(57)【要約】本発明はｐＨ４以上の水溶液でミセルを形成しうる、１個の末端カルボキシル基を有するポリ乳酸誘導体に関する。上記ミセル内部に難溶性薬物を含有できるので多様な形態のドラッグデリバリーシステムとしての応用が可能である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ｐＨ４以上の水溶液でミセルを形成できる下記一般式（Ｉ）で示されるポリ乳酸誘導体。
ＲＯ−ＣＨＺ−［Ａ］n−［Ｂ］m−ＣＯＯＭ      (Ｉ)
式中、Ａは−ＣＯＯ−ＣＨＺ であり、
Ｂは−ＣＯＯ−ＣＨＹ−、 −ＣＯＯ−ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2−または−ＣＯＯ−ＣＨ2ＣＨ2ＯＣＨ2−であり、
Ｒは水素、アセチル基、ベンゾイル基、デカノイル基、パルミトイル基、メチル基またはエチル基であり、
Ｚ及びＹは水素、メチル基またはフェニル基であり、
Ｍは水素、ナトリウム、カリウムまたはリチウムであり、
ｎは１〜３０の整数であり、及び
ｍは０〜２０の整数である。
【請求項２】
上記ポリ乳酸誘導体の数平均分子量が５００〜２，０００ダルトンである請求項１に記載のポリ乳酸誘導体。
【請求項３】
上記ポリ乳酸誘導体が、Ｄ，Ｌ−ポリ乳酸、Ｄ，Ｌ−乳酸とマンデル酸の共重合体、Ｄ，Ｌ−乳酸とグリコール酸の共重合体、Ｄ，Ｌ−乳酸とカプロラクトンの共重合体およびＤ，Ｌ−乳酸と１，４−ジオキサン−２−オンの共重合体からなる群より選択される請求項１に記載のポリ乳酸誘導体。
【請求項４】
上記Ｍがナトリウム、カリウムまたはリチウムである請求項１に記載のポリ乳酸誘導体。
【請求項５】
上記Ｒがデカノイル基またはパルミトイル基である請求項１に記載のポリ乳酸誘導体。
【請求項６】
下記工程１）〜５）を含む方法で製造されたポリ乳酸誘体。
１）ポリ乳酸誘導体のモノマーを昇温、減圧下に縮重合させる工程；
２）工程１）の生成物に蒸留水を加えてポリ乳酸誘導体を沈殿させて低分子量のオリゴマーを除去する工程；
３）上記ポリ乳酸誘導体を中性またはアルカリ水溶液に加えてポリ乳酸誘導体を溶かす工程；
４）工程３）の水溶液からポリ乳酸誘導体を分離する工程；及び
５）工程４）で得られたポリ乳酸誘導体にアルカリ金属塩を加える工程。
【請求項７】
上記工程1）の縮重合の反応温度が１００〜２００℃である請求項６に記載のポリ乳酸誘導体。
【請求項８】
上記工程1）の縮重合が２５〜０．１ｍｍＨｇの圧力下で遂行される請求項６に記載のポリ乳酸誘導体。
【請求項９】
上記工程４）のポリ乳酸誘導体を分離する工程は、上記工程３）の水溶液に酸を添加し、ｐＨを１．５〜２．５に調整してポリ乳酸誘導体を沈澱させてなる請求項６に記載のポリ乳酸誘導体。
【請求項１０】
上記工程４）のポリ乳酸誘導体を分離する工程は、上記工程３）の水溶液に有機溶媒を加えてポリ乳酸誘導体を抽出してなる請求項６に記載のポリ乳酸誘導体。
【請求項１１】
上記工程５）の金属アルカリ塩が炭酸水素ナトリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素カリウム、炭酸カリウムまたは炭酸リチウムからなる群より選択される請求項６に記載のポリ乳酸誘導体。
【請求項１２】
下記工程１）〜６）を含む方法で製造された、Ｒがアセチル基、ベンゾイル基、デカノイル基、パルミトイル基、メチル基、またはエチル基である一般式（Ｉ）のポリ乳酸誘導体。
１）ポリ乳酸誘導体モノマーを昇温、減圧下で縮重合させる工程；
２）上記工程１）の生成物に蒸留水を加えてポリ乳酸誘導体を沈殿させて低分子量のオリゴマーを除去する工程；
３）上記ポリ乳酸誘導体を中性またはアルカリ水溶液に加えてポリ乳酸誘導体を溶かす工程；
４）上記工程３）の水溶液からポリ乳酸誘導体を分離する工程；
５）上記工程４）で得られたポリ乳酸誘導体を酢酸無水物、塩化アセチル、塩化ベンゾイル、塩化デカノイル、塩化パルミトイル、ヨウ化メチルまたはヨウ化エチルと反応させてヒドロキシル末端基を置換させる工程；及び
６）上記置換されたポリ乳酸誘導体に金属アルカリ塩を加える工程。
【請求項１３】
上記工程１）の縮重合の反応温度は１００〜２００℃である請求項１２に記載のポリ乳酸誘導体。
【請求項１４】
上記工程１）の縮重合は２５〜０．１ｍｍＨｇの圧力下で遂行される請求項１２に記載のポリ乳酸誘導体。
【請求項１５】
上記工程４）のポリ乳酸誘導体を分離する工程は、上記工程３）の水溶液に酸を加え、ｐＨを１．５〜２．５に調整して沈澱させてなる請求項１２に記載のポリ乳酸誘導体。
【請求項１６】
上記工程４）のポリ乳酸誘導体を分離する工程は、上記工程３）の水溶液に有機溶媒を加えてポリ乳酸誘導体を抽出してなる請求項１２に記載のポリ乳酸誘導体。
【請求項１７】
上記工程５）のアルカリ金属塩が炭酸水素ナトリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素カリウム、炭酸カリウムまたは炭酸リチウムよりなる群から選択される請求項１２に記載のポリ乳酸誘導体。
【請求項１８】
請求項１〜１７のいずれかに記載のポリ乳酸誘導体を含む高分子ミセルを含有する高分子組成物。
【請求項１９】
請求項１〜１７のいずれかに記載のポリ乳酸誘導体を含む高分子ミセル内部に難溶性薬物が封入された薬学的組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はｐＨ４以上の水溶液でミセルを形成しうる、１個の末端カルボキシル基を有するポリ乳酸誘導体に関し、さらに詳しくは、ポリ乳酸誘導体を含む高分子ミセル組成物に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
難溶性薬物の可溶化は、経口及び非経口投与による薬物の伝達に必須的である。難溶性薬物を可溶化する種々の通常的な方法がある。例えば、難溶性薬物は水−混和性有機溶媒と水の混合溶媒に溶解させることができる。また、他の方法として、難溶性薬物をその酸または塩基からその塩形態への構造的変形は薬物の水溶解性を増進することができる。他の方法は、難溶性薬物を第３の物質と結合させる工程または界面活性剤によって形成されたミセル内に難溶性薬物を封入する工程を含む。参照： Leon Lachman, “The theory and practice of industrial pharmacy”, Lea & Febiger, Philadelphia, 1986。
【０００３】
上記方法中で、界面活性剤を使用して形成されたミセルは単位サイズが数ｎｍ〜数μｍを持つように製造でき、また、水溶液で微細に分散できる。従って、ミセルの使用は難溶性薬物の可溶化に好ましい。
【０００４】
界面活性剤は親水性ブロックと疎水性ブロックを含む分子構造を有し、ここで、上記親水性ブロックは片側に水に高い親和性を有し、また、上記疎水性ブロックは他側に油と高い親和性を有する。上記親水性ブロックが発達すれば、界面活性剤は水によく溶け、反対に疎水性ブロックが発達すれば、界面活性剤は有機溶媒によく溶ける。界面活性剤はイオン界面活性剤と非イオン界面活性剤に分類される。難溶性薬物を可溶化する方法で、非イオン界面活性剤は電気的の中性であるため、イオン相互作用によって難溶性薬物に影響を与えない。このような界面活性剤としては、脂肪酸誘導体のアニオン塩、ツイーン（Ｔween）またはスパン(Ｓpan)などのソルビタン誘導体、ポリオキシエチレンモノアルキルエーテル誘導体（ＢＲＩＪ及びＭＹＲＪ系列）及び脂肪酸のポリエチレングリコールエステル誘導体、クレモフォール（Cremophor）等のポリオキシエチル化キャスター油誘導体等がある。
【０００５】
ヨーロッパ特許第０６４５１４５号は、難溶性薬物であるパクリタキセルを、非イオン界面活性剤であるクレモフォールＥＬ（Cremophor EL）を使用して可溶化させる方法を記述している。しかし、上記界面活性剤で可溶化された難溶性薬物は経口または非経口で投与する場合、過敏反応などの副作用があるため、使用が非常に制限される。また、水溶液に存在するミセルの安全性は非常に低く、長時間放置する場合、薬物がミセルから分離されるという短所がある。
【０００６】
脂肪酸ポリエステルまたはポリアミノ酸などの疎水性の生分解性高分子およびポリアルキレングリコール誘導体の親水性高分子を含む二重ブロックまたは三重ブロック共重合体で造った高分子ミセルを使用した難溶性薬物の可溶化方法が報告された。例えば、米国特許第５，４４９，５１３号には、親水性高分子としてポリエチレングリコールを、また、疎水性高分子としてポリアミノ酸誘導体、例えば、ポリベンジルアスパラギン酸を含む二重ブロック共重合体を記述している。二重ブロック共重合体は疎水性抗癌剤であるドキソルビシンまたは抗−炎症剤であるインドメタシンを可溶化できる。しかし、上記ポリアミノ酸誘導体は生体内で加水分解できず、好ましくない副作用の原因となるという短所がある。
【０００７】
さらに、米国特許第５，４２９，８２６号は親水性ポリアルキレングリコールと疎水性ポリ乳酸を含む二重または多重ブロック共重合体を記述している。具体的に、上記特許はアクリル酸末端基を持つ二重または多重ブロック共重合体を水溶液中でミセル化した後、ミセルを架橋結合させて高分子ミセルを安定化させる方法を記述している。この方法は、高分子ミセルの安定性を向上させることができるが、架橋結合された高分子は分解されなく、従って、生体内（in vivo）使用には適用することができないという短所がある。
【０００８】
ポリ乳酸は生体適合性および生分解性に優れているため、種々の形態のドラッグデリバリーシステムに応用されている。ポリ乳酸はその分子量によって様々な性質を有し、マイクロスフェア、ナノ粒子、高分子ゲル(polymeric gel)及びインプラント剤(implant agent)などの多様な剤形に開発された。しかし、２，０００ダルトン以上の分子量を持つポリ乳酸は水溶液で溶解が不可能である。ｐＨ４以上の水溶液で溶解しないため、ドラッグデリバリーシステムとして２，０００ダルトン未満の分子量を持つポリ乳酸の開発に成功したという報告はなかった。
【特許文献１】
ヨーロッパ特許第０６４５１４５号
【特許文献２】
米国特許第５，４４９，５１３号
【特許文献３】
米国特許第５，４２９，８２６号
【非特許文献１】
Leon Lachman, “The theory and practice of industrial pharmacy”, Lea & Febiger, Philadelphia, 1986
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
上述の状況からみて、生体適合性および生分解性を有する疎水性薬物伝達用の改善された高分子ミセル組成物の開発が認識され、要請された。本発明は、生体適合性および生分解性であり、且つ安定性の減少無しに疎水性薬物を効果的に伝達することができる、改善された高分子ミセル組成物を提供する。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明は、ｐＨ４以上の水溶液中でミセルを形成し、当該ミセル内に難溶性薬物をミセル内に包含させて難溶性薬物が可溶化できるポリ乳酸誘導体に関するものである。より具体的に、本発明のポリ乳酸誘導体は５００〜２，０００ダルトンの分子量を持ち、また、２−ヒドロキシカルボン酸誘導体を重縮合することによって製造できる。
【００１１】
さらに、本発明は触媒を使用せずに、減圧および昇温で２−ヒドロキシカルボン酸誘導体を重縮合させることによって得るポリ乳酸誘導体の製造方法を提供する。
【００１２】
また、本発明はポリ乳酸誘導体によって形成されたミセルを含む高分子組成物を提供する。
【００１３】
また、本発明はｐＨ４以上で、上記ポリ乳酸誘導体で形成されたミセル内部に難溶性薬物が封入された薬学的組成物を提供する。
【００１４】
本発明のポリ乳酸誘導体は一般式（Ｉ）で示されうる。
【００１５】
ＲＯ−ＣＨＺ−［Ａ］n−［Ｂ］m−ＣＯＯＭ      (Ｉ)
式中、Ａは−ＣＯＯ−ＣＨＺ であり、Ｂは−ＣＯＯ−ＣＨＹ−、 −ＣＯＯ−ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2−または−ＣＯＯ−ＣＨ2ＣＨ2ＯＣＨ2−であり、Ｒは水素、アセチル基、ベンゾイル基、デカノイル基、パルミトイル基、メチル基またはエチル基であり、Ｚ及びＹは水素、メチル基またはフェニル基であり、Ｍは水素、ナトリウム、カリウムまたはリチウムであり、ｎは１〜３０の整数であり、及びｍは０〜２０の整数である。
【００１６】
本発明のポリ乳酸誘導体は、ｐＨ４以上の水溶液でミセルを形成することができる。形成されたミセルは１０〜２１ｎｍのサイズを有し、従って、難溶性薬物のキャリアーに適している。以下、本発明をさらに詳細に説明する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１７】
高分子組成物と使用方法及びその製造方法を説明するにあたり、本発明の構成、方法の工程、および材料は幾分か変更してもよいように、ここに記述された特定の構成、方法の工程および材料に限定されるものでないことが理解されるべきである。ここで使用された用語は、単に特定の実施態様を説明する目的で使用されており、また、本発明の範囲は添付された特許請求の範囲およびその均等物に制限されるため、制限的なものと意図してはならない。
【００１８】
本明細書及び添付された請求範囲で使われた単数形態は、明確な他の指示がない限り複数形態を含むことに留意しなければならない。従って、例えば、「末端基」を含有する高分子に対する言及は二つ以上のそのような基に対する言及を含み、「疎水性薬物」に対する言及は二つ以上の薬物に対する言及を含む。
【００１９】
本発明の説明及び特許請求の範囲において、次の用語は下記に提示した定義に従って使用される。
【００２０】
本明細書で使用した用語、「生体活性剤」または「薬物」またはこれと類似した用語は、当該技術分野で既によく知られた方法及び／または本発明で教示された方法による投与に適し、要求される生物学的または薬理学的効果を誘発させる化学的または生物学的物質または化合物を意味する。このような効果は、（１）生体に関して予防的効果を有し、感染予防のような望まれない生物学的効果を予防すること、（２）疾患によって引き起こされる状態を軽減すること、例えば、疾患の結果として引き起こされた痛み及び炎症を軽減すること、及び／または、（３）生体から発生した疾患を軽減、低減または完全に除去することを含むが、これに制限されるものではない。その効果は、局部麻酔効果提供のような局部的であったり、全身的である。
【００２１】
本明細書で使用した、「生分解性」または「生分解」の用語は、可溶性加水分解によってあまり複雑でない中間体または最終生成物へ物質が転換されること、または、酵素や生体の他の生成物として存在し得る生物学的に形成された独立体（entities）の作用によってあまり複雑でない中間体または最終生成物に転換されることを意味する。
【００２２】
本明細書で使用した、「生体適合性」物質という用語は、可溶性加水分解によって形成された物質、中間体または物質の最終生成物、または、酵素や生体の他の生成物として存在し得る生物学的に形成された独立体の作用によって形成され、人体へ副作用が全くない物質、中間体または物質の最終生成物を意味する。
【００２３】
「ポリ(ラクチド)」または「ＰＬＡ」は、乳酸の縮重合またはラクチドの開環重合によって誘導された高分子を意味する。「ポリ（グリコリド）」または「ＰＧＡ」は、グリコール酸の縮重合に由来する高分子、または、グリコリドの開環重合によって誘導される高分子を意味する。本明細書で使用した「有効量」は、 医学治療における合理的な危険（a reasonable risk）／便益率（benefit ratio）比で所望の局所または全身効果および性能を提供するのに充分な生活性剤の量を意味する。
【００２４】
本明細書で使用した、「投与」またはこれと類似な用語は、組成物が全身的に循環できるように治療対象に組成物を伝達すること意味する。好ましくは、本発明の組成物は、皮下、筋肉内、経皮、経口、粘膜内、静脈内または腹腔内に投与される。こうした用途の注射剤は、液状溶液剤若しくは懸濁剤、又は注射前に液体中で溶液剤若しくは懸濁剤として製造するのに適した固体形態、または乳剤のように、通常の形態に製造できる。投与のために使用できる好適な賦形剤としては、例えば、水、生理的食塩水、デキストローズ、グリセロール、エタノールなどを含み、必要に応じて補助物質、例えば、湿潤または乳化剤、緩衝液等を含む。経口投与のためには、溶液剤、錠剤、カプセル剤などの種々の形態に剤形化できる。
【００２５】
ここで典型的な具体例を説明し、特定の用語は同じことを記述するのに使用する。しかし、本発明の範囲がそれが意味することに限定されないと理解されるべきである。本明細書に開示された内容を理解できる当業者が想到するような、本明細書に列挙された発明的特徴の変更または追加変形、及び本明細書に列挙された発明の原理を付加的に応用することは、本発明の範囲に含まれるものと見なされる。
【００２６】
本発明は、ｐＨ４以上の水溶液でミセルを形成でき、上記ミセル内に難溶性薬物を包含させ、これによって、難溶性薬物を可溶化することができるポリ乳酸誘導体に関する。より詳細には、本発明は下記一般式（Ｉ）で示されるポリ乳酸誘導体に関する。
【００２７】
ＲＯ−ＣＨＺ−［Ａ］n−［Ｂ］m−ＣＯＯＭ      (Ｉ)
式中、Ａは−ＣＯＯ−ＣＨＺ であり、Ｂは−ＣＯＯ−ＣＨＹ−、 −ＣＯＯ−ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2−または−ＣＯＯ−ＣＨ2ＣＨ2ＯＣＨ2−であり、Ｒは水素、アセチル基、ベンゾイル基、デカノイル基、パルミトイル基、メチル基またはエチル基であり、Ｚ及びＹは水素、メチル基またはフェニル基であり、Ｍは水素、ナトリウム、カリウムまたはリチウムであり、ｎは１〜３０の整数であり、及びｍは０〜２０の整数である。
【００２８】
上記一般式（Ｉ）で示されるポリ乳酸誘導体は、２−ヒドロキシカルボン酸誘導体の単一重合体またはランダム共重合体が好ましい。より好ましくは、ポリ乳酸誘導体はＤ,Ｌ−ポリ乳酸、Ｄ,Ｌ−乳酸とマンデル酸の共重合体、Ｄ,Ｌ−乳酸とグリコール酸の共重合体、Ｄ,Ｌ−乳酸とカプロラクトンの共重合体およびＤ,Ｌ−乳酸と１,４−ジオキサン−２−オンの共重合体からなる群より選択される。
【００２９】
本発明のポリ乳酸誘導体の一方の末端は、カルボキシル基またはそのアルカリ金属塩、好ましくは、アルカリ金属塩でありうる。上記アルカリ金属塩はナトリウム、カリウムまたはリチウムの１価金属イオン形態のポリ乳酸誘導体を形成する。本発明のポリ乳酸誘導体は、室温で固体であり、 また、ｐＨが中性であるため、空気中の水分にさらされても非常に安定的である。
【００３０】
ポリ乳酸誘導体は他方の末端はヒドロキシル基であり、アセチル基、ベンゾイル基、デカノイル基またはパルミトイル基等よりなる群から選択された基でエステル化されるか、またはメチル基、エチル基、若しくはその均等な基でアルキル化され得る。
【００３１】
本発明のポリ乳酸誘導体は水溶液中に溶解でき、ここで、 ポリ乳酸誘導体の親水性及び疎水性の成分が均衡を成して高分子ミセルを形成する。従って、疎水性エステル部分の分子量があまりにも大きくなると、末端のカルボン酸アニオン同士が会合できず、ミセルを形成しにくくなる。本発明のポリ乳酸誘導体の数平均分子量は、好ましくは、５００〜２，０００ダルトン範囲内である。分子量が５００ダルトン未満では、高分子が水で完全に溶解されミセル形成自体が難しく、また、分子量が２，０００ダルトン以上では、疎水性があまりにも大きくなりミセルを形成することができない。また、ポリ乳酸誘導体の分子量は、製造工程中に、反応温度、真空度及び時間などを適切に制御することにより調節することができる。
【００３２】
本発明の下記実験例によれば、一般式（Ｉ）のポリ乳酸誘導体の溶解度は、周囲環境のｐＨによって変わる。ｐＨ４以上の水溶液では本発明のポリ乳酸誘導体は完全に溶解され、肉眼で観察時、清澄な溶液となる。しかし、溶液のｐＨを４以下に調整するとき、ポリ乳酸誘導体は図７に示すように、部分的に析出される。本発明のポリ乳酸誘導体はｐＨ１〜１０範囲で使用することができ、好ましくは、ｐＨ４〜８の範囲で製造され使用される。
【００３３】
本発明に係るポリ乳酸誘導体は、ｐＨ４以上の水溶液中で分散されミセルを形成する。形成されたミセルはサイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）で確認でき、またミセルのサイズは、好ましくは、約９〜２１ｎｍの範囲である。図３及び表６に示すように、上記ポリ乳酸誘導体の濃度が増加するにつれて、形成されるミセルの量も増加することが確認された。また、ヒドロキシル末端をデカノイル基またはパルミトイル基で置換することによって、末端部分の疎水性が増加されるにつれて、形成されたミセル含量が増加することも示されている。
【００３４】
また、本発明の目的は、一般式（Ｉ）で示されるポリ乳酸誘導体の製造方法に関する。例えば、本発明はＲが水素の一般式（Ｉ）のポリ乳酸誘導体の製造方法、及びＲがアセチル基、ベンゾイル基、デカノイル基、パルミトイル基、メチル基またはエチル基であるポリ乳酸誘導体の製造方法を提供する。
【００３５】
一般式（Ｉ）で、Ｒが水素のポリ乳酸誘導体の製造方法は下記工程を含む：
１）ポリ乳酸誘導体のモノマーを昇温及び減圧下で縮重合させる工程；
２）上記工程１）の生成物に蒸留水を加えてポリ乳酸誘導体を沈殿させて、低分子量のオリゴマーを除去する工程；
３）上記ポリ乳酸誘導体を中性またはアルカリ水溶液に加えてポリ乳酸誘導体を溶かす工程；
４）上記工程３）の溶液からポリ乳酸誘導体を分離する工程；及び
５）工程４）で得られたポリ乳酸誘導体にアルカリ金属塩を加えて一般式（Ｉ）でＲが水素のポリ乳酸誘導体を得る工程。
【００３６】
上記方法で、工程５）は省略することができる。工程５）を省略した場合は、金属イオンによって置換されないカルボキシル基を末端に含むポリ乳酸誘導体が形成される。
【００３７】
さらに詳しくは、工程１）で、ポリ乳酸誘導体は、２−ヒドロキシカルボン酸誘導体を触媒の不在下、１００〜２００℃の温度で、２５〜０．１ｍｍＨｇに減圧下で、６〜２４時間縮重合させて得る。下記実施例で示すように、得られたポリ乳酸誘導体の数平均分子量と収率は、工程１）で、温度、減圧及び反応時間によって変わる。このような条件を調節して、最も好ましいポリ乳酸誘導体を得ることができる。さらに具体的に、反応温度が高くなるほど、反応時間が長くなるほど、または反応圧力が低くなるほどポリ乳酸誘導体の数平均分子量及び収率が増加する。
【００３８】
工程２）は上記工程１）で得られたポリ乳酸誘導体に蒸留水を加えてポリ乳酸誘導体を沈殿させて水に溶ける低分子量のオリゴマーを除去する。
【００３９】
工程３）は上記沈殿されたポリ乳酸誘導体をｐＨ７以上の中性またはアルカリ水溶液、好ましくはｐＨ７〜９の水溶液に加えて溶かす。
【００４０】
工程４）で、上記ポリ乳酸誘導体は工程３）での水溶液のｐＨを１Ｎ酸で１．５〜２．５に調整することにより分離する。これに対して、工程３）で得られたポリ乳酸誘導体水溶液にジクロロメタン、クロロホルムなどの有機溶媒を加えてポリ乳酸誘導体を抽出した後、抽出されたポリ乳酸誘導体を乾燥してカルボキシル末端基を含有したポリ乳酸誘導体を得る。上記カルボキシル末端基を含有するポリ乳酸誘導体は、好ましくは、５００〜２，０００ダルトンの数平均分子量を持つ高分子である。
【００４１】
また、工程５）は工程４）で得られたポリ乳酸誘導体をアセトンまたはアセトン水溶液に溶かすことができる。次いで、得られた溶液を炭酸水素ナトリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素カリウム、炭酸カリウムまたは炭酸リチウムの水溶液を加えて中和させた後、溶媒を蒸発させて、一般式（Ｉ）で示される金属イオン塩状態であり、且つＲが水素のポリ乳酸誘導体を製造する。
【００４２】
１個の末端カルボキシル基を有するポリ乳酸誘導体は室温で粘性液体であり、１個の末端カルボキン酸金属イオン塩を有するポリ乳酸誘導体は室温で固体である。
【００４３】
また、一般式（Ｉ）でＲがアセチル基、ベンゾイル基、デカノイル基、パルミトイル基、メチル基またはエチル基のポリ乳酸誘導体の製造方法は下記工程を含む；
１）ポリ乳酸誘導体のモノマーを昇温及び減圧下で縮重合させる工程；
２）上記工程１）の生成物に蒸留水を加えてポリ乳酸誘導体を沈殿させて低分子量のオリゴマーを除去する工程；
３）上記ポリ乳酸誘導体を中性またはアルカリ水溶液に加えてポリ乳酸誘導体を溶かす工程；
４）上記工程３）の水溶液からポリ乳酸誘導体を分離する工程；
５）上記工程４）で得られたポリ乳酸誘導体を酢酸無水物、塩化アセチル、塩化ベンゾイル、塩化デカノイル、塩化パルミトイル、ヨウ化メチル、またはヨウ化エチルと反応させてヒドロキシル末端基を置換させる段階；及び
６）置換されたポリ乳酸誘導体にアルカリ金属塩を加えて一般式（Ｉ）で Ｒがアセチル基、ベンゾイル基、デカノイル基、パルミトイル基、メチル基またはエチル基であるポリ乳酸誘導体を得る工程。
【００４４】
上記製造方法で、工程６）は省略できる。工程６）を省略した場合は、金属イオンで置換されないカルボキシル基を末端に含有するポリ乳酸誘導体が形成される。
【００４５】
工程５）で、カルボキシル末端基を含有するポリ乳酸誘導体を酢酸無水物、塩化アセチル、塩化ベンゾイル、塩化デカノイル、塩化パルミトイル、ヨウ化メチル、またはヨウ化エチルと反応させて、ヒドロキシル末端基をアセチル、ベンゾイル、デカノイルまたはパルミトイル基等のエステル化された誘導体 、又はメチル若しくはエチル基等のアルキル化された誘導体で置換する。
【００４６】
また、本発明は上記ポリ乳酸誘導体で形成されたミセルを含む高分子組成物を含む。また、本発明はｐＨ４以上で、ポリ乳酸誘導体で形成されたミセル内部に難溶性薬物が包含された薬学的組成物を含む。
【００４７】
難溶性薬物の経口または非経口投与の場合、本発明に係るポリ乳酸誘導体はｐＨ４以上の水溶液でミセルを形成し、 難溶性薬物は上記ミセル内部に含有させて可溶化する。下記実施例で示すように、難溶性薬物を人体へ投与するとき、ポリ乳酸誘導体のミセルが崩れて難溶性薬物がゆっくり放出され薬理効果を示すようになる。
【００４８】
本発明係るポリ乳酸誘導体を利用して可溶化できる難溶性薬物は水に対する溶解度が１０ｍｇ／ｍＬ以下の難溶性薬物ならば、どんな薬物でも使用可能である。代表的な難溶性薬物としては、パクリタキセル、ケトコナゾール、イトラコナゾール、シクロスポリン、シサプリド、アセトアミノフェン、アスピリン、アセチルサリチル酸、インドメタシン、ナプロキセン、ワーファリン、パパベリン、チオアベナゾール（thioabenazole）、ミコナゾール、シナリジン（cinarizin）、ドキソルビシン、オメプラゾール、コレカルシフェロル、メルファラン、ニフェジピン、ジゴキシン、安息香酸トリプトファン、チロシン、フェニルアラニン、アズレオナム、イブプロフェン、フェノキシメチルペニシリン、サリドマイド、メチルテストステロン、プロクロルペラジン、ヒドロコルチゾン、ジデオキシプリンヌクレオシド、ビタミンＤ2、スルホンアミド、スルホニルウレア、パラアミノ安息香酸、メラトニン、ベンジルペニシリン、クロランブシル（chlorambucil）、ジアゼピン、ジギトキシン、ヒドロコルチゾンブチラート、メトロニダゾール安息香酸塩、トルブタミド、プロスタグランジン、フルドロコルチゾン、グリゼオフルビン、硝酸ミコナゾール、ロイコトリエンＢ４抑制剤、プロプラノロール、テオフィリン、フルビプロフェン（flubiprofen）、安息香酸ナトリウム、安息香酸、リボフラビン、ベンゾジアゼピン、フェノバルビタール、グリブリド、スルフィアジン（sulphiazine）、スルファエチルチアヂアゾール、ジクロフェナックナトリウム、フェニトイン、ヒオリダジン（hioridazine）ヒドロクロリド、ブロピリミン、ヒドロクロロチアジド、フルコナゾール等が挙げられる。
【００４９】
難溶性薬物は、上記列挙した薬剤の他にも、抗生物質、抗−炎症鎮痛剤、麻酔剤、ホルモン類、高血圧治療剤、糖尿病治療剤、高脂質症治療剤、抗ウィルス剤、パーキンソン病治療剤、アルツハイマー病治療剤、抗−嘔吐剤、免疫抑制剤、潰瘍治療剤、便泌治療剤または抗マラリア剤が挙げられる。
【００５０】
好ましくは、本発明の薬剤含有ミセル組成物は、難溶性薬物０．１〜２０．０重量％及びポリ乳酸誘導体８０．０〜９９．９重量％を含有する。上記ポリ乳酸誘導体は難溶性薬物を含有したミセル形態で経口投与または非経口投与できる。
【００５１】
非経口投与は難溶性薬物を血管、皮下脂肪及び筋肉などの投与経路で注射し、さらに具体的に、上記ポリ乳酸誘導体を難溶性薬物と混合した後、筋肉または皮下に注射する。また、経口投与用製剤は本発明のポリ乳酸誘導体を難溶性薬物と混合して、製造された錠剤またはカプセルを含む。
【００５２】
さらに、非経口投与の場合、ｐＨ６〜７の体液でゆっくりミセルが形成する剤形に製造することができる。経口投与の場合、ｐＨ１〜２の胃では薬物が放出しないが、ｐＨ６〜７の小腸では薬物を可溶化させてミセル形態で薬物を放出する剤形に製造することができる。
【００５３】
本発明の難溶性薬物が含まれた薬学的組成物は、経口投与のとき、胃を介して小腸へ移動する。小腸のｐＨより胃のｐＨが低い場合は、本発明に係る薬学的組成物に含まれたポリ乳酸誘導体は低いｐＨで錠剤またはカプセル形態をそのまま保持して薬物が放出されない。しかし、ｐＨ６〜７の小腸へ薬学的組成物が移動する場合は、この組成物は薬物を含むミセル形態にゆっくり可溶化され、薬物が放出されながら、小腸で吸収される。このような特性は、低いｐＨで不安定な薬物が、低いｐＨ溶液で放出されることを防止して安全性を向上させ、また、ｐＨ１〜２の溶液で析出され、胃潰瘍などの副作用を引き起こす抗−炎症鎮痛剤等の薬物は胃では放出されないが、ｐＨ６〜７の小腸で放出するようにして薬物の副作用を減少させ、その薬理効果を向上できるという長所がある。
【００５４】
また、本発明は上記ポリ乳酸誘導体を利用して難溶性薬物を含有したミセルを製造する方法に関する。
【００５５】
上記ポリ乳酸誘導体及び難溶性薬物をアセトン、酢酸エチル、アセトニトリル、ジクロロメタン、エタノール、メタノール、クロロホルムまたは酢酸に溶かした後、有機溶媒を除去し、ポリ乳酸誘導体及び難溶性薬物の均一な混合物を製造する。上記得られた混合物に蒸留水を加えて水溶液をｐＨ４〜８に調整すると、自動的に薬物含有ミセルが形成される。次いで、上記難溶性薬物含有ミセル水溶液を凍結乾燥する。
【００５６】
また、経口剤に製造するためには、上記ポリ乳酸誘導体と難溶性薬物を有機溶媒に溶かした後、有機溶媒を除去し、生成されたポリ乳酸誘導体と難溶性薬物の混合物を経口用賦形剤と混合して錠剤を製造するか、カプセルに充填してカプセル製剤を製造する。
【００５７】
本発明の実施例によると、 パクリタキセル及びシクロスポリンを利用して可溶化実験を遂行した結果、ミセルのサイズが１４〜３５ｎｍであり、上記薬物の溶解度が１０〜２５ｍｇ／ｍＬで可溶化することを確認することができた。
【００５８】
下記実施例は、当業者が本発明を実施する方法についてより理解し易いように説明するものである。本発明は、その好適な特定の具体例に基づいて記載されたものであるが、下記実施例は本発明を説明するためのものであって、本発明の範囲を何ら制限するものではない。本発明の他の見地は、当業者にとって明らかであろう。
【実施例】
【００５９】
実施例１−１２：ポリ乳酸誘導体の合成
２−ヒドロキシカルボン酸誘導体を触媒無しに、昇温（１００〜２００℃）及び減圧（１００〜０．１ｍｍＨｇ）条件下で６〜２４時間重合した後、精製して製造した。
【００６０】
実施例１：Ｄ，Ｌ−ポリ乳酸（ＰＬＡ−ＣＯＯＨ）の合成
Ｄ，Ｌ−乳酸１００ｇを２５０ｍＬの三口丸底フラスコに導入し、攪拌器を取り付けた後、８０℃に加熱した油浴で加熱及び減圧アスピレータで２５ｍｍＨｇに減圧しながら、１時間反応させて過量に存在する水分を除去した。反応は温度を１５０℃に昇温し、圧力を２５ｍｍＨｇに減圧した条件で、６時間遂行した後、反応を終結した。生成された反応物に１リットルの蒸留水を加えて高分子を析出させた。析出された高分子を蒸留水に再び加えてｐＨ４以下の水溶液で溶解される低分子量のオリゴマーを除去した後、析出された高分子を１リットルの蒸留水に加え、炭酸水素ナトリウムを少量づつ加えて水溶液のｐＨを６〜８になるように調整して高分子を溶かした。この時、水に溶けない重合体は遠心分離または濾過によって分離して除去した。１Ｎ塩酸水溶液を少量づつ加えて、再び水溶液をｐＨ２に調整しながら、水溶液で高分子を析出させた。析出された高分子を蒸留水で２回洗浄した後、分離して減圧下に乾燥して非結晶性高分子（Ｄ，Ｌ−ポリ乳酸５９ｇ、収率５９％）を得た。高分子の数平均分子量は1Ｈ−ＮＭＲスペクトル（図１）で５４０ダルトンであった。
【００６１】
実施例２：Ｄ，Ｌ−ポリ乳酸（ＰＬＡ−ＣＯＯＨ）の合成２
反応温度を１６０℃に昇温し、圧力を１０ｍｍＨｇに減圧した条件で、１２時間反応させたことを除いては上記実施例１と同じ方法を遂行して、１，１４０ダルトンの 数平均分子量を持つＤ，Ｌ−ポリ乳酸６６ｇ（収率６６％）を得た。
【００６２】
実施例３：Ｄ，Ｌ−ポリ乳酸（ＰＬＡ−ＣＯＯＨ）の合成３
反応温度を１６０℃に昇温し、圧力を１０ｍｍＨｇに減圧した条件で、２４時間反応させたことを除いては上記実施例１と同じ方法を遂行して、 １，５５０ダルトンの数平均分子量を持つＤ，Ｌ−ポリ乳酸７１ｇ（収率７１％）を得た。
【００６３】
実施例４：Ｄ，Ｌ−ポリ乳酸（ＰＬＡ−ＣＯＯＨ）の合成４
反応温度を１６０℃に昇温し、圧力を５ｍｍＨｇに減圧した条件で、２４時間反応させたことを除いては上記実施例１同じ方法を遂行して、２，１００ダルトンの数平均分子量を持つＤ，Ｌ−ポリ乳酸７５ｇ（収率７５％）を得た。
【００６４】
上記実施例１〜４で合成したＤ，Ｌ−ポリ乳酸を下記表１に示した。
【００６５】
【表１】
2005505675.tif 000002
＊収率＝（得られた高分子／使われたモノマー）×１００
【００６６】
実施例５：Ｄ,Ｌ−乳酸とグリコール酸の共重合体（ＰＬＧＡ−ＣＯＯＨ）の合成１
Ｄ，Ｌ−乳酸５５ｇ（０．６モル）とグリコール酸４５ｇ（０．６モル）を共に２５０ｍＬの三口丸底フラスコに導入した。反応温度を１５０℃に昇温し、圧力を１０ｍｍＨｇに減圧した条件で１２時間反応させたことを除いては上記実施例１と同じ方法を遂行して、９２０ダルトンの数平均分子量を持つＤ，Ｌ−乳酸とグリコール酸の共重合体（ＰＬＧＡ−ＣＯＯＨ）６３ｇ（収率６３％）を得た。また、得られた生成物でＤ，Ｌ−乳酸／グリコール酸のモル比は５２／４８であった。
【００６７】
実施例６：Ｄ，Ｌ−乳酸とグリコール酸の共重合体（ＰＬＧＡ−ＣＯＯＨ）の合成２
Ｄ，Ｌ−乳酸７３ｇ（０．８モル）とグリコール酸２７ｇ（０．３５モル）を共に２５０ｍＬの三口丸底フラスコに導入した。反応温度を１６０℃に昇温し、圧力を１０ｍｍＨｇに減圧した条件で、１２時間反応させたことを除いては上記実施例１と同じ方法を遂行して、１，０４０ダルトンの数平均分子量を持つＤ，Ｌ−乳酸とグリコール酸の共重合体（ＰＬＧＡ−ＣＯＯＨ）６５ｇ（収率６５％）を得た。また、得られた生成物でＤ，Ｌ−乳酸／グリコール酸のモル比は６７／３３であった。
【００６８】
実施例７：Ｄ，Ｌ−乳酸とグリコール酸の共重合体（ＰＬＧＡ−ＣＯＯＨ）の合成３
Ｄ，Ｌ−乳酸９１ｇ（１．０モル）とグリコール酸９ｇ（０．１２モル）を共に２５０ｍＬの三口丸底フラスコに導入した。反応温度を１６０℃に昇温し、圧力を１０ｍｍＨｇに減圧した条件で、１２時間反応させたことを除いては上記実施例１と同じ方法を遂行して、１，１８０ダルトンの数平均分子量を持つＤ，Ｌ−乳酸とグリコール酸の共重合体（ＰＬＧＡ−ＣＯＯＨ）６８ｇ（収率６８％）を得た。また、得られた生成物でＤ，Ｌ−乳酸／グリコール酸のモル比は９１／９であった。
【００６９】
実施例８：Ｄ，Ｌ−乳酸とグリコール酸の共重合体（ＰＬＧＡ−ＣＯＯＨ）の合成４
Ｄ，Ｌ−乳酸７３ｇ（０．８モル）とグリコール酸２７ｇ（０．３５モル）を共に２５０ｍＬの三口丸底フラスコに導入した。反応温度を１８０℃に昇温し、圧力を５ｍｍＨｇに減圧した条件で、２４時間反応させたことを除いては上記実施例１と同じ方法を遂行して、１，６５０ダルトンの数平均分子量を持つＤ，Ｌ−乳酸とグリコール酸の共重合体（ＰＬＧＡ−ＣＯＯＨ）７３ｇ（収率７３％）を得た。また、得られた生成物でＤ，Ｌ−乳酸／グリコール酸のモル比は７１／２９であった。
【００７０】
上記実施例５〜８で合成した共重合体を下記表２に示した。
【００７１】
【表２】
2005505675.tif 000003
【００７２】
実施例９：Ｄ，Ｌ−乳酸とマンデル酸の共重合体（ＰＬＭＡ−ＣＯＯＨ）の合成
Ｄ，Ｌ−乳酸７５ｇとＤ，Ｌ−マンデル酸２５ｇを共に２５０ｍＬの三口丸底フラスコに導入した。フラスコに攪拌器を取り付けた後、８０℃の油浴で加熱及び減圧アスピレータで２５ｍｍＨｇに減圧しながら、１時間反応させて、 過量に存在する水分を除去した。反応温度を１８０℃に昇温し、圧力を１０〜２０ｍｍＨｇに減圧した条件で、１２時間反応させたことを除いては上記実施例1と同じ方法を遂行して、１，７５０ダルトンの数平均分子量を持つＤ，Ｌ−乳酸とマンデル酸の共重合体５４ｇ（収率５４％）を得た。また、得られた生成物でＤ，Ｌ−乳酸／マンデル酸のモル比は８５／１５であった。
【００７３】
実施例１０：アセトキシ  Ｄ，Ｌ−ポリ乳酸誘導体（ＡｃＯ−ＰＬＡ−ＣＯＯＨ）の合成
上記実施例２で合成したＤ，Ｌ−ポリ乳酸（数平均分子量：１，１４０ダルトン）５０ｇをクロロ酢酸２０ｍＬと共に２５０ｍＬの丸底フラスコに導入した。フラスコに濃縮器を取り付けた後、反応混合物を窒素気流下で４時間還流した。過量のクロロ酢酸を蒸留して除去した後、反応生成物を氷と水の混合水溶液に加えた。混合物をゆっくり攪拌して高分子を析出させた。析出された高分子を分離して蒸留水で２回洗浄した後、無水アセトンに溶かした。無水硫酸マグネシウムを加えて過量の水分を除去した。得られた生成物を濾過して硫酸マグネシウムを除去した。真空蒸発器を使用してアセトンを除去して高粘度液体のアセトキシＤ，Ｌ−ポリ乳酸（４６ｇ、収率９２％）を得た。1Ｈ−ＮＭＲ測定の結果、アセトキシ基は２．０２ｐｐｍの単一ピークとして確認された。
【００７４】
実施例１１：ベンゾイルオキシ  Ｄ，Ｌ−ポリ乳酸誘導体（ＢｅｎｚｏｙｌＯ−ＰＬＡ−ＣＯＯＨ）の合成
クロロ酢酸の代りにベンゾイルクロリドを添加したことを除いては上記実施例１０と同じ方法を遂行して、ベンゾイルオキシ  Ｄ，Ｌ−ポリ乳酸４７ｇ（収率９４％）を得た。
【００７５】
実施例１２：パルミトイルオキシ  Ｄ，Ｌ−ポリ乳酸誘導体（ＰａｌｍＯ−ＰＬＡ−ＣＯＯＨ）の合成
上記実施例２で合成したＤ，Ｌ−ポリ乳酸（数平均分子量：１，１４０ダルトン）２０ｇを２５０ｍＬの丸底フラスコに導入した。反応物を１２０℃油浴で真空下に完全に脱水した。油浴温度を５０℃に冷却し、アセトン５０ｍＬを加えて高分子を完全に溶かした。ここに塩化パルミトイル（palmitoyl  chloride）５ｍＬを加え、反応温度を５０℃にして窒素雰囲気下で、１０時間反応させた。反応生成物を過量のヘキサンで洗浄して残留反応物を除去した。ヘキサンを蒸留して除去した。次いで、反応生成物をアセトンに溶かした後、溶液を氷と水の混合水溶液に加えた。全体混合物をゆっくり攪拌して高分子を析出させた。析出された高分子を分離して蒸留水で２回洗浄した後、無水アセトンに溶かした。ここに無水硫酸マグネシウムを加えて過量の水分を除去した。得られた生成物を濾過して硫酸マグネシウムを除去し、真空蒸発器でアセトンを除去してパルミトイルオキシ  Ｄ，Ｌ−ポリ乳酸誘導体（１９．１ｇ、収率９６％）を得た。1Ｈ−ＮＭＲ測定結果、パルミトイル基は０．８８、１．３および２．３８ｐｐｍのピークとして確認された。
【００７６】
実施例１３〜２２：ポリ乳酸誘導体のカルボン酸塩の合成
上記実施例１〜１２で合成したポリ乳酸誘導体をアセトンまたはアセトン水溶液に溶かした後、炭酸水素ナトリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素カリウム、または炭酸カリウム、またはこれらの水溶液と反応させて、そのカルボン酸塩を製造した。
【００７７】
実施例１３：ポリ乳酸ナトリウム塩（ＰＬＡ−ＣＯＯＮａ）の合成１
上記実施例１で合成したＤ，Ｌ−ポリ乳酸（数平均分子量：５４0ダルトン）をアセトンに溶かした後、溶液を丸底フラスコに導入し、フラスコに攪拌器を取り付けた後、室温で溶液をゆっくり攪拌し、炭酸水素ナトリウム水溶液（１Ｎ）をゆっくり加えてｐＨが７に達するまで中和させた。少量のアセトン溶液を採って多量の蒸留水に希釈した後、溶液のｐＨを測定した。無水硫酸マグネシウムを加えて過量の水分を除去した。得られた混合物を濾過し、溶媒蒸発器でアセトンを蒸発させて白色固体を得た。固体を再び無水アセトンに溶かした後、溶液を濾過して無水アセトンに溶けない残留物を除去した。アセトンを蒸発させて白色固体状態のＤ，Ｌ−ポリ乳酸ナトリウム塩（収率９６％）を得た。図２に示されるように、1Ｈ−ＮＭＲを通じてカルボン酸基に隣接する水素のピークが４．８８ｐｐｍで確認されており、生成された高分子を水に溶かしたとき、ｐＨ６．５〜７．５であった。
【００７８】
実施例１４：ポリ乳酸ナトリウム塩（ＰＬＡ−ＣＯＯＮａ）の合成２
上記実施例２で合成したＤ，Ｌ−ポリ乳酸（数平均分子量：１，１４０ダルトン）と炭酸ナトリウム水溶液を使用したことを除いては上記実施例１３と同じ方法を遂行して、ポリ乳酸ナトリウム塩（収率９５％）を合成した。
【００７９】
実施例１５：アセトキシ  Ｄ，Ｌ−ポリ乳酸ナトリウム塩（ＡｃＯ−ＰＬＡ−ＣＯＯＮａ）の合成
上記実施例１０で合成したアセトキシ  Ｄ，Ｌ−ポリ乳酸（数平均分子量：１，１４０ダルトン）と炭酸ナトリウム水溶液を使用したことを除いては上記実施例１３と同じ方法を遂行して、アセトキシ  Ｄ，Ｌ−ポリ乳酸ナトリウム塩（収率９５％）を合成した。
【００８０】
実施例１６：パルミトイルオキシ  Ｄ，Ｌ−ポリ乳酸ナトリウム塩（ＰａｌｍＯ−ＰＬＡ−ＣＯＯＮａ）の合成
上記実施例１２で合成したパルミトイルオキシ  Ｄ，Ｌ−ポリ乳酸（数平均分子量：１，１４０ダルトン）をアセトン水溶液（２８．６ｖ／ｖ％）に完全に溶かした後、溶液を丸底フラスコに導入した。フラスコに攪拌器を取り付け、溶液を室温でゆっくり攪拌した後、 炭酸水素ナトリウム水溶液（１Ｎ）をｐＨが７に達するまで加えた。無水硫酸マグネシウムを加えて、過量の水分を除去した。得られた生成物を濾過し、溶媒蒸発器でアセトン水溶液を蒸発させて白色固体を得た。固体を再び無水アセトンに溶かした後、溶液を濾過して無水アセトンに溶けない残留物を除去した後、アセトンを蒸発させて白色固体状態のパルミトイルオキシ  Ｄ，Ｌ−ポリ乳酸ナトリウム塩（収率９６％）を得た。
【００８１】
実施例１７：ポリ乳酸カリウム塩（ＰＬＡ−ＣＯＯＫ）の合成
上記実施例３で合成したＤ，Ｌ−ポリ乳酸（数平均分子量：１，５５０ダルトン）と炭酸水素カリウム水溶液を使用したことを除いては上記実施例１３と同じ方法を遂行して、ポリ乳酸カリウム塩（収率９８％）を合成した。
【００８２】
実施例１８：ポリ乳酸ナトリウム塩（ＰＬＡ−ＣＯＯＮａ）の合成３
上記実施例４で合成したＤ，Ｌ−ポリ乳酸（数平均分子量：２，１００ダルトン）を使用したことを除いては上記実施例１３と同じ方法を遂行して、ポリ乳酸ナトリウム塩（収率９５％）を合成した。
【００８３】
実施例１９：Ｄ，Ｌ−乳酸とグリコール酸の共重合体のナトリウム塩（ＰＬＧＡ−ＣＯＯＮａ）の合成１
上記実施例５で合成したＤ，Ｌ−乳酸とグリコール酸との共重合体（数平均分子量：９２０ダルトン）と炭酸ナトリウム水溶液を使用したことを除いては上記実施例１３と同じ方法を遂行して、Ｄ，Ｌ−乳酸とグリコール酸の共重合体のナトリウム塩（収率９８％）を合成した。
【００８４】
実施例２０：Ｄ，Ｌ−乳酸とグリコール酸の共重合体のナトリウム塩（ＰＬＧＡ−ＣＯＯＮａ）の合成２
上記実施例６で合成したＤ，Ｌ−乳酸とグリコール酸との共重合体（数平均分子量：１，０４０ダルトン)を使用したことを除いては上記実施例１３と同じ方法を遂行して、Ｄ，Ｌ−乳酸とグリコール酸の共重合体のナトリウム塩（収率９３％）を合成した。
【００８５】
実施例２１：Ｄ，Ｌ−乳酸とグリコール酸の共重合体のカリウム塩（ＰＬＧＡ−ＣＯＯＫ）の合成
上記実施例７で合成したＤ，Ｌ−乳酸とグリコール酸との共重合体（数平均分子量：１，１８０ダルトン)と炭酸カリウム水溶液を使用したことを除いては上記実施例１３と同じ方法を遂行して、Ｄ，Ｌ−乳酸とグリコール酸の共重合体のカリウム塩（収率９２％）を合成した。
【００８６】
実施例２２：Ｄ，Ｌ−乳酸とグリコール酸の共重合体のナトリウム塩（ＰＬＧＡ−ＣＯＯＮａ）の合成３
上記実施例８で合成したＤ，Ｌ−乳酸とグリコール酸との共重合体（数平均分子量：１，６５０ダルトン)を使用したことを除いては上記実施例１３と同じ方法を遂行して、Ｄ，Ｌ−乳酸とグリコール酸の共重合体のナトリウム塩（収率９８％）を合成した。
【００８７】
上記実施例１３〜２２で合成したポリ乳酸誘導体のカルボン酸金属イオン塩を下記表３に示した。
【００８８】
【表３】
2005505675.tif 000004
【００８９】
実験例１：ｐＨによるミセル形成
Ｄ，Ｌ−ポリ乳酸ナトリウム塩（数平均分子量：１，０００ダルトン）を水溶液に溶かした後、溶液のｐＨを調整してミセル形成可否を確認した。形成されたミセルの粒子サイズはＤＬＳ（Dynamic Light Scattery, ZetaPlus, Brookhaven Instruments Corp.）を用いて測定した。その結果は図７及び表４に示した。
【００９０】
【表４】
2005505675.tif 000005
【００９１】
上記高分子はｐＨ４以上の水溶液でミセルを形成して清澄な水溶液になったが、ｐＨ４以下で析出した。
【００９２】
実験例２：分子量に依存するミセル形成
数平均分子量が２００、５００、７００ダルトンのＤ，Ｌ−ポリ乳酸をそれぞれ蒸留水に溶かした後、その溶解度およびｐＨを測定した。Ｍｗ  ２００ダルトンのＤ，Ｌ−ポリ乳酸は清澄な水溶液を形成したが、５００ダルトン以上のＤ，Ｌ−ポリ乳酸の水溶液では高分子が析出された。上記水溶液のｐＨは１〜２であった。上記水溶液のｐＨを６．５〜７．５に調整してＤ，Ｌ−ポリ乳酸を完全に溶かした。形成されたミセルの粒子サイズをＤＬＳ（Dynamic Light Scattery, ZetaPlus, Brookhaven Instruments Corp.）を用いて測定した。その結果を表５に示した。
【００９３】
【表５】
2005505675.tif 000006
【００９４】
実験例３：高分子濃度及び種類によるミセルの形成
上記実施例１〜２２で合成されたポリ乳酸誘導体を蒸留水に溶かしてミセル形成の可否を確認し、生成されたミセルのサイズを測定した。実施例１〜１２で合成したポリ乳酸誘導体を蒸留水に溶かし、ｐＨを炭酸水素ナトリウムなどで調整し、実施例１３〜２２のポリ乳酸誘導体はそれ自体が水によく溶けるので、ｐＨを調整せず蒸留水に溶かした。ポリ乳酸誘導体を溶解後の溶液のｐＨは６．５〜７．５であった。ポリ乳酸誘導体の溶解度は、高分子を蒸留水に加えて混合物を５分毎に３０秒間激しく振って混ぜるときに溶ける程度を測定した。蒸留水１０ｍＬに高分子１ｇを溶かした後、細孔径が２００ｎｍの薄膜フィルタに水溶液を通過させた。高分子水溶液は清澄で透明であった。濾過後の高分子の濃度が変化しなかったことから、ポリ乳酸誘導体は水によく溶けると判断した。
【００９５】
さらに、上記高分子をｐＨ７．４のＰＢＳ（リン酸緩衝化生理食塩水）に溶かし、ＳＥＣ（Size Exclusion Chromatography, Water 410 Differential Refractometer）を用いて、ミセルが形成されるか否かを確認した。ＮａＣｌ（６ｇ／ｍＬ）を含むＰＢＳを移動相とし、流速は１ｍL／ｍｉｎとした。使用された高分子の濃度及び種類によるミセル形成の程度を、図３及び表６に示す。
【００９６】
【表６】
2005505675.tif 000007
【００９７】
図３に示されるように、ミセルが形成された高分子部分（ａ）と溶解された高分子部分（ｂ）のそれぞれのピークをスペクトルで示した。その他に表６に示されるように、高分子の濃度を濃くするにつれてミセルが形成された高分子部分を示すピークの相対面積が増加した。上記結果から、高分子の濃度が濃くなるにつれて形成されるミセルの含量が増加するものと確認された。
【００９８】
そして、形成されたミセルの粒子サイズはＤＬＳ（Dynamic Light Scattery, ZetaPlus, Brookhaven Instruments Corp.）を用いて測定した。その結果を表７に示した。
【００９９】
【表７】
2005505675.tif 000008
【０１００】
表７に示されるように、形成されたミセルの平均粒子サイズは１０〜２１ｎｍであった。高分子ミセルの適切なサイズは、１００ｎｍ以下であり、これは高分子ミセルの親水性外核によって生体内での細網内皮系（ＲＥＳ）による薬物の捕獲を最小化し、このことが、長期間体循環を可能にし、高分子量のため腎臓を通じた排泄が抑制される。本発明に係るミセルは上記条件に適したサイズをもっているだけでなく、ミセルのサイズが小さければミセルの安全性が向上するため、適用範囲が広い。
【０１０１】
実験例４：難溶性薬物の可溶化試験
上記実施例で合成したＤ，Ｌ−ポリ乳酸誘導体のナトリウム塩とパクリタキセルは、アセトン、エタノール、酢酸エチル、アセトニトリル、ジクロロメタン、またはクロロホルム等の有機溶媒に溶かして清澄な溶液を得た。真空蒸発器で、この溶液から有機溶媒を除去し、難溶性薬物とＤ，Ｌ−ポリ乳酸誘導体のナトリウム塩の均一な混合物を製造した。混合物をｐＨ４〜８の水溶液に溶かした。生成された難溶性薬物含有−ミセル水溶液を細孔径が２００ｎｍの薄膜フィルタを用いて溶解されない薬物を除去した後、水溶液中の薬物濃度を液体クロマトグラフィーで定量した。その結果を表８に示した。
【０１０２】
【表８】
2005505675.tif 000009
【０１０３】
上記表８に示されるように、本発明のポリ乳酸誘導体はパクリタキセル及びシクロスポリン等の難溶性薬物を效果的に可溶化する。パクリタキセルは水に対する溶解度が０．０１ｍｇ／ｍＬ以下であるが、本発明のポリ乳酸誘導体を使用すると、１５〜２５ｍｇ／ｍＬの大量のパクリタキセルをミセル形態で可溶化できるので、大量の薬物を体内に投与できるようになる。
【０１０４】
その他に、パクリタキセルとＤ，Ｌ−ポリ乳酸誘導体のナトリウム塩の混合物をＣＤＣｌ3とＤ2Ｏに溶かした後、1Ｈ−ＮＭＲ測定結果を図４および図５に示した。図４に示すように、ＣＤＣｌ3は有機溶媒であるため、ポリ乳酸がミセルを形成することができない。従って、パクリタキセルのベンゾイルオキシ基の特性ピークが７．０〜８．２ｐｐｍで表れた。しかし、図５に示すように、パクリタキセルに対して溶解力がほとんどないＤ2Ｏに溶かした場合、パクリタキセルはポリ乳酸誘導体のミセルによって封入されながら、可溶化され、1Ｈ−ＮＭＲスペクトルでベンゾイルオキシ基によるピークが７．０〜８．２ｐｐｍで表れなかった。上記結果はパクリタキセルがポリ乳酸誘導体のミセルに囲まれて核（core）を形成してＮＭＲ磁場の影響を受けないからである。
【０１０５】
実験例５：ｐＨ依存型難溶性薬物含有ミセルの製造及び評価
上記実施例１３で合成したＤ，Ｌ−ポリ乳酸ナトリウム塩９００ｍｇとシクロスポリン１００ｍｇをアセトン１０ｍＬに溶かした後、真空蒸発器を利用してアセトンを除去し、Ｄ，Ｌ−ポリ乳酸誘導体のナトリウム塩とシクロスポリンのナトリウム塩の均一に混合された固体を得た。この固体をプレスで圧搾して直径1ｃｍ、厚さ２ｍｍの円板を製造した。上記シクロスポリン含有−円板をｐＨ２で塩酸水溶液１０ｍＬに加えて、３７℃で培養しながら時間間隔で水溶液の薬物濃度を測定した。２時間後、炭酸水素ナトリウムを加えて水溶液のｐＨを６．２に調整した後、同一条件下に培養しながら水溶液に溶解されたシクロスポリンの濃度を測定した。その結果を図６に示した。
【０１０６】
図６に示すように、ポリ乳酸誘導体はｐＨ２で可溶化しないため、薬物は円板型の固体から放出されなかった。その後、ｐＨが２から６に調整すると、ポリ乳酸誘導体がミセル形態に薬物を包含しながら、ゆっくり可溶化され、薬物が水溶液相に徐々に放出されるようになる。また、ｐＨを６に調整後、１時間内に約８０％の薬物の放出が行われており、２時間後には１００％の薬物が放出された。
【０１０７】
上記結果から、ポリ乳酸誘導体は、ｐＨの変化によって、該ポリ乳酸を含むミセル内に薬剤を捕捉することによって薬剤を可溶化していることが分かり、ｐＨの調整後、時間経過による可溶化程度が分かった。難溶性薬物を含むポリ乳酸誘導体の剤形を経口投与する場合、胃では薬物を放出しないが、小腸で可溶化され吸収されると予測することができる。
【０１０８】
上記に詳述した具体例は、本発明の原理を説明するためだけのものであると解釈すべきである。種々の変形例や代替例は、本発明の思想や範囲を逸脱しない範囲で可能であり、添付された特許請求の範囲はこうした変形例や代替例を含むものである。従って、本発明を図面に図示し、本発明の最も有用で、且つ好ましい実施例であると現在考えられることを用いて詳細に、且つ綿密に上記に説明したが、種々の変形が請求項に記載された本発明の原理や概念から逸脱しない範囲内で可能であるということは、当業者にとっては明白なことである。
【図面の簡単な説明】
【０１０９】
【図１】本発明のＤ,Ｌ−ポリ乳酸の1Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示すグラフである。
【図２】本発明のＤ,Ｌ−ポリ乳酸ナトリウム塩の1Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示すグラフである。
【図３】本発明のＤ,Ｌ−ポリ乳酸ナトリウム塩のサイズ排除クロマトグラフィー(ＳＥＣ)スペクトルを示すグラフであり、図３（ａ）はミセルを形成するＤ,Ｌ−ポリ乳酸ナトリウム塩を示すピーク、（ｂ）はミセルが形成されないＤ,Ｌ−ポリ乳酸ナトリウム塩を示すピークである。
【図４】ＣＤＣｌ3溶媒下で、Ｄ,Ｌ−ポリ乳酸ナトリウム塩とパクリタキセルとの混合物の1Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示すグラフである。
【図５】Ｄ2Ｏ溶媒下で、Ｄ,Ｌ−ポリ乳酸ナトリウム塩とパクリタキセルとの混合物の1Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示すグラフである。
【図６】ｐＨ変化によるシクロスポリンの可溶化を示すグラフである。
【図７】ｐＨ変化によるＤ,Ｌ−ポリ乳酸ナトリウム塩の溶解度を示すグラフである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【国際公開パンフレット】
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【国際調査報告】
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