(57)【要約】本発明の一つの観点は、雌性哺乳動物の卵巣過剰刺激の制御方法に関し、前記方法は、多数の卵胞発達を刺激するための有効量での卵胞刺激ホルモン活性を有する物質（ＦＳＨサブスタンス）；早期のＬＨサージ発生を予防する、１日少なくとも０．５ｍｇのガニレリックスの皮下投与量に相当する量の性腺刺激ホルモン放出ホルモン（ＧｎＲＨ）アンタゴニスト；及びＧｎＲＨアンタゴニスト投与の結果である黄体形成ホルモン（ＬＨ）欠乏の徴候を予防するもしくは抑制するための有効量でのＬＨサブスタンス；を共に投与し、減数分裂及び黄体形成の回復を刺激するための有効量における減数分裂及び黄体形成を引き起こす物質（ＭＬサブスタンス）を引き続き投与することを含んで成り、ここで当該ＬＨサブスタンスはヒト雌性の尿から得られたものでない。本発明の他の観点は、過剰刺激を制御する方法に使用するための医薬キットに関し、当該キットは、：ＦＳＨ５０から１５００Ｉ．Ｕ．での皮下投与量に相当する量の１以上のＦＳＨサブスタンス類を含む少なくとも１の非経口、もしくは経口投与ユニット；ガニレリックス０．５から２５ｍｇでの皮下投与量に相当する量の１以上のＧｎＲＨアンタゴニスト類を含む少なくとも１の非経口投与ユニット；組換えＬＨ５０から３０００Ｉ．Ｕ．での皮下投与量に相当する量の１以上のＬＨサブスタンス類を含む少なくとも１の非経口投与ユニット；を含んで成り、ここでＬＨサブスタンスはヒト雌性の尿から得られたものでない。【特許請求の範囲】
【請求項１】
雌性哺乳動物の卵巣過剰刺激の制御方法に用いる医薬組成物の製造における黄体形成ホルモン活性を有する物質（ＬＨサブスタンス）の使用であって、当該方法は、当該雌性に：
・多数の卵胞発達を刺激するための有効量での卵胞刺激ホルモン活性を有する物質（ＦＳＨサブスタンス）；
・早期のＬＨサージを予防する、１日少なくとも０．５ｍｇのガニレリックスの皮下投与量に相当する量の性腺刺激放出ホルモン（ＧｎＲＨ）アンタゴニスト；及び
・ＧｎＲＨアンタゴニスト投与の結果である黄体形成ホルモン（ＬＨ）欠乏の徴候を予防するもしくは抑制するための有効量での当該ＬＨサブスタンス；
を共に投与し、
減数分裂及び黄体形成の回復を刺激するための有効量における減数分裂及び黄体形成を引き起こす物質（ＭＬサブスタンス）を引き続き投与することを含んで成り、ここで当該ＬＨサブスタンスはヒト雌性の尿から得られたものでないものとする、使用。
【請求項２】
前記方法が更に連続して起こる以下のステップ：
・成熟した卵胞から一以上の卵子を採取し；
・試験管内で１以上の卵子を受精し；
・得られた胎芽を雌性哺乳動物の子宮の中へ運ぶ、
を含んで成る請求項１記載の使用。
【請求項３】
前記ＬＨサブスタンスが、１Ｉ．Ｕ．ＬＨ／リットル以上、より好ましくは１．２Ｉ．Ｕ．ＬＨ／リットル以上に相当するレベルで、前記雌性のＬＨサブスタンスの血漿濃度を維持するための有効量で投与される請求項１又は２記載の使用。
【請求項４】
前記ＬＨサブスタンスが、体重１ｋｇ当り１日１から４０Ｉ．Ｕ．の間の皮下投与量に相当する量、好ましくは２から１５Ｉ．Ｕ．の間の皮下投与量に相当する量で投与される請求項１から３のいずれか１項に記載の使用。
【請求項５】
前記ＧｎＲＨアンタゴニスは、最大に発達した卵胞が平均１４ｍｍ、好ましくは１２ｍｍ、最も好ましくは１０ｍｍの直径に達する瞬間から、減数分裂及び黄体形成の回復を刺激するための有効量での前記ＭＬサブスタンス投与の前日までの期間、少なくとも投与される請求項１から４のいずれか１項に記載の使用。
【請求項６】
前記ＧｎＲＨアンタゴニストは、少なくとも前記ＦＳＨサブスタンスの前記投与開始後６日、もしくは減数分裂及び黄体形成の回復を刺激するための有効量での前記ＭＬサブスタンスの前記投与前少なくとも４日のいずれかより投与期間が開始され、投与開始時期がいずれでも、前記ＭＬサブスタンスの当該投与の前日に投与が終了し、少なくとも当該期間中投与される請求項１から５のいずれか１項に記載の使用。
【請求項７】
前記ＬＨサブスタンスは、前記ＧｎＲＨアンタゴニストの前記投与開始後２日から開始して、前記ＧｎＲＨアンタゴニストの前記投与停止により終了する期間、少なくとも投与される請求項１から６のいずれか１項に記載の使用。
【請求項８】
前記ＦＳＨサブスタンスは、前記雌性の自然に起こる月経の後８日、好ましくは６日後に開始し、減数分裂及び黄体形成の回復を刺激するための有効量での前記ＭＬサブスタンスの前記投与前日までの期間、少なくとも投与される請求項１から７のいずれか１項に記載の使用。
【請求項９】
前記ＧｎＲＨアンタゴニストは、ガニレリックス、セトロレリックス、ガニレリックス前駆体、セトロレリックスの前駆体もしくはそれらの混合物をから成る群から選択される請求項１から８のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１０】
前記ＧｎＲＨアンタゴニストが、ガニレリックス０．８ｍｇから４．０ｍｇの１日皮下投与量に相当する量で投与される請求項１から９のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１１】
前記ＬＨサブスタンスは、組換えＬＨ、ＬＨ活性を有するキメラ体もしくは何らかの態様で修飾された性腺刺激ホルモン類、ＬＨ活性を有する低分子量化合物及びそれらの混合物から成る群から選択される請求項１から１０のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１２】
ＬＨ欠乏の徴候を予防するため、もしくは抑制するために使用される前記ＬＨサブスタンスは、組換え細胞株から得られたものである請求項１から１１のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１３】
前記ＦＳＨサブスタンス、前記ＧｎＲＨアンタゴニスト及び前記ＬＨサブスタンスを少なくとも１日１回、好ましくは非経口で投与する請求項１から１２のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１４】
医薬キットであって：
・ＦＳＨ５０から１５００Ｉ．Ｕ．での皮下投与量に相当する量の１以上のＦＳＨサブスタンス類を含む少なくとも１の非経口、もしくは経口投与ユニット；
・ガニレリックス０．５から２５ｍｇでの皮下投与量に相当する量の１以上のＧｎＲＨアンタゴニスト類を含む少なくとも１の非経口投与ユニット；
・組換えＬＨ５０から３０００Ｉ．Ｕ．での皮下投与量に相当する量の１以上のＬＨサブスタンス類を含む少なくとも１の非経口投与ユニット；を含んで成り、
ここで当該ＬＨサブスタンスは、ヒト雌性の尿から得られたものでないものとする、キット。
【請求項１５】
１以上のＦＳＨサブスタンスを含む前記投与ユニット、１以上のＧｎＲＨアンタゴニスト類を含む前記投与ユニット、及び１以上のＬＨサブスタンス類を含む前記投与ユニットが１日１回の自己皮下投与のためのカートリッジに組合された請求項１４記載の医薬キット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、雌性哺乳動物における卵巣過剰刺激の制御方法に関する。より詳しくは本発明は、哺乳動物の不妊治療のための卵巣過剰刺激を制御する方法に関するものであり、当該方法は多数の卵胞発達を刺激する効果量での卵胞刺激ホルモン活性を有する物質（ＦＳＨサブスタンス）、及び早期のＬＨサージ発生を予防するために十分な量での性腺刺激ホルモン放出ホルモン（ＧｎＲＨ）アンタゴニストを雌性に共に投与し、減数分裂及び黄体形成の回復を刺激するための効果量において、減数分裂及び黄体形成が誘導される物質（ＭＬサブスタンス）を引き続き投与することを含む。
【０００２】
本発明の他の観点は、卵巣過剰刺激を制御する本方法に使用するための医薬キットに関する。
【背景技術】
【０００３】
雌性哺乳動物の卵巣機能は、性腺刺激ホルモンと呼ばれる下垂体ホルモンにより調節される。最も周知な性腺刺激ホルモンは、卵胞成熟の原因となる卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）及び排卵の原因となる黄体形成ホルモン（ＬＨ）である。
【０００４】
それぞれの月経後、卵巣は、卵胞の一群を成長させるために下垂体から放出されるＦＳＨによって刺激される。卵胞はそれぞれ顆粒膜細胞の球体により包まれた卵母細胞（卵細胞）を含む。卵胞の成長の間、顆粒膜細胞のいくつかの層が形成される。徐々に一つの卵胞が支配的になり、他はアポトーシスにより退化し、変質し始める。卵胞成熟は、通常の月経サイクルの間、１２日から１４日のサイクルで起こる。顆粒膜細胞の数が増加するにつれ、より多くのエストロゲンがそれらの細胞から分泌される。
【０００５】
一度、支配卵胞が成熟に達すると、血漿中エストロゲンレベルの増加（正のフィードバック）に対する応答において、下垂体から放出されるＬＨの上昇作用の下で、卵胞が破裂するであろう（排卵）。卵母細胞は卵胞から受精が行われるファロピーオ管の膨大部の中へと放出される。卵母細胞もしくは胎芽は、５日から７日で子宮に輸送され、そこで中間期に（midluteal  phase）着床が起こり得る。
【０００６】
卵母細胞を放出した卵胞は、新しいホルモン生産器官である黄体に変化する。黄体は、エストロゲンとともにプロゲステロンを生産する。黄体は、約１２日から１４日という限られた生存期間を持つ。いわゆる周期（period）の後は、その機能が終わり、結果としてエストロゲン及びプロゲステロンの血中レベルが低下する。このプロゲステロンの低下は子宮内膜のネクローシスを引き起こし、ゆえに月経を引き起こす。
【０００７】
特に排卵を引き起こす分野は、過去１０年で、不妊カップルの生殖能の管理を補助する多くの薬剤の開発及び商業的な導入をみせた。他の中でも、抗エストロゲン（クエン酸クロミフェン及びクエン酸タモキシフェンのような）、拍動性ＧｎＲＨ、精製及び組換え性腺刺激ホルモン、並びにＧｎＲＨアゴニスト及びアンタゴニストがそれらに含まれる。使用される特定の薬剤及び選択される投与方法は、治療の目標である生殖補助技術（ＡＲＴ）における１つの要素としての、例えば、無排卵性の雌性での１の排卵誘導、もしくは制御された卵巣過剰刺激（ＣＯＨ）の雌性での多数の卵胞発達の誘導、に大きく貢献する。ＡＲＴ方法の例は、子宮内受精（ＩＵＩ）及び試験管内受精（ＩＶＦ）を含み、雌性及び／もしくは男性の不妊要因を治療するために広く使用されている。ＩＶＦは、細胞質内部への精子注入（ＩＣＳＩ）の有無を問わず行うことができ、続いて起こる胎芽移植ステップを含む。
【０００８】
ＣＯＨは、今日ＡＲＴに幅広く用いられている。ＣＯＨによる最初の結果は、症例の約３０％に早期のＬＨサージが発生する結果として失望させられた。そのような早期のＬＨサージは、未だ成熟に至らない卵母細胞の排卵を誘発させるおそれがあり、及び／もしくは試験管内での受精（ＩＶＦ）のための卵母細胞の採取を失敗させるおそれがある。ＧｎＲＨアゴニスト類の導入では、治療サイクルのプログラムと早期のＬＨサージを予防することが見出された。今までのところのＧｎＲＨアゴニスト類はサイクルの殆どの間に使用される。しかしながらＧｎＲＨアゴニスト類は不便であり（長い治療期間）、卵巣嚢腫を引き起こすおそれがあり、高価であり、そして不利な効果がなくはない（副作用、卵巣過剰刺激症候群（ＯＨＳＳ）の発生率の増加等）。
【０００９】
近年ＧｎＲＨアンタゴニスト類は、早期のＬＨサージを予防し、ＧｎＲＨアゴニスト類の使用に関する問題を回避することが紹介された。ＷＯ９８／５８６５７（ＡＫＺＯ  ＮＯＢＥＬ）は、ガニレリックス（ganirelix）を１日０．１２５ｍｇから１ｍｇを投与した場合、早期のＬＨサージの上昇の発生を予防し、同時に卵胞成熟及びエストロゲン生合成を支持するために十分なＬＨを維持することを示唆する。同様にＣＮ１１９９６４２（ＡＳＴＡ  Ｍｅｄｉｃａ）は、ＬＨの分泌を選択的に抑制するため、１日０．１から０．５ｍｇの量のセトロレリックス（cetrorelix）の皮下投与について述べている。
【００１０】
しかしながら、それらはＧｎＲＨアンタゴニスト類を使用するプロトコールにより観察された妊娠率についての懸念がある。ＧｎＲＨアンタゴニスト類の妊娠率を示したいくつかの研究では、ＧｎＲＨアゴニスト類による妊娠率よりも低い。最近公表されたＷＯ０１／００２２７（ＡＫＺＯ  ＮＯＢＥＬ）では、着床率とＬＨレベルとの相関性はないが、ＧｎＲＨアンタゴニストレベルと着床率との相関性は存在することが見出された。体重に依存した量のＧｎＲＨアンタゴニストを投与することが適当であると主張されている。その主張されるレベルは、１２８から２６４μｇ／日である。
【００１１】
以上より、ＧｎＲＨアンタゴニストの効果的な使用は、内因性のＬＨレベルを過剰に低下させずにＬＨサージを効果的に予防するために十分な投与量を正確に確立することに依存することが明らかであろう。適した投与量は体重のような個人の生理学上の特質に大いに依存することから、全ての雌性に対して定められたある一定の投与量での使用は、彼女等の一部に早期のＬＨサージを引き起こし、またその他、よくない着床及びよくない妊娠率を引き起こす。これは、高い治療の成功率に達するためには、個人ベースでの投与量の調整が必要であることを意味する。しかしながら、ＷＯ０１／００２２７に主張された投与量レベルでの個人的調整は、自己投与の選択肢はもはやなく、ＧｎＲＨアンタゴニストの異なる量を含む投薬ユニットの分類が求められるという不都合を有する。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
このように、ＬＨサージを予防し、並びに着床及び妊娠率の点から、ＧｎＲＨアンタゴニスト及び少なくともＧｎＲＨアゴニスト類を使用する類似方法が用いられる確固たるＣＯＨ方法が求められている。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
発明の概要
本発明者等は、多数の卵胞発達を刺激するためのＦＳＨサブスタンス、早期のＬＨサージを確実に予防するためのＧｎＲＨアンタゴニスト（少なくともガニレリックス０．５ｍｇの皮下投与量と同等）の比較的高い投与量、及びＬＨサブスタンスの共投与を含むＣＯＨプロトコールによって、前記の目的が実現され得ることを見出した。ＬＨサブスタンスを共に投与することは、引き上げられた投与量レベルでのＧｎＲＨアンタゴニストの投与（例えば着床や妊娠率においていかなる副作用もなく）を可能とすることを見出した。その上、ＧｎＲＨアンタゴニストのより高用量での投与は、早期のＬＨサージのより良い予防を提供することを見出した。
【００１４】
ＧｎＲＨアンタゴニストの比較的高用量での投与とＬＨサブスタンスが組合された他の重要な利点は、生理学的に非常に異なる雌性に良い結果を生み出す薬剤を処方することを可能にするという事実がある。このように、雌性の生理学的特徴とは無関係である、不妊症の効果的な治療において適切に使用され得る一つの医薬キットを開発することが可能である。公知のＣＯＨプロトコールは、ＧｎＲＨアンタゴニスト類の使用は一部の雌性（例えば体重が重い）に早期のＬＨサージを引き起こし、もしくは他の雌性に内因性のＬＨの過剰な抑制を引き起こすことに固執しているが、一方、本方法はより大雑把である。その結果、本方法はＧｎＲＨアンタゴニスト類を使用する現存のＣＯＨプロトコールよりも妊娠率の進展の点からよりよいものである。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１５】
発明の詳細な説明
このように、本発明の１の観点は、雌性哺乳動物における卵巣過剰刺激の制御方法に関するものであり、当該方法は、当該雌性へ以下を共に投与し：
・多数の卵胞発達を刺激するための効果量での卵胞刺激ホルモン活性を有する物質（ＦＳＨサブスタンス）；
・早期のＬＨサージを予防する、１日少なくとも０．５ｍｇのガニレリックスの皮下投与量に相当する量の性腺刺激放出ホルモン（ＧｎＲＨ）アンタゴニスト；そして
・ＧｎＲＨアンタゴニスト投与の結果である黄体形成ホルモン（ＬＨ）欠乏の徴候を予防するもしくは抑制するための効果量でのＬＨサブスタンス；
減数分裂及び黄体形成の回復を刺激するための効果量における減数分裂及び黄体形成を引き起こす物質（ＭＬサブスタンス）を引き続き投与することを含んで成り、ここで当該ＬＨサブスタンスはヒト雌性の尿から得られたものでないものとする。
【００１６】
雌性の尿、特に閉経後の雌性の尿は、ＦＳＨ及びＬＨを上昇されたレベルで含む。ＦＳＨは、ＣＯＨ方法で使用するため雌性の尿から単離されてきた。原理的にはＬＨも雌性の尿から単離され得る。しかしながら、尿ＬＨはとても迅速に代謝されるから、本方法での使用には適さない。その結果、本方法において用いられる当該ＬＨサブスタンスは、ヒト雌性の尿から得られない。
【００１７】
本明細書において使用される”ＦＳＨサブスタンス”という単語は、ＦＳＨの下垂体からの放出を誘発することを可能にする物質類と同様に、ＦＳＨと類似の機能を示す物質類を包含する。同様に”ＭＬサブスタンス”という単語は、ＬＨの下垂体からの放出を誘発することを可能にする物質類と同様に、ＬＨと類似の機能を示す物質類を包含する。”ＬＨサブスタンス”という単語は、ＬＨと類似の機能を示す物質類を言う。その結果、ＬＨサブスタンスの群は、ＬＨと類似の機能を有さないが、ＬＨの下垂体からの放出を誘発できる物質類を包含する。
【００１８】
雌性という単語は、本明細書で言及する時はいつでも雌性哺乳動物に関する。好適な雌性哺乳動物は、ヒトである。ヒトの雌性が生物学的に出産可能なのは普通１２歳から５５歳の間である。
【００１９】
本ＣＯＨ方法は、ＩＶＦプロトコールの一部として都合よく使用される。その結果、好適な態様は、本方法に更に連続して起こる以下のステップを含んで成る：
・成熟した卵胞から一以上の卵子を採取し；
・試験管内で１以上の卵子を受精し；
・得られた胎芽を雌性哺乳動物の子宮の中へ運ぶ。
【００２０】
ＣＯＨプロトコールが適用され、且つ一以上の卵子が採取されるのと、同じサイクルで雌性の子宮中へ当該胎芽が移植され得るが、後のサイクルでも胎芽を移植することができる。しかしながらＬＨサブスタンスの投与のため、ＣＯＨプロトコールと胎芽移植を同じサイクルの中で行う時、本発明は高い着床率を可能にする。従って、制御された卵巣過剰刺激及び胎芽移植は、一つのサイクルの中で実施されるのが特に好ましい。
【００２１】
本発明通りのＬＨサブスタンスの共投与は、治療を受けている雌性において、ＬＨ欠乏（血漿リットル当り、１Ｉ．Ｕ未満）を予防する成果を供給する。従って、本発明の利益は、ＬＨサブスタンスなしで、ＦＳＨサブスタンス及びＧｎＲＨアンタゴニストを投与して、雌性の血漿ＬＨレベルを１Ｉ．Ｕ／リットル未満に減少させ、好ましくは０．５Ｉ．Ｕ／リットル未満に減少させてしまう場合、特に評価される。
【００２２】
本発明の好ましい態様は、１Ｉ．Ｕ．ＬＨ／リットル以上、より好ましくは１．２Ｉ．Ｕ．ＬＨ／リットル以上のＬＨサブスタンス類（内因性及び外因性）の雌性の血漿濃度を維持するための有効量を投与することである。本方法において適切に使用され得るＬＨサブスタンス類は、組換えＬＨ（recＬＨ）、ＬＨ活性を有するキメラ体もしくは何らかの態様で修飾された性腺刺激ホルモン類、ＬＨ活性を有する低分子量化合物及びその混合物を含む。
【００２３】
ＬＨ欠乏の徴候を予防するため、ＬＨサブスタンスは体重１ｋｇ当りの組換えＬＨを１日少なくとも１Ｉ．Ｕ．、好ましくは少なくとも１．４Ｉ．Ｕ．、より好ましくは少なくとも１．７Ｉ．Ｕ．、そして最も好ましくは少なくとも２Ｉ．Ｕ．の皮下投与量に相当する量が適切に投与される。普通投与されるＬＨサブスタンスの１日最大用量は、体重１ｋｇ当り４０Ｉ．Ｕ．の皮下投与量に相当する量を超えない。好ましくは、前記１日最大投与量は、体重１ｋｇ当り２５Ｉ．Ｕ．の皮下投与量に相当する量を超えず、より好ましくは、体重１ｋｇ当り１５Ｉ．Ｕ．の皮下投与量に相当する量を超えない。
【００２４】
ＦＳＨサブスタンスは、好ましくは体重１ｋｇ当り、１日に１から１５Ｉ．Ｕ．のＦＳＨ皮下投与量に相当する量が投与される。
【００２５】
本発明により得られる最も良い結果は、ＧｎＲＨアンタゴニストが仮に治療を受けたほぼ全ての雌性の早期ＬＨサージを予防することを達成するために十分に高い用量で投与することである。このように好適な態様において、ＧｎＲＨアンタゴニストは、ガニレリックスを少なくとも０．６ｍｇ、より好ましくはガニレリックスを少なくとも０．８ｍｇ、そして最も好ましくはガニレリックスを少なくとも１．０ｍｇの皮下投与量に相当する量が１日に投与される。通常、ＧｎＲＨアンタゴニストは１日４．０ｍｇの皮下投与量と同等を超えない量が投与される。好ましくは、前記量は１日３．０ｍｇの皮下投与量と同等を超えず、より好ましくは、１日２．５ｍｇの皮下投与量と同等を超えない。
【００２６】
ＧｎＲＨアンタゴニストの投与は、早期のＬＨサージの機会を最小限にするために十分に早く開始することが必須である。早期のＬＨサージ発生の機会の信頼できる指標は、発達した卵胞のサイズであり、特にそれらの発達した卵胞のうち最大サイズである。好ましくは、ＧｎＲＨアンタゴニストは、最大に発達した卵胞が平均１４ｍｍ、好ましくは１２ｍｍ、最も好ましくは１０ｍｍの直径に達する瞬間から、減数分裂及び黄体形成の回復を刺激するための有効量でのＭＬサブスタンス投与の前日までの期間、少なくとも投与される。
【００２７】
組織学上子宮内膜において所望される効果を達成するために、ＧｎＲＨアンタゴニストは少なくともＦＳＨサブスタンスの投与開始後６日、もしくは減数分裂及び黄体形成の回復を刺激するための有効量でのＭＬサブスタンスの投与前少なくとも４日のいずれかより投与期間が開始し、投与開始時期がいずれでも、ＭＬサブスタンスの当該投与の前日に投与が終了し、少なくとも当該期間中投与される。
【００２８】
ＧｎＲＨアンタゴニストのＬＨ低下効果を効果的に補うため、ＬＨサブスタンスの投与は、ＧｎＲＨアゴニストの投与が開始した後すぐに、もしくは短期間で開始すべきであり、ＧｎＲＨアンタゴニストが投与される限り継続すべきである。好ましくはＬＨサブスタンスは、ＧｎＲＨアンタゴニストの投与開始後２日から開始して、ＧｎＲＨアンタゴニストの投与停止により終了する期間、少なくとも投与される。より好ましくは、ＬＨサブスタンスは治療の間中ＧｎＲＨアンタゴニストとともに共投与されることである。
【００２９】
ＦＳＨサブスタンスは、雌性の自然に起こる月経の後８日に投与が開始され、ＭＬサブスタンスの投与前日まで投与され、少なくとも当該期間中投与される。より好ましくは、ＦＳＨサブスタンスの投与は、雌性の月経の後６日より前に開始され、より好ましくは月経後２日に開始されることである。
【００３０】
原則として、本発明は当業者に公知のいかなるＧｎＲＨアンタゴニストも適切に使用し得る。例えば、適したＧｎＲＨアンタゴニストはガニレリックス、セトロレリックス、ガニレリックス前駆体、セトロレリックス前駆体、ＬＨ放出ホルモンのアナログである拮抗的直鎖ペプチド（例えば、米国特許５，１４０，８３５及び５，１７１，８３５中に記載されている）、環状ヘキサペプチド誘導体類（ＪＰ−Ａ６１  １９１６９８に記載）及びニ環式ペプチド誘導体類（J.of Medic.Chem.(1993),36,3265-73に開示）、もしくはそれらの混合物を含む。好ましくは、本発明中で使用されるＧｎＲＨアンタゴニストは、ガニレリックス、セトロレリックス、及びそれらの混合物から成る群から選択される。
【００３１】
本ＣＯＨ方法は、ＬＨ欠乏の徴候を予防するためＬＨサブスタンスを使用し、卵胞が成熟に達するように導かれた後、且つＦＳＨ及びＧｎＲＨアンタゴニストの投与が停止された後、減数分裂及び黄体形成を刺激するため引き続きＭＬサブスタンスを高用量（単回）で投与する。当該サイクルのこの段階におけるＭＬサブスタンス投与の目的は、通常の月経サイクルの中に起こるＬＨサージをまねることであり、減数分裂の回復、黄体化及び排卵を誘導する。ＬＨの次に広範囲の他の薬剤物質をそのような応答を誘発するために用いることができる。本発明の方法で使用される好適なＭＬサブスタンスは、組換えＬＨ、尿絨毛性性腺刺激ホルモン（urinay  choriotropin  gonadotropin：ｕＣＧ）、組換えＣＧ、性腺刺激ホルモン放出ホルモン（ＧｎＲＨ）、ＧｎＲＨアゴニスト類及び下垂体からのＬＨ放出を刺激し得る他の物質（ＬＨ活性を有するキメラ体もしくは何らかの態様で修飾された性腺刺激ホルモン、ＬＨ活性を有する低分子量化合物及びそれらの混合物）から成る群から選定される。より好ましいＭＬサブスタンスは、組換えＬＨ、尿絨毛性性腺刺激ホルモン（urinay  choriotropin  gonadotropin：ｕＣＧ）、組換えＣＧ、性腺刺激ホルモン放出ホルモン（ＧｎＲＨ）及びそれらの混合物から選定される。減数分裂及び黄体形成の回復を刺激するために用いられる最も好ましいＭＬサブスタンスは、組換えＬＨもしくはｕＣＧである。
【００３２】
本方法に合致したＭＬサブスタンスの投与量は、少なくとも２，０００Ｉ．Ｕ．のヒト尿絨毛性性腺刺激ホルモン（urinay  chorionic  human  gonadotropin：ｕｈＣＧ）の皮下投与量に相当する量を超えるのが好ましく、より好ましくは前記投与量が５，０００から１０，００００Ｉ．Ｕ．のｕｈＣＧの皮下投与量と同等である。より好ましいＭＬサブスタンスは、経口単回投与もしくは非経口投与である。最も好ましくは、ＭＬサブスタンスの皮下投与もしくは経口投与である。
【００３３】
本明細書における用語”非経口投与”は、経口／経腸を除き、注射、移植、もしくは局所投与を必要とする全ての投与形式を包含する。非経口投与の適例は、筋肉内投与、静脈内投与、皮下投与、膣内投与、経皮投与及び経鼻投与を含む。
【００３４】
本明細書において前に述べたように、ＦＳＨ及びＬＨはともに雌性の尿から単離され得ることは周知である。尿から単離されたＬＨは、ｉｎ  ｖｉｖｏでの半減期が非常に短く（ｔ１／２：１０から２０分）、とても早く代謝されるので、本方法の使用にあまり適するものではない。組換え細胞株から得られたＬＨ（ｒｅｃＬＨ）は、より適する（ｔ１／２：１２から１３時間）。その結果、特に適した態様は、ＬＨ欠乏の徴候を予防するため、もしくは抑制するために使用されるＬＨサブスタンスは、組換え細胞株から得られたものである。
【００３５】
本方法で使用されるＦＳＨサブスタンスは、組換えＦＳＨ（ｒｅｃＦＳＨ）、尿ＦＳＨ（ｕＦＳＨ）、拮抗的ＦＳＨムテイン類、及び／もしくはＦＳＨ作用活性を示すヘテロ環状低分子量化合物（６００ダルトン未満）から適宜選択されてよい。好適なＦＳＨサブスタンスはｒｅｃＦＳＨ、もしくはｕＦＳＨである。尿由来のＦＳＨは、ｒｅｃＦＳＨとほぼ同じに機能するが、体液からの有効成分の単離は純度が低く、生成物の濃度が低く、そして病気への移植のリスクに関連することが注意される。従ってＦＳＨサブスタンスのより好ましい態様は、組換え細胞株から得られたＦＳＨである。
【００３６】
本方法においてＬＨサブスタンス共投与の第一の目的は、特に高い着床率、即ちＧｎＲＨアゴニスト類により得られる着床率と少なくとも同様であることの達成を目的としながら、ＬＨ欠乏を予防することである。従って、本方法の好適な態様は、胎芽の着床に不都合に影響するようなＬＨ欠乏にある雌性への治療に用いることである。
【００３７】
本ＣＯＨ方法により得られた最も良い結果は、ＦＳＨサブスタンス及びＬＨサブスタンスを少なくとも１日１回投与した場合である。好ましくは、ＧｎＲＨアンタゴニストも少なくとも１日１回投与することである。好ましい投与の形式は非経口投与であり、よりこのましくは皮下投与である。
【００３８】
本発明の他の観点は、制御された過剰刺激の方法で用いるための医薬キットに関し、当該キットは以下を含んで成る：
・ＦＳＨ５０から１５００Ｉ．Ｕ．での皮下投与量に相当する量の１以上のＦＳＨサブスタンス類を含む少なくとも１の非経口、もしくは経口投与ユニット；
・ガニレリックス０．５から２５ｍｇでの皮下投与量に相当する量の１以上のＧｎＲＨアンタゴニスト類を含む少なくとも１の非経口投与ユニット；
・組換えＬＨ５０から３０００Ｉ．Ｕ．での皮下投与量に相当する量の１以上のＬＨサブスタンス類を含む少なくとも１の非経口投与ユニット；
ここでのＬＨサブスタンスは、ヒト雌性の尿から得られたものでない。前記投与ユニットは、ＦＳＨサブスタンス、ＧｎＲＨアンタゴニストもしくはＬＨサブスタンスを含み別個の投与ユニットとして集めることができ、または２回もしくは１回投与でさえ組合せることができる。
【００３９】
本発明投与ユニットの好ましい態様は、少なくとも１日１回投与のためにデサインされており、ＦＳＨ１００から１２００Ｉ．Ｕ．での皮下投与量に相当する量の１以上のＦＳＨサブスタンスを含み、ガニレリックス０．５から４ｍｇでの皮下投与量に相当する量の１以上のＧｎＲＨアンタゴニスト類、及び１００から１０００Ｉ．Ｕ．での皮下投与量に相当する量の１以上のＬＨサブスタンス類を含む。より好適には、本キットは少なくともガニレリックス０．６ｍｇ、更に好ましくは少なくともガニレリックス０．８ｍｇ、更に好ましくは少なくともガニレリックス１．０ｍｇ、そして最も好ましくは少なくともガニレリックス１．１ｍｇでの皮下投与量に相当する量において１以上のＧｎＲＨアンタゴニスト類が入っている投与ユニットを含む。後者の投与ユニットは、好ましくはガニレリックス３ｍｇでの皮下投与量に相当する量を超えない量、より好ましくはガニレリックス２．５ｍｇでの皮下投与量に相当する量を超えない量の１以上のＧｎＲＨアンタゴニストを含む。
【００４０】
本キットは、少なくともｕｈＣＧが２，０００Ｉ．Ｕ．での皮下投与量に相当する量、好ましくはｕｈＣＧが５，０００から１０，０００Ｉ．Ｕ．での皮下投与量に相当する量の１以上のＭＬサブスタンス類が入っている単回非経口投与もしくは経口投与ユニットを更に含み得る。本キットの他の好適な態様は、１以上のＦＳＨサブスタンスを含む投与ユニット、１以上のＧｎＲＨアンタゴニスト類を含む投与ユニット、及び１以上のＬＨサブスタンス類を含む投与ユニットが１日１回の自己皮下投与のためのカートリッジに組合されたものである。
【００４１】
本キットにおける、好適な全ての投与ユニットは、非経口投与ユニットである。その上、当該キットの中の非経口投与ユニットは、筋肉注射もしくは皮下投与用が好適である。
【００４２】
本発明は、以下の実施例によって更に説明されるが、制限的に解釈されるものではない。その特色は、前述の記載、以下の実施例及び請求項において明らかにされ、（共に独立し、またそれらの組合せのいずれも）、様々な形式で本発明を具現化するための材料であり得る。
【実施例１】
【００４３】
オープン試験(open-label, controlled clinical trial)は、ＣＯＨの下で９０症例（雌性）における早期の内因性ＬＨサージの予防の有効性、安全性及び耐性を研究するため行われ、組換えＦＳＨ治療の６日目から、０．２５ｍｇセトロレリックス（３０症例）、２．０ｍｇセトロレリックス（３０症例）、もしくは４００Ｉ．Ｕ．ｒｅｃＬＨと組合せた２．０ｍｇセトロレリックス（３０症例）の尿ｈＣＧ治療の日を含めるまで毎日の皮下投与に用いられ、後にＩＶＦ及び胎芽移植（ＥＴ）が行われる。
【００４４】
本治療は、ＩＶＦ患者（例えば１８歳から４５歳までの年齢範囲、多嚢胞性卵巣症候群を呈するか否か、一定の周期を有するか否か）の全てのタイプに適するにも関わらず、以下の選定基準が本研究において設定された：不妊カップルの健常雌性；選定時の年齢が２０歳から３９歳；規則的な月経周期及び書面でのインフォームドコンセントの意思を有す。しかしながら、体重もしくは体格（body  mass）に関する特別な予防策はない。
【００４５】
組換えＦＳＨの最初の投与前、ホルモン分析（エストラジオール及びＬＨ）のための血液サンプルが採取され、妊婦を排除するため標準化された尿ｈＣＧアッセイが実施される。組換えＦＳＨ治療は、月経の２日目もしくは３日目からｈＣＧ投与日まで、毎日の皮下注射により開始される。組換えＦＳＨ治療の最初の５日間の１日用量は、１５０ＩＵに定められる。６日目には、２日に１回ずつ薬剤投与前にホルモン分析のため血液サンプルの採取が開始され、もしも必要ならば組換えＦＳＨの１日に注射し得る投与量を調整するため、超音波検査での卵胞成長モニタリングの実施が開始される。
【００４６】
尿ｈＣＧ（１０，０００ＩＵ）による皮下注射は、超音波スキャンの測定により少なくとも３つの卵胞が直径１７ｍｍを超えた時投与され、その後卵母細胞の回復が典型的には３０から３６時間後に起こる。
【００４７】
１日２．０ｍｇセトロレリックスの皮下投与（ｒｅｃＬＨ４００Ｉ．Ｕ．があってもなくても）は、０．２５ｍｇの皮下投与よりも早期のＬＨ上昇をより有効に予防することを見出した。この有効性は、特に体重７５ｋｇ以上のＣＯＨを受けたＩＶＦ患者に明白である。更に、１日２．０ｍｇ（ｒｅｃＬＨ４００Ｉ．Ｕ．があってもなくても）の量でのセトロレリックスの毎日の皮下投与は、良好な耐性であり、ＣＯＨ並びにその後のＩＶＦ及びＥＴ（胎芽移植）を受けた雌性に明白な副作用がないことを示す。
【実施例２】
【００４８】
卵母細胞は、実施例１で示されたようにＣＯＨを受けた雌性において回復される。当該卵母細胞は、後に試験管内で受精され、２日後わずか２つの胎芽が患者の子宮へ移植される。最も高い着床及び妊娠率は、２．０ｍｇのセトロレリックスと４００ＩＵの組換えＬＨとの組合せ物の毎日の投与により早期のＬＨサージが予防されるＩＶＦ患者において得られる。低い着床及び妊娠率は、０．２５ｍｇセトロレリックスの毎日の投与により早期のＬＨサージが予防されるＩＶＦ患者において得られる。最終的に、最も低い着床及び妊娠率は２．０ｍｇのセトロレリックス（ｒｅｃＬＨとの共投与なし）の毎日の投与により早期のＬＨサージが予防されるＩＶＦ患者において得られる。
【実施例３】
【００４９】
実施例１及び２は、２．０ｍｇのセトロレリックスの代わりに２．０ｍｇのガニレリックスを用いて繰り返される。得られた結果物は、実施例１及び２に記載されたものととてもよく似ている。
【国際調査報告】
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