(57)【要約】本発明は式（Ｉ）の化合物に関する。該化合物は、進行にＩκＢキナーゼの増大した活性が関与している疾患の予防および治療のための医薬の製造に適している。  【化１】2005539054.tif 000033
2005539054.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式Ｉ：
【化１】
2005539054.tif 000030
［式中、
ＸおよびＭは同じかまたは異なっていて、そして、相互に独立してＮ原子またはＣＨであり、
Ｒ１およびＲ１１は同じかまたは異なっていて、そして、相互に独立して下記：
１．水素原子、
２．Ｆ、Ｃｌ、ＩまたはＢｒ、
３．−（Ｃ1−Ｃ4）−アルキル、
４．−ＣＮ、
５．−ＣＦ3、
６．−ＯＲ5、ここでＲ5は水素原子または−（Ｃ1−Ｃ4）−アルキルであるもの、
７．−Ｎ（Ｒ5）−Ｒ6、ここでＲ5およびＲ6は相互に独立して水素原子または−（Ｃ1−Ｃ4）−アルキルであるもの、
８．−Ｃ（Ｏ）−Ｒ5、ここでＲ5は水素原子または−（Ｃ1−Ｃ4）−アルキルであるもの、または、
９．−Ｓ（Ｏ）x−Ｒ5、ここでｘは整数０、１または２であり、そしてＲ5は水素原子または−（Ｃ1−Ｃ4）−アルキルであるもの、
であり、
Ｒ２は、
１．３−ヒドロキシピロ−２，４−ジオン、イミダゾール、イミダゾリジン、イミダゾリン、インダゾール、イソチアゾール、イソチアゾリジン、イソオキサゾール、２−イソオキサゾリジン、イソオキサゾリジン、イソオキサゾロン、モルホリン、オキサゾール、１，３，４−オキサジアゾール、オキサジアゾリジンジオン、オキサジアゾロン、１，２，３，５−オキサチアジアゾール−２−オキシド、５−オキソ−４，５−ジヒドロ［１，３，４］−オキサジアゾール、５−オキソ−１，２，４−チアジアゾール、ピペラジン、ピラジン、ピラゾール、ピラゾリン、ピラゾリジン、ピリダジン、ピリミジン、テトラゾール、チアジアゾール、チアゾール、チオモルホリン、トリアゾールまたはトリアゾロンよりなる群から選択されるヘテロアリール基、そしてここで、
ヘテロアリール基は未置換であるか、または、下記：
１．１  −Ｃ（Ｏ）−Ｒ5、ここでＲ5は水素原子または−（Ｃ1−Ｃ4）−アルキルであるもの、
１．２  −（Ｃ1−Ｃ4）−アルキル、
１．３  −Ｏ−Ｒ5、ここでＲ5は水素原子または−（Ｃ1−Ｃ4）−アルキルであるもの、
１．４  −Ｎ（Ｒ5）−Ｒ6、ここでＲ5およびＲ6は相互に独立して水素原子または−（Ｃ1−Ｃ4）−アルキルであるもの、
１．５  ハロゲン、または、
１．６  ケト基、
により相互に独立して１回、２回または３回置換されているもの、
２．−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ5、ここでＲ5は水素原子または−（Ｃ1−Ｃ4）−アルキルであるもの、
３．−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ5、ここでＲ5は水素原子または−（Ｃ1−Ｃ4）−アルキルであるもの、または
４．−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ7）−Ｒ8、ここでＲ7およびＲ8は相互に独立して水素原子、−（Ｃ1−Ｃ4）−アルキル−ＯＨ、−Ｏ−（Ｃ1−Ｃ4）−アルキルまたは−（Ｃ1−Ｃ4）−アルキルであるもの、
であり、
Ｒ３は水素原子または−（Ｃ1−Ｃ4−アルキル）であり、
Ｒ４は、１．ピロール、フラン、チオフェン、イミダゾール、ピラゾール、オキサゾール、イソオキサゾール、チアゾール、イソチアゾール、テトラゾール、１，２，３，５−オキサチアジアゾール−２−オキシド、トリアゾロン、オキサジアゾロン、イソオキサゾロン、オキサジアゾリジンジオン、トリアゾール、３−ヒドロキシピロロ−２，４−ジオン、５−オキソ−１，２，４−チアジアゾール、ピリジン、ピラジン、ピリミジン、インドール、イソインドール、インダゾール、フタラジン、キノリン、イソキノリン、キノキサリン、キナゾリン、シンノリン、β−カルボリンおよびこれらのヘテロアリール基のベンゾ縮合のシクロペンタ誘導体またはシクロヘキサ誘導体よりなる群から選択されるヘテロアリール基、
ここでヘテロアリール基は未置換であるか、または、−（Ｃ1−Ｃ5）−アルキル、−（Ｃ1−Ｃ5）−アルコキシ、ハロゲン、ニトロ、アミノ、トリフルオロメチル、ヒドロキシル、ヒドロキシ−（Ｃ1−Ｃ4）−アルキル、メチレンジオキシ、エチレンジオキシ、ホルミル、アセチル、シアノ、ヒドロキシカルボニル、アミノカルボニルまたは−（Ｃ1−Ｃ4）−アルコキシカルボニルで相互に独立して１回、２回または３回置換されているもの、または、
２．フェニル、ナフチル、１−ナフチル、２−ナフチル、ビフェニリル、２−ビフェニリル、３−ビフェニリルおよび４−ビフェニリル、アントリルまたはフルオレニルよりなる群から選択されるアリール基、そしてここで、
アリール基は未置換であるか、または、−（Ｃ1−Ｃ5）−アルキル、−（Ｃ1−Ｃ5）−アルコキシ、ハロゲン、ニトロ、アミノ、トリフルオロメチル、ヒドロキシル、ヒドロキシ−（Ｃ1−Ｃ4）−アルキル、メチレンジオキシ、エチレンジオキシ、ホルミル、アセチル、シアノ、ヒドロキシカルボニル、アミノカルボニルまたは−（Ｃ1−Ｃ4）−アルコキシカルボニルで相互に独立して１回、２回または３回置換されているもの、
である］の化合物および／または式Ｉの化合物の立体異性体形態および／または式Ｉの化合物の生理学的に耐容性のある塩。
【請求項２】
ＸおよびＭは同じかまたは異なっていて、そして、相互に独立してＮ原子またはＣＨであり、Ｒ１およびＲ１１は同じかまたは異なっていて、そして、相互に独立して下記：
１．水素原子、
２．Ｆ、Ｃｌ、ＩまたはＢｒ、
３．−（Ｃ1−Ｃ4）−アルキル、
４．−ＣＮ、
５．−ＣＦ３、
６．−ＯＲ5、ここでＲ5は水素原子または−（Ｃ1−Ｃ4）−アルキルであるもの、
７．−Ｎ（Ｒ5）−Ｒ6、ここでＲ5およびＲ6は相互に独立して水素原子または−（Ｃ1−Ｃ4）−アルキルであるもの、
８．−Ｃ（Ｏ）−Ｒ5、ここでＲ5は水素原子または−（Ｃ1−Ｃ4）−アルキルであるもの、または、
９．−Ｓ（Ｏ）x−Ｒ5、ここでｘは整数０、１または２であり、そしてＲ5は水素原子または−（Ｃ1−Ｃ4）−アルキルであるもの、
であり、
Ｒ２は、
１．イミダゾール、イソチアゾール、イソオキサゾール、２−イソオキサゾリジン、イソオキサゾリジン、イソオキサゾロン、１，３，４−オキサジアゾール、オキサジアゾリジンジオン、１，２，３，５−オキサジアゾロン、オキサゾール、５−オキソ−４，５−ジヒドロ［１，３，４］−オキサジアゾール、テトラゾール、チアジアゾール、チアゾール、トリアゾールまたはトリアゾロンよりなる群から選択されるヘテロアリール基、そしてここで、
ヘテロアリール基は未置換であるか、または、下記：
１．１  ケト基、
１．２  Ｆ、Ｃｌ、ＩもしくはＢｒ、または、
１．３  −（Ｃ1−Ｃ4）−アルキル、
により相互に独立して１回、２回または３回置換されているもの、または、
２．−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ7）−Ｒ8、ここでＲ7およびＲ8は相互に独立して水素原子、−（Ｃ1−Ｃ4）−アルキル−ＯＨ、−Ｏ−（Ｃ1−Ｃ4）−アルキルまたは−（Ｃ1−Ｃ4）−アルキルであるもの、
であり、
Ｒ３は水素原子、メチルまたはエチルであり、
Ｒ４は、１．ピリジン、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、ピロール、フラン、チオフェン、イミダゾール、ピラゾール、オキサゾール、イソオキサゾール、チアゾール、トリアゾールまたはイソチアゾールから誘導される不飽和、部分飽和または完全飽和の環よりなる群から選択されるヘテロアリール基、
ここでヘテロアリール基は未置換であるか、または、−（Ｃ1−Ｃ4）−アルキル、−（Ｃ1−Ｃ4）−アルコキシ、Ｆ、Ｃｌ、Ｉ、Ｂｒ、ニトロ、アミノ、トリフルオロメチル、ヒドロキシル、ヒドロキシ−（Ｃ1−Ｃ4）−アルキル、メチレンジオキシ、エチレンジオキシ、ホルミル、アセチル、シアノ、ヒドロキシカルボニル、アミノカルボニルまたは−（Ｃ1−Ｃ4）−アルコキシカルボニルで相互に独立して１回、２回または３回置換されているもの、または、
２．フェニル、ここでフェニルはＦ、Ｃｌ、Ｉ、Ｂｒ、ＣＦ3、−ＯＨ、−（Ｃ1−Ｃ4）−アルキルまたは−（Ｃ1−Ｃ4）−アルコキシで相互に独立して１回、２回または３回置換されているもの、
である請求項１記載の式Ｉの化合物。
【請求項３】
式Ｉの化合物が
Ｎ−［（Ｓ）−２−ジフェニルアミノ−１−（５−オキソ−４，５−ジヒドロ［１，３，４］オキサジアゾール−２−イル）エチル］−２−（２−メチルアミノピリジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボキサミド、
Ｎ−｛１−カルバモイル−２−［（４−フルオロフェニル）ピリジン−２−イルアミノ］エチル｝−２−（２−メチルアミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボキサミド、
Ｎ−［（Ｓ）−１−（５−オキソ−４，５−ジヒドロ−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）−２−（フェニルピリジン−２−イルアミノ）エチル］−２−（２−メチルアミノピリジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボキサミド、
Ｎ−｛１−カルバモイル−２−［（４−フルオロフェニル）ピリジン−２−イルアミノ］エチル｝−２−（２−アミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボキサミド、
Ｎ−［２−［（４−フルオロフェニル)ピリミジン−２−イルアミノ］−１−（４Ｈ−
［１，２，４］トリアゾール−３−イル）−エチル］−２−（２−メチルアミノピリミジ
ン−４−イル)−１Ｈ−インドール−５−カルボキサミド、
Ｎ−［１−カルバモイル−２−（フェニルチアゾール−２−イルアミノ）エチル］−（Ｓ）−２−（２−メチルアミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボキサミド、
Ｎ−［１−メトキシカルバモイル−２−（フェニルチピリジン−２−イルアミノ）エチル］−（Ｓ）−２−（２−メチルアミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボキサミド、
Ｎ−｛１−カルバモイル−２−［（フェニル）ピリジン−２−イルアミノ］エチル｝−２−（２−アミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボキサミド、
Ｎ−｛１−カルバモイル−２−［（フェニル）ピリミジル−２−イルアミノ］エチル｝−２−（２−メチルアミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボキサミド、
Ｎ−［１−（２−ヒドロキシエチルカルバモイル）−２−（フェニルピリミジン−２−イルアミノ）エチル］−２−（２−メチルアミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボキサミド、
（Ｓ）−２−｛［２−（２−メチルアミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボニル］アミノ｝−３−［フェニル−（４−トリフルオロメチルピリミジン−２−イル）アミノ］プロピオン酸、
Ｎ−｛１−カルバモイル−２−［（４−フルオロフェニル）−（５−メチルピリミジン−２−イル）アミノ］エチル｝−２−（２−メチルアミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボキサミド、
Ｎ−（（Ｓ）−１−カルバモイル−２−ジフェニルアミノエチル）−２−（２−メチルアミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ベンズイミダゾール−５−カルボキサミド、
Ｎ−｛１−カルバモイル−２−［（フェニル）ピリミジル−２−イルアミノ］エチル｝−２−（２−メチルアミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ベンズイミダゾール−５−カルボキサミド、または、
Ｎ−｛１−カルバモイル−２−［（フェニル）ピリジル−２−イルアミノ］エチル｝−２−（２−メチルアミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ベンズイミダゾール−５−カルボキサミド、
である請求項１または２に記載の式Ｉの化合物。
【請求項４】
下記工程：
ａ）下記式ＩＶ：
【化２】
2005539054.tif 000031
［式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ４は式Ｉのとおり定義される］の化合物を、下記式ＩＩＩ：
【化３】
2005539054.tif 000032
［式中Ｄ１は−ＣＯＯＨであり、そして、Ｒ１１、Ｘ、ＭおよびＲ３は式Ｉのとおり定義される］の化合物の酸クロリドまたは活性エステルと、塩基、または、適宜、脱水剤の存在下、溶液中で反応させること、および、生成物を式Ｉの化合物に変換すること、
ｂ）方法ａ）により製造されており、そして、その化学的構造によりエナンチオマー形態で存在する式Ｉの化合物を、エナンチオマー的に純粋な酸または塩基との塩の形成、キラル固定相上のクロマトグラフィー、または、アミノ酸のようなキラルエナンチオマー的に純粋な化合物を用いた誘導体形成により純粋なエナンチオマーに分離すること、得られたジアステレオマーを分離すること、および、キラルな補助基を除去すること、または、
ｃ）遊離の形態の方法ａ）またはｂ）により製造された式Ｉの化合物を単離するか、または、酸性または塩基性の基が存在する場合は、それを生理学的に耐容性のある塩に変換すること、
を含む、請求項１〜３のいずれか１項に記載の式Ｉの化合物の製造方法。
【請求項５】
式Ｉの化合物および／または式Ｉの化合物の生理学的に耐容性のある塩および／または式Ｉの化合物の場合により立体異性の形態少なくとも１種の有効量を、製薬上適当であり生理学的に耐容性のある担体物質、添加剤および／または他の活性成分および補助的物質と共に含む医薬。
【請求項６】
ＩκＢキナーゼの増大した活性が関与する疾患の全ての予防および治療のための医薬の製造のための請求項１〜３のいずれか１項に記載の式Ｉの化合物の使用。
【請求項７】
疾患が運動器官の慢性疾患、例えば炎症性、免疫または代謝媒介の急性または慢性の関節炎、関節症、慢性関節リューマチまたは変形性関節疾患、例えば骨関節炎、脊椎症、ＩＩ型糖尿病、炎症性腸疾患、関節外傷または半月板または膝蓋骨の傷害または靭帯断裂に続く比較的長期の関節固定の後の軟骨の消失、または、結合組織の疾患、例えば膠原病および歯周病、筋肉痛および骨代謝の障害、または腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦα）の過剰発現またはＴＮＦαの上昇した濃度による疾患、例えば悪液質、多発性硬化症、頭蓋脳の外傷、クローン病および腸の潰瘍、または、アテローム性動脈硬化症、狭窄、潰瘍、アルツハイマー病、筋肉崩壊、癌、心筋梗塞、痛風、敗血症、敗血症性ショック、内毒素ショック、ウィルス感染、例えば感冒、肝炎、ＨＩＶ感染、ＡＩＤＳ、またはアデノウィルスまたはヘルペスウィルスにより誘発された疾患、寄生虫感染、例えばマラリアまたはらい病、カビまたは酵母の感染、髄膜炎、慢性炎症性肺疾患、例えば慢性気管支炎または喘息、急性呼吸窮迫症候群、急性滑膜炎、結核、乾癬、糖尿病、移植された臓器に対する臓器のレシピエントの部分における急性または慢性の拒絶反応の治療、慢性移植片対宿主疾患および炎症性血管疾患である請求項６記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はＩκＢキナーゼを阻害するインドール誘導体またはベンズイミダゾール誘導体、その製造方法および医薬としてのその使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
国際特許出願ＷＯ９４／１２４７８号は特に血液の血小板凝固を抑制するインドール誘導体を記載している。国際特許出願ＷＯ０１／００６１０号および国際特許出願ＷＯ０１／３０７７４号はＮＦκＢをモジュレートすることができるインドール誘導体およびベンズイミダゾール誘導体を記載している。ＮＦκＢは特にＩＬ−１、ＩＬ−２、ＴＮＦαまたはＩＬ−６のようなプロ炎症性サイトカインをコードする遺伝子の多くを活性化させることができるヘテロ二量体の転写因子である。ＮＦκＢは細胞のシトゾルに存在し、そこではその天然の阻害剤ＩκＢと複合体化している。例えばサイトカインによる細胞の刺激によりＩκＢはホスホリル化し、その後は蛋白分解的に崩壊するる。この蛋白分解的な崩壊はＮＦκＢの活性化をもたらし、次にこれが細胞の核に移行してそこで多数のプロ炎症性遺伝子を活性化させる。慢性関節リューマチ（炎症との関連において）、骨関節炎、関節炎、心筋梗塞、アルツハイマー病、ＩＩ型糖尿病、「炎症性腸疾患」またはアテローム性動脈硬化症のような疾患において、ＮＦκＢは正常な範囲を超えて活性化される。ＮＦκＢの阻害はまた、それがそれ自体として、または、細胞殺傷治療の増強のために使用されるため、癌の治療においても価値あるものである。リューマチの治療に用いられている糖質コルチコイド、サリシレートまたは金製剤のような医薬は種々の点においてＮＦκＢ活性化シグナル連鎖を抑制するか、または、遺伝子の転写を直接緩衝することが明らかにされている。上記したシグナルカスケードにおける第１の工程はＩκＢの崩壊である。このホスホリル化は特定のＩκＢキナーゼにより調節される。即ちこれまでＩκＢキナーゼを特異的に阻害する阻害剤は知られていない。
【０００３】
ＩκＢキナーゼの既知阻害剤はキナーゼの僅か１クラスのみを阻害する特性を有さないことの不都合を有している。例えば、ＩκＢキナーゼの大部分の阻害剤はこれらのキナーゼの触媒ドメインの構造が同じであるために同時に数種の異なるキナーゼも阻害する。その結果、阻害剤は生体機能を有するものも含む多くの酵素に対し、望ましくない態様において作用する。
【０００４】
国際特許出願ＷＯ０１／３０７７４号は既に、ＮＦκＢをモジュレートでき、ＩκＢキナーゼの強力な阻害作用を示すインドール誘導体を記載している。しかしながら、国際特許出願ＷＯ０１／３０７７４号に開示されており、実施例に記載されている化合物はまた、ｃＡＭＰ依存性蛋白キナーゼ、蛋白キナーゼＣおよびカゼインキナーゼＩＩのような他のキナーゼに対しても強力な阻害作用を示す。しかしながら、それらの特異性が改善された場合、それらのインドール誘導体の一部はＩκＢキナーゼを阻害するその能力の低下を示す。更にまた国際特許出願ＷＯ０１／３０７７４号に開示されている化合物を用いて達成できる血液血漿中濃度はこれらの誘導体を経口投与するためには不十分である。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
慢性関節リューマチ（炎症との関連において）、骨関節炎、喘息、心筋梗塞、アルツハイマー病、癌疾患（細胞殺傷剤を用いた治療の強化）またはアテローム性動脈硬化症の治療のための有効な化合物を得るための研究において、今回、本発明のインドール誘導体およびベンズイミダゾール誘導体は上記した不都合な点を有していないことがわかった。本
発明のインドール誘導体およびベンズイミダゾール誘導体は、ＩκＢキナーゼの強力な阻害剤であり、この点に関して極めて選択的にキナーゼを阻害し、そして、経口投与後に高い血液血漿中濃度を示す。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
従って本発明は、下記式Ｉ：
【化１】
2005539054.tif 000003
［式中、
ＸおよびＭは同じかまたは異なっていて、そして、相互に独立してＮ原子またはＨであり、
Ｒ１およびＲ１１は同じかまたは異なっていて、そして、相互に独立して下記：
１．水素原子、
２．Ｆ、Ｃｌ、ＩまたはＢｒ、
３．−（Ｃ1−Ｃ4）−アルキル、
４．−ＣＮ、
５．−ＣＦ3、
６．−ＯＲ5、ここでＲ5は水素原子または−（Ｃ1−Ｃ4）−アルキルであるもの、
７．−Ｎ（Ｒ5）−Ｒ6、ここでＲ5およびＲ6は相互に独立して水素原子または−（Ｃ1−Ｃ4）−アルキルであるもの、
８．−Ｃ（Ｏ）−Ｒ5、ここでＲ5は水素原子または−（Ｃ1−Ｃ4）−アルキルであるもの、または、
９．−Ｓ（Ｏ）x−Ｒ5、ここでｘは整数０、１または２であり、そしてＲ5は水素原子または−（Ｃ1−Ｃ4）−アルキルであるもの、
であり、
【０００７】
Ｒ２は、
１．３−ヒドロキシピロ−２，４−ジオン、イミダゾール、イミダゾリジン、イミダゾリン、インダゾール、イソチアゾール、イソチアゾリジン、イソオキサゾール、２−イソオキサゾリジン、イソオキサゾリジン、イソオキサゾロン、モルホリン、オキサゾール、１，３，４−オキサジアゾール、オキサジアゾリジンジオン、オキサジアゾロン、１，２，３，５−オキサチアジアゾール−２−オキシド、５−オキソ−４，５−ジヒドロ［１，３，４］−オキサジアゾール、５−オキソ−１，２，４−チアジアゾール、ピペラジン、ピラジン、ピラゾール、ピラゾリン、ピラゾリジン、ピリダジン、ピリミジン、テトラゾール、チアジアゾール、チアゾール、チオモルホリン、トリアゾールまたはトリアゾロンよりなる群から選択されるヘテロアリール基、そしてここで、
ヘテロアリール基は未置換であるか、または、下記：
１．１  −Ｃ（Ｏ）−Ｒ5、ここでＲ5は水素原子または−（Ｃ1−Ｃ4）−アルキルであるもの、または、
１．２  −（Ｃ1−Ｃ4）−アルキル、
１．３  −Ｏ−Ｒ5、ここでＲ5は水素原子または−（Ｃ1−Ｃ4）−アルキルであるもの、または、
１．４  −Ｎ（Ｒ5）−Ｒ6、ここでＲ5およびＲ6は相互に独立して水素原子または−（Ｃ1−Ｃ4）−アルキルであるもの、
１．５  ハロゲン、または、
１．６  ケト基、
により相互に独立して１回、２回または３回置換されているもの、
２．−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ5、ここでＲ5は水素原子または−（Ｃ1−Ｃ4）−アルキルであるもの、
３．−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ5、ここでＲ5は水素原子または−（Ｃ1−Ｃ4）−アルキルであるもの、
４．−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ7）−Ｒ8、ここでＲ7およびＲ8は相互に独立して水素原子、−（Ｃ1−Ｃ4）−アルキル−ＯＨ、−Ｏ−（Ｃ1−Ｃ4）−アルキルまたは−（Ｃ1−Ｃ4）−アルキルであるもの、
であり、
【０００８】
Ｒ３は水素原子または−（Ｃ1−Ｃ4−アルキル）であり、
Ｒ４は、
１．ピロール、フラン、チオフェン、イミダゾール、ピラゾール、オキサゾール、イソオキサゾール、チアゾール、イソチアゾール、テトラゾール、１，２，３，５−オキサチアジアゾール−２−オキシド、トリアゾロン、オキサジアゾロン、イソオキサゾロン、オキサジアゾリジンジオン、トリアゾール、３−ヒドロキシピロロ−２，４−ジオン、５−オキソ−１，２，４−チアジアゾール、ピリジン、ピラジン、ピリミジン、インドール、イソインドール、インダゾール、フタラジン、キノリン、イソキノリン、キノキサリン、キナゾリン、シンノリン、β−カルボリンおよびこれらのヘテロアリール基のベンゾ縮合のシクロペンタ誘導体またはシクロヘキサ誘導体よりなる群から選択されるヘテロアリール基、
ここでヘテロアリール基は未置換であるか、または、−（Ｃ1−Ｃ5）−アルキル、−（Ｃ1−Ｃ5）−アルコキシ、ハロゲン、ニトロ、アミノ、トリフルオロメチル、ヒドロキシル、ヒドロキシ−（Ｃ1−Ｃ4）−アルキル、メチレンジオキシ、エチレンジオキシ、ホルミル、アセチル、シアノ、ヒドロキシカルボニル、アミノカルボニルまたは−（Ｃ1−Ｃ4）−アルコキシカルボニルで相互に独立して１回、２回または３回置換されているもの、または、
２．フェニル、ナフチル、１−ナフチル、２−ナフチル、ビフェニリル、２−ビフェニリル、３−ビフェニリルおよび４−ビフェニリル、アントリルまたはフルオレニルよりなる群から選択されるアリール基、そしてここで、
アリール基は未置換であるか、または、−（Ｃ1−Ｃ5）−アルキル、−（Ｃ1−Ｃ5）−アルコキシ、ハロゲン、ニトロ、アミノ、トリフルオロメチル、ヒドロキシル、ヒドロキシ−（Ｃ1−Ｃ4）−アルキル、メチレンジオキシ、エチレンジオキシ、ホルミル、アセチル、シアノ、ヒドロキシカルボニル、アミノカルボニルまたは−（Ｃ1−Ｃ4）−アルコキシカルボニルで相互に独立して１回、２回または３回置換されているもの、
である］の化合物および／または式Ｉの化合物の立体異性体形態および／または式Ｉの化合物の生理学的に耐容性のある塩に関する。
【０００９】
本発明は更に、ＸおよびＭは同じかまたは異なっていて、そして、相互に独立してＮ原子またはＨであり、
Ｒ１およびＲ１１は上記の１〜９の通り定義され、
Ｒ２は、
１．イミダゾール、イソチアゾール、イソオキサゾール、２−イソオキサゾリジン、イソオキサゾリジン、イソオキサゾロン、１，３，４−オキサジアゾール、オキサジアゾリ
ジンジオン、１，２，３，５−オキサチアゾロン、オキサゾール、５−オキソ−４，５−ジヒドロ［１，３，４］−オキサジアゾール、テトラゾール、チアジアゾール、チアゾール、トリアゾールまたはトリアゾロンよりなる群から選択されるヘテロアリール基、そしてここで、ヘテロアリール基は未置換であるか、または、下記：
１．１  ケト基、
１．２  ハロゲン、または、
１．３  −（Ｃ1−Ｃ4）−アルキル、
により相互に独立して１回、２回または３回置換されているもの、または、
２．−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ7）−Ｒ8、ここでＲ7およびＲ8は相互に独立して水素原子、−（Ｃ1−Ｃ4）−アルキル−ＯＨ、−Ｏ−（Ｃ1−Ｃ4）−アルキルまたは−（Ｃ1−Ｃ4）−アルキルであるもの、
であり、
Ｒ３は水素原子、メチルまたはエチルであり、
Ｒ４は、
１．ピリジン、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、ピロール、フラン、チオフェン、イミダゾール、ピラゾール、オキサゾール、イソオキサゾール、チアゾール、トリアゾールまたはイソチアゾールから誘導される不飽和、部分飽和または完全飽和の環よりなる群から選択されるヘテロアリール基、
ここでヘテロアリール基は未置換であるか、または、−（Ｃ1−Ｃ4）−アルキル、−（Ｃ1−Ｃ4）−アルコキシ、Ｆ、Ｃｌ、Ｉ、Ｂｒ、ニトロ、アミノ、トリフルオロメチル、ヒドロキシル、ヒドロキシ−（Ｃ1−Ｃ4）−アルキル、メチレンジオキシ、エチレンジオキシ、ホルミル、アセチル、シアノ、ヒドロキシカルボニル、アミノカルボニルまたは−（Ｃ1−Ｃ4）−アルコキシカルボニルで相互に独立して１回、２回または３回置換されているもの、または、
２．フェニル、ここでフェニルはＦ、Ｃｌ、Ｉ、Ｂｒ、ＣＦ3、−ＯＨ、−（Ｃ1−Ｃ4）−アルキルまたは−（Ｃ1−Ｃ4）−アルコキシで相互に独立して１回、２回または３回置換されているもの、
である式Ｉの化合物に関する。
【００１０】
本発明は更に、下記：
Ｎ−［（Ｓ）−２−ジフェニルアミノ−１−（５−オキソ−４，５−ジヒドロ［１，３，４］オキサジアゾール−２−イル）エチル］−２−（２−メチルアミノピリジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボキサミド、
Ｎ−｛１−カルバモイル−２−［（４−フルオロフェニル）ピリジン−２−イルアミノ］エチル｝−２−（２−メチルアミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボキサミド、
Ｎ−［（Ｓ）−１−（５−オキソ−４，５−ジヒドロ−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）−２−（フェニルピリジン−２−イルアミノ）エチル］−２−（２−メチルアミノピリジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボキサミド、
Ｎ−｛１−カルバモイル−２−［（４−フルオロフェニル）ピリジン−２−イルアミノ］エチル｝−２−（２−アミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボキサミド、
Ｎ−［２−［（４−フルオロフェニル)ピリミジン−２−イルアミノ］−１−（４Ｈ−［１，２，４］トリアゾール−３−イル）−エチル］−２−（２−メチルアミノピリミジン−４−イル)−１Ｈ−インドール−５−カルボキサミド、
Ｎ−［１−カルバモイル−２−（フェニルチアゾール−２−イルアミノ）エチル］−（Ｓ）−２−（２−メチルアミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボキサミド、
Ｎ−［１−メトキシカルバモイル−２−（フェニルチピリジン−２−イルアミノ）エチル］−（Ｓ）−２−（２−メチルアミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５
−カルボキサミド、
Ｎ−｛１−カルバモイル−２−［（フェニル）ピリジン−２−イルアミノ］エチル｝−２−（２−アミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボキサミド、
Ｎ−｛１−カルバモイル−２−［（フェニル）ピリミジル−２−イルアミノ］エチル｝−２−（２−メチルアミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボキサミド、
Ｎ−［１−（２−ヒドロキシエチルカルバモイル）−２−（フェニルピリミジン−２−イルアミノ）エチル］−２−（２−メチルアミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボキサミド、
（Ｓ）−２−｛［２−（２−メチルアミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボニル］アミノ｝−３−［フェニル−（４−トリフルオロメチルピリミジン−２−イル）アミノ］プロピオン酸、
Ｎ−｛１−カルバモイル−２−［（４−フルオロフェニル）−（５−メチルピリミジン−２−イル）アミノ］エチル｝−２−（２−メチルアミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボキサミド、
Ｎ−（（Ｓ）−１−カルバモイル−２−ジフェニルアミノエチル）−２−（２−メチルアミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ベンズイミダゾール−５−カルボキサミド、
Ｎ−｛１−カルバモイル−２−［（フェニル）ピリミジル−２−イルアミノ］エチル｝−２−（２−メチルアミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ベンズイミダゾール−５−カルボキサミド、または、
Ｎ−｛１−カルバモイル−２−［（フェニル）ピリジル−２−イルアミノ］エチル｝−２−（２−メチルアミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ベンズイミダゾール−５−カルボキサミド、
の化合物に関する。
【００１１】
「ハロゲン」という用語はフッ素、塩素、臭素またはヨウ素を意味するものとする。「−（Ｃ1−Ｃ5）−アルキル」または「−（Ｃ1−Ｃ5）−アルコキシ」という用語は炭素鎖が直鎖または分枝鎖であり、かつ炭素原子１〜５個を含む炭化水素基、例えばメチル、エチル、プロピル、ｎ−ブチル、ペンチルまたはｔ−ブチルを意味するものとする。「ピリジン、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、ピロール、フラン、チオフェン、イミダゾール、ピラゾール、オキサゾール、イソオキサゾール、チアゾールおよびイソチアゾールから誘導される不飽和、部分飽和または完全飽和の環よりなる群から選択されるヘテロアリール基」という表現は例えばピペラジン、ピラゾリン、イミダゾリン、ピラゾリジン、イミダゾリジン、テトラヒドロピリジン、イソオキサゾリン、イソオキサゾリジン、モルホリン、イソチアゾリン、イソチアゾリジン、テトラヒドロ−１，４−チアジンまたはピペリジンのような化合物を意味するものとする。
【００１２】
式Ｉの化合物は、例えば国際特許出願ＷＯ０１／００６１０号および国際特許出願ＷＯ０１／３０７７４号に記載の通り製造される。化学反応のための原料化合物は既知物質であるか、または、文献記載の方法を用いて容易に製造できる。
【００１３】
本発明は更に、下記工程：
ａ）下記式ＩＶ：
【化２】
2005539054.tif 000004
［式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ４は式Ｉのとおり定義される］の化合物を、下記式ＩＩＩ：
【化３】
2005539054.tif 000005
［式中Ｄ１は−ＣＯＯＨであり、そして、Ｒ１１、Ｘ、ＭおよびＲ３は式Ｉのとおり定義される］の酸クロリドまたは活性エステルと、塩基、または、適宜、脱水剤の存在下、溶液中で反応させること、および、生成物を式Ｉの化合物に変換すること、
ｂ）方法ａ）により製造されており、そして、その化学的構造によりエナンチオマー形態で存在する式Ｉの化合物を、エナンチオマー的に純粋な酸または塩基との塩の形成、キラル固定相上のクロマトグラフィー、または、アミノ酸のようなキラルエナンチオマー的に純粋な化合物を用いた誘導体形成により純粋なエナンチオマーに分離すること、得られたジアステレオマーを分離すること、および、キラルな補助基を除去すること、または、
ｃ）遊離の形態の方法ａ）またはｂ）により製造されている式Ｉの化合物を単離するか、または、酸性または塩基性の基が存在する場合は、それを生理学的に耐容性のある塩に変換すること、
を含む式Ｉの化合物および／または式Ｉの化合物の立体異性体形態および／または式Ｉの化合物の生理学的に耐容性のある塩の製造方法に関する。
【００１４】
インドールカルボン酸誘導体またはベンズイミダゾールカルボン酸誘導体はＨｏｕｂｅｎ−Ｗｅｙｌの「Ｍｅｔｈｏｄｅｎ  ｄｅｒ  Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍｉｅ」、Ｅ６−２ＡまたはＥ６−２Ｂ巻に記載されている方法を用いて製造する。即ち、式ＩＩＩのインドールカルボン酸誘導体またはベンズイミダゾールカルボン酸誘導体を製造するためには、ヒドラジノ安息香酸およびアリールケトンまたはヘテロアリールケトンを好ましくは１４５℃で溶媒としてのポリリン酸の存在下に反応させる。必要なヒドラジノ安息香酸は当業者の知る方法を用いて、例えば相当する安息香酸アニリンから製造され；アリールケトンまたはヘテロアリールケトンもまた当業者の知る方法を用いて、例えば相当する酸クロリドまたはニトリルから、それらを例えば有機金属化合物と反応させることにより製造される。
【００１５】
当業者の知るペプチド化学のカップリング方法（例えばＨｏｕｂｅｎ−ＷｅｙｌのＭｅｔｈｏｄｅｎ  ｄｅｒ  Ｏｒｇａｎｉｓｈ  Ｃｈｅｍｉｅ」、１５／１および１５／２巻、Ｇｅｏｒｇ  Ｔｈｉｅｍｅ  Ｖｅｒｌａｇ，Ｓｔｕｔｔｇａｒｔ，１９７４参照）が式ＩＩＩの化合物に式ＩＶの化合物を縮合させるために好都合に使用される。カルボニルジイミダゾール、カルボジイミド、例えばジシクロヘキシルカルボジイミドまたはジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）、Ｏ−（（シアノ（エトキシカルボニル）−メチレン）−アミノ）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＯＴＵ）またはプロピル無水リン酸（ＰＰＡ）のような化合物が縮合剤またはカップリング試薬として使用するのに適している。
【００１６】
縮合は標準的な条件下に行うことができる。縮合においては、原則として、存在する非反応のアミノ基は可逆保護基を用いて保護されることが必要である。同様のことは反応に関与しないカルボキシル基についても適用され、これらの基は好ましくは縮合中は−（Ｃ1−Ｃ6）−アルキル、ベンジルエステルまたはｔ−ブチルエステルとして存在する。アミノ基の保護は、アミノ基がニトロ基またはシアノ基のような前駆体の形態でなお存在しており、そして縮合の後にのみ水素化により形成される場合には必要ではない。縮合後、存在する保護基を適当な方法で除去する。例えばＮＯ2基（アミノ酸におけるグアニジノ保護）、ベンジルオキシカルボニル基およびベンジル基におけるベンジル基は水素化により除去できる。ｔ−ブチル型の保護基は酸性条件下において除去され、９−フルオレニルメチルオキシカルボニル基は第２アミンを用いて除去される。
【００１７】
本発明はまた、製薬上適当であり生理学的に耐容性のある担体物質、添加剤および／または他の活性成分および補助的物質と組み合わせた式Ｉの化合物および／または式Ｉの化合物の生理学的に耐容性のある塩および／または式Ｉの化合物の場合により立体異性の形態少なくとも１種の有効量を特徴とする医薬に関する。
【００１８】
その生理学的特性のため、本発明の化合物は、過程にＩκＢキナーゼの増大した活性が関与する疾患の全ての予防および治療のために適している。これらの疾患は、例えば、運動器官の慢性疾患、例えば炎症性、免疫または代謝媒介の急性または慢性の関節炎、関節症、慢性関節リューマチまたは変形性関節疾患、例えば骨関節炎、脊椎症、ＩＩ型糖尿病、炎症性腸疾患、関節外傷または半月板または膝蓋骨の傷害または靭帯断裂に続く比較的長期の関節固定の後の軟骨の消失、または、結合組織の疾患、例えば膠原病および歯周病、筋肉痛および骨代謝の障害、または腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦα）の過剰発現またはＴＮＦαの上昇した濃度による疾患、例えば悪液質、多発性硬化症、頭蓋脳の外傷、クローン病および腸の潰瘍、または、アテローム性動脈硬化症、狭窄、潰瘍、アルツハイマー病、筋肉崩壊、癌（細胞毒性剤による治療の強化）、心筋梗塞、痛風、敗血症、敗血症性ショック、内毒素ショック、ウィルス感染、例えば感冒、肝炎、ＨＩＶ感染、ＡＩＤＳ、またはアデノウィルスまたはヘルペスウィルスにより誘発された疾患、寄生虫感染、例えばマラリアまたはらい病、カビまたは酵母の感染、髄膜炎、慢性炎症性肺疾患、例えば慢性気管支炎または喘息、急性呼吸窮迫症候群、急性滑膜炎、結核、乾癬、糖尿病、移植された臓器に対する臓器のレシピエントの部分における慢性または急性の拒絶反応の治療、慢性移植片対宿主疾患および炎症性血管疾患を包含する。上記した疾患は、阻害すべきものは本質的には僅かＩκＢキナーゼのみであるため、本発明に従って使用する化合物を用いてはるかに高い特異性で、そしてより小さい副作用スペクトルで治療できる。
【００１９】
本発明の医薬は経口、吸入、直腸または経皮投与により、または、皮下、関節内、腹腔内または静脈内の注射により投与できる。
【００２０】
本発明はまた、式Ｉの化合物少なくとも１種を薬学的に適し、生理学的に耐容性のある賦形剤、および、適宜、他の適当な活性化合物、添加剤または補助的物質を投与に適する形態とすることを含む医薬の製造方法に関する。
【００２１】
適当な固形またはガレヌス製剤の形態の例は、顆粒、粉末、糖衣錠、錠剤、（マイクロ)カプセル、坐剤、シロップ、ジュース、懸濁液、乳液、ドロップまたは注射溶液および持続性の活性化合物の放出を示す調製物であり、その調製においては、慣用的な補助的物質、例えば担体物質、錠剤崩壊剤、バインダー、コーティング剤、膨潤剤、滑沢剤または滑剤、フレーバー、甘味料および可溶化剤を使用する。例示できる頻繁に使用される補助的物質は、炭酸マグネシウム、二酸化チタン、乳糖、マンニトールおよび他の糖類、タルク、乳蛋白、ゼラチン、澱粉、セルロースおよびその誘導体、動物性および植物性の油、例えばタラ肝油、ヒマワリ油、ピーナツ油またはゴマ油、ポリエチレングリコールおよび溶媒、例えば滅菌水、および、１価または多価のアルコール、例えばグリセロールである。医薬製剤は好ましくは投与単位において製造して投与し、各単位は活性成分として本発明の式Ｉの化合物の特定の用量を含む。錠剤、カプセル、糖衣錠または坐剤のような固体剤型の場合は、この用量は約１０００ｍｇ以下、好ましくは約５０ｍｇ〜３００ｍｇ、そして、アンプル形態の注射溶液の場合は、約３００ｍｇ以下、好ましくは約１０ｍｇ〜１００ｍｇである。式Ｉの化合物の活性に応じて、活性化合物約２０ｍｇ〜１０００ｍｇ、好ましくは１００ｍｇ〜５００ｍｇの一日当たり用量を体重約７０ｋｇの成人患者の治療のために適用する。しかしながら、より高いまたは低い一日当たり用量が適切である場合がある。一日当たり用量は単回剤型の形態で１日１回のみにより、または、数個のより低用量の単位により、または、所定の時間間隔における細分用量の複数回投与によりにより投与できる。
【００２２】
原則として、質量スペクトル法（ＦＡＢ−ＭＳ、ＥＳＩ−ＭＳ）を用いて最終生成物の測定を行った。温度は摂氏で示し、ＲＴは室温（２２℃〜２６℃）を示すものとした。使用する略記法は説明したものであるか、または、慣用例に相当する。本発明を実施例を用いて以下により詳述する。
【００２３】
〔製造実施例〕
Ａ）アニリンの製造
Ａ．１．）２−（ｐ−フルオロアニリノ）ピリジン（３）
【化４】
2005539054.tif 000006
４−フルオロアニリン（１）２９．３４ｇ（０．２６４モル）および２−クロロピリジン（２）２９．９８ｇ（０．２６４モル）の混合物を２時間１５０℃に加熱した。室温に冷却後、これを１ＮＮａＯＨ５００ｍｌおよび酢酸エチル５００ｍｌに分配した。水層を酢酸エチル各々３００ｍｌで２回抽出し、合わせた有機層を硫酸マグネシウム上に乾燥した。溶媒を蒸発した後、残留物を酢酸エチル５００ｍｌに溶解し、活性炭約４０ｇを添加した。混合物を１０分間室温で攪拌し、ケイソウ土で濾過した。活性炭を酢酸エチル各々１Ｌで４回洗浄した。溶媒を真空下（ｉ．ｖ．）除去し、残留物を酢酸エチル１２０ｍｌから析出させた。固体を吸引濾過し、５０℃ｉ．ｖ．で乾燥した。２−（ｐ−フルオロアニリノ）ピリジン（３）４１ｇを得た。収率８３％。
実験式Ｃ11Ｈ9Ｎ2；Ｍ．Ｗ．＝１８８．２１；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）１８９．１
1H NMR (CDCl3) 6.68-6.75 (m, 2 H), 6.88 (s, 1 H), 7. 05 (t, 2 H), 7.24-7. 32 (m,
2 H), 7.43-7.49 (m, 1 H), 8.18 (d, 1 H)。
【００２４】
Ａ．２．）２−（アニリノ）ピリミジン（６）
【化５】
2005539054.tif 000007
Ａ．１．）に記載と同様の方法で２−クロロピリミジン（５）と反応させることによりアニリン１６．２ｇからアニリノピリミジン６  ９．１５ｇ（３１％）を得た。
実験式Ｃ10Ｈ9Ｎ3；Ｍ．Ｗ．＝１７１．０８；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）１７２．２
【００２５】
Ｂ．）Ｚ−セリンラクトン８によるアミノ酸合成
Ｂ．１．）メチル（Ｓ）−２−アミノ−３−ジフェニルアミノプロピオネート（１１）
【化６】
2005539054.tif 000008
【００２６】
Ｂ．１．１．）Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−セリン−β−ラクトン（８）
トリフェニルホスフィン５４．８ｇ（０．２０９モル）をアセトン６００ｍｌに懸濁し、水分を排除しながら懸濁液を−３５℃から−４５℃に冷却した。この温度で５０分間以内にジエチルアゾジカルボキシレート３６．４ｇ（０．２０９モル）を滴加した。次に混合物を１５分間−３５℃で攪拌した。次に温度が−３５℃を超えないように、アセトニトリル５００ｍｌ中のＮ−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−セリン（７）５０ｇからなる溶液をこの混合物にゆっくり添加した。次に得られた混合物を１２時間５℃で攪拌した。反応を終了させるため、反応溶液から減圧下に溶媒を除去し、粗生成物をシリカゲル上の中圧クロマトグラフィーにより精製した（ＤＣＭ／ＡｃＣＮ：２５／１）。溶媒を除去後、Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−セリン−β−ラクトン（８）２０．８ｇを得た。収率４５％（Ｏｒｇ．Ｓｙｎｔｈ．１９９１（７０）１ｆｆも参照）微細な針状。
実験式Ｃ11Ｈ11ＮＯ4；ＭＷ＝２２１．２；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）２２２．１
1H NMR(DMSO-d6) 4.30 (m, 1 H), 4.45 (m, 1 H), 5.10 (s, 2H), 5.22 (m, 2H), 7.45 (m, 5H), 8.20 (d, J =9.8 Hz, 1 H)。
【００２７】
Ｂ．１．２）（Ｓ）−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−３−ジフェニルアミノプロピオン酸（９）
セリンラクトン（５）５．０ｇ（２２．６ミリモル）をジフェニルアミン２０ｇ（１１８．２ミリモル）とともに攪拌し、混合物を２時間１００℃で加熱した。粗生成物をシリカゲル上の中圧クロマトグラフィーにより精製した（ＤＣＭ／メタノール：９／１、次に酢酸エチル／ｎ−ヘプタン：４／１）。溶媒を除去後、純粋な２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−３−ジフェニルアミノプロピオン酸（９）３．６５ｇ（収率４２％）を得た。
実験式Ｃ23Ｈ22Ｎ2Ｏ4；Ｍ．Ｗ．＝３９０．４４；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）３９１．２
1H NMR (DMSO-d6) 3.85 (m, 1H), 4.18 (m, 1H), 4.3 (m,1H), 4.9 (m, 2H), 6.9 (m, 5H), 7.25 (m, 10H)。
【００２８】
Ｂ．１．３．）メチル（Ｓ）−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−３−ジフェニルアミノプロピオネート（１０）
塩化チオニル６．５ｍｌ（８９．１ミリモル）を−５℃でメタノール７５ｍｌに滴加し、混合物を１５分間攪拌した。次にメタノール７５ｍｌに溶解した２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−３−ジフェニルアミノプロピオン酸（９）３．６ｇ（９．２２ミリモル）を添加し、混合物をさらに３時間室温で攪拌した。溶媒を蒸発させた後、残留物を酢酸エチルに溶解し、全量を炭酸ナトリウム溶液で抽出した。フラッシュクロマトグラフィー（ｎ−ヘプタン／酢酸エチル７：３）により精製し、メチル２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−３−ジフェニルアミノプロピオネート（１０）２．７６ｇ（収率５０％）を得た。
実験式Ｃ24Ｈ24Ｎ2Ｏ4；Ｍ．Ｗ．＝４０４．４７；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）４０５．２
1H NMR(DMSO-d6) 3.58 (s, 3H), 3.95 (m,1 H), 4.18 (m,1H), 4.4 (m,1H), 4.95 (m, 2H), 6.9 (m, 6H), 7.3 (m, 9H), 7.85(d, J=9.8Hz, 1H)。
【００２９】
Ｂ．１．４．）メチル（Ｓ）−２−アミノ−３−ジフェニルアミノプロピオネート（１１）
Ｚ保護基を除去するためＺ−保護誘導体（１０）２．７ｇ（６．６８ミリモル）をメタノール５００ｍｌに溶解し、窒素保護雰囲気下に触媒（１０％Ｐｄ（ＯＨ）2−Ｃ）１００ｍｇを供給した。次に不活性ガスを大過剰の水素で置換し、混合物を水素雰囲気下に２時間振とうした。反応を終了させるため、触媒を濾去し、濾液を濃縮した。メチル２−アミノ−３−ジフェニルアミノプロピオネート（１１）１．６５ｇ（収率：９１％）を得た。
実験式Ｃ16Ｈ18Ｎ2Ｏ2；Ｍ．Ｗ．＝２７０．３２；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）２７１．２
1H NMR(DMSO-d6) 3.45 (s, 3H), 3.58 (m, 1H), 3.8 (m, 1H), 3.95(m, 1H), 6.9 (m, 6H), 7.3 (m, 4H)。
【００３０】
Ｂ．２．）アクリル酸１３によるアミノ酸合成
Ｂ．２．１．）エナンチオマーの分離
アクリル酸により製造されたラセミ体のアミノ酸をＣｈｉｒａｌｐａｋＡＤ（Ｄａｉｃｅｌ）１００×３８０のようなキラル相を使用した分取用ＨＰＬＣ、室温、流量３００ｍｌ／分によりエナンチオマーに変換した。エナンチオマーの純度はＣｈｉｒａｌｐａｋ−ＡＤ−Ｈ（Ｄａｉｃｅｌ）４．６×２５０のような分析ＨＰＬＣ、３０℃、流量１ｍｌ／分、室温により決定した。
【００３１】
Ｂ．２．２．メチル（３−（Ｎ−４−フルオロフェニル−Ｎ−２−ピリジル）アミノ）−２−（ジ−ｔ−ブチルオキシ−カルボニル）アミノプロピオネート（１４）
【化７】
2005539054.tif 000009
【００３２】
Ｂ．２．２．１．）メチル２−（ジ−ｔ−ブチルオキシカルボニル）アミノアクリレート（１３）
Ｂｏｃ−セリン（１２）５０ｇ（０．２２８モル）をアセトニトリル３００ｍｌに溶解した。Ｂｏｃ無水物１０７ｇ（０．４９３モル）およびＤＭＡＰ２．６４ｇ（２２ミリモル）を添加した。混合物を１夜かけて室温で攪拌し、真空下に溶媒を除去後、残留物を酢酸エチル５００ｍｌに溶解した。有機層を１ＮＨＣｌ５００ｍｌで洗浄し、硫酸マグネシウムを使用して乾燥した。−３０℃でヘプタン２００ｍｌから結晶化し、次に吸引濾過することによりアクリル酸１３  ２３ｇを得た。母液を濃縮し、残留物をアセトニトリル１４０ｍｌに溶解した。Ｂｏｃ無水物３１ｇ（０．１４２モル）およびＤＭＡＰ１．２６ｇ（１０ミリモル）を添加した。混合物を８時間５０℃で加熱後、溶媒を真空下に除去し、残留物を酢酸エチル５００ｍｌに溶解した。有機層を１ＮＨＣｌ４００ｍｌで洗浄し、硫酸マグネシウム上に乾燥した。溶媒を真空下に除去後、ヘプタンから結晶化することによりさらにアクリレート１３  ３１．５ｇを得た。収量５４．５ｇ（０．１８１モル）７９％。実験式Ｃ14Ｈ23ＮＯ6；Ｍ．Ｗ．＝３０１．３４；ＭＳ（（Ｍ*２）＋Ｎａ+）６２５．７
1H NMR (DMSO-d6) 1.40 (s, 18 H), 3.74 (s, 3 H), 5.85 (s, 1 H), 6.28 (S, 1 H)。
【００３３】
Ｂ．２．２．２．）メチル（３−（Ｎ−４−フルオロフェニル−Ｎ−２−ピリジル）アミノ）−２−（ジ−ｔ−ブチルオキシ−カルボニル）アミノプロピオネート（１４）
アクリレート１３  １１．５ｇ（３８．２ミリモル）をアニリン３  ７．２ｇ（３８．３ミリモル）および炭酸セシウム３７．３ｇ（１１４ミリモル）と混合した。アセトニトリル１００ｍｌを添加し、混合物を２日間５５℃で攪拌した。その後、さらに２日間室温で攪拌した。固体をケイソウ土で吸引濾去し、アセトニトリル各々１００ｍｌで３回洗浄した。合わせた有機層から真空下に溶媒を除去し、残留物をヘプタン／酢酸エチル４：１を使用したシリカゲル上のクロマトグラフィーに付した。収量：１４  １４ｇ（７５％）。
実験式Ｃ25Ｈ32ＦＮ3Ｏ6；Ｍ．Ｗ．＝４８９．５５；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）４９０．６
1H NMR(CDCl3) 1.28 (s, 18 H), 3.72 (s, 3 H), 4.25 (dd, 1 H), 4.75 (dd, 1 H), 5.83 (dd, 1 H), 6.22 (d, 1 H), 6.56-6.61 (m, 1 H), 7.05-7.12 (m, 2 H), 7.19-7. 26 (m, 3 H), 8.18 (d, 1 H)。
【００３４】
Ｂ．２．３．）メチル（３−（Ｎ−フェニル−Ｎ−２−ピリミジル）アミノ）−２−（ジ−ｔ−ブチルオキシ−カルボニル）アミノプロピオネート（１５）
【化８】
2005539054.tif 000010
Ｂ．２．２．２．）に記載と同様の方法で反応を行い、６  ３５ｇからアミノ酸１５  ３ｇ（７％）を得た。
実験式Ｃ24Ｈ32Ｎ4Ｏ6；Ｍ．Ｗ．＝４７２．２３；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）４７３．１
【００３５】
Ｃ．）複素環親物質の合成
【化９】
2005539054.tif 000011
【００３６】
Ｃ．１．）インドール親物質の合成：
２−（２−メチルアミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボン酸（２０）
Ｃ．１．１．）１−ジメチルアミノ−４，４−ジメトキシペンタ−１−エン−３−オン（１８）
３，３−ジメトキシ−２−ブタノン（１６）１００ｇ（０．７６モル）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドジメチルアセタール（１７）９０．２ｇ（０．７６モル）とともに４８時間１２０℃で攪拌した。反応で形成したメタノールを蒸留により反応溶液から継続的に除去した。溶液を冷却すると結晶化が自然に発生し、少量のヘプタンを添加することにより結晶化が完了した。これにより得られた粗生成物１８  １２８．２４ｇ（収率９０％）をさらに精製することなく反応させた。
実験式Ｃ9Ｈ17ＮＯ3；Ｍ．Ｗ．＝１８７．２４；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）１８８．２
1H NMR(DMSO-d6) 1.22(s, 3H), 2.80 (s, 3H), 3.10 (s, 9H), 5.39 (d, J = 15 Hz,1H),
7.59 (d, J= 15 Hz,1 H)。
【００３７】
Ｃ．１．２．）［４−（１，１−ジメトキシエチル）ピリミジン−２−イル］メチルアミン（１９）
ナトリウム１．２２ｇ（５３ミリモル）を無水エタノール１００ｍｌに溶解した。塩酸メチルグアニジン５．８ｇ（５３ミリモル）および１−ジメチルアミノ−４，４−ジメトキシペンタ−１−エン−３−オン（１８）１０ｇ（５３ミリモル）を攪拌しながらこの溶
液に添加し、全量を４時間煮沸熱で加熱した。反応を終了するため、エタノールを蒸発させた。得られた生成物１９をさらに精製することなく次の反応に使用した。収量１１．５ｇ（５８ミリモル、定量的）
実験式Ｃ9Ｈ15Ｎ3Ｏ2；Ｍ．Ｗ．＝１９７．２４；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）１９８．２
1H NMR (DMSO-d6) 1.45 (s, 3H), 2.78 (s, 3H), 3.10 (s, 6H), 6.75 (d, J = 3 Hz, 1 H), 7.0-7.1 (s (b), 1 H), 8.30 (d, J = 3 Hz, 1 H)。
【００３８】
Ｃ．１．３．）２−（２−メチルアミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボン酸（２０）
［４−（１，１−ジメトキシエチル）ピリミジン−２−イル］メチルアミン（１９）５ｇ（２５ミリモル）および４−ヒドラジノ安息香酸３．８５ｇを室温で攪拌しながら５０％硫酸１５０ｍｌに添加し、混合物を４時間１３０℃で加熱した。反応中に形成したメタノールを蒸留により反応溶液から継続的に除去した。１０℃に冷却後、反応混合物を氷２００ｍｌ上に注ぎ込み、濃水酸化ナトリウム溶液でｐＨ約５．５に調整した。この過程で形成した硫酸ナトリウムの沈殿および生成物の混合物を濾去し、濾過残留物をメタノールで数回抽出した。合わせたメタノール抽出物を濃縮し、生成物２０をフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／メタノール９：１）で精製した。収量：０．７６ｇ（１１％）
実験式Ｃ14Ｈ13Ｎ4Ｏ2；Ｍ．Ｗ．＝２６８．２８；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）２６９．１
1H NMR (DMSO-d6) 2.95 (s, 3H), 6.90-7.10 (s (b),1 H), 7.18 (d, J = 3 Hz, 1 H), 7.4 (s, 1 H), 7.58 (d, J=4. 5Hz, 1H), 7.80 (d, J=4. 5Hz, 1H), 8.30 (s, 1H), 7.80 (d, J=4.5Hz, 1H), 8.38 (d, J=3Hz, 1 H), 11.85 (s, 1 H), 12.40-12.60 (s (b), 1H)。
【００３９】
Ｃ．２．）ベンズイミダゾール親物質の合成：
２−（２−メチルアミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ベンズイミダゾール−５−カルボン酸（２５）
【化１０】
2005539054.tif 000012
【００４０】
Ｃ．２．１．）４−ジメチルアミノ−１，１−ジメトキシブタ−３−エン−２−オン（２２）
メチルグリオキサールジメチルアセタール（２１）３００ｇ（３０７ｍｌ、２．５４モル）３００ｇを４時間１１０℃で、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドジメチルアセタール（１７）３０３ｇ（３３７ｍｌ、２．５４モル）とともに攪拌した。反応中に形成したメタノールを蒸留により反応溶液から継続的に除去した。反応溶液を冷却後、ヘプタンで抽出し、溶媒を除去した。これにより得られた粗生成物２２  ３０３ｇ（収率７０％）をさらに精製することなく反応させた。
実験式Ｃ8Ｈ15ＮＯ3；Ｍ．Ｗ．＝１７３．２１；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）１７４．１
1H NMR(DMSO-d6) 2.10 (s, 1H), 2.80 (s, 3H), 3.10 (s, 3H), 3.25 (s, 3H), 3.3 (s, 3H), 4.42 (s, 1H), 5.19 (d (b), J=12.8 Hz, 1H), 7.60 (d, J = 15 Hz, 1 H)。
【００４１】
Ｃ．２．２．）（４−ジメトキシメチルピリミジン−２−イル）メチルアミン（２３）
ナトリウム０．３３ｇ（１４．４ミリモル）を無水エタノール５０ｍｌに溶解した。塩酸メチルグアニジン１．５７ｇ（１４．４ミリモル）および４−ジメチルアミノ−１，１−ジメトキシ−ブタ−３−エン−２−オン（２２）２．４８ｇ（１４．４ミリモル）を攪拌しながらこの溶液に添加し、全量を３時間煮沸熱で加熱した。エタノールを蒸発させることにより反応が終了した。得られた生成物２３をさらに精製することなく使用した。収量２．６ｇ（定量的）。
実験式Ｃ8Ｈ13Ｎ3Ｏ2；Ｍ．Ｗ．＝１８３．２１；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）１８４．１
1H NMR (DMSO-d6) 2.78 (s, 6H), 3.10 (s, 3H), 5.02 (s, 1H), 6.62 (d, J = 3 Hz, 1H), 8.30 (d, J = 3 Hz, 1H)。
【００４２】
Ｃ．２．３．）２−メチルアミノピリミジン−４−カルボアルデヒド（２４）
（４−ジメトキシメチルピリミジン−２−イル）メチルアミン（２３）１０ｇ（５４ミリモル）を２Ｎ硫酸５４ｍｌに溶解し、溶液を攪拌しながら３時間８０℃で加熱した。反応混合物を冷却後、反応溶液を固体Ｎａ2ＣＯ3を使用して慎重にｐＨ約９にして、エタノールで３回抽出した。合わせた乾燥抽出物として溶媒を蒸発させた後、６０％の収率（４．４７ｇ）で標題アルデヒド２４を得た。実験式Ｃ6Ｈ7Ｎ3Ｏ；Ｍ．Ｗ．＝１３７．１２；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）１３８．２
1H NMR (DMSO-d6) 2.60-2.80 (s (b), 3H), 6.95 (d, J = 3 Hz, 1 H), 7.40-7.60 (s (b), 1 H), 8.55 (d, J =3 Hz, 1 H)。
【００４３】
Ｃ．２．４．）２−（２−メチルアミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ベンズイミダゾール−５−カルボン酸（２５）
メチルアミノピリミジン−４−カルボアルデヒド（２４）４．３ｇ（３１．１ミリモル）および３，４−ジアミノ安息香酸４．８ｇ（３１．１ミリモル）をニトロベンゼン３００ｍｌ中に２時間１５０℃で加熱した。混合物を０℃に冷却後、ベンズイミダゾールの沈殿物を濾過によりニトロベンゼンから分離除去し、フラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ／メタノール４：１）により生成物２５を精製した。収量：２．６６ｇ（３２％）。
実験式Ｃ13Ｈ11Ｎ5Ｏ2；Ｍ．Ｗ．＝２６９．２８；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）２７０．２
1H NMR (DMSO-d6) 2.95(s, 3H), 7.50 (d, J=3Hz, 1H), 7.75 (d, J = 4.5 Hz, 1 H), 7.90 (d, J=4.5 Hz, 1 H), 8.35 (s, 1 H), 8.55 (d, J = 3 Hz, 1 H), 8.70-9.05 (s (b), 1 H)。
【００４４】
Ｄ．）インドール最終生成物
Ｄ．１．）Ｎ−［（Ｓ）−２−ジフェニルアミノ−１−（５−オキソ−４，５−ジヒドロ［１，３，４］オキサジアゾール−２−イル）エチル］−２−（２−メチルアミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボキサミド（２８）
【化１１】
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【００４５】
Ｄ．１．１．）メチル３−ジフェニルアミノ−２−｛［２−（２−メチルアミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボニル］−（Ｓ）−アミノ｝プロピオネート（２６）
２−（２−メチルアミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボン酸（２０）５．０ｇ（１８．６４ミリモル）をＤＭＦ１．２ｌに溶解し、次にＴＯＴＵ７．９ｇ（２４．０８ミリモル）およびエチルジイソプロピルアミン７．９ｍｌ（４６．４５ミリモル）を連続して添加した。溶液を２０分間５℃で攪拌し、その後これにメチル（Ｓ）−２−アミノ−３−ジフェニルアミノプロピオネート（１１）０．７３ｇ（３．２８ミリモル）を添加した。１５分間混合物を攪拌後、減圧下に濃縮し、残留物をｎ−ブタノールに溶解した；次に、副生成物を分離除去するため有機層を炭酸水素ナトリウム飽和溶液で抽出した。有機層をＭｇＳＯ4で乾燥し、濃縮し、標題化合物２６のメチルエステルをシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝１９：１）により単離した。収量：４．３ｇ（９８％）。
実験式Ｃ30Ｈ28Ｎ6Ｏ3；Ｍ．Ｗ．＝５２０．２２；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）５２１．３
1H NMR (DMSO-d6) 2.95 (s (b), 3H) j 3.60 (s, 3H), 4.19-4.58 (m, 2H), 4.85 (q, 1H), 6.90-7.10 (m, 7H), 7.18 (d, J = 3 Hz, 1 H), 7.25-7. 40 (m, 5H), 7.50 (d, J = 4.5 Hz, 1 H), 7.65 (d, J= 4.5 Hz, 1 H), 8.05 (s, 1 H), 8.35 (d, J = 3 Hz, 1 H), 8.70 (d, J = 3.75 Hz, 1 H), 11.85 (s, 1 H)。
【００４６】
Ｄ．１．２）Ｎ−（（Ｓ）−２−ジフェニルアミノ−１−ヒドラジノカルボニルエチル）−２−（２−メチルアミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボキサミド（２７）
メチル３−ジフェニルアミノ−２−｛［２−（２−メチルアミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボニル］−（Ｓ）−アミノ｝プロピオネート（２６）１．０ｇ（１．９２ミリモル）をメタノール１０ｍｌに溶解し、その後、ヒドラジン水和物０．４８ｇ（９．９５ミリモル）を添加し、混合物を１５時間室温で攪拌した。生成物（０．３ｇ）の沈殿物を濾過により母液から分離除去した。濃縮した母液からシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝１９：１）によりさらにヒドラゾン２７（０．１ｇ）を単離した。収量：０．４ｇ（４０％）。
実験式Ｃ29Ｈ28Ｎ8Ｏ2；Ｍ．Ｗ．＝５２０．６；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）５２１．４
1H NMR-(DMSO-d6) 2.95 (s (b), 3H), 4.02-4.58 (m, 2H), 4.4 (s, 2H), 4. 85 (q, 1H), 6.90-7.10 (m, 7H), 7.18 (d, J = 3 Hz, 1 H), 7.20-7.45 (m, 5H), 7.50 (d, J = 4.5 Hz, 1 H), 7.62 (d, J = 4.5 Hz, 1 H), 7.99 (s, 1 H), 8. 25 (d, J = 3 Hz, 1 H), 8.35 (s (b), 1 H), 9.30 (s, 1 H), 11.70 (s, 1 H)。
【００４７】
Ｄ．１．３．）Ｎ−［（Ｓ）−２−ジフェニルアミノ−１−（５−オキソ−４，５−ジヒドロ［１，３，４］オキサジアゾール−２−イル）エチル］−２−（２−メチルアミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボキサミド（２８）
Ｎ−（（Ｓ）−２−ジフェニルアミノ−１−ヒドラジノカルボニルエチル）−２−（２−メチルアミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボキサミド（２７）２００ｍｇ（０．３８４ミリモル）を塩化メチレン２０ｍｌに懸濁させ、トルエン中のホスゲン２０％溶液（０．３９８ミリモル）を攪拌しながら０℃で滴加した。混合物をさらに１５時間室温で攪拌し、溶媒を蒸発させた。次にオキサジアゾロン２８をシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝９：１）により単離した。収量：１６０ｍｇ（７６％）。
実験式Ｃ30Ｈ26Ｎ8Ｏ3；Ｍ．Ｗ．＝５４６．６；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）５４７．３
1H NMR(DMSO-d6) 2.95(s (b), 3H), 4.02-4. 58 (m, 2H), 4.85 (q, 1H), 6.90-7. 10 (m, 7H), 7.15 (d, J = 3 Hz, 1 H), 7.20-7. 40 (m, 6H), 7.52 (d, J = 4.5 Hz, 1 H), 7.68 (d, J = 4.5 Hz, 1 H), 8.10 (s, 1 H), 8.92 (d, J = 3 Hz, 1 H), 11.78 (s,1 H), 12.15-12.40 (s (b), 1 H)。
【００４８】
Ｄ．２．）Ｎ−｛１−カルバモイル−２−［（４−フルオロフェニル）ピリジン−２−イルアミノ］エチル｝−２−（２−メチルアミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボン酸（３０）
【化１２】
2005539054.tif 000014
【００４９】
Ｄ．２．１．）３−［（４−フルオロフェニル）ピリジン−２−イルアミノ］−２−｛［２−（２−メチルアミノ−ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボニル］アミノ｝プロピオネート（２９）
１４  ０．７５ｇ（１．５３ミリモル）をジオキサン１０ｌに溶解し、溶液を０℃に冷却した。ジオキサン中の４ＮＨＣｌ１０ｍｌを添加し、混合物を２時間以内に室温に戻した；次に続けて１２時間攪拌した。溶媒を真空下に除去した。残留物をＤＭＦ１０ｍｌに溶解した（溶液Ａ）。酸２０  ６１７ｍｇをＤＭＦ２０ｍｌに溶解し、溶液を０℃に冷却した。ＨＡＴＵ１．０５ｇおよびＤＩＥＡ１．６ｍｌを添加した。混合物を４０分間０℃で攪拌後、溶液Ａを添加した。混合物を室温に戻し、次に続いて４時間攪拌した。溶媒を真空下に除去し、残留物をＮａＨＣＯ3飽和溶液１００ｍｌと酢酸エチル１００ｍｌの間
に分配した。水層を酢酸エチル各々５０ｍｌで３回抽出し、合わせた有機層をＮａＣｌ飽和溶液１００ｍｌで洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムを使用して乾燥した。溶媒を真空下に除去し、残留物をヘプタン／酢酸エチル１：３を使用したシリカゲル上のクロマトグラフィーに付した。エステル２９  ５６０ｍｇ（６８％）を得た。
実験式Ｃ29Ｈ26ＦＮ7Ｏ3；Ｍ．Ｗ．＝５３９．５７；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）５４０．２
【００５０】
Ｄ．２．２．）Ｎ−｛１−カルバモイル−２−［（４−フルオロフェニル）ピリジン−２−イルアミノ］エチル｝−２−（２−メチルアミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボキサミド（３０）
エステル２９  ３２０ｍｇ（０．５９３ミリモル）を０℃でアンモニア飽和メタノール５０ｍｌに溶解した。溶液を２４時間攪拌し、次に室温に戻した。溶媒を真空下に除去し、残留物を酢酸エチル２ｍｌから沈殿させた。固体を吸引濾去し、真空下に５０℃で乾燥した。アミド３０  ２７０ｍｇ（８７％）を得た。
実験式Ｃ28Ｈ25ＦＮ8Ｏ2；Ｍ．Ｗ．＝５２４．５６；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）５２５．２
1H NMR(DMSO-d6) 2.45(s, 3 H), 4.10 (d, 1 H), 4.52-4.66(m, 2 H), 6.26 (d, 1 H), 6.77(t, 1 H), 7.02 (bs, 1 H), 7.09-7. 17(m, 2 H), 7.22-7.32(m, 5 H), 7.38-7.46 (m, 1 H), 7.47-7. 58 (m, 3 H), 7. 92(s, 1 H), 8.27-8.36 (M, 2 H), 8.59 (d, 1H), 11.70 (s, 1 H)。
【００５１】
Ｄ．３．）Ｎ−［（Ｓ）−１−（５−オキソ−４，５−ジヒドロ−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）−２−（フェニルピリジン−２−イルアミノ）エチル］−２−（２−メチルアミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボキサミド（３３）
【化１３】
2005539054.tif 000015
【００５２】
Ｄ．３．１．）メチル（３−（Ｎ−フェニル−Ｎ−２−ピリジル）アミノ）−２−（ジ−ｔ−ブチルオキシカルボニル）−アミノプロピオネート（３１）
アクリレート１３  ４．９６ｇ（１６．５ミリモル）を２−アニリノピリジン５．６ｇ（３２．９ミリモル）および炭酸セシウム３２．１６ｇ（９８．７ミリモル）と混合した。アセトニトリル５０ｍｌを添加し、混合物を２日間４５℃で攪拌した。固体をケイソウ土で吸引濾去し、アセトニトリル各々１００ｍｌで３回洗浄した。合わせた有機層を蒸発させ、残留物をヘプタン／ジエチルエーテル１：１を使用したシリカゲル上のクロマトグラフィーに付した。エステル３１  ５．６６ｇを得た。
実験式Ｃ25Ｈ33Ｎ3Ｏ6；Ｍ．Ｗ．＝４７１．５６；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）４７２．２
【００５３】
Ｄ．３．２．）Ｂ．２．１．）に記載の通りエナンチオマーを分離した。
Ｄ．３．３．）メチル２−｛［２−（２−メチルアミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボニル］−アミノ｝−３−（フェニルピリジン−２−イルアミノ）プロピオネート（３２）
３１のＳエナンチオマー２．９ｇをジオキサン３０ｍｌに溶解し、溶液を０℃に冷却した。ジオキサン中の４ＮＨＣｌ３０ｍｌを添加し、その後混合物を室温に戻し、次に１２時間攪拌した。溶媒を真空下に除去した。残留物をＤＭＦ３０ｍｌに溶解した（溶液Ａ）。酸２０  ２．４７ｇ（９．２ミリモル）をＤＭＦ５０ｍｌに溶解し、０℃に冷却した。ＨＡＴＵ４．２１ｇおよびＤＩＥＡ６．４ｍｌを添加した。混合物を４５分間０℃で攪拌後、室温に戻し、溶液Ａを添加した。混合物を１２時間室温で攪拌した。溶媒を真空下に除去し、残留物をＮａＨＣＯ3飽和溶液３００ｍｌと酢酸エチル３００ｍｌの間に分配した。水層を酢酸エチル各々１００ｍｌで３回抽出し、合わせた有機層をＮａＣｌ飽和溶液４００ｍｌで洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を真空下に除去し、残留物をヘプタン／酢酸エチル１：３を使用したシリカゲル上のクロマトグラフィーに付した。エステル３２  １．７８ｇ（５５％）を得た。
実験式Ｃ29Ｈ27Ｎ7Ｏ3；Ｍ．Ｗ．＝５２１．５８；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）５２２．２
【００５４】
Ｄ．３．４．）Ｎ−［（Ｓ）−１−（５−オキソ−４，５−ジヒドロ−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）−２−（フェニルピリジン−２−イルアミノ）エチル］−２−（２−メチルアミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボキサミド（３３）
エステル３２  １．７８ｇ（３．４ミリモル）をＭｅＯＨ３０ｍｌに溶解した。ヒドラジン水和物０．８３ｍｌを添加し、混合物を５時間４０℃で攪拌した。その後、ヒドラジン水和物１．６ｍｌをさらに添加し、混合物を１５時間室温で攪拌した。溶媒を真空下に除去し、残留物をジクロロメタン８０ｍｌに溶解した。トルエン中のホスゲン２０％溶液３．２ｍｌを添加し、混合物を３時間攪拌した。その後、溶媒を真空下に除去し、残留物を水８０ｍｌと酢酸エチル８０ｍｌの間に分配した。これが終了した際、固体が沈殿し、これを吸引濾去した。有機層を蒸発させ、残留物を固体と合わせ、ヘプタン／酢酸エチル１：５を使用したシリカゲル上のクロマトグラフィーに付した。オキサジアゾロン３３  ３９０ｍｇ（２１％）を得た。実験式Ｃ29Ｈ25Ｎ9Ｏ3；Ｍ．Ｗ．＝５４７．５８；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）５４８．２
1H NMR(DMSO-d6) 2.96(s, 3 H), 4.30 (dd, 1 H), 4.67 (dd, 1 H), 5.40 (dd, 1 H), 6.32 (d, 1 H), 6.70- 6.75 (m, 1 H), 6.98 (bs, 1 H), 7.16 (d, 1 H), 7.22-7. 33 (m, 4 H), 7.38-7.46 (m, 3 H), 7.52 (d, 1 H), 7.63 (d, 1 H), 8.08(s, 1 H), 8.21 (d, 1 H), 8.31-8.35(m, 1 H), 9.00 (d, 1 H), 11.72 (s, 1 H), 12.15 (s, 1 H)。
【００５５】
Ｄ．４．）Ｎ−｛１−カルバモイル−２−［（４−フルオロフェニル）ピリジン−２−イルアミノ］エチル｝−２−（２−アミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボキサミド（３５）
【化１４】
2005539054.tif 000016
【００５６】
Ｄ．４．１）メチル３−［（４−フルオロフェニル）ピリジン−２−イルアミノ］−２−｛［２−（２−アミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボニル］アミノ｝プロピオネート（３４）
Ｄ．２．１．）に記載と同様の方法で反応を行い、１４  ７５０ｍｇからメチルエステル３４  ３７０ｍｇ（４６％）を得た。
実験式Ｃ28Ｈ24ＦＮ7Ｏ3；Ｍ．Ｗ．＝５２５．５５；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）５２６．２
【００５７】
Ｄ．４．２．）Ｎ−｛１−カルバモイル−２−［（４−フルオロフェニル）ピリジン−２−イルアミノ］エチル｝−２−（２−アミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボキサミド（３５）
Ｄ．２．２．）に記載と同様の方法で反応を行い、３４  １５０ｍｇからアミド３５  ９５ｍｇ（６５％）を得た。
実験式Ｃ27Ｈ23ＦＮ8Ｏ2；Ｍ．Ｗ．＝５１０．５４；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）５１１．２
1H NMR (DMSO-d6) 4.08-4.17 (m, 1 H), 4.54-4.65 (m, 2 H), 6.29 (d, 1 H), 6.54 (s,
2 H), 6.74-6.80 (m, 1 H), 7.10 (s, 1 H), 7.18 d, 1 H), 7.22-7.31 (m, 4 H), 7.38-7.56 (m, 6 H), 7.92 (s, 1 H), 8.29-8.35 (m, 2 H), 8.74 (d, 1 H), 11.80 (s, 1 H)。
【００５８】
Ｄ．５．）Ｎ−［２−［（４−フルオロフェニル）ピリジン−２−イルアミノ］−１−（４Ｈ−［１，２，４］トリアゾール−３−イル）エチル］−２−（２−メチルアミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボキサミド（３６）
【化１５】
2005539054.tif 000017
アミド３５  １３０ｍｇ（０．２５ミリモル）をＤＭＦ１０ｍｌに溶解した。ＤＭＦジメチルアセタール４０μｌを添加し、混合物を４時間９０℃で加熱した。溶媒を真空下に
除去し、残留物を酢酸３．５ｍｌに溶解した。ヒドラジン水和物２７μｌを添加した後、混合物を１８時間攪拌した。溶媒を真空下に除去し、残留物を分取用ＨＰＬＣにより精製した。トリアゾール３６  ８４ｍｇ（５０％）を得た。
実験式Ｃ29Ｈ25ＦＮ10Ｏ；Ｍ．Ｗ．＝５４８．５９；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）５４９．２
1H NMR (DMSO-d6) 3.04 (s, 3 H), 4.36-4.43 (m, 1 H), 4.49-4.59 (m, 1 H), 5.60-5. 67 (m, 1 H), 6.50 (d, 1 H), 6.78 (t, 1 H), 7.17-7.37 (m, 7 H), 7.45-7.65 (m, 4 H), 8.02 (s, 1 H), 8.19 (d, 1 H), 8.35 (d, 1 H), 8.39 (d, 1 H), 11.85 (s, 1 H)。
【００５９】
Ｄ．６．）Ｎ−［１−カルバモイル−２−（フェニルチアゾール−２−イルアミノ）エチル］−Ｓ−２−（２−メチル−アミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボキサミド（４２）
【化１６】
2005539054.tif 000018
【００６０】
Ｄ．６．１．）フェニルチアゾール−２−イルアミノ（３９）
フェニルチオ尿素１０ｇ（６５．７ミリモル）を酢酸１００ｍｌに溶解した。アセタール３８  ９．９ｍｌを添加し、混合物を２時間１００℃で加熱した。溶媒を真空下に除去し、残留物を１ＮＮａＯＨ３００ｍｌと酢酸エチル３００ｍｌの間に分配した。水層を酢酸エチル各々１００ｍｌで２回抽出し、合わせた有機層を硫酸マグネシウムを使用して乾燥した。溶媒を除去し、残留物をジイソプロピルエーテル５０ｍｌから沈殿させた。固体を吸引濾去し、真空下に５０℃で乾燥した。アニリン３９  ２．５ｇを得た。ジイソプロピルエーテル母液を蒸発させ、残留物をヘプタン／酢酸エチル２：１を使用したシリカゲル上のクロマトグラフィーに付した。これにより、さらに３９  ３．５ｇを得た。収量：６．０ｇ（５２％）。
実験式Ｃ9Ｈ8Ｎ2Ｓ；Ｍ．Ｗ．＝１７６．２４；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）１７７．１
【００６１】
Ｄ．６．２．）メチル（３−（Ｎ−フェニル−Ｎ−２−チアゾリル）アミノ）−２−（ジ−ｔ−ブチルオキシ−カルボニル）アミノプロピオネート（４０）
Ｄ．３．１．）に記載と同様の方法で反応を行い、アクリレート１３  ３．８ｇ（１２．５ミリモル）、アニリン３９  ２．２ｇ（１２．５ミリモル）および炭酸セシウム２０ｇからエステル４０  ４．５ｇ（７５％）を得た。
実験式Ｃ23Ｈ31Ｎ3Ｏ6Ｓ；Ｍ．Ｗ．＝４６６．５８；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）４７８．２
【００６２】
Ｄ．６．３．）Ｂ．２．１）に記載の通りエナンチオマーを分離した。
【００６３】
Ｄ．６．４．）メチルＳ−２−｛［２−（２−メチルアミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボニル］−アミノ｝−３−（フェニルチアゾール−２−イルアミノ）プロピオネート（４１）
Ｄ．３．３．）に記載と同様の方法で反応を行い、エステル４０  １．０７ｇ（２．２ミリモル）および酸２０  ９０１ｍｇ（３．３ミリモル）から４１  ６４０ｍｇ（５５％）を得た。
実験式Ｃ27Ｈ25Ｎ7Ｏ3Ｓ；Ｍ．Ｗ．＝５２７．６１；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）５２８．１
【００６４】
Ｄ．６．４．）Ｎ−［１−カルバモイル−２−（フェニルチアゾール−２−イルアミノ）エチル］−Ｓ−２−（２−メチル−アミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボキサミド（４２）
Ｄ．２．２．）に記載と同様の方法で反応を行い、４１  ５００ｍｇ（０．９５ミリモル）からアミド４２  ３４０ｍｇ（７０％）を得た。
実験式Ｃ26Ｈ24Ｎ8Ｏ2Ｓ；Ｍ．Ｗ．＝５１２．６０；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）５１３．３
1H NMR (DMSO-d6) 2.97 (s, 3 H), 4.23-4.30 (M, 1 H), 4.39-4.48 (M, 1 H), 4.71-4. 78 (m, 1 H), 6.78 (d, 1 H), 7.16 (d, 1 H), 7.28-7.35 (m, 3 H), 7.37-7.60 (m, 7 H), 7.98 (s, 1 H), 8.33 (d, 1 H), 8.62 (d, 1 H), 11.70 (s, 1 H)。
【００６５】
Ｄ．７．）Ｎ−［１−メトキシカルバモイル−２−（フェニルピリジン−２−イルアミノ）エチル］−Ｓ−２−（２−メチルアミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボキサミド（４３）
【化１７】
2005539054.tif 000019
Ｏ−メチルヒドロキシルアミン塩酸塩８０ｍｇ（０．９５ミリモル）をＴＨＦ１０ｍｌに溶解し、−４０℃に冷却した。次にＴＨＦ中の塩化イソプロピルマグネシウム２Ｍ溶液０．９５ｍｌ（１．９ミリモル）を滴加した。混合物を１時間以内に−２０℃に戻した。次にＴＨＦ３ｍｌ中のエステル３２  １００ｍｇ（０．１９ミリモル）の溶液を滴加した。混合物を室温に４時間以内に戻し、水５ｍｌを添加することにより反応を終了した。ＴＨＦを真空下に除去し、残留物を塩化アンモニウム飽和溶液２０ｍｌと酢酸エチル２０ｍｌの間に分配した。水層を酢酸エチル各々２０ｍｌで３回抽出し、合わせた有機層を硫酸マグネシウムを使用して乾燥した。溶媒を真空下に除去し、残留物を分取用ＨＰＬＣにより精製した。メチルヒドロキサメート４３  ６０ｍｇ（６１％）を得た。
実験式Ｃ29Ｈ28Ｎ8Ｏ3；Ｍ．Ｗ．＝５３６．６０；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）５３７．２
1H NMR (DMSO-d6) 2.95 (s, 3 H), 3.52 (s, 3 H), 4.09-4.18 (m, 1 H), 5.51-4. 62 (m, 2 H), 6.33 (d, 1 H), 6.78 (t, 1 H), 7.00 (bs, 1 H), 7.18 (d, 1 H), 7.25-7.33 (m, 4 H), 7.49-7.61 (m, 5 H), 7.98 (s, 1 H), 8.29-8.36 (m, 2 H), 8.79 (d, 1 H), 11.31 (s, 1 H), 11.75 (s, 1 H)。
【００６６】
Ｄ．８．）Ｎ−｛１−カルバモイル−２−［（フェニル）ピリジン−２−イルアミノ］エチル｝−２−（２−アミノ−ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボキサミド（４５）
【化１８】
2005539054.tif 000020
【００６７】
Ｄ．８．１．）メチル−３−［（フェニル）ピリジン−２−イルアミノ］−２−｛［２−（２−アミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボニル］アミノ｝プロピオネート（４４）
Ｂ．１．４．）およびＤ．１．１．）に記載と同様の方法で反応を行い、ｒａｃ−１０
５４０ｍｇからメチルエステル４４  ８１６ｍｇ（８０％）を得た。
実験式Ｃ29Ｈ26Ｎ6Ｏ3；Ｍ．Ｗ．＝５０６．５６；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）５０７．３７
【００６８】
Ｄ．８．２．）Ｎ−｛１−カルバモイル−２−［（フェニル）ピリジン−２−イルアミノ］エチル｝−２−（２−アミノ−ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボキサミド（４５）
Ｄ．２．２．）に記載と同様の方法で反応を行い、４４  １５０ｍｇからアミド４５  １６２ｍｇ（６７％）を得た。
実験式Ｃ28Ｈ25Ｎ7Ｏ2；Ｍ．Ｗ．＝４９１．５６；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）４９２．３２
1H NMR(DMSO-d6) 3.18(s (b), 3H), 4.05-4.13 (m, 2H), 4.85 (q,1H), 6.58 (s (b), 2H), 6.88-7.59 (m, 19H), 7.98 (s, 1H), 8.25 (d, J = 3 Hz,1H), 8.35 (d,J = 2 Hz, 1H), 11.78 (s, 1H)。
【００６９】
Ｄ．９．）Ｎ−｛１−カルバモイル−２−［（フェニル）ピリミジル−２−イルアミノ］エチル｝−２−（２−メチル−アミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボキサミド（４７）
【化１９】
2005539054.tif 000021
【００７０】
Ｄ．９．１．）メチル３−［（フェニル）ピリジミル−２−イルアミノ］−２−｛［２−（２−メチルアミノ−ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボニル］アミノ｝プロピオネート（４６）
Ｄ．２．１．）に記載と同様の方法で反応を行い、１５  ２．３６ｇからメチルエステル４６  １．７５ｍｇ（６７％）を得た。
実験式Ｃ28Ｈ26Ｎ8Ｏ3；Ｍ．Ｗ．＝５２２．５７；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）５２３．３
【００７１】
Ｄ．９．２．）Ｎ−｛１−カルバモイル−２−［（フェニル）ピリミジル−２−イルアミノ］エチル｝−２−（２−メチル−アミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボキサミド（４７）
Ｄ．２．２．）に記載と同様の方法で反応を行い、４６  ７００ｍｇからアミド４７  ４４０ｍｇ（６５％）を得た。
実験式Ｃ27Ｈ25Ｎ9Ｏ2；Ｍ．Ｗ．＝５０７．２１；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）５０８．４
1H NMR (DMSO-d6) 3.0 (s (b), 3H), 4.20-4.32 (m, 1 H), 4.45-4. 59 (m, 2 H), 4.75-4.90 (m, 1H), 6.75 (m, 1 H), 7.10-7.60 (m, 12 H), 7.95 (s, 1 H), 8.35-8.45 (m, 4
H), 11.85 (s (b), 1 H)。
【００７２】
Ｄ．１０．）Ｎ−［１−（２−ヒドロキシエチルカルバモイル）−２−（フェニルピリミジン−２−イルアミノ）エチル］−２−（２−メチルアミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボキサミド（４９）
【化２０】
2005539054.tif 000022
【００７３】
Ｄ．１０．１．）２−｛［２−（２−メチルアミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボニル］アミノ｝−３−（フェニルピリミジン−２−イルアミノ）プロピオン酸（４８）
メチルエステル４６  ４．０ｇをメタノール４００ｍｌに溶解した。ＮａＯＨ２Ｎ水溶液４０ｍｌを添加し、全量を１２時間室温で攪拌した。溶媒を蒸発させた後、残留物を水に溶解し、ＮａＨ2ＰＯ4飽和溶液を使用してｐＨを〜５に調整した。得られた沈殿物を濾去し、水で洗浄した。これにより酸４８  １．３ｇ（収率９３％）を得た。
実験式Ｃ29Ｈ26Ｎ6Ｏ3；Ｍ．Ｗ．＝５０６．２１；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）５０７．３
【００７４】
Ｄ．１０．２．）Ｎ−［１−（２−ヒドロキシエチルカルバモイル）−２−（フェニルピリミジン−２−イルアミノ）−エチル］−２−（２−メチルアミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボキサミド（４９）
無水ＤＭＦ２ｍｌに酸４８  ２００ｍｇを溶解した。ＨＯＡｔ９４ｍｇおよびＤＩＥＡ１５８μｌを添加した。次にエタノールアミン５６μｌを滴加し、混合物を０℃に冷却した；次にＥＤＣ１９５ｍｇを添加した。室温で２日間攪拌後、溶媒を蒸発させ、粗生成物をＭＰＬＣ（溶離剤：ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝９：１）により精製した。収量：標題アミド４９  １０８ｍｇ（５０％）。
実験式Ｃ31Ｈ31Ｎ8Ｏ2；Ｍ．Ｗ．＝５４９．６４；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）５５０．４
1H NMR (DMSO-d6) 1,2 (t, 2H), 3.0 (s (b), 3H), 3,35 (t, 1H), 4.00-4.32 (m, 2H), 4.80-4.99 (m, 1 H), 6.95 (m, 1 H), 7.00-7.65 (m, 7 H), 7.90 (m, 1 H), 8.35-8.40 (m, 1 H), 11.90 (s (b), 1 H)。
【００７５】
Ｄ．１１．）（Ｓ）−２−｛［２−（２−メチルアミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボニル］−アミノ｝−３−［フェニル−（４−トリフルオロメチルピリミジン−２−イル）アミノ］プロピオン酸（５４）
【化２１】
2005539054.tif 000023
【００７６】
Ｄ．１１．１．）フェニル−（４−トリフルオロメチルピリミジン−２−イル）アミン（５１）
Ａ．１．）に記載と同様の方法で反応を行い、アニリン（４）５．１ｇおよびクロロピリミジン５０  ５ｇからアニリン５１  ５．１ｇ（７８％）を得た。
実験式Ｃ11Ｈ8Ｆ3Ｎ3；Ｍ．Ｗ．＝２３９．２０；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）２４０．１
【００７７】
Ｄ．１１．２．）メチル（３−（Ｎ−フェニル−Ｎ−４−トリフルオロメチルピリミジン−２−イル）アミノ）−２−ジ−ｔ−ブチルオキシカルボニル）アミノプロピオネート（５２）
Ｄ．３．１．）に記載と同様の方法で反応を行い、アクリレート１３  ２．５ｇ（８．４ミリモル）およびアニリン５１  ３ｇ（１２．５ミリモル）からエステル５２  ３．９ｇ（８６％）を得た。
実験式Ｃ25Ｈ31Ｆ3Ｎ4Ｏ6；Ｍ．Ｗ．＝５４０．５４；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）５４１．２
【００７８】
Ｄ．１１．３．）Ｂ．２．１．）に記載の通りエナンチオマーを分離した。
【００７９】
Ｄ．１１．４．）メチルＳ−２−｛［２−（２−メチルアミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボニル］アミノ｝−３−［フェニル−（４−トリフルオロメチルピリミジン−２−イル）アミノ］−プロピオネート（５３）
Ｄ．３．３．）に記載と同様の方法で反応を行い、エステル５２のＳエナンチオマー７４３ｍｇ（１．３７５ミリモル）および酸２０  ５５０ｍｇ（１．４３６ミリモル）から５３  ４６７ｍｇ（５８％）を得た。
実験式Ｃ29Ｈ25Ｆ3Ｎ8Ｏ3；Ｍ．Ｗ．＝５９０．５７；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）５９１．７
【００８０】
Ｄ．１１．５．）（Ｓ）−２−｛［２−（２−メチルアミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボニル］−アミノ｝−３−［フェニル−（４−トリフルオロメチルピリミジン−２−イル）アミノ］プロピオン酸（５４）
Ｄ．１０．１．）に記載と同様の方法で反応を行い、エステル５３  ９７ｍｇ（０．１６４ミリモル）から酸５４  ３８ｍｇ（４０％）を得た。
実験式Ｃ28Ｈ23Ｆ3Ｎ8Ｏ3；Ｍ．Ｗ．＝５７６．５４；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）５７７．７
1H NMR (DMSO-d6) 2.95(s, 3 H), 4.27-4.34 (m, 1 H), 4.54-4.63 (m, 1 H), 4.83-4. 92 (m, 1 H), 6.90 (bs, 1 H), 7.15 (d, 2 H), 7.19-7.23 (m, 1 H), 7.27-7. 36 (m, 5 H), 7.45-7.55 (m, 2 H), 7.96 (s, 1 H), 8.32 (s, 1 H), 8.41 (bs, 1 H), 8.66(d, 1 H), 11.70 (s, 1 H)。
【００８１】
Ｄ．１２．）Ｎ−｛１−カルバモイル−２−［（４−フルオロフェニル）−（５−メチルピリミジン−２−イル）アミノ］−エチル｝−２−（２−メチルアミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボキサミド（６１）
【化２２】
2005539054.tif 000024
【００８２】
Ｄ．１２．１．）ペンタフルオロフェニル２−（２−メチルアミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボキシレート（５５）
酸２０  ６．３８ｇ（２３．７８ミリモル）をＴＨＦ１００ｍｌに懸濁した。次にペンタフルオロフェノール５．２５ｇ（２８．５４ミリモル）および１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ*ＨＣｌ）５．４７ｇ（２８．５４ミリモル）を添加した。混合物を１５時間室温で攪拌し、その後溶媒を真空下に除去し、残留物をＮａＨＣＯ3飽和溶液３００ｍｌと酢酸エチル３００ｍｌの間に分配した。固体をケイソウ土で濾去し、残留物を酢酸エチル各々１００ｍｌで２回洗浄した。層を分離し、水層を酢酸エチル各々１００ｍｌで２回抽出した。合わせた有機層をＮａＣｌ飽和溶液２００ｍｌで洗浄し、次にＭｇＳＯ4で乾燥した。溶媒を真空下に除去した後、残留物をヘプタン／酢酸エチル１：１を使用したシリカゲル上のクロマトグラフィーに付した。ペンタフルオロフェニルエステル５５  ４．７ｇ（４６％）を得た。
実験式Ｃ20Ｈ11Ｆ5Ｎ4Ｏ2；Ｍ．Ｗ．＝４３４．３３；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）４３５．４
【００８３】
Ｄ．１２．２．）２−クロロ−５−メチルピリミジン（５７）
２，４−ジクロロ−５−メチルピリミジン（５６）１０．０ｇ（６１．３５ミリモル）をＴＨＦ５０ｍｌに溶解した。亜鉛１２．９３ｇ（１８４ミリモル）を添加し、混合物を還流下に加熱した。次にＴＨＦ１０ｍｌ中の酢酸３．５１ｍｌ（６１．３５ミリモル）の溶液をゆっくり滴加した。添加終了後、混合物をさらに１時間還流下に加熱した。さらにＴＨＦ５ｍｌ中の酢酸１．５ｍｌを滴加し、混合物を１時間還流下に加熱した。次に室温に冷却し、その後ケイソウ土で濾過した；次いでＴＨＦ各々２０ｍｌで２回洗浄した。溶
媒を真空下に除去し、残留物をシリカゲル上にクロマトグラフィーに付した。クロロピリミジン５７  ４．７ｇ（６０％）を得た。
実験式Ｃ5Ｈ5ＣｌＮ2；Ｍ．Ｗ．＝１２８．５６；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）１２９．２
【００８４】
Ｄ．１２．３．）（４−フルオロフェニル）−（５−メチルピリミジン−２−イル）アミン（５８）
Ａ．１．）に記載と同様の方法で反応を行い、２−クロロ−５−メチルピリミジン（５７）２．５ｇ（１９．４５ミリモル）および４−フルオロアニリン（１）２．７ｇ（２４．３１ミリモル）からアニリン５８  １．８ｇ（４５％）を得た。
実験式Ｃ11Ｈ10ＦＮ3；Ｍ．Ｗ．＝２０３．２２；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）２０４．２
【００８５】
Ｄ．１２．４．）メチル（３−（Ｎ−４−フルオロフェニル−Ｎ−５−メチルピリミジン−２−イル）アミノ）−２−ジ−ｔ−ブチルオキシカルボニル）アミノプロピオネート（５９）
Ｄ．３．１．）に記載と同様の方法で反応を行い、アクリレート１０  １．８ｇ（８．８６ミリモル）、アニリン５８  １．８ｇ（８．８６ミリモル）および炭酸セシウム８．６６ｇ（２６．５８ミリモル）からエステル６９  ２．８８ｇ（６４％）を得た。
実験式Ｃ25Ｈ33ＦＮ4Ｏ6；Ｍ．Ｗ．＝５０４．５６；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）５０５．６
【００８６】
Ｄ．１２．５．）メチル３−［（４−フルオロフェニル）−（５−メチルピリミジン−２−イル）アミノ］−２−｛［２−（２−メチルアミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボニル］アミノ｝プロピオネート（６０）
エステル５９  ５００ｍｇ（０．９９１ミリモル）をジクロロメタン１０ｍｌに溶解し、溶液を０℃に冷却した。ＴＦＡ５ｍｌを添加し、次に混合物を室温に戻し、その後１時間攪拌した。溶媒を真空下に除去した。残留物をＤＭＦ１０ｍｌに溶解し、その後５５  ４３０ｍｇ（０．９９１ミリモル）およびＤＩＥＡ１．３８ｍｌ（７．９３ミリモル）を添加した。混合物を１５時間室温で攪拌し、その後溶媒を真空下に除去し、残留物をヘプタン／酢酸エチル１：３を使用したシリカゲル上のクロマトグラフィーに付した。６０  ４２３ｍｇ（７７％）を得た。
実験式Ｃ29Ｈ27ＦＮ8Ｏ3；Ｍ．Ｗ．＝５５４．５９；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）５５５．２
【００８７】
Ｄ．１２．６．）Ｎ−｛１−カルバモイル−２−［（４−フルオロフェニル）−（５−メチルピリミジン−２−イル）アミノ］エチル｝−２−（２−メチルアミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボキサミド（６１）
Ｄ．２．２．）に記載と同様の方法で反応を行い、エステル６０  ２６０ｍｇ（０．４６９ミリモル）からアミド６１  ２５０ｍｇ（９９％）を得た。
実験式Ｃ28Ｈ26ＦＮ9Ｏ2；Ｍ．Ｗ．＝５３９．５８；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）５４０．２
1H NMR(DMSO-d6) 2.11 (s, 3 H), 2.95 (s, 3 H), 4.21 (dd, 1 H), 4.48 (dd, 1 H), 4.75-4.80 (m, 1 H), 7.01 (bs, 1 H), 7.10-7.16 (m, 4 H), 7.22-7.30 (m, 3 H), 7.43 (s, 1 H), 7.47-7.53 (m, 2 H), 7.91 (s, 1 H), 8.26 (s, 2 H), 8.29-8.34 (m, 2 H), 11.70 (s, 1 H)。
【００８８】
Ｆ．）ベンズイミダゾール最終生成物
Ｆ．１．）Ｎ−（（Ｓ）−１−カルバモイル−２−ジフェニルアミノエチル）−２−（２−メチルアミノ−ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボキサミド（６３）
【化２３】
2005539054.tif 000025
【００８９】
Ｆ．１．１．）メチル３−ジフェニルアミノ−２−｛［２−（２−メチルアミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ベンズイミダゾール−５−カルボニル］−（Ｓ）−アミノ｝プロピオネート（６２）
２−（２−メチルアミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ベンズイミダゾール−５−カルボン酸（２５）２．６ｇ（９．６ミリモル）をＤＭＦ３００ｍｌに溶解し、ＴＯＴＵ３．１７ｇ（９．６ミリモル）およびエチルジイソプロピルアミン１．６ｍｌ（１１．６ミリモル）を連続して添加した。混合物を２０分間５℃で攪拌し、次にメチル（Ｓ）−２−アミノ−３−ジフェニルアミノプロピオネート（１１）２．６ｇ（９．６ミリモル）を溶液に添加した。混合物を１６時間攪拌後、減圧下に蒸発させ、次にメチルエステル６２をシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝９：１）により単離した。収量：１．６１ｇ（３２％）。
実験式Ｃ29Ｈ27Ｎ7Ｏ3；Ｍ．Ｗ．＝５２１．５８；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）５２２．３
1H NMR (DMSO-d6) 2.95 (s (b), 3H), 3.60 (s, 3H), 4.19-4.40 (m, 2H), 4.90 (q, 1H), 6.90-7.10 (m, 6H), 7.25-7.35 (m, 6H), 7.40 (d, J = 4.5 Hz, 1 H), 7.60-7.80 (d (b) 1 H), 8.05-8.25 (d (b), 1 H), 8.45 (d, J = 3 Hz, 1 H), 8.90 (s (b), 1 H), 11.85 (s (b), 1 H)。
【００９０】
Ｆ．１．２．）Ｎ−（Ｓ）−１−カルバモイル−２−ジフェニルアミノエチル）−２−（２−メチルアミノ−ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ベンズイミダゾール−５−カルボキサミド（６３）
（無水）メタノール５０ｍｌを０℃でアンモニアで飽和させた。次にメチル３−ジフェニルアミノ−２−｛［２−（２−メチルアミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ベンズイミダゾール−５−カルボニル］−（Ｓ）−アミノ｝−プロピオネート（６２）０．５ｇ（０．９５９ミリモル）を添加し、混合物を２４時間室温で攪拌した。溶媒および過剰のアンモニアを蒸発させた後、アミド６３をシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝１９：１）により単離した。収量：０．４３ｇ（８９％）。
実験式Ｃ29Ｈ28Ｎ8Ｏ2；Ｍ．Ｗ．＝５０６．５７；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）５０７．２
1H NMR (DMSO-d6) 2.95 (s (b), 3H), 4.02-4. 35 (m, 2H), 4.85 (q, 1H), 6.80-7. 10 (m, 6H), 7.15-7.25 (m, 5H), 7.40 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 7.58 (s (b), 1H), 7.68 (s (b), 1H), 8.06-8.19 (d (b), 1H), 8.40-8.58 (m, 2H), 13.10 (s, 1 H)。
【００９１】
Ｆ．２．）Ｎ−｛１−カルバモイル−２−［（フェニル）ピリミジン−２−イルアミノ］エチル｝−２−（２−メチルアミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ベンズイミダゾール
−５−カルボキサミド（６５）
【化２４】
2005539054.tif 000026
【００９２】
Ｆ．２．１．）メチル３−［（フェニル）ピリジミジン−２−イルアミノ］−２−｛［２−（２−メチルアミノ−ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ベンズイミダゾール−５−カルボニル］アミノ｝プロピオネート（６４）
Ｄ．２．１．）に記載と同様の方法で反応を行い、１５  ６５７ｍｇからメチルエステル６４  ２１０ｍｇ（２９％）を得た。
実験式Ｃ27Ｈ25Ｎ9Ｏ3；Ｍ．Ｗ．＝５２３．５６；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）５２４．２
【００９３】
Ｆ．２．２．）Ｎ−｛１−カルバモイル−２−［（フェニル）ピリミジン−２−イルアミノ］エチル｝２−（２−メチル−アミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ベンズイミダゾール−５−カルボキサミド（６５）
Ｄ．２．２．）に記載と同様の方法で反応を行い、６４  ２００ｍｇからアミド６５  １１０ｍｇ（６５％）を得た。
実験式Ｃ26Ｈ24ＦＮ10Ｏ2；Ｍ．Ｗ．＝５０８．５５；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）５０９．３
1H NMR (DMSO-d6) 3.0 (s (b), 3H), 4.20-4. 32 (m, 1 H), 4.41-4.55 (m, 2 H), 4.80-4.90 (m, 1 H), 6.75 (m, 1 H), 7.10-7.50 (m, 10 H), 7.65 (q, 2 H), 8.10 (s, 1 H),
8.45 (d, 2 H), 8.50 (d, 1 H), 8.58 (d, 1 H), 12.95 (s (b), 1 H)。
【００９４】
Ｆ．３．）Ｎ−｛１−カルバモイル−２−［（フェニル）ピリジル−２−イルアミノ］エチル｝−２−（２−メチルアミノ−２−ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ベンズイミダゾール−５−カルボキサミド（６７）
【化２５】
2005539054.tif 000027
【００９５】
Ｆ．３．１．）メチル３−［（フェニル）ピリジル−２−イルアミノ］−２−｛［２−（２−メチルアミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ベンズイミダゾール−５−カルボニル］アミノ｝プロピオネート（６６）
Ｄ．２．１．）に記載と同様の方法で反応を行い、３１  ３．４４ｇからメチルエステル６６  ０．８５ｇ（２２％）を得た。
実験式Ｃ28Ｈ26Ｎ8Ｏ3；Ｍ．Ｗ．＝５２２．５７；ＭＳ（Ｍ＋Ｈ）５２３．３
【００９６】
Ｆ．３．２．）Ｎ−｛１−カルバモイル−２−［（フェニル）ピリジル−２−イルアミノ］エチル｝−２−（２−メチル−アミノピリミジン−４−イル）−１Ｈ−ベンズイミダゾール−５−カルボキサミド（６７）
Ｄ．２．２．）に記載と同様の方法で反応を行い、６６  ２００ｍｇからアミド６７  １６０ｍｇ（９８％）を得た。
実験式Ｃ27Ｈ26Ｎ9Ｏ2；Ｍ．Ｗ．＝５０７．５６；ＭＳ（Ｍ＋ＨＣＯＯ-）５５２．３
1H NMR (DMSO-d6) 3.0 (s (b), 3H), 4.20-4.32 (m, 1 H), 4.41-4.55 (m, 2 H), 4.70-4.80 (m, 1 H), 6.63 (m, 1 H), 6.85 (m, 1H), 7.20-7.75 (m, 14 H), 8.10 (s, 1 H), 8.20 (d, 2 H), 8.50 (d, 1 H), 8.88 (d, 1 H)。
【００９７】
薬理学的実施例
ＩκＢキナーゼＥＬＩＳＡ：
ＩκＢキナーゼの活性はセリン３２〜セリン３６のＩκＢ蛋白のアミノ酸配列を含むビオチニル化基質ペプチドおよびＩκＢペプチドのホスホリル化形態のみに結合する特異的なポリクローナルまたはモノクローナル抗体（例えばＮｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｂｉｏｌａｂｓ，Ｂｅｖｅｒｌｙ，ＭＡ，ＵＳＡ，カタログ番号：９２４０）よりなるＥＬＩＳＡを用いて測定した。この複合体を抗体結合（プロテインＡコーティング）プレート上に固定化し、ビオチン結合蛋白およびＨＲよりなるコンジュゲート（例えばストレプトアビジン−ＨＲＰ）を用いて検出した。活性は基質ホスホペプチドを用いて作成した標準曲線を用いて定量した。
【００９８】
実施方法：
キナーゼ複合体を得るために１０ｍｌのＨｅＬａＳ３細胞エキスＳ１００を４０ｍｌのＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．５で稀釈し、硫酸アンモニウムについて４０％とし、３０分間氷上でインキュベートした。沈殿したペレットをＳＥＣ緩衝液（５０ｍＭＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．５、１ｍＭＤＴＴ、０．５ｍＭＥＤＴＡ、１０ｍＭ２−グリセロホスフェート）５ｍｌに溶解し、１５分間２００００ｇで遠心分離し、０．２２μｍフィルターを通して濾過した。試料をＳＥＣ緩衝液で平衡化しておいた３２０ｍｌのＳｐｅｒｒｏｓｅ−６ＦＰＬＣカラム（Ａｍｅｒｓｈａｍ  Ｐｈａｒｍａｃｉａ  Ｂｉｏｔｅｃｈ  ＡＢ、Ｕｐｐｓａｌａ，Ｓｗｅｄｅｎ）に適用し、２ｍｌ／分の流量で４℃で操作した。６７０ｋＤａ分子量標準物質の移行時間に位置する画分を合わせて活性化に付した。活性化は１００ｎＭＭＥＫＫ１Δ、２５０μＭＭｇＡＴＰ、１０ｍＭＭｇＣｌ2、５ｍＭジチオスレイトール（ＤＴＴ）、１０ｍＭ２−グリセロホスフェートおよび２．５μＭマイクロシスチン−ＬＲと共に３７℃で４５分間インキュベートすることにより行った。活性化された酵素は−８０℃で保存した。ＤＭＳＯに溶解した被験物質（２μｌ）を活性化酵素（反応緩衝液５０ｍＭＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．５、１０ｍＭＭｇＣｌ2、５ｍＭＤＴＴ、１０ｍＭβ−グリセロホスフェート、２．５μＭマイクロシスチン−ＬＲ）４３μｌと共に３０分間２５℃で予備インキュベートした。次に基質ペプチド５μｌ（ビオチン−（ＣＨ2）6−ＤＲＨＤＳＧＬＤＳＭＫＤ−ＣＯＮＨ2）（２００μＭ）を添加し、その後、混合物を１時間インキュベートし、そして１５０μｌの５０ｍＭＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．５、０．１％ＢＳＡ、５０ｍＭＥＤＴＡ、抗体［１：２００］を用いて反応を停止した。次に１００μｌの停止反応混合物または標準ホスホペプチド連続希釈物（ビオチン−（ＣＨ2）6−ＤＲＨＤＳ［ＰＯ3］ＧＬＤＳＭＫＤ−ＣＯＮＨ2）をプロテインＡプレート（Ｐｉｅｒｃｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．，Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，ＩＬ，ＵＳＡ）に移し、その後、プレートを振とうしながら２時間インキュベートした。ＰＢＳによる３回の洗浄工程の後、０．５μｇ／ｍｌストレプトアビジン−ＨＲＰ（セイヨウワサビペルオキシダーゼ）（５０ｍＭＨＥＰＥＳ／０．１％ＢＳＡ中に希釈）１００μｌを３０分間添加した。ＰＢＳによる５回の洗浄工程の後、ＴＭＢ基質（Ｋｉｒｋｅｇａａｒｄ＆Ｐｅｒｒｙ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，ＭＤ，ＵＳＡ）１００μＬを添加し、発色を０．１８Ｍ硫酸１００μｌを添加することにより停止した。吸光度は４５０ｎＭで測定した。４パラメーターの用量−作用関係に相当する直線回帰より標準曲線を作成した。この標準曲線を用いて酵素の活性および被験物質によるその阻害を定量した。
【００９９】
Ｎ−［（Ｓ）−２−ジフェニルアミノ−１−（５−オキソ−４，５−ジヒドロ［１，３，４］オキサジアゾール−２−イル)エチル］−２−（２−メチルアミノピリジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボキサミドのＩＣ50は０．０５０μＭであった。
【０１００】
Ｎ−［（Ｓ）−２−ジフェニルアミノ−１−（５−オキソ−４，５−ジヒドロ［１，３，４］オキサジアゾール−２−イル)エチル］−２−（２−メチルアミノピリジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボキサミドの血漿中濃度
以下に化合物２８と命名した化合物Ｎ−［（Ｓ）−２−ジフェニルアミノ−１−（５−オキソ−４，５−ジヒドロ［１，３，４］オキサジアゾール−２−イル)エチル］−２−（２−メチルアミノピリジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボキサミドを雄Ｃ５７／ＢＬ６マウスに投与した。その際、各々の場合において、マウスの体重ｋｇ当たり化合物２８約２５ｍｇを、０．５％ヒドロキシエチルセルロース（ＨＥＣ）中で湿式粉砕し、懸濁液（プロバングによる）として経口投与した。血液試料を０．２５、０．５、１、２、４、６および８時間後に採取した（屠殺動物の血液は各々の場合、上記した各時点において２匹より採取した）。血液試料をヘパリンリン血漿に変換した。血漿試料を分析時まで−２０℃で保存した。
【０１０１】
分析：血漿試料を解凍した。次に分析を妨害する血漿蛋白をアセトニトリルで沈殿させた。
処理：血漿５０μｌ＋内標準（５μｇ／ｍｌ）２０μｌ＋緩衝液（２ｍＭギ酸アンモニウム溶液、ｐＨ２．６／アセトニトリル、４０：６０、ｖ／ｖ）５０μｌをＷｈｉｒｌｍｉｘｅｒ上で約１０秒間混合した。次にアセトニトリル１５０μｌを添加し、全体を約１０分間再度混合した。次に試料を遠心分離した（Ｈｅｔｔｉｃｈ，ＥＢＡ１２、約１２０００ｒｐｍ）。上澄み（各々約２００μｌ）をガラス管に移した。上澄み７０μｌを注入した。該当する上澄みを用いて以下の方法に従いＬＣ−ＭＳ／ＭＳにより化合物１３の血漿中濃度を測定した。
ＨＰＬＣシステム：Ａｇｉｌｅｎｔ１１００
ソフトウエア：Ａｎａｌｙｓｔ
カラム：１２５×４ｍｍＮｕｃｌｅｏｓｉｌ  １２０  ５Ｃ１８（Ｍａｃｈｅｒｙ＆Ｎａｇｅｌ）
カラム長：１２５ｍｍ
検出：ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ
ＭＳ装置：ＰＥ−ＳｃｉｅｘＡＰＩ３６５（３重４極質量スペクトル分析計）
ソフトウエア：ＭａｃＱｕａｎソフトウエア（ＰＥ−Ｓｃｉｅｘ）
検出タイプ：ＭＳ／ＭＳ（ＭＲＭ）
流量：０．５ｍｌ／分
注入量：７０μｌ
内標準：アセトニトリル中ＳＫ−７
移動層：アセトニトリル／２ｍＭｏｌギ酸アンモニウム溶液、ｐＨ２．６（７０：３０、ｖ／ｖ）
保持時間（Ｒｔ）：
内標準：４．４分
化合物２８：３．９分
方法の検出下限は０．０１μｇ／ｍｌである。
【０１０２】
結果：
化合物２８の血漿中濃度は最高で４．３μｇ／ｍｌであった。ＡＵＣ＝曲線下面積として求めた曝露は５．４μｇ／ｍｌ×時間であった。
【０１０３】
蛋白チロシンキナーゼ
発見されたＩκＢキナーゼ阻害剤の特異性の例として、そのＩＣ50値をキナーゼ酵素である蛋白チロシンキナーゼの場合において測定した。蛋白チロシンキナーゼ活性はＵｐｓｔａｔｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅより入手した適切な試験キットを用いて、製造元の指示に従い、そして５０μＭのＡＴＰ濃度で測定した。製造元の指示とは異なる点として、ホスホセルロースフィルターの代わりにＭｕｌｔｉＳｃｒｅｅｎプレート（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ；ホスホセルロースＭＳ−ＰＨ、カタログ番号ＭＡＰＨＮＯＢ１０、または、ＤｕｒａｐｏｒｅＰＶＤＦ、カタログ番号ＭＡＤＶＮＯＢ５０）を適切な排気系と共に用いた。Ｐｏｌｙ（Ｇｕ，Ｔｒｙ４：１）（Ｓｉｇｍａカタログ番号Ｐ０２７５）を１ｍｇ／ｍｌの試験濃度において試験キット基質として使用した。次にプレートをＷａｌｌａｃＭｉｃｒｏＢｅｔａシンチレーションカウンターにおいて測定した。被験物質１００μＭを各場合において使用した。被験物質は２連の測定で試験した。ＩＣ50の計算はＧｒａＦｉｔ３．０ソフトウエアパッケージを用いて行った。
【０１０４】
蛋白チロシンキナーゼ試験におけるＮ−［（Ｓ）−２−ジフェニルアミノ−１−（５−オキソ−４，５−ジヒドロ［１，３，４］オキサジアゾール−２−イル)エチル］−２−（２−メチルアミノピリジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−５−カルボキサミド（化合物２８）のＩＣ50は８２．５μＭであった。
【０１０５】
比較実験：
下記化合物：
【化２６】
2005539054.tif 000028
を国際特許出願ＷＯ０１／３０７７４号に記載の通り製造し、以下における比較化合物とした。比較化合物を雄性ＮＭＲＩマウスに投与した。その際、各場合において、マウスの体重ｋｇ当たり比較化合物約５０ｍｇを０．５％ＨＥＣ中の懸濁液として経口投与した（プロバングによる）。血液試料を０．２５、０．５、１、２、４、６および８時間後に採取した（屠殺動物の血液は各々の場合、上記した各時点において２匹より採取した）。血液試料をヘパリン血漿に変換した。血漿試料を分析時まで−２０℃で保存した。
分析：分析はＨＰＬＣ／ＵＶを用いて行った。
【０１０６】
処理：処理：血漿５０μｌ＋内標準（５μｇ／ｍｌ）２０μｌ＋緩衝液（１％ギ酸／アセトニトリル、４０：６０、ｖ／ｖ）５０μｌをＷｈｉｒｌｍｉｘｅｒ上で約１０秒間混合した。次にアセトニトリル１５０μｌを添加し、全体を約１０分間再度混合した。次に試料を遠心分離した（Ｈｅｔｔｉｃｈ，ＥＢＡ１２、約１２０００ｒｐｍ）。上澄み（各々約２００μｌ）をガラス管に移した。上澄み１００μｌを注入した。該当する上澄みを用いて以下の方法に従いＨＰＬＣ／ＵＶより比較化合物の血漿中濃度を測定した。
ＨＰＬＣシステム：Ｇｙｎｋｏｔｅｃｈ  Ｐ５８０  ＨＰＧポンプ＋Ｇｉｌｓｏｎ  Ａｂｉｍｅｄ  ＸＬ−２３１オートサンプラー
ソフトウエア：Ｍａｓｓ−ｃｈｒｏｍ
カラム：１２５×４ｍｍＰ  ｒｏｔｏｓｉｌ  １２０  ３ＯＤＳＡＱ３（Ｂｉｓｃｈｏｆｆ）
検出：ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ
ＭＳ装置：ＰＥ−ＳｃｉｅｘＡＰＩ３６５（３重４極質量スペクトル分析計）
ソフトウエア：ＭａｃＱｕａｎソフトウエア（ＰＥ−Ｓｃｉｅｘ）
検出タイプ：ＭＳ／ＭＳ（ＭＲＭ）
流量：０．５ｍｌ／分
注入量：１００μｌ
内標準：アセトニトリル中ＳＫ−７（Ａｖｅｎｔｉｓ化合物）
移動層：アセトニトリル／２ｍＭｏｌギ酸アンモニウム溶液、ｐＨ２．６（７０：３０、ｖ／ｖ）
保持時間（Ｒｔ）：
内標準：４分
比較化合物：１．５分
【０１０７】
０．０１μｇ／ｍｌにおいて、検出下限は化合物２８を用いた実施例においてＬＣ−ＭＳ／ＭＳを用いた場合と同様であった。
【０１０８】
結果：比較化合物の血漿中濃度は最高で１．５μｇ／ｍｌであった。ＡＵＣ＝曲線下面積として求めた曝露は１．７μｇ／ｍｌ×時間であった。化合物２８を用いた実施例と比較して、化合物２８の場合より２倍高用量の５０ｍｇ／ｋｇで比較化合物を投与したにもかかわらず、比較実験では最大血漿中濃度は約６０％低値であった。比較化合物について測定したＡＵＣ値もまた同様の結果を示した。
【０１０９】
上記した蛋白チロシンキナーゼ試験において、比較化合物のＩＣ50は４６．３５μＭであった。従ってＩＣ50は化合物２８の場合よりもはるかに良好であった。ＩκＢキナーゼに関する特異性の進歩はＩκＢキナーゼと比較した場合の蛋白チロシンキナーゼに対するＩＣ50値の比率を比較した場合にむしろ明確になる。化合物２８の場合はこの比は１６５０（８２．５／０．０５）であるのに対し、比較化合物の場合は４６．３５(４６．３５／１．０；国際特許出願ＷＯ０１／３０７７４号のデータによる）。
【０１１０】
他の実施例の特異性の比および／または血漿中濃度および曝露を同様の方法で測定した。
【０１１１】
【表１】
2005539054.tif 000029
【国際調査報告】
2005539054.tif 000034
2005539054.tif 000035
2005539054.tif 000036
2005539054.tif 000037