(57)【要約】本発明は、ヒストンデアセチラーゼの酵素活性を抑制する式（Ｉ）【化１】2005525381.tif 000088［式中、ｎ、ｍ、ｔ、Ｒ１、Ｒ２、Ｌ、Ｑ、Ｘ、Ｙ、Ｚは、限定した意味を有する］で表される新規な化合物、これらの製造、これらを含有させた組成物、そしてこれらを薬剤として用いることを包含する。
2005525381.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）
【化１】
2005525381.tif 000073
［式中、
ｎは、０、１、２または３であり、そしてｎが０の時には直接結合を意図し、
ｍは、０、１、２または３であり、そしてｍが０の時には直接結合を意図し、
ｔは、０または１であり、そしてｔが０の時には直接結合を意図し、
各Ｑは、窒素または
【化２】
2005525381.tif 000074
であり、
各Ｘは、窒素または
【化３】
2005525381.tif 000075
であり、
各Ｙは、窒素または
【化４】
2005525381.tif 000076
であり、
各Ｚは、−ＣＨ２−または−Ｏ−であり、
Ｒ１は、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ３Ｒ４、−Ｎ（Ｈ）Ｃ（Ｏ）Ｒ７、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルカンジイルＳＲ７、−ＮＲ８Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＯＨ）Ｒ７、−ＮＲ８Ｃ（Ｏ）Ｃ１−６アルカンジイルＳＲ７、−ＮＲ８Ｃ（Ｏ）Ｃ＝Ｎ（ＯＨ）Ｒ７または別のＺｎ−キレート基であり、ここで、
Ｒ３およびＲ４は、各々独立して、水素、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルキル、ヒドロキシＣ１−６アルキル、アミノＣ１−６アルキルまたはアミノアリールから選択され、
Ｒ７は、独立して、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルカルボニル、アリールＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルピラジニル、ピリジノン、ピロリジノンまたはメチルイミダゾリルから選択され、
Ｒ８は、独立して、水素またはＣ１−６アルキルから選択され、
Ｒ２は、水素、ヒドロキシ、アミノ、ヒドロキシＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルオキシ、アリールＣ１−６アルキル、アミノカルボニル、ヒドロキシカルボニル、アミノＣ１−６アルキル、アミノカルボニルＣ１−６アルキル、ヒドロキシカルボニルＣ１−６アルキル、ヒドロキシアミノカルボニル、Ｃ１−６アルキルオキシカルボニル、Ｃ１−６アルキルアミノＣ１−６アルキルまたはジ（Ｃ１−６アルキル）アミノＣ１−６アルキルであり、
−Ｌ−は、Ｃ１−６アルカンジイル、カルボニル、スルホニル、またはフェニルで置換されているＣ１−６アルカンジイルから選択される二価の基であり、
【化５】
2005525381.tif 000077
は、
【化６】
2005525381.tif 000078
【化７】
2005525381.tif 000079
【化８】
2005525381.tif 000080
から選択される基であり、ここで、
各ｓは、独立して、０、１、２、３、４または５であり、
各Ｒ５およびＲ６は、独立して、水素；ハロ；ヒドロキシ；アミノ；ニトロ；トリハロＣ１−６アルキル；トリハロＣ１−６アルキルオキシ；Ｃ１−６アルキル；アリールおよびＣ３−１０シクロアルキルで置換されているＣ１−６アルキル；Ｃ１−６アルキルオキシ；Ｃ１−６アルキルオキシＣ１−６アルキルオキシ；Ｃ１−６アルキルカルボニル；Ｃ１−６アルキルオキシカルボニル；Ｃ１−６アルキルスルホニル；シアノＣ１−６アルキル；ヒドロキシＣ１−６アルキル；ヒドロキシＣ１−６アルキルオキシ；ヒドロキシＣ１−６アルキルアミノ；アミノＣ１−６アルキルオキシ；ジ（Ｃ１−６アルキル）アミノカルボニル；ジ（ヒドロキシＣ１−６アルキル）アミノ；（アリール）（Ｃ１−６アルキル）アミノ；ジ（Ｃ１−６アルキル）アミノＣ１−６アルキルオキシ；ジ（Ｃ１−６アルキル）アミノＣ１−６アルキルアミノ；ジ（Ｃ１−６アルキル）アミノＣ１−６アルキルアミノＣ１−６アルキル；アリールスルホニル；アリールスルホニルアミノ；アリールオキシ；アリールオキシＣ１−６アルキル；アリールＣ２−６アルケンジイル；ジ（Ｃ１−６アルキル）アミノ；ジ（Ｃ１−６アルキル）アミノＣ１−６アルキル；ジ（Ｃ１−６アルキル）アミノ（Ｃ１−６アルキル）アミノ；ジ（Ｃ１−６アルキル）アミノ（Ｃ１−６アルキル）アミノＣ１−６アルキル；ジ（Ｃ１−６アルキル）アミノＣ１−６アルキル（Ｃ１−６アルキル）アミノ；ジ（Ｃ１−６アルキル）アミノＣ１−６アルキル（Ｃ１−６アルキル）アミノＣ１−６アルキル；アミノスルホニルアミノ（Ｃ１−６アルキル）アミノ；アミノスルホニルアミノ（Ｃ１−６アルキル）アミノＣ１−６アルキル；ジ（Ｃ１−６アルキル）アミノスルホニルアミノ（Ｃ１−６アルキル）アミノ；ジ（Ｃ１−６アルキル）アミノスルホニルアミノ（Ｃ１−６アルキル）アミノＣ１−６アルキル；シアノ；チオフェニル；ジ（Ｃ１−６アルキル）アミノＣ１−６アルキル（Ｃ１−６アルキル）アミノＣ１−６アルキル、ジ（Ｃ１−６アルキル）アミノＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルピペラジニルＣ１−６アルキル、ヒドロキシＣ１−６アルキルピペラジニルＣ１−６アルキル、ヒドロキシＣ１−６アルキルオキシＣ１−６アルキルピペラジニルＣ１−６アルキル、ジ（Ｃ１−６アルキル）アミノスルホニルピペラジニルＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルオキシピペリジニル、Ｃ１−６アルキルオキシピペリジニルＣ１−６アルキル、モルホリニルＣ１−６アルキル、ヒドロキシＣ１−６アルキル（Ｃ１−６アルキル）アミノＣ１−６アルキルまたはジ（ヒドロキシＣ１−６アルキル）アミノＣ１−６アルキルで置換されているチオフェニル；フラニル；ヒドロキシＣ１−６アルキルで置換されているフラニル；ベンゾフラニル；イミダゾリル；オキサゾリル；アリールおよびＣ１−６アルキルで置換されているオキサゾリル；Ｃ１−６アルキルトリアゾリル；テトラゾリル；ピロリジニル；ピロリル；ピペリジニルＣ１−６アルキルオキシ；モルホリニル；Ｃ１−６アルキルモルホリニル；モルホリニルＣ１−６アルキルオキシ；モルホリニルＣ１−６アルキル；モルホリニルＣ１−６アルキルアミノ；モルホリニルＣ１−６アルキルアミノＣ１−６アルキル；ピペラジニル；Ｃ１−６アルキルピペラジニル；Ｃ１−６アルキルピペラジニルＣ１−６アルキルオキシ；ピペラジニルＣ１−６アルキル；ナフタレニルスルホニルピペラジニル；ナフタレニルスルホニルピペリジニル；ナフタレニルスルホニル；Ｃ１−６アルキルピペラジニルＣ１−６アルキル；Ｃ１−６アルキルピペラジニルＣ１−６アルキルアミノ；Ｃ１−６アルキルピペラジニルＣ１−６アルキルアミノＣ１−６アルキル；Ｃ１−６アルキルピペラジニルスルホニル；アミノスルホニルピペラジニルＣ１−６アルキルオキシ；アミノスルホニルピペラジニル；アミノスルホニルピペラジニルＣ１−６アルキル；ジ（Ｃ１−６アルキル）アミノスルホニルピペラジニル；ジ（Ｃ１−６アルキル）アミノスルホニルピペラジニルＣ１−６アルキル；ヒドロキシＣ１−６アルキルピペラジニル；ヒドロキシＣ１−６アルキルピペラジニルＣ１−６アルキル；Ｃ１−６アルキルオキシピペリジニル；Ｃ１−６アルキルオキシピペリジニルＣ１−６アルキル；ピペリジニルアミノＣ１−６アルキルアミノ；ピペリジニルアミノＣ１−６アルキルアミノＣ１−６アルキル；（Ｃ１−６アルキルピペリジニル）（ヒドロキシＣ１−６アルキル）アミノＣ１−６アルキルアミノ；（Ｃ１−６アルキルピペリジニル）（ヒドロキシＣ１−６アルキル）アミノＣ１−６アルキルアミノＣ１−６アルキル；ヒドロキシＣ１−６アルキルオキシＣ１−６アルキルピペラジニル；ヒドロキシＣ１−６アルキルオキシＣ１−６アルキルピペラジニルＣ１−６アルキル；（ヒドロキシＣ１−６アルキル）（Ｃ１−６アルキル）アミノ；（ヒドロキシＣ１−６アルキル）（Ｃ１−６アルキル）アミノＣ１−６アルキル；ヒドロキシＣ１−６アルキルアミノＣ１−６アルキル；ジ（ヒドロキシＣ１−６アルキル）アミノＣ１−６アルキル；ピロリジニルＣ１−６アルキル；ピロリジニルＣ１−６アルキルオキシ；ピラゾリル；チオピラゾリル；Ｃ１−６アルキルまたはトリハロＣ１−６アルキルから選択される２個の置換基で置換されているピラゾリル；ピリジニル；Ｃ１−６アルキルオキシ、アリールオキシまたはアリールで置換されているピリジニル；ピリミジニル；テトラヒドロピリミジニルピペラジニル；テトラヒドロピリミジニルピペラジニルＣ１−６アルキル；キノリニル；インドリル；フェニル；ハロ、アミノ、ニトロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルオキシ、ヒドロキシＣ１−４アルキル、トリフルオロメチル、トリフルオロメチルオキシ、ヒドロキシＣ１−４アルキルオキシ、Ｃ１−４アルキルスルホニル、Ｃ１−４アルキルオキシＣ１−４アルキルオキシ、Ｃ１−４アルキルオキシカルボニル、アミノＣ１−４アルキルオキシ、ジ（Ｃ１−４アルキル）アミノＣ１−４アルキルオキシ、ジ（Ｃ１−４アルキル）アミノ、ジ（Ｃ１−４アルキル）アミノカルボニル、ジ（Ｃ１−４アルキル）アミノＣ１−４アルキル、ジ（Ｃ１−４アルキル）アミノＣ１−４アルキルアミノＣ１−４アルキル、ジ（Ｃ１−４アルキル）アミノ（Ｃ１−４アルキル）アミノ、ジ（Ｃ１−４アルキル）アミノ（Ｃ１−４アルキル）アミノＣ１−４アルキル、ジ（Ｃ１−４アルキル）アミノＣ１−４アルキル（Ｃ１−４アルキル）アミノ、ジ（Ｃ１−４アルキル）アミノＣ１−４アルキル（Ｃ１−４アルキル）アミノＣ１−４アルキル、アミノスルホニルアミノ（Ｃ１−４アルキル）アミノ、アミノスルホニルアミノ（Ｃ１−４アルキル）アミノＣ１−４アルキル、ジ（Ｃ１−４アルキル）アミノスルホニルアミノ（Ｃ１−４アルキル）アミノ、ジ（Ｃ１−４アルキル）アミノスルホニルアミノ（Ｃ１−４アルキル）アミノＣ１−６アルキル、シアノ、ピペリジニルＣ１−４アルキルオキシ、ピロリジニルＣ１−４アルキルオキシ、アミノスルホニルピペラジニル、アミノスルホニルピペラジニルＣ１−４アルキル、ジ（Ｃ１−４アルキル）アミノスルホニルピペラジニル、ジ（Ｃ１−４アルキル）アミノスルホニルピペラジニルＣ１−４アルキル、ヒドロキシＣ１−４アルキルピペラジニル、ヒドロキシＣ１−４アルキルピペラジニルＣ１−４アルキル、Ｃ１−４アルキルオキシピペリジニル、Ｃ１−４アルキルオキシピペリジニルＣ１−４アルキル、ヒドロキシＣ１−４アルキルオキシＣ１−４アルキルピペラジニル、ヒドロキシＣ１−４アルキルオキシＣ１−４アルキルピペラジニルＣ１−４アルキル、（ヒドロキシＣ１−４アルキル）（Ｃ１−４アルキル）アミノ、（ヒドロキシＣ１−４アルキル）（Ｃ１−４アルキル）アミノＣ１−４アルキル、ジ（ヒドロキシＣ１−４アルキル）アミノ、ジ（ヒドロキシＣ１−４アルキル）アミノＣ１−４アルキル、フラニル、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ−で置換されているフラニル、ピロリジニルＣ１−４アルキル、ピロリジニルＣ１−４アルキルオキシ、モルホリニル、モルホリニルＣ１−４アルキルオキシ、モルホリニルＣ１−４アルキル、モルホリニルＣ１−４アルキルアミノ、モルホリニルＣ１−４アルキルアミノＣ１−４アルキル、ピペラジニル、Ｃ１−４アルキルピペラジニル、Ｃ１−４アルキルピペラジニルＣ１−４アルキルオキシ、ピペラジニルＣ１−４アルキル、Ｃ１−４アルキルピペラジニルＣ１−４アルキル、Ｃ１−４アルキルピペラジニルＣ１−４アルキルアミノ、Ｃ１−４アルキルピペラジニルＣ１−４アルキルアミノＣ１−６アルキル、テトラヒドロピリミジニルピペラジニル、テトラヒドロピリミジニルピペラジニルＣ１−４アルキル、ピペリジニルアミノＣ１−４アルキルアミノ、ピペリジニルアミノＣ１−４アルキルアミノＣ１−４アルキル、（Ｃ１−４アルキルピペリジニル）（ヒドロキシＣ１−４アルキル）アミノＣ１−４アルキルアミノ、（Ｃ１−４アルキルピペリジニル）（ヒドロキシＣ１−４アルキル）アミノＣ１−４アルキルアミノＣ１−４アルキル、ピリジニルＣ１−４アルキルオキシ、ヒドロキシＣ１−４
アルキルアミノ、ヒドロキシＣ１−４アルキルアミノＣ１−４アルキル、ジ（Ｃ１−４アルキル）アミノＣ１−４アルキルアミノ、アミノチアジアゾリル、アミノスルホニルピペラジニルＣ１−４アルキルオキシまたはチオフェニルＣ１−４アルキルアミノから独立して選択される１、２または３個の置換基で置換されているフェニルから選択され、
各Ｒ５およびＲ６は窒素上に水素の代わりに位置していてもよく、
この上に示したアリールはフェニル、または各々がハロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルオキシ、トリフルオロメチル、シアノまたはヒドロキシカルボニルから独立して選択される１個以上の置換基で置換されているフェニルである］
で表される化合物、これのＮ−オキサイド形態、薬学的に受け入れられる付加塩および立体化学異性体形態。
【請求項２】
ｔが０であり、
Ｒ１が−Ｃ（Ｏ）ＮＲ３Ｒ４、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルカンジイルＳＲ７、−ＮＲ８Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＯＨ）Ｒ７、−ＮＲ８Ｃ（Ｏ）Ｃ１−６アルカンジイルＳＲ７、−ＮＲ８Ｃ（Ｏ）Ｃ＝Ｎ（ＯＨ）Ｒ７または別のＺｎ−キレート基であり、ここで、Ｒ３およびＲ４が各々独立して水素、ヒドロキシ、ヒドロキシＣ１−６アルキルまたはアミノＣ１−６アルキルから選択され、
Ｒ２が水素、ヒドロキシ、アミノ、ヒドロキシＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルオキシ、アリールＣ１−６アルキル、アミノカルボニル、アミノＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルアミノＣ１−６アルキルまたはジ（Ｃ１−６アルキル）アミノＣ１−６アルキルであり、
−Ｌ−がＣ１−６アルカンジイル、カルボニルまたはスルホニルから選択される二価の基であり、
【化９】
2005525381.tif 000081
が（ａ−１）、（ａ−３）、（ａ−４）、（ａ−５）、（ａ−６）、（ａ−７）、（ａ−８）、（ａ−９）、（ａ−１０）、（ａ−１１）、（ａ−１２）、（ａ−１３）、（ａ−１４）、（ａ−１５）、（ａ−１６）、（ａ−１７）、（ａ−１８）、（ａ−１９）、（ａ−２０）、（ａ−２１）、（ａ−２２）、（ａ−２３）、（ａ−２４）、（ａ−２５）、（ａ−２６）、（ａ−２８）、（ａ−２９）、（ａ−３０）、（ａ−３１）、（ａ−３２）、（ａ−３３）、（ａ−３４）、（ａ−３５）、（ａ−３６）、（ａ−３７）、（ａ−３８）、（ａ−３９）、（ａ−４０）、（ａ−４１）、（ａ−４２）、（ａ−４４）、（ａ−４５）、（ａ−４６）、（ａ−４７）、（ａ−４８）または（ａ−５１）から選択される基であり、
ｓが０、１、２、３または４であり、
Ｒ５が水素；ハロ；ヒドロキシ；アミノ；ニトロ；トリハロＣ１−６アルキル；トリハロＣ１−６アルキルオキシ；Ｃ１−６アルキル；Ｃ１−６アルキルオキシ；Ｃ１−６アルキルカルボニル；Ｃ１−６アルキルオキシカルボニル；Ｃ１−６アルキルスルホニル；ヒドロキシＣ１−６アルキル；アリールオキシ；ジ（Ｃ１−６アルキル）アミノ；シアノ；チオフェニル；フラニル；ヒドロキシＣ１−６アルキルで置換されているフラニル；ベンゾフラニル；イミダゾリル；オキサゾリル；アリールおよびＣ１−６アルキルで置換されているオキサゾリル；Ｃ１−６アルキルトリアゾリル；テトラゾリル；ピロリジニル；ピロリル；モルホリニル；Ｃ１−６アルキルモルホリニル；ピペラジニル；Ｃ１−６アルキルピペラジニル；ヒドロキシＣ１−６アルキルピペラジニル；Ｃ１−６アルキルオキシピペリジニル；ピラゾリル；Ｃ１−６アルキルまたはトリハロＣ１−６アルキルから選択される１または２個の置換基で置換されているピラゾリル；ピリジニル；Ｃ１−６アルキルオキシ、アリールオキシまたはアリールで置換されているピリジニル；ピリミジニル；キノリニル；インドール；フェニル；またはハロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルオキシまたはトリフルオロメチルから独立して選択される１または２個の置換基で置換されているフェニルであり、そして
Ｒ６が水素；ハロ；ヒドロキシ；アミノ；ニトロ；トリハロＣ１−６アルキル；トリハロＣ１−６アルキルオキシ；Ｃ１−６アルキル；Ｃ１−６アルキルオキシ；Ｃ１−６アルキルカルボニル；Ｃ１−６アルキルオキシカルボニル；Ｃ１−６アルキルスルホニル；ヒドロキシＣ１−６アルキル；アリールオキシ；ジ（Ｃ１−６アルキル）アミノ；シアノ；ピリジニル；フェニル；またはハロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルオキシまたはトリフルオロメチルから独立して選択される１または２個の置換基で置換されているフェニルである、
請求項１記載の化合物。
【請求項３】
ｎが０、１または２であり、ｍが０、１または２であり、各Ｑが
【化１０】
2005525381.tif 000082
であり、各Ｘが窒素であり、Ｒ１が−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ＯＨ）であり、Ｒ２が水素であり、−Ｌ−がカルボニル、スルホニル、またはフェニルで置換されているＣ１−６アルカンジイルから選択される二価の基であり、
【化１１】
2005525381.tif 000083
が（ａ−１）、（ａ−２０）または（ａ−４３）から選択される基であり、ｓが０または１であり、そして各Ｒ５が独立して水素またはフェニルから選択される請求項１記載の化合物。
【請求項４】
ｎが０、１または２であり、ｍが１または２であり、各Ｑが
【化１２】
2005525381.tif 000084
であり、各Ｘが窒素であり、Ｒ１が−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ＯＨ）であり、Ｒ２が水素であり、−Ｌ−がカルボニルまたはスルホニルから選択される二価の基であり、
【化１３】
2005525381.tif 000085
が（ａ−１）または（ａ−２０）から選択される基であり、各ｓが独立して０または１であり、そして各Ｒ５が独立して水素またはアリールから選択される請求項１および３記載の化合物。
【請求項５】
化合物番号１、番号３、番号５、番号４、番号１４、番号１２、番号７、番号８および番号９
【表１】
2005525381.tif 000086
から選択される請求項１、３および４記載の化合物。
【請求項６】
薬剤的に受け入れられる担体および請求項１から５記載の化合物を活性材料として治療有効量で含有して成る薬剤組成物。
【請求項７】
請求項６記載の薬剤組成物を製造する方法であって、薬学的に受け入れられる担体と請求項１から５記載の化合物を密に混合する方法。
【請求項８】
薬剤として使用するための請求項１から５のいずれか記載の化合物。
【請求項９】
増殖性疾患治療用薬剤を製造するための請求項１から５のいずれか記載化合物の使用。
【請求項１０】
請求項１記載の化合物を製造する方法であって、
【化１４】
2005525381.tif 000087
式（ＩＩ）で表される中間体と適切な酸、例えばトリフルオロ酢酸などを反応させて式（Ｉ−ａ）［式中、Ｒ１は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ＯＨ）である］で表されるヒドロキサム酸を生じさせることを特徴とする方法。
【請求項１１】
生物学的サンプルに入っているＨＤＡＣを検出または同定する方法であって、標識を付けた請求項１記載の化合物とＨＤＡＣの間の複合体の形成を検出または測定することを含んで成る方法。
【請求項１２】
抗癌剤と請求項１から５のいずれか記載のＨＤＡＣ阻害剤の組み合わせ。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）の酵素活性を抑制する化合物に関する。本発明は、更に、それらを製造する方法、それらを含有させた組成物ばかりでなく、それらをＨＤＡＣの阻害でインビトロおよびインビボの両方で用いること、そして薬剤、例えば増殖状態、例えば癌および乾癬などを防止する薬剤として用いることにも関する。
【背景技術】
【０００２】
あらゆる真核細胞において、クロマチンのゲノムＤＮＡとヒストンが結合してヌクレオソームを形成している。各ヌクレオソームは各ヒストンＨ２Ａ、Ｈ２Ｂ、Ｈ３およびＨ４の２個のコピーで構成されている蛋白質オクタマー（ｏｃｔａｍｅｒ）を含有する。ＤＮＡがそのような蛋白質中心部の回りに巻き付いていてヒストンの塩基性アミノ酸とＤＮＡの負に帯電しているホスフェート基が相互作用している。そのような中心ヒストンの最も一般的な翻訳後修飾は、保存されている高度に塩基性のＮ−末端リシン残基が有するε−アミノ基の可逆的アセチル化である。ヒストンのアセチル化の定常状態は、競合するヒストンアセチルトランスフェラーゼ１種または２種以上とヒストンデアセチラーゼ（本明細書で「ＨＤＡＣ」と呼ぶ）１種または２種以上の間の動的平衡で決まる。長年に渡って、ヒストンのアセチル化および脱アセチルは転写調節に関係しているとされていた。いろいろなヒストンアセチルトランスフェラーゼおよびヒストンデアセチラーゼをコード化する遺伝子のクローン化が最近行われ、それによって、ヒストンアセチル化と転写調節の間の関係を説明することが可能になった。ヒストンの可逆的アセチル化が起こると結果としてクロマチンのリモデリングがもたらされる可能性があり、このように、それは遺伝子転写の調節機構として働く可能性がある。一般的には、ヒストンが過度にアセチル化されると遺伝子発現が助長される一方でヒストンの脱アセチルは転写抑制と相互に関係している。ヒストンアセチルトランスフェラーゼは転写共活性化因子（ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌ  ｃｏａｃｔｉｖａｔｏｒｓ）として働くことが分かった一方でヒストンデアセチラーゼは転写抑制経路に属することが分かった。
【０００３】
正常な細胞増殖にはヒストンのアセチル化と脱アセチルの間の動的平衡が必須である。ヒストンデアセチラーゼを阻害すると結果として細胞周期制止、細胞分化、アポトーシスそして形質転換した表現型の逆転がもたらされる。従って、ＨＤＡＣ阻害剤は細胞増殖性疾患または状態の治療で大きな治療効力を持ち得る（非特許文献１）。
【０００４】
ヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）阻害剤の研究によって、実際にそのような酵素は細胞の増殖および分化で重要な役割を果たしていることが分かってきている。阻害剤であるトリコスタチンＡ（Ｔｒｉｃｈｏｓｔａｔｉｎ  Ａ）（ＴＳＡ）はＧ１およびＧ２段階の両方で細胞周期制止をもたらし、いろいろな細胞系の形質転換した表現型を逆転させ、そしてフレンド白血病細胞などの分化を誘発する。ＴＳＡ（およびスベロイルアニリドヒドロキサム酸ＳＡＨＡ）は細胞増殖を抑制し、最終分化を誘発しかつマウスにおける腫瘍の発生を抑制すると報告された（非特許文献２）。
【０００５】
トリコスタチンＡはまた線維症、例えば肝臓線維症および肝硬変などの治療で用いるにも有用であると報告された（特許文献１）。
【０００６】
一般式
【０００７】
【化１】
2005525381.tif 000003
【０００８】
で表される化合物が特許文献２に記述されている。それには前記化合物の製造方法、それらを含んで成る組成物ばかりでなくそれらを殺菌・殺カビ剤として用いることが提供されている。
【０００９】
一般式
【００１０】
【化２】
2005525381.tif 000004
【００１１】
で表されるＮ−メチル−Ｄ−アスパルテート受容体サブタイプの選択的拮抗薬が特許文献３に記述されている。それには前記化合物を含んで成る薬剤組成物が提供されており、かつそのような化合物は神経学的および他の状態の治療で用いるに有用であることが開示されている。
【００１２】
一般式
【００１３】
【化３】
2005525381.tif 000005
【００１４】
で表される化合物が特許文献４に開示されている。それには更に前記化合物を含有する薬剤組成物、前記化合物を認識障害を治療する目的で用いること、そして前記化合物をアセチルコリンエステラーゼ阻害剤と組み合わせて用いることも記述されている。
【００１５】
哺乳動物のＸａ因子に対して活性を示す一般式Ａ−Ｙ−Ｄ−Ｅ−Ｇ−Ｊ−Ｚ−Ｌで表される化合物、それらを含有する薬剤組成物そして前記化合物を凝固障害の予防または治療目的で用いることが特許文献５に記述されている。
【００１６】
一般式
【００１７】
【化４】
2005525381.tif 000006
【００１８】
で表される化合物が特許文献６に記述されている。それには更に前記化合物を含んで成る薬剤組成物ばかりでなく前記化合物を高脂質血症、肥満症およびＩＩ型糖尿病治療用薬剤として用いることも提供されている。
【００１９】
一般式
【００２０】
【化５】
2005525381.tif 000007
【００２１】
で表されるトリプシン様セリンプロテアーゼ酵素阻害剤が特許文献７に開示されている。それには前記化合物含有薬剤組成物そして前記化合物を血栓塞栓障害を治療および予防するための抗凝固剤として用いることが提供されている。
【００２２】
一般式
【００２３】
【化６】
2005525381.tif 000008
【００２４】
で表される化合物が特許文献８に開示されている。それには前記化合物をＣＣＲ３関連病を治療する時に用いることが提供されている。
【００２５】
一般式
【００２６】
【化７】
2005525381.tif 000009
【００２７】
で表される化合物が特許文献９に記述されている。それには更に前記化合物の製造方法、それらを含んで成る組成物ばかりでなくそれらをトロンビン抑制剤として用いることも提供されている。
【００２８】
本発明の化合物は構造および活性の点で特許文献２、３、４、５、７、８および９に記述されている従来技術とは異なる。
【００２９】
とりわけ一般式Ｃｙ−Ｌ１−Ａｒ−Ｙ１−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−Ｚで表されるヒストンデアセチラーゼ阻害剤が特許文献１０に開示されており、細胞増殖性疾患および状態を治療する組成物および方法が提供されている。
【００３０】
式Ｃｙ２−Ｃｙ１−Ｘ−Ｙ１−ＷおよびＣｙ−Ｓ（Ｏ）２−ＮＨ−Ｙ３−Ｗで表されるヒストンデアセチラーゼ阻害剤が特許文献１１に開示されており、更に、細胞増殖性疾患および状態を治療する組成物および方法も提供されている。
【００３１】
解決しようとする課題は、高い酵素活性を有しかつまた有利な特性、例えば細胞活性および向上した生利用度、好適には経口生利用度なども示しかつ副作用がほとんどか全くないヒストンデアセチラーゼ阻害剤を提供することにある。
【特許文献１】１９９８年３月１１日付けで公開されたＧｅｅｒｔｓ他のヨーロッパ特許出願公開第０  ８２７  ７４２号
【特許文献２】１９９４年３月３日付けで公開された特許出願ＤＥ  ４２２８７９２
【特許文献３】１９９７年７月３日付けで公開された特許出願ＷＯ  ９７／２３２１６
【特許文献４】１９９９年９月１４日付けで公開された米国特許第５，９５２，３４９号
【特許文献５】２０００年１１月３０日付けで公開された特許出願ＷＯ  ００／７１５１６
【特許文献６】特許出願ＷＯ  ０２／４２２７１
【特許文献７】２００２年１月３日付けで公開された特許出願ＷＯ  ０２／００６５１
【特許文献８】２００２年３月７日付けで公開された特許出願ＷＯ  ０２／１８３３５
【特許文献９】２００３年１月３日付けで公開された特許出願ＷＯ  ０３／０００６５３
【特許文献１０】２００１年５月３１日付けで公開された特許出願ＷＯ  ０１／３８３２２
【特許文献１１】２００１年９月２７日付けで公開された特許出願ＷＯ  ０１／７０６７５
【非特許文献１】Ｍａｒｋｓ他、Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖｉｅｗｓ、Ｃａｎｃｅｒ  １：１９４−２０２、２００１
【非特許文献２】Ｆｉｎｎｉｎ他、Ｎａｔｕｒｅ、４０１：１８８−１９３、１９９９
【発明の開示】
【００３２】
本発明の新規な化合物はこの上に記述した問題を解決するものである。本化合物は構造の点で従来技術とは異なる。
【００３３】
本発明の化合物はヒストンデアセチラーゼをインビトロで阻害する優れた酵素活性を示す。本化合物は細胞活性に関して有利な特性を有しかつＧ１およびＧ２両方のチェックポイントにおける細胞周期進行の抑制に関して特異的特性［ｐ２１誘発能力］を有する。本発明の化合物は良好な代謝安定性および高い生利用度を示し、より詳細には、経口生利用度を示す。
【００３４】
本発明は、式（Ｉ）
【００３５】
【化８】
2005525381.tif 000010
【００３６】
［式中、
ｎは、０、１、２または３であり、そしてｎが０の時には直接結合を意図し、
ｍは、０、１、２または３であり、そしてｍが０の時には直接結合を意図し、
ｔは、０または１であり、そしてｔが０の時には直接結合を意図し、
各Ｑは、窒素または
【００３７】
【化９】
2005525381.tif 000011
【００３８】
であり、
各Ｘは、窒素または
【００３９】
【化１０】
2005525381.tif 000012
【００４０】
であり、
各Ｙは、窒素または
【００４１】
【化１１】
2005525381.tif 000013
【００４２】
であり、
各Ｚは、−ＣＨ２−または−Ｏ−であり、
Ｒ１は、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ３Ｒ４、−Ｎ（Ｈ）Ｃ（Ｏ）Ｒ７、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルカンジイルＳＲ７、−ＮＲ８Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＯＨ）Ｒ７、−ＮＲ８Ｃ（Ｏ）Ｃ１−６アルカンジイルＳＲ７、−ＮＲ８Ｃ（Ｏ）Ｃ＝Ｎ（ＯＨ）Ｒ７または別のＺｎ−キレート基であり、ここで、
Ｒ３およびＲ４は、各々独立して、水素、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルキル、ヒドロキシＣ１−６アルキル、アミノＣ１−６アルキルまたはアミノアリールから選択され、
Ｒ７は、独立して、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルカルボニル、アリールＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルピラジニル、ピリジノン、ピロリジノンまたはメチルイミダゾリルから選択され、
Ｒ８は、独立して、水素またはＣ１−６アルキルから選択され、
Ｒ２は、水素、ヒドロキシ、アミノ、ヒドロキシＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルオキシ、アリールＣ１−６アルキル、アミノカルボニル、ヒドロキシカルボニル、アミノＣ１−６アルキル、アミノカルボニルＣ１−６アルキル、ヒドロキシカルボニルＣ１−６アルキル、ヒドロキシアミノカルボニル、Ｃ１−６アルキルオキシカルボニル、Ｃ１−６アルキルアミノＣ１−６アルキルまたはジ（Ｃ１−６アルキル）アミノＣ１−６アルキルであり、
−Ｌ−は、Ｃ１−６アルカンジイル、カルボニル、スルホニル、またはフェニルで置換されているＣ１−６アルカンジイルから選択される二価の基であり、
【００４３】
【化１２】
2005525381.tif 000014
【００４４】
は、
【００４５】
【化１３】
2005525381.tif 000015
【００４６】
【化１４】
2005525381.tif 000016
【００４７】
【化１５】
2005525381.tif 000017
【００４８】
から選択される基であり、ここで、
各ｓは、独立して、０、１、２、３、４または５であり、
各Ｒ５およびＲ６は、独立して、水素；ハロ；ヒドロキシ；アミノ；ニトロ；トリハロＣ１−６アルキル；トリハロＣ１−６アルキルオキシ；Ｃ１−６アルキル；アリールおよびＣ３−１０シクロアルキルで置換されているＣ１−６アルキル；Ｃ１−６アルキルオキシ；Ｃ１−６アルキルオキシＣ１−６アルキルオキシ；Ｃ１−６アルキルカルボニル；Ｃ１−６アルキルオキシカルボニル；Ｃ１−６アルキルスルホニル；シアノＣ１−６アルキル；ヒドロキシＣ１−６アルキル；ヒドロキシＣ１−６アルキルオキシ；ヒドロキシＣ１−６アルキルアミノ；アミノＣ１−６アルキルオキシ；ジ（Ｃ１−６アルキル）アミノカルボニル；ジ（ヒドロキシＣ１−６アルキル）アミノ；（アリール）（Ｃ１−６アルキル）アミノ；ジ（Ｃ１−６アルキル）アミノＣ１−６アルキルオキシ；ジ（Ｃ１−６アルキル）アミノＣ１−６アルキルアミノ；ジ（Ｃ１−６アルキル）アミノＣ１−６アルキルアミノＣ１−６アルキル；アリールスルホニル；アリールスルホニルアミノ；アリールオキシ；アリールオキシＣ１−６アルキル；アリールＣ２−６アルケンジイル；ジ（Ｃ１−６アルキル）アミノ；ジ（Ｃ１−６アルキル）アミノＣ１−６アルキル；ジ（Ｃ１−６アルキル）アミノ（Ｃ１−６アルキル）アミノ；ジ（Ｃ１−６アルキル）アミノ（Ｃ１−６アルキル）アミノＣ１−６アルキル；ジ（Ｃ１−６アルキル）アミノＣ１−６アルキル（Ｃ１−６アルキル）アミノ；ジ（Ｃ１−６アルキル）アミノＣ１−６アルキル（Ｃ１−６アルキル）アミノＣ１−６アルキル；アミノスルホニルアミノ（Ｃ１−６アルキル）アミノ、アミノスルホニルアミノ（Ｃ１−６アルキル）アミノＣ１−６アルキル；ジ（Ｃ１−６アルキル）アミノスルホニルアミノ（Ｃ１−６アルキル）アミノ；ジ（Ｃ１−６アルキル）アミノスルホニルアミノ（Ｃ１−６アルキル）アミノＣ１−６アルキル；シアノ；チオフェニル；ジ（Ｃ１−６アルキル）アミノＣ１−６アルキル（Ｃ１−６アルキル）アミノＣ１−６アルキル、ジ（Ｃ１−６アルキル）アミノＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルピペラジニルＣ１−６アルキル、ヒドロキシＣ１−６アルキルピペラジニルＣ１−６アルキル、ヒドロキシＣ１−６アルキルオキシＣ１−６アルキルピペラジニルＣ１−６アルキル、ジ（Ｃ１−６アルキル）アミノスルホニルピペラジニルＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルオキシピペリジニル、Ｃ１−６アルキルオキシピペリジニルＣ１−６アルキル、モルホリニルＣ１−６アルキル、ヒドロキシＣ１−６アルキル（Ｃ１−６アルキル）アミノＣ１−６アルキルまたはジ（ヒドロキシＣ１−６アルキル）アミノＣ１−６アルキルで置換されているチオフェニル；フラニル；ヒドロキシＣ１−６アルキルで置換されているフラニル；ベンゾフラニル；イミダゾリル；オキサゾリル；アリールおよびＣ１−６アルキルで置換されているオキサゾリル；Ｃ１−６アルキルトリアゾリル；テトラゾリル；ピロリジニル；ピロリル；ピペリジニルＣ１−６アルキルオキシ；モルホリニル；Ｃ１−６アルキルモルホリニル；モルホリニルＣ１−６アルキルオキシ；モルホリニルＣ１−６アルキル；モルホリニルＣ１−６アルキルアミノ；モルホリニルＣ１−６アルキルアミノＣ１−６アルキル；ピペラジニル；Ｃ１−６アルキルピペラジニル；Ｃ１−６アルキルピペラジニルＣ１−６アルキルオキシ；ピペラジニルＣ１−６アルキル；ナフタレニルスルホニルピペラジニル；ナフタレニルスルホニルピペリジニル；ナフタレニルスルホニル；Ｃ１−６アルキルピペラジニルＣ１−６アルキル；Ｃ１−６アルキルピペラジニルＣ１−６アルキルアミノ；Ｃ１−６アルキルピペラジニルＣ１−６アルキルアミノＣ１−６アルキル；Ｃ１−６アルキルピペラジニルスルホニル；アミノスルホニルピペラジニルＣ１−６アルキルオキシ；アミノスルホニルピペラジニル；アミノスルホニルピペラジニルＣ１−６アルキル；ジ（Ｃ１−６アルキル）アミノスルホニルピペラジニル；ジ（Ｃ１−６アルキル）アミノスルホニルピペラジニルＣ１−６アルキル；ヒドロキシＣ１−６アルキルピペラジニル；ヒドロキシＣ１−６アルキルピペラジニルＣ１−６アルキル；Ｃ１−６アルキルオキシピペリジニル；Ｃ１−６アルキルオキシピペリジニルＣ１−６アルキル；ピペリジニルアミノＣ１−６アルキルアミノ；ピペリジニルアミノＣ１−６アルキルアミノＣ１−６アルキル；（Ｃ１−６アルキルピペリジニル）（ヒドロキシＣ１−６アルキル）アミノＣ１−６アルキルアミノ；（Ｃ１−６アルキルピペリジニル）（ヒドロキシＣ１−６アルキル）アミノＣ１−６アルキルアミノＣ１−６アルキル；ヒドロキシＣ１−６アルキルオキシＣ１−６アルキルピペラジニル；ヒドロキシＣ１−６アルキルオキシＣ１−６アルキルピペラジニルＣ１−６アルキル；（ヒドロキシＣ１−６アルキル）（Ｃ１−６アルキル）アミノ；（ヒドロキシＣ１−６アルキル）（Ｃ１−６アルキル）アミノＣ１−６アルキル；ヒドロキシＣ１−６アルキルアミノＣ１−６アルキル；ジ（ヒドロキシＣ１−６アルキル）アミノＣ１−６アルキル；ピロリジニルＣ１−６アルキル；ピロリジニルＣ１−６アルキルオキシ；ピラゾリル；チオピラゾリル；Ｃ１−６アルキルまたはトリハロＣ１−６アルキルから選択される２個の置換基で置換されているピラゾリル；ピリジニル；Ｃ１−６アルキルオキシ、アリールオキシまたはアリールで置換されているピリジニル；ピリミジニル；テトラヒドロピリミジニルピペラジニル；テトラヒドロピリミジニルピペラジニルＣ１−６アルキル；キノリニル；インドリル；フェニル；ハロ、アミノ、ニトロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルオキシ、ヒドロキシＣ１−４アルキル、トリフルオロメチル、トリフルオロメチルオキシ、ヒドロキシＣ１−４アルキルオキシ、Ｃ１−４アルキルスルホニル、Ｃ１−４アルキルオキシＣ１−４アルキルオキシ、Ｃ１−４アルキルオキシカルボニル、アミノＣ１−４アルキルオキシ、ジ（Ｃ１−４アルキル）アミノＣ１−４アルキルオキシ、ジ（Ｃ１−４アルキル）アミノ、ジ（Ｃ１−４アルキル）アミノカルボニル、ジ（Ｃ１−４アルキル）アミノＣ１−４アルキル、ジ（Ｃ１−４アルキル）アミノＣ１−４アルキルアミノＣ１−４アルキル、ジ（Ｃ１−４アルキル）アミノ（Ｃ１−４アルキル）アミノ、ジ（Ｃ１−４アルキル）アミノ（Ｃ１−４アルキル）アミノＣ１−４アルキル、ジ（Ｃ１−４アルキル）アミノＣ１−４アルキル（Ｃ１−４アルキル）アミノ、ジ（Ｃ１−４アルキル）アミノＣ１−４アルキル（Ｃ１−４アルキル）アミノＣ１−４アルキル、アミノスルホニルアミノ（Ｃ１−４アルキル）アミノ、アミノスルホニルアミノ（Ｃ１−４アルキル）アミノＣ１−４アルキル、ジ（Ｃ１−４アルキル）アミノスルホニルアミノ（Ｃ１−４アルキル）アミノ、ジ（Ｃ１−４アルキル）アミノスルホニルアミノ（Ｃ１−４アルキル）アミノＣ１−６アルキル、シアノ、ピペリジニルＣ１−４アルキルオキシ、ピロリジニルＣ１−４アルキルオキシ、アミノスルホニルピペラジニル、アミノスルホニルピペラジニルＣ１−４アルキル、ジ（Ｃ１−４アルキル）アミノスルホニルピペラジニル、ジ（Ｃ１−４アルキル）アミノスルホニルピペラジニルＣ１−４アルキル、ヒドロキシＣ１−４アルキルピペラジニル、ヒドロキシＣ１−４アルキルピペラジニルＣ１−４アルキル、Ｃ１−４アルキルオキシピペリジニル、Ｃ１−４アルキルオキシピペリジニルＣ１−４アルキル、ヒドロキシＣ１−４アルキルオキシＣ１−４アルキルピペラジニル、ヒドロキシＣ１−４アルキルオキシＣ１−４アルキルピペラジニルＣ１−４アルキル、（ヒドロキシＣ１−４アルキル）（Ｃ１−４アルキル）アミノ、（ヒドロキシＣ１−４アルキル）（Ｃ１−４アルキル）アミノＣ１−４アルキル、ジ（ヒドロキシＣ１−４アルキル）アミノ、ジ（ヒドロキシＣ１−４アルキル）アミノＣ１−４アルキル、フラニル、−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ＝ＣＨ−で置換されているフラニル、ピロリジニルＣ１−４アルキル、ピロリジニルＣ１−４アルキルオキシ、モルホリニル、モルホリニルＣ１−４アルキルオキシ、モルホリニルＣ１−４アルキル、モルホリニルＣ１−４アルキルアミノ、モルホリニルＣ１−４アルキルアミノＣ１−４アルキル、ピペラジニル、Ｃ１−４アルキルピペラジニル、Ｃ１−４アルキルピペラジニルＣ１−４アルキルオキシ、ピペラジニルＣ１−４アルキル、Ｃ１−４アルキルピペラジニルＣ１−４アルキル、Ｃ１−４アルキルピペラジニルＣ１−４アルキルアミノ、Ｃ１−４アルキルピペラジニルＣ１−４アルキルアミノＣ１−６アルキル、テトラヒドロピリミジニルピペラジニル、テトラヒドロピリミジニルピペラジニルＣ１−４アルキル、ピペリジニルアミノＣ１−４アルキルアミノ、ピペリジニルアミノＣ１−４アルキルアミノＣ１−４アルキル、（Ｃ１−４アルキルピペリジニル）（ヒドロキシＣ１−４アルキル）アミノＣ１−４アルキルアミノ、（Ｃ１−４アルキルピペリジニル）（ヒドロキシＣ１−４アルキル）アミノＣ１−４アルキルアミノＣ１−４アルキル、ピリジニルＣ１−４アルキルオキシ、ヒドロキシＣ１−４
アルキルアミノ、ヒドロキシＣ１−４アルキルアミノＣ１−４アルキル、ジ（Ｃ１−４アルキル）アミノＣ１−４アルキルアミノ、アミノチアジアゾリル、アミノスルホニルピペラジニルＣ１−４アルキルオキシまたはチオフェニルＣ１−４アルキルアミノから独立して選択される１、２または３個の置換基で置換されているフェニルから選択され、
各Ｒ５およびＲ６は窒素上に水素の代わりに位置していてもよく、
この上に示したアリールはフェニル、または各々がハロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルオキシ、トリフルオロメチル、シアノまたはヒドロキシカルボニルから独立して選択される１個以上の置換基で置換されているフェニルである］
で表される化合物、これのＮ−オキサイド形態、薬学的に受け入れられる付加塩および立体化学異性体形態に関する。
【００４９】
ヒストンデアセチラーゼと相互作用してそれの活性を抑制、より特別にはそれの酵素活性を抑制する能力を有する化合物を示す目的で用語「ヒストンデアセチラーゼ阻害剤」または「ヒストンデアセチラーゼの阻害剤」を用いる。ヒストンデアセチラーゼの酵素活性を抑制するは、ヒストンデアセチラーゼがヒストンからアセチル基を除去する能力を低下させることを意味する。そのような阻害は好適には特異的である、即ちヒストンデアセチラーゼがヒストンからアセチル基を除去する能力を低下させるのはヒストンデアセチラーゼ阻害剤の濃度が他のある種の無関係な生物学的影響をもたらすに要する阻害剤濃度よりも低い濃度の時である。
【００５０】
この上で行った定義で用いかつ本明細書の以下で用いる如き「ハロ」はフルオロ、クロロ、ブロモおよびヨードの総称であり、Ｃ１−４アルキルは炭素原子数が１から４の直鎖および分枝鎖飽和炭化水素基、例えばメチル、エチル、プロピル、ブチル、１−メチルエチル、２−メチルプロピルなどを定義するものであり、Ｃ１−６アルキルにはＣ１−４アルキルおよび炭素原子数が５から６の高級同族体、例えばペンチル、２−メチル−ブチル、ヘキシル、２−メチルペンチルなどが含まれ、Ｃ１−６アルカンジイルは、炭素原子数が１から６の二価の直鎖および分枝鎖飽和炭化水素基、例えばメチレン、１，２−エタンジイル、１，３−プロパンジイル、１，４−ブタンジイル、１，５−ペンタンジイル、１，６−ヘキサンジイルおよびこれらの分枝異性体、例えば２−メチルペンタンジイル、３−メチルペンタンジイル、２，２−ジメチルブタンジイル、２，３−ジメチルブタンジイルなどを定義するものであり、トリハロＣ１−６アルキルは、同一もしくは異なるハロ置換基を３個含有するＣ１−６アルキル、例えばトリフルオロメチルなどを定義するものであり、Ｃ２−６アルケルジイルは、二重結合を１個含有する炭素原子数が２から６の二価の直鎖および分枝鎖炭化水素基、例えばエテンジイル、２−プロペンジイル、３−ブテンジイル、２−ペンテンジイル、３−ペンテンジイル、３−メチル−２−ブテンジイルなどを定義するものであり、そしてアミノアリールは、アミノで置換されているアリールを定義するものである。
【００５１】
用語「別のＺｎキレート基」は、酵素結合部位に存在する可能性のあるＺｎイオンと相互作用し得る基を指す。
【００５２】
薬学的に受け入れられる付加塩は薬学的に受け入れられる酸付加塩および薬学的に受け入れられる塩基付加塩を包含する。本明細書の上に述べた如き薬学的に受け入れられる酸付加塩は、これに、式（Ｉ）で表される化合物が形成し得る無毒の治療活性酸付加塩形態を包含させることを意味する。前記式（Ｉ）で表される化合物が塩基特性を有する場合、この塩基形態を適切な酸で処理することで薬学的に受け入れられる酸付加塩に変化させることができる。適切な酸には、例えば無機酸、例えばハロゲン化水素酸、例えば塩酸または臭化水素酸など、硫酸、硝酸、燐酸など、または有機酸、例えば酢酸、トリフルオロ酢酸、プロピオン酸、ヒドロキシ酢酸、乳酸、ピルビン酸、しゅう酸、マロン酸、こはく酸（即ちブタン二酸）、マレイン酸、フマル酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、シクラミン酸、サリチル酸、ｐ−アミノ−サリチル酸、パモ酸（ｐａｍｏｉｃ  ａｃｉｄ）などが含まれる。
【００５３】
前記式（Ｉ）で表される化合物が酸性特性を有する場合、この酸形態を適切な有機もしくは無機塩基で処理することで薬学的に受け入れられる塩基付加塩に変化させることができる。適切な塩基塩形態には、例えばアンモニウム塩、アルカリおよびアルカリ土類金属の塩、例えばリチウム、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウム塩など、有機塩基との塩、例えばベンザチン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、ヒドラバミン塩など、そしてアミノ酸、例えばアルギニン、リシンなどとの塩が含まれる。
【００５４】
用語「酸もしくは塩基付加塩」には、また、前記式（Ｉ）で表される化合物が形成し得る水化物および溶媒付加形態も含まれる。そのような形態の例は、例えば水化物、アルコラートなどである。
【００５５】
本明細書で用いる如き用語「式（Ｉ）で表される化合物の立体化学異性体形態」は、前記式（Ｉ）で表される化合物が持ち得る同じ配列の結合で結合している同じ原子で構成されているが交換不能な異なる三次元構造を有する可能なあらゆる化合物を定義するものである。特に明記も指示もしない限り、ある化合物の化学的表示は、この化合物が取り得る可能なあらゆる立体化学異性体形態の混合物を包含する。前記混合物は前記化合物の基本的な分子構造を有するあらゆるジアステレオマーおよび／またはエナンチオマーを含有している可能性がある。前記式（Ｉ）で表される化合物のあらゆる立体化学異性体形態（純粋な形態または互いの混合物の両方とも）を本発明の範囲内に包含させることを意図する。
【００５６】
前記式（Ｉ）で表される化合物のＮ−オキサイド形態は、これに、１個または数個の窒素原子が酸化されていわゆるＮ−オキサイド、特にピペリジン、ピペラジンまたはピリダジニルの窒素の１個以上がＮ−オキサイド化を受けてＮ−オキサイドになっている式（Ｉ）で表される化合物を包含させることを意味する。
【００５７】
前記式（Ｉ）で表される化合物の数種はまた互変異性形態でも存在し得る。そのような形態を前記式に明瞭には示さなかったが、それらを本発明の範囲内に包含させることを意図する。
【００５８】
用語「式（Ｉ）で表される化合物」を本明細書の以下で用いる場合にはいつでも、それにまた薬学的に受け入れられる付加塩およびあらゆる立体異性体形態を包含させることを意味する。
【００５９】
本明細書で用いる如き用語「ヒストンデアセチラーゼ」および「ＨＤＡＣ」は、ヒストンのＮ末端に位置するリシン残基が有するε−アミノ基からアセチル基を除去する系列の酵素の中のいずれか１種を指すことを意図する。本文で特に明記しない限り、用語「ヒストン」は、いずれかの種のヒストン蛋白質（Ｈ１、Ｈ２Ａ、Ｈ２Ｂ、Ｈ３、Ｈ４およびＨ５を包含）のいずれかを指すことを意味する。ヒトＨＤＡＣ蛋白質または遺伝子産物には、これらに限定するものでないが、ＨＤＡＣ−１、ＨＤＡＣ−２、ＨＤＡＣ−３、ＨＤＡＣ−４、ＨＤＡＣ−５、ＨＤＡＣ−６、ＨＤＡＣ−７、ＨＤＡＣ−８、ＨＤＡＣ−９およびＨＤＡＣ−１０が含まれる。このヒストンデアセチラーゼはまた原生動物または菌・カビ源に由来するものであってもよい。
【００６０】
興味の持たれる化合物の１番目の群は、下記の制限：
ａ）ｎが０、１または２であり、
ｂ）ｍが０、１または２であり、
ｃ）各Ｑが
【００６１】
【化１６】
2005525381.tif 000018
【００６２】
であり、
ｄ）各Ｘが窒素であり、
ｅ）Ｒ１が−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ＯＨ）であり、
ｆ）Ｒ２が水素であり、
ｇ）−Ｌ−がカルボニル、スルホニル、またはフェニルで置換されているＣ１−６アルカンジイルから選択される二価の基であり、
ｈ）
【００６３】
【化１７】
2005525381.tif 000019
【００６４】
が（ａ−１）、（ａ−２０）または（ａ−４３）から選択される基であり、
ｉ）各ｓが独立して０または１であり、
ｊ）各Ｒ５が独立して水素またはフェニルから選択される、
の中の１つ以上が当てはまる前記式（Ｉ）で表される化合物で構成される群である。
【００６５】
興味の持たれる化合物の２番目の群は、下記の制限：
ａ）ｎが０、１または２であり、
ｂ）ｍが１または２であり、
ｃ）各Ｑが
【００６６】
【化１８】
2005525381.tif 000020
【００６７】
であり、
ｄ）各Ｘが窒素であり、
ｄ）Ｒ１が−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ＯＨ）であり、
ｆ）Ｒ２が水素であり、
ｅ）−Ｌ−がカルボニルまたはスルホニルから選択される二価の基であり、
ｆ）
【００６８】
【化１９】
2005525381.tif 000021
【００６９】
が（ａ−１）または（ａ−２０）から選択される基であり、
ｇ）各ｓが独立して０または１であり、
ｈ）各Ｒ５が独立して水素またはアリールから選択される、
の中の１つ以上が当てはまる前記式（Ｉ）で表される化合物で構成される群である。
【００７０】
興味の持たれる化合物の３番目の群は、Ｒ１が−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ＯＨ）である前記式（Ｉ）で表される化合物で構成される群である。
【００７１】
興味の持たれる化合物の４番目の群は、下記の制限：
ａ）ｔが０であり、
ｂ）Ｒ１が−Ｃ（Ｏ）ＮＲ３Ｒ４、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルカンジイルＳＲ７、−ＮＲ８Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＯＨ）Ｒ７、−ＮＲ８Ｃ（Ｏ）Ｃ１−６アルカンジイルＳＲ７、−ＮＲ８Ｃ（Ｏ）Ｃ＝Ｎ（ＯＨ）Ｒ７または別のＺｎ−キレート基であり、ここで、Ｒ３およびＲ４が各々独立して水素、ヒドロキシ、ヒドロキシＣ１−６アルキルまたはアミノＣ１−６アルキルから選択され、
ｃ）Ｒ２が水素、ヒドロキシ、アミノ、ヒドロキシＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルオキシ、アリールＣ１−６アルキル、アミノカルボニル、アミノＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルアミノＣ１−６アルキルまたはジ（Ｃ１−６アルキル）アミノＣ１−６アルキルであり、
ｄ）−Ｌ−がＣ１−６アルカンジイル、カルボニルまたはスルホニルから選択される二価の基であり、
ｅ）
【００７２】
【化２０】
2005525381.tif 000022
【００７３】
が（ａ−１）、（ａ−３）、（ａ−４）、（ａ−５）、（ａ−６）、（ａ−７）、（ａ−８）、（ａ−９）、（ａ−１０）、（ａ−１１）、（ａ−１２）、（ａ−１３）、（ａ−１４）、（ａ−１５）、（ａ−１６）、（ａ−１７）、（ａ−１８）、（ａ−１９）、（ａ−２０）、（ａ−２１）、（ａ−２２）、（ａ−２３）、（ａ−２４）、（ａ−２５）、（ａ−２６）、（ａ−２８）、（ａ−２９）、（ａ−３０）、（ａ−３１）、（ａ−３２）、（ａ−３３）、（ａ−３４）、（ａ−３５）、（ａ−３６）、（ａ−３７）、（ａ−３８）、（ａ−３９）、（ａ−４０）、（ａ−４１）、（ａ−４２）、（ａ−４４）、（ａ−４５）、（ａ−４６）、（ａ−４７）、（ａ−４８）または（ａ−５１）から選択される基であり、
ｆ）各ｓが独立して０、１、２、３または４であり、
ｇ）Ｒ５が水素；ハロ；ヒドロキシ；アミノ；ニトロ；トリハロＣ１−６アルキル；トリハロＣ１−６アルキルオキシ；Ｃ１−６アルキル；Ｃ１−６アルキルオキシ；Ｃ１−６アルキルカルボニル；Ｃ１−６アルキルオキシカルボニル；Ｃ１−６アルキルスルホニル；ヒドロキシＣ１−６アルキル；アリールオキシ；ジ（Ｃ１−６アルキル）アミノ；シアノ；チオフェニル；フラニル；ヒドロキシＣ１−６アルキルで置換されているフラニル；ベンゾフラニル；イミダゾリル；オキサゾリル；アリールおよびＣ１−６アルキルで置換されているオキサゾリル；Ｃ１−６アルキルトリアゾリル；テトラゾリル；ピロリジニル；ピロリル；モルホリニル；Ｃ１−６アルキルモルホリニル；ピペラジニル；Ｃ１−６アルキルピペラジニル；ヒドロキシＣ１−６アルキルピペラジニル；Ｃ１−６アルキルオキシピペリジニル；ピラゾリル；Ｃ１−６アルキルまたはトリハロＣ１−６アルキルから選択される１または２個の置換基で置換されているピラゾリル；ピリジニル；Ｃ１−６アルキルオキシ、アリールオキシまたはアリールで置換されているピリジニル；ピリミジニル；キノリニル；インドール；フェニル；またはハロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルオキシまたはトリフルオロメチルから独立して選択される１または２個の置換基で置換されているフェニルであり、
ｈ）Ｒ６が水素；ハロ；ヒドロキシ；アミノ；ニトロ；トリハロＣ１−６アルキル；トリハロＣ１−６アルキルオキシ；Ｃ１−６アルキル；Ｃ１−６アルキルオキシ；Ｃ１−６アルキルカルボニル；Ｃ１−６アルキルオキシカルボニル；Ｃ１−６アルキルスルホニル；ヒドロキシＣ１−６アルキル；アリールオキシ；ジ（Ｃ１−６アルキル）アミノ；シアノ；ピリジニル；フェニル；またはハロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルオキシまたはトリフルオロメチルから独立して選択される１または２個の置換基で置換されているフェニルである、
の中の１つ以上が当てはまる前記式（Ｉ）で表される化合物で構成される群である。
【００７４】
好適な化合物の群は、
ｔが０であり、
Ｒ１が−Ｃ（Ｏ）ＮＲ３Ｒ４、−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルカンジイルＳＲ７、−ＮＲ８Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＯＨ）Ｒ７、−ＮＲ８Ｃ（Ｏ）Ｃ１−６アルカンジイルＳＲ７、−ＮＲ８Ｃ（Ｏ）Ｃ＝Ｎ（ＯＨ）Ｒ７または別のＺｎ−キレート基であり、ここで、Ｒ３およびＲ４が各々独立して水素、ヒドロキシ、ヒドロキシＣ１−６アルキルまたはアミノＣ１−６アルキルから選択され、
Ｒ２が水素、ヒドロキシ、アミノ、ヒドロキシＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルオキシ、アリールＣ１−６アルキル、アミノカルボニル、アミノＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルアミノＣ１−６アルキルまたはジ（Ｃ１−６アルキル）アミノＣ１−６アルキルであり、
−Ｌ−がＣ１−６アルカンジイル、カルボニルまたはスルホニルから選択される二価の基であり、
【００７５】
【化２１】
2005525381.tif 000023
【００７６】
が（ａ−１）、（ａ−３）、（ａ−４）、（ａ−５）、（ａ−６）、（ａ−７）、（ａ−８）、（ａ−９）、（ａ−１０）、（ａ−１１）、（ａ−１２）、（ａ−１３）、（ａ−１４）、（ａ−１５）、（ａ−１６）、（ａ−１７）、（ａ−１８）、（ａ−１９）、（ａ−２０）、（ａ−２１）、（ａ−２２）、（ａ−２３）、（ａ−２４）、（ａ−２５）、（ａ−２６）、（ａ−２８）、（ａ−２９）、（ａ−３０）、（ａ−３１）、（ａ−３２）、（ａ−３３）、（ａ−３４）、（ａ−３５）、（ａ−３６）、（ａ−３７）、（ａ−３８）、（ａ−３９）、（ａ−４０）、（ａ−４１）、（ａ−４２）、（ａ−４４）、（ａ−４５）、（ａ−４６）、（ａ−４７）、（ａ−４８）または（ａ−５１）から選択される基であり、
ｓが０、１、２、３または４であり、
Ｒ５が水素；ハロ；ヒドロキシ；アミノ；ニトロ；トリハロＣ１−６アルキル；トリハロＣ１−６アルキルオキシ；Ｃ１−６アルキル；Ｃ１−６アルキルオキシ；Ｃ１−６アルキルカルボニル；Ｃ１−６アルキルオキシカルボニル；Ｃ１−６アルキルスルホニル；ヒドロキシＣ１−６アルキル；アリールオキシ；ジ（Ｃ１−６アルキル）アミノ；シアノ；チオフェニル；フラニル；ヒドロキシＣ１−６アルキルで置換されているフラニル；ベンゾフラニル；イミダゾリル；オキサゾリル；アリールおよびＣ１−６アルキルで置換されているオキサゾリル；Ｃ１−６アルキルトリアゾリル；テトラゾリル；ピロリジニル；ピロリル；モルホリニル；Ｃ１−６アルキルモルホリニル；ピペラジニル；Ｃ１−６アルキルピペラジニル；ヒドロキシＣ１−６アルキルピペラジニル；Ｃ１−６アルキルオキシピペリジニル；ピラゾリル；Ｃ１−６アルキルまたはトリハロＣ１−６アルキルから選択される１または２個の置換基で置換されているピラゾリル；ピリジニル；Ｃ１−６アルキルオキシ、アリールオキシまたはアリールで置換されているピリジニル；ピリミジニル；キノリニル；インドール；フェニル；またはハロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルオキシまたはトリフルオロメチルから独立して選択される１または２個の置換基で置換されているフェニルであり、そして
Ｒ６が水素；ハロ；ヒドロキシ；アミノ；ニトロ；トリハロＣ１−６アルキル；トリハロＣ１−６アルキルオキシ；Ｃ１−６アルキル；Ｃ１−６アルキルオキシ；Ｃ１−６アルキルカルボニル；Ｃ１−６アルキルオキシカルボニル；Ｃ１−６アルキルスルホニル；ヒドロキシＣ１−６アルキル；アリールオキシ；ジ（Ｃ１−６アルキル）アミノ；シアノ；ピリジニル；フェニル；またはハロ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルオキシまたはトリフルオロメチルから独立して選択される１または２個の置換基で置換されているフェニルである、
前記式（Ｉ）で表される化合物で構成される群である。
【００７７】
より好適な化合物の群は、
ｎが０、１または２であり、ｍが０、１または２であり、各Ｑが
【００７８】
【化２２】
2005525381.tif 000024
【００７９】
であり、各Ｘが窒素であり、Ｒ１が−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ＯＨ）であり、Ｒ２が水素であり、−Ｌ−がカルボニル、スルホニル、またはフェニルで置換されているＣ１−６アルカンジイルから選択される二価の基であり、
【００８０】
【化２３】
2005525381.tif 000025
【００８１】
が（ａ−１）、（ａ−２０）または（ａ−４３）から選択される基であり、ｓが０または１であり、そして各Ｒ５が独立して水素またはフェニルから選択される前記式（Ｉ）で表される化合物で構成される群である。
【００８２】
更により好適な化合物の群は、ｎが０、１または２であり、ｍが１または２であり、各Ｑが
【００８３】
【化２４】
2005525381.tif 000026
【００８４】
であり、各Ｘが窒素であり、Ｒ１が−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ＯＨ）であり、Ｒ２が水素であり、−Ｌ−がカルボニルまたはスルホニルから選択される二価の基であり、
【００８５】
【化２５】
2005525381.tif 000027
【００８６】
が（ａ−１）または（ａ−２０）から選択される基であり、各ｓが独立して０または１であり、そして各Ｒ５が独立して水素またはアリールから選択される前記式（Ｉ）で表される化合物で構成される群である。
【００８７】
最も好適な化合物は化合物番号１、番号３、番号５、番号４、番号１４、番号１２、番号７、番号８および番号９である。
【００８８】
【表１】
2005525381.tif 000028
【００８９】
前記式（Ｉ）で表される化合物およびこれらの薬学的に受け入れられる塩およびＮ−オキサイドおよび立体化学異性化形態の調製は通常様式で実施可能である。例として下記の一般的合成ルートを含める：
ａ）式（ＩＩ）で表される中間体と適切な酸、例えばトリフルオロ酢酸などを反応させることで式（Ｉ）［式中、Ｒ１は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ＯＨ）である］で表されるヒドロキサム酸［この化合物を式（Ｉ−ａ）で表される化合物と呼ぶ］を生じさせることができる。前記反応を適切な溶媒、例えばメタノールなど中で実施する。
【００９０】
【化２６】
2005525381.tif 000029
【００９１】
ｂ）式（ＩＩＩ）で表される中間体と式（ＩＶ）で表される中間体を適切な反応体、例えば一塩酸Ｎ’−（エチルカルボニミドイル）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−１，３−プロパンジアミン（ＥＤＣ）および１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ）などの存在下で反応させることで式（ＩＩ）で表される中間体を生じさせることができる。この反応は適切な溶媒、例えばジクロロメタンとテトラヒドロフランの混合物など中で実施可能である。
【００９２】
【化２７】
2005525381.tif 000030
【００９３】
ｃ）式（Ｖ）で表される中間体と適切な塩基、例えばＮａＯＨなどを適切な溶媒、例えばエタノールなどの存在下で反応させることで式（ＩＩＩ）で表される中間体を生じさせることができる。
【００９４】
【化２８】
2005525381.tif 000031
【００９５】
また、固相合成技術を用いて前記式（Ｉ）で表される化合物の調製を便利に実施することも可能である。固相合成は、一般に、合成時にある中間体を重合体である支持体と反応させることを伴う。次に、そのように重合体に担持させた中間体を多数の合成段階を通してそれが担持されたままにしてもよい。各段階後、その樹脂を濾過した後、それをいろいろな溶媒で数回洗浄することで不純物を除去する。各段階毎にその樹脂を分離して次の段階でいろいろな中間体と反応させることで多種多様な化合物を合成することができる。この手順の最終段階後に前記樹脂を反応体または工程で処理して、その樹脂をサンプルから開裂させる。固相化学で用いられる技術のより詳細な説明が例えば「Ｔｈｅ  Ｃｏｍｂｉｎａｔｏｒｉａｌ  Ｉｎｄｅｘ」（Ｂ．Ｂｕｎｉｎ、Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ）およびＮｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ’ｓ  １９９９  Ｃａｔａｌｏｇｕｅ  ＆  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ（Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ  ＡＧ、スイス）（両方とも引用することによって本明細書に組み入れられる）などに記述されている。
【００９６】
前記式（Ｉ）で表される化合物および中間体の数種はこれらの構造の中に立体幾何中心（ｓｔｅｒｅｏｇｅｎｉｃ  ｃｅｎｔｒｅ）を少なくとも１つ持ち得る。そのような立体幾何中心はＲまたはＳ形態で存在し得る。
【００９７】
本明細書の上に記述した方法で生じさせた如き前記式（Ｉ）で表される化合物は一般にエナンチオマーのラセミ混合物であり、これは本技術分野で公知の分割手順に従って互いに分離可能である。式（Ｉ）のラセミ化合物を適切なキラリティーを持つ酸と反応させて相当するジアステレオマー塩形態に変化させてもよい。その後、例えば選択的もしくは分別結晶化などで前記ジアステレオマー塩形態を分離した後、アルカリを用いてエナンチオマーをそれから遊離させる。エナンチオマー形態の式（Ｉ）で表される化合物を分離する別の様式は、キラル固定相を用いた液クロの使用を伴う。また、適切な出発材料の相当する高純度の立体化学異性体形態を用いて前記高純度の立体化学異性体形態を生じさせることも可能であるが、但しその反応が立体特異的に起こることを条件とする。特定の立体異性体が望まれる場合、好適には、立体特異的製造方法を用いて前記化合物の合成を行うことになるであろう。そのような方法では有利にエナンチオマー的に高純度の出発材料を用いることになるであろう。
【００９８】
前記式（Ｉ）で表される化合物、これらの薬学的に受け入れられる酸付加塩および立体異性体形態は、ヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）阻害効果を有する点で価値有る薬理学的特性を有する。
【００９９】
本発明は細胞（形質転換した細胞を包含）の異常な増殖を抑制する方法を提供し、ここでは、本発明の化合物を有効量で投与することで抑制を行う。細胞の異常な増殖は、正常な規則的機構から独立した細胞の増殖を指す（例えば接触抑制の損失）。これには、癌細胞の増殖制止、分化停止および／または癌アポトーシスをもたらすことによる直接的および腫瘍の新血管新生を抑制することによる間接的の両方で腫瘍の増殖を抑制することが含まれる。
【０１００】
本発明は、また、腫瘍の治療を必要としている被験体、例えば哺乳動物（より特別にはヒト）などに本発明の化合物を有効量で投与することで腫瘍の増殖を抑制する方法も提供する。特に、本発明は、本発明の化合物を有効量で投与することで腫瘍の増殖を抑制する方法を提供する。抑制可能な腫瘍の例は、これらに限定するものでないが、肺癌［例えば腺癌、そして非小細胞肺癌を包含］、膵臓癌（例えば膵臓癌、例えば外分泌膵臓癌など）、結腸癌（例えば結腸直腸癌、例えば結腸腺癌および結腸腺腫など）、前立腺癌［進行した疾患（ａｄｖａｎｃｅｄ  ｄｉｓｅａｓｅ）、リンパ系の造血腫瘍（例えば急性リンパ性白血病、Ｂ細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫）を包含］、脊髄性白血病［例えば急性脊髄性白血病（ＡＭＬ）］、甲状腺小胞癌、脊髄形成異常症候群（ＭＤＳ）、間葉が源の腫瘍（例えば線維肉腫および横紋筋肉腫）、黒色腫、奇形癌、神経芽腫、神経膠腫、皮膚の良性腫瘍［例えば角化棘細胞腫（ｋｅｒａｔｏａｃａｎｔｈｏｍａｓ）］、乳癌（例えば進んだ乳癌）、腎臓癌、卵巣癌、膀胱癌および表皮癌である。
【０１０１】
本発明に従う化合物を他の治療目的で用いることも可能であり、例えば下記が可能である：
ａ）癌を治療する目的で腫瘍に照射を受けさせる前、受けさせている間または受けさせた後に本発明に従う化合物を投与することで腫瘍を放射線療法に対して増感させる、
ｂ）関節症および骨病理学的状態、例えば慢性関節リューマチ、変形性関節症、若年性関節炎、通風、多発性関節炎、乾癬性関節炎、強直性脊椎炎および全身性エリトマトーデスなどの治療、
ｃ）平滑筋細胞増殖（血管増殖障害、アテローム性動脈硬化症および再狭窄を包含）の抑制、
ｄ）炎症状態および皮膚状態、例えば潰瘍性大腸炎、クローン病、アレルギー性鼻炎、宿主対移植片病、結膜炎、喘息、ＡＲＤＳ、ベーチェット病、移植拒絶、ウチカリア（ｕｔｉｃａｒｉａ）、アレルギー性皮膚炎、円形脱毛症、強皮症、発疹、湿疹、皮膚筋炎、アクネ、糖尿病、全身性エリトマトーデス、川崎病、多発性硬化症、気腫、のう胞性線維症および慢性気管支炎などの治療、
ｅ）子宮内膜症、子宮類線維症、機能障害子宮出血および子宮内膜過形成の治療、
ｆ）眼の血管新生［レチナールおよび絨毛膜様管に影響を与える血管病（ｖａｓｃｕｌｏｐａｔｈｙ）を包含］の治療、
ｇ）心臓機能不全の治療、
ｈ）免疫抑制状態の防止、例えばＨＩＶ感染の治療など、
ｉ）腎臓機能不全の治療、
ｊ）内分泌障害の抑制、
ｋ）糖新生不全の防止、
ｌ）神経病、例えばパーキンソン病など、または認識障害をもたらす神経病、例えばアルツハイマー病またはポリグルタミン関連ニューロン病などの治療、
ｍ）神経節病、例えば筋委縮性側索硬化症などの防止、
ｎ）脊髄筋萎縮症の治療、
ｏ）遺伝子の発現を増強することで治療され得る他の病理学的状態の治療
ｐ）遺伝子治療の強化。
【０１０２】
従って、本発明は、前記式（Ｉ）で表される化合物を上述した状態の中の１種以上を治療する薬剤として用いるばかりでなく前記式（Ｉ）で表される化合物をそのような薬剤の製造で用いることも開示する。
【０１０３】
前記式（Ｉ）で表される化合物、これらの薬学的に受け入れられる酸付加塩および立体異性体形態は、生物学的サンプルに入っているＨＤＡＣを検出または同定する目的で使用可能である点で価値有る診断特性を持ち得、これは、標識を付けておいた化合物とＨＤＡＣの間で起こる複合体形成を検出または測定することを含んで成る。
【０１０４】
このような検出または同定方法では、標識剤、例えば放射性同位元素、酵素、蛍光物質、発光物質などで標識を付けておいた化合物を用いることができる。放射性同位元素の例には１２５Ｉ、１３１Ｉ、３Ｈおよび１４Ｃが含まれる。通常は、検出可能な反応に触媒作用を及ぼす適切な基質と酵素を接合させることで酵素を検出可能にする。その例には、例えばベータ−ガラクトシダーゼ、ベータ−グルコシダーゼ、アルカリ性ホスファターゼ、ペルオキシダーゼおよびマレートデヒドロゲナーゼ、好適には西洋わさびペルオキシダーゼが含まれる。発光物質には、例えばルミノール、ルミノール誘導体、ルシフェリン、エクオリンおよびルシフェラーゼが含まれる。
【０１０５】
生物学的サンプルは体の組織および体液であると定義することができる。体液の例は脳脊髄液、血液、血漿、血清、尿、痰、唾液などである。
【０１０６】
本主題化合物は有用な薬理学的特性を有することを鑑み、投与の目的でいろいろな薬剤形態に調合可能である。
【０１０７】
本発明の薬剤組成物を調製する時、塩基もしくは酸付加塩形態の個々の化合物を活性材料として有効量で薬学的に受け入れられる担体と一緒に密な混合物として組み合わせるが、前記担体が取り得る形態は投与に望まれる調剤の形態に応じて幅広く多様である。望ましくは、本薬剤組成物を好適には経口、直腸、経皮または非経口注入投与に適した単位投薬形態にする。例えば、本組成物を経口投薬形態で調製する時には、通常の薬剤媒体のいずれも使用可能であり、例えば経口用液状調剤、例えば懸濁液、シロップ、エリキシルおよび溶液などの場合には水、グリコール、油、アルコールなど、または粉末、ピル、カプセルおよび錠剤の場合には固体状担体、例えば澱粉、糖、カオリン、滑剤、結合剤、崩壊剤などを用いてもよい。
【０１０８】
投与の容易さが理由で錠剤およびカプセルが最も有利な経口投薬単位形態に相当し、この場合には明らかに固体状の薬剤担体を用いる。非経口用組成物の場合の担体は、一般に、少なくとも大部分が無菌水を含んで成るが、例えば溶解性を補助する目的で他の材料を含有させることも可能である。例えば、注射可能な溶液を調製することも可能であり、この場合の担体には食塩水溶液、グルコース溶液または食塩水溶液とグルコース溶液の混合物が含まれる。また、注射可能な懸濁液を調製することも可能であり、この場合には、適切な液状担体、懸濁剤などを用いてもよい。経皮投与に適した組成物の場合、その担体に場合により浸透増強剤および／または適切な湿潤剤を含めてもよく、それを場合により僅かな比率のいずれかの性質の適切な添加剤と一緒に組み合わせてもよいが、そのような添加剤は皮膚に有害な影響を有意な度合で引き起こさない添加剤である。前記添加剤は皮膚への投与を容易にしそして／または所望組成物の調製に役立つ可能性がある。本組成物はいろいろな様式で投与可能であり、例えば経皮パッチ、スポットオン（ｓｐｏｔ−ｏｎ）または軟膏などとして投与可能である。
【０１０９】
投与が容易でありかつ投薬が均一であることから上述した薬剤組成物を投薬単位形態に調合するのが特に有利である。本明細書および本明細書の請求の範囲で用いる如き投薬単位形態は、各単位が所望の治療効果がもたらされるように計算して前以て決めておいた量の活性材料を必要な薬剤担体と一緒に含有する単位投薬として用いるに適した物理的に個々別々の単位を指す。そのような投薬単位形態の例は錠剤（刻み目付きまたは被覆錠剤を包含）、カプセル、ピル、粉末パケット、ウエハース、注射可能溶液または懸濁液、茶サジ一杯、テーブルスプーン一杯など、そしてそれらを複数に分離させた物（ｓｅｇｒｅｇａｔｅｄ  ｍｕｌｔｉｐｌｅｓ）である。
【０１１０】
本分野の技術者は、本明細書の以下に示す試験結果から有効な量を容易に決定することができるであろう。治療有効量は一般に体重１ｋｇ当たり０．０５ｍｇから１００ｍｇ、特に体重１ｋｇ当たり０．０５ｍｇから１０ｍｇであろうと考えている。１日全体に渡って必要な用量を２分割、３分割、４分割またはそれ以上に分割した副次用量（ｓｕｂ−ｄｏｓｅｓ）として適切な間隔で投与する方が適切である可能性もある。前記副次用量を単位投薬形態として調合することも可能であり、例えば単位投薬形態当たりの活性材料含有量が０．５から５００ｍｇ、特に１０ｍｇから５００ｍｇになるように調合することも可能である。
【０１１１】
本発明の別の面として、ＨＤＡＣ阻害剤と別の抗癌剤の組み合わせを特に薬剤、より具体的には癌および関連病を治療するための薬剤として用いることを意図する。
【０１１２】
この上に示した状態を治療する時、本発明の化合物を有利には他の１種以上の薬剤、より詳細には他の抗癌剤と組み合わせて用いてもよい。抗癌剤の例は下記である：
−  白金配位化合物、例えばシスプラチン（ｃｉｓｐｌａｔｉｎ）、カルボプラチン（ｃａｒｂｏｐｌａｔｉｎ）またはオキサリプラチン（ｏｘａｌｙｐｌａｔｉｎ）；
−  タキサン化合物、例えばパクリタキセル（ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ）またはドセタキセル（ｄｏｃｅｔａｘｅｌ）；
−  トポイソメラーゼＩ阻害剤、例えばカンプトテシン化合物、例えばイリノテカン（ｉｒｉｎｏｔｅｃａｎ）またはトポテカン（ｔｏｐｏｔｅｃａｎ）；
−  トポイソメラーゼＩＩ阻害剤、例えば抗腫瘍性ポドフィロトキシン誘導体、例えばエトポシド（ｅｔｏｐｏｓｉｄｅ）またはテニポシド（ｔｅｎｉｐｏｓｉｄｅ）；
−  抗腫瘍性ビンカアルカロイド、例えばビンブラスチン（ｖｉｎｂｌａｓｔｉｎｅ）、ビンクリスチン（ｖｉｎｃｒｉｓｔｉｎｅ）またはビノレルビン（ｖｉｎｏｒｅｌｂｉｎｅ）；
−  抗腫瘍性ヌクレオシド誘導体、例えば５−フルオロウラシル、ゲンシタビン（ｇｅｍｃｉｔａｂｉｎｅ）またはカペシタビン（ｃａｐｅｃｉｔａｂｉｎｅ）；
−  アルキル化剤、例えば窒素マスタードまたはニトロソ尿素、例えばシクロホスファミド、クロラムブシル（ｃｈｌｏｒａｍｂｕｃｉｌ）、カルムスチン（ｃａｒｍｕｓｔｉｎｅ）またはロムスチン（ｌｏｍｕｓｔｉｎｅ）；
−  抗腫瘍性アントラシクリン誘導体、例えばダウノルビシン（ｄａｕｎｏｒｕｂｉｃｉｎ）、ドキソルビシン（ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ）、イダルビシン（ｉｄａｒｕｂｉｃｉｎ）またはミトキサントロン（ｍｉｔｏｘａｎｔｒｏｎｅ）；
−  ＨＥＲ２抗体、例えばトラスツズマブ（ｔｒａｓｔｕｚｕｍａｂ）；
−  エストロゲン受容体拮抗薬または選択的エストロゲン受容体調節剤、例えばタモキフェン（ｔａｍｏｘｉｆｅｎ）、トレミフェン（ｔｏｒｅｍｉｆｅｎｅ）、ドロロキシフェン（ｄｒｏｌｏｘｉｆｅｎｅ）、ファスロデックス（ｆａｓｌｏｄｅｘ）またはラロキシフェン（ｒａｌｏｘｉｆｅｎｅ）；
−  アロマターゼ阻害剤、例えばエキセメスタン（ｅｘｅｍｅｓｔａｎｅ）、アナストロゾール（ａｎａｓｔｒｏｚｏｌｅ）、レトラゾール（ｌｅｔｒａｚｏｌｅ）およびボロゾール（ｖｏｒｏｚｏｌｅ）；
−  分化剤、例えばレチノイド、ビタミンＤおよびレチン酸代謝遮断剤（ＲＡＭＢＡ）、例えばアクタン（ａｃｃｕｔａｎｅ）；
−  ＤＮＡメチルトランスフェラーゼ阻害剤、例えばアザシチジン（ａｚａｃｙｔｉｄｉｎｅ）；
−  キナーゼ阻害剤、例えばフラボペリドール（ｆｌａｖｏｐｅｒｉｄｏｌ）、イマチニブメシレート（ｉｍａｔｉｎｉｂ  ｍｅｓｙｌａｔｅ）またはゲフィチニブ（ｇｅｆｉｔｉｎｉｂ）；
−  ファルネシルトランスフェラーゼ阻害剤；または
−  他のＨＤＡＣ阻害剤。
【０１１３】
本明細書では、用語「白金配位化合物」を、イオン形態の白金を与える腫瘍細胞増殖抑制性白金配位化合物のいずれかを指す目的で用いる。
【０１１４】
用語「タキサン化合物」は、タキサン環系を有する種類の化合物を指し、これは特定のいちい木種（Ｔａｘｕｓ）から抽出された抽出液に関係しているか或はそれから誘導される。
【０１１５】
用語「トポイソメラーゼ阻害剤」は、真核細胞におけるＤＮＡトポロジーを変える能力を有する酵素を示す目的で用いる。それらは重要な細胞機能および細胞増殖にとって重要である。真核細胞には２種類のトポイソメラーゼ、即ちタイプＩおよびタイプＩＩが存在する。トポイソメラーゼＩは分子量が約１００，０００の単量体酵素である。この酵素はＤＮＡと結合して過渡的短鎖破壊を誘発し、二重螺旋を巻き戻し（即ち、それを解き）そしてその後に前記破壊部を再密封し（ｒｅｓｅａｌｓ）た後、そのＤＮＡ鎖から解離する。トポイソメラーゼＩＩも同様な作用機構を有するが、これは、ＤＮＡ鎖破壊の誘導またはフリーラジカルの生成を伴う。
【０１１６】
用語「カンプトテシン化合物」は、親のカンプトテシン化合物に関係しているか或はそれから誘導された化合物を示す目的で用い、前記化合物は、中国の木であるカンプトテシン・アクミナタ（Ｃａｍｐｔｏｔｈｅｃｉｎ  ａｃｕｍｉｎａｔａ）およびインドの木であるノタポジテス・フォエチダ（Ｎｏｔｈａｐｏｄｙｔｅｓ  ｆｏｅｔｉｄａ）から得られる水に不溶なアルカロイドである。
【０１１７】
用語「ポドフィロトキシン化合物」は、親のポドフィロトキシンに関係しているか或はそれから誘導された化合物を示す目的で用い、それはマンドレーク植物から抽出されたものである。
【０１１８】
用語「抗腫瘍性ビンカアルカロイド」は、つるにちそう植物（Ｖｉｎｃａ  ｒｏｓｅａ）の抽出液に関係しているか或はそれから誘導された化合物を示す目的で用いる。
【０１１９】
用語「アルキル化剤」は、生物学的に重要な巨大分子、例えばＤＮＡなどにアルキル基を生理学的条件下で寄与する能力を有する共通の特徴を有する多様な群の化学品を包含する。より重要な作用剤、例えば窒素マスタードおよびニトロソ尿素などの中で最も重要な作用剤の場合の活性アルキル化部分は、インビボで複雑な減成反応（これらのいくつかは酵素による）が起こることで生じる。アルキル化剤が示す最も重要な薬理学的作用は、細胞増殖、特にＤＮＡ合成および細胞の分割に関係した基本的機構を乱す作用である。そのようなアルキル化剤は急速に増殖する組織の中で果たすＤＮＡの機能および一体性を妨害する能力を有するが、このことが、それらの治療用途および毒性の多くの基礎になっている。
【０１２０】
用語「抗腫瘍性アントラシクリン誘導体」は、菌・カビであるＳｔｒｅｐ．ペウチクス（ｐｅｕｔｉｃｕｓ）  ｖａｒ．カエシウス（ｃａｅｓｉｕｓ）から得られる抗生物質およびこれらの誘導体を包含し、これらは、グリコシド結合によって結合している通常ではない糖であるダウノサミンを伴うテトラシクリン環構造を有することを特徴とする。
【０１２１】
特定の患者ではヒト表皮成長因子受容体２蛋白質（ＨＥＲ２）が原発性乳癌の中で増幅することと臨床的予後が劣ることが相互に関係していることが分かっている。トラスツズマブは、ヒトに適応させた高純度の組換え型ＤＮＡ誘導モノクローナルＩｇＧ１カッパ抗体であり、これはＨＥＲ２受容体の細胞外ドメインと高い親和性と特異性を伴って結合する。
【０１２２】
数多くの乳癌はエストロゲン受容体を有し、このような腫瘍の増殖はエストロゲンによって刺激される可能性がある。用語「エストロゲン受容体拮抗薬」および「選択的エストロゲン受容体調節剤」は、エストロゲン受容体（ＥＲ）と結合するエストラジールを競合的に抑制するものを示す目的で用いる。選択的エストロゲン受容体調節剤は、ＥＲと結合すると、その受容体が有する三次元形状の変化を誘発し、それによって、それがＤＮＡ上のエストロゲン反応要素（ＥＲＥ）と結合するのが抑制される。
【０１２３】
閉経後の女性の場合、循環するエストロゲンの主な源は副腎および卵巣のアンドロゲン（アンドロステンジオンおよびテストステロン）が抹消組織の中でアロマターゼ酵素によってエストロゲン（エストロンおよびエストラジオール）に変化することに由来する。アロマターゼを阻害するか或は不活性にすることでエストロゲンを剥奪することは、ホルモン依存乳癌にかかっているある閉経後患者にとって有効かつ選択的治療である。
【０１２４】
本明細書では、用語「抗エストロゲン剤」をこれにエストロゲン受容体拮抗薬および選択的エストロゲン受容体調節剤ばかりでなくまたこの上で考察した如きアロマターゼ阻害剤も包含させる目的で用いる。
【０１２５】
用語「分化剤」に、細胞増殖をいろいろな様式で抑制しかつ分化を誘発し得る化合物を包含させる。ビタミンＤおよびレチノイドは幅広く多様な正常および悪性型の細胞の増殖および分化の調節で重要な役割を果たすことが知られている。レチン酸代謝遮断剤（ＲＡＭＢＡ）は、シトクロムＰ４５０が介在するレチン酸異化を抑制することによって内因性レチン酸の濃度を高くする。
【０１２６】
ヒト新形成における最も一般的な異常はとりわけＤＮＡメチル化の変化である。選択した遺伝子のプロモーターの中で過剰なメチル化が起こると一般にそれに伴って関係する遺伝子の不活性化が起こる。用語「ＤＮＡメチルトランスフェラーゼ阻害剤」は、ＤＮＡメチルトランスフェラーゼを薬理学的に抑制しかつ腫瘍抑制遺伝子発現を再活性化することを通して作用する化合物を示す目的で用いる。
【０１２７】
用語「キナーゼ阻害剤」は、細胞周期進展およびプログラムされた細胞死（アポトーシス）に関与するキナーゼの効力のある阻害剤を包含する。
【０１２８】
用語「ファルネシルトランスフェラーゼ阻害剤」は、ラス（Ｒａｓ）および他の細胞内蛋白質のファルネシル化を防止するように考案された化合物を示す目的で用いる。それらは悪性細胞の増殖および生存に対して効果を示すことが分かっている。
【０１２９】
用語「他のＨＤＡＣ阻害剤」は、これらに限定するものでないが、
−  短鎖脂肪酸、例えばブチレート、４−フェニルブチレートまたはバルプロイックアシッド（ｖａｌｐｒｏｉｃ  ａｃｉｄ）；
−  ヒドロキサム酸、例えばスベロイルアニリドヒドロキサム酸（ＳＡＨＡ）、ビアリールヒドロキサメートＡ−１６１９０６、二環状アリール−Ｎ−ヒドロキシカルボキサミド、ピロキサミド、ＣＧ−１５２、ＰＸＤ−１０１、スルホンアミドヒドロキサム酸、ＬＡＱ−８２４、トリコスタチンＡ（ＴＳＡ）、オキサムフラチン（ｏｘａｍｆｌａｔｉｎ）、スクリプタイド（ｓｃｒｉｐｔａｉｄ）、ｍ−カルボキシ桂皮酸ビスヒドロキサム酸またはトラポキシン−ヒドロキサム酸類似物；
−  環状テトラペプチド、例えばトラポキシン（ｔｒａｐｏｘｉｎ）、アピジシン（ａｐｉｄｉｃｉｎ）またはデプシペプチド；
−  ベンズアミド、例えばＭＳ−２７５またはＣＩ−９９４；または
−  デプデシン（ｄｅｐｕｄｅｃｉｎ）；
を包含する。
【０１３０】
癌を治療する時、この上に記述したように、本発明に従う化合物を照射と協力させて患者に投与してもよい。照射はイオン化放射線、特にガンマ放射線、特に直線加速器または放射性核種（今日通常用いられる）が発するガンマ放射線を意味する。放射性核種による腫瘍の照射は外部または内部であってもよい。
【０１３１】
本発明は、また、本発明に従うＨＤＡＣ阻害剤と抗癌剤の本発明に従う組み合わせにも関する。
【０１３２】
本発明は、また、医学治療、例えば腫瘍細胞の増殖を抑制するための本発明に従う組み合わせにも関する。
【０１３３】
本発明は、また、腫瘍細胞の増殖を抑制するための本発明に従う組み合わせにも関する。
【０１３４】
本発明は、また、ヒト被験体における腫瘍細胞の増殖を抑制する方法にも関し、この方法は、前記被験体に本発明に従う組み合わせを有効量で投与することを含んで成る。
【０１３５】
本発明は、更に、本発明に従う組み合わせを有効量で投与することで細胞（形質転換した細胞を包含）の異常な増殖を抑制する方法も提供する。
【０１３６】
本ＨＤＡＣ阻害剤と他の薬剤は同時（例えば個別または単一組成物として）またはいずれかの順で逐次的に投与可能である。後者の場合、その２種類の化合物を有利または相乗効果の達成を確保するに充分な量および様式で充分な期間投与する。本組み合わせの各成分に好適な方法および投与順そして個々の投薬量および管理は投与すべき本ＨＤＡＣ阻害剤および他の個々の薬剤、それらを投与する経路、治療すべき個々の腫瘍および治療すべき個々の宿主に依存するであろうことは理解されるであろう。本分野の技術者は本明細書に挙げた情報を考慮に入れて通常の方法を用いることで最適な方法および投与順および投薬量および管理を容易に決定することができるであろう。
【０１３７】
前記白金配位化合物を有利には治療過程毎に体の表面積１平方メートル当たり１から５００ｍｇ（ｍｇ／ｍ２）、例えば５０から４００ｍｇ／ｍ２の投薬量で投与し、詳細には、シスプラチンの場合には約７５ｍｇ／ｍ２の投薬量で投与し、そしてカルボプラチンの場合には約３００ｍｇ／ｍ２の投薬量で投与する。
【０１３８】
前記タキサン化合物を有利には治療過程毎に体の表面積１平方メートル当たり５０から４００ｍｇ（ｍｇ／ｍ２）、例えば７５から２５０ｍｇ／ｍ２の投薬量で投与し、詳細には、パクリタキセルの場合には約１７５から２５０ｍｇ／ｍ２の投薬量で投与し、そしてドセタキセルの場合には約７５から１５０ｍｇ／ｍ２の投薬量で投与する。
【０１３９】
前記カンプトテシン化合物を有利には治療過程毎に体の表面積１平方メートル当たり０．１から４００ｍｇ（ｍｇ／ｍ２）、例えば１から３００ｍｇ／ｍ２の投薬量で投与し、詳細には、イリノテカンの場合には約１００から３５０ｍｇ／ｍ２の投薬量で投与し、そしてトポテカンの場合には約１から２ｍｇ／ｍ２の投薬量で投与する。
【０１４０】
前記抗腫瘍性ポドフィロトキシン誘導体を有利には治療過程毎に体の表面積１平方メートル当たり３０から３００ｍｇ（ｍｇ／ｍ２）、例えば５０から２５０ｍｇ／ｍ２の投薬量で投与し、詳細には、エトポシドの場合には約３５から１００ｍｇ／ｍ２の投薬量で投与し、そしてテニポシドの場合には約５０から２５０ｍｇ／ｍ２の投薬量で投与する。
【０１４１】
前記抗腫瘍性ビンカアルカロイドを有利には治療過程毎に体の表面積１平方メートル当たり２から３０ｍｇ（ｍｇ／ｍ２）の投薬量で投与し、詳細には、ビンブラスチンの場合には約３から１２ｍｇ／ｍ２の投薬量で投与し、ビンクリスチンの場合には約１から２ｍｇ／ｍ２の投薬量で投与し、そしてビノレルビンの場合には約１０から３０ｍｇ／ｍ２の投薬量で投与する。
【０１４２】
前記抗腫瘍性ヌクレオシド誘導体を有利には治療過程毎に体の表面積１平方メートル当たり２００から２５００ｍｇ（ｍｇ／ｍ２）、例えば７００から１５００ｍｇ／ｍ２の投薬量で投与し、詳細には、５−ＦＵの場合には２００から５００ｍｇ／ｍ２の投薬量で投与し、ゲムシタビンの場合には約８００から１２００ｍｇ／ｍ２の投薬量で投与し、そしてカペシタビンの場合には約１０００から２５００ｍｇ／ｍ２の投薬量で投与する。
【０１４３】
前記アルキル化剤、例えば窒素マスタードまたはニトロソ尿素などを有利には治療過程毎に体の表面積１平方メートル当たり１００から５００ｍｇ（ｍｇ／ｍ２）、例えば１２０から２００ｍｇ／ｍ２の投薬量で投与し、詳細には、シクロホスファミドの場合にはそれを約１００から５００ｍｇ／ｍ２の投薬量で投与し、クロラムブシルの場合には約０．１から０．２ｍｇ／ｍ２の投薬量で投与し、カルムスチンの場合には約１５０から２００ｍｇ／ｍ２の投薬量で投与し、そしてロムスチンの場合には約１００から１５０ｍｇ／ｍ２の投薬量で投与する。
【０１４４】
前記抗腫瘍性アントラシクリン誘導体を有利には治療過程毎に体の表面積１平方メートル当たり１０から７５ｍｇ（ｍｇ／ｍ２）、例えば１５から６０ｍｇ／ｍ２の投薬量で投与し、詳細には、ドキソルビシンの場合には約４０から７５ｍｇ／ｍ２の投薬量で投与し、ダウノルビシンの場合には約２５から４５ｍｇ／ｍ２の投薬量で投与し、そしてイダルビシンの場合には約１０から１５ｍｇ／ｍ２の投薬量で投与する。
【０１４５】
トラスツズマブを有利には治療過程毎に体の表面積１平方メートル当たり１から５ｍｇ（ｍｇ／ｍ２）、特に２から４ｍｇ／ｍ２の投薬量で投与する。
【０１４６】
抗エストロゲン剤を個々の作用剤および治療すべき状態に応じて有利には１日当たり約１から１００ｍｇの投薬量で投与する。タモキシフェンを有利には経口で５から５０ｍｇ、好適には１０から２０ｍｇの投薬量で日に２回投与し、この治療を治療効果が達成されかつ維持されるに充分な期間継続する。トレミフェンを有利には経口で約６０ｍｇの投薬量で日に１回投与し、この治療を治療効果が達成されかつ維持されるに充分な期間継続する。アナストロゾールを有利には経口で約１ｍｇの投薬量で日に１回投与する。ドロロキシフェンを有利には経口で約２０−１００ｍｇの投薬量で日に１回投与する。ラロキシフェンを有利には経口で約６０ｍｇの投薬量で日に１回投与する。エキセメスタンを有利には経口で約２５ｍｇの投薬量で日に１回投与する。
【０１４７】
前記投薬量を治療過程当たり例えば１回、２回またはそれ以上投与してもよく、これを例えば７日、１４日、２１日または２８日毎に繰り返してもよい。
【０１４８】
本発明に従う組み合わせに含める成分、即ち本ＨＤＡＣ阻害剤と他の薬剤は、これらが有効な薬理学的特性を有することを考慮して、いろいろな投与目的の薬剤形態に調合可能である。前記成分を個別の薬剤組成物として個別に調合してもよいか或は両方の成分を含有する単一の薬剤組成物として調合してもよい。
【０１４９】
従って、本発明は、また、本ＨＤＡＣ阻害剤と他の薬剤を１種以上の薬学的担体と一緒に含んで成る薬剤組成物にも関する。
【０１５０】
本発明は、また、本発明に従うＨＤＡＣ阻害剤と抗癌剤を１種以上の薬学的担体と一緒に含んで成る薬剤組成物の形態の本発明に従う組み合わせにも関する。
【０１５１】
本発明は、更に、腫瘍細胞の増殖を抑制する薬剤組成物を製造する時に本発明に従う組み合わせを用いることにも関する。
【０１５２】
本発明は、更に、癌に苦しんでいる患者を治療する時に同時、個別または逐次的に用いるに適した組み合わせ調剤として本発明に従うＨＤＡＣ阻害剤を１番目の活性材料として含有しかつ抗癌剤を２番目の活性材料として含有する製品にも関する。
【実施例】
【０１５３】
実験部分
以下の実施例は説明の目的で示すものである。
【０１５４】
本明細書では以降、「ＤＣＭ」はジクロロメタンを意味し、「ＤＭＡ」はジメチルアセトアミドを意味し、「ＤＭＦ」はジメチルホルムアミドを意味し、「ＥｔＯＡｃ」は酢酸エチルを意味し、「ｉＰｒＯＨ」はイソプロピルを意味し、「ＭｅＯＨ」はメタノールを意味し、「ＥｔＯＡｃ」は酢酸エチルを意味し、「ＥｔＯＨ」はエタノールを意味し、「ＴＥＡ」はトリエチルアミンを意味し、「ＴＦＡ」はトリフルオロ酢酸を意味し、そして「ＴＨＦ」はテトラヒドロフランを意味する。
Ａ．  中間体の調製
実施例Ａ１
ａ）
【０１５５】
【化２９】
2005525381.tif 000032
【０１５６】
の調製
２−（４−ピペリジニル）−１Ｈ−イソインドール−１，３（２Ｈ）−ジオン（０．００７８モル）とＴＥＡ（０．０１０９モル）をＤＣＭ（２０ｍｌ）に入れることで生じさせた５℃の混合物にＮ２流下で塩化２−ナフタレンスルホニル（０．００９４モル）をＤＣＭ（１０ｍｌ）に入れることで生じさせた溶液を加えた。この混合物を室温に週末の間保持した。１０％の炭酸カリウムを加えた。この混合物をＤＣＭで抽出した。その有機層を分離し、乾燥（ＭｇＳＯ４）させ、濾過した後、溶媒を乾燥状態になるまで蒸発させることで、中間体１を３．３ｇ（１００％）得た。
ｂ）
【０１５７】
【化３０】
2005525381.tif 000033
【０１５８】
の調製
中間体１（０．００７８モル）を一水加ヒドラジン（３．５ｍｌ）とＥｔＯＨ（３５ｍｌ）に入れることで生じさせた混合物を撹拌しながら１時間還流させた。飽和塩化ナトリウムを加えた。この混合物をＤＣＭで抽出した。その有機層を分離し、乾燥（ＭｇＳＯ４）させ、濾過した後、溶媒を乾燥状態になるまで蒸発させることで、融点が１３５℃の中間体２を２ｇ（９２％）得た。
ｃ）
【０１５９】
【化３１】
2005525381.tif 000034
【０１６０】
の調製
中間体２（０．００３６モル）と６−クロロ−３−ピリジンカルボン酸エチルエステル（０．００４３モル）と炭酸ナトリウム（０．００５４ｍｌ）をＤＭＡ（１０ｍｌ）に入れることで生じさせた混合物を１３０℃で１８時間撹拌し、水の中に注ぎ出した後、ＤＣＭで抽出した。その有機層を分離し、乾燥（ＭｇＳＯ４）させ、濾過した後、溶媒を乾燥状態になるまで蒸発させた。その残留物（２．５ｇ）をシリカゲル（１５−４０μｍ）使用カラムクロマトグラフィー（溶離剤：ＤＣＭ／ＭｅＯＨが９９．５／０．５）で精製した。高純度画分を集めた後、溶媒を蒸発させた。その残留物（０．６８ｇ、４３％）をジエチルエーテルから結晶化させた。その沈澱物を濾別した後、乾燥させることで、融点が２１５℃の中間体３を０．４７７ｇ（３０％）得た。
実施例Ａ２
ａ）
【０１６１】
【化３２】
2005525381.tif 000035
【０１６２】
の調製
１，４−ジオキサ−８−アザスピロ［４．６］ウンデカン（０．０１モル）をＤＣＭ（１０ｍｌ）に入れることで生じさせた５℃の混合物にＮ２流下でＴＥＡ（０．０１１２モル）に続いて塩化［１，１’−ビフェニル］−４−スルホニル（０．０１１２モル）をＤＣＭ（５ｍｌ）に入れることで生じさせた溶液を加えた。この混合物を室温で１８時間撹拌した。１０％の炭酸カリウムを加えた。この混合物をＤＣＭで抽出した。その有機層を分離し、乾燥（ＭｇＳＯ４）させ、濾過した後、溶媒を乾燥状態になるまで蒸発させることで、中間体４を５．１ｇ（＞１００％）得た。
ｂ）
【０１６３】
【化３３】
2005525381.tif 000036
【０１６４】
の調製
中間体４（０．０１モル）を３ＮのＨＣｌ（４０ｍｌ）とＭｅＯＨ（２０ｍｌ）に入れることで生じさせた混合物を撹拌しながら還流させた後、冷却して、氷の上に注ぎ出し、濃ＮＨ４ＯＨで塩基性にした後、ＤＣＭで抽出した。その有機層を分離し、乾燥（ＭｇＳＯ４）させ、濾過した後、溶媒を乾燥状態になるまで蒸発させることで、中間体５を３．４ｇ（１００％）得た。
ｃ）
【０１６５】
【化３４】
2005525381.tif 000037
【０１６６】
の調製
中間体５（０．０１モル）をＭｅＯＨ（３５ｍｌ）に入れることで生じさせた５℃の混合物にＮ２流下でヒドロホウ酸ナトリウム（０．０１１モル）を分割して加えた。この混合物を室温に１時間保持し、水の中に注ぎ出した後、ＤＣＭで抽出した。その有機層を分離し、乾燥（ＭｇＳＯ４）させ、濾過した後、溶媒を乾燥状態になるまで蒸発させることで、中間体６を３．２ｇ（９７％）得た。
ｄ）
【０１６７】
【化３５】
2005525381.tif 000038
【０１６８】
の調製
中間体６（０．００９６モル）と１Ｈ−イソインドール−１，３（２Ｈ）−ジオン（０．０１２６モル）とトリフェニル−ホスフィン（０．０１２６モル）をＴＨＦ（３５ｍｌ）に入れることで生じさせた混合物にＮ２流下でジアゼンジカルボン酸ビス（１−メチルエチル）エステル（０．０１２６モル）を滴下した。この混合物を室温に１８時間保持した。１０％の炭酸カリウムを加えた。この混合物をＤＣＭで抽出した。その有機層を分離し、乾燥（ＭｇＳＯ４）させ、濾過した後、溶媒を乾燥状態になるまで蒸発させた。その残留物（１３．１ｇ）をシリカゲル（１５−４０μｍ）使用カラムクロマトグラフィー（溶離剤：ＤＣＭ／ＥｔＯＡｃが９９／１）で精製した。高純度画分を集めた後、溶媒を蒸発させることで、中間体７を２．９ｇ（６６％）得た。
ｅ）
【０１６９】
【化３６】
2005525381.tif 000039
【０１７０】
の調製
中間体７（０．００６３モル）を一臭化水素酸ヒドラジン（２．９ｍｌ）とＥｔＯＨ（３０ｍｌ）に入れることで生じさせた混合物を撹拌しながら１時間還流させた後、冷却した。飽和ＮａＣｌを加えた。この混合物をＤＣＭで抽出した。その有機層を分離し、乾燥（ＭｇＳＯ４）させ、濾過した後、溶媒を乾燥状態になるまで蒸発させた。その残留物（２．５ｇ）をアセトニトリル／ジエチルエーテルから結晶化させた。その沈澱物を濾別した後、乾燥させることで、融点が１４１℃の中間体８を０．８９ｇ（８９％）得た。
【０１７１】
【化３７】
2005525381.tif 000040
【０１７２】
の調製
中間体１０に処理を実施例Ａ２（ｃ、ｄ、ｅ）に記述した様式と同様な様式で受けさせることで、融点が１２３℃の中間体１９を０．１５７ｇ（５２％）得た。
実施例Ａ３
ａ）
【０１７３】
【化３８】
2005525381.tif 000041
【０１７４】
の調製
１，４−ジオキサ−８−アザスピロ［４．６］ウンデカン（０．０１モル）をＤＣＭ（１０ｍｌ）に入れることで生じさせた５℃の混合物にＮ２流下でＴＥＡ（０．０１１２モル）に続いて塩化２−ナフタレンスルホニル（０．０１１２モル）をＤＣＭ（５ｍｌ）に入れることで生じさせた溶液を加えた。この混合物を室温で１８時間撹拌した。１０％の炭酸カリウムを加えた。この混合物をＤＣＭで抽出した。その有機層を分離し、乾燥（ＭｇＳＯ４）させ、濾過した後、溶媒を乾燥状態になるまで蒸発させることで、中間体９を３．４ｇ（＞１００％）得た。
ｂ）
【０１７５】
【化３９】
2005525381.tif 000042
【０１７６】
の調製
中間体９（０．０１モル）を塩酸（３５ｍｌ）とＭｅＯＨ（３５ｍｌ）に入れることで生じさせた混合物を撹拌しながら３０分間還流させ、氷の上に注ぎ出し、ＮＨ４ＯＨで塩基性にした後、ＤＣＭで抽出した。その有機層を分離し、乾燥（ＭｇＳＯ４）させ、濾過した後、溶媒を乾燥状態になるまで蒸発させることで、中間体１０を３．４ｇ（＞１００％）得た。
ｃ）
【０１７７】
【化４０】
2005525381.tif 000043
【０１７８】
の調製
中間体１０（０．０１モル）とベンゼンメタンアミン（０．０１１モル）をＥｔＯＨ（４０ｍｌ）に入れることで生じさせた室温の混合物にテトライソプロパノラトチタン（０．０１２モル）を加えた。この混合物を１８時間撹拌した。ヒドロホウ酸ナトリウム（０．０１１モル）を分割して加えた。この混合物を室温で１時間３０分撹拌した。１０％の炭酸カリウムを加えた。この混合物をＤＣＭで抽出した。塩を濾過した後、ＤＣＭで洗浄した。その有機層を分離し、乾燥（ＭｇＳＯ４）させ、濾過した後、溶媒を乾燥状態になるまで蒸発させることで、中間体１１を２．７ｇ（７０％）得た。
ｄ）
【０１７９】
【化４１】
2005525381.tif 000044
【０１８０】
の調製
中間体１１（０．００６８モル）と１０％Ｐｄ／Ｃ（０．５ｇ）を酢酸（３ｍｌ）とＭｅＯＨ（３０ｍｌ）に入れることで生じさせた混合物に水添を３バールの圧力下５０℃で４８時間受けさせた後、濾過そしてＤＣＭを用いた洗浄を行った。その濾液に蒸発を受けさせることで、中間体１２を２．５５ｇ（＞１００％）得た。
実施例Ａ４
ａ）
【０１８１】
【化４２】
2005525381.tif 000045
【０１８２】
の調製
４−（アミノメチル）−１−ピペリジンカルボン酸１，１−ジメチルエチルエステル（０．００４モル）をＴＨＦ（２０ｍｌ）に入れることで生じさせた０℃の混合物にＮ２流下で６０％の水素化ナトリウム（０．００８モル）を分割して加えた。この混合物を０℃で１時間撹拌した。２−（メチルスルホニル）−５−ピリミジンカルボン酸エチルエステル（０．００５２モル）をＴＨＦ（１０ｍｌ）に入れることで生じさせた溶液を０℃で滴下した。この混合物を室温にもって行って２時間撹拌し、氷水の中に注ぎ出した後、ＥｔＯＡｃで抽出した。その有機層を分離し、乾燥（ＭｇＳＯ４）させ、濾過した後、溶媒を蒸発させた。その残留物（１．５ｇ）をシリカゲル（１５−４０μｍ）使用カラムクロマトグラフィー（溶離剤：ＤＣＭ／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨが９８／２／０．１）で精製した。高純度画分を集めた後、溶媒を蒸発させた。その残留物（０．５ｇ、３５％）をＤＩＰＥから結晶化させた。その沈澱物を濾別した後、乾燥させることで、融点が１１０℃の中間体１３を０．２８ｇ得た。
ｂ）
【０１８３】
【化４３】
2005525381.tif 000046
【０１８４】
の調製
中間体１３（０．０１６モル）を３Ｎの塩酸（６０ｍｌ）とＴＨＦ（１５ｍｌ）に入れることで生じさせた混合物を８０℃で６時間撹拌し、氷水の中に注ぎ出し、ＮＨ４ＯＨで塩基性にした後、ＤＣＭで抽出した。その有機層を分離し、乾燥（ＭｇＳＯ４）させ、濾過した後、溶媒を蒸発させることで、中間体１４を１．４ｇ（３３％）得た。
実施例Ａ５
ａ）
【０１８５】
【化４４】
2005525381.tif 000047
【０１８６】
の調製
（３−ピペリジニルメチル）−カルバミン酸１，１−ジメチルエチルエステル（０．０１モル）とＴＥＡ（０．０１４モル）をＤＣＭ（５ｍｌ）に入れることで生じさせた５℃の混合物にＮ２流下で１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール（０．０１１モル）をＤＣＭ（５ｍｌ）に入れることで生じさせた溶液を加えた。この混合物を室温で１８時間撹拌した。水を加えた。この混合物をＤＣＭで抽出した。その有機層を分離し、乾燥（ＭｇＳＯ４）させ、濾過した後、溶媒を乾燥状態になるまで蒸発させることで、中間体１５を４ｇ（１００％）得た。
ｂ）
【０１８７】
【化４５】
2005525381.tif 000048
【０１８８】
の調製
中間体１５（０．０１モル）をＨＣｌ／２−プロパノール（５０ｍｌ）に入れることで生じさせた混合物を５０℃で１５分間撹拌し、濃ＮＨ４ＯＨで塩基性にした後、溶媒を乾燥状態になるまで蒸発させた。その残留物をＤＣＭで取り上げた後、濾過した。その濾液を乾燥（ＭｇＳＯ４）させ、濾過した後、溶媒を乾燥状態になるまで蒸発させることで、中間体１６を０．５３ｇ（１８％）得た。
実施例Ａ６
ａ）
【０１８９】
【化４６】
2005525381.tif 000049
【０１９０】
の調製
（２−モルホリニルメチル）−カルバミン酸１，１−ジメチルエチルエステル（０．００９２モル）をＴＨＦ（３０ｍｌ）に入れることで生じさせた０℃の混合物にＮ２流下で６０％の水素化ナトリウム（０．０１４モル）を分割して加えた。この混合物を０℃で１時間撹拌した。塩化２−ナフタレンスルホニル（０．０１１１モル）をＴＨＦ（３０ｍｌ）に入れることで生じさせた溶液を加えた。この混合物を一晩かけて室温にもって行き、氷水の中に注ぎ出した後、ＥｔＯＡｃで抽出した。その有機層を分離し、乾燥（ＭｇＳＯ４）させ、濾過した後、溶媒を蒸発させた。その残留物（４．９ｇ）をシリカゲル（１５−４０μｍ）使用カラムクロマトグラフィー（溶離剤：シクロヘキサン／ＥｔＯＡｃが７０／３０）で精製した。高純度画分を集めた後、溶媒を蒸発させることで、中間体１７を２．１５ｇ（５８％）得た。
ｂ）
【０１９１】
【化４７】
2005525381.tif 000050
【０１９２】
の調製
中間体１７（０．００５２モル）を６ＮのＨＣｌ（２５ｍｌ）に入れることで生じさせた混合物を８０℃で１２時間撹拌し、氷の上に注ぎ出し、水酸化ナトリウムで塩基性にした後、ＤＣＭで抽出した。その有機層を分離し、乾燥（ＭｇＳＯ４）させ、濾過した後、溶媒を蒸発させることで、中間体１８を１ｇ（６３％）得た。
Ｂ．  最終化合物の調製
実施例Ｂ１
ａ）
【０１９３】
【化４８】
2005525381.tif 000051
【０１９４】
の調製
中間体３（０．００１４モル）と水酸化ナトリウム（０．００２８モル）をＥｔＯＨ（１０ｍｌ）に入れることで生じさせた混合物を撹拌しながら１２時間還流させた後、冷却した。その沈澱物を濾過し、ＥｔＯＨに続いてジエチルエーテルで洗浄した後、乾燥させることで、中間体２０を０．５ｇ（８２％）得た。
ｂ）
【０１９５】
【化４９】
2005525381.tif 000052
【０１９６】
の調製
中間体２０（０．００１１モル）とＯ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−ヒドロキシルアミン（０．００１３モル）と１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール（０．００１３モル）をＤＣＭ／ＴＨＦ（１０ｍｌ）に入れることで生じさせた混合物にＮ２流下で一塩酸Ｎ’−（エチルアルボニミドイル）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−１，３−プロパンジアミン（０．００１３モル）を加えた。この混合物を室温で一晩撹拌した。１０％の炭酸カリウムを加えた。この混合物をＤＣＭで抽出した。その有機層を分離し、乾燥（ＭｇＳＯ４）させ、濾過した後、溶媒を乾燥状態になるまで蒸発させた。その残留物（０．９５ｇ）をシリカゲル（１５−４０μｍ）使用カラムクロマトグラフィー（溶離剤：ＤＣＭ／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨが９７／３／０．２）で精製した。高純度画分を集めた後、溶媒を蒸発させた。その残留物（０．４８ｇ、８２％）をアセトニトリル／ジエチルエーテルから結晶化させた。その沈澱物を濾別した後、乾燥させることで、融点が１２９℃の中間体２１を０．４５５ｇ（７７％）得た。
ｃ）
【０１９７】
【化５０】
2005525381.tif 000053
【０１９８】
の調製
中間体２１（０．０００７モル）をＭｅＯＨ（５ｍｌ）に入れることで生じさせた混合物にトリフルオロ酢酸（０．５ｍｌ）を加えた。この混合物を室温で１８時間撹拌した。トリフルオロ酢酸（０．５ｍｌ）を加えた。この混合物を室温で１８時間撹拌した。溶媒を乾燥状態になるまで蒸発させた。その残留物をＭｅＯＨ／ＤＣＭ／ジエチルエーテルから結晶化させた。その沈澱物を濾別した後、乾燥させることで、融点が１６０℃の化合物１・０．７９Ｃ２ＨＦ３Ｏ２を０．１９５ｇ（４８％）得た。
実施例Ｂ２
【０１９９】
【化５１】
2005525381.tif 000054
【０２００】
の調製
中間体８（０．００３１モル）と６−クロロ−３−ピリジンカルボン酸エチルエステル（０．００３７モル）と炭酸ナトリウム（０．００４６モル）をＤＭＡ（１０ｍｌ）に入れることで生じさせた混合物を１３０℃で１８時間撹拌した。水を加えた。この混合物をＥｔＯＡｃで数回抽出した。その有機層を分離し、乾燥（ＭｇＳＯ４）させ、濾過した後、溶媒を乾燥状態になるまで蒸発させた。その残留物（２．１ｇ）をシリカゲル（１５−４０μｍ）使用カラムクロマトグラフィー（溶離剤：ＤＣＭ／ＭｅＯＨが９９／１）で精製した。高純度画分を集めた後、溶媒を蒸発させた。その残留物（０．４１４ｇ、２８％）をジエチルエーテルから結晶化させた。その沈澱物を濾別した後、乾燥させることで、融点が１７６℃の中間体２２を０．２９４ｇ（２０％）得た。
【０２０１】
中間体２２に処理を実施例［Ｂ１］に記述した様式と類似した様式で受けさせることで融点が１１５℃の化合物２・１．２Ｈ２Ｏ・０．７１Ｃ２ＨＦ３Ｏ２（１：１）を０．０８４ｇ（６１％）得た。
【０２０２】
【化５２】
2005525381.tif 000055
【０２０３】
実施例Ｂ３
【０２０４】
【化５３】
2005525381.tif 000056
【０２０５】
の調製
中間体１９（０．００３モル）をＴＨＦ（２０ｍｌ）に入れることで生じさせた５℃の混合物にＮ２流下で油中６０％の水素化ナトリウム（０．００４５モル）を加えた。この混合物を１時間保持した。２−（メチルスルホニル）−５−ピリミジンカルボン酸エチルエステル（０．００３９モル）をＴＨＦ（１０ｍｌ）に入れることで生じさせた溶液を加えた。この混合物を５℃に２時間撹拌した。水を加えた。この混合物をＤＣＭで２回抽出した。その有機層を分離し、乾燥（ＭｇＳＯ４）させ、濾過した後、溶媒を乾燥状態になるまで蒸発させた。その残留物（１．５ｇ）をシリカゲル（１５−４０μｍ）使用カラムクロマトグラフィー（溶離剤：ＤＣＭ／ＭｅＯＨが９９／１）で精製した。高純度画分を集めた後、溶媒を蒸発させた。その残留物（０．４７ｇ、３４％）をジエチルエーテルから結晶化させた。その沈澱物を濾別した後、乾燥させることで、融点が１８６℃の中間体２３を０．２２４ｇ（１６％）得た。
【０２０６】
中間体２３に処理を実施例［Ｂ１］に記述した様式と類似した様式で受けさせることで融点が１４０℃の化合物３・０．２２Ｃ２ＨＦ３Ｏ２を０．０３２ｇ（２６％）得た。
【０２０７】
【化５４】
2005525381.tif 000057
【０２０８】
実施例Ｂ４
【０２０９】
【化５５】
2005525381.tif 000058
【０２１０】
の調製
中間体８（０．００２５モル）をＴＨＦ（２０ｍｌ）に入れることで生じさせた５℃の混合物にＮ２流下で水素化ナトリウム（０．００３８モル）を加えた。この混合物を１時間保持した。２−（メチルスルホニル）−５−ピリミジンカルボン酸エチルエステル（０．００３３モル）をＴＨＦ（１０ｍｌ）に入れることで生じさせた溶液を加えた。この混合物を５℃に１８時間撹拌した。水を加えた。この混合物をＤＣＭで抽出した。その有機層を分離し、乾燥（ＭｇＳＯ４）させ、濾過した後、溶媒を乾燥状態になるまで蒸発させた。その残留物（１．１ｇ）をシリカゲル（１５−３５μｍ）使用カラムクロマトグラフィー（溶離剤：シクロヘキサン／ＥｔＯＡｃが７０／３０）で精製した。高純度画分を集めた後、溶媒を蒸発させた。その残留物（０．１８ｇ、１５％）をジエチルエーテルから結晶化させた。その沈澱物を濾別した後、乾燥させることで、融点が１５１℃の中間体２４を０．１４１ｇ（１２％）得た。
【０２１１】
中間体２４に処理を実施例［Ｂ１］に記述した様式と類似した様式で受けさせることで融点が２２７℃の化合物４・Ｃ２ＨＦ３Ｏ２を０．０４ｇ（５７％）得た。
【０２１２】
【化５６】
2005525381.tif 000059
【０２１３】
実施例Ｂ５
【０２１４】
【化５７】
2005525381.tif 000060
【０２１５】
の調製
中間体２（０．００３モル）をＴＨＦ（１５ｍｌ）に入れることで生じさせた５℃の混合物にＮ２流下で油中６０％の水素化ナトリウム（０．００４５モル）を加えた。この混合物を１時間保持した。２−（メチルスルホニル）−５−ピリミジンカルボン酸エチルエステル（０．００３９モル）をＴＨＦ（１０ｍｌ）に入れることで生じさせた溶液を加えた。この混合物を５℃に２時間撹拌した。水を加えた。この混合物をＤＣＭで２回抽出した。その有機層を分離し、乾燥（ＭｇＳＯ４）させ、濾過した後、溶媒を乾燥状態になるまで蒸発させた。その残留物（１．４ｇ）をシリカゲル（１５−４０μｍ）使用カラムクロマトグラフィー（溶離剤：ＤＣＭ／ＭｅＯＨが９９／１）で精製した。高純度画分を集めた後、溶媒を蒸発させた。その残留物（０．４９ｇ、３７％）をアセトニトリルから結晶化させた。その沈澱物を濾過し、ジエチルエーテルで洗浄した後、乾燥させることで、融点が２２６℃の中間体２５を０．１７２ｇ（１３％）得た。
【０２１６】
中間体２５に処理を実施例［Ｂ１］に記述した様式と類似した様式で受けさせることで融点が２５６℃の化合物５・０．１７Ｃ２ＨＦ３Ｏ２を０．０６４ｇ（４９％）得た。
【０２１７】
【化５８】
2005525381.tif 000061
【０２１８】
実施例Ｂ６
【０２１９】
【化５９】
2005525381.tif 000062
【０２２０】
の調製
中間体１２（０．００５２モル）と６−クロロ−３−ピリジンカルボン酸エチルエステル（０．００６２モル）と炭酸ナトリウム（０．００７８モル）をＤＭＡ（２０ｍｌ）に入れることで生じさせた混合物を１３０℃で１８時間撹拌した。水を加えた。この混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。その有機層を分離し、乾燥（ＭｇＳＯ４）させ、濾過した後、溶媒を乾燥状態になるまで蒸発させた。その残留物（２．６ｇ）をシリカゲル（１５−４０μｍ）使用カラムクロマトグラフィー（溶離剤：ＤＣＭ／ＭｅＯＨが９９／１）で精製した。高純度画分を集めた後、溶媒を蒸発させることで、融点が１４６℃の中間体２６を０．６４ｇ（２７％）得た。
【０２２１】
中間体２６に処理を実施例［Ｂ１］に記述した様式と類似した様式で受けさせることで融点が１１５℃の化合物６・Ｈ２Ｏ（１：１）・０．７３Ｃ２ＨＦ３Ｏ２を０．２６３ｇ（６７％）得た。
【０２２２】
【化６０】
2005525381.tif 000063
【０２２３】
実施例Ｂ７
ｂ）
【０２２４】
【化６１】
2005525381.tif 000064
【０２２５】
の調製
中間体１４（０．０００５モル）とＴＥＡ（０．０００８モル）をＤＣＭ（３ｍｌ）に入れることで生じさせた０℃の混合物に、塩化２−ナフタレンスルホニル（０．０００６モル）をＤＣＭ（２ｍｌ）に入れることで生じさせた溶液を滴下した。この混合物を室温で１２時間撹拌し、水の中に注ぎ出した後、ＥｔＯＡｃで抽出した。その有機層を分離し、乾燥（ＭｇＳＯ４）させ、濾過した後、溶媒を蒸発させた。その残留物（０．３３ｇ）をシリカゲル（１０μｍ）使用カラムクロマトグラフィー（溶離剤：ＤＣＭが１００）で精製した。高純度画分を集めた後、溶媒を蒸発させることで、中間体２７を０．２１ｇ（８０％）得た。
【０２２６】
中間体２７に処理を実施例［Ｂ１］に記述した様式と類似した様式で受けさせることで融点が２４０℃の化合物７を０．０４３ｇ（３３％）得た。
【０２２７】
【化６２】
2005525381.tif 000065
【０２２８】
実施例Ｂ８
【０２２９】
【化６３】
2005525381.tif 000066
【０２３０】
の調製
中間体１６（０．００１７モル）をＴＨＦ（５ｍｌ）に入れることで生じさせた５℃の混合物にＮ２流下で油中６０％の水素化ナトリウム（０．００２３モル）を分割して加えた。この混合物を３０分間撹拌した。２−（メチルスルホニル）−５−ピリミジンカルボン酸エチルエステル（０．００２１モル）をＴＨＦ（２ｍｌ）に入れることで生じさせた溶液を加えた。この混合物を室温で１８時間撹拌した。１０％の炭酸カリウムを加えた。この混合物をＤＣＭで抽出した。その有機層を分離し、乾燥（ＭｇＳＯ４）させ、濾過した後、溶媒を乾燥状態になるまで蒸発させた。その残留物（０．７２ｇ）をシリカゲル（１５−４０μｍ）使用カラムクロマトグラフィー（溶離剤：ＤＣＭ／ＭｅＯＨが９９／１）で精製した。高純度画分を集めた後、溶媒を蒸発させることで、中間体２８を０．３ｇ（３９％）得た。
【０２３１】
中間体２８に処理を実施例［Ｂ１］に記述した様式と類似した様式で受けさせることで融点が１３７℃の化合物８を０．１１９ｇ（７５％）得た。
【０２３２】
【化６４】
2005525381.tif 000067
【０２３３】
実施例Ｂ９
【０２３４】
【化６５】
2005525381.tif 000068
【０２３５】
の調製
中間体１８（０．００１９モル）と２−（メチルスルホニル）−５−ピリミジンカルボン酸エチルエステル（０．００２５モル）と炭酸カリウム（０．００３９モル）をアセトニトリル（１５ｍｌ）に入れることで生じさせた混合物を室温で１２時間撹拌し、氷水の中に注ぎ出した後、ＥｔＯＡｃで抽出した。その有機層を水で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）させ、濾過した後、溶媒を蒸発させた。その残留物（１ｇ）をシリカゲル（１５−４０μｍ）使用カラムクロマトグラフィー（溶離剤：ＤＣＭ／ＥｔＯＡｃが８０／２０）で精製した。高純度画分を集めた後、溶媒を蒸発させた。その残留物（０．４８ｇ、８９％）をＣＨ３ＣＮ／ジエチルエーテルから結晶化させた。その沈澱物を濾別した後、乾燥させることで、融点が１６８℃の中間体２９を０．２ｇ得た。
【０２３６】
中間体２９に処理を実施例［Ｂ１］に記述した様式と類似した様式で受けさせることで融点が２２６℃の化合物９を０．０８ｇ（７３％）得た。
【０２３７】
【化６６】
2005525381.tif 000069
【０２３８】
表Ｆ−１に、この上に示した実施例の中の１つに従って調製した化合物を挙げる。この表では下記の省略形を用いた：・Ｃ２ＨＦ３Ｏ２はトリフルオロ酢酸塩を表す。
【０２３９】
【表２】
2005525381.tif 000070
【０２４０】
【表３】
2005525381.tif 000071
【０２４１】
Ｃ．  薬理学的実施例：
ヒストンデアセチラーゼのインビトロ阻害検定（実施例Ｃ．１を参照）では、前記式（Ｉ）で表される化合物を用いることで得られるＨＤＡＣ酵素活性抑制を測定する。
【０２４２】
比色検定を用いて、前記式（Ｉ）で表される化合物がＡ２７８０腫瘍細胞に対して示す細胞活性を細胞の毒性または生存度に関して測定した（Ｍｏｓｍａｎｎ  Ｔｉｍ、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ６５：５５−６３、１９８３）（実施例Ｃ．２を参照）。
【０２４３】
水性媒体中の動的溶解性（ｋｉｎｅｔｉｃ  ｓｏｌｕｂｉｌｉｔｙ）では、ある化合物が希釈時に水溶液の中に留まる能力を測定する（実施例Ｃ．３を参照）。
【０２４４】
ＤＭＳＯストック溶液を単一の水性緩衝溶媒（ｂｕｆｆｅｒ  ｓｏｌｖｅｎｔ）で逐次的に３段階希釈する。希釈毎に濁度を比濁計で測定する。
【０２４５】
薬剤の代謝は、脂質に溶解する生体異物または生体内存在（ｅｎｄｏｂｉｏｔｉｃ）化合物が酵素によって（ａ）水溶性で排出性（ｅｘｃｒｅｔａｂｌｅ）で極性のある代謝産物１種または２種以上に変化することを意味する。薬剤の代謝をもたらす主要な器官は肝臓である。しばしば、代謝産物の方が親薬剤よりも活性が低いか或は不活性である。しかしながら、ある代謝産物は高い活性または毒性効果を示す可能性がある。従って、薬剤代謝には「無毒化」および「毒化」過程の両方が含まれ得る。有機体が薬剤および化学品を処理する能力を決定する主要な酵素系の１つの代表はシトクロムＰ４５０モノオキシゲナーゼであり、これらはＮＡＤＰＨ依存酵素である。ヒト細胞下組織を用いてある化合物が示す代謝安定性をインビトロで測定することができる（実施例Ｃ．４を参照）。ここでは、当該化合物をミクロソームと一緒に１５分間インキュベートした後に代謝を受けた薬剤の％として当該化合物の代謝安定性を表す。この化合物の量をＬＣ−ＭＳ分析で測定した。
【０２４６】
腫瘍サプレッサーｐ５３はＤＮＡ損傷に反応して数多くの遺伝子を転写的に活性にするが、そのような遺伝子にはＷＡＦ１／ＣＩＰ１遺伝子が含まれる。正常な細胞ではＷＡＦ１遺伝子の２１ｋＤａ産物がサイクリンとサイクリン依存キナーゼ（ＣＤＫ）と増殖する細胞核抗原（ＰＣＮＡ）を伴う複合体として存在するが、形質転換した細胞には存せず、それはＣＤＫ活性の普遍的抑制剤であると見られる。ｐ２１ＷＡＦ１がＣＤＫと結合してそれを阻害すると、１つの結果として、ＣＤＫ依存燐酸化が防止され、従ってＲｂ蛋白質（これは細胞周期進展に必須である）が不活性になる。従って、ｐ２１ＷＡＦ１がＨＤＡＣ阻害剤との細胞接触に反応して誘導されることは、Ｇ１およびＧ２チェックポントの両方において細胞周期進展の抑制を示す効力のある特異的指標である。
【０２４７】
ｐ２１ＷＡＦ１酵素結合免疫測定法（ＯｎｃｏｇｅｎｅのＷＡＦ１  ＥＬＩＳＡ）を用いて、当該化合物がｐ２１ＷＡＦ１を誘導する能力を有するか否かを測定した。ｐ２１ＷＡＦ１検定は、マウスモノクローナルとウサギポリクローナル抗体の両方を用いる「サンドイッチ」酵素免疫検定である。ヒトＷＡＦ１蛋白質に特異的なウサギポリクローナル抗体をキットに備わっているプラスチック製ウエルの表面に固定した。検定を受けさせるべきサンプルにｐ２１ＷＡＦがいくらかでも存在すると、これは捕捉用抗体と結合するであろう。また、ビオチニル化検出体（ｂｉｏｔｉｎｙｌａｔｅｄ  ｄｅｔｅｃｔｏｒ）であるモノクローナル抗体もヒトｐ２１ＷＡＦ１蛋白質を認識し、前記捕捉用抗体がいくらか保持しているｐ２１ＷＡＦ１と結合するであろう。その検出体である抗体は逆に西洋わさびペルオキシダーゼ標識ストレプトアビジンによって拘束される。その西洋わさびペルオキシダーゼは、色原基質であるテトラ−メチルベンジジンが無色の溶液から青色の溶液（または停止用反応体を添加した後に黄色）に変化する変換に触媒作用を及ぼし、その変換の強度は前記プレートと結合したｐ２１ＷＡＦ１蛋白質の量に比例する。その着色した反応生成物を分光光度計で量化する。ｐ２１ＷＡＦ１（提供された凍結乾燥品）の既知濃度を用いて標準曲線を作成することで量化を達成する（実施例Ｃ．５を参照）。
実施例Ｃ．１：ヒストンデアセチラーゼのインビトロ阻害検定：
ＨｅＬａ核抽出液（供給業者：Ｂｉｏｍｏｌ）を６０μｇ／ｍｌの量で２ｘ１０−８Ｍの放射能標識付きペプチド基質と一緒にインキュベートした。ＨＤＡＣ活性測定用基質として合成ペプチド、即ちヒストンＨ４のアミノ酸１４−２１を用いた。６−アミノカプロン酸であるスペーサーを用いて前記基質のＮＨ２末端部にビオチニル化を受けさせそしてＣＯＯＨ末端部をアミド基で保護する、具体的には、リシン１６の所を［３Ｈ］アセチル化する。Ｈｅｐｅｓを２５ｍＭとスクロースを１ＭとＢＳＡを０．１ｍｇ／ｍｌとＴｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００を０．０１％含有する緩衝液（ｐＨ７．４）に基質であるビオチン−（６−アミノカプロン酸）Ｇｌｙ−Ａｌａ−（［３Ｈ］−アセチル−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−ＮＨ２）を加えた。３０分後、ＨＣｌと酢酸を添加（それぞれの最終濃度が０．０３５ｍＭおよび３．８ｍＭになるように）することで脱アセチル反応を停止させた。反応停止後、遊離３Ｈ−アセテートを酢酸エチルで抽出した。混合および遠心分離を行った後、β−カウンターを用いて、一定分量の上方（有機）相が示す放射能を計数した。各実験毎に対照（化合物なしにＨｅＬａ核抽出液とＤＭＳＯを含有）、ブランクインキュベーション（ＤＭＳＯは入れたが、ＨｅＬａ核抽出液も化合物も入っていない）およびサンプル（化合物をＤＭＳＯに溶解させて入れかつＨｅＬａ核抽出液も入れた）に試験を並行して受けさせた。１番目として、化合物に試験を１０−５Ｍの濃度で受けさせた。この化合物が１０−５Ｍの時に活性を示した場合には、その化合物に試験を１０−５Ｍから１０−１２Ｍの濃度で受けさせて濃度応答曲線を作成した。各試験毎に対照の値およびサンプルの値の両方からブランクの値を差し引いた。対照サンプルは基質が脱アセチルを１００％受けることに相当していた。各サンプル毎に放射能を対照の平均値のパーセントとして表した。適宜、段階的データ（ｇｒａｄｅｄ  ｄａｔａ）に関してプロビット解析を用いることでＩＣ５０値（代謝産物の量を対照の５０％にまで下げるに必要な薬剤の濃度）を計算した。本明細書では、試験化合物が示す効果をｐＩＣ５０（ＩＣ５０値の負ｌｏｇ値）として表す。試験を受けさせたあらゆる化合物が１０−５Ｍの試験濃度の時に酵素活性を示し、１４個の化合物が示したｐＩＣ５０値は≧５であった（表Ｆ−２を参照）。
実施例Ｃ．２：  Ａ２７８０細胞に対する抗増殖活性の測定
試験を受けさせるあらゆる化合物をＤＭＳＯに溶解させた後、培養培地でさらなる希釈を行った。細胞増殖検定では、最終ＤＭＳＯ濃度が０．１％（体積／体積）を超えないようにした。対照には化合物を含有させないでＡ２７８０細胞とＤＭＳＯを含有させ、そしてブランクには細胞を含有させないでＤＭＳＯを含有させた。ＭＴＴをＰＢＳに５ｍｇ／ｍｌ溶解させた。０．１Ｍのグリシンと０．１ＭのＮａＣｌで構成させてＮａＯＨ（１Ｎ）でｐＨが１０．５になるように緩衝させたグリシン緩衝液を調製した（あらゆる試薬をＭｅｒｃｋから入手した）。
【０２４８】
ヒトＡ２７８０卵巣癌細胞［Ｄｒ．Ｔ．Ｃ．Ｈａｍｉｌｔｏｎ（Ｆｏｘ  Ｃｈａｓｅ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｎｔｒｅ、ペンシルバニア、米国）から親切に贈られたもの］をＲＰＭＩ  １６４０培地（Ｌ−グルタミンを２ｍＭ、ゲンタマイシンを５０μｇ／ｍｌおよびウシ胎児血清を１０％補充）の中で培養した。細胞を常規通りＣＯが５％の湿った状態の雰囲気下３７℃で単層培養物として保持した。トリプシン／ＥＤＴＡ溶液を用いて細胞に継代を１：４０のスプリット比（ｓｐｌｉｔ  ｒａｔｉｏ）で週に一度受けさせた。あらゆる培地および補充物をＬｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓから入手した。Ｇｅｎ−Ｐｒｏｂｅ  Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅキット（供給業者：ＢｉｏＭｅｒｉｅｕｘ）を用いて測定した時、細胞はマイコプラズマで汚染されていなかった。細胞を９６個ウエルのＮＵＮＣ（商標）培養プレート（供給業者：Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）に種付けして、そのプラスチックに一晩接着させた。平板培養で用いた密度はウエル１個当たり１５００個の細胞であり、それを全体積が２００μｌの培地の中に入れた。細胞が前記プレートに接着した後、培地を交換して薬剤および／または溶媒を最終体積が２００μｌになるように加えた。４日間のインキュベーション後、培地を２００μｌの新鮮な培地と交換し、そしてＭＴＴが基になった検定を用いて細胞の密度と生存度を評価した。各ウエルにＭＴＴ溶液を２５μｌ加えた後、細胞を３７℃で更に２時間インキュベートした。次に、その培地を注意深く吸引した後、グリシン緩衝液を２５μｌに続いてＤＭＳＯを１００μｌ添加することで、青色のＭＴＴ−ホルマザン産物を溶解させた。そのミクロテストプレート（ｍｉｃｒｏｔｅｓｔ  ｐｌａｔｅｓ）をミクロプレート振とう機の上に置いて１０分間振とうした後、９６個ウエルのＥｍａｘ分光光度計（供給業者：Ｓｏｐａｃｈｅｍ）を用いて５４０ｎｍの所の吸光度を測定した。１つの実験の中の各実験条件の結果は３回繰り返したウエルの平均である。最初に選別を行う目的で、化合物に試験を固定した単一濃度である１０−６Ｍの濃度で受けさせた。化合物が活性を示した場合には、実験を繰り返して完全な濃度−反応曲線を確立した。各実験毎に対照（薬剤含有なし）およびブランク（細胞も薬剤も含有しない）のインキュベーションを並行して行った。あらゆる対照値およびサンプル値からブランク値を差し引いた。各サンプル毎に平均細胞増殖値（絶対単位で表す）を対照が示した平均細胞増殖値のパーセントとして表した。適宜、段階的データに関してプロビット解析を用いることでＩＣ５０値（細胞増殖を対照の５０％にまで下げるに必要な薬剤の濃度）を計算した（Ｆｉｎｎｅｙ，Ｄ．Ｊ．、Ｐｒｏｂｉｔ  Ａｎａｌｙｓｅｓ、第２版、１０章、Ｇｒａｄｅｄ  Ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ、ケンブリッジ、１９６２）。本明細書では、試験化合物が示す効果をｐＩＣ５０（ＩＣ５０値の負ｌｏｇ値）として表す。試験を受けさせた大部分の化合物が１０−６Ｍの試験濃度の時に細胞活性を示し、１４個の化合物が示したｐＩＣ５０値は≧５であった（表Ｆ−２を参照）。
実施例Ｃ．３：  水性媒体中の動的溶解性
１番目の希釈段階で、１００μｌの燐酸塩クエン酸塩緩衝液（ｐＨ７．４）に、ＤＭＳＯ（５ｍＭ）に溶解させておいた活性化合物の濃ストック溶液を１０μｌ添加して混合した。２番目の希釈段階で、前記１番目の希釈段階の一定分量（２０μｌ）を更に１００μｌの燐酸塩クエン酸塩緩衝液（ｐＨ７．４）に入れて分散させて混合した。最後に、３番目の希釈段階で、前記２番目の希釈段階のサンプル（２０μｌ）を更に１００μｌの燐酸塩クエン酸塩緩衝液（ｐＨ７．４）に入れて希釈して混合した。あらゆる希釈を９６個ウエルプレートを用いて実施した。最後の希釈段階後直ちに、前記逐次的３希釈段階の濁度を比濁計で測定した。偶発的誤差を排除する目的で希釈を各化合物毎に三重に実施した。濁度測定値を基にして３等級に分ける等級付けを実施する。高い溶解性を示した化合物に３の等級を与え、この化合物は１番目の希釈で透明である。中間的な溶解性を示した化合物に２の等級を与えた。このような化合物は１番目の希釈で不透明であるが、２番目の希釈では透明である。溶解性が低い化合物には１の等級を与え、このような化合物は１番目および２番目の希釈の両方とも不透明である。１４個の化合物が示す溶解度を測定した。これらの化合物の中で６個の化合物が３の等級を示し、２個の化合物が２の等級を示し、そして６個の化合物が１の等級を示した（表Ｆ−２を参照）。
実施例Ｃ．４：  代謝安定性
Ｇｏｒｒｏｄ他（Ｘｅｎｏｂｉｏｔｉｃａ  ５：４５３−４６２、１９７５）に従い、組織を機械的に均一にした後に遠心分離を行うことで、細胞下組織標本（ｓｕｂ−ｃｅｌｌｕｌａｒ  ｔｉｓｓｕｅ  ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓ）を作成した。肝臓の組織を氷で冷却しておいた０．１ＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７．４）緩衝液で濯ぐことで余分な血液を洗い流した。次に、組織を吸い取り紙で乾燥させ、重量を測定した後、外科用ハサミを用いて粗く細断した。テフロン製乳棒が備わっているＰｏｔｔｅｒ−Ｓ（Ｂｒａｕｎ、イタリア）またはＳｏｒｖａｌｌ  Ｏｍｎｉ−Ｍｉｘホモジェナイザーのいずれかを用いて、前記組織片を氷で冷却しておいた３倍体積の０．１Ｍ燐酸塩緩衝液（ｐＨ７．４）に入れて７ｘ１０秒間均一にした。両方の場合とも、均一化過程を行っている間、その容器を氷の中／上に保持した。
【０２４９】
Ｓｏｒｖａｌｌ遠心分離機またはＢｅｃｋｍａｎ  Ｕｌｔｒａｃｅｎｔｒｉｆｕｇｅを用いて、均一にした組織に９０００ｘｇの遠心分離を４℃で２０分間受けさせた。その結果として得た上澄み液を−８０℃で貯蔵し、これに「Ｓ９」の表示を付ける。
【０２５０】
このＳ９画分にＢｅｃｋｍａｎ超遠心分離機を用いたさらなる遠心分離を１００，０００ｘｇで６０分間（４℃）受けさせてもよい。その結果として得た上澄み液を注意深く吸引し、一定分量に分けて、「シトゾル（ｃｙｔｏｓｏｌ）」の標識を付けた。そのペレットを０．１Ｍの燐酸塩緩衝液（ｐＨ７．４）に元々の組織重量０．５ｇ当たり１ｍｌの最終体積になるように入れて再懸濁させ、それに「ミクロソーム」の表示を付けた。
【０２５１】
あらゆる細胞内画分を一定分量に分け、直ちに液体窒素で凍結させて、使用するまで−８０℃で貯蔵した。
【０２５２】
サンプルに試験を受けさせる時、インキュベーション用混合物にＰＢＳ（０．１Ｍ）、化合物（５μＭ）、ミクロソーム（１ｍｇ／ｍｌ）およびＮＡＤＰＨ生成系（０．８ｍＭのグルコース−６−ホスフェート、０．８ｍＭの塩化マグネシウムおよび０．８単位のグルコース−６−ホスフェートデヒドロゲナーゼ）を含有させた。対照サンプルには同じ材料を含有させたが、ミクロソームの代わりに熱で不活性（９５℃で１０分間）にしておいたミクロソームを用いた。この対照サンプルに入れた化合物の回収率は常に１００％であった。
【０２５３】
これらの混合物を３７℃で５分間予備インキュベートした。時間点ゼロ（ｔ＝０）の時にＮＡＤＰを０．８ｍＭ添加することで反応を開始させ、そしてサンプルを１５分間（ｔ＝１５）インキュベートした。ＤＭＳＯを２倍体積添加することで反応を停止させた。次に、これらのサンプルに遠心分離を９００ｘｇで１０分間受けさせた後、その上澄み液を室温で貯蔵したが、これに分析を受けさせるまでの時間が２４時間より長くならないようにした。あらゆるインキュベーションを二重に実施した。ＬＣ−ＭＳ分析を用いて前記上澄み液の分析を実施した。Ｘｔｅｒｒａ  ＭＳ  Ｃ１８（５０ｘ４．６ｍｍ、５μｍ、Ｗａｔｅｒｓ、米国）を用いてサンプルの溶離を実施した。Ａｌｌｉａｎｃｅ  ２７９０（供給業者：Ｗａｔｅｒｓ、米国）ＨＰＬＣ装置を用いた。緩衝液Ａ［Ｈ２Ｏ／アセトニトリル（９５／５）中２５ｍＭの酢酸アンモニウム（ｐＨ５．２）］、アセトニトリルである溶媒Ｂ、溶媒Ｃであるメタノールを２．４ｍｌ／分の流量で用いて溶離を実施した。用いた勾配は、有機相濃度０％から線形様式で５分間でＢが５０％でＣが５０％になりそして１分間でＢが１００％になるような勾配であり、そして有機相濃度を更に１．５分間に渡って固定濃度に保持した。サンプルの全注入体積を２５μｌにした。
【０２５４】
ＥＳＩ源が備わっているＱｕａｔｔｒｏ（供給業者：Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ、マンチェスター、英国）トリプル四重極マススペクトロメーター（ｔｒｉｐｌｅ  ｑｕａｄｒｕｐｏｌｅ  ｍａｓｓ  ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｅｒ）を検出器として用いた。前記源およびデソルベーション（ｄｅｓｏｌｖａｔｉｏｎ）の温度をそれぞれ１２０および１３５℃に設定し、窒素をネブライザーおよび乾燥用ガスとして用いた。データをポジティブスキャンモード（単一イオン反応）で取得した。コーン電圧（ｃｏｎｅ  ｖｏｌｔａｇｅ）を１０Ｖに設定しそしてドエル（ｄｗｅｌｌ）時間を１秒にした。
【０２５５】
代謝安定性を、インキュベーションを活性ミクロソーム（Ｅ（ａｃｔ））の存在下で１５分間行った後の当該化合物の代謝％として表した｛代謝％＝１００％−［（ｔ＝１５の時のＥ（ａｃｔ）の全イオン電流（ＴＩＣ）／ｔ＝０の時のＥ（ａｃｔ）のＴＩＣ）ｘ１００］｝。ある化合物が示した代謝パーセントが２０％未満の場合、そのような化合物は高い代謝安定性を示すと定義した。ある化合物が２０から７０％の代謝を示した場合、そのような化合物は中間的に安定であると定義し、そしてある化合物が示した代謝パーセントが７０％を超える場合、そのような化合物は代謝安定性が低いと定義した。代謝安定性選別を実施する時には常に３種類の基準化合物を含めた。代謝安定性が低い（代謝％＝７３％）化合物としてベラパミル（ｖｅｒａｐａｍｉｌ）を含めた。代謝安定性が中程度（代謝％＝４５％）の化合物としてシサプリド（ｃｉｓａｐｒｉｄｅ）を含め、そして代謝安定性が中程度から高い（２５％の代謝）化合物としてプロパノールを含めた。代謝安定性検定を有効にする目的でそのような基準化合物を用いた。
【０２５６】
３個の化合物に試験を受けさせた。１個の化合物が示した代謝パーセントは２０％未満であり、そして２個の化合物が示した代謝パーセントは２０から７０％の範囲であった。
実施例Ｃ．５：  ｐ２１誘導能力
ヒトＡ２７８０卵巣癌細胞の中に発現するｐ２１蛋白質のレベルを測定する目的で下記のプロトコルを適用した。Ａ２７８０細胞（１８０μｌ当たり２００００個の細胞）を９６個ミクロウエルのプレートに入れておいたＲＰＭＩ  １６４０培地（Ｌ−グルタミンを２ｍＭ、ゲンタマイシンを５０μｇ／ｍｌおよびウシ胎児血清を１０％補充）に種付けした。この細胞を溶解させる２４時間前に化合物を１０−５、１０−６、１０−７および１０−８Ｍの最終濃度で加えた。試験を受けさせるあらゆる化合物をＤＭＳＯに溶解させた後、培養培地を用いてさらなる希釈を行った。当該化合物を添加して２４時間後に上澄み液を細胞から除去した。細胞を氷で冷却しておいた２００μｌのＰＢＳで洗浄した。これらのウエルに吸引を受けさせた後、溶解用緩衝液（ｌｙｓｉｓｂｕｆｆｅｒ）［Ｔｒｉｓ・ＨＣｌ（ｐＨ７．６）が５０ｍＭでＮａＣｌが１５０ｍＭでＮｏｎｉｄｅｔ  ｐ４０が１％でグリセロールが１０％］を３０μｌ加えた。これらのプレートを−７０℃で一晩インキュベートした。
【０２５７】
フォイルパウチ（ｆｏｉｌ  ｐｏｕｃｈ）からミクロタイターウエルを適切な数で取り出して、空のウエルホルダー（ｗｅｌｌ  ｈｏｌｄｅｒ）の中に入れた。洗浄用緩衝液［２０ｘのプレート洗浄用濃縮液：クロロアセトアミド含有量が２％のＰＢＳと界面活性剤の２０倍濃縮溶液（１００ｍｌ）］の作業溶液（ｗｏｒｋｉｎｇ  ｓｏｌｕｔｉｏｎ）（１ｘ）を調製した。蒸留Ｈ２Ｏを用いて凍結乾燥ｐ２１ＷＡＦ標準を再構築した後、サンプル用希釈液（前記キットに備わっている）で更に希釈した。
【０２５８】
それらをサンプル用希釈液の中で１：４に希釈することでサンプルの調製を行った。サンプル（１００μｌ）およびｐ２１ＷＡＦ１標準（１００μｌ）をピペットで適切なウエルに入れた後、室温で２時間インキュベートした。これらのウエルを１ｘの洗浄用緩衝液で３回洗浄した後、ピペットを用いて各ウエルに検出体である抗体試薬（ビオチニル化モノクローナルｐ２１ＷＡＦ１抗体の溶液）を１００μｌ入れた。これらのウエルを室温で１時間インキュベートした後、１ｘの洗浄用緩衝液で３回洗浄した。４００ｘの接合体（ペルオキシダーゼとストレプトアビジンの接合体：４００倍濃縮溶液）を希釈した後、前記ウエルに、その１ｘ溶液を１００μｌ加えた。これらのウエルを室温で３０分間インキュベートした後、１ｘの洗浄用緩衝液で３回そして蒸留Ｈ２Ｏで１回洗浄した。これらのウエルに基質溶液（色原基質）（１００μｌ）を加えた後、これらのウエルを暗所に置いて室温で３０分間インキュベートした。各ウエルに停止用溶液をこの上で加えた基質溶液と同じ順で加えた。プレート用分光光度読み器を４５０／５９５ｎｍの２波長で用いて各ウエルが示す吸光度を測定した。
【０２５９】
各実験毎に対照（薬剤含有なし）およびブランク（細胞も薬剤も含有していない）のインキュベーションを並行して行った。あらゆる対照値およびサンプル値からブランク値を差し引いた。各サンプル毎にｐ２１ＷＡＦ１誘導値（吸光度単位で表す）を対照の中に存在するｐ２１ＷＡＦ１の値のパーセントとして表した。誘導パーセントが１３０％より高い時、これを有意な誘導として定義した。この検定では３個の化合物に試験を受けさせ、それらは有意な誘導を示した。
【０２６０】
表Ｆ−２：  表Ｆ−２に化合物に実施例Ｃ．１、Ｃ．２およびＣ．３に従う試験を受けさせた時の結果を挙げる。
【０２６１】
【表４】
2005525381.tif 000072
【０２６２】
Ｄ．  組成物実施例：膜被覆錠剤
錠剤中心部の調製
式（Ｉ）で表される化合物が１００ｇでラクトースが５７０ｇで澱粉が２００ｇの混合物を充分に混合した後、５ｇのドデシル硫酸ナトリウムと１０ｇのポリビニルピロリドンを約２００ｍｌの水に入れることで生じさせた溶液で湿らせる。この湿らせた粉末混合物をふるいにかけ、乾燥させた後、再びふるいにかける。次に、微結晶性セルロースを１００ｇおよび水添植物油を１５ｇ加える。その全体を充分に混合した後、圧縮して錠剤にすることで、各々が式（Ｉ）で表される化合物を１０ｍｇ含有する錠剤を１０，０００個得る。
被覆
１０ｇのメチルセルロースを７５ｍｌの変性エタノールに入れることで生じさせた溶液に、５ｇのエチルセルロースを１５０ｍｌのジクロロメタンに入れることで生じさせた溶液を加える。次に、７５ｍｌのジクロロメタンおよび２．５ｍｌの１，２，３−プロパントリオールを加える。１０ｇのポリエチレングリコールを溶融させて７５ｍｌのジクロロメタンに溶解させる。後者の溶液を前者に加え、オクタデカン酸マグネシウムを２．５ｇ、ポリビニルピロリドンを５ｇおよび濃カラー懸濁液（ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅｄ  ｃｏｌｏｕｒ  ｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎ）を３０ｍｌ加えた後、その全体を均一にする。被覆装置を用いて、そのようにして得た混合物で前記錠剤中心部を覆った。
【国際調査報告】
2005525381.tif 000089
2005525381.tif 000090