(57)【要約】置換されたキノロンカルボン酸およびその誘導体を記載する。ＧＡＢＡＡ受容体複合体の新規部位を介して、これらの化合物は、γ−アミノ酪酸（ＧＡＢＡ）の効果を、治療上関連性のある様式で変調し、これらの化合物を使用して、ＧＡＢＡＡ受容体複合体の変調に対して受容性のあるＣＮＳ障害を寛解することが可能である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
【化１】
2005535592.tif 000011
［式中：
Ｒ１は、水素；所望により置換されていてもよいアルキル、およびアラルキルよりなる群から選択され；
各Ｒ２は、水素および所望により置換されていてもよいアルキルよりなる群から選択され；
各Ｒ３は、水素、所望により置換されていてもよいアルキル；基ＯＲ１１およびＮＲ１２Ｒ１３よりなる群から選択され；
Ｒ５、Ｒ７およびＲ８は、独立して、水素、所望により置換されていてもよいアルキル、およびハロゲンよりなる群から選択され；
Ｒ９およびＲ１０は、独立して、水素、所望により置換されていてもよいアルキル、アラルキル、シクロアルキルおよびシクロアラルキルよりなる群から選択され；あるいは、Ｒ９およびＲ１０は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、複素環を形成し；
Ｒ１１は、水素、アルカリ金属、負電荷および所望により置換されていてもよいアルキルよりなる群から選択され；
Ｒ１２およびＲ１３は、独立して、水素、所望により置換されていてもよいアルキル、アラルキル、アリ−ル、シクロアルキルおよびシクロアラルキルよりなる群から選択され；あるいはＲ１２およびＲ１３は、それらが結合している窒素原子と一緒になって複素環を形成する］
を有する化合物またはその医薬上許容される塩、プロドラッグあるいは溶媒和化合物。
【請求項２】
式ＩＩ：
【化２】
2005535592.tif 000012
［式中、
Ｒ１は、水素；所望により置換されていてもよいアルキル、およびアラルキルよりなる群から選択され；
各Ｒ２は、水素および所望により置換されていてもよいアルキルよりなる群から選択され；
Ｒ５、Ｒ７およびＲ８は、独立して、水素、所望により置換されていてもよいアルキル、およびハロゲンよりなる群から選択され；
Ｒ９およびＲ１０は、独立して、所望により置換されていてもよいアルキル、アラルキル、シクロアルキルおよびシクロアラルキルよりなる群から選択され；あるいは、Ｒ９およびＲ１０は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、複素環を形成する］
を有する化合物またはその医薬上許容される塩、プロドラッグあるいは溶媒和化合物。
【請求項３】
式ＩＩＩ：
【化３】
2005535592.tif 000013
［式中：
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ５、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９は、請求項１で定義された通りであり；
ｎは、整数０、１、２、３または４である］
を有する化合物またはその医薬上許容される塩、プロドラッグあるいは溶媒和化合物。
【請求項４】
ｎが２である請求項３記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ１がアルキルであり、Ｒ２、Ｒ５およびＲ８が水素であって、Ｒ７がハロゲンである請求項３記載の化合物。
【請求項６】
該化合物が：
７−クロロ−１−エチル−６−（１，２，３，４−テトラヒドロナフチル−１−アミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
（Ｒ）−７−クロロ−１−エチル−６−（１，２，３，４−テトラヒドロナフチル−１−アミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
（Ｓ）−７−クロロ−１−エチル−６−（１，２，３，４−テトラヒドロナフチル−１−アミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−エチル−６−（１−アミノインダニル）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−エチル−６−（２−アミノインダニル）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−エチル−６−（ベンジルアミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−エチル−６−（フェネチル−２−アミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−エチル−６−［４−メトキシ（フェネチルアミノ）］−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−エチル−６−［３−メトキシ（フェネチルアミノ）］−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−エチル−６−［２−メトキシ（フェネチルアミノ）］−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−エチル−６−［４−ブロモ（フェネチルアミノ）］−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−エチル−６−［４−クロロ（フェネチルアミノ）］−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−エチル−６−（３−フェニルプロピルアミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−エチル−６−（４−フェニルブチルアミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−エチル−６−（４−フェニルブチル−２−アミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−エチル−６−（２−フェニルプロピルアミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−エチル−６−（２−フェノキシエチルアミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；または
７−クロロ−１−メチル−６−（１，２，３，４−テトラヒドロナフチル−１−アミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸である請求項１記載の化合物またはその医薬上許容される塩、プロドラッグあるいは溶媒和化合物。
【請求項７】
式Ｉ：
【化４】
2005535592.tif 000014
［式中：
Ｒ１は、水素；所望により置換されていてもよいアルキル、およびアラルキルよりなる群から選択され；
各Ｒ２は、水素および所望により置換されていてもよいアルキルよりなる群から選択され；
各Ｒ３は、水素、所望により置換されていてもよいアルキル；基ＯＲ１１およびＮＲ１２Ｒ１３よりなる群から選択され；
Ｒ５、Ｒ７およびＲ８は、独立して、水素、所望により置換されていてもよいアルキル、およびハロゲンよりなる群から選択され；
Ｒ９およびＲ１０は、独立して、所望により置換されていてもよいアルキル、アラルキル、シクロアルキルおよびシクロアラルキルよりなる群から選択され；あるいは、Ｒ９およびＲ１０は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、複素環を形成し；
Ｒ１１は、水素、アルカリ金属、負電荷および所望により置換されていてもよいアルキルよりなる群から選択され；
Ｒ１２およびＲ１３は、独立して、水素、所望により置換されていてもよいアルキル、アラルキル、アリ−ル、シクロアルキルおよびシクロアラルキルよりなる群から選択され；あるいはＲ１２およびＲ１３は、それらが結合している窒素原子と一緒になって複素環を形成する］
の化合物またはその医薬上許容される塩、プロドラッグあるいは溶媒和化合物、ならびに賦形剤および補助剤よりなる群から選択される医薬上許容される担体を含む医薬組成物。
【請求項８】
化合物が、式Ｉ：
【化５】
2005535592.tif 000015
［式中：
Ｒ１は、水素；所望により置換されていてもよいアルキル、およびアラルキルよりなる群から選択され；
各Ｒ２は、水素および所望により置換されていてもよいアルキルよりなる群から選択され；
各Ｒ３は、水素、所望により置換されていてもよいアルキル；基ＯＲ１１およびＮＲ１２Ｒ１３よりなる群から選択され；
Ｒ５、Ｒ７およびＲ８は、独立して、水素、所望により置換されていてもよいアルキル、およびハロゲンよりなる群から選択され；
Ｒ９およびＲ１０は、独立して、水素、所望により置換されていてもよいアルキル、アラルキル、シクロアルキルおよびシクロアラルキルよりなる群から選択され；あるいは、Ｒ９およびＲ１０は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、複素環を形成し；
Ｒ１１は、水素、アルカリ金属、負電荷および所望により置換されていてもよいアルキルよりなる群から選択され；
Ｒ１２およびＲ１３は、独立して、水素、所望により置換されていてもよいアルキル、アラルキル、アリ−ル、シクロアルキルおよびシクロアラルキルよりなる群から選択され；あるいはＲ１２およびＲ１３は、それらが結合している窒素原子と一緒になって複素環を形成する］
を有する化合物またはその医薬上許容される塩、プロドラッグあるいは溶媒和化合物を含む請求項７記載の組成物。
【請求項９】
化合物が、式ＩＩ：
【化６】
2005535592.tif 000016
［式中、
Ｒ１は、水素；所望により置換されていてもよいアルキル、およびアラルキルよりなる群から選択され；
各Ｒ２は、水素および所望により置換されていてもよいアルキルよりなる群から選択され；
Ｒ５、Ｒ７およびＲ８は、独立して、水素、所望により置換されていてもよいアルキル、およびハロゲンよりなる群から選択され；
Ｒ９およびＲ１０は、独立して、所望により置換されていてもよいアルキル、アラルキル、シクロアルキルおよびシクロアラルキルよりなる群から選択され；あるいは、Ｒ９およびＲ１０は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、複素環を形成する］
を有する化合物またはその医薬上許容される塩、プロドラッグあるいは溶媒和化合物を含む請求項７記載の組成物。
【請求項１０】
化合物が、式ＩＩＩ：
【化７】
2005535592.tif 000017
［式中：
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ５、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９は、請求項１で定義された通りであり；
ｎは、整数０、１、２、３または４である］
を有する化合物またはその医薬上許容される塩、プロドラッグあるいは溶媒和化合物を含む請求項７記載の組成物。
【請求項１１】
ｎが２である請求項１０記載の組成物。
【請求項１２】
Ｒ１がアルキルであり、Ｒ２、Ｒ５およびＲ８が水素であって、Ｒ７がハロゲンである請求項１０記載の組成物。
【請求項１３】
化合物が：
７−クロロ−１−エチル−６−（１，２，３，４−テトラヒドロナフチル−１−アミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
（Ｒ）−７−クロロ−１−エチル−６−（１，２，３，４−テトラヒドロナフチル−１−アミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
（Ｓ）−７−クロロ−１−エチル−６−（１，２，３，４−テトラヒドロナフチル−１−アミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−エチル−６−（１−アミノインダニル）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−エチル−６−（２−アミノインダニル）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−エチル−６−（ベンジルアミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−エチル−６−（フェネチル−２−アミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−エチル−６−［４−メトキシ（フェネチルアミノ）］−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−エチル−６−［３−メトキシ（フェネチルアミノ）］−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−エチル−６−［２−メトキシ（フェネチルアミノ）］−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−エチル−６−［４−ブロモ（フェネチルアミノ）］−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−エチル−６−［４−クロロ（フェネチルアミノ）］−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−エチル−６−（３−フェニルプロピルアミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−エチル−６−（４−フェニルブチルアミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−エチル−６−（４−フェニルブチル−２−アミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−エチル−６−（２−フェニルプロピルアミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−エチル−６−（２−フェノキシエチルアミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；または
７−クロロ−１−メチル−６−（１，２，３，４−テトラヒドロナフチル−１−アミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸、またはその医薬上許容される塩、プロドラッグあるいは溶媒和化合物である請求項１０記載の組成物。
【請求項１４】
そのような治療を必要とする患者に、有効量の式Ｉ：
【化８】
2005535592.tif 000018
［式中：
Ｒ１は、水素；所望により置換されていてもよいアルキル、およびアラルキルよりなる群から選択され；
各Ｒ２は、水素および所望により置換されていてもよいアルキルよりなる群から選択され；
各Ｒ３は、水素、所望により置換されていてもよいアルキル；基ＯＲ１１およびＮＲ１２Ｒ１３よりなる群から選択され；
Ｒ５、Ｒ７およびＲ８は、独立して、水素、所望により置換されていてもよいアルキル、およびハロゲンよりなる群から選択され；
Ｒ９およびＲ１０は、独立して、所望により置換されていてもよいアルキル、アラルキル、シクロアルキルおよびシクロアラルキルよりなる群から選択され；あるいは、Ｒ９およびＲ１０は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、複素環を形成し；
Ｒ１１は、水素、アルカリ金属、負電荷および所望により置換されていてもよいアルキルよりなる群から選択され；
Ｒ１２およびＲ１３は、独立して、水素、所望により置換されていてもよいアルキル、アラルキル、アリ−ル、シクロアルキルおよびシクロアラルキルよりなる群から選択され；あるいはＲ１２およびＲ１３は、それらが結合している窒素原子と一緒になって複素環を形成する］
の化合物またはその医薬上許容される塩、プロドラッグあるいは溶媒和化合物を投与する工程を含むＣＮＳ障害の治療方法。
【請求項１５】
化合物が、式ＩＩ：
【化９】
2005535592.tif 000019
［式中、
Ｒ１は、水素；所望により置換されていてもよいアルキル、およびアラルキルよりなる群から選択され；
各Ｒ２は、水素および所望により置換されていてもよいアルキルよりなる群から選択され；
Ｒ５、Ｒ７およびＲ８は、独立して、水素、所望により置換されていてもよいアルキル、およびハロゲンよりなる群から選択され；
Ｒ９およびＲ１０は、独立して、所望により置換されていてもよいアルキル、アラルキル、シクロアルキルおよびシクロアラルキルよりなる群から選択され；あるいは、Ｒ９およびＲ１０は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、複素環を形成する］
を有する化合物またはその医薬上許容される塩、プロドラッグあるいは溶媒和化合物を含む請求項１４記載の方法。
【請求項１６】
化合物が、式ＩＩＩ：
【化１０】
2005535592.tif 000020
［式中：
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ５、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９は、請求項１で定義された通りであり；
ｎは、整数０、１、２、３または４である］
を有する化合物またはその医薬上許容される塩、プロドラッグあるいは溶媒和化合物を含む請求項１４記載の方法。
【請求項１７】
ｎが２である請求項１６記載の方法。
【請求項１８】
Ｒ１がアルキルであり、Ｒ２、Ｒ５およびＲ８が水素であって、Ｒ７がハロゲンである請求項１６記載の方法。
【請求項１９】
化合物が：
７−クロロ−１−エチル−６−（１，２，３，４−テトラヒドロナフチル−１−アミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
（Ｒ）−７−クロロ−１−エチル−６−（１，２，３，４−テトラヒドロナフチル−１−アミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
（Ｓ）−７−クロロ−１−エチル−６−（１，２，３，４−テトラヒドロナフチル−１−アミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−エチル−６−（１−アミノインダニル）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−エチル−６−（２−アミノインダニル）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−エチル−６−（ベンジルアミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−エチル−６−（フェネチル−２−アミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−エチル−６−［４−メトキシ（フェネチルアミノ）］−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−エチル−６−［３−メトキシ（フェネチルアミノ）］−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−エチル−６−［２−メトキシ（フェネチルアミノ）］−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−エチル−６−［４−ブロモ（フェネチルアミノ）］−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−エチル−６−［４−クロロ（フェネチルアミノ）］−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−エチル−６−（３−フェニルプロピルアミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−エチル−６−（４−フェニルブチルアミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−エチル−６−（４−フェニルブチル−２−アミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−エチル−６−（２−フェニルプロピルアミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−エチル−６−（２−フェノキシエチルアミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；または
７−クロロ−１−メチル−６−（１，２，３，４−テトラヒドロナフチル−１−アミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸、またはその医薬上許容される塩、プロドラッグあるいは溶媒和化合物である請求項９記載の方法。
【請求項２０】
有効量の請求項１記載の式Ｉの化合物またはその医薬上許容される塩を、そのような治療の必要がある患者に投与することを特徴とする不安および関連障害の治療方法。
【請求項２１】
有効量の請求項１記載の式Ｉの化合物またはその医薬上許容される塩を、そのような治療の必要がある患者に投与することを特徴とする痙攣の治療方法。
【請求項２２】
有効量の請求項１記載の式Ｉの化合物またはその医薬上許容される塩を、そのような治療の必要がある患者に投与することを特徴とする不眠症の治療方法。
【請求項２３】
有効量の請求項１記載の式Ｉの化合物またはその医薬上許容される塩を、そのような治療の必要がある患者に投与することを特徴とする躁鬱病および双極性障害の治療方法。
【請求項２４】
有効量の請求項１記載の式Ｉの化合物またはその医薬上許容される塩を、そのような治療の必要がある患者に投与することを特徴とする慢性または急性疼痛の治療方法。
【請求項２５】
有効量の請求項１記載の式Ｉの化合物またはその医薬上許容される塩を、そのような治療の必要がある患者に投与することを特徴とする神経症の治療方法。
【請求項２６】
有効量の請求項１記載の式Ｉの化合物またはその医薬上許容される塩を、そのような治療の必要がある患者に投与することを特徴とする薬物乱用からの禁断症状誘発性痙攣の治療方法。
【請求項２７】
有効量の請求項１記載の式Ｉの化合物またはその医薬上許容される塩を、そのような治療の必要がある患者に投与することを特徴とする恐怖症の治療方法。
【請求項２８】
有効量の請求項１記載の式Ｉの化合物またはその医薬上許容される塩を、そのような治療の必要がある患者に投与することを特徴とするパニック障害の治療方法。
【請求項２９】
有効量の請求項１記載の式Ｉの化合物またはその医薬上許容される塩を、そのような治療の必要がある患者に投与することを特徴とする全般性不安障害の治療方法。
【請求項３０】
有効量の請求項１記載の式Ｉの化合物またはその医薬上許容される塩を、そのような治療の必要がある患者に投与することを特徴とする強迫性障害の治療方法。
【請求項３１】
有効量の請求項１記載の式Ｉの化合物またはその医薬上許容される塩を、そのような治療の必要がある患者に投与することを特徴とする心的外傷後および急性ストレス障害の治療方法。
【請求項３２】
有効量の請求項１記載の式Ｉの化合物またはその医薬上許容される塩を、そのような治療の必要がある患者に投与することを特徴とする偏頭痛疼痛の治療方法。
【請求項３３】
有効量の請求項１記載の式Ｉの化合物またはその医薬上許容される塩を、そのような治療の必要がある患者に投与することを特徴とする双極性躁障害の治療方法。
【請求項３４】
有効量の請求項１記載の式Ｉの化合物またはその医薬上許容される塩を、そのような治療の必要がある患者に投与することを特徴とする認識欠陥障害の治療方法。
【請求項３５】
請求項１記載の式Ｉの化合物またはその医薬上許容される塩の作用を媒介する部位を通じての塩化物コンダクタンスを促進することによって、不安およびストレス関連障害、鬱病および他の情動障害、てんかんおよび他の発作障害、不眠症および関連睡眠障害、および急性ならびに慢性的疼痛を治療する方法。
【請求項３６】
請求項１記載の式Ｉの化合物またはその医薬上許容される塩の作用を媒介する部位を通じての塩化物コンダクタンスを阻害することによって、軽度認識機能障害、年齢関連認識低下、老人性痴呆症、アルツハイマー病、ナルコレプシーのような減少された覚醒を含む睡眠障害および特発性過眠症といった学習および記憶に関連する障害の治療方法。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
関連出願
本出願は、２００２年５月１４日に出願された米国仮出願シリアル番号６０／３８０，６４１号の優先権を主張する。
【０００２】
発明の分野
本発明は、医薬品化学の分野のものである。特に、本発明は、ユニークな部位を介して、治療上関連性のある様式で、ＧＡＢＡＡ受容体複合体に対するγ−アミノ酪酸（ＧＡＢＡ）の効果を変調する置換されたキノロンカルボン酸およびその誘導体に関し、これを使用して、ＧＡＢＡＡ受容体複合体の変調に受け入れられるＣＮＳ障害を寛解させることができる。
【０００３】
発明の背景
ＧＡＢＡは、哺乳類の脳の中で、最も豊富な阻害性神経伝達物質である。ＧＡＢＡは、特定のイオンに対する透過性を変化させることにより、神経膜に対して阻害性機能を及ぼして、脳興奮性を制御する。ＧＡＢＡをＧＡＢＡＡ型（ＧＡＢＡＡ）受容体に結合させると、神経膜の塩化物イオン（Ｃｌ−）に対する透過性は増加する。殆どのニューロンにおいて、相対的Ｃｌ−イオン濃度は、膜内よりも膜外でより高くなっている。すなわち、ＧＡＢＡ結合によって開始されるＣｌ−に対する選択的透過性によって、電子化学的グラジエントでＣｌ−を細胞へ流すことができる。高速阻害性シナプス伝達の大部分は、ＧＡＢＡＡ受容体に結合するＧＡＢＡによるものである。ＧＡＢＡＡ受容体はＣＮＳ全体で普遍的に発現され、ほぼ全てのニューロンはその存在につき染色される。ＧＡＢＡＡ受容体は、ニコチン性アセチルコリン受容体スーパーファミリーのヘテロ五量体蛋白質構造である。未変性ＧＡＢＡＡ受容体は、少なくとも１９の関連するサブユニットから形成される。サブユニットは、α、β、δ、ε、π、およびρファミリーにグループ分けされる。ＧＡＢＡＡ受容体の最も一般的な組合せは、２ｘα、２ｘβ、および１ｘγサブユニットの化学量論的組合せであり、残りのサブユニットは、特異的な発達発現の間または高度に特異的な脳領域局在化において、γサブユニットを置換するように分類される。大人の脳は、残りの受容体の大部分（３５％）を含むα２β３γ２およびα３βｎγ２サブユニットを有するα１β２γ２サブユニット組合せ（６０％）を主に発現する。ＧＡＢＡの相対的効果は、特定の脳領域またはニューロン回路で発現されるＧＡＢＡＡ受容体サブユニットによって影響される。
【０００４】
ＧＡＢＡの神経生理学的効果は、ＧＡＢＡがＧＡＢＡＡ受容体に結合する時に起こる立体配座変化によるものである。ＧＡＢＡＡ受容体および結合イオンチャンネル複合体（ＧＲＣ）は、リガンド作動性イオンチャンネルであり、これはＧＡＢＡのＧＡＢＡＡ受容体に結合する能力をアロステリックに変調する多くの化合物を認識する。アロステリックモジュレーターは、ＧＲＣ上に、異なる部位を有する。これらの部位は別個のものであり、ＧＡＢＡを認識する部位からユニークである。ＧＲＣのアロステリックモジュレーターの最も広く研究され特徴付けられたクラスは、ベンゾジアゼピン（ＢＺ）部位と相互作用するものである。
【０００５】
ＧＲＣを変調する代替部位が記載されている。例えば、神経刺激性ステロイドは、ＧＲＣに結合し、かつ機能的にそれを変調する非−ホルモンステロイドである。ＧＡＢＡＡ受容体薬理学における神経刺激性ステロイドの現在の役割は、圧倒的な証拠によって支持される。電気生理学的および生化学的技術は、作用のユニークな部位を介してＧＲＣをアロステリックに変調する神経刺激性ステロイドの能力を確認した。実験的に、神経刺激性ステロイドは、ベンゾジアゼピンと同様だが同一ではない薬理学的プロファイルを呈する。神経刺激性ステロイドは、抗不安薬、抗痙攣薬、および鎮静−睡眠薬性質を生成する。
【０００６】
特定の抗菌性フルオロキノロン抗生物質は、ヒトの痙攣の原因として、臨床報告で関係づけられている(Ball P (1986) Journal of Antimicrobial Chemotherapy. 18 Suppl D 187-193; Simpson KJ, Brodie MJ (1985) Lancet ii. 161, 1985; Hori S, ら (1987) Program and Abstracts of the Twenty-Seventh InterscienceConference on Antimicrobial Agents and Chemotherapy, New York 1987. Abstract 30, pg101)。実験的に、フルオロキノロンは、マウスに痙攣および死を招くことが実証された。加えて、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）およびその副生成物は、臨床的かつ実験的に、フルオロキノロンの痙攣効果を強力にすることが報告されている。フルオロキノロン抗菌剤の痙攣性副作用に関する懸念は、フルオロキノロンのＧＡＢＡＡ受容体との相互作用に興味を抱かせた。確証的な証拠は、それらがＧＲＣと相互作用して、ＧＡＢＡ作用を阻害することを暗示するものとなった。フルオロキノロンは、高マイクロモラー効力で、［３Ｈ］ムシモールおよびＧＲＣへの［３Ｈ］ＧＡＢＡ結合を拮抗する。電子生理学的研究は、フルオロキノロンのみはＧＡＢＡ誘発電流を柔弱に減少させることを実証した。ならびに、放射性リガンド結合アッセイは、ＮＳＡＩＤと組合せたフルオロキノロンは、ＧＡＢＡＡ受容体−塩化物チャンネル複合体で立体配座変化を誘発し、これはＧＡＢＡの機能的拮抗作用と合致した薬理学的に関連する応答の指標である。
【０００７】
ＧＲＣを変調させれば、不安、発作活性、および不眠症を寛解させることができることは、これまでにたくさん書かれている。すなわち、ＧＡＢＡおよびＧＡＢＡのように作用するあるいはＧＡＢＡの効果を促進する薬物（例えば、バリウムのような治療上有用なバルビツール酸塩およびベンゾジアゼピン（ＢＺ））は、ＧＲＣ上の特定の変調部位と相互作用することによって、治療上有用な効果を生成する。しかしながら、既知の薬物のいずれも、ＧＡＢＡ受容体のα−２サブユニットにて選択的に強力ではない。すなわち、それらは鎮静という望ましくない副作用を呈し、フルオロキノロンの場合には、痙攣という望ましくない副作用を呈する。副作用なしで活性なＧＲＣモジュレーターへの必要性が現存する。
【０００８】
発明の概要
本発明は、ＧＡＢＡのα−２サブユニットにて選択的効力を持つＧＲＣを変調して、副作用なしで、治療上有用な効果を生成する分子に関する。さらに、本発明は、式Ｉによって表される置換されたキノロンに関し、これは、ＧＡＢＡＡ受容体複合体（ＧＲＣ）を介して媒介されるＧＡＢＡ促進性Ｃｌ−フラックスの賦活薬として作用する。
【０００９】
また、本発明は、有効量の式Ｉの化合物を投与し、本明細書中に記載するように、式Ｉの化合物の作用を媒介する新規部位を活性化させることによって、哺乳類のＧＡＢＡ受容体に対するＧＡＢＡ作用の亢進に応答性の障害を治療する方法に関する。新規部位は、式Ｉの化合物は、ＧＡＢＡ、ベンゾジアゼピン、神経刺激性ステロイド、ｔ−ブチルビシクロホスホロチオネート／ピクロトキシン、バルビツール酸塩、４’−クロロジアゼパム、抗菌性キノロン、イベルメクチン、ロレクレゾール／メフェナム酸、フロセミドおよびプロポフォール用の部位を含むＧＲＣの既知の部位では作用しないという除外基準によって定義される(E. R. Korpi, G. Grunder, H. Luddens, Progress Neurobiology 67: 113-159, 2002)。
【００１０】
すなわち、ＧＲＣのユニークな部位用のリガンドである本発明の化合物は、中枢神経系の種々の障害を治療および／または予防するのに有用である。そのような障害は、広場恐怖を伴うまたは伴わないパニック障害、パニック障害の病歴のない広場恐怖、社会恐怖を含む動物および他の恐怖症、強迫性障害、心的外傷後および急性ストレス障害を含むストレス障害、全般的または薬物誘発性不安障害といった不安障害；神経症；痙攣；急性および慢性的疼痛；認識障害；不眠症；偏頭痛；ならびに例えば、一度の発作または反復性抑鬱障害、気分変調障害、双極Ｉ型および双極ＩＩ型躁障害、および気分循環性障害といった抑鬱障害または双極性障害を含む。
【００１１】
本発明のもう１つの態様は、ＧＡＢＡＡ受容体複合体を介して媒介されるＧＡＢＡ促進性Ｃｌ−コンダクタンスの賦活薬または阻害剤として、式Ｉの化合物の活性を媒介する部位の使用に向けられる。ＧＡＢＡ媒介塩化物コンダクタンスの亢進は、不安およびストレス関連障害、鬱病および他の情動障害、てんかんおよび他の発作障害、不眠症および関連睡眠障害、および急性ならびに慢性的疼痛のような障害を治療および予防するのに有用である。ＧＡＢＡ媒介塩化物コンダクタンスの阻害は、軽度認識機能障害、年齢関連認識低下、老人性痴呆症、アルツハイマー病、ナルコレプシーのような減少された覚醒を含む睡眠障害および特発性過眠症といった学習および記憶に関連する障害を治療および予防するのに有用である。
【００１２】
また、本発明の態様は、有効量の１つ以上の医薬上許容される担体または希釈剤との混合物中の式Ｉの化合物を含有するＧＲＣを介して媒介するＧＡＢＡ促進性Ｃｌ−フラックスの亢進に応答性の障害を治療するのに有用な医薬組成物を提供することである。
【００１３】
本発明に有用な化合物は、今まで報告されていない。すなわち、本発明は、式Ｉの構造を有する新規の置換されたキノロンにも向けられている。
【００１４】
さらに、本発明は、式Ｉの３Ｈ、３５Ｓ、３６Ｃｌ、１２５Ｉ、１３１Ｉおよび１４Ｃ放射標識された化合物およびＧＲＣの結合部位用の放射性リガンドとしての使用に向けられている。
【００１５】
本発明のさらなる具体例および利点は、ある程度、続く記載で説明され、ある程度は記載から明白であるか、あるいは本発明の実施によって知ることができる。本発明の具体例および利点は、添付の請求の範囲で特に示された要素および組合せの手段によって認識され、達成されるだろう。
【００１６】
前述の一般的な記載および続く詳細な記載の両方は、例示的および説明的なものであるだけであって、主張されるごとく、本発明を制限するものではないことは理解されるべきである。
【００１７】
発明の詳細な記載
本発明のこの態様に有用な化合物は、式Ｉ：
【００１８】
【化１】
2005535592.tif 000002
【００１９】
［式中：
Ｒ１は、水素；所望により置換されていてもよいアルキル、アミノ、アリールおよびアラルキルよりなる群から選択され；
各Ｒ２は、水素および所望により置換されていてもよいアルキルよりなる群から選択され；
各Ｒ３は、水素、所望により置換されていてもよいアルキル；基ＯＲ１１およびＮＲ１２Ｒ１３よりなる群から選択され；
Ｒ５、Ｒ７およびＲ８は、独立して、水素、所望により置換されていてもよいアルキル、およびハロゲンよりなる群から選択され；
Ｒ９およびＲ１０は、独立して、水素、所望により置換されていてもよいアルキル、アラルキル、シクロアルキルおよびシクロアラルキルよりなる群から選択され；あるいは、Ｒ９およびＲ１０は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、複素環を形成し、但し、Ｒ９およびＲ１０は、同時に双方が水素ではなく；
Ｒ１１は、水素、アルカリ金属、負電荷および所望により置換されていてもよいアルキルよりなる群から選択され；
Ｒ１２およびＲ１３は、独立して、水素、所望により置換されていてもよいアルキル、アラルキル、アリ−ル、シクロアルキルおよびシクロアラルキルよりなる群から選択され；あるいはＲ１２およびＲ１３は、それらが結合している窒素原子と一緒になって複素環を形成する］
によって表される置換されたキノロンまたはその医薬上許容される塩、プロドラッグあるいは溶媒和化合物である。
【００２０】
また、本発明は、式ＩＩ：
【００２１】
【化２】
2005535592.tif 000003
【００２２】
［式中、
Ｒ１は、水素；所望により置換されていてもよいアルキル、およびアラルキルよりなる群から選択され；
各Ｒ２は、水素および所望により置換されていてもよいアルキルよりなる群から選択され；
Ｒ５、Ｒ７およびＲ８は、独立して、水素、所望により置換されていてもよいアルキル、およびハロゲンよりなる群から選択され；
Ｒ９およびＲ１０は、独立して、所望により置換されていてもよいアルキル、アラルキル、シクロアルキルおよびシクロアラルキルよりなる群から選択され；あるいは、Ｒ９およびＲ１０は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、複素環を形成する］
によって表されるキノロンまたはその医薬上許容される塩、プロドラッグあるいは溶媒和化合物に関する。
【００２３】
また、本発明は、式ＩＩＩ：
【００２４】
【化３】
2005535592.tif 000004
【００２５】
［式中：
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ５、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９は、式ＩおよびＩＩに関して、先に定義された通りであり、ｎは、整数０、１、２、３または４である］
の化合物またはその医薬上許容される塩、プロドラッグあるいは溶媒和化合物に関する。
【００２６】
医薬での使用につき、式ＩないしＩＩＩの化合物の塩は医薬上許容される塩であろう。しかしながら、他の塩は、本発明記載の化合物またはその医薬上許容される塩の調製に有用であり得る。本発明の化合物の適した医薬上許容される塩は、酸付加塩を含み、これは、例えば、塩酸、硫酸、メタンスルホン酸、フマル酸、マレイン酸、コハク酸、酢酸、安息香酸、シュウ酸、クエン酸、酒石酸、またはリン酸のような医薬上許容される酸の溶液と、本発明記載の化合物の溶液を混合することによって形成できる。さらに、本発明の化合物が酸性部位を保有する場合、その適した医薬上許容される塩は、例えばナトリウム塩またはカリウム塩のようなアルカリ金属塩；例えばカルシウム塩またはマグネシウム塩といったアルカリ土類金属；および例えば四級アンモニウム塩のような適した有機リガンドで形成される塩を含む。
【００２７】
本発明は、その範囲内に、上記式Ｉの化合物のプロドラッグを含む。一般に、そのようなプロドラッグは、インビボですぐに式Ｉの必要な化合物に変換可能な式Ｉの化合物の機能的誘導体になるだろう。適したプロドラッグ誘導体の選択および調製用の従来の手順は、例えば、Design of Prodrugs, ed. H. Bundgaard, Elsevier, 1985に記載されている。
【００２８】
本発明記載の化合物が、少なくとも１つの非対称性中心を有する場合、従って、それらは鏡像異性体として存在する。本発明記載の化合物が２つ以上の非対称性中心を有する場合、さらに、それらはジアステレオ異性体として存在する。いずれの割合の全てのそのような異性体およびその混合物は、本発明の範囲内で網羅されていることは理解されるべきである。
【００２９】
有用なハロゲン基は、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素を含む。
【００３０】
有用なアルキル基は、直鎖および分岐鎖Ｃ１−２０アルキル基、より好ましくは、Ｃ５−２０アルキル基を含む。典型的なＣ５−２０アルキル基は、ｎ−ペニル、ｎ−ヘキシル、ｎ−ヘプチル、ｎ−オクチル、ｎ−ノニル、ｎ−デシル、ｎ−ウンデシル、ｎ−ドデシル、ｎ−トリセジル、ｎ−テトラデシル、ｎ−ペンタデシル、ｎ−ヘキサデシル、ｎ−へプタデシル、ｎ−オクタデシル、ｎ−ノナデシルおよびエイコサニル基を含む。
【００３１】
有用なアリール基は、Ｃ６−１４アリール、特にＣ６−１０アリールである。典型的なＣ６−１４アリール基は、フェニル、ナフチル、アントラシル、インデニル、およびビフェニル基を含む。
【００３２】
有用なアリールアルキル基は、上記で言及したＣ６−１０アリール基のいずれかで置換された上記で言及したＣ１−２０アルキル基のいずれかを含む。有用なアリールアルキル基は、ベンジルおよびフェネチルを含む。
【００３３】
有用なシクロアルキルアルキル基は、先に言及したシクロアルキル基のいずれかと置換された上記言及したＣ１−２０アルキル基のいずれかを含む。有用なシクロアルキルアルキル基の例は、シクロヘキシルメチルおよびシクロプロピルメチル基を含む。
【００３４】
有用なハロメチル基は、フルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチルおよび１，１−ジフルオロエチル基を含む１またはそれ以上のフッ素、塩素、臭素またはヨウ素原子で置換されたＣ１−２０アルキル基を含む。
【００３５】
有用なヒドロキシルアルキル基は、ヒドロキシメチル、１−および２−ヒドロキシエチルおよび１−ヒドロキシプロピル基を含むヒドロキシによって置換されたＣ１−２０アルキル基を含む。
【００３６】
有用なアルコキシ基は、上記記載のＣ１−２０アルキル基の１つによる酸素置換を含む。
【００３７】
有用なアルキルチオ基は、デシル−およびヘキサデシルチオ基を含む上記記載のＣ１−２０アルキル基の１つによる硫黄置換を含む。
【００３８】
有用なアルキルアミノおよびジアルキルアミノは、−ＮＨＲ９および−ＮＲ９Ｒ１０であり、ここにＲ９およびＲ１０はＣ１−２０アルキル基である。
【００３９】
有用なジアルキルアミノアルキル基は、先に言及したジアルキルアミノ基のいずれかによって置換された上記言及したＣ１−２０アルキル基のいずれかを含む。
【００４０】
有用なアルキルチオール基は、−ＳＨ基によって置換された上記言及したＣ１−２０アルキル基のいずれかを含む。
【００４１】
カルボキシ基は−ＣＯＯＨである。
【００４２】
アミノ基は−ＮＨ２である。
【００４３】
用語複素環式は、飽和または全体的にあるいは部分的に不飽和の３−７員単環式、あるいは７−１０員二環式環系を意味し、これは炭素原子およびＯ、Ｎ、およびＳよりなる群から選択される１ないし４つのヘテロ原子よりなり、ここに窒素および硫黄ヘテロ原子は、所望により酸化されていてもよく、窒素は所望により第四級化されていてもよく、前記定義の複素環のいずれかがベンゼン環に縮合したいずれの二環式環系も含まれ、ここに、該複素環は、もし得られる化合物が安定であるならば、炭素または窒素は置換され得る。その例は、ピロリジン、ピペリジン、ピペラジン、モルホリン、１，２，３，４−テトラヒドロキノリン等を含むが、これらに限定されるものではない。
【００４４】
Ｒ１ないしＲ１３に対する所望の置換基は、ハロ、ハロ（Ｃ１−２０）アルキル、アリール、シクロアルキル、Ｃ１−２０アルキル、アリール（Ｃ１−２０）アルキル、シクロアルキル（Ｃ１−２０）アルキル、ヒドロキシ（Ｃ１−２０）アルキル、アミノ（Ｃ１−２０）アルキル、アルコキシ（Ｃ１−２０）アルキル、アミノ、ヒドロキシ、チオール、アルコキシ、および上記言及したＣ１−２０アルキルチオールのいずれか１を含む。好ましい所望の置換基は：ハロ、ハロ（Ｃ１−６）アルキル、アミノ（Ｃ１−６）アルキル、アルコキシおよびアミノを含む。
【００４５】
式Ｉ［式中、Ｒ７＝ＣｌでありＲ１０＝Ｈである］の化合物の合成は、１−メチル−２−ピロリジノン（ＮＭＰ）中の主要なアミン、Ｒ９ＮＨ２を、７−クロロ−１−エチル−６−フルオロ−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（２，Acrosから商業的に入手可能、反応図式１参照）と反応させることによって達成できる。
【００４６】
【化４】
2005535592.tif 000005
【００４７】
Ｒ９ＮＨ２の例は、置換されたベンジルアミン、置換されたフェネチルアミン、３−フェニルアミノプロパン、１−アミノインダンおよび１−アミノ−１，２，３，４−テトラヒドロナフトレンを含む。
【００４８】
式Ｉの化合物と、Ｒ１のエチルおよびシクロプロピル以外の基との合成につき、６−フルオロ−７−クロロ出発物質（８）は、反応図式２記載の通り、商業的に入手可能な塩化２，４−ジクロロ−５−フルオロベンゾイル（４，Lancaster Synthesis)から出発して調製することができる。
【００４９】
【化５】
2005535592.tif 000006
【００５０】
Ｒ１ＮＨ２の例は、２−フルオロエチルアミン、所望により置換されたベンジルアミンおよび所望により置換されたフェネチルアミンを含む。Atkins,ら, Org. Process Res. & Develop. (1997), 1, 185-197記載の通り、キノロン環を構築する他の方法を使用することができる。
【００５１】
インビトロ結合アッセイ１
［３５Ｓ］ＴＢＰＳ結合アッセイ：雄のＳＤ（Sprague-Dawley）ラット（体重が１６０ないし２００ｇ）からの皮質を、斬首直後に摘出し、氷上で解剖した。Ｐ２ホモジェネートを、先に記載した通り、結合アッセイ用に調製した（Gee KW Phenylquinolines PK 8165 and PK 9084 allosterically modulate [35S]t-butylbicyclophosphorothionate binding to a chloride ionophore in rat brain via a novel Ro5 4864 site. J. Pharmacol.Exp. Ther. 240 : 747-753, 1987）。０．３２Ｍ  スクロース（J. T. Baker Chemical Co., Phillipsburg, NJ, USA）中で、組織をテフロンで覆われた乳棒で均質化し、引き続いて、１０分間、１，０００Ｘｇで遠心分離した。上澄みを収集し、２０分間、９，０００Ｘｇにて遠心分離した。得られたＰ２ペレットを、２００ｍＭ  ＮａＣｌ(J. T. Baker)を含有する氷冷の５０ｍＭリン酸カリウムナトリウム(J. T. Baker)緩衝液（ｐＨ  ７．４）中で、再懸濁し、すぐに結合アッセイで使用した。２ｎＭ濃度の［３５Ｓ］ＴＢＰＳ(86 Ci/mmol; New England Nuclear, Boston, MA, USA)を、５μＭ  ＧＡＢＡ(Sigma Chem. Co., St. Louis, MO)およびジメチルスルホキシド(Sigma Chem. Co.)中に溶解したテスト薬物の５μｌ分割量の存在または非存在下で、１００μｌの組織ホモジェネート（１０％  ｗ／ｖ）と共にインキュベートした（＜１０μｌの溶媒を全てのアッセイにおいて使用した）。使用された濃度（＜１％）にて、ジメチルスルホキシドは、特異的［３５Ｓ］ＴＢＰＳ結合に対して何の影響も有しなかった。全アッセイで、２００ｍＭ  ＮａＣｌを含有するリン酸カリウムナトリウム緩衝液（ｐＨ  ７．４）の最終容量は１ｍｌとした。非−特異的な結合は、２μＭ  ＴＢＰＳ(NEN, Boston, MA)の存在下の結合と定義され、総結合の〜３０％を占めた。ガラス繊維フィルターを介する高速ろ過(no.32; Schleicher & Schuell, Keene, N. H.)によって、アッセイを、２５℃の９０分間の定常状態インキュベーション後に終了させた。飽和濃度の［３５Ｓ］ＴＢＰＳ結合の既知の阻害剤またはテスト化合物を、２ｎＭの［３５Ｓ］ＴＢＰＳで先に平衡化した組織ホモジェネートに添加し、引き続いて、既知の阻害剤またはテスト化合物の添加後の様々な時点でろ過することによる最初の解離によって、［３５Ｓ］ＴＢＰＳ結合の解離動力学を測定した。既知の阻害剤またはテスト化合物のアロステリックモジュレーターは、これらの状況下で、解離の速度を変調するだろうが、通常の部位で作用する剤は、速度に影響を及ぼさないだろう。フィルター−結合放射能を、液体シンチレーション分光測定によって定量した。データを、非線形回帰(GraphPad, Inc., San Diego, CA)によって評価して、（放射性リガンドの半最大阻害が起こる濃度の）ＩＣ５０値を得た。
【００５２】
インビトロ結合アッセイ２
［３Ｈ］フルニトラゼパム結合：５μＭ  ＧＡＢＡの代わりに、１μＭ  ＧＡＢＡを全試料に添加することを除いては、［３５Ｓ］ＴＢＰＳ結合アッセイで使用したものと同一の組織調製を用いて、同一の状況下で、アッセイを実施した。［３Ｈ］フルニトラゼパム、０．２ｎＭ(75Ci/mmol, New England Nuclear, Boston, MA)を使用して、ＢＺ部位を標識した。非−特異的結合を、１μＭ  クロナゼパムの存在下での結合として定義した。非線形回帰によって、データを評価して、ＩＣ５０およびＥＣ５０値を得た。
【００５３】
インビトロ結合アッセイ３
［３Ｈ］ムシモール結合アッセイ：雄のＳＤ（Sprague-Dawley）ラット（１６０ないし２００ｇ）からの皮質を、安楽死直後に摘出し、氷上で解剖した。組織を、１５ｖｏｌの０．３２Ｍ  スクロース中で均質化し、引き続いて、１００００Ｘｇにて、１０分間、遠心分離した。上澄みを、３８ｍＬポリカーボネート管(Beckman Instruments, Palo Alto CA)に移し、２０分間、２０，０００Ｘｇにて遠心分離した。膜ペレットを、１０ｖｏｌのｄＨ２Ｏ中で再懸濁し、２０分間、８，０００Ｘｇにて遠心分離した。得られたペレットを、一度、ｄＨ２Ｏで洗浄し、Ｎａ＋−フリーアッセイ緩衝液（４０ｍＭ  ＫＨ２ＰＯ４，１００ｍＭ  ＫＣｌ，ｐＨ  ７．４）で洗浄した。ペレットを、３５ｍＬのＮａ＋−フリーアッセイ緩衝液中で再懸濁し、３０分間、３７℃にてインキュベートし、次いで、２０分間、３１，０００Ｘｇ遠心分離した。最終ペレットを、１０ｖｏｌのＮａ＋−フリーアッセイ緩衝液中で再懸濁した。膜調製物の蛋白質濃度は、ＢＣＡ試薬蛋白質アッセイによると、〜１ｍｇ／ｍＬであった。Ｎａ＋−フリーアッセイ緩衝液中で、膜懸濁液（１００μＬ）の分割量を、５ｎＭ［３Ｈ］ムシモール(25 Ci/mmol, New England Nuclear, Boston, MA)および５μＬのジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）またはＤＭＳＯ中で溶解した薬物と共にインキュベートした。インキュベーション媒体の最終容量は、１ｍＬであった。非−特異的結合を、１ｍＭ  ＧＡＢＡの存在下での結合として定義した。膜の添加後、管を簡単にボルテックスし、暗室で、４℃にてインキュベートした。ガラス繊維フィルターを介する高速ろ過によって、インキュベーションを６０分後に終了させ、引き続いて、氷冷のアッセイ緩衝液で三度洗浄した。フィルター結合放射能を、一晩抽出した後、ＬＳＣによって定量した。データを非線形回帰によって評価して、ＩＣ５０およびＥＣ５０値を得た。
【００５４】
電気生理学的アッセイ１
妊娠したＳＤ（Sprague-Dawley）ラットを、１７ないし１９日の妊娠期間の胎仔をインキュベートし、頸椎脱臼によって殺した。胎仔を無菌状態下で摘出し、脳をすぐに切除し、外界室温（１８ないし２２℃）にて、ハンクス平衡塩類溶液（ＨＢＳＳ，Gibco)に入れた。海馬を切開し、断片（〜２ｍｍ３）に切り刻み、ＮａＣｌ  １１６、ＫＣｌ  ５．４、ＮａＨＣＯ３  ２６、ＮａＨ２ＰＯ４  １、ＣａＣｌ２  １．５、ＭｇＳＯ４  １、ＥＤＴＡ  ０．５、グルコース  ２５、システイン  １、およびパパイン  ２０Ｕ／ｍｌ(Sigma)（ｍＭで）を含有する酵素溶液に移し、１時間、３７℃、５％  ＣＯ２、１００％  相対的湿度にてインキュベートした。組織断片を、１ｍｇ／ｍｌのウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）および１ｍｇ／ｍｌのオブモコイド（両方ともSigma）を含有するＨＢＳＳ中で洗浄した。組織を、さらに３ないし４ｍｌのこの溶液に移し、先端熱加工したパスツールピペットを用いて、単細胞懸濁液にゆっくりと倍散した。１０ｍｇ／ｍｌのＢＳＡおよび１０ｍｇ／ｍｌのオブモコイドを含有する５ｍｌ  ＨＢＳＳ上に、単細胞懸濁液を層にし、１０分間、１００Ｘｇにて遠心分離した。上澄みを捨て、細胞を、３ないし４ｍｌのグルタミンのない最小基礎培地（ＭＥＭ，Gibco）中で再懸濁し、熱−不活化ウシ胎児血清（５％  ｖ／ｖ Gibco）、熱−不活化ウマ血清（５％  ｖ／ｖ Gibco）、ストレプトマイシンおよびペニシリン（それぞれ５０μｇ／ｍｌおよび５０００ｉ．ｕ．／ｍｌ）、グルタミンおよびグルコース（それぞれ最終濃度２ｍＭおよび２０ｍＭ［GibcoおよびBDH］）で補充した。約１−２ｘ１０５細胞を、〜１ｍｌの血清豊富化ＭＥＭを含有する各３５ｍｍ（Falcon「Primaria」）組織培養液皿に置いた。プレートを、３７℃にて、５％  ＣＯ２中で、１００％の相対的湿度にて維持し、電気生理学的研究に使用した。非ニューロン性要素のバックグラウンド増殖を、最初の解離後、７日間、４８時間、シトシンアラビノシド（１０μＭ，Sigma)で抑制した。
【００５５】
パッチ−クランプ技術の全細胞遠心分離を用いて、アゴニスト誘発性膜電流を、海馬ニューロンから記録した。ニューロンを、Ｌｉｓｔ  ｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃｓ  Ｌ／Ｍ  ＥＰＣ−７変換器および増幅器を用いて、−６０ｍＶにて電位固定した。ＮａＣｌ  １４０、ＫＣｌ  ２．８、ＭｇＣｌ２  ２、ＣａＣｌ２ １およびＨＥＰＥＳ−ＮａＯＨ  １０（ｐＨ  ７．２）（ｍＭで）を含有する外部（浴）記録溶液で、細胞を灌流した。テトロドトキシン（ＴＴＸ，０．３μＭ）を、記録溶液に含ませて、シナプス活性を抑制した。プラスチック製カニューレ（先端径１ｍｍ）に接続された非無菌管を介するワトソン−マーロウ流ポンプによって、外部溶液を（〜２ｍｌ／分）にて送達した。入力カニューレを、Ｐｒｉｏｒ（登録商標）微調整装置上に設置し、研究下にある細胞に近接（＜１ｍｍ）させた。可動性の管によって、水槽吸引ポンプに接続された１９Ｇ針を介して、浴溶液を、皿から取り除いた。ＣｓＣｌまたはＫＣｌ  １４０、ＭｇＣｌ２  ２、ＣａＣｌ２  ０．１、ＥＧＴＡ  １．１（フリーＣａ２＋〜１０−８Ｍ）、ＨＥＰＥＳ−ＮａＯＨ  １０、およびＡＴＰ−Ｍｇ２＋  ２（ｍＭで）よりなる内部溶液で、記録電極を充填した。記録電極を、Ｎａｒｉｓｈｉｇｅ  ＰＢ７  ２つのステージ電極プラー上のガラスヘマトクリット管（Kimble sodalime 管  73811）から製作した。電極を、１００μＭのチップ内で、「Sylgard」（Dow Corning）で覆って、使用の直前に先端熱加工した。Ｐｉｃｏｓｐｒｉｔｚｅｒ  ＩＩデバイス(General Valve Corporation)を用いて、修飾された記録ピペットのチップからの圧力注入（１．４Ｋｐａ，  １０−８０秒,  ０．１−０．０３３Ｈｚ）によって、電位固定されたニューロンの神経細胞体に、アゴニストを局所投与した。アゴニスト含有ピペットを、Ｌｅｉｔｚ微調整装置を用いて、細胞の０．１ｍｍ内に置いた。顕微鏡および微調整装置を、全て、ファラデーケージ内に置かれた振動のない単離空気テーブル（Wentworth)上に設置した。アゴニスト誘発性全細胞電流を、貯蔵オシロスコープ(Tektronix 2212)上でモニターし、デジタルパルスコード変調（周波数応答１４ｋＨｚ， Sony PCM 701)後に記録し、Multitrace（電気機械化された）ペンチャートレコーダー（周波数応答０．５ｋＨｚ）上で表示した。アゴニスト以外の全ての薬物を、灌流システムを介して、細胞に適用した。アゴニスト誘発性全細胞電流を、そのピークにて測定した。薬物の存在下の応答は、非存在下（対照）あるいは薬物下の応答の算術的平均±ＳＥＭとして発現した。
【００５６】
電気生理学的アッセイ２
ＧＡＢＡＡサブユニットトランスフェクトＨＥＫ細胞を、Ｌ−グルタミンおよびピルビン酸ナトリウム(Irvine Scientific #9031, Irvine CA）を有するダルベッコ変法イーグル培地を用いて、３７℃および５％  ＣＯ２にて、維持し、１０％  ウシ胎児血清(Irvine Scientific #3000)、１０Ｕ／ｍｌハイグロマイシンＢ(Calbiochem#400051）、および１００μｇ／ｍｌ  硫酸ストレプトマイシン、０．２５μｇ／ｍｌ  アンホテリシンＢ、１００ユニット／ｍｌ  ペニシリンＧ(Gibco 15240-096, Gaithersburg MD)よりなる抗生物質カクテルで補充する。細胞を、リン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）ｐＨ  ７．４で、２Ｘ洗浄することによって通過させ、集密度が〜９０％に達すると、ＰＢＳ（０．５ｍｇ／ｍｌ  トリプシン，  ０．２ｍｇ／ｍｌ  ＥＤＴＡ，Irvine Scientific #9342）中の１Ｘトリプシン／ＥＤＴＡ溶液を用いて持ち上げる。
【００５７】
ＧＡＢＡＡサブユニットトランスフェクトＨＥＫ細胞を、スライド上で、〜７０％集密度まで増殖させる。細胞を浴に移し、これを細胞外生理食塩水で連続して灌流する。細胞外培地は、１４５ｍＭ  ＮａＣｌ、３ｍＭ  ＫＣｌ、１．５ｍＭ  ＣａＣｌ２、１ｍＭ  ＭｇＣｌ２、５．５ｍＭ  ｄ−グルコース、および１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳを、ｐＨ  ７．４、３２０ないし３３０ｍｏｓＭのモル浸透圧濃度にて、含有した。記録を、全細胞パッチクランプ技術を用いて、室温にて行った。パッチピペット溶液は、３１５ｍｏｓＭのモル浸透圧濃度にて、１４７ｍＭ  Ｎ−メチル−Ｄ−塩酸グルカミン、５ｍＭ  ＣｓＣｌ、５ｍＭ  Ｋ２ＡＴＰ、５ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、１ｍＭ  ＭｇＣｌ２、０．１ｍＭ  ＣａＣｌ２、および１．１ｍＭ  ＥＧＴＡ、ｐＨ  ７．２を含有した。ピペット対浴抵抗性は、典型的に、３ないし５Ｍｏｈｍｓである。細胞を、−６０ｍＶにて電位固定し、塩化物平衡電位は、約０ｍＶであった。薬物を細胞外培地に溶解し、局所灌流によって、細胞にすぐに適用する。モーター可動性マルチ−チャンネルスイッチシステムは、溶液を約２０分間で交換した。
【００５８】
インビボ薬理学
フォーゲル（Ｖｏｇｅｌ）コンフリクト
大人の雄のラットを、６ラット／群の群に無作為に分ける。動物を一晩（２４時間）水を欠乏させる。口渇時に、食物は自由に入手可能であった。テスト薬物、陽性対照薬物（ジアゼパム、１ｍｇ／ｋｇ）、またはビヒクル対照の注射（ｉ．ｐ．）３０分後、ラットを、ドリンコメーター（drinkometer）回路の一側面に接続されたステンレス鋼の底部を含有する四角いＰｌｅｘｉｇｌａｓボックスに入れる。ドリンコメーター（drinkometer）回路の他側面には、ドリンク管がＰｌｅｘｉｇｌａｓボックスに延びるように設置された水ボトルが接続されている。対象がボトルから飲む時、回路は閉鎖され、７回舐めたと記録された後、電気ショックが管にて送達される。３分間セッションの間の舐める回数を記録する。抗不安剤は、動物が水を得るために耐え得るショックの回数を増加させるだろう。
【００５９】
明暗移動
雄のＮＳＡマウス（２５ないし３０ｇ）を使用する。器具は、床部に穴を有する隔壁によって、小さい領域および大きい領域に分けられた上部が開いた箱よりなる。小さな区画は、黒く塗られ、大きい区画は白く塗られている。白い区画を、光で照射し、黒い区画を赤い光で照射した。明るい区画で費やされた時間対暗い区画で費やされた時間および区画間の移動の数を、５分間テストセッションの間、記録した。ビヒクルまたはテスト化合物を、テスト前３０分に、投与する。ジアゼパムを、陽性対象として２ｍｇ／ｋｇにて投与（ｉ．ｐ．）する。抗不安剤は、動物が暗い区画で過ごす時間を減少させ、２つの区画間を移動する回数を増加させるだろう。
【００６０】
担体
化合物を生の化学物質として投与することに加えて、本発明の化合物は、医薬上使用可能であり、調製物に化合物の加工を促進させる賦形剤および補助剤を含む適した医薬上許容される担体を含有する医薬調製物の部分として投与することができる。好ましくは、調製物、特に経口投与できる調製物および例えば、錠剤、糖衣錠、およびカプセル剤といった投与の好ましい型に使用できる調製物、および例えば坐剤のように直腸投与できる調製物、ならびに注射または経口投与に適した溶液は、賦形剤と共に、（複数の）活性化合物の約０．０１ないし９９パーセント、好ましくは約０．２５ないし７５パーセントを含有する。
【００６１】
適した賦形剤は、特に、例えば、ラクトースまたはスクロース、マンニトールまたはソルビトール、例えばリン酸三カルシウムまたはリン酸水素カルシウムといったセルロース調製物および／またはリン酸カルシウムといった糖類のような賦形剤、ならびに例えばトウモロコシスターチ、小麦スターチ、米スターチ、ジャガイモスターチ、ゼラチン、トラガカント、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、および／またはポリビニルピロリドンを用いるスターチペーストといった結合剤である。所望により、上記言及したスターチおよびカルボキシメチルスターチ、交差結合したポリビニルピロリドン、寒天、またはアルギニン酸あるいはアルギニン酸ナトリウムのようなその塩のような崩壊剤を添加してもよい。何よりも、補助剤は、例えば、シリカ、タルク、ステアリン酸またはステアリン酸マグネシウムまたはステアリン酸カルシウムのようなその塩、および／またはポリエチレングリコールといった流動制御剤および滑沢剤である。糖衣錠核は、所望により、適したコーティングで提供され、胃酸に耐性がある。この目的のため、濃縮糖溶液を使用してもよく、これは、所望により、アラビアガム、タルク、ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコールおよび／または二酸化チタン、ラッカー溶液および適した有機溶媒または溶媒混合物を含有していてもよい。胃酸に耐性のあるコーティングを生成するために、フタル酸アセチルセルロースまたはフタル酸ヒドロキシプロピルメチル−セルロースのような適したセルロース調製物を使用する。例えば、同定または活性化合物用量の組合せを特徴付けるために、染料または顔料を、錠剤または糖衣錠コーティングに添加してもよい。
【００６２】
経口的に使用できる他の医薬製剤は、ゼラチンで作られたプッシュ−フィットカプセル剤、ならびにゼラチンおよびグリセロールまたはソルビトールのような可塑剤で作られた柔らかい、密閉されたカプセル剤を含む。プッシュ−フィットカプセル剤は、顆粒の形態で活性化合物を含有し、これは、ラクトースのような賦形剤、スターチのような結合剤、および／またはタルクまたはステアリン酸マグネシウムのような滑沢剤および、所望により、安定剤と混合されてもよい。柔らかいカプセル剤において、活性化合物は、好ましくは、脂肪性油のような適した液体、または流動パラフィン中に溶解あるいは懸濁される。加えて、安定剤を添加してもよい。
【００６３】
直腸的に使用できる可能な医薬調製物は、例えば、１つまたはそれ以上の活性化合物と坐薬基剤との組合せよりなる坐剤を含む。適した坐薬基剤は、例えば、天然または合成トリグリセリド、あるいは炭化水素パラフィンである。加えて、活性化合物と基剤の組合せよりなるゼラチン直腸カプセル剤を使用することも可能である。可能な基剤材料は、例えば、液体トリグリセリド、ポリエチレングリコール、または炭化水素パラフィンを含む。
【００６４】
非経口投与に適した処方は、例えば、水溶性塩およびアルカリ性溶液といった、水溶性形態の活性化合物の水溶液を含む。加えて、適した油性注射懸濁液として活性化合物の懸濁液を投与してもよい。適した親油性溶媒またはビヒクルは、例えば、ゴマ油といった脂肪性油、あるいは、例えばオレイン酸エチルといった合成脂肪酸エステルあるいはトリグリセリドまたはポリエチレングリコール−４００（化合物はＰＥＧ−４００で溶解性である）を含む。水性注射懸濁液は、懸濁液の粘度を増加させる物質を含有し、例えば、カルボキシメチルナトリウムセルロース、ソルビトール、および／またはデキストランを含む。所望により、懸濁液は安定剤を含んでいてもよい。
【実施例】
【００６５】
実施例１
７−クロロ−１−エチル−６−（１，２，３，４−テトラヒドロナフチル−１−アミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸
３０ｍＬの１−メチル−２−ピロリジノン中の７−クロロ−１−エチル−６−フルオロ−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（Acros; ６．０２ｇ、２２．３ｍｍｏｌ）の懸濁液に、シリンジを介して、適切な１，２，３，４−テトラヒドロ−１−アミノナフタレン（２０ｍＬ，２０．５ｇ，１４０ｍｍｏｌ）を滴下した。得られた薄黄色の混合物を、１７時間、１４０℃にて、油浴に入れた。一度、室温にて、反応物を、１２０ｍＬの水性２Ｎ  ＨＣｌ溶液および氷に添加した。形成された固体を、ろ過によって単離し、水性２Ｎ  ＨＣｌ溶液（１２０ｍＬ）、水（２ｘ１００ｍＬ）、ＭｅＯＨ（３ｘ５０ｍＬ）およびＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で洗浄した。次いで、残留した固体を、ＭｅＯＨ（１４００ｍＬ）から再結晶化した。形成された黄色い針状物を単離し、メタノール（２ｘ５０ｍＬ）で洗浄した。次いで、この固体を、フラッシュカラムクロマトグラフィーに付した。３５ｍＬの４％  ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２中の固体の溶液を、５ｃｍ直径カラム中の１６ｃｍのシリカに添加した。１Ｌの７．５％および５００ｍＬの１０％  ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２で溶離して、９６８ｍｇ（１１％）の標記化合物を黄色固体として得た、融点246-247℃. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6)δ15.14 (s,1 H), 8.66 (s,1 H), 7.80 (s,1 H), 7.63 (s,1H), 7.32 (d,1 H,J = 7.7 Hz), 7.26-7. 16 (m, 3 H), 4.90 (s, 2 H), 4.33 (q, 2 H, J = 7. 2 Hz), 2.92-2. 80 (m,2 H), 2.12-2. 00 (m, 2 H), 1.92-1. 86 (m,2 H), 1.60 (t, 3 H, J = 7.2 Hz). MS (M + Na)+ 419. 元素分析C22H2lClN203 + 0.25 HClとして  計算値: C, 65.08 ; H, 5.28 ;Cl, 10.92 ; N, 6.90. 実測値: C, 65.09 ; H, 5.33 ; Cl, 10.85 ; N, 6.81.
【００６６】
次の化合物を、上記記載の方法を用いることによって調製した：
（Ｒ）−７−クロロ−１−エチル−６−（１，２，３，４−テトラヒドロナフチル−１−アミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
（Ｓ）−７−クロロ−１−エチル−６−（１，２，３，４−テトラヒドロナフチル−１−アミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−エチル−６−（６−メトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロナフチル−１−アミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−エチル−６−（１−アミノインダニル）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸;
７−クロロ−１−エチル−６−（５−メチル−１−アミノインダニル）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸;
７−クロロ−１−エチル−６−（２−アミノインダニル）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−エチル−６−（ベンジルアミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−エチル−６−（２−フェネチルアミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸。粗製反応混合物を、ＥｔＯＡｃで希釈し、所望の化合物が白色固体として得られたことを除いては、実施例１記載の通りに、反応を実施した。1H NMR (400 MHz,DMSO-d6)δ 15.15 (br s,1H), 8.64 (s, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.37-7. 33 (m, 2H), 7.29-7. 24 (m, 3H), 4.68 (t, 1H,J = 5.4 Hz), 4.31 (q, 2H,J = 7.3 Hz), 3.59 (q, 2H, J = 6.4 Hz), 3.03 (t, 2H, J = 6.9 Hz), 1.58 (t, 3H, J = 7.3 Hz);
７−クロロ−１−メチル−６−（１，２，３，４−テトラヒドロナフチル−１−アミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸，1H NMR (400 MHz,CDCl3)δ 15.10 (s, 1H), 8.62 (s,1H), 7.77 (s,1H), 7.62 (s, 1H), 7.33 (d,1H, J = 7.0 Hz), 7.25-7. 17 (m, 3H), 4.91 (br s, 2H), 3.99 (s, 3H), 2.86 (m, 2 H), 2.11-2. 01 (m, 2 H), 1.91-1. 87 (m, 2H);
７−クロロ−１−エチル−６−［４−メトキシ（フェネチルアミノ）］−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−シクロプロピル−６−[４−メトキシ（フェネチルアミノ）］−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−エチル−６−［３−メトキシ（フェネチルアミノ）］−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−エチル−６−［２−メトキシ（フェネチルアミノ）］−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−エチル−６−［４−ブロモ（フェネチルアミノ）］−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−エチル−６−［４−クロロ（フェネチルアミノ）］−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−エチル−６−［４−フルオロ（フェネチルアミノ）］−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−エチル−６−（３−フェニルプロピルアミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−エチル−６−（４−フェニルブチルアミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−エチル−６−（４−フェニルブチル−２−アミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−エチル−６−（２−フェニルシクロプロピルアミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−エチル−６−（２−フェニルシクロプロピルアミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−エチル−６−（１−ナフチルエチル−１−アミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸；
７−クロロ−１−エチル−６−（１−ナフチルメチルアミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸および
７−クロロ−１−エチル−６−（２−フェノキシエチルアミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸．
【００６７】
実施例２
７−クロロ−１−エチル−６−（１，２，３，４−テトラヒドロナフチル−１−アミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−（ｎ−プロピル）カルボキシアミド
５ｍＬの−１０℃ＣＨＣｌ３中の７−クロロ−１−エチル−６−（１，２，３，４−テトラヒドロナフチル−１−アミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（３７ｍｇ，０．０９３ｍｍｏｌ）の溶液に、適したＥｔ３Ｎ（３０μＭ，２２ｍｇ，０．２２ｍｍｏｌ）およびクロロギ酸メチル（１７μＬ，２０ｍｇ，０．１１７ｍｍｏｌ）を添加した。４５分間、冷撹拌した後、適したプロピルアミン（１０μＬ，７．２ｍｇ，０．１２２ｍｍｏｌ）を、シリンジを介して、反応物に、−２０℃にて添加した。次いで、反応物を、２時間、室温まで加温し、７ｍＬの各々１０％水性Ｋ２ＣＯ３溶液およびＣＨＣｌ３に添加した。有機層を分離し、水（２ｘ１０ｍＬ）で洗浄し、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）させ、ろ過し、乾燥するまで濃縮した。残留物を、ＣＨ２Ｃｌ２中に吸収させ、２ｃｍ直径カラム中の１０ｃｍのフラッシュシリカゲルに添加した。１００％  ＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍＬ)および２．５％  ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２（２００ｍＬ）で溶離して、３７ｍｇ（９１％）の標記化合物を黄色固体として得た。
【００６８】
実施例２記載の一般的な方法を用いて、次の化合物を調製した：
７−クロロ−１−エチル−６−（１，２，３，４−テトラヒドロナフチル−１−アミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−（２−フェネチル）カルボキシアミド；
７−クロロ−１−エチル−６−（１，２，３，４−テトラヒドロナフチル−１−アミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−（２−ジメチルアミノエチル）カルボキシアミドおよび
７−クロロ−１−エチル−６−（１，２，３，４−テトラヒドロナフチル−１−アミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−（ピリジルメチルアミノ）カルボキシアミド。
【００６９】
実施例３
７−クロロ−１−（２−フェネチル）−６−（１，２，３，４−テトラヒドロナフチル−１−アミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸
ａ．２−（２，４−ジクロロ−５−フルオロベンゾイル）−３−（ジメチルアミノ）アクリル酸エチル
３，３−ジメチルアミノアクリル酸エチル（３．１０ｇ，２１．６ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（８．０ｍＬ，５．９４ｇ，４５．９ｍｍｏｌ）の混合物を、室温にて撹拌し、滴下漏斗を介して、２０分以上にわたり、２，４−ジクロロ−５−塩化フルオロベンゾイル（４．９２ｇ，２１．６ｍｍｏｌ）の溶液を滴下した。形成された曇った黄色い溶液を、８５ないし９０℃にて、油浴に入れた。３時間後、形成された混合物をろ過し、固体をベンゼンで洗浄した。暗色ろ液を濃縮し、残留物をヘキサン（５０ｍＬ）で倍散した。溶解しなかった固体を収集し、ヘキサン（２０ｍＬ）で洗浄した。得られた固体を、水およびＥｔＯＡｃ間で分配した。ＥｔＯＡｃ層を水（３ｘ２５ｍＬ）、ブラインで洗浄し、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）させ、ろ過し、濃縮して、５．０ｇ（６９％）の所望の化合物にした。
【００７０】
ｂ．２−（２，４−ジクロロ−５−フルオロベンゾイル）−３−（２−フェネチルアミノ）アクリル酸エチル
１０ｍＬのＥｔＯＨ中の２−（２，４−ジクロロ−５−フルオロベンゾイル）−３−（ジメチルアミノ）アクリル酸エチル（１．０１４ｇ，３．０３ｍｍｏｌ）の懸濁液を、シリンジを介して滴下された適したフェネチルアミン（０．４ｍＬ，３８６ｍｇ，３．１９ｍｍｏｌ）で処理した。室温にて７５分間撹拌した後、形成された混合物をろ過し、固体をＥｔＯＨで洗浄し、６２０ｍｇ（５０％）のアクリレートを白色固体として得た。
【００７１】
ｃ．７−クロロ−６−フルオロ−１−（２−フェネチル）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル
１．５ｍＬのＤＭＦ中の２−（２，４−ジクロロ−５−フルオロベンゾイル）−３−（２−フェネチルアミノ）アクリル酸エチルの溶液に、固体Ｋ２ＣＯ３（２２７ｍｇ，１．６４ｍｍｏｌ）を添加した。得られた固体を１３０℃の油浴に、１６時間入れた。一度、室温にて、反応物を水に添加した。形成された粘着性の固体を、水およびＥｔＯＡｃ間で分配した。水性層をＥｔＯＡｃ（２ｘ１０ｍＬ）で抽出した。貯蔵された有機層を水（２ｘ１５ｍＬ）、ブラインで洗浄し、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）させた。溶媒を真空除去して、５７２ｍｇ（９６％）の所望のキノロンを得た。
【００７２】
ｄ．７−クロロ−６−フルオロ−１−（２−フェネチル）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸
５．７ｍＬの水性６Ｎ  ＨＣｌ溶液中の７−クロロ−６−フルオロ−１−（２−フェネチル）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸エチル（５１６ｍｇ，１．３８ｍｍｏｌ）の溶液を、１１３℃の油浴に、３時間４０分入れた。一度、室温にて、混合物をろ過し、水（２ｘ１０ｍＬ）で洗浄して、４６６ｍｇ（９８％）の酸を固体として得た。
【００７３】
ｅ．７−クロロ−１−（２−フェネチル）−６−（１，２，３，４−テトラヒドロナフチル−１−アミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸
実施例１記載の手順を用いて、標記化合物を６％収率で単離した。
実施例３記載の方法を使用することによって、次の化合物を調製した：
７−クロロ−１−（ベンジル）−６−（４−フェネチルブチル−２−アミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸
【００７４】
実施例４
７−クロロ−１−エチル−６−（１，２，３，４−テトラヒドロナフチル−１−アミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸によるラット皮質内の［３５Ｓ］ＴＢＰＳ結合の変調
７−クロロ−１−エチル−６−（１，２，３，４−テトラヒドロナフチル−１−アミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸が［３５Ｓ］ＴＢＰＳの結合を阻害する能力を、先に記載した方法によって決定した。また、ラット皮質への［３５Ｓ］ＴＢＰＳ結合を阻害または促進する能力につき、表１および２の次の化合物をテストした。
【００７５】
【表１−１】
2005535592.tif 000007
【表１−２】
2005535592.tif 000008
【表１−３】
2005535592.tif 000009
【００７６】
【表２】
2005535592.tif 000010
【図面の簡単な説明】
【００７７】
【図１】図１は、胚性マウス海馬ニューロンにおけるＧＡＢＡ（Ｇ，１０μＭ）誘発性塩化物電流に対する７−クロロ−１−エチル−６−（１，２，３，４−テトラヒドロナフチル−１−アミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（Ｃ３，５μＭ)の増強効果を示す。これらのデータは、Ｃ３は、ＧＡＢＡ−ゲーテッド塩化物チャンネルの陽性効力モジュレーターであることを示す。
【図２】図２は、α１β２γ２対α２β２γ２サブユニットを含有する発現されたヒトＧＡＢＡＡ受容体のＧＡＢＡ誘発性電流（ＩＧＡＢＡ)に対する７−クロロ−１−エチル−６−（１，２，３，４−テトラヒドロ−ナフチル−１−アミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（化合物３，ＣＭＰ３)対ジアゼパム（ＤＺＰ）の受容体サブユニット選択性および用量依存性陽性効力を示す。
【図３】図３は、不安のマウス明暗移動モデルの暗室で費やした時間に対する７−クロロ−１−エチル−６−（１，２，３，４−テトラヒドロナフチル−１−アミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（化合物３)およびジアゼパム（ＤＺＰ）の比較を示す。これらのデータは、暗室で費やした時間の増加によって示されるように、化合物３の抗不安効果は、ＤＺＰのそれに匹敵することを示す。
【図４】図４は、２４時間口渇させたラットを用いて、不安のフォーゲル（Ｖｏｇｅｌ）モデルにおいて、３分間の間の舐める回数によって測定された罰応答に対する７−クロロ−１−エチル−６−（１，２，３，４−テトラヒドロナフチル−１−アミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（ＣＭＰ３）およびジアゼパム（ＤＺＰ）の比較を示す。増加した罰せられる舐めによって示されるごとく、これらのデータは、化合物３の抗不安効果は、ＤＺＰのそれに匹敵することを示す。
【図５】図５は、３μＭ（閉じた円）および１０μＭ（閉じた四角）のＧＡＢＡＡ受容体アンタゴニスト（＋）−ビククリンの不在（開いた円）または存在下のラット皮質に結合する２ｎＭ［３５Ｓ］ＴＢＰＳに対する７−クロロ−１−エチル−６−（１，２，３，４−テトラヒドロナフチル−１−アミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（化合物３）の効果を示す。これらのデータは、有効性に関して、ＧＡＢＡに対する化合物３の絶対依存を示し、化合物３はアロステリックに結合し、［３５Ｓ］ＴＢＰＳ部位に対して直接作用しないことを示す。
【図６】図６は、ラット皮質でのＢＺ受容体に結合する０．２ｎＭ［３Ｈ］フルニトラゼパムに対する７−クロロ−１−エチル−６−（１，２，３，４−テトラヒドロナフチル−１−アミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（化合物３，閉じた円）、クロナゼパム（開いた円）および５α−プレグナン−３α−オール−２０−オン（３α，５α−Ｐ，開いた四角）の効果を示す。これらのデータは、化合物３がアロステリックに結合し、ＢＺ受容体に直接作用しないことを示す。
【図７】図７は、ラット皮質における５ｎＭ［３Ｈ］ムシモールのＧＡＢＡＡ受容体への結合に対する７−クロロ−１−エチル−６−（１，２，３，４−テトラヒドロナフチル−１−アミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（化合物３，閉じた円）およびＧＡＢＡ（開いた円）の効果を示す。これらのデータは、化合物３はＧＡＢＡＡ受容体に対して直接的には作用しないことを示す。
【図８】図８は、ラット皮質への２ｎＭ［３５Ｓ］ＴＢＰＳ結合の５α−プレグナン−３α，２０α−ジオール（５α，２０α−ジオール，開いた円）阻害に対する１０μＭ７−クロロ−１−エチル−６−（１，２，３，４−テトラヒドロナフチル−１−アミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（化合物３，閉じた円）または１００ｎＭ３α，５α−Ｐ（開いた四角）の効果を示す。予測されたように、５α，２０α−ジオール（部分的アゴニスト）の増加する濃度は、３α，５α−Ｐ（完全なアゴニスト）の効果を拮抗する。５α，２０α−ジオールが化合物３の効果を拮抗することができないことは、化合物３はＧＲＣのニューロステロイド部位に対して直接的には作用しないことを示す。
【図９】図９は、３０μＭノルフロキサシン（閉じた円）および１００μＭノルフロキサシン（閉じた四角）の不在（開いた円）または存在下で、ラット皮質に結合する２ｎＭ［３５Ｓ］ＴＢＰＳに対する７−クロロ−１−エチル−６−（１，２，３，４−テトラヒドロナフチル−１−アミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（化合物３）の効果を示す。ノルフロキサシンが化合物３用量−応答の用量−依存性右向き平行シフトを生成することが不可能であることは、化合物３は、抗菌性キノロンノルフロキサシンと同一の部位にて直接的には作用しないことを示す。
【図１０】図１０は、３０μＭペントバルビタールの不在（閉じた四角）または存在（閉じた三角）下で、１０μＭ７−クロロ−１−エチル−６−（１，２，３，４−テトラヒドロナフチル−１−アミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（化合物３）によって開始するラット皮質からの２ｎＭ［３５Ｓ］ＴＢＰＳ結合の解離を示す。ペントバルビタールの［３５Ｓ］ＴＢＰＳ結合の解離を促進する能力は、化合物３およびバルビツール酸ペントバルビタールは、作用の共通部位を共有しないことを示す。
【図１１】図１１は、０．３μＭ（閉じた円）、１μＭ（閉じた四角）および３０μＭＲｏ５−４８６４（４’−クロロジアゼパム、閉じた三角）の不在（開いた円）または存在下で、ラット皮質への２ｎＭ［３５Ｓ］ＴＢＰＳ結合に対する７−クロロ−１−エチル−６−（１，２，３，４−テトラヒドロナフチル−１−アミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（化合物３）の効果を示す。４’−クロロジアゼパムが、化合物３／［３５Ｓ］ＴＢＰＳ用量応答曲線の用量−依存性右向き平行シフトを生成することができないことは、化合物３は４’−クロロジアゼパムと同一の部位にて直接的には作用しないことを示す。
【図１２】図１２は、１０μＭイベルメクチンの不在（開いた円）または存在（閉じた四角）下での１０μＭ７−クロロ−１−エチル−６−（１，２，３，４−テトラヒドロナフチル−１−アミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（化合物３）によって開始されるマウス前脳からの２ｎＭ［３５Ｓ］ＴＢＰＳ結合の解離を示す。イベルメクチンの［３５Ｓ］ＴＢＰＳ結合の解離を促進させる能力は、化合物３およびイベルメクチンは作用の共通部位を共有しないことを示す。
【図１３】図１３は、１０μＭメフェナム酸の不在（開いた円）または存在（閉じた四角）下での１０μＭ７−クロロ−１−エチル−６−（１，２，３，４−テトラヒドロナフチル−１−アミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（化合物３）によって開始されるマウス前脳からの２ｎＭ［３５Ｓ］ＴＢＰＳ結合の解離を示す。メフェナム酸の［３５Ｓ］ＴＢＰＳ結合の解離を促進させる能力は、化合物３およびメフェナム酸は作用の共通の部位を共有しないことを示す。
【図１４】図１４は、３０μＭフロセミド（閉じた円）の不在（開いた円）または存在下でのラット小脳への２ｎＭ［３５Ｓ］ＴＢＰＳ結合に対する７−クロロ−１−エチル−６−（１，２，３，４−テトラヒドロナフチル−１−アミノ）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（化合物３）の効果を示す。フロセミドが化合物３用量−応答の用量依存性右向き平行シフトを生成することができないことは、化合物３はループ−利尿フロセミドのようにはＧＲＣ上の同一の部位にて直接的には作用しないことを示す。
【図１】
2005535592.tif 000021
【図２】
2005535592.tif 000022
【図３】
2005535592.tif 000023
【図４】
2005535592.tif 000024
【図５】
2005535592.tif 000025
【図６】
2005535592.tif 000026
【図７】
2005535592.tif 000027
【図８】
2005535592.tif 000028
【図９】
2005535592.tif 000029
【図１０】
2005535592.tif 000030
【図１１】
2005535592.tif 000031
【図１２】
2005535592.tif 000032
【図１３】
2005535592.tif 000033
【図１４】
2005535592.tif 000034
【国際調査報告】
2005535592.tif 000035