(57)【要約】エレクトロポーレションを実施するためのショッキングチャンバ（１１）は、ベース（１２）とヒンジ止めふた（１３）との形状に作られていて、そのふたは、下げられている場合、ベース（１２）共に完全に囲われたキュベット（２３）を形成し、キュベット（２３）に対して高電圧を印加していて、ふた（１３）を上げると、電圧印加は解除される。ベース（１２）は二対の電気リード線を含んでいて、一方の対（２４，２５）は、ばね付勢接点でキュベット（２３）と係合し、キュベット（２３）へ電気的接続を提供すると共に、キュベット（２３）を所定位置に取り付けるようになっていて、他方の対（３２，３３）は、高電圧ターミナル（３４，３５）と接続している。ふた（１３）に組み込まれた分流器（４５）は、ふた（１３）が閉じられると二対のリード線を橋絡し、ふた（１３）が開けられると回動してすべてのリード線を断路している。構造のこれら及び他の特徴は、安全で確実な手段をユーザに提供していて、その手段は、装置においてエレクトロポーレションに使用される、片手で操作できる高電圧電気接続を形成している。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
生物学的細胞と生物学的分子との入っているキュベットを受け入れるための、かつ該生物学的分子をエレクトロポーレションにより該生物学的細胞へ移行させるために該キュベットを電界にさらすためのチャンバであって；ハウジングと、キュベットホルダと、一対の第一電気リード線及び一対の第二電気リード線と、分流器とを具備するチャンバにおいて：
該ハウジングは、ベースと、該ベースにヒンジ取りつけされたふたとを具備していて；
該キュベットホルダは、該ベースに取りつけられていて；
該一対の第一電気リード線及び該一対の第二電気リード線は、該ベースに取りつけられていて、該一対の第一電気リード線各々が、ばね付勢された前方接点における前方端部において終点となっており、該前方接点は該キュベットホルダにおけるキュベットを接続的に把持し電気的に係合するようになっていて、該一対の第二電気リード線が、高電圧源により供給されており、該ベースにおいて該一対の第一電気リード線と該一対の第二電気リード線との間に電気的接続はなくて；
該分流器は、該ふたに取りつけられ、かつ該ふたの開閉が該分流器を（ａ）係合位置と（ｂ）係合解除位置との間で回動するように配置されていて、（ａ）該係合位置は該ふたが閉じている場合であり、該分流器は、該一対の第一電気リード線を該一対の第二電気リード線と橋絡していて、従って該一対の第二電気リード線から該一対の第一電気リード線を介して該一対の第一電気リード線の該前方接点に高電圧接続を形成しており、（ｂ）該係合解除位置は該ふたが開いている場合であって、該一対の第一電気リード線及び該一対の第二電気リード線は電気的に接続していなくて、かつ該前方接点は高電圧接続から電気的に遮断されている；チャンバ。
【請求項２】
該一対の第一電気リード線及び該一対の第二電気リード線は、ばね付勢された後方接点で終点となっていて；該分流器が該係合位置にある場合、該後方接点は該分流器と係合するようになっている；請求項１に記載のチャンバ。
【請求項３】
該一対の第一電気リード線及び該一対の第二電気リード線は、電気的に導電材料の平行な帯板である、請求項１に記載のチャンバ。
【請求項４】
電気絶縁パーティションがすべての該電気リード線をお互いに隔てている、請求項１に記載のチャンバ。
【請求項５】
該一対の第一電気リード線と該一対の第二電気リード線との各々の該後方端部が、開口部を有するフック状プロフィールであって、該分流器は四本の脚を備えており、各々が、電気接続を形成するために、該開口部の一つに差し込まれるべくかつ該フックを押さえつけるべく配置されている、請求項１に記載のチャンバ。
【請求項６】
該ふたを該ベースに締めつけかつ該ふたを該ベースから取りはずすための親指で操作するキャップをさらに具備する、請求項１に記載のチャンバ。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はエレクトロポーレション用実験装置の分野に関するものである。より詳細には、ショッキングチャンバ（shocking chamber）の構造に関するものであって、そのショッキングチャンバの中で、適切な媒体に懸濁された生物学的細胞が、エレクトロポーレションに使用される高電圧電気パルスにさらされている。
【背景技術】
【０００２】
トランスフェクションとして公知のエレクトロポーレションは、生物学的細胞を高電圧の電位にさらすプロセスであり、電位が取り除かれると再閉する細胞膜における暫時的な細穴を形成するためのものである。細穴は核酸及びたん白質のような大分子が細胞懸濁媒体から細胞に侵入することを可能に、従ってエレクトロポーレションは細胞にこれらの分子を注入するための手段である。エレクトロポーレションは、外来ＤＮＡを生細胞の内側に配置するのに有効なものであり、従って細胞が所望するたん白質を発現し、注入ＤＮＡにより規定される特定な性状の挙動を可能とする。
【０００３】
エレクトロポーレションに使用される電圧は、細胞のタイプ及び注入される種に依存する。例えば小さな細胞は、より大きな分子と同様により強い電界を必要とする傾向があり、電圧は低くて２００Ｖ／cm〜高くて３５，０００Ｖ／cmの範囲である。この値の電圧を用いることは、ユーザの安全に関心が集まる。
【０００４】
エレクトロポーレション装置は、一般に細胞懸濁液を保持するためのキュベットと、キュベットが挿入され電圧を作用するショッキングチャンバとを含んでいる。キュベットは通常スライドによりチャンバの中に挿入される。この操作には両手を必要としある程度の困難さを伴なうので従ってユーザにリスクとなる。
【特許文献１】米国特許第４７５０１００号明細書
【特許文献２】米国特許第５０９８８４３号明細書
【特許文献３】米国特許第６１０３０８４号明細書
【特許文献４】米国特許第６２５８５９２号明細書
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は、ベースとヒンジ止めされたふたとを含んでいるショッキングチャンバを提供するものであって、チャンバは、キュベットを収容し完全に取り囲むものであり、さらにキュベットがチャンバ内に挿入される場合、キュベットに対して高電圧を作用するために配置された電気回路を含んでおり、その回路は、ふたが閉じた場合高電圧電源と係合するべく配置され、ふたが開いた場合電源と係合解除するべく配置されていて、開閉は簡単な片手操作でできるようになっている。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
ベースは二対の電気リード線を含んでいて、一対の第一電気リード線はばね付勢された接点を用いてキュベットと係合していて、両接点はキュベットに電気接続を提供し、かつキュベットをチャンバのベースに確実に取りつけていて、一対の第二電気リード線はチャンバ外部における高電圧ターミナルと接続されている。電源とキュベットとの係合及び係合解除は、ふたに設置された分流器により行なわれる。分流器は、ふたが閉じた場合ベースにおける二対のリード線を橋絡し、ふたが開いた場合、回動してすべてのリード線を断路している。本発明の好適な実施態様において、ベースにおける四つの電気リード線各々が、ふたに向かって上向きに延伸するフック状端部を有していて、分流器接点が確実に接続するためのフックと係合する。さらに好適な実施態様において、チャンバが電気絶縁用パーティションを含んでいて、そのパーティションは電気リード線各々を隔てていて、アーキングを防止し、ユーザが不注意で指を接触することを防止し、ユーザが受傷することを防止している。
さらなる特徴、利点及び好適な実施態様が、以下の説明により明瞭となる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００７】
本発明は、部品の配置及び形状、並びにそれらの寸法のような構造の詳細において多くの変更が可能であるけれども、本発明は特定の実施態様の詳細な説明により最も良く理解されるものである。添付図面は、そのような実施態様を示している。
【０００８】
図１はエレクトロポーレションチャンバ１１の側面図であって、エレクトロポーレションチャンバ１１は、ベース１２と、ヒンジ継手１４を介してベースに取りつけられたふた１３とを有している。ふたは閉位置で図示されているものの、ヒンジ継手１４周囲を矢印方向１５に点線で示す開位置に向けて回転可能である。親指で操作するキャップタブ１６がチャンバの前方端部に設置されている。タブ１６はベースの一部であって、親指でタブを押すとふたが受け具１７から解放され、ふたは解放時に自然に開くようにばね付勢式となっている。チャンバのベースの後方から高圧ケーブル用のひずみ取りサポート１８が延伸している。エレクトロポーレション装置用電源は、出版物に説明され商業的に入手可能であり、本発明においてデザインされたチャンバ用に意図されたものではないけれども、これらの図に図示されたチャンバに使用できるものである。電源の例は、１９８８年６月７日にRagsdaleに交付された特許文献１、１９９２年３月２４日にCalvinに交付された特許文献２、２０００年８月１５日にUhemに交付された特許文献３、及び２００１年６月１０日にRagsdaleに交付された特許文献４に開示されている。これらの特許各々の開示内容を参考としてここに包含するものである。
【０００９】
ベース１２の内部コンポーネントが図２の斜視図に図示されていて、わかりやすくするために電気リード線は上方にずらしてある。プラットホーム２１がベースのフロアーを形成していて、上部開口壁面２２が、プラットホームから前方端部（すなわち図の左下における端部で、その端部においてふたを開けユーザがアクセス可能である）へ向けて延伸していて、その壁面１２は標準エレクトロポーレションキュベット２３を受容するべく寸法化されていて、そのエレクトロポーレションキュベット２３はプラット上方にずらして挿入に備えて図示されている。一対の電気リード線２４，２５は、プラット上方にずらして図示されていて、プラットホームの外縁に隣接してプラットホームに取りつけられている。これらのリード線の前方端部２６，２７は、キュベットが挿入される際にキュベット壁面と電気的に接続するように形状化されている。これらの前方端部２６，２７各々は、約９０°の角度で上向きに曲げられ、そして鋭角で内向きに曲げられている。角度のついた端部２８，２９がエンクロジャー壁面におけるノッチ３０，３１を介してキュベットエンクロジャー２２の中へ突出している。電気リード線は弾力性のある導電性材料で形成されていて、角度のついた端部２８，２９がキュベット壁面に対してばね付勢するように作用してキュベットを所定位置に保持し、同時にキュベットと強力な電気接続を提供するようになっている。
【００１０】
一対の第二電気リード線３２，３３は、プラットホームの上方にずらして図示されていて、一対の第一電気リード線の間に設置されている。電力は高電圧ケーブル３４，３５を介してこれらのリード線に供給される。プラットホーム２１又はベース内全体に、一対の第一リード線２４，２５と一対の第二リード線３２，３３との間の電気的接続はなくて、電気絶縁用パーティション３６，３７，３８が四つのリード線各々を隔てていて、アーキングを防ぎかつユーザによる指での不注意による接触を防ぐようになっている。端部パーティション３９はキュベットに対し高電圧リード線３２，３３を絶縁している。従って、本実施態様において、四つのリード線は中央における高電圧供給リード線３２，３３と、供給リード線の両側における二つのキュベット接続リード線２４，２５とに平行配置となっている。二組のリード線の位置が反対になっているような、細長い直線のリード線というよりは、円形状若しくは弧状のリード線、又はリード線を絶縁し安全に取扱うことのできるいずれの形状のリード線を使用して；同一のあるいは同等に機能する別の配置であってもよい。
【００１１】
通常含まれている種々の構造体エレメントは、図２から省略されていて、前述の要素が容易に参照出きるようになっている。これらの補助的エレメントは、フロアーをベースの他の部分と組立てるために使用されるエレメントと、抵抗加熱によりもたらされる変形に対してリード線を安定させるためのエレメントと、リード線の電気的接続に使用されない部分をおおうために使用するエレメントとを含んでいてもよい。そのような他のエレメントは電気設備のデザイン、組立に係わる当業者においては容易に理解できるであろう。
【００１２】
キュベットに高電圧を供給するための、二組のリード線間の接続及び断路は、四つのリード線各々の後方端部で行なわれる。図２における分解図に図示するように、これらの後方端部４１，４２，４３，４４は、ベースのフロアーに取りつけられた場合、フロアーの後方に向かって一列に整列する。各々は直角に上向きに曲がっていて、続いて前方に鋭角に曲がり、前方エッジは上向きに湾曲しフック形状となっている。二つのキュベット接続リード線の前方端部２８，２９と同様に、これらのフック状前方接点は分流器（後述する）における接点に対して付勢するべくばねとして作用する。この場合のばねは分流器接点に対して下向きに付勢している。というのは分流器接点が、フックの上向きに湾曲した前方エッジの下方におけるフックの開口部に入ってゆくからである。
【００１３】
分流器４５を図３及び４の斜視図に示す。図３がふた全体１３を図示していて、分流器４５はふたをベースと接続しているヒンジ４６から延伸している。図４はヒンジ４５及び分流器４５の背面から見た図であって、分流器の二分体の二つ４７，４８を図示している。二つの二分体はお互いを電気的に絶縁するギャップにより分離されている。二つの二分体は同一なものであって、各々は、接続ブリッジ５１により接続された一対の脚４９，５０から構成されていて、脚とブリッジとは、導電材料で作られていて、さらに電気的に絶縁されているヒンジとボルト止めされている。四本の脚すべては一列に整列されかつ所定角度に曲げられていて、四本の脚がベースにおける接点フック４１，４２，４３，４４の開口部に差し込まれ、フックの下側に対して上向きに押すようになっている。分流器４５がヒンジ４６にしっかりと取りつけられていて、分流器の脚は、ふたが閉じられた場合に接点フックと回転係合し、ふたが開けられた場合に係合解除されるようになっている。
【００１４】
ベースにおける電気リード線用の分流器に代わって、同一で同一の機能である別の装置が、使用されてもよい。分流器の脚は、例えばフックにおいて上向きというよりは下向きに押さえてもよいし；分流器の脚がベースにおけるリード線というよりはばね付勢作用を提供するべく形成されていてもよくて；また分流器の脚の配置は直線的というよりは非直線的であってもよい。
【００１５】
前述の説明は主に説明目的のためである。本発明の新規な概念に関連する変更と組みかえと実施態様とが、当業者において理解されるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】図１は、本発明におけるショッキングチャンバの側面図である。
【図２】図２は、図１におけるショッキングチャンバのベースコンポーネント部分の分解斜視図である。
【図３】図３は、図１におけるショッキングチャンバのふたコンポーネントの斜視図である。
【図４】図４は、図３におけるふたコンポーネントに取りつけられた分流器の斜視図である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【国際調査報告】
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