(57)【要約】本発明は生物学的に活性な金属ペプチドのペプチド模倣体を誘導する方法に関する。このペプチド模倣体はその金属ペプチドの相当する鋳型空間上に重ね合わせることができる鋳型空間を定義する少なくとも1つの非ペプチド環状構造を含み、このペプチド模倣体はさらにアミノ酸残基、アミノ酸側鎖部分またはその誘導体を独立に含む少なくとも二つの要素を含み、それらの要素はその金属ペプチドの相当する要素に似た鋳型空間を定義し占める。本発明はさらに、5、6および8員環および5-5および5-6縮環型二環式構造のメラノコルチン受容体特異的ペプチド模倣体類を含む鋳型空間複素環環状構造を有するペプチド模倣体類に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の段階から成る、生物学的に活性な金属ペプチドのペプチド模倣体を誘導する方法：
(a) 金属ペプチドが金属イオンが配位する少なくとも1つのペプチド配列から成り、生物学的活性がその金属ペプチドの少なくとも2つの要素に関係し、それらの要素が独立にアミノ酸残基、アミノ酸側鎖部分またはその誘導体から成り、その金属イオンがそのペプチド配列中の少なくとも3つの原子と錯体を形成し、その少なくとも3つの原子がそのペプチド配列を構成する少なくとも2つのアミノ酸残基の部分であり、それによってそのような少なくとも3つの原子とその金属イオンは少なくとも1つの環から成る環状構造の1つの環を形成し、その環状構造のその少なくとも1つの環が、ある鋳型空間を定義するとき、生物学的に活性な金属ペプチドを選び、
(b) その生物学的に活性な金属ペプチドの環状構造の少なくとも1つの環によって定義される鋳型空間上に重ね合わせることができる非ペプチド環状構造をモデル化し、
(c) 少なくとも2つの要素が独立に、生物学的に活性な金属ペプチドの相当する要素に似たデスクリプタ空間を占めるとき、その非ペプチド環状構造に、アミノ酸残基、アミノ酸側鎖部分またはその誘導体からなる少なくとも2つの要素を加えることにより、あるペプチド模倣体を形成する。
【請求項２】
ペプチド模倣体の生物学的活性を生物学的に活性な金属ペプチドのそれと比較する段階をさらに含む、請求項1の方法。
【請求項３】
金属イオンが四座配位子金属イオンであり、金属イオンがペプチド配列内の4つの原子に配位する、請求項1の方法。
【請求項４】
少なくとも4つの原子がN3S1配位子から成る、請求項3の方法。
【請求項５】
少なくとも4つの原子がN2S2配位子から成る、請求項3の方法。
【請求項６】
金属イオンが錯体を形成する生物学的に活性な金属ペプチドの少なくとも2つのアミノ酸残基の少なくとも1つのアミノ酸残基がL-またはD-3-メルカプトアミノ酸である、請求項1の方法。
【請求項７】
L-またはD-3-メルカプトアミノ酸が、L-またはD-システイン、L-またはD-ペニシラミン、3-メルカプトフェニルアラニン、またはこれらの同族体のどれかである、請求項6の方法。
【請求項８】
金属イオンが、V、Mn、Fe、Co、Ni、Cu、Zn、Ga、As、Se、Y、Mo、Tc、Ru、Rh、Pd、Ag、Cd、In、Sn、W、Re、Os、Ir、Pt、Au、Hg、Tl、Pb、Bi、Po、At、Sm、EuまたはGdのうちの一つのイオンである、請求項1の方法。
【請求項９】
生物学的に活性な金属ペプチドが、目的の標的に結合する、請求項1の方法。
【請求項１０】
目的の標的が、受容体、抗体、毒素、酵素、ホルモン、核酸、生物学的に有効な細胞内タンパク質領域または生物学的に有効な細胞外タンパク質領域である、請求項9の方法。
【請求項１１】
金属ペプチドの鋳型が、生物学的に活性な金属ペプチドの環状構造から成るすべての環より少ない環で定義される、請求項1の方法。
【請求項１２】
生物学的に活性な金属ペプチドが、三環構造から成る、請求項1の方法。
【請求項１３】
鋳型空間が、三環構造の1つの環で定義される、請求項12の方法。
【請求項１４】
鋳型空間が、三環構造の2つの環で定義される、請求項12の方法。
【請求項１５】
生物学的に活性な金属ペプチドの環状構造が、5-5-5員、5-5-6員または6-5-5員環構造から成る、請求項1の方法。
【請求項１６】
少なくとも2つの要素と、生物学的に活性な金属ペプチドの定義された鋳型空間が、薬理原子団の少なくとも一部分を定義する、請求項1の方法。
【請求項１７】
生物学的に活性な金属ペプチドのアミノ酸残基またはアミノ酸側鎖部分に独立に由来する少なくとも二つの要素が、天然アミノ酸、合成アミノ酸、修飾アミノ酸、天然アミノ酸の側鎖、合成アミノ酸の側鎖、修飾アミノ酸の側鎖、天然、合成または修飾アミノ酸の側鎖の誘導体またはそれらのどれかの模倣物から成る、請求項1の方法。
【請求項１８】
生物学的に活性な金属ペプチドの定義された鋳型空間が、少なくとも金属イオンの配位形状によって定義される、請求項1の方法。
【請求項１９】
模倣体の生物学的活性を生物学的に活性な金属ペプチドのそれと比較することが、第三の化合物の生物学的活性との比較である、請求項2の方法。
【請求項２０】
模倣体の生物学的活性を生物学的に活性な金属ペプチドのそれと比較することが、請求項9の目的の標的との結合性をスクリーニングすることから成る、請求項2の方法。
【請求項２１】
スクリーニングが、目的の標的との結合性に関して、既知の結合パートナーとペプチド模倣体を競争させることから成る、請求項20の方法。
【請求項２２】
ペプチド模倣体の生物学的活性を生物学的に活性な金属ペプチドのそれと比較することが、機能測定から成る、請求項2の方法。
【請求項２３】
ペプチド模倣体の生物学的活性を生物学的に活性な金属ペプチドのそれと比較することが信号伝達可能な生物学的受容体から成り、比較がさらにペプチド模倣体が信号伝達を誘導するかどうかを判定することから成る、請求項2の方法。
【請求項２４】
ペプチド模倣体の生物学的活性を生物学的に活性な金属ペプチドのそれと比較することが信号伝達可能な生物学的受容体から成り、比較がさらにペプチド模倣体が結合パートナーの存在下で、信号伝達を誘導することが知られている目的の標的への信号伝達を阻害するかどうかを判定することから成る、請求項2の方法。
【請求項２５】
生物学的に活性な金属ペプチドが作用物質である、請求項1の方法。
【請求項２６】
生物学的に活性な金属ペプチドが拮抗物質である、請求項1の方法。
【請求項２７】
生物学的に活性な金属ペプチドが1以上のメラノコルチン受容体に特異的である、請求項1の方法。
【請求項２８】
生物学的に活性な金属ペプチドが1以上のアンジオテンシン受容体に特異的である、請求項1の方法。
【請求項２９】
生物学的に活性な金属ペプチドが1以上のバソブレシン受容体に特異的である、請求項1の方法。
【請求項３０】
生物学的に活性な金属ペプチドが1以上のオキシトシン受容体に特異的である、請求項1の方法。
【請求項３１】
非ペプチド環状構造が、5、6、7、または8員環、5-5、5-6、5-7、5-8、6-6、6-7、6-8、7-7、7-8、または8-8縮環型二環式環、または5-5-5、5-5-6または5-6-6縮環型三環式環である、請求項1の方法。
【請求項３２】
環状構造が二環または三環構造であり、その環状構造の少なくとも1つの環が生物学的に活性な金属ペプチドの環状構造の少なくとも1つの環で定義される鋳型上に重ね合わせることができる、請求項31の方法。
【請求項３３】
二つの隣接するCH基、隣接するNHおよびCH基または隣接するNH基が、二重結合を形成してよく、
X1が、(CH2)mまたはX3；
X2が、独立にCH2、CH、NHまたはN；
X3が、独立に(CH2)n、CH、NH、N、O、C=O、C=S、S、S=O、またはSO2；
R5が、H以外の要素；
R6が、アミノ酸側鎖部分またはその誘導体；
R7が、1以上のアミノ酸残基またはその誘導体類および末端基部分、またはアミノ酸側鎖部分またはその誘導体；
R7およびR6またはR5の少なくとも一つがそれぞれ、生物学的に活性な金属ペプチドの相当する要素に似たデスクリプタ空間を占める要素を構成し、
nが、0、1、2または3；そして
mが、0または1であるとき、
ペプチド模倣体が次式から成る、請求項1の方法：
【化１】
2005504043.tif 000394
【請求項３４】
請求項1の方法で作られるペプチド模倣体。
【請求項３５】
二つの隣接するCH基、隣接するNHおよびCH基または隣接するNH基が、二重結合を形成してよく、
X1が、(CH2)mまたはX3；
X2が、独立にCH2、CH、NHまたはN；
X3が、独立に(CH2)n、CH、NH、N、O、C=O、C=S、S、S=O、またはSO2；
R5が、H以外の要素；
R6が、アミノ酸側鎖部分またはその誘導体；
R7が、1以上のアミノ酸残基またはその誘導体類および末端基部分、またはアミノ酸側鎖部分またはその誘導体；
R7およびR6またはR5の少なくとも一つがそれぞれ、生物学的に活性な金属ペプチドの相当する要素に似たデスクリプタ空間を占める要素を構成し、
nが、0、1、2または3；そして
mが、0または1であるとき、
次式から成る請求項34のペプチド模倣体：
【化２】
2005504043.tif 000395
【請求項３６】
デスクリプタ空間がペプチド模倣体と同じ受容体に結合する金属ペプチドのアミノ酸側鎖部分またはその誘導体である相当する要素によって定義されるデスクリプタ空間に似たデスクリプタ空間を占めるとき、5、6、7、または8員環、5-5、5-6、5-7、5-8、6-6、6-7、6-8、7-7、7-8、または8-8縮環型二環式環、または5-5-5、5-5-6または5-6-6縮環型三環式環である環状構造を含む鋳型空間とその環状構造に共有結合でつながるアミノ酸側鎖部分またはその誘導体である要素を含む少なくとも2つのデスクリプタ空間から成るペプチド模倣体。
【請求項３７】
二つの隣接するCH基、隣接するNHおよびCH基または隣接するNH基が、二重結合を形成してよく、
X1が、(CH2)mまたはX3；
X2が、独立にCH2、CH、NHまたはN；
X3が、独立に(CH2)n、CH、NH、N、O、C=O、C=S、S、S=O、またはSO2；
R5が、H以外の要素；
R6が、アミノ酸側鎖部分またはその誘導体；
R7が、1以上のアミノ酸残基またはその誘導体類および末端基部分、またはアミノ酸側鎖部分またはその誘導体；
R7およびR6またはR5の少なくとも一つがそれぞれ、生物学的に活性な金属ペプチドの相当する要素に似たデスクリプタ空間を占める要素を構成し、
nが、0、1、2または3；そして
mが、0または1であるとき、
次式から成る請求項36のペプチド模倣体：
【化３】
2005504043.tif 000396
【請求項３８】
X1およびX2がアミノ酸側鎖またはその誘導体から成り、X3は環状構造から成るとき、構造X1-X2-X3から成るペプチド模倣体。
【請求項３９】
X2が、5、6、7、または8員環、5-5、5-6、5-7、5-8、6-6、6-7、6-8、7-7、7-8、または8-8縮環型二環式環、または5-5-5、5-5-6または5-6-6縮環型三環式環である、請求項38のペプチド模倣体。
【請求項４０】
X1とX3の選択およびX2から見たX1とX3の向きが生物学的に活性な金属ペプチドに由来する、請求項38のペプチド模倣体。
【請求項４１】
二つの隣接するCH基、隣接するNHおよびCH基または隣接するNH基が、二重結合を形成してよく、
X1が、(CH2)mまたはX3；
X2が、独立にCH2、CH、NHまたはN；
X3が、独立に(CH2)n、CH、NH、N、O、C=O、C=S、S、S=O、またはSO2；
R5が、H以外の要素；
R6が、アミノ酸側鎖部分またはその誘導体；
R7が、1以上のアミノ酸残基またはその誘導体類および末端基部分、またはアミノ酸側鎖部分またはその誘導体；
R7およびR6またはR5の少なくとも一つがそれぞれ、生物学的に活性な金属ペプチドの相当する要素に似たデスクリプタ空間を占める要素を構成し、
nが、0、1、2または3；そして
mが、0または1であるとき、
次式のペプチド模倣体：
【化４】
2005504043.tif 000397
【請求項４２】
ペプチド模倣体が生物学的に活性な金属ペプチドに由来する請求項41のペプチド模倣体。
【請求項４３】
R1が1以上のアミノ酸残基またはその誘導体または末端基またはアミノ酸側鎖部分またはその誘導体、R2がアミノ酸側鎖部分またはその誘導体、R3がH以外の部分、R4が末端基部分、1以上のアミノ酸残基、またはその誘導体、または末端基部分、またはアミノ酸側鎖部分またはその誘導体、Mが金属イオンであるとき、生物学的に活性な金属ペプチドが次式である請求項42のペプチド模倣体。
【化５】
2005504043.tif 000398
【請求項４４】
R7がR1に似たデスクリプタ空間を占め、少なくともR6がR5に似たデスクリプタ空間を占めるかR5がR3に似たデスクリプタ空間を占める、請求項43のペプチド模倣体。
【請求項４５】
R7がR1の機能的または構造的同族体で、少なくともR6がR2の機能的または構造的同族体であるかR5がR3の機能的または構造的同族体である、請求項43のペプチド模倣体。
【請求項４６】
1以上のメラノコルチン受容体に特異的な請求項41のペプチド模倣体。
【請求項４７】
1以上のバソプレシン受容体に特異的な請求項41のペプチド模倣体。
【請求項４８】
1以上のオキシトシン受容体に特異的な請求項41のペプチド模倣体。
【請求項４９】
1以上のメラノコルチン受容体に特異的な請求項41のペプチド模倣体。
【請求項５０】
作用物質である請求項46, 47, 48または49のペプチド模倣体。
【請求項５１】
拮抗物質である請求項46, 47, 48または49のペプチド模倣体。
【請求項５２】
以下の段階から成る、生物学的に活性な金属ペプチドのペプチド模倣体を誘導する方法：
(a) R1が少なくとも1つの天然または非天然のL-またはD-アミノ酸残基または末端または保護基、R2およびR3がアミノ酸側鎖部分またはその誘導体から独立に選ばれた同じまたは異なる基、R4が末端または保護基または1以上の天然または非天然のL-またはD-アミノ酸残基、Mが金属イオンであるとき、ある鋳型空間を定義する環状構造を有する次式の生物学的に活性な金属ペプチドを選び、
【化６】
2005504043.tif 000399
(b) 二つの隣接するCH基、隣接するNHおよびCH基または隣接するNH基が、二重結合を形成してよく、
X1が、(CH2)mまたはX3；
X2が、独立にCH2、CH、NHまたはN；
X3が、独立に(CH2)n、CH、NH、N、O、C=O、C=S、S、S=O、またはSO2；
R5が、H以外の要素；
R6が、アミノ酸側鎖部分またはその誘導体；
R7が、1以上のアミノ酸残基またはその誘導体類および末端基部分、またはアミノ酸側鎖部分またはその誘導体；
R7およびR6またはR5の少なくとも一つがそれぞれ、生物学的に活性な金属ペプチドの相当する要素に似たデスクリプタ空間を占める要素を構成し、
nが、0、1、2または3；そして
mが、0または1であるとき、
その生物学的に活性な金属ペプチドの環状構造の少なくとも1つの環によって定義される鋳型空間に重ね合わせることができる次式の非ペプチド環状構造を提供し、
【化７】
2005504043.tif 000400
(c) R5がH以外の部分、R6がアミノ酸側鎖部分またはその誘導体、R7が1以上のアミノ酸残基またはその誘導体または末端基部分、またはアミノ酸側鎖部分またはその誘導体、R7がR1に似たデスクリプタ空間を占め、少なくともR6がR2に似たデスクリプタ空間を占めるかR5がR3に似たデスクリプタ空間を占めるとき、その非ペプチド環状構造に、少なくとも3つの要素R5、R6、およびR7を加え、それによって次式の一つのペプチド模倣体を得る。
【化８】
2005504043.tif 000401
【請求項５３】
R7がR1の機能的または構造的同族体で、少なくともR6がR2の機能的または構造的同族体であるかR5がR3の機能的または構造的同族体である、請求項52の方法。
【請求項５４】
さらにペプチド模倣体の生物学的活性を、生物学的に活性な金属ペプチドのそれと比較する段階から成る請求項52の方法。
【請求項５５】
金属イオンが、V、Mn、Fe、Co、Ni、Cu、Zn、Ga、As、Se、Y、Mo、Tc、Ru、Rh、Pd、Ag、Cd、In、Sn、W、Re、Os、Ir、Pt、Au、Hg、Tl、Pb、Bi、Po、At、Sm、EuまたはGdのうちの一つのイオンである、請求項52の方法。
【請求項５６】
生物学的に活性な金属ペプチドが目的の標的に結合する請求項52の方法。
【請求項５７】
目的の標的が受容体、抗体、毒素、酵素、ホルモン、核酸、生物学的に有効な細胞内タンパク質領域または生物学的に有効な細胞外タンパク質領域である請求項56の方法。
【請求項５８】
ペプチド模倣体の生物学的活性を生物学的に活性な金属ペプチドのそれと比較することが請求項57の目的の標的との結合性に関してスクリーニングすることから成る請求項54の方法。
【請求項５９】
スクリーニングが目的の標的との結合性に関して、既知の結合パートナーとペプチド模倣体を競争させることから成る請求項58の方法。
【請求項６０】
ペプチド模倣体の生物学的活性を生物学的に活性な金属ペプチドのそれと比較することが機能測定から成る請求項54の方法。
【請求項６１】
ペプチド模倣体の生物学的活性を生物学的に活性な金属ペプチドのそれと比較することが信号を伝達できる生物学的受容体から成り、比較することがさらにペプチド模倣体が信号の伝達を誘導するかどうかを判定することから成る請求項54の方法。
【請求項６２】
ペプチド模倣体の生物学的活性を生物学的に活性な金属ペプチドのそれと比較することが信号を伝達できる生物学的受容体から成り、比較することがさらにペプチド模倣体が信号の伝達を誘導することが知られている目的の標的への結合パートナーの存在下で信号の伝達を阻害するかどうかを判定することから成る請求項54の方法。
【請求項６３】
ペプチド模倣体が1以上のメラノコルチン受容体、アンジオテンシン受容体、バソプレシン受容体、オキシトシン受容体に特異的である請求項52の方法。
【請求項６４】
二つの隣接するCH基、隣接するNHおよびCH基または隣接するNH基が、二重結合を形成してよく、
X1が、(CH2)mまたはX3；
X2が、独立にCH2、CH、NHまたはN；
X3が、独立に(CH2)n、CH、NH、N、O、C=O、C=S、S、S=O、またはSO2；
R5が、H以外の要素；
R6が、アミノ酸側鎖部分またはその誘導体；
R7が、1以上のアミノ酸残基またはその誘導体類および末端基部分、またはアミノ酸側鎖部分またはその誘導体；
R7およびR6またはR5の少なくとも一つがそれぞれ、生物学的に活性な金属ペプチドの相当する要素に似たデスクリプタ空間を占める要素を構成し、
nが、0、1、2または3；そして
mが、0または1であるとき、
次式のメラノコルチン受容体特異的ペプチド模倣体。
【化９】
2005504043.tif 000402
【請求項６５】
R4が、Phe、Phe(2-Cl)、Phe(4-Cl)、Phe(2,4-diCl)、Phe(3,4-diCl)、Phe(4-NO2)、Phe(4-Me)、Phe(4-Phenyl)、HPhe、Pgl、Trp、Nal 1、Nal 2、Bip、Dip、Bpa、Ser(Bzl)、Lys(Z)、Lyz(Z-2’Br)、Lyz(Bz)、Thr(Bzl)、Cys(Bzl)、Tyr(BzlCl2)、pF-Phe、Phe(4-Br)、Phe(4-CF3)、Phe(3,4-diF)、Phe(4-I)またはPhe(3,4-di-OMe)のL-またはD-体である請求項64のペプチド模倣体。
【請求項６６】
R5が、His、Ser(Bzl)、Tic、ヘプタノイル-Ser(Bzl)、ヘキサノイル-Ser(Bzl)、Hyp(bzl)、4-フェニルPro、5-フェニルPro、Tiq、Atc、Igl、Hyp(O-2-ナフチル)、Hyp(o-フェニル)、2-Aic、Idc、1-Aic、NH2(CH2)6CO-、ベンジル、b-ホモSer(Bzl)、Ser(O-2-ナフチル)、Ser(O-フェニル)、Ser(O-4-Cl--フェニル)、Ser(O-2-Cl--フェニル)、Thr(Bzl)、Tic、ヘプタノイル-Thr(Bzl)、ヘキサノイル-Thr(Bzl)、b-ホモThr(Bzl)、Thr(O-2-ナフチル)、Thr(O-フェニル)、Thr(O-4-Cl-フェニル)またはThr(O-2-Cl-フェニル) のL-またはD-体である請求項64のペプチド模倣体。
【請求項６７】
R1が、
【化１０】
2005504043.tif 000403
である請求項64のペプチド模倣体。
【請求項６８】
R2が、-(CH2)4NH2、-(CH2)3NHC(NH2)=NH、-(CH2)3NHCOCH3、-(CH2)3NHCOOCH3、-(CH2)2NHC(NH2)=NH、-(CH2)2NHCONH2、-(CH2)4NHCOH、-(CH2)4NHCOCH3、-(CH2)3NHCONHCH3、-(CH2)3NHSO2NH2、-(CH2)3NHSO2CH3、-(CH2)3NH2、-(CH2)2CONH2、-(CH2)3NH(C=NH)NHMe、-(CH2)3NH(C=NH)NHEt、-(CH2)3NH(C=NH)NHPr、-(CH2)3NH(C=NH)NHPr-i、-(CH2)3NH(C=NH)NH2、-(CH2)4NHCONH2、-(CH2)4NH(C=N)NH2、
【化１１】
2005504043.tif 000404
である請求項64のペプチド模倣体。
【請求項６９】
次式の請求項64のペプチド模倣体：
【化１２】
2005504043.tif 000405
【請求項７０】
次式の請求項64のペプチド模倣体：
【化１３】
2005504043.tif 000406
【請求項７１】
次式の請求項64のペプチド模倣体：
【化１４】
2005504043.tif 000407
【請求項７２】
次式の請求項64のペプチド模倣体：
【化１５】
2005504043.tif 000408
【請求項７３】
次式のメラノコルチン受容体特異的ペプチド模倣体：
【化１６】
2005504043.tif 000409
ここでR1が、
【化１７】
2005504043.tif 000410
R2が、-(CH2)4NH2または-(CH2)3NH(C=NH)NH2；そして
R3には、R5-R4-が含まれ、ここでR4はL-またはD-Phe、pF-Phe、Phe(4-Br)、Phe(4-CF3)、Phe(4-Cl)、Phe(2-Cl)、Phe(2,4-diCl)、Phe(3,4-diCl)、Phe(3,4-diF)、Phe(4-I)、Phe(3,4-OMe)、Phe(4-Me)またはPhe(4-NO2)で、R5は存在しないかL-またはD-His、Ser(Bzl)、Tic、ヘプタノイルSer(Bzl)、Hyp(Bzl)、4-フェニルPro、Tiq、Atc、Igl、Hyp(O-2-ナフチル)、Hyp(O-フェニル)、2-Aic、Idc、1-Aic、NH2(CH2)6C-、ベンジル、b-ホモSer(Bzl)、Ser(O-2-ナフチル)、Ser(O-フェニル)、Ser(O-4-Cl-フェニル)またはSer(O-2-Cl-フェニル)である。
【請求項７４】
次式のメラノコルチン受容体特異的ペプチド模倣体：
【化１８】
2005504043.tif 000411
ここで、R1が
【化１９】
2005504043.tif 000412
R2が、-(CH2)4NH2、-(CH2)3NHC(NH2)=NH、-(CH2)3NHCOCH3、-(CH2)3NHCOOCH3、-(CH2)2NHC(NH2)=NH、-(CH2)2NHCONH2、-(CH2)4NHCOH、-(CH2)4NHCOCH3、-(CH2)3NHCONHCH3、-(CH2)3NHSO2NH2、-(CH2)3NHSO2CH3、-(CH2)3NH2、-(CH2)2CONH2、-(CH2)3NH(C=NH)NHMe、-(CH2)3NH(C=NH)NHEt、-(CH2)3NH(C=NH)NHPr、-(CH2)3NH(C=NH)NHPr-i、-(CH2)3NH(C=NH)NH2、-(CH2)4NHCONH2、
【化２０】
2005504043.tif 000413
R3にR5-R4-が含まれ、R4がL-またはD-Phe、pF-Phe、Phe(4-Br)、Phe(4-CF3)、Phe(4-Cl)、Phe(2-Cl)、Phe(2,4-diCl)、Phe(3,4-diCl)、Phe(3,4-diF)、Phe(4-I)、Phe(3,4-OMe)、Phe(4-Me)またはPhe(4-NO2)で、R5は存在しないかL-またはD-His、Ser(Bzl)、Tic、ヘプタノイルSer(Bzl)、Hyp(Bzl)、4-フェニルPro、Tiq、Atc、Igl、Hyp(O-2-ナフチル)、Hyp(O-フェニル)、2-Aic、Idc、1-Aic、NH2(CH2)6C-、ベンジル、b-ホモSer(Bzl)、Ser(O-2-ナフチル)、Ser(O-フェニル)、Ser(O-4-Cl-フェニル)またはSer(O-2-Cl-フェニル)である。
【請求項７５】
目的の標的と結合するペプチド模倣体を誘導する、以下の段階から成る方法：
(a) nが少なくとも4であるとき、残基数nの既知の一次構造を有し、目的の標的に結合する既知のアミノ酸配列を選び；
(b) 既知の一次構造中の連続する残基群の中から少なくとも二つの連続する残基を選び、その少なくとも二つの連続する残基の二つのカルボキシ末端に、金属イオン錯体形成のためのNおよびSの両方を提供する残基を挿入するか、または既知の一次構造中の連続する残基群の中から少なくとも三つの連続する残基を選び、その少なくとも三つの連続する残基のいずれかの三つのカルボキシ末端を、金属イオン錯体形成のためのNおよびSの両方を提供する残基で置き換え、そのような各配列はライブラリー番号を構成し、各ライブラリー番号は少なくとも一つの残基または金属イオン錯体形成のためのNとSの両方を提供する残基の挿入またはそれによる置き換えの場所が異なるアミノ酸配列のライブラリーを設計し；
(c) 設計したアミノ酸配列のそのライブラリーを構築し；
(d) 金属イオンが、そのペプチド配列中の少なくとも三つの原子と錯体を形成し、そのような、少なくとも三つの原子はペプチド配列を構成する少なくとも二つのアミノ酸残基の部分であり、それによってそのような少なくとも三つの原子とその金属イオンが、少なくとも一つの環から成る環状構造を形成し、その環状構造の少なくとも一つの環が、ある鋳型空間を定義するとき、設計したアミノ酸配列の各ライブライー構成物を金属イオンと錯体形成させ、それによって金属ペプチドのライブラリーを形成し、
(e) 目的の標的への結合性に関して金属ペプチドの、そのライブラリーをスクリーニングし、
(f) 目的の標的への結合性を示す金属ペプチドを選び、
(g) 選んだ金属ペプチドの環状構造の少なくとも一つの環によって定義される鋳型空間上に重ね合わせることができる非ペプチド環状構造をモデル化し、そして
(h) その非ペプチド環状構造に、独立に、アミノ酸残基、アミノ酸側鎖部分またはその誘導体からなる少なくとも二つの要素を加えることによってペプチド模倣体を形成し、そのような少なくとも二つの要素は、その選ばれた金属ペプチドに相当する要素に似たデスクリプタ空間を占める。
【請求項７６】
さらにペプチド模倣体の生物学的活性を、選んだ金属ペプチドのそれと比較することから成る、請求項75の方法。
【請求項７７】
さらにペプチド模倣体の生物学的活性を、既知のアミノ酸配列のそれと比較することから成る、請求項75の方法。
【請求項７８】
残基数nの既知の一次構造を有する既知のアミノ酸配列がペプチド、ポリペプチドまたはタンパク質である請求項75の方法。
【請求項７９】
金属イオンの配位のためにNとSの両方を提供する残基がアミノ酸配列のカルボキシル末端残基であり、設計したアミノ酸配列のライブラリーが少なくとも1つの構成物から成る請求項75の方法。
【請求項８０】
金属イオンの配位のためにNとSの両方を提供する残基がアミノ酸配列のカルボキシル末端残基ではなく、設計したアミノ酸配列のライブラリーが少なくとも1つの構成物から成る請求項75の方法。
【請求項８１】
金属イオンの配位のためにNとSの両方を提供する残基が既知の一次構造の一列の連続する残基に隣接する連続する2つの残基の間に挿入され、設計したアミノ酸配列のライブラリーが少なくとも4つの残基を有する1つの構成物から成る請求項75の方法。
【請求項８２】
金属イオンの配位のためにNとSの両方を提供する残基がL-またはD-メルカプトアミノ酸である請求項75の方法。
【請求項８３】
L-またはD-メルカプトアミノ酸がL-またはD-システイン、L-またはD-ペニシラミン、3-メルカプトフェニルアラニン、またはそれらのどれかの同族体である請求項82の方法。
【請求項８４】
金属イオンが、V、Mn、Fe、Co、Ni、Cu、Zn、Ga、As、Se、Y、Mo、Tc、Ru、Rh、Pd、Ag、Cd、In、Sn、W、Re、Os、Ir、Pt、Au、Hg、Tl、Pb、Bi、Po、At、Sm、EuまたはGdのうちの一つのイオンである、請求項75の方法。
【請求項８５】
目的の標的が受容体、抗体、毒素、酵素、ホルモン、核酸、生物学的に有効な細胞内タンパク質領域または生物学的に有効な細胞外タンパク質領域である請求項75の方法。
【請求項８６】
目的の標的との結合性をスクリーニングすることが目的の標的との結合性に関する既知の結合パートナーと金属ペプチドのライブラリーの構成物を競争させることから成る請求項75の方法。
【請求項８７】
既知の結合パートナーが残基数nの既知の一次構造を有する既知のアミノ酸配列である請求項86の方法。
【請求項８８】
金属イオンの配位のためにNとSの両方を提供する挿入された残基以外のアミノ酸配列のライブラリー中のいずれかのシステイン残基をフリーのスルフヒドリル基を含まない同族体で置換する請求項75の方法。
【請求項８９】
システインをグリシン、アラニン、セリン、アミノイソ酪酸またはデヒドロアラニン残基で置換する請求項88の方法。
【請求項９０】
システインをS-保護システインで置換する請求項88の方法。
【請求項９１】
システインを分子量約150未満のアミノ酸の中性の模倣体で置換する請求項88の方法。
【請求項９２】
アミノ酸配列のライブラリーをペプチド合成の化学的方法で構築する請求項75の方法。
【請求項９３】
いずれかのライブラリー構成物中のNとSの両方を提供する残基のアミノ末端側に隣接する2つの残基中のいずれかのプロリンを金属イオン配位のためのNを提供する残基で置換する請求項75の方法。
【請求項９４】
プロリンをグリシン、アラニン、セリン、アミノイソ酪酸またはデヒドロアラニン残基で置換する請求項93の方法。
【請求項９５】
プロリンを分子量約150未満で金属イオン配位のためのNを提供するアミノ酸の中性の模倣体で置換する請求項93の方法。
【請求項９６】
もしnが少なくとも約15であれば、その一次構造を少なくとも3つに分けた一次構造に分割し、分割された各一次構造が少なくとも2つの残基によって隣接する分割された各一次構造と重なり、その後、それぞれの二次の親ペプチドに関して段階(b)から(f)を実施する請求項75の方法。
【請求項９７】
少なくとも2つの選んだ連続する残基の少なくとも1つの残基が既知の一次構造の一連の連続する残基中の相当する残基の同族体である請求項75の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、目的の標的に結合し、作用物質、拮抗物質またはそれらの混合物であるペプチド模倣体類、特に、1以上のメラノコルチン受容体類に特異的なペプチド模倣体類を含む生物学的に活性な金属ペプチド類に由来するペプチド模倣体類に関する。
関連出願への相互参照
本出願は、2001年8月10日に出願された、「生物学的に活性な金属ペプチド類に由来する受容体特異的ペプチド類」と題され且つ出典を明記することによりその開示内容を本願明細書に援用する米国仮出願番号60/311,404の出願の利益を主張するものである。
【背景技術】
【０００２】
以下の議論は、著者（ら）による多数の出版物および出版年に言及していること、および最新の出版日から考えて、いくつかの出版物は、本発明の従来技術と考えるべきではない。そのような出版物の議論は、より完全な背景として与えられており、そのような出版物が、特許化可能性の決定過程に関して従来技術であると解釈すべきではない。
【０００３】
金属ペプチド類    特異的金属ペプトド類および特異的金属ペプチド類を作り使用する方法は、2002年2月13日に出願された「性的不能の治療のためのメラノコルチン金属ペプチド類」と題する国際出願PCT/US02/04431号、2001年12月19日に出願された「ペプチド類およびタンパク質類の標的特異的折り畳み部位の同定」と題する国際出願PCT/US01/50075号、2000年6月14日に出願された「メラノコルチン金属ペプチド構造類、コンビナトリアル・ライブラリー類および応用」と題する国際出願PCT/US00/16396号、1999年12月14日に出願された「金属ペプチドのコンビナトリアル・ライブラリー類および応用」と題する国際出願PCT/US99/29743号、2000年2月22日に発行された「構造が決定された金属構造類および応用」と題する米国特許6,027,711号、2001年12月18日に発行された「構造が決定された環状金属構造物および応用」と題する米国特許6,331,285号、1999年4月6日に出版された「ペプチド−金属イオン医薬構造物類および応用」と題する米国特許5,891,418号の中に一般論として開示されており、それぞれの明細書は、本明細書に引用文献として記載されている。要するに、前記の特許および応用には、回転構造物の模倣体であり、目的の受容体に結合し、作用物質、拮抗物質、またはそれらの混合物である金属ペプチドの組成や金属ペプチド類を作り使う方法が記載されている。一つの単純化された具体化では、アミノ酸配列は、レニウム(Re)のような四座配位子金属に対するN3S1配位子を提供する。トリペプチド金属イオン結合配列は、LまたはD配置をとるアミノ酸を含みうるが、さらに修飾されたまたは非天然の側鎖を有してもよい。これらの金属ペプチド類は、片方または両方の末端に、1以上のアミノ酸残基、模倣体または他の構造および末端または保護基を含みうる。このような金属ペプチドは、R1およびR4が同じまたは異なり、末端または保護基から独立に選ばれ、または1以上の天然または非天然のLまたはDアミノ酸残基であり；R2およびR3が、同じまたは異なる、アミノ酸側鎖部分またはその誘導体から独立に選ばれ；Mが、Reのような金属イオンであるとき、次のような一般構造を有する：
【０００４】
【化１】
2005504043.tif 000002
直鎖のペプチド類は回転の自由度が高く、既知の一次構造を有する小さなペプチドでさえ、理論的に可能な二次および三次構造は、おそらく数百万になることが知られている。一般に、環状ペプチド類はもっと束縛されており、少なくとも小さい環状ペプチド類は、理論的には、はるかに少ない二次および三次構造を有する。しかし、環状ペプチド類でさえ、そのようなペプチドに存在する実際の二次構造を正確に予測することは不可能であることが少なくない。対照的に、上記の金属ペプチド類は、よく記述された、制限された二次構造を有しており、金属イオン錯体形成に関わる残基が、その金属イオンの周りの回転構造を形成する。金属イオンの配位球の一部を構成する原子は、その金属イオンの配位形状によって固定される。このことは、残基間のペプチド結合および側鎖の結合と関係して、少なくとも金属イオン錯体形成に関わる残基に関して、コンフォーメーションが固定され予測可能な二次構造を作り出す。
【０００５】
ペプチドおよびタンパク質の折り畳み    機能的に三次元構造として特徴付けることができるタンパク質類やペプチド類の生物学的に有効な構造の決定は、生物学、生化学および薬理学において難しい問題である。種々の方法のいずれかを使うことにより、有効なペプチド類またはタンパク質類の一次構造が確認されよう。すなわち、ペプチドまたはタンパク質を構成するアミノ酸残基の配列が既知であり、そのペプチドまたはタンパク質が、目的の標的分子または受容体に結合すること、目的の生物学的活性を介在すること、等の目的の生物学的効果を有することが知られている。しかし、配位子を形成し、それによって目的の生物学的効果を上昇させるペプチドまたはタンパク質の部分の三次元構造および配列の両方とも知られていない。
【０００６】
高い回転自由度を有する各アミノ酸残基のアミノ基およびカルボキシル基の結合の大部分のために、ペプチド類およびタンパク質類は非常にフレキシブルである。また、各アミノ酸残基の側鎖のいくつかの結合もまた回転の自由度を有する。アミノ酸残基間の非結合性立体的相互作用は、ペプチドまたはタンパク質が、その自由度に従い、いくつかの安定な最小自由エネルギー配置になるように強制する。「二次構造」としても知られる局所的構造は、ペプチド類およびタンパク質類に共通である。これらの構造には、αへリックス、b折れ曲がり、シート、拡張鎖、ループなどが含まれ、ペプチド類やタンパク質類の結合や受容体の特異性に、最もしばしば貢献する。
【０００７】
実際の回転のアミノ酸残基内のねじれ角において、また分子内および分子間水素結合の型によって異なる、いくつかの型のαへリックスが知られている。2平面を持つねじれ角ψ（Ｃa-C結合について）またはf（Ｃa-N結合について）または両方が異なる多数の既知の種々のβ折れ曲がりもまた存在する。
【０００８】
X線結晶解析やNMRのような実験手法を用いて、場合によっては、ホモロジーモデリングのようなタンパク質構造決定方法を組み合わせた、構造に基づく薬理原子団の一般化が、本技術では知られている。しかし、この手法を使うためには、その薬理原子団を定義する受容体に特異的な配置にある配位子から適当なデータを得ることができなければならない。これは、多くの場合、実行可能ではない。
【０００９】
本技術では、種々の回転構造の多数の模倣体が知られている。例えば、「タンパク質加工性因子相互作用の阻害剤を設計するための、構造に基づく方法」と題するのWO00/68185は、あるタンパク質のらせん部分を模倣するペプチド模倣体類を開示している。「生物学的に活性なペプチド類またはタンパク質類の阻害剤としてのβシート模倣体類およびその利用」という米国特許6,245,764号はあるbシート模倣体、特にセリンプロテアーゼ阻害剤模倣体類を開示している。両方とも「逆ペプチド模倣体類およびそれらに関する方法」と題する同じ出願者による二つの公開特許出願、米国出願2002/0022620 A1および2002/0065416 A1は、それぞれ、細胞接着関連疾患でのおよび抗炎症剤としての使用のための特異的な化合物類を開示している。しかし、これらの特許や出願のどれも、金属ペプチド類のような特定の最初の化合物類に対するペプチド模倣体類の式や三次元配置を決定する方法を開示するものではない。
【００１０】
メラノコルチン受容体類    正常なヒトのメラニン細胞や黒色腫細胞で発現するメラノコルチン-1受容体(MC1-R)、副腎の細胞で発現するACTH（アドレノコルチコトロピン）のためのメラノコルチン-2受容体(MC2-R)、視床下部、中脳および脳幹の細胞で主として発現するメラノコルチン-3およびメラノコルチン-4受容体(MC3-RおよびMC4-R)、および広範囲の末梢組織で発現するメラノコルチン-5受容体(MC5-R)のようなメラノコルチン受容体の型や亜型のファミリーが同定されてきた。
【００１１】
一般に、MC1-Rに特異的な化合物類は、放射線治療用または薬剤送達剤として、また、特に診断用放射性同位体で標識された時の診断用造影剤としての使用のような黒色腫の治療に役に立つと信じられている。MC3-R、MC4-RまたはMC5-Rに特異的な化合物類は、食物摂取や体重増加を抑えるための使用を含むエネルギー恒常性の調節に、体重増加支援することで拒食症の治療のため、肥満の治療のため、そして他の食物摂取や代謝関連目的での他の治療のために役に立つと信じられている。他のメラノコルチン受容体類のうちで、MC3-RとMC4-Rに特異的な化合物類は、男性の勃起不全を含む、性的不能の治療のための薬剤として使用できる。他のメラノコルチン受容体類のうちで、MC3-RとMC4-Rに特異的な化合物類は、血圧、脈拍や他の神経生理学的パラメータ類を調節するために使用できる。MCR-1作用物質のような、他のメラノコルチン受容体特異的化合物類は、メラニン生産を増やすためのタンニング剤として使用できる。MCR-1やMCR-3に特異的な化合物類は、炎症過程を調節するために使用できよう。
【００１２】
離散メラノコルチン受容体類に非常に特異的な化合物類やメラノコルチン受容体類に特異的な作用物質や拮抗物質である化合物類に対してかなりの需要がある。メラノコルチン受容体に対する高親和性化合物類は、作用物質や拮抗物質として、メラノコルチン受容体類に関連する種々の生理学的応答を開発するために使用できる。また、メラノコルチン受容体類は種々のサイトカイン類の活性に影響を及ぼし、メラノコルチン受容体類に非常に高い親和性を有する化合物類はサイトカイン活性を調節するために使用できる。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１３】
一つの具体例では、本発明は、生物学的に活性な金属ペプチド類のペプチド模倣体を誘導する方法を提供する。本方法の実施においては、生物学的に活性なある金属ペプチドが選ばれる。その金属ペプチドは、錯体を形成するある金属を有する少なくとも一つのペプチド配列を有し、その生物学的活性は、そのような金属ペプチドの少なくとも二つの要素に関係し、その少なくとも二つの要素は、独立に、アミノ酸残基、アミノ酸側鎖部分またはその誘導体から成り、その金属イオンは、ペプチド配列の少なくとも三つの原子と錯体を形成し、その少なくとも三つの原子は、ペプチド配列から成る少なくとも二つのアミノ酸残基から成り、それによって、その少なくとも三つの原子と金属イオンは少なくとも一つの環から成る環状構造を形成し、その環状構造の少なくとも一つの環は鋳型空間を定義する。次に、その生物学的に活性な金属ペプチドの環状構造の少なくとも一つの環によって定義される鋳型空間上に重ねることができる非ペプチド環状構造をモデル化し、あるペプチド模倣体を、独立に、アミノ酸残基、アミノ酸側鎖部分またはその誘導体を含む少なくとも二つの要素を、その非ペプチド環状構造に加えることによって形成する。ここでその少なくとも二つの要素は、その生物学的に活性な金属ペプチドの相当する要素に似たあるデスクリプタ空間を占める。
【課題を解決するための手段】
【００１４】
本方法の実施においては、ペプチド模倣体の生物学的活性を、生物学的に活性な金属ペプチドの生物学的活性と比較することができる。ペプチド模倣体の生物学的活性と、生物学的に活性な金属ペプチドの生物学的活性との比較は、第三の化合物の生物学的活性との比較や目的の定義された標的への結合性のスクリーニングを含みる。スクリーニングには、目的の標的への結合に関する既知の結合パートナーをペプチド模倣体と競争させることが含まれうる。使用するアッセイには、シグナルを伝達できる生物学的受容体を用いることなどによって、ペプチド模倣体の生物学的活性を生物学的に活性な金属ペプチドの生物学的活性と比較し、そのペプチド模倣体がシグナル伝達を誘導するか阻害するかを判定することを含む機能的アッセイが含まれる。その生物学的に活性な金属ペプチドは作用物質または拮抗物質でよい。代表例には、1以上のメラノコルチン、アンジオテンシン、バソプレシンまたはオキシトシン受容体に特異的な生物学的に活性な金属ペプチドが含まれる。
【００１５】
金属ペプチド類には、金属イオンが4配位子金属イオンで、その金属イオンがそのペプチド配列の四つの原子と錯体を形成している組成物が含まれる。一つの具体例では、少なくとも四つの原子がN3S1配位子を構成する。もう一つの具体例では、少なくとも四つの原子がN2S2配位子を構成する。ある好ましい具体例では、金属イオンが錯体を形成する生物学的に活性な金属ペプチドの少なくとも二つのアミノ酸残基の少なくとも一つのアミノ酸残基が、あるL-またはD-3-メルカプトアミノ酸である。そのようなL-またはD-3-メルカプトアミノ酸には、L-またはD-システイン、L-またはD-ペニシラミン、3-メルカプトフェニルアラニン、または前記のもののいずれかの同族体が含まれる。その金属イオンは、V、Mn、Fe、Co、Ni、Cu、Zn、Ga、As、Se、Y、Mo、Tc、Ru、Rh、Pd、Ag、Cd、In、Sn、W、Re、Os、Ir、Pt、Au、Hg、Tl、Pb、Bi、Po、At、Sm、EuまたはGdのうちの一つのイオンでよい。
【００１６】
ある好ましい具体例では、生物学的に活性な金属ペプチドは、目的の標的に結合する。目的のこの標的は、受容体、抗体、毒素、酵素、ホルモン、核酸、生物学的に有効な細胞内タンパク質領域または生物学的に有効な細胞外タンパク質領域でよい。
【００１７】
金属ペプチドの鋳型空間は、生物学的に活性な金属ペプチドの環状構造から成るすべての環より少ない環で定義されうる。これには、生物学的に活性な金属ペプチドの環状構造が3環構造である具体例が含まれる。この場合には、その鋳型空間は、3環構造の一つの環または3環構造の二つの環で定義されてよい。生物学的に活性な金属ペプチドの定義された鋳型空間は、少なくとも部分的に、金属イオンの配位形態によって定義される。
この方法では、生物学的に活性な金属ペプチドのアミノ酸残基またはアミノ酸側鎖部分に独立に由来する少なくとも二つの要素が、天然アミノ酸、合成アミノ酸、天然アミノ酸の側鎖、合成アミノ酸の側鎖、修飾アミノ酸の側鎖、天然、合成または修飾アミノ酸の側鎖の由来物または前記のもののいずれかのものの模倣体を含みうる。
【００１８】
非ペプチド環状構造には、5、6、7、または8員環、5-5、5-6、5-7、5-8、6-6、6-7、6-8、7-7、7-8、または8-8縮環型二環式環、または5-5-5、5-5-6または5-6-6縮環型三環式環が含まれうる。環状構造が二環式または三環式環状構造である例では、環状構造の少なくとも一つの環を、生物学的に活性な金属ペプチドの環状構造の少なくとも一つの環によって定義される鋳型空間に重ねうる。
【００１９】
この方法では、二つの隣接するCH基、隣接するNHおよびCH基または隣接するNH基が、二重結合を形成してよいという条件で、
X1が、(CH2)mまたはX3；
X2が、独立にCH2、CH、NHまたはN；
X3が、独立に(CH2)n、CH、NH、N、O、C=O、C=S、S、S=O、またはSO2；
R5が、H以外の部分；
R6が、アミノ酸側鎖部分またはその誘導体；
R7が、1以上のアミノ酸残基またはその誘導体類または末端基部分、またはアミノ酸側鎖部分またはその誘導体；
R6とR5の少なくとも一つとR7がそれぞれ、生物学的に活性な金属ペプチドの相当する要素に似たデスクリプタ空間を占める要素を構成する。
【００２０】
nが、0、1、2または3；そして
mが、0または1であるとき、
ペプチド模倣体は次の式のものでよい：
【００２１】
【化２】
2005504043.tif 000003
本発明にはさらに、前述の方法で作られるペプチド模倣体類が含まれる。
もう一つの具体例では、本発明は、5、6、7、または8員環の、5-5、5-6、5-7、5-8、6-6、6-7、6-8、7-7、7-8、または8-8縮環型二環式、または5-5-5、5-5-6または5-6-6縮環型三環式環状構造である環状構造と、その環状構造に共有結合により結合されるアミノ酸側鎖部分またはその誘導体である要素を含む少なくとも二つのデスクリプタ空間によって定義される鋳型空間を含むペプチド模倣体を提供する。ここでそのデスクリプタ空間は、そのペプチド模倣体と同じ受容体に結合する金属ペプチドのアミノ酸側鎖部分またはその誘導体である相当する要素によって定義されるデスクリプタ空間に似たデスクリプタ空間を占める。この具体例では、そのペプチド模倣体は、前述の式のものでよい。
【００２２】
もう一つの具体例では、本発明はX1-X2-X3という構造を含む、生物学的に活性なペプチド模倣体を提供する。ここで、X1およびX3はアミノ酸側鎖またはその模倣体からなり、X2は環状構造からなる。この具体例では、X2は5、6、7、または8員環、5-5、5-6、5-7、5-8、6-6、6-7、6-8、7-7、7-8、または8-8縮環型二環式環、または5-5-5、5-5-6または5-6-6縮環型三環式環でよい。X1およびX3の選択、X2に相対するX1とX3の位置と向きは、生物学的に活性な金属ペプチドに由来してよい。
もう一つの具体例では、本発明は、二つの隣接するCH基、隣接するNHおよびCH基または隣接するNH基が、二重結合を形成してよいという条件で、
X1が、(CH2)mまたはX3；
X2が、独立にCH2、CH、NHまたはN；
X3が、独立に(CH2)n、CH、NH、N、O、C=O、C=S、S、S=O、またはSO2；
R5が、H以外の部分；
R6が、アミノ酸側鎖部分またはその誘導体；
R7が、1以上のアミノ酸残基またはその誘導体類および末端基部分、またはアミノ酸側鎖部分またはその誘導体；
R7およびR6またはR5の少なくとも一つがそれぞれ、生物学的に活性な金属ペプチドの相当する要素に似たデスクリプタ空間を占める要素を構成する。
【００２３】
nが、0、1、2または3；そして
mが、0または1であるとき、
次式のペプチド模倣体類を提供する：
【００２４】
【化３】
2005504043.tif 000004
この具体例では、そのペプチド模倣体は、ある生物学的に活性な金属ペプチドに由来してよい。その生物学的に活性な金属ペプチドは、
R1が、1以上のアミノ酸残基またはその誘導体または末端基部分、またはアミノ酸側鎖部分またはその誘導体；
R2が、アミノ酸側鎖部分またはその誘導体；
R3が、H以外の部分；
R4が、末端基部分、1以上のアミノ酸残基またはその誘導体または末端基部分、またはアミノ酸側鎖部分またはその誘導体；そして
Mが、金属イオンであるとき、
次式のものでよい：
【００２５】
【化４】
2005504043.tif 000005
この具体例では、R7は、R1に似たデスクリプタ空間を占め、R6がR2に似たデスクリプタ空間を占めるかR5がR3に似たデスクリプタ空間を占める。この具体例にはさらに、R7がR1の機能的または構造的同族体で、R6がR2の機能的または構造的同族体であるかR5がR3の機能的または構造的同族体である場合も含まれる。
【００２６】
さらに別の具体例では、本発明は、以下の段階から成る生物学的に活性な金属ペプチドのペプチド模倣体を誘導する方法を提供する：
(a) 鋳型構造を定義する環状構造を有する生物学的に活性で、
R1が、少なくとも一つの天然または非天然のLまたはDアミノ酸残基または末端または保護基；
R2およびR3が同じまたは異なり、アミノ酸側鎖部分またはその誘導体から独立に選ばれ；
R4が、末端または保護基または1以上の天然または非天然のLまたはDアミノ酸残基；そして
Mが、金属イオンであるとき、
以下の式を有する金属ペプチドを選び：
【００２７】
【化５】
2005504043.tif 000006
(b) 生物学的に活性な金属ペプチドの環状構造の少なくとも一つの環によって定義される鋳型空間上に重ね合わせることができ、二つの隣接するCH基、隣接するNHおよびCH基または隣接するNH基は、二重結合を形成してよいという条件で、
X1が、(CH2)mまたはX3；
X2が、独立にCH2、CH、NHまたはN；
X3が、独立に(CH2)n、CH、NH、N、O、C=O、C=S、S、S=O、またはSO2；
nが、0、1、2または3；そして
mが、0または1であるとき、
次式の非ペプチド環状構造を提供し、
【００２８】
【化６】
2005504043.tif 000007
そして
(c) 少なくとも三つの要素R5、R6、およびR7を非ペプチド環状構造に加えて、
R5が、H以外の部分；
R6が、アミノ酸側鎖部分またはその誘導体；
R7が、1以上のアミノ酸残基またはその誘導体または末端基部分、またはアミノ酸側鎖部分またはその誘導体；そして
R7が、R1に似たデスクリプタ空間を占め、R6がR2に似たデスクリプタ空間を占めるかR5がR3に似たデスクリプタ空間を占めるとき、
以下の式のうちの一つのペプチド模倣体を得る：
【００２９】
【化７】
2005504043.tif 000008
この具体例では、R7はR1の機能的または構造的同族体でよく、R6がR2の機能的または構造的同族体であるかR5がR3の機能的または構造的同族体である。この方法にはさらに、上述の既知の方法で、ペプチド模倣体の生物学的活性を、生物学的に活性な金属ペプチドと比較する段階が含まれてよい。
【００３０】
別の具体例では、本発明は、
二つの隣接するCH基、隣接するNHおよびCH基または隣接するNH基は、二重結合を形成してよいという条件で、
X1が、(CH2)mまたはX3；
X2が、独立にCH2、CH、NHまたはN；
X3が、独立に(CH2)n、CH、NH、N、O、C=O、C=S、S、S=O、またはSO2；
R1が、H以外の部分；
R2が、アミノ酸側鎖部分またはその誘導体；
R3が、R5-R4-からなり、R4は芳香族の側鎖を有するL-またはD-アミノ酸で、その芳香族側鎖は1以上のハロゲン、アルキルまたはアリール基で機能化されてよく、R5はなくても1以上のアミノ酸残基またはその誘導体または末端基、または末端基で；
nが、0、1、2または3；そして
mが、0または1、
R4が、Phe、Phe(2-Cl)、Phe(4-Cl)、Phe(2,4-diCl)、Phe(3,4-diCl)、Phe(4-NO2)、Phe(4-Me)、Phe(4-Phenyl)、HPhe、Pgl、Trp、Nal 1、Nal 2、Bip、Dip、Bpa、Ser(Bzl)、Lys(Z)、Lyz(Z-2’Br)、Lyz(Bz)、Thr(Bzl)、Cys(Bzl)、Tyr(BzlCl2)、pF-Phe、Phe(4-Br)、Phe(4-CF3)、Phe(3,4-diF)、Phe(4-I)またはPhe(3,4-di-OMe)のL-またはD-体でよい。R5は、His、Ser(Bzl)、Tic、ヘプタノイル-Ser(Bzl)、ヘキサノイル-Ser(Bzl)、Hyp(bzl)、4-フェニルPro、5-フェニルPro、Tiq、Atc、Igl、Hyp(O-2-ナフチル)、Hyp(o-フェニル)、2-Aic、Idc、1-Aic、NH2(CH2)6CO-、ベンジル、b-ホモSer(Bzl)、Ser(O-2-ナフチル)、Ser(O-フェニル)、Ser(O-4-Cl--フェニル)、Ser(O-2-Cl--フェニル)、Thr(Bzl)、Tic、ヘプタノイル-Thr(Bzl)、ヘキサノイル-Thr(Bzl)、b-ホモThr(Bzl)、Thr(O-2-ナフチル)、Thr(O-フェニル)、Thr(O-4-Cl-フェニル)またはThr(O-2-Cl-フェニル) のL-またはD-体でよいとき、
次式のメラノコルチン受容体特異的ペプチド模倣体類を提供する：
【００３１】
【化８】
2005504043.tif 000009
一つの具体例では、R1は、
【００３２】
【化９】
2005504043.tif 000010
別の具体例では、R2は、-(CH2)4NH2、-(CH2)3NHC(NH2)=NH、-(CH2)3NHCOCH3、-(CH2)3NHCOOCH3、-(CH2)2NHC(NH2)=NH、-(CH2)2NHCONH2、-(CH2)4NHCOH、-(CH2)4NHCOCH3、-(CH2)3NHCONHCH3、-(CH2)3NHSO2NH2、-(CH2)3NHSO2CH3、-(CH2)3NH2、-(CH2)2CONH2、-(CH2)3NH(C=NH)NHMe、-(CH2)3NH(C=NH)NHEt、-(CH2)3NH(C=NH)NHPr、-(CH2)3NH(C=NH)NHPr-i、-(CH2)3NH(C=NH)NH2、-(CH2)4NHCONH2、-(CH2)4NH(C=N)NH2、
【００３３】
【化１０】
2005504043.tif 000011
【００３４】
したがって、メラノコルチン受容体特異的ペプチド模倣体にはR1、R2、R3およびnを上述のように定義するとき、次式のペプチド模倣体が含まれる：
【００３５】
【化１１】
2005504043.tif 000012
もう一つの具体例では、本発明は、
【００３６】
【化１２】
2005504043.tif 000013
R2が、-(CH2)4NH2または-(CH2)3NH(C=NH)NH2；そして
R3に、R5-R4-が含まれ、R4がL-またはD-Phe、pF-Phe、Phe(4-Br)、Phe(4-CF3)、Phe(4-Cl)、Phe(2-Cl)、Phe(2,4-diCl)、Phe(3,4-diCl)、Phe(3,4-diF)、Phe(4-I)、Phe(3,4-OMe)、Phe(4-Me)またはPhe(4-NO2)で、R5が存在しないかL-またはD-His、Ser(Bzl)、Tic、ヘプタノイルSer(Bzl)、Hyp(Bzl)、4-フェニルPro、5-フェニルPro、Tiq、Atc、Igl、Hyp(O-2-ナフチル)、Hyp(O-フェニル)、2-Aic、Idc、1-Aic、NH2(CH2)6CO-、ベンジル、b-ホモSer(Bzl)、Ser(O-2-ナフチル)、Ser(O-フェニル)、Ser(O-4-Cl-フェニル)またはSer(O-2-Cl-フェニル)であるとき、
次式のメラノコルチン受容体特異的ペプチド模倣体を提供する：R1が、
【００３７】
【化１３】
2005504043.tif 000014
もう一つの具体例では、本発明は、
【００３８】
【化１４】
2005504043.tif 000015
R1が、
【化１５】
2005504043.tif 000016
R2が、-(CH2)4NH2、-(CH2)3NHC(NH2)=NH、-(CH2)3NHCOCH3、-(CH2)3NHCOOCH3、-(CH2)2NHC(NH2)=NH、-(CH2)2NHCONH2、-(CH2)4NHCOH、-(CH2)4NHCOCH3、-(CH2)3NHCONHCH3、-(CH2)3NHSO2NH2、-(CH2)3NHSO2CH3、-(CH2)3NH2、-(CH2)2CONH2、-(CH2)3NH(C=NH)NHMe、-(CH2)3NH(C=NH)NHEt、-(CH2)3NH(C=NH)NHPr、-(CH2)3NH(C=NH)NHPr-i、-(CH2)3NH(C=NH)NH2、-(CH2)4NHCONH2、-(CH2)4NH(C=N)NH2、                、              、
【００３９】
【化１６】
2005504043.tif 000017
R3にR5-R4-が含まれ、R4がL-またはD-Phe、pF-Phe、Phe(4-Br)、Phe(4-CF3)、Phe(4-Cl)、Phe(2-Cl)、Phe(2,4-diCl)、Phe(3,4-diCl)、Phe(3,4-diF)、Phe(4-I)、Phe(3,4-di-OMe)、Phe(4-Me)またはPhe(4-NO2)で、R5は存在しないかL-またはD-His、Ser(Bzl)、Tic、ヘプタノイルSer(Bzl)、Hyp(Bzl)、4-フェニルPro、5-フェニルPro、Tiq、Atc、Igl、Hyp(O-2-ナフチル)、Hyp(O-フェニル)、2-Aic、Idc、1-Aic、NH2(CH2)6CO-、ベンジル、b-ホモSer(Bzl)、Ser(O-2-ナフチル)、Ser(O-フェニル)、Ser(O-4-Cl-フェニル)またはSer(O-2-Cl-フェニル)である。
【００４０】
本発明はさらに、目的の標的に結合するペプチド模倣体を誘導する、以下の段階から成る方法を提供する：
(a) nが少なくとも4であるとき、残基数nの既知の一次構造を有し、目的の標的に結合する既知のアミノ酸配列を選び；
(b) 既知の一次構造中の連続する残基群の中から少なくとも二つの連続する残基を選び、その少なくとも二つの連続する残基の二つのカルボキシ末端に、金属イオン錯体形成のためのNおよびSの両方を提供する残基を挿入するか、または既知の一次構造中の連続する残基群の中から少なくとも三つの連続する残基を選び、その少なくとも三つの連続する残基のいずれかの三つのカルボキシ末端を、金属イオン錯体形成のためのNおよびSの両方を提供する残基で置き換え、そのような各配列はライブラリー番号を構成し、各ライブラリー番号は少なくとも一つの残基または金属イオン錯体形成のためのNとSの両方を提供する残基の挿入またはそれによる置き換えの場所が異なるアミノ酸配列のライブラリーを設計し；
(c) 設計したアミノ酸配列のそのライブラリーを構築し；
(d) 金属イオンが、そのペプチド配列中の少なくとも三つの原子と錯体を形成し、そのような、少なくとも三つの原子はペプチド配列を構成する少なくとも二つのアミノ酸残基の部分であり、それによってそのような少なくとも三つの原子とその金属イオンが、少なくとも一つの環から成る環状構造を形成し、その環状構造の少なくとも一つの環が、ある鋳型空間を定義するとき、設計したアミノ酸配列の各ライブライー構成物を金属イオンと錯体形成させ、それによって金属ペプチドのライブラリーを形成し、
(e) 目的の標的への結合性に関して金属ペプチドの、そのライブラリーをスクリーニングし、
(f) 目的の標的への結合性を示す金属ペプチドを選び、
(g) 選んだ金属ペプチドの環状構造の少なくとも一つの環によって定義される鋳型空間上に重ね合わせることができる非ペプチド環状構造をモデル化し、そして
(h) その非ペプチド環状構造に、独立に、アミノ酸残基、アミノ酸側鎖部分またはその誘導体からなる少なくとも二つの要素を加えることによってペプチド模倣体を形成し、そのような少なくとも二つの要素は、その選ばれた金属ペプチドに相当する要素に似たデスクリプタ空間を占める。
【００４１】
この方法にはさらに、そのペプチド模倣体の生物学的活性を、その選ばれた金属ペプチドの生物学的活性と比較する段階が含まれる。そのような比較は、上で開示された測定を含む既知の手段で行ってよい。一つの具体例では、目的の標的への結合に関するスクリーニングには、目的の標的への結合に関する既知の結合パートナーを、金属ペプチド類のライブラリーの構成物と競争させることが含まれる。ここで、その既知の結合パートナーは、残基数nの既知の一次構造を有する既知のアミノ酸配列でよい。
【００４２】
この方法では、残基数nの既知の一次構造を有する既知のアミノ酸配列は、ペプチド、ポリペプチドまたはタンパク質でよい。設計されたアミノ酸配列のライブラリーには金属イオン錯体形成のためのNおよびSの両方を提供する残基が、そのアミノ酸配列のカルボキシル末端である、少なくとも一つの構成物が含まれるのが好ましい。一つの具体例では、設計されたアミノ酸配列のライブラリーには少なくとも一つの構成物が含まれる。ここで、金属イオン錯体形成のためのNおよびSの両方を提供する残基は、そのアミノ酸配列のカルボキシル末端残基ではない。別の具体例では、設計したアミノ酸配列のライブラリーには、少なくとも四つの残基を有する少なくとも一つの構成物が含まれる。ここで、金属イオン錯体形成のためのNおよびSの両方を提供する残基は、既知の一次構造中の連続する残基のうちの隣接する二つの残基の間に挿入される。
【００４３】
金属イオン錯体形成のためのNおよびSの両方を提供する残基は、L-またはD-システイン、L-またはD-ペニシラミン、3-メルカプトフェニルアラニンまたは前記のもののどれかの同族体のようなL-またはD-3-メルカプトアミノ酸でよい。その金属イオンは、V、Mn、Fe、Co、Ni、Cu、Zn、Ga、As、Se、Y、Mo、Tc、Ru、Rh、Pd、Ag、Cd、In、Sn、W、Re、Os、Ir、Pt、Au、Hg、Tl、Pb、Bi、Po、At、Sm、EuまたはGdのうちの一つのイオンでよい。
【００４４】
本発明の実施においては、金属イオン錯体形成のためのNおよびSの両方を提供する挿入された残基以外のアミノ酸配列のライブラリー中のどのシステイン残基を、フリーのSH基を含まない同族体で置換してもよい。したがって、システインを、グリシン、アラニン、セリン、アミノイソ酪酸またはデヒドロアラニン残基で、S-保護システインで、または一般的に、分子量約150未満のアミノ酸残基の天然模倣体で置換されてよい。
【００４５】
本発明の実施においては、どのライブラリー構成物中のNおよびSの両方を提供する残基のアミノ末端側に隣接する二つの残基中のプロリン残基を、金属イオン錯体形成のためのNを提供する残基と置換してよい。したがって、プロリンを、グリシン、アラニン、セリン、アミノイソ酪酸またはデヒドロアラニン残基で、または一般的に、金属イオン錯体形成のためのNを提供する分子量約150未満のアミノ酸残基の天然模倣体で置換されてよい。
【００４６】
本発明の実施においては、もしnが少なくとも約15であれば、本方法にはさらに、分割されたそれぞれの一次構造は少なくとも二つの残基によって、それぞれの隣接する分割された一次構造の一次構造と重なるように、一次構造を少なくとも三つの一次構造に分割する段階と、その後そのような各二次的親ポリペプチドに関して段階(b)から(f)までが含まれてよい。さらに本方法では、選ばれた少なくとも二つの連続する残基の少なくとも一つの残基は、既知の一次構造中の連続する残基中の相当する残基の同族体でよい。
【００４７】
本発明の第一の目的は、金属ペプチド類由来の情報に基づいて、環状構造を有するペプチド模倣化合物類を作る方法を提供することである。
【００４８】
本発明のもう一つの目的は、逆回転構造、タイプI、IIおよびIIIb回転、g回転、逆g回転、および短らせん、シートおよび伸びた鎖構造を含む、天然ペプチド類およびタンパク質類に普通に見出されるモチーフのような天然の構造的モチーフの代用物を形成するコンフォーメーション的に強制的な金属ペプチド類由来のペプチド模倣化合物を提供することである。二次構造モチーフは、二次構造モチーフが、天然の構造的モチーフに見られる形状を模倣する、または模倣するようにされうる、コンフォーメーション的に強制された金属ペプチドによって定義される必要がある。ペプチド模倣化合物類は、そのような金属ペプチド類に由来し、それによって、類似のペプチド模倣化合物類は、天然の構造的モチーフに見られる形状を模倣する。
【００４９】
本発明のもう一つの目的は、天然の逆回転構造を模倣する立体化学空間において、アミノ酸残基、アミノ酸側鎖部分およびその誘導体がとる環状構造を含むペプチド模倣化合物類を提供することである。
【００５０】
本発明のもう一つの目的は、金属ペプチド類または古典的タンパク質回転構造または両方に対するかなりの形状的類似性を有するアミノ酸側鎖部分またはその誘導体を有するペプチド模倣化合物類を提供することである。ペプチド模倣化合物類と会合するアミノ酸側鎖部分およびその誘導体類は、それらが、金属ペプチド類またはその古典的回転構造または両方において、相当する側鎖と同じ化学的空間を占めるように形状的に位置してよい。
【００５１】
本発明の、他の目的、利点および新規性、および適用性のさらなる範囲は、以下の詳細説明で部分的に提供され、添付する図の説明との関係で提供され、部分的に以下を調べることで当業者に明らかになり、また本発明の実施により学習されよう。本発明の目的および利点は、添付された特許請求範囲で特に指摘されている手段および組合せによって実現され達成されよう。
【発明を実施するための最良の態様】
【００５２】
定義    本明細書と特許請求範囲を通して用いられるいくつかの用語は以下のように定義される：
本明細書と特許請求範囲を通して用いられる「結合する」、「結合（性）」、「錯体」、および「錯体形成」は、一般に、あらゆるタイプの物理的および化学的結合、反応、錯体形成、誘引、キレーティング等をカバーすることを意図している。
【００５３】
本発明の「ペプチド類」は、a) 天然の、b) 化学合成により製造される、c) 組換えDNA技術により製造される、d) 大きな分子の生化学的または酵素的断片化により製造される、e)上記のaからdまでの方法の組合せによる方法により製造される、またはf) ペプチド類を製造する何か別の手段により製造される。
【００５４】
好ましい製造手段である化学合成を用いることにより、非天然の種々のアミノ酸類を、鎖に沿って導入し、N-またはC-末端を修飾する等し、それによって、改良された安定性や配合組成、プロテアーゼ分解に対する抵抗性等を提供することができる。
【００５５】
本明細書および特許請求範囲を通して使用されている「ペプチド」という用語は、アミノ酸の化学的修飾体類や誘導体類を含む二つ以上のアミノ酸から成る何らかの構造を含ませることを意図している。大抵の場合、本明細書で議論するペプチド類は100アミノ酸未満、好ましくは60アミノ酸未満であり、最も好ましくは約2から20アミノ酸である。あるペプチドの全部または一部を形成するアミノ酸類は、天然アミノ酸類、そのようなアミノ酸類の立体異性体類または修飾物類、非タンパク質アミノ酸類、翻訳後修飾アミノ酸類、酵素により修飾されたアミノ酸類、アミノ酸類を模倣して設計された構築物または構造等であり、その結果、「ペプチド」という用語には、非ペプチド骨格を有する構造を含む疑似ペプチド類およびペプチド模倣体類が含まれる。「ペプチド」という用語にはまた、ペプチド類の二量体または多量体も含まれる。ある「製造された」ペプチドには、化学合成、組換えDNA技術、大きい分子の生化学的または酵素的断片化、前記のものの組合せにより製造された、または、一般的に他の方法により作られたペプチドが含まれる。
【００５６】
本発明により使用される「アミノ酸」および「アミノ酸類」、および本明細書および特許請求の範囲中で使用される用語には、既知の天然アミノ酸類が含まれ、それらは、通常の三文字略号または一文字略号で呼ばれる。総論は、“Synthetic Peptides: A User’s Guide,” GA Grant編、W.H. Freeman & Co., New York, 1992を参照。この文献の説明には、11頁から24頁までに示す本文および表を含む本明細書の引用文献に含まれている。上述のように、「アミノ酸」という用語には、天然タンパク質アミノ酸類の立体異性体類および修飾物類、非タンパク質アミノ酸類、翻訳後修飾アミノ酸類、酵素合成アミノ酸類、誘導されたアミノ酸類、アミノ酸類を模倣して設計された構築物または構造等も含まれる。修飾されたおよび異常アミノ酸類は一般に、上述の“Synthetic Peptides: A User’s Guide”；Hruby VJ, Al-obeidi FおよびKazmierski W: Biochem J 268:249-262, 1990；およびToniolo C: Int J Peptide Protein Res 35:287-300, 1990；これらのすべての説明は、本明細書の引用文献に含まれている。
【００５７】
本明細書および特許請求範囲での使用を含む、本発明で使用される「アミノ酸側鎖部分」という用語には、何かのアミノ酸の何かの側鎖が含まれ、「アミノ酸」という用語はここで定義されている。したがって、これには、天然タンパク質アミノ酸類に存在する側鎖部分が含まれる。それにはさらに、グリコシル化アミノ酸類のような修飾された天然アミノ酸類中の側鎖部分も含まれる。それにはさらに、天然アミノ酸類の立体異性体類または修飾物類、非タンパク質アミノ酸類、翻訳後修飾アミノ酸類、酵素により修飾されたアミノ酸類、誘導されたアミノ酸類を模倣して設計された構築物または構造等が含まれる。例えば、本明細書に開示されているいずれかのアミノ酸の側鎖部分は、その定義に含まれる。
【００５８】
アミノ酸側鎖部分の「誘導体」には、天然アミノ酸側鎖部分の修飾を含むアミノ酸側鎖部分の修飾物または変化物が含まれる。一例として、アミノ酸側鎖部分の誘導体類には、直鎖または分岐、環状または非環状、置換または非置換、飽和または不飽和、アルキル、アリールまたはアラルキル部分が含まれる。
【００５９】
アミノ酸類の以下の略号には、どのアミノ酸のリストも、L-またはD-配置でよいと理解されるという意味を与えている：
Abu                     −      g-アミノ酪酸
2-Abz                   −      2-アミノ安息香酸
3-Abz                   −      3-アミノ安息香酸
4-Abz                   −      4-アミノ安息香酸
Achc                    −      1-アミノ-シクロヘキサン-1-カルボン酸
Acpc                    −      1-アミノ-シクロプロパン-1-カルボン酸
12-Ado                  −      12-アミノドデカン酸
7-Ahept                 −      7-アミノヘプタン酸
Aib                     −      a-アミノイソ酪酸
Aic                     −      2-アミノインデン-2-カルボン酸
6-Ahx                   −      6-アミノヘキサン酸
Amb                     −      4-(アミノメチル)-安息香酸
Amc                     −      4-(アミノメチル)-シクロヘキサンカルボン酸
7’-aminoheptanoyl      −      NH2-(CH2)6CO-
8-Aoc                   −      8-アミノオクタン酸
Arg(Tos)                        −      NG-p-トシル-アルギニン
Ap(anilino)             −      b-アニリノ-アスパラギン酸
Ap(3-Cl-anilino)                −      b-(3-クロロアニリノ)-アスパラギン酸
Ap(3,5-diCl-anilino)    −      b-(3,5-ジクロロクロロアニリノ)-アスパラギン酸
Atc                     −      2-アミノテトラリン-2-カルボン酸
11-Aun                  −      11-アミノウンデカン酸
AVA                     −      5-アミノ吉相酸
b-hHyp(Bzl)             −      b-(O-ベンジル)-ホモヒドロキシプロリン
b-hSer(Bzl)             −      b-(O-ベンジル)-ホモセリン
Bip                     −      ビフェニルアラニン
Bzl                     −      ベンジル
Bz                      −      ベンゾイル
Cha                     −      シクロヘキシルアラニン
Chg                     −      シクロヘキシルグリシン
Cmpi                    −      4-カルボキシメチル-ピペラジン
Dip                     −      3,3-ジフェニルアラニン
Disc                    −      1,3-ジヒドロ-2H-イソインドールカルボン酸
Dpr(b-Ala)              −      Nb-(3-アミノプロピオニル)-a,b-ジアミノプロピオン酸
Et-                     −      エチル
GAA                     −      e-グアニジノ酢酸
GBzA                    −      4-グアニジノ安息香酸
B-Gpa                   −      3-グアニジノプロピオン酸
GVA(Cl)                 −      b-クロロ-e-グアニジノ吉相酸
Heptanoyl               −      CH3-(CH2)5CO-
hPhe                    −      ホモフェニルアラニン
hSer                    −      ホモセリン
Hyp                     −      ヒドロキシプロリン
hHyp                    −      ホモヒドロキシプロリン
Hyp(Bzl)                −      O-ベンジル-ヒドロキシプロリン
Idc                     −      インドリン-2-カルボン酸
Igl                     −      インダニルグリシン
Inp                     −      イソニペコチン酸
Lys(Z)                  −      N-e-ベジルオキシカルボニル-リジン
Me-                     −      メチル
Nal 1                   −      3-(1-ナフチル)アラニン
Nal 2                   −      3-(2-ナフチル)アラニン
(N-Bzl)Nal 2            −      N-ベンジル-3-(2-ナフチル)アラニン
2-Naphthylacetyl                −      2-ナフチル-CH2CO-
(Nlys)Gly               −      N-(アミノブチル)-グリシン
(N-PhEt)Nal 2           −      N(2-フェニルエチル)-3-(2-ナフチル)アラニン
OcHx                    −      シクロヘキシルエステル
Phg                     −      フェニルグリシン
pF-Phe                  −      p-フルオロ-フェニルアラニン
Phe(4-Br)               −      4-ブロモ-フェニルアラニン
Phe(4-CF3)              −      4-トリフルオロメチル-フェニルアラニン
Phe(4-Cl)               −      4-クロロ-フェニルアラニン
Phe(2-Cl)               −      2-クロロ-フェニルアラニン
Phe(2,4-diCl)           −      2,4-ジクロロ-フェニルアラニン
Phe(3,4-diCl)           −      3,4-ジクロロ-フェニルアラニン
Phe(3,4-diF)            −      3,4-ジフルオロ-フェニルアラニン
Phe(4-I)                        −      4-ヨード-フェニルアラニン
Phe(3,4-di-OMe)         −      3,4-ジメトキシ-フェニルアラニン
Phe(4-Me)               −      4-メチル-フェニルアラニン
Phe(4-NO2)              −      4-ニトロ-フェニルアラニン
Pip                     −      ピコリン酸
Pr                      −      プロピル
Pr-i                    −      イソプロピル
3-Pya                   −      3-ピリジルアラニン
Pyr                     −      ピログルタミン酸
Qal(2’)                        −      b-(2-キノリル)-アラニン
Sal                     −      3-スチリルアラニン
Sar                     −      ザルコシン
Ser(Bzl)                        −      O-ベンジル-セリン
Ser(2-Naphthyl)         −      O-2-ナフチル-セリン
Ser(Phenyl)             −      O-2-フェニル-セリン
Ser(4-Cl-Phenyl)                −      O-4-Cl-フェニル-セリン
Ser(2-Cl-Phenyl)                −      O-2-Cl-フェニル-セリン
Ser(p-Cl-Bzl)           −      O-4-Cl-ベンジルセリン
Thr(Bzl)                        −      O-ベンジル-スレオニン
Tic                     −      1,2,3,4-テトラヒドロイソキノリン-3-カルボン酸
Tiq                     −      1,2,3,4-テトラヒドロイソキノリン-1-カルボン酸
Tle                     −      tert-ブチルアラニン
Tpl                     −      1,2,3,4-テトラヒドロノルハルマン-3-カルボン酸
Tyl(Bzl)                        −      O-ベンジル-チロシン
Tyl(2,6-diCl-Bzl)               −      O-(2,6-ジクロロ)ベンジル-チロシン
Z                       −      ベンジルオキシカルボニル
本発明による化合物類の列挙では、従来のアミノ酸残基は、Manual of Patent Examining Procedure第7版の第2400章に与えられた従来の意味を有する。したがって、“Nle”はノルロイシン、“Asp”はアスパラギン酸、“His”はヒスチジン、“D-Phe”はDフェニルアラニン、 “Arg”はアルギニン、“Trp”はトリプトファン、“Lys”はリジン、“Gly”はグリシン、“Pro”はプリロン、“Tyr”はチロシン、“Ser”はセリン、等である。次のアミノ酸類は、本発明のいくつかの具体例で使用される：
【００６０】
(2S,5R)-5-フェニル-      trans-Hyp(Bzl)    cis-Hyp(2-ナフチル)    cis-Hyp(フェニル)
ピロリジン-2-カルボニル
【化１７】
2005504043.tif 000018
前述のものすべてを含む、天然タンパク質アミノ酸類の立体異性体類および修飾物類、非タンパク質アミノ酸類、翻訳後修飾アミノ酸類、酵素合成アミノ酸類、誘導化アミノ酸類、アミノ酸類を模倣して設計された構築物または構造等を含む単一のアミノ酸を、本明細書ではしばしば「残基」と呼ぶ。
【００６１】
本明細書では、種々の試薬類および化合物類が使用され、以下の略号は、次ぎのような意味を有する：
Cbz           ベンジルオキシカルボニル
DCM           ジクロロメタン
DEAD      アゾジカルボン酸ジエチル
DIC           1,3-ジイソプロピルカルボジイミド
DIEA          N,N-ジイソプロピルエチルアミン
DMF           N,N-ジメチルフォルムアミド
DMSO  ジメチルスルフォキサイド
Fmoc          9-フルオレニルメトキシカルボニル
HOAt          1-ヒドロキシ-7-アザベンゾトリアゾール
LAH           水素化リチウムアルミニウム
NMM           N-メチル-モルフォリン
NMP           1-メチル-2-ピロリジノン
TBTU          四フッ化ホウ酸2-(1H-ベンゾトリアゾール-1-イル)-1,1,3,3-テトラメ              チルウロニウム
TEA           トリエチルアミン
TFA           トリフルオロ酢酸
THF           テトラヒドロフラン
TIS           トリイソプロピルシラン
TPP           トリフェニルフォスフィン
本明細書で開示されたペプチド模倣体類は、医学用途および畜産または獣医用途の両方に使用できる。普通、生成物はヒトに使用されるが、他の哺乳類に使用してもよい。「患者」という用語は、哺乳類の個体を指すことを意図しており、本明細書および特許請求範囲を通して使用される。本発明の第一の用途には、ヒトの患者が含まれるが、本発明は、研究所、農場、動物園、野生動物、ペット、競技用動物等に適用してもよい。
【００６２】
一般に、本発明のペプチド模倣体類は、固相合成または他の合成スキームによって合成され、当該分野で良く知られた方法に従って精製される。種々の樹脂や試薬を利用する多数の公知の方法のいずれかを、本発明のペプチド模倣化合物類を調製するために使用してよい。
【００６３】
本発明のペプチド模倣化合物類は、薬理学的に許容できる塩という形態でよい。本発明のペプチド模倣化合物類の酸添加塩は、ペプチド模倣化合物と、塩化水素、臭化水素、硫酸、リン酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、マレイン酸、コハク酸またはメタンスルフォン酸のような過剰の酸から、適当な溶媒中で調製される。酢酸塩の形態が特に有用である。本発明のペプチド模倣化合物類が酸性基を含む場合には、適当な薬理学的に許容できる塩には、ナトリウムまたはカリウム塩のようなアルカリ金属塩、カルシウムまたはマグネシウム塩のようなアルカリ土類金属塩が含まれてよい。
本発明は、本発明のペプチド模倣化合物および薬理学的に許容できる担体を含む薬理学的組成物を提供する。担体は、液体の剤型でよく、緩衝化され等張の水溶液が好ましい。薬理学的に許容できる担体類には、この後説明するように、希釈剤類、担体などの賦形剤類；安定剤類、保存料類、溶剤類、緩衝剤類等の添加物類が含まれる。
【００６４】
一部は、莫大な構造的柔軟性および多様性のゆえに、ペプチド類が、高速薬物リード発生の理想的な候補を作ることが知られ、評価されている。ほとんどの生物学的標的に対する非常に有力なペプチドリードは、合成的または（ファージディスプレーのような）生物学的ペプチドライブラリーを用いて高速で生み出しうる。しかし、これらのリードから商業的価値がある分子への変換は、成功する保証がほとんどない困難で高価で骨が折れる知識集約型の仕事である。
【００６５】
金属ペプチドのコンビナトリアル・ライブラリーと繰り返し合成法の使用は、望む親和性と特異性で目的の受容体に結合する金属ペプチドを作り同定する手段を提供する。これらの方法は、上の「背景技術」の項目で「金属ペプチド類」という見出しの下の引用文献に総論的に開示され説明されている。これらの金属ペプチド構造では、ペプチド骨格は、立体配座が、金属イオンの周りに固定され、それによって生物学的な標的と相互作用できる。従って錯体を形成する金属イオンの配位球が主として金属ペプチドの構造を定義する。ペプチド−金属の足場を、逆回転、伸びたおよびbシート構造のような古典的な二次ペプチド構造と比較すれば、金属ペプチド手法で、ペプチド類のこれらの古典的な構造のモチーフの側鎖の形状を模倣できることが証明される。小ペプチドに特異的な結合対の構成物の生物学的活性は、ほとんど一般に、その小さいペプチドの、折り畳まれた二次構造の結果であるから、金属ペプチド手法は、小さいペプチド類に特異的な多くの受容体でうまくいき、そのような受容体のほとんどでうまくいくであろう。
【００６６】
金属ペプチド類を用いる一つの手法では、ある選択したアミノ酸のアルゴリズム推進挿入と、その後の、選択した繰り返し位置でのペプチドへの金属イオンの錯体形成によって、生物学的活性を有する既知のまたは小さなタンパク質から一連の金属ペプチド類を生み出す。この方法は、2001年12月19日に出願された「ペプチド類およびタンパク質類中の標的特異的折り畳み部位の同定」と題する国際特許出願番号PCT/US01/50075に総論的に開示されている。このプロセスは、それなしでは緩んで立体配置が定まらないペプチド分子中のペプチドの折り畳みの生物学的に有効な部位を高速で正確に予測する。
一つの具体例では、結合性のような、標的物質との相互作用に関わる親ペプチド中の少なくとも一つの活性な配列または領域を決定するために、ある金属ペプチドを、既知の親ペプチドの系統的分析によって記述する。ここで用いる「親ペプチド」とは、結合性のような、標的物質との相互作用を示し、従ってあるペプチド、ポリペプチドまたはタンパク質を構成するアミノ酸残基のある配列のことを指す。その親ペプチドは一般的にアミノ酸残基が約3から約100のペプチドまたはポリペプチドであるが、親ポリペプチドという言葉にはより大きな構造物も含まれ、一般的には、大きなポリペプチド類またはタンパク質類であると、当技術では考えられている。金属ペプチドを作るためには、親ペプチドの少なくとも一部分の、好ましくは全部の一次構造、すなわち配列が既知でなければならない。しかし、本発明の方法を実行するためには、親ポリペプチドの二次構造や三次構造に関する情報を持つことは必要ではない。
【００６７】
親ポリペプチドは、例えば、細胞、組織、器官または他の生物学的材料に見出される受容体への結合性を示すどのような配列でもよい。親ポリペプチドの例としては、生物学的に活性なペプチド類、ホルモン類、神経伝達物質類、酵素類、抗体類等を挙げることができが、それらに限定されない。そのような親ペプチド類は受容体への結合の結果として直接または間接的に信号を伝達してよく、したがって、親ポリペプチドは、作用物質、拮抗物質、またはこれらの混合物でよい。本発明の適当な親ポリペプチド類の例としては、メラノコルチン受容体特異的ペプチド類、ウロキナーゼ型組織プラスミノーゲン活性化タンパク質、アミロイドb-タンパク質関連ペプチド類、プリオン病関連ペプチド類、バソプレシンペプチド類、オキシトシンペプチド類、アンジオテンシンペプチド類、カルシトニン、カルシトニン遺伝子関連ペプチド、オピオイドペプチド類、ヒト成長ホルモン、ヒトプロラクチン受容体リガンド類、a-インターフェロンのような種々のインターフェロン類、上皮細胞成長因子、腫瘍壊死因子、および種々の高血圧ペプチド類、線維素溶解ペプチド類、走化性ペプチド類、成長促進ペプチド類、分裂促進因子類、免疫調節物質類などが含まれる。
【００６８】
一般に、本発明で使用するための金属ペプチドを作るためには、目的の受容体に対する本発明の構造物の結合性を求めるための少なくとも一つの測定または試験または少なくとも一つの機能的パラメータを求めるまたは好ましくは、目的の受容体への親ポリペプチドの結合性を求めるための方法が既知でなければならない。本発明の好ましい具体例では、競争的阻害または類似の測定を用いて、それによって本発明の構築物の結合性または機能的活性を親ペプチドと直接比較でき、従って相対的結合性または機能的活性を直接求めることができる。他の具体例では、他の測定または試験を使用してよい。これらの測定は、機能的測定でよいが、そうである必要はない。測定の例としては、種々の競争的阻害測定、直接結合性測定、機能性測定などが挙げられる。受容体の親和性および特異性ならびに機能的活性を独立に求めるために、例えば、本発明の構築物が作用物質、拮抗物質またはこれらの混合物であるか、さらにどういう場合に結合および機能を別々に求めることができるかを決める測定を使用することも可能であると考えられる。そのような測定や試験の例としては、本技術では公知でよく文書化され、ある親ペプチドについて、一般に、1以上の測定および試験が知られている。
【００６９】
本発明の方法では、1以上の、そして好ましくは、一連のペプチド類を作るために親ポリペプチド使用し、ペプチド類を次に金属イオンと錯体形成させ、金属ペプチド類を得る。一般に（しかし必須ではない）、作られたペプチド類は親ポリペプチドより短い。しかし、作られたペプチドが親ペプチドと同じか長いことはあり得ると考えられる。どの長さであれ、作られたペプチドは、金属イオンと錯体を形成し、それによって金属ペプチドが形成される。次に、金属ペプチドを種々の既知の測定や試験のいずれかに使用し、金属ペプチドの結合性または機能または両方を親ポリペプチドのそれと比較する。上述のことを達成する方法は、2001年12月19日に出願された「ペプチド類およびタンパク質類の標的特異的折り畳み部位の同定」と題し、本明細書に引用文献として含まれている国際特許出願番号PCT/US01/50075に詳細に記載されている。
【００７０】
得られる金属ペプチドは、ペプチド模倣体を作る本発明の方法で使用できる。本発明の一つの具体例では、X線、NMR、インシリコ分子モデリングや他の計算機研究のような物理的方法を必要としない金属ペプチド類の生物学的に活性な構造的特徴に基づく高品質の三次元情報を描き作ることが可能である。本明細書に開示するように、本発明は、生物学的に有効な金属ペプチドに由来する複雑な構造的情報に基づいて、本明細書で「ペプチド模倣化合物」または「ペプチド模倣体」と呼ぶ、小さい分子を合理的に創出する方法や手法を提供する。一般に、本発明のペプチド模倣化合物は、アミノ酸残基部分に相当する1以上の基を有し、非タンパク質アミノ酸残基類または模倣体類またはアミノ酸残基類の誘導体類を含む1以上のアミノ酸残基部分をさらに含んでよい。
【００７１】
本発明は、あるペプチド断片へのある金属イオンの錯体形成の結果得られる、ある金属ペプチド分子の固い構造が予測可能であるという認識に部分的に基づいている。金属ペプチド類の金属イオン結合ペプチド断片中の種々の原子の原子的座標は、その金属イオンの配位化学および配位球によってよく定義される。一連の生物学的に活性な受容体特異的金属ペプチド類の結果に由来するような、この構造情報は、生物学的活性をもたらす構造的パラメータの決定的な組を定義するために分析されうる。金属ペプチド類のペプチド−金属イオン足場に内在する固さのゆえに、得られる構造データは、ペプチド類やペプチド模倣体類に関するNMRまたは類似の研究由来のデータよりよい構造情報を提供する。これにより、ペプチド模倣化合物類やペプチド模倣化合物類を含む医薬組成物類のような小分子に基づく薬物類の新規設計や開発のために、生物学的に活性な受容体特異的な金属ペプチド類から得られるデータを使うことができる。したがって、本発明は、構造および立体配座の一次情報源として金属ペプチド類を利用し、受容体特異的で作用物質または拮抗物質分子でありうる非金属小分子足場となる、合理的薬物設計模範を使用する。これは、小分子開発の他の従来技術による方法に比べて相当な有利性を提供する。従来法は、一般に、受容体特異的拮抗物質類の、希には作用物質類の開発だけに終わる。
【００７２】
金属イオンの配位球は、あるペプチド配列において、環状構造の生成という結果を生ずる。そのような環状構造は、1以上の環で作られる。Reのような金属イオンを用いると、通常、図1に示すように5-5-5員環を生成する。しかし、Reを使用しても、他の環状構造が可能である。例えば、Reに結合する配列では、ホモCysとHisの両方を使用すれば、5-5-6-環状構造が生成し、もしCysがN末端部位にあれば、6-5-5員環構造が生成しうる。環状構造と、その一部を作るそれぞれの環は、本明細書で「鋳型空間」と呼ぶものを定義する。鋳型空間は、化学空間の部分集合であり、大きさ、体積、または立体配座空間のような少なくとも1以上の立体的デスクリプタを含む。したがって、環状構造は鋳型空間を有し、各環およびそれらの環の組合せは鋳型空間を有する。
【００７３】
金属ペプチド類の生物学的活性は、本明細書で「要素」と呼ぶ種々の構成部分のためであり、要素には、1以上のアミノ酸残基、アミノ酸側鎖部分やそれらの誘導体が含まれる。これらの要素は受容体上の受容体部位と相互作用し、その結果、金属ペプチドの認識およびそれとの相互作用が起き、生化学的または薬理学的効果に結びつく。一般に、認識に貢献する相互作用は、静電的、水素結合、ファンデルワールスおよび疎水的な性質のものである。
【００７４】
要素は、本明細書で「デスクリプタ空間」として定義されるものを占める。デスクリプタ空間は、化学空間の部分集合であり、1以上の立体デスクリプタと1以上の電子的または親油性デスクリプタを含む。ある金属ペプチドの要素のデスクリプタ空間には、環状構造とその個々の環の鋳型空間との関係を定義する立体デスクリプタが含まれる。例えば、要素が、図1に示す金属ペプチドのR2のようなアミノ酸側鎖部分である場合には、R2のデスクリプタ空間はその鋳型空間との関係では立体的に固定され、環状構造とその個々の環の鋳型空間に相対的な特別な空間座標を有する。しかし、他の例では、ある要素のデスクリプタ空間は、環状構造とその個々の環の鋳型空間との固定的な関係は定義しない。例えば、R1が2以上のアミノ酸残基の鎖であり、その要素がその金属ペプチド環状構造の少なくとも一つの残基によって分けられる残基のアミノ酸側鎖部分である場合には、その要素のデスクリプタ空間はその金属ペプチド環状構造に相対的な要素の立体配座における自由度のゆえに、環状構造とその個々の環の鋳型空間との推定的に決定可能な関係を有しているに過ぎない。したがって、そのようなR2のデスクリプタ空間には、その要素の立体配座的可動度に基づいてR2の潜在的物理的位置の可能性地図が含まれる。種々の立体配座の相対的立体配座エネルギーは、部分的に、環状構造とその個々の環を含む鋳型空間と要素との推定的に決定可能な関係を決定する。デスクリプタ空間にはさらに、静電ポテンシャル、反応性指標、親油性ポテンシャル等の電子的または親油性デスクリプタが含まれ、それらのデスクリプタは、静電的、水素結合、ファンデルワールスまたは疎水性相互作用のような、金属ペプチドと受容体との相互作用に有効である。デスクリプタ空間にはさらに、要素間の、または1以上の要素と鋳型空間の間の立体デスクリプタが含まれる。例えば、二つの要素間のように、デスクリプタ空間には、主要な原子間の距離や角度のような分子的形状が含まれうる。デスクリプタ空間に有効な他のデスクリプタには、溶媒最近接包絡面積、ファンデルワールス表面および電子密度が含まれる。
【００７５】
少なくともいくつかのデスクリプタが共通で、要素の機能性が保存される時、二つの異なる要素または要素群は「似たデスクリプタ空間」を占める。機能性は受容体相互作用によって求められてよい。これは、結合性研究、機能性研究等のような種々の手段によって求めてよい。次の例は、本明細書で与えられる定義の一つの側面をまとめている。次の一般的な構造の金属ペプチドを考える：
【００７６】
【化１８】
2005504043.tif 000019
5-5-5-員環構造とその各環が鋳型空間を定義することがわかるであろう。R1とR2がそれぞれ、金属ペプチドの生物学的活性に貢献するアミノ酸側鎖部分であると仮定すれば、R1とR2はそれぞれ要素である。それぞれ、（例えば、電荷、親油性等）アミノ酸側鎖部分により、そして、それぞれ、他および鋳型空間との位置関係により定義されるデスクリプタ空間を占める。次の一般式の本発明のペプチド模倣体を考える：
【００７７】
【化１９】
2005504043.tif 000020
この環は同素環として表わされているが、この環には、C基の他に1以上のNまたはS基が含まれ、さらに1以上の二重結合が含まれてよいと考えるべきである。このペプチド模倣体には、金属ペプチド環状構造の一つの環の鋳型空間に重ね合わせることができる鋳型空間を占める環がふくまれ、そのような重ね合わせは同じまたは似たデスクリプタ空間内の要素（ここではR1’とR2’）を位置付ける鋳型空間を定義する環構造によって部分的に定義される。すなわち、両方が5員環であるが、環が異なることは耐えられず、R2’に対するR1’の位置および方向はR2に対するR1の位置および方向と機能的に同じで（同じまたは似たデスクリプタ空間を占めて）よく、したがって、それらの鋳型空間は重ね合わせることができる。ある鋳型空間が別の鋳型空間と重ね合わせることができるかどうかは、実際の構造を用いる結合性測定、機能性測定等のような経験的手段により、しばしば確かめることができることが容易にわかる。しかし、分子モデリングや他の方法は、ある鋳型空間が別の鋳型空間に重ね合わせることができるかどうかを判定するために使用してもよい。環が異なる大きさで、重ね合わせることができる鋳型空間を占める場合には、二つの異なる環を使ってよいことが、さらにわかるであろう。例えば、本発明の次式のペプチド模倣体を考える：
【００７８】
【化２０】
2005504043.tif 000021
ここでも環は同素環として表わされているが、この環には、C基の他に1以上のNまたはS基が含まれ、さらに1以上の二重結合が含まれてよいと考えるべきである。ここで、環構成物の数が金属ペプチドの環構造中の相当する環のそれらとは異なる。しかし、この6員環の鋳型空間が、R2“に相対的な’’R1の位置と方向がR2に相対的なR1の位置や方向と機能的に同じである（同じまた“は似たデスクリプタ空間を占める）である限り、その金属ペプチドの環構造中の6員環と相当する5員環の鋳型空間は重ね合わせることができる。この鋳型空間を別の鋳型空間と重ね合わせることができるかどうかは、主に機能的で経験的な問題であり、要素のデスクリプタ空間は、得られるペプチド模倣体を機能的にするものであるかどうかに取り組むことになる。
【００７９】
最も単純な場合、金属ペプチド上のある要素とペプチド模倣体上の相当する要素の構造的同一性は似たデスクリプタ空間の成分である。すなわち、もし例えば、R1とR1’の両方が同じアミノ酸側鎖部分であれば、両方は、ある他の要素またはデスクリプタ空間に相対的な位置および／または方向のような他のデスクリプタが存在する同じデスクリプタ空間を確実に占める。しかし、R1とR1’は異なるアミノ酸側鎖部分であっても本明細書で与える定義内の似たデスクリプタ空間を占める。例えば、そのような受容体部位の貢献する相互作用の性質を含み、要素R1が特異的な目的の受容体の受容体部位に依存して、多くの異なるアミノ酸側鎖部分のどれかが機能的であろう。もしある与えられた要素が特別な電荷密度と分布を有し、その電荷密度と分布が、受容体の認識と受容体との相互作用を介在するように標的受容体部位と相補的であれば、正しい位置と方向を仮定して、機能的に似た電荷密度と分布を有する別の要素を用いてよく、定義によって、似たデスクリプタ空間を占める。一般的な受容体において、部位が、静電的、水素結合、ファンデルワールスおよび疎水的手段で相互作用をする場合、デスクリプタ空間は同じ相互作用手段によって強制されなければならない。すなわち、もし、あるアミノ酸側鎖残基が、その受容体との相互作用が疎水的な手段によるものであるデスクリプタ空間を占める要素を構成するならば、それらの要素が化学的に同一でなくても、別の分子上の似たデスクリプタ空間を占める別の要素も同じ様に疎水的な手段で相互作用するであろう。一例として、特別な受容体部位に依存して、インドール基はフェニル基と置換されてよく、同素環は複素環と置換されてよく、一つの脂肪族側鎖は別の脂肪族側鎖と置換されてよく、種々の官能基を使用してよい等。デスクリプタ空間が他のデスクリプタ空間および鋳型空間ならびにそのデスクリプタ空間が有効な受容体部位に必ず特異的であるならば、似たデスクリプタ空間の大域的な一対一置換表は不可能であることを認識しなければならない。
【００８０】
したがって、一つの側面では、本発明は、5、6、7、または8員環構造；5-5、5-6、5-7、5-8、6-6、6-7、6-8、7-7、7-8、または8-8縮環型二環式環の足場、または金属ペプチド足場化学空間内に置くことができ、それによって鋳型空間を定義し、次に、すべて生物学的に活性な金属ペプチドの立体化学的アラインメントで、主要な薬理原子団識別官能基またはその代用物で化学的に修飾し、それによってデスクリプタ空間を定義する、同様の三環式環状構造のような小さな分子足場を同定し、設計し、開発する手段および方法を提供する。
【００８１】
本発明はさらに、鋳型空間を形成し、有効なデスクリプタ空間を形成しながら、同定され、メラノコルチン受容体に特異的な金属ペプチド類から巻き戻された薬理原子団識別物で修飾された5、6、および8員環、5-5-縮環型および5-6-縮環型二環式環構造足場の例を提供する。本発明はさらに、目的の巻かれた環状構造の化合物類の合成法を提供する。
【００８２】
図1の一般化されたスキームは、ある金属ペプチドから環状構造への生物学的に活性な薬理原子団デスクリプタの翻訳とそれによる非金属イオン含有分子足場または鋳型の提供を示す。したがって、図1は、LまたはD配置、またはそれらの組合せの残基を含み、修飾または非天然側鎖を含みうる、3ペプチド金属イオン結合配列を表す。その金属ペプチドは、片末端または両末端に1以上の付加的なアミノ酸残基、模倣体または他の構造と末端または保護基を含みうる。示すように、R1は便宜的に末端基または1以上の修飾されてもよいアミノ酸残基で、R2とR3はアミノ酸側鎖部分またはそれらの誘導体を表す。示されているそれぞれの誘導体環状構造は、末端基などの2以上の好ましくは全てのR基および他の標的識別基が、その金属ペプチドの相当する要素が占めるのと同じデスクリプタ空間を、その環状構造誘導体中に占めるように設計される。例えば、方向、R基からの距離、などのように、各R基とそれぞれ他のR基との関係は、金属ペプチドと環状構造誘導体の両方に関して同じまたは実質的に似ている。同様に、距離、角度などに関して、鋳型空間を形成するそれぞれの環状構造に相対的な各R基の位置は、その金属ペプチドとその環状構造誘導体類間と同じまたは実質的に似ている。図1のペプチド模倣化合物類は例示のためのものに過ぎず、他の原子または二重結合を含む他の同素環および複素環構造の両方が可能であり考慮される。また、環の大きさも変えてよく、二環式および三環式環状構造を含むがそれらに限定されない化学的に可能な固定された環状構造を使用してよい。
【００８３】
構造が似た側鎖の選択に加えて、多種類のパラメータのどれかによって誘導される環状構造によって、選ばれた金属ペプチドをモデル化してよいということを、上記からさらに理解されよう。例えば、誘導された環状構造は、水素結合供与体または受容体、電荷中心、芳香環中心、疎水性中心などを有してよく、それぞれはデスクリプタ空間を構成し、すべては金属ペプチド上でモデル化される。典型的なペプチド（すなわち、天然または合成非金属ポリペプチド）では、そのペプチドの広範囲の確率的に求められた二次および三次構造を求める広範囲のねじれ角が存在する。したがって、一次構造の典型的なペプチド知識を有していることが、大規模な実験的証拠なしで二次または三次構造ご求めることができるということは意味しない。しかし、ある金属ペプチドに関して、その金属ペプチドの金属イオンと金属イオン錯体形成部分は、立体配座が強制され、固定され決定された二次構造から、固定された鋳型空間が得られる。金属イオン錯体形成のゆえに、その金属イオンと錯体を形成する残基内および残基間のねじれ角が固定され、その酸化状態、配位形状などを含む、使用する金属イオンの型に基づいて求めてよい。
【００８４】
結果として、特にその金属イオンに、そしてかなりの程度それに隣接する残基に結合するその部分を含むどれかの金属ペプチドがモデル化され、そのような情報は形状分析を行い、誘導された環状構造を構築する。例えば、水素結合供与体および受容体、正または負に荷電した中心、芳香環の中心、疎水的な中心などの三次元構造物の場所を求め（その有効な部分を構成する原子間の距離を求めることを含む）、そのような情報は誘導された環状構造をモデル化するために使用してよい。そのようなモデル化には、SYBYL（トリポス社）、アルケミー（トリポス社）、アライン／ファーマコフォア（アクセルリーズ社）、キャタリスト（アクセルリーズ社）、マクロモデル（シュレージンガー社）、PCモデル（セレナソフトウェア）、CSケムオフィス（ケンブリッジソフト社）やこの分野で知られる他のプログラムのような数多くのソフトウェアプログラムを使用してよい。
【００８５】
金属ペプチドの特殊な立体化学的特徴は、錯体を形成する金属イオンの配位球の立体化学の結果である。金属の配位球の好ましい形状は、立体配座の制限の性質と程度を記述し定義する。一般的に、本発明で有用であるとわかる金属の多くは、配位数が4〜6だが（そして時々しかし希に8）これは、与えられた形状と配位球のある金属イオンで結合を作るという立体的に適合する方法で位置する反応性基を有するペプチドに残基が存在しなければならないことを意味する。ペプチド鎖内の配位基には、アミン、アミド、イミダゾール、またはグアニジノ基の窒素原子；チオールまたはジスルフィドの硫黄原子；そしてヒドロキシ、フェノール、カルボニル、またはカルボキシル基の酸素原子が含まれる。また、ペプチド鎖または個々のアミノ酸残基は、オキシム、ヒドラジノ、スルフヒドリル、フォスフェート、シアノ、ピリジノ、ピペリジノ、またはモルフォリノ基のような配位基を含むように化学的に変えることができる。配位数4の金属に関しては、金属イオンに結合する好ましいペプチド配列は、アミノ酸残基の一つが硫黄ベースの配位基（例えばCys）を有する側鎖を有する3アミノ酸配列であり、そのような残基はN1S1配位子を構成する。したがって、3アミノ酸配列は、N3S、N2SOまたは似た配位子を提供でき、窒素および硫黄または酸素原子を利用する金属イオンの四座配位子配位を作る。
【００８６】
金属イオンを選ぶと、得られる分子の構造が部分的に決まる。例えば、Reイオンを使えば、正四角錐型配位の形状になる。Tc（本明細書のどの例でもほとんど似た配位要求性と化学的性質を有しReと置き換えてよい）も似た正方形のピラミッド形配位の形状になる。Cu、Ni、Znのような他の金属を使えば、正四角錐型配位の形状になる。したがって、Reの原子半径が1.37Åのオーダー、Cuのそれより小さく1.28Åのオーダーにあれば、その金属配位基による大きさは、その金属イオンの原子半径ではなく、大部分が配位形状によって決定される。正方形の平面型配位の四座配位子形状を使うCu、Ni、Znのような金属イオンでは、その金属イオンおよび配位している4つの原子（例えばS、NやO）のそれぞれは、同一平面にある。しかし、（正四角錐型配位の四座配位子形状になる）ReやTcのような金属イオンを使う場合、配位している4つの原子（例えばS、NやO）は同一平面にあるが、Reの場合には、その金属イオンは、約0.65Åだけ配位している原子の面からずれている。
【００８７】
本発明では、広範囲の金属イオンのどれを使ってもよいが、ReとTcが特に好ましい。どちらの金属もCys含有ペプチドと似た錯体を作り、似た正四角錐型錯体ができる。しかし、Re錯体ペプチドは、相当するTc含有ペプチドより化学的に安定である。金属イオンとペプチドの配位している4つの原子すべてが同一平面にあるZnとCuの正方形の平面型錯体は、TcやReで得られるものとほぼ同じ配位形状となる。ここで、その金属イオンは、金属イオンの原子半径の差に耐えずに、そのペプチドの配位している4つの原子の面から上へ突き出す。例えば、もし、Re、Tc、ZnやCuを使えば、最終結果は、それぞれ位相的類似性を与える金属ペプチド類となる。しかし、Re錯体化金属ペプチドは、空気および湿気に安定で特殊なまたは添加物も保護剤も必要ない点がユニークである。Re錯体は、固体の化合物としてルーチン的に単離でき、固体としてまた広いpH範囲の溶液中で安定で、分析的特徴付けと、もっと重要なのは、広範囲の条件で生体外および生体内の両方の生物学的実験での使用が容易である。Zn錯体やCu錯体のような他のタイプの金属は、溶液の形での実験で使用するのに最も好都合である。Zn錯体とCu錯体は、作るのが極めて容易で、適当な緩衝溶液中で、1マイクロモル〜1ミリモルの金属イオンの存在下で本質的に形成される。
【００８８】
ReおよびTc錯体は、一般にそして好ましい具体例では、酸化状態[V]の金属オキソ錯体である。金属ペプチド類中の金属オキソ核M=Oは、核の構造に異性化をもたらしてよい。その金属オキソ基は、キラルなアミノ酸側鎖に関して、synまたはantiでよい。オキソ基の方向はアミノ酸側鎖によって作られる位相表面を変えないので、この異性化はその金属ペプチドの生物学的活性には影響を与えない。その金属イオンは回転が天然の回転構造における水素結合によって安定化される場所に似た空間的位置にあり、したがってオキソ基は天然の回転構造では届かない空間内にある。金属ペプチド類の個々のsynおよびanti異性体のコンピュータモデリングの結果、これらの二つの構造は、各アミノ酸の位置に関して、完全には識別できず、オキソ基の方向だけが異なることが示された。したがって、オキソ基の方向によってだけ異なる金属ペプチド間のような鋳型空間は一般に機能的には識別できない。
【００８９】
図2は、強力な金属ペプチド分子上で同定されるメラノトロピン受容体特異的識別基要素に基づく環状構造の非金属小分子を得ることに関する情報を示す。その金属ペプチド分子は、図2に示す、Re錯体化Ac-Nle-Ala-His-D-Phe-Arg-Trp-Cys-NH2であり、2000年6月14日に出願された「メラノコルチン金属ペプチド構築物、コンビナトリアル・ライブラリーおよび応用」と題する国際特許出願番号PCT/US00/16396（引用文献として本明細書に含む）で同定されたあるメラノコルチン受容体の強力な作用物質である。この金属ペプチドの主要な構造的情報は、Try、Arg、およびD-Phe残基の側鎖によって定義され、これらはその金属ペプチドの足場上で強く強制されている。したがって、これらの側鎖はそれぞれデスクリプタ空間を定義し、それにはその中に金属ペプチドの足場または環状構造の鋳型空間との関係が含まれる。したがって、構造の固さは、Try、Arg、およびD-Pheの側鎖の相互間の立体化学的関係を定義する。さらに、これらの識別要素は、3環金属ペプチド足場の5員環の1つの周りに配置される。したがって、この金属ペプチドのこの一つの環は最も有効な鋳型空間を定義する。図2の化合物1はデスクリプタ空間を定義する同定された構造的要素が鋳型空間を作る5員環ピロリジン環上で修飾される代表的な誘導された環状構造分子であり、その型空間はReO錯体化Ac-Nle-Ala-His-D-Phe-Arg-Trp-Cys-NH2のペプチド−金属足場中に鋳型空間を形成する相当する5員環と重なる。その修飾の過程で、いくつかの合成的妥協を行い、小さい分子的足場上での分子の合成を容易にしてもよい。例えば、化合物1の開発では、インドール基をフェニルで置き換え、アルギニン側鎖を一級アミノ基で終わる脂肪族側鎖で置換した。生物学的スクリーニングのデータから明らかなように（実施例133を参照）、化合物1は、本格的な作用物質活性を有する強力なMCR-1特異的化合物であり、その金属ペプチド中のMCR-1要求性の非金属含有化合物1への完全な翻訳を示唆する。同様に、図2の化合物2中の縮環型5-5員二環足場もまた、金属−ペプチド足場上の三つの環の内の二つの上に重なってよい。したがって、これらの環は、重ね合わせ可能な鋳型空間を定義する。類似の合成的妥協での薬理原子団の翻訳もまた、強力なMCR-1作用物質を与える（実施例180を参照）。化合物2には、その金属ペプチド中のインドール環に取って代わる2’-ナフチル基が存在する。図2の化合物3の鋳型は、それが縮環6-5員二環システムであり、2’-ナフチル基が橋頭の窒素からさらに1炭素原子だけ取り除かれているという点を除けば、化合物2のそれに似ている。これらの違いは、その金属ペプチド中の金属−ペプチド足場の二つの有効な環上へのこの構造を重ね合わせを不可能にし、それによりこの分子による受容体認識にミスマッチを引き起こすので同じ薬理原子団の翻訳は不活性な分子を与える。したがって、化合物3は、実施例3の方法を用いるメラノコルチン受容体への結合性は示さず、実施例4の機能性測定の方法によって不活性化された。他方、6員環足場上の同じ薬理原子団をうまく修飾した結果（実施例11〜78を参照）、その金属ペプチドの金属とペプチドの足場中のそれに似た鋳型空間中にフィットする足場を使い、デスクリプタ要素を定義されたデスクリプタ空間中に適切に置き、それによって、金属ペ��チドを用いて得られる構造情報に基づいて強力なペプチド模倣体類を得ることが概念的には可能であることを示している。これらの結果は、その金属ペプチドに基づいて、側鎖を含む構造情報、立体的位置、および分子デスクリプタを用いて、受容体特異的分子デスクリプタを、（金属イオンに基づく）一つの固い足場から（非金属環に基づく）別の足場へ翻訳していることを証明している。
【００９０】
臨床応用    一般に、本発明で得られるペプチド模倣体類は、生物学的に活性な金属ペプチドを使用できるどのような応用または用途に使用してもよい。したがって、バソプレシン受容体特異的金属ペプチド由来の本発明のペプチド模倣体は、例えば、敗血症性ショック、出血性ショック、心室細動のような心拍停止管理、および血行動態を含む他の症状の治療に使用してよい。拮抗物質のようなアンジオテンシン受容体遮断薬由来のペプチド模倣体は、高血圧、心臓麻痺などの治療に使用できよう。オキシトシン金属ペプチド由来のあるペプチド模倣体は、陣痛誘発、分娩後出血の治療、情動行動の修正などに使用できよう。
【００９１】
メラノコルチン受容体特異的薬剤の場合には、MC1-R特異的である本発明のペプチド模倣体類を、ヒトの皮膚の、UV照射によるような太陽誘導性の腫瘍性活動に対する化学的予防薬として使用可能である。本発明のMC1-R作用物質ペプチド模倣化合物類は、メラニンを作り、フェオメラニンをユーメラニンに変換するために使用してよい。暗褐色のまたは黒い色素であるユーメラニンは、黄色いまたは赤い色素であるフェオメラニンより光保護効果があると考えられている。メラニン生成過程には、表皮性メラノサイト中のMC1-Rの刺激が関わっており、それによってこれらの色素細胞内のチロシナーゼ酵素の刺激を介在し、チロシンからドーパ、次にドーパキノンを経てユーメラニンへの変換を誘導すると信じられている。直接的な太陽光線への暴露による日焼けは、表皮中でのPOMC遺伝子からのメラニン細胞刺激性ペプチドの局所的生産によって同じ経路から起きると提案されている。したがって、ユーメラニン生産の刺激とフェオメラニンからユーメラニンへの変換は、皮膚の太陽またはUV誘導腫瘍性活動の遮断において望ましい化学予防様式であろう。したがって、本発明の強力で、高親和性で、高選択性のMC1-R作用物質ペプチド模倣化合物は、皮膚のメラノサイトで腫瘍性活動を誘発する有害な太陽またはUV暴露に対する治療用の化学予防薬として使用できる。
【００９２】
別の具体例では、MC4-R作用物質である本発明のペプチド模倣化合物類は、病的肥満や関係する症状の治療を含むエネルギー代謝や摂食行動を修正するための治療薬として使用できる。MC4-R拮抗物質である本発明のペプチド模倣化合物類もまた、食欲減退の治療のような摂食障害の治療薬として使用できる。摂食と満腹の制御センターは視床下部にある。これらの応答は、視床下部内の特定の受容体を通して信号を伝達する種々のホルモンや可溶性因子によって決まる。MC4-Rは、脳で発現することが知られており、遺伝子を標的にすることによるこの受容体の不活性化は、食欲亢進、高インシュリン血症および高血糖症に関係する円熟開始肥満症候群をマウスに引き起こした。
【００９３】
もう一つの具体例では、本発明のペプチド模倣化合物類は、男性の勃起不全と女性の性的不全の両方の治療を含む性的不全の治療のための治療薬として使用されよう。もう一つの具体例では、本発明のペプチド模倣化合物類は、特にMC1-RおよびMC3-R作用物質金属ペプチドペプチド類を含む炎症の治療のための治療薬として使用してよい。
【００９４】
本発明のもう一つの具体例では、MC5-R特異的である本発明のペプチド模倣化合物類は皮脂生産を減らし、したがってニキビおよび関連する疾患の治療に有効であろう。本用途のためのペプチド模倣化合物類は、ジェル、ローション、クリームや他の局所的製剤として、局所的投与のために使い勝手よく処方してよい。
【００９５】
ペプチド模倣化合物類は、当分野で既知のあらゆる方法で製剤してよい。それらの方法には、錠剤、カプセル、キャプレット、懸濁液、粉末、凍結乾燥状態およびエアロゾルが含まれるが、これらには限定されず、緩衝剤、結合剤、安定剤、抗酸化剤および本技術で知られる他の薬剤と混合され製剤してよい。これらのペプチド模倣化合物類は、静脈注射、皮下注射、粘膜経由投与、経口投与、皮膚投与、皮膚パッチ、エアロゾルなどを含む、本技術で既知の全身性または部分的に全身性の手段で投与してよい。
本発明はさらに、本発明のペプチド模倣化合物と薬理学的に許容できる担体を含む薬理学的組成物を提供する。したがって、本発明のペプチド模倣化合物は、本発明のペプチド模倣化合物類の少なくとも一つと、希釈剤、担体などのような結着剤と、安定剤、保存料、緩衝剤などのような添加物を含む1以上の薬理学的に許容できる担体を含む薬理学的組成物に製剤または配合されてよい。製剤の結着剤には、ポリビニルピロリドン、ゼラチン、ヒドロキシセルロース、アカシア、ポリエチレングリコール、マニトール、塩化ナトリウムやクエン酸ナトリウムが含まれてよい。注射や他の液体投与製剤のためには、少なくとも1以上の緩衝剤成分を含む水が適当であり、安定剤、保存料および溶解剤を使用してもよい。固体の投与製剤のためには、澱粉類、糖類、脂肪酸類などのような種々の増粘剤、増量剤、増嵩剤および担体添加物のどれかを使用してよい。局所投与製剤のためには、種々のクリーム、軟膏、ジェル、ローションなどのどれかを使用してよい。ほとんどの薬理学的製剤のためには、不活性成分が、薬剤の重量または体積の大部分を構成するであろう。薬理学的製剤のためには、種々の抑制放出性、徐放性または時間放出性の製剤または添加物のどれかを使用してよく、その結果、投与物は、本発明のペプチド模倣化合物がある一定時間かけて送達されるように製剤してよい。
本発明のペプチド模倣化合物類および薬理学的組成物類は注射により投与してよく、その投与は、静脈、皮下、筋肉内、腹腔内または本技術で良く知られる他の手段で行ってよい。一般に、本発明のペプチド模倣化合物類が細胞の表皮層を通して導入されどの投与経路を使用してもよい。投与手段には、経粘膜投与、口腔内投与、経口投与、経皮投与、吸引投与、経鼻投与などが含まれてよい。治療のための投与量は、上述の手段や本発明の技術で知られる他の手段のどれかによって、目的の治療効果を得るのに充分な量である。
【００９６】
一般に、ある患者に投与される本発明のペプチド模倣化合物の実際の量は、投与の形態、使用する薬剤、そして目的の応答により、かなり広い範囲で変えてよい。これは、本技術に普通の熟練を有する人にとっては、薬理動力学的研究、血漿内半減期、投与量増大研究などのような手段により容易に求められるであろう。
【００９７】
本発明を以下の非制限的実施例によりさらに説明する。
実施例1
メラノコルチン受容体特異的金属ペプチドの合成および金属イオン錯体化
ペプチド配列Ac-Nle-Ala-His-D-Phe-Arg-Trp-Cys-NH2を、側鎖の官能基を酸不安定基で保護しながら、Fmoc化学を用いて合成した。レニウム錯体化は、国際特許出願PCT/US00/16396に総論的に開示されている、塩基存在下でのレニウム転移剤ReOCl3(PPh3)2での処理により行った。レニウムイオン錯体化の後、得られる金属ペプチドを実施例3の方法を用いてメラノコルチン受容体特異性に関して調べた。競争的阻害結合測定において、1mMの濃度で、その金属ペプチドは、MC4-Rに対する125I-NDP-a-MSHの98%およびMC1-Rに対して91%の結合を阻害したことが求められた。作用物質／拮抗物質状態を求めるための実施例4中のcAMP測定において、その金属ペプチドはMC1-R、MC4-RおよびMC5-Rに関して作用物質であることが求められた。Kiを実施例4の方法によって求め、以下の結果が得られた：
2005504043.tif 000022
実施例2
質量測定および核磁気共鳴分析
正モード用いるウォーターズマイクロマスZQ装置を用いて質量値を求めた。求めた質量値を計算値と比較し質量+1(M+1)の形で表した。
【００９８】
プロトンNMRのデータは、ブルカー300MHzスペクトロメーターを用いて得た。スペクトルは、化合物類を、適宜、クロロホルム、ジメチルスルフォキサイド、またはメタノールのような重水素化溶媒に溶解した後で得た。
実施例3
競争的阻害によるメラノコルチン受容体特異性の測定
競争的阻害結合測定は、pH 7.2で1 mM MgCl2、2 mM CaCl2、5 mM KClを含む50 mM HEPES緩衝液中の0.4 nM 125I-NDP-a-MSH（ニューイングランドニュークリア、ボストン、マサチューセッツ、アメリカ）を用いて、hMC3-R、hMC4-R、hMC5-R、およびB-16マウスメラノーマ細胞（MC1-Rを含む）から調製された膜を用いて行った。測定管には、その受容体に対する125I-NDP-a-MSHの結合を阻害する効率を求めるための、ある選ばれた濃度の本発明の試験ペプチド模倣体を入れた。非特異的結合は、1 mM a-MSHの存在下での測定における125I-NDP-a-MSHの結合の完全な阻害によって測定した。
【００９９】
インキュベーションは、室温で90分行い、その後、測定混合物を濾過し、膜を氷冷緩衝液で3回洗浄した。フィルターを乾燥させ、膜に結合した残存放射能をg線カウンター内で計数した。100%特異的な結合を、1 mM a-MSHの存在または非存在下で細胞膜に結合した放射能(cpm)の差と定義した。試験化合物の存在下で得られるcpmを100%特異的な結合で正規化し、125I-NDP-a-MSH結合の阻害百分率を求めた。各分析は3回行い、実際の平均値を記載した。
実施例4
作用物質／拮抗物質状態およびKiの測定
いくつかのペプチド模倣体類のKi(nM)は、MC4-Rに関する作用物質／拮抗物質状態と同様に求めた。メラノコルチン受容体類での化合物類の機能性評価は、MC3-R、MC4-RまたはMC5-Rを発現するHEK-293細胞中およびB-16マウスメラノーマ細胞（MC1-Rを含む）中での細胞内cAMPの蓄積を測定することにより行った。拮抗活性は、それらの化合物に暴露させた後で、a-MSH誘導cAMPレベルを測定することによって求めた。10 mM HEPES、pH 7.5、5 mM MgCl2、1 mMグルタミン、0.1%アルブミンおよびフォスフォジエステラーゼ阻害剤である3-イソブチル-1-メチル-キサンチン0.6 mMを含むEarle均衡化塩溶液に懸濁させた細胞をウェル当たり0.5×105細胞の密度で96穴プレートに移植した。細胞は、a-MSHの存在または非存在下、37℃で1時間、試験化合物類とインキュベートした。cAMPレベルは、細胞溶解液中でEIA（アマシャム）により測定した。データ解析およびEC50値は、プリズムグラフパッドソフトを用いる非線形回帰分析により求めた。
実施例5
ピロリジン型化合物類の合成のための一般的手順
1,4-ジアミノブタントリチル樹脂（0.1ミリモル、ノボバイオケム）をDCM中で30分間、膨潤させた。溶媒を除去し、NMP中、N-Fmoc-O-ベンジル-ヒドロキシプロリン（0.4ミリモル）、TBTU（0.4ミリモル）およびDIEA（0.6ミリモル）をその樹脂に加えた。それを窒素下で30分間、攪拌し、NMPで2回およびDCMで2回洗浄した。Fmoc基はその樹脂をNMP中ピペリジン(2%)で20分間処理してはずした。NMPで3回およびDCMで3回洗浄した。次に、Fmocで保護された目的のアミノ酸を上述と同じ要領で樹脂に付着させた。カルボン酸上のN末端の保護基も同様に結合させた。または、樹脂を乾燥ピリジン中の無水物（6ミリモル）と1時間攪拌して使用した。
スキーム1に示すように、樹脂上に化合物を完全に集合させた後、Fmoc基が存在するならば除去し、樹脂を、NMPで3回、DCMで3回、そしてメタノールで3回洗浄した。次に、樹脂を、真空下で完全に乾燥させた。最後の化合物は、TIS/TFA/DCM(2 mL; v/v/v=5/50/50)で1時間、処理することで樹脂から除去した。有機性液体を留去し、残渣をHPLCで精製して最終化合物を得た。質量分析を行い、化合物の分子量を確認した。
【０１００】
【化２１】
2005504043.tif 000023
実施例6
ピペリジン-2-オン化合物類の合成のための一般的手順
方法A。この方法をスキーム2にまとめる。ワインレブAM樹脂（1.5ミリモル、ノボバイオケム）をDCM中で1時間、膨潤させた。Fmoc基は、NMP中ピペリジン(20%)での処理により除去した。樹脂は、NMPで3回、DCMで3回洗浄した。
【０１０１】
【化２２】
2005504043.tif 000024
2-ブロモ酢酸（7.5ミリモル、アルドリッチ）とHOAt（7.5ミリモル、アルドリッチ）をDMF(10 mL)に別々に溶かし、次にDIC（7.5ミリモル）をゆっくり添加した。30分間、攪拌後、調製した樹脂にこの溶液を添加した。樹脂混合物を20時間、激しく攪拌した。
次に、樹脂混合物を、DMFで2回、DCMで2回洗浄した。次に、目的のアミン（75ミリモル）をDMSO(16 mL)中のこの樹脂に添加し、得られる混合物を、24時間、攪拌し、DMSOで2回、DMFで2回、DCMで2回洗浄した。樹脂上に生成する二級アミンを、24時間、DCM/DMF(25 mL; v/v = 4/1)中で、HOAt（15ミリモル）とDIC（15ミリモル）を用いてZ-Lys(Boc)-OH（5ミリモル）と結合させた。樹脂を、DMFで2回、DCMで2回、メタノールで2回そしてエーテルで洗浄し、次に真空下で一夜、乾燥させた。
乾燥させた樹脂は、窒素下で乾燥THF(20 mL)中で1時間、膨潤させた。このLAHの溶液に、0℃でTHF（1.875ミリモル）をゆっくり添加した。さらに1時間攪拌後、硫酸水素カリウム水溶液（1.25等量）で反応を停止させた。樹脂を濾過により除去し、DCMで3回洗浄した。合わせた濾液を減圧濃縮し、エーテルで再抽出し、食塩水で洗浄した。エーテル層を硫酸ナトリウム上で乾燥し、エーテルを留去し、粗アルデヒド化合物残渣を得、これを真空乾燥し、質量分析で調べた。得られた粗化合物をメタノール(10 mL)に溶解し、触媒量の硫酸バリウム上のパラジウム(5%)上、水素（1気圧）下で2日間、攪拌した。反応は質量分析でモニターし、アルデヒドの完全な消失と、還元化合物ピペラジン-2-オンの存在を確認した。この粗化合物をさらに精製することなく次の段階に使用した。
ピペラジン-2-オンは、DMF中で、HOAt（2等量）とDIC（2等量）を用いて、室温で一夜、適当なアミノ酸誘導体（2等量）とカップルさせた。続くアミノ酸類も同様にカップルさせた。フラッシュクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン、v/v = 1/2）を用いて、最終的な充分に保護された生成物を得た。適当な場合には、酢酸エチル中ジエチルアミン 20%溶液での処理でFmoc基を除去し、メチレンクロライド中TFA 30%溶液で1時間、処理してBoc基を除去した。最終化合物類をHPLCでの精製後、純粋な形で得た。
【０１０２】
方法B。方法Bをスキーム3にまとめる。乾燥DMF中に化合物A（有機カルボン酸）とHOAt（1当量）を含む溶液に、1-(3-ジメチルアミノプロピル)-3-エチルカルボジイミド塩酸（2当量）を加えた。得られた混合物を室温で30分間、撹拌した。エタノールアミン（2当量）を加え、16時間、反応を行わせた。反応混合物を水に注ぎ、酢酸エチルで2回抽出した。有機層を、1N塩酸で2回、1N水酸化ナトリウムで2回、そして食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥した。減圧濃縮後、生成物Bをシリカゲルカラム上でメチレンクロライド中10%メタノールで精製した。
【０１０３】
ジオキサンに溶かした酢酸（5当量）を同じくジオキサンに溶かした化合物B（1当量）と水素化ホウ素ナトリウム（5当量）の混合物にゆっくり添加した。溶液を2時間、還流し、反応を水で停止させた。生成物を1N塩酸でエーテルから抽出した。溶液をKOHでpH 11に調整し、エーテルで3回、抽出し、有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、化合物Cを得、これをさらに精製することなく次の反応に用いた。
【０１０４】
目的のN保護アミノ酸（1当量）を、DMFに溶かしたHOAt（1当量）とDIC（1当量）に加え、得られる溶液を30分間、撹拌した。次に化合物Cを加え、混合物を一夜、撹拌した。溶媒を留去した後、シリカゲルカラム精製により化合物Dを得た。
【０１０５】
【化２３】
2005504043.tif 000025
保護基P（FmocまたはCbz）は、酢酸エチルに溶かしたジエチルアミン(20%)または炭素上10%のパラジウムで触媒される水素ではずした。得られる化合物を、TPP（3当量）を含む乾燥THFに溶解した。THFに溶かしたDEAD（3当量）をゆっくり添加した。反応混合物をさらに12時間、撹拌し、溶媒を留去し、生成物Eをシリカゲルカラム上で酢酸エチル／メタノール(v/v = 4/1)で精製した。
【０１０６】
最終化合物Fは、実施例6の方法Aで説明したように合成した。
【０１０７】
方法C。反応スキームをスキーム4に示す。ディーンスタークトラップを付けた丸底フラスコに、ベンゼンに溶かしたジエタノールアミン（1当量）とベンズアルデヒド（1当量）の混合物を入れ、4時間、共沸的に還流した後、溶媒を留去した。生成物Bが無色の油状物として得られ、これを次の反応に使用した。
【０１０８】
化合物B（1当量）、2-ナフトール（1.3当量）およびTPP(1.5当量)をトルエン(80 mL)に溶かした。トルエンに溶かしたDEAD(1.1当量)を、窒素下、0℃で滴下した。反応混合物を室温で一夜、撹拌した。反応の完了は、TLCでモニターした。反応終了後、濃塩酸(1 mL)を反応混合物に加え、50℃で1時間、撹拌した。生成した析出物を濾過で集め、DCMで2回、洗浄した。集めた白色固体を1N水酸化ナトリウム(20 mL)に溶解し、溶液を酢酸エチル30 mLで4回抽出した。合わせた有機層を水で3回、食塩水で1回洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、溶媒を減圧留去すると、生成物Dが白色結晶性固体として得られた。最終化合物Eは、実施例6、方法AとBを用いて合成した。
【０１０９】
【化２４】
2005504043.tif 000026
実施例7
ヘキサヒドロ-ピロロ[1,2-a]ピラジン-4-オンの合成のための一般的手順
この方法をスキーム5に示す。DCMに溶かしたN-(tert-ブトキシカルボニル)-O-ベンジル-ヒドロキシプロリンの溶液に、NMM(1当量)とクロロ蟻酸イソブチル(1当量)を-15℃で加え、30分間、撹拌した。N,O-ジメチルヒドロキシルアミン塩酸(1.5当量)とNMM(1.5当量)の溶液をその混合物に加え、30分後、反応混合物を室温まで下げ、一夜、撹拌した。溶媒を留去し、残留物を、酢酸エチル-ヘキサン混合物(v/v = 2/1)を用いてシリカゲルカラムで精製し、N-(tert-ブトキシカルボニル)-O-ベンジル-ヒドロキシプロリンジメチルヒドロキサミドを得た。O-ベンジル基は、水素1気圧下でメタノール中で、炭素上10%パラジウムを用いて10時間かけてはずした。濾過の後、溶媒を留去し、得られる化合物を真空乾燥後、次の段階の反応に用いた。エーテル結合の生成は、次の方法Aまたは方法Bのいずれかで行った。
【０１１０】
【化２５】
2005504043.tif 000027
方法A    N-(tert-ブトキシカルボニル)-ヒドロキシプロリン N,O-ジメチルヒドロキサミド、芳香族アルコール(1.5当量)およびTPPをTHFに溶解した。この溶液に、THFに溶かしたDEAD(1.5当量)を0℃で滴下した。12時間後、溶媒を留去し、残留物を酢酸エチルに溶かし、1N水酸化ナトリウム、水、食塩水の順に洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。酢酸エチル-ヘキサン(v/v = 2/1)を用いるシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより、精製されたO-置換 N-(tert-ブトキシカルボニル)-ヒドロキシプロリン N,O-ジメチルヒドロキサミドが得られた。
【０１１１】
方法B    メタンスルフォン酸クロライド（2当量）を、N-(tert-ブトキシカルボニル)-ヒドロキシプロリン N,O-ジメチルヒドロキサミドとTEA(2等量)のDCM溶液に0℃でゆっくり加えた。反応混合物をさらに10分間、攪拌し、室温になるまで、さらに45分間、攪拌した。次に溶媒を留去し、残留物を水に溶解させた。それを酢酸エチルで2回抽出し、合わせた有機層を食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。溶媒を留去し、残留物を真空乾燥させO-メシル N-(tert-ブトキシカルボニル)-ヒドロキシプロリン N,O-ジメチルヒドロキサミドを得た。この反応の収率は100%に達した。水素化ナトリウム(2当量)をDMFに懸濁させた液に、DMFに溶解させた芳香族アルコール(2当量)を、激しく攪拌しながら添加した。水素放出の完了後、O-メシル N-(tert-ブトキシカルボニル)-ヒドロキシプロリン N,O-ジメチルヒドロキサミドのDMF溶液を加え、16時間、攪拌した。次に、反応温度を90℃まで上げ、24〜48時間、攪拌を継続した。冷却後、反応混合物を水中に注ぎ、酢酸エチルで2回、抽出した。合わせた有機層を水で2回、食塩水で1回、洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。溶媒を留去し、生成物を、実施例7の方法Aに従って精製した。
上記の方法でエーテル結合を生成させた後、O-置換 N-(tert-ブトキシカルボニル)-ヒドロキシプロリン N,O-ジメチルヒドロキサミドからDCMに溶かしたTFA25%で1時間、処理することでtert-ブトキシカルボニル基をはずした。溶媒を留去した後、化合物をDCMに溶解し、NMM(1当量)を添加した。その化合物は、塩化ギ酸イソブチルを、Z-Lys(Boc)-OH(1当量)とNMM(1当量)のDCM溶液と-15℃で30分間ゆっくり攪拌することにより別々に得られた反応混合物と混合した。次に、合わせた溶液を室温でさらに16時間、攪拌した。溶液を留去した後、残留物を、酢酸エチルを溶離液としてシカゲルカラムで精製した。
上で得られたO-置換 N-(N-ベンジルオキシカルボニル-N’-tert-ブトキシカルボニル-リジル)-ヒドロキシプロリン N,O-ジメチルヒドロキサミドを乾燥THFに溶解し、溶液を0℃まで冷やした。THFに溶解したLAH(1.25当量)をゆっくり加え、反応混合物をさらに30分間、攪拌した。反応は、硫酸水素カリウム水溶液(1.75当量)で停止させた。溶液をエーテルで希釈し、1N塩酸、飽和炭酸水素ナトリウム、および食塩水で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、溶媒を留去し、乾燥させた。得られるアルデヒド誘導体は精製せずに次の反応に使用した。
前の工程からの生成物をメタノールに溶解し、触媒量の硫酸バリウム中パラジウム(5%)を添加し、混合物を1気圧の水素で3日間、水素化した。反応は、質量分析によりモニターした。得られる混合物を濾過し、溶媒を留去し、2,7-二置換ヘキサヒドロ-ピロロ[1,2-a]ピラジン-4-オンを得た。この化合物をさらに精製することなく使用した。
この2,7-二置換ヘキサヒドロ-ピロロ[1,2-a]ピラジン-4-オンは、DMFに溶かしたHOAt(2当量)とDIC(2当量)を用いて、目的のアミノ酸残基類(2当量)と室温で一夜、カップルさせた。他のアミノ酸誘導体類も同様にカップルさせた。最終的に完全に保護された化合物は、フラッシュクロマトグラフィー（酢酸エチル／ヘキサン、v/v = 1/2）で精製した。適当な場合には、酢酸エチルに溶かしたジエチルアミン(20%)での処理でFmoc基をはずし、DCMに溶かしたTFA(30%)で1時間、処理してBoc基をはずした。最終化合物類は、HPLCでの精製の後、純粋な形で得られた。
【０１１２】
実施例8
置換ヘキサヒドロ-ピロロ[1,2-a]イミダゾール-3-オンの合成のための一般的手順
一般的方法をスキーム6に示す。TBTU(1当量)を、乾燥DCMに溶かしたN-(tert-ブトキシカルボニル)-グルタミンベンジルエステルおよびNMM(1当量)の溶液に加え、混合物を室温で30分間、撹拌した。DCMにN,O-ジメチルヒドロキシアミン塩酸(1.5当量)とNMM(1.5当量)を溶かした混合物を上記のものとは別に30分間、撹拌した。これらの二つの混合物を合わせ、室温で18時間、撹拌した。有機溶媒を留去し、残留物をフラッシュクロマトグラフカラムにかけ、酢酸エチル／ヘキサン(v/v = 2/1)で溶離し、N-(tert-ブトキシカルボニル)-5-(N,O-ジメチル-ヒドロキサミド)-グルタミンベンジルエステルを得た。メタノール中に用意した、N-(tert-ブトキシカルボニル)-5-(N,O-ジメチル-ヒドロキサミド)-グルタミンベンジルエステルと触媒量の炭素中パラジウム(10%)を室温、1気圧の水素下で一夜、撹拌した。濾過および溶媒留去の後、透明な油状生成物が得られ、これを次の段階に用いた。
【０１１３】
【化２６】
2005504043.tif 000028
THFにN-(tert-ブトキシカルボニル)-5-(N,O-ジメチル-ヒドロキサミド)-グルタミン(3.9 g, 13.45ミリモル)とNMM(1当量)を溶かした溶液を-15℃に保ち、それにクロロ蟻酸イソブチルのTHF溶液をゆっくり添加した。混合物をその温度でさらに30分間、撹拌した。水に水素化ホウ素ナトリウム(1.5当量)を溶かした溶液を、そのTHF溶液に少しずつ添加した。20分後、温度を室温まで上げ、さらに1時間、撹拌した。有機溶媒を留去し、残留物をカラム(DCM中10%メタノール)で精製し、N-(tert-ブトキシカルボニル)-5-(N,O-ジメチル-ヒドロキサミド)-グルタミノールを得た。
【０１１４】
DCMにN-(tert-ブトキシカルボニル)-5-(N,O-ジメチル-ヒドロキサミド)-グルタミノールとTEA(2当量)を溶かした溶液を0℃に保ち、それにメタンスルフォン酸クロライド(2当量)を添加した。その溶液を、0℃で20分間、そして室温でさらに45分間、撹拌した。溶媒を留去し、生成物を酢酸エチルで水から抽出した。有機層を水と食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。溶媒を除いた後、メシル化した生成物の収量は100%に達した。
【０１１５】
ヘキサンで洗い、乾燥DMFに移した水素化ホウ素ナトリウム(1.5当量)を芳香族アルコール(1.5.当量)と、室温でゆっくり混合した。その溶液を、水素が発生しなくなるまで1時間、撹拌した。DMFに溶かしたそのメシル化化合物を上記の化合物と混合し室温で24時間、撹拌した。次にその溶液を90℃でさらに24時間、加熱した。冷やした後、その溶液を水に注ぎ、酢酸エチルで2回、抽出した。合わせた有機層を水、食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。有機溶媒を留去し、残留物をシリカゲルカラム上で酢酸エチル／ヘキサン(v/v = 2/1)で溶出させ、O-アルキル化N-(tert-ブトキシカルボニル)-5-(N,O-ジメチル-ヒドロキサミド)-グルタミノールを得た。
【０１１６】
前の工程で合成した化合物を、TFA/DCM(v/v = 1/4)中で1時間、撹拌した。溶媒を留去し、残留物を真空下で乾燥させた。得られた残留物を、DCMに溶かしたNMM(4当量)と混合した。これとは別に、Z-Lys(Boc)-OH(2当量)とNMM(2当量)のDCM溶液を、TBTU(2当量)と混合し、30分間、撹拌した。これら二つの溶液を合わせ、室温で一夜、撹拌した。溶媒を留去し、酢酸エチルカラムで精製した後、O-アルキル化N-(N-ベンジルオキシ-N’-tert-ブトキシカルボニル-L-リジル)-5-(N,O-ジメチル-ヒドロキサミド)-グルタミノールを純粋な形で得た。
【０１１７】
O-アルキル化N-(N-ベンジルオキシ-N’-tert-ブトキシカルボニル-L-リジル)-5-(N,O-ジメチル-ヒドロキサミド)-グルタミノールを、乾燥THFに溶解した。この溶液を、窒素雰囲気下で0℃に冷却した。この溶液に、LAH(THF中1 M, 1.25当量)をゆっくり添加した。この溶液を、この温度で30分間、撹拌し、水に硫酸水素カリウム(1.5.当量)を溶かした溶液を添加することにより反応を停止させた。30分間、撹拌した後、溶媒を除き、残留物をエーテルに再溶解させた。有機層を1 N塩酸、飽和炭酸水素ナトリウムおよび食塩水で洗浄した。エーテル層を硫酸ナトリウム上で乾燥させた。溶媒を除き、アルデヒド誘導体を得、それをさらに精製することなく次の反応に使用した。
【０１１８】
そのアルデヒド誘導体を、触媒量のTFAを含むDCMに溶解し、得られる溶液を5時間、還流した。溶媒を除いた後、残留物をカラム上でDCM／アセトン(v/v = 8/1)で精製し、2,5-置換1-ベンジルオキシカルボニル-ヘキサヒドロ-ピロロ[1,2-a]イミダゾール-3-オンを得た。
【０１１９】
2,5-置換1-ベンジルオキシカルボニル-ヘキサヒドロ-ピロロ[1,2-a]イミダゾール-3-オンをメタノールに溶解し、触媒量の炭素上パラジウム(10%)を添加した。得られた混合物を、水素（1気圧）下で一夜、撹拌した。濾過および溶媒留去の後、残留物を真空下で乾燥させ、2,5-置換1-ヘキサヒドロ-ピロロ[1,2-a]イミダゾール-3-オンを得た。目的のFmoc保護アミノ酸(2当量)とHOAt(2当量)を含むDMF溶液をDIC（2当量）と混合し、10分間、撹拌し、2,5-置換1-ヘキサヒドロ-ピロロ[1,2-a]イミダゾール-3-オンに添加した。室温で24時間後、DMFを除き、残留物をシリカゲルカラム上で精製し、Fmoc保護アミノ酸とカップルさせた2,5-置換ヘキサヒドロ-ピロロ[1,2-a]イミダゾール-3-オンを得た。室温で12時間、ジエチルアミン／酢酸エチル(v/v = 1/4)中でその化合物を撹拌することにより、Fmoc基をはずした。溶媒を減圧下で留去し、残留物を得、それをさらに精製することなく使用した。目的の置換された酸(2当量)とNMM(2当量)をTBTU(2当量)とDMF中で10分間、別々に処理することにより得られる反応混合物とそれとを混合した。合わせた反応混合物をさらに24時間、撹拌した。溶媒を除去し、最終の完全に保護された化合物をフラッシュクロマトグラフィーで精製した。酢酸エチル中20%ジエチルアミンで処理することによりFmoc基をはずし、DCM中30%TFAで1時間、処理することによりBoc基をはずした。HPLCでの精製後、最終化合物類を純粋な形で得た。
【０１２０】
実施例9
1,4-ベンゾジアゼピン化合物類の合成
1,4-ベンゾジアゼピン化合物類の合成は主にJonathan A. EllmanらがJ. Am. Chem. Soc., 1995, 117, 3306-3307に記載した方法に基づいている。スキーム7に示す目的の基を得るために、いくつかの段階で変更を行う。
【０１２１】
【化２７】
2005504043.tif 000029
メチレンクロライドに4-アミノフェノール(A)(1当量)とイミダゾール(2当量)を溶かした溶液に、0℃で、トリイソプロピルシリルクロライド(2.6.当量)を添加した。得られた溶液を、1時間、撹拌し、メチレンクロライドで希釈し、水および食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させた。溶媒を留去し、生成物をシリカゲルカラム上で精製した。
【０１２２】
THFに溶かした生成物(1当量)とジ-tert-ブチルジカーボネート(1当量)に、水素化カリウム(2.3.当量)を0℃で少量ずつ添加した。得られた混合物を0℃で30分間、撹拌し、室温で4時間、撹拌した。その混合物に酢酸エチル(100 mL)を加え、反応を水で停止させた。得られた混合物を水で抽出し、食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、留去して生成物Bを得、これをフラッシュクロマトグラフィーで精製した。
【０１２３】
乾燥THF(1当量)に溶かしたBの溶液を-78℃に冷却し、n-ブチルリチウム(1.1.当量)を添加し、次にt-ブチルリチウム(1.3.当量)をゆっくり添加した。温度を-10℃まで上げ、2時間、撹拌し、再び-78℃まで冷却した。トリメチル錫塩化物(1.6.当量)を添加し、得られる混合物を室温で1時間、撹拌した。反応溶液を酢酸エチルで希釈し、水、食塩水で洗い、硫酸マグネシウム上で乾燥させた。溶媒を留去した後、生成物をフラッシュクロマトグラフィーで精製した。
【０１２４】
THFに溶かした生成物(1当量)にフッ化テトラブチルアンモニウム(1.25当量)を加えた。反応はすぐに完了し、酢酸エチルで停止させた。溶液を水、食塩水で洗い、硫酸マグネシウム上で乾燥させた。溶媒を留去した後、得られる生成物Cを更に精製することなく次の反応に用いた。
【０１２５】
化合物C(1当量)、フェネチルアルコール(1.2.当量)およびTPP(1.2.当量)の溶液に、アゾジカルボン酸ジエチル(1.2.当量)を0℃でゆっくり添加した。得られる混合物を室温で一夜、撹拌した。溶媒の留去の後、生成物をシリカゲルカラム上で精製した。
【０１２６】
ベンゼンに溶かしたフルオレニルメトキシカルボニル-N-6-アミノヘキサン酸(1当量)にシュウ酸クロライド(1.8.当量)と1滴のDMFを添加した。得られる混合物を一夜、撹拌し、翌日、ベンゼンを留去した。この手順を繰り返し、真空下で乾燥し、黄色固体、フルオレニルメトキシカルボニル-N-6-アミノヘキサン酸クロライドを得、これを次の反応に用いた。
【０１２７】
乾燥THFに溶かしたこの化合物(1当量)トリス（ジベンジリジンアセトン）ジパラジウム(7%水溶液)に、THFに溶かしたフルオレニルメトキシカルボニル-N-6-アミノヘキサン酸塩化物を添加した。反応混合物の色が暗くなり、一夜、撹拌した。析出したパラジウムをセライト（登録商標）濾過媒体（セライト社）での濾過で除いた。カラムで精製し、化合物Dが得られた。
【０１２８】
化合物DをメチレンクロライドとTFA(v/v = 1/1)に溶かし、反応を1時間、継続し、溶媒を留去した。得られる残留物を真空下で徹底的に乾燥させた。Boc-D-2-ナフチルアラニン(4当量)とトリエチルアミン(4当量)のメチレンクロライド溶液に、塩化シアヌル(2当量)を添加した。得られる混合物を3時間、撹拌し、酸クロライドを生成させた。乾燥させた残留物と2,6,-ジ-t-ブチル4-メチルピリジンの溶液に、その酸クロライド溶液をゆっくり添加した。2時間さらに撹拌処理してカラム上で精製し、目的の生成物Eを得た。
【０１２９】
化合物EをメチレンクロライドとTHF(v/v = 1/1)に溶解し、溶媒を留去した。ベンゼンを加え、反応混合物を2時間、還流した。冷却後、溶媒を留去し、得られる化合物Fを更に精製することなく次の反応に用いた。化合物F上のフルオレニルメトキシカルボニル基は、酢酸エチルに溶かしたジエチルアミン(20%)ではずし、TLCで反応をモニターした。反応が完了した後、溶媒を留去し、残留物を真空乾燥した。残留物を、アセトニトリルとTFA(1.5当量)に溶かし、1,3-ビス(t-ブトキシカルボニル)-2-メチル-2-チオイソ尿素(1当量)と硝酸銀(1.5.当量)を添加した。得られる混合物を一夜、撹拌し、翌日、溶媒を留去し、フラッシュクロマトグラフィーで精製した。
【０１３０】
乾燥THFに溶かした、この精製化合物を0℃に冷やし、予め調製した、THFに溶かしたリチウム化5-ベンジル-2-オキサゾリジノン(4当量)を添加した。得られる溶液を1時間、撹拌した。次にヨードヘプタン(4当量)を加え、反応温度を室温まで上げ、混合物を一夜、撹拌した。溶媒を留去した後、生成物をフラッシュクロマトグラフィーで精製した。得られる化合物を、メチレンクロライドとTFA(v/v = 1/1)中で1時間、撹拌した。溶媒を留去し、生成物Gを得た。
【０１３１】
実施例10
ピペラジン型化合物類の合成
一般的手順をスキーム8に示す。
【０１３２】
【化２８】
2005504043.tif 000030
2-ベンジルオキシカルボニルアミノ-5-フタルイミド-ペンタン酸(A)は、Z-オルニチン(1.33g, 5.0ミリモル)、N-カレトキシ-フタルイミド(1.10 g, 5.0ミリモル)、およびトリエチルアミン(1.0 mL, 6.0ミリモル)を10 mLの乾燥THF中に溶解して得られる混合物を一夜、還流し、溶媒を減圧留去して調製した。得られた残留物を酢酸エチルに溶かし、1N塩酸、水、および飽和食塩水で順に洗い、次にMgSO4上で乾燥させ、減圧濃縮し、粗生成物(2.2 g)を得た。
【０１３３】
粗生成物(A)を5 mLのTHFに溶解し、得られた溶液に、NMM(0.44 mL)を添加した。得られた溶液を、塩氷浴で-15℃まで冷却し、クロロ蟻酸イソブチル(0.52 mL, 1当量)を添加した。10分後、反応混合物を濾過して、生成した塩固形物を除去した。固形物は、充分な量のTHFで2回洗浄した。得られた濾液を-10℃まで冷却し、水2 mLに溶かしたNaBH4(0.23 g, 1.50当量)をそれに添加した。得られた反応混合物を更に15分間撹拌し、減圧濃縮した。残留物を酢酸エチルに溶かし、10%クエン酸、飽和NaHCO3、H2Oおよび飽和食塩水で順に洗い、次にMgSO4上で乾燥させ、減圧濃縮した。得られた粗生成物を、酢酸エチル:ヘキサン=1:1で溶出させるカラムクロマトグラフィーで精製した。精製した生成物[4-フタルイミド-1-ヒドロキシメチル-ブチル]-カルバミン酸ベンジルエステル(B)が白色固体として得られた。1.1 g(58%)。
【０１３４】
B(253 mg, 0.66ミリモル)とトリフェニルフォスフィン(260 mg, 1.5当量)をトルエンに懸濁させ、N2下で-20℃に冷却し、四臭化炭素(242 mg, 1.1当量)を添加した。氷冷を止め、反応混合物を室温で一夜撹拌した。反応混合物を減圧濃縮し、得られた粗生成物をヘキサン：酢酸エチル=2:1で溶出させるカラムクロマトグラフィーで精製した。精製した生成物[1-ブロモメチル-4-フタルイミド-ブチル]-カルバミン酸ベンジルエステル(C)が白色固体として得られた。263 mg (99%)。
【０１３５】
ジクロロメタン2 mLにC(400 mg, 0.90 mL)とアミン(400 mg, 1.86ミリモル)を溶かした混合物を65℃で撹拌した。溶媒を留去し、乾燥した反応生成物を65℃で2時間加熱した。生成した粗生成物をカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル=1:2で溶出）で精製した。生成物(4-フタルイミド-1-[[(2-ヒドロキシ-エチル)-(2-ナフタレン-2-イル-エチル)-アミノ]-メチル]-ブチル)-カルバミン酸ベンジルエステル(D)が白色固体として得られた。260 mg (50%)。
【０１３６】
メタノール中4% HCHO 21 mLに溶かした、D(240 mg, 0.41ミリモル)とパラジクム黒(80 mg)の混合物を窒素下で室温で1時間激しく撹拌した。反応混合物を濾過し、濾液を、飽和NaHCO3で中和した。メタノールを留去し、残留物を酢酸エチルに溶解し、飽和NaHCO3、水、飽和食塩水で順に洗い、MgSO4で乾燥し、溶媒を留去した。生成物2-(4-アミノ)-5-[(2-ヒドロキシ-エチル)-(2-ナフタレン-2-イル-エチル)-アミノ]-ペンチル]-イソインドール-1,3-ジオン(E)を白色固体として集めた。160 mg (88%)。
【０１３７】
無水THF 10 mL中にE(150 mg, 0.34ミリモル)とトリフェニルフォスフィン(133 mg, 1.5当量)を溶かした溶液に、無水THF 1 mLに溶かしたジエチルアゾジカーボネート(65 mg, 1.1当量)を、0℃、窒素下で添加した。室温で4時間、撹拌した後、反応混合物を減圧濃縮し、粗生成物をカラムクロマトグラフィーで精製した。生成物2-[3-[4-(2-ナフタレン-2-イル-エチル)-ピペラジン-2-イル]-プロピル]-イソインドール-1,3-ジオン(F)を、黄色系固体として得た。42 mg (29%)。
【０１３８】
DMF中0.5 M HOAt 0.4 mLと無水DMF 0.5 mLに溶かしたF(42 mg, 0.10ミリモル)とBOC-D-2,4-ジクロロフェニルアラニン(66 mg, 2当量)の混合物に、ジイソプロピルカルボイミド(24 mg, 2当量)を添加した。得られた反応混合物を室温で一夜撹拌した。溶媒を減圧留去し、得られた粗生成物をカラムクロマトグラフィーで精製した（ヘキサン：酢酸エチル＝1：2で溶出）。精製された生成物[1-(2,4-ジクロロ-ベンジル)-2-[2-[3-フタルイミド-プロピル]-4-(2-ナフタレン-2-イル-エチル)-ピペラジン1-イル]-2-オキソ-エチル]-カルバミン酸tert-ブチルエステル(G)を白色固体として得た。30 mg(40%)。
【０１３９】
メタノール中0.2 Mヒドラジン10 mLに溶かしたG(30 mg)の溶液を、室温で19時間撹拌した。質量分析の結果、反応混合物中に出発物質が残っていないことがわかった。得られた反応混合物を留去し、メタノールと3回、酢酸エチルと1回共沸させ、次に高真空下で2日間乾燥させた。粗生成物[2-[2-(3-アミノ-プロピル)-4-(2-ナフタレン-2-イル-エチル)-ピペラジン-1-イル]-1-(2,4-ジクロロ-ベンジル)-2-オキソ-エチル]-カルバミン酸tert-ブチルエステル(H)(約30 mg)をさらに精製することなく次の反応に使用した。
【０１４０】
粗生成物Hを、ジクロロメタン中33% TFA 3 mLで、室温で2.5時間処理した。溶媒を減圧留去し、粗生成物をHPLC(10-90-60、アセトニトリル−水濃度勾配)で精製した。集めた画分を凍結乾燥した後、生成物2-アミノ-1-[2-(3-アミノ-プロピル)-4-(2-ナフタレン-2-イル-エチル)-ピペラジン-1-イル]-3-(2,4-ジクロロ-フェニル)-プロパン-1-オン(1)を白色固体として得た。2.1 mg（HPLCで純度＞90%）。
【０１４１】
または、20 mg(0.033ミリモル)の粗生成物Hを、アセトニトリル5 mLに溶かした1,3-ビス(tert-ブトキシカルボニル)-2-メチル-2-チオイソ尿素(10 mg, 1.1当量)、硝酸銀(6 mg, 1.1当量)およびNMM(2.2当量)と室温で24時間反応させ、溶媒を留去し、カラムクロマトグラフィーで精製し、4.5 mgの生成物[2-[2-[3-(N’,N”-ジ-tert-ブトキシカルボニル-グアニジノ)-プロピル]-4-(2-ナフタレン-2-イル-エチル)-ピペラジン-1-イル]-1-(2,4-ジクロロ-ベンジル)-2-オキソ-エチル]-カルバミン酸tert-ブチルエステル(J)を得た。DCMに溶かした33% TFAで生成物J(4.5 mg)を処理し、得られた反応混合物を濃縮し、HPLCで精製し、1.05 mgの[1-(2,4-ジクロロ-ベンジル)-2-[2-(3-グアニジノ-プロピル)-4-(2-ナフタレン-2-イル-エチル)-ピペラジン-1-イル]-2-オキソ-エチル]-カルバミン酸tert-ブチルエステル(K)を得た。
【０１４２】
実施例11
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム2の一般的方法で合成した：
【０１４３】
【化２９】
2005504043.tif 000031
分子量は、実施例2の方法により、785.0 ESI-MS (M+1)と決定された。(1H NMR, CD3OD) d: 0.8-1.9 (m, 17H), 2.25 (m, 2H), 2.75-3.25 (m, 8H), 3.35-4.05 (m, 6H), 4.55 (m, 3H), 4.9 (m, 1H), 5.3 (m, 1H), 6.9-7.6 (m, 14H)。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000032
【０１４４】
実施例12
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム2の一般的方法で合成した：
【０１４５】
【化３０】
2005504043.tif 000033
分子量は、実施例2の方法により、634.5 ESI-MS (M+1)と決定された。(1H NMR, CD3OD) d: 1.2 (m, 2H), 1.55-1.75 (m, 4H), 2.75-3.25 (m, 8H), 3.5 (m, 1H), 3.65 (m, 1H), 3.55-4.15 (m, 5H), 4.55 (m, 2H), 4.75 (m, 1H), 5.15 (m, 1H), 7.15-7.45 (m, 14H)。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000034
【０１４６】
実施例13
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム2の一般的方法で合成した：
【０１４７】
【化３１】
2005504043.tif 000035
分子量は、実施例2の方法により、616.3 ESI-MS (M+1)と決定された。(1H NMR, CD3OD) d: 1.2 (m, 2H), 1.55-1.85 (m, 4H), 2.8-3.25 (m, 10H), 3.55-4.25 (m, 5H), 4.4 (m, 2H), 4.8 (m, 1H), 5.2 (m, 1H), 7.15-7.45 (m, 13H)。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000036
【０１４８】
実施例14
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム2の一般的方法で合成した：
【０１４９】
【化３２】
2005504043.tif 000037
分子量は、実施例2の方法により、683.6 ESI-MS (M+1)と決定された。(1H NMR, D6-DMSO) d: 1.4 (m, 2H), 1.65 (m, 1H), 1.85 (m, 1H), 2.8-3.5 (m, 10H), 3.7 (m, 2H), 4.05-4.4 (m, 5H), 4.75 (m, 1H), 5.15 (m, 1H) , 7.15-7.45 (m, 13H)。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000038
実施例4の方法で求めたKi値は以下の通りであった：
2005504043.tif 000039
【０１５０】
実施例15
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム2の一般的方法で合成した：
【０１５１】
【化３３】
2005504043.tif 000040
分子量は、実施例2の方法により、735.6 ESI-MS (M+1)と決定された。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000041
【０１５２】
実施例16
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム2の一般的方法で合成した：
【０１５３】
【化３４】
2005504043.tif 000042
分子量は、実施例2の方法により、701.8 ESI-MS (M+1)と決定された。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000043
【０１５４】
実施例17
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム2の一般的方法で合成した：
【０１５５】
【化３５】
2005504043.tif 000044
分子量は、実施例2の方法により、829.0 ESI-MS (M+1)と決定された。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000045
実施例4の方法で求めたKi値は以下の通り：
2005504043.tif 000046
【０１５６】
実施例18
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム2の一般的方法で合成した：
【０１５７】
【化３６】
2005504043.tif 000047
分子量は、実施例2の方法により、684.1 ESI-MS (M+1)と決定された。(1H NMR, CD3OD) d: 1.4-1.9 (m, 4H), 2.7-3.3 (m, 10H), 3.45 (m, 1H), 3.55 (m, 1H), 3.8-4.2 (m, 3H), 4.4 (m, 2H), 4.8-5.45 (m, 2H), 6.9-7.6 (m, 13H)。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000048
【０１５８】
実施例19
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム2の一般的方法で合成した：
【０１５９】
【化３７】
2005504043.tif 000049
分子量は、実施例2の方法により、728.3 ESI-MS (M+1)と決定された。(1H NMR, CD3OD) d: 1.4-1.9 (m, 4H), 2.6 (m, 2H), 2.95-3.25 (m, 10H), 3.4-3.55 (m, 4H), 3.4-3.55 (m, 4H), 3.7-4.2 (m, 2H), 4.3-4.45 (m, 2H), 4.55 (m, 2H) , 4.8-5.45 (m, 2H), 6.9-7.6 (m, 14H)。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000050
【０１６０】
実施例20
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム2の一般的方法で合成した：
【０１６１】
【化３８】
2005504043.tif 000051
分子量は、実施例2の方法により、702.2 ESI-MS (M+1)と決定された。(1H NMR, CD3OD) d: 1.4-1.9 (m, 4H), 2.85-3.25 (m, 8H), 3.35-3.7 (m, 4H), 3.75-4.15 (m, 3H), 4.5 (m, 2H), 4.8-5.35 (m, 2H), 6.9-7.6 (m, 14H)。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000052
【０１６２】
実施例21
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム2の一般的方法で合成した：
【０１６３】
【化３９】
2005504043.tif 000053
分子量は、実施例2の方法により、698.1 ESI-MS (M+1)と決定された。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000054
【０１６４】
実施例22
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム3の一般的方法で合成した：
【０１６５】
【化４０】
2005504043.tif 000055
分子量は、実施例2の方法により、718.5 ESI-MS (M+1)と決定された。(1H NMR, CD3OD) d: 1.0-1.9 (m, 6H), 2.5-3.3 (m, 8H), 3.53-3.8 (m, 4H), 4.1 (m, 3H), 4.5 (m, 2H), 4.7-5.3 (m, 2H), 7.0-7.9 (m, 15H)。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000056
作用物質か拮抗物質かを判定するための実施例4のcAMP測定において、この化合物は、MC1-R、MC4-R、MC5-Rに関しては作用物質であることが判明した。
【０１６６】
実施例23
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム3の一般的方法で合成した：
【０１６７】
【化４１】
2005504043.tif 000057
分子量は、実施例2の方法により、700.3 ESI-MS (M+1)と決定された。(1H NMR, CD3OD) d: 1.0-1.9 (m, 6H), 2.6-3.3 (m, 10H), 3.4-4.7 (m, 5H), 4.4 (m, 2H), 4.7-5.4 (m, 2H), 7.0-7.9 (m, 14H)。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000058
作用物質か拮抗物質かを判定するための実施例4のcAMP測定において、この化合物は、MC1-R、MC4-R、MC5-Rに関しては作用物質であることが判明した。
【０１６８】
実施例24
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム3の一般的方法で合成した：
【０１６９】
【化４２】
2005504043.tif 000059
分子量は、実施例2の方法により、732.4 ESI-MS (M+1)と決定された。(1H NMR, CD3OD) d: 1.0-1.9 (m, 9H), 2.5-3.25 (m, 8H), 3.4-3.9 (m, 4H), 4.05 (m, 1H), 4.15 (m, 1H), 4.25 (m, 1H), 4.5 (m, 1H), 4.7-5.3 (m, 2H), 7.0-7.9 (m, 15H)。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000060
作用物質か拮抗物質かを判定するための実施例4のcAMP測定において、この化合物は、MC1-R、MC4-R、MC5-Rに関しては作用物質であることが判明した。
【０１７０】
実施例25
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム3の一般的方法で合成した：
【０１７１】
【化４３】
2005504043.tif 000061
分子量は、実施例2の方法により、744.5 ESI-MS (M+1)と決定された。(1H NMR, CD3OD) d: 1.0-1.9 (m, 6H), 2.55-3.3 (m, 10H), 3.4-4.15 (m, 7H), 4.4 (m, 2H), 4.7-5.4 (m, 2H), 7.1-7.9 (m, 15H)。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000062
作用物質か拮抗物質かを判定するための実施例4のcAMP測定において、この化合物は、MC1-R、MC4-R、MC5-Rに関しては作用物質であることが判明した。
【０１７２】
実施例26
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム3の一般的方法で合成した：
【０１７３】
【化４４】
2005504043.tif 000063
分子量は、実施例2の方法により、714.5 ESI-MS (M+1)と決定された。(1H NMR, CD3OD) d: 1.0-1.9 (m, 6H), 2.1-3.25 (m, 10H), 3.4-4.15 (m, 4H), 4.4 (m, 1H), 4.65 (m, 1H), 4.7-5.3 (m, 2H), 7.1-7.9 (m, 15H)。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000064
作用物質か拮抗物質かを判定するための実施例4のcAMP測定において、この化合物は、MC1-R、MC4-R、MC5-Rに関しては作用物質であることが判明した。実施例4の方法で求めたKi値は以下の通りである：
2005504043.tif 000065
【０１７４】
実施例27
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム3の一般的方法で合成した：
【０１７５】
【化４７】
2005504043.tif 000066
分子量は、実施例2の方法により、714.5 ESI-MS (M+1)と決定された。(1H NMR, CD3OD) d: 1.0-1.9 (m, 6H), 2.1-3.3 (m, 10H), 3.45-4.1 (m, 4H), 4.45 (m, 1H), 4.7 (m, 1H), 4.75-5.3 (m, 2H), 7.1-7.9 (m, 15H)。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000067
作用物質か拮抗物質かを判定するための実施例4のcAMP測定において、この化合物は、MC1-R、MC4-R、MC5-Rに関しては作用物質であることが判明した。
【０１７６】
実施例28
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム4の一般的方法で合成した：
【０１７７】
【化４８】
2005504043.tif 000068
分子量は、実施例2の方法により、660.6 ESI-MS (M+1)と決定された。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000069
【０１７８】
実施例29
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム4の一般的方法で合成した：
【０１７９】
【化４９】
2005504043.tif 000070
分子量は、実施例2の方法により、700.4 ESI-MS (M+1)と決定された。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000071
【０１８０】
実施例30
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム4の一般的方法で合成した：
【０１８１】
【化５０】
2005504043.tif 000072
分子量は、実施例2の方法により、682.5 ESI-MS (M+1)と決定された。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000073
【０１８２】
実施例31
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム3の一般的方法で合成した：
【０１８３】
【化５１】
2005504043.tif 000074
分子量は、実施例2の方法により、671.2 ESI-MS (M+1)と決定された。(1H NMR, CD3OD) d: 1.0-1.9 (m, 6H), 2.7-3.25 (m, 8H), 3.45-4.15 (m, 4H), 4.35-5.3 (m, 2H), 6.55-6.75 (m, 2H), 7.1-7.9 (m, 15H)。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000075
作用物質か拮抗物質かを判定するための実施例4のcAMP測定において、この化合物は、MC1-R、MC4-R、MC5-Rに関しては作用物質であることが判明した。実施例4の方法で求めたKi値は以下の通りであった：
2005504043.tif 000076
【０１８４】
実施例32
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム3の一般的方法で合成した：
【０１８５】
【化５２】
2005504043.tif 000077
分子量は、実施例2の方法により、735.3 ESI-MS (M+1)と決定された。(1H NMR, CD3OD) d: 1.0-1.9 (m, 6H), 2.6-3.25 (m, 8H), 3.4-4.15 (m, 4H), 4.35-5.3 (m, 2H), 7.1-7.9 (m, 19H)。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000078
【０１８６】
実施例33
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム3の一般的方法で合成した：
【０１８７】
【化５３】
2005504043.tif 000079
分子量は、実施例2の方法により、685.2 ESI-MS (M+1)と決定された。(1H NMR, CD3OD) d: 1.0-1.9 (m, 6H), 2.6-3.25 (m, 10H), 3.4-4.1 (m, 4H), 4.35-5.3 (m, 2H), 6.15 (m, 1H),  6.45 (m, 1H), 7.0-7.9 (m, 15H)。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000080
作用物質か拮抗物質かを判定するための実施例4のcAMP測定において、この化合物は、MC1-R、MC4-R、MC5-Rに関しては拮抗物質であることが判明した。
【０１８８】
実施例34
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム3の一般的方法で合成した：
【０１８９】
【化５４】
2005504043.tif 000081
分子量は、実施例2の方法により、657.1 ESI-MS (M+1)と決定された。(1H NMR, CD3OD) d: 0.85-1.7 (m, 6H), 2.6-3.3 (m, 10H), 3.4-4.1 (m, 4H), 4.4-4.8 (m, 2H), 6.15 (m, 1H), 6.8 (m, 1H), 7.2-7.9 (m, 15H)。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000082
作用物質か拮抗物質かを判定するための実施例4のcAMP測定において、この化合物は、MC1-R、MC4-R、MC5-Rに関しては作用物質であることが判明した。
【０１９０】
実施例35
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム3の一般的方法で合成した：
【０１９１】
【化５５】
2005504043.tif 000083
分子量は、実施例2の方法により、541.4 ESI-MS (M+1)と決定された。(1H NMR, CD3OD) d: 1.0-1.8 (m, 6H), 2.6-3.3 (m, 8H), 3.4-4.1 (m, 4H), 4.4-4.7 (m, 2H), 7.1-8.0 (m, 10H)。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000084
【０１９２】
実施例36
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム3の一般的方法で合成した：
【０１９３】
【化５６】
2005504043.tif 000085
分子量は、実施例2の方法により、673.2 ESI-MS (M+1)と決定された。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000086
作用物質か拮抗物質かを判定するための実施例4のcAMP測定において、この化合物は、MC1-R、MC4-R、MC5-Rに関しては作用物質であることが判明した。
【０１９４】
実施例37
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム3の一般的方法で合成した：
【０１９５】
【化５７】
2005504043.tif 000087
分子量は、実施例2の方法により、737.2 ESI-MS (M+1)と決定された。(1H NMR, CD3OD) d: 1.0-2.0 (m, 6H), 2.7-3.3 (m, 8H), 3.4-4.15 (m, 4H), 4.4-5.3 (m, 2H), 7.0-8.0 (m, 19H)。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000088
作用物質か拮抗物質かを判定するための実施例4のcAMP測定において、この化合物は、MC1-R、MC4-R、MC5-Rに関しては作用物質であることが判明した。
【０１９６】
実施例38
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム3の一般的方法で合成した：
【０１９７】
【化５８】
2005504043.tif 000089
分子量は、実施例2の方法により、737.2 ESI-MS (M+1)と決定された。(1H NMR, CD3OD) d: 1.0-2.0 (m, 6H), 2.7-3.3 (m, 8H), 3.4-4.15 (m, 4H), 4.4-5.3 (m, 2H), 7.0-8.0 (m, 19H)。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000090
作用物質か拮抗物質かを判定するための実施例4のcAMP測定において、この化合物は、MC1-R、MC4-R、MC5-Rに関しては拮抗物質であることが判明した。
【０１９８】
実施例39
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム3の一般的方法で合成した：
【０１９９】
【化５９】
2005504043.tif 000091
分子量は、実施例2の方法により、707.1 ESI-MS (M+1)と決定された。(1H NMR, CD3OD) d: 0.9-1.7 (m, 6H), 2.6-3.3 (m, 8H), 3.4-4.1 (m, 4H), 4.4-5.1 (m, 4H), 7.2-7.9 (m, 19H)。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000092
作用物質か拮抗物質かを判定するための実施例4のcAMP測定において、この化合物は、MC1-R、MC4-R、MC5-Rに関しては拮抗物質であることが判明した。
【０２００】
実施例40
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム3の一般的方法で合成した：
【０２０１】
【化６０】
2005504043.tif 000093
分子量は、実施例2の方法により、675.3 ESI-MS (M+1)と決定された。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000094
作用物質か拮抗物質かを判定するための実施例4のcAMP測定において、この化合物は、MC1-R、MC4-R、MC5-Rに関しては拮抗物質であることが判明した。
【０２０２】
実施例41
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム3の一般的方法で合成した：
【０２０３】
【化６１】
2005504043.tif 000095
分子量は、実施例2の方法により、681.2 ESI-MS (M+1)と決定された。(1H NMR, CD3OD) d: 0.9-1.7 (m, 6H), 2.6-3.3 (m, 8H), 3.4-4.1 (m, 4H), 4.4-5.1 (m, 4H), 7.2-8.0 (m, 19H)。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000096
作用物質か拮抗物質かを判定するための実施例4のcAMP測定において、この化合物は、MC1-R、MC4-R、MC5-Rに関しては作用物質であることが判明した。
【０２０４】
実施例42
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム3の一般的方法で合成した：
【０２０５】
【化６２】
2005504043.tif 000097
分子量は、実施例2の方法により、746.4 ESI-MS (M+1)と決定された。(1H NMR, CD3OD) d: 1.25-1.85 (m, 4H), 1.95 (d, 3H), 2.5-3.25 (m, 8H), 3.3-4.1 (m, 7H), 4.35-5.3 (m, 4H), 7.1-7.9 (m, 15H)。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000098
【０２０６】
実施例43
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム3の一般的方法で合成した：
【０２０７】
【化６３】
2005504043.tif 000099
分子量は、実施例2の方法により、762.3ESI-MS (M+1)と決定された。(1H NMR, CD3OD) d: 1.25-1.85 (m, 4H), 2.5-3.25 (m, 8H), 3.3-4.1 (m, 10H), 4.35-5.3 (m, 4H), 7.1-7.9 (m, 15H)。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000100
【０２０８】
実施例44
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム3の一般的方法で合成した：
【０２０９】
【化６４】
2005504043.tif 000101
分子量は、実施例2の方法により、747.3 ESI-MS (M+1)と決定された。(1H NMR, CD3OD) d: 1.25-1.85 (m, 4H), 2.5-3.25 (m, 8H), 3.3-4.1 (m, 7H), 4.35-5.3 (m, 4H), 7.1-7.9 (m, 15H)。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000102
作用物質か拮抗物質かを判定するための実施例4のcAMP測定において、この化合物は、MC1-R、MC4-R、MC5-Rに関しては作用物質であることが判明した。
【０２１０】
実施例45
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム3の一般的方法で合成した：
【０２１１】
【化６５】
2005504043.tif 000103
分子量は、実施例2の方法により、761.4 ESI-MS (M+1)と決定された。(1H NMR, CD3OD) d: 1.25-1.85 (m, 4H), 2.5-3.25 (m, 11H), 3.3-4.1 (m, 6H), 4.35-5.3 (m, 4H), 7.1-7.9 (m, 15H)。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000104
【０２１２】
実施例46
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム3の一般的方法で合成した：
【０２１３】
【化６６】
2005504043.tif 000105
分子量は、実施例2の方法により、783.2 ESI-MS (M+1)と決定された。(1H NMR, CD3OD) d: 1.25-1.85 (m, 4H), 2.5-3.25 (m, 8H), 3.3-4.1 (m, 6H), 4.35-5.3 (m, 4H), 7.1-7.9 (m, 15H)。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000106
【０２１４】
実施例47
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム3の一般的方法で合成した：
【０２１５】
【化６７】
2005504043.tif 000107
分子量は、実施例2の方法により、782.3 ESI-MS (M+1)と決定された。(1H NMR, CD3OD) d: 1.25-1.85 (m, 4H), 2.5-3.25 (m, 8H), 3.3-4.1 (m, 10H), 4.35-5.3 (m, 4H), 7.1-7.9 (m, 15H)。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000108
【０２１６】
実施例48
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム3の一般的方法で合成した：
【０２１７】
【化６８】
2005504043.tif 000109
分子量は、実施例2の方法により、772.4 ESI-MS (M+1)と決定された。(1H NMR, CD3OD) d: 1.0-1.8 (m, 6H), 2.4-3.3 (m, 12H), 3.4-4.1 (m, 4H), 4.3-5.3 (m, 2H), 7.1-8.0 (m, 15H)。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000110
作用物質か拮抗物質かを判定するための実施例4のcAMP測定において、この化合物は、MC1-R、MC4-R、MC5-Rに関しては作用物質であることが判明した。実施例4の方法で求めたKi値は以下の通りであった：
2005504043.tif 000111
【０２１８】
実施例49
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム3の一般的方法で合成した：
【０２１９】
【化６９】
2005504043.tif 000112
分子量は、実施例2の方法により、627.2ESI-MS (M+1)と決定された。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000113
【０２２０】
実施例50
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム3の一般的方法で合成した：
【０２２１】
【化７０】
2005504043.tif 000114
分子量は、実施例2の方法により、541.2 ESI-MS (M+1)と決定された。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000115
【０２２２】
実施例51
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム3の一般的方法で合成した：
【０２２３】
【化７１】
2005504043.tif 000116
分子量は、実施例2の方法により、568.9 ESI-MS (M+1)と決定された。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000117
作用物質か拮抗物質かを判定するための実施例4のcAMP測定において、この化合物は、MC1-R、MC4-R、MC5-Rに関しては作用物質であることが判明した。
【０２２４】
実施例52
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム3の一般的方法で合成した：
【０２２５】
【化７２】
2005504043.tif 000118
分子量は、実施例2の方法により、704.1 ESI-MS (M+1)と決定された。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000119
作用物質か拮抗物質かを判定するための実施例4のcAMP測定において、この化合物は、MC1-R、MC4-R、MC5-Rに関しては作用物質であることが判明した。
【０２２６】
実施例53
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム3の一般的方法で合成した：
【０２２７】
【化７３】
2005504043.tif 000120
分子量は、実施例2の方法により、746.1 ESI-MS (M+1)と決定された。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000121
作用物質か拮抗物質かを判定するための実施例4のcAMP測定において、この化合物は、MC1-R、MC4-R、MC5-Rに関しては作用物質であることが判明した。
【０２２８】
実施例54
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム3の一般的方法で合成した：
【０２２９】
【化７４】
2005504043.tif 000122
分子量は、実施例2の方法により、512.8 ESI-MS (M+1)と決定された。(1H NMR, CD3OD) d: 1.9 (m, 2H), 2.9-3.3 (m, 8H), 3.5-4.0 (m, 4H), 4.4-5.0 (m, 2H), 7.2-7.9 (m, 10H)。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000123
【０２３０】
実施例55
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム3の一般的方法で合成した：
【０２３１】
【化７５】
2005504043.tif 000124
分子量は、実施例2の方法により、580.9 ESI-MS (M+1)と決定された。(1H NMR, CD3OD) d: 1.75 (m, 2H), 2.9-3.3 (m, 8H), 3.4-4.1 (m, 8H), 4.4-5.0 (m, 2H), 7.2-7.9 (m, 10H)。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000125
【０２３２】
実施例56
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム3の一般的方法で合成した：
【０２３３】
【化７６】
2005504043.tif 000126
分子量は、実施例2の方法により、554.7 ESI-MS (M+1)と決定された。(1H NMR, CD3OD) d: 1.9 (m, 2H), 2.9-3.3 (m, 8H), 3.4-4.1 (m, 8H), 4.3-5.0 (m, 2H), 7.2-7.9 (m, 10H)。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000127
【０２３４】
実施例57
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム3の一般的方法で合成した：
【０２３５】
【化７７】
2005504043.tif 000128
分子量は、実施例2の方法により、555.8 ESI-MS (M+1)と決定された。(1H NMR, CD3OD) d: 1.8 (m, 2H), 2.9-3.3 (m, 8H), 3.4-4.05 (m, 4H), 4.4-5.0 (m, 2H), 7.1-7.9 (m, 10H)。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000129
【０２３６】
実施例58
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム3の一般的方法で合成した：
【０２３７】
【化７８】
2005504043.tif 000130
分子量は、実施例2の方法により、579.2 ESI-MS (M+1)と決定された。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000131
【０２３８】
実施例59
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム3の一般的方法で合成した：
【０２３９】
【化７９】
2005504043.tif 000132
分子量は、実施例2の方法により、523.2 ESI-MS (M+1)と決定された。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000133
【０２４０】
実施例60
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム3の一般的方法で合成した：
【０２４１】
【化８０】
2005504043.tif 000134
分子量は、実施例2の方法により、645.9 ESI-MS (M+1)と決定された。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000135
【０２４２】
実施例61
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム3の一般的方法で合成した：
【０２４３】
【化８１】
2005504043.tif 000136
分子量は、実施例2の方法により、660.8 ESI-MS (M+1)と決定された。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000137
【０２４４】
実施例62
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム3の一般的方法で合成した：
【０２４５】
【化８２】
2005504043.tif 000138
分子量は、実施例2の方法により、664.9 ESI-MS (M+1)と決定された。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000139
【０２４６】
実施例63
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム3の一般的方法で合成した：
【０２４７】
【化８３】
2005504043.tif 000140
分子量は、実施例2の方法により、664.9 ESI-MS (M+1)と決定された。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000141
【０２４８】
実施例64
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム3の一般的方法で合成した：
【０２４９】
【化８４】
2005504043.tif 000142
分子量は、実施例2の方法により、568.9 ESI-MS (M+1)と決定された。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000143
【０２５０】
実施例65
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム3の一般的方法で合成した：
【０２５１】
【化８５】
2005504043.tif 000144
分子量は、実施例2の方法により、582.9 ESI-MS (M+1)と決定された。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000145
【０２５２】
実施例66
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム3の一般的方法で合成した：
【０２５３】
【化８６】
2005504043.tif 000146
分子量は、実施例2の方法により、583.9 ESI-MS (M+1)と決定された。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000147
【０２５４】
実施例67
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム3の一般的方法で合成した：
【０２５５】
【化８７】
2005504043.tif 000148
分子量は、実施例2の方法により、582.9 ESI-MS (M+1)と決定された。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000149
【０２５６】
実施例68
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム3の一般的方法で合成した：
【０２５７】
【化８８】
2005504043.tif 000150
分子量は、実施例2の方法により、605.8 ESI-MS (M+1)と決定された。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000151
【０２５８】
実施例69
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム3の一般的方法で合成した：
【０２５９】
【化８９】
2005504043.tif 000152
分子量は、実施例2の方法により、593.1 ESI-MS (M+1)と決定された。(1H NMR, CD3OD) d: 1.7 (m, 2H), 2.9-3.3 (m, 8H), 3.4-4.1 (m, 4H), 4.4-5.0 (m, 2H), 7.2-7.9 (m, 12H)。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000153
【０２６０】
実施例70
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム3の一般的方法で合成した：
【０２６１】
【化９０】
2005504043.tif 000154
分子量は、実施例2の方法により、611.0 ESI-MS (M+1)と決定された。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000155
【０２６２】
実施例71
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム3の一般的方法で合成した：
【０２６３】
【化９１】
2005504043.tif 000156
分子量は、実施例2の方法により、565.3 ESI-MS (M+1)と決定された。(1H NMR, CD3OD) d: 1.9 (m, 2H), 2.9-3.3 (m, 8H), 3.4-4.1 (m, 8H), 4.3-5.0 (m, 2H), 7.2-7.9 (m, 10H)。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000157
【０２６４】
実施例72
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム3の一般的方法で合成した：
【０２６５】
【化９２】
2005504043.tif 000158
分子量は、実施例2の方法により、582.6 ESI-MS (M+1)と決定された。(1H NMR, CD3OD) d: 1.1-1.8 (m, 4H), 2.85 (s, 1H), 2.9-3.3 (m, 8H), 3.35-4.1 (m, 4H), 4.4-5.0 (m, 2H), 7.1-7.9 (m, 10H)。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000159
【０２６６】
実施例73
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム3の一般的方法で合成した：
【０２６７】
【化９３】
2005504043.tif 000160
分子量は、実施例2の方法により、596.6 ESI-MS (M+1)と決定された。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000161
【０２６８】
実施例74
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム3の一般的方法で合成した：
【０２６９】
【化９４】
2005504043.tif 000162
分子量は、実施例2の方法により、610.6 ESI-MS (M+1)と決定された。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000163
【０２７０】
実施例75
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム3の一般的方法で合成した：
【０２７１】
【化９５】
2005504043.tif 000164
分子量は、実施例2の方法により、610.6 ESI-MS (M+1)と決定された。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000165
【０２７２】
実施例76
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム3の一般的方法で合成した：
【０２７３】
【化９６】
2005504043.tif 000166
分子量は、実施例2の方法により、569.5 ESI-MS (M+1)と決定された。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000167
【０２７４】
実施例77
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム3の一般的方法で合成した：
【０２７５】
【化９７】
2005504043.tif 000168
分子量は、実施例2の方法により、555.6 ESI-MS (M+1)と決定された。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000169
実施例78
次式の化合物を、実施例6で示したスキーム2の一般的方法で合成した：
【０２７６】
【化９８】
2005504043.tif 000170
分子量は、実施例2の方法により、785.3 ESI-MS (M+1)と決定された。(1H NMR, CD3OD) d: 0.8-1.9 (m, 17H), 2.25 (m, 2H), 2.75-3.25 (m, 8H), 3.35-4.05 (m, 6H), 4.55 (m, 3H), 4.9 (m, 1H), 5.3 (m, 1H), 6.9-7.6 (m, 14H)。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000171
【０２７７】
実施例79
次式の化合物を、実施例8で示したスキーム6の一般的方法で合成した：
【０２７８】
【化９９】
2005504043.tif 000172
分子量は、実施例2の方法により、712.3 ESI-MS (M+1)と決定された。(1H NMR, CD3OD) d: 1.0-1.8 (m, 6H), 2.2 (m, 2H), 2.5 (m, 2H), 2.7 (m, 2H), 3.0 (m, 2H), 3.7 (m, 2H), 4.1 (m, 2H), 4.3-4.5 (m, 3H), 4.6 (m, 2H), 5.1 (m, H), 5.3 (m, H), 7.1-7.9 (m, 16H)。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000173
【０２７９】
実施例80
次式の化合物を、実施例8で示したスキーム6の一般的方法で合成した：
【０２８０】
【化１００】
2005504043.tif 000174
分子量は、実施例2の方法により、694.0 ESI-MS (M+1)と決定された。(1H NMR, CD3OD) d: 1.0-1.8 (m, 6H), 2.2 (m, 2H), 2.5 (m, 2H), 2.7 (m, 2H), 2.9 (m, 2H), 3.2 (m, 2H), 4.2 (m, 2H), 4.2-4.4 (m, 3H), 5.1 (m, H), 5.4 (m, H), 7.1-7.9 (m, 15H)。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000175
作用物質か拮抗物質かを判定するための実施例4のcAMP測定において、この化合物は、MC4-Rに関しては作用物質であることが判明した。実施例4の方法で求めたKi値は以下の通りであった：
2005504043.tif 000176
【０２８１】
実施例81
次式の化合物を、実施例8で示したスキーム6の一般的方法で合成した：
【０２８２】
【化１０１】
2005504043.tif 000177
分子量は、実施例2の方法により、824.2 ESI-MS (M+1)と決定された。(1H NMR, CD3OD) d: 0.9 (m, 3H), 1.1-1.8 (m, 14H), 2.1 (m, 2H), 2.2 (m, 2H), 2.5 (m, 2H), 2.7 (m, 2H), 3.0 (m, 2H), 3.7 (m, 2H), 4.2 (m, 2H), 4.3-4.5 (m, 3H), 4.6 (m, 2H), 5.1 (m, H), 5.3 (m, H), 7.1-7.9 (m, 16H)。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000178
作用物質か拮抗物質かを判定するための実施例4のcAMP測定において、この化合物は、MC4-Rに関しては作用物質であることが判明した。実施例4の方法で求めたKi値は以下の通りであった：
2005504043.tif 000179
【０２８３】
実施例82
次式の化合物を、実施例8で示したスキーム6の一般的方法で合成した：
【０２８４】
【化１０２】
2005504043.tif 000180
分子量は、実施例2の方法により、711.9 ESI-MS (M+1)と決定された。(1H NMR, CD3OD) d: 1.0-1.8 (m, 6H), 2.1 (m, 2H), 2.4 (m, 2H), 2.7 (m, 2H), 3.1 (m, 2H), 3.6 (m, 2H), 4.1 (m, 2H), 4.2-4.4 (m, 3H), 4.5 (m, 2H), 5.1 (m, H), 5.3 (m, H), 7.1-7.9 (m, 16H)。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000181
【０２８５】
実施例83
次式の化合物を、実施例8で示したスキーム6の一般的方法で合成した：
【０２８６】
【化１０３】
2005504043.tif 000182
分子量は、実施例2の方法により、694.3 ESI-MS (M+1)と決定された。(1H NMR, CD3OD) d: 1.0-1.8 (m, 6H), 2.2 (m, 2H), 2.4 (m, 2H), 2.7 (m, 2H), 2.8 (m, 2H), 3.2 (m, 2H), 4.2 (m, 2H), 4.2-4.4 (m, 3H), 4.4 (m, 2H), 5.2 (m, H), 5.4 (m, H), 7.1-7.9 (m, 15H)。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000183
【０２８７】
実施例84
次式の化合物を、実施例8で示したスキーム6の一般的方法で合成した：
【０２８８】
【化１０４】
2005504043.tif 000184
分子量は、実施例2の方法により、738.0 ESI-MS (M+1)と決定された。(1H NMR, CD3OD) d: 1.0-2.0 (m, 6H), 2.2 (m, 2H), 2.3-2.9 (m, 6H), 3.2 (m, 2H), 3.4 (m, 2H), 4.2 (m, 2H), 4.2-4.4 (m, 3H), 4.6 (m, 2H), 5.2 (m, H), 5.4 (m, H), 7.1-7.9 (m, 16H)。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000185
【０２８９】
実施例85
次式の化合物を、実施例8で示したスキーム6の一般的方法で合成した：
【０２９０】
【化１０５】
2005504043.tif 000186
分子量は、実施例2の方法により、707.9 ESI-MS (M+1)と決定された。(1H NMR, CD3OD) d: 1.0-1.8 (m, 6H), 2.1 (m, 2H), 2.2-2.9 (m, 10H), 3.2 (m, 2H), 4.2 (m, 2H), 4.2-4.7 (m, 4H), 5.3 (m, H), 5.5 (m, H), 7.1-7.9 (m, 16H)。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000187
【０２９１】
実施例86
次式の化合物を、実施例8で示したスキーム6の一般的方法で合成した：
【０２９２】
【化１０６】
2005504043.tif 000188
分子量は、実施例2の方法により、824.0 ESI-MS (M+1)と決定された。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000189
【０２９３】
実施例87
次式の化合物を、実施例8で示したスキーム6の一般的方法で合成した：
【０２９４】
【化１０７】
2005504043.tif 000190
分子量は、実施例2の方法により、694.2 ESI-MS (M+1)と決定された。(1H NMR, CD3OD) d: 1.0-1.8 (m, 6H), 2.15 (m, 1H), 2.35 (m, 1H), 2.45 (m, 1H), 2.65-2.9 (m, 3H), 3.1 (m, 3H), 3.4 (m, 3H), 3.65 (m, 1H), 4.2 (m, 1H), 4.3-4.6 (m, 3H), 5.0-5.55 (m, 3H), 6.8-7.9 (m, 15H)。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000191
【０２９５】
実施例88
次式の化合物を、実施例8で示したスキーム6の一般的方法で合成した：
【０２９６】
【化１０８】
2005504043.tif 000192
分子量は、実施例2の方法により、694.2 ESI-MS (M+1)と決定された。(1H NMR, CD3OD) d: 1.0-1.8 (m, 6H), 2.15 (m, 2H), 2.4 (m, 2H), 2.7 (m, 4H), 3.15 (m, 3H), 3.45 (m, 3H), 3.75 (m, 1H), 4.15 (m, 1H), 4.2-4.5 (m, 3H), 5.0-5.55 (m, 3H), 6.8-7.9 (m, 15H)。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000193
【０２９７】
実施例89
次式の化合物を、実施例8で示したスキーム6の一般的方法で合成した：
【０２９８】
【化１０９】
2005504043.tif 000194
分子量は、実施例2の方法により、708.2 ESI-MS (M+1)と決定された。(1H NMR, CD3OD) d: 1.0-2.0 (m, 8H), 2.1-2.5 (m, 4H), 2.7 (m, 2H), 2.9-3.1 (m, 4H), 3.4 (m, 1H), 3.6 (m, 1H), 4.15 (m, 1H), 4.25-4.5 (m, 3H), 5.05 (m, 1H), 5.35 (m, 2H), 6.8-7.9 (m, 15H)。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000195
【０２９９】
実施例90
次式の化合物を、実施例8で示したスキーム6の一般的方法で合成した：
【０３００】
【化１１０】
2005504043.tif 000196
分子量は、実施例2の方法により、708.2 ESI-MS (M+1)と決定された。(1H NMR, CD3OD) d: 1.0-2.0 (m, 6H), 2.2 (m, 2H), 2.5 (m, 2H), 2.65-2.9 (m, 6H), 3.05 (m, 1H), 3.25 (m, 1H), 3.95 (m, 1H), 4.2 (m, 1H), 4.3-4.5 (m, 3H), 5.0-5.5 (m, 3H), 6.8-7.9 (m, 15H)。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000197
【０３０１】
実施例91
次式の化合物を、実施例8で示したスキーム6の一般的方法で合成した：
【０３０２】
【化１１１】
2005504043.tif 000198
分子量は、実施例2の方法により、774.2 ESI-MS (M+1)と決定された。(1H NMR, CD3OD) d: 1.1-2.0 (m, 6H), 2.0-2.9 (m, 8H), 2.95 (m, 1H), 3.15 (m, 1H), 3.55 (m, 1H), 3.65 (m, 1H), 4.15 (m, 1H), 4.3-4.5 (m, 3H), 5.0-5.4 (m, 3H), 6.75-7.9 (m, 16H)。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000199
【０３０３】
実施例92
次式の化合物を、実施例8で示したスキーム6の一般的方法で合成した：
【０３０４】
【化１１２】
2005504043.tif 000200
分子量は、実施例2の方法により、724.3 ESI-MS (M+1)と決定された。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000201
【０３０５】
実施例93
次式の化合物を、実施例8で示したスキーム6の一般的方法で合成した：
【０３０６】
【化１１３】
2005504043.tif 000202
分子量は、実施例2の方法により、694.2 ESI-MS (M+1)と決定された。(1H NMR, CD3OD) d: 0.9-1.85 (m, 6H), 1.95-2.85 (m, 6H), 2.95 (m, 1H), 3.05-3.55 (m, 4H), 3.55 (m, 1H), 3.65 (m, 1H), 3.9-4.5 (m, 7H), 5.0-5.4 (m, 2H), 6.75-7.9 (m, 15H)。実施例3の方法に従って行ったa-MSHに対するこの化合物の競争的阻害試験結果は以下の通りである（3つの実験の実際の平均値で記載；0%未満の実験結果は0%と報告）：
2005504043.tif 000203
【０３０７】
実施例94
以下の構造の化合物：
【０３０８】
【化１１４】
2005504043.tif 000204
を、実施例8において述べた方式6の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、693.9ESI−MS（M＋1）と決定された。（1H  NMR，CD3OD）δ：1.1−1.9（m、6H）、2.0−2.8（m、6H）、2.9−3.4（m、4H）、3.6（m、1H）、3.7（m、1H）、4.15−4.5（m、3H）、5.0−5.4（m、3H）、7.1−7.9（m、15H）。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000205
【０３０９】
実施例95
以下の構造の化合物：
【０３１０】
【化１１５】
2005504043.tif 000206
を、実施例8において述べた方式6の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、679.9ESI−MS（M＋1）と決定された。（1H  NMR，CD3OD）δ：1.1−1.9（m、6H）、2.1−2.8（m、6H）、2.85−3.5（m、4H）、4.05−4.5（m、3H）、5.0−5.4（m、3H）、6.75−7.9（m、15H）。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000207
【０３１１】
実施例96
以下の構造の化合物：
【０３１２】
【化１１６】
2005504043.tif 000208
を、実施例8において述べた方式6の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、694.2ESI−MS（M＋1）と決定された。（1H  NMR，CD3OD）δ：1.1−1.9（m、6H）、2.1−3.3（m、10H）、4.1−4.5（m、3H）、5.0−5.4（m、2H）、6.8−7.9（m、15H）。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000209
【０３１３】
実施例97
以下の構造の化合物：
【０３１４】
【化１１７】
2005504043.tif 000210
を、実施例8において述べた方式6の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、666.1ESI−MS（M＋1）と決定された。（1H  NMR，CD3OD）δ：1.1−1.9（m、4H）、1.95−2.85（m、5H）、2.95−3.35（m、5H）、3.9−4.4（m、5H）、4.7−5.4（m、2H）、6.75−7.9（m、14H）。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000211
実施例4の機能的アッセイにおいて、この化合物は、完全アゴニストとなった。Kiは、実施例4の方法で決定し、以下の結果となった。
2005504043.tif 000212
【０３１５】
実施例98
以下の構造の化合物：
【０３１６】
【化１１８】
2005504043.tif 000213
を、実施例8において述べた方式6の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、722.2ESI−MS（M＋1）と決定された。（1H  NMR，CD3OD）δ：1.1−1.9（m、4H）、2.0−2.55（m、4H）、2.7−3.2（m、6H）、4.1−4.55（m、5H）、4.9−5.5（m、2H）、7.15−7.9（m、15H）。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000214
アゴニスト／アンタゴニスト状態を判断する実施例4のようなcAMPアッセイにおいて、この化合物は、MC1−R及びMC4−Rに関してアゴニストであると判断された。Kiは、実施例4の方法で決定し、以下の結果となった。
2005504043.tif 000215
【０３１７】
実施例99
以下の構造の化合物：
【０３１８】
【化１１９】
2005504043.tif 000216
を、実施例8において述べた方式6の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、740.0ESI−MS（M＋1）と決定された。（1H  NMR，CD3OD）δ：1.1−1.9（m、4H）、2.0−2.5（m、3H）、2.7−3.2（m、5H）、3.5（m、1H）、3.7（m、1H）、4.05−4.6（m、7H）、4.9−5.5（m、2H）、7.15−7.9（m、16H）。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000217
【０３１９】
アゴニスト／アンタゴニスト状態を判断する実施例4のようなcAMPアッセイにおいて、この化合物は、MC1−R及びMC4−Rに関してアゴニストであると判断された。Kiは、実施例4の方法で決定し、以下の結果となった。
2005504043.tif 000218
【０３２０】
実施例100
以下の構造の化合物：
【０３２１】
【化１２０】
2005504043.tif 000219
を、実施例8において述べた方式6の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、765.6ESI−MS（M＋1）と決定された。（1H  NMR，CD3OD）δ：1.2−1.95（m、4H）、2.0−2.95（m、6H）、2.0−3.2（m、4H）、3.4（m、1H）、3.5（m、1H）、4.1−4.55（m、7H）、4.9−5.5（m、2H）、7.15−7.9（m、16H）。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000220
【０３２２】
アゴニスト／アンタゴニスト状態を判断する実施例4のようなcAMPアッセイにおいて、この化合物は、MC1−R及びMC4−Rに関してアゴニストであると判断された。Kiは、実施例4の方法で決定し、以下の結果となった。
2005504043.tif 000221
【０３２３】
実施例101
以下の構造の化合物：
【０３２４】
【化１２１】
2005504043.tif 000222
を、実施例8において述べた方式6の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、689.5ESI−MS（M＋1）と決定された。（1H  NMR，CD3OD）δ：1.2−2.0（m、12H）、2.0−2.95（m、6H）、2.1−3.3（m、12H）、4.0−4.5（m、4H）、4.9−5.5（m、2H）、7.15−7.9（m、11H）。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000223
【０３２５】
実施例102
以下の構造の化合物：
【０３２６】
【化１２２】
2005504043.tif 000224
を、実施例8において述べた方式6の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、624.9ESI−MS（M＋1）と決定された。（1H  NMR，CD3OD）δ：1.0−1.75（m、6H）、1.85（m、1H）、2.15（m、1H）、2.3−2.8（m、4H）、3.3（m、2H）、3.6−4.6（m、7H）、4.8−5.5（m、1H）、7.1−7.9（m、16H）。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000225
【０３２７】
実施例103
以下の構造の化合物：
【０３２８】
【化１２３】
2005504043.tif 000226
を、実施例8において述べた方式6の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、485.0ESI−MS（M＋1）と決定された。（1H  NMR，CD3OD）δ：1.0−1.75（m、6H）、1.85（m、1H）、2.15（m、1H）、2.25−2.8（m、4H）、3.2（m、2H）、3.65−4.55（m、5H）、4.8−5.5（m、1H）、6.9−8.0（m、9H）。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000227
【０３２９】
実施例104
以下の構造の化合物：
【０３３０】
【化１２４】
2005504043.tif 000228
を、実施例8において述べた方式6の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、484.9ESI−MS（M＋1）と決定された。（1H  NMR，CD3OD）δ：1.1−1.85（m、6H）、1.9（m、1H）、2.15（m、1H）、2.25−2.85（m、4H）、3.35（m、2H）、3.6−4.6（m、5H）、4.8−5.5（m、1H）、6.9−8.0（m、9H）。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000229
【０３３１】
実施例105
以下の構造の化合物：
【０３３２】
【化１２５】
2005504043.tif 000230
を、実施例8において述べた方式6の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、450.9ESI−MS（M＋1）と決定された。（1H  NMR，CD3OD）δ：1.1−1.75（m、6H）、1.85（m、1H）、2.15（m、1H）、2.45（m、1H）、2.65（m、1H）、2.8（m、2H）、3.2（m、2H）、3.4−4.5（m、5H）、4.6−5.5（m、1H）、6.9−7.5（m、10H）。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000231
【０３３３】
実施例106
以下の構造の化合物：
【０３３４】
【化１２６】
2005504043.tif 000232
を、実施例8において述べた方式6の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、644.0ESI−MS（M＋1）と決定された。（1H  NMR，CD3OD）δ：1.0−1.85（m、6H）、2.15（m、2H）、2.35−2.85（m、4H）、3.0（m、1H）、3.15（m、2H）、4.0−4.5（m、6H）、4.8−5.4（m、2H）、6.9−7.5（m、13H）。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000233
【０３３５】
実施例107
以下の構造の化合物：
【０３３６】
【化１２７】
2005504043.tif 000234
を、実施例8において述べた方式6の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、501.2ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000235
【０３３７】
実施例108
以下の構造の化合物：
【０３３８】
【化１２８】
2005504043.tif 000236
を、実施例8において述べた方式6の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、698.5ESI−MS（M＋1）と決定された。（1H  NMR，CD3OD）δ：1.0−1.9（m、10H）、2.0−2.45（m、4H）、2.6−3.1（m、8H）、3.2（m、2H）、3.95−4.5（m、6H）、5.0−5.4（m、1H）、6.4−7.5（m、11H）。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000237
【０３３９】
実施例109
以下の構造の化合物：
【０３４０】
【化１２９】
2005504043.tif 000238
を、実施例8において述べた方式6の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、716.5ESI−MS（M＋1）と決定された。（1H  NMR，CD3OD）δ：1.0−1.9（m、10H）、2.0−2.45（m、4H）、2.55−3.15（m、8H）、2.5−3.75（m、2H）、3.85−4.65（m、7H）、4.7−5.4（m、2H）、6.4−7.5（m、12H）。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000239
【０３４１】
実施例110
以下の構造の化合物：
【０３４２】
【化１３０】
2005504043.tif 000240
を、実施例8において述べた方式6の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、843.4ESI−MS（M＋1）と決定された。（1H  NMR，CD3OD）δ：1.0−1.9（m、18H）、2.0−3.05（m、16H）、3.7（m、2H）、3.9−4.65（m、7H）、4.7−5.4（m、2H）、6.4−7.5（m、12H）。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000241
【０３４３】
実施例111
以下の構造の化合物：
【０３４４】
【化１３１】
2005504043.tif 000242
を、実施例8において述べた方式6の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、658.1ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000243
【０３４５】
実施例112
以下の構造の化合物：
【０３４６】
【化１３２】
2005504043.tif 000244
を、実施例8において述べた方式6の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、757.2ESI−MS（M＋1）と決定された。（1H  NMR，CD3OD）δ：1.3−1.95（m、4H）、2.0−2.5（m、3H）、2.7−2.95（m、4H）、3.05−3.25（m、3H）、3.3（m、2H）、4.1−4.55（m、7H）、5.0−5.6（m、2H）、7.1−7.9（m、14H）。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000245
【０３４７】
アゴニスト／アンタゴニスト状態を判断する実施例4のようなcAMPアッセイにおいて、この化合物は、MC1−5に関して不活性であり、MC4−R及びMC−5に関してアンタゴニストであると判断された。Kiは、実施例4の方法で決定し、以下の結果となった。
2005504043.tif 000246
【０３４８】
実施例113
以下の構造の化合物：
【０３４９】
【化１３３】
2005504043.tif 000247
を、実施例8において述べた方式6の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、801.1ESI−MS（M＋1）と決定された。（1H  NMR，CD3OD）δ：1.3−1.95（m、4H）、2.0−2.7（m、4H）、2.55−2.7（m、4H）、2.55−3.15（m、4H）、3.3（m、2H）、3.5（m、2H）、4.1−4.65（m、7H）、5.0−5.6（m、2H）、7.1−7.9（m、15H）。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000248
【０３５０】
アゴニスト／アンタゴニスト状態を判断する実施例4のようなcAMPアッセイにおいて、この化合物は、MC1−R及びMC5−Rに関してアゴニストであり、MC4−Rに関してアンタゴニストであると判断された。
【０３５１】
実施例114
以下の構造の化合物：
【０３５２】
【化１３４】
2005504043.tif 000249
を、実施例8において述べた方式6の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、775.0ESI−MS（M＋1）と決定された。（1H  NMR，CD3OD）δ：1.3−1.95（m、4H）、2.0−2.5（m、3H）、2.65−3.2（m、5H）、3.5（m、1H）、3.7（m、1H）、3.75−4.65（m、7H）、5.0−5.6（m、2H）、7.1−7.9（m、15H）。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000250
【０３５３】
アゴニスト／アンタゴニスト状態を判断する実施例4のようなcAMPアッセイにおいて、この化合物は、MC1−R、MC4−R、及びMC5−Rに関してアゴニストであると判断された。
【０３５４】
実施例115
以下の構造の化合物：
【０３５５】
【化１３５】
2005504043.tif 000251
を、実施例8において述べた方式6の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、770.3ESI−MS（M＋1）と決定された。（1H  NMR，CD3OD）δ：1.3−1.95（m、4H）、2.0−2.55（m、6H）、2.75−3.3（m、6H）、4.1−4.7（m、5H）、5.1−5.6（m、2H）、7.1−7.9（m、15H）。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000252
【０３５６】
アゴニスト／アンタゴニスト状態を判断する実施例4のようなcAMPアッセイにおいて、この化合物は、MC1−R及びMC−5に関してアゴニストであり、MC4−Rに関してアンタゴニストであると判断された。Kiは、実施例4の方法で決定し、以下の結果となった。
2005504043.tif 000253
【０３５７】
実施例116
以下の構造の化合物：
【０３５８】
【化１３６】
2005504043.tif 000254
を、実施例8において述べた方式6の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、788.3ESI−MS（M＋1）と決定された。（1H  NMR，CD3OD）δ：1.2−1.9（m、4H）、1.9−2.75（m、6H）、3.0−3.25（m、4H）、3.45（m、1H）、3.6（m、1H）、3.7（m、1H）、4.15−4.65（m、6H）、5.0−5.4（m、2H）、7.1−7.9（m、15H）。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000255
【０３５９】
実施例117
以下の構造の化合物：
【０３６０】
【化１３７】
2005504043.tif 000256
を、実施例8において述べた方式6の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、814.3ESI−MS（M＋1）と決定された。（1H  NMR，CD3OD）δ：1.3−1.95（m、4H）、2.0−2.5（m、4H）、2.6−3.25（m、8H）、3.35（m、1H）、3.45（m、1H）、4.05（m、1H）、4.15−4.65（m、7H）、4.9−5.5（m、2H）、7.1−7.9（m、15H）。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000257
【０３６１】
実施例118
以下の構造の化合物：
【０３６２】
【化１３８】
2005504043.tif 000258
を、実施例8において述べた方式6の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、762.4ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000259
【０３６３】
実施例119
以下の構造の化合物：
【０３６４】
【化１３９】
2005504043.tif 000260
を、実施例8において述べた方式6の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、712.2ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000261
【０３６５】
実施例120
以下の構造の化合物：
【０３６６】
【化１４０】
2005504043.tif 000262
を、実施例8において述べた方式6の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、746.2ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000263
【０３６７】
実施例121
以下の構造の化合物：
【０３６８】
【化１４１】
2005504043.tif 000264
を、実施例8において述べた方式6の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、746.2ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000265
【０３６９】
実施例122
以下の構造の化合物：
【０３７０】
【化１４２】
2005504043.tif 000266
を、実施例10において述べた方式8の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、534.4ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000267
【０３７１】
実施例123
以下の構造の化合物：
【０３７２】
【化１４３】
2005504043.tif 000268
を、実施例10において述べた方式8の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、534.5ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000269
【０３７３】
実施例124
以下の構造の化合物：
【０３７４】
【化１４４】
2005504043.tif 000270
を、実施例10において述べた方式8の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、557.5ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000271
【０３７５】
実施例125
以下の構造の化合物：
【０３７６】
【化１４５】
2005504043.tif 000272
を、実施例10において述べた方式8の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、523.6ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000273
【０３７７】
実施例126
以下の構造の化合物：
【０３７８】
【化１４６】
2005504043.tif 000274
を、実施例10において述べた方式8の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、532.4ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000275
【０３７９】
実施例127
以下の構造の化合物：
【０３８０】
【化１４７】
2005504043.tif 000276
を、実施例10において述べた方式8の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、498.6ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000277
【０３８１】
実施例128
以下の構造の化合物：
【０３８２】
【化１４８】
2005504043.tif 000278
を、実施例10において述べた方式8の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、601.5ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000279
【０３８３】
実施例129
以下の構造の化合物：
【０３８４】
【化１４９】
2005504043.tif 000280
を、実施例10において述べた方式8の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、512.0ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000281
【０３８５】
実施例130
以下の構造の化合物：
【０３８６】
【化１５０】
2005504043.tif 000282
を、実施例Yにおいて述べた方式Xの一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、554.1ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000283
【０３８７】
実施例131
以下の構造の化合物：
【０３８８】
【化１５１】
2005504043.tif 000284
を、実施例Yにおいて述べた方式Xの一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、828.7ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000285
【０３８９】
実施例132
以下の構造の化合物：
【０３９０】
【化１５２】
2005504043.tif 000286
を、実施例Yにおいて述べた方式Xの一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、683.9ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000287
【０３９１】
実施例133
以下の構造の化合物：
【０３９２】
【化１５３】
2005504043.tif 000288
を、実施例5において述べた方式1の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、788.6ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000289
【０３９３】
アゴニスト／アンタゴニスト状態を判断する実施例4のようなcAMPアッセイにおいて、このメタロペプチドは、MC1−Rのアゴニストであると判断された。Kiは、実施例4の方法で決定し、以下の結果となった。
2005504043.tif 000290
【０３９４】
実施例134
以下の構造の化合物：
【０３９５】
【化１５４】
2005504043.tif 000291
を、実施例5において述べた方式1の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、746.6ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000292
【０３９６】
Kiは、実施例4の方法で決定し、以下の結果となった。
2005504043.tif 000293
【０３９７】
実施例135
以下の構造の化合物：
【０３９８】
【化１５５】
2005504043.tif 000294
を、実施例5において述べた方式1の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、633.4ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000295
【０３９９】
実施例136
以下の構造の化合物：
【０４００】
【化１５６】
2005504043.tif 000296
を、実施例5において述べた方式1の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、562.4ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000297
【０４０１】
実施例137
以下の構造の化合物：
【０４０２】
【化１５７】
2005504043.tif 000298
を、実施例5において述べた方式1の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、425.4ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000299
【０４０３】
実施例138
以下の構造の化合物：
【０４０４】
【化１５８】
2005504043.tif 000300
を、実施例5の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、800.4ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000301
【０４０５】
実施例139
以下の構造の化合物：
【０４０６】
【化１５９】
2005504043.tif 000302
を、実施例5において述べた方式1の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、604.0ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000303
【０４０７】
実施例140
以下の構造の化合物：
【０４０８】
【化１６０】
2005504043.tif 000304
を、実施例5において述べた方式1の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、666.2ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000305
【０４０９】
実施例141
以下の構造の化合物：
【０４１０】
【化１６１】
2005504043.tif 000306
を、実施例5において述べた方式1の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、730.2ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000307
【０４１１】
実施例142
以下の構造の化合物：
【０４１２】
【化１６２】
2005504043.tif 000308
を、実施例5において述べた方式1の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、686.2ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000309
【０４１３】
実施例143
以下の構造の化合物：
【０４１４】
【化１６３】
2005504043.tif 000310
を、実施例5において述べた方式1の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、688.2ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000311
【０４１５】
実施例144
以下の構造の化合物：
【０４１６】
【化１６４】
2005504043.tif 000312
を、実施例5において述べた方式1の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、771.4ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000313
【０４１７】
実施例145
以下の構造の化合物：
【０４１８】
【化１６５】
2005504043.tif 000314
を、実施例5において述べた方式1の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、618.4ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000315
【０４１９】
Kiは、実施例4の方法で決定し、以下の結果となった。
2005504043.tif 000316
【０４２０】
実施例146
以下の構造の化合物：
【０４２１】
【化１６６】
2005504043.tif 000317
を、実施例5において述べた方式1の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、618.0ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000318
【０４２２】
Kiは、実施例4の方法で決定し、以下の結果となった。
2005504043.tif 000319
【０４２３】
実施例147
以下の構造の化合物：
【０４２４】
【化１６７】
2005504043.tif 000320
を、実施例5において述べた方式1の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、584.4ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000321
【０４２５】
Kiは、実施例4の方法で決定し、以下の結果となった。
2005504043.tif 000322
【０４２６】
実施例148
以下の構造の化合物：
【０４２７】
【化１６８】
2005504043.tif 000323
を、実施例5において述べた方式1の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、584.4ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000324
【０４２８】
Kiは、実施例4の方法で決定し、以下の結果となった。
2005504043.tif 000325
【０４２９】
実施例149
以下の構造の化合物：
【０４３０】
【化１６９】
2005504043.tif 000326
を、実施例5において述べた方式1の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、576.5ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000327
【０４３１】
実施例150
以下の構造の化合物：
【０４３２】
【化１７０】
2005504043.tif 000328
を、実施例5において述べた方式1の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、590.4ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000329
【０４３３】
実施例151
以下の構造の化合物：
【０４３４】
【化１７１】
2005504043.tif 000330
を、実施例5において述べた方式1の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、604.3ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000331
【０４３５】
実施例152
以下の構造の化合物：
【０４３６】
【化１７２】
2005504043.tif 000332
を、実施例5において述べた方式1の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、505.4ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000333
【０４３７】
実施例153
以下の構造の化合物：
【０４３８】
【化１７３】
2005504043.tif 000334
を、実施例5において述べた方式1の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、604.6ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000335
【０４３９】
実施例154
以下の構造の化合物：
【０４４０】
【化１７４】
2005504043.tif 000336
を、実施例5において述べた方式1の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、716.5ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000337
【０４４１】
実施例155
以下の構造の化合物：
【０４４２】
【化１７５】
2005504043.tif 000338
を、実施例5において述べた方式1の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、674.5ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000339
【０４４３】
実施例156
以下の構造の化合物：
【０４４４】
【化１７６】
2005504043.tif 000340
を、実施例5において述べた方式1の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、701.6ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000341
【０４４５】
実施例157
以下の構造の化合物：
【０４４６】
【化１７７】
2005504043.tif 000342
を、実施例5において述べた方式1の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、659.4ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000343
【０４４７】
実施例158
以下の構造の化合物：
【０４４８】
【化１７８】
2005504043.tif 000344
を、実施例5において述べた方式1の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、622.5ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000345
【０４４９】
実施例159
以下の構造の化合物：
【０４５０】
【化１７９】
2005504043.tif 000346
を、実施例5において述べた方式1の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、584.4ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000347
【０４５１】
実施例160
以下の構造の化合物：
【０４５２】
【化１８０】
2005504043.tif 000348
を、実施例5において述べた方式1の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、584.5ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000349
【０４５３】
実施例161
以下の構造の化合物：
【０４５４】
【化１８１】
2005504043.tif 000350
を、実施例5において述べた方式1の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、536.5ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000351
【０４５５】
実施例162
以下の構造の化合物：
【０４５６】
【化１８２】
2005504043.tif 000352
を、実施例5において述べた方式1の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、550.3ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000353
【０４５７】
実施例163
以下の構造の化合物：
【０４５８】
【化１８３】
2005504043.tif 000354
を、実施例5において述べた方式1の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、584.5ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000355
【０４５９】
実施例164
以下の構造の化合物：
【０４６０】
【化１８４】
2005504043.tif 000356
を、実施例5において述べた方式1の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、622.5ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000357
【０４６１】
実施例165
以下の構造の化合物：
【０４６２】
【化１８５】
2005504043.tif 000358
を、実施例5において述べた方式1の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、622.5ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000359
【０４６３】
実施例166
以下の構造の化合物：
【０４６４】
【化１８６】
2005504043.tif 000360
を、実施例5において述べた方式1の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、622.2ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000361
【０４６５】
実施例167
以下の構造の化合物：
【０４６６】
【化１８７】
2005504043.tif 000362
を、実施例5において述べた方式1の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、522.5ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000363
【０４６７】
実施例168
以下の構造の化合物：
【０４６８】
【化１８８】
2005504043.tif 000364
を、実施例5において述べた方式1の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、564.3ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000365
【０４６９】
実施例169
以下の構造の化合物：
【０４７０】
【化１８９】
2005504043.tif 000366
を、実施例5において述べた方式1の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、558.2ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000367
【０４７１】
実施例170
以下の構造の化合物：
【０４７２】
【化１９０】
2005504043.tif 000368
を、実施例5において述べた方式1の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、522.3ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000369
【０４７３】
実施例171
以下の構造の化合物：
【０４７４】
【化１９１】
2005504043.tif 000370
を、実施例5において述べた方式1の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、648.2ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000371
【０４７５】
実施例172
以下の構造の化合物：
【０４７６】
【化１９２】
2005504043.tif 000372
を、実施例5において述べた方式1の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、570.2ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000373
【０４７７】
実施例173
以下の構造の化合物：
【０４７８】
【化１９３】
2005504043.tif 000374
を、実施例5において述べた方式1の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、648.3ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000375
【０４７９】
実施例174
以下の構造の化合物：
【０４８０】
【化１９４】
2005504043.tif 000376
を、実施例5において述べた方式1の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、598.5ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000377
【０４８１】
実施例175
以下の構造の化合物：
【０４８２】
【化１９５】
2005504043.tif 000378
を、実施例5において述べた方式1の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、598.3ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000379
【０４８３】
実施例176
以下の構造の化合物：
【０４８４】
【化１９６】
2005504043.tif 000380
を、実施例5において述べた方式1の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、526.3ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000381
【０４８５】
実施例177
以下の構造の化合物：
【０４８６】
【化１９７】
2005504043.tif 000382
を、実施例5において述べた方式1の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、670.4ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000383
【０４８７】
実施例178
以下の構造の化合物：
【０４８８】
【化１９８】
2005504043.tif 000384
を、実施例7において述べた方式5の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、840.4ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000385
【０４８９】
実施例179
以下の構造の化合物：
【０４９０】
【化１９９】
2005504043.tif 000386
を、実施例7において述べた方式5の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、638.4ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000387
【０４９１】
実施例180
以下の構造の化合物：
【０４９２】
【化２００】
2005504043.tif 000388
を、実施例8において述べた方式6の一般的な方法により合成した。分子量は、実施例2の方法により、638.4ESI−MS（M＋1）と決定された。実施例3の方法に続くα−MSHに対する化合物の競合的阻害試験では、以下の結果が生じた（実際の平均値を有する三つ組の平均を記載、0％未満の実験結果は0％として報告）：
2005504043.tif 000389
【０４９３】
アゴニスト／アンタゴニスト状態を判断する実施例4のようなcAMPアッセイにおいて、この化合物は、MC1−Rに関してアゴニストであると判断された。Kiは、実施例4の方法で決定し、以下の結果となった。
2005504043.tif 000390
【０４９４】
実施例181  ペニス勃起の誘導の判定
化合物がペニス勃起（PE）を誘導する能力は、選択されたメラノコルチン受容体特異的ペプチドミメティックスにより評価される。重量200乃至250gのオスのSprague−Dawleyラットを、食物及び水を自由に与え、12時間の明暗サイクルで飼育する。全ての行動調査は、午前10時乃至午後5時に実行する。四乃至八匹のラットのグループは、静脈（IV）、皮下（SC）、脳室内（ICV）、腹腔内（IP）注射によって、様々な投与量でペプチドにより処理し、或いはマイクロピペッタを使用して、25μLの溶液を一方の鼻孔に鼻腔内投与する。処理の直後、ラットは、行動観察のため、個別のポリスチレンのケージ（長さ27cm、幅16cm、高さ25cm）内に入れる。ラットを30分間観察し、欠伸と、グルーミング期間と、PEとの数を、十分間の三区画で記録する。
【０４９５】
実施例182  食物摂取量及び体重の影響
食物摂取量及び体重の変化を、選択したメラノコルチン受容体特異的ペプチドミメティックスに関して評価する。実験開始時点で重量300gまでのオスのSprague−Dawleyラットを、12時間の明暗サイクルで飼育する。消灯は、午後12時に合わせ、暗期間開始直前の投与を可能にする。ラット（12／グループ）には、粉末飼料及び水を自由に与える。処置前の一週間に、24時間の食物摂取量及び体重の変化を記録し、媒介物処置中のグループの基準線を判断する。ラットには、0日目にICV、IV、SC、又はIPで投与し、食物摂取量及び体重を一週間に渡って毎日計測する。一週間に一度、六週間に渡って、動物への投与を行い、変化した食物摂取量及び体重を基準線と比較する。
【０４９６】
実施例183  条件味覚嫌悪
条件味覚嫌悪は、ラットにおいて、実施例182において利用したペプチドミメティックスを使用して評価した。重量300gまでのオスのSprague−Dawleyラットを、12時間の明暗サイクルで飼育する。消灯は、午後12時に合わせ、食物を自由に与える。一日に30分間、水を利用できることに慣れるように動物を訓練する。実験の一日目には、化合物をICV、IV、又はIP投与する直前に、0.15％のサッカリンを含む水を30分間利用できるようにする。二日目には、ただの水を、指定の時間に渡って与える。三日目には、サッカリンを含む水を再度ラットに与える。これらの動物が一日目及び三日目に消費した液体の量を比較する。三日目の摂取量の低下は、一日目の薬品処理によって誘導された疾患による条件味覚嫌悪を示唆する。LiCl処置（127mg／kg、IP）を、陽性対照として使用する。
【０４９７】
実施例184  アンジオテンシンメタロペプチド誘導環式化合物
図3に示すように、再複合化アンジオテンシン受容体特異的ペプチドSar−Arg−Val−Tyr−Ile−His−Cys−Pro−Thrを利用して、環式化合物を誘導する。このペプチドは、実施例1のように合成し、レニウムとの複合体を形成させた。メタロペプチドは、既知のアンジオテンシンリガンドSar−Arg−Val−Tyr−Ile−His−Pro−Thrに基づいて作成されたペプチドの個別ライブラリから誘導し、これにおいて、Sarはサルコシンであり、親ペプチドとして機能し、これについては、2001年12月19日提出の国際特許出願第PCT／US01／50075号「ペプチド及びタンパク質における標的特異的折り畳み部位」に更に詳しく記載されており、これは参照により本明細書に組み込むものとする。メタロペプチドは、ヒトの神経芽細胞腫細胞（KAN−TS）から取得した細胞膜を使用して、アンジオテンシンII受容体との結合に関してスクリーニングした。アッセイは、放射性ヨウ化トレーサリガンドを使用して、三つ組において実行した。最終濃度1乃至3nMの125I−Tyr4，Sar2，Ile8−アンジオテンシンIIリガンド（Perkin  Elemer−NEN  Life  Sciencesから入手）を、ラジオトレーサとして使用し、アンジオテンシンII（最終アッセイ濃度1μM）を。非特異的結合の測定に使用した。培養用培地の濾過後、洗浄し、フィルタを乾燥させ、フィルタを打ち抜いて試験管に入れ、放射能に関して計数した。試験化合物の活性プロフィールは、受容体に対するラジオトレーサの特異的結合を阻害する能力によって生成した。このアッセイにおいて、メタロペプチドは、1μMで60％の阻害を示した。
【０４９８】
このメタロペプチドに基づく誘導環式化合物は、以下を含む。
【０４９９】
【化２０１】
2005504043.tif 000391
【０５００】
実施例185  バソプレシンメタロペプチド誘導環式化合物
図4に示すように、再複合化バソプレシン受容体特異的ペプチド、シクロヘキシルアセチル−D−Trp−Ile−Cys−Thr−Dap−Ala−Pro−Orn−NH2を利用して、環構造を誘導する。メタロペプチドは、既知のバソプレシンリガンドPmp−D−Trp−Ile−Thr−Dap−Cys−Pro−Ornに基づいて作成されたペプチドの個別ライブラリから選択し、これにおいて、Pmpはβ−メルカプト−βで、β−シクロペンタメチレンプロピオニル及びDapはジアミノプロピオン酸であり、これについては、2001年12月19日提出の国際特許出願第PCT／US01／50075号「ペプチド及びタンパク質における標的特異的折り畳み部位」に更に詳しく記載されており、これは参照により本明細書に組み込むものとする。このペプチドは、実施例1において一般的に説明するように作成され、その中で説明されるように、レニウムとの複合体を形成させた。バソプレシン−1受容体に関する化合物のスクリーニングは、ラットの肝臓から準備した細胞膜を使用して実行した。このアッセイは、基本的には、次の実施例でオキシトシン受容体に関して説明するように実行した。このアッセイでは、2乃至4nMの3H−バソプレシン−1アンタゴニスト（Perkin  Elemer−NEN  Life  Sciencesから入手）を、ラジオトレーサとして使用し、Arg8−バソプレシン（アッセイにおける最終濃度1μM）を、非特異的結合の判定に使用した。このアッセイは、三つ組で実行した。試験化合物の活性プロフィールは、受容体に対するラジオトレーサの特異的結合を阻害する能力によって生成した。このアッセイにおいて、メタロペプチドは、1μMで52％の阻害を示した。
【０５０１】
このメタロペプチドに基づく誘導環式化合物は、以下を含む。
【０５０２】
【化２０２】
2005504043.tif 000392
【０５０３】
実施例186  オキシトシンメタロペプチド誘導環式化合物
図5に示すように、再複合化オキシトシン受容体特異的ペプチドAla−Tyr−Ile−Gin−Asn−Cys−Ala−Pro−Leu−Gly−NH2を利用して、環構造を誘導する。このペプチドは、実施例1のように合成し、レニウムとの複合体を形成させた。オキシトシン受容体とのメタロペプチドの結合は、ラットの子宮から準備した細胞膜を使用して判定した。アッセイには、ミリポアマルチスクリーンシステムを使用し、リン酸緩衝生理食塩水（PBS）中で0.5％ウシ血清アルブミンによりブロックした直後の96ウェルミリポアフィルタプレート（Durapore、0.45μm多孔性）において実行した。膜調製物（10乃至50μg／ウェル）を、試験化合物（最終アッセイ濃度1μM）と共に、0.2％ウシ血清アルブミンを含有するHEPES緩衝液において、412乃至800pMの3H−オキシトシンにより、4℃で2時間培養した。非特異的結合は、試験化合物の代わりに10-6Mオキシトシンを追加することで判定した。培養後、膜を濾過し、氷温のPBSで三回洗浄した。この膜を空気乾燥させ、打ち抜いてシンチレーションバイアルに直接入れた。シンチレーションカクテルの追加後、バイアルに蓋をして、12時間に渡って穏やかに揺らし、フィルタに含まれる放射能を溶解させた。次に、シンチレーションカウンタにおいて、トリチウムに関して、このバイアルを読み出した。特異的結合は、3H−オキシトシンのみを含むウェルにおける放射能から10-6Mオキシトシンを含むウェルにおける放射能を差し引いたものとして判定した。このアッセイは、三つ組で実行した。試験化合物の活性プロフィールは、受容体に対するラジオトレーサの特異的結合を阻害する能力によって生成した。このアッセイにおいて、メタロペプチドは、1μMで42％の阻害を示した。
【０５０４】
このメタロペプチドに基づく誘導環式化合物は、以下を含む。
【０５０５】
【化２０３】
2005504043.tif 000393
上の実施例は、一般的又は具体的に説明した本発明の反応物及び又は動作条件を、上の実施例において使用されたものに置き換えることで、反復し同様の成果を上げることができる。
【０５０６】
好適な実施形態を特に参照して、本発明について詳細に説明してきたが、他の実施形態でも、同じ結果を達成できる。本発明の変形及び変更は当業者には明らかであり、添付特許請求の範囲はこうした全ての変更及び変形を包含するものである。上で引用した参考文献、出願、特許、出版物の開示内容全体は、参照により本明細書に援用する。
【図面の簡単な説明】
【０５０７】
本明細書に含まれその一部を成す添付図は、本発明の1以上の具体例を示し、説明文とともに、本発明の諸原理を説明するためのものである。図面は、本発明の1以上の好ましい具体例を示すためだけのものであり、本発明を制限していると解釈してはならない。図面のうち：
【図１】図1は、ある金属ペプチドから生物学的に活性なペプチド模倣体類を誘導するための本発明の理想化されたスキームを表す。R1、R2およびR3はそれぞれ独立に、2以上のアミノ酸残基のアミノ酸側鎖部分、その誘導体、末端基、保護基または鎖を表し、Mは、四座配位子複合体を形成する金属イオンのような金属イオンを表し；
【図２】図2は、Reがレニウム金属イオンを表すときメラノコルチン受容体に特異的な金属ペプチドから生物学的に活性なペプチド模倣体類を誘導する本発明のスキームを表し；
【図３】図3は、Reがレニウム金属イオンを表すときアンジオテンシン受容体に特異的な金属ペプチドから生物学的に活性なペプチド模倣体類を誘導する本発明のスキームを表し；
【図４】図4は、Reがレニウム金属イオンを表すときバソプレシン受容体に特異的な金属ペプチドから生物学的に活性なペプチド模倣体類を誘導する本発明のスキームを表し；
【図５】図5は、Reがレニウム金属イオンを表すときオキシトシン受容体に特異的な金属ペプチドから生物学的に活性なペプチド模倣体類を誘導する本発明のスキームを表す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【国際公開パンフレット】
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2005504043.tif 000580
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【国際調査報告】
2005504043.tif 000582
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