(57)【要約】本発明は、式（Ｉ）のプロスタグランジンＥ２受容体のＥＰ４サブタイプの強力な選択的作動薬、患者の眼に於ける上昇した眼圧に関連する緑内障及びその他の状態の治療に於けるこれらの使用又はこれらの配合物に関する。本発明は、更に、骨芽細胞及び破骨細胞の骨構築及び再構築過程を仲介するための本発明の化合物の使用に関する。    【化１１】2005534653.tif 000015
2005534653.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
構造式Ｉ：
【化１】
2005534653.tif 000010
［式中、
Ｘは、結合、Ｏ又はＳであり、
Ｙは、＝Ｏ又は−ＯＨを表し、
Ｒ１は、ヒドロキシ、ＣＮ、（ＣＨ２）ｐＣＯ２Ｒ６、（ＣＨ２）ｎＳＯ３Ｒ６、−ＣＦ２ＳＯ２ＮＨ２、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＣＯＮＨＳＯ２Ｒ２−、−ＳＯ２ＮＨＣＯＲ２、−ＰＯ（ＯＨ）２、ＣＯＮＨＰＯ２Ｒ６、ＣＯＮＨＲ８、Ｃ１−４アルコキシ、−（ＣＨ２）ｎＮＲ６Ｒ７、ヒドロキシメチルケトン又は（ＣＨ２）ｎヘテロシクリルを表し、該ヘテロシクリルは、置換されていないか又は１から３個のＲａの基で置換されており、そして場合により酸性水素原子を含有し、
Ｒ２は、水素、Ｃ６−１０アリール又はＣ１−４アルキルを表し、
Ｒ３及びＲ４は、独立に、水素、ハロゲン又はＣ１−６アルキルを表し、
Ｒ５は、独立に、（ＣＨ２）ｍＣ６−１０アリール、（ＣＨ２）ｍＣ５−１０ヘテロアリール、（ＣＨ２）ｍＣ３−１０ヘテロシクロアルキル、（ＣＨ２）ｍＣ３−８シクロアルキルを表し、該シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール又はヘテロアリールは、置換されていないか又は１から３個のＲａの基で置換されており、
Ｒ６及びＲ７は、独立に、水素又はＣ１−４アルキルを表し、
Ｒ８は、水素、アシル又はスルホニルを表し、
Ｚは、（Ｃ（Ｒｂ）２）ｎ、
【化２】
2005534653.tif 000011
を表し、
Ｒｂは、独立に、Ｈ、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−６シクロアルキルを表し、
Ｒａは、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキル、ＣＦ３、ニトロ、アミノ、シアノ、Ｃ１−６アルキルアミノ又はハロゲンを表し、
−−−は、二重結合又は単結合を表し、
ｐは、１〜３を表し、
ｎは、０〜４を表し、
ｍは、０〜８を表す］
を有する化合物又はその医薬適合性の塩、エナンチオマー、ジアステレオマー、プロドラッグ若しくはそれらの混合物。
【請求項２】
Ｒ１が、ＣＮ、（ＣＨ２）ｍＣ５−１０ヘテロシクリル、−ＰＯ（ＯＨ）２、ＣＯＮＨＰＯ２Ｒ６、（ＣＨ２）ｐＣＯ２Ｒ６又はＣＯＮＨＲ６であり、該ヘテロシクリルが、置換されていないか又は１から３個のＲａの基で置換されており、そして全ての他の変数が最初に記載された通りである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｘが結合である、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
ＸがＳである、請求項２に記載の化合物。
【請求項５】
ＸがＯである、請求項２に記載の化合物。
【請求項６】
Ｙが＝Ｏである、請求項２に記載の化合物。
【請求項７】
Ｙが−ＯＨである、請求項２に記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ１が（ＣＨ２）ｍＣ５−１０ヘテロシクリルであり、ＹがＯＨ又は＝Ｏであり、Ｘが結合であり、該ヘテロシクリルが、置換されていないか又は１から３個のＲａの基で置換されており、そして全ての他の変数が最初に記載された通りである、請求項２に記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ１が（ＣＨ２）ｍＣ５−１０ヘテロシクリルであり、ＹがＯＨ又は＝Ｏであり、ＸがＳであり、該ヘテロシクリルが、置換されていないか又は１から３個のＲａの基で置換されており、そして全ての他の変数が最初に記載された通りである、請求項２に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ１が（ＣＨ２）ｍＣ５−１０ヘテロシクリルであり、ＹがＯＨ又は＝Ｏであり、ＸがＯであり、該ヘテロシクリルが、置換されていないか又は１から３個のＲａの基で置換されており、そして全ての他の変数が最初に記載された通りである、請求項２に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｒ５が（ＣＨ２）ｍＣ６−１０アリールであり、該アリールが、置換されていないか又は１から３個のＲａの基で置換されており、そして全ての他の変数が最初に記載された通りである、請求項８に記載の化合物。
【請求項１２】
Ｒ５が（ＣＨ２）ｍＣ６−１０アリールであり、該アリールが、置換されていないか又は１から３個のＲａの基で置換されており、そして全ての他の変数が最初に記載された通りである、請求項９に記載の化合物。
【請求項１３】
Ｒ５が（ＣＨ２）ｍＣ６−１０アリールであり、該アリールが、置換されていないか又は１から３個のＲａの基で置換されており、そして全ての他の変数が最初に記載された通りである、請求項１０に記載の化合物。
【請求項１４】
（４Ｓ）−４−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−１−メチル−３−［６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヘキシル］イミダゾリジン−２−オン、
（４Ｓ）−１−ベンジル−４−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヘキシル］イミダゾリジン−２−オン、
（５Ｓ）−１−［４，４−ジフルオロ−６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヘキシル］−５−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］イミダゾリジン−２−オン、
（４Ｓ）−３−［４，４−ジフルオロ−６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヘキシル］−４−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−１−メチルイミダゾリジン−２−オン、
（４Ｓ）−１−ベンジル−３−［４，４−ジフルオロ−６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヘキシル］−４−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］イミダゾリジン−２−オン、
（５Ｓ）−１−［３，３−ジフルオロ−６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヘキシル］−５−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］イミダゾリジン−２−オン、
（４Ｓ）−３−［３，３−ジフルオロ−６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヘキシル］−４−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−１−メチルイミダゾリジン−２−オン、
（４Ｓ）−１−ベンジル−３−［３，３−ジフルオロ−６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヘキシル］−４−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］イミダゾリジン−２−オン、
（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−１−｛４−［（１Ｈ−テトラゾール−５−イルメチル）チオ］ブチル｝イミダゾリジン−２−オン、
（４Ｓ）−４−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−１−メチル−３−｛４−［（１Ｈ−テトラゾール−５−イルメチル）チオ］ブチル｝イミダゾリジン−２−オン、
（４Ｓ）−１−ベンジル−４−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−｛４−［（１Ｈ−テトラゾール−５−イルメチル）チオ］ブチル｝イミダゾリジン−２−オン、
（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−１−［４−（１Ｈ−テトラゾール−５−イルメトキシ）ブチル］イミダゾリジン−２−オン、
（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−１−［６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヘキシル］イミダゾリジン−２−オン、
（４Ｓ）−４−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−１−メチル−３−［４−（１Ｈ−テトラゾール−５−イルメトキシ）ブチル］イミダゾリジン−２−オン、
（４Ｓ）−１−ベンジル−４−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［４−（１Ｈ−テトラゾール−５−イルメトキシ）ブチル］イミダゾリジン−２−オン、
（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−１−｛４−［１−（１Ｈ−テトラゾール−５−イルメチル）シクロプロピル］ブチル｝イミダゾリジン−２−オン、
（４Ｓ）−４−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−１−メチル−３−｛４−［１−（１Ｈ−テトラゾール−５−イルメチル）シクロプロピル］ブチル｝イミダゾリジン−２−オン、
（４Ｓ）−１−ベンジル−４−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−｛４−［１−（１Ｈ−テトラゾール−５−イルメチル）シクロプロピル］ブチル｝イミダゾリジン−２−オン、
（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−１−（３−｛１−［２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）エチル］シクロプロピル｝プロピル）イミダゾリジン−２−オン、
（４Ｓ）−４−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−１−メチル−３−（３−｛１−［２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）エチル］シクロプロピル｝プロピル）イミダゾリジン−２−オン、
（４Ｓ）−１−ベンジル−４−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−（３−｛１−［２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）エチル］シクロプロピル｝プロピル）イミダゾリジン−２−オン、
（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−１−（２−｛１−［３−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）プロピル］シクロプロピル｝エチル）イミダゾリジン−２−オン、
（４Ｓ）−４−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−１−メチル−３−（２−｛１−［３−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）プロピル］シクロプロピル｝エチル）イミダゾリジン−２−オン、
（４Ｓ）−１−ベンジル−４−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−（２−｛１−［３−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）プロピル］シクロプロピル｝エチル）イミダゾリジン−２−オン、
（５Ｓ）−１−［３，３−ジフルオロ−６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヘキシル］−５−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］イミダゾリジン−２−オン、
（４Ｓ）−３−［３，３−ジフルオロ−６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヘキシル］−４−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−１−メチルイミダゾリジン−２−オン、
（４Ｓ）−１−ベンジル−３−［３，３−ジフルオロ−６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヘキシル］−４−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］イミダゾリジン−２−オン、
（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−１−｛４−［（１Ｈ−テトラゾール−５−イルメチル）チオ］ブチル｝イミダゾリジン−２−オン、
（４Ｓ）−４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−１−メチル−３−｛４−［（１Ｈ−テトラゾール−５−イルメチル）チオ］ブチル｝イミダゾリジン−２−オン、
（４Ｓ）−１−ベンジル−４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−｛４−［（１Ｈ−テトラゾール−５−イルメチル）チオ］ブチル｝イミダゾリジン−２−オン、
（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−１−［４−（１Ｈ−テトラゾール−５−イルメトキシ）ブチル］イミダゾリジン−２−オン、
（４Ｓ）−４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−１−メチル−３−［４−（１Ｈ−テトラゾール−５−イルメトキシ）ブチル］イミダゾリジン−２−オン、
（４Ｓ）−１−ベンジル−４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［４−（１Ｈ−テトラゾール−５−イルメトキシ）ブチル］イミダゾリジン−２−オン、
（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−１−［４，４−ジフルオロ−６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヘキシル］イミダゾリジン−２−オン、
（４Ｓ）−４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［４，４−ジフルオロ−６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヘキシル］−１−メチルイミダゾリジン−２−オン、
（４Ｓ）−１−ベンジル−４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［４，４−ジフルオロ−６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヘキシル］イミダゾリジン−２−オン、
（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−１−［３，３−ジフルオロ−６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヘキシル］イミダゾリジン−２−オン、
（４Ｓ）−４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［３，３−ジフルオロ−６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヘキシル］−１−メチルイミダゾリジン−２−オン、
（４Ｓ）−１−ベンジル−４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［３，３−ジフルオロ−６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヘキシル］イミダゾリジン−２−オン、
７−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ヘプタン酸、
７−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−メチル−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ヘプタン酸、
７−｛（５Ｓ）−３−ベンジル−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ヘプタン酸、
メチル−７−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ヘプタノアート、
メチル−７−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−メチル−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ヘプタノアート、
メチル−７−｛（５Ｓ）−３−ベンジル−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ヘプタノアート、
［（４−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ブチル）チオ］酢酸、
［（４−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−メチル−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ブチル）チオ］酢酸、
［（４−｛（５Ｓ）−３−ベンジル−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ブチル）チオ］酢酸、
メチル−［（４−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ブチル）チオ］アセタート、
メチル−［（４−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−メチル−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ブチル）チオ］アセタート、
メチル−［（４−｛（５Ｓ）−３−ベンジル−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ブチル）チオ］アセタート、
（４−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ブトキシ）酢酸、
（４−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−メチル−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ブトキシ）酢酸、
（４−｛（５Ｓ）−３−ベンジル−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ブトキシ）酢酸、
メチル（４−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ブトキシ）アセタート、
メチル（４−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−メチル−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ブトキシ）アセタート、
メチル（４−｛（５Ｓ）−３−ベンジル−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ブトキシ）アセタート、
７−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ヘプタン酸、
メチル−７−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ヘプタノアート、
７−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−メチル−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ヘプタン酸、
メチル−７−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−メチル−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ヘプタノアート、
７−｛（５Ｓ）−３−ベンジル−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ヘプタン酸、
メチル−７−｛（５Ｓ）−３−ベンジル−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ヘプタノアート、
７−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝−４，４−ジフルオロヘプタン酸、
メチル−７−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝−４，４−ジフルオロヘプタノアート、
７−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−メチル−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝−４，４−ジフルオロヘプタン酸、
メチル−７−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−メチル−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝−４，４−ジフルオロヘプタノアート、
７−｛（５Ｓ）−３−ベンジル−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝−４，４−ジフルオロヘプタン酸、
メチル−７−｛（５Ｓ）−３−ベンジル−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝−４，４−ジフルオロヘプタノアート、
６−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ヘキシルホスホン酸、
６−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ヘキシルホスホン酸、
６−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−メチル−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ヘキシルホスホン酸、
６−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−メチル−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ヘキシルホスホン酸、
６−｛（５Ｓ）−３−ベンジル−５−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ヘキシルホスホン酸、
６−｛（５Ｓ）−３−ベンジル−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ヘキシルホスホン酸、
［（４−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ブチル）チオ］メチルホスホン酸、
［（４−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ブチル）チオ］メチルホスホン酸、
［（４−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−メチル−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ブチル）チオ］メチルホスホン酸、
［（４−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−メチル−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ブチル）チオ］メチルホスホン酸、
［（４−｛（５Ｓ）−３−ベンジル−５−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ブチル）チオ］メチルホスホン酸、
［（４−｛（５Ｓ）−３−ベンジル−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ブチル）チオ］メチルホスホン酸、
［（１，１−ジフルオロ−４−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ブチル）チオ］メチルホスホン酸、
６−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝−３，３−ジフルオロヘキシルホスホン酸、
［（１，１−ジフルオロ−４−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−メチル−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ブチル）チオ］メチルホスホン酸、
［（４−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−メチル−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝−１，１−ジフルオロブチル）チオ］メチルホスホン酸、
［（４−｛（５Ｓ）−３−ベンジル−５−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝−１，１−ジフルオロブチル）チオ］メチルホスホン酸、
［（４−｛（５Ｓ）−３−ベンジル−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝−１，１−ジフルオロブチル）チオ］メチルホスホン酸、
２−［１−（３−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝プロピル）シクロプロピル］エチルホスホン酸、
２−［１−（３−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝プロピル）シクロプロピル］エチルホスホン酸、
２−［１−（３−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−メチル−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝プロピル）シクロプロピル］エチルホスホン酸、
２−［１−（３−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−メチル−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝プロピル）シクロプロピル］エチルホスホン酸、
２−［１−（３−｛（５Ｓ）−３−ベンジル−５−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝プロピル）シクロプロピル］エチルホスホン酸、
２−［１−（３−｛（５Ｓ）−３−ベンジル−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝プロピル）シクロプロピル］エチルホスホン酸、
Ｎ−｛３−［１−（３−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝プロピル）シクロプロピル］プロパノイル｝メタンスルホンアミド、
Ｎ−｛３−［１−（３−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝プロピル）シクロプロピル］プロパノイル｝メタンスルホンアミド、
Ｎ−｛３−［１−（３−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−メチル−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝プロピル）シクロプロピル］プロパノイル｝メタンスルホンアミド、
Ｎ−｛３−［１−（３−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−メチル−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝プロピル）シクロプロピル］プロパノイル｝メタンスルホンアミド、
Ｎ−｛３−［１−（３−｛（５Ｓ）−３−ベンジル−５−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝プロピル）シクロプロピル］プロパノイル｝メタンスルホンアミド若しくは
Ｎ−｛３−［１−（３−｛（５Ｓ）−３−ベンジル−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝プロピル）シクロプロピル］プロパノイル｝メタンスルホンアミド又はこれらの医薬適合性の塩、エナンチオマー、ジアステレオマー、プロドラッグ若しくは混合物である化合物。
【請求項１５】
眼圧亢進症又は緑内障の治療方法であって、このような治療が必要な患者に、治療的有効量の、式Ｉ：
【化３】
2005534653.tif 000012
2005534653.tif 000013
［式中、
Ｘは、結合、Ｏ又はＳであり、
Ｙは、＝Ｏ又は−ＯＨを表し、
Ｒ１は、ヒドロキシ、ＣＮ、（ＣＨ２）ｐＣＯ２Ｒ６、（ＣＨ２）ｎＳＯ３Ｒ６、−ＣＦ２ＳＯ２ＮＨ２、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＣＯＮＨＳＯ２Ｒ２−、−ＳＯ２ＮＨＣＯＲ２、−ＰＯ（ＯＨ）２、ＣＯＮＨＰＯ２Ｒ６、ＣＯＮＨＲ８、Ｃ１−４アルコキシ、−（ＣＨ２）ｎＮＲ６Ｒ７、ヒドロキシメチルケトン又は（ＣＨ２）ｎヘテロシクリルを表し、該ヘテロシクリルは、置換されていないか又は１から３個のＲａの基で置換されており、そして場合により酸性水素原子を含有し、
Ｒ２は、水素、Ｃ６−１０アリール又はＣ１−４アルキルを表し、
Ｒ３及びＲ４は、独立に、水素、ハロゲン又はＣ１−６アルキルを表し、
Ｒ５は、独立に、（ＣＨ２）ｍＣ６−１０アリール、（ＣＨ２）ｍＣ５−１０ヘテロアリール、（ＣＨ２）ｍＣ３−１０ヘテロシクロアルキル、（ＣＨ２）ｍＣ３−８シクロアルキルを表し、該シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール又はヘテロアリールは、置換されていないか又は１から３個のＲａの基で置換されており、
Ｒ６及びＲ７は、独立に、水素又はＣ１−４アルキルを表し、
Ｒ８は、水素、アシル又はスルホニルを表し、
Ｚは、（Ｃ（Ｒｂ）２）ｎ、
【化４】
2005534653.tif 000014
を表し、
Ｒｂは、独立に、Ｈ、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−６シクロアルキルを表し、
Ｒａは、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキル、ＣＦ３、ニトロ、アミノ、シアノ、Ｃ１−６アルキルアミノ又はハロゲンを表し、
−−−は、二重結合又は単結合を表し、
ｐは、１〜３を表し、
ｎは、０〜４を表し、
ｍは、０〜８を表す］
の化合物又はその医薬適合性の塩、エナンチオマー、ジアステレオマー、プロドラッグ若しくは混合物を投薬することを含む方法。
【請求項１６】
式Ｉの化合物を、溶液又は懸濁液として局所配合物で投薬する、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
β−アドレナリン作動遮断薬、副交感神経刺激剤、交感神経作用薬、炭酸脱水酵素阻害剤、マクシ−Ｋチャンネル遮断薬並びにプロスタグランジン、低圧脂質、神経保護剤及び５−ＨＴ２受容体作動薬からなる群に属する第二活性成分を、局所配合物に添加する、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
β−アドレナリン作動遮断薬が、チモロール、ベタキソロール、レボベタキソロール、カルテオロール又はレボブノロールであり、副交感神経刺激剤がピロカルピンであり、交感神経作用薬が、エピネフリン、ブリモニジン、イオピジン、クロニジン又はパラ−アミノクロニジンであり、炭酸脱水酵素阻害剤が、ドルゾラミド、アセタゾラミド、メタゾラミド又はブリンゾラミドであり、プロスタグランジンが、ラタノプロスト、トラバプロスト、ウノプロストン、レスキュラ又はＳ１０３３であり、低圧脂質がルミガンであり、神経保護剤がエリプロジル、Ｒ−エリプロジル又はメマンチンであり、そして５−ＨＴ２受容体作動薬が、１−（２−アミノプロピル）−３−メチル−１Ｈ−イミダゾール−６−オールフマラート又は２−（３−クロロ−６−メトキシ−インダゾール−１−イル）−１−メチルエチルアミンである、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
黄斑水腫、黄斑変性を治療する、ドライアイを治療する、網膜及び視神経頭血液速度を上昇させる、網膜及び視神経酸素圧を増加させる又は神経保護を与えるための方法であって、このような治療が必要な患者に、薬物的有効量の請求項１に列挙したような式Ｉの化合物を投薬することを含む方法。
【請求項２０】
式Ｉの化合が局所配合物として適用され、そしてβ−アドレナリン作動遮断薬、副交感神経刺激剤、交感神経作用薬、炭酸脱水酵素阻害剤、並びにプロスタグランジン、低圧脂質、神経保護剤及び５−ＨＴ２受容体作動薬からなる群に属する活性成分が、この配合物に添加される、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
β−アドレナリン作動遮断薬が、チモロール、ベタキソロール、レボベタキソロール、カルテオロール又はレボブノロールであり、副交感神経刺激剤がピロカルピンであり、交感神経作用薬が、エピネフリン、ブリモニジン、イオピジン、クロニジン又はパラ−アミノクロニジンであり、炭酸脱水酵素阻害剤が、ドルゾラミド、アセタゾラミド、メタゾラミド又はブリンゾラミドであり、プロスタグランジンが、ラタノプロスト、トラバプロスト、ウノプロストン、レスキュラ又はＳ１０３３であり、低圧脂質がルミガンであり、神経保護剤がエリプロジル、Ｒ−エリプロジル又はメマンチンであり、そして５−ＨＴ２受容体作動薬が、１−（２−アミノプロピル）−３−メチル−１Ｈ−イミダゾール−６−オールフマラート又は２−（３−クロロ−６−メトキシ−インダゾール−１−イル）−１−メチルエチルアミンである、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
局所配合物に、場合により、キサンタンガム又はゲランガムが含有されている、請求項１６に記載の方法。
【請求項２３】
下記のことが必要である哺乳動物に於ける、骨形成を刺激する、異常な骨吸収に関連する疾患状態又は状況を治療する又はこの状態にかかるリスクを減少するための方法であって、該哺乳動物に、治療的有効量の、請求項１に記載の式Ｉの化合物を投薬することを含む方法。
【請求項２４】
該疾患状態又は状況が、骨粗鬆症、グルココルチコイド誘発骨粗鬆症、ぺージェット病、異常に増加した骨ターンオーバー、歯根膜疾患、歯損失、骨折、慢性関節リウマチ、プロテーゼ周囲の骨溶解、骨形成不全症、転移骨疾患、悪性の高カルシウム血症及び多発性骨髄腫からなる群から選択される、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
更に、アレンドロナート、シマドロナート、クロドロナート、チルドロナート、エチドロナート、イバンドロナート、ネリドロナート、オルパンドロナート、リセドロナート、ピリドロナート、パミドロナート、ゾレンドロナート、これらの医薬適合性の塩及びこれらの混合物からなる群から選択されたビスホスホナート活性物が含有されている、請求項１９に記載の方法。
【請求項２６】
該ビスホスホナート活性物が、アレンドロナート、その医薬適合性の塩及びこれらの混合物である、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
有機ビスホスホナート；カテプシンＫ阻害薬、エストロゲン、エストロゲン受容体モジュレーター、アンドロゲン受容体モジュレーター、破骨細胞プロトンＡＴＰアーゼの阻害薬、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼの阻害薬、インテグリン受容体拮抗薬、骨芽細胞同化剤、カルシトニン、ビタミンＤ、合成ビタミンＤ類似化合物又はこれらの医薬適合性の塩若しくは混合物から選択された他の薬物を投薬することを含む、請求項１９に記載の方法。
【請求項２８】
医薬適合性の担体及び請求項１から１４の何れか１項に記載の式Ｉの化合物を含む医薬組成物。
【請求項２９】
薬物治療で使用するための、請求項１から１４の何れか１項に記載の化合物又はその医薬適合性の塩。
【請求項３０】
眼圧亢進症又は緑内障を治療するための薬物の製造に於ける、請求項１から１４の何れか１項に記載の化合物又はその医薬適合性の塩の使用。
【請求項３１】
黄斑水腫若しくは黄斑変性を治療する、ドライアイを治療する、網膜及び視神経頭血液速度を上昇させる、網膜及び視神経酸素圧を増加させる又は神経保護を与えるための薬物の製造に於ける、請求項１から１４の何れか１項に記載の化合物又はその医薬適合性の塩の使用。
【請求項３２】
骨形成を刺激する、異常な骨吸収に関連する疾患状態又は状況を治療する又はこの状態にかかるリスクを減少するための薬物の製造に於ける、請求項１から１４の何れか１項に記載の化合物又はその医薬適合性の塩の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本件特許出願は、２００２年６月６日出願の米国仮特許出願第６０／３８６，６４１号の利益を請求する。
【０００２】
緑内障は、眼圧が、正常な眼機能を許容するためには高すぎる、眼の変性疾患である。その結果、損傷が視神経頭に起こり、視力機能の不可逆損失になるかもしれない。治療しない場合には、緑内障は、いつかは失明に至る。眼圧亢進症、即ち、視神経頭損傷を伴わない上昇した眼圧又は特徴的緑内障性視野欠如の状態は、現在、大多数の眼科医によって、緑内障の開始に於ける最も早い期を、単に表していると信じられている。
【背景技術】
【０００３】
緑内障を治療するために以前に使用された薬物の多くは、不満足であることを示した。緑内障を治療する初期の方法は、ピロカルピンを使用し、この薬物を、価値があるけれども、第一線の薬物として不満足にした、望ましくない局部作用をもたらした。更に最近、臨床医は、多くのβ−アドレナリン作動性拮抗薬が、眼圧を下げる上で有効であることに注目した。これらの薬物の多くは、この目的のために有効であるけれども、この治療が有効ではない又は十分に有効ではない、或る患者が存在する。これらの薬物の多くは、また、他の特徴、例えば、増加した用量で一層明らかになり、それを慢性的眼使用のために許容できなくし、そしてまた心血管作用を起こし得る、膜安定化活性を有する。
【０００４】
炭酸脱水酵素阻害剤とも呼ばれる薬物は、酵素炭酸脱水酵素を阻害することによって、眼房水の生成を減少させる。このような炭酸脱水酵素阻害剤は、現在、全身及び局所経路によって上昇した眼圧を治療するために使用されているけれども、これらの薬物を使用する現在の治療、特に全身経路を使用するものは、未だ、望ましくない作用を伴わないものではない。局所的に有効な炭酸脱水酵素阻害剤は、米国特許第４，３８６，０９８号明細書、同第４，４１６，８９０号明細書、同第４，４２６，３８８号明細書、同第４，６６８，６９７号明細書、同第４，８６３，９２２号明細書、同第４，７９７，４１３号明細書、同第５，３７８，７０３号明細書、同第５，２４０，９２３号明細書及び同第５，１５３，１９２号明細書に開示されている。
【０００５】
プロスタグランジン及びプロスタグランジン誘導体も、眼圧を下げることが知られている。Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｉ及びＪ−シリーズを含む、数種のプロスタグランジン型が存在する（欧州特許出願公開第０５６１０７３Ａ１号明細書）。Ｂｉｔｏに付与された米国特許第４，８８３，８１９号明細書には、眼圧を下げる際の、ＰＧＡ、ＰＧＢ及びＰＧＣの使用及び合成が記載されている。Ｇｏｈらに付与された米国特許第４，８２４，８５７号明細書には、眼圧を下げる際の、ＰＧＤ２及びＣ−１０が窒素で置換されている誘導体を含むその誘導体の使用及び合成が記載されている。Ｕｅｎｏらに付与された米国特許第５，００１，１５３号明細書には、眼圧を下げるための、１３，１４−ジヒドロ−１５−ケトプロスタグランジン及びプロスタグランジン誘導体の使用及び合成が記載されている。米国特許第４，５９９，３５３号明細書には、眼圧を下げる際の、プロスタグランジン及びプロスタグランジン阻害剤を含む、エイコサノイド及びエイコサノイド誘導体の使用が記載されている。国際特許出願公開第００／３８６６７号明細書、国際特許出願公開第９９／３２４４１号明細書、国際特許出願公開第９９／０２１６５号明細書、国際特許出願公開第００／３８６６３号明細書、国際特許出願公開第０１／４６１４０号明細書、欧州特許出願公開第０８５５３８９号明細書、日本特許出願公開第２０００−１４７２号明細書、米国特許第６，０４３，２７５号明細書及び国際特許出願公開第００／３８６９０号明細書も参照されたい。
【０００６】
プロスタグランジン及びプロスタグランジン誘導体は、ぶどう膜強膜（ｕｖｅｏｓｃｌｅｒａｌ）流出を増加させることによって、眼圧を下げることが知られている。これは、プロスタグランジンのＦ型及びＡ型の両方について真実である。本発明は、ぶどう膜強膜流出経路を経てＩＯＰを下げるこれらの化合物及びＥシリーズプロスタグランジン（ＰＧＥ２）がＩＯＰ低下を容易にすることができる他の機構に特に関係がある。ＥＰ受容体の４種の認められたサブタイプは、ＩＯＰを下げる効果を変調すると信じられる（ＥＰ１、ＥＰ２、ＥＰ３及びＥＰ４；Ｊ．Ｌｉｐｉｄ  Ｍｅｄｉａｔｏｒｓ  Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ、第１４巻、第８３−８７頁（１９８８年））。Ｊ．Ｏｃｕｌａｒ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ、第４巻、１、第１３−１８頁（１９８８年）；Ｊ．Ｏｃｕｌａｒ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ、第１１巻、３、第４４７−４５４頁（１９９５年）；Ｊ．Ｌｉｐｉｄ  Ｍｅｄｉａｔｏｒｓ、第６巻、第５４５−５５３頁（１９９３年）；米国特許第５，６９８，５９８号及び同第５，４６２，９６８号並びにＩｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｖｅ  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｖｉｓｕａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ、第３１巻、１２、第２５６０−２５６７頁（１９９０年）も参照されたい。本発明にとって特に関係のあるものは、ＥＰ４サブタイプ受容体の作動薬である化合物である。
【０００７】
眼圧を下げるためにプロスタグランジン又はその誘導体を使用することに伴う問題点は、これらの化合物が、しばしば、眼圧に於ける初期上昇を誘発し、眼色素沈着の色を変化させることができそして眼の周りの或る組織の増殖を起こすことである。
【０００８】
公知のように、緑内障及び上昇した眼圧を治療するための幾つかの現在の治療が存在するが、これらの薬物の効能及び副作用プロフィールは理想的ではない。それで、副作用を殆ど又は全く伴わない、新規で有効な治療についての要求がなお存在する。
【０００９】
ヒト及び他の哺乳動物に於ける種々の異常症は、異常な又は過度の骨損失を含むか又はこれに関連する。このような異常症には、これらに限定されないが、骨粗鬆症、グルココルチコイド誘発骨粗鬆症、ぺージェット病、異常に増加した骨ターンオーバー、歯根膜疾患、歯損失、骨折、慢性関節リウマチ、プロテーゼ周囲の骨溶解、骨形成不全症、転移骨疾患、悪性の高カルシウム血症及び多発性骨髄腫が含まれる。これらの異常症の最も一般的なものの一つは、その最も頻繁な兆候に於いて、閉経後の女性で起こる骨粗鬆症である。骨粗鬆症は、骨脆弱性及び骨折に対する感受性の両方に於いて必然的増加を伴う、低い骨質量及び骨組織のミクロ構造的劣化によって特徴付けられる、全身骨格疾患である。骨粗鬆症的骨折は、初老人口に於ける罹病率及び死亡率の主要な原因である。女性の５０％及び男性の三分の一のように多数が、骨粗鬆症的骨折を経験する。高齢者人口の大部分は、既に、低い骨密度及び高い骨折のリスクを有している。骨粗鬆症及び骨吸収を随伴する他の状態を予防し且つ治療するための顕著な要求が存在する。骨粗鬆症及び骨損失を随伴する他の異常症は、一般的に慢性状態であるので、適切な治療は典型的に長期間の治療を必要とする。
【００１０】
骨芽細胞及び破骨細胞と呼ばれる二つの異なった細胞の種類が、それぞれ骨形成及び吸収過程に含まれる。Ｈ．Ｆｌｅｉｓｃｈ、「骨疾患に於けるビスホスホナート、研究所から患者へ（Ｂｉｓｐｈｏｓｐｈｏｎａｔｅｓ  Ｉｎ  Ｂｏｎｅ  Ｄｉｓｅａｓｅ，Ｆｒｏｍ  Ｔｈｅ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｔｏ  Ｔｈｅ  Ｐａｔｉｅｎｔ）」、第３版、パルテノン・パブリッシング（Ｐａｒｔｈｅｎｏｎ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ）（１９９７年）（その全部が、参照してここに組み込まれる）を参照されたい。
【００１１】
骨芽細胞は、骨表面上に位置している細胞である。これらの細胞は、次いで骨化する骨有機マトリックスを分泌する。フッ化物、上皮小体ホルモン及びプロスタグランジンのようなある種のシトキンのような物質は、骨芽細胞に刺激効果を与えることが知られている。しかしながら、現在の研究の目的は、骨芽細胞の骨形成活性を選択的に増加又は刺激する治療薬を開発することである。
【００１２】
破骨細胞は、通常、皮質骨若しくは小柱骨の表面上又は皮質骨内に位置している大きい多核化細胞である。破骨細胞は、細胞と骨との間に位置する、閉じた密封されたミクロ環境内で骨を再吸収する。破骨細胞の補強及び活性は、一連のシトキン及びホルモンによって影響を受けることが知られている。ビスホスホナートは、破骨細胞骨吸収の選択的阻害剤であり、これらの化合物を、異常な骨吸収によって起こされる又は異常な骨吸収を伴う、種々の全身又は局在化骨異常症の治療又は予防に於ける重要な治療薬にすることがよく知られている。しかしながら、ビスホスホナートの有用性にもかかわらず、研究者の中で、破骨細胞の骨吸収活性を阻害するための追加の治療薬を開発するための願望が残っている。
【００１３】
ＰＧＥ２シリーズのようなプロスタグランジンは、ヒトを含む哺乳動物に於いて、骨形成を刺激し、そして骨質量を増加することが知られている。ＥＰ１、ＥＰ２、ＥＰ３及びＥＰ４と指定される、４種の異なった受容体サブタイプが、骨芽細胞及び破骨細胞の骨構築及び骨再構築過程を仲介する際に含まれると信じられる。骨内の主なプロスタグランジン受容体はＥＰ４であり、これは、サイクリックＡＭＰによるシグナリング（ｓｉｇｎａｌｉｎｇ）によりその影響を与えると信じられる。
【００１４】
本発明に於いて、ＥＰ４サブタイプ受容体の式Ｉ作動薬が、骨形成を刺激するために有用であることが更に見出されている。
【００１５】
国際特許出願公開第０２／２４６４７号明細書、国際特許出願公開第０２／４２２６８号明細書、欧州特許出願公開第１１１４８１６号明細書、国際特許出願公開第０１／４６１４０号明細書及び国際特許出願公開第０１／７２２６８号明細書には、ＥＰ４作動薬が開示されている。しかしながら、これらには本発明の化合物は開示されていない。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【００１６】
本発明は、プロスタグランジンＥ２受容体のＥＰ４サブタイプの強力な選択的作動薬、緑内障及び患者の眼の上昇した眼圧に関連する他の状態の治療に於けるそれらの使用又はそれらの配合物に関する。本発明の他の局面は、哺乳動物種、特にヒトの眼に対して神経保護作用を与えるための、このような化合物の使用に関する。本発明は、更に、骨芽細胞及び破骨細胞の骨構築及び骨再構築過程を仲介するための、本発明の化合物の使用に関する。
【００１７】
更に特に、本発明は、眼圧亢進症及び／又は緑内障を治療するための、構造式Ｉ：
【００１８】
【化５】
2005534653.tif 000003
2005534653.tif 000004
［式中、
Ｘは、結合、Ｏ又はＳであり、
Ｙは、＝Ｏ又は−ＯＨを表し、
Ｒ１は、ヒドロキシ、ＣＮ、（ＣＨ２）ｐＣＯ２Ｒ６、（ＣＨ２）ｎＳＯ３Ｒ６、−ＣＦ２ＳＯ２ＮＨ２、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＣＯＮＨＳＯ２Ｒ２−、−ＳＯ２ＮＨＣＯＲ２、−ＰＯ（ＯＨ）２、ＣＯＮＨＰＯ２Ｒ６、ＣＯＮＨＲ８、Ｃ１−４アルコキシ、−（ＣＨ２）ｎＮＲ６Ｒ７、ヒドロキシメチルケトン又は（ＣＨ２）ｎヘテロシクリルを表し、該ヘテロシクリルは、置換されていないか又は１から３個のＲａの基で置換されており、そして場合により酸性水素原子を含有し、
Ｒ２は、水素、Ｃ６−１０アリール又はＣ１−４アルキルを表し、
Ｒ３及びＲ４は、独立に、水素、ハロゲン又はＣ１−６アルキルを表し、
Ｒ５は、独立に、（ＣＨ２）ｍＣ６−１０アリール、（ＣＨ２）ｍＣ５−１０ヘテロアリール、（ＣＨ２）ｍＣ３−１０ヘテロシクロアルキル、（ＣＨ２）ｍＣ３−８シクロアルキルを表し、該シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール又はヘテロアリールは、置換されていないか又は１から３個のＲａの基で置換されており、
Ｒ６及びＲ７は、独立に、水素又はＣ１−４アルキルを表し、
Ｒ８は、水素、アシル又はスルホニルを表し、
Ｚは、（Ｃ（Ｒｂ）２）ｎ、
【００１９】
【化６】
2005534653.tif 000005
を表し、
Ｒｂは、独立に、Ｈ、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−６シクロアルキルを表し、
Ｒａは、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキル、ＣＦ３、ニトロ、アミノ、シアノ、Ｃ１−６アルキルアミノ又はハロゲンを表し、
−−−は、二重結合又は単結合を表し、
ｐは、１〜３を表し、
ｎは、０〜４を表し、
ｍは、０〜８を表す］
を有する新規ＥＰ４作動薬又はその医薬適合性の塩、エナンチオマー、ジアステレオマー、プロドラッグ若しくは混合物の使用に関する。
【００２０】
本発明のこの局面及び他の局面は、全体として本発明の精査に基づいて実現される。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２１】
本発明を、本明細書中で、他に特定しない限り、下記に定義する用語を使用して、詳細に説明する。
【００２２】
本明細書で使用されるとき、用語「治療的有効量」は、所望の治療処方に従って投薬したとき、所望の治療効果を引き出す又は所望の利点に応答する若しくは利点を与える、式ＩのＥＰ４受容体サブタイプ作動薬又は本発明の他の活性物の量を意味する。異常な骨吸収の治療に関する好ましい治療的有効量は、骨形成刺激量である。同様に、眼圧亢進症又は緑内障の治療に関する好ましい治療的有効量は、眼圧を下げるため並びに／又は眼圧亢進症及び／若しくは緑内障を治療するために有効な量である。
【００２３】
本明細書で使用されるとき、「医薬適合性の」は、毒性又は安全性観点から、ヒトを含む哺乳動物に投薬するために一般的に適していることを意味する。
【００２４】
用語「プロドラッグ」は、投薬及び吸収に続いて、或る代謝過程によりインビボで特許請求の範囲に記載された薬物を放出する薬物前駆体である化合物を指す。本発明の化合物のプロドラッグの限定されない例は、ピロリジノン基の酸であり、この場合、酸官能基は、患者に投薬した後で、それを容易に加水分解する構造を有する。プロドラッグの例には、環系、好ましくは芳香族又はヘテロ芳香族環系に典型的に結合している、遊離ＣＨ２ＣＯＯＨ基（場合により、医薬適合性の塩、例えば、−ＣＨ２ＣＯＯ−Ｎａ＋の形であってよい）を有する、非麻酔性、鎮痛性／非ステロイド性、抗炎症性薬物である、酢酸誘導体が含まれる。
【００２５】
用語「アルキル」は、他に定義されない限り、１から１０個の炭素原子を含有する一価のアルカン（炭化水素）誘導基を指す。これは、直線的であるか、枝分かれしているか又は環式であってよい。好ましいアルキル基には、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｔ−ブチル、シクロペンチル及びシクロヘキシルが含まれる。アルキル基が、アルキル基で置換されていると言われるとき、これは、「枝分かれしたアルキル基」と互換的に使用される。
【００２６】
シクロアルキルは、炭素原子間の交互又は共鳴二重結合を有しない、３から１５個の炭素原子を含有するアルキルの１種である。縮合されている、１から４個の環が含有されてよい。シクロアルキル基の例は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル及びシクロヘプチルである。
【００２７】
アルコキシは、アルキル基が本明細書に記載されたように場合により置換されている、Ｃ１〜Ｃ６アルキル−Ｏ−を指す。アルコキシ基の例は、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシ及びこれらの異性体基である。
【００２８】
ハロゲン（ハロ）は、塩素、フッ素、ヨウ素又は臭素を指す。
【００２９】
アリールは、芳香族環、例えば、フェニル、置換フェニル等並びに縮合された環、例えば、ナフチル、フェナントレニル等を指す。それで、アリール基には、少なくとも１個の、少なくとも６個の原子を有する環が含まれており、５個以下のこのような環が存在し、その中に２２個以下の原子を含有し、隣接する炭素原子又は適切なヘテロ原子の間の交互（共鳴）二重結合が存在する。好ましいアリール基は、フェニル、ナフチル及びフェナントレニルである。アリール基は同様に、定義されるように置換されていてよい。好ましい置換アリールには、フェニル及びナフチルが含まれる。
【００３０】
用語「ヘテロシクロアルキル」は、環内の炭素原子の１個が、Ｏ、Ｓ又はＮから選択されたヘテロ原子によって置き換わっており、そして３個以下の追加の炭素原子がヘテロ原子によって置き換わっていてよい、３から１０個の炭素原子を有するシクロアルキル基（非芳香族）を指す。
【００３１】
用語「シクロアルキル」は、３から１０個の炭素原子を有する環式アルキル基（非芳香族）を指す。
【００３２】
用語「ヘテロ原子」は、独立基準で選択された、Ｏ、Ｓ又はＮを意味する。
【００３３】
用語「ヘテロアリール」は、少なくとも１個のヘテロ原子、Ｏ、Ｓ又はＮを含有し、炭素又は窒素原子が結合の点であり、１個又は２個の追加の炭素原子が場合によりＯ又はＳから選択されたヘテロ原子によって置き換わっており、そして１から３個の追加の炭素原子が場合により窒素ヘテロ原子によって置き換わっている、５個若しくは６個の環原子を有する単環式芳香族炭化水素基又は８から１０個の原子を有する二環式芳香族基を指し、該ヘテロアリール基は本明細書に記載されたように場合により置換されている。この種類の例は、ピロール、ピリジン、オキサゾール、チアゾール、テトラゾール及びオキサジンである。本発明の目的のために、テトラゾールには、全ての互変異性体形が含まれる。追加の窒素原子が、最初の窒素原子及び酸素又は硫黄と一緒に存在して、例えば、チアジアゾールを与えることができる。
【００３４】
本明細書で使用されるとき、用語「ヘテロシクリル」又は「複素環式」は、飽和されているか又は飽和されていない、炭素原子並びにＮ、Ｏ及びＳからなる群から選択された１から４個のヘテロ原子からなり、上記定義された複素環式環の何れかがベンゼン環に縮合されている全ての二環式基を含む、安定な５から７員の単環式又は安定な８から１１員の二環式複素環式環を表わす。複素環式環は、安定な構造の形成になる全てのヘテロ原子又は炭素原子で結合していてよい。縮合した複素環式環系は、炭素環式環を含んでいてよく、そして１個のみの複素環式環を含むことを必要とする。用語「複素環」又は「複素環式」には、ヘテロアリール単位が含まれる。このような複素環式要素の例には、これらに限定されないが、アゼピニル、ベンズイミダゾリル、ベンズイソキサゾリル、ベンゾフラザニル、ベンゾピラニル、ベンゾチオピラニル、ベンゾフリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾチエニル、ベンゾオキサゾリル、クロマニル、シンノリニル、ジヒドロベンゾフリル、ジヒドロベンゾチエニル、ジヒドロベンゾチオピラニル、ジヒドロベンゾチオピラニルスルホン、１，３−ジオキソラニル、フリル、イミダゾリジニル、イミダゾリニル、イミダゾリル、インドリニル、インドリル、イソクロマニル、イソインドリニル、イソキノリニル、イソチアゾリジニル、イソチアゾリル、イソチアゾリジニル、モルホリニル、ナフチリジニル、オキサジアゾリル、２−オキソアゼピニル、オキサゾリル、２−オキソピペラジニル、２−オキソピペリジニル、２−オキソピロリジニル、ピペリジル、ピペラジニル、ピリジル、ピラジニル、ピラゾリジニル、ピラゾリル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピロリジニル、ピロリル、キナゾリニル、キノリニル、キノキサリニル、テトラヒドロフリル、テトラヒドロイソキノリニル、テトラヒドロキノリニル、チアモルホリニル、チアモルホリニルスルホキシド、チアゾリル、チアゾリニル、チエノフリル、チエノチエニル及びチエニルが含まれる。このような複素環式要素の例の実施態様には、これらに限定されないが、アゼピニル、ベンズイミダゾリル、ベンズイソキサゾリル、ベンゾフラザニル、ベンゾピラニル、ベンゾチオピラニル、ベンゾフリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾチエニル、ベンゾオキサゾリル、クロマニル、シンノリニル、ジヒドロベンゾフリル、ジヒドロベンゾチエニル、ジヒドロベンゾチオピラニル、ジヒドロベンゾチオピラニルスルホン、フリル、イミダゾリジニル、イミダゾリニル、イミダゾリル、インドリニル、インドリル、イソクロマニル、イソインドリニル、イソキノリニル、イソチアゾリジニル、イソチアゾリル、イソチアゾリジニル、モルホリニル、ナフチリジニル、オキサジアゾリル、２−オキソアゼピニル、オキサゾリル、２−オキソピペラジニル、２−オキソピペリジニル、２−オキソピロリジニル、ピペリジル、ピペラジニル、ピリジル、２−ピリジノリル、ピラジニル、ピラゾリジニル、ピラゾリル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピロリジニル、ピロリル、キナゾリニル、キノリニル、キノキサリニル、テトラヒドロフリル、テトラヒドロイソキノリニル、テトラヒドロキノリニル、チアモルホリニル、チアモルホリニルスルホキシド、チアゾリル、チアゾリニル、チエノフリル、チエノチエニル、チエニル及びトリアゾリルが含まれる。
【００３５】
本発明の目的のために、酸性基を含有するヘテロシクリルは、酸性ヒドロキシ原子を有し、そして３〜７の範囲内のｐＫａを有し得るヘテロシクリル基である。酸性水素原子を含有するヘテロシクリルの限定されない例は、
【００３６】
【化７】
2005534653.tif 000006
（式中、Ｘは、−Ｃ（Ｒｃ）３、
【００３７】
【化８】
2005534653.tif 000007
【００３８】
−Ｎ（Ｒｅ）２、Ｏ又はＳであり、
それぞれのＲｃは、独立に、Ｈ、フッ素、シアノ又はＣ１−４アルキルであり、
それぞれのＲｄは、独立に、Ｈ、Ｃ１−４アルキル又は医薬適合性のカチオンであり、
それぞれのＲｅは、独立に、Ｈ、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒｆ又は−ＳＯ２Ｒｅ（式中、Ｒｆは、Ｃ１−４直鎖アルキル又はフェニルである）である）
である。
【００３９】
本明細書で使用されるとき、用語「作動薬」は、ＥＰ４受容体と相互作用して、天然の作動薬であるＰＧＥ２に対して比較して、最大の、最大を超えた又は最大よりも低い効果をもたらす、式ＩのＥＰ４サブタイプ化合物を意味する。Ｇｏｏｄｍａｎ及びＧｉｌｍａｎ著、「治療の薬理学的基礎（Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）」、第９版、１９９６年刊、第２章を参照されたい。
【００４０】
本発明の一つの実施態様は、Ｒ１が、ＣＮ、（ＣＨ２）ｍＣ５−１０ヘテロシクリル、−ＰＯ（ＯＨ）２、ＣＯＮＨＰＯ２Ｒ６、（ＣＨ２）ｐＣＯ２Ｒ６、ＣＯＮＨＲ６であり、該ヘテロシクリルが、置換されていないか又は１から３個のＲａの基で置換されており、そして全ての他の変数が最初に記載された通りであるとき実現される。本発明のサブ実施態様は、Ｘが結合であるとき実現される。本発明の他のサブ実施態様は、Ｘが硫黄であるとき実現される。Ｒ１が（ＣＨ２）ｐＣＯ２Ｒ６、であり、そしてＸが硫黄であるとき、硫黄は二価である。本発明の他の実施態様は、ＸがＯであるときである。
【００４１】
本発明の他の実施態様は、Ｒ１が（ＣＨ２）ｍＣ５−１０ヘテロシクリルであり、該ヘテロシクリルが、置換されていないか又は１から３個のＲａの基で置換されており、そして全ての他の変数が最初に記載された通りであるとき実現される。本発明のサブ実施態様は、Ｘが結合であるとき実現される。本発明の他のサブ実施態様は、ＸがＳであるとき実現される。本発明の他の実施態様は、ＸがＯであるときである。
【００４２】
本発明の他の実施態様は、Ｒ５が（ＣＨ２）ｍＣ６−１０アリールであり、該アリールが、置換されていないか又は１から３個のＲａの基で置換されており、そして全ての他の変数が最初に記載された通りであるとき実現される。
【００４３】
本発明のサブ実施態様は、Ｒ１が、ＣＯＯＲ６、ＣＯＮＨＲ６、−ＰＯ（ＯＨ）２、ＣＯＮＨＰＯ２Ｒ６又はテトラゾリルであり、該テトラゾリルが、置換されていないか又はＲａ基で置換されており、そして全ての他の変数が最初に記載された通りであるとき実現される。本発明のサブ実施態様は、Ｘが結合であるとき実現される。本発明の他のサブ実施態様は、ＸがＳであるとき実現される。本発明の他の実施態様は、ＸがＯであるときである。
【００４４】
本発明の更に他の実施態様は、Ｒ５が、置換されていないか又は１から３個のＲａの基で置換されたフェニルであり、そして全ての他の変数が最初に記載された通りであるとき実現される。
【００４５】
本発明の更に他のサブ実施態様は、Ｒ１がテトラゾリルであり、そしてＲ５がフェニルであり、該テトラゾリルが、置換されていないか又はＲａ基で置換されており、該フェニルが、置換されていないか又は１から３個のＲａの基で置換されており、そして全ての他の変数が最初に記載された通りであるとき実現される。本発明のサブ実施態様は、Ｘが結合であるとき実現される。本発明の他のサブ実施態様は、ＸがＳであるとき実現される。本発明の他の実施態様は、ＸがＯであるときである。
【００４６】
本発明の更に他の実施態様は、＝＝Ｙが−ＯＨであるとき実現される。
【００４７】
本発明の更に他の実施態様は、＝＝Ｙが＝Ｏであるとき実現される。
【００４８】
本発明の更に他の実施態様は、Ｚが、（ＣＨ２）ｎ、Ｃ（ハロ）２又は
【００４９】
【化９】
2005534653.tif 000008
によって記載される二重結合を表し、全ての他の変数が最初に記載された通りであるとき実現される。本発明のサブ実施態様は、Ｘが結合であるとき実現される。本発明の他のサブ実施態様は、ＸがＳであるとき実現される。本発明の更に他の実施態様は、ＸがＯであるときである。
【００５０】
本発明の化合物は、
（４Ｓ）−４−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−１−メチル−３−［６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヘキシル］イミダゾリジン−２−オン、
（４Ｓ）−１−ベンジル−４−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヘキシル］イミダゾリジン−２−オン、
（５Ｓ）−１−［４，４−ジフルオロ−６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヘキシル］−５−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］イミダゾリジン−２−オン、
（４Ｓ）−３−［４，４−ジフルオロ−６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヘキシル］−４−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−１−メチルイミダゾリジン−２−オン、
（４Ｓ）−１−ベンジル−３−［４，４−ジフルオロ−６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヘキシル］−４−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］イミダゾリジン−２−オン、
（５Ｓ）−１−［３，３−ジフルオロ−６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヘキシル］−５−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］イミダゾリジン−２−オン、
（４Ｓ）−３−［３，３−ジフルオロ−６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヘキシル］−４−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−１−メチルイミダゾリジン−２−オン、
（４Ｓ）−１−ベンジル−３−［３，３−ジフルオロ−６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヘキシル］−４−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］イミダゾリジン−２−オン、
（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−１−｛４−［（１Ｈ−テトラゾール−５−イルメチル）チオ］ブチル｝イミダゾリジン−２−オン、
（４Ｓ）−４−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−１−メチル−３−｛４−［（１Ｈ−テトラゾール−５−イルメチル）チオ］ブチル｝イミダゾリジン−２−オン、
（４Ｓ）−１−ベンジル−４−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−｛４−［（１Ｈ−テトラゾール−５−イルメチル）チオ］ブチル｝イミダゾリジン−２−オン、
（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−１−［４−（１Ｈ−テトラゾール−５−イルメトキシ）ブチル］イミダゾリジン−２−オン、
（４Ｓ）−４−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−１−メチル−３−［４−（１Ｈ−テトラゾール−５−イルメトキシ）ブチル］イミダゾリジン−２−オン、
（４Ｓ）−１−ベンジル−４−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［４−（１Ｈ−テトラゾール−５−イルメトキシ）ブチル］イミダゾリジン−２−オン、
（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−１−｛４−［１−（１Ｈ−テトラゾール−５−イルメチル）シクロプロピル］ブチル｝イミダゾリジン−２−オン、
（４Ｓ）−４−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−１−メチル−３−｛４−［１−（１Ｈ−テトラゾール−５−イルメチル）シクロプロピル］ブチル｝イミダゾリジン−２−オン、
（４Ｓ）−１−ベンジル−４−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−｛４−［１−（１Ｈ−テトラゾール−５−イルメチル）シクロプロピル］ブチル｝イミダゾリジン−２−オン、
（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−１−（３−｛１−［２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）エチル］シクロプロピル｝プロピル）イミダゾリジン−２−オン、
（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−１−［６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヘキシル］イミダゾリジン−２−オン、
（４Ｓ）−４−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−１−メチル−３−（３−｛１−［２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）エチル］シクロプロピル｝プロピル）イミダゾリジン−２−オン、
（４Ｓ）−１−ベンジル−４−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−（３−｛１−［２−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）エチル］シクロプロピル｝プロピル）イミダゾリジン−２−オン、
（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−１−（２−｛１−［３−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）プロピル］シクロプロピル｝エチル）イミダゾリジン−２−オン、
（４Ｓ）−４−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−１−メチル−３−（２−｛１−［３−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）プロピル］シクロプロピル｝エチル）イミダゾリジン−２−オン、
（４Ｓ）−１−ベンジル−４−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−（２−｛１−［３−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）プロピル］シクロプロピル｝エチル）イミダゾリジン−２−オン、
（５Ｓ）−１−［３，３−ジフルオロ−６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヘキシル］−５−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］イミダゾリジン−２−オン、
（４Ｓ）−３−［３，３−ジフルオロ−６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヘキシル］−４−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−１−メチルイミダゾリジン−２−オン、
（４Ｓ）−１−ベンジル−３−［３，３−ジフルオロ−６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヘキシル］−４−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］イミダゾリジン−２−オン、
（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−１−｛４−［（１Ｈ−テトラゾール−５−イルメチル）チオ］ブチル｝イミダゾリジン−２−オン、
（４Ｓ）−４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−１−メチル−３−｛４−［（１Ｈ−テトラゾール−５−イルメチル）チオ］ブチル｝イミダゾリジン−２−オン、
（４Ｓ）−１−ベンジル−４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−｛４−［（１Ｈ−テトラゾール−５−イルメチル）チオ］ブチル｝イミダゾリジン−２−オン、
（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−１−［４−（１Ｈ−テトラゾール−５−イルメトキシ）ブチル」イミダゾリジン−２−オン、
（４Ｓ）−４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−１−メチル−３−［４−（１Ｈ−テトラゾール−５−イルメトキシ）ブチル］イミダゾリジン−２−オン、
（４Ｓ）−１−ベンジル−４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［４−（１Ｈ−テトラゾール−５−イルメトキシ）ブチル］イミダゾリジン−２−オン、
（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−１−［４，４−ジフルオロ−６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヘキシル］イミダゾリジン−２−オン、
（４Ｓ）−４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［４，４−ジフルオロ−６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヘキシル］−１−メチルイミダゾリジン−２−オン、
（４Ｓ）−１−ベンジル−４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［４，４−ジフルオロ−６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヘキシル］イミダゾリジン−２−オン、
（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−１−［３，３−ジフルオロ−６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヘキシル］イミダゾリジン−２−オン、
（４Ｓ）−４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［３，３−ジフルオロ−６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヘキシル］−１−メチルイミダゾリジン−２−オン、
（４Ｓ）−１−ベンジル−４−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−［３，３−ジフルオロ−６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヘキシル］イミダゾリジン−２−オン、
７−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ヘプタン酸、
７−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−メチル−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ヘプタン酸、
７−｛（５Ｓ）−３−ベンジル−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ヘプタン酸、
メチル−７−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ヘプタノアート、
メチル−７−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−メチル−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ヘプタノアート、
メチル−７−｛（５Ｓ）−３−ベンジル−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ヘプタノアート、
［（４−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ブチル）チオ］酢酸、
［（４−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−メチル−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ブチル）チオ］酢酸、
［（４−｛（５Ｓ）−３−ベンジル−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ブチル）チオ］酢酸、
メチル−［（４−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ブチル）チオ］アセタート、
メチル−［（４−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−メチル−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ブチル）チオ］アセタート、
メチル−［（４−｛（５Ｓ）−３−ベンジル−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ブチル）チオ］アセタート、
（４−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ブトキシ）酢酸、
（４−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−メチル−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ブトキシ）酢酸、
（４−｛（５Ｓ）−３−ベンジル−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ブトキシ）酢酸、
メチル（４−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ブトキシ）アセタート、
メチル（４−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−メチル−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ブトキシ）アセタート、
メチル（４−｛（５Ｓ）−３−ベンジル−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ブトキシ）アセタート、
７−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ヘプタン酸、
メチル−７−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ヘプタノアート、
７−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−メチル−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ヘプタン酸、
メチル−７−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−メチル−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ヘプタノアート、
７−｛（５Ｓ）−３−ベンジル−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ヘプタン酸、
メチル−７−｛（５Ｓ）−３−ベンジル−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ヘプタノアート、
７−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝−４，４−ジフルオロヘプタン酸、
メチル−７−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝−４，４−ジフルオロヘプタノアート、
７−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−メチル−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝−４，４−ジフルオロヘプタン酸、
メチル−７−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−メチル−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝−４，４−ジフルオロヘプタノアート、
７−｛（５Ｓ）−３−ベンジル−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝−４，４−ジフルオロヘプタン酸、
メチル−７−｛（５Ｓ）−３−ベンジル−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝−４，４−ジフルオロヘプタノアート、
６−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ヘキシルホスホン酸、
６−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ヘキシルホスホン酸、
６−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−メチル−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ヘキシルホスホン酸、
６−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−メチル−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ヘキシルホスホン酸、
６−｛（５Ｓ）−３−ベンジル−５−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ヘキシルホスホン酸、
６−｛（５Ｓ）−３−ベンジル−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ヘキシルホスホン酸、
［（４−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ブチル）チオ］メチルホスホン酸、
［（４−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ブチル）チオ］メチルホスホン酸、
［（４−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−メチル−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ブチル）チオ］メチルホスホン酸、
［（４−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−メチル−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ブチル）チオ］メチルホスホン酸、
［（４−｛（５Ｓ）−３−ベンジル−５−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ブチル）チオ］メチルホスホン酸、
［（４−｛（５Ｓ）−３−ベンジル−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ブチル）チオ］メチルホスホン酸、
［（１，１−ジフルオロ−４−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ブチル）チオ］メチルホスホン酸、
６−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝−３，３−ジフルオロヘキシルホスホン酸、
［（１，１−ジフルオロ−４−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−メチル−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝ブチル）チオ］メチルホスホン酸、
［（４−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−メチル−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝−１，１−ジフルオロブチル）チオ］メチルホスホン酸、
［（４−｛（５Ｓ）−３−ベンジル−５−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝−１，１−ジフルオロブチル）チオ］メチルホスホン酸、
［（４−｛（５Ｓ）−３−ベンジル−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝−１，１−ジフルオロブチル）チオ］メチルホスホン酸、
２−［１−（３−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝プロピル）シクロプロピル］エチルホスホン酸、
２−［１−（３−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝プロピル）シクロプロピル］エチルホスホン酸、
２−［１−（３−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−メチル−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝プロピル）シクロプロピル］エチルホスホン酸、
２−［１−（３−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−メチル−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝プロピル）シクロプロピル］エチルホスホン酸、
２−［１−（３−｛（５Ｓ）−３−ベンジル−５−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝プロピル）シクロプロピル］エチルホスホン酸、
２−［１−（３−｛（５Ｓ）−３−ベンジル−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝プロピル）シクロプロピル］エチルホスホン酸、
Ｎ−｛３−［１−（３−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝プロピル）シクロプロピル］プロパノイル｝メタンスルホンアミド、
Ｎ−｛３−［１−（３−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝プロピル）シクロプロピル］プロパノイル｝メタンスルホンアミド、
Ｎ−｛３−［１−（３−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−メチル−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝プロピル）シクロプロピル］プロパノイル｝メタンスルホンアミド、
Ｎ−｛３−［１−（３−｛（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−３−メチル−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝プロピル）シクロプロピル］プロパノイル｝メタンスルホンアミド、
Ｎ−｛３−［１−（３−｛（５Ｓ）−３−ベンジル−５−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝プロピル）シクロプロピル］プロパノイル｝メタンスルホンアミド若しくは
Ｎ−｛３−［１−（３−｛（５Ｓ）−３−ベンジル−５−［（１Ｅ）−４，４−ジフルオロ−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−イル｝プロピル）シクロプロピル］プロパノイル｝メタンスルホンアミド又はこれらの医薬適合性の塩、エナンチオマー、ジアステレオマー、プロドラッグ若しくは混合物である。
【００５１】
本発明の他の実施態様は、式ＩのＥＰ４作動薬及び場合により医薬適合性の担体を含有する組成物に指向している。
【００５２】
本発明の更に他の実施態様は、式ＩのＥＰ４作動薬及び場合により医薬適合性の担体を含有する組成物の投薬、好ましくは局所又はカマラル内（ｉｎｔｒａ−ｃａｍａｒａｌ）投薬による、上昇した眼圧を下げるための又は緑内障を治療するための方法に指向している。上昇した眼圧若しくは緑内障又はこれらの組合せを治療するための薬物の製造のための、式Ｉの化合物の使用も、本発明に含まれる。
【００５３】
本発明は、更に、式Ｉの化合物を含有する医薬組成物の製造方法に関する。
【００５４】
本発明は、更に、式Ｉの化合物及び医薬適合性の担体を含有する医薬組成物の製造方法に関する。
【００５５】
特許請求の範囲に記載された化合物は、ＰＧＥ２受容体、特にＥＰ４サブタイプ受容体に強く結合し、そして作用し、それで、緑内障及び眼圧亢進症を予防し及び／又は治療するために有用である。
【００５６】
ドライアイは、何百万人の人々を苦しめる、一般的な眼表面疾患である。ドライアイは、多数の関係のない病原性原因からもたらされることが明らかであるけれども、一般的な最終結果は涙膜の破損であり、眼の露出した外側表面の乾燥になる。（Ｌｅｍｐ、ドライアイでの臨床試行についての国眼研究所／産業討論会の報告（Ｒｅｐｏｒｔ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎａｔｉｏｎ  Ｅｙｅ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ／Ｉｎｄｕｓｔｒｙ  Ｗｏｒｋｓｈｏｐ  ｏｎ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｔｒｉａｌｓ  ｉｎ  Ｄｒｙ  Ｅｙｅｓ）、Ｔｈｅ  ＣＬＡＯ  Ｊｏｕｒｎｅｌ、第２１（４）巻、第２２１−２３１頁（１９９５年））。ドライアイの一つの原因は、眼表面を保護し、潤滑する、ムチンの結膜細胞及び／又は角膜上皮細胞による減少したムチン産生である（Ｇｉｐｓｏｎ及びＩｎａｔｏｍｉ、眼表面上皮により発現されたムチン遺伝子。Ｐｒｏｇｒｅｓｓ  ｉｎ  Ｒｅｔｉｎａｌ  ａｎｄ  Ｅｙｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ、第１６巻、第８１−９８頁（１９９７年））。機能性ＥＰ４受容体が、ヒト結膜上皮細胞中に見出され（米国特許第６，３４４，４７７号明細書参照、その全部が参照してここに組み込まれる）、ヒト角膜上皮細胞（Ｐｒｏｇｒｅｓｓ  ｉｎ  Ｒｅｔｉｎａｌ  ａｎｄ  Ｅｙｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ、第１６巻、第８１−９８頁（１９９７年））及び結膜細胞（Ｄａｒｔｔら、ラット結膜内の杯状細胞に隣接する神経の局在化（Ｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｎｅｒｖｅｓ  ａｄｊａｃｅｎｔ  ｔｏ  ｇｏｂｌｅｔ  ｃｅｌｌｓ  ｉｎ  ｒａｔ  ｃｏｎｊｕｃｎｔｉｖａ）、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｅｙｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ、第１４巻、第９９３−１０００頁（１９９５年））の両方が、ムチンを分泌することができることが認められる。それで、式Ｉの化合物は、ドライアイを治療するために有用である。
【００５７】
黄斑水腫は、眼の後極で決定的に重要な中心視覚帯内の網膜内で膨潤している。網膜内の液体の蓄積は、お互いから及びそれらの局部血液供給から神経要素を分離し、この領域内の視覚機能の休止を作る傾向がある。ＩＯＰを下げるＥＰ４作動薬は、黄斑水腫又は黄斑変性のような黄斑の疾患を治療するために有用であると信じられる。それで、本発明の他の局面は、黄斑水腫又は黄斑変性の治療方法である。
【００５８】
緑内障は、視神経の進行性萎縮によって特徴付けられ、しばしば上昇した眼圧（ＩＯＰ）を伴う。しかしながら、神経保護効果を与える薬物を使用することによって、必ずしもＩＯＰに影響を与えることなく、緑内障を治療することが可能である。Ａｒｃｈ．Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．、第１１２巻、１９９４年１月、第３７−４４頁；Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｖｅ  Ｏｐｈｔｈａｍｏｌ．＆  Ｖｉｓｕａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ、第３２巻、第５号、１９９１年４月、第１５９３−９９頁参照。ＩＯＰを下げるＥＰ４作動薬は、神経保護効果を与えるために有用であると信じられる。これらはまた、ＩＯＰを下げることによって、網膜及び視神経頭血液速度を上昇させ、そして網膜及び視神経酸素を増加させる（これらは一緒に結合して、視神経健康に利益を与える）ために有効であると信じられる。その結果、本発明は、更に、式ＩのＥＰ４作動薬を使用することによって、網膜及び視神経頭血液速度を上昇させるため若しくは網膜及び視神経酸素圧を上昇させるため若しくは神経保護効果を与えるため又はこれらの組合せのための方法に関する。
【００５９】
本発明に於いて製造された化合物は、ヒトを含む哺乳動物に投薬して、有効なＩＯＰ低下を達成することができる組成物を製造するために、適切で公知の医薬適合性の賦形剤と容易に組み合わせられる。それで、本発明は、また、眼圧亢進症又は緑内障の治療方法であって、これらの治療が必要な患者に、式Ｉの化合物の１種を、単独で又はチモロール、ベタキソロール、レボベタキソロール（ｌｅｖｏｂｅｔａｘｏｌｏｌ）、カルテオロール、レボブノロール（ｌｅｖｏｂｕｎｏｌｏｌ）のようなβ−アドレナリン作動遮断薬、ピロカルピンのような副交感神経刺激剤、エピネフリン、イオピジン（ｉｏｐｉｄｉｎｅ）、ブリモニジン（ｂｒｉｍｏｎｉｄｉｎｅ）、クロニジン、パラ−アミノクロニジンのような交感神経作用薬、ドルゾラミド（ｄｏｒｚｏｌａｍｉｄｅ）、アセタゾラミド、メタゾラミド（ｍｅｔａｚｏｌａｍｉｄｅ）又はブリンゾラミド（ｂｒｉｎｚｏｌａｍｉｄｅ）のような炭酸脱水酵素阻害薬；２００２年６月１７日出願の米国特許出願第６０／３８９，２０５号明細書（代理人ドケット（Ｄｏｃｋｅｔ）第２１１２１ＰＶ号）、２００２年６月１７日出願の米国特許出願第６０／３８９，２２２号明細書（代理人ドケット第２１０９２ＰＶ号）、２００３年３月２７日出願の米国特許出願第６０／４５８，９８１号明細書（代理人ドケット第２１１０１ＰＶ４号）、２００２年１１月８日出願の米国特許出願第６０／４２４７９０号明細書（代理人ドケット第２１２６０ＰＶ号）、２００２年１１月８日出願の米国特許出願第６０／４２４８０８号明細書（代理人ドケット第２１２８１ＰＶ号）、２００１年１月１７日出願の米国特許出願第０９／７６５７１６号明細書、２００１年１月１７日出願の米国特許出願第０９／７６４７３８号明細書並びにＰＣＴ公開第ＷＯ０２／０７７１６８号明細書及び同第ＷＯ０２／０２０６０８６３号明細書（これらの全ては、それらの全部が参照してここに組み込まれる）に開示されているようなマクシ−Ｋ（Ｍａｘｉ−Ｋ）チャンネル遮断薬、ラタノプロスト（ｌａｔａｎｏｐｒｏｓｔ）、トラバプロスト（ｔｒａｖａｐｒｏｓｔ）、ウノプロストン（ｕｎｏｐｒｏｓｔｏｎｅ）、レスキュラ（ｒｅｓｃｕｌａ）、Ｓ１０３３（米国特許第５，８８９，０５２号明細書、同第５，２９６，５０４号明細書、同第５，４２２，３６８号明細書及び同第５，１５１，４４４号明細書に記載されている化合物）のようなプロスタグランジン；ルミガン（ｌｕｍｉｇａｎ）及び米国特許第５，３５２，７０８号明細書に記載されている化合物のような低圧脂質（ｈｙｐｏｔｅｎｓｉｖｅ  ｌｉｐｉｄ）；米国特許第４，６９０，９３１号明細書に開示されている神経保護剤（ｎｅｕｒｏｐｒｏｔｅｃｔａｎｔ）、特に、メマンチン（ｍｅｍａｎｔｉｎｅ）を含む、国際特許出願公開第９４／１３２７５号明細書に記載されているようなエリプロジル（ｅｌｉｐｒｏｄｉｌ）及びＲ−エリプロジル；又はＰＣＴ／ＵＳ第００／３１２４７号明細書に記載されているような５−ＨＴ２受容体の作動薬、特に、１−（２−アミノプロピル）−３−メチル−１Ｈ−イミダゾール−６−オールフマラート及び２−（３−クロロ−６−メトキシ−インダゾール−１−イル）−１−メチル��チルアミンと組み合わせて投薬することによる方法に関する。
【００６０】
それで、本発明は、また、網膜及び視神経頭血液速度を上昇させるため若しくは網膜及び視神経酸素圧を上昇させるため若しくは神経保護効果を与えるため又はこれらの組合せのための方法であって、これらが必要な患者に、式Ｉの化合物の１種を、単独で又はチモロール、ベタキソロール、レボベタキソロール、カルテオロール、レボブノロールのようなβ−アドレナリン作動遮断薬、ピロカルピンのような副交感神経刺激剤、エピネフリン、イオピジン、ブリモニジン、クロニジン、パラ−アミノクロニジンのような交感神経作用薬、ドルゾラミド、アセタゾラミド、メタゾラミド又はブリンゾラミドのような炭酸脱水酵素阻害薬；ラタノプロスト、トラバプロスト、ウノプロストン、レスキュラ、Ｓ１０３３（米国特許第５，８８９，０５２号明細書、同第５，２９６，５０４号明細書、同第５，４２２，３６８号明細書及び同第５，１５１，４４４号明細書に記載されている化合物）のようなプロスタグランジン；２００２年６月１７日出願の米国特許出願第６０／３８９，２０５号明細書（代理人ドケット第２１１２１ＰＶ号）、２００２年６月１７日出願の米国特許出願第６０／３８９，２２２号明細書（代理人ドケット第２１０９２ＰＶ号）、２００３年３月２７日出願の米国特許出願第６０／４５８，９８１号明細書（代理人ドケット第２１１０１ＰＶ４号）、２００２年１１月８日出願の米国特許出願第６０／４２４７９０号明細書（代理人ドケット第２１２６０ＰＶ号）、２００２年１１月８日出願の米国特許出願第６０／４２４８０８号明細書（代理人ドケット第２１２８１ＰＶ号）、２００１年１月１７日出願の米国特許出願第０９／７６５７１６号明細書、２００１年１月１７日出願の米国特許出願第０９／７６４７３８号明細書並びにＰＣＴ公開第ＷＯ０２／０７７１６８号明細書及び同第ＷＯ０２／０２０６０８６３号明細書（これらの全ては、それらの全部が参照してここに組み込まれる）に開示されているようなマクシ−Ｋチャンネル遮断薬、ルミガン及び米国特許第５，３５２，７０８号明細書に記載されている化合物のような低圧脂質；米国特許第４，６９０，９３１号明細書に開示されている神経保護剤、特に、メマンチンを含む、国際特許出願公開第９４／１３２７５号明細書に記載されているようなエリプロジル及びＲ−エリプロジル；又はＰＣＴ／ＵＳ第００／３１２４７号明細書に記載されているような５−ＨＴ２受容体の作動薬、特に、１−（２−アミノプロピル）−３−メチル−１Ｈ−イミダゾール−６−オールフマラート及び２−（３−クロロ−６−メトキシ−インダゾール−１−イル）−１−メチルエチルアミンと組み合わせて投薬することによる方法に関する。網膜及び視神経頭血液速度を上昇させるため若しくは網膜及び視神経酸素圧を上昇させるため若しくは神経保護効果を与えるため又はこれらの組合せのための薬物の製造のための、式Ｉの化合物の使用も、本発明に含まれる。
【００６１】
本発明は、更に、黄斑水腫又は黄斑変性の治療方法であって、これらが必要な患者に、式Ｉの化合物の１種を、単独で又はチモロール、ベタキソロール、レボベタキソロール、カルテオロール、レボブノロールのようなβ−アドレナリン作動遮断薬、ピロカルピンのような副交感神経刺激剤、エピネフリン、イオピジン、ブリモニジン、クロニジン、パラ−アミノクロニジンのような交感神経作用薬、ドルゾラミド、アセタゾラミド、メタゾラミド又はブリンゾラミドのような炭酸脱水酵素阻害薬；２００２年６月１７日出願の米国特許出願第６０／３８９，２０５号明細書（代理人ドケット第２１１２１ＰＶ号）、２００２年６月１７日出願の米国特許出願第６０／３８９，２２２号明細書（代理人ドケット第２１０９２ＰＶ号）、２００３年３月２７日出願の米国特許出願第６０／４５８，９８１号明細書（代理人ドケット第２１１０１ＰＶ４号）、２００２年１１月８日出願の米国特許出願第６０／４２４７９０号明細書（代理人ドケット第２１２６０ＰＶ号）、２００２年１１月８日出願の米国特許出願第６０／４２４８０８号明細書（代理人ドケット第２１２８１ＰＶ号）、２００１年１月１７日出願の米国特許出願第０９／７６５７１６号明細書、２００１年１月１７日出願の米国特許出願第０９／７６４７３８号明細書並びにＰＣＴ公開第ＷＯ０２／０７７１６８号明細書及び同第ＷＯ０２／０２０６０８６３号明細書（これらの全ては、それらの全部が参照してここに組み込まれる）に開示されているようなマクシ−Ｋチャンネル遮断薬、ラタノプロスト、トラバプロスト、ウノプロストン、レスキュラ、Ｓ１０３３（米国特許第５，８８９，０５２号明細書、同第５，２９６，５０４号明細書、同第５，４２２，３６８号明細書及び同第５，１５１，４４４号明細書に記載されている化合物）のようなプロスタグランジン；ルミガン及び米国特許第５，３５２，７０８号明細書に記載されている化合物のような低圧脂質；米国特許第４，６９０，９３１号明細書に開示されている神経保護剤、特に、メマンチンを含む、国際特許出願公開第９４／１３２７５号明細書に記載されているようなエリプロジル及びＲ−エリプロジル；又はＰＣＴ／ＵＳ００／３１２４７号明細書に記載されているような５−ＨＴ２受容体の作動薬、特に、１−（２−アミノプロピル）−３−メチル−１Ｈ−イミダゾール−６−オールフマラート及び２−（３−クロロ−６−メトキシ−インダゾール−１−イル）−１−メチルエチルアミンと組み合わせて投薬することによる方法に関する。黄斑水腫又は黄斑変性用の薬物の製造のための、式Ｉの化合物の使用も、本発明に含まれる。
【００６２】
本発明で使用されるＥＰ４作動薬は、治療的有効量で、静脈内に、皮下で、局所に、経皮で、非経口で又は当業者に公知の全ての他の方法で投薬することができる。眼用医薬組成物は、好ましくは、水剤、懸濁剤、軟膏剤、クリーム剤又は固体挿入物の形態で、眼への局所投薬のために適合されている。この化合物の眼用配合物には、０．００１から５％、特に０．００１から０．１％の薬物が含有されていてよい。用量が、眼圧を下げ、緑内障を治療し、血液流速又は酸素圧を上昇させる限り、例えば、約１０％までのように高い用量又はより低い用量を使用することができる。１回用量のために、０．００１から５．０ｍｇ、好ましくは０．００５から２．０ｍｇ、特に０．００５から１．０ｍｇの化合物を、ヒトの眼に適用することができる。
【００６３】
この化合物を含有する薬物製剤は、非毒性薬物有機担体又は非毒性薬物無機担体と便利に混合することができる。医薬適合性の担体の典型は、例えば、水、水と低級アルカノール又はアラルカノールのような水混和性溶媒との混合物、植物油、ピーナッツ油、ポリアルキレングリコール、石油系ゼリー、エチルセルロース、オレイン酸エチル、カルボキシメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、ミリスチン酸イソプロピル及び他の一般的に使用される許容される担体である。薬物製剤には、また、乳化剤、保存剤、湿潤剤、増粘剤等のような非毒性補助物質、例えば、ポリエチレングリコール２００、３００、４００及び６００、カーボワックス１，０００、１，５００、４，０００、６，０００及び１０，０００、第四級アンモニウム化合物、冷滅菌特性を有し使用の際に非障害性であることが知られているフェニル水銀塩、チメロサール、メチルパラベン及びプロピルパラベン、ベンジルアルコール、フェニルエタノールのような抗菌成分、硼酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、グルコン酸塩緩衝剤のような緩衝成分並びにソルビタンモノラウラート、トリエタノールアミン、オレアート、ポリオキシエチレンソルビタンモノパルミチラート、スルホコハク酸ナトリウムジオクチル、モノチオグリセロール、チオソルビトール、エチレンジアミン四酢酸等のような他の一般的な成分が含有されていてよい。更に、一般的なリン酸塩緩衝ビヒクルシステム、等張硼酸ビヒクル、等張塩化ナトリウムビヒクル、等張硼酸ナトリウムビヒクル等を含む適切な眼用ビヒクルを、本発明の目的のための担体媒体として使用することができる。薬物製剤は、また、微粒子配合物の形であってもよい。薬物製剤は、また、固体挿入物の形であってもよい。例えば、薬物用の担体として固体の水溶性ポリマーを使用することができる。挿入物を形成するために使用されるポリマーは、全ての水溶性非毒性ポリマー、例えば、メチルセルロース、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、（ヒドロキシ低級アルキルセルロース）、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースのようなセルロース誘導体；ポリアクリル酸塩、アクリル酸エチル、ポリアクリルアミドのようなアクリラート；ゼラチン、アルギナート、ペクチン、トラガカント、カラヤ、コンドルス、寒天、アラビアゴムのような天然産物；酢酸デンプン、ヒドロキシメチルデンプンエーテル、ヒドロキシプロピルデンプンのようなデンプン誘導体並びにポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポリビニルメチルエーテル、ポリエチレンオキシド、中和したカルボポル（ｃａｒｂｏｐｏｌ）及びキサンタンガム、ゲランガム（ｇｅｌｌａｎ  ｇｕｍ）のような他の合成誘導体並びに該ポリマーの混合物であってよい。
【００６４】
本発明の配合物の投薬のための適切な被検者には、霊長類、ヒト及び他の動物、特にヒト並びにネコ、ウサギ及びイヌのような飼い慣らされた動物が含まれる。
【００６５】
薬物製剤には、使用の際に非障害性である抗菌成分、例えば、チメロサール、塩化ベンザルコニウム、メチルパラベン及びプロピルパラベン、臭化ベンジルドデシニウム（ｂｅｎｚｙｌｄｏｄｅｃｉｎｉｕｍ  ｂｒｏｍｉｄｅ）、ベンジルアルコール又はフェニルエタノール；塩化ナトリウム、硼酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム又はグルコン酸塩緩衝剤のような緩衝成分並びにソルビタンモノラウラート、トリエタノールアミン、ポリオキシエチレンソルビタンモノパルミチラート、エチレンジアミン四酢酸等のような他の一般的な成分のような非毒性の補助物質が含有されていてよい。
【００６６】
眼用水剤又は懸濁剤は、眼中の許容されるＩＯＰレベルを維持するために必要であるたび毎に投薬することができる。哺乳動物の眼への投薬は、１日１から３回であることが意図される。
【００６７】
局所眼投薬のために、本発明の新規な配合物は、単位剤形が、治療的有効量の活性成分又は組合せ治療の場合にそれらの幾つかの複合物を含有するように配合された、水剤、ゲル剤、軟膏、懸濁剤又は固体挿入物の形を取ることができる。
【００６８】
本発明の化合物は、また、骨芽細胞及び破骨細胞の骨構築及び骨再構築過程を仲介するために有用である。１９９９年１０月１２日出願のＰＣＴ  ＵＳ第９９／２３７５７号明細書（その全部が参照してここに組み込まれる）を参照されたい。骨内の主なプロスタグランジン受容体はＥＰ４であり、これは、環式ＡＭＰによるシグナリングによりその影響を与えると信じられる。Ｉｋｅｄａ  Ｔ、Ｍｉｙａｕｒａ  Ｃ、Ｉｃｈｉｋａｗａ  Ａ、Ｎａｒｕｍｉｙａ  Ｓ、Ｙｏｓｈｉｋｉ  Ｓ及びＳｕｄａ  Ｔ、１９９５年、「胚及び新生マウスに於けるプロスタグランジンＥ受容体の３種類のサブタイプ（ＥＰ１、ＥＰ３及びＥＰ４）のインシトゥ局在化（Ｉｎ  ｓｉｔｕ  ｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｒｅｅ  ｓｕｂｔｙｐｅｓ（ＥＰ１，ＥＰ３  ａｎｄ  ＥＰ４）  ｏｆ  ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎ  Ｅ  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ  ｉｎ  ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ  ａｎｄ  ｎｅｗｂｏｒｎ  ｍｉｃｅ）」、Ｊ  Ｂｏｎｅ  Ｍｉｎｅｒ  Ｒｅｓ、第１０巻（補１）、第１７２頁（その全部が、参照してここに組み込まれる）を参照されたい。骨構築及び骨再構築過程を仲介するための薬物の製造のための式Ｉの化合物の使用も、本発明に含まれる。
【００６９】
それで、本発明の他の目的は、哺乳動物に於ける骨生成、即ち骨形成を刺激するための方法であって、これが必要な哺乳動物に、治療的有効量の、式ＩのＥＰ４受容体サブタイプ作動薬を投薬することを含む方法を提供することである。
【００７０】
本発明の更に他の目的は、これが必要な哺乳動物に於ける骨生成を刺激するための方法であって、該哺乳動物に、治療的有効量の、式ＩのＥＰ４受容体サブタイプ作動薬及びビスホスホナート活性物を投薬することを含む方法を提供することである。骨生成を刺激するための薬物の製造のための式Ｉの化合物の使用も、本発明に含まれる。
【００７１】
本発明の更に他の目的は、治療的有効量の、式ＩのＥＰ４受容体サブタイプ作動薬及びビスホスホナート活性物を含有する医薬組成物を提供することである。
【００７２】
本発明の他の目的は、下記のような治療又は予防が必要である哺乳動物に於ける、異常な骨吸収に関連する疾患状態又は状況を治療する又はこの状態にかかるリスクを減少する方法であって、該哺乳動物に、治療的有効量の、式ＩのＥＰ４受容体サブタイプ作動薬を投薬することを含む方法を提供することである。異常な骨吸収に関連する疾患状態又は状況を治療する又はこの状態にかかるリスクを減少するための薬物の製造のための式Ｉの化合物の使用も、本発明に含まれる。
【００７３】
異常な骨吸収に関連する疾患状態又は状況には、これらに限定されないが、骨粗鬆症、グルココルチコイド誘発骨粗鬆症、ぺージェット病、異常に増加した骨ターンオーバー、歯根膜疾患、歯損失、骨折、慢性関節リウマチ、プロテーゼ周囲の骨溶解、骨形成不全症、転移骨疾患、悪性の高カルシウム血症及び多発性骨髄腫が含まれる。
【００７４】
治療的有効量の式ＩのＥＰ４受容体サブタイプ作動薬及びビスホスホナート活性物を投薬することを含む方法内で、式ＩのＥＰ４受容体サブタイプ作動薬及びビスホスホナート活性物の同時投薬及び逐次投薬の両方は、本発明の範囲内であると考えられる。一般的に、ビスホスホン酸活性物基準で、５ｍｇ又は１０ｍｇのビスホスホナート活性物を含有する配合物が製造される。逐次投薬で、作動薬とビスホスホナートとは、何れの順序でも投薬することができる。逐次投薬のサブクラスに於いて、作動薬とビスホスホナートとは、典型的に同じ２４時間以内に投薬される。更に他のサブクラスに於いて、作動薬とビスホスホナートとは、典型的にお互いから約４時間以内に投薬される。
【００７５】
ここで有用なビスホスホナート活性物の限定されない例には、下記のものが含まれる。
【００７６】
アレンドロン酸（Ａｌｅｎｄｒｏｎｉｃ  ａｃｉｄ）、４−アミノ−１−ヒドロキシブチリデン−１，１−ビスホスホン酸；
アレンドロナート（アレンドロン酸ナトリウム又はアレンドロン酸モノナトリウム三水和物としても知られている）、４−アミノ−１−ヒドロキシブチリデン−１，１−ビスホスホン酸モノナトリウム三水和物；
アレンドロン酸及びアレンドロナートは、１９９０年５月１日発行の、Ｋｉｅｃｚｙｋｏｗｓｋｉらに付与された、米国特許第４，９２２，００７号明細書；１９９１年５月２８日発行の、Ｋｉｅｃｚｙｋｏｗｓｋｉらに付与された、米国特許第５，０１９，６５１号明細書；１９９６年４月２３日発行の、Ｄａｕｅｒらに付与された、米国特許第５，５１０，５１７号明細書；１９９７年７月１５日発行の、Ｄａｕｅｒらに付与された、米国特許第５，６４８，４９１号明細書（これらの全ては、それらの全部を参照してここに組み込まれる）に記載されている；
１９９０年１１月１３日発行の、Ｉｓｏｍｕｒａらに付与された、米国特許第４，９７０，３３５号明細書（これは、その全部を参照してここに組み込まれる）に記載されているような、シクロヘプチルアミノメチレン−１，１−ビスホスホン酸、ＹＭ１７５、Ｙａｍａｎｏｕｃｈｉ（シマドロナート（ｃｉｍａｄｒｏｎａｔｅ））；
１，１−ジクロロメチレン−１，１−ジホスホン酸（クロドロン酸）及び二ナトリウム塩（クロドロナート、プロクター・アンド・ギャンブル社（Ｐｒｏｃｔｅｒ  ａｎｄ  Ｇａｍｂｌｅ））は、ベルギー特許第６７２，２０５号明細書（１９６６年）及びＪ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．、第３２巻、第４１１１頁（１９６７年）（これらの両方は、それらの全部を参照してここに組み込まれる）に記載されている；
１−ヒドロキシ−３−（１−ピロリジニル）−プロピリデン−１，１−ビスホスホン酸（ＥＢ−１０５３）；
１−ヒドロキシエタン−１，１−ジホスホン酸（エチドロン酸）；
ＢＭ−２１０９５５としても知られている、１−ヒドロキシ−３−（Ｎ−メチル−Ｎ−ペンチルアミノ）プロピリデン−１，１−ビスホスホン酸、べーリンガー−マンハイム社（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ−Ｍａｎｎｈｅｉｍ）（イバンドロナート（ｉｂａｎｄｒｏｎａｔｅ））は、１９９０年５月２２日発行の、米国特許第４，９２７，８１４号明細書（これは、その全部を参照してここに組み込まれる）に記載されている；
６−アミノ−１−ヒドロキシエチリデン−１，１−ビスホスホン酸（ネリドロナート（ｎｅｒｉｄｒｏｎａｔｅ））；
３−（ジメチルアミノ）−１−ヒドロキシプロピリデン−１，１−ビスホスホン酸（オルパドロナート（ｏｌｐａｄｒｏｎａｔｅ））；
３−アミノ−１−ヒドロキシプロピリデン−１，１−ビスホスホン酸（パミドロナート（ｐａｍｉｄｒｏｎａｔｅ））；
［２−（２−ピリジニル）エチリデン］−１，１−ビスホスホン酸（ピリドロナート（ｐｉｒｉｄｒｏｎａｔｅ））は、米国特許第４，７６１，４０６号明細書（これは、その全部を参照してここに組み込まれる）に記載されている；
１−ヒドロキシ−２−（３−ピリジニル）エチリデン−１，１−ビスホスホン酸（リセドロナート（ｒｉｓｅｄｒｏｎａｔｅ））；
（４−クロロフェニル）チオメタン−１，１−ビスホスホン酸（チルドロナート（ｔｉｌｄｒｏｎａｔｅ））は、１９８９年１０月２４日発行の、Ｂｒｅｌｉｅｒｅらに付与された、米国特許第４，８７６，２４８号明細書（これは、その全部を参照してここに組み込まれる）に記載されている；並びに
１−ヒドロキシ−２−（１Ｈ−イミダゾール−１−イル）エチリデン−１，１−ビスホスホン酸（ゾレンドロナート（ｚｏｌｅｎｄｒｏｎａｔｅ））。
【００７７】
本発明に於いて有用なビスホスホナート活性物の限定されないクラスは、アレンドロナート、シマドロナート、クロドロナート、チルドロナート、エチドロナート、イバンドロナート、ネリドロナート、オルパンドロナート、リセドロナート、ピリドロナート、パミドロナート、ゾレンドロナート、これらの医薬適合性の塩及びこれらの混合物からなる群から選択される。
【００７８】
この場合の上記のクラスの限定されないサブクラスは、アレンドロナート、その医薬適合性の塩及びこれらの混合物からなる群から選択される。
【００７９】
このサブクラスの限定されない例は、アレンドロン酸モノナトリウム三水和物である。
【００８０】
本発明に於いて、これが骨刺激に関するとき、作動薬は、典型的に、所望の治療効果が達成されるまで、十分な期間投薬される。本明細書で使用されるとき、用語「所望の治療効果が達成されるまで」は、仲介される疾患又は状態について求められる臨床的又は医学的効果が、臨床医又は研究者によって観察される時まで、治療薬又は治療薬群が、選択された投薬スケジュールに従って連続的に投薬されることを意味する。本発明の処置方法のために、化合物は、骨質量又は構造に於ける所望の変化が観察されるまで、連続的に投薬される。このような例に於いて、骨質量に於ける増加又は正常な骨構造による異常な骨構造の置換を達成することが、所望の目的である。疾患状態又は状況のリスクを減少する方法のために、化合物は、所望しない状況を防止するために必要なほど長く、連続的に投薬される。このような例に於いて、骨質量密度の維持が、しばしば目的である。
【００８１】
投薬期間の限定されない例は、約２週間から哺乳動物の残りの寿命までの範囲であってよい。ヒトについて、投薬期間は、約２週間からヒトの残りの寿命まで、好ましくは約２週間から約２０年間まで、更に好ましくは約１月間から約２０年間まで、更に好ましくは約６月間から約１０年間、最も好ましくは約１年間から約１０年間までの範囲であってよい。
【００８２】
本発明の化合物は、また、骨損失、骨折、骨粗鬆症、グルココルチコイド誘発骨粗鬆症、ぺージェット病、異常に増加した骨ターンオーバー、歯根膜疾患、歯損失、骨関節症、骨折、慢性関節リウマチ、プロテーゼ周囲の骨溶解、骨形成不全症、転移骨疾患、悪性の高カルシウム血症及び多発性骨髄腫を治療又は予防するために有用な公知の薬物と組み合わせて有用である。現在開示されている化合物と、骨粗鬆症又は他の骨異常症を治療又は予防するために有用である他の薬物との組合せ物は、本発明の範囲内である。当業者は、含まれる薬物及び疾患の特別の特徴に基づいて、どの薬物の組合せ物が有用であるかを見つけることが可能である。このような薬物には、下記のもの、即ち、有機ビスホスホナート；カテプシンＫ阻害薬；エストロゲン又はエストロゲン受容体モジュレーター；アンドロゲン受容体モジュレーター；破骨細胞プロトンＡＴＰアーゼの阻害薬；ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼの阻害薬；インテグリン受容体拮抗薬；ＰＴＨのような骨芽細胞同化剤；カルシトニン；ビタミンＤ又は合成ビタミンＤ類似化合物；並びにこれらの医薬適合性の塩及び混合物が含まれる。好ましい組合せ物は、本発明の化合物及び有機ビスホスホナートである。他の好ましい組合せ物は、本発明の化合物及びエストロゲン受容体モジュレーターである。他の好ましい組合せ物は、本発明の化合物及びエストロゲンである。他の好ましい組合せ物は、本発明の化合物及びアンドロゲン受容体モジュレーターである。他の好ましい組合せ物は、本発明の化合物及び骨芽細胞同化剤である。
【００８３】
異常骨吸収及び眼異常症の治療に関して、式Ｉ作動薬は、一般的に、約０．００１ｎＭから約１００ミクロＭのＥＣ５０値を有するけれども、この範囲外の活性を有する作動薬も用量及び投薬の経路に依存して有用である。本発明のサブクラスに於いて、作動薬は、約１ｎＭから約１０ミクロＭのＥＣ５０値を有する。本発明の更なるサブクラスに於いて、作動薬は、約０．１ミクロＭから約１０ミクロＭのＥＣ５０値を有する。ＥＣ５０は、当業者によく知られている作動薬活性の一般的な尺度であり、最大効果の半分、即ち５０％をもたらすために必要な、作動薬の濃度又は用量として定義される。Ｇｏｏｄｍａｎ及びＧｉｌｍａｎ著、「治療の薬理学的基礎」、第９版、１９９６年刊、第２章、Ｅ．Ｍ．Ｒｏｓｓ、「薬力学、薬物作用の機構及び薬物濃度と効果との間の関係（Ｐｈａｒｍａｃｏｄｙｎａｍｉｃｓ，Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ｏｆ  Ｄｒｕｇ  Ａｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｔｈｅ  Ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ  Ｂｅｔｗｅｅｎ  Ｄｒｕｇ  Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｅｆｆｅｃｔ）」及び１９９９年１０月１２日出願のＰＣＴ  ＵＳ第９９／２３７５７号明細書（これらは、それらの全部を参照してここに組み込まれる）も参照されたい。
【００８４】
本明細書中の実施例は例示であり、特許請求の範囲に記載された本発明を限定しない。特許請求の範囲に記載された化合物のそれぞれは、ＥＰ４作動薬であり、多数の生理学的眼及び骨異常症のために有用である。
【００８５】
本発明の化合物は、幾つかの修正を加えて、米国特許第６，０４３，２７５号明細書、欧州特許出願公開第０８５５３８９号明細書、米国特許出願第６０／３３７２２８号明細書（メルク（Ｍｅｒｃｋ）ドケット第ＭＣ０５２号）及び国際特許出願公開第０１／４６１４０号明細書（これらの全ては、それらの全部を参照してここに組み込まれる）に従って製造することができる。例示の手段によって示す下記の限定されない実施例は、本発明の例示である。
【００８６】
製造１
１−ベンジル  ５−メチル（５Ｒ）−２−オキソイミダゾリジン−１，５−ジカルボキシラート
工程Ａ：（４Ｒ）−３−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−２−オキソイミダゾリジン−４−カルボン酸
０℃の水（５０ｍＬ）中のＮａＯＨ（２．４８ｇ、６１．９７ミリモル）の溶液に、臭素（３．３０５ｇ、２０．６６ミリモル）を添加する。５分後に、（Ｒ）−ＮＣｂｚ−アスパラギンを上記の溶液に添加し、この混合物を５０℃で１時間攪拌する。５％Ｎａ２Ｓ２Ｏ３の添加及び続くＥｔ２Ｏ（１×１００ｍＬ）による抽出。水性相を６Ｎ  ＨＣｌでｐＨ２にまで酸性化し、この反応混合物を冷蔵庫内に６日間放置する。結晶を濾過し、熱水中で再結晶して、（４Ｒ）−３−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−２−オキソイミダゾリジン−４−カルボン酸を白色粉末として得る。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−Ｄ６）δ７．５−７．２（Ｍ，５Ｈ），６．５（ＳＬ，１Ｈ），５．２８（Ｓ，２Ｈ），４．８８（Ｍ，１Ｈ），３．８８（Ｍ，１Ｈ），３．５（Ｍ，１Ｈ）；ＭＳ２６３．２（Ｍ−１）。
【００８７】
工程Ｂ：１−ベンジル  ５−メチル（５Ｒ）−２−オキソイミダゾリジン−１，５−ジカルボキシラート
−２０℃のＭｅＯＨ（１０ｍＬ）中の（４Ｒ）−３−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−２−オキソイミダゾリジン−４−カルボン酸（１ｇ、３．８ミリモル）の溶液に、塩化チオニル（３３７ｍｇ、２．８４ミリモル）を滴下により添加する。この混合物を−２０℃で２時間、次いで室温で一晩攪拌する。溶媒を減圧下で除去し、そして残渣をＡｃＯＥｔ中に溶解し、飽和ＮａＨＣＯ３溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、溶媒を除去する。残渣を最小量の熱ＡｃＯＥｔ中に溶解し、次いで室温にまで冷却し、ヘキサンを添加して、１−ベンジル  ５−メチル（５Ｒ）−２−オキソイミダゾリジン−１，５−ジカルボキシラートを、無定型白色粉末として結晶化させる。１Ｈ  ＮＭＲ（ＭＥＯＨ−Ｄ４）δ７．５−７．２（Ｍ，５Ｈ），６．４（ＳＬ，１Ｈ），５．３８（Ｍ，１Ｈ），５．２（Ｍ，１Ｈ），４．８（Ｍ，１Ｈ），３．８０−３．６５（Ｍ，４Ｈ），３．４５（Ｍ，１Ｈ）；ＭＳ２７９．１（Ｍ＋１）。
【００８８】
工程Ｃ：１−ベンジル−４−メチル（４Ｒ）−３−（６−シアノヘキシル）−２−オキソイミダゾリジン−１，４−ジカルボキシラート
ＤＭＦ（８ｍＬ）中の１−ベンジル−５−メチル（５Ｒ）−２−オキソイミダゾリジン−１，５−ジカルボキシラート（９０２ｍｇ、３．２４ミリモル）の溶液に、室温でＮａＨ（油中の６０％分散液、１３６．３ｍｇ、３．４０ミリモル）を添加し、この混合物を室温で３０分間そして５０℃で３０分間攪拌する。次いで、７−ブロモヘプタノニトリル（１．２３１ｇ、６．４８ミリモル）及び触媒量のテトラブチルアンモニウムヨージドを添加する。この混合物を５０℃で１２時間攪拌し、１Ｎ  ＨＣｌを添加することによって仕上げ、ＡｃＯＥｔ（３×２０ｍＬ）で抽出し、有機相を食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、溶媒を除去する。残渣を、シリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィー（１：１  ＡｃＯＥｔ：ヘキサン）によって精製して、１−ベンジル−４−メチル（４Ｒ）−３−（６−シアノヘキシル）−２−オキソイミダゾリジン−１，４−ジカルボキシラートを油として得る。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣＬ３）δ７．５−７．３（Ｍ，５Ｈ），５．３（Ｓ，２Ｈ），４．２（Ｍ，１Ｈ），４．００（Ｍ，１Ｈ），３．９２（Ｍ，１Ｈ），４．８（Ｓ，３Ｈ），３．６３（Ｍ，１Ｈ），３．０３（Ｍ，１Ｈ），２．３５（Ｍ，２Ｈ），１．８−１．３（Ｍ，８Ｈ）；ＭＳ３８８．２（Ｍ＋１）。
【００８９】
工程Ｄ：ベンジル（４Ｒ）−３−（６−シアノヘキシル）−４−（ヒドロキシメチル）−２−オキソイミダゾリジン−１−カルボキシラート
−２０℃のＭｅＯＨ（１５ｍＬ）中の１−ベンジル−４−メチル（４Ｒ）−３−（６−シアノヘキシル）−２−オキソイミダゾリジン−１，４−ジカルボキシラート（１．４２４ｇ、３．６８ミリモル）の溶液に、ＮａＢＨ４（２７８ｍｇ、７．３５ミリモル）を少しずつ添加し、この反応混合物を室温にまで到達させ、室温で２時間攪拌する。ｐＨ６にまで濃ＨＣｌを添加し、溶媒を除去する。残渣を水中に溶解し、ＡｃＯＥｔ（３×２０ｍＬ）で抽出し、有機相を食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、溶媒を除去する。残渣をシリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィー（ＡｃＯＥｔ）によって精製して、ベンジル（４Ｒ）−３−（６−シアノヘキシル）−４−（ヒドロキシメチル）−２−オキソイミダゾリジン−１−カルボキシラートを油として得る。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣＬ３）δ７．５−７．３（Ｍ，５Ｈ），５．２８（Ｍ，２Ｈ），３．９（Ｍ，１Ｈ），３．８１−３．６２（Ｍ，４Ｈ），３．５（Ｍ，１Ｈ），３．１（Ｍ，１Ｈ），２．４（ＳＬ，１Ｈ），２．３５（Ｔ，Ｊ＝７．０ＨＺ，２Ｈ），１．７５−１．２５（Ｍ，８Ｈ）；ＭＳ３５９．９（Ｍ＋１）。
【００９０】
工程Ｅ：ベンジル（４Ｒ）−３−（６−シアノヘキシル）−４−ホルミル−２−オキソイミダゾリジン−１−カルボキシラート
ＣＨ２Ｃｌ２（７ｍＬ）中のベンジル（４Ｒ）−３−（６−シアノヘキシル）−４−（ヒドロキシメチル）−２−オキソイミダゾリジン−１−カルボキシラート（２８４．４ｍｇ、０．７９ミリモル）の溶液に、デス−マーチン（Ｄｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎ）ペリオジナン（３３６ｍｇ、０．７９ミリモル）を少しずつ添加し、この反応混合物を室温で１時間攪拌した。溶媒を真空中で除去し、残渣をトルエンと共に粉砕し、セライト上で濾過し、溶媒を除去して、ベンジル（４Ｒ）−３−（６−シアノヘキシル）−４−ホルミル−２−オキソイミダゾリジン−１−カルボキシラートを油として得る。
【実施例１】
【００９１】
（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−１−［６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヘキシル］イミダゾリジン−２−オン
【００９２】
【化１０】
2005534653.tif 000009
【００９３】
工程Ａ：ベンジル（４Ｓ）−３−（６−シアノヘキシル）−２−オキソ−４−［（１Ｅ）−３−オキソ−４−フェニルブト−１−エニル］イミダゾリジン−１−カルボキシラート
０℃のＴＨＦ（２ｍＬ）中のジメチル  ３−フェニル−２−オキソ−プロピルホスホナート（１８３ｍｇ、０．７５６ミリモル）の溶液に、ＮａＨ（油中の６０％分散液、３０．２４ｍｇ、０．７９３ミリモル）を添加し、この混合物を０℃で１時間攪拌する。次いで、ベンジル（４Ｒ）−３−（６−シアノヘキシル）−４−ホルミル−２−オキソイミダゾリジン−１−カルボキシラート（２７０ｍｇ、０．７５６ミリモル）の溶液を添加し、この混合物を０℃で１時間そして室温で２時間攪拌する。次いで、この混合物を塩化アンモニウム溶液（２ｍＬ）を添加することによって仕上げ、ＡｃＯＥｔ（３×１０ｍＬ）で抽出し、有機相を食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、溶媒を除去する。残渣を、シリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィー（１５：８５  アセトン：トルエン）によって精製して、ベンジル（４Ｓ）−３−（６−シアノヘキシル）−２−オキソ−４−［（１Ｅ）−３−オキソ−４−フェニルブト−１−エニル］イミダゾリジン−１−カルボキシラートを油として得る。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣＬ３）δ７．４５−７．１５（Ｍ，１０Ｈ），６．５５（ＤＤ，Ｊ＝８．４ＨＺ，１５．５ＨＺ，１Ｈ），６．２６（Ｄ，１５．５ＨＺ，１Ｈ），５．２５（Ｍ，２Ｈ），４．１（Ｍ，１Ｈ），３．９５（Ｍ，１Ｈ），３．８（Ｍ，２Ｈ），３．５  ９Ｍ，１Ｈ），３．３５（Ｍ，１Ｈ），２．８（Ｍ，１Ｈ），２．３（Ｔ，Ｊ＝７．０ＨＺ，２Ｈ），１．６−１．１５（Ｍ，８Ｈ）；ＭＳ４７４．３（Ｍ＋１）。
【００９４】
工程Ｂ：メチル（４Ｓ）−３−（６−シアノヘキシル）−４−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−カルボキシラート
−２０℃のＭｅＯＨ（５ｍＬ）中のベンジル（４Ｓ）−３−（６−シアノヘキシル）−２−オキソ−４−［（１Ｅ）−３−オキソ−４−フェニルブト−１−エニル］イミダゾリジン−１−カルボキシラート（１３２．８ｍｇ、０．２８ミリモル）の溶液に、ＮａＢＨ４（１７ｍｇ、０．４５ミリモル）を添加し、この混合物を−２０℃で１時間攪拌し、そして室温にまで到達させる。次いで、この混合物を、０．５ｍＬのアセトンを添加することによって仕上げ、溶媒を減圧下で除去する。残渣を水（２ｍＬ）及び１Ｎ  ＨＣｌ（１ｍＬ）中に溶解し、ＡｃＯＥｔ（３×１０ｍＬ）で抽出し、有機相を食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、溶媒を除去する。残渣を、シリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィー（３：７  アセトン：トルエン）によって精製して、メチル（４Ｓ）−３−（６−シアノヘキシル）−４−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−カルボキシラートを油として得る。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣＬ３）δ７．３５−７．１（Ｍ，５Ｈ），５．８（Ｍ，１Ｈ），５．４５（Ｍ，１Ｈ），４．４（Ｍ，１Ｈ），４．０（Ｍ，１Ｈ），３．９（Ｍ，１Ｈ），３．８（Ｓ，３Ｈ），３．４５−３．２３（Ｍ，２Ｈ），２．９５−２．７（Ｍ，３Ｈ），２．３（Ｔ，Ｊ＝７．０ＨＺ，２Ｈ），２．１５（ＳＬ，１Ｈ），１．６５−１．２（Ｍ，８Ｈ）；ＭＳ４００．２（Ｍ＋１）。
【００９５】
工程Ｃ：（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−１−［６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヘキシル］イミダゾリジン−２−オン
メチル（４Ｓ）−３−（６−シアノヘキシル）−４−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−２−オキソイミダゾリジン−１−カルボキシラート（５５．９ｍｇ、０．１４ミリモル）に、トリブチルスタンニルアジド（１３９．５ｍｇ、０．４２ミリモル）を添加し、この混合物を１００℃で３時間加熱する。この粗製混合物を、ＭｅＯＨ中の３Ｎ  ＫＯＨと混合し、室温で２４時間攪拌する。溶媒を減圧下で除去し、残渣を１Ｎ  ＨＣｌ（７ｍＬ）中に溶解する。水性相をＡｃＯＥｔ（３×２０ｍＬ）によって抽出し、有機相を食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、溶媒を除去する。シリカゲル濾過、（１００：０）から（９４：６）までの勾配（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ：０．１％ＨＣＯＯＨ）による精製によって、（５Ｓ）−５−［（１Ｅ）−３−ヒドロキシ−４−フェニルブト−１−エニル］−１−［６−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヘキシル］イミダゾリジン−２−オンを油として得る。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣＬ３）δ７．３−７．１（Ｍ，５Ｈ），５．８（Ｍ，１Ｈ），５．５（Ｍ，１Ｈ），５．３（ＳＬ，１Ｈ），４．４５（Ｍ，１Ｈ），４．０５（Ｍ，１Ｈ），３．４５（Ｍ，１Ｈ），３．２−２．７（Ｍ，７Ｈ），２．０５（Ｓ，１Ｈ），１．７（Ｍ，２Ｈ），１．４−１．１（Ｍ，６Ｈ）；ＭＳ３８５．４（Ｍ＋１）。
【００９６】
Ｉ．ウサギ及びサルに於ける眼圧（ＩＯＰ）へのＥＰ４作動薬の効果
動物
薬物投与を受けたことがない、雄ダッチベルテッド種ウサギ及び雌シノモルグスサルを、この研究で使用する。この研究に於ける動物ケア及び処理は、研究用動物の使用に於ける、国立健康研究所（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ）（ＮＩＨ）並びに視力及び眼科学研究協会（Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ｉｎ  Ｖｉｓｉｏｎ  ａｎｄ  Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｙ）（ＡＲＶＯ）決議によるガイドラインに従う。全ての実験手順は、メルク社の規格化動物ケア及び使用委員会（Ｉｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ  Ａｎｉｍａｌ  Ｃａｒｅ  ａｎｄ  Ｕｓｅ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ  ｏｆ  Ｍｅｒｃｋ  ａｎｄ  Ｃｏｍｐａｎｙ）によって承認されている。
【００９７】
薬物製剤及び投与
薬物濃度は、活性成分（ベース）の項目で表される。本発明の化合物を、ウサギ研究のために０．０１、０．００１、０．０００１％で、そしてサル研究のために０．０５、０．００５％で、生理食塩水中に溶解させる。薬物又はビヒクルアリコート（２５μＬ）を、局所的に片側又は両側に投与する。片側適用に於いて、反対側の眼は、等体積の食塩水を受け取る。プロパラカイン（０．５％）が、眼圧測定の前に不快を最小にするために、角膜に適用される。眼圧（ＩＯＰ）は、空気眼圧計（Ａｌｃｏｎ  Ａｐｐｌａｎａｔｉｏｎ  Ｐｎｅｕｍａｔｏｎｏｇｒａｐｈ）又は同等物を使用して記録される。
【００９８】
解析
結果は、薬物又はビヒクルの投薬の直前に測定された基本レベルからの、ＩＯＰに於ける変化として表され、平均プラス又はマイナス標準偏差を表す。統計的比較は、薬物処理した動物の応答とビヒクル処理した動物の応答との間の非対データについての及び匹敵する時間間隔で同側の眼と反対側の眼との間の対データについてのスチューデントのテストを使用して行う。データの有意性は、また、ダンネット（Ｄｕｎｎｅｔｔ）のｔテストを使用し「ｔ−０」値からの差として決定される。アステリスクは、ｐ＜０．０５の有意性レベルを表す。
【００９９】
Ａ．ウサギに於ける眼圧測定
体重２．５から４．０ｋｇの雄ダッチベルテッドウサギを、１２時間明／暗サイクル及びウサギ食物で保持する。全ての実験を、一日のリズムに関する変動性を最小にするために、１日の同じ時間で実施する。ＩＯＰを処理の前に測定し、次いで本発明の化合物又はビヒクルを、片方の眼又は両方の眼に点滴し（２５μＬの１滴）、点滴後３０、６０、１２０、１８０、２４０、３００及び３６０分後にＩＯＰを測定する。幾つかの場合に、ビヒクルのみで両側に処理した同数の動物を、評価し、並行対照として薬物処理した動物に対して比較する。
【０１００】
Ｂ．サルに於ける眼圧測定
右目の片側眼圧亢進症が、２ｋｇと３ｋｇとの間の体重を有する雌シノモルグスサルに於いて、Ｌｅｅらの方法（１９８５年）を使用して、アルゴンレーザシステム（コヒーレント・ノブス（Ｃｏｈｅｒｅｎｔ  ＮＯＶＵＳ）２０００、Ｐａｌｏ  Ａｌｔｏ、米国）での小柱網の光凝固によって誘発される。眼圧（ＩＯＰ）に於ける長期間増加は、緑内障患者に見られるものと同様である視神経頭の変化になる。
【０１０１】
ＩＯＰ測定のために、サルを、実験の期間、拘束椅子で座位に保持する。動物に、それぞれのＩＯＰ測定の約５分間前に、塩酸ケタミン（３から５ｍｇ／ｋｇ）の筋肉内注射によって軽く麻酔をかけ、０．５％プロパラカインの１滴を点滴し、その後ＩＯＰを記録する。ＩＯＰは、空気眼圧計（Ａｌｃｏｎ  Ａｐｐｌａｎａｔｉｏｎ  Ｔｏｎｏｍｅｔｅｒ）又はディジラブ（Ｄｉｇｉｌａｂ）空気眼圧計（Ｂｉｏ−Ｒａｄ  Ｏｐｈｔｈａｌｍｉｃ  Ｄｉｖｉｓｉｏｎ、米国マサチューセッツ州ケンブリッジ）を使用して測定する。
【０１０２】
ＩＯＰは、処理前及び一般的に処理後３０、６０、１２４、１８０、３００及び３６０分で測定する。基線値は、また、一般的に処理前２日又は３日のこれらの時間点で得られる。処理は、本発明の化合物（０．０５及び０．００５％）又はビヒクル（食塩水）の２５μＬの１滴を点滴することからなる。少なくとも１週間の洗出期間が、同じ動物での試験の前に使用される。正常圧（高血圧に対して反対側）の眼を、高血圧の眼と正確に同じ方法で処理する。両方の眼についてのＩＯＰ測定値を、同じ時点で対応する基線値に対して比較する。結果は、ｍｍＨｇで、平均プラス−マイナス標準偏差として表される。眼使用のための本発明の化合物の活性範囲は、０．０１から１００，０００ｎＭである。
【０１０３】
ＩＩ．放射性リガンド結合アッセイ
これらの化合物を試験するために使用するアッセイは、本質的に、Ａｂｒａｍｏｖｉｔｚ  Ｍ、Ａｄａｍ  Ｍ、Ｂｏｉｅ  Ｙ、Ｃａｒｒｉｅｒｅ  Ｍ、Ｄｅｎｉｓ  Ｄ、Ｇｏｄｂｏｕｔ  Ｃ、Ｌａｍｏｎｔａｇｎｅ  Ｓ、Ｒｏｃｈｅｔｔｅ  Ｃ、Ｓａｗｙｅｒ  Ｎ、Ｔｒｅｍｂｌａｙ  ＮＭ、Ｂｅｌｌｅｙ  Ｍ、Ｇａｌｌａｎｔ  Ｍ、Ｄｕｆｒｅｓｎｅ  Ｃ、Ｇａｒｅａｕ  Ｙ、Ｒｕｅｌ  Ｒ、Ｊｕｔｅａｕ  Ｈ、Ｌａｂｅｌｌｅ  Ｍ、Ｏｕｉｍｅｔ  Ｎ、Ｍｅｔｔｅｒｓ  ＫＭ：プロスタグランジン及び関連アナログの親和力及び選択率を決定するための、組換えプロスタノイド受容体の利用（Ｔｈｅ  ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ  ｐｒｏｓｔａｎｏｉｄ  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ  ｔｏ  ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ  ｔｈｅ  ａｆｆｉｎｉｔｉｅｓ  ａｎｄ  ｓｅｌｅｃｔｉｖｉｔｉｅｓ  ｏｆ  ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎｓ  ａｎｄ  ｒｅｌａｔｅｄ  ａｎａｌｏｇｓ）、Ｂｉｏｃｈｉｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ａｃｔａ、２０００年１月１７日、第１４８３（２）号、第２８５−２９３頁に記載されたようにして実施し、以下述べる。
【０１０４】
ヒト胚腎臓（ＨＥＫ）２９３（ＥＢＮＡ）細胞系に於けるプロスタノイド受容体の安定な発現
全長コーディング配列に対応するプロスタノイド受容体（ＰＧ）ｃＤＮＡを、哺乳動物発現ベクターｐＣＥＰ４（インビトロゲン（ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ））の適切な部位の中にサブクローン化し、ｐＣＥＰ４ＰＧプラスミドＤＮＡを、キアゲン（Ｑｉａｇｅｎ）プラスミド調製キット（キアゲン社）を使用して調製し、そしてメーカーの使用説明書に従って、リポフェクト・アミン（Ｌｉｐｏｆｅｃｔ  ＡＭＩＮＥ）＠（ギブコ−ＢＲＬ社（ＧＩＢＣＯ−ＢＲＬ））を使用して、ＨＥＫ２９３（ＥＢＮＡ）細胞の中にトランスフェクトした。ヒグロマイシン耐性遺伝子と一緒にｃＤＮＡを発現するＨＥＫ２９３（ＥＢＮＡ）細胞を、１０％の熱不活性化ウシ胎仔血清、１ｍＭのピルビン酸ナトリウム、１００Ｕ／ｍＬのペニシリン−Ｇ、１００μｇ／ｍＬの硫酸ストレプトマイシン、２５０μｇ／ｍＬの活性ゲネチシン（ＧＥＮＥＴＩＣＩＮ）（登録商標）（Ｇ４１８）（全て、ライフ・テクノロジース社（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｉｎｃ．）／ＢＲＬから）及び２００μｇ／ｍＬのヒグロマイシン（カルビオケム社（Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍ））を補充した、ダルベッコの変性イーグル培地（ＤＭＥＭ）の中に選択した。個々のコロニーを、選択下で２から３週間の成長の後、クローニングリング法を使用して単離し、続いてクローン細胞系に膨張させた。受容体ｃＤＮＡの発現は、受容体結合アッセイによって評価した。
【０１０５】
ＨＥＫ２９３（ＥＢＮＡ）細胞を、補充したＤＭＥＭ完全培地中で３７℃で、空気中の６％ＣＯ２の湿潤雰囲気内で成長させ、次いで収穫し、プロテアーゼインヒビター（２ｍＭのフェニルメチルスルホニルフルオリド、１０μＭのＥ−６４、１００μＭのロイペプチン及び０．０５ｍｇ／ｍＬのペプスタチン）の存在下で、氷上で３０分間の８００ｐｓｉでの窒素キャビテーションによる細胞のリーシスに続いて、分画遠心法（１０００×ｇ１０分間、次いで１６０，０００×ｇ３０分間、全て４℃で）により、膜を調製した。１６０，０００×ｇペレットを、１ｍＭのＥＤＴＡを含有する１０ｍＭのＨＥＰＥＳ／ＫＯＨ（ｐＨ７．４）中に、ドゥンス（Ｄｏｕｎｃｅ）均質化（ドゥンスＡ；１０ストローク）により約５から１０ｍｇ／ｍＬタンパク質で再懸濁し、液体窒素中で凍結し、−８０℃で貯蔵した。
【０１０６】
プロスタノイド受容体結合アッセイ
プロスタノイド受容体結合アッセイは、１ｍＭのＥＤＴＡ、１０ｍＭのＭｇＣｌ２（ＥＰサブタイプ）又は１０ｍＭのＭｎＣｌ２（ＤＰ、ＦＰ、ＩＰ及びＴＰ）及び放射性リガンド［ＥＰサブタイプのために０．５から１．０ｎＭ［３Ｈ］ＰＧＥ２（１８１Ｃｉ／ミリモル）、ＤＰのために０．７ｎＭ［３Ｈ］ＰＧＤ２（１１５Ｃｉ／ミリモル）、ＦＰのために０．９５ｎＭ［３Ｈ］ＰＧＦ２α（１７０Ｃｉ／ミリモル）、ＩＰのために５ｎＭ［３Ｈ］イロプロスト（ｉｌｏｐｒｏｓｔ）（１６Ｃｉ／ミリモル）及びＴＰのために１．８ｎＭ［３Ｈ］ＳＱ２９５４８（４６Ｃｉ／ミリモル）］を含有する、１０ｍＭ  ＭＥＳ／ＫＯＨ（ｐＨ６．０）（ＥＰサブタイプ、ＦＰ及びＴＰ）又は１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ／ＫＯＨ（ｐＨ７．４）（ＤＰ及びＩＰ）中で、０．２ｍＬの最終インキュベーション体積中で実施した。ＥＰ３アッセイには、また、１００μＭのＧＴＰγＳが含有されていた。反応は、１６０，０００×ｇ画分からの膜タンパク質（ほぼ、ＥＰ１のために３０μｇ、ＥＰ２のために２０μｇ、ＥＰ３のために２μｇ、ＥＰ４のために１０μｇ、ＦＰのために６０μｇ、ＤＰのために３０μｇ、ＩＰのために１０μｇ及びＴＰのために１０μｇ）の添加によって開始させた。リガンドはジメチルスルホキシド（Ｍｅ２ＳＯ）中に添加し、全てのインキュベーションで１％（ｖ／ｖ）で一定に保持した。非特異結合は、１μＭの対応する非放射性プロスタノイドの存在下で決定した。インキュベーションは、３０℃（ＥＰサブタイプ、ＤＰ、ＦＰ及びＴＰ）又は室温（ＩＰ）で、６０分間（ＥＰサブタイプ、ＦＰ及びＩＰ）又は３０分間（ＤＰ及びＴＰ）実施し、ＥＤＴＡを含有しないアッセイインキュベーション緩衝液（４℃）中に予備湿潤させた９６ウエルのユニフィルター（Ｕｎｉｆｉｌｔｅｒ）ＧＦ／Ｃ（キャンベラ・パッカード社（Ｃａｎｂｅｒｒａ  Ｐａｃｋａｒｄ））を通す急速濾過及びトムテック・マッハ（Ｔｏｍｔｅｃ  Ｍａｃｈ）ＩＩＩ９６ウエル半自動式細胞ハーベスターを使用することによって終結させた。フィルターを３から４ｍＬの同じ緩衝液で洗浄し、５５℃で９０分乾燥させ、そして個々のフィルターに結合した残留放射能を、１４５０マイクロベータ（ＭｉｃｒｏＢｅｔａ）（ワラック社（Ｗａｌｌａｃ））を使用して５０μＬのウルチマ・ゴールド（Ｕｌｔｉｍａ  Ｇｏｌｄ）Ｆ（キャンベラ・パッカード社）を添加して、シンチレーションカウントによって決定した。特異結合は、全結合から非特異結合を差し引くことによって計算した。特異結合は、全結合の９０から９５％を表し、使用した放射性リガンド及びタンパク質の濃度に対して直線状であった。全結合は、インキュベーション培地に添加した放射性リガンドの５から１０％を表した。
【０１０７】
骨使用のための本発明の化合物の活性範囲は、０．０１と１００，０００ｎＭの間である。
【０１０８】
骨吸収アッセイ
１．動物処置
ｍＲＮＡ局在化実験のために、５週齢のスプレーグ−ドーリーラット（チャールス・リバー社（Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ））を、ＣＯ２によって安楽死させ、それらの脛骨及び頭蓋冠を切除し、軟組織を取り除き、そして直ちに液体窒素中で凍結する。ＥＰ４調節実験のために、６週齢のラットに、ビヒクル（滅菌水中の７％エタノール）又は同化用量のＰＧＥ２（ケイマン・ケミカル社（Ｃａｙｍａｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ）、ミシガン州アンアーバー（Ａｎｎ  Ａｒｂｏｒ）、同じビヒクル中３から６ｍｇ／ｋｇ）の１回注射を腹腔内で与える。動物を、注射後の幾つかの時点で安楽死させ、それらの脛骨及び頭蓋冠並びに肺組織及び腎組織からのサンプルを、液体窒素中で凍結する。
【０１０９】
２．細胞培養
ＲＰ−１骨膜細胞を、４週齢のスプレーグ−ドーリーラットの脛骨からの骨膜細胞の一次培養から、自然発生的に不死化し、１０％ウシ胎仔血清（ＪＲＨバイオサイエンス社（ＪＲＨ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）、カンザス州レネキサ（Ｌｅｎｅｘａ））と共にＤＭＥＭ（ＢＲＬ、メリーランド州ガイザースブルグ（Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ））中で培養する。これらの細胞は、初期の培養では骨芽細胞の表現型マーカーを発現しないが、合流すると、Ｉ型コラーゲン、アルカリ性ホスファターゼ及びオステオカルシンを発現し、無機化した細胞外マトリックスを産生する。
【０１１０】
ＲＣＴ−１及びＲＣＴ−３は、組合せコラゲナーゼ／ヒアルロニダーゼ消化によりラット胎仔頭蓋冠から放出された細胞から、ＳＶ−４０ラージＴ抗原によって不死化されたクローン細胞系である。消化の最初の１０分間の間に放出された細胞から誘導された、ＲＣＴ−１細胞（画分Ｉ）を、１０％のウシ胎仔血清及び０．４ｍｇ／ｍＬのＧ４１８（ＢＲＬ）を含有するＲＰＭＩ１６４０培地（ＢＲＬ）中で培養する。これらの細胞は、分化し、レチノン酸処理の際に骨芽細胞特徴を発現する。骨芽細胞富化画分ＩＩＩ細胞から不死化されたＲＣＴ−３細胞を、５％のウシ胎仔血清及び０．４ｍｇ／ｍＬのＧ４１８を含有するＦ−１２培地（ＢＲＬ）中で培養する。ＴＲＡＢ−１１細胞も、成ラット脛骨からのＳＶ４０ラージＴ抗原によって不死化し、１０％のＦＢＳ及び０．４ｍｇ／ｍＬのＧ４１８を含有するＲＰＭＩ１６４０培地中で培養する。ＲＯＳ１７／２．８ラット骨肉腫細胞を、５％ＦＢＳを含有するＦ−１２中で培養する。骨芽細胞富化（画分ＩＩＩ）一次ラット胎仔頭蓋冠細胞を、１９日齢ラット胎仔の頭蓋冠のコラーゲナーゼ／ヒアルロニダーゼ消化によって得る。Ｒｏｄａｎら、「酸性ＦＧＦによるラット頭蓋冠骨芽細胞の成長刺激（Ｇｒｏｗｔｈ  ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｒａｔ  ｃａｌｖａｒｉａ  ｏｓｔｅｏｂｌａｓｔｉｃ  ｃｅｌｌｓ  ｂｙ  ａｃｉｄｉｃ  ＦＧＦ）」、Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ、第１２１巻、第１９１９−１９２３頁（１９８７年）（その全部がここに参照して組み込まれる）参照。細胞は３０から５０分間の消化（画分ＩＩＩ）の間に放出され、５％のＦＢＳを含有するＦ−１２中で培養する。
【０１１１】
１０％ＦＢＳを含有するイーグルＭＥＭ中で培養された、Ｐ８１５（マウス肥満細胞腫）細胞及び１０％のＦＢＳを含有するＤＭＥＭ中で培養されたＮＲＫ（正常なラット腎線維芽細胞）を、それぞれＥＰ４の発現のための正の対照及び負の対照として使用する。Ｓａｍｕｌｅｓｓｏｎ  Ｂ．ら編、Ａｄｖａｎｃｅｓ  ｉｎ  ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎ，Ｔｈｒｏｍｂｏｓｚｎｅｓ  ａｎｄ  ｌｅｕｋｏｔｒｉｅｎｅ  ｒｅｓｅａｒｃｈ、第２３巻、第４９９−５０４頁（１９９５年）中の、Ａｂｒａｍｏｖｉｔｚら、「ヒトプロスタノイド受容体：クローン化及びキャラクタリゼーション（Ｈｕｍａｎ  ｐｒｏｓｔａｎｏｉｄ  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ：  ｃｌｏｎｉｎｇ  ａｎｄ  ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ）」及びｄｅ  Ｌａｒｃｏら、「上皮様及び線維芽細胞ラット腎細胞クローン：ＥＧＦ受容体及びマウス肉腫ウイルス転換の影響（Ｅｐｉｔｈｅｌｉｏｉｄ  ａｎｄ  ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｉｃ  ｒａｔ  ｋｉｄｎｅｙ  ｃｅｌｌ  ｃｌｏｎｅｓ：  ＥＧＦ  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ  ａｎｄ  ｔｈｅ  ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ｍｏｕｓｅ  ｓａｒｃｏｍａ  ｖｉｒｕｓ  ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ）」、Ｃｅｌｌ  Ｐｈｙｓｉｏｌ．、第９４巻、第３３５−３４２頁（１９７８年）（両方がそれらの全部を参照してここに組み込まれる）参照。
【０１１２】
３．ノーザンブロット分析
全ＲＮＡを、組織ホモジナイザーにより凍結した骨サンプルを粉砕した後、イソチオシアン酸グアニジニウム−フェノール−クロロホルム法を使用して、脛骨の骨幹端又は骨幹及び頭蓋冠から抽出する。Ｐ．Ｃｈｏｍｃｚｙｎｓｋｉら、「酸チオシアン酸グアニジニウム−フェノール−クロロホルム抽出によるＲＮＡ単離の一段方法（Ｓｉｎｇｌｅ−ｓｔｅｐ  ｍｅｔｈｏｄ  ｏｆ  ＲＮＡ  ｉｓｏｌａｔｉｏｎ  ｂｙ  ａｃｉｄ  ｇｕａｎｉｄｉｕｍ  ｔｈｉｏｃｙａｎａｔｅ−ｐｈｅｎｏｌ−ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ  ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ）」、Ａｎａｌｙｔ  Ｂｉｏｃｈｅｍ、第１６２巻、第１５６−１５９頁（１９８７年）（その全部がここに参照して組み込まれる）参照。ＲＮＡサンプル（２０ｍｇ）を、０．９％アガロース／ホルムアルデヒドゲル上で分離し、ナイロン膜（べーリンゲル社（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ）、独国マンハイム）の上に移す。膜を、ハイブリゾル（Ｈｙｂｒｉｓｏｌ）Ｉ（オンコル社（Ｏｎｃｏｒ）、メリーランド州ガイザースブルグ）及び０．５ｍｇ／ｍＬの音波処理したサケ精子ＤＮＡ（べーリンゲル社）中で、４２℃で３時間プレハイブリッド形成し、レジプライム・キット（ｒｅｄｉｐｒｉｍｅ  ｋｉｔ）（アメルシャム社（Ａｍｅｒｓｈａｍ）、英国バッキンガムシャー（Ｂｕｃｋｉｎｇｈａｍｓｈｉｒｅ））を使用するランダム初回免疫により、［３２Ｐ］−ｄＣＴＰ（アメルシャム社）で標識化したラットＥＰ２及びマウスＥＰ４ｃＤＮＡプローブで、４２℃でハイブリッド形成する。ハイブリッド形成の後、膜を、２ｘＳＳＣ＋０．１％ＳＤＳ中で４回、室温で合計１時間そして０．２ｘＳＳＣ＋０．１％ＳＤＳ中で１回、５５℃で１時間洗浄し、次いで−７０℃で増感スクリーンを使用して、コダック（Ｋｏｄａｋ）ＸＡＲ２フィルムに露出する。フィルムを現像した後、結合したプローブを、０．１％ＳＤＳで８０℃で２回除去し、膜を、担持量制御のために、ヒトＧＡＰＤＨ（グリセルアルデヒド３−リン酸デヒドロゲナーゼ）ｃＤＮＡプローブ（クロンテク社（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ）、カリフォルニア州パロアルト（Ｐａｌｏ  Ａｌｔｏ））でハイブリッド形成する。
【０１１３】
４．インシトゥハイブリッド形成
凍結した脛骨を、７ｍｍ厚さで冠状に切断し、断片を、帯電したスライド（プローブ・オン・プラス（Ｐｒｏｂｅ  Ｏｎ  Ｐｌｕｓ）、フィッシャー・サイエンティフィック社（Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）、ニュージャージー州スプリングフィールド（Ｓｐｒｉｎｇｆｉｅｌｄ））の上に装着し、−７０℃でハイブリッド形成まで保持する。ｃＲＮＡプローブを、リボプローブ（Ｒｉｂｏｐｒｏｂｅ）ＩＩキット（プロメガ社（Ｐｒｏｍｅｇａ）、ウィスコンシン州マディソン（Ｍａｄｉｓｏｎ））を使用して、３５Ｓ−ＵＴＰｇＳ（ＩＣＮ社、カリフォルニア州コスタメーサ（Ｃｏｓｔａ  Ｍｅｓａ））で標識化する。ハイブリッド形成は、５０℃で一晩実施する。Ｍ．Ｗｅｉｎｒｅｂら、「インシトゥハイブリッド形成により視覚化された発達中のラット骨内のアルカリ性ホスファターゼ、オステオポンチン及びオステオカルシン発現の異なったパターン（Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ  ｐａｔｔｅｒｎ  ｏｆ  ａｌｋａｌｉｎｅ  ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ，ｏｓｔｅｏｐｏｎｔｉｎ  ａｎｄ  ｏｓｔｅｏｃａｌｃｉｎ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｉｎ  ｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇ  ｒａｔ  ｂｏｎｅ  ｖｉｓｕａｌｉｚｅｄ  ｂｙ  ｉｎ−ｓｉｔｕ  ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ）」、Ｊ．Ｂｏｎｅ  Ｍｉｎｅｒ  Ｒｅｓ．、第５巻、第８３１−８４２頁（１９９０年）及びＤ．Ｓｈｉｎａｒら、「インシトゥでのラット破骨細胞に於けるα−及びβ３インテグリンサブユニットの発現（Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  ａｌｐｈａｒ  ａｎｄ  ｂｅｔａ３  ｉｎｔｅｇｒｉｎ  ｓｕｂｕｎｉｔｓ  ｉｎ  ｒａｔ  ｏｓｔｅｏｃｌａｓｔｓ  ｉｎ  ｓｉｔｕ）」、Ｊ．Ｂｏｎｅ  Ｍｉｎｅｒ．  Ｒｅｓ．、第８巻、第４０３−４１４頁（１９９３年）（共に、それらの全部がここに参照して組み込まれる）参照。ハイブリッド形成及び洗浄に続いて、断片を、水中６％グリセロールで２：１希釈したイルフォード（Ｉｌｆｏｒｄ）Ｋ５エマルジョン中に４２℃で浸漬し、暗所中に４℃で１２から１４日間露出する。スライドを、水で１：１希釈したコダックＤ−１９中で１５℃で現像し、定着し、蒸留水で洗浄し、そしてヘマトキシリン染色した後にグリセロール−ゼラチン（シグマ社（Ｓｉｇｍａ））を載せる。染色した断片を、明視野又は暗視野光学を使用して、顕微鏡（オリンパス社（Ｏｌｙｍｐｕｓ）、独国ハンブルグ）下で見る。
【０１１４】
５．骨芽細胞系内及び骨組織内のＥＰ４の発現
ＥＰ４及びＥＰ２ｍＲＮＡの発現を、骨芽細胞富化一次ラット頭蓋冠細胞、ラット胎仔頭蓋冠からの又は成ラット脛骨からの不死化された骨芽細胞系及び骨芽細胞骨肉腫細胞系を含む種々の骨誘導細胞中で検査する。この骨芽細胞及び細胞系の大部分は、ラット骨肉腫細胞系ＲＯＳ１７／２．８以外は、顕著な量の３．８ｋｂ  ＥＰ４ｍＲＮＡを示す。この発見と一致して、ＲＯＳ１７／２．８細胞に於いて、ＰＧＥ２は、ＲＣＴ−３及びＴＲＡＢ−１１細胞に於いて顕著に誘発される、細胞内ｃＡＭＰへの影響を有しない。それらの分化を促進する、レチノン酸によるＲＣＴ−１細胞の処理は、ＥＰ４ｍＲＮＡのレベルを低下させない。ＮＲＫ線維芽細胞はＥＰ４ｍＲＮＡを発現せず、他方、正の対照として使用されるＰ８１５マスト細胞腫細胞は、大量のＥＰ４ｍＲＮＡを発現する。ＥＰ４ｍＲＮＡとは反対に、骨芽細胞及び細胞系列のどれも、全ＲＮＡサンプルに於いて検出可能な量のＥＰ２ｍＲＡを発現しない。骨芽細胞内のＥＰ４ｍＲＮＡの発現、ＥＰ４は、５週齢ラットの脛骨及び頭蓋冠から単離された全ＲＮＡ内で発現される。反対に、ＥＰ２ｍＲＮＡは、脛骨幹からのＲＮＡ内に見出されない。
【０１１５】
６．ＰＧＥ２は、ＲＰ−１骨膜細胞内及び成ラット脛骨内のＥＰ４ｍＲＮＡの発現を誘発する
ＰＧＥ２は、骨芽細胞内及び骨組織内のシクロオキシゲナーゼ２発現の上向き調節によりそれ自体の産生を増強し、そうしてそれ自体の効果を自己増幅する。ＰＧＥ２は、また、ＥＰ４ｍＲＮＡのレベルを上昇させる。ＲＰ−１細胞は、検査された成ラット脛骨骨膜の一次培養から不死化される。これらの細胞は、合流の際に骨芽細胞表現型マーカーを発現し、ヌードマウスに移植したとき無機化した骨マトリックスを形成する。検査した他の骨芽細胞と同様に、ＲＰ−１骨膜細胞は、３．８ｋｂＥＰ４転写を発現する。ＰＧＥ２（１０−６Ｍ）による処理によって、ＥＰ４ｍＲＮＡレベルが急速に上昇し、処理後２時間でピークになる。ＰＧＥ２は、一層分化したＲＣＴ−３細胞内のＥＰ４ｍＲＮＡレベルへの影響を有さず、ＰＧＥ２によるＥＰ４発現の細胞型特異調節を指す。ＥＰ２ｍＲＮＡは、ＰＧＥ２による処理の前後でＲＰ−１細胞内で発現しない。
【０１１６】
骨組織内でインビボでＰＧＥ２がＥＰ４ｍＲＮＡレベルを調節するかどうかを検査するために、５週齢の雄ラットにＰＧＥ２（３から６ｍｇ／Ｋｇ）を注射する。ＰＧＥ２の全身投薬によって、脛骨骨幹内でＥＰ４ｍＲＮＡレベルが急速に上昇し、注射後２時間でピークになる。ＥＰ４ｍＲＮＡへのＰＧＥ２の同様の影響が、脛骨骨幹端及び頭蓋冠内で観察される。ＰＧＥ２は、細胞型特異的及び組織特異的方式で、骨原性骨膜細胞内でインビトロで及び骨組織内でインビボで、ＥＰ４ｍＲＮＡレベルを誘発する。ＰＧＥ２は、ＲＰ−１細胞内でも骨組織内でも、ＥＰ２ｍＲＮＡを誘発しない。
【０１１７】
７．骨組織内のＥＰ４ｍＲＮＡ発現の局在化
インシトゥハイブリッド形成は、骨内でＥＰ４を発現する細胞を局在化するために使用される。対照実験（ビヒクル注射した）ラットに於いて、ＥＰ４の低い発現が、骨髄細胞内で検出される。ＰＧＥ２の１回同化用量の投薬によって、骨髄細胞内のＥＰ４の発現が増加した。骨髄上の銀粒子の分布は均一ではなく、骨幹端の多くの領域でクランプ又はパッチ状になる。脛骨骨幹端内で、ＥＰ４発現は、二次海綿状領域に限定され、一次海綿状領域には見られない。知覚プローブでの類似の断片のハイブリッド形成（負の対照）は、如何なる徴候も示さない。
【０１１８】
ＥＰ４は、インビトロで骨芽細胞内でそしてインビボで骨髄細胞内で発現され、そのリガンド、ＰＧＥ２により上向き調節される。
【０１１９】
８．本発明の作動薬
作動薬活性を測定するための標準方法を使用して、下記の化合物を、細胞培養及びＥＰ４受容体細胞無しシステムに於いて評価して、それらのＥＣ５０値の項目で化合物の作動薬活性を決定する。
【国際調査報告】
2005534653.tif 000016
2005534653.tif 000017
2005534653.tif 000018
2005534653.tif 000019
2005534653.tif 000020