(57)【要約】本発明はウロキナーゼ−プラスミノゲンアクチベーター（ｕＰＡ、ＥＣ ３．４．２１．３１）の新規の選択的インヒビター並びに、ウロキナーゼ関連疾患、例えば悪性腫瘍及び転移の治療のための治療的作用物質としての使用に関する。
2005518388.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式Ｉ
【化１】
2005518388.tif 000039
［式中、
Ａｒは芳香族又は複素芳香族の環系を意味し、
Ｅは
【化２】
2005518388.tif 000040
を意味するか、又はＡｒ及びＥは一緒になって基
【化３】
2005518388.tif 000041
を形成し、その際、ＺはＯ、ＮＨ又はＣ＝Ｏであり、かつＸ４はＣ＝Ｏ、ＨＮ又はＣＨ２であってよく、ＷはＮ、ＣＲ３又はＣＲ６であり、かつＸ５はＣＨ、ＣＲ３、ＣＲ６又はＮであってよく、
Ｂは−ＳＯ２−、−ＣＲ３２−、−ＮＲ３−又は−ＮＨ−を意味し、
Ｘ１はＮＲ１３Ｒ４、ＯＲ３、ＳＲ３、ＣＯＯＲ３、ＣＯＮＲ３Ｒ４又はＣＯＲ５を意味し、
Ｒ１はＨ、置換されてよいアルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基、ヘテロアリール基又はＣＯＯＲ３、ＣＯＮＲ３Ｒ４又はＣＯＲ５を意味し、
Ｒ２はハロゲン、Ｃ（Ｒ６）３、Ｃ２（Ｒ６）５、ＯＣ（Ｒ６）３又はＯＣ２（Ｒ６）５を意味し、
Ｒ３はＨ又は１つの任意の有機基を意味し、
Ｒ１３は一般式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）
【化４】
2005518388.tif 000042
の基を意味し、
Ｘ２はＮＨ、ＮＲ４、Ｏ又はＳを意味し、
Ｘ３はＮＨ、ＮＲ４、Ｏ、Ｓ、ＣＯ、ＣＯＯ、ＣＯＮＨ又はＣＯＮＲ４を意味し、
ＹはＣ（Ｒ８）２、ＮＨ又はＮＲ３を意味し、
Ｒ４はＨ又は分枝鎖状又は非分枝鎖状の置換されてよいアルキル基、アルケニル基又はアルキニル基を意味し、
Ｒ５はＨ、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、カルボキシ−アルキル基、カルボキシ−アルケニル基、カルボキシ−アルキニル基、カルボキシ−アリール基、カルボキシ−ヘテロアリール基、−（ＣＯ）ＮＲ３Ｒ４又は−ＣＯＯ−Ｒ３を意味し、その際、アルキル基、アリール基及びヘテロアリール基は置換されていてよい、
Ｒ６はそれぞれ無関係にＨ又はハロゲン、特にＦであり、
Ｒ７はＨ又は置換されてよいアルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基又はヘテロアリール基又は−ＣＯＲ９を意味し、
Ｒ８はそれぞれ無関係にＨ、又は分枝鎖状又は非分枝鎖状の置換されてよいアルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基、ヘテロアリール基、アラルキル基、アルキルアリール基、ヘテロアラルキル基及び／又は置換もしくは非置換の二環式又は多環式の基を意味し、
Ｒ９はＨ又は分枝鎖状又は非分枝鎖状の場合により置換されたアルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基及び／又はヘテロアリール基を意味し、
Ｒ１０は基（Ｃ（Ｒ１）２）ｏ−Ｘ３Ｒ５を意味し、
Ｒ１１はＨ、カルボニル基−ＣＯ−Ｒ１２、カルボンアミド基−ＣＯＮＲ１２２、オキシカルボニル基−ＣＯＯ−Ｒ１２又は特に有利にはスルホニル基−ＳＯ２Ｒ１２を意味し、
Ｒ１２はＨ、分枝鎖状又は非分枝鎖状の置換又は非置換のアルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基又はヘテロアリール基又は置換又は非置換の環式のアルキル基又は置換又は非置換のアラルキル基、アルキルアリール基又はヘテロアラルキル基又は置換又は非置換の二環式又は多環式の基を意味し、
Ｒ１５はＣ＝Ｘ２、ＮＲ３又はＣＲ３２を表し、
ｎは０〜２の整数であり、
ｍは０〜５の整数であり、
ｏは１〜５の整数であり、
ｐは１〜５の整数である］の化合物又はこれらの化合物の塩の、ウロキナーゼ−プラスミノゲンアクチベーターの阻害のための薬剤の製造のための使用。
【請求項２】
一般式ＩＩＩ
【化５】
2005518388.tif 000043
［式中、
Ａｒは芳香族又は複素芳香族の環系を意味し、
Ｘ１はＮＲ１３Ｒ４、ＯＲ３、ＳＲ３、ＣＯＯＲ３、ＣＯＮＲ３Ｒ４又はＣＯＲ５を意味し、
Ｒ１はＨ、置換されてよいアルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基、ヘテロアリール基又はＣＯＯＲ３、ＣＯＮＲ３Ｒ４又はＣＯＲ５を意味し、
Ｒ２はハロゲン、Ｃ（Ｒ６）３、Ｃ２（Ｒ６）５、ＯＣ（Ｒ６）３又はＯＣ２（Ｒ６）５を意味し、
Ｒ３はＨ又は任意の有機基を意味し、
Ｒ１３は一般式（ＩＶａ）又は（ＩＶｂ）：
【化６】
2005518388.tif 000044
の基を意味し、
Ｘ２はＮＨ、ＮＲ４、Ｏ又はＳを意味し、
Ｘ３はＮＨ、ＮＲ４、Ｏ、Ｓ、ＣＯ、ＣＯＯ、ＣＯＮＨ又はＣＯＮＲ４を意味し、
ＹはＣ（Ｒ８）２、ＮＨ又はＮＲ３を意味し、
Ｒ４はＨ又は分枝鎖状又は非分枝鎖状の置換されてよいアルキル基、アルケニル基又はアルキニル基を意味し、
Ｒ５はＨ、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、カルボキシアルキル基、カルボキシアルケニル基、カルボキシル−アルキニル基、カルボキシ−アリール基、カルボキシ−ヘテロアリール基、−（ＣＯ）ＮＲ３Ｒ４又は−ＣＯＯ−Ｒ３を意味し、その際、アルキル基、アリール基及びヘテロアリール基は置換されていてよい、
Ｒ６はそれぞれ無関係にＨ又はハロゲン、特にＦであり、
Ｒ７はＨ又は置換されてよいアルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基又はヘテロアリール基又は−ＣＯＲ９を意味し、
Ｒ８はそれぞれ無関係にＨ、ハロゲン又は分枝鎖状又は非分枝鎖状の置換されてよいアルキル基、アルキニル基、アリール基、ヘテロアリール基及び／又は（ＣＨ２）ｍ−ＯＨを意味し、
Ｒ９はＨ又は分枝鎖状又は非分枝鎖状の場合により置換されたアルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基及び／又はヘテロアリール基を意味し、
Ｒ１０は基（Ｃ（Ｒ１）２）ｏ−Ｘ３Ｒ５を意味し、
Ｒ１１はＨ、カルボニル基−ＣＯ−Ｒ１２、オキシカルボニル基−ＣＯＯ−Ｒ１２又は、特に有利にはスルホニル基−ＳＯ２Ｒ１２を意味し、
Ｒ１２は分枝鎖状又は非分枝鎖状の置換又は非置換のアルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基又はヘテロアリール基又は置換又は非置換の環式のアルキル基又は置換又は非置換のアラルキル基、アルキルアリール基又はヘテロアラルキル基又は置換又は非置換の二環式又は多環式の基を意味し、
ｎは０〜２の整数であり、
ｍは０〜５の整数であり、
ｏは１〜５の整数である］の化合物又はこれらの化合物の塩の、ウロキナーゼ−プラスミノゲンアクチベーターの阻害のための薬剤の製造のための請求項１記載の使用。
【請求項３】
Ａｒがベンゼン環を意味する、請求項１又は２記載の使用。
【請求項４】
Ｒ１２がベンジル基を意味する、請求項１から３までのいずれか１項記載の使用。
【請求項５】
Ｒ１２がアダマンチル基又はショウノウ基を意味する、請求項１から３までのいずれか１項記載の使用。
【請求項６】
置換基Ｂ、特に−ＣＨｘ１Ｒ１及びＥ、特に−ＮＨＣ（ＮＨ）ＮＨ２が互いにパラ位で配置されている、請求項１から５までのいずれか１項記載の使用。
【請求項７】
化合物Ｎ−［２−（４−グアニジノ−ベンゼンスルホニルアミノ）エチル］−３−ヒドロキシ−２−フェニルメタンスルホニルアミノ−プロピオンアミド塩酸、Ｂｚ−ＳＯ２−（Ｄ）−Ｓｅｒ−（Ａｚａ−Ｇｌｙ）−４−グアニジノ−ベンジルアミド塩酸、Ｎ−（４−グアニジノ−ベンジル）−２−（３−ヒドロキシ−２−フェニルメタン−スルホニルアミノ−プロピオニルアミノ）−４−フェニル−ブチルアミド塩酸、Ｎ−［（４−グアニジノ−ベンジルカルバモイル）メチル］−３−ヒドロキシ−２−フェニルメタンスルホニルアミノプロピオンアミド、３−ニトロベンジル−スルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−３１６）、３−クロロベンジル−スルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−３１８）、４−クロロベンジル−スルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−３４０）、ベンジルスルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ａｌａ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸ−５３２）、４−クロロベンジルスルホニル−（ｄ）−Ｓｅｒ−Ｎ−Ｍｅ−Ａｌａ−（４−グアニジノベンジル）アミド（ＷＸ−５８２）又はベンジルスルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｎ−Ｍｅ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド（ＷＸ−５３８）を使用する、請求項１から６までのいずれか１項記載の使用。
【請求項８】
ウロキナーゼ及び／又はウロキナーゼ受容体の病理学的過剰発現と関連している疾患の撲滅のための、請求項１から７までのいずれか１項記載の使用。
【請求項９】
腫瘍撲滅のための、請求項１から８までのいずれか１項記載の使用。
【請求項１０】
転移形成の撲滅のための、請求項１から９までのいずれか１項記載の使用。
【請求項１１】
経口的、局所的、経腸的、非経口的、皮下的、筋内的、腹膜腔内的、舌下的、経鼻的又は吸入的に投与可能な医薬品を製造する、請求項１から１０までのいずれか１項記載の使用。
【請求項１２】
錠剤、糖衣錠、カプセル剤、ペレット剤、坐剤、液剤、乳剤、懸濁剤、リポソーム、吸入スプレー又は経皮系、例えばプラスターの形の薬剤を製造する、請求項１から１１までのいずれか１項記載の使用。
【請求項１３】
式Ｉ
【化７】
2005518388.tif 000045
［式中、Ａｒ、Ｘ１、Ｒ２、Ｂ、Ｅ及びｍが請求項１記載の定義である］の化合物。
【請求項１４】
式ＩＩＩ
【化８】
2005518388.tif 000046
［式中、Ａｒ、Ｘ１、Ｒ１、Ｒ２及びｍが請求項２記載の定義である］の化合物。
【請求項１５】
Ｎ−［２−（４−グアニジノ−ベンゼンスルホニルアミノ）エチル］−３−ヒドロキシ−２−フェニルメタンスルホニルアミノ−プロピオンアミド塩酸、Ｂｚ−ＳＯ２−（Ｄ）−Ｓｅｒ−（Ａｚａ−Ｇｌｙ）−４−グアニジノ−ベンジルアミド塩酸、Ｎ−（４−グアニジノ−ベンジル）−２−（３−ヒドロキシ−２−フェニルメタン−スルホニルアミノ−プロピオニルアミノ）−４−フェニル−ブチルアミド塩酸、Ｎ−［（４−グアニジノ−ベンジルカルバモイル）メチル］−３−ヒドロキシ−２−フェニルメタンスルホニルアミノプロピオンアミド、３−ニトロベンジル−スルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−３１６）、３−クロロベンジル−スルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−３１８）、４−クロロベンジル−スルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−３４０）、ベンジルスルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ａｌａ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸ−５３２）、４−クロロベンジルスルホニル−（ｄ）−Ｓｅｒ−Ｎ−Ｍｅ−Ａｌａ−（４−グアニジノベンジル）アミド（ＷＸ−５８２）又はベンジルスルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｎ−Ｍｅ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド（ＷＸ−５３８）。
【請求項１６】
請求項１３から１５までのいずれか１項記載の少なくとも１種の化合物の有効量の投与による、生物におけるウロキナーゼ阻害のための方法。
【請求項１７】
請求項１３から１５までのいずれか１項記載の少なくとも１種の化合物の有効量の投与による、ヒトにおけるウロキナーゼ阻害のための方法。
【請求項１８】
請求項１３から１５までのいずれか１項記載の化合物の治療的活性量を含有する医薬品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の詳細な説明
本発明はウロキナーゼ−プラスミノゲンアクチベーター（ｕＰＡ、ＥＣ３．４．２１．３１）の新規の選択的インヒビター並びにウロキナーゼ関連疾患、例えば悪性腫瘍及び転移の治療のための治療的作用物質としての使用に関する。特に本発明はアリールグアニジン型のウロキナーゼ−プラスミノゲンアクチベーター（ｕＰＡ、ＥＣ３．４．２１．３１）の新規の高選択的及び高活性のインヒビターに関する。
【０００２】
ウロキナーゼ型のプラスミノゲンアクチベーター（ｕＰＡ）は腫瘍侵襲及び転移形成において重要な役割を担う（Schmitt et al., Obst. Gyn. 21 (1995), 151-165）。ｕＰＡは様々な種類の腫瘍細胞中で過剰発現し（Kwaan, Cancer Metastasis Rev. 11(1992), 291-311）、かつプラスミノゲンのプラスミンへの活性化が行われる腫瘍関連ｕＰＡ受容体（ｕＰＡ−Ｒ）に結合する。プラスミンは、細胞外基質（ＥＣＭ）、例えばフィブロネクチン、ラミニン及びコラーゲンＩＶ型の種々の成分を分解することが可能である。またプラスミンは幾つかの別のＥＣＭ分解酵素、特に基質−金属プロテイナーゼを活性化する。大量の腫瘍関連ｕＰＡは癌患者に関してより高い転移リスクと相関する（Stephens et al., Breast Cancer Res.& Treat.52 (1998), 99-111）。ｕＰＡのタンパク質分解活性の阻害は従って抗転移療法のための良好な出発点である。
【０００３】
多くの公知の合成ｕＰＡインヒビターの一般的な特徴はアミジノ基又はグアニジノ基を有し、ｕＰＡのＳ１特異的ポケット中のＡｓｐ１８９に結合でき、そこでアルギニンミメティックとして作用する塩基性基である（Spraggon et al., Structure 3 (1995),681-691）。
【０００４】
しかしながら殆どの公知のインヒビターはｕＰＡに選択的でなく、別のセリンプロテアーゼ、例えばトリプシン、トロンビン、プラスミン又は組織−プラスミノゲンアクチベーター（ｔＰＡ）も阻害する。
【０００５】
ｐ−アミノベンズアミジンは８２μＭの阻害定数を有する中程度の選択的ｕＰＡインヒビターである。Ｂｉｌｌｓｔｒｏｅｍ他（Int. J. Cancer 61 (1995), 542-547）は、１２５〜２５０ｍｇのｐ−アミノベンズアミジン／ｋｇ／日の日用量での経口投与においてＳＣＩＤマウス中のＤＵ１４５腫瘍（前立腺腺癌細胞株）の成長速度の明らかな低下を示すことができた。副作用は無視できるほど低かった。
【０００６】
幾つかの一置換フェニルグアニジンは、インビトロで有効かつ選択的なｕＰＡインヒビターであると明らかになった。前記の低分子はマイクロモラー範囲で阻害定数を示すが、これらはｕＰＡのＳ１ポケットにおいてのみ結合する（Yang et al., J. Med. Chem. 33 (1990), 2956-2961）。前記の化合物による生物学的調査は実施されていない。
【０００７】
利尿剤のアミロリドは、肺転移の形成をラット乳腺癌細胞の静脈内接種により阻害する選択的ｕＰＡインヒビター（Ｋｉ、ｕＰＡ＝７μＭ）である（Kellen et al., Anticancer Res.8 (1988), 1373-1376）。３−アミジノフェニルアラニンの幾つかの誘導体は、同様にセリンプロテアーゼの有効なインヒビターであると明らかにされたが、これらの化合物は一般にｕＰＡに対して僅かな選択性しか示さない（Stuerzebecher et al., J. Med. Chem. 40 (1997), 3091-3099 ; Stuerzebecher et al., J. EnzymeInhib. 9 (1995), 87-99）。
【０００８】
公知のｕＰＡインヒビターはベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボキサミジンの誘導体（Ｂ４２８及びＢ６２３：Ｋｉ、ｕＰＡ＝０．３２もしくは０．０７μＭ；米国特許第５，３４０，８３３号）である。Ｒａｂｂａｎｉ他（Int. J. Cancer 63 (1995), 840-845）並びにＸｉｎｇ他（Cancer Res.57 (1997), 3585-3593）は４−ヨードベンゾ［ｂ］チオフェン−２−カルボキサミジン（Ｂ４２８）の投与によりラット前立腺腺癌もしくはマウス乳腺癌についての同系モデルにおける腫瘍成長及び転移形成の低下を示すことができた。後者の調査は、Ｂ４２８と抗エストロゲンのタモキシフェンとの同時投与における原発腫瘍成長の更なる低下を示した。
【０００９】
ドイツ国特許出願第１９９４９３８９．９号は、選択的ｕＰＡインヒビターとしてのアリールグアニジン誘導体及び、特にフェニルグアニジン誘導体の使用を提案している。前記の化合物は、芳香族環系に、有利にはグアニジン基に対してパラ位で更なる置換基を有し、該置換基は水素供与体／受容体官能性に従う場合により置換されたメチレン基を有する。前記の置換基型に基づいて該化合物はｕＰＡに対して特に高い作用及び選択性を有する。前記の化合物によって、これらの化合物がアルギニンミメティックとしてｕＰＡのＳ１ポケット中のアミノ酸残基Ａｓｐ１８９と相互作用し、そしてｕＰＡのＳ２及び／又はＳ３ポケットと相互作用しうることが想定される。
【００１０】
ドイツ国特許出願第１００１３７１５．６号は、ｕＰＡ、特にアミノ酸残基Ｇｌｎ１９２及び／又はＳｅｒ２１４と更に特異的な相互作用をしうるアリール−グアニジン誘導体を記載している。これらの化合物は、グアニジン基の他に芳香族環系に更なる置換基を有し、該置換基は、水素供与体官能性、水素受容体官能性及び更に水素供与体官能性に従う場合により置換されたメチレン基を有する。
【００１１】
国際特許出願ＷＯ００／０４９５４号はウロキナーゼインヒビターとしてのアリールアミジン誘導体、特にアミジノフェニルアラニン誘導体を記載している。
【００１２】
本発明の課題はウロキナーゼ−プラスミノゲンアクチベーターの新規の高選択性及び高活性のインヒビターを提供することであった。
【００１３】
前記課題は、本発明によれば、一般式Ｉ
【００１４】
【化１】
2005518388.tif 000003
［式中、
Ａｒは芳香族又は複素芳香族の環系を意味し、
Ｅは
【００１５】
【化２】
2005518388.tif 000004
を意味するか、又はＡｒ及びＥは一緒になって基
【００１６】
【化３】
2005518388.tif 000005
を形成し、その際、ＺはＯ、ＮＨ又はＣ＝Ｏであり、かつＸ４はＣ＝Ｏ、ＨＮ又はＣＨ２であってよく、ＷはＮ、ＣＲ３又はＣＲ６であり、かつＸ５はＣＨ、ＣＲ３、ＣＲ６又はＮであってよく、
Ｂは−ＳＯ２−、−ＣＲ３２−、−ＮＲ３−又は−ＮＨ−を意味し、
Ｘ１はＮＲ１３Ｒ４、ＯＲ３、ＳＲ３、ＣＯＯＲ３、ＣＯＮＲ３Ｒ４又はＣＯＲ５を意味し、
Ｒ１はＨ、場合により置換されたアルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基、ヘテロアリール基又はＣＯＯＲ３、ＣＯＮＲ３Ｒ４又はＣＯＲ５を意味し、
Ｒ２はハロゲン、Ｃ（Ｒ６）３、Ｃ２（Ｒ６）５、ＯＣ（Ｒ６）３又はＯＣ２（Ｒ６）５を意味し、
Ｒ３はそれぞれ無関係にＨ又は１つの任意の有機基を意味し、
Ｒ１３は一般式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）
【００１７】
【化４】
2005518388.tif 000006
の基を意味し、
Ｘ２はＮＨ、ＮＲ４、Ｏ又はＳを意味し、
Ｘ３はＮＨ、ＮＲ４、Ｏ、Ｓ、ＣＯ、ＣＯＯ、ＣＯＮＨ又はＣＯＮＲ４を意味し、
ＹはＣ（Ｒ８）２、ＮＨ又はＮＲ３を意味し、
Ｒ４はＨ又は分枝鎖状又は非分枝鎖状の場合により置換されたアルキル基、アルケニル基又はアルキニル基を意味し、
Ｒ５はＨ、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、カルボキシ−アルキル基、カルボキシ−アルケニル基、カルボキシ−アルキニル基、カルボキシ−アリール基、カルボキシ−ヘテロアリール基、−（ＣＯ）ＮＲ３Ｒ４又は−ＣＯＯ−Ｒ３を意味し、その際、アルキル基、アリール基及びヘテロアリール基は場合により置換されていてよい、
Ｒ６はそれぞれ無関係にＨ又はハロゲン、特にＦであり、
Ｒ７はＨ又は場合により置換されたアルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基又はヘテロアリール基又は−ＣＯＲ９を意味し、
Ｒ８はそれぞれ無関係にＨ、又は分枝鎖状又は非分枝鎖状の場合により置換されたアルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基、ヘテロアリール基、アラルキル基、アルキルアリール基、ヘテロアラルキル基及び／又は置換もしくは非置換の二環式又は多環式の基を意味し、
Ｒ９はＨ又は分枝鎖状又は非分枝鎖状の場合により置換されたアルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基及び／又はヘテロアリール基を意味し、
Ｒ１０は基（Ｃ（Ｒ１）２）ｏ−Ｘ３Ｒ５を意味し、特に−ＣＨ２−ＯＨであり、
Ｒ１１はＨ、カルボニル基−ＣＯ−Ｒ１２、カルボンアミド基−ＣＯＮＲ１２２、オキシカルボニル基−ＣＯＯ−Ｒ１２又は特に有利にはスルホニル基−ＳＯ２Ｒ１２を意味し、
Ｒ１２はＨ、分枝鎖状又は非分枝鎖状の置換又は非置換のアルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基又はヘテロアリール基又は置換又は非置換の環式のアルキル基又は置換又は非置換のアラルキル基、アルキルアリール基又はヘテロアラルキル基又は置換又は非置換の二環式又は多環式の基を意味し、
Ｒ１５はＣ＝Ｘ２、ＮＲ３又はＣＲ３２を表し、
ｎは０〜２の整数であり、
ｍは０〜５の整数であり、
ｏは１〜５の整数であり、
ｐは１〜５の整数である］の化合物又はこれらの化合物の塩の、ウロキナーゼ−プラスミノゲンアクチベーターの阻害のための薬剤の製造のための使用によって解決される。
【００１８】
有利には、一般式ＩＩＩ
【００１９】
【化５】
2005518388.tif 000007
［式中、
Ａｒは芳香族又は複素芳香族の環系を意味し、
Ｘ１はＮＲ１３Ｒ４、ＯＲ３、ＳＲ３、ＣＯＯＲ３、ＣＯＮＲ３Ｒ４又はＣＯＲ５を意味し、
Ｒ１はＨ、場合により置換されたアルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基、ヘテロアリール基又はＣＯＯＲ３、ＣＯＮＲ３Ｒ４又はＣＯＲ５を意味し、
Ｒ２はハロゲン、Ｃ（Ｒ６）３、Ｃ２（Ｒ６）５、ＯＣ（Ｒ６）３又はＯＣ２（Ｒ６）５を意味し、
Ｒ３はＨ又は任意の有機基を意味し、
Ｒ１３は一般式（ＩＶａ）又は（ＩＶｂ）：
【００２０】
【化６】
2005518388.tif 000008
の基を意味し、
Ｘ２はＮＨ、ＮＲ４、Ｏ又はＳを意味し、
Ｘ３はＮＨ、ＮＲ４、Ｏ、Ｓ、ＣＯ、ＣＯＯ、ＣＯＮＨ又はＣＯＮＲ４を意味し、
ＹはＣ（Ｒ８）２、ＮＨ又はＮＲ３を意味し、
Ｒ４はＨ又は分枝鎖状又は非分枝鎖状の場合により置換されたアルキル基、アルケニル基又はアルキニル基を意味し、
Ｒ５はＨ、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、カルボキシアルキル基、カルボキシアルケニル基、カルボキシル−アルキニル基、カルボキシ−アリール基、カルボキシ−ヘテロアリール基、−（ＣＯ）ＮＲ３Ｒ４又は−ＣＯＯ−Ｒ３を意味し、その際、アルキル基、アリール基及びヘテロアリール基は場合により置換されていてよい、
Ｒ６はそれぞれ無関係にＨ又はハロゲン、特にＦであり、
Ｒ７はＨ又は場合により置換されたアルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基又はヘテロアリール基又は−ＣＯＲ９を意味し、
Ｒ８はそれぞれ無関係にＨ、ハロゲン又は分枝鎖状又は非分枝鎖状の場合により置換されたアルキル基、アルキニル基、アリール基、ヘテロアリール基及び／又は（ＣＨ２）ｍ−ＯＨを意味し、
Ｒ９はＨ又は分枝鎖状又は非分枝鎖状の場合により置換されたアルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基及び／又はヘテロアリール基を意味し、
Ｒ１０は基（Ｃ（Ｒ１）２）ｏ−Ｘ３Ｒ５を意味し、特に−ＣＨ２−ＯＨであり、
Ｒ１１はＨ、カルボニル基−ＣＯ−Ｒ１２、オキシカルボニル基−ＣＯＯ−Ｒ１２又は、特に有利にはスルホニル基−ＳＯ２Ｒ１２を意味し、
Ｒ１２は分枝鎖状又は非分枝鎖状の置換又は非置換のアルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基又はヘテロアリール基又は置換又は非置換の環式のアルキル基又は置換又は非置換のアラルキル基、アルキルアリール基又はヘテロアラルキル基又は置換又は非置換の二環式又は多環式の基を意味し、
ｎは０〜２の整数であり、
ｍは０〜５の整数であり、
ｏは１〜５の整数である］の化合物又はこれらの化合物の塩はウロキナーゼ−プラスミノゲンアクチベーターの阻害のための薬剤の製造のために有利である。
【００２１】
該化合物は、塩として、有利には生理学的に認容性の酸塩として、例えば鉱酸の塩として、特に有利には塩酸塩として又は適当な有機酸の塩として存在してよい。グアニジウム基は場合により、有利には生理学的条件下に分解可能である保護官能基を有してよい。該化合物は光学的に純粋な化合物として又はエナンチオマー及び／又はジアステレオマーの混合物として存在してよい。
【００２２】
環系Ａｒは、有利には４〜３０個の、特に５〜１０個のＣ原子を有する。一般式（Ｉ）又は（ＩＩＩ）の化合物において、Ａｒは有利には１つの環を有する芳香族又は複素芳香族の環系である。更にＡｒ及びＥが一緒になって１つの二環式系を形成する化合物が有利である。複素芳香族系は、有利には１つ以上のＯ原子、Ｓ原子及び／又はＮ原子を有する。有利な芳香族環系はベンゼン環であり、有利な複素芳香族環系は、特に２位に窒素を有するピリジニル、ピリミジニル又はピラジニルである。有利な二環式の環系はＺ又はＷの位置に窒素又は酸素を有するものである。最も有利にはＡｒはベンゼン環である。
【００２３】
構造要素：
【００２４】
【化７】
2005518388.tif 000009
を有する化合物が特に有利である。
【００２５】
一般式（Ｉ）又は（ＩＩＩ）の化合物において、その環系Ａｒで置換基Ｂが例えばＣＨＸ１Ｒ１及びＥ、例えばＮＨＣ（ＮＨ）ＮＨ２（グアニジノ）又はＮＨ２ＣＮＨ（アミジノ）が有利にはメタ位又はパラ位に、特に有利にはパラ位に互いに配置されている。更にＡｒはなおも水素とは異なる１つ以上の他の置換基Ｒ２を有してよい。有利には置換基Ｒ２の数は０、１、２又は３、特に有利には０又は１、最も有利には０である。Ｒ２はハロゲン、Ｃ（Ｒ６）３、Ｃ２（Ｒ６）５、ＯＣ（Ｒ６）３又はＯＣ２（Ｒ６）５を意味し、その際、Ｒ６はそれぞれ無関係にＨ又はハロゲン、特にＦである。Ｒ２のための有利な例はハロゲン原子（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ又はＩ）、ＣＨ３、ＣＦ３、ＯＨ、ＯＣＨ３又はＯＣＦ３である。
【００２６】
グアニジノ基を有する本発明による化合物は高い選択性に優れている。従ってしばしばＥは有利には−ＮＨ−Ｃ（ＮＨ）−ＮＨ２である。
【００２７】
インヒビター活性に関して、式（Ｉ）中の置換基Ｂもしくは式（ＩＩＩ）中の−ＣＨＸ１Ｒ１が重要である。有利にはＢは−ＳＯ２−、−ＮＲ３−、−ＮＨ−及び／又は−ＣＲ３２−、特に−ＣＲ１２−から選択される。
【００２８】
Ｒ１はＨ又は場合により置換されたアルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基及び／又はヘテロアリール基又はＣＯＯＲ３、ＣＯＮＲ３Ｒ４又はＣＯＲ５であってよい。最も有利にはＲ１はＨである。
【００２９】
特に記載がない限り、ここに記載されるアルキル基が使用される、有利には直鎖状又は分枝鎖状のＣ１〜Ｃ３０−アルキル基、有利にはＣ１〜Ｃ１０−アルキル基、特にＣ１〜Ｃ４−アルキル基又はＣ３〜Ｃ３０−シクロアルキル基、特にＣ３〜Ｃ８−シクロアルキル基であり、前記基は、例えばＣ１〜Ｃ３−アルコキシ、ヒドロキシル、カルボキシル、アミノ、スルホニル、ニトロ、シアノ、オキソ及び／又はハロゲン、またアリール基又はヘテロアリール基で置換されていてよい。アルケニル基及びアルキニル基はここでは、特に記載がない限り、有利にはＣ２〜Ｃ１０−基、特にＣ２〜Ｃ４−基であり、前記基は、場合により前記のように置換されていてよい。アリール基及びヘテロアリール基は、例えばＣ１〜Ｃ６−アルキル、Ｃ１〜Ｃ３−アルコキシ−ヒドロキシル、カルボキシル、スルホニル、ニトロ、シアノ及び／又はオキソで置換されていてよい。アリール基もしくはヘテロアリール基は、有利には３〜３０個、特に４〜２０個、有利には５〜１５個の、最も有利には６〜１０個のＣ原子を有する。
【００３０】
Ｘ１は有利にはＮＲ１３Ｒ４を表す。
【００３１】
Ｒ３はＨ又は任意の有機基であってよい。有機基は、特に１〜３０個の炭素原子を有する基である。前記基は、飽和又は不飽和、直鎖状、分枝鎖状又は環式であってよく、場合により置換基を有してよい。有利な実施態様においてＲ３＝Ｈであり、特に該基においてＢ＝−ＣＲ３２−である。
【００３２】
特に有利な実施態様において、Ｂは基−ＳＯ２−であるので、スルホ化合物である。ＳＯ２−基はこの場合にＣＨ２基に対して等電子である。ＣＨ２基を等電子のＳＯ２基と交換することによって、付加的にウロキナーゼのＧｌｙ１９３、Ａｓｐ１９４及びＳｅｒ１９５のＮＨ基へのＨ架橋が可能であり、これは阻害活性の更なる改善に導く（図１を参照）。
【００３３】
Ｒ１３は式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）：
【００３４】
【化８】
2005518388.tif 000010
の基を表す。式（ＩＩａ）において、Ｒ１５はＣ＝Ｘ２又はＣＲ３を意味し、その際、Ｘ２はＮＨ、ＮＲ４、Ｏ又はＳであり、そしてＸ３はＮＨ、ＮＲ４、Ｏ、Ｓ、ＣＯ、ＣＯＯ、ＣＯＮＨ又はＣＯＮＲ４である。ＹはＣ（Ｒ８）２、ＮＨ又はＮＲ３を表す。Ｒ４は他方でＨ又は分枝鎖状又は非分枝鎖状の、場合により置換されたアルキル基、アルケニル基又はアルキニル基を意味する。Ｒ７はＨ又は場合により置換されたアルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基又はヘテロアリール基又は−ＣＯＲ９を意味し、その際、Ｒ９は他方でＨ又は分枝鎖状又は非分枝鎖状の場合により置換されたアルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基及び／又はヘテロアリール基を表す。
【００３５】
有利にはＲ１３は式（ＩＩｂ）の基を表す。
【００３６】
更に有利には、特に式（ＩＩＩ）の化合物においてＲ１３は式（ＶＩａ）又は（ＶＩｂ）：
【００３７】
【化９】
2005518388.tif 000011
の基を表す。式（ＩＶａ）において、Ｘ２は有利にはＮＨ、ＮＲ４、Ｏ又はＳ、特にＯを意味し、かつＸ３はＮＨ、ＮＲ４、Ｏ、Ｓ、ＣＯ、ＣＯＯ、ＣＯＮＨ又はＣＯＮＲ４を意味する。ＹはＣ（Ｒ８）２、ＮＨ又はＮＲ３を表す。Ｒ４は付加的にＨ又は分枝鎖状又は非分枝鎖状の場合により置換されたアルキル基、アルケニル基又はアルキニル基を意味する。Ｒ７はＨ又は場合により置換されたアルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基又はヘテロアリール基又は−ＣＯＲ９を意味し、その際、Ｒ９は他方でＨ又は分枝鎖状又は非分枝鎖状の場合により置換されたアルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基及び／又はヘテロアリール基を表す。有利には式（ＩＩＩ）の化合物におけるＲ１３は式（ＩＶｂ）の基を表す。
【００３８】
Ｒ８は有利には水素又は（ＣＨ２）ｍ−ＯＨ、特に有利にはＨである。Ｒ１０は基（ＣＲＲ１）２）ｏ−Ｘ３Ｒ５を表す。前記の場合においてＲ１は特に有利には水素であり、Ｘ３は特に有利には酸素であり、Ｒ５は特に有利には水素であり、かつｏは特に有利には１である。
【００３９】
Ｒ１１は特に有利にはスルホニル基−ＳＯ２−Ｒ１２であり、その際、Ｒ１２は有利にはアラルキル基、特にベンジル基である。特に有利な実施態様において、ベンジル基は、メタ位及び／又はパラ位でハロゲン、最も有利にはＣｌ−で置換されている。更に有利な実施態様において、Ｒ１２はアダマンチル基又はショウノウ基である。
【００４０】
Ｒ１５は特に有利にはカルボニル基−ＣＯ、アミン基−ＮＲ３−及び／又はアルキル基−ＣＲ３２、有利には−ＣＲ１２−、最も有利には−ＣＨ２−を表す。Ｒ１５がＣＨ２である化合物は、特に簡単な合成に優れている。この位置はウロキナーゼとのＨ架橋の形成に関連していないので、阻害活性の欠損に結びつかずにカルボニルの代わりに容易にＣＨ２基が存在してよい。
【００４１】
構成要素として、特に基Ｒ１０を構成する非天然アミノ酸を含む化合物が更に有利である。更に、基ＮＨ−ＮＨを有するアザ化合物、例えばＹ＝ＮＨ及びｎ＝１のアザ化合物（式ＩＩｂの化合物）が有利である。
【００４２】
更に特に有利な化合物はビスルホンアミド、従って要素−ＳＯ２−ＮＨ−を２つ有する化合物である。更に、Ｒ１３が式ＩＩｂの基であり、かつＹが−Ｃ（Ｒ８）２−を表し、その際、Ｒ８が１つのＨを表し、かつ芳香族基を有する１つの基、特に−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ６Ｈ５を表す化合物が有利である。
【００４３】
更にＸ１が
【００４４】
【化１０】
2005518388.tif 000012
を意味する化合物が有利である。
【００４５】
化合物Ｎ−［２−（４−グアニジノ−ベンゼンスルホニルアミノ）エチル］−３−ヒドロキシ−２−フェニルメタンスルホニルアミノ−プロピオンアミド塩酸、Ｂｚ−ＳＯ２−（Ｄ）−Ｓｅｒ−（Ａｚａ−Ｇｌｙ）−４−グアニジノ−ベンジルアミド塩酸又はＮ−（４−グアニジノ−ベンジル）−２−（３−ヒドロキシ−２−フェニルメタン−スルホニルアミノ−プロピオニルアミノ）−４−フェニル−ブチルアミド塩酸並びにＮ−［（４−グアニジノ−ベンジルカルバモイル）メチル］−３−ヒドロキシ−２−フェニルメタンスルホニルアミノプロピオンアミド（図２：ＷＸ−５０８も参照）。更に有利な化合物は３−ニトロベンジル−スルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−３１６）、３−クロロベンジル−スルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−３１８）、４−クロロベンジル−スルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−３４０）、ベンジルスルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ａｌａ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸ−５３２）、４−クロロベンジルスルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｎ−Ｍｅ−Ａｌａ−（４−グアニジノベンジル）アミド（ＷＸ−５８２）又はベンジルスルホニル−（ｄ）−Ｓｅｒ−Ｎ−Ｍｅ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジルアミド（ＷＸ−５３８）である。
【００４６】
一般式（Ｉ）の化合物は、例えば図２及び図３ａ、３ｂ及び３ｃの合成式の特に有利な化合物の例で示されるように製造できる。
【００４７】
本発明によるウロキナーゼインヒビターは、場合により適当な医薬品助剤又は担体材料と一緒に医薬品の製造のために又は診断において使用できる。この場合に、別の作用物質、例えば別のウロキナーゼインヒビター、例えば抗体及び／又はペプチド、また化学療法剤及び細胞静止作用物質と組み合わせて投与することが可能である。
【００４８】
該医薬品はヒト及び動物において局所的、経口、直腸又は非経口で、例えば静脈内、皮下、筋内、腹膜腔内、舌下、経鼻及び／又は吸入で、例えば錠剤、糖衣錠、ペレット剤、坐剤、液剤、乳剤、懸濁剤、リポソーム、吸入スプレー又は経皮吸収系、例えばプラスターの形で投与できる。
【００４９】
本発明による化合物は、ｕＰＡ及び／又はウロキナーゼ−プラスミノゲンアクチベーター受容体（ｕＰＡＲ）の病理学的過剰発現に関連する疾患の撲滅のために適当である。これらの化合物は、例えば悪性腫瘍の成長及び／又は伝播並びに腫瘍の転移を高効率で阻害することが可能である。この場合に、ｕＰＡインヒビターを場合により別の腫瘍剤又は別の治療タイプ、例えば照射又は外科手術と一緒に使用してよい。更に本発明によるインヒビターは別のｕＰＡ関連及び／又はｕＰＡＲ関連の疾患のためにも有効である。
【００５０】
本発明によるｕＰＡインヒビターは、有利にはこれらがｔＰＡ、プラスミン及び／又はトロンビンに対して少なくとも２倍、有利には少なくとも５倍、特に有利には１０〜１０００倍低いＫｉ値を有することを特徴とする。更に、本発明による化合物は血液凝固に僅かだけ影響するにすぎない。それというのもトロンビン、プラスミン及びＸａ因子の効果的な阻害のために高すぎるＫｉ値を有するからである。
【００５１】
本発明による式（Ｉ）もしくは式（ＩＩＩ）の物質は、生理学的作用物質、例えば放射線標識又は細胞毒性剤、例えば化学療法剤、例えばシスプラチン又は５−フルオロウラシル又はペプチドと組み合わせて使用できる。更にこれらの物質はまた担体ベシクル、例えばリポソームの膜中に導入してよく、かつ／又は担体ベシクル中に封入された作用物質、例えば細胞毒性剤、例えばドキソルビシンと一緒に投与してよい。
【００５２】
本発明によって、一般式（Ｉ）の少なくとも１種の化合物の作用量の投与による生物、特にヒトにおけるウロキナーゼ阻害のための方法が提供される。該化合物の用量は通常一日当たり０．０１〜１００ｍｇ／ｋｇ体重の範囲である。治療期間は患者の重度に依存し、そして一回の投与から、場合により間隔をおいて反復できる数週間又は数ヶ月の治療までに至りうる。
【００５３】
最後に本発明は一般式（Ｉ）もしくは（ＩＩＩ）の新規の塩基性のフェニルアラニン誘導体に関する。
【００５４】
本発明を以下の実施例及び添付の図面によって詳細に説明する。
【００５５】
図１はＢがＳＯ２基である本発明によるインヒビターとウロキナーゼとの間の相互作用を示している。Ｇｌｙ１９３、Ａｓｐ１９４及びＳｅｒ１９５のウロキナーゼの骨格において形成されるＳＯ２基及びＮＨ基の間の水素架橋が明らかである。
【００５６】
図２は特に有利な化合物のＮ−［（４−グアニジノ−ベンジルカルバモイル）メチル］−３−ヒドロキシ−２−フェニルメタンスルホニルアミノプロピオンアミド（ＷＸ−５０８）の製造のための合成式を示している。式（Ｉ）の化合物は前記の一般反応式に従ってｐ−アミノ−ベンジルアミンから出発して製造できる。図２では、Ｚは保護基のベンジルオキシカルボニルを意味し、かつＢｏｃは保護基のｔ−ブチルオキシカルボニルを意味する。
【００５７】
図３は、特に有利な化合物ＷＸ−５５０（図３ａ）、ＷＸ−５４４（図３ｂ）及びＷＸ−５６８（図３ｃ）の製造のための合成式を示している。式（Ｉ）の化合物は前記の一般反応式に従ってｐ−アミノ−ベンジルアミンから出発して製造できる。図３では、Ｚは保護基のベンジルオキシカルボニルを意味し、かつＢｏｃは保護基のｔ−ブチルオキシカルボニルを意味する。
【００５８】
図４は化合物ＷＸ−６００の製造のための合成式を示している。
【００５９】
実施例
実施例では以下の略語を使用する： 
【００６０】
【表１】
2005518388.tif 000013
【００６１】
例１：
Ｎ−［２−（４−グアニジノ−ベンゼンスルホニルアミノ）エチル］−３−ヒドロキシ−２−フェニルメタンスルホニルアミノ−プロピオンアミド塩酸［ＷＸ−５６８］（図３ｃを参照）の合成の説明
４−ニトロフェニルスルホニルクロリド（１）を不活性有機溶剤（例えばジクロロメタン）中で有機塩基（例えばＴＥＡ、ＤＩＰＥＡ）を添加してＮ−Ｚ−ジアミノエタン塩酸（２）と反応させて化合物３を得る。Ｐｄ−活性炭触媒上での３の接触水素化はニトロ基を相応のアミンに変換し、そして同時にＺ−保護基を分解する（４）。化合物４のアミノエチル基をペプチド化学において慣用のカップリング試薬（例えばＰｙＢＯＰ、ＨＢＴＵ又はＤＣＣ及びＨＯＢｔ）と、Ｚ−（Ｄ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−ＯＨと一緒に反応させて相応のアミド５を得ることができる。完全に保護された中間体６への変換は、適当なグアニジニル化試薬、例えばＮ，Ｎ′−ビス（ｔ−ブトキシカルボニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−カルボキサミジンを用いて実施する。Ｐｄ−活性炭触媒上での接触水素化によるＺ−保護基の引き続いての分解（７）及び不活性有機溶剤（例えばジクロロメタン）中での有機塩基を添加するベンジルスルホニルクロリドとの反応は、完全に保護された生成物８を提供する。保護基（ＢＯＣ及びｔ−ブチルエーテル）の分解は、酸（例えばトリフルオロ酢酸又はジオキサン中の４ＭのＨＣｌｇ）中の化合物８の溶解によって行われ、それによって目標化合物のＮ−［２−（４−グアニジノ−ベンゼンスルホニルアミノ）−エチル］−３−ヒドロキシ−２−フェニルメタンスルホニルアミノ−プロピオンアミド（９）の相応の塩が得られる。
【００６２】
例２：
Ｂｚ−ＳＯ２−（Ｄ）−Ｓｅｒ−（Ａｚａ−Ｇｌｙ）−４−グアニジノベンジルアミド塩酸［ＷＸ−５４４］（図３ｂを参照）の合成の説明
出発物質４−アミノベンジルアミン（１０）のアミノメチル基にまず、例えば１０とクロロギ酸ベンジルエステル又はＺ−ＯＳｕとを反応させて化合物１１を得ることによって適当な保護基を備わせる。適当な保護されたグアニジニル化試薬、例えばＮ，Ｎ′−ビス（ｔ−ブトキシカルボニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−カルボキサミジンとの反応は、Ｚ−保護基をＰｄ−活性炭触媒上での接触水素化によって分解できる（１３）化合物１２を提供する。従って遊離されるアミノ官能を冷却及びトリホスゲン（固体の、従って僅かに有毒なホスゲン代替物）を有する１当量の有機塩基を添加して、引き続きインサイチュウでベンジルカルバゼートと反応させて化合物１４［Ｚ−Ａｚａ−Ｇｌｙ−４−（Ｎ，Ｎ′−ビス−ＢＯＣ−グアニジノベンジル）アミド］を得る。Ｚ−保護基を化合物１３について記載されるように水素化によって分解し（１５）、そしてＺ−（Ｄ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ及びペプチド化学において慣用のカップリング試薬（例えばＰｙＢＯＰ、ＨＢＴＵ又はＤＣＣ及びＨＯＢｔ）と反応させてアミド１６を得る。Ｚ−保護基を再び触媒により分解し（１７）、そして得られる遊離アミンとベンジルスルホニルクロリドとを不活性有機溶剤（例えばジクロロメタン）中で有機塩基を添加して反応させて、相応のスルホンアミド１８を得る。残りの保護基の分解は、酸性溶液（例えばトリフルオロ酢酸又は４ＭのＨＣｌｇ／ジオキサン中）中の反応によって行い、目標化合物のＢｚ−ＳＯ２−（Ｄ）−Ｓｅｒ−（Ａｚａ−Ｇｌｙ）−４−グアニジノベンジルアミド（１９）の相応の塩を得る。
【００６３】
例３：
Ｎ−（４−グアニジノ−ベンジル）−２−（３−ヒドロキシ−２−フェニルメタン−スルホニルアミノ−プロピオニルアミノ）−４−フェニルブチルアミド塩酸［ＷＸ−５５０］（図３ａを参照）の合成の説明
４−アミノベンジルアミン（２０）をＺ−（Ｌ）−ホモフェニルアラニン及びペプチド化学において慣用のカップリング試薬（例えばＰｙＢＯＰ、ＨＢＴＵ又はＤＣＣ及びＨＯＢｔ）と反応させてアミド２１を得る。Ｐｄ−活性炭触媒上での接触水素化によってＺ−保護基を分解し（２２）、遊離のアミノ基を２１に記載のようにＺ−（Ｄ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）ＯＨと反応させてアミド２３を得る。適当に保護されたグアニジニル化試薬、例えばＮ，Ｎ′−ビス（ｔ−ブトキシカルボニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−カルボキサミジンとの反応は、化合物２４を提供する。Ｎ−末端のＺ−保護基を２２について記載されるように分解し、そして得られた化合物２５とベンジルスルホニルクロリドとを反応させてスルホンアミド２６を得る。最後の工程において、残りの保護基を酸性媒体（例えばトリフルオロ酢酸又は４ＭのＨＣｌｇ／ジオキサン中）中で分解して、目標化合物２７の相応の塩を得る。
【００６４】
例４：
Ｎ−［（４−グアニジノ−ベンジルカルバモイル）メチル］−３−ヒドロキシ−２−フェニル−メタンスルホニルアミノ−プロピオンアミド塩酸もしくはベンジルスルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸ−５０８）（図２を参照）の合成
【００６５】
【化１１】
2005518388.tif 000014
【００６６】
市販の４−アミノベンジルアミンを不活性溶剤中でＺ−Ｇｌｙ−ＯＳｕと反応させてＺ−Ｇｌｙ−（４−アミノベンジル）アミドを得る。選択的にＺ−Ｇｌｙ−ＯＨ及びペプチド化学において慣用のカップリング試薬（例えばＤＣＣ又はＨＢＴＵ及びＨＯＢｔ）を使用してよい。パラジウム／活性炭触媒上での接触水素化によるＺ−保護基の分解後に、遊離のアミノ基をペプチド化学において慣用のカップリング試薬（例えばＤＣＣ又はＨＢＴＵ又はＨＯＢｔ）を用いてＺ−（Ｄ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−ＯＨと反応させてＺ−（Ｄ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｇｌｙ−（４−アミノベンジル）アミドを得る。ＢＯＣ保護されたグアニジノ官能の合成は、例えば前記の段階で、Ｎ，Ｎ′−ビス−ＢＯＣ−１Ｈ−ピラゾール−１−カルボキサミジンとできる限り非極性かつ不活性の溶剤（例えばジクロロメタン）中で反応させることによって実施できる。Ｚ−保護基の再度の分解の後に、フェニルメタンスルホニルクロリドと反応させて完全に保護された生成物Ｂｚ−ＳＯ２−（Ｄ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｇｌｙ−（４−Ｎ，Ｎ′−ビス−ＢＯＣ−グアニジノベンジル）アミドを得る。最後の合成工程において、ＢＯＣ保護基及びｔ−ブチルエーテル基をジオキサン中の４ＭのＨＣｌｇによって分解し、それによってＮ−［（４−グアニジノ−ベンジルカルバモイル）メチル］−３−ヒドロキシ−２−フェニル−メタンスルホニルアミノプロピオンアミドの塩酸塩を直接得る。選択的に保護基をＴＦＡによって分解してもよい。生じる生成物のＴＦＡ塩を引き続きイオン交換によって相応の塩酸塩に変換する。
【００６７】
例５：
一般的な構成単位Ｈ−（Ｄ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｇｌｙ−（４−Ｎ，Ｎ′−ビス−ＢＯＣ−グアニジノ−ベンジル）アミド（１）の合成 
【００６８】
【化１２】
2005518388.tif 000015
【００６９】
市販の４−アミノベンジルアミンを不活性溶剤中でＺ−Ｇｌｙ−ＯＳｕと反応させてＺ−Ｇｌｙ−（４−アミノベンジル）アミドを得る。選択的にＺ−Ｇｌｙ−ＯＨ及びペプチド化学において慣用のカップリング試薬（例えばＤＣＣ又はＨＢＴＵ及びＨＯＢｔ）を使用してよい。ＢＯＣ保護されたグアニジノ官能の合成は、例えば前記の段階で、Ｎ，Ｎ′−ビス−ＢＯＣ−１Ｈ−ピラゾール−１−カルボキサミジンとできる限り非極性かつ不活性の溶剤（例えばジクロロメタン）中で反応させることによって実施できる。パラジウム／活性炭触媒上での接触水素化によるＺ−保護基の分解後に、遊離のアミノ基をペプチド化学において慣用のカップリング試薬（例えばＤＣＣ又はＨＢＴＵ又はＨＯＢｔ）を用いてＺ−（Ｄ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−ＯＨと反応させて相応のＺ−（Ｄ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｇｌｙ−（４−Ｎ，Ｎ′−ビス−ＢＯＣ−グアニジノベンジル）アミドを得る。Ｐｄ−活性炭触媒上での接触水素化によるＺ−保護基の分解は、以下に記載されるＮ−末端誘導体化反応のための構成単位（１）としてのＨ−（Ｄ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｇｌｙ−（４−Ｎ，Ｎ′−ビス−ＢＯＣ−グアニジノ−ベンジル）アミドを提供する。
【００７０】
例６：
一般式
【００７１】
【化１３】
2005518388.tif 000016
のＮ−末端スルホンアミド誘導体の合成（例ＷＸＣ−２９６、２９８、３００、３０２、３１６、３１８、３４０）
本発明によるＮ−末端スルホンアミド誘導体の合成のために構成単位１を１当量の所望の置換されたスルホニルクロリドと第三級有機塩基（例えばＴＥＡ又はＤＩＰＥＡ）の存在下で不活性溶剤（例えばジクロロメタン）中で反応させる。引き続きその場合に形成される完全に保護された生成物の保護基をジオキサン中の４ＭのＨＣｌｇによって分解し、それによって所望の化合物Ｒ−ＳＯ２−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミドの塩酸塩を得る（Ｒは一般に有機基を表す）。選択的に保護基をＴＦＡによって分解してもよい。生じる生成物のＴＦＡ塩を引き続きイオン交換によって相応の塩酸塩に変換する。
【００７２】
６．１．  （−）−ショウノウ−１０−スルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−２９６）
本発明による化合物（−）−ショウノウ−１０−スルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−２９６）の合成のために、構成単位１を１当量の（−）−ショウノウ−１０−スルホニルクロリドと第三級有機塩基（例えばＴＥＡ又はＤＩＰＥＡ）の存在下に不活性有機溶剤（例えばジクロロメタン）中で反応させる。
【００７３】
引き続きこの場合に形成される完全に保護された生成物の保護基をジオキサン中の４ＭのＨＣｌｇによって分解し、それによって目標化合物の塩酸塩を得る。選択的に保護基をＴＦＡによって分解してもよい。生じる生成物のＴＦＡ塩を引き続きイオン交換によって相応の塩酸塩に変換する。
【００７４】
６．２．  （＋）−ショウノウ−１０−スルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−２９８）
（＋）−ショウノウ−１０−スルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−２９８）の合成を６．１．に記載のように、但し（＋）−ショウノウ−１０−スルホニルクロリドを用いて行う。
【００７５】
６．３．  ｎ−ブチル−スルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−３００）
ｎ−ブチル−スルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−３００）の合成を６．１．に記載のように、但しブチルスルホニルクロリドを用いて行う。
【００７６】
６．４．  ｎ−オクチル−スルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−３０２）
ｎ−オクチル−スルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−３０２）の合成を６．１．に記載のように、但しｎ−オクチルスルホニルクロリドを用いて行う。
【００７７】
６．５．  ３−ニトロベンジル−スルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−３１６）
３−ニトロベンジル−スルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−３１６）の合成を６．１．に記載のように、但し３−ニトロベンジル−スルホニルクロリドを用いて行う。
【００７８】
６．６．  ３−クロロベンジル−スルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−３１８）
３−クロロベンジル−スルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−３１８）の合成を６．１．に記載のように、但し３−クロロベンジル−スルホニルクロリドを用いて行う。
【００７９】
６．７．  ４−クロロベンジル−スルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−３４０）
４−クロロベンジル−スルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−３４０）の合成を６．１．に記載のように、但し４−クロロベンジル−スルホニルクロリドを用いて行う。
【００８０】
例７：
一般式
【００８１】
【化１４】
2005518388.tif 000017
のＮ−末端尿素誘導体の合成（例ＷＸＣ−２０２、３０４、３０６、３０８、３１０、３１２、３１４、３２０、３２２、３２４、３２６、３２８、３３０、３３２、３３４、３３６、３３８、３４２）
本発明によるＮ−末端尿素誘導体の合成のために、構成単位１を１当量の所望の置換されたイソシアネートと不活性有機溶剤（例えばジクロロメタン）中で反応させる。引き続きその場合に形成される完全に保護された生成物の保護基をジオキサン中の４ＭのＨＣｌｇによって分解し、それによって所望の化合物Ｎ−［（４−グアニジノベンジルカルバモイル）メチル］−３−ヒドロキシ−２−（３−Ｒ−ウレイド）プロピオンアミドの塩酸塩を得る（Ｒは一般に有機基を表す）。選択的に保護基をＴＦＡによって分解してもよい。生じる生成物のＴＦＡ塩を引き続きイオン交換によって相応の塩酸塩に変換する。
【００８２】
７．１．  ３−クロロフェニル−アミノカルボニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−２９２）
本発明による化合物３−クロロフェニル−アミノカルボニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−２９２）の合成のために構成単位１を１当量の３−クロロフェニルイソシアネートと不活性有機溶剤（例えばジクロロメタン）中で反応させる。引き続きこの場合に形成される完全に保護された生成物の保護基をジオキサン中の４ＭのＨＣｌｇによって分解し、それによって所望の生成物の塩酸塩を得る。選択的に保護基をＴＦＡによって分解してもよい。生じる生成物のＴＦＡ塩を引き続きイオン交換によって相応の塩酸塩に変換する。
【００８３】
７．２．  ２−クロロフェニル−アミノカルボニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−３０４）
２−クロロフェニル−アミノカルボニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−３０４）の合成を７．１．に記載のように、但し２−クロロフェニルイソシアネートを用いて行う。
【００８４】
７．３．  ４−メトキシフェニル−アミノカルボニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−３０６）
４−メトキシフェニル−アミノカルボニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−３０６）の合成を７．１．に記載のように、但し４−メトキシフェニルイソシアネートを用いて行う。
【００８５】
７．４．  ３，４，５−トリメトキシフェニル−アミノカルボニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−３０８）
３，４，５−トリメトキシフェニル−アミノカルボニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−３０８）の合成を７．１．に記載のように、但し３，４，５−トリメトキシフェニルイソシアネートを用いて行う。
【００８６】
７．５．  ４−フェノキシフェニル−アミノカルボニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−３１０）
４−フェノキシフェニル−アミノカルボニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−３１０）の合成を７．１．に記載のように、但し４−フェノキシフェニルイソシアネートを用いて行う。
【００８７】
７．６．  ３−エトキシカルボニルフェニル−アミノカルボニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−３１２）
３−エトキシカルボニルフェニル−アミノカルボニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−３１２）の合成を７．１．に記載のように、但しエチル−３−イソシアネートベンゾエートを用いて行う。
【００８８】
７．７．  ３−アセチルフェニル−アミノカルボニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−３１４）
３−アセチルフェニル−アミノカルボニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−３１４）の合成を７．１．に記載のように、但し３−アセチルフェニルイソシアネートを用いて行う。
【００８９】
７．８．  １−アダマンチル−アミノカルボニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−３２０）
1−アダマンチル−アミノカルボニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−３２０）の合成を７．１．に記載のように、但し１−アダマンチルイソシアネートを用いて行う。
【００９０】
７．９．  ２−ブロモフェニル−アミノカルボニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−３２２）
２−ブロモフェニル−アミノカルボニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−３２２）の合成を７．１．に記載のように、但し２−ブロモフェニルイソシアネートを用いて行う。
【００９１】
７．１０．  ３−カルボキシフェニル−アミノカルボニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−３２４）
３−カルボニルフェニル−アミノカルボニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−３２４）の合成を７．１．に記載のように、但しｔ−ブチル−３−イソシアネートベンゾエートを用いて行う。ｔ−ブチル保護基を別の酸反応性保護基と一緒にジオキサン中の４ＭのＨＣｌｇでの処理によって分解する。
【００９２】
７．１１．  ２，３−ジヒドロ−１，４−ベンゾジオキシン−６−イル−アミノカルボニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−３２６）
２，３−ジヒドロ−１，４−ベンゾジオキシン−６−イル−アミノカルボニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−３２６）の合成を７．１．に記載のように、但し、２，３−ジヒドロ−１，４−ベンゾジオキシン−６−イル−イソシアネートを用いて行う。
【００９３】
７．１２．  １−ナフチル−アミノカルボニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−３２８）
１−ナフチル−アミノカルボニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−３２８）の合成を７．１．に記載のように、但し１−ナフチルイソシアネートを用いて行う。
【００９４】
７．１３．  ４−アセチルフェニル−アミノカルボニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−３３０）
４−アセチルフェニル−アミノカルボニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−３２８）の合成を７．１．に記載のように、但し４−アセチルフェニルイソシアネートを用いて行う。
【００９５】
７．１４．  ３，４−メチレンジオキシフェニル−アミノカルボニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−３３２）
３，４−メチレンジオキシフェニル−アミノカルボニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−３３２）の合成を７．１．に記載のように、但し３，４−メチレンジオキシフェニルイソシアネートを用いて行う。
【００９６】
７．１５．  ２，３−ジクロロフェニル−アミノカルボニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−３３４）
２，３−ジクロロフェニル−アミノカルボニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−３３４）の合成を７．１．に記載のように、但し２，３−ジクロロフェニルイソシアネートを用いて行う。
【００９７】
７．１６．  ４−エトキシカルボニルフェニル−アミノカルボニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−３３６）
４−エトキシカルボニルフェニル−アミノカルボニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−３３６）の合成を７．１．に記載のように、但し４−エチルオキシカルボニルフェニルイソシアネートを用いて行う。
【００９８】
７．１７．  ２，４−ジブロモフェニル−アミノカルボニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−３３８）
２，４−ジブロモフェニル−アミノカルボニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−３３８）の合成を７．１．に記載のように、但し２，４−ジブロモフェニルイソシアネートを用いて行う。
【００９９】
７．１８．  ４−ニトロフェニル−アミノカルボニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−３４２）
４−ニトロフェニル−アミノカルボニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−３４２）の合成を７．１．に記載のように、但し４−ニトロフェニルイソシアネートを用いて行う。
【０１００】
例８：
一般式
【０１０１】
【化１５】
2005518388.tif 000018
のＮ末端アミド誘導体の合成（例ＷＸ−５７１）
本発明によるＮ−末端アミド誘導体の合成のために構成単位１を１当量の所望の置換されたカルボン酸塩化物と第三級有機塩基（例えばＴＥＡ又はＤＩＰＥＡ）の存在下で不活性有機溶剤（例えばジクロロメタン）中で反応させる。選択的にカルボン酸とペプチド化学において慣用のカップリング試薬（例えばＤＣＣ又はＨＢＴＵ又はＨＯＢｔ）とを反応させて所望のアミドを得る。例えばペンタフルオロフェニルエステル、ヒドロキシスクシンイミドエステル又は無水物としての別の形のカルボン酸活性化も同様に可能である。引き続きその場合に形成される完全に保護された生成物の保護基をジオキサン中の４ＭのＨＣｌｇによって分解し、それによって所望の化合物Ｎ−［（４−グアニジノベンジルカルバモイル）メチル］−３−ヒドロキシ−２−Ｒ−アシルアミノ−プロピオンアミドの塩酸塩を得る（Ｒは一般に有機基を表す）。選択的に保護基をＴＦＡによって分解してもよい。生じる生成物のＴＦＡ塩を引き続きイオン交換によって相応の塩酸塩に変換する。
【０１０２】
８．１．  ３，４−ジヒドロキシフェニル−アセチル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸ−５７１）
本発明による化合物の３，４−ジヒドロキシフェニル−アセチル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸ−５７１）の合成のために構成単位１と１当量の３，４−ジヒドロキシフェニル酢酸及び１．１当量のペプチド化学において慣用のカップリング試薬（例えばＤＣＣ又はＨＢＴＵ及びＨＯＢｔ）とを第三級有機相（例えばＴＥＡ又はＤＩＰＥＡ）の存在下に不活性有機溶剤（例えばジクロロメタン）中で反応させる。引き続きこの場合に形成される完全に保護された生成物の保護基をジオキサン中の４ＭのＨＣｌｇによって分解し、それによって所望の化合物の塩酸塩を得る。選択的に保護基をＴＦＡによって分解してもよい。生じる生成物のＴＦＡ塩を引き続きイオン交換によって相応の塩酸塩に変換する。
【０１０３】
例９：
ＢｚＳＯ２−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ａｚａ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド（ＷＸ−５４４）の合成
【０１０４】
【化１６】
2005518388.tif 000019
【０１０５】
本発明による化合物のＢｚＳＯ２−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ａｚａ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミドの合成のためにまず４−アミノベンジルアミンのアミノメチル基をＺ−ＯＳｕと反応させてＮ−Ｚ−（４−アミノベンジル）アミンを得る。ＢＯＣ保護されたグアニジノ官能の合成は、例えば前記の段階で、Ｎ，Ｎ′−ビス−ＢＯＣ−１Ｈ−ピラゾール−１−カルボキサミジンとできる限り非極性かつ不活性の溶剤（例えばジクロロメタン）中で反応させることによって実施できる。パラジウム／活性炭触媒上での接触水素化によるＺ−保護基の分解後に、遊離のアミノ基をまず不活性溶剤（例えばジクロロメタン）中で氷冷下に１／３当量のトリホスゲン及び１当量のＴＥＡと反応させ、そして反応実施後にベンジルカルバゼートと反応させてＺ−Ａｚａ−Ｇｌｙ−（４−Ｎ，Ｎ′−ビス−ＢＯＣ−グアニジノベンジル）アミドを得る。パラジウム／活性炭触媒上での接触水素化によるＺ−保護基の分解後に、遊離のアミノ基をペプチド化学において慣用のカップリング試薬（例えばＤＣＣ又はＨＢＴＵ又はＨＯＢｔ）を用いてＺ−（Ｄ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−ＯＨと反応させて相応のＺ−（Ｄ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ａｚａ−Ｇｌｙ−（４−Ｎ，Ｎ′−ビス−ＢＯＣ−グアニジノベンジル）アミドを得る。Ｚ−保護基の再度の触媒による分解の後に、フェニルメタンスルホニルクロリドと反応を行って、完全に保護された生成物ＢｚＳＯ２−（Ｄ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ａｚａ−Ｇｌｙ−４（Ｎ，Ｎ′−ビス−ＢＯＣ−グアニジノベンジル）アミドを得る。最後の合成工程において、ＢＯＣ保護基及びｔ−ブチルエーテル基をジオキサン中の４ＭのＨＣｌｇによって分解し、それによってＢｚＳＯ２−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ａｚａ−Ｇｌｙ−４−（グアニジノベンジル）アミドの塩酸塩を直接得る。選択的に保護基をＴＦＡによって分解してもよい。生じる生成物のＴＦＡ塩を引き続きイオン交換によって相応の塩酸塩に変換する。
【０１０６】
例１０：
本発明によるＢｚＳＯ２−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ａａａ−（４−グアニジノベンジル）アミド型の化合物の合成（Ａａａは一般にＲ配置又はＳ配置又はそのラセミ体における天然又は非天然のα−アミノ酸を意味する）（例ＷＸ−５５０）
【０１０７】
【化１７】
2005518388.tif 000020
【０１０８】
市販の４−アミノベンジルアミンを不活性溶剤中で所望のＺ−保護されたアミノ酸（Ｚ−Ａａａ）及びペプチド化学において慣用のカップリング試薬（例えばＤＣＣ又はＨＢＴＵ及びＨＯＢｔ）と反応させてＺ−Ａａａ−（４−アミノベンジル）アミドを得る。場合により存在するアミノ酸Ａａａの側鎖中の反応性基はこの場合に酸反応性保護基（例えばＢＯＣ、トリチル、ｔ−ブチルエステルもしくは−エーテル）を備えさせるべきである。パラジウム／活性炭触媒上での接触水素化によるＺ−保護基の分解後に、遊離のアミノ基をペプチド化学において慣用のカップリング試薬（例えばＤＣＣ又はＨＢＴＵ又はＨＯＢｔ）を用いてＺ−（Ｄ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−ＯＨと反応させてＺ−（Ｄ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ａａａ−（４−アミノベンジル）アミドを得る。ＢＯＣ保護されたグアニジノ官能の合成は、例えば前記の段階で、Ｎ，Ｎ′−ビス−ＢＯＣ−１Ｈ−ピラゾール−１−カルボキサミジンとできる限り非極性かつ不活性の溶剤（例えばジクロロメタン）中で反応させることによって実施できる。Ｚ−保護基の再度の触媒による分解の後に、フェニルメタンスルホニルクロリドと反応を行って、完全に保護された生成物ＢｚＳＯ２−（Ｄ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｇｌｙ−４（Ｎ，Ｎ′−ビス−ＢＯＣ−グアニジノベンジル）アミドを得る。最後の合成工程において、ＢＯＣ保護基及びｔ−ブチルエーテル基をジオキサン中の４ＭのＨＣｌｇによって分解し、それによってＢｚＳＯ２−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ａａａ−（４−グアニジノベンジル）アミドの塩酸塩を直接得る。選択的に保護基をＴＦＡによって分解してもよい。生じる生成物のＴＦＡ塩を引き続きイオン交換によって相応の塩酸塩に変換する。
【０１０９】
１０．１．  ベンジルスルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−ホモＰｈｅ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸ−５５０）
市販の４−アミノベンジルアミンを不活性溶剤（例えばジクロロメタン）中でＺ−ホモＰｈｅ−ＯＨ及びペプチド化学において慣用のカップリング試薬（例えばＤＣＣ又はＨＢＴＵ及びＨＯＢｔ）と反応させてＺ−ホモＰｈｅ−（４−アミノベンジル）アミドを得る。パラジウム／活性炭触媒上での接触水素化によるＺ−保護基の分解後に、遊離のアミノ基をペプチド化学において慣用のカップリング試薬（例えばＤＣＣ又はＨＢＴＵ及びＨＯＢｔ）を用いてＺ−（Ｄ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−ＯＨと反応させてＺ−（Ｄ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−ホモＰｈｅ−（４−アミノベンジル）アミドを得る。ＢＯＣ保護されたグアニジノ官能の合成は、例えば前記の段階で、Ｎ，Ｎ′−ビス−ＢＯＣ−１Ｈ−ピラゾール−１−カルボキサミジンとできる限り非極性かつ不活性の溶剤（例えばジクロロメタン）中で反応させることによって実施できる。Ｚ−保護基の再度の触媒による分解の後に、フェニルメタンスルホニルクロリドと反応を行って、完全に保護された生成物ＢｚＳＯ２−（Ｄ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−ホモＰｈｅ−４（Ｎ，Ｎ′−ビス−ＢＯＣ−グアニジノベンジル）アミドを得る。最後の合成工程において、ＢＯＣ保護基及びｔ−ブチルエーテル基をジオキサン中の４ＭのＨＣｌｇによって分解し、それによってＢｚＳＯ２−（Ｄ）−Ｓｅｒ−ホモＰｈｅ−（４−グアニジノベンジル）アミドの塩酸塩を直接得る。選択的に保護基をＴＦＡによって分解してもよい。生じる生成物のＴＦＡ塩を引き続きイオン交換によって相応の塩酸塩に変換する。
【０１１０】
１０．２．  ベンジルスルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ａｌａ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸ−５３２）
ベンジルスルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ａｌａ−（４−グアニジノベンジル）アミド塩酸（ＷＸＣ−５３２）の合成を１０．１．に記載のように、但しＺ−ホモＰｈｅ−ＯＨの代わりにＺ−Ａｌａ−ＯＨを用いて行う。
【０１１１】
例１１：
１１．１．  本発明による化合物２−（４−クロロフェニル−メタンスルホニルアミノ）−Ｎ−［１−（４−グアニジノ−ベンジルカルバモイル）エチル］−３−ヒドロキシ−Ｎ−メチル−プロピオンアミドもしくは４−クロロベンジルスルホニル−（ｄ）−Ｓｅｒ−Ｎ−Ｍｅ−Ａｌａ−（４−グアニジノベンジルアミド）（ＷＸ−５８２）の合成
【０１１２】
【化１８】
2005518388.tif 000021
【０１１３】
本発明による化合物の合成のために、Ｎ−Ｚ−Ｎ−メチル−アラニンをペプチド化学において慣用のカップリング試薬（例えばＤＣＣ又はＨＢＴＵ又はＨＯＢｔ）と４−アミノベンジルアミンとを反応させて、Ｎ−Ｚ−Ｎ−メチル−アラニン−（４−アミノベンジル）アミドを得る。パラジウム／活性炭触媒上での接触水素化によるＺ−保護基の分解後に、遊離のアミノ基をペプチド化学において慣用のカップリング試薬（例えばＤＣＣ又はＨＢＴＵ又はＨＯＢｔ）を用いてＺ−（Ｄ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−ＯＨと反応させてＺ−（Ｄ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｎ−メチル−Ａｌａ−（４−アミノベンジル）アミドを得る。ＢＯＣ保護されたグアニジノ官能の合成は、例えば前記の段階で、Ｎ，Ｎ′−ビス−ＢＯＣ−１Ｈ−ピラゾール−１−カルボキサミジンとできる限り非極性かつ不活性の溶剤（例えばジクロロメタン）中で反応させることによって実施できる。Ｚ−保護基の再度の触媒による分解の後に、４−クロロフェニルメタンスルホニルクロリドと反応を行って、完全に保護された生成物４−Ｃｌ−ＢｚＳＯ２−（Ｄ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｎ−メチル−Ａｌａ−（４−Ｎ，Ｎ′−ビス−ＢＯＣ−グアニジノベンジル）アミドを得る。最後の合成工程において、ＢＯＣ保護基及びｔ−ブチルエーテル基をジオキサン中の４ＭのＨＣｌｇによって分解し、それによって２−（４−クロロフェニル−メタンスルホニルアミノ）−Ｎ−［１−（４−グアニジノ−ベンジルカルバモイル）エチル］−３−ヒドロキシ−Ｎ−メチルプロピオンアミドを直接得る。選択的に保護基をＴＦＡによって分解してもよい。生じる生成物のＴＦＡ塩を引き続きイオン交換によって相応の塩酸塩に変換する。
【０１１４】
１１．２  ベンジルスルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｎ−Ｍｅ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド（ＷＸ−５３８）の合成
本発明による化合物ベンジルスルホニル−（Ｄ）−Ｓｅｒ−Ｎ−Ｍｅ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド（ＷＸ−５３８）の合成を１１．１．と同様に行うが、但しＮ−Ｚ−Ｎ−メチル−アラニンの代わりにＮ−Ｚ−Ｎ−Ｍｅ−Ｇｌｙ−ＯＨを使用し、そして４−クロロベンジルスルホニルクロリドの代わりにベンジルスルホニルクロリドを使用する。
【０１１５】
例１２：
Ｎ−［Ｎ′−グアニジノ−フェニル）−ヒドラジノカルボニルメチル］−３−ヒドロキシ−２−フェニル−メタンスルホニルアミノプロピオンアミド塩酸（ＷＸ−６００）（図４を参照）の合成
４−ニトロフェニルヒドラジン（１）をＺ−Ｇｌｙ−ＯＨ及びペプチド化学において慣用のカップリング試薬（例えばＰｙＢＯＰ、ＨＢＴＵ又はＤＣＣ及びＨＯＢｔ）と不活性有機溶剤（例えばジクロロメタン又はＤＭＦ）中で反応させて化合物２を得る。パラジウム−活性炭触媒上での接触水素化によって、Ｚ−保護基を分解でき、またニトロ官能を還元して、相応のアミノ基を得て、それによってアミノ酸−Ｎ′−（４−アミノ−フェニル）ヒドラジン（３）を得る。脂肪族アミノ官能はペプチド化学において慣用のカップリング試薬（例えばＰｙＢＯＰ、ＨＢＴＵ又はＤＣＣ及びＨＯＢｔ）によって不活性有機溶剤（例えばジクロロメタン又はＤＭＦ）中でＺ−（Ｄ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−ＯＨと反応させて、中間体４を得る。ビス−Ｂｏｃ保護されたグアニジノ官能の合成（５）は不活性有機物（例えばジクロロメタン）中でのＮ，Ｎ′−ビス（ｔ−ブトキシカルボニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−カルボキサミジンとの反応によって実施する。パラジウム−活性炭触媒上での再度の接触水素化によって、Ｚ−保護基を分解する（６）。引き続いての１当量のベンジルスルホニルクロリドとのジクロロメタン中での反応は完全に保護された生成物７を提供し、該生成物はジオキサン中の４ＭのＨＣｌｇ中での反応によって脱保護され、所望の生成物のＮ−［Ｎ′−（４−グアニジノ−フェニル）ヒドラジノカルボニルメチル］−３−ヒドロキシ−２−フェニル−メタンスルホニルアミノプロピオンアミド（８）の塩酸塩を得る。
【０１１６】
例１３：
一般式
【０１１７】
【化１９】
2005518388.tif 000022
を有する誘導体の合成
１３．１．  ベンジルスルホニル−（Ｄ）−Ｄａｐ（Ｚ）−Ｇｌｙ−（４−グアニジノ−ベンジル）アミド塩酸（ＷＸＭ−５）の合成
市販の４−アミノベンジルアミンを不活性溶剤中でＺ−Ｇｌｙ−ＯＳｕと反応させてＺ−Ｇｌｙ−（４−アミノベンジル）アミノを得る。選択的にＺ−Ｇｌｙ−ＯＨ及びペプチド化学において慣用のカップリング試薬（例えばＤＣＣ又はＨＢＴＵ及びＨＯＢｔ）を使用してよい。パラジウム／活性炭触媒上での接触水素化によるＺ−保護基の分解後に、遊離のアミノ基をペプチド化学において慣用のカップリング試薬（例えばＤＣＣ又はＨＢＴＵ又はＨＯＢｔ）を用いてＦｍｏｃ−（Ｄ）−Ｄａｐ（Ｚ）−ＯＨと反応させてＦｍｏｃ−（Ｄ）−Ｄａｐ（Ｚ）−Ｇｌｙ−（４−アミノベンジル）アミドを得る。ＢＯＣ保護されたグアニジノ官能の合成は、例えば前記の段階で、Ｎ，Ｎ′−ビス−ＢＯＣ−１Ｈ−ピラゾール−１−カルボキサミジンとできる限り非極性かつ不活性の溶剤（例えばジクロロメタン）中で反応させることによって実施できる。Ｆｍｏｃ−保護基の第二級有機塩基（例えばジエチルアミン又はピペリジン）による分解によって、フェニルメタンスルホニルクロリドとの反応を実施して、保護された生成物ＢｚＳＯ２−（Ｄ）−Ｄａｐ（Ｚ）−Ｇｌｙ−（４−Ｎ，Ｎ′−ビス−ＢＯＣ−グアニジノベンジル）アミドを得る。最後の合成工程において、ＢＯＣ保護基をジオキサン中の４ＭのＨＣｌｇによって分解し、それによってベンジルスルホニル−（Ｄ）−Ｄａｐ（Ｚ）−Ｇｌｙ−（４−グアニジノ−ベンジル）アミド塩酸（ＷＸＭ−５）の塩酸塩を得る。選択的に保護基をＴＦＡによって分解してもよい。生じる生成物のＴＦＡ塩を引き続きイオン交換によって相応の塩酸塩に変換する。
【０１１８】
１３．２．  ベンジルスルホニル−（Ｄ）−Ｄａｐ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノ−ベンジル）アミド二塩酸（ＷＸＭ−６）の合成
ベンジルスルホニル−（Ｄ）−Ｄａｐ−Ｇｌｙ−（４−グアニジノベンジル）アミド二塩酸（ＷＸＭ−６）をパラジウム−活性炭触媒上での、２モル当量の１ＭのＨＣｌを含有するメタノール中でのＷＸＭ−５（１３．１．を参照）の接触水素化によって合成できる。
【０１１９】
例１４：
ウロキナーゼ及びプラスミンのインビトロ阻害
インヒビター活性を測定するために２００μｌのトリス緩衝液（０．０５モル／ｌ、インヒビターを含有する、０．１５４モル／ｌのＮａＣｌ、ｐＨ８．０）、２５μｌの基質（Ｈ２Ｏ中のＰｅｆａｃｈｒｏｍｅのｕＰＡ、ＰｅｆａｃｈｒｏｍｅのＰＬ又はＰｅｆａｂｌｏｃのＴＨ；Ｐｅｎｔａｐｈａｒｍ  ＬＴＤ，バーゼル、スイス）及び５０μｌのウロキナーゼ（Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍ−Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ ＧｍｂＨ、Ｂａｄ Ｓｏｄｅｎ，ドイツ）もしくは相応の別のプロテアーゼ、例えばプラスミン、トロンビン又はＸａ因子を３０℃で１０分間インキュベートした。約３０分及び３０サイクル後に、４０５ｎｍでの吸光をマイクロプレートリーダー（Mediators PHL, Aureon Biosystems、ウィーン、オーストリア）を用いて測定する。Ｋｉ値をディクソンに従って線形回帰によってコンピュータプログラムを用いて測定した。Ｋｉ値は少なくとも３つの測定値からの平均であり、標準偏差は２５％未満であった。
【０１２０】
【表２】
2005518388.tif 000023
【０１２１】
【表３】
2005518388.tif 000024
【０１２２】
【表４】
2005518388.tif 000025
【０１２３】
【表５】
2005518388.tif 000026
【０１２４】
【表６】
2005518388.tif 000027
【０１２５】
【表７】
2005518388.tif 000028
【０１２６】
例１５：
ウロキナーゼのＷＸ−５０８によるインビトロ阻害
ｕＰＡインヒビター活性を測定するために２００μｌのトリス緩衝液（０．０５モル／ｌ、インヒビターを含有する、０．１５４モル／ｌのＮａＣｌ、ｐＨ８．０）、２５μｌの基質（Ｈ２Ｏ中のＰｅｆａｃｈｒｏｍｅのｕＰＡ又はＢＺ−β−Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−ｐＮＡ；Ｐｅｎｔａｐｈａｒｍ  ＬＴＤ，バーゼル、スイス）及び５０μｌのウロキナーゼ（Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍ−Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ ＧｍｂＨ、Ｂａｄ Ｓｏｄｅｎ，ドイツ）もしくは相応の別のプロテアーゼを３０℃でインキュベートした。約３０分及び３０サイクル後に、４０５ｎｍでの吸光をマイクロプレートリーダー（Mediators PHL, Aureon Biosystems、ウィーン、オーストリア）を用いて測定する。Ｋｉ値をディクソンに従って線形回帰によってコンピュータプログラムを用いて測定した。Ｋｉ値は少なくとも３つの測定値からの平均であり、標準偏差は２５％未満であった。
【０１２７】
Ｋｉ（μＭ）
ウロキナーゼ                ０．０４
プラスミン              ＞１０００
トロンビン              ＞１０００
例１６：
細胞培養実験（Ｃａｃｏアッセイ）
Ｃａｃｏ−２−細胞単層を介しての化合物ＷＸ−５０８、ＷＸＣ−３１６、ＷＸＣ−３１８、ＷＸＣ−３２４、ＷＸＣ−３４０、ＷＸ−５３２、ＷＸ−５３８、ＷＸ−５５０及びＷＸ−５８２の輸送を調査した。この試験において、前記の化合物を経口適用によるその生物学的利用率に関して評価した。
【０１２８】
１６．１  試験構成
１６．１．１  細胞培養：
Ｃａｃｏ−２−細胞（American Type Culture Collection, Rockville, MD, USA）を１０％容量／容量の加熱変性されたウシ胎児血清（ＦＣＳ）、１％容量／容量の非必須アミノ酸、１６０Ｕ／ｍｌのベンジルペニシリン及び１００Ｕ／ｍｌのストレプトマイシン（Sigma Chemical, St. Louis, MO, USA）を含有するダルベッコ変性イーグル培地（ＤＭＥＭ）（Life Technologies, Gibco BRL, UK）中で培養した。これらの細胞を３７℃で９５％の空気及び５％のＣＯ２からなる９０％の相対空気湿度を有する雰囲気中に保持する。これらの細胞を２５ｃｍ３の培養フラスコ中で培養し、その際、該培地を２日おきに交換し、そして細胞を１週間に１回トリプシン処理する。
【０１２９】
１６．１．２．  輸送試験及び経上皮電気抵抗（ＴＥＥＲ）
輸送試験のためにＣａｃｏ−２−細胞を孔サイズ０．４μｍ及び４．７ｃｍ２の表面積を有する多孔質のポリカーボネートフィルター膜上で６つのウェルの集合体（Costar Transwell, Badhoevedorp, Niederlande）中で培養する。該細胞を１０４細胞／ｃｍ２の最初の密度で各フィルタ上に接種する。これらの細胞を３７℃で前記の雰囲気下に保持する。該培地を３週間に亘って２日おきに交換する。
【０１３０】
輸送試験の日に培養培地を３０ｍＭのＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．２で緩衝された同量のハンクス均衡塩溶液（ＨＢＳＳ）（輸送培地）と交換し、そして細胞を１時間に亘って平衡させる。次いでアピカル培地を、１．５ｍｌの、化合物を含有するＨＢＳＳ／ＨＥＰＥＳ（１０μｇ／ｍｌ）中の溶液によって交換する。細胞単層を４時間に亘ってインキュベートする。アピカル及びバソラテラルのコンパートメントの試料を試験の終わりに取り、そしてそれぞれの化合物の輸送の定量的測定のために考慮する。
【０１３１】
経上皮電気抵抗（ＴＥＥＲ）を平衡の前後に、フィルター上に形成された単層の完全性を証明するために１対の電極と接続されたＭｉｌｉｃｅｌｌ ＥＲＳメーターを使用して測定する。ＴＥＥＲを試験の終わりに、細胞単層がつながっていることを証明するために測定する。
【０１３２】
１４Ｃ−マンニトールを使用するＣａｃｏ−２−細胞単層を介しての透過性試験を、１．５ｍｌの、ＨＢＳＳ−ＨＥＰＥＳ中の放射線標識された１４Ｃ−マンニトール溶液（０．２μＣｉ／ｍｌの比活性を有する４ミリモル／ｌ）をアピカル側に添加することによって実施する。アピカル側及びバソラテラル側の試料を取り、そしてシンチレーションカクテルの添加後にベータカウンタ中で分析する。全ての試験を３回実施した。
【０１３３】
試験のフローチャートは以下の通りである： 
【０１３４】
【表８】
2005518388.tif 000029
【０１３５】
結果：
【０１３６】
【表９】
2005518388.tif 000030
【０１３７】
１６．１．３  結果
Ｃａｃｏ−２−細胞単層はヒト腸管吸収性上皮を模倣しており、そして経上皮輸送の試験のための有用な道具である。ＴＥＥＲ値は単層の生存性及び統合性のためのコントロールであり、それは１００％〜１２０％であった。ＴＥＥＲは抵抗×表面積の積として定義されている。該抵抗はタイトジャンクション（細胞間経路）を介する抵抗率を反映し、細胞膜（経細胞経路）を介する抵抗率を反映しない。
【０１３８】
前記のインビトロ輸送試験で得られる値は、試験された化合物について上皮細胞層のアピカル側からバソラテラル側までの輸送が生じることを示している。この結果は、試験された化合物が生物学的利用率を有することを示している。
試験された化合物についての結果をもう一度以下の表にまとめる： 
【０１３９】
【表１０】
2005518388.tif 000031
【０１４０】
【表１１】
2005518388.tif 000032
【０１４１】
【表１２】
2005518388.tif 000033
【０１４２】
【表１３】
2005518388.tif 000034
【０１４３】
例１７：
インビトロ試験
１０種の本発明によるｕＰＡインヒビター代表物を齧歯類動物において経口の生物学的利用率及びプラスミン動力学に関して調査した。このために９週齢の１７．６〜１８．５ｇの体重を有する雌のＢａｌｂ／ｃマウスで試験を実施した。対イオンとしてのＨＣｌを有するグアニジノフェニルアラニン誘導体である以下の試験物質を使用した： 
【０１４４】
【表１４】
2005518388.tif 000035
【０１４５】
これらの化合物は０．１〜１０００ｍｇ／ｋｇ、特に０．５〜５００ｍｇ、より有利には３〜３００ｍｇ／ｋｇの範囲で使用した。投与をこの場合には胃カテーテルを介して行った。試料採取を２０分、４０分及び６０分で実施した。
【０１４６】
結果を以下の表にまとめる。
【０１４７】
【表１５】
2005518388.tif 000036
【０１４８】
【表１６】
2005518388.tif 000037
【０１４９】
【表１７】
2005518388.tif 000038
【図面の簡単な説明】
【０１５０】
【図１】図１はＢがＳＯ２基である本発明によるインヒビターとウロキナーゼとの間の相互作用を示している
【図２】図２は特に有利な化合物のＮ−［（４−グアニジノ−ベンジルカルバモイル）メチル］−３−ヒドロキシ−２−フェニルメタンスルホニルアミノプロピオンアミド（ＷＸ−５０８）の製造のための合成式を示している
【図３ａ】図３ａは、化合物ＷＸ−５５０の製造のための合成式を示している
【図３ｂ】図３ｂは、化合物ＷＸ−５４４の製造のための合成式を示している
【図３ｃ】図３ｃは、化合物ＷＸ−５６８の製造のための合成式を示している
【図４】図４は化合物ＷＸ−６００の製造のための合成式を示している
【図１】
2005518388.tif 000047
【図２−１】
2005518388.tif 000048
【図２−２】
2005518388.tif 000049
【図３ａ】
2005518388.tif 000050
【図３ｂ】
2005518388.tif 000051
【図３ｃ】
2005518388.tif 000052
【図４】
2005518388.tif 000053
【手続補正書】
【提出日】平成15年11月13日(2003.11.13)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項１】
一般式Ｉ
【化１】
2005518388.tif 000054
［式中、
Ａｒは芳香族又は複素芳香族の環系を意味し、
Ｅは
【化２】
2005518388.tif 000055
を意味するか、又はＡｒ及びＥは一緒になって基
【化３】
2005518388.tif 000056
を形成し、その際、ＺはＯ、ＮＨ又はＣ＝Ｏであり、かつＸ４はＣ＝Ｏ、ＨＮ又はＣＨ２であってよく、ＷはＮ、ＣＲ３又はＣＲ６であり、かつＸ５はＣＨ、ＣＲ３、ＣＲ６又はＮであってよく、
Ｂは−ＳＯ２−、−ＣＲ３２−、−ＮＲ３−又は−ＮＨ−を意味し、
Ｘ１はＮＲ１３Ｒ４、ＯＲ３、ＳＲ３、ＣＯＯＲ３、ＣＯＮＲ３Ｒ４又はＣＯＲ５を意味し、
Ｒ１はＨ、置換されてよいアルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基、ヘテロアリール基又はＣＯＯＲ３、ＣＯＮＲ３Ｒ４又はＣＯＲ５を意味し、
Ｒ２はハロゲン、Ｃ（Ｒ６）３、Ｃ２（Ｒ６）５、ＯＣ（Ｒ６）３又はＯＣ２（Ｒ６）５を意味し、
Ｒ３はＨ又は１つの任意の有機基を意味し、
Ｒ１３は一般式（ＩＩａ）又は（ＩＩｂ）
【化４】
2005518388.tif 000057
の基を意味し、
Ｘ２はＮＨ、ＮＲ４、Ｏ又はＳを意味し、
Ｘ３はＮＨ、ＮＲ４、Ｏ、Ｓ、ＣＯ、ＣＯＯ、ＣＯＮＨ又はＣＯＮＲ４を意味し、
ＹはＣ（Ｒ８）２、ＮＨ又はＮＲ３を意味し、
Ｒ４はＨ又は分枝鎖状又は非分枝鎖状の置換されてよいアルキル基、アルケニル基又はアルキニル基を意味し、
Ｒ５はＨ、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、カルボキシ−アルキル基、カルボキシ−アルケニル基、カルボキシ−アルキニル基、カルボキシ−アリール基、カルボキシ−ヘテロアリール基、−（ＣＯ）ＮＲ３Ｒ４又は−ＣＯＯ−Ｒ３を意味し、その際、アルキル基、アリール基及びヘテロアリール基は置換されていてよい、
Ｒ６はそれぞれ無関係にＨ又はハロゲン、特にＦであり、
Ｒ７はＨ又は置換されてよいアルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基又はヘテロアリール基又は−ＣＯＲ９を意味し、
Ｒ８はそれぞれ無関係にＨ、又は分枝鎖状又は非分枝鎖状の置換されてよいアルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基、ヘテロアリール基、アラルキル基、アルキルアリール基、ヘテロアラルキル基及び／又は置換もしくは非置換の二環式又は多環式の基を意味し、
Ｒ９はＨ又は分枝鎖状又は非分枝鎖状の場合により置換されたアルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基及び／又はヘテロアリール基を意味し、
Ｒ１０は基（Ｃ（Ｒ１）２）ｏ−Ｘ３Ｒ５を意味し、
Ｒ１１はＨ、カルボニル基−ＣＯ−Ｒ１２又は、特に有利にはスルホニル基−ＳＯ２Ｒ１２を意味し、
Ｒ１２はＨ、分枝鎖状又は非分枝鎖状の置換又は非置換のアルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基又はヘテロアリール基又は置換又は非置換の環式のアルキル基又は置換又は非置換のアラルキル基、アルキルアリール基又はヘテロアラルキル基又は置換又は非置換の二環式又は多環式の基を意味し、
Ｒ１５はＣ＝Ｘ２、ＮＲ３又はＣＲ３２を表し、
ｎは０〜２の整数であり、
ｍは０〜５の整数であり、
ｏは１〜５の整数であり、
ｐは１〜５の整数である］の化合物又はこれらの化合物の塩の、ウロキナーゼ−プラスミノゲンアクチベーターの阻害のための薬剤の製造のための使用。
【手続補正２】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項２】
一般式ＩＩＩ
【化５】
2005518388.tif 000058
［式中、
Ａｒは芳香族又は複素芳香族の環系を意味し、
Ｘ１はＮＲ１３Ｒ４、ＯＲ３、ＳＲ３、ＣＯＯＲ３、ＣＯＮＲ３Ｒ４又はＣＯＲ５を意味し、
Ｒ１はＨ、置換されてよいアルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基、ヘテロアリール基又はＣＯＯＲ３、ＣＯＮＲ３Ｒ４又はＣＯＲ５を意味し、
Ｒ２はハロゲン、Ｃ（Ｒ６）３、Ｃ２（Ｒ６）５、ＯＣ（Ｒ６）３又はＯＣ２（Ｒ６）５を意味し、
Ｒ３はＨ又は任意の有機基を意味し、
Ｒ１３は一般式（ＩＶａ）又は（ＩＶｂ）：
【化６】
2005518388.tif 000059
の基を意味し、
Ｘ２はＮＨ、ＮＲ４、Ｏ又はＳを意味し、
Ｘ３はＮＨ、ＮＲ４、Ｏ、Ｓ、ＣＯ、ＣＯＯ、ＣＯＮＨ又はＣＯＮＲ４を意味し、
ＹはＣ（Ｒ８）２、ＮＨ又はＮＲ３を意味し、
Ｒ４はＨ又は分枝鎖状又は非分枝鎖状の置換されてよいアルキル基、アルケニル基又はアルキニル基を意味し、
Ｒ５はＨ、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、カルボキシアルキル基、カルボキシアルケニル基、カルボキシル−アルキニル基、カルボキシ−アリール基、カルボキシ−ヘテロアリール基、−（ＣＯ）ＮＲ３Ｒ４又は−ＣＯＯ−Ｒ３を意味し、その際、アルキル基、アリール基及びヘテロアリール基は置換されていてよい、
Ｒ６はそれぞれ無関係にＨ又はハロゲン、特にＦであり、
Ｒ７はＨ又は置換されてよいアルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基又はヘテロアリール基又は−ＣＯＲ９を意味し、
Ｒ８はそれぞれ無関係にＨ、ハロゲン又は分枝鎖状又は非分枝鎖状の置換されてよいアルキル基、アルキニル基、アリール基、ヘテロアリール基及び／又は（ＣＨ２）ｍ−ＯＨを意味し、
Ｒ９はＨ又は分枝鎖状又は非分枝鎖状の場合により置換されたアルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基及び／又はヘテロアリール基を意味し、
Ｒ１０は基（Ｃ（Ｒ１）２）ｏ−Ｘ３Ｒ５を意味し、
Ｒ１１はＨ、カルボニル基−ＣＯ−Ｒ１２又は、特に有利にはスルホニル基−ＳＯ２Ｒ１２を意味し、
Ｒ１２は分枝鎖状又は非分枝鎖状の置換又は非置換のアルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基又はヘテロアリール基又は置換又は非置換の環式のアルキル基又は置換又は非置換のアラルキル基、アルキルアリール基又はヘテロアラルキル基又は置換又は非置換の二環式又は多環式の基を意味し、
ｎは０〜２の整数であり、
ｍは０〜５の整数であり、
ｏは１〜５の整数である］の化合物又はこれらの化合物の塩の、ウロキナーゼ−プラスミノゲンアクチベーターの阻害のための薬剤の製造のための請求項１記載の使用。
【国際調査報告】
2005518388.tif 000060
2005518388.tif 000061
2005518388.tif 000062
2005518388.tif 000063
2005518388.tif 000064
2005518388.tif 000065
2005518388.tif 000066
2005518388.tif 000067
2005518388.tif 000068
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