２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−メチル−３−ピリジンメタノール エタンジオエート
表題化合物を、段階ｃ)の生成物から、実施例８の段階ｃ)に記載された手順に従って製造した。
1H  300MHz (DMSO-d6/D2O) 7.6-7.2 (6H, m), 6.97 (1H, d), 5.28 (1H, t), 4.36 (2H, s), 3.63-3.38 (2H, m), 3.15 (1H, t), 2.5 (3H, s), 2.31 (2H, t).
MS APCI +ve  m/z 319 ([M+H]+).
【０１３８】
実施例２０
６−アセチル−２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−３−ピリジン カルボニトリル塩酸塩
ａ)６−アセチル−２−(メチルスルホニル)−３−ピリジン カルボニトリル
６−アセチル−２−(メチルチオ)−３−ピリジン カルボニトリル(１７０mg)を、アセトン(４０ml)と水(８ml)に溶解した。オキソン(１.６６ｇ)を加え、懸濁液を室温で６８時間攪拌した。０.５Ｍ チオ硫酸ナトリウム水溶液(５０ml)を加え、溶液を０.５時間攪拌した。次に、反応物を酢酸エチル(３×５０ml)で抽出し、合わせた有機抽出物を水(３×２０ml)で洗浄し、乾燥し(ＭｇＳＯ４)、真空下で蒸発した。残さをクロマトグラフィー(シリカ, ヘキサン／酢酸エチルを溶出液として)によって精製し、副題化合物を白色の固体として得た(１０９mg)。
1H NMR 300MHz (CDCl3) 8.40 (2H, dd), 3.47 (3H, s), 2.78 (3H, s).
【０１３９】
ｂ)(４Ｓ)−１,１−ジメチルエチル ４−[(２Ｒ)−２−[(６−アセチル−３−シアノ−２−ピリジニル)チオ]−２−フェニルエチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
副題化合物を実施例１０の段階ｍ)の方法によって、段階ａ)の生成物(１００mg)と実施例１０の段階ｇ)の生成物(１９９mg)を用いて製造した。生成物をクロマトグラフィー(シリカ, ヘキサン／酢酸エチルを溶出液として)によって精製し、表題化合物を無色の油状物として得た(１２５mg)。
1H NMR 400MHz (CDCl3) 7.89 (1H, s), 7.71 (1H, d), 7.46 (2H, t), 7.32 (2H ,t), 7.23 (1H ,d), 5.16 (1H, m), 4.16 (1H, m), 3.86 (1H, m), 3.51 (1H, m), 2.75-2.62 (3H, d), 2.60-2.33 (1H, m), 2.23-2.10 (1H, m), 1.59-1.40 (15H, m).
【０１４０】
ｃ)６−アセチル−２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−３−ピリジン カルボニトリル塩酸塩
段階ｂ)の生成物(１２５mg)を、メタノール(２０ml)に溶解し、溶液をジオキサン中 ４Ｍ  ＨＣｌ(１０ml)で処理した。反応物を室温で３時間攪拌した。真空下で溶媒を除去し、残さをヘキサン中２０％ 酢酸エチルでトリチュレートした。固体をろ過し、乾燥し、表題化合物を薄黄色の固体として得た(７５mg)。
ｍ.ｐ.  ７８℃.
MS APCI +ve m/z 342 ([M+H]+).
1H NMR 300MHz (DMSO-D6) 8.41 (1H, dd), 8.16 (3H, s), 7.76 (1H, dd), 7.58 (2H, d), 7.39 (2H, t), 7.30 (1H, m), 5.46 (1H, t), 5.35 (1H, t), 3.59-3.40 (2H, m), 3.07 (1H, s), 2.76 (3H, d), 2.34 (2H, t).
【０１４１】
実施例２１
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−(ヒドロキシメチル)−３−ピリジン カルボニトリル (Ｅ)−ブテンジオエート
ａ)６−(ヒドロキシメチル)−２−(メチルチオ)−３−ピリジン カルボニトリル
６−ホルミル−２−(メチルチオ)ニコチノニトリル(５００mg)をエタノール(５０ml)に溶解し、溶液を水素化ホウ素ナトリウム(１１７mg)で処理した。反応物を室温で１時間攪拌し、次に水(５０ml)でクエンチした。反応物を真空下で約５０mlになるまで濃縮し、次に酢酸エチル(３×６０ml)で抽出した。合わせた有機抽出物を水(２×４０ml)で洗浄し、乾燥し(ＭｇＳＯ４)、真空下で蒸発し、副題化合物を白色の固体として得た(４７８mg)。
1H NMR 300MHz (CDCl3) 7.79 (1H, d), 7.07 (1H, d), 4.80 (2H, d), 3.18 (1H, t), 2.65 (3H, s).
【０１４２】
ｂ)６−[[[(１,１−ジメチルエチル)ジメチルシリル]オキシ]メチル]−２−(メチルチオ)−３−ピリジン カルボニトリル
段階ａ)の生成物(４７３mg)を、ジクロロメタン(８０ml)に溶解し、イミダゾール(１９６mg)で処理した。溶液を０℃まで冷却し、ｔ−ＢＤＭＳＣｌ(４３４mg)を加えた。反応物を室温で１８時間攪拌し、次に水(５０ml)でクエンチした。酢酸エチル(３×６０ml)で抽出し、合わせた有機抽出物を(２×４０ml)で洗浄し、乾燥し(ＭｇＳＯ４)、真空下で蒸発し、副題化合物を白色の固体として得た(７３１mg)。
1H NMR 300 MHz (CDCl3) 7.79 (1H, d), 7.27 (1H, d), 4.80 (2H, s), 2.59 (3H, s), 0.98 (9H, s), 0.13 (6H, s).
【０１４３】
ｃ)６−[[[(１,１−ジメチルエチル)ジメチルシリル]オキシ]メチル]−２−(メチルスルホニル)−３−ピリジン カルボニトリル
段階ｂ)の生成物(７２５mg)を、アセトン(８０ml)と水(４０ml)と飽和炭酸水素ナトリウム水溶液(２０ml)に溶解した。懸濁液をオキソン(４.１ｇ)で処理し、反応物を室温で２４時間攪拌した。反応混合物を、真空下、約７０mlになるまで濃縮し、酢酸エチル(３×６０ml)で抽出した。合わせた有機抽出物を水(３×４０ml)で洗浄し、乾燥し(ＭｇＳＯ４)、真空下で蒸発し、副題化合物を白色の固体として得た(７１５mg)。
1H NMR 300MHz (CDCl3) 8.24 (1H, d), 7.91 (1H, d), 4.92 (2H, s), 3.35 (3H, s), 0.97 (9H, s), 0.16 (6H, s).
【０１４４】
ｄ)１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[(２Ｒ)−２−[[３−シアノ−６−[[[(１,１−ジメチルエチル)ジメチルシリル]オキシ]メチル]−２−ピリジニル]チオ]−２−フェニルエチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
副題化合物を実施例１０の段階ｍ)の方法によって、段階ｃ)の生成物(２２２mg)と実施例１０の段階ｇ)の生成物(３００mg)を用いて製造した。生成物をクロマトグラフィー(シリカ, ヘキサン／酢酸エチルを溶出液として)によって精製し、副題化合物を無色の油状物として得た(１８０mg)。
1H NMR 300MHz (CDCl3) 7.75 (1H, d), 7.39 (2H, d), 7.33-7.18 (4H, m), 5.20-5.00 (1H, m), 4.89-4.67 (2H, m), 4.17-4.04 (1H, m), 3.85 (1H, s), 3.72-3.42 (1H, m), 2.66-2.33 (1H, m), 2.17 (1H, dd), 1.57-1.39 (15H, m), 0.96 (9H, d), 0.14 (6H, d).
【０１４５】
ｅ)２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−(ヒドロキシメチル)−３−ピリジン カルボニトリル (Ｅ)−ブテンジオエート
表題化合物を、実施例１０の段階ｎ)の方法によって、段階ｄ)の生成物(１７５mg)を用いて、灰白色の固体として得た(１００mg)。
ｍ.ｐ.  １４７−１４９℃.
1H NMR 300MHz (d6-DMSO) 8.17 (1H, d), 7.50 (2H, d), 7.39-7.23 (4H, m), 6.46 (2H, s), 5.33 (1H, t), 4.69 (2H, dd), 3.51-3.34 (2H, m), 2.83 (1H, t), 2.35-2.14 (2H, m).
MS APCI +ve m/z 330 ([M+H]+).
【０１４６】
実施例２２
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−３−ピリジンカルボニトリル (Ｅ)−ブテンジオエート
ａ)１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[(２Ｒ)−２−[(３−シアノ−２−ピリジニル)チオ]−２−フェニルエチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
実施例１０の段階ｇ)の生成物(３１８mg)を、メタノール中 ７Ｍ アンモニア(４０ml)に溶解し、２−クロロ−３−シアノピリジン(１００mg)を加えた。反応物を室温で２４時間攪拌した。溶媒を真空下で除去し、残さをクロマトグラフィー(シリカ, 酢酸エチル／ヘキサンを溶出液として)によって精製し、副題化合物を無色の油状物として得た(２００mg)。
MS APCI +ve m/z 440 ([M+H]+).
【０１４７】
ｂ)２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−３−ピリジンカルボニトリル (Ｅ)−ブテンジオエート
表題化合物を、実施例１０の段階ｎ)の方法によって、段階ａ)の生成物を用いて、灰白色の固体として得た(１２５mg)。
ｍ.ｐ.  ６７−６９℃.
1H NMR 300MHz d6-(DMSO) 8.74 (1H, d), 8.21 (1H, dd), 7.50 (2H, d), 7.32 (4H, m), 6.46 (2H, s), 5.37 (1H, t), 3.53-3.33 (2H, m), 2.90-2.80 (1H, m), 2.36-2.17 (2H, m).
MS APCI +ve m/z 300 ([M+H]+).
【０１４８】
実施例２３
(β１Ｓ,δ１Ｒ)−β−アミノ−δ−[(２,５−ジクロロ−４−ピリジニル)チオベンゼンブタノール]塩酸塩
ａ)２,５−ジクロロ−４−(メチルチオ)−ピリジン
窒素下、０℃で、ＴＨＦ(２０ml)中のＤＭＦ(３.１３ml)に、ｎＢｕＬｉ(８.９ml, ２.５Ｍヘキサン溶液)を滴下し、１５分間攪拌した。反応混合物を、−７８℃で、ＴＨＦ(２０ml)中の２,５−ジクロロピリジン(３ｇ)の溶液に滴下した。２時間後、ジメチルジスルフィド(２.４ml)を加え、反応物の温度が０℃になるまで温めた。水を加え、混合物を酢酸エチルで抽出した。合わせた有機物を乾燥し(Ｎａ２ＳＯ４)、蒸発し、副題化合物を黄色の固体として得た(３ｇ)。
1H NMR 400MHz (CDCl3) 8.18 (1H, s), 7.02 (1H, s), 2.50 (3H, s).
【０１４９】
ｂ)２,５−ジクロロ−４−(メチルスルホニル)−ピリジン
副題化合物を、実施例５の段階ｂ)の方法によって、実施例２３の段階ａ)の生成物を用いて製造した。
白色固体。
1H NMR 300MHz (CDCl3) 8.39 (1H, s), 7.91 (1H, s), 2.90 (3H, s).
【０１５０】
ｃ)(β１Ｓ, δ１Ｒ)−β−アミノ−δ−[(２,５−ジクロロ−４−ピリジニル)チオベンゼンブタノール] 塩酸塩
表題化合物を、実施例１０の段階ｍおよびｎ)の方法によって、実施例２３の段階ｂ)の生成物と 実施例１０の段階ｇ)の生成物を用いて製造した。最終精製は、逆相ＨＰＬＣによって行い、次にＨＣｌで処理した。
MS (APCI+ve) m/z 343 [M(+H)]+.
1H  400MHz (DMSO-d6) 8.37 (1H, s), 8.08 (3H, bs), 7.58 (3H, m), 7.41 (2H, t), 7.33 (1H, tt), 3.54-3.50 (2H, m), 3.41 (1H, dd), 2.96 (1H, bs), 2.33-2.14 (2H, m).
【０１５１】
実施例２４
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−５−フルオロ−６−メトキシ−３−ピリジンカルボニトリル−(Ｅ)−ブテンジオエート
ａ)２−クロロ−５−フルオロ−６−メトキシ−３−ピリジンカルボニトリル
ＤＭＦ中の２,６−ジクロロ−５−フルオロ−３−ピリジンカルボニトリル(２.３３ｇ)とナトリウム メトキシド(１.９ml, ２５％ｗｔ. メタノール溶液)の溶液を、５０℃で１６時間加熱した。さらにナトリウム メトキシド(０.５７ml)を加え、加熱をさらに４８時間続けた。水を加え、混合物をジエチルエーテルで抽出した。合わせた有機物を水で洗浄し、乾燥し(Ｎａ２ＳＯ４)、蒸発し、副題化合物を白色の固体として得た(２.０８ｇ)。
1H NMR 300MHz (CDCl3) 7.58 (1H, d), 4.11 (3H, s).
【０１５２】
ｂ)２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−５−フルオロ−６−メトキシ−３−ピリジンカルボニトリル−(Ｅ)−ブテンジオエート
表題化合物を、実施例１０の段階ｍおよびｎ)の方法によって、実施例２４の段階ａ)の生成物と実施例１０の段階ｇ)の生成物を用いて製造した。
MS (APCI+ve) m/z 348 [M(+H)]+.
1H 400MHz (DMSO-d6) 8.20 (1H, d), 7.49 (2H, d), 7.36 (2H, t), 7.28 (1H, m), 5.28 (1H, dd), 4.13 (3H, s), 3.31 (2H, m), 2.67 (1H, m), 2.21 (1H, m), 2.08 (1H, m).
【０１５３】
実施例２５
４−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−(ジメチルアミノ)−３−ピリジンカルボニトリル (Ｅ)−２−ブテンジオエート
ａ)５−(４,５−ジヒドロ−４,４−ジメチル−２−オキサゾリル)−Ｎ,Ｎ−ジメチル−２−ピリジンアミン
実施例１０の段階ｈ)の生成物(２.１ｇ)と、２.０Ｍ ジメチルアミン／ＴＨＦ(８０ml)と、トルエン(８０ml)の混合物を、封をしたチューブ中で、１２０℃で１６時間加熱した。次に混合物を蒸発乾固し、残さをクロマトグラフィー(シリカ, 酢酸エチルを溶出液として)によって精製し、副題化合物を薄橙色の固体として得た(１.５５ｇ)。
1H NMR 400MHz (CDCl3) 8.64 (1H, s), 7.97 (1H, d), 6.48 (1H, d), 4.05 (2H, s), 3.14 (6H, s), 1.36 (6H, s).
【０１５４】
ｂ)５−(４,５−ジヒドロ−４,４−ジメチル−２−オキサゾリル)−Ｎ,Ｎ−ジメチル−４−(メチルチオ)−２−ピリジンアミン
副題化合物を、実施例１０の段階ｊ)の方法によって、段階ａ)の生成物を用いて製造し、クロマトグラフィー(シリカ, イソヘキサン／酢酸エチルを溶出液として)によって精製した。
MS APCI +ve m/z 266 ([M(+H)]+).
【０１５５】
ｃ)６−(ジメチルアミノ)−４−(メチルチオ)−３−ピリジンカルボニトリル
副題化合物を、実施例１０の段階ｋ)の方法によって、段階ｂ)の生成物を用いて製造した。
MS APCI +ve m/z 194 ([M(+H)]+).
【０１５６】
ｄ)６−(ジメチルアミノ)−４−(メチルスルホニル)−３−ピリジンカルボニトリル
副題化合物を、実施例１６の段階ｄ)の方法によって、段階ｃ)の生成物を用いて製造した。
MS APCI +ve m/z 226 ([M(+H)]+).
【０１５７】
ｅ)１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[(２Ｒ)−２−[[５−シアノ−２−(ジメチルアミノ)−４−ピリジニル]チオ]２−フェニルエチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
副題化合物を、実施例１０の段階ｍ)の方法によって、段階ｄ)の生成物を用いて製造した。
MS APCI +ve m/z 483 ([M(+H)]+).
【０１５８】
ｆ)４−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−(ジメチルアミノ)−３−ピリジンカルボニトリル (Ｅ)−２−ブテンジオエート
表題化合物を、実施例１０の段階ｎ)の方法によって、段階ｅ)の生成物を用いて製造した。
ｍ.ｐ.  １７５−１７７℃.
1H NMR 400MHz (d6-DMSO) 8.29 (1H, s), 7.55 (2H, d), 7.38 (2H, t), 7.29 (1H, t), 6.47 (4H, d), 5.11 (1H, m), 3.38 (2H, m), 3.05 (6H, s), 2.75 (1H, m), 2.17 (1H, m), 2.04 (1H, m).
【０１５９】
実施例２６
４−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−(メチルアミノ)−３−ピリジンカルボニトリル二塩酸塩
ａ)５−(４,５−ジヒドロ−４,４−ジメチル−２−オキサゾリル)−Ｎ−メチル−２−ピリジンアミン
実施例１０の段階ｈ)の生成物(２.１ｇ)と、２.０Ｍ メチルアミン／ＴＨＦ(３０ml)と、トルエン(３０ml)の混合物を、封をしたチューブ中で、１２０℃で１６時間加熱した。次に、混合物を蒸発乾固し、残さをクロマトグラフィー(シリカ, 酢酸エチルを溶出液として)によって精製し、副題化合物をベージュ色の固体として得た(７００mg)。
1H NMR 400MHz (CDCl3) 8.60 (1H, s), 7.97 (1H, d), 6.36 (1H, d), 4.85 (1H, br s), 4.06 (2H, s), 2.96 (3H, d), 1.36 (6H, s).
【０１６０】
ｂ)１,１−ジメチルエチル [５−(４,５−ジヒドロ−４,４−ジメチル−２−オキサゾリル)−２−ピリジニル]メチルカルバメート
ジ−ｔｅｒｔ−ブチル ジカルボン酸エステル(１.４７ｇ)を、ジクロロメタン(１０ml)中の段階ａ)の生成物(７００mg)の溶液に加えた。次に４−(ジメチルアミノ)ピリジン(４２mg)を加え、混合物を室温で１６時間攪拌した。反応混合物を水に注ぎ、有機相を分離し、乾燥し(ＭｇＳＯ４)、ろ過し、蒸発乾固し、副題化合物を無色の油状物として得た(９００mg)。
MS APCI +ve m/z 306 ([M(+H)]+).
【０１６１】
ｃ)１,１−ジメチルエチル [５−(４,５−ジヒドロ−４,４−ジメチル−２−オキサゾリル)−４−(メチルチオ)−２−ピリジニル]メチル−カルバメート
副題化合物を、実施例１０の段階ｊ)の方法によって、段階ｂ)の生成物を用いて製造した。
MS APCI +ve m/z 252 ([M(+H)]+).
【０１６２】
ｄ)１,１−ジメチルエチル [５−シアノ−４−(メチルチオ)−２−ピリジニル]メチルカルバメート
副題化合物を、実施例１０の段階ｋ)の方法によって、段階ｃ)の生成物を用いて製造した。
MS APCI +ve m/z 180 ([M(+H)]+).
【０１６３】
ｅ)１,１−ジメチルエチル [５−シアノ−４−(メチルスルホニル)−２−ピリジニル]メチルカルバメート
副題化合物を、実施例１６の段階ｄ)の方法によって、段階ｄ)の生成物を用いて製造した。
MS APCI +ve m/z 212 ([M(+H)]+).
【０１６４】
ｆ)１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[[[５−シアノ[[(１,１−ジメチルエトキシ)カルボニル]メチルアミノ]−４−ピリジニル]チオ]−２−フェニルエチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
副題化合物を、実施例１０の段階ｍ)の方法によって、段階ｅ)の生成物を用いて製造した。
MS APCI +ve m/z 569 ([M(+H)]+).
【０１６５】
ｇ)４−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−(メチルアミノ)−３−ピリジンカルボニトリル 二塩酸塩
メタノール(２０ml)中の段階ｆ)の生成物(４９０mg)の溶液に、ジオキサン(２０ml)中の４Ｍ  ＨＣｌを加えた。混合物を室温で８時間攪拌し、溶媒を真空下で除去した。残さをジエチルエーテルでトリチュレートし、表題化合物(３４０mg)を、白色の固体として、ろ過によって集めた。
ｍ.ｐ.  ２０６−２０８℃.
MS APCI +ve m/z 329 ([M(+H)]+).
1H NMR 400MHz (d6-DMSO) 8.21 (1H, s), 8.18 (2H, br s), 7.53 (2H, m), 7.36 (2H, m), 7.28 (1H, m), 6.66 (1H, s), 5.04 (1H, t), 3.45 (2H, m), 2.99 (1H, br s), 2.83 (3H, s), 2.31 (2H, t).
【０１６６】
実施例２７
(β１Ｓ,δ１Ｒ)−β−アミノ−δ−[(５−ブロモ−２−メトキシ−４−ピリジニル)チオ]−ベンゼンブタノール (Ｅ)−２−ブテンジオエート
ａ)５−ブロモ−２−メトキシ−４−(メチルチオ)−ピリジン
窒素下、０℃で、ＴＨＦ(４５ml)中のＮ,Ｎ−ジイソプロピルアミン(１１.７ml)に、ｎＢｕＬｉ(３２.５ml, ２.５Ｍ ヘキサン溶液)を滴下し、１５分間攪拌した。反応混合物を−７８℃まで冷却し、ＴＨＦ(１０ml)中の５−ブロモ−２−メトキシピリジン(１４.３ｇ)の溶液を滴下した。２時間後、ジメチルジスルフィド(１３.８ml)を、次にＴＨＦ(２０ml)を加えた。反応物の温度が−４０℃になるまで温めた。反応物を塩化アンモニウム水溶液に注ぎ、混合物をエーテルで抽出した。合わせた有機物を乾燥し(Ｎａ２ＳＯ４)、蒸発した。冷イソヘキサンでトリチュレートし、副題化合物をベージュ色の固体として得た(１１ｇ)。
1H NMR 300MHz (CDCl3) 8.08 (1H, s), 6.45 (1H, s), 3.91 (3H, s), 2.44 (3H, s).
【０１６７】
ｂ)５−ブロモ−２−メトキシ−４−(メチルスルホニル)ピリジン
副題化合物を、実施例１６の段階ｄ)の方法によって、段階ａ)の生成物を用いて製造した。
MS APCI +ve m/z 267/269 ([M(+H)]+).
【０１６８】
ｃ)１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[(２Ｒ)−２−[(５−ブロモ−２−メトキシ−４−ピリジニル)チオ]−２−フェニルエチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
副題化合物を、実施例１０の段階ｍ)の方法によって、段階ｂ)の生成物を用いて製造した。
MS APCI +ve m/z 523/525 ([M(+H)]+).
【０１６９】
ｄ)(β１Ｓ,δ１Ｒ)−β−アミノ−δ−[(５−ブロモ−２−メトキシ−４−ピリジニル)チオ]−ベンゼンブタノール (Ｅ)−２−ブテンジオエート
表題化合物を、実施例１０の段階ｎ)の方法によって、段階ｃ)の生成物を用いて製造した。
ｍ.ｐ.  １７８−１８０℃.
MS APCI +ve m/z 383/385 ([M(+H)]+).
1H NMR 400MHz (d6-DMSO) 8.17 (1H, s), 7.56 (2H, d), 7.38 (2H, t), 7.29 (1H, t), 6.86 (1H, s), 6.47 (2H, s), 4.98 (1H, m), 3.79 (3H, s), 3.30-3.41 (2H, m), 2.72 (1H, m), 2.17 (1H, m), 2.04 (1H, m).
【０１７０】
実施例２８
(β１Ｓ,δ１Ｒ)−β−アミノ−δ−[(５−クロロ−２−メトキシ−４−ピリジニル)チオ]−ベンゼンブタノール (Ｅ)−２−ブテンジオエート
ａ)５−クロロ−２−メトキシ−４−(メチルチオ)−ピリジン
メタノール(２０ml)中の実施例２３の段階ａ)の生成物(１.４ｇ)の生成物を、ナトリウム メトキシド(８.２ml, ２５％ｗｔメタノール溶液)で処理し、４８時間還流した。溶媒を減圧下で除去し、残さを水(５０ml)とジクロロメタン(５０ml)の層間に分配した。有機相を乾燥し(ＭｇＳＯ４)、蒸発乾固した。クロマトグラフィー(シリカ, ジクロロメタンを溶出液として)によって精製し、副題化合物を白色の固体として得た(３４５mg)。
MS APCI +ve m/z 189 ([M(+H)]+).
【０１７１】
ｂ)５−クロロ−２−メトキシ−４−(メチルスルホニル)ピリジン
副題化合物を、実施例５の段階ｂ)の方法によって、段階ａ)の生成物を用いて製造した。
MS APCI +ve m/z 222/224 ([M(+H)]+).
【０１７２】
ｃ)１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[(２Ｒ)−２−[(５−クロロ−２−メトキシ−４−ピリジニル)チオ]−２−フェニルエチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
副題化合物を、実施例１０の段階ｍ)の方法によって、段階ｂ)の生成物を用いて製造した。
MS APCI +ve m/z 479/481 ([M(+H)]+).
【０１７３】
ｄ)(β１Ｓ,δ１Ｒ)−β−アミノ−δ−[(５−クロロ−２−メトキシ−４−ピリジニル)チオ]−ベンゼンブタノール (Ｅ)−２−ブテンジオエート
表題化合物を、実施例１０の段階ｎ)の方法によって、段階ｃ)の生成物を用いて製造した。
ｍ.ｐ.  １９１−１９３℃.
MS APCI +ve m/z 339-341 ([M(+H)]+)
1H NMR 400MHz (d6-DMSO) 8.08 (1H, s), 7.56 (2H, d), 7.38 (2H, t), 7.29 (1H, t), 6.88 (1H, s), 6.48 (2H, s), 4.99 (1H, m), 3.80 (3H, s), 3.30-3.41 (2H, m), 2.73 (1H, m), 2.18 (1H, m), 2.05 (1H, m).
【０１７４】
実施例２９
４−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−エトキシ−３−ピリジンカルボニトリル (Ｅ)−ブテンジオエート
ａ)５−(４,５−ジヒドロ−４,４−ジメチル−２−オキサゾリル)−２−エトキシ−ピリジン
ＤＭＦ(５０ml)中の実施例１０の段階ｈ)の生成物(２.１ｇ)を、エタノール(１.２ml)と水素化ナトリウム(０.８ｇ, 鉱油中６０％分散液)で処理し、６０℃で２０時間加熱した。水(２００ml)を加え、得られた混合物を酢酸エチル(２×１５０ml)で抽出した。合わせた有機物を乾燥し(ＭｇＳＯ４)、蒸発し、副題化合物を黄色の油状物として得た(３.０ｇ)。
MS APCI +ve m/z 221 [M+H]+.
1H NMR  400MHz  (d6-DMSO) 8.66 (1H , s), 8.09 (1H, d), 6.71 (1H, d), 4.40 (2H, q), 4.09 (2H, s), 1.26-1.41 (9H, m).
【０１７５】
ｂ)６−エトキシ−４−(メチルチオ)−３−ピリジンカルボニトリル
副題化合物を、実施例１０の段階ｊ)からｋ)の方法によって、段階ａ)の生成物から製造した。
MS APCI +ve m/z 195 [M+H]+.
1H NMR 400MHz  (d6-DMSO) 8.28 (1H, s), 6.49 (1H, s), 4.42 (2H, q), 2.52 (3H, s), 1.38 (3H, t).
【０１７６】
ｃ)６−エトキシ−４−(メチルスルホニル)−３−ピリジンカルボニトリル
副題化合物を、実施例１４の段階ｄ)の方法によって、段階ｂ)の生成物から製造した。
1H NMR 400MHz  (d6-DMSO) 8.67 (1H, s), 7.44 (1H, s), 4.52 (2H, q), 3.27 (3H, s), 1.42 (3H, t).
【０１７７】
ｄ)４−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−エトキシ−３−ピリジンカルボニトリル (Ｅ)−ブテンジオエート
表題化合物を、実施例１０の段階ｍ)からｎ)の方法によって、段階ｃ)の生成物を用いて製造した。
ｍ.ｐ.  １６９.５−１７１.５℃.
MS APCI +ve m/z 344 [M+H]+.
1H NMR  400MHz  (d6-DMSO) 8.52 (1H, s), 7.55 (2H, d), 7.39 (2H, t), 7.30 (1H, t), 6.98 (1H, s),  6.47 (2H, s), 5.13 (1H, m), 4.34 (2H, q) 3.40 (2H, m), 2.70 (1H, m), 2.21 (1H, m), 2.02 (1H, m), 1.30 (3H, t).
【０１７８】
実施例３０
３−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−５−(トリフルオロメチル)−２−ピリジンカルボニトリル エタンジオエート
ａ)１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[(２Ｒ)−２−[[２−シアノ−５−(トリフルオロメチル)−３−ピリジニル]チオ]−２−フェニルエチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
副題化合物を、実施例１の段階ｃ)の方法によって、実施例１の段階ｂ)の生成物と、３−クロロ−２−シアノ−５−トリフルオロメチルピリジンを用いて製造した。
MS APCI +ve m/z 408 [M+H-Boc]+.
【０１７９】
ｂ)３−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−５−(トリフルオロメチル)−２−ピリジンカルボニトリル エタンジオエート
表題化合物を、実施例１の段階ｄ)の方法によって、段階ａ)の生成物を用いて製造し、表題化合物を白色の固体として得た(１３３mg)。
ｍ.ｐ.  １４７−１４９℃.
MS APCI +ve m/z 368 [M+H]+.
1H NMR 400MHz (d6-DMSO) 8.98 (1H, s), 8.33 (1H, s), 7.34 (5H, m), 5.04 (1H, t), 3.58 (1H, dd), 3.48 (1H, m), 3.05 (1H, m), 2.33 (1H, m), 2.18 (1H, m).
【０１８０】
実施例３１
３−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−１,６−ジヒドロ−５−メチル−６−オキソ−２−ピリジンカルボニトリル
ａ)３−ブロモ−５−メチル−２−ピリジンカルボニトリル
乾燥ＤＭＳＯ(１００ml)中の３−ブロモ−２−フルオロ−５−メチルピリジン(J. Het. Chem. 1967, 641, 642)の溶液を、シアン化ナトリウム(１.４８ｇ)で処理し、８０℃で２４時間加熱した。混合物を塩水に注ぎ、酢酸エチルで抽出し、有機層を乾燥した(ＭｇＳＯ４)。溶媒を蒸発し、残さをクロマトグラフィー(シリカ, ジエチルエーテル)によって精製し、副題生成物を薄黄色の固体として得た(３.０ｇ)。
1H NMR 400MHz (CDCl3) 8.47 (1H, s), 7.84 (1H, s), 2.44 (3H, s).
【０１８１】
ｂ)３−ブロモ−５−メチル−２−ピリジンカルボニトリル−Ｎ−オキシド
氷酢酸(１００ml)中の段階ａ)の生成物(２.０ｇ)の溶液を、３０％ 過酸化水素(２０ml)で処理し、８０℃で２２時間加熱した。混合物を蒸発し、残さをヘキサンでトリチュレートし、得られた固体を集め、副題生成物を薄黄色の固体として得た(２.０ｇ)。
MS APCI +ve m/z 214 [M+H]+.
1H NMR 400MHz (CDCl3) 8.07 (1H, s), 7.35 (1H, s), 2.37 (3H, s).
【０１８２】
ｃ)１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[(２Ｒ)−２−[(２−シアノ−５−メチル−３−ピリジニル)チオ]−２−フェニルエチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル Ｎ−オキシド
副題化合物を、実施例１の段階ｃ)の方法によって、実施例１の段階ｂ)のチオベンゾエートと、段階ｂ)のピリジン−Ｎ−オキシド(０.４３ｇ)を用いて、ゴム状物質を得た(１.２５ｇ)。それを段階ｄ)に直接用いた。
MS APCI +ve m/z 470 [M+H]+.
【０１８３】
ｄ)１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[(２Ｒ)−２−[[６−(アセチルオキシ)−２−シアノ−５−メチル−３−ピリジニル]チオ]−２−フェニルエチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
酢酸無水物(２０ml)中の段階ｄ)の生成物の溶液を、４時間還流した。混合物を蒸発し、残さを酢酸エチルに溶解し、水で、次に水性のＮａＨＣＯ３で洗浄し、乾燥した(ＭｇＳＯ４)。溶媒を蒸発し、残さをクロマトグラフィー(シリカ, ２０％  酢酸エチル／ヘキサン)によって精製し、副題生成物を粘性の油状物として得た(０.４５ｇ)。
MS APCI +ve m/z 456 [M+2H-tBu]+.
【０１８４】
ｅ)３−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−１,６−ジヒドロ−５−メチル−６−オキソ−２−ピリジンカルボニトリル
表題化合物を、実施例１の段階ｄ)の方法によって、段階ｄ)の生成物を用いて製造し、表題化合物を白色の固体として得て(１３１mg)、遊離塩基として単離した。
MS APCI +ve m/z 330 [M+H]+.
1H NMR 400MHz  (d6-DMSO) 7.27 (1H, s), 7.26 (5H, m), 4.53 (1H, m), 3.23 (4H, m), 2.50 (1H, m), 2.12 (1H, m), 1.82 (1H, m), 1.97 (3H, s).
【０１８５】
実施例３２
３−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−５−クロロ−２−ピリジンカルボニトリル エタンジオエート
表題化合物を、実施例１０の段階ｍおよびｎ)の方法によって、３,５−ジクロロ−２−ピリジンカルボニトリルと実施例１０の段階ｇ)の生成物を用いて製造した。ＨＣｌで処理した後、表題化合物を逆相ＨＰＬＣによって精製(望ましくないレギオ異性体を除去するため)し、次にシュウ酸で処理し、白色の固体を得た。
MS (APCI+ve) m/z 334 [M(+H)]+.
1H  400MHz (DMSO-d6) 8.66 (1H, d), 8.22 (1H, d), 8.03 (ca. 2H, vbs), 7.41-7.27 (5H, m), 4.97 (1H, t), 3.55 (1H, dd), 3.44 (1H, dd), 3.02 (1H, m), 2.32 (1H, m), 2.16 (1H, dt).
【０１８６】
実施例３３
６−アミノ−４−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−３−ピリジンカルボニトリル (Ｅ)−ブテンジオエート
ａ)１,６−ジヒドロ−４−(メチルスルホニル)−６−オキソ−３−ピリジンカルボニトリル
実施例１０の段階ｌ)の６−メトキシ−４−(メチルスルホニル)−３−ピリジンカルボニトリル(５.１ｇ)を、アセトニトリル(２００ml)に溶解し、ヨウ化ナトリウム(７.２８ｇ)と 塩化トリメチルシリル(５.２８ｇ)を加えた。反応物を４８時間還流し、次に冷却し、溶媒を真空下で蒸発した。残さを水(１２０ml)と酢酸エチル(１２０ml)の層間に分配した。振盪後、層をろ過し、固体を集め、真空オーブン中 ６０℃で乾燥し、副題化合物を灰白色の固体として得た(３.６ｇ)。
1H NMR  400MHz (d6-DMSO) 13.15 (1H, bs), 8.58 (1H, s), 6.89 (1H, s), 3.39 (3H, s).
【０１８７】
ｂ)５−シアノ−４−(メチルスルホニル)−２−ピリジニル トリフルオロメタンスルホン酸塩
トリフリック酸無水物(０.１ml)を、アセトニトリル(２ml)中の段階ａ)の生成物(５７mg)とトリエチルアミン(０.１ml)の溶液に加え、−２０℃で、−２０℃から２０℃で２時間攪拌した。水を加え、混合物をジクロロメタンで抽出した。有機抽出物を乾燥し(ＭｇＳＯ４)、蒸発し、クロマトグラフィー(シリカ, ジクロロメタンを溶出液として)によって精製し、副題化合物を得た(６６mg)。
1H  300MHz (CDCl3)  8.94 (1H, s), 7.91 (1H, s), 3.37 (3H, s).
【０１８８】
ｃ)６−アミノ−４−(メチルスルホニル)−３−ピリジンカルボニトリル
ジオキサン中０.５Ｍ アンモニア(２ml)を、ＴＨＦ(２ml)中の段階ｂ)の生成物(１６４mg)の溶液に加え、１６時間攪拌した。溶媒を真空下で除去し、残さをクロマトグラフィー(シリカ, イソヘキサン／酢酸エチルを溶出液として)によって精製し、副題化合物を白色の固体として得た(３３mg)。
1H NMR (d6-DMSO) 8.57 (1H, s), 7.78 (2H, s), 7.05 (1H, s), 3.35 (3H, s).
【０１８９】
ｄ)１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[(２Ｒ)−２−[(２−アミノ−５−シアノ−４−ピリジニル)チオ]−２−フェニルエチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
メタノール中７Ｍ アンモニア(５ml)中の実施例１０の段階ｇ)の生成物(１０５mg)の溶液を、８時間攪拌した。メタノールを蒸発し、残さを乾燥アセトニトリル(３ml)に溶解した。段階ｃ)の生成物(４５mg)と炭酸セシウム(１５１mg)を加え、混合物を２０℃で１時間攪拌した。塩化アンモニウム溶液を加え、混合物を酢酸エチルで抽出した。有機抽出物を乾燥し(ＭｇＳＯ４)、蒸発し、クロマトグラフィー(シリカ, イソヘキサン／アセトンを溶出液として)によって精製し、副題化合物を白色の固体として得た(５５mg)。
MS (APCI+ve) m/z 455 [M(+H)]+.
1H  300MHz (CDCl3)  8.16 (1H, s), 7.38-7.30 (5H, m), 6.83 (1H, s), 5.22 (2H, s), 4.45 (1H, d), 3.97 (1H, t), 3.55 (1H, t), 2.93 (1H, d), 2.59 (1H, d), 2.29 (1H, q), 1.61-1.42 (15H, m).
【０１９０】
ｅ)６−アミノ−４−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−３−ピリジンカルボニトリル (Ｅ)−ブテンジオエート
表題化合物を段階ｄ)の生成物から、実施例１０の段階ｎ)の方法によって製造した。
MS (APCI+ve) m/z 315 [M(+H)]+.
1H NMR 400MHz (DMSO) 8.16 (1H, s), 7.51 (2H, d), 7.38 (2H, t), 7.31 (1H, t), 7.14 (2H, s), 6.62 (1H, s), 6.50 (2H, s), 4.95 (1H, s), 3.41-3.33 (2H, m), 2.78-2.70 (1H, m), 2.29-2.19 (1H, m), 2.16-2.07 (1H, m).
【０１９１】
実施例３４
３−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−５−メチル−２−ピリジンカルボニトリル
ａ)１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[(２Ｒ)−２−[(２−シアノ−５−メチル−３−ピリジニル)チオ]−２−フェニルエチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
副題化合物を、実施例１の段階ｃ)の方法によって、実施例１の段階ｂ)のチオベンゾエートと、実施例３１の段階ａ)のブロモピリジン(０.１７ｇ)を用いて製造し、生成物をガラス状物質として得た(０.１９ｇ)。
MS APCI +ve m/z 398 [M+2H-tBu]+.
【０１９２】
ｂ)３−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−５−メチル−２−ピリジンカルボニトリル
表題化合物を実施例１の段階ｄ)の方法によって、段階ａ)の生成物を用いて製造し、表題化合物を白色の固体として得て(１３９mg)、遊離塩基として単離した。
MS APCI +ve m/z 314 [M+H]+.
1H NMR 400MHz  (d6-DMSO) 8.41 (1H, s), 8.18 (2H, bs), 8.04 (1H, s), 7.43 (2H, d), 7.31 (3H, m), 5.32 (1H, bt), 5.13 (1H, m), 3.46 (2H, m), 2.93 (1H, m), 2.35 (3H, s), 2.28 (1H, m), 2.16 (1H, m).
【０１９３】
実施例３５
４−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−１−(２−フルオロフェニル)−４−ヒドロキシブチル]チオ]−６−メトキシ−３−ピリジンカルボニトリル エタンジオエート
ａ)１,１−ジメチルエチル ４−[(２Ｓ)−２−(２−フルオロフェニル)−２−ヒドロキシエチル]−２,２−ジメチル−(４Ｓ)−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル および １,１−ジメチルエチル ４−[(２Ｒ)−２−(２−フルオロフェニル)−２−ヒドロキシエチル]−２,２−ジメチル−(４Ｓ)−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
窒素下、ＴＨＦ(３０ml)中のマグネシウム(２４３mg)の懸濁液を、攪拌しながら、１,２−ジブロモエタン(２.４４ｇ)で処理し、穏やかに加熱した。発熱器をセットし、混合物を還流し始めた。金属を溶解した後、混合物を、窒素下、室温で保存した。窒素下、−６５から−７０℃で、ＴＨＦ(１０ml)中の３−ブロモフルオロベンゼン(１.１７ｇ)の溶液を、攪拌しながら、ｎ−ブチルリチウム(ヘキサン中２.５Ｍ, ２.２６ml, ５.６７mmol)で処理し、−７０℃で３０分間攪拌した。溶液を−６５から−７０℃で、上記の二臭化マグネシウムの溶液で処理し、−７０℃で５分間、次に０℃で２０分間攪拌した。窒素下、０℃で、ＴＨＦ(２０ml)中の１,１−ジメチルエチル ２,２−ジメチル−４−[(４Ｓ)−２−オキソエチル)−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル(１.２１ｇ)の溶液を、攪拌しながら、上記で生成したグリニャール試薬で処理し、０℃で３０分間、次に室温で終夜攪拌した。溶液を飽和塩化アンモニウム水溶液でクエンチし、エーテルで抽出した。洗浄し、乾燥(ＭｇＳＯ４)した抽出物を蒸発し、残さをクロマトグラフィー(シリカ, エーテル／イソヘキサンを溶出液として)によって精製し、副題化合物 １,１−ジメチルエチル ４−[(２Ｓ)−２−(２−フルオロフェニル)−２−ヒドロキシエチル]−２,２−ジメチル−(４Ｓ)−３−オキサゾリジンカルボン酸エステルを白色の固体として得た(６００mg)。
1H NMR 300MHz  (d4-MeOH)  7.38 (1H, s), 7.28 (4H, s), 7.12 (5H, d), 4.80-4.75 (9H, m), 4.00-3.79 (18H, m), 2.12-1.96 (11H, m), 1.54-1.41 (96H, m).
【０１９４】
さらに溶出し、第２の副題化合物 １,１−ジメチルエチル ４−[(２Ｒ)−２−(２−フルオロフェニル)−２−ヒドロキシエチル]−２,２−ジメチル−(４Ｓ)−３−オキサゾリジンカルボン酸エステルを、白色の固体として得た(４２９mg)。
1H NMR 300MHz  (d4-MeOH)   7.40-7.37 (1H, m), 7.28 (1H, s), 7.12 (1H, d), 4.83-4.79 (1H, m), 4.06 (1H, s), 3.90-3.84 (1H, m), 3.75-3.72 (1H, m), 2.20 (1H, s), 1.96-1.86 (1H, m), 1.54-1.47 (15H, m).
【０１９５】
ｂ)４−メルカプト−６−メトキシ−３−ピリジンカルボニトリル
実施例１０の段階ｉの生成物(１.０ｇ)と、エタノール(５０ml)中の硫化水素(７９０mg)の混合物を２時間攪拌し、蒸発した。残さを水に溶かし、ｐＨ ６になるまで希塩酸で処理し、酢酸エチルで抽出した。乾燥(ＭｇＳＯ４)した抽出物を蒸発し、副題化合物を褐色の粉末として得た(７４１mg)。
1H NMR 300MHz  (CDCl3)  8.36 (1H, s), 6.72 (1H, s), 3.97 (3H, s).
【０１９６】
ｃ)４−[[３(３Ｓ)−アミノ−１(１Ｒ)−(２−フルオロフェニル)−４−ヒドロキシブチル]チオ]−６−メトキシ−３−ピリジンカルボニトリル エタンジオエート
窒素下、トリフェニルホスフィン(３０９mg)とＴＨＦ(１０ml)の溶液を、攪拌しながら、−５から０℃で、ＤＩＡＤ(２３８mg)で処理し、−５℃で２０分間攪拌し、次に−２０℃まで冷却し、保存した。段階ｂ)の生成物(１９６mg)と、段階ａ)の生成物(５８９mg)の混合物を攪拌し、上記のＤＩＡＤ／トリフェニルホスフィン溶液で処理し、終夜攪拌し、蒸発した。残さをクロマトグラフィー(シリカ, エーテル／イソヘキサン)によって精製し、メタノール(１０ml)に溶かし、ジオキサン中２Ｍ  ＨＣｌ(１０ml)で処理し、２時間攪拌し、蒸発した。残さを１９×５０mm Xterra C8 5 micron column での逆相ＨＰＬＣによって、６分に渡って２％ ０.８８０ アンモニア水溶液中１０から６０％のアセトニトリル、２０ml／分、ＤＡＤによるＵＶ検出を用いて精製した。遊離塩基をエーテル／エタノール混合液に溶かし、エタノール中のシュウ酸の溶液で処理し、蒸発した。残さをエーテルでトリチュレートし、残さを乾燥し、表題化合物をクリーム色の粉末として得た(３１mg)。
ｍ.ｐ.  １７９−１８５℃.
MS APCI +ve  m/z 348  [M+H]+.
1H NMR 300MHz  (d4-MeOH)  8.58 (1H, s), 7.62 (1H, t), 7.43-7.37 (1H, m), 7.31-7.23 (2H, m), 6.98 (1H, s), 5.22 (1H, t), 3.91 (3H, s), 3.56-3.40 (4H, m), 3.05-3.02 (1H, m), 2.40-2.17 (2H, m).
【０１９７】
実施例３６
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−１−(４−フルオロフェニル)−４−ヒドロキシブチル]オキシ]−６−トリフルオロメチル−３−ピリジンカルボニトリル エタンジオエート
ａ)１,１−ジメチルエチル ４−[(２Ｓ)−２−(４−フルオロフェニル)−２−ヒドロキシエチル]−２,２−ジメチル−(４Ｓ)−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル および １,１−ジメチルエチル ４−[(２Ｒ)−２−(４−フルオロフェニル)−２−ヒドロキシエチル]−２,２−ジメチル−(４Ｓ)−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
窒素下、０℃で、ＴＨＦ(２０ml)中の１,１−ジメチルエチル ２,２−ジメチル−４−[(４Ｓ)−２−オキソエチル)−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル(３.０ｇ)の溶液を、攪拌しながら、臭化 ４−フルオロフェニル マグネシウム(エーテル中２Ｍ, ８.３２ml)で処理し、０℃で１時間攪拌した。溶液を飽和塩化アンモニウム溶液でクエンチし、エーテルで抽出した。洗浄し、乾燥(ＭｇＳＯ４)した抽出物を蒸発し、残さをクロマトグラフィー(シリカ, エーテル／イソヘキサンを溶出液として)によって精製し、副題化合物 １,１−ジメチルエチル ４−[(２Ｓ)−２−(４−フルオロフェニル)−２−ヒドロキシエチル]−２,２−ジメチル−(４Ｓ)−３−オキサゾリジンカルボン酸エステルを白色の固体として得た(１.６２ｇ)。
1H NMR 300MHz  (d4-MeOH)  7.40-7.35 (2H, m), 7.10-7.04 (2H, m), 4.72-4.61 (1H, m), 4.02-3.74 (3H, m), 2.05-1.87 (2H, m), 1.55-1.41 (15H, m).
【０１９８】
さらに溶出し、第２の副題化合物 １,１−ジメチルエチル ４−[(２Ｒ)−２−(２−フルオロフェニル)−２−ヒドロキシエチル]−２,２−ジメチル−(４Ｓ)−３−オキサゾリジンカルボン酸エステルを、白色の固体として得た(１.２１ｇ)。
1H NMR 300MHz  (d4-MeOH)  7.39 (2H, m), 7.07 (2H, m), 4.73-4.69 (1H, m), 4.08 (1H, m), 3.92-3.80 (2H, m), 2.15 (1H, m), 1.83 (1H, m), 1.53-1.41 (15H, m).
【０１９９】
ｂ)２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−１−(４−フルオロフェニル)−４−ヒドロキシブチル]オキシ]−６−トリフルオロメチル−３−ピリジンカルボニトリル エタンジオエート
ＮＭＰ(３ml)中の段階ａ)の(２Ｒ,４Ｓ)異性体(２１４mg)と、２−クロロ−６−トリフルオロメチル−３−ピリジンカルボニトリル(１３０mg)の溶液を、攪拌しながら、水素化ナトリウム(油中６０％分散液, ３０mg)で処理し、終夜攪拌した。蒸発した。残さをエーテルに溶かし、洗浄し、乾燥し(ＭｇＳＯ４)、蒸発した。残さをクロマトグラフィー(シリカ, エーテル／イソヘキサンを溶出液として)によって精製し、油状物を得た。それをメタノール(５ml)に溶かし、ジオキサン中４Ｍ  ＨＣｌで処理し、２時間攪拌し、蒸発した。残さを１９×５０mm Xterra C8 5 micron column での分取逆相ＨＰＬＣによって、５分に渡って２％ ０.８８０ アンモニア水溶液中１０から８０％ アセトニトリル、２０ml／分、ＤＡＤによるＵＶ検出を用いて精製した。遊離塩基をエーテル／エタノール混合液に溶かし、エタノール中のシュウ酸の溶液で処理し、蒸発した。残さをエーテルでトリチュレートし、残さを乾燥し、表題化合物をクリーム色の粉末として得た(８５mg)。
ｍ.ｐ.  １０９−１１４℃.
MS APCI +ve  m/z 370  [M+H]+.
1H NMR 300MHz  (d4-MeOH) 8.34 (1H, d), 7.56-7.50 (3H, m), 7.13-7.09 (2H, m), 6.35-6.31 (1H, m), 3.85-3.81 (1H, m), 3.75-3.71 (1H, m), 3.53-3.47 (1H, m), 2.53-2.45 (1H, m), 2.34-2.27 (1H, m).
【０２００】
実施例３７
２−(２Ｓ)−アミノ−４−(４Ｒ)−(３−フルオロフェニル)−４−[(４−メトキシ−２−ニトロフェニル)チオ]ブタン−１−オール
ａ)１,１−ジメチルエチル ４−[(２Ｓ)−２−(３−フルオロフェニル)−２−ヒドロキシエチル]−２,２−ジメチル−３−(４Ｓ)−オキサゾリジンカルボン酸エステル
副題化合物を、臭化 ３−フルオロフェニル マグネシウム[３−フルオロブロモベンゼン(２.９１ｇ)と、マグネシウム(４８５mg)と、ＴＨＦ(２０ml)から]と、１,１−ジメチルエチル ２,２−ジメチル−４−[(４Ｓ)−２−オキソエチル)−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル(３.０ｇ)から、実施例３６の段階ａ)の方法によって、水−白色の油状物を得た(２.０６ｇ)。
1H NMR 300MHz  (d4-MeOH) 7.39-7.30 (1H, m), 7.18-7.09 (2H, m), 7.02-6.94 (1H, m), 4.75-4.63 (1H, m), 4.02-4.00 (2H, m), 3.76-3.72 (1H, m), 2.02-1.85 (2H, m), 1.55-1.42 (15H, m).
【０２０１】
ｂ)１,１−ジメチルエチル ４−[(２−(ベンゾイルチオ)−２(２Ｒ)−(３−フルオロフェニル)エチル]−２,２−ジメチル−３(４Ｓ)−オキサゾリジン(ozolidine)カルボン酸エステル
窒素下、０℃で、ＴＨＦ(１００ml)中のトリフェニルホスフィン(８.７６ｇ)の溶液を、攪拌しながら、ＤＩＡＤ(６.７５ｇ)を滴下して処理し、３０分間攪拌し、チオ安息香酸(４.６１ｇ)と、段階ａ)のアルコール(５.６７ｇ)の混合物で処理し、終夜攪拌し、蒸発した。残さをジクロロメタン／メタノールと共に、シリカのパッドを通してろ過し、ろ液を蒸発した。残さをエーテル／イソヘキサンで消化し、上清をデカンテーションで除き、蒸発した。残さをクロマトグラフィー(シリカ, ジクロロメタン／イソヘキサン)によって精製し、副題化合物を、黄色の油状物として得た(４.８ｇ)。それを直接次の段階に用いた。
【０２０２】
ｃ)１,１−ジメチルエチル ４−[(２Ｒ)−２−(３−フルオロフェニル)−２−メルカプトエチル]−２,２−ジメチル−(４Ｓ)−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
段階ｃ)の生成物(４.８ｇ)と、７Ｍ メタノール性アンモニアの混合物を、６時間攪拌し、蒸発し、副題化合物をゴム状物質として得た。それをＮＭＰ(８６ml)に溶かし、直接次の段階に用いた。
MS APCI +ve  m/z 356  [M+H]+.
【０２０３】
ｄ)２−(２Ｓ)−アミノ−４−(３−フルオロフェニル)−４−(４Ｒ)−[(４−メトキシ−２−ニトロフェニル)チオ]ブタン−１−オール
炭酸セシウム(７１７mg)と、４−クロロ−３−ニトロアニソール(０.２mmol)の混合物を、段階ｄ)のチオールの溶液(２ml)で処理し、終夜攪拌した。混合物を水で希釈し、塩化メチレンで抽出した。洗浄し、乾燥(ＭｇＳＯ４)した抽出物を蒸発し、残さをクロマトグラフィー(シリカ, エーテル／イソヘキサン)によって精製し、油状物を得た。それをメタノール(２ml)に溶かし、ジオキサン中 ４Ｍ  ＨＣｌ(５ml)で処理し、３０分間攪拌し、蒸発した。残さを１９×５０mm Xterra C8 5 micron column での分取逆相ＨＰＬＣによって、６分に渡って２％ ０.８８０ アンモニア水溶液中１０から６０％のアセトニトリル、２０ml／分、ＤＡＤによるＵＶ検出を用いて精製し、表題化合物を黄色の油状物として得た(５mg)。
MS APCI +ve  m/z 367  [M+H]+.
1H NMR 300MHz  (d4-MeOH)  7.44-7.38 (2H, m), 7.31-7.24 (1H, m), 7.16-7.05 (3H, m), 6.98-6.91 (1H, m), 4.65-4.60 (1H, m), 3.83 (3H, s), 3.50-3.35 (2H, m), 2.77-2.69 (1H, m), 2.16-2.06 (1H, m), 1.96-1.87 (1H, m).
【０２０４】
実施例３８
２(２Ｓ)−アミノ−４(４Ｒ)−(３−フルオロフェニル)−４−[(４−クロロ−２−ニトロフェニル)チオ]ブタン−１−オール
表題化合物を、１−ブロモ−４−クロロ−２−ニトロベンゼンと、実施例３の段階ｃ)のチオール(２ml)から、実施例３７の段階ｄ)の方法によって、黄色の油状物として製造した(１４mg)。
MS APCI +ve  m/z 371  [M+H]+.
1H NMR 300MHz  (d4-MeOH)  8.04-8.03 (1H, m), 7.63 (1H, d), 7.54 (1H, dd), 7.36-7.19 (3H, m), 7.01-6.94 (1H, m), 4.83-4.79 (1H, m), 3.46-3.34 (2H, m), 2.67-2.59 (1H, m), 2.17-2.06 (1H, m), 1.97-1.87 (1H, m).
【０２０５】
実施例３９
２(２Ｓ)−アミノ−４(４Ｒ)−(３−フルオロフェニル)−４−[(５−アミノ−４−クロロ−２−ニトロフェニル)チオ]ブタン−１−オール
表題化合物を、１−ブロモ−４−クロロ−２−ニトロベンゼンと、実施例３７の段階ｃ)のチオール(２ml)から、実施例３７の段階ｄ)の方法によって、黄色の油状物として製造した(１４mg)。
MS APCI +ve  m/z 386  [M+H]+.
1H NMR 300MHz  (d4-MeOH) 8.13 (1H, s), 7.37-7.26 (3H, m), 7.03-6.96 (1H, m), 6.83 (1H, s), 4.71-4.66 (1H, m), 3.47-3.34 (2H, m), 2.69-2.61 (1H, m), 2.14-1.90 (2H, m).
【０２０６】
実施例４０
２(２Ｓ)−アミノ−４(４Ｒ)−(３−フルオロフェニル)−４−[(４−ヒドロキシメチル)−２−ニトロフェニル)チオ]ブタン−１−オール
表題化合物を、１−ブロモ−４−クロロ−２−ニトロベンゼンと、実施例３７の段階ｃ)の生成物(２ml)から、実施例３７の段階ｄ)の方法によって、黄色の油状物として製造した(１２mg)。
MS APCI +ve  m/z 367  [M+H]+.
1H NMR 300MHz  (d4-MeOH) 7.97 (1H, d), 7.61 (1H, d), 7.49 (1H, dd), 7.31-7.19 (3H, m), 6.98-6.91 (1H, m), 4.86-4.78 (1H, m), 4.61 (2H, s), 3.46-3.33 (2H, m), 2.68-2.60 (1H, m), 2.13-2.04 (1H, m), 1.97-1.87 (1H, m).
【０２０７】
実施例４１
２(２Ｓ)−アミノ−４(４Ｒ)−(３−フルオロフェニル)−４−[(４−フルオロ−２−ニトロフェニル)チオ]ブタン−１−オール
表題化合物を、１−クロロ−４−フルオロ−２−ニトロベンゼンと、実施例３７の段階ｃ)のチオールから、実施例３７の段階ｄ)の方法によって製造した。
MS APCI +ve  m/z 355  [M+H]+.
1H NMR 300MHz  (d4-MeOH)  7.79-7.74 (1H, m), 7.68-7.61 (1H, m), 7.39-7.26 (2H, m), 7.24-7.14 (2H, m), 7.01-6.93 (1H, m), 4.79-4.72 (1H, m), 3.47-3.35 (2H, m), 2.69-2.60 (1H, m), 2.16-2.05 (1H, m), 1.96-1.86 (1H, m).
【０２０８】
実施例４２
２(２Ｓ)−アミノ−４(４Ｒ)−(３−フルオロフェニル)−４−[(３,５−ジクロロ−２−ピリジル)チオ]ブタン−１−オール
表題化合物を、２,３,５−トリクロロピリジンと、実施例３７の段階ｃ)のチオール(２ml)から、実施例３７の段階ｄ)の方法によって、水−白色の油状物として製造した(２５mg)。
MS APCI +ve  m/z 361  [M+H]+.
1H NMR 300MHz  (d4-MeOH)  8.43 (1H, d), 7.82 (1H, d), 7.37-7.23 (3H, m), 7.02-6.95 (1H, m), 5.28-5.21 (1H, m), 3.48-3.34 (2H, m), 2.71-2.63 (1H, m), 2.26-2.16 (1H, m), 2.08-1.99 (1H, m).
【０２０９】
実施例４３
４−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−３−クロロベンゾニトリル エタンジオエート
ａ)１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[(２Ｒ)−２−[(２−クロロ−４−シアノフェニル)チオ]−２−フェニルエチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
副題化合物(３２０mg)を、実施例３の段階ａ)の方法によって、実施例１の段階ｂ)の生成物と、３−クロロ−４−フルオロベンゾニトリルを用いて製造した。
MS APCI +ve m/z 3473/5 (M+H+).
1H NMR 400MHz  (d6-DMSO (90℃)) 7.87 (1H, d), 7.45-7.62 (4H, m), 7.23-7.34 (3H, m), 4.70 (1H, m), 4.04 (1H,m), 3.78 (1H,m), 3.65 (1H, m), 2.15 (1H, m), 2.06 (1H, m), 1.46 (9H, s), 1.43 (3H,s), 1.39 (3H, s).
【０２１０】
ｂ)４−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−３−クロロベンゾニトリル エタンジオエート
表題化合物(１７５mg)(ｍ.ｐ.  １４２−１４４℃)を、白色固体として、実施例４の段階ｂ)の方法によって、段階ａ)の生成物を用いて製造した。
MS APCI +ve m/z 333/5 (M+H+).
1H NMR 400MHz  (d6-DMSO) 8.02 (1H, s), 7.75 (1H, d), 7.61 (1H, d), 7.52 (2H, m), 7.25-7.4 (3H, m), 5.00 (1H, m), 3.50 (1H, m), 3.39 (1H, m), 2.96 (1H, t), 2.10-2.30 (2H, m).
【０２１１】
実施例４４
４−クロロ−２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−(エチルアミノ)−４−ヒドロキシ−１−(２−チアゾリル)ブチル]オキシ]−５−フルオロ−ベンゾニトリル エタンジオエート塩
エタノール(４ml)中の実施例８の段階ｃ)の生成物(１４０mg)の溶液に、アセトアルデヒド(３５μｌ)を加え、反応物を１６時間攪拌した。０℃まで冷却した後、水素化ホウ素ナトリウム(７７mg)を加え、反応物を３０分間攪拌した。水(０.５ml)を加え、混合物を酢酸エチルで希釈し、ろ過した。溶液を乾燥し(ＭｇＳＯ４)、蒸発した。逆相ＨＰＬＣによって精製し、関連のフラクションを中和し、シュウ酸(１当量)を添加し、表題化合物を得た。酢酸エチル／ジエチルエーテルから再結晶し、白色固体を得た。
ｍ.ｐ.  ５５−８０℃.
MS (APCI+ve) m/z 370 [M(+H)]+.
1H 400MHz (CD3OD) 7.87 (1H, d), 7.70 (2H, m), 7.40 (1H, d), 6.05 (1H, dd), 3.92 (1H, dd), 3.80 (1H, dd), 3.51 (1H, m), 3.16 (2H, m), 2.54 (2H, m), 1.33 (3H, t).
【０２１２】
実施例４５
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−(５−チアゾリル)ブチル]オキシ]−５−フルオロ−ベンゾニトリル (２Ｅ)−２−ブテンジオエート
ａ)１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[(２Ｒ)−２−(２−クロロ−５−チアゾリル)−２−ヒドロキシエチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル および １,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[(２Ｓ)−２−(２−クロロ−５−チアゾリル)−２−ヒドロキシエチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
窒素雰囲気下、−７８℃で、ブチルリチウム(ヘキサン中１.６Ｍ, ４.２６ml)を、ＴＨＦ(２０ml)中のジイソプロピルアミン(１.５９ml)の溶液に滴下した。１５分後、−７８℃で、ＴＨＦ(１０ml)中の２−クロロチアゾール(９００mg)の溶液を滴下し、反応混合物を冷却しながら１５分間攪拌した。ＴＨＦ(１０ml)中の１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−２,２−ジメチル−４−(２−オキソエチル)−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル(１.８２ｇ)の溶液を、５分に渡って加えた。添加完了後、冷却器を除去し、混合物を３０分間攪拌した。反応混合物を水に注ぎ、生成物をジエチルエーテルで抽出した。合わせた抽出物を乾燥し(ＭｇＳＯ４)、ろ過し、真空下で蒸発した。クロマトグラフィー(シリカ, ５０％ イソヘキサン／ジエチルエーテルを溶出液として)によって精製し、(４Ｓ,２Ｓ)副題化合物を無色の油状物として得た(５００mg)。
1H NMR 400MHz (CDCl3) 7.34 (1H, s), 5.47 (1H, d), 4.80 (1H, d), 4.32 (1H, m), 4.03 (1H, m), 3.73 (1H, d), 2.09 (1H, m), 1.89 (1H, m), 1.53 (15H, m).
【０２１３】
さらに溶出し、(４Ｓ,２Ｒ)副題化合物を無色の油状物として得た(３８０mg)。
1H NMR 400MHz (CDCl3) 7.37 (1H, s), 5.01 (1H, m), 4.73 (1H, br  s), 4.18 (1H, br s), 4.05 (1H, m), 3.73 (1H, br d), 2.18 (2H, br d), 1.48 (15H, m).
【０２１４】
ｂ)１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[(２Ｒ)−２−ヒドロキシ−２−(５−チアゾリル)エチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
１０％ パラジウム−炭素を、エタノール(１５ml)中の段階ａ)の生成物(３８０mg)と酢酸ナトリウム(１２９mg)の溶液に加えた。反応混合物を、５気圧の水素下、１６時間攪拌した。混合物をろ過し、蒸発した。次に残さをジクロロメタンに溶解し、再度ろ過し、蒸発し、副題化合物を無色の油状物として得た(２３５mg)。
1H NMR 400MHz (CDCl3) 8.73 (1H, br s), 7.76 (1H, s), 5.12 (1H, m), 4.22 (1H, m), 4.04 (1H, m), 3.82 (1H, m), 2.22 (2H, m), 1.48 (15H, s).
【０２１５】
ｃ)１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[(２Ｒ)−２−(２−シアノ−４−フルオロフェノキシ)−２−(５−チアゾリル)エチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
炭酸セシウム(４６６mg)を、ＤＭＦ(１５ml)中の段階ｂ)の生成物(２３５mg)と、２,５−ジフルオロベンゾニトリル(１００mg)の溶液に加えた。次に、反応混合物を室温で３日間攪拌した。反応温度を５日間 ５５−６０℃に上げた。室温まで冷却した後、混合物を水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。有機相を乾燥し(ＭｇＳＯ４)、ろ過し、真空下で濃縮し、残さをクロマトグラフィー(シリカ, イソヘキサン／酢酸エチルを溶出液として)によって精製した。副題化合物(１５０mg)を、無色の油状物として得た。
MS APCI +ve m/z 448 ([M(+H)]+).
【０２１６】
ｄ)２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−(５−チアゾリル)ブチル]オキシ]−５−フルオロ−ベンゾニトリル (２Ｅ)−２−ブテンジオエート
表題化合物を、実施例１０の段階ｎ)の方法によって、段階ｃ)の生成物を用いて製造した。
ｍ.ｐ.  １６３−１６５℃.
MS APCI +ve m/z 308 ([M(+H)]+).
1H NMR 400MHz (d6-DMSO) 9.11 (1H, s), 8.04 (1H, s), 7.73 (1H, m), 7.52 (1H, m), 7.41 (1H, m), 6.47 (2H, s), 6.24 (1H, t), 3.55 (1H, m), 3.46 (1H, m), 3.00 (1H, t), 2.30 (1H, m), 2.17 (1H, m).
【０２１７】
実施例４６
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−メトキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−メチル−３−ピリジンカルボニトリル エタンジオエート
ａ)６−メチル−２−[[(１Ｒ)−１−フェニル−３−ブテニル]チオ]−３−ピリジンカルボニトリル
乾燥ＴＨＦ(１５０ml)中の２−メルカプト−６−メチル−３−ピリジンカルボニトリル(６.０８ｇ)と、α−(２−プロペニル)−(α１Ｓ)−ベンゼンメタノール(６ｇ)と、トリフェニルホスフィン(１３.８ｇ)の混合物を、０℃で攪拌した。混合物に、ジイソプロピル アゾジカルボン酸エステル(１０.４ml)を、２０分に渡って滴下した。次に混合物を環境温度とし、１７時間攪拌した。次に、反応混合物を乾固するまで濃縮し、残さをクロマトグラフィー(シリカ, イソヘキサン／酢酸エチル  ９５：５)によって精製し、副題化合物を、薄黄色の油状物として得た(９.５８ｇ)。
MS APCI +ve  m/z 281 ([M+H]+).
【０２１８】
ｂ)２−[[(１Ｒ,３Ｒ)−３,４−ジヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−メチル−３−ピリジンカルボニトリル
ＡＤ−ｍｉｘ β(４７.８９ｇ)を、勢いよく攪拌しながら、２−メチル−２−プロパノールと水(それぞれ１６０ml)の混合物に加えた。混合物を０℃まで冷却し、段階ａ)の生成物(９.５８ｇ)を、２−メチル−２−プロパノール(２０ml)中の溶液として、混合物に滴下した。０℃で２０時間後、混合物を酢酸エチル(３×１００ml)で抽出し、有機抽出物を合わせ、乾燥し(Ｎａ２ＳＯ４)、乾固するまで濃縮した。混合物をクロマトグラフィー(シリカ, ジクロロメタン／メタノール中７Ｍ アンモニア  ９９：１から９８：２)によって精製し、副題化合物を得た(５.３９ｇ)。
MS APCI +ve  m/z 315 ([M+H]+).
【０２１９】
ｃ)２−[[(１Ｒ,３Ｒ)−４−[[(１,１−ジメチルエチル)ジメチルシリル]オキシ]−３−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−メチル−３−ピリジンカルボニトリル
０℃で、クロロ−(１,１−ジメチルエチル)ジメチルシラン(１.５４ｇ)を、攪拌しながら、乾燥ＴＨＦ(７５ml)中の段階ｂ)の生成物(３.２ｇ)と、イミダゾール(７００mg)の混合物に加えた。混合物を０℃で１時間、そして２０℃で１時間攪拌した。さらにクロロ−(１,１−ジメチルエチル)ジメチルシラン(７５０mg)と、イミダゾール(３５０mg)を加え、さらに３時間攪拌し続けた。混合物を乾固するまで濃縮し、残さをジエチルエーテル(１００ml)に溶解し、溶液をシリカゲルのパッドに通した。次に、エーテル性の溶液を、乾固するまで濃縮し、副題化合物を得た(３ｇ)。
MS APCI +ve  m/z 429 ([M+H]+).
【０２２０】
ｄ)２−[[(１Ｒ,３Ｒ)−４−[[(１,１−ジメチルエチル)ジメチルシリル]オキシ]−３−[(メチルスルホニル)オキシ]−１−フェニルブチル]チオ]−６−メチル−３−ピリジンカルボニトリル
０℃で、乾燥ＴＨＦ(５０ml)中の段階ｃ)の生成物(５ｇ)を、ジイソプロピルエチルアミン(２.１ml)と塩化メタンスルホニル(０.９１ml)で処理し、混合物を１時間攪拌した。さらに２当量のジイソプロピルエチルアミンと塩化メタンスルホニルをさらに３時間に渡って加え、反応を完了させた。次に、溶媒を減圧下で除去し、残さをジクロロメタンとジエチルエーテルの混合物(２００ml, １：１)に溶解し、溶液をシリカゲルのパッドに通した。ろ液を集め、さらにシリカゲルのエーテルでの洗浄液と合わせた。濃縮し、副題化合物を得た。それをすぐに用いた。
MS APCI +ve  m/z 507 ([M+H]+).
【０２２１】
ｅ)２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アジド−４−[[(１,１−ジメチルエチル)ジメチルシリル]オキシ]−１−フェニルブチル]チオ]−６−メチル−３−ピリジンカルボニトリル
段階ｄ)の生成物を、乾燥ＤＭＦ(５０ml)に溶解し、溶液をアジ化ナトリウム(１.５２ｇ)で処理した。混合物を９０℃で４時間加熱し、次に冷却し、水(１００ml)で希釈した。生成物をジエチルエーテル(２×１００ml)で抽出し、合わせた抽出物を乾燥し(ＭｇＳＯ４)、濃縮し、油状物とした。粗生成物をクロマトグラフィー(シリカ, ジエチルエーテル／イソヘキサン  １：４)によって精製し、副題化合物を得た(４.９ｇ)。
1H NMR 400MHz (CDCl3) 7.59 (1H, d), 7.43-7.2 (5H, m), 6.86 (1H, d), 5.29 (1H, dd), 3.65-3.54 (2H, m), 3.04 (1H, m), 2.56 (3H,s) 2.25-2.07 (2H, m), 0.83 (9h, s), 0.00(6H, s).
【０２２２】
ｆ)２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アジド−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−メチル−３−ピリジンカルボニトリル
フッ化テトラブチルアンモニウム(１１ml, １Ｍ  ＴＨＦ溶液)を含む 乾燥ＴＨＦ(５０ml)中の段階ｅ)の生成物を、環境温度で、２０時間攪拌した。混合物を乾固するまで濃縮し、残さをジエチルエーテルとジクロロメタンの混合物に溶解し、次にシリカゲルのパッドに通した。ろ液を濃縮し、副題化合物を得た(２.６ｇ)。
MS APCI +ve  m/z 454 ([M+H]+).
【０２２３】
ｇ)２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アジド−４−[(メチルスルホニル)オキシ]−１−フェニルブチル]チオ]−６−メチル−３−ピリジンカルボニトリル
乾燥ＴＨＦ(２０ml)中の、段階ｆ)の生成物(０.５ｇ)と ジイソプロピルエチルアミン(０.２６ml)の氷冷した溶液を、塩化メタンスルホニル(０.１２ml)で処理した。添加完了後、混合物を室温にし、１時間攪拌した。さらにジイソプロピルエチルアミン(０.２６ml)と、塩化メタンスルホニル(０.１２ml)を加え、さらに２時間攪拌し続けた。混合物を水(１００ml)で希釈し、生成物を酢酸エチル(２×５０ml)で抽出した。合わせた有機抽出物を乾燥し(ＭｇＳＯ４)、濃縮し、油状物とした。粗生成物をクロマトグラフィー(シリカ, ジエチルエーテル／イソヘキサン  １：１)によって精製した。副題化合物を油状物として単離した(６３０mg)。
MS APCI +ve  m/z 418 ([M+H]+).
【０２２４】
ｈ)２−[(３−アジド−４−メトキシ−１−フェニルブチル)チオ]−６−メチル−３−ピリジンカルボニトリル
メタノール(５０ml)中の段階ｇ)のスルホネート エステル(０.９ｇ)の溶液を、ナトリウム メトキシド(１ml, ２５wt/v メタノール溶液)で処理した。混合物を２０時間還流した。次に混合物を低体積になるまで濃縮し、１０％ 水性のクエン酸(２０ml)で処理した。生成物をジエチルエーテル(１００ml)で抽出し、抽出物を乾燥し(ＭｇＳＯ４)、濃縮した。粗油状物をクロマトグラフィー(シリカ, ジエチルエーテル／イソヘキサン  １：４)によって精製し、副題化合物を琥珀色の油状物として得た(２００mg)。
MS APCI +ve  m/z 354 ([M+H]+).
【０２２５】
ｉ)２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−メトキシ−１−フェニルブチル]チオ]−６−メチル−３−ピリジンカルボニトリル
水を含むＴＨＦ(１０ml＋０.２ml  水)中の、アジド  ４６ｇ(１９８mg)と トリフェニルホスフィンの溶液を攪拌し、３時間還流した。次に混合物を濃縮し、残さをクロマトグラフィー(シリカ, ジクロロメタン／メタノール中７Ｍ アンモニア  ９５：５)によって精製し、遊離塩基を得た(１８０mg)。シュウ酸塩は、アセトニトリル中の１当量のシュウ酸の 遊離塩基への添加によって製造し、クリーム色の固体を得た(１８０mg)。
MS APCI +ve  m/z 328 ([M+H]+).
1H  400MHz (d6-DMSO) 8.08 (1H, d), 7.51-7.19 6H, m), 5.31 (1H, t), 3.47-3.35 (2H, m), 3.21-3.17 (4H, m), 2.6 (3H, s), 2.33 (2H, t).
【０２２６】
実施例４７
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−４−メチル−１−フェニルペンチル]オキシ]−４−クロロ−５−フルオロベンゾニトリル エタンジオエート
ａ)１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[(２Ｒ)−２−ヒドロキシ−２−フェニルエチル]−２,２,５,５−テトラメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
窒素雰囲気下、０℃で、乾燥ＴＨＦ(５０ml)中の１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−２,２,５,５−テトラメチル−４−(２−オキソエチル)−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル(４.６ｇ)の溶液を、臭化 フェニル マグネシウム(１Ｍ  ＴＨＦ溶液, ２２ml)で処理した。添加完了後、反応物を２０℃まで温め、０.５時間攪拌した。反応混合物を水性のクエン酸(１５０ml, １０％(w/v))でクエンチし、生成物を酢酸エチル(２×７５ml)で抽出した。合わせた有機抽出物を、乾燥し(ＭｇＳＯ４)、濃縮し、ゴム状物質とした。ジアステレオマー混合物を、クロマトグラフィー(シリカ, イソヘキサン／ジエチルエーテル)によって分割した。表題化合物を無色の固体として単離した(１.３ｇ)。
1H  400MHz (d6-DMSO) 7.35-7.20  (5H, m), 5.19 (1H, d), 4.63-4.59 (1H, m), 3.93 (1H, m), 1.9-1.7 (2H, m), 1.50 (3H, s), 1.44 (9H, s), 1.29 (3H, s), 1.26 (3H, s), 1.24 (3H, s).
【０２２７】
ｂ)１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[(２Ｒ)−２−(５−クロロ−２−シアノ−４−フルオロフェノキシ)−２−フェニルエチル]−２,２,５,５−テトラメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
副題化合物を、実施例８の段階ｂ)に記載された手順に従って、段階ａ)の生成物を用いて製造した。
MS APCI +ve  m/z 403 ([M+H-boc]+).
【０２２８】
ｃ)２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−４−メチル−１−フェニルペンチル]オキシ]−４−クロロ−５−フルオロ  ベンゾニトリル  エタンジオエート
表題化合物を、段階ｂ)の化合物から、実施例８の段階ｃ)の方法によって製造した。
ｍ.ｐ  ８０℃.
1H  400MHz (d6-DMSO) 7.62 (1H, d), 7.49-7.34  (5H, m), 7.17 (1H, d), 5.67 (1H, dd), 3.24 (1H, dd), 2.38-2.25 (2H, m), 1.26 (3H, s), 1.21 (3H, s).
MS APCI +ve  m/z 363 ([M+H]+).
【０２２９】
実施例４８
２−[[(１Ｓ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−プロピルブチル]オキシ]−４−クロロ−５−フルオロベンゾニトリル エタンジオエート
ａ)１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[(２Ｓ)−２−ヒドロキシペンチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
副題化合物を、実施例４７の段階ａ)の方法によって、塩化 プロピル マグネシウムと、１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−２,２−ジメチル−４−(２−オキソエチル)−３−オキサゾリジンカルボン酸エステルを用いて製造した。
MS APCI +ve  m/z 188 ([M+H-boc]+).
【０２３０】
ｂ)１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[(２Ｓ)−２−(５−クロロ−２−シアノ−４−フルオロフェノキシ)ペンチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
副題化合物を、実施例８の段階ｂ)の方法によって、乾燥ＴＨＦ中の段階ａ)の生成物を用いて製造した。
MS APCI +ve  m/z 341 ([M+H-boc]+).
【０２３１】
ｃ)２−[[(１Ｓ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−プロピルブチル]オキシ]−４−クロロ−５−フルオロベンゾニトリル エタンジオエート
表題化合物を実施例８の段階ｃ)の生成物において記載された手順に従って製造した。
ｍ.ｐ.  １７１−２℃.
MS APCI +ve  m/z 301 ([M+H]+).
1H  300MHz (d6-DMSO) 8.02 (1H, d), 7.66 (1H, d), 4.79 (1H, m), 3.67-3.61 (1H, m), 3.48-3.42 (1H, m), 3.2 (1H, m), 1.92 (2H, t), 1.66-1.56 (2H, m), 1.5-1.2 (2H, m), 0.89 (3H, t).
【０２３２】
実施例４９
２−[[(１Ｓ)−１−[(２Ｓ)−２−アミノ−３−ヒドロキシプロピル]ペンチル]チオ]−６−メチル−３−ピリジンカルボニトリル エタンジオエート
ａ)１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[(２Ｒ)−２−ヒドロキシヘキシル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
副題化合物を、実施例４７の段階ａ)の化合物において記載された手順と同様の手順で、塩化 ブチル マグネシウムと １,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−２,２−ジメチル−４−(２−オキソエチル)−３−オキサゾリジンカルボン酸エステルを用いて製造した。
1H  300MHz (d6-DMSO) 4.53(1H, d), 4.28-4.22 (1H, m), 4.00 (1H, dd), 3.66 (1H, d), 3.55-3.42 (1H, m), 1.8-1.71 (1H, m), 1.5-1.3 (21H, m), 0.90 (3H, t).
【０２３３】
ｂ)１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[(２Ｓ)−２−(ベンゾイルチオ)ヘキシル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
副題化合物を、実施例１の段階ｂ)の方法によって、実施例４９の段階ａ)の生成物を用いて製造した。
MS APCI +ve  m/z 322 ([M+H-boc]+).
【０２３４】
ｃ)１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[(２Ｓ)−２−[(３−シアノ−６−メチル−２−ピリジニル)チオ]ヘキシル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
副題化合物を、実施例１７の段階ｂ)の方法によって、実施例４９の段階ｂ)の生成物を用いて製造した。
MS APCI +ve  m/z 434 ([M+H]+).
【０２３５】
ｄ)２−[[(１Ｓ)−１−[(２Ｓ)−２−アミノ−３−ヒドロキシプロピル]ペンチル]チオ]−６−メチル−３−ピリジンカルボニトリル エタンジオエート
表題化合物を、実施例８の段階ｃ)の方法によって、段階ｃ)の生成物を用いて製造した。
MS APCI +ve  m/z 294 ([M+H]+).
1H 400MHz (d6-DMSO) 8.09 (1H, d), 7.2 (1H, d), 4.22 (1H, br s), 3.5-3.8 (2H, m), 3.2 (1H, br s), 2.52 (3H, s), 1.5-2.2 (4H, m), 0.93 (4H,d), 0.88 (3H, t).
【０２３６】
実施例５０
２−[[(１Ｓ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−(２−メチルプロピル)ブチル]チオ]−６−メチル−３−ピリジンカルボニトリル エタンジオエート
ａ)１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[(２Ｒ)−２−ヒドロキシ−４−メチルペンチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
副題化合物を、実施例４７の段階ａ)の方法によって、塩化 イソブチル マグネシウムと、１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−２,２−ジメチル−４−(２−オキソエチル)−３−オキサゾリジンカルボン酸エステルを用いて製造した。
MS APCI +ve  m/z 202 ([M+H-boc]+).
【０２３７】
ｂ)１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[(２Ｓ)−２−(ベンゾイルチオ)−４−メチルペンチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
副題化合物を、実施例１の段階ｂ)の方法によって、段階ａ)の生成物を用いて製造した。
MS APCI +ve  m/z 322 ([M+H-boc]+).
【０２３８】
ｃ)１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[(２Ｓ)−２−[(３−シアノ−６−メチル−２−ピリジニル)チオ]−４−メチルペンチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
副題化合物を、実施例１７の段階ｂ)の方法によって、段階ｂ)の生成物を用いて製造した。
MS APCI +ve  m/z 434 ([M+H]+).
【０２３９】
ｄ)２−[[(１Ｓ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−(２−メチルプロピル)ブチル]チオ]−６−メチル−３−ピリジンカルボニトリル エタンジオエート
表題化合物を、実施例８の段階ｃ)の方法によって、段階ｃ)の生成物を用いて製造した。
MS APCI +ve  m/z 322 ([M+H]+).
1H  400MHz (DMSO-d6) 8.1 (1H, d), 7.2 (1H, d), 4.2-4.1 (1H, m), 3.7-3.5 (2H, m), 3.2 (1H, m), 2.52 (3H, s), 2.1-2 (1H, m), 1.73-1.7 (2H, m), 1.45-1.24 (4H, m), 0.86 (3H, t).
【０２４０】
実施例５１
２−[[(３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−(５−イソオキサゾリル)ブチル]チオ]−６−メチル−３−ピリジンカルボニトリル (Ｅ)−ブテンジオエート
ａ)(４Ｓ)−４−[２−(５−イソオキサゾリル)−２−オキソエチル]−２−オキサゾリジノン
副題化合物を、実施例２の段階ａ)の方法によって、塩化 ５−イソオキサゾールカルボニルを用いて製造した。
1H NMR (d6-DMSO) δ 8.84 (1H, d), 7.72 (1H, d), 4.49 (1H, t), 4.37 (1H, t), 4.24 (1H, quintet), 4.06 (1H, dd), 3.92-3.74 (2H, t).
【０２４１】
ｂ)(４Ｓ)−４−[２−ヒドロキシ−２−(５−イソオキサゾリル)エチル]−２−オキサゾリジノン
副題化合物を、実施例２の段階ｂ)の方法によって、段階ａ)の生成物を用いて製造した。
1H NMR (d6-DMSO)  8.49 (1H, t), 7.83 and 7.65 (1H, s), 6.37 (1H, dd), 5.90 (1H, dd), 4.87 (1H, dd), 4.43-4.31 (1H, m), 4.10-3.72 (2H, m), 1.99-1.85 (2H, m).
【０２４２】
ｃ)(４Ｓ)−４−[２−(ベンゾイルチオ)−２−(５−イソオキサゾリル)エチル]−２−オキサゾリジノン
副題化合物を、実施例２の段階ｃ)の方法によって、段階ｂ)の生成物を用いて製造した。
MS APCI +ve m/z 318 [M+H]+.
【０２４３】
ｄ)２−[[１−(５−イソオキサゾリル)−２−[(４Ｓ)−２−オキソオキサゾリジニル]エチル]チオ]−６−メチル−３−ピリジンカルボニトリル
副題化合物を、実施例２の段階ｄ)の方法によって、段階ｃ)の生成物を用いて製造した。
MS APCI +ve m/z 330 [M+H]+.
【０２４４】
ｅ)１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[２−[(３−シアノ−６−メチル−２−ピリジニル)チオ]−２−(５−イソオキサゾリル)エチル]−２−オキソ−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
副題化合物を、実施例２の段階ｅ)の方法によって、段階ｄ)の生成物を用いて製造した。
1H NMR (CDCl3)  8.22 (1H, ddd), 7.75 (1H, dd), 7.03 (1H, dd), 6.44, 6.29 (1H,2 x dd), 5.59, 5.48-5.40 (1H, t and m), 4.56-4.22 (3H, m), 2.65-2.54 (5H, m), 1.62-1.48 (9H, m).
【０２４５】
ｆ)１,１−ジメチルエチル [(１Ｓ)−３−[(３−シアノ−６−メチル−２−ピリジニル)チオ]−１−(ヒドロキシメチル)−３−(５−イソオキサゾリル)プロピル]カルバメート
副題化合物を、実施例２の段階ｆ)の方法によって、段階ｅ)の生成物を用いて製造した。
MS APCI +ve m/z 405 [M+H]+.
【０２４６】
ｇ)２−[[(３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−(５−イソオキサゾリル)ブチル]チオ]−６−メチル−３−ピリジンカルボニトリル (Ｅ)−ブテンジオエート
ジオキサン中４Ｍ  ＨＣｌ(２ml)中の段階ｆ)の生成物(４８mg)の溶液を、２時間攪拌した。２Ｍ 炭酸カリウム溶液を加え、混合物を酢酸エチルで抽出した。有機抽出物を乾燥し(Ｎａ２ＳＯ４)、蒸発し、クロマトグラフィー(シリカ, ジクロロメタン／メタノール中 ７Ｍ アンモニアを溶出液として)によって精製し、次に１当量のフマル酸を添加することによって、(Ｅ)−ブテンジオエート塩に変え、表題化合物を白色の固体として得た(１７mg)。
ｍ.ｐ.  １５０−２℃.
MS APCI +ve m/z 305 [M+H]+.
1H NMR (d6-DMSO) 8.51 (1H, d), 8.13 (1H, d), 7.24 (1H, dd), 6.54 (1H, dd), 6.43 (2H, s), 5.69, 5.62 (1H, 2 x  t), 3.57-3.32 (3H, m), 2.97-2.75 (1H, m), 2.60 (3H, s), 2.43-2.01 (2H, m).
【０２４７】
実施例５２
２−[[(３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−(５−イソオキサゾリル)ブチル]オキシ]−６−(トリフルオロメチル)−３−ピリジンカルボニトリル (Ｅ)−ブテンジオエート
ａ)２−[１−(５−イソオキサゾリル)−２−[(４Ｓ)−２−オキソ−４−オキサゾリジニル]エトキシ]−６−(トリフルオロメチル)−３−ピリジンカルボニトリル
炭酸セシウム(１.３５ｇ)を、ＤＭＦ(２ml)中の実施例５１の段階ｂ)の生成物(３３０mg)と ３−クロロ−５−(トリフルオロメチル)−２−ピリジンカルボニトリル(５５６mg)の溶液に加え、混合物を２０℃で１時間攪拌した。塩化アンモニウム溶液を加え、混合物を酢酸エチルで抽出した。有機抽出物を乾燥し(ＭｇＳＯ４)、蒸発し、クロマトグラフィー(シリカ, イソヘキサン／酢酸エチルを溶出液として)によって精製し、副題化合物を得た(２５８mg)。
1H NMR (CDCl3) 8.25 (1H, d), 8.15 (1H, t), 7.47 (1H, t), 6.53 (1H, t), 6.42 (1H, d), 5.78, 5.64 (1H, 2 x s), 4.66-4.53 (1H, m), 4.29-4.07 (2H, m), 2.68-2.37 (2H, m).
【０２４８】
ｂ)１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[２−[[３−シアノ−６−(トリフルオロメチル)−２−ピリジニル]オキシ]−２−(５−イソオキサゾリル)エチル]−２−オキソ−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
副題化合物を、実施例２の段階ｅ)の方法によって、段階ａ)の生成物を用いて製造した。
1H NMR  (CDCl3) 8.24 (1H, d), 8.14 (1H, d), 7.46 (1H, d), 6.58 (1H, dd), 6.45 (1H, d), 4.57-4.39 (3H, m), 2.88-2.76 (1H, m), 2.68-2.57 (1H, m), 1.57-1.51 (9H, m).
【０２４９】
ｃ)１,１−ジメチルエチル [(１Ｓ)−３−[[３−シアノ−６−(トリフルオロメチル)−２−ピリジニル]オキシ]−１−(ヒドロキシメチル)−３−(５−イソオキサゾリル)プロピル]−１−カルバメート
副題化合物を、実施例２の段階ｆ)の方法によって、段階ｂ)の生成物を用いて製造した。
MS APCI +ve m/z 443 [M+H]+.
【０２５０】
ｄ)２−[[(３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−(５−イソオキサゾリル)ブチル]オキシ]−６−(トリフルオロメチル)−３−ピリジンカルボニトリル (Ｅ)−ブテンジオエート
表題化合物を、実施例５１の段階ｇ)の方法によって、段階ｃ)の生成物を用いて製造した。
ｍ.ｐ.  １５０−２℃.
MS APCI +ve m/z 343 [M+H]+.
1H NMR (DMSO)  8.63 (1H, d), 8.57 (1H, d), 7.74 (1H, d), 6.60 (1H, d), 6.55 (1H, t), 6.47 (2H, s), 3.64-3.49 (2H, m), 3.17-3.09 (1H, m), 2.38 (2H, t).
【０２５１】
実施例５３
２−[[３−(３Ｓ)−アミノ−４−ヒドロキシ−１−(１Ｒ)−(２−チエニル)ブチル]オキシ]−４−クロロ−５−フルオロベンゾニトリル エタンジオエート
ａ)１,１−ジメチルエチル ４−[(２Ｒ)−２−ヒドロキシ−２−(２−チエニル)エチル]−２,２−ジメチル−(４Ｓ)−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
副題化合物を、ＴＨＦ(２０ml)中の２−ブロモチオフェン(２.７１ｇ)と、マグネシウム(４８５mg)と、１,１−ジメチルエチル ２,２−ジメチル−４−[(４Ｓ)−２−オキソエチル)−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル(３ｇ)から、実施例３６の段階ａ)の方法によって製造し、油状物を得た(１.５１ｇ)。
1H NMR 300MHz  (d4-MeOH) 7.31 (1H, dd), 7.03-6.95 (2H, m), 5.00-4.95 (1H, m), 4.15-4.04 (1H, m), 3.92-3.86 (1H, m), 3.81-3.69 (1H, m), 2.35-2.18 (1H, m), 2.01-1.90 (1H, m), 1.56-1.44 (15H, m).
【０２５２】
ｂ)２−[[３−(３Ｓ)−アミノ−４−ヒドロキシ−１−(１Ｒ)−(２−チエニル)ブチル]オキシ]−４−クロロ−５−フルオロベンゾニトリル エタンジオエート
表題化合物を、段階ａ)の生成物(２３６mg)と、４−クロロ−２,５−ジフルオロベンゾニトリルから、実施例３６の段階ｂ)の方法によって、クリーム色の粉末を得た(３８mg)。
MS APCI +ve  m/z 341  [M+H]+.
1H NMR 300MHz  (d4-MeOH)  7.63 (1H, d), 7.47 (1H, d), 7.38 (1H, d), 7.24 (1H, d), 7.04-7.01 (1H, m), 6.00 (1H, dd), 3.87 (1H, dd), 3.75-3.69 (1H, m), 3.63-3.55 (1H, m), 2.58-2.48 (1H, m), 2.40-2.31 (1H, m).
【０２５３】
実施例５４
２−[[３−(３Ｓ)−アミノ−４−ヒドロキシ−１(１Ｒ)−(３−チエニル)ブチル]オキシ]−４−クロロ−５−フルオロベンゾニトリル エタンジオエート
ａ)１,１−ジメチルエチル ４−[(２Ｒ)−２−ヒドロキシ−２−(３−チエニル)エチル]−２,２−ジメチル−(４Ｓ)−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
副題化合物を、３−ブロモチオフェン(１.０９ｇ)と、ＴＨＦ(２０ml)中の１,１−ジメチルエチル ２,２−ジメチル−４−[(４Ｓ)−２−オキソエチル)−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル(３ｇ)と、二臭化マグネシウムから、実施例３５の段階ａ)の方法によって、黄色の油状物を得た(１５８mg)。
1H NMR 300MHz  (d4-MeOH) 7.40-7.37 (1H, m), 7.28 (1H, s), 7.12 (1H, d), 4.84-4.79 (1H, m), 4.13-3.97 (1H, m), 3.91-3.83 (1H, m), 3.77-3.69 (1H, m), 2.31-2.11 (1H, m), 1.97-1.84 (1H, m), 1.56-1.47 (15H, m).
【０２５４】
ｂ)２−[[３(３Ｓ)−アミノ−４−ヒドロキシ−１(１Ｒ)−(３−チエニル)ブチル]オキシ]−４−クロロ−５−フルオロベンゾニトリル エタンジオエート
表題化合物を、段階ａ)で製造されたアルコール(１５８mg)と、４−クロロ−２,５−ジフルオロベンゾニトリルから、実施例３６の段階ｂ)の方法によって、クリーム色の粉末を得た(３０mg)。
ｍ.ｐ.  １１１−１１５℃.
MS APCI +ve  m/z 341  [M+H]+.
1H NMR 300MHz  (d4-MeOH)  7.62 (1H, d), 7.51-7.48 (2H, m), 7.25 (1H, d), 7.18-7.16 (1H, m), 5.78-5.75 (1H, m), 3.86 (1H, dd), 3.72-3.67 (1H, m), 3.58-3.53 (1H, m), 2.47-2.40 (1H, m), 2.29-2.23 (1H, m).
【０２５５】
実施例５５
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−(３−ピリジニル)ブチル]チオ]−４−(トリフルオロメチル)ベンゾニトリル 二塩酸塩
ａ)１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[(２Ｓ)−２−ヒドロキシ−２−(３−ピリジニル)エチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル および １,１−ジメチルエチル (４Ｒ)−４−[(２Ｓ)−２−ヒドロキシ−２−(３−ピリジニル)エチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
副題化合物を、実施例１の段階ａ)の方法によって、臭化 ３−ピリジル マグネシウムを用いて製造した。カラムから始めに溶出されたものから、(２Ｓ,４Ｓ)副題化合物を油状物として得た(３.４０ｇ)。
MS APCI +ve m/z 323 ([M+H]+).
1H NMR 400MHz  (CDCl3) 8.58 (1H, m), 8.49 (1H, d), 7.75 (1H, d), 7.26 (1H, m), 5.19 (1H, m), 4.68 (1H, m), 4.35 (1H, m), 4.03 (1H, m), 3.67 (1H, d), 2.03 (1H, m), 1.80 (1H, m), 1.62 (3H, s), 1.53 (12H, m).
【０２５６】
さらにカラムから溶出し、(２Ｒ,４Ｓ)副題化合物を薄黄色の油状物として得た(２.３０ｇ)。
MS APCI +ve m/z 323 ([M+H]+).
1H NMR 400MHz  (CDCl3) 8.59 (1H, m), 8.51 (1H, d), 7.73 (1H, d), 7.26 (1H, m), 4.83 (1H, m), 3.80-4.20 (4H, m), 2.07 (2H, m), 1.65 (3H, s), 1.50 (12H, m).
【０２５７】
ｂ)１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[(２Ｒ)−２−(ベンゾイルチオ)−２−(３−ピリジニル)エチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
副題化合物(２.８０ｇ)を、実施例２の段階ｃ)の方法によって、段階ａ)の(２Ｓ,４Ｓ)生成物を用いて製造した。
MS APCI +ve m/z 443 (M+H+).
1H NMR 400MHz  (CDCl3) 8.68 (1H, d), 8.51 (1H, m), 7.91 (2H, m), 7.72 (1H, m), 7.55 (1H, m), 7.42 (2H, m), 7.26 (1H, m), 4.78 (1H, m), 3.90-4.15 (3H, m), 2.58-2.38 (1H, m), 2.13 (1H, m), 1.60-1.40 (15H, m).
【０２５８】
ｃ)１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[(２Ｒ)−２−[[２−シアノ−５−(トリフルオロメチル)フェニル]チオ]−２−(３−ピリジニル)エチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
副題化合物(１８０mg)を、実施例３の段階ａ)の方法によって、段階ｂ)の生成物と、２−フルオロ−４−(トリフルオロメチル)ベンゾニトリルの生成物を用いて製造した。
MS APCI +ve m/z 508 (M+H+).
【０２５９】
ｄ)２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−(３−ピリジニル)ブチル]チオ]−４−(トリフルオロメチル)ベンゾニトリル 二塩酸塩
段階ｃ)の生成物(１７５mg)を、メタノール(５ml)と、ジオキサン中 ４Ｍ塩酸(５ml)と共に４時間攪拌した。反応混合物を蒸発し、残さをエタノール／ジエチルエーテルから再結晶し、表題化合物を白色の固体として得た(１２０mg)。
ｍ.ｐ.  ２３８−４０℃.
MS APCI +ve  m/z 368 [M+H]+.
1H NMR 400MHz  (d6-DMSO) 8.90 (1H, s), 8.70 (1H, d), 8.40 (1H, m), 8.30 (2H, m), 8.05 (2H, m), 7.78 (2H, m),  5.47 (1H, m), 3.50-3.60 (2H, m), 3.03 (1H, m), 2.40 (2H, m), 2.30 (1H, m).
【０２６０】
実施例５６
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−(５−ピリミジル)ブチル]チオ]−４−クロロベンゾニトリル塩酸塩
ａ)１,１−ジメチルエチル ４−[(２Ｓ)−２−ヒドロキシ−２−(３−ピリジニル)エチル]−２,２−ジメチル−(４Ｓ)−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル および １,１−ジメチルエチル ４−[(２Ｒ)−２−ヒドロキシ−２−(３−ピリジニル)エチル]−２,２−ジメチル−(４Ｓ)−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
窒素下、−７８℃で、乾燥ＴＨＦ(５０ml)中の１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−２,２−ジメチル−４−(２−オキソエチル)−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル(４.５５ｇ)と ５−ブロモピリミジン(３.００ｇ)の溶液に、攪拌しながら、ブチルリチウム(ヘキサン中２.５Ｍ, ７.９０ml)を滴下した。混合物を−７８℃で１.５時間攪拌し、次に飽和塩化アンモニウム溶液でクエンチし、生成物を酢酸エチルで抽出した。有機抽出物を乾燥し(ＭｇＳＯ４)、濃縮し、油状物とした。ジアステレオマーの混合物を、クロマトグラフィー(シリカ, メタノール／ジクロロメタンを溶出液として)によって精製した。始めにカラムから溶出したものから(２Ｓ,４Ｓ)副題化合物を黄色の固体として得た(１.０８ｇ)。
MS APCI +ve m/z 324 ([M+H]+).
1H NMR 400MHz  (CDCl3) 9.13 (1H, s), 8.76 (2H, s), 5.41 (1H, m), 4.67 (1H, m), 4.38 (1H, m), 4.06 (1H, dd), 3.68 (1H, d), 2.04 (1H, m), 1.79 (1H, m), 1.62 (3H, s), 1.55 (3H, s), 1.53 (9H, s).
【０２６１】
カラムからさらに溶出し、(２Ｒ,４Ｓ)副題化合物を、薄黄色の油状物として得た(５４０mg)。
MS APCI +ve m/z 324 ([M+H]+).
1H NMR 400MHz  (CDCl3) 9.13 (1H, s), 8.77 (2H, s), 4.87 (1H, m), 4.67 (1H, m), 4.22 (1H, m), 3.85 (1H, m), 2.15 (2H, m), 1.48-1.60 (15H, m).
【０２６２】
ｂ)１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[(２Ｒ)−２−(ベンゾイルチオ)−２−(５−ピリミジニル)エチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
副題化合物を、実施例２の段階ｃ)の方法によって、段階ａ)の(２Ｓ,４Ｓ)生成物を用いて製造した。
MS APCI +ve m/z 444 (M+H+).
1H NMR 400MHz  (CDCl3) 9.11 (1H, s), 8.81 (2H, m), 7.90 (2H, d), 7.58 (1H, m), 7.44 (2H, m), 4.76 (1H, m), 3.96 (2H, m), 2.40-2.65 (1H, m), 2.16 (1H, m), 1.45-1.80 (16H, m).
【０２６３】
ｃ)１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[(２Ｒ)−２−[(５−クロロ−２−シアノフェニル)チオ]−２−(５−ピリミジニル)エチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
副題化合物(２００mg)を、実施例３の段階ａ)の方法によって、段階ｂ)の生成物と、４−クロロ−２−フルオロベンゾニトリルを用いて製造した。
MS APCI +ve m/z 475/7 (M+H+).
【０２６４】
ｄ)２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−(５−ピリミジル)ブチル]チオ]−４−クロロベンゾニトリル塩酸塩
固体として、表題化合物(９０mg)(ｍ.ｐ.  １２０−３０℃)を、実施例７の段階ｃ)の方法によって、段階ｃ)の生成物を用いて製造した。
MS APCI +ve  m/z 335/7 [M+H]+.
1H NMR  400MHz  (d6-DMSO) 9.08 (1H, s), 8.85 (2H, s), 8.23 (3H, bs), 7.90 (1H, d), 7.84 (1H, d), 7.56 (1H, dd), 5.24 (1H, m), 3.50-3.75 (2H, m), 3.01 (1H, m), 2.43 (1H, m), 2.28 (1H, m).
【０２６５】
実施例５７
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−(３−ピリジニル)ブチル]チオ]−４−クロロ−５−フルオロベンゾニトリル 二塩酸塩
ａ)Ｏ−(５−クロロ−２−シアノ−４−フルオロフェニル) ジメチルカルバモチオエート
アセトン(３０ml)中の、フェノール(２.００ｇ)と 炭酸カリウム(１.８５ｇ)と Ｎ,Ｎ−ジメチルチオカルバメートを２４時間還流した。混合物を水に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を塩水で洗浄し、乾燥し(ＭｇＳＯ４)、蒸発した。残さをクロマトグラフィー(シリカ, イソヘキサン／ジエチルエーテルを溶出液として)によって精製し、副題化合物を固体として得た(２.３６ｇ)。
MS APCI +ve  m/z 259/261 [M+H]+.
1H NMR  400MHz  (CDCl3) 7.43 (1H, d), 7.36 (1H, d), 3.46 (3H, s), 3.40 (3H, s).
【０２６６】
ｂ)Ｓ−(５−クロロ−２−シアノ−４−フルオロフェニル) ジメチルカルバモチオエート
窒素下、ジメチルアニリン(２５ml)中の段階ａ)の生成物(２.３５ｇ)を、４時間加熱した。次に、混合物を２Ｍ  ＨＣｌ溶液に注ぎ、酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機層を塩水で洗浄し、乾燥し(ＭｇＳＯ４)、蒸発し、副題化合物を白色の固体として単離した(２.３ｇ)。
1H NMR  400MHz  (CDCl3) 7.73 (1H, d), 7.52 (1H, d), 3.13 (3H, s), 3.06 (3H, s).
【０２６７】
ｃ)４−クロロ−５−フルオロ−２−メルカプトベンゾニトリル
段階ｂ)の生成物(２.００ｇ)をメタノール(１００ml)に溶解し、水(５０ml)中の水酸化ナトリウム(１.５５ｇ)の溶液を加えた。窒素下で、混合物を１.５時間還流した。冷却後、混合物を蒸発し、残さを水で希釈し、次にジエチルエーテルで２回洗浄した。水層を２Ｍ  ＨＣｌ溶液で酸性にし、酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機抽出物を塩水で洗浄し、乾燥し(ＭｇＳＯ４)、蒸発し、副題化合物を得た(１.４５ｇ)。
1H NMR  400MHz  (CDCl3) 7.50 (1H, d), 7.40 (1H, d), 4.08 (1H, s).
【０２６８】
ｄ)１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[(２Ｒ)−２−[(５−クロロ−２−シアノ−４−フルオロフェニル)チオ]−２−(３−ピリジニル)エチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
段階ｃ)の生成物(１００mg)を、ＴＨＦ(１０ml)に溶解し、実施例５５の段階ａ)の(２Ｓ,４Ｓ)生成物(１７０mg)を加え、次にトリフェニルホスフィン(１４０mg)と、ジエチル アゾジカルボン酸エステル(０.１０ml)を加えた。混合物を２０℃で２４時間攪拌し、次に蒸発した。残さをクロマトグラフィー(シリカ, ジエチルエーテルを溶出液として)によって精製し、副題化合物を油状物として得た(８５mg)。
MS APCI +ve  m/z 492/494 [M+H]+.
【０２６９】
ｅ)２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−(３−ピリジニル)ブチル]チオ]−４−クロロ−５−フルオロベンゾニトリル 二塩酸塩
灰白色の固体として、表題化合物(６０mg)を、実施例５５の段階ｄ)の方法によって、段階ｄ)の生成物を用いて製造した。
ｍ.ｐ.  ２５２−５℃.
MS APCI +ve  m/z 352/4 [M+H]+.
1H NMR 400MHz (d6-DMSO) 8.78 (1H, s), 8.67 (1H, d), 8.20 (1H, d), 8.08 (2H, m), 7.72 (1H, dd), 5.21 (1H, t), 3.61-3.37 (2H, m), 3.03 (1H, m), 2.40 (1H, m), 2.25 (1H, m).
【０２７０】
実施例５８
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−(３−ピリジル)ブチル]チオ]−４−ブロモベンゾニトリル 二塩酸塩
ａ)１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[(２Ｒ)−２−[(５−ブロモ−２−シアノフェニル)チオ]−２−(３−ピリジニル)エチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
副題化合物(１７０mg)を、実施例３の段階ａ)の方法によって、実施例５５の段階ｂ)の生成物と ４−ブロモ−２−フルオロベンゾニトリルを用いて製造した。
MS APCI +ve m/z 520/2 (M+H+).
1H NMR 400MHz  (CDCl3) 8.50-8.30 (1H, m), 7.75-7.57 (5H,m), 7.26 (1H, m), 4.50-3.60 (4H, m), 2.60-2.30 (1H, m), 2.18 (1H, m), 1.60-1.40 (15H, m).
【０２７１】
ｂ)２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−(３−ピリジル)ブチル]チオ]−４−ブロモベンゾニトリル二塩酸塩
白色の固体として、表題化合物(１１８mg)を、実施例５５の段階ｄ)の方法によって、段階ａ)の生成物を用いて製造した。
ｍ.ｐ.  ２７８−２８０℃.
MS APCI +ve  m/z 380 [M+H]+.
1H NMR  400MHz  (d6-DMSO) 8.94 (1H, s), 8.73 (1H, d), 8.42 (1H, d), 8.32 (3H, bs), 8.03 (1H, s), 7.84 (1H, dd),  7.74 (1H, d), 7.68 (1H, dd), 5.41 (1H, m), 3.60-3.48 (2H, m), 3.02 (1H, m), 2.43 (1H, m), 2.27 (1H, m).
【０２７２】
実施例５９
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−(２−チアゾリル)ブチル]オキシ]−５−フルオロ−６−メチル−３−ピリジンカルボニトリル 塩酸塩
ａ)ビス(１,１−ジメチルエチル) ２−(６−クロロ−５−シアノ−３−フルオロ−２−ピリジニル)プロパンジオエート
窒素下、乾燥ＤＭＦ(２０ml)中のビス(１,１−ジメチルエチル)マロン酸エステル(１.０８ｇ)の溶液に、水素化ナトリウム(２００mg)を加えた。混合物を２０℃で３０分間攪拌し、次に２,６−ジクロロ−３−シアノ−５−フルオロピリジンを加えた。混合物を３０分間攪拌し、次に氷酢酸(１００ml)に注ぎ、エーテルで抽出した。エーテル層を乾燥し(ＭｇＳＯ４)、蒸発した。残さをクロマトグラフィー(シリカ, ジクロロメタン／イソヘキサンを溶出液として)によって精製し、副題化合物を固体として得た(１.３８ｇ)。
MS APCI +ve m/z 369/371 (M+H+).
1H NMR  400MHz  (CDCl3) 7.72 (1H, d), 4.83 (1H, d), 1.50 (18H, s).
【０２７３】
ｂ)２−クロロ−５−フルオロ−６−メチル−３−ピリジンカルボニトリル
段階ａ)の生成物(１.３ｇ)に、トリフルオロ酢酸(２ml)と、ジフェニル エーテル(１０ｇ)を加えた。混合物を１０分間還流した。混合物をイソヘキサンに溶解し、ろ過し、シリカに通した。シリカを１０％ ジクロロメタン／イソヘキサンで、次にジクロロメタンで洗浄した。ジクロロメタン層を蒸発し、固体を得、それを冷イソヘキサンでトリチュレートし、副題化合物を得た(５１０mg)。
MS APCI +ve m/z 169/71 (M+H+).
1H NMR  400MHz  (CDCl3) 7.64 (1H, d), 2.59 (3H, s).
【０２７４】
ｃ)１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[(２Ｒ)−２−[(３−クロロ−５−フルオロ−６−メチル−２−ピリジニル)オキシ]−２−(２−チアゾリル)エチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
副題化合物(１８０mg)を、実施例８の段階ｂ)の方法によって、段階ｂ)の生成物と、実施例８の段階ａ)の(２Ｒ,４Ｓ)生成物を用いて製造した。
MS APCI +ve m/z 463/5 (M+H+).
【０２７５】
ｄ)２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−(２−チアゾリル)ブチル]オキシ]−５−フルオロ−６−メチル−３−ピリジンカルボニトリル塩酸塩
白色の固体として、表題化合物(１００mg)を、実施例５５の段階ｄ)の方法によって、段階ｃ)の生成物を用いて製造した。
ｍ.ｐ.  １４８−５０℃.
MS APCI +ve m/z 323 (M+H+).
1H NMR 400MHz  (d6-DMSO) 8.38 (1H, d), 8.12 (4H, bs), 7.85 (1H, d), 7.78 (1H, d), 6.60 (1H, m), 3.70 (1H, m), 3.59 (1H, m), 3.35 (1H, m), 2.52-2.43 (5H, m).
【０２７６】
実施例６０
４−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−１−(３−フルオロ−２−チエニル)−４−ヒドロキシブチル]チオ]−６−メトキシ−３−ピリジンカルボニトリル (Ｅ)−ブテンジオエート塩
ａ)３−フルオロ−２−チオフェンカルボン酸
副題化合物を、参考文献 (OPPI BRIEFS, 1997, 29, 221-223) の方法によって、副題化合物を黄色の固体として得た(１.５ｇ, ４０％)。
ｍ.ｐ.  １７１−１７２℃(ｌｉｔ.  １７２−１７３℃).
1H NMR 300MHz (CDCl3) δ 7.52 (1H, dd), 6.89 (1H, d).
【０２７７】
ｂ)３−フルオロチオフェン
副題化合物を、参考文献 (Synth. Comm, 1994, 24, 95-101) の方法によって、副題化合物を透明な液体として得た(５４０mg, ６２％)。
1H NMR 300MHz (CDCl3) 7.20-7.16 (1H, m), 6.85-6.83 (1H, m), 6.71-6.69 (1H, m).
【０２７８】
ｃ)(４Ｓ)−１,１−ジメチル(Dimethethyl) ４−[(２Ｓ)−２−(３−フルオロ−２−チエニル)−２−ヒドロキシエチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
副題化合物を、実施例１の段階ａ)の方法によって、(４Ｓ)−１,１−ジメチルエチル−２,２−ジメチル−４−(２−オキソエチル)−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル、およびフェニルリチウムの代わりに３−フルオロ−２−チエニルリチウムを用いて製造した。クロマトグラフィー(シリカ, １０％ 酢酸エチル／イソヘキサンを溶出液として)によって精製し、副題化合物を薄黄色のゴム状物質として得た(５００mg, ２８％)。
MS (APCI+ve) m/z  246 [M(+H)]+.
1H NMR 300MHz (CDCl3)  7.07 (1H, dd), 6.73 (1H, d), 5.23 (1H, d), 5.03-4.93 (1H, m), 4.38-4.28 (1H, m), 4.04-3.99 (1H, m), 3.70-3.66 (1H, m), 2.20-2.10 (1H, m), 1.96-1.86 (1H, m), 1.55-1.52 (15H, m).
【０２７９】
ｄ)(４Ｓ)−１,１−ジメチルエチル ４−[(２Ｒ)−２−(アセチルチオ)−２−(３−フルオロ−２−チエニル)−２−エチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
副題化合物を、実施例１０の段階ｇ)の方法によって、チオ安息香酸の代わりに、チオ酢酸と段階ｃ)の生成物を、および(４Ｓ)−１,１−ジメチルエチル ４−[(２Ｓ)−２−ヒドロキシ−２−フェニルエチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステルを用いて製造した。クロマトグラフィー(シリカ, ５％ 酢酸エチル／イソヘキサンを溶出液として)によって精製し、副題化合物を無色の油状物として得た(３００mg)。
MS (APCI+ve) m/z  304 [M(+H)(-Boc)]+.
1H NMR 300MHz (CDCl3)  7.07-7.05 (1H, m), 6.74-6.70 (1H, m), 4.94-4.80 (1H, m), 4.05-3.80 (3H, m), 2.36-2.30 (4H, m), 2.18-2.08 (1H, m), 1.57-1.47 (15H, m).
【０２８０】
ｅ)(４Ｓ)−１,１−ジメチルエチル ４−[(２Ｓ)−２−[(５−シアノ−２−メトキシ−４−ピリジニル)チオ]−２−(３−フルオロ−２−チエニル)エチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
副題化合物を、実施例１０の段階ｍ)の方法によって、６−メトキシ−４−(メチルスルホニル)−３−ピリジンカルボニトリル、および(４Ｓ)−１,１−ジメチルエチル ４−[(２Ｓ)−２−(ベンゾイルチオ)−２−フェニルエチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステルの代わりに、(４Ｓ)−１,１−ジメチルエチル ４−[(２Ｓ)−２−(アセチルチオ)−２−(３−フルオロ−２−チエニル)エチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジン カルボン酸エステルを用いて製造した。クロマトグラフィー(シリカ, １０％ 酢酸エチル／イソヘキサン)によって精製し、副題化合物を、透明なゴム状物質として得た(１００mg)。
MS (APCI+ve) m/z  394 [M(+H)(-Boc)]+.
1H NMR 300MHz (CDCl3)  8.32-8.30 (1H, m), 7.14-7.10 (1H, m), 6.74-6.70 (2H, m) 5.06-4.64  (1H, m), 4.18-4.08 (1H, m), 4.00-3.85 (4H, m), 3.78-3.48 (1H, m), 2.56-2.15 (2H, m), 1.58-1.46 (15H, m).
【０２８１】
ｆ)４−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−１−(３−フルオロ−２−チエニル)−４−ヒドロキシブチル]チオ]−６−メトキシ−３−ピリジンカルボニトリル (Ｅ)−ブテンジオエート塩
表題化合物を、実施例１０の段階ｎ)の方法によって製造し、表題化合物を白色の固体として得た(５６mg)。
ｍ.ｐ.  １７７−１７８℃.
MS (APCI+ve) m/z  354 [M(+H)]+.
1H NMR 300MHz (d6-DMSO) 8.59 (1H, s), 7.55-7.52 (1H, m), 7.02-6.94 (2H, m), 6.47 (2H, s), 5.45-5.39 (1H, m), 3.92 (3H, s), 3.55-3.35 (1H, m), 3.00-2.90 (1H, m), 2.70-2.60 (1H, m), 2.20-2.10 (1H, m), 2.05-1.95 (1H, m).
【０２８２】
実施例６１
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−１−(４−クロロ−５−チアゾリル)−４−ヒドロキシブチル]オキシ]−４−クロロ−５−フルオロベンゾニトリル (Ｅ)−ブテンジオエート塩
ａ)２,４−ジクロロチアゾール
副題化合物を、参考文献 (Bull. Chim. Soc. Fr., 1962, 1735) の方法によって、副題化合物を白色の固体として得た(７.１６ｇ)。
ｍ.ｐ.  ４１−４２℃(ｌｉｔ.  ４２−４３℃).
1H NMR 300MHz (CDCl3) 7.01 (1H, s).
【０２８３】
ｂ)(４Ｓ)−１,１−ジメチルエチル ４−[(２Ｒ)−２−(２,４−ジクロロ−５−チアゾリル)−２−ヒドロキシエチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
副題化合物を、実施例１の段階ａ)の方法によって、(４Ｓ)−１,１−ジメチルエチル エステル ２,２−ジメチル−４−(２−オキソエチル)−３−オキサゾリジンカルボン酸、およびフェニルリチウムの代わりに２,４−ジクロロ−５−チアゾリルリチウムを用いて製造した。クロマトグラフィー(シリカ, イソヘキサン中２０％ 酢酸エチルを溶出液として)によって精製し、副題化合物を薄黄色のゴム状物質として得た(７４４mg)。
MS (APCI+ve) m/z  297/299/301 [M(+H)(-Boc)]+.
1H NMR 300MHz (CDCl3) 5.08-4.98 (1H, m), 4.16-4.04 (2H, m), 3.84-3.71 (1H, m), 2.32-2.22 (2H, m), 1.61-1.45 (15H, m).
【０２８４】
ｃ)(４Ｓ)−１,１−ジメチルエチル ４−[(２Ｒ)−２−(４−クロロ−５−チアゾリル)−２−ヒドロキシエチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
ＭｅＯＨ(１０ml)中のパラジウム−活性炭(７５mg)と、酢酸ナトリウム三水和物(３８０mg)の懸濁液に、攪拌しながら、ＭｅＯＨ(１５ml)中の段階ｂ)の生成物(７４０mg)の溶液を加えた。混合物を水素雰囲気下で(５bar)、７２時間置いた。混合物をろ過し、蒸発乾固した。残さをジクロロメタン(２５ml)に溶解し、乾燥し(Ｎａ２ＳＯ４)、ろ過し、真空下で濃縮した。クロマトグラフィー(シリカ, ２０％ 酢酸エチル／イソヘキサンを溶出液として)によって精製し、副題化合物を無色のゴム状物質として得た(６５３mg)。
MS (APCI+ve) m/z  363/365 [M(+H)]+.
1H NMR 300MHz (CDCl3) 8.63 (1H, s), 5.20-5.10 (1H, m), 4.18-4.04 (2H, m), 3.91-3.84 (1H, m), 2.27-2.20 (2H, m), 1.62-1.44 (15H, m).
【０２８５】
ｄ)(４Ｓ)−１,１−ジメチルエチル ４−[(２Ｒ)−２−(５−クロロ−２−シアノ−４−フルオロフェノキシ)−２−(４−クロロ−５−チアゾリル)エチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
副題化合物を、実施例８の段階ｂ)の方法によって、４−クロロ−２,５−ジフルオロベンゾニトリル、および段階ｂ)の生成物(６５０mg)を用いて製造した。クロマトグラフィー(シリカ, ２０％ 酢酸エチル／イソヘキサン)によって精製し、副題化合物を薄緑色の泡沫として得た(１９０mg)。
MS (APCI+ve) m/z  416/418/420 [M(+H)(-Boc)]+.
1H NMR 300MHz (CDCl3)   9.10 (1H, s), 7.87 (1H, d), 7.39 (1H, d) 5.98  (1H, dd), 4.19-4.13 (1H, m), 3.99-3.97 (2H, m), 2.58-2.48 (1H, m), 2.20-2.13 (1H, m), 1.42-1.40 (15H, m).
【０２８６】
ｅ)２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−１−(４−クロロ−５−チアゾリル)−４−ヒドロキシブチル]チオ]−４−クロロ−５−フルオロベンゾニトリル (Ｅ)−ブテンジオエート塩
表題化合物を実施例１０の段階ｎ)の方法によって製造し、表題化合物を薄黄色の固体として得た(１３６mg)。
ｍ.ｐ.  １７７−１７８℃.
MS (APCI+ve) m/z  376/378/380 [M(+H)]+.
1H NMR 300MHz (d6-DMSO) 9.19 (1H, s), 8.03 (1H, d), 7.65 (1H, d), 6.48 (2H, s), 6.17 (1H, t), 3.60-3.48 (2H, m), 3.10-3.06 (1H, m), 2.37-2.18 (2H, m).
【０２８７】
実施例６２
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−５−ニトロベンゾニトリル塩酸塩
表題化合物を、実施例１０の段階ｍ)の方法 および実施例２６の段階ｇ)の方法によって、２−クロロ−４−ニトロ−ベンゾニトリルと 実施例１０の段階ｇ)の生成物を用いて製造した。
MS (APCI+ve) m/z 344 [M(+H)]+.
1H  400MHz (DMSO-d6) 8.68 (1H, s), 8.38 (1H, d of d), 8.19 (3H, bs), 7.95 (1H, d), 7.58 (2H, d), 7.39 (2H, m), 7.31 (1H, t),  5.35 (2H, m), 3.2-3.52 (2H m), 2.96 (1H, bs), 2.33 (1H, m), 2.22 (1H, m).
【０２８８】
実施例６３
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−５−クロロ−３−ピリジンカルボニトリル−(Ｅ)−ブテンジオエート塩
ａ)２,５−ジクロロ−３−ピリジンカルボニトリル
窒素下、−７８℃で、Ｅｔ２Ｏ(４ml)中のｎ−ＢｕＬｉ(１.９ml, ２.５Ｍ ヘキサン溶液)に、Ｅｔ２Ｏ(４ml)中の３−ブロモ−２,５−ジクロロ−ピリジン(１.０８ｇ)の溶液を滴下し、１.５時間攪拌した。固体の１−シアノイミダゾール(０.５３ｇ)を加え、反応物を２時間攪拌した。室温まで温めた後、水を加え、混合物をＥｔ２Ｏで抽出した。合わせた有機物を塩水で洗浄し、乾燥し(Ｎａ２ＳＯ４)、蒸発し、黒色の固体を得た(０.６４ｇ)。クロマトグラフィー(シリカ, イソヘキサン／Ｅｔ２Ｏを溶出液として)によって精製し、副題化合物を白色の固体として得た(０.１３ｇ)。
1H NMR 300MHz (CDCl3) 8.56 (1H, d), 7.98 (1H, d).
【０２８９】
ｂ)２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−５−クロロ−３−ピリジンカルボニトリル−(Ｅ)−ブテンジオエート塩
表題化合物を、実施例１０の段階ｍの方法 およびｎ)の方法によって、段階ａ)の生成物と 実施例１０の段階ｇ)の生成物を用いて製造した。
MS (APCI+ve) m/z 334 [M(+H)]+.
1H  400MHz (DMSO-d6) 8.80 (1H, d), 8.50 (1H, d),7.50 (2H, d), 7.36 (2H, t), 7.29 (1H, tt), 6.47 (2H, s), 5.32 (1H, dd), 3.44 (1H, dd), 3.35 (1H, dd), 2.79 (1H, m), 2.29 (1H, m), 2.17 (1H, m).
【０２９０】
実施例６４
β−アミノ−δ−[(４−アミノ−２−ニトロフェニル)チオ]−(β１Ｓ,δ１Ｒ)−ベンゼンブタノール
ａ)１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[(２Ｒ)−２−[(４−アミノ−２−ニトロフェニル)チオ]−２−フェニルエチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
副題化合物を、実施例１０の段階ｍ)の方法によって、実施例１０の段階ｇ)の生成物と ４−クロロ−３−ニトロアニリンを用いて製造した。
MS APCI +ve m/z 374 ([M+H-boc]+).
【０２９１】
ｂ)β−アミノ−δ−[(４−アミノ−２−ニトロフェニル)チオ]−(β１Ｓ,δ１Ｒ)−ベンゼンブタノール
表題化合物を、実施例１０の段階ｎ)の方法によって、段階ａ)の生成物を用いて製造した。
MS APCI +ve  m/z 334 ([M+H]+).
1H  400MHz (DMSO-d6/D2O) 7.35-7.18 (6H, m), 6.98 (1H, d), 6.72 (1H, dd), 4.54 (1H, t), 3.62-3.36 (2H, m), 2.96 (1H, t), 2.18-2.05 (2H, m).
【０２９２】
実施例６５
２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−５−ブロモ−ベンゾニトリル エタンジオエート
ａ)１,１−ジメチルエチル (４Ｓ)−４−[(２Ｒ)−２−[(４−ブロモ−２−シアノフェニル)チオ]−２−フェニルエチル]−２,２−ジメチル−３−オキサゾリジンカルボン酸エステル
窒素下、室温で、実施例１の段階ｂ)の生成物(４４１mg)を、メタノール中 ７Ｍ  ＮＨ３(１０ml)中で６時間攪拌した。次に混合物を真空下で濃縮し、残さをＤＭＦ(１０ml)に溶解し、５−ブロモ−２−フルオロベンゾニトリル(２００mg)で処理し、次に、窒素下で、炭酸セシウム(６５０mg)で処理した。混合物を室温で２０時間攪拌し、次に酢酸エチルと水の層間に分配した。分離した水相を酢酸エチルで抽出し、合わせた有機抽出物を塩水で洗浄し、乾燥した(ＭｇＳＯ４)。溶媒を蒸発し、残さをクロマトグラフィー(シリカ, １０％ 酢酸エチル／イソヘキサン)によって精製し、副題化合物を無色の泡沫性油状物として得た(３３２mg, ６４％)。
MS APCI +ve  m/z  418 [M-Boc+2H]+.
【０２９３】
ｂ)１,１−ジメチルエチル [(１Ｓ,３Ｒ)−３−[(４−ブロモ−２−シアノフェニル)チオ]−１−(ヒドロキシメチル)−３−フェニルプロピル]カルバメート
窒素下で、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物(１mg)を、攪拌しながら、メタノール(５ml)中の段階ａ)の溶液に加え、混合物を２０℃で４８時間攪拌した。混合物を酢酸エチルで希釈し、１Ｍ 硫酸水素カリウム水溶液、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、塩水で洗浄し、次に乾燥し(ＭｇＳＯ４)、蒸発した。得られた残さをクロマトグラフィー(シリカ, ３０％  酢酸エチル／イソヘキサン)によって精製し、副題化合物を無色の泡沫性油状物を得た(１７５mg, ５７％)。
MS APCI +ve  m/z  378 [M-Boc+2H]+.
【０２９４】
ｃ)２−[[(１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−１−フェニルブチル]チオ]−５−ブロモ−ベンゾニトリル エタンジオエート
段階ｂ)の生成物を、実施例４の段階ｂ)の手順に従って脱保護し、表題化合物を白色の固体として得た(１１３mg, ６５％)。
MS APCI +ve  m/z  378 [M+H]+.
1H NMR 300 MHz (D6-DMSO) 8.11 (1H, d), 7.83 (1H, dd), 7.50 (1H, d), 7.40-7.25 (5H, m), 4.83 (1H, dd), 3.52 (1H, dd), 3.41 (1H, dd), 3.03-2.95 (1H, m), 2.31-2.21 (1H, m), 2.15-2.05 (1H, m).
【０２９５】
スクリーン
本発明による化合物の薬理学的活性を、下記のスクリーンで試験した。
スクリーン１
式(Ｉ)の化合物、またはその薬学的に許容される塩、エナンチオマー、もしくは ラセミ体の活性を、一酸化窒素合成酵素阻害活性において、Foerstermann et al., Eur. J. Pharm., 1992, 225, 161-165 の手順に基づく手順によって、スクリーニングし得る。一酸化窒素合成酵素は、３Ｈ−Ｌ−アルギニンを３Ｈ−Ｌ−シトルリンに変える。３Ｈ−Ｌ−シトルリンは、カチオン交換クロマトグラフィーによって分離して液体シンチレーション計数によって定量化し得る。
【０２９６】
誘発後に、酵素を、培養されたネズミのマクロファージ細胞株 J774A-1 (Imperial Cancer Research Fund の研究所から得た)から製造した。J774A-1 細胞を、１０％ ウシ胎児血清、４ｍＭ  Ｌ−グルタミン、および抗生物質(１００単位／ml ペニシリン Ｇ、１００mg/ml ストレプトマイシン、および０.２５mg/ml アンホテリシン Ｂ)を加えた ダルベッコ変法イーグル培地(ＤＭＥＭ)中で培養する。細胞を３５mlの培地を含む２２５ｃｍ３フラスコ中で、３７℃で、５％ ＣＯ２を含む加湿雰囲気下で普通に成長させる。
【０２９７】
一酸化窒素合成酵素は、インターフェロン−ｇ(ＩＦＮｇ)およびリポポリサッカライド(ＬＰＳ)に対する応答で、細胞によって産生される。コンフルーエントな培養フラスコの培地を除き、１mg/mlのＬＰＳと１０単位／mlのＩＦＮｇを含む２５ml(フラスコ当たり)の新しい培地に置き換える。培養１７−２０時間後、培養培地のフラスコ表面から細胞のシートをかき取ることによって、細胞の収穫を行う。細胞を遠心分離(１０００Ｇ, １０分間)によって集め、５０ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ(ｐＨ ７.５, ２０℃)、１０％(v/v)のグリセロール、０.１％(v/v) Triton-X-100、０.１ｍＭのジチオトレイトール、およびロイペプチン(２mg/ml)、大豆トリプシン阻害剤(１０mg/ml)、アプロチニン(５mg/ml)、およびフェニルメチル−スルホニル フッ化物(５０mg/ml)を含むプロテアーゼ阻害剤のカクテルを含む溶液を、細胞のペレットに加えることによってライセートを製造した。
【０２９８】
アッセイのために、２５μｌの基質カクテル(５０ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ(ｐＨ ７.５, ２０℃)、４００μＭのＮＡＤＰＨ、２０μＭのフラビン アデニン ジヌクレオチド、２０μＭのフラビン モノヌクレオチド、４μＭのテトラヒドロビオプテリン、１２μＭのＬ−アルギニン、および０.０２５ｍＣｉ  Ｌ−[３Ｈ]アルギニン)を、２５μｌの５０ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ中の試験化合物の溶液を含む９６ウェル フィルター プレート(孔のサイズ：０.４５μＭ)に加える。反応は、５０μｌの細胞ライセート(上記で製造)を添加することによって始め、１時間室温でインキュベートした後、３ｍＭ ニトロアルギニンと２１ｍＭのＥＤＴＡの水溶液５０μｌを添加することによって終わらせた。
【０２９９】
ラベルされたＬ−シトルリンを、ラベルされたＬ−アルギニンから、Dowex AG-50W を用いて分離した。１５０μｌの２５％ Dowex 50W (Ｎａ＋型)の水性のスラリーをアッセイに加え、その後全体を９６ウェルプレートでろ過した。７５μｌのろ液をサンプリングし、固形シンチラント(scintillant)を含む９６ウェルプレートのウェルに加えた。試料を乾燥させた後、Ｌ−シトルリンをシンチレーション計数によって定量した。
【０３００】
典型的な実験において、基礎活性(basal activity)は、試料７５μｌ当たり３００ｄｐｍであり、試薬コントロールでは１９００ｄｐｍに増大する。化合物の活性は、ＩＣ５０(アッセイ中５０％酵素阻害を示す薬物の濃度)として表し、アミノグアニジン[ＩＣ５０(５０％阻害濃度)が１０μＭ]は、手順を確かめるための標準として試験された。化合物は、濃度の範囲で試験され、ＩＣ５０値を得る阻害から計算される。１００μＭで少なくとも２５％まで酵素を阻害する化合物は、活性があるとして分類され、少なくとも１回再試験にかけられる。
【０３０１】
上記のスクリーンにおいて、実施例１から１０の化合物を試験し、１０μＭ未満のＩＣ５０値を得た。このことは、これらが有用な治療活性を示すことが期待されることを示している。
【０３０２】
スクリーン２
リコンビナントのヒトのＮＯ合成酵素(ｉＮＯＳ、ｅＮＯＳ、およびｎＮＯＳ)を、E. coli 中で発現し、補因子(ＦＡＤ、ＦＭＮ、Ｈ４Ｂ)、プロテアーゼ阻害剤、リゾチウム、および界面活性剤 CHAPS を含む、Hepes 緩衝液(ｐＨ ７.４)中でライセートを作製した。これらの調製物を、適切な希釈で、様々なアイソフォーム(isoform)の阻害を評価するために用いた。Foerstermann et al.9の方法の適応を用いて、ＮＯＳの阻害を、Ｌ−[３Ｈ]−アルギニンからのＬ−[３Ｈ]−シトルリンの形成を測定することによって決定した。酵素アッセイを、３μＭの[３Ｈ]−アルギニン、１ｍＭのＮＡＤＰＨ、およびＮＯＳ活性を維持するのに必要な他の補因子(ＦＡＤ、ＦＭＮ、Ｈ４Ｂ、カルモジュリン、Ｃａ２＋)の存在下で行った。様々なＮＯＳ阻害剤がゆっくりとした結合速度を示すか、または時間依存で酵素を不活性化することが報告されていることから、酵素と阻害剤を、アルギニンを添加して反応を始める前に、ＮＡＤＰＨの存在下で、６０分間プレインキュベートした。アッセイをクエンチする前に、インキュベーションをさらに６０分間続け、９６−ウェル形式での Dowex-50W 樹脂でのクロマトグラフィーによって、[３Ｈ]−シトルリンを未反応の基質から分離した。
【０３０３】
上記のスクリーンで、実施例１から６５の化合物を試験し、ｉＮＯＳ酵素に対して１０μＭ未満のＩＣ５０値を得た。このことは、これらが有用な治療活性を示すことが期待されることを示している。
【０３０４】
スクリーン３
化合物はまた、下記のアッセイで示されるように、ヒト型の誘導型一酸化窒素合成酵素に対して活性を示す。
ヒトの結腸直腸癌細胞株ＤＬＤ−１(European Collection of Animal Cell Culture - cell line number 90102540 から得られる)を、１０%(v/v) ウシ胎児血清と、２ｍＭのＬ−グルタミンを加えたＲＰＭＩ １６４０中で、３７℃で、５％ ＣＯ２中で、決まった方法で成長させた。
【０３０５】
一酸化窒素合成酵素を、ヒトのリコンビナント γ−ＩＦＮ(１０００単位／ml)、ＴＮＦ−α(２００Ｕ／ml)、ＩＬ−６(２００Ｕ／ml)、およびＩＬ−１β(２５０Ｕ／ml)を含む培地の添加によって、細胞中で誘発した。３７℃で１８時間インキュベートした後、培地を除去し、細胞を温リン酸緩衝生理食塩水で洗浄した。試験化合物の存在下 および非存在下で、１００μＭのＬ−アルギニンと １００μＭのベラパミル−ＨＣｌを含むＲＰＭＩ １６４０中で、３７℃／５％ ＣＯ２で、さらに５時間細胞をインキュベートした。
【０３０６】
亜硝酸塩の蓄積を、Griess 試薬 (１mlの２.５%(v/v)  リン酸中の １０mg/mlのスルファニルアミド、１mgのＮ−(１−ナフチル)エチレンジアミン)を伴う培養培地を等体積混合することによって決定した。化合物の存在下での阻害を、未処理の細胞によって生産される亜硝酸塩のレベルに関して計算した。ＩＣ５０値を、化合物の濃度に対する％阻害の片対数プロットから見積もった。
【０３０７】
このスクリーンにおいて、実施例１から６５の化合物は、１００μＭ未満のＩＣ５０値を与えた。このことは、これらが有用な治療活性を示すことが予期されることを示している。
【国際公開パンフレット】
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