(57)【要約】本発明は、自己免疫疾患、例えば多発性硬化症（ＭＳ）を治療するためのエストリオールのエステル、例えば、エストリオール３，１７−ジプロピオナートまたはエストリオール３，１７−ジヘキサノアートの使用に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
哺乳動物における自己免疫疾患の治療用薬剤を製造するための、以下の一般式：
【化１】
2005518438.tif 000003
｛式中、
Ｒは、Ｃ1-10直鎖若しくは分枝鎖アルキル基またはフェニルである。｝によって表されるエストリオールエステルの使用。
【請求項２】
前記エストリオールエステルが、エストリオール３，１７−ジプロピオナートまたはエストリオール３，１７−ジヘキサノアートである、請求項１に記載の使用。
【請求項３】
前記エストリオールエステルが、３，１７β−ジ−ｎ−ヘキサノイルオキシ−１，３，５（１０）−エストラトリエン−１６α−オールである、請求項１に記載の使用。
【請求項４】
前記哺乳動物がヒトである、請求項１〜３のいずれか１項に記載の使用。
【請求項５】
前記自己免疫疾患がＴｈ１介在免疫応答を含む、請求項１〜４のいずれか１項に記載の使用。
【請求項６】
前記疾患が、多発性硬化症、慢性関節リウマチ、若年性オリゴ関節炎、１型真性糖尿病、炎症性腸疾患、橋本甲状腺炎、アディソン病、狼瘡疾患、急性移植片対宿主疾患、クローン病から成る群から選択される、請求項１〜５のいずれか１項に記載の使用。
【請求項７】
前記疾患が多発性硬化症である、請求項１〜６のいずれか１項に記載の使用。
【請求項８】
前記エストリオールエステルを１〜１０００ｍｇ／月の累積投与量で投与する、請求項１〜７のいずれか１項に記載の使用。
【請求項９】
前記治療が第２の治療剤の投与をさらに含む、請求項１〜８のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１０】
前記薬剤を注射により皮下または筋中に投与する、請求項１〜９のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１１】
女性における妊娠後期間に観察されるエストリオールの血中レベルを提供する薬剤を製造するための、以下の一般式：
【化２】
2005518438.tif 000004
｛式中、
Ｒは、Ｃ1-10直鎖若しくは分枝鎖アルキル基またはフェニルである。｝によって表されるエストリオールエステルの使用。
【請求項１２】
前記エストリオールエステルが、エストリオール３，１７−ジプロピオナートまたはエストリオール３，１７−ジヘキサノアートである、請求項１１に記載の使用。
【請求項１３】
前記エストリオールエステルが、３，１７β−ジ−ｎ−ヘキサノイルオキシ−１，３，５（１０）−エストラトリエン−１６α−オールである、請求項１１に記載の使用。
【請求項１４】
前記エストリオールの血中レベルが、０．１〜１００ｎｇ／ｍｌである、請求項１１〜１３のいずれか１項に記載の使用。
【請求項１５】
前記薬剤を注射により皮下または筋中に投与する、請求項１１〜１４のいずれか１項に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明の分野
本発明は、自己免疫疾患、例えば、多発性硬化症（ＭＳ）を治療するためのエストリオールのエステル、例えば、エストリオール３，１７−ジプロピオナートまたはエストリオール３，１７−ジヘキサノアートの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
本発明の背景
自己免疫疾患は、自己抗原に対する制御不可能な免疫応答から生ずる免疫性病理の一種である。自己免疫疾患に対する感受性は性別により影響を受ける。生殖年齢の間に、女性において自己免疫疾患、例えば、多発性硬化症（ＭＳ）または慢性関節リウマチ（ＲＡ）を患う罹患率が存在する。例えば、ＭＳを発生する女性／男性の比は２：１である（Ｖｏｓｋｕｈｌ他、２００１；Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｔｉｓｔ  ７：２５８−２７０；Ｗｈｉｔａｃｒｅ他、１９９９；Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２８３：１２７７−１２７８）。
【０００３】
ＭＳはニューロンの髄鞘に影響を与え、髄鞘脱落、引き続いてニューロン細胞死に導く、中枢神経系の自己免疫疾患である。この疾患はＣＤ４＋Ｔリンパ球により仲介される。ＣＤ４＋Ｔリンパ球は、髄鞘中のタンパク質、例えば、ミエリン塩基性タンパク質（ＭＢＰ）、プロテオリピドタンパク質（ＰＬＰ）、およびミエリンオリゴ樹状細胞タンパク質に対して特異的である。１つの仮説は次の通りである。遺伝的に決定された素因に基づいて、ウイルス感染のような環境因子がこの疾患の大発生を誘発し、これはリンパ球のＴｈ１およびＴｈ２集団の不均衡を生じ、これにより活性化されたＴｈ１細胞の蓄積を促進し、これらのＴｈ１細胞は血液脳関門を貫通し、ＣＮＳにおいて前炎症作用を発揮することができる。軸索の髄鞘脱落は部分的にミエリン特異的ＣＤ４＋リンパ球により引き起こされる。これらのリンパ球はＴｈ１サイトカイン、例えば、インターロイキン（ＩＬ）−１２、インターフェロンガンマ（ＩＦＮγ）および腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦα）を分泌する。この前炎症性サイトカインパターンを、細胞仲介免疫応答について特性決定する。健康な個体において、細胞仲介Ｔｈ１免疫応答は、体液Ｔｈ２免疫応答とバランスされている。体液免疫応答は、抗炎症性Ｔｈ２サイトカインＩＬ−４、ＩＬ−５およびＩＬ−１０により仲介される。
【０００４】
現在、ＭＳの治療戦略はインターフェロンまたは酢酸グラチラマーを使用する免疫調節治療に基づく。しかしながら、これらの治療はある患者においてのみ疾患の進行を遅延する。コルチコステロイドは抗炎症作用を有するので、再発の急性治療のために使用される。コルチコステロイドを使用する治療はＭＳのいくつかの症状を軽減するが、長期間の予後に影響を与えることに失敗する。コルチコステロイドの既知の多数の副作用に加えて、コルチコステロイドはまた内因的免疫抑制メカニズムを阻害し、長期間の治療に不適当である。高度に活性な疾患の治療、または標準的治療に対して応答しない患者（二次的に進行性のＭＳを患う患者を含む）の治療のために、免疫抑制剤、例えば、メトトレキセートまたはシクロスポリンが使用される。これらの物質は許容性がしばしば低い。
したがって、ＭＳおよび他のＴｈ１仲介免疫病の追加の治療戦略が必要とされている。
【０００５】
多数の自己免疫疾患、例えば、ＭＳにおいて、Ｔｈ１／Ｔｈ２バランスが混乱される。女性の性ホルモンは、このバランスの調節に対して影響を及ぼすように思われる。妊娠の間、Ｔｈ２サイトカインパターンに向かうシフトが証明された。妊娠の間のＴｈ１仲介免疫病（例えば、ＭＳ）の臨床的症候の改良もまた観察された。特に妊娠の第３の３ヶ月間において、再発率はＭＳを有する女性において低下する（Ｃｏｎｆａｖｒｅｕｘ他、１９９８；Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３３９（５）：２８５−２９１）。疾患活動の減少は少なくとも一部分高いレベルのエストロゲン、例えば、エストラジオールおよびエストリオールのためであるように見える。このようなエストロゲンは妊娠の最後の３ヶ月間に観測される。ＭＳ、Ｔｈ１仲介の実験的自己免疫性脳脊髄炎（ＥＡＥ）の動物モデルにおいて、妊娠において見出されるレベルに等しいエストリオールの投与は疾患を改善できることが示された（Ｋｉｎ他、１９９９；Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ  ５２：１２３０−１２３８；Ｊａｎｓｓｏｎ他、Ｊ．Ｎｅｕｒｏｉｍｍｕｎｏｌ．５２：２０３−２０７）。さらに、ＭＳ患者のＣＤ４＋リンパ球による抗炎症性サイトカインの分泌は、妊娠におけると同様なレベルの濃度のエストラジオール、エストロンおよびエストリオールにより刺激されることがＣｏｒｒｅａｌｅ他（１９９８；Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６１：３３６５−３３７４）により示された。
【０００６】
ＷＯ０１／８５１５４には、低い投与量のエストロゲンで免疫病を治療して、基底レベルよりも上であるが、妊娠レベルより低い血清濃度を発生させる方法が開示されている。
前炎症性症状と抗炎症性症状との間のバランスの調節におけるエストロゲンの掛かり合いのために、Ｔｈ１仲介免疫病を患う患者に対する潜在的療法はエストロゲン、特にエストリオールを投与すること、好ましくは典型的には妊娠において見出される連続的血清濃度を達成することである。
【０００７】
しかしながら、エストロゲンの治療的使用はいくつかの問題に悩される。治療においてエストロゲンを使用することの１つの欠点は、エストロゲンが子宮癌（子宮内膜癌腫）または乳癌を引き起こす潜在的能力を有することである。例えば、エストラジオールの使用は、代謝物質１６α−ヒドロキシエストロン、すなわち、既知の腫瘍促進活性を有する代謝物質に導くことがある（Ｂｒｅｄｌｏｗ他、１９８５；Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８２：６２９５−６２９９：Ｋａｂａｔ他、１９９７；Ｃａｎｃｅｒ  Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌ．Ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ  Ｐｒｅｖ．  ６：５０５−５０９）。
【０００８】
活性成分としてエストリオールはこの問題を回避する。エストリオール療法は、ヒトにおける癌発生の小さいリスクに関連すると考えられる。エストリオール−エストロゲンレセプター（ＥＲ）の解離はエストラジオール−ＥＲ複合体の解離よりも非常に速いので、エストリオールはより弱い、わずかに短い持続性のエストロゲンとして作用する。したがって、エストリオールは最小の子宮内膜増殖を引き起こす。さらに、エストリオールはレセプターに対するエストラジオールの結合に対して拮抗活性を表示し（Ｃｌａｒｋ他、１９８４；Ｊ．Ｓｔｅｒｏｉｄ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．２０：１００５−１０１３）、したがってエストリオールはエストラジオールの発癌作用に対抗する保護的役割を有するように思われる。エストリオール／エストラジオールおよびエストロンの比が１０：１である場合においてのみ、エストリオールの拮抗作用が観測され、この比より低いと、エストラジオールは部分的にのみ、または最小に拮抗化され、効力のあるエストロゲンとして作用する  （Ｍｅｌａｍｅｄ他、１９９７；Ｍｏｌ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．１１：１８６８−１８７８）。この比は妊娠後期において達成される。
【０００９】
先行技術において直面する１つの問題は、患者に対して快適である投与形態を有するエストリオールの連続的妊娠血液レベルを達成できないことである。経口的に投与するとき、エストリオールの生物学的利用率は低い。膣内適用後におけるようなエストリオールの匹敵する血清レベルを達成するために、１０倍のより多くのエストリオールを経口投与しなくてはならない（Ｈｅａｄ他、１９９８；Ａｌｔｅｍ．Ｍｅｄ．Ｒｅｖ．３：１０１−１１３）。こうして、エストリオールを高い投与量で経口投与なくてはならず、副作用を引き起こすことがある。エストリオールの経口適用は、肝臓において高い発情促進力に導く。肝臓の作用は、例えば、血液凝固系の因子およびアンギオテンシノゲンの合成の増加を含む。
【００１０】
エストリオールを使用する経口的療法について先行技術から知られている他の問題は、エストリオールの血液レベルが患者ごとに広く変化し、これにより投与量の一般的推奨が不可能ことである。
【００１１】
また、エストリオールの半減期は非常に短く、約１．５〜５．３時間であることは問題である（Ｈｅｌｔｈｅｃｋｅｒ他、１９９１；Ｈｏｒｍ．Ｒｅｓ．３５：２３４−２３８）。こうして、十分に規定された、妊娠において見出される血液レベルに類似する、エストリオールの持続した血液レベルを達成するために、患者にとって好都合ではない短時間で、経口的エストリオールの高い投与量を投与なくてはならず、そしていくつかの副作用を考慮しなくてはならない。
【００１２】
エストリオールの経口的に投与される量の増加は、必要な全身的発情促進力を増加させる方法ではない。エストリオールの骨保護的性質は、エストリオールの全身的発情促進力についての非常にすぐれたマーカーである。ＥＰ  ０  ６３０  ２４８において、少なくとも２４時間の間エストリオールを連続的に放出し、これによりエストリオールの一定血液レベルを達成する系において、エストリオールを経皮的に投与する場合、エストリオールの一定血液レベルが達成され、エストリオールは抗骨粗しょう症作用を示すことが教示されている。これらの作用の決定的因子は、一定のエストリオール血液レベルである。Ｌｉｎｄｓａｙ他（１９７９；Ｍａｔｕｒｉｔａｓ  １：２７９−２８５）はエストリオールを非常に高い投与量（１２ｍｇ／日）で経口的に投与したが、このような投与量のエストリオールは骨保護作用を示すことができなかった。
【００１３】
ＥＰ  ０１６３  ５９６において、エストラ−１，３，５（１０）−トリエン誘導体、このような化合物を製造する方法およびそれらを含有する医薬組成物が開示されている。
【００１４】
先行技術において直面する問題にかんがみて、説明した欠点なしにエストリオールの十分に規定された、持続した血液レベルを達成することによって、自己免疫疾患を治療する新規な療法的アプローチは望ましいであろう。
【発明の開示】
【００１５】
本発明の目的
本発明の目的は、先行技術の欠点を防止または減少すること、すなわち、自己免疫疾患、特にＭＳを治療する新規な戦略を提供することである。本発明の１つの側面において、自己免疫疾患はＴｈ１介在である。
【００１６】
この目的は、エストリオール、特にエストリオールジエステル、好ましくはエストリオール３，１７−ジプロピオナートまたはエストリオール３，１７−ジヘキサノアートのプロドラッグにより達成される。エストリオールエステル３，１７β−ジ−ｎ−ヘキサノイルオキシ−１，３，５（１０）−エストラトリエン−１６α−オールは最も好ましい。この化合物は好ましくは非経口的に投与されるプロドラッグであり、これにより肝臓−エストリオールの相互作用は防止されるであろう。エストリオールジエステルプロドラッグ、例えば、３，１７β−ジ−ｎ−ヘキサノイルオキシ−１，３，５（１０）−エストラトリエン−１６α−オールの十分に規定された、持続した血液レベルを達成する。本発明によるエストリオールジエステルプロドラッグ、例えば、３，１７β−ジ−ｎ−ヘキサノイルオキシ−１，３，５（１０）−エストラトリエン−１６α−オールは、免疫応答の抗炎症性Ｔｈ２型に向かうシフトを引き起こし、したがって、ＭＳのような自己免疫疾患を改善する有望な方法および使用を提供する。
【００１７】
本発明の概要
本発明は、哺乳動物における自己免疫疾患、例えば、ＭＳを治療する薬剤を製造するためのエストリオールジエステルの使用に関する。好ましくは、このようなエストリオールジエステルはエストリオール３，１７−ジプロピオナートまたはエストリオール３，１７−ジヘキサノアートである。最も好ましいエストリオールジエステルは、３，１７β−ジ−ｎ−ヘキサノイルオキシ−１，３，５（１０）−エストラトリエン−１６α−オールである。特に、低い投与量の本発明のエストリオールジエステル、例えば、３，１７β−ジ−ｎ−ヘキサノイルオキシ−１，３，５（１０）−エストラトリエン−１６α−オールの投与は、肝臓機能に影響を与えないで、妊娠後期、例えば、妊娠の第２または第３の３ヶ月間、好ましくは最後の３ヶ月間において観測される高くかつ持続したエストリオール血液レベルを生ずる。
【００１８】
他の側面において、本発明は、治療を必要とする哺乳動物における自己免疫疾患、例えば、ＭＳを治療する方法を提供し、前記方法は治療を必要とする哺乳動物に薬学的に有効量のエストリオールジエステルを投与することを含む。本発明の方法および使用のために、３，１７β−ジ−ｎ−ヘキサノイルオキシ−１，３，５（１０）−エストラトリエン−１６α−オールは最も好ましいエストリオールジエステル・プロドラッグである。
【００１９】
本発明の詳細な説明
本発明は、自己免疫疾患、例えば、ＭＳを治療する方法およびそれを治療するためのエストリオールジエステル・プロドラッグ、例えば、３，１７β−ジ−ｎ−ヘキサノイルオキシ−１，３，５（１０）−エストラトリエン−１６α−オールの使用に関する。
エストリオールジエステルは以下の一般式：
【００２０】
【化１】
2005518438.tif 000002
【００２１】
｛式中、
Ｒは、Ｃ1-10直鎖状または分枝鎖状のアルキル基またはフェニルである。｝により表される。
【００２２】
本発明において使用するエストリオールジエステルは、好ましくはエストリオール３，１７−ジプロピオナートまたはエストリオール３，１７−ジヘキサノアートである。本発明において使用するために最も好ましい化合物は、３，１７β−ジ−ｎ−ヘキサノイルオキシ−１，３，５（１０）−エストラトリエン−１６α−オールである。３，１７β−ジ−ｎ−ヘキサノイルオキシ−１，３，５（１０）−エストラトリエン−１６α−オールは本発明の目的に対して好ましいエストリオールジエステルであるが、これは他の適当なエストリオールジエステルをその上使用する可能性を排除しない。
【００２３】
本発明の関係において用語「プロドラッグ」は、生物中で活性形態に代謝する、生物学的に不活性な物質を意味する。
本発明において使用するために適当なエストリオールジエステル・プロドラッグは、ＥＰ  ０  １６３  ５９６に記載されている。特に、３，１７β−ジ−ｎ−ヘキサノイルオキシ−１，３，５（１０）−エストラトリエン−１６α−オールを製造する方法は、ＥＰ  ０  １６３  ５９６の実施例６に記載されている。
【００２４】
本発明は、自己免疫疾患、例えば、ＭＳを治療する新規な療法戦略を提供する。本発明は、妊娠の第２または第３の３ヶ月間におけるように高いエストリオールの血液レベルを達成し、持続する可能性を提供する。この血液レベルは、Ｔｈ１仲介免疫病における免疫シフトを引き起こすために十分である。
【００２５】
先行技術を超えた本発明の優秀性は、従来使用されているエストリオール（Ｅ３）に比較して、ジエステル・プロドラッグから放出されるエストリオールの高い生物学的利用率から生ずる。本発明のエストリオールジエステル・プロドラッグは、大きい投与間隔において使用するために特に適当である。ジエステル・プロドラッグからのエストリオールの放出は低いために、比較的低い投与量の投与後、エストリオールの高い、十分に規定され、持続した血液レベルに到達できる。Ｈｅｉｔｈｅｃｋｅｒ他、１９９１（Ｈｏｒｍ．Ｒｅｓ．３５：２３４−２３８）による予備的研究は、エストリオールジエステル誘導体がエストリオールよりも非常に長い期間にわたってエストリオール血液レベルを増加することを示した。
【００２６】
本発明の目的に対してプロドラッグとしてエストリオールエステルを投与する好適な結果は、最初の通過間の肝臓機能との相互作用が非常に減少することを観測できることである。これは放出されたエストリオールが十分に許容されるという利点を有する。
【００２７】
好ましい側面において、本発明は、自己免疫疾患を治療する薬剤を製造するためのエストリオールエステル（例えば、エストリオール３，１７−ジプロピオナートまたはエストリオール３，１７−ジヘキサノアート）の使用に関する。好ましくは、疾患はＴｈ１仲介免疫病、最も好ましくはＭＳである。最も好ましいエストリオールジエステル・プロドラッグは、３，１７β−ジ−ｎ−ヘキサノイルオキシ−１，３，５（１０）−エストラトリエン−１６α−オールである。好ましくは、薬剤はヒトにおける治療のための薬剤である。
【００２８】
第２の好ましい側面において、本発明は自己免疫疾患を治療する方法に関する。好ましくは、疾患はＴｈ１仲介免疫病、最も好ましくはＭＳである。この方法は、治療を必要とする哺乳動物、好ましくはヒトにエストリオールジエステルを投与することを含む。エストリオールジエステルは好ましくはエストリオール３，１７−ジプロピオナートまたはエストリオール３，１７−ジヘキサノアート、最も好ましくはジエステル３，１７β−ジ−ｎ−ヘキサノイルオキシ−１，３，５（１０）−エストラトリエン−１６α−オールである。
【００２９】
自己免疫疾患は一部分Ｔ細胞により引き起こされる。Ｔ細胞は特定の組織（器官特異的）または種々の組織において宿主成分（自己抗原）を異質として認識し、その組織を攻撃する。本発明の関係において自己免疫疾患は以下を包むが、これらに限定されない：例えば、多発性硬化症（ＭＳ）、実験的自己免疫性脳脊髄炎（ＥＡＥ）、慢性関節リウマチ、若年性オリゴ関節炎、コラーゲン誘導関節炎、１型真性糖尿病、炎症性腸疾患、橋本甲状腺炎、クローン病、移植片対宿主疾患、狼瘡疾患、アディソン病、およびその他。
【００３０】
本発明のプロドラッグは、エストリオールの血清濃度を妊娠レベルに等しいレベルに上昇させるために十分な量で投与することが望ましい。例えば、エストリオールは４０ｍｇ／２４時間程度で分泌され、妊娠後期の間に１〜１００ｎｇ／ｍｌの濃度で血液中を循環することが観察された（参照：Ｋａｔａｇｉｒｉ他、１９７６、Ａｍ．Ｊ．Ｏｂｓｔｅｔ．Ｇｙｎｅｃｏｌ．２７２−２８０；Ｋｌｏｐｐｅｒ他、１９７７、Ｏｂｓｔｅｔ．Ｇｙｎｅｃｏｌ．４５９−４６１；Ｆｉｓｃｈｅｒ−Ｒａｓｍｕｓｓｅｎ他、１９８１；Ａｃｔａ．Ｏｂｓｔｅｔ．Ｇｙｎｅｃｏｌ．Ｓｃａｎｄ．４１７−４２０）。
【００３１】
本発明によれば、一般式（第６頁参照）のエストリオールのジエステル・プロドラッグは代謝的に安定化された形態のエストリオールの吸収および／または結合を可能とする。したがって、肝臓の発情促進力の副作用なしに、高い全身的エストリオールレベルを達成できる。さらに、発生したエストリオール蓄積のために、十分に規定され、持続したエストリオールの血液レベルが得られる。生物中のエストリオールの半減期は延長される。したがって、大きい間隔の投与が可能である。改良された生物学的利用率のために、これは比較的低い投与量で達成できる。
【００３２】
本発明のエストリオールジエステル・プロドラッグ、例えば、最も好ましい３，１７β−ジ−ｎ−ヘキサノイルオキシ−１，３，５（１０）−エストラトリエン−１６α−オールの利点は多数であり、すなわち、次の通りである：
１．肝臓中の副作用の減少；
２．生物おけるエストリオールの半減期の延長；および
３．生物学的利用率の増強。
結局、本発明によるプロドラッグは、投与間の間隔を長くして、比較的低い投与量で投与することができる。さらに、患者間の個々の変動性は減少される。
ジエステルの蓄積作用のために、本発明の目的に対する適用頻度はエストリオールの適用に比較して減少できるであろう。蓄積作用の期間は、エステル化モノ炭酸の鎖長に依存する。
【００３３】
先に規定の本発明の目的に対して適当な活性物質、例えば、エストリオールジエステル、例えば、３，１７β−ジ−ｎ−ヘキサノイルオキシ−１，３，５（１０）−エストラトリエン−１６α−オールは、既知のガレヌス製剤を調製する方法に従い、医薬組成物の中に組み込まれることができる。
【００３４】
本発明において使用する薬剤および医薬組成物の調製は、この分野において知られている方法に従い実施することができる。普通に知られ、使用されているアジュバントならびにそれ以上の適当な担体または希釈剤を使用することができる。適当な担体およびアジュバントは、例えば、下記の文献において薬学、化粧品および関係する分野のために推奨されているものであることができる：Ｕｌｌｍａｎｎ’ｓ  Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ  ｏｆ  Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、Ｖｏｌ．４、（１９５３）、ｐｐ．１−３９；Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｖｏｌ．５２（１９６３）、ｐ．９１８ｆｆ；Ｈ．ｖ．Ｃｚｅｔｓｃｈ−Ｌｉｎｄｅｎｗａｌｄ、“Ｈｉｌｆｓｓｔｏｆｆｅ  ｆｕｒ  Ｐｈａｍａｚｉｅ  ｕｎｄ  ａｎｇｒｅｎｚｅｎｄｅ  Ｇｅｂｉｅｔｅ”；Ｐｈａｒｍａｚｉｅ  Ｉｎｄ．２、１９６１、ｐ．７２ｆｆ；Ｄｒ．Ｈ．Ｐ．Ｆｉｅｄｌｅｒ、Ｌｅｘｉｋｏｎ  ｄｅｒ  Ｈｉｌｆｓｓｔｏｆｆｅ  ｆｕｒ  Ｐｈａｍａｚｉｅ，Ｋｏｓｍｅｔｉｋ  ｕｎｄ  ａｎｇｒｅｎｚｅｎｄｅ  Ｇｅｂｉｅｔｅ、Ｃａｎｔｏｒ  ＫＧ、Ａｕｌｅｎｄｏｒｆ  ｉｎ  Ｗｕｒｔｔｅｍｂｅｒｇ、１９７１。
【００３５】
薬剤として、本発明のエストリオールジエステル・プロドラッグ、例えば、３，１７β−ジ−ｎ−ヘキサノイルオキシ−１，３，５（１０）−エストラトリエン−１６α−オールを投与することは、経口的、経直腸的、子宮内、膣内、局所的、経皮的または非経口的であることができる。経口的適用は、粉末、顆粒、錠剤、丸剤、トローチ剤、糖衣錠、カプセル剤、流動性エキス剤、チンキ剤およびシロップ剤の形態であることができる。経直腸的または膣内適用は、坐剤または子宮内デバイスの形態であることができる。局所的適用は、懸濁液またはエマルジョン、軟膏、クリームまたはゲルの形態であることができる。経皮的適用はパッチの形態であることができる。注射可能な無菌の水性または油性の溶液または懸濁液の非経口的適用は、皮下的または皮内ならびに経皮的であることができる。本発明による薬剤は、蓄積注射または移植調製物を介して、必要に応じて活性物質の徐放のために、投与することができる。好ましい適用モードは、注射を介する投与である。
【００３６】
移植片は不活性物質、例えば、生物分解性ポリマーまたは合成シリコーン、例えば、シリコーンゴムを含むことができる。
医薬組成物を調製するために適当な希釈剤は、ＥＰ  ０  １６３  ５９６において規定されている。
【００３７】
投与すべき、本発明のエストリオールジエステル・プロドラッグ、例えば、３，１７β−ジ−ｎ−ヘキサノイルオキシ−１，３，５（１０）−エストラトリエン−１６α−オールの投与量は、エストリオールの血清濃度を０．１〜１００ｎｇ／ｍｌに上昇させることができる。０．１〜１００ｎｇ／ｍｌの範囲、より好ましくは０．１〜１０ｎｇ／ｍｌの範囲、最も好ましくは１〜１０ｎｇ／ｍｌの範囲の血清濃度は望ましい。本発明によれば、これは１〜１０００ｍｇ、好ましくは１０〜５００ｍｇ／月の累積投与量で本発明のエストリオールジエステル・プロドラッグを適用することによって達成される。適用間の間隔は１〜６０日間、好ましくは５〜５０日間、最も好ましくは２０〜４０日間であることができる。エストリオールの血清濃度を測定する方法は既知であり、例えば、適当なラジオイムノアッセイは下記の文献：Ｈｅｉｔｈｅｃｋｅｒら（Ｈｏｒｍ．Ｒｅｓ．３５：２３４−２３８）に開示されている。
【００３８】
必要に応じて、本発明による薬学上の使用および方法は、他の薬学的活性物質をさらに含む。例えば、薬学的活性物質は、ホルモン、例えば、プロゲステロン（ゲスタゲン）、またはプロゲステロン前駆体、アナログ、プロゲステロン・レセプター・アゴニストまたはメソプロゲスチンであることができる。本発明の化合物と、例えば、プロゲステロン（ゲスタゲン）との組み合わせは、子宮内膜増殖に対して、およびエストリオールの長期使用に付随する、ある種の他のリスクに対して、追加の保護的作用を示すことができる。テストステロン分泌の喪失によるリビドの喪失を回避するために、テストステロンまたは他のアンドロゲンとの組み合わせを必要とすることがある。
【００３９】
３，１７β−ジ−ｎ−ヘキサノイルオキシ−１，３，５（１０）−エストラトリエン−１６α−オールの連続的投与は、子宮内膜の増殖に導くことがある。エストロゲン治療と関連する望ましくない作用は、プロゲスチン、例えば、“Ｋｏｎｔｒａｚｅｐｔｉｏｎ  ｍｉｔ  Ｈｏｒｍｏｎｅｎ”、Ｈ．−Ｄ．ＴａｕｂｅｒｔおよびＨ．Ｋｕｈｌ、Ｇｅｏｒｇ  Ｔｈｉｅｍｅ  Ｖｅｒｌａｇ、Ｓｔｕｔｔｇａｒｔ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、１９９５、またはメソプロゲスチン（＝有意な部分的アゴニスト活性を有するプロゲステロンアンタゴニスト）、例えば、ＥＰ０６４８７７８  Ｂ１、ＥＰ０６４８７７９  Ｂ１、ＥＰ１１５７９９６  Ａ１、ＷＯ０１／３４１２６およびＷＯ９９／４５０２３に記載されている化合物を使用する付随的治療により排除される。プロゲスチンまたはメソプロゲスチンは通常の投与形態および投与量で投与することができ、そして投与は、例えば、経口的、非経口的または子宮内であることができる。
この治療は多発性硬化症の疾患の過程に影響を及ぼさない。この付随する治療は、子宮摘出した女性において省略することができる。
【００４０】
本発明のエストリオールジエステル・プロドラッグを使用する自己免疫疾患、例えばＴｈ１仲介疾患、例えばＭＳの治療は、慣用の免疫治療剤の投与をさらに含むことができる。本発明の関係において用語「免疫治療剤」は下記のものを包含するが、これらに限定されない：免疫調節剤または免疫抑制剤、例えば、コルチコステロイド、シクロスポリン、ＦＫ  ５０６、メトトレキセート、アザチオプリン、ミトキサントロン、シクロホスファミド、グラチラマーアセテートコポリマー−１、抗炎症性サイトカイン、例えば、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−１０、ＩＦＮβ、例えば、ベータフェロン（ｂｅｔａｆｅｒｏｎ（登録商標））、サイトカイン−アンタゴニスト、例えば、ＩＬ−１、ＩＬ−２およびＩＬ−１２アゴニスト、ＴＮＦα、抗炎症性ＰＤＥ  ＩＶレセプター・アンタゴニスト、例えば、メソプラム、インテグリンα４アンタゴニストおよび抗炎症性ケモカイン・アンタゴニスト、例えば、ＣＣＲ１レセプター・アンタゴニスト（抗体、アンチセンス・オリゴヌクレオチドおよび可溶性レセプターを包含する）。
【００４１】
本発明によるエストリオールジエステル・プロドラッグ、例えば、３，１７β−ジ−ｎ−ヘキサノイルオキシ−１，３，５（１０）−エストラトリエン−１６α−オール、および薬学的に活性な免疫治療剤は、一緒にまたは別々に、同時におよび／または順次に投与することができる。投与の様式は、本発明のプロドラッグと第２の薬学的活性物質との間で異なることがある。
【実施例】
【００４２】
ラット急性ＥＡＥにおける３，１７β−ジ−ｎ−ヘキサノイルオキシ−１，３，５（１０）−エストラトリエン−１６α−オールの効能
実験の設計：
ＭＳの動物モデルにおける３，１７β−ジ−ｎ−ヘキサノイルオキシ−１，３，５（１０）−エストラトリエン−１６α−オールの効能を研究するために、この化合物をルイス（Ｌｅｗｉｓ）ラットＥＡＥモデルにおいて試験した。
【００４３】
１．疾患の誘導
雌のルイスラットを８週齢において抗原エマルジョンで免疫化した。第１日に、各後足裏のふくらみに０．０５ｍｌの下記の混合物を皮下注射することによって、ラットを免疫化した：均質化し、混合した、全モルモット脊髄１ｇ：１ｍｌの生理的食塩水。次いでこのホモジネートをフロインド不完全アジュバントと１：１で混合する、ここでフロインド不完全アジュバントは１ｍｇ／ｍｌのヒト型結核菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）を含有する。第１日に、単回ボーラス注射により、０．０５ｍｌの脊髄ホモジネート（ＳＣＨ）を各後足裏のふくらみに合計０．１ｍｌ／ラットの割合で注射する。
【００４４】
２．処置
３，１７β−ジ−ｎ−ヘキサノイルオキシ−１，３，５（１０）−エストラトリエン−１６α−オールを、溶媒ベンジルベンゾエート：ヒマシ油（３：２ｇ／ｇ）中で調製した。３，１７β−ジ−ｎ−ヘキサノイルオキシ−１，３，５（１０）−エストラトリエン−１６α−オールを、０．５ｍｌ／注射で１０００μｇ／ラットにおいて皮下（ｓ．ｃ．）投与した。３，１７β−ジ−ｎ−ヘキサノイルオキシ−１，３，５（１０）−エストラトリエン−１６α−オールをこの研究の間２回投与した（第１日および第１５日）。溶液を各投与前に新しく調製し、ここでまず３，１７β−ジ−ｎ−ヘキサノイルオキシ−１，３，５（１０）−エストラトリエン−１６α−オールをベンジルベンゾエート中に溶解し、ヒマシ油の添加前におだやかに加熱した。それぞれの群につき１０匹の動物が存在した（溶媒−ベンジルベンゾエート／ヒマシ油、および処置−１０００μｇ／ラットの３，１７β−ジ−ｎ−ヘキサノイルオキシ−１，３，５（１０）−エストラトリエン−１６α−オール）。
【００４５】
３．臨床的評価
十分に確立されたプロトコルに従い、臨床的評価を実施した。ゼロのＥＡＥスコアは、動物が神経学的症状を持たず、正常として分類されたことを意味する。１の臨床的スコアは動物が力のない尾を有したことを意味し、そして２は一方または両方の後足の不完全な麻痺を表す。一方の後足または両方の後足が完全に麻痺している動物は動くことができるが、体の運動を促進しない動物に３のスコアを付ける。４のＥＡＥスコアは両方の後足の完全な麻痺を表し、そして５は後足の完全な麻痺および一方または両方の前足の弱さまたは瀕死の状態、または死を表す。
ラットを第４日まで二、三日ごとに秤量し、及びスコアを付け、次いで第２０日まで毎日秤量し、及びスコアを付けた。血液の化学分析のために、血漿および血清の試料を収集した。
スコアがボーダーラインであるラットには１／２のスコア、例えば３．５を付ける。
【００４６】
結果および結論：
３，１７β−ジ−ｎ−ヘキサノイルオキシ−１，３，５（１０）−エストラトリエン−１６α−オールは、ルイスラットＥＡＥモデルにおいて疾患の慢性段階の間に臨床的スコアを低下するために有効であった。溶媒および３，１７β−ジ−ｎ−ヘキサノイルオキシ−１，３，５（１０）−エストラトリエン−１６α−オールで処置した動物についての臨床的スコアを図１に表す。ＡＮＯＶＡを行いスコアを解析すると、疾病の慢性段階において溶媒で処置した動物と３，１７β−ジ−ｎ−ヘキサノイルオキシ−１，３，５（１０）−エストラトリエン−１６α−オールで処置した動物との間に有意差が存在する（ｐ≦０．０２８）。
【００４７】
これらの結果が示唆するように、３，１７β−ジ−ｎ−ヘキサノイルオキシ−１，３，５（１０）−エストラトリエン−１６α−オールは、自己免疫性髄鞘脱落の治療について潜在的能力を有することができ、２回／月以下で投与することができ、そしてなおその保護的作用を示すことができる。
【図面の簡単な説明】
【００４８】
【図１】溶媒および３，１７β−ジ−ｎ−ヘキサノイルオキシ−１，３，５（１０）−エストラトリエン−１６α−オールについての臨床的スコア（ラットの急性ＥＡＥモデル）の概要を表す。
【図１】
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【国際調査報告】
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