(57)【要約】ヒトを含む哺乳動物における、肝臓疾患状態を処置及び／又は予防するための方法であって、前記方法には、効果的な量の式１の１０−Ｏ−ｐ−ヒドロキシベンゾイルアウクビン化合物、またアグヌシドと呼ばれるものを、任意に単独で、又は１つ又はそれ以上の薬理学的に許容可能な添加物との組み合わせで、前記哺乳動物に投与する段階が含まれる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒトを含む哺乳動物の肝臓疾患状態を治療及び／又は予防するための使用であって、前記哺乳動物に、効果的な量の式１の１０−Ｏ−ｐ−ヒドロキシベンゾイルアウクビン化合物、又はアグヌシドと呼ばれるものを、任意に単独で又は１つ又はそれ以上の薬理学的に許容可能な添加物との組み合わせで、投与する工程を含む、方法。
【請求項２】
前記組成物が、約７０％、血清グルタミン−ピルビン酸トランスアミナーゼ（ＧＰＴ）の上昇したレベルを減少させる、請求項１に記載の使用。
【請求項３】
前記組成物が、約６０％、血清グルタミン−オキサロ酢酸トランスアミナーゼ（ＧＯＴ）の上昇したレベルを減少させる、請求項１に記載の使用。
【請求項４】
前記組成物が、約６２％、血清アルカリホスファターゼ（ＡＬＰ）の上昇したレベルを減少させる、請求項１に記載の使用。
【請求項５】
前記組成物が、約７０％、血清トリグリセリドの上昇したレベルを減少させる、請求項１に記載の使用。
【請求項６】
前記組成物が、約７２％、ビリルビンの上昇したレベルに対抗する、請求項１に記載の使用。
【請求項７】
化合物アグヌシドが、全植物から得られる、請求項１に記載の使用。
【請求項８】
１０−Ｏ−ｐ−ヒドロキシベンゾイルアウクビンが、約２０〜２００ｍｇ／ｋｇ−体重の範囲の濃度である、請求項１に記載の使用。
【請求項９】
１０−Ｏ−ｐ−ヒドロキシベンゾイルアウクビンが、約５０ｍｇ／ｋｇ−体重の濃度である、請求項１に記載の使用。
【請求項１０】
前記病理学的状態が、肝臓疾病より選択される、請求項１に記載の使用。
【請求項１１】
前記対象が、哺乳動物及び動物、好ましくはヒトから選択される、請求項１に記載の使用。
【請求項１２】
前記組成物が、単独で、又は薬理学的に許容可能な担体との組み合わせで使用される、請求項１に記載の使用。
【請求項１３】
前記組成物が、薬理学的に許容可能な添加物、担体、希釈剤、溶媒、フィルター、滑剤、賦形剤、結合剤又は安定剤との組み合わせで対象に投与される、請求項１に記載の使用。
【請求項１４】
望ましい用量が、予防及び治癒の目的両方のために投与される、請求項１に記載の使用。
【請求項１５】
前記組成物が、経口又は臨床的／医学的に許容可能な方法で投与される、請求項１に記載の使用。
【請求項１６】
ヒトへの好ましい用量が、約５ｍｇ／Ｋｇ体重である、請求項１に記載の使用。
【請求項１７】
前記組成物が、たとえば、粉末、錠剤、カプセル、シロップ、顆粒、エマルジョン、エアゾール又はビーズで入手可能な、種々の物理的形態の状態。
【請求項１８】
肝硬変、ガラクトース血症、ヘモアニゴーマ、ヘモクロマトーシス、Ａ型肝炎、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、Ｄ型肝炎、Ｅ型肝炎、Ｇ型肝炎、アルコール性肝臓疾患、自己免疫肝炎、肝臓がん、胆管閉鎖症、糖原病１、アルファ−１−アンチトリプシン欠損症、アラジール症候群（Ａｌａｇｉｌｌｅ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、バイラー病（Ｂａｙｌｅｒ  Ｄｉｓｅａｓｅ）、カロリ病、脂肪肝、肝臓のかゆみ、原発性胆管閉鎖症、硬化性胆管炎、又はプロトポルフィリア  エリスロパチック（Ｐｒｏｔｏｐｏｒｐｈｙｒｉａ  Ｅｒｙｔｈｒｏｅｐａｔｉｃ）に対して有用な、請求項１に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
本発明は、植物の地上部／全体を、９５％エタノール、メタノール、水性エタノール又は水のような極性溶媒で抽出すること、エチレンクロライド、メチレンクロライド、クロロホルム、又は酢酸エチルのような溶媒で前記抽出物を完全に粉砕することによって脂肪族非極性成分を除去して、分画を得、そこからアグヌシドをカラムクロマトグラフィーで分離することによって、バイテックス  ネグンド（タイワンニンジンボク：Ｖｉｔｅｘ  Ｎｅｇｕｎｄｏ）より単離した、イリドイド配糖体、式１の１０−Ｏ−ｐ−ヒドロキシベンゾイルアウクビン（アグヌシド）の肝臓保護活性に関する。アグヌシドの肝臓保護活性は、ＣＣｌ及びガラクトサミン誘発肝臓障害モデルに対する、その保護活性の評価によって確認されている。
【０００２】
背景と先行技術
バイテックス  ネグンド  リン（クマツヅラ科）は、インドにおいて、その土地固有の薬剤体系で広く使用されている。種々の医薬の特性が、この植物の葉及び根に帰属している。葉は芳香性の強壮剤及び駆虫剤であり、根は去痰薬、解熱剤及び強壮剤として使用される。（Ｃｈｏｐｒａ，Ｒ．Ｎ．，Ｎａｙａｒ，Ｓ．Ｌ．ａｎｄ  Ｃｈｏｐｒａ，Ｉ．Ｃ．，Ｇｌｏｓｓａｒｙ  ｏｆ  Ｉｎｄｉａｎ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｐｌａｎｔｓ，ＣＳＩＲ，ｎｅｗ  ｄｅｌｈｉ，１９５６，ｐ．２５６；ｗｅａｌｔｈ  ｏｆ  ｉｎｄｉａ：ｒａｗ  ｍａｔｅｒｉａｌ，ｃｓｉｒ，ｎｅｗ  ｄｅｌｈｉ，１９７６，ｖｏｌ．ｘ．ｐ．５２２）。多くの化合物が、この植物の種々の部分から単離されている。ｇｈｏｓｈ及びｋｒｉｓｈｎａは、葉から多くの化合物、すなわち、２つの配糖体と無定形のアルカロイドとともに、グルコノニトール、ｐ−ヒドロキシ安息香酸、５−ヒドロキシイソフタル酸、及び３，４−ジヒドロキシ安息香酸を単離した[ｇｈｏｓｈ，ｔ．ｐ．  ａｎｄ  ｋｒｉｓｈｎａ，ｓ．，７．ｉｎｄｉａｎ  ｃｈｅｍ．  ｓｏｃ．１９３６，１３，６３４]。ｍａｓｉｌｕｎｇａｎは、葉の精油中の、テルペン類、ｏｃ−ピネン、カンフェン、シトラール及びβ−カリヨフィレンの存在を報告した［ｍａｓｉｌｕｎｇａｎ，ｖ．ａ．ｐｈｉｌｉｐ．ｊ．ｓｃｉ．１９５５，８４，２７５］。多数のフラボノイドが、葉及び小枝から単離されている。これらは、カスチシン、オリエンチン、イソオリエンチン、ルテオリン、ルテオリン−７−Ｏ−グルコシド、コリムボシン、ガルデニンａ及びｂ、３−Ｏ−デスメチルアルテメチン、５−Ｏ−デスメチルノビレチン、３’，４’，５，５’，６，７，８−ヘプタメトキシ−フラボン、３’、５−ジヒドロキシ−４’，７，８−トリメトキシフラバノン及び３’、５−ジヒドロキシ−４’，６，７−トリメトキシフラバノンである［ｓｉｒａｉｔ，ｌ．ｍ．，ｒｉｍｐｌｅｒ，ｈ．ａｎｄ  ｈａｅｎｓａｌ，ｒ．，ｅｘｐｅｒｉｅｎｔｉａ  １９６２，１８，７２；ｈａｅｎｓａｌ，ｒら，ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  １９６５，４，１９；ｂａｎｅｒｊｉ  ａ．ら，ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  １９６９，８，５１１；ｆｅｒｄｏｕｓ，ａ．ｊ．ら，ｂａｎｇｌａｄｅｓｈ  ａｃａｄ．ｓｃｉ．１９８４，８，２３；ｄａｙｒｉｔ  ｆ．ｍ．ら，ｐｈｉｌｉｐｐ．ｊ．ｓｃｉ．１９８７，１１６，４０３；ｂａｎｅｒｊｉ，ｊ．ら，ｉｎｄｉａｎ  ｊ．ｃｈｅｍ．１９８８；２７ｂ、５９７；ａｃｈａｒｉ，ｂ．ら，ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．１９８４，２３，７０３］。茎樹皮（ｓｔｅｍ−ｂａｒｋ）は、ルテオリン及びアセロシンの他に５つの新規フラボン配糖体を提供した。新規のフラボン配糖体は、６β−グルコピラノシル−７−ヒドロキシ−３’，４’，５’，８−テトラメトキシフラボン−５−Ｏ−ａ−ｌ−ラムノピラノシド、３’，７−ジヒドロキシ−４’，６，８−トリメトキシフラボン−５−Ｏ−（６”−Ｏ−アセチル−ｐ−ｄ−グルコピラノシド）、３，３’，４’，６，７−ペンタメトキシフラボン  ５’−Ｏ−（４”−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシル−ａ−ラムノピラノシド、４’，５，７−トリ−ヒドロキシフラボン−８−（２”−カフェオイル−ａ−グ��コピラノシド）及び３’，５，５’，７−テトラヒドロキシ−４−メトキシフラボン−３’−Ｏ−（４”−Ｏ−ａ−Ｄ−ガラクトピラノシル）ガラクトピラノシドである［Ｒａｏ，Ｖ．Ｋ．ら，Ｉｎｄｉａｎ  Ｊ．Ｐｈａｒｍ．１９７７，３９，４１；Ｓｕｂｒａｍａｍｉａｎ，Ｐ．Ｍ．Ａｎｄ  Ｍｉｓｒａ，Ｇ．Ｓ．Ｉｎｄｉａｎ  Ｊ．Ｃｈｅｍ．１９７８，１６Ｂ，６１５；Ｓｕｂｒａｍａｎｉａｍ，Ｐ．Ｍ．ａｎｄ  Ｍｉｓｒａ，Ｇ．Ｓ．Ｊ．Ｎａｔ．Ｐｒｏｄ．１９７９，４２，５４０］。ジテルペノイド、５β−ヒドロ−８，１１，１３−アビエタ−トリエン−６ａ−オール及び３つのトリトルペノイド、２ａ，３ａ−ジヒドロキシオレアナ−５  １２−ジエン−２８−オイック  アシッド、２ａ，３ａ−ジアセトキシオレアナ−５，１２−ジエン−２８−オイック  アシッド、２，３−ｃｃ−ジアセトキシ−１８−ヒドロキシオレアナ−５，１２−ジエン−２８−オイック  アシッドが、種子から単離された。これらの化合物が、抗炎症活性を示した［Ｃｈａｗｌａ，Ａ．Ｓ．，Ｓｈａｒｍａ，Ａ．Ｋ．，Ｈａｎｄａ，Ｓ．Ｓ．ａｎｄ  Ｄｈａｒ，Ｋ．Ｌ．Ｉｎｄｉａｎ  Ｊ．Ｃｈｅｍ．１９９１，３０Ｂ，７７３及びＪ．Ｎａｔ．Ｐｒｏｄ．１９９２，５５，１６３］。しかしながら、葉は、トリテルペノイド類を産出しなかったが、根から、アセチルオレアノール酸が単離された［Ｖｉｓｈｎｏｌ，Ｓ．Ｐ．，Ｓｈｏｅｂ，Ａ．，Ｋａｐｉｌ，Ｒ．Ｓ．ａｎｄ  Ｐｏｐｌｉ，Ｓ．Ｐ．Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  １９８３，２２，５９７］。
【０００３】
５つのイリドイド配糖体が、Ｖ.ネグンドの葉から報告されている。これらは、アウクビン、アグヌシド（Ｈａｎｓａｌら，Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ４，１９６５，９  ネグンドシド（ｎｅｇｕｎｄｏｓｉｄｅ）  ６’−ｐ−ヒドロキシベンゾイルムサエノシジン酸（Ｓｅｈｇａｌら，Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２１，１９８２，３６３）及びニシンダシド（ｎｉｓｈｉｎｄａｓｉｄｅ）（Ｄａｔｔａら，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  ３９，１９８３，３０６７）である。
【０００４】
植物起源の肝臓保護剤に関する、本発明者らの検索の間に、Ｖ.ネグンドの水性アルコール性抽出物及びそれから単離された分画が、強力な免疫刺激肝臓保護活性を示した。バイテックスネグンドの葉からの免疫刺激剤の単離に関して、工程が開発され、その特許はＲｅｇｉｏｎａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｊａｍｍｕに付与されている［Ｓｕｒｉ，Ｊ．Ｌ．ら，インド特許第７８３８８ｄｔ号、１９−０３．９７］。他の特許出願が、肝臓保護及び免疫刺激活性を持つ生物活性組成物の単離に関する方法について、Ｒｅｇｉｏｎａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｊａｍｍｕによって提出された（出願番号第１６／ＤＥＬ９８、ｄｔ．１６．１．９８）。ピクロリザ  クロア（Ｐｉｃｒｏｒｈｉｚａ  ｋｕｒｒｏａ）のイリドイド配糖体によって示された強力な肝臓保護活性（Ａｎｓａｒｉ，Ｒ．Ａ．ら，Ｉｎｄｉａｎ  Ｊ．  Ｍｅｄ．Ｒｅｓｅａｒｃｈ，１９８８，８７，４０１）を考慮すると、Ｖ.ネグンドのイリドイド配糖体を肝臓保護活性に関して評価することが望ましいと考えられた。アグヌシド、イリドイド配糖体をＶ.ネグンドから単離し、肝臓保護活性をその植物の水性アルコール性抽出物と共に評価した。（０３３とコードされた）水性アルコール性抽出物、及び（０３３（１）とコードされた）アグヌシドが、ラットにおけるＣＣｌ４及びガラクトサミン（ＧａｌＮ）を用いて実験的に誘発させた肝臓障害において、著しい肝臓保護活性を示した。公知の肝臓保護剤シリマリンとの比較は、０３３及び０３３（１）が、血清及び肝臓ホモジネートパラメータの上昇レベルにおけるその効果に関して、ほとんどのパラメータで、より高い肝臓保護潜在力を示すことを明らかにした（表１及び２）。
【０００５】
発明の記述
したがって、本発明の主要な目的は、Ｖ.ネグンドｖｉｚ．の葉から単離された、定義された生物活性分子、すなわち、本明細書に添付する図式中で示したような、式１のアグヌシドの肝臓保護活性を提供することである。
【０００６】
したがって、本発明は、
（ａ）公知の方法によって、植物原料を粉末化すること、
（ｂ）濾過によって、水性アルコール性抽出物を調製すること、
（ｃ）前記アルコール性抽出物を従来の方法によって濃縮すること、
（ｄ）前記抽出物を、エチレンクロライド、メチレンクロライド、クロロホルム又は酢酸エチルのような、溶媒で完全に破砕することによって、脂肪族非極性成分を除去すること、
（ｅ）前記残余抽出物を、シリカゲルに吸着させること、
（ｆ）前記吸着抽出物から、カラムクロマトグラフィーによって、アグヌシドを単離すること、及び
（ｇ）肝臓保護活性に関して評価すること、
を含む、本明細書に添付する式１の化合物の肝臓保護活性を提供する。
【０００７】
段階（ｂ）における抽出のために使用する溶媒は、エタノール、水性エタノール、メタノール、水性メタノール又は水である。
【０００８】
該化合物の肝臓保護活性は、ラットで５０ｍｇ／ｋｇ−１経口用量で表され、推定では単独又は分割用量で３００〜４００ｍｇ１日ヒト用量（７０ｋｇ）となる。
【０００９】
アグヌシド１の特徴づけ
１は結晶性化合物として得た。ｍｐ  １４８〜５０℃  ＩｖＴ：−４４６、ＵＶ−２３２ｎｍ，ＩＲ（ＫＢｒ）スペクトルは、３４００、１７００、１６４２及び１６１８ｃｍ−１で吸収を示した。
【００１０】
【化１】
2005530767.tif 000002
【００１１】
発明の詳細な記述
したがって、本発明は、ヒトを含む哺乳動物の肝臓疾患状態を治療及び／又は予防するための方法を提供し、前記方法は哺乳動物に効果的な量の式１の１０−Ｏ−ｐ−ヒドロキシベンゾイルアウクビン化合物、又はアグヌシドと呼ばれるものを、任意に単独で又は１つ又はそれ以上の薬理学的に許容可能な添加物との組み合わせで、投与する工程を含む。
【００１２】
本発明の他の実施形態では、前記組成物が、約７０％、血清グルタミン−ピルビン酸トランスアミナーゼ（ＧＰＴ）の上昇したレベルを減少させる。
【００１３】
本発明のまた他の実施形態では、前記組成物が、約６０％、血清グルタミン−オキサロ酢酸トランスアミナーゼ（ＧＯＴ）の上昇したレベルを減少させる。
【００１４】
本発明のまた他の実施形態では、前記組成物が、約６２％、血清アルカリホスファターゼ（ＡＬＰ）の上昇したレベルを減少させる。
【００１５】
本発明のまた他の実施形態では、前記組成物が、約７０％、血清トリグリセリドの上昇したレベルを減少させる。
【００１６】
本発明のまた他の実施形態では、前記組成物が、約７２％、ビリルビンの上昇したレベルに対抗する。
【００１７】
本発明のまた他の実施形態において、化合物アグヌシドは、全植物から得られる。
【００１８】
本発明のまた他の実施形態において、１０−Ｏ−ｐ−ヒドロキシベンゾイルアウクビンが、約２０〜２００ｍｇ／ｋｇ−体重の範囲の濃度である。
【００１９】
本発明のまた他の実施形態において、１０−Ｏ−ｐ−ヒドロキシベンゾイルアウクビンが、約５０ｍｇ／ｋｇ−体重の濃度である。
【００２０】
本発明のまた他の実施形態において、前記病理学的状態は、肝臓疾病より選択される。
【００２１】
本発明のまた他の実施形態において、前記対象は、哺乳動物及び動物、好ましくはヒトから選択される。
【００２２】
本発明のまた他の実施形態において、前記組成物は、単独で、又は薬理学的に許容可能な担体との組み合わせで使用される。
【００２３】
本発明のまた他の実施形態において、前記組成物は、薬理学的に許容可能な添加物、担体、希釈液、溶媒、フィルター、滑剤、賦形剤、結合剤又は安定剤との組み合わせで対象に投与される。
【００２４】
本発明のまた他の実施形態において、望ましい用量が、予防及び治癒の目的両方のために投与される。
【００２５】
本発明のまた他の実施形態において、前記組成物が、経口又は臨床的／医学的に許容可能な方法で投与される。
【００２６】
本発明のまた他の実施形態において、ヒトへの好ましい用量が、約５ｍｇ／体重Ｋｇである。
【００２７】
本発明のまた他の実施形態において、前記組成物が、たとえば、粉末、錠剤、カプセル、シロップ、顆粒、エマルジョン、エアゾール又はビーズで入手可能な、種々の物理的形態である。
【００２８】
本発明のまた他の実施形態において、本化合物は、肝硬変、ガラクトース血症、ヘモアニゴーマ、ヘモクロマトーシス、Ａ型肝炎、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、Ｄ型肝炎、Ｅ型肝炎、Ｇ型肝炎、アルコール性肝臓疾患、自己免疫肝炎、肝臓がん、胆管閉鎖症、糖原病１、アルファ−１−アンチトリプシン欠損症、アラジール症候群（Ａｌａｇｉｌｌｅ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、バイラー病（Ｂａｙｌｅｒ  Ｄｉｓｅａｓｅ）、カロリ病、脂肪肝、肝臓のかゆみ、原発性胆管閉鎖症、硬化性胆管炎、又はプロトポルフィリア  エリスロパチックに対して有用である。
【００２９】
本発明のもう１つの実施形態は、式１の化合物１０−Ｏ−ｐ−ヒドロキシベンゾイルアウクビン化合物、またアグヌシドと呼ばれる化合物の単離のための工程であって、前記化合物が、
（ａ）公知の方法によって、植物原料を粉末化すること、
（ｂ）濾過によって、水性アルコール性抽出物を調製すること、
（ｃ）前記アルコール性抽出物を従来の方法によって濃縮すること、
（ｄ）前記抽出物を、エチレンクロライド、メチレンクロライド、クロロホルム又は酢酸エチルのような、溶媒で完全に粉砕することによって、脂肪族非極性成分を除去すること、
（ｅ）前記残余抽出物を、シリカゲルに吸着させること、
（ｆ）前記吸着抽出物から、カラムクロマトグラフィーによって、２’−ｐ−ヒドロキシベンゾイルムサエノシジン酸を単離すること、
の段階を含む、地上部／全体から単離される。
【００３０】
本発明は、以下で提供される実施例によって詳細に記述され、それらは本発明の範囲を限定するために解釈されるべきでない。
【００３１】
実施例１
Ｖ.ネグンド（１ｋｇ）の日陰で乾燥し粉末化した葉を、濾過によって、８０％エタノール（４×３Ｌ）で抽出した。プールした抽出物を、５０℃未満で、減圧下、１リットルの水性濃縮液まで濃縮した。前記水性濃縮液を、酢酸エチル（３×５００ｍｌ）で洗浄し、さらに４００ｍｌまで濃縮した。このシロップ様残余物を、シリカゲル（４００ｇ）上に吸着させ、室温にて乾燥させた。スラリーをシリカゲルカラム上にのせ、クロロホルム−メタノール（１９：１）の混合物で溶出し、１（２．１ｇ）を得た（０３３（１）とコードした）。
【００３２】
実施例２
バイテックスネグンドの細かく粉末化した葉（２００ｇ）を、石油エーテル（６０〜８０°）を用いて３回抽出した（最初の抽出に対しては１リットル、続く二回の抽出に対しては各６００ｍｌ）。室温にて薬剤から溶媒を除去した。ついでエタノールで抽出した（最初の抽出に対しては１リットル、次いで各回同じ溶媒６００ｍｌで３回）。エタノールをロータリーフィルムエバポレーター中で蒸発させて、３０ｇの抽出物を得た（とコードした）。
【００３３】
実施例３
実験動物を、ＣＣＵ誘発肝臓障害に対して０３３及び０３３（１）を用いて処置することで、血清ＧＰＴ、ＧＯＴ、ＡＬＰ、ビリルビン、ＴＧ及び肝臓の脂質過酸化の上昇したレベルが減少し、ＧＳＨレベルが増加した。公知の肝臓保護剤シリマリンとの比較は、０３３及び０３３（１）が、ＣＣＵによる上記パラメータの上昇したレベルにおけるその効果に関して、ほとんどのパラメータで、より高い保護潜在力を示すことを明らかにした。０３３及び０３３（１）で観察された肝臓保護活性は、それぞれ、血清ＧＰＴ−６７．５２＆５９．５２、ＧＯＴ−５８．９１＆５７．４２、ＡＬＰ−５８．２６＆６０．１７、ビリルビン−６０．００＆７１．７９、ＴＧ−４６．４７＆３８．５３、及び肝臓ホモジネート内、Ｌｐ−５５．７１＆４１．４８及びＧＳＨ−６１．４２＆３８．１２％であった。シリマリンは同様に、それぞれ、５８．４４、５１．６３、５２．２６、５７．５０、４１．３０、６２．０５＆６０．１５であった（表１）。
【００３４】
実施例４
ガラクトサミン（ＧａｌＮ）誘発肝臓障害に対する動物の処置によっても、血清ＧＰＴ、ＧＯＴ、ＡＬＰ、ビリルビン、ＴＧ及び肝臓の脂質過酸化の上昇したレベルが減少し、ＧＳＨレベルが増加した。０３３及び０３３（１）で観察された肝臓保護活性は、血清ＧＰＴ、ＧＯＴ、ビリルビン、ＡＬＰ及びＴＧにおいて、それぞれ、５９．５８＆４４，９７、５６．６２＆４４．０５、５４．２８＆４７．６６、５７．７１＆６６．６６、５７．８９＆４９．３３パーセントであり、肝臓の脂質過酸化（ＬＰ）及びＧＳＨにおいてそれぞれ６７．５１＆４８．３４、６６．５６＆５５．１３パーセントであった。シリマリンでは同様に、それぞれ、５７．３８、５５．４０、６０．００、５３．５４、４６．１７、６９．５９、６７．１８パーセントであった（表２）。
【００３５】
現在使用されている植物由来の肝臓保護物に対する本発明の利点：
１．アグヌシドは、市販に入手可能な薬草の肝臓保護剤シリマリンよりも強力である。
２．シリマリンは、相対的比率がバッチ間で変化する３つの成分の混合物であるが、アグヌシドは純粋な化合物である。
【００３６】
【表１】
2005530767.tif 000003
ａ：値は各群６匹の動物の平均パーセント肝臓保護活性を表している。
Ｈ：肝臓保護活性は｛１−（Ｔ−Ｖ／Ｃ・Ｖ）｝×１００で計算され、式中「Ｔ」は薬剤及びＣＣＵの平均値であり、「Ｃ」はＣＣＵのみの平均値であり、「Ｖ」は賦形剤処置動物の平均値である。
ユニット：各ユニットは（モル  ピルビン酸塩／分／Ｌである。
ｂ：ｂは形成されたｐ−ニトロフェノール／ミニＵの１１モルである。
ｃ：ｃはｎモルＭＤＡ／ｇ肝臓である。
ｄ：ｄはｎモルＧＳＨ／ｇ肝臓である。
【００３７】
【表２】
2005530767.tif 000004
ａ：値は各群６匹の動物の平均パーセント肝臓保護活性を表している。
Ｈ：肝臓保護活性は｛１−（Ｔ−Ｖ／Ｃ−Ｖ）｝×１００で計算され、式中「Ｔ」は薬剤及びＧａｌＮの平均値であり、「Ｃ」はＧａｌＮのみの平均値であり、「Ｖ」は賦形剤処置動物の平均値である。
ユニット：各ユニットはピルビン酸ピノール（ｐｉｎｏｌｅ  ｐｙｒｕｖａｔｅ）／分／Ｌである。
ｂ：ｂはＭ、形成されたＪ−ニトロフェノール／分／Ｌである。
ｃ：ｃはｎモルＭＤＡ／ｇ肝臓である。
ｄ：ｄは、ｐモルＧＳＨ／ｇ肝臓である。
【図面の簡単な説明】
【００３８】
【図１】図１は、式１の化合物１０−Ｏ−ｐ−ヒドロキシベンゾイルアウクビン（アグヌシド）を表している。
【図２】図２は、１０−Ｏ−ｐ−ヒドロキシベンゾイルアウクビン（アグヌシド）の単離に関するフローシートを表している。
【図１】
2005530767.tif 000005
【図２】
2005530767.tif 000006
【国際調査報告】
2005530767.tif 000007
2005530767.tif 000008
2005530767.tif 000009
2005530767.tif 000010
2005530767.tif 000011