(57)【要約】本発明は、ＨＩＶ感染およびＡＩＤＳを処置するためにサイトカインアンタゴニストを使用する方法である。特に、本発明は、サイトカイントラップならびに抗ＩＬ−４抗体および抗ＩＬ−１３抗体などのＩＬ−４／ＩＬ−１３サイトカインアンタゴニストを使用してＨＩＶ感染およびＡＩＤＳを処置する方法である。本発明はまた、ＩＬ−４／ＩＬ−１３サイトカインアンタゴニストを同時投与することでＨＩＶワクチンの効力を増大させる工程も包含する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
哺乳動物におけるＨＩＶ感染を処置する方法であって、ＨＩＶ感染が処置されるように、サイトカインアンタゴニストを該哺乳動物に投与する工程を包含する、方法。
【請求項２】
前記ＨＩＶ感染が急性ＨＩＶ感染である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記ＨＩＶ感染が慢性ＨＩＶ感染である、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記哺乳動物がヒトである、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記サイトカインアンタゴニストが、ＩＬ−４／ＩＬ−１３トラップ、ＩＬ−４トラップ、ＩＬ−１３トラップ、抗ＩＬ−４抗体、および抗ＩＬ−１３抗体からなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記投与が、皮下投与、筋肉内投与、鼻腔内投与、動脈内投与、静脈内投与、局所的投与、経膣投与、経皮投与、または経肛門投与である、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
ヒトにおけるＨＩＶワクチンの効力を増大させる方法であって、ＨＩＶワクチン接種の効力を増大させるように、サイトカインアンタゴニストを該ヒトに投与する工程を包含する、方法。
【請求項８】
前記サイトカインアンタゴニストが、ＩＬ−４／ＩＬ−１３トラップ、ＩＬ−４トラップ、ＩＬ−１３トラップ、抗ＩＬ−４抗体、および抗ＩＬ−１３抗体からなる群から選択される、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記投与が、皮下投与、筋肉内投与、鼻腔内投与、動脈内投与、静脈内投与、局所的投与、経膣投与、経皮投与、または経肛門投与である、請求項７に記載の方法。
【請求項１０】
ヒトにおいてＨＩＶワクチン接種により誘導された免疫応答をＴｈ１型の応答に変更する方法であって、ＨＩＶワクチン接種により誘導された免疫応答をＴｈ１型の応答に変更するように、サイトカインアンタゴニストと該ワクチンを該ヒトに同時投与する、方法。
【請求項１１】
前記サイトカインアンタゴニストが、ＩＬ−４／ＩＬ−１３トラップ、ＩＬ−４トラップ、ＩＬ−１３トラップ、抗ＩＬ−４抗体、および抗ＩＬ−１３抗体からなる群から選択される、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記投与が、皮下投与、筋肉内投与、鼻腔内投与、動脈内投与、静脈内投与、局所的投与、経膣投与、経皮投与、または経肛門投与である、請求項１０に記載の方法。
【請求項１３】
ＨＩＶ感染したヒトにおいてＴｈ２型の免疫応答をＴｈ１型の免疫応答に変更する方法であって、Ｔｈ２型の応答をＴｈ１型の応答に変更するように、サイトカインアンタゴニストを該ヒトに投与する工程を包含する、方法。
【請求項１４】
前記サイトカインアンタゴニストが、ＩＬ−４／ＩＬ−１３トラップ、ＩＬ−４トラップ、ＩＬ−１３トラップ、抗ＩＬ−４抗体、および抗ＩＬ−１３抗体からなる群から選択される、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記投与が、皮下投与、筋肉内投与、鼻腔内投与、動脈内投与、静脈内投与、局所的投与、経膣投与、経皮投与、または経肛門投与である、請求項１３に記載の方法。
【請求項１６】
ＨＩＶ感染したヒトにおいてＴｈ２型の免疫応答を阻害する方法であって、該ＴＨ２型の応答を阻害するように、サイトカインアンタゴニストを該ヒトに投与する工程を包含する、方法。
【請求項１７】
前記サイトカインアンタゴニストが、ＩＬ−４／ＩＬ−１３トラップ、ＩＬ−４トラップ、ＩＬ−１３トラップ、抗ＩＬ−４抗体、および抗ＩＬ−１３抗体からなる群から選択される、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記投与が、皮下投与、筋肉内投与、鼻腔内投与、動脈内投与、静脈内投与、局所的投与、経膣投与、経皮投与、または経肛門投与である、請求項１６に記載の方法。
【請求項１９】
ＩＬ−４媒介性の生物学的活動およびＩＬ−１３媒介性の生物学的活動の活動を阻止し得る薬剤を投与して、ＨＩＶ感染が処置されることによる、ＨＩＶ感染の処置する方法。
【請求項２０】
前記薬剤がサイトカインアンタゴニストである、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記サイトカインアンタゴニストが、ＩＬ−４／ＩＬ−１３トラップ、ＩＬ−４トラップ、ＩＬ−１３トラップ、抗ＩＬ−４抗体、および抗ＩＬ−１３抗体からなる群から選択される、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記投与が、皮下投与、筋肉内投与、鼻腔内投与、動脈内投与、静脈内投与、局所的投与、経膣投与、経皮投与、または経肛門投与である、請求項１９に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、米国仮特許出願第６０／３７７，２６０号（２００２年５月１日提出）および同第６０／４２６，２７０号（２００２年１１月１４日提出）（これらの内容は、本明細書において参考として援用される）の利益を主張する。
【０００２】
（発明の分野）
本発明の分野は、ＨＩＶ感染およびＡＩＤＳを処置するためにサイトカインアンタゴニストを使用する方法である。特に、本発明の分野は、ＩＬ−４／ＩＬ−１３サイトカインアンタゴニストを使用してＨＩＶ感染およびＡＩＤＳを処置する方法である。本発明の分野はまた、ＩＬ−４／ＩＬ−１３サイトカインアンタゴニストを同時投与することでＨＩＶワクチンの効力を増大させる工程も包含する。
【背景技術】
【０００３】
（背景）
ＡＩＤＳ（後天性免疫不全症候群）は、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）によって引き起こされる。大部分の科学者は、ＨＩＶは、ＣＤ４＋Ｔ細胞を直接的に殺すか、またはその正常な機能に干渉すること、および、個人の免疫機能を弱める他の事象を誘発することによって、ＡＩＤＳを引き起こすと考えている。ＨＩＶ特異的な細胞毒性Ｔ−リンパ球（ＣＴＬ）およびT−ヘルパー細胞が、ウイルスの複製の制御において主要な役割を果たすと広く考えられている（ＧｈａｎｄｉおよびＷａｌｋｅｒ  ２００２  Ａｎｎｕ  Ｒｅｖ  Ｍｅｄ  ２００２；５３：１４９−７２；ＡｌｔｆｅｌｄおよびＷａｌｋｅｒ  ２００１  ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  ８（７）８８１−８８４）によって総説される）。さらに、中和抗体が、ウイルス制御において明らかに従属的な役割を果たしている（Ｐｏｉｇｎａｒｄ  Ｐら、１９９９  Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  １０、４３１−４３８)。実際に、ＨＩＶは、主に、免疫回避の機構を提供し得るインビボの非中和性の抗体応答を引き起こす（Ｃ．Ｇｒｕｎｄｎｅｒら  ２００２  ９ｔｈ  Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ  ｏｎ  Ｒｅｔｒｏｖｉｒｕｓｅｓ  ａｎｄ  Ｏｐｐｏｒｔｕｎｉｓｔｉｃ  Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ、Ｆｅｂ  ２４−２８、Ａｂｓｔｒａｃｔ  １０５）。
【０００４】
ＨＩＶ感染を処置するための多くの薬物が、各１０年にわたって承認されている。これらの薬剤としては、ウイルスの複製の初期の段階を中断するヌクレオシドアナログ逆転写酵素インヒビター（ＮＲＴＩ）が挙げられる。このクラスの薬剤に含まれるのは、ジドブジン（ＡＺＴ）、ジダノシン（ｄｉｄａｎｏｓｉｎｅ）（ｄｄＩ）、スタブジン（ｓｔａｖｕｄｉｎｅ）（Ｄ４Ｔ）、ラミブジン（ｌａｍｉｖｕｄｉｎｅ）（３ＴＣ）およびアバカビル（ａｂａｃａｖｉｒ）スクシネートである。これらの薬剤は、ＨＩＶ感染および増殖によって生じる全身性のウイルス負荷を軽減し、従って、日和見感染症の頻度を軽減する。重要なことに、それらは、伝播の速度を軽減するようであるが、他の個体へのＨＩＶの伝播を予防しない。非ヌクレオシドアナログ逆転写酵素インヒビター（ＮＮＲＴＩ）（例えば、ネビラピン（ｎｅｖｉｒａｐｉｎｅ）およびエファビレンツ（ｅｆａｖｉｒｅｎｚ））もまた、他のレトロウイルス薬物と組み合わせて使用するために利用可能である。別のクラスの薬物は、プロテアーゼインヒビターと呼ばれ、生活環の後期でのウイルスの複製を中断する。それらとしては、リトナビル、サクイニビル、インディナビル、アンプレナビル、ロピナビル、およびネルフィナビルが挙げられる。最後に、融合インヒビターと呼ばれる真新しいクラスの薬物が、使用を承認されたばかりである（Ｔ−２０またはフゼオン（ｆｕｚｅｏｎ））。ＨＩＶは、各クラスの薬物に対して耐性となり得るので、組合せ処置が、このウイルスを有効に抑制するために必要である。現在利用可能な抗レトロウイルス薬剤は、ＨＩＶ感染を治療せず、それらはすべて、重症となり得る副作用を有する。多くの薬剤が、ＨＩＶ感染が進行する傾向にある日和見感染症の人の処置を助けるために利用可能である。これらの薬物としては、サイトメガロウイルスの眼への感染を処置するために使用されるホスカネットおよびガンシクロビル、酵母および他の真菌感染を処置するために使用されるフルコナゾール（ｆｌｕｃｏｎａｚｏｌｅ）、ならびにＰｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓ  ｃａｒｉｎｉｉ肺炎（ＰＣＰ）を処置するために使用されるＴＭＸ／ＳＭＸまたはペンタミジンが挙げられる。カポージ肉腫または他の癌を発症したＨＩＶ感染した個体は、放射線、化学療法、またはαインターフェロン注射（遺伝学的に操作された天然に存在するタンパク質）によって処置される。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
明らかに、ウイルス耐性を受けにくく、かつ、最小の副作用を有する、ＨＩＶ感染およびＡＩＤＳの処置のためのさらなる治療法を開発する必要性が存在する。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
（発明の簡単な要旨）
１つの局面において、本発明は、ＨＩＶ感染が処置されるようにサイトカインアンタゴニストを哺乳動物に投与する工程を包含する、哺乳動物におけるＨＩＶ感染を処置する方法を特徴とする。好ましい実施形態において、哺乳動物は、ＨＩＶ感染の処置を必要とするヒトである。別の局面において、本発明は、サイトカインアンタゴニストを被験体に投与する工程を包含する、ＨＩＶ感染の危険がある被験体を処置する工程を特徴とする。
【０００７】
別の実施形態において、サイトカインアンタゴニストはＩＬ−４／ＩＬ−１３トラップである。また別の実施形態において、サイトカインアンタゴニストは、ＩＬ−４トラップ、ＩＬ−１３トラップ、あるいは抗ＩＬ−４抗体または抗ＩＬ−１３抗体である。
【０００８】
１つの実施形態において、ＨＩＶ感染は、慢性感染である。慢性感染期は、ＨＩＶに対する複数の抗体および限定的なＴｈ１／ＣＴＬ応答によって特徴付けられる。別の実施形態において、ＨＩＶ感染は、急性感染である。急性感染期において、抗体はまだ発生しておらず、適切に処置した場合、個体は、長期の非進行者（すなわちＡＩＤＳを発症しない）となるより大きな機会を有する。
【０００９】
本発明の方法の別の実施形態において、ＨＩＶ感染は、ＩＬ−４媒介性およびＩＬ−１３媒介性の生物学的効果を阻止することによって処置される。
【００１０】
第２の局面において、本発明は、ＨＩＶワクチン接種の効力が増大されるように、ＩＬ−４／ＩＬ−１３アンタゴニストをヒトに投与する工程を包含する、ヒトにおけるＨＩＶワクチン接種の効力を増大させる方法を特徴とする。特定の実施形態において、ＩＬ−４／ＩＬ−１３アンタゴニストは、ＩＬ−４／ＩＬ−１３トラップである。また他の特定の実施形態において、サイトカインアンタゴニストは、ＩＬ−４トラップ、ＩＬ−１３とラップ、あるいは抗ＩＬ−４抗体または抗ＩＬ−１３抗体である。
【００１１】
第３の局面において、本発明は、ＨＩＶワクチン接種誘導性の免疫応答がＴｈ１型の応答へと変化されるように、ＩＬ−４／ＩＬ−１３アンタゴニストおよびワクチンをヒトに投与する工程を包含する、ヒトにおけるＨＩＶワクチン接種誘導性免疫応答をＴｈ１型の応答へと変化させる方法を特徴とする。特定の実施形態において、ＩＬ−４／ＩＬ−１３アンタゴニストは、ＩＬ−４／ＩＬ−１３トラップである。別の実施形態において、サイトカインアンタゴニストは、ＩＬ−４トラップ、ＩＬ−１３とラップ、あるいは抗ＩＬ−４抗体または抗ＩＬ−１３抗体である。別の実施形態は、同時投与または交互投与のいずれかによって、抗レトロウイルス治療と組み合わせてサイトカインアンタゴニスト（例えば、ＩＬ−４／ＩＬ−１３トラップ）を投与する工程を包含する、ＨＩＶまたはＡＩＤＳを処置する方法である。
【００１２】
第４の局面において、本発明は、Ｔｈ２型の応答がＴｈ１型の応答に変化されるように、ヒトにＩＬ−４／ＩＬ−１３アンタゴニストを投与する工程を包含する、ＨＩＶに感染したヒトにおいてＴｈ２型の免疫応答をＴｈ１型の免疫応答に変化させる方法を特徴とする。特定の実施形態において、ＩＬ−４／ＩＬ−１３アンタゴニストは、ＩＬ−４／ＩＬ−１３トラップである。他の特定の実施形態において、サイトカインアンタゴニストは、ＩＬ−４トラップ、ＩＬ−１３とラップ、あるいは抗ＩＬ−４抗体または抗ＩＬ−１３抗体である。
【００１３】
関連する第５の局面において、本発明は、Ｔｈ２型の応答が阻害されるように、ヒトにＩＬ−４／ＩＬ−１３アンタゴニストを投与する工程を包含する、ＨＩＶに感染したヒトにおいてＴｈ２型の免疫応答を阻害する方法を特徴とする。特定の実施形態において、ＩＬ−４／ＩＬ−１３アンタゴニストは、ＩＬ−４／ＩＬ−１３トラップであり、また他の特定の実施形態において、サイトカインアンタゴニストは、ＩＬ−４トラップ、ＩＬ−１３とラップ、あるいは抗ＩＬ−４抗体または抗ＩＬ−１３抗体である。
【００１４】
本発明のさらなる実施形態は、投与が、皮下投与、筋肉内投与、鼻腔内投与、包膜内投与、動脈内投与、静脈内投与、局所的投与、経膣投与、経皮投与、または経肛門投与である方法を含む。
【００１５】
第６の局面において、本発明は、薬学的に受容可能なキャリアと共に本発明のＩＬ−４／ＩＬ−１３アンタゴニストを含む、薬学的組成物を特徴とする。他の目的および利点は、続く詳細な説明を検討することから明らかとなる。
【００１６】
（発明の詳細な説明）
本発明の方法を記載する前に、本発明は、特定の方法および記載する実験条件に限定されず、よってこれらの方法および条件が変化し得ることが理解されるべきである。本明細書で使用される用語は、特定の実施形態のみを記載する目的のためであり、制限的であることを企図しないこともまた理解されるべきである。本発明の範囲は、添付した特許請求の範囲のみに限定されるためである。
【００１７】
本明細書および添付した特許請求の範囲において使用される場合、単数形「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」は、文脈が明確に別に示さない限り、複数についての言及を含む。従って、例えば、「ａ  ｍｅｔｈｏｄ」という言及は、本明細書に記載される、および／または本開示などを読めば当業者にとって明らかとなる、１つ以上の方法および／または工程の種類を含む。
【００１８】
別に定義しない限り、本明細書において使用される全ての技術用語および科学用語は、本発明が属する分野の当業者によって一般的に理解されているものと同じ意味を有する。本明細書において記載するものと類似または等価の任意の方法および材料が、本発明の実施または試験において使用され得るが、好ましい方法および材料をここに記載する。本明細書で言及する全ての刊行物は、引用する刊行物と関連して方法および／または材料を記載するために、本明細書に参考として援用される。
【００１９】
（全体的な説明）
本発明の目的は、サイトカインが関連する疾患または障害（ＨＩＶ感染およびＡＩＤＳを含む）の処置におけるサイトカインアンタゴニストの使用である。特に、本出願人は、患者にサイトカインアンタゴニストを投与する工程を包含するＨＩＶ感染およびＡＩＤＳの処置のための新規の治療法を、本明細書に記載する。このサイトカインアンタゴニストは、Ｔｈ−１型の免疫応答を促進すること、特に、治療利益を提供し得るＨＩＶ特異的なＣＴＬ応答を促進することによって、免疫応答を調節するように機能する。詳細には、本出願人は、ＩＬ−４／ＩＬ−１３アンタゴニストを投与する工程を包含する、ＨＩＶ感染およびＡＩＤＳを処置するための方法を、本明細書に記載する。
【００２０】
ＨＩＶ疾患は、免疫機能の漸次的な衰退によって特徴付けられる。最も注目すべきこととして、感染の代表的な過程の間に、ＣＴ４＋Ｔ細胞と呼ばれる重要な免疫細胞が不能化され、殺される。これらの細胞は、時々「Ｔ−ヘルパー細胞」とも呼ばれ、免疫応答において主要な役割を果たしており、免疫系の他の細胞へ信号を伝達し、それらの機能を行わせる。
【００２１】
健康で非感染のヒトは、通常は、血液１立方ミリメートル（ｍｍ３）あたり８００〜１，２００個のＣＴ４＋Ｔ細胞を有する。ＨＩＶ感染の間、個人の血液中のこれらの細胞の数は、進行的に減少する。個人のＣＴ４＋Ｔ細胞数が、２００／ｍｍ３未満に低下する場合、彼または彼女は、日和見感染症および癌に特に脆弱となり、これはＨＩＶ感染の最終段階であるＡＩＤＳを象徴する。強いＨＩＶ特異的ＣＴＬは、この疾患を首尾よく制御する主な機構であり得る。
【００２２】
そのため、免疫系を促進し、Ｔｈ１／ＣＴＬ応答を引き起こす薬剤は、ＨＩＶ疾患の処置において治療利益を提供し得る。さらに、抗体ベースのＴｈ２応答を減少させることもまた、ＨＩＶ疾患の処置においてさらなる全体的な治療利益を提供し得る。
【００２３】
本発明は、ＩＬ−４媒介性またはＩＬ−１３媒介性の活動のいずれかまたは両方を阻止または阻害し得る薬剤の投与が、ＨＩＶ感染およびＡＩＤＳの免疫制御のために必要とされるＴｈ１応答を提供する、という本出願人の新規の知見に部分的に基づく。これらの知見は、ＩＬ−４媒介性および／またはＩＬ−１３媒介性の活動を阻止または阻害し得る薬剤が、これらの効果を有することが示されたことを最初に示す。従って、本発明は、ＩＬ−４および／またはＩＬ−１３ブロッカー、特にＩＬ−４／ＩＬ−１３トラップを投与することによって、哺乳動物においてＨＩＶ感染およびＡＩＤＳを処置するための新規の方法を提供する。特定の実施形態において、ＩＬ−４媒介性の活動を阻止し得る薬剤が投与される。別の特定の実施形態において、ＩＬ−１３媒介性の活動を阻止し得る薬剤が投与される。第３の特定の実施形態において、ＩＬ−４媒介性とおよびＩＬ−１３媒介性の活動の両方を阻止し得る薬剤が投与される。第４の特定の実施形態において、ＩＬ−４媒介性の活動を阻止し得る薬剤は、抗ＩＬ−４抗体である。第５の特定の実施形態において、ＩＬ−１３媒介性の活動を阻止し得る薬剤は、抗ＩＬ−１３抗体である。
【００２４】
ＨＩＶ感染に対する強いＴｈ１応答は、ＨＩＶ感染およびＡＩＤＳを究極的な制御のために必要であると考えられる。実際に、ウイルス感染に対するＴｈ２応答へのＴｈ１応答の不均等は、悪い予後と相関がある。ＩＬ−４およびＩＬ−１３は、Ｔｈ２応答の強力なメディエーターである。本明細書において、本出願人は、ＩＬ−４媒介性またはＩＬ−１３媒介性の活動およびそれによって生じるＴｈ２応答を阻止し、従って、ＨＩＶ感染およびＡＩＤＳの免疫制御のために必要であるＴｈ１応答を提供する新規の生物学的薬剤を記載する。
【００２５】
サイトカイントラップと名付けるこれらの薬剤は、サイトカインレセプター構成要素とＩｇＧのＦｃ部分との間の融合物である。サイトカイントラップは、レセプター−Ｆｃ融合コンセプトの新規の延長物であり、それらは１つのサイトカインに結合する２つの異なるレセプター構成成分を含み、１つの構成成分の試薬によって提供されるものよりも劇的に増大した親和性を有するブロッカーの生成を生じる。実際に、本明細書に記載されるサイトカイントラップは、これまでに記載されてきたものの中で、最も強力なサイトカインブロッカーである。簡潔に言うと、ＩＬ−４／ＩＬ−１３トラップは、ヒトＩＬ−１３Ｒαの細胞外ドメイン、それに続いてヒトＩＬ−４Ｒαの細胞外ドメイン、それに続いてヒトＩｇＧのヒンジ領域の一部、ＣＨ２ドメインおよびＣＨ３ドメインの一部によって構成される。あるいは、ＩＬ−４／ＩＬ−１３トラップは、ヒトＩＬ−１４Ｒαの細胞外ドメイン、それに続いてヒトＩＬ−１３Ｒαの細胞外ドメイン、それに続いてヒトＩｇＧのヒンジ領域の一部、ＣＨ２ドメインおよびＣＨ３ドメインの一部によって構成される。ＩＬ−４トラップ、ＩＬ−１３トラップおよびＩＬ−４／ＩＬ−１３トラップのより詳細な記載については、Ｒｅｇｅｎｅｒｏｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．名のＰＣＴ国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ９９／２２０４号（１９９９年９月２２日提出）（ＷＯ公開番号第００／１８９３２号）を参照のこと（その内容は、その全体が本明細書に参考として援用される）。これらのＩＬ−４トラップ、ＩＬ−１３トラップおよびＩＬ−４／ＩＬ−１３トラップは、それぞれの循環するサイトカインに結合し、こららのサイトカインを不活性にする。ＩＬ−４／ＩＬ−１３トラップは、それぞれ２０ｐＭおよび４ｐＭのＫｄ値でＩＬ−４およびＩＬ−１３に結合し、従って、サイトカインのシグナル伝達を阻止する。
【００２６】
ＩＬ−４およびＩＬ−１３は、Ｔｈ２抗体免疫応答を媒介する。そのため、そのトラップは、ＩＬ−４媒介性およびＩＬ−１３媒介性の生物学的効果を阻止することによって、Ｔｈ２応答を阻害し、免疫系をＴｈ１／ＣＴＬベースの応答へと傾ける。この種類の調節が、最もよくＨＩＶの複製を制御するものであるので、これらのトラップは、ＨＩＶ感染およびＡＩＤＳの処置における治療利益を提供する。
【００２７】
このサイトカインアンタゴニストは、単一の治療としてか、あるいは高度に活性な抗レトロウイルス治療（ＨＡＡＲＴ）と組み合わせるか、またはワクチンベースのＨＩＶ治療と組み合わせて、有益であり得る。このコンセプトを支持するように、ＨＩＶ感染に抵抗性の被験体は、ＩＬ−４産生に対して全体性低応答（ｇｌｏｂａｌ  ｈｙｐｏｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅｎｅｓｓ）に関連している（Ｔｒｉｖｅｄｉら、２００１  ＦＡＳＥＢ  １５：１７９５−９７）。さらに、ＨＩＶに感染し、かつＩＬ−４遺伝子のすぐ上流に多型を有する被験体は、この多型を有さない被験者と比較して、軽減したウイルス負荷に関連している。しかし、この場合において、この多型がＩＬ−４を阻止しているのか否かについては不明である。本出願人は、ＩＬ−４および／またはＩＬ−１３を阻止する方法が、ＨＩＶ感染およびＡＩＤＳの処置における治療利益を提供し得ることを主張する。
【００２８】
ＨＩＶ感染は、感染の急性期および慢性期を有する。大部分の感染した個体は、慢性期である。慢性期は、ＨＩＶに対する複数の抗体および限定的なＴｈ１／ＣＴＬ応答によって特徴付けられる。急性期において、抗体はまだ発生しておらず、個体は、適切に処置された場合、長期の非進行者となる、すなわちＡＩＤＳを発症しないより大きな機会を有する。サイトカインアンタゴニスト（例えば、ＩＬ−４トラップ、ＩＬ−１３トラップまたはＩＬ−４／ＩＬ−１３トラップ、あるいは抗ＩＬ−４抗体または抗ＩＬ−１３抗体）による処置が、感染の急性期にある個体が、長期の非進行者となる確率を増大させ得ることは、可能である。
【００２９】
本発明の方法は、受容可能な薬学的キャリア（以下を参照のこと）中の治療的有効量のサイトカインアンタゴニスト（好ましくは、ＩＬ−４トラップ、ＩＬ−１３トラップまたはＩＬ−４／ＩＬ−１３トラップ、あるいは抗ＩＬ−４抗体または抗ＩＬ−１３抗体）の薬学的組成物を、必要とする被験体、すなわちＨＩＶ感染またはＡＩＤＳに罹患した被験体に投与する工程を包含する。いくつかの特定の実施形態において、サイトカインアンタゴニスト（好ましくはＩＬ−４／ＩＬ−１３アンタゴニスト、より好ましくはＩＬ−４／ＩＬ−１３トラップ）が、ＨＩＶ感染およびＡＩＤＳの症状を経験している患者を処置するために使用される。
【００３０】
（定義）
用語「治療的有効用量」によって、投与の所望の効果を起こす用量を意味する。正確な用量は、処置の目的に依存し、公知の技術を使用して当業者が確認可能である（例えば、Ｌｌｏｙｄ（１９９９）Ｔｈｅ  Ａｒｔ，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｉｎｇを参照のこと）。
【００３１】
用語「ブロッカー」または「インヒビター」によって、化学的または生理学的な反応または応答を遅延または予防する物質を意味する。一般的なブロッカーまたはインヒビターとしては、アンチセンス分子、抗体、アンタゴニスト、トラップ、およびそれらの誘導体が挙げられるが、これらに限定されない。より詳細には、ＩＬ−４およびＩＬ−１３のブロッカーまたはインヒビターの例は、ＩＬ−４レセプターおよびＩＬ−１３レセプターベースのアンタゴニストであり、これには、ＩＬ−４／ＩＬ−１３トラップが挙げられるが、これに限定されない。ＩＬ−４レセプター／ＩＬ−１３レセプターベースのアンタゴニスト（ＩＬ−４／ＩＬ−１３トラップを含む）の完全な記載については、Ｒｅｇｅｎｅｒｏｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．名の米国特許第６，４７２，１７９号を参照のこと（その内容は、その全体が本明細書に参考として援用される）。
【００３２】
本明細書において使用される場合、用語「ＨＩＶ感染」は、一般的に、レトロウイルスのヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）ファミリー（ＨＩＶ  Ｉ、ＨＩＶ  ＩＩ、ＨＩＶ  ＩＩＩ（または、ＨＴＬＶ−ＩＩＩ、ＬＡＶ−１、ＬＡＶ−２としても公知）などが挙げられるが、これらに限定されない）による宿主、特にヒト宿主の感染を含む。「ＨＩＶ」は、本明細書において、ＨＩＶファミリーの任意の株、形態、サブタイプ、クレイド（ｃｌａｄｅ）およびバリエーションをいうために使用され得る。従って、ＨＩＶ感染を処置するとは、レトロウイルスのＨＩＶファミリーのいずれかの保有者である個人、または活性のＡＩＤＳと診断された個人の処置、およびこれらの個人のＡＩＤＳ関連状態の処置または予防を含む。ＨＩＶの保有者は、当該分野で公知の任意の方法によって同定され得る。例えば、個人は、その個人が、抗ＨＩＶ抗体陽性、すなわちＨＩＶ陽性であったこと、またはＡＩＤＳの症状を有していることに基づいて、ＨＩＶ保有者として同定され得る。つまり、「ＨＩＶ感染を処置する」は、ＨＩＶ感染の進行のいくつかの段階のうちの任意の１つの段階にある患者を処置することとして理解されるべきである。ＨＩＶ感染の進行のいくつかの段階としては、例えば、急性の初期感染症状（無症状であり得るか、または、熱、倦怠、下痢および神経学的症状（例えば、頭痛）を伴うインフルエンザ様の疾患に関連し得る）、無症状感染（循環ＣＤ４＋Ｔ細胞の数の漸次的減少を伴う長期の潜伏期間である）、およびＡＩＤＳ（より深刻なＡＩＤＳ定義疾患および／または有効な免疫機能に適合性であるレベル未満までの循環ＣＤ４細胞数の減少によって規定される）が挙げられる。さらに、「ＨＩＶ感染を処置または予防する」もまた、疑わしい過去のＨＩＶへの曝露（例えば、ＨＩＶ汚染された血液への接触、輸血、体液の交換、感染した個人との「安全でない」セックス、不慮の針挿入、汚染された装置での刺青または鍼治療の受容、あるいは妊娠、分娩の間、またはそのすぐ後の母から赤ん坊へのウイルスの伝達による）の後で、疑わしいＨＩＶ感染を処置することを含む。用語「ＨＩＶ感染を処置する」はまた、ＨＩＶ感染を有すると診断されていないが、ＨＩＶ感染の危険性があると考えられる個人を処置することを含む。
【００３３】
用語「ＡＩＤＳを処置する」とは、より深刻なＡＩＤＳ定義疾患および／または有効な免疫機能に適合性であるレベル未満までの循環ＣＤ４細胞数の減少を示す個人を処置することを意味する。用語「ＡＩＤＳを処置する」もまた、ＡＩＤＳに関連する状態を処置することを含み、ＡＩＤＳに関連する状態とは、例えば、ＡＩＤＳ関連症候群（ＡＲＣ）、進行性全身性リンパ節腫（ＰＧＬ）、抗ＨＩＶ抗体陽性状態、およびＨＩＶ陽性状態、ＡＩＤＳ関連神経学的状態（例えば、痴呆または熱帯性不全対麻痺）、カポージ肉腫、特発性血小板減少性紫斑病、および関連する日和見感染症（例えば、ニューモシスティスカリニ肺炎、ミコバクテリアによる結核、食道カンジダ症、脳のトキソプラスマ症、ＣＭＶ網膜炎、ＨＩＶ関連脳障害、ＨＩＶ関連るいそう症候群など）のような、ＡＩＤＳまたはＨＩＶ感染に付随または関連する障害または疾患を意味する。
【００３４】
従って、用語「ＡＩＤＳを予防する」とは、本明細書で使用される場合、ＨＩＶ感染を有するか、あるいは、ＨＩＶ感染を有すると疑われるか、またはＨＩＶ感染の危険性がある患者において、ＡＩＤＳ（より深刻なＡＩＤＳ定義疾患および／または有効な免疫機能に適合性であるレベル未満までの循環ＣＤ４細胞数の減少によって特徴付けられる）および／またはＡＩＤＳ関連状態に発展することを予防することを意味する。
【００３５】
本発明のサイトカインアンタゴニストは、治療的にまたは予防的に、必要とされるかまたは、ＨＩＶ感染およびＡＩＤＳの危険性がある被験体に使用され得る。例えば、それらは、感染した被験体のウイルス負荷を軽減するために使用され得る。さらに、本発明のサイトカインアンタゴニストは、ＨＩＶに感染した被験体において、ＡＩＤＳの進行を阻害するために使用され得る。なおさらに、サイトカインアンタゴニストは、例えば、ＨＩＶへの曝露または疑われる曝露の後に、感染を予防するために予防的に使用され得る。
【００３６】
ＨＩＶ感染およびＡＩＤＳへの進行をインビボで測定するための標準的な方法が、被験体が、本発明のＨＩＶ特異的な融合タンパク質での処置に対して陽性に応答するか否かを決定するために使用され得る。例えば、本発明のサイトカインアンタゴニストでの処置の後、被験体のＴ細胞数をモニターし得る。Ｔ細胞の増大は、被験体が、サイトカインアンタゴニストの投与によって利益を得ていることを示す。この方法および当該分野で公知の他の方法は、本発明の方法が、被験体のＨＩＶ感染およびＡＩＤＳを処置する上で効果的である程度を決定するために使用され得る。
【００３７】
（アンチセンス核酸）
さらなる実施形態において、ＩＬ−４媒介性およびＩＬ−１３媒介性の活動は、ＩＬ−４およびＩＬ−１３アンチセンス核酸の使用によって阻止または阻害される。本発明は、ＩＬ−４およびＩＬ−１３または各々のその部分をコードする遺伝子またはｃＤＮＡに対してアンチセンスである、少なくとも６つのヌクレオチドを含む核酸の治療的用途または予防的用途を提供する。本明細書で使用される場合、ＩＬ−４およびＩＬ−１３の「アンチセンス」核酸とは、ＩＬ−４またはＩＬ−１３のいずれかをコードするＲＮＡ（好ましくはｍＲＮＡ）の一部とのいくらかの配列相補性を利用してハイブリダイズし得る核酸をいう。アンチセンス核酸は、ＩＬ−４またはＩＬ−１３のいずれかをコードするｍＲＮＡのコード領域および／または非コード領域に対して相補的であり得る。このようなアンチセンス核酸は、ＩＬ−４およびＩＬ−１３の発現を防止する化合物として有用性を有し、ＨＩＶ感染およびＡＩＤＳの処置において使用され得る。本発明のアンチセンス核酸は、二本鎖または一本鎖のオリゴヌクレオチド、ＲＮＡまたはＤＮＡ、あるいはそれらの改変体または誘導体であり、そして細胞に直接的に投与され得るか、または外因性の導入配列の転写によって細胞内で産生され得る。
【００３８】
本発明はさらに、治療的有効量のＩＬ−４およびＩＬ−１３のアンチセンス核酸、および薬学的に受容可能なキャリア、ビヒクルまたは希釈剤を含む薬学的組成物を提供する。
【００３９】
ＩＬ−４およびＩＬ−１３のアンチセンス核酸は、少なくとも６ヌクレオチドであり、好ましくは、６〜５０オリゴヌクレオチドの範囲のオリゴヌクレオチドである。特定の局面において、オリゴヌクレオチドは、少なくとも１０ヌクレオチド、少なくとも１５ヌクレオチド、少なくとも１００ヌクレオチド、または少なくとも２００ヌクレオチドである。オリゴヌクレオチドは、ＤＮＡまたはＲＮＡ、あるいはキメラ混合物、あるいはそれらの誘導体または改変バージョンであり得、一本鎖または二本鎖であり得る。さらに、アンチセンス分子は、核酸模倣物であるポリマー（例えば、ＰＮＡ、モルホリノオリゴ、およびＬＮＡ）であり得る。他の型のアンチセンス分子としては、ｓｉＲＮＡとして公知の短い二本鎖ＲＮＡ、および短いヘアピンＲＮＡ、ならびに長いｄｓＲＮＡ（＞５０ｂｐだが、通常は≧５００ｂｐ）が挙げられる。
【００４０】
（短い干渉ＲＮＡ）
別の実施形態において、ＩＬ−４またはＩＬ−１３の発現は、短い干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）によって、ＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）、すなわち転写後遺伝子サイレンシング（ＰＴＧＳ）を介して阻害される（例えば、Ｋｅｔｔｉｎｇら（２００１）Ｇｅｎｅｓ  Ｄｅｖｅｌｏｐ．１５：２６５４−２６５９を参照のこと）。ｓｉＲＮＡ分子は、ｓｉＲＮＡ分子によって繋がれる領域内でｍＲＮＡ分子を切断することによる破壊のために、相同なｍＲＮＡ分子を標的化し得る。従って、相同なＩＬ−４またはＩＬ−１３のｍＲＮＡを標的化し、切断し得るｓｉＲＮＡは、ＨＩＶ感染およびＡＩＤＳの処置するのに有用である。
【００４１】
（阻害的リボザイム）
別の実施形態において、ＨＩＶ感染およびＡＩＤＳは、リボザイム分子を使用してＩＬ−４活性およびＩＬ−１３活性のレベルを減少させることにより、このような疾患を被る被験体において処置され得る。リボザイム分子は、ＩＬ−４またはＩＬ−１３をコードする遺伝子のｍＲＮＡ転写物を触媒的に切断するように設計され、標的遺伝子のｍＲＮＡの翻訳を防止し、そのために遺伝子産物の発現を防止する。
【００４２】
リボザイムは、ＲＮＡの特定の切断を触媒し得る、酵素的ＲＮＡ分子である。リボザイムの作用機構は、相補的標的ＲＮＡへのリボザイム分子の配列特異的ハイブリダイゼーション、それに続くエンドヌクレアーゼ的切断事象を含む。リボザイム分子の組成物は、標的遺伝子のｍＲＮＡに相補的な１つ以上の配列を含まなければならず、かつｍＲＮＡ切断を担う周知の触媒配列を含まなければならない。この配列について、例えば、米国特許第５，０９３，２４６号を参照のこと。部位特異的認識配列でｍＲＮＡを切断するリボザイムは、ＩＬ−４またはＩＬ−１３をコードするｍＲＮＡを破壊するために使用され得るが、ハンマーヘッドリボザイムの使用が好ましい。ハンマーヘッドリボザイムは、標的ｍＲＮＡと相補的塩基対を形成する隣接領域によって指示される位置でｍＲＮＡを切断する。唯一必要なことは、標的ｍＲＮＡが、以下の２塩基配列を有することである：５’−ＵＧ−３’。ハンマーヘッドリボザイムの構築および生産は、当該分野で周知である。本発明のリボザイムもまた、ＲＮＡエンドリボヌクレアーゼ（例えば、Ｔｅｔｒａｈｙｍｅｎａ  ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌａにおいて天然に存在するＲＮＡエンドリボヌクレアーゼ（ＩＶＳ、またはＬ−１９  ＩＶＳ  ＲＮＡとして公知））を含む（本明細書では、以降は「Ｃｅｃｈ型リボザイム」）。Ｃｅｃｈ型リボザイムは、標的ＲＮＡの切断が行われた後、標的ＲＮＡ配列を加水分解する、８塩基対の活性部位を有する。本発明は、ＩＬ−４およびＩＬ−１３をコードする遺伝子中に存在する８塩基対の活性部位配列を標的化するこれらのＣｅｃｈ型リボザイムを含む。
【００４３】
（ＩＬ−４およびＩＬ−１３タンパク質に対する抗体の産生）
別の実施形態において、ＨＩＶ感染およびＡＩＤＳは、ＩＬ−４またはＩＬ−１３に対する抗体を使用することによってＩＬ−４活性およびＩＬ−１３活性のレベルを減少させることにより、このような疾患を被る被験体において処置され得る。用語「抗体」は、本明細書で使用される場合、抗原に特異的に結合し、そして認識する、免疫グロブリン遺伝子の由来の骨格領域またはそのフラグメントを含むポリペプチドをいう。認識されている免疫グロブリン遺伝子は、κ定常領域、λ定常領域、α定常領域、γ定常領域、δ定常領域、ε定常領域、およびμ定常領域、ならびに無数の免疫グロブリン可変領域遺伝子を含む。軽鎖は、κまたはλのいずれかとして分類される。重鎖は、γ、μ、α、δまたはεとして分類され、それによって、代わりにそれぞれ、免疫グロブリンのクラスＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＤおよびＩｇＥを規定する。各ＩｇＧクラス内に、異なるアイソタイプ（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２など）が存在する。代表的には、抗体の抗原結合領域が、結合特異性および結合親和性を決定する上で最も重要である。
【００４４】
例示的な免疫グロブリン（抗体）の構造単位は、テトラマーを含む。各テトラマーは、２つの同一対のポリペプチド鎖からなり、各対は、１つの軽鎖（約２５ｋＤ）と１つの重鎖（約５０〜７０ｋＤ）を有する。各鎖のＮ末端は、主に抗原認識を担う、約１００〜１１０またはそれ以上のアミノ酸の可変領域を規定する。用語「可変軽鎖」（ＶＬ）および可変重鎖（ＶＨ）とは、それぞれ、これらの軽鎖および重鎖いう。
【００４５】
抗体を調製する方法は当該分野で公知である。例えば、Ｋｏｈｌｅｒ＆Ｍｉｌｓｔｅｉｎ（１９７５）Ｎａｔｕｒｅ  ２５６：４９５−４９７；Ｈａｒｌｏｗ＆Ｌａｎｅ（１９８８）Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ、Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂ．、Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ、ＮＹを参照のこと。目的の抗体の重鎖および軽鎖をコードする遺伝子は、細胞からクローン化され得、例えば、モノクローナル抗体をコードする遺伝子は、ハイブリドーマからクローン化され得、組換えモノクローナル抗体を生産するために使用され得る。モノクローナル抗体の重鎖と軽鎖をコードする遺伝子ライブラリーもまた、ハイブリドーマまたはプラスマ細胞から作製され得る。重鎖遺伝子産物と軽鎖遺伝子産物のランダムな組合せにより、異なる抗原特異性を有する抗体の大規模なプールが産生される。一本鎖の抗体または組換え抗体を産生するための技術（米国第４，９４６，７７８号；米国第４，８１６，５６７号）は、本発明の融合タンパク質および方法において使用される抗体を産生するように適応され得る。また、トランスジェニックマウスまたは他の生物体（例えば、他の哺乳動物）は、ヒト抗体またはヒト化抗体を発現するために使用され得る。あるいは、ファージディスプレイ技術が、選択した抗原に特異的に結合する、抗体およびヘテロマーのＦａｂフラグメントを同定するために使用され得る。
【００４６】
（抗体スクリーニングおよび選択）
好ましい抗体のスクリーニングおよび選択は、当該分野で公知の種々の方法によって行われ得る。標的抗原に特異的なモノクローナル抗体の存在についての最初のスクリーニングは、例えば、ＥＬＩＳＡベースの方法の使用によって行われ得る。２度目のスクリーニングは、好ましくは、本発明の多特異性の融合タンパク質の構築において使用するための所望のモノクローナル抗体を同定および選択するために行われる。２度目のスクリーニングは、当該分野で公知の任意の適切な方法で行われ得る。「バイオセンサー改変支援プロファイリング」（「ＢｉａＭＡＰ」）と名付けられた１つの好ましい方法が、同時継続中のＵＳＳＮ  ６０／４２３，０１７（２００２年１１月１日提出）に記載されており、これは本明細書においてその全体が参考として詳細に援用される。ＢｉａＭＡＰは、ハイブリドーマのクローンの容易な同定を可能とし、所望の特徴を有するモノクローナル抗体を産生することを可能とする。より詳細には、モノクローナル抗体を、抗体：抗原相互作用の評価に基づいて異なるエピトープ関連グループに分別する。
【００４７】
（投与方法）
本発明は、本発明の有効量の薬剤を被験体に投与する工程を包含する、処置の方法を提供する。好ましい局面において、薬剤は、実質的に純粋化されている（例えば、効果を制限するか、または所望されない副作用を起こす物質を実質的に含まない）。被験体は、好ましくは動物（例えば、ウシ、ブタ、ウマ、ヒヨコ、ネコ、イヌなど）であり、好ましくは哺乳動物であり、そして最も好ましくはヒトである。
【００４８】
種々の送達システムが公知であり、本発明の薬剤を投与するために使用され得る。このような送達システムは、例えば、リポソームへのカプセル化、微粒子、微小カプセル、化合物を発現し得る組換え細胞、レセプター媒介性エンドサイトーシス（例えば、ＷｕおよびＷｕ、１９８７、Ｊ．Ｂｉｏｌ，Ｃｈｅｍ．２６２：４４２９−４４３２を参照のこと）、レトロウイルスまたは他のベクターの一部としての核酸の構築などである。導入方法は、経腸的または非経口的であり得、皮内経路、筋肉内経路、腹膜内経路、静脈内経路、皮下的経路、鼻腔内経路、硬膜内経路、および経口経路が挙げられるが、これらに限定されない。化合物は、任意の簡便な経路によって（例えば、注入またはボーラス注射によって、上皮または粘膜皮膚ライン（例えば、口粘膜、直腸および腸管粘膜など）を介した吸収によって）投与され得、他の生物学的活性な薬剤と共に投与され得る。投与は、全身的または局所的であり得る。投与は、急性または慢性（すなわち、毎日、毎週、毎年など）であり得る。このような投与は、単独または他の薬剤との組合せであり得る。さらに、任意の適切な経路（脳室内注射および髄腔内注射を含む；脳室内注射は、例えばレザバー（例えば、オマヤレザバー）に取り付けられた脳室内カテーテルによって容易になり得る）によって、本発明の薬学的組成物を中枢神経系に導入することが望ましくあり得る。肺投与もまた、例えば、吸入器またはネブライザーの使用によって、およびエアロゾル化した薬剤による処方によって、行われ得る。
【００４９】
特定の実施形態において、本発明の薬学的組成物を、処置を必要とする領域に局所的に投与することが望ましくあり得る；これは、例えば（限定ではない）、手術の間の局所的注入、局所的な適用（例えば、注射によって、カテーテル手段によって、または移植手段（例えば、膜（例えば、シアラスティック（ｓｉａｌａｓｔｉｃ）膜）、繊維、または商業的皮膚置換物を含む、多孔性材料、非多孔性材料、またはゼラチン様材料）の移植によって）によって達成され得る。さらに、このような組織または器官の移植の前に、組織または器官の薬剤で前処置することが望ましくあり得る。
【００５０】
別の実施形態において、活性薬剤は、ビヒクル、特にリポソームに入って送達され得る（Ｌａｎｇｅｒ（１９９０）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４９：１５２７−１５３３を参照のこと）。なお別の実施形態において、活性薬剤は、制御放出システムで送達され得る。１つの実施形態において、ポンプが使用され得る（Ｌａｎｇｅｒ（１９９０）前出を参照のこと）。別の実施形態において、ポリマー材料が使用され得る（Ｈｏｗａｒｄら（１９８９）Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ．７１：１０５を参照のこと）。本発明の活性成分が、タンパク質をコードする核酸である、別の実施形態において、この核酸は、それを適切な核酸発現ベクターの一部として構築し、それを投与することで、そのコードするタンパク質の発現を促進するためにインビボで投与され得、その結果、細胞内に入る。この投与は、例えば、レトロウイルスベクター（例えば、米国特許第４，９８０，２８６号を参照のこと）の使用、または直接的な注射の使用、または微粒子衝撃法（例えば、遺伝子銃（Ｂｉｏｌｉｓｔｉｃ、Ｄｕｐｏｎｔ））の使用、あるいは脂質または細胞表面レセプターまたはトランスフェクト薬剤の塗布、または核に入ることが公知であるホメオボックス様ペプチドに連結して投与すること（例えば、Ｊｏｌｉｏｔら、１９９１、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８８：１８６４−１８６８）などによるものである。あるいは、核酸は、細胞内に導入され得、そして相同組換えによって、発現のために宿主細胞ＤＮＡ内に取り込まれ得る。
【００５１】
（組合せ治療）
多数の実施形態において、本発明の融合タンパク質は、１つ以上のさらなる化合物または治療剤と組合わせて投与され得る。例えば、複数の融合タンパク質が同時投与され得るか、または１つ以上の融合タンパク質が、１つ以上の治療的化合物と結合して投与され得る。例えば、他の治療剤は、ヌクレオシドアナログ逆転写酵素インヒビター（ＮＲＴＩ）（ジドブジン（ＡＺＴ）、ザルシタビン（ｚａｌｃｉｔａｂｉｎｅ）（ｄｄＣ）、ジダノシン（ｄｄＩ）、スタブジン（Ｄ４Ｔ）、ラミブジン（３ＴＣ）およびアバカビルスクシネートが挙げられる）であり得る。さらに、他の治療剤は、非ヌクレオシド逆転写酵素インヒビター（ＮＮＲＴＩ）（例えば、デラビルジン（ｄｅｌａｖｉｒｄｉｎｅ）、ネビラピンおよびエファビレンツ）であり得る。さらに、他の治療剤は、プロテアーゼインヒビター（リトナビル、サクイニビル、インディナビル、アンプレナビル、ロピナビル、およびネルフィナビルが挙げられる）であり得る。組合せて使用される最後のクラスは、融合インヒビター（例えば、Ｔ−２０）であり得る。さらに、他の治療剤は、ＨＩＶ感染が進展する傾向にある日和見感染している人々を処置することを助けるための薬物であり得る。これらの薬物としては、サイトメガロウイルスの眼への感染を処置するために使用されるホスカネットおよびガンシクロビル、酵母および他の真菌感染を処置するために使用されるフルコナゾール、ならびにＰｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓ  ｃａｒｉｎｉｉ肺炎（ＰＣＰ）を処置するために使用されるＴＭＰ／ＳＭＸまたはペンタミジンが挙げられる。また、カポージ肉腫または他の癌を処置するための治療剤または処置様式は、放射線、化学療法、またはαインターフェロン注射（遺伝学的に操作された天然に存在するタンパク質であって、本発明の融合タンパク質と同時投与される）である。
【００５２】
（薬学的組成物）
本発明はまた、薬学的組成物を提供する。このような組成物は、治療的有効量の活性薬剤、および薬学的に受容可能なキャリアを含む。用語「薬学的に受容可能」とは、連邦政府または州政府の規制機関によって承認されていること、または米国薬局方または、動物（より特定すると、ヒト）における使用のための他の一般的に認識されている薬局方に列記されていることを意味する。用語「キャリア」は、薬剤と共に投与される、希釈剤、アジュバント、賦形剤、またはビヒクルをいう。このような薬学的キャリアは、滅菌した液体であり得、例えば、水および油（石油、動物、植物または合成的起源（例えば、ピーナッツ油、大豆油、鉱油、ゴマ油など）の油）である。適切な薬学的賦形剤としては、デンプン、グルコース、ラクトース、スクロース、ゼラチン、麦芽、コメ、小麦粉、チョーク、シリカゲル、ステアリン酸ナトリウム、モノステアリン酸グリセロール、タルク、塩化ナトリウム、乾燥脱脂乳、グリセロール、プロピレングリコール、水、エタノールなどが挙げられる。所望される場合、組成物はまた、微量の湿潤剤または乳化剤、あるいはｐＨ緩衝剤を含み得る。これらの組成物は、溶液、懸濁液、乳濁液、錠剤、ピル、カプセル、粉末、持続性放出処方物などの形態を取り得る。組成物は、従来の結合剤およびキャリア（例えば、トリグリセリド）と共に、坐剤として処方され得る。経口処方物は、標準的キャリア（例えば、医薬等級のマンニトール、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、糖ナトリウム、セルロース、マグネシウムカーボネートなど）を含み得る。適切な薬学的キャリアの例が、Ｅ．Ｗ．Ｍａｒｔｉｎによる「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ」に記載されている。好ましい実施形態において、組成物は、薬学的組成物がヒトへの静脈内投与に適応するように、ルーチンの手順に従って処方される。必要な場合、組成物はまた、可溶化剤および注射部位の痛みを和らげるための局所麻酔薬（例えば、リドカイン）を含み得る。組成物が、注入によって投与されるべきである場合、それは、滅菌した医薬等級の水または食塩水を含む注入ボトルで調合され得る。組成物が、注射によって投与される場合、成分が投与前に混合され得るように、注射のための滅菌水または食塩水のアンプルが提供され得る。
【００５３】
本発明の活性薬剤は、中性の形態または塩の形態で処方され得る。薬学的に受容可能な塩としては、遊離のアミノ基により形成される塩（例えば、塩酸、リン酸、酢酸、シュウ酸、酒石酸などに由来する塩）、カルボキシル基により形成される塩（例えば、ナトリウム、カリウム、アンモニウム、カルシウム、水酸化第二鉄、イソプロピルアミン、トリエチルアミン、２−エチルアミノエタノール、ヒスチジン、プロカインなどに由来する塩）が挙げられる。
【００５４】
遅延型過敏症の処置において有効である、本発明の活性成分の量は、本説明に基づいて、標準的臨床技術によって決定され得る。さらに、インビトロアッセイが、必要に応じて、最適な投薬範囲を同定することを補助するために使用され得る。処方物中に使用される正確な用量はまた、投与経路、および状態の重症度に依存し、開業医の判断および各被験体の環境に従って決定されるべきである。しかし、静脈投与についての適切な投薬範囲は、一般的に、体重１キログラムあたり活性化合物が約２０〜５００マイクログラムである。鼻腔内投与についての適切な投薬範囲は、一般的に、約０．０１ｐｇ／ｋｇ体重〜１ｍｇ／ｋｇ体重である。有効用量は、インビトロまたは動物モデルの試験系から得られた用量−応答曲線から外挿され得る。
【００５５】
全身投与について、治療的有効用量は、最初はインビトロアッセイから見積もられ得る。例えば、用量は、培養細胞において決定されるように、ＩＣ５０を含む循環濃度の範囲を達成するように、動物モデルにおいて処方され得る。このような情報は、より正確にヒトにおいて有用な用量を決定するために使用され得る。最初の投薬はまた、当該分野で周知の技術を用いて、インビボのデータ（例えば、動物モデル）から見積もられ得る。当業者は、動物データに基づいてヒトへの投与を容易に最適化し得る。
【００５６】
投薬量および間隔は、治療効果を維持するために十分な組成物の血漿レベルを提供するために、個々に調節され得る。局所的投与または選択的取り込みの場合、化合物の有効な局所濃度は、血漿濃度とは関係しないかもしれない。当業者は、過度の実験をすることなく治療的に有効な局所的投薬を最適化し得る。
【００５７】
投与される化合物の量は、もちろん、処置されている被験体に依存し、被験体の体重、苦痛の重症度、投与の様式、および指示する医師の判断に依存する。
【００５８】
治療法は、症状が検出可能である間または、それらが検出不可能である場合でさえ、間欠的に繰り返され得る。治療法は、単独または他の薬物と組合わせて提供され得る。
【００５９】
好ましくは、本明細書に記載する化合物の治療的有効量は、実質的な毒性を引き起こすこと無く、治療的利益を提供する。
【００６０】
本明細書に記載する化合物の毒性は、細胞培養物または実験動物において、標準的な薬学的手順によって（例えば、ＬＤ５０（母集団の５０％にとって致死性の用量）またはＬＤ１００（母集団の１００％にとって致死性の用量）を決定することによって）決定され得る。毒性と治療効果の間の投与比が、治療インデックスである。高い治療インデックスを示す化合物が、好ましい。これらの培養細胞アッセイおよび動物実験から得られたデータは、ヒトにおける使用において毒性でない投薬範囲を処方する際に使用され得る。本明細書に記載する化合物の投薬は、好ましくは、ほとんどまたは全く毒性を有さない有効用量を含む循環濃度の範囲内にある。投薬は、使用される投薬形態および利用される投与経路に依存するこの範囲内で変化し得る。正確な処方、投与経路および投薬は、患者の状態を考慮し、個々の医師によって選択され得る（例えば、Ｆｉｎｇｌら、１９７５、Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ、Ｃｈ．１、ｐ．１を参照のこと）。
【００６１】
担当医師は、毒性または器官の機能不全に起因して、投与を終了、中断、または調節する方法および場合を知っていることに留意すべきである。逆に、担当医師はまた、臨床的応答が十分でない（毒性を防止するため）場合、処置をより高いレベルに調節することを知っている。目的の臨床的障害の管理における投与用量の強度は、処置されるべき状態の重症度および投与経路と共に変化し得る。状態の重症度は、例えば、適切な診断的評価方法によって部分的に評価される。さらに、用量および、おそらく用量頻度はまた、個々の患者の年齢、体重、および応答に従って、変化する。
【実施例】
【００６２】
（実施例１：ＩＬ−４／ＩＬ−１３トラップは、免疫応答をＴｈ２型応答からＴｈ１型応答へと変化させ得る）
Ｂａｌｂ／ｃマウス（Ｔｈ２型応答に向かう傾向を有する）をオボアルブミン（ＯＶＡ）の鼻腔内送達で感作し、次いでオボアルブミンの鼻腔内送達でチャレンジして、ヒト喘息と類似の状態を作製した。これは、高レベルのＩｇＥ（Ｔｈ２型応答マーカー）および高レベルの好酸球増加（Ｔｈ２サイトカインであるＩＬ−５によって誘導される）を含む。モデルのチャレンジ期の間のＩＬ−４／ＩＬ−１３トラップの投与の効果をマイクロアレイによって評価した。ヒトＦｃまたはマウスＩＬ−４／１３トラップのいずれかで処置したマウスの肺由来のＲＮＡを分析した。ＩＬ−４およびＩＬ−１３によって調節されるいくつかの遺伝子が、ＩＬ−４／ＩＬ−１３トラップの存在によって減少するが、ヒトＦｃでは減少しないことが見出された。より重要なことに、ＴＦＮγおよびＩＬ−１８は、ＩＬ−４／ＩＬ−１３トラップで処置した動物のＲＮＡにおいてのみ検出可能であった。このことは、ＩＬ−４／ＩＬ−１３トラップの投与によって、Ｔｈ２型免疫応答が減少することのみならず、Ｔｈ１型応答の誘導もまた存在したことを示す。
【００６３】
（実施例２：ＩＬ−４トラップは、免疫応答をＴｈ２型応答からＴｈ１型応答へと変化させ得る）
ヒトＩＬ−４は、げっ歯類において交差反応性ではないので、本出願人は、マウスモデルにおいて、ヒトＩＬ−４トラップの効力を調査できなかった。そのため、本出願人は、マウスバージョンのＩＬ−４トラップを操作し、マウスのオボアルブミン（ＯＶＡ）誘導性の喘息モデルにおいて、ＩＬ−４を阻止する能力を評価した。ＩＬ−４は、Ｔｈ２免疫応答を生成する上で重要な役割を果たしており、活性化したＴｈ２細胞が、種々のサイトカイン（ＩＬ−５（喘息表現型で観察される好酸球増加において重大な役割を果たす）が挙げられる）を分泌する。ＯＶＡ処置したマウスの気管支肺胞洗浄（ＢＡＬ）液体において、好酸球の数の増大が観察される。感作前およびチャレンジ期間の間続いたマウスＩＬ−４トラップの投与によって、好酸球のレベルが有意に減少し、このことは、ＩＬ−４トラップが、インビボでＴｈ２型応答のＩＬ−４媒介性の活性化を阻止することを示す（図１）。臨床的に適切なヒトＩＬ−４トラップを評価するために、本出願人は、霊長類においてＩＬ−４作用を阻止するその能力を評価した。ヒトＩＬ−４をカニクイザルに４日の計画にわたって皮下投与した結果、種々の生物学的応答（ヘマクリットおよびケモカインＭＣＰ−１の血清レベルの増大が挙げられる）が生じた。重要なことに、ＩＬ−４トラップの前投与は、ＩＬ−４媒介性のＭＣＰ１の誘導およびヘマトクリットの増大の両方を阻止した。これらの結果は、ヒトＩＬ−４トラップが、インビボでＩＬ−４作用を阻害し得ることを立証する。
【００６４】
（実施例３：マウスＩＬ−４／ＩＬ−１３トラップは、インビボでＩｇＥ応答を阻害し得る）
モノクローナル抗マウスＩｇＤ抗体によるマウスの注射は、ＩＬ−４媒介性の様式で、Ｂ細胞およびＴ細胞の両方の活性および、それに続く血液循環中へのＩｇＥの分泌を誘導する（Ｓａｔｏら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、１９９３、１５０：２７１７−２７２３）。以前の研究は、抗ＩＬ−４抗体での処置は、抗ＩｇＤ抗体へのＩｇＥの応答を阻害し得ることを示している（Ｓａｔｏら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、１９９３、１５０：２７１７−２７２３）。そのため、このモデルを使用して、ＩＬ−４媒介性の事象の阻止における種々の「抗ＩＬ−４」治療薬（マウスＩＬ−４およびマウスＩＬ−１３サイトカインの両方に結合し得るマウスＩＬ−４／ＩＬ−１３トラップが挙げられる）の効力を評価し得る。
【００６５】
０日目に、メスＢＡＬＢ／ｃマウス（９週齢；Ｔａｃｏｎｉｃ）にラット抗マウスＩｇＤモノクローナル抗体（２００μｇ；Ｂｉｏｓｏｕｒｃｅ）またはＰＢＳの皮下注射を行った。抗ＩｇＤ抗体を受容した動物には、１日に２回（１〜８日目）、偽薬またはマウスＩＬ−４／ＩＬ−１３トラップを皮下注射した（１６〜６４ｍｇ／ｋｇ／日；８〜３２ｍｇ／ｋｇ／注射）；他のマウスには、抗マウスＩＬ−４抗体を注射した（１１Ｂ１１；３０μｇ／日、皮下投与；１〜８日）。０日目にＰＢＳを受容したマウスには、この期間の間、偽薬を皮下注射した。９日目に、血液サンプルを採取し、その血清をＯｐｔＥＩＡ  マウスＩｇＥ  ＥＬＩＳＡキット（ＰｈａｒＭｉｎｇｅｎ）を用いてＩｇＥレベルについてアッセイした。
【００６６】
抗マウスＩｇ−Ｄ抗体の外因性投与は、ＰＢＳを注射したコントロールに対して血清ＩｇＥレベルを有意に増大させた（図２）。マウスＩＬ−４／ＩＬ−１３トラップによる処置は、明らかに用量依存的な様式で、偽薬と比較して血清ＩｇＥレベルを有意に減少させた（図２）。抗マウスＩＬ−４抗体（１１Ｂ１１）もまた、血清ＩｇＥレベルを減少させる上で効果的であった。これらのデータは、マウスＩＬ−４／ＩＬ−１３トラップが、インビボ状況において、ＩＬ−４媒介性の事象を阻止し得ることを示す。
【００６７】
カニクイザルに皮下注射（３ｍｇ／ｋｇ）として投与されたＩＬ−４／ＩＬ−１３トラップは、ヒトでの一週間の投薬に置き換え得る優れた薬物速度論的特性（Ｃｌ／Ｆ＝３．４±０．８  ｍｌ／ｈ／ｋｇ、Ｃｍａｘ＝１７±４μｇ／ｍｌ、およびｔ１／２＝２９±２ｈ）を有している。ＩＬ−４／ＩＬ−１３トラップのマウスバージョンは、マウスにおいて、抗ＩｇＤ誘導性のＴｈ２駆動性のＩｇＥ産生へのＢ細胞スイッチを減少させ、このことは、インビボでのこのＩＬ−４駆動性のＴｈ２応答の阻止を実証する。ヒトＩＬ−４／ＩＬ−１３トラップの投与は、マウス肺へのヒトＩＬ−１３の点滴注入によって誘導される気道の過反応性を阻止し、このことは、インビボでのＩＬ−１３シグナルの阻止を実証する。ヒトＩＬ−４／ＩＬ−１３トラップはまた、カニクイザルにおける６週間の毒物学的試験（週に２回、１０ｍｇ／ｋｇまでのトラップを皮下投与した）においても、よく耐えた。これらの結果から、本出願人は、ＩＬ−４／ＩＬ−１３トラップは、感染の全ての段階において、単独または他の化学療法薬と組合わせのいずれかで、ＨＩＶの処置のために有用であり得ることを提唱する。このトラップはまた、ＨＩＶワクチン療法と組合わせて免疫応答を増強するためにも有用であり得る。
【図面の簡単な説明】
【００６８】
【図１】ＩＬ−４トラップは、インビボでＩＬ−４の効果を阻止する。マウスＩＬ−４トラップは、マウスにおいて、ＯＶＡ誘導性喘息モデルにおける喘息に関連する好酸球増加症を軽減する。０日目と１４日目において、ＢＡＬＢ／ｃマウス（１グループあたりｎ＝６）をミョウバンでエマルジョン化したＯＶＡ（１匹のマウスあたり２０ｍｇ）に対して感作させた。感作の前日に、マウスＩＬ−４トラップまたはビヒクルを３ｍｇ／ｋｇで皮下投与し、次いで４週間の間、週に３回投与し、次いでチャレンジ期間の間、毎日投与した。抗ＩＬ−４抗体または抗ＩＬ−５抗体を、１ｍｇ／ｋｇで１週間に１度、皮下投与した。２８日目〜３０日目において、このマウスを２０分間、エアロゾル化したＯＶＡ（２０分間で１％）でチャレンジした。３２日目に、このマウスを屠殺し、ＢＡＬにおける好酸球増加症の数を定量した（平均値±ＳＥＭ）。
【図２】マウスＩＬ−４／ＩＬ−１３トラップは、インビボのＩｇＥ応答を阻害し得る。０日目に、雌ＢＡＬＢ／ｃマウスに、ラット抗マウスＩｇ−Ｄモノクローナル抗体（２００μｇ）またはＰＢＳの皮下注射をした。抗マウスＩｇ−Ｄ抗体を受容した動物には、１日に２回（１〜８日目）、偽薬またはマウスＩＬ−４／ＩＬ−１３トラップを皮下注射した（１６〜６４ｍｇ／ｋｇ／日；８〜３２ｍｇ／ｋｇ／注射）；他のマウスには、抗マウスＩＬ−４抗体を注射した（１１Ｂ１１；３０μｇ／日、皮下投与；１〜８日目）。０日目にＰＢＳを受容したマウスには、この期間の間、偽薬を皮下投与した。９日目に、血液サンプルを採取し、その血清をＯｐｔＥＩＡ  マウスＩｇＥ  ＥＬＩＳＡキットを用いてＩｇＥレベルについてアッセイした。抗マウスＩｇ−Ｄ抗体の外因性投与は、ＰＢＳを注射したコントロールに対して血清ＩｇＥレベルを有意に増大させた。マウスＩＬ−４／ＩＬ−１３トラップによる処置は、明らかに用量依存的な様式で、偽薬と比較して血清ＩｇＥレベルを有意に減少させた。抗マウスＩＬ−４抗体（１１Ｂ１１）もまた、血清ＩｇＥレベルを減少させる上で効果的であった。
【図１】
2005525404.tif 000002
【図２】
2005525404.tif 000003
【手続補正書】
【提出日】平成17年1月6日(2005.1.6)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
哺乳動物におけるＴｈ２型免疫応答を減少させるための組成物であって、サイトカインアンタゴニストを含む、組成物。
【請求項２】
前記哺乳動物がヒトである、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
請求項１に記載の組成物であって、前記サイトカインアンタゴニストが、ＩＬ−４／ＩＬ−１３トラップ、ＩＬ−４トラップ、ＩＬ−１３トラップ、抗ＩＬ−４抗体、および抗ＩＬ−１３抗体からなる群から選択される、組成物。
【請求項４】
請求項１に記載の組成物であって、該組成物が、皮下投与、筋肉内投与、鼻腔内投与、動脈内投与、静脈内投与、局所的投与、経膣投与、経皮投与、または経肛門投与のために処方される、組成物。
【請求項５】
ヒトにおけるＴｈ１型免疫応答を増加させるための組成物であって、サイトカインアンタゴニストを含む、組成物。
【請求項６】
請求項５に記載の組成物であって、前記サイトカインアンタゴニストが、ＩＬ−４／ＩＬ−１３トラップ、ＩＬ−４トラップ、ＩＬ−１３トラップ、抗ＩＬ−４抗体、および抗ＩＬ−１３抗体からなる群から選択される、組成物。
【請求項７】
請求項５に記載の組成物であって、該組成物が、皮下投与、筋肉内投与、鼻腔内投与、動脈内投与、静脈内投与、局所的投与、経膣投与、経皮投与、または経肛門投与のために処方される、組成物。
【請求項８】
哺乳動物において、Ｔｈ２型免疫応答をＴｈ１型免疫応答に変更するための組成物であって、サイトカインアンタゴニストを含む、組成物。
【請求項９】
請求項８に記載の組成物であって、前記サイトカインアンタゴニストが、ＩＬ−４／ＩＬ−１３トラップ、ＩＬ−４トラップ、ＩＬ−１３トラップ、抗ＩＬ−４抗体、および抗ＩＬ−１３抗体からなる群から選択される、組成物。
【請求項１０】
請求項８に記載の組成物であって、前記組成物が、皮下投与、筋肉内投与、鼻腔内投与、動脈内投与、静脈内投与、局所的投与、経膣投与、経皮投与、または経肛門投与のために処方される、組成物。
【請求項１１】
哺乳動物における喘息を阻害するための組成物であって、サイトカインアンタゴニストを含む、組成物。
【請求項１２】
請求項１１に記載の組成物であって、前記サイトカインアンタゴニストが、ＩＬ−４／ＩＬ−１３トラップ、ＩＬ−４トラップ、ＩＬ−１３トラップ、抗ＩＬ−４抗体、および抗ＩＬ−１３抗体からなる群から選択される、組成物。
【請求項１３】
請求項１１に記載の組成物であって、該組成物が、皮下投与、筋肉内投与、鼻腔内投与、動脈内投与、静脈内投与、局所的投与、経膣投与、経皮投与、または経肛門投与のために処方される、組成物。
【国際調査報告】
2005525404.tif 000004
2005525404.tif 000005