(57)【要約】  本発明は４−置換−フェニルアミノベンズヒドロキサム酸誘導体の酸素化エステル、その医薬組成物および使用方法に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の式：
【化１】
2005515251.tif 000043
〔式中、
Ｗは
【化２】
2005515251.tif 000044
であり、
Ｒ2は水素、メチル、フッ素または塩素であり；
Ｒ3は水素またはフッ素であり；
Ｒ4は−ＣＨ2Ｓ(ＣＨ2)m(ＣＨ3)、−Ｃ≡Ｃ−(ＣＨ2)qＮＨＣＨ3、−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ2ＯＣＨ3、(Ｚ)−ＣＨＣＨＣＨ2ＯＣＨ3、−(ＣＨ2)nＣＯ2Ｒ6、−(ＣＦ2)pＣＦ3、−ＣＨ2(ＣＦ2)qＣＦ3、−(ＣＨ2)mＣＦ(ＣＦ3)2、−ＣＨ(ＣＦ3)2、−ＣＦ2ＣＦ(ＣＦ3)2、−Ｃ(ＣＦ3)3、−Ｃ≡Ｃ−(ＣＨ2)qＮ(ＣＨ3)2、−(Ｚ)−ＣＨＣＨ−(ＣＨ2)qＮＨＣＨ3、(Ｚ)−ＣＨＣＨ−(ＣＨ2)qＮ(ＣＨ3)2、Ｃ(Ｏ)Ｃ1-3アルキル、またはＣ(Ｏ)ＮＨＣＨ3であり；
ｍは０〜１であり；
ｎは０〜２であり；
ｐは１〜５であり；
ｑは１〜２であり；
Ｒ5は水素、フッ素、臭素または塩素であり；
Ｒ6は水素、メチルまたはエチルである〕
の化合物およびその薬学的に許容できる塩。
【請求項２】
Ｗが
【化３】
2005515251.tif 000045
である請求項１記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ2が水素、フッ素または塩素である請求項１記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ3がフッ素である請求項１記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ4が−(ＣＨ2)nＣＯ2Ｒ6である請求項１記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ4が−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ2ＯＣＨ3である請求項１記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ4がＣ(Ｏ)ＣＨ3である請求項１記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ5が水素である請求項１記載の化合物。
【請求項９】
請求項１記載の化合物および薬学的に許容できる担体を含有する医薬組成物。
【請求項１０】
増殖性疾患の治療を必要とする患者に治療的有効量の請求項１記載の化合物を投与することからなる、該疾患を治療する方法。
【請求項１１】
ガンの治療を必要とする患者に治療的有効量の請求項１記載の化合物を投与することからなる、該疾患を治療する方法。
【請求項１２】
再狭窄、乾癬、アテローム性動脈硬化、骨関節炎、リウマチ様関節炎、心不全、慢性的痛み、神経障害性の痛みの治療を必要とする患者に治療的有効量の請求項１記載の化合物を投与することからなる、該疾患を治療する方法。
【請求項１３】
ガンの治療を必要とする患者に放射線治療と組み合わせて治療的有効量の請求項１記載の化合物を投与することからなる、該疾患を治療する方法。
【請求項１４】
ガンの治療を必要とする患者に少なくとも１つの化学療法剤を組み合わせて治療的有効量の請求項１記載の化合物を投与することからなる、該疾患を治療する方法。
【請求項１５】
以下からなる群：
メチル４−［［２,３−ジフルオロ−６−［［（２−ヒドロキシエトキシ）アミノ］カルボニル］−フェニル］アミノ］ベンゾエート；
４−［［２,３−ジフルオロ−６−［［（２−ヒドロキシエトキシ）アミノ］カルボニル］フェニル］アミノ］安息香酸；
３,４−ジフルオロ−２−［［２−フルオロ−４−（３−メトキシ−１−プロピニル）フェニル］アミノ］−Ｎ−（２−ヒドロキシエトキシ）ベンズアミド；
メチル４−（２,３−ジフルオロ−６−｛［（２−ヒドロキシ−エトキシ）アミノ］カルボニル｝アニリノ）−３−フルオロベンゾエート；
４−（２,３−ジフルオロ−６−｛［（２−ヒドロキシエトキシ）アミノ］カルボニル｝アニリノ）−３−フルオロ安息香酸；
２−（４−アセチル−２−クロロ−フェニルアミノ）−３,４−ジフルオロ−Ｎ−（２−ヒドロキシ−エトキシ）−ベンズアミド；および
２−｛２−フルオロ−４−［（メチルアミノ）カルボニル］アニリノ｝−３,４−ジフルオロ−Ｎ−（２−ヒドロキシエトキシ）ベンズアミド
から選択される化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は４−置換−フェニルアミノベンズヒドロキサム酸誘導体の酸素化エステル、その医薬組成物および使用方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
ＭＡＰＫ／ＥＲＫキナーゼ（「ＭＥＫ」）酵素は、例えば免疫修飾、炎症および増殖性疾患、例えばガンおよび再狭窄に関与する二重特異性キナーゼである。
【０００３】
増殖性疾患は、細胞内のシグナリングシステムまたは特定のタンパク質の情報伝達機構の欠陥によって生じる。欠陥は、固有の活性またはシグナリングカスケードの１つまたはそれ以上のシグナリングタンパク質の細胞濃度のいずれかの変化を含む。細胞はそれ自体のレセプタに結合する成育因子を産生し、絶えず増殖を刺激する自己自律分泌ループを生じ得る。細胞内シグナリングタンパク質の突然変異または過剰発現は、細胞内の偽性の分裂促進性シグナルをもたらし得る。いくつかの最も一般的な突然変異は、Ｒａｓとして公知のタンパク質、ＧＴＰに結合されると活性化されそしてＧＤＰに結合されると不活性化されるＧ−タンパク質をコードする遺伝子で生じる。上述の成長因子レセプタ、および多数の他の分裂促進性レセプタは、活性化されるとＧＤＰ−結合状態からＧＴＰ−結合状態に変換されるＲａｓをもたらす。このシグナルは、大部分の細胞型における増殖の絶対的な前提条件である。特にＲａｓ−ＧＴＰ複合体の失活におけるこのシグナリングシステムの欠陥は、ガンにおいて一般的であり、そして慢性的に活性化されているＲａｓの下でシグナリングカスケードをもたらす。
【０００４】
活性化されたＲａｓは、次にセリン／トレオニンキナーゼのカスケードの活性化をもたらす。それ自体の活性化のために活性Ｒａｓ−ＧＴＰを必要とすることが公知のキナーゼ群の一つが、Ｒａｆファミリーである。これらは次にＭＥＫ（例えばＭＥＫ1およびＭＥＫ2）を活性化し、次いでＭＡＰキナーゼ、ＥＲＫ（ＥＲＫ1およびＥＲＫ2）を活性化する。分裂促進因子によるＭＡＰキナーゼの活性化は増殖に必須のようであり；このキナーゼの構成的活性化は細胞形質転換を誘導するのに十分である。例えば、ドミナントネガティブなＲａｆ−１タンパク質を用いることにより、下流のＲａｓシグナリングの遮断は細胞表面レセプタからまたは腫瘍形成性Ｒａｓ突然変異から誘導されるかどうかに関係なくマイトジェネシスを完全に阻害することができる。Ｒａｓはそれ自体がプロテインキナーゼでないにもかかわらず、Ｒａｆおよび他のキナーゼの活性化に、おそらくリン酸化機構を介して参加する。一旦活性化されると、Ｒａｆおよび他のキナーゼは、２つの接近して隣接したセリン残基、ＭＥＫ−１の場合Ｓ218およびＳ222においてＭＥＫをリン酸化し、それはキナーゼとしてのＭＥＫの活性化の前提条件である。次にＭＥＫは、単一のアミノ酸によって分離される、チロシン、Ｙ185およびスレオニン残基、Ｔ183両方においてＭＡＰキナーゼをリン酸化する。この二重のリン酸化は、少なくとも１００倍、ＭＡＰキナーゼを活性化する。次いで、活性化されたＭＡＰキナーゼは、いくつかの転写因子および他のキナーゼを含む多数のタンパク質のリン酸化を触媒することができる。これらのＭＡＰキナーゼリン酸化の多くが、標的タンパク質、例えばキナーゼ、転写因子または他の細胞タンパク質を分裂促進的に活性化している。Ｒａｆ−１およびＭＥＫＫに加え、他のキナーゼがＭＥＫを活性化し、そしてＭＥＫ自体はシグナル統合キナーゼであると思われる。現在の見解は、ＭＥＫがＭＡＰキナーゼのリン酸化に非常に特異的であることである。事実、ＭＡＰキナーゼ、ＥＲＫ以外のＭＥＫについての基質がこれまで示されておらず、そしてＭＥＫはＭＡＰキナーゼリン酸化配列に基づくペプチドをリン酸化しないか、または変性されたＭＡＰキナーゼさえリン酸化しない。ＭＥＫはまた、ＭＡＰキナーゼをリン酸化する前にＭＡＰキナーゼと強く関連するように見え、ＭＥＫによるＭＡＰキナーゼのリン酸化がその２つのタンパク質間の事前の強い相互作用を必要とする可能性があることを示唆する。ＭＥＫのこの条件および普通でない特異性の両方は、おそらくＡＴＰ結合部の通常の遮断よりむしろアロステリック機構を介して働くＭＥＫの選択的阻害剤を見出し得るのに十分な相違を、他のタンパク質キナーゼに対する作用のその機構において有し得ることを示唆する。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明の化合物がＭＥＫの阻害剤であり、そしてＭＥＫカスケードによって調節される疾患に加え、種々の増殖性疾患状態、例えばＭＥＫの機能亢進に関連した状態の治療に有用であることを見出した。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明は以下の式の化合物ならびにその薬学的に許容できる塩、（Ｃ1-6）アミドおよび（Ｃ1-6）エステルを提供する：
【化１】
2005515251.tif 000002
（式中、
Ｗは、
【化２】
2005515251.tif 000003
であり、
Ｒ2は水素、メチル、フッ素または塩素であり；
Ｒ3は水素またはフッ素であり；
Ｒ4は−ＣＨ2Ｓ(ＣＨ2)m(ＣＨ3)、−Ｃ≡Ｃ−(ＣＨ2)qＮＨＣＨ3、−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ2ＯＣＨ3、(Ｚ)−ＣＨＣＨＣＨ2ＯＣＨ3、−(ＣＨ2)nＣＯ2Ｒ6、−(ＣＦ2)pＣＦ3、−ＣＨ2(ＣＦ2)qＣＦ3、−(ＣＨ2)mＣＦ(ＣＦ3)2、−ＣＨ(ＣＦ3)2、−ＣＦ2ＣＦ(ＣＦ3)2、−Ｃ(ＣＦ3)3、−Ｃ≡Ｃ−(ＣＨ2)qＮ(ＣＨ3)2、−(Ｚ)−ＣＨＣＨ−(ＣＨ2)qＮＨＣＨ3、(Ｚ)−ＣＨＣＨ−(ＣＨ2)qＮ(ＣＨ3)2またはＣ(Ｏ)Ｃ1-3アルキルであり；
ｍは０〜１であり；
ｎは０〜２であり；
ｐは１〜５であり；
ｑは１〜２であり；
Ｒ5は水素、フッ素、臭素または塩素であり；
Ｒ6は水素、メチルまたはエチルである）。
【０００７】
本発明は式Ｉの化合物を提供し、ここでＷは
【化３】
2005515251.tif 000004
であり；Ｒ2は水素、フッ素または塩素であり；Ｒ3はフッ素であり；Ｒ4は−(ＣＨ2)nＣＯ2Ｒ6（式中ｎは０である）であるか；Ｒ4は−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ2ＯＣＨ3であるか；またはＲ4はＣ(Ｏ)Ｃ1-3アルキルであり；そしてＲ5は水素である。
【０００８】
本発明はまた式Ｉの化合物および薬学的に許容できる担体を含有する医薬組成物を提供する。
【０００９】
さらに、本発明は治療的有効量の式Ｉの化合物を投与することからなる、増殖性疾患の治療を必要とする患者においてそれを治療する方法を提供する。
【００１０】
本発明はまた、増殖性疾患の治療のための医薬の製造のための式Ｉの化合物の使用を提供する。
【００１１】
さらに、本発明は、治療的有効量の式Ｉの化合物を投与することからなる、ガン、再狭窄、乾癬、自己免疫性疾患、アテローム性動脈硬化、骨関節炎、リウマチ様関節炎、心不全、慢性的痛みおよび神経障害性の痛みの治療を必要とする患者において、それらを治療する方法を提供する。
【００１２】
本発明はまた、ガン、再狭窄、乾癬、自己免疫性疾患、アテローム性動脈硬化、骨関節炎、リウマチ様関節炎、心不全、慢性的痛みおよび神経障害性の痛みを治療する医薬の製造のための式Ｉの化合物の使用を提供する。
【００１３】
更に本発明は、放射線治療または少なくとも１つの化学療法剤を組み合わせて治療的有効量の式Ｉの化合物を投与することからなる、ガンの治療を必要とする患者においてそれを治療する方法を提供する。
【００１４】
特定の用語は、以下、およびこの開示の全体にわたるそれらの用語の使用によって定義される。
【００１５】
本発明における用語「ハロゲン」または「ハロ」は、フッ素、臭素、塩素およびヨウ素原子、またはフルオロ、ブロモ、クロロ、およびヨードをいう。用語フッ素およびフルオロは例えば、本願明細書において同等であると理解される。
【００１６】
アルキル基、例えばＣ1-6アルキルは、自由原子と共に脂肪族鎖（すなわち、水素および炭素原子を含んでいるヒドロカルビルまたは炭化水素基構造）を含む。アルキル基は、直鎖および分枝鎖構造を含むと理解される。例としては、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔ−ブチル、ペンチル、２−ペンチル、３−ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、（Ｒ）−２−メチルブチル、（Ｓ）−２−メチルブチル、３−メチルブチル、２，３−ジメチルプロピル、ヘキシル等が挙げられる。その用語「Ｃ1-6アルキル」は、用語「Ｃ1-4アルキル」および「Ｃ1-6アルキル」の定義の範囲内に含まれる。
【００１７】
アルケニル基はアルキル基に類似であるが、少なくとも一つの二重結合（２つの隣接したｓｐ2炭素原子）を有する。二重結合および置換基の配置によって、もしあれば、二重結合の幾何構造はエンタゲゲン（entgegen）（Ｅ）またはズサメン（zusammen）（Ｚ）、シスまたはトランスであってもよい。同様に、アルキニル基は少なくとも一つの三重結合
（２つの隣接したｓｐ炭素原子）を有する。不飽和アルケニルまたはアルキニル基はそれぞれ１つまたはそれ以上の二重もしくは三重結合、またはその混合を有してもよい。アルキル基のように、不飽和基は直鎖または分枝鎖であってもよい。アルケニルおよびアルキニルの例は、ビニル、アリル、２−メチル−２−プロペニル、シス−２−ブテニル、トランス−２−ブテニルおよびアセチルを含む。
【００１８】
本発明は水和物および薬学的に許容できる塩および式Ｉによって定義される化合物の溶媒化合物を含む。本発明の化合物は十分に塩基性の官能基を持つことができ、したがって多数の無機および有機酸のいずれとも反応することができ、薬学的に許容できる塩を形成し得る。
【００１９】
本願明細書において用いられる用語「製薬上許容できる塩」は、生体に実質的に非毒性である式Ｉの化合物の塩に関する。典型的な薬学的に許容できる塩は、薬学的に許容できる鉱物または有機酸との本発明の化合物の反応によって製造されるそれらの塩を含む。上記塩はまた酸付加塩としても公知である。上記塩は、J of Pharm Sci. 1977; 66: 2-19にリストされる薬学的に許容できる塩を含み、これは当業者に公知である。
【００２０】
酸付加塩の形成に一般に使用される酸は、無機酸、例えば塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、リン酸など、および有機酸、例えばｐ−トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、シュウ酸、ｐ−ブロモフェニルスルホン酸、炭酸、コハク酸、クエン酸、安息香酸、酢酸等である。上記薬学的に許容できる塩の実施例は、硫酸塩、ピロ硫酸塩、重硫酸塩、亜硫酸塩、重亜硫酸塩、リン酸塩、モノリン酸水素塩、リン酸二水素塩、メタリン酸塩、ピロリン酸塩、臭化物、水素酸塩、ヨウ化物、酢酸塩、プロピオン酸塩、デカン酸塩、カプリン酸塩、カプリル酸塩、アクリル酸塩、アスコルビン酸塩、蟻酸塩、塩酸塩、二塩化水素化物、イソ酪酸塩、カプロン酸塩、へプタン酸塩、プロピオン酸塩、グルクロン酸塩、グルタミン酸塩、プロピオン酸塩、フェニルプロピオン酸塩、サリチル酸塩、シュウ酸塩、マロン酸塩、琥珀酸塩、スベリン酸塩、セバシン酸塩、フマル酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、ヒドロキシマテアート、マンデレート、メシレート、ニコチン酸塩、イソニコチン酸塩、ケイ皮酸塩、馬尿酸塩、ニトラート、ステアリン酸塩、フタル酸塩、テレフタル酸塩（teraphthalate）、ブチン−１，４−ジオエート、ブチン−１，４−ジカルボキシレート、ヘキシン−１，４−ジカルボキシレート、へキシン−１，６−ジオエート、安息香酸塩、クロロ安息香酸塩、メチル安息香酸塩、ヒドロジ安息香酸塩（hydrozybenzoate）、メトキシ安息香酸塩、ジニトロ安息香酸塩、ｏ−アセトキシ安息香酸塩、ナフタレン−２−安息香酸塩、フタル酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、ｐ−ブロモベンゼンスルホン酸塩、ｐ−クロロベンゼンスルホン酸塩、キシレンスルホン酸塩、フェニルアセタート、トリフルオロアセタート、フェニルプロピオン酸塩、フェニル酪酸塩、クエン酸塩、乳酸塩、α−ヒドロキシ酪酸塩、グリコール酸塩、酒石酸塩、ヘミ−酒石酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、プロパンスルホン酸塩、ヒドロキシエタンスルホン酸塩、１−ナフタレンスルホン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、１，５−ナフタレンジスルホン酸塩、マンデル酸塩、酒石酸塩等である。好適な薬学的に許容できる塩は、塩酸塩である。
【００２１】
本発明の任意の塩の一部を形成する特定の対イオンは、全体としてその塩が薬理学的に許容できる限り、そしてその対イオンが全体として塩に望ましくない性質をもたらさない限り、通常重要な性質ではないことが認識されるべきである。このような塩が水和物として存在することができることが更に理解される。
【００２２】
本明細書中に用いられる場合、用語「立体異性体」は同じ結合により結合される同じ原子からなるが、互換性のない異なる３次元構造を有する化合物をいう。その３次元構造は立体配置と呼ばれる。本明細書中に用いられる場合、用語「エナンチオマー」は分子が互
いに重ね合わせることができない鏡像である２つの立体異性体それぞれをいう。用語「キラル中心」は４つの異なる基が結合された炭素原子をいう。本明細書中に用いられる場合、用語「ジアステレオマー」はエナンチオマーでない立体異性体をいう。用語「ラセミ体」または「ラセミ混合物」はエナンチオマーの混合物をいう。
【００２３】
本発明の化合物のエナンチオマーは当該分野で周知の標準的技術を使用して当業者により分割することができ、例えば、J. Jacques他,“Enantiomers, Racemates, and Resolutions", John Wiley and Sons, Inc.1981に記載されている。分割の例としては再結晶技術またはキラルクロマトグラフィーが挙げられる。
【００２４】
本発明の化合物のいくつかは１またはそれ以上のキラル中心を有し、種々の立体異性配置で存在することができる。これらのキラル中心の結果として、本発明の化合物はラセミ体、エナンチオマーの混合物としておよび個々のエナンチオマー並びにジアステレオマーおよびジアステレオマーの混合物として存在する。全てのこのようなラセミ体、エナンチオマーおよびジアステレオイソマーが本発明の範囲内にある。
【００２５】
式Ｉの化合物は当業者が直ちに利用できる技術および手順により、例えば以下のスキームに示される以下の手順、またはその類似の変法により製造することができる。これらの合成戦略が、下記の実施例において更に例証される。これらのスキームは、いかなる形であれ本発明の範囲を限定することを目的としない。
【００２６】
本明細書中で使用される場合、次の用語は示される意味を有する：「ＢＯＣ」は、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルをいい；セライト（登録商標）は、酸洗浄されそして約９５％のＳｉＯ2であるろ過剤をいい；「ＤＭＡ」はＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミドをいい；「ＤＭＴ−ＭＭ」は４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウムクロリドをいい；「ＥｔＯＡｃ」は酢酸エチルをいい；「ＥｔＯＨ」はエチルアルコールをいい；「Ｅｔ2Ｏ」はジエチルエーテルをいい；「ｈ」は時間をいい；「ＬｉＨＭＤＳ」はリチウム１，１，１，３，３，３−ヘキサメチルジシラザンまたはリチウムビス（トリメチルシリルアミド）をいい；「リンドラー触媒」はＰｂ（ＯＡｃ）2で洗われるＰｄ／ＣａＣＯ3触媒をいい；「Ｍｅ」はメチルをいい；「ＭｅＯＨ」はメタノールをいい；「ＭｓＣｌ」はメタンスルフォニルクロリドをいい；「Ｐｄ／Ｃ」はパラジウム担持炭素をいい；「（Ｐｈ3Ｐ）2ＰｄＣｌ2」はジクロロビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）をいい；「（Ｐｈ3Ｐ）4Ｐｄ」はテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジイウム（０）をいい；「ＰｙＢｏｐ」はベンゾトリアゾール−１−イル−オキシ−トリス−ピロリジノ−ホスホニウムヘキサフルオロホスフェートをいい；「ＲＴ」は室温をいい；「ＴＥＡ」はトリエチルアミンをいい；「ＴＦＡ」はトリフルオロ酢酸をいい；「ＴＨＦ」はテトラヒドロフランをいい；「ＴＬＣ」は薄層クロマトグラフィをいい；そして「ＴＭＳ」はトリメチルシリルをいう。他の全ての用語および置換基は、特に明記しない限り前に定義される。試薬および出発材料は、当業者が直ちに利用できる。スキーム１および２は、式Ｉの化合物の合成を提供する。
【００２７】
【化４】
2005515251.tif 000005
【００２８】
スキーム１、工程Ａにおいて、２−（アリルアミノ）−安息香酸またはジフェニルアミン（３）は、テトラヒドロフラン、アセトニトリルまたはジメチルホルムアミドのような極性の非プロトン性溶剤中の強塩基、例えばリチウム１，１，１，３，３，３−ヘキサメチルジシラザン（ＬｉＨＭＤＳ）の存在下で適当な安息香酸（１）および適当なアニリン（２）のカップリングから製造することができる。例えば、アニリン（２）および安息香酸（１）を、適当な有機溶剤に溶解し、窒素下で約−７８℃まで冷やした。この懸濁液を過剰の適当な塩基、例えばＬｉＨＭＤＳで処理し、そして室温に温めた。反応は、約２時間〜約５日以内で一般的に終了させる。得られた安息香酸（３）を、溶剤を除去することにより、例えば減圧下の蒸発によってまたはセライト（登録商標）に通して沈殿固体をろ過し、そして適当な溶剤で洗浄することによって単離することができる。必要に応じて、安息香酸（３）は、標準的方法、例えばクロマトグラフィ、結晶化または蒸留によって更に精製することができる。
【００２９】
スキーム１、工程Ｂにおいて、式Ｉの化合物は、２−（アリールアミノ）−安息香酸（３）のアルコキシルアミン（４）との結合よって、必要に応じて塩基の存在下、ペプチドカップリング剤の作用によって一般に得られる。アルコキシルアミン（４）が適切に保護されることができると理解される。このような場合には、スキーム１は当該分野で公知の手順による保護基の除去を含むために変更され得る。好適なカップリング剤は、１，１’−カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）、リチウムビス（トリメチルシリルアミド）（ＬｉＨＭＤＳ）、ジフェニルホスフィンクロリド（ＤＰＰ−ＣＩ）、ベンゾトリアゾール−イル−オキシ−トリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＰｙＢＯＰ）、ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ−トリス（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＢＯＰ）、Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）または１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣＩ）を含む。好適な塩基は、ジイソプロピルエチルアミン、トリエチルアミン，４−メチルモルホリンまたはピリジンもしくは置換ピリジン、例えば４−ジメチルアミノピリジンまたは２，６−ジメチルピリジンを含む。好適な溶剤は、極性の非プロトン性溶剤、例えばジクロロメタン、テトラヒドロフラン、またはジメチルホルムアミドである。この反応は一般的に約−７８℃〜約２５℃の間の温度で実施され、そして通常約１時間〜約５日以内に終了する。生成物アミドは、溶剤を除去することにより、例えば減圧下の蒸発により単離することができ、そして必要に応じて、標準方法、例えばクロマトグラフィ、結晶化または蒸留によって更に精製することができる。
【００３０】
当分野の技術者にはジフェニルアミン（３）上のＲ4の置換基または式Ｉの化合物上のＲ4の置換基がカップリング反応前に還元され得ることが理解されよう。還元は、公知技術の条件下、例えば水素の雰囲気下、Ｐｄ／Ｃを用いた水素化を介して、アルケンまたはアルキン誘導体において行われる。
【００３１】
あるいは、式Ｉの化合物をスキーム１、工程ＣおよびＤに示すように、アルコキシアミン（４）の「活性化された」安息香酸誘導体（３ａ）との接触により一般に製造され、ここで活性化している基「Ｘ」は、酸ハロゲン化物、無水物、混合された無水物、または活性化されたエステル、例えばペンタフルオロフェニルエステル、ニトロフェニルエステルまたはチオエステルを完成させる。好適な塩基は、ジイソプロピルエチルアミン、トリエチルアミン、４−メチルモルホリン、イミダゾール、ピリジンまたは置換されたピリジン、例えば４−ジメチルアミノピリジンまたは２，６−ジメチルピリジンを含む。好適な溶剤は、極性の非プロトン性溶剤、例えばジクロロメタン、テトラヒドロフラン、またはジメチルホルムアミドである。
【００３２】
【化５】
2005515251.tif 000006
【００３３】
スキーム２、工程Ａにおいて、４−ヨードフェニルアミノ安息香酸（３’）を、適当な安息香酸（１）と適当な４−ヨードアニリン（５）の結合からスキーム１、工程Ａの一般手順に従って製造する。
【００３４】
スキーム２、工程Ｂにおいて、４−ヨードフェニルアミノ安息香酸（３’）を、スキーム１、工程Ｂまたはスキーム１、工程ＣおよびＤの一般手順に従ってアルコキシルアミン
（４）とカップリングする。
【００３５】
スキーム２、工程Ｃにおいて、式Ｉの化合物を、トリエチルアミンのような適当な溶剤中の試薬Ｍ−Ｒ4（７）による遷移金属で促進されるカップリングによって、４−ヨード−フェニルアミノベンズアミド（６）から製造する。全ての混合物を、室温で約２〜２４時間撹拌する。遷移金属で促進されるカップリングは、パラジウム(０)またはパラジウム（ＩＩ）カップリング剤、例えば(Ｐｈ3Ｐ)4Ｐｄまたは(Ｐｈ3Ｐ)2ＰｄＣｌ2およびヨウ化銅を用いて行うことができる。Ｍは遷移金属で促進されるカップリングプロセスにおいて炭素基フラグメントを移すことで知られる官能基として定義される。適当なＭ基の例はトリアルキルスタンニル、トリアルキルシリル、トリメチルシリル、亜鉛、銅、ホウ素、マグネシウムおよびリチウムを含む。当分野の技術者には置換基Ｒ4は例えば酸化、還元、脱保護、または水素化により更に変換され得ることが理解されよう。置換基Ｒ4はまた、当業者に公知の標準的合成手順により異なるＲ4に変換することができる。保護された式Ｉの化合物と同様に、生じた式Ｉの化合物は、溶剤を除去することにより、例えば減圧下で蒸発させることにより単離され得、そしてさらに所望により、標準的方法、例えばクロマトグラフィ、結晶化または蒸留によって更に精製される。
【００３６】
アニリン（２）は、当業者が直ちに利用できる技術および手順により、ならびに以下のスキームに示される以下の手順またはその変法により製造することができる。これらのスキームは、いかなる形であれ本発明の範囲を制限することを目的としない。
【００３７】
【化６】
2005515251.tif 000007
【００３８】
スキーム３、工程Ａにおいて、適当なチオレート（１１）は、４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−置換−臭化ベンジル、例えば４−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−３−フルオロベンジルブロミドと反応し（J Med Chem. 2000 ; 43: 5017)、構造（１２）の化合物を提供する。工程Ｂにおいて、化合物（１２）のＢＯＣ保護基は、例えばＴＦＡにより加水分解され、所望のアニリン（２ａ）を提供する。
【００３９】
【化７】
2005515251.tif 000008
【００４０】
スキーム４、工程Ａにおいて、適当なアセチレン（１４）、例えばメチルプロパルギルエーテル、および適当な４−ヨードアニリン（１３）を、ソノガシラ反応によってカップリングさせる。例えば、４−ヨードアニリン（１３）、例えば２−フルオロ−４−ヨードアニリンを、窒素下、ＣｕＩおよび(Ｐｈ3Ｐ)2ＰｄＣｌ2と合わせる。アセチレン誘導体（１４）を、適当な溶剤、例えばＴＥＡに加え、混合物全体を室温で、約２〜２４時間撹拌する。
【００４１】
【化８】
2005515251.tif 000009
【００４２】
上記スキーム１、工程Ａにおけるように、ジフェニルアミンを形成する標準条件下で適当な安息香酸（１）とアニリン（２ｂ）を反応させた後、アルキニルジフェニルアミン（３ａ）を、触媒、例えばリンドラー触媒またはパラジウム担持炭素および、所望により、触媒の作用を壊す適当な化合物、例えばキノリンまたはピリジンの存在下、適当な溶剤、例えばテトラヒドロフラン中にに溶解する。この混合物を、室温で、約１〜２４時間、水素の雰囲気下で撹拌する。生じたアルケニルジフェニルアミン（３ｂ）を、溶剤を除去することにより、例えば減圧下で蒸発させることにより単離でき、そしてさらに所望により、標準的方法、例えばクロマトグラフィ、結晶化または蒸留によって更に精製することができる。スキーム１、工程Ｂの条件下での適当なアルコキシアミンと、２−（アリールアミノ）安息香酸（３ａおよび３ｂ）との反応により、所望の式Ｉの化合物（式中、Ｒ4は−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ2ＯＣＨ3または−Ｃ＝Ｃ−ＣＨ2ＯＣＨ3である）を得る。
【００４３】
【化９】
2005515251.tif 000010
【００４４】
スキーム６、工程Ｂにおいて、例えばテトラヒドロピラニルエーテルにより保護された適当なアセチレン誘導体（１６）および適当な４−ヨードアニリン（１３）、例えば２−フルオロ−４−ヨードアニリンを、スキーム４、工程Ａにおけるようなソノガシラ反応によりカップリングし、所望のアニリン（２ｃ）を提供する。
【００４５】
【化１０】
2005515251.tif 000011
【００４６】
スキーム７、工程Ａにおいて、プロパルギルアルコール化合物（２０）を、スキーム２、工程Ｃの一般手順に従って遷移金属で促進されるカップリングにより、ヨウ化化合物（１８）から製造する。
【００４７】
スキーム７、工程Ｂにおいて、プロパルギルアルコール化合物（２０）を、水素化により、例えば水素の雰囲気下でＰｄ／Ｃを用いて完全に飽和した置換基に変換し、メチル４−置換−フェニルアミノベンゾエート（２２）を提供する。
【００４８】
スキーム７、工程Ｃにおいて、メチル４−置換−フェニルアミノベンゾエート（２２）を、当業者に公知の様式で、例えばＥｔＯＨ中のＮａＯＨ水溶液において脱保護し、次いでスキーム１、工程Ｂの一般手順に従ってヒドロキシルアミンとカップリングする。
【００４９】
スキーム７、工程Ｄにおいて、化合物（２４）を適当な溶剤、例えばテトラヒドロフラン中に溶解し、そして塩化メタンスルホニルと反応させ、中間体メシレートを得て、次い
でＥｔＯＡｃ中のＮａＩと反応させ、ヨウ化化合物（２６）を得る。
【００５０】
スキーム７、工程ＥおよびＦにおいて、ヨウ化化合物（２６）をそれぞれメチルアミンおよびジメチルアミンと反応させ、式Ｉの化合物（式中、ｍは３であり、そしてＲ4は−(ＣＨ2)mＮＨＣＨ3（２８）および−(ＣＨ2)mＮ(ＣＨ３)2（３０）である）を得る。
【００５１】
【化１１】
2005515251.tif 000012
【００５２】
スキーム８、工程Ａにおいて、所望のペルフルオロアルキルアニリン（２ｄ）を、ペルフルオロアルキルイオジド（２４）、例えばＣＦ3(ＣＦ2)nＩとの、適当な４−ヨードアニリン（５）、例えば２−フルオロ−４−ヨードアニリンのアルマン凝縮によって製造する（例えば、N. Yoshino他, Bull Chem Soc Jpn, 1992; 65: 2141）。
【００５３】
スキーム８、工程Ｂにおいて、所望のアニリン（２ｅ）を、適当な還元剤、例えばＬｉＡｌＨ4を用いてベンジリックフッ素原子の還元的除去により、ペルフルオロアルキルアニリン（２ｄ）から製造する（Tetrahedron Letters,1996; 37: 4655）。
【００５４】
アニリン（５）（式中、Ｒ4は−(ＣＨ2)nＣＯ2Ｒ6であり、ｎは１であり、そしてＲ6は水素またはエチルである）は、市販されているかまたは当業者により製造され得る。アニリン（５）（式中、Ｒ4は−(ＣＨ2)nＣＯ2Ｒ6であり、ｎは１であり、そしてＲ6はメチルである）を、ジアゾメタンを用いた市販の対応するアニリンのエステル化から製造する。アニリン（５）（式中、Ｒ4は−(ＣＨ2)nＣＯ2Ｒ6であり、ｎは２であり、そしてＲ6は水素である）は、市販されているかまたは当業者により製造され得る。アニリン（５）（式中、Ｒ4は−(ＣＨ2)nＣＯ2Ｒ6であり、ｎは２であり、そしてＲ6はメチルまたはエチルである）を、ジアゾメタンを用いた市販の対応するアニリンのエステル化から製造する。
【００５５】
スキーム９
【化１２】
2005515251.tif 000013
スキーム９のアニリンは式Ｉの化合物（式中、Ｒ4は−(ＣＨ2)nＣＯ2Ｒ6であり、ｎは０であり、そしてＲ6はメチルである）の製造に使用される。Ｒ2が水素であるアニリンは市販されており、そしてＲ2がフッ素であるアニリンは当業者が利用できる文献手順によって製造することができる。
【００５６】
式Ｉの化合物が本発明により提供され、式中：
Ｗは
【化１３】
2005515251.tif 000014
であり；または
Ｗは
【化１４】
2005515251.tif 000015
であり；または
Ｗは
【化１５】
2005515251.tif 000016
であり；または
Ｗは
【化１６】
2005515251.tif 000017
であり；
Ｒ2は水素、フッ素または塩素であるか；または、Ｒ2は水素またはフッ素であり；またはＲ2は水素であり；またはＲ2はフッ素であり；
Ｒ3はフッ素であり；
Ｒ4は−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ2ＯＣＨ3、−(ＣＨ2)nＣＯ2Ｒ6またはＣ(Ｏ)ＣＨ3アルキルであるか；またはＲ4は−(ＣＨ2)nＣＯ2Ｒ6（式中、ｎは０でありそしてＲ6は水素またはメチルである）であるか；またはＲ4はＣＯ2Ｈであるか；またはＲ4はＣＯ2ＣＨ3であるか；またはＲ4はＣ(Ｏ)ＣＨ3であるか；またはＲ4は−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ2ＯＣＨ3であり；
Ｒ5は水素である。
【００５７】
また、以下の式の化合物およびその薬学的に許容できる塩も本発明によって提供される：
【化１７】
2005515251.tif 000018
（式中、
Ｗは
【化１８】
2005515251.tif 000019
であり；
Ｒ2は水素、フッ素または塩素であり；
Ｒ3はフッ素であり；
Ｒ4は−ＣＨ2Ｓ(ＣＨ2)m(ＣＨ3)、−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ2ＯＣＨ3、(Ｚ)−ＣＨＣＨＣＨ2ＯＣＨ3、−(ＣＨ2)nＣＯ2Ｒ6、−(ＣＦ2)pＣＦ3、−ＣＨ2(ＣＦ2)qＣＦ3、−(ＣＨ2)mＣＦ(ＣＦ3)2、−ＣＨ（ＣＦ3)2、−ＣＦ2ＣＦ(ＣＦ3)2、−Ｃ(ＣＦ3)3、−(Ｚ)−ＣＨＣＨ−(ＣＨ2)qＮＨＣＨ3、または(Ｚ)−ＣＨＣＨ−(ＣＨ2)qＮ(ＣＨ3)2、またはＣ(Ｏ)ＣＨ3であり；
ｎは０であり；
Ｒ5は水素であり；
Ｒ6は水素またはメチルである）。
【００５８】
また、以下の式の化合物およびその薬学的に許容できる塩も本発明によって提供される：
【化１９】
2005515251.tif 000020
（式中、
Ｗは
【化２０】
2005515251.tif 000021
であり；
Ｒ2は水素、フッ素または塩素であり；
Ｒ3はフッ素であり；
Ｒ4は−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ2ＯＣＨ3、−(ＣＨ2)nＣＯ2Ｒ6またはＣ(Ｏ)ＣＨ3であり；
ｎは０であり；
Ｒ5は水素であり；
Ｒ6は水素またはメチルである）。
【００５９】
特に、本発明は以下の化合物を提供する：
メチル４−［［２，３−ジフルオロ−６−［［（２−ヒドロキシエトキシ）アミノ］カ
ルボニル］−フェニル］アミノ］ベンゾエート；
４−［［２，３−ジフルオロ−６−［［（２−ヒドロキシエトキシ）アミノ］カルボニル］フェニル］−アミノ］安息香酸；
３，４−ジフルオロ−２−［［２−フルオロ−４−（３−メトキシ−１−プロピニル）フェニル］アミノ］−Ｎ−（２−ヒドロキシエトキシ）ベンズアミド；
メチル４−（２，３−ジフルオロ−６−｛［（２−ヒドロキシエトキシ）アミノ］カルボニル｝アニリノ）−３−フルオロベンゾエート；
４−（２，３−ジフルオロ−６−｛［（２−ヒドロキシエトキシ）アミノ］カルボニル｝アニリノ）−３−フルオロ安息香酸；
２−（４−アセチル−２−クロロ−フェニルアミノ）−３，４−ジフルオロ−Ｎ−（２−ヒドロキシエトキシ）−ベンズアミドおよび
２−｛２−フルオロ−４−［（メチルアミノ）カルボニル］アニリノ｝−３，４−ジフルオロ−Ｎ−（２−ヒドロキシエトキシ）ベンズアミド。
【００６０】
本発明の化合物は以下の化合物を含むがこれらに限定されるものではない：
メチル４−［［２，３−ジフルオロ−６−［［（２−ヒドロキシ−エトキシ）アミノ］カルボニル］−フェニル］アミノ］ベンゾエート；
４−［［２，３−ジフルオロ−６−［［（２−ヒドロキシエトキシ）アミノ］カルボニル］フェニル］アミノ］安息香酸；および
３，４−ジフルオロ−２−［［２−フルオロ−４−（３−メトキシ１−プロピニル）フェニル］アミノ］−Ｎ−（２−ヒドロキシエトキシ）ベンズアミド。
【００６１】
また、以下の化合物を含むがこれらに限定されるものではない化合物が、本発明によって提供される：
３，４−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−メチルスルファニルメチル−フェニルアミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシ−エトキシ）−ベンズアミド；
２−（４−エチルスルファニルメチル−２−フルオロ−フェニルアミノ）−３，４−ジフルオロ−Ｎ−（２−ヒドロキシ−エトキシ）−ベンズアミド；
３，４−ジフルオロ−２−［２−フルオロ−４−（３−メチルアミノ−プロパ−１−イニル）フェニルアミノ］−Ｎ−（２−ヒドロキシ−エトキシ）−ベンズアミド；
３，４−ジフルオロ−２−［２−フルオロ−４−（３−メトキシ−プロパ−１−イニル）−フェニルアミノ］−Ｎ−（２−ヒドロキシ−エトキシ）−ベンズアミド；
３，４−ジフルオロ−２−［２−フルオロ−４−（（Ｚ）−３−メトキシ−プロペニル）−フェニルアミノ］−Ｎ−（２−ヒドロキシ−エトキシ）−ベンズアミド；
４−［２，３−ジフルオロ−６−（２−ヒドロキシ−エトキシカルバモイル）−フェニルアミノ］−３−フルオロ−安息香酸；
４−［２，３−ジフルオロ−６−（２−ヒドロキシ−エトキシカルバモイル）−フェニルアミノ］−３−フルオロ−安息香酸メチルエステル；
４−［２，３−ジフルオロ−６−（２−ヒドロキシ−エトキシカルバモイル）−フェニルアミノ］−３−フルオロ−安息香酸エチルエステル；
｛４−［２，３−ジフルオロ−６−（２−ヒドロキシ−エトキシカルバモイル）−フェニルアミノ］−３−フルオロ−フェニル｝−酢酸；
｛４−［２，３−ジフルオロ−６−（２−ヒドロキシ−エトキシカルバモイル）−フェニルアミノ］−３−フルオロ−フェニル｝−酢酸メチルエステル；
｛４−［２，３−ジフルオロ−６−（２−ヒドロキシ−エトキシカルバモイル）−フェニルアミノ］−３−フルオロ−フェニル｝−酢酸エチルエステル；
３−｛４−［２，３−ジフルオロ−６−（２−ヒドロキシ−エトキシカルバモイル）−フェニルアミノ］−３−フルオロ−フェニル｝−プロピオン酸；
【００６２】
３−｛４−［２，３−ジフルオロ−６−（２−ヒドロキシ−エトキシカルバモイル）−
フェニルアミノ］−３−フルオロ−フェニル｝−プロピオン酸メチルエステル；
３−｛４−［２，３−ジフルオロ−６−（２−ヒドロキシ−エトキシカルバモイル）−フェニルアミノ］−３−フルオロ−フェニル｝−プロピオン酸エチルエステル；
３，４−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ペンタフルオロエチル−フェニルアミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシ−エトキシ）−ベンズアミド；
３，４−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ヘプタフルオロプロピル−フェニルアミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシ−エトキシ）−ベンズアミド；
３，４−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ノナフルオロブチル−フェニルアミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシ−エトキシ）−ベンズアミド；
３，４−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−ウンデカフルオロペンチル−フェニルアミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシ−エトキシ）−ベンズアミド；
３，４−ジフルオロ−２−（２−フルオロ−４−トリデカフルオロヘキシル−フェニルアミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシ−エトキシ）−ベンズアミド；
３，４−ジフルオロ−２−［２−フルオロ−４−（２，２，３，３，３−ペンタフルオロ−プロピル）−フェニルアミノ］−Ｎ−（２−ヒドロキシ−エトキシ）−ベンズアミド；
３，４−ジフルオロ−２−［２−フルオロ−４−（２，２，３，３，４，４，４−ヘプタフルオロ−ブチル）−フェニルアミノ］−Ｎ−（２−ヒドロキシ−エトキシ）−ベンズアミド；
３，４−ジフルオロ−２−［２−フルオロ−４−（２，３，３，３−テトラフルオロ−２−トリフルオロメチル−プロピル）−フェニルアミノ］−Ｎ−（２−ヒドロキシ−エトキシ）−ベンズアミド；
３，４−ジフルオロ−２−［２−フルオロ−４−（１，２，２，２−テトラフルオロ−１−トリフルオロメチル−エチル）−フェニルアミノ］−Ｎ−（２−ヒドロキシ−エトキシ）−ベンズアミド；
【００６３】
２−（４−アセチル−２−フルオロ−フェニルアミノ）−３，４−ジフルオロ−Ｎ−（２−ヒドロキシ−エトキシ）−ベンズアミド；
３，４−ジフルオロ−２−［２−フルオロ−４−（２，２，２−トリフルオロ−１−トリフルオロメチル−エチル）−フェニルアミノ］−Ｎ−（２−ヒドロキシ−エトキシ）−ベンズアミド；
３，４−ジフルオロ−２−［２−フルオロ−４−（１，１，２，３，３，３−ヘキサフルオロ−２−トリフルオロメチル−プロピル）−フェニルアミノ］−Ｎ−（２−ヒドロキシ−エトキシ）−ベンズアミド；
３，４−ジフルオロ−２−［２−フルオロ−４−（２，２，２−トリフルオロ−１，１−ビス−トリフルオロメチル−エチル）−フェニルアミノ］−Ｎ−（２−ヒドロキシ−エトキシ）−ベンズアミド；
メチル４−（２，３−ジフルオロ−６−｛［（２−ヒドロキシエトキシ）アミノ］カルボニル｝アニリノ）−３−フルオロベンゾエート；
４−（２，３−ジフルオロ−６−｛［（２−ヒドロキシエトキシ）アミノ］カルボニル｝アニリノ）−３−フルオロ安息香酸；
２−（４−アセチル−２−クロロ−フェニルアミノ）−３，４−ジフルオロ−Ｎ−（２−ヒドロキシ−エトキシ）−ベンズアミドおよび
２−｛２−フルオロ−４−［（メチルアミノ）カルボニル］アニリノ｝−３，４−ジフルオロ−Ｎ−（２−ヒドロキシエトキシ）ベンズアミド。
【００６４】
本明細書中に使用される場合、用語「患者」は任意の温血動物をいい、例えばヒト、ウマ、イヌ、モルモットまたはマウスであるがこれらに限定されるものではない。好ましくは患者はヒトである。
【００６５】
本発明のための用語「治療する」は、一度状態が確認されて認定された状態の治療、予防または防止、緩和または除去をいう。
【００６６】
選択的ＭＥＫ １またはＭＥＫ ２阻害剤は、他の酵素、例えばＭＫＫ３、ＰＫＣ、Ｃｄｋ２Ａ、ホスホリラーゼキナーゼ、ＥＧＦ、およびＰＤＧＦ受容体キナーゼならびにＣ−ｓｒｃを実質的に阻害することなくＭＥＫ １またはＭＥＫ ２酵素それぞれを阻害する化合物である。一般に、選択的ＭＥＫ １またはＭＥＫ ２阻害剤は、上記で挙げられた他の酵素のうちの１つについてのＩＣ50の少なくとも５０分の１（１／５０）であるＭＥＫ １またはＭＥＫ ２についてのＩＣ50を有する。好ましくは、選択的阻害剤は、上記で挙げられた酵素のうちの１またはそれ以上のＩＣ50の、少なくとも１／１００、より好ましくは１／５００、およびさらにより好ましくは１／１０００、１／５０００、またはそれより少ないＩＣ50を有する。
【００６７】
開示組成物は、ＭＥＫカスケードにより調節される疾患または状態と同様、ＭＥＫの活動過多に関連した疾患または状態の予防的および治療的処置の両方に有用である。実施例は、発作、敗血症性ショック、心不全、骨関節炎、リウマチ様関節炎、臓器移植拒絶反応、および様々な腫瘍、例えば卵巣、肺、膵臓、脳、前立腺および結腸直腸を含むが、これに限定されるものではない。
【００６８】
本発明は更に、増殖性疾患、例えばガン、再狭窄、乾癬、自己免疫性疾患、およびアテローム性動脈硬化を治療する方法に関する。他の本発明の態様は、固形または造血性のどちらにせよＭＥＫ関連の（Ｒａｓ−関連を含む）ガンを治療する方法を含む。ガンの実施例は、脳、乳房、肺、例えば非小細胞肺、卵巣、膵臓、前立腺、腎臓、結腸直腸、頸部、急性白血病および胃のガンを含む。本発明の更なる態様は、異種移植片（細胞、皮膚、四肢、器官または骨髄の移植片）拒絶、骨関節炎、リウマチ様関節炎、嚢胞性繊維症、糖尿病の合併症（糖尿病性網膜症および糖尿病性腎障害を含む）、肝腫、心臓肥大症、発作（例えば急性焦点性虚血性卒中および広域的な脳の乏血）、心不全、敗血症性ショック、喘息、アルツハイマー病および慢性的または神経障害性の痛みの症状を治療または緩和する方法を含む。本発明の化合物はまた、ウィルス感染、例えばＨＩＶ、肝炎（Ｂ）ウィルス（ＨＢＶ）、ヒト乳頭腫ウィルス（ＨＰＶ）、サイトメガロウィルス（ＣＭＶ）およびエプスティン−バーウイルス（ＥＢＶ）を治療するための抗ウイルス薬に有用である。これらの方法は、上記治療の必要があるか、または上記疾患または状態を患う患者に、治療的有効量の式Ｉの開示化合物またはその医薬組成物を投与する工程を含む。
【００６９】
本発明のための用語「慢性的痛み」は神経障害性の痛み、特発性の痛み、および慢性アルコール中毒、ビタミン欠乏症、尿毒症または甲状腺機能低下症に伴う痛みを含むが、これに限定されるものではない。慢性的な痛みは、炎症、関節炎、および術後の痛みを含むがこれらに限らず多数の状態と関連する。
【００７０】
本明細書中で使用される場合、用語「神経障害性の痛み」は、炎症、術後の痛み、幻肢痛、熱傷痛覚、痛風、三叉神経痛、急性疱疹および疱疹後の痛み、灼熱痛、糖尿病患者神経病、叢自然分離、神経腫、脈管炎、ウィルス感染、粉砕損傷、狭搾損傷、組織損傷、四肢切断、関節炎の痛み、および末梢神経系と中枢神経系間の神経損傷を含むが、これらに限定されるものではない多数の状態と関連する。
【００７１】
本発明はまた、複合治療の方法、例えばガンを治療する方法を特徴とし、ここで該方法は、分裂阻害剤、例えばタキサンまたはビンカアルカロイドを用いた、放射線療法または化学療法を提供することを更に含む。分裂阻害剤の例は、パクリタキセル、ドセタキセル、ビンクリスチン、ビンブラスチン、ビノレルビンおよびビンフルニンを含む。他の治療的組み合わせは、本発明のＭＥＫ阻害剤および抗癌剤、例えばシスプラチン、５−フルオロウラシルまたは５−フルオロ−２−４（１Ｈ，３Ｈ）−ピリミジンジオン（５ＦＵ）、フルタミドおよびゲムシタビン（gemcitabine）を含む。
【００７２】
化学療法または照射治療は、患者の必要に従って開示化合物の投与の、前か、並行してか、または後に投与されてもよい。
【００７３】
当業者は、公知の方法に従って、患者に投与する、適当な治療的有効量または投薬量の本発明化合物を、判断要因（例えば年齢、重量、健康状態、投与される化合物、投与の経路、治療を必要としている痛みまたは状態の型、および他の薬物の存在）を考慮して、決定することが可能である。一般に、有効量または治療的有効量は、１日当たり約０．１〜約１０００ｍｇ／ｋｇの間、好ましくは約１〜約３００ｍｇ／ｋｇ体重の間であり、そして１日の投薬量は正常重量の成人対象者に対して約１０〜約５０００ｍｇの間である。１００、２００、３００または４００ｍｇの市販のカプセルまたは他の製剤（例えば液体およびフィルムコートの錠剤）を、開示された方法によって投与することができる。
【００７４】
本発明の化合物は、好ましくは投与の前に処方される。したがって、本発明の別の態様は式Ｉの化合物および薬学的に許容できる担体を含有する医薬組成物である。本発明の組成物を作ることにおいて、活性成分、例えば式Ｉの化合物は通常担体と調合されるか、または担体によって希釈されるかまたは担体内に封入される。投薬量単位形または医薬組成物は、錠剤、カプセル、ピル、散剤、顆粒、水性および非水系経口溶液および懸濁液、ならびに個々の用量への細分に適した容器に詰められた非経口溶液を含む。
【００７５】
投薬量単位形は投与の種々の方法に適させることができ、徐放製剤、例えば皮下のインプラントを含む。投与方法は、経口、直腸、非経口（静脈、筋肉内および皮下）、くも膜下槽内（intracisternal）、膣内、腹腔内、膀胱内、局在部（滴剤、散剤、軟膏、ゲルまたはクリーム）、および吸入（頬側または鼻噴霧）を含む。
【００７６】
非経口製剤は、その製品に関して、薬学的に許容できる水溶液または非水系溶液、分散剤、懸濁液、エマルションおよび滅菌散剤を含む。担体の例は、水、エチルアルコール、ポリオール（プロピレングリコール、ポリエチレングリコール）、植物油および注射可能な有機エステル、例えばエチルオレアートを含む。流動率は、剤皮、例えばレシチン、界面活性剤の使用、または適当な粒度を維持することによって維持され得る。固体剤形の担体は、（ａ）充填剤または増量剤、（ｂ）結合剤、（ｃ）湿潤剤、（ｄ）崩壊剤、（ｅ）溶液抑制剤、（ｆ）吸収促進剤、（ｇ）吸着剤、（ｈ）潤滑油、（ｉ）緩衝剤、および（ｊ）推進体を含む。
【００７７】
組成物はまた、アジュバント、例えば保存剤、湿潤剤、乳化剤、およびディスペンシング剤（dispensing agent）；抗菌剤、例えばパラベン、クロロブタノール、フェノールおよびソルビン酸；等張性因子、例えば糖または塩化ナトリウム；吸収−遅延剤、例えばモノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチン；ならびに吸収−促進剤を含むことができる。
【００７８】
以下の実施例は、一般に上記されている本発明の化合物の典型的合成を示す。これらの実施例は例証となるのみで、いかなる形であれ本発明を限定することを目的とするものではない。試薬および出発物質は、当業者に直ちに利用され得る。
【実施例】
【００７９】
［製造１］
【化２１】
2005515251.tif 000022
（Ｒ）−（２,２−ジメチル−［１,３］ジオキソラン−４−イルメチル）−ヒドロキシルアミン
【００８０】
工程Ａ：１,２：５,６−ジ−Ｏ−イソプロピリデン−Ｄ−マンニトールの製造
テトラヒドロフラン（２１ｍＬ）およびジメチルホルムアミド（９ｍＬ）中のＤ−マンニトール（１.８２ｇ、１０.０ｍｍｏｌ）の攪拌懸濁液に、周囲温度で、ｐ−トルエンスルホン酸モノヒドレート（０.０２ｇ、０.１ｍｍｏｌ）、その後に２,２−ジメトキシプロパン（２.８ｍＬ、０.０２３ｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で１８時間攪拌し、次いでさらに２,２−ジメトキシプロパン（０.３ｍＬ、２.４ｍｍｏｌ）を添加した。この懸濁液を４０℃〜４５℃まで加熱し、そして２時間攪拌した。炭酸水素ナトリウム（１.８ｇ、０.０１６ｍｏｌ）を添加し、酸を中和して、そして混合物を３０分間攪拌した。過剰のＮａ2ＣＯ3をろ過し、そしてテトラヒドロフラン（５ｍＬ）で洗浄した。このろ液を濃縮した。残った明黄色油状物にトルエン（１５ｍＬ）を添加し、そして混合物を明黄色のゼラチン状固体が形成されるまで３℃〜５℃で攪拌した。固体をろ過し、そしてヘキサン（２×５ｍＬ）で洗浄した。生成物を真空オーブンで１８時間乾燥させ、オフホワイト固体として１,２：５,６−ジ−Ｏ−イソプロピリデン−Ｄ−マンニトール（１.２４ｇ、４７.３％）、を与えた、mp110-113℃。
【００８１】
【化２２】
2005515251.tif 000023
工程Ｂ：（Ｓ）−（＋）−（２,２−ジメチル−［１,３］ジオキソラン−４−イル）−メタノールの製造
水（７００ｍＬ）中の、製造１、工程Ａの生成物、１,２：５,６−ジ−Ｏ−イソプロピリデン−Ｄ−マンニトール（５０ｇ、０.１９１ｍｏｌ）の溶液に、固体の炭酸水素ナトリウム（２０ｇ）を添加した。生じた溶液を固体全てが溶解するまで攪拌し、次いで氷−水浴で冷却した。固体の過ヨウ素酸ナトリウム（８１.５ｇ、０.３８１ｍｏｌ）を一部ずつ溶液にゆっくり添加した。気体の発生が観察された。白色混合物を周囲温度で、２時間攪拌した。固体の塩化ナトリウム（３０ｇ）を添加し、そして混合物を１５分間攪拌した。その白色固体をろ過した。ろ液を氷−水浴で冷却した。固体ナトリウムボロヒドリドをゆっくり添加した。気泡を放出した。混合物を周囲温度に温め、一晩撹拌した。乳状の混合物は透明溶液に変化した。水溶液をジクロロメタン（３×）によって抽出した。有機溶液をブラインによって洗浄し、そして硫酸マグネシウム上で乾燥させた。溶剤を真空中で除去し、無色の油状物として（Ｓ）−（＋）−（２,２−ジメチル−［１,３］ジオキソラン−４−イル）−メタノールを得て、これを高圧下、周囲温度で一晩乾燥させた。34.82ｇ(60％); MS(APCI+)=133(M++1).
【００８２】
工程Ｃ：（Ｒ）−２−（２,２−ジメチル−［１,３］ジオキソラン−４−イルメトキシ）−イソインドール−１,３−ジオンの製造
自動スタイラーおよび追加の漏斗を備えた３−Ｌ丸底フラスコに、窒素雰囲気下でＮ−ヒドロキシフタルイミド（６８.０ｇ、０.４１６ｍｏｌ）およびテトラヒドロフラン（１.２Ｌ）を充填した。この溶液に、トリフェニルホスフィン（１０９.２ｇ、０.４１６ｍｏｌ）および製造１、工程Ｂの生成物、（Ｓ）−（２,２−ジメチル−［１,３］ジオキソラン−４−イル）−メタノール（５５.０ｇ、０.４１６ｍｏｌ）を添加した。混合物を３℃〜５℃まで冷却し、そしてジエチルアゾジカルボキシレート（８５.２ｍＬ、０.５４１ｍｏｌ）を滴下により添加し、１５℃以下に内部温度を維持した。反応混合物を周囲温度まで温め、そして１８時間攪拌した。テトラヒドロフランを減圧下で蒸発させた。残ったオレンジ色固体にジクロロメタン（０.５Ｌ）を添加し、そしてその混合物を１時間攪拌した。白色固体（Ｐｈ3ＰＯ）をろ過し、そしてジクロロメタン（０.１Ｌ）で洗浄した。溶剤を除去し、そしてエタノール（０.５Ｌ）を、生じた固体に添加した。混合物を２時間、３℃〜５℃で攪拌した。白色固体をろ過し、少量の冷ＥｔＯＨで洗浄し、そして真空オーブンにおいて４０℃で乾燥させ、白色固体として（Ｒ）−２−（２,２−ジメチル−［１,３］ジオキソラン−４−イルメトキシ）−イソインドール−１,３−ジオン（１１２.５ｇ、９７％）を得た：1H NMR(CDCl3):δ 1.33(s, 3H), 1.99(s, 3H), 3.96(m, 1H), 4.15(m, 2H), 4.30(m, 1H), 4.48(m, 1H), 7.59(m, 2H), 7.84(m, 2H); MS(APCI+)=278(M++1).
【００８３】
【化２３】
2005515251.tif 000024
工程Ｄ：（Ｒ）−（２,２−ジメチル−［１,３］ジオキソラン−４−イルメチル）−ヒドロキシルアミンの製造
３℃〜５℃で、ジクロロメタン（４８０ｍＬ）中の製造１、工程Ｃの生成物、（Ｒ）−２−（２,２−ジメチル−［１,３］ジオキソラン−４−イルメトキシ）−イソインドール−１,３−ジオン（７４.９ｇ、０.２７ｍｏｌ）の攪拌溶液に、メチルヒドラジン（１５.８ｍＬ、０.２９ｍｏｌ）を滴下により添加した。懸濁液の色は黄色から白色に変わった。氷浴を除去し、そして混合物を２時間、周囲温度で攪拌した。生じた懸濁液を回転蒸発器で濃縮した。白色固体にエーテル（０.５Ｌ）を添加し、そして生じた混合物を１.５時間、周囲温度で攪拌した。白色沈殿物をろ過し、そしてエーテル（０.２Ｌ）で洗浄した。ろ液を回転蒸発器で濃縮し、（Ｒ）−（２,２−ジメチル−［１,３］ジオキソラン−４−イルメチル）−ヒドロキシルアミンを得た（３９.０ｇ、９８.３％）：1H NMR(CDCl3):δ 1.35(s, 3H), 1.42(s, 3H), 3.73(m, 3H), 4.05(m, 1H), 4.33(m, 1H), 5.39(m, 2H); MS(APCI+)=148.1(M++1).
【００８４】
［製造２］
【化２４】
2005515251.tif 000025
（Ｓ）−（２,２−ジメチル−［１,３］ジオキソラン−４−イルメチル）−ヒドロキシルアミン
【００８５】
工程Ａ：Ｌ−グロン（gulonic）γ−ラクトンの製造
水（６００ｍＬ）中のＬ−アスコルビン酸（８３.９ｇ、０.４７７ｍｏｌ）の溶液に、Ｐｄ／Ｃ（１０％,８.３ｇ）を添加した。混合物を、４８ｐｓｉ、１８℃、６２時間、Parr hydrogenatorで水素化に供した。反応混合物をろ過し、そしてろ液を真空中で濃縮し、５０℃、真空オーブンで１８時間乾燥させた後、オフホワイト固体としてＬ−グロンγ−ラクトン（８１.０ｇ、９６％）を得た：mp182-184℃。
【００８６】
工程Ｂ：５,６−イソプロピリデン−Ｌ−グロン酸γ−ラクトンの製造
製造２、工程Ａの生成物、Ｌ−グロンγ−ラクトン（２５.０ｇ、１４０.３ｍｍｏｌ）を、テトラヒドロフラン（１４０ｍＬ）およびジメチルホルムアミド（２００ｍＬ）の混合物中に溶解した。ｐ−トルエンスルホン酸モノヒドレート（２.６７ｇ、１４.０ｍｍｏｌ）を添加し、そして反応混合物を０℃〜５℃まで、氷−水浴で冷却した。２,２−ジメ
トキシプロパン（２２.４ｍＬ、１８２.４ｍｍｏｌ）を滴下により添加し、そして反応混合物を周囲温度で、１８時間攪拌した。混合物を固体炭酸ナトリウム（２４.０ｇ）で中和し、そして１時間攪拌した。固体をろ過し、テトラヒドロフランで洗浄した。ＴＨＦを真空下で除去し、そしてＤＭＦを高圧下の蒸留により除去した。生じたオレンジ色固体をトルエン（３００ｍＬ）を用いて磨砕し、ろ過し、トルエン（２０ｍＬ）で洗浄し、そして真空オーブンで４０℃、３日間乾燥させ、薄いオレンジ色固体として５,６−イソプロピリデン−Ｌ−グロン酸γ−ラクトン（２８.９ｇ、９４％）を得た：mp155-158℃; MS(APCI+)=219.0(M++1).
【００８７】
【化２５】
2005515251.tif 000026
工程Ｃ：（Ｒ）−（＋）−（２,２−ジメチル−［１,３］ジオキソラン−４−イル）−メタノールの製造
水（０.３Ｌ）中の製造２、工程Ｂの生成物、５,６−Ｏ−イソプロピリデン−Ｌ−グロノ−１,４−ラクトン（１５.１６ｇ、６９.５ｍｍｏｌ）の攪拌懸濁液に、３℃〜５℃において固体過ヨウ素酸ナトリウムを少しずつ添加した。混合物のｐＨを、１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液を用いて５.５に調整した。懸濁液を２時間、周囲温度で攪拌し、次いで塩化ナトリウム（２０.０ｇ）により飽和し、そしてろ過した。３℃〜５℃で、ろ液に水素化ホウ素ナトリウム（１０.５ｇ、０.２７８ｍｏｌ）を少しずつ添加した。反応混合物を、１８時間、周囲温度で攪拌した。アセトン（１００ｍＬ）を添加し、過剰の水素化ホウ素ナトリウムを壊し、そして攪拌を３０分間続けた。アセトンを減圧下で除去し、そして水性残留物をジクロロメタン（３×３００ｍＬ）およびＥｔＯＡｃ（３×３００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を硫酸マグネシウム上で乾燥させ、ろ過し、そして蒸発させ、無色の透明液体として（Ｒ）−（＋）−（２,２−ジメチル−［１,３］ジオキソラン−４−イル）−メタノール（５.０７ｇ、５５.７％）を得た：MS(APCI+)=132.9(M++1).
【００８８】
工程Ｄ：（Ｓ）−２−（２,２−ジメチル−［１,３］ジオキソラン−４−イルメトキシ）−イソインドール−１,３−ジオンの製造
自動スタイラーおよび追加漏斗を備えた３−Ｌ丸底フラスコを、窒素雰囲気下、Ｎ−ヒドロキシフタルイミド（６８.０ｇ、０.４１６ｍｏｌ）およびテトラヒドロフラン（１.２Ｌ）で充填した。この溶液に、トリフェニルホスフィン（１０９.２ｇ、０.４１６ｍｏｌ）および（Ｒ）−（２,２−ジメチル−［１,３］ジオキソラン−４−イル）−メタノール（５５.０ｇ、０.４１６ｍｏｌ）を添加した。混合物を３℃〜５℃まで冷却し、そしてジエチルアゾジカルボキシレート（８５.２ｍＬ、０.５４１ｍｏｌ）を滴下により添加し、内部温度を１５℃以下に維持した。反応混合物を周囲温度まで温め、そして１８時間攪拌した。テトラヒドロフランを減圧下で蒸発させた。残ったオレンジ色固体にジクロロメタン（０.５Ｌ）を添加し、そして混合物を１時間攪拌した。白色固体（Ｐｈ3ＰＯ）をろ過し、そしてジクロロメタン（０.１Ｌ）で洗浄した。溶剤を除去し、そしてエタノール（０.５Ｌ）を生じた固体に添加した。混合物を、２時間、３℃〜５℃で攪拌した。白色固体をろ過し、少量の冷ＥｔＯＨを用いて洗浄し、そして真空オーブン中、４０℃で乾燥させ、白色固体として（Ｓ）−２−（２,２−ジメチル−［１,３］ジオキソラン−４−イルメトキシ）−イソインドール−１,３−ジオン（１１２.５ｇ、９７％）を得た：1H NMR(CDCl3):δ 1.33(s, 3H), 1.99(s, 3H), 3.96(m, 1H), 4.15(m, 2H), 4.30(m, 1H), 4.48(m, 1H), 7.59(m, 2H), 7.84(m, 2H); MS(APCI+)=278(M++1).
【００８９】
工程Ｅ：（Ｓ）−（２,２−ジメチル−［１,３］ジオキソラン−４−イルメチル）−ヒドロキシルアミンの製造
３℃〜５℃において、ジクロロメタン（４８０ｍＬ）中の（Ｓ）−２−（２,２−ジメ
チル−［１,３］ジオキソラン−４−イルメトキシ）−イソインドール−１,３−ジオン（７４.９ｇ、０.２７ｍｏｌ）の攪拌溶液に、メチルヒドラジン（１５.８ｍＬ、０.２９ｍｏｌ）を滴下により添加した。懸濁液の色は黄色から白色に変わった。冷浴を除去し、そして混合物を２時間、周囲温度で攪拌した。生じた懸濁液を回転蒸発器で濃縮した。白色固体にエーテル（０.５Ｌ）を添加し、そして生じた混合物を１.５時間、周囲温度で攪拌した。白色沈殿物をろ過し、そしてエーテル（０.２Ｌ）で洗浄した。ろ液を回転蒸発器で濃縮し、（Ｓ）−（２,２−ジメチル−［１,３］ジオキソラン−４−イルメチル）−ヒドロキシルアミン（３９.０ｇ、９８.３％）を得た:1H NMR(CDCl3):δ 1.35(s, 3H), 1.42(s, 3H), 3.73(m, 3H), 4.05(m, 1H), 4.33(m, 1H), 5.39(m, 2H); MS(APCI+)=148.1(M++1).
【００９０】
［製造３］
【化２６】
2005515251.tif 000027
Ｏ−（２,２−ジメチル−［１,３］ジオキサン−５−イル）−ヒドロキシルアミン
【００９１】
工程Ａ：２−（２,２−ジメチル−［１,３］ジオキサン−５−イルオキシ）−イソインドール−１,３−ジオンの製造
２,２−ジメチル−［１,３］ジオキサン−５−オールを以前に記載されたように（Forbes, D.C.他. Synthesis, 1998; 6:879-82）製造した。1H NMR(400 MHz; DMSO-d6)δ 4.91(d, 1H, J =5.1), 3.70-3.75(m, 2H), 3.41-3.46(m, 3H), 1.30(s, 3H), 1.24(s, 3H); MS(APCI+)=132.９。０℃の無水テトラヒドロフラン（３０ｍＬ）中の２,２−ジメチル−［１,３］ジオキサン−５−オール（１.５０ｇ、１１.３５ｍｍｏｌ）、Ｎ−ヒドロキシフタルイミド（１.８５ｇ、１１.３５ｍｍｏｌ）およびトリフェニルホスフィン（２.９８ｇ、１１.３５ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、ジエチルアゾジカルボキシレート（２.３ｍＬ、１４.７５ｍｍｏｌ）を添加した。生じた溶液を室温まで温めた。３時間攪拌後、混合物を真空中で濃縮し、そしてクロロホルムを充填し、白色固体を得た。固体をろ過し、そしてろ液を回収して濃縮した。残留物をシリカカラムクロマトグラフィにより精製し（４：１へキサン／酢酸エチル）、透明結晶として２−（２,２−ジメチル−［１,３］ジオキサン−５−イルオキシ）−イソインドール−１,３−ジオンを得た（２工程に対し１.７４ｇ、５５％）:1H NMR(400 MHz; DMSO-d6)δ 7.83(s, 4H), 4.11-4.12(m, 1H), 4.04-4.09(m, 2H), 3.92-3.96(m, 2H), 1.32(s, 3H), 1.25(s, 3H); MS(APCI+)=278.0.
【００９２】
工程Ｂ：Ｏ−（２,２−ジメチル−［１,３］ジオキサン−５−イル）−ヒドロキシルアミンの製造
０℃、窒素雰囲気下で、ジクロロメタン（１５ｍＬ）中の実施例１３、工程Ａの生成物、２−（２,２−ジメチル−［１,３］ジオキサン−５−イルオキシ）−イソインドール−１,３−ジオン（１.７２ｇ、６.２０ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、メチルヒドラジン（０.３６ｍＬ、６.８２ｍｍｏｌ）を添加し、そして室温まで温めた。２時間撹拌後、反応混合物を真空中で濃縮し、そしてジエチルエーテルを充填した。固体をろ過し、そしてろ液を回収して濃縮し、黄色油状物としてＯ−（２,２−ジメチル−［１,３］ジオキサン−５−イル）−ヒドロキシルアミンを得た（０.９７ｇ、１００％）。1H NMR(400 MHz; DMSO-d6)δ 5.98(bs, 2H), 3.84-3.87(m, 2H), 3.66-3.68(m, 2H), 3.30-3.35(m, 1H), 1.29(s, 3H), 1.22(s, 3H); MS(APCI+)=147.9.
【００９３】
［実施例１］
【化２７】
2005515251.tif 000028
メチル４−［［２,３−ジフルオロ−６−［［（２−ヒドロキシエトキシ）アミノ］カルボニル］フェニル］−アミノ］ベンゾエート
−７８℃、窒素雰囲気下、乾燥ＴＨＦ（１０ｍＬ）中の２,３,４−トリフルオロ安息香酸（１.００ｇ、５.６８ｍｍｏｌ）溶液に、リチウムビス（トリメチルシリル）アミド（５.３６ｍＬ、５.６８ｍｍｏｌ、ＴＨＦ中の１.０６Ｍ溶液）をゆっくり添加した。生じた溶液を１５分間、上記温度で攪拌した。これを溶液Ａという。
【００９４】
−７８℃（外部）、窒素雰囲気下、乾燥ＴＨＦ（１０ｍＬ）中のメチル４−アミノベンゾエート（８５７ｍｇ、５.６８ｍｍｏｌ）溶液に、リチウムビス（トリメチルシリル）アミド（１０.７１ｍＬ、１１.３６ｍｍｏｌ、ＴＨＦ中の１.０６Ｍ溶液）をゆっくり添加した。生じた溶液を１５分間攪拌した。これを溶液Ｂという。
【００９５】
溶液Ａを、陽窒素圧を用いて溶液Ｂに移した。反応混合物を、周囲温度で一晩攪拌した。生じた黄色懸濁液を１Ｍ  ＨＣｌ溶液（１５０ｍＬ）を注ぎ、そしてＥｔＯＡｃ（２×１００ｍＬ）により抽出した。次いで、ＥｔＯＡｃ画分を合わせ、そして水（２００ｍＬ）およびブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、セライト（登録商標）によりろ過し、そして溶剤を減圧下で除去し、クリーム状固体として粗３,４−ジフルオロ−２−［［４−（メトキシカルボニル）−フェニル］アミノ］安息香酸（１.８９ｇ）を得た。1H NMR[400 MHz, (CD3)2SO]δ 13.38(br s, 1 H), 9.25(br s, 1 H),  7.84-7.76(m, 2 H), 7.29-7.13(m, 2 H), 6.93(dd, J =8.8, 3.0 Hz, 2 H), 3.84(s, 3 H).
【００９６】
次いでこの物質を以下のように２−（アミノオキシ）エタノールと直接カップリングした：粗３,４−ジフルオロ−２−［［４−（メトキシカルボニル）−フェニル］アミノ］安息香酸を乾燥ＴＨＦ（２０ｍＬ）中に溶解し、これにＣＤＩ（１.６３ｇ、１０.０ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を室温で、２時間攪拌し、次いで乾燥ＴＨＦ（１０ｍＬ）中の２−（アミノオキシ）エタノール（１.５５ｇ、２０.１ｍｍｏｌ）溶液を添加し、そして反応物を室温で、一晩攪拌した。反応溶剤を減圧下で除去し、そして生じた油状物をＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）中に溶解し、これを連続的に１Ｍ  ＨＣ１（１００ｍＬ）、水（１００ｍＬ）、およびブライン（１００ｍＬ）で洗浄した。この溶液を乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、溶剤を減圧下で除去し、そして粗油状物をフラッシュシリカでクロマトグラフィ（溶出剤として１０％  ＥｔＯＡｃ）により精製し、白色固体としてメチル４−［［２,３−ジフルオロ−６−［［（２−ヒドロキシエトキシ）アミノ］カルボニル］フェニル］アミノ］ベンゾエート（０.８８９ｇ、４８％）を得た; mp(EtOAc／ヘキサン) 158-160℃。1H NMR[400 MHz, (CD3)2SO]δ 11.64(br s, 1 H), 8.76(br s, 1 H), 7.78(d, J =8.8 Hz, 2 H), 7.41-7.27(m, 2 H), 6.80(dd, J =8.8, 1.8 Hz, 2 H), 4.67(br s, 1 H), 3.78(s, 3 H), 3.76(t, J =4.8 Hz, 2 H), 3.50(t, J =4.6 Hz, 2 H). C17H16F2N2O5についての計算値:C, 55.7 ; H, 4.4 ; N, 7.7.実験値 C, 55.7 ; H, 4.4 ; N, 7.6.
【００９７】
［実施例２］
【化２８】
2005515251.tif 000029
４−［［２,３−ジフルオロ−６−［［（２−ヒドロキシエトキシ）アミノ］カルボニル］フェニル］アミノ］−安息香酸
実施例１の生成物、メチル４−［［２,３−ジフルオロ−６−［［（２−ヒドロキシエトキシ）アミノ］カルボニル］フェニル］アミノ］ベンゾエート（３０６ｍｇ、０.８４
ｍｍｏｌ）を、エタノール（４０ｍＬ）中に溶解し、これに１Ｍ  ＮａＯＨ溶液（４０ｍＬ）を添加した。この混合物を室温で、１５時間攪拌し、次いで１Ｍ  ＨＣ１溶液（１００ｍＬ）に注いだ。生じた沈殿物をＥｔＯＡｃ（３ｘ８０ｍＬ）で抽出し、次いでその抽出物を合わせ、水（２×１００ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（１００ｍＬ）で洗浄した。有機画分を乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、溶剤を減圧下で除去し、そして生じた残留物をフラッシュシリカでカラムクロマトグラフィ（溶出剤として５０％  ＥｔＯＡｃ／へキサン）により精製し、結晶性白色固体として４−［［２,３−ジフルオロ−６−［［（２−ヒドロキシエトキシ）アミノ］カルボニル］−フェニル］アミノ］安息香酸を得た（１６８ｍｇ、５７％）；mp(EtOAc／ヘキサン)180-183℃。1H NMR[400 MHz, (CD3)2SO]δ 11.89(br s, 2 H), 8.75(br s, 1 H), 7.75(d, J =8.8 Hz, 2 H), 7.41-7.25(m, 2 H), 6.79(dd, J =8.6, 1.7 Hz, 2 H), 4.76(br s, 1 H), 3.76(t, J =4.8 Hz, 2 H), 3.50(t, J =4.8 Hz, 2 H). C16H14F2N2O5についての計算値:C, 54.5 ; H, 4.0 ; N, 8.0.実験値 C, 54.8 ; H, 3.9 ; N, 8.0.
【００９８】
［実施例３］
【化２９】
2005515251.tif 000030
メチル４−（２,３−ジフルオロ−６−｛［（２−ヒドロキシエトキシ）アミノ］カルボニル｝アニリノ）−３−フルオロベンゾエート
【００９９】
【化３０】
2005515251.tif 000031
工程Ａ：３,４−ジフルオロ−２−［２−フルオロ−４−（メトキシカルボニル）アニリノ］安息香酸の製造
２,３,４−トリフルオロ安息香酸およびメチル４−アミノ−３−フルオロカルボキシレート［次に文献の先例（J. Org Chem.,1990; 55:2034-2044）に従って製造されるメチル２−フルオロ−４−ニトロベンゾエートの５％Ｐｄ／Ｃの存在下での水素化により製造される］を、実施例１の一般手順によりＴＨＦ中のＬｉＨＭＤＳ溶液の存在下で反応させた。処理後、精製をシリカゲルでクロマトグラフィ（溶出剤として５０％  ＥｔＯＡｃ／ＰＥ）により実施し、薄い黄色固体として３,４−ジフルオロ−２−［２−フルオロ−４−（メトキシカルボニル）アニリノ］安息香酸（２６％）を得て、これを次の工程に直接使用した。1H NMR[400 MHz, (CD3)2SO]δ 13.75(v br s, 1 H), 10.25(br s, 1 H), 7.84(ddd, J =8.4, 5.9, 1.7 Hz, 1 H), 7.74-7.66(m, 2 H), 7.31-7.23(m, 1 H), 7.01-6.94(m, 1 H), 3.83(s, 3 H).LCMS(APCI-)324(M-H).
【０１００】
工程Ｂ：メチル４−（２,３−ジフルオロ−６−｛［（２−ヒドロキシエトキシ）アミノ］カルボニル｝アニリノ）−３−フルオロベンゾエートの製造
３,４−ジフルオロ−２−［２−フルオロ−４−（メトキシカルボニル）アニリノ］安息香酸（３２０ｍｇ、０.９９ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（５０ｍＬ）中に溶解し、２−（アミノオキシ）エタノール、その後に４−（４,６−ジメトキシ−１,３,５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウム（methymorpholinium）クロリド［ＤＭＴ−ＭＭ,
Kunishima他［Tetrahedron, 55, 13159-13170(1999)］の手順に従って製造される］（３２６ｍｇ、１.１８ｍｍｏｌ）を添加した。この混合物を１５時間、室温で攪拌した。このＭｅＯＨを減圧下で除去し、そして生じた油状物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）中に溶解し、これを水（２×１００ｍＬ）、ブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、そして乾燥させた（Ｎａ2ＳＯ4）。溶剤を減圧下で除去し、粗黄色油状物を得て、これをシリカゲルのプラグによるろ過（溶出剤として１００％  ＥｔＯＡｃ）によって精製し、クリーム状固体としてメチル４−（２,３−ジフルオロ−６−｛［（２−ヒドロキシエトキシ）アミノ］カルボニル｝アニリノ）−３−フルオロベンゾエートを得た（７９％）；m.p.(EtOAc／ヘキサン)162-165℃。1H NMR[400 MHz, (CD3)2SO]δ 11.82(v br s, 1 H), 9.08(v br s, 1 H), 7.70-7.62(m, 2 H), 7.49-7.43(m, 1 H), 7.38-7.29(m, 1 H), 6.81(ddd, J =8.6, 8.6, 4.7 Hz, 1 H), 4.76(v br s, 1 H), 3.83-3.78(m, 5 H), 3.53(t, J =4.8 Hz, 2 H). C17H15F3N2O5についての計算値:C, 53.1 ; H, 3.9 ; N, 7.3.実験値 C, 53.3 ; H, 4.2 ;
N, 7.3.
【０１０１】
［実施例４］
【化３１】
2005515251.tif 000032
４−（２,３−ジフルオロ−６−｛［（２−ヒドロキシエトキシ）アミノ］カルボニル｝アニリノ）−３−フルオロ安息香酸
メチル４−（２,３−ジフルオロ−６−｛［（２−ヒドロキシエトキシ）アミノ］カルボニル｝アニリノ）−３−フルオロベンゾエートを上記のようにＥｔＯＨ／１Ｍ  ＮａＯＨを用いて脱保護し、処理後、クリーム状固体として４−（２,３−ジフルオロ−６−｛［（２−ヒドロキシエトキシ）アミノ］カルボニル｝アニリノ）−３−フルオロ安息香酸を得た（９１％）; m.p.(MeOH／EtOAc)196-200℃。1H NMR[400 MHz, (CD3)2SO]δ 12.70(v br s, 1 H), 11.84(v br s, 1 H), 8.86(br s, 1 H), 7.67-7.60(m, 2 H), 7.58-7.41(m, 1 H), 7.38-7.29(m, 1 H), 6.81(ddd, J =8.4, 8.4, 4.5 Hz, 1 H), 4.69(v br s, 1 H), 3.83(t, J =4.7 Hz, 2 H), 3.54(t, J =4.7 Hz, 2 H). C16H13F3N2O5についての計算値:C, 51.9 ; H, 3.5 ; N, 7.6.実験値 C, 51.8 ; H, 3.9 ; N, 7.3.
【０１０２】
［実施例５］
【化３２】
2005515251.tif 000033
３,４−ジフルオロ−２−［［２−フルオロ−４−（３−メトキシ−１−プロピニル）フ
ェニル］アミノ］−Ｎ−（２−ヒドロキシエトキシ）ベンズアミド
【０１０３】
【化３３】
2005515251.tif 000034
工程Ａ：２−フルオロ−４−（３−メトキシ−１−プロピニル）アニリンの製造
２−フルオロ−４−ヨードアニリン（２.００ｇ、８.４４ｍｍｏｌ）、ＣｕＩ（３２ｍｇ、０.１７ｍｍｏｌ）、および(Ｐｈ3Ｐ)2ＰｄＣｌ2（１１９ｍｇ、０.１７ｍｍｏｌ）をフラスコにはかり入れ、フラスコを密封して、Ｎ2でフラッシュした。ＴＥＡ（８ｍＬ）中のメチルプロパルギルエーテル（０.６５ｇ、９.２８ｍｍｏｌ）溶液を添加し、次いで混合物全体を１５時間、室温で攪拌した。反応混合物をジエチルエーテル（１００ｍＬ）で希釈し、セライト（登録商標）によりろ過し、次いで溶剤全部を減圧下で除去した。生じた暗褐色油状物をフラッシュシリカのプラグによるろ過（溶出剤として１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製し、薄いオレンジ色油状物として２−フルオロ−４−（３−メトキシ−１−プロピニル）アニリンを得て、これは直ちに固まりダークオレンジ色固体を得た（１.３８ｇ、９１％）; 1H NMR[400 MHz, (CD3)2SO]δ 7.07(dd, J =12.2, 1.8 Hz, 1 H), 6.98(dd, J =8.2, 1.7 Hz, 1 H), 6.71(dd, J =9.3, 8.4 Hz, 1 H), 5.56(s, 2 H), 4.26(s, 2 H), 3.29(s, 3 H).
【０１０４】
【化３４】
2005515251.tif 000035
工程Ｂ：３,４−ジフルオロ−２−［［２−フルオロ−４−（３−メトキシ−１−プロピニル）フェニル］アミノ］安息香酸の製造
２,３,４−トリフルオロ安息香酸および実施例５、工程Ａの生成物、２−フルオロ−４−（３−メトキシ−１−プロピニル）アニリンを、ＴＨＦ中のＬｉＨＭＤＳ溶液の存在下、実施例１の一般手順により反応させた。処理後、引き続きシリカゲルでクロマトグラフィ（溶出剤として１０％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製し、３,４−ジフルオロ−２−［［２−フルオロ−４−（３−メトキシ−１−プロピニル）フェニル］アミノ］−安息香酸を薄い黄色固体として単離した（６２％）; mp(EtOAc／ヘキサン)221-223℃。1H NMR[400 MHz, (CD3)2SO]δ 13.60(br s, 1 H), 9.27(br s, 1 H), 7.85-7.79(m, 1 H,), 7.36(dd, J =12.0, 1.8 Hz, 1 H), 7.20(dd, J =8.3, 1.5 Hz, 1 H), 7.18-7.11(m, 1 H), 6.96(td, 8.8, 5.5 Hz, 1 H), 4.31(s, 2 H), 3.32(s, 3 H). C17H12F3NO3についての計算値:C, 60.9 ; H, 3.6 ; N, 4.2.実験値 C, 61.4 ; H, 3.6 ; N, 4.2.
【０１０５】
工程Ｃ：３,４−ジフルオロ−２−［［２−フルオロ−４−（３−メトキシ−１−プロピニル）フェニル］アミノ］−Ｎ（２−ヒドロキシエトキシ）ベンズアミドの製造
表題化合物を、実施例５、工程Ｂの生成物、３,４−ジフルオロ−２−［［２−フルオロ−４−（３−メトキシ−ｌ−プロピニル）フェニル］−アミノ］安息香酸の反応から製造した。この生成物（２００ｍｇ、０.６０ｍｍｏｌ）を乾燥ＴＨＦ（５ｍＬ）中に溶解し、そしてＣＤＩ（１９３ｍｇ、１.１９ｍｍｏｌ）を添加した。室温で０.５時間後、ＴＬＣは所望のイミダゾリドへの完全な変換を示した。乾燥ＴＨＦ（２ｍＬ）中の２−（アミノオキシ）エタノール（１８４ｍｇ、２.３９ｍｍｏｌ）溶液を添加し、そして反応混合物を一晩、室温で攪拌した。次いで反応溶剤を減圧下で除去し、そして生じた残留物をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）と飽和ＮａＨＣＯ3溶液（５０ｍＬ）の間に分けた。次いでＥｔＯＡｃ層を乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、溶剤を減圧下で除去し、そして生じた油状物を、シリカゲル（５０％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）におけるカラムクロマトグラフィにより精製し、白色固体として３,４−ジフルオロ−２−［［２−フルオロ−４−（３−メトキシ−ｌ−プロピニル）フェニル］アミノ］−Ｎ−（２−ヒドロキシエトキシ）ベンズアミドを得た（１６５ｍｇ、７１％）; mp(EtOAc／Et2O)121-123℃。1H NMR[400 MHz, (CD3)2SO]δ 11.84(br s, 1 H), 8.85(br s, 1 H), 7.46-7.38(m, 1 H), 7.32(dd, J =12.1, 1.7 Hz, 1 H), 7.29-7.21(m, 1 H), 7.14(dd, J =8.4, 1.6 Hz, 1 H), 6.79(td, J =8.8, 4.7 Hz, 1 H), 4.74(br s, 1 H), 4.30(s, 2 H), 3.84(t, J =4.8 Hz, 2 H), 3.56(t, J=4.9Hz, 2 H), 3.32(s, 3 H). C19H17F3N2O4についての計算値:C, 57.9 ; H, 4.4 ; N, 7.1. 実験値 C, 57.9 ; H, 4.3 ; N, 7.0.
【０１０６】
［実施例６］
【化３５】
2005515251.tif 000036
２−（４−アセチル−２−クロロ−フェニルアミノ）−３,４−ジフルオロ−Ｎ−（２−ヒドロキシ−エトキシ）−ベンズアミド
【０１０７】
【化３６】
2005515251.tif 000037
工程Ａ：２−（２−クロロ−４−ヨードフェニルアミノ）−３,４−ジフルオロ安息香酸の製造
−７８℃、窒素雰囲気下、無水テトラヒドロフラン中の２,３,４−トリフルオロ安息香酸（７５ｇ、０.４２６ｍｏｌ）溶液に、リチウムビス（トリメチルシリル）アミド（４２６ｍＬ、０.４２６ｍｏｌ,ＴＨＦ中の１.０Ｍ溶液）をゆっくり添加した。暗褐色反応混合物を１５分間、−６５℃（内部温度）で攪拌した。これを溶液Ａという。
【０１０８】
−７８℃（外部）、窒素下、無水テトラヒドロフラン（１０００ｍＬ）中の２−クロロ−４−ヨードアニリン（１０８ｇ、０.４２６ｍｏｌ）溶液に、リチウムビス（トリメチルシリル）アミド（８５２ｍｌ,０.８５２ｍｏｌ,Aldrich,ＴＨＦ中の１.０Ｍ溶液）をゆ
っくり添加した。暗緑色溶液を０.５時間攪拌した。これを溶液Ｂという。
【０１０９】
溶液Ａを陽窒素圧を用いて溶液Ｂに移した。反応混合物を、周囲温度で一晩攪拌した。反応を、ｐＨが約１.０になるまで２.５Ｌ乾燥エーテル（塩化水素ガスで飽和させる）でクエンチした。沈殿物固体をセライト（登録商標）でろ過し、エーテルで十分に洗浄した。
【０１１０】
ろ液を１Ｎ  ＨＣｌ（２×５００ｍＬ）、ブライン（２×５００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ、濃縮して明褐色固体（１４３ｇ）を得て、これをメタノール（４５０ｍＬ）および塩化メチレン（１.２５Ｌ）から結晶化し、オフホワイト粉末として２−（２−クロロ−４−ヨードフェニルアミノ）−３,４−ジフルオロ安息香酸（１０４ｇ、６０％収率）を得た：mp:226-227℃;1H NMR(400 MHz, DMSO-d6)δ 13.83(br s), 9.26(s), 7.85(ddd, J =8.9, 6.1, 1.9 Hz, 1 H), 7.81(d, J =1.9 Hz, 1 H), 7.54(dd, J =8.6, 1.9 Hz, 1 H),
7.18(dt, J =7.3, 9.3 Hz, 1 H), 6.74(dd, J =8.5, 7.1 Hz, 1 H);19F-NMR(376 MHz, DMSO-d6)δ-129.9, -141.9. C13H7NO2F2ClIについての計算値／実験値:C, 38.13／37.33; H, 1.72／1.60; N, 3.42／3.31.
【０１１１】
【化３７】
2005515251.tif 000038
工程Ｂ：２−（２−クロロ−４−ヨードフェニルアミノ）−３,４−ジフルオロ安息香酸ペンタフルオロフェニルエステルの製造
無水ジメチルホルムアミド（４９ｍＬ）中の実施例６、工程Ａの生成物、２−（２−クロロ−４−ヨードフェニルアミノ）−３,４−ジフルオロ安息香酸（１０.０ｇ、２４.４ｍｍｏｌ）、およびピリジン（２.１６ｍＬ、２６.８ｍｍｏｌ）溶液に、ペンタフルオロフェニルトリフルオロアセテート（５.３５ｍＬ、３０.５ｍｍｏｌ）を添加した。生じた溶液を、周囲温度で２時間を攪拌した。反応混合物を酢酸エチル（６００ｍＬ）で希釈し、そして０.１Ｍ塩酸水溶液（２×２４０ｍＬ）、２５％飽和重炭酸ナトリウム水溶液（２×２４０ｍＬ）、および飽和ブライン（２４０ｍＬ）で洗浄した。有機物を無水硫酸マグネシウム上で乾燥させ、そして減圧下で濃縮し、油状物を得て、これをシリカゲルで精製した。ヘキサン−酢酸エチル（１９：１）によって溶出し、薄い黄色粉末として２−（２−クロロ−４−ヨードフェニルアミノ）−３,４−ジフルオロ安息香酸ペンタフルオロフェニルエステル（１２.８ｇ、９１％）を得た：mp.108.5-110.0℃ ; 1H-NMR(400 MHz, CDCl3)δ 8.77(br s, 1H), 8.07(br s, 1 H), 7.69(br s, 1H), 7.48(br d, J=7.0 Hz, 1H), 6.91(br d, J=7.2 Hz, 1H), 6.67(br s., 1H); 19F-NMR(376 MHz, CDCl3)δ-123.74(s, 1F), -139.17(d, J=16.8 Hz, 1F), -152 35(d, J=21.4 Hz, 2F), -156.96(t, J=21.4 Hz, 1F), -161.81(t, J=21.4 Hz, 2F). C19H6NO2F7ClIについての計算値／実験値:C, 39.65／39.32; H, 1.05／0.91; N, 2.43／2.35; F, 23.10／22.85;Cl, 6.16／6.92;I, 22.05／22.50.
【０１１２】
【化３８】
2005515251.tif 000039
工程Ｃ：２−（２−クロロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−３,４−ジフルオロ−Ｎ−
（２−ヒドロキシ−エトキシ）−ベンズアミドの製造
無水ジメチルホルムアミド（３６ｍＬ）中の実施例６、工程Ｂの生成物、２−（２−クロロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−３,４−ジフルオロ安息香酸ペンタフルオロフェニルエステル（１０.０ｇ、１７.４ｍｍｏｌ）溶液に、２−（アミノオキシ）−エタノール［文献の先例：Dhanak, D.; Reese, C. B. J. Chem. Soc., Perkin Trans. 1 1987, 2829により製造］（１.６ｇ、２０.８ｍｍｏｌ）およびＮ,Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（６.０ｍＬ、３４.８ｍｍｏｌ）を添加した。生じた溶液を周囲温度で１６時間攪拌した。反応混合物を２０％体積まで濃縮し、次いで酢酸エチル（３６０ｍＬ）で希釈した。生じた溶液を水（６×６０ｍＬ）およびブライン（２×６０ｍＬ）で洗浄した。有機物を無水硫酸マグネシウム上で乾燥させ、減圧下で濃縮し、白色固体を得て、これをシリカゲルで精製した。酢酸エチル−メタノール（９：１）による溶出により、白色固体として２−（２−クロロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−３,４−ジフルオロ−Ｎ−（２−ヒドロキシ−エトキシ）−ベンズアミド（７.３１ｇ、９０％）を得た。メタノールからの再結晶化により分析的に純粋な物質を得た：m.p.173-175℃; 1H NMR(400 MHz, DMSO-d6)δ 11.93(br s, 1 H), 8.85(br s, 1 H), 7.76(d, J =1.7 Hz, 1 H), 7.48(dd, J =8.6, 1.7 Hz, 1 H), 7.44(dd, J =8.5, 6.2 Hz, 1 H), 7.25(dt, J =8.5, 9.3 Hz, 1H), 6.58(dd, J =8.5, 6.4 Hz, 1 H), 4.70(br s, 1 H), 3.86(br s, 2 H), 3.56(br d, J =3.9 Hz, 2 H); MS(APCI+)=469.0 ; MS(APCI-)=467.0 ; C15H12ClF2IN2O3についての計算値／実験値:C, 38.45／38.60 ; H, 2.58／2.53; N, 5.98／5.91; F, 8.11／8.08;1, 27.08／27.43.
【０１１３】
【化３９】
2005515251.tif 000040
工程Ｄ：２−（２−クロロ−４−トリメチルシラニルエチニル−フェニルアミノ）−３,４−ジフルオロ−Ｎ−（２−ヒドロキシ−エトキシ）−ベンズアミドの製造
実施例６、工程Ｃの生成物、２−（２−クロロ−４−ヨード−フェニルアミノ）−３,４−ジフルオロ−Ｎ−（２−ヒドロキシ−エトキシ）−ベンズアミド（３.２５ｇ、６.９３ｍｍｏｌ）および（トリメチルシリル）アセチレン（１.１０ｍＬ、７.７８ｍｍｏｌ）を、トリエチルアミン（１７ｍＬ）中で合わせた。ジクロロビス（トリフェニルホスフィン）−パラジウム（ＩＩ）（０.１２０ｇ、０.０１７ｍｏｌ）およびヨウ化銅（０.０３３ｇ、０.１７ｍｍｏｌ）を添加し、そして生じた溶液を周囲温度で、２２時間攪拌した。反応混合物を、２０分間セライト上に吸着させ、そしてろ過し、酢酸エチルで洗浄した。ろ液を濃い油状物に濃縮し、さらに酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈し、そしてクエン酸水溶液（２Ｍ，２×２５ｍＬ）、水、およびブラインで洗浄した。次いで有機層を硫酸マグネシウム上で乾燥させ、そして真空中で濃縮し、黄褐色に色づいた固体を得た。ヘプタン−酢酸エチルからの再結晶化により、灰色に色づいた固体として２−（２−クロロ−４−トリメチルシラニルエチニル−フェニルアミノ）−３,４−ジフルオロ−Ｎ−（２−ヒドロキシ−エトキシ）−ベンズアミド（２.３４ｇ、７６％収率）を得た：1H NMR(400 MHz, DMSO-d6)δ 11.96(s, 1 H), 8.95(s, 1 H), 7.53(d, J =1.7 Hz, 1 H), 7.47(m, 1H), 7.32(m, 1 H), 7.27(dd, J =8.4, 1.8 Hz, 1 H), 6.72(dd, J =8.0, 6.6 Hz, 1 H), 4.73(t, J =5.5, 1 H), 3.87(明らかなt, J =4.7 Hz, 2 H), 3.57(m, 2 H), 0.21(s, 9 H); MS(APCI+)=439.1; MS(APCI-)=437.1.
【０１１４】
工程Ｅ：２−（４−アセチル−２−クロロ−フェニルアミノ）−３,４−ジフルオロ−Ｎ−（２−ヒドロキシ−エトキシ）−ベンズアミドの製造
ジクロロメタン（２５ｍＬ）中の２−（２−クロロ−トリメチルシラニルエチニル−フェニルアミノ）―３,４−ジフルオロ−Ｎ−（２−ヒドロキシ−エトキシ）−ベンズアミド（４５２ｍｇ、１.０３ｍｍｏｌ）溶液をポリスチレン−結合ｐ−トルエンスルホン酸（Argonaut,１.５ｍｍｏｌ／ｇ、１.０５ｇ）で処理した。生じた混合物を周囲温度でかき混ぜた。３.５時間後、反応混合物をろ過し、そして樹脂ビーズをジクロロメタン−メタノール−３０％水性水酸化アンモニウム（１００：１０：１,６０ｍＬ）からなる溶液で洗浄した。ろ液および洗浄液を真空中で濃縮し、そして酢酸エチル（１００ｍＬ）と水（２０ｍＬ）との間に分けた。有機層を水およびブラインで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、そして真空中で濃縮して麦わら色の泡状物を得た。ジクロロメタン−メタノールからの再結晶化により、白色固体として２−（４−アセチル−２−クロロ−フェニルアミノ）−３,４−ジフルオロ−Ｎ−（２−ヒドロキシ−エトキシ）−ベンズアミドを得た（１１３ｍｇ）:m.p.161.5-162.5℃; 1H NMR(400 MHz, DMSO-d6)δ 11.93(s, 1 H), 8.99(s, 1 H), 7.99(d, J =1.7 Hz, 1 H), 7.77(dd, J =8.5, 1.7 Hz, 1 H), 7.49(m, 1 H), 7.39(m, 1 H), 6.78(dd, J =8.3, 6.3 Hz, 1 H), 4.71(br s, 1 H), 3.86(br s, 2 H), 3.56(br s, 2 H), 2.51(s, 3 H); MS(APCI+)=385.0 ; MS(APCI-)=383.0; C17H15ClF2N2O4+0.06 eqCH2Cl2についての計算値／実験値:C, 52.56／52.52; H, 3.91／3.69; N, 7.19／7.07. 母液の濃縮により結晶のクロップをさらに得た（１４７ｍｇ、６６％  総収率）。
【０１１５】
［実施例７］
【化４１】
2005515251.tif 000041
２−｛２−フルオロ−４−［（メチルアミノ）カルボニル］アニリノ｝−３,４−ジフルオロ−Ｎ−（２−ヒドロキシエトキシ）ベンズアミド
【０１１６】
【化４１】
2005515251.tif 000042
工程Ａ：３,４−ジフルオロ−２−｛２−フルオロ−４−［（メチルアミノ）カルボニル］アニリノ｝安息香酸の製造
２,３,４−トリフルオロ安息香酸および４−アミノ−３−フルオロ−Ｎ−メチルベンズアミド［Anker他, Helv. Chim. Acta., 67(3), 706-716(1984)］を、実施例１、工程Ｂの一般手順により、ＴＨＦ中のＬｉＨＭＤＳ溶液の存在下で反応させた。処理後、シリカゲルでクロマトグラフィ（溶出剤として１００％  ＥｔＯＡｃ）により精製し、３,４−ジフルオロ−２−｛２−フルオロ−４−［（メチルアミノ）カルボニル］アニリノ｝−安息
香酸を薄い黄色オレンジ色固体として単離した; m.p.(EtOAc／MeOH)242-244℃。1H NMR[400 MHz, (CD3)2SO]δ 13.70(v br s, 1 H), 9.28(br s, 1 H), 8.36(br d, J =4.5 Hz, 1 H), 7.88-7.80(m, 1 H)7.69(dd, J =12.5, 1.7 Hz, 1 H), 7.60(dd, J =8.5, 1.5 Hz, 1 H), 7.19(dd, J =16.7, 9.3 Hz, 1 H), 7.01(ddd, J =8.6, 8.6, 5.8 Hz, 1 H), 2.77(d, J =4.4 Hz, 3 H). C15H11F3N2O3についての計算値:C, 55.6 ; H, 3.4 ; N, 8.6. 実験値待ち。
【０１１７】
工程Ｂ：２−｛２−フルオロ−４−［（メチルアミノ）カルボニル］アニリノ｝−３,４
−ジフルオロ−Ｎ−（２−ヒドロキシエトキシ）ベンズアミドの製造
表題化合物を、実施例３、工程Ｂの一般手順により、２−（アミノオキシ）エタノールおよびＤＭＴ−ＭＭとの３,４−ジフルオロ−２−｛２−フルオロ−４−［（メチルアミノ）カルボニル］アニリノ｝安息香酸の反応から製造し、次いでシリカゲルでカラムクロマトグラフィ（溶出剤として１０％ＭｅＯＨ／ＣＨ2Ｃｌ2）により精製し、結晶性クリーム状固体として２−｛２−フルオロ−４−［（メチルアミノ）カルボニル］アニリノ｝−３,４−ジフルオロ−Ｎ−（２−ヒドロキシエトキシ）ベンズアミドを得た（４５％）; m.p.(アセトン)197-200℃。1H NMR[400 MHz, (CD3)2SO]δ 11.84(br s, 1 H), 8.86(br s, 1 H), 8.31(br q, J =4.3 Hz, 1 H), 7.65(dd, J=12.6, 1.8 Hz, 1 H), 7.55(dd, J =8.4, 1.8 Hz, 1 H), 7.47-7.41(m, 1 H), 7.27(dd, J=16.9, 9.5 Hz, 1 H), 6.84(ddd, J =8.6, 8.6, 4.8 Hz, 1 H), 4.72(v br s, 1 H), 3.84(t, J =4.8 Hz, 2 H), 3.56(t, J =4.8 Hz, 2 H), 2.76(d, J =4.5 Hz, 3 H). C17H16F3N3O4についての計算値:C, 53.3 ; H, 4.2 ; N, 11.0. 実験値待ち。
【０１１８】
［実施例８］
ＭＥＫ阻害を測定するための細胞アッセイ
ネズミ大腸２６（Ｃ２６）カルシノーマ細胞のＭＡＰキナーゼ（ＥＲＫ）のリン酸化を阻害するその細胞の能力を測定するアッセイにおいて、ＭＥＫ阻害剤としての化合物の評価を行った。ＥＲＫ１およびＥＲＫ２はＭＥＫに対する唯一の公知の基質を示すので、細胞のＥＲＫリン酸化の阻害の測定は、本発明の化合物による細胞ＭＥＫ阻害の直接的読み出しを提供する。簡潔には、アッセイは、指数関数的に増殖するＣ２６細胞を試験化合物（またはビヒクルコントロール）の濃度を変化させ、１時間、３７℃で処理することを伴う。次いで細胞を、化合物／ビヒクルなしですすぎ、そして７０ｍＭ  ＮａＣｌ、５０ｍＭグリセロールホスフェート、１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７.４、１％トリトンＸ−１００、１ｍＭ  Ｎａ3ＶＯ4、１００μＭ  ＰＭＳＦ、１０μＭロイペプチンおよび１０μＭペプスタチンを含んでいる溶液に溶解した。次いで上清を、ゲル電気泳動および二重にリン酸化されたＥＲＫ１およびＥＲＫ２を認識する一次抗体を使用したウェスタンブロッティングにかけた。総ＭＡＰＫレベルを評価するため、その後ブロットを除き、リン酸化されていないＥＲＫ１およびＥＲＫ２を認識するポリクローナル抗体の１：１混合物により再度調べた。
【０１１９】
上記のプロトコルによって得られた阻害データを、表Ｉにおいて開示する。阻害剤のいくつかの濃度が試験される場合、ＩＣ50値（５０％阻害を与える濃度）を、％阻害についての用量応答曲線から視覚的に決定した。一方、測定された濃度のパーセント阻害が報告される。
【０１２０】
〔表１〕
表Ｉ．本発明の化合物によるＥＲＫリン酸化の細胞阻害
化合物の実施例番号   ＩＣ50（μＭ）
１                  ＞1.000000
２                  0.073
３                  0.027
４                  ＞1.000000
５                  ＞1.000000
７                  ＞10.00000
【０１２１】
［実施例９］
カラゲナンから誘発された肉趾水腫（ＣＦＥ）ラットモデル
雄の異系交配されたウィスターラット（１３５−１５０ｇ、Charles River Labs）に、ビヒクル１０ｍＬ／ｋｇまたは試験化合物を、カラゲナンの超音波処理された懸濁液（１ｍｇ／０.１ｍＬ生理食塩水）の投与の１時間前に経口投与した。カラゲナンを、右後足の足底半分の部位に注入した。足の体積は、注入直後、および再度、カラゲナン注入の５時間後に水銀プレチスモグラフィで測定した。水腫のパーセント阻害を測定し、そしてＩＤ４０を線型回帰によって算出した。対照動物と比較した膨潤の差は１−ウェイＡＮＯＶＡ、その後ダネット試験によって評価した。
【０１２２】
［実施例１０］
マウスのコラーゲン誘導された関節炎
マウスのＩＩ型コラーゲン誘導された関節炎（ＣＩＡ）は、リウマチ様関節炎と共通する多くの病理学的、免疫学的および遺伝学的特徴を有する関節炎の実験モデルである。この疾患はＩＩ型コラーゲン１００μｇによるＤＢＡ／１マウスの免疫化によって誘導され、そしてそれはフロインド完全アジュバントにおいて皮内に送達される関節軟骨の主要成分である。疾患感受性はクラスＩＩ  ＭＨＣ遺伝子座によって調節され、そしてそれはＨＬＡ−ＤＲ４とリウマチ様関節炎との関連に類似する。
【０１２３】
進行性および炎症性関節炎は免疫された大半のマウスにおいて発現され、１００％までの足幅増加によって特徴づけられる。試験化合物を、例えば２０、６０、１００および２００ｍｇ／ｋｇ体重／日の量の範囲でマウスに投与した。試験の継続は、数週間〜数ヶ月、例えば４０、６０または８０日にすることができる。臨床的スコアリング指数は、紅斑および水腫（段階１）、関節歪曲（段階２）から関節強直（段階３）までの疾患の進行を評価するために用いた。この疾患は動物の１または全ての足に影響を及ぼすことができ、各々のマウスに対して１２の可能な全スコアを生じる点で可変的である。関節炎関節の組織変化は、関節滑膜炎、パンヌス形成ならびに軟骨および硬骨浸食を現す。ＣＩＡに影響されやすい全てのマウス系統は、ＩＩ型コラーゲンに対する高い抗体応答者であり、そしてＣＩＩに著しい細胞反応がある。
【０１２４】
［実施例１１］
ＳＣＷにより誘導されたモノ関節性関節炎（Monoarticular Arthritis）
関節炎を、Schwab他, Infection and Immunity, 1991; 59: 4436-42の記載に小さい変更を加えて誘発させた。ラットは、０日目に、右脛距骨関節（tibiotalar joint）への関節内注入によって、６μｇの超音波処理したＳＣＷ（１０μＬダルベッコのＰＢＳ［ＤＰＢＳ］中）を受けた。２１日目にＤＴＨが、ＳＣＷ（２５０μＬ）１００μｇの投与によって始まったＩＶ。経口化合物研究のために、化合物をビヒクル（０.５％のヒドロキシプロピル−メチルセルロース／０.２％Ｔｗｅｅｎ  ８０）中に懸濁し、超音波処理し、そしてＳＣＷよる再活性化１時間前に始めて、毎日２回（１０ｍＬ／ｋｇ体積）投与した。化合物を、１０〜５００ｍｇ／ｋｇ体重／日の量、例えば２０、３０、６０、１００、２００および３００ｍｇ／ｋｇ／日で投与した。水腫の測定値を、２１日目、再活性化の前に感度を高めた後足のベースライン体積を測定し、そして次の時点、例えば２２、２３、２４および２５日の体積とそれらを比較することによって得た。足体積は、水銀プレチスモグラフィで測定した。
【０１２５】
［実施例１２］
マウス耳−心臓移植モデル
Fey, TA他は、マウスおよびラットの耳の耳介に、分離した心臓の新生児期の噴門移植片を移植する方法を記載している（J Pharm and Toxic Meth. 1998 ; 39: 9-17）。化合物は、無水エチルアルコール、水中の０.２％ヒドロキシプロピルメチルセルロース、プロピレングリコール、クレモフ（cremophor）およびデキストロースまたは他の溶剤もしくは懸濁したビヒクルの組み合わせを含む溶液中に溶解した。マウスには、経口的にまたは腹膜内に毎日１回、２回、または３回、移植の日（０日目）〜１３日目または移植片が拒絶されるまで投与した。ラットには、毎日１回、２回、または３回、０日目〜１３日目まで投与した。各動物に麻酔をかけ、そして被移植者の耳の基部を切開し、背側表皮および真皮だけを切った。切開を頭部と平行に軟骨まで広げて開放し、そしてラットに適当な穴またはマウスに適当な挿入器具に対応させて十分に広くした。誕生から６０時間未満の新生児マウスまたは子ラットを麻酔にかけ、頚部脱臼した。心臓を胸から取り除き、生理食塩水ですすぎ、外科用メスで縦に二分し、滅菌生理食塩水ですすいだ。移植用心臓断片を、挿入器具により予め形成された穴に入れ、そして空気または残留液を光圧で穴から穏やかに出した。縫合、接着結合、包帯または抗生物質による治療は必要ない。
【０１２６】
移植片を、麻酔をせず立体的解剖顕微鏡を用いて１０−〜２０−倍で調べた。移植片が目に見えて鼓動していない被移植体に麻酔をかけ、耳介に、または移植片に直接配置するいずれかのグラスＥ−２プラチナ皮下ピンマイクロ電極（Grass E-2 platinum subdermal
pin microelectode）およびタコグラフを使用して電気的活動の存在を評価した。移植片を、１日につき１〜４回、１０、２０、３０日またはそれより以上の間調べることができる。移植片拒絶の症状を改善する試験化合物の能力は、コントロール化合物、例えばサイクロスポリン、タクロリムスまたは経口投与されるレフルオノミド（lefluonomide）と比較することができる。
【０１２７】
［実施例１３］
本発明化合物の鎮痛剤活性を、ラットによる試験によって評価した。体重が１７５〜２００ｇのラットにおいて、片方の後肢の足裏にカラゲナン（０.９％の塩化ナトリウム水溶液において２％、１００μＬの注射体積）を注射した。ラットをガラスプレート上にのせ、注射した足のま下にハロゲンランプを配置し照明をあてた。照射開始から後肢がガラスから引っ込められるまでの時間（秒で）を測定し、足引っ込め反応時間（paw withdrawal latency）（ＰＷＬ）として記録した。薬物物質は、足裏にカラゲナンを注射して２.５時間後、経口的な胃管による強制注入によって与えた。ＰＷＬを、カラゲナン注射前、薬物注射の直前、および薬物注射の後１、２、（および時々３）時間に測定した。
【０１２８】
皮膚の下に注入する場合、カラゲナン（海草から抽出される多糖）は無菌性（sterile）炎症を引き起こす。ラット肉趾への注射は、ほとんどまたは全く自然発生的な痛に関連する挙動を生じないが、末梢熱刺激または機械的な刺激に対しては過度の痛覚過敏（予想されるより大きな激しい痛みに関連した行動反応）を誘発した。この過度の痛覚過敏は、注射後最大２〜３時間である。さまざまな鎮痛医薬品によるラットの処置が、このようにして測定される痛覚過敏を減らし、そしてこの処置がラットの鎮痛剤活性の検出のための従来の試験である（Hargreaves K, Dubner R, Brown F, Flores C, Joris J. A new and sensitive method for measuring thermal nociception in cutaneous hyperalgesia. Pain, 1988; 32:77-88 and Kayser V, Guilbaud G. Local and remote modifications of nociceptive sensitivity during carrageenan-induced inflammation in the rat. Pain, 1987; 28: 99-108）。未処置のラットはほぼ１０秒のＰＷＬを有する。カラゲナン注射はＰＷＬを少なくとも４時間の間ほぼ３秒に下げ、熱痛覚過敏を示す。カラゲナン熱痛覚過敏反応の阻害は、薬物処置前の減少したＰＷＬと薬物処置後の違いで測定し、そして反応のパーセント阻害として表した。ＭＥＫ阻害剤の投与は、用量に依存して熱痛覚過敏を減らした。
【国際調査報告】
2005515251.tif 000046
2005515251.tif 000047
2005515251.tif 000048
2005515251.tif 000049