(57)【要約】本発明は、インビトロおよびインビボの両方において熱ショックタンパク質90(HSP90)を阻害する、そして例えば癌を含むHSP90により媒介される症状の治療における式(I)(式中：Ar3は独立して：C5〜20アリール基であり、かつ任意に置換されていてもよく；Ar4は独立して：C5〜20アリール基であり、かつ任意に置換されていてもよく；R5は独立して：水素；ハロゲン；ヒドロキシ；エーテル；ホルミル；アシル；カルボキシ；エステル；アシルオキシ；オキシカルボニルオキシ；アミド；アシルアミド；アミノカルボニルオキシ；テトラゾリル；アミノ；ニトロ；シアノ；アジド；スルフヒドリル；チオエーテル；スルホンアミド；C1〜7アルキル；C3〜20ヘテロサイクリル；またはC5〜20アリールであり；RNは独立して：-H；C1〜7アルキル；C3〜20へテロサイクリル；またはC5〜20アリールである)の特定の3,4-ジアリールピラゾール、ならびにその医薬的に許容される塩、溶媒和物、アミド、エステル、エーテル、化学的に保護された形態、およびプロドラッグの使用に関する。本発明は、このような化合物、このような化合物を含む医薬組成物、医薬の使用のためのこのような化合物、HSP90により媒介される症状、例えば、癌の治療における使用のためのこのような化合物、ならびにこのような治療のための医薬の製造におけるこのような化合物の使用にも関する。【化１】2005517675.tif 000331
2005517675.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式：
【化１】
2005517675.tif 000295
(式中：
Ar3は独立して：C5〜20アリール基であり、かつ任意に置換されていてもよく；
Ar4は独立して：C5〜20アリール基であり、かつ任意に置換されていてもよく；
R5は独立して：水素；ハロゲン；ヒドロキシ；エーテル；ホルミル；アシル；カルボキシ；エステル；アシルオキシ；オキシカルボニルオキシ；アミド；アシルアミド；アミノカルボニルオキシ；テトラゾリル；アミノ；ニトロ；シアノ；アジド；スルフヒドリル；チオエーテル；スルホンアミド；C1〜7アルキル；C3〜20ヘテロサイクリル；またはC5〜20アリールであり；
RNは独立して：-H；C1〜7アルキル；C3〜20へテロサイクリル；またはC5〜20アリールである)
の化合物、または医薬的に許容されるそれらの塩、溶媒和物、アミド、エステル、エーテル、化学的に保護された形態、もしくはプロドラッグの有効量を、細胞と接触させることを含む、インビトロまたはインビボにおいてHSP90を阻害する方法。
【請求項２】
化合物が、式：
【化２】
2005517675.tif 000296
(式中：
nは0〜5の整数であり；そして
各RPは独立して、水素；ハロゲン；ヒドロキシ；エーテル；ホルミル；アシル；カルボキシ；エステル；アシルオキシ；オキシカルボニルオキシ；アミド；アシルアミド；アミノカルボニルオキシ；テトラゾリル；アミノ；ニトロ；シアノ；アジド：スルフヒドリル；チオエーテル；スルホンアミド；C1〜7アルキル；C3〜20ヘテロサイクリル；またはC5〜20アリールである)
をもつ、請求項1に記載の方法。
【請求項３】
化合物が、式：
【化３】
2005517675.tif 000297
(式中：
mは0〜4の整数であり；そして
RP2および各RPはそれぞれ独立して：水素；ハロゲン；ヒドロキシ；エーテル；ホルミル；アシル；カルボキシ；エステル；アシルオキシ；オキシカルボニルオキシ；アミド；アシルアミド；アミノカルボニルオキシ；テトラゾリル；アミノ；ニトロ；シアノ；アジド；スルフヒドリル；チオエーテル；スルホンアミド；C1〜7アルキル；C3〜20ヘテロサイクリル；またはC5〜20アリールである)
をもつ、請求項1に記載の方法。
【請求項４】
化合物が、式：
【化４】
2005517675.tif 000298
(式中：
RP2は独立して：水素；ハロゲン；ヒドロキシ；エーテル；ホルミル；アシル；カルボキシ；エステル；アシルオキシ；オキシカルボニルオキシ；アミド；アシルアミド；アミノカルボニルオキシ；テトラゾリル；アミノ；ニトロ；シアノ；アジド；スルフヒドリル；チオエーテル；スルホンアミド；C1〜7アルキル；C3〜20ヘテロサイクリル；またはC5〜20アリールである)
をもつ、請求項1に記載の方法。
【請求項５】
化合物が、式：
【化５】
2005517675.tif 000299
(式中：
pは0〜3の整数であり；そして
RP2、RP4および各RPはそれぞれ独立して：水素；ハロゲン；ヒドロキシ；エーテル；ホルミル；アシル；カルボキシ；エステル；アシルオキシ；オキシカルボニルオキシ；アミド；アシルアミド；アミノカルボニルオキシ；テトラゾリル；アミノ；ニトロ；シアノ；アジド；スルフヒドリル；チオエーテル；スルホンアミド；C1〜7アルキル；C3〜20ヘテロサイクリル；またはC5〜20アリールである)
をもつ、請求項1に記載の方法。
【請求項６】
化合物が、式：
【化６】
2005517675.tif 000300
(式中：
RP2およびRP4はそれぞれ独立して：水素；ハロゲン；ヒドロキシ；エーテル；ホルミル；アシル；カルボキシ；エステル；アシルオキシ；オキシカルボニルオキシ；アミド；アシルアミド；アミノカルボニルオキシ；テトラゾリル；アミノ；ニトロ；シアノ；アジド；スルフヒドリル；チオエーテル；スルホンアミド；C1〜7アルキル；C3〜20ヘテロサイクリル；またはC5〜20アリールである)
をもつ、請求項1に記載の方法。
【請求項７】
化合物が、式：
【化７】
2005517675.tif 000301
(式中：
mは0〜4の整数であり；そして
RP4および各RPはそれぞれ独立して：水素；ハロゲン；ヒドロキシ；エーテル；ホルミル；アシル；カルボキシ；エステル；アシルオキシ；オキシカルボニルオキシ；アミド；アシルアミド；アミノカルボニルオキシ；テトラゾリル；アミノ；ニトロ；シアノ；アジド；スルフヒドリル；チオエーテル；スルホンアミド；C1〜7アルキル；C3〜20ヘテロサイクリル；またはC5〜20アリールである)
をもつ、請求項1に記載の方法。
【請求項８】
化合物が、式：
【化８】
2005517675.tif 000302
(式中：
RP4は独立して：水素；ハロゲン；ヒドロキシ；エーテル；ホルミル；アシル；カルボキシ；エステル；アシルオキシ；オキシカルボニルオキシ；アミド；アシルアミド；アミノカルボニルオキシ；テトラゾリル；アミノ；ニトロ；シアノ；アジド；スルフヒドリル；チオエーテル；スルホンアミド；C1〜7アルキル；C3〜20ヘテロサイクリル；またはC5〜20アリールである)
をもつ、請求項1に記載の方法。
【請求項９】
化合物が、式：
【化９】
2005517675.tif 000303
(式中：
qは0〜2の整数であり；そして
RP2、RP4、RP5および各RPはそれぞれ独立して：水素；ハロゲン；ヒドロキシ；エーテル；ホルミル；アシル；カルボキシ；エステル；アシルオキシ；オキシカルボニルオキシ；アミド；アシルアミド；アミノカルボニルオキシ；テトラゾリル；アミノ；ニトロ；シアノ；アジド；スルフヒドリル；チオエーテル；スルホンアミド；C1〜7アルキル；C3〜20ヘテロサイクリル；またはC5〜20アリールである)
をもつ、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
化合物が、式：
【化１０】
2005517675.tif 000304
(式中：
RP2、RP4およびRP5はそれぞれ独立して：水素；ハロゲン；ヒドロキシ；エーテル；ホルミル；アシル；カルボキシ；エステル；アシルオキシ；オキシカルボニルオキシ；アミド；アシルアミド；アミノカルボニルオキシ；テトラゾリル；アミノ；ニトロ；シアノ；アジド；スルフヒドリル；チオエーテル；スルホンアミド；C1〜7アルキル；C3〜20ヘテロサイクリル；またはC5〜20アリールである）
をもつ、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
化合物が、式：
【化１１】
2005517675.tif 000305
(式中：
pは0〜3の整数であり；そして
RP2、RP5および各RPはそれぞれ独立して：水素；ハロゲン；ヒドロキシ；エーテル；ホルミル；アシル；カルボキシ；エステル；アシルオキシ；オキシカルボニルオキシ；アミド；アシルアミド；アミノカルボニルオキシ；テトラゾリル；アミノ；ニトロ；シアノ；アジド；スルフヒドリル；チオエーテル；スルホンアミド；C1〜7アルキル；C3〜20ヘテロサイクリル；またはC5〜20アリールである)
をもつ、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
化合物が、式：
【化１２】
2005517675.tif 000306
(式中：
RP2およびRP5はそれぞれ独立して：水素；ハロゲン；ヒドロキシ；エーテル；ホルミル；アシル；カルボキシ；エステル；アシルオキシ；オキシカルボニルオキシ；アミド；アシルアミド；アミノカルボニルオキシ；テトラゾリル；アミノ；ニトロ；シアノ；アジド；スルフヒドリル；チオエーテル；スルホンアミド；C1〜7アルキル；C3〜20ヘテロサイクリル；またはC5〜20アリールである)
をもつ、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
化合物が、式：
【化１３】
2005517675.tif 000307
(式中：
pは0〜3の整数であり；そして
RP4、RP5および各RPはそれぞれ独立して：水素；ハロゲン；ヒドロキシ；エーテル；ホルミル；アシル；カルボキシ；エステル；アシルオキシ；オキシカルボニルオキシ；アミド；アシルアミド；アミノカルボニルオキシ；テトラゾリル；アミノ；ニトロ；シアノ；アジド；スルフヒドリル；チオエーテル；スルホンアミド；C1〜7アルキル；C3〜20ヘテロサイクリル；またはC5〜20アリールである)
をもつ、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
化合物が、式：
【化１４】
2005517675.tif 000308
(式中：
RP4およびRP5はそれぞれ独立して：水素；ハロゲン；ヒドロキシ；エーテル；ホルミル；アシル；カルボキシ；エステル；アシルオキシ；オキシカルボニルオキシ；アミド；アシルアミド；アミノカルボニルオキシ；テトラゾリル；アミノ；ニトロ；シアノ；アジド；スルフヒドリル；チオエーテル；スルホンアミド；C1〜7アルキル；C3〜20ヘテロサイクリル；またはC5〜20アリールである)
をもつ、請求項１に記載の方法。
【請求項１５】
化合物が、式：
【化１５】
2005517675.tif 000309
(式中：
mは0〜4の整数であり；そして
RP5および各RPはそれぞれ独立して：水素；ハロゲン；ヒドロキシ；エーテル；ホルミル；アシル；カルボキシ；エステル；アシルオキシ；オキシカルボニルオキシ；アミド；アシルアミド；アミノカルボニルオキシ；テトラゾリル；アミノ；ニトロ；シアノ；アジド；スルフヒドリル；チオエーテル；スルホンアミド；C1〜7アルキル；C3〜20ヘテロサイクリル；またはC5〜20アリールである)
をもつ、請求項１に記載の方法。
【請求項１６】
化合物が、式：
【化１６】
2005517675.tif 000310
(式中：
RP5は独立して：水素；ハロゲン；ヒドロキシ；エーテル；ホルミル；アシル；カルボキシ；エステル；アシルオキシ；オキシカルボニルオキシ；アミド；アシルアミド；アミノカルボニルオキシ；テトラゾリル；アミノ；ニトロ；シアノ；アジド；スルフヒドリル；チオエーテル；スルホンアミド；C1〜7アルキル；C3〜20ヘテロサイクリル；またはC5〜20アリールである)
をもつ、請求項１に記載の方法。
【請求項１７】
RP2が独立して：ヒドロキシ；ハロゲン；またはC1〜4アルキルである、請求項3、4、5、6、9、10、11および12のいずれか1つに記載の方法。
【請求項１８】
RP2が独立して：-OH、-F、-Cl、-Br、-I、-Me、-Et、-nPr、-iPr、-nBu、-iBu、-sBu、-tBuまたは-CF3である、請求項3、4、5、6、9、10、11および12のいずれか1つに記載の方法。
【請求項１９】
RP2が独立して：ヒドロキシ；ハロゲン；またはC1〜2アルキルである、請求項3、4、5、6、9、10、11、および12のいずれか1つに記載の方法。
【請求項２０】
RP2が独立して：-OH、-F、-Cl、-Br、-I、-Me、-Et、または-CF3である、請求項3、4、5、6、9、10、11および12のいずれか1つに記載の方法。
【請求項２１】
RP2が-OHである、請求項3、4、5、6、9、10、11および12のいずれか1つに記載の方法。
【請求項２２】
化合物が、式：
【化１７】
2005517675.tif 000311
をもつ、請求項3に記載の方法。
【請求項２３】
化合物が、式：
【化１８】
2005517675.tif 000312
をもつ、請求項4に記載の方法。
【請求項２４】
化合物が、式：
【化１９】
2005517675.tif 000313
をもつ、請求項5に記載の方法。
【請求項２５】
化合物が、式：
【化２０】
2005517675.tif 000314
をもつ、請求項6に記載の方法。
【請求項２６】
化合物が、式：
【化２１】
2005517675.tif 000315
をもつ、請求項9に記載の方法。
【請求項２７】
化合物が、式：
【化２２】
2005517675.tif 000316
をもつ、請求項10に記載の方法。
【請求項２８】
化合物が、式：
【化２３】
2005517675.tif 000317
をもつ、請求項11に記載の方法。
【請求項２９】
化合物が、式：
【化２４】
2005517675.tif 000318
をもつ、請求項12に記載の方法。
【請求項３０】
RP4が独立して：ヒドロキシ；ハロゲン；またはC1〜4アルキルである、請求項5、6、7、8、9、10、13および14のいずれか1つに記載の方法。
【請求項３１】
RP4が独立して：-OH、-F、-Cl、-Br、-I、-Me、-Et、-nPr、-iPr、-nBu、-iBu、-sBu、-tBu、-CF3、または-(CH2)wJ 
(ここで、wは1〜7の整数であり、そしてJは独立して：ハロゲン、ヒドロキシ、カルボキシ、アシルオキシ、オキシカルボニル、オキシカルボニルオキシ、アミノ、アミド、アシルアミド、アミノカルボニルオキシ、シアノ、スルホンアミド、またはC5〜20アリールである)
である、請求項5、6、7、8、9、10、13および14のいずれか1つに記載の方法。
【請求項３２】
RP4が独立して：-(CH2)wJ
（ここで、wは1〜7の整数であり、そしてJは独立して：ハロゲン、ヒドロキシ、カルボキシ、アシルオキシ、オキシカルボニル、オキシカルボニルオキシ、アミノ、アミド、アシルアミド、アミノカルボニルオキシ、シアノ、スルホンアミド、またはC5〜20アリールである）
である、請求項5、6、7、8、9、10、13および14のいずれか1つに記載の方法。
【請求項３３】
RP4が独立して：ヒドロキシ；ハロゲン；またはC1〜2アルキルである、請求項5、6、7、8、9、10、13および14のいずれか1つに記載の方法。
【請求項３４】
RP4が独立して：-OH、-F、-Cl、-Br、-I、-Me、-Et、-CF3、または-(CH2)wJ
(ここで、wは1〜7の整数であり、そしてJは独立して：ハロゲン、ヒドロキシ、カルボキシ、アシルオキシ、オキシカルボニル、オキシカルボニルオキシ、アミノ、アミド、アシルアミド、アミノカルボニルオキシ、シアノ、スルホンアミド、またはC5〜20アリールである)
である、請求項5、6、7、8、9、10、13および14のいずれか1つに記載の方法。
【請求項３５】
RP4が独立して-OHである、請求項5、6、7、8、9、10、13および14に記載の方法。
【請求項３６】
化合物が、式：
【化２５】
2005517675.tif 000319
をもつ、請求項5に記載の方法。
【請求項３７】
化合物が、式：
【化２６】
2005517675.tif 000320
をもつ、請求項6に記載の方法。
【請求項３８】
化合物が、式：
【化２７】
2005517675.tif 000321
をもつ、請求項7に記載の方法。
【請求項３９】
化合物が、式：
【化２８】
2005517675.tif 000322
をもつ、請求項8に記載の方法。
【請求項４０】
化合物が、式：
【化２９】
2005517675.tif 000323
をもつ、請求項9に記載の方法。
【請求項４１】
化合物が、式：
【化３０】
2005517675.tif 000324
をもつ、請求項10に記載の方法。
【請求項４２】
化合物が、式：
【化３１】
2005517675.tif 000325
をもつ、請求項13に記載の方法。
【請求項４３】
化合物が、式：
【化３２】
2005517675.tif 000326
をもつ、請求項14に記載の方法。
【請求項４４】
化合物が、式：
【化３３】
2005517675.tif 000327
をもつ、請求項5に記載の方法。
【請求項４５】
化合物が、式：
【化３４】
2005517675.tif 000328
をもつ、請求項6に記載の方法。
【請求項４６】
化合物が、式：
【化３５】
2005517675.tif 000329
をもつ、請求項9に記載の方法。
【請求項４７】
化合物が、式：
【化３６】
2005517675.tif 000330
をもつ、請求項10に記載の方法。
【請求項４８】
RP5が独立して：ヒドロキシ；ハロゲン；C1〜4アルキル；またはC5〜20アリールである、請求項1〜47のいずれか1つに記載の方法。
【請求項４９】
RP5が独立して：-OH、-F、-Cl、-Br、-I、-Me、-Et、-nPr、-iPr、-nBu、-iBu、-sBu、-tBu、-CF3、-(CH2)wJ、または-Ph
(ここで、wは1〜7の整数であり、そしてJは独立してハロゲン、ヒドロキシ、カルボキシ、アシルオキシ、オキシカルボニル、オキシカルボニルオキシ、アミノ、アミド、アシルアミド、アミノカルボニルオキシ、シアノ、スルホンアミド、またはC5〜20アリールである)
である、請求項1〜47のいずれか1つに記載の方法。
【請求項５０】
RP5が独立して：ハロゲン；C1〜4アルキル；またはC5〜20アリールである、請求項1〜47のいずれか1つに記載の方法。
【請求項５１】
RP5が独立して：-F、-Cl、-Br、-I、-Me、-Et、-nPr、-iPr、-nBu、-iBu、-sBu、-tBu、-CF3、-(CH2)wJ、または-Ph
（ここで、wは1〜7の整数であり、そしてJは独立して：ハロゲン、ヒドロキシ、カルボキシ、アシルオキシ、オキシカルボニル、オキシカルボニルオキシ、アミノ、アミド、アシルアミド、アミノカルボニルオキシ、シアノ、スルホンアミド、またはC5〜20アリールである）
である、請求項1〜47のいずれか1つに記載の方法。
【請求項５２】
RP5が独立して：ヒドロキシ；ハロゲン；またはC1〜4アルキルである、請求項1〜47のいずれか1つに記載の方法。
【請求項５３】
RP5が独立して：-OH、-F、-Cl、-Br、-I、-Me、-Et、-nPr、-iPr、-nBu、-iBu、-sBu、-tBu、-CF3、または-(CH2)wJ
（ここで、wは1〜7の整数であり、そしてJは独立して：ハロゲン、ヒドロキシ、カルボキシ、アシルオキシ、オキシカルボニル、オキシカルボニルオキシ、アミノ、アミド、アシルアミド、アミノカルボニルオキシ、シアノ、スルホンアミド、またはC5〜20アリールである）
である、請求項1〜47のいずれか1つに記載の方法。
【請求項５４】
RP5が独立して：ハロゲン；またはC1〜4アルキルである、請求項1〜47のいずれか1つに記載の方法。
【請求項５５】
RP5が独立して：-F、-Cl、-Br、-I、-Me、-Et、-nPr、-iPr、-nBu、-iBu、-sBu、-tBu、-CF3、または-(CH2)wJ
(ここで、wは1〜7の整数であり、そしてJは独立して：ハロゲン、ヒドロキシ、カルボキシ、アシルオキシ、オキシカルボニル、オキシカルボニルオキシ、アミノ、アミド、アシルアミド、アミノカルボニルオキシ、シアノ、スルホンアミド、またはC5〜20アリールである)
である、請求項1〜47のいずれか1つに記載の方法。
【請求項５６】
RP5が独立して：-(CH2)wJ；
(ここで、wは1〜7の整数であり、そしてJは独立して：ハロゲン、ヒドロキシ、カルボキシ、アシルオキシ、オキシカルボニル、オキシカルボニルオキシ、アミノ、アミド、アシルアミド、アミノカルボニルオキシ、シアノ、スルホンアミド、またはC5〜20アリールである)
である、請求項1〜47のいずれか1つに記載の方法。
【請求項５７】
RP5が独立して：-Meまたは-iPrである、請求項1〜47のいずれか1つに記載の方法。
【請求項５８】
Ar4が独立してC5〜20ヘテロアリール基であり、かつ任意に置換されていてもよい、請求項1〜57のいずれか1つに記載の方法。
【請求項５９】
Ar4が独立して単環式C5〜6ヘテロアリール基であり、かつ任意に置換されていてもよい、請求項1〜57のいずれか1つに記載の方法。
【請求項６０】
Ar4が独立してC5〜20カルボアリール基であり、かつ任意に置換されていてもよい、請求項1〜57のいずれか1つに記載の方法。
【請求項６１】
Ar4が独立して単環式C5〜6カルボアリール基であり、かつ任意に置換されていてもよい、請求項1〜57のいずれか1つに記載の方法。
【請求項６２】
Ar4が独立して、次の：
ベンゼン、ピリジン、フラン、インドール、ピロール、イミダゾール、チアゾール、イソチアゾール、ナフタレン、キノリン、ベンズイミダゾール、ベンゾチオフラン、ベンゾチアゾール、ベンゾジオキソラン、ベンゾジオキサン、ベンゾジオキセタン、フルオレン、アクリジン、およびカルバゾール
の1つから誘導され、かつ任意に置換されていてもよいC5〜20アリール基である、請求項1〜57のいずれか1つに記載の方法。
【請求項６３】
Ar4が独立して、次の：
ベンゼン、チアゾール、ベンゾチアゾール、ベンゾジオキソラン、ベンゾジオキサン、およびベンゾジオキセタン
の1つから誘導され、かつ任意に置換されていてもよいC5〜20アリール基である、請求項1〜57のいずれか1つに記載の方法。
【請求項６４】
Ar4が独立して：フェニル、チアゾール-5-イル、ベンゾチアゾール-2-イル、ベンゾジオキソラン-5-イル、ベンゾジオキサン-6-イル、またはベンゾジオキセタン-7-イルであり；かつ任意に置換されていてもよい、請求項1〜57のいずれか1つに記載の方法。
【請求項６５】
Ar4が独立して、次の：
ベンゼン、チアゾール、およびベンゾチアゾール
の1つから誘導され、かつ任意に置換されていてもよいC5〜20アリール基である、請求項1〜57のいずれか1つに記載の方法。
【請求項６６】
Ar4が独立して：フェニル、チアゾール-5-イル、またはベンゾチアゾール-2-イルであり；かつ任意に置換されていてもよい、請求項1〜57のいずれか1つに記載の方法。
【請求項６７】
Ar4が独立して、フェニルであり、かつ任意に置換されていてもよい、請求項1〜57のいずれか1つに記載の方法。
【請求項６８】
Ar4が独立して、フェニルであり、かつ任意に置換されていてもよいが、多環式基を形成するようには置換されていない、請求項1〜57のいずれか1つに記載の方法。
【請求項６９】
Ar4が独立して、非置換のフェニルである、請求項1〜57のいずれか1つに記載の方法。
【請求項７０】
R5が独立して：-H；ヒドロキシ；ハロゲン；またはC1〜4アルキルである、請求項1〜69のいずれか1つに記載の方法。
【請求項７１】
R5が独立して：-H、-OH、-F、-Cl、-Br、-I、-Me、-Et、-nPr、-iPr、-nBu、-iBu、-sBu、-tBu、-CF3、または-(CH2)wJ
(ここで、wは1〜7の整数であり、そしてJは独立して：ハロゲン、ヒドロキシ、カルボキシ、アシルオキシ、オキシカルボニル、オキシカルボニルオキシ、アミノ、アミド、アシルアミド、アミノカルボニルオキシ、シアノ、スルホンアミド、またはC5〜20アリールである)
である、請求項1〜69のいずれか1つに記載の方法。
【請求項７２】
R5が独立して：-H；ハロゲン；またはC1〜4アルキルである、請求項1〜69のいずれか1つに記載の方法。
【請求項７３】
R5が独立して： -H、-F、-Cl、-Br、-I、-Me、-Et、-nPr、-iPr、-nBu、-iBu、-sBu、-tBu、-CF3、または-(CH2)wJ
(ここで、wは1〜7の整数であり、そしてJは独立して：ハロゲン、ヒドロキシ、カルボキシ、アシルオキシ、オキシカルボニル、オキシカルボニルオキシ、アミノ、アミド、アシルアミド、アミノカルボニルオキシ、シアノ、スルホンアミド、またはC5〜20アリールである)
である、請求項1〜69のいずれか1つに記載の方法。
【請求項７４】
R5が独立して：-H；ヒドロキシ；またはC1〜4アルキルである、請求項1〜69のいずれか1つに記載の方法。
【請求項７５】
R5が独立して：-H、-OH、-Me、-Et、-nPr、-iPr、-nBu、-iBu、-sBu、-tBu、-CF3、または-(CH2)wJ
(ここで、wは1〜7の整数であり、そしてJは独立して：ハロゲン、ヒドロキシ、カルボキシ、アシルオキシ、オキシカルボニル、オキシカルボニルオキシ、アミノ、アミド、アシルアミド、アミノカルボニルオキシ、シアノ、スルホンアミド、またはC5〜20アリールである)
である、請求項1〜69のいずれか1つに記載の方法。
【請求項７６】
R5が独立して：-H；またはC1〜4アルキルである、請求項1〜69のいずれか1つに記載の方法。
【請求項７７】
R5が独立して：-H、-Me、-Et、-nPr、-iPr、-nBu、-iBu、-sBu、-tBu、-CF3、または-(CH2)wJ
(ここで、wは1〜7の整数であり、そしてJは独立して：ハロゲン、ヒドロキシ、カルボキシ、アシルオキシ、オキシカルボニル、オキシカルボニルオキシ、アミノ、アミド、アシルアミド、アミノカルボニルオキシ、シアノ、スルホンアミド、またはC5〜20アリールである)
である、請求項1〜69のいずれか1つに記載の方法。
【請求項７８】
R5が独立して、-Hでない、請求項1〜69のいずれか1つに記載の方法。
【請求項７９】
R5が独立してアミドである、請求項1〜69のいずれか1つに記載の方法。
【請求項８０】
R5が独立して-Hである、請求項1〜69のいずれか1つに記載の方法。
【請求項８１】
RNが独立して：-H；C1〜4アルキル；またはC5〜6アリールである、請求項1〜80のいずれか1つに記載の方法。
【請求項８２】
RNが独立して： -H、-Me、-Et、-nPr、-iPr、-nBu、-iBu、-sBu、-tBu、-CF3、-(CH2)wJ、または-Ph
(ここで、wは1〜7の整数であり、そしてJは独立して：ハロゲン、ヒドロキシ、カルボキシ、アシルオキシ、オキシカルボニル、オキシカルボニルオキシ、アミノ、アミド、アシルアミド、アミノカルボニルオキシ、シアノ、スルホンアミド、またはC5〜20アリールである)
である、請求項1〜80のいずれか1つに記載の方法。
【請求項８３】
RNが独立して、-HまたはC1〜4アルキルである、請求項1〜80のいずれか1つに記載の方法。
【請求項８４】
RNが独立して： -H、-Me、-Et、-nPr、-iPr、-nBu、-iBu、-sBu、-tBu、-CF3、または-(CH2)wJ
(ここで、wは1〜7の整数であり、そしてJは独立して：ハロゲン、ヒドロキシ、カルボキシ、アシルオキシ、オキシカルボニル、オキシカルボニルオキシ、アミノ、アミド、アシルアミド、アミノカルボニルオキシ、シアノ、スルホンアミド、またはC5〜20アリールである)
である、請求項1〜80のいずれか1つに記載の方法。
【請求項８５】
RNが独立して： -H、-Me、-Et、-nPr、-iPr、-nBu、または-tBuである、請求項1〜80のいずれか1つに記載の方法。
【請求項８６】
RNが独立して： -H、-Me、-Etである、請求項1〜80のいずれか1つに記載の方法。
【請求項８７】
RNが独立して、-Hまたは-Meである、請求項1〜80のいずれか1つに記載の方法。
【請求項８８】
RNが独立して、-Hでない、請求項1〜80のいずれか1つに記載の方法。
【請求項８９】
RNが独立して、-Hである、請求項1〜80のいずれか1つに記載の方法。
【請求項９０】
RNが独立して-Hである、請求項22〜29のいずれか1つに記載の方法。
【請求項９１】
RP4が独立して：ヒドロキシまたはC1〜7アルコキシである、請求項90に記載の方法。
【請求項９２】
RP4が独立して：ヒドロキシである、請求項91に記載の方法。
【請求項９３】
RP5が、請求項48〜57のいずれか1つに定義されたとおりである、請求項90〜92のいずれか1つに記載の方法。
【請求項９４】
RP5が独立して：、-Cl、-Br、-Me、-Et、-nPr、-iPr、-nBu、-iBu、-sBu、-tBu、-CF3、-(CH2)wPh、または-Ph
(ここで、wは1〜7の整数である)
である、請求項93に記載の方法。
【請求項９５】
R5が、請求項70〜80のいずれか1つに定義されたとおりである、請求項90〜94のいずれか1つに記載の方法。
【請求項９６】
R5が独立して：-H、カルボキシ、-Me、-Et、-nPr、-iPr、-nBu、-iBu、-sBu、-tBu、-CF3、または-(CH2)wJ
(ここで、wは1〜7の整数であり、そしてJは独立して：ハロゲン、ヒドロキシ、カルボキシ、アシルオキシ、オキシカルボニル、オキシカルボニルオキシ、アミノ、アミド、アシルアミド、アミノカルボニルオキシ、シアノ、スルホンアミド、またはC5〜20アリールである)
である、請求項90〜94のいずれか1つに記載の方法。
【請求項９７】
R5が独立してアミドである、請求項90〜94のいずれか1つに記載の方法。
【請求項９８】
Ar4が、請求項58〜69のいずれか1つに定義されたとおりである、請求項90〜97のいずれか1つに記載の方法。
【請求項９９】
Ar4が独立して、次の：
ベンゼン、ピリジン、イミダゾール、チアゾール、メチル-チアゾール、ピラゾール、フラン、ベンズイミダゾール、N-メチル-ベンズイミダゾール、ベンゾチアゾール、ベンゾジオキソラン、ベンゾジオキサン、およびベンゾジオキセタン
の1つから誘導され、かつ任意に置換されていてもよいC5〜20アリール基である、請求項90〜97のいずれか1つに記載の方法。
【請求項１００】
Ar4が独立して、4-C1〜7アルコキシ-フェニル基、好ましくは4-メトキシ-フェニル基である、請求項99に記載の方法。
【請求項１０１】
請求項1〜100のいずれか1つに記載の化合物の有効量を、細胞と接触させることを含む、インビトロまたはインビボにおいてHSP90のATPアーゼ活性を阻害する方法。
【請求項１０２】
請求項1〜100のいずれか1つに記載の化合物の治療的有効量を対象に投与することを含む、対象においてHSP90により媒介される症状を治療する方法。
【請求項１０３】
HSP90により媒介される症状の治療における使用のための医薬の製造のための、請求項1〜100のいずれか1つに記載の化合物の使用。
【請求項１０４】
a. Ar3は、置換もしくは非置換のピロール-3-イル、ピラゾール-3-イル、[1,2,4]トリアゾール-3-イル、[1,2,3]トリアゾール-4-イルまたはテトラゾール-5-イル基でない；
b. Ar4はピリジルまたはキノリルでない；
c. Ar3が3,4,5-トリメトキシフェニルであるときに、Ar4は3-アミノ-4-メトキシフェニルでない；
d. Ar4は、置換または非置換の 3-ヒドロキシ-ピラゾール-4-イル基でない
という条件の下で、
請求項1〜100のいずれか1つに記載の化合物の治療的有効量を対象に投与することを含む、対象において非エストロゲン依存性癌を治療する方法。
【請求項１０５】
a. Ar3は、置換もしくは非置換のピロール-3-イル、ピラゾール-3-イル、[1,2,4]トリアゾール-3-イル、[1,2,3]トリアゾール-4-イルまたはテトラゾール-5-イル基でない；
b. Ar4はピリジルまたはキノリルでない；
c. Ar3が3,4,5-トリメトキシフェニルであるときに、Ar4は3-アミノ-4-メトキシフェニルでない；
d. Ar4は、置換または非置換の3-ヒドロキシ-ピラゾール-4-イル基でない
という条件の下で、
非エストロゲン依存性癌の治療における使用のための医薬の製造のための、請求項1〜100のいずれか1つに記載の化合物の使用。
【請求項１０６】
a. Ar3は、置換もしくは非置換のピロール-3-イル、ピラゾール-3-イル、[1,2,4]トリアゾール-3-イル、[1,2,3]トリアゾール-4-イルまたはテトラゾール-5-イル基でない；
b. Ar3、Ar4、R5およびRNの2つ以上は、フェニル、4-ヒドロキシフェニルまたは4-アルコキシフェニル基でない；好ましくは、Ar3、Ar4、R5およびRNの2つ以上は、フェニル、4-ヒドロキシフェニルまたは4-(置換もしくは非置換のアルコキシ-、アルケノキシまたはアルキニルオキシ-)フェニル基でない；
c. Ar4はピリジルまたはキノリルでない；
d. Ar3が3,4,5-トリメトキシフェニルであるときに、Ar4は3-アミノ-4-メトキシフェニルでない；
e. Ar4は置換または非置換の3-ヒドロキシ-ピラゾール-4-イル基でない
という条件の下で、
請求項1〜100のいずれか1つに記載の化合物の治療的有効量を対象に投与することを含む、対象において癌を治療する方法。
【請求項１０７】
請求項90〜100のいずれか1つに記載の化合物の治療的有効量を対象に投与することを含む、対象において癌を治療する方法。
【請求項１０８】
a. Ar3は、置換もしくは非置換のピロール-3-イル、ピラゾール-3-イル、[1,2,4]トリアゾール-3-イル、[1,2,3]トリアゾール-4-イルまたはテトラゾール-5-イル基でない；
b. Ar3、Ar4、R5およびRNの2つ以上は、フェニル、4-ヒドロキシフェニルまたは4-アルコキシフェニル基でない；好ましくは、Ar3、Ar4、R5およびRNの2つ以上は、フェニル、4-ヒドロキシフェニル、または4-(置換もしくは非置換のアルコキシ-、アルケノキシまたはアルキニルオキシ-)フェニル基でない；
c. Ar4はピリジルまたはキノリルでない；
d. Ar3が3,4,5-トリメトキシフェニルであるときに、Ar4は3-アミノ-4-メトキシフェニルでない；
e. Ar4は、置換または非置換の3-ヒドロキシ-ピラゾール-4-イル基でない
という条件の下で、
癌の治療における使用のための医薬の製造のための、請求項1〜100のいずれか1つに記載の化合物の使用。
【請求項１０９】
癌の治療における使用のための医薬の製造のための、請求項90〜100のいずれか1つに記載の化合物の使用。
【請求項１１０】
a. Ar3は、置換もしくは非置換のピロール-3-イル、ピラゾール-3-イル、[1,2,4]トリアゾール-3-イル、[1,2,3]トリアゾール-4-イルまたはテトラゾール-5-イル基でない；
b. Ar3、Ar4、R5およびRNの2つ以上は、フェニル、4-ヒドロキシフェニルまたは4-アルコキシフェニル基でない；好ましくは、Ar3、Ar4、R5およびRNの2つ以上は、フェニル、4-ヒドロキシフェニルまたは4-(置換もしくは非置換のアルコキシ-、アルケノキシまたはアルキニルオキシ-)フェニル基でない；
c. Ar4はピリジルまたはキノリルでない；
d. Ar3が3,4,5-トリメトキシフェニルであるときに、Ar4は3-アミノ-4-メトキシフェニルでない；
e. Ar4は、置換または非置換の3-ヒドロキシ-ピラゾール-4-イル基でない
という条件の下で、
ヒトまたは動物の身体の治療方法における使用のための、請求項1〜100のいずれか1つに記載の化合物。
【請求項１１１】
ヒトまたは動物の身体の治療方法における使用のための、請求項90〜100のいずれか1つに記載の化合物。
【請求項１１２】
a. Ar3は、置換もしくは非置換のピロール-3-イル、ピラゾール-3-イル、[1,2,4]トリアゾール-3-イル、[1,2,3]トリアゾール-4-イルまたはテトラゾール-5-イル基でない；
b. Ar3、Ar4、R5およびRNの2つ以上は、フェニル、4-ヒドロキシフェニルまたは4-アルコキシフェニル基でない；好ましくは、Ar3、Ar4、R5およびRNの2つ以上は、フェニル、4-ヒドロキシフェニルまたは4-(置換もしくは非置換のアルコキシ-、アルケノキシまたはアルキニルオキシ-)フェニル基でない；
c. Ar4はピリジルまたはキノリルでない；
d. Ar3が3,4,5-トリメトキシフェニルであるときに、Ar4は3-アミノ-4-メトキシフェニルでない；
e. Ar4は、置換または非置換の3-ヒドロキシ-ピラゾール-4-イル基でない
という条件の下で、
ヒトまたは動物の身体のHSP90により媒介される症状の治療方法における使用のための、請求項1〜100のいずれか1つに記載の化合物。
【請求項１１３】
ヒトまたは動物の身体のHSP90により媒介される症状の治療方法における使用のための、請求項90〜100のいずれか1つに記載の化合物。
【請求項１１４】
a. Ar3は、置換もしくは非置換のピロール-3-イル、ピラゾール-3-イル、[1,2,4]トリアゾール-3-イル、[1,2,3]トリアゾール-4-イルまたはテトラゾール-5-イル基でない；
b. Ar3、Ar4、R5およびRNの2つ以上は、フェニル、4-ヒドロキシフェニルまたは4-アルコキシフェニル基でない；好ましくは、Ar3、Ar4、R5およびRNの2つ以上は、フェニル、4-ヒドロキシフェニルまたは4-(置換もしくは非置換のアルコキシ-、アルケノキシまたはアルキニルオキシ-)フェニル基でない；
c. Ar4はピリジルまたはキノリルでない；
d. Ar3が3,4,5-トリメトキシフェニルであるときに、Ar4は3-アミノ-4-メトキシフェニルでない；
e. Ar4は、置換または非置換の3-ヒドロキシ-ピラゾール-4-イル基でない
という条件の下で、
ヒトまたは動物の身体の癌の治療の方法における使用のための、請求項1〜100のいずれか1つに記載の化合物。
【請求項１１５】
ヒトまたは動物の身体の癌の治療の方法における使用のための、請求項90〜100のいずれか1つに記載の化合物。
【請求項１１６】
a. Ar3は、置換もしくは非置換のピロール-3-イル、ピラゾール-3-イル、[1,2,4]トリアゾール-3-イル、[1,2,3]トリアゾール-4-イルまたはテトラゾール-5-イル基でない；
b. Ar3、Ar4、R5およびRNの2つ以上は、フェニル、4-ヒドロキシフェニルまたは4-アルコキシフェニル基でない；好ましくは、Ar3、Ar4、R5およびRNの2つ以上は、フェニル、4-ヒドロキシフェニルまたは4-(置換もしくは非置換のアルコキシ-、アルケノキシまたはアルキニルオキシ-)フェニル基でない；
c. Ar4はピリジルまたはキノリルでない；
d. Ar3が3,4,5-トリメトキシフェニルであるときに、Ar4は3-アミノ-4-メトキシフェニルでない；
e. Ar4は、置換または非置換の3-ヒドロキシ-ピラゾール-4-イル基でない
という条件の下で、
請求項1〜100のいずれか1つに記載の化合物、および医薬的に許容される担体または希釈剤を含む組成物。
【請求項１１７】
請求項90〜100のいずれか1つに記載の化合物、および医薬的に許容される担体または希釈剤を含む組成物。
【請求項１１８】
a. Ar3は、置換もしくは非置換のピロール-3-イル、ピラゾール-3-イル、[1,2,4]トリアゾール-3-イル、[1,2,3]トリアゾール-4-イルまたはテトラゾール-5-イル基でない；
b. Ar3、Ar4、R5およびRNの2つ以上は、フェニル、4-ヒドロキシフェニルまたは4-アルコキシフェニル基でない；好ましくは、Ar3、Ar4、R5およびRNの2つ以上は、フェニル、4-ヒドロキシフェニルまたは4-(置換もしくは非置換のアルコキシ-、アルケノキシまたはアルキニルオキシ-)フェニル基でない；
c. Ar4はピリジルまたはキノリルでない；
d. Ar3が3,4,5-トリメトキシフェニルであるときに、Ar4は3-アミノ-4-メトキシフェニルでない；
e. Ar4は、置換または非置換の3-ヒドロキシ-ピラゾール-4-イル基でない；
f. Ar4は、ベンゾジオキソラン、ベンゾジオキサンまたはベンゾジオキセパンでない
という条件の下での、請求項1〜100のいずれか1つに記載の化合物。
【請求項１１９】
Ar4は、ベンゾジオキソラン、ベンゾジオキサンまたはベンゾジオキセパンでないという条件の下での、請求項90〜100のいずれか1つに記載の化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
技術分野
本発明は、一般に、治療用化合物、および治療におけるそれらの使用に関する。より具体的には、本発明は、インビトロおよびインビボの両方において熱ショックタンパク質90 (HSP90)を阻害し、そして例えば癌を含む、HSP90により媒介される症状の治療における、本明細書に記載する特定の3,4-ジアリールピラゾールの使用に関する。本発明は、このような化合物、このような化合物を含む医薬組成物、医薬上の使用のためのこのような化合物、例えば癌を含むHSP90により媒介される症状の治療における使用のためのこのような化合物、ならびにこのような治療のための医薬の製造におけるこのような化合物の使用にも関する。
【背景技術】
【０００２】
背景
分子シャペロンは、タンパク質の適切な折り畳みと立体配置とを維持し、かつタンパク質合成および分解の間のバランスを調節するのに重要である。これらは、細胞のストレス応答における極めて重大な役割を有するだけでなく、細胞増殖およびアポトーシスのような多くの重要な細胞の機能の調節に重要であることも示されている(JollyおよびMorimoto、2000；Smithら、1998；Smith、2001)。
【０００３】
熱ショックタンパク質(HSP)
熱ショック、アルコール、重金属および酸化ストレスを含むいくつかの環境ストレスへの細胞の曝露は、一般に熱ショックタンパク質(HSP)として知られる、いくつかのシャペロンの細胞内蓄積をする。この作用は、転写因子熱ショック因子1 (HSF1)により媒介され、「熱ショック応答」とよばれる(Morimoto、1998)。HSPの誘導は、初期ストレス傷害に対して細胞を防御し、回復を増強し、そしてストレス耐性状態の維持に導く。しかしながら、特定のHSPが、重要な細胞のタンパク質の増殖リスト(growing list)の正しい折り畳み、分解、局在化および機能を調節することにより、通常のストレスのない状況下で、主要な分子シャペロンの役割を果たし得ることも明らかになってきている。
【０００４】
その個々の遺伝子産物の細胞での発現、機能および局在化が多様な、HSPのいくつかの多重遺伝子ファミリーが存在する。これらは、分子量によって分類され、例えば、HSP70、HSP90およびHSP27である。この命名の規則の例外としては、グルコースレギュレーテッドタンパク質として同定されたシャペロンの小さいサブセット、例えば、GRP94およびGRP75である。
【０００５】
ヒトにおけるいくつかの疾患は、タンパク質の誤った折り畳みの結果として獲得される(Tytellら、2001；Smithら、1998において概説されている)。したがって、分子シャペロンの機構を破壊する治療の開発は、有益であることが証明され得る。ある症状(例えばアルツハイマー病、プリオン病およびハンチントン病)においては、誤って折り畳まれたタンパク質はタンパク質凝集を引き起こし、神経組織変性の疾患となる。また、誤って折り畳まれたタンパク質は、野生型タンパク質の機能の損失となり、細胞内における調節されない分子的および生理的機能に導く。
【０００６】
HSPも癌に関連している。例えば腫瘍の進行の段階に関係しているであろう、HSPの特異な発現が明らかにされている(Martinら、2000；Conroyら、1996；Kawanishiら、1999；Jameelら、1992；Hoangら、2000；Lebeauら、1991)。種々の重要な発癌経路でのHSP90の関与、および抗癌活性を有する、ある特定の天然物質がこの分子シャペロンを標的とするという発見の結果として、HSP機能の阻害が、癌の治療において有用であろうという、魅力的な新しい概念が発生している。最初の分子シャペロン阻害剤は、現在、臨床試験が行われている。
【０００７】
HSP90
HSP90は、全細胞タンパク質の約1〜2%を構成し、いくつかの他のタンパク質の一つと共に二量体として、通常、細胞内に存在している(例えば、Pratt、1997を参照)。これは、細胞の生存力に必須であり、二重のシャペロン機能を示す(Youngら、2001)。これは、熱ショックのような種々の環境ストレスにより多くのタンパク質の天然の立体配置が変更された後にそれらと相互作用し、適切なタンパク質の折り畳みを確実にして、非特異的凝集を防止することにより、細胞のストレス応答において重要な役割を果たす(Smithら、1998)。加えて、最近の結果は、HSP90が、おそらく変異タンパク質の不適切な折りたたみを訂正することにより、変異の影響に対しても緩衝の役割を果たし得ることを示唆している(RutherfordおよびLindquist、1998)。しかしながら、HSP90は、重要な調節の役割も有している。通常の生理的条件下では、その小胞体ホモログGRP94と共に、HSP90は、立体配置安定性およびいくつかの重要なクライエントタンパク質の成熟を維持して、細胞内のハウスキーピングの役割を担っている。これらは、3つの群に細分することができる：(a)ステロイドホルモン受容体、(b) Ser/Thrまたはチロシンキナーゼ(例えばERBB2、RAF-1、CDK4およびLCK)、ならびに(c)明らかに関連のないタンパク質の集合、例えば、変異体p53およびテロメラーゼの触媒サブユニットhTERTである。これらのタンパク質の全ては、細胞内の多くの生理的および生化学的なプロセスにおいて、重要な調節の役割を果たす。新規なHSP90クライエントタンパク質は、引き続き同定されている。
【０００８】
ヒトにおける高度に保存されたHSP90ファミリーは、4つの遺伝子からなり、つまり、サイトソルのHSP90αおよびHSP90βイソ型(Hickeyら、1989)、小胞体中のGRP94 (Argonら、1999)、ならびにミトコンドリア基質中のHSP75/TRAP1 (Feltsら、2000)である。すべてのファミリーの要素が類似の作用形態を有すると考えられるが、細胞内での局在化に依存して、異なるクライエントタンパク質に結合する。例えばERBB2は、GRP94の特定のクライエントタンパク質であることが知られており(Argonら、1999)、タイプ1腫瘍壊死因子受容体(TNFR1)およびRBはどちらも、TRAP1のクライエントであることが示されている(Songら、1995；Chenら、1996)。
【０００９】
HSP90は、クライエントおよび調節タンパク質の範囲の、複合体の相互作用の組に参加する(Smith、2001)。正確な分子の詳細は解明されないままであるが、ここ数年間で行われた生化学およびX線結晶学の研究(Prodromouら、1997；Stebbinsら、1997)は、HSP90のシャペロン機能への、増加する詳細な洞察を提供している。
【００１０】
HSP90の単量体は、荷電されたリンカー領域(TRAP1には存在しない)により共に連結された、保存された25 kDaのN末端および55 kDaのC末端からなる(ProdromouおよびPearl、2000a)。HSP90のNおよびC末端の両方は、クライエントタンパク質およびコシャペロン(co-chaperone)を含む基質ポリペプチドに結合することが報告されている。N末端は、トポイソメラーゼII型ジャイレースB、MutL DNA ミスマッチ修復タンパク質のN-末端フラグメントおよびヒスチジンキナーゼChe AのC-末端フラグメントと構造的な相同性を有する、珍しいATP結合部位を含む(ProdromouおよびPearl、2000a)。
【００１１】
この問題についての初期の論争に続いて、HSP90がATP-依存性の分子シャペロンである(Prodromouら、1997)ことと共に、ATPの加水分解にはヌクレオチド結合ドメインの二量体化が必要であり、これが次いでシャペロンの機能にも必要であることが、現在、明らかになっている(Prodromouら、2000a)。ATPの結合は、N末端ドメインが互いにより近接して接触され、「クランプ機構」として知られる立体構造の転換となる、ドーナツ型をした二量体構造を形成ならしめる(ProdromouおよびPearl、2000b)。
【００１２】
HSP90の機能は、種々の様式で組み合わされて、多量体タンパク質の複合体の組を形成するいくつかの分子シャペロンとの関連により調節される。種々のヘテロ複合体におけるこれらの種々のパートナーとの相互作用は、時間的、空間的および生化学的な因子により制限され得る。これらのコシャペロンのいくつかは、テトラコペプチドの繰返しを含み、これらのタンパク質のHSP90への結合は、C末端MEEVDモチーフに局在化されている(ProdromouおよびPearl、2000a)。
【００１３】
いくつかの概説が、HSP90の分子シャペロンとしての役割、および立体構造安定性におけるその重要性、ならびに現在同定されているクライエントタンパク質の機能の詳細を記載している(Scheibelら、1998；Smithら、2001)。
【００１４】
既知のHSP90阻害剤
発見されたHSP90阻害剤の最初のクラスは、化合物ハービマイシン(herbimycin) Aおよびゲルダナマイシン(geldanamycin)を含む、ベンゾキノンアンサマイシン(ansamycin)クラスであった。
【００１５】
【化１】
2005517675.tif 000003
【００１６】
これらの剤は、最初に放線菌の培養液から単離された、天然物質である(DeBoer、1970)。しかしながら、抗腫瘍剤としてのこれらの使用の可能性は、1980年代まで見出されなかった。これらは、v-Src腫瘍遺伝子により形質転換された線維芽細胞の悪性表現型を逆にすることが示され(Ueharaら、1985)、続いてインビトロ(Schulteら、1998)およびインビボ(Supkoら、1995)動物モデルの両方において、有能な抗腫瘍活性を示すことが示された。
【００１７】
最初に、ベンゾキノンアンサマイシンは、チロシンキナーゼ阻害剤として作用すると考えられていた。しかしながら、ユビキチンプロテアソーム経路を介しての発癌性タンパク質キナーゼの除去が、それらの酵素活性の阻害よりもむしろ、抗腫瘍活性に主に原因があることが明らかになっている。後続の免疫沈降および親和性マトリックスの研究は、ゲルダナマイシンの作用の主な機構が、HSP90への結合を含むことを示している(Whitesellら、1994；SchulteおよびNeckers、1998)。さらに、X線結晶学の研究は、ゲンタマイシンがATP結合部位で競合して、HSP90の本来のATPアーゼ活性を阻害することを示している(Prodromouら、1997；Panaretouら、1998)。これは、次に、クライエントタンパク質に付き添うことができる(chaperoning)、成熟多量体のHSP90複合体の形成を防ぐ。結果として、クライエントタンパク質は、ユビキチンプロテアソーム経路を介して分解の標的にされる。最近の結果は、これが、ユビキチンリガーゼ、HSC70相互作用タンパク質のカルボキシ末端(CHIP)のような他の調節タンパク質の、HSP90複合体への加入に関与することを示唆している(Connellら、2001)。これらのHSP90クライエントタンパク質の特定の機能、およびHSP90阻害によりそれらがどのように影響されるかが、HSP90阻害剤についての2つの以前の概説に論じられている(Neckersら、1999；Ochelら、2001)。
【００１８】
ゲルダナマイシンは、ヒト腫瘍異種移植片モデルにおいて活性を示したが、この化合物の臨床試験への移行は、治療的な活性に必要な投与量でみられた、許容されないレベルの肝毒性のために中止された(Supkoら、1995)。しかしながら、米国国立癌研究所(US National Cancer Institute (NCI))でのゲルダナマイシンアナログの組のスクリーニングに続いて、17-アリルアミノ、17-デメトキシゲルダナマイシン(17AAG)がHSP90阻害の能力を保持しており、細胞培養および異種移植片モデルにおいて、クライエントタンパク質の除去および抗腫瘍活性となる(Schulteら、1998；Kellandら、1999)が、ゲルダナマイシンよりもかなり低い肝毒性を有する(Pageら、1997)ことが見出された。17AAGは、現在、NCIおよび英国癌研究運動(UK Cancer Research Campaign (CRC))の後援の下で、いくつかの異なる生活規制の予定を用いてフェーズI臨床試験において評価されている。
【００１９】
【化２】
2005517675.tif 000004
【００２０】
ゲルダナマイシンアナログの組は、既に記載されており(Schnurら、1995aおよびb)、ここで、17AAGは、治療的指標の点で最も有望なようである。17AAGの臨床的進展、ならびに向上された薬学的特性(例えば、溶解性、経口の生物学的利用能)および異なる薬理学的挙動を有し得る、さらなるアナログの探索が続いている(SybertおよびSpiegel、2001)。17AAGアナログとの構造-活性の関係(SAR)は、HSP90阻害活性、およびNQO1増強効果に必要な化学的性質の解明に役立つ(Schnurら、1995aおよびb、Maloneyら、1999)。
【００２１】
ラディシコール(Radicicol)は、モノスポリウム・ボノルデン(Monosporium bonorden)から単離される大環状抗生物質である。これは、v-Srcおよびv-Ha-Ras形質転換繊維芽細胞の悪性表現型を逆にすることが示された(Kwonら、1992；Zhaoら、1995)。
【００２２】
【化３】
2005517675.tif 000005
【００２３】
ベンゾキノンアンサマイシンと同様に、ラディシコールは、当初、チロシンキナーゼ阻害剤として作用すると考えられていた。しかしながらその後、HSP90阻害の結果として、いくつかのシグナリングタンパク質を分解することが示された(Schulteら、1998)。X線結晶学のデータは、ラディシコールもHSP90のN末端ドメインに結合し、本来のATPアーゼ活性を阻害することを確認した(Roeら、1998)。興味深いことに、ラディシコールは、ゲルダナマイシンおよび17AAGに比べて、これらは腫瘍細胞への同様の成長阻害を有するにも関わらず、HSP90 ATPアーゼ活性の阻害により効力がある(Panaretouら、1998)。これは、これらの化合物の細胞での接種または代謝の差異の結果であろう。ラディシコールは、すべてのHSP90ファミリーの構成要素に結合するが、サイトソルのHSP90イソ型に比べて、GRP94およびTRAP1の両方に対するより低い結合親和性を有する(Schulteら、1999)。
【００２４】
しかしながら、17AAGと同様に、ラディシコールの構造は、好ましくない代謝に導き得る、いくつかの有害な薬理学的特性を有している。これらは、エポキシド残基、ケト基、２つのフェノール性ヒドロキシ基およびミカエルアクセプター(Michael acceptor)を含む。 ラディシコールは、化合物の不安定な化学的性質のために、インビボでは抗腫瘍活性がない。ラディシコールのオキシム誘導体(KF25706およびKF58333)が合成され、これらはラディシコールのHSP90阻害活性を保持しており、KF25706は、ヒト腫瘍異種移植片モデルにおいてインビボで抗腫瘍活性を示すことが示されている(Sogaら、1999)。
【００２５】
クマリン抗生物質は、HSP90のものと相同なATP結合部位において、細菌のDNAジャイレースに結合することが知られている。クマリンであるノボビオシンは、HSP90のカルボキシ末端、すなわち、N-末端に結合するベンゾキノンアンサマイシンおよびラディシコールにより占められるのとは異なる部位に結合することが示されている(Marcuら、2000b)。しかしながら、これはまだ、HSP90の機能の阻害、およびいくつかのHSP90がシャペロンとなったシグナリングタンパク質の分解とならしめた(Marcuら、2000a)。ゲルダナマイシンは、ノボビオシンの後にHSP90に結合できない；これは、NおよびC末端ドメインの間に何らかの相互作用が存在するはずであることを示唆し、両方の部位がHSP90シャペロン特性に重要であるとの見解と矛盾しない。
【００２６】
【化４】
2005517675.tif 000006
【００２７】
プリンに基づくHSP90阻害剤であるPU3は、X線結晶構造を使った合理的薬剤設計に基づいて合成されている(Chiosisら、2001)。この剤は、ERBB2を含むシグナリング分子の分解とならしめ、乳癌細胞において細胞周期の停止および分化を引き起こすことが示されている(Chiosisら、2001)。17AAGより能力は低いが、これはより溶解性が高く、よってより一般的な賦形剤に処方することができ、おそらくより好ましい経口生物学的利用性を有し得る。
【００２８】
【化５】
2005517675.tif 000007
【００２９】
治療的標的としてのHSP90
腫瘍の表現型を推進するのに非常に重要ないくつかのシグナリング経路の調節に関与するので、そしてある特定の生物学的に活性な天然物質がHSP90活性を介してそれらの効果を発揮することが発見されたので、分子シャペロンHSP90は、抗癌剤の開発の新規な標的として、現在、評価されている(Neckersら、1999)。
【００３０】
ゲルダナマイシン、17AAGおよびラディシコールの作用の主な機構は、タンパク質のN-末端ドメインに位置するATP結合部位でのHSP90への結合を含み、HSP90の本来のATPアーゼ活性の阻害に導く(例えば、Prodromouら、1997；Stebbinsら、1997；Panaretouら、1998参照)。
HSP90 ATPアーゼ活性の阻害は、コシャペロンの加入を防ぎ、HSP90ヘテロ複合体のタイプの形成を促進し、そしてそのタイプからこれらのクライエントタンパク質がユビキチンプロテアソーム経路を介して分解の標的にされる(例えば、Neckersら、1999；Kellandら、1999参照)。
【００３１】
HSP90阻害剤を用いる治療は、癌において基本的に重要なプロセスである細胞増殖、細胞周期調節およびアポトーシスに関与する重要なタンパク質の選択的分解を導く。
HSP90機能の阻害は、癌において基本的に重要であり、通常、調節されないプロセスである細胞増殖、細胞周期調節およびアポトーシスに関与する重要なシグナリングタンパク質の選択的分解を引き起こすことが示されている(例えば、Hosteinら、2001)。臨床での使用のための、この標的に対する薬剤の開発の魅力的な原理は、形質転換された表現型に関するタンパク質を同時に減少させることにより、強い抗腫瘍活性を得ることができ、通常の細胞に比べて癌に対して治療的な利点を達成することができることである。HSP90阻害の下流にあるこれらの事象は、細胞培養および動物モデルにおいてHSP90阻害剤の抗腫瘍活性の原因であると考えられている(例えば、Schulteら、1998；Kellandら、1999参照)。
【００３２】
Khilyaら、1994は、ヒドラジン水和物とアルコールで沸騰させながらの、イソフラボンとベンゾジオキソラン(n=1)、ベンゾジオキサン(n=2)またはベンゾジオキセパン(n=3)との反応による、いくつかの3,4-ジアリールピラゾールの合成を記載している(次の表参照)。しかしながら、この文書のどこにもこれらの化合物の可能性のある使用を教示していない。
【００３３】
【表１】
2005517675.tif 000008
【００３４】
Penningら、1997は、明らかに効力があり、シクロオキシゲナーゼ-2 (COX-2)の選択的阻害剤である種々の3,4-ジアリールピラゾール(次の表参照)を記載しており、それらのいくつかは抗炎症活性を明らかに有している。
【００３５】
【表２】
2005517675.tif 000009
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００３６】
HSP90阻害剤は知られているが、次の利点の1つ以上を提供する、強いHSP90阻害剤への大きな必要性が残されている：
(a) 活性の向上。
(b) 選択性の向上(例えば通常の細胞に比べて、腫瘍細胞に対して)。
(c) 他の治療薬(例えば、化学療法剤)の活性の補完；
(d) 望まれない副作用の強さの減少；
(e) より少ない、望まれない副作用；
(f) より簡便な投与方法；
(g) 必要な投与量の減少；
(h) 必要な投与の頻度の減少；
(i) 合成、精製、取り扱い、貯蔵などの増加された簡便性；
(j) 合成、精製、取り扱い、貯蔵などの減少されたコスト。
【００３７】
したがって、本発明の目的の1つは、上記の特性および利点の1つ以上を提供する、能力のあるHSP90阻害剤、抗癌剤などである化合物の提供である。
【００３８】
本発明者らは、本明細書に記載の特定の3,4-ジアリールピラゾールが、上記の特性および利点の1つ以上を提供し、さらに、予期しないことには、多くの対応する既知のアナログよりも活性があることを見出した。
本発明は、本明細書に記載の特定の3,4-ジアリールピラゾール、およびHSP90阻害剤としての、これらの驚くべき、予期しない活性の発見に関する。
【課題を解決するための手段】
【００３９】
発明の要約
本発明は、一般に、本明細書に記載のような、HSP90を阻害する、特定の活性な3,4-ジアリールピラゾール、およびそれらの使用に関する。
本発明の一つの観点は、本明細書に記載のような化合物の有効量を、細胞と接触させることを含む、インビトロまたはインビボでHSP90を阻害する方法に関する。
【００４０】
本発明のその他の観点は、本明細書に記載のような化合物の有効量を、細胞と接触させることを含む、インビトロまたはインビボでHSP90のATPアーゼ活性を阻害する方法に関する。
本発明のその他の観点は、本明細書に記載のような活性化合物の有効量を、細胞と接触させることを含む、インビトロまたはインビボで(a) 細胞増殖を阻害する方法；(b) 細胞周期の進行を阻害する方法；(c) アポトーシスを促進する方法；(d) これらの1つ以上の組み合わせの方法に関する。
【００４１】
本発明のその他の観点は、本明細書に記載のような活性化合物の治療的有効量を対象に投与することを含む、対象においてHSP90により媒介される症状を治療する方法に関する。
本発明のその他の観点は、本明細書に記載のような活性化合物の治療的有効量を対象に投与することを含む、対象において癌を治療する方法に関する。
【００４２】
本発明のその他の観点は、ヒトまたは動物の身体を治療する方法における使用のための、本明細書に記載のような活性化合物に関する。
本発明のその他の観点は、ヒトまたは動物の身体のHSP90により媒介される症状を治療する方法における使用のための、本明細書に記載のような活性化合物に関する。
本発明のその他の観点は、ヒトまたは動物の身体の癌を治療する方法における使用のための、本明細書に記載のような活性化合物に関する。
【００４３】
本発明のその他の観点は、HSP90により媒介される症状の治療における使用のための医薬の製造のための、本明細書に記載のような活性化合物の使用に関する。
本発明のその他の観点は、癌の治療における使用のための医薬の製造のための、本明細書に記載のような活性化合物の使用に関する。
【００４４】
本発明のその他の観点は、(a) 好ましくは医薬組成物として、適切な容器中にあるか、および／または適切な包装を用いて提供される活性化合物；ならびに(b) 使用のための指示、例えば、活性化合物をどのように投与するかについての記載された使用説明を含むキットに関する。
【００４５】
本発明のその他の観点は、本明細書に記載のような、ある特定の活性化合物に関する。
本発明のその他の観点は、本明細書に記載のような化合物および医薬的に許容される担体を含む組成物に関する。
【００４６】
本発明のその他の観点は、本明細書に記載のような合成方法、または本明細書に記載のような合成方法を含む方法により得ることができる化合物に関する。
本発明のその他の観点は、本明細書に記載のような合成方法、または本明細書に記載のような合成方法を含む方法により得られる化合物に関する。
【００４７】
本発明のその他の観点は、本明細書に記載のような合成方法での使用に適切な、本明細書に記載のような新規な中間体に関する。
本発明のその他の観点は、本明細書に記載のような合成方法における、本明細書に記載のような新規な中間体の使用に関する。
【００４８】
当業者により認識されるように、本発明のある観点の特徴および好ましい実施形態は、本発明の他の観点にも関係する。
【００４９】
図面の簡単な説明
図1は、A2780ヒト卵巣癌細胞の17AAG (5×IC50に等しい60 nM)への曝露の後の、種々の時間におけるHSP70 (誘導された)およびRAF-1 (減少された)の発現を示すイムノブロットである。
図2は、HT29細胞を、種々の濃度のCCT018159および17AAGに曝露した24時間後のCDK4 (減少された)、HSP70 (誘導された)、およびGAPDHの発現を示すイムノブロットである。
【００５０】
詳細な説明
化合物
本発明の化合物は、次の式：
【００５１】
【化６】
2005517675.tif 000010
【００５２】
(式中：
Ar3は独立して：C5〜20アリール基であり、かつ任意に置換されていてもよく；
Ar4は独立して：C5〜20アリール基であり、かつ任意に置換されていてもよく；
R5は独立して：水素；ハロゲン；ヒドロキシ；エーテル；ホルミル；アシル；カルボキシ；エステル；アシルオキシ；オキシカルボニルオキシ；アミド；アシルアミド；アミノカルボニルオキシ；テトラゾリル；アミノ；ニトロ；シアノ；アジド；スルフヒドリル；チオエーテル；スルホンアミド；C1〜7アルキル；C3〜20ヘテロサイクリル；またはC5〜20アリールであり；
RNは独立して：-H；C1〜7アルキル；C3〜20へテロサイクリル；またはC5〜20アリールである)
の3,4-ジアリールピラゾール、または医薬的に許容されるそれらの塩、溶媒和物、アミド、エステル、エーテル、化学的に保護された形態、もしくはプロドラッグとして簡便に記載され得る。
【００５３】
当業者により認識されるように、上記の構造は、同じ化合物として記載され得る多くの可能な共鳴構造の一つである。本明細書において用いられるように、そして特に明記しない限りは、一つの構造に関する言及は、すべての可能な対応する共鳴構造についての言及であると考えられる。
【００５４】
アリール置換基、Ar3
アリール置換基であるAr3は、C5〜20アリール基であり、任意に置換されていてもよい。
ある実施形態において、Ar3はC5〜20ヘテロアリール基であり、かつ任意に置換されていてもよい。ある実施形態において、Ar3は単環式C5〜20ヘテロアリール基であり、かつ任意に置換されていてもよい。ある実施形態において、Ar3は単環式C5〜6ヘテロアリール基であり、かつ任意に置換されていてもよい。
ある実施形態において、Ar3はC5〜20カルボアリール基であり、かつ任意に置換されていてもよい。ある実施形態において、Ar3は単環式C5〜20カルボアリール基であり、かつ任意に置換されていてもよい。ある実施形態において、Ar3は単環式C5〜6カルボアリール基であり、かつ任意に置換されていてもよい。ある実施形態において、Ar3はフェニル基であり、かつ任意に置換されていてもよい。
【００５５】
ある実施形態において、Ar3は、次の：
ベンゼン、ピリジン、ピリミジン、フラン、インドール、インダゾール、ベンズトリアゾール、ピロール、イミダゾール、チアゾール、イソチアゾール、オキサゾール、イソオキサゾール、ナフタレン、キノリン、ベンズイミダゾール、ベンズオキサゾール、ベンゾチアゾール、フルオレン、アクリジン、およびカルバゾール
の1つから誘導されるC5〜20アリール基である。
【００５６】
ある実施形態において、Ar3は、次の：
ベンゼン、ピリジン、フラン、インドール、ピロール、イミダゾール、チアゾール、イソチアゾール、ナフタレン、キノリン、ベンズイミダゾール、ベンゾチオフラン、ベンゾチアゾール、フルオレン、アクリジン、およびカルバゾール
の1つから誘導されるC5〜20アリール基である。
【００５７】
ある好ましい実施形態において、Ar3は任意に置換されたフェニル基であり、化合物は次の式(式中、nは0〜5の整数であり、各RPは独立してフェニル置換基である)をもつ。
【００５８】
【化７】
2005517675.tif 000011
【００５９】
ある実施形態において、nは0〜5の整数である。
ある実施形態において、nは1〜5の整数である。
ある実施形態において、nは0〜4の整数である。
ある実施形態において、nは1〜4の整数である。
ある実施形態において、nは0〜3の整数である。
ある実施形態において、nは1〜3の整数である。
ある実施形態において、nは0〜2の整数である。
ある実施形態において、nは1または2である。
ある実施形態において、nは0または1である。
ある実施形態において、nは5である。
ある実施形態において、nは4である。
ある実施形態において、nは3である。
ある実施形態において、nは2である。
ある実施形態において、nは1である。
ある実施形態において、nは0である。
【００６０】
ある好ましい実施形態において、Ar3は、置換されたフェニル基であり、化合物は次の式(式中、mは0〜4の整数であり、各RPは独立して、フェニル置換基である)をもつ。
【００６１】
【化８】
2005517675.tif 000012
【００６２】
ある実施形態において、mは0〜4の整数である。
ある実施形態において、mは1〜4の整数である。
ある実施形態において、mは0〜3の整数である。
ある実施形態において、mは1〜3の整数である。
ある実施形態において、mは0〜2の整数である。
ある実施形態において、mは1または2である。
ある実施形態において、mは0または1である。
ある実施形態において、mは4である。
ある実施形態において、mは3である。
ある実施形態において、mは2である。
ある実施形態において、mは1である。
ある実施形態において、mは0である。
ある実施形態において、化合物は次の式をもつ：
【００６３】
【化９】
2005517675.tif 000013
【００６４】
ある好ましい実施形態において、Ar3は、置換されたフェニル基であり、化合物は次の式(式中、pは0〜3の整数であり、各RPは独立して、フェニル置換基である)をもつ。
【００６５】
【化１０】
2005517675.tif 000014
【００６６】
ある実施形態において、pは0〜3の整数である。
ある実施形態において、pは1〜3の整数である。
ある実施形態において、pは0〜2の整数である。
ある実施形態において、pは1または2である。
ある実施形態において、pは0または1である。
ある実施形態において、pは3である。
ある実施形態において、pは2である。
ある実施形態において、pは1である。
ある実施形態において、pは0である。
ある実施形態において、化合物は次の式をもつ：
【００６７】
【化１１】
2005517675.tif 000015
【００６８】
ある好ましい実施形態において、Ar3は、置換されたフェニル基であり、化合物は次の式(式中、mは0〜4の整数であり(上述したように)、各RPは独立して、フェニル置換基である)をもつ。
【００６９】
【化１２】
2005517675.tif 000016
【００７０】
ある実施形態において、化合物は次の式をもつ：
【００７１】
【化１３】
2005517675.tif 000017
【００７２】
ある好ましい実施形態において、Ar3は、置換されたフェニル基であり、化合物は次の式(式中、qは0〜2の整数であり、各RPは独立して、フェニル置換基である)をもつ。
【００７３】
【化１４】
2005517675.tif 000018
【００７４】
ある実施形態において、qは0〜2の整数である。
ある実施形態において、qは1または2である。
ある実施形態において、qは0または1である。
ある実施形態において、qは2である。
ある実施形態において、qは1である。
ある実施形態において、qは0である。
ある実施形態において、化合物は次の式をもつ：
【００７５】
【化１５】
2005517675.tif 000019
【００７６】
ある好ましい実施形態において、Ar3は、置換されたフェニル基であり、化合物は次の式(式中、pは0〜3の整数であり(上で定義したように)、各RPは独立して、フェニル置換基である)をもつ。
【００７７】
【化１６】
2005517675.tif 000020
【００７８】
ある実施形態において、化合物は次の式をもつ：
【００７９】
【化１７】
2005517675.tif 000021
【００８０】
ある好ましい実施形態において、Ar3は、置換されたフェニル基であり、化合物は次の式(式中、pは0〜3の整数であり(上で定義したように)、各RPは独立して、フェニル置換基である)をもつ。
【００８１】
【化１８】
2005517675.tif 000022
【００８２】
ある実施形態において、化合物は次の式をもつ：
【００８３】
【化１９】
2005517675.tif 000023
【００８４】
ある好ましい実施形態において、Ar3は、置換されたフェニル基であり、化合物は次の式(式中、mは0〜4の整数であり(上で定義したように)、各RPは独立して、フェニル置換基である)をもつ。
【００８５】
【化２０】
2005517675.tif 000024
【００８６】
ある実施形態において、化合物は次の式をもつ：
【００８７】
【化２１】
2005517675.tif 000025
【００８８】
フェニル置換基、RP
各フェニル置換基、RPは以下に定義されるとおりである。
ある実施形態において、次の項で論じるように、あるフェニル置換基(例えば、RP2、RP4、RP5)は、より狭く定義される。
フェニル置換基、RPの例は、制限されないが、以下の「置換基」の見出しの下で記載されるものを含む。
【００８９】
Ar3については、好ましくは、RP4およびRP5が、これらが結合する環原子と共に環状構造、例えば、親のフェニル環に縮合する環を形成しないことが記載される。
ある実施形態において、各RPは独立して：
ハロゲン；
ヒドロキシ；
エーテル(例えば、C1〜7アルコキシ(例えば非置換のC1〜7アルコキシ、およびC1〜7ハロアルコキシ、C1〜7ヒドロキシアルコキシ、C1〜7カルボキシアルコキシ、C1〜7アシルオキシアルコキシ、C1〜7オキシカルボニルアルコキシ、C1〜7オキシカルボニルオキシアルコキシ、C1〜7アミノアルコキシ、C1〜7アミドアルコキシ、C1〜7アシルアミドアルコキシ、C1〜7ヒドラジノカルボニルアルコキシ、C1〜7アミノカルボニルオキシアルコキシ、C1〜7シアノアルコキシ、C5〜20アリール-C1〜7アルコキシなどのような置換のC1〜7アルコキシを含む))；
ホルミル；
アシル(例えば、C1〜7アルキルアシル、C5〜20アリールアシル)；
カルボキシ；
【００９０】
エステル；
アシルオキシ；
オキシカルボニルオキシ；
アミド；
アシルアミド；
アミノカルボニルオキシ；
テトラゾリル；
アミノ(例えば、C1〜7アミノアルキルアミノを含む)；
ニトロ；
シアノ；
アジド；
スルフヒドリル；
チオエーテル(例えば、C1〜7アルキルチオ)；
スルホンアミド；または
【００９１】
C1〜7アルキル(例えば、非置換のC1〜7アルキル、およびC1〜7ハロアルキル、C1〜7ヒドロキシアルキル、C1〜7カルボキシアルキル、C1〜7アシルオキシアルキル、C1〜7オキシカルボニルアルキル、C1〜7オキシカルボニルオキシアルキル、C1〜7アミノアルキル、C1〜7アミドアルキル、C1〜7アシルアミドアルキル、C1〜7アミノカルボニルオキシアルキル、C1〜7シアノアルキル、C5〜20アリール-C1〜7アルキルなどのような置換のC1〜7アルキルを含む)；
C3〜20ヘテロサイクリル；ならびに
C5〜20アリール
である。
【００９２】
ある実施形態において、置換のC1〜7アルキル基は、式(CH2)wJの基、Qである。
ある実施形態において、wは1〜7の整数である。
ある実施形態において、wは1〜6の整数である。
ある実施形態において、wは1〜5の整数である。
ある実施形態において、wは1〜4の整数である。
ある実施形態において、wは1〜3の整数である。
ある実施形態において、wは1または2である。
ある実施形態において、wは2〜7の整数である。
ある実施形態において、wは2〜6の整数である。
ある実施形態において、wは2〜5の整数である。
ある実施形態において、wは2〜4の整数である。
ある実施形態において、wは2〜3の整数である。
【００９３】
ある実施形態において、wは7である。
ある実施形態において、wは6である。
ある実施形態において、wは5である。
ある実施形態において、wは4である。
ある実施形態において、wは3である。
ある実施形態において、wは2である。
ある実施形態において、wは1である。
【００９４】
ある実施形態において、Jは独立して：ハロゲン、ヒドロキシ、カルボキシ、アシルオキシ、オキシカルボニル、オキシカルボニルオキシ、アミノ、アミド、アシルアミド、アミノカルボニルオキシ；シアノ、スルホンアミドまたはC5〜20アリールである。
ある実施形態において、Jは独立して：ヒドロキシ、アミノ、アミド、アシルアミド、アミノカルボニルオキシまたはスルホンアミドである。
ある実施形態において、Jは独立して：アミノ、アミド、アシルアミド、アミノカルボニルオキシまたはスルホンアミドである。
【００９５】
ある実施形態において、各RPは独立して：
-F、-Cl、-Br、-I；
-OH；
-OMe、-OEt、-O(nPr)、-O(iPr)、-O(nBu)、-O(tBu)、-OCH2Ph；
-OCF3、-OCHF2、-OCH2F、-OCCl3、-OCBr3、-OCH2CH2F、-OCH2CHF2、-OCH2CF3；
-C(=O)H；
-C(=O)Me、-C(=O)Et、-C(=O)(nPr)、-C(=O)(iPr)、-C(=O)(nBu)、-C(=O)(tBu)、-C(=O)Ph；
【００９６】
-C(=O)OH；
-C(=O)OMe、-C(=O)OEt、-C(=O)O(nPr)、-C(=O)O(iPr)、-C(=O)O(nBu)、-C(=O)O(tBu)；
-OC(=O)Me、-OC(=O)Et、-OC(=O)(nPr)、-OC(=O)(iPr)、-OC(=O)(nBu)、-OC(=O)(tBu)；
-OC(=O)OMe、-OC(=O)OEt、-OC(=O)O(nPr)、-OC(=O)O(iPr)、-OC(=O)O(nBu)、-OC(=O)O(tBu)；
-C(=O)NH2、-C(=O)NHMe、-C(=O)NHEt、-C(=O)NH(nPr)、-C(=O)NH(iPr)、-C(=O)NH(nBu)、-C(=O)NH(tBu)、-C(=O)NMe2、-C(=O)NEt2、-C(=O)N(nPr)2、-C(=O)N(iPr)2、-C(=O)N(nBu)2、-C(=O)N(tBu)2；
-NHC(=O)Me、-NHC(=O)Et、-NHC(=O)(nPr)、-NHC(=O)(iPr)、-NHC(=O)(nBu)、-NHC(=O)(tBu)、-NHC(=O)Ph、スクシンイミジル、マレイミジル；
テトラゾリル；
【００９７】
-NH2、-NHMe、-NHEt、-NH(nPr)、-NH(iPr)、-NH(nBu)、-NH(tBu)、-NMe2、-NEt2、-N(nPr)2、-N(iPr)2、-N(nBu)2、-N(tBu)2；
-NH(CH2)2NH2、-NH(CH2)3NH2、-NH(CH2)4NH2、-NH(CH2)5NH2、-NH(CH2)6NH2、-NHCH2NH(Me)、-NH(CH2)2NH(Me)、-NH(CH2)3NH(Me)、-NH(CH2)4NH(Me)、-NH(CH2)5NH(Me)、-NH(CH2)6NH(Me)、-NHCH2NH(Et)、-NH(CH2)2NH(Et)、-NH(CH2)3NH(Et)、-NH(CH2)4NH(Et)、-NH(CH2)5NH(Et)、-NH(CH2)6NH(Et)；
-NO2；
-CN；
-N3；
-SH；
-SMe、-SEt、-S(nPr)、-S(iPr)、-S(nBu)、-S(tBu)、-SCH2Ph；
-S(=O)2NH2、-S(=O)2NHMe、-S(=O)2NMe2、-S(=O)2NHEt、-S(=O)2NEt2、-S(=O)2NH(nPr)、-S(=O)2N(nPr)2、-S(=O)2NH(iPr)、-S(=O)2N(iPr)2、-S(=O)2NH(nBu)、-S(=O)2N(nBu)2、-S(=O)2NH(tBu)、-S(=O)2N(tBu)2、-S(=O)2NHPh；
【００９８】
-Me、-Et、-nPr、-iPr、-nBu、-tBu；
-CF3、-CHF2、-CH2F、-CCl3、-CBr3、-CH2CH2F、-CH2CHF2、-CH2CF3；
例えば-CH2OH、-CH2CH2OH、-CH(OH)CH2OH；
-CH2COOH、-CH2CH2COOH、-CH2CH2CH2COOH；
-CH2OC(=O)Me、-CH2CH2OC(=O)Me、-CH=CHOC(=O)Me；
-CH2C(=O)OMe、-CH2CH2C(=O)OMe、-CH=CHC(=O)OMe；
-CH2OC(=O)OMe、-CH2CH2OC(=O)OMe、-CH=CHOC(=O)OMe；
-CH2NH2、-CH2CH2NH2、-CH=CHNH2、-CH2CH2NMe2；
-CH2NHC(=O)Me、-CH2CH2NHC(=O)Me、-CH=CHNHC(=O)Me；
-CH2C(=O)NH2、-CH2CH2C(=O)NH2、-CH=CHC(=O)NH2；
-CH2OC(=O)NH2、-CH2CH2OC(=O)NH2、-CH=CHOC(=O)NH2；
-CH2CN、-CH2CH2CN、-CH=CHCN
を含む-(CH2)wJ (上で定義したような)
である。
【００９９】
ある実施形態において、各RPは独立して：
-F、-Cl、-Br、-I、-Me、-Et、-iPr、-tBu、-CN、-CF3、-OH、-OMe、-OEt、-O(iPr)、-OCF3、-OPh、-SMe、-SCF3、-NH2、-NMe2、-NEt2、-CONH2、-NHC(=O)Me、-C(=O)Me、-NO2、-SO2NH2、-Ph、または-(CH2)wJ (上で定義したような)
である。
【０１００】
ある実施形態において、少なくとも1つのRP、RP2、RP4、RP5は、-(CH2)wJ (上で定義したような)である。
ある実施形態において、少なくとも1つのRP4は、-(CH2)wJ (上で定義したような)である。
ある実施形態において、少なくとも1つのRP5は、-(CH2)wJ (上で定義したような)である。
ある実施形態において、RP、RP2、RP4、RP5基の1つのみが、-(CH2)wJ (上で定義したような)である。
【０１０１】
フェニル置換基、RP2
ある実施形態において、RP2は独立して、RPについて上で定義したとおりである。
ある実施形態において、RP2は独立して：水素；ハロゲン；ヒドロキシ；エーテル；ホルミル；アシル；カルボキシ；エステル；アシルオキシ；オキシカルボニルオキシ；アミド；アシルアミド；アミノカルボニルオキシ；テトラゾリル；アミノ；ニトロ；シアノ；アジド；スルフヒドリル；チオエーテル；スルホンアミド；C1〜7アルキル；C3〜20ヘテロサイクリル；またはC5〜20アリールである。
【０１０２】
ある実施形態において、RP2は独立して：
ヒドロキシ；
ハロゲン；または
C1〜4アルキル(例えば、置換のC1〜4アルキルを含む)
である。
ある実施形態において、RP2は独立して：
-OH、-F、-Cl、-Br、-I、-Me、-Et、-nPr、-iPr、-nBu、-iBu、-sBu、-tBu、または-CF3である。
【０１０３】
ある実施形態において、RP2は独立して：
ヒドロキシ；
ハロゲン；または
C1〜2アルキル(例えば、置換のC1〜2アルキルを含む)
である。
ある実施形態において、RP2は独立して：
-OH、-F、-Cl、-Br、-I、-Me、-Et、または-CF3である。
ある実施形態において、RP2は、例えば、次の式の化合物のように、-OHである。
【０１０４】
【化２２】
2005517675.tif 000026
【０１０５】
【化２３】
2005517675.tif 000027
【０１０６】
フェニル置換基、RP4
ある実施形態において、RP4は独立して、RPについて上で定義したとおりである。
ある実施形態において、RP4は独立して：水素；ハロゲン；ヒドロキシ；エーテル；ホルミル；アシル；カルボキシ；エステル；アシルオキシ；オキシカルボニルオキシ；アミド；アシルアミド；アミノカルボニルオキシ；テトラゾリル；アミノ；ニトロ；シアノ；アジド；スルフヒドリル；チオエーテル；スルホンアミド；C1〜7アルキル；C3〜20ヘテロサイクリル；またはC5〜20アリールである。
【０１０７】
ある実施形態において、RP4は独立して：
ヒドロキシ；
ハロゲン；または
C1〜4アルキル(例えば、置換のC1〜4アルキルを含む)
である。
ある実施形態において、RP4は独立して：
-OH、-F、-Cl、-Br、-I、-Me、-Et、-nPr、-iPr、-nBu、-iBu、-sBu、-tBu、-CF3、または-(CH2)wJ (上で定義したような)である。
【０１０８】
ある実施形態において、RP4は独立して：
ヒドロキシ；
ハロゲン；または
C1〜2アルキル(例えば、置換のC1〜2アルキルを含む)。
ある実施形態において、RP4は独立して：
-OH、-F、-Cl、-Br、-I、-Me、-Et、-CF3、または-(CH2)wJ (上で定義したような)である。
ある実施形態において、RP4は独立して、例えば、次の式の化合物のように、-OHである：
【０１０９】
【化２４】
2005517675.tif 000028
【０１１０】
【化２５】
2005517675.tif 000029
【０１１１】
【化２６】
2005517675.tif 000030
【０１１２】
フェニル置換基、RP5
ある実施形態において、RP5は独立して、RPについて上で定義したとおりである。
ある実施形態において、RP5は独立して： ハロゲン；ヒドロキシ；エーテル；ホルミル；アシル；カルボキシ；エステル；アシルオキシ；オキシカルボニルオキシ；アミド；アシルアミド；アミノカルボニルオキシ；テトラゾリル；アミノ；ニトロ；シアノ；アジド；スルフヒドリル；チオエーテル；スルホンアミド；C1〜7アルキル；C3〜20ヘテロサイクリル；またはC5〜20アリールである。
【０１１３】
ある実施形態において、RP5は独立して：
ヒドロキシ；
ハロゲン；
C1〜4アルキル(例えば、置換のC1〜4アルキルを含む)；または
C5〜20アリール
である。
ある実施形態において、RP5は独立して：
-OH、-F、-Cl、-Br、-I、-Me、-Et、-nPr、-iPr、-nBu、-iBu、-sBu、-tBu、-CF3、-(CH2)wJ (上で定義したような)、または-Phである。
【０１１４】
ある実施形態において、RP5は独立して：
ハロゲン；
C1〜4アルキル(例えば、置換のC1〜4アルキルを含む)；または
C5〜20アリールである。
ある実施形態において、RP5は独立して：
-F、-Cl、-Br、-I、-Me、-Et、-nPr、-iPr、-nBu、-iBu、-sBu、-tBu、-CF3、-(CH2)wJ (上で定義したような)、または-Phである。
【０１１５】
ある実施形態において、RP5は独立して：
ヒドロキシ；
ハロゲン；または
C1〜4アルキル(例えば、置換のC1〜4アルキルを含む)である。
ある実施形態において、RP5は独立して：
-OH、-F、-Cl、-Br、-I、-Me、-Et、-nPr、-iPr、-nBu、-iBu、-sBu、-tBu、-CF3、または-(CH2)wJ (上で定義したような)である。
【０１１６】
ある実施形態において、RP5は独立して：
ハロゲン；または
C1〜4アルキル(例えば、置換のC1〜4アルキルを含む)である。
ある実施形態において、RP5は独立して：
-F、-Cl、-Br、-I、-Me、-Et、-nPr、-iPr、-nBu、-iBu、-sBu、-tBu、-CF3、または-(CH2)wJ (上で定義したような)である。
ある実施形態において、RP5は独立して：-(CH2)wJ (上で定義したような)である。
ある実施形態において、RP5は独立して：-Meまたは-iPrである。
【０１１７】
アリール置換基、Ar4
アリール置換基、Ar4は独立して、C5〜20アリール基であり、かつ任意に置換されていてもよい。
ある実施形態において、Ar4は独立して、C5〜20ヘテロアリール基であり、かつ任意に置換されていてもよい。ある実施形態において、Ar4は独立して、単環式C5〜20ヘテロアリール基であり、かつ任意に置換されていてもよい。ある実施形態において、Ar4は独立して、単環式C5〜6ヘテロアリール基であり、かつ任意に置換されていてもよい。
【０１１８】
ある実施形態において、Ar4は独立して、C5〜20カルボアリール基であり、かつ任意に置換されていてもよい。ある実施形態において、Ar4は独立して、単環式C5〜20カルボアリール基であり、かつ任意に置換されていてもよい。ある実施形態において、Ar4は独立して、単環式C5〜6カルボアリール基であり、かつ任意に置換されていてもよい。
【０１１９】
ある実施形態において、Ar4は独立して、次の：ベンゼン、ピリジン、フラン、インドール、ピロール、イミダゾール、チアゾール、イソチアゾール、ナフタレン、キノリン、ベンズイミダゾール、ベンゾチオフラン、ベンゾチアゾール、ベンゾジオキソラン、ベンゾジオキサン、ベンゾジオキセタン、フルオレン、アクリジン、およびカルバゾールの1つから誘導され、かつ任意に置換されていてもよいC5〜20アリール基である。
ある実施形態において、Ar4は独立して、次の：ベンゼン、チアゾール、ベンゾチアゾール、ベンゾジオキソラン、ベンゾジオキサン、およびベンゾジオキセタンの1つから誘導され、かつ任意に置換されていてもよいC5〜20アリール基である。
【０１２０】
ある実施形態において、Ar4は独立して： フェニル、チアゾール-5-イル、ベンゾチアゾール-2-イル、ベンゾジオキソラン-5-イル、ベンゾジオキサン-6-イル、またはベンゾジオキセタン-7-イルであり；かつ任意に置換されていてもよい。
【０１２１】
【化２７】
2005517675.tif 000031
【０１２２】
ある実施形態において、Ar4は独立して、次の：ベンゼン、チアゾール、およびベンゾチアゾールの1つから誘導され、かつ任意に置換されていてもよいC5〜20アリール基である。
ある実施形態において、Ar4は独立して：フェニル、チアゾール-5-イル、またはベンゾチアゾール-2-イルであり；かつ任意に置換されていてもよい。
ある実施形態において、Ar4は独立してフェニルであり、かつ任意に置換されていてもよい。
【０１２３】
ある実施形態において、Ar4は独立して、次の：ベンゾジオキソラン、ベンゾジオキサン、およびベンゾジオキセタンの1つから誘導され、かつ任意に置換されていてもよいC5〜20アリール基である。
ある実施形態において、Ar4は独立して： ベンゾジオキソラン-5-イル、ベンゾジオキサン-6-イル、またはベンゾジオキセタン-7-イルであり；かつ任意に置換されていてもよい。
ある実施形態において、Ar4は独立してフェニルであり、かつ任意に置換されていてもよいが、多環式基を形成するようには置換されていない(つまり、ベンゾジオキソラン-5-イル、ベンゾジオキサン-6-イル、またはベンゾジオキセタン-7-イルのような基は除外される)。
ある実施形態において、Ar4は独立してフェニルであり、かつ任意に置換されていてもよいが、多環式基を形成するようには置換されておらず；そして、RP4はC1〜7アルコキシでない。
【０１２４】
ある実施形態において、Ar4は独立してフェニルであり、かつ任意に置換されていてもよいが、多環式基を形成するようには置換されておらず；そして、RP4は-OMeでない。
ある実施形態において、Ar4は独立して、非置換のフェニルである。
上述したように、アリール置換基、Ar4は任意に置換されていてもよい。置換基の例は、限定されないが、以下の「置換基」の見出しの下に記載されるものを含む。付加的な例は、RPについて上で記載されたものを含む。
【０１２５】
環置換基、R5
環置換基、R5は独立して、-HまたはRPについて上で定義したような置換基である。
ある実施形態において、R5は独立して：
-H；
ヒドロキシ；
ハロゲン；または
C1〜4アルキル(例えば、置換のC1〜4アルキルを含む)である。
ある実施形態において、R5は独立して：
-H、-OH、-F、-Cl、-Br、-I、-Me、-Et、-nPr、-iPr、-nBu、-iBu、-sBu、-tBu、-CF3、または-(CH2)wJ (上で定義したような)である。
【０１２６】
ある実施形態において、R5は独立して：
-H；
ハロゲン；または
C1〜4アルキル(例えば、置換のC1〜4アルキルを含む)である。
ある実施形態において、R5は独立して：
-H、-F、-Cl、-Br、-I、-Me、-Et、-nPr、-iPr、-nBu、-iBu、-sBu、-tBu、-CF3、または-(CH2)wJ (上で定義したような)である。
【０１２７】
ある実施形態において、R5は独立して：
-H；
ヒドロキシ；または
C1〜4アルキル(例えば、置換のC1〜4アルキルを含む)である。
ある実施形態において、R5は独立して：
-H、-OH、-Me、-Et、-nPr、-iPr、-nBu、-iBu、-sBu、-tBu、-CF3、または-(CH2)wJ (上で定義したような)である。
【０１２８】
ある実施形態において、R5は独立して：
-H；または
C1〜4アルキル(例えば、置換のC1〜4アルキルを含む)である。
ある実施形態において、R5は独立して：
-H、-Me、-Et、-nPr、-iPr、-nBu、-iBu、-sBu、-tBu、-CF3、または-(CH2)wJ (上で定義したような)である。
ある実施形態において、R5は独立して、-Hでない以外は上述したとおりである。
ある実施形態において、R5は独立して、アミド(カルバモイル、カルバミル、アミノカルボニル、カルボキシアミド)：-C(=O)NR1R2(ここで、R1およびR2は独立して、アミノ基について定義したようなアミノ置換基である)である。アミド基の例は、限定されないが、-C(=O)NH2、-C(=O)NHCH3、-C(=O)N(CH3)2、-C(=O)NHCH2CH3、-C(=O)N(CH2CH3)2、-C(=O)NHCH(CH3)2、および-C(=O)NHCH2Phとともに、アミド基(ここで、R1およびR2は、それらが結合している窒素原子と共に、例えば、ピペリジノカルボニル、モルホリノカルボニル、チオモルホリノカルボニル、およびピペラジノカルボニル中のようなヘテロ環状構造を形成する)を含む。
ある実施形態において、R5は独立して-Hである。
【０１２９】
窒素置換基、RN
窒素置換基、RNは独立して：
-H；
C1〜7アルキル(例えば、置換のC1〜7アルキルを含む)；
C3〜20ヘテロサイクリル；または
C5〜20アリールである。
ある実施形態において、RNは独立して：
-H；
C1〜4アルキル(例えば、置換のC1〜4アルキルを含む)；
C5〜6アリールである。
ある実施形態において、RNは独立して：-H、-Me、-Et、-nPr、-iPr、-nBu、-iBu、-sBu、-tBu、-CF3、-(CH2)wJ (上で定義したような)、または-Phである。
【０１３０】
ある実施形態において、RNは独立して、-HまたはC1〜4アルキル(例えば、置換のC1〜4アルキルを含む)である。
ある実施形態において、RNは独立して：-H、-Me、-Et、-nPr、-iPr、-nBu、-iBu、-sBu、-tBu、-CF3、または-(CH2)wJ (上で定義したような)である。
ある実施形態において、RNは独立して：-H、-Me、-Et、-nPr、-iPr、-nBu、または-tBuである。
ある実施形態において、RNは独立して：-H、-Me、-Etである。
ある実施形態において、RNは独立して、-Hまたは-Meである。
ある実施形態において、RNは独立して、-Hでない以外は上で定義したとおりである。
ある実施形態において、RNは独立して-Hである。
【０１３１】
ある実施形態において、化合物は、上記の式(17)〜(24)から選択される式である。本実施形態の好ましい観点において、RNは独立して-Hである。本実施形態のさらに好ましい観点において、RP4は独立して： ヒドロキシまたはC1〜7アルコキシであり、より好ましくはヒドロキシである。
本実施形態のさらに好ましい観点において、RP5は、上記の「フェニル置換基RP5」の題名の項の実施形態のいずれか1つに定義されたとおりである；好ましくは、RP5は独立して：-Cl、-Br、-Me、-Et、-nPr、-iPr、-nBu、-iBu、-sBu、-tBu、-CF3、-(CH2)wPh、または-Ph (ここで、wは1〜7の整数である)である。
【０１３２】
本実施形態のさらに好ましい観点において、R5は、上記の「環置換基、R5」の題名の項の実施形態のいずれか1つに定義されたとおりである；好ましくは、R5は独立して：-H、カルボキシ、-Me、-Et、-nPr、-iPr、-nBu、-iBu、-sBu、-tBu、-CF3、または-(CH2)wJ (ここで、wは1〜7の整数であり、そしてJは独立して：ハロゲン、ヒドロキシ、カルボキシ、アシルオキシ、オキシカルボニル、オキシカルボニルオキシ、アミノ、アミド、アシルアミド、アミノカルボニルオキシ、シアノ、スルホンアミド、またはC5〜20アリールである)である。
本実施形態のさらに好ましい観点において、R5は独立して、アミド (カルバモイル、カルバミル、アミノカルボニル、カルボキサミド)：-C(=O)NR1R2 (ここで、R1およびR2は独立して、アミノ基について定義したようなアミノ置換基である)である。
本実施形態のさらに好ましい観点において、Ar4は、上記の「アリール置換基、Ar4」の題名の項の実施形態のいずれか1つに定義されたとおりである；好ましくは、Ar4は独立して、次の：ベンゼン、ピリジン、イミダゾール、チアゾール、メチル-チアゾール、ピラゾール、フラン、ベンズイミダゾール、N-メチル-ベンズイミダゾール、ベンゾチアゾール、ベンゾジオキソラン、ベンゾジオキサン、およびベンゾジオキセタンの1つから誘導され、かつ任意に置換されていてもよいC5〜20アリール基である；より好ましくは、Ar4は独立して、4-C1〜7アルコキシ-フェニル基、より好ましくは4-メトキシ-フェニル基である。
【０１３３】
本実施形態のさらなる観点において、本発明は、本実施形態で記載のような化合物の有効量を、細胞と接触させることを含む、インビトロまたはインビボでHSP90のATPアーゼ活性を阻害する方法を提供する。本実施形態のさらなる観点において、本発明は、本実施形態で記載のような化合物の治療的有効量を対象に投与することを含む、対象においてHSP90により媒介される症状を治療する方法を提供する。本実施形態のさらなる観点において、本発明は、HSP90により媒介される症状の治療における使用のための、本実施形態で記載のような化合物を提供する。
本実施形態のさらなる観点において、本発明は、本実施形態で記載のような化合物の治療的有効量を対象に投与することを含む、対象において非エストロゲン依存性癌を治療する方法を提供する。本実施形態のさらなる観点において、本発明は、非エストロゲン依存性癌の治療における使用のための医薬の製造のための、本実施形態で記載のような化合物の使用を提供する。
本実施形態のさらなる観点において、本発明は、本実施形態で記載のような化合物の治療的有効量を対象に投与することを含む、対象において癌を治療する方法を提供する。本実施形態のさらなる観点において、本発明は、癌の治療における使用のための医薬の製造のための、本実施形態で記載のような化合物の使用を提供する。
本実施形態のさらなる観点において、本発明は、ヒトまたは動物の身体の治療の方法における使用のための、本実施形態に記載のような化合物を提供する。本実施形態のさらなる観点において、本発明は、ヒトまたは動物の身体のHSP90により媒介される症状の治療の方法における使用のための、本実施形態に記載のような化合物を提供する。本実施形態のさらなる観点において、本発明は、ヒトまたは動物の身体の癌の治療の方法における使用のための、本実施形態に記載のような化合物を提供する。
本実施形態のさらなる観点において、本発明は、本実施形態に記載のような化合物、および医薬的に許容される担体または希釈剤を含む組成物を提供する。本実施形態のさらなる観点において、本発明は、Ar4がベンゾジオキソラン、ベンゾジオキサン、またはベンゾジオキセパンでないという条件の下での、本実施形態に記載のような化合物を提供する。
【０１３４】
本発明のさらなる観点において、本発明は、本発明のいずれの実施形態に記載の化合物の治療的有効量を対象に投与することを含む、対象においてHSP90により媒介される症状を治療する方法を提供する。
本発明のさらなる観点において、本発明は、HSP90により媒介される症状の治療における使用のための医薬の製造のための、本発明の実施形態に記載の化合物の使用を提供する。
【０１３５】
本発明のさらなる観点において、本発明は、
a. Ar3は、置換もしくは非置換のピロール-3-イル、ピラゾール-3-イル、[1,2,4]トリアゾール-3-イル、[1,2,3]トリアゾール-4-イルまたはテトラゾール-5-イル基でない；
b. Ar4はピリジルまたはキノリルでない；
c. Ar3が3,4,5-トリメトキシフェニルであるときに、Ar4は3-アミノ-4-メトキシフェニルでない；
d. Ar4は、置換または非置換の 3-ヒドロキシ-ピラゾール-4-イル基でない
という条件の下で、本発明のいずれの実施形態に記載の化合物の治療的有効量を対象に投与することを含む、対象において非エストロゲン依存性癌を治療する方法を提供する。
【０１３６】
本発明のさらなる観点において、本発明は、
a. Ar3は、置換もしくは非置換のピロール-3-イル、ピラゾール-3-イル、[1,2,4]トリアゾール-3-イル、[1,2,3]トリアゾール-4-イルまたはテトラゾール-5-イル基でない；
b. Ar4はピリジルまたはキノリルでない；
c. Ar3が3,4,5-トリメトキシフェニルであるときに、Ar4は3-アミノ-4-メトキシフェニルでない；
d. Ar4は、置換または非置換の3-ヒドロキシ-ピラゾール-4-イル基でない
という条件の下で、非エストロゲン依存性癌の治療における使用のための医薬の製造のための、本発明のいずれの実施形態に記載の化合物の使用を提供する。
【０１３７】
本発明のさらなる観点において、本発明は、
a. Ar3は、置換もしくは非置換のピロール-3-イル、ピラゾール-3-イル、[1,2,4]トリアゾール-3-イル、[1,2,3]トリアゾール-4-イルまたはテトラゾール-5-イル基でない；
b. Ar3、Ar4、R5およびRNの2つ以上は、フェニル、4-ヒドロキシフェニルまたは4-アルコキシフェニル基でない；好ましくは、Ar3、Ar4、R5およびRNの2つ以上は、フェニル、4-ヒドロキシフェニルまたは4-(置換もしくは非置換のアルコキシ-、アルケノキシまたはアルキニルオキシ-)フェニル基でない；
c. Ar4はピリジルまたはキノリルでない；
d. Ar3が3,4,5-トリメトキシフェニルであるときに、Ar4は3-アミノ-4-メトキシフェニルでない；
e. Ar4は、置換または非置換の3-ヒドロキシ-ピラゾール-4-イル基でない
という条件の下で、本発明のいずれの実施形態に記載の化合物の治療的有効量を対象に投与することを含む、対象において癌を治療する方法を提供する。
【０１３８】
本発明のさらなる観点において、本発明は、
a. Ar3は、置換もしくは非置換のピロール-3-イル、ピラゾール-3-イル、[1,2,4]トリアゾール-3-イル、[1,2,3]トリアゾール-4-イルまたはテトラゾール-5-イル基でない；
b. Ar3、Ar4、R5およびRNの2つ以上は、フェニル、4-ヒドロキシフェニルまたは4-アルコキシフェニル基でない；好ましくは、Ar3、Ar4、R5およびRNの2つ以上は、フェニル、4-ヒドロキシフェニル、または4-(置換もしくは非置換のアルコキシ-、アルケノキシまたはアルキニルオキシ-)フェニル基でない；
c. Ar4はピリジルまたはキノリルでない；
d. Ar3が3,4,5-トリメトキシフェニルであるときに、Ar4は3-アミノ-4-メトキシフェニルでない；
e. Ar4は、置換または非置換の3-ヒドロキシ-ピラゾール-4-イル基でない
という条件の下で、癌の治療における使用のための医薬の製造のための、本発明のいずれの実施形態に記載の化合物の使用を提供する。
【０１３９】
本発明のさらなる観点において、本発明は、
a. Ar3は、置換もしくは非置換のピロール-3-イル、ピラゾール-3-イル、[1,2,4]トリアゾール-3-イル、[1,2,3]トリアゾール-4-イルまたはテトラゾール-5-イル基でない；
b. Ar3、Ar4、R5およびRNの2つ以上は、フェニル、4-ヒドロキシフェニルまたは4-アルコキシフェニル基でない；好ましくは、Ar3、Ar4、R5およびRNの2つ以上は、フェニル、4-ヒドロキシフェニルまたは4-(置換もしくは非置換のアルコキシ-、アルケノキシまたはアルキニルオキシ-)フェニル基でない；
c. Ar4はピリジルまたはキノリルでない；
d. Ar3が3,4,5-トリメトキシフェニルであるときに、Ar4は3-アミノ-4-メトキシフェニルでない；
e. Ar4は、置換または非置換の3-ヒドロキシ-ピラゾール-4-イル基でない
という条件の下で、ヒトまたは動物の身体の治療の方法における使用のための、本発明のいずれの実施形態に記載の化合物を提供する。
【０１４０】
本発明のさらなる観点において、本発明は、
a. Ar3は、置換もしくは非置換のピロール-3-イル、ピラゾール-3-イル、[1,2,4]トリアゾール-3-イル、[1,2,3]トリアゾール-4-イルまたはテトラゾール-5-イル基でない；
b. Ar3、Ar4、R5およびRNの2つ以上は、フェニル、4-ヒドロキシフェニルまたは4-アルコキシフェニル基でない；好ましくは、Ar3、Ar4、R5およびRNの2つ以上は、フェニル、4-ヒドロキシフェニルまたは4-(置換もしくは非置換のアルコキシ-、アルケノキシまたはアルキニルオキシ-)フェニル基でない；
c. Ar4はピリジルまたはキノリルでない；
d. Ar3が3,4,5-トリメトキシフェニルであるときに、Ar4は3-アミノ-4-メトキシフェニルでない；
e. Ar4は、置換または非置換の3-ヒドロキシ-ピラゾール-4-イル基でない
という条件の下で、ヒトまたは動物の身体のHSP90により媒介される症状の治療の方法における使用のための、本発明のいずれの実施形態に記載の化合物を提供する。
【０１４１】
本発明のさらなる観点において、本発明は、
a. Ar3は、置換もしくは非置換のピロール-3-イル、ピラゾール-3-イル、[1,2,4]トリアゾール-3-イル、[1,2,3]トリアゾール-4-イルまたはテトラゾール-5-イル基でない；
b. Ar3、Ar4、R5およびRNの2つ以上は、フェニル、4-ヒドロキシフェニルまたは4-アルコキシフェニル基でない；好ましくは、Ar3、Ar4、R5およびRNの2つ以上は、フェニル、4-ヒドロキシフェニルまたは4-(置換もしくは非置換のアルコキシ-、アルケノキシまたはアルキニルオキシ-)フェニル基でない；
c. Ar4はピリジルまたはキノリルでない；
d. Ar3が3,4,5-トリメトキシフェニルであるときに、Ar4は3-アミノ-4-メトキシフェニルでない；
e. Ar4は、置換または非置換の3-ヒドロキシ-ピラゾール-4-イル基でない
という条件の下で、ヒトまたは動物の身体の癌の治療の方法における使用のための、いずれに記載の化合物を提供する。
【０１４２】
本発明のさらなる観点において、本発明は、
a. Ar3は、置換もしくは非置換のピロール-3-イル、ピラゾール-3-イル、[1,2,4]トリアゾール-3-イル、[1,2,3]トリアゾール-4-イルまたはテトラゾール-5-イル基でない；
b. Ar3、Ar4、R5およびRNの2つ以上は、フェニル、4-ヒドロキシフェニルまたは4-アルコキシフェニル基でない；好ましくは、Ar3、Ar4、R5およびRNの2つ以上は、フェニル、4-ヒドロキシフェニルまたは4-(置換もしくは非置換のアルコキシ-、アルケノキシまたはアルキニルオキシ-)フェニル基でない；
c. Ar4はピリジルまたはキノリルでない；
d. Ar3が3,4,5-トリメトキシフェニルであるときに、Ar4は3-アミノ-4-メトキシフェニルでない；
e. Ar4は、置換または非置換の3-ヒドロキシ-ピラゾール-4-イル基でない
という条件の下で、本発明のいずれの実施形態による化合物、および医薬的に許容される担体または希釈剤を含む組成物を提供する。
【０１４３】
本発明のさらなる観点において、本発明は、
a. Ar3は、置換もしくは非置換のピロール-3-イル、ピラゾール-3-イル、[1,2,4]トリアゾール-3-イル、[1,2,3]トリアゾール-4-イルまたはテトラゾール-5-イル基でない；
b. Ar3、Ar4、R5およびRNの2つ以上は、フェニル、4-ヒドロキシフェニルまたは4-アルコキシフェニル基でない；好ましくは、Ar3、Ar4、R5およびRNの2つ以上は、フェニル、4-ヒドロキシフェニルまたは4-(置換もしくは非置換のアルコキシ-、アルケノキシまたはアルキニルオキシ-)フェニル基でない；
c. Ar4はピリジルまたはキノリルでない；
d. Ar3が3,4,5-トリメトキシフェニルであるときに、Ar4は3-アミノ-4-メトキシフェニルでない；
e. Ar4は、置換または非置換の3-ヒドロキシ-ピラゾール-4-イル基でない；
f. Ar4は、ベンゾジオキソラン、ベンゾジオキサンまたはベンゾジオキセパンでない
という条件の下での、本発明のいずれの実施形態に記載の化合物を提供する。
【０１４４】
いくつかの具体的な実施形態
本発明のいくつかの具体的な実施形態を以下に示す。
【表３−１】
2005517675.tif 000032
【０１４５】
【表３−２】
2005517675.tif 000033
【０１４６】
【表３−３】
2005517675.tif 000034
【０１４７】
【表３−４】
2005517675.tif 000035
【０１４８】
【表３−５】
2005517675.tif 000036
【０１４９】
【表３−６】
2005517675.tif 000037
【０１５０】
【表３−７】
2005517675.tif 000038
【０１５１】
本発明のいくつかのさらに具体的な実施形態を以下に示す。
【表４−１】
2005517675.tif 000039
【０１５２】
【表４−２】
2005517675.tif 000040
【０１５３】
【表４−３】
2005517675.tif 000041
【０１５４】
【表４−４】
2005517675.tif 000042
【０１５５】
【表４−５】
2005517675.tif 000043
【０１５６】
【表４−６】
2005517675.tif 000044
【０１５７】
【表４−７】
2005517675.tif 000045
【０１５８】
【表４−８】
2005517675.tif 000046
【０１５９】
【表４−９】
2005517675.tif 000047
【０１６０】
【表４−１０】
2005517675.tif 000048
【０１６１】
【表４−１１】
2005517675.tif 000049
【０１６２】
【表４−１２】
2005517675.tif 000050
【０１６３】
【表４−１３】
2005517675.tif 000051
【０１６４】
【表４−１４】
2005517675.tif 000052
【０１６５】
【表４−１５】
2005517675.tif 000053
【０１６６】
【表４−１６】
2005517675.tif 000054
【０１６７】
【表４−１７】
2005517675.tif 000055
【０１６８】
【表４−１８】
2005517675.tif 000056
【０１６９】
【表４−１９】
2005517675.tif 000057
【０１７０】
【表４−２０】
2005517675.tif 000058
【０１７１】
次の表は、実施例158〜183で製造した本発明のさらなる化合物の構造、およびそれらが製造された合成経路を、以下の「アッセイ」の部分に記載されたATPアーゼアッセイで得られた結果と共にまとめている。以下の「実施例」部分で、さらなる実験および特性決定の詳細が続く場合もある。ATPアーゼアッセイの結果に関して、試験された化合物は、2つの活性範囲、すなわちA = ＜50μM；B = ＞50μMのうちの1つが割り当てられ、これらの割り当てを報告する。
【０１７２】
【表５−１】
2005517675.tif 000059
【０１７３】
【表５−２】
2005517675.tif 000060
【０１７４】
【表５−３】
2005517675.tif 000061
【０１７５】
【表５−４】
2005517675.tif 000062
【０１７６】
【表５−５】
2005517675.tif 000063
【０１７７】
化学用語
本明細書で用いられている「カルボ」、「カルビル」、「ヒドロカルボ」および「ヒドロカルビル」の語は、炭素および水素原子のみを有する化合物および／または基に関する(しかし、以下の「炭素環式」を参照)。
本明細書で用いられている「ヘテロ」の語は、少なくとも1つのへテロ原子、例えば、ホウ素、ケイ素、窒素、リン、酸素、硫黄、およびセレニウム(より一般的には窒素、酸素および硫黄)のような多価へテロ原子(環のヘテロ原子としても適する)、ならびにフッ素、塩素、臭素およびヨウ素のような1価のヘテロ原子を有する化合物および／または基に関する。
【０１７８】
本明細書で用いられている「飽和の」の語は、いずれの炭素-炭素二重結合または炭素-炭素三重結合を有さない化合物および／または基に関する。
本明細書で用いられている「不飽和の」の語は、少なくとも1つの炭素-炭素二重結合または炭素-炭素三重結合を有する化合物および／または基に関する。
本明細書で用いられている「脂肪族の」の語は、線状および／または分岐状であるが、環状でない化合物および／または基に関する(「非環式」または「開鎖」基としても知られる)。
【０１７９】
本明細書で用いられている「環」の語は、3〜10の共有結合原子、より好ましくは3〜8の共有結合原子、さらにより好ましくは5〜6の共有結合原子の閉環に関する。環は、非環式環または芳香環であり得る。本明細書で用いられている「非環式環」の語は、芳香環でない環に関する。
本明細書で用いられている「炭素環式環」の語は、環原子のすべてが炭素原子である環に関する。
本明細書で用いられている「炭素芳香環(carboaromatic ring)」の語は、環原子のすべてが炭素原子である芳香環に関する。
本明細書で用いられている「ヘテロ環式環」の語は、少なくとも1つの環原子が多価の環へテロ原子、例えば、窒素、リン、ケイ素、酸素、または硫黄、より一般的には窒素、酸素または硫黄である環に関する。好ましくは、ヘテロ環式環は、1〜4のヘテロ原子を有する。
【０１８０】
本明細書で用いられている「環式化合物」の語は、少なくとも1つの環を有する化合物に関する。本明細書で用いられている「サイクリル」の語は、環式化合物の環原子から水素原子を除くことにより得られる1価の部分に関する。
環式化合物が2以上の環を有する場合、これらは縮合(例えば、ナフタレン中のように)、橋かけ(例えば、ノルボルナン中のように)、スピロ(例えば、スピロ[3.3]ヘプタン中のように)、またはこれらの組み合わせであり得る。1つの環を有する環式化合物は、「単環式(monocyclic)」または「単環式(mononuclear)」と呼ぶことができ、2以上の環を有する環式化合物は、「多環式(polycyclic)」または「多環式(polynuclear)」と呼ぶことができる。
【０１８１】
本明細書で用いられている「炭素環式化合物」の語は、炭素環式環のみを有する環式化合物に関する。
本明細書で用いられている「ヘテロ環式化合物」の語は、少なくとも1つのへテロ環式環を有する環式化合物に関する。
本明細書で用いられている「芳香族化合物」の語は、少なくとも1つの芳香環を有する環式化合物に関する。
本明細書で用いられている「炭素芳香族化合物」の語は、炭素芳香環のみを有する環式化合物に関する。
本明細書で用いられている「ヘテロ芳香族化合物」の語は、少なくとも1つのへテロ芳香環を有する環式化合物に関する。
【０１８２】
本明細書で用いられている「単座置換基」の語は、共有結合の連結の1点を有する置換基に関する。
本明細書で用いられている「1価の単座置換基」の語は、単結合を介して、共有結合の連結の1点を有する置換基に関する。このような置換基の例は、ハロゲン、ヒドロキシおよびアルキルを含む。
本明細書で用いられている「多価単座置換基」の語は、共有結合の連結の1点を有するが、二重結合または三重結合を介するものに関する。このような置換基の例は、オキソ、イミノ、アルキリデン、およびアルキリジンを含む。
本明細書で用いられている「二座置換基」の語は、共有結合の連結の2点を有し、かつ2つの他の部分との間の結合基として作用する置換基に関する。このような置換基の例は、アルキレンおよびアリーレンを含む。
【０１８３】
置換基
本明細書で用いられている「任意に置換された」の句は、非置換であってもよいか、または置換されていてもよい親の基(parent group)に関する。
特に記載しない限りは、本明細書で用いられている「置換された」の語は、1つ以上の置換基を持つ親の基に関する。「置換基」の語は、本明細書において、一般的な意味で用いられ、親の基に共有的に結合するか、付加されるか(appended to)、または適切ならば縮合される化学的な部分に言及する。広い種類の置換基が周知であり、これらの形成、および種々の親の基への導入の方法が周知である。
【０１８４】
置換基を、以下により詳細に記載する。
アルキル：本明細書で用いられている「アルキル」の語は、1〜20の炭素原子を有する(特に明記しない限りは)炭化水素化合物の炭素原子から水素原子を除くことにより得られる1価の部分に関し、これは脂肪族または脂環式であることができ、かつ飽和、部分的に不飽和、または完全に不飽和であることができる。よって、「アルキル」の語は、以下に論じるアルケニル、アルキニル、シクロアルキルなどの亜集団を含む。
この関係において、接頭辞(例えば、C1〜4、C1〜7、C1〜20、C2〜7、C3〜7など)は、炭素原子の数、または炭素原子の数の範囲を表す。例えば本明細書で用いられている「C1〜4アルキル」の語は、1〜4の炭素原子を有するアルキル基に関する。アルキル基の基の例は、C1〜4アルキル(「低級アルキル」)、C1〜7アルキル、およびC1〜20アルキルを含む。
【０１８５】
(非置換の)飽和アルキル基の例は、限定されないが、メチル(C1)、エチル(C2)、プロピル(C3)、ブチル(C4)、ペンチル(C5)、ヘキシル(C6)、ヘプチル(C7)、オクチル(C8)、ノニル(C9)、デシル(C10)、n-ウンデシル(C11)、ドデシル(C12)、トリデシル(C13)、テトラデシル(C14)、ペンタデシル(C15)、およびエイコデシル(C20)を含む。
(非置換の)飽和線状アルキル基の例は、限定されないが、メチル(C1)、エチル(C2)、n-プロピル(C3)、n-ブチル(C4)、n-ペンチル(アミル) (C5)、n-ヘキシル(C6)、およびn-ヘプチル(C7)を含む。
(非置換の)飽和分岐状アルキル基の例は、限定されないが、イソ-プロピル(C3)、イソ-ブチル(C4)、sec-ブチル(C4)、tert-ブチル(C4)、イソ-ペンチル(C5)、およびネオ-ペンチル(C5)を含む。
【０１８６】
シクロアルキル：本明細書で用いられている「シクロアルキル」の語は、サイクリル基でもあるアルキル基に関する；つまり、環式炭化水素(炭素環式)化合物の脂環式環原子から水素原子を除去することにより得られる1価の部分であり、この部分は、3〜20の環原子(特に明記しない限りは)を有する。好ましくは、各環は3〜7の環原子を有する。
(非置換の)飽和シクロアルキル基の例は、限定されないが、シクロプロパン(C3)、シクロブタン(C4)、シクロペンタン(C5)、シクロヘキサン(C6)、シクロヘプタン(C7)、ノルボルナン(C7)、ノルピナン(C7)、ノルカラン(C7)、アダマンタン(C10)、およびデカリン(デカヒドロナフタレン) (C10)から誘導されるものを含む。
【０１８７】
本明細書で「アルキル-シクロアルキル」基ともいう(置換の)飽和シクロアルキル基の例は、限定されないが、メチルシクロプロピル、ジメチルシクロプロピル、メチルシクロブチル、ジメチルシクロブチル、メチルシクロペンチル、ジメチルシクロペンチル、メチルシクロヘキシルおよびジメチルシクロヘキシル、メンタン、ツジャン、カラン、ピナン、ボルナン、ノルカランおよびカンフェンを含む。
本明細書で「アルキル-シクロアルケニル」基ともいう(置換の)不飽和の環式アルケニル基の例は、限定されないが、メチルシクロプロペニル、ジメチルシクロペンチル、メチルシクロブテニル、ジメチルシクロブテニル、メチルシクロペンテニル、ジメチルシクロペンテニル、メチルシクロヘキセニル、およびジメチルシクロヘキセニルを含む。
【０１８８】
親のシクロアルキル基に縮合した1つ以上の環を有する(置換の)シクロアルキル基の例は、限定されないが、インデン(C9)、インダン(例えば、2,3-ジヒドロ-1H-インデン) (C9)、テトラリン(1,2,3,4-テトラヒドロナフタレン(C10)、アセナフテン(C12)、フルオレン(C13)、フェナレン(C13)、アセフェナントレン(C15)、アセアントレン(C16)から誘導されるものを含む。例えば2H-インデン-2-イルは、置換基(フェニル)が縮合されたC5シクロアルキル基である。
【０１８９】
アルケニル：本明細書で用いられている「アルケニル」の語は、1以上の炭素-炭素二重結合を有するアルキル基に関する。アルケニル基の基の例は、C2〜4アルケニル、C2〜7アルケニル、C2〜20アルケニルを含む。
(非置換の)不飽和アルケニル基の例は、限定されないが、エテニル(ビニル、-CH=CH2)、1-プロペニル(-CH=CH-CH3)、2-プロペニル(アリル、-CH-CH=CH2)、イソプロペニル(-C(CH3)=CH2)、ブテニル(C4)、ペンテニル(C5)、およびヘキセニル(C6)を含む。
本明細書中で「シクロアルケニル」基ともいう(非置換の)不飽和環式アルケニル基の例は、限定されないが、シクロプロペニル(C3)、シクロブテニル(C4)、シクロペンテニル(C5)、およびシクロヘキセニル(C6)を含む。
【０１９０】
アルキニル：本明細書で用いられている「アルキニル」の語は、1以上の炭素-炭素三重結合を有するアルキル基に関する。アルキニル基の基の例は、C2〜4アルキニル、C2〜7アルキニル、C2〜20アルキニルを含む。
(非置換の)不飽和アルキニル基の例は、限定されないが、エチニル(ethynyl) (エチニル(ethinyl)、-C≡CH)および2-プロピニル(プロパルギル、-CH2-C≡CH)を含む。
【０１９１】
アルキリデン：本明細書で用いられる「アルキリデン」の語は、1〜20の炭素原子(特に明記しない限りは)を有する炭化水素化合物の炭素原子から2つの水素原子を除くことにより得られる二価の単座部分に関し、それは脂肪族もしくは脂環式、またはそれらの組み合わせであることができ、そして飽和、部分的に不飽和、または完全に不飽和であることができる。アルキリデン基の基の例は、C1〜4アルキリデン、C1〜7アルキリデン、C1〜20アルキリデンを含む。
アルキリデン基の例は、限定されないが、メチリデン(=CH2)、エチリデン(=CH-CH3)、ビニリデン(=C=CH2)、およびイソプロピリデン(=C(CH3)2)を含む。置換のアルキリデンの例は、ベンジリデン(=CH-Ph)である。
【０１９２】
アルキリジン：本明細書で用いられている「アルキリジン」の語は、1〜20の炭素原子(特に明記しない限りは)を有する炭化水素化合物の炭素原子から3つの水素原子を除くことにより得られる三価の単座部分に関し、それは脂肪族もしくは脂環式、またはそれらの組み合わせであることができ、そして飽和、部分的に不飽和、または完全に不飽和であることができる。アルキリジン基の基の例は、C1〜4アルキリジン、C1〜7アルキリジン、C1〜20アルキリジンを含む。
アルキリジン基の例は、限定されないが、メチリジン(≡CH)およびエチリジン(≡C-CH3)を含む。
【０１９３】
カルボサイクリル：本明細書で用いられている「カルボサイクリル」の語は、炭素環式化合物の環原子から水素原子を除くことにより得られる1価の部分に関し、この部分は3〜20の環原子(特に明記しない限りは)を有することができる。好ましくは、各環は3〜7の環原子を有する。
この関係において、接頭辞(例えば、C3〜20、C3〜7、C5〜6など)は、環原子の数、または環原子の数の範囲を表す。例えば本明細書で用いられている「C5〜6カルボサイクリル」の語は、5〜6の環原子を有するカルボサイクリル基に関する。カルボサイクリル基の基の例は、C3〜20カルボサイクリル、C3〜10カルボサイクリル、C5〜10カルボサイクリル、C3〜7カルボサイクリル、およびC5〜7カルボサイクリルを含む。
カルボサイクリル基の例は、限定されないが、上記でシクロアルキル基として記載されたもの；以下でカルボアリール基として記載されるものを含む。
【０１９４】
ヘテロサイクリル：本明細書で用いられている「ヘテロサイクリル」の語は、へテロ環式化合物の環原子から水素原子を除くことにより得られる1価の部分に関し、この部分は、その1〜10が環へテロ原子である3〜20の環原子(特に明記しない限りは)を有する。好ましくは、各環は、その1〜4が環へテロ原子である3〜7の環原子を有する。
この関係において、接頭辞(例えば、C3〜20、C3〜7、C5〜6など)は、炭素原子またはヘテロ原子のどちらかの環原子の数、または環原子の数の範囲を表す。例えば本明細書で用いられている「C5〜6ヘテロサイクリル」の語は、5または6の環原子を有するヘテロサイクリル基に関する。ヘテロサイクリル基の基の例は、C3〜20ヘテロサイクリル、C3〜7ヘテロサイクリル、C5〜7ヘテロサイクリル、およびC5〜6ヘテロサイクリルを含む。
【０１９５】
(非芳香族の)単環式ヘテロサイクリル基は、限定されないが：
N1：アジリジン(C3)、アゼチジン(C4)、ピロリジン(テトラヒドロピロール) (C5)、ピロリン(例えば、3-ピロリン、2,5-ジヒドロピロール) (C5)、2H-ピロールまたは3H-ピロール(イソピロール、イソアゾール) (C5)、ピペリジン(C6)、ジヒドロピリジン(C6)、テトラヒドロピリジン(C6)、アゼピン(C7)；
O1：オキシラン(C3)、オキセタン(C4)、オキソラン(テトラヒドロフラン) (C5)、オキソール(ジヒドロフラン) (C5)、オキサン(テトラヒドロピラン) (C6)、ジヒドロピラン (C6)、ピラン(C6)、オキセピン(C7)；
【０１９６】
S1：チイラン(C3)、チエタン(C4)、チオラン(テトラヒドロチオフェン) (C5)、チアン(テトラヒドロチオピラン) (C6)、チエパン(C7)；
O2：ジオキソラン(C5)、ジオキサン(C6)、およびジオキセパン(C7)；
O3：トリオキサン(C6)；
【０１９７】
N2：イミダゾリジン(C5)、ピラゾリジン(ジアゾリジン) (C5)、イミダゾリン(C5)、ピラゾリン(ジヒドロピラゾール) (C5)、ピペラジン(C6)；
N1O1：テトラヒドロオキサゾール(C5)、ジヒドロオキサゾール(C5)、テトラヒドロイソキサゾール(C5)、ジヒドロイソキサゾール(C5)、モルホリン(C6)、テトラヒドロオキサジン(C6)、ジヒドロオキサジン(C6)、オキサジン(C6)；
【０１９８】
N1S1：チアゾリン(C5)、チアゾリジン(C5)、チオモルホリン(C6)；
N2O1：オキサジアジン(C6)；
O1S1：オキサチオール(C5)およびオキサチアン(チオキサン) (C6)；ならびに
N1O1S1：オキサチアジン(C6)
から誘導されるものを含む。
【０１９９】
置換の(非芳香族の)単環式ヘテロサイクリル基の例は、環式の形態の糖類、例えば、アラビノフラノース、リキソフラノース、リボフラノース、およびキシロフラノースのようなフラノース類(C5)、ならびにアロピラノース、アルトロピラノース、グルコピラノース、マンノピラノース、グロピラノース、イドピラノース、ガラクトピラノース、およびタロピラノースのようなピラノース類(C6)を含む。
ヘテロアリール基でもあるヘテロサイクリル基の例は、以下のアリール基で記載する。
【０２００】
アリール：本明細書中で用いられている「アリール」の語は、芳香族化合物の芳香環原子から水素原子を除くことにより得られる1価の部分に関し、その部分は、3〜20の環原子(特に明記しない限りは)を有する。好ましくは、各環は5〜7の環原子を有する。
この関係において、接頭辞(例えば、C3〜20、C5〜7、C5〜6など)は、炭素原子またはヘテロ原子のどちらかの環原子の数、または環原子の数の範囲を表す。例えば本明細書で用いられている「C5〜6アリール」の語は5または6の環原子を有するアリール基に関する。アリール基の基の例は、C3〜20アリール、C3〜12アリール、C5〜12アリール、C5〜7アリール、およびC5〜6アリールを含む。
【０２０１】
環原子は、「カルボアリール基」(例えば、C5〜20カルボアリール)中のように、全て炭素原子であることができる。
カルボアリール基の例は、限定されないが、ベンゼン(すなわちフェニル) (C6)、ナフタレン(C10)、アズレン(C10)、アントラセン(C14)、フェナントレン(C14)、ピレン(C16)、およびナフタセン(C18)から誘導されるものを含む。
その少なくとも1つが芳香環である縮合環を含むアリール基の例は、限定されないが、インデン(C9)、イソインデン(C9)、およびフルオレン(C13)から誘導される基を含む。
【０２０２】
代わりに、環原子は、「ヘテロアリール基」 (例えば、C5〜20ヘテロアリール)中のように、1以上のヘテロ原子を含むことができる。
単環式ヘテロアリール基の例は、限定されないが：
N1：ピロール(アゾール) (C5)、ピリジン(アジン) (C6)；
O1：フラン(オキソール) (C5)；
S1：チオフェン(チオール) (C5)；
N1O1：オキサゾール(C5)、イソキサゾール(C5)、イソキサジン(C6)；
N2O1：オキサジアゾール(フラザン) (C5)；
N3O1：オキサトリアゾール(C5)；
N1S1：チアゾール(C5)、イソチアゾール(C5)；
【０２０３】
N2：イミダゾール(1,3-ジアゾール) (C5)、ピラゾール(1,2-ジアゾール) (C5)、ピリダジン(1,2-ジアジン) (C6)、ピリミジン(1,3-ジアジン) (C6) (例えば、シトシン、チミン、ウラシル)、ピラジン(1,4-ジアジン) (C6)；
N3：トリアゾール(C5)、トリアジン(C6)；ならびに
N4：テトラゾール(C5)
から誘導されるものを含む。
【０２０４】
縮合環を含むヘテロ環式基(これらのうちいくつかはヘテロアリール基でもある)は、限定されないが：
ベンゾフラン(O1)、イソベンゾフラン(O1)、インドール(N1)、イソインドール(N1)、インドリジン(N1)、インドリン(N1)、イソインドリン(N1)、プリン(N4) (例えば、アデニン、グアニン)、ベンズイミダゾール(N2)、インダゾール(N2)、ベンズオキサゾール(N1O1)、ベンズイソキサゾール(N1O1)、ベンゾジオキソール(O2)、ベンゾフラザン(N2O1)、ベンゾトリアゾール(N3)、ベンゾチオフラン(S1)、ベンゾチアゾール(N1S1)、ベンゾチアジアゾール(N2S)から誘導されるC9ヘテロ環式基(2つの縮合環をもつ)；
【０２０５】
クロメン(O1)、イソクロメン(O1)、クロマン(O1)、イソクロマン(O1)、ベンゾジオキサン(O2)、キノリン(N1)、イソキノリン(N1)、キノリジン(N1)、ベンズオキサジン(N1O1)、ベンゾジアジン(N2)、ピリドピリジン(N2)、キノキサリン(N2)、キナゾリン(N2)、シノリン(N2)、フタラジン(N2)、ナフチリジン(N2)、プテリジン(N4)から誘導されるC10ヘテロ環式基(2つの縮合環をもつ)；
カルバゾール(N1)、ジベンゾフラン(O1)、ジベンゾチオフェン(S1)、カルボリン(N2)、ペリミジン(N2)、ピリドインドール(N2)から誘導されるC13ヘテロ環式基(3つの縮合環をもつ)；および
アクリジン(N1)、キサンテン(O1)、チオキサンテン(S1)、オキサントレン(O2)、フェノキサチイン(O1S1)、フェナジン(N2)、フェノキサジン(N1O1)、フェノチアジン(N1S1)、チアントレン(S2)、フェナントリジン(N1)、フェナントロリン(N2)、フェナジン(N2)から誘導されるC14ヘテロ環式基(3つの縮合環をもつ)
を含む。
【０２０６】
-NH-基の形態で窒素環原子を有するヘテロ環式基(ヘテロアリール基を含む)は、N置換されることができ、つまり、-NR-のようである。例えばピロールはN-メチル置換されて、N-メチルピロールを得ることができる。N-置換基の例は、限定されないが、C1〜7アルキル、C3〜20ヘテロサイクリル、C5〜20アリール、およびアシル基を含む。
-N=基の形態で窒素環原子を有するヘテロ環式基(ヘテロアリール基を含む)は、N-オキサイドの形態に置換されることができ、つまり、-N(→O)= (-N+(→O-)=とも表す)のようである。例えばキノリンは置換されてキノリンN-オキサイドを得ることができる； ピリジンはピリジンN-オキサイドを得る；ベンゾフラザンはベンゾフラザンN-オキサイド(ベンゾフロキサンとしても知られる)を得る。
【０２０７】
環式基は、さらに、環炭素原子上に1以上のオキソ(=O)基を有することができる。そのような基の単環式の例は、限定されないが、
C5：シクロペンタノン、シクロペンテノン、シクロペンタジエノン；
C6：シクロヘキサノン、シクロへキセノン、シクロヘキサジエノン；
O1：フラノン(C5)、ピロン(C6)；
N1：ピロリドン(ピロリジノン) (C5)、ピペリジノン(ピペリドン) (C6)、ピペリジンジオン(C6)；
N2：イミダゾリドン(イミダゾリジノン) (C5)、ピラゾロン(ピラゾリノン) (C5)、ピペラジノン(C6)、ピペラジンジオン(C6)、ピリダジノン(C6)、ピリミジノン(C6) (例えばシトシン)、ピリミジンジオン(C6) (例えば、チミン、ウラシル)、バルビツール酸(C6)；
N1S1：チアゾロン(C5)、イソチアゾロン(C5)；
N1O1：オキサゾリノン(C5)
から誘導されるものを含む。
【０２０８】
このような基の多環式の例は、限定されないが、
C9：インデンジオン；
C10：テトラロン、デカロン；
C14：アントロン、フェナントロン；
N1：オキシンドール(C9)；
O1：ベンゾピロン(例えば、クマリン、イソクマリン、クロモン) (C10)；
N1O1：ベンゾキサゾリノン(C9)、ベンゾキサゾリノン(C10)；
N2：キナゾリンジオン(C10)；
N4：プリノン(C9) (例えば、グアニン)
から誘導されるものを含む。
【０２０９】
環炭素原子上に1以上のオキソ(=O)基をもつ環式基のさらなる例は、限定されないが、
マレイン酸無水物(C5)、コハク酸無水物(C5)、およびグルタル酸無水物(C6)を含む、限定されない環式無水物(環の中に-C(=O)-O-C(=O)-)；
エチレンカーボネート(C5)、および1,2-プロピレンカーボネート(C5)のような環式カーボネート(環の中に-O-C(=O)-O-)；
スクシンイミド(C5)、マレイミド(C5)、フタルイミド、およびグルタルイミド(C6)を含む、限定されないイミド(環の中に-C(=O)-NR-C(=O)-)；
β-プロピオラクトン、γ-ブチロラクトン、δ-バレロラクトン(2-ピペリドン)、およびε-カプロラクトンを含む、限定されないラクトン(環式エステル、環の中に-O-C(=O)-)；
β-プロピオラクタム(C4)、γ-ブチロラクタム(2-ピロリドン) (C5)、δ-バレロラクタム (C6)、およびε-カプロラクタム (C7)を含む、限定されないラクタム(環式アミド、環の中に-NR-C(=O)-)；
2-オキサゾリドン(C5)のような環式カルバメート(環の中に-O-C(=O)-NR-)；
2-イミダゾリドン(C5)およびピリミジン-2,4-ジオン(例えば、チミン、ウラシル) (C6)のような環式ウレア(環の中に-NR-C(=O)-NR-)
から誘導されるものを含む。
【０２１０】
単独、または他の置換基の部分の上記の基(例えば、アルキル、アルキリデン、アルキリジン、ヘテロサイクリル、アリール)のそれら自身は、それら自身および以下に記載のさらなる置換基から選択される1以上の基で任意に置換されていてもよい。
水素：-H。特定の位置の置換基が水素である場合、化合物がその位置において「非置換」というのが都合がよいことが記載される。
ハロゲン：-F、-Cl、-Br、および-I。
ヒドロキシ：-OH。
【０２１１】
エーテル：-OR (ここで、Rはエーテル置換基であり、例えば、C1〜7アルキル基(C1〜7アルコキシ基ともいう、以下を参照)、C3〜20ヘテロサイクリル基(C3〜20ヘテロサイクリルオキシ基ともいう)、またはC5〜20アリール基(C5〜20アリールオキシ基ともいう)であり、好ましくはC1〜7アルキル基である)。
【０２１２】
C1〜7アルコキシ：-OR (ここで、RはC1〜7アルキル基である)。C1〜7アルコキシ基の例は、限定されないが、-OMe (メトキシ)、-OEt (エトキシ)、-O(nPr) (n-プロポキシ)、-O(iPr) (イソプロポキシ)、-O(nBu) (n-ブトキシ)、-O(sBu) (sec-ブトキシ)、-O(iBu) (イソブトキシ)、および-O(tBu) (tert-ブトキシ)を含む。
【０２１３】
アセタール：-CH(OR1)(OR2) (ここで、R1およびR2は独立して、アセタール置換基、例えば、C1〜7アルキル基、C3〜20ヘテロサイクリル基、またはC5〜20アリール基、好ましくはC1〜7アルキル基であるか、または「環式」アセタール基の場合は、R1およびR2は、それらが結合している2つの酸素原子、およびそれらが結合している炭素原子とともに4〜8の環原子を有するヘテロ環式環を形成している)。アセタール基の例は、限定されないが、-CH(OMe)2、-CH(OEt)2、および-CH(OMe)(OEt)を含む。
【０２１４】
ヘミアセタール：-CH(OH)(OR1) (ここで、R1はヘミアセタール置換基、例えば、C1〜7アルキル基、C3〜20ヘテロサイクリル基、またはC5〜20アリール基、好ましくはC1〜7アルキル基である)。ヘミアセタール基の例は、限定されないが、-CH(OH)(OMe)および-CH(OH)(OEt)を含む。
【０２１５】
ケタール：-CR(OR1)(OR2) (ここで、R1およびR2は、アセタールについて定義したとおりであり、Rは水素以外のケタール置換基、例えば、C1〜7アルキル基、C3〜20ヘテロサイクリル基、またはC5〜20アリール基、好ましくはC1〜7アルキル基である)。ケタール基の例は、限定されないが、-C(Me)(OMe)2、-C(Me)(OEt)2、-C(Me)(OMe)(OEt)、-C(Et)(OMe)2、-C(Et)(OEt)2、および-C(Et)(OMe)(OEt)を含む。
【０２１６】
ヘミケタール：-CR(OH)(OR1) (ここで、R1はヘミアセタールについて定義したとおりであり、Rは水素以外のヘミケタール 置換基、例えば、C1〜7アルキル基、C3〜20ヘテロサイクリル基、またはC5〜20アリール基、好ましくはC1〜7アルキル基である)。ヘミアセタール基の例は、限定されないが、-C(Me)(OH)(OMe)、-C(Et)(OH)(OMe)、-C(Me)(OH)(OEt)、および-C(Et)(OH)(OEt)を含む。
【０２１７】
オキソ(ケト、-オン)： =O。
チオン(チオケトン)： =S。
イミノ(イミン)：=NR (ここで、Rはイミノ置換基、例えば、水素、C1〜7アルキル基、C3〜20ヘテロサイクリル基、またはC5〜20アリール基、好ましくは水素またはC1〜7アルキル基である)。エステル基の例は、限定されないが、=NH、=NMe、=NEt、および=NPhを含む。
ホルミル(カルバルデヒド、カルボキサルデヒド)：-C(=O)H。
【０２１８】
アシル(ケト)：-C(=O)R (ここで、Rはアシル置換基、例えば、C1〜7アルキル基(C1〜7アルキルアシルまたはC1〜7アルカノイルともいう)、C3〜20ヘテロサイクリル基(C3〜20ヘテロサイクリルアシルともいう)、またはC5〜20アリール基(C5〜20アリールアシルともいう)、好ましくはC1〜7アルキル基である)。アシル基の例は、限定されないが、-C(=O)CH3 (アセチル)、-C(=O)CH2CH3 (プロピオニル)、-C(=O)C(CH3)3 (t-ブチリル)、および-C(=O)Ph (ベンゾイル、フェノン)を含む。
【０２１９】
カルボキシ(カルボン酸)：-C(=O)OH。
チオカルボキシ(チオカルボン酸)：-C(=S)SH。
チオロカルボキシ(チオロカルボン酸)：-C(=O)SH。
チオノカルボキシ(チオノカルボン酸)：-C(=S)OH。
イミド酸：-C(=NH)OH。
ヒドロキサム酸：-C(=NOH)OH。
【０２２０】
エステル (カルボキシレート、カルボン酸エステル、オキシカルボニル)：-C(=O)OR (ここで、Rはエステル置換基、例えば、C1〜7アルキル基、C3〜20ヘテロサイクリル基、またはC5〜20アリール基、好ましくはC1〜7アルキル基である)。エステル基の例は、限定されないが、-C(=O)OCH3、-C(=O)OCH2CH3、-C(=O)OC(CH3)3、および-C(=O)OPhを含む。
【０２２１】
アシルオキシ(リバースエステル)：-OC(=O)R (ここで、Rはアシルオキシ置換基、例えば、C1〜7アルキル基、C3〜20ヘテロサイクリル基、またはC5〜20アリール基、好ましくはC1〜7アルキル基である)。アシルオキシ基の例は、限定されないが、-OC(=O)CH3 (アセトキシ)、-OC(=O)CH2CH3、-OC(=O)C(CH3)3、-OC(=O)Ph、および-OC(=O)CH2Phを含む。
【０２２２】
オキシカルボイルオキシ：-OC(=O)OR (ここで、Rはエステル置換基、例えば、C1〜7アルキル基、C3〜20ヘテロサイクリル基、またはC5〜20アリール基、好ましくはC1〜7アルキル基である)。エステル基の例は、限定されないが、-OC(=O)OCH3、-OC(=O)OCH2CH3、-OC(=O)OC(CH3)3、および-OC(=O)OPhを含む。
【０２２３】
アミド(カルバモイル、カルバミル、アミノカルボニル、カルボキサミド)：-C(=O)NR1R2 (ここで、R1およびR2は独立して、アミノ基について定義したようなアミノ置換基である)。アミド基の例は、制限されないが、-C(=O)NH2、-C(=O)NHCH3、-C(=O)N(CH3)2、-C(=O)NHCH2CH3、および-C(=O)N(CH2CH3)2、ならびにアミド基(ここで、R1およびR2は、それら結合している窒素原子と共に、例えば、ピペリジノカルボニル、モルホリノカルボニル、チオモルホリノカルボニル、およびピペラジノカルボニル中のようなヘテロ環式構造を形成する)を含む。
【０２２４】
アシルアミド(アシルアミノ)：-NR1C(=O)R2 (ここで、R1はアミド置換基、例えば水素、C1〜7アルキル基、C3〜20ヘテロサイクリル基、またはC5〜20アリール基、好ましくは水素またはC1〜7アルキル基であり、そしてR2はアシル置換基、例えばC1〜7アルキル基、C3〜20ヘテロサイクリル基、またはC5〜20アリール基、好ましくは水素またはC1〜7アルキル基である)。アシルアミド基の例は、制限されないが、-NHC(=O)CH3、-NHC(=O)CH2CH3、および-NHC(=O)Phを含む。R1およびR2は、例えば、スクシンイミジル、マレイミジル、およびフタルイミジル中のような環状構造を形成することができる：
【０２２５】
【化２８】
2005517675.tif 000064
【０２２６】
アミノカルボニルオキシ：-OC(=O)NR1R2 (ここで、R1およびR2は独立して、アミノ基について定義したようなアミノ置換基である)。アミノカルボニルオキシ基の例は、制限されないが、-OC(=O)NH2、-OC(=O)NHMe、-OC(=O)NMe2、および-OC(=O)NEt2を含む。
【０２２７】
チオアミド(チオカルバミル)：-C(=S)NR1R2 (ここで、R1およびR2は独立して、アミノ基について定義したようなアミノ置換基である)。アミド基の例は、制限されないが、-C(=S)NH2、-C(=S)NHCH3、-C(=S)N(CH3)2、および-C(=S)NHCH2CH3を含む。
【０２２８】
ウレイド：-N(R1)CONR2R3 (ここで、R2およびR3は独立して、アミノ基について定義したようなアミノ置換基であり、そしてR1はウレイド置換基、例えば、水素、C1〜7アルキル基、C3〜20ヘテロサイクリル基、またはC5〜20アリール基、好ましくは水素またはC1〜7アルキル基である)。ウレイド基の例は、制限されないが、-NHCONH2、-NHCONHMe、-NHCONHEt、-NHCONMe2、-NHCONEt2、-NMeCONH2、-NMeCONHMe、-NMeCONHEt、-NMeCONMe2、および-NMeCONEt2を含む。
【０２２９】
グアニジノ：-NH-C(=NH)NH2。
テトラゾリル：4つの窒素原子および1つの炭素原子を有する5員芳香環：
【０２３０】
【化２９】
2005517675.tif 000065
【０２３１】
アミノ：-NR1R2 (ここで、R1およびR2は独立して、アミノ置換基、例えば、水素、C1〜7アルキル基(C1〜7アルキルアミノまたはジ-C1〜7アルキルアミノともいう)、C3〜20ヘテロサイクリル基、またはC5〜20アリール基、好ましくはHまたはC1〜7アルキル基であるか、または「環式」アミノ基の場合、R1およびR2は、それらが結合している窒素原子と共に、4〜8の環原子を有するヘテロ環式環を形成している)。アミノ基は、一級(-NH2)、二級(-NHR1)、または三級(-NHR1R2)、およびカチオンの形態では、四級(-+NR1R2R3)であり得る。アミノ基の例は、制限されないが、-NH2、-NHCH3、-NHC(CH3)2、-N(CH3)2、-N(CH2CH3)2、および-NHPhを含む。環式アミノ基の例は、制限されないが、アジリジノ、アゼチジノ、ピロリジノ、ピペリジノ、ピペラジノ、モルホリノ、およびチオモルホリノを含む。
【０２３２】
イミノ：=NR (ここで、Rはイミノ置換基、例えば水素、C1〜7アルキル基、C3〜20ヘテロサイクリル基、またはC5〜20アリール基、好ましくはHまたはC1〜7アルキル基である)。イミノ基の例は、制限されないが、=NH、=NMe、および=NEtである。
【０２３３】
アミジン(アミジノ)：-C(=NR)NR2 (ここで、各Rはアミジン置換基、例えば、水素、C1〜7アルキル基、C3〜20ヘテロサイクリル基、またはC5〜20アリール基、好ましくはHまたはC1〜7アルキル基である)。アミジン基の例は、制限されないが、-C(=NH)NH2、-C(=NH)NMe2、および-C(=NMe)NMe2を含む。
ニトロ：-NO2。
ニトロソ： -NO。
アジド： -N3。
シアノ (ニトリル、カルボニトリル)：-CN。
イソシアノ：-NC。
シアナト：-OCN。
イソシアナト：-NCO。
チオシアノ(チオシアナト)：-SCN。
イソチオシアノ(イソチオシアナト)：-NCS。
【０２３４】
スルフヒドリル(チオール、メルカプト)：-SH。
チオエーテル (スルフィド)：-SR (ここで、Rはチオエーテル 置換基、例えば、C1〜7アルキル基(C1〜7アルキルチオ基ともいう)、C3〜20ヘテロサイクリル基、またはC5〜20アリール基、好ましくはC1〜7アルキル基である)。C1〜7アルキルチオ基の例は、制限されないが、-SCH3および-SCH2CH3を含む。
【０２３５】
ジスルフィド：-SS-R (ここで、Rはジスルフィド置換基、例えば、C1〜7アルキル基、C3〜20ヘテロサイクリル基、またはC5〜20アリール基、好ましくはC1〜7アルキル基(本明細書中では、C1〜7アルキルジスルフィドともいう)である)。C1〜7アルキルジスルフィド基の例は、制限されないが、-SSCH3および-SSCH2CH3を含む。
【０２３６】
スルフィン(スルフィニル、スルホキシド)：-S(=O)R (ここで、Rはスルフィン置換基、例えば、C1〜7アルキル基、C3〜20ヘテロサイクリル基、またはC5〜20アリール基、好ましくはC1〜7アルキル基である)。スルフィン基の例は、制限されないが、-S(=O)CH3および-S(=O)CH2CH3を含む。
【０２３７】
スルホン(スルホニル)：-S(=O)2R (ここで、Rはスルホン置換基、例えばC1〜7アルキル基、C3〜20ヘテロサイクリル基、またはC5〜20アリール基、好ましくは、例えば、フルオロ化またはペルフルオロ化したC1〜7アルキル基を含むC1〜7アルキル基である)。スルホン基の例は、限定されないが、-S(=O)2CH3 (メタンスルホニル、メシル)、-S(=O)2CF3 (トリフリル)、-S(=O)2CH2CH3 (エシル)、-S(=O)2C4F9 (ノナフリル)、-S(=O)2CH2CF3 (トレシル)、-S(=O)2CH2CH2NH2 (タウリル)、-S(=O)2Ph (フェニルスルホニル、ベシル)、4-メチルフェニルスルホニル (トシル)、4-クロロフェニルスルホニル (クロシル)、4-ブロモフェニルスルホニル (ブロシル)、4-ニトロフェニル (ノシル)、2-ナフタレンスルホナート (ナプシル)、および5-ジメチルアミノ-ナフタレン-1-イルスルホナート (ダンシル)を含む。
【０２３８】
スルフィン酸(スルフィノ)：-S(=O)OH、-SO2H。
スルホン酸(スルホ)：-S(=O)2OH、-SO3H。
スルフィナート(スルフィン酸エステル)：-S(=O)OR；ここで、Rはスルフィナート置換基、例えばC1〜7アルキル基、C3〜20ヘテロサイクリル基、またはC5〜20アリール基、好ましくはC1〜7アルキル基である。スルフィナート基の例は、限定されないが、-S(=O)OCH3 (メトキシスルフィニル；メチル スルフィナート)および-S(=O)OCH2CH3 (エトキシスルフィニル；エチル スルフィナート)を含む。
【０２３９】
スルホナート(スルホン酸エステル)：-S(=O)2OR (ここで、Rはスルホナート置換基、例えばC1〜7アルキル基、C3〜20ヘテロサイクリル基、またはC5〜20アリール基、好ましくはC1〜7アルキル基である)。スルホナート基の例は、限定されないが、-S(=O)2OCH3 (メトキシスルホニル；メチル スルホナート)および-S(=O)2OCH2CH3 (エトキシスルホニル；エチル スルホナート)を含む。
【０２４０】
スルフィニルオキシ：-OS(=O)R (ここで、Rはスルフィニルオキシ置換基、例えば、C1〜7アルキル基、C3〜20ヘテロサイクリル基、またはC5〜20アリール基、好ましくはC1〜7アルキル基である)。スルフィニルオキシ基の例は、特に限定されないが、-OS(=O)CH3および-OS(=O)CH2CH3を含む。
【０２４１】
スルホニルオキシ：-OS(=O)2R (ここで、Rはスルホニルオキシ置換基、例えば、C1〜7アルキル基、C3〜20ヘテロサイクリル基、またはC5〜20アリール基、好ましくはC1〜7アルキル基である)。スルホニルオキシ基の例は、限定されないが、-OS(=O)2CH3 (メシラート)および-OS(=O)2CH2CH3 (エシラート)を含む。
【０２４２】
サルフェート：-OS(=O)2OR；ここで、Rはサルフェート置換基、例えば、C1〜7アルキル基、C3〜20ヘテロサイクリル基、またはC5〜20アリール基、好ましくはC1〜7アルキル基である。サルフェート基の例は、限定されないが、-OS(=O)2OCH3および-SO(=O)2OCH2CH3を含む。
【０２４３】
スルファミル(スルファモイル；スルフィン酸アミド；スルフィンアミド)：-S(=O)NR1R2 (ここで、R1およびR2は独立して、アミノ基について定義したようなアミノ置換基である)。スルファミル基の例は、限定されないが、-S(=O)NH2、-S(=O)NH(CH3)、-S(=O)N(CH3)2、-S(=O)NH(CH2CH3)、-S(=O)N(CH2CH3)2、および-S(=O)NHPhを含む。
【０２４４】
スルホンアミド(スルフィンアモイル；スルホン酸アミド；スルホンアミド)：-S(=O)2NR1R2 (ここで、R1およびR2は独立して、アミノ基について定義したようなアミノ置換基である)。スルホンアミド基の例は、限定されないが、-S(=O)2NH2、-S(=O)2NH(CH3)、-S(=O)2N(CH3)2、-S(=O)2NH(CH2CH3)、-S(=O)2N(CH2CH3)2、および-S(=O)2NHPhを含む。
【０２４５】
スルファミノ：-NR1S(=O)2OH (ここで、R1はアミノ基について定義したようなアミノ置換基である)。スルファミノ基の例は、限定されないが、-NHS(=O)2OHおよび-N(CH3)S(=O)2OHを含む。
【０２４６】
スルホンアミノ：-NR1S(=O)2R (ここで、R1は、アミノ基について定義したようなアミノ置換基であり、Rはスルホンアミノ置換基、例えば、C1〜7アルキル基、C3〜20ヘテロサイクリル基、またはC5〜20アリール基、好ましくはC1〜7アルキル基である)。スルホンアミノ基の例は、限定されないが、-NHS(=O)2CH3および-N(CH3)S(=O)2C6H5を含む。
【０２４７】
スルフィンアミノ：-NR1S(=O)R (ここで、R1は、アミノ基について定義したようなアミノ置換基であり、Rはスルフィンアミノ置換基、例えば、C1〜7アルキル基、C3〜20ヘテロサイクリル基、またはC5〜20アリール基、好ましくはC1〜7アルキル基である)。スルフィンアミノ基の例は、限定されないが、-NHS(=O)CH3および-N(CH3)S(=O)C6H5含む。
【０２４８】
多くの場合において、置換基自身が置換されることができる。例えばC1〜7アルキル基は、例えば、ヒドロキシ(例えばC1〜7ヒドロキシアルキル基)、C1〜7アルコキシ(例えばC1〜7アルコキシアルキル基)、アミノ(例えばC1〜7アミノアルキル基)、ハロゲン(例えばC1〜7ハロアルキル基)、カルボキシ(例えばC1〜7カルボキシアルキル基)、およびC5〜20アリール(例えばC5〜20アリール-C1〜7アルキル基)で置換されることができる。
【０２４９】
同様に、C5〜20アリール基は、例えばヒドロキシ(例えばC5〜20ヒドロキシアリール基)、ハロゲン(例えばC5〜20ハロアリール基)、アミノ(例えばアニリン中のような、例えばC5〜20アミノアリール基)、C1〜7アルキル(例えばトルエン中のような、例えばC1〜7アルキル-C5〜20アリール基)、およびC1〜7アルコキシ(例えばアニソール中のような、例えばC1〜7アルコキシ-C5〜20アリール基)で置換されることができる。
【０２５０】
このような置換された置換基の、これらのおよびその他の具体的な例を、以下に示す。
C1〜7ハロアルキル基：本明細書で用いられている「C1〜7ハロアルキル基」の語は、少なくとも1つ(例えば1、2、3)の水素原子がハロゲン原子(例えばF、Cl、Br、I)で置き換えられたC1〜7アルキル基に関する。1以上の水素原子がハロゲン原子で置き換えられた場合、ハロゲン原子は独立して、同じまたは異なっていてもよい。各水素原子が全てハロゲン原子で置き換えられることができ、その場合に、該基は簡単に「C1〜7ペルハロアルキル基」ということができる。C1〜7ハロアルキル基の例は、限定されないが-CF3、-CHF2、-CH2F、-CCl3、-CBr3、-CH2CH2F、-CH2CHF2、および-CH2CF3を含む。
【０２５１】
C1〜7ハロアルコキシ：-OR (ここで、RはC1〜7ハロアルキル基である)。C1〜7ハロアルコキシ基の例は、限定されないが、-OCF3、-OCHF2、-OCH2F、-OCCl3、-OCBr3、-OCH2CH2F、-OCH2CHF2、および-OCH2CF3を含む。
【０２５２】
C1〜7ヒドロキシアルキル：本明細書で用いられている「C1〜7ヒドロキシアルキル基」の語は、少なくとも1つの水素原子がヒドロキシ基で置き換えられたC1〜7アルキル基に関する。C1〜7ヒドロキシアルキル基の例は、限定されないが、-CH2OH、-CH2CH2OH、および-CH(OH)CH2OHを含む。
【０２５３】
C1〜7カルボキシアルキル：本明細書で用いられている「C1〜7カルボキシアルキル基」の語は、少なくとも1つの水素原子がカルボキシ基で置き換えられたC1〜7アルキル基に関する。C1〜7カルボキシアルキル基の例は、限定されないが、-CH2COOHおよび-CH2CH2COOHを含む。
【０２５４】
C1〜7アミノアルキル：本明細書で用いられている「C1〜7アミノアルキル基」の語は、少なくとも1つの水素原子がアミノ基で置き換えられたC1〜7アルキル基に関する。C1〜7アミノアルキル基の例は、限定されないが、-CH2NH2、-CH2CH2NH2、および-CH2CH2N(CH3)2を含む。
【０２５５】
C1〜7アミノアルキルアミノ：本明細書で用いられている「C1〜7アミノアルキルアミノ」の語は、アミノ基、-NR1R2 (ここで、置換基のうちの1つ、R1またはR2それ自身が、C1〜7アミノアルキル基 (-C1〜7アルキル-NR1R2)である)に関する。C1〜7アミノアルキルアミノは、例えば式-NR1-C1〜7アルキル-NR1R2で表される。アミノ-C1〜7アルキルアミノ基の例は、限定されないが、式-NR1(CH2)nNR1R2 (式中、nは1〜6である)の基、例えば-NHCH2NH2、-NH(CH2)2NH2、-NH(CH2)3NH2、-NH(CH2)4NH2、-NH(CH2)5NH2、-NH(CH2)6NH2、-NHCH2NH(Me)、-NH(CH2)2NH(Me)、-NH(CH2)3NH(Me)、-NH(CH2)4NH(Me)、-NH(CH2)5NH(Me)、-NH(CH2)6NH(Me)、-NHCH2NH(Et)、-NH(CH2)2NH(Et)、-NH(CH2)3NH(Et)、-NH(CH2)4NH(Et)、-NH(CH2)5NH(Et)、および-NH(CH2)6NH(Et)を含む。
【０２５６】
C1〜7アルキル- C5〜20アリール：本明細書で用いられている「C1〜7アルキル- C5〜20アリール」の語は、C1〜7アルキル基で置換された特定のC5〜20アリール基を表す。そのような基の例は、限定されないが、トリル(トルエンから)、キシリル(キシレンから)、メシチル(メシチレンから)、およびクメニル(またはクミル、クメンから)、ならびにジュリル(ジュレンから)を含む。
【０２５７】
C1〜7アルキル-C5〜20アリールオキシ：本明細書で用いられている「C1〜7アルキル-C5〜20アリールオキシ」の語は、C1〜7アルキル基で置換された特定のC5〜20アリールオキシ基を表す。そのような基の例は、限定されないが、トリルオキシ、キシリルオキシ、メシチルオキシ、クメニルオキシ、およびジュリルオキシを含む。
【０２５８】
C5〜20アリール-C1〜7アルキル：本明細書で用いられている「C5〜20アリール-C1〜7アルキル」の語は、C5〜20アリール基で置換された特定のC1〜7アルキル基を表す。そのような基の例は、限定されないが、ベンジル(フェニルメチル、PhCH2-)、ベンズヒドリル(Ph2CH-)、トリチル(トリフェニルメチル、Ph3C-)、フェネチル(フェニルエチル、Ph-CH2CH2-)、スチリル(Ph-CH=CH-)、シンナミル(Ph-CH=CH-CH2-)を含む。
【０２５９】
C5〜20アリール-C1〜7アルコキシ：本明細書で用いられている「C5〜20アリール-C1〜7アルコキシ」の語は、C5〜20アリール基で置換された特定のC1〜7アルコキシ基を表す。そのような基の例は、限定されないが、ベンジルオキシ、ベンズヒドリルオキシ、トリチルオキシ、フェネトキシ、スチリルオキシ、およびシンナミルオキシを含む。
【０２６０】
C5〜20ハロアリール：本明細書で用いられている「C5〜20ハロアリール」の語は、1以上のハロゲン基で置換されたC5〜20アリール基を表す。そのような基の例は、限定されないが、ハロフェニル(例えば、オルト-、メタ-、またはパラ-置換のいずれかのフルオロフェニル、クロロフェニル、ブロモフェニル、またはヨードフェニル)、ジハロフェニル、トリハロフェニル、テトラハロフェニル、またはペンタハロフェニルを含む。
【０２６１】
その他の形態を含む
特に記載しない限り、これらの置換基の周知のイオン、塩、溶媒和物、および保護された形態が上記に含まれる。例えばカルボン酸(-COOH)の表示は、そのアニオン(カルボキシレート)の形態(-COO-)、塩または溶媒和物、ならびに通常の保護された形態を含む。同様に、アミノ基の表示は、アミノ基のプロトン化された形態(-N+HR1R2)、塩または溶媒和物、例えば塩酸塩、ならびにアミノ基の通常の保護された形態を含む。同様に、ヒドロキシル基の表示は、そのアニオンの形態(-O-)、塩または溶媒和物、ならびにヒドロキシル基の通常の保護された形態を含む。
【０２６２】
異性体、塩、溶媒和物、保護された形態、およびプロドラッグ
ある化合物は、シス- およびトランス-型； E- およびZ-型；c-、t-、およびr-型；エンド- およびエキソ-型；R-、S-、およびメソ-型；D- およびL-型；d- およびl-型；(+) および(-)型；ケト-、エノール-およびエノラート-型；シン- およびアンチ-型； シンクリナル(synclinal)-およびアンチクリナル(anticlinal)-型；α-およびβ-型；アキシアルおよびエクアトリアル型；舟-、いす-、ねじれ-、エンベロープ-、および半いす-形；ならびにこれらの組み合わせを含むが限定されない、1以上の特定の幾何学上の、光学の、鏡像の、ジアステレオマーの、エピマーの、アトロプ異性体の(atropic)、立体異性体の、互変体の、立体配置の、またはアノマーの形態で存在することができ、本明細書の以下ではまとめて「異性体」 (または「異性の形態」)という。
【０２６３】
以下で互変体の形態について論じることを除いて、構造異性体(すなわち、単に空間内の原子の配置によるよりも、原子間の結合が異なる異性体)を、本明細書で用いられている「異性体」の語から具体的に排除することが記載される。例えば、メトキシ基、-OCH3の表示は、その構造異性体である、ヒドロキシメチル基、-CH2OHの表示のように解釈されない。同様に、オルト-クロロフェニルの表示は、その構造異性体である、メタ-クロロフェニルの表示であるように解釈されない。しかしながら、構造のクラスの表示は、そのクラス内となる構造異性の形態も含む(例えば、C1〜7アルキルは、n-プロピルおよびイソ-プロピルを含む；ブチルは、n-、イソ-、sec-、およびtert-ブチルを含む；メトキシフェニルは、オルト-、メタ-、およびパラ-メトキシフェニルを含む)。
【０２６４】
上記の排除は、例えば以下の互変体の組の内のような互変体、例えばケト-、エノール-、およびエノラート-形には適用されない：ケト/エノール(以下に図示)、イミン/エナミン、アミド/イミノ アルコール、アミジン/アミジン、ニトロソ/オキシム、チオケトン/エネチオール(enethiol)、N-ニトロソ/ヒドロキシアゾ(hyroxyazo)、およびニトロ/aci-ニトロ。
【０２６５】
【化３０】
2005517675.tif 000066
【０２６６】
RNが水素である場合、本発明のピラゾールは、以下に図示するような互変体の形態で存在し得ることが認識される。疑問を回避するために、両方の互変体の形態を本発明に包含し、1つの互変体の形態の表示はもう一方の表示を含む。
【０２６７】
【化３１】
2005517675.tif 000067
【０２６８】
「異性体」の語は、1以上の同位元素の置換をもつ化合物も特異的に含むことが記載される。例えばHは、1H、2H (D)、および3H (T)を含むいずれの同位体の形態であってもよく；Cは、12C、13C、および14Cを含むいずれの同位体の形態であってもよく；Oは、16Oおよび18Oを含むいずれの同位体の形態などであってもよい。
【０２６９】
特に記載しない限り、特定の化合物の表示は、(完全または部分的に)ラセミのおよびその他のそれらの混合物を含む、このような異性体の形態を全て含む。このような異性体の形態の製造(例えば不斉合成)および分割方法(例えば分別結晶およびクロマトグラフィー法)は、当該技術で公知であるか、または本明細書に記載の方法もしくは公知の方法を、公知の様式で適用することにより、容易に得られる。
【０２７０】
特に記載しない限り、特定の化合物の表示は、それらのイオン、塩、溶媒和物、および保護された形態、例えば以下で論じるものも含む。
【０２７１】
活性化合物の対応する塩、例えば医薬的に許容される塩を製造し、精製し、および／または取り扱うことが簡便であるか、または望ましい。医薬的に許容される塩は、Bergeら、1977、"Pharmaceutically Acceptable Salts," J. Pharm. Sci.、66巻、1〜19頁で論じられている。
【０２７２】
例えば化合物がアニオンであるか、またはアニオンであり得る官能基(例えば、-COOHは-COO-であり得る)を有する場合、適切なカチオンと共に塩が形成され得る。適切な無機カチオンの例は、限定されないが、Na+およびK+のようなアルカリ金属イオン、Ca2+およびMg2+のようなアルカリ土類カチオン、ならびにAl+3のようなその他のカチオンを含む。適切な有機カチオンの例は、限定されないが、アンモニウムイオン(すなわちNH4+)および置換のアンモニウムイオン(例えばNH3R+、NH2R2+、NHR3+、NR4+)を含む。ある適切な置換のアンモニウムイオンの例は： エチルアミン、ジエチルアミン、ジシクロヘキシルアミン、トリエチルアミン、ブチルアミン、エチレンジアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、ピペラジン、ベンジルアミン、フェニルベンジルアミン、コリン、メグルミン、およびトロメタミン、ならびにリジンおよびアルギニンのようなアミノ酸から誘導されるものである。通常の4級アンモニウムイオンの例は、N(CH3)4+である。
【０２７３】
化合物がカチオンであるか、またはカチオンであり得る官能基 (例えば、-NH2は-NH3+であり得る)を有する場合、適切なアニオンと共に塩が形成され得る。適切な無機アニオンの例は、限定されないが、次の無機酸から誘導されるものを含む：塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、亜硫酸、硝酸、亜硝酸、リン酸、および亜リン酸。
【０２７４】
適切な有機アニオンの例は、限定されないが、次の有機酸から誘導されるものを含む： 2-アセチルオキシ安息香酸、酢酸、アスコルビン酸、アスパラギン酸、安息香酸、ショウノウスルホン酸、桂皮酸、クエン酸、エデト酸、エタンジスルホン酸、エタンスルホン酸、フマル酸、グルコヘプト酸、グルコン酸、グルタミン酸、グリコール酸、ヒドロキシマレイン酸、ヒドロキシナフタレンカルボン酸、イセチオン酸、乳酸、ラクトビオン酸(lactobionic)、ラウリン酸、マレイン酸、リンゴ酸、メタンスルホン酸、粘液酸、オレイン酸、シュウ酸、パルミチン酸、パモイック酸(pamoic)、パントテン酸、フェニル酢酸、フェニルスルホン酸、プロピオン酸、ピルビン酸、サリチル酸、ステアリン酸、コハク酸、スルファニル酸、酒石酸、トルエンスルホン酸、および吉草酸。適切な高分子の有機アニオンの例は、限定されないが、次の高分子の酸から誘導されるものを含む：タンニン酸、カルボキシメチルセルロース。
【０２７５】
活性化合物の対応する溶媒和物を製造し、精製し、および／または取り扱うことが簡便であるか、または望ましい。「溶媒和物」の語は、本明細書において、一般的な意味で、溶質(例えば活性化合物、活性化合物の塩)および溶媒の複合体をいう。溶媒が水である場合、溶媒和物は、簡単に、水和物、例えば一水和物、二水和物、三水和物などということができる。
【０２７６】
化学的に保護された形態の活性化合物を製造し、精製し、および／または取り扱うことが簡便であるか、または望ましい。「化学的に保護された形態」の語は、本明細書において、通常の化学的意味で用いられ、1以上の反応性官能基が、特定の条件(例えばpH、温度、照射、溶媒など)下での望まれない化学的反応から保護されている化合物に関する。実際には、周知の化学的方法が、特定の条件下で、そうでなければ反応性である官能基を可逆的に非反応性にするのに用いられる。化学的に保護された形態では、1以上の反応性官能基が保護されたか、または保護基(マスクされたか、もしくはマスキング基、またはブロックされたか、もしくはブロッキング基)の形態である。反応性の官能基を保護することにより、保護された基に影響することなく、他の保護されていない反応性の官能基を含む反応を行うことができる；保護基は、通常、後続の工程で、分子の残りの部分に実質的に影響することなく、除去することができる。例えば、Protective Groups in Organic Synthesis (T. GreenおよびP. Wuts；第3版；John Wiley and Sons、1999)を参照。
【０２７７】
広い種類のこのような「保護」、「ブロッキング」または「マスキング」の方法が広く用いられ、有機合成において周知である。例えば、どちらも特定の条件下で反応性である2つの不等な反応性官能基を有する化合物を誘導体化して、1つの官能基を「保護された」ようにし、よって特定の条件下で反応性でなくすることができる；このように保護されると、化合物は1つの反応性官能基のみを有効に有する反応物として用いることができる。所望の反応(もう1つの官能基を含む)が終了後、保護された基は「脱保護」されて、その本来の官能基に戻ることができる。
【０２７８】
例えばヒドロキシ基は、例えばt-ブチルエーテル；ベンジル、ベンズヒドリル(ジフェニルメチル)、もしくはトリチル(トリフェニルメチル) エーテル；トリメチルシリルもしくはt-ブチルジメチルシリル エーテル；またはアセチル エステル(-OC(=O)CH3、-OAc)のような、エーテル(-OR)またはエステル(-OC(=O)R)として保護され得る。
【０２７９】
例えばアルデヒドまたはケトン基は、それぞれアセタール(R-CH(OR)2)またはケタール(R2C(OR)2)として保護されることができ、ここでカルボニル基(＞C=O)は、例えば1級アルコールとの反応により、ジエーテル(＞C(OR)2)に変換される。アルデヒドまたはケトン基は、酸の存在下に、大過剰の水を用いる加水分解により、容易に再生される。
【０２８０】
例えばアミン基は、例えばメチルアミド(-NHCO-CH3)；ベンジルオキシアミド(-NHCO-OCH2C6H5、-NH-Cbz)；t-ブトキシアミド(-NHCO-OC(CH3)3、-NH-Boc)として； 2-ビフェニル-2-プロポキシアミド(-NHCO-OC(CH3)2C6H4C6H5、-NH-Bpoc)、9-フルオレニルメトキシアミド(-NH-Fmoc)として、6-ニトロベラトリルオキシアミド(-NH-Nvoc)として、2-トリメチルシリルエチルオキシアミド(-NH-Teoc)として、2,2,2-トリクロロエチルオキシアミド(-NH-Troc)として、アリルオキシアミド(-NH-Alloc)として、2(-フェニルスルホニル)エチルオキシアミド(-NH-Psec)としてのような、アミド(-NRCO-R)またはウレタン(-NRCO-OR)；または適切な場合(例えば、環式アミン)、ニトロオキシドラジカル(＞N-O・)として保護され得る。
【０２８１】
例えばカルボン酸基は、例えば：C1〜7アルキルエステル(例えば、メチルエステル；t-ブチルエステル)；C1〜7ハロゲンアルキルエステル(例えば、C1〜7トリハロアルキルエステル)；トリC1〜7アルキルシリル- C1〜7アルキルエステル；またはC5〜20アリール- C1〜7アルキルエステル(例えば、ベンジルエステル；ニトロベンジルエステル)のようなエステルとして；またはアミド、例えばメチルアミドとして保護され得る。
【０２８２】
例えばチオール基は、例えば：ベンジルチオエーテル；およびアセトアミドメチルエーテル(-S-CH2NHC(=O)CH3)のようなチオエーテル(-SR)として保護され得る。
【０２８３】
プロドラッグの形態の活性化合物を製造し、精製し、および／または取り扱うことが簡便であるか、または望ましい。本明細書で用いられている「プロドラッグ」の語は、代謝された場合(例えばインビボで)に、所望の活性化合物を与える化合物に関する。一般的に、プロドラッグは、不活性であるか、活性化合物より活性が低いが、有利な取り扱い、投与、または代謝特性を提供し得る。
【０２８４】
例えば、あるプロドラッグは活性化合物のエステル(例えば生理的に許容される、代謝的に不安定なエステル)である。代謝の間に、エステル基(-C(=O)OR)が開裂されて、活性な薬剤を与える。このようなエステルは、例えば、適当であれば、親の化合物中に存在するいずれの他の反応性基を前もって保護し、親の化合物のいずれのカルボン酸基(-C(=O)OH)のエステル化により形成されることができ、そして必要であれば後に脱保護を続ける。
【０２８５】
このような代謝的に不安定なエステルは、式-C(=O)OR
(式中、Rは：
C1〜7アルキル
(例えば、-Me、-Et、-nPr、-iPr、-nBu、-sBu、-iBu、-tBu)；
C1〜7アミノアルキル
(例えば、アミノエチル；2-(N,N-ジエチルアミノ)エチル；2-(4-モルホリノ)エチル)；および
アシルオキシ- C1〜7アルキル
(例えば、アシルオキシメチル；
アシルオキシエチル；
ピバロイルオキシメチル；
アセトキシメチル；
1-アセトキシエチル；
1-(1-メトキシ-1-メチル)エチル-カルボニルオキシエチル；
1-(ベンゾイルオキシ)エチル；イソプロポキシ-カルボニルオキシメチル；
1-イソプロポキシ-カルボニルオキシエチル； シクロヘキシル-カルボニルオキシメチル；
1-シクロヘキシル-カルボニルオキシエチル；
シクロヘキシルオキシ-カルボニルオキシメチル；
1-シクロヘキシルオキシ-カルボニルオキシエチル；
(4-テトラヒドロピラニルオキシ)カルボニルオキシメチル；
1-(4-テトラヒドロピラニルオキシ)カルボニルオキシエチル；
(4-テトラヒドロピラニル)カルボニルオキシメチル；および
1-(4-テトラヒドロピラニル)カルボニルオキシエチルである)
のものを含む。
【０２８６】
また、あるプロドラッグは、酵素的に活性化されて活性化合物、またはさらなる化学反応を経て活性化合物を生じる化合物(例えばADEPT、GDEPT、LIDEPTなどの中のような)を与える。例えばプロドラッグは、糖の誘導体もしくはその他のグリコシドコンジュゲートであるか、またはアミノ酸エステル誘導体であり得る。
【０２８７】
アクロニム
簡便のために、多くの化学的部分は、限定されないがメチル(Me)、エチル(Et)、n-プロピル(nPr)、イソ-プロピル(iPr)、n-ブチル(nBu)、sec-ブチル(sBu)、イソ-ブチル(iBu)、tert-ブチル(tBu)、n-ヘキシル(nHex)、シクロヘキシル(cHex)、フェニル(Ph)、ビフェニル(biPh)、ベンジル(Bn)、ナフチル(naph)、メトキシ(MeO)、エトキシ(EtO)、ベンゾイル(Bz)、およびアセチル(Ac)を含む周知の略語を用いて表示される。
【０２８８】
簡便のために、多くの化学物質は、限定されないがメタノール(MeOH)、エタノール(EtOH)、イソ-プロパノール(i-PrOH)、メチルエチルケトン(MEK)、エーテルまたはジエチルエーテル(Et2O)、酢酸(AcOH)、ジクロロメタン(塩化メチレン、DCM)、アセトニトリル(ACN)、トリフルオロ酢酸(TFA)、ジメチルホルムアミド(DMF)、テトラヒドロフラン(THF)、およびジメチルスルホキシド(DMSO) を含む周知の略語を用いて表示される。
【０２８９】
一般的な合成
本発明の3,4-ジアリールピラゾールは、例えば本明細書に記載の方法、または周知の手段でこれらもしくは周知の方法を適用することにより製造することができる。
ある方法においては、例えば次のスキームに記載のように、イソフラボンをヒドラジンと反応させて対応するピラゾールを得る。例えばBass、1976； Nakanoら、1979； Bakerら、1953；およびKhilyaら、1994参照。
【０２９０】
【化３２】
2005517675.tif 000068
【０２９１】
より一般的には、3,4-ジアリールピラゾールは、例えば次のスキームに記載のように、適切に置換されたジカルボニル化合物のヒドラジンとの反応により製造することができる。例えばTerrett ら、1996およびLeighら、1979参照。
【０２９２】
【化３３】
2005517675.tif 000069
【０２９３】
所望のジカルボニル化合物は、次を含む、種々の合成アプローチにより得ることができる。
ある方法においては、ジカルボニル化合物は、例えば次のスキームに記載のように、アリールベンジルケトンのアシル化により製造される。例えばBerkら、1988およびLeら、1997参照。
【０２９４】
【化３４】
2005517675.tif 000070
【０２９５】
アシル化剤、R5COXの例は、エステル、酸塩化物、無水物などを含み、そして反応は、例えば金属アルコキシドのような塩基によるか、または例えばリチウムジ-イソプロピルアミドをテトラヒドロフラン中で低温で用いる、前もってのエノラートアニオンの形成により触媒され得る。代わりに、アシル化剤はBF3のようなルイス酸触媒の存在下で用いるホルムアミド、またはオルトホルメートであり得る。
【０２９６】
アリールベンジルケトン、Ar3C(=O)CH2Ar4は、以下に示すエノールエーテルのような適切な基質により置き換えることができ、ここでRは、例えばアルキル、トリアルキルシリルなどである。
【０２９７】
【化３５】
2005517675.tif 000071
【０２９８】
その他の方法において、ジカルボニル化合物は、例えば次のスキームに記載のように、アルキルベンジルケトンのアシル化により製造される。例えばBerkら、1988参照。
【０２９９】
【化３６】
2005517675.tif 000072
【０３００】
再び、アシル化剤、R5COXの例は、エステル、酸塩化物、無水物などを含み、そして反応は、例えば金属アルコキシドのような塩基によるか、または例えばリチウムジ-イソプロピルアミドをテトラヒドロフラン中で低温で用いる、前もってのエノラートアニオンの形成により触媒され得る。代わりに、アシル化剤はBF3のようなルイス酸触媒の存在下で用いるホルムアミドまたはオルトホルメートであり得る。
【０３０１】
再び、アルキルベンジルケトン、R5C(=O)CH2Ar4は、以下に示すエノールエーテルのような適切な基質により置き換えることができ、ここでRは、例えばアルキル、トリアルキルシリルなどである。
【０３０２】
【化３７】
2005517675.tif 000073
【０３０３】
その他の方法において、ジカルボニル化合物は、例えば次のスキームに記載のように、1,3-ジカルボニル化合物のアリール化により製造することができる。例えば
【０３０４】
【化３８】
2005517675.tif 000074
【０３０５】
を参照。
好ましい場合において、1,3-ジケトンから誘導されるアニオンは、ハロ芳香族化合物Ar2X (式中、Xは、例えばF、ClまたはBrである)との反応により直接アリール化され得る。この方法は、芳香環Ar4が、例えば4-ニトロフェニルのような基、ならびに4-ピリジルおよび2-ピリミジニルのようなヘテロアリール基の中のように電子不足である場合に特に有用である。
【０３０６】
所望のベンジルアリールケトンは、例えば次のスキームに記載のものを含む種々の合成アプローチにより得ることができる。例えばBerkら、1988；Hajipourら、1998；Andersonら、1997；Farkasら、2000；Wahalaら、1991；Knchelら、1988；およびZhuら、1991参照。
【０３０７】
【化３９】
2005517675.tif 000075
【０３０８】
【化４０】
2005517675.tif 000076
【０３０９】
【化４１】
2005517675.tif 000077
【０３１０】
【化４２】
2005517675.tif 000078
【０３１１】
【化４３】
2005517675.tif 000079
【０３１２】
対応するアセチルクロリドの製造の一般的な方法
酸(例えば実施例149) (約5 mg)を、乾燥THF (2 mL)に溶解した；オキサリルクロリド(2 モル等量)に続いてDMFの滴を添加した。溶液を室温で1時間攪拌し、使用できるようになった。
【０３１３】
対応するアセトアミドの製造の一般的な方法
THF中の酸クロリドの溶液に、濃NH3 (1/2 mL)または対応するアミン(1.5モル等量)、トリエチルアミン(1.5モル等量)およびDMAPのいくつかの結晶を添加した。溶液を1時間還流した。次いで、これを水(3 mL)で希釈し、EtOAC (3×3 mL)で抽出した。合わせた有機相をNaCl溶液で洗浄し、Na2SO4で乾燥した。溶媒を蒸発後、油を得、次いでこれをクロマトグラフィーで精製した； EtOAc：MeOH (7：1)で溶出。
【０３１４】
【化４４】
2005517675.tif 000080
【０３１５】
使用
本発明は、活性化合物、具体的には、本明細書に記載のように、HSP90を阻害し得る活性な3,4-ジアリールピラゾールを提供する。
本発明は、本明細書に記載のような活性化合物の有効量を細胞と接触させることを含む、インビトロまたはインビボでHSP90を阻害する方法も提供する。ある実施形態においては、該方法はインビトロで行われる。ある実施形態においては、該方法はインビボで行われる。
【０３１６】
本明細書で用いられる「HSP90を阻害する」の語は：HSP90活性の阻害；HSP90複合体の形成の阻害；HSP90複合体の活性の阻害；クライエントタンパク質に作用するHSP90の能力の阻害；クライエントタンパク質にシャペロンとして作用するHSP90の能力の阻害；クライエントタンパク質の立体配置の変更(例えば折り畳み)を促進するHSP90の能力の阻害を含む。
【０３１７】
例えば、HSP90阻害のある形態は、HSP90 ATP結合部位に結合する(例えば競合的に)化合物に関与する。その他の形態は、代わりに、または付加的に、HSP90分子、クライエントタンパク質、コシャペロンまたはそれらの組み合わせのあらゆる位置に結合する化合物に関与する。
【０３１８】
本明細書で用いられている「活性な」の語は、HSP90を阻害し得る化合物に関し、そして特に固有活量(薬剤)をもつ化合物、およびそのような化合物のプロドラッグの両方を含み、該プロドラッグはそれ自身がほとんど、または全く固有活量を示さない。
当業者は、候補の化合物がHSP90活性を阻害するか否かを容易に決定することができる。例えば、特定の化合物によりもたらされるHSP90阻害を評価するために簡便に用いられるアッセイを、以下の実施例に示す。
【０３１９】
本発明は、HSP90のATPアーゼ活性を阻害する活性化合物も提供する。
本発明は、本明細書に記載のような活性化合物の有効量を細胞と接触させることを含む、インビトロまたはインビボでHSP90のATPアーゼ活性を阻害する方法も提供する。ある実施形態において、該方法はインビトロで行われる。ある実施形態において、該方法はインビボで行われる。
当業者は、候補の化合物がHSP90のATPアーゼ活性を阻害するか否かを容易に決定することができる。例えば、特定の化合物によりもたらされる阻害を評価するために簡便に用いられるアッセイを、以下の実施例に示す。
【０３２０】
本発明は、好ましくは医薬的に許容される組成物の形態にある活性化合物の有効量を細胞と接触させることを含む、細胞においてHSP90を阻害する方法も提供する。このような方法は、インビトロまたはインビボで実行され得る。
【０３２１】
本発明は、(a) 細胞増殖を阻害する；(b) 細胞周期の進行を阻害する；(c) アポトーシスを促進する；または(d) これらの1以上の組み合わせの活性化合物も提供する。
よって、本発明は、本明細書で記載のような活性化合物の有効量を細胞と接触させることを含む、インビトロまたはインビボで(a) 細胞増殖を阻害する；(b) 細胞周期の進行を阻害する；(c) アポトーシスを促進する；または(d) これらの1以上の組み合わせの方法も提供する。
【０３２２】
本発明は、HSP90により媒介される症状の治療に有用な活性化合物も提供する。
本明細書で用いられている「HSP90により媒介される症状」の語は、例えばその症状の発症、進行、発現などに、HSP90および／またはHSP90の作用が重要であるか、または必須である症状に関する。HSP90により媒介される症状の例は、制限されないが、その症状を推進するクライエントタンパク質へのHSP90の作用を特徴とする症状；HSP90により作用された1以上のクライエントタンパク質を特徴とする症状；1以上のタンパク質により推進される症状であって、該タンパク質がHSP90クライエントタンパク質であり、該タンパク質がHSP90による作用(例えばシャペロン作用)がなければ該症状を推進することができない；HSP90クライエントタンパク質である1以上のタンパク質、および症状を推進するためのHSP90の作用(例えばシャペロン作用)により推進される症状を含む。
【０３２３】
このような症状の例は、制限されないが：癌；自己免疫疾患のような免疫抑制の適用；関節炎；プリオン病(例えばクロイツフェルトヤコブ病(CJD)、変型CJD)；タンパク質の折り畳みおよび凝集の欠陥に関連するその他の疾患(例えばアルツハイマー病、ハンチントン病)を含む。
【０３２４】
例えば、多くの腫瘍性タンパク質がHSP90クライエントタンパク質である。HSP90のシャペロン作用なしでは、これらのタンパク質は、例えばユビキチン依存性プロテアソーム分解により分解される。同様に、多くの自己免疫疾患に特徴的なLCKタンパク質も、HSP90クライエントタンパク質である。HSP90のシャペロン作用なしでは、LCKのレベルは減少される。
【０３２５】
したがって、ある実施形態において、本発明は、抗癌剤である活性化合物を提供する。本明細書で用いられている「抗癌剤」の語は、癌を治療する化合物(すなわち、癌の治療に有用な化合物)に関する。抗癌作用は、制限されないが、細胞増殖(proliferation)の調節、細胞周期の進行の阻害、脈管形成(新しい血管の形成)の阻害、転移(その起源からの腫瘍の広がり)の阻害、侵襲(隣接する通常の構造内への腫瘍細胞の広がり)の阻害、またはアポトーシス(プログラムされた細胞死)の増進を含む1以上の機構を介して生じる。
【０３２６】
当業者は、候補の化合物が、いずれの特定の細胞タイプの癌性の症状を治療するか否かを容易に決定することができる。例えば、特定の化合物によりもたらされる阻害を評価するのに簡便に用いられるアッセイを、以下の実施例に示す。
【０３２７】
本発明は、増殖抑制薬である活性化合物も提供する。本明細書で用いられている「増殖抑制薬」の語は、増殖性の症状を治療する化合物(すなわち、増殖性の症状の治療に有用な化合物)に関する。
当業者は、候補の化合物が、いずれの特定の細胞タイプの増殖性の症状を治療するか否かを容易に決定することができる。例えば、特定の化合物によりもたらされる阻害を評価するのに簡便に用いられるアッセイを、以下の実施例に示す。
【０３２８】
「細胞増殖」、「増殖性の症状」、「増殖性障害」および「増殖性疾患」の語は、本明細書において互換性をもって用いられ、インビトロまたはインビボのいずれかでの腫瘍性もしくは増殖性(hyperplastic)増殖のような、不要である過度のまたは異常な細胞の不要な、または調節されない細胞増殖に関する。
【０３２９】
増殖性の症状の例は、限定されないが、新生物および腫瘍(例えば組織球腫、神経膠腫、星状細胞腫、骨腫)、癌(例えば肺癌、小細胞肺癌、胃腸の癌、腸の癌、結腸癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、精巣癌、肝臓癌、腎臓癌、膀胱癌、膵臓癌、大脳腫瘍(brain cancer)、肉腫、骨肉腫、カポジ肉腫、黒色腫)、白血病、乾癬、骨疾患、繊維増殖性疾患(例えば結合組織の)、アテローム性動脈硬化症を含むが限定されない、良性の、悪性になる前のおよび悪性の細胞増殖を含む。
【０３３０】
いずれのタイプの細胞を処理することができ、限定されないが、肺、胃腸(例えば腸、結腸を含む)、胸部、卵巣、前立腺、肝臓(肝)、膀胱、膵臓、脳および皮膚を含む。
【０３３１】
さらに、本発明は、ヒトまたは動物の治療方法を提供し、該方法は、治療が必要な対象に、好ましくは医薬組成物の形態にある活性化合物の治療的有効量を投与することを含む。
症状の治療の関係において本明細書で用いられる「治療」の語は、通常、ある所望の治療的効果、例えば症状の進行の阻害が達成される、ヒトまたは動物(例えば獣医の使用において)の治療および療法に関し、進行の速度の減少、進行の速度における停止、症状の改善、および症状の治癒を含む。予防的処置(すなわち予防)としての治療も含まれる。
【０３３２】
本明細書において用いる「治療的有効量」の語は、妥当な損益比に見合った、ある所望の治療的効果を生じるために有効な、活性化合物、または活性化合物を含む物質、組成物もしくは投与形態の量に関する。
「治療」の語は、例えば連続の、もしくは同時の2以上の治療または療法が組み合わされた、組み合わせ治療および療法を含む。治療および療法の例は、制限されないが、化学療法(活性剤、例えば薬剤、抗体(例えば免疫療法でのように)、プロドラッグ(例えば光力学療法、GDEPT、ADEPTなどでのように)を含む活性な剤の投与)；外科手術；放射線療法；および遺伝子療法を含む。
【０３３３】
さらに、本発明は、癌または上述したようなその他の症状のような、ヒトまたは動物の身体の治療の方法、例えばHSP90により媒介される症状の治療における使用のための活性化合物を提供する。
さらに、本発明は、癌または上述したようなその他の症状のような、例えばHSP90により媒介される症状の治療のための医薬の製造のための活性な化合物の使用を提供する。
【０３３４】
活性化合物は、細胞培養の添加物として用いて、HSP90を阻害することもできる。
活性化合物は、上述のように、組み合わせ療法において、すなわち、他の剤、例えば細胞毒性の剤と共に用いることもできる。
活性化合物は、例えば候補の宿主が問題の化合物を用いる治療で利益を得られるかを測定するために、インビトロアッセイの部分として用いることもできる。
活性化合物は、その他の活性化合物、その他のHSP90阻害剤、その他の抗癌剤などを同定するために、例えばアッセイにおける標準物質として用いることもできる。
【０３３５】
投与経路
活性化合物、または活性化合物を含む医薬組成物は、全身/末梢性、または局所的(すなわち所望の作用の部位に)のいずれの簡便な投与経路により対象に投与され得る。
【０３３６】
投与経路は、限定されないが、経口(例えば摂取による)；バッカル；舌下；経皮(例えばパッチ、プラスターによるのを含む)；経粘膜(例えばパッチ、プラスターによるのを含む)；鼻腔内(例えば鼻内噴霧による)；眼(例えば点眼剤による)；肺(例えば口または鼻を介しての、例えばエアロゾルを用いる、例えば吸入(inhalation)または注入(insufflation)療法による)；直腸(例えば坐薬または浣腸剤による)；膣(例えば膣坐剤による)；例えば皮下、皮内、筋肉内、静脈内、動脈内、心臓内、鞘内、髄腔内、嚢内、被膜下、眼窩内、腹膜内、気管内、表皮下、関節内、クモ膜下、および胸骨内を含む注射による非経口；例えば皮下または筋肉内のデポーまたはリザーバーの移植によるものを含む。
【０３３７】
対象
対象は、原核生物(例えば細菌)、または真核生物(例えばプロトクティスタ(protoctista)、菌類、植物、動物)であり得る。
対象は、プロトクティスタ、藻類、または原虫であり得る。
対象は、植物、被子植物、双子葉植物、単子葉植物、裸子植物、針葉樹、イチョウ、ソテツ、シダ、トクサ、ヒカゲノカズラ、苔類または蘚類であり得る。
【０３３８】
対象は、動物であり得る。
対象は、脊索動物、無脊椎動物、棘皮動物(例えばヒトデ、ウニ、蛇尾類)、節足動物、環形動物(条虫類) (例えばミミズ、タマシキゴカイ、ヒル)、軟体動物(頭足類(例えばイカ、タコ)、斧足類(例えばカキ、イガイ、ハマグリ)、腹足類動物(例えばカタツムリ、ナメクジ))、線虫類(回虫)、扁形動物(扁虫) (例えばプラナリア、吸虫、サナダムシ)、刺胞動物(例えばクラゲ、イソギンチャク、サンゴ)、または海綿動物(例えば海綿)であり得る。
【０３３９】
対象は、節足動物、昆虫(例えばカブトムシ、チョウ、ガ)、唇脚類(ムカデ)、倍脚類(ヤスデ)、甲殻類(例えばシバエビ、カニ、ロブスター)または蛛形類(例えばクモ、サソリ、ダニ)であり得る。
対象は、脊索動物、脊椎動物、哺乳動物、鳥類、爬虫類(例えばヘビ、トカゲ、ワニ)、両生類(例えばカエル、ヒキガエル)、硬骨魚(例えばサケ、カレイ、ウナギ、肺魚)、軟骨魚(例えばサメ、エイ)、または下あごのない魚(例えばヤツメウナギ、メクラウナギ)であり得る。
【０３４０】
対象は、哺乳動物、胎盤哺乳類、有袋類(例えばカンガルー、ウォンバット)、単孔類(例えばカモノハシ)、げっ歯類(例えばモルモット、ハムスター、ラット、マウス)、ネズミ科(例えばマウス)、ウサギ目(例えばラビット)、鳥類(例えばトリ)、犬科(例えばドッグ)、ネコ科(例えばキャット)、ウマ科(例えばホース)、ブタ(例えばピッグ)、ヒツジ(例えばシープ)、ウシ属(例えばカウ)、霊長類、シミアン(例えばモンキーまたは類人猿)、モンキー(たとえばマーモセット、ヒヒ)、類人猿(例えばゴリラ、チンパンジー、オランウータン、ギボン)、またはヒトであり得る。
【０３４１】
さらに、対象は、その発達の形態、例えば胞子、種子、卵、幼虫、さなぎ、胎児のいずれの形態であり得る。
ある好ましい形態において、対象はヒトである。
【０３４２】
製剤
活性化合物を単独で投与することが可能であるが、1以上の医薬的に許容される担体、賦形剤、緩衝液、アジュバント、安定剤または当業者に知られたその他の物質、および任意にその他の治療薬と共に上記で定義したような少なくとも1つの有効成分を含む医薬組成物(例えば製剤)としてそれを提示するのが好ましい。
したがって、本発明はさらに、上記で定義したような医薬組成物、および上記で定義したような少なくとも1つの有効成分を、本明細書に記載されるような、1以上の医薬的に許容される担体、賦形剤、緩衝液、アジュバント、安定剤またはその他の物質と共に混合することを含む、医薬組成物の製造方法を提供する。
【０３４３】
本明細書で用いられている「医薬的に許容される」の語は、妥当な損益比に見合った、過剰な毒性、刺激、アレルギー性応答、またはその他の問題もしくは合併症なしに、健全な医学上の判断の範囲内で、対象(例えばヒト)の組織との接触における使用に適切な化合物、物質、組成物、および／または投与形態に関する。それぞれの担体、賦形剤などは、製剤の他の成分に影響を与えないという意味においても「許容され」なければならない。
【０３４４】
製剤は、単回投与量形態で簡便に提示されることができ、そして薬学の技術において周知のいずれの方法により製造できる。そのような方法は、有効成分を、1以上の補助的な成分を構成する担体と混合する工程を含む。一般に、製剤は、有効成分を、液体の担体または微細に分割された固体の担体またはその両方と均一にそして充分に混合し、そして必要であれば物質を成形することにより製造される。
【０３４５】
製剤は、液体、溶液、懸濁液、エマルジョン、錠剤、ロゼンジ、顆粒、粉末、カプセル、丸剤、アンプル、坐剤、膣坐剤、軟膏、ゲル、パスタ剤、クリーム、噴霧剤、フォーム、ローション、油、ボーラス、舐剤、またはエアロゾルの形態であり得る。
【０３４６】
経口投与(例えば摂取)に適切な製剤は、それぞれが有効成分の予め決められた量を含む、カプセル、カシェ剤または錠剤のような別々の単位として；粉末または顆粒として；水性または非水性の液体中の溶液または懸濁液として；または水中油型液体エマルジョンもしくは油中水型液体エマルジョンとして；ボーラスとして；舐剤として；またはパスタ剤として提示され得る。
【０３４７】
錠剤は、任意に1以上の補助的な成分と共に、圧縮またはモールディングにより作ることができる。圧縮錠剤は、任意に結合剤(たとえばポビドン、ゼラチン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース)、滑沢剤、不活性な希釈剤、保存剤、崩壊剤(例えばデンプングリコレートナトリウム、架橋ポビドン、架橋カルボキシメチルセルロースナトリウム)、界面活性剤または分散剤と混合した、粉体または顆粒のような自由に流動する形態の有効成分を適切な装置内で圧縮することにより製造できる。モールドされた錠剤は、不活性な液体の希釈剤で湿らせた粉末の化合物の混合物を、適切な装置内でモールディングすることによりつくることができる。錠剤は、任意に被覆するか、または刻み目を入れることができ、例えばヒドロキシプロピルメチルセルロースを、所望の放出プロフィールを与えるように種々の割合で用いて、その中の有効成分の徐放または制御された放出となるように処方され得る。錠剤は、任意に腸溶コーティングを施されて、胃以外の腸の部分での放出されてもよい。
【０３４８】
局所の投与(例えば経皮、鼻腔内、眼、バッカル、および舌下)に適切な製剤は、軟膏、クリーム、懸濁物、ローション、粉末、溶液、パスタ剤、ゲル、噴霧剤、エアロゾル、または油として処方され得る。代わりに、製剤は、有効成分および任意の1以上の賦形剤または希釈剤を含浸させた、バンデージまたは接着性硬膏剤のようなパッチまたはドレッシングを含み得る。
【０３４９】
口腔内での局所の投与に適切な製剤は、味をつけた基材、通常、スクロースおよびアカシアまたはトラガカント中の有効成分を含むロゼンジ；ゼラチンおよびグリセリン、またはスクロースおよびアカシアのような不活性の基材中の有効成分を含む香錠；適切な液体担体中の有効成分を含む口内洗浄剤を含む。
【０３５０】
眼での局所の投与に適切な製剤は、有効成分を適切な担体、特に有効成分に対する水性溶媒に溶解または懸濁した点眼剤も含む。
担体が固体である、鼻での投与に適切な製剤は、例えば約20〜約500ミクロンの範囲の粒子径をもつ粗い粉末を含み、これは鼻吸入、すなわち鼻に近付けた粉末の容器から鼻管を通じての急激な吸入が行われる様式により投与される。例えば鼻噴霧剤、点鼻剤、またはネブライザーによるエアロゾル投与によるもののような、担体が投与のための液体である適切な製剤は、有効成分の水性または油性の溶液を含む。
【０３５１】
皮膚を介する局所の投与に適切な製剤は、軟膏、クリームおよびエマルジョンを含む。軟膏に処方される場合、有効成分は、任意にパラフィンのまたは水混和性の軟膏基材とともに用いることができる。代わりに、有効成分は、水中油型クリーム基材と共にクリーム中に処方することもできる。所望により、クリーム基材の水性相は、例えば少なくとも約30% w/wの多価アルコール、すなわちプロピレングリコール、ブタン-1,3-ジオール、マンニトール、ソルビトール、グリセロールおよびポリエチレングリコール、ならびにそれらの混液のような2以上のヒドロキシル基を有するアルコールを含み得る。局所の製剤は、望ましくは、皮膚またはその他の患部を介しての有効成分の吸収または浸透を高める化合物を含み得る。このような皮膚浸透エンハンサーは、ジメチルスルホキシドおよび対応するアナログを含む。
【０３５２】
局所のエマルジョンとして処方される場合、油相は、任意に乳化剤(他にはエマルゲンとして知られる)を単に含むか、または少なくとも1つの乳化剤と、脂肪もしくは油との、または脂肪と油の両方との混合物を含むことができる。好ましくは、親水性乳化剤を、安定剤として作用する親油性乳化剤とともに含む。油と脂肪との両方を含むのも好ましい。また、安定化剤を含むかまたは含まない乳化剤は、いわゆる乳化ワックスをつくり、油および／または脂肪を含むワックスは、いわゆる乳化軟膏基材をつくり、これはクリーム製剤の油性の分散相を形成する。
【０３５３】
適切なエマルゲンおよびエマルジョン安定化剤は、ツイーン60、スパン80、セトステアリールアルコール、ミリスチルアルコール、グリセリルモノステアレートおよびラウリル硫酸ナトリウムを含む。製剤用の適切な油または脂肪は、医薬のエマルジョン製剤に用いられそうなほとんどの油への有効成分の溶解性が非常に低いので、所望の表面的な特性を達成することに基づく。よって、クリームは、適切な粘稠度でチューブやその他の容器からの漏れを防ぎ、好ましくはべたつかず、汚れがつかず、そして洗浄可能な製品であるべきである。ジ-イソアジペート、イソセチルステアレート、ココナツ脂肪酸のプロピレングリコールジエステル、イソプロピルミリステート、デシルオレエート、イソプロピルパルミテート、ブチルステアレート、2-エチルヘキシルパルミテートまたはクロダモールCAPとして知られる分岐鎖エステルのブレンドのような直鎖または分岐鎖の1-もしくは2塩基性のアルキルエステルを用いることができ、最後の3つが好ましいエステルである。これらは、所望の特性により、単独または組み合わせて用いることができる。代わりに、ホワイトソフトパラフィンおよび／または流動パラフィン、または他のミネラルオイルのような高融点の脂質を用いることができる。
【０３５４】
直腸内投与に適切な製剤は、例えばカカオ脂またはサリチル酸塩を含む適切な基材を含む坐剤として提示される。
膣での投与に適切な製剤は、有効成分に加えて、当該技術で適切であると知られている担体を含む、膣坐剤、タンポン、クリーム、ゲル、パスタ剤、フォーム、または噴霧剤製剤として提示される。
【０３５５】
非経口の投与(例えば皮膚、皮下、筋肉内、静脈内および経皮を含む注射による)に適切な製剤は、抗酸化剤、緩衝剤、保存剤、安定化剤、静菌剤、および製剤を目的の受容者の血液と等張にする溶質を含み得る、水性および非水性で等張の発熱物質なしの滅菌注射用溶液；ならびに懸濁化剤および粘稠化剤を含み得る水性および非水性の滅菌懸濁液、ならびに血液成分もしくは1以上の器官へ化合物を目標とさせるように設計されたリポソームまたはその他の微粒子システムを含む。このような製剤での使用のための適切な等張の媒体の例は、生理食塩水注射、リンゲル液、または乳酸加リンゲル液を含む。一般的に、溶液中の有効成分の濃度は、約1 ng/ml〜約10μg/ml、例えば約10 ng/ml〜約1μg/mlである。製剤は、単回投与量または複数回投与量の密閉された容器、例えばアンプルおよびバイアルで提示されることができ、使用の直前に滅菌液体担体、例えば注射のための水の添加のみを必要とする、凍結乾燥状態で貯蔵されうる。即時注射溶液および懸濁液は、滅菌粉末、顆粒および錠剤から製造することができる。製剤は、血液成分もしくは1以上の器官へ有効成分を目標とさせるように設計されたリポソームまたはその他の微粒子システムの形態であり得る。
【０３５６】
投与量
有効成分、および有効成分を含む組成物の適切な投与量は、患者によって多様であり得ることが認識される。最適な投与量の決定は、通常、本発明の治療のいずれの危険性または有害な副作用に対する治療的な利益のレベルのバランスをとることに関与する。選択された投与量のレベルは、制限されないが、特定の化合物の活性、投与経路、投与の時間、化合物の排泄の速度、治療の期間、組み合わせて用いるその他の薬剤、化合物および／または物質、ならびに患者の年齢、性別、体重、症状、全身の健康状態、および以前の病歴を含む種々の要因に依存する。化合物の量および投与経路は、結局、医師の自由裁量であるが、一般に、投与量は、所望の効果を達成する、作用部位における局所の濃度を達成するものである。
【０３５７】
インビボでの投与は、治療の経過を通して、1回の投与、連続的または間欠的に行うことができる。最も効果的な投与の手段および投与量を決定する方法は、当業者に知られており、療法に用いる処方、療法の目的、治療される標的細胞、および治療される対象と共に変化する。単回または複数回の投与は、治療する医師により選択された投与レベルおよびパターンと共に行うことができる。
【０３５８】
一般に、有効成分の適切な投与量は、1日当たり、対象の体重1キログラム当たり約0.1〜約250 mgである。有効成分が塩、エステル、プロドラッグなどである場合、投与された量は、親となる化合物ベースで計算され、用いられる実際の重量は、比例して増える。
【０３５９】
キット
本発明のある観点は、(a) 好ましくは適切な容器内および／または適切な包装で提供される有効成分；(b) 使用のための説明、例えば有効成分をどのように投与するかについて記載された使用説明書を含むキットに関する。
記載された使用説明書は、有効成分が何に適切な治療であるかを明記したリストも含み得る。
【０３６０】
実施例
次の実施例は、本発明を説明するためだけに提供され、本明細書に記載のような本発明の範囲を限定しようとするものではない。いくつかの実施例は、市販の出典から購入した。質量分析データは、これらの実施例については上記の表に記載している。
【０３６１】
本発明の化合物の製造
一般的な方法  市販の出典から得たすべての試薬は、さらなる精製を行わずに用いた。無水の溶媒は、市販の出典から得てさらなる乾燥を行わずに用いた。フラッシュクロマトグラフィーは、シリカゲル60、0.015〜0.040 mm (MERCK)で行った。薄層クロマトグラフィーは、シリカゲル60 F254アルミニウムプレート(MERCK)上で行った。本発明の化合物は、supelco DISCOVERY C18 5cm×4.6mm内径、5μmカラム、グラジエントA：MeOH、C：0.1% H2O中のギ酸 [0分 10%A 90%C、0.5分 10%A 90%C、6.5分 90%A 10%C、10分 90%A 10%C、10.5分 10%A 90%C、12分 10%A 90%C]、流速1ml/分、エレクトロスプレーイオン化、スキャン 20〜850m/z、UV λ：254nmを用いるLC/MS、またはPhenomenex からのLuna 3μm、C18(2)、30mm×4.6mm内径のカラムを用い、温度22℃で次の溶媒：A - 水 + 酢酸アンモニウム10ミリモル + ギ酸0.08% (v/v)および B - アセトニトリル + ギ酸0.08% (v/v)、流速2mL/分を用いるHP1100装置により特性決定された。グラジエント：
【０３６２】
【表６】
2005517675.tif 000081
全取得時間は3.75分である。
検出：230nm、254nmおよび270nmでのUV検出
質量分析：HP1100 MSD、シリーズA
イオン化は、陽イオンエレクトロスプレーである。
分子量のスキャン範囲は120〜1000である。
【０３６３】
核磁気共鳴分光(NMR)を、Bruker 300または400MHz を用いて行い、重水素化溶媒中で記録した。
マイクロ波実験を、CEMディスカバーシンセシスユニットまたはSmithパーソナルシンセサイザーを用いて行った。これらの装置は、連続焦点マイクロ波送達システム(continuous focused microwave delivery system)を提供する。
CEMシステムについて、動力出力は0〜300 Wで変動し得る。反応は、隔壁で密閉されたガラス容器(約10 ml)内で行った。セプタムを貫通したゲージの針により圧力をモニターし、温度をガラス容器の底にある赤外線のプローブによりモニターした。すべての実験は、攪拌の選択のもとで行った。融点は、電熱装置で測定し、修正していない。すべての収率は、最適化していない。
【０３６４】
実施例
実施例49、61、62、63、68、70、71、153〜157のフェニル酢酸の製造
【化４５】
2005517675.tif 000082
2,3-ジヒドロ-ベンゾ[1,4]ジオキシン-6-イル)-酢酸
3,4-ジヒドロキシフェニル酢酸 (5.08g、30.2 mmol)および炭酸カリウム(12.5g、3.0当量) を、アセトン(80ml)および水(80ml)の混液中に溶解し、1,2-ジブロモエタン (3.4ml、1.3当量)を添加する前に1時間還流した。次いで、混合物を速く攪拌しながら36時間還流した。冷却後、アセトンを真空下に除去し、中性物をエーテル(1×50ml)で抽出した。水相を3M HClで酸性化し、EtOAc (40ml×3)で抽出し、最後の抽出は、水相をNaClで飽和した後に行った。EtOAc抽出物を合わせ、Na2SO4で乾燥し、溶媒を除去して茶色の粘性の油を得た。これを少量のDCMに溶解し、溶出溶媒として95/5 DCM/EtOH混液を用いるカラムクロマトグラフィーにより精製した。適切なフラクションから、オフホワイトの着色した粉末として2.8g (48%収率)を得た。
【０３６５】
δH (CDCl3), 8.86 (1H, ブロード, CO2H), 6.67 (3H, m, Ar-H), 4.16 (4H, s, O-CH2CH2-O), 3.45 (2H, s, CH2CO2H). LCMS tR = 5.38, MS m/z 193.3 [M-H]-.
【０３６６】
【化４６】
2005517675.tif 000083
[4-(3-シアノ-プロポキシ)-フェニル]-酢酸
4-ヒドロキシフェニル酢酸(3.5g、23mmol)および水酸化カリウム(3.9g、3.0当量)をMeOH (100ml)に溶解し、4-ブロモブチロニトリル(10g、3当量)を添加する前に1時間攪拌した。MeOH中のKOH (3.7g)をさらに添加する前に、混合物を一晩還流し、冷却する前にさらに1時間還流した。混合物を水(100ml)中に注ぎ、EtOAc (2×20ml)で洗浄し、5M HClを用いて酸性化した。得られた白色の沈殿物をろ去し、ろ液をDCM (2×30ml)で抽出した。DCM抽出物を合わせ、塩水で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、蒸発乾燥して、白色粉末として純粋な物質3.78g (75%収率)を得た。
【０３６７】
δH (CDCl3), 7.24 (2H, d, Ar-H), 6.86 (2H, d, Ar-H), 4.11 (2H, t, OCH2), 3.61 (2H, s, CH2CO2H), 2.60 (2H, t, CH2CN), 2.10 (2H, m, CH2 CH2CH2). LCMS tR = 5.54, MS m/z 218.2 [M-H]-, 220.3 [M+H]+.
【０３６８】
【化４７】
2005517675.tif 000084
[3-(3-シアノ-プロポキシ)-フェニル]-酢酸
3-ヒドロキシフェニル酢酸(0.74g、4.9mmol)および水酸化カリウム(0.76g、2.8当量)をMeOH (30ml)に溶解し、4-ブロモブチロニトリル(2.45g、3.4当量)を添加する前に1時間攪拌した。混合物を、MeOH中のKOH (4g)をさらに添加する前に一晩還流し、冷却する前にさらに1時間還流した。混合物を水(100ml)中に注ぎ、EtOAc (2×20ml)で抽出し、5M HClを用いて酸性化し、今回はDCM (2×30ml)を用いて再び抽出した。DCM抽出物を合わせ、塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムを用いて乾燥し、蒸発乾燥して、さらなる精製の必要がない白色粉末としての物質0.65g (61%収率)を得た。
【０３６９】
δH (CDCl3), 7.18 (1H, m, Ar-H), 6.76 (3H, m, Ar-H), 4.00 (2H, t, OCH2), 3.55 (2H, s, CH2CO2H), 2.51 (2H, t, CH2CN), 2.06 (2H, m, CH2 CH2CH2).
【０３７０】
【化４８】
2005517675.tif 000085
[2-(3-シアノ-プロポキシ)-フェニル]-酢酸
2-ヒドロキシフェニル酢酸(2.48g、16.8 mmol)を用いた以外は、上記と同じ方法を用いた。DCM抽出物から、淡黄色の着色した油としての物質0.19g (18%)を得た。
【０３７１】
δH (CDCl3), 7.18 (2H, m, Ar-H), 6.85 (2H, m, Ar-H), 4.03 (2H, t, OCH2), 3.58 (2H, s, CH2CO2H), 2.51 (2H, t, CH2CN), 2.05 (2H, m, CH2 CH2CH2).
【０３７２】
【化４９】
2005517675.tif 000086
[4-(4-シアノ-ブトキシ)-フェニル]-酢酸
4-ヒドロキシフェニル酢酸(1.0g、6.6 mmol)、水酸化カリウム(0.77g、2.1当量)および5-ブロモバレロニトリル(3.0ml、3.8当量)を用いた以外は、上記と同じ方法を用いた。DCM抽出物から、明白色の結晶粉末としての物質1.18g (77%)を得た。
【０３７３】
δH (CDCl3), 7.23 (2H, d, Ar-H), 6.86 (2H, d, Ar-H), 4.02 (2H, t, OCH2), 3.61 (2H, s, CH2CO2H), 2.47 (2H, t, CH2CN), 1.94 (2H, m, CH2 CH2CH2) 1.78 (2H, m, CH2 CH2CH2). LCMS tR = 6.04, MS m/z 232.1 [M-H]-.
【０３７４】
【化５０】
2005517675.tif 000087
[3-(4-シアノ-ブトキシ)-フェニル]-酢酸
3-ヒドロキシフェニル酢酸(1.0g、6.6 mmol)、水酸化カリウム(0.77g、2.1当量)および5-ブロモバレロニトリル(0.79ml、1当量)を用いた以外は、上記と同じ方法を用いた。DCM抽出物から、明白色の結晶粉末としての物質0.98g (63%)を得た。
【０３７５】
δH (CDCl3), 7.17 (1H, m, Ar-H), 6.75 (3H, m, Ar-H), 3.93 (2H, t, OCH2), 3.54 (2H, s, CH2CO2H), 2.37 (2H, t, CH2CN), 1.84 (4H, m, CH2 CH2CH2). LCMS tR = 5.98, MS m/z 232.1 [M-H]-.
【０３７６】
【化５１】
2005517675.tif 000088
[3,4-ビス-(3-シアノ-プロポキシ)-フェニル]-酢酸
3,4-ジヒドロキシフェニル酢酸(2.4g、14mmol)および炭酸カリウム(5.9g、3.3当量)を1:1 アセトン/水溶媒混液に溶解し、4-ブロモブチロニトリル(4.9g、2.3当量)を添加する前に1時間還流し、混合物を激しく攪拌しながら、さらに35時間還流した。冷却後、アセトンを真空下の蒸発により乾燥し、さらに水(20ml)を添加した。溶液をエーテル(2×20ml)で洗浄し、5M HClを用いて酸性化し、EtOAc (2×25ml)で抽出した。水相を固体のNaClで飽和し、再びEtOAc (20ml)で抽出した。これらの抽出物を合わせ、塩水で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、そして蒸発乾燥して、残渣を、溶出溶媒としてDCM:EtOH (95/5)混液を用いるカラムクロマトグラフィーにより精製した。適切なフラクションから、白色結晶固体としての物質2.35g (54%収率)を得た。
【０３７７】
δH (CDCl3), 6.78 (3H, s, Ar-H), 4.03 (4H, t, OCH2), 3.51 (2H, s, CH2CO2H), 2.54 (4H, t, CH2CN), 2.11 (4H, m, CH2 CH2CH2). LCMS tR = 5.42, MS m/z 301.0 [M-H]-.
【０３７８】
【化５２】
2005517675.tif 000089
(4'-フルオロ-ビフェニル-4-イル)-酢酸 (Gala, D.、Stamford, A.、Jenkins, J. およびKugelman M.、Org. Proc. Res. & Dev、1997、1、163〜164から改変)
カーボン上の5%パラジウム (0.16g)を攪拌した溶液に添加する前に、4-ブロモフェニル酢酸 (0.7g、3.3mmol)および4-フルオロホウ素酸(0.5g、1.1当量)を、EtOH (2ml)およびH2O (5ml)の混液に溶解した(少し多くのEtOHを、酸の溶解を助けるために添加し得る)。炭酸ナトリウム(0.4g、1.3当量)を、最小限の量の水に溶解し、反応混合物に添加し、これを次いでマグネティックスターラーバーが入ったマイクロ波リアクターチューブに、等しい量に分けて密閉した。これらを激しく攪拌しながら15Wの動力を用いて加熱し、65℃で25分間保持した。冷却後、2つの溶液を合わせ、ろ過し、チューブおよび固体をEtOH/0.1M NaOH の1:1混液で洗浄した。ろ液の揮発性の成分を蒸発して除き、残った水溶液を酸性化すると沈殿が形成された。これをろ過し、少量の水で洗浄し、P2O5の存在下で真空下に乾燥して、白色粉末としての物質0.59g (79%収率)を得た。
【０３７９】
δH (d6-DMSO), 7.69 (2H, m, Ar-H), 7.55 (2H, d, Ar-H), 7.27 (4H, m, Ar-H), 3.56 (2H, s, CH2CO2H). LCMS tR = 7.43, MS m/z 228.8 [M-H]-.
【０３８０】
【化５３】
2005517675.tif 000090
(4'-フルオロ-ビフェニル-3-イル)-酢酸
3-ブロモフェニル酢酸(0.5g、2.3mmol)を用いて、先の反応で記載した方法を行い、白色結晶として0.42g (78%収率)を得た。
δH (d6-DMSO), 7.67 (2H, m, Ar-H), 7.49 (2H, m, Ar-H), 7.33 (4H, m, Ar-H), 3.56 (2H, s, CH2CO2H). LCMS tR = 7.37, MS m/z 229.1 [M-H]-.
【０３８１】
【化５４】
2005517675.tif 000091
(3',4'-ジメトキシ-ビフェニル-4-イル)-酢酸
4-ブロモフェニル酢酸(0.5g、2.3mmol)および3,4-ジメトキシフェニルホウ素酸(0.55g、1.3当量)を用いて上記のような方法を行い、白色粉末として0.47g (74%収率)を得た。
δH (d6-DMSO), 7.57 (2H, d, Ar-H), 7.31 (2H, d, Ar-H), 7.16 (2H, d, Ar-H), 7.02 (1H, d, Ar-H), 3.84 (3H, s, OCH3),  3.79 (3H, s, OCH3), 3.58 (2H, s, CH2CO2H). LCMS tR = 6.83, MS m/z 270.9 [M-H]-.
【０３８２】
【化５５】
2005517675.tif 000092
(3',4'-ジメトキシ-ビフェニル-3-イル)-酢酸
3-ブロモフェニル酢酸(0.5g、2.3mmol)を用いて上記のような方法を行い、白色粉末として0.29g (45%収率)を得た。
δH (d6-DMSO), 7.51 (2H, d, Ar-H), 7.34 (1H, t, Ar-H), 7.15 (3H, m, Ar-H), 7.00 (1H, m, Ar-H), 3.84 (3H, s, OCH3),  3.79 (3H, s, OCH3), 3.58 (2H, s, CH2CO2H). LCMS tR = 6.83, MS m/z 271.0 [M-H]-.
【０３８３】
【化５６】
2005517675.tif 000093
(3'-エトキシ-ビフェニル-4-イル)-酢酸
4-ブロモフェニル酢酸(0.6g、2.8mmol)および3-エトキシフェニルホウ素酸(0.51g、1.1当量)を用いて上記のような方法を行い、白色粉末として0.47g (66%収率)を得た。
δH (d6-DMSO), 7.59 (2H, d, Ar-H), 7.33 (2H, d, Ar-H), 7.17 (2H, m, Ar-H), 6.90 (1H, m, Ar-H), 4.08 (2H, q, CH3CH2), 3.58 (2H, s, CH2CO2H), 1.35 (3H, t, CH3CH2).
【０３８４】
【化５７】
2005517675.tif 000094
[3-(2-フルオロ-エトキシ)-フェニル]-酢酸
3-ヒドロキシフェニル酢酸(1.0g、6.6mmol)および1-ブロモ-2-フルオロエタン(1.1mL、2.3当量)を用いて上記のような方法を行い、白色粉末として0.61g (47%収率)を得た。
δH (d6-アセトン), 10.76 (1H, s ブロード, CO2H), 7.27 (1H, t, Ar-H), 6.90 (3H, m, Ar-H), 4.76 (2H, 2t, J =  4Hz, JH-F = 48 Hz, CH2CH2F ), 4.27 (2H, 2t, J =  4Hz, JH-F = 26 Hz, CH2CH2F), 3.63 (2H, s, CH2CO2H). LCMS tR = 5.37, MS m/z (親イオンは観察されなかった).
【０３８５】
以下の反応はスキーム10に関する：実施例49、53〜63、69、70、73、78、79のジヒドロキシフェニルケトンの一般的な合成
1-(2,4-ジヒドロキシ-フェニル)-2-フェニル-エタノンの合成
【化５８】
2005517675.tif 000095
フェニル酢酸(0.82g、6mmol)、レゾルシノール(0.66g、6mmol)および三フッ化ホウ素エーテル錯体(4ml、33mmol)を一緒に混合し、アルゴン下に80℃に加熱した。次いで、混合物を10% NaOAc (100ml)に注ぎ、2時間放置した後に茶色の固体の沈殿物が形成された。これをフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、白色固体としての所望の化合物を得た(1.19g、87%)；Rf 0.5 ヘキサン/ 酢酸エチル(70/30)。
ν(max) (フィルム) cm-1 : 3349 (OH), 1700 (C=O). δH (DMSO) : 10.71 (1H, s, OH), 8.26 (2H, d, J=8Hz, ArH), 7.27 (5H, m, ArH), 6.42 (1H, dd, ArH), 6.27 (1H, s, ArH), 4.29 (2H, s, CH2). LCMS tR 6.98, m/z 227 [M-H]-.
【０３８６】
1-(5-クロロ-2,4-ジヒドロキシ-フェニル)-2-フェニル-エタノンの合成
【化５９】
2005517675.tif 000096
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。フェニル酢酸(4.71g、34.6mmol)、4-クロロレゾルシノール(5g、34.6mmol)、三フッ化ホウ素エーテル錯体(30ml)。2時間放置した後にオレンジ色の沈殿物が形成された。これをフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、白色固体としての所望の化合物を得た(7.2g、79.3%)；Rf 0.9 ヘキサン/ 酢酸エチル(20/80)]。
δH (DMSO) : 8.01 (1H, s, ArH), 7.28 (5H, m, ArH), 6.47 (1H, s, ArH), 4.33 (2H, s, CH2). δc (DMSO) : 201.6 (C=O), 162.8, 160.6, 135.3, 132.5, 129.8, 128.7, 126.9, 113.3, 112.1, 104.1 (CAr), 44.8 (CH2). LCMS tR 7.55, m/z 261 [M-H]-.
【０３８７】
2-(4-ブロモ-フェニル)-1-(5-クロロ-2,4-ジヒドロキシ-フェニル)-エタノンの合成
【化６０】
2005517675.tif 000097
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。4-ブロモフェニル酢酸(7.44g、34.6mmol)、4-クロロレゾルシノール(5g、34.6mmol)、三フッ化ホウ素エーテル錯体(30ml)。2時間放置した後にオレンジ色の沈殿物が形成された。これをフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、オフホワイト色の固体としての所望の化合物を得た(10.5g、89%)；Rf 0.9 ヘキサン/ 酢酸エチル(20/80)。
δH (DMSO) : 8.01 (1H, s, ArH), 7.49 (2H, d, J=8Hz, ArH), 7.22 (2H, d, J=8Hz, ArH), 6.45 (1H, s, ArH), 4.29 (2H, s, CH2). δc (CDCl3) : 200.9 (C=O), 162.5, 160.3, 134.7, 132.4, 132.0, 131.4, 120.2, 113.6, 112.0, 104.1 (CAr), 44.3 (CH2). LCMS tR 8.12, m/z 339/341/343 [M-H]-.
【０３８８】
2-(2-ブロモ-フェニル)-1-(5-クロロ-2,4-ジヒドロキシ-フェニル)-エタノンの合成
【化６１】
2005517675.tif 000098
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。2-ブロモフェニル酢酸(5g、23.3mmol)、4-クロロレゾルシノール(3.36g、23.3mmol)、三フッ化ホウ素エーテル錯体(20ml)。2時間放置した後に茶色の沈殿物が形成された(7.4g、93.3%)；Rf 0.4 ヘキサン/ 酢酸エチル(70/30)。これは、所望の物質であることが示された。
LCMS tR 7.92, m/z 339/341 [M-H]-.
【０３８９】
1-(5-クロロ-2,4-ジヒドロキシ-フェニル)-2-(2,3-ジヒドロ-ベンゾ[1,4]ジオキシン-6-イル)-エタノンの合成
【化６２】
2005517675.tif 000099
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。(2,3-ジヒドロ-ベンゾ[1,4]ジオキシン-6-イル)-酢酸 (0.3g、1.55mmol)、4-クロロレゾルシノール(0.22g、1.55mmol)、三フッ化ホウ素エーテル錯体(3ml)。2時間放置した後に沈殿物が形成され、これをろ過し、洗浄(水)し、乾燥して、白色固体としての1-(5-クロロ-2,4-ジヒドロキシ-フェニル)-2-(2,3-ジヒドロ-ベンゾ[1,4]ジオキシン-6-イル)-エタノンを得た(0.34g、68.3%)；Rf 0.9 ヘキサン/ 酢酸エチル(20/80)。
δH (DMSO) : 8.02 (1H, s, ArH), 6.80 (3H, m, ArH), 6.01 (1H, s, ArH), 4.20 (4H, s, (CH2)2), 4.00 (2H, s, CH2). δc (CDCl3) : 198.7 (C=O), 173.0, 168.8, 164.6, 143.4, 131.3, 129.2, 122.3, 118.1, 117.2, 115.8, 108.3, 104.0 (CAr), 64.3, 43.1, 22.1. LCMS tR 7.46, m/z 319/321 [M-H]-.
【０３９０】
2-(2,3-ジヒドロ-ベンゾ[1,4]ジオキシン-6-イル)-1-(5-エチル-2,4-ジヒドロキシ-フェニル)-エタノンの合成
【化６３】
2005517675.tif 000100
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。(2,3-ジヒドロ-ベンゾ[1,4]ジオキシン-6-イル)-酢酸(1.0g、5.15mmol)、エチルレゾルシノール(0.71g、5.15mmol)、三フッ化ホウ素エーテル錯体(6ml)。2時間放置した後に油を分離した。これを酢酸エチル中に抽出し、洗浄(水)し、乾燥(MgSO4)し、溶媒を除去して粘性のオレンジ色の固体を得た。LC-MSは、これが主要な成分として2-(2,3-ジヒドロ-ベンゾ[1,4]ジオキシン-6-イル)-1-(5-エチル-2,4-ジヒドロキシ-フェニル)-エタノンを含むことを示した。この物質を、さらなる精製を行わずに次の段階に用いた。
LCMS tR 7.69, m/z 313/315 [M-H]-.
【０３９１】
4-[4-[2-(5-クロロ-2,4-ジヒドロキシ-フェニル)-2-オキソ-エチル]-フェノキシ]-ブチロニトリルの合成
【化６４】
2005517675.tif 000101
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。[4-(3-シアノ-プロポキシ)-フェニル]-酢酸(0.5g、2.28mmol)、4-クロロレゾルシノール(0.33g、2.28mmol)、三フッ化ホウ素エーテル錯体(5ml)。2時間放置した後に沈殿物が形成され、これをろ過し、洗浄(水)し、乾燥して、白色固体として4-[4-[2-(5-クロロ-2,4-ジヒドロキシ-フェニル)-2-オキソ-エチル]-フェノキシ]-ブチロニトリル(0.62g、78.7%)を得た；Rf 0.6 ヘキサン/ 酢酸エチル(20/80)。
LCMS tR 7.24, m/z 344/346 [M-H]-.
【０３９２】
次の反応は、スキーム11に関する。実施例49、59、69、70の7-ヒドロキシ-2-メチル-3-フェニル-クロメン-4-オンの一般的な合成
7-ヒドロキシ-2-メチル-3-フェニル-クロメン-4-オンの合成
【化６５】
2005517675.tif 000102
1-(2,4-ジヒドロキシ-フェニル)-2-フェニル-エタノン (0.5g、3.2mmol)を、無水DMFと無水酢酸(1.5ml)、および無水炭酸カリウム(1.4g、10.1mmol)中で3時間還流した。次いで、溶液を水に注ぎ、沈殿をろ過して、白色固体としての7-ヒドロキシ-2-メチル-3-フェニル-クロメン-4-オン(0.62g、66%)を得た；Rf 0.75 cf SM 0.9 酢酸エチル/ ヘキサン(75/25)。
【０３９３】
δH (DMSO) : 10.72 (1H, s, OH), 7.88 (1H, d, J=9Hz, ArH),  7.37 (3H, m, ArH), 7.27 (2H, m, ArH), 6.92 (1H, d, J=9Hz, ArH), 6.73 (1H, s, ArH), 2.22 (3H, s, CH3). δc (DMSO) : 175.1 (C=O), 162.9, 162.8, 157.4, 133.8, 130.9, 128.3, 127.7, 127.4, 122.5, 115.9, 115.1, 102.3 (不飽和),  19.5 (CH3). LCMS tR 7.02, MS m/z 295 [M+H]+.
【０３９４】
6-クロロ-7-ヒドロキシ-2-メチル-3-フェニル-クロメン-4-オンの合成
【化６６】
2005517675.tif 000103
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。1-(5-クロロ-2,4-ジヒドロキシ-フェニル)-2-フェニル-エタノン(1.5g、5.7mmol)、無水酢酸(2.0ml)、炭酸カリウム(2.1g 15.2mmol)。6-クロロ-7-ヒドロキシ-2-メチル-3-フェニル-クロメン-4-オンを、白色固体として得た(1.4g、85.8%)。
LCMS tR 7.26, MS m/z 287 [M+H]+.
【０３９５】
3-(4-ブロモ-フェニル)-6-クロロ-7-ヒドロキシ-2-メチル-クロメン-4-オンの合成
【化６７】
2005517675.tif 000104
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。2-(4-ブロモ-フェニル)-1-(5-クロロ-2,4-ジヒドロキシ-フェニル)-エタノン(1.5g、4.4mmol)、無水酢酸(2.0ml)、炭酸カリウム(2.1g 15.2mmol)。3-(4-ブロモ-フェニル)-6-クロロ-7-ヒドロキシ-2-メチル-クロメン-4-オンを、オフホワイト色の固体として得た(1.2g、74.5%)。
LCMS tR 7.88, MS m/z 365 [M-H]-.
【０３９６】
3-(2-ブロモ-フェニル)-6-クロロ-7-ヒドロキシ-2-メチル-クロメン-4-オンの合成
【化６８】
2005517675.tif 000105
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。2-(2-ブロモ-フェニル)-1-(5-クロロ-2,4-ジヒドロキシ-フェニル)-エタノン(2.0g、5.88mmol)、無水酢酸(2.0ml)、炭酸カリウム(2.5g 18.1mmol)。形成された白色の固体は、所望の化合物を含むことが示され、直接次の段階に用いた。
LCMS tR 7.51, MS m/z 365/367/369 [M+H]+.
【０３９７】
6-クロロ-3-(2,3-ジヒドロ-ベンゾ[1,4]ジオキシン-6-イル)-7-ヒドロキシ-2-メチル-クロメン-4-オン
【化６９】
2005517675.tif 000106
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。1-(5-クロロ-2,4-ジヒドロキシ-フェニル)-2-(2,3-ジヒドロ-ベンゾ[1,4]ジオキシン-6-イル)-エタノン(1.1.2.5) (0.3g、0.9mmol)、無水酢酸(0.5ml)、炭酸カリウム(0.5g 3.6mmol)。6-クロロ-3-(2,3-ジヒドロ-ベンゾ[1,4]ジオキシン-6-イル)-7-ヒドロキシ-2-メチル-クロメン-4-オンを、オフホワイト色の固体として得た(0.3g、96.8%)。
LCMS tR 7.16, MS m/z 343 [M-H]-.
【０３９８】
3-(2,3-ジヒドロ-ベンゾ[1,4]ジオキシン-6-イル)-6-エチル-7-ヒドロキシ-2-メチル-クロメン-4-オン
【化７０】
2005517675.tif 000107
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。2-(2,3-ジヒドロ-ベンゾ[1,4]ジオキシン-6-イル)-1-(5-エチル-2,4-ジヒドロキシ-フェニル)-エタノン(1.0g、3.2mmol)、無水酢酸(2.0ml)、炭酸カリウム(2.1g、15.2mmol)。LCMS により、3-(2,3-ジヒドロ-ベンゾ[1,4]ジオキシン-6-イル)-6-エチル-7-ヒドロキシ-2-メチル-クロメン-4-オンが油の物質中に存在することが示された、Rf 0.8 酢酸エチル/ ヘキサン(70/30)。該物質を、さらなる精製を行わずに次の段階に用いた。
LCMS tR 7.41, m/z 337/339 [M-H]-
【０３９９】
4-[4-(6-クロロ-7-ヒドロキシ-2-メチル-4-オキソ-4H-クロメン-3-イル)-フェノキシ]-ブチロニトリル
【化７１】
2005517675.tif 000108
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。4-[4-[2-(5-クロロ-2,4-ジヒドロキシ-フェニル)-2-オキソ-エチル]-フェノキシ]-ブチロニトリル(0.62g、1.8mmol)、無水酢酸(1.0ml)、炭酸カリウム(1g、7.2mmol). 4-[4-(6-クロロ-7-ヒドロキシ-2-メチル-4-オキソ-4H-クロメン-3-イル)-フェノキシ]-ブチロニトリルを、白色固体として得た(0.55g、82.7%) Rf 0.6 酢酸エチル/ ヘキサン(70/30)。
LCMS  tR 7.07, m/z 368/371 [M+H]+.
【０４００】
次の反応は、スキーム12に関する。実施例50〜57、60、62、63、65〜68、72〜74、77、79、153〜157のイソフラボンのワンポット合成
7-ヒドロキシ-3-フェニル-クロメン-4-オンの合成
【化７２】
2005517675.tif 000109
レゾルシノール(0.66g、6mmol)、フェニル酢酸(0.816g、6mmol)、および三フッ化ホウ素ジエチルエーテル錯体(5ml)を、85℃に90分間加熱した。この時間後、反応を冷却し、DMF (4ml)を添加した。第一段階の完了の30分前に、PCl5 (1.878g、9mmol)を冷DMF (8ml)に添加し、混合物を20分間加熱した(60℃)。これを第一段階からの溶液に添加し、そして合わせた溶液を室温で1時間攪拌することを許容した。次いで、反応混合物を1M HCl (100ml)に注いだ。形成された沈殿物をろ過し、メタノールから再結晶させて、白色固体として7-ヒドロキシ-3-フェニル-クロメン-4-オンを得た(1.3g、91.0%)；Rf 0.25 酢酸エチル/ ヘキサン(30/70)]。
【０４０１】
ν(max) (フィルム) cm-1 : 3195 (OH), 1621 (C=O). δH (DMSO) : 10.84 (1H, s, OH), 8.37 (1H, s, =CH), 8.0 (1H, d, J=8Hz, ArH), 7.55 (2H, m, ArH), 7.39 (3H, m, ArH), 6.94 (1H, d, J=8Hz, ArH), 6.63 (1H, s, ArH). δc (CDCl3) : 174.7 (C=O), 163.0, 157.8, 154.1, 132.5, 129.3, 128.4, 128.1, 127.7, 123.9, 117.0, 115.6, 102.5. LCMS tR 6.94, MS m/z 239 [M+H]+.
【０４０２】
3-(4-ブロモ-フェニル)-7-ヒドロキシ-クロメン-4-オンの合成
【化７３】
2005517675.tif 000110
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。レゾルシノール(0.66g、6mmol)、4-ブロモフェニル酢酸(1.29g、6mmol)、BF3Et2O (4ml)、PCl5 (1.9g、9.1mmol)、DMF (5mlおよび10ml)。形成された沈殿物をろ過し、メタノールから再結晶させて、白色の結晶固体として3-(4-ブロモ-フェニル)-7-ヒドロキシ-クロメン-4-オンを得た(1.1g、57.8%)；Rf 0.85 酢酸エチル。
【０４０３】
δH (DMSO) : 10.84 (1H, s, OH), 8.43 (1H, s, =CH), 7.97 (1H, d, J=8Hz, ArH), 7.58 (4H, m, ArH), 6.97 (1H, d, J=8Hz, ArH), 6.88 (1H, s, ArH). δc (DMSO): 174.5 (C=O), 163.1, 157.8, 154.4, 131.7, 131.4, 131.3, 127.7, 122.7, 121.4, 116.9, 115.7, 102.6. LCMS tR 7.63, MS m/z 317 [M+H]+.
【０４０４】
3-(3,4-ジメトキシ-フェニル)-7-ヒドロキシ-クロメン-4-オンの合成
【化７４】
2005517675.tif 000111
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。レゾルシノール(0.66g、6mmol)、3,4-ジメトキシ-フェニル酢酸(1.18g、6mmol)、BF3Et2O (4ml)、PCl5 (1.9g、9.1mmol)、DMF (5mlおよび10ml)。形成された沈殿物をろ過し、メタノールから再結晶させて、薄いオレンジ色の固体として3-(3,4-ジメトキシ-フェニル)-7-ヒドロキシ-クロメン-4-オンを得た(1.43g、80%)；Rf 0.9 酢酸エチル/ ヘキサン(75/25)。
【０４０５】
δH (DMSO) : 10.78 (1H, s, OH), 8.56 (1H, s, =CH), 7.99 (1H, d, J=9Hz, ArH), 7.00 (5H, m, ArH), 3.78 (6H, s, 2xCH3). δc (DMSO): 174.9 (C=O), 162.9, 157.7, 153.7, 148.6, 149.0, 127.6, 124.9, 123.6, 121.6, 117.0, 115.5, 113.2, 111.9, 102.5 (不飽和), 55.9 (CH3). LCMS tR 6.51, MS m/z 299 [M+H]+.
【０４０６】
6-エチル-7-ヒドロキシ-3-フェニル-クロメン-4-オンの合成
【化７５】
2005517675.tif 000112
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。エチル レゾルシノール(0.83g、6mmol)、フェニル酢酸(0.82g、6mmol)、BF3Et2O (3.88ml、31.5mmol)、PCl5 (1.88g、9mmol)、DMF (4.6ml and 10ml)。形成された沈殿物をろ過し、メタノールから再結晶させて、薄い茶色の固体として6-エチル-7-ヒドロキシ-3-フェニル-クロメン-4-オンを得た(1.4g、87.7%)；Rf 0.4 cf SM 0.5 酢酸エチル/ ヘキサン(40/60)。
【０４０７】
δH (DMSO) : 10.84 (1H, s, OH), 8.35 (1H, s, =CH), 7.97 (1H, s, ArH), 7.54 (2H, m, ArH), 7.40 (3H, m, ArH), 6.90 (1H, s, ArH), 2.50 (2H, q, J=7Hz, CH2), 1.18 (3H, t, J=7Hz, CH3). δc (DMSO) : 174.7 (C=O), 161.0, 156.1, 153.9, 132.7, 130.5, 129.3, 128.4, 128.0, 125.3, 123.8, 116.7, 101.8 (不飽和炭素), 22.7 (CH2), 14.1 (CH3). LCMS tR 7.48, MS m/z 267 [M+H]+.
【０４０８】
3-(4-ブロモ-フェニル)-6-エチル-7-ヒドロキシ-クロメン-4-オンの合成
【化７６】
2005517675.tif 000113
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。エチル レゾルシノール(0.83g、6mmol)、4-ブロモフェニル酢酸(1.29g、6mmol)、BF3Et2O (5ml)、PCl5 (1.9g、9.1mmol)、DMF (5mlおよび10ml)。形成された沈殿物をろ過し、メタノールから再結晶させて、薄いピンク色の固体として3-(4-ブロモ-フェニル)-6-エチル-7-ヒドロキシ-クロメン-4-オンを得た(1.7g、82.3%)；Rf 0.84 酢酸エチル。
【０４０９】
δH (DMSO) : 10.76 (1H, s, OH), 8.30 (1H, s, =CH), 7.73 (1H, s, ArH), 7.52 (4H, m, ArH), 6.80 (1H, s, ArH), 2.53 (2H, q, J=7Hz, CH2), 1.09 (3H, t, J=7Hz, CH3). δc (DMSO): 174.4 (C=O), 161.1, 156.1, 154.1, 131.9, 131.4, 131.3, 130.7, 125.3, 122.6, 121.3, 116.6, 101.8, (不飽和炭素), 22.7 (CH2), 14.1 (CH3). LCMS tR 8.16, MS m/z 347 [M+H]+.
【０４１０】
3-(3,4-ジメトキシ-フェニル)-6-エチル-7-ヒドロキシ-クロメン-4-オンの合成
【化７７】
2005517675.tif 000114
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。エチル レゾルシノール(0.83g、6mmol)、3,4-ジメトキシフェニル酢酸(0.83g、6mmol)、BF3Et2O (4ml)、PCl5 (1.9g、9.1mmol)、DMF (5mlおよび10ml)。形成された沈殿物をろ過し、メタノールから再結晶させて、薄い茶色の固体として3-(3,4-ジメトキシ-フェニル)-6-エチル-7-ヒドロキシ-クロメン-4-オンを得た(1.8g、92%)；Rf 0.4 cf SM 0.5 エーテル/ 石油エーテル [40〜60℃] (50/50)。
【０４１１】
δH (DMSO) : 10.70 (1H, s, OH), 8.42 (1H, s, =CH), 7.73 (1H, s, ArH), 7.10 (1H, s, ArH), 6.91 (1H, d, J=8Hz, ArH), 6.83 (1H, d, J=8Hz, ArH), 6.70 (1H, s, ArH), 3.69 (6H, s, OCH3), 2.50 (2H, q, J=7Hz, CH2), 1.07 (3H, t, J=7Hz, CH3). δc (DMSO): 174.9 (C=O), 160.0, 156.0, 153.4, 148.9, 148.6, 130.4, 125.2, 125.1, 123.5, 121.5, 116.7, 113.2, 111.9, 101.7, (不飽和炭素), 55.9 (OCH3), 22.7 (CH2), 14.1 (CH3). LCMS tR 7.14, MS m/z 327 [M+H]+.
【０４１２】
6-クロロ-7-ヒドロキシ-3-フェニル-クロメン-4-オンの合成
【化７８】
2005517675.tif 000115
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。クロロレゾルシノール(0.87g、6mmol)、フェニル酢酸(0.82g、6mmol)、BF3Et2O (4ml)、PCl5 (1.9g、9.1mmol)、DMF (5mlおよび10ml)。形成されたピンク色の固体をろ過し、メタノールから再結晶させて、微細な薄いピンク色の結晶として6-クロロ-7-ヒドロキシ-3-フェニル-クロメン-4-オンを得た(1.4g、85%)；Rf 0.6 酢酸エチル/ ヘキサン(75/25)。
【０４１３】
δH (DMSO) : 8.33 (1H, s, =CH), 7.98 (1H, s, ArH), 7.54 (2H, m, ArH), 7.43 (3H, m, ArH), 7.07 (1H, s, ArH). δc (DMSO): 173.9 (C=O), 158.3, 155.9, 154.5, 132.1, 129.3, 128.5, 128.2, 126.5, 123.8, 120.1, 117.5, 104.0. LCMS tR 7.25, MS m/z 273 [M+H]+.
【０４１４】
3-(4-ブロモ-フェニル)-6-クロロ-7-ヒドロキシ-クロメン-4-オンの合成
【化７９】
2005517675.tif 000116
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。4-クロロレゾルシノール(0.87g、6mmol)、4-ブロモフェニル酢酸(1.29g、6mmol)、BF3Et2O (4ml)、PCl5 (1.9g、9.1mmol)、DMF (5mlおよび10ml)。形成された沈殿物をろ過し、メタノールから再結晶させて、薄片状の白色固体として3-(4-ブロモ-フェニル)-6-クロロ-7-ヒドロキシ-クロメン-4-オンを得た(1.2g、56.8%)；Rf 0.81 酢酸エチル。
【０４１５】
δH (DMSO) : 8.47 (1H, s, =CH), 8.00 (1H, s, ArH), 7.60 (4H, dd, ArH), 7.07 (1H, s, ArH), δc (DMSO): 174.1 (C=O), 158.4, 155.9, 154.7, 131.4, 131.4, 131.3, 126.5, 122.7, 121.5, 120.2, 117.3, 104.0 (不飽和). LCMS tR 8.02, MS m/z 351/353 [M+H]+.
【０４１６】
6-クロロ-3-(3,4-ジメトキシ-フェニル)-7-ヒドロキシ-クロメン-4-オンの合成
【化８０】
2005517675.tif 000117
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。4-クロロレゾルシノール(0.87g、6mmol)、3,4-ジメトキシ-フェニル酢酸(1.18g、6mmol)、BF3Et2O (4ml)、PCl5 (1.9g、9.1mmol)、DMF (5mlおよび10ml)。形成された沈殿物をろ過し、メタノールから再結晶させて、オフホワイト色の固体として6-クロロ-3-(3,4-ジメトキシ-フェニル)-7-ヒドロキシ-クロメン-4-オンを得た(1.4g、70.20%)；Rf 0.72 酢酸エチル。
【０４１７】
δH (DMSO) : 8.78 (1H, s, =CH), 7.99 (1H, s, ArH), 7.00 (4H, m, ArH), 3.78 (6H, s, 2xCH3). δc (DMSO): 174.1 (C=O), 158.21, 155.86, 154.0, 149.0, 148.7, 126.5, 124.5, 123.5, 121.6, 120.0, 117.4, 113.1, 111.9, 103.9 (不飽和), 55.9 (CH3). LCMS tR 6.91, MS m/z 333 [M+H]+.
【０４１８】
6-クロロ-3-(2,3-ジヒドロ-ベンゾ[1,4]ジオキシン-6-イル)-7-ヒドロキシ-クロメン-4-オンの合成
【化８１】
2005517675.tif 000118
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。クロロレゾルシノール(0.075g、0.52mmol)、2,3-ジヒドロ-ベンゾ[1,4]ジオキシン-6-イル)酢酸 (0.1g、0.52mmol)、BF3Et2O (4ml)、PCl5 (0.16g、0.77mmol)、DMF (5mlおよび8ml)。冷却した溶液を酢酸エチル(2×30ml)中に抽出し、洗浄(2×50mlの水)し、乾燥(MgSO4)し、そして溶媒を除去して粗生成物を得て、これをカラムクロマトグラフィーにより精製して、粉末状の白色固体として6-クロロ-3-(2,3-ジヒドロ-ベンゾ[1,4]ジオキシン-6-イル)-7-ヒドロキシ-クロメン-4-オンを得た(0.1g、58%)；Rf 0.8 cf SMs 0.85、0.82 酢酸エチル/ ヘキサン(75/25)。
【０４１９】
δH (DMSO) : 8.40 (1H, s, =CH), 8.05 (1H, s, ArH), 7.10 (4H, m, ArH), 6.89 (1H, d, J= 8Hz, ArH), 4.32 (4H, s, CH2CH2). LCMS tR 7.20, MS m/z 331/333 [M+H]+.
【０４２０】
3-(2-ブロモ-フェニル)-6-クロロ-7-ヒドロキシ-クロメン-4-オンの合成
【化８２】
2005517675.tif 000119
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。4-クロロレゾルシノール(2.0g、13.8mmol)、2-ブロモフェニル酢酸(2.98g、13.8mmol)、BF3Et2O (8ml)、PCl5 (4.3g、20.6mmol)、DMF (8mlおよび12ml)。形成された沈殿物をろ過し、メタノールから再結晶させて、白色固体としての3-(2-ブロモ-フェニル)-6-クロロ-7-ヒドロキシ-クロメン-4-オンを得た(1.9g、39.1%)；Rf 0.85 酢酸エチル/ ヘキサン(75/25)。
【０４２１】
δH (DMSO) : 8.32 (1H, s, =CH), 7.99 (1H, s, ArH), 7.70 (1H, d, J=8Hz, ArH), 7.39 (3H, m, ArH), 7.11 (1H, s, ArH), δc (DMSO): 173.1 (C=O), 158.5, 156.2, 155.2, 133.6, 132.9, 132.7, 130.6, 127.9, 126.4, 125.12, 124.9, 120.2, 117.2, 104.2. LCMS tR 7.23, MS m/z 351/353/355 [M+H]+.
【０４２２】
4-[4-(6-クロロ-7-ヒドロキシ-4-オキソ-4H-クロメン-3-イル)-フェノキシ]-ブチロニトリルの合成
【化８３】
2005517675.tif 000120
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。4-クロロレゾルシノール(0.33g、2.28mmol)、[4-(3-シアノプロポキシ)-フェニル]酢酸(0.5g、2.28mmol)、BF3Et2O (5ml)、PCl5 (0.94gg、4.5mmol)、DMF (8mlおよび12ml)。形成された沈殿物をろ過し、メタノールから再結晶させて、白色固体として4-[4-(6-クロロ-7-ヒドロキシ-4-オキソ-4H-クロメン-3-イル)-フェノキシ]-ブチロニトリルを得た(0.55g、67.9%)；Rf 0.75 酢酸エチル/ ヘキサン(80/20)。
LCMS tR 7.10, m/z 356/358 [M+H]+.
【０４２３】
6-クロロ-3-(4'-フルオロ-ビフェニル-4-イル)-7-ヒドロキシ-クロメン-4-オンの合成
【化８４】
2005517675.tif 000121
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。4-クロロレゾルシノール(0.31g、2.17mmol)、(4'-フルオロビフェニル-4-イル)-酢酸(0.5g、2.17mmol)、BF3Et2O (5ml)、PCl5 (0.68g、3.3mmol)、DMF (8mlおよび5ml)。6-クロロ-3-(4'-フルオロ-ビフェニル-4-イル)-7-ヒドロキシ-クロメン-4-オンが、白色固体として析出した(0.45g、68.6%)。
LCMS tR 8.41, MS m/z 365/367 [M-H]-.
【０４２４】
6-クロロ-7-ヒドロキシ-3-(3-メトキシ-フェニル)-クロメン-4-オンの合成
【化８５】
2005517675.tif 000122
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。4-クロロレゾルシノール(1.74g、12mmol)、3-メトキシフェニル酢酸 (2.0g、12mmol)、BF3Et2O (5ml)、PCl5 (3.75g、18mmol)、DMF (15mlおよび10ml)。6-クロロ-7-ヒドロキシ-3-(3-メトキシ-フェニル)-クロメン-4-オンが、白色固体として析出した(1.6g、44%)。
δH (DMSO) : 8.45 (1H, s, =CH), 8.02 (1H, s, ArH), 6.98 (5H, m, ArH), 3.79 (3H, s, CH3). LCMS tR 7.32, MS m/z 301 [M-H]-.
【０４２５】
6-クロロ-3-(3'-エトキシ-ビフェニル-4-イル)-7-ヒドロキシ-クロメン-4-オンの合成
【化８６】
2005517675.tif 000123
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。4-クロロレゾルシノール(0.26g、1.8mmol)、(3'-エトキシビフェニル-4-イル)-酢酸(0.44g、1.8mmol)、BF3Et2O (5ml)、PCl5 (0.56g、2.69mmol)、DMF (8mlおよび5ml)。粗油物質(0.39g、55.2%)を、次の段階に用いた。Rf 0.8 酢酸エチル/ ヘキサン(70/30)]。
LCMS tR 8.34, MS m/z 391/393 [M-H]-.
【０４２６】
6-クロロ-3-(4'-フルオロ-ビフェニル-3-イル)-7-ヒドロキシ-クロメン-4-オンの合成
【化８７】
2005517675.tif 000124
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。4-クロロレゾルシノール(0.25g、1.7mmol)、(4'-フルオロビフェニル-3-イル)-酢酸(0.4g、1.7mmol)、BF3Et2O (5ml)、PCl5 (0.54g、2.59mmol)、DMF (8mlおよび5ml)。6-クロロ-3-(4'-フルオロ-ビフェニル-3-イル)-7-ヒドロキシ-クロメン-4-オンが、白色固体として析出した(0.36g、57.8%)。これを、さらなる精製を行わずに次の段階に用いた。Rf 0.6 酢酸エチル/ ヘキサン(70/30)。
LCMS tR 8.33, MS m/z 365/367 [M-H]-.
【０４２７】
6-クロロ-3-[3-(2-フルオロ-エトキシ)-フェニル]-7-ヒドロキシ-クロメン-4-オンの合成
【化８８】
2005517675.tif 000125
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。4-クロロレゾルシノール(0.36g、2.5mmol)、[3-(2-フルオロ-エトキシ)-フェニル]-酢酸(0.5g、2.5mmol)、BF3Et2O (5ml)、PCl5 (0.79g、3.79mmol)、DMF (8mlおよび5ml)。6-クロロ-3-[3-(2-フルオロ-エトキシ)-フェニル]-7-ヒドロキシ-クロメン-4-オンが、白色固体として析出した(0.49g、58.6%)。これを、さらなる精製を行わずに次の段階に用いた。Rf 0.6 酢酸エチル/ ヘキサン(70/30)]。
LCMS tR 7.16, MS m/z 333/335 [M-H]-.
【０４２８】
3-(3-ブロモ-フェニル)-6-クロロ-7-ヒドロキシ-クロメン-4-オンの合成
【化８９】
2005517675.tif 000126
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。4-クロロレゾルシノール(0.34g、2.4mmol)、3-ブロモフェニル酢酸(0.51g、2.4mmol)、BF3Et2O (5ml)、PCl5 (0.74g、3.6mmol)、DMF (5mlおよび10ml)。形成された沈殿物をろ過し、メタノールから再結晶させて、薄片状の白色固体として3-(3-ブロモ-フェニル)-6-クロロ-7-ヒドロキシ-クロメン-4-オンを得た(0.64g、76%)。
LCMS tR 7.96, MS m/z 349/351 [M-H]-.
【０４２９】
6-クロロ-3-(3',4'-ジメトキシ-ビフェニル-3-イル)-7-ヒドロキシ-クロメン-4-オンの合成
【化９０】
2005517675.tif 000127
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。4-クロロレゾルシノール(0.15g、1.0mmol)、(3',4'-ジメトキシ-ビフェニル-3-イル)-酢酸(0.28g、1mmol)、BF3Et2O (5ml)、PCl5 (0.32g、1.5mmol)、DMF (6mlおよび4ml)。形成された白色の沈殿物は、所望の化合物を含むことが示され、直接次の段階に用いた。
LCMS tR 7.86, MS m/z 407/409 [M-H]-.
【０４３０】
6-クロロ-7-ヒドロキシ-3-(2-メトキシ-フェニル)-クロメン-4-オンの合成
【化９１】
2005517675.tif 000128
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。4-クロロレゾルシノール(1.74g、12.0mmol)、2-メトキシフェニル酢酸(2.0g、12.0mmol)、BF3Et2O (10ml)、PCl5 (3.76g、18.1mmol)、DMF (20mlおよび10ml)。薄い茶色の固体沈殿物は、さらなる精製を行わずに次の段階に用いた。
【０４３１】
4-[3-(6-クロロ-7-ヒドロキシ-4-オキソ-4H-クロメン-3-イル)-フェノキシ]-ブチロニトリルの合成
【化９２】
2005517675.tif 000129
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。4-クロロレゾルシノール(0.33g、2.28mmol)、[3-(3-シアノ-プロポキシ)-フェニル]-酢酸(0.5g、2.28mmol)、BF3Et2O (5ml)、PCl5 (0.71g、3.4mmol)、DMF (8mlおよび5ml)。粗4-[3-(6-クロロ-7-ヒドロキシ-4-オキソ-4H-クロメン-3-イル)-フェノキシ]-ブチロニトリルを油として得て、これをさらなる精製を行わずに次の段階に用いた。
LCMS tR 7.10, MS m/z 354/356 [M-H]-.
【０４３２】
4-[2-(6-クロロ-7-ヒドロキシ-4-オキソ-4H-クロメン-3-イル)-フェノキシ]-ブチロニトリルの合成
【化９３】
2005517675.tif 000130
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。4-クロロレゾルシノール(0.125g、0.87mmol)、[2-(3-シアノ-プロポキシ)-フェニル]-酢酸(0.19g、0.87mmol)、BF3Et2O (5ml)、PCl5 (0.27g、1.3mmol)、DMF (8mlおよび5ml)。粗4-[2-(6-クロロ-7-ヒドロキシ-4-オキソ-4H-クロメン-3-イル)-フェノキシ]-ブチロニトリルを油として得て、これをさらなる精製を行わずに次の段階に用いた。
LCMS tR 6.76, MS m/z 354/356 [M-H]-.
【０４３３】
6-クロロ-3-(2-フルオロ-フェニル)-7-ヒドロキシ-クロメン-4-オンの合成
【化９４】
2005517675.tif 000131
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。4-クロロレゾルシノール(1.88g、13.0mmol)、2-フルオロフェニル酢酸(2.0g、13mmol)、BF3Et2O (10ml)、PCl5 (4.0g、19.2mmol)、DMF (20mlおよび10ml)。形成された薄い白色の沈殿物は、所望の化合物を含むことが示され、直接次の段階に用いた。
LCMS tR 7.01, MS m/z 289/291 [M-H]-.
【０４３４】
4-[4-(6-クロロ-7-ヒドロキシ-4-オキソ-4H-クロメン-3-イル)-2-(3-シアノ-プロポキシ)-フェノキシ]-ブチロニトリル
【化９５】
2005517675.tif 000132
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。4-クロロレゾルシノール(0.48g、3.31mmol)、[3,4-ビス-(3-シアノ-プロポキシ)-フェニル]-酢酸(1g、3.31mmol)、BF3Et2O (8ml)、PCl5 (1.03g、4.97mmol)、DMF (8mlおよび12ml)。形成された沈殿物をろ過し、メタノールから再結晶させて、白色固体として4-[4-(6-クロロ-7-ヒドロキシ-4-オキソ-4H-クロメン-3-イル)-2-(3-シアノ-プロポキシ)-フェノキシ]-ブチロニトリルを得た(1.05g、72.5%)；Rf 0.6 酢酸エチル/ ヘキサン(80/20)]。
LCMS tR 6.847.10, m/z 439/441 [M+H]+.
【０４３５】
5-[3-(6-クロロ-7-ヒドロキシ-4-オキソ-4H-クロメン-3-イル)-フェノキシ]-ペンタンニトリルの合成
【化９６】
2005517675.tif 000133
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。4-クロロレゾルシノール(0.37g、2.58mmol)、[3-(4-シアノ-ブトキシ)-フェニル]-酢酸(0.6g、2.58mmol)、BF3Et2O (8ml)、PCl5 (0.81g、3.89mmol)、DMF (8mlおよび12ml)。形成された沈殿物をろ過し、メタノールから再結晶させて、白色固体として5-[3-(6-クロロ-7-ヒドロキシ-4-オキソ-4H-クロメン-3-イル)-フェノキシ]-ペンタンニトリルを得た(0.59g、59.1%)；Rf 0.7 酢酸エチル/ ヘキサン(80/20)]。
LCMS tR 7.26, m/z 368/370 [M-H]-.
【０４３６】
5-[4-(6-クロロ-7-ヒドロキシ-4-オキソ-4H-クロメン-3-イル)-フェノキシ]-ペンタンニトリルの合成
【化９７】
2005517675.tif 000134
この化合物は、セクション1.1.4.1に記載したのと同じ方法で合成した。4-クロロレゾルシノール(0.37g、2.58mmol)、[[4-(4-シアノ-ブトキシ)-フェニル]-酢酸(0.6g、2.28mmol)、BF3Et2O (5ml)、PCl5 (0.81g、3.89mmol)、DMF (8mlおよび12ml)。形成された沈殿物をろ過し、メタノールから再結晶させて、白色固体として5-[4-(6-クロロ-7-ヒドロキシ-4-オキソ-4H-クロメン-3-イル)-フェノキシ]-ペンタンニトリルを得た(0.63g、66.2%)；Rf 0.65 酢酸エチル/ ヘキサン(80/20)。
LCMS tR 7.29, m/z 368/370 [M-H]-.
【０４３７】
次の反応は、スキーム13に関する。実施例49〜63、65〜79、109、153〜157のピラゾールの合成
4-(4-フェニル-1H-ピラゾール-3-イル)-ベンゼン-1,3-ジオールの合成
【化９８】
2005517675.tif 000135
7-ヒドロキシ-3-フェニル-クロメン-4-オン(0.2g、0.84mmol)をエタノール(5ml)に溶解し、〜60℃に加熱した。ヒドラジン水和物(5ml)を添加し、出発物質がTLC (45分)により見えなくなるまで溶液を還流した。この時点で、エタノールの大部分を真空下に除去し、残渣を冷水で冷却した。残渣を酢酸エチル中に抽出し、洗浄(水)し、そして溶媒を真空下に除去して、白色固体として4-(4-フェニル-1H-ピラゾール-3-イル)-ベンゼン-1,3-ジオールを得た(0.17g、80.3%)；Rf 0.65 酢酸エチル/ ヘキサン(70/30)]。
【０４３８】
δH (DMSO) : 9.63, 9.43 (2H, s, OH), 7.81 (1H, s, =CH), 7.25 (6H, m, ArH), 6.87 (1H, d, J=8Hz, ArH), 6.38 (1H, s, ArH), 6.19 (1H, d, J=8Hz, ArH). LCMS tR 6.29, MS m/z 253 [M+H]+.
【０４３９】
4-[4-(4-ブロモ-フェニル)-1H-ピラゾール-3-イル]-ベンゼン-1,3-ジオールの合成
【化９９】
2005517675.tif 000136
この化合物は、先行する実験に記載したのと同じ方法で合成した。3-(4-ブロモ-フェニル)-7-ヒドロキシ-クロメン-4-オン(0.1g、0.3mmol)、ヒドラジン水和物(4ml)、エタノール(10ml)。粗固体物質を熱エーテル中で洗浄して、白色固体として4-[4-(4-ブロモ-フェニル)-1H-ピラゾール-3-イル]-ベンゼン-1,3-ジオールを得た(0.06g、60.6%)；Rf 0.44 Cf SM 0.79 酢酸エチル/ ヘキサン(75/25)。
【０４４０】
δH (DMSO) : 9.47, 8.92 (2H, s, OH), 7.81 (1H, s, =CH), 7.43 (2H, d, J=9Hz, ArH), 7.24 (2H, d, J=9Hz, ArH), 6.89 (1H, d, J=9Hz, ArH), 6.37 (1H, s, ArH), 6.26 (1H, d, J=9Hz, ArH). LCMS tR 7.12, MS m/z 331/333 [M+H]+.
【０４４１】
4-[4-(3,4-ジメトキシ-フェニル)-1H-ピラゾール-3-イル]-ベンゼン-1,3-ジオールの合成
【化１００】
2005517675.tif 000137
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。3-(3,4-ジメトキシ-フェニル)-7-ヒドロキシ-クロメン-4-オン(0.5g、1.68mmol)、ヒドラジン水和物(4ml)、エタノール(10ml)。粗生成物をカラムにかけて、薄い黄色の固体として4-[4-(3,4-ジメトキシ-フェニル)-1H-ピラゾール-3-イル]-ベンゼン-1,3-ジオールを得た(0.29g、55.3%)；Rf 0.2 Cf SM 0.7 酢酸エチル/ ヘキサン(75/25)。
【０４４２】
δH (DMSO) : 10.18, 9.42 (2H, s, OH), 7.77 (1H, s, =CH), 6.90 (4H, m, ArH), 6.38 (1H, s, ArH), 6.24 (1H, s, ArH), 3.71 (3H, s, CH3), 3.59 (3H, s, CH3). LCMS tR 5.71, MS m/z 313 [M+H]+.
【０４４３】
4-エチル-6-(4-フェニル-1H-ピラゾール-3-イル)-ベンゼン-1,3-ジオールの合成
【化１０１】
2005517675.tif 000138
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。6-エチル-7-ヒドロキシ-3-フェニル-クロメン-4-オン(0.29g、1.1mmol)、ヒドラジン水和物(4ml)、エタノール(20ml)。粗生成物をカラムにかけて、オフホワイト色の固体として4-エチル-6-(4-フェニル-1H-ピラゾール-3-イル)-ベンゼン-1,3-ジオールを得た(0.23g、74.73%)；Rf 0.7 Cf SM 0.9 酢酸エチル/ ヘキサン(70/30)。
【０４４４】
δH (DMSO) : 9.63, 9.43 (2H, s, OH), 7.62 (1H, s, =CH), 7.23 (5H, m, ArH), 6.96 (1H, s, ArH), 6.24 (1H, s, ArH), 2.36 (2H, q, J=7Hz, CH2), 0.78 (3H, t, J=7Hz, CH3). LCMS tR 7.29, MS m/z 281 [M+H]+.
【０４４５】
4-[4-(4-ブロモ-フェニル)-1H-ピラゾール-3-イル]-6-エチル-ベンゼン-1,3-ジオールの合成
【化１０２】
2005517675.tif 000139
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。3-(4-ブロモ-フェニル)-6-エチル-7-ヒドロキシ-クロメン-4-オン(0.13g、0.38mmol)、ヒドラジン水和物(4ml)、エタノール(10ml)。粗生成物をカラムにかけて、白色固体として4-[4-(4-ブロモ-フェニル)-1H-ピラゾール-3-イル]-6-エチル-ベンゼン-1,3-ジオールを得た(0.0969g、71%)；Rf 0.44 Cf SM 0.79 酢酸エチル/ ヘキサン(75/25)。
【０４４６】
δH (DMSO) : 9.48 (2H, s, OH), 8.27 (1H, s, =CH), 7.53 (2H, d, J=9Hz, ArH), 7.34 (2H, d, J=9Hz, ArH), 6.91 (1H, s, ArH), 6.54, (1H, s, ArH), 2.49 (2H, q, J=7Hz, CH2), 1.11 (3H, t, J=7Hz, CH3). LCMS tR 7.89, MS m/z 359/361 [M+H]+.
【０４４７】
4-[4-(3,4-ジメトキシ-フェニル)-1H-ピラゾール-3-イル]-6-エチル-ベンゼン-1,3-ジオールの合成
【化１０３】
2005517675.tif 000140
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。3-(3,4-ジメトキシ-フェニル)-6-エチル-7-ヒドロキシ-クロメン-4-オン(0.25g、0.77mmol)、ヒドラジン水和物(4ml)、エタノール(10ml)。粗生成物をカラムにかけて、白色固体として4-[4-(3,4-ジメトキシ-フェニル)-1H-ピラゾール-3-イル]-6-エチル-ベンゼン-1,3-ジオールを得た(0.16g、61.1%)；Rf 0.33 Cf SM 0.71 酢酸エチル/ ヘキサン(75/25)。
【０４４８】
δH (DMSO) : 10.06, 9.36 (2H, s, OH), 7.81 (1H, s, =CH), 7.19 (4H, m, ArH), 6.47 (1H, s, ArH), 3.72 (3H, s, CH3), 3.60 (3H, s, CH3), 2.39 (2H, q, J=7Hz, CH2), 1.01 (3H, t, J=7Hz, CH3). LCMS tR 6.57, MS m/z 341 [M+H]+.
【０４４９】
4-クロロ-6-(4-フェニル-1H-ピラゾール-3-イル)-ベンゼン-1,3-ジオールの合成
【化１０４】
2005517675.tif 000141
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。6-クロロ-7-ヒドロキシ-3-フェニル-クロメン-4-オン(0.4g、1.47mmol)、ヒドラジン水和物(4ml)、エタノール(10ml)。4-クロロ-6-(4-フェニル-1H-ピラゾール-3-イル)-ベンゼン-1,3-ジオールが、冷却により薄い黄色として析出した(0.37g、88%)；Rf 0.3 Cf SM 0.7 酢酸エチル/ ヘキサン(75/25)。
δH (DMSO) : 10.16 (2H, 2 x s, OH), 7.86 (1H, s, =CH), 7.24 (5H, m, ArH), 7.03 (1H, s, ArH), 6.41 (IH, s, ArH). LCMS tR 6.89, MS m/z 287/289 [M+H]+.
【０４５０】
4-[4-(4-ブロモ-フェニル)-1H-ピラゾール-3-イル]-6-クロロ-ベンゼン-1,3-ジオールの合成
【化１０５】
2005517675.tif 000142
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。3-(4-ブロモ-フェニル)-6-クロロ-7-ヒドロキシ-クロメン-4-オン(0.1g、0.28mmol)、ヒドラジン水和物(4ml)、エタノール(10ml)。4-[4-(4-ブロモ-フェニル)-1H-ピラゾール-3-イル]-6-クロロ-ベンゼン-1,3-ジオールが、冷却により白色固体として析出した(0.073g、71.2%)；Rf 0.34 Cf SM 0.55 酢酸エチル/ ヘキサン(75/25)。
【０４５１】
δH (DMSO) : 10.47 (2H, 2 x s, OH), 7.88 (1H, s, =CH), 7.46 (2H, d, J=9Hz, ArH), 7.21 (2H, d, J=9Hz, ArH),  7.05 (1H, s, ArH), 6.5 (1H, s, ArH). LCMS シングルピーク tR 7.56, MS m/z 365/367 [M+H]+.
【０４５２】
4-クロロ-6-[4-(3,4-ジメトキシ-フェニル)-1H-ピラゾール-3-イル]-ベンゼン-1,3-ジオールの合成
【化１０６】
2005517675.tif 000143
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。6-クロロ-3-(3,4-ジメトキシ-フェニル)-7-ヒドロキシ-クロメン-4-オン(0.2g、0.62mmol)、ヒドラジン水和物(4ml)、エタノール(10ml)。粗固体生成物をカラムにかけて、白色固体として4-クロロ-6-[4-(3,4-ジメトキシ-フェニル)-1H-ピラゾール-3-イル]-ベンゼン-1,3-ジオールを得た(0.139g、65.1%)；Rf 0.36 Cf SM 0.56 酢酸エチル/ ヘキサン(75/25)。
【０４５３】
δH (DMSO) : 10.19, 10.02 (2H, 2 x s, OH), 7.83 (1H, s, =CH), 7.05 (1H, s, ArH), 6.84 (4H, m, ArH), 6.59 (1H, s, ArH), 3.72 (3H, s, CH3), 3.61 (3H, s, CH3). δc (DMSO) : 115.8, 154.0, 148.8, 147.6, 137.2, 131.4, 126.7, 120.1, 119.4, 112.4, 111.5, 110.9, 109.9, 104.2 (不飽和), 55.8, 55.5 (CH3). LCMS tR 6.24, MS m/z 347/349 [M+H]+.
【０４５４】
4-クロロ-6-[4-(2,3-ジヒドロ-ベンゾ[1,4]ジオキシン-6-イル)-1H-ピラゾール-3-イル]-ベンゼン-1,3-ジオールの合成
【化１０７】
2005517675.tif 000144
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。6-クロロ-3-(2,3-ジヒドロ-ベンゾ[1,4]ジオキシン-6-イル)-7-ヒドロキシ-クロメン-4-オン(0.1g、0.30mmol)、ヒドラジン水和物(4ml)、エタノール(10ml)。冷却した反応物を酢酸エチル(2×30ml)中に抽出し、洗浄(水)し、乾燥(MgSO4)し、そして溶媒を除去して、オフホワイト色の固体として4-クロロ-6-[4-(2,3-ジヒドロ-ベンゾ[1,4]ジオキシン-6-イル)-1H-ピラゾール-3-イル]-ベンゼン-1,3-ジオールを得た(0.031g、30%)；Rf 0.6 Cf SM 0.8 酢酸エチル/ ヘキサン(75/25)。
【０４５５】
δH (DMSO) : 10.19, 9.91 (2H, 2 x s, OH), 7.78 (1H, s, =CH), 7.02 (1H, s, ArH), 6.75 (3H, m, ArH), 6.52 (IH, s, ArH). LCMS tR 6.56, MS m/z 345/347 [M+H]+.
【０４５６】
4-[4-(2-ブロモ-フェニル)-1H-ピラゾール-3-イル]-6-クロロ-ベンゼン-1,3-ジオールの合成
【化１０８】
2005517675.tif 000145
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。3-(2-ブロモ-フェニル)-6-クロロ-7-ヒドロキシ-クロメン-4-オン(0.4g、1.1mmol)、ヒドラジン水和物(10ml)、エタノール(10ml)。冷却した溶液を酢酸エチル中に抽出し、洗浄(水)し、乾燥(MgSO4)し、そして溶媒を真空下に除去して黄色の油を得て、これをカラムクロマトグラフィーにより生成して、白色固体として4-[4-(2-ブロモ-フェニル)-1H-ピラゾール-3-イル]-6-クロロ-ベンゼン-1,3-ジオールを得た(0.28g、70%)；Rf 0.6 酢酸エチル/ ヘキサン(80/20)。
【０４５７】
δH (DMSO) : 10.17, 9.93 (2H, 2 x s, OH), 7.94 (1H, s, C=H), 7.54 (4H, m, ArH), 6.76 (1H, s, ArH), 6.51 (1H, s, ArH). LCMS tR 7.02, MS m/z 263/365 [M-H]-.
【０４５８】
4-[4-[3-(5-クロロ-2,4-ジヒドロキシ-フェニル)-1H-ピラゾール-4-イル]-フェノキシ]-ブチロニトリルの合成
【化１０９】
2005517675.tif 000146
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。4-[4-(6-クロロ-7-ヒドロキシ-4-オキソ-4H-クロメン-3-イル)-フェノキシ]-ブチロニトリル(0.12g、0.34mmol)、ヒドラジン水和物(5ml)。冷却により形成された沈殿物をろ過して、白色固体として4-[4-[3-(5-クロロ-2,4-ジヒドロキシ-フェニル)-1H-ピラゾール-4-イル]-フェノキシ]-ブチロニトリルを得た(0.09g、71.6%)；Rf 0.6 酢酸エチル/ ヘキサン(70/30)]。
【０４５９】
δH (DMSO) : 10.19 (2H, s, OH), 7.78 (1H, s, =CH), 7.20 (2H, d, J=9Hz, ArH), 7.01 (1H, s, ArH), 6.88 (2H, d, J=9Hz, ArH), 6.43 (1H, s, ArH), 4.01 (2H, t, J=7Hz, CH2), 2.64 (2H, t, J=7Hz, CH2), 2.06 (2H, m, CH2). LCMS tR 6.47, m/z 370/372 [M+H]+.
【０４６０】
4-クロロ-6-[4-(4'-フルオロ-ビフェニル-4-イル)-1H-ピラゾール-3-イル]-ベンゼン-1,3-ジオールの合成
【化１１０】
2005517675.tif 000147
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。6-クロロ-3-(4'-フルオロビフェニル-4-イル)-7-ヒドロキシ-クロメン-4-オン(0.12g、0.33mmol)、ヒドラジン水和物(5ml)。冷却した反応物を酢酸エチル中に抽出し、洗浄(水)し、乾燥(MgSO4)し、そして真空下に溶媒を除去して、白色固体としての4-クロロ-6-[4-(4'-フルオロ-ビフェニル-4-イル)-1H-ピラゾール-3-イル]-ベンゼン-1,3-ジオールを得た(0.08g、63.7%)。
【０４６１】
δH (DMSO) : 10.02, 9.88 (2H, 2 x s, OH), 7.90 (1H, s, =CH), 7.70 (2H, d, J=9Hz, ArH), 7.56 (2H, d, J=9Hz, ArH), 7.29 (2H, d, J=9Hz, ArH), 7.22 (2H, d, J=9Hz, ArH), 7.09 (1H, s, ArH), 6.63 (1H, s, ArH). LCMS tR 7.96, m/z 379/381 [M-H]-.
【０４６２】
4-クロロ-6-[4-(3-メトキシ-フェニル)-1H-ピラゾール-3-イル]-ベンゼン-1,3-ジオールの合成
【化１１１】
2005517675.tif 000148
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。6-クロロ-7-ヒドロキシ-3-(3-メトキシ-フェニル)-クロメン-4-オン(1.0g、3.3mmol)、ヒドラジン水和物(8ml)。冷却した反応物を酢酸エチル中に抽出し、洗浄(水)し、乾燥(MgSO4)し、そして真空下に溶媒を除去して、白色固体として4-クロロ-6-[4-(3-メトキシ-フェニル)-1H-ピラゾール-3-イル]-ベンゼン-1,3-ジオールを得た(0.48g、46%)；Rf 0.5 酢酸エチル/ ヘキサン(80/20)]。
【０４６３】
δH (DMSO) : 10.23, 9.94 (2H, 2 x s, OH), 7.88 (1H, s, C=CH), 7.22 (1H, t, ArH), 7.16 (1H, s, ArH), 6.91 (1H, d, ArH), 6.85 (1H, s, ArH), 6.73 (1H, d, ArH), 6.49 (1H, s, ArH),  3.66 (3H, s, OCH3). δc (DMSO). LCMS tR 6.72, m/z 317/319 [M+H]+.
【０４６４】
4-クロロ-6-[4-(3'-エトキシ-ビフェニル-4-イル)-1H-ピラゾール-3-イル]-ベンゼン-1,3-ジオールの合成
【化１１２】
2005517675.tif 000149
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。6-クロロ-3-(3'-エトキシ-ビフェニル-4-イル)-7-ヒドロキシ-クロメン-4-オン(0.2g、0.69mmol)、ヒドラジン水和物(5ml)、エタノール(10ml)。冷却した溶液を酢酸エチル中に抽出し、洗浄(水)し、乾燥(MgSO4)し、そして真空下に溶媒を除去して油を得た。
MS m/z 407 [M-H]-.
【０４６５】
4-クロロ-6-[4-(4'-フルオロ-ビフェニル-3-イル)-1H-ピラゾール-3-イル]-ベンゼン-1,3-ジオールの合成
【化１１３】
2005517675.tif 000150
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。6-クロロ-3-(4'-フルオロ-ビフェニル-3-イル)-7-ヒドロキシ-クロメン-4-オン(0.2g、0.54mmol)、ヒドラジン水和物(2.5ml)、エタノール(10ml)。冷却した溶液を酢酸エチル中に抽出し、洗浄(水)し、乾燥(MgSO4)し、そして真空下に溶媒を除去して油を得て、これをカラムクロマトグラフィーにより精製して、オフホワイト色の固体として4-クロロ-6-[4-(4'-フルオロ-ビフェニル-3-イル)-1H-ピラゾール-3-イル]-ベンゼン-1,3-ジオールを得た(0.13g、63.3%)；Rf 0.2 cf SM 0.7 酢酸エチル/ ヘキサン(80/20)。
【０４６６】
δH (DMSO) : 10.24, 9.98 (2H, 2 x s, OH), 7.99 (1H, s, C=CH), 7.39 (8H, m, ArH), 7.10 (1H, s, ArH), 6.63 (1H, s, ArH).  LCMS tR 7.86, MS m/z 381/383 [M-H]-.
【０４６７】
4-クロロ-6-[4-[3-(2-フルオロ-エトキシ)-フェニル]-1H-ピラゾール-3-イル]-ベンゼン-1,3-ジオールの合成
【化１１４】
2005517675.tif 000151
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。6-クロロ-3-[3-(2-フルオロ-エトキシ)-フェニル]-7-ヒドロキシ-クロメン-4-オン(0.2g、0.6mmol)、ヒドラジン水和物(2.5ml)、エタノール(10ml)。冷却した溶液を酢酸エチル中に抽出し、洗浄(水)し、乾燥(MgSO4)し、そして真空下に溶媒を除去して油を得て、これをカラムクロマトグラフィーにより精製して、オフホワイト色の固体として4-クロロ-6-[4-[3-(2-フルオロ-エトキシ)-フェニル]-1H-ピラゾール-3-イル]-ベンゼン-1,3-ジオールを得た(0.12g、57.3%)；Rf 0.5 cf SM 0.85 酢酸エチル/ ヘキサン(80/20)。
【０４６８】
δH (DMSO) : 10.21, 9.92 (2H, 2 x s, OH), 7.87 (1H, s, C=CH), 7.02 (1H, s, ArH), 6.87 (4H, m, ArH), 6.60 (1H, s, ArH), 4.66 (2H, dt, CH2), 4.15 (2H, dt, CH2). LCMS tR 6.72, MS m/z 347/349 [M-H]-.
【０４６９】
4-[4-(3-ブロモ-フェニル)-1H-ピラゾール-3-イル]-6-クロロ-ベンゼン-1,3-ジオールの合成
【化１１５】
2005517675.tif 000152
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。3-(3-ブロモ-フェニル)-6-クロロ-7-ヒドロキシ-クロメン-4-オン(0.25g、0.71mmol)、ヒドラジン水和物(5ml)、エタノール(10ml)。冷却した溶液を酢酸エチル中に抽出し、洗浄(水)し、乾燥(MgSO4)し、そして真空下に溶媒を除去して黄色の油を得て、これをカラムクロマトグラフィーにより精製して、白色固体として4-[4-(3-ブロモ-フェニル)-1H-ピラゾール-3-イル]-6-クロロ-ベンゼン-1,3-ジオールを得た(0.21g、80.8%)；Rf 0.8 酢酸エチル/ ヘキサン(70/30)。
【０４７０】
δH (DMSO) : 10.29, 9.84 (2H, 2 x s, OH), 7.90 (1H, s, C=H), 7.48 (1H, s, ArH), 7.26 (3H, m, ArH), 7.07 (1H, s, ArH), 6.62 (1H, s, ArH). LCMS tR 7.40, MS m/z 265/367/369 [M+H]+.
【０４７１】
4-クロロ-6-[4-(3',4'-ジメトキシ-ビフェニル-3-イル)-1H-ピラゾール-3-イル]-ベンゼン-1,3-ジオールの合成
【化１１６】
2005517675.tif 000153
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。6-クロロ-3-(3',4'-ジメトキシ-ビフェニル-3-イル)-7-ヒドロキシ-クロメン-4-オン(0.1g、0.24mmol)、ヒドラジン水和物(2.5ml)、エタノール(10ml)。冷却した溶液を酢酸エチル中に抽出し、洗浄(水)し、乾燥(MgSO4)し、そして真空下に溶媒を除去して油を得て、これをカラムクロマトグラフィーにより精製して、オフホワイト色の固体として4-クロロ-6-[4-(3',4'-ジメトキシ-ビフェニル-3-イル)-1H-ピラゾール-3-イル]-ベンゼン-1,3-ジオールを得た(0.05g、49.3.3%)；Rf 0.3 cf SM 0.6 酢酸エチル/ ヘキサン(70/30)。
LCMS tR 6.27, MS m/z 423/425 [M+H]+.
【０４７２】
4-クロロ-6-[4-(2-メトキシ-フェニル)-1H-ピラゾール-3-イル]-ベンゼン-1,3-ジオールの合成
【化１１７】
2005517675.tif 000154
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。6-クロロ-7-ヒドロキシ-3-(2-メトキシ-フェニル)-クロメン-4-オン(2.0g、6.6mmol)、ヒドラジン水和物(5ml)、エタノール(10ml)。冷却した溶液を酢酸エチル中に抽出し、洗浄(水)し、乾燥(MgSO4)し、そして真空下に溶媒を除去して、白色固体として4-クロロ-6-[4-(2-メトキシ-フェニル)-1H-ピラゾール-3-イル]-ベンゼン-1,3-ジオールを得た。Rf 0.8 酢酸エチル/ ヘキサン(70/30)。
LCMS tR 6.74, MS m/z 317/319 [M+H]+.
【０４７３】
4-[3-[3-(5-クロロ-2,4-ジヒドロキシ-フェニル)-1H-ピラゾール-4-イル]-フェノキシ]-ブチロニトリルの合成
【化１１８】
2005517675.tif 000155
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。4-[3-(6-クロロ-7-ヒドロキシ-4-オキソ-4H-クロメン-3-イル)-フェノキシ]-ブチロニトリル(0.3g、0.84mmol)、ヒドラジン水和物(6ml)。冷却した反応物を酢酸エチル中に抽出し、洗浄(水)し、乾燥(MgSO4)し、そして真空下に溶媒を除去して透明な油を得て、これをカラムクロマトグラフィーにより精製して白色固体としての4-[3-[3-(5-クロロ-2,4-ジヒドロキシ-フェニル)-1H-ピラゾール-4-イル]-フェノキシ]-ブチロニトリルを得た。Rf 0.6 酢酸エチル/ ヘキサン(70/30)。
【０４７４】
δH (DMSO) : 10.14, 9.82 (2H, 2 x s, OH), 7.80 (1H, s, =CH), 6.67 (6H, m, ArH), 3.89 (2H, t, J=7Hz, CH2), 2.53 (2H, t, J=7Hz, CH2), 1.93 (2H, m, CH2). LCMS tR 6.64, m/z 370/372 [M+H]+.
【０４７５】
4-[2-[3-(5-クロロ-2,4-ジヒドロキシ-フェニル)-1H-ピラゾール-4-イル]-フェノキシ]-ブチロニトリルの合成
【化１１９】
2005517675.tif 000156
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。4-[2-(6-クロロ-7-ヒドロキシ-4-オキソ-4H-クロメン-3-イル)-フェノキシ]-ブチロニトリル(0.1g、0.28mmol)、ヒドラジン水和物(6ml)。冷却した反応物を酢酸エチル中に抽出し、洗浄(水)し、乾燥(MgSO4)し、そして真空下に溶媒を除去して透明な油を得て、これをカラムクロマトグラフィーにより精製して、オフホワイト色の固体として4-[2-[3-(5-クロロ-2,4-ジヒドロキシ-フェニル)-1H-ピラゾール-4-イル]-フェノキシ]-ブチロニトリルを得た。Rf 0.65 酢酸エチル/ ヘキサン(70/30)。
【０４７６】
δH (DMSO) : 10.13 (2H, 2 x s, OH), 7.86 (1H, s, =CH), 6.89 (6H, m, ArH), 3.90 (2H, t, J=7Hz, CH2), 2.24 (2H, t, J=7Hz, CH2), 1.75 (2H, m, CH2). LCMS tR 6.71, m/z 370/372 [M+H]+.
【０４７７】
4-クロロ-6-[4-(2-フルオロ-フェニル)-1H-ピラゾール-3-イル]-ベンゼン-1,3-ジオールの合成
【化１２０】
2005517675.tif 000157
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。6-クロロ-3-(2-フルオロ-フェニル)-7-ヒドロキシ-クロメン-4-オン(0.37g、1.27mmol)、ヒドラジン水和物(5ml)、エタノール(15ml)。冷却した溶液を酢酸エチル中に抽出し、洗浄(水)し、乾燥(MgSO4)し、そして真空下に溶媒を除去して黄色の油を得て、これをカラムクロマトグラフィーにより精製して、白色固体として 4-クロロ-6-[4-(2-フルオロ-フェニル)-1H-ピラゾール-3-イル]-ベンゼン-1,3-ジオールを得た(0.28g、72.4%)；Rf 0.8 cf SM 0.9 酢酸エチル/ ヘキサン(70/30)。
【０４７８】
δH (DMSO) : 10.21, 9.86 (2H, 2 x s, OH), 7.90 (1H, s, C=H), 7.17 (4H, m, ArH), 6.98 (1H, s, ArH), 6.57 (1H, s, ArH). LCMS tR 6.84, MS m/z 303/305 [M-H]-.
【０４７９】
4-(5-メチル-4-フェニル-1H-ピラゾール-3-イル)-ベンゼン-1,3-ジオールの合成
【化１２１】
2005517675.tif 000158
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。7-ヒドロキシ-2-メチル-3-フェニル-クロメン-4-オン(0.5g、1.70mmol)、ヒドラジン水和物(5ml)、エタノール(10ml)。冷却した溶液を酢酸エチル中に抽出し、洗浄(水)し、乾燥(MgSO4)し、そして真空下に溶媒を除去して黄色の油を得て、これをカラムクロマトグラフィーにより精製して、オフホワイト色の固体として4-(5-メチル-4-フェニル-1H-ピラゾール-3-イル)-ベンゼン-1,3-ジオールを得た(0.37g、88%)；Rf 0.7 Cf SM 0.8 酢酸エチル/ ヘキサン(80/20)。
【０４８０】
δH (DMSO) : 10.53, 9.37 (2H, 2 x s, OH), 7.29 (5H, m, ArH), 7.76 (1H, d, J=8Hz, ArH), 6.32 (IH, s, ArH), 6.06 (1H, d, J=8Hz, ArH), 2.18 (3H, s, CH3). □
c (DMSO) : 170.7, 158.4, 157.3, 134.6, 129.9, 128.7, 126.7, 116.8, 109.5, 106.5, 103.2 (11の不飽和Cピークのみが観察された), 21.1 (CH3). LCMS tR 6.54, MS m/z 267 [M+H]+.
【０４８１】
4-クロロ-6-(5-メチル-4-フェニル-1H-ピラゾール-3-イル)-ベンゼン-1,3-ジオールの合成
【化１２２】
2005517675.tif 000159
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。6-クロロ-7-ヒドロキシ-2-メチル-3-フェニル-クロメン-4-オン(0.5g、1.75mmol)、ヒドラジン水和物(5ml)。冷却した反応物を酢酸エチル中に抽出し、洗浄(水)し、乾燥(MgSO4)し、そして真空下に溶媒を除去して、白色固体として4-クロロ-6-(5-メチル-4-フェニル-1H-ピラゾール-3-イル)-ベンゼン-1,3-ジオールを得た(0.27g、51.4%)；Rf 0.55 酢酸エチル/ ヘキサン(80/20)]。
【０４８２】
δH (DMSO) : 10.84, 10.13 (2H,2 x s, OH), 7.33 (5H, m, ArH), 6.78 (1H, s, ArH), 6.52 (1H, s, ArH), 2.19 (3H, s, CH3). LCMS tR 7.16, m/z 301/303 [M+H]+.
【０４８３】
4-[4-(4-ブロモ-フェニル)-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル]-6-クロロ-ベンゼン-1,3-ジオールの合成
【化１２３】
2005517675.tif 000160
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。3-(4-ブロモ-フェニル)-6-クロロ-7-ヒドロキシ-2-メチル-クロメン-4-オン(0.5g、1.4mmol)、ヒドラジン水和物(5ml)。4-[4-(4-ブロモ-フェニル)-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル]-6-クロロ-ベンゼン-1,3-ジオールが、薄いオレンジ色の固体として析出した(0.08g、63.7%)；Rf 0.48 cf SM 0.8 [酢酸エチル/ 石油エーテル40〜60℃ (80/20)]。
【０４８４】
δH (DMSO) : 7.53 (2H, d, J=8Hz, ArH), 7.14 (2H, d, J=8Hz, ArH), 6.90 (1H, s, ArH), 6.49 (1H, s, ArH), 2.20 (3H, s, CH3). LCMS tR 7.75, m/z 379/381 [M+H]+.
【０４８５】
4-[4-(2-ブロモ-フェニル)-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル]-6-クロロ-ベンゼン-1,3-ジオールの合成
【化１２４】
2005517675.tif 000161
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。3-(2-ブロモ-フェニル)-6-クロロ-7-ヒドロキシ-2-メチル-クロメン-4-オン(2.5g、6.9mmol)、ヒドラジン水和物(10ml)。4-[4-(2-ブロモ-フェニル)-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル]-6-クロロ-ベンゼン-1,3-ジオールが、オフホワイト色の固体として析出した(0.53g、20.2%)；Rf 0.5 cf SM 0.85 [酢酸エチル/ 石油エーテル40〜60℃ (80/20)]。
【０４８６】
δH (DMSO) : 10.21, 9.23 (2H, 2 x s, OH), 7.77 (1H, d, J=8Hz, ArH), 7.38 (3H, m, ArH), 6.69 (1H, s, ArH), 6.50 (1H, s, ArH), 2.06 (3H, s, CH3). LCMS  tR 7.28, m/z 379/381 [M+H]+.
【０４８７】
4-クロロ-6-[4-(2,3-ジヒドロ-ベンゾ[1,4]ジオキシン-6-イル)-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル]-ベンゼン-1,3-ジオールの合成
【化１２５】
2005517675.tif 000162
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。6-クロロ-3-(2,3-ジヒドロ-ベンゾ[1,4]ジオキシン-6-イル)-7-ヒドロキシ-2-メチル-クロメン-4-オン(0.2g、0.58mmol)、ヒドラジン水和物(5ml)。冷却した反応物を酢酸エチル中に抽出し、洗浄(水)し、乾燥(MgSO4)し、そして真空下に溶媒を除去して、白色固体として4-クロロ-6-[4-(2,3-ジヒドロ-ベンゾ[1,4]ジオキシン-6-イル)-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル]-ベンゼン-1,3-ジオールを得た(0.08g、63.7%)。
【０４８８】
δH (CDCl3) : 6.97 (1H, s, ArH), 6.88 (1H, d, J=8Hz, ArH), 6.69 (1H, d, J=8Hz, ArH), 6.62 (1H, s, ArH), 6.58 (1H, s, ArH), 4.25 (4H, s, 2 x CH2), 2.10 (3H, s, CH3). LCMS tR 6.85, m/z 357/359 [M-H]-.
【０４８９】
4-[4-(2,3-ジヒドロ-ベンゾ[1,4]ジオキシン-6-イル)-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル]-6-エチル-ベンゼン-1,3-ジオールの合成
【化１２６】
2005517675.tif 000163
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。3-(2,3-ジヒドロ-ベンゾ[1,4]ジオキシン-6-イル)-6-エチル-7-ヒドロキシ-2-メチル-クロメン-4-オン(0.6g、1.77mmol)、ヒドラジン水和物(6ml)。冷却した反応物を酢酸エチル中に抽出し、洗浄(水)し、乾燥(MgSO4)し、そして真空下に溶媒を除去して黄色の油を得て、これをカラムクロマトグラフィーにより精製して、透明な油として4-[4-(2,3-ジヒドロ-ベンゾ[1,4]ジオキシン-6-イル)-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル]-6-エチル-ベンゼン-1,3-ジオールを得、これは1ヶ月の期間で固化した(0.38g、60.9%)；Rf 0.4 cf SM 0.6 ヘキサン/ 酢酸エチル/ MeOH (8/4/1)。
【０４９０】
δH (DMSO) : 10.85, 9.24 (2H, 2 x s, OH), 6.76 (5H, m, ArH), 4.23 (4H, s, 2 x CH2), 2.05 (3H, s, CH3). LCMS tR 6.46, m/z 353/355 [M+H]-.
【０４９１】
4-[4-[3-(5-クロロ-2,4-ジヒドロキシ-フェニル)-5-メチル-1H-ピラゾール-4-イル]-フェノキシ]-ブチロニトリルの合成
【化１２７】
2005517675.tif 000164
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。4-[4-(6-クロロ-7-ヒドロキシ-2-メチル-4-オキソ-4H-クロメン-3-イル)-フェノキシ]-ブチロニトリル(0.55、1.49mmol)、ヒドラジン水和物(6ml)。冷却した反応物を酢酸エチル中に抽出し、洗浄(水)し、乾燥(MgSO4)し、そして真空下に溶媒を除去して茶色の油を得て、これをカラムクロマトグラフィーにより精製して、白色固体として4-[4-[3-(5-クロロ-2,4-ジヒドロキシ-フェニル)-5-メチル-1H-ピラゾール-4-イル]-フェノキシ]-ブチロニトリルを得た(0.18g、31.5%)；Rf 0.5 酢酸エチル/ ヘキサン(70/30)。
【０４９２】
δH (DMSO) : 10.98, 10.13 (2H, 2 x s, OH), 7.13 (2H, d, J=8Hz, ArH), 7.04 (2H, d, J = 8Hz, ArH), 6.90  (41, s, ArH),  6.24 (1H, s, ArH), 4.05 (2H, t, J=7Hz, CH2),  2.66 (2H, t, J = 7Hz, CH2), 2.01 (2H, m, CH2). LCMS tR 6.72, m/z 384/386 [M+H]-.
【０４９３】
4-{4-[3-(5-クロロ-2,4-ジヒドロキシ-フェニル)-1H-ピラゾール-4-イル]-フェノキシ}-酪酸および4-クロロ-6-[4-(4-ヒドロキシ-フェニル)-1H-ピラゾール-3-イル]-ベンゼン-1,3-ジオール
【化１２８】
2005517675.tif 000165
4-{4-[3-(5-クロロ-2,4-ジヒドロキシ-フェニル)-1H-ピラゾール-4-イル]-フェノキシ}-ブチロニトリル(11mg、0.03mmol)を5M HCl (2 ml)中に溶解し、水に注ぎ、EtOAc (2×15ml)で抽出する前に20時間還流した。抽出物を合わせ、塩水で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、蒸発させて灰色の着色した固体が残った。この固体は2つの物質を含み、これらをEtOAc/ヘキサン/酢酸 (70:30:1)で溶出する分取TLCで単離し、それぞれ白色の結晶固体として0.9mg (12%収率)および1.1mg (12%収率)の物質を得た。
【０４９４】
4-{4-[3-(5-クロロ-2,4-ジヒドロキシ-フェニル)-1H-ピラゾール-4-イル]-フェノキシ}-酪酸: δH (d6-アセトン) 10.59, 8.64 (2H, 2 x ブロード s, OH), 7.71 (1H, s, Het-H), 7.17 (2H, d, J = 8.8Hz, Ar-H), 7.07 (1H, s, Ar-H), 6.88 (2H, d, J = 8.8Hz, Ar-H), 6.46 (1H, s, Ar-H), 3.99 (2H, t, J = 6.4 Hz, OCH2CH2H), 2.41 (2H, t, J = 6.3 Hz, CH2CO2H), 21.97 (2H, t, CH2CH2CH2). LCMS tR = 6.53, MS m/z 389.3 [M+H]+.
【０４９５】
4-クロロ-6-[4-(4-ヒドロキシ-フェニル)-1H-ピラゾール-3-イル]-ベンゼン-1,3-ジオール:
δH (d6-アセトン) 10.85, 8.59, 8.33 (3H, 2 x ブロード s, OH), 7.69 (1H, s, Het-H), 7.08 (3H, m Ar-H), 6.78 (2H, d, Ar-H), 6.44 (1H, s, Ar-H). LCMS tR = 5.65, MS m/z 303.3 [M+H]+.
【０４９６】
4-[4-[3-(5-クロロ-2,4-ジヒドロキシ-フェニル)-1H-ピラゾール-4-イル]-2-(3-シアノ-プロポキシ)-フェノキシ]-ブチロニトリル
【化１２９】
2005517675.tif 000166
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。4-[4-(6-クロロ-7-ヒドロキシ-4-オキソ-4H-クロメン-3-イル)-2-(3-シアノ-プロポキシ)-フェノキシ]-ブチロニトリル(0.12g、0.27mmol)、ヒドラジン水和物(5ml)。冷却により形成された沈殿物をろ過して、白色固体としての4-[4-[3-(5-クロロ-2,4-ジヒドロキシ-フェニル)-1H-ピラゾール-4-イル]-2-(3-シアノ-プロポキシ)-フェノキシ]-ブチロニトリルを得た(0.11g、90.1%)；Rf 0.6 酢酸エチル/ ヘキサン(70/30)]。
LCMS tR 6.21, m/z 453/455 [M+H]+.
【０４９７】
5-{3-[3-(5-クロロ-2,4-ジヒドロキシ-フェニル)-1H-ピラゾール-4-イル]-フェノキシ}-ペンタンニトリル
【化１３０】
2005517675.tif 000167
この化合物は、上記と同じ方法で合成した。5-[3-(6-クロロ-7-ヒドロキシ-4-オキソ-4H-クロメン-3-イル)-フェノキシ]-ペンタンニトリル(0.1g、0.27mmol)、ヒドラジン水和物(5ml)。冷却により形成された沈殿物をろ過して、白色固体としての5-{3-[3-(5-クロロ-2,4-ジヒドロキシ-フェニル)-1H-ピラゾール-4-イル]-フェノキシ}-ペンタンニトリルを得た(0.09g、87.0%)；Rf 0.6 酢酸エチル/ ヘキサン(70/30)]。
【０４９８】
δH (DMSO) : 10.14 (2H, s, OH), 7.72 (1H, s, =CH), 6.96 (6H, m, ArH),  3.90 (2H, t, J=7Hz, CH2), 2.45 (2H, t, J=7Hz, CH2), 1.68 (4H, m, -(CH2)2-) . LCMS tR 6.63, m/z 384/386 [M+H]+.
【０４９９】
5-{4-[3-(5-クロロ-2,4-ジヒドロキシ-フェニル)-1H-ピラゾール-4-イル]-フェノキシ}-ペンタンニトリル
【化１３１】
2005517675.tif 000168
この化合物は、セクション1.1.5.1に記載されたのと同じ方法で合成した。5-[4-(6-クロロ-7-ヒドロキシ-4-オキソ-4H-クロメン-3-イル)-フェノキシ]-ペンタンニトリル(0.1g、0.27mmol)、ヒドラジン水和物(5ml)。冷却により形成された沈殿物をろ過して、白色固体として5-{3-[3-(5-クロロ-2,4-ジヒドロキシ-フェニル)-1H-ピラゾール-4-イル]-フェノキシ}-ペンタンニトリルを得た(0.08g、77%)；Rf 0.65 酢酸エチル/ ヘキサン(70/30)]。
【０５００】
δH (DMSO) : 10.16 (2H, s, OH), 7.80 (1H, s, =CH), 6.90 (6H, m, ArH),  3.84 (2H, t, J=7Hz, CH2), 2.46 (2H, t, J=7Hz, CH2), 1.65 (4H, m, -(CH2)2-) . LCMS tR 6.83, m/z 384/386 [M+H]+.
【０５０１】
4-クロロ-6-[4-(3',4'-ジメトキシ-ビフェニル-4-イル)-1H-ピラゾール-3-イル]-ベンゼン-1,3-ジオール
【化１３２】
2005517675.tif 000169
この化合物は、上記のようにして製造した。
δH (DMSO) : 10.23, 9.89 (2H, 2 x s, OH), 7.78 (1H, s, =CH), 7.17 (9H, m, ArH), 3.83, 3.78 (6H, 2 x s, 2 x CH3). LCMS tR 7.33, m/z 423/425 [M+H]+.
【０５０２】
次の反応は、スキーム15に関する：実施例104のベンジル中間体の合成
炭酸 2-ベンゾイル-5-エトキシカルボニルオキシ-フェニル エステル エチル エステル
【化１３３】
2005517675.tif 000170
トリエチルアミン(10ml、72.2mmol)を、THF (50ml)中の2,4-ジヒドロキシベンゾフェノン(1) (5.4g,23.3 mmol)の溶液に添加し、溶液を0℃に冷却した。クロロギ酸エチル(6.9ml、72.2mmol)をゆっくり添加し、懸濁液を0℃で〜30分間、そして室温で〜3時間攪拌した。水(150ml)を添加し、混合物をジエチルエーテル(150ml)で抽出した。抽出物を水(2×150ml)、および飽和塩化ナトリウム水溶液(100ml)で洗浄した。溶液を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮して4-ベンジル-ベンゼン-1,3-ジオールを薄い緑色のガムとして得て、放置して固化した(8.2g)。
【０５０３】
LC保持時間2.73分 [M+H]+ 359.2       (実行時間3.75分)
δ (クロロホルム-d) 7.7(m 2ArH) 7.5(m 2ArH) 7.35(m 2ArH) 7.15(m 2ArH) 4.25(q J 7.1Hz 2CH2) 4.05(q J 7.1Hz 2 CH2) 1.35(t J 7.1Hz 3CH3) 1.15(t J 7.1Hz 3 CH3)
【０５０４】
【化１３４】
2005517675.tif 000171
4-ベンジル-ベンゼン-1,3-ジオール
水(30ml)中の水素化ホウ素ナトリウム(1.85g、49mmol)の溶液を、THF (30ml)中の炭酸 2-ベンゾイル-5-エトキシカルボニルオキシ-フェニル エステル エチル エステル (3.6g、10mmol)の氷冷却水溶液に添加した。混合物を0℃で〜60分間、そして室温で〜60時間攪拌して薄い赤色の溶液を得た。水(150ml)を添加し、混合物をジエチルエーテル(150ml)で抽出した。抽出物を水(2×100ml)、および飽和塩化ナトリウム水溶液(50ml)で洗浄した。溶液を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮して薄い黄色のガムを得た。このガムを水酸化ナトリウム水溶液(20ml、10%)中に採取し、溶液を還流下に〜60分間加熱した。溶液が冷却するのを許容し、塩酸(5ml、37%)で酸性化した。混合物をジエチルエーテル(50ml)で抽出した。抽出物を水(3×40ml)、および飽和塩化ナトリウム水溶液(30ml)で洗浄した。溶液を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮して、濃赤色のガムとして4-ベンジル-ベンゼン-1,3-ジオールを得た(2.1g)。
【０５０５】
LC保持時間2.28分 [M+H]+ イオンなし        (実行時間 3.75分)
δ (クロロホルム-d) 7.2(m 3ArH) 7.1(m 2ArH) 6.85(d  J 8.1Hz ArH) 6.3(d J 8.1Hz ArH) 6.2(s ArH)  3.85(s 2CH2)
【０５０６】
次の反応は、スキーム10に関する：実施例64、92〜96、104、140のジヒドロキシフェニルケトンの一般的な合成
1-(2,4-ジヒドロキシ-フェニル)-2-(4-メトキシ-フェニル)-エタノン
【化１３５】
2005517675.tif 000172
三フッ化ホウ素エーテル錯体(25ml、0.2mol)中のレゾルシノール(4.4g、40mmol)および4-メトキシフェニル酢酸(6.6g、40mmol)を、窒素雰囲気下に90℃で〜90分間加熱して、薄い赤色の溶液を得た。溶液が冷却するのを許容し、酢酸ナトリウム水溶液(200ml、10%)中に注ぎ、混合物を攪拌して薄い黄色の沈殿物を得た。固体をろ去し、水(200ml)で洗浄した。固体を酢酸エチル(250ml)中に採取し、水(200ml)で洗浄した。溶液を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮して黄色の半固体を得た。ジエチルエーテル(100ml)で粉砕して、薄いオレンジ色の固体として1-(2,4-ジヒドロキシ-フェニル)-2-(4-メトキシ-フェニル)-エタノンを得て、真空下に乾燥した(2.2g)。
【０５０７】
LC保持時間2.39分 [M+H]+ 259.2       (実行時間 3.75分)
δ (DMSO-d6) 7.95(d J 8.9Hz ArH) 7.2(d J 8.7Hz 2ArH) 6.9(d J 8.7Hz 2ArH) 6.4(d J 9.9 ArH) 6.25(s ArH) 4.2(s  2CH2)  3.75(s 3OCH3)
【０５０８】
同様に
【化１３６】
2005517675.tif 000173
4-クロロレゾルシノールは、1-(5-クロロ-2,4-ジヒドロキシ-フェニル)-2-(4-メトキシ-フェニル)-エタノンを与えた。
LC保持時間 2.74 分 [M+H]+ 293.2           (実行時間 3.75分)
δ (DMSO-d6) 7.65(s ArH) 7.0(d J 8.7Hz 2ArH) 6.7(d J 8.7Hz 2ArH) 5.45(s ArH) 3.7(s  2CH2)  3.5(s 3OCH3)
【０５０９】
【化１３７】
2005517675.tif 000174
4-ベンジル-ベンゼン-1,3-ジオールは、1-(5-ベンジル-2,4-ジヒドロキシ-フェニル)-2-(4-メトキシ-フェニル)-エタノンを与えた。
LC保持時間 2.78 分 [M+H]+ 349.3           (実行時間 3.75分)
δ (クロロホルム-d) 7.4(s ArH) 7.3-7.0(m 5ArH) 6.95(d J 8.7Hz  2ArH) 6.75(d J 8.7Hz  2ArH) 6.25(s ArH) 3.95(s  2CH2) 3.8(s  2CH2) 3.7(s 3OCH3)
【０５１０】
次の反応は、スキーム11に関する。実施例64、92〜96、104、140の7-ヒドロキシ-2-メチル-3-フェニル-クロメン-4-オンの一般的な合成
7-ヒドロキシ-3-(4-メトキシ-フェニル)-2-メチル-クロメン-4-オン
【化１３８】
2005517675.tif 000175
無水酢酸(3ml、30mmol)を、DMF (10ml)中の炭酸カリウム(4.0g、29mmol)および1-(2,4-ジヒドロキシ-フェニル)-2-(4-メトキシ-フェニル)-エタノン(1.95g、7.5mmol)の懸濁物に添加し、得られた懸濁物を115℃で〜90分間加熱した。混合物が冷却するのを許容し、水(200ml)に注いで、オフホワイト色の沈殿物を得た。固体をろ去し、水(100ml)およびジエチルエーテル(2×40ml)で洗浄して、オフホワイト色の粉末として7-ヒドロキシ-3-(4-メトキシ-フェニル)-2-メチル-クロメン-4-オンを得て、真空で乾燥した(1.65g)。
【０５１１】
LC保持時間 2.26 分 [M+H]+ 283.2           (実行時間 3.75分)
δ (DMSO-d6) 7.8(d J 8.7Hz ArH) 7.2(d J 8.8Hz 2ArH) 7.0(d J 8.8Hz 2ArH) 6.9(d J 8.7 ArH) 6.8(s ArH) 3.8(s 3OCH3) 2.2(s  3CH3)
【０５１２】
同様に
【化１３９】
2005517675.tif 000176
1-(5-クロロ-2,4-ジヒドロキシ-フェニル)-2-(4-メトキシ-フェニル)-エタノンは、6-クロロ-7-ヒドロキシ-3-(4-メトキシ-フェニル)-2-メチル-クロメン-4-オンを与えた。
LC保持時間 2.33 分 [M+H]+ 317.2           (実行時間 3.75分)
δ (DMSO-d6) 8.0(s ArH) 7.3(d J 8.7Hz 2ArH)  7.15(s ArH)  7.1(d J 8.7Hz 2ArH) 3.9(s 3OCH3) 2.35(s  3CH3)
【０５１３】
【化１４０】
2005517675.tif 000177
7-ヒドロキシ-3-(4-メトキシ-フェニル)-2-メチル-クロメン-4-オンは、6-ベンジル-7-ヒドロキシ-3-(4-メトキシ-フェニル)-2-メチル-クロメン-4-オンを与えた。
LC保持時間 2.57 分 [M+H]+ 373.3           (実行時間 3.75分)
δ (DMSO-d6) 7.7(s ArH) 7.4-7.2(m 5ArH) 7.15(d J 8.8Hz 2ArH) 6.95(d J 8.8Hz 2ArH) 6.9(s ArH) 4.0(s 2CH2) 3.8(s 3OCH3) 2.25(s  3CH3)
【０５１４】
次の反応は、スキーム16に関する：実施例139のジクロロの合成
【化１４１】
2005517675.tif 000178
6,8-ジクロロ-7-ヒドロキシ-2-メチル-3-フェニル-クロメン-4-オン
N-クロロスクシンイミド(0.27g、2mmol)を、DMF (4ml)中の6-クロロ-7-ヒドロキシ-3-(4-メトキシ-フェニル)-2-メチル-クロメン-4-オン(0.29g、1mmol)の溶液に添加し、溶液を〜3時間、および50℃で〜3時間攪拌した。得られた溶液を水(50ml)に注ぎ、酢酸エチル(2×30ml)で抽出した。合わせた抽出物を水(5×50ml)、および飽和塩化ナトリウム水溶液(30ml)で洗浄した。溶液を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮して濃黄色の油を得た。ヘキサンで粉砕して、薄いオレンジ色の粉末として6,8-ジクロロ-7-ヒドロキシ-2-メチル-3-フェニル-クロメン-4-オンを得て、真空で乾燥した(0.19g)。
LC保持時間 2.52 分 [M+H]+ 323.1           (実行時間 3.75分)
δ (クロロホルム-d) 8.1(s ArH) 7.5- 7.3(m 3ArH) 7.3- 7.15(m 2ArH) 2.3(s 3CH3)
【０５１５】
次の反応は、スキーム17に関する：実施例135のブロモフラボン
8-ブロモ-7-ヒドロキシ-2-メチル-3-フェニル-クロメン-4-オン
【化１４２】
2005517675.tif 000179
N-ブロモスクシンイミド(2.0g、11.2mmol)を、DMF (20ml)中の7-ヒドロキシ-2-メチル-3-フェニル-クロメン-4-オン(2.5g、10mmol)の溶液に添加し、溶液を〜24時間攪拌して、オレンジ色の懸濁物を得た。懸濁物を水(200ml)に注いで薄いピンク色の沈殿物を得て、固体をろ過し、水で洗浄した。固体をエタノールから再結晶して、オフホワイト色の固体として8-ブロモ-7-ヒドロキシ-2-メチル-3-フェニル-クロメン-4-オンを得た(1.95g)。
LC保持時間 2.39 分 [M+H]+ 333.1           (実行時間 3.75分)
δ (DMSO-d6) 7.75(d J 8.8Hz ArH) 7.4-7.2(m 3ArH)  7.15(m 2ArH)  6.95(d J 8.8Hz ArH) 2.15(s  3CH3)
【０５１６】
次の反応は、スキーム13に関する。実施例64、92〜96、104、140のピラゾールの合成
4-[4-(4-メトキシ-フェニル)-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル]-ベンゼン-1,3-ジオール
【化１４３】
2005517675.tif 000180
ヒドラジン水和物(2ml、〜55%)を、エタノール(15ml)中の7-ヒドロキシ-3-(4-メトキシ-フェニル)-2-メチル-クロメン-4-オン(0.57g、2mmol)の懸濁物に添加し、混合物を還流下に〜5時間加熱して、薄茶色の溶液を得た。溶液が冷却するのを許容し、濃縮して薄い黄色の固体を得、固体を水で洗浄して、オフホワイト色の固体としてピラゾールを得て、真空で乾燥した(0.45g)。サンプルを沸騰したトルエンから再結晶させて、薄茶色の結晶固体として4-[4-(4-メトキシ-フェニル)-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル]-ベンゼン-1,3-ジオールを得て、ヘキサンで洗浄し、真空で乾燥した。
LC保持時間 2.16分 [M+H]+ 297.2            (実行時間 3.75分)
δ (アセトン-d6) 7.2(d J 8.8Hz 2ArH)  7.0(d J 8.8Hz 2ArH) 6.9(d J 8.6Hz ArH) 6.35(s ArH)  6.1(d J 8.7Hz ArH) 3.85(s 3OCH3) 2.2(s  3CH3)
【０５１７】
同様に
【化１４４】
2005517675.tif 000181
6-クロロ-7-ヒドロキシ-3-(4-メトキシ-フェニル)-2-メチル-クロメン-4-オンは、4-クロロ-6-[4-(4-メトキシ-フェニル)-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル]-ベンゼン-1,3-ジオールを与えた。
LC保持時間 2.34分 [M+H]+ 331.2            (実行時間 3.75分)
δ (アセトン-d6) 7.25(d J 8.8Hz 2ArH)  7.15(d J 8.8Hz 2ArH) 7.1(s ArH) 6.5(s ArH) 3.85(s 3OCH3) 2.2(s  3CH3)
【０５１８】
【化１４５】
2005517675.tif 000182
6-ベンジル-7-ヒドロキシ-3-(4-メトキシ-フェニル)-2-メチル-クロメン-4-オンは、4-ベンジル-6-[4-(4-メトキシ-フェニル)-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル]-ベンゼン-1,3-ジオールを与えた。
LC保持時間 2.57分 [M+H]+ 387.3            (実行時間 3.75分)
δ (アセトン-d6) 7.15-6.9(m 9ArH) 6.75(s ArH) 6.3(s ArH) 3.75(s 3OCH3) 2.45(br s 4CH2) 2.15(s 3CH3)
【０５１９】
【化１４６】
2005517675.tif 000183
7-ヒドロキシ-3-(4-メトキシ-フェニル)-2-メチル-6-フェニル-クロメン-4-オンは、5-[4-(4-メトキシ-フェニル)-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル]-ビフェニル-2,4-ジオールを与えた。
LC保持時間 2.49分 [M+H]+ 373.3            (実行時間 3.75分)
δ (アセトン-d6) 7.3-7.05(m 10ArH) 6.5(s ArH) 3.85(s 3OCH3) 2.2(s 3CH3)
【０５２０】
【化１４７】
2005517675.tif 000184
7-ヒドロキシ-3-(4-メトキシ-フェニル)-2-メチル-6-フェネチル-クロメン-4-オンは、4-[4-(4-メトキシ-フェニル)-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル]-6-フェネチル-ベンゼン-1,3-ジオールを与えた。
LC保持時間 2.64分 [M+H]+ 401.3            (実行時間 3.75分)
δ (アセトン-d6) 7.15-6.9(m 9ArH) 6.8(s ArH) 6.4(s ArH) 3.8(s 3OCH3) 3.55(s 2CH2) 2.15(s 3CH3)
【０５２１】
【化１４８】
2005517675.tif 000185
6,8-ジクロロ-7-ヒドロキシ-2-メチル-3-フェニル-クロメン-4-オンは、2,4-ジクロロ-6-(5-メチル-4-フェニル-1H-ピラゾール-3-イル)-ベンゼン-1,3-ジオールを与えた。
LC保持時間 2.56分 [M+H]+ 337.2            (実行時間 3.75分)
δ (アセトン-d6) 7.45-7.25(m 3ArH)  7.15(m 2ArH) 6.95(s ArH) 2.25(s 3CH3)
【０５２２】
次の反応は、スキーム18に関する：実施例93、135、140のブロモレゾルシノールの合成
【化１４９】
2005517675.tif 000186
8-ブロモ-7-ヒドロキシ-2-メチル-3-フェニル-クロメン-4-オンは、2-ブロモ-4-(5-メチル-4-フェニル-1H-ピラゾール-3-イル)-ベンゼン-1,3-ジオールを与えた。
LC保持時間 2.4分 [M+H]+ 347.2       (実行時間 3.75分)
δ (アセトン-d6) 7.5-7.35(m 3ArH)  7.3(m 2ArH) 6.85(d J 8.6Hz ArH) 6.25(d J 8.6Hz ArH)  2.2(s 3CH3)
【０５２３】
4-ブロモ-6-[4-(4-メトキシ-フェニル)-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル]-ベンゼン-1,3-ジオール
【化１５０】
2005517675.tif 000187
ベンジルトリメチルアンモニウムトリブロミド(4.0g、10.2mmol)を、ジクロロメタン(50ml)中の4-[4-(4-メトキシ-フェニル)-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル]-ベンゼン-1,3-ジオール(2.95g、10mmol)の懸濁物に分割様式で添加して、混合物を〜90分間攪拌した。混合物を水(3×50ml)および飽和塩化ナトリウム水溶液(25ml)で洗浄した。溶液を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮して薄い黄色の固体を得た。
粗生成物をシリカ上の、酢酸エチル/ ヘキサン(1:2)で溶出するカラムクロマトグラフィーにより精製して、4-ブロモ-6-[4-(4-メトキシ-フェニル)-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル]-ベンゼン-1,3-ジオールを得た(1.75g)。
LC保持時間 2.37分 [M+H]+ 375.1            (実行時間 3.75分)
δ (アセトン-d6) 7.25(d J 8.8Hz 2ArH) 7.2(s ArH) 7.1(d J 8.8Hz 2ArH) 6.55(s ArH) 3.9(s 3OCH3) 2.2(s 3CH3)
【０５２４】
同様に
【化１５１】
2005517675.tif 000188
2,4-ジブロモ-6-[4-(4-メトキシ-フェニル)-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル]-ベンゼン-1,3-ジオール (0.14g)
LC保持時間 2.59分 [M+H]+ 455.1            (実行時間 3.75分)
δ (アセトン-d6) 7.25(d J 8.8Hz 2ArH) 7.2(s ArH) 7.1(d J 8.8Hz 2ArH) 3.85(s 3OCH3) 2.2(s 3CH3)
【０５２５】
次の反応は、スキーム21に関する：実施例105、106の蛍光プローブの合成  
3-(2,4-ビス-ベンジルオキシ-5-クロロ-フェニル)-1H-ピラゾールを、上記の方法に従って製造した。
3-(2,4-ビス-ベンジルオキシ-5-クロロ-フェニル)-4-ヨード-1H-ピラゾール
【化１５２】
2005517675.tif 000189
DCM (50ml)中の3-(2,4-ビス-ベンジルオキシ-5-クロロ-フェニル)-1H-ピラゾール (4.06g 10.05 mmol)の混合物に、N-ヨードスクシンイミド (2.35g、10.45mmol)をばらで添加した。混合物を室温で2時間攪拌し、次いで水とDCMとに分配した。有機物を飽和チオ硫酸ナトリウム溶液で、次いで水で洗浄し、真空で乾燥して黄色の結晶の塊を得、これを、攪拌しながらヘキサンを徐々に添加して酢酸エチルから粉砕して、3-(2,4-ビス-ベンジルオキシ-5-クロロ-フェニル)-4-ヨード-1H-ピラゾールを得た(5.21g、97%)。
LC保持時間 2.93分、[M+H]+ 517.
【０５２６】
3-(2,4-ビス-ベンジルオキシ-5-クロロ-フェニル)-4-ヨード-1-(2-トリメチルシラニル-エトキシメチル)-1H-ピラゾール
【化１５３】
2005517675.tif 000190
DMF (50ml)中の3-(2,4-ビス-ベンジルオキシ-5-クロロ-フェニル)-4-ヨード-1H-ピラゾール(4.46g、8.63mmol)および炭酸セシウム(8.43g、25.88mmol)の混合物に、2-(トリメチルシリル)エトキシメチルクロライド(2.29ml、12.94mmol)を添加した。水およびDCMに分配する前に、混合物を室温で一晩攪拌した。次いで、有機物を塩水および水で洗浄し、真空で乾燥して黄色の油を得て、これを、ヘキサンおよび酢酸エチルを溶離液として用いるカラムクロマトグラフィーにより精製して、透明無色の油として3-(2,4-ビス-ベンジルオキシ-5-クロロ-フェニル)-4-ヨード-1-(2-トリメチルシラニル-エトキシメチル)-1H-ピラゾールを得た(4.44g、80%)。
LC保持時間 3.24分、[M+H]+ 647.
【０５２７】
4-[3-(2,4-ビス-ベンジルオキシ-5-クロロ-フェニル)-1-(2-トリメチルシラニル-エトキシメチル)-1H-ピラゾール-4-イル]-ベンジルアミン
【化１５４】
2005517675.tif 000191
DMF (3ml)中の3-(2,4-ビス-ベンジルオキシ-5-クロロ-フェニル)-4-ヨード-1-(2-トリメチルシラニル-エトキシメチル)-1H-ピラゾール(0.1g、0.15mmol)の混合物に、4-アミノメチルホウ素酸(0.028g、0.30mmol)を添加した。次いで、1M 重炭酸ナトリウム溶液(0.5ml、0.5mmol)を添加し、続いてジクロロビス(トリフェニルホスフィン) パラジウムII (0.011g、0.015mmol)を添加した。混合物を脱気し、次いでマイクロ波の照射下に150℃で600秒間加熱した。次いで、混合物を真空で濃縮し、ジクロロメタンおよびメタノールを溶離液として用いるカラムクロマトグラフィーにより精製して、4-[3-(2,4-ビス-ベンジルオキシ-5-クロロ-フェニル)-1-(2-トリメチルシラニル-エトキシメチル)-1H-ピラゾール-4-イル]-ベンジルアミンを得た(0.025g、26%)。
LC保持時間 2.59分、[M+H]+ 626.
【０５２８】
4-[3-(2,4-ビス-ベンジルオキシ-5-クロロ-フェニル)-1-(2-トリメチルシラニル-エトキシメチル)-1H-ピラゾール-4-イル]-ベンジルアミン
【化１５５】
2005517675.tif 000192
DCM (1ml)中の4-[3-(2,4-ビス-ベンジルオキシ-5-クロロ-フェニル)-1-(2-トリメチルシラニル-エトキシメチル)-1H-ピラゾール-4-イル]-ベンジルアミン(0.0076g、0.012mmol)およびトリエチルアミン (0.005ml、0.036mmol)の混合物に、(7-アミノ-4,6-ジメチル-2-オキソ-2H-クロメン-3-イル)-酢酸 2,5-ジオキソ-ピロリジン-1-イル エステル(0.005g、0.0121mmol)を添加した。混合物を1時間、室温で攪拌し、次いで三塩化ホウ素(DCM中に1M、0.06ml、0.06mmol)を滴下した。1時間の攪拌後、混合物を水(0.5ml)の添加により冷却し、次いで真空で濃縮して白色の粉末を得て、これを分取スケールのLCMSにより精製して、白色粉末として4-[3-(2,4-ビス-ベンジルオキシ-5-クロロ-フェニル)-1-(2-トリメチルシラニル-エトキシメチル)-1H-ピラゾール-4-イル]-ベンジルアミンを得た(0.0018g、27%)。
LC保持時間 1.80分、[M+H]+ 611.
【０５２９】
N-4-[3-(2,4-ビス-ベンジルオキシ-5-クロロ-フェニル)-1-(2-トリメチルシラニル-エトキシメチル)-1H-ピラゾール-4-イル]-ベンジル)-6-(6-ヒドロキシ-3-オキソ-3H-キサンテン-9-イル)-イソフタル酸
【化１５６】
2005517675.tif 000193
DCM (1ml)中の4-[3-(2,4-ビス-ベンジルオキシ-5-クロロ-フェニル)-1-(2-トリメチルシラニル-エトキシメチル)-1H-ピラゾール-4-イル]-ベンジルアミン(0.02g、0.03mmol)およびトリエチルアミン(0.02ml、0.15mmol)の混合物に、4-(6-ヒドロキシ-3-オキソ-3H-キサンテン-9-イル)-イソフタル酸 2,5-ジオキソ-ピロリジン-1-イル エステル(0.016g、0.03mmol)を添加した。混合物を室温で1時間攪拌し、次いで真空で濃縮した。混合物を、酢酸エチルおよびヘキサンを溶離液として用いるカラムクロマトグラフィーにより精製して、黄色の固体としてN-4-[3-(2,4-ビス-ベンジルオキシ-5-クロロ-フェニル)-1-(2-トリメチルシラニル-エトキシメチル)-1H-ピラゾール-4-イル]-ベンジル)-6-(6-ヒドロキシ-3-オキソ-3H-キサンテン-9-イル)-イソフタル酸を得た(0.0126g、40%)。
LC保持時間 3.16分、[M+H]+ 983.
【０５３０】
N-{4-[3-(5-クロロ-2,4-ジヒドロキシ-フェニル)-1H-ピラゾール-4-イル]-ベンジル}-6-(6-ヒドロキシ-3-オキソ-3H-キサンテン-9-イル)-イソフタルアミド酸
【化１５７】
2005517675.tif 000194
DCM (1ml)中のN-4-[3-(2,4-ビス-ベンジルオキシ-5-クロロ-フェニル)-1-(2-トリメチルシラニル-エトキシメチル)-1H-ピラゾール-4-イル]-ベンジル)-6-(6-ヒドロキシ-3-オキソ-3H-キサンテン-9-イル)-イソフタル酸(0.0126g、0.013mmol)の混合物に、三塩化ホウ素 (DCM中に1M、0.06ml、0.06mmol)を滴下した。1時間攪拌後、混合物を水(0.5ml)の添加により冷却し、次いで真空で濃縮して黄色の粉末を得て、これを分取スケールのLCMSにより精製して、黄色の粉末としてN-{4-[3-(5-クロロ-2,4-ジヒドロキシ-フェニル)-1H-ピラゾール-4-イル]-ベンジル}-6-(6-ヒドロキシ-3-オキソ-3H-キサンテン-9-イル)-イソフタルアミド酸を得た(0.00285g、32%)。
LC保持時間 2.21分、[M+H]+ 675.
【０５３１】
次の反応は、スキーム20に関する：実施例148、151、152の4'フルオロ-2'-フェノールの合成
4-(4-メトキシ-フェニル)-5-メチル-1H-ピラゾール
【化１５８】
2005517675.tif 000195
p-メトキシ フェニルアセトン(1当量)に、ジメチルホルムアミド ジメチルアセタール(1.5当量)を添加し、混合物を還流にて一晩攪拌した。反応物を室温に冷却し、エタノールで希釈した。ヒドラジン水和物を添加し(3当量)、全体を85℃で一晩加熱した。一旦冷却して、反応混合物を真空で濃縮し、EtOAcと水に分割した。有機相をMgSO4で乾燥し、ろ過し、真空で濃縮して、白色固体として4-(4-メトキシ-フェニル)-5-メチル-1H-ピラゾールを得た。
LC保持時間 2.017分 [M+H]+ 189.2
【０５３２】
4-(4-メトキシ-フェニル)-5-メチル-1-(2-トリメチルシラニル-エトキシメチル)-1H-ピラゾール および4-(4-メトキシ-フェニル)-3-メチル-1-(2-トリメチルシラニル-エトキシメチル)-1H-ピラゾール
【化１５９】
2005517675.tif 000196
4-(4-メトキシ-フェニル)-5-メチル-1H-ピラゾール (1当量)をDMF中にN2下で採取し、0℃に冷却した。炭酸セシウム(1当量)を添加し、溶液を5分間攪拌した。2-(トリメチルシリル)エトキシ メチル クロライド(0.95当量)を滴下し、全体を2時間攪拌した。反応混合物を水とEtOAcに分割した。有機相をMgSO4で乾燥し、ろ過し、真空で濃縮してガムを得た。これをフラッシュクロマトグラフィーにより(8:1 ヘキサン: EtOAc)精製して、異性体の混合物として4-(4-メトキシ-フェニル)-5-メチル-1-(2-トリメチルシラニル-エトキシメチル)-1H-ピラゾールおよび4-(4-メトキシ-フェニル)-3-メチル-1-(2-トリメチルシラニル-エトキシメチル)-1H-ピラゾールを得た。
LC保持時間 2.868分 [M+H]+ 319.3
【０５３３】
4-(4-メトキシ-フェニル)-3-メチル-1-(2-トリメチルシラニル-エトキシメチル)-1H-ピラゾール-5-ホウ素酸
【化１６０】
2005517675.tif 000197
4-(4-メトキシ-フェニル)-5-メチル-1-(2-トリメチルシラニル-エトキシメチル)-1H-ピラゾールおよび4-(4-メトキシ-フェニル)-3-メチル-1-(2-トリメチルシラニル-エトキシメチル)-1H-ピラゾール(1当量)の混合物を、THF中に採取し、窒素下で-78℃に冷却した。nBuLi (1.2当量)を滴下し、全体を30分間攪拌した。トリイソプロピルボレート(2.5当量)を添加して、反応物を室温で攪拌した。45分後に、反応混合物を水で冷却し、EtOAcで抽出した。有機相をMgSO4で乾燥し、ろ過し、真空で濃縮してガムを得た。これをフラッシュクロマトグラフィーにより(9:1 ヘキサン: EtOAc)精製して、油として4-(4-メトキシ-フェニル)-3-メチル-1-(2-トリメチルシラニル-エトキシメチル)-1H-ピラゾール-5-ホウ素酸を得た。
LC保持時間2.538分 [M+H]+ 363.3
【０５３４】
2-ブロモ-4-クロロ-5-フルオロ-フェノール
【化１６１】
2005517675.tif 000198
4-クロロ-3-フルオロフェノールを、JOC 1997 62 4504〜4506に記載のようにして処理し、ガムとして2-ブロモ-4-クロロ-5-フルオロ-フェノールを得た。
LC保持時間 2.468分；サンプルはイオン化しない。
【０５３５】
1-ベンジルオキシ-2-ブロモ-4-クロロ-5-フルオロ-ベンゼン
【化１６２】
2005517675.tif 000199
2-ブロモ-4-クロロ-5-フルオロ-フェノール (1当量)をDMF中に採取した。炭酸セシウム(2.5当量)を添加し、溶液を5分間攪拌した。ベンジルブロミド(1.05当量)を添加して、全体を室温で窒素下に3時間攪拌した。反応混合物を塩水で希釈し、ジエチルエーテル中に抽出した。有機相を塩水で数回洗浄し、MgSO4で乾燥し、ろ過し、真空で濃縮して、油として1-ベンジルオキシ-2-ブロモ-4-クロロ-5-フルオロ-ベンゼンを得て、これを放置して固化した。
LC保持時間 2.930分 サンプルはイオン化しない。
【０５３６】
5-(2-ベンジルオキシ-5-クロロ-4-フルオロ-フェニル)-4-(4-メトキシ-フェニル)-3-メチル-1-(2-トリメチルシラニル-エトキシメチル)-1H-ピラゾール
【化１６３】
2005517675.tif 000200
1-ベンジルオキシ-2-ブロモ-4-クロロ-5-フルオロ-ベンゼン(1.5当量)をエチル グリコール ジメチルエーテル中に採取し、窒素で脱気した。実施例3 (1当量)を添加し、溶液を同じ容積の1M Na2CO3で希釈した。触媒量のPd(PPh3)4を添加し、反応混合物をスミスパーソナルシンセザイザーマイクロ波(Smith Personal Synthesiser microwave)中に150℃で5分間加熱した。得られた反応混合物を水で希釈し、ジエチルエーテル中に抽出した。有機相をMgSO4で乾燥し、ろ過し、真空で濃縮して分取LC/MSにより精製して、5-(2-ベンジルオキシ-5-クロロ-4-フルオロ-フェニル)-4-(4-メトキシ-フェニル)-3-メチル-1-(2-トリメチルシラニル-エトキシメチル)-1H-ピラゾールを得た。
LC保持時間 3.197分 [M+H]+ 553.5/555.5 (塩素分解パターン)
【０５３７】
4-クロロ-5-フルオロ-2-[4-(4-メトキシ-フェニル)-5-メチル-2H-ピラゾール-3-イル]-フェノール
【化１６４】
2005517675.tif 000201
5-(2-ベンジルオキシ-5-クロロ-4-フルオロ-フェニル)-4-(4-メトキシ-フェニル)-3-メチル-1-(2-トリメチルシラニル-エトキシメチル)-1H-ピラゾール(1当量)を無水ジクロロメタン中に採取し、溶液を窒素下に0℃に冷却した。ジクロロメタン中の1M 三塩化ホウ素(6当量)を滴下し、溶液が冷却するのを許容して1時間攪拌した。反応混合物を飽和NaHCO3 (水溶液)に滴下し、得られた溶液をジクロロメタン中に抽出した。有機相を塩水で洗浄し、MgSO4で乾燥し、ろ過し、真空で濃縮した。残渣を分取LC/MSにより精製して、白色固体として4-クロロ-5-フルオロ-2-[4-(4-メトキシ-フェニル)-5-メチル-2H-ピラゾール-3-イル]-フェノールを得た。
LC/MS保持時間 =2.755分 [M+H]+ 333.2/335.2 (塩素開裂様式)
【０５３８】
次の反応は、スキーム23に関する：実施例152のアミノピリミジンの合成
4-[4-(4-メトキシ-フェニル)-5-メチル-2-(2-トリメチルシラニル-エトキシメチル)-2H-ピラゾール-3-イル]-6-メチル-ピリミジン-2-イルアミン
【化１６５】
2005517675.tif 000202
4-クロロ-6-メチル ピリミジン-2-イル アミン (1.5当量)をエチル グリコール ジメチルエーテル中に採取し、窒素で脱気した。実施例3 (1当量)を添加し、溶液を、同じ容積の1M Na2CO3で希釈した。触媒量のPd(PPh3)4を添加し、反応混合物をスミスパーソナルシンセザイザーマイクロ波中に150℃で5分間加熱した。得られた反応混合物を水で希釈し、ジエチルエーテル中に採取した。有機相をMgSO4で乾燥し、ろ過し、真空で濃縮し、分取LC/MSにより精製して、4-[4-(4-メトキシ-フェニル)-5-メチル-2-(2-トリメチルシラニル-エトキシメチル)-2H-ピラゾール-3-イル]-6-メチル-ピリミジン-2-イルアミンを得た。
LC保持時間 2.686分 [M+H]+ 426.4
d
【０５３９】
4-[4-(4-メトキシ-フェニル)-5-メチル-2H-ピラゾール-3-イル]-6-メチル-ピリミジン-2-イルアミン
【化１６６】
2005517675.tif 000203
4-[4-(4-メトキシ-フェニル)-5-メチル-2-(2-トリメチルシラニル-エトキシメチル)-2H-ピラゾール-3-イル]-6-メチル-ピリミジン-2-イルアミンを、窒素下に無水ジクロロメタンに溶解した。ジクロロメタン(7当量)中の2M 三塩化ホウ素ジメチルエーテルを滴下し、全体を2時間攪拌した。反応混合物を飽和NaHCO3(水溶液)に滴下し、ジクロロメタン中に抽出した。有機相をMgSO4で乾燥し、ろ過し、真空で濃縮した。残渣を分取LC/MSにより精製して、固体として4-[4-(4-メトキシ-フェニル)-5-メチル-2H-ピラゾール-3-イル]-6-メチル-ピリミジン-2-イルアミンを得た。
LC保持時間 1.885分 [M+H]+ 296.1
【０５４０】
次の反応は、スキーム22に関する：実施例151のメチル-アミノピリミジンの合成
5-[4-(4-メトキシ-フェニル)-5-メチル-2-(2-トリメチルシラニル-エトキシメチル)-2H-ピラゾール-3-イル]-ピリミジン-2-イルアミン
【化１６７】
2005517675.tif 000204
5-ブロモ-ピリミジン-2-イル アミン(1.5当量)をエチル グリコール ジメチルエーテル中に採取して、窒素で脱気した。実施例3 (1当量)を添加し、溶液を、同じ容積の1M Na2CO3で希釈した。触媒量のPd(PPh3)4を添加し、反応混合物をスミスパーソナルシンセザイザーマイクロ波中に150℃で5分間加熱した。得られた反応混合物を水で希釈して、ジエチルエーテル中に抽出した。有機相をMgSO4で乾燥し、ろ過し、真空で濃縮し、分取LC/MSで精製して、5-[4-(4-メトキシ-フェニル)-5-メチル-2-(2-トリメチルシラニル-エトキシメチル)-2H-ピラゾール-3-イル]-ピリミジン-2-イルアミンを得た。
LC保持時間 2.631分 [M+H]+ 412.4
【０５４１】
5-[4-(4-メトキシ-フェニル)-5-メチル-2H-ピラゾール-3-イル]-ピリミジン-2-イルアミン
【化１６８】
2005517675.tif 000205
5-[4-(4-メトキシ-フェニル)-5-メチル-2-(2-トリメチルシラニル-エトキシメチル)-2H-ピラゾール-3-イル]-ピリミジン-2-イルアミンを、窒素下に無水ジクロロメタンに溶解した。ジクロロメタン(7当量)中の2M 三塩化ホウ素ジメチルエーテルを滴下し、全体を2時間攪拌した。反応混合物を飽和NaHCO3(水溶液)に滴下し、ジクロロメタン中に抽出した。有機相をMgSO4で乾燥し、ろ過し、真空で濃縮した。残渣を分取LC/MSにより精製して、固体として5-[4-(4-メトキシ-フェニル)-5-メチル-2H-ピラゾール-3-イル]-ピリミジン-2-イルアミンを得た。
LC保持時間 1.894分 [M+H]+ 282.2
【０５４２】
次の反応は、スキーム19に関する：実施例133、134の2-メチルレゾルシノールの合成
1-(2,4-ジヒドロキシ-3-メチル-フェニル)-2-(4-メトキシ-フェニル)-エタノン
【化１６９】
2005517675.tif 000206
三フッ化ホウ素ジエチルエーテル錯体(8当量)中の2-メチルレゾルシノール(1当量)およびp-メトキシフェニル酢酸の溶液を、攪拌しながら窒素下に3.5時間還流した。茶色の溶液が室温に冷却するのを許容し、NaOAc溶液で冷却し(10% w/v)、一晩放置した。得られた沈殿物をろ過し、水で洗浄し、乾燥して、固体として1-(2,4-ジヒドロキシ-3-メチル-フェニル)-2-(4-メトキシ-フェニル)-エタノンを得た。
LC-MS保持時間 2.453分 [M+H]+ 273.2
【０５４３】
1HNMR δH (400 MHz; DMSO-d6):  10.76(1H, s, -OH), 8.01(1H, d, J 9 Hz, 6-H ), 7.37(1H, d, J 5 Hz, Ha), 7.05(1H, d, J 5 Hz, Hb), 6.64(1H, d, J 9 Hz, 5-H ), 4.37(2H, s, -CH2), 3.89(3H, s, -OCH3), 2.18(3H, s, -CH3).
【０５４４】
3-(4-メトキシ-フェニル)-2,8-ジメチル-4H-クロメン-4,7-ジオール
【化１７０】
2005517675.tif 000207
無水DMF中の1-(2,4-ジヒドロキシ-3-メチル-フェニル)-2-(4-メトキシ-フェニル)-エタノン (1当量)の溶液に、K2CO3 (3当量)を添加した。無水酢酸(3当量)を溶液に滴下し、次いでこれを窒素下に攪拌しながら5時間還流した。溶液を水中に採取し、酢酸エチルを用いて抽出し、MgSO4で乾燥し、真空で濃縮して、黄色の固体として3-(4-メトキシ-フェニル)-2,8-ジメチル-4H-クロメン-4,7-ジオールを得た。
LC-MS保持時間 2.373分 [M+H]+ 297.2
【０５４５】
4-[4-(4-メトキシ-フェニル)-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル]-2-メチル-ベンゼン-1,3-ジオール
【化１７１】
2005517675.tif 000208
3-(4-メトキシ-フェニル)-2,8-ジメチル-4H-クロメン-4,7-ジオール (1当量)を、EtOH:ヒドラジン水和物の1:1溶液中に採取し、マイクロ波条件下で(120℃、300秒)加熱した。溶液を真空で濃縮し、残渣を冷水で冷却し、酢酸エチルで抽出し、フラッシュクロマトグラフィーにより(1% MeOH-DCM)精製した。次いで、黄色の油をエーテル:ヘキサンで粉砕して、固体として4-[4-(4-メトキシ-フェニル)-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル]-2-メチル-ベンゼン-1,3-ジオールを得た。
LC-MS保持時間 2.328 分 [M+H]+ = 311.2
【０５４６】
1HNMR δH (400 MHz; アセトン-d6): 7.18(1H, m, Ha), 7.00(1H, m, Hb), 6.76(1H, d, J 9 Hz, 6-H), 6.08(1H, d, J 9 Hz, 5-H), 3.84(3H, s, -OCH3), 2.14(3H, s, ピラゾール -CH3), 2.10(3H, s, -CH3).
【０５４７】
4-クロロ-2-メチル-ベンゼン-1,3-ジオール
【化１７２】
2005517675.tif 000209
MeCN (5 ml)中の2-メチルレゾルシノール(1当量)の溶液に、N-クロロスクシンイミド (1当量)を添加し、窒素下に一晩還流した。黄色の溶液を真空で濃縮して、フラッシュクロマトグラフィーにより精製して、固体として4-クロロ-2-メチル-ベンゼン-1,3-ジオールを得た。
LC-MS保持時間 3.27分 [M+H]+ = 159/157
1HNMR δH (400 MHz; DMSO-d6): 6.93(1H, d, J 9 Hz, 5-H), 6.34(1H, d, J 9 Hz, 6-H), 2.00(3H, s, -CH3).
【０５４８】
1-(5-クロロ-2,4-ジヒドロキシ-3-メチル-フェニル)-2-(4-メトキシ-フェニル)-エタノン
【化１７３】
2005517675.tif 000210
三フッ化ホウ素ジエチルエーテル錯体(8当量)中の4-クロロ-2-メチル-ベンゼン-1,3-ジオール (1当量)およびp-メトキシフェニル酢酸 (1当量)の溶液を、窒素下に攪拌しながら5時間還流した。溶液が室温まで冷却するのを許容し、10% NaOAc (水溶液)で冷却し、一晩放置した。得られた沈殿物をろ過し、水で洗浄して、乾燥して、固体として1-(5-クロロ-2,4-ジヒドロキシ-3-メチル-フェニル)-2-(4-メトキシ-フェニル)-エタノンを得た。
LC-MS保持時間 2.618分 [M+H]+ = 307.2
1HNMR δH (400 MHz; DMSO-d6): 7.89(1H, s, 6-H), 7.17(2H, m, Ha), 6.75(2H, m, Hb), 4.16(2H, s, -CH2), 3.60(3H, s, -OCH3), 1.92(3H, s, -CH3).
【０５４９】
6-クロロ-3-(4-メトキシ-フェニル)-2,8-ジメチル-4H-クロメン-4,7-ジオール
【化１７４】
2005517675.tif 000211
DMF (7 ml)中の1-(5-クロロ-2,4-ジヒドロキシ-3-メチル-フェニル)-2-(4-メトキシ-フェニル)-エタノン(1当量)の溶液に、K2CO3 (3当量)を添加した。無水酢酸(3当量)を溶液に滴下し、次いでこれを窒素下に攪拌しながら5時間還流した。溶液を水中に採取し、酢酸エチルを用いて抽出し、MgSO4で乾燥し、真空で濃縮して、結晶固体として6-クロロ-3-(4-メトキシ-フェニル)-2,8-ジメチル-4H-クロメン-4,7-ジオールを得た。
LC-MS保持時間 2.528分 [M+H]+ = 331.2
1HNMR δH (400 MHz; DMSO-d6): 7.87(1H, s, 6-H), 7.25(2H, m, Ha), 7.05(2H, m, Hb), 3.86(3H, s, -OCH3), 2.39(3H, s, Ar-CH3), 2.35(3H, s, -CH3).
【０５５０】
4-クロロ-6-[4-(4-メトキシ-フェニル)-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル]-2-メチル-ベンゼン-1,3-ジオール
【化１７５】
2005517675.tif 000212
6-クロロ-3-(4-メトキシ-フェニル)-2,8-ジメチル-4H-クロメン-4,7-ジオール (1当量)を、EtOH:ヒドラジン水和物の1:1溶液中に採取し、マイクロ波条件下で(120℃、300秒)加熱した。溶液を真空下に濃縮し、残渣を冷水で冷却し、酢酸エチルで抽出し、フラッシュクロマトグラフィーにより(ニートDCM)精製した。次いで、黄色の油をエーテル:ヘキサンで粉砕して、固体として4-クロロ-6-[4-(4-メトキシ-フェニル)-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル]-2-メチル-ベンゼン-1,3-ジオールを得た。
LC-MS保持時間 2.531分 [M+H]+ = 345.2
1HNMR δH (400 MHz; アセトン-d6): 7.09(2H, m, Ha), 6.92(2H, m, Hb), 6.79(1H, s, 6-H), 3.73(3H, s, -OCH3), 2.10(3H, s, ピラゾール-CH3), 2.04(3H, s, Ar-CH3).
【０５５１】
次の記載は、スキーム14に関する：実施例107、108、111〜119、149〜151の非-レゾルシノールの合成
フェノール化合物のベンジル化の一般的な方法
アセトン(30 ml)中のフェノール(mmol)の溶液に、K2CO3 (mmol)およびベンジルブロミド(mmol)を添加した。懸濁物を、還流下に24時間加熱した。冷却後、これをろ過した。溶媒の蒸発後、特に記載しない限りは、粗生成物をEtOHから再結晶させた。
【０５５２】
Na / EtOAc を用いるジケトンの製造の一般的な方法(方法A)
特に記載しない限り、すべてのジケトンはこの方法を用いて合成した。EtOAc (10 ml)中のケトン(4 mmol)の溶液に、金属ナトリウム(8 mmol) の小片を添加した。懸濁物を室温で1時間攪拌し、次いで4時間還流した。溶液が冷却されたら、酢酸(0.5 ml)、次いで水(15 ml)を添加した。溶液をEtOAc (3×15 ml)で抽出し、合わせた有機相を塩水(2×10 ml)および水(2×10 ml) で洗浄し、Na2SO4で乾燥した。ろ過および溶媒の蒸発後、物質を再結晶またはクロマトグラフィーのいずれかにより精製した。
【０５５３】
BF3 / 無水酢酸を用いるジケトンの製造の一般的な方法(方法B)
無水酢酸(15 ml)中のケトン(20 mmol)の溶液に、0℃で含エーテルBF3 (15 ml)を滴下した。溶液をこの温度で4時間、および室温で48時間攪拌した。水(80 ml)をゆっくりと(注意して)添加し、形成された固体をろ過し、水で洗浄して回収した。これらを真空で乾燥した。沈殿が形成されなかった場合、NaOAc溶液(13%、50 ml)を添加した。懸濁物を20分間還流した。氷中で冷却した際に、固体が形成され、水で洗浄して回収した。
【０５５４】
ピラゾールの製造の一般的な方法
EtOH (10 ml)中のジオン(1 mmol)の還流溶液(または懸濁液)に、ヒドラジン水和物(0.3 ml)を添加した。溶液をさらに3時間還流した。その後、EtOAcでの抽出または水による沈殿のいずれかにより、物質を得た。
【０５５５】
ヨード-ピラゾールの製造の一般的な方法
水(3 ml)およびTHF (3 ml)およびピラゾール(0.15 mmol)の混合物を含むマイクロ波の容器に、ヨウ素(0.3 mmol)、NaI (0.9 mmol)およびNa2CO3 (0.3 mmol)を添加した。マグネティックスターラーを入れ、容器を密閉した。サンプルを、200 Wを用いて30分間照射した。室温に冷却後、容器を開けて塩水(10 ml)を添加した。溶液をEtOAc (3×10 ml)で抽出し、合わせた有機相を飽和チオ硫酸ナトリウム溶液(2×10 ml)、塩水(10 ml)および水(10 ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥した。ろ過および溶媒の蒸発後、物質を分取TLCまたは再結晶のいずれかにより精製した。
【０５５６】
ビアリール-ピラゾールの製造の一般的な方法
水(3 ml)および1-プロパノール(3 ml)およびよう化物(0.15 mmol)の混合物を含むマイクロ波の容器に、2,3-ジヒドロ-ベンゾ[1,4]ジオキシン-6-ホウ素酸(0.23 mmol)、Cs2CO3 (0.33 mmol)、Pd(PPh3)4 (3 mol %)およびLiCl (1.5 mmol)を添加した。マグネティックスターラーを入れ、容器を密閉した。サンプルを、200 Wを用いて30分間照射した。室温に冷却後、容器を開けて塩水(10 ml)を添加した。溶液をEtOAc (3×10 ml)で抽出し、合わせた有機相を塩水(10 ml)および水(10 ml)で洗浄し、Na2SO4で乾燥した。ろ過および溶媒の蒸発後、物質を分取TLCで精製した。
【０５５７】
脱ベンジル化の一般的な方法
対応する化合物を、EtOH中でPd/Cを用いる水素添加、または室温で、アセトニトリル中でNaI / 含エーテルBF3を用いる24時間の攪拌のいずれかにより、脱ベンジル化した。
【０５５８】
1-(2-ベンジルオキシ-5-メチルフェニル)-3-ヒドロキシブト-2-エン-1-オン
【化１７６】
2005517675.tif 000213
物質を、黄色の固体として、エノールおよびケト型異性体の混合物(約5 : 1)として得た(40 %収率)。[エノール]: 1H NMR (CDCl3) δ = 16.18 (1H, s, ブロード); 7.78 (1H, d, J = 2.0Hz); 7.40 (5H, m); 7.22 (1H, dd, J = 2.0 および 8.5 Hz); 6.92 (1H, d, J = 8.5 Hz); 6.56 (1H, s); 5.18 (2H, s); 2.34 (3H, s) および 2.10 (3H, s).  13C NMR (CDCl3) δ = 192.70, 180.93, 155.52, 136.53, 133.37, 130.51, 128.82, 128.56, 128.06, 127.32, 113.22, 102.18, 70.92, 26.00 および20.39. MS: 283.1 (M + H)+, 305.2 (M + Na)+.
【０５５９】
1-(2-ベンジルオキシ-5-クロロフェニル)-3-ヒドロキシブト-2-エン-1-オン
【化１７７】
2005517675.tif 000214
物質を、黄色の固体として、主にエノール型の異性体で得た(90 %収率)。[エノール]: 1H NMR (CDCl3) δ = 16.20 (1H, s, ブロード); 7.82 (1H, d, J = 2.5Hz); 7.44 - 7.40 (5H + 1H, m); 6.90 (1H, d, J = 8.8 Hz); 6.41 (1H, s); 5.08 (2H, s) および 2.00 (3H, s).  13C NMR (CDCl3) δ = 195.07, 179.00, 155.99, 135.86, 132.28, 129.97, 128.68, 128.33, 127.35, 126.44, 114.50, 102.27, 71.19, および 26.10. MS: 302.9 (M + H)+.
【０５６０】
1-(4-ベンジルオキシ-3-クロロフェニル)-3-ヒドロキシブト-2-エン-1-オン
【化１７８】
2005517675.tif 000215
物質を、黄色の固体として、エノールおよびケト型異性体の混合物(約14 : 1)として得た(40 %収率)。[エノール]: 1H NMR (CDCl3) δ = 16.00 (1H, s, ブロード); 8.00 (1H, d, J = 2.0 Hz); 7.78 (1H, dd, J = 2.0 および8.6 Hz); 7.44 (5H, m); 7.02 (1H, d, J = 8.6 Hz); 6.11 (1H, s); 5.25 (2H, s)および2.21 (3H, s).  13C NMR (CDCl3) δ = 192.43, 183.24, 157.74, 136.15, 132.28, 129.75, 129.17, 128.64, 127.44, 123.94, 113.53, 96.41, 71.24, および25.71. MS: 302.9 (M + H)+.
【０５６１】
1-(2-ベンジルオキシ-5-フルオロフェニル)-3-ヒドロキシブト-2-エン-1-オン
【化１７９】
2005517675.tif 000216
物質を、黄色の固体として、エノールおよびケト型異性体の混合物(約17 : 1)として得た(40 %収率)。[エノール]: 1H NMR (CDCl3) δ = 16.00 (1H, s, ブロード); 7.68 (1H, dd, J = 3.0 および9.0Hz); 7.47 (5H, m); 7.14 (1H, ddd, J = 3.0, 7.5 および 9.0 Hz); 7.00 (1H, dd, J = 4.2 および9.0 Hz); 6.58 (1H, s); 5.17 (2H, s) および 2.10 (3H, s).  13C NMR (CDCl3) δ = 195.29, 178.78, 157.03 (d, J = 240 Hz), 153.72, 136.06, 128.91, 128.63, 128.27, 127.40, 119.00 (d, J = 24 Hz), 116.50 (d, J = 24 Hz), 114.50 (d, J = 8 Hz), 102.22, 71.56,および26.14. MS: 287.1 (M + H)+.
【０５６２】
1-(2,4-ビス-ベンジルオキシ-5-クロロフェニル)-3-ヒドロキシブト-2-エン-1-オン
【化１８０】
2005517675.tif 000217
物質を、黄色の固体として、主にエノール型の異性体で得た(76 %収率)。1H NMR (CDCl3) δ = 16.25 (1H, s, ブロード); 8.04 (1H, s); 7.47 (10H, m); 6.59 (1H, s); 6.51 (1H, s); 5.18 (2H, s); 5.10 (2H, s) および2.07 (3H, s).  13C NMR (CDCl3) δ = 193.87, 179.47, 157.68, 157.35, 135.68, 131.49, 128.75, 128.43, 128.28, 127.40, 127.00, 101.35, 70.99, および 25.78. MS: 409.2 (M + H)+.
【０５６３】
1-(2,4-ビス-ベンジルオキシ-5-エチルフェニル)-3-ヒドロキシブト-2-エン-1-オン
【化１８１】
2005517675.tif 000218
物質を、黄色の固体として、エノールおよびケト型異性体の混合物(約5 : 1)として得た(36 %収率)。[エノール]: 1H NMR (CDCl3) δ = 16.20 (1H, s, ブロード); 7.87 (2H, d, J = 9.2 Hz); 6.90 (2H, d, J = 9.2 Hz); 6.12 (1H, s); 3.80 (2H, m); 3.66 (2H, m); 3.38 (4H, m); 2.18 (3H, s) および 2.17 (3H, s).  13C NMR (CDCl3) δ = 190.91, 184.10, 169.05, 153.32, 130.92, 128.89, 125.47, 114.22, 113.57, 95.41, 47.65, 47.42, 45.71, 40.89, 25.16 および21.27.
【０５６４】
3-(3-ヒドロキシ-ブト-2-エノイル)-ベンゾニトリル
【化１８２】
2005517675.tif 000219
物質を、黄色の固体として、エノール型の異性体のみで得た(45 %収率)。[エノール]: 1H NMR (CDCl3) δ = 16.10 (1H, s, ブロード); 8.18 (1H, ddd, J = 0.6, 1.5および4.2 Hz); 8.11 (1H, ddd, J = 1.5, 3.2および8.0 Hz); 7.81 (1H, ddd, J = 1.5, 3.2および7.8 Hz); 7.61 (1H, ddd, J = 0.6, 7.8および8.0 Hz); 6.20 (1H, s)および2.26 (3H, s).  13C NMR (CDCl3) δ = 194.60, 180.53, 136.16, 135.02, 130.90, 130.58, 129.55, 117.97, 113.09, 96.97および25.87. MS: 186.3 (M - H)-.
【０５６５】
4-(3-ヒドロキシ-ブト-2-エノイル)-ベンゾニトリル
【化１８３】
2005517675.tif 000220
物質を、黄色の固体として、エノール型の異性体のみで得た(30 %収率)。[エノール]: 1H NMR (CDCl3) δ = 15.90 (1H, s, ブロード); 8.00 (2H, d, J = 8.7 Hz); 7.75 (2H, d, J = 8.7 Hz); 6.22 (1H, s) および2.28 (3H, s).  13C NMR (CDCl3) δ = 195.73, 179.77, 138.73, 132.38, 127.38, 118.06, 115.37, 97.64 および26.33. MS: 186.3 (M - H)-.
【０５６６】
3-(3-ヒドロキシ-ブト-2-エノイル)-安息香酸 エチル エステル
【化１８４】
2005517675.tif 000221
物質を、黄色の固体として、主にエノール型の異性体で得た(65 %収率)。[エノール]: 1H NMR (CDCl3) δ = 16.20 (1H, s, ブロード); 8.53 (1H, ddd, J = 0.6, 1.2および2.4 Hz); 8.24 (1H, ddd, J = 1.2, 2.4および7.8 Hz); 8.09 (1H, ddd, J = 1.2, 2.4および7.8 Hz); 7.54 (1H, ddd, J = 0.6, 7.8および7.8 Hz); 6.27 (1H, s); 4.43 (2H, q, J = 7.0 Hz); 2.26 (3H, s)および1.45 (3H, t, J = 7.0 Hz).
【０５６７】
4-(3-ヒドロキシ-ブト-2-エノイル)-安息香酸 エチル エステル
【化１８５】
2005517675.tif 000222
物質を、黄色の固体として、エノール型の異性体のみで得た(60 %収率)。[エノール]: 1H NMR (CDCl3) δ = 16.10 (1H, s, ブロード); 8.10 (2H, d, J = 8.7 Hz); 7.93 (2H, d, J = 8.7 Hz); 6.23 (1H, s); 4.41 (2H, q, J = 7.0 Hz); 2.24 (3H, s) および1.43 (3H, t, J = 7.0 Hz).  13C NMR (CDCl3) δ = 195.28, 180.99, 165.75, 138.48, 129.66, 126.76, 97.44, 61.30, 50.07, 26.19および14.21.
【０５６８】
4-(3-ヒドロキシ-ブト-2-エノイル)-ベンゼンスルホンアミド
【化１８６】
2005517675.tif 000223
(方法B) 物質を、黄色の固体として、エノール型の異性体のみで得た(69 %収率)。[エノール]: 1H NMR (d6-DMSO) δ = 12.40 (1H, s, ブロード); 8.30 (2H, d, J = 8.5 Hz); 8.05 (2H, d, J = 8.5 Hz); 7.32 (1H, s); 2.50 (2H, s)および1.92 (3H, s).  13C NMR (d6-DMSO) δ = 194.32, 169.43, 144.78, 135.43, 129.87, 128.67, 100.01および23.61.
【０５６９】
3-(2-ベンジルオキシ-5-メチル-フェニル)-5-メチル-1H-ピラゾール
【化１８７】
2005517675.tif 000224
物質を、黄色の固体として得た(90 %収率)。1H NMR (d6-DMSO) δ = 12.49 (1H, s, ブロード); 7.61 (1H, s); 7.42 (5H, m); 7.02 (1H + 1H, s, オーバーラップ); 6.47 (1H, s); 5.19 (2H, s); 2.25 (3H, s)および2.20 (3H, s). MS: 279.2 (M + H)+.
【０５７０】
3-(2-ベンジルオキシ-5-クロロ-フェニル)-5-メチル-1H-ピラゾール
【化１８８】
2005517675.tif 000225
物質を、白色の固体として得た(78 %収率)。1H NMR (d6-DMSO) δ = 12.68 (1H, s, ブロード); 7.87 (1H, s); 7.40 (5H + 1H, m); 7.16 (1H, d, J = 8.4 Hz); 6.52 (1H, s); 5.23 (2H, s)および2.21 (3H, s). MS: 299.2 (M + H)+.
【０５７１】
3-(4-ベンジルオキシ-3-クロロ-フェニル)-5-メチル-1H-ピラゾール
【化１８９】
2005517675.tif 000226
物質を、クリーム状の黄色の固体として得た(96 %収率)。1H NMR (CDCl3) δ = 12.68 (1H, s, ブロード); 7.78 (1H, d, J = 2.0 Hz); 7.35 - 7.60 (5H + 1H, m); 6.97 (1H, d, J = 8.5 Hz); 6.29 (1H, s); 5.20 (2H, s)および2.35 (3H, s). 13C NMR (d6-DMSO) δ = 154.20, 149.73, 145.44, 136.84, 129.00, 128.40, 128.06, 127.51, 125.26, 114.55, 102.16, 71.30 および11.90.
【０５７２】
3-(2-ベンジルオキシ-5-フルオロ-フェニル)-5-メチル-1H-ピラゾール
【化１９０】
2005517675.tif 000227
物質を、クリーム状の白色の固体として得た(80 %収率)。1H NMR (d6-DMSO) δ = 12.66 (1H, s, ブロード); 7.62 (1H, s); 7.40 (5H, m); 7.12 (2H, m); 6.53 (1H, s); 5.20 (2H, s)および2.21 (3H, s). MS: 283.2 (M + H)+.
【０５７３】
3-(2,4-ビス-ベンジルオキシ-5-クロロ-フェニル)-5-メチル-1H-ピラゾール
【化１９１】
2005517675.tif 000228
物質を、黄色の固体として得た(65 %収率)。1H NMR (d6-DMSO) δ = 12.51 (1H, s, ブロード); 7.83 (1H, s); 7.46 (10H, m); 7.08 (1H, s), 6.42 (1H, s); 5.26 (2H, s); 5.24 (2H, s)および2.19 (3H, s). MS: 405.2 (M + H)+.
【０５７４】
3-(2,4-ビス-ベンジルオキシ-5-エチル-フェニル)-5-メチル-1H-ピラゾール
【化１９２】
2005517675.tif 000229
物質を、クリーム状の白色の固体として得た(84 %収率)。1H NMR (d6-DMSO) δ = 12.32 (1H, s, ブロード); 7.53 (1H, s); 7.38 (10H, m); 6.84 (1H, s), 6.34 (1H, s); 5.17 (2H, s); 5.10 (2H, s); 2.50 (2H, q, J = 7.5 Hz); 2.14 (3H, s)および1.09 (3H, t, J = 7.5 Hz). MS: 399.3 (M + H)+.
【０５７５】
3-(5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル)-ベンゾニトリル
【化１９３】
2005517675.tif 000230
物質を、クリーム状の白色の固体として得た(74 %収率)。1H NMR (CDCl3) δ = 10.20 (1H, s, ブロード); 8.03 (1H, m); 7.98 (1H, ddd, J = 1.5, 1.7および7.7 Hz); 7.57 (1H, ddd, J = 1.5, 3.0および7.7 Hz); 7.48 (1H, ddd, J = 0.6, 7.7および7.7 Hz); 6.39 (1H, s)および2.35 (3H, s).  13C NMR (CDCl3) δ = 149.68, 142.40, 134.86, 131.40, 130.21, 129.88, 129.56, 119.18, 113.15, 102.68および11.61. MS: 184.3 (M + H)+.
【０５７６】
4-(5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル)-ベンゾニトリル
【化１９４】
2005517675.tif 000231
物質を、黄色の固体として得た(88 %収率)。1H NMR (CDCl3) δ = 10.30 (1H, s, ブロード); 7.85 (2H, d, J = 8.7 Hz); 7.65 (2H, d, J = 8.7 Hz); 6.42 (1H, s)および2.31 (3H, s).  13C NMR (CDCl3) δ = 149.94, 142.47, 137.90, 132.93, 126.41, 119.35, 111.34, 103.15および11.58. MS: 184.3 (M + H)+.
【０５７７】
3-(5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル)-安息香酸 エチル エステル
【化１９５】
2005517675.tif 000232
物質を、黄色の固体として得た(45 %収率)。1H NMR (CDCl3) δ = 8.39 (1H, m); 7.96 (1H + 1H, m); 7.45 (1H, dd, J = 7.7および8.3 Hz); 6.42 (1H, s); 4.40 (2H, q, J = 7.0 Hz); 2.36 (3H, s)および1.40 (3H, t, J = 7.0 Hz).
【０５７８】
4-(5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル)-安息香酸 エチル エステル
【化１９６】
2005517675.tif 000233
物質を、黄色の固体として得た(50 %収率)。1H NMR (CDCl3) δ = 8.05 (2H, d, J = 8.7 Hz); 7.80 (2H, d, J = 8.7 Hz); 6.42 (1H, s); 4.41 (2H, q, J = 7.0 Hz); 2.32 (3H, s) および1.42 (3H, t, J = 7.0 Hz).  13C NMR (CDCl3) δ = 166.84, 149.96, 142.93, 137.35, 130.37, 129.86, 125.74, 103.02, 61.34, 14.68および11.78.
【０５７９】
4-(5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル)-ベンゼンスルホンアミド
【化１９７】
2005517675.tif 000234
物質を、クリーム状の白色の固体として得た(73 %収率)。1H NMR (d6-DMSO) δ = 12.78 (1H, s, ブロード); 7.92 (2H, d, J = 8.7 Hz); 7.82 (2H, d, J = 8.7 Hz); 7.30 (2H, s, ブロード); 6.55 (1H, s); および2.27 (3H, s).  13C NMR (d6-DMSO) δ = 194.32, 169.43, 144.78, 135.43, 129.87, 128.67, 100.01および23.61. MS: 238.2 (M + H)+.
【０５８０】
3-(2-ベンジルオキシ-5-メチル-フェニル)-4-ヨード-5-メチル-1H-ピラゾール
【化１９８】
2005517675.tif 000235
物質を、黄色の固体として得た(60 %収率)。1H NMR (CDCl3) δ = 7.76 (1H, d, J = 2.7 Hz); 7.34 (5H, m); 7.15 (1H, dd, J = 2.7および8.5 Hz); 6.95 (1H, d, J = 8.5 Hz); 5.01 (2H, s); 2.36 (3H, s)および2.33 (3H, s).
【０５８１】
3-(4-ベンジルオキシ-3-メチル-フェニル)-4-ヨード-5-メチル-1H-ピラゾール
【化１９９】
2005517675.tif 000236
物質を、茶色の半固体として得た(60 %収率)。Rf = 0.46 (EtOAc : ヘキサン / 1 : 1). 1H NMR (CDCl3) δ = 7.44 (5H + 2H, m); 6.93 (1H, d, J = 9.0 Hz); 5.14 (2H, s); 2.38 (3H, s)および2.27 (3H, s).
【０５８２】
3-(2-ベンジルオキシ-5-クロロ-フェニル)-4-ヨード-5-メチル-1H-ピラゾール
【化２００】
2005517675.tif 000237
物質を、固体として得た(75 %収率)。Rf = 0.46 (EtOAc : ヘキサン / 2 : 1).1H NMR (CDCl3) δ = 7.85 (1H, d, J = 2.5 Hz); 7.36 (5H, m); 7.32 (1H, dd, J = 2.5および8.8 Hz); 7.00 (1H, d, J = 8.8 Hz); 5.12 (2H, s)および2.34 (3H, s). 13C NMR (CDCl3) δ = 154.93, 148.22, 142.50, 136.33, 130.88, 129.07, 128.58, 127.62, 126.40, 121.75, 114.84, 71.54, 62.89および13.90.
【０５８３】
3-(4-ベンジルオキシ-3-クロロ-フェニル)-4-ヨード-5-メチル-1H-ピラゾール
【化２０１】
2005517675.tif 000238
物質を、オレンジ色の半固体として得た(80 %収率)。Rf = 0.66 (EtOAc : ヘキサン / 1 : 1). 1H NMR (CDCl3) δ = 7.76 (1H, d, J = 2.0 Hz); 7.40 (5H + 1H, m); 6.92 (1H, d, J = 8.6 Hz); 5.16 (2H, s); および2.19 (3H, s).
【０５８４】
3-(2-ベンジルオキシ-5-フルオロ-フェニル)-4-ヨード-5-メチル-1H-ピラゾール
【化２０２】
2005517675.tif 000239
物質を、固体として得た(75 %収率)。Rf =  (EtOAc : ヘキサン / 2 : 1). 1H NMR (CDCl3) δ = 7.61 (1H, dd, J = 3および9.0 Hz); 7.32 (5H, m); 6.95 - 7.05 (1H + 1H, m); 5.05 (2H, s) および2.28 (3H, s).
【０５８５】
3-(2,4-ビス-ベンジルオキシ-5-クロロ-フェニル)-4-ヨード-5-メチル-1H-ピラゾール
【化２０３】
2005517675.tif 000240
物質を、固体として得た(85 %収率)。Rf = 0.65 (EtOAc : ヘキサン / 2 : 1). 1H NMR (d6-DMSO) δ = 12.95 (1H, s, ブロード); 7.38 (10H + 1H, m); 7.12 (1H, s); 5.28 (2H, s); 5.16 (2H, s) および2.18 (3H, s).
【０５８６】
3-(2,4-ビス-ベンジルオキシ-5-エチル-フェニル)-4-ヨード-5-メチル-1H-ピラゾール
【化２０４】
2005517675.tif 000241
物質を、固体として得た(85 %収率)。Rf = 0.65 (EtOAc : ヘキサン / 2 : 1). 1H NMR (d6-DMSO) δ = 12.80 (1H, s, ブロード); 7.38 (10H, m); 7.10 (1H, s), 6.92 (1H, s); 5.18 (2H, s); 5.11 (2H, s); 2.56 (2H, q, J = 7.5 Hz); 2.19 (3H, s)および1.14 (3H, t, J = 7.5 Hz).
【０５８７】
3-(4-ヨード-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル)-ベンゾニトリル
【化２０５】
2005517675.tif 000242
物質を、黄色の固体として得た(80 %収率)。Rf = 0.49 (EtOAc : ヘキサン / 1 : 1). 1H NMR (CDCl3) δ = 7.95 - 8.05 (1H + 1H, m); 7.65 (1H, ddd, J = 1.3, 2.5および8.0 Hz); 7.57 (1H, ddd, J = 0.8, 8.0および8.0 Hz);および2.23 (3H, s).  13C NMR (CDCl3) δ = 149.20, 145.73, 133.98, 132.71, 131.86, 129.74, 118.89, 112.96, 60.81および12.81.
【０５８８】
4-(4-ヨード-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル)-ベンゾニトリル
【化２０６】
2005517675.tif 000243
物質を、黄色の固体として得た(50 %収率)。1H NMR (d6-DMSO) δ = 13.40 (1H, s, ブロード); 8.02 (2H, d, J = 8.0 Hz); 7.92 (2H, d, J = 8.0 Hz)および2.28 (3H, s).  13C NMR (d6-DMSO) δ = 149.44, 142.97, 138.00, 132.74, 128.14, 119.15, 110.65, 60.00 および12.02.
【０５８９】
3-(4-ヨード-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル)-安息香酸 エチル エステル
【化２０７】
2005517675.tif 000244
物質を、茶色の油として得た(18 %収率)。Rf =  (EtOAc : ヘキサン / 3 : 4). 1H NMR (CDCl3) δ = 9.70 (1H, s, ブロード); 8.41 (1H, dd, J = 1.2および1.8 Hz); 8.03 (1H, ddd, J = 1.2, 1.8および7.7 Hz); 7.93 (1H, ddd, J = 1.2, 2.0および7.7 Hz); 7.46 (1H, ddd, J = 0.5, 7.7および8.0 Hz); 4.38 (2H, q, J = 7.0 Hz); 2.22 (3H, s)および1.37 (3H, t, J = 7.0 Hz). 13C NMR (CDCl3) δ = 166.25, 148.77, 146.22, 132.22, 132.02, 130.56, 129.46, 129.08, 128.48, 61.14, 59.00, 14.27および12.71.
【０５９０】
4-(4-ヨード-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル)-安息香酸 エチル エステル
【化２０８】
2005517675.tif 000245
物質を、黄色の固体として得た(80 %収率)。1H NMR (CDCl3) δ = 11.20 (1H, s, ブロード); 8.02 (2H, d, J = 8.6 Hz); 7.78 (2H, d, J = 8.6 Hz); 4.40 (2H, q, J = 7.0 Hz); 2.14 (3H, s)および1.40 (3H, t, J = 7.0 Hz).  13C NMR (CDCl3) δ = 166.66, 149.38, 146.49, 136.50, 130.55, 130.04, 128.89, 128.23, 61.53, 61.01, 14.73および12.98.
【０５９１】
N-[3-(4-ヨード-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル)-フェニル]-アセトアミド
【化２０９】
2005517675.tif 000246
物質を、白色固体として得た(55 %収率)。1H NMR (CDCl3) δ = 9.70 (1H, s,ブロード); 8.55 (1H, s, ブロード); 7.75 (1H, s, ブロード); 7.48 (1H, d, J = 8.5 Hz); 7.40 (1H, d, J = 7.7 Hz); 7.24 (1H, dd, J = 7.7および8.5 Hz); 2.20 (3H, s)および2.04 (3H, s). 13C NMR (CDCl3) δ = 169.44, 147.94, 147.22, 138.12, 131.78, 128.80, 123.85, 120.22, 119.47, 60.40, 21.02および13.00.
【０５９２】
N-[4-(4-ヨード-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル)-フェニル]-アセトアミド
【化２１０】
2005517675.tif 000247
物質を、オレンジ色の油として得た(35 %収率)。1H NMR (d6-アセトン) δ = 9.30 (1H, s, ブロード); 7.74 (4H + 1H, s, ブロード); 2.30 (3H, s) および2.10 (3H, s).
【０５９３】
4-(4-ヨード-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル)-ベンゼンスルホンアミド
【化２１１】
2005517675.tif 000248
物質を、固体として得た(55 %収率)。Rf = 0.49 (EtOAc : ヘキサン / 3 : 1).1H NMR (d6-アセトン) δ = 12.50 (1H, s, ブロード); 8.03 (2H, d, J = 8.7 Hz); 7.97 (2H, d, J = 8.7 Hz); 6.62 (2H, s) および2.36 (3H, s).
【０５９４】
3-(2-ベンジルオキシ-5-メチル-フェニル)-4-(2,3-ジヒドロ-ベンゾ[1,4]ジオキシン-6-イル)-5-メチル-1H-ピラゾール
【化２１２】
2005517675.tif 000249
物質を、黄色の固体として得た(35%収率)。1H NMR (CDCl3) δ = 7.30 (5H, m); 6.96 - 7.03 (1H + 1H, m); 6.86 (1H, d, J = 8.3 Hz); 6.83 (1H, d, J = 8.3 Hz); 6.76 (1H, d, J = 2.0 Hz); 6.68 (1H, dd, J = 2.0および8.3 Hz); 5.04 (2H, s); 4.27 (4H, s); 2.2 (3H, s) および2.10 (3H, s). 13C NMR (CDCl3) δ = 154.05, 146.35, 143.78, 142.70, 136.93, 131.23, 130.72, 129.96, 129.12, 128.52, 128.12, 127.80, 123.60, 119.39, 118.93, 118.57, 117.59, 113.53, 71.43, 64.82, 20.83および12.64.
【０５９５】
3-(2-ベンジルオキシ-5-クロロ-フェニル)-4-(2,3-ジヒドロ-ベンゾ[1,4]ジオキシン-6-イル)-5-メチル-1H-ピラゾール
【化２１３】
2005517675.tif 000250
物質を、油として得た(30 %収率)。1H NMR (CDCl3) δ = 7.35 (5H, m); 7.24 (1H, m); 7.20 (1H, d, J = 2.5 Hz); 7.14 (1H, dd, J = 2.5および8.8 Hz); 6.86 (1H, d, J = 8.8 Hz); 6.84 (1H, d, J = 8.3 Hz); 6.71 (1H, d, J = 2.0 Hz); 6.62 (1H, dd, J = 2.0および8.3 Hz); 5.02 (2H, s); 4.27 (4H, s)および2.25 (3H, s). 13C NMR (CDCl3) δ = 154.72, 143.92, 142.91, 136.35, 130.40, 129.17, 129.07, 128.69, 127.74, 127.47, 126.50, 123.33, 121.83, 119.13, 118.74, 117.80, 114.68, 71.59, 64.81および12.37.
【０５９６】
3-(2-ベンジルオキシ-5-フルオロ-フェニル)-4-(2,3-ジヒドロ-ベンゾ[1,4]ジオキシン-6-イル)-5-メチル-1H-ピラゾール
【化２１４】
2005517675.tif 000251
物質を、固体として得た(50 %収率)。1H NMR (CDCl3) δ = 7.25 (5H, m); 6.89 (1H, ddd, J = 0.9, 2.5および10.5 Hz); 6.76 - 6.81 (1H + 1H, m); 7.14 (1H, d, J = 8.3 Hz); 6.63 (1H, d, J = 2.0 Hz); 6.54 (1H, dd, J = 2.0および8.3 Hz); 6.71 (1H, d, J = 2.0 Hz); 6.62 (1H, dd, J = 2.0および8.3 Hz); 4.92 (2H, s); 4.17 (4H, s)および2.13 (3H, s). 13C NMR (CDCl3) δ = 157.35 (d, J =240 Hz), 152.37, 143.94, 142.93, 136.58, 129.14, 128.65, 127.81, 127.53, 123.40, 121.77, 119.04, 118.81, 117.83, 117.35, 116.33 (d, J =25 Hz), 115.10 (d, J = 25 Hz), 114.73, 72.02, 64.76および12.31.
【０５９７】
3-(2,4-ビス-ベンジルオキシ-5-クロロ-フェニル)-4-(2,3-ジヒドロ-ベンゾ[1,4]ジオキシン-6-イル)-5-メチル-1H-ピラゾール
【化２１５】
2005517675.tif 000252
物質を、黄色の固体として得た(32 %収率)。Rf = 0.48 (EtOAc : ヘキサン / 2 : 1). 1H NMR (CDCl3) δ = 7.40 (10H, m); 7.24 (1H, s); 6.84 (1H, d, J = 8.2 Hz), 6.74 (1H, d, J = 2.0 Hz); 6.63 (1H, dd, J = 2.0および8.2 Hz); 6.55 (1H, s); 5.06 (2H, s); 4.95 (2H, s); 4.28 (4H, s) および2.24 (3H, s). 13C NMR (CDCl3) δ = 155.16, 154.23, 143.46, 142.42, 136.09, 135.84, 131.01, 128.71, 128.64, 128.31, 128.10, 127.30, 127.06, 122.96, 118.38, 117.34, 115.22, 113.53, 100.81, 71.37, 71.01, 64.35および12.02.
MS: 539.3 (M + H)+.
【０５９８】
3-(4-ベンジルオキシ-3-クロロ-フェニル)-4-(2,3-ジヒドロ-ベンゾ[1,4]ジオキシン-6-イル)-5-メチル-1H-ピラゾール
【化２１６】
2005517675.tif 000253
物質を、黄色の油として得た(65 %収率)。Rf = 0.65 (EtOAc : ヘキサン / 1 : 1). 1H NMR (CDCl3) δ = 7.50 (1H, d, J = 2.0 Hz); 7.48-7.30 (5H, m); 7.19 (1H, dd, J = 2.0 および8.7 Hz); 6.85 (1H, d, J = 8.7 Hz); 6.83 (1H, d, J = 8.7 Hz); 6.72 (1H, d, J = 2.0 Hz); 6.62 (1H, dd, J = 2.0および8.7 Hz); 5.13 (2H, s); 4.29 (4H, s)および2.27 (3H, s). MS: 433.3 (M + H)+.
【０５９９】
3-(2,4-ビス-ベンジルオキシ-5-エチル-フェニル)-4-(2,3-ジヒドロ-ベンゾ[1,4]ジオキシン-6-イル)-5-メチル-1H-ピラゾール
【化２１７】
2005517675.tif 000254
物質を、黄色の油として得た(30 %収率)。Rf = 0.4 (EtOAc : ヘキサン / 2 : 1). 1H NMR (CDCl3) δ = 7.41 - 7.32 (10H, m); 6.99 (1H, s); 6.85 (1H, d, J = 8.3 Hz), 6.77 (1H, d, J = 2.0 Hz); 6.70 (1H, dd, J = 2.0および8.3 Hz); 6.57 (1H, s); 5.05 (2H, s); 5.02 (2H, s); 4.27 (4H, s); 2.41 (2H, q, J = 7.0 Hz); 2.25 (3H, s)および0.92 (3H, t, J = 7.0 Hz). MS: 533.3 (M + H)+.
【０６００】
3-[4-(2,3-ジヒドロ-ベンゾ[1,4]ジオキシン-6-イル)-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル]-ベンゾニトリル
【化２１８】
2005517675.tif 000255
物質を、黄色の固体として得た(25 %収率)。Rf = 0.54 (EtOAc : ヘキサン : CHCl3 / 3 : 1 : 4). 1H NMR (CDCl3) δ = 7.75 (1H, dd, J = 1.2および1.6 Hz); 7.67 (1H, ddd, J = 1.2, 1.6および7.9 Hz); 7.51 (1H, ddd, J = 1.2, 1.6および7.9 Hz); 7.35 (1H, dd, J =7.9 および7.9 Hz); 6.85 (1H, d, J = 8.3 Hz); 6.68 (1H, d, J = 2.0 Hz); 6.61 (1H, dd, J = 2.0および8.3 Hz); 4.29 (4H, s)および2.25 (3H, s).  13C NMR (CDCl3) δ = 143.35, 143.61, 142.83, 139.77, 134.44, 132.01, 131.19, 130.93, 129.07, 125.79, 123.15, 118.77, 118.52, 117.89, 117.58, 112.40, 64.36および10.35.
【０６０１】
4-[4-(2,3-ジヒドロ-ベンゾ[1,4]ジオキシン-6-イル)-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル]-ベンゾニトリル
【化２１９】
2005517675.tif 000256
物質を、黄色の固体として得た(20 %収率)。Rf = 0.2 (EtOAc : ヘキサン / 1 : 1).1H NMR (d6-アセトン) δ = 12.2 (1H, s, ブロード); 7.65 (4H, s); 6.85 (1H, d, J = 8.1 Hz); 6.70 (1H, d, J = 2.0 Hz); 6.65 (1H, dd, J = 2.0 および8.1 Hz)および2.26 (3H, s).  13C NMR (d6-アセトン) δ = 147.36, 145.72, 144.79, 141.42, 140.52, 134.27, 133.78, 129.74, 128.52, 127.58, 124.84, 120.47, 119.56, 119.22, 112.14, 103.85, 61.53および11.20. MS: 318.4 (M + H)+.
【０６０２】
3-[4-(2,3-ジヒドロ-ベンゾ[1,4]ジオキシン-6-イル)-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル]-安息香酸 エチル エステル
【化２２０】
2005517675.tif 000257
物質を、黄色の油として得た(32 %収率)。Rf = 0.36 (EtOAc : ヘキサン / 1 : 1). 1H NMR (CDCl3) δ = 8.70 (1H, dd, J = 1.7および1.7 Hz); 7.92 (1H, ddd, J = 1.3, 1.7 および7.8 Hz); 7.54 (1H, ddd, J = 1.3, 1.7および7.8 Hz); 7.30 (1H, dd, J =7.8および7.8 Hz); 6.83 (1H, d, J = 8.2 Hz); 6.72 (1H, d, J = 2.0 Hz); 6.64 (1H, dd, J = 2.0 および8.2 Hz); 4.33 (2H, q, J = 7.0 Hz); 4.27 (4H, s); 2.24 (3H, s)および1.34 (3H, t, J = 7.0 Hz).  13C NMR (CDCl3) δ = 166.38, 145.75, 143.43, 142.51, 141.42, 132.64, 132.10, 130.64, 128.69, 128.33, 126.45, 123.32, 118.64, 117.74, 117.32, 64.33, 60.90, 14.23 および10.80. MS: 365.3 (M + H)+.
【０６０３】
4-[4-(2,3-ジヒドロ-ベンゾ[1,4]ジオキシン-6-イル)-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル]-安息香酸 エチル エステル
【化２２１】
2005517675.tif 000258
物質を、黄色の固体として得た(48 %収率)。Rf = 0.28 (EtOAc : ヘキサン / 1 : 1).1H NMR (CDCl3) δ = 7.92 (2H, d, J = 8.7 Hz); 7.49 (2H, d, J = 8.7 Hz); 6.82 (1H, d, J = 8.2 Hz); 6.71 (1H, d, J = 2.0 Hz); 6.61 (1H, dd, J = 2.0 および 8.2 Hz); 4.36 (2H, q, J = 7.0 Hz); 4.28 (4H, s); 2.22 (3H, s)および1.26 (3H, t, J = 7.0 Hz).  13C NMR (CDCl3) δ = 166.41, 143.46, 142.62, 140.98, 140.33, 129.59, 129.36, 127.53, 126.29, 123.28, 118.62, 118.15, 117.36, 64.35, 60.90, 14.30および10.68. MS: 365.3 (M + H)+.
【０６０４】
N-{3-[4-(2,3-ジヒドロ-ベンゾ[1,4]ジオキシン-6-イル)-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル]-フェニル}-アセトアミド
【化２２２】
2005517675.tif 000259
物質を、黄色の油として得た(30 %収率)。Rf = 0.23 (EtOAc : ヘキサン / 4 : 1). 1H NMR (d4-MeOH) δ = 7.60 (1H + 1H, m, ブロード); 7.50 (1H, t, ブロード); 7.18 (1H, d, ブロード); 6.82 (1H, d, J = 8.2 Hz); 6.69 (1H, d, J = 2.0 Hz); 6.64 (1H, dd, J = 2.0 および8.2 Hz); 4.27 (4H, s); 2.28 (3H, s) および2.13 (3H, s).  13C NMR (d4MeOH) δ = 171.71, 145.00, 144.06, 140.01, 129.75, 127.90, 125.10, 124.28, 122.42, 120.72, 119.75, 118.28, 65.66, 23.82および11.29.
【０６０５】
N-{4-[4-(2,3-ジヒドロ-ベンゾ[1,4]ジオキシン-6-イル)-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル]-フェニル}-アセトアミド
【化２２３】
2005517675.tif 000260
物質を、黄色の油として得た(50 %収率)。Rf = 0.15 (EtOAc).1H NMR (d4-MeOH) δ = 7.50 (1H, s, ブロード); 7.35 (2H, d, J = 8.2 Hz); 7.28 (2H, d, J = 8,2 Hz); 6.82 (1H, d, J = 8.2 Hz); 6.71 (1H, d, J = 2.0 Hz); 6.62 (1H, dd, J = 2.0 および 8.2 Hz); 4.27 (4H, s); 2.27 (3H, s)および2.16 (3H, s).  13C NMR (d4-MeOH) δ = 171.68, 151.69, 145.04, 144.11, 140.70, 139.74, 129.32, 128.14, 127.05, 124.33, 120.87, 119.82, 118.32, 65.68, 23.87および9.43. MS: 350.4 (M + H)+.
【０６０６】
4-[4-(2,3-ジヒドロ-ベンゾ[1,4]ジオキシン-6-イル)-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル]-ベンゼンスルホンアミド
【化２２４】
2005517675.tif 000261
物質を、黄色の固体として得た(73 %収率)。Rf = 0.15 (EtOAc : ヘキサン / 3 : 2).1H NMR (d6-アセトン) δ = 12.2 (1H, s, ブロード); 7.78 (2H, d, J = 8.8 Hz); 7.62 (2H, d, J = 8.8 Hz); 6.86 (1H, d, J = 8.0 Hz); 6.70 (1H, d, J = 2.0 Hz); 6.65 (1H, dd, J = 2.0 および 8.0 Hz); 6.54 (2H, s); 4.28 (4H, s)および2.26 (3H, s).  13C NMR (d6-アセトン) δ = 145.66, 144.71, 144.44, 141.60, 139.92, 129.43, 128.72, 128.30, 127.80, 127.16, 124.86, 120.39, 119.16, 66.19および11.37. MS: 370.3 (M - H)-.
【０６０７】
2-[4-(2,3-ジヒドロ-ベンゾ[1,4]ジオキシン-6-イル)-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル]-4-メチル-フェノール
【化２２５】
2005517675.tif 000262
物質を、黄色の油として得た(64 %収率)。1H NMR (CDCl3) δ = 7.40 (1H + 1H, s, ブロード); 6.85 (1H + 1H + 1H, m); 6.84 (1H, d, J = 8.1 Hz); 6.68 (1H, d, J = 2.0 Hz); 6.64 (1H, dd, J = 2.0および8.1 Hz); 4.30 (4H, s); 2.25 (3H, s)および2.03 (3H, s). MS: 323.4 (M + H)+.
【０６０８】
4-クロロ-2-[4-(2,3-ジヒドロ-ベンゾ[1,4]ジオキシン-6-イル)-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル]-フェノール
【化２２６】
2005517675.tif 000263
物質を、黄色の油として得た(36 %収率)。Rf = 0.47 (EtOAc : ヘキサン / 1 : 1).1H NMR (CDCl3) δ = 7.26 (1H, s); 7.08 (1H, d, J = 2.0 Hz); 7.04 (1H, d, J = 2.0 Hz); 6.84 (1H, d, J = 8.3 Hz); 6.78 (1H, d, J = 2.0 Hz); 6.70 (1H, dd, J = 2.0 および8.3 Hz); 4.32 (4H, s)および2.25 (3H, s). MS: 343.3 (M + H)+.
【０６０９】
2-クロロ-4-[4-(2,3-ジヒドロ-ベンゾ[1,4]ジオキシン-6-イル)-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル]-フェノール
【化２２７】
2005517675.tif 000264
物質を、黄色の油として得た(40 %収率)。Rf = 0.2 (EtOAc : ヘキサン / 1 : 1). 1H NMR (CDCl3) δ = 7.85 (1H + 1H, s, ブロード); 7.36 (1H, d, J = 2.0 Hz); 7.10 (1H, dd, J = 2.0 および8.4 Hz); 6.82 (1H + 1H, d, J = 8.4 Hz); 6.70 (1H, d, J = 2.0 Hz); 6.62 (1H, dd, J = 2.0および8.4 Hz); 4.27 (4H, s)および2.25 (3H, s).
【０６１０】
2-[4-(2,3-ジヒドロ-ベンゾ[1,4]ジオキシン-6-イル)-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル]-4-フルオロ-フェノール
【化２２８】
2005517675.tif 000265
物質を、黄色の油として得た(75 %収率)。Rf = 0.55 (EtOAc : ヘキサン / 1 : 1).1H NMR (d4-MeOH) δ = 7.10 (1H, m); 6.98 (1H, m); 6.94 (1H, d, J = 8.3 Hz); 6.86 (1H, m); 6.80 (1H, d, J = 2.0 Hz); 6.74 (1H, dd, J = 2.0および8.3 Hz); 4.94 (4H, s)および2.44 (3H, s). MS: 327.3 (M + H)+.
【０６１１】
1-(2,3-ジクロロ-フェニル)-3-ヒドロキシ-ブト-2-エン-1-オン
【化２２９】
2005517675.tif 000266
物質を、茶色の油として得た(40 %収率)。[エノール]: 1H NMR (CDCl3) δ = 7.55 (1H, dd, J = 1.7および8.0 Hz); 7.49 (1H, dd, J = 1.7および8.0 Hz); 7.25 (1H, dd, J = 8.0および8.0 Hz); 5.59 (1H, s)および2.20 (3H, s).
【０６１２】
3-(2,3-ジクロロ-フェニル)-5-メチル-1H-ピラゾール
【化２３０】
2005517675.tif 000267
物質を、茶色の油として得た(58 %収率)。1H NMR (CDCl3) δ = 11.00 (1H, s, ブロード); 7.50 (1H, dd, J = 1.7および8.0); 7.40 (1H, dd, J = 1.7および8.0 Hz); 7.10 (1H, dd, J = 8.0および8.0 Hz); 6.46 (1H, s)および2.10 (3H, s).
【０６１３】
3-(2,3-ジクロロ-フェニル)-4-ヨード-5-メチル-1H-ピラゾール
【化２３１】
2005517675.tif 000268
物質を、オレンジ色の油として得た(70 %収率)。Rf = 0.54 (EtOAc : ヘキサン / 1 : 1). 1H NMR (CDCl3) δ = 7.58 (1H, m); 7.30 (2H, m) および2.21 (3H, s).
【０６１４】
3-(2,3-ジクロロ-フェニル)-4-(2,3-ジヒドロ-ベンゾ[1,4]ジオキシン-6-イル)-5-メチル-1H-ピラゾール
【化２３２】
2005517675.tif 000269
物質を、黄色の油として得た(30 %収率)。Rf = 0.36 (EtOAc : ヘキサン / 1 : 1). 1H NMR (CDCl3) δ = 7.44 (1H, dd, J = 2.0および7.6 Hz); 7.18 (2H, m); 6.75 (1H, d, J = 8.3 Hz), 6.62 (1H, d, J = 2.0 Hz); 6.50 (1H, dd, J = 2.0および8.3 Hz); 4.23 (4H, s)および2.29 (3H, s).
【０６１５】
4-[4-(2,3-ジクロロ-ベンゾ[1,4]ジオキシン-6-イル)-5-メチル-1H-ピラゾール-3-イル]-安息香酸
【化２３３】
2005517675.tif 000270
物質を、黄色の固体として得た(70 %収率)。Rf = 0.43 (EtOAc). 1H NMR (d6-アセトン)  δ = 7.92 (2H, d, J = 8.7 Hz); 7.60 (2H, d, J = 8.7 Hz); 6.85 (1H, d, J = 8.2 Hz); 6.70 (1H, d, J = 2.0 Hz); 6.64 (1H, dd, J = 2.0および8.2 Hz); 4.30 (4H, s)および2.25 (3H, s). MS: 337.4 (M + H)+.
【０６１６】
実施例161
4-[4-(4-ブロモ-フェニル)-1-メチル-1H-ピラゾール-3-イル]-6-クロロ-ベンゼン-1,3-ジオール
【化２３４】
2005517675.tif 000271
3-(4-ブロモ-フェニル)-6-クロロ-7-ヒドロキシ-クロメン-4-オン(100mg、28mmol)のエタノール溶液(5ml)を加熱して沸騰させ、メチル ヒドラジン(0.30ml、20当量)を1容量添加し、還流を16時間継続した。冷却後、揮発性物質を減圧下に蒸発させ、残渣に水を添加して析出物を形成させた。これをろ過し、P2O5の存在下で真空下に乾燥して、黄褐色の着色した粉末として78mg (73%収率)を得た。LCMSにより純粋であったが、まずヘキサン中の40% EtOAc、ついで60%に増加して溶出するカラムクロマトグラフィーによるさらなる精製により、灰白色の粉末を得た(6mg)。厳密な位置異性体をNOESY 1H NMRにより確認した。
【０６１７】
δH (d6-アセトン) 10.29 (ブロード s, OH), 7.70 (1H, s, Het-H), 7.48 (2H, d, Ar-H), 7.19 (2H, d, Ar-H), 6.96 (1H, s, Ar-H), 6.46 (1H, s, Ar-H), 3.88 (3H, s, N-CH3). LCMS tR = 7.58, MS m/z 379.4/381.4 [M+H]+.
【０６１８】
実施例162
4-[4-(3,4-ジメトキシ-フェニル)-1-メチル-1H-ピラゾール-3-イル]-6-エチル-ベンゼン-1,3-ジオール
【化２３５】
2005517675.tif 000272
3-(3,4-ジメトキシ-フェニル)-6-エチル-7-ヒドロキシ-クロメン-4-オン (50mg、0.15mmol)を用い、還流を24時間継続して、前の実施例に記載の方法を行った。回収した粗生成物を分取TLCにより精製して、白色の結晶として5mg (28%収率)を得た。厳密な位置異性体を、NOESY 1H NMRにより確認した。
δH (d6-アセトン) 10.28 (ブロード s, OH), 8.07 (1H, ブロード s, OH), 7.54 (1H, s, Het-H), 6.77 (4H, m, Ar-H), 6.29 (1H, s, Ar-H), 3.84 (3H, s, CH3), 3.70 (3H, s, OCH3), 3.61  (3H, s, OCH3), 2.19 (2H, q, CH2CH3), 0.77 (3H, t, CH2CH3). LCMS tR = 6.78, MS m/z 355.4 [M+H]+.
【０６１９】
実施例163
(4-[4-(4-ブロモ-フェニル)-1,5-ジメチル-1H-ピラゾール-3-イル]-6-クロロ-ベンゼン-1,3-ジオール
【化２３６】
2005517675.tif 000273
3-(4-ブロモ-フェニル)-6-クロロ-7-ヒドロキシ-2-メチル-クロメン-4-オン (50mg、0.14mmol)を用い、還流を60時間継続して、前の実施例に記載の方法を行った。回収した粗生成物を分取TLCにより精製して、白色の結晶として7mg (13%収率)を得た。厳密な位置異性体を、NOESY 1H NMRにより確認した。
δH (d6-アセトン) 10.81 (ブロードs, OH), 8.60 (1H, ブロード s, OH), 7.55 (2H, d, Ar-H), 7.12 (2H, d, Ar-H), 6.77 (1H, s, Ar-H), 6.42 (1H, s, Ar-H), 3.79 (3H, s, CH3), 2.09 (3H, s, CH3). LCMS tR = 8.04, MS m/z 392.9/394.9 [M+H]+.
【０６２０】
実施例164
4-クロロ-6-(1,5-ジメチル-4-フェニル-1H-ピラゾール-3-イル)-ベンゼン-1,3-ジオール
【化２３７】
2005517675.tif 000274
6-クロロ-7-ヒドロキシ-2-メチル-3-フェニル-クロメン-4-オン(50mg、0.17mmol)を用い、還流を60時間継続して、前の実施例に記載の方法を行った。回収した粗生成物を分取TLCにより精製して、白色の結晶として10mg (18%収率) を得た。厳密な位置異性体を、NOESY 1H NMRにより確認した。
δH (d6-アセトン) 7.38 (3H, m, Ar-H), 7.15 (2H, m, Ar-H), 6.78 (1H, s, Ar-H), 6.41 (1H, s, Ar-H), 3.79 (3H, s, CH3), 2.07 (3H, s, CH3). LCMS tR = 7.41, MS m/z 315.4 [M+H]+.
【０６２１】
実施例165
(4-クロロ-6-[4-(3,4-ジメトキシ-フェニル)-1-メチル-1H-ピラゾール-3-イル]-ベンゼン-1,3-ジオール
【化２３８】
2005517675.tif 000275
6-クロロ-3-(3,4-ジメトキシ-フェニル)-7-ヒドロキシ-クロメン-4-オン(100mg、0.30mmol)を用い、前の実施例に記載の方法を行った。粗生成物は、明るい茶色の粉末として69mg (64%収率)を与え、これはさらなる精製を必要としなかった。厳密な位置異性体を、NOESY 1H NMRにより確認した。
δH (d6-DMSO) 7.91 (1H, s, Het-H), 6.85 (3H, m, Ar-H), 6.53 (1H, s, Ar-H), 5.75 (1H, s, Ar-H), 3.87 (3H, s, CH3), 3.77 (3H, s, OCH3), 3.61  (3H, s, OCH3). LCMS tR = 6.53, MS m/z 361.3 [M+H]+.
【０６２２】
実施例166
4-[4-(4-ブロモ-フェニル)-1-(2-ヒドロキシ-エチル)-1H-ピラゾール-3-イル]-6-クロロ-ベンゼン-1,3-ジオールの合成
【化２３９】
2005517675.tif 000276
3-(4-ブロモ-フェニル)-6-クロロ-7-ヒドロキシ-クロメン-4-オン (0.1g、0.28mmol)、および2-ヒドラジノ-エタノール(0.04g)をエタノール(10ml)中に懸濁し、1時間還流した。4-[4-(4-ブロモ-フェニル)-1-(2-ヒドロキシ-エチル)-1H-ピラゾール-3-イル]-6-クロロ-ベンゼン-1,3-ジオールが、冷却により白色の固体として析出した(0.09g、78.8%)。
δH (DMSO) : 8.01 (1H, s, =CH), 7.48 (2H, d, J=9Hz, ArH), 7.19 (2H, d, J=9Hz, ArH),  7.06 (1H, s, ArH), 6.51 (1H, s, ArH), 4.16 (2H, t, CH2), 3.79 (2H, t, CH2). LCMS シングルピーク tR 7.34, MS m/z 409/411 [M+H]+.
【０６２３】
6-クロロ-7-ヒドロキシ-3-(4-メトキシ-フェニル)-4-オキソ-4H-クロメン-2-カルボン酸 メチル エステル (スキーム25参照)
【化２４０】
2005517675.tif 000277
1-(5-クロロ-2,4-ジヒドロキシ-フェニル)-2-(4-メトキシ-フェニル)-エタノン (1当量)を、無水ピリジン中に採取し、氷浴中で0℃に冷却した。メチル クロロオキソアセテート(3当量)を滴下し、溶液に栓をして、冷蔵庫内で一晩放置した。
明るいオレンジ色の溶液に、注意して1M HCl (水溶液) 100mlを添加し、DCM 2×70ml中に抽出した。有機相を合わせ、塩水2×50mlで洗浄した。全体を黄色の固体になるまで真空で濃縮した。これを1MHCl (水溶液)およびメタノールの1:1混液に懸濁した。全体を還流で4時間加熱した。冷却するのを許容した。
反応混合物を真空で濃縮して、薄い黄色の固体として6-クロロ-7-ヒドロキシ-3-(4-メトキシ-フェニル)-4-オキソ-4H-クロメン-2-カルボン酸 メチル エステルを得た。
LC保持時間 2.423分 [M+H]+ 361.2/363.2 塩素開裂様式。
【０６２４】
6-クロロ-7-ヒドロキシ-3-(4-メトキシ-フェニル)-4-オキソ-4H-クロメン-2-カルボン酸
【化２４１】
2005517675.tif 000278
6-クロロ-7-ヒドロキシ-3-(4-メトキシ-フェニル)-4-オキソ-4H-クロメン-2-カルボン酸 メチル エステルを、飽和NaHCO3 (水溶液): メタノールの2:1 混液に採取し、全体を65℃で5時間加熱した。溶液を室温に冷却し、真空で濃縮してメタノールを除去した。残存の水溶液を1M HCl (水溶液)で酸性化し、淡黄褐色の着色した沈殿物が析出した。これを真空ろ過により回収し、水で、そしてジエチルエーテルで洗浄して、6-クロロ-7-ヒドロキシ-3-(4-メトキシ-フェニル)-4-オキソ-4H-クロメン-2-カルボン酸を得た。
LC保持時間 1.814分 347.2/349.2 塩素開裂様式。
【０６２５】
実施例167
5-(5-クロロ-2,4-ジヒドロキシ-フェニル)-4-(4-メトキシ-フェニル)-2H-ピラゾール-3-カルボン酸
【化２４２】
2005517675.tif 000279
6-クロロ-7-ヒドロキシ-3-(4-メトキシ-フェニル)-4-オキソ-4H-クロメン-2-カルボン酸(1当量)をエタノール中に採取し、ヒドラジン水和物(3当量)を添加した。溶解を助けるために、NaHCO3 (水溶液)を数滴添加し、次いで全体を窒素下に2時間、70℃で加熱した。溶液を室温に冷却し、真空で濃縮して茶色の油を得た。これを、1MHCl(水溶液)およびジエチルエーテルに分割した。有機相を合わせ、1MHCl(水溶液)で洗浄し、MgSO4で乾燥し、ろ過し、真空で濃縮して、黄色のフォームとして5-(5-クロロ-2,4-ジヒドロキシ-フェニル)-4-(4-メトキシ-フェニル)-2H-ピラゾール-3-カルボン酸を得た。
LC保持時間 2.020分 [M+H]+ 361.2/ 363.2 塩素開裂様式。
【０６２６】
R5アミドの一般的な合成
【化２４３】
2005517675.tif 000280
5-(5-クロロ-2,4-ジヒドロキシ-フェニル)-4-(4-メトキシ-フェニル)-2H-ピラゾール-3-カルボン酸 (1当量)を、無水ジクロロメタン中の懸濁物として採取した。得られた溶液を、窒素下に0℃に冷却した。1-ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物(3当量)、続いてN-メチルモルホリン(10当量)、N-エチル-N'-(3-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド HCl (3当量)およびアミン(2当量)を添加した。全体を室温に一晩攪拌した。得られた溶液をジクロロメタンで希釈し、1MHCl(水溶液)、飽和NaHCO3 (水溶液)および飽和NaCl (水溶液)で抽出し、次いでMgSO4で乾燥し、ろ過し、真空で濃縮した。残渣を分取LC/MSにより精製して、アミド生成物を得た。
【０６２７】
実施例168
5-(5-クロロ-2,4-ジヒドロキシ-フェニル)-4-(4-メトキシ-フェニル)-2H-ピラゾール-3-カルボン酸 メチルアミド
【化２４４】
2005517675.tif 000281
LC保持時間 1.968分 [M+H]+ 374.3 / 376.2 塩素開裂様式。
【０６２８】
実施例169
5-(5-クロロ-2,4-ジヒドロキシ-フェニル)-4-(4-メトキシ-フェニル)-2H-ピラゾール-3-カルボン酸 エチルアミド
【化２４５】
2005517675.tif 000282
LC保持時間 2.108分 [M+H]+ 388.3/390.2 塩素開裂様式。
【０６２９】
実施例170
5-(5-クロロ-2,4-ジヒドロキシ-フェニル)-4-(4-メトキシ-フェニル)-2H-ピラゾール-3-カルボン酸 イソプロピルアミド
【化２４６】
2005517675.tif 000283
LC保持時間 2.204分 [M+H]+ 402.3/404.3 塩素開裂様式。
【０６３０】
実施例171
5-(5-クロロ-2,4-ジヒドロキシ-フェニル)-4-(4-メトキシ-フェニル)-2H-ピラゾール-3-カルボン酸 ベンジルアミド
【化２４７】
2005517675.tif 000284
LC保持時間 2.421分 [M+H]+ 450.3/452.3 塩素開裂様式。
【０６３１】
実施例172
5-(5-クロロ-2,4-ジヒドロキシ-フェニル)-4-(4-メトキシ-フェニル)-2H-ピラゾール-3-カルボン酸 アミド
【化２４８】
2005517675.tif 000285
実施例4 (1当量)を、室温で窒素雰囲気下に、無水DMF中に採取した。2-(1H-ベンゾトリアゾール-1-イル)-1,1,3,3-テトラメチルウロニウム ヘキサフルオロホスフェート(2当量)、続いてN,N-ジイソプロピルエチルアミン(3当量)を添加した。反応混合物を5分間攪拌し、この時間の後、アンモニア水溶液(非常に過剰に) 0.88を添加した。全体を室温で窒素下に2日間攪拌するのを許容した。
反応混合物を1MHCl (水溶液)中に冷却し、ジクロロメタンで抽出した。有機相を合わせ、飽和NaCl (水溶液)で洗浄し、MgSO4で乾燥し、ろ過し、真空で濃縮した。分取LC/MSで精製した。
LC保持時間 1.920分 [M+H]+ 360.2/362.2 塩素開裂様式。
【０６３２】
実施例179を、スキーム26に従って製造した。
1-(2,4-ビス-ベンジルオキシ-5-クロロ-フェニル)-2-(4-メトキシ-フェニル)-エタノン
【化２４９】
2005517675.tif 000286
1-(5-クロロ-2,4-ジヒドロキシ-フェニル)-2-(4-メトキシ-フェニル)-エタノン (1当量)をアセトニトリル中に溶解し、炭酸カリウム(4当量)を部分方式で添加した。懸濁物を、ベンジルブロミド(2.4当量)の添加の前に5分間攪拌し、その後、反応混合物を窒素下に還流で3時間攪拌した。反応物が室温に冷却するのを許容し、水で希釈した。これを酢酸エチル中に抽出した。有機相をMgSO4で乾燥し、ろ過し、真空で濃縮してシロップを得た。これを1:1 ジエチルエーテル:ヘキサンで粉砕して、白色の固体として1-(2,4-ビス-ベンジルオキシ-5-クロロ-フェニル)-2-(4-メトキシ-フェニル)-エタノンを得た。
LC保持時間 3.019分、[M+H]+ 475.3 /473.3 塩素開裂様式。
【０６３３】
3-(2,4-ビス-ベンジルオキシ-5-クロロ-フェニル)-4-(4-メトキシ-フェニル)-1H-ピラゾール
【化２５０】
2005517675.tif 000287
1-(2,4-ビス-ベンジルオキシ-5-クロロ-フェニル)-2-(4-メトキシ-フェニル)-エタノンを、ジメチルホルムアミド ジメチルアセタール(1.5当量)中に懸濁した。溶解を助けるためにDMFの数滴を添加した。得られた溶液を、窒素雰囲気下に、一晩110℃に加熱した。溶液を周囲温度に冷却した。ヒドラジン水和物 (3当量)を添加し、溶液を窒素下に80℃で2時間攪拌した。
反応混合物を室温に冷却し、酢酸エチルで希釈し、水で数回洗浄した。有機相をMgSO4で乾燥し、ろ過し、真空で濃縮してピンク色のガムを得た。これを1:1 ジエチルエーテル: ヘキサンで粉砕して、クリーム色の着色した固体として3-(2,4-ビス-ベンジルオキシ-5-クロロ-フェニル)-4-(4-メトキシ-フェニル)-1H-ピラゾールを得た。
LC保持時間 2.848分 [M+H]+ 497.3 / 499.3 塩素開裂様式。
【０６３４】
3-(2,4-ビス-ベンジルオキシ-5-クロロ-フェニル)-5-ブロモ-4-(4-メトキシ-フェニル)-1H-ピラゾール
【化２５１】
2005517675.tif 000288
3-(2,4-ビス-ベンジルオキシ-5-クロロ-フェニル)-4-(4-メトキシ-フェニル)-1H-ピラゾール(1当量)を無水ジクロロメタン中に溶解し、窒素雰囲気下に0℃に冷却した。N-ブロモスクシンイミド(1当量)を部分方式で添加し、反応混合物を室温で3時間攪拌した。N-ブロモスクシンイミド(1当量)のさらなる部分を添加し、45分で臭素化を完了した。
反応混合物を水で希釈して、5分間攪拌した。この時間の後、混合物をジクロロメタン中に抽出した。有機相を水で数回洗浄し、MgSO4で乾燥し、ろ過し、真空で濃縮した。残渣を、5% 酢酸エチル/ ヘキサンで溶出するフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、フォームとして3-(2,4-ビス-ベンジルオキシ-5-クロロ-フェニル)-5-ブロモ-4-(4-メトキシ-フェニル)-1H-ピラゾールを得た。
LC保持時間 2.845 分[M+H]+ 575.3/577.3 塩素開裂様式。
【０６３５】
4-[5-ブロモ-4-(4-メトキシ-フェニル)-1H-ピラゾール-3-イル]-6-クロロ-ベンゼン-1,3-ジオール
【化２５２】
2005517675.tif 000289
3-(2,4-ビス-ベンジルオキシ-5-クロロ-フェニル)-5-ブロモ-4-(4-メトキシ-フェニル)-1H-ピラゾール(1当量)を無水ジクロロメタン中に溶解し、窒素雰囲気下に、0℃に冷却した。ジクロロメタン中の1M 三塩化ホウ素(8当量)を滴下し、溶液を0℃で30分間攪拌した。
溶液を飽和NaHCO3(水溶液)に添加し、ジクロロメタン中に抽出した。有機相を塩水で洗浄し、MgSO4で乾燥し、ろ過し、真空で濃縮して、白色固体を得た。これを分取LC/MSにより精製して、白色固体として4-[5-ブロモ-4-(4-メトキシ-フェニル)-1H-ピラゾール-3-イル]-6-クロロ-ベンゼン-1,3-ジオール(実施例179)を得た。
LC保持時間 2.355分 [M+H]+ 395.1/397.1/399.1 モノ塩素/モノ臭素開裂様式。
【０６３６】
本発明の化合物のいくつかの例は、市販の出典(例えばChemDiv Inc.、San Diego、California、USA)から得た。
HSP90活性を、とりわけ、以下に記載のアッセイを用いて測定した。
【０６３７】
アッセイ方法
酵母HSP90をモデル系として用いて、2つの方法を開発してHSP90の元来のATPアーゼ活性を測定した。第一の方法は、再生共役酵素アッセイ(regenerating coupled enzyme assay)を用いる。無機ホスフェートの測定のためのマラカイトグリーンの使用に基づく第二のアッセイは、高処理量のスクリーニング(HTS)として設計され、新規なHSP90阻害薬剤候補を同定する。
HSP90阻害を示す分子マーカーが同定されており(例えばWhitesellら、1994; Clarkeら、2000参照)、これらはウェスタンブロッティング技術を用いて、容易に測定することができる。
【０６３８】
他のタンパク質および翻訳語修飾について記載されたもの(例えばStockwellら、1999; Versteegら、2000参照)に類似の、細胞ベースのELISA (酸素結合免疫吸着アッセイ)も開発されている。この技術は、HSP90阻害剤の評価の薬力学的エンドポイントを測定するための、代替のより高い処理量のアッセイを提供する。該アッセイは、非ATPアーゼ管理機構によりHSP90を阻害する化合物の同定のための、細胞ベースの一次スクリーンとして有用であることが示され得る。
増殖阻害アッセイは、HSP90阻害剤の候補の評価のために用いられた。
【０６３９】
共役酵素ATPアーゼアッセイ
ATPアーゼアッセイを、Aliら、1993に記載されたピルベートキナーゼ/ ラクテートデヒドロゲナーゼ結合アッセイを用いて行い、これを次のスキームに説明する。
【化２５３】
2005517675.tif 000290
HSP90により生じたADPは、ホスホエノールピルビン酸(PEP)を基質として用いて、ピルベートキナーゼによりリン酸化され、生成物としてATPおよびピルビン酸を産生する。次いで、ピルビン酸は、NADに変換されるNADHを用いて、ラクテートデヒドロゲナーゼにより乳酸に変換される。このNADH濃度の消費が、分光学的にモニターされる340 nmでの吸光度の減少を導く。よって、HSP90のATPアーゼ活性により発生するADPの各モルについて、1モルのNADHが用いられる。HSP90の添加の前に、酵素系は、ATP基質中に存在するいずれのADPを、ATPに変換する。これは、ATPよりもADPについてより強い親和性を示すHSP90のような酵素には重要である。
【０６４０】
材料
化学薬品は、最高純度の市販で入手可能なものであり、すべての水溶液はAR水中につくられる。
(1)  1 M Tris-HCl緩衝液、pH 7.5。
(2)  100 mM KCl。
(3)  100 mM MgCl2。
(4)  4℃で保存した、10 mg ml-1 ホスホエノールピルビン酸(PEP、108 294、Roche Diagnostics Ltd.、Lewes、UK)。
(5)  -20℃で保存した、4 mg ml-1 ATP (A-9187、Sigma Aldrich Ltd.、Poole、UK)
(6)  4℃で保存した、35.5 mg ml-1 NADH (837 075、Roche Diagnostics Ltd.)
(7)  4℃で保存した、10 mg ml-1 ピルベートキナーゼ(109 045、Roche Diagnostics Ltd.)
(8)  4℃で保存した、10 mg ml-1 ラクテートデヒドロゲナーゼ(127 221、Roche Diagnostics Ltd.)
(9)  新たに調製した、15 mM ゲルダナマイシン(100% DMSO中)
【０６４１】
方法
次のプロトコルを用いた：
(1)  (a) 1 M Tris 緩衝液 pH 7.5 10 ml、(b) 100 mM KCl 20 mlおよび(c) 100 mM MgCl2 6 mlを混合する。これは、緩衝液Aであり、アッセイの期間中37℃に保たれ、各日の最後に放棄する。
(2)  適量の蒸留水(dH2O)を、37℃でインキュベートする。
(3)  ATP 12.8 mgを、緩衝液A 2 mlに溶解し、氷上に保持する。
(4)  PEP 10 mgを、緩衝液A 1 mlに溶解し、氷上でインキュベートする。
(5)  緩衝液A 0.25 mlをNADH 8.9 mgに添加し、氷上におく。
(6)  ピルベートキナーゼおよびラクテートデヒドロゲナーゼを氷上におく。
(7)  参照のセルに、 (a) 緩衝液A 360μl、(b) dH2O 520μl、(c) ATP 溶液80μlおよび(d) PEP 溶液40μlを入れる。
(8)  テストセルに、 (a) 緩衝液A 360μl、(b) dH2O 490μl、(c) ATP 80μl、(d) PEP 40μl、(e) ピルベートキナーゼ20μlおよび(f) ラクテートデヒドロゲナーゼ2μlを入れる。
(9)  キュベットの内容物を混合し、340 nmでの吸光度をゼロにする。次いで、NADH 2μlを添加すると、吸光度が上昇するはずである。安定なベースラインが得られるまで、反応を37℃で追跡する。
(10)  テストキュベットにHSP90を添加し、dH2Oでキュベットの容積を1 mlに合わせ、適切な分光光度計(例えばShimadzu UV-240)を用いて、340 nmでの吸光度の減少を追跡する。
(11)  ゲルダナマイシン2μlを添加し、340 nMでの吸光度の減少を追跡する。HSP90 ATPアーゼ活性は、工程9および10の速度の差により与えられる。
(12)  反応の速度(モル 分-1 ml-1)は、ΔOD / (1000×6200 M-1 cm-1)に由来し、ここで、6200の値は、NADHの吸光係数である。これは、速度を反応に用いたHSP90の質量(mg)またはモル量で割ることにより、比活性(モルATP 分-1 mg-1)またはターンオーバー(モル 分-1 モル-1)に変換され得る。
【０６４２】
コメント
(1)  酵母HSP90タンパク質の精製の詳細は、以前に記載されている(Panaretouら、1998)。37℃での酵母HSP90のATPアーゼ活性は、〜0.7 モルATP 分-1 mgタンパク質である。他のATPアーゼに比較して、この活性は非常に低く、よってHSP90調製物は、高度に精製されなければならない。
(2)  測定されたATPアーゼ活性が、バックグラウンドの紛れ込んだATPアーゼ活性ではなく、HSP90によることを示すために、活性がゲルダナマイシン感受性であることを示さなければならない。
(3)  すべてのアッセイは、2μM のHSP90濃度で3重に行う。
(4)  このアッセイは、比較的時間を消費し、よって処理量は低い。各アッセイは、終了するのに約60分かかる。
【０６４３】
マラカイトグリーンATPアーゼアッセイ
リンモリブデン酸塩錯体の形成に基づく、ホスフェートの測定のための比色アッセイは、安価な試薬を用いて、いくつかの工程で行うことができ、高処理量のスクリーニングに必要とされる自動化によく適している(例えばCoganら、1999参照)。無機ホスフェートを放出する酵素を、610nmで最大限の吸光度であり、青緑色を生じる、無機ホスフェートとモリブデン酸塩の反応により形成された錯体を用いる、カチオン性の色素であるマラカイトグリーンを用いて分析する(例えばBaykovら、1988; Harderら、1994; Maehamaら、2000)。該方法は、種々の非-HSP90 ATPアーゼについて、高処理量(例えばRumsfeldら、2000参照)および超高処理量のスクリーニングの形式(例えばLaveryら、2001参照)の両方において用いられる。しかしながら、この方法は、酸性のマラカイトグリーン試薬の存在下でのATPの非酵素的加水分解により、色の増加を引き起こすことにより、面倒である(例えばChanら、1986; Henkelら、1988参照)。このプロセスは、モリブデン酸塩により媒介され、試薬のすぐ後にクエン酸ナトリウムを添加することにより克服できる(例えばLanzettaら、1979; Schirmerら、1998; Baginskiら、1975参照)。この修飾は、他のATPアーゼについて記載された96ウェルマイクロタイタープレートアッセイ(例えばLanzettaら、1979参照)に適応されており、HSP90 ATPアーゼのための次のプロトコルを作り出し、これは高処理量のスクリーニングに適切である。
【０６４４】
材料
化学薬品は、最高純度の市販で入手可能なものであり、すべての水溶液はAR水中につくられる。無機ホスフェートでの汚染を最小限にする必要があるので、アッセイに用いる溶液および装置には、注意が払われるべきである。ガラス器具およびpHメーターは、使用前に蒸留水または脱イオン水で2重に洗浄し、可能であれば、プラスチック器具を用いるべきである。すべての手順において、手袋を着用する。
【０６４５】
(1)  イムロン96-ウェル(Thermo Labsystems、Basingstoke、UK)またはクリニプレート384ウェル平底ポリスチレンマルチウェルプレート(Thermo Labsystems)。
(2)  (a) 100 mM Tris-HCl、pH 7.4、(b) 20 mM KCl、(c) 6 mM MgCl2のアッセイ緩衝液。4℃で保存。
(3)  0.0812% (w/v)マラカイトグリーン(M 9636、Sigma Aldrich Ltd.、Poole、UK)。室温で保存。
(4)  沸騰水(コメント1参照)中の2.32% (w/v) ポリビニルアルコールUSP (P 1097、Sigma Aldrich Ltd、Poole、UK)、冷却を許容し、室温で保存。
(5)  6 M 塩酸中の5.72% (w/v) モリブデン酸アンモニウム。室温で保存。
(6)  34% (w/v)クエン酸ナトリウム。室温で保存。
(7)  ATP、二ナトリウム塩、特別品質(519979、Boehringer Mannheim、Lewes、UK)。4℃で保存。
(8)  イー・コリ(E. coli)で発現された酵母HSP90タンパク質、＞95％に精製(例えばPanaretouら、1998参照)、タンパク質0.5 mgを含む10μlのアリコートとして、-80℃で保存。
【０６４６】
方法
次のプロトコルを用いた：
(1)  使用する日に、ストック溶液からマラカイトグリーン試薬を調製する。(a) マラカイトグリーン2部、(b) ポリビニルアルコール1部、(c) モリブデン酸アンモニウム1部、および(d) 水2部を混合する。当初、試薬は濃茶色であるが、室温で約2時間放置後に、これは黄金色になり、使用する準備ができている。
(2)  高処理量のスクリーニングアッセイのために、テスト化合物を200μMで2.0％のDMSOに溶解し、化学ライブラリーに由来する娘プレート(daughter plates)に入れる。娘プレートから各サンプルの5μlを、自動化された装置を用いてアッセイプレートの各ウェルに移す(コメント3参照)。これは、40μMのウェル中の最終濃度を表す。96ウェルプレートの最初および最終の列は溶媒のみを含み、コントロールおよびバックグラウンドの値をそれぞれ表す。
(3)  IC50値を測定するために、DMSO 中の化合物のストック濃度の列を調製する。各化合物の比力価に従って、5つの適切な濃度を用いる。各濃度の1μlのアリコートをアッセイプレートのウェルに移し、アッセイ緩衝液の4μLを添加する。
(4)  アッセイ緩衝液にATPを溶解し、2.5 mMのストック濃度を得、室温で保存する。
(5)   ATP 溶液の10μlのアリコートを各ウェルに添加して、1 mMの最終アッセイ濃度を得る。
(6)  使用の直前に、氷上でHSP90タンパク質を融かし、冷えたアッセイ緩衝液に、ストック濃度0.25 mg/mlで懸濁して、氷上に保存する。アッセイ緩衝液10μlが添加されるバックグラウンドのウェルを除いて、各ウェルにストックHSP90 10μlを添加することによりインキュベーションを開始し、最終アッセイ容量25μlを得る。
(7)  プレートシェーカー(例えばWellmixx (Thermo Labsystems)またはMTS4 (IKA-Schuttler))を用いてプレートを振とうし(約2分)、プラスチックフィルムでふたをして37℃で3時間インキュベートする。
(8)  インキュベーションを停止するために、マラカイトグリーン試薬80μlを各ウェルに添加し、再びプレートを振とうする。
(9)  各ウェルに34％クエン酸ナトリウム10μlを添加し(コメント2参照)、再び振とうする。これがコントロールにおいて青緑色の顕色を導くが、バックグラウンドは黄色っぽい。
(10)  適切なプレートリーダー(例えばVictor 2、Perkin Elmer Life Sciences、Milton Keynes、UK)を用いて620 nmでの吸光度を測定する。上記の条件下で、コントロールの吸光度は0.7〜1.0であり、バックグラウンドは0.15〜0.20である；ノイズに対するシグナルの比は〜30である。これらの条件を用いて得られたデータから算出されたZ' 因子(例えばZhangら、1999参照)は、0.8であり、アッセイがスクリーニングの目的に非常に適することを示した。
【０６４７】
コメント
(1)  ポリビニルアルコールを沸騰水中に溶解するのは困難であり、2〜3時間の攪拌が必要である。
(2)  マラカイトグリーン試薬およびクエン酸ナトリウムの添加の間の間隔は、ATPの非酵素的加水分解を減少させるために、できる限り短く保つべきである。一旦クエン酸ナトリウムが添加されると、色は室温で4時間まで安定である。
(3)  化合物は、ラピッドプレート96/384 (Zymark、Runcorn、UK)を用いてアッセイプレートに添加することができる。マルチドロップ384ディスペンサー(Thermo Labsystems、Basingstoke、UK)を簡便に用いて、試薬をプレートに添加することができる。
(4)  アッセイ条件は、記載したプロトコルのもとで酵素活性の直線性を達成するために、時間、タンパク質および基質濃度に関して最適化された。
(5)  上記のアッセイプロトコルは96ウェルプレートで用いられるが、容積の減少は、384ウェルプレートの使用を容易に許容する。
(6)  ノイズに対するシグナル(S/N)は、次の式を用いて算出される：
(S-B)/ √(SのSD)2 + (BのSD)2
(7)  HSP90の比活性を測定するために、無機ホスフェートの濃度(0〜10μM)の列を調製し、記載したようにして620 nmでの吸光度を測定する。比活性は、得られた検量線から算出される。
【０６４８】
ウェスタンブロットアッセイ
HSP90阻害剤の細胞への影響は、いくつかの分子マーカーを用いて測定され得る。既に述べたように、HSP90阻害は、いくつかの重要な細胞のシグナリングタンパク質の減少を導く。RAF-1は、ウェスタンブロッティングにより容易に検出することができ、HSP90阻害剤への曝露の後に、いくつかのヒト腫瘍細胞ラインにおいて減少することが示されている(例えばKellandら、1999; Hosteinら、2001; Schulteら、1998; Clarkeら、2000参照)。減少は、通常、6時間までに観察され、最大の減少は24時間で起こる。RAF-1と同様に、いくつかの他のHSP90クライエントタンパク質の減少は、イムノブロッティングにより測定でき、例えばCDK4、ERBB2である。しかしながら、これらのタンパク質のいくつかは、細胞ライン特異的であり、例えばERBB2は乳癌、甲状腺癌、腎臓癌およびある種の卵巣腫瘍細胞ラインで主に発現されることが記載されることが重要である。HSP90阻害剤のその他の非常に重要なマーカーは、熱ショックタンパク質70 (HSP70)である。HSP70のレベルのHSF-1 (熱ショック因子1)に依存する増加が、我々、および他のグループにより報告されており(例えばWhitesellら、1994; Clarkeら、2000参照)、この効果はHSP90阻害剤作用の肯定的な指標として用いることができる。記載されるイムノブロッティングの方法は標準の技術に基づくが、参照しやすいように詳細に記載される。
【０６４９】
材料
化学薬品は、最高純度の市販で入手可能なものである。
(1)  17AAG、ゲルダナマイシン、およびラディシコールは、DMSO中の2 mMストックとして-20℃で保存される。
(2)  ヒト腫瘍細胞ライン(例えばATCCからの)を、4500mg/mlグルコース、10%ウシ胎児血清(FBS)、200 mM L-グルタミンおよび5 ml非必須アミノ酸を補ったイーグル培地ダルベッコ変法(DMEM)で、5% CO2の加湿雰囲気下に37℃で培養する。
(3)  溶解緩衝液：(a) 150 mM NaCl、(b) 50mM Tris-HCl、(c) 1% NP40、(d) 0.2 % ドデシル硫酸ナトリウム(SDS)、(e) 2 mM フェニルメチルスルホニルフルオリド(PMSF)、(f) 10μg/l アプロチニン、(g) 10μg/l ロイペプチン、(h) 1 mM オルトバナジン酸ナトリウム、(i) 0.5 mM ジチオトレイトール(DTT)、(j) 0.5 mM NaF、(k) 0.5 mM β-グリセロホスフェート。要時に調製し、-20℃で保存。
(4)  ビシンコニン酸(BCA)タンパク質アッセイ試薬(PerBio Science UK、Ltd.、Chester、UK).
(5)  カゼインブロッキング緩衝液 (PBS中の0.5%カゼイン、0.02%チメロサール)。4℃で2週間まで保存。
(6)  洗浄緩衝液 (0.05% Tween 20を含むリン酸緩衝食塩水(PBS))。
(7)  Tris-グリシン勾配ポリアクリルアミドプレキャストゲル(4〜20 %) (厚さ1 mm) (Novex、InVitrogen、Groningen、NL)。
(8)  ニトロセルロースメンブレン(孔サイズ0.2μm) (InVitrogen、Groningen、NL)。
(9)  ポンソーレッドステイン(30% TCA/30% BSA中に2% w/v、Sigma Aldrich Ltd.、Pool、UK)。
(10)  強化化学発光(スーパーシグナル)試薬(PerBio Science UK、Ltd.、Chester、UK)。
(11)  写真フィルム(Hyperfilm ECL、Amersham Pharmacia Biotech、Little Chalfont、Bucks、UK)。
【０６５０】
方法
次のプロトコルを用いた：
(1)  細胞(約4×106)を、溶解緩衝液100μl中に、氷上に30分間で溶解する。溶解緩衝液を添加する際に、Gilson P200ピペットを用いて、ピペット操作を上下することにより細胞を破砕する。
(2)  溶解液を、4℃、13,000 rpmで10分間スピンし、上清を回収して-70℃で保存する。
(3)  BCAタンパク質アッセイ試薬でタンパク質濃度を測定する。
(4)  細胞溶解液のサンプル(50μg タンパク質/レーン)を、ゲルにロードし、タンパク質を、4〜20 % Tris-グリシンゲルを用いてSDS-ポリアクリルアミドゲル電気泳動(SDS-PAGE)により分離する。
(5)  入手可能な装置に最適な条件を用いて、タンパク質をニトロセルロースメンブレンに移す。例えばマイティースモールトランスファーシステム(Hoeffer TE22 Mini Tank Transphor Unit、Amersham Pharmacia Biotech、Little Chalfont、Bucks、UK)を用いて150 mAで2時間である。この段階において、通常、メンブレンをポンソーレッド溶液で5分間染色してタンパク質のバンドを視覚化し、等量のローディングを確認する。
(6)  ブロットしたニトロセルロースメンブレンを、カゼインブロッキング緩衝液中で少なくとも1時間、室温で、一定の振動でブロックする(例えばGyro-Rocker STR9 (Stuart)を用いて)。
(7)  全ての一次抗体を、カゼインブロッキング緩衝液中で、推奨される希釈に希釈し(以下の表参照)、ニトロセルロースメンブレンと、一晩、室温で、振動しながらインキュベートする。
(8)  ニトロセルロースメンブレンを、洗浄溶液で各10分、2回洗浄し、適切な酵素で標識された二次抗体(以下の表参照)中で1時間、室温で振動しながらインキュベートする。抗マウスおよび抗ラビットの両方の二次抗体を、カゼインブロッキング緩衝液中で1:1000に希釈した。
(9)  ニトロセルロースメンブレンを、洗浄溶液で各10分、4回洗浄する。
(10)  タンパク質のバンドを、強化化学発光試薬を用いて、製造業者により記載されたようにして視覚化し、写真フィルムに露光する(通常、1〜5分の間の露光が必要である)。
【０６５１】
【表７】
2005517675.tif 000291
【０６５２】
コメント
(1)  タンパク質のバンドは、通常、視覚的に評価される。デンシトメトリーは、バンドの強度が写真フィルムの直線の範囲を超過し得るので、HSP70発現の評価について信頼できない方法であることが示されている。
(2)  実験の時間の点を選択する場合に、ある細胞ラインにおいて、RAF-1タンパク質のレベルが24時間後に回復することを記載することが重要である。
(3)  ウェスタンブロッティングは、現在、17AAGフェーズI臨床試験において、末梢血リンパ球および腫瘍組織におけるこれらの薬力学的マーカーを分析し、化合物が作用のその提案された機構を介して作用しているかを測定するのに用いられている。
【０６５３】
(4)  RAF-1は、全ての末梢血リンパ球において発現されるわけではなく、患者間の変動を示す(発表されていない所見)。末梢血リンパ球におけるクライエントタンパク質の減少を試験するためのその他のマーカーが、チロシンキナーゼLCKであることが測定されている。
(5)   HSP90阻害に続くHSP70の発現の増加は、メッセンジャーRNAレベルで測定することもできる。マイクロアレイ分析を用いる、HSP90阻害剤の、HSP70およびその他の遺伝子の発現への影響を測定するためのこのような方法は、発表されている(例えばClarkeら、2000参照)。
【０６５４】
ELISA
ウェスタンブロッティングは、細胞ラインおよび組織溶解液におけるタンパク質発現のレベルを評価するために普遍的に用いられる技術になってきているが、各ゲルに含まれ得るサンプルの数は限られている。加えて、低いレベルで発現しているタンパク質を検出するには比較的多数の細胞が必要であり、精密な定量は困難である。
【０６５５】
細胞ベースのELISA法(例えばStockwellら、1999; Versteegら、2000参照)は、新規な、機構ベースの阻害剤の薬力学的効果を評価するためのいくつかの利点を提供し、先導する同定および最適化の反復されるプロセスの間に同定された阻害剤の比較のために選択される方法であり得る。該技術は、化合物の有効性を迅速に評価するのと共に、それらの作用の分子的な機構を探求するのに用いることができる。ELISAで可能なサンプル処理量の増加は、化合物を種々の用量および曝露時間で、多様な重複測定で同時に研究することができることを意味する。また、観察当たりに必要な細胞の数は、イムノブロッティングに必要なものに比べて大きく減少させることができる。アッセイは、マイクロタイタープレートで増殖し、処理された細胞に直接行うことができ、したがって細胞溶解液の調製の必要性を除去する。ELISA技術は、理論的には、それに対する抗体が入手可能ないずれの細胞のタンパク質または翻訳後修飾に用いることができ、結果は少なくとも半定量的である。
【０６５６】
材料
化学薬品は、最高純度の市販で入手可能なものである。
(1)   4500 mg/mlグルコース、10%ウシ胎児血清(FBS)、200 mM L-グルタミン、および5 ml非必須アミノ酸を補ったイーグル培地ダルベッコ変法(DMEM) (CSSD、Institute of Cancer Research、London、UK)で、5% CO2の加湿雰囲気下に、37℃で培養したヒト結腸腫瘍細胞ライン(例えばAmerican Tissue Culture Collection、ATCC からのHCT116 および HT29)。
(2)  96ウェルファルコン透明マイクロタイター組織培養プレート(BD Labware、Hospital Management and Supplies、Ltd.、Northampton、UK)。
(3)  dH2O 中で希釈したDMSO (8%)。
(4)  DMSO 中に溶解した、所望の濃度のHSP90阻害剤。
(5)  固定溶液(0.25% グルタルアルデヒド、3% パラホルムアルデヒドおよび0.25% Triton-X 100) (すべてSigma Aldrich Ltd、Poole、UKから)。
(6)  日々調製するブロッキング溶液(PBS中の5%ドライミルク(Marvel))。
(7)  抗HSP70 モノクローナル抗体(SPA 810、Bioquote、York、UK)。
(8)  DELFIA(登録商標)洗浄緩衝液、増強溶液、アッセイ緩衝液およびユーロピウム標識抗-マウスIgG (1244-1330) (PerkinElmer Life Sciences、Milton Keynes、UK)。
(9)  BCAタンパク質アッセイ試薬(Perbio Science UK Ltd.、Chester、UK)。
【０６５７】
方法
次のプロトコルを用いた：
(1)  細胞(42,000 細胞/ml; 8000細胞/190μl/ウェル)を、手動またはマルチドロップディスペンサー(Thermo Labsystems、Basingstoke、UK)を用いて配置する。
(2)  細胞を、5% CO2雰囲気中に37℃で36時間インキュベートする。
(3)  8% DMSO (コントロール)または8% DMSOに溶解した化合物10μlを、各ウェルに入れる(これは、各ウェル中に0.4% DMSOの最終濃度となる)。
(4)  DMSOまたは化合物存在下に、細胞を48時間までインキュベートする。
(5)  手で培地を「払い落とし(Flick out)」、固定溶液100μlの添加により、細胞を固定して透過できるようにする。37℃で30分間インキュベートする。
(6)  自動化洗浄機(Wellwash 5000テンプレートスタッカーウォッシャーまたはWellwash Ascentシングルプレートウォッシャー、Thermo Labsystems、Basingstoke、UK)を用いて、プレートをPBS中で2回洗浄する。
(7)  ブロッキング溶液(100μl)の添加によりプレートをブロックし、30分間インキュベートする。
(8)  PBS中で0.95μg/mlに希釈された一次抗体100μlを、各ウェルに添加して、プレートを1.5時間インキュベートする。プレートを、DELFIA(登録商標)洗浄溶液で1回洗浄する。
(9)   DELFIA (登録商標)アッセイ緩衝液で75 ng/mlに希釈したユーロピウム標識抗-マウスIgG 100μlを添加して、1時間インキュベートする。前と同じようにして、プレートをDELFIA(登録商標)洗浄溶液で1回洗浄する。
(10)  各ウェルに、DELFIA (登録商標)増強溶液100μlを添加する。
(11)  時間分解測定モードを用いて、Victor 2 1420 マルチラベルカウンター(Perkin Elmer Life Sciences、Milton Keynes、UK)で蛍光(615 nm)を測定する。
(12)  プレートをPBSで1回洗浄し、各ウェルにBCA試薬200μlを添加することによりタンパク質濃度を測定し、1〜2分間振とうし、37℃で30分間インキュベートする。570 nmで吸光度を読む。
(13)  ウェル中のタンパク質に標準化することにより、ELISAの結果を表す(570 nm でのOD で割ったEuカウント(cpm))。HSP70発現へのHSP90阻害剤の影響を、DMSO処理のコントロールと比較する。
【０６５８】
コメント
(1)  96ウェルプレートに配置した細胞を、プラスチックの箱の中でインキュベートしてウェルの外からの蒸発を減少させる。加えて、ELISAインキュベーションの工程を、37℃の実験室のインキュベーター内の湿性の環境、例えば湿ったティッシュペーパーをつめたプラスチックの箱の中で行う。
(2)  マイクロタイタープレートへの全ての添加は、マルチチャンネルピペット、またはより多数のプレートについてはマルチドロップ(Thermo Labsytems、Basingstoke、UK)のような自動化されたディスペンサーを用いて達成することができる。
(3)  簡便のために、化合物の効果をいくつかの時間点で調べる場合には、ELISAを、固定化工程の後にプレートを4℃で保存する(容器の中で)、バッチで行うことができる。この場合、プレートを固定化の後に1回だけ洗浄し、最初のELISA工程(上記の工程6)の直前にもう一度洗浄する。加えて、全てのプレートを、その後のタンパク質定量のために保存することができる。
(4)  測定されたユーロピウムのカウントおよびタンパク質測定の両方の再現性は、10〜15% (CV)の間であった。
(5)  DELFIA(登録商標)試薬(例えばHemmilaおよびWebb、1997参照)は、細胞ベースのELISAでルーチンに用いられている。この終点は、高い感度を提供し、時間分解測定が非特異的な蛍光からの干渉を減少する。しかしながら、ホースラディッシュペルオキシダーゼ二次抗体コンジュゲート、および終点の測定のために比色(例えばテトラメチルベンジジン)または化学発光試薬(例えばECL試薬(Amersham Pharmacia Biotech、Little Chalfont、Bucks、UK)を用いることも可能である。
(6)  二次抗体のみからなるブランク(すなわち一次抗体なし)とともに、適切な一次抗体のコントロール(例えばIgGに一致するアイソタイプ)を、試薬の濃度の最適化プロセスの間にアッセイに含むことが推奨される。
【０６５９】
増殖阻害アッセイ
行った増殖阻害アッセイは、以前に記載されたものに基づいた(Kellandら、1993)。ヒト結腸腫瘍細胞HCT116およびHT29 (American Tissue Culture Collection)を、96ウェル組織培養プレートに播種し(ウェル当たり約1600〜2000細胞)、36時間接着するのを許容した。8つのウェルを化合物の濃度の並びからの1つの濃度で処理し、96時間インキュベートした。細胞を、氷冷10% トリクロロ酢酸 (TCA)で固定した。次いで、プレートを水で5回洗浄し、空気乾燥し、1% 酢酸中の0.4 % スルホローダミンB (SRB)で10分間染色した。SRB染色を10 mM Tris-HCl中で可溶化し、タイターテックマルチスキャンMCC/340 MKIIプレートリーダー(Flow Laboratories、IEC、Basingstoke、Hampshire)を用いて540 nmで吸光度を測定した。吸光度の値は全タンパク質含量に相当し、細胞増殖の尺度として用いられる。これらの値を、log/直線のグラフ用紙にプロットし、コントロールの細胞増殖に比べて細胞増殖を50%阻害する薬剤の濃度としてIC50を算出した。
【０６６０】
生物学的データ
マラカイトグリーンATPアーゼアッセイ
上記のマラカイトグリーンアッセイを用いて評価した本発明のいくつかの化合物についてのHSP90 ATPアーゼ活性の阻害(IC50、±SD、n =3〜5の場合)を、次の表にまとめる。基質濃度は1 mM ATP (Km= 0.44 mM)を用いた。ゲルダナマイシンおよび17AAGの値は、比較のために含める。共役酵素アッセイにおいて、ゲルダナマイシンは、5μMのIC50をもつ。
【０６６１】
【表８】
2005517675.tif 000292
【０６６２】
ウェスタンブロッティングアッセイ
HSP70およびクライエントタンパク質(CDK4)発現に対するCCT018159の影響を、上記のようにしてウェスタンブロッティングアッセイを用いて評価した。化合物への曝露の後のHSP70の上昇(細胞ベースのELISAを用いても観察された)が確認された。
【０６６３】
図1は、A2780ヒト卵巣癌細胞の17AAG (5×IC50に等しい60 nM)への曝露の後の、種々の時間でのHSP70 (誘導された)およびRAF-1 (減少された)の発現を示すイムノブロットである。
【０６６４】
図2は、HT29細胞を種々の濃度のCCT018159および17AAGに曝露した24時間後のCDK4 (減少された)、HSP70 (誘導された)、およびGAPDHの発現を示すイムノブロットである。
【０６６５】
HT29細胞では、CCT018159がHSP70発現を上昇させた。化合物への曝露の後にこのタンパク質が上昇された程度は、17AAGについて観察されたものと同様であった。グリセルアルデヒドホスフェートデヒドロゲナーゼ(GAPDH)を、各レーンのタンパク質のローディングを比較するのに用いた。
【０６６６】
同じ時間点において、かつ化合物の同じ濃度を用いて、クライエントタンパク質CDK4は減少した。これらの結果は、17AAGおよびその他のHSP90阻害剤で観察されたものと同様である(Kellandら、1999; Hosteinら、2001; Schulteら、1998)。
【０６６７】
ELISA
分子マーカーHSP70の発現への本発明の種々の化合物の効果を、上記のようにして、細胞ベースのELISAおよびHCT116細胞中のHSP70に対する特異的モノクローナル抗体を用いて測定した。結果を次の表にまとめる。化合物への曝露の後の細胞のタンパク質は、上記の方法で記載したようにしてBCAアッセイを用いて測定した。
【０６６８】
【表９】
2005517675.tif 000293
【０６６９】
結果は、HCT116細胞において、HSP70が、CCT018159 (10μM)への48時間の曝露のあとに2.8倍まで誘導されたことを示す。同時に、BCAにより測定された細胞のタンパク質は、DMSOコントロールの50〜80%に減少された。これらの結果は、ゲルダナマイシン(1μM)で得られた結果と同様であった。これは、クライエントタンパク質の減少およびHSP90の上昇とならしめる化合物の濃度における細胞増殖阻害を示す。
【０６７０】
増殖阻害アッセイ
上記の増殖阻害アッセイを用いて評価した、HCT116およびHT29ヒト結腸腫瘍細胞ラインの増殖に対する、本発明の種々の化合物の影響を、次の表にまとめる。
【０６７１】
【表１０】
2005517675.tif 000294
【０６７２】
上記は、本発明の原理、好ましい実施形態、および操作の形態を記載している。しかしながら、本発明は、論じた特定の実施形態に限定されると解釈されるべきではない。代わりに、上記の実施形態は、限定的であるというよりも実例とみなされるべきであり、従属クレームにより定義されるように、本発明の範囲からそれることなく当業者によりこれらの実施形態に変形をなすことができることが認識されるべきである。
【０６７３】
参考文献
本発明および本発明が関連する当該技術の状態をより充分に記載し、開示するために、いくつかの特許および出版物を上記で引用する。これらの参考文献の全体の引用を以下に示す。これらの参考文献のそれぞれは、本発明の開示に参照としてその全てが組み込まれる。
【０６７４】
Ali JA, Jackson AP, Howells AJおよびMaxwell A. 1993 "The 43 kilodalton N-terminal fragment of the DNA gyrase β protein hydrolyses ATP and binds coumarin drugs", Biochemistry, Vol. 32, pp. 2717〜2724.
Anderson C, Freeman J, Lucus LH, Farley M, Dalhoumi HおよびWidlanski TS. 1997 "Estrone sulfatase: probing structural requirements for substrate and inhibitor recognition, Biochemistry, Vol. 36, pp. 2586〜2594.
Argon YおよびSimen BB. 1999 "Grp94, an ER chaperone with protein and peptide binding properties", Semin. Cell Dev. Biol., Vol. 10, pp. 495〜-505.
Baginski ES, Epstein EおよびZak B. 1975 "Review of phosphate methodologies", Ann. Clin. Lab. Sci., Vol. 5, pp. 399〜416.
Baker  W, Chadderton J, Harborne JBおよびOllis WD.  1953 "Pt 1. A new synthesis of isoflavones", J. Chem Soc, p.1852.
Baker  W, Harborne JBおよびOllis WD. 1953  "Pt II. A new synthesis of isoflavones, 5:7:2'-trihydroxyisoflavones", J. Chem. Soc., p.1860.
Bass RJ.  1976 "Synthesis of chromones by cyclization of 2-hydroxyphenyl ketones with boron trifluoride-diethyl ether and methanesulphonyl chloride", J. Chem. Soc., Chem. Commun., p.78.
【０６７５】
Baykov AA, Evtushenko OAおよびAvaeva SM. 1988 "A malachite green procedure for orthophosphate determination and its use in alkaline phosphatase-based enzyme immunoassay", Anal. Biochem., Vol. 171, pp. 266〜270.
Berk SC, Knochel PおよびYeh MCP. 1988 "General approach to highly functionalized benzylic organometallics of zinc and copper", J. Org. Chem., Vol. 53, pp. 5789〜5791.
Chan KM, Delfert DおよびJunger KD. 1986 "A direct colorimetric assay for Ca2+ stimulated ATPase activity",  Anal. Biochem., Vol. 157, pp. 375〜380.
Chen C-F, Chen Y, Dai KD, Chen P-L, Riley DJおよびLee W-H. 1996 "A new member of the hsp90 family of molecular chaperones interacts with the retinoblastoma protein during mitosis and after heat shock", Mol. Cell. Biol., Vol. 16, pp. 4691〜4699.
Chiosis G, Timaul MN, Lucas B, Munster PN, Zheng FF, Sepp-Lozenzino LおよびRosen N.  2001 "A small molecule designed to bind to the adenine nucleotide pocket of HSP90 causes Her2 degradation and the growth arrest and differentiation of breast cancer cells", Chem. Biol., Vol. 8, pp. 289〜299.
【０６７６】
Clarke PA, Hostein I, Banerji U, Stefano FD, Maloney A, Walton M, Judson IおよびWorkman P. 2000 "Gene expression profiling of human colon cancer cells following inhibition of signal transduction by 17-allylamino-17-demethoxygeldanamycin, an inhibitor of the HSP90 molecular chaperone", Oncogene, Vol. 19, pp. 4125〜33.
Cogan EB, Birrell GBおよびGriffith OH. 1999 "A robotics-based automated assay for inorganic and organic phosphates", Anal. Biochem., Vol. 271, pp. 29〜35.
Connell P, Ballinger CA, Jiang J, Wu Y, Thompson LJ, Hohfeld JおよびPatterson C. 2001 "The co-chaperone CHIP regulates protein triage decisions mediated by heat shock proteins", Nature Cell Biol., Vol. 3, pp. 93〜96.
Conroy SEおよびLatchman DS. 1996 "Do heat shock proteins have a role in breast cancer?", Brit. J. Cancer, Vol. 74, pp. 717〜721.
Deboer C, Meulman PA, Wnuk RJおよびPeterson DH. 1970 "Geldanamycin, a new antibiotic", J. Antibiot. (Tokyo), Vol. 23, pp. 442.
【０６７７】
Farkas J, Bekassy S, Agai B, Hegedus MおよびFigueras F. 2000 "Acylation of resorcinol on clay catalysts", Syn. Commun., Vol. 30, pp. 2479.
Felts SJ, Owen BAL, Nguyen P, Trepel J, Donner DBおよびToft DO. 2000 "The HSP90-related protein TRAP1 is a mitochondrial protein with distinct functional properties", J. Biol. Chem., Vol. 5, pp. 3305〜3312.
Hajipour AR, Baltork IMおよびKianfar G.  1998 "Bis (1-benzyl-4-aza-1-azoniabicyclo[2.2.2]octane) peroxodisulphate: a mild and efficient oxidant for cleavage of nitrogen double bonds and oxidation of alcohols under anhydrous conditions", Bull. Chem. Soc. Japan, Vol. 71, pp. 2655.
Harder KW, Owen P, Wong LKH, Aebersold R, Clark-Lewis IおよびJirik FR. 1994 "Characterization and kinetic analysis of the intracellular domain of human protein tyrosine phosphatase β (HPTPβ) using synthetic phosphopeptides", Biochem. J., Vol. 298, pp. 395〜401.
【０６７８】
Hemmila IおよびWebb S. 1997 "Time-resolved fluorometry: an overview of the labels and core technologies for drug screening applications", Drug Discovery Today, Vol. 2, pp. 373〜381.
Henkel RD, Vandeberg JLおよびWalsh RA. 1988 "A microassay for ATPase", Anal. Biochem., Vol. 169, pp. 312〜318.
Hickey E, Brandon SE, Smale G, Lloyd DおよびWeber LA. 1999 "Sequence and regulation of a gene encoding a human 89-kilodalton heat shock protein", Mol. Cell. Biol., Vol. 9, pp. 2615〜2626.
Hoang AT, Huang J, Rudra-Gonguly N, Zheng J, Powell WC, Rabindron SK, Wu C およびRoy-Burman P. 2000 "A novel association between the human heat shock transcription factor I (HSF1) and prostate adenocarcinoma,  Am. J. Pathol., Vol. 156, pp. 857〜864.
Hostein I, Robertson D, Di Stefano F, Workman PおよびClarke PA. 2001 "Inhibition of signal transduction by the HSP90 inhibitor 17-allylamino-17-demethoxygeldanamycin results in cytostasis and apoptosis", Cancer Res., Vol. 61, pp. 4003〜4009.
【０６７９】
Jameel A, Skilton RA, Campbell TA, Chander SK, Coombes RCおよびLuqmani YA. 1992 "Clinical and biological significance of HSP89a in human breast cancer", Int. J. Cancer, Vol. 50, pp. 409〜415.
Jolly CおよびMorimoto RI. 2000 "Role of the heat shock response and molecular chaperones in oncogenesis and cell death", J. Natl. Cancer Inst., Vol. 92, pp. 1564〜1572.
Kawanishi K, Shiozaki H, Doki Y, Sakita I, Inoue M, Yano M, Tsujinata T, Shamma A およびMonden M. 1999 "Prognostic significance of heat shock proteins 27 and 70 in patients with squamous cell carcinoma of the esophagus", Cancer, Vol. 85, pp. 1649〜1657.
Kelland LR, Abel G, McKeage MJ, Jones M, Goddard PM, Valenti M, Murrer BAおよびHarrap KR. 1993 "Preclinical antitumour evaluation of bis-acetalo-amino-dichloro-cyclohexylamine platinum (IV): an orally active platinum drug", Cancer Research, Vol. 53, pp. 2581〜2586.
Kelland LR, Sharp SY, Rogers PM, Myers TGおよびWorkman P. 1999 "DT-diaphorase expression and tumor cell sensitivity to 17-allylamino, 17 demethoxygeldanamycin, an inhibitor of heat shock protein 90", J. Natl. Cancer Inst., Vol. 91, pp. 1940〜1949.
Khilya VP, Aitmambetov A, Ismailov MおよびGrishko LG. 1994 "Synthetic and modified isoflavanoids XV. Interaction of synthetic analogs of isoflavones with hydrazine hydrate and its derivatives", Chem. Natural Compounds,  Vol. 30, pp. 580〜583.
【０６８０】
Knochel P, Yeh MCP, Berk SおよびTalbert J.  1988 "Synthesis and reactivity towards acyl chlorides and enones of the new highly functionalized copper reagents RCu (CN) ZnI",  J. Org. Chem.,  Vol. 53, pp. 2390.
Kwon HJ, Yoshida M, Abe K, Horinouchi SおよびBepple T.  1992 "Radicicol, an agent inducing the reversal of transformed phentoype of src-transformed fibroblasts, Biosci., Biotechnol., Biochem.,  Vol. 56, pp. 538〜539.
Lanzetta PH, Alvarez LJ, Reinach PSおよびCandia OA. 1979 "An improved assay for nanomole amounts of inorganic phosphate", Anal. Biochem., Vol. 100, pp. 95〜97.
Lavery P, Brown MJBおよびPope AJ. 2001 "Simple absorbance-based assays for ultra-high throughput screening", J. Biomol. Screen., Vol. 6, pp. 3〜9.
Le QTH, Umetani S and Matsui M.  1997 "Ion-size recognition of group 13 metals (Al3+, In3+) with modified β-diketones", J. Chem. Soc. Dalton Trans., Vol. 20, pp. 3835〜3840.
Lebeau J, Le Cholony C, Prosperi MTおよびGoubin G. 1991 "Constitutive overexpression of 89 kDa heat shock protein gene in the HBL100 mammary cell line converted to a tumorigenic phenotype by the EJ/T24 Harvey-ras oncogene", Oncogene, Vol. 6, pp. 1125〜1132.
Leigh WJおよびArnold DR. 1979 "Photochemical and thermal rearrangements of some 3H-pyrazoles", Can. J. Chem.,  Vol. 57, pp. 1186〜1200.
Maehama T, Taylor GS, Slama JTおよびDixon JE. 2000 "A sensitive assay for phosphoinositide phosphatases", Anal. Biochem., Vol. 279, pp. 248〜250.
Maloney A, Walton MI, Sharp SY, Kelland LR, Jarman M, Prodromou C, Pearl LおよびWorkman P. 1999 "Structure-activity relationships of the HSP90 inhibitor 17-allylamino 17-demethoxy geldanamycin analogues (17AAG)", Clin. Cancer Res., Vol. 5, pp. 3781.
【０６８１】
Marcu MG, Chadli A, Bouhouche I, Catelli MおよびNeckers L. 2000a "The heat shock protein 90 antagonist novobiocin interacts with a previously unrecognized ATP-binding domain in the carboxyl terminus of the chaperone", J. Biol. Chem., Vol. 275, pp. 37181〜37186.
Marcu MG, Schulte TWおよびNeckers L. 2000b "Novobiocin and related coumarins and depletion of heat shock protein 90-dependent signaling proteins", J. Natl. Cancer Inst., Vol. 92, pp. 242〜248.
Martin KJ, Kritzman BM, Price LM, Koh B, Kwan CP, Zhang X, MacKay A, O'Hare MJ, Kaelin CM, Mutter GL, Pardee ABおよびSager R. 2000 "Linking gene expression patterns to therapeutic groups in breast cancer", Cancer Res., Vol. 60, pp. 2232〜2238.
Morimoto RI. 1998 "Regulation of the heat shock transcriptional response: cross talk between a family of heat shock factors, molecular chaperones, and negative regulators", Genes and Dev., Vol. 12, pp. 3788〜3796.
【０６８２】
Nakano T, Alonso J, Grillet RおよびMartin A.  1979 "Pt1, Isoflavonoids of the bark of dipteryx odorata willd (Aubl)", J. Chem. Soc., pp. 2107.
Neckers L, Schulte TWおよびMomnaaugh E. 1999 "Geldanamycin as a potential anti-cancer agent: its molecular target and biochemical activity", Invest. New Drugs, Vol. 17, pp. 361〜373.
Ochel H-J, Eichhorn KおよびGademann G. 2001 "Geldanamycin: the prototype of a class of antitumor drugs targeting the heat shock protein 90 family of molecular chaperones", Cell Stress and Chaperones, Vol. 6, pp. 105〜112.
Page J, Heath J, Fulton R, Yalkowsky E, Tabibi E, Tomaszewski J, Smith AおよびRodman L. 1997 "Comparison of geldanamycin (NSC-122750) and 17 allylaminogeldanamycin (NSC-330507D) toxicity in rats", Proc. Am. Assoc. Cancer Res., Vol. 38, pp. 308.
Panaretou B, Prodromou C, Roe SM, O'Brien R, Ladbury JE, Piper PWおよびPearl LH.  1998 "ATP binding and hydrolysis are essential to the function of the HSP90 molecular chaperone in vivo", EMBO J., Vol. 17, pp. 4829〜4836.
Penning TD, Kramer SW, Lee LF, Collins PW, Koboldt CM, Seibert K, Veenhuizen AW, Zhang YYおよびIsakson PC. 1997 "3,4-diarylpyrazoles: Potent and Selective Inhibitors of Cyclooxygenase-2", Bioorg. & Med. Chem. Lett.,  Vol. 7,  pp. 2121〜2124.
【０６８３】
Pratt WB. 1997 "The role of the HSP90-based chaperone system in signal transduction by nuclear receptors and receptors signalling via MAP kinase",  Annu. Rev. Pharmacol. Toxicol.,  Vol. 37, pp. 297〜326.
Prodromou CおよびPearl LH. 2000a "Structure and in vivo function of HSP90", Curr. Opin. Struct. Biol., Vol. 10, pp. 46〜51.
Prodromou C, Roe SM, O'Brien R, Ladbury JE, Piper PWおよびPearl LH. 1997 "Identification and structural characterization of the ATP/ADP-binding site in the HSP90 molecular chaperone", Cell, Vol. 90, pp. 65〜75.
Prodromou C, Panaretou B, Chohan S, Siligardi G, O'Brien R, Ladbury JE, Roe SM, Piper PWおよびPearl LH. 2000b "The ATPase cycle of HSP90 drives a molecular 'clamp' via transient dimerization of the N-terminal domains", EMBO J., Vol. 19, pp. 4383〜4392.
【０６８４】
Roe SM, Prodromou C, O'Brien R, Ladbury JE, Piper PWおよびPearl LH. 1999 "Structural basis for inhibition of the HSP90 molecular chaperone by the antitumour antibiotics radicicol and geldanamycin", J. Med. Chem., Vol. 42, pp. 260〜266.
Rumsfeld J, Ziegelbauer KおよびSpaltmann F. 2000 "High-throughput assay for inorganic pyrophosphatases using the cytosolic enzymes of Saccharomyces cerevisiae and human as an example", Protein Expr. Purif., Vol. 18, pp. 303〜309.
Rutherford SLおよびLindquist S. 1998 "HSP90 as a capacitor for morphological evolution.  Nature, Vol. 396, pp. 336〜342.
Scheibel TおよびBuchner J. 1998 "The HSP90 complex-A super-chaperone machine as a novel drug target", Biochem. Pharmacol., Vol. 56, pp. 675〜682.
Schirmer EC, Queitsch C, Kowal AS, Parsell DAおよびLindquist S. 1998 "The ATPase activity of hsp104, effects of environmental conditions and mutations", J. Biol. Chem., Vol. 273, pp. 15546〜15552.
【０６８５】
Schnur RC, Corman ML, Gallascun RJ, Cooper BA, Dee MF, Doty JL, Muzzi ML, Diorio CI, Barbacci EGおよびMiller PE. 1995a "erbB2 oncogene inhibition by geldanamycin derivatives: synthesis, mechanism of action, and structure-activity relationships", J. Med. Chem., Vol. 38, pp. 3813〜3820.
Schnur RC, Corman ML, Gallascun RJ, Cooper BA, Dee MF, Doty JL, Muzzi ML, Moyer JD, Diorio CIおよびBarbacci EG. 1995b "Inhibition of the oncogene product p185erbB2 in vitro and in vivo by geldanamycin and dihydrogeldanamycin derivatives", J. Med. Chem., Vol. 38, pp. 3806〜3812.
Schulte TW, Akinaga S, Murakata T, Agatsuma T, Sugimoto S, Nakano H, Lee YS, Simen BB, Argon Y, Felts S, Toft DO, Neckers LMおよびSharma SV. 1999 "Interaction of radicicol with members of the heat shock protein 90 family of molecular chaperones", Mol. Endocrinology, Vol. 13, pp. 1435〜1448.
Schulte TW, Akinaga S, Soga S, Sullivan W, Sensgard B, Toft DおよびNeckers LM. 1998 "Antibiotic radicicol binds to the N-terminal domain of HSP90 and shares important biologic activities with geldanamcyin", Cell Stress and Chaperones, Vol. 3, pp. 100〜108.
Schulte TWおよびNeckers LM. 1998 "The benzoquinone ansamycin 17 allylamino-17-deemthoxygeldanamcyin binds to HSP90 and shares important biologic activities with geldanamycin", Cancer Chemother. Pharmacol., Vol. 42, pp. 273〜279.
【０６８６】
Smith DF. 2001 "Chaperones in signal transduction", in: Molecular chaperones in the cell (P Lund, ed.; Oxford University Press, Oxford and NY), pp. 165〜178.
Smith DF, Whitesell LおよびKatsanis E. 1998 "Molecular chaperones: Biology and prospects for pharmacological intervention", Pharmacological Reviews, Vol. 50, pp. 493〜513.
Soga S, Neckers LM, Schulte TW, Shiotsu Y, Akasaka K, Narumi H, Agatsuma T, Ikuima Y, Murakata C, Tornaoki TおよびAkinaga S. 1999 "KF25706, a novel oxime derivative of radicicol, exhibits in vivo antitumor activity via selective depletion of HSP90 binding signaling molecules", Cancer Res., Vol. 59, pp. 2931〜2938.
Song HY, Dunbar JD, Zhang YX, Guo DおよびDonner DB. 1995 "Identification of a protein with homology to hsp90 that binds the type 1 tumour necrosis factor receptor", J. Biol. Chem., Vol. 270, pp. 3574〜3581.
【０６８７】
Stebbins CE, Russo A, Schneider C, Rosen N, Hartl FUおよびPavletich NP. 1997 "Crystal structure of an HSP90-geldanamcyin complex: targeting of a protein chaperone by an antitumor agent", Cell, Vol. 89, pp. 239〜250.
Stockwell BR, Haggarty SJおよびSchreiber SL. 1999 "High-throughput screening of small molecules in miniaturised mammalian cell-based assays involving post-translational modifications", Chem. Biol., Vol. 6, pp. 71〜83. 
Supko JG, Hickman RL, Grever MRおよびMalspeis L. 1995 "Preclinical pharmacologic evaluation of geldanamycin as an antitumour agent", Cancer Chemother. Pharmacol., Vol. 36, pp. 305〜315.
Sybert KおよびSpiegel J.  2001 Federal Register, Vol. 66, pp. 35443〜35444.
Terrett NK, Bell AS, Brown DおよびEllis P.  1996  "Sildenafil (viagraTM): a potent and selective inhibitor of type 5 CGMP phosphodiesterase with utility for the treatment of male erectile dysfunction",  Bioorg. Med. Chem. Lett.,  Vol. 6,  pp. 1819〜1824.
【０６８８】
Tytell MおよびHooper PL. 2001 "Heat shock proteins: new keys to the development of cytoprotective therapies", Emerging Therapeutic Targets, Vol. 5, pp. 267〜287.
Uehara U, Hori M, Takeuchi TおよびUmezawa H. 1986 "Phenotypic change from transformed to normal induced by benzoquinoid ansamycins accompanies inactivation of p60src in rat kidney cells infected with Rous sarcoma virus", Mol. Cell. Biol., Vol. 6, pp. 2198〜2206.
Versteeg HH, Nijhuis E, Van Den Brink GR, Evertzen M, Pynaert GN, Van deventer JH, Coffer PJおよびPeppelenbosch MP. 2000 "A new phosphospecific cell-based ELISA for p42/p44 mitogen-activated protein kinase (MAPK), p38 MAPK, protein kinase B and cAMP-response-element-binding protein", Biochem. J., Vol. 350, pp. 717〜722.
Wahala KおよびHase TA.  1991 "Expedient synthesis of polyhydroxyisoflavones", J. Chem. Soc, PT1, pp. 3005.
Whitesell L, Mimnaugh EG, De Costa B, Myers CEおよびNeckers LM. 1994 "Inhibition of heat shock protein HSP90-pp60v-src heteroprotein complex formation by benzoquinone ansamycins: essential role for stress proteins in oncogenic transformation", Proc. Natl. Acad. Sci. U S A., Vol. 91, pp. 8324〜8328. 
【０６８９】
Young JC, Moarefi IおよびHartl FU. 2001 "HSP90: a specialized but essential protein-folding tool", J. Cell. Biol., Vol. 154, pp. 267〜273.
Zhang JH, Chung TDおよびOldenburg KR. 1999 "A simple statistical parameter for use in evaluation and validation of high throughput screening assays", J. Biomol. Screen., Vol. 4, pp. 67〜73.
Zhao JF, Nakano HおよびSharma S.  1995 "Suppression of RAS and MOS transformation by radicicol", Oncogene, Vol. 11, pp. 161〜173.
Zhu L, Wehmeyer RMおよびRieke, RD. 1991 "The direct formation of functionalized alky(aryl)zinc halides by oxidation addition of highly reactive zinc with organic halides and their reactions with acid chlorides, α,β unsaturated ketones, and allylic, aryl and vinyl halides", J. Org. Chem., Vol. 56, pp. 1445, 1991.
【図面の簡単な説明】
【０６９０】
【図１】図1は、A2780ヒト卵巣癌細胞の17AAG (5×IC50に等しい60 nM)への曝露の後の、種々の時間でのHSP70 (誘導された)およびRAF-1 (減少された)の発現を示すイムノブロットである。
【図２】図2は、HT29細胞を種々の濃度のCCT018159および17AAGに曝露した24時間後のCDK4 (減少された)、HSP70 (誘導された)、およびGAPDHの発現を示すイムノブロットである。
【図１】
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【図２】
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【国際調査報告】
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