(57)【要約】本発明は、乾癬を治療するための医薬におけるジャショウシの全クマリン類の使用に関する。本発明によって、ラットの膣の上皮細胞の有糸分裂を有意に阻害し、ラットの尾の鱗屑表皮顆粒層の形成を促進し、ラットの受動皮膚アナフィラキシーを抑制し、ハズ油により誘導されるマウスの耳の腫脹および卵白により誘導されるラットの足の腫脹を有意に縮小し、リン酸ヒスタミンにより誘導されるモルモットのかゆみが生じる閾値を高くし、それによりかゆみ反応を小さくすることができる。本発明の全クマリン類は乾癬の臨床症状を改善させることができ、より高い治癒効果を有し、そして安全に使用できる。外用的に、そして経口的にも投与することができる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ジャショウシ抽出物であって、該抽出物の化学成分が六種のクマリン化合物から構成される全クマリン類であり、オストールが全クマリン類の９０重量％を超える量を占め、残りの五種の化合物がキサントトキソール（Ｉ）、キサントトキシン（ＩＩ）、イソピンピネリン（ＩＩＩ）、ベルガプテン（ＩＶ）およびインペラトリン（Ｖ）を含むフロクマリン類である、ジャショウシ抽出物。
【請求項２】
乾癬を治療するための医薬の調製におけるジャショウシの全クマリン類の使用。
【請求項３】
前記医薬が、５〜３５重量％のジャショウシの全クマリン類を含み、残りが薬学的に許容可能な担体および／または賦形剤である、請求項２に記載の医薬。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ジャショウシ抽出物およびその使用に関する。特にジャショウシから抽出される全クマリン類（total coumarins）ならびに乾癬の治療におけるその使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
乾癬は、患者の頭皮、ひじ、ひざ、および下背部に最も多く見られる慢性の皮膚疾患の一種であり、患部は銀色の鱗屑で覆われている。患者はこのことにひどく苦しんでいる。結果として、乾癬は患者の日常生活や仕事に重大な影響を与えている。
【０００３】
最近では、極めて多数の患者が乾癬に苦しんでいる。しかしながら、乾癬を治療することは非常に難しく、乾癬は、ＷＨＯによって、皮膚病の分野における、治療および予防すべき最も重要な疾患の一つであると判断されてきた。
【０００４】
乾癬の病因はあまり明白にはなっていない。遺伝、感染、免疫、代謝能、内分泌、炎症および心理学的態様などの複雑な要素が関連していると、一般的に考えられている。
【０００５】
乾癬の治療方法としては多くの方法が用いられてきたが、医薬を用いることが現在のところの主な方法である。しかしながら、あまりにも困難なため、再発を防ぐことができない。治療のために、副腎皮質ホルモンまたは免疫抑制剤は既に用いられている（外用の副腎皮質ホルモン医薬の進歩（Ｐｒｏｇｒｅｓｓ  ｏｆ  Ｅｘｔｅｒｎａｌ  Ｃｏｒｔｉｃａｌ  Ｈｏｒｍｏｎｅ  Ｍｅｄｉｃａｍｅｎｔｓ），Ｙａｏｘｕｅｔｏｎｇｂａｏ，１９８５，２０（９）を参照のこと。副腎皮質ホルモンによって短期間で良好な効果に達することができるが、長期間使用する場合、患部の表皮および真皮をより薄くさせたり、毛細管拡張症および医薬への依存を導くことなどの副作用を生じさせたり、さらにはその他の合併症を導くだろう。それと同時に、これらの医薬は高価である。
【０００６】
疾患の治療のために用いられる漢方薬のジャショウシ（「フルクツス・クニジイ（fructus cnidii）」または「コモン・クニジウム・フルート（common cnidium fruit）」とも称される）は、古代の医学書に記録されていた。中国人は、ジャショウシには「湿気を除去すること」、「寄生虫を死滅させること」および「痒みを止めること」という効果があると信じていたので、苔癬、疥癬および陰嚢の湿疹などの外科、婦人科、皮膚科および耳鼻咽喉科の疾患を治療するために、ジャショウシを臨床で用いてきた。しかしながら、ジャショウシ抽出物の全クマリン類を用いて乾癬を治療することに関する報告は一切なされてこなかった。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明の目的は、ジャショウシから抽出される全クマリン類を提供することにある。本発明の別の目的は、乾癬を治療するための医薬の調製における、本明細書に定義される全クマリン類の使用を提供することにあり、この医薬は治効があり、副作用をほとんど伴わない。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明において、Ｃｎｉｄｉｕｍ  ｍｏｎｎｉｅｒｉ（Ｌ．）Ｃｕｓｓｏｎ．の果実からジャショウシの全クマリン類を抽出する。抽出物の主な成分はクマリン化合物であり、これは、抽出物を基準とするとその８５重量％を超える量を占める。本明細書で述べる全クマリン類には六種のクマリン化合物が含まれ、この中ではオストールの含有量が最も多く、９０重量％を超える。オストール（Osthal:化合物ＶＩ）がジャショウシ抽出物における主な活性化合物である。その他の五種の活性化合物のすべてはフロクマリンであり、キサントトキソール（xanthotoxol:化合物Ｉ）、キサントトキシン（xanthotoxin:化合物ＩＩ）、イソピンピネリン（isopimpinellin:化合物ＩＩＩ）、ベルガプテン（bergapten:化合物ＩＶ）、インペラトリン（imperatorine:化合物Ｖ）が同定されている。
【０００９】
本発明で記載されるクマリン類はＨＰＬＣによって同定、分離されており、六種のクマリン類のＵＶ吸収スペクトル、オストール：λmax３２２ｎｍ（ｌｇε＝３．９）；キサントトキソール：λmax２５０ｎｍ（ｌｇε＝４．２５）；キサントトキシン：λmax２４８ｎｍ（ｌｇε＝４．４）；イソピンピネリン：λmax２６８ｎｍ（ｌｇε＝４．２６）；ベルガプテン：λmax２４９ｎｍ（ｌｇε＝４．３８）；およびインペラトリン：λmax２４９ｎｍ（ｌｇε＝３．６５）も示されている。
【００１０】
理論に従えば、すべてのクマリン類のＵＶ吸収スペクトルを一つにまとめてクマリン類の量を計算することができる。エタノール中の全クマリン類のＵＶ吸収スペクトルは既知である。
【００１１】
本発明において、ジャショウシ抽出物の１１の群を、エタノール中のＵＶによって同定した。その結果、これらの吸収スペクトルはほとんど同一であることが示された。すべての抽出物の最大吸収は平坦なピークの約３２２ｎｍ（３１９〜３２６ｎｍ）であり、その他のピークはそれぞれ２５０ｎｍ、２５５ｎｍおよび２６５ｎｍに見られた。
【００１２】
本発明は、乾癬を治療するための医薬の調製における全クマリン類の使用に関する。特に乾癬の治療における漢方薬のジャショウシの使用に関する。本発明において、医薬は５〜３５重量％の全クマリン類と、薬学的に許容可能な担体および／または賦形剤を含む。
【００１３】
本発明に包含される全クマリン類を、次のようにして調製する。
【００１４】
ジャショウシをすりつぶして粉末にした。８０〜９５％のエタノールを用いて、６０〜８０℃で二時間かけてこの粉末の抽出処理を行い、そしてろ過した。次いで、８０〜９５％のエタノールを用いて残留物の抽出処理を二回行った。ろ液を一つにまとめ、そして少なくとも１６時間、室温で維持した。そして、ろ過を行って緑色の沈殿を得た。ろ液を濃縮することによって、更なる沈殿を得た。次いで、沈殿を乾燥させた後、本発明の全クマリン類を得た。
【００１５】
１．マウスにおける膣の上皮細胞の有糸分裂に与える全クマリン類の効果
２７ｇ±２ｇのメスのＮＩＨマウスを６０匹選択した。それぞれの動物について一日あたり０．２ｍｇのジエチルスチルベスロルム（diethylstilbesrolum）を３日間、継続的に腹腔内に注入した後、すべてのマウスを発情期の合間の状態とした。４日目から、マウスをそれぞれ１５匹のマウスの四群にランダムに分割した。胃管栄養法によって、四群のマウスにそれぞれ１５０ｍｇ／ｋｇの全クマリン類、７５ｍｇ／ｋｇの全クマリン類、１５ｍｇ／ｋｇのアントラリンおよび１５ｍｇ／ｋｇの生理食塩水を、一日に一回、三日間投与した。マウスの昼夜間での種々の投与リズムが試験結果に干渉することを避けるために、午前８時００分に最後の投与を行った。午前９時００分に、２ｍｇ／ｋｇのコルヒチンをマウスに注入して、膣の上皮細胞の有糸分裂を、Ｍ期のミドル・サイクルで停止させた。
【００１６】
午後２時にマウスを殺した。動物の膣からサンプルを取り出し、そして１０％のホルムアルデヒド溶液で固定した。光学顕微鏡の下で組織の薄片を観察した。底部の細胞の３００個あたりの有糸分裂の数を計算して、底部の細胞の１００個中の有糸分裂の平均数を得た。この平均数を、膣の上皮細胞の有糸分裂指数とみなした。
【００１７】
試験結果を表１に示した。本発明の全クマリン類は、マウスにおける膣の上皮細胞の有糸分裂を顕著に阻害することが示された。
【００１８】
【表１】
2005530697.tif 000002
【００１９】
２．ラットの尾の鱗屑における表皮顆粒層の形成に与える全クマリン類の軟膏の効果
１８０ｇ±１０ｇのＳＤラットの４０匹を、四群にランダムに分割した。一つの群の尾に、本発明の全クマリン類によって調製された軟膏を一日に一回塗布し、それぞれのラットについての投与量を０．３ｇとした；別の群では、同じ軟膏を同じ投与量にて、一日に二回塗布した。第三の群では、アントラリンによって調製された軟膏を同じ投与量にて、一日に二回塗布した。そして第四の群ではブランクの軟膏を一日に二回塗布した。軟膏を２０日間、継続的に尾に塗布した後、ラットを殺した。
【００２０】
尾の根元から約１．５ｃｍの位置のラットの背中の皮膚の一部を切除した。背中の皮膚を組織の薄片として調製し、これを光学顕微鏡の下で観察した。ラットの尾の表皮における１００の鱗屑の中で、連続した層の顆粒細胞を有する鱗屑の数を得た。結果を表２に示した。全クマリン類から作られた軟膏が、ラットの尾における表皮顆粒層細胞を有する鱗屑の数を大きく増加させることができることが示された。
【００２１】
【表２】
2005530697.tif 000003
【００２２】
３．ラットの受動皮膚アナフィラキシー（ＰＣＡ）の抑制
４０匹の１８０ｇ±１０ｇのＳＤラットの背中の体毛をそり落とした。０．２ｍＬの希釈されたラット抗血清（１：１０）を、それぞれのラットの背中の二ヶ所の皮下に、一ヶ所あたり０．１ｍＬずつ注入した。注入後、ラットを四群にランダムに分割した。胃管栄養法によって、これらに７５ｍｇ／ｋｇの全クマリン類、１５０ｍｇ／ｋｇの全クマリン類、１５ｍｇ／ｋｇのアントラリンおよび１５ｍＬ／ｋｇの蒸留水を、一日に一回、三日間投与した。ラット抗血清の注入から４８時間後に、抗原として０．５％のエバンスブルーの１ｍＬを、尾静脈を経由してラットの静脈内に注入した。２０分間以内にラットを殺した。青色の小斑点を有する皮膚の一部を背中から切り取り、５ｍＬのアセトン／生理食塩水（アセトン：生理食塩水＝７：３ｖ／ｖ）溶液中に２４時間浸した。遠心分離の後、５９０ｎｍの光学濃度（ＯＤ）を測定するために、上清を取り出した。次の方程式に従って、抑制率を得た。結果を表３に示した。全クマリン類が、ラットの受動皮膚アナフィラキシー（ＰＣＡ）に有意な抑制効果を与えることが示された。
抑制（％）＝［ＯＤ（対照）−ＯＤ（医薬）］×１００％／ＯＤ（対照）
【００２３】
【表３】
2005530697.tif 000004
【００２４】
４．ハズ油により誘導されるマウスの耳の腫脹に関する全クマリン類の抑制
２７±２ｇのＮＩＨマウスの８０匹を、四群にランダムに分割した。これらの両耳の耳介に、２重量％のハズ油、５重量％の水、２０重量％のエタノールおよび７３重量％のエーテルからなるハズ油組成物の５０μＬを塗布した。０．５時間後に、四群のマウスの左の耳介に、０．１５ｇおよび０．３ｇの全クマリン類によって調製された軟膏、０．３ｇのブランクの軟膏、ならびに０．３ｇのアントラリンによって調製された軟膏をそれぞれ塗布した。
【００２５】
処置から４時間後に、マウスを殺した。それぞれのマウスの両方の二つの耳介から、耳の一部を９ｍｍの直径分切り出し、そして重量を測った。二つの耳の間の重量の違いを、耳の腫脹の程度とみなした。
【００２６】
結果を表４に記載した。ここでは、全クマリン類によって調製された軟膏が、ハズ油により誘導されるマウスの耳の腫脹を有意に抑制することが示された。
【００２７】
【表４】
2005530697.tif 000005
【００２８】
５．卵白の注入により誘導されるラットのつまさきの腫脹に関する抑制効果
１５０ｇ±１０ｇのＳＤラットの５０匹を、五群にランダムに分割した。５群中のラットの同じ側のつまさきの体積を測定した。１０％の卵白を、つまさきに注入した。それぞれのつまさきにつき０．２ｍＬとした。この後、二群のラットのそれぞれのつまさきに、０．１５ｇおよび０．３ｇの全クマリン類の軟膏（１０％の全クマリン類を含む）をそれぞれ塗布した。その他の二群のラットのそれぞれのつまさきには、０．３ｇのブランクの軟膏および０．３ｇのアントラリンの軟膏をそれぞれ塗布した。残りの一群は、対照として何らの処置も施さなかった。０．５時間後、上記の処置を繰り返した。１時間目、２時間目、４時間目および６時間目に、つまさきの体積を測定した。この体積の違いを、つまさきの腫脹の程度とみなした。結果を表５に示した。
【００２９】
表５から、全クマリン類の軟膏が、卵白により誘導されるマウスのつまさき（足）の腫脹を抑制できることが示された。
【００３０】
【表５】
2005530697.tif 000006
【００３１】
６．リン酸ヒスタミンにより誘導されるモルモットに関するかゆみ止め効果
２５０ｇ±１５ｇのモルモットの５０匹を、五群にランダムに分割した。この動物の右のつまさきの体毛をそり落とした。二群の動物のそれぞれのつまさきに、０．１５ｇおよび０．３ｇの全クマリン類の軟膏（１０％の全クマリン類を含む）をそれぞれ塗布した。二群の動物のそれぞれのつまさきには、０．３ｇの全クマリン類を含まない軟膏および０．３ｇのアントラリンの軟膏をそれぞれ塗布した。残りの群は、対照として何らの処置も施さなかった。
【００３２】
その箇所の体毛をそり落とした皮膚に、翌日に溢出物が多少にじみ出るまで、１#の紙やすりで擦り傷を付けた。次いで、上記の処置を繰り返した。１０分後に、０．０１％、０．０２％、０．０３％から始まる一連の濃度の０．０１％のリン酸ヒスタミン溶液を、擦り傷を付けたつまさき上に滴下した。モルモットがつまさきを舌でなめ始めるまで、３分間（それぞれの時点で０．０５ｍＬずつ）の間隔を開けて滴下した。モルモットがつまさきを舌でなめ始めた時のヒスタミンの投与量を、かゆみが生じる閾値とみなした。結果を表６に記した。ここから、全クマリン類の軟膏が、リン酸ヒスタミンにより誘導されるモルモットのかゆみが生じる閾値を有意に高くすることが示された。
【００３３】
【表６】
2005530697.tif 000007
【００３４】
７．臨床試験
方法：患者における、全クマリン類が乾癬に与える効果とアントラリンが与えるそれとを比較すること。患者のある部位の乾癬の上に１０％の全クマリン類を含む軟膏を塗布し、そして同じ患者の別の部位の乾癬の上に（ポジティブコントロールとして）アントラリンの軟膏を塗布した。３０日間、一日に一回または二回塗布した。試験期間中は、関連性があるその他の医薬での治療は行わなかった。
【００３５】
治療の評価基準：国家保健省によって規定された皮膚病に関する基準に従った、四つの段階を適用した。
【００３６】
表７に記された結果から、臨床的に治癒した割合は６０％に達し、有効な割合の合計は９６．７％に達することが示された。
【００３７】
【表７】
2005530697.tif 000008
【００３８】
８．急性毒性
経口での実験：
１６時間絶食させた後、１９±１ｇのＮＩＨマウスの１００匹（半分はオスでもう半分はメス）を１０群にランダムに分割した。それぞれの群は１０匹のマウスを含んでいた。それぞれの群の間での、継続的に投与した割合は１：０．７５であった。胃管栄養法によって、それぞれのマウスに一回につき０．８ｍＬを投与した。毒性についての日常の臨床的症状と死亡した数を１４日間観察した。ブリス（Ｂｌｉｓｓ）の方法によるＬＤ５０および９５％の有効範囲を計算した。この結果から、次のことが示された。ＬＤ５０（オス）＝４６３．９０ｍｇ／ｋｇ、９５％の有効範囲は４０６．１６〜５２９．８６ｍｇ／ｋｇであった；そしてＬＤ５０（メス）＝４０９．８５ｍｇ／ｋｇ、９５％の有効範囲は３５７．０２〜４７０．５０ｍｇ／ｋｇであった。実験で生き残った動物はそれぞれ、健康状態は極めて良好であり、正常な食欲を伴っており、そして体重も増加していた。
【００３９】
外用での実験：
（１）擦り傷をつけたウサギの皮膚上での急性毒性試験
１６羽のウサギ（ＮＺＲ）の背中の１５０ｃｍ2について露出させた。２４時間後、裸の皮膚に、組織液がにじみ出るまで、１＃の紙やすりで傷を付けた。次いで、１６羽のウサギを四群（半分をオスとした）にランダムに分割した。三群のウサギに、それぞれ１０％、２０％および３０％の全クマリン類を含む軟膏をそれぞれにつき３ｇ分塗布した。そしてその他の群のものには、全クマリン類を含まない軟膏を、それぞれにつき５ｇ分塗布した。１枚の油紙およびガーゼを用いて、処置された皮膚を覆った。塗布した物質を２４時間後に除去した。動物の一般的な健康状態を７日間観察した。その結果、死亡したウサギはなく、食べる動作、活動および排便などを含むウサギの一般的な健康状態は、正常な状態を維持することが示された。
【００４０】
（２）正常なウサギの皮膚上での急性毒性試験
試験（１）に記載された方法と同じ方法で、正常なウサギの皮膚上での急性毒性試験を実施した。その結果、四群のすべてにおいて死亡例はないことが示された。処置の後、動物の健康状態は良好であり、そして活動および排泄に目立った変化は見られず、正常な食欲を伴っており、そして食べる動作、活動および排便などを含むウサギの一般的な健康状態は、正常な状態を維持していた。
【００４１】
結論
正常なウサギの皮膚上および擦り傷をつけたウサギの皮膚上の両者での急性毒性試験から、全クマリン類（１０％、２０％および３０％）の処理による動物への毒性はないことが示された。
【００４２】
９．慢性毒性
３群のラットを高ドーサル群、中位ドーサル群および低ドーサル群に分割した。２５０ｍｇ／ｋｇ、１５８ｍｇ／ｋｇおよび１００ｍｇ／ｋｇの全クマリン類を９０日間投与した。結果的に、ブランク対照としてラットの一つの群を処置することはなかった。ラットの一般的な健康状態を観察し、そして血液学的におよび血清・臨床化学的に評価した。その結果、２５０ｍｇ／ｋｇが投与された群における二羽のウサギ以外の、正常なものとして示されたすべての動物が死亡し、この群におけるその他のラットの体重の増加が、その他の群におけるものよりも鈍化することが示された。
【００４３】
上記の実験から、次のような本発明の利点が示される。
（１）本発明のジャショウシの全クマリン類は、マウスにおける膣の上皮細胞の有糸分裂を有意に阻害することができる。
（２）本発明のジャショウシの全クマリン類は、ラットの尾の鱗屑における表皮顆粒層の形成を大幅に促進することができ、そしてラットの受動皮膚アナフィラキシーへの強力な抑制効果を有する。
（３）卵白により誘導されるラットの足の腫脹だけではなく、ハズ油により誘導されるマウスの耳の腫脹も縮小することができる。
（４）モルモットに関するかゆみ止め実験から、本発明の軟膏はかゆみ反応を小さくすることができることが示される。
（５）全クマリン類はケラトーデの減少を刺激できること、および抗炎症効果、抗アナフィラキシー効果、抗アレルギー効果および真菌類を死滅させる効果を有することが確認される。
（６）ジャショウシから抽出される全クマリン類は安全に用いることができ、そして複数の成分に対する強力な薬理活性を有する。外用的にも経口的にも投与することができる。
（７）本発明の全クマリン類は乾癬患者の臨床症状を改善させることができ、そして有効な割合（６０％、有効なものの合計は９６．７％）を増加させる。
（８）本発明で用いた物質を複数の供給源の形態で入手することができる。
【００４４】
たとえば、カプセル、シロップ、注射剤、軟膏、クリーム、坐薬、チンキなどの種々の剤形で、本発明の医薬を調製することができる。
【００４５】
次の実施例によって、本発明をさらに説明したい。
【実施例１】
【００４６】
１ｋｇのＣｎｉｄｉｕｍ  ｍｏｎｎｉｅｒｉ（Ｌ．）Ｃｕｓｓｏｎの果実を粉末にし、次いで６ｋｇの８５％のエタノールに溶解させた。混合物を８０℃で２時間維持し、そしてろ過した。３，０００ｍＬの８５％のエタノールを用いて、８０℃での残留物の抽出処理を、それぞれ２時間かけて二回行った。すべてのろ液を一つにまとめ、そして室温で維持した。ろ過によって鮮やかな色の沈殿を回収した。次いで、減圧下、８０℃にて、ろ液中のエタノールの濃度が４５％に達するまでろ液を濃縮し、そして室温を維持した。２４時間後、緑色の沈殿を回収し、６０℃で乾燥させて全クマリン類の抽出物を１．２％の収率で得た。
【実施例２】
【００４７】
１ｋｇのＣｎｉｄｉｕｍ  ｍｏｎｎｉｅｒｉ（Ｌ．）Ｃｕｓｓｏｎの果実を粉末にし、次いで５ｋｇの９５％のエタノールに溶解させた。混合物を６０℃で２時間維持し、そしてろ過した。３，０００ｍＬの９５％のエタノールを用いて、６０℃での残留物の抽出処理を、それぞれ２時間かけて二回行った。すべてのろ液を一つにまとめ、そして室温で維持した。ろ過によって鮮やかな色の沈殿を回収した。次いで、減圧下、６０℃にて、ろ液中のエタノールの濃度が４５％に達するまでろ液を濃縮し、そして室温を維持した。２４時間後、緑色の沈殿を回収し、８０℃で乾燥させて全クマリン類の抽出物を１．２％の収率で得た。
【実施例３】
【００４８】
水中油型の軟膏を、実施例１において得られた全クマリン類およびその他の成分によって調製した。１００ｇの全クマリン類、８０ｇのステアリン酸、１００ｇのモノステアリン酸グリセリン、８０ｇの白色ワセリン、１６０ｇのグリセリン、６０ｇのＴｗｅｅｎ−８０、２８０ｇの水、そしてグリセリンと水（４：１０）を添加して１，０００ｇとした。調製された軟膏は均一かつ滑らかで、皮膚に対する刺激性はなかった。
【実施例４】
【００４９】
実施例１で調製された１００ｇの全クマリン類をデンプンと混合し、そして少量のエタノールで湿り気を与えた。均一に混合した後、この混合物を造粒し、乾燥させた。次いで、潤滑剤を添加した後、従来の方法と同じ方法を用いてこの造粒物を打錠し、被覆し、そして研磨して、１，０００錠の錠剤を調製した。それぞれの錠剤には０．１ｇの全クマリン類が含まれていた。
【実施例５】
【００５０】
実施例２で調製された３００ｇの全クマリン類をデンプンと混合し、そして少量のエタノールで湿り気を与えた。均一に混合した後、この混合物を造粒し、乾燥させた。次いで、潤滑剤を添加した後、従来の方法と同じ方法を用いてこの造粒物を打錠し、被覆し、そして研磨して、１，０００錠の錠剤を調製した。それぞれの錠剤には０．３ｇの全クマリン類が含まれていた。
【実施例６】
【００５１】
実施例２で調製された２５０ｇの全クマリン類をすりつぶして微粉末とし、そしてふるい分けた。ふるい分け済みの粉末をカプセルに封入した。１，０００錠のカプセルを調製し、それぞれには０．２５ｇの全クマリン類が含まれていた。
【実施例７】
【００５２】
実施例１で調製された１０ｇの全クマリン類を、１０ｍＬのベンジルアルコールおよび１０ｍＬのＴｗｅｅｎ−８０に溶解させた。この混合物に、注射用水を添加して２，０００ｍＬとした。この溶液をろ過し、殺菌し、そしてそれぞれ２ｍＬずつ瓶に詰めた。１ｍＬの注射には、５ｍｇの全クマリン類が含まれていた。
【実施例８】
【００５３】
実施例２で調製された２０ｇの全クマリン類を、２００ｍＬのベンジルアルコールおよび２０ｍＬのプロピレングリコールに溶解させた。この混合物に、注射用水を添加して２，０００ｍＬとした。この溶液をろ過し、殺菌し、そしてそれぞれ２ｍＬずつ瓶に詰めた。１ｍＬの注射には、１０ｍｇの全クマリン類が含まれていた。
【国際調査報告】
2005530697.tif 000009
2005530697.tif 000010