(57)【要約】本発明は、プロテアーゼのインターロイキン−１β−変換酵素（ＩＣＥ）／ＣＥＤ−３ファミリーのメンバーの活性を抑制することにより、感染症を治療しそれに付随した炎症を抑制するかその症状を改善する方法および組成物を提供する。また、これらの目的のために有用な組成物も提供されている。本発明の方法で有用な代表的な化合物は、本明細書中で提供されている。本発明は、一般に、プログラムされた細胞死に関し、具体的には、インターロイキン−１β−変換酵素（ＩＣＥ）／ＣＥＤ−３ファミリーインヒビターを用いて、それに付随した炎症および症状を改善または予防する組成物および方法に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
感染症を改善または治療する方法であって、細胞集団を、インターロイキン−１β−変換酵素（ＩＣＥ）／ＣＥＤ−３ファミリーの少なくとも１個のメンバーのプロテアーゼ活性を抑制する試薬の阻害有効量と接触させて、それにより、感染症を改善または治療する工程を包含する、
方法。
【請求項２】
前記感染症が、ウイルスである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記接触が、インビトロで行われる、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記接触が、インビボで行われる、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記試薬が、非可逆的な様式で前記プロテアーゼ活性を抑制する、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記試薬が、可逆的な様式で前記プロテアーゼ活性を抑制する、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記試薬が、式１の化合物またはそれらの薬学的に受容可能な塩である、請求項１に記載の方法であって：
【化１】
2005506346.tif 000077
ここで：
ｎは、１または２である；
Ｒ１は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、（置換）フェニル、フェニルアルキル、（置換）フェニルアルキル、ヘテロアリール、（ヘテロアリール）アルキルまたは（ＣＨ２）ｍＣＯ２Ｒ４であり、ここで、ｍ＝１〜４であり、そしてＲ４は、以下で定義する；
Ｒ２は、水素原子、クロロ、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、（置換）フェニル、フェニルアルキル、（置換）フェニルアルキル、ヘテロアリール、（ヘテロアリール）アルキルまたは（ＣＨ２）ｐＣＯ２Ｒ５であり、ここで、ｐ＝０〜４であり、そしてＲ５は、以下で定義する；
Ｒ３は、水素原子、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニルアルキルまたは（置換）フェニルアルキルである；
Ｒ４は、水素原子、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニルアルキルまたは（置換）フェニルアルキルである；
Ｒ５は、水素原子、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニルアルキルまたは（置換）フェニルアルキルである；
Ａは、天然または非天然のアミノ酸である；
Ｂは、水素原子、重水素原子、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、（置換）フェニル、フェニルアルキル、（置換）フェニルアルキル、ヘテロアリール、（ヘテロアリール）アルキル、ハロメチル、ＣＨ２ＺＲ６、ＣＨ２ＯＣＯ（アリール）、ＣＨ２ＯＣＯ（ヘテロアリール）、またはＣＨ２ＯＰＯ（Ｒ７）Ｒ８であり、
ここで、Ｚは、酸素原子またはイオウ原子である；
Ｒ６は、フェニル、置換フェニル、フェニルアルキル、置換フェニルアルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；そして
Ｒ７およびＲ８は、独立して、アルキル、シクロアルキル、フェニル、置換フェニル、フェニルアルキル、（置換フェニル）アルキルおよび（シクロアルキル）アルキルからなる群から選択される；そして
ＸおよびＹは、独立して、水素原子、ハロ、トリハロメチル、アミノ、保護アミノ、アミノ塩、一置換アミノ、二置換アミノ、カルボキシ、保護カルボキシ、カルボン酸塩、ヒドロキシ、保護ヒドロキシ、ヒドロキシ基の塩、低級アルコキシ、低級アルキルチオ、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、置換（シクロアルキル）アルキル、フェニル、置換フェニル、フェニルアルキルおよび（置換フェニル）アルキルからなる群から選択される、
方法。
【請求項８】
前記試薬が、式３の化合物およびそれらの薬学的に受容可能な塩である、請求項１に記載の方法であって：
【化２】
2005506346.tif 000078
ここで：
ｎは、１または２である；
ｍは、１または２である；
Ａは、Ｒ２ＣＯ−、Ｒ３−Ｏ−ＣＯ−またはＲ４ＳＯ２−；
次式の基：
【化３】
2005506346.tif 000079
さらに、ここで：
Ｒ１は、水素原子、アルキルまたはフェニルアルキルである；
Ｒ２は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、フェニルアルキル、置換フェニル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；
Ｒ３は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニルアルキルまたは（置換フェニル）アルキルである；
Ｒ４は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、フェニルアルキル、置換フェニル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；
Ｒ５は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、フェニルアルキル、置換フェニル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；
Ｒ６は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニルアルキルまたは（置換フェニル）アルキルである；
Ｒ７は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、フェニルアルキル、置換フェニル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；
Ｒ８は、天然および非天然アミノ酸からなる群から選択されるアミノ酸側鎖である；
Ｂは、水素原子、重水素原子、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、フェニルアルキル、置換フェニル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリール、（ヘテロアリール）アルキルまたはハロメチル；
次式の基：
−ＣＨ２ＸＲ９；
ここで、Ｒ９は、フェニル、置換フェニル、フェニルアルキル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；そしてＸは、酸素原子またはイオウ原子である；
次式の基：
−ＣＨ２−Ｏ−ＣＯ−（アリール）；
次式の基：
−ＣＨ２−Ｏ−ＣＯ−（ヘテロアリール）；
次式の基：
−ＣＨ２−Ｏ−ＰＯ（Ｒ１０）Ｒ１１；
ここで、Ｒ１０およびＲ１１は、独立して、アルキル、シクロアルキル、フェニル、置換フェニル、フェニルアルキルおよび（置換フェニル）アルキルからなる群から選択される、
方法。
【請求項９】
感染症が原因の炎症を予防または改善する方法であって、感染性因子に晒された細胞集団を、インターロイキン−１β−変換酵素（ＩＣＥ）／ＣＥＤ−３ファミリーの少なくとも１個のメンバーのプロテアーゼ活性を抑制する試薬の阻害有効量と接触させる工程を包含する、
方法。
【請求項１０】
前記接触が、インビトロで行われる、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記接触が、インビボで行われる、請求項９に記載の方法。
【請求項１２】
前記試薬が、非可逆的な様式で前記プロテアーゼ活性を抑制する、請求項９に記載の方法。
【請求項１３】
前記試薬が、可逆的な様式で前記プロテアーゼ活性を抑制する、請求項９に記載の方法。
【請求項１４】
前記試薬が、式１の化合物またはそれらの薬学的に受容可能な塩である、請求項９に記載の方法であって：
【化４】
2005506346.tif 000080
ここで：
ｎは、１または２である；
Ｒ１は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、（置換）フェニル、フェニルアルキル、（置換）フェニルアルキル、ヘテロアリール、（ヘテロアリール）アルキルまたは（ＣＨ２）ｍＣＯ２Ｒ４であり、ここで、ｍ＝１〜４であり、そしてＲ４は、以下で定義する；
Ｒ２は、水素原子、クロロ、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、（置換）フェニル、フェニルアルキル、（置換）フェニルアルキル、ヘテロアリール、（ヘテロアリール）アルキルまたは（ＣＨ２）ＰＣＯ２Ｒ５であり、ここで、ｐ＝０〜４であり、そしてＲ５は、以下で定義する；
Ｒ３は、水素原子、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニルアルキルまたは（置換）フェニルアルキルである；
Ｒ４は、水素原子、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニルアルキルまたは（置換）フェニルアルキルである；
Ｒ５は、水素原子、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニルアルキルまたは（置換）フェニルアルキルである；
Ａは、天然または非天然のアミノ酸である；
Ｂは、水素原子、重水素原子、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、（置換）フェニル、フェニルアルキル、（置換）フェニルアルキル、ヘテロアリール、（ヘテロアリール）アルキル、ハロメチル、ＣＨ２ＺＲ６、ＣＨ２ＯＣＯ（アリール）、ＣＨ２ＯＣＯ（ヘテロアリール）、またはＣＨ２ＯＰＯ（Ｒ７）Ｒ８であり、
ここで、Ｚは、酸素原子またはイオウ原子である；
Ｒ６は、フェニル、置換フェニル、フェニルアルキル、置換フェニルアルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；そして
Ｒ７およびＲ８は、独立して、アルキル、シクロアルキル、フェニル、置換フェニル、フェニルアルキル、（置換フェニル）アルキルおよび（シクロアルキル）アルキルからなる群から選択される；そして
ＸおよびＹは、独立して、水素原子、ハロ、トリハロメチル、アミノ、保護アミノ、アミノ塩、一置換アミノ、二置換アミノ、カルボキシ、保護カルボキシ、カルボン酸塩、ヒドロキシ、保護ヒドロキシ、ヒドロキシ基の塩、低級アルコキシ、低級アルキルチオ、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、置換（シクロアルキル）アルキル、フェニル、置換フェニル、フェニルアルキルおよび（置換フェニル）アルキルからなる群から選択される、
方法。
【請求項１５】
前記試薬が、式３の化合物およびそれらの薬学的に受容可能な塩である、請求項９に記載の方法であって：
【化５】
2005506346.tif 000081
ここで：
ｎは、１または２である；
ｍは、１または２である；
Ａは、Ｒ２ＣＯ−、Ｒ３−Ｏ−ＣＯ−またはＲ４ＳＯ２−；
次式の基：
【化６】
2005506346.tif 000082
さらに、ここで：
Ｒ１は、水素原子、アルキルまたはフェニルアルキルである；
Ｒ２は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、フェニルアルキル、置換フェニル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；
Ｒ３は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニルアルキルまたは（置換フェニル）アルキルである；
Ｒ４は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、フェニルアルキル、置換フェニル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；
Ｒ５は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、フェニルアルキル、置換フェニル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；
Ｒ６は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニルアルキルまたは（置換フェニル）アルキルである；
Ｒ７は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、フェニルアルキル、置換フェニル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；
Ｒ８は、天然および非天然アミノ酸からなる群から選択されるアミノ酸側鎖である；
Ｂは、水素原子、重水素原子、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、フェニルアルキル、置換フェニル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリール、（ヘテロアリール）アルキルまたはハロメチル；
次式の基：
−ＣＨ２ＸＲ９；
ここで、Ｒ９は、フェニル、置換フェニル、フェニルアルキル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；そしてＸは、酸素原子またはイオウ原子である；
次式の基：
−ＣＨ２−Ｏ−ＣＯ−（アリール）；
次式の基：
−ＣＨ２−Ｏ−ＣＯ−（ヘテロアリール）；
次式の基：
−ＣＨ２−Ｏ−ＰＯ（Ｒ１０）Ｒ１１；
ここで、Ｒ１０およびＲ１１は、独立して、アルキル、シクロアルキル、フェニル、置換フェニル、フェニルアルキルおよび（置換フェニル）アルキルからなる群から選択される、
方法。
【請求項１６】
炎症を予防または治療する方法であって、細胞集団を、インターロイキン−１β−変換酵素（ＩＣＥ）／ＣＥＤ−３ファミリーの少なくとも１個のメンバーのプロテアーゼ活性を抑制する試薬の阻害有効量と接触させて、それにより、炎症を予防または治療する工程を包含する、
方法。
【請求項１７】
前記炎症が、慢性炎症である、請求項２に記載の方法。
【請求項１８】
前記炎症が、急性炎症である、請求項２に記載の方法。
【請求項１９】
前記炎症が、炎症性疾患が原因である、請求項２に記載の方法。
【請求項２０】
前記炎症性疾患が、敗血症性ショック、敗血症および成人呼吸窮迫症候群からなる群から選択される、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記試薬が、非可逆的な様式で前記プロテアーゼ活性を抑制する、請求項１６に記載の方法。
【請求項２２】
前記試薬が、可逆的な様式で前記プロテアーゼ活性を抑制する、請求項１６に記載の方法。
【請求項２３】
前記試薬が、式１の化合物またはそれらの薬学的に受容可能な塩である、請求項１６に記載の方法であって：
【化７】
2005506346.tif 000083
ここで：
ｎは、１または２である；
Ｒ１は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、（置換）フェニル、フェニルアルキル、（置換）フェニルアルキル、ヘテロアリール、（ヘテロアリール）アルキルまたは（ＣＨ２）ｍＣＯ２Ｒ４であり、ここで、ｍ＝１〜４であり、そしてＲ４は、以下で定義する；
Ｒ２は、水素原子、クロロ、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、（置換）フェニル、フェニルアルキル、（置換）フェニルアルキル、ヘテロアリール、（ヘテロアリール）アルキルまたは（ＣＨ２）ｐＣＯ２Ｒ５であり、ここで、ｐ＝０〜４であり、そしてＲ５は、以下で定義する；
Ｒ３は、水素原子、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニルアルキルまたは（置換）フェニルアルキルである；
Ｒ４は、水素原子、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニルアルキルまたは（置換）フェニルアルキルである；
Ｒ５は、水素原子、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニルアルキルまたは（置換）フェニルアルキルである；
Ａは、天然または非天然のアミノ酸である；
Ｂは、水素原子、重水素原子、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、（置換）フェニル、フェニルアルキル、（置換）フェニルアルキル、ヘテロアリール、（ヘテロアリール）アルキル、ハロメチル、ＣＨ２ＺＲ６、ＣＨ２ＯＣＯ（アリール）、ＣＨ２ＯＣＯ（ヘテロアリール）、またはＣＨ２ＯＰＯ（Ｒ７）Ｒ８であり、
ここで、Ｚは、酸素原子またはイオウ原子である；
Ｒ６は、フェニル、置換フェニル、フェニルアルキル、置換フェニルアルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；そして
Ｒ７およびＲ８は、独立して、アルキル、シクロアルキル、フェニル、置換フェニル、フェニルアルキル、（置換フェニル）アルキルおよび（シクロアルキル）アルキルからなる群から選択される；そして
ＸおよびＹは、独立して、水素原子、ハロ、トリハロメチル、アミノ、保護アミノ、アミノ塩、一置換アミノ、二置換アミノ、カルボキシ、保護カルボキシ、カルボン酸塩、ヒドロキシ、保護ヒドロキシ、ヒドロキシ基の塩、低級アルコキシ、低級アルキルチオ、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、置換（シクロアルキル）アルキル、フェニル、置換フェニル、フェニルアルキルおよび（置換フェニル）アルキルからなる群から選択される、
方法。
【請求項２４】
前記試薬が、式３の化合物およびそれらの薬学的に受容可能な塩である、請求項１６に記載の方法であって：
【化８】
2005506346.tif 000084
ここで：
ｎは、１または２である；
ｍは、１または２である；
Ａは、Ｒ２ＣＯ−、Ｒ３−Ｏ−ＣＯ−またはＲ４ＳＯ２−；
次式の基：
【化９】
2005506346.tif 000085
さらに、ここで：
Ｒ１は、水素原子、アルキルまたはフェニルアルキルである；
Ｒ２は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、フェニルアルキル、置換フェニル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；
Ｒ３は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニルアルキルまたは（置換フェニル）アルキルである；
Ｒ４は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、フェニルアルキル、置換フェニル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；
Ｒ５は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、フェニルアルキル、置換フェニル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；
Ｒ６は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニルアルキルまたは（置換フェニル）アルキルである；
Ｒ７は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、フェニルアルキル、置換フェニル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；
Ｒ８は、天然および非天然アミノ酸からなる群から選択されるアミノ酸側鎖である；
Ｂは、水素原子、重水素原子、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、フェニルアルキル、置換フェニル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリール、（ヘテロアリール）アルキルまたはハロメチル；
次式の基：
−ＣＨ２ＸＲ９；
ここで、Ｒ９は、フェニル、置換フェニル、フェニルアルキル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；そしてＸは、酸素原子またはイオウ原子である；
次式の基：
−ＣＨ２−Ｏ−ＣＯ−（アリール）；
次式の基：
−ＣＨ２−Ｏ−ＣＯ−（ヘテロアリール）；
次式の基：
−ＣＨ２−Ｏ−ＰＯ（Ｒ１０）Ｒ１１；
ここで、Ｒ１０およびＲ１１は、独立して、アルキル、シクロアルキル、フェニル、置換フェニル、フェニルアルキルおよび（置換フェニル）アルキルからなる群から選択される、
方法。
【請求項２５】
化粧品、インターロイキン−１β−変換酵素（ＩＣＥ）／ＣＥＤ−３ファミリーの少なくとも１個のメンバーのプロテアーゼ活性を抑制する試薬および化粧品的または皮膚科学的に受容可能な担体を含有する組成物であって、該化粧品が原因の哺乳動物の皮膚の刺激を予防または改善するように適合されている、組成物。
【請求項２６】
前記試薬が、非可逆的な様式で前記プロテアーゼ活性を抑制する、請求項２５に記載の組成物。
【請求項２７】
前記試薬が、可逆的な様式で前記プロテアーゼ活性を抑制する、請求項２５に記載の組成物。
【請求項２８】
前記試薬が、式１の化合物またはそれらの薬学的に受容可能な塩である、請求項２５に記載の組成物であって：
【化１０】
2005506346.tif 000086
ここで：
ｎは、１または２である；
Ｒ１は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、（置換）フェニル、フェニルアルキル、（置換）フェニルアルキル、ヘテロアリール、（ヘテロアリール）アルキルまたは（ＣＨ２）ｍＣＯ２Ｒ４であり、ここで、ｍ＝１〜４であり、そしてＲ４は、以下で定義する；
Ｒ２は、水素原子、クロロ、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、（置換）フェニル、フェニルアルキル、（置換）フェニルアルキル、ヘテロアリール、（ヘテロアリール）アルキルまたは（ＣＨ２）ｐＣＯ２Ｒ５であり、ここで、ｐ＝０〜４であり、そしてＲ５は、以下で定義する；
Ｒ３は、水素原子、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニルアルキルまたは（置換）フェニルアルキルである；
Ｒ４は、水素原子、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニルアルキルまたは（置換）フェニルアルキルである；
Ｒ５は、水素原子、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニルアルキルまたは（置換）フェニルアルキルである；
Ａは、天然または非天然のアミノ酸である；
Ｂは、水素原子、重水素原子、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、（置換）フェニル、フェニルアルキル、（置換）フェニルアルキル、ヘテロアリール、（ヘテロアリール）アルキル、ハロメチル、ＣＨ２ＺＲ６、ＣＨ２ＯＣＯ（アリール）、ＣＨ２ＯＣＯ（ヘテロアリール）、またはＣＨ２ＯＰＯ（Ｒ７）Ｒ８であり、
ここで、Ｚは、酸素原子またはイオウ原子である；
Ｒ６は、フェニル、置換フェニル、フェニルアルキル、置換フェニルアルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；そして
Ｒ７およびＲ８は、独立して、アルキル、シクロアルキル、フェニル、置換フェニル、フェニルアルキル、（置換フェニル）アルキルおよび（シクロアルキル）アルキルからなる群から選択される；そして
ＸおよびＹは、独立して、水素原子、ハロ、トリハロメチル、アミノ、保護アミノ、アミノ塩、一置換アミノ、二置換アミノ、カルボキシ、保護カルボキシ、カルボン酸塩、ヒドロキシ、保護ヒドロキシ、ヒドロキシ基の塩、低級アルコキシ、低級アルキルチオ、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、置換（シクロアルキル）アルキル、フェニル、置換フェニル、フェニルアルキルおよび（置換フェニル）アルキルからなる群から選択される、
組成物。
【請求項２９】
前記試薬が、式３の化合物およびそれらの薬学的に受容可能な塩である、請求項２５に記載の組成物であって：
【化１１】
2005506346.tif 000087
ここで：
ｎは、１または２である；
ｍは、１または２である；
Ａは、Ｒ２ＣＯ−、Ｒ３−Ｏ−ＣＯ−またはＲ４ＳＯ２−；
次式の基：
【化１２】
2005506346.tif 000088
さらに、ここで：
Ｒ１は、水素原子、アルキルまたはフェニルアルキルである；
Ｒ２は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、フェニルアルキル、置換フェニル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；
Ｒ３は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニルアルキルまたは（置換フェニル）アルキルである；
Ｒ４は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、フェニルアルキル、置換フェニル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；
Ｒ５は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、フェニルアルキル、置換フェニル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；
Ｒ６は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニルアルキルまたは（置換フェニル）アルキルである；
Ｒ７は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、フェニルアルキル、置換フェニル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；
Ｒ８は、天然および非天然アミノ酸からなる群から選択されるアミノ酸側鎖である；
Ｂは、水素原子、重水素原子、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、フェニルアルキル、置換フェニル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリール、（ヘテロアリール）アルキルまたはハロメチル；
次式の基：
−ＣＨ２ＸＲ９；
ここで、Ｒ９は、フェニル、置換フェニル、フェニルアルキル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；そしてＸは、酸素原子またはイオウ原子である；
次式の基：
−ＣＨ２−Ｏ−ＣＯ−（アリール）；
次式の基：
−ＣＨ２−Ｏ−ＣＯ−（ヘテロアリール）；
次式の基：
−ＣＨ２−Ｏ−ＰＯ（Ｒ１０）Ｒ１１；
ここで、Ｒ１０およびＲ１１は、独立して、アルキル、シクロアルキル、フェニル、置換フェニル、フェニルアルキルおよび（置換フェニル）アルキルからなる群から選択される、
組成物。
【請求項３０】
哺乳動物の皮膚を刺激物と接触させることが原因の炎症を予防または改善する方法であって、該皮膚を、インターロイキン−１β−変換酵素（ＩＣＥ）／ＣＥＤ−３ファミリーの少なくとも１個のメンバーのプロテアーゼ活性を抑制する試薬と接触させる工程を包含する、
方法。
【請求項３１】
前記刺激物が、化学刺激物である、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
前記化学刺激物が、化粧品である、請求項３０に記載の方法。
【請求項３３】
前記化学刺激物が、植物に由来する、請求項３０に記載の方法。
【請求項３４】
前記植物が、ポイズンアイビー、ポイズンオークおよびポイズンスマックからなる群から選択される、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
前記刺激物が、放射線である、請求項３０に記載の方法。
【請求項３６】
前記放射線が、紫外線である、請求項３５に記載の方法。
【請求項３７】
前記試薬が、非可逆的な様式で前記プロテアーゼ活性を抑制する、請求項３０に記載の方法。
【請求項３８】
前記試薬が、可逆的な様式で前記プロテアーゼ活性を抑制する、請求項３０に記載の方法。
【請求項３９】
前記試薬が、式１の化合物またはそれらの薬学的に受容可能な塩である、請求項３０に記載の方法であって：
【化１３】
2005506346.tif 000089
ここで：
ｎは、１または２である；
Ｒ１は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、（置換）フェニル、フェニルアルキル、（置換）フェニルアルキル、ヘテロアリール、（ヘテロアリール）アルキルまたは（ＣＨ２）ｍＣＯ２Ｒ４であり、ここで、ｍ＝１〜４であり、そしてＲ４は、以下で定義する；
Ｒ２は、水素原子、クロロ、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、（置換）フェニル、フェニルアルキル、（置換）フェニルアルキル、ヘテロアリール、（ヘテロアリール）アルキルまたは（ＣＨ２）ｐＣＯ２Ｒ５であり、ここで、ｐ＝０〜４であり、そしてＲ５は、以下で定義する；
Ｒ３は、水素原子、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニルアルキルまたは（置換）フェニルアルキルである；
Ｒ４は、水素原子、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニルアルキルまたは（置換）フェニルアルキルである；
Ｒ５は、水素原子、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニルアルキルまたは（置換）フェニルアルキルである；
Ａは、天然または非天然のアミノ酸である；
Ｂは、水素原子、重水素原子、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、（置換）フェニル、フェニルアルキル、（置換）フェニルアルキル、ヘテロアリール、（ヘテロアリール）アルキル、ハロメチル、ＣＨ２ＺＲ６、ＣＨ２ＯＣＯ（アリール）、ＣＨ２ＯＣＯ（ヘテロアリール）、またはＣＨ２ＯＰＯ（Ｒ７）Ｒ８であり、
ここで、Ｚは、酸素原子またはイオウ原子である；
Ｒ６は、フェニル、置換フェニル、フェニルアルキル、置換フェニルアルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；そして
Ｒ７およびＲ８は、独立して、アルキル、シクロアルキル、フェニル、置換フェニル、フェニルアルキル、（置換フェニル）アルキルおよび（シクロアルキル）アルキルからなる群から選択される；そして
ＸおよびＹは、独立して、水素原子、ハロ、トリハロメチル、アミノ、保護アミノ、アミノ塩、一置換アミノ、二置換アミノ、カルボキシ、保護カルボキシ、カルボン酸塩、ヒドロキシ、保護ヒドロキシ、ヒドロキシ基の塩、低級アルコキシ、低級アルキルチオ、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、置換（シクロアルキル）アルキル、フェニル、置換フェニル、フェニルアルキルおよび（置換フェニル）アルキルからなる群から選択される、
方法。
【請求項４０】
前記試薬が、式３の化合物およびそれらの薬学的に受容可能な塩である、請求項３０に記載の方法であって：
【化１４】
2005506346.tif 000090
ここで：
ｎは、１または２である；
ｍは、１または２である；
Ａは、Ｒ２ＣＯ−、Ｒ３−Ｏ−ＣＯ−またはＲ４ＳＯ２−；
次式の基：
【化１５】
2005506346.tif 000091
さらに、ここで：
Ｒ１は、水素原子、アルキルまたはフェニルアルキルである；
Ｒ２は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、フェニルアルキル、置換フェニル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；
Ｒ３は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニルアルキルまたは（置換フェニル）アルキルである；
Ｒ４は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、フェニルアルキル、置換フェニル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；
Ｒ５は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、フェニルアルキル、置換フェニル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；
Ｒ６は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニルアルキルまたは（置換フェニル）アルキルである；
Ｒ７は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、フェニルアルキル、置換フェニル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；
Ｒ８は、天然および非天然アミノ酸からなる群から選択されるアミノ酸側鎖である；
Ｂは、水素原子、重水素原子、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、フェニルアルキル、置換フェニル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリール、（ヘテロアリール）アルキルまたはハロメチル；
次式の基：
−ＣＨ２ＸＲ９；
ここで、Ｒ９は、フェニル、置換フェニル、フェニルアルキル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；そしてＸは、酸素原子またはイオウ原子である；
次式の基：
−ＣＨ２−Ｏ−ＣＯ−（アリール）；
次式の基：
−ＣＨ２−Ｏ−ＣＯ−（ヘテロアリール）；
次式の基：
−ＣＨ２−Ｏ−ＰＯ（Ｒ１０）Ｒ１１；
ここで、Ｒ１０およびＲ１１は、独立して、アルキル、シクロアルキル、フェニル、置換フェニル、フェニルアルキルおよび（置換フェニル）アルキルからなる群から選択される、
方法。
【請求項４１】
インターロイキン−１β−変換酵素（ＩＣＥ）／ＣＥＤ−３ファミリーの少なくとも１個のメンバーのプロテアーゼ活性を抑制する試薬を含有する組成物であって、皮膚刺激が原因の炎症を予防または改善する際に使用する局所投与用に処方されている、組成物。
【請求項４２】
前記処方が、ローション、クリーム、ゲル、液体、固体または半固体から選択される、請求項４１に記載の組成物。
【請求項４３】
前記皮膚刺激が、皮膚を化学刺激物と接触させることが原因である、請求項４１に記載の組成物。
【請求項４４】
前記化学刺激物が、化粧品または植物由来因子である、請求項４３に記載の組成物。
【請求項４５】
前記刺激が、放射線である、請求項４１に記載の組成物。
【請求項４６】
前記刺激が、昆虫の刺傷が原因である、請求項４１に記載の組成物。
【請求項４７】
前記刺激が、昆虫の咬傷が原因である、請求項４１に記載の組成物。
【請求項４８】
前記刺激が、組織損傷が原因である、請求項４１に記載の組成物。
【請求項４９】
前記組織損傷が、身体の外傷または疾患が原因である、請求項４１に記載の組成物。
【請求項５０】
前記組織（身体の外傷または疾患）損傷が、火傷、かすり傷、切り傷、凍傷および薬物傷害からなる群から選択される、請求項４８に記載の組成物。
【請求項５１】
前記試薬が、非可逆的な様式で前記プロテアーゼ活性を抑制する、請求項４１に記載の組成物。
【請求項５２】
前記試薬が、可逆的な様式で前記プロテアーゼ活性を抑制する、請求項４１に記載の組成物。
【請求項５３】
前記試薬が、式１の化合物またはそれらの薬学的に受容可能な塩である、請求項４１に記載の組成物であって：
【化１６】
2005506346.tif 000092
ここで：
ｎは、１または２である；
Ｒ１は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、（置換）フェニル、フェニルアルキル、（置換）フェニルアルキル、ヘテロアリール、（ヘテロアリール）アルキルまたは（ＣＨ２）ｍＣＯ２Ｒ４であり、ここで、ｍ＝１〜４であり、そしてＲ４は、以下で定義する；
Ｒ２は、水素原子、クロロ、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、（置換）フェニル、フェニルアルキル、（置換）フェニルアルキル、ヘテロアリール、（ヘテロアリール）アルキルまたは（ＣＨ２）ｐＣＯ２Ｒ５であり、ここで、ｐ＝０〜４であり、そしてＲ５は、以下で定義する；
Ｒ３は、水素原子、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニルアルキルまたは（置換）フェニルアルキルである；
Ｒ４は、水素原子、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニルアルキルまたは（置換）フェニルアルキルである；
Ｒ５は、水素原子、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニルアルキルまたは（置換）フェニルアルキルである；
Ａは、天然または非天然のアミノ酸である；
Ｂは、水素原子、重水素原子、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、（置換）フェニル、フェニルアルキル、（置換）フェニルアルキル、ヘテロアリール、（ヘテロアリール）アルキル、ハロメチル、ＣＨ２ＺＲ６、ＣＨ２ＯＣＯ（アリール）、ＣＨ２ＯＣＯ（ヘテロアリール）、またはＣＨ２ＯＰＯ（Ｒ７）Ｒ８であり、
ここで、Ｚは、酸素原子またはイオウ原子である；
Ｒ６は、フェニル、置換フェニル、フェニルアルキル、置換フェニルアルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；そして
Ｒ７およびＲ８は、独立して、アルキル、シクロアルキル、フェニル、置換フェニル、フェニルアルキル、（置換フェニル）アルキルおよび（シクロアルキル）アルキルからなる群から選択される；そして
ＸおよびＹは、独立して、水素原子、ハロ、トリハロメチル、アミノ、保護アミノ、アミノ塩、一置換アミノ、二置換アミノ、カルボキシ、保護カルボキシ、カルボン酸塩、ヒドロキシ、保護ヒドロキシ、ヒドロキシ基の塩、低級アルコキシ、低級アルキルチオ、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、置換（シクロアルキル）アルキル、フェニル、置換フェニル、フェニルアルキルおよび（置換フェニル）アルキルからなる群から選択される、
組成物。
【請求項５４】
前記試薬が、式３の化合物およびそれらの薬学的に受容可能な塩である、請求項４１に記載の組成物であって：
【化１７】
2005506346.tif 000093
ここで：
ｎは、１または２である；
ｍは、１または２である；
Ａは、Ｒ２ＣＯ−、Ｒ３−Ｏ−ＣＯ−またはＲ４ＳＯ２−；
次式の基：
【化１８】
2005506346.tif 000094
さらに、ここで：
Ｒ１は、水素原子、アルキルまたはフェニルアルキルである；
Ｒ２は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、フェニルアルキル、置換フェニル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；
Ｒ３は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニルアルキルまたは（置換フェニル）アルキルである；
Ｒ４は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、フェニルアルキル、置換フェニル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；
Ｒ５は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、フェニルアルキル、置換フェニル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；
Ｒ６は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニルアルキルまたは（置換フェニル）アルキルである；
Ｒ７は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、フェニルアルキル、置換フェニル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；
Ｒ８は、天然および非天然アミノ酸からなる群から選択されるアミノ酸側鎖である；
Ｂは、水素原子、重水素原子、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、フェニルアルキル、置換フェニル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリール、（ヘテロアリール）アルキルまたはハロメチル；
次式の基：
−ＣＨ２ＸＲ９；
ここで、Ｒ９は、フェニル、置換フェニル、フェニルアルキル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；そしてＸは、酸素原子またはイオウ原子である；
次式の基：
−ＣＨ２−Ｏ−ＣＯ−（アリール）；
次式の基：
−ＣＨ２−Ｏ−ＣＯ−（ヘテロアリール）；
次式の基：
−ＣＨ２−Ｏ−ＰＯ（Ｒ１０）Ｒ１１；
ここで、Ｒ１０およびＲ１１は、独立して、アルキル、シクロアルキル、フェニル、置換フェニル、フェニルアルキルおよび（置換フェニル）アルキルからなる群から選択される、
組成物。
【請求項５５】
哺乳動物の組織を刺激物と接触させることが原因の炎症を予防または改善する方法であって、該組織を、インターロイキン−１β−変換酵素（ＩＣＥ）／ＣＥＤ−３ファミリーの少なくとも１個のメンバーのプロテアーゼ活性を抑制する試薬と接触させる工程を包含する、
方法。
【請求項５６】
前記刺激物が、化学刺激物である、請求項５５に記載の方法。
【請求項５７】
前記化学刺激物が、化粧品である、請求項５６に記載の方法。
【請求項５８】
前記化学刺激物が、植物に由来する、請求項５６に記載の方法。
【請求項５９】
前記植物が、ポイズンアイビー、ポイズンオークおよびポイズンスマックからなる群から選択される、請求項５８に記載の方法。
【請求項６０】
前記刺激物が、放射線である、請求項５５に記載の方法。
【請求項６１】
前記放射線が、紫外線である、請求項６０に記載の方法。
【請求項６２】
前記刺激物が、細菌である、請求項５５に記載の方法。
【請求項６３】
前記試薬が、非可逆的な様式で前記プロテアーゼ活性を抑制する、請求項５５に記載の方法。
【請求項６４】
前記試薬が、可逆的な様式で前記プロテアーゼ活性を抑制する、請求項５５に記載の方法。
【請求項６５】
前記試薬が、式１の化合物またはそれらの薬学的に受容可能な塩である、請求項５５に記載の方法であって：
【化１９】
2005506346.tif 000095
ここで：
ｎは、１または２である；
Ｒ１は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、（置換）フェニル、フェニルアルキル、（置換）フェニルアルキル、ヘテロアリール、（ヘテロアリール）アルキルまたは（ＣＨ２）ｍＣＯ２Ｒ４であり、ここで、ｍ＝１〜４であり、そしてＲ４は、以下で定義する；
Ｒ２は、水素原子、クロロ、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、（置換）フェニル、フェニルアルキル、（置換）フェニルアルキル、ヘテロアリール、（ヘテロアリール）アルキルまたは（ＣＨ２）ｐＣＯ２Ｒ５であり、ここで、ｐ＝０〜４であり、そしてＲ５は、以下で定義する；
Ｒ３は、水素原子、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニルアルキルまたは（置換）フェニルアルキルである；
Ｒ４は、水素原子、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニルアルキルまたは（置換）フェニルアルキルである；
Ｒ５は、水素原子、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニルアルキルまたは（置換）フェニルアルキルである；
Ａは、天然または非天然のアミノ酸である；
Ｂは、水素原子、重水素原子、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、（置換）フェニル、フェニルアルキル、（置換）フェニルアルキル、ヘテロアリール、（ヘテロアリール）アルキル、ハロメチル、ＣＨ２ＺＲ６、ＣＨ２ＯＣＯ（アリール）、ＣＨ２ＯＣＯ（ヘテロアリール）、またはＣＨ２ＯＰＯ（Ｒ７）Ｒ８であり、
ここで、Ｚは、酸素原子またはイオウ原子である；
Ｒ６は、フェニル、置換フェニル、フェニルアルキル、置換フェニルアルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；そして
Ｒ７およびＲ８は、独立して、アルキル、シクロアルキル、フェニル、置換フェニル、フェニルアルキル、（置換フェニル）アルキルおよび（シクロアルキル）アルキルからなる群から選択される；そして
ＸおよびＹは、独立して、水素原子、ハロ、トリハロメチル、アミノ、保護アミノ、アミノ塩、一置換アミノ、二置換アミノ、カルボキシ、保護カルボキシ、カルボン酸塩、ヒドロキシ、保護ヒドロキシ、ヒドロキシ基の塩、低級アルコキシ、低級アルキルチオ、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、置換（シクロアルキル）アルキル、フェニル、置換フェニル、フェニルアルキルおよび（置換フェニル）アルキルからなる群から選択される、
方法。
【請求項６６】
前記試薬が、式３の化合物およびそれらの薬学的に受容可能な塩である、請求項５５に記載の方法であって：
【化２０】
2005506346.tif 000096
ここで：
ｎは、１または２である；
ｍは、１または２である；
Ａは、Ｒ２ＣＯ−、Ｒ３−Ｏ−ＣＯ−またはＲ４ＳＯ２−；
次式の基：
【化２１】
2005506346.tif 000097
さらに、ここで：
Ｒ１は、水素原子、アルキルまたはフェニルアルキルである；
Ｒ２は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、フェニルアルキル、置換フェニル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；
Ｒ３は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニルアルキルまたは（置換フェニル）アルキルである；
Ｒ４は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、フェニルアルキル、置換フェニル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；
Ｒ５は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、フェニルアルキル、置換フェニル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；
Ｒ６は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニルアルキルまたは（置換フェニル）アルキルである；
Ｒ７は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、フェニルアルキル、置換フェニル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；
Ｒ８は、天然および非天然アミノ酸からなる群から選択されるアミノ酸側鎖である；
Ｂは、水素原子、重水素原子、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、フェニルアルキル、置換フェニル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリール、（ヘテロアリール）アルキルまたはハロメチル；
次式の基：
−ＣＨ２ＸＲ９；
ここで、Ｒ９は、フェニル、置換フェニル、フェニルアルキル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；そしてＸは、酸素原子またはイオウ原子である；
次式の基：
−ＣＨ２−Ｏ−ＣＯ−（アリール）；
次式の基：
−ＣＨ２−Ｏ−ＣＯ−（ヘテロアリール）；
次式の基：
−ＣＨ２−Ｏ−ＰＯ（Ｒ１０）Ｒ１１；
ここで、Ｒ１０およびＲ１１は、独立して、アルキル、シクロアルキル、フェニル、置換フェニル、フェニルアルキルおよび（置換フェニル）アルキルからなる群から選択される、
方法。
【請求項６７】
組織損傷に付随した炎症を予防または改善する方法であって、該組織を、インターロイキン−１β−変換酵素（ＩＣＥ）／ＣＥＤ−３ファミリーの少なくとも１個のメンバーのプロテアーゼ活性を抑制する試薬と接触させる工程を包含する、
方法。
【請求項６８】
前記組織損傷が、身体の外傷が原因である、請求項６７に記載の方法。
【請求項６９】
前記組織損傷が、自己免疫応答が原因である、請求項６７に記載の方法。
【請求項７０】
前記組織損傷が、感染症が原因である、請求項６７に記載の方法。
【請求項７１】
前記組織損傷が、慢性疾患が原因である、請求項６７に記載の方法。
【請求項７２】
前記組織損傷が、脊髄または脳の外傷が原因である、請求項６７に記載の方法。
【請求項７３】
前記組織損傷が、酸が原因である、請求項６７に記載の方法。
【請求項７４】
前記組織損傷が、塩基が原因である、請求項６７に記載の方法。
【請求項７５】
前記組織損傷が、放射線が原因である、請求項６７に記載の方法。
【請求項７６】
前記試薬が、非可逆的な様式で前記プロテアーゼ活性を抑制する、請求項６７に記載の方法。
【請求項７７】
前記試薬が、可逆的な様式で前記プロテアーゼ活性を抑制する、請求項６７に記載の方法。
【請求項７８】
前記試薬が、式１の化合物またはそれらの薬学的に受容可能な塩である、請求項６７に記載の方法であって：
【化２２】
2005506346.tif 000098
ここで：
ｎは、１または２である；
Ｒ１は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、（置換）フェニル、フェニルアルキル、（置換）フェニルアルキル、ヘテロアリール、（ヘテロアリール）アルキルまたは（ＣＨ２）ｍＣＯ２Ｒ４であり、ここで、ｍ＝１〜４であり、そしてＲ４は、以下で定義する；
Ｒ２は、水素原子、クロロ、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、（置換）フェニル、フェニルアルキル、（置換）フェニルアルキル、ヘテロアリール、（ヘテロアリール）アルキルまたは（ＣＨ２）ｐＣＯ２Ｒ５であり、ここで、ｐ＝０〜４であり、そしてＲ５は、以下で定義する；
Ｒ３は、水素原子、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニルアルキルまたは（置換）フェニルアルキルである；
Ｒ４は、水素原子、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニルアルキルまたは（置換）フェニルアルキルである；
Ｒ５は、水素原子、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニルアルキルまたは（置換）フェニルアルキルである；
Ａは、天然または非天然のアミノ酸である；
Ｂは、水素原子、重水素原子、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、（置換）フェニル、フェニルアルキル、（置換）フェニルアルキル、ヘテロアリール、（ヘテロアリール）アルキル、ハロメチル、ＣＨ２ＺＲ６、ＣＨ２ＯＣＯ（アリール）、ＣＨ２ＯＣＯ（ヘテロアリール）、またはＣＨ２ＯＰＯ（Ｒ７）Ｒ８であり、
ここで、Ｚは、酸素原子またはイオウ原子である；
Ｒ６は、フェニル、置換フェニル、フェニルアルキル、置換フェニルアルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；そして
Ｒ７およびＲ８は、独立して、アルキル、シクロアルキル、フェニル、置換フェニル、フェニルアルキル、（置換フェニル）アルキルおよび（シクロアルキル）アルキルからなる群から選択される；そして
ＸおよびＹは、独立して、水素原子、ハロ、トリハロメチル、アミノ、保護アミノ、アミノ塩、一置換アミノ、二置換アミノ、カルボキシ、保護カルボキシ、カルボン酸塩、ヒドロキシ、保護ヒドロキシ、ヒドロキシ基の塩、低級アルコキシ、低級アルキルチオ、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、置換（シクロアルキル）アルキル、フェニル、置換フェニル、フェニルアルキルおよび（置換フェニル）アルキルからなる群から選択される、
方法。
【請求項７９】
前記試薬が、式３の化合物およびそれらの薬学的に受容可能な塩である、請求項６７に記載の方法であって：
【化２３】
2005506346.tif 000099
ここで：
ｎは、１または２である；
ｍは、１または２である；
Ａは、Ｒ２ＣＯ−、Ｒ３−Ｏ−ＣＯ−またはＲ４ＳＯ２−；
次式の基：
【化２４】
2005506346.tif 000100
さらに、ここで：
Ｒ１は、水素原子、アルキルまたはフェニルアルキルである；
Ｒ２は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、フェニルアルキル、置換フェニル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；
Ｒ３は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニルアルキルまたは（置換フェニル）アルキルである；
Ｒ４は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、フェニルアルキル、置換フェニル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；
Ｒ５は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、フェニルアルキル、置換フェニル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；
Ｒ６は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニルアルキルまたは（置換フェニル）アルキルである；
Ｒ７は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、フェニルアルキル、置換フェニル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；
Ｒ８は、天然および非天然アミノ酸からなる群から選択されるアミノ酸側鎖である；
Ｂは、水素原子、重水素原子、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、フェニルアルキル、置換フェニル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリール、（ヘテロアリール）アルキルまたはハロメチル；
次式の基：
−ＣＨ２ＸＲ９；
ここで、Ｒ９は、フェニル、置換フェニル、フェニルアルキル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；そしてＸは、酸素原子またはイオウ原子である；
次式の基：
−ＣＨ２−Ｏ−ＣＯ−（アリール）；
次式の基：
−ＣＨ２−Ｏ−ＣＯ−（ヘテロアリール）；
次式の基：
−ＣＨ２−Ｏ−ＰＯ（Ｒ１０）Ｒ１１；
ここで、Ｒ１０およびＲ１１は、独立して、アルキル、シクロアルキル、フェニル、置換フェニル、フェニルアルキルおよび（置換フェニル）アルキルからなる群から選択される、
方法。
【請求項８０】
インターロイキン−１β−変換酵素（ＩＣＥ）／ＣＥＤ−３ファミリーの少なくとも１個のメンバーのプロテアーゼ活性を抑制する試薬および薬学的、皮膚科学的または化粧品的に受容可能な担体を含有する組成物であって、動物の皮膚または粘膜に局所塗布するように処方されている、組成物。
【請求項８１】
前記組成物が、炎症応答に付随した症状を改善する、請求項８０に記載の組成物。
【請求項８２】
前記症状が、そう痒、発赤または腫れを含む、請求項８１に記載の組成物。
【請求項８３】
前記組成物が、コラーゲンの損失を少なくするか皮膚の弾性および外観を維持する際に有用である、請求項８０に記載の組成物。
【請求項８４】
前記試薬が、非可逆的な様式で前記プロテアーゼ活性を抑制する、請求項８０に記載の組成物。
【請求項８５】
前記試薬が、可逆的な様式で前記プロテアーゼ活性を抑制する、請求項８０に記載の組成物。
【請求項８６】
前記試薬が、式１の化合物またはそれらの薬学的に受容可能な塩である、請求項８０に記載の組成物であって：
【化２５】
2005506346.tif 000101
ここで：
ｎは、１または２である；
Ｒ１は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、（置換）フェニル、フェニルアルキル、（置換）フェニルアルキル、ヘテロアリール、（ヘテロアリール）アルキルまたは（ＣＨ２）ｍＣＯ２Ｒ４であり、ここで、ｍ＝１〜４であり、そしてＲ４は、以下で定義する；
Ｒ２は、水素原子、クロロ、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、（置換）フェニル、フェニルアルキル、（置換）フェニルアルキル、ヘテロアリール、（ヘテロアリール）アルキルまたは（ＣＨ２）ｐＣＯ２Ｒ５であり、ここで、ｐ＝０〜４であり、そしてＲ５は、以下で定義する；
Ｒ３は、水素原子、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニルアルキルまたは（置換）フェニルアルキルである；
Ｒ４は、水素原子、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニルアルキルまたは（置換）フェニルアルキルである；
Ｒ５は、水素原子、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニルアルキルまたは（置換）フェニルアルキルである；
Ａは、天然または非天然のアミノ酸である；
Ｂは、水素原子、重水素原子、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、（置換）フェニル、フェニルアルキル、（置換）フェニルアルキル、ヘテロアリール、（ヘテロアリール）アルキル、ハロメチル、ＣＨ２ＺＲ６、ＣＨ２ＯＣＯ（アリール）、ＣＨ２ＯＣＯ（ヘテロアリール）、またはＣＨ２ＯＰＯ（Ｒ７）Ｒ８であり、
ここで、Ｚは、酸素原子またはイオウ原子である；
Ｒ６は、フェニル、置換フェニル、フェニルアルキル、置換フェニルアルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；そして
Ｒ７およびＲ８は、独立して、アルキル、シクロアルキル、フェニル、置換フェニル、フェニルアルキル、（置換フェニル）アルキルおよび（シクロアルキル）アルキルからなる群から選択される；そして
ＸおよびＹは、独立して、水素原子、ハロ、トリハロメチル、アミノ、保護アミノ、アミノ塩、一置換アミノ、二置換アミノ、カルボキシ、保護カルボキシ、カルボン酸塩、ヒドロキシ、保護ヒドロキシ、ヒドロキシ基の塩、低級アルコキシ、低級アルキルチオ、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、置換（シクロアルキル）アルキル、フェニル、置換フェニル、フェニルアルキルおよび（置換フェニル）アルキルからなる群から選択される、
組成物。
【請求項８７】
前記試薬が、式３の化合物およびそれらの薬学的に受容可能な塩である、請求項８０に記載の組成物であって：
【化２６】
2005506346.tif 000102
ここで：
ｎは、１または２である；
ｍは、１または２である；
Ａは、Ｒ２ＣＯ−、Ｒ３−Ｏ−ＣＯ−またはＲ４ＳＯ２−；
次式の基：
【化２７】
2005506346.tif 000103
さらに、ここで：
Ｒ１は、水素原子、アルキルまたはフェニルアルキルである；
Ｒ２は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、フェニルアルキル、置換フェニル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；
Ｒ３は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニルアルキルまたは（置換フェニル）アルキルである；
Ｒ４は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、フェニルアルキル、置換フェニル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；
Ｒ５は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、フェニルアルキル、置換フェニル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；
Ｒ６は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニルアルキルまたは（置換フェニル）アルキルである；
Ｒ７は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、フェニルアルキル、置換フェニル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；
Ｒ８は、天然および非天然アミノ酸からなる群から選択されるアミノ酸側鎖である；
Ｂは、水素原子、重水素原子、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、フェニルアルキル、置換フェニル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリール、（ヘテロアリール）アルキルまたはハロメチル；
次式の基：
−ＣＨ２ＸＲ９；
ここで、Ｒ９は、フェニル、置換フェニル、フェニルアルキル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；そしてＸは、酸素原子またはイオウ原子である；
次式の基：
−ＣＨ２−Ｏ−ＣＯ−（アリール）；
次式の基：
−ＣＨ２−Ｏ−ＣＯ−（ヘテロアリール）；
次式の基：
−ＣＨ２−Ｏ−ＰＯ（Ｒ１０）Ｒ１１；
ここで、Ｒ１０およびＲ１１は、独立して、アルキル、シクロアルキル、フェニル、置換フェニル、フェニルアルキルおよび（置換フェニル）アルキルからなる群から選択される、
組成物。
【請求項８８】
組織の炎症を少なくする方法であって、該組織を、インターロイキン−１β−変換酵素（ＩＣＥ）／ＣＥＤ−３ファミリーの少なくとも１個のメンバーのプロテアーゼ活性を抑制する試薬の有効量と接触させて、それにより、該組織を炎症を少なくする工程を包含する、
方法。
【請求項８９】
前記組織が、皮膚である、請求項８８に記載の方法。
【請求項９０】
前記組織炎症が、外傷、日焼け、湿疹、接触アレルギー、皮膚炎、乾癬、丹毒、ざ瘡、嵌入爪、切り傷、火傷、昆虫の咬傷、昆虫の刺傷またはそう痒が原因である、請求項８７に記載の方法。
【請求項９１】
前記組織が、粘膜である、請求項８８に記載の方法。
【請求項９２】
前記組織炎症が、膣炎、痔核、結膜炎、歯周炎、親知らず萌生、抜歯、歯肉炎、歯周膿瘍または補綴物が原因である、請求項８８に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
（発明の分野）
本発明は、一般に、プログラムされた細胞死に関し、具体的には、インターロイキン−１β−変換酵素（ＩＣＥ）／ＣＥＤ−３ファミリーインヒビターを用いて、それに付随した炎症および症状を改善または予防する組成物および方法に関する。
【０００２】
（関連技術の説明）
本発明は、一般に、プログラムされた細胞死に関し、具体的には、インターロイキン−１β−変換酵素（ＩＣＥ）／ＣＥＤ−３ファミリーインヒビターを用いて、造血細胞を拡張し、移植用の臓器の生存度を延ばし、そして生物生産において使用される細胞系の生存度を維持する方法に関する。
【０００３】
ネクローシスおよびアポトーシスは、細胞が死滅し得る２つの基本的なプロセスである。ネクローシスでは、細胞死は、通常、細胞損傷の結果である。その細胞は、一般に、膨潤および溶解し、細胞内容物は、細胞外空間にあふれる。対照的に、アポトーシスは、単一細胞が生体組織の中で消去される形態の細胞死である。アポトーシスは、再構築された組織でのプログラムされた細胞死の殆どの原因であり、エンドクリンおよび他の成長刺激剤の使用中止に続く成体組織の萎縮に付随する細胞損失の原因である。加えて、アポトーシスは、正常組織のターンオーバー（すなわち、細胞ホメオスタシス）の過程での細胞の生理学的な死の原因であると考えられている（Ｋｅｒｒ、Ｊ．Ｆ．ら、１９７２．Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ  ２６：２３９−２５７；Ｗｙｌｌｉｅ、Ａ．Ｈ．ら、１９８０．Ｉｎｔ．Ｒｅｖ．Ｃｙｔｏｌ．６８：２５１−３０６）。
【０００４】
アポトーシスの作動メカニズムは、完全には理解されていないが、最終的に、ある種の核変化が起こり、それは、内因性ヌクレアーゼの活性化により起こり、ヌクレオソーム間のクロマチンを切断し、そしてアポトーシス細胞中のインタクトＤＮＡの含量を低減すると思われる。多数のアポトーシス調節剤が同定されている。それらの一部は、プロトオンコジーンおよびオンコサプレッサー遺伝子（ｃ−ｍｙｃ、ｂｃｌ−２、ｐ５３およびｒａｓを含めて）として、既に知られている。このプロトオンコジーン産物およびオンコサプレッサータンパク質は、アポトーシスに対する細胞感受性を制御すると考えられている（Ｉｓｓａｃｓ、Ｊ．Ｔ．１９９４．Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．６：８２−８９）。Ｃ−ｍｙｃは、重要な成長因子の有効性に依存して、細胞が引き続いて増殖するかまたはアポトーシスに入るかどうかを決定し得る（Ｂｉｓｏｎｎｅｔｅ、Ｒ．Ｐ．ら、１９９４．Ｉｎ  Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ  ＩＩ：Ｔｈｅ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ  ｉｎ  Ｄｉｓｅａｓｅｓ．Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ）。培養細胞では、増殖は、通常、ｃ−ｍｙｃおよび成長因子の存在下にて観察されるが、アポトーシスは、ｃ−ｍｙｃは存在するが成長因子は存在しないときに、見られる。ある種の他のオンコジーン（例えば、ｂｃｌ−２）は、アポトーシスに対する感受性から細胞を解放する。具体的には、ｂｃｌ−２遺伝子ファミリーのメンバーは、プログラムされた細胞死を抑制するか（例えば、ｂｃｌ−２、ｂｃｌ−ｘＬ、ｃｅｄ−９）または細胞死を促進する（例えば、ｂａｘ、ｂａｋ、ｂｃｌ−ｘＳ）ように作用し得る。加えて、このＩＣＥ／ＣＥＤ−３ファミリーのメンバーは、細胞死を促進し得る（例えば、ＩＣＥ、ＣＰＰ３２、Ｉｃｈ−１、ＣＥＤ３）。
【０００５】
インターロイキン１（「ＩＬ−１」）は、主要な炎症誘発性（ｐｒｏ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ）および免疫調節性タンパク質であり、これは、繊維芽細胞の分化および増殖、滑膜細胞および軟骨細胞によるプロスタグランジン、コラゲナーゼおよびホスホリパーゼの産生、好塩基球および好酸球の脱顆粒ならびに好中球活性化を刺激する（Ｏｐｐｅｎｈｅｉｍ、Ｊ．Ｈ．ら、Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  Ｔｏｄａｙ、７：４５−５６（１９８６））。このように、これは、慢性および急性の炎症性疾患および自己免疫疾患の病因に関与する。ＩＬ−１は、炎症応答の一部として、末梢血単核細胞により、優先的に産生される（Ｍｏｓｅｌｙ、Ｂ．Ｓ．ら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．、８４：４５７２−４５７６（１９８７）；Ｌｏｎｎｅｍａｎｎ、Ｇ．ら、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１９：１５３１−１５３６（１９８９））。
【０００６】
哺乳類のＩＬ−１βは、約３１．５  ｋＤａの前駆体ポリペプチドとして、合成される（Ｌｉｎｊｕｃｏら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、８３：３９７２、１９８６）。前駆体ＩＬ−１βは、ＩＬ−１レセプターに結合できず、生体不活性である（Ｍｏｓｌｅｙら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、２６２：２９４１、１９８７）。生体活性は、タンパク質分解プロセシングに依存して現れ、その結果、前駆体３１．５  ｋＤａ形態が１７．５  ｋＤａ形態に転換される。
【０００７】
ヒト前駆体ＩＬ−１βが成熟するタンパク質分解成熟では、１７ｋＤａのＩＬ−１βは、Ａｓｐ１１６とＡｌａ１１７との間の切断から得られる。エンドプロテイナーゼ（インターロイキン−１β転化酵素（ＩＣＥ）と呼ばれる）は、Ａｓｐ１１６−Ａｌａ１１７だけでなく、Ａｓｐ２７−Ｇｌｙ２８部位にて、ＩＬ−１β前駆体を切断し得、そしてＡｌａ１１７にて、適当なアミノ酸末端で、成熟ＩＬ−１βを産生し得るヒト単核細胞において同定されている。１１６位のＡｓｐは、切断に必須であることが分かっている。なぜなら、Ａｌａ（Ｋｏｓｔｕｒａら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．、８６：５２２７、１９８９）または他のアミノ酸（Ｈｏｗａｒｄら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１４７：２９６４、１９９１）をＡｓｐと置き換えると、この切断事象を阻害するからである。
【０００８】
ヒトＩＣＥの基質特異性は、この酵素の切断部位を広げるペプチドの使用により、規定されている。ペプチド基質の２つの特徴は、その酵素による触媒認識に必須である。第１に、切断部位に隣接したアスパラギン酸は、このＩＬ−１β前駆体およびペプチド基質中のこの残基の任意の置換により、触媒作用の速度が相当減少するという点で、非常に好ましい（Ｋｏｓｔｕｒａら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．、８６：５２２７、１９８９；Ｓｌｅａｔｈら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、２６５：１４５２６、１９９０；Ｈｏｗａｒｄら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１４７：２９６４、１９９１）。この切断部位の左の４個のアミノ酸に対しては、同等に、ストリンジェントな必要条件が存在するのに対して、その右には、メチレンアミンで十分である。この酵素に対する最小基質（ＡＣ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｓｐ−ＮＨ−ＣＨ３）は、ＩＬ−１β前駆体それ自体のものと類似の相対Ｖｍａｘ／Ｋｍを有する特に良好なペプチド基質である（Ｔｈｏｍｂｅｒｒｙら、Ｎａｔｕｒｅ  ３５６：７６８、１９９２）。
【０００９】
ＩＣＥは、以下の規準により、システインプロテアーゼである：（１）ジアゾメチルケトン、ＡＣ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｓｐ−ＣＯＣＨＮＨ２は、この酵素の強力で競合性で不可逆的なインヒビターである；（２）ヨードアセテートによるこの酵素の不活性化は、基質と競合的である；および（３）触媒活性Ｃｙｓは、他のシステインまたはジチオスレイトールよりも１０倍より速く、［１４Ｃ］ヨードアセテートと選択的に反応する（Ｔｈｏｍｂｅｒｒｙら、Ｎａｔｕｒｅ  ３５６：７６８、１９９２）。
【００１０】
ＩＣＥは、線虫Ｃ．ｅｌｅｇａｎｓでの細胞死エフェクターとして機能するＣＥＤ−３プロテアーゼと、構造的かつ機能的に関連している（Ｙｕａｎら、Ｃｅｌｌ、７５：６４１、１９９３）。ＩＣＥおよびＣＥＤ−３は、より大きなプロテアーゼファミリー（ＩＣＥ／ＣＥＤ−３ファミリー）（これには、ＣＰＰ３２、ＩＣＨ−１、Ｍｃｈ−２、ＩＣＥｒｅｌＩＩ、ＩＣＥｒｅｌＩＩＩ、Ｍｃｈ−３、Ｍｃｈ−４およびＭｃｈ−５が挙げられる）の一部をなす。これらの酵素の全ては、その活性部位において、有意な相同性を共有するシステインプロテアーゼである。これらはまた、ａｓｐ−ｘ結合での基質切断に対する特異性を共有する。加えて、ＩＣＥ／ＣＥＤ−３ファミリーのメンバーのそれぞれは、プロ酵素として合成され、これは、次いで、タンパク質分解的に活性化されて、活性酵素を形成する。
【００１１】
それゆえ、システインプロテアーゼのＩＣＥ／ｃｅｄ−３ファミリーのインヒビターが治療剤として有用な疾患状態には、以下が挙げられる：感染症（例えば、髄膜炎および耳管炎）；敗血性ショック、呼吸器疾患；炎症性状態（例えば、関節炎、胆管炎、結腸炎、脳炎、子宮膜炎、肝炎、膵炎および再潅流傷害）；虚血性疾患（例えば、心筋梗塞、脳卒中および虚血性腎臓疾患）；免疫ベースの疾患（例えば、過敏性）；自己免疫疾患（例えば、多発性硬化症）；骨疾患；およびある種の神経変性疾患。
【００１２】
種々の細胞培養系では、ＩＣＥ／ＣＥＤ−３ファミリーのメンバーを阻害すれば、アポトーシスを効果的に阻害し得ることが示された。例えば、アセチル−ＤＥＶＤ−アルデヒド化合物は、Ｔ−リンパ球細胞株にて、抗Ｆａｓ誘発のアポトーシスを抑制した（Ｓｃｈｌｅｇｅｌら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７１：１８４１、１９９６；Ｅｎａｒｉら、Ｎａｔｕｒｅ、３８０：７２３、１９９６）。同様に、アセチル−ＹＶＡＤ−アルデヒドおよびアセチル−ＹＶＡＤ−クロロメチルケトンは、インビトロおよびインビボにて、運動ニューロンの死をブロックした（Ｍｉｌｌｉｇａｎら、Ｎｅｕｒｏｎ、１５：３８５、１９９５）。加えて、ＩＣＥ／ＣＥＤ−３ファミリーインヒビターであるＢｏｃ−Ｄ−（ベンジル）クロロメチルケトンおよびｃｒｍＡは、細胞外マトリックスがないときに起こる哺乳類の上皮細胞の細胞死を防止した（Ｂｏｕｄｒｅａｕら、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２６７：８９１、１９９５）。
【００１３】
アポトーシスの制御は、疾患治療に有用性があり得ることが知られている。具体的には、ＩＣＥ／ＣＥＤ−３ファミリーのインヒビターは、治療効果を有し得る。例えば、ＩＣＥの抑制は、炎症障害の治療に有用であり得ることが示唆されている（Ｄｏｌｌｅら、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．３７：５６３、１９９４；Ｔｈｏｍｂｅｒｒｙら、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、３３：３９３４、１９９４）。ＩＣＥ／ＣＥＤ−３ファミリーメンバーのインヒビターは、変性疾患、例えば、神経変性疾患（例えば、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化、ハンチントン病）、心臓または中枢神経系の虚血性疾患（例えば、心筋梗塞および脳卒中）、および外傷性脳障害だけでなく、脱毛、エイズおよび毒物誘発性肝臓疾患を治療する際に、有用性を有し得ることも、知られている（Ｎｉｃｈｏｌｓｏｎ、Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １４：２９７、１９９６）。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１４】
ＩＣＥのペプチドおよびペプチジルインヒビターが記述されている。しかしながら、このようなインヒビターは、典型的には、望ましくない薬理学特性（例えば、乏しい経口吸収性、乏しい安定性および迅速な代謝）により、特徴づけられる（Ｐｌａｔｔｎｅｒ、Ｊ．Ｊ．およびＤ．Ｗ．Ｎｏｒｂｅｃｋ、Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｃ．Ｒ．ＣｌａｒｋおよびＷ．Ｈ．Ｍｏｏｓ著（Ｅｌｌｉｓ  Ｈｏｒｗｏｏｄ、Ｃｈｉｃｈｅｓｔｅｒ、Ｅｎｇｌａｎｄ、１９９０）、ｐｐ．９２−１２６）。これらの望ましくない特性は、効果的な薬剤の開発を妨害している。本発明の方法は、立体的に束縛されたジペプチド擬態物またはＮ−置換インドイルペプチド代替物のいずれかの使用を包含する。これらの擬態物は、そのペプチド対応物と比較して、改良された特性（例えば、改良された吸収性および代謝安定性）を示し、その結果、バイオアベイラビリティーが高まる。
【課題を解決するための手段】
【００１５】
（発明の簡単な要旨）
本発明は、インターロイキン−１β−変換酵素（ＩＣＥ）／ＣＥＤ−３ファミリーのプロテアーゼの活性を阻害することにより、炎症および／またはその症状（例えば、発赤、刺激、そう痒、浮腫（腫れ）、火傷など）を改善することに関する。本発明は、ＩＣＥ／ＣＥＤ−３インヒビターを使用するための新規組成物および方法を提供する。
【００１６】
本発明は、一般に、炎症を予防または治療する方法および組成物を提供する。１局面では、本発明は、細胞集団を、インターロイキン−１β−変換酵素（ＩＣＥ）／ＣＥＤ−３ファミリーの少なくとも１個のメンバーのプロテアーゼ活性を抑制する試薬の阻害有効量と接触させて、それにより、炎症を予防または治療することにより、炎症を予防または治療する方法を提供する。ある実施態様では、前記炎症は、慢性炎症、急性炎症であるか、炎症性疾患が原因である。さらに他の実施態様では、前記炎症性疾患は、敗血症性ショック、敗血症および成人呼吸窮迫症候群からなる群から選択される。他の実施態様では、前記試薬は、非可逆的な様式または可逆的な様式で前記プロテアーゼ活性を抑制する。他の実施態様では、前記試薬は、化合物またはそれらの薬学的に受容可能な塩である。前記化合物は、式１により表わされる：
【００１７】
【化２８】
2005506346.tif 000002
ここで：
ｎは、１または２である；Ｒ１は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、（置換）フェニル、フェニルアルキル、（置換）フェニルアルキル、ヘテロアリール、（ヘテロアリール）アルキルまたは（ＣＨ２）ｍＣＯ２Ｒ４であり、ここで、ｍ＝１〜４であり、そしてＲ４は、以下で定義するとおりである；Ｒ２は、水素原子、クロロ、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、（置換）フェニル、フェニルアルキル、（置換）フェニルアルキル、ヘテロアリール、（ヘテロアリール）アルキルまたは（ＣＨ２）ＰＣＯ２Ｒ５であり、ここで、ｐ＝０〜４であり、そしてＲ５は、以下で定義するとおりである；Ｒ３は、水素原子、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニルアルキルまたは（置換）フェニルアルキルである；Ｒ４は、水素原子、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニルアルキルまたは（置換）フェニルアルキルである；Ｒ５は、水素原子、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニルアルキルまたは（置換）フェニルアルキルである；Ａは、天然または非天然のアミノ酸である；Ｂは、水素原子、重水素原子、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、（置換）フェニル、フェニルアルキル、（置換）フェニルアルキル、ヘテロアリール、（ヘテロアリール）アルキル、ハロメチル、ＣＨ２ＺＲ６、ＣＨ２ＯＣＯ（アリール）、ＣＨ２ＯＣＯ（ヘテロアリール）、またはＣＨ２ＯＰＯ（Ｒ７）Ｒ８であり、ここで、Ｚは、酸素原子またはイオウ原子である；Ｒ６は、フェニル、置換フェニル、フェニルアルキル、置換フェニルアルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；Ｒ７およびＲ８は、独立して、アルキル、シクロアルキル、フェニル、置換フェニル、フェニルアルキル、（置換フェニル）アルキルおよび（シクロアルキル）アルキルからなる群から選択される；そしてＸおよびＹは、独立して、水素原子、ハロ、トリハロメチル、アミノ、保護アミノ、アミノ塩、一置換アミノ、二置換アミノ、カルボキシ、保護カルボキシ、カルボン酸塩、ヒドロキシ、保護ヒドロキシ、ヒドロキシ基の塩、低級アルコキシ、低級アルキルチオ、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、置換（シクロアルキル）アルキル、フェニル、置換フェニル、フェニルアルキルおよび（置換フェニル）アルキルからなる群から選択される。
【００１８】
さらに他の実施態様では、前記試薬は、式３の化合物およびそれらの薬学的に受容可能な塩である：
【００１９】
【化２９】
2005506346.tif 000003
ここで、ｎは、１または２である；ｍは、１または２である；Ａは、Ｒ２ＣＯ−、Ｒ３−Ｏ−ＣＯ−またはＲ４ＳＯ２−；次式の基：
【００２０】
【化３０】
2005506346.tif 000004
さらに、ここで：Ｒ１は、水素原子、アルキルまたはフェニルアルキルである；Ｒ２は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、フェニルアルキル、置換フェニル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；Ｒ３は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニルアルキルまたは（置換フェニル）アルキルである；Ｒ４は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、フェニルアルキル、置換フェニル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；Ｒ５は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、フェニルアルキル、置換フェニル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；Ｒ６は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニルアルキルまたは（置換フェニル）アルキルである；Ｒ７は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、フェニルアルキル、置換フェニル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；Ｒ８は、天然および非天然アミノ酸からなる群から選択されるアミノ酸側鎖である；Ｂは、水素原子、重水素原子、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、フェニルアルキル、置換フェニル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリール、（ヘテロアリール）アルキルまたはハロメチル；次式の基：
−ＣＨ２ＸＲ９；
ここで、Ｒ９は、フェニル、置換フェニル、フェニルアルキル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；そしてＸは、酸素原子またはイオウ原子である；次式の基：
−ＣＨ２−Ｏ−ＣＯ−（アリール）；
次式の基：
−ＣＨ２−Ｏ−ＣＯ−（ヘテロアリール）；
次式の基：
−ＣＨ２−Ｏ−ＰＯ（Ｒ１０）Ｒ１１；
ここで、Ｒ１０およびＲ１１は、独立して、アルキル、シクロアルキル、フェニル、置換フェニル、フェニルアルキルおよび（置換フェニル）アルキルからなる群から選択される。
【００２１】
他の局面では、本発明は、インターロイキン−１β−変換酵素（ＩＣＥ）／ＣＥＤ−３ファミリーの少なくとも１個のメンバーのプロテアーゼ活性を抑制する化粧品用試薬および化粧品的または皮膚科学的に受容可能な担体を含有する組成物を提供し、該組成物は、該化粧品が原因の哺乳動物の皮膚の刺激を予防または改善するように適合されている。ある実施態様では、前記試薬は、非可逆的な様式または可逆的な様式で前記プロテアーゼ活性を抑制する。他の実施態様では、前記試薬は、上で開示した式１の化合物である。さらに他の実施態様では、前記試薬は、上で開示した式３の化合物である。
【００２２】
他の局面では、本発明は、哺乳動物の皮膚を、インターロイキン−１β−変換酵素（ＩＣＥ）／ＣＥＤ−３ファミリーの少なくとも１個のメンバーのプロテアーゼ活性を抑制する試薬と接触させることにより、該皮膚を刺激物と接触させることが原因の炎症を予防または改善する方法を提供する。１実施態様では、前記刺激物は、化学刺激物である。さらに他の実施態様では、前記化学刺激物は、化粧品または植物に由来するものである。さらに他の実施態様では、前記植物は、ポイズンアイビー、ポイズンオークおよびポイズンスマックからなる群から選択される。他の実施態様では、前記刺激物は、放射線である。さらに他の１実施態様では、前記放射線は、紫外線である。さらに他の実施態様では、前記試薬は、非可逆的な様式または可逆的な様式で前記プロテアーゼ活性を抑制する。さらに他の実施態様では、前記試薬は、上述の式１または式３で表わされる化合物である。
【００２３】
他の局面では、本発明は、インターロイキン−１β−変換酵素（ＩＣＥ）／ＣＥＤ−３ファミリーの少なくとも１個のメンバーのプロテアーゼ活性を抑制する試薬を含有する組成物を提供し、該組成物は、皮膚刺激が原因の炎症を予防または改善する際に使用する局所投与用に処方されている。１実施態様では、前記処方は、ローション、クリーム、ゲル、液体、固体または半固体から選択される。他の実施態様では、前記皮膚刺激は、皮膚を化学刺激物と接触させることが原因である。さらに他の実施態様では、前記化学刺激物は、化粧品または植物由来試薬である。さらに他の実施態様では、前記刺激は、放射線である。ある実施態様では、前記刺激は、昆虫の刺傷、昆虫の咬傷または組織損傷が原因である。さらに他の実施態様では、前記組織損傷は、身体の外傷または疾患が原因である。さらに他の実施態様では、前記組織（身体の外傷または疾患）損傷は、火傷、切屑、切り傷、凍傷および化学傷害からなる群から選択される。ある実施態様では、前記試薬は、非可逆的な様式または可逆的な様式で前記プロテアーゼ活性を抑制する。ある種の実施態様では、前記試薬は、上述の式１または式３で表わされる化合物である。
【００２４】
他の局面では、本発明は、哺乳動物の組織を、インターロイキン−１β−変換酵素（ＩＣＥ）／ＣＥＤ−３ファミリーの少なくとも１個のメンバーのプロテアーゼ活性を抑制する試薬と接触させることにより、該組織を刺激物と接触させることが原因の炎症を予防または改善する方法を提供する。１実施態様では、前記刺激物は、化学刺激物である。さらに他の実施態様では、前記化学刺激物は、化粧品または植物由来試薬である。さらに他の実施態様では、前記植物は、ポイズンアイビー、ポイズンオークおよびポイズンスマックからなる群から選択される。他の実施態様では、前記刺激物は、放射線である。さらに他の実施態様では、前記放射線は、紫外線である。さらに他の実施態様では、前記刺激物は、細菌である。他の実施態様では、前記試薬は、非可逆的な様式または可逆的な様式で前記プロテアーゼ活性を抑制する。ある実施態様では、前記試薬は、上述の式１または式３で表わされる化合物である。
【００２５】
他の局面では、本発明は、組織を、インターロイキン−１β−変換酵素（ＩＣＥ）／ＣＥＤ−３ファミリーの少なくとも１個のメンバーのプロテアーゼ活性を抑制する試薬と接触させることにより、該組織損傷に付随した炎症を予防または改善する方法を提供する。ある実施態様では、前記組織損傷は、身体の外傷、自己免疫応答、感染症、慢性疾患、脊髄または脳の外傷、酸、塩基または放射線が原因である。他の実施態様では、前記試薬は、非可逆的な様式または可逆的な様式で前記プロテアーゼ活性を抑制する。なお他の実施態様では、前記試薬は、上述の式１または式３で表わされる化合物である。
【００２６】
他の局面では、本発明は、インターロイキン−１β−変換酵素（ＩＣＥ）／ＣＥＤ−３ファミリーの少なくとも１個のメンバーのプロテアーゼ活性を抑制する試薬、薬理学的担体、皮膚科学的担体、または化粧品用担体を含有する組成物を提供し、該組成物は、動物の皮膚または粘膜に局所塗布するように処方されている。１実施態様では、前記組成物は、炎症応答に付随した症状を改善する。さらに他の実施態様では、前記症状は、そう痒、発赤または腫れを含む。他の実施態様では、前記組成物は、コラーゲンの損失を少なくするか皮膚の弾性および外観を維持する際に有用である。ある実施態様では、前記試薬は、非可逆的な様式または可逆的な様式で前記プロテアーゼ活性を抑制する。さらにある実施態様では、前記試薬は、上述の式１または式３で表わされる化合物である。
【００２７】
さらに他の局面では、本発明は、組織を、インターロイキン−１β−変換酵素（ＩＣＥ）／ＣＥＤ−３ファミリーの少なくとも１個のメンバーのプロテアーゼ活性を抑制する試薬の有効量と接触させて、それにより、該組織を炎症を少なくすることにより、該組織の炎症を少なくする方法を提供する。１実施態様では、前記組織は、皮膚である。さらに他の実施態様では、前記組織炎症は、外傷、日焼け、湿疹、接触アレルギー、皮膚炎、乾癬、丹毒、ざ瘡、嵌入爪、切り傷、火傷、昆虫の咬傷、昆虫の刺傷またはそう痒が原因である。他の実施態様では、前記組織は、粘膜である。さらに他の実施態様では、前記組織炎症は、膣炎、痔核、結膜炎、歯周炎、親知らず萌生、抜歯、歯肉炎、歯周膿瘍または補綴物が原因である。
【００２８】
さらに他の局面では、本発明は、感染因子に晒されたまたはその危険がある細胞または細胞集団を、インターロイキン−１β−変換酵素（ＩＣＥ）／ＣＥＤ−３ファミリーの少なくとも１個のメンバーのプロテアーゼ活性を抑制または減少する試薬の阻害量または抑制量と接触させることにより、感染症またはそれに付随した症状（例えば、炎症）を改善および／または治療する方法を提供する。
【００２９】
ある実施態様では、前記方法は、インビトロまたはインビボで使用できる。他の実施態様では、前記感染因子は、ウイルス、真菌または細菌であり得る。さらに他の実施態様では、前記試薬は、非可逆的な様式または可逆的な様式で前記プロテアーゼ活性を抑制する。
【００３０】
ＩＣＥ／ＣＥＤ−３インヒビターとして有用な代表的な化合物もまた、本明細書中で含まれる。このような化合物および合成方法は、その全体が、同時係属中の米国特許出願第０９／４８２，８１３号（これは、２０００年１月１３日に出願された）、第０９／５５０，９１７号（これは、２０００年４月１７日に出願された）、第０９／７４７，３１７号（これは、２０００年１２月２０日に出願された）、第０９／９０８，９６９号（これは、２００１年７月１８日に出願された）、米国特許第５，８６９，５１９号（これは、１９９９年２月９日に発行された）、米国特許第５，８７７，１９７号（これは、１９９９年３月２日に発行された）、米国特許第６，１８４，２４４号（これは、２００１年２月６日に発行された）、米国特許第６，１８７，７７１号（これは、２００１年２月１３日に発行された）、米国特許第６，１９７，７５０号（これは、２００１年３月６日に発行された）、米国特許第６，２４２，４２２号（これは、２００１年６月５日に発行された）、およびそれらの各一部継続出願で記述されている。
【００３１】
本発明のこれらの局面および他の局面は、以下の詳細な説明および添付の図面を参照すると、明らかとなる。本明細書中で開示した全ての参考文献の内容は、各々の内容が個々に援用されているごとく、それら全体が本明細書中で参考として援用されている。
【００３２】
（発明の詳細な説明）
本発明は、ＩＣＥ／ＣＥＤ−３ファミリーのメンバーを阻害することにより、それに付随した炎症および／または症状を改善する組成物および方法を提供する。これには、ＩＣＥ／ＣＥＤ−３酵素活性のインヒビターだけでなく、ＩＣＥ／ＣＥＤ−３ファミリーをコード化する遺伝子の発現を特異的に阻止する任意の方法が挙げられる。それゆえ、ＩＣＥ／ＣＥＤ−３ファミリーメンバーの遺伝子に相補的であって、関連したタンパク質の転写または翻訳、優性自生形態のＩＣＥ／ＣＥＤ−３プロテアーゼ（例えば、その活性部位システインをセリンまたはアラニンのような他のアミノ酸で置き換えるように操作した変異体）の発現を阻害できる核酸配列から構成されたアンチセンスＲＮＡまたはＤＮＡ、またはＩＣＥ／ＣＥＤ−３ファミリーポリペプチドを結合する抗体は、小分子インヒビター（ペプチドを含めて）と同様に、本発明の範囲内である。
【００３３】
本明細書中で使用する「免疫応答」とは、特定の細胞の特定のエフェクター機能が誘発されるように免疫系の細胞（これらには、Ｔ細胞が挙げられるが、これらに限定されない）を活性化することを意味する。エフェクター機能には、増殖、サイトカインの分泌、抗体の分泌、制御分子および／または接着分子の発現、および細胞溶解を誘発する性能が挙げられ得るが、これらに限定されない。
【００３４】
本明細書中で使用する「免疫応答を高める」とは、対照と比較したエフェクター細胞機能の任意の上方制御を意味する。
【００３５】
本明細書中で使用する「感染症の発生を予防または阻止する」とは、感染症の発生が阻止されたか感染症の発症が遅らされたか、または既存の感染の蔓延が後退した状態を意味する。
【００３６】
本明細書中で使用する「改善する」とき、より良い状態にすること、改善することとして、定義される。
【００３７】
本明細書中で使用する「感染症」との用語には、感染性の生物により引き起こされる任意の疾患が挙げられるが、これらに限定されない。感染性の生物は、ウイルス（例えば、一本鎖ＲＮＡウイルス、一本鎖ＤＮＡウイルス、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、Ａ型肝炎ウイルス、Ｂ型肝炎ウイルスおよびＣ型肝炎ウイルス、単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、エプスタイン・バーウイルス（ＥＢＶ）、ヒト乳頭腫ウイルス（ＨＰＶ））、寄生虫（例えば、原生生物および後生動物の病原体（例えば、Ｐｌａｓｍｏｄｉａ種、Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａ種、Ｓｃｈｉｓｔｏｓｏｍａ種、Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ種））、細菌（例えば、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉａ、特に、Ｍ．ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｉ、Ｅ．ｃｏｌｉ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｉ）、真菌（例えば、Ｃａｎｄｉｄａ種、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ種）、Ｐｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓ  ｃａｒｉｎｉｉおよびプリオンを包含し得る。
【００３８】
本発明の方法を記述する前に、本発明の方法で有用ないくつかの例示的な化合物またはそれらの薬学的に受容可能な塩を、以下に記述する：
【００３９】
【化３１】
2005506346.tif 000005
ここで：
ｎは、１または２である；
Ｒ１は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、（置換）フェニル、フェニルアルキル、（置換）フェニルアルキル、ヘテロアリール、（ヘテロアリール）アルキルまたは（ＣＨ２）ｍＣＯ２Ｒ４であり、ここで、
ｍ＝１〜４であり、そしてＲ４は、以下で定義する；
Ｒ２は、水素原子、クロロ、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、（置換）フェニル、フェニルアルキル、（置換）フェニルアルキル、ヘテロアリール、（ヘテロアリール）アルキルまたは（ＣＨ２）ＰＣＯ２Ｒ５であり、ここで、ｐ＝０〜４であり、そしてＲ５は、以下で定義する；
Ｒ３は、水素原子、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニルアルキルまたは（置換）フェニルアルキルである；
Ｒ４は、水素原子、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニルアルキルまたは（置換）フェニルアルキルである；
Ｒ５は、水素原子、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニルアルキルまたは（置換）フェニルアルキルである；
Ａは、天然または非天然のアミノ酸である；
Ｂは、水素原子、重水素原子、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、（置換）フェニル、フェニルアルキル、（置換）フェニルアルキル、ヘテロアリール、（ヘテロアリール）アルキル、ハロメチル、ＣＨ２ＺＲ６、ＣＨ２ＯＣＯ（アリール）、ＣＨ２ＯＣＯ（ヘテロアリール）、またはＣＨ２ＯＰＯ（Ｒ７）Ｒ８であり、ここで、Ｚは、酸素原子またはイオウ原子である；
Ｒ６は、フェニル、置換フェニル、フェニルアルキル、置換フェニルアルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；そして
Ｒ７およびＲ８は、独立して、アルキル、シクロアルキル、フェニル、置換フェニル、フェニルアルキル、（置換フェニル）アルキルおよび（シクロアルキル）アルキルからなる群から選択される；そして
ＸおよびＹは、独立して、水素原子、ハロ、トリハロメチル、アミノ、保護アミノ、アミノ塩、一置換アミノ、二置換アミノ、カルボキシ、保護カルボキシ、カルボン酸塩、ヒドロキシ、保護ヒドロキシ、ヒドロキシ基の塩、低級アルコキシ、低級アルキルチオ、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、置換（シクロアルキル）アルキル、フェニル、置換フェニル、フェニルアルキルおよび（置換フェニル）アルキルからなる群から選択される。
【００４０】
上記の式１および下記の式３に使用されるように、用語「アルキル」は、直鎖または分枝鎖のＣ１〜Ｃ８炭素鎖（例えば、メチル、エチル、ｔｅｒｔ−ブチル、イソプロピル、ｎ−オクチルなど）を意味する。
【００４１】
用語「シクロアルキル」は、完全に飽和または部分的に不飽和の一環式、二環式、または三環式飽和環を意味する。そのような環の例としてはシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロへプチル、アダマンチル、シクロオクチル、シスデカリンまたはトランスデカリン、ビシクロ［２．２．１］ヘプト−２−エン、シクロヘキシ−１−エニル、シクロペント−１−エニル、１，４−シクトオクタジエニルなどが挙げられる。
【００４２】
用語「（シクロアルキル）アルキル」は、上記のシクロアルキル環の１つで置換された上記定義のアルキル基を意味する。そのような基の例としては、（シクロヘキシル）メチル、３−（シクロプロピル）−ｎ−プロピル、５−（シクロペンチル）ヘキシル、６−（アダマンチル）ヘキシルなどが挙げられる。
【００４３】
用語「置換フェニル」は、以下からなる群から選択される部分の１つ以上、好ましくは１つまたは２つで置換されたフェニル基を特定する：ハロゲン、ヒドロキシ、保護ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、トリフルオロメチル、Ｃ１〜Ｃ７アルキル、Ｃ１〜Ｃ７アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ７アシル、Ｃ１〜Ｃ７アシロキシ、カルボキシ、保護カルボキシ、カルボキシメチル、保護カルボキシメチル、ヒドロキシメチル、保護ヒドロキシメチル、アミノ、保護アミノ、（モノ置換）アミノ、保護（モノ置換）アミノ、（ジ置換）アミノ、カルボキサミド、保護カルボキサミド、Ｎ−（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）カルボキサミド、保護Ｎ−（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）カルボキサミド、Ｎ，Ｎ−ジ（Ｃ１〜Ｃ６アルキル）カルボキサミド、Ｎ−（（Ｃ〜Ｃ６アルキル）スルホニル）アミノ、Ｎ−（フェニルスルホニル）アミノ、あるいは置換または非置換フェニル（例えば、後者の場合ビフェニル基もしくはナフチル基を生じる）。
【００４４】
用語「置換フェニル」の例としては、２、３、または４−クロロフェニル、２，６−ジクロロフェニル、２，５−ジクロロフェニル、３，４−ジクロロフェニル、２、３または４−ブロモフェニル、３，４−ジブロモフェニル、３−クロロ−４−フルオロフェニル、２、３または４−フルオロフェニルなどのようなモノまたはジ（ハロ）フェニル基；２、３または４−ヒドロキシフェニル、２，４−ジヒドロキシフェニル、これらの保護ヒドロキシ誘導体などのようなモノまたはジ（ヒドロキシ）フェニル基；２、３、または４−ニトロフェニルのようなニトロフェニル基；２、３、または４−シアノフェニルのようなシアノフェニル基；２、３、または４−メチルフェニル、２，４−ジメチルフェニル、２、３または４−（イソ−プロピル）フェニル、２、３または４−エチルフェニル、２、３または４−（ｎ−プロピル）フェニルなどのようなモノまたはジ（アルキル）フェニル基；２，６−ジメトキシフェニル、２、３または４−（イソ−プロポキシ）フェニル、２、３または４−（ｔ−ブトキシ）フェニル、３−エトキシ−４−メトキシフェニルなどのモノまたはジ（アルコキシ）フェニル基；２、３または４−トリフルオロメチルフェニル；２、３または４−カルボキシフェニルあるいは２，４−ジ（保護カルボキシ）フェニルのようなモノまたはジカルボキシフェニルあるいは（保護カルボキシ）フェニル基；２、３または４−（保護ヒドロキシメチル）フェニルまたは３，４−ジ（ヒドロキシメチル）フェニルのようなモノまたはジ（ヒドロメチル）フェニルあるいは（保護ヒドロキシメチル）フェニル；２、３または４−（アミノメチル）フェニルあるいは２，４−（保護アミノメチル）フェニルのようなモノまたはジ（アミノメチル）フェニルあるいは（保護アミノメチル）フェニル；あるいは２、３または４−（Ｎ−（メチルスルホニルアミノ））フェニルのようなモノまたはジ（Ｎ−（メチルスルホニルアミノ））フェニルが挙げられる。また、用語「置換フェニル」は、置換基が異なるジ置換フェニル基を表し、例えば、３−メチル−４−ヒドロキシフェニル、３−クロロ−４−ヒドロキシフェニル、２−メトキシ−４−ブロモフェニル、４−エチル−２−ヒドロキシフェニル、３−ヒドロキシ−４−ニトロフェニル、２−ヒドロキシ−４−クロロフェニルなどがある。
【００４５】
用語「（置換フェニル）アルキル」は、上記アルキル基の１つに結合した上記置換フェニル基の１つを意味する。このような基の例には、２−フェニル−１−クロロエチル、２−（４’−メトキシフェニル）エチル、４−（２’，６’−ジヒドロキシフェニル）ｎ−ヘキシル、２−（５’−シアノ−３’−メトキシフェニル）ｎ−ペンチル、３−（２’，６’−ジメチルフェニル）ｎ−プロピル、４−クロロ−３−アミノベンジル、６−（４’−メトキシフェニル）−３−カルボキシ（ｎ−ヘキシル）、５−（４’−アミノメチルフェニル）−３−（アミノメチル）ｎ−ペンチル、５−フェニル−３−オキソ−ｎ−ペント−１−イル、（４−ヒドロキシナフト−２−イル）メチルなどが挙げられる。
【００４６】
用語「ハロ」および「ハロゲン」は、フルオロ基、クロロ基、ブロモ基、またはヨード基を意味する。これらは、同じまたは異なる１つ以上のハロゲンであり得る。好ましいハロゲンは、クロロおよびフルオロである。
【００４７】
用語「アリール」は、５および６員環の芳香族炭素環式環を意味する。６員環が好ましい。
【００４８】
用語「ヘテロアリール」は、酸素、イオウおよび／または窒素原子、特に窒素（単独またはイオウもしくは酸素環原子のいずれかと共に）のような１〜４個のヘテロ原子を有する、必要に応じて置換された５員または６員環を表す。これらの５員または６員環は完全不飽和である。
【００４９】
以下の環系は、用語「ヘテロアリール」によって表されるヘテロ環式（置換または非置換のいずれか）基の例である：チエニル、フリル、ピロリル、ピロリジニル、イミダゾリル、イソキサゾリル、トリアゾリル、チアジアゾリル、オキサジアゾリル、テトラゾリル、チアトリアゾリル、オキサトリアゾリル、ピリジル、ピリミジル、ピラジニル、ピリダジニル、オキサジニル、トリアジニル、チアジアジニルテトラゾロ、１，５−［ｂ］ピリダジニルおよびプリニル、ならびにベンゾ縮合誘導体、例えば、ベンズオキサゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンズイミダゾリルおよびインドリル。
【００５０】
上記の必要に応じて置換されたヘテロアリール環の置換基は、１〜３の、ハロ、トリハロメチル、アミノ、保護アミノ、アミノ塩、モノ置換アミノ、ジ置換アミノ、カルボキシ、保護カルボキシ、カルボン酸塩、ヒドロキシ、保護ヒドロキシ、ヒドロキシ基の塩、低級アルコキシ、低級アルキルチオ、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、置換（シクロアルキル）アルキル、フェニル、置換フェニル、フェニルアルキル、および（置換フェニル）アルキル基がある。ヘテロアリール基の置換基は、上記で定義されたものと同様であるか、または以下に説明する。ヘテロアリール環の上記置換基と共に使用されるように、「トリハロメチル」は、トリフルオロメチル、トリクロロメチル、トリブロモメチル、またはトリヨードメチルであり得る。「低級アルコキシ」は、Ｃ〜Ｃ４アルコキシ基を意味し、同様に、「低級アルキルチオ」はＣ１〜Ｃ４アルキルチオ基を意味する。用語「置換アルキル」は、以下の基で１〜３回置換された上記定義のアルキル基を意味する：ヒドロキシ、保護ヒドロキシ、アミノ、保護アミノ、シアノ、ハロ、トリフルオロメチル、モノ置換アミノ、ジ置換アミノ、低級アルコキシ、低級アルキルチオ、カルボキシ、保護カルボキシ、またはカルボキシ、アミノ、および／またはヒドロキシ塩。ヘテロアリール環の置換基と共に使用されるように、用語「置換（シクロアルキル）アルキル」および「置換シクロアルキル」は、「置換アルキル」基について列挙された基と同じ基で置換された上記で定義されたものである。用語「（モノ置換）アミノ」は、以下からなる群から選択される１つの置換基を有するアミノ基を意味する：フェニル、置換フェニル、アルキル、置換アルキル、Ｃ１〜Ｃ７アシル、Ｃ２〜Ｃ７アルケニル、Ｃ２〜Ｃ７置換アルケニル、Ｃ２〜Ｃ７アルキニル、Ｃ７〜Ｃ１６アルキルアリール、Ｃ７〜Ｃ１６置換アルキルアリールおよびヘテロアリール基。（モノ置換）アミノは、さらに、用語「保護（モノ置換）アミノ」によって包含されるようなアミノ保護基を有し得る。用語「（ジ置換）アミノ」は、以下からなる群から選択される２つの置換基を有するアミノ基を意味する：フェニル、置換フェニル、アルキル、置換アルキル、Ｃ１〜Ｃ７アシル、Ｃ２〜Ｃ７アルケニル、Ｃ２〜Ｃ７アルキニル、Ｃ７〜Ｃ１６アルキルアリール基、Ｃ７〜Ｃ１６置換アルキルアリールおよびヘテロアリール基。２つの置換基は同じか、または異なり得る。用語「ヘテロアリール（アルキル）」は、任意の位置で上記で定義されたヘテロアリール基によって置換された、上記で定義されたアルキル基を表す。
【００５１】
さらに、上記の必要に応じて置換された５員または６員の複素環は、必要に応じて、芳香族の５員または６員のアリールまたはヘテロアリール環系に縮合され得る。例えば、これらの環は、必要に応じて、芳香族の５員または６員環系（例えば、ピリジンまたはトリアゾール系）、好ましくは、ベンゼン環に縮合され得る。
【００５２】
用語「薬学的に受容可能な塩」は、カルボキシレートアニオンと塩を形成するものを含み、そして以下から選択されたような有機および無機のカチオンと形成された塩を含む：アルカリおよびアルカリ土類金属（例えば、リチウム、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、バリウムおよびカルシウム）；およびアンモニウムイオン；ならびに有機カチオン（例えば、ジベンジルアンモニウム、ベンジルアンモニウム、２−ヒドロキシエチルアンモニウム、ビス（２−ヒドロキシエチル）アンモニウム、フェニルエチルベンジルアンモニウム、ジベンジルエチレンジアンモニウムなどのカチオン）。上記の用語に含まれる他のカチオンは、プロカイン、キニーネおよびＮ−メチルグルコサミンのプロトン化された形態、グリシン、オルニチン、ヒスチジン、フェニルグリシン、リジン、およびアルギニンのような塩基性アミノ酸のプロトン化された形態を含む。さらに、この用語は、カルボン酸およびアミノ基により形成された任意の双性イオン形態の本発明の化合物を意味する。カルボキシレートアニオンのために好ましいカチオンは、ナトリウムカチオンである。さらに、この用語は、塩基性基（例えば、アミノ基）との標準的な酸−塩基反応により形成される塩を含み、有機酸または無機酸を含む。このような酸には、塩酸、硫酸、リン酸、酢酸、コハク酸、クエン酸、乳酸、マレイン酸、フマル酸、パルミチン酸、コール酸、パモ（ｐａｍｏｉｃ）酸、粘液（ｍｕｃｉｃ）酸、Ｄ−グルタミン酸、Ｄ−樟脳酸、グルタル酸、フタル酸、酒石酸、ラウリン酸、ステアリン酸、サリチル酸（ｓａｌｉｃｙｃｌｉｃ）、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ソルビン酸、ピクリン酸、安息香酸、桂皮酸などの酸が挙げられる。
【００５３】
式１の化合物はまた、溶媒和物および水和物として存在し得る。従って、これらの化合物は、例えば、水和の水、またはこれらの溶媒和物の母液溶媒分子の１つ、または複数もしくは任意の画分と結晶化し得る。そのような化合物の溶媒和物および水和物は、本発明の範囲に含まれる。
【００５４】
本明細書中に使用される用語「カルボキシ保護基」は、化合物上の他の官能基において反応が行われる間、カルボン酸基をブロックするまたは保護するために一般に使用される、カルボン酸基のエステル誘導体の１つを意味する。そのようなカルボン酸保護基の例としては以下が挙げられる：ｔ−ブチル、４−ニトロベンジル、４−メトキシベンジル、３，４−ジメトキシベンジル、２，４−ジメトキシベンジル、２，４，６−トリメトキシベンジル、２，４，６−トリメチルベンジル、ペンタメチルベンジル、３，４−メチレンジオキシベンジル、ベンズヒドリル、４，４’−ジメトキシトリチル、４，４’，４’−トリメトキシトリチル、２−フェニルプロピル、トリメチルシリル、ｔ−ブチルジメチルシリル、フェナシル、２，２，２−トリクロロエチル、β−（トリメチルシリル）エチル、β−（ジ（ｎ−ブチル）メチルシリル）エチル、ｐ−トルエンスルホニルエチル、４−ニトロベンジルスルホニルエチル、アリル、シンナミル、１−（トリメチルシリルメチル）−プロペニルなどの部分。使用されるカルボキシ保護基の種は、誘導体化カルボン酸がその後の反応の条件に安定であり、そして適切な時点で、残りの分子を分裂させることなく除去され得る限り重要ではない。これらの基のさらなる例は以下に見出される：Ｃ．Ｂ．ＲｅｅｓｅおよびＥ．Ｈａｓｌａｍ、「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ」Ｊ．Ｇ．Ｗ．ＭｃＯｍｉｅ編、Ｐｌｅｎｕｍ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ＮＹ，１９７３，第５章、それぞれ、およびＴ．Ｗ．ＧｒｅｅｎｅおよびＰ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ、「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」第２版、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ＮＹ，１９９１，第５章、それぞれは本明細書中に参照として援用される。関連した用語は、「保護カルボキシ」であり、これは上記のカルボキシ保護基の１つで置換されたカルボキシ基をいう。
【００５５】
用語「ヒドロキシ保護基」は、例えば、テトラヒドロピラニル基、２−メトキシプロプ−２−イル基、１−エトキシエト−１−イル基、メトキシメチル基、β−メトキシエトキシメチル基、メチルチオメチル基、ｔ−ブチル基、ｔ−アミル基、トリチル基、４−メトキシトリチル基、４，４’−ジメトキシトリチル基、４，４’，４’−トリメトキシトリチル基、ベンジル基、アリル基、トリメチルシリル基、（ｔ−ブチル）ジメチルシリル基、２，２，２−トリクロロエトキシカルボニル基などのヒドロキシ基に結合した、容易に切断され得る基をいう。
【００５６】
ヒドロキシ保護基のさらなる例は、Ｃ．Ｂ．ＲｅｅｓｅおよびＥ．Ｈａｓｌａｍ，「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ」Ｊ．Ｇ．Ｗ．ＭｃＯｍｉｅ編、Ｐｌｅｎｕｍ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ＮＹ，１９７３，第３および４章、それぞれ、およびＴ．Ｗ．ＧｒｅｅｎｅおよびＰ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ、「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」第２版、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ＮＹ，１９９１，第２および３章に記載されている。好ましいヒドロキシ保護基は、ｔｅｒｔ−ブチル基である。
【００５７】
関連した用語「保護ヒドロキシ」は、上記の１つのヒドロキシ保護基に結合したヒドロキシ基を意味する。
【００５８】
本明細書中で使用される用語「アミノ保護基」は、分子の他の官能基を反応する間、アミノの官能性をブロックするかまたは保護するために一般に使用されるアミノ基の置換基をいう。用語「保護（モノ置換）アミノ」は、モノ置換されたアミノの窒素原子上にアミノ保護基が存在することを意味する。
【００５９】
そのようなアミノ保護基の例としては、以下が挙げられる：ホルミル（「Ｆｏｒ」）基、トリチル基、フタルイミド基、トリクロロアセチル基、トリフルオロアセチル基、クロロアセチル基、ブロモアセチル基、およびヨードアセチル基、ウレタンタイプ保護基、例えば、ｔ−ブトキシカルボニル（「Ｂｏｃ」）、２−（４−ビフェニリル）プロピル−２−オキシカルボニル（「Ｂｐｏｃ」）、２−フェニルプロピル−２−オキシカルボニル（「Ｐｏｃ」）、２−（４−キセニル）イソプロポキシカルボニル、１，１−ジフェニルエチル−１−オキシカルボニル、１，１−ジフェニルプロピル−１−オキシカルボニル、２−（３，５−ジメトキシフェニル）プロピル−２−オキシカルボニル（「Ｄｄｚ」）、２−Ｈ−（トルイル）プロピル−２−オキシカルボニル、シクロペンタニルオキシカルボニル、１−メチルシクロペンタニルオキシカルボニル、シクロヘキサニルオキシ−カルボニル、１−メチルシクロヘキサニルオキシカルボニル、２−メチルシクロヘキサニルオキシカルボニル、２−（４−トルイルスルホニル）エトキシカルボニル、２−（メチルスルホニル）エトキシカルボニル、２−（トリフェニルホスフィノ）エトキシカルボニル、９−フルオレニルメトキシカルボニル（「Ｆｍｏｃ」）、２−（トリメチルシリル）エトキシカルボニル、アリルオキシカルボニル、１−（トリメチルシリルメチル）プロプ−１−エニルオキシカルボニル、５−ベンズイソキサリルメトキシカルボニル、４−アセトキシベンジルオキシカルボニル、２，２，２−トリクロロエトキシカルボニル、２−エチニル−２−プロポキシカルボニル、シクロプロピルメトキシカルボニル、イソボルニルオキシカルボニル(ｉｓｏｂｏｍｙｌｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ）、１−ピペリジルオキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニル（「Ｃｂｚ」）、４−フェニルベンジルオキシカルボニル、２−メチルベンジルオキシカルボニル、α−２，４，５，−テトラメチルベンジル−オキシカルボニル（「Ｔｍｚ」）、４−メトキシベンジルオキシカルボニル、４−フルオロベンジルオキシカルボニル、４−クロロベンジルオキシカルボニル、３−クロロベンジルオキシカルボニル、２−クロロベンジルオキシカルボニル、２，４−ジクロロベンジルオキシカルボニル、４−ブロモベンジルオキシカルボニル、３−ブロモベンジルオキシカルボニル、４−ニトロベンジルオキシカルボニル、４−シアノベンジルオキシカルボニル、４−（デシルオキシ）ベンジルオキシカルボニルなど；ベンゾイルメチルスルホニル（ｂｅｎｚｏｙｈｎｅｔｈｙｌｓｕｌｆｏｎｙｌ）基、２，２，５，７，８−ペンタメチルクロマン−６−スルホニル基（「ＰＭＣ」）、ジチアスクシノイル（「Ｄｔｓ」）基、２−（ニトロ）フェニルスルフェニル基（「Ｎｐｓ」）、ジフェニルホスフィンオキシド基などのアミノ保護基。使用されるアミノ保護基の種は、誘導体化アミノ基がその後の反応の条件に安定であり、そして適切な時点で、残りの分子を分裂させることなく除去され得る限り重要ではない。好ましいアミノ保護基は、Ｂｏｃ、ＣｂｚおよびＦｍｏｃである。上記用語に包含されるアミノ保護基のさらなる例は、有機合成およびペプチド分野において周知であり、そしてこれらは、以下に記載されている。例えば、Ｔ．Ｗ．ＧｒｅｅｎｅおよびＰ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ、「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」第２版、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ＮＹ，１９９１，第７章、Ｍ．Ｂｏｄａｎｚｓｋｙ、「Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」、第１および第２改訂版、Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ＮＹ，１９８４および１９９３、ならびにＪ．Ｍ．ＳｔｅｗａｒｔおよびＪ．Ｄ．Ｙｏｕｎｇ、「Ｓｏｌｉｄ  Ｐｈａｓｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」第２版、Ｐｉｅｒｃｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．，Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，Ｉｌｌ，１９８４、Ｅ．ＡｔｈｅｒｔｏｎおよびＲ．Ｃ．Ｓｈｅｐｈａｒｄ、「Ｓｏｌｉｄ  Ｐｈａｓｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ−Ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ」ＩＲＬ  Ｐｒｅｓｓ，Ｏｘｆｏｒｄ，Ｅｎｇｌａｎｄ（１９８９）、これらのそれぞれは本明細書中に参照として援用される。関連した用語「保護アミノ」は、上記のアミノ保護基で置換されたアミノ基を定義する。
【００６０】
用語「天然および非天然アミノ酸」は、天然に存在するアミノ酸および天然に存在するペプチド（Ｄ型およびＬ型を含む）の合成アナログを調製する場合に、ペプチド化学分野の当業者によって一般に利用される他の非タンパク新生ａ−アミノ酸の両方をいう。天然に存在するアミノ酸は、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、セリン、メチオニン、スレオニン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファン、システイン、プロリン、ヒスチジン、アスパラギン酸、アスパラギン、グルタミン酸、グルタミン、γ−カルボキシグルタミン酸、アルギニン、オルニチン、およびリジンである。非天然α−アミノ酸の例としては、以下が挙げられる：ヒドロキシリジン、シトルリン、キヌレニン、（４−アミノフェニル）アラニン、３−（２’−ナフチル）アラニン、３−（１’−ナフチル）アラニン、メチオニンスルホン、（ｔ−ブチル）アラニン、（ｔ−ブチル）グリシン、４−ヒドロキシフェニル−グリシン、アミノアラニン、フェニルグリシン、ビニルアラニン、プロパルギル−グリシン、１，２，４−トリアゾロ−３−アラニン、チロニン、６−ヒドロキシトリプトファン、５−ヒドロキシトリプトファン、３−ヒドロキシ−キヌレニン、３−アミノチロシン、トリフルオロメチルアラニン、２−チエニルアラニン、（２−（４−ピリジル）エチル）システイン、３，４−ジメトキシ−フェニルアラニン、３−（２’−チアゾリル）アラニン、イボテン酸、１−アミノ−１−シクロペンタン−カルボン酸、１−アミノ−１−シクロヘキサンカルボン酸、キスカル酸（ｑｕｉｓｑｕａｌｉｃ  ａｃｉｄ）、３−（トリフルオロメチルフェニル）アラニン、（シクロヘキシル）グリシン、チオヒスチジン、３−メトキシチロシン、ノルロイシン、ノルバリン、アロイソロイシン、ホモアルギニン、チオプロリン、デヒドロ−プロリン、ヒドロキシプロリン、ホモプロリン、インドリン−２−カルボン酸、１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−３−カルボン酸、１，２，３，４−テトラヒドロキノリン−２−カルボン酸、α−アミノ−ｎ−酪酸、シクロへキシルアラニン、２−アミノ−３−フェニル酪酸、フェニル部分のオルト位、メタ位、またはパラ位が以下の１つまたは２つで置換されたフェニルアラニン：（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル基、（Ｃ１〜Ｃ４）アルコキシ基、ハロゲン基もしくはニトロ基、またはメチレンジオキシ基で１回置換されたもの；β−２−および３−チエニルアラニン；β−２−および３−フラニルアラニン；Ｐ−２−、３−および４−ピリジルアラニン；β−（ベンゾチエニル−２−および３−イル）アラニン；β−（１−および２−ナフチル）アラニン；セリン、スレオニンまたはチロシンのＯ−アルキル化誘導体；Ｓ−アルキル化システイン、Ｓ−アルキル化ホモシステイン、チロシンのＯ−スルフェートエステル、Ｏ−ホスフェートエステルおよびＯ−カルボン酸エステル；３−（スルホ）チロシン、３−（カルボキシ）チロシン、３−（ホスホ）チロシン、チロシンの４−メタンスルホン酸エステル、チロシンの４−メタンホスホン酸エステル、３，５−ジヨードチロシン、３−ニトロチロシン、ε−アルキルリジン、およびδ−アルキルオルニチン。任意のこれらのα−ア��ノ酸は、α位でメチル基により、α−アミノ側鎖上の芳香族残基の任意の位置でハロゲンにより、または側鎖残基のＯ、ＮまたはＳ原子で適切な保護基により置換され得る。適切な保護基は上述されている。
【００６１】
当業者に公知の溶媒および他の条件の選択に依存して、本発明の化合物はまた、ケタールまたはアセタール形態であり得、これらの形態は本発明に含まれる。
【００６２】
さらに、本発明の化合物の平衡形態は、互変異性形態を含み得ることが理解されるべきである。これらの化合物のこのような形態の全ては、本発明に明らかに含まれる。
【００６３】
本発明の方法で有用な化合物は、選択的生物学的性質を増強するために、好適な官能基によって改変され得る。そのような改変は、当該分野に公知であり、そして所定の生物学的系（例えば、血液、リンパ系、中枢神経系）への生物学的浸透の増大、経口アベイラビリティーの増大、注入による投与を可能にする可溶性の増大、代謝の変更、および発揮率（ｒａｔｅ  ｏｆ  ｅｘｅｒｔｉｏｎ）の変更を含む。さらに、これらの化合物は、プロドラッグ形態に変更され得、それによってプロドラッグに対する代謝または他の生化学的過程の作用の結果として、所望される化合物が患者の体内で形成される。いくつかの化合物のプロドラッグ形態の例には、特にこれらが式Ｉの「Ａ」基または「Ａ」基に結合した改変アスパラギン残基もしくはグルタミン残基に見いだされる場合には、ケトンまたはアルデヒド基を含む化合物のケタール、アセタール、オキシムおよびヒドラゾン形態が挙げられる。
【００６４】
上記式１または下記式３では、ｎが１のときに、最適化合物の群が存在し、Ｂが水素原子のとき、さらに最適であり、Ｒ３が水素原子またはｔ−ブチル基のとき、特に最適である。この群の化合物のうち、注目すべきものには、Ａが天然に存在するアミノ酸のときのものである。この後者の群の化合物は、本明細書中では、「４−オキソブタン酸化合物（ｏｘｏｂｕｔａｎｏｉｃ  ｃｏｍｐｏｕｎｄ）」と呼ばれる。
【００６５】
この群の４−オキソブタン酸化合物には、Ｒ１がメチル基である最適化合物、すなわち、Ｎ−メチルインドール化合物がある。この群のＮ−メチルインドール化合物の１実施態様は、Ａが、アラニン残基、バリン残基、ロイシン残基、フェニルアラニン残基、グリシン残基またはプロリン残基のときに、存在する。これらの群の天然アミノ酸Ｎ−メチルインドール化合物の各１個のうち、注目すべき化合物は、このＮ−メチルインドールが他には置換されていないとき、すなわち、ここで、Ｘ、ＹおよびＲ２がそれぞれ水素原子であるとき、最適には、Ｒ３が水素原子であるとき、存在する。
【００６６】
他の最適な群の４−オキソブタン酸化合物は、Ｎ−ベンジルインドール化合物からなる。例えば、ある群のＮ−ベンジルインドール化合物は、Ａがアラニン残基のときに、存在する。この群のアラニン化合物のうち、注目すべきものには、Ｘ、ＹおよびＲ２がそれぞれ水素原子であるもの、特に、Ｒが水素原子であるものがある。
【００６７】
別の最適な群の４−オキソブタン酸化合物は、そのインドール基のＮ−置換基が１−ブテニル基であるときに、存在する。この群のＮ−（１−ブテニル）インドール化合物の１実施態様は、Ａがバリン残基のとき、特に、Ｘ、ＹおよびＲ２がそれぞれ水素原子であるとき、存在する。この後者の群の化合物の最適な群は、Ｒ３が水素原子であるとき、存在する。
【００６８】
さらに他の群の最適な４−オキソブタン酸化合物は、そのインドール環のＮ−置換基が２’−酢酸残基であるときに、存在する。Ｎ−（２’−酢酸化合物）の代表的な群は、Ａがアラニン残基のとき、存在する。この特定の群のアラニン化合物の１実施態様は、Ｘ、ＹおよびＲ２がそれぞれ水素原子であるとき、特に、Ｒ３が水素原子であるとき、存在する。
【００６９】
インドール基を、その窒素上で、３’−プロピオン酸残基で置換したときの４−オキソブタン酸化合物の群は、本発明の他の例である。このようなＮ−（プロピオン酸）インドール化合物の最適な群は、Ａがアラニン残基のとき、存在する。この群のアラニン化合物のうち、注目すべきものは、Ｘ、ＹおよびＲ２がそれぞれ水素原子であるもの、特に、Ｒ３が水素原子であるものがある。
【００７０】
他の最適な群の式１の化合物は、ｎが１であるとき、存在し、Ｂがモノフルオロメチル基であるとき、さらに最適である。これらのモノフルオロメチル化合物の１実施態様は、Ｒ３が水素原子またはｔ−ブチル基のとき存在し、Ａが中性アミノ基のとき、さらに最適である。Ａが中性アミノ基であるこれらの化合物の一例は、Ａがバリン残基であるとき、存在する。この後者の群のバリン化合物は、本明細書中では、「４−オキソ−５−（フルオロペンタン酸）化合物」と呼ばれる。
【００７１】
４−オキソ−５−（フルオロペンタン酸）化合物の最適な一群は、Ｒ１がメチル基であるとき存在し、言い換えれば、Ｎ−メチルインドール化合物である。このようなＮ−メチルインドール化合物の代表的な例は、Ｒ２がメチル基であり、かつＸおよびＹがそれぞれ水素原子であるとき、特に、Ｒ３が水素原子であるとき、存在する。このようなＮ−メチルインドール化合物の他の代表的な群は、Ｒ２が塩素原子であり、かつＸおよびＹがそれぞれ水素原子であるとき、特に、Ｒ３が水素原子であるとき、存在する。Ｎ−メチルインドール化合物の第三の代表的な群は、Ｒ２がクロ基であり、Ｘが５−フルオロ基であり、かつＹが水素原子であるとき、特に、Ｒ３が水素原子であるとき、存在する。
【００７２】
他の最適な群の４−オキソ−５−（フルオロペンタン酸）化合物は、Ｎ−（３’−フェニルプロプ−１−イル）インドール化合物から構成される。この後者のクラスの化合物のうち、注目すべき群は、Ｒ２、ＸおよびＹがそれぞれ水素原子であるとき、特に、Ｒが水素原子であるとき、存在する。
【００７３】
第三の最適な群の４−オキソ−５−（フルオロペンタン酸）化合物は、Ｎ−（カルボキシメチルまたは保護カルボキシメチル）インドール部分を有する。この群の１実施態様は、Ｒ２、ＸおよびＹがそれぞれ水素原子であるとき、特に、Ｒが水素原子であり、かつこのインドール環の窒素原子がカルボキシメチル基で置換されているとき、存在する。
【００７４】
他の最適なクラスの式１化合物は、ｎが１であり、かつＢが（２，６−ジクロロベンジルオキシ）メチル基のとき、特に、Ｒ３が水素原子またはｔ−ブチル基であり、かつＡが中性アミノ酸のとき、存在する。このような化合物の例は、Ｒ１がメチル基のとき、特に、Ｒ２がメチル基のとき、存在する。
【００７５】
式１の化合物は、以下で述べるような通常の方法を用いて、合成できる。有利なことに、これらの化合物は、容易に入手できる出発物質から好都合に合成される。
【００７６】
化合物を合成する１つの合成経路は、以下のスキームＩに示す：
【００７７】
【化３２】
2005506346.tif 000006
上記スキームＩでは、式（２）、すなわち、Ｈ２Ｎ−（Ｇｌｕ，Ａｓｐ）は、式２ａ〜２ｄの改変アスパラギン酸またはグルタミン酸残基を表す：
【００７８】
【化３３】
2005506346.tif 000007
上記スキームＩでは、（Ｐ）は、アミノ保護基を表わし、そして（Ａ）は、上で述べたように、天然または非天然アミノ酸である。
【００７９】
式２ａ〜ｄの改変アスパラギン酸またはグルタミン酸は、当該分野で周知の方法で作製され得る。例えば、欧州特許出願第５１９，７４８号；ＰＣＴ特許出願番号ＰＣＴ／ＥＰ９２／０２４７２；ＰＣＴ特許出願番号ＰＣＴ／ＵＳ９１／０６５９５；ＰＣＴ特許出願番号ＰＣＴ／ＵＳ９１／０２３３９；欧州特許出願第６２３，５９２号；国際特許出願番号ＷＯ９３／０９１３５；ＰＣＴ特許出願番号ＰＣＴ／ＵＳ９４／０８８６８；欧州特許出願第６２３，６０６号；欧州特許出願第６１８，２２３号；欧州特許出願第５３３，２２６号；欧州特許出願第５２８，４８７号；欧州特許出願第６１８，２３３号；ＰＣＴ特許出願番号ＰＣＴ／ＥＰ９２／０２４７２；国際特許出願番号ＷＯ９３／０９１３５；ＰＣＴ特許出願番号ＰＣＴ／ＵＳ９３／０３５８９；およびＰＣＴ特許出願番号ＰＣＴ／ＵＳ９３／００４８１（これらは全て本明細書中に参考として援用される）を参照のこと。
【００８０】
工程Ａで起こるカップリング反応は、Ｊ．Ｊｏｎｅｓ、”Ａｍｉｎｏ  Ａｃｉｄ  ａｎｄ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，”Ｓｔｅｖｅｎ  Ｇ．Ｄａｖｉｓ編、Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ、Ｏｘｆｏｒｄ、２５−４１頁（１９９２）；Ｍ．Ｂｏｄａｎｚｋｙ、”Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，”  Ｈａｆｎｅｒら編、Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ、Ｂｅｒｌｉｎ  Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ、９−５２頁および２０２−２５１頁（１９８４）；Ｍ．Ｂｏｄａｎｚｋｙ、”Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ａ  Ｐｒａｃｔｉｃａｌ  Ｔｅｘｔｂｏｏｋ，”  Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ、Ｂｅｒｌｉｎ  Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ、５５−７３頁および１２９−１８０頁；ならびにＳｔｅｗａｒｔおよびＹｏｕｎｇ、”Ｓｏｌｉｄ  Ｐｈａｓｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，”  Ｐｉｅｒｃｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏｍｐａｎｙ（１９８４）（これらの全ての内容は、本明細書中で参考として援用されている）で述べているように、標準的なペプチドカップリング剤（例えば、ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）および１−ヒドロキシ−ベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）の組み合わせ、ならびにＢＯＰ（ベンゾトリアゾリルオキシ−トリオ−（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート）試薬、ｐｙＢＯＰ（ベンゾトリアゾリルオキシ−トリス（Ｎ−ピロリジニル）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート）、ＨＢＴＵ（Ｏ−ベンゾトリアゾリル−テトラメチルイソウロニウム−ヘキサフルオロホスフェート）およびＥＥＤＱ（１−エチルオキシカルボニル−２−エチルオキシ−１，２−ジヒドロキノリン）試薬との組み合わせ、１−エチル（３，３'−ジメチル−１'−アミノプロピル）カルボジイミド（ＥＤＡＣ）およびＨＯＢｔの組み合わせなど）の存在下にて、行われる。このアミノ保護基は、次いで、除去され、得られたアミンは、（３）の２−（カルボキシ）インドールとカップリングされる（工程Ｂ）。再度、このカップリング反応は、前記の標準的なペプチドカップリング反応を使用する。（３）のインドール環は、工程Ｂでの反応前またはその後で置換できる。このようなインドール環の合成および置換反応は、例えば、Ｂｒｏｗｎ、Ｒ．Ｔ．およびＪｏｕｌｅ，Ｊ．Ａ．"Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ  ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（Ｐ．Ｇ．Ｓａｍｍｅｓ編）（Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、Ｖｏｌ．４、Ｄ．ＢａｒｔｏｎおよびＷ．Ｄ．Ｏｌｌｉｓ編）、（１９７９）、Ｐｅｒｇａｍｏｎ  Ｐｒｅｓｓ、Ｏｘｆｏｒｄ；Ｈｏｕｌｉｈａｎ，Ｗ．Ｊ．編、"Ｉｎｄｏｌｅｓ（Ｔｈｅ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ［Ａ．ＷｅｉｓｓｂｕｒｇｅｒおよびＥ．Ｃ．Ｔａｙｌｏｒ編］、Ｖｏｌ．２５、Ｐａｒｔｓ  １−３）、Ｗｉｌｅｙ  Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９７２）：およびＳａｘｔｏｎ，Ｊ．Ｅ．編、"Ｉｎｄｏｌｅｓ（Ｔｈｅ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ）、［Ａ．ＷｅｉｓｓｂｕｒｇｅｒおよびＥ．Ｃ．Ｔａｙｌｏｒ編］、Ｖｏｌ．２５、Ｐａｒｔ  ４）、Ｗｉｌ���ｙ  Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９７９）（これらの全ての内容は、本明細書中で参考として援用されている）で記述しているように、周知である。
【００８１】
このカップリング反応が式２ｃのアミノアルコールを用いて行われる場合には、そのアルコール部分は、この保護基の除去前に、対応するカルボニル化合物に酸化されなければならない。この酸化反応の好ましい方法には、Ｓｗｅｍ酸化（−７８℃でのオキサリルクロライド−ジメチルスルホキシド、塩化メチレンに続いて、トリエチルアミン）；およびＤｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎ酸化（Ｄｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎペリオジナン（ｐｅｒｉｏｄｉｎａｎｅ）、ｔ−ブタノールおよび塩化メチレン）が挙げられる。式２ａ−ｄおよびＡの副構造に含有される保護基は、当該技術分野で周知の方法により、除去される。これらの保護基の一部または全部の反応および除去は、上記スキームの工程Ｃに含まれる。
【００８２】
以下の式３の化合物およびそれらの薬学的に受容可能な塩もまた、本発明の方法で有用である：
【００８３】
【化３４】
2005506346.tif 000008
ここで：
ｎは、１または２である；
ｍは、１または２である；
Ａは、Ｒ２ＣＯ−、Ｒ３−Ｏ−ＣＯ−またはＲ４ＳＯ２−；
次式の基：
【００８４】
【化３５】
2005506346.tif 000009
さらに、ここで：
Ｒ１は、水素原子、アルキルまたはフェニルアルキルである；
Ｒ２は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、フェニルアルキル、置換フェニル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；
Ｒ３は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニルアルキルまたは（置換フェニル）アルキルである；
Ｒ４は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、フェニルアルキル、置換フェニル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；
Ｒ５は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、フェニルアルキル、置換フェニル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；
Ｒ６は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニルアルキルまたは（置換フェニル）アルキルである；
Ｒ７は、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、フェニルアルキル、置換フェニル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；
Ｒ８は、天然および非天然アミノ酸からなる群から選択されるアミノ酸側鎖である；
Ｂは、水素原子、重水素原子、アルキル、シクロアルキル、（シクロアルキル）アルキル、フェニル、フェニルアルキル、置換フェニル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリール、（ヘテロアリール）アルキルまたはハロメチル；
次式の基：
−ＣＨ２ＸＲ９；
ここで、Ｒ９は、フェニル、置換フェニル、フェニルアルキル、（置換フェニル）アルキル、ヘテロアリールまたは（ヘテロアリール）アルキルである；そしてＸは、酸素原子またはイオウ原子である；
次式の基：
−ＣＨ２−Ｏ−ＣＯ−（アリール）；
次式の基：
−ＣＨ２−Ｏ−ＣＯ−（ヘテロアリール）；
次式の基：
−ＣＨ２−Ｏ−ＰＯ（Ｒ１０）Ｒ１１；
ここで、Ｒ１０およびＲ１１は、独立して、アルキル、シクロアルキル、フェニル、置換フェニル、フェニルアルキルおよび（置換フェニル）アルキルからなる群から選択される。
【００８５】
式３の化合物は、溶媒和物および水和物としても存在し得る。それゆえ、これらの化合物は、例えば、水和水、または多数の母液溶媒の分子またはそれらの任意の画分で、結晶化できる。このような化合物の溶媒和物および水和物は、本発明の範囲内に含まれる。
【００８６】
本発明の式１および３の化合物は、通常の方法を用いて合成できる。有利には、これらの化合物は、容易に入手できる出発物質から便利に合成される。
【００８７】
それゆえ、式３の化合物は、一般に、Ｊ．Ｊｏｎｅｓ、”Ａｍｉｎｏ  Ａｃｉｄ  ａｎｄ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，”  Ｓｔｅｖｅｎ  Ｇ．Ｄａｖｉｓ編、Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ、Ｏｘｆｏｒｄ、２５−４１頁（１９９２）（これは本明細書中で参考として援用されている）で述べられているように、ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）−１−ヒドロキシ−ベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）、ＢＯＰ試薬、ｐｙＢＯＰ、ＴＢＴＵ、ＥＥＤＱ、１−エチル（３，３'−ジメチル−１'−アミノプロピル）カルボジイミド（ＥＤＡＣ）−ＨＯＢｔなどのような標準的なペプチドカップリング剤の存在下にて式４で以下で示した３環式の核を、式５ａ−ｄの改変アスパラギン酸および改変グルタミン酸残基と組み合わせることにより、合成できる：
【００８８】
【化３６】
2005506346.tif 000010
2005506346.tif 000011
2005506346.tif 000012
上記の式において、Ａは、アミノ保護基である。アミノ保護基は、次いで、除去され、得られたアミンは、式６の置換アシル基または式７のスルホニル基と組み合わせされる：
Ｒｃ−ＣＯ−Ｘ                                          （６）
Ｒ４ＳＯ２−Ｘ                                          （７）
上式では、Ｒ１は、上で定義したものと同じであり、そしてＲＣは、Ｒ２、Ｒ３−Ｏ、Ｒ４、または式３のＡ基について定義したＲ８を含有する任意の側鎖である。もちろん、このような部分は、このカップリング反応（式５ａ−ｄ）、アシル化反応（式４）またはスルホン化反応（式７）を妨害しないような保護形状にて、任意のヒドロキシ基、カルボニル基またはアミノ基を有する。上式でのＸは、このアシル化反応またはスルホン化反応のための促進脱離基を表わす。
【００８９】
このカップリング反応が式５ｃのアミノアルコールを用いて行われる場合には、そのアルコール部分は、この保護基の除去前に、対応するカルボニル化合物に酸化しなければならない。この酸化反応の好ましい方法には、Ｓｗｅｍ「酸化（−７８℃でのオキサリルクロライド−ジメチルスルホキシド、塩化メチレンに続いて、トリエチルアミン）；およびＤｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎ酸化（Ｄｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎペリオデナン、ｔ−ブタノールおよび塩化メチレン）が挙げられる。式５ａ−ｄおよびＡの副構造に含有される保護基は、当該技術分野で周知の方法により、除去される。
【００９０】
式３の３環式の核は、当該技術分野で公知の方法により、合成される。例えば、１９９６年４月２日に発行されたＤ．Ｓ．Ｋａｒａｎｅｗｓｋｙ、米国特許第５，５０４，０８０号；Ｊ．Ａ．Ｒｏｂｌら、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔｅｒｓ，３６：１５９３−１５９６（１９９５）；およびＳ．Ｄｅ  Ｌｏｍｂａｅｒｔら、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔｅｒｓ  ３５：７５１３−７５１６（１９９４）（これらの全ての内容は、本明細書中で参考として援用されている）を参照のこと。
【００９１】
式５ａ〜ｄの改変アスパラギン酸またはグルタミン酸は、当該分野で周知の方法で作製され得る。例えば、欧州特許出願第５１９，７４８号；ＰＣＴ特許出願番号ＰＣＴ／ＥＰ９２／０２４７２；ＰＣＴ特許出願番号ＰＣＴ／ＵＳ９１／０６５９５；ＰＣＴ特許出願番号ＰＣＴ／ＵＳ９１／０２３３９；欧州特許出願第６２３，５９２号；国際特許出願番号ＷＯ９３／０９１３５；ＰＣＴ特許出願番号ＰＣＴ／ＵＳ９４／０８８６８；欧州特許出願第６２３，６０６号；欧州特許出願第６１８，２２３号；欧州特許出願第５３３，２２６号；欧州特許出願第５２８，４８７号；欧州特許出願第６１８，２３３号；ＰＣＴ特許出願番号ＰＣＴ／ＥＰ９２／０２４７２；国際特許出願番号ＷＯ９３／０９１３５；ＰＣＴ特許出願番号ＰＣＴ／ＵＳ９３／０３５８９；およびＰＣＴ特許出願番号ＰＣＴ／ＵＳ９３／００４８１（これらは全て本明細書中に参考として援用される）を参照のこと。
【００９２】
式６のアシル基および対応するＲ４ＳＯ２基はまた、当該技術分野で周知の方法により、合成される。例えば、１９９６年４月２日に出願された米国特許第５，５０４，０８０号（その内容は、本明細書中で参考として援用されている）を参照のこと。この基は、一旦、この３環式の核に結合すると、加工できるものの、それは、この核に結合する前は、インタクトであるのが好ましい。
【００９３】
一旦、式５および式６または式７の側鎖が、式３の３環式の核に結合すると、当業者は、合成した分子の活性を高めるために、通常、任意のアミノ基、ヒドロキシ基またはカルボキシ保護基を除去する。
【００９４】
本明細書中で使用する「皮膚薬剤」とは、ヒトまたは動物の皮膚病を治療する薬剤を意味し、これには、通常ざ瘡、局部ヘルペス、乾癬、湿疹、足白癬などが挙げられるが、これらに限定されない。
【００９５】
本明細書中で使用する「化粧品剤」とは、身体またはその任意の一部に対して、その外観を清浄にするか、美しくするか、魅力を促進するか、または変えるために、擦り付けられるか、注がれるか、振りかけられるか、または噴霧されるか、その上に導入される薬剤を意味する。
【００９６】
本明細書中で使用する化粧品用組成物、皮膚科用組成物、局所用組成物または皮膚用組成物は、具体的には、医用だけでなく、通常の化粧用（例えば、化粧品および洗面品）である治療および使用を包含する。
【００９７】
本願で使用する「局所」との用語は、本発明の処方（これは、ローション作用を発揮する領域の部位で、適当な基剤または媒体に取り込まれる）の導入に関する。従って、このような局所組成物には、その処方が治療する皮膚面と直接接触させることにより外部で塗布される形状が挙げられる。この目的のための通常の形態には、クリーム、軟膏、ローション、ゲル、ペースト、粉末などが挙げられるが、これらに限定されない。「軟膏」との用語は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，１１ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，３３６（１９５６）で記述されているように、油性の吸収剤、水溶性で乳濁液型の基剤を有する処方（クリームを含めて）を含む。
【００９８】
（アポトーシスを阻害する方法）
本発明は、ＩＣＥ／ＣＥＤ−３ファミリーのメンバーの阻害により、プログラムされた細胞死、すなわちアポトーシスを阻害する方法を提供する。本発明は、ＩＣＥ／ＣＥＤ−３酵素活性のインヒビターのための新規な用途だけでなく、ＩＣＥ／ＣＥＤ−３ファミリーをコードする遺伝子の発現を特異的に防止する任意の方法を提供する。それゆえ、ＩＣＥ／ＣＥＤ−３ファミリーメンバーの遺伝子と相補的なヌクレオチド配列から構成され関連タンパク質の転写または翻訳を阻害できるアンチセンスＲＮＡまたはＤＮＡ、ＩＣＥ／ＣＥＤ−３プロテアーゼ（例えば、その活性部位システインを、セリンまたはアラニンのような他のアミノ酸で置き換えるように設計した突然変異株）のドミナントネガティブな形態の発現、またはＩＣＥ／ＣＥＤ−３ファミリーポリペプチドに結合する抗体は、ペプチドを含めた低分子インヒビター（特に、本明細書中で提示した化合物）と同様に、本発明の範囲内である。
【００９９】
第一局面では、本発明は、造血および血液細胞集団を拡大するかまたはこのような集団の生存を延長する方法を提供し、この方法は、この細胞を、１個以上のＩＣＥ／ＣＥＤ−３ファミリーのメンバーの活性を抑制する効果的な量の試薬と接触させて、未成熟な前駆体および／または成熟細胞のプログラムされた細胞死を阻害し、それにより、この細胞集団の生存を拡大および／または高めることを包含する。本明細書中で使用する「拡大」または「拡大する」との用語は、現存している細胞集団の細胞数を増やすことを意味する。「生存」との用語は、典型的には、エクスビボにて、細胞の生存能を維持することを意味するが、しかしながら、この用語は、同様に、インビボも含むことを意味する。生存は、数時間から数日またはそれより長時間であり得る。
【０１００】
この方法は、所望の細胞を、ＩＣＥ／ＣＥＤ−３の活性を抑制する阻害有効量の試薬と接触させることを包含する。本明細書中で使用する「接触させる」との用語は、インヒビターがＩＣＥ／ＣＥＤ−３の活性を効果的に阻害して、それにより細胞のアポトーシスを阻害し細胞を増殖させ蓄積させるように、この細胞をＩＣＥ／ＣＥＤ−３ファミリーインヒビターに晒すことを意味する。「阻害有効量」との用語は、インタクトの標的細胞内のＩＣＥ／ＣＥＤ−３酵素活性を効果的にブロックするＩＣＥ／ＣＥＤ−３インヒビターの量を意味する。本発明の方法では、１種以上のＩＣＥ／ＣＥＤ−３ファミリーインヒビターが同時に使用できることが明らかである。好ましい実施態様では、接触は、細胞集団の拡大が必要な検体（例えば、最近化学療法を受けた検体）へのＩＣＥ／ＣＥＤ−３インヒビターのインビボ投薬であり得る。このような試薬の例は、Ｃｂｚ−ＶａｌＡｌａＡｓｐ−ＣＨ２Ｆ、Ｃｂｚ−ＶａｌＡｌａＡｓｐ−ＣＨ２ＯＣＯ（２，６−ジＣｌ−Ｃ６Ｈ４）、Ｃｂｚ−ＶａｌＡｌａＡｓｐ−ＣＨ２Ｆメチルエステル、Ａｃ−ＡｓｐＶａｌＡｌａＡｓｐ−ＣＨ２Ｆを含めて、当該技術分野で一般的に知られている。代表的な化合物には、前出の式１および式３が挙げられる。
【０１０１】
ＩＣＥ／ＣＥＤ−３活性の検出は、標準的な方法（例えば、関連ペプチド（例えば、Ａｃ−ＤＥＶＤ−ａｍｃ）と結合したアミノメチルクマリン（ＡＭＣ）の酵素的切断により生じた蛍光を測定する酵素アッセイ）による。このようなアッセイは、当該技術分野で標準的である（Ａｒｍｓｔｒｏｎｇら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７１：１６８５０、１９９６；Ｆｅｒｍａｎｄｅｓ−Ａｌｎｅｍｒｉら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．、５５：６０４５、１９９５）。加えて、ＩＣＥ活性の阻害は、ＩＬ−１βの生物検定により、測定できる。ＩＣＥ／ＣＥＤ−３活性は、好ましくは、ＩＣＥ／ＣＥＤ−３ファミリーインヒビターにより、少なくとも約７５％まで、好ましくは、約９０％まで抑制される。
【０１０２】
「細胞」または「細胞集団」には、前駆細胞（例えば、多分化能幹細胞）および／または分化した成熟細胞が含まれる。拡大した細胞および／またはその生存が本発明の方法により拡大された細胞の例には、顆粒球（例えば、好中球）、単球、赤血球、リンパ球および血小板が挙げられる。
【０１０３】
造血の成功はまた、血球容量、白血球数、膵臓または骨髄から骨髄ＤＮＡへの粉砕チミジンの含入、膵臓の重量、バースト形成（ｂｕｒｓｔ−ｆｏｒｍｉｎｇ）単位−赤血球の数またはコロニー形成単位（赤血球、顆粒球／マクロファージおよび巨核球形成系列）を測定することにより、検出できる。
【０１０４】
造血疾患は、一次疾患の結果としてまたは他の疾患の治療の結果として、起こり得る。例えば、放射線療法また化学療法の重大な副作用には、骨髄抑制がある。骨髄移植に続いて、汎血球減少が認められ得、重症の白血球減少症は、しばしば、エイズで認められる。慢性腎不全があって透析を受けている患者は、しばしば、貧血がある。ＡＺＴで治療を受けているエイズ患者、白金で治療している癌患者、およびリューマチ性関節炎のある貧血患者は、しばしば、貧血および白血球減少のために、輸血が必要である。種々の造血成長因子（例えば、エリスロポエチン、顆粒球、顆粒球−マクロファージコロニー刺激因子）、またはサイトカイン（例えば、インターロイキン−１）は、造血を刺激することが知られており、これらの病態を治療するのに使用されている。しかしながら、治療時間は、一般に、およそ数週間であり、特に、好中球減少の場合には、患者は、日和見感染の危険がある。それらは、組換え産生タンパク質であるので、これらの治療は、通常、高価なものである。それゆえ、低分子（例えば、ＩＣＥ／ＣＥＤ−３インヒビター）を、単独でまたは造血回復を速める成長因子と組み合わせて、投与することが有利である。造血成長因子を含む種々のサイトカインは、増殖を高めるだけでなく、標的細胞のアポトーシスを阻害することが知られている（ＫｏｕｒｙおよびＢｏｎｄｕｒａｎｔ、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２４８：３７８、１９９０；ＭｕｔａおよびＫｒａｎｔｚ、Ｊ．Ｃｅｌｌ  Ｐｈｙｓｉｏｌ．、１５６：２６４、１９９３）。しかしながら、これらの試薬は、アポトーシス細胞機構の上流で作用し、その機構に間接的に影響を及ぼすにすぎない。本発明は、このアポトーシス機構を直接的に阻害することにより、細胞を増やす方法を提供する。本発明の方法と共に造血成長因子を投与することを包含する組み合わせ治療は、好ましい実施態様である。
【０１０５】
本発明の方法は、骨髄の再形成が必要な個体にて、正常な造血を回復させるのに有用である。この多分化能幹細胞は、自己更新のための独特の性能、および顆粒球、単球、赤血球、巨核球およびリンパ球系列の成長および分化の可能性を有する。
【０１０６】
当業者も理解できるように、幹細胞は、適当な造血成長因子または成長因子の組み合わせと共にインキュベーションすることにより、リンパ球、骨髄また赤血球系列の集団として分化するよう方向付けられる。従って、本発明の方法は、さらに、これらの細胞を、このＩＣＥ／ＣＥＤ−３インヒビターに加えて、適当な造血成長因子と接触させることを包含する。本明細書中で使用する「適当な造血成長因子」との用語は、祖先の幹細胞を所望のリンパ球、顆粒球、単球、巨核球または赤血球系列の細胞集団に向けるための当該技術分野で公知の１種以上の造血成長因子を意味する。種々の成長因子が、細胞の増殖を促進することおよびアポトーシスを阻害することの両方により、機能する。これらの両方は、細胞の蓄積を促進する機能がある。ある種の造血成長因子（Ｇ−ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦおよびエリスロポエチンを含めて）は、それらの各個の標的細胞のプログラムされた細胞死を阻害でき、および、それらの細胞の増殖を刺激できるような成長因子の例である。これらの因子は、患者の顆粒球（好中球）、単球および赤血球の再増殖を促進する際に、臨床的に、有用であることが分かっている。Ｇ−ＣＳＦおよびＧＭ−ＣＳＦは、しばしば、化学療法または放射線療法に続いて患者に使用され、エリスロポエチンは、一般的に、腎透析を受けた患者に使用される。これらの目的に使用できる当該技術分野で公知の他の代表的な成長因子には、ＩＬ−１、ＩＬ−６、幹細胞およびＩＬ−３がある。造血系を刺激する他の成長因子は、当業者に公知である（例えば、Ｈａｒｒｉｓｏｎ'ｓ  Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  Ｉｎｔｅｒｎａｌ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、Ｉｓｓｅｌｂａｃｈｅｒら著、ｐｐ  １７１４−１７１１、ＭｃＧｒａｗ  Ｈｉｌｌ、１９９４（これらの内容は、本明細書中で参考として援用されている）を参照のこと）。
【０１０７】
アポトーシスインヒビター（例えば、ＩＣＥ／ＣＥＤ−３インヒビター）は、成熟血球自体の生存を延長できるだけでなく、骨髄中の血球前駆体の生存を延長できる。成熟血球の生存の延長に関して、これは、（骨髄移植と共にまたはそれなしで）化学療法および／または放射線療法後の顆粒球の再増殖に、特に有益であり得る。成熟顆粒球（特に、好中球）は、血流中にて、２４時間生存するにすぎず、その後、アポトーシスにより死滅する。アポトーシスをブロックし好中球の生存を増やすＩＣＥ／ＣＥＤ−３インヒビターは、患者がその白血球数を正常化する速度を速める。最終的に成熟細胞集団を生じる前駆細胞でのアポトーシスの阻害は、成熟細胞への効果と相乗的である。
【０１０８】
本発明は、さらなる顆粒球の必要な受血者への引き続いた輸血のためのエクスビボでの好中球／顆粒球の生存能を保持する方法を提供する。供血者から取り出した顆粒球の寿命は限られており、それゆえ、輸血に機能する顆粒球を供給するのは困難である。
【０１０９】
本発明の組成物で治療または予防され得る疾患状態には、炎症性疾患、自己免疫疾患および神経変性疾患、また、虚血傷害に関与している不要なアポトーシスを阻止するために、例えば、心臓に対する虚血傷害（例えば、心筋梗塞）、脳に対する虚血傷害（例えば、脳卒中）および腎臓に対する虚血傷害（例えば、虚血性腎臓病）が挙げられるが、これらに限定されない。それらがアポトーシスを阻止する能力の結果として、本発明の医薬組成物はまた、化学療法後の、患者の造血細胞の再増殖にも有用である。このような治療が必要な哺乳動物（これはまた、本明細書中にて、患者とも呼ぶ；すなわち、炎症性疾患、自己免疫疾患および神経変性疾患に罹っている患者、および造血細胞の再増殖について、化学療法を受けている癌患者）に上記医薬組成物の有効量を投与する方法は、本発明の他の局面である。最後に、それらがアポトーシを阻止する性能のさらに他の結果として、本発明の医薬組成物は、移植で使用する臓器の生存度を延ばす方法で使用され得る。
【０１１０】
治療または予防され得る炎症性疾患には、例えば、敗血症性ショック、敗血症および成人呼吸窮迫症候群が挙げられる。標的自己免疫疾患には、例えば、リウマチ、関節炎、全身性エリテマトーデス、強皮症、慢性甲状腺炎、グレーブス病、自己免疫性胃炎、インシュリン依存性糖尿病、自己免疫性溶血性貧血、自己免疫性好中球減少、血小板減少症、慢性活動性肝炎、重症筋無力症および多発性硬化症が挙げられる。標的神経変性疾患には、例えば、筋萎縮性側索硬化症、アルツハイマー病、パーキンソン病および一次側索硬化症が挙げられる。本発明の医薬組成物はまた、創傷の治癒を促進するのに使用され得る。有害なアポトーシスに付随した標的疾患（言い換えれば、虚血傷害に付随したもの）には、心筋梗塞、脳卒中および虚血性腎臓病が挙げられる。本発明の医薬組成物はまた、感染症（特に、ウイルス感染が関与したもの）を治療するのに使用され得る。
【０１１１】
本発明は、多種多様な症状（炎症により引き起こされる組織または細胞の損傷を含めて）を治療または予防する組成物および方法を提供する。このような炎症は、急性の炎症であり得、これは、有害な薬剤（例えば、化学薬品（例えば、化粧品剤、植物または昆虫に由来の薬剤））、物理的外傷、火傷またはは一過性微生物感染に対する迅速かつ早期の応答を含む。あるいは、それは、慢性炎症（例えば、傷害性刺激（例えば、細胞内微生物による持続性感染、非分解性無生物物質への長期間にわたる暴露）が連続して存在していることにより生じるもの）または自己免疫疾患であり得る。
【０１１２】
本発明の組成物および方法は、種々の感染（細菌感染、真菌感染およびウイルス感染を含めて）により引き起こされる炎症または敗血症を治療または予防するのに使用され得る。細菌感染には、グラム陽性菌およびグラム陰性菌の両方が含まれる。グラム陽性細菌および付随した疾患の例には、破傷風菌（テタヌス）、ボツリヌス菌（ボツリスム）、炭疽菌（炭疽）、黄色ブドウ球菌（ざ瘡、皮膚膿瘍、毒素ショック症候群）、肺炎連鎖球菌（細菌性肺炎）が挙げられる。連鎖球菌はまた、連鎖球菌性咽頭炎、膿痂疹、中耳感染、猩紅熱、リウマチ熱、壊死性筋膜炎の原因となる媒介物である。病的グラム陰性菌の例には、大腸菌、腸炎菌（腸チフス発熱）、緑膿菌、ペスト菌（腺ペスト）、ヘモフィルスインフルエンザ（細菌性髄膜炎、中耳感染）、ナイセリア属髄膜炎（髄膜炎菌性髄膜炎）および淋菌（淋病）が挙げられる。
【０１１３】
他の微生物による感染に付随した症状もまた、本発明により治療され得る。このような感染性微生物には、例えば、放線菌（例えば、結核菌およびライ菌）、コリネバクテリウム、スピロヘータ（例えば、梅毒トレポネーマ（梅毒）およびＢｏｒｒｅｌｉａ  ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉ（ライム病））、マイコプラズマ、リケッチア（例えば、発疹チフスリケッチア（チフス発熱）およびクラミジア（例えば、トラコーマ病原体（骨盤の炎症性病、トラコーマ））が挙げられる。それに加えて、本発明の方法および組成物は、他の生物の寄生に付随した細胞損傷を治療または予防するのに使用され得、これには、例えば、真菌、原虫（例えば、プラスモディウム）、渦虫（例えば、サナダムシ、吸虫）、線虫、昆虫（例えば、ノミ、シラミ）およびクモ形類動物（例えば、ダニ）が挙げられる。
【０１１４】
本発明で治療され得るウイルス感染には、ＤＮＡウイルスおよびＲＮＡウイルスの両方により引き起こされるものが挙げられる。ＤＮＡウイルスは、二本鎖ＤＮＡゲノム（例えば、天然痘）または一本鎖ＤＮＡゲノム（ｅ．ｇ．、アデノ随伴ウイルス）を含み得る。ＲＮＡウイルスは、アンチセンスＲＮＡ（例えば、エボラ）、センスＲＮＡ（例えば、ポリオウイルス）または二本鎖ＲＮＡ（例えば、レオウイルス）だけでなく、レトロウイルス（例えば、ＨＩＶ−１）を含むものが挙げられる。本発明で治療され得るＤＮＡウイルスおよびそれに付随した疾患の例には、以下が挙げられる：痘瘡（天然痘）；ヘルペスウイルス、例えば、単純疱疹（コールドソアー）、水痘帯状疱疹（水痘、帯状疱疹）、ＥＢウイルス（単核球症、バーキットリンパ腫）、ＫＳＨＶ（カポジ肉腫）およびサイトメガロウイルス（失明）；アデノウイルス；およびＢ型肝炎。ＲＮＡウイルスには、ポリオウイルス、ライノウイルス、風疹、黄熱病、西ナイルウイルス、デング、ウマの脳炎、Ａ型肝炎およびＣ型肝炎、呼吸器合胞体ウイルス、パラインフルエンザウイルスおよびタバコモザイクウイルスが挙げられる。ＲＮＡウイルスは、本発明で治療され得る種々のヒト疾患に関与しており、これには、例えば、はしか、おたふく風邪、狂犬病、エボラおよびインフルエンザが挙げられる。本発明で治療されるウイルス感染は、特定の細胞または組織に局在化され得るか、全身性であり得る。それに加えて、これらのウイルス感染は、溶解性または潜在性であり得る。
【０１１５】
本発明はまた、重症の出血熱を引き起こし得る全身性ウイルス感染を治療するのに使用され得る。多くのウイルス感染は、出血性合併症を伴い得るものの、数種のＲＮＡウイルスのいずれかを伴う感染は、血管性関与およびウイルス性出血熱を引き起こす。公知のウイルス性出血熱には、エボラ出血熱、マールブルグ病、ラッサ熱、アルゼンチン出血熱およびボリビア出血熱が挙げられる。これらの病気の病原体には、それぞれ、エボラウイルス、マールブルグウイルス、ラッサ熱ウイルス、フニンウイルスおよびマチュポウイルスが挙げられる。
【０１１６】
種々のウイルスは、ウイルス性出血熱に付随しており、これには、フィロウイルス（例えば、エボラ、マールブルグおよびレストン）、アレナウイルス（例えば、ラッサ、フニンおよびマチュポ）およびブニヤウイルスが挙げられる。それに加えて、フレボウイルス（例えば、リフトバレー熱ウイルス）は、ウイルス性出血熱の病原体であることが確認されている。パラミキソウイルスは、フィロウイルスと進化的に近縁種であるので、出血熱およびそれに付随した炎症の病原体にはまた、パラミキソウイルス（特に、呼吸器合胞体ウイルス）も含まれ得る（Ｆｅｌｄｍａｎｎ，Ｈ．ら、Ａｒｃｈ  Ｖｉｒｏｌ  Ｓｕｐｐｌ  １９９３；７：８１−１００）。それに加えて、ヒトにおいて出血性発熱を引き起こす他のウイルスは、以下のウイルス群に属するとして、特徴付けられている：トガウイルス（Ｃｈｉｋｕｎｇｕｎｙａ）、フラビウイルス（デング、黄熱病、キャサヌール森林病、オムスク出血熱）、ナイロウイルス（クリミアン・コンゴ出血熱）およびハンタウイルス（腎症候群、腎症の流行に伴う出血熱）。さらに、アメリカ南西部における１９９３年のハンタウイルス肺症候群の蔓延の病原体として、Ｓｉｎ  Ｎｏｍｂｒｅウイルスが確認された。
【０１１７】
本発明の方法および組成物は、ウイルス感染に付随した症状を処置または改善することに関し得、この症状としては、炎症、組織損傷、および出血熱の他の身体的症状発現が挙げられるが、これらに限定されない。ウイルス感染および出血熱により影響を受ける適当な標的細胞としては、例えば、単核食細胞系、リンパ球、内皮細胞、線維芽細胞、肝細胞、および多くの他の細胞が挙げられる。
【０１１８】
本発明の方法および組成物はまた、抗原提示細胞の生存向上および免疫エフェクター／応答細胞（例えば、リンパ球（例えば、Ｔリンパ球およびＢ細胞）、樹状細胞、マクロファージなど）の生存能増大をもたらす。従って、本発明は、微生物（例えば、細菌、真菌またはウイルスなど）の感染に付随した組織損傷および炎症を予防し、改善し、または処置するだけでなく、それに対する免疫応答の効力および持続時間を高める際に有用性を有する。それゆえ、免疫系の細胞における細胞死を誘発する多数の適応症（例えば、ＨＩＶおよび敗血症）では、より長い細胞寿命は、疾患の進行を劇的に変え得、および／またはこのような微生物に対する免疫応答を高め得る。
【０１１９】
本発明の方法および組成物が種々の用途を有することは、当業者に明らかである。例えば、多くの化粧品は、アレルゲンであるか、皮膚に対して刺激を引き起こすことが知られている。しかしながら、ＩＣＥ／Ｃｅｄ−３ファミリーのプロテアーゼを抑制する試薬と組み合わせると、刺激作用のある化粧品に付随した炎症応答および／または症状は、実質的に低下する。
【０１２０】
さらに、炎症に付随した症状を改善するか既存の炎症を減らすために、他の炎症誘発性の状態が処置され得る。炎症またはそれに付随した刺激は、上で述べたような種々の物理的または化学的な原因に由来し得、これらとしては、以下が挙げられ得る：昆虫の咬傷または刺傷、特定種類の植物（例えば、有毒オーク）との接触、放射線（例えば、紫外線）、非伝染性結膜炎、痔核（急性）、擦過傷、手指または足指の嵌入爪（肉芽形成）、皮膚移植ドナー部位、膣炎、乾癬、単純疱疹（コールドソアー、アフタ性胃潰瘍）、掻痒症アニ／クルリ、化学炎症など。さらに、ＩＣＥ／ｃｅｄ３ファミリーのプロテアーゼのこのような炎症または他の活性は、弾性の欠如または皮膚の外観および肌理の低下を引き起こし得る。従って、本明細書中で述べた組成物および方法は、炎症性疾患を処置する際に有用であるだけでなく、付随した疾患および症状を処置するのにも有用である。
【０１２１】
炎症は、細胞または組織に対して外部から誘発された損傷の結果である。このような損傷は、ヒトおよび動物の皮膚または粘膜に対する化学的および／または物理的な影響により、誘発され得る。物理的影響の例には、梗塞、熱、冷気、放射線および電気的ショックがあり、また、化学的影響の例には、酸、塩基およびアレルゲンとの接触がある。炎症は、皮膚に作用する微生物により誘発され得るだけでなく、ヒトまたは動物の身体に侵入する微生物の結果でもあり得る。
【０１２２】
種々の症状は、炎症に関連し、これとしては、以下のうちの１以上が挙げられるが、これらに限定されない：疼痛、表面温度の上昇、膨潤、そう痒および機能低下または機能停止。
【０１２３】
改善され得る炎症応答は、動物の皮膚または粘膜にあり得、これには、萌生している親知らずの周りの炎症、抜歯、歯周膿瘍、粘膜に対する補綴物誘発圧力の痛み、真菌感染に続いた炎症、歯槽骨炎シカドロローサ（ａｌｖｅｏｌｉｔｉｓ  ｓｉｃｃａ  ｄｏｌｏｒｏｓａ）（これは、抜歯に続いて起こり得る痛む状態である）の露出した骨表面の治療、慢性および急性炎症疾患（これには、膵炎、関節リウマチ、骨関節炎、喘息、炎症性腸疾患、乾癬およびある種の神経障害（例えば、アルツハイマー病）が含まれるが、これらに限定されない）のような疾患が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１２４】
エクリンおよび皮脂腺出力の減少と結び付いたいくつかの形態学的変化（これには、角質層の含水量減少が含まれる）は、これらの成分の存在を低下でき、これは、皮膚を保護して、コラーゲン（これは、主要な皮膚タンパク質である）の喪失を可能にする。皮膚の角質層の完全性を損なう形態学的変化は、種々の状態により引き起こされ得る。このような状態には、環境（例えば、日光または風への露出）、外傷または創傷（例えば、切り傷、熱傷または擦過傷）、化学物質（例えば、アルカリ性石鹸、洗剤、液体溶媒、オイル、防腐剤）への暴露、および疾患（例えば、湿疹、乾癬、脂漏性皮膚炎）がある。従って、ＩＣＥ／ｃｅｄ３ファミリーのプロテアーゼのプロテアーゼ活性を抑制する組成物および方法は、皮膚を維持する際に有用である。
【０１２５】
ＩＣＥ／ｃｅｄ３プロテアーゼ抑制剤およびそれらの組成物はまた、創傷の修復で有用である。創傷は、物理的または化学的な手段、体組織の慢性の刺激および／または炎症により引き起こされる身体のどこかでの組織の喪失または損傷である。創傷の修復で有用であることが知られている薬剤としては、抗炎症剤および局所塗布剤（これらは、コラーゲンおよび線維質の組織の発生で有用である）が挙げられる。
【０１２６】
当業者が容易に理解できるように、獣医学用途もまた、本発明の範囲内である。１実施態様では、ＩＣＥ／ｃｅｄ３ファミリーのプロテアーゼのメンバーのプロテアーゼ活性を抑制する少なくとも１種の薬剤またはそれらの化粧品的、薬学的または皮膚科学的に受容可能な塩を含有する、化粧品用、薬学用または皮膚科学用組成物は、化粧品的、薬学的または皮膚科学的に受容可能な媒体に含有され、ここで、刺激副作用を有するこの少なくとも１種の生成物は、ＩＣＥ／ｃｅｄ３ファミリーのプロテアーゼのメンバーのプロテアーゼ活性を抑制する、抗刺激有効量なしでのこの少なくとも１種の薬剤の刺激を引き起こす量で、含有される。
【０１２７】
ある実施態様では、刺激副作用を有する生成物は、α−ヒドロキシ酸、α−ケト酸、レチノイド、アントラリン、アントラノイド、過酸化物、ミノキシジル、リチウム塩、代謝拮抗剤、ビタミンＤ、毛髪染料、ヘアトニック、制汗剤、脱毛剤、永久パーマ剤、芳香アルコール性溶液、脱色剤、界面活性剤および溶媒からなる群に由来し得る。
【０１２８】
本発明の試薬は、可逆的または不可逆的な様式で、ＩＣＥ／ＣＥＤ−３ファミリーのメンバーの触媒活性を阻害するという点で、「ＩＣＥ／ＣＥＤ−３インヒビター」である。本明細書中で使用する「不可逆的」との用語は、このインヒビターとＩＣＥ／ＣＥＤ−３ファミリーメンバーとの間の共有結合の形成を意味する。可逆インヒビターとなるものに不可逆「弾頭（ｗａｒｈｅａｄ）」を組み込むことにより、可逆インヒビターを不可逆インヒビターに変えることも可能である。
【０１２９】
ＩＣＥ／ＣＥＤ−３阻害の可逆性は、一般に、その分子内の電気陰性基の機能である。この電気陰性基がジアゾアルキルケトンのとき、ＩＣＥ活性の阻害は不可逆的であり、この化合物は、不可逆インヒビターである。この電気陰性基がアルデヒドのとき、ＩＣＥの阻害は可逆的であり、このインヒビターは、可逆インヒビターである。
【０１３０】
本発明の化合物は、好ましくは、アルデヒド、ジアゾアルキルケトン、ハロアルキルケトンまたはアシルオキシメチルケトンを有する。電気陰性基に関して本明細書中で使用する「アルキル」との用語は、１個〜３個の炭素原子を有する直鎖状または分枝鎖基をいい、これは、必要に応じて、置換されていてもよい。代表的なアルキル基としては、メチル、エチル、プロピルなどが挙げられる。必要に応じて、この電気陰性基は、アルデヒド、フルオロメチル（ＣＨ２Ｆ）ケトンまたはアシルオキシメチルケトンである。
【０１３１】
本発明の化合物は、当業者に公知であり容易に明らかな方法に一般に対応する技術により、製造される。例えば、Ｋｅｔｔｎｅｒら、Ａｒｃｈ，Ｂｉｏｃｈｅｍ，Ｂｉｏｐｈｙｓ．、１６２：５６、１９７４；米国特許第４，５８２，８２１号；同４，６４４，０５５号；Ｋｅｔｔｎｅｒら、Ａｒｃｈ，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ、１６５：７３９、１９７４；ＤａｋｉｎおよびＷｅｓｔ、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、７８：９１、１９２８；Ｒａｓｎｉｃｋ，Ｄ．、Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．、１４９：４６１、１９８５；Ｒｅｖｅｓｚ，Ｌ．、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．、３５：９６９３、１９９４を参照のこと。代表的なインドリルジペプチドおよび３環式化合物は、本明細書中で提供されている。
【０１３２】
非フルオロハロアルキルケトン電気陰性脱離基を有する化合物は、好ましくは、Ｋｅｔｔｎｅｒ手順に従って、合成される。Ｎ−ブロック化アミノ酸またはペプチドは、Ｎ−メチルモルホリンおよびアルキル非フルオロハロホルメートと反応されて、ペプチド−酸無水物が生成される。この無水物は、次いで、不活性非プロトン性溶媒中で、ジアゾアルカンと反応されて、ペプチド−ジアゾメタンケトンを形成する。このジアゾメタンケトンは、次いで、ＨＣｌ、ＨＢｒまたはＨＩの無水溶液と反応して、所望のＮ−ブロック化Ｃ末端ハロアルキルケトンペプチドまたはアミノ酸が生成される。
【０１３３】
フルオロメチル電気陰性脱離基を有する化合物は、好ましくは、Ｒｅｖｅｓｚ手順により、合成される。Ｎ−ブロック化ペプチドまたはアミノ酸は、標準的なペプチドカップリング剤（例えば、ジシクロヘキシルカルボジイミド−ヒドロキシ−ベンゾトリアゾール）の存在下にて、ｔ−ブチル（３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−フルオロ）ペンタノエートと反応される。得られた生成物は、Ｓｅｖｅｒｎ酸化またはＤｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎ酸化のいずれかにより、対応するケトンに酸化される。最終的に、トリフルオロ酢酸によるこのｔ−ブチルエステルの脱保護により、対応するカルボン酸が得られる。
【０１３４】
フルオロアルキルケトン電気陰性脱離基を有する化合物は、そのＮ末端ブロック基を除去し、その脱保護化合物を他の保護アミノ酸とカップリングさせることにより、そのＮ末端方向に伸長できる。Ｂｏｄａｎｓｚｋｙ、Ｔｈｅ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ、Ｂｅｒｌｉｎ、１９８４。あるいは、脱保護化合物はアシル化されて、Ｎ末端アセチル保護基を有する化合物を生じる。Ｓｔｅｗａｒｔら、Ｓｏｌｉｄ  Ｐｈａｓｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、Ｐｉｅｒｃｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．、Ｒｏｃｋｆｏｒｄ、Ｉｌｌ．、１９８４。
【０１３５】
他の実施態様では、本発明は、器官の生存能を延長する方法を提供し、この方法は、移植用の器官の細胞を、インターロイキン−１β−変換酵素の（ＩＣＥ）／ＣＥＤ−３活性を抑制する阻害有効量の試薬と接触させて、それにより、未処理の器官と比較して、この器官の生存能を延長することを包含する。「器官」との用語は、無傷の多細胞器官（例えば、腎臓、肝臓または心臓）；多細胞器官由来の細胞懸濁液（例えば、ドーパミン作動性ニューロン中の膵島細胞）にだけでなく、血球または造血前駆細胞の懸濁液を含むことを意味する。好ましくは、この器官は、移植用の器官を保存するために、エキソビボで処理される。「延長する」との用語は、移植用の器官が、本発明の方法を用いた処理により、ＩＣＥ／ＣＥＤ−３インヒビターで処理されていない類似の器官と比較して、保存されることを意味する。特定の理論に束縛されることは望まないものの、移植用の器官の細胞をＩＣＥ／ＣＥＤ−３インヒビターと接触させると、プログラムされた細胞死が阻害され、それにより、この器官が保存されて生存能が延長されると考えられる。
【０１３６】
本発明の方法は、移植の前または移植に続いて、ドナー器官の細胞のアポトーシスを阻害するために遺伝的に改変されたかまたはＩＣＥ／ＣＥＤ−３インヒビターに浸したドナー器官、および必要に応じて、免疫抑制剤で、レシピエントを処置することを包含する。
【０１３７】
本発明は、種々の臨床用途（遺伝子治療、骨髄移植の増強、および骨髄移植の代替を含めて）に有用な造血細胞のエキソビボでの拡大または生存を包含する。従って、顆粒球、赤血球および／または血小板の集団のエキソビボでの拡大および／または生存を促進するために、アポトーシス機構のインヒビター（例えば、ＩＣＥ／ＣＥＤ−３ファミリーインヒビター）を使用することは、有用な方法を構成する。例えば、被験体から単離した細胞の組織培養物に、または、このような細胞で作動可能なＩＣＥ／ＣＥＤ−３インヒビターをコードするポリヌクレオチド（例えば、アンチセンス）を含有する発現ベクターでこの細胞をトランスフェクトすることによって、ＩＣＥ／ＣＥＤ−３インヒビターを添加し得る。
【０１３８】
本発明の方法は、治療上の有用性を有する。例えば、当該技術分野での標準的な方法により得た多能性造血幹細胞（ＨＳＣ）の懸濁液は、本発明の方法により処理でき、そしてレシピエントの造血再形成を行うのに使用できる。例えば、エキソビボ処置としては、レシピエントに由来の（自己再形成）またはレシピエント以外の個体に由来の（非自己再形成）富化された多能性幹細胞は拡大でき、そして種々の疾患または障害（例えば、貧血、悪性疾患、自己免疫疾患、および種々の免疫不全および欠乏症）の処置または予防だけでなく、造血細胞のレパートリーが枯渇しているレシピエント（例えば、化学療法剤または放射性剤で処置したレシピエントまたはエイズを罹患したレシピエント）で、使用できる。本発明の組成物の他の治療用途は、当業者に周知である。移植した細胞の処理は、エキソビボで、および移植に続いてインビボでの両方であり得る。
【０１３９】
本発明をヒトレシピエントのための非自己ドナー器官に適用し得る方法の一例は、以下の通りである：移植の１週間前から始めて、レシピエントは、誘発免疫応答の可能性を減らすために、シクロホスファミドを投薬される。移植片の受容を高めるために、移植の少し前（１〜３日前）に、免疫抑制投薬量のシクロスポリンまたはＦＫ５０６を開始してもよい。移植の直前で器官の取り出し前に、ドナーに、ＩＣＥ／ＣＥＤ−３インヒビターを投薬してもよい。ドナーの器官は、移植前に取り出されると、少なくとも１種のＩＣＥ／ＣＥＤ−３インヒビター（例えば、ペプチドフルオロアルキルケトン）を含有する溶液でフラッシュされる。標準的な手術技術による移植に続いて、患者は、典型的には、シクロスポリンまたはＦＫ５０６、シクロホスファミド、およびステロイド、および必要に応じて、ＩＣＥ／ＣＥＤ−３インヒビターを用いた慣用的な免疫抑制で維持される。免疫応答性に関連した臨床的な徴候および症状に基づいて、種々の免疫抑制剤は、投薬量が低減される。
【０１４０】
移植中に使用される免疫抑制剤には、シクロスポリンＡ（ＣｓＡ）のような薬剤であるが、しかしながら、免疫抑制を起こす他の薬剤（例えば、ラパマイシン、デスオキシスペルグアリンおよびＦＫ５０６、またはこれらの化合物の機能性等価物）もまた、利用できる。ＣｓＡは、好ましくは、免疫抑制用量での注射により、投与される。ＣｓＡ処置の持続期間は、約２日間〜約２０日間の範囲であり得る。
【０１４１】
移植前の器官生存を高めるために、このＩＣＥ／ＣＥＤ−３ファミリーインヒビターは、切り出した器官を灌流するのに使用する液体に添加することにより、投与され得る。このＩＣＥ／ＣＥＤ−３インヒビターを、また、器官の切り出し前のドナーに投与するなら、ＩＣＥ／ＣＥＤ−３インヒビターは、任意の適当な手段（非経口投与、皮下投与、肺内投与、および鼻腔内投与を含めて）により、投与される。非経口の注入としては、筋肉内投与、静脈内投与、動脈内投与または腹腔内投与が挙げられる。
【０１４２】
任意の種に由来の任意の器官が移植できることが理解される。本発明の方法は、同じ種の移植（例えば、ヒトレシピエントおよび他のヒトドナー（同種異系移植または自己移植））または他の種（例えば、羊、ブタまたはヒトでない霊長類）からヒトレシピエントへの移植（異種移植）に使用する器官を保存するのに有用である。このような移植用組織としては、心臓、肝臓、腎臓、肺、膵臓、膵島、脳組織、角膜、骨、腸、皮膚および造血細胞が挙げられるが、これらに限定されない。ヒトは、好ましいレシピエントである。
【０１４３】
ドナー（例えば、ブタ）に投与するＩＣＥ／ＣＥＤ−３インヒビターの量、および移植する器官を処理するＩＣＥ／ＣＥＤ−３インヒビターの量を決定するために、化合物は、血管系中のその濃度が、細胞培養物モデルのアポトーシスを阻害するのに必要な量と少なくとも同程度に高いように、投与される。種々の細胞培養物モデルは、当該技術分野で公知である（例えば、Ａｒｍｓｔｒｏｎｇら（上記）；Ｓｃｈｌｅｇｅｌら（上記）；Ｂｏｕｄｒｅａｕら（上記））。このドナー器官、および必要に応じて、ドナーは、次いで、ドナーからの器官で認められる通常のアポトーシスの約１０％未満までアポトーシスを低下させるために、ＩＣＥインヒビターを投薬される。従って、本明細書中で使用する「アポトーシス阻害」量との用語は、ＩＣＥ活性および／またはアポトーシスを約７５％、好ましくは、約９０％阻害するＩＣＥインヒビターの量をいう。
【０１４４】
（生物生産を高める方法）
さらに他の実施態様では、本発明は、移植以外の用途のために、インビトロで培養した細胞の生存を高める方法を提供する。例えば、プログラムされた細胞死の阻害は、生物生産プロセスを高めるに有用である。例えば、組み換えタンパク質の産生では、培養した宿主細胞のアポトーシス細胞死により、収量が限定され得る。従って、ＩＣＥ／ＣＥＤ−３インヒビターによる宿主細胞の処理、またはＩＣＥ／ＣＥＤ−３と相補的なアンチセンスＲＮＡ配列もしくはＤＮＡ配列を発現しＩＣＥ／ＣＥＤ−３ファミリーメンバーの転写もしくは翻訳を阻害できる宿主細胞を使用すること、またはＩＣＥ／ＣＥＤ−３ファミリーインヒビターをコードする遺伝子を発現する宿主細胞を使用することは、細胞がより長く生存しそして所望の産生物をより長く生成および／または分泌可能にすることにより、生物生産を高め、それにより、より高い収量の生成物が得られる。プログラムされた細胞死を防止する能力は、細胞が、通常必要な増殖因子とは無関係に生存することを可能にし、培地補充の費用を低減する。
【０１４５】
生物生産に有用なことを立証するために、有用な生成物（例えば、サイトカイン）を自然に産生する細胞株または有用な生成物（例えば、組み換えヒトエリスロポエチン、成長ホルモンまたはＧ−ＣＳＦを安定に発現する、ＣＯＳ細胞またはＣＨＯ細胞）を発現するために遺伝子操作された細胞株は、発酵中にて、ＩＣＥ／ＣＥＤ−３インヒビターと接触される。生物生産に対するＩＣＥ／ＣＥＤ−３インヒビターの効果は、いくつかの方法で測定できる：１）異なる時点での培養物中のアポトーシス細胞の割合を決定すること；２）所望生成物の産生に関して、培養物の有用寿命を決定すること；３）細胞１グラムまたは培養物の１容量あたりの生成物の収量を測定すること；４）生成物の最終純度を測定すること。
【０１４６】
生物生産の効率または全体的な生産性を増大させる方法は、天然生成物または組み換え生成物を生産するコストを低下させるので、有用である。哺乳類の細胞の発酵は、時間の経過につれた細胞生存能の低下により、限定される。発酵中の細胞死は、アポトーシスであることが示されており、それゆえ、アポトーシスインヒビターは、生物生産中の細胞生存能を高める。生物生産に使用される増殖培地は、しばしば、細胞生存能を高めるために、血清なしで、増殖因子が補充される。本発明のＩＣＥ／ＣＥＤ−３インヒビターの補充は、このような添加剤と置き換えるかまたはそれを増強するように設計されている。
【０１４７】
（薬学的組成物、化粧品組成物または皮膚科学組成物）
本発明の組成物は、その組成物が経口摂取されるか、注射されるか、皮膚または粘膜に塗布されるかに依存して、通常使用される全ての薬学的形態であり得る。
【０１４８】
局所塗布には、この組成物は、特に、ローション型または血清型の水性または油性の溶液または分散液、ミルク型の液状または半液状稠度の乳濁液（これらは、脂肪相を水相に分散するか（Ｏ／Ｗ）またはその逆（Ｗ／Ｏ）により、得られる）、または水性または無水のクリーム型またはゲル型の滑らかな稠度の懸濁液または乳濁液、あるいは、イオン型および／または非イオン型のマイクロカプセルまたは微小粒子、微小乳濁液または小胞分散体の形態をとらなければならない。これらの組成物は、通常の方法に従って、調製される。
【０１４９】
それらはまた、水溶液、アルコール性溶液または水性−アルコール性溶液の形態で、またはクリーム、ゲル、乳濁液またはムースの形態で、あるいは、圧力下で推進剤も含有するエアロゾル組成物の形態で、髪に使用され得る。
【０１５０】
注射には、この組成物は、水性または油性のローションの形態または血清の形態であり得る。眼には、それは、点眼剤の形態であり得、また、経口摂取には、それは、カプセル、顆粒、シロップまたは錠剤の形態であり得る。
【０１５１】
本発明による組成物の異なる構成成分の量は、当該分野で伝統的に使用されている量である。
【０１５２】
化粧品用途または皮膚科学用途のための組成物は、特に、顔面、手、足、主要な身体の屈折部または躰幹部用のクレンジング、保護、処置またはスキンケアクリーム（例えば、デークリーム、ナイトクリーム、メーキャップ除去クリーム、ファンデーションクリーム、日焼け止めクリーム）、液体ファンデーション、メーキャップ除去ミルク、保護またはスキンケアボディミルク、アフターサンミルク、スキンケアローション、ゲルまたはフォーム（例えば、クレンジングまたは消毒ローション）、入浴組成物、脱臭組成物、アフターシェーブゲルまたはローション、ある種の皮膚障害（例えば、上で言及したもの）を処置する組成物を構成する。
【０１５３】
本発明による組成物はまた、クレンジングバーまたはソープを構成する固形製剤からなり得る。
【０１５４】
これらの組成物はまた、圧力下で推進剤も含有するエアロゾル組成物の形態で、包装され得る。
【０１５５】
本発明の化合物はまた、必要に応じて、カラリングシャンプー、髪の再構成ローション、永久パーマ組成物（特に、永久パーマ操作の第一段階用の組成物）、脱毛を防ぐローションまたはゲル、駆虫性シャンプーなどの形態で、種々のヘアケア組成物、特に、シャンプー、ヘアセッティングローション、トリーティングローション、スタイリングクリームまたはゲル、染料組成物（特に、酸化染料）に取り込まれ得る。
【０１５６】
本発明の組成物はまた、歯科口腔用途（例えば、歯磨きまたはうがい薬）用であり得る。この場合、これらの組成物は、口腔用途の組成物に標準的な補助剤および添加剤（特に、界面活性剤、増粘剤、湿潤剤、艶だし剤（例えば、シリカ）、種々の活性成分（例えば、フッ化物、特に、フッ化ナトリウム）および適当な場合には、甘味料（例えば、サッカリンナトリウム））を含有できる。
【０１５７】
本発明の組成物が乳濁液であるとき、その脂肪相の割合は、その組成物の全重量に対して、５重量％〜８０重量％、好ましくは、５重量％〜５０重量％の範囲であり得る。この組成物中にて乳濁液形態で使用されるオイル、ワックス、乳化剤および共乳化剤は、化粧品分野で便利に使用されるものから選択される。この乳化剤および共乳化剤は、この組成物中にて、その組成物の全重量に対して、０．３重量％〜３０重量％、好ましくは、０．５重量％〜２０重量％の範囲の割合で、存在している。この乳化剤はまた、脂質小胞を含有し得る。
【０１５８】
本発明の組成物が油性溶液またはゲルであるとき、その脂肪相は、その組成物の全重量の９０％を超える割合に相当し得る。
【０１５９】
公知の様式では、本発明の化粧品組成物はまた、化粧品分野で一般的な補助剤（例えば、親水性ゲル化剤または親油性ゲル化剤、親水性添加剤または親油性添加剤、防腐剤、酸化防止剤、溶媒、芳香剤、充填剤、スクリーニング剤、臭気吸収剤および染料）を含有し得る。これらの種々の補助剤の量は、化粧品分野で従来使用される量、例えば、その組成物の総重量の０．０１重量％〜１０重量％である。これらの補助剤は、それらの性質に依存して、この脂肪相、水相および／または脂質小球に導入され得る。
【０１６０】
本発明で使用され得るオイルまたはワックスとして、鉱油（液状ワセリン）、植物油（カリテバター、ヒマワリ油の液状画分）、動物油（パーヒドロスクアレン）、合成油（パーセリン油）、シリコーン油またはワックス（シクロメチコン）およびフルオロオイル（パーフルオロポリエーテル）、蜜蝋、カルナウバ蝋またはパラフィンワックスが言及され得る。これらのオイルには、脂肪アルコールおよび脂肪酸（ステアリン酸）が加えられ得る。
【０１６１】
本発明で使用され得る乳化剤として、例えば、ステアリン酸グリセリル、ポリソルベート６０およびＰＥＧ−６／ＰＥＧ−３２／ステアリン酸グリコール混合物（これは、Ｇａｔｔｅｆｏｓｓｅ社から、ＴＥＦＯＳＥ（登録商標）６３の名称で販売されている）が言及され得る。
【０１６２】
本発明で使用され得る溶媒として、低級アルコール、特に、エタノールおよびイソプロパノール、およびプロピレングリコールが言及され得る。
【０１６３】
有用であり得る親水性ゲル化剤には、カルボキシビニル重合体（カーボマー）、アクリル共重合体（例えば、アクリレート／アルキルアクリレート共重合体）、ポリアクリルアミド、多糖類（例えば、ヒドロキシプロピルセルロース）、天然ゴムおよび粘土があり、親油性ゲル化剤としては、変性粘土（例えば、ベントン）、脂肪酸金属塩（例えば、ステアリン酸アルミニウム）、および疎水性シリカ、エチルセルロースおよびポリエチレンが言及され得る。
【０１６４】
親水性活性剤として、タンパク質またはタンパク質加水分解物（ｈｙｄｆｏｌｙｓｏｔｅ）、アミノ酸、ポリオール、尿素、アラントイン、糖および糖誘導体、水溶性ビタミン、デンプンおよび植物抽出物（特に、ａｌｏｅ  ｖｅｒａのもの）が使用され得る。
【０１６５】
本発明の組成物は、他の親水性活性剤（例えば、タンパク質またはタンパク質加水分解物、アミノ酸、ポリオール、尿素、アラントイン、糖および糖誘導体、水溶性ビタミン、植物抽出物およびヒドロキシ酸）を含有し得る。
【０１６６】
使用され得る親油性活性剤には、レチノール（ビタミンＡ）およびそれらの誘導体、トコフェロール（ビタミンＥ）およびそれらの誘導体、必須脂肪酸、セラミド、精油、およびサリチル酸およびそれらの誘導体がある。
【０１６７】
特に、プロテアーゼのＩＣＥ／ｃｅｄ３ファミリーのメンバー（これは、必要に応じて、塩化されている）のプロテアーゼ活性を抑制する試薬と、特に、皮膚の病気を予防および／または治療することに向けた他の活性剤とを併用することが可能である。これらの活性剤には、以下が挙げられるが、これらに限定されない：
皮膚の分化および／または増殖および／または色素沈着を変性する試薬（例えば、レチノイン酸およびそれらの異性体、レチノールおよびそれらのエステル、ビタミンＤおよびそれらの誘導体、エストロゲン（例えば、エストラジオール）、コウジ酸またはヒドロキノン）；
抗菌薬（例えば、クリンダマイシンリン酸、エリスロマイシンまたはテトラサイクリンファミリーに由来の抗生物質）；
駆虫薬（特に、メトロニダゾール、クロタミトンまたはピレスロイド）；
抗真菌薬（特に、イミダゾール族に属する化合物（例えば、エコナゾール、ケトコナゾールまたはミコナゾールまたはそれらの塩）、ポリエン化合物（例えば、アンホテリシンＢ）、アリルアミン族に由来の化合物（例えば、アステルビナフィン、あるいは、オクトピロックス））；
ステロイド抗炎症薬（例えば、ヒドロコルチゾン、吉草酸ベタメタゾンまたはプロピオン酸クロベタゾール）、または非ステロイド抗炎症薬（例えば、イブプロフェンおよびその塩、ジクロフェナクおよびその塩、アセチルサリチル酸、アセトアミノフェンまたはグリチルレチン酸）；
麻酔薬（塩酸リドカインおよびそれらの誘導体）；
鎮痒薬（例えば、セナルジン、トリメプラジンまたはシプロヘプタジン）；
抗ウイルス薬（例えば、アシクロビル）；
角質溶解薬（例えば、α−およびβ−ヒドロキシカルボン酸またはβ−ケトカルボン酸、それらの塩、アミドまたはエステル、さらに特定すると、ヒドロキシ酸（例えば、グリコール酸、乳酸、サリチル酸、クエン酸および果実酸一般、および５−ｎ−オクタノイルサリチル酸）；
抗フリーラジカル薬（例えば、α−トコフェロールまたはそれらのエステル、スーパーオキシドジスムターゼ、ある種の金属キレート化剤またはアスコルビン酸およびそれらのエステル）
抗脂漏薬（例えば、プロゲステロン）；
抗フケ薬（例えば、オクトピロックスまたは亜鉛ピリチオン）；
抗ざ瘡薬（例えば、レチノイン酸または過酸化ベンゾイル）。
【０１６８】
プロテアーゼのＩＣＥ／ｃｅｄ３ファミリーのメンバーのプロテアーゼ活性を阻害する薬剤は、刺激副作用を有する生成物、特に、化粧品分野、医薬分野または皮膚科学分野で通例使用されている活性剤と併用され得る。プロテアーゼのＩＣＥ／ｃｅｄ３ファミリーのメンバーのプロテアーゼ活性を阻害する薬剤の存在は、生成物を含有する化粧品組成物、医薬組成物または皮膚科学組成物にあり得、刺激効果を有する活性剤でさえ、この刺激効果を著しく弱めるかなくすことが可能である。さらに、当業者は、前記組成物のいずれかにて、他の抗炎症薬が併用され得ることを理解する。
【０１６９】
特に、ＩＣＥ／ｃｅｄ３プロテアーゼの活性を抑制する薬剤は、特に、有効性の改善に関して、通常使用される量に対して、化粧品活性剤、医薬活性剤または皮膚科学活性剤の量を高めることが可能となる。
【０１７０】
それゆえ、１実施態様では、本発明はまた、化粧品的、薬学的または皮膚科学的に受容可能な媒体にて、刺激副作用を有する少なくとも１種の生成物を含有する組成物であり、これは、ＩＣＥ／ｃｅｄ３ファミリーのプロテアーゼの活性を抑制する少なくとも１種の薬剤およびそれらの組合せを含有することで特徴付けられる。
【０１７１】
これらの薬剤はまた、被験体における炎症の治療、および他の炎症関連疾患の治療において、例えば、痛みおよび頭痛の治療での鎮痛薬として、または発熱を治療する解熱薬として、有用である。例えば、これらの組成物は、関節炎を治療するのに有用であり、これには、関節リウマチ、脊椎関節症、痛風性関節炎、全身性エリテマトーデス、骨関節炎および若年性関節炎が挙げられるが、これらに限定されない。このような組成物は、喘息、気管支炎、生理痛、腱炎、滑液包炎および皮膚関連疾患（例えば、乾癬、湿疹、火傷および皮膚炎）を治療する際に有用である。これらの組成物はまた、胃腸疾患（例えば、炎症性腸症候群、クローン病、胃炎、被刺激性腸症候群および潰瘍性大腸炎）を治療するのに有用である。これらの組成物はまた、以下のような疾患における炎症を治療する際に有用である：血管病、片頭痛、動脈周囲炎、甲状腺炎、可塑的貧血、ホジキン病、強皮症、リウマチ熱、Ｉ型糖尿病、重症筋無力症、サルコイドーシス、ネフローゼ性症候群、ベーチェット症候群、多発性筋炎、過敏症、結膜炎、歯肉炎、傷害後に起こる腫れ、心筋虚血など。
【０１７２】
本発明の医薬組成物は、本発明の任意の化合物、およびその薬学的に受容可能な塩を、任意の薬学的に受容可能なキャリア、アジュバント、またはビヒクル（以後、まとめて「薬学的に受容可能なキャリア」とよぶ）と共に含む。本発明の医薬組成物において使用され得る薬学的に受容可能なキャリア、アジュバント、およびビヒクルには、アルミナ、ステアリン酸アルミニウム、レシチン、ヒト血清アルブミンのような血清タンパク質、種々のリン酸塩のような緩衝物質、グリシン、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、飽和植物性脂肪酸の部分グリセリド混合物、水、塩または電解質（例えば、硫酸プロタミン、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛塩）、コロイドシリカ、三ケイ酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、セルロースベースの物質、ポリエチレングリコール、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリアリーレート（ｐｏｌｙａｒｙｌａｔｅ）、ワックス、ポリエチレン−ポリオキシプロピレン−ブロックポリマー、ポリエチレングリコール、および羊毛脂（ｗｏｏｌ  ｆａｔ）などが包含されるが、これらに限定されない。
【０１７３】
本発明の医薬組成物は、経口的、非経口的、吸入スプレーにより、局所的、経直腸的、経鼻的、経頬的、経膣的、あるいは移植されたレザーバーを介して、投与され得る。経口および非経口投与が好ましい。本明細書中で使用される用語「非経口」は、皮下、皮内、静脈内、筋肉内、関節内、滑液内、胸骨内、包膜内、病変内（ｉｎｔｒａｌｅｓｉｏｎａｌ）、および頭蓋内の注射あるいは注入技術を包含する。
【０１７４】
この医薬組成物は、無菌の注射用調製物の形態、例えば、無菌の注射可能な水性または油性の懸濁液であり得る。この懸濁液は、当該分野で公知の技術に従って、適切な分散剤または湿潤剤（例えば、Ｔｗｅｅｎ  ８０のような）および懸濁剤を用いて処方され得る。無菌注射用製剤はまた、無毒性の非経口的に受容可能な希釈剤または溶媒中の、無菌の注射可能な溶液または懸濁液、例えば、１，３−ブタンジオール溶液であり得る。受容可能なビヒクルおよび溶媒の中でも、使用され得るのは、マンニトール、水、リンゲル液、および等張性塩化ナトリウム溶液であり得る。さらに、無菌の不揮発性油が、溶媒または懸濁媒体として簡便に使用される。この目的のために、合成のモノ−またはジグリセリドを包含する任意の低刺激性の（ｂｌａｎｄ）不揮発性油が使用され得る。オレイン酸およびそのグリセリド誘導体のような脂肪酸は注射剤の調製に有用であり、例えば、オリーブ油またはヒマシ油のような天然の薬学的に受容可能な油、特にそれらのポリオキシエチル化形態である。これらの油溶液または懸濁液は、Ｐｈ．Ｈｅｌｖまたは同様のアルコールのような長鎖アルコール希釈剤または分散剤をもまた含み得る。
【０１７５】
本発明の医薬組成物は、任意の経口的に受容可能な投薬形態（これにはカプセル、錠剤、ならびに水性懸濁液および溶液が包含されるがこれらに限定されない）で経口投与され得る。経口用途の錠剤の場合、通常使用されるキャリアは、ラクトースおよびコーンスターチを包含する。ステアリン酸マグネシウムのような滑沢剤もまた典型的には添加される。カプセル形態での経口投与のために有用な希釈剤は、ラクトースおよび乾燥コーンスターチを包含する。水性懸濁液が経口投与される場合には、活性成分は乳化剤および懸濁剤と組み合わされる。所望であれば、特定の甘味剤および／または着香剤および／または着色剤が添加され得る。
【０１７６】
本発明の医薬組成物はまた、経直腸投与のための座剤の形態で投与され得る。これらの組成物は、本発明の化合物を、室温で固体であるが直腸温度で液体である適切な非刺激性の賦形剤と混合することによって調製され得る。そのような物質は、ココアバター、ミツロウ、およびポリエチレングリコールを包含するが、これらに限定されない。
【０１７７】
本発明の医薬組成物の局所投与は、所望の処置が局所適用で容易に到達可能な領域または器官に関連する場合に特に有用である。皮膚への局所適用のためには、医薬組成物は、キャリア中に懸濁するかまたは溶解した活性成分を含む適切な軟膏で処方されるべきである。本発明の化合物の局所投与のためのキャリアは、鉱油、液体石油、白色石油、プロピレングリコール、ポリオキシエチレン、ポリオキシプロピレン化合物、乳化ワックス、および水を包含するが、これらに限定されない。あるいは、医薬組成物は、キャリア中に懸濁するかまたは溶解した活性化合物を含む適切なローションまたはクリームで処方され得る。適切なキャリアは、鉱油、ソルビタンモノステアレート、ポリソルベート６０、セチルエステルワックス、セテアリールアルコール（ｃｅｔｅａｒｙｌ  ａｌｃｏｈｏｌ）、２−オクチルドデカノール、ベンジルアルコール、および水を包含するが、これらに限定されない。本発明の医薬組成物はまた、直腸座剤処方物によって、あるいは適切な浣腸処方物として、下部腸管に局所適用され得る。局所経皮パッチもまた本発明に包含される。
【０１７８】
本発明の医薬組成物は、経鼻エアロゾルまたは吸入によって投与され得る。そのような組成物は、薬剤処方の分野で周知の技術に従って調製され、そして生理食塩水中の溶液として、ベンジルアルコールまたは他の適切な防腐剤、バイオアベイラビリティーを増強するための吸収促進剤、フッ化炭素、および／または当該分野で公知の他の可溶化剤または分散剤を用いて調製され得る。
【０１７９】
本発明の化合物は、通常の抗炎症剤またはマトリックスメタロプロテアーゼインヒビター、リポキシゲナーゼインヒビターおよびＩＬ−１β以外のサイトカインのアンタゴニストのいずれかと組み合わせて、使用できる。
【０１８０】
本発明の化合物を他の薬剤との組み合わせの療法において投与する場合、それらは、順次または同時に患者に投与され得る。あるいは、本発明による医薬組成物は、式１または３の化合物または本明細書中で記述の他のＩＣＥインヒビターと他の治療剤または予防剤との組み合わせから構成され得る。
【０１８１】
用語「有効量」は、上記状態の処置において使用するための、１日当たり体重１キログラム当たり、約０．０５ｍｇから約１４０ｍｇのオーダーの投薬レベルをいう（典型的に、１日当たり患者１人当たり約２．５ｍｇから約７ｇ）。例えば、炎症は、１日当たり体重１キログラム当たり約０．０１〜５０ｍｇ（１日当たり患者１人当たり約０．５ｍｇから約３．５ｇ）の化合物の投与によって、有効に処置され得る。キャリア物質と組み合わされて単回投薬形態を生成し得る式１、３の化合物または他のＩＣＥ／ｃｅｄ−３インヒビターの量は、処置される宿主および特定の投与モードに応じて変化する。例えば、ヒトに経口投与することが意図される処方物は、適切かつ簡便な量の薬学的に受容可能なキャリア（これは組成物全体の約５％から約９５％まで変化し得る）と配合された、０．５ｍｇ〜５ｇの式１の化合物を含み得る。投薬単位形態は、通常、約１ｍｇから約５００ｍｇの間の式１、３の活性化合物または他のＩＣＥ／ｃｅｄ−３インヒビターを含む。
【０１８２】
しかし、任意の特定の患者のための特定の「有効量」は、使用される特定の化合物の活性、年齢、体重、全般的な健康状態、性別、食餌、投与の時間、投与経路、排泄速度、薬物の組み合わせ、および予防または治療を受ける特定の疾患の重篤度を包含する種々の因子に依存することが、理解される。
【０１８３】
本発明は、本明細書中に開示される化合物をＩＣＥ／ＣＥＤ−３プロテアーゼを抑制しアポトーシスを防止するために使用するすることに焦点を当てているが、本発明の化合物はまた、他のシステインプロテアーゼのための阻害剤としても使用され得る。
【０１８４】
本発明の化合物はまた、システインプロテアーゼのＩＣＥ／ｃｅｄ−３ファミリーあるいは他のシステインプロテアーゼに効果的に結合する市販試薬として有用である。市販試薬として、本発明の化合物およびその誘導体は、標的ペプチドのタンパク質分解をブロックするために使用され得るか、あるいは誘導体化されて、アフィニティークロマトグラフィー用途のための固定基質として、安定な樹脂に結合され得る。市販のシステインプロテアーゼインヒビターを特徴づける、これらの、および他の使用は、当業者には明白である。
【０１８５】
以下の実施例は、本発明を例示することを意図しているが、それらを限定することを意図していない。それらは、使用できるもののうちの典型であるものの、当業者に公知の他の手法を代わりに使用してもよい。
【０１８６】
以下の実施例において、プロトンＮＭＲスペクトルは、３００ＭＨｚで得られた；化学シフトは、内部テトラメチルシランから低磁場に引用される。
【実施例】
【０１８７】
（実施例１）
（ＩＣＥ／ｃｅｄ−３プロテアーゼファミリー活性の阻害についてのアッセイ）
Ａ．ＩＣ５０値の決定
組み替えＩＣＥおよびｃｐｐ３２酵素を用いて、本質的に、それぞれ、Ｔｈｏｍｂｅｒｒｙら（Ｎａｔｕｒｅ、３５６：７６８：７７４（１９９２）およびＮｉｃｈｏｌｓｏｎら（Ｎａｔｕｒｅ、３７６：３７−４３（１９９５））（本明細書中で参考として援用される）に従って、９６ウェルマイクロタイタープレート中で式１の化合物の活性を検出する蛍光酵素アッセイを行った。これらのアッセイについての基質は、ＩＣＥアッセイについてアセチル−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ａｌａ−Ａｓｐ−アミノ−４−メチルクマリン（ＡＭＣ）であり、そしてｃｐｐ３２およびＭｃｈ５アッセイについてアセチル−Ａｓｐ−Ｇｌｕ−Ｖａｌ−Ａｓｐ−アミノ−４−メチルクマリンであった。酵素反応は、２ｍＭ  ＤＴＴを含むＩＣＥ緩衝液（２５ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、１ｍＭ  ＥＤＴＡ、０．１％ＣＨＡＰＳ、１０％スクロース、ｐＨ  ７．５）中で、室温で、２連で行われた。アッセイは、以下の成分を混合することにより行われた：
８．０（ＩＣＥ、Ｍｃｈ２、Ｍｃｈ３、ｃｐｐ３２）または２０（Ｍｃｈ５）ｍＭ  ＤＴＴのいずれかを含むＩＣＥ緩衝液中の、５０μｌの、ＩＣＥ、Ｍｃｈ２、Ｍｃｈ５、またはｃｐｐ３２のいずれか（それぞれ１８．８、３８、８．１および０．１５３ｎＭ濃度）またはＭｃｈ３（１ユニット）の酵素；
５０μＬの式１の化合物またはＩＣＥ緩衝液（コントロール）のいずれか；および
１００μｌの２０μＭの基質。
【０１８８】
アッセイする酵素および式１の化合物をマイクロタータープレートウェル中で３０分間室温でプレインキュベートした後、基質を添加して反応を開始した。３６０ｎｍの励起波長を用いて４６０ｎｍにおける蛍光発光を測定することにより、蛍光ＡＭＣ生成物形成を室温で１時間モニターした。２連（コントロール）のウェル中の蛍光変化の平均を計算しそして平均値を、インヒビター濃度の関数としてプロットして、５０％阻害を生成するインヒビター濃度（ＩＣ５０）を決定した。結果を表１および４（図１および４）に示す。
【０１８９】
このアッセイについての参照化合物は、Ｃｂｚ−ＶａｌＡｌａＡｓｐ−Ｈであった。これを、表１および４中において「参照（ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ）」と呼ぶ。
【０１９０】
Ｂ．非可逆的インヒビターについての解離定数Ｋｉおよび非可逆的速度定数ｋＳの決定
競合的非可逆的インヒビターによるＩＣＥ／ｃｅｄ−３ファミリープロテアーゼ酵素の非可逆的阻害について、以下の式で表されるモデルを用いて：
【０１９１】
【化３７】
2005506346.tif 000013
時間ｔにおける生成物の形成は、以下で表現される：
【０１９２】
【化３８】
2005506346.tif 000014
ここでＥ、Ｉ、ＥＩ、およびＥ−Ｉは、それぞれ、活性酵素、インヒビター、非共有結合酵素−インヒビター複合体および共有結合酵素−インヒビター付加物を示す。Ｋｉ値は、可逆的結合工程の全体の解離定数である。そしてｋ３は、非可逆的速度定数である。［Ｓ］およびＫＳ値は、それぞれ、基質濃度および酵素に結合した基質の解離定数である。
【０１９３】
上記の等式は、ＩＣＥ／ｃｅｄ−３ファミリープロテアーゼに結合した所定のインヒビターのＫｉおよびｋ３値を決定するために使用される。従って、連続的なアッセイを、６０分間、様々な濃度のインヒビターおよび基質で行った。アッセイは、本質的に、表１のデータの生成についての上記と同様に、行われた（ｆｏｒｍｕｌａｔｅｄ）。ただし、反応は、酵素を基質−インヒビター混合物に添加することにより開始された。Ｋｉおよびｋ３値を、生成物ＡＭＣ形成を式１に従う時間の関数としてシミュレーションすることにより得た。この第２のアッセイの結果を、以下の表２、３および５（図２、３および５）に示す。
【０１９４】
このアッセイについての参照化合物は、Ｃｂｚ−ＶａｌＡｌａＡｓｐ−ＣＨ２Ｆであり、そして値は、表２、３および５において「参照（Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ）」として示される。
【０１９５】
（実施例２）
（（３Ｓ）−３−［（１−メチルインドール−２−カルボニル）アラニニル］アミノ−４−オキソブタン酸、ｔ−ブチルエステルセミカルバゾン）
１−メチルインドール−２−カルボン酸（１０７ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）および（３Ｓ）−３−（アラニニル）−アミノ−４−オキソブタン酸、ｔ−ブチルエステルセミカルバゾン（１８８ｍｇ、９６％、０．６ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（２ｍＬ）中に溶解し、次いで、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール−水和物（９６ｍｇ、０．６３ｍｍｏｌ）および１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＡＣ）（１６１ｍｇ、０．８４ｍｍｏｌ）の両方を、０℃において窒素雰囲気下で、得られた混合物に添加した。攪拌を０℃において１時間継続し、そしてさらに２０時間室温で継続した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、飽和重炭酸ナトリウム水溶液およびブラインで連続して洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして濃縮して黄色の固体を得た。エーテルでの固体の粉末化により、表題生成物を、わずかに黄色の粉末（２１３ｍｇ、７７％）として得た。ＴＬＣ：（メタノール／塩化メチレン：１／９、シリカゲル）：Ｒｆ＝０．４７；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３＋ＣＤ３ＯＤ）：δ  ７．９６（ｄ、Ｊ＝８．０、１Ｈ）、７．５７−７．６７（ｍ、２Ｈ）、７．３１−７．４２（ｍ、２Ｈ）、７．１３−７．１９（ｍ、２Ｈ）、７．０６（ｓ、１Ｈ）、４．９１（ｍ、１Ｈ）、４．６５（ｑ、Ｊ＝７．１、１Ｈ）、４．０１（ｓ、３Ｈ１）、２．５９−２．７８（ｍ、Ｊ＝５．６、１５．７、２Ｈ）、１．４９（ｄ、Ｊ＝７．１、３Ｈ）、１．３９（ｓ、９Ｈ）。
【０１９６】
（実施例３）
（（３Ｓ）−３−［（１−メチルインドール−２−カルボニル）アラニニル］アミノ−４−オキソブタン酸、セミカルバゾン）
（３Ｓ）−３−［（１−メチルインドール−２−カルボニル）アラニニル］アミノ−４−オキソブタン酸、ｔ−ブチルエステルセミカルバゾン（１２７ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）を、アニソール（０．２ｍＬ）および塩化メチレン（２ｍＬ）中に懸濁し、そして懸濁液をトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）（１ｍＬ）で処理した。得られた溶液を、窒素雰囲気下、室温で２時間攪拌した。次いで、反応混合物を濃縮して、そして塩化メチレンでチェース（ｃｈａｓｅ）して紫色の発泡体を得た。発泡体をエーテルで粉末化して、表題生成物を紫色の粉末として得た（１０８ｍｇ、９７％）。ＴＬＣ：（塩化メチレン：メタノール：酢酸、２０：１：１、シリカゲル）：Ｒｆ＝０．２７；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：δ  ７．６２（ｄ、Ｊ＝８．０、１Ｈ）、７．４４（ｄ、Ｊ＝８．２、１Ｈ）、７．２４−７．３２（ｍ、２Ｈ）、７．０７−７．１３（ｍ、２Ｈ）、４．９１（ｍ、１Ｈ）、４．５６（ｑ、Ｊ＝７．１、１Ｈ）、３．９８（ｓ、３Ｈ）、２．７８（ｄ、Ｊ＝６．５、２Ｈ）、１．４９（ｄ、Ｊ＝７．３、３Ｈ）。
【０１９７】
（実施例４）
（（３Ｓ）−３−［（１−メチルインドール−２−カルボニル）アラニニル］アミノ−４−オキソブタン酸）
（３Ｓ）−３−［（１−メチルインドール−２−カルボニル）アラニニル］アミノ−４−オキソブタン酸、セミカルバゾン（８７ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）を、メタノール（３ｍＬ）、ホルムアルデヒド（１ｍＬ、３７重量％、ａｑ）および酢酸（１ｍＬ）中に溶解し、そして得られた混合物を窒素雰囲気下、室温で４時間攪拌した。反応混合物を水で希釈し、そして酢酸エチルで２回抽出した。酢酸エチル溶液を、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして濃縮してガラス状の物質を得、これをエーテルで粉末化して、表題生成物を灰色の粉末（２４ｍｇ、３２％）として得た。ＴＬＣ：（塩化メチレン：メタノール：酢酸、２０：１：１、シリカゲル）：Ｒｆ＝０．４４；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：Δ  ７．６２（ｄ、Ｊ＝８．０、１Ｈ）、７．４４（ｄｄ、Ｊ＝０．８、８．４、１Ｈ）、７．２６−７．３２（ｍ、１Ｈ）、７．０８−７．１３（ｍ、２Ｈ）、４．６３−４．５３（ｍ、２Ｈ）、４．３１（ｍ、１Ｈ）、３．９９（ｓ、３Ｈ）、２．４８−２．７３（ｍ、２Ｈ）、１．４６（７．１、３Ｈ）。
【０１９８】
（実施例５）
（（３Ｓ）−３−［（１−メチルインドール−２−カルボニル）プロリニル］アミノ−４−オキソ−ブタン酸、ｔ−ブチルエステルセミカルバゾン）
１−メチルインドール−２−カルボン酸（１０２ｍｇ、０．５８ｍｍｏｌ）および（３Ｓ）−３−（プロリニル）アミノ−４−オキソブタン酸、ｔ−ブチルエステルセミカルバゾン（１８９ｍｇ、０．５８ｍｍｏｌ）を、塩化メチレン（２ｍＬ）およびＤＭＦ（１ｍＬ）中に溶解し、そして４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）（７１ｍｇ、０．５８ｍｍｏｌ）およびＥＤＡＣ（１５５ｍｇ、０．８１ｍｍｏｌ）の両方を、窒素雰囲気下、０℃で混合物に添加した。攪拌を０℃で１時間継続し、そしてさらに室温で２時間継続した。反応混合物を、酢酸エチルおよび５％ＫＨＳＯ４溶液の間で分配した。酢酸エチル溶液を、飽和重炭酸ナトリウム溶液およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして濃縮して１５３ｍｇの褐色の発泡体を得た。発泡体を、フラッシュクロマトグラフによりシリカゲルで、２％メタノール−塩化メチレンを溶出液として用いることにより精製し、表題生成物を、明るい褐色の発泡体（５０ｍｇ）として得た。ＴＬＣ（メタノール／塩化メチレン：５／９５、シリカゲル）：Ｒｆ＝０．２７、１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３＋ＣＤ３ＯＤ）：δ  ８．８７（ｂｓ、１Ｈ）、７．６３（ｄ、Ｊ＝７．７、１Ｈ）、７．３８−７．５０（ｍ、２Ｈ）、７．１７−７．１３（ｍ、１Ｈ）、６．８５（ｂｓ、１Ｈ）、４．９０−４．８１（ｍ、２Ｈ）、３．９２−３．７４（ｍ、５Ｈ）、２．７８−１．９３（ｍ、６Ｈ１）、１．３７（ｓ、９Ｈ）。
【０１９９】
（実施例６）
（（３Ｓ）−３−［（１−メチルインドール−２−カルボニル）プロリニル］アミノ−４−オキソブタン酸セミカルバゾン）
（３Ｓ）−３−［（１−メチルインドール−２−カルボニル）プロリニル］アミノ−４−オキソブタン酸、ｔ−ブチルエステルセミカルバゾン（５０ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）を、アニソール（０．２ｍＬ）および塩化メチレン（２ｍＬ）中に溶解し、そして得られた溶液を、ＴＦＡ（１ｍＬ）で処理した。次いで、この反応混合物を、窒素雰囲気下、室温で１時間攪拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、そして塩化メチレンでチェースして、紫色のフィルムを得た。フィルムを、エーテルで粉末化して、表題生成物を、紫色の粉末（４７ｍｇ）として得た。ＴＬＣ：（塩化メチレン：メタノール：酢酸、２０：１：１、シリカゲル）：Ｒｆ＝０．１８；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：δ  ７．６３−６．９３（ｍ、６Ｈ）、６．６７（ｂｓ、１Ｈ）、４．８９−４．５０（ｍ、２Ｈ）、３．８６−３．７４（ｍ、５Ｈ）、２．８２−２．７４（ｍ、２Ｈ）、２．４０−２．３０（ｍ、１Ｈ）、２．１５−１．９０（ｍ、３Ｈ）。
【０２００】
（実施例７）
（（３Ｓ）−３−［（１−メチルインドール−２−カルボニル）プロリニル］アミノ−４−オキソブタン酸）
（３Ｓ）−３−［（１−メチルインドール−２−カルボニル）プロリニル）アミノ−４−オキソブタン酸、セミカルバゾン（８７ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）を、メタノール（３ｍＬ）、ホルムアルデヒド（１ｍＬ、３７重量％、ａｑ）および酢酸（１ｍＬ）中に溶解し、そして得られた混合物を、窒素雰囲気下、室温で４時間攪拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、水で希釈して、そして酢酸エチルで２回抽出した。酢酸エチル溶液を、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして濃縮して褐色のオイル（２２ｍｇ）を得、これを、エーテルで粉末化して表題生成物を、明るい褐色の粉末（８ｍｇ）として得た。ＴＬＣ（塩化メチレン：メタノール：酢酸、２０：１：１、シリカゲル）：Ｒｆ＝０．２８；ＭＳ（ＥＩ）、Ｃ１９Ｈ２１Ｎ３Ｏ５＋Ｈ＋＝３７２；Ｃ１９Ｈ２１Ｎ３Ｏ５−Ｈ＋＝３７０）。
【０２０１】
（実施例８）
（（３Ｓ）−３−［（１−メチルインドール−２−カルボニル）バリニル］アミノ−４−オキソブタン酸、ｔ−ブチルエステルセミカルバゾン）
１−メチルインドール−２−カルボン酸（８８ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）および（３Ｓ）−３−（バリニル）アミノ−４−オキソブタン酸、ｔ−ブチルエステルセミカルバゾン（１６３ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（１ｍＬ）および塩化メチレン（２ｍＬ）中に溶解し、次いで、ＤＭＡＰ（６１ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）およびＥＤＡＣ（１３４ｍｇ、０．７ｍｍｏｌ）の両方を、窒素雰囲気下、０℃で、溶液に添加した。攪拌を０℃で１時間継続し、そしてさらに４時間室温で継続した。反応混合物を、酢酸エチルおよび５％ＫＨＳＯ４溶液の間で分配した。酢酸エチル溶液を、連続的に、５％ＫＨＳＯ溶液、飽和重炭酸ナトリウム溶液、およびブライン溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして濃縮して黄色の発泡体を得た。発泡体をエーテルで粉末化して、表題生成物を、わずかに黄色の粉末（２０３ｍｇ、８６％）として得た。ＴＬＣ（メタノール／塩化メチレン：５／９５、シリカゲル）：Ｒｆ＝０．１７。
【０２０２】
（実施例９）
（（３Ｓ）−３−［（１−メチルインドール−２−カルボニル）バリニル］アミノ−４−オキソブタン酸セミカルバゾン）
（３Ｓ）−３−［（１−メチルインドール−２−カルボニル）バリニル］アミノ−４−オキソブタン酸、ｔ−ブチルエステルセミカルバゾン（１７０ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）を、アニソール（０．２ｍＬ）および塩化メチレン（２ｍＬ）に溶解し、そして得られた溶液を、ＴＦＡ（１ｍＬ）で処理した。得られた溶液を３．５時間、窒素雰囲気下、室温で攪拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、そして塩化メチレンでチェースして紫色の発泡体を得た。発泡体をエーテルで粉末化して、表題生成物を固体の紫色の粉末（１３３ｍｇ、８９％）として得た。
【０２０３】
（実施例１０）
（（３Ｓ）−３−［（１−メチルインドール−２−カルボニル）バリニル］アミノ−４−オキソブタン酸）
（３Ｓ）−３−［（１−メチルインドール−２−カルボニル）バリニル］アミノ−４−オキソブタン酸、セミカルバゾン（１３６ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）を、メタノール（３ｍＬ）、ホルムアルデヒド（１ｍＬ、３７重量％、水溶液）および酢酸（１ｍＬ）中に溶解し、そして得られた混合物を、５時間、窒素雰囲気下、室温で攪拌した。反応混合物を真空下で濃縮し、水で希釈し、そして酢酸エチルで２回抽出した。合わせた酢酸エチル溶液を、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして真空下で濃縮して紫色の発泡体を得、これをエーテルで粉砕して、表題生成物を薄い紫色の粉末（４０ｍｇ、３３％）として得た。ＴＬＣ：（塩化メチレン：メタノール：酢酸、２０：１：１、シリカゲル）：Ｒｆ＝０．３６；ＭＳ（Ｅ）以下について、Ｃ１９Ｈ２３Ｎ３Ｏ５＋Ｈ＋＝３７４；Ｃ１９Ｈ２３Ｎ３Ｏ５−Ｈ＋＝３７２。
【０２０４】
（実施例１１）
（（３Ｓ）−３−［（１−メチルインドール−２−カルボニル）ロイシニル］アミノ−４−オキソブタン酸、ｔ−ブチルエステルセミカルバゾン）
１−メチルインドール−２−カルボン酸（７０ｍｇ、０．４ｍｍｏｌ）および３（Ｓ）−（ロイシニル）アミノ−４−オキソブタン酸、ｔ−ブチルエステルセミカルバゾン（１３１ｍｇ、０．４ｍｍｏｌ）を、塩化メチレン（２ｍＬ）中に溶解し、そしてＤＭＡＰ（４９ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ）およびＥＤＡＣ（１０７ｍｇ、０．５６ｍｍｏｌ）を、窒素雰囲気下、０℃で、溶液に添加した。攪拌を、０℃で１時間継続し、そしてさらに３時間、室温で継続した。反応混合物を、酢酸エチルと５％ＫＨＳＯ４溶液との間で分配した。酢酸エチル溶液を、連続的に、５％ＫＨＳＯ４溶液、飽和重炭酸ナトリウム溶液（２×）、およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして真空下で濃縮して、粗製の固体を得た。この固体をエーテルで粉砕して、表題生成物を、白色の粉末（１５６ｍｇ、８０％）として得た。ＴＬＣ：（メタノール／塩化メチレン：５／９５、シリカゲル）：Ｒｆ＝０．４２；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３＋ＣＤ３ＯＤ）：δ  ８．１８（ｓ、１Ｈ）、７．６６−７．１１（ｍ、６Ｈ）、６．９７（ｓ、１Ｈ）、６．３２（ｄ、Ｊ＝７．７、１Ｈ）、４．９５−４．８８（ｍ、１Ｈ）、４．７０−４．６２（ｍ、１Ｈ）、４．０３（ｓ、３Ｈ）、２．８２−２．５６（ｍ、２Ｈ）、１．８７−１．５８（ｍ、３Ｈ）、１．３８（９Ｈ）、１．００（ｔ、Ｊ−６．３、６Ｈ）。
【０２０５】
（実施例１２）
（（３Ｓ）−３−［（１−メチルインドール−２−カルボニル）ロイシニル］アミノ−４−オキソブタン酸、セミカルバゾン）
（３Ｓ）−３−［（１−メチルインドール−２−カルボニル）ロイシニル］アミノ−４−オキソブタン酸、ｔ−ブチルエステルセミカルバゾン（１３２ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）を、アニソール（０．２ｍＬ）および塩化メチレン（２ｍＬ）中に溶解し、そして得られた溶液をＴＦＡ（１ｍＬ）で処理した。得られた溶液を窒素雰囲気下、室温で、３時間攪拌した。反応混合物を真空下で濃縮し、そして塩化メチレンでチェース（ｃｈａｓｅ）してピンク色の発泡体を得た。発泡体をエーテルで粉砕して、表題生成物を、ピンク色の粉末（１０８ｍｇ、９２％）として得た。ＴＬＣ：（塩化メチレン：メタノール：酢酸、２０：１：１、シリカゲル）：Ｒｆ＝０．２２；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：δ７．６２（ｄｔ、Ｊ＝８．０、１．１、１Ｈ）、７．４５（ｄｄ、Ｊ＝８．５、０．８、１Ｈ）、７．３２−７．２３（ｍ、２ｌ）、７．１３−７．０８（ｍ、２Ｈ）、４．９４−４．８９（ｍ、１Ｈ）、４．６４−４．５９（ｍ、１Ｈ）、３．９８（ｓ、３Ｈ）、２．７８（ｄ、Ｊ＝６．２、２Ｈ）、１．８２−１．７０（ｍ、３Ｈ）、１．０２（ｄ、Ｊ＝６．０、３Ｈ）、０．９９（ｄ、Ｊ＝６．３、３Ｈ）。
【０２０６】
（実施例１３）
（（３Ｓ）−３−［（１−メチルインドール−２−カルボニル）ロイシニル］アミノ−４−オキソブタン酸）
（３Ｓ）−３−［（１−メチルインドール−２−カルボニル）ロイシニル］アミノ−４−オキソブタン酸、セミカルバゾン（９０ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を、メタノール（３ｍＬ）、ホルムアルデヒド（１ｍＬ、３７重量％、水溶液）および酢酸（１ｍＬ）中に溶解し、そして得られた溶液を、７時間、窒素雰囲気下、室温で攪拌した。反応混合物を真空下で濃縮し、水で希釈し、そして酢酸エチルで２回抽出した。酢酸エチル溶液を、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして真空下で濃縮して、紫色の発泡体を得、これをエーテルで粉砕して、表題生成物を紫色の粉末（３５ｍｇ、４３％）として得た。ＴＬＣ：（塩化メチレン：メタノール：酢酸、２０：１：１、シリカゲル）：Ｒｆ＝０．４５；ＭＳ（ＥＩ）Ｃ２０Ｈ２５Ｎ３Ｏ５について；Ｍ＋Ｈ＋＝３８８；Ｍ−Ｈ＋＝３８６。
【０２０７】
（実施例１４）
（（３Ｓ）−３−［（１−メチルインドール−２−カルボニル）フェニルアラニニル］アミノ−４−オキソブタン酸、ｔ−ブチルエステルセミカルバゾン）
１−メチルインドール−２−カルボン酸（７２ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）および３（Ｓ）−（フェニルアラニニル］アミノ−４−オキソブタン酸、ｔ−ブチルエステルセミカルバゾン（１５４ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）を、塩化メチレン（２ｍＬ）中に溶解し、そしてＤＭＡＰ（５３ｍｇ、０．４３ｍｍｏｌ）およびＥＤＡＣ（１０９ｍｇ、０．５７ｍｍｏｌ）の両方を、窒素雰囲気下、０℃で、溶液に添加した。攪拌を１時間、０℃で継続し、そしてさらに４時間、室温で継続した。反応混合物を、酢酸エチルと５％ＫＨＳＯ４溶液の間で分配し、続いて、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして濃縮して、白色の固体を得た。固体をエーテルで粉砕して、表題生成物を白色の粉末（１７９ｍｇ、８２％）として得た。ＴＬＣ：（メタノール／塩化メチレン：５／９５、シリカゲル）：Ｒｆ＝０．４４。
【０２０８】
（実施例１５）
（（３Ｓ）−３−［（１−メチルインドール−２−カルボニル）フェニルアラニニル］アミノ−４−オキソブタン酸、セミカルバゾン）
（３Ｓ）−３−［（１−メチルインドール−２−カルボニル）フェニルアラニニル］アミノ−４−オキソブタン酸、ｔ−ブチルエステルセミカルバゾン（１５４ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ）を、アニソール（０．２ｍＬ）および塩化メチレン（２ｍＬ）中に溶解し、そして得られた溶液を、ＴＦＡ（１ｍＬ）で処理した。得られた溶液を、４時間、窒素雰囲気下、室温で攪拌した。反応混合物を真空下で濃縮し、そして塩化メチレンを共沸させて、紫色の固体を得た。固体をエーテルで粉砕して、表題生成物を紫色の粉末（１４１ｍｇ、１００％）として得た。ＴＬＣ：（塩化メチレン：メタノール：酢酸、２０：１：１、シリカゲル）：Ｒｆ＝０．２５。
【０２０９】
（実施例１６）
（（３Ｓ）−３−［（１−メチルインドール−２−カルボニル）フェニルアラニニル］アミノ−４−オキソブタン酸）
（３Ｓ）−３−［（１−メチルインドール−２−カルボニル）フェニル−アラニニル］アミノ−４−オキソブタン酸、セミカルバゾン（１１６ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）を、メタノール（３ｍＬ）、ホルムアルデヒド（１ｍＬ、３７重量％、水溶液）および酢酸（１ｍＬ）中に溶解し、そして得られた溶液を、９時間、窒素雰囲気下、室温で攪拌した。反応混合物を真空下で濃縮し、水で希釈し、そして酢酸エチルで２回抽出した。酢酸エチル溶液を、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして濃縮して粗製生成物を得、これをエーテルで粉砕して、表題生成物を、褐色の粉末（２６ｍｇ、２５％）として得た。ＴＬＣ：（塩化メチレン：メタノール：酢酸、２０：１：１、シリカゲル）：Ｒｆ＝０．３３；ＭＳ（ＥＩ）Ｃ２３Ｈ２１Ｎ３Ｏ５について；Ｍ＋Ｈ＋＝４２２；Ｍ−Ｈ＋＝４２０。
【０２１０】
（実施例１７）
（（１−メチルインドール−２−カルボニル）グリシン、メチルエステル）
ＤＭＡＰ（１．２２２ｇ、０．０１ｍｏｌ）およびＥＤＡＣ（２．６８０ｇ、０．０１４ｍｏｌ）を、固体として、塩化メチレン（３０ｍＬ）およびＤＭＦ（５ｍＬ）中の１−メチルインドール−２−カルボン酸（１．７５２ｇ、０．０１ｍｏｌ）およびグリシンメチルエステル塩酸塩（１．２５６ｇ、０．０１ｍｏｌ）溶液に、窒素雰囲気下、０℃で添加した。攪拌を０℃で１時間継続し、次いで３時間、室温で継続した。反応混合物を、酢酸エチルと５％ＫＨＳＯ４溶液との間で分配し、そして水層を酢酸エチルで抽出した。合わせた酢酸エチル溶液を、５％ＫＨＳＯ４溶液、飽和重炭酸ナトリウム溶液（２×）溶液、およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして濃縮して、粗製生成物として、紫色の粉末を得た。粉末をエーテルで粉砕して、表題生成物（１．７３４ｍｇ、７０％）を得た。ＴＬＣ：（メタノール／塩化メチレン  １：９）：Ｒｆ＝０．６１；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ  ７．６５（ｄｔ、Ｊ＝８．０、１．１、１Ｈ）、７．４１−７．３１（ｍ、２Ｈ）、７．１６（ｄｄ、Ｊ＝６．６、１．４、１Ｈ）、６．９６（ｄ、Ｊ＝０．５、１Ｈ）、６．６７（ｂｓ、１Ｈ）、４．２５（ｄ、Ｊ＝５．２、２Ｈ）、４．０５（ｓ、３Ｈ）、３．８２（ｓ、３Ｈ）。
【０２１１】
（実施例１８）
（（１−メチルインドール−２−カルボニル）グリシン）
（１−メチルインドール−２−カルボニル）グリシンメチルエステル（１．６８７ｇ、６．８５ｍｍｏｌ）を、１、４−ジオキサン（１０ｍＬ）中に溶解し、そして攪拌しながら、１Ｎ  水酸化リチウム（７．０ｍＬ、水溶液）で処理した。反応混合物は、直ちに、透明になり、そして１Ｎ  ＨＣｌで酸性化し、そして濃縮して１，４−ジオキサンを除去し、その結果、紫色の沈殿が得られた。沈殿を濾過し、水で洗浄し、そして真空下で乾燥して表題生成物を紫色の粉末（１．４８２ｇ、９３％）として得た。ＴＬＣ：（塩化メチレン：メタノール：酢酸、２０：１：１、シリカゲル）：Ｒｆ＝０．２８；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：δ  ７．６１（ｄｔ、Ｊ＝８．２、１Ｈ）、７．４４（ｄｄ、Ｊ＝８．５、０．８、１Ｈ）、７．３２−７．２６（ｍ、１Ｈ）、７．１３−７．０９（ｍ、１Ｈ）、７．０４（ｓ、１Ｈ）、４．０８（ｓ、２Ｈ）、３．９９（ｓ、３Ｈ）。
【０２１２】
（実施例１９）
（（３Ｓ）−３−［（１−メチルインドール−２−カルボニル）グリシン］アミノ−４−オキソブタン酸、ｔ−ブチルエステル、セミカルバゾン）
（１−メチルインドール−２−カルボニル）グリシン（１８６ｍｇ、０．８ｍｍｏｌ）を、塩化メチレン（５ｍＬ）およびＤＭＦ（１ｍＬ）中に溶解し、そして得られた溶液を、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（１２９ｍｇ、０．８４ｍｍｏｌ）およびＥＤＡＣ（２１５ｍｇ、１．１２ｍｍｏｌ）で、窒素雰囲気下で処理し、そして反応混合物を０℃で１０分間攪拌した。３（Ｓ）−アミノ−４−オキソブタン酸、ｔ−ブチルエステルセミカルバゾンｐ−トルエンスルフェート（３１２ｍｇ、０．８ｍｍｏｌ）、次いでＮ−メチルモルホリン（０．０９ｍＬ、０．８ｍｍｏｌ）を、反応混合物に添加し、そして混合物を、１時間、０℃で攪拌し、そして室温でさらに４時間攪拌した。反応混合物を酢酸エチルと５％ＫＨＳＯ４との間で分配し、そして後処理の間に生成物が沈殿した。水性部分からの白色沈殿を濾過により得て、そして水およびエーテルで洗浄した。有機相を濃縮し、そして残渣をエーテルで粉砕することにより、白色沈殿物の別の部分を得た。合わせた沈殿物は、表題生成物（２９７ｍｇ、６６％）であった。ＴＬＣ：（メタノール／塩化メチレン：１／９、シリカゲル）：Ｒｆ＝０．４２；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ  ７．６５（ｄ、Ｊ＝８．０、１Ｈ）、７．４１−７．３４（ｍ、２Ｈ）、７．１９−７．１３（ｍ、２Ｈ）、７．０５（ｄ、Ｊ＝０．５、１Ｈ）、４．９５−４．９３（ｍ、１Ｈ）、４．０８（ｓ、２Ｈ）、４．０３（ｓ、３Ｈ）、２．７９−２．５９（ｍ、２Ｈ）、１．４１（ｓ、９Ｈ）。
【０２１３】
（実施例２０）
（（３Ｓ）−３−［（１−メチルインドール−２−カルボニル）グリシニル］アミノ−４−オキソブタン酸、セミカルバゾン）
（３Ｓ）−３−［（１−メチルインドール−２−カルボニル）グリシニル］アミノ−４−オキソブタン酸、ｔ−ブチルエステルセミカルバゾン（１１８ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）を、アニソール（０．２ｍＬ）および塩化メチレン（２ｍＬ）中に溶解し、そして得られた溶液をＴＦＡ（１ｍＬ）で処理した。得られた溶液を、３時間、窒素雰囲気下、室温で攪拌した。反応混合物を真空下で濃縮し、そして塩化メチレンでチェースして、緑色の固体を得た。エーテルでの固体の粉砕により、表題生成物を緑色の粉末（８８ｍｇ、８７％）として得た。ＴＬＣ：（塩化メチレン：メタノール：酢酸、２０：１：１、シリカゲル）：Ｒｆ＝０．４７；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：δ  ７．６３−７．０８（ｍ、６Ｈ）、４．９５（ｍ、１Ｈ）、４．０５（ｓ、２Ｈ）、４．０１（ｓ、３Ｈ）、３．７７（ｄ、Ｊ＝５．８、２Ｈ）。
【０２１４】
（実施例２１）
（（３Ｓ）−３−［（１−メチルインドール−２−カルボニル）グリシニル］−アミノ−４−オキソブタン酸）
（３Ｓ）−３−［（１−メチルインドール−２−カルボニル）グリシニル］アミノ−４−オキソブタン酸、セミカルバゾン（７６ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）を、メタノール（３ｍＬ）、ホルムアルデヒド（１ｍＬ、３７重量％、水溶液）および酢酸（１ｍＬ）の混合物中に溶解し、そしてこの混合物を、６時間、窒素雰囲気下、室温で攪拌した。反応混合物を真空下で濃縮し、水で希釈し、酢酸エチルで２回抽出した。合わせた酢酸エチル溶液を、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして濃縮して、粗製生成物を得、これをエーテルで粉砕して、表題生成物を、明るい黄色の粉末（２９ｍｇ、４４％）として得た。ＴＬＣ：（塩化メチレン：メタノール：酢酸、８：１：１、シリカゲル）：Ｒｆ＝０．６１；ＭＳ（ＥＩ）Ｃ１６Ｈ１７Ｎ３Ｏ５について：Ｍ＋Ｈ＋  ３３０。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：δ  ７．７３−７．０８（ｍ、５Ｈ）、４．９０−３．８（ｍ、７Ｈ）、２．７２−２．４７（ｍ、２Ｈ）。
【０２１５】
（実施例２２）
（（３Ｓ）−３−［（１−ベンジルインドール−２−カルボニル）アラニニル］アミノ−４−オキソブタン酸、ｔ−ブチルエステルセミカルバゾン）
１−ベンジルインドール−２−カルボン酸（４７７ｍｇ、１．９ｍｍｏｌ）および３（Ｓ）−（アラニニル）アミノ−４−オキソブタン酸、ｔ−ブチルエステルセミカルバゾン（５８１ｍｇ、１．９ｍｍｏｌ）を、塩化メチレン（８ｍＬ）中に溶解し、そしてＤＭＡＰ（２３２ｍｇ、１．９ｍｍｏｌ）およびＥＤＡＣ（４９８ｍｇ、２．６ｍｍｏｌ）の両方を、窒素雰囲気下、０℃で溶液に添加した。得られた溶液を、０℃で１時間攪拌し、そしてさらに２時間室温で攪拌した。反応混合物を、酢酸エチルで希釈し、連続的に飽和重炭酸ナトリウム溶液およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして濃縮して黄色の発泡体を得た。発泡体を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、メタノール／塩化メチレン  ２〜５％）により精製して、表題生成物を白色の粉末（５７０ｍｇ、５６％）として得た。ＴＬＣ：（メタノール／塩化メチレン：１／９、シリカゲル）：Ｒｆ＝０．３８；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ  ８．６０（ｂｓ、１Ｈ）、７．６７（ｄｄ、Ｊ＝８．０、１．１、１Ｈ）、７．５０（ｄ、Ｊ＝８．０、１Ｈ）、７．３３−７．０１（ｍ、８Ｈ）、６．７９（ｄ、Ｊ＝７．４、１Ｈ）、５．７８（ｓ、２Ｈ）、４．８７−４．８３（ｍ、１Ｈ）、４．６７−４．６２（ｍ、１Ｈ）、２．７３−２．４３（ｍ、２Ｈ）、１．４６（ｄ、Ｊ＝７．１、３Ｈ）、１．３９（ｓ、９Ｈ）。
【０２１６】
（実施例２３）
（（３Ｓ）−３−［（１−ベンジルインドール−２−カルボニル）アラニニル］アミノ−４−オキソブタン酸、セミカルバゾン）
（３Ｓ）−３−［（１−ベンジルインドール−２−カルボニル）アラニニル］アミノ−４−オキソブタン酸、ｔ−ブチルエステルセミカルバゾン（２４７ｍｇ、０．４６ｍｍｏｌ）を、アニソール（０．５ｍＬ）および塩化メチレン（２ｍＬ）に溶解し、そして得られた混合物をＴＦＡ（１ｍＬ）で処理した。得られた溶液を、窒素雰囲気下、室温にて３．５時間撹拌した。反応混合物を濃縮し、そして塩化メチレンでチェースし、明るい緑色の固体を得た。この固体をエーテルで粉砕し、表題生成物を緑色の粉末（２１５ｍｇ、９８％）として得た。ＴＬＣ：（塩化メチレン：メタノール：酢酸、８：１：１、シリカゲル）：Ｒｆ＝０．５０；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：δ８．２６（ｄ、Ｊ＝８．０、１Ｈ）、７．６５（ｄ、Ｊ＝８．０、１Ｈ）、７．３９（ｄｄ、Ｊ＝８．５、０．８、１Ｈ）、７．２６−７．０１（ｍ、８Ｈ）、５．６９（ｄ、Ｊ＝７．４、１Ｈ）、４．５６−４．４９（ｍ、１Ｈ）、２．７７−２．６２（ｍ、２Ｈ）、１．４３（ｄ、Ｊ＝７．４、３Ｈ）。
【０２１７】
（実施例２４）
（（３Ｓ）−３−［（１−ベンジルインドール−２−カルボニル）アラニニル］アミノ−４−オキソブタン酸）
（３Ｓ）−３−［（１−ベンジルインドール−２−カルボニル）アラニニル］アミノ−４−オキソブタン酸、セミカルバゾン（１７６ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）を、メタノール（４．５ｍＬ）、ホルムアルデヒド（１．５ｍＬ、３７重量％水溶液）、および酢酸（１．５ｍＬ）に溶解し、そして得られた混合物を、窒素雰囲気下、室温にて４時間撹拌した。反応混合物を真空下で濃縮し、水で希釈し、そして酢酸エチルで２度抽出した。酢酸エチル溶液をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして濃縮し、粗生成物を得た。これを、エーテルで粉砕し、表題生成物を明るい緑色の粉末（１１３ｍｇ、７２％）として得た。ＴＬＣ：（塩化メチレン：メタノール：酢酸、２０：１：１、シリカゲル）：Ｒｆ＝０．３８；Ｃ２３Ｈ２３Ｎ３Ｏ５についてＭＳ；Ｍ＋Ｈ＋＝４２２；Ｍ−Ｈ＋＝４２０。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：δ７．６５（ｄ、Ｊ＝８．０、１Ｈ）、７．３７（ｄｄ、Ｊ＝８．２、０．８、１Ｈ）、７．２４−７．０４（ｍ、８Ｈ）、５．８７−５．７３（ｍ、２Ｈ）、４．６０−４．４９（ｍ、２Ｈ）、４．３２−４．２３（ｍ、１Ｈ）、２．６９−２．４４（ｍ、２Ｈ）、１．４１（ｄ、Ｊ＝７．１、２セット、３Ｈ）。
【０２１８】
（実施例２５）
（（３Ｓ）−３−［（１−（４’−ブテニル）インドール−２−カルボニル）バリニル］アミノ−４−オキソブタン酸、ｔ−ブチルエステルセミカルバゾン）
［１−（４’−ブテニル）インドール］−２−カルボン酸（１０８ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）および３（Ｓ）−（バリニル）アミノ−４−オキソブタン酸、ｔ−ブチルエステルセミカルバゾン（１６３ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）を、塩化メチレン（３ｍＬ）に溶解した。この溶液に、ＤＭＡＰ（６１ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）およびＥＤＡＣ（１３４ｍｇ、０．７ｍｍｏｌ）の両方を、窒素雰囲気下、温度０℃にて添加し、そして得られた反応混合物を１時間０℃で撹拌し、さらに室温で５時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、連続的に飽和重炭酸ナトリウム溶液およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして濃縮し、黄色泡状物を得た。この泡状物をエーテルで粉砕し、表題生成物をわずかに黄色の粉末（１４６ｍｇ、５５％）として得た。ＴＬＣ：（メタノール／塩化メチレン：１／９、シリカゲル）：Ｒｆ＝０．２３；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ８．６９（ｂｓ、１Ｈ）、７．６４（ｄ、Ｊ＝８．０、１Ｈ）、７．４１−７．１３（ｍ、３Ｈ）、６．９９（ｓ、１Ｈ）、６．９１（ｄ、Ｊ＝８．８、１Ｈ）、５．８５−５．７１（ｍ、１Ｈ）、５．０４−４．９４（ｍ、３Ｈ）、４．６５−４．４５（ｍ、３Ｈ）、３．５２−２．５０（ｍ、４Ｈ）、２．３３−２．２６（ｍ、１Ｈ）、１．４１（ｓ、９Ｈ）、１．０５−１．０２（ｍ、６Ｈ）。
【０２１９】
（実施例２６）
（（３Ｓ）−３−［（１−（４’−ブテニル）インドール−２−カルボニル）バリニル］アミノ−４−オキソブタン酸、セミカルバゾン）
（３Ｓ）−３−［（１−（４’−ブテニル）インドール−２−カルボニル）バリニル］アミノ−４−オキソブタン酸、ｔ−ブチルエステルセミカルバゾン（１２６ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）を、アニソール（０．２ｍＬ）および塩化メチレン（２ｍＬ）に溶解し、そして得られた溶液をＴＦＡ（１ｍＬ）で処理した。酸性化反応混合物を、窒素雰囲気下、室温にて４時間撹拌した。反応混合物を濃縮し、そして塩化メチレンでチェースし、粗製固体を得た。この固体をエーテルで粉砕し、表題生成物を紫色の粉末（９９ｍｇ、８８％）として得た。ＴＬＣ：（塩化メチレン：メタノール：酢酸、２０：１：１、シリカゲル）：Ｒｆ＝０．３６；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：δ８．４６（ｄ、Ｊ＝８．０、１Ｈ）、８．１２（ｄ、Ｊ＝８．２、１Ｈ）、７．６２（ｄ、Ｊ＝８．０、１Ｈ）、７．４６（ｄｄ、Ｊ＝８．５、０．８、１Ｈ）、７．３１−７．２１（ｍ、２Ｈ）、７．３１−７．０５（ｍ、２Ｈ）、５．８４−５．７０（ｍ、１Ｈ）、４．９９−４．７８（ｍ、３Ｈ）、４．６２−４．５７（ｍ、２Ｈ）、４．３９−４．３３（ｍ、１Ｈ）、２．８８−２．６９（ｍ、２Ｈ）、２．５２−２．４５（ｍ、２Ｈ）、２．２４−２．１５（ｍ、１Ｈ）、１．０７−１．０２（ｍ、６Ｈ）。
【０２２０】
（実施例２７）
（（３Ｓ）−３−［（１−（４’−ブテニル）インドール−２−カルボニル）バリニル］アミノ−４−オキソブタン酸）
（３Ｓ）−３−［（１−（４’−ブテニル）インドール−２−カルボニル）バリニル］アミノ−４−オキソブタン酸、セミカルバゾン（７９ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）を、メタノール（３ｍＬ）、ホルムアルデヒド（１ｍＬ、３７重量％水溶液）および酢酸（１ｍＬ）に溶解し、そして得られた混合物を、窒素雰囲気下、室温にて７時間撹拌した。反応混合物を真空下で濃縮し、水で希釈し、そして酢酸エチルで２度抽出した。合わせた酢酸エチル溶液をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして濃縮し、粗生成物を得た。これをエーテルで粉砕し、表題生成物を明るい紫色の粉末（２４ｍｇ、３４％）として得た。ＴＬＣ：（塩化メチレン：メタノール：酢酸、２０：１：１、シリカゲル）：Ｒｆ＝０．６０；Ｃ２２Ｈ２７Ｎ３Ｏ５についてＭＳ（ＥＩ）：Ｍ＋Ｈ＋＝４１４；Ｍ−Ｈ＋＝４１２。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：δ８．０９−８．０５（ｍ、１Ｈ）、７．６２（ｄ、Ｊ＝８．０、１Ｈ）、７．４６（ｄｄ、Ｊ＝８．５、０．８、１Ｈ）、７．３１−７．２５（ｍ、１Ｈ）、７．１３−７．０７（ｍ、２Ｈ）、５．８５−５．７１（ｍ、１Ｈ）、４．９９−４．９０（ｍ、３Ｈ）、４．６２−４．５４（ｍ、３Ｈ）、４．４１−４．３０（ｍ、２Ｈ）、２．７５−２．４６（ｍ、４Ｈ）、２．２２−２．１４（ｍ、１Ｈ）、１．０６−１．０２（ｍ、６Ｈ）。
【０２２１】
（実施例２８）
（（３Ｓ）−３−［（１−（２’−（１’−ｔ−ブトキシ−１’−オキソ）エチル）インドール−２−カルボニル）アラニニル］アミノ−４−オキソブタン酸、ｔ−ブチルエステルセミカルバゾン）
１−［２’−（１’−ｔ−ブトキシ−１’−オキソ）エチル］インドール−２−カルボン酸（２２０ｍｇ、０．８ｍｍｏｌ）および３（Ｓ）−（アラニニル）アミノ−４−オキソブタン酸、ｔ−ブチルエステルセミカルバゾン（２４１ｍｇ、０．８ｍｍｏｌ）を、塩化メチレン（３ｍＬ）およびＤＭＦ（１ｍＬ）に溶解し、そして得られた溶液を、ＤＭＡＰ（９８ｍｇ、０．８ｍｍｏｌ）およびＥＤＡＣ（２１１ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）の両方で処理した。得られた反応混合物を、０℃で１時間撹拌し、次いでさらに室温で３時間撹拌し、白色の沈殿物を得た。反応混合物を濃縮し、塩化メチレンを除去し、そして５％ＫＨＳＯ４溶液でクエンチした。白色固体を濾過によって回収し、水およびエーテルで洗浄し、そして真空下で乾燥し、表題生成物を白色の粉末（２９７ｍｇ、６６％）として得た。ＴＬＣ：（メタノール／塩化メチレン／：１／９、シリカゲル）：Ｒｆ＝０．２７。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：δ７．６５（ｄ、Ｊ＝８．０、１Ｈ）、７．４１（ｄ、Ｊ＝８．０、１Ｈ）、７．２６（ｓ、１Ｈ）、７．２２（ｄ、Ｊ＝３．０、１Ｈ）、７．１６−７．１１（ｍ、１Ｈ）、５．３２（ｄ、Ｊ＝２．２、２Ｈ）、４．９４−４．８９（ｍ、１Ｈ）、４．５４（ｑ、Ｊ＝７．１、１Ｈ）、２．７６（ｄ、２Ｈ）、１．４８（ｄ、Ｊ＝７．４、３Ｈ）。
【０２２２】
（実施例２９）
（（３Ｓ）−３−［（１−カルボキシメチル）−インドール−２−カルボニル）アラニニル］アミノ−４−オキソブタン酸、セミカルバゾン）
塩化メチレン（２ｍＬ）中の（３Ｓ）−３−［（１−（２’−（１’−ｔ−ブトキシ−１’−オキソ）エチル）インドール−２−カルボニル）］アミノ−４−オキソブタン酸、ｔ−ブチルエステル、セミカルバゾン（２７４ｍｇ、０．５１ｍｍｏｌ）を、ＴＦＡ（１ｍＬ）で処理した。得られた溶液を、室温、窒素雰囲気下で２時間撹拌した。反応混合物を濃縮し、そして塩化メチレンでチェースし、固体を得た。この固体をエーテルで粉砕し、表題生成物を明るい灰色の粉末（２６２ｍｇ）として得た。ＴＬＣ：（塩化メチレン：メタノール：酢酸、８：１：１、シリカゲル）：Ｒｆ＝０．０８。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：δ７．６５（ｄ、Ｊ＝８．０、１Ｈ）、７．４１（ｄ、Ｊ＝８．０、１Ｈ）、７．２６（ｓ、１Ｈ）、７．２２（ｄ、Ｊ＝３．０、１Ｈ）、７．１６−７．１１（ｍ、１Ｈ）、５．３２（ｄ、Ｊ＝２．２、２Ｈ）、４．９４−４．８９（ｍ、１Ｈ）、４．５４（ｑ、Ｊ＝７．１、１Ｈ）、２．７６（ｄ、２Ｈ）、１．４８（ｄ、Ｊ＝７．４、３Ｈ）。
【０２２３】
（実施例３０）
（（３Ｓ）−３−［（１−カルボキシメチル）インドール−２−カルボニル）アラニニル］アミノ−４−オキソブタン酸）
（３Ｓ）−３−［（１−（カルボキシメチル）インドール−２−カルボニル）アラニニル］アミノ−４−オキソブタン酸、セミカルバゾン（２４１ｍｇ、０．４７ｍｍｏｌ）を、メタノール（３ｍＬ）、ホルムアルデヒド（１ｍＬ、３７％水溶液）および酢酸（１ｍＬ）に溶解し、そして得られた溶液を、室温、窒素雰囲気下で３時間撹拌した。反応混合物を真空下で濃縮し、水で希釈し、そして酢酸エチルで２度抽出した。合わせた酢酸エチル溶液をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして濃縮し、ガラス状物質を得た。このガラス状物質をエーテルで粉砕し、表題生成物をわずかに黄色の粉末（１１４ｍｇ、６３％）として得た。ＴＬＣ：（塩化メチレン：メタノール：酢酸、８：１：１、シリカゲル）：Ｒｆ＝０．１６。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：δ７．６５（ｄ、Ｊ＝８．０、１Ｈ）、７．４０（ｄ、Ｊ＝８．２、１Ｈ）、７．３３−７．２７（ｍ、１Ｈ）、７．２４（ｓ、１Ｈ）、７．１６−７．１０（ｍ、１Ｈ）、５．３６および５．２６（ＡＢ、Ｊ＝１７．９、２Ｈ）、４．６４−４．５０（ｍ、２Ｈ）、４．３４−４．２０（ｍ、１Ｈ）、２．７２−２．４８（ｍ、２Ｈ）、１．４５（ｄ、Ｊ＝７．１４、２Ｈ、２セット）。
【０２２４】
（実施例３１）
（（３Ｓ）−３−［（１−（３’−（１’−ｔ−ブトキシ−１’−オキソ）プロピル）インドール−２−カルボニル）アラニニル］アミノ−４−オキソブタン酸、ｔ−ブチルエステルセミカルバゾン）
１−［３’−（１’−ｔ−ブトキシ−１’−オキソ）プロピル］インドール−２−カルボン酸（１４７ｍｇ、０．５１ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（３ｍＬ）に溶解し、そして得られた溶液に、ＤＭＡＰ（６８ｍｇ、０．５６ｍｍｏｌ）およびＥＤＡＣ（１４０ｍｇ、０．７３ｍｍｏｌ）の両方を添加した。撹拌を、窒素雰囲気下、０℃で１０分間続けた。（３Ｓ）−３−（アラニニル）アミノ−４−オキソブタン酸、ｔ−ブチルエステルセミカルバゾン（１５４ｍｇ、０．５１ｍｍｏｌ）を、この反応混合物に添加し、そして混合物を０℃で１時間撹拌し、次いでさらに室温で４時間撹拌した。反応混合物を、５％ＫＨＳＯ４溶液と酢酸エチルとの間で分配した。酢酸エチル溶液を５％ＫＨＳＯ４溶液、飽和重炭酸ナトリウム溶液（２×）、およびブラインで連続的に洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして濃縮し、粗生成物として泡状物質を得た。この泡状物質をエーテルで粉砕し、表題生成物を白色の粉末（１６１ｍｇ、５５％）として得た。ＴＬＣ：（メタノール／塩化メチレン／：１／９、シリカゲル）：Ｒｆ＝０．３６；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：δ７．６２（ｄ、Ｊ＝８．０、１Ｈ）、７．５０（ｄ、Ｊ＝８．２、１Ｈ）、７．２９（ｔ、Ｊ＝８．２、１Ｈ）、７．２２（ｄ、Ｊ＝３．０、１Ｈ）、７．１６（ｓ、１Ｈ）、７．１１（ｔ、Ｊ＝７．４、１Ｈ）、４．９６−４．９０（ｍ、１Ｈ）、４．８２−４．７２（ｍ、２Ｈ）、４．５６（ｑ、Ｊ＝７．１、１Ｈ）、２．７８−２．６６（ｍ、４Ｈ）、１．４９（ｄ、Ｊ＝７．４、３Ｈ）、１．４０（ｓ、９Ｈ）、１．２８（ｓ、９Ｈ）。
【０２２５】
（実施例３２）
（（３Ｓ）−３−［（１−（２’−カルボキシエチル）インドール−２−カルボニル）アラニニル］アミノ−４−オキソブタン酸セミカルバゾン）
（３Ｓ）−３−［（１−（３’−（１’−ｔ−ブトキシ−１’−オキソ）プロピル）インドール−２−カルボニル）アラニニル］アミノ−４−オキソブタン酸、ｔ−ブチルエステルセミカルバゾン（１４０ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）を、アニソール（０．２ｍＬ）および塩化メチレン（２ｍＬ）に溶解し、そしてこの懸濁液をＴＦＡ（１ｍＬ）で処理した。得られた溶液を、窒素雰囲気下、室温で２時間撹拌した。反応混合物を濃縮し、そして塩化メチレンでチェースし、固体を得た。この固体をエーテルで粉砕し、表題生成物を無色の粉末（１０７ｍｇ、９５％）として得た。ＴＬＣ：（塩化メチレン：メタノール：酢酸、８：１：１、シリカゲル）：Ｒｆ＝０．１７；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：δ７．６２（ｄ、Ｊ＝８．０、１Ｈ）、７．５０（ｄ、Ｊ＝８．２、１Ｈ）、７．３２−７．２７（ｍ、１Ｈ）、７．２３（ｄ、Ｊ＝３．０、１Ｈ）、７．１３−７０８（ｍ、２Ｈ）、４．９７−４．９０（ｍ、１Ｈ）、４．８０−４．６９（ｍ、１Ｈ）、４．５４（ｑ、Ｊ＝７．１、１Ｈ）、２．８２−２．７３（ｍ、４Ｈ）、１．４９（ｄ、Ｊ＝７．１、３Ｈ）。
【０２２６】
（実施例３３）
（（３Ｓ）−３−［（１−（２'−カルボキシエチル）インドール−２−カルボニル）アラニニル］アミノ−４−オキソブタン酸）
（３Ｓ）−３−［（１−（２'−カルボキシエチル）インドール−２−カルボニル）アラニニル］アミノ−４−オキソブタン酸、セミカルバゾン（９５ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を、メタノール（３ｍＬ）、ホルムアルデヒド（１ｍＬ、３７重量％水溶液）および酢酸（１ｍＬ）に溶解し、そして得られた溶液を、室温、窒素雰囲気下で４時間撹拌した。反応混合物を濃縮し、メタノールを除去し、水で希釈し、そして酢酸エチルで２度抽出した。合わせた酢酸エチル溶液をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして濃縮し、ガラス状物質を得た。このガラス状物質をエーテルで粉末化し、表題生成物をわずかに黄色の粉末（２０ｍｇ、２０％）として得た。ＴＬＣ：（塩化メチレン：メタノール：酢酸、８：１：１、シリカゲル）：Ｒｆ＝０．２６。１ＨＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：δ７．６２（ｄ、Ｊ＝８．０、１Ｈ）、７．５１（ｄ、Ｊ＝１Ｈ）、７．３２−７．２７（ｍ、１Ｈ）、７．１３−７．０８（ｍ、２Ｈ）、４．８０−４．７６（ｍ、２Ｈ）、４．６８−４．５２（ｍ、２Ｈ）、４．３７−４．２５（ｍ、１Ｈ）、２．８４−２．５０（ｍ、３Ｈ１）、１．４７（ｄ、Ｊ＝７．１、３Ｈ、２セット）。
【０２２７】
（実施例３４）
（２，６−ジクロロベンジルオキシエタノール）
水素化ナトリウム（１．７６ｇ、０．０４４ｍｏｌ、鉱油中６０重量％）を、乾燥ＴＨＦ（１００ｍＬ）中のエチレングリコール（１１．２ｍＬ）の溶液にゆっくりと添加した。得られた混合物を、窒素雰囲気下、室温で短時間撹拌した。α−ブロモ−２、６−ジクロロトルエン（９．８９４ｇ、０．０４ｍｏｌ）をこの混合物に添加し、そして混合物を窒素雰囲気下、室温でさらに５．５時間撹拌した。さらなる水酸化ナトリウム（０．４００ｇ）を添加し、次いで混合物を室温で２４時間撹拌した。反応混合物を濃縮し、ＴＨＦを除去し、そして残渣をエーテルと水との間に分配した。水層をエーテル（２×）で逆抽出した。合わせた有機溶液を水およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、そして濃縮し、粗製オイルを得た。このオイルを、酢酸エチル／ヘキサン（１０−５０％）を用いて、シリカゲル上でフラッシュクロマトグラフし、表題生成物を黄色オイル（４．５６ｇ、５１％）として得た。ＴＬＣ：（酢酸エチル／ヘキサン、３０／７０）：
Ｒｆ＝０．２６。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ７．３５−７．１８（ｍ、３Ｈ）、４．８４（ｓ、２Ｈ）、３．７６−３．６６（ｍ、４Ｈ）。
【０２２８】
（実施例３５）
（５−（２'，６'−ジクロロベンジルオキシ）−４−ヒドロキシ−３−ニトロペンタン酸、ｔ−ブチルエステル）
ＤＭＳＯを、塩化オキサリル（７．５ｍＬ、１５．０ｍｍｏｌ、塩化メチレン中２．０Ｍ）溶液（４７．５ｍＬ）に滴下し、そして得られた反応混合物を−７８℃で１０分間撹拌した。乾燥塩化メチレン（５ｍＬ）中の２，６−ジクロロベンジルオキシエタノール（２２１１ｍｇ、１０ｍｍｏｌ）を、この混合物に滴下し、次いで、この混合物を窒素雰囲気下、−７８℃で１５分間撹拌した。トリエチルアミン（８．４ｍＬ、６０ｍｍｏｌ）を反応混合物に滴下し、そして得られた混合物を−７８℃で１０分間撹拌し、次いで０℃に加温した（約２０分間にわたって）。ｔｅｒｔ−ブチル  ３−ニトロプロピオネート（１９２７ｍｇ、乾燥塩化メチレン（５ｍＬ）中１１．０ｍｍｏｌ）の塩化メチレン溶液を、反応混合物に滴下し、そして混合物を１時間撹拌した。残渣をエーテルで抽出し、そして得られた白色固体を濾過によって回収した。有機濾液を５％ＫＨＳＯ４溶液（２×）およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして濃縮し、粗製オイル（３．９５ｇ）を得た。オイルを、酢酸エチル／ヘキサン（１：２）を用いるシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィーにかけ、表題生成物を黄色オイル（２．９１７ｇ、７４％）として得た。ＴＬＣ：（酢酸エチル、ヘキサン、６０／４０）：Ｒｆ＝０．５４。
【０２２９】
（実施例３６）
（３−アミノ−５−（２'，６'−ジクロロベンジルオキシ）−４−ヒドロキシペンタン酸、ｔ−ブチルエステル）
メタノール（１５０ｍＬ）中の５−（２'，６'−ジクロロベンジルオキシ）−４−ヒドロキシ−３−ニトロペンタン酸  ｔ−ブチルエステル（２．２１３ｇ，０．００５６ｍｏｌ）および湿潤ラネーニッケル（３．４ｇ）の混合物を、水素バルーン下、室温で２時間撹拌した。反応混合物をＣｅｌｉｔｅを通して濾過し、そして濾過ケーキをメタノールで洗浄した。濾液を濃縮し、そして塩化メチレンでチェースし、表題生成物（２．０７８ｇ，１００％）を得た。ＴＬＣ：（メタノー／塩化メチレン、１／９）：Ｒｆ＝０．２１。
【０２３０】
（実施例３７）
（Ｎ−（１，３−ジメチルインドール−２−カルボニル）バリン）
ＤＭＡＰ（３６７ｍｇ，３．０ｍｍｏｌ）およびＥＤＡＣ（７４８ｍｇ，３．９ｍｍｏｌ）を、固体として、ＤＭＦ（５ｍＬ）中の１，３−ジメチルインドール−２−カルボン酸（５６８ｍｇ，３．３ｍｍｏｌ）の溶液に添加し、そして得られた混合物を窒素雰囲気下、０℃で１０分間撹拌した。バリンのメチルエステルの塩化メチレン溶液（５５３ｍｇ，３．３ｍｍｏｌ，５ｍＬの塩化メチレン中）をこの混合物に添加し、そして混合物をまず０℃で１時間撹拌し、次いで室温で５時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチルと５％ＫＨＳＯ４溶液との間に分配し、そして水溶液を酢酸エチルで逆抽出した。合わせた酢酸エチルを、順に、５％ＫＨＳＯ４溶液、飽和重炭酸ナトリウム溶液（２×）、およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして濃縮し、表題生成物を黄色シロップ（９００ｍｇ）として得た。
【０２３１】
上記黄色シロップの１，４−ジオキサン溶液（５ｍＬ）を、水酸化リチウム（１．０Ｍ  ＬｉＯＨ，３．０ｍＬ）の水溶液で処理し、そして得られた混合物を室温で１時間撹拌した（混合物が均一になった）。反応混合物を１Ｍ  塩酸で酸性化し、そして酢酸エチル（３×）で抽出した。合わせた酢酸エチル溶液をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして濃縮し、表題生成物を黄色泡状物（８３９ｍｇ）として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：δ７．５８（ｄｔ、Ｊ＝８．０、０．８、１Ｈ）、７．３７（ｄｄ、Ｊ＝８．０、０．８、１Ｈ）、７．２９−７．２４（ｍ、１Ｈ）、７．１２−７．０６（ｍ、１Ｈ）、４．５７（ｄ、Ｊ＝５．８、１Ｈ）、３．８０（ｓ、３Ｈ）、２．４８（ｓ、３Ｈ）、３．３４−２．２８（ｍ、１Ｈ）、１．１０（ｄ、Ｊ＝６．９、３Ｈ）、１．０７（ｄ、Ｊ＝６．９、３Ｈ）。
【０２３２】
（実施例３８）
（Ｎ−［（１，３−ジメチルインドール−２−カルボニル）バリニル］−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−（２'，６'−ジクロロベンジルオキシ）ペンタン酸、ｔ−ブチルエステル）
１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（１５３ｍｇ，１．０ｍｍｏｌ）およびＥＤＡＣ（２６８ｍｇ，１．４ｍｍｏｌ）を、Ｎ−（１，３−ジメチルインドール−２−カルボニル）バリン（塩化メチレン３ｍＬ中、２８８ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）の塩化メチレン溶液に添加した。得られた混合物を窒素雰囲気下、室温にて１０分間撹拌した。３−アミノ−５−（２'，６'−ジクロロベンジルオキシ）−４−ヒドロキシペンタン酸、ｔ−ブチルエステル（塩化メチレン２ｍＬ中、３６４ｍｇ，１．０ｍｍｏｌ）の塩化メチレン溶液を、反応混合物に添加し、そして混合物をまず窒素雰囲気下、０℃にて１時間撹拌し、次いで室温で１６時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチルと５％ＫＨＳＯ４溶液との間に分配し、そして水溶液を酢酸エチルで逆抽出した。合わせた酢酸エチル溶液を、５％ＫＨＳＯ４溶液、飽和重炭酸ナトリウム溶液（２×）、およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして濃縮し、粗生成物を（５８３ｍｇ）を得た。この粗生成物を酢酸エチル／ヘキサン（２／３）を用いるシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィーにかけ、表題生成物を白色固体（２６０ｍｇ）として得た。ＴＬＣ：（酢酸エチル／ヘキサン  １：１）：Ｒｆ＝０．３８。
【０２３３】
（実施例３９）
（Ｎ−［（１，３−ジメチルインドール−２−カルボニル）バリニル］−３−アミノ−４−オキソ−５−（２'，６'−ジクロロベンジルオキシ）ペンタン酸、ｔ−ブチルエステル）
Ｄｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎペルヨージナン（１９５ｍｇ）を、固体として、ＤＭＳＯ（１．５ｍｌ）中のＮ−［（１，３−ジメチルインドール−２−カルボニル）バリニル］−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−（２'，６'−ジクロロ−ベンジルオキシ）ペンタン酸、ｔ−ブチルエステル（９６ｍｇ）の溶液に添加した。得られた溶液を、窒素雰囲気下、室温にて３０分間撹拌し、次いで、ＥｔＯＡｃと水との間に分配した。有機相を水（２×）およびブラインで洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、そして濃縮し、白色固体（８３ｍｇ）を得た。ＥｔＯＡｃ／ヘキサン（１：１）によるフラッシュクロマトグラフィーで精製し、表題生成物を白色固体（５４ｍｇ）として得た。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン；１：１、シリカゲル）：Ｒｆ＝０．５２。
【０２３４】
（実施例４０）
（Ｎ−［（１，３−ジメチルインドール−２−カルボニル）バリニル］−３−アミノ−４−オキソ−５−（２'，６'−ジクロロベンジルオキシ）ペンタン酸）
アニソール（０．２ｍＬ）および塩化メチレン（２ｍＬ）中のＮ−［（１，３−ジメチルインドール−２−カルボニル）バリニル］−３−アミノ−４−オキソ−５−（２'，６'−ジクロロ−ベンジルオキシ）ペンタン酸、ｔ−ブチルエステル（４９ｍｇ）の溶液を、ＴＦＡ（１ｍＬ）で処理し、そして、窒素雰囲気下、室温にて３０分間撹拌した。得られた溶液を濃縮し、そして塩化メチレンでチェースし、白色固体を粗生成物として得た。この粗生成物をエーテルで粉末化し、表題生成物を白色粉末（３４ｍｇ）として得た。Ｃ２８Ｈ３１Ｃｌ２Ｎ３Ｏ６に関するＭＳ（ＥＩ）；ＭＨ＋＝５７６／５７８；（ＭＨ）−＝５７４／５７６。
【０２３５】
（実施例４１）
（Ｎ−［（１，３−ジメチルインドール−２−カルボニル）バリニル］−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−フルオロペンタン酸、ｔ−ブチルエステル）
４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）（６７ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）および１−（３'−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミドヒドロクロリド（ＥＤＡＣ）（１２５ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ）を、固体として、１，３−ジメチルインドール−２−カルボン酸（ＤＭＦ  １ｍＬ中、９５ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液に添加し、そして得られた反応混合物を、窒素雰囲気下、０℃で１０分間撹拌した。Ｎ−（バリニル）−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−フルオロペンタン酸、ｔ−ブチルエステル（塩化メチレン１ｍＬ中、１５３ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）の塩化メチレン溶液を添加し、そして得られた反応混合物をまず０℃で１時間撹拌し、次いで室温で４時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチルと５％ＫＨＳＯ４溶液との間に分配し、そして水溶液を酢酸エチルで逆抽出した。合わせた酢酸エチル溶液を、５％ＫＨＳＯ４溶液、飽和重炭酸ナトリウム溶液（２×）、およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして濃縮し、固体を得た。この固体をエーテル／ヘキサンで粉末化し、表題生成物を白色固体（１３４ｍｇ、５６％）として得た。ＴＬＣ：（酢酸エチル／ヘキサン  ２：１）：Ｒｆ＝０．４２。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ７．５９（ｄ、Ｊ＝８．８、１Ｈ）、７．３７（ｄ、Ｊ＝７．７、１Ｈ）、７．２９−７．２４（ｍ、１Ｈ）、７．１２−７．０７（ｍ、１Ｈ）、４．４９−４．２６（ｍ、５Ｈ）、３．８１−３．７９（ｍ、３Ｈ）、２．６６−２．４７（ｍ、５Ｈ）、２．２２−２．１０（ｍ、１Ｈ）、１．４５−１．４１（ｍ、９Ｈ）、１．０９−１．０３（ｍ、６Ｈ）。
【０２３６】
（実施例４２）
（Ｎ−［（１，３−ジメチルインドール−２−カルボニル）バリニル］−３−アミノ−４−オキソ−５−フルオロペンタン酸、ｔ−ブチルエステル）
ジメチルスルホキシド（０．０９ｍＬ、１．２５ｍｍｏｌ）を、塩化メチレン（４ｍＬ）中の塩化オキサリル（０．１９ｍＬ、２．０Ｍ、０．３８ｍｍｏｌ）の溶液に添加し、そして得られた混合物を、窒素雰囲気下、−７８℃で１０分間撹拌した。Ｎ−［１，３−ジメチルインドール−２−カルボニル）バリニル］−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−フルオロペンタン酸、ｔ−ブチルエステル（１１９ｍｇ、乾燥塩化メチレン１ｍＬ中０．２５ｍｍｏｌ）の乾燥塩化メチレン溶液を、この混合物に滴下し、そして得られた反応混合物を−７８℃で１５分間撹拌した。トリエチルアミン（０．２１ｍＬ、１．５ｍｍｏｌ）を滴下し、次いで反応混合物を−７８℃で１０分間撹拌し、次いで室温まで加温した。反応混合物を酢酸エチルと５％ＫＨＳＯ４溶液との間に分配し、そして水層を酢酸エチルで逆抽出した。合わせた酢酸エチル溶液を、５％ＫＨＳＯ４溶液およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして濃縮し、粗生成物を得た。この粗生成物を酢酸エチル／ヘキサン（２：１）でシリカゲル上でクロマトグラフし、表題生成物を白色固体（４８ｍｇ、４１％）として得た。ＴＬＣ：（酢酸エチル／ヘキサン  ２：１）：Ｒｆ＝０．５８。
【０２３７】
（実施例４３）
（Ｎ−［（１，３−ジメチルインドール−２−カルボニル）バリニル］−３−アミノ−４−オキソ−５−フルオロペンタン酸）
アニソール（０．２ｍＬ）および塩化メチレン（２ｍＬ）中のＮ−［１，３−ジメチルインドール−２−カルボニル）バリニル］−３−アミノ−４−オキソ−５−フルオロペンタン酸、ｔ−ブチルエステル（４０ｍｇ）の溶液を、トリフルオロ酢酸（１ｍＬ）で処理し、そして得られた反応混合物を、窒素雰囲気下、室温にて３０分間撹拌した。この反応混合物を濃縮し、そして塩化メチレンでチェースし、固体を得た。この固体をエーテルで粉末化し、表題生成物を褐色粉末（１７ｍｇ）として得た。ＴＬＣ：（塩化メチレン／メタノール／酢酸  ２０：１：１）：Ｒｆ＝０．４０。Ｃ１２Ｈ２６ＦＮ３Ｏ５に関するＭＳ（ＥＩ）：ＭＨ＋＝４２０；ＭＨ−＝４１８。
【０２３８】
（実施例４４）
（Ｎ−［（１−メチルインドール−２−カルボニル）バリニル］−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−フルオロペンタン酸、ｔ−ブチルエステル）
ＤＭＡＰ（９５ｍｇ、０．７８ｍｍｏｌ）およびＥＤＡＣ（２００ｍｇ、１．０４ｍｍｏｌ）を、固体として、塩化メチレン（５ｍＬ）中の１−メチルインドール−２−カルボン酸（１３０ｍｇ、０．７４ｍｍｏｌ）およびＮ−（バリニル）−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−フルオロペンタン酸、ｔ−ブチルエステル（２２７ｍｇ、０．７４ｍｍｏｌ）の溶液に添加し、そして得られた溶液を窒素雰囲気下、０℃で１時間撹拌し、次いで室温で４時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチルと５％ＫＨＳＯ４溶液との間に分配し、そして水溶液を酢酸エチルで逆抽出した。合わせた酢酸エチル溶液を、５％ＫＨＳＯ４溶液、飽和重炭酸ナトリウム溶液（２×）、およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして濃縮し、泡状物を得た。この泡状物をエーテルで粉末化し、表題生成物をわずかに褐色固体（２２４ｍｇ、６５％）として得た。ＴＬＣ：（メタノール／塩化メチレン、１：９）：Ｒｆ＝０．４６。
【０２３９】
（実施例４５）
（Ｎ−［（３−クロロ−１−メチルインドール−２−カルボニル）バリニル］−３−アミノ−４−オキソ−５−フルオロペンタン酸、ｔ−ブチルエステル）
ＤＭＳＯ（０．０６ｍＬ、０．９ｍｍｏｌ）を、塩化オキサリル溶液（０．１４ｍＬ、２．０Ｍ、０．２８ｍｍｏｌ、塩化メチレン４ｍＬ中）に添加し、次いでこの溶液を、窒素雰囲気下、−７８℃で１０分間撹拌した。乾燥塩化メチレン（１ｍＬ）中のＮ−［（１−メチルインドール−２−カルボニル）バリニル］−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−フルオロペンタン酸、ｔ−ブチルエステル（８５ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）の溶液をこの反応混合物に滴下し、そしてこの混合物を−７８℃で１５分間撹拌した。トリエチルアミン（０．１５ｍＬ、１．０８ｍｍｏｌ）を反応混合物に滴下し、そして混合物を−７８℃で１０分間撹拌し、次いで室温まで加温した。反応混合物を酢酸エチルと５％ＫＨＳＯ４溶液との間に分配し、そして水層を酢酸エチルで逆抽出した。合わせた酢酸エチル溶液を、５％ＫＨＳＯ４溶液およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして濃縮し、褐色泡状物を得た。この泡状物をエーテルで粉末化し、表題生成物を明るい褐色の粉末（６４ｍｇ）として得た。Ｃ２４Ｈ３１ＣｌＦＮ３Ｏ５に関するＭＳ：（ＭＨ）−＝４９４／４９６。
【０２４０】
（実施例４６）
（Ｎ−［（３−クロロ−１−メチルインドール−２−カルボニル）バリニル］−３−アミノ−４−オキソ−５−フルオロペンタン酸）
アニソール（０．２ｍＬ）および塩化メチレン（２ｍＬ）中のＮ−［（３−クロロ−１−メチルインドール−２−カルボニル）バリニル］−３−アミノ−４−オキソ−５−フルオロペンタン酸、ｔ−ブチルエステル（４７ｍｇ）の溶液を、ＴＦＡ（１ｍＬ）で処理し、得られた反応混合物を、窒素雰囲気下、室温で１時間攪拌した。反応混合物を濃縮し、塩化メチレンでチェースし（ｃｈａｓｅ）、次いで、エーテルで粉末化し、茶色粉末（２８ｍｇ）を得た。この粉末を、１滴の酢酸を含有するメタノール／塩化メチレンを用いて、シリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィーに供し、表題化合物（２５ｍｇ）を得た。ＴＬＣ（塩化メチレン／メタノール、９：１）：Ｒｆ＝０．２９。Ｃ２０Ｈ２３ＣｌＦＮ３Ｏ５についてのＭＳ：ＭＨ＋＝４４０．４４２；（Ｍ−Ｈ）−＝４３８／４４０。
【０２４１】
（実施例４７）
（Ｎ−［（５−フルオロ−１−メチルインドール−２−カルボニル）バリニル］−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−フルオロペンタン酸、ｔ−ブチルエステル）
ＤＭＡＰ（２５７ｍｇ、２．０８ｍｍｏｌ）およびＥＤＡＣ（４２７ｍｇ、２．２３ｍｍｏｌ）を、固体として、５−フルオロ−１−メチルインドール−２−カルボン酸（３ｍＬのＤＭＦ中、３５９ｍｇ、８６ｍｍｏｌ）の溶液に加え、得られた反応混合物を窒素雰囲気下、０℃で１０分間攪拌した。ＤＭＦ（３ｍＬ）中のＮ−（バリニル）−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−フルオロペンタン酸、ｔ−ブチルエステル（５７９ｍｇ、１．８６ｍｍｏｌ）を加え、得られた溶液を窒素雰囲気下、０℃で１時間および室温で４時間攪拌した。反応混合物を酢酸エチルと５％ＫＨＳＯ４溶液との間で分配し、水溶液を酢酸エチルで逆抽出した。合わせた酢酸エチル溶液を、５％ＫＨＳＯ４溶液、飽和重炭酸ナトリウム溶液（２×）およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして濃縮して表題生成物をわずかに黄色の固体（０．８２７ｍｇ）として得た。ＴＬＣ（メタノール／塩化メチレン、１：９）：Ｒｆ＝０．５２。
【０２４２】
（実施例４８）
（Ｎ−［（３−クロロ−５−フルオロ−１−メチルインドール−２−カルボニル）バリニル］−３−アミノ−４−オキソ−５−フルオロペンタン酸、ｔ−ブチルエステル）
ＤＭＳＯ（０．６０ｍＬ、８．５ｍｍｏｌ）を、塩化オキサリル（１５ｍＬの塩化メチレン中、２．１ｍＬ、２．０Ｍ、４．２ｍｍｏｌ）の塩化メチレン溶液に加え、得られた反応混合物を窒素雰囲気下、−７８℃で１０分間攪拌した。Ｎ−［（５−フルオロ−１−メチルインドール−２−カルボニル）バリニル］−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−フルオロペンタン酸、ｔ−ブチルエステル（８ｍＬの乾燥塩化メチレン中、８２０ｍｇ、１．７ｍｍｏｌ）の塩化メチレン溶液、およびＤＭＳＯ（０．４ｍＬ）を反応混合物に滴下し、−７８℃で１５分間攪拌した。ＴＥＡ（１．４ｍＬ、１０．２ｍｍｏｌ）を混合物に滴下し、混合物を−７８℃で１０分間攪拌し、次いで、室温まで加温した。反応混合物を酢酸エチルと５％ＫＨＳＯ４溶液との間で分配し、水層を酢酸エチルで逆抽出した。合わせた酢酸エチル溶液を５％ＫＨＳＯ４溶液およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして濃縮して表題生成物をわずかに黄色の固体として得た。エーテルで粉末化して表題生成物を白色粉末（７０５ｍｇ、８５％）として得た。ＴＬＣ（メタノール／塩化メチレン、１：９）：Ｒｆ＝０．６３。Ｃ２４Ｈ３０ＣｌＦ２Ｎ３Ｏ５についてのＭＳ：ＭＨ＋＝５１４／５１６；（Ｍ−Ｈ）−＝５１２／５１４。
【０２４３】
（実施例４９）
（Ｎ−［（３−クロロ−５−フルオロ−１−メチルインドール−２−カルボニル）バリニル］−３−アミノ−４−オキソ−５−フルオロペンタン酸）
アニソール（１ｍＬ）および塩化メチレン（１０ｍＬ）中のＮ−［（３−クロロ−５−フルオロ−１−メチルインドール−２−カルボニル）バリニル］−３−アミノ−４−オキソ−５−フルオロペンタン酸、ｔ−ブチルエステル（６８２ｍｇ）溶液を、ＴＦＡ（５ｍＬ）で処理し、得られた反応混合物を窒素雰囲気下、室温で４５分間攪拌した。反応混合物を濃縮し、塩化メチレンでチェースし、次いで、エーテルで粉末化して表題生成物を白色粉末（５００ｍｇ）として得た。Ｃ２０Ｈ２２ＣｌＦ２Ｎ３Ｏ５についてのＭＳ（ＥＩ）：ＭＨ＋＝４５８／４６０；（Ｍ−Ｈ）−＝４５６／４５８。
【０２４４】
（実施例５０）
（Ｎ−［（１−（３'−フェニルプロピル）インドール−２−カルボニル）バリニル］−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−フルオロペンタン酸、ｔ−ブチルエステル）
ＤＭＡＰ（１２２ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）およびＥＤＡＣ（２４９ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ）を、固体として、１−（３'−フェニルプロピル）インドール−２−カルボン酸（２ｍＬのＤＭＦ中、２７９ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液に加え、得られた混合物を窒素雰囲気下、０℃で１０分間攪拌した。Ｎ−（バリニル）−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−フルオロペンタン酸、ｔ−ブチルエステル（２ｍＬの塩化メチレン中、３０６ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）の塩化メチレン溶液を反応混合物に加え、この混合物を窒素雰囲気下、０℃で１時間、次いで、室温で４時間攪拌した。黄色反応混合物を酢酸エチルと５％ＫＨＳＯ４溶液との間で分配し、水溶液を酢酸エチルで逆抽出した。合わせた酢酸エチル溶液を、５％ＫＨＳＯ４溶液、飽和重炭酸ナトリウム溶液（２×）およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして濃縮して粗固体（０．８２７ｇ）を得た。粗固体を、酢酸エチル／ヘキサン（１：２）で溶出するシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィーに供し、表題生成物をわずかに黄色の固体（１７１ｍｇ）として得た。ＴＬＣ（酢酸エチル／ヘキサン、２：１）：Ｒｆ＝０．５７。
【０２４５】
（実施例５１）
（Ｎ−［（１−（３'−フェニルプロピル）インドール−２−カルボニル）バリニル］−３−アミノ−４−オキソ−５−フルオロペンタン酸、ｔ−ブチルエステル）
ＤＭＳＯ（０．１１ｍＬ、１．５ｍｍｏｌ）を、塩化オキサリル（３．５ｍＬの塩化メチレン中、０．２２ｍＬ、２．０Ｍ、０．４４ｍｍｏｌ）の塩化メチレン溶液に加え、得られた溶液を窒素雰囲気下、−７８℃で１０分間攪拌した。Ｎ−［（１−（３'−フェニルプロピル）インドール−２−カルボニル）バリニル］−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−フルオロペンタン酸、ｔ−ブチルエステル（１．５ｍＬの乾燥塩化メチレン中、１６９ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）の塩化メチレン溶液を滴下し、得られた溶液を−７８℃で１５分間攪拌した。トリエチルアミン（０．２５ｍＬ、１．８ｍｍｏｌ）を反応混合物に滴下し、この混合物を−７８℃で１０分間攪拌し、次いで、室温まで加温した。反応混合物を酢酸エチルと５％ＫＨＳＯ４溶液との間で分配し、水層を酢酸エチルで逆抽出した。合わせた酢酸エチル溶液を５％ＫＨＳＯ４溶液およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして濃縮して粗生成物を得た。粗生成物をヘキサンで粉末化して表題生成物をわずかに黄色の粉末（１２９ｍｇ、７７％）として得た。ＴＬＣ（酢酸エチル／ヘキサン、２：１）：Ｒｆ＝０．６９。
【０２４６】
（実施例５２）
（Ｎ−［（１−（３'−フェニルプロピル）インドール−２−カルボニル）バリニル］−３−アミノ−４−オキソ−５−フルオロペンタン酸）
アニソール（０．２ｍＬ）および塩化メチレン（２ｍＬ）中のＮ−［（１−（３'−フェニルプロピル）インドール−２−カルボニル）バリニル］−３−アミノ−４−オキソ−５−フルオロペンタン酸、ｔ−ブチルエステル（９７ｍｇ）溶液を、ＴＦＡ（１ｍＬ）で処理し、得られた反応混合物を窒素雰囲気下、室温で１時間攪拌した。反応混合物を濃縮し、塩化メチレンでチェースし、次いで、エーテルで粉末化して表題生成物をわずかに黄色の粉末（４４ｍｇ）として得た。ＴＬＣ（塩化メチレン／メタノール／酢酸、２０：１：１）：Ｒｆ＝０．４；Ｃ３２Ｈ４０ＦＮ３Ｏ５についてのＭＳ（ＥＩ）：ＭＨ＋＝５１０；（Ｍ−Ｈ）−＝５０８。
【０２４７】
（実施例５３）
（Ｎ−［（１−フェニルインドール−２−カルボニル）バリニル］−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−フルオロペンタン酸、ｔ−ブチルエステル）
ＤＭＡＰ（１２２ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）およびＥＤＡＣ（２４９ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ）を、固体として、１−フェニルインドール−２−カルボン酸（２ｍＬのＤＭＦ中、２３７ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液に加え、得られた反応混合物を窒素雰囲気下、０℃で１０分間攪拌した。Ｎ−（バリニル）−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−フルオロペンタン酸、ｔ−ブチルエステル（２ｍＬの塩化メチレン中、３０６ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）の塩化メチレン溶液を反応混合物に加え、この混合物を窒素雰囲気下、０℃で１時間および室温で４時間攪拌した。黄色反応混合物を酢酸エチルと５％ＫＨＳＯ４溶液との間で分配し、水溶液を酢酸エチルで逆抽出した。合わせた酢酸エチル溶液を、５％ＫＨＳＯ４溶液、飽和重炭酸ナトリウム溶液（２×）およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして濃縮して無色フィルム（０．８２７ｇ）を得た。このフィルムを、酢酸エチル／ヘキサン（１：２）を用いるシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィーに供し、表題生成物を白色泡状物（４００ｍｇ、７８％）として得た。ＴＬＣ（酢酸エチル／ヘキサン、１：１）：Ｒｆ＝０．２７。
【０２４８】
（実施例５４）
（Ｎ−［（１−フェニルインドール−２−カルボニル）バリニル］−３−アミノ−４−オキソ−５−フルオロペンタン酸、ｔ−ブチルエステル）
ＤＭＳＯ（０．１３ｍＬ、１．９ｍｍｏｌ）を、塩化オキサリル（４ｍＬの塩化メチレン中、０．２９ｍＬ、２．０Ｍ、０．５８ｍｍｏｌ）の塩化メチレン溶液に加え、得られた溶液を窒素雰囲気下、７８℃で１０分間攪拌した。Ｎ−［（１−フェニルインドール−２−カルボニル）バリニル］−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−フルオロペンタン酸、ｔ−ブチルエステル（２ｍＬの乾燥塩化メチレン中、２００ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）の塩化メチレン溶液を滴下し、得られた混合物を−７８℃で１５分間攪拌した。トリエチルアミン（０．３０ｍＬ、２．１ｍｍｏｌ）を混合物に滴下し、得られた混合物を−７８℃で１０分間攪拌し、次いで、室温まで加温した。反応混合物を酢酸エチルと５％ＫＨＳＯ４溶液との間で分配し、水層を酢酸エチルで逆抽出した。合わせた酢酸エチル溶液を５％ＫＨＳＯ４溶液およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして濃縮して粗生成物を得た。粗生成物を粉末化して表題生成物をわずかに黄色の粉末（１８１ｍｇ）として得た。ＴＬＣ（酢酸エチル／ヘキサン、１：１）：Ｒｆ＝０．４３。
【０２４９】
（実施例５５）
（Ｎ−［（１−フェニルインドール−２−カルボニル）バリニル］−３−アミノ−４−オキソ−５−フルオロペンタン酸）
アニソール（０．２ｍＬ）および塩化メチレン（２ｍＬ）中のＮ−［（１−フェニルインドール−２−カルボニル）バリニル］−３−アミノ−４−オキソ−５−フルオロペンタン酸、ｔ−ブチルエステル（１５４ｍｇ）溶液を、ＴＦＡ（１ｍＬ）で処理し、得られた反応混合物を窒素雰囲気下、室温で１時間攪拌した。反応混合物を濃縮し、塩化メチレンでチェースし、次いで、エーテルで粉末化して表題生成物を白色粉末（１００ｍｇ）として得た。ＴＬＣ（塩化メチレン／メタノール／酢酸、２０：１：１）：Ｒｆ＝０．３８；Ｃ２５Ｈ２６ＦＮ５Ｏ５についてのＭＳ（ＥＩ）：ＭＨ＋＝４６８；（Ｍ−Ｈ）−＝４６６。
【０２５０】
（実施例５６）
（Ｎ−［（１−（２’−（（１’−ｔ−ブトキシ−１’−オキソ）エチル）インドール−２−カルボニル）バリニル］−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−フルオロペンタン酸、ｔ−ブチルエステル）
ＤＭＡＰ（１２２ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）およびＥＤＡＣ（２４９ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ）を、固体として、（１−（２’−（（１’−ｔ−ブトキシ−１’−オキソ）エチル）インドール−２−カルボン酸（２ｍＬのＤＭＦ中、２７５ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液に加え、得られた溶液を窒素雰囲気下、０℃で１０分間攪拌した。Ｎ−（バリニル）−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−フルオロペンタン酸、ｔ−ブチルエステル（２ｍＬの塩化メチレン中、３０６ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）の塩化メチレン溶液をこれに加え、窒素雰囲気下、０℃で１時間および室温で４時間攪拌した。黄色反応混合物を酢酸エチルと５％ＫＨＳＯ４溶液との間で分配し、水溶液を酢酸エチルで逆抽出した。合わせた酢酸エチル溶液を、５％ＫＨＳＯ４溶液、飽和重炭酸ナトリウム溶液（×２）およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして濃縮して無色フィルム（０．８２７ｇ）を得た。このフィルムを、酢酸エチル／ヘキサン（１：１）を用いるシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィーに供し、表題生成物を白色泡状物（４６１ｍｇ）として得た。ＴＬＣ（酢酸エチル／ヘキサン、３０：７０）：Ｒｆ＝０．１１。
【０２５１】
（実施例５７）
（Ｎ−［（１−（２’−（（１’−ｔ−ブトキシ−１’−オキソ）エチル）インドール−２−カルボニル）バリニル］−３−アミノ−４−オキソ−５−フルオロペンタン酸、ｔ−ブチルエステル）
乾燥塩化メチレン（２ｍＬ）中のＮ−［（１−（２’−（（１’−ｔ−ブトキシ−１’−オキソ）エチル）インドール−２−カルボニル）バリニル］−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−フルオロペンタン酸、ｔ−ブチルエステル（２３０ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）、Ｎ−メチルモルホリンＮ−オキシド（７１ｍｇ、０．６１ｍｍｏ）および粉末状モレキュラーシーブ（２０５ｍｇ）の混合物を、窒素雰囲気下、室温で１．５時間攪拌した。過ルテニウム酸テトラ（プロピル）アンモニウム（７ｍｇ）を加え、得られた混合物を窒素雰囲気下、室温で２時間攪拌した。反応混合物を、酢酸エチルを溶出液として用いてシリカゲルを通して濾過した。濾液を濃縮し、酢酸エチル／ヘキサン（約１：２〜約１：１）を用いてシリカゲル上でクロマトグラフにかけ、表題生成物を黄色オイル（１００ｍｇ）として得た。ＴＬＣ（酢酸エチル／ヘキサン３０／７０）：Ｒｆ＝０．２７。
【０２５２】
（実施例５８）
（Ｎ−［（１−（カルボキシメチル）インドール−２−カルボニル）バリニル］−３−アミノ−４−オキソ−５−フルオロペンタン酸）
アニソール（０．２ｍＬ）および塩化メチレン（２ｍＬ）中のＮ−［（１−（２’−（（１’−ｔ−ブトキシ−１’−オキソ）エチル）インドール−２−カルボニル）バリニル］−３−アミノ−４−オキソ−５−フルオロペンタン酸、ｔ−ブチルエステル（１００ｍｇ）溶液を、ＴＦＡ（１ｍＬ）で処理した。得られた反応混合物を窒素雰囲気下、室温で３０分間攪拌した。反応混合物を濃縮し、塩化メチレンでチェースし、次いで、エーテルで粉末化して表題生成物を薄い黄色粉末（２６ｍｇ）として得た。ＴＬＣ（塩化メチレン／メタノール、８：１：１）：Ｒｆ＝０．３２；Ｃ２１Ｈ２４ＦＮ３Ｏ７についてのＭＳ（ＥＩ）：ＭＨ＋＝４５０；（Ｍ−Ｈ）−＝４４８。
【０２５３】
（実施例５９）
（Ｎ−［（１−メチルインドール−２−カルボニル）バリニル］−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−フルオロペンタン酸、ｔ−ブチルエステル）
塩化メチレン（５ｍＬ）中の１−メチルインドール２−カルボン酸（１３０ｍｇ、０．７４ｍｍｏｌ）およびＮ−（バリニル）−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−フルオロペンタン酸、ｔｅｒｔ−ブチルエステルの溶液に、そして０℃まで冷却した。固体の４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）（９５ｍｇ、０．７８ｍｍｏｌ）および１−（３’−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＡＣ）（２００ｍｇ、１．０４ｍｍｏｌ）を、０℃で溶液に加えた。反応混合物を０℃で１時間攪拌し、そして室温までゆっくりと加温した。４時間後、反応物を酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）および５％ＫＨＳＯ４水溶液の間で分配した。有機層を、５％ＫＨＳＯ４溶液、飽和重炭酸ナトリウム溶液、ブラインで洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、そして濃縮して泡状物を得た。粗残渣をジエチルエーテルで粉末化し、そして固体を濾過して表題化合物を薄い茶色固体（２２４ｍｇ、収率６５％）として得た。ＴＬＣ（ＭｅＯＨ：ＣＨ２Ｃｌ２、１：９）：Ｒｆ＝０．４６。
【０２５４】
（実施例６０）
（Ｎ−［（１−メチルインドール−２−カルボニル）バリニル］−３−アミノ−４−オキソ−５−フルオロペンタン酸、ｔ−ブチルエステル）
ＤＭＳＯ（１ｍＬ）中のＮ−［（１−メチルインドール−２−カルボニル）バリニル］−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−フルオロペンタン酸、ｔ−ブチルエステル（５１ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｄｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎパーヨージナン（ｐｅｒｉｏｄｉｎａｎｅ）（１１０ｍｇ）を加えた。室温で３０分後、反応混合物を酢酸エチルおよび水の間で分配した。有機層を、水およびブラインで洗浄し、乾燥し、そして濃縮して白色固体を得た。ジエチルエーテルで粉末化し、そして固体を収集して表題化合物を白色粉末（２５ｍｇ、収率４９％）として得た。ＴＬＣ（ＭｅＯＨ：ＣＨ２Ｃｌ２、５：９５）：Ｒｆ＝０．４８。
【０２５５】
（実施例６１）
（Ｎ−［（１−メチルインドール−２−カルボニル）バリニル］−３−アミノ−４−オキソ−５−フルオロペンタン酸）
ＣＨ２Ｃｌ２（１ｍＬ）中のＮ−［（１−メチルインドール−２−カルボニル）バリニル］−３−アミノ−４−オキソ−５−フルオロペンタン酸、ｔ−ブチルエステル（１９ｍｇ、０．０４１ｍｍｏｌ）およびアニソール（０．１ｍＬ）の溶液を、室温でトリフルオロ酢酸（０．５ｍＬ）で処理した。３０分後、反応混合物を濃縮し、そして塩化メチレンでチェースした。粗残渣をジエチルエーテルで粉末化し、そして固体を濾過して表題化合物を薄い茶色固体（１２ｍｇ、収率７２％）として得た。ＴＬＣ（ＡｃＯＨ：ＭｅＯＨ：ＣＨ２Ｃｌ２、１：１：２０）：Ｒｆ＝０．５９。Ｃ２０Ｈ２４ＦＮ３Ｏ５についての質量スペクトル：［ＭＨ］＋４０６、［ＭＨ］−４０４。
【０２５６】
実施例５９〜６１に示す方法に従って、以下の化合物を調製した：
（実施例６２）
（Ｎ−［（１，３−ジメチル−５−フルオロインドール−２−カルボニル）バリニル］−３−アミノ−４−オキソ−５−フルオロペンタン酸）
収率５７％；ＴＬＣ（ＭｅＯＨ：ＣＨ２Ｃｌ２、５：９５）：Ｒｆ＝０．５６。Ｃ２１Ｈ２５Ｆ２Ｎ３Ｏ５についての質量スペクトル：［ＭＨ］＋４３８、［ＭＨ］−４３６。
【０２５７】
（実施例６３）
（Ｎ−［（１−ホモアリルインドール−２−カルボニル）バリニル］−３−アミノ−４−オキソ−５−フルオロペンタン酸）
収率２９％；ＴＬＣ（ＭｅＯＨ：ＣＨ２Ｃｌ２、１：９）：Ｒｆ＝０．３３。Ｃ２３Ｈ２８ＦＮ３Ｏ５についての質量スペクトル：［ＭＨ］＋４４６、［ＭＮａ］＋４６８、［ＭＨ］−４４４。
【０２５８】
（実施例６４）
（Ｎ−［（１−メチル−５−フルオロインドール−２−カルボニル）バリニル］−３−アミノ−４−オキソ−５−フルオロペンタン酸）
収率８９％；ＴＬＣ（ＭｅＯＨ：ＣＨ２Ｃｌ２、９：１）：Ｒｆ＝０．１４。Ｃ２０Ｈ２３Ｆ２Ｎ３Ｏ５についての質量スペクトル：［ＭＨ］＋４２４、［ＭＨ］−４２２。
【０２５９】
（実施例６５）
（Ｎ−［（１−メチル−３−イソブチルインドール−２−カルボニル）バリニル］−３−アミノ−４−オキソ−５−フルオロペンタン酸）
収率５０％；ＴＬＣ（ＭｅＯＨ：ＣＨ２Ｃｌ２、９：１）：Ｒｆ＝０．２０。Ｃ２４Ｈ
３２ＦＮ３Ｏ５についての質量スペクトル：［ＭＨ］＋４６２、［ＭＨ］−４６０。
【０２６０】
（実施例６６）
（Ｎ−［（１−メチル−３−フェネチルインドール−２−カルボニル）バリニル］−３−アミノ−４−オキソ−５−フルオロペンタン酸）
収率３８％；ＴＬＣ（酢酸エチル：ヘキサン、１：１）：Ｒｆ＝０．１９。Ｃ２８Ｈ３２ＦＮ３Ｏ５についての質量スペクトル：［ＭＨ］＋５１０、［ＭＨ］−５０８。
【０２６１】
（実施例６７）
（Ｎ−［（１−メチル−５−Ｏベンジルインドール−２−カルボニル）バリニル］−３−アミノ−４−オキソ−５−フルオロペンタン酸）
収率７８％；ＴＬＣ（酢酸エチル：ヘキサン、１：１）：Ｒｆ＝０．１７。Ｃ２７Ｈ３０ＦＮ３Ｏ６についての質量スペクトル：［ＭＨ］＋５１２、［ＭＨ］−５１０。
【０２６２】
（実施例６８）
（Ｎ−（１，３−ジメチル−インドール−２−カルボニル）−バリニル−３−アミノ−５−ブロモ−４−オキソ−ペンタン酸、ｔ−ブチルエステル）
１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（３．１９ｇ、２０．８ｍｍｏｌ）および１−（３’−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＡＣ）（５．６０ｇ、２９．２ｍｍｏｌ）を、窒素下、０℃で、塩化メチレン／ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）（６０ｍｌ／３０ｍｌ）中のＮ−カルボベンジルオキシカルボニルバリン（５．２４ｇ、２０．８ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に加えた。１５分後、アスパラギン酸α−メチル、β−ｔｅｒｔ−ブチルジエステル（５．００ｇ、２０．８ｍｍｏｌ）を、固体として加え、続いてニートの４−メチルモルホリン（２．４０ｍｌ、２１．８ｍｍｏｌ）を加えた。０℃で１時間および室温で５時間攪拌後、混合物を酢酸エチルと５％ＫＨＳＯ４溶液との間で分配した。水溶液を酢酸エチルで逆抽出し、そして合わせた抽出物を飽和ＮａＨＣＯ３およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして濃縮して固体を得た。エーテルで粉末化し、Ｎ−［カルボベンジルオキシカルボニルバリニル］アスパラギン酸、α−メチル、β−ｔｅｒｔ−ブチルジエステルを白色固体（８．３６ｇ、９２％）として得た。ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ、９５／５）：Ｒｆ＝０．４８。
【０２６３】
２００ｍｌのメタノール中の上記生成物（４．００ｇ、９．１７ｍｍｏｌ）の溶液を、水素雰囲気下（１ａｔｍ）で５０分間、活性炭坦持パラジウム（０．４５ｇ）と共に攪拌した。次いで、反応混合物をセライトのパッドを通して濾過し、濾過ケーキをメタノールおよび塩化メチレンで洗浄した。濾液を合わせ、濃縮し、そして残渣を塩化メチレンでチェースしてＮ−［バリニル］アスパラギン酸、α−メチル、β−ｔｅｒｔ−ブチルジエステルを白色固体（２．７５ｇ、９９％）として得た。ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ、９５／５）：Ｒｆ＝０．１０。
【０２６４】
ＤＭＦ（３０ｍｌ）中の上記生成物（２．７５ｇ、９．１１ｍｍｏｌ）および１、３−ジメチルインドール−２−カルボン酸（１．９５ｇ、１０．３ｍｍｏｌ）の濁った混合物に、４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）（１．２６ｇ、１０．３ｍｍｏｌ）および１−（３’−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＡＣ）（２．３７ｇ、１２．４ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を、窒素雰囲気下、０℃で１時間および室温で３時間攪拌した。次いで、反応混合物を酢酸エチルと５％ＫＨＳＯ４溶液との間で分配し、そして水溶液を酢酸エチルで逆抽出した。合わせた抽出物を飽和ＮａＨＣＯ３溶液、水、およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして濃縮して固体を得た。固体をエーテルで粉末化し、Ｎ−［（１，３−ジメチル−インドール−２−カルボニル）バリニル］アスパラギン酸、α−メチル、β−ｔｅｒｔ−ブチルジエステルを白色粉末（２．８７ｇ、６７％）として得た。ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ、９５／５）：Ｒｆ＝０．５９。
【０２６５】
水酸化リチウムの水溶液（１．０Ｍ、２．９８ｍｌ）を、１、４−ジオキサン（１０ｍｌ）中の上記生成物（１．４１ｇ、２．９８ｍｍｏｌ）の懸濁液に滴下した。室温で３０分間攪拌後、得られた透明液（ｃｌｅａｒ）を、１Ｎ塩酸溶液で酸性化し、そして水で希釈した。得られた白色沈澱を、吸引濾過により集め、そして水および少量のエーテルで連続して洗浄し、Ｎ−［（１，３−ジメチル−インドール−２−カルボニル）バリニル］アスパラギン酸、β−ｔｅｒｔ−ブチルエステルを白色粉末（１．１８ｇ、８６％）として得た。ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ、９０／１０）：Ｒｆ＝０．２１。
【０２６６】
ＴＨＦ（２０ｍｌ）中の上記生成物（１．０３ｇ、２．２４ｍｍｏｌ）および４−メチルモルホリン（０．３５ｍｌ、３．１４ｍｍｏｌ）の溶液に、窒素下、−１０℃で、イソブチルクロロホルメート（０．３８０ｍｌ、２．９２ｍｍｏｌ）を滴下した。反応混合物を、窒素雰囲気下、−１０℃で１５分間攪拌し、そして濾過した。濾過ケーキを乾燥ＴＨＦで洗浄し、そして濾液を合わせ、０℃まで冷却した。次いで、濾液を新しく調製したジアゾメタンのエーテル溶液（過剰）で処理した。混合物を０℃で１時間攪拌した後、臭化水素酸（４８重量％、水溶液）および酢酸（６ｍｌ、１／１）の混合物を、ガスの発生が終わるまで滴下した。さらに５分後、反応混合物を濃縮し、そして酢酸エチルと水との間で分配した。水層を酢酸エチルで逆抽出した。有機層を合わせ、水、飽和ＮａＨＣＯ３溶液、およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして濃縮した。残渣をエーテルで粉末化し、表題化合物を白色粉末（１．００ｇ、８３％）として得た。ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ、９５／５）：Ｒｆ＝０．８８。
【０２６７】
（実施例６９）
（Ｎ−［（１，３−ジメチル−インドール−２−カルボニル）−バリニル］−３−アミノ−５−（２，６−ジクロロベンゾイル）オキシ−４−オキソ−ペンタン酸、ｔ−ブチルエステル）
２，６−ジクロロ安息香酸（０．０２３ｇ、０．１２ｍｍｏｌ）およびフッ化カリウム（０．０１５ｇ、０．２５ｍｍｏｌ）の混合物に、窒素下、室温にて、Ｎ−［（１，３−ジメチル−インドール−２−カルボニル）バリニル］−３−アミノ−５−ブロモ−４−オキソ−ペンタン酸、ｔｅｒｔ−ブチルエステル（０．０５４ｇ、０．１０ｍｍｏｌ）を一度に加えた。室温でさらに１６時間攪拌後、混合物を酢酸エチルおよび水の間で分配した。有機層を、水、飽和ＮａＨＣＯ３溶液、およびブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そして濃縮した。エーテルで粉末化して表題化合物を白色粉末（０．０５１ｇ、７９％）として得た。ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ、９５：５）：Ｒｆ＝０．８８。
【０２６８】
（実施例７０）
（Ｎ−［Ｎ−（１，３−ジメチル−インドール−２−カルボニル）−バリニル］−３−アミノ−５−（２，６−ジクロロベンゾイル）オキシ−４−オキソ−ペンタン酸）
トリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を、アニソール（０．２ｍＬ）を含有する塩化メチレン中のＮ−（１，３−ジメチル−インドール−２−カルボニル）−バリニル−３−アミノ−５−（２，６−ジクロロベンゾイル）オキシ−４−オキソ−ペンタン酸、ｔｅｒｔ−ブチルエステル（０．０３４０ｇ、０．０５２６ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に加えた。反応混合物を、窒素下、室温で３０分間攪拌し、そして濃縮した。残渣を塩化メチレンと共沸し、そしてエーテルで粉末化して表題化合物を白色粉末（０．０２７０ｇ、８７％）として得た。ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／ＡｃＯＨ、２０／１／１）：Ｒｆ＝０．４３。Ｃ２８Ｈ２９Ｃｌ２Ｎ３Ｏ７についてのＭＳ：［ＭＨ］＋５９０／５９２、［ＭＨ］−５８８／５９０。
【０２６９】
実施例６９〜７０に示す方法に従って、以下の化合物を調製した：
（実施例７１）
（Ｎ−（１，３−ジメチル−インドール−２−カルボニル）−バリニル−３−アミノ−５−（ジフェニルホスフィニル）オキシ−４−オキソ−ペンタン酸）
収率２４％；ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／ＡｃＯＨ、２０／１／１）：Ｒｆ＝０．３１。Ｃ３３Ｈ３６ＰＮ３Ｏ７についてのＭＳ：［ＭＨ］＋６１８、［ＭＨ］−６１６。
【０２７０】
（実施例７２）
（Ｎ−（１，３−ジメチル−インドール−２−カルボニル）−バリニル−３−アミノ−５−（１−フェニル−３−（トリフルオロメチル）ピラゾール−５−イル）オキシ−４−オキソ−ペンタン酸）
収率４９％；ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ、９０／１０）：Ｒｆ＝０．２９。Ｃ３１Ｈ３２Ｆ３Ｎ５Ｏ６についてのＭＳ：［ＭＨ］＋６２８、［ＭＨ］−６２６。
【０２７１】
（実施例７３）
（Ｎ−（１，３−ジメチル−インドール−２−カルボニル）−バリニル−３−アミノ−５−（３−（Ｎ−フェニル）アミノカルボニル−２−ナフチル）オキシ−４−オキソ−ペンタン酸）
収率６８％；ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ、８０／２０）：Ｒｆ＝０．４６。Ｃ３８Ｈ３８Ｎ４Ｏ７についてのＭＳ：［ＭＨ］＋６６３、［ＭＨ］−６６１。
【０２７２】
（実施例７４）
（Ｎ−（１，３−ジメチル−インドール−２−カルボニル）−バリニル−３−アミノ−５−（２−アミノカルボニル−１−フェニル）オキシ−４−オキソ−ペンタン酸）
収率６１％；ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／ＨＯＡｃ、８／１／１）：Ｒｆ＝０．３２。Ｃ２８Ｈ３２Ｎ４Ｏ７についてのＭＳ：［ＭＨ］＋５３７、［ＭＨ］−５３５。
【０２７３】
（実施例７５）
（Ｎ−（１，３−ジメチル−インドール−２−カルボニル）−バリニル−３−アミノ−５−（ジメチルホスフィニル）オキシ−４−オキソ−ペンタン酸）
収率７６％；ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ、９０／１０）：Ｒｆ＝０．１２。Ｃ２３Ｈ３２ＰＮ３Ｏ７についてのＭＳ：［ＭＨ］＋４９４、［ＭＨ］−４９２。
【０２７４】
（実施例７６）
【０２７５】
【化３９】
2005506346.tif 000015
（（２Ｓ−ｃｉｓ）−［５−ベンジルオキシカルボニルアミノ−１，２，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボニル）アミノ］−４−オキソ−ブタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルセミカルバゾン）
１．（２Ｓ−ｃｉｓ）−５−ベンジルオキシカルボニルアミノ−１，２，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボン酸エチルエステルの調製
塩化メチレン（４ｍＬ）中、（２Ｓ−ｃｉｓ）−５−アミノ−１，２，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボン酸エチルエステル（０．４３７ｇ、１．７３ｍｍｏｌ、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔｅｒｓ  ３６，１５９３−１５９６頁（１９９５）および米国特許第５，５０４，０８０号（１９９６年４月２日）に記載のように調製）溶液に、０℃で攪拌しながら、ベンジルクロロホルメート（０．３７０ｍＬ、２．６ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（０．７２４ｍＬ、５．２ｍｍｏ）を添加し、そして得られる混合物を窒素下４５分間攪拌した。反応を水でクエンチし、次いで酢酸エチルおよび５％重硫酸カリウム水溶液の間で分配した。水層を２回、酢酸エチルで逆抽出し、次いで合わせた有機層を飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そしてエバポレートし乾燥した。粗生成物のシリカゲル（Ｓ／Ｐブランド  シリカゲル６０Å、２３０〜４００メッシュＡＳＴＭ）を用い酢酸エチル−ヘキサン（２：１）で溶出するフラッシュクロマトグラフィーによる精製により、粗生成物０．５５８ｇ（６８％）を得た。酢酸エチル−ヘキサン（１：４）で粉末化し、白色固体として表題化合物０．４８０ｇを得た。；融点：１３９〜１４０℃；ＴＬＣ（酢酸エチル−ヘキサン、２：１）：Ｒｆ＝０．６；
【０２７６】
【化４０】
2005506346.tif 000016
２．（２Ｓ−ｃｉｓ）−５−ベンジルオキシカルボニルアミノ−１，２，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボン酸の調製
１，４−ジオキサン（７．５ｍＬ）および水（２．５ｍＬ）中の（２Ｓ−ｃｉｓ）−５−ベンジルオキシカルボニルアミノ−１，２，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボン酸エチルエステル（０．４２８ｇ、１．０５ｍｍｏｌ）の溶液に、１Ｍ水酸化リチウム水溶液（１．６ｍＬ、１．６ｍｍｏｌ）を添加し、そして得られる混合物を室温で窒素下３０分間攪拌した。反応混合物を５％重硫酸カリウム塩化ナトリウム水溶液でｐＨ３に酸性化した。水層を２回、酢酸エチルで逆抽出し、そして合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、そしてエバポレートし乾燥し、細かい白色固体として表題化合物０．３９５ｇ（９９％）を得た。；融点：１８８〜１８９℃；ＴＬＣ（塩化メチレン−メタノール−酢酸、９：１：１）：Ｒｆ＝０．５５；
【０２７７】
【化４１】
2005506346.tif 000017
３．Ｎ−（ベンジルオキシカルボニル）−Ｌ−（Ｎ’−メチル−Ｎ’−メトキシ）アスパラギン酸アミドβ−（ｔｅｒｔ−ブチルエステル）の調製
ＣＨ２Ｃｌ２（１５０ｍＬ）中のＮ−（ベンジルオキシカルボニル）−Ｌ−アスパラギン酸−β−（ｔｅｒｔ−ブチル）エステル（１４．６５ｇ、４５．３ｍｍｏｌ、Ｂａｃｈｅｍ）溶液に、０℃（氷浴）で窒素下、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（７．２９ｇ、４７．６ｍｍｏｌ、Ａｌｄｒｉｃｈ）を、続いて１−エチル−３−（３’，３’−ジメチル−１’−アミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（９．５５ｇ、４９．８ｍｍｏｌ、Ｓｉｇｍａ）を添加した。０℃で１５分間攪拌後、Ｎ、Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩（５．１０ｇ、５２．３ｍｍｏｌ、Ａｌｄｒｉｃｈ）およびＮ−メチルモルホリン（５．８ｍＬ、５３ｍｍｏｌ、Ａｌｄｒｉｃｈ）を添加した。混合物を３時間かけて室温に温め、次いで室温で１６時間攪拌した。溶液を真空下、濃縮し、そして残渣を酢酸エチル−５％ＫＨＳＯ４（各２００ｍＬ）の間に分配した。有機相を次いで５％ＫＨＳＯ４、飽和重炭酸ナトリウム、そして飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、そしてエバポレートしオイルにした。オイルをヘキサンから結晶化し、綿毛状白色結晶固体として表題化合物（１６．１０ｇ、収率９７％）を得た。ＴＬＣ（酢酸エチル）、単一点（ＵＶおよびＰＭＡ）：Ｒｆ＝０．３７。
【０２７８】
上記のものと類似の手順により、Ｎ−（ベンジルオキシカルボニル）−Ｌ−アスパラギン酸−β−（ｔｅｒｔ−ブチル）エステル（２倍スケールアップ）２９．３ｇで開始し、表題生成物３１．１８ｇ（収率９４％）を得た。
【０２７９】
４．Ｎ−（ベンジルオキシカルボニル）−Ｌ−アスパラギン酸セミカルバゾンβ−（ｔｅｒｔ−ブチル）エステルの調製
無水エーテル（４００ｍＬ）中のＮ−（ベンジルオキシカルボニル）−Ｌ−（Ｎ’−メチル−Ｎ’−メトキシ）アスパラギン酸アミドβ−（ｔｅｒｔ−ブチルエステル）（１５．５０ｇ、４２．３ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃（氷浴）で窒素雰囲気下、エーテル中のＬｉＡｌＨ４の１．０Ｍ溶液（２２．０ｍＬ、２２．０ｍｍｏｌ、Ａｌｄｒｉｃｈ）を、反応溶液温度を０〜５℃の間に保つような速度で滴下した（添加時間１５〜２０分）。水素化リチウムアルミニウム試薬の添加が完了した後、混合物を０〜５℃で１時間、攪拌し、次いで０．３Ｎ  ＫＨＳＯ４溶液（１００ｍＬ）の滴下によってクエンチした。得られる混合物を分離漏斗に移し十分な５％ＫＨＳＯ４溶液（７５ｍＬ）を加え固体を溶解した。有機相を分離し、そして合わせた洗浄水をエーテル（１００ｍＬ）で逆抽出した。合わせたエーテル抽出物を飽和ＮａＣｌ溶液で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、そして最小限加熱して真空で濃縮した。ＴＬＣ（酢酸エチル）：筋状点（ＵＶおよびＰＭＡ）Ｒｆ＝０．４８。ＴＬＣ（メタノール／塩化メチレン、１：９）主要点（ＵＶおよびＰＭＡ）Ｒｆ＝０．７５。
【０２８０】
粗アルデヒドを直ちに水性エタノール（水４５ｍＬ／アルコール１０５ｍＬ）中に取り、氷浴中に置き、そして酢酸ナトリウム（３．８２ｇ、４６．６ｍｍｏｌ）および塩酸セミカルバジド（５．２０ｇ、４６．６ｍｍｏｌ、Ａｌｄｒｉｔｃｈ）で処理した。混合物を、０℃（氷浴）で窒素雰囲気下３時間攪拌し、室温に温め、そして、一晩（１６時間）攪拌した。ほとんどのエタノールを真空下、除去し、そして残渣を、酢酸エチルおよび水（各１００ｍＬ）の間で分配した。有機相を、それぞれ５％ＫＨＳＯ４、飽和重炭酸ナトリウムそして飽和塩化ナトリウム溶液で連続して洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、そしてエバポレートし乾燥した。この反応粗生成物を、Ｎ−（ベンジルオキシカルボニル）−Ｌ−（Ｎ’−メチル−Ｎ’−メトキシ）アスパラギン酸アミドβ−（ｔｅｒｔ−ブチルエステル）１５．４０ｇおよび４．６２５ｇで開始する２つの類似の手順のものと合わせ（計：３５．５２５ｇ、９７ｍｍｏｌ）、そしてこれらの合わせた生成物を、シリカゲルを用いアセトン／塩化メチレン（３：７）、次いでメタノール−アセトン−塩化メチレン（０．５：３：７）で溶出するフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、無色の泡として純粋な表題生成物（２７．７３ｇ、７８．５％）を得た。ＴＬＣ（ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２、１：９）：単一点（ＵＶおよびＰＭＡ）、Ｒｆ＝０．５１。
【０２８１】
５．Ｌ−アスパラギン酸セミカルバゾンβ−（ｔｅｒｔ−ブチル）エステルｐ−トルエンスルホン酸塩の調製
純粋エタノール（２５０ｍＬ）中のＮ−（ベンジルオキシカルボニル）−Ｌ−アスパラギン酸セミカルバゾンβ−（ｔｅｒｔ−ブチル）エステル（１３．８４ｇ、３８．０ｍｍｏｌ）の溶液に、１０％Ｐｄ／Ｃ（１．５０ｇ、Ａｌｄｒｉｃｈ）を添加し、そして得られる混合物を水素雰囲気下（バルーン）、ＴＬＣ（メタノール／塩化メチレン、１：９）が出発物質の完全な消費を示すまで（６０分）攪拌した。注意：生成物が過剰に還元され得るので、この反応をきっちりとフォローすることが重要である。混合物をセライトを通して濾過し、そしてエバポレートしオイルにした。オイルを塩化メチレン（７５ｍＬ×２）で、次いで塩化メチレン／トルエン（１：１、７５ｍＬ）で追い出し、白色結晶固体として粗アミンを得た。ＴＬＣ（ＥｔＯＡｃ−ピリジン−ＡｃＯＨ−Ｈ２Ｏ；６０：２５：５：１０）単一点（ＵＶおよびＰＭＡ）Ｒｆ＝０．２４。注意：このＴＬＣ系では、あらゆる過剰に還元された生成物が、所望の生成物のすぐ下に現れる、Ｒｆ＝０．１８（ＰＭＡのみ）。
【０２８２】
粗アミンをＣＨ３ＣＮ（６０ｍＬ）中に取り、そしてアセトニトリル（６０ｍＬ）中のｐ−トルエンスルホン酸１水和物（７．２２ｇ、３８．０ｍｍｏｌ）溶液で処理した。結晶沈殿物を集め、アセトニトリルおよびエーテルで洗浄し、そして風乾し白色結晶固体として表題生成物（１３．９５ｇ、収率９２％）を得た。
【０２８３】
この物質の光学純度を、対応するＭｏｓｈｅｒアミドへの変換［（Ｒ）−（−）−α−メトキシ−α−（トリフルオロメチル）フェニルアセチルクロライド１．０５当量、ＣＨ２Ｃｌ２中のｉ−Ｐｒ２ＮＥｔ  ２．１当量、室温、３０分］により調べた。所望の生成物は、２重線（７．１３ｐｐｍ、１Ｈ、ｄ、Ｊ＝２．４Ｈｚ、ＣＨ＝Ｎ）を有するが、そのジアステレオマーの対応するシグナルは、７．０７ｐｐｍであった。以上の手順から得られる表題化合物の光学純度は、代表的に＞９５：５である。
【０２８４】
６．（２Ｓ−ｃｉｓ）−［５−ベンジルオキシカルボニルアミノ−１，２，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボニル）アミノ］−４−オキソ−ブタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル  セミカルバゾン
塩化メチレン（７ｍＬ）中の（２Ｓ−ｃｉｓ）−５−ベンジルオキシカルボニルアミノ−１，２，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボン酸（０．３７５ｇ、０．９８９ｍｍｏｌ）の溶液に、攪拌しながら、０℃で窒素下、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（０．１８２ｇ、１．１９ｍｍｏｌ）および１−エチル−３−（３’、３’−ジメチル−１’−アミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（０．２８４ｇ、１．４８ｍｍｏｌ）を添加した。１５分後、Ｌ−アスパル酸セミカルバゾンｂ−（ｔｅｒｔ−ブチル）エステル、ｐ−トルエンスルホン酸塩（０．３８６ｇ、０．９８９ｍｍｏｌ）およびＮ−メチルモルホリン（０．１６３ｍＬ、１．４８ｍｍｏｌ）を添加し、そして得られる反応混合物を１時間内に室温にした。一晩、攪拌の後、反応混合物を酢酸エチルで希釈し、そして５％重硫酸カリウムおよび飽和塩化ナトリウム溶液でよく洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、そしてエバポレートし乾燥した。粗生成物をシリカゲル（Ｓ／Ｐブランド  シリカゲル６０Å、２３０〜４００メッシュＡＳＴＭ）を用い２％メタノール−塩化メチレンで溶出するフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、白色泡として表題化合物０．４６３ｇ（７９％）を得た。ＴＬＣ（塩化メチレン−メタノール、９：１）：Ｒｆ＝０．５。
【０２８５】
【化４２】
2005506346.tif 000018
（実施例７７）
【０２８６】
【化４３】
2005506346.tif 000019
（（２−ｃｉｓ）−［５−ベンジルオキシカルボニルアミノ−１，２，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボニル）−アミノ］−４−オキソ−ブタン酸セミカルバゾン）
塩化メチレン（１．５ｍＬ）中の（２Ｓ−ｃｉｓ）−［５−ベンジルオキシカルボニルアミノ−１，２，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボニル）−アミノ］−４−オキソ−ブタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルセミカルバゾン（０．２１４ｇ、０．３６２ｍｍｏｌ）の溶液に、アニソール（０．５ｍＬ、４．３４ｍｍｏｌ）、続いてトリフルオロ酢酸（０．７５ｍＬ）を添加した。室温で、窒素下、２時間、撹拌した後、反応混合物を塩化メチレンで希釈し、そしてエバポレートし、次いで塩化メチレンで２回、チェイス（ｃｈａｓｅ）し、表題化合物（０．１９５ｇ）を得た。ＴＬＣ（塩化メチレン−メタノール、９５：５）Ｒｆ＝０．２。
【０２８７】
【化４４】
2005506346.tif 000020
（実施例７８）
【０２８８】
【化４５】
2005506346.tif 000021
（（２−ｃｉｓ）−［５−ベンジルオキシカルボニルアミノ−１，２，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボニル）−アミノ］−４−オキソ−ブタン酸）
（２−ｃｉｓ）−［５−ベンジルオキシカルボニルアミノ−１，２，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボニル）−アミノ］−４−オキソ−ブタン酸セミカルバゾン（０．１９５ｇ、０．３６ｍｍｏｌ）を、メタノール−酢酸−３７％ホルムアルデヒド（２ｍＬ）の３：１：１溶液で処理し、そして得られる混合物を窒素下、１．５時間、撹拌した。反応混合物を水で希釈し、メタノールをエバポレートにより除去し、次いで残った混合物を凍結乾燥した。逆相ゲル（ＭＣＩゲル、ＣＨＰ−２０Ｐ、７５〜１５０ミクロン）を用い、１０％〜８０％メタノール−水勾配で溶出するフラッシュクロマトグラフィーによる粗生成物の精製により、凍結乾燥後、白色固体として表題化合物（０．０７３ｇ、４２％）を得た；ｍ．ｐ．１０１〜１０４℃。ＴＬＣ（塩化メチレン−メタノール−酢酸、９７：２．５：０．５）Ｒｆ＝０．４５。
【０２８９】
【化４６】
2005506346.tif 000022
（実施例７９）
【０２９０】
【化４７】
2005506346.tif 000023
（（２Ｓ−ｃｉｓ）−［５−アミノ−１，２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボニル）−アミノ］−４−オキソ−ブタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルセミカルバゾン）
炭素担持１０％パラジウム（０．１８０ｇ）をメタノール（２７ｍＬ）中の（２Ｓ−ｃｉｓ）−［５−ベンジルオキシカルボニルアミノ−１，２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボニル）−アミノ］−４−オキソ−ブタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルセミカルバゾン（０．３０８ｇ、０．５２０ｍｍｏｌ）の溶液に添加し、得られる混合物を水素のバルーンを用い（１ａｔｍ、室温）１８時間、水素付加した。混合物を、セライトを通して濾過し、エバポレートして乾燥し、次いで、トルエンで２回、追い出し、灰白色の固体として表題化合物を得た（０．２１５ｇ）。ＴＬＣ（塩化メチレン−メタノール、９：１）Ｒｆ＝０．１５。
【０２９１】
【化４８】
2005506346.tif 000024
（実施例８０）
【０２９２】
【化４９】
2005506346.tif 000025
（（２Ｓ−ｃｉｓ）−［５−（Ｎ−アセチル−（Ｓ）−アスパルチル−ｂ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル）アミノ−１，２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボニル）−アミノ］−４−オキソ−ブタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルセミカルバゾン）
塩化メチレン（１．５ｍＬ）中のＮ−アセチルアスパラギン酸、β−ｔｅｒｔ−ブチルエステル（０．１２０ｇ、０．５１７ｍｍｏｌ）の溶液に、撹拌しながら、０℃で、窒素下、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（０．０８６ｇ、０．５６４ｍｍｏｌ）および１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミドヒドロクロリド（０．１３５ｇ、０．７０５ｍｍｏｌ）を添加した。１５分後、塩化メチレン（２ｍＬ）中の（２Ｓ−ｃｉｓ）−［５−アミノ−１，２，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボニルアミノ］−４−オキソブタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルセミカルバゾン（０．２１３ｇ、０．４７ｍｍｏｌ）の溶液を添加し、そして反応物を１時間かけて室温にした。一晩、攪拌の後、反応混合物を酢酸エチルで希釈し、そして５％硫酸水素カリウムおよび飽和塩化ナトリウム溶液で続けて洗浄し、乾燥（硫酸ナトリウム）し、そしてエバポレートし乾燥した。粗生成物をシリカゲル（Ｓ／Ｐブランド  シリカゲル６０Å、２３０〜４００メッシュＡＳＴＭ）を用い５％次いで１０％メタノール−塩化メチレンで溶出するフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、白色固体として表題化合物０．１２６ｇ（４１％）を得た。ＴＬＣ（塩化メチレン−メタノール、９：１）：Ｒｆ＝０．４。
【０２９３】
【化５０】
2005506346.tif 000026
（実施例８１）
【０２９４】
【化５１】
2005506346.tif 000027
（（２Ｓ−ｃｉｓ）−［５−（Ｎ−アセチル−（Ｓ）−アスパルチル）アミノ−１，２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボニル）−アミノ］−４−オキソ−ブタン酸セミカルバゾン）
塩化メチレン（１ｍＬ）中の（２Ｓ−ｃｉｓ）−［５−（Ｎ−アセチル−（Ｓ）−アスパルチル−ｂ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル）アミノ−１，２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボニル）−アミノ］−４−オキソ−ブタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルセミカルバゾン（０．１１７ｇ、０．１７８ｍｍｏｌ）の溶液に、アニソール（０．５ｍＬ）、続いてトリフルオロ酢酸（１ｍＬ）を添加した。室温で、窒素下、２時間、撹拌した後、反応混合物を塩化メチレンで希釈し、そしてエバポレートし、次いで塩化メチレンで２回チェイスし、表題化合物（０．０９９ｇ）を得た。ＴＬＣ（塩化メチレン−メタノール−酢酸、１３：６：１）Ｒｆ＝０．２。質量スペクトル：ｍ／ｚ  ５６０（Ｍ＋Ｈ）。
【０２９５】
（実施例８２）
【０２９６】
【化５２】
2005506346.tif 000028
（（２Ｓ−ｃｉｓ）−［５−（Ｎ−アセチル−（Ｓ）−アスパルチル）アミノ−１，２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボニル−アミノ］−４−オキソ−ブタン酸）
（２Ｓ−ｃｉｓ）−［５−（Ｎ−アセチル−（Ｓ）−アスパルチル）アミノ−１，２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボニル−アミノ］−４−オキソ−ブタン酸セミカルバゾン（０．０９７ｇ、０．１７７ｍｍｏｌ）を、メタノール−酢酸−３７％ホルムアルデヒド（２ｍＬ）の３：１：１溶液で処理し、そして得られる混合物を窒素下、１．５時間、撹拌した。次いで、反応混合物を水で希釈し、メタノールをエバポレートにより除去し、次いで残った混合物を凍結乾燥した。逆相ゲル（ＭＣＩゲル、ＣＨＰ−２０Ｐ、７５〜１５０ミクロン）を用い、１０％〜８０％メタノール−水勾配で溶出するフラッシュクロマトグラフィーによる粗生成物の精製により、凍結乾燥後、白色固体として表題化合物（０．０５０ｇ、５６％）を得た；ｍ．ｐ．１６０〜１７５℃（分解）。ＴＬＣ（塩化メチレン−メタノール−酢酸、１３：６：１）Ｒｆ＝０．３。質量スペクトル：ｍ／ｚ  ５０３（Ｍ＋Ｈ）。
【０２９７】
（実施例８３）
【０２９８】
【化５３】
2005506346.tif 000029
（（２Ｓ−ｃｉｓ）−［５−スクシニルアミノ−１，２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボニル）−アミノ］−４−オキソ−ブタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルセミカルバゾン）
塩化メチレン（６ｍＬ）中の（２Ｓ−ｃｉｓ）−［５−アミノ−１，２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボニル−アミノ］−４−オキソ−ブタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルセミカルバゾン（０．１９７ｇ、０．４３５ｍｍｏｌ）の溶液に、撹拌しながら、０℃で、窒素下、コハク酸無水物（０．０５７ｇ、０．５６６ｍｍｏｌ）を、続いてピリジン（０．０５２ｍＬ、０．６５３ｍｍｏｌ）を添加した。室温で、窒素下、３時間、撹拌した後、反応混合物を酢酸エチルで希釈し、そして５％硫酸水素カリウム、そして飽和塩化ナトリウム溶液で、続けて洗浄し、乾燥（硫酸ナトリウム）し、そしてエバポレートし乾燥した。粗生成物をシリカゲル（Ｓ／Ｐブランドシリカゲル６０Å、２３０〜４００メッシュＡＳＴＭ）を用い１０％メタノール−塩化メチレン、次いで塩化メチレン−メタノール−酢酸８０：１９：１で溶出するフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、白色固体として表題化合物０．２１６ｇ（８８％）を得た。ＴＬＣ（塩化メチレン−メタノール−酢酸、８：１：１）Ｒｆ＝０．５。質量スペクトル：ｍ／ｚ  ５５７（Ｍ−Ｈ）。
【０２９９】
（実施例８４）
【０３００】
【化５４】
2005506346.tif 000030
（（２Ｓ−ｃｉｓ）−［５−スクシニルアミノ−１，２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボニル）−アミノ］−４−オキソ−ブタン酸セミカルバゾン）
塩化メチレン（１ｍＬ）中の（２Ｓ−ｃｉｓ）−［５−スクシニルアミノ−１，２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボニル）−アミノ］−４−オキソ−ブタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルセミカルバゾン（０．１９１ｇ、０．３４２ｍｍｏｌ）の溶液に、アニソール（０．５ｍＬ）、続いてトリフルオロ酢酸（１ｍＬ）を添加した。室温で、窒素下、２時間、撹拌した後、反応混合物を塩化メチレンで希釈し、そしてエバポレートし、次いで塩化メチレンで２回チェイスし、表題化合物（０．２１０ｇ）を得た。ＴＬＣ（塩化メチレン−メタノール−酢酸、８：１：１）Ｒｆ＝０．４。質量スペクトル：ｍ／ｚ  ５０３（Ｍ＋Ｈ）。
【０３０１】
（実施例８５）
【０３０２】
【化５５】
2005506346.tif 000031
（（２Ｓ−ｃｉｓ）−［５−スクシニルアミノ−１，２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボニル）−アミノ］−４−オキソ−ブタン酸）
（２Ｓ−ｃｉｓ）−［５−スクシニルアミノ−１，２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボニル）−アミノ］−４−オキソ−ブタン酸セミカルバゾン（０．２０８ｇ、約０．３４２ｍｍｏｌ）を、メタノール−酢酸−３７％ホルムアルデヒド（３ｍＬ）の３：１：１溶液で処理し、そして得られる混合物を窒素下、１．５時間、撹拌した。次いで、反応混合物を水で希釈し、メタノールをエバポレートにより除去し、次いで残った混合物を凍結乾燥した。逆相ゲル（ＭＣＩゲル、ＣＨＰ−２０Ｐ、７５〜１５０ミクロン）を用い、１０％〜８０％メタノール−水勾配で溶出するフラッシュクロマトグラフィーによる粗生成物の精製により、凍結乾燥後、白色固体として表題化合物（０．０６４ｇ、４２％）を得た；ｍ．ｐ．１４５〜１６０℃（分解）。ＴＬＣ（塩化メチレン−メタノール−酢酸、８：１：１）Ｒｆ＝０．４５。質量スペクトル：ｍ／ｚ  ４４６（Ｍ＋Ｈ）。
【０３０３】
（実施例８６）
【０３０４】
【化５６】
2005506346.tif 000032
（（２Ｓ−ｃｉｓ）−［５−（Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−（Ｓ）−アスパルチル−ｂ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル）アミノ−１，２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボニル）−アミノ］−４−オキソ−ブタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルセミカルバゾン）
塩化メチレン（１．５ｍＬ）中のＮ−ベンジルオキシカルボニル−（Ｓ）−アスパルチル−β−ｔｅｒｔ−ブチルエステル（０．１６９ｇ、０．５２１ｍｍｏｌ）の溶液に、撹拌しながら、０℃で、窒素下、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（０．０８７ｇ、０．５６９ｍｍｏｌ）および１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミドヒドロクロリド（０．１３６ｇ、０．７１１ｍｍｏｌ）を添加した。１５分後、塩化メチレン（２ｍＬ）中の（２Ｓ−ｃｉｓ）−［５−アミノ−１，２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボニル−アミノ］−４−オキソブタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルセミカルバゾン（０．２１７ｇ、０．４７４ｍｍｏｌ）の溶液を添加し、そして反応物を１時間以内で室温にした。一晩、攪拌の後、反応混合物を酢酸エチルで希釈し、そして５％硫酸水素カリウムそして飽和塩化ナトリウム溶液で続けて洗浄し、乾燥（硫酸ナトリウム）し、そしてエバポレートし乾燥した。粗生成物をシリカゲル（Ｓ／Ｐブランド  シリカゲル６０Å、２３０〜４００メッシュＡＳＴＭ）を用い２％次いで５％メタノール−塩化メチレンで溶出するフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、灰白色固体として表題化合物０．２４４ｇ（６７％）を得た。ＴＬＣ（塩化メチレン−メタノール、９：１）：Ｒｆ＝０．５５。
【０３０５】
【化５７】
2005506346.tif 000033
（実施例８７）
【０３０６】
【化５８】
2005506346.tif 000034
（（２Ｓ−ｃｉｓ）−［５−（Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−（Ｓ）−アスパルチル）アミノ−１，２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボニル）−アミノ］−４−オキソ−ブタン酸セミカルバゾン）
塩化メチレン（１ｍＬ）中の（２Ｓ−ｃｉｓ）−［５−（Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−（Ｓ）−アスパルチル−ｂ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル）アミノ−１，２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボニル）−アミノ］−４−オキソ−ブタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルセミカルバゾン（０．２１７ｇ、０．２８９ｍｍｏｌ）の溶液に、アニソール（０．５ｍＬ）、続いてトリフルオロ酢酸（１ｍＬ）を添加した。室温で、窒素下、３時間、撹拌した後、反応混合物を塩化メチレンで希釈し、そしてエバポレートし、次いで塩化メチレンで２回チェイスし、表題化合物（０．１９３ｇ）を得た。ＴＬＣ（塩化メチレン−メタノール、９：１）Ｒｆ＝０．３５。質量スペクトル：ｍ／ｚ  ６５２（Ｍ＋Ｈ）。
【０３０７】
（実施例８８）
【０３０８】
【化５９】
2005506346.tif 000035
（（２Ｓ−ｃｉｓ）−［５−（Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−（Ｓ）−アスパルチル）アミノ−１，２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボニル）−アミノ］−４−オキソ−ブタン酸）
（２Ｓ−ｃｉｓ）−［５−（Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−（Ｓ）−アスパルチル）アミノ−１，２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボニル）−アミノ］−４−オキソ−ブタン酸セミカルバゾン（０．１９１ｇ、０．２９ｍｍｏｌ）、メタノール−酢酸−３７％ホルムアルデヒド（２ｍＬ）の３：１：１溶液で処理し、そして得られる混合物を窒素下、２時間、撹拌した。次いで、反応混合物を水で希釈し、メタノールをエバポレートにより除去し、次いで残った混合物を凍結乾燥した。逆相ゲル（ＭＣＩゲル、ＣＨＰ−２０Ｐ、７５〜１５０ミクロン）を用い、１０％〜８０％メタノール−水勾配で溶出するフラッシュクロマトグラフィーによる粗生成物の精製により、凍結乾燥後、白色固体として表題化合物（０．１１１ｇ、６４％）を得た；ｍ．ｐ．１４０〜１４４℃（分解）。ＴＬＣ（塩化メチレン−メタノール、９：１）Ｒｆ＝０．４。質量スペクトル：ｍ／ｚ  ５９３（Ｍ−Ｈ）。
【０３０９】
（実施例８９）
【０３１０】
【化６０】
2005506346.tif 000036
（（２Ｓ−ｃｉｓ）−［５−ジヒドロシンナミルアミノ−１，２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボニル）−アミノ］−４−オキソ−ブタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルセミカルバゾン）
塩化メチレン（１．５ｍＬ）中のジヒドロケイ皮酸（０．１６９ｇ、０．５２１ｍｍｏｌ）の溶液に、撹拌しながら、０℃で、窒素下、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（０．０８８ｇ、０．５７６ｍｍｏｌ）および１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミドヒドロクロリド（０．１２７ｇ、０．６６５ｍｍｏｌ）を添加した。１５分後、塩化メチレン（２ｍＬ）中の（２Ｓ−ｃｉｓ）−［５−アミノ−１，２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボニル）−アミノ］−４−オキソブタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルセミカルバゾン（０．２０３ｇ、０．４４３ｍｍｏｌ）の溶液を添加し、そして反応物を１時間以内で室温にした。一晩、攪拌の後、反応混合物を酢酸エチルで希釈し、そして５％硫酸水素カリウムそして飽和塩化ナトリウム溶液で続けて洗浄し、乾燥（硫酸ナトリウム）し、そしてエバポレートし乾燥した。粗生成物をシリカゲル（Ｓ／Ｐブランド  シリカゲル６０Å、２３０〜４００メッシュＡＳＴＭ）を用い２％次いで５％メタノール−塩化メチレンで溶出するフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、灰白色固体として表題化合物０．２０８ｇ（７９％）を得た。ＴＬＣ（塩化メチレン−メタノール、９：１）：Ｒｆ＝０．７。
【０３１１】
【化６１】
2005506346.tif 000037
（実施例９０）
【０３１２】
【化６２】
2005506346.tif 000038
（（２Ｓ−ｃｉｓ）−［５−ジヒドロシンナミルアミノ−１，２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボニル）−アミノ］−４−オキソ−ブタン酸セミカルバゾン）
塩化メチレン（１ｍＬ）中の（２Ｓ−ｃｉｓ）−［５−ジヒドロシンナミルアミノ−１，２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボニル）−アミノ］−４−オキソ−ブタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルセミカルバゾン（０．１８９ｇ、０．３２０ｍｍｏｌ）の溶液に、アニソール（０．５ｍＬ）、続いてトリフルオロ酢酸（１ｍＬ）を添加した。室温で、窒素下、３時間、撹拌した後、反応混合物を塩化メチレンで希釈し、そしてエバポレートし、次いで塩化メチレンで２回チェイスし、表題化合物（０．１８３ｇ）を得た。ＴＬＣ（塩化メチレン−メタノール、９：１）Ｒｆ＝０．２５。質量スペクトル：ｍ／ｚ  ５３５（Ｍ＋Ｈ）。
【０３１３】
（実施例９１）
【０３１４】
【化６３】
2005506346.tif 000039
（（２Ｓ−ｃｉｓ）−［５−ジヒドロシンナミルアミノ−１，２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボニル）−アミノ］−４−オキソ−ブタン酸）
（２Ｓ−ｃｉｓ）−［５−ジヒドロシンナミルアミノ−１，２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボニル）−アミノ］−４−オキソ−ブタン酸セミカルバゾン（０．１８１ｇ、約０．３２０ｍｍｏｌ）を、メタノール−酢酸−３７％ホルムアルデヒドの３：１：１溶液（２ｍｌ）で処理し、そして得られた混合物を窒素下で４時間撹拌した。次いで、反応混合物を水で希釈し、エバポレートしてメタノールを除去し、次いで残った混合物を凍結乾燥した。逆相ゲル（ＭＣＩゲル、ＣＨＰ−２０Ｐ、７５−１５０ミクロン）でのフラッシュクロマトグラフィー（１０％〜８０％メタノール−水勾配を用いて溶出する）により粗生成物を精製し、凍結乾燥後、白色固体として０．０７５ｇの表題の化合物（４７％）を得た；ｍ．ｐ．７８−８１℃。ＴＬＣ（塩化メチレン−メタノール、９：１）Ｒｆ＝０．４５。
【０３１５】
【化６４】
2005506346.tif 000040
（実施例９２）
【０３１６】
【化６５】
2005506346.tif 000041
（（２Ｓ−ｃｉｓ）−［５−アセトアミノ−１，２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボニル）−アミノ］−４−オキソ−ブタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルセミカルバゾン）
ピリジン（３ｍｌ）中の（２Ｓ−ｃｉｓ）−［５−アミノ−１，２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボニル）−アミノ］−４−オキソ−ブタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルセミカルバゾン（０．２２２ｇ、０．４９０ｍｍｏｌ）の溶液に、室温で窒素下で無水酢酸（０．０７ｍＬ、０．７３５ｍｍｏｌ）を添加した。一晩撹拌した後、反応混合物を塩化メチレンで希釈し、そしてエバポレートして泡状物を得た。これを酢酸エチル中に取り、そして５％硫酸水素カリウム溶液および飽和塩化ナトリウム溶液で連続的に洗浄し；乾燥（硫酸ナトリウム）し、そして乾燥するまでエバポレートして、灰白色固体として０．１３０ｇの表題の化合物（５３％）を得た。ＴＬＣ（塩化メチレン−メタノール、９：１）Ｒｆ＝０．５５。
【０３１７】
【化６６】
2005506346.tif 000042
（実施例９３）
【０３１８】
【化６７】
2005506346.tif 000043
（（２Ｓ−ｃｉｓ）−［５−アセチルアミノ−１，２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボニル）−アミノ］−４−オキソ−ブタン酸セミカルバゾン）
塩化メチレン（１ｍｌ）中の（２Ｓ−ｃｉｓ）−［５−アセチルアミノ−１，２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボニル）−アミノ］−４−オキソ−ブタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルセミカルバゾン（０．１１２ｇ、０．２２４ｍｍｏｌ）の溶液に、アニソール（０．５ｍＬ）、次いでトリフルオロ酢酸（１ｍｌ）を添加した。窒素下室温で２．５時間撹拌した後、反応混合物を塩化メチレンで希釈し、そしてエバポレートし、次いで塩化メチレンで２度チェイス（ｃｈａｓｅ）して表題の化合物（０．１１７ｇ）を得た。ＴＬＣ（塩化メチレン−メタノール、９：１）Ｒｆ＝０．１５。質量スペクトル：ｍ／ｚ４４５（Ｍ＋Ｈ）。
【０３１９】
（実施例９４）
【０３２０】
【化６８】
2005506346.tif 000044
（（２Ｓ−ｃｉｓ）−［５−アセチルアミノ−１，２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボニル）−アミノ］−４−オキソ−ブタン酸）
（２Ｓ−ｃｉｓ）−［５−アセチルアミノ−１，２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボニル）−アミノ］−４−オキソ−ブタン酸セミカルバゾン（０．１１５ｇ、約０．２２４ｍｍｏｌ）を、メタノール−酢酸−３７％ホルムアルデヒドの３：１：１溶液（２ｍｌ）で処理し、そして得られた混合物を窒素下で５時間撹拌した。反応混合物を水で希釈し、エバポレートしてメタノールを除去し、次いで残った混合物を凍結乾燥した。逆相ゲル（ＭＣＩゲル、ＣＨＰ−２０Ｐ、７５−１５０ミクロン）でのフラッシュクロマトグラフィー（１０％〜８０％メタノール−水勾配を用いて溶出する）により粗生成物を精製し、凍結乾燥後、白色固体として０．０４４ｇの表題の化合物（５１％）を得た；ｍ．ｐ．２１０−２１５℃（分解）。ＴＬＣ（塩化メチレン−メタノール−酢酸、４４：５：１）Ｒｆ＝０．４５。質量スペクトル：ｍ／ｚ３８８（Ｍ＋Ｈ）。
【０３２１】
（実施例９５）
【０３２２】
【化６９】
2005506346.tif 000045
（（２Ｓ−ｃｉｓ）−［５−（１−ナフトイル）アミノ−１，２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボニル）−アミノ］−４−オキソ−ブタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルセミカルバゾン）
塩化メチレン（１．５ｍｌ）中の１−ナフタレンカルボン酸（０．０７２ｇ，０．４１７ｍｍｏｌ）の溶液に窒素下０℃で撹拌しながら１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（０．０７７ｇ、０．５０１ｍｍｏｌ）および１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミドヒドロクロリド（０．１２０ｇ、０．６２６ｍｍｏｌ）を添加した。１５分後、塩化メチレン（２ｍＬ）中の（２Ｓ−ｃｉｓ）−［５−アミノ−１，２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボニル）−アミノ］−４−オキソ−ブタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルセミカルバゾン（０．１８９ｇ、０．１４７ｍｍｏｌ）の溶液を添加し、そして反応を１時間以内に室温にした。全体で５時間の撹拌の後、反応混合物を酢酸エチルで希釈し、そして５％硫酸水素カリウム溶液および飽和塩化ナトリウム溶液で連続的に洗浄し；乾燥（硫酸ナトリウム）し、そして乾燥するまでエバポレートした。シリカゲル（Ｓ／Ｐブランドシリカゲル６０Å、２３０−４００メッシュＡＳＴＭ）でのフラッシュクロマトグラフィー（５％メタノール−塩化メチレンを用いて溶出する）により粗生成物を精製し、灰白色固体として０．１６８ｇの表題の化合物（６６％）を得た；ｍ．ｐ．１０３−１０５℃（分解）。ＴＬＣ（塩化メチレン−メタノール、９：１）Ｒｆ＝０．６。質量スペクトル：ｍ／ｚ６１３（Ｍ＋Ｈ）。
【０３２３】
【化７０】
2005506346.tif 000046
（実施例９６）
【０３２４】
【化７１】
2005506346.tif 000047
（（２Ｓ−ｃｉｓ）−［５−（１−ナフトイル）アミノ−１，２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボニル）−アミノ］−４−オキソ−ブタン酸セミカルバゾン）
塩化メチレン（１ｍＬ）中の（２Ｓ−ｃｉｓ）−［５−（１−ナフトイル）アミノ−１，２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボニル）−アミノ］−４−オキソ−ブタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルセミカルバゾン（０．１０６ｇ、０．１７３ｍｍｏｌ）の溶液に、アニソール（０．５ｍＬ）、次いでトリフルオロ酢酸（１ｍＬ）を添加した。窒素下室温で３時間撹拌した後、反応混合物を塩化メチレンで希釈し、そしてエバポレートし、次いで塩化メチレンで２度チェイスして表題の化合物（０．１１０ｇ）を得た。ＴＬＣ（塩化メチレン−メタノール、９：１）Ｒｆ＝０．３。
【０３２５】
（実施例９７）
【０３２６】
【化７２】
2005506346.tif 000048
（（２Ｓ−ｃｉｓ）−［５−（１−ナフトイル）アミノ−１，２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボニル）−アミノ］−４−オキソ−ブタン酸）
（２Ｓ−ｃｉｓ）−［５−（１−ナフトイル）アミノ−１，２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボニル）−アミノ］−４−オキソ−ブタン酸セミカルバゾン（０．１１０ｇ、約０．１７３ｍｍｏｌ）を、メタノール−酢酸−３７％ホルムアルデヒドの３：１：１溶液（３ｍｌ）で処理し、そして得られた混合物を窒素下で５時間撹拌した。次いで、反応混合物を水で希釈し、エバポレートしてメタノールを除去し、次いで残った混合物を凍結乾燥した。シリカゲル（Ｓ／Ｐブランドシリカゲル６０Å、２３０−４００メッシュＡＳＴＭ）でのフラッシュクロマトグラフィー（５％−２０％メタノール−塩化メチレン勾配を用いて溶出する）により粗生成物を精製し、白色固体として０．０７６ｇの表題の化合物（８６％）を得た；ｍ．ｐ．２０２−２０３℃（分解）。ＴＬＣ（塩化メチレン−メタノール−酢酸、２０：１：１）Ｒｆ＝０．３。質量スペクトル：ｍ／ｚ４９８（Ｍ−Ｈ）。
【０３２７】
【化７３】
2005506346.tif 000049
（実施例９８）
【０３２８】
【化７４】
2005506346.tif 000050
（（２Ｓ−ｃｉｓ）−［５−ベンゾイルアミノ−１，２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボニル）−アミノ］−４−オキソ−ブタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルセミカルバゾン）
塩化メチレン（２．５ｍｌ）中の（２Ｓ−ｃｉｓ）−［５−アミノ−１，２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボニル）−アミノ］−４−オキソ−ブタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルセミカルバゾン（０．１２１ｇ、０．２６４ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃窒素下で撹拌しながらトリエチルアミン（０．０５５ｍＬ、０．３９６ｍｍｏｌ）、次いで塩化ベンゾイル（０．０３７ｍＬ、０．３１７ｍｍｏｌ）を添加した。室温、窒素下で１時間撹拌した後、反応混合物を酢酸エチルで希釈し、そして５％硫酸水素カリウム溶液、飽和重炭酸ナトリウム溶液および飽和塩化ナトリウム溶液で連続的に洗浄し；乾燥（硫酸ナトリウム）し、そして乾燥するまでエバポレートした。シリカゲル（Ｓ／Ｐブランドシリカゲル６０Å、２３０−４００メッシュＡＳＴＭ）でのフラッシュクロマトグラフィー（１０％ヘキサン−酢酸エチル、１００％酢酸エチル、次いで１０％メタノール−酢酸エチルを用いて溶出する）により粗生成物を精製し、灰白色固体として０．０７３ｇの表題の化合物（４９％）を得た。ＴＬＣ（塩化メチレン−メタノール、９：１）Ｒｆ＝０．７。質量スペクトル：ｍ／ｚ５６３（Ｍ＋Ｈ）。
【０３２９】
【化７５】
2005506346.tif 000051
（実施例９９）
【０３３０】
【化７６】
2005506346.tif 000052
（（２Ｓ−ｃｉｓ）−［５−ベンゾイルアミノ−１，２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボニル）−アミノ］−４−オキソ−ブタン酸セミカルバゾン）
塩化メチレン（１ｍＬ）中の（２Ｓ−ｃｉｓ）−［５−ベンゾイルアミノ−１，２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボニル）−アミノ］−４−オキソ−ブタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルセミカルバゾン（０．０６４ｇ、０．１１４ｍｍｏｌ）の溶液に、アニソール（０．５ｍＬ）、次いでトリフルオロ酢酸（１ｍＬ）を添加した。窒素下室温で２．５時間撹拌した後、反応混合物を酢酸エチルで希釈し、そしてエバポレートして表題の化合物（０．０７０ｇ）を得た。ＴＬＣ（塩化メチレン−メタノール、４：１）Ｒｆ＝０．４。質量スペクトル：ｍ／ｚ５０７（Ｍ＋Ｈ）。
【０３３１】
（実施例１００）
【０３３２】
【化７７】
2005506346.tif 000053
（（２Ｓ−ｃｉｓ）−［５−ベンゾイルアミノ−１，２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボニル）−アミノ］−４−オキソ−ブタン酸）
（２Ｓ−ｃｉｓ）−［５−ベンゾイルアミノ−１，２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボニル）−アミノ］−４−オキソ−ブタン酸セミカルバゾン（０．０７０ｇ、約０．１１４ｍｍｏｌ）を、メタノール−酢酸−３７％ホルムアルデヒドの３：１：１溶液（３ｍｌ）で処理し、そして得られた混合物を窒素下で３．５時間撹拌した。次いで、反応混合物を水で希釈し、エバポレートしてメタノールを除去し、次いで残った混合物を凍結乾燥した。シリカゲル（Ｓ／Ｐブランドシリカゲル６０Å、２３０−４００メッシュＡＳＴＭ）でのフラッシュクロマトグラフィー（１０および２０％メタノール−塩化メチレンを用いて溶出する）により粗生成物を精製し、白色固体として０．０４２ｇの表題の化合物（８２％）を得た；ｍ．ｐ．２０４−２０５℃（分解）。ＴＬＣ（塩化メチレン−メタノール、４：１）Ｒｆ＝０．４。質量スペクトル：ｍ／ｚ４４８（Ｍ−Ｈ）。
【０３３３】
【化７８】
2005506346.tif 000054
（実施例１０１）
【０３３４】
【化７９】
2005506346.tif 000055
（（３Ｒ，Ｓ−ｃｉｓ）−６−ベンジルオキシカルボニルアミノ−５−オキソ−２，３，４，５，６，７，８−ヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピノ［３，２，１−ｈｉ］キノリン−３−カルボニル）−アミノ］−４−オキソ−ブタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルセミカルバゾン）
１．（３Ｒ，Ｓ−ｃｉｓ）−６−ベンジルオキシカルボニルアミノ−５−オキソ−２，３，４，５，６，７，８−ヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピノ［３，２，１−ｈｉ］キノリン−３−カルボン酸，メチルエステルの調製
塩化メチレン（６ｍＬ）中の（３Ｒ，Ｓ−ｃｉｓ）−６−アミノ−５−オキソ−２，３，４，５，６，７，８−ヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピノ［３，２，１−ｈｉ］キノリン−３−カルボン酸，メチルエステル（０．５７０ｇ、２．１ｍｍｏｌ、Ｔｅｔｒａｈｄｅｒｏｎ  Ｌｅｔｔｅｒｓ  ３６，１５９３−１５９６頁（１９９５）および米国特許第５，５０４，０８０号（１９９６年４月２日）に記載されるように調製される）の溶液に、ベンジルクロロホルメート（０．６ｍＬ、４．２ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（１．２ｍＬ、８．４ｍｍｏｌ）を添加し、そして得られた混合物を窒素下で３０分間撹拌した。反応を水でクエンチし、次いで酢酸エチルと５％硫酸水素カリウム水溶液との間にに分配した。水層を酢酸エチルで２度抽出し、次いで合わせた有機層を飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、乾燥（硫酸ナトリウム）し、そして乾燥するまでエバポレートした。シリカゲル（Ｓ／Ｐブランドシリカゲル６０Å、２３０−４００メッシュＡＳＴＭ）でのフラッシュクロマトグラフィー（酢酸エチル−ヘキサン（２：１）を用いて溶出する）により粗生成物を精製し、白色泡状物として０．６４３ｇの表題の化合物（７６％）を得た。ＴＬＣ（塩化メチレン−メタノール、９５：５）Ｒｆ＝０．８。
【０３３５】
【化８０】
2005506346.tif 000056
２．（３Ｒ，Ｓ−ｃｉｓ）−６−ベンジルオキシカルボニルアミノ−５−オキソ−２，３，４，５，６，７，８−ヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピノ［３，２，１−ｈｉ］キノリン−３−カルボン酸の調製
１，４−ジオキサン（１０．５ｍＬ）および水（３．５ｍＬ）中の（３Ｒ，Ｓ−ｃｉｓ）−６−ベンジルオキシカルボニルアミノ−５−オキソ−２，３，４，５，６，７，８−ヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピノ［３，２，１−ｈｉ］キノリン−３−カルボン酸，メチルエステル（０．６２２ｇ、１．５３ｍｍｏｌ）の溶液に、１Ｍ水性水酸化リチウム（２．３ｍＬ、２．３ｍｍｏｌ）を添加し、そして得られた混合物を窒素下室温で１時間撹拌した。反応混合物を５％硫酸水素カリウム水溶液を用いて約ｐＨ２まで酸性化し、次いで酢酸エチルと飽和塩化ナトリウム水溶液との間に分配した。水層を酢酸エチルで２度抽出し、そして合わせた有機層を乾燥（硫酸ナトリウム）させ、そしてエバポレートして表題の化合物を得た（０．６７０ｇ）。ＴＬＣ（塩化メチレン−メタノール−酢酸、３２：１：１）Ｒｆ＝０．３５。
【０３３６】
【化８１】
2005506346.tif 000057
３．（３Ｒ，Ｓ−ｃｉｓ）−６−ベンジルオキシカルボニルアミノ−５−オキソ−２，３，４，５，６，７，８−ヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピノ［３，２，１−ｈｉ］キノリン−３−カルボニル）−アミノ］−４−オキソ−ブタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルセミカルバゾン
塩化メチレン（１２ｍＬ）中の（３Ｒ，Ｓ−ｃｉｓ）−６−ベンジルオキシカルボニルアミノ−５−オキソ−２，３，４，５，６，７，８−ヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピノ［３，２，１−ｈｉ］キノリン−３−カルボン酸（０．６０４ｇ、１．５ｍｍｏｌ）の溶液に、窒素下０℃で撹拌しながら１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（０．２８２ｇ、１．８ｍｍｏｌ）および１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミドヒドロクロリド（０．４４２ｇ、３ｍｍｏｌ）を添加した。１５分後、Ｌ−アスパラギン酸セミカルバゾンβ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル、ｐ−トルエンスルホネート塩（０．６０ｇ、１．５ｍｍｏｌ）およびＮ−メチルモルホリン（０．２５ｍＬ、３ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を１時間以内に室温まで上昇させた。さらに１時間撹拌した後、反応混合物を酢酸エチルで希釈し、そして５％硫酸水素カリウムおよび飽和塩化ナトリウム溶液で連続的に洗浄し；乾燥（硫酸ナトリウム）し、そして乾燥するまでエバポレートした。シリカゲル（Ｓ／Ｐブランドシリカゲル６０A、２３０−４００メッシュＡＳＴＭ）上でのフラッシュクロマトグラフィー（１０％メタノール−塩化メチレンを用いて溶出する）により粗生成物を精製し、白色泡状物として０．５２３ｇの表題の化合物（５６％）を得た。ＴＬＣ（塩化メチレン−メタノール、９：１）Ｒｆ＝０．６５。
【０３３７】
【化８２】
2005506346.tif 000058
（実施例１０２）
【０３３８】
【化８３】
2005506346.tif 000059
（（３Ｒ，Ｓ−ｃｉｓ）−６−ベンジルオキシカルボニルアミノ−５−オキソ−２，３，４，５，６，７，８−ヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピノ［３，２，１−ｈｉ］キノリン−３−カルボニル）−アミノ］−４−オキソ−ブタン酸セミカルバゾン）
塩化メチレン（１ｍＬ）中の（３Ｒ，Ｓ−ｃｉｓ）−６−ベンジルオキシカルボニルアミノ−５−オキソ−２，３，４，５，６，７，８−ヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピノ［３，２，１−ｈｉ］キノリン−３−カルボニル）−アミノ］−４−オキソ−ブタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルセミカルバゾン（０．２００ｇ、０．３３ｍｍｏｌ）の溶液に、アニソール（０．５ｍＬ、４．６２ｍｍｏｌ）、次いでトリフルオロ酢酸（１ｍＬ）を添加した。窒素下室温で１．５時間撹拌した後、反応混合物を塩化メチレンで希釈し、そしてエバポレートし、次いで塩化メチレンで２度共沸させて表題の化合物（０．２４８ｇ）を得た。ＴＬＣ（塩化メチレン−メタノール−酢酸、８：１：１）Ｒｆ＝０．２。質量スペクトル：ｍ／ｚ  ５４９［Ｍ−Ｈ］−。
【０３３９】
（実施例１０３）
【０３４０】
【化８４】
2005506346.tif 000060
（（３Ｒ，Ｓ−ｃｉｓ）−６−ベンジルオキシカルボニルアミノ−５−オキソ−２，３，４，５，６，７，８−ヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピノ［３，２，１−ｈｉ］キノリン−３−カルボニル）−アミノ］−４−オキソ−ブタン酸）
（３Ｒ，Ｓ−ｃｉｓ）−６−ベンジルオキシカルボニルアミノ−５−オキソ−２，３，４，５，６，７，８−ヘキサヒドロ−１Ｈ−アゼピノ［３，２，１−ｈｉ］キノリン−３−カルボニル）−アミノ］−４−オキソ−ブタン酸セミカルバゾン（０．２４５ｇ、約０．３３ｍｍｏｌ）を、メタノール−酢酸−３７％ホルムアルデヒドの３：１：１溶液（３ｍｌ）で処理し、そして得られた混合物を窒素下で１．５時間撹拌した。反応混合物を水で希釈し、エバポレートしてメタノールを除去し、次いで残った混合物を凍結乾燥した。逆相ゲル（ＭＣＩゲル、ＣＨＰ−２０Ｐ、７５−１５０ミクロン）上でのフラッシュクロマトグラフィー（１０％〜８０％メタノール−水グラジエントを用いて溶出する）により粗生成物を精製し、凍結乾燥後、白色固体として０．０９０ｇの表題の化合物（６０％）を得た；ｍ．ｐ．１２０−１２３℃（分解）。ＴＬＣ（塩化メチレン−メタノール−酢酸、３２：１：１）Ｒｆ＝０．４５。
【０３４１】
【化８５】
2005506346.tif 000061
（実施例１０４）
【０３４２】
【化８６】
2005506346.tif 000062
（３｛（２Ｓ−ｃｉｓ）−［５−ベンジルオキシカルボニルアミノ−１，２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボニル）−アミノ］｝−５−フルオロ−４−ヒドロキシ−ペンタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル）
塩化メチレン（３ｍＬ）中の（２Ｓ−ｃｉｓ）−５−ベンジルオキシカルボニルアミノ−１，２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボン酸（０．３７３ｇ、０．９８ｍｍｏｌ）の溶液に、窒素下０℃で撹拌しながら１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（０．１５１ｇ、０．９８ｍｍｏｌ）および１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミドヒドロクロリド（０．２８３ｇ、１．４７ｍｍｏｌ）を添加した。１５分後、３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−フルオロペンタン酸，ｔｅｒｔ−ブチルエステル（０．２０４ｇ、０．９８ｍｍｏｌ、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔｅｒｓ  ３５，９６９３−９６９６頁（１９９４）に記載されるように調製される）を添加し、そして混合物を１時間以内に室温にした。一晩撹拌した後、反応混合物を酢酸エチルで希釈し、そして５％硫酸水素カリウムおよび飽和塩化ナトリウム溶液で連続的に洗浄し；乾燥（硫酸ナトリウム）し、そして乾燥するまでエバポレートした。シリカゲル（Ｓ／Ｐブランドシリカゲル６０A、２３０−４００メッシュＡＳＴＭ）上でのフラッシュクロマトグラフィー（２％メタノール−塩化メチレンを用いて溶出する）により粗生成物を精製し、白色泡状物として０．３８３ｇの表題の化合物（６８％）を得た。ＴＬＣ（塩化メチレン−メタノール、９：１）Ｒｆ＝０．６。
【０３４３】
【化８７】
2005506346.tif 000063
（実施例１０５）
【０３４４】
【化８８】
2005506346.tif 000064
（３｛（２Ｓ−ｃｉｓ）−［５−ベンジルオキシカルボニルアミノ−１，２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボニル）−アミノ］｝−５−フルオロ−４−オキソ−ペンタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル）
メチルスルホキシド（１．３ｍＬ）中の３｛（２Ｓ−ｃｉｓ）−［５−ベンジルオキシカルボニルアミノ−１，２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボニル）−アミノ］｝−５−フルオロ−４−ヒドロキシ−ペンタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（０．１１４ｇ、０．２０ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｄｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎ過ヨウ素化物（ｐｅｒｉｏｄｉｎａｎｅ）（０．２２８ｇ）を添加した。窒素下室温で２時間撹拌した後、さらなる部分のＤｅｓｓ−Ｍａｒｔｉｎ過ヨウ素化物（０．１３５ｇ）を添加し、次いで２．５時間後に第３の部分（０．１０ｇ）を添加した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、そして水および飽和塩化ナトリウム溶液で２度洗浄し；乾燥（硫酸ナトリウム）し、そして乾燥するまでエバポレートした。シリカゲル（Ｓ／Ｐブランドシリカゲル６０A、２３０−４００メッシュＡＳＴＭ）上でのフラッシュクロマトグラフィー（１／１酢酸エチル−ヘキサンを用いて溶出する）により粗生成物を精製し、白色泡状物として０．０７６ｇの表題の化合物（６７％）を得た。ＴＬＣ（酢酸エチル−ヘキサン、１：１）Ｒｆ＝０．６。
【０３４５】
【化８９】
2005506346.tif 000065
（実施例１０６）
【０３４６】
【化９０】
2005506346.tif 000066
（３｛（２Ｓ−ｃｉｓ）−［５−ベンジルオキシカルボニルアミノ−１，２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボニル）−アミノ］｝−５−フルオロ−４−オキソ−ペンタン酸）
塩化メチレン（１．０ｍＬ）中の３｛（２Ｓ−ｃｉｓ）−［５−ベンジルオキシカルボニルアミノ−１，２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボニル）−アミノ］｝−５−フルオロ−４−オキソ−ペンタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（０．０６３ｇ、０．１１１ｍｍｏｌ）の溶液に、アニソール（０．５ｍＬ）、次いでトリフルオロ酢酸（１．０ｍＬ）を添加した。窒素下室温で２時間撹拌した後、反応混合物を塩化メチレンで希釈し、そしてエバポレートし、次いで塩化メチレンで２度チェイスした。粗製残渣をエチルエーテルで粉末化して表題の生成物（０．０３０ｇ）を白色個体として得た；ｍ．ｐ．１０６−１０７℃（分解）。ＴＬＣ（塩化メチレン−メタノール−酢酸、３２：１：１）Ｒｆ＝０．３。
【０３４７】
【化９１】
2005506346.tif 000067
（実施例１０７）
【０３４８】
【化９２】
2005506346.tif 000068
（３｛（２Ｓ−ｃｉｓ）−［５−ベンジルオキシカルボニルアミノ−１，２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボニル］−アミノ｝−５−ブロモ−４−オキソ−ペンタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル）
塩化メチレン（５．５ｍＬ）中の（２Ｓ−ｃｉｓ）−５−ベンジルオキシカルボニルアミノ−１，２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボン酸（０．３０２ｇ、０．７９７ｍｍｏｌ）の溶液に、窒素下０℃で撹拌しながら１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（０．１４６ｇ、０．９６ｍｍｏｌ）および１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミドヒドロクロリド（０．２３０ｇ、１．２ｍｍｏｌ）を添加した。１５分後、アスパラギン酸、α−メチル，β−ｔｅｒｔ−ブチルジエステルヒドロクロリド（０．１９１ｇ、０．７９７ｍｍｏｌ）、次いでＮ−メチルモルホリン（０．１３ｍＬ、１．２ｍｍｏｌ）を添加し、そしてこの混合物を１時間以内に室温にした。一晩撹拌した後、反応混合物を酢酸エチルで希釈し、そして５％硫酸水素カリウムおよび飽和塩化ナトリウム溶液で連続的に洗浄し；乾燥（硫酸ナトリウム）し、そして乾燥するまでエバポレートした。シリカゲル（Ｓ／Ｐブランドシリカゲル６０A、２３０−４００メッシュＡＳＴＭ）上でのフラッシュクロマトグラフィー（酢酸エチル−ヘキサン（１：１）を用いて溶出する）により粗生成物を精製し、白色固体として０．３５０ｇのＮ−［（２Ｓ−ｃｉｓ）−［５−ベンジルオキシカルボニルアミノ−１，２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボニル］］アスパラギン酸，α−メチル，β−ｔｅｒｔ−ブチルジエステル（７８％）を得た。ＴＬＣ（塩化メチレン−メタノール、９：１）Ｒｆ＝０．８．ｍ．ｐ．１４７−１４８℃（分解）。
【０３４９】
【化９３】
2005506346.tif 000069
１，４−ジオキサン（４．５ｍＬ）および水（１．５ｍＬ）中の上記生成物（０．３３０ｇ、０．５８５ｍｍｏｌ）の溶液に、１Ｍ水性水酸化リチウム（０．７ｍＬ、０．７０２ｍｍｏｌ）を添加し、そして得られた混合物を窒素下室温で３０分間撹拌した。反応混合物を０．１Ｎ  ＨＣｌ溶液を用いて約ｐＨ３まで酸性化し、次いで酢酸エチルと飽和塩化ナトリウム溶液との間に分配した。水層を酢酸エチルで２度抽出し、そして合わせた有機層を乾燥（硫酸ナトリウム）させ、そしてエバポレートして、白色泡状物として０．２７５ｇ（８５％）のＮ−［（２Ｓ−ｃｉｓ）−［５−ベンジルオキシカルボニルアミノ−１，２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ｈｉ］インドール−２−カルボニル］］アスパラギン酸，β−ｔｅｒｔ−ブチルジエステルを得た。ＴＬＣ（塩化メチレン−メタノール−酢酸、９：１）Ｒｆ＝０．２５。
【０３５０】
【化９４】
2005506346.tif 000070
テトラヒドロフラン（３．０ｍＬ）中の上記生成物（０．２６２ｇ、０．４７５ｍｍｏｌ）の溶液に、窒素下−１０℃で撹拌しながら、Ｎ−メチルモルホリン（０．１１４ｍＬ、１．０５ｍｍｏｌ）を添加し、次いでイソブチルクロロホルメート（０．１０７ｍＬ、０．８１ｍｍｏｌ）を滴下した。４０分後、反応混合物をろ過し、この塩を乾燥ＴＨＦで洗浄し、そしてろ液を０℃に冷却した。これを新たに調製したジアゾメタン（過剰）のエーテルの（ｅｔｈｅｒｅａｌ）溶液で処理した。混合物を０℃で３０分間撹拌した後、臭化水素酸（４８重量％水溶液）／酢酸（１．３ｍＬ、１／１）の混合物を滴下した。さらに１０分間撹拌した後、反応混合物を酢酸エチルで希釈し、次いで飽和重炭酸ナトリウムおよび飽和塩化ナトリウム溶液で連続的に洗浄し；乾燥（硫酸ナトリウム）し、そして乾燥するまでエバポレートした。シリカゲル（Ｓ／Ｐブランドシリカゲル６０A、２３０−４００メッシュＡＳＴＭ）上でのフラッシュクロマトグラフィー（酢酸エチル−ヘキサン（１：１）を用いて溶出する）により粗生成物を精製し、白色泡状物として０．２００ｇの表題の化合物（６７％）を得た。ＴＬＣ（酢酸エチル−ヘキサン、１：１）Ｒｆ＝０．７。
【０３５１】
【化９５】
2005506346.tif 000071
（実施例１０８）
【０３５２】
【化９６】
2005506346.tif 000072
（３−［（２Ｓ−シス）−［５−ベンジルオキシカルボニルアミノ−１，２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ハイ（ｈｉ）］インドール−２−カルボニル］アミノ］−５−（ジフェニルホスフィニル）オキシ−４−オキソ−ペンタン酸、ｔｅｒｔ−ブチルエステル）
３−［（２Ｓ−シス）−［５−ベンジルオキシカルボニルアミノ−１，２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ハイ（ｈｉ）］インドール−２−カルボニル］アミノ］−５−ブロモ−４−オキソ−ペンタン酸、ｔｅｒｔ−ブチルエステル（０．０６９ｇ、０．１１０ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１．０ｍＬ）溶液に、フッ化カリウム（０．０２９ｇ、０．４９５ｍｍｏｌ）を添加し、続いてジフェニルホスフィン酸（０．０２９ｇ、０．１３９ｍｍｏｌ）を添加した。室温下において、窒素下で４８時間撹拌した後、反応混合物を酢酸エチルで希釈し、次いで重炭酸ナトリウム希薄溶液、次いで水で連続的に洗浄した。乾燥（硫酸ナトリウム）し、そしてエバポレートして乾燥させた。粗生成物を、シリカゲル（Ｓ／Ｐブランドシリカゲル６０A、２３０〜４００メッシュＡＳＴＭ）上のフラッシュクロマトグラフィー（酢酸エチル−ヘキサン（１：１）で溶離する）により精製し、０．０４８ｇ（５９％）の表題化合物を、透明なオイルとして得た。ＴＬＣ（酢酸エチル−ヘキサン、２：１）、Ｒｆ＝０．３。
【０３５３】
【化９７】
2005506346.tif 000073
（実施例１０９）
【０３５４】
【化９８】
2005506346.tif 000074
（３−［（２Ｓ−シス）−［５−ベンジルオキシカルボニルアミノ−１，２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ハイ（ｈｉ）］インドール−２−カルボニル］アミノ］−５−（ジフェニルホスフィニル）オキシ−４−オキソ−ペンタン酸）
３−［（２Ｓ−シス）−［５−ベンジルオキシカルボニルアミノ−１，２，３，４，５，６，７−ヘキサヒドロ−４−オキソアゼピノ［３，２，１−ハイ（ｈｉ）］インドール−２−カルボニル］アミノ］−５−（ジフェニルホスフィニル）オキシ−４−オキソ−ペンタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（０．０４０ｇ、０．０５４ｍｍｏｌ）塩化メチレン（１．０ｍＬ）溶液に、アニソール（０．５ｍＬ）を添加し、続いてトリフルオロ酢酸（１．０ｍＬ）を添加した。室温において窒素下で３０分撹拌した後、反応混合物を塩化メチレンで希釈し、そしてエバポレートし、次いで塩化メチレンと共に２回共沸させた。粗製残渣をエチルエーテルで粉末化（ｔｒｉｔｕｒａｔｅ）して、０．０３０ｇの表題化合物を、白色固体として得た。融点：１０９〜１１１℃（分解）。ＴＬＣ（塩化メチレン−メタノール、９：１）。Ｒｆ＝０．４。
【０３５５】
【化９９】
2005506346.tif 000075
（実施例１１０）
（ＩＣＥ／ＣＥＤ−３インヒビターの顆粒球好中球に対する影響の評価のための材料および方法）
好中球単離：
酸クエン酸デキストロース（ＡＣＤ）で抗凝血化された全血（１：５のＡＣＤ−血液比を有する）を回収した（約１００ｍｌ）。
【０３５６】
ポリプロピレンプラスチック容器を用いて、好中球を以下のように単離した：
３０ｍｌの全血を、６％デキストラン（生理食塩水中）を１５ｍｌ含む５０ｍｌポリプロピレン遠心分離管に添加する。血液を、約１時間、室温にて沈降させる。
【０３５７】
シリンダの頂部から収集した、濁った麦わら色の（ｓｔｒａｗ  ｃｏｌｏｒｅｄ）層を、５０ｍｌの円錐状ポリプロピレン管に入れる。血液細胞を、４℃にて、ブレーキを低速にして（ｂｒａｋｅ  ｏｎ  ｌｏｗ）２４０×ｇ（Ｓｏｒｖａｌｌ遠心分離（１２００ｒｐｍにて））で１２分間遠心分離して、ペレット化した。
【０３５８】
上清を吸引し、そしてプールしたペレットを、４０〜５０ｍｌの冷却したＰＢＳ（ｗ／ｏ、Ｃａ、Ｍｇ）中で再懸濁させ、そして２４０×ｇ（Ｓｏｒｖａｌｌ遠心分離（１２００ｒｐｍにて））で、４℃にて、ブレーキを高速にして（ｂｒａｋｅ  ｏｎ  ｈｉｇｈ）、６分間遠心分離した。
【０３５９】
上清を吸引し、そしてペレットを、１２ｍｌの冷却した細胞培養グレードの水中で再懸濁させた。懸濁物を、ピペットを用いて穏やかに３０秒間滴定し（ｔｉｔｒｉａｔｅ）、次いで４ｍｌの冷却した０．６Ｍ  ＫＣｌを添加した。（冷却したＰＢＳ（ｗ／ｏ、Ｃａ、Ｍｇ）を用いて５０ｍｌまで上げ、次いで、４℃にて、ブレーキを高速にして、３００×ｇで６分間遠心分離（Ｓｏｒｖａｌｌ遠心分離（１４００ｒｐｍにて））した。
【０３６０】
上記を１回繰り返した。
【０３６１】
上清を吸引し、そして細胞を、２．５ｍｌの冷却したＰＢＳ（ｗ／ｏ、Ｃａ、Ｍｇ）中に再懸濁させた。細胞懸濁物を、１５ｍｌのポリプロピレン円錐状管中で、３ｍｌのＦｉｃｏｌｌ−Ｈｙｐａｑｕｅ上に層形成（ｌａｙｅｒ）させ、４℃にて、ブレーキを低速にして、４００×ｇで３０分間遠心分離（Ｓｏｒｖａｌｌ遠心分離（１９００ｒｐｍにて））した。
【０３６２】
吸引された懸濁液を、沈降させて好中球ペレットにした。このペレットを、冷却したＰＢＳ（ｗ／ｏ、Ｃａ、Ｍｇ）中に再懸濁させ、そして５０ｍｌの円錐状管に移し、そして冷却したＰＢＳ（ｗ／ｏ、Ｃａ、Ｍｇ）を用いて５０ｍｌとし、そして、４℃にて、ブレーキを高速にして、３００×ｇで６分間遠心分離（Ｓｏｒｖａｌｌ遠心分離（１４００ｒｐｍにて））した。
【０３６３】
上清を吸引し、そしてペレットを冷却した５０ｍｌのＰＢＳ（ｗ／ｏ、Ｃａ、Ｍｇ）中に再懸濁させ、そして、４℃にて、ブレーキを高速にして、３００×ｇで６分間遠心分離（Ｓｏｒｖａｌｌ遠心分離（１４００ｒｐｍにて））した。
【０３６４】
上清を吸引し、そして好中球ペレットを、氷上で、４．０ｍｌの冷却したＰＢＳ（ｗ／ｏ、Ｃａ、Ｍｇ）中に再懸濁させた。１０μｌの好中球懸濁液を、９９０μｌのトリパンブルー（Ｔｒｙｐａｎ  ｂｌｕｅ）（１：１００）で希釈し、そして血球計を用いて細胞をカウントした。細胞の数および生存率を決定した。
【０３６５】
好中球培養条件：
培養培地は、以下の通りであった：（ＲＰＭＩ  １６４０；１０％ＦＢＳ；１０ｍＭ  Ｈｅｐｅｓ；０．２ｍＭ  Ｌ−グルタミン；２５Ｕ／ｍｌペニシリン；および２５ｍｇ／ｍｌストレプトマイシン）
精製した好中球の維持を、以下の条件下で実行した：（上記培養培地中、５×１０６細胞／ｍｌ；ポリスチレン丸底９６ウェルプレート；２５０μｌ／ウェル；および３７℃、５％ＣＯ２／９５％大気で加湿したインキュベーター）（Ｌｉｌｅｓら、Ｂｌｏｏｄ  １１９（１９９５）３１８１−３１８８）。
【０３６６】
フローサイトメトリーによる、低２倍体核（ｎｕｃｌｅｉ）の分析：
低浸透圧性蛍光色素溶液（５０μｇ／ｍｌプロピジウムヨージド（Ｓｉｇｍａ  ｃａｔａｌｏｇ番号Ｐ４１７０）；０．１％Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００；および０．１％クエン酸ナトリウム）。
【０３６７】
好中球を、４℃にてペレット化し、そして上清を吸引した。
【０３６８】
好中球を、５×１０６細胞／ｍｌの密度で、低浸透圧性蛍光色素溶液中に再懸濁させた。個々の核のプロピジウムヨージド蛍光を、ＦＬ２において評価し、そして前方および側方散乱における物理的パラメータをゲートオン（ｇａｔｅ  ｏｎ）しながら、対数スケールで測定し、細胞破片を排除した。
【０３６９】
サンプルあたり少なくとも１０，０００事象（ｅｖｅｎｔ）を回収し、そして結果を、非アポトーシス性好中球個体群に対して評価した。（Ｌｉｌｅｓら、Ｂｌｏｏｄ  １１９（１９９５）３１８１〜３１８８）。
【０３７０】
化学発光により測定された、単離された好中球におけるレスピレイトリーバースト
酸クエン酸デキストロース（ＡＣＤ）で抗凝血化した全血（ＡＣＤと血液の比１：５を有する）を回収した（１５０ｍｌ）。
【０３７１】
好中球を、上記の通り単離した。
【０３７２】
１２５ｍｇのザイモサン粒子を、２５ｍｌのプールしたヒト血清（５ｍｇ／ｍｌ）中に懸濁してオプソニン化したザイモサンを調製し、そしてこれを３７℃にて２０分間インキュベートした。この懸濁液を遠心分離し、そして粒子を７ｍｌ中のＰＢＳ（１８ｍｇ／ｍｌ）中に再懸濁させ、そして使用するまで氷上で貯蔵した（ピペッティングの前にボルテックスする）。
【０３７３】
Ｌｕｃｉｇｅｎｉｎ（分子量５１０．５）の２５０μＭ溶液５０ｍｌを、６．４ｍｇの固体を５０ｍｌのＰＢＳ−Ｇ（＋Ｃａ、Ｍｇ）に溶解させることにより調製した。１０μｌのＰＢＳ−Ｇ（＋Ｃａ、Ｍｇ）を、白色９６ウェルプレート中のウェルに入れた。
【０３７４】
Ｌｕｃｉｇｅｎｉｎの２５０μＭ溶液５０μｌを、白色９６ウェルプレート中のウェルに添加した。
【０３７５】
細胞調製物を、ＰＢＳ−Ｇ（＋Ｃａ、Ｍｇ）を用いて、細胞培養物（時間０における濃度＝５．０×１０６細胞／ｍｌ）から得た。
【０３７６】
２０μｌの好中球懸濁液を、適切なウェル中に懸濁させ、そしてプレートを、３７℃で３分間インキュベートした。１０μｌのオプソニン化ザイモサンを、ウェルに添加した。
【０３７７】
プレートを、動力学モードにおいて３７℃にて１４分間、照度計（Ｌａｂｓｙｓｔｅｍｓ  Ｌｕｍｉｎｏｓｋａｎ、Ｎｅｅｄｈａｍ  Ｈｅｉｇｈｔｓ、ＭＡ）上で読みとり、そして結果をソフトウェア（ＤｅｌｔａＳｏｆｔ）を用いて記録した。
【０３７８】
全血アッセイ：
以下の試薬を用いた：
抗−ＣＤ３２−ＦＩＴＣモノクローナル抗体（Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎより入手）
溶解溶液（１０×Ｓｔｏｃｋ：８９．９ｇ  ＮＨ４Ｃｌ；
１０．０ｇ  ＫＨＣＯ；
０．３７ｇ  ＥＤＴＡ四ナトリウム；
１リットルのｄＨ２Ｏ中に溶解する。ｐＨ７．３に調整する。密閉したボトル中で、４℃にて保存する。（使用の前に、ｄＨ２Ｏを用いて１：１０に希釈する。）
（カルシウムもマグネシウムも含まないＤＰＢＳは、Ｉｒｉｖｉｎｅ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃから入手した。ＤＰＢＳ中の２％ウシ胎仔血清を、４℃にて保存した。  ＤＰＢＳ中の５０μｇ／ｍｌプロピジウムヨージドを滅菌濾過し、そして４℃にて保存した。）
以下のプロトコルに従った：
２００μｌの血液サンプル／２．８ｍｌ  １Ｘ溶解溶液を、１５ｍｌのポリプロピレン円錐状管に入れる。キャップをして反転させ、混合する。室温で３〜５分間放置する。
【０３７９】
卓上Ｓｏｒｖａｌｌ（１２００ｒｐｍ）中で、４℃にて５分間遠心分離する。
【０３８０】
上清を吸引する。ペレットを、２００μｌ／サンプル２％ＦＢＳ／ＤＰＢＳ中で再懸濁させる。２０μｌ／サンプルに抗−ＣＤ３２−ＦＩＴＣを添加する。暗所にて、氷上で３０分間インキュベートする。
【０３８１】
５ｍｌ／サンプルＤＰＢＳを添加する。４℃にて５分間、１０００ｒｐｍで遠心分離する。
【０３８２】
上清を吸引する。ペレットを、１ｍｌ／サンプル２％ＦＢＳ／ＤＰＢＳ中に再懸濁させる。
【０３８３】
３ｍｌ／サンプルを、穏やかにボルテックスしながら氷冷９５％ＥｔＯＨに滴下する。
【０３８４】
サンプルを、暗所にて、氷上で３０分間インキュベートする。
【０３８５】
１０００ｒｐｍで、４℃にて５分間遠心分離する。
【０３８６】
各サンプルを、５０μｌの５ｍｇ／ｍｌ  ＲＮＡ分解酵素中に再懸濁させる。サンプルを、１２×７５ｍｍ  Ｆａｌｃｏｎポリスチレン管中の５０μｇ／ｍｌプロピジウムヨージドの９００μｌ／サンプルに移す。
【０３８７】
氷上で、３０分間インキュベートする。
【０３８８】
サンプルを、フローサイトメトリー（アルゴンレーザー）にて、前方および側方散乱ならびに蛍光について分析する。
【０３８９】
（実施例１１１）
（ＩＣＥ／ｃｅｄ−３インヒビターのエクソビボ適用による、好中球／顆粒球生存の増強）
本発明は、好中球／顆粒球のエクソビボ生存を増強するための方法を提供する。培地中で顆粒球を保存するための化合物の能力を確立するために、化合物を、多数のインビトロアッセイにおいて試験した。顆粒球の生存への影響を試験するための１つの一般的なモデルは、新鮮な全血から顆粒球を分離する工程、細胞を３７℃で培養する工程、および細胞を、核高２倍体性について２４時間間隔で試験する工程（実施例１１０に記載の通り）を包含する。高２倍体ＤＮＡの存在は、アポトーシスの指標であり、これはプロピジウムヨージド染色を用いて、フローサイトメトリーにより評価される。本発明の化合物を、培地中の顆粒球と共にインキュベートし、それらが顆粒球の生存に及ぼす影響を測定し、そしてＩＣ５０を計算した。図６において、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔｅｒ，３５  ９６９３−９６９６（１９９４）に記載の通りに調製されたカスパースインヒビター（ｃａｓｐａｓｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ）ｚＶＡＤｆｍｋは、４８時間における顆粒球の生存の改善への影響が弱いのに対し、本発明の実施例４３、７０、および１０６は、５μＭ未満のＩＣ５０を有するので、これらは顆粒球の死に対する強力なインヒビターである。
【０３９０】
レスピレイトリーバーストに耐える能力は、顆粒球の生存率の別の尺度である。レスピレイトリーバーストは、細菌などの外部刺激に対する顆粒球の生理学的応答である。この実施例において、レスピレイトリーバーストを誘発するための方法は、オプソニン化細菌性ザイモサンを利用した。レスピレイトリーバーストは、化学ルミネッセンスにより測定された。図７は、カスパースインヒビターｚＶＡＤｆｍｋ（これは、高２倍体性実験における顆粒球の生存率に対する影響が弱い）は、レスピレイトリーバーストを維持しなかったことを示している。対照的に、本発明の２つの例示的な化合物である実施例４３および７０は、レスピレイトリーバーストを実質的に４８時間維持し、そして顆粒球の培養後、レスピレイトリーバーストを７２時間、部分的に維持した。
【０３９１】
全血中の顆粒球の生存は、単離された顆粒球と同様の様式で、フローサイトメトリーによる高２倍体性分析により測定された。本発明のＩＣＥ／ｃｅｄ−３インヒビターは、以下の表に示すように、室温にて、顆粒球の生存を全血中で９６時間維持した：
【０３９２】
【化１００】
2005506346.tif 000076
従って、本発明は、単離された成熟顆粒球および全血中の成熟顆粒球の両方において、エクソビボでの生存を維持するための方法を提供する。本実施例の方法はまた、顆粒球の生存の維持において効果的なこれらのＩＣＥ／ｃｅｄ−３インヒビターを、効果的でないものから識別するための手段を提供する。
【０３９３】
（実施例１１２）
（ＩＣＥ／ｃｅｄ−３インヒビターの適用による、アフェレーシス産物の生存の増強）
顆粒球に富む細胞の個体群を得るために、血液ドナーのアフェレーシス（白血球搬出法）を実行し得る。次いで、これらの細胞を、さらなる顆粒球を必要とするレシピエントに輸血する。このアフェレーシスの産物の保存期間は短く、そして、現在の標準（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｂｌｏｏｄ  Ｂａｎｋｓ，Ｓｔａｎｄａｒｄ  ｆｏｒ  Ｂｌｏｏｄ  Ｂａｎｋｓ  ａｎｄ  Ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，Ｅｄ．１７，１９９６）では、２０〜２４℃にて２４時間を超えない間の保存が必要とされる。輸血は、可能であれば６時間以内に行うことが推奨されている。
【０３９４】
本発明において記載される例示的な化合物は、アフェレーシスの産物の貯蔵期間を延長するのに用いられ得る。実施例６４に示すように、ＩＣＥ／ｃｅｄ−３インヒビターは、単離された顆粒球および全血について、顆粒球の生存を延長するのに効果的である。アフェレーシスのセッティングにおける使用について、この化合物は、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）などの混和性溶媒中で処方され得る。この化合物は、バイアル中で貯蔵され得、そしてアフェレーシスバッグに予め添加され得るか、または回収プロセスの間にドナーのアフェレーシスラインに注入され得る。効果的な化合物の最終濃度は、１〜２５μＭの範囲内であり得る。次いで、ＩＣＥ／ｃｅｄ−３インヒビターを含む白血球搬出法産物を、貯蔵の後にレシピエントに注入する。多くの貯蔵条件が可能であり得、例えば、貯蔵は、室温にて、回収後１週間までであり得る。
【０３９５】
（実施例１１３）
（骨髄再構築／造血細胞の回収）
造血細胞の再構築の促進における有用性を示すために、化合物を、いくつかの動物モデルにおいて試験する。造血細胞を破壊するための１つの一般的なモデルには、マウスの致死照射または準致死照射を包含し、このモデルでは、動物をＸ線（通常、１３７セシウム源から発生する）に曝露する。準致死照射の場合、回復をモニタリングするために、照射後の異なる時間において、造血を測定するための種々の指標点を決定し得る。本発明の化合物を、準致死照射の後に動物に投与し、そしてそれらが回復に及ぼす影響を測定する。指標点には、以下が含まれ得る：ヘマトクリット値、白血球細胞数、トリチウム化チミジンの骨髄ＤＮＡへの取り込み、脾臓重量、脾臓あるいは上腕骨または大腿骨からの骨髄からの、バースト形成ユニット−赤血球（ｂｕｒｓｔ−ｆｏｒｍｉｎｇ  ｕｎｉｔ−ｅｒｙｔｈｒｏｉｄ）の数またはコロニー形成ユニット（赤血球、顆粒球／マクロファージおよび巨核球形成結合）の数。いくつかの場合には、カルボプラチン（ｃａｒｂｏｐｌａｔｉｎｕｍ）などの化学療法剤の注入により、動物をさらに骨髄抑制し得る。異なる機構により作用するとはいえ、これらのモデルにおいて効果的な化合物には、とりわけ、トロンボポエチン、Ｐｈｏｔｏｆｒｉｎ、ヘム、インターロイキン−１、およびテトラクロロデカオキシドが挙げられる。
【０３９６】
致死照射のモデルもまた、一般に動物を救助するための骨髄移植片を包含しているとはいえ、効果を試験するのに使用され得る。これらの実験は、しばしばマウスで行われるが、これに限定されない。次いで、上記と同様の指標点を用いて、同種移植片についての移植のための時間が測定され得る。造血細胞のヒト起点を最初に確立した後、ヒト前駆細胞の移植もまた、上記と同様の方法により、レシピエントとしてＳＣＩＤ−ｈｕマウスを用いて測定され得る。これらの場合、本発明の化合物は、骨髄移植の時点で、レシピエント動物に投与される。骨髄細胞はまた、移植の前に、ＩＣＥ／ＣＥＤ−３ファミリーのインヒビター化合物で処理され得る。
【０３９７】
（実施例１１４）
（移植）
心臓、肝臓、および腎臓を包含する多くの器官系について、多数の種類の移植の研究が実行されてきた。これらの研究の目的には、移植の前に組織の貯蔵を最適化する方法、および移植拒絶を最小化するための方法が包含される。本出願は、組織の貯蔵を最適化することに焦点を当てているが、移植片の機能を延長することおよび移植拒絶を最小化することへの適用もまた可能である。
【０３９８】
心臓を麻痺させるために設計された、心臓麻痺溶液（ｃａｒｄｉｏｐｌｅｇｉｃ  ｓｏｌｕｔｉｏｎ）を、心肺バイパスのためおよび移植のために用いる。これらの溶液の最も一般的なものは、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ溶液およびＳｔ．Ｔｈｏｍａｓ'  Ｈｏｓｐｉｔａｌ溶液である。移植の前に心臓を貯蔵し得る期間は、数時間に限られる。心臓の生存度を延長するために、これらの溶液への添加物を試験するために種々の実験的アプローチがなされている。心臓をドナー動物から取り出し、そして単離した調製物（一般に、Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆｆ調製物として公知である）中で機能を研究した（Ｇａｌｉｎａｎｅｓら、Ｊ．Ｔｈｏｒａｃｉｃ  ＆  Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ  Ｓｕｒｇｅｒｙ，１０４；１５１，１９９２）。心機能の低下は、貯蔵時間の関数として測定され得、そして測定されるパラメータには、心拍出量、左心室圧、収縮力、心拍数、および冠状動脈フロー（ｃｏｒｏｎａｒｙ  ｆｌｏｗ）が挙げられ得る。
【０３９９】
保存溶液の効果は、肝臓および腎臓移植についてもまた研究されてきた。この例では、器官は、通常、溶液中に所定の時間貯蔵され、次いでレシピエントに移植される。これらの研究の一般的な指標点は、生存の長さおよび移植片の組織学的検査である。肝臓移植については、移植片の機能は、血液中のアラニンおよびアスパラギン酸アミノトランスフェラーゼの濃度を測定することによっても評価され得る。腎臓移植については、移植片の機能は、尿素の血液濃度、血中尿素窒素（ＢＵＮ）、およびクレアチンキナーゼを測定することによって評価され得る。
【０４００】
上記のように、移植のための器官の適切な貯蔵は、器官の生存率を維持するために重要である。利用可能な器官が不足していることを仮定すれば、器官（特に、死体からの器官）が維持され得る時間の長さを延長することは、移植医学にとって非常に重要である。心臓は、単離および貯蔵の間に特に損傷を受けやすいようである。これらの条件を改良することは、移植に利用可能な生存心臓の数の増加をもたらし得る。改良された器官貯蔵溶液はまた、器官を、取り出す前に灌流する（これにより、おそらく器官の保護効果がさらに増強される）のに用いられ得る。本発明の方法は、ＩＣＥ／ＣＥＤ−３インヒビターを貯蔵溶液に添加することからなる、このような改善された方法を提供する。
【０４０１】
（実施例１１５）
（炎症および鎮痛モデル）
抗炎症性を試験するために受け入れ可能なモデルは、カラゲナン足浮腫試験である。Ｗｉｎｔｅｒら、Ｐｒｏｃ．Ｓｏｃ．Ｅｘｐ．Ｂｉｏｌ．Ｍｅｄ．１１１：５４４（１９６２）で記述されたものとほぼ同じ材料、試薬および手順を使って、実行した。各群にて、その平均体重ができるだけ近くなるように、雄性ＳＤラットを選択する。この試験の前に、ラットを、１６時間以上にわたって、水に自由にアクセスさせつつ、絶食させる。これらのラットに、試験化合物（１ｍＬ）（これは、０．５％メチルセルロースおよび０．０２５％界面活性剤を含有するビヒクル中にて、懸濁させた）またはビヒクルだけで、経口投薬する。１時間後、カラゲナン／無菌０．９％生理食塩水の１％溶液０．１ｍＬを足裏注射で投与し、そして変位プラチスモメーター（これは、デジタル指示器を備えた圧力変換器に連結されている）を使って、注射した足の容量を測定する。カラゲナンを注射して３時間後、足の容量を再度測定する。薬剤で処理した動物の群における平均した足の腫れを、偽薬で処理した動物の群のものと比較して、浮腫の阻害割合を決定する（Ｏｔｔｅｒｎｅｓｓ  ａｎｄ  Ｂｌｉｖｅｎ，Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍｏｄｅｌｓ  ｆｏｒ  Ｔｅｓｔｉｎｇ  ＮＳＡＩＤｓ，ｉｎ  Ｎｏｎ−Ｓｔｅｒｏｉｄａｌ  Ａｎｔｉ−  Ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  Ｄｒｕｇｓ，（Ｊ．Ｌｏｍｂａｒｄｉｎｏ著、１９８５））。
【０４０２】
Ｈａｒｇｒｅａｖｅｓ，ら、（Ｐａｉｎ  ３２：７７（１９８８））で基本的に記述された材料、試薬および手順を使って、ラットカラゲナンを使用する鎮痛試験を実行する。カラゲナン足底浮腫（ｔｈｅ  Ｃａｒｒａｇｅｅｎａｎ  Ｆｏｏｔ  Ｐａｄ  Ｅｄｅｍａ）試験について先に記述したようにして、オスＳＤラットを処理する。カラゲナンを注射した３時間後、これらのラットを、透明床を備えたプレキシガラス（これは、放射熱源として高強度ランプを有し、床に配置可能である）に入れる。最初の２０分後、注射した足または注射していない対側の足のいずれかで、熱刺激を開始した。足を引き出すことにより光が遮断されたとき、光電池がランプおよびタイマーを止めた。次いで、ラットがその足を引き出すまでの時間を測定する。対照群および薬剤処理群について、その引き出し潜伏期間（秒）を測定し、痛覚過敏の足引き出しの阻害割合を測定する。
【０４０３】
本発明を、上記で提供した実施例を参照して記載したが、本発明の精神から逸脱することなく種々の改変がなされ得ることが理解されるべきである。従って、本発明は、請求の範囲によってのみ限定される。
【図面の簡単な説明】
【０４０４】
【図１】図１は、ＩＣＥ酵素およびｈＣＰＰ３２酵素の活性を阻害する際の式Ａの化合物の活性を示す。
【図２】図２は、組換えＩＣＥ酵素、ｈＣＰＰ３２酵素、ＭＣＨ２酵素およびＭＣＨ５酵素に関する式Ｂの化合物の活性を図示している。
【図３】図３は、組換えＩＣＥ酵素、ＣＰＰ３２酵素、ＭＣＨ２酵素およびＭＣＨ５酵素に関する式Ｃの化合物の活性を図示している。
【図４】図４は、ＩＣＥ酵素、ＣＰＰ３２酵素、ＭＣＨ２酵素、ＭＣＨ３酵素およびＭＣＨ５酵素の活性を阻害する際の式Ｄの化合物の活性を示している。
【図５】図５は、ＩＣＥ酵素、ＣＰＰ３２酵素、ＭＣＨ２酵素およびＭＣＨ５酵素の活性を阻害する際の実施例１０６の活性を示している。
【図６】図６は、ＤＮＡ含量（低２倍体の％）で測定される好中球生存に対するＩＣＥ／ＣＥＤ−３インヒビターの効果を立証するＦＡＣＳ分析に由来の結果を示す。
【図７】図７は、生存好中球が酸化性の破裂を受ける性能により測定されるＩＣＥ／ＣＥＤ−３インヒビターまたは好中球生存の効果を示す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【国際公開パンフレット】
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【国際公開パンフレット（コレクトバージョン）】
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【国際調査報告】
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