(57)【要約】インターロイキン−２（ＩＬ−２）またはその生物学的に活性な改変体と少なくとも１つの抗ＨＥＲ２抗体またはその抗原結合フラグメントとの組み合わせを使用して、ＨＥＲ２レセプタータンパク質の過剰発現によって特徴付けられる癌を有する被験体を処置するための方法が、提供される。これらの治療剤は、２つの別々の薬学的組成物として投与され、一方は、ＩＬ−２（またはその改変体）を含み、これは、一定のＩＬ−２投薬レジメンまたは２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンに従って投与され、他方は、少なくとも１つの抗ＨＥＲ２抗体（またはそのフラグメント）を含み、これは、１週間の投薬レジメンに従って投与されるか、または２週間毎、３週間毎または４週間毎に１回投与される。これらの２つの薬剤を一緒に投与することは、抗ＨＥＲ２抗体単独の有効性を増強し、その結果、この治療剤単独で観察される応答と比較して、改善された正の治療応答を生じる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒト被験体におけるＨＥＲ２レセプタータンパク質の過剰発現によって特徴付けられる癌を処置する方法であって、該方法は、処置期間の間、一定のＩＬ−２投薬レジメンの１回以上のサイクルの投与と組み合わせて、該処置期間全体にわたって、１週間の投薬スケジュールに従って、または３週間毎に１回、治療有効用量の抗ＨＥＲ２抗体を該被験体に投与する工程を包含し、ここで、該一定のＩＬ−２投薬レジメンは、第１の期間および第２の期間を含み、第１の期間において、一定の合計週間用量のＩＬ−２が、該被験体に投与され、第２の期間において、ＩＬ−２投与が、該被験体から控えられる、方法。
【請求項２】
前記第１の期間が、約２週間〜約１２週間の持続時間を有し、かつ、前記第２の期間が、約１週間〜約４週間の持続時間を有する、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記第１の期間が、４週間の持続時間を有し、かつ、前記第２の期間が、１週間の持続時間を有する、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記抗ＨＥＲ２抗体の第１の投与が、前記処置期間の１日目に開始し、そして、前記一定のＩＬ−２投薬レジメンの第１のサイクルが、該抗ＨＥＲ２抗体の第１の投与から１０日以内に開始される、請求項２に記載の方法。
【請求項５】
前記一定のＩＬ−２投薬レジメンの第１のサイクルが、前記処置期間の８日目に開始される、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
請求項４に記載の方法であって、前記処置期間が、前記一定のＩＬ−２投薬レジメンの１回以上のその次のサイクルを含み、該その次のサイクルは、該一定のＩＬ−２投薬レジメンの第１のサイクルの完了後か、または該一定のＩＬ−２投薬レジメンの任意のその次のサイクルの完了後の４週間以内に開始され、ここで、前記抗ＨＥＲ２抗体は、該処置期間全体にわたって投与される、方法。
【請求項７】
前記抗ＨＥＲ２抗体の治療有効用量が、約１．０ｍｇ／ｋｇ〜約１０．０ｍｇ／ｋｇの範囲である、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記抗ＨＥＲ２抗体の治療有効用量が、前記処置期間の１日目において約４．０ｍｇ／ｋｇであり、その後の各用量については約２．０ｍｇ／ｋｇである、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記ＩＬ−２の合計週間用量が、単一用量として投与されるか、または１週間に２回、１週間に３回、１週間に４回、１週間に５回、１週間に６回もしくは１週間に７回の投薬スケジュールに従って投与される、一連の等価な用量に分割される、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
前記ＩＬ−２が、静脈内、筋肉内、および皮下からなる群より選択される経路によって投与される、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
請求項１に記載の方法であって、前記ＩＬ−２の一定の合計週間用量が、ヒト薬物動力学（ＰＫ）データからの血清濃度−時間曲線の下の面積によって決定されるように、２７０μｇ〜１６２０μｇの範囲の参照ＩＬ−２標準の合計週間用量に等しい量である、方法。
【請求項１２】
前記ＩＬ−２の一定の合計週間用量が、６００μｇ〜１０８０μｇである、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記ＩＬ−２の一定の合計週間用量が、１週間に２回の投薬スケジュールに従って投与される２つの等価な用量に分割される、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記ＩＬ−２の１一定の合計週間用量が、３６０μｇ〜８４０μｇである、請求項１１に記載の方法。
【請求項１５】
前記ＩＬ−２の一定の合計週間用量が、１週間に３回の投薬スケジュールに従って投与される３つの等価な用量に分割される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記ＩＬ−２が、単量体ＩＬ−２薬学的組成物、多量体ＩＬ−２薬学的組成物、安定化凍結乾燥ＩＬ−２薬学的組成物、および安定化噴霧乾燥ＩＬ−２薬学的組成物からなる群より選択される薬学的組成物で提供される、請求項１に記載の方法。
【請求項１７】
前記ＩＬ−２が、多量体ＩＬ−２薬学的組成物で提供される、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記ＩＬ−２の一定の合計週間用量が、約１１００μｇ〜約３３００μｇのＩＬ−２の合計週間用量に等価な量の前記多量体ＩＬ−２薬学的組成物である、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
請求項１８に記載の方法であって、前記ＩＬ−２の一定の合計週間用量が、約１８３３μｇ〜約３３００μｇのＩＬ−２の合計週間用量に等価な量の前記多量体ＩＬ−２薬学的組成物であり、ここで、該ＩＬ−２の１週間の総一定用量が、１週間に２回の投薬スケジュールに従って投与される２つの等価な用量に分割される、方法。
【請求項２０】
請求項１８に記載の方法であって、前記ＩＬ−２の１週間の総一定用量が、約１１００μｇ〜約２５６７μｇのＩＬ−２の１週間の総用量に等価な量の前記多量体ＩＬ−２薬学的組成物であり、ここで、該ＩＬ−２の一定の合計週間用量が、１週間に３回の投薬スケジュールに従って投与される３つの等価な用量に分割される、方法。
【請求項２１】
前記抗ＨＥＲ２抗体の治療有効用量が、前記処置期間の１日目において約４．０ｍｇ／ｋｇであり、その後の各用量については約２．０ｍｇ／ｋｇである、請求項１８に記載の方法。
【請求項２２】
前記ＩＬ−２が、ヒトＩＬ−２についてのアミノ酸配列を有する組換え産生されたＩＬ−２であるか、またはヒトＩＬ−２についてのアミノ酸配列に少なくとも７０％の配列同一性を有するその改変体である、請求項１に記載の方法。
【請求項２３】
前記その改変体が、ｄｅｓ−アラニル−１、セリン１２５ヒトインターロイキン−２である、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記抗ＨＥＲ２抗体が、少なくとも１つのヒト定常領域を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項２５】
前記抗ＨＥＲ２抗体が、４Ｄ５、５２０Ｃ９、４Ｄ５の抗原結合フラグメント、および５２０Ｃ９の抗原結合フラグメントからなる群より選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項２６】
前記抗ＨＥＲ２抗体が、４Ｄ５またはそのヒト化形態、キメラ形態もしくはヒト形態である、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
ヒト被験体におけるＨＥＲ２レセプタータンパク質の過剰発現によって特徴付けられる癌を処置する方法であって、該方法は、処置期間の間、２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンの１回以上のサイクルの投与と組み合わせて、該処置期間全体にわたって、１週間の投薬スケジュールに従って、または３週間毎に１回、治療有効用量の抗ＨＥＲ２抗体を該被験体に投与する工程を包含し、ここで、該２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンは、第１の期間、その後の第２の期間を含み、第１の期間において、より高い合計週間用量のＩＬ−２が、該被験体に投与され、第２の期間において、より低い合計週間用量のＩＬ−２が、該被験体に投与される、方法。
【請求項２８】
前記第１の用量のＩＬ−２が、第１の用量の抗ＨＥＲ２抗体の投与より前に、前記被験体に投与される、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
前記第１の用量のＩＬ−２が、前記第１の用量の抗ＨＥＲ２抗体が前記被験体に投与される１ヶ月前までに投与される、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
前記第１の用量のＩＬ−２が、前記第１の用量の抗ＨＥＲ２抗体が前記被験体に投与される１週間前に投与される、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
第１の用量のＩＬ−２が、第１の用量の抗ＨＥＲ２抗体と同時に前記被験体に投与される、請求項２７に記載の方法。
【請求項３２】
第１の用量のＩＬ−２が、第１の用量の抗ＨＥＲ２抗体が前記被験体に投与される１週間後に、該被験体に投与される、請求項２７に記載の方法。
【請求項３３】
前記抗ＨＥＲ２抗体の治療有効用量が、約１．０ｍｇ／ｋｇ〜約１０．０ｍｇ／ｋｇの範囲である、請求項２７に記載の方法。
【請求項３４】
前記抗ＨＥＲ２抗体の治療有効用量が、前記処置期間の１日目において約４．０ｍｇ／ｋｇであり、その後の各用量については約２．０ｍｇ／ｋｇである、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
前記２つのレベルのＩＬ−２の投薬レジメンが、４週間〜１６週間の組み合わされた持続時間を有する、請求項２７に記載の方法。
【請求項３６】
前記２つのレベルのＩＬ−２の投薬レジメンの第１の期間が、４週間〜１６週間の前記組み合わされた持続時間から離れた、少なくとも１週間持続時間を有する、請求項３５に記載の方法。
【請求項３７】
前記２つのレベルのＩＬ−２の投薬レジメンの第１の期間が、４週間〜１６週間の前記組み合わされた持続時間の２分の１の持続時間を有する、請求項３５に記載の方法。
【請求項３８】
請求項２７に記載の方法であって、前記ＩＬ−２のより高い合計週間用量が、単一用量として投与されるか、または１週間に２回、１週間に３回、１週間に４回、１週間に５回、１週間に６回もしくは１週間に７回の投薬スケジュールに従って投与される、第１の一連の等価な用量に分割され、かつ、前記ＩＬ−２のより低い合計週間用量が、単一用量として投与されるか、または１週間に２回、１週間に３回、１週間に４回、１週間に５回、１週間に６回もしくは１週間に７回の投薬スケジュールに従って投与される、第２の一連の等価な用量に分割される、方法。
【請求項３９】
前記ＩＬ−２が、静脈内、筋肉内、および皮下からなる群より選択される経路によって投与される、請求項３８に記載の方法。
【請求項４０】
前記ＩＬ−２のより高い合計週間用量が、単一用量として投与される、請求項３８に記載の方法。
【請求項４１】
前記第１の一連の等価な用量が、１週間に２回の投薬スケジュールに従って投与される、請求項３８に記載の方法。
【請求項４２】
前記第１の一連の等価な用量が、１週間に３回の投薬スケジュールに従って投与される、請求項３８に記載の方法。
【請求項４３】
前記第１の一連の等価な用量が、１週間に４回の投薬スケジュールに従って投与される、請求項３８に記載の方法。
【請求項４４】
前記第１の一連の等価な用量が、１週間に５回の投薬スケジュールに従って投与される、請求項３８に記載の方法。
【請求項４５】
前記第１の一連の等価な用量が、１週間に６回の投薬スケジュールに従って投与される、請求項３８に記載の方法。
【請求項４６】
前記第１の一連の等価な用量が、１週間に７回の投薬スケジュールに従って投与される、請求項３８に記載の方法。
【請求項４７】
前記ＩＬ−２のより低い合計週間用量が、単一用量として投与される、請求項３８に記載の方法。
【請求項４８】
前記第２の一連の等価な用量が、１週間に２回の投薬スケジュールに従って投与される、請求項３８に記載の方法。
【請求項４９】
前記第２の一連の等価な用量が、１週間に３回の投薬スケジュールに従って投与される、請求項３８に記載の方法。
【請求項５０】
前記第２の一連の等価な用量が、１週間に４回の投薬スケジュールに従って投与される、請求項３８に記載の方法。
【請求項５１】
前記第２の一連の等価な用量が、１週間に５回の投薬スケジュールに従って投与される、請求項３８に記載の方法。
【請求項５２】
前記第２の一連の等価な用量が、１週間に６回の投薬スケジュールに従って投与される、請求項３８に記載の方法。
【請求項５３】
前記第２の一連の等価な用量が、１週間に７回の投薬スケジュールに従って投与される、請求項３８に記載の方法。
【請求項５４】
請求項２７に記載の方法であって、前記ＩＬ−２のより高い合計週間用量が、ヒト薬物動力学（ＰＫ）データからの血清濃度−時間曲線の下の面積によって決定されるように、６００μｇ〜１６２０μｇの範囲の参照ＩＬ−２標準の１週間の総用量に等しい量であり、前記ＩＬ−２のより低い合計週間用量が、ヒトＰＫデータからの血清濃度−時間曲線の下の面積によって決定されるように、３６０μｇ〜約１０８０μｇの範囲の参照ＩＬ−２標準の合計週間用量に等しい量であり、ここで、該ＩＬ−２のより低い合計週間用量が、該ＩＬ−２のより高い合計週間用量より低い、方法。
【請求項５５】
請求項５４に記載の方法であって、前記ＩＬ−２のより高い合計週間用量が、単一用量として投与されるか、または１週間に２回、１週間に３回、１週間に４回、１週間に５回、１週間に６回もしくは１週間に７回の投薬スケジュールに従って投与される、第１の一連の等価な用量に分割され、かつ、前記ＩＬ−２のより低い合計週間用量が、単一用量として投与されるか、または１週間に２回、１週間に３回、１週間に４回、１週間に５回、１週間に６回もしくは１週間に７回の投薬スケジュールに従って投与される、第２の一連の等価な用量に分割される、方法。
【請求項５６】
前記ＩＬ−２のより高い合計週間用量が、６００μｇ〜１０８０μｇであり、前記ＩＬ−２のより低い合計週間用量が、３６０μｇ〜８４０μｇである、請求項５４に記載の方法。
【請求項５７】
前記ＩＬ−２のより高い合計週間用量が、１０８０μｇであり、前記ＩＬ−２のより低い合計週間用量が、８４０μｇである、請求項５６に記載の方法。
【請求項５８】
前記抗ＨＥＲ２抗体の治療有効用量が、約１．０ｍｇ／ｋｇ〜約１０．０ｍｇ／ｋｇの範囲である、請求項５４に記載の方法。
【請求項５９】
前記抗ＨＥＲ２抗体の治療有効用量が、前記処置期間の１日目において約４．０ｍｇ／ｋｇであり、その後の各用量については約２．０ｍｇ／ｋｇである、請求項５８に記載の方法。
【請求項６０】
前記ＩＬ−２が、単量体ＩＬ−２薬学的組成物、多量体ＩＬ−２薬学的組成物、安定化凍結乾燥ＩＬ−２薬学的組成物、および安定化噴霧乾燥ＩＬ−２薬学的組成物からなる群より選択される薬学的組成物で提供される、請求項２７に記載の方法。
【請求項６１】
前記ＩＬ−２が、多量体ＩＬ−２薬学的組成物で提供される、請求項６０に記載の方法。
【請求項６２】
請求項６１に記載の方法であって、前記ＩＬ−２のより高い合計週間用量が、約１８３３μｇ〜約３３００μｇのＩＬ−２の合計週間用量に等しい量の前記多量体ＩＬ−２薬学的組成物であり、前記ＩＬ−２のより低い合計週間用量が、約１１００μｇ〜約２５６７μｇのＩＬ−２の合計週間用量に等しい量の該多量体ＩＬ−２薬学的組成物であり、ここで、該ＩＬ−２のより低い合計週間用量が、該ＩＬ−２のより高い合計週間用量より低い、方法。
【請求項６３】
請求項６２に記載の方法であって、前記ＩＬ−２のより高い合計週間用量が、約１８３３μｇ〜約２５６７μｇのＩＬ−２の合計週間用量に等しい量の前記多量体ＩＬ−２薬学的組成物であり、前記ＩＬ−２のより低い合計週間用量が、約１１００μｇ〜約１８３３μｇのＩＬ−２の合計週間用量に等しい量の該多量体ＩＬ−２薬学的組成物であり、ここで、該ＩＬ−２のより低い合計週間用量が、該ＩＬ−２のより高い合計週間用量より低い、方法。
【請求項６４】
請求項６３に記載の方法であって、前記ＩＬ−２のより高い合計週間用量が、２５６７μｇのＩＬ−２の合計週間用量に等しい量の前記多量体ＩＬ−２薬学的組成物であり、前記ＩＬ−２のより低い合計週間用量が、約１８３３μｇのＩＬ−２の合計週間用量に等しい量の該多量体ＩＬ−２薬学的組成物である、方法。
【請求項６５】
前記抗ＨＥＲ２抗体の治療有効用量が、前記処置期間の１日目において約４．０ｍｇ／ｋｇであり、その後の各用量については約２．０ｍｇ／ｋｇである、請求項６２に記載の方法。
【請求項６６】
請求項６２に記載の方法であって、前記ＩＬ−２のより高い合計週間用量が、単一用量として投与されるか、または１週間に２回、１週間に３回、１週間に４回、１週間に５回、１週間に６回もしくは１週間に７回の投薬スケジュールに従って投与される、第１の一連の等価な用量に分割され、かつ、前記ＩＬ−２のより低い合計週間用量が、単一用量として投与されるか、または１週間に２回、１週間に３回、１週間に４回、１週間に５回、１週間に６回もしくは１週間に７回の投薬スケジュールに従って投与される、第２の一連の等価な用量に分割される、方法。
【請求項６７】
請求項２７に記載の方法であって、前記２つのレベルのＩＬ−２の投薬レジメンにおける中断をさらに含み、該中断は、前記２つのレベルのＩＬ−２の投薬レジメンの前記第１の期間と前記第２の期間との間の期間外のＩＬ−２投与を含む、方法。
【請求項６８】
前記中断が、約１週間〜約４週間の持続期間を有する、請求項６７に記載の方法。
【請求項６９】
請求項２７に記載の方法であって、前記処置期間が、前記２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンの１つ以上のその次のサイクルを含み、該その次のサイクルは、該２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンの完了後、または該２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンの任意の引き続くサイクルの完了後の、約１週間〜約４週間で開始され、ここで、前記抗ＨＥＲ２抗体は、該処置期間全体を通じて投与される、方法。
【請求項７０】
前記ＩＬ−２が、ヒトＩＬ−２についてのアミノ酸配列を有する、組換え産生されたＩＬ−２か、またはヒトＩＬ−２についてのアミノ酸配列に少なくとも７０％の配列同一性を有するその改変体である、請求項２７に記載の方法。
【請求項７１】
前記その改変体が、ｄｅｓ−アラニル−１、セリン１２５ヒトインターロイキン−２である、請求項７０に記載の方法。
【請求項７２】
前記抗ＨＥＲ２抗体が、少なくとも１つのヒト定常領域を含む、請求項２７に記載の方法。
【請求項７３】
前記抗ＨＥＲ２抗体が、４Ｄ５、５２０Ｃ９、４Ｄ５の抗原結合フラグメント、および５２０Ｃ９の抗原結合フラグメントからなる群より選択される、請求項２７に記載の方法。
【請求項７４】
前記抗ＨＥＲ２抗体が、４Ｄ５またはそのヒト化形態、キメラ形態もしくはヒト形態である、請求項７３に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（発明の分野）
本発明は、細胞増殖障害のための治療の方法に関し、より具体的には、インターロイキン−２およびＨＥＲ２レセプタータンパク質を標的化するモノクローナル抗体を用いて、ＨＥＲ２レセプタータンパク質の過剰発現によって特徴づけられる癌を処置する同時治療に関する。
【背景技術】
【０００２】
（発明の背景）
癌研究は、治療剤としてのモノクローナル抗体の使用に転じた。診断的抗体と類似の様式で産生された治療的抗体は、腫瘍細胞を標的化してその破壊を促進するように設計される。治療的モノクローナル抗体の使用は、タンパク質の抗原性に関する問題点に主に起因して、過去に阻まれてきた。モノクローナル抗体は、伝統的にマウス産物であり、従って、ヒトに注射される場合に抗マウス応答を引き起こす。このいわゆるＨＡＭＡ（ヒト抗マウス抗体）応答は、繰り返し投薬をほぼ常に不可能にするので、モノクローナル抗体の使用に対して大きな制限を課してきた。さらに、重篤な合併症（例えば、血清病）が、これらの薬剤の使用で報告されている。キメラ抗体およびヒト化抗体の出現により、モノクローナル抗体の治療的利益が理解されている。組換えＤＮＡ技術を使用して、ヒト骨格に抗体の可変部位すなわち抗原認識部位を連結することによって、モノクローナル抗体を構築することが可能である。この構築は、宿主からの、外来抗体の遮断または浄化の発生率を大きく低下させる。この開発は、複数の用量の抗体が与えられるのを可能にし、この治療を用いた、再現性があり、かつ持続性の応答のための機会を提供する。
【０００３】
最近の癌研究は、その細胞がタンパク質ｐ１８５ＨＥＲ２を過剰発現する癌の処置のための組換えヒト化モノクローナル抗体の使用に焦点を当ててきた。この１８５ｋＤａの増殖因子レセプターは、ｈｅｒ−２癌原遺伝子によってコードされ、また、ｎｅｕおよびｃ−ｅｒｂＢ−２とも称される（Ｓｌａｍｏｎら（１９８７）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２３５：１７７−１８２）。ｈｅｒ−２遺伝子は、上皮増殖因子レセプター（ＥＧＦＲ）をコードする遺伝子に密接に関連するが、これとは別のものである。この遺伝子の増幅は、ヒト乳癌細胞における新生物変換に関連していた（Ｓｌａｍｏｎら（１９８７）前出）。このタンパク質の過剰発現は、乳癌患者の２０〜３０％内で同定され、これは、局所的に進行した疾患、腫瘍再発の可能性の増大および患者生存率の低下と相関する。胃癌、子宮内膜癌、唾液腺癌、非小細胞肺癌、膵臓癌、卵巣癌、腹膜癌、前立腺癌または結腸直腸癌を有する患者の３０〜４０％ほどもまた、このタンパク質の過剰発現を示し得る。
【０００４】
ＨＥＲ２レセプター機能を標的化する、最も広範に認識されるモノクローナル抗体は、商標名Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ（登録商標）（トラスツザマブ（ｔｒａｓｔｕｚａｍａｂ）として一般に公知であり、そしてＧｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．，Ｓａｎ  Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａから入手可能）の下で市販される。この組換えヒト化モノクローナル抗体は、ｐ１８５ＨＥＲ２に対する高い親和性を有する。広範な転移性の乳房癌腫を有する患者での初期の臨床試験は、このモノクローナル抗体が、ＨＥＲ２を過剰発現する乳癌細胞の増殖を阻害する能力を実証した（Ｂａｓｅｌｇａら（１９９６）Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．１４（３）：７３７−７４４）。１つのこのような試験において、転移性の乳癌患者におけるＨｅｒｃｅｐｔｉｎ（登録商標）を用いた単一治療（ｍｏｎｏｔｈｅｒａｐｙ）は、１４％（２％の完全応答者（ｒｅｓｐｏｎｄｅｒ）および１２％の部分的応答者）の全体的応答率を生じた。応答の平均持続時間は、９．１ヶ月であり、平均生存は、１２．８ヶ月であった（０．５〜２４＋月の範囲）。２４％の患者が、５．８ヶ月にて、進行していなかった（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．、出願時のデータ）。ｐ１８５ＨＥＲ２の過剰発現の程度は、処置効果の予測であった。別の臨床試験において、Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ（登録商標）を用いた単一治療は、４３人の評価可能な転移性乳癌患者のうち５人（１１．６％）において、客観的応答を生じた（「Ｃａｎｃｅｒ  ａｎｄ  Ｌｅｕｋｅｍｉａ  Ｇｒｏｕｐ  Ｂ  （ＣＡＬＧＢ）  ９６６１，  Ａ  Ｐｉｌｏｔ  Ｓｔｕｄｙ  ｏｆ  Ｌｏｗ−ｄｏｓｅ  Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ−２  ｐｌｕｓ  Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ  Ｈｕｍａｎ  Ａｎｔｉ−ＨＥＲ２  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｉｎ  Ｓｏｌｉｄ  Ｔｕｍｏｒｓ」において引用されるように；本明細書中で参考として援用される）。
【０００５】
インターロイキン−２（ＩＬ−２）は、ナチュラルキラー（ＮＫ）およびＴ細胞の増殖および機能の強力な刺激因子である（Ｍｏｒｇａｎら（１９７６）Ｓｃｉｅｎｃｅ  １９３：１００７−１０１１）。この天然に存在するリンホカインは、単独でかまたはリンホカイン活性化キラー（ＬＡＫ）細胞もしくは腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）と組み合わせた場合のいずれかで、種々の悪性腫瘍に対する抗腫瘍活性を有することが示されている（例えば、Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇら（１９８７）Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３１６：８８９−８９７；Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ（１９８８）Ａｎｎ．Ｓｕｒｇ．２０８：１２１−１３５；Ｔｏｐａｌｉａｎら（１９８８）Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．６：８３９−８５３；Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇら（１９８８）Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３１９：１６７６−１６８０；およびＷｅｂｅｒら（１９９２）Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．１０：３３−４０を参照のこと）。ＩＬ−２の抗腫瘍活性は、転移性黒色腫および腎細胞癌腫を有する患者において最も記載されてきたが、他の疾患（特に、リンパ腫）もまた、ＩＬ−２での処置に応答するようである。しかし、腫瘍増殖に関する正の治療結果を達成するために使用される高用量のＩＬ−２は、毛細管漏出、低血圧および神経学的変化を含む重篤な副作用を度々引き起こす（例えば、Ｄｕｇｇａｎら（１９９２）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ  １２：１１５−１２２；Ｇｉｓｓｅｌｂｒｅｃｈｔら（１９９４）Ｂｌｏｏｄ  ８３：２０８１−２０８５；ならびにＳｚｎｏｌおよびＰａｒｋｉｎｓｏｎ（１９９４）Ｂｌｏｏｄ  ８３：２０２０−２０２２を参照のこと）。研究により、ＩＬ−２が、抗体依存的な細胞の細胞傷害性をインビトロで増強し、そして潜在的なナチュラルキラー細胞エフェクターが、低用量のＩＬ−２を用いて、インビボで増殖および活性化され得ることが示されている（Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．４６（１９９８）：３１８）。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
これらの因子の両方が、見込みのある抗腫瘍活性を示すが、癌患者についてのそれらの治療的可能性は、さらに試験される必要がある。その細胞がＨＥＲ２レセプターを過剰発現する癌は、特に処置が困難であり得る。より攻撃的なアプローチを提供する新規治療方法が必要とされる。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
（発明の要旨）
インターロイキン−２またはその生物学的に活性な改変体（本明細書中以降、集合的に「ＩＬ−２」）と、少なくとも１つの抗ＨＥＲ２抗体またはその抗原結合フラグメント（本明細書中以降、集合的に「抗ＨＥＲ２抗体」）との組み合わせを使用して、ｐ１８５ＨＥＲ２増殖因子レセプターの過剰発現によって特徴付けられる癌を有する被験体に処置を提供するための方法が提供される。これら２つの治療剤は、２つの別個の薬学的組成物（１つはＩＬ−２を含み、そして他方は少なくとも１つの抗ＨＥＲ２抗体を含み、各々、特定の投薬レジメンに従う）として、同時に投与される。抗ＨＥＲ２抗体を含む薬学的組成物は、一週間に１回の投薬スケジュールに従って投与されるか、あるいは、２週間毎、３週間毎または４週間毎に１回投薬される。ＩＬ−２を含む薬学的組成物は、一定ＩＬ−２投薬レジメンに従って投与されるか、または、２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンに従って投与される。
【０００８】
一定ＩＬ−２投薬レジメンは、一定の合計週間用量のＩＬ−２が被験体に投与される間の期間、その後のＩＬ−２投薬のない期間を含む。一定ＩＬ−２投薬レジメンの１つ以上のサイクルが、それを必要とする被験体に投与される。一定ＩＬ−２投薬レジメンの各サイクルの間に投与されるべき合計週間用量は、単一用量として投与され得る。あるいは、一定ＩＬ−２投薬レジメンの各サイクルの間に投与される合計週間用量は、一週間に２回、３回、４回、５回、６回または７回の投薬スケジュールに従って投与される、一連の等価な用量へと、分割され得る。
【０００９】
２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンは、ＩＬ−２投薬の第１の期間（ここで、より高い合計週間用量のＩＬ−２が被験体に投与される）、その後のＩＬ−２投薬の第２の期間（ここで、より低い合計週間用量のＩＬ−２が被験体に投与される）を含む。ＩＬ−２投薬の第２の期間の間のＩＬ−２の合計週間用量は、ＩＬ−２投薬の第１の期間の間に投与されるＩＬ−２の合計週間用量よりも低い。ＩＬ−２投薬の第１の期間の間および／または第２の期間の間に投与されるべき合計週間用量は、単一用量として投与され得る。あるいは、ＩＬ−２投薬の第１の期間および第２の期間のいずれかまたは両方の間に投与される合計週間用量は、一週間に２回、３回、４回、５回、６回または７回の投薬スケジュールに従って投与される、一連の等価な用量へと、分割され得る。これらの方法はまた、ＩＬ−２の２つのレベルの投薬レジメンにおいて中断を提供し、ここで、被験体には、２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンの第１の期間と第２の期間との間に、ＩＬ−２投与がされない期間が与えられる。これらの２つの治療剤を用いた同時治療は、抗ＨＥＲ２抗体についての推奨投薬レジメンと組み合わせて、２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンの１以上のサイクルの投与を含み得る。
【００１０】
本明細書中に示される様式でこれらの因子の両方を一緒に投与することは、抗ＨＥＲ２抗体の有効性を増強し、この抗体単独を用いて観察された治療応答に対して改善された、正の治療応答を生じる。
【００１１】
（発明の詳細な説明）
本発明は、ｐ１８５ＨＥＲ２増殖因子レセプタータンパク質の過剰発現によって特徴付けられる癌を有するヒト被験体を処置する方法に関する。この方法は、インターロイキン−２またはその生物学的に活性な改変体（本明細書中以降、集合的に「ＩＬ−２」）、および少なくとも１つの抗ＨＥＲ２抗体またはその抗原結合フラグメント（本明細書中以降、集合的に「抗ＨＥＲ２抗体」）を用いた組み合わせ治療を含み、これらの各々は、本明細書中に開示される特定の投薬レジメンに従って投与される。これらの投薬レジメンは、被験体が、抗ＨＥＲ２抗体治療を受けなくなるまで（例えば、この被験体が、完全な応答を示すか、または以下に留意されるような抗ＨＥＲ２抗体毒性の１つ以上の症状を示すか、あるいは、本明細書中以下に留意されるＩＬ−２毒性症状の発症に起因して、ＩＬ−２治療を受けなくなるとき）、続けられる。
【００１２】
ＩＬ−２および抗ＨＥＲ２抗体を用いた組み合わせ治療は、抗腫瘍活性を提供する。「抗腫瘍活性」によって、細胞増殖の速度の減少、および従って、既存の腫瘍もしくは治療の間に生じる腫瘍の増殖速度の低下、ならびに／または既存の新生物（腫瘍）細胞または新たに形成された腫瘍性細胞の破壊、および従って、治療の間の腫瘍の全体的サイズの減少、が意図される。本明細書中に示される様式での、ＩＬ−２および少なくとも１つの抗ＨＥＲ２抗体の組み合わせを用いた治療は、衰えない増殖細胞がその表面にＨＥＲ２レセプターを過剰発現する癌の治療に関して有益である生理学的応答を引き起こす。さらに、本明細書中に開示される特定のＩＬ−２投薬レジメンは、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞活性の断続的な刺激およびＩＬ−２投薬への長期曝露に関連し得るＩＬ２−関連の副作用の危険性の低下を提供する。
【００１３】
ｐ１８５ＨＥＲ２は、多くの癌原遺伝子産物が属するチロシン特異的プロテインキナーゼファミリーのメンバーである、１８５ｋＤａの細胞表面増殖因子レセプタータンパク質である。このタンパク質をコードするＨＥＲ２遺伝子はまた、当該分野でｃ−ｅｒＢ−２遺伝子とも称される。このヒト遺伝子は、Ｓｅｍｂａら（１９８５）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８２：６４９７−６５０１；Ｃｏｕｓｓｅｎｓら（１９８５）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２３０：１１３２−１１３９；およびＫｉｎｇら（１９８５）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２２９：９７４−９７６によって報告された。この癌原遺伝子は、化学的に誘導された神経芽細胞腫から同定されたラットｎｅｕ遺伝子の種改変体である（Ｓｃｈｅｃｔｅｒら（１９８５）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２２９：９７６−９７８）。ＨＥＲ２によってコードされるＨＥＲ２タンパク質は、細胞外ドメイン、２つのシステインリッチリピートクラスターを含む膜貫通ドメイン、および細胞内キナーゼドメインを有し、このことは、いまだ同定されていないリガンドに対する細胞レセプターであることを示す。本発明の目的のために、この増殖因子レセプタータンパク質は、本明細書中以降、ＨＥＲ２と称される。
【００１４】
少量のＨＥＲ２タンパク質が、組織特異的様式で、正常細胞の原形質膜上で発現される。このタンパク質は、増殖因子リガンドに結合するヘテロダイマーのレセプター複合体の一部として存在する。このリガンドの結合が、ＨＥＲ２レセプターを活性化し、細胞の外側から核への増殖シグナルの伝達を生じる。これらの増殖シグナルは、正常細胞の増殖および分裂の局面を調節する。正常細胞におけるＨＥＲ２遺伝子の変更は、ＨＥＲ２タンパク質の過剰発現を導き、細胞分裂の増加、細胞増殖速度の増加を生じ、そして癌細胞表現型への形質転換に関連し得る。ＨＥＲ２遺伝子におけるこのような変更が腫瘍細胞において生じる場合、ＨＥＲ２タンパク質が直接過剰発現されるか、または遺伝子増幅が複数コピーの遺伝子および引き続くＨＥＲ２タンパク質の過剰発現を生じるかのいずれかである。これらの変更を誘発する因子は、現在未知である。
【００１５】
ＨＥＲ２レセプタータンパク質の「過剰発現」によって、特定の組織または器官由来の正常細胞における発現レベルと比較した、患者のその組織または器官内の腫瘍由来の細胞におけるＨＥＲ２レセプタータンパク質の異常な発現レベルが意図される。ＨＥＲ２レセプターの過剰発現によって特徴づけられる癌を有する患者は、当該分野で公知の標準的なアッセイによって、決定され得る。好ましくは、過剰発現は、免疫組織化学（ＩＨＣ）検出を使用して、凍結組織切片またはパラフィン包埋組織切片の固定細胞において測定される。組織学的染色と組み合わせると、標的化タンパク質の局在が決定され得、そして腫瘍内でのその発現の程度が、定性的および半定量的の両方で測定され得る。このようなＩＨＣ検出アッセイは、当該分野で公知であり、そしてこれには、臨床試験アッセイ（ＣＴＡ）、市販のＬａｂＣｏｒｐ  ４Ｄ５試験および市販のＤＡＫＯ  ＨｅｒｃｅｐＴｅｓｔＴＭ（ＤＡＫＯ，Ｃａｒｐｉｎｔｅｒｉａ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ）が挙げられる。後者のアッセイは、０〜３＋の細胞染色（０は正常な発現であり、３＋は最も強力なポジティブ発現を示す）の特定の範囲を使用して、ＨＥＲ２タンパク質の過剰発現を有する癌を同定する（ｔｈｅ  Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ（登録商標）（Ｔｒａｓｔｕｚｕｍａｂ）ｆｕｌｌ  ｐｒｅｓｃｒｉｂｉｎｇ  ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ；１９９８年９月；Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．，Ｓａｎ  Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａを参照のこと）。従って、免疫組織化学（ＩＨＣ）または蛍光インサイチュハイブリダイゼーション（ＦＩＳＨ）によって、１＋、２＋または３＋、特に２＋または３＋、より具体的には３＋の範囲のＨＥＲ２タンパク質の過剰発現によって特徴づけられる癌を有する患者は、本発明の治療方法から利益を得る。
【００１６】
標準的な検出アッセイを使用して、いくつかの型の癌が、ＨＥＲ２レセプターを過剰発現する細胞を有すると特徴づけられている。このような癌としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：乳癌、胃癌、子宮内膜癌、唾液腺癌、非小細胞肺癌、膵臓癌、腎臓癌、卵巣癌、腹膜癌、前立腺癌、膀胱癌、結腸直腸癌およびグリア芽細胞腫。本発明の方法は、細胞がＨＥＲ２レセプタータンパク質を過剰発現する任意のこのような癌の処置／管理において有用である。乳癌が特に目的である。これは、米国の女性において最も一般的な悪性腫瘍であり、１９９９年について１７６，３００の新規症例が推定された（Ｌａｎｄｉｓら（１９９９）ＣＡ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｊ  Ｃｌｉｎ．４９：８−３１）。ＨＥＲ２タンパク質の過剰発現は、全ての人乳癌患者のうち約２５〜３０％において生じ（Ｓｌａｍｏｎら（１９８９）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４４：７０７−７１２）、そして、特に節ポジティブな乳癌患者において、芳しくない臨床的結果（再発の増加および低い生存率）と関連する。
【００１７】
本発明の方法は、既存の癌の処置に関するが、これらの方法は、治療の間に生じるさらなる腫瘍増殖の予防において有用であり得ることが認識される。本発明の方法は、乳癌を有する被験体、より具体的には、転移性乳癌を有し、そしてその転移性疾患についての１つ以上の化学療法レジメンの後に再発を経験するか、または抗ＨＥＲ２抗体を用いた以前の処置が失敗した被験体の処置において、特に有用である。従って、この型の癌の処置は、応答者の相対数が増加するので、本発明の方法を使用して改善される。
【００１８】
本発明の方法によれば、以下の他の箇所で規定されるようなＩＬ−２および少なくとも１つの抗ＨＥＲ２抗体は、ＨＥＲ２レセプタータンパク質の過剰発現によって特徴付けられる癌に関して、正の治療応答を促進するために、組み合わせて使用され得る。「正の治療応答」によって、これらの因子の組み合わされた抗腫瘍活性に関連する疾患における改善、および／またはこの疾患に関連する症状における改善が意図される。従って、例えば、正の治療応答は、この疾患における以下の改善のうち１つ以上をいう：（１）腫瘍サイズの減少；（２）癌細胞数の減少；（３）腫瘍増殖の阻害（すなわち、ある程度までの遅延、好ましくは停止）；（４）末梢器官への癌細胞浸潤の阻害（すなわち、ある程度までの遅延、好ましくは停止）；（５）腫瘍転移の阻害（すなわち、ある程度までの遅延、好ましくは停止）；ならびに（６）癌に関連する１つ以上の症状からのある程度の緩和。このような治療応答は、改善の程度としてさらに特徴付けされ得る。従って、例えば、改善は、完全な応答として特徴付けられ得る。「完全な応答」は、物理的試験、実験質研究、核研究およびＸ線研究（すなわち、ＣＴ（コンピューター断層撮影）および／またはＭＲＩ（磁気共鳴画像化））、ならびに研究に入る時点での全ての最初の異常または陽性部位について繰り返される他の非侵襲製手段によって確認される、全ての測定可能もしくは評価可能な疾患の全ての症状および徴候の消失の資料である。あるいは、疾患の改善は、部分的応答として分類され得る。「部分的応答」によって、処置前の測定値と比較した場合、全ての測定可能な病変の垂直直径の積の合計における、５０％より多い減少が意図される（評価可能な応答のみを有する患者について、部分的応答は適用されない）。
【００１９】
ＨＥＲ２レセプターの過剰発現によって特徴づけられる癌に関して、被験体における正の治療応答の促進は、ＩＬ−２および少なくとも１つの抗ＨＥＲ２抗体の両方を用いた同時治療によって達成される。「同時治療」によって、両方の物質の組み合わせの治療効果が、処置を受ける被験体において引き起こされるような、それを必要とする被験体への、ＩＬ−２および少なくとも１つの抗ＨＥＲ２抗体の提示が意図される。同時治療は、少なくとも１つの抗ＨＥＲ２抗体を含む薬学的組成物と組み合わせて、本明細書中に開示される投薬スケジュールに従って、ＩＬ−２を含む薬学的組成物の、少なくとも１つの治療有効用量を投与することによって達成され得、ここで、少なくとも１つの抗ＨＥＲ２抗体を含む薬学的組成物の治療有効量が、推奨投薬レジメンに従って投与される。例えば、本発明の方法によれば、同時治療は、少なくとも１つの抗ＨＥＲ２抗体を含む薬学的組成物の推奨治療有効量と組み合わせて、ＩＬ−２を含む薬学的組成物の推奨合計週間用量を投与することによって達成され、これらは各々、特定の投薬レジメンに従って投与される。「治療有効用量または治療有効量」によって、これら２つの治療剤の一方の量が、これら２つの治療剤の他方の治療有効用量または治療有効量と共に投与される場合、ＨＥＲ２レセプタータンパク質の過剰発現によって特徴づけられる癌の処置に関して、正の治療応答をもたらすことが意図される。別個の薬学的組成物の投与は、両方の物質の組み合わせの治療効果が、治療を受ける被験体において引き起こされる限り、同時または異なる時点であり得る。
【００２０】
これらの治療剤を治療的に活性な成分として含む別個の薬学的組成物は、当該分野で公知の任意の受容可能な方法を使用して投与され得る。従って、例えば、ＩＬ−２を含む薬学的組成物は、任意の注射形態（静脈内（ＩＶ）注射、筋内（ＩＭ）注射または皮下（ＳＣ）注射を含む）によって投与され得る。本発明のいくつかの実施形態において、ＩＬ−２を含む薬学的組成物は、ＳＣ注射によって投与される。本発明の他の実施形態において、ＩＬ−２を含む薬学的組成物は、徐放性処方物または徐放性デバイスを使用して投与される処方物である。このようなデバイスは、当該分野で周知であり、そしてこれには、例えば、経皮パッチ、および非徐放性ＩＬ−２薬学的組成物を用いて徐放性効果を達成するために、種々の用量で、連続的な一定状態の様式での経時的な薬物送達を提供し得る、小型移植可能ポンプが挙げられる。モノクローナル抗体を含む薬学的組成物は、例えば、静脈内で投与される。静脈内投与される場合、抗ＨＥＲ２抗体を含む薬学的組成物は、約０．５〜約５時間の期間にわたって、注入によって投与され得る。いくつかの実施形態において、注入は、投与される抗ＨＥＲ２抗体および投与される抗ＨＥＲ２抗体の量に依存して、約０．５〜約２．５時間の間の期間、約０．５〜約２．０時間の期間、約０．５〜約１．５時間の期間、または約１．５時間の期間にわたって生じる。
【００２１】
これらの治療剤の両方を用いる同時治療は、抗ＨＥＲ２抗体の抗腫瘍活性を増強させ、これによって、少なくとも１つの抗ＨＥＲ２抗体単独の投与を包含する治療を用いて観察される応答に関して、改善された正の治療応答を提供する。ある量のＩＬ−２と組み合わせて投与されるべき少なくとも１つの抗ＨＥＲ２抗体の量、および他の治療剤の有効性を増強するために必要とされる、これらの治療剤のいずれかの量は、本明細書中に記載される開示を考慮して、過度に実験することなく、当業者によって容易に決定される。本明細書中に開示される投薬レジメンに従って、所定の量の少なくとも１つの抗ＨＥＲ２抗体と組み合わせて投与されるべきＩＬ−２のそれぞれの量に影響を与える要因としては、投与の様式、治療を受けている特定の癌、疾患の重篤度、疾患の病歴、ならびに治療を受けている個体の年齢、身長、体重、健康、および身体状態が挙げられるが、これらに限定されない。同様に、これらの要因は、ＩＬ−２／抗ＨＥＲ２抗体治療の組み合わせへの、本明細書中に記載される様式での繰り返しの曝露の必要性に影響を与える。一般に、高用量の抗体薬剤は、治療を受けている被験体の体重を増加させるので、好ましい。
【００２２】
本発明の方法に従って、本明細書中以下に規定されるような抗ＨＥＲ２抗体の１週間の用量で処置を受けているヒト被験体はまた、一定のＩＬ−２投薬レジメンに従って、または２つのレベルＩＬ−２投薬レジメンに従って、本明細書中以下に規定されるように、ＩＬ−２を投与される。被験体に投与される第１の治療有効用量は、どちらのＩＬ−２投薬レジメンが使用されるかに依存して、抗ＨＥＲ２抗体であり得るか、またはＩＬ−２であり得る。
【００２３】
一般に、ＩＬ−２および抗ＨＥＲ２抗体を用いる同時治療が、１サイクル以上の一定のＩＬ−２投薬レジメンを包含する場合、処置サイクルの開始時に被験体に投与されるべき最初の治療剤は、抗ＨＥＲ２抗体であり、一方で、一定のＩＬ−２投薬の第１のサイクルは、例えば、最初の治療有効用量の抗ＨＥＲ２抗体の投与後１０日以内（例えば、１日以内、２日以内、３日以内、４日以内、５日以内、６日以内、７日以内、８日以内、９日以内、または１０日以内）に、第１の用量のＩＬ−２を投与することによって、開始される。いくつかの実施形態において、一定のＩＬ−２投薬の第１のサイクルは、最初の治療有効用量の抗ＨＥＲ２抗体の投与後７日以内（例えば、１日以内、２日以内、３日以内、４日以内、５日以内、６日以内、または７日以内）に、第１の用量のＩＬ−２を投与することによって、開始される。従って、例えば、１つの実施形態において、治療有効用量の抗ＨＥＲ２抗体は、処置期間の１日目に投与され、そして一定のＩＬ−２投薬の第１のサイクルは、７日後に（すなわち、処置期間の８日目に初期用量のＩＬ−２を投与することによって）開始される。
【００２４】
一定のＩＬ−２投薬の第１サイクルの完了後、１週間の治療有効量の抗ＨＥＲ抗体を受けているヒト被験体は、引き続く１サイクル以上の一定のＩＬ−２投薬を投与され得る。一定のＩＬ−２投薬の第２サイクルおよび引き続く全てのサイクルの間、一般に、この被験体に投与される第１の治療剤は、抗ＨＥＲ２抗体であり、一定のＩＬ−２投薬の第２サイクルまたは引き続くサイクルは、抗ＨＥＲ２抗体の用量の投薬の２４時間以内（例えば、０．５時間以内、１時間以内、２時間以内、４時間以内、８時間以内、１２時間以内、１６時間以内、２０時間以内、または２４時間以内）に第１の用量のＩＬ−２を投与することによって開始される。抗ＨＥＲ２抗体とＩＬ−２との両方が、被験体に投与されるように計画されている日には、これらの治療剤は、同時に（すなわち、同時投与）または異なる時点で（すなわち、いずれかの順序での連続投与）のいずれかで投与され得る。１つのこのような実施形態において、抗ＨＥＲ２抗体の用量が、まず投与され、次いで、この用量の抗ＨＥＲ２抗体の投与の完了の約１０分〜約４時間以内（例えば、約１０分以内、約１５分以内、約２０分以内、約２５分以内、約３０分以内、約４５分以内、約６０分以内、約９０分以内、約１２０分以内、約１５０分以内、約１８０分以内、約２１０分以内、または約２４０分以内）に、ＩＬ−２の用量が投与される。
【００２５】
処置の必要がある被験体が２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンを受ける場合、被験体が、両方の治療剤が（各々が本明細書中に開示される特定の投薬レジメンに従って）被験体に投与される重なった期間を有する限り、いずれかの治療剤がまず投与され得る。
【００２６】
従って、１つの実施形態において、２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンは、治療有効用量の抗ＨＥＲ２抗体の１週間の投与の開始前に、開始される。この様式で、第１の用量のＩＬ−２は、第１の用量の抗ＨＥＲ２抗体が投与される１ヶ月前までに、投与される。「１ヶ月まで」とは、ＩＬ−２の第１の用量が、抗ＨＥＲ２抗体投与の開始の少なくとも１日前であるが、抗ＨＥＲ２抗体投与の開始の１ヶ月（すなわち、３０日）以上前ではないことを意図する。従って、ＩＬ−２の投与は、例えば、第１の治療有効用量の抗ＨＥＲ２抗体の投与の、１日前、２日前、３日前、４日前、５日前、６日前、７日（すなわち、１週間）前、１０日前、１４日（すなわち、２週間）前、１７日前、２１日（すなわち、３週間）前、２４日前、２８日（４週間）前、または１ヶ月（すなわち、３０日）前までに開始され得る。
【００２７】
他の実施形態において、２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンおよび抗ＨＥＲ２抗体投与は、同時に（すなわち、同時投与）または異なる時点で（すなわち、いずれかの順序での連続投与）のいずれかで、同日に同時に開始する。従って、例えば、これらの２つの治療剤での同時治療が処置期間の１日目に開始する１つの実施形態において、第１の治療有効用量の抗ＨＥＲ２抗体および第１の用量のＩＬ−２は、両方、この処置期間の１日目に投与される。１つのこのような実施形態において、抗ＨＥＲ２抗体の用量がまず投与され、続いて、この用量の抗ＨＥＲ２抗体の投与の完了の約１０分〜約４時間以内（例えば、約１０分以内、約１５分以内、約２０分以内、約２５分以内、約３０分以内、約４５分以内、約６０分以内、約９０分以内、約１２０分以内、約１５０分以内、約１８０分以内、約２１０分以内、または約２４０分以内）に、ＩＬ−２の用量が投与される。
【００２８】
代替の実施形態において、第１の治療有効用量の抗ＨＥＲ２抗体は、例えば、処置期間の１日目に被験体に投与され、そして２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンが、第１の治療有効用量の抗ＨＥＲ２抗体の投与の１０日以内に、第１の用量のＩＬ−２を投与することによって、開始される。このような実施形態において、好ましくは、２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンは、第１の治療有効用量の抗ＨＥＲ２抗体の投与の７日以内（例えば、１日以内、２日以内、３日以内、４日以内、５日以内、６日以内、または７日以内）に、第１の用量のＩＬ−２を投与することによって、開始される。
【００２９】
疾患の重篤度、患者の健康、および患者の疾患の以前の病歴に依存して、１サイクル以上の２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンが、抗ＨＥＲ２抗体治療と同時に施され得、ここで、治療有効用量の抗体は、１週間に１回投与されるか、あるいは２週間ごと、３週間ごと、または４週間ごとに１回投与され得る。
【００３０】
本発明の方法に従って、治療有効用量の抗ＨＥＲ２抗体は、１サイクル以上の一定のＩＬ−２投薬レジメンと組み合わせて、または１サイクル以上の２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンと組み合わせて、毎週投与されるか、または２週間ごと、３週間ごと、または４週間ごとに１回投与される。抗ＨＥＲ２抗体投与の持続時間および任意の所定のサイクルのＩＬ−２投薬レジメンのいずれかの持続時間は、被験体の全体的な健康、疾患の進行の病歴、および特定の抗ＨＥＲ２抗体／ＩＬ−２投与プロトコルの耐性に依存する。一般に、治療有効用量の抗ＨＥＲ２抗体は、被験体が１つ以上の抗ＨＥＲ２抗体毒性症状を示すまで、毎週（すなわち、１週間に１回）、または２〜４週間ごとに１回（例えば、２週間ごとに１回、３週間ごとに１回、または４週間ごとに１回）投与され、その時点で、抗体の投薬およびＩＬ−２の投薬が、進行中であれば、完了する。抗ＨＥＲ２抗体毒性症状としては、心臓または脈管の機能不全（呼吸困難（ｄｙｓｐｅｎａ）、末梢水腫、Ｓ３奔馬調律、およびうっ血性心不全が挙げられる）；呼吸窮迫；肺性事象；ならびに重篤な過敏性反応（アナフィラキシー、気管支痙攣、血管性水腫、低血圧症、および蕁麻疹が挙げられる）、または認可された抗ＨＥＲ２抗体製品のパッケージ挿入ラベル上の他の適応症が挙げられる。この被験体は、これらの抗ＨＥＲ２抗体毒性症状の兆候および症状の消散に続いて、必要なように、これらの２つの治療剤での同時治療を再開し得る。これら２つの治療剤での同時治療の再開は、被験体の全体的な健康、関連する疾患状態、および特定の抗ＨＥＲ２抗体／ＩＬ−２投与プロトコルに対する耐性に依存して、本明細書中に開示される抗ＨＥＲ２抗体／ＩＬ−２投与プロトコル（すなわち、一定のＩＬ−２投薬レジメンとの抗ＨＥＲ２抗体、または２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンとの抗ＨＥＲ２抗体）のいずれかを伴い得る。
【００３１】
これらの２つの治療剤での同時治療の間に投与されるＩＬ−２の持続時間は、使用されるＩＬ−２投薬レジメンに従って変化する。一般に、ＩＬ−２は、開示されるプロトコルに従って投与され、そして被験体は、ＩＬ−２毒性症状が発生しない限り、１サイクル以上の一定または２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンを、必要なように繰り返し得る。このような毒性症状が発生する場合、被験体は、観察されるあらゆる毒性症状の消散が完了するまで、ＩＬ−２投薬を中止され得る。このようなＩＬ−２毒性応答としては、慢性疲労、悪心、低血圧症、熱、悪寒、体重増加、かゆみまたは発疹、呼吸困難、高窒素血症、錯乱、血小板減少症、心筋梗塞、胃腸毒性、および脈管漏出症候群が挙げられるが、これらに限定されない（例えば、Ａｌｌｉｓｏｎら（１９８９）Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．７（１）：７５−８０を参照のこと）。
【００３２】
本発明のいくつかの実施形態において、これらの２つの治療剤での同時治療を受けている被験体は、本明細書中に開示される抗ＨＥＲ２抗体投薬スケジュール（すなわち、治療有効用量の抗ＨＥＲ２抗体が毎週投与されるか、または２週間ごと、３週間ごと、もしくは４週間ごとに１回投与される）と組み合わせて、１サイクル以上の一定のＩＬ−２投薬レジメンを施される。「一定のＩＬ−２投薬レジメン」とは、ＩＬ−２および抗ＨＥＲ２抗体での同時治療を受けている被験体が、任意の所定のサイクルのＩＬ−２の投与の仮定にわたって、一定の合計週間用量のＩＬ−２を投与されることを意味する。１つの完全なサイクルの一定のＩＬ−２投薬レジメンは、一定の合計週間用量のＩＬ−２の、約２週間〜約１２週間（例えば、約２週間、３週間、４週間、５週間、６週間、７週間、８週間、９週間、１０週間、１１週間、または１２週間）にわたる投与、引き続く、ＩＬ−２の投薬のない期間（これは、約１週間〜約４週間の持続時間を有し、１週間、２週間、３週間、または４週間が挙げられる）を包含する。従って、一定のＩＬ−２投薬レジメンの各サイクルは、被験体が一定の合計週間用量のＩＬ−２を投与される、第１の期間、およびＩＬ−２の投薬が保留される、第２の期間（すなわち、ＩＬ−２の投与からの「休止」期間または「休日」）を含む。好ましくは、被験体は、一定の合計週間用量のＩＬ−２を、少なくとも４週間、約１２週間まで投与され、この時点で、ＩＬ−２の投薬が、約１週間〜約４週間保留される。一定のＩＬ−２投薬レジメンの各サイクルの間、被験体は、抗ＨＥＲ２抗体についての推奨される投薬レジメンを受けているままであり、従って、１週間ごとの投薬スケジュール、または２週間ごとに１回、３週間ごとに１回、もしくは４週間ごとに１回の投薬スケジュールに従って、治療有効量の抗ＨＥＲ２抗体を受ける。
【００３３】
管理している医師の判断により、１週間ごとの抗ＨＥＲ２抗体投与、または２週間ごと、３週間ごと、もしくは４週間ごとに１回の抗ＨＥＲ２抗体投与を受けている患者は、一定の合計週間用量のＩＬ−２を、１２週間を超える延長した期間（例えば、さらに１〜８週間）にわたって受け続け得、抗ＨＥＲ２抗体／一定のＩＬ−２投薬プロトコルが、十分に許容され、そして被験体が、抗ＨＥＲ２抗体および／またはＩＬ−２の毒性症状のいずれかの最小の兆候を示すように提供される。このような実施形態において、ＩＬ−２投薬の終了後に、約１週間〜約４週間の期間が続き、この間に、ＩＬ−２の投薬が保留されて、被験体に、この治療剤を休止する時間を許容し、その後、一定のＩＬ−２投薬レジメンの引き続くサイクルを開始する。
【００３４】
１つの実施形態において、抗ＨＥＲ２抗体およびＩＬ−２の同時治療を必要とする被験体は、治療有効用量の抗ＨＥＲ２抗体を、処置期間の全体にわたって１週間に１回投与されるか、または治療有効用量の抗ＨＥＲ２抗体を、この処置期間の１日目から開始して、この処置期間の全体にわたって３週間ごとに１回投与され、そして一定のＩＬ−２投薬レジメンの第１サイクルが、同じ処置期間の３日目、４日目、５日目、６日目、７日目、８日目、９日目、または１０日目に開始される。１つのこのような実施形態において、一定のＩＬ−２投薬レジメンの第１サイクルは、処置期間の８日目（すなわち、２週間目の開始時）に開始し、そして約４週間から約１２週間のＩＬ−２投与の持続時間を有し、続いて、ＩＬ−２の投与がない期間があり、これは、約１週間〜約４週間の持続時間を有する。一定ＩＬ−２投薬レジメンのこの第１サイクルの終了時に、被験体は、本明細書中上記のように、１サイクル以上の引き続く一定のＩＬ−２投薬レジメンを受ける。
【００３５】
別の実施形態において、この被験体は、治療有効用量の抗ＨＥＲ２抗体を、処置期間にわたって１週間に１回投与されるか、または治療有効用量の抗ＨＥＲ２抗体を、この処置期間の１日目に開始して、この処置期間にわたって３週間ごとに１回投与され、そして一定のＩＬ−２投薬レジメンの第１サイクルが、この処置期間の８日目（すなわち、２週目の開始時）に開始され、４週間のＩＬ−２投薬の持続時間を有し、続いて、１週間の持続時間を有する、ＩＬ−２の投与がない期間がある。管理する医師の判断により、この被験体は、次いで、１サイクル以上の引き続くこの一定のＩＬ−２投薬レジメンを投与される（すなわち、一定の合計週間用量のＩＬ−２の、４週間にわたる投与、引き続いて、１週間のＩＬ−２の投与がない期間）。全処置期間の間、この被験体は、１週間に１回の投薬スケジュール、または３週間ごとに１回の投薬スケジュールに従って、治療有効用量の抗ＨＥＲ２抗体を受け続けるが、但し、この被験体は、抗ＨＥＲ２抗体毒性の症状を示さない。従って、例えば、被験体が、３サイクルの一定のＩＬ−２投薬レジメンを、抗ＨＥＲ２抗体の毎週（すなわち、１週間に１回）の投与（ＩＬ−２投与の第１のサイクルを処置期間の８日目（すなわち、２週間目の１日目）に開始する）と組み合わせて受ける場合、治療有効用量の抗ＨＥＲ２抗体は、この被験体に、処置の各週の１日目（すなわち、第１週〜第１６週の１日目）に投与され、そして一定の合計週間用量のＩＬ−２は、第２週〜第５週、第７週〜第１０週、および第１２週〜第１５週の間に投与され、ここで、ＩＬ−２の投薬がない時間は、第６週、第１１週、および第１６週の間に起こる。
【００３６】
本発明の他の実施形態において、抗ＨＥＲ抗体およびＩＬ−２を用いる同時治療は、治療有効用量の抗ＨＥＲ２抗体を、処置期間の経過の間、「２つのレベルＩＬ−２投薬レジメン」の１サイクル以上と組み合わせて、処置期間全体にわたって、１週間に１回、または２週間ごと、３週間ごと、もしくは４週間ごとに１回投与する工程を包含する。「２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメン」とは、ＩＬ−２および抗ＨＥＲ２抗体での同時治療を受けている患者が、ＩＬ−２の投薬の２倍の期間の間、ＩＬ−２を投与され、これは、約２週間から約１６週間の組み合わせた持続時間（２週間、３週間、４週間、５週間、６週間、７週間、８週間、９週間、１０週間、１１週間、１２週間、１３週間、１４週間、１５週間、または１６週間が挙げられる）を有する。１つの実施形態において、２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンは、約４週間〜約１２週間の組み合わせ持続時間を有する；他の実施形態において、２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンは、約４週間〜約８週間の組み合わせ持続時間（約４週間、５週間、６週間、７週間、または８週間を含む）を有する。２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンの第１期間および第２期間の間に投与されるべきＩＬ−２の合計週間用量は、より高い合計週間用量のＩＬ−２が、第１期間の間に与えられ、そしてより低い合計週間用量のＩＬ−２が、第２の期間の間に与えられるように、選択される。
【００３７】
２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンの任意の所定のサイクルの、個々の第１の期間および第２の期間の持続時間は、個体の健康状態および疾患進行の履歴に依存して、変動し得る。一般に、被験体は、より高い合計週間用量のＩＬ−２を、４週間〜１６週間の２つのレベルＩＬ−２投薬レジメンのうちの、少なくとも１週間投与される。１つの実施形態において、より高い合計週間用量のＩＬ−２は、２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンの第１の半分の間に投与され、より低い合計週間用量は、２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンの第２の半分の間に投与される。従って、例えば、２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンの１つの完全なサイクルが、８週間の組み合わせ持続時間を有する場合、より高い合計週間用量のＩＬ−２は、ＩＬ−２の投薬の最初の４週間にわたって投与され、そしてより低い合計週間用量のＩＬ−２は、４週間のＩＬ−２投薬の２番目に投与される。
【００３８】
特定の投薬レジメンが、本明細書中以下に開示されるが、本発明は、抗ＨＥＲ２抗体および１サイクル以上の２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンでの組み合わせ治療（これは、最初により高い合計週間用量のＩＬ−２への曝露、および引き続いて、より低い合計週間用量のＩＬ−２への曝露を提供する）を提供する、任意の投与プロトコルを包含することが認識される。理論によって束縛されないが、より高い用量のＩＬ−２を、ＩＬ−２投薬の初期段階に投与することにより、ＮＫ細胞活性の初期の刺激を提供し、これは、引き続く数週間のＩＬ−２投薬の間、低用量に維持され得ると考えられる。ＩＬ−２の副作用は、用量に関連するので、低下された用量のＩＬ−２は、延長された処置期間の間のこの治療剤の許容性を増加させる。
【００３９】
従って、本発明の方法は、治療有効用量の少なくとも１種の抗ＨＥＲ２抗体が、処置期間にわたって１週間に１回投与されるか、またはこの処置期間にわたって、２週間ごと、３週間ごと、もしくは４週間ごとに１回投与され、これが、約２週間〜約１６週間（２週間、３週間、４週間、５週間、６週間、７週間、８週間、９週間、１０週間、１１週間、１２週間、１３週間、１４週間、１５週間、または１６週間が挙げられる）の、組み合わせた持続時間を有する２つのレベルのＩＬ−２投薬と組み合わせられる、処置レジメンを意図する。この２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンに関して上で説明されるように、いずれかの薬剤が、最初に投与され得る。例えば、１つの実施形態において、治療有効用量の抗ＨＥＲ２抗体が、例えば、処置期間の１日目にまず投与され、続いて、２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンが、抗ＨＥＲ２抗体の最初の投与の１０日以内、好ましくは、抗ＨＥＲ２抗体の最初の投与の７日以内（例えば、１日目、２日目、３日目、４日目、５日目、６日目、または７日目）に開始される。２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンの間、より高い合計週間用量のＩＬ−２が、２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンの第１の期間（例えば、ＩＬ−２投与の最初の１〜４週間）に投与され、そしてより低い合計週間用量のＩＬ−２は、２つのレベルＩＬ−２投薬レジメンの第２の期間（すなわち、２つのレベルのＩＬ−２投与レジメンの残りの経過にわたって）の間に投薬される。
【００４０】
１つの実施形態において、本発明の方法は、少なくとも１種の抗ＨＥＲ２抗体を含有する、治療有効用量の薬学的組成物を、処置期間にわたって毎週（すなわち、１週間あたり１回）投与すること、またはこの治療有効用量の抗ＨＥＲ−２抗体を、処置期間にわたって３週間ごとに１回、この処置期間の経過の間、１サイクル以上の２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンと組み合わせて投与することを提供し、各サイクルの２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンは、４週間〜８週間（４週間、５週間、６週間、７週間、または８週間を含む）の組み合わせ持続時間を有する。従って、例えば、抗ＨＥＲ２抗体が１週間に１回投与される場合、治療有効用量の少なくとも１種の抗ＨＥＲ２抗体は、処置期間の各週の１日目に投与され、そして４週間〜８週間の２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンの第１のサイクルは、同じ処置期間の３日目、４日目、５日目、６日目、７日目、８日目、９日目、または１０日目に開始される。
【００４１】
１つのこのような実施形態において、抗ＨＥＲ２抗体を含有する治療有効用量の薬学的組成物は、処置期間の１日目に開始して、毎週投与され、そしてこの処置期間全体にわたって継続され、そして２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンの第１のサイクルは、同じ処置期間の８日目に開始し、そして８週間（すなわち、処置期間の第２週〜第９週の間）継続される。
【００４２】
本発明の方法はまた、本明細書中に推奨される投薬スケジュールに従って、１サイクル以上の２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンの投与と組み合わせて、抗ＨＥＲ２抗体投与を受けている被験体が、「薬物の休日」（すなわち、２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンの任意の所定のサイクルの第１の期間の終了と、２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンのその特定のサイクルの第２の期間の開始との間のＩＬ−２投薬のない期間）を与えられる実施形態を意図する。これらの実施形態において、２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンは、２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンの所定のサイクルの第１の期間（この間に、より高い合計週間用量が投与された）の終了に続いて、ＩＬ−２投薬が約１週間〜約４週間の間保留されるように、中断される。ＩＬ−２投薬がないこの期間の間、被験体が抗ＨＥＲ２抗体毒性の症状を示さない限り、この被験体は、治療有効用量の抗ＨＥＲ２抗体を、本明細書中に推奨される投薬スケジュール（すなわち、１週間に１回、または２週間ごと、３週間ごと、もしくは４週間ごとに１回）に従って、受け続け得る。ＩＬ−２投薬のこの中断の長さは、被験体の健康状態、疾患の進行の履歴、および２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンの任意の所定のサイクルの第１の期間の間に受けられた、初期のＩＬ−２／抗体治療に対する被験体の応答性に依存する。一般に、ＩＬ−２投薬は、約１週間〜約４週間の期間にわたって中断され、この時点で、被験体は、第２の期間の２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンを投与され、ここで、より低い合計週間用量のＩＬ−２が、治療有効用量の抗ＨＥＲ２抗体の毎週の投与と組み合わせて、投与される。２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンの任意の所定のサイクルを完了するために、被験体は、第１のサイクルのより高い合計週間投薬と、第２のサイクルのより低い合計週間投薬との両方を投与されなければならない。
【００４３】
被験体の全体的な健康状態、臨床応答、および同時治療のこれら２つの治療剤との許容度に依存して、第１サイクルの２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンの完了後、被験体は、２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンの１回以上の続くサイクルを、治療有効用量の抗−ＨＥＲ２抗体の投与と組み合わせて施与され得、ここで、抗体は、１週間に１回投与され得るか、または２週間、３週間、または４週間毎に１回投与される。このような実施形態において、取り扱っている医師は、連続するサイクルの間で、ＩＬ−２投与の薬物休日またはＩＬ−２投与をしない期間を可能にし得る。従って、２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメン（これは、それ自体、第１のＩＬ−２投薬期間と第２のＩＬ−２投薬期間との間に、ＩＬ−２投薬をしない期間を含んでも含まなくても良い）の任意の所定のサイクルの完了の際に、被験体は、２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンの続くサイクルを開始する前に、ＩＬ−２投与の中断を与えられ得る。一般的に、２つのレベルのＩＬ−２投薬の任意の所定のサイクルの間のＩＬ−２投薬をしない期間は、約１週間〜約４週間（約１週間、２週間、３週間、または４週間を含む）である。ＩＬ−２薬物休日の間、被験体は、治療有効用量の抗−ＨＥＲ２抗体を治療的に受容し続け得、これは、１週間に１回、または２週間、３週間、もしくは４週間に１回投与され得る。
【００４４】
複数サイクルの一定のＩＬ−２投薬レジメンまたは複数サイクルの２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンを施与する必要性は、取り扱っている医師の自由裁量であり、そして本発明の方法を用いる処置を受ける被験体において、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞数をモニタリングすることによって評価され得る。一般的に、ＮＫ細胞数は、ＣＤ１６＋細胞またはＣＤ５６＋細胞の蛍光細胞分類によって決定されるべきである。この様式において、ＮＫ細胞計数は、一定ＩＬ−２投薬レジメンまたは２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンの間、１週間に２回または１ヶ月に１回測定され、ＩＬ−２投薬からの休み（すなわち、休日）の前のＩＬ−２投薬の任意の所定のサイクルの結論に、このＮＫ細胞計数が、開始される。２００細胞／μｌを超えるＮＫ細胞レベルは、抗−ＨＥＲ２抗体治療に対する正の臨床応答に影響する重要な因子であり得る。従って、このレベル未満へのＮＫ細胞計数の低下は、ＩＬ−２投薬をしなかった（例えば、一定ＩＬ−２投薬レジメンのサイクルと２つのレベルの投薬レジメンのサイクルとの間、または第１の２つのレベルのＩＬ−２投薬期間と第２の２つのレベルのＩＬ−２投薬期間との間）後のＩＬ−２治療を回復させる必要性を示す。
【００４５】
１回以上のサイクルの一定ＩＬ−２投薬レジメンまたは１回以上のサイクルの２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンと組み合わせて、本明細書中で推奨される投与スケジュールに従って、抗−ＨＥＲ２抗体を用いる同時治療を受けるヒト被験体について、ＩＬ−２投薬の期間の間に、投与されるべきＩＬ−２の合計週間用量は、単一用量として投与され得るか、または１週間に２回、３回、４回、５回、６回、もしくは７回の投薬スケジュールに従って投薬される一連の等価な用量に分割され得る。より高い合計週間用量が、第１の期間の間に投与されるべきであり、より低い合計週間用量が、第２の期間の間に投与されるべきである場合、合計週間用量が、両方の投薬期間の経過にわたって同じ様式で投与されることは、必要ではない。従って、例えば、２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンの第１の期間の間のより高い合計週間用量は、単一用量として投与され得るか、または、１週間に２回、３回、４回、５回、６回、もしくは７回の投薬スケジュールに従って投与される一連の等価な用量に分割され得る。同様に、２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンの第２の期間の間のより低い合計週間用量は、単一用量として投与され得るか、または、１週間に２回、３回、４回、５回、６回、もしくは７回の投薬スケジュールに従って投与される一連の等価な用量に分割され得る。
【００４６】
本発明の目的について、「１週間に２回、３回、４回、５回、６回、もしくは７回の投薬スケジュール」は、合計週間用量が、それぞれ、２、３、４、５、６、または７の等価な用量に分割され、これが、７日の期間の経過にわたって、被験体に投与され、１を超えない等価な用量が、２４時間の期間当たりに投与されることを意味することが意図される。一連の等価な用量は、連続した日に投与され得るか、または、１週間当たりに投与される等価な用量の全数に依存して、１日以上が、任意の２の連続する日の間に存在するように投与され得る。
【００４７】
従って、例えば、ＩＬ−２の一連の２つの等価な用量が、１週間当たり（すなわち、７日間にわたって）に投与され、その週の第１の等価な用量が、第１日に投与される場合、ＩＬ−２の第２の等価な用量が、この週の第２日、第３日、第４日、第５日、第６日、または第７日に投与され得る。１つの実施形態において、ＩＬ−２の合計週間用量は、２つの等価な用量に分割され、これは、７日の期間以内に被験体に投与され、このことによって、用量間に最小７２時間および最大９６時間を許容される。
【００４８】
同様に、ＩＬ−２の一連の３つの等価な用量が、１週間当たりに投与され、その週の第１の等価な用量が、第１日に投与される場合、第２の等価な用量と第３の等価な用量との間に、約２４時間存在する限り、第２の等価な用量が、この週の第２日、第３日、第４日、第５日、または第６日に投与され得、第３の等価な用量が、この週の第３日、第４日、第５日、第６日、または第７日に投与され得る。１つの実施形態において、ＩＬ−２の合計週間用量は、３つの等価な用量に分割され、これは、７日の期間以内に被験体に投与され、このことによって、用量間に最小２５時間および最大７２時間を許容される。
【００４９】
ＩＬ−２の一連の４つの等価な用量が、１週間当たりに投与され、その週の第１の等価な用量が、第１日に投与される場合、任意の２つの連続する用量の投与の間（すなわち、第１の等価な用量と第２の等価な用量との間、第２の等価な用量と第３の等価な用量との間、および第３の等価な用量と第４の等価な用量との間）に、約２４時間存在する限り、第２の等価な用量が、この週の第２日、第３日、第４日、または第５日に投与され得、第３の等価な用量が、この週の第３日、第４日、第５日、または第６日に投与され得、そして、第４の等価な用量が、この週の第４日、第５日、第６日、または第７日に投与され得る。
【００５０】
一連の５つの等価な用量が、１週間当たりに投与され、その週の第１の等価な用量が、第１日に投与される場合、任意の２つの連続する用量の投与の間（すなわち、第１の等価な用量と第２の等価な用量との間、第２の等価な用量と第３の等価な用量との間、第３の等価な用量と第４の等価な用量との間、および第４の等価な用量と第５の等価な用量との間）に、約２４時間存在する限り、第２の等価な用量が、この週の第２日、第３日、または第４日に投与され得、第３の等価な用量が、この週の第３日、第４日、または第５日に投与され得、第４の等価な用量が、この週の第４日、第５日、または第６日に投与され得、第５の等価な用量が、この週の第５日、第６日、または第７日に投与され得る。
【００５１】
ＩＬ−２の一連の６つの等価な用量が、１週間当たりに投与され、その週の第１の投与の用量が、第１日に投与される場合、任意の２つの連続する用量の投与の間（すなわち、第１の等価な用量と第２の等価な用量との間、第２の等価な用量と第３の等価な用量との間、第３の等価な用量と第４の等価な用量との間、第４の等価な用量と第５の等価な用量との間、および第５の等価な用量と第６の等価な用量との間）に、約２４時間存在する限り、第２の等価な用量が、この週の第２日または第３日に投与され得、第３の等価な用量が、この週の第３日または第４日に投与され得、第４の等価な用量が、この週の第４日または第５日に投与され得、第５の等価な用量が、この週の第５日または第６日に投与され得、第６の等価な用量が、この週の第６日または第７日に投与され得る。
【００５２】
１つの実施形態において、ＩＬ−２の合計週間用量は、７の等価な用量に分割され、これは、７日の期間にわたって毎日投与され、各連続する用量の間に、約２４時間存在する。
【００５３】
同じ投薬スケジュールが、一定のＩＬ−２投薬レジメンをたどられるか、または同じ用量スケジュールが、２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンの第１の期間および第２の期間の両方の間たどられる必要はない。従って、投薬スケジュールは、抗−ＨＥＲ２抗体治療と組み合わせて、延長されたＩＬ−２治療の個体の許容度に適応するように、そしてこれらの２つの治療剤との同時治療に対する個体の応答を反映するように調節され得る。一定ＩＬ−２投薬レジメンおよび２期間の２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンの間の好ましい投薬スケジュールは、患者の医歴および本明細書中に提供される指針が与えられると、取り扱っている医師によって容易に決定される。
【００５４】
従って、本発明は、１回以上のサイクルの、一定ＩＬ−２投薬レジメンまたは２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンのいずれかと組み合わせて、本明細書中で推奨される投薬スケジュールに従って投与される抗−ＨＥＲ２抗体を用いる同時治療を使用して、ＨＥＲ２レセプタータンパク質の過剰発現によって特徴付けられる癌を有するヒト被験体を処置するための方法を提供する。本発明の目的のために、１回以上のサイクルの一定ＩＬ−２投薬レジメンまたは２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンと同時に、１週間に１回のスケジュールで、２週間毎、３週間毎、または４週間毎に１回、投与される治療有効用量の抗−ＨＥＲ２抗体は、約１．０ｍｇ／体重１ｋｇ〜約１０．０ｍｇ／体重１ｋｇまでにわたる。いくつかの実施形態において、抗−ＨＥＲ２抗体の治療有効用量は、約１．０ｍｇ／ｋｇ〜約８．０ｍｇ／ｋｇ、約１．０ｍｇ／ｋｇ〜約６．０ｍｇ／ｋｇ、または約１．０ｍｇ／ｋｇ〜約４．０ｍｇ／ｋｇであり、これは、１．０ｍｇ／ｋｇ、１．５ｍｇ／ｋｇ、２．０ｍｇ／ｋｇ、２．５ｍｇ／ｋｇ、３．０ｍｇ／ｋｇ、３．５ｍｇ／ｋｇ、４．０ｍｇ／ｋｇおよびこの範囲内の他のこのような値を含む。抗−ＨＥＲ２抗体の同じ治療有効用量は、各週の投薬で投与され得る。あるいは、抗−ＨＥＲ２抗体の異なる治療有効用量は、処置期間の経過にわたって使用され得る。従って、いくつかの実施形態において、抗−ＨＥＲ２抗体の最初の治療有効用量は、より高い用量範囲（すなわち、約３．５ｍｇ／体重１ｋｇ〜約１０．０ｍｇ／体重１ｋｇ）に存在し得、続いての用量は、より低い投薬量範囲内（すなわち、約１．０ｍｇ／体重１ｋｇ〜約３．５ｍｇ／体重１ｋｇ）に含まれる。１つの実施形態において、抗−ＨＥＲ２抗体の最初の治療有効用量は、約３．５ｍｇ／体重１ｋｇ〜約５．０ｍｇ／体重１ｋｇ（約３．５ｍｇ／体重１ｋｇ、約４．０ｍｇ／体重１ｋｇ、約４．５ｍｇ／体重１ｋｇ、および約５．０ｍｇ／体重１ｋｇを含む）であり、そして、抗−ＨＥＲ２抗体の続いての治療有効用量は、約１．５ｍｇ／体重１ｋｇ〜約３．０ｍｇ／体重１ｋｇ（約１．５ｍｇ／体重１ｋｇ、約２．０ｍｇ／体重１ｋｇ、約２．５ｍｇ／体重１ｋｇ、および約３．０ｍｇ／体重１ｋｇを含む）である。好ましい実施形態において、抗−ＨＥＲ２抗体の最初の治療有効用量は、約４．０ｍｇ／体重１ｋｇであり、そして、抗−ＨＥＲ２抗体の続いての治療有効用量は、約２．０ｍｇ／体重１ｋｇである。抗−ＨＥＲ２抗体を含有する薬学的組成物は、例えば、本明細書中上記に示されるように、静脈内投与される。
【００５５】
本発明の方法に従って、以下により十分に記載されるように、一定ＩＬ−２投薬レジメンまたは２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンの間に、ＩＬ−２は、抗−ＨＥＲ２抗体治療と組み合わせて、例えば、ＩＶ、ＩＭ、またはＳＣ注射によって投与され、ＩＬ−２の推奨される合計週間用量を提供する。以下の実施形態は、ＩＬ−２についての適切な合計週間用量および投薬レジメンに関する指針を提供するが、任意の数の異なる投薬レジメンが、本明細書中に示される開示を一旦知った当業者によって企図され得る。
【００５６】
治療有効用量のＩＬ−２の以下の考察の目的のために、本明細書中で「Ｌ２−７００１  ＩＬ−２」といわれる単量体ＩＬ−２薬学的処方物は、参照ＩＬ−２標準として使用される。「参照ＩＬ−２標準」は、所望される正の効果（すなわち、これらの抗腫瘍剤単独のいずれかを用いて観察される応答に関して、改善された正の治療応答）を達成するために、少なくとも１つの抗−ＨＥＲ２抗体と組み合わせて、ＨＥＲ２レセプタータンパク質の過剰発現によって特徴付けられる癌を有する被験体に投与されるべき治療有効用量を決定するための基準を提供する、ＩＬ−２の処方物が意図される。液体処方物は、Ｐｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）ＩＬ−２（Ｃｈｉｒｏｎ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｅｍｅｒｙｖｉｌｌｅ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａから市販される）と同じヒトＩＬ−２ムテイン（アルデスロイキン）を含み、そのＬ２−７００１としての処方の前の最終精製工程を除いて、２０００年１０月３日に出願され、「Ｓｔａｂｉｌｉｚｅｄ  Ｌｉｑｕｉｄ  Ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ−Ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ」と題され、米国出願番号０９／６７７，６４３を与えられた同時係属出願に開示される方法に従う。以下の実施例２を参照のこと。抗−ＨＥＲ２抗体およびＩＬ−２を用いる同時治療が必要な被験体に投与されるべきＬ２−７００１  ＩＬ−２の治療有効量は、上記されるように、被験体の医療条件および推奨される投薬レジメン（すなわち、一定  対  ２つのレベル）に依存する。
【００５７】
本発明の方法に従って、上に規定されるような抗−ＨＥＲ２抗体の治療有効用量の１週間に１回の投与と同時に投与されるべきＬ２−７００１の合計週間用量は、約２７０μｇ〜約１６２０μｇであり得、これは、患者が受けた治療の医歴および推奨されるＩＬ−２投薬レジメン（すなわち、一定ＩＬ−２投薬レジメン  対  ２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメン）に依存する。より高い用量のＩＬ−２が投与されるべき場合、Ｌ２−７００１の合計週間用量は、約８４０μｇ〜約１６２０μｇの範囲にあり得、これは、約８４０μｇ、９００μｇ、９６０μｇ、１０２０μｇ、１０８０μｇ、１１４０μｇ、１２００μｇ、１２６０μｇ、１３５０μｇ、１５００μｇ、および１６２０μｇ、ならびにこの範囲内に含まれる他のこのような値を含む。ＩＬ−２の中間用量が投与されるべき場合、Ｌ２−７００１  ＩＬ−２の合計週間用量は、約６００μｇ〜約８４０μｇの範囲にあり得、これは、約６００μｇ、６３０μｇ、６６０μｇ、６９０μｇ、７２０μｇ、７５０μｇ、７８０μｇ、８１０μｇ、８４０μｇ、およびこの範囲内に含まれる他のこのような値を含む。より低い用量のＩＬ−２が投与されるべき場合、Ｌ２−７００１  ＩＬ−２の合計週間用量は、約２７０μｇ〜約６００μｇの範囲にあり得、これは、約２７０μｇ、３００μｇ、３３０μｇ、３６０μｇ、３９０μｇ、４２０μｇ、４５０μｇ、４８０μｇ、５１０μｇ、５４０μｇ、５７０μｇおよび６００μｇ、ならびにこの範囲内に含まれる他のこのような値を含む。これらの合計週間用量は、絶対的な用量を示す。対応する相対用量は、容易に計算される。平均的なヒトは、約１．７ｍ２である。従って、例えば、投与されるべきＬ２−７００１  ＩＬ−２の絶対合計週間用量が、約２７０μｇ〜約６００μｇである（すなわち、より低い用量範囲内）場合、投与されるべきＬ２−７００１の相対的合計週間用量は、約１５９μｇ／ｍ２〜３５３μｇ／ｍ２である。
【００５８】
Ｌ２−７００１  ＩＬ−２が、一定のＩＬ−２投薬レジメンに従って投与されるべき場合、合計週間用量は、約２７０μｇ〜約１６２０μｇまでであり、好ましくは、約６００μｇ〜約１３５０μｇである。従って、例えば、いくつかの実施形態において、一定のＩＬ−２投薬レジメンの一部として１週間当たりに投与されるできであるＬ２−７００１  ＩＬ−２の総量は、約２７０μｇ、３６０μｇ、４５０μｇ、６００μｇ、６６０μｇ、７２０μｇ、７８０μｇ、８１０μｇ、８４０μｇ、９００μｇ、９６０μｇおよび１０８０μｇ、１２００μｇ、１３５０μｇ、１４４０μｇ、１５００μｇ、１５６０μｇ、１６２０μｇ、または約２７０μｇ〜約１６２０μｇの範囲内に含まれる他のこのような値を含む。１つの実施形態において、Ｌ２−７００１  ＩＬ−２の合計週間用量は、約８４０μｇ〜約１０８０μｇである。他の実施形態において、Ｌ２−７００１の合計週間用量は、約６００μｇ〜約８４０μｇである。
【００５９】
以前に示されるように、一定のＩＬ−２投薬レジメンの間のＩＬ−２の合計週間用量は、単一用量として投薬され得るか、または一連の等価な用量に分割され得、これは、１週間に２回、３回、４回、５回、６回、もしくは７回の投薬スケジュールに従って投与される。従って、例えば、参照ＩＬ−２標準  Ｌ２−７００１  ＩＬ−２の合計週間用量が、２７０μｇである場合、各週の間に投与されるべきこの参照ＩＬ−２標準の３つの等価な用量は、９０μｇであり、そして各週の間に投与されるべきこの参照ＩＬ−２標準の２つの等価な用量は、１３５μｇである。同様に、Ｌ２−７００１  ＩＬ−２の合計週間用量が、１６２０μｇである場合、ＩＬ−２投薬の各週の間に投与されるべきこの参照ＩＬ−２標準の３つの等価な用量は、５４０μｇであり、そしてＩＬ−２投薬の各週の間に投与されるべきこの参照ＩＬ−２標準の２つの等価な用量は、８１０μｇである。
【００６０】
Ｌ２−７００１  ＩＬ−２が、２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンに従って投与されるべき場合、この投薬レジメンの第１の期間の間に投与されるより高い合計週間用量は、約６００μｇ〜約１６２０μｇであり、この投薬レジメンの第２の期間の間に投与されるより低い合計週間用量は、約３６０μｇ〜約１０８０μｇである。以前に示されるように、２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンの第１の期間の間（例えば、この投薬レジメンの第１の半分の間）、投与される合計週間用量は、常に、２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンの第２の期間の間（例えば、この投薬レジメンの第２の半分の間）に投与される合計週間用量より高い。
【００６１】
従って、いくつかの実施形態において、２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンの任意の所定のサイクルの第１の期間の間に投与されるＬ２−７００１  ＩＬ−２のより高い合計週間用量は、約６００μｇ〜約１０８０μｇであり、これは、約６００μｇ、６６０μｇ、７２０μｇ、７８０μｇ、８４０μｇ、９００μｇ、９６０μｇ、１０２０μｇ、１０８０μｇおよびこのより高い用量範囲内に含まれる他のこのような値を含み、そして、Ｌ２−７００１  ＩＬ−２のより低い合計週間用量は、約３６０μｇ〜約８４０μｇであり、これは、約３６０μｇ、３９０μｇ、４２０μｇ、４５０μｇ、４８０μｇ、５１０μｇ、５４０μｇ、５７０μｇ、６００μｇ、６３０μｇ、６６０μｇ、６９０μｇ、７２０μｇ、７５０μｇ、７８０μｇ、８１０μｇ、８４０μｇおよびこのより低い用量範囲内に含まれる他のこのような値を含む。１つの実施形態において、２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンは、合わせて４週間〜８週間の持続時間を有し、ここで、２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンの第１の期間の間に投与されるＬ２−７００１  ＩＬ−２のより高い合計週間用量は、約６００μｇ〜約８４０μｇであり、例えば、６００μｇ、６３０μｇ、６６０μｇ、６９０μｇ、７２０μｇ、７５０μｇ、７８０μｇ、８１０μｇ、または８４０μｇであり、２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンの第２の期間の間に投与されるＬ２−７００１  ＩＬ−２のより低い合計週間用量は、約３６０μｇ〜約６００μｇの範囲にあり得、例えば、３６０μｇ、３９０μｇ、４２０μｇ、４５０μｇ、４８０μｇ、５１０μｇ、５４０μｇ、または５７０μｇ、または５８８μｇである。１つのこのような実施形態において、第１の期間の間に投与されるＬ２−７００１  ＩＬ−２のより高い合計週間用量は、約８４０μｇであり、第２の期間の間に投与されるＬ２−７００１  ＩＬ−２のより低い合計週間用量は、約６００μｇである。別の実施形態において、第１の期間の間に投与されるＬ２−７００１  ＩＬ−２のより高い合計週間用量は、約１０８０μｇであり、第２の期間の間に投与されるＬ２−７００１  ＩＬ−２のより低い合計週間用量は、約８４０μｇである。
【００６２】
以前に示されるように、２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンの第１の期間および第２の期間の間のＩＬ−２の合計週間用量は、単一用量として投薬され得るか、または一連の等価な用量に分割され得、これは、１週間に２回、３回、４回、５回、６回、もしくは７回の投薬スケジュールに従って投与される。従って、例えば、２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンの第１の期間の間のＬ２−７００１  ＩＬ−２の合計週間用量が、８４０μｇである場合、各週の間に投与されるべきこの参照ＩＬ−２標準の３つの等価な用量は、約２８０μｇであり、そして各週の間に投与されるべきこの参照ＩＬ−２標準の２つの等価な用量は、約４２０μｇである。同様に、２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンの第２の期間の間のＬ２−７００１  ＩＬ−２の合計週間用量が、約６００μｇである場合、各週の間に投与されるべきこの参照ＩＬ−２標準の３つの等価な用量は、約２００μｇであり、そして各週の間に投与されるべきこの参照ＩＬ−２標準の２つの等価な用量は、３００μｇである。
【００６３】
好ましい実施形態において、治療有効用量の抗−ＨＥＲ２抗体は、処置段階の第１日に始まる週間用量スケジュールに従って、投与され、２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンの第１のサイクルは、この処置段階の第８日に開始され、合わせて８週間の持続期間を有する。この実施形態において、処置段階の第２〜５週の間に投与されるＩＬ−２のより高い合計週間用量は、約６００μｇ〜約１０８０μｇであり、好ましくは、約６００μｇ〜約８４０μｇであり、そして第６〜９週の間に投与されるＩＬ−２のより低い合計週間用量は、約３６０μｇ〜約８４０μｇであり、好ましくは、約３６０μｇ〜約６００μｇである。ＩＬ−２の高い合計週間用量および低い合計週間用量は、単一用量として投薬され得るか、または等価な用量に分割され得、これは、１週間に２回、３回、４回、５回、６回、もしくは７回の投薬スケジュールに従って投与される。１つのこのような実施形態において、処置段階の第２〜５週の間のＩＬ−２のより高い合計週間用量は、約６００μｇ〜約８４０μｇであり、例えば、８４０μｇであり、そしてＩＬ−２のより低い合計週間用量は、約３６０μｇ〜約６００μｇであり、例えば、６００μｇである。この実施形態において、ＩＬ−２のより高い合計週間用量およびより低い合計週間用量の各々は、２つの等価な用量に分割され、これは、１週間に２回の用量スケジュールに従って投与され、２つの等価な用量が、７日の期間以内に被験体に投与され、このことによって、用量間に最小７２時間および最大９６時間を許容される。代替的な実施形態において、ＩＬ−２のより高い合計週間用量およびより低い合計週間用量の各々は、３つの等価な用量に分割され、これは、１週間に３回の用量スケジュールに従って投与され、３つの等価な用量が、７日の期間以内に被験体に投与され、このことによって、用量間に最小２５時間および最大７２時間を許容される。
【００６４】
本発明を記載する目的のために、ＩＬ−２の用量が、参照ＩＬ−２標準として、Ｌ２−７００１  ＩＬ−２を使用して示された。当業者は、どの対応する用量が、Ｌ２−７００１  ＩＬ−２に対して２４時間の期間の間に収集された、競合薬物動態学的（ＰＫ）データおよびＰＫデータについての血清濃度−時間曲線（ＡＵＣ）に基づく転換因子を使用して、ＩＬ−２の任意の形態を含む任意のＩＬ−２産物に対するものであるかを容易に決定し得る。ＰＫデータを使用して、単一用量の参照ＩＬ−２標準を投与されたヒト被験体におけるＩＬ−２曝露が決定される。これらの被験体は、以前に外因性ＩＬ−２治療を受けていないように選択される（すなわち、これらの被験体は、ＩＬ−２治療を受けたことがない）。「外因性ＩＬ−２治療」は、被験体が、天然に存在するＩＬ−２の人体産生と共に生じる曝露と対照的な、ＩＬ−２の外因性供給源に曝露される任意の介入が意図される。これらの被験体の幾人かが、単一用量の５０μｇの参照ＩＬ−２標準を受容し、その一方で、他の被験体は、単一用量の９０μｇ、１３５μｇ、または１８０μｇの参照ＩＬ−２標準を受容する。本明細書中以下の実施例４を参照のこと。
【００６５】
参照ＩＬ−２標準Ｌ２−７００１の単一用量の投与後、血清中のＩＬ−２曝露を、注入後の最初の１０〜１２時間にわたってモニタリングし、次いで２４時間後までを推定し、そして２４時間の間に収集したデータについて、血清濃度−時間曲線（ＡＵＣ）下で得られる領域を算出する。血清濃度−時間曲線下のこの領域は、ＡＵＣ０−２４として本明細書中に言及される。この様式においてＩＬ−２曝露を測定する方法は、当該分野で周知である。例えば、Ｇｕｓｔａｖｓｏｎ（１９９８）Ｊ  Ｂｉｏｌ．Ｒｅｓｐｏｎｓｅ  Ｍｏｄｉｆｉｅｒｓ  １９９８：４４０−４４９；Ｔｈｏｍｐｓｏｎら、（１９８７）Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ４７：４２０２−４２０７；Ｋｉｒｃｈｎｅｒら（１９９８）Ｂｒ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．４６：５−１０；Ｐｉｓｃｉｔｅｌｌｉら、（１９９６）Ｐｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒａｐｙ  １６（５）：７５４−７５９；および以下の実施例４を参照こと。従って、５０μｇ用量のＬ２−７００１  ＩＬ−２を受ける被験体についてのＡＵＣ０−２４値は、６０ＩＵ＊時間／ｍｌ（ＳＤ＝１１）であり；９０μｇ用量のＬ２−７００１  ＩＬ−２を受ける被験体についてのＡＵＣ０−２４値は、１１０ＩＵ＊時間／ｍｌ（ＳＤ＝３６）であり；１３５μｇ用量のＬ２−７００１  ＩＬ−２を受ける被験体についてのＡＵＣ０−２４値は、１４３ＩＵ＊時間／ｍｌ（ＳＤ＝４１）であり；そして１８０μｇ用量のＬ２−７００１  ＩＬ−２を受ける被験体についてのＡＵＣ０−２４値は、２７５ＩＵ＊時間／ｍｌ（ＳＤ＝９９）であった（以下の実施例４を参照のこと）。
【００６６】
個々の用量からの個々のＡＵＣ０−２４の合計は、分割された個々の用量において合計週間ＡＵＣ０−２４を含む。例えば、９０μｇの用量は、１週あたり３回投与され、個々のＡＵＣ０−２４は１１０ＩＵ＊時間／ｍｌと見積もられ、そして合計週間ＡＵＣ０−２４は、以下の表１に示される用量で、増加したＡＵＣ０−２４の線形仮定に基づいて、３３０ＩＵ＊時間／ｍｌである。
【００６７】
（表１：Ｌ２−７００１  ＩＬ−２の投与後に得られるＡＵＣ０−２４値）
【００６８】
【表１】
2005525317.tif 000002
同一の、合計週間ＡＵＣ０−２４（３３０ＩＵ＊時間／ｍｌ）はまた、１３５μｇで１週間あたり２回の投与または約５４μｇで１週間あたり５回の投与によって得られ得る。
【００６９】
他の任意のＩＬ−２の供給源（すなわち、他の任意のＩＬ−２処方物またはＩＬ−２の任意の形態（ネイティブまたはそれらの生物学的に活性な改変体（例えば、ムテイン）を含む）について、本発明の方法における使用のために比較可能な推奨用量は、Ｌ２−７００１  ＩＬ−２についてのこのＡＵＣ０−２４データに基づいて決定され得る。この様式において、目的のＩＬ−２供給源の単一用量は、ヒト被験体に投与され、この初期ＩＬ−２曝露後の血清におけるＩＬ−２のレベルは、ＰＫデータを収集し、そして目的のＩＬ−２供給源に対するＡＵＣ０−２４を作製することによって決定される。「開始ＩＬ−２曝露」は、上記のように、ＩＬ−２曝露を測定するために使用される被験体が、ＩＬ−２の外因性供給源用いた治療を以前に受けていないことを意図する。次いで、このＡＵＣ０−２４は、Ｌ２−７００１  ＩＬ−２についてのＡＵＣ０−２４と比較され、Ｌ２−７００１  ＩＬ−２についての推奨用量に匹敵するＩＬ−２供給源の用量を算出ために使用され得る変換係数が決定される。例えば、以下の実施例４に示される、代表的な多量体ＩＬ−２処方物であるＰｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）ＩＬ−２についての算出を参照のこと。従って、本発明の方法において使用される任意のＩＬ−２供給源について、一定のＩＬ−２投薬レジメンの所定の任意のサイクルの間か、または２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンの所定の任意のサイクルの間に投与されるＩＬ−２の合計週間用量は、ヒトＰＫデータからの血清濃度−時間曲線下の領域によって決定されるように、参照ＩＬ−２標準物（すなわち、Ｌ２−７００１  ＩＬ−２）の、推奨される合計週間用量に等価な量である。
【００７０】
従って、例えば、ＩＬ−２の供給源がＰｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）ＩＬ−２である場合、治療有効用量の抗ＨＥＲ２抗体の週間投与と同時に投与されるＰｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）の合計週間用量は、治療を受ける患者の病歴および推奨ＩＬ−２投与レジメン（すなわち、２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンに対して一定）に依存して、約１８ＭＩＵ〜約５４ＭＩＵの範囲である。より高用量のＩＬ−２が投与される場合、Ｐｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）ＩＬ−２の合計週間用量は、約４２．０ＭＩＵ〜約５４．０ＭＩＵ（約４２．０ＭＩＵ、約４３．５ＭＩＵ、約４５．０ＭＩＵ、約４６．５ＭＩＵ、約４８．０ＭＩＵ、約４９．５ＭＩＵ、約５１．０ＭＩＵ、約５２．５ＭＩＵ、および約５４．０ＭＩＵを含む）の範囲内、ならびにこの範囲内にある他のこのような値であり得る。ＩＬ−２の中間用量が投与される場合、Ｐｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）ＩＬ−２の合計週間用量は、約３０．０ＭＩＵ〜約４２．０ＭＩＵ（約３０．０ＭＩＵ、約３１．５ＭＩＵ、約３３．０ＭＩＵ、約３４．５ＭＩＵ、約３６．０ＭＩＵ、約３７．５ＭＩＵ、約３９．０ＭＩＵ、約４０．５ＭＩＵ、および約４２．０ＭＩＵを含む）の範囲内、およびこの範囲内にある他のこのような値であり得る。より低用量のＩＬ−２が投与される場合、Ｐｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）ＩＬ−２の合計週間用量は、約１８．０ＭＩＵ〜約３０．０ＭＩＵ（約１８．０ＭＩＵ、約１９．５ＭＩＵ、約２１．０ＭＩＵ、約２２．５ＭＩＵ、約２４．０ＭＩＵ、約２５．５ＭＩＵ、約２７．０ＭＩＵ、約２８．５ＭＩＵ、および約３０．０ＭＩＵを含む）の範囲内、ならびにこの範囲内にある他のこのような値であり得る。
【００７１】
Ｐｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）ＩＬ−２の、先の合計週間用量は、１週あたりを基礎としてヒト被験体に投与される全体量または絶対用量を示すＭＩＵという形で表される。ヒトに投与されるＰｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）ＩＬ−２の、対応する合計週間相対用量は、容易に算出され得る。平均的なヒトは、約１．７ｍ２である。従って、投与されるべきＰｒｏｌｅｕｉｎ（登録商標）ＩＬ−２の合計週間絶対用量は、約４２．０ＭＩＵ〜約５４．０ＭＩＵであり、Ｐｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）ＩＬ−２の対応する合計週間相対用量は、約２４．７ＭＩＵ／ｍ２〜約３１．８ＭＩＵ／ｍ２である。同様に、合計週間絶対用量が約３０．０ＭＩＵ〜約４２．０ＭＩＵである場合、対応する合計週間相対用量は約１７．６ＭＩＵ／ｍ２〜約２４．７ＭＩＵ／ｍ２である。合計週間絶対用量が約１８．０ＭＩＵ〜約３０．０ＭＩＵである場合、対応する合計週間相対用量は約１０．６ＭＩＵ／ｍ２〜約１７．６ＭＩＵ／ｍ２である。
【００７２】
ＭＩＵは、患者の生物学的活性についての国際単位を示す。このＩＬ−２の生物学的活性についての国際単位は、１９８８年にｔｈｅ  Ｗｏｒｌｄ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ（ＷＨＯ）Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  ｆｏｒ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｓｔａｎｄａｒｄｓによって確立された。ＷＨＯに属するｔｈｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｆｏｒ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｓｔａｎｄａｒｄｓ  ａｎｄ  Ｃｏｎｔｒｏｌ（ＮＩＢＳＣ）によって提供されたＩＬ−２の生物学的参照物質は、ネイティブなヒト、Ｊｕｒｋａｔに由来するＩＬ−２の１アンプルあたり１００国際単位を有する。ＩＬ−２産物の活性は、ＨＴ−２細胞増殖によるインビトロ力価アッセイにおいて、この国際標準物に対して測定され得る。従って、例えば、Ｐｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）ＩＬ−２は、ＨＴ−２細胞増殖アッセイによって決定されるように、このＩＬ−２産物１ｍｇあたり、約１６．３６ＭＩＵの生物学的活性を有する（例えば、Ｇｅａｒｉｎｇ  ａｎｄ  Ｔｈｏｒｐｅ（１９８８）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  １１４：３−９；Ｎａｋａｎｉｓｈｉら（１９８４）Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１６０（６）：１６０５−１６２１を参照のこと）。この産物において使用される活性部分は、組換えヒトＩＬ−２ムテインアルデスロイキン（ａｌｄｅｓｌｅｕｋｉｎ）である（ｄｅｓ−アラニル−１、セリン−１２５ヒトインターロイキン−２と称される；米国特許第４，９３１，５４３号を参照のこと、これは参考として本明細書中に援用される）。この情報を使用して、推奨される治療に有効な、Ｐｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）ＩＬ−２の絶対用量（μｇ）を算出し得る。
【００７３】
従って、Ｐｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）の合計週間絶対用量が約１８．０ＭＩＵ〜約５４．０ＭＩＵである場合、Ｐｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）ＩＬ−２（μｇ）の対応する合計週間絶対用量は、この製品の約１１００μｇ〜約３３００μｇである。同様に、合計週間用量（ＭＩＵ）が約１８．０ＭＩＵ〜約３０．０ＭＩＵである場合、Ｐｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）ＩＬ−２の対応する合計週間絶対用量（μｇ）は、約１１００μｇ〜約１８３３μｇである。Ｐｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）ＩＬ−２の合計週間絶対用量（ＭＩＵ）が約３０．０ＭＩＵ〜約４２．０ＭＩＵである場合、対応する合計週間絶対用量（μｇ）は、約１８３３μｇ〜約２５６７μｇである。従って、Ｐｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）ＩＬ−２の合計週間絶対用量（ＭＩＵで示される）を考慮すると、当業者は、この特定のＩＬ−２製品のＭＩＵ／ｍ２またはμｇのいずれかで表される、対応する合計週間絶対用量を容易に算出し得る。
【００７４】
Ｐｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）ＩＬ−２が、一定のＩＬ−２投薬レジメンに従って投与される場合、合計週間用量は、約１８．０ＭＩＵ〜約５４．０ＭＩＵ、好ましくは約１８．０ＭＩＵ〜約４２．０ＭＩＵである。従って、例えば、いくつかの実施形態において、一定のＩＬ−２投薬レジメンの一部としての１週間当たり投与されるべきＰｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）ＩＬ−２の全体量は、約１８．０ＭＩＵ、約２２．５ＭＩＵ、約３０．０ＭＩＵ、約３３．０ＭＩＵ、約３６．０ＭＩＵ、約３９．０ＭＩＵ、または約４２．０ＭＩＵである。１つの実施形態において、Ｐｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）ＩＬ−２の合計週間用量は、約３０．０ＭＩＵ〜約４２．０ＭＩＵである。他の実施形態において、Ｐｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）ＩＬ−２の合計週間用量は、約１８．０ＭＩＵ〜約３０．０ＭＩＵである。
【００７５】
以前に記載されたように、一定のＩＬ−２投薬レジメンの間のＩＬ−２の合計週間用量は、単一用量として投与され得るか、あるいは１週間の投与計画あたり２回、３回、４回、５回、６回または７回の投与計画に従って投与される、一連の等用量に分割され得る。従って、例えば、Ｐｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）ＩＬ−２の合計週間用量が４２．０ＭＩＵである場合、１週間あたりの投与されるべきこのＩＬ−２供給源の３等用量は１４．０ＭＩＵであり、そして１週間あたりの投与されるべきこのＩＬ−２供給源の２等用量は２１．０ＭＩＵである。同様に、Ｐｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）ＩＬ−２の合計週間用量が３０．０ＭＩＵである場合、ＩＬ−２投与の１週間あたりの投与されるべきこのＩＬ−２供給源の３等用量は１０．０ＭＩＵであり、そしてＩＬ−２投与の１週間あたりの投与されるべきこのＩＬ−２供給源の２等用量は、１５ＭＩＵである。
【００７６】
２つのレベルのＩＬ−２投与が本発明の方法において企図される場合、Ｐｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）ＩＬ−２の対応する用量は以下の通りである。中用量または高用量（すなわち、約１０．０ＭＩＵ〜約１８．０ＭＩＵ、好ましくは、約１０．０ＭＩＵ〜約１４．０ＭＩＵ）のＰｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）ＩＬ−２は、２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンの第１の期間（例えば、ＩＬ−２投与の最初の２〜６週間にわたって）に投与され、続いて、処置期間の残りにわたって、低〜中程度のＩＬ−２投与範囲（すなわち、約６．０ＭＩＵ〜約１４．０ＭＩＵ、好ましくは約６．０ＭＩＵ〜約１０．０ＭＩＵのＰｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）ＩＬ−２）における用量の投与に移行する
従って、例えば、被験体が、１週間の抗ＨＥＲ２抗体投与と２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンとの同時治療（第２週の１日目（すなわち、抗ＨＥＲ２抗体の最初の投与後８日目）から開始して８週間の併用期間を有する）を受ける場合、処置期間の２〜５週間目に投与されるべきＰｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）ＩＬ−２の合計週間絶対用量は、約３０．０ＭＩＵ〜約５４．０ＭＩＵ（例えば、３０．０ＭＩＵ、３３．０ＭＩＵ、３６．０ＭＩＵ、３９．０ＭＩＵ、４２．０ＭＩＵ、４５．０ＭＩＵ、４８．０ＭＩＵ、５１．０ＭＩＵ、または５４．０ＭＩＵ）、あるいはこの範囲内にある他のこのような値である。この実施形態において、処置期間の６〜９週間目に投与されるべきＰｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）ＩＬ−２の合計週間絶対用量は、約１８．０ＭＩＵ〜約４２．０ＭＩＵまたは約１８．０ＭＩＵ〜約３６．０ＭＩＵ（例えば、約１８．０ＭＩＵ、約２１．０ＭＩＵ、約２４．０ＭＩＵ、約２７．０ＭＩＵ、約３０．０ＭＩＵ、約３３．０ＭＩＵ、または約３６．０ＭＩＵ）、およびこの範囲内にある他のこのような値である。先に記載したように、２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンの第１の期間および第２の期間の間に投与されるべき合計週間絶対用量は、以下のようにこれらの範囲内から選択される：より高い合計週間絶対用量が、２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンの第１の期間（例えば、９週間の処置期間の第２〜５週目）に投与され、そしてより低い合計週間絶対用量が２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンの第２の期間（例えば、同じ９週間の処置期間の第６〜９週目）に投与される。従って、例えば、２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンの第１期間の、ＩＬ−２の合計週間絶対用量が、約４８．０ＭＩＵ〜約５４．０ＭＩＵである場合、ＩＬ−２投薬の第２の期間のＰｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）ＩＬ−２の合計週間絶対用量は、好ましくは約１８．０ＭＩＵ〜約４２．０ＭＩＵの範囲内である。
【００７７】
従って、１週間の抗ＨＥＲ２抗体投薬と２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンとの同時治療による処置期間の持続期間が約９週間である場合、１つの実施形態において、処置期間の第２〜５週間目のＰｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）ＩＬ−２の合計週間絶対用量は、約３０．０ＭＩＵ〜約５４．０ＭＩＵ、または約３０．０ＭＩＵ〜約４２．０ＭＩＵであり、この処置期間の第６〜９週目のＰｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）ＩＬ−２の合計週間絶対用量は、約１８．０ＭＩＵ〜約３０．０ＭＩＵである。この実施形態において、第２〜５週目の対応するＰｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）ＩＬ−２の合計週間相対用量は、それぞれ、約１７．６ＭＩＵ／ｍ２〜約３１．８ＭＩＵ／ｍ２または約１７．６ＭＩＵ／ｍ２〜約２４．７ＭＩＵ／ｍ２である。第６〜９週目の対応するＰｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）ＩＬ−２の合計週間相対用量は、約１０．６ＭＩＵ／ｍ２〜約１７．６ＭＩＵ／ｍ２である。この同一の実施形態について、第２〜５週目の対応するＰｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）ＩＬ−２の合計週間相対用量（μｇで表す）は、それぞれ、約１８３３μｇ〜約３３００μｇまたは約１８３３μｇ〜約２５６６μｇである。第６〜９週目の対応するＰｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）ＩＬ−２の合計週間相対用量（μｇで表す）は、約１１００μｇ〜約１８３３μｇである。
【００７８】
１つの実施形態において、２〜５週間のＰｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）ＩＬ−２の絶対的な合計週間用量は、約４２．０ＭＩＵであり、６〜９週間のＰｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）ＩＬ−２の絶対的な合計週間用量は、約３０．０ＭＩＵである。この実施形態において、Ｐｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）ＩＬ−２のより多量の合計週間用量およびより低量の合計週間用量の各々は、１週間に２回の投薬スケジュールに従って投与される２つの等用量に分配される。ここで、これら２つの等用量は、７日以内に被験体に投与され、最小７２時間の投薬間隔、最大９６時間の投薬間隔が可能である。代替の実施形態において、Ｐｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）ＩＬ−２のより高い合計週間用量およびより低い合計週間用量の各々は、１週間に３回の投薬スケジュールに従って投与される３つの等用量に分配される。ここで、これら３つの等用量は、７日以内に被験体に投与され、最小２５時間の投薬間隔、最大７２時間の投薬間隔が可能である。
【００７９】
一般に、以前に言及した投薬レジメンに従って治療を受けた被験体は、この被験体が１つ以上の抗ＨＥＲ２抗体毒性の症状を示すまで、特定の投薬レジメンのままであり、この時点で、これらの薬剤両方の投薬を終了する。ＩＬ−２毒性の症状が発症した場合、ＩＬ−２の投薬は、中止される。この被験体は、必要な場合、現在の治療を再開し、その後、抗ＨＥＲ２抗体の徴候および症状またはＩＬ−２毒性の症状が回復する。
【００８０】
本発明の投与プロトコルは、ヒト患者におけるＨＥＲ２レセプタータンパク質の過剰発現によって特徴付けられる癌を管理するための改善された手段を提供する。一定のＩＬ−２投薬スケジュール（その間で中断を伴う）は、抗ＨＥＲ２抗体治療の間のＩＬ−２の投与頻度が低くかつ長期にわたるＩＬ−２治療のより良好な耐容性を可能にする、断続的な投薬スケジュールを提供する。２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンは、ＩＬ−２のより高い合計週間用量を患者に提供する機会を与え、この用量は、次週のＩＬ−２投薬の間、より低い用量によって維持され得るＮＫ細胞数の増加を提供する。ＩＬ−２副作用は用量に関連するので、低下させた用量は、延長した処置期間の間の耐容性を増加させる。この投与プロトコルは、より高い合計週間ＩＬ−２投薬スケジュールとより低い合計週間ＩＬ−２投薬スケジュールとの間でＩＬ−２薬物の休みを与え、かつ２つのレベルのＩＬ−２投薬レジメンの完全なサイクルの間でＩＬ−２薬物の休みを与えるという、さらなる魅力を有する。これは、抗ＨＥＲ２抗体およびＩＬ−２を用いた同時治療の耐容性の増加にさらに寄与する。
【００８１】
用語「ＩＬ−２」とは、本明細書中で使用される場合、正常な末梢血リンパ球によって産生されかつ低濃度で体内に存在しているリンホカインをいう。ＩＬ−２は、Ｍｏｒｇａｎら（１９７６）Ｓｃｉｅｎｃｅ  １９３：１００７−１００８によって最初に記載され、本来、刺激されたＴリンパ球の増殖を誘導するその能力に起因して、Ｔ細胞増殖因子と呼ばれる。これは、１３，０００〜１７，０００の範囲の報告された分子量のタンパク質であり（ＧｉｌｌｉｓおよびＷａｔｓｏｎ（１９８０）Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１５９：１７０９）、かつ６〜８．５の範囲の等電点を有する。本発明の目的のために、用語「ＩＬ−２」は、ＩＬ−２の任意の供給源（哺乳動物供給源（例えば、マウス、ラット、ウサギ、霊長類、ブタおよびヒト）が挙げられる）を包含することが意図され、これは、ネイティブであり得るかまたは組換え技術によって得られ得る（例えば、微生物宿主によって産生される組換えＩＬ−２ポリペプチド）。このＩＬ−２は、ネイティブポリペプチド配列であり得るか、または改変体ＩＬ−２ポリペプチドが本明細書中に規定される目的のＩＬ−２の生物学的活性を維持する限り、本明細書中以下に記載されるようなネイティブＩＬ−２ポリペプチドの改変体であり得る。好ましくは、このＩＬ−２ポリペプチドまたはその改変体は、ヒト供給源由来であり、組換え産生されるヒトＩＬ−２（例えば、微生物宿主によって産生される組換えヒトＩＬ−２ポリペプチド）、および目的のＩＬ−２の生物学的活性を維持するそれらの改変体を含む。治療学的に活性な成分としてＩＬ−２を含有する任意の薬学的組成物が、本発明を実施するために使用され得る。
【００８２】
本発明の方法において有用な薬学的組成物は、ＩＬ−２の生物学的に活性な改変体を含有し得る。このような改変体は、ネイティブポリペプチドの所望の生物学的活性を維持するはずであり、その結果、この改変体ポリペプチドを含有する薬学的組成物は、被験体に投与された場合、ネイティブポリペプチドを含有する薬学的組成物と同じ治療効果を有する。すなわち、この改変体ポリペプチドは、ネイティブポリペプチドについて観察されるのと類似の様式で、薬学的組成物中で治療学的に活性な成分として働く。改変体ポリペプチドが所望の生物学的活性を維持し、それによって薬学的組成物中で治療学的に活性な成分として働くか否かを決定するための方法は、当該分野で利用可能である。生物学的活性は、ネイティブポリペプチドまたはネイティブタンパク質の活性を測定するように特異的に設計されたアッセイ（本発明において記載されているアッセイを含む）を使用して測定され得る。さらに、生物学的に活性なネイティブポリペプチドに対して惹起される抗体は、その改変体ポリペプチドに結合する能力について試験され得る。ここで、効果的な結合は、そのネイティブポリペプチドのコンホメーションと類似のコンホメーションを有するポリペプチを示す。
【００８３】
本発明の目的のために、目的のＩＬ−２の生物学的活性は、ＩＬ−２がナチュラルキラー（ＮＫ）細胞を活性化および／または増大させて、リンホカイン活性化キラー（ＬＡＫ）活性および抗体依存性細胞性細胞傷害（ＡＤＣＣ）を媒介する能力である。従って、本発明の方法における使用のためのＩＬ−２改変体（例えば、ヒトＩＬ−２のムテイン）は、ＮＫ細胞を活性化および／または増大させて、ＬＡＫ活性およびＡＤＣＣを媒介する。ＩＬ−２活性またはＮＫ細胞の増大およびＬＡＣ活性またはＡＤＣＣ活性の媒介を決定するためのアッセイは、当該分野で周知である。
【００８４】
ネイティブのＩＬ−２または天然に存在するＩＬ−２の適切な生物学的に活性な改変体は、そのポリペプチドのフラグメント、アナログおよび誘導体であり得る。「フラグメント」によって、インタクトなポリペプチドの配列および構造の一部のみからなるポリペプチドが意図され、これは、ネイティブポリペプチドのＣ末端欠失またはＮ末端欠失であり得る。「アナログ」によって、ネイティブポリペプチドまたはネイティブポリペプチドのフラグメントのいずれかのアナログが意図される。ここで、このアナログは、１つ以上のアミノ酸の置換、挿入、または欠失を有する、ネイティブポリペプチドの配列および構造を含む。本明細書中で記載されるような「ムテイン」、および１つ以上のペプトイド（ペプチド模倣物）を有するペプチドもまた、この用語「アナログ」によって包含される（国際公開番号ＷＯ  ９１／０４２８２を参照のこと）。「誘導体」によって、ネイティブポリペプチドの所望の生物学的活性が維持される限り、目的のネイティブポリペプチド、このネイティブポリペプチドのフラグメント、またはそれらのそれぞれのアナログ、または外来部分の他の付加物の任意の適切な改変（例えば、グリコシル化、リン酸化、ポリマー結合体化（例えば、ポリエチレングリコールを有する））が意図される。ポリペプチドフラグメント、アナログ、および誘導体を作製するための方法は、一般に、当該分野で利用可能である。
【００８５】
例えば、ポリペプチドのアミノ酸配列改変体は、目的のネイティブポリペプチドをコードするクローン化されたＤＮＡ配列中での変異によって調製され得る。変異誘発およびヌクレオチド配列変化のための方法は、当該分野で周知である。例えば、ＷａｌｋｅｒおよびＧａａｓｔｒａ編（１９８３）Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ（ＭａｃＭｉｌｌａｎ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ）；Ｋｕｎｋｅｌ（１９８５）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８２：４８８−４９２；Ｋｕｎｋｅｌら（１９８７）Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍｏｌ．１５４：３６７−３８２；Ｓａｍｂｒｏｏｋら（１９８９）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ（Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｐｌａｉｎｖｉｅｗ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ）；米国特許第４，８７３，１９２号；およびそれらで引用される参考文献（本明細書中で参考として援用される）を参照のこと。目的のポリペプチドの生物学的活性に影響を及ぼさないアミノ酸置換に適するようなガイダンスは、Ｄａｙｈｏｆｆら（１９７８）Ａｔｌａｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ（Ｎａｔｌ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ｒｅｓ．Ｆｏｕｎｄ．，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｄ．Ｃ．）（本明細書中で参考として援用される）のモデルにおいて見出され得る。保存的置換（例えば、１つのアミノ酸を、類似の特性を有する別のアミノ酸と交換すること）が、好ましくあり得る。保存的置換としては、以下が挙げられるがこれらに限定されない：Ｇｌｙ⇔Ａｌａ、Ｖａｌ⇔Ｉｌｅ⇔Ｌｅｕ、Ａｓｐ⇔Ｇｌｕ、Ｌｙｓ⇔Ａｒｇ、Ａｓｎ⇔Ｇｌｎ、およびＰｈｅ⇔Ｔｒｐ⇔Ｔｙｒ。
【００８６】
目的のＩＬ−２ポリペプチドの改変体を構築する際に、改変体が所望の活性を保有し続けるように、改変がなされる、明らかに、その改変体ポリペプチドをコードするＤＮＡにおいてなされるいかなる改変も、その配列をリーディングフレームの範囲外に配置するはずがなく、好ましくは、ｍＲＮＡの二次構造を生成し得る相補性領域を作製しない。欧州特許出願公開番号７５，４４４号を参照のこと。
【００８７】
ＩＬ−２の生物学的に活性な改変体は、アミノ酸配列に対し、一般的には少なくとも７０％、好ましくは少なくとも８０％、より好ましくは約９０％〜９５％またはそれ以上、および最も好ましくは約９８％またはそれ以上のアミノ酸配列同一性を有する。従って、ＩＬ−２参照分子がヒトＩＬ−２である場合、その生物学的に活性な改変体は、ヒトＩＬ−２のアミノ酸配列に対し、少なくとも７０％、好ましくは少なくとも８０％、より好ましくは約９０％〜９５％またはそれ以上、および最も好ましくは約９８％またはそれ以上の配列同一性を有する。目的のネイティブポリペプチドの生物学的に活性な改変体は、わずか１〜１５アミノ酸、わずか１〜１０アミノ酸（例えば、６〜１０）、わずか５アミノ酸、わずか４、３、２、またはちょうど１アミノ酸残基に関して、ネイティブポリペプチドと異なり得る。「配列同一性」により、改変体のアミノ酸配列の特定の連続セグメントが、参照分子のアミノ酸配列に対して一列に並べられ、そして比較される場合、同じアミノ酸残基が改変体ポリペプチドおよび比較の基礎となる参照ポリペプチド分子の中で見出されることが意図される。２つのアミノ酸配列間の配列同一性の百分率は、同一アミノ酸残基が両方の配列で生じるところの位置の数を決定して一致した位置の数を出し、一致した位置の数を参照分子と比較されているセグメント中の位置の総数で割り、その結果に１００を乗ずることにより配列同一性の百分率を出すことにより、計算される。
【００８８】
従って、任意の２つの配列間の相同性の百分率の決定は、数学的アルゴリズムを用いて達成され得る。好ましくは、ＩＬ−２の天然に生じる改変体または非天然に生じる改変体は、参照分子（例えば、ネイティブヒトＩＬ−２）または参照ＩＬ−２分子のより短い部分のアミノ酸配列と、少なくとも７０％、好ましくは８０％、より好ましくは、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％または９５％同一であるアミノ酸配列を有する。より好ましくは、この分子は、９６％、９７％、９８％または９９％同一である。パーセント配列同一性は、１２のギャップオープンペナルティーおよび２のギャップ伸長ペナルティー、６２のＢＬＯＳＵＭマトリクスを用いるアフィンギャップ検索を使用するＳｍｉｔｈ−Ｗａｔｅｒｍａｎ相同性検索アルゴリズムを使用して決定される。Ｓｍｉｔｈ−Ｗａｔｅｒｍａｎ相同性検索アルゴリズムは、Ｓｍｉｔｈ  ａｎｄ  Ｗａｔｅｒｍａｎ，Ａｄｖ．Ａｐｐｌ．Ｍａｔｈ．（１９８１）２：４８２−４８９において教示される。例えば、改変体は、１〜１０アミノ酸残基（例えば、６〜１０、わずか５アミノ酸残基、わずか４、３、２アミノ酸残基、またはちょうど１アミノ酸残基）に関して異なり得る。
【００８９】
２つのアミノ酸配列の最適な整列に関し、改変体アミノ酸配列の隣接セグメントは、参照アミノ酸配列に対する付加アミノ酸残基または欠失アミノ酸残基を有し得る。参照アミノ酸配列との比較に使用される隣接セグメントは、少なくとも２０隣接アミノ酸残基を含み、そして３０、４０、５０、またはそれ以上のアミノ酸残基であり得る。保存的残基置換またはギャップに関連する配列同一性の補正がなされ得る（Ｓｍｉｔｈ−Ｗａｔｅｒｍａｎ相同性検索アルゴリズムを参照のこと）。
【００９０】
ＩＬ−２活性を有するポリペプチドの正確な化学構造は、多くの因子に依存する。イオン化可能なアミノ基およびカルボキシル基が分子中に存在するので、特定のポリペプチドが酸性塩または塩基性塩として得られ得るか、または中性形態で得られ得る。生物学的活性を保持する全てのこのような調製物は、適切な環境条件に配置された場合、本明細書中で使用されるようなＩＬ−２活性を有するポリペプチドの定義に包含される。さらに、ポリペプチドの一次アミノ酸配列は、糖部分を使用した誘導体化（グリコシル化）または他の補足分子（例えば、脂質、リン酸基、アセチル基など）により増強され得る。それはまた、糖類との結合により増強され得る。このような増強の特定の局面は、生産宿主の翻訳後のプロセシングシステムにより達成され；他のこのような修飾は、インビトロで誘導され得る。いずれの場合においても、このような修飾は、ポリペプチドのＩＬ−２活性が破壊されない限り、本明細書で使用されるＩＬ−２ポリペプチドの定義に包含される。このような修飾は、様々なアッセイにおいて、ポリペプチドの活性を高めるか、または減少するかのいずれかによって、活性に量的または質的に影響を与え得ることが予想される。さらに、この鎖における個々のアミノ酸残基は、酸化、還元、または他の誘導体化により修飾され得、そしてこのポリペプチドは切断され、活性を保有するフラグメントを得ることができる。活性を破壊しないこのような改変は、本明細書中で使用されるような、目的のＩＬ−２ポリペプチドの定義から、このポリペプチド配列を除去しない。
【００９１】
当該分野は、ポリペプチド改変体の調製および使用に関する実質的な指導を提供する。ＩＬ−２改変体の調製において、当業者は、ネイティブタンパク質、ヌクレオチド配列またはアミノ酸配列に対するどの修飾が、本発明の方法において使用される薬学的組成物の治療的活性成分としての使用に適切な改変体を生じるかを容易に決定し得る。
【００９２】
本発明の方法における使用のためのＩＬ−２またはその改変体は、任意の供給源に由来し得るが、好ましくは組換えＩＬ−２である。「組換えＩＬ−２」は、ネイティブ配列ＩＬ−２と比較可能な生物活性を有し、そして例えば、Ｔａｎｉｇｕｃｈｉら（１９８３）Ｎａｔｕｒｅ  ３０２：３０５−３１０およびＤｅｖｏｓ（１９８３）Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  １１：４３０７−４３２３によって記載されるような組換えＤＮＡ技術により調製されるか、またはＷａｎｇら（１９８４）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２２４：１４３１−１４３３により記載されるようにＩＬ−２を変異的に変化させることが意図されるインターロイキン−２である。一般的に、ＩＬ−２コード遺伝子は、本明細書に記載されるように、クローン化され、次いで形質転換した生物体（好ましくは、微生物、そして最も好ましくは、Ｅ．ｃｏｌｉ）中で発現される。宿主生物体は、発現条件下で、外来遺伝子を発現しＩＬ−２を生成する。合成組換えＩＬ−２はまた、真核細胞（例えば、酵母またはヒト細胞）において作られ得る。増殖、収集、分裂、または細胞からＩＬ−２を抽出するためのプロセスは、例えば、米国特許第４，６０４，３７７号、同４，７３８，９２７号、同４，６５６，１３２号、同４，５６９，７９０号、同４，７４８，２３４号、同４，５３０，７８７号、同４，５７２，７９８号、同４，７４８，２３４号、および同４，９３１，５４３号（これらの全体が、参考として本明細書中に援用される）において、実質的に記載される。
【００９３】
改変体ＩＬ−２タンパク質の例に関しては、ヨーロッパ特許（ＥＰ）公報番号ＥＰ  １３６，４８９（自然に生じるＩＬ−２のアミノ酸配列における１つ以上の以下の変更（Ａｓｎ２６からＧｌｎ２６に；Ｔｒｐ１２１からＰｈｅ１２１に；Ｃｙｓ５８からＳｅｒ５８またはＡｌａ５８に，Ｃｙｓ１０５からＳｅｒ１０５またはＡｌａ１０５に；Ｃｙｓ１２５からＳｅｒ１２５またはＡｌａ１２５に）；Ａｒｇ１２０以下の全ての残基の欠失；およびそのＭｅｔ−１形態を開示する）；および１９８３年１０月１３日に出願されたヨーロッパ特許出願番号８３３０６２２１．９（公開番号ＥＰ１０９，７４８で１９８４年５月３０日公開）これはベルギー特許番号８９３，０１６および共有に係る米国特許第４，５１８，５８４号に対応する）に記載される組換えＩＬ−２ムテイン（組換えヒトＩＬ−２ムテインを開示し、ここで位置１２５（天然ヒトＩＬ−２に従って番号をつけられた）でシステインが欠失するか、または中性アミノ酸に置換される；アラニル−ｓｅｒ１２５−ＩＬ−２；およびｄｅｓ−アラニル−ｓｅｒ１２５−ＩＬ−２）を参照のこと。米国特許第４，７５２，５８５号（以下の改変体ＩＬ−２タンパク質を開示する：
【００９４】
【化１】
2005525317.tif 000003
）および米国特許第４，９３１，５４３号（本明細書中の実施例において使用されるＩＬ−２ムテインｄｅｓ−アラニル−１、セリン−１２５ヒトＩＬ−２ならびに他のＩＬ−２ムテインを開示する）もまた参照のこと。
【００９５】
ヨーロッパ特許公開番号ＥＰ２００，２８０（１９８６年１２月１０日公開）（組換えＩＬ−２ムテインを開示し、ここで位置１０４のメチオニンが、保存的なアミノ酸により置換される。例としては以下のムテインが挙げられる：
【００９６】
【化２】
2005525317.tif 000004
）もまた参照のこと。ヨーロッパ特許公開番号ＥＰ１１８，６１７および米国特許第５，７００，９１３（ネイティブＩＬ−２のメチオニンの代わりに、Ｎ末端アミノ酸としてアラニンを保有するグリコシル化されないヒトＩＬ−２改変体；最初のメチオニンが欠失し、その結果プロリンがＮ末端アミノ酸となるグリコシル化されないヒトＩＬ−２；およびＮ末端メチオニンおよびプロリンアミノ酸の間に挿入されたアラニンを有するグリコシル化されないヒトＩＬ−２を開示する）もまた参照のこと。
【００９７】
他のＩＬ−２ムテインとしては、以下に開示されるムテインが挙げられる；ＷＯ９９／６０１２８（ヒスチジンまたはイソロイシンでの位置２０のアスパラギン酸の置換、アルギニン、グリシン、またはイソロイシンでの位置８８のアスパラギンの置換、またはロイシンまたはグルタミン酸での位置１２６のグルタミンの置換）、これは、報告によれば、ＮＫ細胞よりはむしろＴ細胞レセプターを発現し、ＩＬ−２毒性を減少する細胞によって発現される高親和性ＩＬ−２レセプターに対する選択的な活性を有する；米国特許第５，２２９，１０９号に開示されるムテイン（アラニンでの位置３８のアルギニンの置換、またはリジンでの位置４２のフェニルアラニンの置換）、これは、ネイティブＩＬ−２と比較した場合、高親和性ＩＬ−２レセプターに対する結合が減少するが、ＬＡＫ細胞を刺激する能力を維持することを示す；国際公開番号ＷＯ００／５８４５６に開示されるムテイン（天然ＩＬ−２中の天然に生じる（ｘ）Ｄ（ｙ）配列を改変するか、または欠失し、ここでＤはアスパラギン酸であり、（ｘ）はロイシン、イソロイシン、グリシン、またはバリンであり、そして（ｙ）はバリン、ロイシンまたはセリンである）、これらは、血管漏出症候群（ｖａｓｃｕｌａｒ  ｌｅａｋ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ）を減少すると主張されている；国際公開番号ＷＯ  ００／０４０４８に開示されるＩＬ−２  ｐｌ−３０ペプチド（ＩＬ−２の最初の３０アミノ酸に対応し、このアミノ酸は、ＩＬ−２の完全なα−ヘリックスＡを含み、そしてＩＬ−２レセプターのｂ鎖と相互作用する）、これは、報告によれば、ＮＫ細胞およびＬＡＫ細胞の誘導を刺激し；そしてＩＬ−２  ｐ１−３０ペプチドの変異体形態はまた、ＷＯ  ００／０４０４８（リジンでの２０位のアスパラギン酸の置換）に開示される。これは、報告によれば、血管出血を誘導し得ないが、ＬＡＫ細胞を生成する能力を残す。さらに、ＩＬ−２は、ポリエチレングリコールで修飾され、高められた溶解度および改変された薬物速度論的（ｐｈａｒｍｏｋｉｎｅｔｉｃ）プロフィールを提供し得る（米国特許第４，７６６，１０６を参照のこと）。
【００９８】
本明細書中で使用される場合、用語ＩＬ−２はまた、投薬頻度を減らすか、またはＩＬ−２許容性を改善するために第２のタンパク質と融合したＩＬ−２またはポリプロリンもしくは水溶性ポリマーと共有結合したＩＬ−２を含め、ＩＬ−２融合体またはＩＬ−２結合体を包含することを意図する。例えば、ＩＬ−２（または、本明細書中に定義されるようなそれらの改変体）は、当該分野で公知の方法（ＷＯ  ０１／７９２５８を参照のこと）を用いて、ヒトアルブミンまたはアルブミンフラグメントと融合され得る。あるいは、ＩＬ−２は、当該分野で公知の方法（例えば、米国特許第４，７６６，１０６号、同第５，２０６，３４４号および同第４，８９４，２２６号を参照のこと）を用いて、ポリプロリンまたはポリエチレングリコールホモポリマーおよびポリオキシエチル化ポリオールと共有結合され得、ここで、このホモポリマーは、１つの末端にて置換されないかまたはアルキル基で置換され、そしてポリオールは置換されない。
【００９９】
治療的活性成分としてＩＬ−２を含有する任意の薬学的組成物が、本発明の方法において使用され得る。このような薬学的組成物は当該分野で公知であり、以下に開示された化合物が挙げられるが、これらに限定されない；米国特許第４，７４５，１８０号；同第４，７６６，１０６号；同第４，８１６，４４０号；同第４，８９４，２２６号；同第４，９３１，５４４号；および同第５，０７８，９９７号（本明細書中に参考として援用される）。従って、ＩＬ−２または当該分野で公知のそれらの改変体を含有する、液体の組成物、凍結乾燥された組成物またはスプレー乾燥された組成物は、本発明に従う、被験体へのその後の連続投与のための水性または非水性のまたは懸濁液として、調製され得る。これらの組成物の各々は、治療的活性成分または予防的活性成分としてＩＬ−２またはその改変体を含有する。「治療的活性成分または予防的活性成分」によって、薬学的組成物が被験体に投与される場合、被験体内の疾患または状態の処置、予防、または診断に関する、所望の治療応答または予防応答を引き起こすようにＩＬ−２またはその改変体が組成物中に特異的に取り込まれていることが意図される。好ましくは、薬学的組成物は、適切な安定剤、バルク剤、またはそれら両方を含み、調製および保存の間のタンパク質安定性および生物活性の損失に関する問題を最小限にする。
【０１００】
本発明の好ましい実施形態において、本発明の方法において有用な、ＩＬ−２を含有する薬学的組成物は、安定化された単量体ＩＬ−２またはその改変体を含有する組成物、多量体ＩＬ−２またはその改変体を含有する組成物、および安定化され、凍結乾燥またはスプレー乾燥されたＩＬ−２またはその改変体を含有する組成物を含有する組成物である。
【０１０１】
安定化された単量体ＩＬ−２またはその改変体を含む薬学的組成物は、「Ｓｔａｂｉｌｉｚｅｄ  Ｌｉｑｕｉｄ  Ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ−Ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｓ」と題された国際公開番号ＷＯ  ０１／２４８１４において、開示される。「単量体」ＩＬ−２により、本明細書中に記載される薬学的組成物において、タンパク質分子が、凝集形態ではなく、実質的にそれらの単量体形態で安定して存在することが意図される。従って、ＩＬ−２の共有結合オリゴマーも共有結合凝集体もＩＬ−２の疎水性オリゴマーも疎水性凝集体も存在しない。簡単に言えば、これらの液体組成物中のＩＬ−２は、保存の間のＩＬ−２凝集体形成を減らすために十分な量のアミノ酸ベースとともに処方される。アミノ酸ベースは、アミノ酸またはアミノ酸の組み合わせであり、ここで任意の所定のアミノ酸が遊離基形態または塩形態のいずれかで存在する。好ましいアミノ酸は、アルギニン、リジン、アスパラギン酸、およびグルタミン酸からなる群から選択される。これらの組成物はさらに、ＩＬ−２の安定性に関して受容可能な範囲内に液体組成物のｐＨを維持する緩衝剤を含み、ここで、緩衝剤は、その塩形態を実質的に含まない酸、塩形態の酸、または酸およびその塩形態の混合物である。好ましくは、酸は、コハク酸、クエン酸、リン酸およびグルタミン酸からなる群から選択される。このような組成物は、本明細書中、安定化された単量体ＩＬ−２の薬学的組成物と言われる。
【０１０２】
これらの組成物中のアミノ酸ベースが、液体薬学的組成物の保存の間の凝集体形成に対してＩＬ−２を安定化するために役立つが、その塩形態を実質的に含まない酸、塩形態の酸、または酸およびその塩形態の混合物の緩衝剤として使用は、等張に近い容量オスモル濃度を有する液体組成物を生じる。この液体薬学的組成物はさらに、ポリペプチドの安定性をさらに増大させるために、他の安定剤、より特別にはメチオニン、非イオン性界面活性剤（例えば、ポリソルベート８０およびＥＤＴＡ）を組み込み得る。このような液体薬学的組成物は、その塩形態を実質的に含まない酸、その塩形態の酸、または酸とその塩形態との混合物と組み合わせたアミノ酸ベースの添加、これらの２つの成分の組み合わせの組成物の非存在下で処方された液体薬学的組成物と比べて、増大した保存安定性を有する組成物を生じるので、安定化されていると言われる。
【０１０３】
安定化された単量体ＩＬ−２を含有する、これらの液体薬学的組成物は、水性液体形態で使用され得るか、あるいは後の使用のために凍結状態で保存され得るか、または液体形態または本発明の方法に従う、被験体への投与に適した他の形態への後の再構築のために乾燥状態で保存され得るかのいずれかである。「乾燥形態」によって、液体薬学的組成物または処方物がフリーズドライ（ｆｒｅｅｚｅ  ｄｒｙ）（すなわち、凍結乾燥（ｌｙｏｐｈｉｌｉｚａｔｉｏｎ）；例えば、ＷｉｌｌｉａｍｓおよびＰｏｌｌｉ（１９８４）Ｊ．Ｐａｒｅｎｔｅｒａｌ  Ｓｃｉ．Ｔｅｃｈｎｏｌ．３８：４８−５９を参照のこと）、スプレー乾燥（Ｍａｓｔｅｒｓ（１９９１）、Ｓｐｒａｙ−Ｄｒｙｉｎｇ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ（第５版；Ｌｏｎｇｍａｎ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  ａｎｄ  Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ，Ｅｓｓｅｚ，Ｕ．Ｋ．）、４９１〜６７６頁；Ｂｒｏａｄｈｅａｄら（１９９２）Ｄｒｕｇ  Ｄｅｖｅｌ．Ｉｎｄ．Ｐｈａｒｍ．１８：１１６９−１２０６；およびＭｕｍｅｎｔｈａｌｅｒら（１９９４）Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．１１：１２−２０）、または風乾（ＣａｒｐｅｎｔｅｒおよびＣｒｏｗｅ（１９８８）Ｃｒｙｏｂｉｏｌｏｇｙ  ２５：４５９−４７０；およびＲｏｓｅｒ（１９９１）Ｂｉｏｐｈａｒｍ．４：４７−５３）のいずれかによって乾燥されることが意図される。
【０１０４】
非凝集性の単量体状態においてＩＬ−２を含むＩＬ−２処方物の他の例は、ＷｈｉｔｔｉｎｇｔｏｎおよびＦａｕｌｄｓ（１９９３）Ｄｒｕｇｓ  ４６（３）：４４６−５１４に記載されるものを含む。これらの処方物は、組換えＩＬ−２ムテインＴｅｃｅｌｅｕｋｉｎ（アミノ末端に付加されたメチオニン残基を有するグリコシル化されていないヒトＩＬ−２）が、等張性の生理食塩水において再構成された凍結乾燥粉末における０．２５％ヒト血清アルブミンで処方され、そして組換えＩＬ−２ムテインＢｉｏｌｅｕｋｉｎ（アミノ末端に付加されるメチオニン残基を有するヒトＩＬ−２、およびヒトＩＬ−２配列の１２５位のシステイン残基のアラニンへの置換）が０．１〜１．０ｍｇ／ｍｌのＩＬ−２ムテインが、酸と混合されるように処方され、ここでその処方物は、３．０〜４．０のｐＨを有し、有利には緩衝剤を有さず、１０００ｍｍｈｏｓ／ｃｍ未満の導伝性を有する（有利には、５００ｍｍｈｏｓ／ｃｍ未満）。ＥＰ  ３７３，６７９；Ｘｈａｎｇら（１９９６）Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔ．Ｒｅｓ．１３（４）：６４３−６４４；およびＰｒｅｓｔｒｅｌｓｋｉら（１９９５）Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔ．Ｒｅｓ．１２（９）：１２５０−１２５８を参照のこと。
【０１０５】
多量体ＩＬ−２を含む薬学的組成物の例は、共有に係る米国特許第４，６０４，３７７号に開示される。「多量体」により、タンパク質分子が１０〜５０分子の平均分子会合を有する微小凝集した形態における薬学的組成物中に存在することが意図される。これらの多量体は、ゆるく結合された、物理的に会合したＩＬ−２分子として存在する。これらの組成物の凍結乾燥形態は、商品名Ｐｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）ＩＬ−２（Ｃｈｉｒｏｎ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｅｍｅｒｙｖｉｌｌｅ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ）の下で市販されている。この参照文献に開示される凍結乾燥された処方物は、選択的に酸化された、微生物で作製される組換えＩＬ−２を含む。この組換えＩＬ−２は、マンニトールのような水溶性キャリア（これは、バルクを提供する）および十分な量のドデシル硫酸ナトリウムと混合され、組換えＩＬ−２の水への溶解性を確実にする。これらの組成物は、非経口投与のための水性注入物における再構成に適切であり、かつ安全であり、ヒト患者において十分耐性である。再構成される場合、ＩＬ−２はその多量体状態を保つ。多量体ＩＬ−２を含むこのような凍結乾燥された組成物または液体組成物は、本発明の方法により包含される。このような組成物は、本明細書中で、多量体ＩＬ−２薬学的組成物といわれる。
【０１０６】
本発明の方法はまた、ＩＬ−２を含む安定化された凍結乾燥された薬学的組成物または噴霧乾燥された薬学的組成物を使用し得、これは、液体または本発明の方法に従う投与の他の適切な形態に再構成され得る。このような薬学的組成物は、「Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ｐｕｌｍｏｎａｒｙ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｏｆ  Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ−２」と題される国際公開番号ＷＯ０１／４９２７４に開示される。これらの組成物は、さらに少なくとも１つの充填剤、乾燥プロセスの間タンパク質を安定化させるのに十分な量の少なくとも１つの因子、またはそれらの両方をさらに含み得る。「安定化された」によってＩＬ−２タンパク質またはその改変体が、組成物の固体形態または乾燥粉末形態を得るための凍結乾燥または噴霧乾燥の後に、その単量体形態または多量体形態および質、純度、および効果といった他の重要な性質を保つことが意図される。これらの組成物において、充填剤としての使用のための好ましいキャリア材料としては、グリシン、マンニトール、アラニン、バリン、またはそれらの任意の組み合わせが挙げられ、最も好ましくはグリシンである。充填剤は、０％〜約１０％（ｗ／ｖ）の範囲で処方物中に存在し、使用される因子に依存する。安定化剤としての使用のための好ましいキャリア材料としては、任意の糖または糖アルコールまたは任意のアミノ酸が挙げられる。好ましい糖としては、スクロース、トレハロース、ラフィノース、スタキオース、ソルビトール、グルコース、ラクトース、デキストロースまたはそれらの任意の組み合わせが挙げられ、好ましくは、スクロースである。安定化剤が糖である場合、約０％〜約９．０％の範囲（ｗ／ｖ）、好ましくは約０．５％〜約５．０％の範囲、より好ましくは約１．０％〜約３．０％の範囲、最も好ましくは約１．０％で存在する。安定化剤が、アミノ酸である場合、約０％〜約１．０％の範囲（ｗ／ｖ）、好ましくは約０．３％〜約０．７％の範囲、最も好ましくは約０．５％に存在する。これらの安定化された組成物、凍結乾燥された組成物または噴霧乾燥された組成物は、必要に応じて、メチオニン酸化からＩＬ−２またはその改変体を保護するメチオニン、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）またはその塩の１つ（例えば、ＥＤＴＡ二ナトリウム）または他のキレート化剤を含み得る。この様式におけるこれらの薬剤の使用は、本明細書中に参考として援用される米国特許出願番号０９／６７７，６４３に記載される。安定化された組成物、凍結乾燥された組成物または噴霧乾燥された組成物は、緩衝剤を使用して処方され得、液相中にある場合、例えば、処方プロセスの間または組成物の乾燥形態の再構築後に、受容可能な範囲内、好ましくは約ｐＨ４．０〜約ｐＨ８．５の間に薬学的組成物のｐＨを維持する。緩衝剤は、乾燥プロセスと適合性であり、そしてプロセスの間および保管に際してタンパク質の質、純度、効果および安定性に影響を及ぼさないように選択される。
【０１０７】
以前に記載された安定化された単量体、多量体の、安定化された、凍結乾燥された、または噴霧乾燥されたＩＬ−２薬学的組成物が、本発明の方法における使用のための適切な組成物を表す。しかし、治療的に有効な成分としてＩＬ−２を含む任意の薬学的組成物が、本発明の方法によって包含される。
【０１０８】
本明細書中で使用される場合、用語「抗ＨＥＲ２抗体」は、ＨＥＲ２タンパク質を特異的に認識しかつＨＥＲ２タンパク質に特異的に結合する、任意の抗体を包含し、この抗体としては、以下が挙げられる：ポリクローナル抗ＨＥＲ２抗体、モノクローナル抗ＨＥＲ２抗体、ヒト抗ＨＥＲ２抗体、ヒト化抗ＨＥＲ２抗体、キメラ抗ＨＥＲ２抗体、異種抗ＨＥＲ２抗体、およびＨＥＲ２タンパク質を特異的に認識しかつＨＥＲ２タンパク質に特異的に結合する（好ましくは、ＨＥＲ２タンパク質の細胞外ドメインを特異的に認識しかつＨＥＲ２タンパク質に特異的に結合する）これらの抗ＨＥＲ２抗体のフラグメント。好ましくは、この抗体は、天然のモノクローナル抗体である。「モノクローナル抗体」によって、実質的に同種の抗体集団から得られる抗体が意図される。すなわち、この集団を含む個々の抗体は、天然に存在する可能な変異が少量で存在し得ること以外は、同一である。モノクローナル抗体は、高度に特異的にあり、単一の抗原部位に対して指向される。さらに、種々の決定因子（エピトープ）に対して指向される種々の抗体を代表的に含む従来の（ポリクローナル）抗体調製物とは対照的に、各モノクローナル抗体は、その抗原上の単一の決定因子に対して指向される。修飾語「モノクローナル」は、実質的に同種の抗体集団から得られるような抗体の特徴を示し、いかなる特定の方法によっても抗体産生を必要とするとしては解釈されない。例えば、本発明に従って使用されるモノクローナル抗体は、Ｋｏｈｌｅｒら（１９７５）Ｎａｔｕｒｅ  ２５６：４９５によって最初に記載されたハイブリドーマ方法によって作製され得るか、組換えＤＮＡ方法（例えば、米国特許第４，８１６，５６７号を参照のこと）によって作製され得る。「モノクローナル抗体」はまた、例えば、Ｃｌａｃｋｓｏｎら（１９９１）Ｎａｔｕｒｅ  ３５２：６２４−６２８およびＭａｒｋｓら（１９９１）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２２：５８１−５９７において記載される技術を使用して、ファージ抗体ライブラリーから単離され得る。
【０１０９】
マウス起源の抗ＨＥＲ２抗体、ならびにそれらのヒト化バージョンおよびキメラバージョンは、本発明の方法における使用に適切である。このような抗ＨＥＲ２抗体の例としては、以下が挙げられるがこれらに限定されない：４Ｄ５抗体（米国特許第５，６７７，１７１号および同第５，７７２，９９７号に記載される）；ならびに５２０Ｃ９抗体およびその機能的等価物（４５２Ｆ２、７３６Ｇ９、７４１Ｆ８、７５８Ｇ５、および７６１Ｂ１０と命名されている）（米国特許第６，０５４，５６１号に記載される）（これらは、本明細書中で参考として援用される）。
【０１１０】
用語「抗ＨＥＲ２抗体」は、本明細書中で使用される場合、キメラＢ抗ＨＥＲ２抗体を含む。「キメラ抗体」によって、最も好ましくは組み換えデオキシリボ核酸技術を使用して誘導される抗体が意図され、この抗体は、ヒト成分（免疫学的に「関連する」種（例えば、チンパンジー）が挙げられる）と非ヒト成分との両方を含む。従って、このキメラ抗体の定常領域は、最も好ましくは、天然のヒト抗体の定常領域と実質的に同一であり、このキメラ抗体の可変領域は、最も好ましくは、非ヒト供給源由来であり、ＨＥＲ２タンパク質に対する所望の抗原特異性を有する。この非ヒト供給源は、任意の脊椎動物供給源であり得、これを使用して、目的のヒト細胞表面抗原または目的のヒト細胞表面抗原を含む物質に対する抗体を作製し得る。このような非ヒト供給源としては、以下が挙げられるがこれらに限定されない：げっ歯類（例えば、ウサギ、ラット、マウスなど；例えば、米国特許第４，８１６，５６７号（本明細書中で参考として援用される）を参照のこと）および非ヒト霊長類（例えば、旧世界ザル）、サルなど；例えば、米国特許第５，７５０，１０５号および同第５，７５６，０９６号（本明細書中で参考として援用される）を参照こと）。最も好ましくは、非ヒト成分（可変領域）は、マウス供給源由来である。このようなキメラ抗体は、米国特許第５，７５０，１０５号；同第５，５００，３６２号；同第５，６７７，１８０号；同第５，７２１，１０８号；および同第５，８４３，６８５号（本明細書中で参考として援用される）に記載されている。
【０１１１】
ヒト化抗ＨＥＲ２抗体はまた、本明細書中で使用される場合、用語「抗ＨＥＲ２抗体」によって包含される。「ヒト化」によって、非ヒト免疫グロブリン配列由来の最小配列を含む抗ＨＥＲ２抗体の形態が意図される。ヒト化抗体は、大部分が、ヒト免疫グログリン（レシピエント抗体）であり、ここにおいて、レシピエントの超可変領域由来の残基は、非ヒト種（ドナー抗体）（例えば、マウス、ラット、ウサギまたは所望の特異性、親和性および能力を有するヒト霊長類）の超可変領域由来の残基で置き換えられる。例えば、米国特許第５，２２５，５３９号；同第５，５８５，０８９号；同第５，６９３，７６１号；同第５，６９３，７６２号；同第５，８５９，２０５号（本明細書中で参考として援用される）を参照のこと。いくつかの場合において、ヒト免疫グロブリンのフレームワーク残基は、対応する非ヒト残基によって置き換えられる（例えば、米国特許第５，５８５，０８９号；同第５，６９３，７６１号；同第５，６９３，７６２号を参照のこと）。さらに、ヒト化抗体は、レシピエント抗体においてもドナー抗体においても見出されない残基を含み得る。これらの改変は、抗体性能をさらに洗練するために（例えば、所望の親和性を獲得するために）なされる。一般に、ヒト化抗体は、少なくとも１つの可変ドメイン、代表的には２つの可変ドメインの、実質的に全てを含む。ここで、超可変領域の全てまたは実質的に全ては、非ヒト免疫グロブリンの超可変領域に対応し、そしてフレームワーク領域の全てまたは実質的に全ては、ヒト免疫グロブリン配列のフレームワーク領域に対応する。ヒト化抗体はまた、必要に応じて、免疫グロブリン定常領域（Ｆｃ）の少なくとも一部、代表的には、ヒト免疫グロブリンの少なくとも一部を含む。さらなる詳細については、Ｊｏｎｅｓら（１９８６）Ｎａｔｕｒｅ  ３３１：５２２−５２５；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎら（１９８８）Ｎａｔｕｒｅ  ３３２：３２３−３２９；およびＰｒｅｓｔａ（１９９２）Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．２：５９３−５９６（本明細書中で参考として援用される）を参照のこと。１つのこのようなヒト化抗ＨＥＲ２抗体は、Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ（登録商標）という商品名で市販されている（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ、Ｉｎｃ．、Ｓａｎ  Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ）。
【０１１２】
用語「抗ＨＥＲ２抗体」によって、非ヒト哺乳動物宿主、より好ましくは、トランスジェニックマウスにおいて産生される異種抗ＨＥＲ２抗体または改変抗ＨＥＲ２抗体がまた包含され、これは、不活性化内因性免疫グロブリン（Ｉｇ）位置によって特徴付けられる。このようなトランスジェニック動物において、宿主免疫グロブリンの軽鎖サブユニットおよび重鎖サブユニットの発現のためのコンピテントな内因性遺伝子は、非機能的にされ、類似のヒト免疫グロブリン位置で置換される。これらのトランスジェニック動物は、宿主免疫グロブリンサブユニットの軽鎖または重鎖の実質的な非存在下においてヒト抗体を産生する。例えば、米国特許第５，９３９，５９８号（本明細書中で参考として援用される）を参照のこと。
【０１１３】
抗ＨＥＲ２抗体のフラグメントは、それらのフラグメントが全長抗体の所望の親和性を維持する限り、本発明の方法における使用に適切である。従って、抗ＨＥＲ２抗体の適切なフラグメントは、ＨＥＲ２レセプタータンパク質に結合する能力を維持し、本明細書中で「抗原結合フラグメント」と称される。抗体のフラグメントは、全長抗体の一部、一般的には、抗原結合領域またはその可変領域を含む。抗体フラグメントの例としては、以下が挙げられるがこれらに限定されない：Ｆａｂフラグメント、Ｆａｂ’フラグメント、Ｆ（ａｂ’）２フラグメントおよびＦｖフラグメント、ならびに一本鎖抗体分子。「一本鎖Ｆｖ」抗体フラグメントまたは「ｓＦｖ」抗体フラグメントによって、抗体のＶＨドメインおよびＶＬドメインを含むフラグメントが意図され、ここで、これらのドメインは、単一のポリペプチド鎖中に存在する。例えば、米国特許第４，９４６，７７８号；同第５，２６０，２０３号；同第５，４５５，０３０号；同第５，８５６，４５６号（本明細書中で参考として援用される）を参照のこと。一般に、このＦｖポリペプチドは、ＶＨドメインとＶＬドメインとの間にペプチドリンカーをさらに含み、このペプチドリンカーは、ｓＦｖが抗原結合のための所望の構造を形成することを可能にする。ｓＦｖの総説については、Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ（１９９４）Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ｏｆ  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ、第１１３巻、ＲｏｓｅｎｂｕｒｇおよびＭｏｏｒｅ編（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ）２６９−３１５頁を参照のこと。
【０１１４】
抗体または抗体フラグメントは、ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙら（１９９０）Ｎａｔｕｒｅ  ３４８：５５２−５５４（１９９０）に記載される技術を使用して作製される抗体ファージライブラリーから単離され得る。Ｃｌａｃｋｓｏｎら（１９９１）Ｎａｔｕｒｅ  ３５２：６２４−６２８およびＭａｒｋｓら（１９９１）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２２：５８１−５９７は、ファージライブラリーを使用した、それぞれ、マウス抗体およびヒト抗体の単離を記載している。その後の刊行物は、鎖シャッフリング（Ｍａｒｋｓら（１９９２）Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １０：７７９−７８３）、ならびに非常に大きいファージライブラリーを構築するためのストラテジーとしてのコンビナトリアル感染およびインビボ組換え（Ｗａｔｅｒｈｏｕｓｅら（１９９３）Ｎｕｃｌｅｉｃ．Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．２１：２２６５−２２６６）による、高親和性（ｎＭ範囲）ヒト抗体の作製を記載している。従って、これらの技術は、モノクローナル抗体を単離するための伝統的なモノクローナル抗体ハイブリドーマ技術に対する実行可能な代替技術である。
【０１１５】
ヒト化抗体は、非ヒトである供給源由来の抗体に導入される１種以上のアミノ酸残基を有する。これらの非ヒトアミノ酸残基は、しばしば、「ドナー」残基と称され、これは、代表的に、「ドナー」可変ドメインから得られる。ヒト化は、本質的に、Ｗｉｎｔｅｒおよび共同研究者ら（Ｊｏｎｅｓら（１９８６）Ｎａｔｕｒｅ  ３２１：５２２−５２５；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎら（１９８８）Ｎａｔｕｒｅ  ３３２：３２３−３２７；Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎら（１９８８）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２３９：１５３４−１５３６）の方法に従って、げっ歯類のＣＤＲまたはＣＤＲ配列を、ヒト抗体の対応する配列で置換することによって、行われ得る。例えば、米国特許第５，２２５，５３９号；同第５，５８５，０８９号；同第５，６９３，７６１号；同第５，６９３，７６２号；同第５，８５９，２０５号（本明細書中で参考として援用される）を参照のこと。従って、このような「ヒト化」抗体としては、実質的にほとんどインタクトではないヒト可変ドメインが、非ヒト種由来の対応する配列によって置換されている、抗体が挙げられ得る。実際には、ヒト化抗体は、代表的に、いくらかのＣＤＲ残基およびおそらくいくらかのフレームワーク残基が、げっ歯類抗体において類似の部位由来の残基で置換されているヒト抗体である。例えば、米国特許第５，２２５，５３９号；同第５，５８５，０８９号；同第５，６９３，７６１号；同第５，６９３，７６２号；および同第５，８５９，２０５号を参照のこと。米国特許第６，１８０，３７０号、および国際公開番号ＷＯ  ０１／２７１６０もまた参照のこと（ここに、ヒト化抗体および所定の抗原に対する改善された親和性を有するヒト化抗体を作製するための技術が、開示されている）。
【０１１６】
種々の技術が、抗体フラグメントの作製のために開発されている。伝統的には、これらのフラグメントは、インタクトな抗体のタンパク質分解性消化によって誘導された（例えば、Ｍｏｒｉｍｏｔｏら（１９９２）Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２４：１０７−１１７（１９９２）およびＢｒｅｎｎａｎら（１９８５）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２２９：８１を参照のこと）。しかし、ここで、これらのフラグメントは、組換え宿主細胞によって直接作製され得る。例えば、これらの抗体フラグメントは、上で考察される抗体ファージライブラリーから単離され得る。あるいは、Ｆａｂ’−ＳＨフラグメントは、Ｅ．ｃｏｌｉから直接取り除かれ得、そして化学的に結合して、Ｆ（ａｂ’）２フラグメントを形成する（Ｃａｒｔｅｒら（１９９２）Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １０：１６３−１６７）。別のアプローチに従って、Ｆ（ａｂ’）２フラグメントは、組換え宿主細胞培養物から直接単離され得る。抗体フラグメントを作製するための他の技術は、熟練した実施者に明らかである。
【０１１７】
あるいは、免疫原性応答が低下したタンパク質を産生するための方法を使用して、本発明の方法における使用に適切な抗ＨＥＲ２抗体を作製し得る。例えば、ＷＯ  ９８／５２９７６（本明細書中で参考として援用される）において開示される方法を参照のこと。このような方法を使用して作製される抗ＨＥＲ２抗体は、本明細書中で使用される場合、用語「抗ＨＥＲ２抗体」によって包含される。
【０１１８】
さらに、前記の抗ＨＥＲ２抗体のいずれかは、本発明の方法における使用前に結合体化され得る。このような結合体化抗体は、当該分野で利用可能である。従って、抗ＨＥＲ２抗体は、間接標識または間接標識アプローチを使用して、標識され得る。「間接標識」または「間接標識アプローチ」によって、キレート剤が抗体に共有結合され、少なくとも１種の放射性核種がこのキレート剤に挿入されることが意図される。例えば、ＳｒｉｖａｇｔａｖａおよびＭｅａｓｅ（１９９１）Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．Ｂｉｏ．１８：５８９−６０３（本明細書中で参考として援用される）に記載されるキレート剤および放射性核種を参照のこと。あるいは、この抗ＨＥＲ２抗体は、「直接標識」または「直接標識アプローチ」を使用して標識され得る。ここで、放射性核種は、（代表的には、アミノ酸残基を介して）抗体に直接共有結合される。好ましい放射性核種は、ＳｒｉｖａｇｔａｖａおよびＭｅａｓｅ（１９９１）前出において提供される。間接標識アプローチが、特に好ましい。
【０１１９】
抗ＨＥＲ２抗体は、代表的に、標準的な技術によって、薬学的に受容可能な緩衝液（例えば、滅菌生理食塩水、滅菌緩衝化水、プロピレングリコール、前出のものの組み合わせなど）中に提供される。非経口投与可能な薬剤を調製するための方法は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（第１８巻；Ｍａｃｋ  Ｐｕｂ．Ｃｏ．：Ｅａｔｏｎ、Ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａ、１９９０）（本明細書中で参考として援用される）に記載されている。例えば、ＷＯ  ９８／５６４１８（これは、本発明の方法における使用に適切な、安定化した抗体の薬学的処方物を記載している）もまた、参照のこと。
【０１２０】
以下の実施例は、例示の目的で提供されており、制限の目的では提供されていない。
【実施例】
【０１２１】
（実施例１：Ｈｅｒ−Ｈｅｒ−２／Ｎｅｕポジティブ転移性乳癌を有する被験体における、Ｌ２−７００１  ＩＬ−２の一定ＩＬ−２投薬レジメンと組み合わせた毎週のトラスツザマブ（ｔｒａｓｔｕｚａｍａｂ）治療を用いた、第Ｉ相の用量段階的上昇研究）
第Ｉ相の研究を行って、ｈｅｒ−２／ｎｅｕ−ポジティブ転移性乳癌を有する被験体を処置するための、トラスツザマブ（Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ（登録商標））の毎週投与と組み合わせたＩＬ−２、Ｌ２−７００１の単量体処方物の使用を試験する。Ｌ２−７００１は、液体処方物であり、その処方前の最終精製工程を除いて、Ｐｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）ＩＬ−２と同じヒトＩＬ−２ムテイン（アルデスロイキン（ａｌｄｅｓｌｅｕｋｉｎ））を含む。実施例２において以下で留意されるように、このＩＬ−２ムテインは、Ｅ．ｃｏｌｉから発現される。アルデスロイキンを得るための初期精製工程は、２つの処方について類似している。米国特許第４，９３１，５４３号を参照のこと。両方の場合において、組換え産生されたＩＬ−２ムテインは、宿主細胞内で屈折小体（ｒｅｆｒａｃｔｉｌｅ  ｂｏｄｙ）として生じる。細胞分裂後、この屈折小体を単離し、サイズ排除クロマトグラフィーおよびＲＰ−ＨＰＬＣを使用して最初に精製する。Ｌ２−７００１において使用されるＩＬ−２ムテインについての残りの精製工程は、以下の通りである。得られたタンパク質沈殿物を、塩酸グアニジンによって溶解させ、次いで、ダイアフィルトレーション、イオン交換クロマトグラフィー、およびその後のダイアフィルトレーションによって処理して、Ｌ２−７００１処方物を作製する際に使用するための最終精製ＩＬ−２ムテインを得る。対照的に、このＩＬ−２ムテインをＰｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）ＩＬ−２において使用する場合、初期精製工程から得られるタンパク質沈殿物を、１％  ＳＤＳによって可溶化し、次いで、サイズ排除クロマトグラフィーおよびダイアフィルトレーションによって処理する。次いで、精製されたＩＬ−２ムテインを、２０００年１０月３日に出願された同時係属中出願（表題：「Ｓｔａｂｉｌｉｚｅｄ  Ｌｉｑｕｉｄ  Ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ−Ｃｏｔａｉｎｉｎｇ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ」）および譲渡された米国特許第０９／６７７，６４３号に開示された方法に従って、Ｌ２−７００１に処方する。
【０１２２】
この研究において投与される抗ＨＥＲ抗体は、Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ（登録商標）（トラスツザマブ；Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ、Ｉｎｃ．、Ｓａｎ  Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ）として市販されている。Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ（登録商標）は、ヒト上皮増殖因子レセプター２タンパク質であるＨＥＲ２の細胞外ドメインに選択的に結合する組換えヒト化モノクローナル抗体である。この抗体は、ＨＥＲ２に結合するマウス抗体（４Ｄ５）の相補性決定領域を有するヒトフレームワーク領域を含むＩｇＧ１κである。ＨＥＲ２に対するヒト化抗体を、抗生物質ゲンタマイシンを含む栄養培地中での哺乳動物細胞（チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ））懸濁液培養によって産生する。この抗生物質は、最終産物中で検出することができない。
【０１２３】
Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ（登録商標）は、静脈内（ＩＶ）注射用の、無菌性の、白色から淡黄色の、保存薬を含まない凍結乾燥粉末である。各Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ（登録商標）バイアルの名目上の含有量は、４４０ｍｇトラスツザマブ、９．９ｍｇ  Ｌ−ヒスチジンＨＣ１、６．４ｍｇ  Ｌ−ヒスチジン、４００ｍｇ  ａａ−トレハロース二水和物、および１．８ｍｇポリソルベート２０、ＵＳＰである。
【０１２４】
（研究の説明）
これは、ＭＴＤ用量調査研究である。ここで、一定の合計週間用量のＬ２−７００１を、トラスツザマブの週間用量と組み合わせて、４週間にわたって投与する。トラスツザマブを、１週間で４ｍｇ／ｋｇの標的化用量で与え、その後、５週間にわたって２ｍｇ／ｋｇを毎週注入する。Ｌ２−７００１の合計週間用量を、３つの等用量に分割し、これらを、最小でも４８時間の投与間隔を空けて、１週間に３回の投薬スケジュールに従って皮下投与する。Ｌ２−７００１の投与を、２週目に開始して、４週間続ける（すなわち、５週間を通した研究）。研究した初期Ｌ２−７００１の合計週間用量は、２７０μｇ、５４０μｇ、８１０μｇ、および１０８０μｇである。
【０１２５】
２週目から６週目は、最初のＭＴＤ評価期間である。各Ｌ２−７００１用量レベルにて、３〜６人の被験体のコホートを登録する。各被験体は、１つのコホートのみに参加する。各用量群を処置し、６週目の終わりまで観察し、その後、次のより高い用量レベルのＬ２−７００１で被験体の処置を開始し得る。任意の用量レベルにてＤＬＴを受けた個体への、両薬物（Ｌ２−７００１およびトラスツザマブ）を停止し、その後直ちに、この個体をモニタリングする。Ｌ２−７００１を、最大で２週間停止し得る。Ｌ２−７００１を停止したので、２週間より多くが経過した場合、被験体は、この研究を終了する。（うっ血性心不全または左心機能不全以外の）全ての毒性の徴候が少なくとも２等級まで低下した場合、この被験体は、次のより低用量レベルのＬ２−７００１にて再度開始し得る（または、被験体を２７０μｇの合計週間用量で処置する場合、中断した）。このＭＴＤは、最大用量として規定されており、この用量にて、最小で６人の評価可能な被験体を、６週間のレジメンで処置し、そしてＤＬＴは、２〜６週の間の被験体の１人以下で生じた。ＤＬＴが６人未満の被験体のコホートにおいて１人の被験体においてのみ観察される場合、さらなる被験体を、この用量レベルにて合計６人の被験体まで登録し得、そして用量段階的上昇を、２〜６週の間に１人以下の被験体がＤＬＴを受ける場合にのみ進める。ＤＬＴが任意の用量レベルにて２人以上の被験体において観察される場合、この用量を、ＭＴＤを超える用量とみなし、そしてこの用量レベルが以前に６人未満の被験体を登録している場合、以前より低用量にて、さらなる被験体を登録する。ＭＴＤが１０８０μｇの合計週間用量に到達しない場合、さらなる用量レベルを、ＭＴＤが確立されるまで（例えば、次の合計週間用量は、１３５０μｇであり、次いで１６２０μｇである）、９０μｇの漸増で加え得る。
【０１２６】
６週間後、被験体は、疾患進行まで現在の用量レベルにてＬ２−７００１およびトラスツザマブの連続したさらなる５週間のサイクルの選択肢を有する。Ｌ２−７００１／トラスツザマブのさらなるサイクルの各々は、割り当てた用量にて４週間のＬ２−７００１、続いて、ＩＬ−２投薬から１週間の休み（すなわち、ＩＬ−２投薬を、１週間差し控える）からなり、トラスツザマブを、各サイクルの全体を通して毎週与える。従って、最初の任意のサイクルが６週間の研究の結果として開始される場合、トラスツザマブを、第７週、第８週、第９週、第１０週および第１１週の第１日に投与し、そしてこの割り当てたＬ２−７００１  ＩＬ−２の合計週間用量を、毎週３回の投薬スケジュールに従って、７週間，８週間、９週間および１０週間の間に投与される３つの等用量に分割する。
【０１２７】
一旦、ＭＴＤが決定されると、ＭＴＤを超えるＬ２−７００１用量レベルで６週間ＤＬＴを受けていない任意の被験体は、ＭＴＤにてそれらのＬ２−７００１を続ける。ＭＴＤを受けるコホートを、合計３０人の被験体にまで広げ、より安全なデータを獲得して、ＮＫ細胞の増殖およびＭＴＤにおける腫瘍応答を評価する。安全性および有効性を、毎週の外来患者の訪問中に評価する。腫瘍応答は、ＣＴスキャン、他の画像化ツール、または物理的試験によって得られる全ての腫瘍部位の評価に基づく。心臓機能を、物理的試験およびこの研究を通してＥＣＨＯ／ＭＵＧＡによって、綿密にモニタリングする、ＤＬＴは、心臓の有害事象または任意の他のＮＣＩの３等級または４等級の処置関連有害反応（肺性反応を含む）（血液検査室異常を除く）として規定され、これは、ＤＬＴであるとみなされるには、４等級の毒性を必要とする。
【０１２８】
（研究集団の選択）
初期包含診断基準は、臨床学試験者１人につき測定可能な疾患を有するｈｅｒ−２／ｎｅｕポジティブ乳癌（ＩＨＣ３＋またはＦＩＳＨ＋）の文書である。被験体を、以下の理由から、この研究から除外する：本研究の開始時における中枢神経系（ＣＮＳ）の転移または癌性髄膜炎の徴候；不活性非黒色腫皮膚癌、頸部のインサイチュ癌腫、または治癒的に処置される他の固形腫瘍を除いて、研究への参加直前まで少なくとも２年間再発の徴候を示していない、以前のまたは同時のさらなる悪性疾患；甲状腺機能低下症に対する置換処置以外の医療介入を必要とする症候性甲状腺疾患；自己免疫疾患の病歴；研究への参加前の禁制薬物適用を伴う治療；重篤な無制御の能動的感染；Ｉ型過敏症またはマウスタンパク質に対するアナフィラキシー反応；心臓機能不全、または異常なエコースキャンもしくはＭＵＧＡスキャンの病歴；トラスツザマブに対する不耐性。
【０１２９】
（安全性および有効性）
安全性および有効性の測定を、毎週の外来患者の訪問中に行う。安全性を、全ての有害事象（重篤な有害事象［ＳＡＥ］を含む）の発生率から評価する。有害事象の重篤度を、ＮＣＩの共通毒性等級スケールに従って等級付けする。正常範囲の外側の血液学値、化学値および尿検査値の発生率を、ベースラインならびに１週目、２週目、３週目、４週目、６週目、８週目、９週目および１７週目の評価にて決定する。エコースキャンまたはＭＵＧＡスキャンを、ベースラインおよび１７週目に行う。
【０１３０】
有効性を、５週目、９週目および１７週目での腫瘍応答によって測定する。応答を、ＥＯＲＴＣ、ＮＣＩおよびＮａｔｉｏｎａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｏｆ  Ｃａｎａｄａ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｔｒｉａｌｓ  Ｇｒｏｕｐによって示される、Ｒｅｓｐｏｎｓｅ  Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  Ｃｒｉｔｅｒｉａ  ｉｎ  Ｓｏｌｉｄ  Ｔｕｍｏｒｓ（ＲＥＣＩＳＴ）ガイドラインに従って、研究者によって、完全な応答（ＣＲ）、部分的な応答（ＰＲ）、安定な疾患（ＳＤ）、または進行性疾患（ＰＤ）として分類する。９週目または１７週目の応答を、４週後に評価を再度行って確認する。５週目および９週目に安定な疾患を有する応答者および被験体は、毎週トラスツザマブを受け続け、そして物理的試験およびＣＴスキャンを用いて、疾患進行（すなわち、進行性疾患）まで、腫瘍の徴候および症状を８週間毎に追跡する。
【０１３１】
（応答、進行、および再発についての診断基準）
腫瘍応答を、固形腫瘍における応答評価診断基準（ＲＥＣＩＳＴ）に従って評価する（Ｔｈｅｒａｓｓｅら（２０００）Ｊ．Ｎａｔｌ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔ．９２：２０５〜２１６を参照のこと）。腫瘍応答の類別は、以下の通りである：
・完全応答−全ての標的病変および非標的病変（または疾患の全ての症状および徴候）の完全消滅ならびに腫瘍マーカーレベルの正常化の考証。
【０１３２】
・部分応答−ベースライン合計ＬＤを参照して、標的病変の最長直径（ＬＤ）の合計が少なくとも３０％低下し、非標的病変において有意な増加がなく、そして新規の病変もない。
【０１３３】
・安定疾患−処置開始からの最小合計ＬＤを参照して、ＰＲを満たす十分な縮小もＰＤを満たす十分な増大もどちらもない。
【０１３４】
・進行性疾患−処置開始または１つ以上の新規の病変の出現もしくは現存する非標的病変の明確な進行から記録された最小合計ＬＤを参照して、標的病変のＬＤの合計が少なくとも２０％増大する。
【０１３５】
（実施例２：ｈｅｒ−２／ｎｅｕ陽性の転移性乳癌を有する被験体においてＰｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）の８週間の２レベルのＩＬ−２投薬レジメンと組み合わせた毎週のトラスツザマブ（Ｔｒａｓｔｕｚａｍａｂ）療法）
本研究の目的は、Ｈｅｒ−２／Ｎｅｕ陽性の転移性乳癌を有する被験体に投与する場合のトラスツザマブ（Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ（登録商標））の毎週投与と組み合わせたＰｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）ＩＬ−２（アルデスロイキン（ａｌｄｅｓｌｅｕｋｉｎ））の週３回の投与後の腫瘍応答を評価することであり、本研究は、トラスツザマブの毎週投与と組み合わせたＰｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）ＩＬ−２の３回の毎週投与の安全性および耐容性を明らかにする。
【０１３６】
本研究に使用されるＩＬ−２処方物は、Ｅｍｅｒｙｖｉｌｌｅ，ＣａｌｉｆｏｒｎｉａのＣｈｉｒｏｎ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎによって、Ｐｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）ＩＬ−２の商品名で製造される。この処方物中のＩＬ−２は、組換え的に生産される非グリコシル化ヒトＩＬ−２ムテイン（アルデスロイキンと呼ばれる）であり、ネイティブヒトＩＬ−２アミノ酸配列と異なり、最初のアラニン残基が削除され、かつ１２５位のシステイン残基がセリン残基に置換されている（脱アラニル−１、セリン−１２５  ヒトインターロイキン２と呼ばれる）。このＩＬ−２ムテインを、Ｅ．ｃｏｌｉで発現させ、続いて、米国特許第４，９３１，５４３に記載のように、ダイアフィルトレーションおよびカチオン交換クロマトグラフィーによって精製する。このＰｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）ＩＬ−２として市販されるＩＬ−２処方物は、バイアル中に、滅菌された、白色から灰白色の、防腐剤を含まない凍結乾燥粉末として、１．３ｍｇのタンパク質（２２ＭＩＵ）を含んで提供される。
【０１３７】
（研究の詳細）
適格な被験体に、Ｐｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）ＩＬ−２を皮下注射によって投与し、そしてトラスツザマブを静脈注入によって投与する。使用するトラスツザマブの用量は、その表示に従う。１日目に初回負荷投薬量の４ｍｇ／ｋｇのトラスツザマブを使用し、続いて疾患進行または抗体毒性まで、毎週２ｍｇ／ｋｇを使用する。Ｐｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）ＩＬ−２の１週間の総用量は、２週目から５週目を通じて、４２．０ＭＩＵである。この４２．０ＭＩＵ用量を、３等用量に分配し、週３回の投薬スケジュールに従って投与する（すなわち、各等用量は１４．０ＭＩＵである）。Ｐｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）ＩＬ−２の１週間の総用量は、６週目から９週目の間、３０．０ＭＩＵである。この３０．０ＭＩＵ用量を３等用量に分配し、週３回の投薬スケジュールに従って投与する（すなわち、各等用量は１０．０ＭＩＵである）。９週間の処置期間にわたるこの処置レジメンの有効性および安全性について、患者をモニタリングし、本研究の開始後１７週目に追跡判定する。
【０１３８】
（実施例３：Ｈｅｒ−２／ｎｅｕ陽性の転移性乳癌を有する被験体においてＬ２−７００１の８週間の２回用量レジメンと組み合わせた毎週のトラスツザマブ療法）
実施例２において概説した投薬レジメンに対する代替として、適格な被験体に、Ｐｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）ＩＬ−２の代わりに単量体のＩＬ−２処方物Ｌ２−７００１  ＩＬ−２を投与する。トラスツザマブを、１週目に、４ｍｇ／ｋｇの表示用量で与え、次いで８週間、２ｍｇ／ｋｇの毎週の注入によって与える。被験体に、第２週の１日目（すなわち、処置期間の８日目）に、皮下注射によるＬ２−７００１  ＩＬ−２の同時投与を開始する。Ｌ２−７００１  ＩＬ−２の毎週の総用量を３回の等用量に分割し、週３回の投薬スケジュールに従って、最小４８時間の投与間隔で、８週間にわたって投与する（すなわち、第２週〜第９週の処置期間の間、合計２４回の用量）。第２週〜第５週の間、３回の等用量として投与されるべきＬ２−７００１  ＩＬ−２の毎週の総用量は、８１０μｇである（すなわち、各等用量は２７０μｇである）。Ｌ２−７００１  ＩＬ−２投与の４週間後、Ｌ２−７００１  ＩＬ−２の毎週の総用量を、５４０μｇに下げる。従って、第６週〜第９週の間、毎週の総用量５４０μｇのＬ２−７００１  ＩＬ−２を、３つの等用量（すなわち、各１８０μｇ）に分割し、週３回の投薬スケジュールに従って投与する。被験体を、１６週（すなわち、ＩＬ−２投与の最後の週を越えて７週間）を通じた追跡判定に関して、９週間処置期間中のこの処置レジメンの効力および安全性についてモニタリングする。
【０１３９】
（実施例４：ＩＬ−２の薬学的処方物についてのＩＬ−２血清濃度−時間曲線の計算）
４５０万国際単位（ＭＩＵ）（約２７５μｇタンパク質に等価）で皮下に（ＳＣ）投与されたＰｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）ＩＬ−２の血清濃度−時間曲線（ＡＵＣ）の下のエリアを、未公開のＨＩＶ研究からのデータを用いて決定した。血清濃度時間プロフィールを、８人のＩＬ−２未処置のＨＩＶ患者において、本研究におけるＩＬ−２投与への最初の暴露後に測定した。各患者について、ＡＵＣを、最後の測定可能な濃度まで線形台形公式（ｌｉｎｅａｒ  ｔｒａｐｅｚｏｉｄａｌ  ｒｕｌｅ）を用いて計算し、そして２４時間まで推定した（Ｗｉｎｎｏｎｌｉｎソフトウェア  バージョン３．１、Ｐｈａｒｓｉｇｈｔ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ）。４．５ＭＩＵ用量での平均ＡＵＣ０〜２４、ＳＤ、ならびに９５％信頼限界の下限および上限を、表２に提示する。
【０１４０】
１８ＭＩＵ（１１００μｇ）に等価な用量で皮下投与されたＰｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）ＩＬ−２のＡＵＣ０〜２４値を、このＩＬ−２製品を皮下投与した３つの異なる研究からのデータを用いて推定した。２つは公開された研究であり、一方は、ＨＩＶ患者（Ｎ＝３）における研究（Ｐｉｓｃｉｔｅｌｌｉら（１９９６）Ｐｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒａｐｙ  １６（５）：７５４−７５９）であり、そしてもう一方は癌患者（Ｎ＝７）における研究（Ｋｉｒｃｈｎｅｒら（１９９８）Ｂｒ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．４６：５−１０）である。３つ目は、未公開の研究であり、これは、血清濃度時間データがＩＬ−２の皮下投与の後で６人の癌患者から入手可能であった。癌患者およびＨＩＶ患者におけるＡＵＣの類似性は、以前に立証された（未公開データ）。これらの３つの研究において投与された実際の用量は、１８ＭＩＵと３４ＭＩＵとの間で変動した。公開された２つの試行について、２４時間までのＡＵＣ（ＡＵＣ０〜２４）値を、１８（ＭＩＵ）および実際の用量（ＭＩＵ）の商でＡＵＣを乗算することによって、１８ＭＩＵ用量に正規化した。例えば、２０ＭＩＵ用量についてのＡＵＣ０〜２４が４００であると計算された場合、正規化ＡＵＣ０〜２４は、４００×１８／２０＝３６０である。未公開癌患者研究について、個々のＡＵＣ値を、血清濃度時間データから、線形台形公式を用いて、最後の測定可能な濃度まで計算し、そして２４時間まで推定し（Ｗｉｎｎｏｎｌｉｎソフトウェア  バージョン３．１、Ｐｈａｒｓｉｇｈｔ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ）、次いで、これらを上記のように１８ＭＩＵ用量に正規化した。全ての３つの研究についての全体の平均値およびＳＤを、各々、方程式１および方程式２を用いて、平均値および分散の加重平均として計算した。
【０１４１】
【化３】
2005525317.tif 000005
ここで、
【０１４２】
【化４】
2005525317.tif 000006
は、それぞれ、３つの研究の各々についての被験体の数、平均値、および分散である。
【０１４３】
【化５】
2005525317.tif 000007
は、全体の平均値および標準偏差の推定値である。１８ＭＩＵでの全体の平均ＡＵＣ、ＳＤ、ならびに９５％信頼限界の下限および上限もまた、表２に提示する。
【０１４４】
（表２：平均値（±ＳＤ）ＡＵＣ０〜２４は、皮下投与されたＰｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）ＩＬ−２の単回用量投与に対する最初の曝露後に得た。）
【０１４５】
【表２】
2005525317.tif 000008
１  ９５％信頼区間（ＣＩ）の上限（ＵＬ）および下限（ＬＬ）限界。９５％ＣＩを、平均値±２  ＳＤとして計算した。
２  ６．０ＭＩＵについての値を、４．５ＭＩＵおよび７．５ＭＩＵについての実際値に基づいて推定する。
【０１４６】
Ｐｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）ＩＬ−２、Ｌ２−７００１と同様に、単量体ＩＬ−２の液体処方物を、ＨＩＶ患者に、５０〜１８０μｇの範囲の用量で投与した（未公開データ）。ＡＵＣで測定された本研究から得られた曝露を、表３に示す。これらの曝露値は、Ｐｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）ＩＬ−２を用いて生じた曝露値の範囲の中にあった（表２）。
【０１４７】
（表３：平均値（±ＳＤ）ＡＵＣ０〜２４は、単量体ＩＬ−２処方物Ｌ２−７００１の単回用量投与に対する最初の曝露後に得た。）
【０１４８】
【表３】
2005525317.tif 000009
ＩＬ−２曝露データ（ＡＵＣ）を、公開された文献から得た。この文献において、組換えヒトネイティブＩＬ−２は、０．１ＭＵ〜３．０ＭＵの範囲の用量で、８人の癌患者に皮下投与された。０．３ＭＵ、１ＭＵ、および３ＭＵ用量レベルについて報告された平均（％ＣＶ）ＡＵＣは、１２０（３８）、１７７（３６）、および３５９（４６）Ｕ＊時間／ｍｌであった（Ｇｕｓｔａｖｓｏｎ（１９９８）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｒｅｓｐｏｎｓｅ  Ｍｏｄｉｆｉｅｒｓ  １９９８：４４０〜４４９）。Ｔｈｏｍｐｓｏｎら１９８７  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ４７：４２０２〜４２０７に示されるように、本研究で測定した単位をＢＲＭＰ単位に正規化し（Ｒｏｓｓｉｏら（１９８６）Ｌｙｍｐｈｏｋｉｎｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ５（補遺１）：Ｓ１３〜Ｓ１８）、その後、ＷＨＯによる国際単位（ＩＵ）として採用した（ＧｅａｒｉｎｇおよびＴｈｏｒｐｅ（１９８８）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  １１４：３〜９）。研究条件下で生じたＡＵＣ値もまた、確立されたＰｒｏｌｅｕｋｉｎ（登録商標）ＩＬ−２の曝露と十分に一致する。
【０１４９】
本明細書中で言及される全ての刊行物および特許出願は、本発明に関係する当業者のレベルを示す。全ての刊行物および特許出願は、各個々の刊行物または特許出願が、参考として援用されるために具体的にかつ個々に示されるかのように同程度まで、参考として本明細書中に援用される。
【０１５０】
当業者は、本明細書中に記載される本発明の特定の実施形態に対する多くの等価物を、日常的にすぎない実験法を用いて、認識するか、または確認可能である。このような等価物は、本明細書中に開示される本発明および実施形態に包含されることが意図される。