(57)【要約】本発明は、治療処置に有用な、エストラジオール代謝産物（２−ヒドロキシエストラジオール、２−メトキシエストラジオール、４−ヒドロキシエストラジオールおよび４−メトキシエストラジオールを含む）の改善された徐放性処方物を提供する。本発明はまた、徐放性形態のエストラジオール代謝産物を生成する方法を提供する。本発明の組成物としては、微粒子、ナノパーティクル、パッチ、結晶、ゲル、ロッド、スティント、ペレット、ディスク、ロゼンジ、ウェーハ、カプセル、フィルム、マイクロカプセル、ナノカプセル、ヒドロゲル、リポソーム、移植片および膣リングが挙げられる。組成物はまた、エストラジオール代謝産物の経皮送達および静脈内送達のための処方物を包含する。本発明は、従来の形態のエストラジオール代謝産物に対する多数の改善点を提供し、このような利点は、通常短い半減期の化合物の、治療血液レベルを維持する徐放性を含む。【特許請求の範囲】
【請求項１】
組成物であって、以下：
（ａ）エストラジオール代謝産物；および
（ｂ）徐放を提供する材料
を含む、組成物。
【請求項２】
前記徐放を提供する材料が、微粒子、ナノパーティクル、パッチ、結晶、ゲル、ロッド、スティント、ペレット、ディスク、ロゼンジ、ウェーハ、カプセル、フィルム、マイクロカプセル、ナノカプセル、ヒドロゲル、リポソーム、移植片および膣リング、からなる群から選択される、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記微粒子またはナノパーティクルが、ポリ（ラクチド）、ポリ（グリコリド）、ポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）、ポリ（乳酸）、ポリ（グリコール酸）、ポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）、ポリカプロラクトン、ポリカーボネート、ポリエステルアミド、ポリ無水物、ポリ（アミノ酸）、ポリオルトエステル、ポリアセチル、ポリシアノアクリレート、ポリエーテルエステル、ポリ（ジオキサノン）、ポリ（アルキレンアルキレート）、ポリエチレングリコールとポリオルトエステルとのコポリマー、ポリウレタン、それらのブレンドおよびコポリマーからなる群から選択される生分解性ポリマーから構成される、請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
前記微粒子またはナノパーティクルが、ポリ（ｄ，ｌ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド）から構成される、請求項３に記載の組成物。
【請求項５】
前記微粒子が、１マイクロメートルと２００マイクロメートルとの間の直径を有する、請求項２に記載の組成物。
【請求項６】
前記ナノパーティクルが、２０ナノメートルと２０００ナノメートルとの間の直径を有する、請求項２に記載の組成物。
【請求項７】
前記微粒子またはナノパーティクルが、添加剤をさらに含む、請求項２に記載の組成物。
【請求項８】
前記添加剤が、ブチル化ヒドロキシトルエン、没食子酸プロピル、トコフェロール、アスコルビン酸パルミテート、抗酸化剤、放出モディファイヤおよび緩衝剤からなる群から選択される、請求項７に記載の組成物。
【請求項９】
前記エストラジオール代謝産物が、２−メトキシエストラジオール、２−ヒドロキシエストラジオール、４−メトキシエストラジオールおよび４−ヒドロキシエストラジオールからなる群から選択される、請求項１に記載の組成物。
【請求項１０】
前記エストラジオール代謝産物が、経皮送達される、請求項１に記載の組成物。
【請求項１１】
前記経皮送達が、頬側送達、経口送達、眼送達、鼻送達、直腸送達および膣送達からなる群から選択される、請求項１０に記載の組成物。
【請求項１２】
前記エストラジオール代謝産物がプロドラッグである、請求項１に記載の組成物。
【請求項１３】
前記プロドラッグがエステルである、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１４】
請求項１３に記載の組成物であって、前記エステルが、３−ベンゾイル−２−メトキシエストラジオール；１７−ベンゾイル−２−メトキシエストラジオール；１７−アセチル−２−メトキシエストラジオール；３−アセチル−２−メトキシエストラジオール；３，１７−ジベンゾイル−２−メトキシエストラジオール；３，１７−ジアセチル−２−メトキシエストラジオール；３−ベンゾイル−４−メトキシエストラジオール；１７−ベンゾイル−４−メトキシエストラジオール；１７−アセチル−４−メトキシエストラジオール；３−アセチル−４−メトキシエストラジオール；３，１７−ジベンゾイル−４−メトキシエストラジオール；３，１７−ジアセチル４−メトキシエストラジオール；３−ベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール；１７−ベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール；１７−アセチル−２−ヒドロキシエストラジオール；３−アセチル−２−ヒドロキシエストラジオール；３，１７−ジベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール；３，１７−ジアセチル−２−ヒドロキシエストラジオール；２，３−ジベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール；２，１７−ジベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール；２，１７−ジアセチル−２−ヒドロキシエストラジオール；２，３−ジアセチル−２−ヒドロキシエストラジオール；２，３，１７−トリベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール；２，３，１７−トリアセチル−２−ヒドロキシエストラジオール；３−ベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール；１７−ベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール；１７−アセチル−４−ヒドロキシエストラジオール；３−アセチル−４−ヒドロキシエストラジオール；３，１７−ジベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール；３，１７−ジアセチル−４−ヒドロキシエストラジオール；３，４−ジベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール；４，１７−ジベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール；４，１７−ジアセチル−４−ヒドロキシエストラジオール；３，４−ジアセチル−４−ヒドロキシエストラジオール；３，４，１７−トリベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール；３，４，１７−トリアセチル−４−ヒドロキシエストラジオールからなる群から選択される、組成物。
【請求項１５】
前記エストラジオール代謝産物が、共晶混合物である、請求項１に記載の組成物。
【請求項１６】
親水性ポリマーをさらに含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項１７】
前記親水性ポリマーが、ポリ（エチレングリコール）、ポリ（プロピレングリコール）およびポリ（エチレングリコール）とポリ（プロピレングリコール）とのコポリマーからなる群から選択される、請求項１６に記載の組成物。
【請求項１８】
前記エストラジオール代謝産物が、誘導体化されている、請求項１に記載の組成物。
【請求項１９】
誘導体が、ジカルボン酸化合物、二酸、極性化合物およびイオン性化合物からなる群から選択される、請求項１８に記載の組成物。
【請求項２０】
前記ジカルボン酸化合物が、シュウ酸、マロン酸、マレイン酸、コハク酸、グルタル酸、アジピン酸、ピメリン酸およびパモ酸からなる群から選択される、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２１】
前記二酸が、コハク酸、グルタル酸、マレイン酸、マロン酸およびシュウ酸からなる群から選択される、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２２】
前記組成物が、有機溶媒中に溶解したポリマーおよびエストラジオール代謝産物の溶液を噴霧乾燥することによって生成される、請求項１〜２１のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項２３】
前記組成物が、連続相および不連続相を含む湿式乳化、続いて溶媒除去によって生成される、請求項１〜２１のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項２４】
前記不連続相がエストラジオール代謝産物およびポリマーを含む、請求項２３に記載の組成物。
【請求項２５】
添加剤をさらに含む、請求項２４に記載の組成物。
【請求項２６】
前記添加剤が、抗酸化剤、緩衝剤および放出モディファイヤからなる群から選択される、請求項２５に記載の組成物。
【請求項２７】
前記不連続相が有機溶媒を含む、請求項２３に記載の組成物。
【請求項２８】
前記連続相が乳化剤をさらに含む、請求項２３に記載の組成物。
【請求項２９】
前記乳化剤が、リン脂質、レシチン、イオン性界面活性剤、非イオン性界面活性剤、ポロキサマー、ポリマー、ポリビニルピロリドンおよびポリビニルアルコールからなる群から選択される、請求項２８に記載の組成物。
【請求項３０】
前記乳化剤がポリビニルアルコールである、請求項２９に記載の組成物。
【請求項３１】
前記組成物が、油相溶媒の選択的抽出によって生成された、請求項１〜２１のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項３２】
前記組成物が、乳化プロセスによって生成された、請求項１〜２１のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項３３】
前記組成物が、アニールリング工程を含むプロセスによって生成される、請求項１〜３２のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項３４】
前記組成物が、個体を処置するために有用である、請求項１〜３３のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項３５】
治療方法であって、以下：
（ａ）エストラジオール代謝産物を含む徐放性処方物を個体に投与する工程
を包含する、方法。
【請求項３６】
前記エストラジオール代謝産物を含む徐放性処方物が、微粒子、ナノパーティクル、パッチ、結晶、ゲル、ロッド、スティント、ペレット、ディスク、ロゼンジ、ウェーハ、カプセル、フィルム、マイクロカプセル、ナノカプセル、ヒドロゲル、リポソーム、移植片および膣リングからなる群から選択される、請求項３５に記載の方法。
【請求項３７】
前記微粒子またはナノパーティクルが、ポリ（ラクチド）、ポリ（グリコリド）、ポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）、ポリ（乳酸）、ポリ（グリコール酸）、ポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）、ポリカプロラクトン、ポリカーボネート、ポリエステルアミド、ポリ無水物、ポリ（アミノ酸）、ポリオルトエステル、ポリアセチル、ポリシアノアクリレート、ポリエーテルエステル、ポリ（ジオキサノン）、ポリ（アルキレンアルキレート）、ポリエチレングリコールとポリオルトエステルとのコポリマー、生分解性ポリウレタン、それらのブレンドおよびコポリマーからなる群から選択される生分解性ポリマーから構成される、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
前記微粒子またはナノパーティクルが、ポリ（ｄ，ｌ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド）から構成される、請求項３７に記載の方法。
【請求項３９】
前記微粒子が、１マイクロメートルと２００マイクロメートルとの間の直径を有する、請求項３７に記載の方法。
【請求項４０】
前記ナノパーティクルが、２０ナノメートルと２０００ナノメートルとの間の直径を有する、請求項３７に記載の方法。
【請求項４１】
前記微粒子またはナノパーティクルが、添加剤をさらに含む、請求項３７に記載の方法。
【請求項４２】
前記添加剤が、ブチル化ヒドロキシトルエン、没食子酸プロピル、トコフェロール、アスコルビン酸パルミテート、抗酸化剤、放出モディファイヤおよび緩衝剤からなる群から選択される、請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】
前記エストラジオール代謝産物が、２−メトキシエストラジオール、２−ヒドロキシエストラジオール、４−メトキシエストラジオールおよび４−ヒドロキシエストラジオールからなる群から選択される、請求項３５に記載の方法。
【請求項４４】
前記エストラジオール代謝産物が、経皮送達される、請求項３５に記載の方法。
【請求項４５】
前記経皮送達が、頬側送達、経口送達、眼送達、鼻送達、直腸送達および膣送達からなる群から選択される、請求項４４に記載の方法。
【請求項４６】
前記エストラジオール代謝産物がプロドラッグである、請求項３５に記載の方法。
【請求項４７】
前記プロドラッグがエステルである、請求項４６に記載の方法。
【請求項４８】
請求項４７に記載の方法であって、前記エステルが、３−ベンゾイル−２−メトキシエストラジオール；１７−ベンゾイル−２−メトキシエストラジオール；１７−アセチル−２−メトキシエストラジオール；３−アセチル−２−メトキシエストラジオール；３，１７−ジベンゾイル−２−メトキシエストラジオール；３，１７−ジアセチル−２−メトキシエストラジオール；３−ベンゾイル−４−メトキシエストラジオール；１７−ベンゾイル−４−メトキシエストラジオール；１７−アセチル−４−メトキシエストラジオール；３−アセチル−４−メトキシエストラジオール；３，１７−ジベンゾイル−４−メトキシエストラジオール；３，１７−ジアセチル−４−メトキシエストラジオール；
３−ベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール；１７−ベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール；１７−アセチル−２−ヒドロキシエストラジオール；３−アセチル−２−ヒドロキシエストラジオール；３，１７−ジベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール；３，１７−ジアセチル−２−ヒドロキシエストラジオール；２，３−ジベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール；２，１７−ジベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール；２，１７−ジアセチル−２−ヒドロキシエストラジオール；２，３−ジアセチル−２−ヒドロキシエストラジオール；２，３，１７−トリベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール；２，３，１７−トリアセチル−２−ヒドロキシエストラジオール；３−ベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール；１７−ベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール；１７−アセチル−４−ヒドロキシエストラジオール；３−アセチル−４−ヒドロキシエストラジオール；３，１７−ジベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール；３，１７−ジアセチル−４−ヒドロキシエストラジオール；３，４−ジベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール；４，１７−ジベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール；４，１７−ジアセチル−４−ヒドロキシエストラジオール；３，４−ジアセチル−４−ヒドロキシエストラジオール；３，４，１７−トリベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール；３，４，１７−トリアセチル−４−ヒドロキシエストラジオールからなる群から選択される、方法。
【請求項４９】
前記エストラジオール代謝産物を含む徐放性処方物が、共晶混合物である、請求項３５に記載の方法。
【請求項５０】
親水性ポリマーをさらに含む、請求項３５に記載の方法。
【請求項５１】
前記親水性ポリマーが、ポリ（エチレングリコール）、ポリ（プロピレングリコール）およびポリ（エチレングリコール）とポリ（プロピレングリコール）とのコポリマーからなる群から選択される、請求項５０に記載の方法。
【請求項５２】
前記エストラジオール代謝産物が、誘導体化されている、請求項３５に記載の方法。
【請求項５３】
誘導体が、ジカルボン酸化合物、二酸、極性化合物およびイオン性化合物からなる群から選択される、請求項５２に記載の方法。
【請求項５４】
前記ジカルボン酸化合物が、シュウ酸、マロン酸、マレイン酸、コハク酸、グルタル酸、アジピン酸、ピメリン酸およびパモ酸からなる群から選択される、請求項５３に記載の方法。
【請求項５５】
前記二酸が、コハク酸、グルタル酸、マレイン酸、マロン酸およびシュウ酸からなる群から選択される、請求項５３に記載の方法。
【請求項５６】
前記エストラジオール代謝産物を含む徐放性処方物が、有機溶媒中に溶解したポリマーおよびエストラジオール代謝産物の溶液を噴霧乾燥することによって生成される、請求項３５〜５５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５７】
前記エストラジオール代謝産物を含む徐放性処方物が、連続相および不連続相を含む湿式乳化、続いて溶媒除去によって生成される、請求項３５〜５５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５８】
前記不連続相がエストラジオール代謝産物およびポリマーを含む、請求項５７に記載の方法。
【請求項５９】
添加剤をさらに含む、請求項５８に記載の方法。
【請求項６０】
前記添加剤が、抗酸化剤、緩衝剤および放出モディファイヤからなる群から選択される、請求項５９に記載の方法。
【請求項６１】
前記不連続相が、有機溶媒を含む、請求項５７に記載の方法。
【請求項６２】
前記有機溶媒が、１つの溶媒、２つの溶媒および溶媒混合物からなる群から選択される、請求項６１に記載の方法。
【請求項６３】
前記連続相が、乳化剤をさらに含む、請求項５７に記載の方法。
【請求項６４】
前記乳化剤が、リン脂質、レシチン、イオン性界面活性剤、非イオン性界面活性剤、ポロキサマー、ポリマー、ポリビニルピロリドンおよびポリビニルアルコールからなる群から選択される、請求項６３に記載の方法。
【請求項６５】
前記乳化剤がポリビニルアルコールである、請求項６４に記載の方法。
【請求項６６】
前記エストラジオール代謝産物を含む徐放性処方物が、油相溶媒の選択的抽出によって生成された、請求項３５〜５５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６７】
前記エストラジオール代謝産物を含む徐放性処方物が、乳化プロセスによって生成された、請求項３５〜５５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６８】
組成物であって、以下；
（ａ）カテコールエストロゲンおよびメトキシエストラジオールからなる群から選択されたエストラジオール代謝産物；ならびに
（ｂ）徐放を提供する材料
を含む、組成物。
【請求項６９】
前記徐放を提供する材料が、ポリ（ラクチド）、ポリ（グリコリド）、ポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）、ポリ（乳酸）、ポリ（グリコール酸）、ポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）、ポリカプロラクトン、ポリカーボネート、ポリエステルアミド、ポリ無水物、ポリ（アミノ酸）、ポリオルトエステル、ポリアセチル、ポリシアノアクリレート、ポリエーテルエステル、ポリ（ジオキサノン）、ポリ（アルキレンアルキレート）、ポリエチレングリコールとポリオルトエステルとのコポリマー、生分解性ポリウレタン、それらのブレンドおよびコポリマーからなる群から選択される生分解性ポリマーから構成される微粒子またはナノパーティクルである、請求項６８に記載の組成物。
【請求項７０】
前記エストラジオール代謝産物が、２−メトキシエストラジオール、２−ヒドロキシエストラジオール、４−メトキシエストラジオールおよび４−ヒドロキシエストラジオールからなる群から選択される、請求項６８に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連出願の引用）
本願は、「Ｅｓｔｒａｄｉｏｌ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ  ａｎｄ  Ｅｓｔｅｒ  Ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ  ｏｆ  Ｅｓｔｒａｄｉｏｌ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ」との発明の名称の米国仮特許出願第６０／３７７，４９０号（２００２年５月３日出願）による優先権を主張する。米国仮特許出願第６０／３７７，４９０号は、その全体が本明細書中に参考として援用される。
【０００２】
（発明の分野）
本発明は一般に、徐放形態のエストラジオール代謝産物、ならびにこれらの製造方法および使用方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
（発明の背景）
エストラジオールは、インビボでの代謝プロセスにより、異なる誘導体に変換される。２つの特定の種類の代謝産物は、カテコールエストロゲンおよびメトキシエストラジオールである。カテコールエストロゲンである２−ヒドロキシエストラジオールおよび４−ヒドロキシエストラジオールは、シトクロムＰ４５０酵素によるエストロゲンのヒドロキシル化によって生成される。カテコールエストロゲンは、カテコール−Ｏ−メチルトランスフェラーゼによってメチル化されて、メトキシエストラジオールである２−メトキシエストラジオールおよび４−メトキシエストラジオールを生成し得る。
【０００４】
エストラジオール代謝産物は、多数の細胞プロセスに影響を及ぼすことが報告されている。これらは、活発に増殖する細胞におけるチュービュリンの細胞の血管新生および組織化を明らかに阻害し、そしていくつかの細胞におけるアポトーシスを誘導する。さらに、２−ヒドロキシエストラジオールおよび２−メトキシエストラジオールは、卵巣抽出されたされたラットにおけるコレステロールレベルに影響を及ぼし、そして培養中の脂肪細胞の増殖を阻害するようであり、一方、２−ヒドロキシエストラジオールおよび２−メトキシエストラジオールは、肥満したラットにおける肥満、代謝症候群ならびに脈管機能不全および腎臓機能不全の影響を明らかに減少させる。エストラジオール代謝産物はまた、末期の腎臓疾患および喘息の処置において有益であると報告されている。さらに、エストラジオール代謝産物は、有効な抗真菌剤であるようである。
【０００５】
エストラジオール代謝産物の有益な効果はまた、癌の処置について報告されている。２−メトキシエストラジオールは、野生型ｐ５３とともに投与された場合、培養中の肺癌細胞の増殖を減少させ、ヒト膵臓癌細胞および前立腺癌細胞の増殖を阻害し、そして骨肉腫細胞に対して毒性であるようである。２−メトキシエストラジオールまた、下垂体の神経芽細胞腫細胞および腫瘍の増殖速度を減少させると報告された。エストラジオール代謝産物はまた、迅速に分裂する細胞中のスーパーオキシド陰イオンの細胞内蓄積を明らかに増やし、そして既存の癌処置（例えば、放射免疫療法）の効果を増強するようである。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
従って、エストラジオール代謝産物は、様々な疾患の処置または予防に有用であり得る。残念なことに、天然に存在するエストラジオール代謝産物は、乏しい生物学的利用能および短い半減期を有し、そして、有益な効果は、長期間の処置に結び付いているようである。動物およびヒトの患者の両方において望ましくない頻繁な投与を必要とすることなく、代謝産物の作用の持続時間を長期化させる、エストラジオール代謝産物の薬学的処方物についての必要性が存在する。エストラジオール代謝産物についての徐放系の開発は、広範な種々の獣医学的疾患およびヒトの疾患の処置について、改善された治療オプションを提供する。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
（発明の要旨）
本発明の目的によれば、本明細書において具体化され、かつ広範に記載されているように、本発明は、１つの局面において、エストラジオール代謝産物の徐放性処方物、ならびにこの処方物の作製方法および使用方法に関する。
【０００８】
特定の実施形態によれば、この組成物および方法は、エストラジオール代謝産物および徐放を提供する材料を含み得る。徐放を提供するこのような材料は、微粒子、ナノパーティクル、パッチ、結晶、ゲル、ロッド、スティント（ｓｔｉｎｔ）、ペレット、ディスク、ロゼンジ、ウェーハ、カプセル、フィルム、マイクロカプセル、ナノカプセル、ヒドロゲル、リポソーム、移植片および膣リングからなる群から選択され得る。さらに、本発明は、親水性ポリマーをさらに提供する。特定の実施形態では、本発明はエストラジオール代謝産物のプロドラッグを利用する、組成物または方法を提供する。このようなプロドラッグは、エストラジオール代謝産物のエステル誘導体であり得る。他の実施形態では、エストラジオール代謝産物は、誘導体化され得る。
【０００９】
本発明において有用な親水性ポリマーとしては、ポリ（エチレングリコール）、ポリ（プロピレングリコール）、ならびにポリ（エチレングリコール）とポリ（プロピレングリコール）とのコポリマーが挙げられ得るが、これらに限定されない。
【００１０】
特定の実施形態では、エストラジオール代謝産物は、カテコールエストロゲンまたはメトキシエストラジオールである。特定の実施形態では、これらは、２−メトキシエストラジオール、２−ヒドロキシエストラジオール、４−メトキシエストラジオールおよび４−ヒドロキシエストラジオールからなる群から選択される。
【００１１】
他の特定の実施形態では、微粒子またはナノパーティクルは、ポリ（ラクチド）、ポリ（グリコリド）、ポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）、ポリ（乳酸）、ポリ（グリコール酸）、ポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）、ポリカプロラクトン、ポリカーボネート、ポリエステルアミド、ポリ無水物、ポリ（アミノ酸）、ポリオルトエステル、ポリアセチル、ポリシアノアクリレート、ポリエーテルエステル、ポリ（ジオキサノン）、ポリ（アルキレンアルキレート）、ポリエチレングリコールとポリオルトエステルとのコポリマー、生分解性ポリウレタン、それらのブレンドおよびコポリマーからなる群から選択される生分解性ポリマーを含み得る。
【００１２】
本発明において有用なエストラジオール代謝産物は、２−メトキシエストラジオール、２−ヒドロキシエストラジオール、４−メトキシエストラジオールおよび４−ヒドロキシエストラジオールからなる群から選択され得る。特定の実施形態では、エストラジオール代謝産物のエステル誘導体は、以下からなる群から選択される：３−ベンゾイル−２−メトキシエストラジオール；１７−ベンゾイル−２−メトキシエストラジオール；１７−アセチル−２−メトキシエストラジオール；３−アセチル−２−メトキシエストラジオール；３，１７−ジベンゾイル−２−メトキシエストラジオール；３，１７−ジアセチル−２−メトキシエストラジオール；３−ベンゾイル−４−メトキシエストラジオール；１７−ベンゾイル−４−メトキシエストラジオール；１７−アセチル−４−メトキシエストラジオール；３−アセチル−４−メトキシエストラジオール；３，１７−ジベンゾイル−４−メトキシエストラジオール；３，１７−ジアセチル−４−メトキシエストラジオール；３−ベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール；１７−ベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール；１７−アセチル−２−ヒドロキシエストラジオール；３−アセチル−２−ヒドロキシエストラジオール；３，１７−ジベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール；３，１７−ジアセチル−２−ヒドロキシエストラジオール；２，３−ジベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール；２，１７−ジベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール；２，１７−ジアセチル−２−ヒドロキシエストラジオール；２，３−ジアセチル−２−ヒドロキシエストラジオール；２，３，１７−トリベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール；２，３，１７−トリアセチル−２−ヒドロキシエストラジオール；３−ベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール；１７−ベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール；１７−アセチル−４−ヒドロキシエストラジオール；３−アセチル−４−ヒドロキシエストラジオール；３，１７−ジベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール；３，１７−ジアセチル−４−ヒドロキシエストラジオール；３，４−ジベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール；４，１７−ジベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール；４，１７−ジアセチル−４−ヒドロキシエストラジオール；３，４−ジアセチル−４−ヒドロキシエストラジオール；３，４，１７−トリベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール；３，４，１７−トリアセチル−４−ヒドロキシエストラジオール。
【００１３】
誘導体としては、ジカルボン酸化合物、二酸、極性化合物およびイオン性化合物が挙げられるが、これらに限定されない。
【００１４】
本発明の組成物は、（例えば、頬側適用、経口適用、眼適用、鼻適用、直腸適用または膣適用により）経皮適用され得る。本発明の組成物および方法はまた、共晶混合物中のエストラジオール代謝産物を利用し得る。
【００１５】
本発明の組成物および方法は、当該分野で公知の任意の方法によって生成された徐放形態のエストラジオール代謝産物を利用し得る。特定の実施形態では、このような生成方法としては、有機溶媒中に溶解したポリマーおよびエストラジオール代謝産物の溶液を噴霧乾燥すること；連続相および不連続相を含む湿式乳化、続いて溶媒除去；油相溶媒の選択的な抽出；ならびに乳化が挙げられるが、これらに限定されない。任意の生成方法が、アニーリング工程をさらに提供し得る。
【００１６】
本発明の組成物および方法は、個体を処置するために有用であり得る。
【００１７】
本発明のさらなる利点は、以下の記載に部分的に示され、そしてこの記載から部分的に明らかであるか、または本発明の実施によって学習され得る。本発明の利点は、添付の特許請求の範囲において特に指摘される要素および組合せによって現実化および獲得される。上記の一般的説明および以下の詳細な説明が、単なる例示でかつ説明であって、請求される本発明の限定ではないことが理解されるべきである。
【００１８】
（発明の説明）
本発明は、本明細書中に含まれる本発明の特定の実施形態および実施例の以下の詳細な説明を参照することで、より容易に理解され得る。
【００１９】
本発明の化合物、組成物および／または方法を開示および記載する前に、本発明が特定の合成方法にも、特定の試薬にも、実験技術にも製造技術にも限定されず、もちろんこれらは、そうでないと示さない限り変化し得ることが理解されるべきである。本明細書において用いられる用語が、特定の実施形態を記載することのみを目的とし、制限することを意図しないこともまた理解されるべきである。
【００２０】
（定義）
本発明の目的のために、以下の用語は、以下の意味を有するものとする：
本発明の目的のために、用語「生分解性」とは、特定の治療状況において許容される一定期間内でインビボにて溶解または分解するポリマーをいう。この時間は、生理的ｐＨおよび温度（例えば、６〜９の範囲のｐＨおよび２５℃〜３８℃の範囲の温度）に対する曝露の後、代表的に５年未満であり、通常１年未満である。
【００２１】
用語「アナログ」およびそれと同語源の語は、エストラジオール代謝産物活性を示す任意の分子をいう。このような分子は、合成アナログ、エストラジオール代謝産物のフラグメントまたはエストラジオール代謝産物様活性が可能なエストラジオール代謝産物以外の内因性生物学的分子であり得る。要するに、エストラジオール代謝産物アナログとは、エストラジオール代謝産物自体と類似するかまたはそれよりも高い生物活性を示す任意の分子をいう。
【００２２】
本発明の目的のために、用語「プロドラッグ」とは、長期化した血漿循環時間、増大した封入効率および／または増大した水溶性をもたらす物理的もしくは化学的な変化を含む、エストラジオール代謝産物の任意の改変をいう。この薬物に対する化学的改変は、個体へと投与されると内因性機構によって可逆的である。このような内因性機構の産物は、エストラジオール代謝産物である。
【００２３】
本発明の目的のために、用語「エストラジオール代謝産物」は、エストラジオールの代謝分解から生じる任意の分子およびエストラジオール代謝産物に由来する任意の分子（例えばプロドラッグ）；またはアナログを包含する。
【００２４】
本発明の目的のために、用語「薬物」とは、任意のエストラジオール代謝産物、任意のエストラジオール代謝産物アナログ、またはエストラジオール代謝産物プロドラッグを言及し得る。
【００２５】
さらに、本発明の目的のために、用語「ａ」または「ａｎ」の存在は、その存在の一つ以上をいう；例えば、「プロドラッグ」または「エストラジオール代謝産物分子」とは、これらの化合物のうちの一つまたは少なくとも一つの化合物をいう。このように、用語「ａ」または「ａｎ」、「一つ以上」、そして、「少なくとも１つ」は、本明細書において交換可能に用いられ得る。用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」、「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」で、「有する（ｈａｖｉｎｇ）」は、交換可能に用いられ得ることもまた、留意すべきである。さらに、「からなる群から選択される」化合物とは、その後に続くリストにおける一つ以上の化合物（２以上の化合物（すなわち、組み合わせ）を含む）をいう。
【００２６】
本発明の目的のために、「共晶」混合物は、可能な最も低い温度で溶融する２つ以上の物質から構成される。
【００２７】
本発明によれば、単離されたかまたは生物学的に純粋な分子は、その天然の環境から取り出された化合物である。このように「単離された」および「生物学的に純粋な」とは、化合物が精製された程度を必ずしも反映するわけではない。本発明の単離された化合物は、その天然供給源から入手されてもよく、実験室の合成技術を使用して生成されてもよく、または任意のこのような化学合成経路によって生成されてもよい。
【００２８】
本発明の目的のために、範囲は、本明細書において、「約」１の特定の値から、そして／または「約」別の特定の値までと表現され得る。このような範囲が表されるときに、別の実施形態は、特定の値から、そして／または他の特定の値までを含む。同様に、値が近似値として表されるとき、「約」という先行詞を用いることにより、特定の値が別の実施形態を形成すると理解される。各々の範囲の終点が、他の終点に関しても、そして、それぞれに他の終点と独立しての両方で有意であることがさらに理解される。
【００２９】
最後に、本発明の目的のために、用語「個体」は、いずれかの性別の動物またはヒトを意味する。
【００３０】
参照は、ここで、本発明の特定の実施形態に対して詳細におこなわれる。
【００３１】
天然に存在するエストラジオール代謝産物は、短い血漿半減期を有する。急速な肝臓代謝に部分的に起因して、経口生物学的利用能は、低い。さらに、エストラジオール代謝産物、エストラジオール代謝産物アナログまたはエストラジオール代謝産物プロドラッグを使用して処置され得るいくつかの適応症（例えば、糖尿病性腎症または肥満）は、薬物の長期投与を必要とする。長期間にわたる送達のためのエストラジオール代謝産物、エストラジオール代謝産物アナログまたはエストラジオール代謝産物プロドラッグの投薬形態の開発は、有用な処方物においてこれらの特定の治療を投与する新規な方法である。
【００３２】
迅速に代謝される薬物（特に、ステロイド）への曝露の持続時間を延長するために、２つの主な戦略が存在する。第一は、有機酸でステロイドを化学的に修飾してステロイドエステルプロドラッグを形成することによって、血漿循環時間を延長することである。送達の後、ステロイドエステル結合は内因性酵素によって切断されて、親化合物が形成される。有機酸または他の修飾化合物によってステロイドに与えられる物理的特性および化学的特性は、親化合物がそのプロドラッグ形態から放出される速度を支配する。このようにして、血漿循環時間は、制御された様式で延長され得る。ステロイドエステルプロドラッグに対する持続した曝露は、静脈経路、経口経路、筋肉内経路、皮下経路、経皮経路、直腸経路、眼経路などを含む、任意の送達経路によって実現され得る。本発明の特定の実施形態は、非経口的または経口的に送達され得る、長期化した半減期を有する、エストラジオール代謝産物、エストラジオール代謝産物アナログまたはエストラジオール代謝産物プロドラッグの水溶性処方物のための組成物を提供する。
【００３３】
エストラジオール代謝産物治療への持続した曝露を達成するための第２の戦略は、エストラジオール代謝産物、エストラジオール代謝産物アナログまたはエストラジオール代謝産物プロドラッグを、いくつかのポリマー徐放性送達系に組み込むことである。徐放性デバイスは、親化合物の血漿半減期を超える長期化された血漿半減期を有する、エストラジオール代謝産物、エストラジオール代謝産物アナログまたはエストラジオール代謝産物プロドラッグ自体を組み込み得る。エストラジオール代謝産物を組み込んだ徐放性送達系を製造する際に特に有利であるのは、最終的な送達系の放出特性を最適化するために、代謝産物の物理的特性および化学的特性を（例えば、エステル化によって）改変する能力である。本発明の特定の実施形態では、処方物は、エストラジオール代謝産物、エストラジオール代謝産物アナログまたはエストラジオール代謝産物のプロドラッグと、体温で液体を形成する別の化合物との混合物（例えば、共晶混合物）からなり得る。他の実施形態では、エストラジオール代謝産物、それらのエストラジオール代謝産物アナログまたはエストラジオール代謝産物プロドラッグの経皮送達のためのレザバおよび透過補助剤からなる処方物が記載されている。なお他の実施形態では、本発明は、エストラジオール代謝産物、それらのエストラジオール代謝産物アナログまたはエストラジオール代謝産物プロドラッグの制御放出のためのポリマーマトリックスの組成物を記載する。このようなマトリックスは、ポリマー微粒子またはナノパーティクルから構成され得る。特定の実施形態では、このようなポリマーは、生分解性である。
【００３４】
（エストラジオール代謝産物）
特定の実施形態では、エストラジオール代謝産物は、カテコールエストラジオール（例えば、２−ヒドロキシエストラジオール（エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−２，３，１７−トリオール（１７β））または４−ヒドロキシエストラジオール（エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−３，４，１７−トリオール（１７β）））または、メトキシエストラジオール（例えば、２−メトキシエストラジオール（エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−２−メトキシ−３，１７−ジオール（１７β））または４−メトキシエストラジオール（エストラ−１，３，５（１０）−トリエン−４−メトキシ−３，１７−ジオール（１７β））である。これらの化合物の全ての商業的調製物は、容易に入手可能である。さらに、高度に精製された２−メトキシエストラジオールを生成する方法は、米国仮特許出願第１５０，２９３号において開示される。
【００３５】
特定の実施形態では、このエストラジオール代謝産物は、親水性ポリマーに結合され得る。この親水性ポリマーは、ポリ（プロピレングリコール）、ポリ（エチレングリコール）、ポリ（エチレングリコール）とポリ（プロピレングリコール）とのコポリマーからなる群から選択され得る。特定の実施形態では、親水性分子は、ポリ（エチレングリコール）（ＰＥＧ）である。
【００３６】
代替の実施形態では、このエストラジオール代謝産物は、微粒子またはナノパーティクルに会合している。特定の実施形態では、この微粒子またはナノパーティクルは、ポリ（ラクチド）、ポリ（グリコリド）、ポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）、ポリ（乳酸）、ポリ（グリコール酸）、ポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）、ポリカプロラクトン、ポリカーボネート、ポリエステルアミド、ポリ無水物、ポリ（アミノ酸）、ポリオルトエステル、ポリアセチル、ポリシアノアクリレート、ポリエーテルエステル、ポリ（ジオキサノン）、ポリ（アルキレンアルキレート）、ポリエチレングリコールとポリオルトエステルとのコポリマー、ポリウレタン、それらのブレンドおよびコポリマーからなる群から選択される。特定の実施形態では、この微粒子またはナノパーティクルは、ポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）（ＰＬＧＡ）である。別の特定の実施形態では、この微粒子またはナノパーティクルは、生分解性ポリマーから構成される。
【００３７】
当業者は、上記に列挙した化合物が単なる例示であって、親エストラジオール化合物上の特定のヒドロキシル化部位またはメチル化部位に依存して多くのバリエーションが用いられ得ることを理解する。例えば、エストラジオールは、多くの部位で水酸化またはメチル化され得、そしてこのようなバリエーションは、当該分野で公知である。
【００３８】
（エストラジオール代謝産物のエステル）
特定の実施形態では、エストラジオール代謝産物のエステルは、プロドラッグをつくるために利用される。エステル結合は、薬物の調製および保存の間、インタクトなままであり、そして、患者への投与後にのみ、加水分解を受けやすい。それゆえ、エステルは、最適なプロドラッグである。なぜなら、生理的環境は、この結合の加水分解を触媒する豊富な内因性エステラーゼを有するからである。一旦加水分解が起こると、活性なエストラジオール代謝産物および無毒性の生物学的化合物（例えば、酢酸またはプロピオン酸）だけが残る。
【００３９】
特定の実施形態では、エストラジオール代謝産物のエステルは、エストラジオール代謝産物の溶解度の制御に利用される。水溶性は、例えば、コハク酸によってエステル化することによって付与され得る。他のエステルは、様々な他の溶媒中での溶解度を改善し得、そしてまた、エストラジオール代謝産物エステルと徐放性送達デバイスを含む何らかのポリマーとの間の何らかの相互作用を可能にし得、次いでこのことは、このポリマーマトリックスから周囲の組織流体へのエステルプロドラッグの放出を制御する。
【００４０】
特定の実施形態では、２−メトキシエストラジオールのエステルとしては、３−ベンゾイル−２−メトキシエストラジオール、１７−ベンゾイル−２−メトキシエストラジオール、１７−アセチル−２−メトキシエストラジオール、３−アセチル−２−メトキシエストラジオール、３，１７−ベンゾイル−２−メトキシエストラジオールおよび３，１７−ジアセチル−２−メトキシエストラジオールが挙げられるがこれらに限定されない。
【００４１】
別の特定の実施形態では、４−メトキシエストラジオールのエステルとしては、３−ベンゾイル−４−メトキシエストラジオール、１７−ベンゾイル−４−メトキシエストラジオール、１７−アセチル−４−メトキシエストラジオール、３−アセチル−４−メトキシエストラジオール、３，１７−ジベンゾイル−４−メトキシエストラジオールおよび３，１７−ジアセチル−４−メトキシエストラジオールが挙げられるがこれらに限定されない。
【００４２】
代替の特定の実施形態では、２−ヒドロキシエストラジオールのエステルとしては、３−ベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール、１７−ベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール、１７−アセチル−２−ヒドロキシエストラジオール、３−アセチル−２−ヒドロキシエストラジオール、３，１７−ジベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール、３，１７−ジアセチル−２−ヒドロキシエストラジオール、２，３−ジベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール、２，１７−ジベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール、２，１７−ジアセチル−２−ヒドロキシエストラジオール、２，３−ジアセチル−２−ヒドロキシエストラジオール、２，３，１７−トリベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオールおよび２，３，１７−トリアセチル−２−ヒドロキシエストラジオールが挙げられるがこれらに限定されない。
【００４３】
別の特定の実施形態では、４−ヒドロキシエストラジオールのエステルとしては、３−ベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール、１７−ベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール、１７−アセチル−４−ヒドロキシエストラジオール、３−アセチル−４−ヒドロキシエストラジオール、３，１７−ジベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール、３，１７−ジアセチル−４−ヒドロキシエストラジオール、３，４−ジベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール、４，１７−ジベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール、４，１７−ジアセチル−４−ヒドロキシエストラジオール、３，４−ジアセチル−４−ヒドロキシエストラジオール、３，４，１７−トリベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオールおよび３，４，１７−トリアセチル−４−ヒドロキシエストラジオールが挙げられるが、これらに限定されない。
【００４４】
特定の実施形態では、４つ全てのエストラジオール代謝産物のエステルは、元々のエストラジオール代謝産物の有機酸誘導体であり得る。特定の実施形態としては、プロピオン酸、酪酸、吉草酸、ヘキサン酸、安息香酸、酢酸、プロピオン酸、酪酸、ステアリン酸および他の脂肪酸のエステルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００４５】
本発明において有用なエストラジオール代謝産物は、２−メトキシエストラジオール、２−ヒドロキシエストラジオール、４−メトキシエストラジオールおよび４−ヒドロキシエストラジオールからなる群から選択され得る。特定の実施形態では、エストラジオール代謝産物のエステル誘導体は、以下からなる群から選択される；３−ベンゾイル−２−メトキシエストラジオール；１７−ベンゾイル−２−メトキシエストラジオール；１７−アセチル−２−メトキシエストラジオール；３−アセチル−２−メトキシエストラジオール；３，１７−ジベンゾイル−２−メトキシエストラジオール；３，１７−ジアセチル−２−メトキシエストラジオール；３−ベンゾイル−４−メトキシエストラジオール；１７−ベンゾイル−４−メトキシエストラジオール；１７−アセチル−４−メトキシエストラジオール；３−アセチル−４−メトキシエストラジオール；３，１７−ジベンゾイル−４−メトキシエストラジオール；３，１７−ジアセチル−４−メトキシエストラジオール；３−ベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール；１７−ベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール；１７−アセチル−２−ヒドロキシエストラジオール；３−アセチル−２−ヒドロキシエストラジオール；３，１７−ジベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール；３，１７−ジアセチル−２−ヒドロキシエストラジオール；２，３−ジベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール；２，１７−ジベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール；２，１７−ジアセチル−２−ヒドロキシエストラジオール；２，３−ジアセチル−２−ヒドロキシエストラジオール；２，３，１７−トリベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール；２，３，１７−トリアセチル−２−ヒドロキシエストラジオール；３−ベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール；１７−ベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール；１７−アセチル−４−ヒドロキシエストラジオール；３−アセチル−４−ヒドロキシエストラジオール；３，１７−ジベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール；３，１７−ジアセチル−４−ヒドロキシエストラジオール；３，４−ジベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール；４，１７−ジベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール；４，１７−ジアセチル−４−ヒドロキシエストラジオール；３，４−ジアセチル−４−ヒドロキシエストラジオール；３，４，１７−トリベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール；３，４，１７−トリアセチル−４−ヒドロキシエストラジオール。
【００４６】
エストラジオール代謝産物のいくつかのエステルを合成するための方法は、公知である（日本国特許第５７，０４１，４７９号および同第４９，１００，０７０号を参照のこと）。
【００４７】
代替的実施形態では、エストラジオール代謝産物のエステルは、親水性ポリマーに結合され得る。親水性ポリマーは、化合物の半減期を延ばし得、そしてまた、より少ない頻繁でより低い用量での投与を可能にする。特定の実施形態では、加水分解可能な結合は、加水分解の後にエステル分子を親水性ポリマーから遊離させるために含まれる。このことは、エステル分子が加水分解の後にのみ細胞の細胞質に入ることを可能にする。なぜなら、これは、親水性分子（例えばＰＥＧ）が結合しているので、細胞膜を通って通過するのがより遅いかまたはできないからである。
【００４８】
特定の実施形態では、エストラジオール代謝産物のエステルはまた、親水性ポリマーが結合していようが結合していまいが、また、微粒子（例えば、ミクロスフェアまたはナノスフェア）に取り込まれ得る。
【００４９】
当業者は、上記に列挙した化合物が単なる例示であって、特定のエストラジオール代謝産物からつくられる特定のエステル誘導体に依存して多くのバリエーションが用いられ得ることを理解する。このようなバリエーションは、当該分野で公知である。
【００５０】
（エストラジオール代謝産物の静脈内処方物または経口処方物の調製）
特定の実施形態では、エストラジオール代謝産物、エストラジオール代謝産物アナログまたはエストラジオール代謝産物プロドラッグは、極性化号物またはイオン性化合物によって誘導体化され、その結果、この誘導体は、水溶性であり、親代謝産物と比較して長期化した血漿循環時間を示す。特定の実施形態では、エストラジオール代謝産物、エストラジオール代謝産物アナログまたはエストラジオール代謝産物プロドラッグは、ジカルボン酸化合物（シュウ酸、マロン酸、マレイン酸、コハク酸、グルタル酸、アジピン酸、ピメリン酸、パモ酸または他の二酸が挙げられるがこれらに限定されない）によって誘導体化される。別の特定の実施形態では、より短い介在炭素鎖を有する二酸（例えば、コハク酸、グルタル酸、マレイン酸、マロン酸、またはシュウ酸）が用いられる。これらのような化合物は、エストラジオール代謝産物と比較して増大した水溶性および長期化した血漿循環時間を付与する。二酸を用いたエステル化の方法は、当該分野で周知の技術を使用して、適切な無水物または二酸の混合無水物を用いてもたらされ得る。本発明は、増大した水溶性および血漿半減期を達成する、エストラジオール代謝産物、エストラジオール代謝産物アナログまたはエストラジオール代謝産物プロドラッグに対する全ての改変物を含む。このような誘導体が着想され得、そしてこのような誘導体の合成経路は、当業者によって容易に実施され得る（例えば、米国特許第２，８９７，２１８号）。エストラジオール代謝産物またはエストラジオール代謝産物エステル上の任意の利用可能な官能基が誘導体化され得る。
【００５１】
（エストラジオール代謝産物の経皮処方物の調製）
特定の実施形態では、エストラジオール代謝産物、エストラジオール代謝産物アナログまたはそれらのエストラジオール代謝産物は、薬物が適切な速度で皮膚へと分配され得るレザバを含む適切なビヒクルと混合される。この薬物は、皮膚層（ここから全身薬物吸収が生じる）に入る前に保護角皮層バリアを通過して拡散しなければならない。透過性は、物理的手段（例えば、水和の増大、超音波、熱ポテンシャルまたは電気ポテンシャルの適用）によって、または化学的手段（例えば、脂肪酸エステル、カオトロピック剤、ポリオール、テルペノイドまたは界面活性剤の組込み）によって増強され得る。ビヒクルと角皮層との間での分配は、各々の環境におけるその薬物の相対的な溶解度に依存する。従って、ビヒクルの正体および（例えば、エステル化を経た）薬物の組成は両方とも、経皮パッチからのこの薬物の放出プロファイルを最適化するために変更され得る。特定の実施形態では、エストラジオール代謝産物の溶液または固体懸濁物は、皮膚透過エンハンサーおよび／または生体適合性の溶媒もしくは溶媒混合物または経皮接着剤を含む媒質中で作製される。懸濁物は、角質層への薬物の溶解および角皮層を通してのこの薬物の経皮透過を促進するように設計される。別の特定の実施形態では、エストラジオール代謝産物、エストラジオール代謝産物アナログまたはエストラジオール代謝産物プロドラッグは、その処方物が皮膚の温度において液体であるように、メントールのようなビヒクル中に溶解される。別の特定の実施形態では、エストラジオール代謝産物、エストラジオール代謝産物アナログまたはエストラジオール代謝産物プロドラッグは、適切な経皮接着剤中に懸濁または溶解されて、そして粘着性経皮パッチ中の標準薬物に組み込まれるか；または（皮膚の隣の）接着剤中の薬物、速度調節膜およびレザバとして作用する接着剤中の薬物を含む多層パッチ中に組み込まれる。
【００５２】
（エストラジオール代謝産物の徐放性微粒子処方物の調製）
肝臓初回通過代謝は、経口送達されたステロイドの生物学的利用能を減少させる。その結果、ステロイドはしばしば、注射によって与えられる。ステロイドは代表的に、短期作用性であり、そして慢性の処置は、反復注射を必要とする。ステロイドのエステル化および誘導体化によるエストラジオール代謝産物もしくはエストラジオール代謝産物アナログプロドラッグの形成または油ビヒクル中での非経口送達は、投与頻度を減少させる。長期間にわたって治療レベルのエストラジオール代謝産物を達成する代替的方法は、エストラジオール代謝産物、エストラジオール代謝産物アナログまたはエストラジオール代謝産物プロドラッグを長期送達デバイス中に組み込むことである。
【００５３】
本発明の特定の実施形態は、ポリ−Ｄ，Ｌ−（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）から構成されるミクロスフェアを提供する。このポリエステルは、生体適合性であり、医療安全性の長期の記録が存在する。身体内でのポリマー腐食は、薬放出速度を制御し、そして当業者は、この速度を操作することに熟達している。長期放出投与系は、ＩＩ型糖尿病（これはしばしば、生涯にわたる薬物治療を必要とする）のような状態のエストラジオール代謝産物処置に対する理想的な利点である。
【００５４】
本発明はさらに、エストラジオール代謝産物、エストラジオール代謝産物アナログ、またはエストラジオール代謝産物プロドラッグを徐放性のための適切なポリマー送達デバイス中に封入するための方法を提供する。薬物は、ポリマーマトリックス全体に分散され得るか、あるいは、薬物は、単独でまたは別のポリマー、溶媒または他の薬剤との混合物としてのいずれかで、ポリマーカプセルによって取り囲まれ得る。薬物の放出は、ポリマーマトリックスを通しての拡散によって、またはポリマーマトリックスを通しての薬物拡散とポリマー送達デバイスの腐食との組合せによって、制御され得る。好μ肢位デバイスとしては、ロッド、スティント、ペレット、ディスク、ロゼンジ、ウェーハ、カプセル、フィルム、微粒子、またはナノパーティクル、マイクロカプセルもしくはナノカプセルが挙げられる。特定の実施形態では、エストラジオール代謝産物、エストラジオール代謝産物アナログまたはエストラジオール代謝産物プロドラッグは、微粒子またはナノパーティクルの形態の生分解性ポリマーと会合している。
【００５５】
特定の実施形態では、エストラジオール代謝産物、エストラジオール代謝産物アナログまたはエストラジオール代謝産物プロドラッグは、微粒子形態のポリマーと会合している。好ましい実施形態では、微粒子は、１．０ｍｍ未満の好ましい直径を有し、そして好ましくは１．０マイクロメートルと２００．０マイクロメートルとの間にある。微粒子は、ミクロスフェアおよびマイクロカプセルの両方を包含する。ミクロスフェアは代表的に、固体の球面微粒子であり、そしてマイクロカプセルは、異なるポリマー、薬物または組成の核を有するミクロスフェアである。
【００５６】
特定の実施形態では、エストラジオール代謝産物、エストラジオール代謝産物アナログまたはエストラジオール代謝産物プロドラッグは、親水性ポリマーが結合しようと結合しまいと、代謝産物分子の制御放出のための生分解性のミクロン未満の粒子と会合している。ナノパーティクルは、２０．０ナノメートルから約２．０ミクロンまでの範囲の直径を有して、そして代表的に１００．０ナノメートルと１．０ミクロンと間にある。
【００５７】
ナノパーティクルは、当該分野で周知の任意の技術によって作製され得る。これらは、高速での混合または均質化を用いてポリマー／生体活性薬剤乳剤のサイズを２．０ミクロン未満、好ましくは１．０ミクロン未満まで低下させること以外は、微粒子と同様の様式で作製され得る（例えば、ＷＯ  ９７／０４７４７を参照のこと）。
【００５８】
特定の実施形態では、この微粒子またはナノパーティクルは、ポリ（ラクチド）、ポリ（グリコリド）、ポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）、ポリ（乳酸）、ポリ（グリコール酸）、ポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）、ポリカプロラクトン、ポリカーボネート、ポリエステルアミド、ポリ無水物、ポリ（アミノ酸）、ポリオルトエステル、ポリアセチル、ポリシアノアクリレート、ポリエーテルエステル、ポリ（ジオキサノン）、ポリ（アルキレンアルキレート）、ポリエチレングリコールとポリオルトエステルとのコポリマー、生分解性ポリウレタン、それらのブレンドおよびコポリマーから構成される。
【００５９】
別の実施形態では、この微粒子またはナノパーティクルは、ポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）（ＰＬＧＡ）である。ＰＬＧＡは、生理的ｐＨに曝露されると分解され、そして加水分解して、乳酸およびグリコール酸（これらは、細胞代謝の通常の副産物である）を形成する。ＰＬＧＡポリマーの崩壊速度は、ポリマー分子量、ポリマー鎖中のラクチドとグリコリドとのモノマー比、およびモノマーサブユニットの立体規則性に従って変化する。ポリマー崩壊速度は、ポリマー結晶度を崩壊させるＬ立体異性体とＤ立体異性体との混合物によって増加する。さらに、ミクロスフェアは、異なる分子量の、および／または異なるモノマー比の、２つ以上の生分解性ポリマーのブレンドを含み得る。
【００６０】
他の代替の実施形態において、ＰＬＧＡに結合された親水性ポリマーを含む、誘導体化された生分解性微粒子は、ミクロスフェアを形成するために用いられ得る。
【００６１】
例示の実施形態は、エストラジオール代謝産物、エストラジオール代謝産物アナログまたはエストラジオール代謝産物プロドラッグの封入のための方法を記載する。方法は、特定の溶媒中でのエストラジオール代謝産物の溶解度、最終的な送達系における薬物の所望の物理状態、ミクロスフェア送達系中での所望の薬物充填量、その送達系からの薬物の所望の放出速度および放出の持続時間、所望の粒子サイズなどを含むいくつかの考慮事項に基づいて選択および適合され得る。ミクロスフェアは、当該分野で周知の任意の技術によって作製され得る。特定の実施形態では、ミクロスフェアは、１つまたは２つの乳化工程、続いて溶媒除去によって生成される。代替の実施形態では、噴霧乾燥、溶媒エバポレーション、相分離およびコアセルベーションのような他の公知の方法は、ミクロスフェアを作製するために利用され得る。他の方法および上記のバリエーションもまた、当該分野において公知であり、そしてまた、本発明について用いられ得る。
【００６２】
特定の実施形態では、ポリマー微粒子は、適切な有機溶媒中に溶解した、ポリマーおよびエストラジオール代謝産物、エストラジオール代謝産物アナログまたはエストラジオール代謝産物プロドラッグの溶液を噴霧乾燥することによって形成される。ポリマーおよび溶媒の濃度は、ポリマーに対して所定の重量比の薬物を含む微粒子を与えるように制御される。コア充填量は、送達デバイスからのその特定の薬物の放出特性を部分的に制御する。
【００６３】
別の特定の実施形態では、ポリマー微粒子は、湿式乳化、続いて溶媒除去によって形成される。薬物およびポリマーは、不連続な別個の相の乳化物を含む適切な有機溶媒中に溶解される。特定の実施形態では、不連続相溶媒はまた、保存剤（例えば、抗酸化剤、緩衝剤、または微粒子成分の化学的完全性を保存することが意図された他の薬剤）を含む。この保存剤は、不連続相の溶媒中に溶解または懸濁され得る。選択される有機溶媒は、連続相と混合されたときにミクロスフェアを形成し得、続いて、連続性中での不連続相の分散後に溶媒が除去されると微粒子を形成し得る溶液を得るために充分な薬物およびポリマーを可溶化するべきである。充分な量の薬物およびポリマーの両方を可溶化する目的で、溶媒の組合せが、用いられ得る。特定の実施形態では、薬物を含む一定量の第２溶媒は、ポリマーを含む溶媒と混合される。第２溶媒は、第１溶媒と充分に混和性であり、その結果、２つの不連続相溶媒が混合されると、澄んだ均一な溶液が形成される。第２溶媒は、連続相溶媒と不混和性、部分的に混和性、または完全に混和性であり得る。
【００６４】
不連続相溶媒または溶媒混合物は、連続相溶媒と不混和性または部分的に混和性であり得る。単一の不連続相溶媒を用いる特定の実施形態では、その溶媒は、０．０５％と２０％との間で連続相溶媒と混和性であり得る。別の特定の実施形態では、溶媒不連続相は、連続相溶媒において１％と１０％との間で混和性である。
【００６５】
不連続相溶媒は、乳化を形成するために必要に応じて、適切な乳化安定剤を含む連続相液体と混合される。連続相液体は代表的に、ポリマーについての溶媒でも、封入された薬物についての溶媒でもない。しかし、連続相は、不連続相溶媒についての溶媒であり得る。乳化の間の、不連続相溶媒の、連続相溶媒に対する体積比または質量比は、所望の特徴（粒子サイズが挙げられる）および例えば、微粒子中に封入される薬物の物理的状態を有する微粒子が形成され得る任意の比であり得る。特定の実施形態では、不連続相体積の、連続相体積に対する比は、０．５：１〜３０：１の範囲に及び得る。特定の実施形態では、連続相は、微量から飽和量の、不連続相溶媒または乳濁物の油相からの不連続溶媒の抽出を調節するように設計されている溶媒の混合物を含み得る。特定の実施形態では、連続相液体は、水である。
【００６６】
乳化剤は、形成およびその後の不連続相溶媒除去の間、乳化を安定させるために連続相液体に添加され得る。このような乳化剤の例としては、リン脂質（例えば、レシチン）、イオン性界面活性剤および非イオン性界面活性剤、ポロキサマーまたはポリマー（例えばポリビニルピロリドンおよびポリビニルアルコール）が挙げられる。好ましい実施形態では、ポリビニルアルコールは、０．０５％ｗ／ｖ〜１０％ｗ／ｖの範囲の濃度で用いられる。特にある実施形態では、ポリビニルアルコールは、０．３％ｗ／ｖと４％ｗ／ｖとの間の濃度で用いられる。
【００６７】
湿式乳化において、粒子サイズは、水相に含まれる乳化剤のタイプおよび量によって、そしてまた、連続相中に不連続相を分散させるために用いられる混合エネルギーによって、部分的に制御される。混合は、磁性バー、インペラーデバイスおよびローター固定子ホモジェナイザー、またはプローブもしくはバスソニケーターを使用した、単一の容器中での相の迅速な攪拌を含むさまざまな手段のいずれかによって達成され得る。特定の実施形態では、混合は、磁性バーを用いて攪拌することにより達成される。
【００６８】
乳濁物の不連続相からの溶媒除去およびその後の微粒子の硬化は、さまざまな手段によって達成され得る。乳濁物は、溶媒抽出前に規定の期間にわたって所定の温度で、抽出を行わずに保持され得る。または、あるいは、有機溶媒は、乳化されたらすぐに抽出され得る。
【００６９】
本発明の特定の実施形態では、溶媒除去は、エバポレーションによって制御され得る。他の実施形態では、エバポレーションは、減圧付与によって補助され得る。特定の実施形態では、溶媒は、乳化の後、微粒子の迅速な硬化が、乳濁物に含まれる有機溶媒の全てを可溶化するに充分なさらなる量の水を乳濁物へ添加することから生じるように、水と部分的に混和性であり得る。抽出媒体が乳濁物に添加される速度、または乳濁物が抽出媒体に添加される速度は、所望の溶媒抽出速度（これは次いで、溶液状態の変化に対する薬物／ポリマー系の感度に依存する）に依存して変動し得る。当業者は、これらの要因を決定し得る。さらなる実施形態では、不連続相溶媒抽出は、連続相中での不連続相の溶解度を増大させて不連続相溶媒を充分に抽出するために乳濁物の温度を調節することによって達成され得る。
【実施例】
【００７０】
以下の実施例において開示される技術が、本発明において充分に機能することが本発明者らにより見出された技術を表し、従って、その実施の好ましい形態を構成するとみなされ得ることが当業者により認識されるべきである。しかし、当業者は、本開示を考慮して、本明細書中に開示される特定の実施形態において、本発明の趣旨および範囲から逸脱することなく、同様または類似の結果が得られる多くの変更が行われ得ることを認識すべきである。
【００７１】
（実施例１．ポリ−（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）ミクロスフェア中への２−メトキシエストラジオールの封入）
１：１のラクチドモノマー：グリコリドモノマーのモル比および０．１５ｄｌ／ｇの固有粘度を有する１．６ｇのポリ−（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）（ＰＬＧＡ）（ＰＬＧＡ  ５０５０  ２Ａ，Ｍｅｄｉｓｏｒｂ，ＵＳＡ）、および８００ｍｇの２−メトキシエストラジオール（２ＭＥ）を、６５℃の２８ｍｌの酢酸エチル中に溶解した。油相を、４５０ｒｐｍで攪拌している磁性バーを含む、２５０ｍｌのビーカー中の８０ｍｌの水性ポリビニルアルコール（ａｖ．Ｍｏｌ．Ｗｔ．１００ｋＤ、１％ｗ／ｖ）中にゆっくりと注いだ。混合物を、５分間にわたってこのようにして乳化し、その後、乳濁物を６００ｍｌの１％  ｗ／ｖの水性ポリビニルアルコール中に迅速に注いだ。室温および大気圧にて磁性攪拌することにより、ミクロスフェアを３時間にわたって硬化させた。硬化した粒子を収集し、そして遠心分離により水で洗浄し、次いで凍結乾燥した。
【００７２】
乾燥したミクロスフェアのサンプルを、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に溶解させ、そして、サンプル中に存在する２ＭＥを、標準濃度の薬物に対するＨＰＬＣ分析により定量した。コア充填物は、２８．０重量％の２ＭＥであった。封入効率を、名目コア充填量に対する測定されたコア充填量のパーセント比として算出し、そしてこれは、この調製について８５％であった。
【００７３】
５ｍｇの２ＭＥを含む１８ｍｇの２ＭＥミクロスフェアを、０．２５ｍｌの２．５重量％ナトリウムカルボキシメチルセルロースからなるビヒクル中に懸濁した。この懸濁物を、Ｓｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙラットに皮下注射した。３匹の動物を、指定の時点で屠殺し、注射部位を切開し、そして血液サンプルを採血し、そして血漿を分離し、そして−８０℃にて凍結した。ミクロスフェア移植片を、注射部位から単離し、そしてＤＭＳＯを用いて抽出して、放出されていない薬物をＨＰＬＣにより定量した。インビボでの放出を、移植片中に残っている薬物の量を注射した２ＭＥの総量から差し引くことにより算出した。インビボでの放出プロファイルは、初日の約３５％のバースト放出、続いて２８日間における、封入された薬物の１００％の線形放出を示す。
【００７４】
凍結した血漿サンプルを融解し、抽出し、誘導体化し、そして２ＭＥの血漿レベルを、既知の２ＭＥ標準に対するガスクロマトグラフィーによって定量した。注射の１日後、血漿２ＭＥレベルは６．５ｎｇ／ｍｌであり、３日目に５ｎｇ／ｍｌまで低下した。次いで、２ＭＥ血漿濃度は、３日目と７日目との間で上昇し、そして１４日目まで８ｎｇ／ｍｌにて保たれた。次いで、この薬物の血漿濃度は、１４日目と２８日目との間で着実に低下して、２８日目には２ｎｇ／ｍｌの最終濃度になった。
【００７５】
（実施例２．ポリ−（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）ミクロスフェアへの２−ヒドロキシエストラジオールの封入）
ミクロスフェア調製物を、１０６７ｍｇの２−ヒドロキシエストラジオール（２ＨＥ）および１６００ｍｇのＰＬＧＡ  （５０：５０ラクチド：グリコリド，Ｍｗ  ２７ｋＤ）を２８ｍｌの酢酸エチル中に溶解することにより作製した。このミクロスフェアを、実施例１における詳細に従って調製した。コア充填量は、３８．３％（９６％の封入効率）であると測定された。
【００７６】
５ｍｇの２ＨＥに等価なミクロスフェアを、ラットに皮下注射した。所定の間隔で、動物を屠殺し、そして注射部位を切開してミクロスフェアを回収した。同時に、血液サンプルをこれらの動物から採取し、そして血漿を分離して−８０℃にて凍結した。回収されたミクロスフェアを遠心分離によって清澄化し、そして凍結乾燥した。注意深く重量を測定したサンプルをＤＭＳＯ中に溶解し、そして回収されたミクロスフェア中の２ＨＥ含量をＨＰＬＣ分析により定量した。インビボでのインキュベーション後にミクロスフェア中に残っている薬物の量をこのミクロスフェア中での薬物の初期量から差し引くことにより、インビボでのエストラジオール代謝産物の放出を直接的に算出した。封入された薬物の３２％が、注射１日以内に放出され、用量の約５０％が３日後に放出された。残りの薬物は、注射後３日目と２８日目との間で着実に放出された。
【００７７】
各時点からのサンプルを収集した後、凍結した血漿サンプルを融解し、抽出し、誘導体化し、そして２ＨＥおよび２ＭＥの血漿レベルを、既知標準に対するガスクロマトグラフィーによって定量した。血漿の薬物動態学的プロファイルは、注射２４時間後に約２０ｎｇ／ｍｌの２ＨＥの血液レベルを示し、これは、注射７日後まで着実に低下した。２ＨＥの血液レベルは、７日目と２８日目の間、痕跡量レベルと２ｎｇ／ｍｌとの間で検出可能であった。より低いバーストレベル（１１．５ｎｇ／ｍｌ）の２ＭＥが注射１日後に検出され、これは、７日目まで２ｎｇ／ｍｌまで次第に消失し、これは、７日目と２８日目との間で持続した。
【００７８】
（実施例３．選択的溶媒抽出法によるＰＬＧＡミクロスフェア中への２ＨＥの封入）
２７ｋＤの平均分子量を有するポリ−Ｄ，Ｌ−（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）（５０：５０のモル比）（ＰＬＧＡ  ５０５０  ２．５Ｍ）を、酢酸エチル中に２０％ｗ／ｖの濃度になるように溶解した。３００ｍｇの２−ヒドロキシエストラジオールを１．２ｍｌのジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）中に溶解することにより、第２溶液を作製した。これらの２つの溶液を、ボルテックスによって混合し、単一の清澄な溶液を得た。この有機溶液を、１インチの磁性バーを用いて６５０ｒｐｍにて５分間４℃にて攪拌することにより、５０ｍｌビーカー中の、７００ｍｇのポリビニルアルコールを含む１７．５ｍｌの水、２．５ｍｌの酢酸エチル、および４ｍｌのＤＭＳＯからなる水相を用いて乳化した。得られた乳濁物を、４℃にて、２４０ｍｌの水、４８ｍｌのＤＭＳＯ、および６ｍｌの酢酸エチルを含む６００ｍｌのビーカー中にゆっくりと注いだ。粒子懸濁物を、環境条件下で室温まで温め、そして酢酸エチルを乳濁物から一晩抽出／エバポレートさせた。硬化した粒子を濾過し、水で洗浄し、そして風乾し、その後、コア充填量を決定した。
【００７９】
各調製物からの乾燥した微粒子をＤＭＳＯ中に可溶化し、そして２ＨＥ標準に対するＨＰＬＣによって定量した。２ＨＥ含有量は、１３．１％であるとわかった。封入効率は、６６％であった。
【００８０】
５ｍｇの２ＨＥに等価なミクロスフェアを、ラットに皮下注射した。所定の間隔で、動物を屠殺し、そして注射部位を切開してミクロスフェアを回収した。同時に、血液サンプルをこれらの動物から採取し、そして血漿を分離し、そして−８０℃にて凍結した。回収されたミクロスフェアを遠心分離により清澄化し、そして凍結乾燥した。注意深く重量を測定したサンプルをＤＭＳＯ中に溶解し、そして回収されたミクロスフェア中の２ＨＥ含量をＨＰＬＣ分析により定量した。インビボでのインキュベーション後にミクロスフェア中に残っている薬物の量をこのミクロスフェア中での薬物の初期量から差し引くことにより、インビボでのエストラジオール代謝産物の放出を直接的に算出した。２ＨＥのインビボでの放出は、注射１日以内の間の用量の３８％のバースト放出、続いて注射３日後での５５％の累積放出によって特徴付けられた。総用量の３０％が、３日目と２８日目との間で放出され、用量のうちの合計８８％が４週間で放出された。
【００８１】
各時点からのサンプルを収集した後、凍結した血漿サンプルを融解し、抽出し、誘導体化し、そして２ＨＥおよび２ＭＥの血漿レベルを、既知標準に対するガスクロマトグラフィーによって定量した。３８％のバースト放出は、４ｎｇ／ｍｌの２ＨＥの血漿レベルに対応し、これは、３日目と２８日目との間の痕跡量レベルまで減少した。２ＭＥの血漿レベルは、注射１日後に５．５ｎｇ／ｍｌのピークに達し、そして３日目に２ｎｇ／ｍｌまで減少した。このレベルは、３日目と２８日目との間で持続した。
【００８２】
（実施例４．２ＭＥの水中油中固体封入）
２５％ｗ／ｖ濃度の２ＭＥのＤＭＳＯ溶液を、液体窒素中で凍結してクエンチして、薬物の結晶化を防止した。１ｍｌアリコートの凍結２ＭＥ−ＤＭＳＯ溶液を、冷たい乳鉢および乳棒において粉砕し、次いで冷却した７ｍｍチップを取り付けたＦｉｓｈｅｒ  Ｐｏｗｅｒｇｅｎ  １２５ローター／固定子ホモジナイザーを用いて、冷却した酢酸エチル中２０％ｗ／ｖのＰＬＧＡ  ５０：５０（ラクチド：グリコリド、平均Ｍｗ  ５３ｋＤ）溶液１０ｍｌと３３，０００ｒｐｍにて混合した。２つの調製物を作製した。第一のものは、全ての成分を−２０℃に冷却して乳化し、そして第２のものは、全ての成分を−４℃に冷却してに冷却して乳化した。両方の温度で、２ＭＥ−ＤＭＳＯ溶液は凍結状態に保持された。油中固体乳濁物を、４℃にて、１インチの攪拌バーを用いて１００ｍｌのビーカー中で６００ｒｐｍにて攪拌しながら、４％  ｗ／ｖ  ポリビニルアルコールを含む３０ｍｌの蒸留水および３．５ｍｌの酢酸エチルに添加した。得られた水中油中固体乳濁物を、１０ｍｌの酢酸エチルを含む６００ｍｌビーカー中の２５０ｍｌの氷冷水にゆっくりと注ぎ、そして１．５インチの攪拌バーを用いて４００ｒｐｍにて攪拌した。抽出ビーカーを、ミクロスフェアの硬化の間、氷浴中に配置した。このビーカーを一晩攪拌して、ミクロスフェアから溶媒を抽出し、そして氷が融けて水が環境条件下で温まるにつれて、温度をゆっくりと２２℃まで上昇させた。
【００８３】
粒子を濾過によって収集し、水で洗浄し、そして凍結乾燥した。乾燥した粒子をＤＭＳＯ中に溶解し、そして２ＭＥ含量をＨＰＬＣにより測定した。−２０℃および４℃での固体／油／水技術の封入効率を、表Ｉに示す。
【００８４】
【表１】
2005525403.tif 000002
２ＭＥのインビトロ放出を、１２．５ｍｇのミクロスフェアを１００ｍｌの５０％水性エチルアルコールに添加することにより測定した。アリコートを所定の間隔で取り出し、そしｓて２ＭＥ濃度を、吸光度分光学によって測定した。−２０℃で乳化された抽出物は、６時間にわたって、線形の様式で、封入された薬物の１５％を放出した。対照的に、４℃にて乳化された処方物は、封入された薬物のうちの７％を３０分以内に放出し、放出速度は、３０分と７時間との間で着実に減少した。
【００８５】
（実施例５．２ＭＥおよびメントールの共晶混合物）
低用量薬物の慢性投与のために、経皮パッチが、ＰＬＧＡミクロスフェアの反復投与に好適であり得る。経皮投与に対する２つの重要な障害は、薬物の安定な高濃度レザバの処方、および皮膚の透過性を増強する何らかの機構である。Ｋａｐｌｕｎ−ＦｒｉｓｃｈｏｆｆおよびＴｏｕｉｔｏｕ（１９９７）Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．８６：１３９４−１３９９（Ｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｅ  ｓｋｉｎ  ｐｅｒｍｅａｔｉｏｎ  ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ  ｂｙ  ｍｅｎｔｈｏｌ  ｔｈｒｏｕｇｈ  ｆｏｒｍａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｅｕｔｅｃｔｉｃ  ｗｉｔｈ  ｄｒｕｇ  ａｎｄ  ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ  ｗｉｔｈ  ｓｋｉｎ  ｌｉｐｉｄｓ）は、テストステロンがメントール（これは、既知の皮膚透過性エンハンサーである）と共晶混合物を形成することを見出した。しかし、２ＭＥは、テストステロンよりもずっと低いアルコール中溶解度を有するので、２ＭＥとメントールとの共晶混合物の形成は、現在の技術から自明ではない。
【００８６】
１８７．６ｍｇのメントールを、１２１．３ｍｇの２ＭＥとともに５分間、乳鉢および乳棒で粉砕して、均質なロウ状の固体を形成した。１．２ｍｇのこの混合物をアルミニウムパン中に密封し、そして２５℃にてＴＡ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  Ｑ１０示差走査熱量計のサンプル区画に充填した。このサンプルを、１０℃／分にて２５℃〜１６０℃にて走査した。一次吸熱ピークが３１．４７℃の開始温度にて認められた。このピークは、いずれの純粋な化合物（メントール４１．７７℃、２ＭＥ  １８７．３６℃）にも対応せず、そして別個の共晶の形成と一貫している。エストラジオール代謝産物の経皮送達は、メントールとの共晶混合物から増強されていると期待される。なぜなら、この混合物は、体温にて液体である。
【００８７】
（実施例６．噴霧乾燥によって調製した３−ベンゾイル−２−メトキシエストラジオールミクロスフェア）
５３６ｍｇの３−ベンゾイル−２メトキシエストラジオールおよび１２５０ｍｇのＰＬＧＡ（５０：５０のラクチド：グリコリド，２７ｋＤ  Ｍｗ）を、２５ｍｌの塩化メチレン中に溶解した。この溶液を、Ｂｕｃｈｉ  Ｍｉｎｉ  Ｓｐｒａｙ  ＤｒｙｅｒモデルＢ−１９１の入口アトマイザーによって３ｍｌ／分でポンピングした。機器の設定は、以下の通りであった：入口温度、５０℃；出口温度、４３℃；アスピレータ、８０％；アトマイザー気流、６００ｍｌ／分。粒子を収集し、そして走査型電子顕微鏡によって検査した（０６／１８／０２）。粒子サイズは、０．２μｍと３μｍとの間の範囲にわたった。薬物結晶は特になかった。このことは、薬物の効率的な封入を示す。
【００８８】
（実施例７．充填層乳化剤を通しての抽出によって調製した、抗酸化剤を含む２−メトキシエストラジオールミクロスフェア）
８００ｍｇのＰＬＧＡ（５０：５０のラクチド：グリコリド、１３ｋＤの平均Ｍｗ）、４００ｍｇの２メトキシエストラジオール、および８．２ｍｇのＢＨＴを、６５℃の１４ｍｌの酢酸エチル中に溶解した。この油相を、１部の油対１．５部の水の比の１％  ｗ／ｖポリビニルアルコールからなる水相を用いて乳化させた。得られた懸濁物を、８００ｍｌの０．５％  ｗ／ｖポリビニルアルコールからなる溶媒抽出媒体中に３ｍｌ／分で直接的にポンピングするか、またはこの乳濁物を抽出媒体中に添加する前に６５℃で約１０分間保持した。このミクロスフェアを、室温で２時間撹拌することによって抽出媒体中で硬化させた。硬化したミクロスフェアを遠心分離により収集し、蒸留水で洗浄し、そして凍結乾燥した。
【００８９】
この調製物からの乾燥した微粒子をＤＭＳＯ中に可溶化させ、そして２ＭＥ標準に対するＨＰＬＣにより定量した。２ＭＥ含量は、３３．２％であるとわかった。封入効率は、９７％であった。このミクロスフェアのＢＨＴ含量を、公知のＢＨＴ標準に対する同じアッセイにおいて定量した。ＢＨＴ充填量は０．７重量％であり、保存剤のための１００％の封入効率と一致した。
【００９０】
（実施例８．温度を調節した溶媒抽出により調製された２−メトキシエストラジオールミクロスフェア）
１６００ｍｇのＰＬＧＡ（５０：５０のラクチド：グリコリド、１３ｋＤ  Ｍｗ）および８０５ｍｇの２−メトキシエストラジオールを、６５℃の２８ｍｌの酢酸エチル中に溶解した。この油相を、１部の油対２０部の水の比の１％ｗ／ｖポリビニルアルコールからなる水相を用いて乳化した。得られた乳濁物を、氷水中に浸漬したラグチューブ（ｌａｇ  ｔｕｂｅ）を通してポンピングした。水中での酢酸エチルの溶解度は、温度の低下とともに上昇し、その結果、冷却した水相は、有機溶媒についてのレザバになる。冷却したミクロスフェア懸濁物をビーカー中にポンピングし、そしてミクロスフェアを、室温で３時間攪拌することにより硬化させた。硬化したミクロスフェアを遠心分離により収集し、蒸留水で洗浄し、そして凍結乾燥した。
【００９１】
この調製物からの乾燥したミクロスフェアを、ＤＭＳＯ中に可溶化し、そして２ＭＥ標準に対するＨＰＬＣにより定量した。２ＭＥ含量は、２７．３％であるとわかった。封入効率は、８２％であった。
【００９２】
（実施例９．アニーリングによるミクロスフェア中での２−メトキシエストラジオールの安定化）
２ＭＥを含むミクロスフェアを、上記の実施例６の詳細に従って調製した。乾性したミクロスフェア粉末を１０倍重量過剰の顆粒状スクロースと混合した。固体懸濁物をポリプロピレン管中にシールし、そして６５℃の水浴に３時間浸漬して、封入された２−メトキシエストラジオールの結晶化を可能にした。アニーリング後、このチューブを温度浴から取り出し、そして充分な水を添加してスクロースを溶解させた。このミクロスフェアを遠心分離によって水で３回洗浄し、そして凍結乾燥した。アニーリングしたミクロスフェアのサンプルの示差走査熱量計は、９９％を超える薬物が結晶化することを確認した。
【００９３】
アニーリングの前および後のミクロスフェアのサンプルをガラスバイアルに充填し、大気圧でシールし、そして２３℃または３８℃に温度制御されたインキュベーター中に配置した。バイアルを所定の時間間隔でインキュベーターから取り出し、そしてミクロスフェア中の２ＭＥの含量および純度を分析した。非晶質薬物を含む処方物は、室温で保存した場合、１３％よりも多く分解し、一方、結晶薬物を含む処方物は、３８℃にて５８日間のインキュベーションの間、分解しなかった。
【００９４】
【表２】
2005525403.tif 000003
（実施例１０．微粉化された結晶の封入によって調製された２−メトキシエストラジオールミクロスフェア）
２−メトキシエストラジオール薬物を、粒子が直径５μｍ未満になるまで乳鉢および乳棒において粉砕した。粒子サイズを、走査型電子顕微鏡法によりモニタリングした。微粉化した薬物１２９ｍｇを、酢酸エチル中の３０％  ｗ／ｖ  ＰＬＧＡ（５０：５０のラクチド：グリコリド、２７ｋＤ  Ｍｗ）溶液１ｍｌに添加した。この薬物を、氷上に置いた容器とともにプローブソニケーターを用いてポリマー溶液中に懸濁した。懸濁物を、１５０ｍｌのビーカー中の８００ｒｐｍで攪拌した５０ｍｌの４％  ｗ／ｖ水性ポリビニルアルコールに滴下した。ミクロスフェア懸濁物を、室温で一晩撹拌した。硬化したミクロスフェアを遠心分離によって収集し、蒸留水で洗浄し、そして凍結乾燥した。ジメチルスルホキシド中に溶解し、そして既知の２ＭＷ標準に対して測定した、最終ミクロスフェア調製物のサンプルのクロマトグラフィー分析は、コア充填量が２８．８重量％の２−メトキシエストラジオールであり、封入効率が９６％になること示した。
【００９５】
（実施例１１．２−メトキシエストラジオール経皮パッチ処方物の調製）
２−メトキシエストラジオール薬物を、異なる経皮グレードの感圧性接着剤（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｓｔａｒｃｈ）中に懸濁し、そしてＧａｒｄｃｏ「Ｍｉｃｒｏｍ」フィルムアプリケーターを用いて、ポリエチレンおよびアルミニウム蒸気でコーティングしたポリエステル裏打ち層（３Ｍ）にコーティングした。コーティングを換気フード中で一晩乾燥させ、そして乾燥を２〜４時間にわたって８０℃のオーブンにおいて完了させた。
【００９６】
（実施例１２．２−メトキシエストラジオール−３，１７−ジアセテートミクロスフェアの調製）
１：１のモル比のラクチドモノマー：グリコリドモノマーを有しかつ０．２５ｄｌ／ｇの固有粘度を有する４００ｍｇのポリ−（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）（ＰＬＧＡ）（平均Ｍｗ２７ｋＤ）（ＰＬＧＡ  ５０５０  ２．５Ｍ、Ｍｅｄｉｓｏｒｂ、ＵＳＡ）、および２００ｍｇの２−メトキシエストラジオール−３，１７−ジアセテートを、２３℃にて攪拌することにより、７ｍｌの酢酸エチル中に溶解した。この油相を、４５０ｒｐｍで攪拌している磁性バーを含む５０ｍｌのビーカー内の２０ｍｌの水性ポリビニルアルコール（ａｖ．Ｍｏｌ．Ｗｔ．１００ｋＤ、１％  ｗ／ｖ）中にゆっくりと注いだ。この混合物を、５分間にわたってこのようにして乳化し、その後、懸濁物を１５０ｍｌの１％ｗ／ｖ水性ポリビニルアルコール中に迅速に注いだ。ミクロスフェアを、室温および大気圧での磁気攪拌により、３時間にわたって硬化させた。硬化した粒子を収集し、そして遠心分離によって水で洗浄し、次いで凍結乾燥した。
【００９７】
各々４００ｍｇのＰＬＧＡおよび２−メトキシエストラジオール−３，１７−ジアセテートを７ｍｌの酢酸エチル中に溶解することにより、第２調製物を作製した。乳化を上記の通りに実行した。
【００９８】
各調製物由来の乾燥ミクロスフェアのサンプルを、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）中に溶解し、そしてサンプル中に存在する２ＭＥジアセテートを。標準濃度のこの薬物に対するＨＰＬＣ分析により定量した。薬物充填量および封入効率を、表ＩＩＩに詳述する。
【００９９】
【表３】
2005525403.tif 000004
５ｍｇの２ＭＥジアセテートに等価な、各調製物由来のミクロスフェアを、１００ｍｌの５０％水性アルコールに添加した。容器を１００ｒｐｍで２３℃にて７時間攪拌した。放出媒体のサンプルを、間隔をおいて採取し、そして薬物の濃度を、２８７ｎｍにおけるＵＶ吸収により測定した。ロット０４１−０３４−Ａは、インビトロ放出アッセイにおいて、封入された薬物の５％を１時間で放出し、７時間以内の総放出は８％であった。対照的に、封入された薬物の８％は、ロット０４１−０３４−Ｂから３０分以内に放出され、その後合計２４％が７時間以内に放出された。
【０１００】
上記のロット番号０４１−０３４−Ｂ由来の、５ｍｇの２ＭＥジアセテートに等価なミクロスフェアを、Ｓｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙラットに皮下注射した。血液を、４週間にわたって周期的に収集した。収集の直後に、血漿を分離し、そして−８０℃で保存した。各時点からのサンプルを収集した後、凍結した血漿サンプルを融解し、抽出し、誘導体化し、そして２ＭＥの血漿レベルを、既知の２ＭＥ標準に対するガスクロマトグラフィーによって定量した。薬物動態学的プロファイルは、０日目と３日目との間の２ｎｇ／ｍｌへの着実な増加によって特徴付けられた。血漿レベルは、３日目と２８日目の間、１ｎｇ／ｍｌと３ｎｇ／ｍｌとの間で保持された。興味深いことに、このジアセテートプロドラッグを含むミクロスフェア処方物からの２−メトキシエストラジオールの大きなバースト放出は、注射後の最初の３日間の間に観察されなかった。
【０１０１】
本明細書中で開示および特許請求される組成物、方法および装置の全ては、本発明の開示を考慮して、過度の実験を伴わずに作製および実行され得る。本発明の組成物および方法は好ましい実施形態に関して記載されているが、これらの組成物、方法および装置、ならびに本明細書中に記載される方法の工程または一連の工程に対するバリエーションが、本発明の趣旨、精神および範囲から逸脱することなく適用され得ることが当業者に明らかである。より詳細には、同じまたは類似の結果が達成しながらも、化学的および生理学的の両方で関連した特定の薬剤で本明細書中に記載された薬剤を置換され得ることが明らかである。当業者に明らかな全てのこのような類似の置換および改変は、添付の特許請求の範囲によって定義される本発明の精神、範囲および趣旨の範囲内にあるとみなされる。
【手続補正書】
【提出日】平成16年11月4日(2004.11.4)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
組成物であって、以下：
（ａ）エストラジオール代謝産物；および
（ｂ）徐放を提供する材料
を含む、組成物。
【請求項２】
前記徐放を提供する材料が、微粒子、ナノパーティクル、パッチ、結晶、ゲル、ロッド、スティント、ペレット、ディスク、ロゼンジ、ウェーハ、カプセル、フィルム、マイクロカプセル、ナノカプセル、ヒドロゲル、リポソーム、移植片および膣リング、からなる群から選択される、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記微粒子またはナノパーティクルが、ポリ（ラクチド）、ポリ（グリコリド）、ポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）、ポリ（乳酸）、ポリ（グリコール酸）、ポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）、ポリカプロラクトン、ポリカーボネート、ポリエステルアミド、ポリ無水物、ポリ（アミノ酸）、ポリオルトエステル、ポリアセチル、ポリシアノアクリレート、ポリエーテルエステル、ポリ（ジオキサノン）、ポリ（アルキレンアルキレート）、ポリエチレングリコールとポリオルトエステルとのコポリマー、ポリウレタン、それらのブレンドおよびコポリマーからなる群から選択される生分解性ポリマーから構成される、請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
前記微粒子またはナノパーティクルが、ポリ（ｄ，ｌ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド）から構成される、請求項３に記載の組成物。
【請求項５】
前記微粒子が、１マイクロメートルと２００マイクロメートルとの間の直径を有する、請求項２に記載の組成物。
【請求項６】
前記ナノパーティクルが、２０ナノメートルと２０００ナノメートルとの間の直径を有する、請求項２に記載の組成物。
【請求項７】
前記微粒子またはナノパーティクルが、添加剤をさらに含む、請求項２に記載の組成物。
【請求項８】
前記添加剤が、ブチル化ヒドロキシトルエン、没食子酸プロピル、α−トコフェロール、アスコルビン酸パルミテート、抗酸化剤、放出モディファイヤおよび緩衝剤からなる群から選択される、請求項７に記載の組成物。
【請求項９】
前記エストラジオール代謝産物が、２−メトキシエストラジオール、２−ヒドロキシエストラジオール、４−メトキシエストラジオールおよび４−ヒドロキシエストラジオールからなる群から選択される、請求項１に記載の組成物。
【請求項１０】
前記エストラジオール代謝産物が、経粘膜送達される、請求項１に記載の組成物。
【請求項１１】
前記経粘膜送達が、頬側送達、経口送達、眼送達、鼻送達、直腸送達および膣送達からなる群から選択される、請求項１０に記載の組成物。
【請求項１２】
前記エストラジオール代謝産物がプロドラッグである、請求項１に記載の組成物。
【請求項１３】
前記プロドラッグがエステルである、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１４】
請求項１３に記載の組成物であって、前記エステルが、３−ベンゾイル−２−メトキシエストラジオール；１７−ベンゾイル−２−メトキシエストラジオール；１７−アセチル−２−メトキシエストラジオール；３−アセチル−２−メトキシエストラジオール；３，１７−ジベンゾイル−２−メトキシエストラジオール；３，１７−ジアセチル−２−メトキシエストラジオール；３−ベンゾイル−４−メトキシエストラジオール；１７−ベンゾイル−４−メトキシエストラジオール；１７−アセチル−４−メトキシエストラジオール；３−アセチル−４−メトキシエストラジオール；３，１７−ジベンゾイル−４−メトキシエストラジオール；３，１７−ジアセチル４−メトキシエストラジオール；３−ベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール；１７−ベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール；１７−アセチル−２−ヒドロキシエストラジオール；３−アセチル−２−ヒドロキシエストラジオール；３，１７−ジベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール；３，１７−ジアセチル−２−ヒドロキシエストラジオール；２，３−ジベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール；２，１７−ジベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール；２，１７−ジアセチル−２−ヒドロキシエストラジオール；２，３−ジアセチル−２−ヒドロキシエストラジオール；２，３，１７−トリベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール；２，３，１７−トリアセチル−２−ヒドロキシエストラジオール；３−ベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール；１７−ベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール；１７−アセチル−４−ヒドロキシエストラジオール；３−アセチル−４−ヒドロキシエストラジオール；３，１７−ジベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール；３，１７−ジアセチル−４−ヒドロキシエストラジオール；３，４−ジベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール；４，１７−ジベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール；４，１７−ジアセチル−４−ヒドロキシエストラジオール；３，４−ジアセチル−４−ヒドロキシエストラジオール；３，４，１７−トリベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール；３，４，１７−トリアセチル−４−ヒドロキシエストラジオールからなる群から選択される、組成物。
【請求項１５】
前記エストラジオール代謝産物が、共晶混合物である、請求項１に記載の組成物。
【請求項１６】
親水性ポリマーをさらに含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項１７】
前記親水性ポリマーが、ポリ（エチレングリコール）、ポリ（プロピレングリコール）およびポリ（エチレングリコール）とポリ（プロピレングリコール）とのコポリマーからなる群から選択される、請求項１６に記載の組成物。
【請求項１８】
前記エストラジオール代謝産物が、誘導体化されている、請求項１に記載の組成物。
【請求項１９】
誘導体が、ジカルボン酸化合物、二酸、極性化合物およびイオン性化合物からなる群から選択される、請求項１８に記載の組成物。
【請求項２０】
前記ジカルボン酸化合物が、シュウ酸、マロン酸、マレイン酸、コハク酸、グルタル酸、アジピン酸、ピメリン酸およびパモ酸からなる群から選択される、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２１】
前記二酸が、コハク酸、グルタル酸、マレイン酸、マロン酸およびシュウ酸からなる群から選択される、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２２】
前記組成物が、有機溶媒中に溶解したポリマーおよびエストラジオール代謝産物の溶液を噴霧乾燥することによって生成される、請求項１〜２１のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項２３】
前記組成物が、連続相および不連続相を含む湿式乳化、続いて溶媒除去によって生成される、請求項１〜２１のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項２４】
前記不連続相がエストラジオール代謝産物およびポリマーを含む、請求項２３に記載の組成物。
【請求項２５】
添加剤をさらに含む、請求項２４に記載の組成物。
【請求項２６】
前記添加剤が、抗酸化剤、緩衝剤および放出モディファイヤからなる群から選択される、請求項２５に記載の組成物。
【請求項２７】
前記不連続相が有機溶媒を含む、請求項２３に記載の組成物。
【請求項２８】
前記連続相が乳化剤をさらに含む、請求項２３に記載の組成物。
【請求項２９】
前記乳化剤が、リン脂質、レシチン、イオン性界面活性剤、非イオン性界面活性剤、ポロキサマー、ポリマー、ポリビニルピロリドンおよびポリビニルアルコールからなる群から選択される、請求項２８に記載の組成物。
【請求項３０】
前記乳化剤がポリビニルアルコールである、請求項２９に記載の組成物。
【請求項３１】
前記組成物が、油相溶媒の選択的抽出によって生成された、請求項１〜２１のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項３２】
前記組成物が、乳化プロセスによって生成された、請求項１〜２１のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項３３】
前記組成物が、アニールリング工程を含むプロセスによって生成される、請求項１〜３２のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項３４】
前記組成物が、個体を処置するために有用である、請求項１〜３３のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項３５】
治療方法であって、以下：
（ａ）エストラジオール代謝産物を含む徐放性処方物を個体に投与する工程
を包含する、方法。
【請求項３６】
前記エストラジオール代謝産物を含む徐放性処方物が、微粒子、ナノパーティクル、パッチ、結晶、ゲル、ロッド、スティント、ペレット、ディスク、ロゼンジ、ウェーハ、カプセル、フィルム、マイクロカプセル、ナノカプセル、ヒドロゲル、リポソーム、移植片および膣リングからなる群から選択される、請求項３５に記載の方法。
【請求項３７】
前記微粒子またはナノパーティクルが、ポリ（ラクチド）、ポリ（グリコリド）、ポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）、ポリ（乳酸）、ポリ（グリコール酸）、ポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）、ポリカプロラクトン、ポリカーボネート、ポリエステルアミド、ポリ無水物、ポリ（アミノ酸）、ポリオルトエステル、ポリアセチル、ポリシアノアクリレート、ポリエーテルエステル、ポリ（ジオキサノン）、ポリ（アルキレンアルキレート）、ポリエチレングリコールとポリオルトエステルとのコポリマー、生分解性ポリウレタン、それらのブレンドおよびコポリマーからなる群から選択される生分解性ポリマーから構成される、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
前記微粒子またはナノパーティクルが、ポリ（ｄ，ｌ−ラクチド−ｃｏ−グリコリド）から構成される、請求項３７に記載の方法。
【請求項３９】
前記微粒子が、１マイクロメートルと２００マイクロメートルとの間の直径を有する、請求項３７に記載の方法。
【請求項４０】
前記ナノパーティクルが、２０ナノメートルと２０００ナノメートルとの間の直径を有する、請求項３７に記載の方法。
【請求項４１】
前記微粒子またはナノパーティクルが、添加剤をさらに含む、請求項３７に記載の方法。
【請求項４２】
前記添加剤が、ブチル化ヒドロキシトルエン、没食子酸プロピル、α−トコフェロール、アスコルビン酸パルミテート、抗酸化剤、放出モディファイヤおよび緩衝剤からなる群から選択される、請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】
前記エストラジオール代謝産物が、２−メトキシエストラジオール、２−ヒドロキシエストラジオール、４−メトキシエストラジオールおよび４−ヒドロキシエストラジオールからなる群から選択される、請求項３５に記載の方法。
【請求項４４】
前記エストラジオール代謝産物が、経粘膜送達される、請求項３５に記載の方法。
【請求項４５】
前記経粘膜送達が、頬側送達、経口送達、眼送達、鼻送達、直腸送達および膣送達からなる群から選択される、請求項４４に記載の方法。
【請求項４６】
前記エストラジオール代謝産物がプロドラッグである、請求項３５に記載の方法。
【請求項４７】
前記プロドラッグがエステルである、請求項４６に記載の方法。
【請求項４８】
請求項４７に記載の方法であって、前記エステルが、３−ベンゾイル−２−メトキシエストラジオール；１７−ベンゾイル−２−メトキシエストラジオール；１７−アセチル−２−メトキシエストラジオール；３−アセチル−２−メトキシエストラジオール；３，１７−ジベンゾイル−２−メトキシエストラジオール；３，１７−ジアセチル−２−メトキシエストラジオール；３−ベンゾイル−４−メトキシエストラジオール；１７−ベンゾイル−４−メトキシエストラジオール；１７−アセチル−４−メトキシエストラジオール；３−アセチル−４−メトキシエストラジオール；３，１７−ジベンゾイル−４−メトキシエストラジオール；３，１７−ジアセチル−４−メトキシエストラジオール；
３−ベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール；１７−ベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール；１７−アセチル−２−ヒドロキシエストラジオール；３−アセチル−２−ヒドロキシエストラジオール；３，１７−ジベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール；３，１７−ジアセチル−２−ヒドロキシエストラジオール；２，３−ジベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール；２，１７−ジベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール；２，１７−ジアセチル−２−ヒドロキシエストラジオール；２，３−ジアセチル−２−ヒドロキシエストラジオール；２，３，１７−トリベンゾイル−２−ヒドロキシエストラジオール；２，３，１７−トリアセチル−２−ヒドロキシエストラジオール；３−ベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール；１７−ベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール；１７−アセチル−４−ヒドロキシエストラジオール；３−アセチル−４−ヒドロキシエストラジオール；３，１７−ジベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール；３，１７−ジアセチル−４−ヒドロキシエストラジオール；３，４−ジベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール；４，１７−ジベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール；４，１７−ジアセチル−４−ヒドロキシエストラジオール；３，４−ジアセチル−４−ヒドロキシエストラジオール；３，４，１７−トリベンゾイル−４−ヒドロキシエストラジオール；３，４，１７−トリアセチル−４−ヒドロキシエストラジオールからなる群から選択される、方法。
【請求項４９】
前記エストラジオール代謝産物を含む徐放性処方物が、共晶混合物である、請求項３５に記載の方法。
【請求項５０】
親水性ポリマーをさらに含む、請求項３５に記載の方法。
【請求項５１】
前記親水性ポリマーが、ポリ（エチレングリコール）、ポリ（プロピレングリコール）およびポリ（エチレングリコール）とポリ（プロピレングリコール）とのコポリマーからなる群から選択される、請求項５０に記載の方法。
【請求項５２】
前記エストラジオール代謝産物が、誘導体化されている、請求項３５に記載の方法。
【請求項５３】
誘導体が、ジカルボン酸化合物、二酸、極性化合物およびイオン性化合物からなる群から選択される、請求項５２に記載の方法。
【請求項５４】
前記ジカルボン酸化合物が、シュウ酸、マロン酸、マレイン酸、コハク酸、グルタル酸、アジピン酸、ピメリン酸およびパモ酸からなる群から選択される、請求項５３に記載の方法。
【請求項５５】
前記二酸が、コハク酸、グルタル酸、マレイン酸、マロン酸およびシュウ酸からなる群から選択される、請求項５３に記載の方法。
【請求項５６】
前記エストラジオール代謝産物を含む徐放性処方物が、有機溶媒中に溶解したポリマーおよびエストラジオール代謝産物の溶液を噴霧乾燥することによって生成される、請求項３５〜５５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５７】
前記エストラジオール代謝産物を含む徐放性処方物が、連続相および不連続相を含む湿式乳化、続いて溶媒除去によって生成される、請求項３５〜５５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５８】
前記不連続相がエストラジオール代謝産物およびポリマーを含む、請求項５７に記載の方法。
【請求項５９】
添加剤をさらに含む、請求項５８に記載の方法。
【請求項６０】
前記添加剤が、抗酸化剤、緩衝剤および放出モディファイヤからなる群から選択される、請求項５９に記載の方法。
【請求項６１】
前記不連続相が、有機溶媒を含む、請求項５７に記載の方法。
【請求項６２】
前記有機溶媒が、１つの溶媒、２つの溶媒および溶媒混合物からなる群から選択される、請求項６１に記載の方法。
【請求項６３】
前記連続相が、乳化剤をさらに含む、請求項５７に記載の方法。
【請求項６４】
前記乳化剤が、リン脂質、レシチン、イオン性界面活性剤、非イオン性界面活性剤、ポロキサマー、ポリマー、ポリビニルピロリドンおよびポリビニルアルコールからなる群から選択される、請求項６３に記載の方法。
【請求項６５】
前記乳化剤がポリビニルアルコールである、請求項６４に記載の方法。
【請求項６６】
前記エストラジオール代謝産物を含む徐放性処方物が、油相溶媒の選択的抽出によって生成された、請求項３５〜５５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６７】
前記エストラジオール代謝産物を含む徐放性処方物が、乳化プロセスによって生成された、請求項３５〜５５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６８】
組成物であって、以下；
（ａ）カテコールエストロゲンおよびメトキシエストラジオールからなる群から選択されたエストラジオール代謝産物；ならびに
（ｂ）徐放を提供する材料
を含む、組成物。
【請求項６９】
前記徐放を提供する材料が、ポリ（ラクチド）、ポリ（グリコリド）、ポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）、ポリ（乳酸）、ポリ（グリコール酸）、ポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）、ポリカプロラクトン、ポリカーボネート、ポリエステルアミド、ポリ無水物、ポリ（アミノ酸）、ポリオルトエステル、ポリアセチル、ポリシアノアクリレート、ポリエーテルエステル、ポリ（ジオキサノン）、ポリ（アルキレンアルキレート）、ポリエチレングリコールとポリオルトエステルとのコポリマー、生分解性ポリウレタン、それらのブレンドおよびコポリマーからなる群から選択される生分解性ポリマーから構成される微粒子またはナノパーティクルである、請求項６８に記載の組成物。
【請求項７０】
前記エストラジオール代謝産物が、２−メトキシエストラジオール、２−ヒドロキシエストラジオール、４−メトキシエストラジオールおよび４−ヒドロキシエストラジオールからなる群から選択される、請求項６８に記載の組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１４】
本発明の組成物は、（例えば、頬側適用、経口適用、眼適用、鼻適用、直腸適用または膣適用により）経粘膜適用され得るか、または皮膚の角質層を通して経皮送達され得る。本発明の組成物および方法はまた、共晶混合物中のエストラジオール代謝産物を利用し得る。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６６】
乳化剤は、形成およびその後の不連続相溶媒除去の間、乳化を安定させるために連続相液体に添加され得る。このような乳化剤の例としては、リン脂質（例えば、レシチン）、イオン性界面活性剤および非イオン性界面活性剤、ポロキサマーまたはポリマー（例えばポリビニルピロリドンおよびポリビニルアルコール）が挙げられる。好ましい実施形態では、ポリビニルアルコールは、０．０５％ｗ／ｖ〜１０％ｗ／ｖの範囲の濃度で用いられる。特定の実施形態では、ポリビニルアルコールは、０．３％ｗ／ｖと４％ｗ／ｖとの間の濃度で用いられる。
【国際調査報告】
2005525403.tif 000005
2005525403.tif 000006