(57)【要約】許容される担体とともに送出される有効量のトコフェロール、ユビキノール、アスコルビン酸、トコトリエノール、レチノールおよびそれらの混合物のホスフェート誘導体から成る群から選択される微量栄養素を含んでなる規定食または健康サプリメントが提供される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
許容される担体とともに送出される有効量のユビキノール、アスコルビン酸、トコトリエノール、レチノールおよびそれらの混合物のホスフェート誘導体から成る群から選択される微量栄養素を含んでなる規定食または健康サプリメント。
【請求項２】
微量栄養素がリン酸ユビキニルである、請求項1に記載の規定食または健康サプリメント。
【請求項３】
微量栄養素がユビキノール、アスコルビン酸、トコトリエノール、レチノールおよびそれらの混合物のホスファチジル誘導体である、請求項1に記載の規定食または健康サプリメント。
【請求項４】
微量栄養素の1種以上のホスフェート誘導体が10 ppm〜10,000 ppm％(w/w) の濃度で添加される、請求項1に記載の規定食または健康サプリメント。
【請求項５】
微量栄養素の1種以上のホスフェート誘導体が50 ppm〜1,000 ppm％(w/w) の濃度で添加される、請求項4に記載の規定食または健康サプリメント。
【請求項６】
カプセル剤、錠剤、粉末、食品添加物、クッキー、ビスケット、朝食用加工穀物食、スポーツドリンクおよびスポーツ食品棒状物から成る群から選択される、請求項1に記載の規定食または健康サプリメント。
【請求項７】
カプセル剤である、請求項6に記載の規定食または健康サプリメント。
【請求項８】
リン酸ユビキニルを含有する、請求項7に記載の規定食または健康サプリメント。
【請求項９】
スポーツドリンクである、請求項6に記載の規定食または健康サプリメント。
【請求項１０】
リン酸ユビキニルを含有する、請求項9に記載の規定食または健康サプリメント。
【請求項１１】
リン酸ユビキニルを含有するクッキーである、請求項6に記載の規定食または健康サプリメント。
【請求項１２】
リン酸ユビキニルを含有する、請求項11に記載の規定食または健康サプリメント。
【請求項１３】
許容される担体とともに送出される微量栄養素のホスフェート誘導体の形態で有効量の微量栄養素を含んでなる規定食または健康サプリメントを被検体に投与することを含んでなる、ユビキノール、アスコルビン酸、トコトリエノール、レチノールおよびそれらの混合物から成る群から選択される微量栄養素を毎日の所要量で被検体の摂取物に補充する方法。
【請求項１４】
微量栄養素がユビキノール、アスコルビン酸、トコトリエノール、レチノールおよびそれらの混合物から成る群から選択される、毎日の所要量の微量栄養素を被検体の摂取物に補充するための規定食または健康サプリメントの製造における、許容される担体と一緒に有効量の1種以上の微量栄養素の1種以上のホスフェート誘導体の使用。
【請求項１５】
規定食または健康サプリメントが有効量の1種以上の微量栄養素の1種以上のホスフェート誘導体と、許容される担体とを含んでなる、ユビキノール、アスコルビン酸、トコトリエノール、レチノールおよびそれらの混合物から成る群から選択される微量栄養素を被検体の摂取物に補充するために使用する規定食または健康サプリメント。
【請求項１６】
許容される担体とともに送出される有効量のユビキノール、アスコルビン酸、レチノール、トコトリエノール、トコフェロールおよびそれらの混合物のホスフェート誘導体の複合体から成る群から選択される微量栄養素を含んでなる規定食または健康サプリメント。
【請求項１７】
微量栄養素が
(a)  リン酸トコフェリル、リン酸レチニル、リン酸アスコルビル、リン酸トコトリエニル、リン酸ユビキニルまたはそれらの混合物、および
(b)  アルギニン、リシンまたはラウリルイミノジプロピオン酸から成る群から選択される複合化剤、
の反応生成物から成る群から選択される、請求項16に記載の規定食または健康サプリメント。
【請求項１８】
微量栄養素がリン酸ユビキニルアルギニン複合体である、請求項17に記載の規定食または健康サプリメント。
【請求項１９】
微量栄養素がリン酸トコフェリルアルギニン複合体である、請求項17に記載の規定食または健康サプリメント。
【請求項２０】
微量栄養素のホスフェート誘導体の複合体を10 ppm〜10,000 ppm％(w/w) の濃度で添加する、請求項16に記載の規定食または健康サプリメント。
【請求項２１】
微量栄養素を50 ppm〜1,000 ppm％(w/w) の濃度で添加する、請求項20に記載の規定食または健康サプリメント。
【請求項２２】
カプセル剤、錠剤、粉末、食品添加物、クッキー、ビスケット、朝食用加工穀物食、スポーツドリンクおよびスポーツ食品棒状物から成る群から選択される、請求項16に記載の規定食または健康サプリメント。
【請求項２３】
カプセル剤である、請求項22に記載の規定食または健康サプリメント。
【請求項２４】
リン酸トコフェリルアルギニン複合体を含有する、請求項23に記載の規定食または健康サプリメント。
【請求項２５】
スポーツドリンクである、請求項22に記載の規定食または健康サプリメント。
【請求項２６】
リン酸トコフェリルアルギニン複合体を含有する、請求項25に記載の規定食または健康サプリメント。
【請求項２７】
リン酸ユビキニルを含有するクッキーである、請求項22に記載の規定食または健康サプリメント。
【請求項２８】
リン酸トコフェリルアルギニン複合体を含有する、請求項27に記載の規定食または健康サプリメント。
【請求項２９】
許容される担体とともに送出される微量栄養素のホスフェート誘導体の1種以上の複合体の形態の微量栄養素を有効量で含んでなる規定食または健康サプリメントを被検体に投与することを含んでなる、トコフェロール、ユビキノール、アスコルビン酸、トコトリエノール、レチノールおよびそれらの混合物から成る群から選択される微量栄養素を毎日の所要量で被検体の摂取物に補充する方法。
【請求項３０】
許容される担体と一緒の有効量の微量栄養素の、毎日の所要量の微量栄養素を被検体の摂取物に補充するための規定食または健康サプリメントの製造における使用であって、微量栄養素がユビキノール、アスコルビン酸、レチノール、トコトリエノール、トコフェロールおよびそれらの混合物のホスフェート誘導体の複合体から成る群から選択される、前記使用。
【請求項３１】
有効量のユビキノール、アスコルビン酸、レチノール、トコトリエノール、トコフェロールおよびそれらの混合物のホスフェート誘導体の1種以上の複合体と、許容される担体とを含んでなる、微量栄養素を被検体の摂取物に補充するために使用する規定食または健康サプリメント。
【請求項３２】
許容される担体とともに送出される有効量のリン酸ユビキニルとリン酸ジユビキニルとの混合物を含んでなる規定食または健康サプリメントを被検体に投与することを含んでなる、毎日の所要量のCoQ10を被検体の摂取物に補充する方法。
【請求項３３】
許容される担体とともに送出される有効量のリン酸トコフェリルアルギニン複合体を含んでなる規定食または健康サプリメントを被検体に投与することを含んでなる、毎日の所要量のビタミンEを被検体の摂取物に補充する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、微量栄養素化合物の送出が改良された規定食または健康サプリメントに関する。さらに詳しくは、本発明は、電子伝達剤である微量栄養素化合物の送出が改良された規定食または健康サプリメントに関する。
【背景技術】
【０００２】
この明細書において、知識の文献、会報または項目が言及または論考される場合、この言及または論考は、知識の文献、会報または項目またはそれらの任意の組合わせが優先日に：
(a)常識の一部分であったこと、または
(b)この明細書が関係する問題を解決することの試みに関係することが知られていたこと、
を認めるものではない。
【０００３】
下記の論考は主としてユビキノールおよびトコフェロールに関するが、これは単に例示であり、本発明はこれらの電子伝達剤に限定されないことを理解すべきである。
【０００４】
補酵素Q10 (CoQ10) すなわちユビキノンは10の反復イソプレン単位を有するので、親油性である。それは体のすべての細胞中に存在し、細胞内のエネルギー産生においていくつかの主要な工程に関係する補酵素として働く内因的必須細胞構成成分である。CoQ10は電子のミトコンドリア輸送および各細胞のミトコンドリア内のエネルギー産生において重要な生理学的役割を演ずるので、基本的に重要であると見なされる。
【０００５】
CoQ10は内因的生合成および規定食摂取物を通して体に対して利用可能となる。フォルカーズ（Folkers）は、下記の理由で、臨床的に有意な疾患状態の証拠に導くCoQ10の欠乏症が起こりうることを示唆している：
規定食CoQ10の不足、
CoQ10生合成の障害、
体によるCoQ10の過剰利用、
またはそれら3つの任意の組合わせ。CoQ10はすべての細胞型の最適な機能に対して必須であるので、CoQ10補充に対して好適に反応する、概観上多様多数の疾患状態が見出されることは驚くべきことではない。したがって、すべての代謝的に活性な組織はCoQ10欠乏に対して高度に感受性であることがある。最適な栄養素 (これは将来最適なレベルのCoQ10を含む) は一般に多数の疾患状態において有益であると仮定することは合理的である。
【０００６】
CoQ10は細胞の呼吸鎖を改善し、ミトコンドリア膜を安定化するので、それは老化に関連するいくつかの心不全疾患において潜在的役割を有する。心筋細胞の高いエネルギー要求のために、CoQ10は心筋細胞中で高度に濃縮されることが知られている。一次的、二次的または両方であるかどうかにかかわらず、このCoQ10の欠乏は心不全のそうでなければ不変の進行において主要な処理可能な因子であることがある。心臓血管系疾患の治療において潜在的に使用可能であることが報告されているビタミンE、イノシン、シトクロムCを包含する他の栄養素、または経口的葉酸塩、ベタインおよび／またはピリドキシン療法を使用する高ホモシステイン血症の治療において潜在的に使用可能であることが報告されている他の栄養素も考慮することができるであろう。これらの栄養素は年齢に関連するある範囲の疾患の治療を補助し、内因的CoQ10の産生を刺激する。
【０００７】
規定食サプリメント
CoQ10はその吸収において高い変動性を示し、ある被検体は100 mg／日ですぐれた血液レベルのCoQ10を獲得するが、他の被検体は同一血液レベルを獲得するためにこの量の2または3倍を必要とする。米国において現在入手可能なすべてのCoQ10は日本で製造されており、CoQ10をプレスした錠剤、粉末充填カプセル剤、または油をベースとする軟質ゲルカプセル剤のいずれかに入れて、多数の会社により販売されている。CoQ10は脂溶性であり、規定食脂肪とともに投与されるとき、吸収は改善されるであろう。CoQ10の投与量に関する発表されたデータは、ほとんどもっぱら疾患状態の治療に関する。病気の予防のためのCoQ10の使用に関する情報は存在しない。これは、今日まで、回答されなかった、極めて重要な問題である。
【０００８】
吸収は下記を通して起こることが報告されている：
(a)ビタミンAと同様な方式における胆汁酸塩とともにミセルの形成、または
(b)腸膜に対するCoQ10の直接的接着後、受動的輸送(これはその高分子量により強く阻害される) により、および／または
(c)リポタンパク質の輸送。
【０００９】
しかしながら、経口的に投与するとき、吸収は高度に変動性であり、処方パラメーターに依存する。
CoQ10は溶解度が低いキノンである。CoQ10の腸内吸収は有効な処方により改善することができる。脂溶性栄養素が油性調製物よりも水性または乳化ベヒクルからよりよく吸収されるという証拠が存在する。
【００１０】
【表１】
2005506972.tif 000002
【００１１】
これらの生物学的利用能の増加にかかわらず、絶対吸収は最適値よりもなお低いままであることに注目することは重要である。上記表に記載されている生物学的利用能の増加は、溶解度および溶解速度を増加させる油性乳濁液界面活性剤系のためであるか、あるいは生物学的膜を貫通し、それを崩壊させて薬剤負荷の透過性を増加させる界面活性剤の能力のためであることが示唆される。これは腸膜を通る吸収が受動的プロセスであることを仮定する。
【００１２】
主要なアメリカのCoQ10 (Q−ゲル) 軟質ゼラチンカプセル剤は、ソルビタンモノオレエート、ポリソルベート80、中鎖トリグリセリド (MCT)、プロピレングリコール、ｄ−α−トコフェロール、PVP (Plasdone) およびベニノキ種子抽出物の配合物中にCoQ10を含有する登録処方箋を使用している[これは米国特許第6,056,971号明細書(特許文献１)において他の商業的処方物に比較してCoQ10の生物学的利用能を増加させることが報告された]。
【００１３】
CoQ10を可溶化する他の方法は、水素化ヒマシ油 (HCO−60) およびエタノール−水 (1：5容量) および米国特許第5,989,583号明細書(特許文献２)に論じられているレシチン中に安定な1ミクロンより小さい範囲の粒子を含む、他のリポイド薬物送達システムを包含することが報告されている。脂質微小球はCoQ10の吸収を増強することがある。
【００１４】
CoQ10の吸収に対して重要な他のパラメーターは下記のものを包含する：
(a)生物学的利用能の関数としてミセルサイズの感知、
(b)生物学的利用能の関数として界面活性剤のHLB値、高いHLB数は生物学的利用能を改善することがある (Pozzl他、1991、Weis他、1994)、および
(c)CoQ10の粒体サイズ。
【００１５】
脂溶性薬物の腸内吸収は、経口投与形態ならびに処方因子により顕著に影響を受けることがある。多数の商業的ビタミン製剤は、賦形剤、充填剤または他のアジュバントの複合マトリックスを含有する圧縮錠剤、硬質ゼラチンカプセル剤または軟質ゼラチンカプセル剤として処方される。液状充填剤を意味する軟質ゼラチンカプセル剤中に処方される化合物は、乾燥粉末の配合物をカプセル化する硬質ゼラチンカプセル剤よりも吸収にすぐれる傾向があるが、規定食サプリメントの生物学的利用能に対して歴史的にほとんど注目されてきていない。
【００１６】
ワルクビスト（Walhqvist）が実施した最近の研究において、2つの異なる製剤からのCoQ10の生物学的利用能を比較して、乳化製剤が粉末状製剤よりも高いCoQ10の生物学的利用能を有するかどうかを確認した。この研究において、50 mgのCoQ10を含有する2つの異なるゼラチンカプセル剤が使用された。第1の製剤は、硬質ゼラチンカプセル剤中に充填された、充填剤としてリン酸二カルシウムおよび賦形剤としてステアリン酸マグネシウムを含む、結晶質CoQ10であった。他の製剤は軟質ゼラチンカプセル剤中にカプセル化された乳濁液中の複合体ミセルとしてCoQ10を含有した。この研究の結論は、乳化された軟質ゼラチンカプセル剤はこの研究において使用した硬質ゲル中の粉末よりも高い生物学的利用能を有するということであった。軟質ゼラチン処方物中の界面活性剤の存在は、CoQ10の可溶化および放出の増強に寄与するであろう。
CoQ10の送出に関するこの研究にかかわらず、達成された吸収レベルはまだ最適ではない。
【００１７】
微量栄養素を添加した食品
規定食サプリメントおよび機能性食品の処方を考慮するとき、規定食CoQ10の摂取の評価は多数の理由で重要である。また、この化合物の化学は重要であり、体により利用される好ましい形態を示すことができる。例えば、ビタミンB6は遊離形態 (ピリドキシン)、グリコシド (ピリドキシアミン) で見出すことができ、塩酸塩 (ピリドキシン塩酸塩) として規定食サプリメント中に供給することができる。食品において、ビタミンは主としてホスフェート (ピリドキサル5−ホスフェート) として存在する。生物学的利用能は食品の種類および製造方法に依存して変化するが、典型的にはホスフェートはよりよく摂取される。
【００１８】
仕上げられた製品の処方物は本来の食品源を代表し、食品中に本来存在するCoQ10を伴う他の化合物が確実に存在するようにすべきである。これらの規定食化合物は、仕上げられた製品の生物学的利用能を劇的に変更することができるので、考慮することが重要である。それゆえ可能ならば、どんな化合物が存在するかも考えるべきである。例えば、CoQ10に富んだ食品は典型的には脂肪性であり、例えば、油っこい魚類および大豆油である。したがって、脂肪ベヒクルとともに処方するとき、CoQ10の生物学的利用能が改善されることは驚くべきことではない。
【００１９】
CoQ10に富んだ食品源を考慮すると、正常な規定食摂取レベルの同定に役立つであろう。文献を十分に概観すると、CoQ10の適切なまたは有効な投与量に関して見解が多少相異し、そして規定食摂取を均一に低下させることができることが考えられている。
【００２０】
また、食品製造を考慮することが重要であり、これらの方法が吸収にどのように影響を与えるかを知ると、食品製造が促進される。例えば、料理の効果はフライにすることによってCoQ10の14〜32％が破壊され、そして沸騰による破壊は検出されない。これが示唆するように、CoQ10は熱安定性であるようであり、熱い飲料において利用可能であり、温和な加熱抽出により首尾よく濃縮することができるであろう。
【００２１】
食品中に存在する自然に共投与される化合物は吸収を改善するので、正常の個体において低い摂取が適切であること、あるいは生物学的利用能が最適であることを考慮しかつそれを示すことが重要である。
【００２２】
サプリメント中に送出される還元されたCoQ10 (ユビキノール) は、還元されたCoQ10の循環レベルを増加させることが報告された。この分子が酸化された形態に変化するプロセスが明らかになりつつある。食品中のユビキノールの実際の形態の分析は実施されてきておらず、どんな形態が体に好まれるかも明瞭ではない。しかしながら、電子伝達剤として有効に作用するために、CoQ10は還元された形態であり続けなくてはならないと考えられる。
こうして、微量栄養素化合物、例えば、還元されたCoQ10および他の重要な規定食または健康サプリメントのための改良された送出系が必要とされている。
【００２３】
ビタミンE
ビタミンEは効力のある電子伝達剤であり、生物学的膜のリン脂質および血漿リポタンパク質内のポリ不飽和脂肪酸 (PUFA) を保護することができる。また、ビタミンEは膜を安定化し、プロテインキナーゼC活性を調整し、積極的に免疫応答に影響を及ぼす。補充は普及しているが、より高い規定食の消費のみが異文化基準で男性および女性の両方における冠状動脈性心臓疾患の低い危険に信頼性をもって関係付けられる。
【００２４】
サプリメントとして提供されるとき、ビタミンEはトコフェロールとして提供される。単離された栄養素として送出されるとき、ビタミンEは脂溶性であるために吸収が低く、フェノール基の一次酸化のために化学的に不安定性である。送出を改良するために、ビタミンEはエステル化され、単純な置換エステル−スクシネートまたはアセテート誘導体として提供される。このプロドラッグの戦略は主としてフェノール基の酸化を防止し、リンパ輸送を改良し、そして安定性を増強するために実行されるが、組織トコフェロールの増加を達成するためには多数週を必要とする。
【００２５】
ビタミンEエステル、特に天然の形態−RRR−立体異性体を含む規定食サプリメントは血漿および赤血球中のα−トコフェロール含有率を増加させることができるが、生物学的利用能はなお最適値よりも有意に低く、血液レベルは患者内で広く変動し、臨床的効能は失望させる程度のものである。
【００２６】
胃腸管の脂肪消化における管腔の事象は十分に研究されてきており、そして脂肪吸収のミセルの仮説は確立されている。したがって、脂肪形成アプローチを介してα−トコフェロールアセテートのリンパ輸送を増強させるために、多数の試みがなされてきている。改良にかかわらず、食品は経口投与後にα−トコフェロールエステルの吸収度を増加させる、有意な衝撃をなお有することができ、分散、消化および可溶化以外の因子がビタミンEの腸内吸収に関係しうることを示す。また、他の親油性薬剤および栄養素はビタミンAを含めて経口投与後に吸収性に劣り、変動し、現在の自己乳化性薬剤送出処方物のアプローチならびに他の脂肪をベースとする処方物は、低可溶性脂質化合物の生物学的利用能の増加において制限された価値を有することがあることを示す。
【００２７】
ビタミンEは、細胞の生活能力に対して基本的に重要であるので、効率よく輸送され、要求に応じて可動化し、電子伝達剤として作用しなくてはならず、そして高過ぎる濃度に到達して酸化促進剤とならないようしなくてはならない。この精密な生物学的バランスは、小腸粘膜を横切る有効な輸送から始まらなければならないにもかかわらず、このプロセスは最近でもよく分かっていない。
【００２８】
リン酸トコフェリル (TP) はトコフェロールのいっそう水溶性の類似体であり、そしていっそう効率よい腸内吸収を有する可能性が最も高いので、酢酸トコフェリル (TA) よりも高い生物学的利用能を有することが提案される。水溶性類似体TPは機能性食品中で処方が容易であり、そして胃腸管中の多数の酵素を除く規定食サプリメントはホスホリラーゼ活性を有し、小腸に送出されるTPの量を減少させる。また、TPは酸不溶性複合体を形成し、それらの複合体は腸壁を横切る輸送に利用可能な生成物の量を減少させる。
【特許文献１】
米国特許第6,056,971号明細書
【特許文献２】
米国特許第5,989,583号明細書
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００２９】
微量栄養素化合物、例えば、ビタミンEおよびCoQ10の毎日の所要量の一部分の送出を効率よく改良する送出系が必要とされている。
【課題を解決するための手段】
【００３０】
ホスフェート誘導体の形態の微量栄養素を使用することによって、微量栄養素化合物を含んでなる規定食または健康サプリメントの提供が顕著に改良されることが発見された。
【００３１】
本発明の第1の面によれば、許容される担体とともに送出される有効量のユビキノール、アスコルビン酸、トコトリエノール、レチノールおよびそれらの混合物のホスフェート誘導体から成る群から選択される微量栄養素を含んでなる規定食または健康サプリメントが提供される。
好ましくは、微量栄養素はリン酸ユビキニルである。
【００３２】
用語「ホスフェート誘導体」は、酸素によりホスフェート基のリン原子に共有結合された化合物を含んでなる。酸素原子は典型的には微量栄養素上のヒドロキシル基に由来する。ホスフェート誘導体は、遊離リン酸、その塩、微量栄養素の2分子を有するホスフェートエステル、2つの異なる微量栄養素を有する混合ホスフェートエステル、遊離ホスフェート酸素がアルキルまたは置換アルキル基と結合を形成するホスファチジル化合物、並びに両性界面活性剤、カチオン界面活性剤、窒素官能基を有するアミノ酸およびこれらのアミノ酸に富んだタンパク質との複合体の形態で存在することができる。
【００３３】
好ましくは、ホスフェート混合物は1つのモノ微量栄養素ホスフェート誘導体と、1つのジ微量栄養素ホスフェート誘導体とから成り、ここで国際特許出願No. PCT／AU 01／01475号に開示されているように、モノ微量栄養素ホスフェート誘導体の量はジ微量栄養素ホスフェート誘導体に対して等モルより多い。例えば、70％のリン酸ユビキニルおよび26％のリン酸ジユビキニルを含有する混合物。
【００３４】
リン酸化は任意の適当な方法により達成することができる。好ましくは、国際特許出願No. PCT／AU 00／00452号に開示されている方法に従い、ヒドロキシル基を含有する微量栄養素をP4O10でリン酸化する。過剰のジホスフェート誘導体をこの分野において知られている方法に従い加水分解することができる。
【００３５】
いくつかの状況において、追加の性質、例えば、水溶性の増加が好ましい場合、ホスフェート誘導体、例えば、ホスファチドを使用することが必要であることがある。ホスファチジル誘導体は有機ホスフェートのアミノアルキル誘導体である。これらの誘導体はR1R2N(CH2)nOHの構造を有するアミンから製造することができ、式中nは1〜6の整数であり、そしてR1およびR2はHまたは3以下の数の炭素を有する短いアルキル鎖であることができる。R1およびR2は同一であるか、あるいは異なることができる。ホスファチジル誘導体は、微量栄養素のヒドロキシルプロトンをホスフェート実在物と置換し、次いでこれをアミン、例えば、エタノールアミンまたはN,N’−ジメチルエタノールアミンと反応させて、微量栄養素のホスファチジル誘導体を生じさせることによって製造される。ホスファチジル誘導体を製造する1つの方法において、塩基性溶媒、例えば、ピリジンまたはトリエチルアミンをオキシ塩化リンとともに使用して中間体を生成し、次いでこれをアミンのヒドロキシ基と反応させて、対応するホスファチジル誘導体、例えば、PコリルPユビキニル二水素ホスフェートを生成する。
【００３６】
本発明の第2の面によれば、許容される担体とともに送出される微量栄養素のホスフェート誘導体の形態で有効量の微量栄養素を含んでなる規定食または健康のサプリメントを被検体に投与することを含んでなる、ユビキノール、アスコルビン酸、トコトリエノール、レチノールおよびそれらの混合物から成る群から選択される微量栄養素を毎日の所要量で被検体の摂取物に補充する方法が提供される。
【００３７】
微量栄養素がユビキノール、アスコルビン酸、トコトリエノール、レチノールおよびそれらの混合物から成る群から選択される、毎日の所要量の微量栄養素を被検体の摂取物に補充するための規定食または健康サプリメントの製造における、許容される担体と一緒に有効量の1種以上の微量栄養素の1種以上のホスフェート誘導体の使用。
【００３８】
規定食または健康サプリメントが有効量の1種以上の微量栄養素の1種以上のホスフェート誘導体と、許容される担体とを含んでなる、ユビキノール、アスコルビン酸、トコトリエノール、レチノールおよびそれらの混合物から成る群から選択される微量栄養素を被検体の摂取物に補充するために使用する規定食または健康サプリメント。
【００３９】
本発明の第3の面によれば、許容される担体とともに送出される有効量のユビキノール、アスコルビン酸、レチノール、トコトリエノール、トコフェロールおよびそれらの混合物のホスフェート誘導体の複合体から成る群から選択される微量栄養素を含んでなる規定食または健康サプリメントが提供される。
【００４０】
用語「微量栄養素のホスフェート誘導体の複合体」は、ユビキノール、アスコルビン酸、トコトリエノール、レチノール、トコフェロールおよびそれらの混合物の1種以上のホスフェート誘導体と、両性界面活性剤、カチオン界面活性剤、窒素官能基を有するアミノ酸およびこれらのアミノ酸に富んだタンパク質から成る群から選択される1種以上の複合化剤との反応生成物を意味し、これらは国際特許出願No. PCT／AU 01／01476号に開示されている。
【００４１】
好ましい複合化剤は、アルギニン、リシンおよび第三級置換アミン、例えば、下記式を有するものから成る群から選択される：
NR1R2R3
(式中、R1はC6〜C22の直鎖状または分枝鎖状混合アルキル基またはそのカルボニル誘導体から成る群から選択され、
R2およびR3はH、CH2COOX、CH2CHOHCH2SO3X、CH2CHOHCH2PO3X、CH2CH2COOX、CH2COOX、CH2CH2CHOHCH2SO3XまたはCH2CH2CHOHCH2OPO3Xであり、そしてXはH、Na、Kまたはアルカノールアミンであり、ただしR2およびR3は両方共がHであることはなく、そして
R1がRCOであるとき、R2はCH3でありかつR3は (CH2CH2)N(C2H4OH)H2CHOPO3であることができるか、あるいはR2およびR3は一緒になってN(CH2)2(C2H4OH)CH2COO−であることができる。)
【００４２】
微量栄養素のホスフェート誘導体のこのような複合体は、A) リン酸トコフェリル、リン酸レチニル、リン酸アスコルビル、リン酸トコトリエニル、リン酸ユビキニルまたはそれらの混合物と、B) アルギニン、リシンまたはラウリルイミノジプロピオン酸との任意の組み合わせの反応により形成され、ここで複合体化はアルカリ性窒素中心とリン酸エステルとの間で起こって安定な複合体を形成する。
【００４３】
本発明の第4の面によれば、許容される担体とともに送出される微量栄養素のホスフェート誘導体の1種以上の複合体の形態の微量栄養素を有効量で含んでなる規定食または健康サプリメントを被検体に投与することを含んでなる、トコフェロール、ユビキノール、アスコルビン酸、トコトリエノール、レチノールおよびそれらの混合物から成る群から選択される微量栄養素を毎日の所要量で被検体の摂取物に補充する方法が提供される。
【００４４】
用語「有効量」は、被検体に対して生物学的活性効果を提供する各微量栄養素の毎日の所要量の一部分または複数倍を意味する。親油性物質は容易に外分泌または代謝されないので、推奨される毎日の所要量 (RDA) の多数倍を食品源中に供給することは異常であることが認識される。典型的には非医学的に使用される規定食サプリメントは推奨されるRDAよりも少ない量、典型的にはRDAの1／3を含有することが推奨される。しかし慢性的医学的使用のために、回復を急速にするためにRDAの多数倍を供給することが望ましいことが認識される。
【００４５】
微量栄養素の1種以上のホスフェート誘導体の有効量は、規定食または健康サプリメントの10 ppm〜10,000 ppm (w/w) の範囲の濃度であることができる。好ましくは、推奨される毎日の所要量またはその小さい複数倍を供給するという必要性に従い、微量栄養素の1種以上のホスフェート誘導体は50 ppm〜1,000 ppm (w/w) の濃度で添加される。
【００４６】
用語「規定食または健康サプリメント」は、本明細書において使用するとき、微量栄養素化合物を供給することに関するすべての形態を意味する。例えば、錠剤、粉末、噛み砕き可能な錠剤、カプセル剤、経鼻送達溶液、食品添加物、経口懸濁液、子供用処方物、腸内供給物、非経口栄養素 (例えば、静脈内供給物)、栄養薬学的食品および機能性食品。好ましくは、規定食または健康サプリメントは、カプセル剤、粉末および食品、例えば、クッキー、ビスケット、朝食用加工穀物食、スポーツドリンクおよびスポーツ食品棒状物から成る群から選択されるが、これらに限定されない。当業者は本発明において使用できる許容される担体および他の賦形剤を知っているであろう。典型的には、微量栄養素の1種以上のホスフェート誘導体、例えば、リン酸ユビキニルが親油性である場合、使用する脂質担体、例えば、中鎖トリグリセリドが存在する。
【００４７】
微量栄養素がユビキノール、アスコルビン酸、レチノール、トコトリエノール、トコフェロールおよびそれらの混合物のホスフェート誘導体の複合体から成る群から選択される、毎日の所要量の微量栄養素を被検体の摂取物に補充するための規定食または健康サプリメントの製造において、許容される担体と一緒に有効量の微量栄養素を使用すること。
【００４８】
有効量のユビキノール、アスコルビン酸、レチノール、トコトリエノール、トコフェロールおよびそれらの混合物のホスフェート誘導体の1種以上の複合体と、許容される担体とを含んでなる、微量栄養素を被検体の摂取物に補充するために使用する規定食または健康サプリメント。
【実施例】
【００４９】
添付する非限定的例を参照することによって、本発明をさらに説明し、例示する。
実施例１
この実施例において、リン酸ユビキニルを本発明によるサプリメントにおいて使用するために適当な形態で調製した。
100 gのユビキノールを100 ℃に加熱し、33 gのP4O10を添加した。この混合物を3時間攪拌し、次いで500 mlの水を混合物の中にゆっくり導入した。反応温度を沸点直下でさらに1時間維持した。水を除去すると、リン酸ユビキニルおよび無機ホスフェートが得られた。熱水でさらに洗浄することによって、無機ホスフェートを除去した。次いで残留する非晶質物質を、少なくとも1〜5％のレシチンを含有する100リットルのバージングレードのカノーラ油と混合した。1 mg/mlの濃度におけるカノーラ油中のリン酸ユビキニルの最終混合物をサプリメント、例えば、カプセルおよび機能性食品に混入した。
【００５０】
実施例２
この実施例において、本発明によるリン酸ユビキニルを含有する、増加するCoQ10レベルにおいて使用するためのカプセル剤を調製した。
適当な大きさのゼラチンカプセル (10〜17ミナム (minum) 軟質ゼラチンカプセルまたは100〜1000 mgの充填容量の適当な大きさの投与形態) を商業的に入手可能な源から選択した。次いで、1リットルの実施例1において形成したリン酸ユビキニル脂質混合物を30 ℃に加熱した後、軟質ゼラチンカプセル剤の既知の標準的製造方法に従い、密閉した軟質ゼラチンカプセル剤の中に分散させた。
【００５１】
実施例３
この実施例において、本発明によるリン酸ユビキニルを含有する、CoQ10を送出するための機能性食品を調製した。この場合において、リン酸ユビキニルをチョコレートチップクッキー中に混入した。
【００５２】
3 gのリン酸ユビキニルを含む1カップのバターまたはマーガリンを、1カップの褐色砂糖および1カップの普通の砂糖でクリーム化した。次いで、1個の卵および茶さじ0.5杯のバニラエッセンスを混合物にブレンドした。2カップの普通の小麦粉を1.5カップのカラスムギ、茶さじ1杯のベーキングパウダーおよび300 gのチョコレートチップと組合わせた。次いで、湿潤混合物を乾燥成分に添加し、練り粉の硬さが得られるまで混合した。グリースを塗ったトレー上に小さい球を配置して、拡がる余地を与えた。クッキーを180 ℃に予熱した炉中で8〜10分間焼いた。100 mgのリン酸ユビキニル／供給を達成するレシピを使用して、ほぼ30個のビスケットを作った。必要な投与量を達成するために、この量を変動することができる。
【００５３】
実施例４
リン酸トコフェリルアルギニン複合体を次のようにして製造する。
化合物アルギニン、NaOHおよびリン酸トコフェリル／リン酸ジトコフェリル (遊離形態) の混合物のモル比は公称1：1：1であるが、わずかに過剰量のアルギニンおよびNaOHを使用した。NaOHの飽和溶液 (60％w/w) を乾燥アルギニンに添加し、70 ℃において20分間攪拌した。水 (使用すべきTP/T2Pの150 g毎に30 ml) を添加して、よりよい混合を促進した。リン酸トコフェリル／リン酸ジトコフェリルの混合物を溶液に添加し、高剪断ミキサーで70 ℃において1時間激しく攪拌した。
【００５４】
実施例５
この実施例において、飲料中のリン酸トコフェリルアルギニン複合体 (TP) を研究した。
リン酸トコフェリルアルギニン複合体 (50 mg／500 mlの等価α−トコフェロール含量) を、商業的に入手可能なムサシ (Musashi) 飲料 (Musashi、オーストラリア) 青色の種類およびオレンジ色の種類に添加した。
【００５５】
ミリポア・ミレックス (Millipore Millex)−GP 25 mm、直径0.22 μmのフィルターおよび無菌の皮下注射器を使用して、2％(w/w) のリン酸トコフェリルアルギニン複合体の原液を調製し、滅菌濾過した。無菌条件下に4 mlを各500 mlのびんに添加した。3つの処理グループを各飲料について使用した：4 ℃、37 ℃および室温 (RT)。飲料を細菌の増殖および汚染について毎週の基準でモニターした。このモニターは視的に実施し、また試料をLB寒天プレート上に配置し、これを37 ℃において47時間増殖させることによって実施した。
【００５６】
これらの結果が示唆するように、各処理グループにおいていずれの試料においても、細菌または菌類の汚染は存在しなかった。
【００５７】
【表２】
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【００５８】
【表３】
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【００５９】
飲料を酸性として微生物安定性とした。低いpHにおいて検出可能な濁りが存在する。しかしながら、生物学的安定性に必要なpHにおいて、リン酸トコフェリルアルギニン複合体の分解量は無視できた。ビタミンE補充の形態はこのような飲料に有効である。
【００６０】
実施例６
この実施例において、ラットにおけるリン酸トコフェリルの生物学的活性を研究した。
方法
下記のプロトコルを使用して、ラットに投与した：
(a)単一投与量の化合物を雄のSD (Spraque−Dawley) ラットに投与した (表1参照)。18 gの栄養針および1 mlの注射器を使用して、経口栄養を与えた。26 gの皮下注射針および1 mlの注射器を使用して、静脈内投与を実施した。
(b)投与後24時間に、腹腔内注射により60 mg／kgのネムブタール (Nembutal) (麻酔薬、Meril、米国) を使用して、ラットを麻酔した。
(c)ラットが十分に麻酔された後、尾静脈から血液試料を採取し、大腿静脈を暴露させ、500単位のヘパリンを注射した。腹腔を開き、ラットを生理食塩水で潅流した。肝臓、心臓、精巣上体の脂肪パッド、後脚の筋肉および脳を取出し、液体窒素中で凍結させた。
【００６１】
下記の方法に従い、肝臓を抽出した：
(a)10 mlのジクロロメタン中で1 gの肝臓を均質化した。
(b)内部標準として、0.1 mgのリン酸ジトコフェリル (50％テトラヒドロフラン中の1 mg／ml) を添加する。
(c)ホモジナイザーを使用して混合し、試料を遠心する。
(d)ジクロロメタンを除去し、蒸発させる。
(e)9 mlのKOH (2 M) を添加し、室温において1時間攪拌する。
(f)10 mlのヘキサンを添加し、震蘯し、ヘキサン (上) 層を取出す。
(g)10 mlのHCl (2 M) を9 mlのKOH (2 M) 溶液に添加する。
(h)10 mlのヘキサンを添加し、震蘯し、ヘキサン層を取出す。
(i)ヘキサン層を蒸発乾固する。
【００６２】
抽出物を分析し、確立された検量線 (リン酸トコフェリルvsリン酸ジトコフェリル) を使用してエレクトロスプレー質量分析によりTP (μg) 含量について定量した。
【００６３】
ES/MS分析条件：1％のアンモニアを含有する1 mlのテトラヒドロフラン (THF) 中に試料を溶解し、20 μlを試料ループ中に注射した。試料をTHF：水 (9：1) 20 μl／分で溶離した。マイクロマス・プラットフォーム (Micromass Platform) により40 Vの円錐体電圧を使用して、質量分析を負イオンモードで実施した。
【００６４】
【表４】
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【００６５】
結論
経口および静脈内投与により、リン酸トコフェリルまたは酢酸トコフェリルをラットに投与した。リン酸トコフェリルの静脈内投与は、24時間後、肝臓中に存在するリン酸トコフェリルの量を有意に増加させた。また、腸溶剤皮調製物または経口溶液としてリン酸トコフェリルを投与すると、肝臓において検出されたリン酸トコフェリルの量が増加した。酢酸トコフェリルの投与は、対照に比較して、リン酸トコフェリルの存在量を有意に増加させなかった。
【００６６】
用語「含んでなる」および用語「含んでなる」の形態は、本明細書において使用するとき、特許請求の範囲に記載されている本発明について任意の変動または付加を排除するように限定しない。
【００６７】
本発明に対する変更および改良は、当業者にとって容易に明らかである。このような変更および改良は、本発明の範囲内に含まれることを意図する。
【国際公開パンフレット】
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【国際調査報告】
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