(57)【要約】２種もしくは３種以上のサポニンおよび／またはサポゲニンを含む、癌の処置のための組成物を提供する。該組成物は、個別の成分単体の場合と比べて、高められた抗癌活性を有する。さらに、癌を有する哺乳類の対象の処置に用いるための、該組成物を含む医薬および非医薬製剤、ならびにかかる組成物または製剤を含む医薬キットを提供する。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
活性を高める量の２種もしくは３種以上のサポニン、２種もしくは３種以上のサポゲニン、または１種もしくは２種以上のサポニンと１種もしくは２種以上のサポゲニンとの組合せを含み、抗癌活性を有する組成物。
【請求項２】
サポニンおよびサポゲニンが、Ｒｈ２、アグリコンプロトパナキサトリオール、およびアグリコンプロトパナキサジオールを含む群から選択される、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
Ｒｈ２、アグリコンプロトパナキサトリオール、およびアグリコンプロトパナキサジオールを、それぞれ約１〜９０％含む、請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
Ｒｈ２を約１〜５０％、アグリコンプロトパナキサトリオールを約５〜４０％、およびアグリコンプロトパナキサジオールを約５〜７５％含む、請求項３に記載の組成物。
【請求項５】
Ｒｈ２を約５〜４０％、アグリコンプロトパナキサトリオールを約５〜４０％、およびアグリコンプロトパナキサジオールを約１０〜７０％含む、請求項４に記載の組成物。
【請求項６】
１種または２種以上のサポニンおよびサポゲニンが、植物材料から抽出される、請求項１に記載の組成物。
【請求項７】
植物材料が、パナックス属の１種または２種以上の植物に由来する、請求項６に記載の組成物。
【請求項８】
植物が高麗人参である、請求項７に記載の組成物。
【請求項９】
植物がアメリカ人参である、請求項７に記載の組成物。
【請求項１０】
植物が三七人参である、請求項７に記載の組成物。
【請求項１１】
１種または２種以上のサポニンおよびサポゲニンが合成物である、請求項１に記載の組成物。
【請求項１２】
治療有効量の請求項１に記載の組成物、および薬理学的に許容し得る担体を含む、癌の処置のための医薬製剤。
【請求項１３】
治療有効量の請求項１に記載の組成物、および薬理学的に許容し得る担体を含む、癌の処置のための非医薬製剤。
【請求項１４】
経口投与可能な形態である、請求項１２または１３に記載の製剤。
【請求項１５】
注入可能な形態である、請求項１２または１３に記載の製剤。
【請求項１６】
局所投与可能な形態である、請求項１２または１３に記載の製剤。
【請求項１７】
治療有効量が、Ｒｈ２を、１日体重１ｋｇ当たり０．０１ｍｇ〜１０００ｍｇの用量で含む、請求項１２または１３に記載の製剤。
【請求項１８】
治療有効量が、アグリコンプロトパナキサトリオールを、１日体重１ｋｇ当たり０．０１ｍｇ〜１０００ｍｇの用量含む、請求項１２または１３に記載の製剤。
【請求項１９】
治療有効量が、アグリコンプロトパナキサジオールを、１日体重１ｋｇ当たり０．０１ｍｇ〜１０００ｍｇの用量含む、請求項１２または１３に記載の製剤。
【請求項２０】
哺乳類における癌の処置のための、請求項１に記載の組成物の使用。
【請求項２１】
癌が、神経膠腫、メラノーマ、乳癌、膵癌、脳腫瘍、腸および胃癌、前立腺癌、および肺癌からなる群から選択される、請求項２０に記載の使用。
【請求項２２】
癌が、胃癌、食道癌、結腸および直腸癌、卵巣癌、肝臓癌、腎臓癌、喉頭癌、骨肉腫、多発性骨髄腫、膀胱癌、子宮体部癌、口腔癌、甲状腺癌、頚部癌、睾丸癌、非ホジキンリンパ腫、白血病、ホジキン病、皮膚癌、および軟部組織癌からなる群から選択される、請求項２０に記載の使用。
【請求項２３】
癌が、多剤耐性癌である、請求項２０に記載の使用。
【請求項２４】
多剤耐性癌が、固形腫瘍を含む、筋肉、骨または結合組織、皮膚、脳、肺、生殖器、リンパ系または腎臓系、乳細胞または血液細胞、肝臓、消化管、膵臓および甲状腺または副腎の癌、卵巣、乳房、脳、前立腺、結腸、胃、腎臓または睾丸の癌、カポジ肉腫、胆管腫、絨毛腫、神経芽細胞腫、ウィルムス腫瘍、ホジキン病、メラノーマ、多発性骨髄腫、リンパ性白血病および急性または慢性の顆粒球性リンパ腫からなる群から選択される、原発性癌である、請求項２３に記載の使用。
【請求項２５】
多剤耐性癌が、膵癌、肺癌、胃癌、食道癌、結腸および直腸癌、脳腫瘍、卵巣癌、肝臓癌、腎臓癌、喉頭癌、骨肉腫、多発性骨髄腫、メラノーマ、乳癌、前立腺癌、膀胱癌、子宮体癌、口腔癌、甲状腺癌、頚部癌、睾丸癌、非ホジキンリンパ腫、白血病、ホジキン病、皮膚癌、および軟部組織癌からなる群から選択される、再発性癌である、請求項２３に記載の使用。
【請求項２６】
組成物を、１種または２種以上の他の化学療法剤と組み合せて用いる、請求項２０〜２５のいずれかに記載の使用。
【請求項２７】
哺乳類がヒトである、請求項２０〜２５のいずれかに記載の使用。
【請求項２８】
癌の処置のための医薬の製造における、請求項１に記載の組成物の使用。
【請求項２９】
請求項１に記載の組成物および１種または２種以上の容器を含む、哺乳類における癌の処置のための医薬キット。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
発明の分野
本発明は、癌治療の分野、特に、癌の処置における使用のための、サポニンおよび／またはサポゲニンを含む組成物に関する。
【０００２】
発明の背景
新しい抗癌剤および薬剤の組合せの開発は、継続的に必要とされている。そのため癌研究は、天然源から得られる新規な抗癌剤の発見、およびこれらの天然源に見出される合成化合物の識別および製造に対してより多く向けられている。
チョウセンニンジン（ginseng）は、一般の強壮薬および良性で安全なハーブとして長く認識されてきた。チョウセンニンジンの多くの成分が単離され、ジンセノシド、炭水化物、窒素化合物、脂溶性化合物、ビタミンおよびミネラルに分類されている。チョウセンニンジンから単離されたサポニン（「ジンセノシド」とも呼ばれる）は、チョウセンニンジンの主要な活性成分と考えられている。
【０００３】
サポニンは、一般に、糖の部分（グリコン）と、糖でない部分（アグリコンまたはサポゲニン）から構成される。サポニンの主鎖であるチョウセンニンジンのサポゲニンは、さらに３つのタイプに分類される：これらは、プロトパナキサジオールおよびプロトパナキサトリオール（ダンマラン系の四環性テルペノイド）、およびオレアノ酸（oleanoic acid）である。
サポゲニンであるアグリコンプロトパナキサトリオール（ａＰＰＴ）は、次の化学構造を有する：
【化１】
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【０００４】
サポゲニンであるアグリコンプロトパナキサジオール（ａＰＰＤ）は、次の化学構造を有する：
【化２】
2005534654.tif 000004
【０００５】
２５種類以上のダンマラン型サポニンが高麗人参(Panax ginseng C. A. Meyer) から単離されており、それらの糖側鎖に存在する単糖残基の数および種類は異なる。個々のジンセノシドは、薄層クロマトグラフィプレート上における移動性によりＲｘと名付けられている。既知のジンセノシドの例は、Ｒａ〜Ｒｈ群のものを含む。最近の報告によれば、３種類の新しいダンマラン型サポニン（Ｒｋ１〜Ｒｋ３と名付けられた）が、熱処理されたチョウセンニンジンから単離されている（Prak, I. H. (2002) Arch Pharm Res. 25: 428-32を参照のこと）。
【０００６】
近年、癌の処置におけるジンセノシドの有益な効果が報告されている。例えば、米国特許出願第09/910,887号（第20030087835号として公開）および第09/982,018号（第20030087836号として公開）には、抗癌活性を有する新規なサポゲニン化合物が記載されている。同様に、米国特許第5,776,460号には、ジンセノシドＲｈ２［３−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシル−２０（ｓ）−プロトパナキサジオール］が抗癌活性を有することが報告されている。Ｒｈ２は、次の化学構造を有するサポニンであり、ここで「Ｇｌｃ」はグリコン（ブドウ糖）である：
【化３】
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【０００７】
文献にはまた、Ｒｈ２が、癌細胞の分化およびアポトーシスを引き起こし得ること（Kikuchi Y. et al. (1991) Anti-cancer Drugs. 2: 63-7；Lee K Y et al. (1996) Cancer Lett. 110: 193-200；Oh M et al. (1999) Int J Oncol. 18: 869-75；Ota T et al. (1997) Life Sci. 60: PL39-88；Nakata H. et al. (1998) Jpn J Cancer Res. 89: 733-80；Kim H. E. et al. (1999) Life Sci. 65: PL33-80；Park J A et al. (1997) Cancer Lett. 121: 73-81）；ヌードマウスにおいて経口投与の後にヒト卵巣癌の成長を阻害すること（Nakata H et al. (1998) Jpn J Cancer Res. 89 733-80）；および、他の化学療法剤との組合せで用いられた場合、in vitroで多剤耐性（ＭＤＲ）癌細胞を殺すこと（米国特許出願第60/204,785号）が示されている。
【０００８】
ジンセノシドＲｇ３［３−Ｏ−［β−Ｄ−グルコピラノシル（１→２）−β−Ｄ−グルコピラノシル］−２０（ｓ）−プロトパナキサジオール］についても研究され、種々の癌細胞の活性を抑制することが報告されており（Sinkai K et al. (1996) Jpn J Cancer Res. 87: 357-62）、それにはin vitroでのヒト前立腺癌細胞（Liu W K et al. (2000) Life Sci. 67 (11): 1297-306）、マウスにおける肺転移（Ishii H et al. (1997) Clin Exp Metastasis 15: 603-11）、およびラットにおける腹膜転移（Mochizuki M et al. (1995) Biol Pharm Bull. 18: 1197-202）などが含まれる。さらに、２種類のサポゲニン、プロトパナキサジオールおよびプロトパナキサトリオールは、他の化学療法剤と組み合せて用いられた場合、in vitroでＭＤＲ癌細胞の化学感受性を高めることが報告されている（米国特許出願第09/957,082号（第20030092638号として公開））。
【０００９】
単離されたある種のジンセノシドの抗癌活性に加えて、チョウセンニンジンから単離された幾つかのオレアナン型四環性テルペノイド化合物は、in vitroの分析において幾らかの抗癌活性を有することが示されている（Shibata S. (2001) J. Korean Med. Sci., 16 Suppl.: S28-37）。
【００１０】
これらの背景情報は、出願人が信じる既知の情報を、本発明に対して潜在的関連性のあるものとすることを目的として提供される。任意の前記情報は、本発明に対する先行技術を構成するものと承認することは必ずしも意図されておらず、そのように理解すべきでもない。本明細書を通して引用された刊行物は、ここに参照としてその全体が本明細書に組み込まれる。
【００１１】
発明の概要
本発明の目的は、癌治療のための組成物および、癌の処置におけるこの組成物の使用を提供することである。本発明の１つの側面により、活性を高める量の２種もしくは３種以上のサポニンおよび／またはサポゲニンを含み、抗癌活性を有する組成物を提供する。
本発明の他の側面により、治療有効量の組成物および好適な担体を含む、癌の処置のための医薬製剤を提供する。
【００１２】
本発明の他の側面により、治療有効量の組成物および好適な担体を含む、癌の処置のための非医薬製剤を提供する。
本発明の他の側面により、癌を有する哺乳類の対象の処置のための組成物の使用を提供する。
【００１３】
発明の詳細な説明
本発明は、それぞれが抗癌作用を有することが知られているサポニンおよび／またはサポゲニンを含む組合せが、癌細胞に対して、任意の個別の成分のみの場合よりも高い細胞毒性効果を有することが見出されたこと、すなわち、この組合せを癌細胞の処置に用いた場合に、予想外に高められた細胞毒性効果が観察されたことに基づく。
【００１４】
従って、本発明の組成物は、単独で用いられた場合の組成物の個別成分の各々よりも高い癌に対する有効性（efficacy）および効力（potency）を示す。この癌に対する有効性および効力のレベルは、個々の成分を非常に高用量で用いた場合にのみ達成でき、このような高用量は毒性のある副作用のために耐用不可能である。
【００１５】
定義
別に定義されない限り、本明細書で用いられるすべての技術的および科学的用語は、本発明が関連する当業者により一般的に理解されるものと同じ意味を有する。
本明細書で用いられる場合、「抽出物」は、１種または２種以上のサポニンおよび／またはサポゲニンを含む、植物材料から物理的または化学的に抽出された組成物を意味する。当業者は、本明細書に示されるような当分野でよく知られた方法、例えば植物材料に溶媒を接触させる等に従って抽出物が生成できることを理解する。抽出物は粗製抽出物であってもよく、または部分精製抽出物（partially purified extract）でもよい。
【００１６】
本明細書で用いられる場合、「植物材料(Plant material)」は、個別にまたは群として収集された、１部分または２部分以上の植物の部分を意味し、葉、花、根、種、茎、実などを含むが、これらに限定はされない。
本明細書で用いられる場合、「粗製抽出物」は、未加工で処理されていない形態の植物からの抽出物を指す。
【００１７】
植物からの抽出物との関連で本明細書で用いられる場合、「部分精製抽出物」とは、抽出物が、植物に天然に付随するタンパク質、核酸、脂質、炭水化物または他の同様の物質を、粗製抽出物よりも少ない種類で含む形態であることを意味する。本発明の組成物において用いられる抽出物（単数または複数）は、部分精製されたものである。
本明細書で用いられる場合、「活性成分」は、組成物の抗癌活性がもたらされるところの組成物の成分を意味する。本発明の組成物の活性成分は、サポニンおよび／またはサポゲニンを含む。
【００１８】
本明細書で用いられる場合、「サポニン」は、消化されて糖およびサポゲニンアグリコンを生成する植物のグリコシドを意味する。サポニンはまた、「ジンセノシド」とも呼ばれる。
本明細書で用いられる場合、「サポゲニン」は、通常は加水分解によって得られ、複合テルペノイドまたはステロイド構造のどちらかを有する、サポニンの糖でない部分である。
【００１９】
２種または３種以上の活性成分との関連において本明細書で用いられる場合、「高められた効果」とは、２種または３種以上の成分の組み合せの活性が、各成分単独の活性より高いことを示す。
本明細書で用いられる場合、「活性を高める量／活性を高める割合」とは、組成物の他の成分（単数または複数）と組み合せて用いられた場合に、例えば高められた細胞毒性作用などの高められた効果をもたらすのに十分な本発明の組成物の１つの成分の量をいう。
【００２０】
本明細書で用いられる場合、「有効性」とは、成分または組成物の癌細胞を殺す効果を意味する。
本明細書で用いられる場合、「効力」とは、成分または組成物の用量に関連した有効性を意味する。
【００２１】
本明細書で用いられる場合、「薬剤耐性癌」とは、癌細胞および／または腫瘍の、処置に対する耐性を発現する先天的または後天的な能力を指す。用語「薬剤耐性癌」は、多剤耐性（ＭＤＲ）癌を含む。慣用として：原発性ＭＤＲ癌は、化学療法に応答しないと考えられる未処置の癌であり、二次性ＭＤＲ癌は、処置の過程において耐性を発現する。当業者は、薬剤耐性は数種類の機構によりもたらされ得ることを理解しているところ、これには、薬剤の蓄積の減少（例えば、プロテインポンプ（例えばＰ−グリコプロテイン）による化学療法物質の積極的排出）、加速された薬剤の代謝、および薬剤代謝のその他の改変、ならびに薬剤が引き起こした損傷を修復する細胞の能力の増加などを含むが、これらに限定されない。本発明の文脈において、用語「薬剤耐性癌」は、耐性の作用の機構に関わらず、１種の化学療法薬剤、または２種以上の化学療法薬剤に対する耐性を示す癌を包含することが意図される。
【００２２】
本明細書で用いられる場合、「進行癌」とは、対象における顕在的な癌を指し、ここでかかる顕在的な癌は局所的ではなく、局所的な処置の様式、例えば外科手術または放射線療法などによっては容易に治癒しない。
本明細書で用いられる場合、「原発性癌」とは、元の腫瘍または原発性の腫瘍を指し、通常はそれが発生した身体の部分に由来して名付けられる。
【００２３】
本明細書で用いられる場合、「転移癌」とは、最初の部位（「原発性癌」）から他の部位（単数または複数）（「二次性癌」）へ広がった癌を指す。実質的にすべての癌は転移性となり得る。従ってこの用語は、特定の１種類の癌に限定はされない。転移癌はしばしば薬剤耐性である。
本明細書で用いられる場合、「再発癌」とは、治癒したかまたは不活性化された（すなわち寛解にある）と考えられていた癌の再発症を指す。癌は、数週間後、数ヵ月後、２、３年後または何年もの後に再発する可能性がある。当業者は、再発癌は、最初の治療、例えば化学療法、放射線療法、手術などによって除去または破壊されなかった癌細胞から生じることを理解する。
【００２４】
サポニンおよび／またはサポゲニンの組成物
本発明は、哺乳類の対象における癌の処置のための、２種または３種以上のサポニンおよび／またはサポゲニンの組合せを含む組成物を提供する。本発明の組成物は、例えば、２種もしくは３種以上のサポニン、２種もしくは３種以上のサポゲニン、または１種もしくは２種以上のサポニンと１種もしくは２種以上のサポゲニンとを共に含むことができる。本発明により、組成物は、各成分単独の場合と比較して、癌細胞の増殖の阻害において高められた効果を示す。組成物の高められた効果は、相乗的であってもよく、相乗的でなくてもよい。
【００２５】
本発明の組合せは、各成分単独の有効性に比べて少なくとも約５％の有効性の増加を示す。１つの実施態様において、組合せは、各成分単独の有効性に比べて少なくとも約１０％の有効性の増加を示す。他の実施態様において、組合せは、少なくとも約１５％の有効性の増加を示す。さらに他の実施態様において、組合せは、少なくとも約２０％の有効性の増加を示す。他の実施態様において、組合せは、少なくとも約２３％、少なくとも約２５％、少なくとも約２７％および少なくとも約３０％の有効性の増加を示す。
【００２６】
組成物において用いられるサポニンおよびサポゲニンは、パナックス属の植物に由来するものである。従って好適なサポゲニンは、プロトパナキサジオールおよびプロトパナキサトリオールである。本発明の１つの実施態様において、組成物は、１種または２種以上のサポゲニン、アグリコンプロトパナキサジオール（ａＰＰＤ）およおびアグリコンプロトパナキサトリオール（ａＰＰＴ）を含む。
【００２７】
パナックス属の植物に由来する多数のサポニンが当分野において知られており、本発明の組成物に用いるのに好適である。サポニンは、プロトパナキサジオール型またはプロトパナキサトリオール型のサポニンであってよい。好適なサポニンは、それに限定はされないが、Ｒａ１、Ｒａ２、Ｒｂ１、Ｒｂ２、Ｒｂ３、Ｒｃ、グルコ−Ｒｃ、Ｒｄ、Ｒｅ、Ｒｆ、２０−グルコ−Ｒｆ、Ｒｇ１、Ｒｇ２、Ｒｇ３、Ｒｈ１、Ｒｈ２、Ｒｈ４、ノトジンセノシドＲ１、コリョウジンセノシド（koryoginsenoside）Ｒ２、Ｒs１、Ｒs２、Ｑ−Ｒ１およびチクセツサポニンＶを含む。当業者は、多くのジンセノシドの天然型は２０Ｓであるが、植物材料からジンセノシドを抽出する過程において、２０Ｒ化合物が形成されることがあることを理解する。従って本発明は、２０Ｓまたは２０Ｒコンフォメーションのサポニンの使用を意図している。
【００２８】
本発明の１つの実施態様においては、組成物は、１種もしくは２種以上のプロトパナキサジオール型サポニンおよび／または１種もしくは２種以上のプロトパナキサトリオール型サポニンを含む。他の実施態様においては、組成物はサポニンＲｈ２を含む。さらに他の実施態様においては、組成物はサポニンＲｇ３を含む。特定の実施態様においては、組成物は、Ｒｈ２、ａＰＰＴおよびａＰＰＤの群から選択されるサポニンおよび／またはサポゲニンの組合せを含む。他の特定の実施態様においては、組成物は、Ｒｈ２、Ｒｇ３、ａＰＰＴおよびａＰＰＤの群から選択されるサポニンおよび／またはサポゲニンの組合せを含む。組成物はさらに、少量の１種または２種以上の非特定サポニンを含むことができる。
【００２９】
組成物に含まれるべき各成分の量は、約１〜約９０％（ｗ／ｗ）の範囲で変化する。本発明の１つの実施態様においては、組成物中の各サポニンの量は約１〜約５０％（ｗ／ｗ）の範囲であり、各サポゲニンの量は約５〜約７５％（ｗ／ｗ）の範囲である。他の実施態様においては、組成物中の各サポニンの量は約５〜約４０％（ｗ／ｗ）の範囲であり、各サポゲニンの量は約１０〜約７０％（ｗ／ｗ）の範囲である。
【００３０】
従って、本発明の例示的な組成物は、Ｒｈ２を１〜９０％（ｗ／ｗ）、ａＰＰＴを１〜９０％（ｗ／ｗ）、およびａＰＰＤを１〜９０％（ｗ／ｗ）含む。１つの実施態様においては、組成物は、Ｒｈ２を１〜５０％（ｗ／ｗ）、ａＰＰＴを５〜４０％（ｗ／ｗ）、およびａＰＰＤを５〜７５％（ｗ／ｗ）含む。他の実施態様においては、組成物は、Ｒｈ２を５〜４０％（ｗ／ｗ）、ａＰＰＴを１０〜３５％（ｗ／ｗ）、およびａＰＰＤを１０〜７０％（ｗ／ｗ）含む。さらに他の実施態様においては、組成物は、Ｒｈ２を７〜４２％（ｗ／ｗ）、ａＰＰＴを１５〜３０％（ｗ／ｗ）、およびａＰＰＤを４０〜７０％（ｗ／ｗ）含む。
【００３１】
本発明の組成物において用いられるサポニンおよびサポゲニンは、個別に、または組み合せて、パナックス属の植物から調製される抽出物から得ることができる。多くのサポニンおよび／またはサポゲニンが市場を通しても入手でき（Pegasus Pharmaceuticals, Inc., Richmond, British Columbia, Canada）、または当業者に周知の技法を用いて化学的もしくは生物学的に合成することができる（例えば、Shibata, S. (2001) J. Korean Med. Sci., 16 Suppl.: S28-37およびこれに引用されている文献を参照のこと）。
【００３２】
本発明の組成物は、部分精製された植物の抽出物から、適切な濃度に単純に希釈して調製することができ、または、１種もしくは２種以上の個別のサポニンおよび／またはサポゲニン成分を植物抽出物へ添加して、活性成分の割合を所望の量に調節することができる。代替的に、組成物は、２種または３種以上の個別のサポニンおよび／またはサポゲニン成分を活性を高める割合で混合することによって調製できる。個別のサポニンおよび／またはサポゲニンは精製また部分精製することができる。
【００３３】
植物材料
本発明の１つの実施態様においては、サポニンおよび／またはサポゲニンは植物材料から抽出する。他の実施態様においては、活性を高める割合のサポニンおよび／またはサポゲニンの組合せを含む部分精製された植物抽出物を、組成物の調製に用いる。
【００３４】
本発明により、抽出物を調製するのに好適な植物材料は、パナックス属の植物に由来する。植物材料を得ることができる植物の例は、これらに限定されないが、以下を含む：Panax aureus；Panax bipinnatifidus（別名Panax majorおよびPanax pseudoginseng var. bipinnatifidus）；高麗人参(Panax ginseng C. A. Meyer（別名高麗人参）)；Panax japonicus（別名Panax pseudoginseng subsup. japonicus；Panax pseudoginseng var. japonicusおよびPanax repens）；三七人参（Panax notoginseng (別名Aralia quinquefolia var. notoginsengおよびPanax pseudoginseng var. notoginseng）)；Panax pseudoginseng（別名Aralia pseudoginsengおよびPanax pseudoginseng var. pseudoginseng）；Panax wangianus（別名Panax pseudoginseng var. wangianus）；Panax quinquefolius；Panax stipuleanatus；Panax trifolius；Panax vietnamensisおよびPanax zingiberensis。
【００３５】
本発明に用いることができる植物材料は、個別にまたは群として収集される１種または２種以上の植物の部分を含み、葉、花、根、種、茎、実およびそれらの部分を含むが、これらに限定されない。当業者に知られているように、植物抽出物の化学組成および有効性は、植物の生物気候学的年齢、収穫された材料の湿度パーセント、抽出に選ばれた植物の部分、および抽出方法により変化する。当分野で周知の方法が当業者により適用でき、抽出物の所望の収率および品質を達成することができる。
【００３６】
本発明の１つの実施態様においては、高麗人参由来の植物材料は、サポニンおよび／またはサポゲニンを含む抽出物を調製するのに用いられる。他の実施態様においては、植物材料はアメリカ人参 (Panax quinquefolium L) に由来する。さらなる実施態様においては、植物材料は三七人参に由来する。
【００３７】
植物材料の前処理
植物の花暦学的年齢、植物が収穫された地域または地方、収穫された材料の湿度パーセント、抽出に選ばれた植物の部分、および抽出方法などのパラメータに加えて、抽出物の化学組成は、植物材料の前処理にも影響され得る。例えば、植物にストレスを加えると幾つかの生化学的プロセスが活性化され、それに応答して多くの新しい化合物が構造的に発現されるものに加えて合成される。害虫（pest）、菌類および他の病原性の攻撃のほか、ストレッサーには、干ばつ、熱、水および機械的損傷が含まれる。従って植物にストレスを加えることは、１種または２種以上の所望の化合物の含有を増加させるための道具として用いることができる。当業者は、上記のストレッサーの１つをこの目的で用いることができること、またはストレッサーの種々の組み合わせを用いることができることを理解する。例えば機械的損傷の効果は、ストレスがかかった場合に植物が自然に合成する化合物の添加により増加させることができる。かかる化合物は、ジャスモン酸（ＪＡ）を含む。昆虫の口腔内分泌の類似物もまた、この方法でストレスに対する植物の反応を高めるために用いられる。
【００３８】
１つの実施態様において、本発明の組成物は、植物材料の収集および抽出前に、化学的または機械的損傷、干ばつ、熱または寒さ、またはそれらの組み合わせによって植物にストレスを加えること等により前処理された植物材料の抽出物に由来する。
【００３９】
植物抽出物の調製および活性成分の検証
抽出物は、当分野で知られた標準の技法により、植物材料から調製することができる。植物材料からの抽出物の調製には種々の戦略が利用でき、その選択は、本発明の組成物のために必要な成分を抽出する方法の機能に依存する。抽出物調製のための好適な方法の例は、これらに限定されないが、水による蒸留（hydro-distillation）、直接水蒸気蒸留、溶媒抽出、およびマイクロ波援用プロセス（Microwave Assisted Process）（登録商標ＭＡＰ）を含む。
【００４０】
従って、例えば、植物材料は水中で沸騰させて処理することができる。成分は水中に放出され、続いて蒸留および冷却後に回収される。代替的に、植物材料は蒸気で処理することができ、それによって細胞膜内の成分が拡散して、水蒸気と共に混合物が形成される。水蒸気および成分は次に濃縮され、抽出物が収集される。有機溶媒も、活性成分を抽出するのに用いることができる。かかる有機溶媒の非限定的な例は、メタノール、エタノール、ヘキサン、および塩化メチレンを含む。水溶性または有機溶媒の代替として、植物組織内の水分子を励起するのにマイクロ波を用いることができ、それによって細胞が壊されて、植物材料の細胞外組織に捕えられている化合物が放出される。
【００４１】
抽出物内に所望の成分（すなわち、サポニンおよび／またはサポゲニン）が存在することを確認するために、当業者に周知の種々の解析技法を用いることができる。かかる技法は、例えば、有機分子のクロマトグラフィによる分離（例えば、ガスクロマトグラフィまたは液体クロマトグラフィ）、質量分析、または他の分光分析技法（例えば、赤外線、紫外線または核磁気共鳴分光分析）などを含む。
【００４２】
組成物の抗癌活性の決定
候補組成物の調製に続いて、組成物の抗癌活性を測定して、個別の成分のそれと比較することができる。当業者に周知の多数の試験法を、本発明の抽出物、組成物、および製剤の抗癌活性の試験に用いることができる。
【００４３】
ｉ）in vitro試験
本発明の組成物の有効性に関する最初の測定は、in vitro技法を用いて行うことができる。
例えば、個々のサポニンまたはサポゲニンの種々の癌細胞株に対する細胞毒性活性は、３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−２，５−ジフェニルテトラゾリウムブロミド（ＭＴＴ）のアッセイを用いて本発明の組成物と比較できる。一般にこの技法においては、癌細胞を培養して９６穴プレートに導入する。次に細胞を、候補組成物に２４時間暴露する。プレートから培地を取り除き、ＭＴＴ溶液を代わりに入れる。このプレートを分析して、組成物により処置された細胞を含む各ウェルの生存可能な細胞数を５７０ｎｍにおける吸収から計算し、無処置の対照、または組成物の１つの成分のみで処置した対照と比較する。各濃度における各剤に対する平均値および標準偏差を、標準の統計的手法を用いて計算する。
【００４４】
代替的に、組成物は、腫瘍細胞の付着非依存性増殖（anchorage-independent growth）を阻害する能力により試験することもできる。付着非依存性増殖は、当分野において、腫瘍形成性（tumorigenicity）の優れた指標であることが知られている。一般に、付着非依存性増殖は、適切な癌細胞株からの細胞を柔らかい寒天培地上に導入し、適切なインキュベーション時間の後に形成されたコロニーの数を測定して評価する。候補組成物で処置した細胞の増殖は、次に、適切な対照で処置した細胞（すなわち、サポニンおよび／またはサポゲニン成分単独で処置した細胞）の増殖、および処置なしの細胞の増殖と比較することができる。
【００４５】
組成物の毒性はまた、in vitroで標準の技法を用いて初回評価することができる。例えば、ヒト原生線維芽細胞をin vitroで組成物を用いて処置し、処置の後、トリパンブルー排除アッセイ（trypan-blue exclusion assay）などの標準の生死判別アッセイを用いて、それらの生存力を異なる時点で試験することができる。細胞はまた、ＤＮＡを合成するその能力については、例えばチミジン取込みアッセイ（thymidine incorporation assay）を用いて、また細胞周期動力学（cell cycle dynamics）における変化については、例えば、蛍光血球分類計算器（fluorocytometer cell sorter）（ＦＡＣＳ）と共に標準細胞分類アッセイ（standard cell sorting assay）を用いて評価できる。
【００４６】
ｉｉ）in vivo試験
組成物がin vivoで腫瘍の成長または増殖を阻害する能力は、適切な動物モデルにおいて当分野で知られた標準の技法を用いて（例えば、Enna, et al., Current Protocols in Pharmacology, J. Wiley & Sons, Inc., New York, NYを参照のこと）決定できる。
【００４７】
一般に、抗腫瘍化合物のスクリーニングのための現在の動物モデルは、ヒトの腫瘍を動物に移植した異種移植モデルである。ヒトの癌の異種移植モデルの例は、腫瘍成長アッセイに用いるための、マウスへのヒト固形腫瘍の皮下注射による異種移植；腫瘍成長アッセイに用いるための、マウスへのヒト固形腫瘍の脂肪パッド注射による同系移植；生存アッセイに用いるための、マウスにおけるリンパ腫および白血病の実験モデル；およびマウスにおける肺転移の実験モデルを含むが、これらに限定されない。
【００４８】
例えば組成物は、in vivoで固形腫瘍について、０日目に腫瘍の断片３０〜６０ｍｇを左右両方に皮下移植したマウスを用いて試験することができる。腫瘍を有する動物は、種々の処置および対照として供する前に混合する。進行性腫瘍の処置の場合は、腫瘍は所望のサイズまで成長させ、腫瘍の成長が不十分な動物は取り除く。選択された動物は、ランダムに処置および対照に分ける。腫瘍を有さない動物にも腫瘍を有する動物と同じ処置を行って、腫瘍に対する特定の効果から毒性の効果を分離することができるようにする。化学療法は一般に、腫瘍のタイプにより移植の３〜２２日後に開始し、動物は毎日観察する。本発明の組成物は、動物に対して、例えばボーラス注入により投与できる。異なる動物群は、最大の体重減少を得るまでは１週間に約３または４回体重を測定し、その後はこれらの群は、試験が終わるまで少なくとも週に１回、体重を測定する。
【００４９】
腫瘍は、腫瘍が規定のサイズおよび／または重量に達するまで、または、腫瘍が規定のサイズおよび／または重量に達する前に動物が死亡した場合は死亡のときまで、週に２回または３回計測する。次に動物を屠殺し、腫瘍の組織の病理組織学的検査所見、サイズおよび／または増殖について評価する。
白血病に対する組成物の効果の試験では、動物に特定数の細胞を移植し、処置を受けたマウスの対照と比較した生存時間の増加から、抗腫瘍活性を決定する。
【００５０】
本発明の組成物の、腫瘍転移に対する効果を試験するため、腫瘍細胞を生体外（ex vivo）で組成物により通常に処置し、次に好適な試験動物に注入する。注射部位からの腫瘍細胞の広がりを好適な期間監視する。
組成物のin vivoでの毒性効果は、処置期間中における動物の体重に対する組成物の効果を測定し、動物を屠殺した後に血液学的プロファイルおよび肝臓酵素分析を行うことにより、評価することができる。
【００５１】
表１：ヒト癌の異種移植モデルの例
【表１】
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【００５２】
組成物の治療的使用
本発明の組成物は、ヒトを含む哺乳類の対象における癌の処置に有用である。
本発明の組成物により処置または安定化することができる癌の例は、これらに限定されないが、白血病、カルチノーマ、腺癌、メラノーマおよび肉腫を含む。カルチノーマ、腺癌および肉腫はまた、しばしば「固形腫瘍」と呼ばれ、一般的に生じる固形腫瘍の例は、これらに限定されないが、脳、乳房、頚部、結腸、頭部および首、腎臓、肺、卵巣、膵臓、前立腺、胃および子宮の癌、非小細胞肺癌および結腸直腸癌を含む。
【００５３】
用語「白血病」は、広く、血液を生成する器官の進行性の悪性疾患を指す。白血病は一般に、血液および骨髄における白血球およびそれらの前駆体の異常な増殖および発達により特徴付けられるが、それはまた、未成熟な赤血球に影響をおよぼす赤白血病などの、他の血液細胞の悪性疾患を指すこともある。白血病は一般に、以下に基づき臨床的に分類される：（１）疾患の期間および性質―急性または慢性；（２）関与する細胞のタイプ―骨髄性（骨髄で生じた）、リンパ性（リンパ形成の）または単核球性；および（３）血液中の異常細胞の数の増加または非増加―白血病、非白血性（亜白血病）。白血病は、例えば、急性非リンパ性白血病、慢性リンパ性白血病、急性顆粒球性白血病、慢性顆粒球性白血病、急性骨髄球性白血病、成人Ｔ細胞白血病、非白血性白血病、無白血球性（aleukocythemic）白血病、好塩基球性（basophylic）白血病、芽細胞白血病、ウシ白血病、慢性骨髄性白血病、皮膚白血病、胎生白血病、好酸球性白血病、グロス白血病、ヘアリー細胞白血病、血芽球性白血病、血球母細胞性白血病、組織球性白血病、幹細胞性白血病、急性単球性白血病、白血球減少性白血病、リンパ性白血病（lymphatic leukaemia）、リンパ芽球性白血病、リンパ性白血病（lymphocytic leukaemia）、リンパ性白血病（lymphogenous leukaemia）、リンパ性白血病（lymphoid leukaemia）、リンパ肉腫細胞性白血病、肥満細胞白血病、骨髄巨核球性白血病、微小骨髄芽球性白血病、単球性白血病、骨髄芽球性白血病、骨髄性白血病、骨髄顆粒球性白血病、骨髄単球性白血病、ネーゲリ白血病、形質細胞白血病（plasma cell leukaemia）、形質細胞白血病（plasmacytic leukaemia）、骨髄球性白血病、リーダー細胞（Rieder cell）白血病、シリング白血病、幹細胞白血病、亜白血性白血病、および未分化細胞白血病を含む。
【００５４】
用語「肉腫」は、一般に筋肉、骨、軟骨または脂肪などの結合組織に発生する腫瘍を指し、胎生結合組織などの物質からなり、線維性または均質な物質に包埋された緊密に濃縮された細胞から一般に構成されている。肉腫は、軟部組織の肉腫、軟骨肉腫、線維肉腫、リンパ肉腫、黒色肉腫、粘液肉腫、骨肉腫、アベメチイ肉腫（Abemethy’s sarcoma）、脂肪肉腫（adipose sarcoma）、脂肪肉腫（liposarcoma）、胞状軟部肉腫、エナメル上皮肉腫、ブドウ状肉腫、クロローマ（chloroma）肉腫、絨毛膜肉腫（chorio sarcoma）、胎生肉腫、ウィルムス腫瘍肉腫、子宮内膜肉腫、間質肉腫、ユーイング肉腫、筋膜肉腫、線維芽細胞性肉腫、巨細胞肉腫、顆粒球性肉腫、ホジキン肉腫、突発性多発性色素性出血性肉腫、Ｂ細胞免疫芽球性肉腫、リンパ腫、Ｔ細胞免疫芽球性肉腫、イエンセン肉腫、カポジ肉腫、クッパー細胞肉腫、血管肉腫、白血肉腫、悪性間葉腫肉腫、傍骨性骨肉腫、網赤血球肉腫、ラウス肉腫、漿液嚢胞性肉腫（serocystic sarcoma）、滑膜肉腫、および毛細管拡張性肉腫を含む。
【００５５】
用語「メラノーマ（黒色腫）」は、皮膚および他の器官の色素細胞系から生じる腫瘍を意味するとされる。メラノーマは、例えば、末端性ほくろ性黒色腫、メラニン欠乏性黒色腫、良性若年性黒色腫、クラウドマン黒色腫、Ｓ９１黒色腫、ハーディング-パッセー黒色腫、若年性黒色腫、ほくろ(または黒子)悪性メラノーマ、悪性黒色腫、結節性メラノーマ、爪下黒色腫、および表在性広範メラノーマを含む。
【００５６】
用語「カルチノーマ」は、上皮細胞からなる悪性の新生物であって、周囲の組織に浸潤して転移を生じる傾向のあるものを指す。カルチノーマの例は、例えば、小葉癌（acinar carcinoma）、小葉癌（acinous carcinoma）、腺様嚢胞癌（adenocystic carcinoma）、腺様嚢胞癌（adenoid cystic carcinoma）、腺腫性癌（carcinoma adenomatosum）、副腎皮質細胞癌、肺胞癌（alveolar carcinoma）、肺胞細胞癌、基底細胞癌（basal cell carcinoma）、基底細胞癌（carcinoma basocellulare）、類基底細胞癌、基底有棘細胞癌、細気管支肺胞癌、細気管支癌、気管支原性癌、大脳様癌（cerebriform carcinoma）、胆管細胞癌、絨毛癌、直腸結腸癌、膠様癌、面皰癌、内体癌（corpus carcinoma）、篩状癌（cribriform carcinoma）、鎧状癌、皮膚癌、円筒細胞癌（cylindrical carcinoma）、円筒細胞癌（cylindrical cell carcinoma）、腺管癌、ドュラム癌(carcinoma durum)、胎性癌、髄様癌、扁平上皮細胞癌、上皮性腺様癌（carcionma epitheliale adenoides）、外向発育癌、エクルセレ癌(carcinoma ex ulcere)、線維性癌、ゼラチン様癌（gelatinform carcinoma）、膠様癌（gelatinous carcinoma）、巨細胞癌（giant cell carcinoma）、巨細胞癌（carcinoma giantocellulare）、腺癌、顆粒膜癌、毛母癌、血液様癌（haematoid carcinoma）、肝細胞癌、ヒュルトレ細胞癌、硝子様癌（hyaline carcinoma）、ハイペメフロイド癌(hypemephroid carcinoma)、乳児胎性癌（infantile embryonal carcioma）、上皮内癌（carcinoma in situ）、表皮内癌、上皮内癌（intraepithelial carcinoma）、クロンペッカー癌（Krompecher’s carcinoma）、クルチッキ細胞癌（Kulchitzky-cell carcinoma）、大細胞癌、水晶体癌（lenticular carcinoma）、水晶体癌（carcioma lenticulare）、脂肪腫性癌（lipomatous carcinoma）、リンパ上皮癌（lymhpoepithelial carcinoma）、髄質癌（carcinoma medullare）、髄様癌、悪性黒色腫、軟性癌（carcioma molle）、粘液性癌腫、ムシパルム癌(carcinoma muciparum)、粘液細胞性癌（carcioma mucocellulare）、粘液性類表皮癌、粘膜性癌（carcinoma mucosum）、粘膜癌、粘液腫様癌（carcinoma myxomatodes）、上咽頭癌、燕麦細胞癌、非小細胞癌、骨化性癌（carcinoma ossificans）、類骨癌（osteoid carcinoma）、乳頭状癌、門脈周囲性癌、前浸潤癌、有棘細胞癌、髄質様癌（pultaceous carcinoma）、腎臓の腎細胞癌、補充細胞癌、肉腫様癌（carcinoma sarcomatodes）、シュナイダー癌、硬性癌、陰嚢癌、印環細胞癌、単純癌、小細胞癌、ソラノイド癌(solanoid carcinoma)、球状細胞癌（spheroidal cell carcinoma）、紡錘体細胞癌、海綿状癌（carcinoma spongiosum）、扁平上皮癌（squamous carcinoma）、扁平上皮癌（squamous cell carcinoma）、ひも状癌（string carcinoma）、血管拡張性癌（carcinoma telangiectaticum）、毛細血管拡張様癌、移行上皮癌、結節性癌（carcinoma tuberosum）、結節性癌（tuberous carcinoma）、いぼ状癌、および絨毛性癌（carcinoma villosum）を含む。
【００５７】
用語「カルチノーマ」はまた、腺癌を包含する。腺癌は、腺性（分泌性）の特性を有する器官を作る細胞、または中空の内臓、例えば消化管または気管支上皮などに並ぶ細胞に発生する癌である。これらの例は胸部、肺、膵臓および前立腺の腺癌を含むが、それらに限定されない。
【００５８】
本発明に包含されるさらなる癌は、例えば、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、多発性骨髄腫、神経芽細胞腫、横紋筋肉腫、原発性血小板血症、原発性マクログロブリン血症、小細胞肺腫瘍、原発性脳腫瘍、悪性膵臓性インスラノーマ（malignant pancreatic insulanoma）、悪性カルチノイド、膀胱癌、前癌皮膚病変、神経膠腫、睾丸癌、甲状腺癌、食道癌、泌尿生殖器癌、悪性高カルシウム血症、子宮内膜癌、副腎皮質癌（adrenal cortical cancer）、中皮腫および髄芽腫を含む。
【００５９】
本発明の１つの実施態様においては、組成物は、膵癌、肺癌、胃癌、食道癌、結腸および直腸癌、脳腫瘍（神経膠腫）、卵巣癌、肝臓癌、腎臓癌、喉頭癌、骨肉腫、多発性骨髄腫、メラノーマ、乳癌、前立腺癌、膀胱癌、子宮体部癌、口腔癌、甲状腺癌、頚部癌、睾丸癌、非ホジキンリンパ腫、白血病、ホジキン病、皮膚癌、および軟部組織癌の群から選択される癌の処置または安定化に用いられる。
【００６０】
本発明の組成物は、進行癌および／または転移癌の処置または安定化に用いることができ、これには、進行および／または転移段階における上記の癌が含まれる。かかる癌は、しばしば薬剤耐性を有する。組成物は、上記の癌の再発または難治性の場合の処置に用いることもできる。
本発明に包含されるさらなる癌は、例えば、原発性または転移性の、種々の組織および／または器官における多剤耐性癌を含み、その組織および／または器官は、限定を意図するものではないが、筋肉、骨または結合組織、皮膚、脳、肺、生殖器、リンパ系または腎臓系、乳房または血液細胞、肝臓、消化管、膵臓および甲状腺または副腎を含む。これらの病態はまた、固形腫瘍、卵巣、胸部、脳、前立腺、結腸、胃、腎臓または睾丸の癌、カポジ肉腫、胆管腫、絨毛腫、神経芽細胞腫、ウィルムス腫瘍、ホジキン病、メラノーマ、多発性骨髄腫、リンパ性白血病および急性または慢性顆粒球性リンパ腫を含んでよい。
【００６１】
薬剤に対する耐性の発生は、癌の管理における主要な障害の１つである。この薬剤耐性の問題の回避を試みる従来方法の１つは、複数の薬剤の異なる作用機序および細胞毒性ポテンシャルを用いる、併用化学療法であった。多剤耐性に打ち勝つ能力を示す薬剤は、化学療法剤として、それのみで、または他の薬剤と組み合わせて、用いることができた。かかる薬剤を化学療法と組み合わせて用いることの潜在的な利点は、より毒性の少ない化合物を組み合わせて用いる必要があること、コストの削減、および高められた効果などにより、より少ない処置を含む処置法をもたらすことである。
【００６２】
本発明は、１種または２種以上の化学療法剤と組み合わせた組成物を、併用化学療法の一部として、多剤耐性癌を有する対象の処置に用いることを意図する。従って本発明の組成物は、それ自体で、または他の薬理学的に活性な化学療法剤と組み合わせて、癌の処置に用いることができる。
【００６３】
医薬製剤
本発明の組成物は、薬学的生理学的に許容し得る適切な担体、希釈剤、賦形剤または媒質と共に医薬製剤として投与することができる。医薬製剤は、対象への同時投与のために、組成物および１種または２種以上の他の化学療法剤を含むよう製剤してもよい。
【００６４】
本発明の医薬製剤は、経口的に、局所的に、非経口的に、吸入またはスプレイによりまたは経直腸的に、従来の非毒性の薬学的に許容し得る担体、補助剤および媒体を含む用量単位の製剤として投与することができる。本明細書で用いられる場合、非経口的という用語は、皮下注射、静脈内、筋肉内、胸部内の注射もしくは注入手法を含む。
【００６５】
医薬製剤は、経口的使用に好適な形態、例えば、錠剤、トローチ、ロゼンジ、水性もしくは油性の懸濁液、分散性粉末もしくは顆粒、乳濁液、硬質もしくは軟質のカプセル、またはシロップまたはエリキシル剤（elixir）であってよい。経口的使用を意図した製剤は、医薬製剤の製造のために当分野で知られた方法に従って調製することができ、薬学的に上品で口当たりのよい調製物を提供するため、甘味剤、香味剤、着色剤および保存剤の群から選択される１種または２種以上の剤を含んでよい。錠剤は活性成分を、好適で無毒性の薬学的に許容し得る賦形剤との混合で含み、該賦形剤は例えば、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、乳糖、リン酸カルシウムまたはリン酸ナトリウムなどの不活性な希釈剤；コーンスターチまたはアルギン酸などの顆粒化および崩壊剤（disintegrating agent）；スターチ、ゼラチンまたはアカシアなどの結合剤；およびステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸またはタルクなどの潤滑剤を含む。錠剤はコーティングなしでもよく、または、消化管内での分解および吸収を遅らせ、それによって長期間持続作用を提供するために、既知の技法によりコーティングしてもよい。例えば、モノステアリン酸グリセリンまたはジステアリン酸グリセリンなどの時間を遅延させる材料を用いることができる。
【００６６】
経口的使用のための医薬製剤はまた、活性成分が、例えば炭酸カルシウム、リン酸カルシウムもしくはカオリンなどの不活性固体希釈剤と混合されている硬カプセルとして、または、活性成分が、水またはピーナツ油、流動パラフィンもしくはオリーブ油などの油性媒体と共に混合されている軟カプセル（soft gelatin capsule）として提供されてもよい。
【００６７】
水性懸濁液は、活性化合物を、例えば以下を含む好適な賦形剤との混合で含む：懸濁剤、例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、トラガカントガム、およびアカシアゴムなど；分散剤または湿潤剤、例えば、レシチンなどの天然のリン脂質、またはステアリン酸ポリオキシエチレンなどのアルキレンオキシドと脂肪酸の縮合生成物、またはヘプタデカエチレンオキシセタノールなどの、エチレンオキシドと長鎖脂肪族アルコールとの縮合生成物、またはポリオキシエチレンソルビトールモノオレアートなどの、エチレンオキシドと脂肪酸およびヘキシトール由来の部分エステルとの縮合生成物。水性の懸濁液はまた、１種または２種以上の保存剤、例えばエチルもしくはｎ−プロピルｐ−ヒドロキシベンゾアート、１種または２種以上の着色剤、１種または２種以上の香味剤、または１種または２種以上の甘味剤、例えばショ糖もしくはサッカリンを含むことができる。
【００６８】
油性懸濁液は、活性成分を、例えばラッカセイ油、オリーブ油、ゴマ油もしくはココナッツ油などの植物油、または流動パラフィンなどの鉱油に懸濁させて配合することができる。油性懸濁液は、増粘剤、例えば蜜ろう、固形パラフィンまたはセチルアルコールなどを含んでもよい。上記のような甘味剤、および／または香味剤を、口当たりのよい経口調製物を提供するために添加してもよい。これら組成物は、アスコルビン酸などの抗酸化剤を添加して保存することができる。
【００６９】
水の添加による水性懸濁液の調製に好適な分散性粉末および顆粒は、分散剤または湿潤剤、懸濁剤および１種または２種以上の保存剤と混合されて活性化合物を提供する。好適な分散剤または湿潤剤および懸濁剤は、上に既に例示されている。さらなる賦形剤、例えば甘味剤、香味剤および着色剤も存在してよい。
【００７０】
本発明の医薬製剤は、水中油型乳剤の形態であってもよい。油相は、オリーブ油もしくはラッカセイ油などの植物油、または流動パラフィンなどの鉱油、またはこれらの油の混合物でもよい。好適な乳化剤は、アカシアゴムもしくはトラガカントガムなどの天然のゴム；大豆、レシチンなどの天然のリン脂質；または、脂肪酸およびヘキシトール、アンヒドリドに由来するエステルまたは部分エステル、例えばモノオレイン酸ソルビタン（sorbitan monoleate）など、および前記部分エステルと酸化エチレンとの縮合生成物、例えばポリオキシエチレンソルビタンモノオレアートなどであってよい。乳化剤はまた、甘味剤および香味剤を含むことができる。
シロップおよびエリキシル剤は、例えばグリセロール、プロピレングリコール、ソルビトールまたはショ糖などの甘味剤と共に配合することができる。かかる製剤はまた、緩和剤、保存剤、および／または香味剤および着色剤を含むことができる。
【００７１】
医薬製剤は、無菌で注入可能な水性または油性の懸濁液の形態であってもよい。この懸濁液は、上記のような好適な分散剤または湿潤剤および懸濁剤を用いて、既知の技術に従って配合することができる。無菌で注入可能な調製物はまた、無毒性で非経口的に許容し得る希釈剤または溶媒中の、無菌で注入可能な溶液または懸濁液であってもよく、例えば、１，３−ブタンジオール中の溶液であってよい。使用できる、許容し得る媒体および溶媒は、これらに限定はされないが、リンガー液、乳酸化リンガー液および生理食塩液を含む。他の例は、従来から溶媒または懸濁媒体として用いられている無菌の不揮発性油および、例えば合成モノおよびジグリセリドなどの種々の無刺激の不揮発性油である。さらに、オレイン酸などの脂肪酸も、注入可能物の調製において使用が見出されている。
【００７２】
他の医薬製剤および医薬製剤の調製方法が当分野に知られており、例えば”Remington: The Science and Practice of Pharmacy,” Gennaro, A. Lippincott, Williams & Wilkins, Philadelphia, PA (2000)（前の”Remingtons Pharmaceutical Sciences”）に記載されている。
【００７３】
非医薬製剤
非医薬製剤は、医薬または生物学的製品の製造、使用または販売を規制する政府機関、例えば、米国食品医薬品局などからの市場導入前の薬品認定を必要としない製剤である。当業者は、製剤が医薬製剤および非医薬製剤の両方として存在できることを認識する。例えば、植物性の製剤は、医薬製剤および非医薬製剤の両方と考えることができる。非医薬製剤は、（上記の）医薬製剤と同じ方法を用いて、同じ形態で同じ薬理学的に許容し得る媒体もしくは担体と共に配合することができる。
【００７４】
非医薬製剤は、例えば、栄養補助組成物、食物、健康食品（health food）、天然健康製品（natural health product）、機能食品、栄養補給剤（nutritional supplement）、栄養補助食品（dietary supplement）、ハーブ系サプリメント、ハーブ、代替医薬品、または自然療法製品（naturopathic product）の形態であってよい。本発明の１つの実施態様において、本発明の組成物を、薬理学的に許容し得る媒体中の非医薬製剤として提供する。本明細書に開示される非医薬製剤は、一般には錠剤、カプセルまたは軟膏の形態をとることができる。
【００７５】
投与および用量プロトコル
本発明に従って、治療有効量の本発明の組成物または組成物を含む製剤を、癌の処置のために対象に投与する。本発明の組成物または組成物を含む製剤は、従来の化学療法の実践に整合した様式で投与することができる。
【００７６】
本発明の組成物の投与すべき用量は、処置すべき癌のタイプ、患者が経験する症状の重篤度、および対象のサイズに依存し、熟練した開業医により容易に決定可能である。しかし、投与の用量および頻度は、当分野で知られた実践に従って異なる癌を処置するために状況に適合させることができる。
【００７７】
例として、組成物中の各活性成分の治療有効量は、体重１ｋｇ当たり約０．０１ｍｇ〜約１０００ｍｇの範囲であってよい。１つの実施態様においては、組成物は、Ｒｈ２の治療有効量として体重１ｋｇ当たり約０．０１ｍｇ〜約１０００ｍｇを含む。他の実施態様においては、組成物は、アグリコンプロトパナキサトリオールの治療有効量として体重１ｋｇ当たり約０．０１ｍｇ〜約１０００ｍｇを含む。さらに他の実施態様においては、組成物は、アグリコンプロトパナキサジオールの治療有効量として体重１ｋｇ当たり約０．０１ｍｇ〜約１０００ｍｇを含む。
【００７８】
医薬キット
本発明はさらに、癌治療に用いる医薬製剤内に本発明の組成物を含む、治療キットを提供する。キットの個々の成分は個別の容器に入れ、かかる容器と関連して、医薬または生物学的製品の製造、使用または販売を規制する政府機関により規定された形式の通知を有することができ、ここで該通知は、ヒトへの投与のための製造、使用または販売の機関による承認を反映する。
【００７９】
キットの成分が１種または２種以上の溶液において提供される場合は、溶液は無菌水溶液などの水溶液であってもよい。この場合、容器はそれ自体が吸入器、シリンジ、ピペット、点眼びん、またはその他の類似の器具であって、それらから組成物を対象に投与できるものであることを意味する。
【００８０】
キットの成分はまた、乾燥または凍結乾燥した形態において供給されてもよく、該キットは凍結乾燥した成分を再形成するための好適な溶媒をさらに含むことができる。容器の数またはタイプに関わりなく、本発明のキットはまた、組成物を対象へ投与するのを支援するための器具を含むことができる。かかる器具は、吸入器、シリンジ、ピペット、ピンセット、計量スプーン、点眼びん、または任意の医学的に承認されたかかる送達媒体であってよい。
【００８１】
キットはさらに、本発明の組成物と共に対象に投与するための、１種または２種以上の他の化学療法剤を含むことができる。
本明細書に記載の発明についてさらなる理解を得るために、以下の例を示す。これらの例は例示目的のみであることが理解されるべきである。従ってこれらは、いかなる意味においても本発明の範囲を限定するものではない。
【００８２】
例
Ｒｈ２、ａＰＰＴ、およびａＰＰＤを含む組成物の抗癌効果を、各個別成分のそれと比較した。組成物は、個別の成分を以下の量（％ｗ／ｗ）で混合して調製した：
【表２】
2005534654.tif 000007
【００８３】
組成物の調製：高麗人参、アメリカ人参および三七人参からなる群から選択された植物から得た、または幾つかの他の植物からのサポゲニン源から得たＲｈ２、ａＰＰＴ、およびａＰＰＤサポニンおよび／またはサポゲニンを含む組成物の調製の方法、および処置は、以下のステップに従う：
【００８４】
（ａ）ジンセノシド抽出物を水と混合すること；
（ｂ）（ｉ）ジンセノシド抽出物および水を、短鎖（１〜５炭素）のアルカリ金属アルコラート溶液またはヒドロキシド−エタノール溶液と混合して混合物を生成すること；および
（ｉｉ）得られた混合物を反応タンクに入れることにより、得られた混合物に、２４０〜３００℃の温度および３．５〜８．４ＭＰａの圧力において化学反応を起こさせること；または、
（ｃ）（ｉ）代替的に、ジンセノシド抽出物をエタノールと混合すること；
（ｉｉ）抽出物およびエタノールを、アルカリ金属アルコラート溶液と混合して混合物を生成すること；および
（ｉｉｉ）得られた混合物を反応タンクに入れることにより、得られた混合物に、２４０〜３００℃の温度および３．５〜８．４ＭＰａの圧力において化学反応を起こさせること；および
（ｄ）反応が完了した後、エタノール混合物から、サポニンおよび／またはサポゲニンが混合した中間生成物を収集すること。
【００８５】
細胞毒性は、標準ミクロ培養テトラゾリウムアッセイ（microculture tetrazolium assay）（ＭＴＴ）（Alley, M. C. et al. Cancer Research 48: 589-601, 1988）を用いて計測した。多剤耐性細胞株を含む、指数関数的に増殖する腫瘍細胞の培養を用いて、微小検定板培養を実施した。９６穴プレートにおいて、１ウェル当たり１．２×１０３個の細胞を播き、３７℃で１晩増殖させた。次に試験化合物を加えた。細胞を２４時間処置した。各ウェル内の生存可能な細胞数を決定するために、当分野で知られた標準的技法に従って、ＭＭＴ染料を加えた（生理食塩水中の３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−２，５−ジフェニルテトラゾリウムブロミド）。
【００８６】
例１：Ｒｈ２、ａＰＰＴ、およびａＰＰＤを含む組成物の、Ｕ８７ヒトグリオーマ細胞に対する高められた効果
培養されたヒトグリオーマ腫瘍細胞（Ｕ８７）を、サポニンおよびサポゲニンＲｈ２、ａＰＰＴ、およびａＰＰＤを用いて、個別に、種々の濃度において処置した。Ｕ８７細胞を同様に、サポニンおよびサポゲニンＲｈ２、ａＰＰＴ、およびａＰＰＤを含む組成物でも処置した。この例で用いた組成物１は、Ｒｈ２を７．３％、ａＰＰＴを２６．３％、およびａＰＰＤを６６．４％（％ｗ／ｗ）との化学プロファイルを有する。細胞の生存力はＭＴＴで２４時間試験した。
【００８７】
図１は、ヒトグリオーマ腫瘍細胞（Ｕ８７）に対する、組成物１の高められた効果を示す。図に示されるように、１５μｇ／ｍＬの組成物はほぼ１００％（９９％）の癌細胞を殺しており、一方同じ濃度の個別の成分Ｒｈ２、ａＰＰＴ、およびａＰＰＤは、それぞれ６４％、２９％および５２％を殺したにすぎない。この例では、各成分と組成物を同じ濃度において比較すると、大幅に改善された有効性および効力という結果であった。
【００８８】
例２：Ｒｈ２、ａＰＰＴ、およびａＰＰＤを含む組成物の、Ｂ１６マウスメラノーマ細胞に対する高められた効果
培養されたマウスメラノーマ細胞（Ｂ１６）を、サポニンおよびサポゲニンＲｈ２、ａＰＰＴ、およびａＰＰＤで、個別に、種々の濃度において処置した。Ｂ１６細胞を同様に、サポニンおよびサポゲニンＲｈ２、ａＰＰＴ、およびａＰＰＤを含む本発明の組成物でも処置した。この例で用いた組成物２は、Ｒｈ２を１４．３％、ａＰＰＴを１６．５％、およびａＰＰＤを６９．２％（％ｗ／ｗ）との化学プロファイルを有する。細胞の生存力はＭＴＴで２４時間試験した。
【００８９】
図２は、マウスメラノーマ細胞（Ｂ１６）に対する、組成物２の高められた効果を示す。図に示されるように、１０μｇ／ｍＬの組成物は８１％の癌細胞を殺しており、一方同じ濃度の個別の成分Ｒｈ２、ａＰＰＴ、およびａＰＰＤは、それぞれ５６％、４７％および４４％を殺したにすぎない。この例では、各成分と組成物を同じ濃度において比較すると、大幅に改善された有効性および効力という結果であった。
【００９０】
例３：Ｒｈ２、ａＰＰＴ、およびａＰＰＤを含む組成物の、ＭＣＦ７ヒト乳癌細胞に対する高められた効果
培養されたヒト乳癌細胞（ＭＣＦ７）を、サポニンおよびサポゲニンＲｈ２、ａＰＰＴ、およびａＰＰＤで個別に、種々の濃度において処置した。ＭＣＦ７細胞を同様に、サポニンおよびサポゲニンＲｈ２、ａＰＰＴ、およびａＰＰＤを含む本発明の組成物でも処置した。この例で用いた組成物３は、Ｒｈ２を４１．２％、ａＰＰＴを１７．６％、およびａＰＰＤを４１．２％（％ｗ／ｗ）との化学プロファイルを有する。細胞の生存力はＭＴＴで２４時間試験した。
【００９１】
図３は、ヒト乳癌細胞ＭＣＦ７に対する、組成物３の高められた効果を示す。図に示されるように、１５μｇ／ｍＬの組成物は９２％の癌細胞を殺しており、一方同じ濃度の個別の成分Ｒｈ２、ａＰＰＴ、およびａＰＰＤは、それぞれ６８％、６８％および６９％を殺したにすぎない。この例では、各成分と組成物を同じ濃度において比較すると、大幅に改善された有効性および効力という結果であった。
【００９２】
例４：Ｒｈ２、ａＰＰＴ、およびａＰＰＤを含む組成物の、多剤耐性／進行癌細胞に対する高められた効果
薬剤耐性膵癌細胞（ＢＸＣＰ−３）および（ＣＡＰＡＮ−１）を、サポニンおよびサポゲニンＲｈ２、ａＰＰＴ、およびａＰＰＤを含む本発明の組成物で処置した。この例で用いた組成物１は、Ｒｈ２を７．３％、ａＰＰＴを２６．３％、およびａＰＰＤを６６．４％（％ｗ／ｗ）との化学プロファイルを有する。細胞の生存力はＭＴＴで２４時間試験した。
【００９３】
図４ａは、薬剤耐性癌細胞株（ＢＸＣＰ−３）に対する、種々の濃度の組成物１の効果を示す。図４ｂは、薬剤耐性癌細胞株（ＣＡＰＡＮ−１）に対する、種々の濃度の組成物１の効果を示す。両方の細胞株が組成物に応答したことは明白である。
【００９４】
例５：Ｒｈ２、ａＰＰＴ、およびａＰＰＤを含む組成物の、種々の癌細胞に対する抗癌効果
組成物１の、種々の癌細胞の増殖の阻害における有効性を表２に示す。
【００９５】
表２
【表３】
2005534654.tif 000008
【００９６】
例６：組成物４のin vivo癌抑制効果
組成物４：
Ｒｈ２               ８％
Ｒｇ３               ２％
サポゲニン         ７０％
未知のジンセノシド ２０％
【００９７】
組成物４の抗癌活性をin vivoで試験するため、動物の悪性脳腫瘍モデルを用いた。腫瘍細胞をラットの脳に移植し、腫瘍が定着（establish）した移植後１０日目に、３用量の組成物４を経口投与した。図５に示すように、組成物４で２×５日間の処置を行った後、処置群と対照群の動物の生存率の間に大きな差が生じた。特に２５ｍｇ／ｋｇと５０ｍｇ／ｋｇの動物については、その４０％が、対照群の平均１８日に比べて４２日より長く生存した。さらに、生存した動物の５０％以上に、解剖により完全な腫瘍の退縮がみられた。
【００９８】
例７：組成物４の毒性学的プロファイル
組成物４の、正規の（formal）急性および長期毒性試験を実施した。簡潔に述べると、急性試験においては、４０００ｍｇ／ｋｇの組成物４を１回、ラットに対して経口で与えた。処置された動物は、処置の３０分後に、眼を閉じて静かになり活動的でなくなった。嗜眠状態は４時間内に消え、活動、食事および水の摂取は正常に戻った。７日間の観察期間中、死亡した動物は存在せず、解剖では、心臓、肝臓、脾臓、肺、腎臓、胃および腸管に異常は認められなかった。長期の毒性試験では、動物に、高用量（Ｈ）、中用量（Ｍ）、および低用量（Ｌ）として、それぞれ３３３．３ｍｇ／ｋｇ、１３１．０ｍｇ／ｋｇ、および５１．５ｍｇ／ｋｇの組成物４を経口で与えた。処置は毎日、８週間行い、加えて２週間の処置後観察期間をもうけた。Ｈ群の動物に２４時間以内に、前立腺（１８７％）および卵巣（１２４％）の一時的な肥大が見られた。同様な前立腺の肥大（１５６％）が、Ｍ群にも見られた。しかし、２週間後には肥大は見られなかった。他の微細な毒性反応はＨ群にのみ見られ、これには第３および第４週の間の嗜眠状態（その後正常に戻る）、および処置の後期（第４〜９週）における体重増加の減少（統計的に有意なし）を含む。血液の所定の検査および器官の組織学的検査では、全３群ともに異常は認められなかった。
【００９９】
組成物４の急性毒性試験を実施した。結果を以下に簡単にまとめる。
Ｉ．血管刺激試験（Blood vessel irritation test）
組成物４を、５ｍｌ／ｋｇ（１ｍｇ／ｍｌ）の用量で、ラビット（ジャパニーズ−ビッグ・イヤー(Japanese Big-ear)）の耳の血管を介して静脈内に７日間連続して投与した。注射した領域に目立った変化は見られなかった。注射した領域の組織切片の顕微鏡検査では、静脈性鬱血、浮腫、または炎症細胞の浸潤は認められなかった。
結論：組成物４は、血管に刺激を引き起こさない。
【０１００】
ＩＩ．内毒素試験：
リムルス属アメーバ様細胞ライセート（Limulus Amebocyte Lysate）（ＬＡＬ）干渉試験を行って、組成物４の内毒素レベルを決定した。内毒素の最低検出レベルは、用いたＬＡＬ試験キットでは０．１２５ＥＵ／ｍｌ〜０．２５ＥＵ／ｍｌであった。組成物４を１ｍｇ／ｍｌ、０．５ｍｇ／ｍｌ、０．２５ｍｇ／ｍｌおよび０．１２５ｍｇ／ｍｌに希釈した場合、いずれも干渉は検出されなかった。
結論：内毒素レベルは、組成物４の１ｍｇ当たり１ＥＵ未満である。
【０１０１】
ＩＩＩ．溶血性試験
ラビット全血を用いて組成物４の希釈物と混合し、上澄みの分光光度吸収を５４５ｎｍ波長で計測して、溶血反応を決定した。生理食塩水で希釈した組成物４（組成物４：生理食塩水＝３：１、最終濃度：１ｍｇ／ｍｌ）が引き起こした溶血効果は１％未満（正常値：＜５％）であった。しかし、希釈しない組成物４（４ｍｇ／ｍｌ）は、少量の溶血をもたらした（５１％）。
結論：組成物４を１：３で生理食塩水に希釈して用いた場合、溶血効果は検出されない。
【０１０２】
ＩＶ．アレルギー試験
アレルギー試験を、ギニーピッグ（genie pig）を用いて行った。０．５ｍｌの組成物４を、２日毎に６日間（３回）、静脈内に投与した。さらに、１ｍｌの組成物４を、同じ動物に対して第１４日および第２１日に静脈内に投与した。咳、くしゃみ、皮膚／毛および呼吸器反応等の典型的なアレルギー反応が、注射から１５分内に観察された。
結論：組成物４はアレルギー反応を引き起こさない。
【０１０３】
Ｖ．組成物のＬＤ５０
５群のマウスに、組成物４を５種類の異なる用量（８３．５ｍｇ／ｋｇ〜１６０．０ｍｇ／ｋｇ）で１回、静脈内に注射した。動物を注射後７日間観察し、ＬＤ５０をブリス法により決定した。１３６ｍｇ／ｋｇおよび１６０．０ｍｇ／ｋｇの用量を用いた動物に、重篤な毒性および死亡が見られた。用量を減少させると、毒性は大幅に低減した。
結論：静脈内に注射された組成物４のＬＤ５０は、１０５．０〜１４１．６ｍｇ／ｋｇの９５％信頼区間で１２１．９ｍｇ／ｋｇである。
【０１０４】
例８：非正規第１相臨床試験
非正規第１相臨床試験を遼寧省ＴＣＭ研究所（Liaoning Provincial TCM Research Institute）で行った。試験は、最初の処置が失敗したかまたは従来の処置を拒絶した、４０人の種々のタイプの悪性軟性腫瘍の患者で行った。患者は以下の癌を患っていた：肺（１０人）、肝臓（６人）、乳房（５人）、Ｒ＆Ｃ（４人）、子宮（３人）、膵臓（２人）、鼻−咽喉（１人）、食道（１人）、胆管（１人）、胃（１人）、睾丸（１人）、腎臓（１人）、膀胱（１人）、尿管（１人）、口（６人）およびhepatosorrhesis（１人）。平均年齢５６．１±１１．５歳の４０人の患者を、組成物４を２００ｍｇ／日、経口にて、平均５３．７±２５．４日間処置した。第１の目的は、組成物４の毒性を、悪心、嘔吐、口内炎、抜け毛などの症状、神経系の症状および皮膚の異常から計測することであった。観察された任意の患者において、上記の症状はどれも報告されなかった。従って毒性は０グレードであると結論された。
【０１０５】
この試験の第１の目的ではなかったが、有効性についての予備的観察の結果は非常に有望であった。組成物４で処置された患者の７５％において、様々な程度でその症状の改善がみられ、幾人かの患者では大幅な腫瘍の退縮がみられた。
【０１０６】
症例：
ケース１：女性、５８歳、下部胆管癌（３．０×２．６ｃｍ）
症状：体重減少、悪心、めまい、疲労、腹部上部の痛み、黄疸等。
処置：１１４日間、２００ｍｇ／日。
改善：腫瘍サイズが１．８×１．４ｃｍに減少。上記症状の消失。自ら調子がよいと感じる。
【０１０７】
ケース２：女性、７４歳、食道癌（傘型）、長さ６．０ｃｍ（Ｘ線写真）。
症状：嚥下困難、痛み、体重減少、頻繁なしゃっくり。
処置：１１０日間、２００ｍｇ／日。
改善：腫瘍サイズが１．５ｃｍに減少。嚥下に困難なし、しゃっくりが大幅に少なくなり、痛みなし。自ら調子がよいと感じる。
【０１０８】
ケース３：男性、６６歳、膵癌（４．５×４．５×３．７ｃｍ）。
症状：疲労、めまい、腹部上部および肝臓の痛み、異常に高いＧＰＴ、ＧＯＴおよび血糖値。
処置：９０日間、２００ｍｇ／日。
改善：痛みが大幅に減少する。ＧＰＴ、ＧＯＴおよび血糖値がすべて正常に戻った。
【０１０９】
本発明の実施態様をこのように記載すると、実施態様が多くの方法で改変できることは明白である。かかる改変は、本発明の精神および範囲からはずれるものとされるべきではなく、かかる改変のすべては、当業者に明白であるように、下記特許請求の範囲に含まれることが意図されている。
排他的な財産または特権が請求されている本発明の実施態様は、下記のとおりである。
【図面の簡単な説明】
【０１１０】
【図１】種々の個別のサポニンおよびサポゲニン、ならびに本発明の組成物で処置されたヒトグリオーマ腫瘍細胞（Ｕ８７）の細胞生存率のグラフによる表示である。
【図２】種々の個別のサポニンおよびサポゲニン、ならびに本発明の組成物で処置されたマウスメラノーマ細胞（Ｂ１６）の細胞生存率のグラフによる表示である。
【図３】種々の個別のサポニンおよびサポゲニン、ならびに本発明の組成物で処置されたヒト乳癌細胞（ＭＣＦ７）の細胞生存率のグラフによる表示である。
【図４ａ】種々の濃度の本発明の組成物で処置された膵癌細胞（ＢＸＣＰ−３）の細胞生存率のグラフによる表示である。
【図４ｂ】種々の濃度の本発明の組成物で処置された膵癌細胞（ＣＡＰＡＮ−１）の細胞生存率のグラフによる表示である。
【図５】種々の濃度の本発明の組成物のin vivo癌抑制効果を示す図である。
【図１】
2005534654.tif 000009
【図２】
2005534654.tif 000010
【図３】
2005534654.tif 000011
【図４ａ】
2005534654.tif 000012
【図４ｂ】
2005534654.tif 000013
【図５】
2005534654.tif 000014
【手続補正書】
【提出日】平成16年8月17日(2004.8.17)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
活性を高める量の１種もしくは２種以上のサポニンを、１種もしくは２種以上のサポゲニンと組み合せて含み、高められた抗癌活性を有する組成物。
【請求項２】
サポニンおよびサポゲニンが、Ｒｈ２、Ｒｇ３、アグリコンプロトパナキサトリオール、およびアグリコンプロトパナキサジオールを含む群から選択される、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
サポゲニンを約７０％、Ｒｈ２を約８％、およびＲｇ３を約２％含む、請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
Ｒｈ２、アグリコンプロトパナキサトリオール、およびアグリコンプロトパナキサジオールをそれぞれ約１〜９０％含む、請求項２に記載の組成物。
【請求項５】
Ｒｈ２を約１〜５０％、アグリコンプロトパナキサトリオールを約５〜４０％、およびアグリコンプロトパナキサジオールを約５〜７５％含む、請求項４に記載の組成物。
【請求項６】
Ｒｈ２を約５〜４０％、アグリコンプロトパナキサトリオールを約５〜４０％、およびアグリコンプロトパナキサジオールを約１０〜７０％含む、請求項５に記載の組成物。
【請求項７】
１種または２種以上のサポニンおよびサポゲニンが、植物材料から抽出される、請求項１〜６のいずれかに記載の組成物。
【請求項８】
植物材料が、パナックス属の１種または２種以上の植物に由来する、請求項７に記載の組成物。
【請求項９】
植物が高麗人参である、請求項８に記載の組成物。
【請求項１０】
植物がアメリカ人参である、請求項８に記載の組成物。
【請求項１１】
植物が三七人参である、請求項８に記載の組成物。
【請求項１２】
１種または２種以上のサポニンおよびサポゲニンが合成物である、請求項１〜１１のいずれかに記載の組成物。
【請求項１３】
治療有効量の請求項１〜１２のいずれかに記載の組成物、および薬理学的に許容し得る担体を含む、癌の処置のための医薬製剤。
【請求項１４】
治療有効量の請求項１〜１２のいずれかに記載の組成物、および薬理学的に許容し得る担体を含む、癌の処置のための非医薬製剤。
【請求項１５】
経口投与可能な形態である、請求項１３または１４に記載の製剤。
【請求項１６】
注入可能な形態である、請求項１３または１４に記載の製剤。
【請求項１７】
局所投与可能な形態である、請求項１３または１４に記載の製剤。
【請求項１８】
治療有効量が、Ｒｈ２を、１日体重１ｋｇ当たり０．０１ｍｇ〜１０００ｍｇの用量で含む、請求項１３または１４に記載の製剤。
【請求項１９】
治療有効量が、アグリコンプロトパナキサトリオールを、１日体重１ｋｇ当たり０．０１ｍｇ〜１０００ｍｇの用量含む、請求項１３または１４に記載の製剤。
【請求項２０】
治療有効量が、アグリコンプロトパナキサジオールを、１日体重１ｋｇ当たり０．０１ｍｇ〜１０００ｍｇの用量含む、請求項１３または１４に記載の製剤。
【請求項２１】
哺乳類における癌の処置のための、請求項１〜１２のいずれかに記載の組成物の使用。
【請求項２２】
癌が、神経膠腫、メラノーマ、乳癌、膵癌、脳腫瘍、腸および胃癌、前立腺癌、および肺癌からなる群から選択される、請求項２１に記載の使用。
【請求項２３】
癌が、胃癌、食道癌、結腸および直腸癌、卵巣癌、肝臓癌、腎臓癌、喉頭癌、骨肉腫、多発性骨髄腫、膀胱癌、子宮体部癌、口腔癌、甲状腺癌、頚部癌、睾丸癌、非ホジキンリンパ腫、白血病、ホジキン病、皮膚癌、および軟部組織癌からなる群から選択される、請求項２１に記載の使用。
【請求項２４】
癌が、多剤耐性癌である、請求項２１に記載の使用。
【請求項２５】
多剤耐性癌が、固形腫瘍を含む、筋肉、骨または結合組織、皮膚、脳、肺、生殖器、リンパ系または腎臓系、乳細胞または血液細胞、肝臓、消化管、膵臓および甲状腺または副腎の癌、卵巣、乳房、脳、前立腺、結腸、胃、腎臓または睾丸の癌、カポジ肉腫、胆管腫、絨毛腫、神経芽細胞腫、ウィルムス腫瘍、ホジキン病、メラノーマ、多発性骨髄腫、リンパ性白血病および急性または慢性の顆粒球性リンパ腫からなる群から選択される、原発性癌である、請求項２４に記載の使用。
【請求項２６】
多剤耐性癌が、膵癌、肺癌、胃癌、食道癌、結腸および直腸癌、脳腫瘍、卵巣癌、肝臓癌、腎臓癌、喉頭癌、骨肉腫、多発性骨髄腫、メラノーマ、乳癌、前立腺癌、膀胱癌、子宮体癌、口腔癌、甲状腺癌、頚部癌、睾丸癌、非ホジキンリンパ腫、白血病、ホジキン病、皮膚癌、および軟部組織癌からなる群から選択される、再発性癌である、請求項２４に記載の使用。
【請求項２７】
組成物を、１種または２種以上の他の化学療法剤と組み合せて用いる、請求項２１〜２６のいずれかに記載の使用。
【請求項２８】
哺乳類がヒトである、請求項２１〜２６のいずれかに記載の使用。
【請求項２９】
癌の処置のための医薬の製造における、請求項１〜１２のいずれかに記載の組成物の使用。
【請求項３０】
請求項１〜１２のいずれかに記載の組成物および１種または２種以上の容器を含む、哺乳類における癌の処置のための医薬キット。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００３】
サポニンは、一般に、糖の部分（グリコン）と、糖でない部分（アグリコンまたはサポゲニン）から構成される。サポニンの主鎖であるチョウセンニンジンのサポゲニンは、さらに３つのタイプに分類される：これらは、プロトパナキサジオールおよびプロトパナキサトリオール（ダンマラン系の四環性テルペノイド）、およびオレアノ酸（oleanoic acid）である。
サポゲニンであるアグリコンプロトパナキサトリオール（ａＰＰＴ）は、次の化学構造を有する：
【化１】
2005534654.tif 000015
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００４】
サポゲニンであるアグリコンプロトパナキサジオール（ａＰＰＤ）は、次の化学構造を有する：
【化２】
2005534654.tif 000016
【手続補正４】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】図５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図５】
2005534654.tif 000017
【国際調査報告】
2005534654.tif 000018
2005534654.tif 000019
2005534654.tif 000020
2005534654.tif 000021
2005534654.tif 000022