(57)【要約】本発明は、一酸化窒素を放出する医療装置を製造するための方法を提供する。本方法は、アミンを官能化したシラン残基を基質、例えば金属製基質に接触させ、該アミンを官能化したシラン残基を架橋剤で接触させ、少なくとも１つの求核性残基を架橋したアミンを官能化したシラン残基と接触させ、及び該求核性残基を一酸化窒素ガスと接触させることを含む。本発明はまた、架橋したアミンを官能化したシラン残基に少なくとも１つの一酸化窒素を放出する官能基を接触させる方法を提供する。さらに、本発明は、治療用濃度で一酸化窒素を輸送するための医療用装置を提供し、ここで、装置は、シラン中間体に結合したジアゼニウムジオレート求核剤を介して結合した一酸化窒素を有する基質を含む。シラン中間体は基質に結合し、アミンが官能化され架橋される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）アミン−機能性シラン残基を基質と接触させ、（ｂ）前記アミン−機能性シラン残基を架橋剤と接触させ、そして（ｃ）少なくても１つの一酸化窒素−放出官能基を前記架橋したアミン−機能性シラン残基と接触させる工程を含む、一酸化窒素−放出基質を調製する方法。
【請求項２】
前記基質は金属、ガラス、プラスチック、ゴム、又はセラミックを含む、請求項１記載の方法。
【請求項３】
前記基質は金属を含む、請求項２記載の方法。
【請求項４】
前記金属は、金又は金合金、金含有被膜を有する金属基質、チタン及びチタン合金、チタン含有被膜を有する金属基質、ニッケル又はニッケル合金、ニッケル含有被膜を有する金属基質、ケイ素及びケイ素合金、ケイ素含有被膜を有する金属基質、アルミニウム及びアルミニウム合金、アルミニウム含有被膜を有する金属基質、亜鉛及び亜鉛合金、亜鉛含有被膜を有する金属基質、マグネシウム合金、錫及び錫合金、錫含有被膜を有する金属基質、銅及び銅合金、そして銅含有被膜を有する金属基質から成る群から選ばれる、請求項３記載の方法。
【請求項５】
前記金属はステンレス鋼である、請求項３記載の方法。
【請求項６】
前記基質はガラスを含む、請求項２記載の方法。
【請求項７】
前記ガラスはソーダ石灰ガラス、ストロンチウムガラス、バリウムガラス、ホウケイ酸ガラス、及びランタンを含むガラス−セラミックスから成る群から選ばれる、請求項６記載の方法。
【請求項８】
前記基質はプラスチックを含む、請求項２記載の方法。
【請求項９】
前記プラスチックは、アクリル樹脂、アクリロニトリル−ブタジエン−スチレン、アセタール樹脂、ポリフェニレンオキシド樹脂、ポリイミド樹脂、ポリスチレン、ポリプロピレン、ポリエチレン、ポリテトラフルオロエチレン、ポリビニリデン、ポリエチレンイミン、ポリエステル樹脂、ポリエーテル樹脂、ポリラクトン樹脂、ポリウレタン樹脂、ポリカーボネート樹脂、ポリエチレンテレフタレート、及びその組み合わせから成る群から選ばれる、請求項８記載の方法。
【請求項１０】
前記基質はゴムを含む、請求項２記載の方法。
【請求項１１】
前記ゴムは、シリコン、フルオロシリコン、ニトリルゴム、シリコンゴム、フルオロシリコンゴム、ポリイソプレンゴム、硫黄硬化ゴム、イソプレン−アクリロニトリルゴム、及びその組み合わせから成る群から選ばれる、請求項１０記載の方法。
【請求項１２】
前記基質はセラミックを含む、請求項２記載の方法。
【請求項１３】
前記セラミックは、アルミナ、窒化ケイ素、炭化ホウ素、窒化ホウ素、シリカ、及びその組み合わせから成る群から選ばれる、請求項１２記載の方法。
【請求項１４】
前記アミン−機能性シランは、３−アミノプロピルトリメトキシシラン、３−アミノプロピルトリエトキシシラン、３−アミノプロピルジメトキシシラン、Ｎ−（３−アクリルオキシ−２−ヒドロキシプロピル）−３−アミノ−プロピルトリエトキシシラン、Ｎ−２−（アミノエチル）−３−アミノプロピルトリス（２−エチル−ヘキソキシ）シラン、３−（ｍ−アミノフェノキシ）プロピルトリメトキシシラン、３−（１−アミノプロポキシ）−３，３−ジメチル−１−プロペニル−トリメトキシシラン、３−アミノプロピルトリス（メトキシエトキシエトキシ）シラン、３−アミノプロピルメチルジエトキシシラン、３−アミノプロピルトリス（トリメチルシロキシ）シラン、ビス（ジメチルアミノ）メチルクロロシラン、ビス（ジメチルアミノ）メチルメトキシシラン、ビス（ジメチルアミノ）フェニルクロロシラン、ビス（ジメチルアミノ）フェニルエトキシシラン、ビス（２−ヒドロキシエチル）−３−アミノプロピルトリエトキシシラン、ビス（２−ヒドロキシエチル）−３−アミノプロピルトリメトキシシラン、ビス（３−トリエトキシシリル）プロピルアミン、１，４−ビス［３−（トリメトキシシリル）プロピル］エチレンジアミン、（Ｎ，Ｎ−ジエチル−３−アミノプロピル）トリメトキシシラン、（Ｎ，Ｎ−ジメチル−３−アミノプロピル）トリメトキシシラン、Ｎ−フェニルアミノプロピルトリメトキシシラン、トリメトキシシリルプロピルジエチレントリアミン、トリメトキシシリルプロピルペンタエチレンヘキサミン、トリエトキシシリルオクチルジエチレントリアミン、トリイソプロポキシシリルペンタエチレンヘキサミン、ｎ−トリメトキシシリルプロピル−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルアンモニウムクロリド、３−アミノプロピルメチルジエトキシシラン、２−（ペルフルオロオクチル）エチルトリアミノトリメトキシシラン、４−アミノブチルトリメトキシシラン、Ｎ−（６−アミノヘキシル）アミノプロピルトリメトキシシラン、３−（ジメトキシメチルシリルプロピル）ジエチレントリアミン、Ｎ−（２−アミノエチル）−Ｎ’−［３−（ジメトキシメチルシリル）プロピル］−１，２−エタンジアミン、アミン−機能性ポリジメチルシロキサンコポリマー、及びビスアミノシランから成る群から選ばれる、請求項１記載の方法。
【請求項１５】
前記架橋剤はジハロゲン化アルキル又はジハロゲン化アリールを含む、請求項１記載の方法。
【請求項１６】
前記架橋剤はアルキル、シクロアルキル、ヒドロキシル、ニトロ、ハロゲン、シアノ、及びその組み合わせから成る群から選ばれる置換基で置換される、請求項１５記載の方法。
【請求項１７】
前記架橋剤は１，４−ジブロモエタン又は１，５−ジフルオロ−２，４−ジニトロベンゼンである、請求項１６記載の方法。
【請求項１８】
前記一酸化窒素−放出官能基は、アミン−機能性シランのＯ2−保護ジアゼニウムジオレートである一酸化窒素−放出官能基を含む、請求項１記載の方法。
【請求項１９】
前記アミン−機能性シラン残基は少なくとも１モル当量の水を含む溶媒に溶解される、請求項１記載の方法。
【請求項２０】
（ａ）前記アミノプロピルトリメトキシシラン溶液を基質と接触させ、（ｂ）前記アミノプロピルトリメトキシシランを１，４−ジブロモエタン及び１，５−ジフルオロ−２，４−ジニトロベンゼンから成る群から選ばれる架橋剤と接触させ、そして（ｃ）Ｏ2−保護ジアゼニウムジオレート（diazeniumdiolate）を前記架橋したアミノプロピルトリメトキシシランと接触させる工程を含む、一酸化窒素−放出金属基質を調製する方法。
【請求項２１】
前記アミン−機能性シラン残基は少なくても１モル当量の水を含む溶媒に溶解される、請求項２０記載の方法。
【請求項２２】
（ａ）前記アミン−機能性シラン残基溶液を基質と接触させ、（ｂ）前記アミン−機能性シラン残基を架橋剤と接触させ、（ｃ）少なくても１つの求核残基を前記架橋したアミン−機能性シラン残基と接触させ、そして（ｄ）前記求核残基を一酸化窒素ガスと接触させる工程を含む、一酸化窒素−放出基質を調製する方法。
【請求項２３】
前記求核残基はアミン誘導残基である、請求項２２記載の方法。
【請求項２４】
前記アミン誘導残基は、ジエチレントリアミン、ペンタエチレンヘキサミン、高分子量線状／分岐鎖のポリエチレンイミン、アミン−機能性ジビニルベンゼン、ピペラジン、及びその組み合わせから成る群から選ばれる、請求項２３記載の方法。
【請求項２５】
工程（ｃ）の後に、前記求核残基を架橋剤と接触させ、そして少なくても１つの追加の求核残基を前記架橋した求核残基と接触させる工程を更に含む、請求項２２記載の方法。
【請求項２６】
工程（ｄ）の前に、前記架橋したアミン−機能性シラン残基を有する前記基質を生体適合性のトップコートで処理する工程を更に含む、請求項２２記載の方法。
【請求項２７】
前記生体適合性トップコートは滑らかなヒドロゲルである、請求項２６記載の方法。
【請求項２８】
前記滑らかなヒドロゲルは、ホモ−及びへテロポリエーテル、ポリオール、ポリウレタン、ポリラクトン、アルブミン−、ヘパリン−、及びポリホスホリルコリン−機能性ポリマー、及びその組み合わせから成る群から選ばれる、請求項２７記載の方法。
【請求項２９】
前記アミン−機能性シラン残基は少なくても１モル当量の水を含む溶媒に溶解される、請求項２２記載の方法。
【請求項３０】
（ａ）アミノプロピルトリメトキシシランを基質と接触させ、（ｂ）前記アミノプロピルトリメトキシシランを１，４−ジブロモエタン及び１，５−ジフルオロ−２，４−ジニトロベンゼンから成る群から選ばれる架橋剤と接触させ、（ｃ）ジエチレントリアミン、ペンタエチレンヘキサミン、高分子量線状／分岐鎖のポリエチレンイミン、アミン−機能性ジビニルベンゼン、及びピペラジンから成る群から選ばれるアミン誘導残基を前記架橋したアミノプロピルトリメトキシシランと接触させ、そして（ｄ）前記アミン誘導残基を一酸化窒素ガスと接触させる工程を含む、一酸化窒素−放出基質を調製する方法。
【請求項３１】
前記アミン−機能性シラン残基は少なくても１モル当量の水を含む溶媒に溶解される、請求項２２記載の方法。
【請求項３２】
一酸化窒素を治療濃度で輸送するための医療装置であって、シラン中間体に結合したジアゼニウムジオレート化された求核剤によって、これに結合した一酸化窒素を有する基質を含み、前記シラン中間体はアミン−機能性であり、そして架橋されている、前記装置。
【請求項３３】
前記装置は金属を含む、請求項３２記載の医療装置。
【請求項３４】
前記金属はステンレス鋼である、請求項３３記載の医療装置。
【請求項３５】
前記シラン中間体は、３−アミノプロピルトリメトキシシラン、３−アミノプロピルトリエトキシシラン、３−アミノプロピルジメトキシシラン、Ｎ−（３−アクリルオキシ−２−ヒドロキシプロピル）−３−アミノ−プロピルトリエトキシシラン、Ｎ−２−（アミノエチル）−３−アミノプロピルトリス（２−エチル−ヘキソキシ）シラン、３−（ｍ−アミノフェノキシ）プロピルトリメトキシシラン、３−（１−アミノプロポキシ）−３，３−ジメチル−１−プロペニル−トリメトキシシラン、３−アミノプロピルトリス（メトキシエトキシエトキシ）シラン、３−アミノプロピルメチルジエトキシシラン、３−アミノプロピルトリス（トリメチルシロキシ）シラン、ビス（ジメチルアミノ）メチルクロロシラン、ビス（ジメチルアミノ）メチルメトキシシラン、ビス（ジメチルアミノ）フェニルクロロシラン、ビス（ジメチルアミノ）フェニルエトキシシラン、ビス（２−ヒドロキシエチル）−３−アミノプロピルトリエトキシシラン、ビス（２−ヒドロキシエチル）−３−アミノプロピルトリメトキシシラン、ビス（３−トリエトキシシリル）プロピルアミン、１，４−ビス［３−（トリメトキシシリル）プロピル］エチレンジアミン、（Ｎ，Ｎ−ジエチル−３−アミノプロピル）トリメトキシシラン、（Ｎ，Ｎ−ジメチル−３−アミノプロピル）トリメトキシシラン、Ｎ−フェニルアミノプロピルトリメトキシシラン、トリメトキシシリルプロピルジエチレントリアミン、トリメトキシシリルプロピルペンタエチレンヘキサミン、トリエトキシシリルオクチルジエチレントリアミン、トリイソプロポキシシリルペンタエチレンヘキサミン、ｎ−トリメトキシシリルプロピル−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルアンモニウムクロリド、３−アミノプロピルメチルジエトキシシラン、２−（ペルフルオロオクチル）エチルトリアミノトリメトキシシラン、４−アミノブチルトリメトキシシラン、Ｎ−（６−アミノヘキシル）アミノプロピルトリメトキシシラン、３−（ジメトキシメチルシリルプロピル）ジエチレントリアミン、Ｎ−（２−アミノエチル）−Ｎ’−［３−（ジメトキシメチルシリル）プロピル］−１，２−エタンジアミン、アミン−機能性ポリジメチルシロキサンコポリマー、及びビスアミノシランから成る群から選ばれる、請求項３２記載の医療装置。
【請求項３６】
前記シラン中間体は架橋剤を用いて架橋される、請求項３２記載の医療装置。
【請求項３７】
前記架橋剤はジハロゲン化アルキル又はジハロゲン化アリールである、請求項３６記載の医療装置。
【請求項３８】
前記架橋剤はアルキル、シクロアルキル、ヒドロキシル、ニトロ、ハロゲン、及びシアノ、から成る群から選ばれる置換基で置換される、請求項３７記載の医療装置。
【請求項３９】
前記架橋剤は１，４−ジブロモエタン又は１，５−ジフルオロ−２，４−ジニトロベンゼンである、請求項３８記載の医療装置。
【請求項４０】
前記ジアゼニウムジオレート化された求核剤は、アミン−機能性シランのＯ2−保護ジアゼニウムジオレートである一酸化窒素−放出官能基を含む、請求項３２載の医療装置。
【請求項４１】
前記医療装置は、動脈ステント（ｓｔｅｎｔ）、ガイドワイヤー、カテーテル、トロカール針、骨固定具、骨スクリュー、保護プレーティング、腰と関節のインプラント、導線、バイオセンサー、及びプローブから成る群から選ばれる、請求項３２載の医療装置。
【請求項４２】
一酸化窒素を治療濃度で供給するための動脈ステントであって、アミノプロピルトリメトキシシランに結合したＯ2−保護ジアゼニウムジオレートによって、これに放出可能に結合した一酸化窒素を有する金属基質を含み、前記アミノプロピルトリメトキシシランは１，４−ジブロモエタン及び１，５−ジフルオロ−２，４−ジニトロベンゼンから成る群から選ばれた架橋剤によって架橋される、前記動脈ステント。
【請求項４３】
（ａ）非求核的又は弱求核的なシラン残基を基質と接触させ、（ｂ）前記シラン残基を架橋剤と接触させ、そして（ｃ）一酸化窒素を前記架橋したシラン残基と接触させる工程を含む、一酸化窒素−放出基質を調製する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
［0001］本発明は架橋した一酸化窒素−放出基質、これを含有する組成物及びこれを製造する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
発明の背景
［0002］一酸化窒素（ＮＯ）は、細胞生理学において多様で複雑な役割を果たす簡単な２原子分子である。ＮＯは、強力なシグナル伝達化合物であり、そして内皮細胞、神経細胞、及びマクロファージを含む、人体のほぼ全ての細胞組織に見られる細胞傷害性／細胞分裂抑制性の作用物質であることが知られている。ＮＯは最近、血圧、血管形成、及び血栓症、ならびに神経伝達、ガン、そして感染症の正常な生理的コントロールを含む種々の生体調整のプロセスに関与している。例えば、Ｍｏｎｃａｄａ，“Ｎｉｔｒｉｃ  Ｏｘｉｄｅ，”Ｊ．Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓ．Ｓｕｐｐｌ．１２（１０）：Ｓ３５−３９（１９９４）；  Ｍｏｎｃａｄａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｎｉｔｒｉｃ  Ｏｘｉｄｅ  ｆｒｏｍ  Ｌ−Ａｒｇｉｎｉｎｅ：Ａ  Ｂｉｏｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍ，”Ｅｘｃｅｐｔａ  Ｍｅｄｉｃａ，Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｏｎｇｒｅｓｓ  Ｓｅｒｉｅｓ  ８９７（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ  Ｂ．Ｖ．：Ａｍｓｔｅｒｄａｍ，  １９９０）；  Ｍａｒｌｅｔｔａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｕｎｒａｖｅｌｉｎｇ  ｔｈｅ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ  ｏｆ  Ｎｉｔｒｉｃ  Ｏｘｉｄｅ，”Ｂｉｏｆａｃｔｏｒｓ  ２：２１９−２２５（１９９０）；  Ｉｇｎａｒｒｏ，“Ｎｉｔｒｉｃ  Ｏｘｉｄｅ．Ａ  Ｎｏｖｅｌ  Ｓｉｇｎａｌ  Ｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎ  Ｍｅｃｈａｎｉｓｍ  ｆｏｒ  Ｔｒａｎｓｃｅｌｌａｒ  Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎ，”  Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ  １６：４７７−４８３（１９９０）；  Ｈａｒｉａｗａｌａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ  ａｎｄ  ｔｈｅ  Ｈｅａｒｔ：Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，”Ｊ．Ｒ．Ｓｏｃ．Ｍｅｄ．９０（６）：３０７−３１１（１９９７）；  Ｇｒａｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ａｎｄ  Ｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ  Ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ，”  Ｃｅｌｌ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．Ｒｅｓ．４０（２）：８１−８５（１９９４）；  Ｃｈｉｕｅｈ，“Ｎｅｕｒｏｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ  ｏｆ  Ｎｉｔｒｉｃ  Ｏｘｉｄｅ，”Ａｎｎ．Ｎ．Ｙ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．８９０：３０１−３１１（１９９１）；  Ｗｉｎｋ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｔｈｅ  Ｒｏｌｅ  ｏｆ  Ｎｉｔｒｉｃ  Ｏｘｉｄｅ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ，”Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（Ｍｏｓｃｏｗ）６３（７）：８０２−８０７（１９９８）；  Ｆａｎｇ，Ｆ．Ｃ．，“Ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅｓ  Ｓｅｒｉｅｓ：Ｈｏｓｔ／Ｐａｔｈｏｇｅｎ  Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ．Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ｏｆ  Ｎｉｔｒｉｃ  Ｏｘｉｄｅ−Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ａｃｔｉｖｉｔｙ，”Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．９９（１２）：２８１８−２５（１９９７）；及びＦａｎｇ，Ｆ．Ｃ．，“Ｎｉｔｒｉｃ  Ｏｘｉｄｅ  ａｎｄ  Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ，”（Ｋｌｕｗｅｒ  Ａｃａｄｅｍｉｃ／Ｐｌｅｎｕｍ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ：Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９９９）を参照。
【０００３】
［0003］グリセリルトリニトレート及びニトロプルシドナトリウムは、現在広範囲の臨床使用を享受する血管拡張薬の２つの例であって、その薬理作用はｉｎ  ｓｉｔｕにおけるＮＯ放出種への代謝転換から生じる。例えば、Ｉｇｎａｒｒｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｐｈａｒｍｏｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．２１８：７３９−７４９（１９８１）；  Ｉｇｎａｒｒｏ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｏｘｉｃｏｌ．３０：５３５−５６０（１９９０）；及びＫｒｕｓｚｙｎａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｈｅｍ．Ｒｅｓ．Ｔｏｘｉｃｏｌ．３：７１−７６（１９９０）を参照。また、自然発生的にＮＯを放出するか、又は親形態又はプロドラッグ形態の代謝転換の後にＮＯを放出する他の薬剤が文献に記載されている。例えば、Ｄｒａｇｏ，ＡＣＳ  Ａｄｖ．Ｃｈｅｍ．Ｓｅｒ．３６：１４３−１４９（１９６２）；  Ｌｏｎｇｈｉ  ａｎｄ  Ｄｒａｇｏ，Ｉｎｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．２：８５（１９６３）；  Ｓｃｈｏｎａｆｉｎｇｅｒ，“Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ  ＮＯ  ｐｒｏｄｒｕｇｓ，”Ｆａｒｍａｃｏ５４（５）：３１６−３２０（１９９９）；  Ｈｏｕ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｃｕｒｒｅｎｔ  ｔｒｅｎｄｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｎｉｔｒｉｃ  Ｏｘｉｄｅ  Ｄｏｎｏｒｓ，”Ｃｕｒｒ．Ｐｈａｒｍ．Ｄｅｓ．５（６）：４１７−４４１（１９９９）；  Ｍｕｓｃａｒａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｎｉｔｒｉｃ  Ｏｘｉｄｅ．Ｖ．Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  ｏｆ  Ｎｉｔｒｉｃ  Ｏｘｉｄｅ  Ｄｏｎｏｒｓ  ａｎｄ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ，”Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．２７６（６，Ｐｔ．１）：Ｇ１３１３−１３１６（１９９９）；  Ｍａｒａｇｏｓ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｃｏｍｐｌｅｘｅｓ  ｏｆ  ＮＯ  ｗｉｔｈ  Ｎｕｃｌｅｏｐｈｉｌｅｓ  ａｓ  Ａｇｅｎｔｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｒｅｌｅａｓｅ  ｏｆ  Ｎｉｔｒｉｃ  Ｏｘｉｄｅ．Ｖａｓｏｒｅｌａｘａｎｔ  Ｅｆｆｅｃｔｓ，”Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．３４：３２４２−３２４７（１９９１）；  Ｆｉｔｚｈｕｇｈ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｄｉａｚｅｎｉｕｍｄｉｏｌａｔｅｓ：ｐｒｏ−ａｎｄ  ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ  ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ｔｈｅ‘ＮＯＮＯａｔｅｓ，’”Ｆｒｅｅ  Ｒａｄｉｃ．Ｂｉｏｌ．Ｍｅｄ．２８（１０）：１４６３−１４６９（２０００）；  Ｓａａｖｅｄｒａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｄｉａｚｅｎｉｕｍｄｉｏｌａｔｅｓ（Ｆｏｒｍｅｒｌｙ  ＮＯＮＯａｔｅｓ）ｉｎ  Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ａｎｄ  Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，”Ｎｉｔｒｉｃ  Ｏｘｉｄｅ  ａｎｄ  ｔｈｅ  Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ  Ｓｙｓｔｅｍ（Ｈｕｍａｎａ  Ｐｒｅｓｓ：Ｔｏｔｏｗａ，Ｎｅｗ  Ｊｅｒｓｅｙ，２０００）；及びＹａｍａｍｏｔｏ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｎｉｔｒｉｃ  ｏｘｉｄｅ  ｄｏｎｏｒｓ，”Ｐｒｏ．Ｓｏｃ．Ｅｘｐ．Ｂｉｏｌ．Ｍｅｄ．２２５（３）：２００−２０６（２０００）を参照。
【０００４】
［0004］ＮＯ−供与体化合物は強力な腫瘍殺害効果及び細胞分裂抑制効果を与えることができる。このような効果は、特定の細胞系におけるミトコンドリア呼吸及びＤＮＡ合成を示すＮＯの能力に起因すると考えられる。これらのバイオ調節の特性に加えて、ＮＯは細胞移動を阻止できる。マクロファージも酵素的メカニズムによって高レベルの内在ＮＯ産生を維持できるため、これらの効果は、明らかにＮＯ−供与体化合物に限定されない。また、類似の抑制効果が他の細胞においても観察された。例えば、Ｈｉｂｂｓ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｎｉｔｒｉｃ  Ｏｘｉｄｅ：Ａ  Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ  Ａｃｔｉｖａｔｅｄ  Ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ  Ｅｆｆｅｃｔｏｒ  Ｍｏｌｅｃｕｌｅ，”Ｂｉｏｃｈｅｍ．ａｎｄ  Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍ．１５７：８７−９４（１９８８）；  Ｓｔｕｅｈｒ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｎｉｔｒｉｃ  Ｏｘｉｄｅ．Ａ  Ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ  Ｐｒｏｄｕｃｔ  Ｒｅｓｐｏｎｓｉｂｌｅ  ｆｏｒ  Ｃｙｔｏｓｔａｓｉｓ  ａｎｄ  Ｒｅｓｐｏｎｓｉｂｌｅ  ｆｏｒ  Ｃｙｔｏｓｔａｓｉｓ  ａｎｄ  Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ  Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｉｎ  Ｔｕｍｏｒ  Ｔａｒｇｅｔ  Ｃｅｌｌｓ，”Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１６９：１５４３−１５５５（１９８９）；  Ｚｉｎｇａｒｅｌｌｉ，  ｅｔ  ａｌ．，“Ｏｘｉｄａｔｉｏｎ，Ｔｙｒｏｓｉｎｅ  Ｎｉｔｒａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｃｙｔｏｓｔａｓｉｓ  Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ａｂｓｅｎｃｅ  ｏｆ  Ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ  Ｎｉｔｒｉｃ  Ｏｘｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈａｓｅ，”Ｉｎｔ．Ｊ．Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．１（５）：７８７−７９５（１９９８）；  Ｙａｍａｓｈｉｔａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｎｉｔｒｉｃ  Ｏｘｉｄｅ  ｉｓ  ａｎ  Ｅｆｆｅｃｔｏｒ  Ｍｏｌｅｃｕｌｅ  ｉｎ  Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｔｕｍｏｒ  Ｃｅｌｌ  Ｇｒｏｗｔｈ  ｂｙ  ｒＩＦＮ−ｇａｍｍａ−ａｃｔｉｖａｔｅｄ  Ｒａｔ  Ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌｓ，”Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ７１（２）：２２３−２３０（１９９７）；  Ｇａｒｇ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｎｉｔｒｉｃ  ｏｘｉｄｅ−Ｇｅｎｅｒａｔｉｎｇ  Ｖａｓｏｄｉｌａｔｏｒｓ  Ｉｎｈｉｂｉｔ  Ｍｉｔｏｇｅｎｅｓｉｓ  ａｎｄ  Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  ＢＡＬＢ／Ｃ３Ｔ３  Ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ  ｂｙ  ａ  Ｃｙｃｌｉｃ  ＧＭＰ−Ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ，”Ｂｉｏｃｈｅｍ．ａｎｄ  Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍ．１７１：４７４−４７９（１９９０）；及びＳａｒｋａｒ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｎｉｔｒｉｃ  Ｏｘｉｄｅ  Ｒｅｖｅｒｓｉｂｌｙ  Ｉｎｈｉｂｉｔｓ  ｔｈｅ  Ｍｉｇｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｃｕｌｔｕｒｅｄ  Ｖａｓｃｕｌａｒ  Ｓｍｏｏｔｈ  Ｍｕｓｃｌｅ  Ｃｅｌｌｓ，”Ｃｉｒｃ．Ｒｅｓ．７８（２）：２２５−３０（１９９６）を参照。
【０００５】
［0005］薬物探査は、特に、血管外科及びインベーション心臓学の分野において、ＮＯ−放出化合物／物質のための多くの可能な治療適用法を急速に発見しつつある。例えば、脂肪堆積物が、動脈壁にプラークとして積層されるかもしれない。時間の経過とともに、追加物質が添加されるにつれて、プラークが厚くなり、動脈硬化として知られる過程で管内腔の断面積を劇的に狭くなる。心筋への血流が弱まり、一時的な胸痛から軽度の疲れの範囲の症状に至る。このような症状の減少や血流を改善する努力においては、この状態の患者は、冠状動脈バイパス移植（ＣＡＢＧ）として知られる手法を受けることを選択することができる。典型的なＣＡＢＧ手法においては、静脈の一部を脚から取り出す。次いで、静脈の断片をプラークを誘導している狭くなっている冠状静脈の部位にバイパスするために使用する。ＣＡＢＧは、主に外科的手法を必要とし、ここで、患者の胸部は手術を促進するために開かれ、結果として、かなりの罹患率及び死亡率のリスクを有する。しかし、最大に狭まっている部位を移植した静脈でバイパスすることは、この状態に共通である胸痛と疲労を実質的に和らげ、一方、急性の動脈封鎖のリスクを減少する。プラークによって狭くなった冠状動脈を治療するための、侵襲性が少なく、増加する共通の手法は、いわゆる経皮的冠動脈形成術（ＰＴＣＡ）（バルーン血管形成術としても知られる）である。ＰＴＣＡでは、カテーテルを患者の大腿静脈に挿入し、冠状脈管閉塞の部位に達するまで循環系を介して通す。その部位に達した後、脈管壁に対してプラークを圧縮するようにカテーテルの先端にあるバルーンを膨らませる。その後、バルーンを萎ませ、カテーテルを取り出す。ＰＴＣＡは、脈管内腔の断面をこの手法によって実質的に増大させるので、冠状血量を劇的に改善する結果となる。しかし、この手法の共通の合併症は、ＰＴＣＡ治療の部位での血栓形成、過剰な拡張による脈管の破裂、又はバルーンの収縮後の即座の管の完全な崩壊を含む。これらの合併症は、心筋に対する結果として生じる損傷により、血量における重大な変化を導く可能性がある。
【０００６】
［0006］ＰＴＣＡ治療に関連する多くの問題を制限するために、心臓病学者は、ステントとして知られる小さな管状装置をしばしば挿入するであろう。そのステントは、バルーンを先端に有するカテーテルの収縮と動脈からの除去に続く管の開通を維持するために、永久的な骨格として仕える。ステントは永久的な移植であるため、その挿入は、ＰＴＣＡ損傷の部位の脈管壁を再狭窄として知られる複合的な多因子過程における応答することを引き起こすことが可能である。この過程は、栓球（血小板）が損傷部位に移動し、損傷した内皮にマイトジェンを放出するときに開始される。凝固形成又は血液凝固は、活性化した血小板やフィブリンが脈管壁上の圧搾したプラークに集積し付着し始めるように発生する。マイトジェン分泌はまた、損傷部位の下側の脈管平滑筋細胞の層（ネオインティマ（ｎｅｏｉｎｔｉｍａ））を過剰増殖させ、損傷した脈管壁がかなりの厚さになる。ＰＴＣＡ治療の６ヶ月以内で、患者のおおよそ３０−５０％が重大又は合併した管の再閉塞を示すであろう。
【０００７】
［0007］最近、一酸化窒素は、血小板やフィブリン集積／付着、及び平滑筋細胞の過形成を劇的に減少させ、内皮細胞の増殖を促進することが示されている（Ｃｈａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  Ｃｅｌｌｓ  ａｎｄ  Ｍｏｎｏｎｕｃｌｅａｒ  Ｌｅｕｋｏｃｙｔｅｓ  ｏｎ  Ｐｌａｔｅｌｅｔ  Ａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎ，”Ｈａｅｍａｔｏｌｏｇｉａ（Ｂｕｄａｐ）３０（２）：９７−１０６（２０００）；  Ｌｏｗｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｔｈｅ  Ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  Ｎｉｔｒｉｃ  Ｏｘｉｄｅ  ｏｎ  Ｐｌａｔｅｌｅｔｓ  Ｗｈｅｎ  Ｄｅｌｉｖｅｒｅｄ  ｔｏ  ｔｈｅ  Ｃａｒｄｉｏｐｕｌｍｏｎａｒｙ  Ｂｙｐａｓｓ  Ｃｉｒｃｕｉｔ，”Ａｎｅｓｔ．Ａｎａｌｇ．８９（６）：１３６０−１３６５（１９９９）；  Ｒｉｄｄｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｎｉｔｒｉｃ  Ｏｘｉｄｅ  ａｎｄ  Ｐｌｔｅｌｅｔ  Ａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎ，”Ｖｉｔａｍ．Ｈｏｒｍ．５７：２５−４８（１９９９）；  Ｇｒｉｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｉｎｈａｌｅｄ  Ｎｉｔｒｉｃ  Ｏｘｉｄｅ  Ｉｎｈｉｂｉｔｓ  Ｈｕｍａｎ  Ｐｌａｔｅｌｅｔ  Ａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎ，Ｐ−ｓｅｌｅｃｔｉｎ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ，ａｎｄ  Ｆｉｂｒｉｎｏｇｅｎ  Ｂｉｎｄｉｎｇ  Ｉｎ  Ｖｉｔｒｏ  ａｎｄ  Ｉｎ  Ｖｉｖｏ，”Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ  ９７（１５）：１４８１−１４８７（１９９８）；ａｎｄ  Ｌｕｓｃｈｅｒ，“Ｔｈｒｏｍｂｏｃｙｔｅ−ｖａｓｃｕｌａｒ  Ｗａｌｌ  Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｃｏｒｏｎａｒｙ  Ｈｅａｒｔ  Ｄｉｓｅａｓｅ，”Ｓｃｗｅｉｚ  ‘Ｍｅｄ．Ｗｏｃｈｅｎｓｃｈｒ’１２１（５１−５２）：１９１３−１９２２（１９９１）。ＮＯは、冠状内のステントの配備に関連する再狭窄の影響のための可能な治療として研究者による開発下でのいくつかの「薬物」の１つである。しかし、修復できない脈管の損傷に導く事象のカスケードがステントの配備の数秒から数分以内で発生し得るため、いかなる抗−再狭窄の「薬物」治療もステントの移植の代わりに利用することが本質的である。また、凝固形成や再狭窄のリスクは内皮細胞の内層が損傷部位で復原するまで持続するため、そのような治療は、その後しばらく継続することを要するかもしれないということは広く考えられている。
【０００８】
［0008］理論的には、そのような合併症を治療するための１つのアプローチは、ＰＴＣＡ−損傷部位に治療レベルのＮＯを予防的に提供することを含む。これは、ＮＯの内因的な生産を刺激し、又は外因のＮＯ供給源を用いることによって達成することができる。内因のＮＯ放出を制御する方法は、Ｌ−アルギニンのような過剰のＮＯ代謝前駆体を用いる酵素経路の活性、及び／又は遺伝子治療を用いる一酸化窒素シンターゼ（ＮＯＳ）の局所発現を増加することに主に焦点が当てられる。米国特許第５，９４５，４５２号、第５，８９１，４５９号、及び第５，４２８，０７０号は、経口投与したＬ−アルギニン及び／又はＬ−リジンを用いる持続的なＮＯ上昇を記載し、一方、米国特許第５，２６８，４６５号、第５，４６８，６３０号、及び５，６５８，５６５号は、様々な遺伝子治療アプローチを記載する。他の様々な遺伝子治療アプローチは、文献に記載されている。例えば、Ｓｍｉｔｈ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒａｐｙ  ｆｏｒ  Ｒｅｓｔｅｎｏｓｉｓ，”Ｃｕｒｒ．Ｃａｒｄｉｏｌ．Ｒｅｐ．２（１）：１３−２３（２０００）；  Ａｌｅｘａｎｄｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｇｅｎｅ  Ｔｒａｎｓｆｅｒ  ｏｆ  Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  Ｎｉｔｒｉｃ  Ｏｘｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈａｓｅ  ｂｕｔ  ｎｏｔ  Ｃｕ／Ｚｎ  Ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ  Ｄｉｓｍｕｔａｓｅ  ｒｅｓｔｏｒｅｓ  Ｎｉｔｒｉｃ  Ｏｘｉｄｅ  Ａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ  ｉｎ  ｔｈｅ  ＳＨＲＳＰ，”Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ．Ｒｅｓ．４８（３）：６０９−６１７（２０００）；  Ｃｈａｎｎｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｎｉｔｒｉｃ  Ｏｘｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅａｓｅ  ｉｎ  Ａｔｈｅｒｏｓｌｅｒｏｓｉｓ  ａｎｄ  Ｖａｓｃｕｌａｒ  Ｉｎｊｕｒｙ：  Ｉｎｓｉｇｈｔｓ  ｆｒｏｍ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒａｐｙ，”Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒ．Ｔｈｒｏｍｂ．Ｖａｓｃ．Ｂｉｏｌ．２０（８）：１８７３−１８８１（２０００）；  Ｔａｎｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｎｉｔｏｒｉｃ  Ｏｘｉｄｅ  Ｍｏｄｕｌａｔｅｓ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  Ｃｅｌｌ  Ｃｙｃｌｅ  Ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ：Ａ  Ｃｙｔｏｓｔａｔｉｃ  Ｓｔｒａｔｅｇｙ  ｆｏｒ  Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｈｕｍａｎ  Ｖａｓｃｕｌａｒ  Ｓｍｏｏｔｈ  Ｍｕｓｃｌｅ  Ｃｅｌｌ  Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ，”Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ  １０１（１６）：１９８２−１９８９（２０００）；  Ｋｉｂｂｅ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｎｉｔｒｉｃ  Ｏｘｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈａｓｅ  Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒａｐｙ  ｉｎ  Ｖａｓｃｕｌａｒ  Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ，”Ｓｅｍｉｎ．Ｐｅｒｉｎａｔｏｌ．２４（１）：５１−５４（２０００）；  Ｋｉｂｂｅ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ  Ｎｉｔｒｉｃ  Ｏｘｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈａｓｅ  ａｎｄ  Ｖａｓｃｕｌａｒ  Ｉｎｊｕｒｙ，”Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ．Ｒｅｓ．４３（３）：６５２−６５７（１９９９）；  Ｋｉｂｂｅ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｎｉｔｒｉｃ  Ｏｘｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈａｓｅ  Ｇｅｎｅ  Ｔｒａｎｓｆｅｒ  ｔｏ  ｔｈｅ  Ｖｅｓｓｅｌ  Ｗａｌｌ，”Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｎｅｐｈｒｏｌ．Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓ．８（１）：７５−８１（１９９９）；  Ｖａｓｓａｌｌｉ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｇｅｎｅ  Ｔｈ���ｒａｐｙ  ｆｏｒ  Ａｒｔｅｒｉａｌ  Ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ，”Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ．Ｒｅｓ．３５（３）：４５９−４６９（１９９７）；ａｎｄ  Ｙ１ａ−Ｈｅｒｔｔｕａｌａ，“Ｖａｓｃｕｌａｒ  Ｇｅｎｅ  Ｔｒａｎｓｆｅｒ，”Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｌｉｐｉｄｏｌ．８（２）：７２−７６（１９９７）を参照。しかし、これらの方法は、再狭窄を予防することにおいて臨床効果が立証されていない。同様に、ＮＯＳベクターのような遺伝子治療技術を用いる内因的に発現したＮＯを制御することは、非常に実験的な状態である。また、部位特異的なＮＯＳ遺伝子輸送が実施可能な治療様式となる前に、克服しなければならない重大な技術的ハードルや安全性の懸念が残されている。
【０００９】
［0009］ガス状の一酸化窒素の外因の投与は、非常に毒性があり、短命であり、及び生理緩衝液では相対的に不溶性の性質のため適さない。結果として、ガス状のＮＯの臨床使用は、永続的な肺高血圧症のような状態の新生児の治療に非常に限定される（Ｗｅｉｎｂｅｒｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｔｈｅ  Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ  ｏｆ  Ｉｎｈａｌｅｄ  Ｎｉｔｒｉｃ  Ｏｘｉｄｅ，”Ｔｏｘｉｃｏｌ．Ｓｃｉ．５９（１），５−１６（２００１）；  Ｋｉｎｓｅｌｌａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｉｎｈａｌｅｄ  Ｎｉｔｒｉｃ  Ｏｘｉｄｅ：  Ｃｕｒｒｅｎｔ  ａｎｄ  Ｆｕｔｕｒｅ  Ｕｓｅｓ  ｉｎ  Ｎｅｏｎａｔｅｓ，”Ｓｅｍｉｎ．Ｐｅｒｉｎａｔｏｌ．２４（６），３８７−３９５（２０００）；ａｎｄ  Ｍａｒｋｅｗｉｔｚ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｉｎｈａｌｅｄ  Ｎｉｔｒｉｃ  Ｏｘｉｄｅ  ｉｎ  Ａｄｕｌｔｓ  ｗｉｔｈ  ｔｈｅ  Ａｃｕｔｅ  Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ  Ｄｉｓｔｒｅｓｓ  Ｓｙｎｄｒｏｍｅ，”Ｒｅｓｐｉｒ．Ｍｅｄ．９４（１１），１０２３−１０２８（２０００））。しかし、その他、ニトログリセリンのようなプロドラッグを用いる外因の性ＮＯの全身投与は、狭心症の医療管理、又はアテローム動脈硬化的な狭まった冠状動脈に関連する「胸痛」において、長期に享有される広範な用途を有する。ニトログリセリンのような試薬の使用という問題はある。ニトログリセリンは、ＮＯを放出するために様々な酵素や補助因子を要求するため、短い間隔でのこの試薬の繰り返しの使用は、治療の恩恵を減退させることになる。この現象は、いわゆる薬物寛容であり、ニトログリセリンをＮＯ放出物に効率的に返還するための血中に必要とされる酵素／補助因子の近い又は完全な消耗に起因する。対象的に、非常に多量のニトログリセリンを初期に患者に与えた場合、厳しい低血圧やフリーラジカルによる細胞損傷を含む悲惨な副作用を有し得る。
【００１０】
［0010］ＮＯの全身輸送と関連する問題のため、ＰＴＣＡ−脈管損傷の部位に直接、長期に渡ってＮＯ又はその他の抗再狭窄試薬を直接放出することが可能な試薬／物質を同定するという方向に最近シフトしつつある。結果として、血液面に接触した瞬間からステントを冠状動脈内に配置した後の数日又は数週間まで、ＮＯを継続して放出することができる材料で構成され、又は被覆されたステントに実質的な必要性が存在する。そのような装置は、冠状動脈内へのステントの移植をしばしば伴う再狭窄の治療の理想的な手法を潜在的に表す。詳細な技術文献は、金属性のステント及びその他の医療装置のためのＮＯ放出被覆剤の開発にアプローチしている、米国特許第６，０８７，４７９号、及び第５，６５０，４４７号、米国特許出願第２００１／０００００３９号、及びＰＣＴ国際公開ＷＯ００／０２５０１号を参照。
【００１１】
［0011］ジアゼニウムジオレート（ｄｉａｚｅｎｉｕｍｄｉｏｌａｔｅ）は、様々な種類のＮＯ放出化合物／材料を含み、治療薬として有用である十分な安定性を提示するものとして知られる。１００年以上も前にＴｒａｕｂｅら（Ｌｉｅｂｉｇｓ  Ａｎｎ．Ｃｈｅｍ．３００：８１−１２８（１８９８）によって発見されたが、ジアゼニウムジオレートの化学及び特性は、Ｋｅｅｆｅｒ及び共同研究者によって広範囲に再調査され、米国特許第４，９５４，５２６号、第５，０３９，７０５号、第５，１５５，１３７号、第５，２１２，２０４号、第５，２５０，５５０号、第５，３６６，９９７号、第５，４０５，９１９号、第５，５２５，３５７号、及び第５，６５０，４４７号、及びＪ．Ａ．Ｈｒａｂｉｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．５８：１４７２−１４７６（１９９３）に記載され、本明細書に参照により援用される。
【００１２】
［0012］多くのＮＯ−放出ジアゼニウムジオレートはアミンから製造されているため、ＰＴＣＡに関連した再狭窄を治療するための１つの可能なアプローチは、安定にジアゼニウムジオレート化したアミンを官能化したポリマー材料で装置を被覆することである。例えば、米国特許第５，４０５，９１９号には、いくつかの生物学的に受容されるアミン−機能性ポリオレフィン誘導ポリマーが記載される。しかし、ポリオレフィンに基づく被覆に関連する多くの問題がある。被覆がステントの拡張のような処理の間にストレスが与えられ、破壊しやすくなる。そのような破壊が起こったとすれば、過度に伸びている脈管の内腔に被覆からの粒子状の断片を放出させることになり、最終的には、非常に狭まっている細動脈や毛細血管へと下流に運ばれ、影響された動脈によって供給される心筋のその部分への血流が損なわれる。加えて、ポリオレフィンを基礎とし、被覆した医療装置は、バイオフィルムや装置に関連する感染の発症をよりし易くする傾向にある。これらの問題は、ポリオレフィンを基礎とした材料が、永続的なｉｎ  ｓｉｔｕの移植を所望される使用に適切でないかもしれないことを示唆する。対象的に、金属性医療装置は、多くのポリオレフィンを基礎とした材料に優れたバイオ−及び血液適合性特性を提示することが繰り返し示されている。Ｐａｌｍａｚ，“Ｒｅｖｉｅｗ  ｏｆ  Ｐｏｌｙｍｅｒｉｃ  Ｇｒａｆｔ  Ｍａｔｅｒｉａｌｓ  ｆｏｒ  Ｅｎｄｏｖａｓｃｕｌａｒ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，”Ｊ．Ｖａｓｃ．Ｉｎｔｅｒｖ．Ｒａｄｉｏｌ．９（１  Ｐｔ．１）：７−１３（１９９８）；  Ｔｅｐｅ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｃｏｖｅｒｅｄ  Ｓｔｅｎｔｓ  ｆｏｒ  Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｒｅｓｔｅｎｏｓｉｓ．Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ａｎｄ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｒｅｓｕｌｔｓ  ｗｉｔｈ  Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ  Ｓｔｅｎｔ  Ｄｅｓｉｇｎｓ，”Ｉｎｖｅｓｔ．Ｒａｄｉｏｌ．３１（４）：２２３−２２９（１９９６）；  Ｆａｒｅｅｄ，“Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｔｒｅｎｄｓ  ｉｎ  Ａｎｔｉｔｈｒｏｍｂｏｔｉｃ  Ｄｒｕｇ  ａｎｄ  Ｄｅｖｉｃｅ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，”Ｓｅｍｉｎ．Ｔｈｒｏｍｂ．Ｈｅｍｏｓｔ．２２（Ｓｕｐｐｌ．１）：３−８（１９９６）；  Ｂｏｌｚ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｃｏａｔｉｎｇ  ｏｆ  Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ  Ｓｔｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ａ  Ｓｅｍｉｃｏｎｄｕｃｔｏｒ  ｔｏ  Ｉｍｐｒｏｖｅ  Ｔｈｅｉｒ  Ｈｅｍｏｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙ，”Ｔｅｘ．Ｈｅａｒｔ  Ｉｎｓｔ．Ｊ．２３（２）：１６２−１６６（１９９６）；  Ｄｅ  Ｓｃｈｅｅｒｄｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｂｉｏｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙ  ｏｆ  Ｐｏｌｙｍｅｒ−Ｃｏａｔｅｄ  Ｏｖｅｒｓｉｚｅｄ  Ｍｅｔａｌｌｉｃ  Ｓｔｅｎｔｓ  Ｉｍｐｌａｎｔｅｄ  ｉｎ  Ｎｏｒｍａｌ  Ｐｏｒｃｉｎｅ  Ｃｏｒｏｎａｒｙ  Ａｒｔｅｒｉｅｓ，”Ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ  １１４（１）：１０５−１１４（１９９５）；ａｎｄ  Ｌｉｂｂｙ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｕｌｔｒａｓｍｏｏｔｈ  Ｐｌａｓｔｉｃ  ｔｏ  Ｐｒｅｖｅｎｔ  Ｓｔｅｎｔ  Ｃｏｌｏｇｇｉｎｇ，”Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔ．Ｅｎｄｏｓｃ．４０（３）：３８６−３８７（１９９４）を参照。ごく最近、生体及び血液適合性におけるかなりの劇的な改良はまた、特定のポリマー材料（例えば、シリコン、ハイドロゲル、ヘパリン−、アルブミン−、ホスホリルコリン−機能性ポリマー等）で被覆した医療装置において観察されている。Ｍａｌｉｋ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌｃｈｏｌｉｎｅ−Ｃｏａｔｅｄ  Ｓｔｅｎｔｓ  ｉｎ  Ｐｏｒｃｉｎｅ  Ｃｏｒｏｎａｒｙ  Ａｒｔｅｒｉｅｓ．Ｉｎ  Ｖｉｖｏ  Ａｓｓｅｎｓｓｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｂｉｏｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙ，”Ｊ．Ｉｎｖａｓｉｖｅ  Ｃａｒｄｉｏｌ．１３（３）：１９３−２０１（２００１）；  Ｔｓａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｓｉｌｉｃｏｎ−Ｃｏｖｅｒｅｄ  Ｍｅｔａｌ  Ｓｔｅｎｔｓ：Ａｎ  Ｉｎ  Ｖｉｔｒｏ  Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  Ｂｉｏｆｉｌｍ  Ｆｏｒｍａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｐａｔｅｎｃｙ，”Ｄｉｇ．Ｄｉｓ．Ｓｃｉ．４４（９）：１７８−１７８５（１９９９）；  Ｋｕｉｐｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌｃｈｏｌｉｎｅ−ｃｏａｔｅｄ  Ｍｅｔａｌｌｉｃ  Ｓｔｅｎｔｓ  ｉｎ  Ｒａｂｂｉｔ  Ｉｌｌｉａｃ  ａｎｄ  Ｐｏｒｃｉｎｅ  Ｃｏｒｏｎａｒｙ  Ａｒｔｅｒｉｅｓ，”Ｓｃａｎｄ．Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ．Ｊ．３２（５）：２６１−２６８（１９９８）；ａｎｄ  ＭｃＮａｉｒ，“Ｕｓｉｎｇ  Ｈｙｄｒｏｇｅｌ  Ｐｏｌｙｍｅｒｓ  ｆｏｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ，”Ｍｅｄ．Ｄｅｖｉｃｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌ．７（１０）：１６−２２（１９９６）を参照。
【００１３】
［0013］医療装置を被覆するために使用される材料のタイプ以外は、ＮＯを正確に投与する方法は、これまで開発されているいずれかのＮＯ−放出ジアゼニウムジオレート化した化合物／材料でまだ実施されていない。例えば、水又は生理学的な分泌液のような水素イオン（即ち、プロトン）供与体に晒す場合、シールドされておらず、保護されていない［（ＮＯ）ＮＯ］-基を有する大部分のジアゼニウムジオレートは、ＮＯの「破裂」を生むために急速に分解される。ＮＯのこの初期のサージ（ｓｕｒｇｅ）又は破裂は、材料のＮＯ全含有量が枯渇するまで、一様であるが減少する放出速度で典型的に続く。大部分のジアゼニウムヂオレート化合物については、そのような進行は、初期のＮＯ破裂の数分から数時間以内に完成する。
【００１４】
［0014］したがって、様々な医療用適応症の治療における使用に適したＮＯ−放出医療装置にとって必要性が残され、人体や内部器官、血管、組織及び細胞を含む動物体に適合可能である。望ましくは、そのような装置は、数日から数週間又はそれ以上永続する期間、ＮＯの持続的な放出が可能である。本明細書に記載される本発明は、そのような被覆した医療装置の調製を提供する。本発明のこれらの及びその他の利点は、追加の進歩的な特徴と共に、下記に適用される発明の記載から明白となろう。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１５】
発明の概要
［0015］本発明は一酸化窒素−放出基質を調製する方法を提供する。特に、この方法は、アミン−機能性シラン残基を基質と接触させ、このアミン−機能性シラン残基を架橋剤と接触させ、そして少なくても１つの一酸化窒素−放出官能基を前記架橋したアミン−機能性シラン残基と接触させる、工程を含む。
【００１６】
［0016］本発明は一酸化窒素−放出基質を調製する別の方法を提供し、この方法は、アミン−機能性シラン残基を基質と接触させ、前記アミン−機能性シラン残基を架橋剤と接触させ、そして少なくても１つの一酸化窒素−放出求核残基を前記架橋したアミン−機能性シラン残基と接触させる、工程を含む。一酸化窒素ガスは前記基質上で前記求核残基と接触して、前記基質上に一酸化窒素−放出官能基を形成する。
【００１７】
［0017］この方法は前記基質の表面を変化させてこの表面に所望の一酸化窒素−放出能力を与えるために使用できることを、上述の方法のそれぞれにおいて理解できるであろう。
【００１８】
［0018］本発明は、更に一酸化窒素を治療量で調製するための医療装置を提供する。特に、本発明の医療装置は、例えば、金属表面のようなアミン−機能性シラン残基が結合できる基質とアミン−機能性の架橋したシラン中間体に結合するＮＯ−放出求核剤によって前記基質に結合した一酸化窒素を包含する。
【００１９】
［0019］用語の「医療装置」は、使用又は手術を通じて組織、血液、又は他の体液に接触する表面を有する装置、製品、用具又は物質を示し、これらの体液は患者又は動物の体内で見られるか、又は後に体内で使用される。医療装置としては、例えば、血液酸素付加装置、血液ポンプ、血液保存用バッグ、血液採取管、ろ過媒体を含む血液フィルター、血液に接触して患者又は動物に戻る血液等を運ぶために使用される管、のような外科で使用するための体外装置がある。また、医療装置としては、ステント、ペースメーカー、ペースメーカー導線、心臓弁、パルス発生器、心臓細動除去器、電気的細動除去器、せき髄刺激装置、脳及び神経刺激装置、導入器、化学センサー、等があり、これらは血管又は心臓に埋め込まれる。また、医療装置としては、カテーテル、ガイドワイヤー、羊水穿刺及び生検針、カニューレ、排液管、シャント、センサー、トランスジューサー、プローブ等のような一時的に血管内で使用する装置があり、これらは、監視、治療又は処置のために、血管、心臓、器官又は組織内に設置される。また、医療装置としては、腰又は膝の人工器官及び人工心臓がある。更に、医療装置としては、インプラント、鏡（ｓｐｅｃｕｌａ）、イリガートル、ノズル、パス、ピンセット、レトラクター、代用血管、個人衛生用品、吸収性縫合糸、創傷包帯等がある。
【課題を解決するための手段】
【００２０】
発明の詳細な説明
［0020］本発明は、使用時には一酸化窒素を放出できるが、そうでない場合には一酸化窒素の放出に不活性な医療装置を提供する。特に、ＮＯ−放出官能基はアミン−機能性シラン残基、特にポリシロキサン残基を被覆された基質に結合する。あるいは、求核残基が前記基質に結合し、続いて一酸化窒素でジアゼニウムジオレーション（diazeniumdiolation）を実施される。この求核残基は前記基質の一部を形成してもよく、あるいは前記基質に共有的に連結した分子及び／又はポリマーに取付けられた側基として存在する。本明細書で使用される場合、用語の「結合」は、共有結合、イオン結合、ファンデルワールス力、水素結合、静電結合、及び一酸化窒素を基質に結合させるための他の方法を包含する。
【００２１】
［0021］本明細書で使用する場合、用語の「ジアゼニウムジオレーション」は、求核残基をＮＯガスと接触させて［Ｎ（Ｏ）ＮＯ］サブユニットを含有する一酸化窒素−放出求核残基複合体を生成する方法を示す。ＮＯとアミン−機能性ポリシランとの反応は、この技術分野で公知のいかなる方法でも生じるであろう。ジアゼニウムジオレーションは、ＮＯガスに適切に晒すことによって生じるか、又は被覆された基質を有機溶媒中に浸漬し、次いでこの溶液をＮＯに晒すことによって生じるであろう。代表的な有機溶媒としては、例えば、アセトニトリル、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサン又はその混合物がある。この溶媒系において、ＮＯガスは被覆された基質を含有する溶媒中に吹き込まれるか、又は公知の典型的な装置及び方法を用いて穏やかな又は高い圧力で添加されてもよい。更に、少なくても１つの一酸化窒素−放出ジアゼニウムジオレート基を生成できる限り、どのような温度も使用可能である。
【００２２】
［0022］本発明の一つの好ましい態様は一酸化窒素−放出基質を調製する方法を提供する。具体的には、この方法は、（ａ）前記アミン−機能性シラン残基を基質と接触させ、（ｂ）前記アミン−機能性シラン残基を架橋剤と接触させ、そして（ｃ）少なくても１つの一酸化窒素−放出官能基を前記架橋したアミン−機能性シラン残基と接触させる、工程を含む。
【００２３】
［0023］基質はシランと反応できるどのような物質であってもよい。基質は、シート、繊維、管、織物、アモルファス固体、凝集体、粉塵、等を含むどのような形状であってもよい。基質の材料の例としては、金属、ガラス、セラミック、プラスチック、ゴム、天然繊維材料、合成繊維材料、又はその全ての組み合わせがある。天然材料としては、綿、絹、リネン、大麻、羊毛、等がある。より好ましくは、基質は金属、セラミック、プラスチック又はゴムの基質である。最も好ましくは、基質は金属である。好ましくは、基質は生体適合性の物質を含む。
【００２４】
［0024］典型的な金属基質は、ステンレス鋼、ニッケル、チタニウム、鉄、タンタル、アルミニウム、銅、金、銀、プラチナ、亜鉛、シリコン、マグネシウム、スズ、合金、上記のいくつかを含む被覆、及び上記のいくつかの組み合わせを含む。また、亜鉛メッキ鋼、融解メッキした亜鉛メッキ鋼、電気亜鉛メッキ鋼、アニール化融解メッキした亜鉛メッキ鋼等のような金属基質も含まれる。好ましくは、金属基質は、ステンレス鋼である。
【００２５】
［0025］典型的なガラス基質は、ソーダ石灰ガラス、ストロンチウムガラス、ホウケイ酸ガラス、バリウムガラス、ランタンを含有するガラスセラミックス、及びそれらの組み合わせを含む。
【００２６】
［0026］典型的なセラミック基質は、窒化ホウ素、窒化ケイ素、アルミナ、シリカ、及びそれらの組み合わせを含む。
［0027］典型的なプラスチック基質及び合成繊維材料は、アクリル樹脂、アクリロニトリル−ブタジエン−スチレン、アセタール樹脂、ポリフェニレンオキシド樹脂、ポリイミド樹脂、ポリスチレン、ポリプロピレン、ポリエチレン、ポリテトラフルオロエチレン、ポリビニリデン、ポリエチレンイミン、ポリエステル樹脂、ポリエーテル樹脂、ポリラクトン樹脂、ポリウレタン樹脂、ポリカルボネート樹脂、ポリエチレンテレフタレート、並びにそれらのコポリマー及びそれらの組み合わせを含む。
【００２７】
［0028］典型的なゴム基質は、シリコン、フルオロシリコン、ニトリルゴム、シリコンゴム、フルオロシリコンゴム、ポリイソプレンゴム、硫黄硬化ゴム、イソプレン−アクリロノトリルゴム、及びそれらの組み合わせを含む。シリコン、フルオロシリコン、ポリウレタン、ポリカーボネート、ポリアクトン、及びそれらの混合物又はコポリマーは、好ましくはプラスチック又はゴムであり、組織、血液、血液成分、又は体液に直接的に接触する場合にそれらの証明された生体及び血液適合性のためである。
【００２８】
［0029］典型的な天然の繊維材料は、綿、リネン、絹、大麻、羊毛、及びそれらの組み合わせを含む。
［0030］その他の典型的な基質は、ＷＯ００／６３４６２に記載される基質を含み、参照により本明細書に援用され、並びに上述した基質の組み合わせを含む。
【００２９】
［0031］好ましくは、基質は、シラン試薬と反応させるために、当該技術分野において周知の方法に従って洗浄される。本発明の一酸化窒素放出被覆基質を製造するために、基質（例えば、ステンレス鋼）をアミン−機能性シラン化合物又はそのオリゴマーを含有する組成物に接触させる。
【００３０】
［0032］アミン−機能性シラン化合物は、好ましくは、基質に接触させる前に加水分解する。より好ましくは、アミン−機能性シラン化合物を加水分解試薬を含む組成物中で溶解する。加水分解試薬は、シランを加水分解し、モノ−及びオリゴマーシランを形成する。したがって、好都合には、１以上のシランを加水分解試薬、例えば水、又はオリゴマー形成が有力な試薬となるようにその加水分解を促進するために少なくとも一モル当量の水を含有する加水分解試薬を含む溶媒に溶解する。この形質転換の好ましい溶媒は、当該技術分野において既知のもの、例えば、水と容易に混和できるメタノール、エタノール、イソプロパノール、テトラヒドロフラン、アセトニトリル等を含む。しかし、場合により、アミン−機能性シラン化合物は、少なくとも一モル当量の水を含有するシリコンゲルに混合し、基質に適用することができる。
【００３１】
［0033］アミン−機能性シラン組成物又は溶液は、例えば、浸漬、スプレイ、ブラッシング、吸収（ｉｍｂｉｂｉｎｇ）、及びローリングを含む当該技術分野において既知の方法を用いて基質を接触させる。いかなる特別な理論に結びつけたくないならば、アミン−機能性オリゴマーシラン組成物を基質で被覆した後、基質の表面上の官能基（例えば、ヒドロキシル）をシラン誘導体に接触し、シランと基質との間に共有結合を形成することは信じられる。好ましくは、シラン被覆基質は硬化する。硬化は、いずれかの温度、圧力、又は不活性ガス／ガス混合物の有無、水分の有無、又は外部のエネルギー源、例えば、熱若しくはその他の放射、例えばガンマー放射、又は機械的エネルギー、例えば音エネルギーで生じることができ、ただし、この工程中に形成したアミン−機能性ポリシラン層が損傷されない、即ち、更なる被覆サイクル及び／又はＮＯによるジアゼニウムジオレーションができないようにしない場合に限る。特に好ましくは、求核残基を保存するであろう条件下で基質を硬化することであり、そのような求核基は、ジアゼニウムジオレーションに利用可能である。そのような被覆及び硬化のサイクル数は、被覆基質から放出されるＮＯの量と期間を最適化するために、いずれかの所望のレベルまで繰り返すことができる。
【００３２】
［0034］本発明の範囲内に包含される典型的なアミン−機能性シランは、基質に結合できる適当なあらゆるシラン化合物を包含し、そしてＮＯ−放出能力を与えるために、ＮＯ又は一酸化窒素−放出官能基で更に誘導体化されてもよい。典型的なアミン−機能性シランとしては、例えば、米国特許第６，０２４，９１８号；第６，０４０，０５８号；第６，００１，４２２号；及び第６，０７２，０１８号；及びＰＣＴ番号ＷＯ９９／３７７２１及びＷＯ００／６３４６２に開示され、そして説明されて、そして本明細書において参照により援用される。好ましくは、アミン−機能性シランは、ジ−又はトリ−アルコキシシロキサン核に結合した反応性アミノ又はポリアミノアルキル部分を有する加水分解できるシラン化合物のような適当な化合物であり、ジ−及びトリ−置換シリル基を有するビス−アミノシランを含み、ここで、加水分解できる置換基は、アルコキシ、アリールオキシ、アシルオキシ、アミン、塩素、等を包含する。
【００３３】
［0035］アミノシラン及びビス−アミノシランは以下に示す化学式で一般に説明できる：
【００３４】
【化１】
2005534485.tif 000002
【００３５】
ここで、ｍは１又は２であり、ｎ＝（２−ｍ）、そしてＱ1は有機官能部分である。典型的な有機官能部分としては、アルコキシ、アリールオキシ、アシルオキシ、アミン、ハロ又はその誘導体がある。有機官能部分Ｑ1は、未置換又は置換のＣ1-24脂肪族炭化水素、未置換又は置換のＣ3-12オレフィン、未置換又は置換のＣ3-24へテロシクロアルキル、未置換又は置換のＣ3-24シクロアルキル、未置換又は置換のＣ3-30アリール、未置換又は置換のベンジル、未置換又は置換のフェニル、未置換又は置換のベンジルカルボニル、未置換又は置換のフェニルカルボニル、又はサッカライドであってもよい。部分Ｙはアミン含有部分である。典型的なアミン含有部分は、例えば、
【００３６】
【化２】
2005534485.tif 000003
【００３７】
を含有し、ここで、ｎは２−１００の整数である。部分Ｑ2及びＱ3は同じか又は相違してもよく、有機又は無機部分である。典型的な有機又は無機部分Ｑ2及びＱ3は、本明細書に記載されるように一酸化窒素−放出官能基、水、未置換又は置換Ｃ1-24脂肪族、未置換又は置換Ｃ3-12オレフィン、未置換又は置換Ｃ3-24シクロアルキル、未置換又は置換Ｃ3-12オレフィン、未置換又は置換Ｃ3-24シクロアルキル、未置換又は置換Ｃ3-24ヘテロシクロアルキル、未置換又は置換Ｃ3-30アリール、未置換又は置換ベンジル、未置換又は置換フェニル、未置換又は置換ベンジルカルボニル、未置換又は置換フェニルカルボニル、又はモノ−又はポリサッカライドを含む。好ましいモノ−及びポリサッカライドは、リボース、グルコース、デオキシリボース、デキストラン、スターチ、グリコーゲン、ラクトース、フコース、ガラクトース、フルクトース、グルコサミン、ガラクトサミン、ヘパリン、マンノース、マルトース、スクロース、シアル酸、セルロース、及びそれらの組み合わせを含む。
【００３８】
［0036］Ｑ1、Ｑ2及びＱ3の全ての部分は、水素を除き、場合により１ないし５の置換基で置換することができ、置換基は同じか又は相違してもよい。Ｑ1-3の典型的な置換基は、ニトロ、ハロ、ヒドロキシ、Ｃ1-24アルキル、Ｃ1-24アルコキシ、アミノ、モノ−Ｃ1-24アルキルアミノ、ジ−Ｃ1-24アルキルアミノ、シアノ、フェニル、及びフェノキシを含む。また、Ｙは、場合により置換することができる。Ｙの典型的な置換基は、未置換又は置換Ｃ1-24脂肪族ポリアミン、未置換又は置換Ｃ3-24シクロアルキルアミン、未置換又は置換Ｃ3-24ヘテロシクロアルキルアミン、未置換又は置換Ｃ3-30アリールアミン、例えば未置換又は置換フェニルアミン、未置換又は置換ベンジルアミン、未置換又は置換ベンジルアミンカルボニル、未置換又は置換フェニルアミンカルボニル、及びそれらの組み合わせを含む。
【００３９】
［0037］本発明の範囲内に包含される典型的なアミン−機能性シランとしては、３−アミノプロピルトリメトキシシラン、３−アミノプロピルトリエトキシシラン、３−アミノプロピルジメトキシシラン、Ｎ−（３−アクリルオキシ−２−ヒドロキシプロピル）−３−アミノ−プロピルトリエトキシシラン、Ｎ−２−（アミノエチル）−３−アミノプロピルトリス（２−エチル−ヘキソキシ）シラン、３−（ｍ−アミノフェノキシ）プロピルトリメトキシシラン、３−（１−アミノプロポキシ）−３，３−ジメチル−１−プロペニル−トリメトキシシラン、３−アミノプロピルトリス（メトキシエトキシエトキシ）シラン、３−アミノプロピルメチルジエトキシシラン、３−アミノプロピルトリス（トリメチルシロキシ）シラン、ビス（ジメチルアミノ）メチルクロロシラン、ビス（ジメチルアミノ）メチルメトキシシラン、ビス（ジメチルアミノ）フェニルクロロシラン、ビス（ジメチルアミノ）フェニルエトキシシラン、ビス（２−ヒドロキシエチル）−３−アミノプロピルトリエトキシシラン、ビス（２−ヒドロキシエチル）−３−アミノプロピルトリメトキシシラン、ビス（３−トリエトキシシリル）プロピルアミン、１，４−ビス［３−（トリメトキシシリル）プロピル］エチレンジアミン、（Ｎ，Ｎ−ジエチル−３−アミノプロピル）トリメトキシシラン、（Ｎ，Ｎ−ジメチル−３−アミノプロピル）トリメトキシシラン、Ｎ−フェニルアミノプロピルトリメトキシシラン、トリメトキシシリルプロピルジエチレントリアミン、トリメトキシシリルプロピルペンタエチレンヘキサミン、トリエトキシシリルオクチルジエチレントリアミン、トリイソプロポキシシリルペンタエチレンヘキサミン、３−アミノプロピルメチルジエトキシシラン、２−（ペルフルオロオクチル）エチルトリアミノトリメトキシシラン、４−アミノブチルトリメトキシシラン、Ｎ−（６−アミノヘキシル）アミノプロピルトリメトキシシラン、３−（ジメトキシメチルシリルプロピル）ジエチレントリアミン、Ｎ−（２−アミノエチル）−Ｎ’−［３−（ジメトキシメチルシリル）プロピル］−１，２−エタンジアミン、アミン−機能性ポリジメチルシロキサンコポリマー（「ＭＤＸ４−４１５９」としてＤｏｗ  Ｃｏｒｎｉｎｇから入手できる）、及びその組み合わせがある。また、アミン−機能性シラン化合物としては、例えば、ビス−（トリメトキシシリルプロピル）アミン、ビス−（トリエトキシシリルプロピル）アミン、ビス−（トリエトキシシリルプロピル）エチレンジアミン、Ｎ−［２−ビニルベンジルアミノ］エチル］−３−アミノプロピルトリメトキシシラン、アミノエチルアミノプロピルトリメトキシシラン、トリメトキシシリル−変性ポリエチレンイミン、メチルジメトキシシリル−変性ポリエチレンイミン、及びその組み合わせのようなビス−アミノシランがある。他の典型的なアミン−機能性シランとしては、例えば、ＰＣＴ出願ＷＯ００／６３４６２に開示され、そして説明されて、そして本明細書に参照により援用される。
【００４０】
［0038］アミン−機能性シランは、単独で又は別のものと組み合わせて使用することができる。加えて、本発明のアミン−機能性シランは、他のモノ−、オリゴ−、又はポリマー−機能性及び非機能性シラン、及びシリコン、例えば、２−アセトキシエチルトリクロロシラン、２−アセトキシエチルジメチルクロロシラン、アクリルオキシプロピルメチルジメトキシシラン、３−アクリルオキシプロピルトリクロロシラン、３−アクリルオキシプロピルトリメトキシシラン、アダマンチルエチルトリクロロシラン、アリルジメチルクロロシラン、アリルトリクロロシラン、アリルトリエトキシシラン、アリルトリメトキシシラン、アミルトリクロロシラン、アミルトリエトキシシラン、アミルトリメトキシシラン、５−（ビシクロヘプテニル）メチルジクロロシラン、５−（ビシクロヘプテニル）メチルトリエトキシシラン、５−（ビシクロヘプテニル）メチルトリメトキシシラン、５−（ビシクロヘプテニル）ジメチルメトキシシラン、５−（ビシクロヘプテニル）メチルジエトキシシラン、ビス（３−シアノプロピル）ジクロロシラン、ビス（３−シアノプロピル）ジエトキシシラン、ビス（３−シアノプロピル）ジメトキシシラン、１，６−ビス（トリメトキシシリル）ヘキサン、ビス（トリメチルシロキシ）メチルシラン、ブロモメチルジメチルクロロシラン、ブロモメチルジメチルメトキシシラン、３−ブロモプロピルトリクロロシラン、３−ブロモプロピルトリエトキシシラン、ｎ−ブチルジメチルクロロシラン、ｎ−ブチルジメチルメトキシシラン、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルクロロシラン、ｔｅｒ−ブチルジメチルイソプロピルシラン、ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルクロロシラン、ｔｅｒｔ−ジフェニルメトキシシラン、ｎ−ブチルメチルジクロロシラン、ｎ−ブチルジメトキシシラン、ｎ−ブチルジエトキシシラン、ｎ−ブチルジイソプロピルシラン、ｎ−ブチルトリメトキシシラン、（１０−カルボメトキシデシル）ジメトキシクロロシラン、２−（カルボメトキシ）エチルトリメトキシシラン、４−クロロブチルジメチルメトキシシラン、４−クロロブチルジメチルエトキシシラン、２−クロロエチルメチルジイソプロピルシラン、２−クロロエチルトリエトキシシラン、クロロメチルジメチルエトキシシラン、ｐ−（クロロメチル）フェニルトリエトキシシラン、ｐ−（クロロメチル）フェニルトリメトキシシラン、クロロメチルトリエトキシシラン、クロロフェニルトリメトキシシラン、３−クロロプロピルメチルジメトキシシラン、３−クロロプロピルトリエトキシシラン、２−（４−クロロスルホニルフェニル）エチルトリクロロシラン、２−シアノエチルメチルトリメトキシシラン、（シアノメチルフェネチル）トリエトキシシラン、３−シアノプロピルジメチルジイソプロピルシラン、２−（３−シクロヘキセニル）エチル］トリメトキシシラン、シクロヘキシジエトキシメチルシラン、シクロペンチルトリメトキシシラン、ジ−ｔ−ブトキシジアセトキシシラン、ジ−ｎ−ブチルジメトキシシラン、ジクロロペンチルジメトキシシラン、ジエチルジエトキシシラン、ジエチルジメトキシシラン、ジエチルジブトキシシラン、ジエチルホスフェートエチルトリエトキシシラン、ジエチル（トリエト��シシリルプロピル）マロネート、ジ−ｎ−ヘキシルジメトキシシラン、ジイソプロピルジクロロシラン、ジイソプロピルジメトキシシラン、ジメチルジアセトキシシラン、ジメチルジメトキシシラン、２，３−ジメチルプロピルジメチルエトキシシラン、ジメチルエトキシシラン、ジメチルメトキシクロロシラン、ジメチル−ｎ−オクタデシルクロロシラン、Ｎ，Ｎ−ジメチルトリエチルシリルアミン、１，３−ジメチルテトラメトキシジソロキサン、ジフェニルクロロシラン、ジフェニルジアセトキシシラン、ジフェニルジエトキシシラン、ジフェニルジフルオロシラン、ジフェニルジメトキシシラン、ジフェニルメチルクロロシラン、ジフェニルメチルエトキシシラン、２−（ジフェニルホスフィノ）エチルトリエトキシシラン、ジビニルエトキシシラン、ジビニルジクロロシラン、ｎ−ドコシルメチルジクロロシラン、ｎ−ドデシルトリエトキシシラン、２−（３，４−エポキシシクロヘキシル）エチルトリメトキシシラン、エチルジメチルクロロシラン、エチルトリアセトキシシラン、エチルトリエトキシシラン、エチルトリメトキシシラン、３−グリシドキシプロピルジメチルエトキシシラン、（３−グリシドキシプロピル）メチルジメトキシシラン、３−グルシドキシプロピルトリメトキシシラン、（３−ヘプタフルオロイソプロポキシ）プロピルメチルジクロロシラン、ｎ−ヘプチルメチルジクロロシラン、ｎ−ヘプチルメチルジメトキシシラン、ｎ−ヘキサデシルトリクロロシラン、ｎ−ヘキサデシルトリエトキシシラン、６−ヘキサ−１−エニルトリクロロシラン、５−ヘキセニルトリメトキシシラン、ｎ−ヘキシルメチルジクロロシラン、ｎ−ヘキシルトリクロロシラン、ｎ−ヘキシルトリエトキシシラン、ｎ−ヘキシルトリメトキシシラン、３−ヨ−ドプロピルトリエトキシシラン、３−ヨードプロピルトリメトキシシラン、イソブチルジメチルクロロシラン、イソブチルメチルジクロロシラン、イソブチルトリメトキシシラン、イソブチルトリエトキシシラン、３−イソシアネートプロピルジメチルクロロシラン、イソシアネートプロピルジメチルメトキシシラン、３−イソシアネートプロピルトリエトキシシラン、イソオクチルトリクロロシラン、イソオクチルトリエトキシシラン、イソプロピルジメチルクロロシラン、３−メルカプトプロピルメチルジメトキシシラン、３−メルカプトプロピルトリメトキシシラン、３−メルカプトプロピルトリエトキシシラン、３−メタクリルオキシプロピルメチルジエトキシシラン、３−メタクリルオキシプロピル−メチルジメトキシシラン、３−メタクリルオキシプロピルトリメトキシシラン、３−（４−メトキシフェニル）プロピルトリクロロシラン、３−（４−メトキシフェニル）プロピルトリメトキシシラン、メチルシクロヘキシルジクロロシラン、メチルシクロヘキシルジエトキシシラン、メチルジアセトキシシラン、メチルジクロロシラン、メチルジエトキシシラン、メチルジメトキシシラン、メチルドデシルジクロロシラン、メチルドデシルジエトキシシラン、メチルイソプロピルジクロロシラン、メチル−ｎ−オクタデシルジメトキシシラン、メチル−ｎ−オクチルジクロロシラン、（ｐ−メチルフェネチル）メチルジクロロシラン、メチル（２��フェネチル）ジメトキシシラン、メチルフェニルジイソプロポキシシラン、メチルフェニルジエトキシシラン、メチルフェニルジメトキシシラン、メチル−ｎ−プロピルジメトキシシラン、メチルトリアセトキシシラン、メチルトリエトキシシラン、ネオフィルメチルジエトキシシラン、ｎ−オクタデシルジメチルメトキシシラン、ｎ−オクタデシルトリエトキシシラン、ｎ−オクタデシルトリメトキシシラン、７−オクト−１−エニルメチルクロロシラン、７−オクト−エニルトリメトキシシラン、ｎ−オクチルジイソプロピルクロロシラン、ｎ−オクチルジメチルクロロシラン、ｎ−オクチルメチルジメトキシシラン、ｎ−オクチルトリエトキシシラン、１，１，１，３，３−ペンタメチル−３−アセトキシジシロキサン、フェネチルジメチルクロロシラン、フェネチルジメチルメトキシシラン、フェネチルトリエトキシシラン、フェニル（３−クロロプロピル）ジクロロシラン、フェニルジメチルアセトキシシラン、フェニルジメチルエトキシシラン、フェニルメチルビニルクロロシラン、（３−フェニルプロピル）ジメチルクロロシラン、フェニルトリエトキシシラン、フェニルトリメトキシシラン、フタロシアネートジメトキシシラン、ｎ−プロピルジメチルクロロシラン、ｎ−プルピルトリメトキシシラン、スチリルエチルトリメトキシシラン、テトラ−ｎ−ブトキシシラン、テトエラエトキシシラン、テトラメトキシシラン、テトエラプロプロキシシラン、（トリデカフルオロ−１，１，２，２−テトエラヒドロオクチル）−１−トリメトキシシラン、トリエトキシシラン、トリエトキシシリルプロピルエチルカルバメート、トリエチルアセトキシシラン、トリエチルエトキシシラン、（３，３，３−トリフルオロプロピル）ジメチルクロロシラン、（３，３，３−トリフルオロプロピル）メチルジメトキシシラン、（３，３，３−トリフルオロプロピル）トリエトキシシラン、トリイソプロピルクロロシラン、トリメトキシシラン、１−トリメトキシシリル−２−（ｐ，ｍ−クロロメチル）−フェニルエタン、トリメチルエトキシシラン、２−（トリメチルシロキシ）エチルメタクリレート、ｐ−トリメチルシロキシニトロベンゼン、ｏ−トリメチルシリルアセテート、トリフェニルエトキシシラン、ｎ−ウンデシルトリメトキシシラン、ビニルジメチルエトキシシラン、ビニルトリアセトキシシラン、ビニルトリメトキシシラン、及びそれらの組み合わせとの混合物として使用することができる。場合により、基質は、アミン−機能性及び機能性／非機能性シラン及びシリコンで選択的に又は連続的に被覆した。本発明の範囲内に包含される追加の機能性及び非機能性シラン及びシリコンは、例えば、Ｕｎｉｔｅｄ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｉｎｃ．Ｃａｔａｌｏｇ  ＣＤ（１９９９−２０００）に開示され、及び記載されており、参照により本明細書に援用される。
【００４１】
［0039］一酸化窒素−放出機能基は、ＮＯを放出することが可能ないずれかの適切な基である。一酸化窒素−放出機能基は、好ましくは、ジアゼニウムジオレート化一酸化窒素−放出／求核残基、即ち、一酸化窒素及び求核試薬の化合物、最も好ましくは、アニオン部分Ｘ−［Ｎ（Ｏ）ＮＯ］-、Ｘ−［Ｎ（Ｏ）ＮＯ］−Ｒ又はＸ−ＮＯを含み、ここで、Ｘは、いずれかの適切な求核残基である。好ましくは、本発明の一酸化窒素−放出機能基は下記の式：
【００４２】
【化３】
2005534485.tif 000004
【００４３】
に従って形成する。
［0040］求核残基は、最も好ましくは、一級アミン（例えば、（ＣＨ3）2ＣＨＮＨ［Ｎ（Ｏ）ＮＯ］ＮａのようなＸ＝（ＣＨ3）2ＣＨＮＨ）、二級アミン（例えば、（ＣＨ3ＣＨ2）2Ｎ［Ｎ（Ｏ）ＮＯ］ＮａのようなＸ＝（ＣＨ3ＣＨ2）2Ｎ）、ポリアミン（例えば、双極性イオンＨ2Ｎ（ＣＨ2）3ＮＨ2+（ＣＨ2）4Ｎ［Ｎ（Ｏ）ＮＯ］-（ＣＨ2）3ＮＨ2のようなＸ＝スペルミン、双極性イオンＣＨ3ＣＨ2Ｎ［Ｎ（Ｏ）ＮＯ］-ＣＨ2ＣＨ2ＮＨ3+のようなＸ＝（エチルアミノ）エチルアミン、双極性イオンＣＨ3ＣＨ2ＣＨ2Ｎ［Ｎ（Ｏ）ＮＯ］-ＣＨ2ＣＨ2ＣＨ2ＮＨ3+のような３−（ｎ−プロピルアミノ）プロピルアミン）、酸化物（即ち、Ｎａ2Ｏ［Ｎ（Ｏ）ＮＯ］のようなＸ＝Ｏ-）、又はその誘導体の求核残基である。そのような一酸化窒素／求核残基複合体は、固体として安定であり、予測できる速度で生物学的に有用な形体で一酸化窒素を放出することができる。最も好ましくは、本発明の一酸化窒素／求核残基複合体は、加水分解できるアミン−機能性オルガノシラン部分から形成される。安定な一酸化窒素／アミン−機能性オルガノシランは、本明細書に記載されるものを含み、Ｑ2は［Ｎ（Ｏ）ＮＯ］-Ｑ2又はＱ3は［Ｎ（Ｏ）ＮＯ］-Ｘであり；場合により、Ｑ2及びＱ3は同一か又は相違し、水素、未置換又は置換Ｃ1-24脂肪族、未置換又は置換Ｃ3-12オレフィン、未置換又は置換Ｃ3-24シクロアルキル、未置換又は置換Ｃ3-24ヘテロシクロアルキル、未置換又は置換Ｃ3-30アリール、未置換又は置換ベンジル、未置換又は置換フェニル、未置換又は置換ベンジルカルボニル、未置換又は置換フェニルカルボニル、又はサッカライドである。好ましいサッカライドには、リボース、グルコース、デオキシリボース、デキストラン、スターチ、グリコーゲン、ラクトース、フコース、ガラクトース、フルクトース、グルコサミン、ガラクトサミン、ヘパリン、マンノース、マルトース、スクロース、シアル酸及びセルロースが含まれる。
【００４４】
［0041］ＮＯ−放出官能基を提供し得るその他の適切な一酸化窒素／求核残基の複合体は、当該技術分野において周知であり、例えば、Ｋｅｅｆｅｒらに対する米国特許第４，９５４，５２６号、第５，０３９，７０５号、第５，１５５，１３７号、第５，１２１，２０４号、第５，２５０，５５０号、第５，３６６，９９７号、第５，４０５，９１９号、第５，５２５，３５７号、及び第５，６５０，４４７号、及びＨｒａｂｉｅら、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．５８：１４７２−１４７６（１９９３）に記載されるものを含み、それらは、本明細書に参照により援用される。
【００４５】
［0042］ＮＯ−放出官能基を提供できる典型的な一酸化窒素／求核残基の複合体は、以下の化学式を有するものを含む：
【００４６】
【化４】
2005534485.tif 000005
【００４７】
ここで、Ｊは、例えば、窒素原子を通じてＮ2Ｏ2-基の窒素に結合しない部分を含む有機又は無機部分であり、Ｍ+xは医薬的に許容できるカチオンであって、ｘはこのカチオンの原子価であり、ａは１又は２であり、そしてｂ及びｃは、中性化合物、好ましくは、この化合物がアラノシン又はドパスチン（dopastin）の塩ではないような中性化合物を生じる最小の整数であり、これらは米国特許第５，２１２，２０４号に記述され、そして本明細書に参照により援用される；
【００４８】
【化５】
2005534485.tif 000006
【００４９】
ここで、ｂ及びｄは同一又は異なり、そして０又は１であってもよく、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4及びＲ5は、同一又は異なり、そして水素、Ｃ3-8シクロアルキル、Ｃ1-12直鎖又は分岐鎖アルキル、ベンジル、ベンゾイル、フタロイル、アセチル、トリフルオロアセチル、ｐ−トルイル、ｔ−ブトキシカルボニル、又は２，２，２−トリクロロ−ｔ−ブトキシカルボニルであってもよく、そしてｘ、ｙ、及びｚは同一又は異なり、そして２−１２の整数であり、これらは米国特許第５，１５５，１３７号に記載され、そして本明細書に参照により援用される；
【００５０】
【化６】
2005534485.tif 000007
【００５１】
ここで、Ｂは
【００５２】
【化７】
2005534485.tif 000008
【００５３】
であり、Ｒ6及びＲ7は同一又は異なり、そして水素、Ｃ3-8シクロアルキル、Ｃ1-12直鎖アルキル、又はＣ3-12分岐鎖アルキル、ベンジル、ベンゾイル、フタロイル、アセチル、トリフルオロアセチル、ｐ−トルイル、ｔ−ブトキシカルボニル、又は２，２，２−トリクロロ−ｔ−ブトキシカルボニルであり、Ｂが置換ピペラジン部分
【００５４】
【化８】
2005534485.tif 000009
【００５５】
であるという条件の下で、ｆは０−１２の整数であり、
そしてｆは２−１２の整数であり、これらは米国特許第５，１５５，１３７号に記載され、そして本明細書に参照により援用される；
【００５６】
【化９】
2005534485.tif 000010
【００５７】
ここで、Ｒ8は水素、Ｃ3-8シクロアルキル、Ｃ1-12直鎖アルキル、Ｃ3-12分岐鎖アルキル、ベンジル、ベンゾイル、フタロイル、アセチル、トリフルオロアセチル、ｐ−トルイル、ｔ−ブトキシカルボニル、又は２，２，２−トリクロロ−ｔ−ブトキシカルボニル、であり、Ｒ9は水素又はＣ1-12直鎖アルキル、Ｃ3-12分岐鎖アルキルであり、そしてｇは２−６であり、これらは米国特許第５，２５０，５５０号に記述され、そして本明細書において参考用に示される；
【００５８】
【化１０】
2005534485.tif 000011
【００５９】
ここで、Ｒ10及びＲ11は、独立して、直鎖Ｃ1-12アルキル又はＣ3-12分岐鎖アルキル基及びベンジル基からなる群から選択され、好ましくはα炭素原子上に分岐がないものであり、又はその代わりにＲ10及びＲ11は、それらが結合する窒素原子と共に、複素環基、好ましくはピロリジノ、ピペリジノ、ピペラジノ又はモルホリノ基を形成し、Ｍ+xは、医薬的に受容可能なカチオンであり、及びｘは１−１０の整数であり、米国特許第５，０３９，７０５号、第５，２０８，２３３号、及び第５，７３１，３０５号に記載され、これらは参照により本明細書に援用される；
【００６０】
【化１１】
2005534485.tif 000012
【００６１】
ここで、Ｍは、医薬的に受容可能な金属であり、又は、Ｘは少なくとも２である場合、２つの異なる医薬的に受容可能な金属の混合物であり、Ｌは、（Ｒ12Ｒ13Ｎ−Ｎ2Ｏ2）とは異なるリガンドであり、少なくとも１つの金属に結合し、Ｒ12及びＲ13は、それぞれ有機部分であり、同一か又は異なっていてもよく、ｘは１−１０の整数であり、ｘ’は金属Ｍの形式的な酸化状態であり、１−６の整数であり、ｙは１−１８の整数であり、そして、ｙが少なくとも２である場合、リガンドＬは同一か又は異なっていてもよく、ｚは１−２０の整数であり、及びＫは、必要な程度に中性である化合物を与える医薬的に受容可能な対イオンであり、米国特許第５，３８９，６７５号に記載され、参照により本明細書に援用される；
【００６２】
【化１２】
2005534485.tif 000013
【００６３】
ここで、Ｒ14は、Ｃ2-8アルキル、フェニル、ベンジル、又はＣ3-8シクロアルキルであり、いずれのＲ14も１−３の置換基によって置換されていてもよく、同一又は相違しており、ハロ、ヒドロキ、Ｃ1-8アルコキシ、−ＮＨ2、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ2、−ＣＨ（Ｏ）、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、及びＮＯ2からなる群から選択され、Ｘは、医薬的に受容可能なカチオン、医薬的に受容可能な金属中心、又はＣ1-8アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ3、及び−Ｃ（Ｏ）ＮＨ2からなる群から選択される医薬的に受容可能な有機基であり、そして、ｙは、１−３であり、Ｘの原子価と一致し、米国特許第４，９５４，５２６号に記載され、本明細書に参照により援用され；そして
【００６４】
【化１３】
2005534485.tif 000014
【００６５】
ここで、Ｒ15及びＲ16はＣ1-12直鎖アルキル、Ｃ1-12アルキル又はアシルオキシ置換直鎖アルキル、Ｃ1-12ヒドロキシ−又はハロ−置換直鎖アルキル、Ｃ3-12分岐鎖アルキル、Ｃ3-12ヒドロキシ−、ハロ−、アルコキシ−、又はアシルオキシ置換分岐鎖アルキル、Ｃ3-12直鎖アルケニル、及び、Ｃ3-12分岐アルケニルから独立して選択され、これらは、未置換か又はヒドロキシ、アルコキシ、アルコキシ、ハロ又はベンジルで置換され、又はＲ15及びＲ16は、それらに結合する窒素原子と共に、複素環基、好ましくはピロリジノ、ピペリジノ、ピペラジノ又はモルホリノ基を形成し、及びＲ17は、未置換の又はヒドロキシ、ハロ、アシルオキシ又はアルコキシによって置換されたＣ1-12直鎖及びＣ3-12分岐鎖アルキル、未置換の又はハロ、アルコキシ、アシルオキシ又はヒドロキシによって置換されたＣ1-12直鎖又はＣ3-12分岐鎖アルケニル、Ｃ1-12未置換又は置換のアシル、スルホニル、及びカルボキサミドから選択される基であり；又はＲ17は、式−（ＣＨ2）n−ＯＮ＝Ｎ（Ｏ）ＮＲ15Ｒ16の基であり、ここで、ｎは２−８の整数であり、及びＲ15及びＲ16は、上述される通りである。好ましくはＲ15、Ｒ16、及びＲ17は、ヘテロ原子に対してαであるハロ又はヒドロキシ置換体を含まず、米国特許第５，３６６，９９７号に記載される通りであり、本明細書に参照により援用される。
【００６６】
［0043］好ましくは、一酸化窒素−放出官能基は、ピペラジンのＯ2−保護モノジアゼニウムジオレート、例えば、ピペラジンのＯ2−グリコシル化又はメトキシメチル保護モノジアゼニウムジオレートからなる少なくとも１つの化合物である。別の好ましい一酸化窒素−放出官能基は、１−［（２−カルボキシレート）ピロリジン−１−イル］ジアゼン−１−イウム−１，２−ジオレートであり、これは、一酸化窒素−放出官能基の代謝産物がアミノ酸のプロリンであるためである。
【００６７】
［0044］ＮＯ−放出官能基を提供することができる他の好ましい一酸化窒素／求核残基複合体は、Ｏ2−アリール化及びＯ2−グリコシル化ジアゼニウムジオレート、例えば、国際特許出願ＰＣＴ／ＵＳ９７／１７２６７（１９９７年９月２６日に出願）に記載されるものを含み、本明細書に参照により援用される。例えば、好ましいＯ2−アリール置換ジアゼニウムジオレートは下記の式：
【００６８】
【化１４】
2005534485.tif 000015
【００６９】
［ここで、Ｘは、アミノ、ポリアミノ、Ｃ1-24脂肪族、Ｃ3-30アリール、Ｃ3-30非芳香族環、及びオキシムからなる群から選択され、及びＱは、場合により、アクリジニル、アントラセニル、ベンジル、ベンゾフラニル、ベンゾチオフェニル、ベンゾキサゾリル、ベンゾピラゾリル、ベンゾチアゾリル、カルバゾリル、クロロフィリル、シンノリニル、フラニル、イミダゾリイル、インドリル、イソベンゾフラニル、イソインドレイル、イソキサゾリル、イソチアゾリル、イソキノリニル、ナフタレニル、オキサゾリル、フェナントレニル、フェナントリジニル、フェノチアジニル、フェノキサジニル、フタルイミジル、フタラジニル、フタロシアニニル、ポルフィニル、プテリジニル、プリニル、ピラジニル、ピラゾリイル、ピリダジニル、ピリジニル、ピリミジニル、ピロリル、キノリジニウムイオン、キノリニル、キノキサリニル、キノゾリニル、シドノニルイ、テトラゾリル、チアゾリル、チオフェニル、チロキシニル、トリアジニル、及びトリアゾリルからなる群から選択され、ここで、アリール基の環の原子は、Ｏ2−酸素に結合する］
を有する。
【００７０】
［0045］Ｏ2−グリコシル化ジアゼニウムジオレートに関して好ましい態様としては、化学式ＩＸのＯ2−グリコシル化１−置換ジアゼン−１−イウム−１，２−ジオラートがある。好ましくはＸはアミノ、ポリアミノ、Ｃ1-24脂肪族、Ｃ3-30アリール、及びＣ3-30非芳香族環から成る群から選ばれ、そしてＱはサッカライドである。任意に、Ｑは当該技術分野のおいて既知の保護基である（例えば、Ｇｒｅｅｎｅ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐ  Ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，”Ｊ．Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ：Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９９９，が参照され、そして本明細書において参照により援用される）。最も好ましくは、このＯ2−置換ジアゼニウムジオレートはＯ2−置換１−[（２−カルボキシラト）ピロリジン−１−イル]ジアゼン−１−ウム−１，２−ジオラートを含む。
【００７１】
［0046］ＮＯ−放出官能基を供与できる他の好ましい一酸化窒素／求核残基複合体としては、エナミン−及びアミジン−誘導ジアゼニウムジオレートがあり、これらは国際特許公開番号ＷＯ９９／０１４２７（ＰＣＴ／ＵＳ９８／１３７２３）に開示され、そして本明細書に参照により援用される。
【００７２】
［0047］また、一酸化窒素−放出官能基はポリマーの性質を有するもの、例えば、米国特許第５，４０５，９１９号；第５，５２５，３５７号；第５，６３２，９８１号；第５，６５０，４４７号；第５，６７６，９６３号；第５，６９１，４２３号；及び第５，７１８，８９２号に開示されるようなポリマーに結合した一酸化窒素−放出／求核剤複合体であってもよく、そして本明細書において参考用に援用される。「ポリマーに結合した」ことの意味は、化学式Ｉ−ＩＸで示されるような一酸化窒素−放出／求核剤複合体が、ポリマーマトリックスに物理的に又は化学的に会合し、一部が混合し、又はポリマーマトリックス内に含有される、ことである。ポリマーに対する一酸化窒素−放出／求核剤複合体の物理的会合又は結合は、一酸化窒素−放出／求核剤複合体でポリマーを共沈させるか、あるいは前記複合体をポリマーに共有結合させることによって達成できる。ポリマーに対する一酸化窒素−放出／求核剤複合体の化学的結合は、例えば、ＮＯＮＯ基が結合する求核剤がポリマー自体の一部を形成する、即ち、この求核剤がポリマー主鎖中に存在するか、又はポリマー主鎖にぶら下がる基に結合する、ようなポリマーに一酸化窒素−放出／求核剤複合体の求核残基部分を共有結合させることによって、達成できる。一酸化窒素−放出／求核剤複合体が、ポリマーに会合し、一部が、混合し、又はポリマー内に含有される方法、即ち、ポリマーに「結合する」方法は、本発明にとって重要ではなく、そして会合、混合又は結合の全ての方法が本明細書において予期される。好ましくは、一酸化窒素−放出／求核剤複合体はポリマーに共有結合する。
【００７３】
［0048］求核剤残基は、好ましくはアミン−誘導残基、例えば、本明細書で記述したような、一級又は二級アミンである。このアミン−誘導求核剤残基は、好ましくはジエチレントリアミン、ペンタエチレンヘキサミン、高分子量の線状／分岐鎖ポリエチレンイミン、ポリアミン−機能性ジビニルベンゼン、ピペラジン、又はその全ての組み合わせである。
【００７４】
［0049］本発明に従うアミン−機能性シラン残基で被覆された基質は、（ｉ）ＮＯを用いたジアゼニウムジオレーションを可能にさせ、（ｉｉ）生理的条件下でＮＯを自然に放出させるために、十分に安定であることが判明した。このような予期しない結果は、本発明の教えに従ってＮＯの放出を持続できる本明細書中で記述されたような医療装置の開発を可能にする。
【００７５】
［0050］この基質は、これらが本発明の教示に従ってアミン−機能性ポリシラン被覆を与えられるとすぐに、ジアゼニウムジオレートに転換できる。即ち、本発明の一酸化窒素−放出基質は、前もって処理された基質（架橋したアミン−機能性シラン−被覆基質）を一酸化窒素又は一酸化窒素−放出官能基と接触させることにより形成される。あるいは、この基質は、これらが、適切に、又は、好ましくは適切な溶媒又は溶媒混合物中において、求核剤残基をＮＯガスと接触させることよって求核剤残基を与えられるとすぐに、ジアゼニウムジオレートに転換できる。
【００７６】
［0051］直接のジアゼニウムジオレーションと一酸化窒素−放出官能基の結合との組み合わせも本発明の範囲内である。
［0052］本発明の好ましい態様において、アミン−機能性シラン化合物は、架橋剤と接触する。シラン変性基質が、例えば、生理的液体のような水溶液に晒される場合、アミン−機能性シラン化合物を架橋すると、膨潤が抑えられることが判明した。膨潤を抑制又は防止すると、ＮＯが与えられた基質の保全性が維持されて、早すぎるＮＯの放出を防止する。被膜の早急な膨潤を回避すると、水分子がジアゼニウムジオレート化されたアミン−機能性基質から一酸化窒素を解放できる割合は大幅に増大する。これに対して、非架橋ＮＯ−放出被覆表面で膨潤が生じると、アミン−機能性シラン化合物の内部に水が早急に浸入して、隔絶した一酸化窒素−放出官能基と接触し、その結果、かなり大きな速度でＮＯを遊離させる。更に、前記機能性非架橋ポリシラン被膜が膨潤するにつれて、放出可能な一酸化窒素の供給が実質的に消耗するまで、遊離したＮＯ分子が妨害されずに逃避できる大きな経路が形成される。
【００７７】
［0053］更に、プロトン性溶媒（例えば、水）が求核残基内のＮＯ−放出基の近傍においてアミン基をプロトン化すると考えられる。これらのプロトン化アミン基は、静電的反発力を発揮し、ＮＯ放出基に対するプロトン攻撃を阻害し、即ち、時間経過に伴い放出されるＮＯ量をさらに維持する。Ｈａｒｂｉｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．５８：１４７２−１４７６（１９９３）を参照し、本明細書に参照により援用される。架橋の程度は、ＮＯ放出の時期を最適化するために、いずれかの所望のレベルであることができる。
【００７８】
［0054］架橋剤は適当なホモ−又はヘテロビ−又はホモ−又はヘテロ多官能性化合物であってもよい。代表的な適したビ−又は多官能性架橋剤としては、例えば、ジハロゲン化アルキル、ジハロゲン化アリール基、フェニルアジ化物、マレイミド、イミドエステル、ビニルスルホン、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル、ハロアセチル、及びヒドロキシメチルホスフィンがある。架橋剤は１−３個の他の置換基で更に置換されてもよい。好ましくは、これらの他の置換基はアルキル、シクロアルキル、ヒドロキシ、ニトロ、ハロゲン、又はシアノから構成される。好ましい架橋剤は、１，４−ジブロモエタン、１，５−ジフルオロ−２，４−ジニトロベンゼン、１，４−ビス−マレイミドブタン、１，４−ビスマレイミジル−２，３−ジヒドロキシブタン、ビスマレイミドヘキサン、１、１１−ビス−マレイミドテトラエチレングリコール、ビス［２−（スクシンイミジルオキシカルボニルエチル）スルホン、ビス−［スルホスクシンイミジル］スベラート、ジメチルアジピミダート−２ＨＣｌ、ジメチルピメリミダート−２ＨＣｌ、ジスクシンイミジルグルタラート、ジスクシンイミジルスベラート、ジスクシンイミジルタルトラート、エチレングリコールビス［スクシンイミジルスクシナート］、Ｎ−［ｐ−マレイミドフェニル］イソシアナート、スクシンイミジル３−［ブロモアセタミド］プロピオナート、Ｎ−スクシンイミジルヨードアセテート、ビス［２−スルホスクシンイミドオキシカルボニルオキシ］−エチル］スルホン、ジスルホスクシンイミジルアミノトリアセテート、β−［トリス（ヒドロキシメチル）ホスフィノ］−プロピオン酸、及びトリス−［２−マレイミドエチル］アミンがある。例えば、Ｐｉｅｒｃｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏｍｐａｎｙ  Ｃａｔａｌｏｇ（２００１−２００２）（２９４−３４３頁）が参照され、そして本明細書において参考用に援用される。
【００７９】
［0055］本発明のその他の態様は、一酸化窒素−放出基質を調製する方法を包含し、この方法は、（ａ）アミン−機能性シラン残基を基質と接触させ、（ｂ）前記アミン−機能性シラン残基を架橋剤と接触させ、（ｃ）少なくても１つの求核残基を前記架橋したアミン−機能性シラン残基と接触させ、そして（ｄ）前記求核残基を一酸化窒素ガスと接触させる、工程を含む。
【００８０】
［0056］架橋の程度を高め、これにより、水の透過性を低下させるために、本発明の方法は、工程（ｃ）の後に、前記求核残基を架橋剤で架橋し、続いて、少なくとも１つの別の求核残基又は、任意に、一酸化窒素−放出官能基を、前記架橋した求核残基と接触させる工程を更に含有してもよい。本明細書で記述したものと同じタイプの架橋剤が、求核残基を任意の度合いまで架橋するために使用されてもよい。架橋が所望のレベルに到達した後に、追加の求核残基が、ＮＯガスとのジアゼニウムジオレーションを実施するための反応部位を生成するために、前記架橋した求核残基に結合してもよい。好ましい追加の求核残基は本明細書で記述されているようなものである。
【００８１】
［0057］架橋の度合いが高いと、「ラチス」又は「マトリックス」構造を形成して、その内部でＮＯを捕捉し、生理的溶液に晒された場合、長時間、捕捉したＮＯを解放するものと考えられる。その点において、適切な架橋剤で架橋する場合、生理的条件に晒されるまでＮＯを捕獲するのに役立つ化学格子又はマトリックスを形成するようなＸの非求核残基又は弱求核残基も本発明の範囲内にあると考えられる。
【００８２】
［0058］必要に応じて、ＮＯガスによるジアゼニウムジオレーションの実施の前に、架橋されたアミン−機能性ポリシラン残基は、生体適合性又は血液適合性のトップコートで処理されてもよい。この生体適合性のトップコートは滑らかであればどのようなヒドロゲルでもよい。好ましい滑らかなヒドロゲルとしては、例えば、親水性シリコーン、ホモ−及びへテロポリエステル、ポリオール、ポリウレタン、ポリアセトン、アルブミン−，ヘパリン−，及びホスホリルコリン−機能性ポリマー、又はそのあらゆる組み合わせがある。
【００８３】
［0059］本発明のその他の好ましい態様は、架橋したアミン−機能性シラン化合物を有する基質上に疎水性トップコートを形成することである。適当な疎水性トップコートとしては、例えば、パリレン、ポリシロキサン、及び無極性置換基で機能性化されたシリコーンがある。
【００８４】
［0060］本発明のその他の態様において、一酸化窒素を長時間治療濃度で供給するための医療装置が提供される。この装置は、ジアゼニウムジオレート化された求核残基の形態でこれに放出可能に結合した一酸化窒素を有する基質を含む。このポリシラン中間体は前記基質に結合し、そしてアミン−機能性であり、そして架橋されている。
【００８５】
［0061］このように本発明に従って作られたジアゼニウムジオレート化された医療装置は、当該技術分野において既知  の方法によって生理的条件に晒されることに基づくＮＯ放出の濃度及び持続時間を測定するために、試験できる（例えば、３７℃でｐＨ７．４のリン酸塩緩衝化食塩水に浸漬）。一酸化窒素ガスが、好ましくは化学発光方法を用いて検出されて、定量化され、この方法は、Ｋｅｅｆｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，“ＮＯＮＯａｔｅｓ（１−Ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ  Ｄｉａｚｅｎ−１−ｉｕｍ−１，２  ｄｉｏｌａｔｅｓ）ａｓ  Ｎｉｔｒｉｃ  Ｏｘｉｄｅ  Ｄｏｎｏｒｓ：Ｃｏｎｖｅｎｉｅｎｔ  Ｎｉｔｒｉｃ  Ｏｘｉｄｅ  Ｄｏｎｏｒｓ：Ｃｏｎｖｅｎｉｅｎｔ  Ｎｉｔｒｉｃ  Ｏｘｉｄｅ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ，”Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ  ２８：２８１−２９３（１９９６）に記述され、そして本明細書に参照により援用される。
【００８６】
［0062］本発明のＮＯ−放出基質は、被覆基質の平方ミリメートル（ｍｍ2）当たり約１，０００−約４０，０００ピコモル、好ましくは約２，０００−約３５，０００ピコモル、より好ましくは約５，０００−約２０，０００ピコモル、そして最も好ましくは約８，０００−約１３，０００ピコモルを生成する。しかしながら、ＮＯの収量及び持続時間の両方は、本発明の教示によって、基質をアミン−機能性ポリシランの他の層で被覆することによって容易に増大する。更に、本発明のＮＯ−放出基質は数時間〜数週間又はそれ以上の期間に亘って繰り返しＮＯを放出できる。これらの発見は、放出されたＮＯの量又は持続時間に関して、以前に報告されたアミン−機能性ポリシラン被覆のどれよりもはるかに優れている。
【００８７】
［0063］本発明の架橋した基質は生理的条件下で一酸化窒素の局部的放出を与える。ＮＯの局部的放出又は局部的に持続された放出は、ｉｎ  ｓｉｔｕにおいて細胞増殖抑制性効果、抗血栓性効果、血管拡張効果、抗増殖性効果、及び他の薬理的効果を与える。本発明のＮＯ−放出基質は、血液と接触する場合、抗血栓形成性であり、そして動脈再狭窄を抑制し、また脈管形成を促進できる。従って、単独で使用されるか、他の物質（例えば、ステンレス鋼、ガラス、シリコーンゴム、プラスチック、天然繊維材料等）の上の被膜として使用されるか、又は他の物質と組み合わされて使用される場合、多くの用途が見込まれる。
【００８８】
［0064］本発明のＮＯ−放出基質は、例えば、虚血性心疾患、再狭窄、癌、高血圧、感染症、及び性的機能不全、を含む広範囲の健康状態を治療するか、又は予防するために使用できる。商業的な応用例としては、例えば、本明細書に開示されたような被覆ＮＯ−放出医療装置の作製があり、これらの医療装置としては、ステント、外科／歯科の装置、カテーテル、注射器、注射針、血液採取管及び袋、使い捨てコンタクトレンズ、人工器官、インプラント、ペースメーカー、ペースメーカー導線、心臓弁、パルス発生器、心臓細動除去器、電気的細動除去器、せき髄刺激装置、脳及び神経刺激装置、導入器、化学センサー、人工関節、皮膚／血管の移植片、包帯及び包帯用品、化学及び生理学的な電極／センサー、個人衛生用品及び避妊用品がある。また任意に、本発明のアミン−機能性ポリシラン被膜は、当該技術分野において既知の方法に従って、薬、プロドラッグ、ヌクレオチド、オリゴヌクレオチド、ポリヌクレオチド、アミノ酸、蛋白質、サッカライドを結合し、そして選択的に放出するために、また組織学的又は病理学的に検査するための皮膚片／試験片を固定するために使用できる。
【００８９】
［0065］以下の実施例は、更に本発明を説明するが、当然ながら本発明の範囲を決して限定するものではない。
【実施例】
【００９０】
実施例１
［0066］本実施例は、ジアゼニウムジオレート化した置換アンモニウム１−アミノプロピルシロキサン−５−ＰＥＩ−２，４−ジニトロベンゼン−被覆ステンレス鋼片（ｃｏｕｐｏｎ）の製造を例証する。
【００９１】
［0067］３−アミノプロピルトリメトキシシランの適切な溶液を含む１３×１００ｍｍの試験管内に医療グレードのステンレス鋼の１×１ｃｍシートを置いた。３分間晒した後、過剰のシラン試薬を取り除いた。片をメタノールとジエチルエーテルで洗浄し、残りの溶媒が完全に蒸発するまで、数分間窒素下で乾燥させた。片を含む試験管を１１０℃で１５分間、オーブンに置いた。試験管をオーブンから取り出し、室温まで冷却させた。
【００９２】
［0068］片を新しい試験管に移し、４０ｍｇの１，５−ジフルオロ−２，４−ジニトロベンゼン及び２０ｍｇの無水炭酸カリウムを含むテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）溶液２ｍＬを添加した。次いで、熱風ドライヤーを用いて、溶液が沸騰し始めるまで注意深く加熱し、その後、即座に金属製の試験管ラックに起き、室温まで徐々に冷却した。溶液を除去し、片をさらにＴＨＦ２０ｍｌで洗浄した。
【００９３】
［0069］架橋して誘導化した医療片を直鎖ポリエチレンイミン（「ＰＥＩ」分子量＝２５，０００ｇ／ｍｏｌ）のスラリー４０ｍｇを含有するＴＨＦ２ｍｌで処理した。ＴＨＦが沸騰し始めるまで試験管を加熱し、室温まで冷却させた。過剰の溶媒を試験管から除去し、ＴＨＦ及びジエチルエーテルの各２０ｍＬで片を洗浄した。片を窒素下で乾燥させ、新しい試験管に移した。３ｍＬのアセトニトリルを添加し、試験管をＰａｒｒ（登録商標）水素化圧力管に設置した。窒素を用いて加圧／減圧のサイクルを繰り返して試験管から酸素を除去した。続いて、これにＮＯの２７６ｋＰａ（４０ｐｓｉ）を導入した。片を含有する試験管をＮＯ装置内で一晩放置した。アセトニトリルを傾斜除去し、片をジエチルエーテル２０ｍＬで洗浄し、窒素下で乾燥させた。
【００９４】
［0070］ジアゼニウム片を０．１Ｍ  リン酸緩衝液、ｐＨ７．４中、３７℃に浸し、その後、化学ルミネセンス検出可能なＮＯを解析のおよそ４日間放出した。全ＮＯ放出は、測定によりポリマー１ｇ当り１７０４ｐｍｏｌであった。
【００９５】
実施例２
［0071］本実施例は、ピペラジン−２，４−ジニトロベンゼンを被覆したステンレス鋼片の１−アミノプロピルシロキサン−５−メトキシメチル−保護モノジアゼニウムジオレートの製造を例証する。
【００９６】
［0072］上記で概要した方法について、ピペラジン誘導体のメトキシメチル−保護モノジアゼニウムジオレート１００ｍｇを１−アミノプロピルシロキサン−５−フルオロ−２，４−ジニトロベンゼン被覆金属性片の表面に連結した。１．０Ｍのリン酸緩衝液、ｐＨ７．４中、３７℃で浸した場合、化学ルミネセンス−検出可能なＮＯを無視してよい程度の初期比率で放出させた。１５分後、２５％の硫酸溶液の１ｍＬを添加し、その後、５５１ｐｍｏｌのＮＯが２．２６時間に検出された。
【００９７】
［0073］本明細書に引用される刊行物、特許出願、及び特許を含む全ての参考文献は、各参考文献が参照により援用されるように個別に及び具体的に示され、全体として本明細書に記載されているような程度で参照により援用される。
【００９８】
［0074］本発明を記述する情況において（特に、前述の請求の範囲の情況において）、用語「１つの」（“ａ”）、「１つの」（“ａｎ”）、及び「その」（“ｔｈｅ”）、及び同じような指示語の使用は、本明細書において他に指示がなく、又は文脈によって明白に矛盾がないという場合でなければ、単数及び複数の両方を覆うものと解釈されるべきである。本明細書における値の範囲の詳説は、本明細書において他に指示がない場合、その範囲内に含まれる各々の分離した値に個別に言及する即時の方法として提供するために意図されるだけであり、各々の分離した値は、本明細書に個別に引用されるかのように明細書中に援用される。本明細書に記載の全ての方法は、本明細書に他に指示がなく、又は文脈によって他に明白に矛盾がない場合、いずれの適切な順番で実行することができる。いずれの又はいかなる実施例、又は本明細書に提供される例示的な言語（例えば、「のような」（“ｓｕｃｈ  ａｓ”）の使用は、発明をより良く解釈するためにだけに意図され、他に請求されない場合、発明の範囲の限定を主張するものではない。本明細書中のいかなる言語も発明の実施に不可欠な請求されていない要素を指示する場合には矛盾すべきではない。
【００９９】
［0075］本発明の好ましい態様は、本明細書に記載され、本発明を実施するために発明者らに知られる最良の形態を含む。当然、それらの好ましい態様の変形は、前述の明細書を読むことに基づき当業者に明白となるであろう。本発明者らは、当業者に適切なようにそのような変形を使用することを期待し、そして、発明者らは、本明細書に具体的に記載さｒている以外に発明を実施することを意図する。即ち、本発明は、利用できる法律によって許可されるように、本明細書に添付される請求の範囲に引用される特定事項の全ての修飾物及び均等物を含む。さらに、全ての可能な変形における上述した要素のいずれかの組み合わせも、本明細書に他に指示がなく、文脈によって明白に矛盾がない場合、発明に包含される。
【国際調査報告】
2005534485.tif 000016
2005534485.tif 000017