(57)【要約】本発明は、ある種の細菌性感染、特にＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ（Ｅ．ｃｏｌｉ）又はＨｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ（Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ）感染に起因する、若しくはそれに関連する疾病又は疾患を治療或いは予防するための組成物及び方法に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の式Ｉ：
【化１】
2005504123.tif 000029
を有する化合物、又は医薬的に受容可能なその塩であって、式中、ｎは、０−１の整数であり、そしてＲは、Ｃ1-10アルキル、Ｃ1-10アリール及び以下の式：
【化２】
2005504123.tif 000030
からなる群から選択され、そしてここにおいてｎが０である場合、ＲがＣ1-10アリールではない、前記化合物。
【請求項２】
以下の式ＩＩ：
【化３】
2005504123.tif 000031
を有する化合物、又は医薬的に受容可能なその塩。
【請求項３】
医薬組成物であって、請求項１又は請求項２に記載の化合物を含んでなる、前記組成物。
【請求項４】
更に医薬的に受容可能な担体又は賦形剤を含んでなる、請求項３に記載の医薬組成物。
【請求項５】
Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ（Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ）感染に起因する疾病又は疾患を治療或いは予防するための方法であって、このような治療又は予防を必要とする或いはそれが好ましい対象に、有効な量の請求項１又は請求項２に記載の化合物若しくは医薬的に受容可能なその塩を投与し、それによって前記疾病又は疾患を治療或いは予防することを含んでなる、前記方法。
【請求項６】
前記対象が哺乳動物である、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記哺乳動物がヒトである、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
請求項２に記載の化合物、又は医薬的に受容可能なその塩を対象に投与することを含んでなる、請求項５に記載の方法。
【請求項９】
請求項３に記載の医薬組成物を対象に投与することを含んでなる、請求項５に記載の方法。
【請求項１０】
Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ感染に起因する治療或いは予防される疾病又は疾患が、慢性胃炎、胃十二指腸潰瘍、末端胃の腺癌、胃リンパ腫又は胃癌である、請求項５に記載の方法。
【請求項１１】
対象が、抗Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ剤を投与されることなく治療される、請求項５に記載の方法。
【請求項１２】
前記抗Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ剤が、プロトンポンプ阻害剤（ＰＰＩ）、メトロニダゾール、クラリスロマイシン又はアモキシシリンである、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記Ｈ．ｐｙｌｏｒｉが、ＰＰＩ、メトロニダゾール、クラリスロマイシン又はアモキシシリン治療によって誘発された耐性系である、請求項５に記載の方法。
【請求項１４】
前記化合物又は医薬的に受容可能なその塩が、空洞内注射、皮下注射、静脈内注射、筋肉内注射、皮内注射、経口投与、又は局所投与によって投与される、請求項５に記載の方法。
【請求項１５】
更に対象のＨ．ｐｙｌｏｒｉ感染の診断又は予測の段階を含んでなる、請求項５に記載の方法。
【請求項１６】
組合せであって、請求項１又は請求項２に記載の化合物或いは医薬的に受容可能なこれらの塩、及び抗Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ剤を含んでなる、前記組合せ。
【請求項１７】
前記抗Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ剤が、ＰＰＩ、メトロニダゾール、クラリスロマイシン又はアモキシシリンである、請求項１６に記載の組合せ。
【請求項１８】
Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ感染に起因する疾病又は疾患を治療或いは予防するための方法であって、このような治療又は予防を必要とする或いはそれが好ましい対象に、有効な量の請求項１６に記載の組合せ若しくは医薬的に受容可能なその塩を投与し、そしてこれによって前記疾病又は疾患を治療或いは予防することを含んでなる、前記方法。
【請求項１９】
キットであって、請求項１又は請求項２に記載の化合物或いは医薬的に受容可能なこれらの塩、及び前記化合物又は医薬的に受容可能な塩を、Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ感染に起因する疾病又は疾患の治療或いは予防において使用するための指導書を含んでなる、前記キット。
【請求項２０】
キットであって、請求項１５に記載の組合せ、及び前記組合せをＨ．ｐｙｌｏｒｉ感染に起因する疾病又は疾患の治療或いは予防において使用するための指導書を含んでなる、前記キット。
【請求項２１】
Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ（Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ）感染に起因する疾病又は疾患を治療又は予防するための方法であって、このような治療又は予防を必要とする或いはそれが好ましい対象に、有効な量の以下の式ＩＩＩ：
【化４】
2005504123.tif 000032
を有する化合物を投与し、これによって前記疾病又は疾患を治療或いは予防することを含んでなり、式中、ｎは、０−１の整数であり、そしてＲは、水素、Ｃ1-10アルキル、Ｃ1-10アリール及び以下の式：
【化５】
2005504123.tif 000033
からなる群から選択される、前記方法。
【請求項２２】
組合せであって、以下の式ＩＩＩ：
【化６】
2005504123.tif 000034
を有する化合物又は医薬的に受容可能なその塩、及び抗Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ剤を含んでなり、式中、ｎは、０−１の整数であり、そしてＲは、水素、Ｃ1-10アルキル、Ｃ1-10アリール及び以下の式：
【化７】
2005504123.tif 000035
からなる群から選択される、前記組合せ。
【請求項２３】
キットであって、以下の式ＩＩＩ：
【化８】
2005504123.tif 000036
を有する化合物又は医薬的に受容可能なその塩、及び前記化合物又は医薬的に受容可能な塩を、Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ感染に起因する疾病又は疾患の治療或いは予防において使用するための指導書を含んでなり、式中、ｎは、０−１の整数であり、そしてＲは、水素、Ｃ1-10アルキル、Ｃ1-10アリール及び以下の式：
【化９】
2005504123.tif 000037
からなる群から選択される、前記キット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ある種の細菌性感染、特にＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ（Ｅ．ｃｏｌｉ）又はＨｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ（Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ）感染に起因する、若しくはそれに関連する疾病又は疾患を治療或いは予防するための組成物及び方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
１９４０年代に抗生物質が商業的に入手可能になってから、これらは、患者に多くの危害を加えることなく細菌を排除する魔法の銃弾とみなされてきた。然しながら、１０年がそれぞれ経過するごとに、増大する抗生物質耐性系の数に対してもはや有効ではない抗生物質の数が増加する。結核及び肺炎のような感染は、抗生物質の発見以前のように治療不可能になってきた。我々は、いまや深刻な世界的公衆衛生の危機に直面している（Ｎｅｕ，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２５７：１０６４−１０７３，（１９９２））。
【０００３】
１９２９年のペニシリンの発見以来、我々はいまや１５０を超える抗生物質を有している。これらは、抗生物質のいくつかの群に属し、そして異なった作用の機構を有する（Ｌｙｏｎ  ａｎｄ  Ｓｋｕｒｒａｙ，Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｒｅｖ．，５１：８８−１３４，（１９８７））。一般的に、これらの化合物は、生体系によって製造され、これらは、細菌の成長及び増殖を阻害する。例えば、バンコマイシン及びβ−ラクタムは、細胞壁の合成を遮断することができる（Ｃｈｏｐｒａ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．，４１：４９７−５０３，（１９９７）；及びＮｉｃｏｌａｏｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ａｍｅｒｉｃａｎ，４８−５２  Ｍａｙ（２００１））。エリスロマイシン及びテトラサイクリンは、タンパク質合成を中断することができる。スルホンアミドは、葉酸代謝を妨げ、リファンピンは、ＲＮＡ合成を遮断することができ、そしてキノロンは、ＤＮＡ複製を阻害する。
【０００４】
細菌の耐性と闘うために、細菌性感染の治療の新しい方法が、研究及び開発されている。これらの新しい方法は、既存の抗生物質に分子変更のような新しい生命を与えることを含む。最近になって、抗生物質の新しい群“自己組織化ペプチドナノチューブ”が関心を生んでいる（Ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  Ｐｒｅｓｓ  Ｎｅｗ，Ｊｕｌｙ  ２５，（２００１））。この化合物は、細菌の表面に押し入るチューブを形成する顕微鏡的アミノ酸の環を使用する。ゲノムの分野において更に多くの新しい開発が存在する。これらは、細菌のＲＮＡ（ｒＲＮＡ）及びメッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）を阻害することを必要とする。細菌の遺伝子を標識することができるｉｎ  ｖｉｖｏ発現技術（ＩＶＥＴ）と呼ばれる新しい技術も更に研究中である。更に、有望な方法は、細菌性感染の治療のためのアンチセンス療法である（Ｊａｓｎｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２８６：４４３−４９１，（１９９９））。
【０００５】
ＤＮＡ合成に関係する特異的プロテアーゼを目標とするように見受けられる抗細菌剤の群が同定されている（Ｋａｔｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｌ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．，１６：１２０−１２４（１９９８）；Ｉｒｉｓａｗａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｌ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．，１６：６２１−６２６（１９９３）；Ｉｒｉｓａｗａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｌ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．，１６：１２１１−１２１５（１９９３）；Ｋａｔｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｅｎｚｙｍｅ  Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ，８：２５−３７（１９９４）；Ｋａｔｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，２１０：１００７−１０１４（１９９２）；及び（Ｋａｔｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｌ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．，１６：５５２−５５７（１９９３））。Ｉｎ  ｖｉｔｒｏにおいて競合的トリプシン阻害剤として作用するこの群の化合物は、ｔｒａｎｓ−４−グアニジノメチルシクロヘキサンカルボン酸（ＧＭＣＨＡ）の各種の芳香族エステルとして製造される（以下の式Ｉ：
【０００６】
【化１】
2005504123.tif 000002
【０００７】
を参照）。
グラム陰性ラセン状菌であるＨｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ（Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ）は、最初慢性胃炎の患者からＷａｒｒｅｎ及びＭａｒｓｈａｌｌによって１９８３年に単離された（Ｗａｒｒｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｌａｎｃｅｔ，１：１２７３−１２７５（１９８３））。多くの証拠が胃十二指腸疾病及びＨ．ｐｙｌｏｒｉ間の密接な関係を示している。従って、Ｈ．ｐｙｌｏｒｉが慢性胃炎を誘発する重要な細菌性病原であり、そしてヒトの胃十二指腸潰瘍、末端胃の腺癌、及び胃リンパ腫に関連することが仮定される。最近になって、世界保健機関は、Ｈ．ｐｙｌｏｒｉを、胃癌の発生におけるその主要な役割に対して責を負うべき発癌物質の１群として分類した（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ａｇｅｎｃｙ  ｆｏｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ｏｎ  Ｃａｎｃｅｒ．Ｗｏｒｌｄ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ，Ｌｙｏｎ，Ｆｒａｎｃｅ，Ｍｏｎｏｇｒａｐｈ  ｏｎ  ｔｈｅ  ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｉｃ  ｒｉｓｋ  ｔｏ  ｈｕｍａｎｓ．６１：１７７−２４０，１９９４）。
【０００８】
１９９４年に、アメリカ予防衛生研究所（ＮＩＨ）は、Ｈ．ｐｙｌｏｒｉを根絶するために、プロトンポンプ阻害剤（ＰＰＩ）及び抗細菌剤の同時投与による管理を推奨した（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  Ｐｙｌｏｒｉ  ｉｎ  ｐｅｐｔｉｃ  ｕｌｃｅｒ  ｄｉｓｅａｓｅ：ＮＩＨ  ｃｏｎｓｅｎｓｕｓ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｐａｎｅｌ  ｏｎ  Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  Ｐｙｌｏｒｉ  ｉｎ  ｐｅｐｔｉｃ  ｕｌｃｅｒ  ｄｉｓｅａｓｅ．（ＪＡＭＡ，２７２：６５−６９（１９９４））。それ以降、メトロニダゾール、ＰＰＩ、並びにクラリスロマイシン及びアモキシシリンの経口投与が実行され、感染症例の８０−９０％までを治癒することが可能である。然しながら、抗細菌剤の適用は、試薬に対するＨ．ｐｙｌｏｒｉの耐性系を誘発するという深刻な問題を惹き起こす。実際に、メトニダゾール（ｍｅｔｈｏｎｉｄａｚｏｌｅ）、クラリスロマイシン及びアモキシシリンに対する耐性系は、すでに報告されている（Ｚｗｅｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｌａｎｃｅｔ，３５２：１５９５（１９９８））。ＰＰＩ及び抗細菌剤の投与に起因する他の厳しい問題は、ＰＰＩが消化不良を誘発し、そして大量の抗細菌剤は消化管における細菌叢の破壊を激しくすることである。
【０００９】
従って、新しい種類の活性な抗細菌化合物を見出すことが非常に重要である。本発明は、これ及び当技術における他の関連する必要性を目標とする。
【発明の開示】
【００１０】
本発明は、ある種の細菌のＤＮＡ複製の開始を阻害するものである薬物を提供することによって、抗細菌剤のレパートリーを追加する。一つの側面において、本発明は、以下の式ＩＩ：
【００１１】
【化２】
2005504123.tif 000003
【００１２】
を有する化合物、又は医薬的に受容可能なその塩を指向し、式中、ｎは、０−１の整数であり、そしてＲは、水素、Ｃ1-10アルキル、Ｃ1-10アリール及び以下の式：
【００１３】
【化３】
2005504123.tif 000004
【００１４】
からなる群から選出される。
好ましくは、化合物は、以下の式ＩＩＩ（ＮＥ−２００１）：
【００１５】
【化４】
2005504123.tif 000005
【００１６】
を有する。
更に好ましくは、化合物、又はその医薬的に受容可能なその塩は、単独又は医薬的に受容可能な担体若しくは賦形剤との組合せのいずれかの医薬組成物の形態として提供される。細菌性感染、例えばＥ．ｃｏｌｉ又はＨ．ｐｙｌｏｒｉ感染に起因する、或いはそれに関連する疾病若しくは疾患の治療又は予防のための上記の化合物を含んでなるキットも更に提供される。
【００１７】
もう一つの側面において、本発明は、細菌性感染に起因或いはそれに関連する疾病又は疾患を治療若しくは予防するための方法を指向し、この方法は、このような治療又は予防を必要とする或いはそれが好ましい対象に、有効な量の細菌のＤＮＡ複製の開始を選択的に阻害する薬剤、又は医薬的に受容可能なその塩を投与し、それによって前記の疾病又は疾患を治療或いは予防することを含んでなる。好ましくは、疾病又は疾患は、Ｅ．ｃｏｌｉ又はＨ．ｐｙｌｏｒｉに起因或いはそれに関連する。更に好ましくは、細菌、特にＥ．ｃｏｌｉ若しくはＨ．ｐｙｌｏｒｉに起因或いはそれに関連する疾病又は疾患は、対象に有効な量の以下の式ＩＩ：
【００１８】
【化５】
2005504123.tif 000006
【００１９】
を有する化合物、又は医薬的に受容可能なその塩を投与することによって治療或いは予防され、式中、ｎは、０−１の整数であり、そしてＲは、水素、Ｃ1-10アルキル、Ｃ1-10アリール及び以下の式：
【００２０】
【化６】
2005504123.tif 000007
【００２１】
からなる群から選出される。
好ましくは、投与される化合物は、以下の式ＩＩＩ（ＮＥ−２００１）：
【００２２】
【化７】
2005504123.tif 000008
【００２３】
を有する。
なおもう一つの側面において、本発明は、組合せを指向し、この組合せは、Ｅ．ｃｏｌｉ若しくはＨ．ｐｙｌｏｒｉの細菌のＤＮＡ複製の開始を選択的に阻害する薬剤、又は医薬的に受容可能なその塩、及び抗Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ又は抗Ｅ．ｃｏｌｉ剤を含んでなる。好ましくは、組合せは、以下の式ＩＩ：
【００２４】
【化８】
2005504123.tif 000009
【００２５】
を有する化合物、又は医薬的に受容可能なその塩、及び抗Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ剤を含んでなり、式中、ｎは、０−１の整数であり、そしてＲは、水素、Ｃ1-10アルキル、Ｃ1-10アリール及び以下の式：
【００２６】
【化９】
2005504123.tif 000010
【００２７】
からなる群から選出される。更に好ましくは、組合せ中に含まれる化合物は、以下の式ＩＩＩ（ＮＥ−２００１）：
【００２８】
【化１０】
2005504123.tif 000011
【００２９】
を有する。
上記の組合せを含んでなるキットも更に提供される。上記の組合せ及びキットを使用して、細菌性感染、例えばＥ．ｃｏｌｉ又はＨ．ｐｙｌｏｒｉ感染に起因或いはそれに関連する疾病若しくは疾患を治療又は予防するための方法が、更に提供される。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３０】
本発明を行う方式
開示を明瞭にするために、そして制約する方法としてではなく、本発明の詳細な説明を、以下の小区分に分割する。
【００３１】
Ａ．定義
他に規定されない限り、本明細書中で使用される全ての技術的及び科学的用語は、本発明が属する当業者によって普通に理解されるものと同一の意味を有する。本明細書中で参照される、全ての特許、出願、公開出願及び他の刊行物並びに遺伝子銀行及び他のデータベースから得られた配列は、その全てが参考文献として援用される。本項目において規定される定義が、本明細書中に参考文献として援用された出願、公開出願、及び他の刊行物中に規定された定義並びに遺伝子銀行及び他のデータベースから得られた配列と相容れない又はさもなければ一致しない場合、本項目において規定された定義が、本明細書中に参考文献として援用されたものの定義に優先する。
【００３２】
本明細書中に使用される場合、“ａ”又は“ａｎ”は、“少なくとも一つ”又は“一つ又はそれより多い”を意味する。
本明細書中で使用される場合、“Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ”は、丸い末端及び末端球状部に多数の鞘付鞭毛（一極又は二極及び側方）を持つラセン状の、曲がった又は直線の微好気性細菌の属を表す。これは、通常１−２ｍｍ直径の着色されない半透明のコロニーを形成する。これは、通常カタラーゼ及びオキシダーゼ陽性である。これは、ヒト及びフェレットを含む霊長類動物の胃粘膜に見出される。いくつかの種は、胃及び消化性潰瘍に関連する。
【００３３】
本明細書中で使用される場合、“Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ”は、Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒの属の種を表す。これは、非胞子形成のＳ型又は曲がったグラム陰性細菌であり、そして鞭毛を持つことができる。これは、ヒトの胃で見出され、そして元はＣａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉｄｉｓと命名された。Ｈ．ｐｙｌｏｒｉによる感染は、ウレアーゼを生産し、そして胃炎並びに胃、十二指腸、及び消化性潰瘍を含むいくつかの胃十二指腸疾病に関連する。
【００３４】
本明細書中で使用される場合、“Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ感染に起因する疾病又は疾患”は、Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ感染単独或いは他の薬剤及び／又は遺伝的及び／又は後天的を問わない条件との組合せに起因する疾病又は疾患を表す。
【００３５】
本明細書中で使用される場合、“抗Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ剤”は、本発明の化合物、即ち、以下の式ＩＩ：
【００３６】
【化１１】
2005504123.tif 000012
【００３７】
を有する化合物を包含しない。
本明細書中で使用される場合、“Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ（Ｅ．ｃｏｌｉ）”は、生化学者にとって実験作業で非常に広く使用される原型的な細菌を表す。これは、哺乳動物の大腸（腸）に豊富に存在する桿型グラム陰性桿菌を表す。これは、通常非病原性であるが；しかしある系、例えばウシの腸に普通に存在するＥ．ｃｏｌｉ  Ｏ１５７系は、最近多くの死者の原因となっている。
【００３８】
本明細書中で使用される場合、“Ｅ．ｃｏｌｉ感染に起因する疾病又は疾患”は、Ｅ．ｃｏｌｉ感染単独或いは他の薬剤及び／又は遺伝的及び／又は後天的を問わない条件との組合せに起因する疾病又は疾患を表す。
【００３９】
本明細書中で使用される場合、特定の疾病を治療するための化合物の“有効な量”は、疾病に関連する兆候を改善、又はある様式においては軽減するために充分な量である。このような量は、単一投与量として投与することができ、或いはそれによって有効である投薬計画に従って投与することができる。この量は、疾病を治癒することができるが、しかし典型的には、疾病の兆候を改善するために投与される。所望する兆候の改善を達成するために、繰り返し投与を必要とすることができる。
【００４０】
本明細書中で使用される場合、“医薬的に受容可能な塩、エステル又は他の誘導体”は、当業者によって、このような誘導のための、そして実質的に毒性の影響なく動物又はヒトに投与することができる化合物を製造し、そして医薬的に活性であるか、或いはプロドラッグである、既知の方法を使用して容易に調製することができるいずれもの塩、エステル又は誘導体を含む。
【００４１】
本明細書中で使用される場合、“治療”は、症状、疾患又は疾病の兆候が改善又は利益を持って変更されるいずれもの様式を意味する。治療は、更に本明細書中の組成物のいずれもの医薬的使用を包含する。
【００４２】
本明細書中で使用される場合、特定の医薬組成物の投与による特定の疾患の兆候の“改善”は、永久的又は一時的、継続的又は一過的を問わず、組成物の投与に帰せられる或いはそれに関連することができるいずれもの減少を表す。
【００４３】
本明細書中で使用される場合、“実質的に純粋な”は、当業者によってこのような不純物を評価するために使用される薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）、ゲル電気泳動及び高性能液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）のような標準的分析法によって決定されるような、容易に検出可能な不純物を含まないとみなされる程度に充分に均質であるか、或いは更なる精製が、酵素的及び生物学的活性のような、物質の物理的及び化学的特性を検出可能なように変化するものではないように充分に純粋であることを意味する。実質的に化学的に純粋な化合物を製造するための化合物の精製方法は、当業者にとって既知である。然しながら、実質的に化学的に純粋な化合物は、立体異性体又は異性体の混合物であることができる。このような場合、更なる精製は、化合物の特異的活性を増加することができる。
【００４４】
本明細書中で使用される場合、“プロドラッグ”は、ｉｎ  ｖｉｖｏの投与において、化合物の生物学的に、医薬的に又は治療的に活性な形態に代謝され、或いは転換される化合物である。プロドラッグを製造するために、医薬的に活性な化合物は、活性な化合物が代謝過程によって再生されるように修飾される。プロドラッグは、薬物の代謝安定性又は輸送特質を変化し、副作用又は毒性を遮蔽し、薬物の香りを改良し、或いは薬物の他の特質又は特性を変更するために設計することができる。当業者は、一旦医薬的に活性な化合物を知った場合、薬力学の過程及びｉｎ  ｖｉｖｏの薬物代謝の知識の価値によって、化合物のプロドラッグを設計することができる（例えば、Ｎｏｒｇｒａｄｙ（１９８５）Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ａ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ，Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ｐａｇｅｓ３８８−３９２を参照されたい）。
【００４５】
用語“実質的に”同一又は相同或いは同様な用語は、当業者によって理解されるように内容によって変化し、そして一般的に少なくとも７０％を意味し、好ましくは少なくとも８０％、更に好ましくは少なくとも９０％、そして最も好ましくは少なくとも９５％同一であることを意味する。
【００４６】
本明細書中で使用される場合、“組成物”は、いずれもの混合物を表す。これは、溶液、懸濁液、液体、粉末、ペースト、水性、非水性又はこれらのいずれもの組合せであることができる。
【００４７】
本明細書中で使用される場合、“組合せ”は、二つの間の、又は更なる品目間の会合体を表す。
本明細書中で使用される場合、用語“対象”は、ヒト、並びに例えばイヌ、ネコ、ウシ、ブタ、ネズミ、等のような他の動物種を包含する。対象がある種の細菌性感染、例えばＥ．ｃｏｌｉ又はＨ．ｐｙｌｏｒｉ感染に起因或いはそれに関連する疾病又は疾患の治療若しくは予防の妥当性が適当であるものであることは当業者にとって理解されるものである。
【００４８】
本明細書中で使用される場合、いずれもの保護基、アミノ酸及び他の化合物の略語は、他に示さない限り、その通常の使用、認識された略語、又はＩＵＰＡＣ−ＩＵＢ  Ｃｏｍｍｉｓｓｉｏｎ  ｏｎ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｎｏｍｅｎｃｌａｔｕｒｅ（（１９７２）Ｂｉｏｃｈｅｍ． １１：１７２６）である。
【００４９】
Ｂ．抗細菌剤
本発明は、ある種の細菌のＤＮＡ複製の開始を阻害するものである薬物を提供することによって、抗細菌剤のレパートリーを追加する。一つの側面において、本発明は、以下の式ＩＩ：
【００５０】
【化１２】
2005504123.tif 000013
【００５１】
を有する化合物、又は医薬的に受容可能なその塩を指向し、式中、ｎは、０−１の整数であり、そしてＲは、水素、低級アルキル、例えばＣ1-10アルキル、低級アリール、例えばＣ1-10アリール及び以下の式：
【００５２】
【化１３】
2005504123.tif 000014
【００５３】
からなる群から選出される。
低級アルキルは、アルカン、アルケン、アルキン及び環式脂肪族基を含むいずれもの適した脂肪族基であることができる。低級アルキルは、改変されていない炭素−水素基であることができ、或いは適した置換基、例えば、ハロゲン化物を含んでなることができる。低級アリールも、更に改変されていない炭素−水素基であることができ、或いは適した置換基、例えば、ハロゲン化物を含んでなることができる。
【００５４】
好ましくは、化合物は、以下の式ＩＩＩ（ＮＥ−２００１）：
【００５５】
【化１４】
2005504123.tif 000015
【００５６】
を有する。
Ｒ基は、芳香族基又はエステルを含んでなることができる。別の方法として、Ｒ基は、いずれもの芳香族基又はエステルを含まずになることができる。
【００５７】
本発明の化合物は、特定の立体異性体、例えば、Ｒ−又はＳ−配置であるか、或いはこれらの混合物、例えばラセミ混合物であることができる。本明細書中で企図される用語化合物は、化合物の全ての医薬的に活性な種、又はその溶液、或いはその混合物を包含する。本明細書中で企図される化合物は、更にこれらの化合物の水溶液、加水分解産物又はイオン化産物のような水和された変形をも包含し；そしてこれらの化合物は、異なった数の接続した水分子を含有することができる。
【００５８】
本発明の化合物は、いずれもの適した方法によって調製又は合成することができる。好ましくは、化合物を調製するために、以下のＦ項に例示した合成方法が使用される。
更に好ましくは、化合物、又はその医薬的に受容可能なその塩は、単独で、或いは医薬的に受容可能な担体又は賦形剤との組合せのいずれかの医薬組成物の形態で提供される。
【００５９】
本発明の化合物は、いずれもの適した酸とのこれらの医薬的に受容可能な塩として調製することができる。例えば、塩酸、臭化水素酸、硝酸、硫酸、及びリン酸、等のような無機酸を使用することができる。もう一つの例において、ギ酸、昨酸、プロパン酸、安息香酸、マレイン酸、フマル酸、コハク酸、酒石酸、クエン酸、等のような有機酸を使用することができる。なおもう一つの例において、メチルスルホン酸、エチルスルホン酸、等のようなアルキルスルホン酸を使用することができる。なおもう一つの例において、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、等のようなアリールスルホン酸を使用することができる。
【００６０】
Ｃ．治療及び予防法
もう一つの側面において、本発明は、細菌性感染に起因又はそれに関連する疾病若しくは疾患を治療或いは予防するための方法を指向し、この方法は、このような治療又は予防を必要とする、或いはそれが好ましい患者に、有効な量の細菌のＤＮＡ複製の開始を選択的に阻害する薬剤、又は医薬的に受容可能なその塩を投与し、それによって前記疾病又は疾患を治療或いは予防することを含んでなる。
【００６１】
好ましくは、疾病又は疾患は、Ｅ．ｃｏｌｉ若しくはＨ．ｐｙｌｏｒｉ感染に起因、或いはそれに関連する。更に好ましくは、細菌、特にＥ．ｃｏｌｉ若しくはＨ．ｐｙｌｏｒｉ感染に起因、或いはそれに関連する疾病又は疾患は、対象に、有効な量の以下の式ＩＩ：
【００６２】
【化１５】
2005504123.tif 000016
【００６３】
を有する化合物、又は医薬的に受容可能なその塩を投与することによって治療或いは予防され、式中、ｎは、０−１の整数であり、そしてＲは、水素、Ｃ1-10アルキル、Ｃ1-10アリール及び以下の式：
【００６４】
【化１６】
2005504123.tif 000017
【００６５】
からなる群から選出される。
上記Ｂ項に記載したものを含むいずれもの適した化合物又はその医薬的に受容可能なその塩を使用することができる。好ましくは、投与される化合物は、以下の式ＩＩＩ（ＮＥ−２００１）：
【００６６】
【化１７】
2005504123.tif 000018
【００６７】
を有する。
いずれもの対象を、本発明の方法によって治療することができる。好ましくは、哺乳動物、更に好ましくはヒトが、本発明の方法によって治療される。
【００６８】
本発明の方法は、Ｅ．ｃｏｌｉ若しくはＨ．ｐｙｌｏｒｉ感染に起因するいずれもの疾病又は疾患を治療或いは予防するために使用することができる。好ましくは、治療或いは予防されるＨ．ｐｙｌｏｒｉ感染に起因する疾病又は疾患は、慢性胃炎、胃十二指腸潰瘍、末端胃の腺癌、胃リンパ腫又は胃癌である。
【００６９】
本発明の方法は、いずれものＥ．ｃｏｌｉ若しくはＨ．ｐｙｌｏｒｉ系の感染に起因する疾病又は疾患を治療或いは予防するために使用することができる。例えば、以下のＨ．ｐｙｌｏｒｉ系に起因する疾病又は疾患を、治療又は予防することができる：
１：Ｗａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎｅｇａｔｉｖｅ  ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｔ  ｃｅｌｌｓ  ｂｙ  Ｈｅｌｏｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ  ａｓ  ａ  ｍｏｄｅｌ  ｆｏｒ  ｂａｃｔｅｒｉａｌ  ｓｔｒａｉｎ  ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ｂｙ  ｉｍｍｕｎｅ  ｅｖａｓｉｏｎ．Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．２００１  Ｊｕｌ  １５；１６７（２）：９２６−３４．
２：Ｐｅｅｋ  ＲＭ  Ｊｒ．，Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ  ｓｔｒａｉｎ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｓｉｇｎａｌ  ｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎ  ｃａｓｃａｄｅｓ  ｒｅｌａｔｅｄ  ｔｏ  ｇａｓｔｒｉｃ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ．Ｊ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔ  Ｌｉｖｅｒ  Ｐｈｙｓｉｏｌ．２００１  Ａｐｒ；２８０（４）：Ｇ５２５−３０．
３：Ｉｓｒａｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ  ｓｔｒａｉｎ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ  ｉｎ  ｇｅｎｅｔｉｃ  ｃｏｎｔｅｎｔ，ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ  ｙ  ｍｉｃｒｏａｒｒａｙ，ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ  ｈｏｓｔ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．２００１  Ｍａｒ；１０７（５）：６１１−２０．
４：Ｖｉｔｋｕｔｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｉｅｓ  ｏｆ  ｅｌｅｖｅｎ  ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ  ＤＮＡ  ｍｅｔｈｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅｓ  ｏｆ  Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ  ｔｒａｉｎ  ２６６９５．Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ．２００１  Ｊａｎ；１８３（２）：４４３−５０．
５：ＤｅＬｏｎｅｙ  ａｎｄ  Ｓｃｈｉｌｌｅｒ，Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａｎ  Ｉｎ  ｖｉｔｒｏ−ｓｅｌｅｃｔｅｄ  ａｍｏｘｉｃｉｌｌｉｎ−ｒｅｓｉｓｔａｎｔ  ｓｔｒａｉｎ  ｏｆ  Ｈｅｌｏｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ．Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．２０００  Ｄｅｃ；４４（１２）：３３６８−７３．
６：Ｈｕａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  ｓｉｎｇｌｅ  ｓｔｒａｉｎ  ｏｆ  Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ  ｆｒｏｍ  ｔｈｅ  ａｎｔｒｕｍ  ａｎｄ  ｂｏｄｙ  ｏｆ  ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌ  ｐａｔｉｅｎｔｓ．Ｅｕｒ  Ｊ  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ  Ｈｅｐａｔｏｌ．２０００  Ｏｃｔ；１２（１０）：１１２９−３４．
７：Ｏｃｃｈｉａｌｉｎｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ  ｏｆ  ｏｐｅｎ  ｒｅａｄｉｎｇ  ｆｒａｍｅｓ  ｏｆ  ｐｌａｓｔｉｃｉｔｙ  ｒｅｇｉｏｎ  ｏｆ  ｓｔｒａｉｎ  Ｊ９９  ｉｎ  Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ  ｓｔｒａｉｎ  ｉｓｏｌａｔｅｄ  ｆｒｏｍ  ｇａｓｔｒｉｃ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ａｎｄ  ｇａｓｔｒｉｔｉｓ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｉｎ  Ｃｏｓｔａ  Ｒｉｃａ．Ｉｎｆｅｃｔ  Ｉｍｍｕｎ．２０００  Ｎｏｖ；６８（１１）：６２４０−９．
８：Ｆａｓｓｂｉｎｄｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ  ａｎｄ  ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  ａｎａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｒｉｖｏｆｌａｖｉｎ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｇｅｎｅ  ｅｎｃｏｄｉｎｇ  ＧＰＴ  ｃｙｃｌｏｈｙｄｒｏｌａｓｅ  ＩＩ（ｒｉｂＡ），ＤＨＢＰ  ｓｙｎｔｈａｓｅ（ｒｉｂＢＡ），ｒｉｂｏｆｌａｖｉｎ  ｓｙｎｔｈａｓｅ（ｒｉｂＣ），ａｎｄ  ｒｉｂｏｆｌａｖｉｎ  ｄｅａｍｉｎａｓｅ／ｒｅｄｕｃｔａｓｅ（ｒｉｂＤ）ｆｒｏｍ  Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ  ｓｔｒａｉｎ  Ｐ１．ＦＥＭＳ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ  Ｌｅｔｔ．２０００  Ｏｃｔ  １５；１９１（２）：１９１−７／
９：Ｅｎｒｏｔｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ  ｓｔｒａｉｎ  ｔｙｐｅｓ  ａｎｄ  ｒｉｓｋ  ｏｆ  ｇａｓｔｉｃ  ｃａｎｃｅｒ：ａ  ｃａｓｅ−ｃｏｎｔｒｏｌ  ｓｔｕｄｙ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌ  Ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ  Ｐｒｅｖ．２０００  Ｓｅｐ；９（９）：９８１−５．
１０：Ｐｅｔｅｒｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｒｏｌｅ  ｏｆ  ｓｔｒａｉｎ  ｔｙｐｅ，ＡＧＳ  ｃｅｌｌ  ａｎｄ  ｆｅｔａｌ  ｃａｌｆ  ｓｅｒｕｍ  ｉｎ  Ｈｅｌｏｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ  ａｄｈｅｓｉｏｎ  ａｎｄ  ｉｎｖａｓｉｏｎ  ａｓｓａｙｓ．ＦＥＭＳ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｍｅｄ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．２０００  Ｓｅｐ；２９（１）：５９−６７．
１１：Ｍａｔｓｕｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｒｅｃｕｒｒｅｎｃｅ  ｏｆ  ｇａｓｔｉｃ  ｕｌｃｅｒ  ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  ｕｐｏｎ  ｓｔｒａｉｎ  ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ  ｉｎ  ｕｒｅａｓｅ  Ｂ  ｇｅｎｅ．Ｄｉｇ  Ｄｉｓ  Ｓｃｉ．２０００  Ｊａｎ；４５（１）：４９−５４．
１２：Ｑｕｅｉｒｏｚ  ｅｔ  ａｌ．，Ｆａｃｔｏｒｓ  ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ  ｂｙ  ａ  ｃａｇＡ−ｐｏｓｉｔｉｖｅ  ｓｔｒａｉｎ  ｉｎ  ｃｈｉｌｄｒｅｎ．Ｊ  Ｉｎｆｅｃｔ  Ｄｉｓ．２０００  Ｆｅｂ；１８１（２）：６２６−３０．
１３：Ｍｏｎｔｅｉｒｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ  ｏｆ  Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ  ｇｅｎｏｍｉｃ  ｓｔｒａｉｎ  ２６６９５  ａｎｄ  Ｊ９９，ｍｏｕｓｅ  ｍｏｄｅｌ  Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ  Ｓｙｄｎｅｙ  ｓｔｒａｉｎ，Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ  Ｐ４６６  ｃａｒｒｙｉｎｇ  ｓｉａｌｙｌ  Ｌｅｗｉｓ  Ｘ，ａｎｄ  Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ  ＵＡ９１５  ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ  Ｌｅｗｉｓ  Ｂ  ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ  ｌｏｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ  ｉｎｔｏ  ｇｌｙｃｏｔｙｐｅ  ｆａｍｉｌｉｅｓ．Ｅｕｒ  Ｊ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．２０００  Ｊａｎ；２６７（２）：３０５−２０．
１４：Ｐｅｅｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ  ｓｔｒａｉｎ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｇｅｎｏｔｙｐｅｓ  ａｎｄ  ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｇａｓｔｒｉｃ  ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ  ｃｅｌｌ  ｃｙｃｌｅ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．１９９９  Ｄｅｃ  １５；５９（２４）：６１２４−３１．
１５：Ａｓｐｉｎａｌｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ａ  ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ  ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ  ｏｆ  ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ  ｆｒｏｍ  ｔｗｏ  ｓｔｒａｉｎｓ  ｏｆ  Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ，ｏｆ  ｗｈｉｃｈ  ｏｎｅ  ｓｔｒａｉｎ（４４２）ｄｏｅｓ  ａｎｄ  ｔｈｅ  ｏｔｈｅｒ  ｓｔｒａｉｎ（４７１）ｄｏｅｓ  ｎｏｔ  ｓｔｉｍｕｌａｔｅ  ｐｅｐｓｉｎｏｇｅｎ  ｓｅｃｒｅｔｉｏｎ．Ｇｌｙｃｏｂｉｏｌｏｇｙ．１９９９  Ｎｏｖ；９（１１）：１２３５−４５．
１６：Ｅｎｒｏｔｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅ  ｏｆ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ｍｕｔａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｃｌｏｎａｌ  ｅｘｐａｎｓｉｏｎ  ｉｎ  Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ  ｍｕｌｔｉｐｌｅ−ｓｔｒａｉｎ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ：ａ  ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  ｒｉｓｋ  ｉｎ  ｃｌａｒｉｔｈｒｏｍｙｃｉｎ−ｂａｓｅｄ  ｔｈｅｒａｐｙ．Ｃｌｉｎ  Ｉｎｆｅｃｔ  Ｄｉｓ．１９９９  Ｊｕｎ；２８（６）：１３０５−７．
１７：Ｈｕａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｅｄｏｍｉｎａｎｃｅ  ｏｆ  ａ  ｓｉｎｇｌｅ  ｓｔｒａｉｎ  ｏｆ  Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ  ｉｎ  ｇａｓｔｒｉｃ  ａｎｔｒｕｍ．Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ．１９９９  Ｍａｒ；４（１）：２８−３２．
１８：ｖａｎ  Ｄｏｏｒｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｈｅｌｏｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ−ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｇａｓｔｒｉｔｉｓ  ｉｎ  ｍｉｃｅ  ｉｓ  ｈｏｓｔ  ａｎｄ  ｓｔｒａｉｎ  ｓｐｅｃｉｆｉｃ．Ｉｎｆｅｃｔ  Ｉｍｍｕｎ．１９９９  Ｊｕｎ；６７（６）：３０４０−６．
１９：ｖａｎ  Ｄｏｏｒｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｈｅ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｉｎ  ＣＤ１  ｍｉｃｅ  ｓｈｏｒｔｌｙ  ａｆｔｅｒ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ  ｗｉｔｈ  ａ  ＣａｇＡ＋／ＶａｃＡ＋Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ  ｓｔｒａｉｎ．Ｃｌｉｎ  Ｅｘｐ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９９９  Ｍａｒ；１１５（３）：４２１−７．
２０：Ｄｅ  Ｕｎｇｒｉａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｉｎｔｅｒｓｔｒａｉｎ  ｖａｒｉａｂｉｌｉｔｙ  ｏｆ  ｐＨＰＳ１，ａ  ｐｌａｓｍｉｄ  ｉｓｏｌａｔｅｄ  ｆｒｏｍ  ｔｈｅ  Ｓｙｄｎｅｙ  ｓｔｒａｉｎ（ＳＳ１）ｏｆ  Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ．Ｐｌａｓｍｉｄ．１９９９  Ｍａｒ；４１（２）：９７−１０９。
【００７０】
Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ感染に起因する疾病又は疾患の治療或いは予防において、本発明の化合物は、単独で使用することができるか、或いは抗Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ剤との組合せで使用することができる。いずれもの適した抗Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ剤を、本発明の化合物との組合せで使用することができる。このような例示的な抗Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ剤は、プロトンポンプ阻害剤（ＰＰＩ）、メトロニダゾール、クラリスロマイシン、アモキシシリン及びファモチジンを含む（Ｇａｓｃｈｗａｎｔｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ  Ｈｅｐａｔｏｌ．，１０（７）：５７９−８２（１９９８））。
【００７１】
好ましい態様において、本発明の化合物は、ＰＰＩ、メトロニダゾール、クラリスロマイシン、アモキシシリン及びファモチジンのような抗Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ剤を投与することなく使用される。更に好ましくは、本発明の化合物は、ＰＰＩ、メトロニダゾール、クラリスロマイシン、アモキシシリン又はファモチジン治療によって誘発されたＨ．ｐｙｌｏｒｉ耐性系に起因する疾病若しくは疾患を、治療或いは予防するために使用される。
【００７２】
単独の又は他の適した抗Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ剤との組合せにおける本発明の化合物は、いずれもの適した方法によって投与することができる。例えば、本発明の化合物又は医薬的に受容可能なその塩は、空洞内注射、皮下注射、静脈注射、筋肉内注射、皮内注入、経口投与、又は局所投与によって投与することができる。
【００７３】
具体的な態様において、本発明は、更に対象のＨ．ｐｙｌｏｒｉ感染の診断又は予測の段階を含んでなる。Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ感染を診断又は予測するためのいずれもの適した方法を使用することができる。予測又は診断は、その酵素、抗原及び抗体、核酸（類）のような、いずれかの又は全てのＨ．ｐｙｌｏｒｉタンパク質（類）の検出及び／又は同定、或いは他の病理学的又は臨床的マーカー及び兆候に基づくことができる。例えば、国際特許出願公開ＷＯ０１／４４８１５及び米国特許第５，５７１，６７４号中に開示されている診断又は予測法を使用することができる。
【００７４】
Ｄ．組合せ、キット及びコンビナトリアル法
なおもう一つの側面において、本発明は組合せを指向し、この組合せは、Ｅ．ｃｏｌｉ又はＨ．ｐｙｌｏｒｉのＤＮＡ複製の開始を選択的に阻害する薬剤又は医薬的に受容可能なその塩、及び抗Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ又は抗Ｅ．ｃｏｌｉ剤を含んでなる。
【００７５】
好ましくは、組合せは、以下の式ＩＩ：
【００７６】
【化１８】
2005504123.tif 000019
【００７７】
を有する化合物、又は医薬的に受容可能なその塩、及び抗Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ剤を含んでなり、式中、ｎは、０−１の整数であり、そしてＲは、水素、Ｃ1-10アルキル、Ｃ1-10アリール及び以下の式：
【００７８】
【化１９】
2005504123.tif 000020
【００７９】
からなる群から選出される。更に好ましくは、組合せ中に含まれる化合物は、以下の式ＩＩＩ（Ｎｅ−２００１）：
【００８０】
【化２０】
2005504123.tif 000021
【００８１】
を有する。
いずれもの適した抗Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ剤を、本発明の組合せ中に使用することができる。具体的な態様において、組合せ中に使用される抗Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ剤は、ＰＰＩ、メトロニダゾール、クラリスロマイシン、アモキシシリン又はファモチジンである。
【００８２】
もう一つの具体的な態様において、細菌性感染、例えばＥ．ｃｏｌｉ若しくはＨ．ｐｙｌｏｒｉ感染に起因する疾病又は疾患を治療或いは予防するための方法が提供され、この方法は、このような治療又は予防を必要とする、或いはそれが好ましい対象に、有効な量の上記の組合せ又は医薬的に受容可能なその塩を投与し、それによって前記の疾病又は疾患を治療或いは予防することを含んでなる。
【００８３】
なおもう一つの具体的な態様において、キットが提供され、このキットは、本発明の化合物、又は医薬的に受容可能なその塩、及び前記の化合物又は医薬的に受容可能な塩を、細菌性感染、例えばＥ．ｃｏｌｉ若しくはＨ．ｐｙｌｏｒｉ感染に起因する疾病又は疾患の治療或いは予防において使用するための指導書を含んでなる。
【００８４】
なお具体的な態様において、キットが提供され、このキットは、上記の組合せ、及び前記の組合せを、細菌性感染、例えばＥ．ｃｏｌｉ若しくはＨ．ｐｙｌｏｒｉ感染に起因する疾病又は疾患の治療或いは予防に使用するための指導書を含んでなる。
【００８５】
Ｅ．製剤及び投与量
本発明によれば、単独の又は他の薬剤、担体或いは賦形剤との組合せにおける本発明の化合物は、空洞内注射、皮下注射、静脈注射、筋肉内注射、皮内注射、経口又は局所投与のようないずれもの適した投与経路に対して処方することができる。方法は、添加された保存剤を伴う単位投与剤形、アンプル又は多数回投与容器の注射用投与のための製剤を使用することができる。製剤は、油性又は水性ベヒクル中の懸濁液、溶液又は乳剤のような形態をとることができ、そして懸濁、安定及び／又は分散剤のような調剤用剤を含むことができる。別の方法として、活性成分は、使用前に、適したベヒクル、滅菌の発熱物質を含まない水又は他の溶媒で再構成される粉末の形態であることができる。本発明における局所投与は、泡、ゲル、クリーム、軟膏、経皮貼布、又はペーストの使用を採用することができる。
【００８６】
本発明の使用のために採用することができる医薬的に受容可能な組成物及びこれらの投与方法は、制約されるものではないが、米国特許第５，７３６，１５４号；６，１９７，８０１Ｂ１号；５，７４１，５１１号；５，８８６，０３９号；５，９４１，８６８号；６，２５８，３７４Ｂ１号；及び５，６８６，１０２号中に記載されているものを含む。
【００８７】
治療又は予防における療法的投与量の規模は、治療される症状の重篤度及び投与の経路により変化するものである。投与量、及び恐らくは投与頻度は、更に個々の患者の年齢、体重、症状及び反応によって変化するものである。
【００８８】
担当医が、毒性又は副作用のために、如何に、そして何時、治療を終了、中断、又はより低い投与量に調節するかを知っているものであることは注意すべきである。対照的に、医師は、臨床的反応が充分ではない（毒性の副作用を除外して）場合、如何に、そして何時、治療を高い水準に調節するかを知っているものである。
【００８９】
いずれもの適した投与経路を使用することができる。投与剤形は、錠剤、トローチ、カシェ、分散物、懸濁液、溶液、カプセル、貼布、等を含む。Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅを参照されたい。
【００９０】
実際の使用において、単独の又は他の薬剤との組合せの本発明の化合物は、ベータ−シクロデキストリン及び２−ヒドロキシ−プロピル−ベータ−シクロデキストリンのような医薬的担体又は賦形剤との緊密な混合物中で活性であるように、慣用的な医薬配合技術によって混合することができる。担体は、投与、局所又は非経口のために好ましい幅広い製剤の形態をとることができる。静脈注射又は注入のような非経口投与剤形のための組成物の調製において、当業者にとって既知の、同様な医薬的媒体、水、グリコール、油、緩衝液、糖、保存剤、リポソーム、等を使用することができる。このような非経口組成物の例は、制約されるものではないが、５重量／容量％のデキストロース、正常な生理食塩水又は他の溶液を含む。単独の又は投与される他の薬剤との組合せの本発明の化合物の合計投与量は、約１ｍｌないし２０００ｍｌの範囲の静脈用流体のガラス瓶で投与することができる。希釈用流体の体積は、投与される合計投与量によって変化するものである。
【００９１】
本発明は、更に本発明の治療的投与計画を行うためのキットを提供する。このようなキットは、一つ又はそれより多い入れ物内に、療法的に有効な量の本発明の化合物を、単独で又は他の薬剤との組合せで医薬的に受容可能な形態で含んでなる。好ましい医薬的形態は、滅菌生理食塩水、デキストロース溶液、又は緩衝溶液、あるいは他の医薬的に受容可能な滅菌流体との組合せであるものである。別の方法として、組成物は、凍結乾燥又は乾燥することができ；この場合、キットは、所望により更に入れ物中に、複合体を再構成して、注射目的の溶液を形成するために、好ましくは滅菌された、医薬的に受容可能な溶液を含んでなる。例示的な医薬的に受容可能な溶液は、生理食塩水及びデキストロース溶液である。
【００９２】
もう一つの態様において、本発明のキットは、更に組成物を注射するための、好ましくは滅菌の形態に包装された、注射針又はシリンジ、及び／又は包装されたアルコールのパッドを含んでなる。所望により、医師又は患者による組成物の投与のための指導書が含まれる。
【実施例】
【００９３】
Ｆ．実施例
実施例１．一連の新規な抗Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ化合物の合成
慢性胃炎を持つ患者の胃の粘液内層における１９８３年のその発見以来、科学者はＨ．ｐｙｌｏｒｉの詳細な研究を行っている。Ｈ．ｐｙｌｏｒｉが胃及び十二指腸において潰瘍を起こすことができるという仮説を支持する強力な証拠が存在する。
【００９４】
Ｈ．ｐｙｌｏｒｉは、世界中の人口の概略６０％に感染し、そしてこれは、世界中でもっとも普通の胃腸の感染である。感染の結果として、あるヒトは、胃炎、消化性潰瘍、そして更に胃癌を発症する。これが、その外部表面にいくつかの鞭毛を持つ、らせん状の形で、厚く被覆された細菌であるために、これは、上部胃腸（ＧＩ）管の微小環境に非常によく適合し、そして根絶することが困難である。
【００９５】
本出願人は、ここに一連の化合物を合成することを意図し、そして以下の式：
【００９６】
【化２１】
2005504123.tif 000022
【００９７】
のＮＥ−２００１が、Ｈ．ｐｙｌｏｒｉに対して特異的な、そして選択的な作用を有し、そして従って多剤療法の更に経済効果のある方法において使用することができることを見出した。
【００９８】
合成スキーム
【００９９】
【化２２】
2005504123.tif 000023
【０１００】
実験の部
機器及び試薬
二連ポンプ、オンライン脱ガス器、自動試料採取器、温度調節されたカラム室、ダイオード−アレイ検出器を含むＨＰ１１００ＨＰＬＣ装置。カラムはＺＯＲＢＡＸ  ＯＤＳ（４．６×２５０ｍｍ）である。移動相は、メタノール／水＝９０：１０（０．１％酢酸）である。流速は１ｍＬ／分である。検出波は２５４ｎｍである。
【０１０１】
全ての溶媒は、ＨＰＬＣ級である。ＭＳスペクトルは、ＡＰＩ  ２０００  ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ装置によって得られる。1Ｈ−ＮＭＲデータは、のＡｎａｌｙｓｉｓ  Ｃｅｎｔｅｒ  ｏｆ  Ｅａｓｔ  Ｃｈｉｎａ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙから得られる。全ての出発物質は、市場において公的に入手可能である。
【０１０２】
４−（４−メチルベンジル）−４’−ヒドロキシビフェニル−４−カルボキシレートの合成
４−メチル−４’−ヒドロキシビフェニル−４−カルボキシレート
フラスコ中の、４−（４−ヒドロキシフェニル）安息香酸２１．４ｇ（０．１モル）の５００ｍＬの無水メタノール中の溶液に、Ａ４モレキュラーシーブを充填したソックスレー装置を設置した。次いで２．０ｍＬの濃硫酸を滴下した。混合物を７２時間還流した。溶媒を真空中で除去した後、残留油状物を１００ｍＬのトルエンに溶解し、水でｐＨ＝７まで洗浄した。有機層をＭｇＳＯ4で乾燥し、そして濾過した。得られた濾液にある量の活性炭を加え、そして還流で１０〜１５分間還流まで加熱し、そして濾過した。溶媒を除去して、白色の結晶、４−メチル−４’−ヒドロキシビフェニル−４−カルボキシレート１８．２ｇ（収率８０％）を得た。
【０１０３】
４−（４−メチルベンジル）−４’−ヒドロキシビフェニル−４−カルボキシレート
４−メチル−４’−ヒドロキシビフェニル−４−カルボキシレート９．０ｇ（４０．０ミリモル）、４−メチルベンジルアルコール２４．４ｇ（２００．０ミリモル）、ナトリウムメトキシド１．０ｇ（４．０ミリモル）、トルエン２０．０ｍＬのＮ2防止下の懸濁液を、還流で２．５時間加熱した。反応中に、還流下で得られたメタノールを取り出すために、更に２０．０ｍＬのトルエンを加えた。次いで室温に冷却し、１０ｍＬの酢酸及び氷４０ｇを加えて、ｐＨ＝５に調節した。得られた有機層を減圧下で濃縮して、溶媒及び過剰の４−メチルベンジルアルコールを除去した。冷却して、褐色の油状物を得た。静置して、粗製結晶をゆっくりと製造した。トルエン／ｎ−ヘキサンから再結晶して、白色の結晶、４−（４−メチルベンジル）−４’−ヒドロキシビフェニル−４−カルボキシレート７．３ｇ（収率７１％）を得た。
1Ｈ−ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）：δ  ２．３５（ｓ，３Ｈ），５．３５（ｓ，２Ｈ），６．９０（ｄ，２Ｈ），７．１５（ｄ，２Ｈ），７．３５（ｄ，２Ｈ），７．５０（ｄ，２Ｈ），７．６０（ｄ，２Ｈ），８．１０（ｄ，２Ｈ）。
【０１０４】
４−グアニジノアルキル安息香酸塩酸塩の合成
４−グアニジノメチル安息香酸塩酸塩
２ＮのＮａＯＨ溶液７２ｍＬを、メチルイソチオウレアジスルフェート２０．０ｇ（０．１４モル）の３６ｍＬの水中の溶液に、氷浴で冷却しながら加え、そして撹拌した。次いで１４０ｍＬの２ＮのＮａＯＨ溶液中の、２１．０ｇ（０．１３８モル）の４−アミノメチル安息香酸を滴下により加えた。混合物を一晩室温で放置し、そして次いで氷水中で１時間冷却した。沈殿した白色の結晶を濾過して除去し、そして冷水で洗浄した。濾液を温めた１ＮのＨＣｌに溶解し、そして不溶性物質を濾過によって除去した。溶液を真空中で濃縮して、結晶化させた。溶液を冷却した時点で無色のプリズム状物が結晶し、次いで濾過し、そして乾燥して、４−グアニジノメチル安息香酸塩酸塩２２．１ｇ（収率７０％）を得た。
ＬＣ／ＭＳ＝１９４（Ｍ＋Ｈ）。
【０１０５】
４−グアニジノ安息香酸塩酸塩
２ＮのＮａＯＨ溶液３６ｍＬを、メチルイソチオウレアジスルフェート１０．０ｇ（０．０７モル）の３６ｍＬの水中の溶液に、氷浴で冷却しながら加え、そして撹拌し、次いで２ＮのＮａＯＨ溶液７０ｍＬ中の、９．５ｇ（０．０６９モル）の４−アミノメチル安息香酸を滴下により加えた。混合物を一晩室温で放置し、そして次いで氷水中で１時間冷却した。沈殿した白色の結晶を濾過して除去し、そして冷水で洗浄した。濾液を温めた１ＮのＨＣｌに溶解し、そして不溶性物質を濾過によって除去した。溶液を真空中で濃縮して、結晶化させた。溶液を冷却した時点で無色のプリズム状物が結晶し、次いで濾過し、そして乾燥して、４−グアニジノ安息香酸塩酸塩１０．０ｇ（収率６７％）を得た。
ＬＣ／ＭＳ＝１８０（Ｍ＋Ｈ）。
【０１０６】
４−グアニジノアルキルベンゾエートの合成
４−（４−メチルベンジル）−４’−［グアニジノメチルベンゾイルオキシ］ビフェニル−４−カルボキシレート塩酸塩
４−メチルベンジル−４’−ヒドロキシビフェニル−４−カルボキシレート、２．４２ｇ（０．０１０モル）、４−グアニジノメチル安息香酸塩酸塩２．３ｇ（０．０１０モル）及びジシクロヘキシルカルボジイミド４．１ｇ（０．０２０モル）のピリジン１５０ｍｌ中の懸濁液を、室温で４８時間撹拌し、その後、不溶性物質を濾過により除去した。濾液を乾燥状態まで蒸発し、そして残留固体を０．１Ｎの塩酸（５０ｍＬ）及びエーテル（５０ｍＬ）で処理した。水層をエーテルで再び洗浄し、そして２０ｍｌまで濃縮し、得られた結晶をエタノール／ヘキサン中で再結晶して、４−（４−メチルベンジル）−４’［グアニジノメチルベンゾイルオキシ］ビフェニル−４−カルボキシレート塩酸塩２．９ｇ（収率５５％）を得た。
ＬＣ／ＭＳ＝４９４（Ｍ＋Ｈ）。
【０１０７】
４−（４−メチルベンジル）−４’−［グアニジノベンゾイルオキシ］ビフェニル−４−カルボキシレート塩酸塩
４−メチルベンジル−４’−ヒドロキシベンジル−４−カルボキシレート、２．４２ｇ（０．０１０モル）、４−グアニジノ安息香酸塩酸塩２．２ｇ（０．０１０モル）及びジシクロヘキシルカルボジイミド４．１ｇ（０．０２０モル）のピリジン１５０ｍｌ中の懸濁液を、室温で４８時間撹拌し、その後不溶性物質を濾過により除去した。濾液を乾燥状態まで蒸発し、そして残留固体を０．１Ｎの塩酸（５０ｍＬ）及びエーテル（５０ｍＬ）で処理した。水層をエーテルで再び洗浄し、そして２０ｍｌまで濃縮し、得られた結晶をエタノール／ヘキサン中で再結晶して、４−（４−メチルベンジル）−４’−［グアニジノベンゾイルオキシ］ビフェニル−４−カルボキシレート塩酸塩３．０ｇ（収率６０％）を得た。
ＬＣ／ＭＳ＝４８２（Ｍ＋Ｈ）。
【０１０８】
４−フェニル−４’−グアニジノメチルベンゾエート塩酸塩
４−グアニジノメチル安息香酸塩酸塩、２．３ｇ（０．０１０モル）、フェノール１．０ｇ（０．０１１モル）及びジシクロヘキシルカルボジイミド４．１ｇ（０．０２０モル）のピリジン（１５０ｍｌ）中の懸濁液を、室温で４８時間撹拌した。不溶性物質を濾過により除去した後、濾液を乾燥状態まで蒸発し、そして残留固体を０．１Ｎの塩酸（５０ｍｌ）で処理し、エーテルで洗浄した。水層を２０ｍｌまで濃縮し、得られた結晶を濾過し、そしてイソプロパノール／イソプロピルエーテルで洗浄して、４−フェニル−４’−グアニジノメチルベンゾエート塩酸塩２．３ｇ（収率７５％）を得た。
ＬＣ／ＭＳ＝２６９（Ｍ＋Ｈ）。
【０１０９】
４−フェニル−４’−グアニジノベンゾエート塩酸塩
４−グアニジノ安息香酸塩酸塩、２．２ｇ（０．０１０モル）、フェノール１．０ｇ（０．０１１モル）及びジシクロヘキシルカルボジイミド４．１ｇ（０．０２０モル）のピリジン（１５０ｍｌ）中の懸濁液を、室温で４８時間撹拌した。不溶性物質を濾過により除去した後、濾液を乾燥状態まで蒸発し、そして残留固体を０．１Ｎの塩酸（５０ｍｌ）で処理し、エーテルで洗浄した。水層を２０ｍｌまで濃縮し、得られた結晶を濾過し、そしてイソプロパノール／イソプロピルエーテルで洗浄して、４−フェニル−４’−グアニジノベンゾエート塩酸塩２．２ｇ（収率７５％）を得た。
ＬＣ／ＭＳ＝２５５（Ｍ＋Ｈ）。
【０１１０】
４−（４−ビフェニル）−４’−グアニジノメチルベンゾエート塩酸塩
４−グアニジノメチル安息香酸塩酸塩、２．３ｇ（０．０１０モル）、４−フェニルフェノール１．７ｇ（０．０１０モル）及びジシクロヘキシルカルボジイミド４．１ｇ（０．０２０モル）のピリジン（１５０ｍｌ）中の懸濁液を、室温で４８時間撹拌した。不溶性物質を濾過により除去した後、濾液を乾燥状態まで蒸発し、そして残留固体を０．１Ｎの塩酸（５０ｍｌ）で処理し、エーテルで洗浄した。水層を２０ｍｌまで濃縮し、得られた結晶を濾過し、そしてイソプロパノール／イソプロピルエーテルで洗浄して、４−（４−ビフェニル）−４’−グアニジノメチルベンゾエート塩酸塩２．５ｇ（収率６５％）を得た。
ＬＣ／ＭＳ＝３４６（Ｍ＋Ｈ）。
【０１１１】
４−（４−ビフェニル）−４’−グアニジノベンゾエート塩酸塩
４−グアニジノ安息香酸塩酸塩、２．２ｇ（０．０１０モル）、４−フェニルフェノール１．７ｇ（０．０１０モル）及びジシクロヘキシルカルボジイミド４．１ｇ（０．０２０モル）のピリジン（１５０ｍｌ）中の懸濁液を、室温で４８時間撹拌した。不溶性物質を濾過により除去した後、濾液を乾燥状態まで蒸発し、そして残留固体を０．１Ｎの塩酸（５０ｍｌ）で処理し、エーテルで洗浄した。水層を２０ｍｌまで濃縮し、得られた結晶を濾過し、そしてイソプロパノール／イソプロピルエーテルで洗浄して、４−（４−ビフェニル）−４’−グアニジノベンゾエート塩酸塩２．６ｇ（収率７０％）を得た。
ＬＣ／ＭＳ＝３３２（Ｍ＋Ｈ）。
【０１１２】
４−（４−メチルフェニル）−４’−グアニジノメチルベンゾエート塩酸塩
４−グアニジノメチル安息香酸塩酸塩、２．３ｇ（０．０１０モル）、４−メチルフェノール１．１ｇ（０．０１０モル）及びジシクロヘキシル−カルボジイミド４．１ｇ（０．０２０モル）のピリジン（１５０ｍｌ）中の懸濁液を、室温で４８時間撹拌した。不溶性物質を濾過により除去した後、濾液を乾燥状態まで蒸発し、そして残留固体を０．１Ｎの塩酸（５０ｍｌ）で処理し、エーテルで洗浄した。水層を２０ｍｌまで濃縮し、得られた結晶を濾過し、そしてイソプロパノール／イソプロピルエーテルで洗浄して、４−（４−メチルフェニル）−４’−グアニジノメチルベンゾエート塩酸塩２．４ｇ（収率７５％）を得た。
ＬＣ／ＭＳ＝２８４（Ｍ＋Ｈ）。
【０１１３】
４−（４−メチルフェニル）−４’−グアニジノベンゾエート塩酸塩
４−グアニジノ安息香酸塩酸塩、２．２ｇ（０．０１０モル）、４−メチルフェノール１．１ｇ（０．０１０モル）及びジシクロヘキシル−カルボジイミド４．１ｇ（０．０２０モル）のピリジン（１５０ｍｌ）中の懸濁液を、室温で４８時間撹拌した。不溶性物質を濾過により除去した後、濾液を乾燥状態まで蒸発し、そして残留固体を０．１Ｎの塩酸（５０ｍｌ）で処理し、エーテルで洗浄した。水層を２０ｍｌまで濃縮し、得られた結晶を濾過し、そしてイソプロパノール／イソプロピルエーテルで洗浄して、４−（４−メチルフェニル）−４’−グアニジノベンゾエート塩酸塩２．２ｇ（収率７５％）を得た。
ＬＣ／ＭＳ＝２７０（Ｍ＋Ｈ）。
【０１１４】
参考文献及び注記：
１．米国特許第、４，３４８，４１０号
２．Ｊ．Ｏ．Ｃ．ｖｏｌ．３３（１９８５）６５２
３．Ｗｅｎｒｅｎ  ｅｔ  ａｌ．Ｒｅａｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｄｒｕｇｓ  ｓｙｎｔｈｓｉｓ．Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｉｎｄｕｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｃｈｉｎａにより刊行
４．Ｃｈｅｎ  ｆｅｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．Ｓｙｎｔｈｓｉｓ  ｍｅｔｈｏｄｓ  ｏｆ  ｏｒｇａｎｉｃ  ｄｒｕｇ．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  ｓｃｉｅｎｃｅ  ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ｏｆ  Ｃｈｉｎａにより刊行。
【０１１５】
実施例２．ＧＭＣＨＡ誘導体の活性
ＧＭＣＨＡの異なった修飾は、Ｅ．ｃｏｌｉの増殖に異なった阻害効果を有することが見出された（表１）。例えば、フェニルエステル（ＰＨ０１）誘導体は、Ｅ．ｃｏｌｉの増殖に対して＞２００μＭのＩＣ50を有するが、４−メチルフェニル（ＰＨ０２）、４−エチルフェニル（ＰＨ０３）、４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル（ＰＨ０４）、及び４−ビフェニル（ＢＰ０１）における各種の修飾は、＞２００から１６７、４５、そして２６μＭにそれぞれ減少した。有意には、これらの化合物の効果は、Ｅ．ｃｏｌｉに限定されない。（Ｉｒｉｓａｗａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｌ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．，１６：１２１１−１２１５（１９９３）；及びＫａｔｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｅｎｚｙｍｅ  Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ，８：２５−３７（１９９４））。この群の分子の個々の一員の相対的効果は、標的細胞がＥ．ｃｏｌｉ、Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ、Ｓ．ａｕｒｅｕｓ又はＳ．ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓであることにかかわらず、同一のままである（表２）。それぞれの場合、最も有効な化合物は、４−ビフェニル（ＢＰ０１）誘導体のままである。興味あることには、特定の化合物のＩＣ50が、異なった細菌種に対して有意に変化し、試験されたもの間で殆ど対数値２の差を持つ。例えば、４−ビフェニルエステル（ＢＰ０１）において、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓは、Ｂａｃｉｌｌｕｓより対数値１敏感であり、これは、今度はＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａより対数値１敏感であるように見受けられた。
表１．Ｅ．ｃｏｌｉの増殖及びプロテイナーゼＩｎ活性に対するＧＭＣＨＡ誘導体の効果
【０１１６】
【表１】
2005504123.tif 000024
【０１１７】
表２．異なった細菌種の増殖に対するＧＭＣＨＡの各種の芳香族エステルの効果
【０１１８】
【表２】
2005504123.tif 000025
【０１１９】
図１は、同調されたＥ．ｃｏｌｉ細胞中の細胞増殖、ＤＮＡ合成及びプロテイナーゼＩｎ活性に対するＧＭＣＨＡ誘導体の効果を例示する。左側、化合物ＰＨ０４の非存在における同調された細胞の増殖。（ａ）、生存細胞数及び［3Ｈ］チミジン取込みは、５分間隔で決定し、そしてプロテイナーゼＩｎ活性は、３０秒間隔で決定した。時間ゼロは、細胞分裂の最初の兆候に設定した。（ｂ）及び（ｃ）、それぞれ−３０分及び＋３０分におけるプロテイナーゼＩｎの出現。Ｐ、Ｑ、及びＲは、細胞分裂期間、細胞分裂及び染色体複製開始間の期間、並びに染色体複製開始及び細胞分裂間の期間をそれぞれを表す。右側、２７μＭの化合物ＰＨ０４の存在中の同調された細胞の増殖。（ａ）、阻害剤は−８分において加えられた（矢印）。試料は上記に記載された通りである。ＰＨ０４を加えない場合、Ｐ、Ｑ、Ｒ１、及びＲ２の期間は、それぞれ１５、１５、１５、及び１０分であったが、ＰＨ０４を加えた場合、ＤＮＡ合成は、３０分において開始され、そしてＤＮＡ合成活性は、６５分において倍加された。Ｒ１期は、１５から３５分に延長された。（ｂ）、約３０分における対照細胞としてのプロテイナーゼ活性の出現、しかし延長された半減期を有していた。
【０１２０】
ＧＭＣＨＡ誘導体は、本来ｉｎ  ｖｉｔｒｏの合成トリプシンの阻害剤として同定されたために、本出願人は、トリプシン様プロテアーゼがＥ．ｃｏｌｉ抽出物中に検出することができるか否かを、Ｂｏｃ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−ＮＨ−Ｍｅｃ（Ｋａｔｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，２１０：１００７−１０１４（１９９２））を蛍光発生基質として使用して研究した。本出願人は、単一の活性を検出し、そしてこれを均質まで精製した。これは、８工程で達成され、２，８８０倍の精製及び１５パーセントの収率であった。精製された酵素は、約６６ｋＤａの分子質量及び４．９の等電位点を有していた。最適ｐＨ、各種の合成基質に対する加水分解活性、及び各種の既知のタンパク質分解阻害剤の効果に基づいて、このＥ．ｃｏｌｉプロテアーゼは、哺乳動物のトリプシン又は既知の細菌の酵素のいずれとも非常に異なった特異性を有する。最も興奮させることは、精製された酵素の各種のＧＭＣＨＡ誘導体に対する感受性が、そのＥ．ｃｏｌｉに対するその阻害効果と正確に平行であることの発見である（表１）。この後者の発見は、このプロテアーゼが、この群の増殖阻害化合物のための、Ｅ．ｃｏｌｉ中の分子的目標であることを示唆することができる。本出願人は、このプロテアーゼの発現が、染色体ＤＮＡ複製の開始の直前に限定される（図２、左側）ことを同調されたＥ．ｃｏｌｉ培養を使用して証明することを継続した。（Ｋａｔｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｌ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．，１６：５５２−５５７（１９９３））。更に、ＤＮＡ合成が開始した後の４−ｔｅｒｔ−ブチルフェニル（ＰＨ０４）誘導体の添加は、その回の細胞分裂には影響しないが、しかし次のサイクルを妨害した。然しながら、ＤＮＡ複製の開始に先立つ阻害剤の添加は、その同じ回の細胞分裂の延長となった（図１、右側）。これらの結果は、いっしょに、このプロテアーゼが、Ｅ．ｃｏｌｉの染色体の複製の開始に恐らく直接関与し、そしてこれが、ＧＭＣＨＡの芳香族エステルによる阻害の標的であることを示唆する。本出願人は、この抗素をプロテイナーゼＩｎと命名し、そしてこの遺伝子は、ｐｒｌＣと同一であった。ｐｒｌＣ遺伝子は、６７ｋＤａタンパク質を、プロテイナーゼＩｎ及びオリゴペプチダーゼＡに対する二つの活性部位でコードした。（Ｊｉａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１２４：９８０−９８５（１９９８））。プロテイナーゼＩｎ様プロテイナーゼは、Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓから部分的に精製され、そしてこれは、ＧＭＣＨＡの各種のエステルによって石のように阻害され、そしてこれらの効果は、細胞の増殖に対するその阻害効果と相関していた。（Ｉｒｉｓａｗａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｌ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．，１６：１２１１−１２１５（１９９３））。これらの結果は、各種の細胞におけるプロテイナーゼＩｎ又はプロテイナーゼＩｎ様プロテイナーゼの偏在する出現を強く示唆し、そしてこのプロテイナーゼに対する強力な阻害剤が、新しい種類の抗細菌剤として有用である。
【０１２１】
実施例３．ＮＥ−２００１の活性
本明細書中で報告された新規な化合物４−（４−メチルベンジル）−４’−［グアニジノメチルベンジルオキシ］ビフェニル−４−カルボキシレート、ＮＥ−２００１は、Ｈ．ｐｙｌｏｒｉの増殖を特異的に阻害し、そして各種のｐＨにおいてＨ．ｐｙｌｏｒｉを完全に根絶した。
【０１２２】
いくつかの物質の、Ｈ．ｐｙｌｏｒｉの９個の系（ＡＴＣＣ４３５０４、ＡＴＣＣ４３６２９、ＡＴＣＣ４３５２６、ＡＴＣＣ４３５７９、ＡＴＣＣ４９５０３、ＡＴＣＣ５１１１０、ＡＴＣＣ５１６５２、ＡＴＣＣ５１６５３、ＡＴＣＣ５１９３２）に対するＭＩＣ（μｇ／ｍｌ）を試験した。ＮＥ−２００１は、０．１０ないし０．４８μｇ／ｍｌの最小阻害濃度（ＭＩＣ）を有していた。概要を以下の表３に示す。
表３．Ｈ．ｐｙｌｏｒｉに対するＭＩＣの範囲の概要
【０１２３】
【表３】
2005504123.tif 000026
【０１２４】
図２は、化合物ＮＥ−２００１の抗Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ効果を例示する。殺細菌効果を、各種の濃度（０．１５−２．５０μｇ／ｍｌ）で１６８時間実験した。代表的な曲線を図２に示した。ＮＥ−２００１は、Ｈ．ｐｙｌｏｒｉに対して強力な殺細菌効果を示した。≧１．２５μｇ／ｍｌの濃度において、３時間、観察可能な有機体は検出されなかった。ＮＥ−２００１は、全ての試験されたｐＨ範囲（ｐＨ３−７）においてＨ．ｐｙｌｏｒｉに対して殺細菌効果を示した（図３参照）。
【０１２５】
図３は、各種のｐＨ値における化合物ＮＥ−２００１の抗Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ効果を例示する。ＮＥ−２００１に対する天然の耐性突然変異の出現頻度を試験した（表４）。明らかに、全てのＮＥ−２００１の試験濃度（０．３０−１．２０μｇ／ｍｌ）において天然の耐性突然変異は出現しなかった。
表４．ＮＥ−２００１に対する天然の耐性突然変異の出現頻度
【０１２６】
【表４】
2005504123.tif 000027
【０１２７】
ＮＥ−２００１の単一投与毒性に対する研究を、オスのマウスで経口的に行った。２０００ｍｇ／ｋｇのＮＥ−２００１の投与量（０．５％のメチルセルロース懸濁液として調製された最大投与量）において、マウスの死は起こらず、そして全てのマウスの体重は増加した。一般的な毒性も、いずれの場合も観察されなかった。明らかに、ＮＥ−２００１は、安全である（表５）。
表５．マウスにおけるＮＥ−２００１の単一投与毒性
【０１２８】
【表５】
2005504123.tif 000028
【０１２９】
上記の実施例は、例示的な目的のみのために含められ、そして本発明の範囲を制約するものではない。変更は当業者にとって明白であるものであり、本発明は、特許請求項の範囲によってのみ制約されることを意図している。
【図面の簡単な説明】
【０１３０】
【図１】図１は、同調されたＥ．ｃｏｌｉ細胞中の、細胞増殖、ＤＮＡ合成及びプロテイナーゼＩｎ活性に対する、化合物ＰＨ０４の効果を例示する。
【図２】図２Ａ及び２Ｂは、化合物ＮＥ−２００１の抗Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ効果を例示する。
【図３Ａ】図３Ａは、各種のｐＨ値における化合物ＮＥ−２００１の抗Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ効果を例示する。
【図３Ｂ】図３Ｂは、各種のｐＨ値における化合物ＮＥ−２００１の抗Ｈ．ｐｙｌｏｒｉ効果を例示する。
【図１】
2005504123.tif 000038
【図２】
2005504123.tif 000039
【図３Ａ】
2005504123.tif 000040
【図３Ｂ】
2005504123.tif 000041
【国際公開パンフレット】
2005504123.tif 000042
2005504123.tif 000043
2005504123.tif 000044
2005504123.tif 000045
2005504123.tif 000046
2005504123.tif 000047
2005504123.tif 000048
2005504123.tif 000049
2005504123.tif 000050
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【国際調査報告】
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