(57)【要約】本発明は、新規な置換酢酸誘導体、特に心臓血管系疾患、とりわけ高脂血症・脂質代謝異常および冠状動脈性心疾患の予防および/または治療のためのＰＰＡＲ−deltaを強く活性化する化合物、その製造方法およびその薬剤の使用に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（I)
【化１】
2005506379.tif 000073
(I),
［式中Ａは、単結合または、−ＣＨ２−もしくは−ＣＨ２ＣＨ２−基を示す；
ＸはＯ，ＳまたはＣＨ２を示す；
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、同一または異なり、お互いに独立して、水素、（Ｃ１−Ｃ６）−アルキル、（Ｃ３−Ｃ７）−シクロアルキル、ヒドロキシル、（Ｃ１−Ｃ６）−アルコキシ、アミノ、モノ−またはジ−（Ｃ１−Ｃ６）−アルキルアミノ、ハロゲン、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、ニトロまたはシアノ基を示す；
Ｒ４は、水素または（Ｃ１−Ｃ４）−アルキルを示す；
Ｒ５およびＲ６は水素またはそれらが結合している炭素原子と一緒になって、カルボニル基を形成する；
Ｒ７は、水素または（Ｃ１−Ｃ４）−アルキルを示す；
Ｒ８は、直鎖の（Ｃ５−Ｃ１０）アルキル、または式−（ＣＨ２）ｎ−Ｅ（式中Ｅは、（Ｃ１−Ｃ６）−アルキル、トリフルオロメチル、ヒドロキシル、（Ｃ１−Ｃ６）−アルコキシ、カルボキシル、および（Ｃ１−Ｃ６）−アルコキシカルボニルからなる基から選択された同一または相異なる基によって４回まで置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ１２）−シクロアルキルを示すか；または、（Ｃ１−Ｃ６）−アルキルからなる基から選択された同一または相異なる基によって２回まで置換されていてもよい、ＯおよびＳからなる二つまでのヘテロ原子を有する４ないし８員環の複素環を示し、ｎは、０，１、または２を示す）を示す；
Ｒ９およびＲ１０は同一または異なり、お互いに独立して、水素、（Ｃ１−Ｃ６）−アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）−アルコキシ、トリフルオロメチルまたはハロゲンを示す；
Ｒ１１およびＲ１２は、同一または異なり、お互いに独立して、水素、（Ｃ１−Ｃ４）−アルキルを示す；
そしてＲ１３は、水素、または、対応するカルボン酸に分解しうる加水分解可能な基を示す］で示される化合物およびその製薬学的に許容できる塩、水和物および溶媒和物。
【請求項２】
Ａは、−ＣＨ２−もしくは−ＣＨ２ＣＨ２−基を示し；
ＸはＯ，またはＳを示し；
Ｒ１、Ｒ２は、同一または異なり、お互いに独立して、水素、（Ｃ１−Ｃ４）−アルキル、ジ−（Ｃ１−Ｃ４）−アルキルアミノ、塩素、フッ素、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、ニトロまたはシアノ基を示し；
Ｒ３は水素を示す；
Ｒ４は、水素またはメチルを示し；
Ｒ５およびＲ６は水素またはそれらが結合している炭素原子と一緒になって、カルボニル基を形成し；
Ｒ７は、水素を示し；
Ｒ８は、（Ｃ１−Ｃ４）−アルキル、トリフルオロメチル、（Ｃ１−Ｃ４）−アルコキシ、カルボキシルおよび（Ｃ１−Ｃ４）−アルコキシカルボニルからなる群から選択される同一もしくは異なる置換基によって４回まで置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ８）−シクロアルキルを示すか；または酸素原子（Ｏ）および硫黄原子（Ｓ）からなる群から選択された二つまでのヘテロ原子を有し、かつ（Ｃ１−Ｃ４）−アルキルからなる群より選択される同一または相異なる置換基により２回まで置換されていてもよい５または６員環の複素環を示し；
Ｒ９は、水素、（Ｃ１−Ｃ３）−アルキル、（Ｃ１−Ｃ３）−アルコキシ、トリフルオロメチル、フッ素または塩素を示し；
Ｒ１０は、水素を示し；
Ｒ１１およびＲ１２は、同一または異なり、お互いに独立して、水素またはメチルを示し；
そしてＲ１３は、水素、または、対応するカルボン酸に分解しうる加水分解可能な基を示す請求項１記載の一般式（I)の化合物およびその製薬学的に許容できる塩、水和物および溶媒和物。
【請求項３】
Ａは、−ＣＨ２−基を示し；
ＸはＯ，またはＳを示し；
Ｒ１は、水素原子、メチル、トリフルオロメチル、塩素、フッ素、ニトロまたはシアノを示し；
Ｒ２は、メチル、トリフルオロメチル、塩素、フッ素、ニトロまたはシアノを示し、
Ｒ３は、水素を示し；
Ｒ４は、水素を示し；
Ｒ５およびＲ６はそれらが結合している炭素原子と一緒になって、カルボニル基を形成し；
Ｒ７は、水素を示す；
Ｒ８は、シクロペンチルまたはシクロヘキシルを示し、それぞれは、メトキシ、エトキシで置換されていてもよく、または、メチルによって４回まで置換されていてもよい、または３−テトラヒドロフラニル、３−テトラヒドロピラニルまたは４−テトラヒドロピラニルを示し、各々は、メチルでモノ置換もしくはジ置換されていてもよい；
Ｒ９は、メチルを示し、
Ｒ１０は、水素を示し、
Ｒ１１およびＲ１２は、両方とも水素を示すかまたは両方ともメチルを示し；
そしてＲ１３は、対応するカルボン酸に分解しうる加水分解可能な基を示すか、または特に水素を示す請求項１記載の一般式（I)の化合物およびその製薬学的に許容できる塩、水和物および溶媒和物。
【請求項４】
Ｒ４が水素またはメチルを示し、Ｒ７が水素を示す請求項１〜３のいずれかの請求項記載の一般式（I)の化合物。
【請求項５】
Ｒ５およびＲ６はそれらが結合している炭素原子と一緒になって、カルボニル基を形成している請求項１〜４のいずれかの請求項記載の一般式（I)の化合物。
【請求項６】
式（IＡ）
【化２】
2005506379.tif 000074
(IA),
［式中、Ｒ１およびＲ２は、同一または異なり、お互いに独立してメチル、トリフルオロメチル、フッ素、塩素、ニトロまたはシアノを示し、Ａ、Ｘ、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１およびＲ１２はそれぞれ請求項１〜５で定義されている意味を有する］で示される化合物。
【請求項７】
疾患の予防および治療のための請求項１〜６に定義されている式（I)または式（IＡ）の化合物。
【請求項８】
請求項１および６にそれぞれ定義されている式（I）または式（IＡ）の化合物の少なくても一つの化合物と、不活性の非毒性の製薬学的に許容される担体、補助剤、溶剤、賦形剤、乳化剤、および／または分散剤を含む薬剤。
【請求項９】
疾患の予防および治療のための請求項１〜８にそれぞれ定義されている式（I）または式（IＡ）の化合物の使用。
【請求項１０】
薬剤を製造するための請求項１〜６にそれぞれ定義されている式（I）または式（IＡ）の化合物の使用。
【請求項１１】
冠状動脈性心疾患、高脂血症(dyslipidaemidas)の予防および治療、心筋梗塞の予防および冠状動脈血管形成術またはステントの後の狭窄の治療の薬剤を製造するための請求項１〜６にそれぞれ定義されている式（I）または式（IＡ）の化合物の使用。
【請求項１２】
請求項１および６にそれぞれ定義されている式（I）または式（IＡ）の化合物を生物体(living being)に作用させることを特徴とする疾患の予防および治療方法。
【請求項１３】
請求項１および６にそれぞれ定義されている式（I）または式（IＡ）の化合物の少なくても一つの化合物を、補助剤および/または担体を用いて投与形態に変換することを特徴とする薬剤の製造方法。
【請求項１４】
［Ａ］一般式（II)
【化３】
2005506379.tif 000075
(II),
［式中、Ａ、Ｘ、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１およびＲ１２は請求項１で定義されているものであり、Ｔは、ベンジル、(Ｃ１−Ｃ６）アルキル、または固相合成に適する高分子担体を意味する]で表される化合物を、（II)のカルボン酸基の活性化とともに、一般式（III)の化合物と最初に反応させ、
【化４】
2005506379.tif 000076
(III),
[式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は請求項１に定義されている］一般式（Iａ）
【化５】
2005506379.tif 000077
(Ia),
［式中、Ａ，Ｘ，Ｔ，Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３，Ｒ４，Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１およびＲ１２は、上記に定義された意味である]で表される化合物を得るか；または、
［Ｂ］一般式（IV)の化合物
【化６】
2005506379.tif 000078
(IV),
［式中、Ａ、Ｘ、Ｔ、Ｒ８，Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１およびＲ１２は請求項１の定義を意味する］を塩基の存在下において、一般式（V)
【化７】
2005506379.tif 000079
(V),
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ７は請求項１に定義されて意味を有し、Ｑは、たとえばハロゲン、メシレートまたはトシレート、好ましくは、臭素、ヨウ素のような適切な脱離基を意味する］の化合物と反応させて、同様に一般式（Iａ）で表される化合物を得、次いで、一般式（Iａ）の化合物を、適切な場合は、公知の方法でアミド体を還元し、一般式（Iｂ）
【化８】
2005506379.tif 000080
(Ib),
[式中、Ａ，Ｘ，Ｔ，Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５，Ｒ６，Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１およびＲ１２は、上記に定義された意味である]の化合物に変換し、次に、酸または塩基で一般式（Iｃ）で表される対応するカルボン酸に転換し、
【化９】
2005506379.tif 000081
(Ic),
［式中、Ａ，Ｘ，Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５，Ｒ６，Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１およびＲ１２は、上記に定義された意味である]そして、適切な場合は、これらの化合物を、さらに公知のエステル化方法により、一般式（VI)
R13-Z     (VI),
［式中Ｒ１３は上記に定義された意味であり、Ｚは、たとえば、ハロゲン、メシレート、またはトシレートのような適切な脱離基であるかまたは水酸基を意味する］の化合物と反応させ、化合物を更に変換させることを特徴とする請求項１記載の式（I)の化合物の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、新規な置換酢酸誘導体、特に心臓血管系疾患、とりわけ高脂血症・脂質代謝異常（dyslipidaemias）および冠状動脈性心疾患の予防および/または治療のためのＰＰＡＲ−deltaを強く活性化する化合物、その製造方法およびその薬剤の使用に関する。
【０００２】
多くの成功した治療にもかかわらず、冠状動脈性心疾患（ＣＨＤ）は、深刻な公衆衛生問題である。ＨＭＧ−ＣｏＡ  リダクターゼを阻害するスタチン類で治療することにより、ＬＤＬコレステロールを際立って低下させ、その結果危険な患者の死亡率をかなり低下させることになるが、ＨＤＬ／ＬＤＬコレステロールの比率が好ましくない患者および/または高グリセリド血症の患者には、効果的な適切な治療戦術がいままでのところまだ利用できる状況にない。
【０００３】
現在、フィブリン酸類がこれら危険なグループの患者の唯一の選択される治療である。これらは、ペルオキシーム増殖剤応答性受容体（ＰＰＡＲ）−αの弱いアゴニストである(Nature 1990, 347, 645-50)。これまで承認されてきたフィブリン酸類が不利な点は、レセプターとの相互作用がやや弱く、一日の容量が高くなり、著しい副作用を引き起こすことである。
【０００４】
ペルオキシーム増殖剤応答性受容体（ＰＰＡＲ）−δ(Mol.Endocrinol.1992,6,1634-41)に関して、動物モデルにおいての最初の薬理学的発見は、効力が強いＰＰＡＲ−δアゴニストによって、同様にＨＤＬ／ＬＤＬコレステロール比率および高グリセリド血症を改善しうることが判明したことである。
【０００５】
ＷＯ  ００／２３４０７は、肥満、動脈硬化症および/または糖尿病の治療のためのＰＰＡＲ調節因子(modulator)を述べている。
【０００６】
本発明の目的は、ＰＰＡＲ−delta(δ）調整因子として適切な新規な化合物を提供するにある。
【０００７】
一般式（Ｉ）化合物およびその製薬学的に許容できる塩、水和物および溶媒和物が薬理学的に活性があり、医薬として使用することができ、さらに医薬製剤を製造するのに使用することができることがいまや見出された。
【化１】
2005506379.tif 000002
(I),
［式中Ａは、単結合（a bond)、−ＣＨ２−もしくは−ＣＨ２ＣＨ２−基を示し；
ＸはＯ，ＳまたはＣＨ２を示す；
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、同一または異なり、お互いに独立して、水素、（Ｃ１−Ｃ６）−アルキル、（Ｃ３−Ｃ７）−シクロアルキル、ヒドロキシル、（Ｃ１−Ｃ６）−アルコキシ、アミノ、モノ−またはジ−（Ｃ１−Ｃ６）−アルキルアミノ、ハロゲン、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、ニトロまたはシアノ基を示す；
Ｒ４は、水素または（Ｃ１−Ｃ４）−アルキルを示す；
Ｒ５およびＲ６は水素またはそれらが結合している炭素原子と一緒になって、カルボニル基を形成する；
Ｒ７は、水素または（Ｃ１−Ｃ４）−アルキルを示す；
Ｒ８は、直鎖の（Ｃ５−Ｃ１０）アルキル、または式−（ＣＨ２）ｎ−Ｅ（式中Ｅは、（Ｃ１−Ｃ６）−アルキル、トリフルオロメチル、ヒドロキシル、（Ｃ１−Ｃ６）−アルコキシ、カルボキシル、および（Ｃ１−Ｃ６）−アルコキシカルボニルからなる基から選択された同一または相異なる基によって４回まで置換されてもよい（Ｃ３−Ｃ１２）−シクロアルキルを示すか；または、（Ｃ１−Ｃ６）−アルキルからなる基から選択された同一または相異なる基によって２回まで置換されていてもよい、ＯおよびＳからなる二つまでのヘテロ原子を有する４ないし８員環の複素環を示し、ｎは、０，１、または２を示す）を示す；
Ｒ９およびＲ１０は同一または異なり、お互いに独立して、水素原子、（Ｃ１−Ｃ６）−アルキル、（Ｃ１−Ｃ６）−アルコキシ、トリフルオロメチルまたはハロゲンを示す；
Ｒ１１およびＲ１２は、同一または異なり、お互いに独立して、水素原子、（Ｃ１−Ｃ４）−アルキルを示す；
Ｒ１３は、水素、または、対応するカルボン酸に分解しうる加水分解可能(hydrolysable)な基を示す]
【０００８】
本発明におけるＲ１３の定義において、加水分解可能な基とは、特に体内で−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１３−基が、対応するカルボン酸（Ｒ１３＝水素）に変換される基を意味する。
【０００９】
そのような基としては、実施例および好ましい例から挙げると、ベンジル、(Ｃ１−Ｃ６）−アルキルまたは(Ｃ３−Ｃ８）−シクロアルキルであり、それらは、それぞれの場合において任意に、ハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、（Ｃ１−Ｃ６）−アルコキシ、カルボキシル、（Ｃ１−Ｃ６）−アルコキシカルボニル、（Ｃ１−Ｃ６）−アルコキシカルボニルアミノ、または（Ｃ１−Ｃ６）−アルカノイルオキシからなる基から同一または相異なるモノあるいは多置換されるが、特に(Ｃ１−Ｃ４）−アルキルの場合は、ハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、（Ｃ１−Ｃ４）−アルコキシ、カルボキシル、（Ｃ１−Ｃ４）−アルコキシカルボニル、（Ｃ１−Ｃ４）−アルコキシカルボニルアミノ、または（Ｃ１−Ｃ４）−アルカノイルオキシからなる基から任意に同一または相異なるモノあるいは多置換される。
【００１０】
本発明における(Ｃ１−Ｃ６）アルキル、(Ｃ１−Ｃ４）−アルキルおよび、(Ｃ１−Ｃ３）−アルキルは、炭素原子数がそれぞれ１から６、１から４、１から３である直鎖アルキルまたは、分岐したアルキル基を意味する。好ましい例としては、炭素原子１ないし４を有する直鎖または分枝状のアルキル基である。実施例および好ましい例から次のもの、すなわちメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｔ−ブチル基をあげることができる。
【００１１】
本発明において、（Ｃ５−Ｃ１０）−アルキルとは、炭素原子５から１０を有する直鎖アルキル基を示す。好ましい基は、炭素原子５から７を有する直鎖アルキル基である。次の基、すなわちｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシルおよびｎ−ヘプチル基を、実施例および好ましい例からあげることができる。
【００１２】
本発明において、(Ｃ３−Ｃ１２）シクロアルキルおよび(Ｃ３−Ｃ７）−シクロアルキルは、炭素原子数が３から１２を有している単環式シクロアルキル基、二環式シクロアルキル基または三環式シクロアルキル基 (mono-,bi-or tricyclic cycloalkyl group)を、および炭素原子数が３から７を有している単環式シクロアルキル基、二環式シクロアルキル基をそれぞれ意味する。次の基、すなわちシクロブチル、シクロペンチル、チクロヘキシル基を、実施例および好ましい例からあげることができる。
【００１３】
本発明における(Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、(Ｃ１−Ｃ４）−アルコキシおよび、(Ｃ１−Ｃ３）−アルコキシは、炭素原子数がそれぞれ１から６、１から４、１から３である直鎖アルコキシ基または分枝アルコキシ基をそれぞれ意味する。好ましい基は、炭素原子１から４である直鎖または分枝状のアルコキシ基である。次の基、すなわちメトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ、ｔ−ブトキシ、ｎ−ペントキシおよびｎ−ヘキソキシ(n-hexoxy)基を、実施例および好ましい例からあげることができる。
【００１４】
本発明における(Ｃ１−Ｃ６）アルコキシカルボニルは、カルボニル基を介して結合している１から６の炭素原子を有する直鎖または分枝状のアルコキシ基を意味する。好ましい例は、炭素原子１から４まで直鎖または分枝状のアルコキシカルボニル基である。次の基、すなわちメトキシカルボニル、エトキシカルボニル、ｎ−プロポキシカルボニル、イソプロポキシカルボイル、およびｔ−ブトキシカルボニル基を、実施例および好ましい例からあげることができる。
【００１５】
本発明における(Ｃ１−Ｃ６）アルコキシカルボニルアミノは、炭素数１から６のアルコキシを有し、かつカルボニル基を介して結合している直鎖または分枝状のアルコキシカルボニル置換基を有しているアミノ基を意味する。好ましいものとしては、１から４の炭素原子を有するアルコキシカルボニルアミノ基である。次の基、すなわちメトキシカルボニルアミノ、エトキシカルボニルアミノ、ｎ−プロポキシカルボニルアミノおよびｔ−ブトキシカルボニルアミノ基を、実施例および好ましい例からあげることができる。
【００１６】
本発明における(Ｃ１−Ｃ６）アルカノイルオキシは、炭素数１から６のアルキル基を有し、それは、ひとつの位置で酸素原子が二重結合し（二重結合によって、酸素原子と結合し）、かつひとつの位置でさらに酸素原子を介して結合している。次の基、すなわちアセトキシ、プロピオニルオキシ、ｎ−ブチリルオキシ、イソブチリルオキシ、ピバロイルオキシ、ｎ−ヘキサノイルオキシ基を実施例および好ましい基からあげることができる。
【００１７】
本発明におけるモノ−(Ｃ１−Ｃ６）アルキルアミノは、炭素数１から６の直鎖または分枝状アルキル置換基を有するアミノ基を意味する。好ましい例としては、炭素数１から４の直鎖または分枝状のモノアルキルアミノ基である。次の基、すなわちメチルアミノ、エチルアミノ、ｎ−プロピルアミノ、イソプロピルアミノ、ｔ−ブチルアミノ、ｎ−ペンチルアミノおよびｎ−ヘキシルアミノを実施例および好ましい例から挙げることができる。
【００１８】
本発明におけるジ−(Ｃ１−Ｃ６）アルキルアミノおよびジ−(Ｃ１−Ｃ４）アルキルアミノは、二つの同一または異なる炭素原子１から６、または１から４を有する直鎖または分枝状のアルキル置換基をそれぞれ有するアミノ基を意味する。次の基、すなわちＮ，Ｎ−ジメチルアミノ、Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノ、Ｎ−エチル−Ｎ−メチルアミノ、Ｎ−メチル−Ｎ−ｎ−プロピルアミノ、Ｎ−イソプロピル−Ｎ−ｎ−プロピルアミノ、Ｎ−ｔ−ブチル−Ｎ−メチルアミノ、Ｎ−エチル−Ｎ−ｎ−ペンチルアミノ、Ｎ−ヘキシル−Ｎ−メチルアミノを実施例および好ましい例から挙げることができる。
【００１９】
本発明において、ハロゲンとは、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素である。好ましいものは、塩素、フッ素である。
【００２０】
本発明において、酸素原子、硫黄原子からなる群から選択された二つまでからなるヘテロ原子を有する４ないし８員環とは、環の炭素原子を介して結合している飽和単環式または飽和二環式化合物を意味する。好ましい例としては、ヘテロ原子として、ひとつの酸素原子を有する５員環または６員環の飽和複素環があげられる。次の基、すなわち、テトラヒドロフラン−３−イル、テトラヒドロピラン−３−イルおよびテトラヒドロピラン−４−イルをあげることができる。
【００２１】
本発明よる化合物は、置換基のパターンによっては、像と鏡像のような場合（エナンチオマー）と、像と鏡像のようでない場合（ジアステレオマー）のように、立体異性体が存在しうる。本発明は、エナンチオマーまたはジアステレオマーおよびその混合物に関する。ジアステロマーのようにラセミ体である場合は、公知の方法で、立体異性的に、同一の化合物に分離することが可能である。
【００２２】
さらに、ある化合物は、互変異性体の形で存在しうる。このことは、当業者にとって公知のことであるが、同様にこのような化合物が本発明の範囲に含まれる。
【００２３】
本発明による化合物は、塩の形でも存在しうる。本発明においては生理学的に許容される塩が好ましい。
【００２４】
製薬学的に許容できる塩とは、無機または有機酸と本発明による化合物との塩をあげることができる。好ましい無機塩をあげれば、たとえば、塩酸、臭化水素酸、燐酸、または硫酸との塩を、好ましい有機カルボン酸またはスルホン酸をあげれば、たとえば、酢酸、プロピオン酸、マレイン酸、フマール酸、マレイン酸、クエン酸、酒石酸、乳酸、安息香酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、トルエンスルホン酸、またはナフタレンジスルホン酸との塩である。
【００２５】
製薬学的に許容される塩はまた、たとえば金属またはアンモニウム塩のように、塩基と本発明化合物との塩がありうる。好ましい例としては、たとえば、アルカリ金属塩（たとえば、ナトリウム塩またはカリウム塩）、アルカリ土類金属塩（たとえば、マグネシウム塩またはカルシウム塩）、または、たとえばエチルアミン、ジ−またはトリエチルアミン、エチルジイソプロピルアミン、モノエタノールアミン、ジ−またはトリエタノールアミン、ジシクロヘキシルアミン、ジメチルアミノエタノール、ジベンジルアミン、Ｎ−メチルモルホリン、ジヒドロアビエチルアミン(dihydroabietylamine)、１−エフェナミン(1-ephenamine)、 メチルピペリジン、アルギニン、リジン、エチレンジアミンまたは２−フェニルエチルアミンのようなアンモニアまたは有機アミンから誘導されるアンモニウム塩である。
【００２６】
本発明による化合物は、その溶媒和物の形でも存在し、特にそれらの水和物の形で存在しうる。
【００２７】
好ましい化合物は、一般式（Ｉ）の化合物に含まれ、次の定義で示される。
［Ａは、−ＣＨ２−もしくは−ＣＨ２ＣＨ２−基を示す、
ＸはＯ，またはＳを示す、
Ｒ１、Ｒ２は、同一または異なり、お互いに独立して、水素、（Ｃ１−Ｃ４）−アルキル、ジ−（Ｃ１−Ｃ４）−アルキルアミノ、塩素、フッ素、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、ニトロまたはシアノ基を示す、
Ｒ３は水素を示す、
Ｒ４は、水素またはメチルを示す、
Ｒ５およびＲ６は水素またはそれらが結合している炭素原子と一緒になって、カルボニル基を形成する、
Ｒ７は、水素を示す、
Ｒ８は、（Ｃ１−Ｃ４）−アルキル、トリフルオロメチル、（Ｃ１−Ｃ４）−アルコキシ、カルボキシルおよび（Ｃ１−Ｃ４）−アルコキシカルボニルからなる群から選択される同一もしくは異なる置換基によって４回まで置換されることができる（Ｃ３−Ｃ８）−シクロアルキルを示すか；または酸素原子（Ｏ）および硫黄原子（Ｓ）からなる群から選択された二つまでのヘテロ原子を有し、かつ（Ｃ１−Ｃ４）−アルキルからなる群より選択される２回まで置換されることができる５または６員環の複素環を示す、
Ｒ９は、水素、（Ｃ１−Ｃ３）−アルキル、（Ｃ１−Ｃ３）−アルコキシ、トリフルオロメチル、フッ素または塩素を示す、
Ｒ１０は、水素を示す、
Ｒ１１およびＲ１２は、同一または異なり、お互いに独立して、水素原子またはメチルを示す、
Ｒ１３は、水素、または、対応するカルボン酸に分解しうる加水分解可能な基を示す］で示される化合物およびその製薬学的に許容できる塩、水和物および溶媒和物。
【００２８】
特に好ましい化合物は一般式（Ｉ）で次のように定義される。
[Ａは、−ＣＨ２−基を示す、
ＸはＯ，またはＳを示す、
Ｒ１は、水素、メチル、トリフルオロメチル、塩素、フッ素、ニトロまたはシアノを示す、
Ｒ２は、メチル、トリフルオロメチル、塩素、フッ素、ニトロまたはシアノを示す、
Ｒ３は、水素を示す、
Ｒ４は、水素示す、
Ｒ５およびＲ６はそれらが結合している炭素原子と一緒になって、カルボニル基を形成する、
Ｒ７は、水素を示す、
Ｒ８は、シクロペンチルまたはシクロヘキシルを示し、それぞれは、メトキシ、エトキシで置換されるかまたは、メチルによって４回まで置換されることができる；または３−テトラヒドロフラニル、３−テトラヒドロピラニルまたは４−テトラヒドロピラニルを示し、それぞれは、メチルでモノ置換もしくはジ置換されることができる。
Ｒ９は、メチルを示す、
Ｒ１０は、水素を示す、
Ｒ１１およびＲ１２は、両方とも水素原子を示すかまたは両方ともメチルを示す、
Ｒ１３は、水素、または、対応するカルボン酸に分解しうる加水分解可能な基を示す］で示される化合物およびその製薬学的に許容できる塩、水和物および溶媒和物。
【００２９】
上記に列挙された一般的、もしくは好ましい基の定義は、式（Ｉ）で示される最終目的物に適用されるが、相応して、同様にそれぞれの場合の製造に必要な出発物質および中間体にも適用される。
【００３０】
それぞれの組み合わせまたは好ましい基の組み合わせで示された個々の基の定義は、それぞれ与えられた基の組み合わせとは独立して、他の組み合わせの基の定義によって置き換えられることもある。
【００３１】
式（I)において、Ｒ４が水素またはメチル基であり、かつＲ７が水素原子である場合が特に重要である。
【００３２】
式（I)において、Ｒ５およびＲ６はそれらが結合している炭素原子と一緒になって、カルボニル基を形成する場合が特に好ましい。
【００３３】
式（IＡ）の化合物が特に好ましい。
【化２】
2005506379.tif 000003
(IA),
[式中Ｒ１およびＲ２は同一または異なり、お互いに独立して、メチル、トリフルオロメチル、フッ素、塩素、ニトロまたはシアノを示す。
Ａ，Ｘ，Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１およびＲ１２は、それぞれ上記に定義されている。]
【００３４】
さらに、本発明者らは、一般式（I)の化合物の製造方法を見出した。その製造方法は次の方法により特徴づけられる。
【００３５】
[製造方法Ａ]一般式（II)の化合物を、
【化３】
2005506379.tif 000004
(II),
[式中、Ａ、Ｘ、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１およびＲ１２は上記の意味であり、Ｔは、ベンジル、(Ｃ１−Ｃ６）アルキル、または固相合成に適する高分子支持体(polymeric support)を意味する]
最初（II)のカルボン酸基の活性化とともに、一般式（III)の化合物と反応させると、一般式（Iａ）の化合物になる。
【化４】
2005506379.tif 000005
(III),
[式中Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４上記に定義された意味である]
【化５】
2005506379.tif 000006
(Ia),
[式中、Ａ，Ｘ，Ｔ，Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３，Ｒ４，Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１およびＲ１２は、上記に定義された意味である]
【００３６】
「製造方法Ｂ]一般式（IV)の化合物
【化６】
2005506379.tif 000007
(IV),
[式中、Ａ，Ｘ，Ｔ，Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１およびＲ１２は、上記に定義された意味である]を、塩基の存在下で一般式（V)の化合物と反応させると、同様に一般式（Iａ）を得る。
【化７】
2005506379.tif 000008
(V),
[式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ７は、上記に定義された意味であり、Ｑはたとえば、ハロゲン、メシレート、またはトシレートのような適切な脱離基であり、好ましくは、臭素、ヨウ素を意味する。]
【００３７】
一般式（Iａ）は、適切な場合は、公知の方法によりアミド体を還元することにより、一般式（Iｂ）の化合物に変換され、次いで、酸または塩基で、一般式（Iｃ）のカルボン酸に変換される。
【化８】
2005506379.tif 000009
(Ib),
[式中、Ａ，Ｘ，Ｔ，Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５，Ｒ６，Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１およびＲ１２は、上記に定義された意味である]
【化９】
2005506379.tif 000010
(Ic),
［式中、Ａ，Ｘ，Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３，Ｒ４，Ｒ５，Ｒ６，Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１およびＲ１２は、上記に定義された意味である]
そして、これらの化合物は必要により、さらに公知のエステル化法により、一般式（VI)の化合物と反応せしめ、これらの化合物を更に変換させる。
R13-Z     (VI),
［式中Ｒ１３は上記に定義された意味であり、Ｚは、たとえば、ハロゲン、メシレート、またはトシレートのような適切な脱離基であるかまたは水酸基を意味する］
【００３８】
本発明による方法は、一般に大気圧でおこなわれる。しかしながら、高圧下または減圧下（たとえば、０．５ないし５バール）で本方法をおこなうことも可能である。
【００３９】
本方法に適切な溶媒は、反応条件によって変化しない慣習上用いられる有機溶媒である。これらは、ジエチルエーテル、ジオキサン、テトラヒドロフラン、グリコールジメチルエーテルのようなエーテル類、ベンゼン、トルエン、キシレン、ヘキサン、シクロヘキサンのような炭化水素、鉱油留分、ジクロロメタン、トリクロロメタン、四塩化炭素、ジクロロエチレン、トリクロロエチレンまたはクロロベンゼンのようなハロゲン化炭化水素、酢酸エチル、ピリジン、ジメチルスルホキシド、ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ’−ジメチルプロピレンウレア（ＤＭＰＵ），Ｎ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）、アセトニトリル、アセトンまたはニトロメタンを含む。上記の溶媒の混合物もまた使用可能である。
【００４０】
製造ステップ（ＩＩ）＋（ＩＩＩ）→（Ｉａ）における溶媒は、ジクロロメタン、ジメチルホルムアミドおよびジメチルホルムアミドとピリジンの混合物が好ましい。製造ステップ（ＩＶ）＋（Ｖ）→（Ｉａ）においては、ジメチルホルムアミドが好ましい結果をあたえる。
【００４１】
本発明による製造ステップ（ＩＩ）＋（ＩＩＩ）→（Ｉａ）は、一般的に０℃から＋１００℃、好ましくは０℃から＋４０℃の範囲の温度でおこなわれる。製造ステップ（ＩＶ）＋（Ｖ）→（Ｉａ）においては、一般的に０℃から１２０℃、好ましくは＋５０℃から＋１００℃の範囲の温度でおこなわれる。
【００４２】
ステップ（ＩＩ）＋（ＩＩＩ）→（Ｉａ）におけるアミド形成のためには、補助剤、たとえば、Ｎ，Ｎ’−ジエチル−、Ｎ，Ｎ’−ジプロピル−、Ｎ，Ｎ’−ジイソプロピル−、Ｎ，Ｎ’−ジイソプロピル−のそれぞれのカルボジイミド、Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ），Ｎ−（３−ジメチルアミノイソプロピル）−Ｎ’−エチルカルボンジイミド  塩酸塩（ＥＤＣ）のようなカルボジイミド、またはカルボニルジイミダゾールのようなカルボニル化合物、２−エチル−５−フェニル−１，２−オキサゾリウム  ３−サルフェート（硫酸塩）、２−tert−ブチル−５−メチル−イソキサゾリウム  パークロレート(perchlorate-過塩素酸塩）、２−エトキシ−１−エトキシカルボニル−１，２−ジヒドロキノリンのようなアシルアミノ化合物、プロパンホスホニック  アンハイドライド（無水物）、イソブチル  クロロホルメート、ビス−（２−オキソ−３−オキサゾリジニル）−ホスホリル  クロライド、ベンゾトリアゾリルオキシ−トリ（ジメチル−アミノ）ホスホニウム  ヘキサフルオロホスフェイト、Ｏ−（ベンゾトリアゾール１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスフェート（ＨＢＴＵ）、２−（２−オキソ−１−（２Ｈ）−ピリジル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウム  テトラフルオロボレート（ＴＰＴＵ）、またはＯ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ）のような慣習的に用いられる縮合剤が用いられ、適切な場合は、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドのような他の補助剤とともに用いられ、そして好ましくは、たとえば、炭酸ナトリウム、またはその炭酸水素塩（bicarbonate)、炭酸カリウム、またはその炭酸水素塩のようなアルカリ金属炭酸塩のような塩基、または、たとえばトリアルキルアミン、Ｎ−メチルモルホリン、Ｎ−メチルピペリジンまたはジイソプロピルエチルアミンのようなトリアルキルアミン、またはピリジンのような有機塩基が用いられる。特に好もしい例は、ＥＤＣ、Ｎ−メチルモルホリン、１−ヒドロキシベンゾトリアゾールの組み合わせ、ＥＤＣ，トリエチルアミン、１−ヒドロキシベンゾトリアゾールの組み合わせ、ＨＡＴＵ，ジイソプロピルエチルアミンの組み合わせ、ＨＡＴＵとピリジンの組み合わせである。
【００４３】
反応（ＩＶ）＋（Ｖ）→（Ｉａ）における適切な塩基は、たとえば、水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、または水酸化カリウムのようなアルカリ金属の水酸化物、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸カルシウム、または炭酸セシウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウムのようなアルカリ金属、アルカリ土類金属の炭酸塩のごとき慣習上用いられる無機塩基またはトリアルキルアミン、たとえばトリエチルアミン、Ｎ−メチルモルホリン、Ｎ−メチルピペリジンまたはジイソプロピルエチルアミンであるトリアルキルアミンのような有機塩基である。好ましくは、炭酸水素ナトリウムである。
【００４４】
製造ステップ（Ｉａ）または（Ｉｂ）→（Ｉｃ）におけるカルボン酸エステルの加水分解は、慣習的に用いられている方法でおこなわれる。すなわち、不活性な溶媒中で、エステルを塩基で処理し、最初に得られる塩を酸で処理して、カルボン酸に変換する。tert-ブチルエステルの場合は、加水分解は、酸を使用しておこなうのが好ましい。
【００４５】
カルボン酸を加水分解する際の適切な溶媒は、水もしくはエステル開烈に慣習的に用いられる有機溶媒である。これらは、好ましくはメタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、またはブタノールのようなアルコール類、または、テトラヒドロフラン、ジオキサンのようなエーテル類、ジメチルホルムアミド、ジクロロメタン、またはジメチルスルホキシドを含む。上記記載の溶媒の混合物を用いることも可能である。水/テトラヒドロフランが好ましい結果を与えるが、トリフルオロ酢酸との反応の場合は、ジクロロメタンが、塩酸との反応の場合は、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル、ジオキサン、または水が好ましい。
【００４６】
加水分解の際の適切な塩基は、慣習的に用いられている無機塩基である。これらは、好ましくは、たとえば、水酸化ナトリウム、水酸化リチウム、水酸化カリウムまたは、水酸化バリウムのようなアルカリ金属の水酸化物またはアルカリ土類金属の水酸化物、または、炭酸ナトリウム、炭酸カリウムまたは炭酸水素ナトリウムのようなアルカリ金属の炭酸塩である。特に好ましいものは、水酸化ナトリウムおよび水酸化リチウムを用いる場合である。
【００４７】
一般的には、トリフルオロ酢酸、硫酸、塩化水素、臭化水素および酢酸あるいはこれらの混合物が好ましい酸であり、適切な場合は、水を加えてもよい。tert-ブチルエステルの場合は、塩化水素またはトリフルオロ酢酸が好ましく、メチルエステルの場合は塩酸が好ましい。
【００４８】
固相合成によって製造され、カルボン酸基を介して高分子支持体(polymer support)に結合する一般式（Ｉａ）または（Ｉｂ）であらわされる化合物の場合は、レジン(resin)から劈開(cleavage)させて一般式（Ｉｃ）であらわされる化合物を得るために、レジンからの劈開は、カルボン酸エステルの加水分解の際の方法と同様に上記に述べられた方法によりおこなわれる。この際、好ましい例としては、トリフルオロ酢酸を用いる。
【００４９】
加水分解をおこなう際には、塩基または酸は、一般にはエステル１ｍｏｌを基準にして、１から１００ｍｏｌ、好ましくは１．５から４０ｍｏｌを用いる。
【００５０】
加水分解は、一般に、０℃から＋１００℃、好ましくは０℃から＋５０℃の温度範囲でおこなわれる。
【００５１】
一般式（ＩＩ）の化合物は、新規化合物であり、次の方法によって製造することができる。
すなわち、最初に［ａ］一般式（ＶＩＩ）：
【化１０】
2005506379.tif 000011
(VII),
［式中、Ｘ、Ｔ、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１およびＲ１２は上記の定義を意味する。Ｂは、単結合またはメチレン基を意味する。］
で表される化合物を、適切な還元剤の存在下に一般式（ＶＩＩＩ）：
Ｒ14-ＮＨ2     (VIII),
｛［式中Ｒ１４は、［ａ−１］または［ａ−２］を示す。
［ａ−１］は、上記に示したＲ８を意味する。
［ａ−２］は、次の式：
【化１１】
2005506379.tif 000012
［式中、Ｒ７は、上記に定義された意味を有し、Ｒ１５は、（Ｃ１−Ｃ４）−アルキルまたはトリメチルシリルを示す。］｝で示される化合物と反応させて、一般式（ＩＸ）で示される化合物を得て、
【化１２】
2005506379.tif 000013
(IX),
［式中Ｂ、Ｘ、Ｔ、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１，Ｒ１２およびＲ１４上記の定義を意味する。］
次いで、塩基の存在下でこれらの化合物を一般式（Ｘ）：
Ｒ16-Ｙ     (X),
｛［式中、プロセスバリエントが［ａ−１］である場合は、Ｒ１６は、一般式：
【化１３】
2005506379.tif 000014
[式中、Ｒ７およびＲ１５は、それぞれ上記の定義の意味を有する。］
プロセスバリエントが［ａ−２］であるときは、Ｒ１６はＲ８を意味する。Ｙはたとえば、ハロゲン、メシレートまたはトシレート、好ましくは臭素、ヨウ素のような適切な脱離基を意味する。｝
であらわされる化合物と反応せしめて、一般式（ＸＩ）であらわされる化合物を得る。
【化１４】
2005506379.tif 000015
(XI)
［式中Ｂ、Ｘ、Ｔ、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１，Ｒ１２およびＲ１５は上記の定義を意味する。］
次いで、これらの化合物の−ＣＯＯＲ１５とされているカルボン酸エステルを最終的には選択的に加水分解してカルボン酸を得る。
【００５２】
一般式（ＩＩ）の化合物は、次の［ｂ］の方法によっても製造することできる。
[ｂ]一般式（ＸＩＩ）の化合物を、
【化１５】
2005506379.tif 000016
(XII)
［式中Ａ、Ｘ、Ｔ、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１およびＲ１２は上記の定義を意味する。］
適切な還元剤の存在下で、一般式（ＸＩＩＩ）であらわされる化合物と反応せしめ、
Ｒ17-ＣＨＯ     (XIII),
［式中Ｒ１７は、直鎖の（Ｃ４−Ｃ９）アルキル、または式−（ＣＨ２）ｍ−Ｅ（式中Ｅは、上記に定義の意味を有する。ｍは、０または１を示す］
一般式（ＸＩＶ）であらわされる化合物を得る。
【化１６】
2005506379.tif 000017
(XIV),
［式中、Ａ、Ｘ、Ｔ、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２およびＲ１７は上記の定義を意味する。］
次いで、これらの化合物を、塩基の存在下で一般式（ＸＶ）：
【化１７】
2005506379.tif 000018
(XV,
［式中Ｒ７、Ｒ１５およびＹは上記の定義を意味する。］
であらわされる化合物を反応せしめて一般式（ＸＶＩ）の化合物を得る。
【化１８】
2005506379.tif 000019
(XVI),
［式中、Ａ、Ｘ、Ｔ、Ｒ７、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１５およびＲ１７は上記の定義を意味する。］
次いで、これらの化合物の−ＣＯＯＲ１５とされているカルボン酸エステルを最終的には選択的に加水分解してカルボン酸を得る。
【００５３】
全体のプロセスは、固相合成でおこなうことも可能である。この場合、一般式（ＶＩＩ）または（ＸＩＩ）の化合物は、カルボン酸エステルとして、適切な支持体レジンに結合させ、更なる反応は固相でおこなわれ、最終的には、目的化合物は、レジンから開裂・分離される。固相合成、レジンへの結合、レジンからの開烈は、慣習上おこなわれている標準的な技法である。広範囲な文献からひとつの例に挙げれば、“固相有機合成のリンカー”、Ian W. James, Tetrahedron ５５、４８５５−４９４６（１９９９）が公開されているものとして言及することができる。
【００５４】
（ＶＩＩ）＋（ＶＩＩＩ）→（ＩＸ）または（ＸＩＩ）＋（ＸＩＩＩ）→（ＸＩＶ）の反応は、還元的アミノ化に慣習的に使用されているもので、反応条件において、不活性な溶媒中でおこなわれるが、適切な場合は、酸の存在下でおこなわれる。溶媒としては、たとえば、水、ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフラン、ジクロロメタン、ジクロロエタン、またはメタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、またはブタノールのごときアルコール類を包含する。上記記載の溶媒の混合物も使用することができる。好ましいものとしては、メタノール、エタノールそれぞれの場合において、酢酸を添加することができる。
【００５５】
反応（ＶＩＩ）＋（ＶＩＩＩ）→（ＩＸ）または（ＸＩＩ）＋（ＸＩＩＩ）→（ＸＩＶ）における適切な還元剤としては、たとえばジイソブチルアルミニウム塩酸塩、ソジウムボロハイドライド、ソジウムトリアセトキシボロハイドライド、ソジウムシアノボロハイドライド、またはテトラブチルアンモニウムボロハイドライドのような錯体であるアルミミウムハイドライドまたはボロンハイドライド、たとえば、パラジウム、プラチナ、ロジウム、ラニーニッケルのような遷移金属触媒の存在下における他の水素化分解用触媒を挙げることができる。好ましい還元剤としては、ソジウムシアノボロハイドライド、ソジウムトリアセトキシボロハイドライドおよびテトラブチルアンモニウムボロハイドライドをあげることができる。
【００５６】
反応（ＶＩＩ）＋（ＶＩＩＩ）→（ＩＸ）または（ＸＩＩ）＋（ＸＩＩＩ）→（ＸＩＶ）は、一般に０℃から＋４０℃までの温度範囲でおこなわれる。
【００５７】
反応（ＩＸ）＋（Ｘ）→（ＸＩ）または（ＸＩＶ）＋（ＸＶ）→（ＸＶＩ）は、反応条件において、不活性な慣習的に使用されている溶媒中でおこなわれる。好ましいものは、ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフランおよびジオキサンである。
【００５８】
反応（ＩＸ）＋（Ｘ）→（ＸＩ）または（ＸＩＶ）＋（ＸＶ）→（ＸＶＩ）における適切な塩基は、慣習上用いられている無機および有機の塩基である。好ましいものとしては、トリエチルアミンをあげることができる。
【００５９】
反応（ＩＸ）＋（Ｘ）→（ＸＩ）または（ＸＩＶ）＋（ＸＶ）→（ＸＶＩ）は一般に０℃から＋１００℃の温度範囲でおこなわれる。
【００６０】
（ＸＩ）→（ＩＩ）または（ＸＶＩ）→（ＩＩ）の反応は、反応条件において不活性であり、エステル開裂に慣習的に使用されている溶媒中でおこなわれる。エステルの加水分解の際は、好ましくはテトラヒドロフラン、ジオキサン、メタノール、エタノールのようなアルコール類、またはそれぞれのケースによっては、水との混合溶媒もあげることができる。シリルエステルの開裂には、ジオキサン、テトラヒドロフランの使用が好ましい。
【００６１】
（ＸＩ）→（ＩＩ）または（ＸＶＩ）→（ＩＩ）の反応において、加水分解の際に好ましい塩基は、慣習上用いられる無機塩基である。好ましいものとしては、水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウムである。シリルエステルの開裂には、テトラブチルアンモニウムフロリドが好ましく用いられる。
【００６２】
（ＸＩ）→（ＩＩ）または（ＸＶＩ）→（ＩＩ）の反応は、一般に０℃から＋１００℃間の温度範囲でおこなわれる。
【００６３】
一般式（ＩＸ）または（ＸＩＶ）の化合物に相当する一般式（ＩＶ）の化合物は、上述したように製造することができる。
【００６４】
一般式（ＩＩＩ），（Ｖ），（ＶＩ），（ＶＩＩ），（ＶＩＩＩ）、（Ｘ）、（ＸＩＩ）、（ＸＩＩＩ）および（ＸＶ）の化合物は、商業的に手に入れることができ、知られているものであり、あるいは、慣習上知られている方法によって製造することが可能である［たとえば、P.J.Brown et al., J. Med.Chem.42,3785-88(1999)参照］
【００６５】
本発明により一般式（Ｉ）の化合物は、驚くべき有用な範囲の薬理活性を有し、それゆえ多方面の薬物・薬剤として使用することができる。特に、これらは、冠動脈心疾患の治療に適切であり、心筋梗塞の予防、および冠状動脈血管形成術またはステントのあとの再狭窄の治療に適切である。本発明による一般式（Ｉ）の化合物は、動脈硬化症および高コレステロール血症の治療、病的に低いＨＤＬレベルを増加せしめ、高くなったトリグリセリドおよびＬＤＬのレベルを低下させるのに適切である。加うるに、これらは、肥満、糖尿病の治療、代謝異常に基づく疾患−メタボリック症候群(metabolic syndrome)(インスリン抵抗性のため耐糖能低下、高脂血症および高血圧）の治療、肝繊維症（hepatic fibrosis)および癌の治療に使用することができる。
【００６６】
新規な活性成分化合物は、単独で投与することもできるし、または必要ならば、他の有効成分、好ましくはＣＥＴＰ（コレステロールエステル転送蛋白）阻害剤、抗糖尿病薬、抗酸化剤、細胞成長抑制剤、カルシウムアンタゴニスト、降圧剤、甲状腺ホルモンおよび/または甲状腺模倣薬（thyroid mimetics）, ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤，ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素発現（expression)阻害剤、スクワレン合成阻害剤、ＡＣＡＴ（アシル−ＣｏＡコレステロールアシルトランスフェラーゼ）阻害剤、血流・灌流促進剤（perfusion promoters）、血小板凝集阻害剤、抗凝固剤、アンジオテンシIIレセプターアンタゴニスト、コレストロール吸収阻害剤、ＭＴＰ阻害剤、アルドラーゼリダクターゼインヒビター、フィブリン酸、ナイアシン（ニコチン酸）、食欲抑制剤、リパーゼインヒビター、およびＰＰＡＲ−αおよびＰＰＡＲ−γアゴニストと併用することができる。
【００６７】
本発明による化合物の活性は、たとえば、in vitroにおいて、実験の部において述べられている転写活性化アッセイによって検討することができる。
【００６８】
本発明による化合物の活性は、たとえば、in vivoにおいて、実験の部において述べられているテストによって検討することができる。
【００６９】
一般式（Ｉ）の化合物を投与する際は、すべての慣習上おこなわれている投与形態、すなわち、経口、非経口、吸入、鼻、舌下、直腸、たとえば、経皮のような外用、たとえば、移植、ステントのような局所が適切である。非経口投与の場合、特に好ましい例は、静脈、筋肉内、たとえば、皮下蓄積注射(subcutaneous depot)皮下投与である。経口でも非経口でもよいが、特に好ましいのは、経口投与である。
【００７０】
ここで、活性化合物は、それ自身、あるいは、製剤の形で投与されることが可能である。経口のための適切な製剤、とりわけ、錠剤、カプセル、ペレット、糖衣錠、丸剤、顆粒、固体または液状のエーロゾル、シロップ、エマルジョン、サスペンジョンおよび溶液が望ましい。また、活性化合物は、治療的効果が得られる量存在していなければならない。
一般に、活性化合物の濃度は、０．１から１００％（重量％）であり、特には、０．５から９０％（重量％）であり、好ましくは、５から８０％（重量％）である。特に、活性化合物の濃度は、０．５から９０％であるべきである。すなわち、活性化合物は、述べられた投与範囲に到達するのに十分な量存在すべきである。
【００７１】
この目的のために、活性化合物は、それ自体知られている方法で、慣習上知られている製剤に変換すべきである。このことは、不活性な非毒性の製薬学的に適切な賦形薬、補助剤、溶媒、vehicles（賦形剤）、乳化剤、および/または分散剤を使用することによっておこなわれる。
【００７２】
言及されうる補助剤とは、たとえば、水、たとえば、パラフィン、植物油（たとえばごま油）、アルコール（たとえば、エタノール、グリセロール）、グリコール(たとえばポリエチレングリコール)のような非毒性有機溶剤、天然または合成の土壌由来のミネラル（ground mineral）(たとえば、タルク、シリケイト）のような固体の担体、糖類（たとえば、乳糖）、乳化剤、分散剤（たとえば、ポリビニルピロリドン）およびグライダント（たとえば、硫酸マグネシウム）である。
【００７３】
経口投与の場合、錠剤は、もちろんクエン酸ナトリウム、のような付加剤を含むことができ、付加剤とともにでんぷん、ゼラチン、およびそれに類するものを含むこともできる。経口投与のための水溶性製剤は、さらに味覚改善剤または着色料を包含させることもできる。
【００７４】
経口投与の場合、好ましくは、２４時間につき、体重あたり０．００１ないし５ｍｇ/ｋｇ、好ましくは、０．００５ないし３ｍｇ／ｋｇを投与する。
【００７５】
下記に、本発明の態様を解説する。本発明は、実施例に限定されることはない。
【００７６】
省略：
ＴＬＣ：   Thin-layer Chromatography（薄層クロマトグラフィー）
ＤＣＩ：   Direct chemical ionization(in MS)（直接イオン化法）
ＤＭＡＰ:  4-N,N-Dimethylaminopyridine（４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン）
ＥＳＩ:    Electrospray ionization(in MS)（エレクトロスプレーイオン化法）
ＨＡＴＵ:  O-(7-Azabenzotriazol-1-yl)-N,N,N',N'-tetramethyluronium hexafluorop hosphate（Ｏ−(７−アザベンゾトリアゾ−ル−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム  ヘキサフルオロホスフェート）
ＨＰＬＣ:  High-pressure,high-performance liquid chromatography(高速液体クロマトグラフィー）
ＬＣ−ＭＳ:Liquid-chromatography-coupled mass spectroscopy（液体クロマトグラフィー／マススペクトロスコピー）
ＭＳ：     Mass spectroscopy（マススペクトロスコピー）
ＮＭＲ:    Nuclear magnetic resonance spectroscopy（磁気共鳴分析）
Ｒｔ:       Retention time(in HPLC)（保持時間）
ＴＨＦ:    Tetrahydrofuran（テトラヒドロフラン）
【００７７】
実施例
実施例１
２−［４−［［［２−［（２，４−ジクロロフェニル）アミノ］−２−オキソエチル］シクロヘキシルアミノ］メチル］−２−メチルフェノキシ］−２−メチルプロパン酸
【化１９】
2005506379.tif 000020
【００７８】
ステップ１ａ）：
tert-ブチル  ２−（４−ホルミル−２−メチルフェノキシ）−２−メチルプロパノエート
【化２０】
2005506379.tif 000021
【００７９】
１０．０ｇ（７３．５ｍｍｏｌ）の４−ヒドロキシ−３−メチルベンズアルデヒドと１４、２ｇ（１０３ｍｍｏｌ）の炭酸カリウムを、最初に９０ｍｌのジメチルホルムアミドに加え、９０℃で３０分攪拌する。次いで、５０℃で、２２．９ｇ（１０３ｍｍｏｌ）のtert−ブチル  ２−ブロモ−２−メチルプロパノエート（tert-butyl 2-bromo-2-methylpropanoate)を加える。５０℃で１．５時間経過した後、混合物を、１００℃まで加熱し、一晩攪拌する。溶媒を、減圧下の元で除く。残渣を、酢酸エチル中で取り出し、水で２回洗浄し、ついで飽和水性炭酸水素ナトリウム溶液で２回洗浄し、さらに飽和水性塩化ナトリウムで一回洗浄する。ひとつにまとめられる有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮する。粗生成物をメタノールに溶解し、シリカゲルクロマトグラフィー〔移動相：シクロへキサン/酢酸エチル  １０：１）により精製する。これにより、５．０５ｇ〔理論上の２５％）の目的物を得る。
ＬＣ−ＭＳ（方法Ａ）：Ｒｔ＝４．８分(min)
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 1.40 (s, 9H), 1.65 (s, 6H), 2.30 (s, 3H), 6.23 (d, 1H), 7.58 (dd, 1H), 7.67 (m, 1H), 9.83 (s, 1H).
【００８０】
ステップ１ｂ）：
tert−ブチル  ２−｛４−［（シクロヘキシルアミノ）メチル］−２−メチルフェノキシ｝−２−メチルプロパノエート
【化２１】
2005506379.tif 000022
【００８１】
０．３６ｇ（３．６ｍｍｏｌ）のシクロヘキシルアミンと１．０ｇ（３．６ｍｍｏｌ）のtert−ブチル  ２−（４−ホルミル−２−メチルフェノキシ）−２−メチルプロパノエート（ステップ１ａから得られる）を最初に１２ｍｌのジクロロメタンを加え、室温で1時間攪拌する。１．２ｇ（５．４ｍｍｏｌ）のソジウム  トリアセトキシボロハイドライド（sodium triacetoxyborohydride)を加え、ついで、混合物を室温で一晩攪拌し、飽和した水溶性の炭酸水素ナトリウム溶液およびジクロロメタンを加える。分離した層から、水層を酢酸エチルで抽出する。ひとつにまとめられた有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮する。これにより、１．２９ｇ（理論上の９９％）の粗生成物を得るが、これは、さらに精製することなく反応に付される。
ＭＳ（ＤＣＩ）：ｍ／ｚ＝３６２［Ｍ＋Ｈ］＋
1H-NMR (200 MHz, CDCl3): δ = 1.00-1.30 (m, 4H), 1.42 (s, 9H), 1.53 (s, 6H), 1.5-2.0 (m, 6H), 2.20 (s, 3H), 2.47 (m, 1H), 3.70 (s, 2H), 6.68 (dd, 1H), 6.98 (dd, 1H), 7.07 (s, 1H).
【００８２】
ステップ１ｃ）：
２−ブロモ−Ｎ−（２，４−ジクロロフェニル）アセトアミド
【化２２】
2005506379.tif 000023
【００８３】
２４．１ｇ（１４９ｍｍｏｌ）の２，４−ジクロロアニリンおよび２０．７ｍｌ（１４９ｍｍｏｌ）のトリエチルアミンを最初に３００ｍｌのジクロロメタンに加え、そして３０から５０℃で５０ｍｌのジクロロメタン中の３０．０ｇ（１４９ｍｍｏｌ）のブロムアセチルブロマイド溶液を加える。混合物を室温で１時間攪拌し、次いで、水で２回、飽和した水性の塩化ナトリウム溶液で１回洗浄する。有機層をひとつにまとめ、濃縮し、粗生成物をエタノールで再結晶する。これにより、１９．８８ｇ（理論上の４７％）の目的物を得る。
ＬＣ−ＭＳ（方法Ａ）：Ｒｔ＝４．１分
ＭＳ（ＥＳＩpos）: ｍ／ｚ＝２８２［Ｍ＋Ｈ］＋
1H-NMR (300 MHz, CDCl3): δ = 4.06 (s, 2H), 7.28 (dd, 1H), 7.40 (d, 1H), 8.30 (d, 1H), 8.72 (br. s, 1H).
【００８４】
ステップ１ｄ）：
tert-ブチル  ２−［４−［［［２−［（２，４−ジクロロフェニル）アミノ］−２−オキソエチル］シクロヘキシルアミノ］−メチル］−２−メチルフェノキシ］−２−メチルプロパノエート
【化２３】
2005506379.tif 000024
【００８５】
ステップ  １ｃ）から得られる０．６２６ｇ（２．２１ｍｍｏｌ）の２−ブロモ−Ｎ−（２，４−ジクロロフェニル）アセトアミドを１２ｍｌのジメチルホルムアミド中の０．８００ｇ（２．２１ｍｍｏｌ）のtert-ブチル  ２−｛４−［（シクロヘキシルアミノ）メチル］−２−メチルフェノキシ｝−２−メチルプロパノエート（ステップ  １ｂ）から得られる）および０．２０５ｇ（２．４３ｍｍｏｌ）炭酸水素ナトリウムに加え、その混合物を９０℃、４時間攪拌する。反応混合物を濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィー〔移動相；シクロへキサン/酢酸エチル、グラジエント；９５：５−＞７０：３０）により精製する。これにより、０．９０９ｇ（理論上の５６％）の所望の目的物を得る。
ＨＰＬＣ（方法Ｂ）：Ｒｔ＝３．６９分
1H-NMR (300 MHz, CDCl3): δ = 1.05-1.70 (m, 6H), 1.33 (s, 9H)および 1.47 (s, 6H)と重なる, 1.77-2.0 (m, 4H), 2.14 (s, 3H), 2.57 (m, 1H), 3.23 (s, 2H), 3.61 (s, 2H), 6.61 (d, 1H), 6.98 (dd, 1H), 7.12 (br. s, 1H), 7.16 (dd, 1H), 7.33 (d, 1 H), 8.40 (d, 1H), 9.93 (s, 1H).
【００８６】
ステップ１ｅ）：
２−［４−［［［２−［（２，４−ジクロロフェニル）アミノ］−２−オキソエチル］シクロヘキシルアミノ］メチル］−２−メチルフェノキシ］−２−メチルプロパン酸
【化２４】
2005506379.tif 000025
【００８７】
０．７０９ｇ（１．３３ｍｍｏｌ）のtert−ブチル  ２−［４−［［［２−［（２，４−ジクロロフェニル）アミノ］−２−オキソエチル］−シクロヘキシルアミノ］メチル］−２−メチルフェノキシ−２−メチルプロパノエート（ステップ  １ｄから得られる）を、４ｍｌのジクロロメタンの溶解し、そして４ｍｌのトリフルオロ酢酸を加える。混合物を室温、２時間攪拌し、ついでトルエンで希釈し、濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィー（移動相；ジクロロメタン/メタノール、グラジエント；９８：２−＞９５：５）精製する。これにより、表題化合物０．７ｇ（理論上１００％）を得る。
ＬＣ−ＭＳ（方法Ａ）：Ｒｔ＝４．４分
ＭＳ（ＥＳＩpos）：ｍ／ｚ＝５０７［Ｍ＋Ｈ］＋
1H-NMR (300 MHz, CDCl3): δ = 1.10-1.75 (m, 6H), 1.60 (s, 6H)と重なる, 1.87-2.18 (m, 4H), 2.13 (s, 3H)と重なる, 3.35 (m, 1H), 4.11 (s, 2H), 4.20 (s, 2H), 6.61 (d, 1H), 6.92 (dd, 1H), 7.11 (br. s, 1H), 7.16 (dd, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.68 (d, 1H), 9.82 (s, 1H).
【００８８】
実施例２
２−［４−［［［２−［（２、４−ジクロロフェニル）アミノ］−２−オキソエチル］シクロヘキシルアミノ］メチル］−２−メチルフェノキシ］酢酸
【化２５】
2005506379.tif 000026
【００８９】
ステップ２ａ）：
tert-ブチル  （４−ホルミル−２−メチルフェノキシ）アセテート
【化２６】
2005506379.tif 000027
【００９０】
５．０ｇ（３７ｍｍｏｌ）の４−ヒドロキシ−３−メチルベンズアルデヒドおよび７．１ｇ（５１ｍｍｏｌ）の炭酸カリウムを最初４５ｍｌのジメチルホルムアミドに加え、５０℃で３０分攪拌する。次いで、５０℃で、１０．０ｇ（５１．４ｍｍｏｌ）のtert-ブチル  ２−ブロモアセテートを加える。混合物は、５０℃で１時間のあと、室温で一晩攪拌する。溶媒は、減圧下で取り除かれる。残渣を、酢酸エチル中で取り出し、水で２回、飽和した水性炭酸水素ナトリウム溶液で２回、次いで、飽和した水性塩化ナトリウム溶液で１回それぞれ洗浄する。有機層をひとつにまとめ、硫酸マグネシウムで乾燥し、そして濃縮する。１０．２３ｇの粗生成物は、さらに精製することなく反応に供せられる。
ＬＳ−ＭＳ（方法Ａ）：Ｒｔ＝４．３分
ＭＳ（ＥＳＩpos）：ｍ／ｚ＝１９５［Ｍ＋Ｈ−tブチル］＋
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 1.48 (s, 9H), 2.33 (s, 3H), 4.61 (s, 1H), 6.77 (d, 1H), 7.65 (d, 1H), 7.70 (br. s, 1H), 9.87 (s, 1H).
【００９１】
ステップ２ｂ）：
tert−ブチル  ｛４−［シクロヘキシルアミノ］メチル｝−２−メチルフェノキシ｝アセテート
【化２７】
2005506379.tif 000028
【００９２】
０．４０ｇ（４．０ｍｍｏｌ）のシクロヘキシルアミンと１．０ｇ（４．０ｍｍｏｌ）のtert-ブチル（４−ホルミル−２−メチルフェノキシ）アセテート（ステップ２ａから得られる）を１４ｍｌのジクロロメタンに加え、次いで室温で３０分間攪拌する。１．３４ｇ（５．９９ｍｍｏｌ）のソジウム  トリアセトキシボロハイドライド(sodium triacetoxyborohydride)を加え、次いで混合物を室温で一晩攪拌し、飽和した水溶性の炭酸水素ナトリウム溶液を加える。混合物は、酢酸エチルで抽出される。層を分離し、水層を１Ｍの水溶性の水酸化ナトリウム溶液で希釈し、酢酸エチルで再抽出する。集められた有機層は、硫酸マグネシウムで乾燥され、濃縮される。これにより、１．２５ｇ（理論上の９４％）の粗生成物を得るが、これは、精製することなく反応に供せられる。
ＨＰＬＣ（方法Ｂ）：Ｒｔ＝２．５９分
ＭＳ（ＤＣＩ）：ｍ／ｚ＝３３４［Ｍ＋Ｈ］＋
1H-NMR (200 MHz, CDCl3): δ = 1.00-2.10 (m, 10H), 1.48 (s, 9H)と重なる, 2.28 (s, 3H), 2.49 (m, 1H), 3.70 (s, 2H), 4.50 (s, 2H), 6.61 (d, 1H), 7.05 (d, 1H), 7.10 (s, 1H).
【００９３】
ステップ２ｃ）：
tert−ブチル  ２−［４−［［［２−［（２，４−ジクロロフェニル）アミノ］−２−オキソエチル］シクロヘキシルアミノ］−メチル］−２−メチルフェノキシ］アセテート
【化２８】
2005506379.tif 000029
【００９４】
０．６７９ｇ（２．４０ｍｍｏｌ）の２−ブロモ−Ｎ−（２，４−ジクロロフェニル）アセトアミド（実施例１のステップ１ｃから得られる）を、１２ｍｌのジメチルホルムアミド中の０．８００ｇ（２．４０ｍｍｏｌ）のtert−ブチル  ｛４−［（シクロヘキシルアミノ）メチル］−２−メチルフェノキシ｝アセテート（ステップ  ２ｂから得られる）と０．２２２ｇ（２．６４ｍｍｏｌ）の炭酸水素ナトリウムの溶液に加え、混合物を９０℃、４時間で攪拌する。反応混合物は、濃縮されシリカゲルクロマトグラフィー（移動相；シクロヘキサン/酢酸エチル、グラジエント；９５：５−＞７０：３０）で精製する。これにより、目的物０．７９０ｇ〔理論上の４６％）を得る。
ＨＰＬＣ（方法Ｂ）：Ｒｔ＝３．２７分
1H-NMR (300 MHz, CDCl3): δ = 1.05-1.70 (m, 6H), 1.41 (s, 9H)と重なる, 1.77-2.01 (m, 4H), 2.20 (s, 3H), 2.57 (m, 1H), 3.24 (s, 2H), 3.62 (s, 2H), 4.45 (s, 1H), 6.56 (d, 1H), 7.05 (dd, 1H), 7.14 (br. s, 1H), 7.18 (dd, 1H)と重なる, 7.36 (d, 1 H), 8.39 (d, 1H), 9.92 (s, 1H).
【００９５】
ステップ２ｄ）：
２−［４−［［［２−［（２，４−ジクロロフェニル）アミノ］−２−オキソエチル］シクロヘキシルアミノ］メチル］−２−メチルフェノキシ］酢酸
【化２９】
2005506379.tif 000030
【００９６】
０．７０９ｇ（１．４８ｍｍｏｌ）のtert−ブチル  ２−［４−［［［２−［（２，４−ジクロロフェニル）アミノ］−２−オキソエチル］シクロヘキシルアミノ］−メチル］−２−メチルフェノキシ］アセテート（ステップ  ２ｃから得られる）を４ｍｌのジクロロメタンに溶解し、４ｍｌのトリフルオロ酢酸を加える。室温で２時間攪拌後、混合物を、トで希釈し、濃縮後、シリカゲルクロマトグラフィー（移動相；ジクロロメタン/メタノール、グラジエント；９８：２−＞９５：５）で精製する。これにより、表題化合物を０．７ｇ（理論上の１００％）得る。
ＬＣ−ＭＳ（方法Ａ）：Ｒｔ＝３．９分
ＭＳ（ＥＳＩ  pos）：ｍ/ｚ＝４７９［Ｍ＋Ｈ］＋
1H-NMR (300 MHz, CDCl3): δ = 1.10-1.74 (m, 6H), 1.86-2.18 (m, 4H), 2.14 (s, 3H)と重なる, 3.41 (m, 1H), 4.08 (s, 2H), 4.20 (s, 2H), 4.62 (s, 2H), 6.67 (d, 1H), 7.00 (d, 1H), 7.09 (s, 1H), 7.15 (dd, 1H), 7.29 (d, 1H), 7.62 (d, 1H), 9.58 (s, 1H).
【００９７】
実施例３
２−［４−［［［２−［（２，４−ジクロロフェニル）アミノ］−２−オキソエチル］−（２，５−ジメチルシクロペンチル）−アミノ］メチル］−２−メチルフェノキシ］−２−メチルプロパン酸
【化３０】
2005506379.tif 000031
【００９８】
ステップ３ａ）：
tert-ブチル  ２−（４−｛［（２，５−ジメチルシクロペンチル）アミノ］メチル｝−２−メチルフェノキシ）−２−メチルプロパノエート
【化３１】
2005506379.tif 000032
【００９９】
０．０４４ｇ（０．３９ｍｍｏｌ）の２，５−ジメチルシクロペンチルアミンおよび０．１１ｇ（０．３９ｍｍｏｌ）のtert-ブチル  ２−（４−ホルミル−２−メチルフェノキシ）−２−メチルプロパノエート（実施例１/ステップ１ａ）から得られる）を最初に１．５ｍｌのジクロロメタンに加え、室温で１時間攪拌する。０．１３ｇ（０．５８ｍｍｏｌ）のソジウム  トリアセトキシボロハイドライドを加え、混合物を、室温、２０時間攪拌する。飽和した水溶性炭酸水素ナトリウム溶液を加え、混合物をジクロロメタンで希釈する。層に分離され、水層を酢酸エチルで抽出する。ひとつに集められた有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮する。これにより、粗生成物を０．１３ｇ（理論上の８８％）を得るが、これは、さらに精製することなく反応に供せられる。
ＬＣ−ＭＳ（方法Ａ）：Ｒｔ＝３．２分
ＭＳ（ＥＳＩpos）：ｍ／ｚ＝３７６［Ｍ＋Ｈ］＋
1H-NMR (200 MHz, CDCl3): δ = 0.90 (d, 3H), 0.99 (d, 3H), 1.0-2.0 (m, 6H), 1.43 (s, 9H)および 1.53 (s, 3H)と重なる, 2.20 (s, 3H), 2.47 (t, 1H), 3.64 (q, 2H), 6.68 (d, 1H), 7.0 (dd, 1H), 7.10 (br. s, 1H).
【０１００】
ステップ３ｂ）：
tert-ブチル  ２−［４−［［［２−［（２，４−ジクロロフェニル）アミノ］−２−オキソエチル］−（２，５−ジメチルシクロペンチル）アミノ］メチル］−２−メチルフェノキシ］−２−メチルプロパノエート
【化３２】
2005506379.tif 000033
【０１０１】
０．０９６ｇ（０．３４ｍｍｏｌ）の２−ブロモ−Ｎ−（２，４−ジクロロフェニル）アセトアミド（実施例１のステップ１ｃ）から得られる）をジメチルホルムアミド３ｍｌ中の０．１３ｇ（０．３４ｍｍｏｌ）のtert−ブチル  ２−（４−｛［（２，５−ジメチルシクロペンチル）アミノ］メチル｝−２−メチルフェノキシ）−２−メチル−プロパノエート（ステップ３ａ）から得られる）および０．０３２ｇ（０．３７ｍｍｏｌ）の炭酸水素ナトリウム溶液に加え、そして混合物を９０℃、４時間攪拌する。反応混合物は、濃縮され、シリカゲルクロマトグラフィー（移動相；シクロヘキサン/酢酸エチル、グラジエント；９９：１−＞７０：３０）で精製する。濃縮すると、目的物０．０５３ｇ〔理論上の２３％）を得る。
ＴＬＣ（シクロヘキサン/酢酸エチル  ５：１）：Ｒｆ＝０．４１
ＬＣ−ＭＳ（方法Ｄ）：Ｒｔ＝３．４０分
ＭＳ（ＥＳＩpos）：ｍ／ｚ＝５７７［Ｍ＋Ｈ］＋
1H-NMR (200 MHz, CDCl3): δ = 1.12 (t, 6H), 1.2-2.4 (m, 6H), 1.38 (s, 9H), 1.49 (s, 3H) および 2.14 (s, 3H)と重なる, 2.83 (t, 1H), 3.4-3.9 (m, 4H), 6.52 (d, 1H), 7.05 (dd, 1H), 7.19 (m, 2H), 7.37 (d, 1H), 8.32 (d, 1H), 9.72 (s, 1H).
【０１０２】
ステップ３ｃ）：
tert−ブチル  ２−［４−［［［２−［（２，４−ジクロロペンチル）アミノ］−２−オキソエチル］−（２，５−ジメチルシクロペンチル）アミノ］メチル］−２−メチルフェノキシ］−２−メチルプロパン酸
【化３３】
2005506379.tif 000034
【０１０３】
０．０４ｇ（０．０７ｍｍｏｌ）のtert-ブチル  ２−［４−［［［２−［（２，４−ジクロロフェニル）アミノ］−２−オキソエチル］−(２，５−ジメチルシクロペンチル）アミノ］メチル］−２−メチルフェノキシ］−２−メチルプロパノエート（ステップ３ｂ）から得られる）を、１．５ｍｌのジクロロメタンに溶解し、次いで１．５ｍｌのトリフルオロ酢酸を加える。混合物は室温で２時間攪拌し、ついでトルエンで希釈し、濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィー（移動相；ジクロロメタン/メタノール、グラジエント；９８：２−＞９０：１０）で精製する。これにより、表題化合物０．０２４ｇ（理論上の６６％）を得る。
ＬＣ−ＭＳ（方法Ａ）：Ｒｔ＝５．５２分
ＭＳ（ＥＳＩpos）：ｍ／ｚ＝５２１［Ｍ＋Ｈ］＋
1H-NMR (300 MHz, CDCl3): δ = 1.0-2.4 (m, 6H), 1.09 (d, 3H), 1.13 (d, 3H), 1.48 (s, 3H) および 2.12 (s, 3H)と重なる, 2.75 (t, 1H), 3.3-3.85 (m, 4 H), 6.70 (d, 1H), 7.0-7.3 (m, 3H), 7.44 (d, 1H), 8.38 (d, 1H), 9.65 (s, 1H).
【０１０４】
実施例４
２−｛４−［（シクロヘキシル｛２−［（２，４−ジクロロフェニル）アミノ］エチル｝アミノ）メチル］−２−メチル−フェノキシ｝−２−メチルプロパン酸
【化３４】
2005506379.tif 000035
【０１０５】
ステップ４ａ）：
tert-ブチル  ２−｛４−［（シクロヘキシル｛２−［（２，４−ジクロロフェニル）アミノ］エチル｝アミノ）メチル］−２−メチルフェノキシ｝−２−メチルプロパノエート
【化３５】
2005506379.tif 000036
【０１０６】
アルゴン雰囲気下、０．１６ｇ（０．２８ｍｍｏｌ）のtert-ブチル  ２−［４−［［［２−［（２，４−ジクロロフェニル）アミノ］−２−オキソエチル］シクロヘキシルアミノ］−メチル］−２−メチルフェノキシ］−２−メチルプロパノエート（実施例１のステップ１ｄ）から得られる）を最初に３ｍｌのトルエンに加える。次いで、０．１７ｍｌのボラン−ジメチルスルフィド錯体（テトラヒドロフラン中で２.０Ｍ）を加える。１１０℃で２時間後、混合物は、室温で冷却し、３ｍｌの２Ｎ水溶性の炭酸ナトリウム溶液で１時間攪拌する。その後、酢酸エチルおよび水で希釈する。有機層を分離し、飽和水溶性塩化ナトリウム溶液で洗浄後、硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮する。粗生成物は、シリカゲルクロマトグラフィー（移動相；シクロヘキサン/酢酸エチル、グラジエント；９８：２−＞７０：３０）で精製する。これにより、表題化合物０．０８５ｇ〔理論上の５４％）を得る。
ＴＬＣ（シクロヘキサン/酢酸エチル  ５：１）：Ｒｆ＝０．５９
ＬＣ−ＭＳ（方法Ａ）：Ｒｔ＝４．０分
ＭＳ（ＥＳＩpos）：ｍ／ｚ＝５４９［Ｍ＋Ｈ］＋
1H-NMR (300 MHz, CDCl3): δ = 1.0-1.68 (m, 6H), 1.48 (s, 9H) および 1.55 (s, 6H)と重なる, 1.7-1.92 (m, 4H), 2.13 (s, 3H), 2.48 (m, 1H), 2.80 (m, 2H), 2.92 (m, 2H), 3.51 (s, 2H), 5.18 (br. s, 1H), 6.47 (d, 1H), 6.62 (d, 1H), 6.9-7.1 (m ,3H), 7.21 (d, 1H).
【０１０７】
ステップ４ｂ）：
２−｛４−［（シクロヘキシル｛２−［（２，４−ジシクロロフェニル）アミノ］エチル｝アミノ）メチル］−２−メチルフェノキシ｝−２−メチルプロパン酸
【化３６】
2005506379.tif 000037
【０１０８】
０．０８５ｇ（０．１５ｍｍｏｌ）のtert-ブチル  ２−｛４−［（シクロヘキシル｛２−［（２，４−ジクロロフェニル）アミノ］エチル｝アミノ）メチル］−２−メチルフェノキシ｝−２−メチルプロパノエート（ステップ４ａ）から得られる）を１ｍｌのジクロロメタンに溶解し、次に１ｍｌのトリフルオロ酢酸を加える。室温で２時間攪拌した後、混合物をトルエンで希釈し、濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィー（移動相；ジクロロメタン/メタノール、グラジエント；９８：２−＞９５：５）で精製する。これにより、表題化合物０．０６ｇ（理論上の７９％）を得る。
ＴＬＣ（ジクロロメタン/メタノール  １０：１）：Ｒｆ＝０．３７
ＬＣ−ＭＳ（方法Ａ）：Ｒｔ＝３．３分
ＭＳ（ＥＳＩneg）：ｍ／ｚ＝４９１［Ｍ−Ｈ］＋
1H-NMR (200 MHz, CDCl3): δ = 0.8-2.2 (m, 10H), 1.60 (s, 6H)と重なる, 2.19 (s, 3H), 2.92 (m, 4H), 3.22 (br. s, 1H), 4.07 (s, 2H), 6.07 (s, H), 6.7-7.4 (m, 6H).
【０１０９】
実施例５
２−［４−［［［［２−（２，４−ジクロロフェニル）アミノ］−２−オキソエチル］シクロヘキシルアミノ］メチル］フェニル］−チオ］−２−メチルプロパン酸
【化３７】
2005506379.tif 000038
【０１１０】
ステップ５ａ）：
tert-ブチル  ２−［（４−ブロモフェニル）スルファニル」−２−メチルプロパノエート
【化３８】
2005506379.tif 000039
【０１１１】
１００ｇ（０．５２９ｍｍｏｌ）の４−ブロモチオフェノールおよび１１８ｇ（０．５２９ｍｍｏｌ）のtert-ブチル  ２−ブロムイソブチレートを１リットル（ｌ）のエタノールの溶解し、次に、２９ｇ（０．５１７ｍｏｌ）の水酸化カリウムを加える。混合物を、２時間還流下に攪拌し、その後冷却し、臭化カリウムをろ過して除く。ろ液を濃縮し、ｎ−ヘキサンで再結晶する。これにより、所望の目的物が無色の固体として、９３．６ｇ（理論上の５３％）得られる。
1H-NMR (200 MHz, CDCl3): δ = 1.48 (s, 15H), 7.38 (m, 4H).
【０１１２】
ステップ５ｂ）：
tert−ブチル  ２−［（４−ホルミルフェニル）スルファニル］−２−メチルプロパノエ−ト
【化３９】
2005506379.tif 000040
【０１１３】
１.０ｇ（３．０２ｍｍｏｌ）のtert-ブチル  ２−［（４−ブロモフェニル）スルファニル」−２−メチルプロパノエート（ステップ５ａ）から得られる）を２０ｍｌのＴＨＦに溶解し、−７８℃でヘキサン中のｎ−ブチルリチウム溶液１．８９ｍｌ（３．０２ｍｍｏｌ）を加える。その後すぐに、０．４６ｍｌ（０．４３ｇ，５．９２ｍｍｏｌ）のジメチルホルムアミドを加え、混合物を室温まで暖めてさらに１時間攪拌する。反応は、１ｍｌの１Ｎの塩酸を添加することによって終了し、反応混合物は、酢酸エチルで濃縮され、取りだされる。溶液を飽和炭酸水素ナトリウム溶液、飽和塩化ナトリウム溶液で抽出し、硫酸マグネシウムで乾燥する。シリカゲルでのクロマトグラフィーによる精製（移動相：ジクロロメタン）により、０．５５ｇ（理論上の６５％）を所望の目的物をオイルとして得る。
ＬＣ−ＭＳ：アセトニトリル/３０％塩酸溶液/水（グラジエント）：Ｒｔ＝４．８６分
ＭＳ（ＥＳＩpos）：ｍ／ｚ＝２８１［Ｍ＋Ｈ］＋
【０１１４】
ステップ５ｃ）：
［［２−（２，４−ジクロロフェニル）アミノ］−２−オキソエチル］シクロヘキシルアミン
【化４０】
2005506379.tif 000041
【０１１５】
室温で、実施例１（ステップ１ｃ）で得られるジメチルホルムアミド５ｍｌ中の２−ブロモ−Ｎ−（２，４−ジクロロフェニル）アセトアミド１．０ｇ（３．５３４ｍｍｏｌ）の溶液をジメチルホルムアミド５ｍｌ中におけるシクロヘキシルアミン１．７５２ｇ（１７．６７ｍｍｏｌ）および炭酸水素ナトリウム０．３２７ｇ（３．８８８ｍｍｏｌ）からなる懸濁液に加える。反応混合物を、９０℃で４時間攪拌し、氷水に入れて冷却したあと、水層を酢酸エチルで３回抽出する。ひとつに集められた有機抽出物を水で２回、飽和塩化ナトリウム溶液で一回洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、有機溶媒を減圧下で除く。これにより、０．９６０ｇ（理論上９０％）の所望の生成物を無色のオイルとして、得る。
ＨＰＬＣ［Kromasil C18, 0.75 ml/min, 水溶性ＨＣｌＯ４/アセトニトリル（グラジエント）：Ｒｔ＝４．１５分
ＭＳ（ＤＣＩ）：ｍ／ｚ＝３０１［Ｍ＋Ｈ］＋
1H-NMR (300 MHz, CDCl3): δ = 1.00-1.39 (m, 6H), 1.57 (s, 1H), 1.62 (m, 1H), 1.75 (m, 2H), 1.95 (m, 2H), 2.45 (m, 1H), 3.43 (s, 2H), 7.23 (dd, 1H), 7.38 (d, 1H), 8.49 (d, 1H), 10.31 (broad s, 1H).
【０１１６】
ステップ５ｄ）：
tert-ブチル  ２−［４−［［［［２−（２，４−ジクロロフェニル）アミノ］−２−オキソエチル］シクロヘキシルアミノ］−メチル］フェニル］チオ］−２−メチルプロパノエート
【化４１】
2005506379.tif 000042
【０１１７】
室温下で、８７．５ｍｇ（０．９１３ｍｍｏｌ）のソジウム  トリアセトキシボロハイドライド（sodium triacetoxyborohydride)をＴＨＦ５ｍｌ中の１３７．５ｍｇ（０．４５７ｍｏｌ）の［［２−（２，４−ジクロロフェニル）アミノ］−２−オキソエチル］シクロヘキシルアミン（ステップ５ｃ）で得られる）と１６０ｍｇ（０．５７１ｍｍｏｌ）のtert−ブチル  ２−［（４−ホルミルフェニル）スルファニル］−２−メチルプロパノエート（ステップ５ｂ）で得られる）の溶液に加える、混合物を２４時間攪拌する。次いで、飽和炭酸水素ナトリウム溶液をその混合物に加え、分離した層の水層をメチレンクロライド（塩化メチレン）で抽出する。集められた有機抽出物を硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧下で除き、残渣をシリカゲルでのクロマトグラフィー（移動相：シクロへキサン/酢酸エチル  １０：１）により精製する。これによって、所望の目的物６２ｍｇ（理論上の２４％）を無色の油状物として得る。
ＬＣ−ＭＳ（方法Ｄ）：Ｒｔ＝３．３２分
ＭＳ（ＥＳＩpos）：ｍ／ｚ＝５６５［Ｍ＋Ｈ］＋
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 1.03-1.39 (m, 5H), 1.37 (s, 9H), 1.38 (s, 6H), 1.66 (d, 1H), 1.82 (d, 2H), 1.97 (d, 2H), 2.58 (tt, 1H), 3.28 (s, 2H), 3.72 (s, 2H), 7.20 (dd, 1H), 7.32 (d, 2H), 7.35 (d, 1H), 7.42 (d, 2H), 8.42 (d, 1H), 9.86 ( s, 1H).
【０１１８】
ステップ５ｅ）：
２−［４−［［［［２−（２，４−ジクロロフェニル）アミノ］−２−オキソエチル］シクロヘキシルアミノ］メチル］−フェニル］チオ］−２−メチルプロパン酸
【化４２】
2005506379.tif 000043
【０１１９】
室温で、２７７ｍｇ（２．４３１ｍｍｏｌ）のトリフルオロ酢酸を、ジクロロメタン５ｍｌ中のtert-ブチル  ２−［４−［［［［２−（２，４−ジクロロフェニル）アミノ］−２−オキソエチル］シクロヘキシルアミノ］−メチル］フェニル］チオ］−２−メチルプロパノエート（ステップ５ｄ）で得られる）５５ｍｇ（０．０９７ｍｍｏｌ）の溶液に加え、混合物を４時間攪拌する。次いで、混合物を、減圧下で濃縮し、残渣を酢酸エチルで取り出し、有機層を水で２回、飽和炭酸水素ナトリウム溶液で１回洗浄する。混合物を、硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下で濃縮し、次いで残渣をシリカゲルでのクロマトグラフィー（移動相：シクロへキサン/酢酸エチル  １：１）により精製する。これによって、所望の目的物４０ｍｇ（理論上の８１％）を無色の油状物として得る。
ＨＰＬＣ［Kromasil C18, 0.75 ml/min, 水溶性ＨＣｌＯ４/アセトニトリル（グラジエント）：Ｒｔ＝４．５１分
ＭＳ（ＥＳＩpos）：ｍ／ｚ＝５０９［Ｍ＋Ｈ］＋
1H-NMR (200 MHz, CDCl3): δ = 1.03-1.39 (m, 5H), 1.42 (s, 6H), 1.66 (m, 1H), 1.82 (m, 2H), 1.98 (m, 2H), 2.58 (m, 1H), 3.27 (s, 2H), 3.71 (s, 2H), 7.18 (dd, 1H), 7.28 (d, 1H), 7.32 (d, 2H), 7.42 (d, 2H), 8.37 (d, 1H), 9.82 (s, 1H).
【０１２０】
実施例６
２−［４−［［［２−［（２，４−ジメチルフェニル）アミノ］−２−オキソエチル］シクロヘキシルアミノ］メチル］−２−メチルフェノキシ］プロパン酸
【化４３】
2005506379.tif 000044
【０１２１】
この化合物は、下記に述べる反応図１によって、高分子担体樹脂(Wang resin)を用いて、固相合成によって製造された。
【０１２２】
反応図１
【化４４】
2005506379.tif 000045
Pol＝高分子担体レジン
【０１２３】
反応条件：ａ）ジイソプロピルカルボジイミド；ＤＭＡＰ，トリメチルアミン、ジクロロメタン、室温、２０時間；ｂ）炭酸セシウム（caesium carbonate), ジオキサン／イソプロパノール１：１、６０℃、２４時間；ｃ）トリメチル  オルソホルメート（trimethyl orthoformate)/ジメチルホルムアミド  １：１、室温、２０時間；テトラブチルアンモニウム  ボロハイドライド、酢酸、ジメチルホルムアミソ、室温、２０時間；ｄ）トリエチルアミン、ジオキサン、６０℃、２０時間；テトラブチルアンモニウム  フルオライド、ジオキサン、室温、１−２時間；ｅ）ＨＡＴＵ，ピリジン/ジメチルホルムアミド  ２：１、室温、２０時間；ｆ）トリフルオロ酢酸、ジクロロメタン、室温、３０分
【０１２４】
ステップ  ６ａ）：
３０．０ｇ（反応基として２８．２ｍｍｏｌ；理論量としては０．９４ｍｍｏｌ／ｇ）のワングレジン（Wang resin)(Ｒａｐｐ  Ｐｏｌｙｍｅｒｅ、Ｏｒｄｅｒ  Ｎｏ．  Ｈ１０１１）を２００ｍｌのジクロロメタンに懸濁させる。１２．９ｇ（８４．６ｍｍｏｌ）の２−ブロモプロパン酸、１７．８ｇ（１４１ｍｍｏｌ）のジイソプロピルカルボジイミドおよび５．１７ｇ（４２．３ｍｍｏｌ）のＤＭＡＰを加え、混合物を室温で２０時間振盪させる。ついで、混合物をろ過し、レジン（樹脂）をジメチルホルムアミド、メタノールおよびジクロロメタンで交互に洗浄する。これにより、レジン６ａが得られるが、これは、更に精製することなく反応に供せられる。
【０１２５】
ステップ  ６ｂ）：
１０．０ｇ（９．４０ｍｍｏｌ）のレジン６ａを最初に１００ｍｌのジオキサン／イソプロパノール（１：１）に加え、２１．４ｇ（６５．８ｍｍｏｌ）炭酸セシウムおよび８．９６ｇ（６５．８ｍｍｏｌ）の４−ヒドロキシ−３−メチルベンゾアルデヒドとともに、６０℃で一晩攪拌する。混合物を室温まで冷却し、４．３ｍｌの酢酸で中和する。次いでその混合物を、ろ過し、レジン（樹脂）を水、ジメチルホルムアミド、メタノールおよびジクロロメタンで交互に洗浄する。これにより、レジン６ｂが得られるが、これは、更に精製することなく反応に供せられる。
【０１２６】
ステップ  ６ｃ）：
２．００ｇ（１．８８ｍｍｏｌ）のレジン６ｂと０．９３２ｇ（９．４０ｍｍｏｌ）のシクロヘキシルアミンを２０ｍｌトリメチル  オルトホルメート（オルト蟻酸トリメチルエステル）/ジメチルホルムアミド（１；１）に懸濁させる。混合物を室温で２０時間振盪する。混合物をろ過し、レジンはジメチルホルムアミドで洗浄する。次いで、レジンを２０ｍｌのジメチルホルムアミド、１．９３ｇ（７．５２ｍｍｏｌ）のテトラブチルアンモニウム  ボロハイドライドおよび１．０８ｍｌ（１８．８ｍｍｏｌ）の酢酸を加え、混合物を室温、２０時間振盪する。混合物をろ過し、レジンをジメチルホルムアイド、メタノールおよびジクロロメタンで洗浄する。これにより、レジン６ｃが得られるが、これは、更にすぐに反応に供せられる。
【０１２７】
ステップ  ６ｄ）：
０．５４８ｇ（１．８８ｍｍｏｌ）のレジン６ｃを１００ｍｌのジオキサンに懸濁し、５．２４ｍｌ（３７．６ｍｍｏｌ）のトリエチルアミンおよび４．６４ｍｌ（２８．２ｍｍｏｌ）のトリメチルシリル  ブロモアセテートを加える。混合物を、６０℃、２０時間振盪する。ついで、混合物をろ過し、レジンをジメチルホルムアミド、メタノールおよびジクロロメタンで洗浄する。シリル保護基を除くために、レジンを５０ｍｌのジオキサンに懸濁させ、３．８ｍｌ（３．８ｍｍｏｌ）のＴＨＦ中のテトラブチルアンモニウムの１Ｍ溶液を加える。混合物を、室温、１−２時間振盪し、次いでろ過する。レジンをジメチルホルムアミド、メタノールおよびジクロロメタンで洗浄する。この結果得られるレジン６ｄは、すぐにその先の反応に用いる。
【０１２８】
ステップ  ６ｅ）：
１．０ｇ（０．９４ｍｍｏｌ）のレジン６ｄを１２ｍｌのピリジン/ジメチルホルムアミド（１：１）に懸濁し、１．１４ｇ（９．４０ｍｍｏｌ）の２，５−ジメチルアニリンおよび１．０７ｇ（２．８２ｍｍｏｌ）のＨＡＴＵを加える。混合物を室温で２０時間振盪し、ろ過する。レジンはジメチルホルムアミド、３０％強度（strength)酢酸、水、ジメチルホルムアミド、メタノールおよびジクロロメタンで洗浄する。得られるレジン６ｅは、次に１２ｍｌのジクロロメタン/トリフルオロ酢酸（１：１）の混和物に懸濁させる。混合物を、室温、３０分振盪し、次いでろ過し、生成物は、プリパラティブＨＰＬＣ（ＲＰ−１８，移動相：水/アセトニトリル、グラジエント  ６０：４０−＞１０：９０）で精製される。これにより、表題化合物を０．１４ｇ（理論上の３３％）を得る。
ＬＣ−ＭＳ（方法Ｄ）：Ｒｔ＝１．９３分
ＭＳ（ＥＳＩpos）：ｍ／ｚ＝４５３［Ｍ＋Ｈ］＋
1H-NMR (200 MHz, DMSO-d6): δ = 1.0-2.3 (m, 10H), 1.50 (d, 3H), 2.00 (s, 3H), 2.13 (s, 3H) および 2.22 (s, 3H)と重なり, 3.48 (m, 1H), 4.34 (br. s, 2H), 4.78 (m, 3H), 6.72-7.44 (m, 6H), 9.08 (br. s, 1H).
【０１２９】
下記に列挙される実施例は、化合物ライブラリーの固相合成の間製造された。プロセスは、ミニカンス（MiniKans）（IRORI)におけるライブラリー合成[K.C.Nicolaou、X.−Y.Xiano,Z.Parandoosh, A.Senyei,M.P.Nova,Angew.Chem.Int.Ed.Engl.35、2289-2290(1995)]に記載による”Mix & Split" 法によって、ミニカンス（MiniKans）（IRORI)におけるライブラリー合成を例示している。反応図２および３に示されるように、二つの異なる方法が使用された。
【０１３０】
反応図２（方法１）
【化４５】
2005506379.tif 000046
Pol＝高分子担体レジン；
【０１３１】
反応条件：ａ）トリメチル  オルトホルメート/ジメチルホルムアミド  １：１、室温、１２−２０時間；テトラブチルアンモニウム  ボロハイドライド、酢酸、ジメチルホルムアミド、室温、２０時間；ｂ）トリエチルアミン、ジオキサン、６０℃、１２−２０時間；テトラブチルアンモニウム  フルオライド、ジオキサン、室温、１−２時間；ｃ）ＨＡＴＵ，ピリジン／ジメチルホルムアミド２：１、室温、２０時間；ｄ）トリフルオロ酢酸、ジクロロメタン、室温、３０分
【０１３２】
反応図３（方法２）
【化４６】
2005506379.tif 000047
Pol＝高分子担体レジン
【０１３３】
反応条件：ｂ）トリエチルアミン、ジクロロメタン、１５℃−＞室温、１時間；ｃ）炭酸水素ナトリウム、ジメチルホルムアミド、９０℃、３時間；ｄ）トリフルオロ酢酸、ジクロロメタン、室温、３０分
【０１３４】
出発物質としてのレジンＩＩ（反応図２）は、二つの別の製法によって、製造されたが、それは、反応図４および５に示されている。
【０１３５】
反応図４（方法Ａ）
【化４７】
2005506379.tif 000048
【０１３６】
反応条件：ａ）トリメチルアミン、ジクロロメタン、−２０℃−＞室温、２４時間（Ｘ＝Ｂｒ）またはジイソプロピルカルボジイミド、ＤＭＡＰ，トリエチルアミン、ジクロロメタン、室温、２０時間（Ｘ＝ＯＨ）；ｂ）炭酸セシウム（caesium carbonate), ジオキサン／イソプロパノール  １：１、６０℃、２４時間
【０１３７】
反応図５（方法Ｂ）
【化４８】
2005506379.tif 000049
【０１３８】
反応条件：ａ）炭酸カリウム、ジメチルホルムアミド、５０−１００℃、２０時間；ｂ）トリフルオロ酢酸、ジクロロメタン、室温、２時間；ｃ）Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルカルボジイミド、ＤＭＡＰ，ジクロロメタン、室温、２０時間
【０１３９】
方法Ａによる出発物質レジンＩＩの製造
レジンＩＩａ
【化４９】
2005506379.tif 000050
【０１４０】
ステップａ）：
２０ｇ（反応基に基づく１８．８ｍｍｏｌ；理論量０．９４ｍｍｏｌ/ｇ）のワングレジン（Wang resin)(Rapp Polymere, Order No. H 1011）を２００ｍｌのジクロロメタンに懸濁させる。２１．０ｍｌ（１５０ｍｍｏｌ）のトリエチルアミンを添加した後、混合物を、−２０℃まで冷却し、３４．６ｇ（１５０ｍｍｏｌ）の２−ブロモ−２−メチルプロパノイル  ブロマイドを加える。−２０℃で１．５時間の後、室温まで暖め、更に２０時間攪拌する。混合物を、その後、ろ過し、レジンをジメチルホルムアミド、メタノールとジクロロメタンで交互に洗浄する。これにより、レジンＩａが得られるが、更に精製することなく反応に供せられる。
【０１４１】
ステップｂ）：
１６．０ｇ（１５．０４ｍｍｏｌ）のレジンＩａを最初に１６０ｍｌのジオキサン/イソプロパノール（１：１）に加え、そして３９．２ｇ（１２０ｍｍｏｌ）の炭酸セシウムと１４．７ｇ（１２０ｍｍｏｌ）の４−ヒドロキシベンゾアルデヒドを一緒にし、６０℃で一晩攪拌する。混合物は、室温まで冷却され、６．９ｍｌの酢酸で中和される。次いで、混合物をろ過し、レジンを、水、ジメチルホルムアミド、メタノールとジクロロメタンで交互に洗浄する。これにより、レジンＩＩａが得られるが、これは更に精製することなく下記の合成の連続的な進行に使用される。
【０１４２】
次の出発レジンＩＩは、方法Ａに類似して（準じて）製造される。
レジンＩＩｂ
【化５０】
2005506379.tif 000051
レジンＩＩｃ
【化５１】
2005506379.tif 000052
【０１４３】
方法Ｂによる出発物質レジンＩＩの製造
レジンＩＩｄ
【化５２】
2005506379.tif 000053
【０１４４】
ステップａ）
tert-ブチル  ２−（４−ホルミル−２−メチルフェノキシ）−２−メチルプロパノエート
【化５３】
2005506379.tif 000054
【０１４５】
１０．０ｇ（７３．５ｍｍｏｌ）の４−ヒドロキシ−３−メチルベンズアルデヒドおよび１４．２ｇ（１０３ｍｍｏｌ）の炭酸カリウムを最初に９０ｍｌのジメチルホルムアミドに加え、５０℃で３０分攪拌する。１９．２ｍｌ（１０３ｍｍｏｌ）のtert-ブチル  ２−ブロモイソブチレートをその懸濁液に滴下する。ついで、これを５０℃で、更に１時間攪拌し、次に１００℃で、２０時間加熱する。室温まで冷却した後、溶媒を減圧下で除き、残渣を、酢酸エチルで取り出し、混合物を水、飽和水溶性炭酸水素ナトリウム溶液および飽和水溶性塩化ナトリウム溶液で抽出する。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下で濃縮する。粗生成物は、シリカゲルでのクロマトグラフィー（移動相：シクロへキサン/酢酸エチル  １０：１）により精製する。これによって、所望の目的物５．０５ｇ（理論上の２５％）を得る。
ＬＣ−ＭＳ（方法Ａ）：Ｒｔ＝４．８分
ＭＳ（ＥＳＩpos）：ｍ／ｚ＝２２３［Ｍ＋Ｈ−tブチル］＋
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 1.40 (s, 9H), 1.68 (s, 6H), 2.29 (s, 3H), 6.74 (d, 1H), 7.58 (dd, 1H), 7.70 (br. s, 1H), 9.83 (s, 1H).
【０１４６】
ステップｂ）
２−（４−ホルミル−２−メチルフェノキシ）−２−メチルプロパン酸
【化５４】
2005506379.tif 000055
【０１４７】
２．２ｇ（７．９ｍｍｏｌ）のtert-ブチル−２−（４−ホルミル−２−メチルフェノキシ）−２−メチルプロパノエートを２０ｍｌのジクロロメタンに溶解し、２０ｍｌのトリフルオロ酢酸を加える。混合物を室温、２時間攪拌し、血で、減圧下濃縮し、所望の化合物を得る。
ＬＣ−ＭＳ（方法Ｄ）：Ｒｔ＝２．３３分
ＭＳ（ＥＳＩpos）：ｍ／ｚ＝２２３［Ｍ＋Ｈ］＋
【０１４８】
ステップｃ）
【化５５】
2005506379.tif 000056
【０１４９】
５．０ｇ（反応基からは４．７ｍｍｏｌ；理論量から０．９４ｍｍｏｌ）のWang  レジン(Rapp Polymere, Order No. H 1011）を４０ｍｌのジクロロメタンに懸濁する。１．９８ｇ（８．９３ｍｍｏｌ）の２−（４−ホルミル−２−メチルフェノキシ）−２−メチルプロパン酸、２．３７ｇ（１８．８ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジイソプロピルカルボジイミドおよび０．７５ｇ（６．１ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジメチルアミノピリジンを連続的に加える。混合物を、室温で２０時間振盪し、次いで、レジンを吸引ろ過し、ジメチルホルムアミド、メタノールおよびジクロロメタンで繰り返し、交互に洗浄する。これにより、レジンＩＩｄが得られ、これは、さらに精製することなく下記の反応に連続して用いる。
【０１５０】
次の出発物質レジンＩＩは、方法Ｂと類似に（に準じて）製造される。
レジンＩＩｅ
【化５６】
2005506379.tif 000057
レジンＩＩｆ
【化５７】
2005506379.tif 000058
【０１５１】
反応図３/方法２によるライブラリー合成に必要なブロモアセトアニリドＶＩの製造
（実施例１／ステップ１ｃ）も参照）：
ＶＩａ）  ２−ブロモ−Ｎ−（２，４−ジメチルフェニル）アセトアミド
【化５８】
2005506379.tif 000059
【０１５２】
１５．０ｇ（１２４ｍｍｏｌ）の２，４−ジメチルアニリンおよび１７．３ｍｌ（１２４ｍｍｏｌ）のトリエチルアミンを最初に２００ｍｌのジクロロメタンに加え(charged)、次いで１５℃でジクロロメタン５０ｍｌ中のブロムアセチルブロマイド２５．０ｇ（１２４ｍｍｏｌ）溶液を加える。室温で１時間攪拌すると、生成物が晶出する。結晶を吸引ろ過して除く。母液を減圧下で濃縮する。その結果得られる結晶を、同様に吸引ろ過して除き、減圧下で乾燥する。これにより、全量１９．４５ｇ（理論上の６５％）の生成物を得る。
ＬＣ−ＭＳ（方法Ａ）：Ｒｔ＝３．５４分
ＭＳ（ＥＳＩpos）：ｍ／ｚ＝２４２［Ｍ＋Ｈ］＋
【０１５３】
ＶＩｂ）２−ブロモ−Ｎ−（２，４−ジフルオロフェニル）アセトアミド
【化５９】
2005506379.tif 000060
【０１５４】
１４．０ｇ（１０８ｍｍｏｌ）の２，４−ジフルオロアニリンおよび１５．１ｍｌ（１０８ｍｍｏｌ）のトリエチルアミンを最初に２００ｍｌのジクロロメタンに加え、次いで１５℃で５０ｍｌ中のブロムアセチルブロマイド２１．９ｇ（１０８ｍｍｏｌ）の溶液をくわえる。室温で１時間攪拌の後、水をその溶液に加え、溶液は、水で繰り返し洗浄し、次いで飽和水溶性炭酸水素ナトリウム溶液で一度洗浄する。ひとつに集められ有機層を減圧下で濃縮する。これにより、生成物は、晶出する。２２．４ｇ（理論量の８３％）の生成物が得られる。
ＬＣ−ＭＳ（方法Ａ）：Ｒｔ＝３．２６分
ＭＳ（ＥＳＩpos）：ｍ／ｚ＝２５１［Ｍ＋Ｈ］＋
【０１５５】
方法１（反応図２）による固相ライブラリー合成の一般的手法：
ａ）レジンの製造
０．０７−０．１ｇのレジン５ｂ，ＩＩａ，ＩＩｂ，ＩＩｃ，ＩＩｄ，ＩＩｅおよびＩＩｆ（ｐｅｒ−Ｋａｎ）を、ジメチルホルムアミド/ジクロロメタン（１：２）中の懸濁液とし、ＩＲＯＲＩ  Ｍｉｎｉ−Ｋａｎｓに注ぎ、ジエチルエーテルで洗浄し、乾燥する。
【０１５６】
ｂ）還元的アミノ化によるレジンＩＩＩの製造
このように仕切られたレジンをジクロロメタン/トリメチル  オルトホルメート（trimethyl orthformate)（１：１）に懸濁させ、アミン（５−７当量）を添加した後、室温で１２−１８時間振盪する。レジンをろ過して除去し、ジメチルホルムアミドで洗浄する。次いで、レジンをジメチルホルムアミドおよび氷酢酸（１０当量）に懸濁し、テトラブチルアンモニウム  ボロハイドライド（４当量）を加え、そしてレジンを室温で６時間振盪させる［この手法の代替方法としては、レジンをジメチルホルムアミドに懸濁し、テトラブチルアンモニウム  ボロハイドライド（４当量）を加え、そしてレジンを室温で１５分振盪させることが可能である；そのあと、−４０℃まで冷却し、氷酢酸（１００当量）を添加し、次いで室温まで暖めて、６時間振盪する］。混合物を次いでろ過し、レジンをメタノール、ジクロロメタン/酢酸（１０：１）、メタノール、ジメチルホルムアミド、ジクロロメタン／ジイソプロピルエチルアミン（１０：１）、メタノール、ジクロロメタンおよびジエチルエーテルで繰り返し洗浄し、最後に減圧下で乾燥する。
【０１５７】
ｃ）トリメチルシリル  ブロモアセテートによるアルキル化
アルゴン雰囲気中で、反応容器を（the separated reaction vessels)２．５ｍｌのジオキサン（ｐｅｒ  Ｋａｎ）とトリエチルアミン（１４当量）で懸濁し、これにトリメチルシリル  ブロモアセテート（１４等量）を加える。混合物を、６０℃で一晩振盪させる。混合物を、ろ過し、レジンを、水、メタノール、ジメチルホルムアミド、メタノール、ジクロロメタン、メタノール、ジクロロメタン、およびジエチルエーテルで洗浄する。減圧下で乾燥させた後、反応が完全になるまで繰り返す。最後にレジンを水で洗浄し、次にジオキサンで２回洗浄する。
【０１５８】
ｄ）トリメチルシリルエステルの開裂によるレジンＩＶの取得
レジンを２．５ｍｌのジオキサン/カン（Ｋａｎ）に懸濁させ、テトラブチルアンモニウム  フルオライド（fluoride)（ＴＨＦ中の１Ｍ溶液の２当量）を加える。混合物を室温で２時間振盪させ、次いでろ過する。次にレジンをジメチルホルムアミド、メタノール、ジクロロメタンおよびジエチルエーテルで洗浄する。
【０１５９】
ｅ）レジンＶを得るためのアミドの形成
レジンをピリジン/ジメチルホルムアミド（２：１）に懸濁し、これにアニリン誘導体（５−１０当量）およびＨＡＴＵ（３当量）を加える。混合物を、室温で２０時間振盪させ、次いでろ過する。この処置は、変換を完全にするために繰り返さなければならない場合がある。ついで、レジンを３０％濃度酢酸、水、ジメチルホルムアミド、メタノール、ジクロロメタン、メタノール、およびジクロロメタンで洗浄する。
【０１６０】
ｆ）担体（support)レジンからの開裂(分離)
反応器の底を切り開き(cut open)、反応器（reactor）をＦｌｅｘ−Ｃｈｅｍ  ｂｌｏｃｋで４回それぞれ５００μｌのジクロロメタン/トリフルオロ酢酸（１：１）で処理する。減圧下で濃縮すると、当該物を得る。
【０１６１】
実施例７
２−［４−［［［２−［Ｎ−メチル−２，４−（ジメチルフェニル）アミノ］−２−オキソエチル］シクロヘキシルアミノ」−メチル］フェノキシ−２−メチルプロパン酸
【化６０】
2005506379.tif 000061
【０１６２】
この化合物は、方法１(method 1）によるライブラリー合成の一般的な処理を用いて製造される。
ＬＣ−ＭＳ（方法Ｃ）：Ｒｔ＝３．１分
ＭＳ（ＥＳＩpos）：ｍ／ｚ＝４６７［Ｍ＋Ｈ］＋
【０１６３】
方法２（反応図３）による固相ライブラリー合成の一般的手法：
ａ）レジンＶを得るブロモアセトアニリドでのアルキル化
セパレートされた反応容器に方法１（反応図２）によりえられるレジンＩＩＩがジメチルホルムアミド中で充填され、炭酸水素ナトリウム（３当量）および実施例１/ステップ１ｃ）から得られるブロモアセトアニリド、ＶＩａまたはＶＩｂ（３当量）が加えられる。混合物を、９０℃で３時間攪拌する。レジンを、メタノール、ジメチルホルムアミド、ジクロロメタン、メタノール、ジクロロメタンおよびジエチルエーテルで洗浄される。
【０１６４】
ｂ）担体レジンからの開裂(分離)
反応器の底を切り開き、反応器をＦｌｅｘ−Ｃｈｅｍ  ｂｌｏｃｋで４回それぞれ５００μｌのジクロロメタン/トリフルオロ酢酸（１：１）で処理する。減圧下で濃縮すると、当該物を得る。
【０１６５】
下記の表に列挙されている実施例８−５６は、方法１または方法２により、ライブラリー合成の一般的な方法によって製造させた。
【０１６６】
【表１】
2005506379.tif 000062
【０１６７】
【表２】
2005506379.tif 000063
【０１６８】
【表３】
2005506379.tif 000064
【０１６９】
【表４】
2005506379.tif 000065
【０１７０】
【表５】
2005506379.tif 000066
【０１７１】
【表６】
2005506379.tif 000067
【０１７２】
【表７】
2005506379.tif 000068
【０１７３】
【表８】
2005506379.tif 000069
【０１７４】
【表９】
2005506379.tif 000070
【０１７５】
【表１０】
2005506379.tif 000071
【０１７６】
【表１１】
2005506379.tif 000072
【０１７７】
ＬＣ−ＭＳ方法：
Ａ：Ｓｙｍｍｅｔｒｙ  Ｃ−１８，３．５μｍ，２．１×５０mm; ７０℃；０．５ｍｌ/ｍｉｎ; 移動相Ａ＝アセトニトリル＋０．１％蟻酸、移動相Ｂ＝水＋０．１％蟻酸、グラジエント：０．０ｍｉｎ(分)１０％Ａ→４分９０％Ａ→６分９０％Ａ
【０１７８】
Ｂ：ＬｉＣｈｒｏｓｐｈｅｒ  １００  ＲＰ  １８．５μｍ，４０℃；２．５ｍｌ/ｍｉｎ; 移動相Ａ＝アセトニトリル＋０．０５％トリフルオロ酢酸、移動相Ｂ＝水＋０．０５％トリフルオロ酢酸、グラジエント：０．０ｍｉｎ(分)１０％Ａ→３．０分９０％Ａ→４分９０％Ａ
【０１７９】
Ｃ：Ｓｙｍｍｅｔｒｙ  Ｃ−１８，３．５μｍ，２．１×５０ｍｍ;４０℃；０．５ｍｌ/ｍｉｎ; 移動相Ａ＝アセトニトリル＋０．１％蟻酸、移動相Ｂ＝水＋０．１％蟻酸、グラジエント：０．０ｍｉｎ(分)１０％Ａ→４．０分９０％Ａ→６分９０％Ａ
【０１８０】
Ｄ：Ｓｙｍｍｅｔｒｙ  Ｃ−１８，５μｍ，２．１×１５０ｍｍ;７０℃；１．２ｍｌ/ｍｉｎ; 移動相Ａ＝アセトニトリル、移動相Ｂ＝水＋０．３ｇ３０e％塩酸/ｌ、グラジエント：０．０ｍｉｎ(分)２％Ａ→２．５分９５％Ａ→５分９５％Ａ
【０１８１】
Ｅ：Ｓｙｍｍｅｔｒｙ  Ｃ−１８，３．５μｍ，２．１×５０ｍｍ;２４℃；０．７５ｍｌ/ｍｉｎ; 移動相Ａ＝アセトニトリル＋０．１％蟻酸、移動相Ｂ＝水＋０．１％蟻酸、グラジエント：０．０ｍｉｎ(分)１０％Ａ→４分９０％Ａ→５．５分９０％Ａ
【０１８２】
Ｆ：ＹＭＣ−ＯＤＳ−ＡＱ，３μｍ，２．１×５０ｍｍ;室温；０．８ｍｌ/ｍｉｎ; 移動相Ａ＝水＋０．０５％蟻酸、移動相Ｂ＝アセトニトリル＋０．０５％蟻酸、グラジエント：０．０ｍｉｎ(分)１００％Ａ→２．９分３０％Ａ→３．１分１０％Ａ→４．５分１０％Ａ
【０１８３】
実施例Ａ
細胞転写活性化アッセイ（Cellular transactivation assay）
【０１８４】
テスト原理
ペルオキシーム増殖剤応答性受容体（ＰＰＡＲ）−デルタ（ＰＰＡＲ−ｄｅｌｔａ）の活性体を特定化、識別するのに、細胞アッセイが使用される。
哺乳類の細胞は、結果を明確に解釈することを複雑化する可能性のある内因性の核内レセプターを含んでいるので、確立されているキメラシステム(chimera system)を使用する。そのシステムにおいては、ヒトのＰＰＡＲδ受容体のリガンド結合ドメインは、酵母の転写活性因子ＧＡＬ４のＤＮＡ結合ドメインと融合している。その結果得られるＧＡＬ４−ＰＰＡＲδ  キメラは、コトランスフェクト(co-transfected)され、レポーターコンストラクト(reporter construct)を有しているチャイニーズハムスターオバリー（ＣＨＯ）細胞において安定して発現する。
【０１８５】
クローニング：
ＧＡＬ４−ＰＰＡＲδ発現コンストラクト(expression construct)は、ＰＰＡＲδ（アミノ酸  ４１４−１３２６）のリガンド結合ドメインを含んでいるが、ＰＣＲ法によって増幅され、ベクターｐｃＤＮＡ３．１の中にクローニングされる。このベクターは、すでに、ベクターｐＦＣ２−ｄｂｄ（Strategene）のＧＡＬ４  ＤＮＡ結合ドメインを含んでいる（アミノ酸１−１４７）。レポーターコンストラクトは、チミジンカイネース(thymidine kinease)プロモター上流のＧＡＬ４結合サイトを５個のコピーを包含しているが、ＧＡＬ４-の活性化およびＧＡＬ４−ＰＰＡＲδの結合に伴って、蛍光のルシフェラーゼ(Photinus pyralis)を発現する。
【０１８６】
転写活性化アッセイ（ルシフェラーゼレポーター）
ＣＨＯ(Chinese hamster ovary)を、ＣＨＯ−Ａ−ＳＦＭ培地（ＧＩＢＣＯ）に植え付け、２．５％の子牛の胎児血清、１％のペニシリン/ストレプトマイシン（ＧＩＢＣＯ）を、３８４ウエルプレート（Greiner）において、ウエルにつき２×１０３のセルデンシティ(cell density)でさらに追加した。細胞を３７℃で４８時間培養し、ついで、刺激を与える（stimulated)。この目的のために、試験化合物を上記の培地から取り、細胞に加える。２４時間にわたる刺激（stimulation）の後、ルシフェラーゼ活性をビデオカメラを使用して、測定する。測定される相対的な光のユニット（units)により、物質濃度の機能として、Ｓ字状の刺激の曲線（sigmoidal stimulation）が作成される。ＥＤ５０値は、コンピュータープログラム  GraphPad PRISM(Version ３，０２)を使用して、計算される。
【０１８７】
このテストによって、本発明における実施例１，２，３，４，６，８、および９の化合物について、ＥＤ５０値は、１から１００ｎΜであることが判明する。
【０１８８】
実施例Ｂ
ヒトＡｐｏＡ１遺伝子（hApoA1）でトランスフェクト（transfect）されたトランスジェニックマウスの血清のＨＤＬコレステロール（ＨＤＬ−Ｃ）濃度を増加し、および/または脂肪ob/obマウス(adipose ob,ob mice)のメタボリック症候群に対する効果および血中のグルコース濃度を低下させる薬理学的に活性のある物質を見出す試験の説明
【０１８９】
ＨＤＬ−Ｃを増加させる活性に関して、イン・ビボ（in vivo）において検討される物質が、雄のトランスジェニックｈＡｐｏＡ１マウスに経口的に投与される。実験の一日前に、動物は、同じ数、一般的には７から１０（ｎ=７−１０）になるようにグループに無作為に分ける。実験全体において、動物には、水を与えたり、自由に食べさせる（feed as libitum）。物質は７日間、一日に一度経口的に投与される。このため、試験物質は、Soltol HS 15,エタノールおよび食塩水（０．９％）をそれぞれ１：１：８の溶液、またはSoltol HS および食塩水（０．９％）をそれぞれ２：８の溶液に溶解する。溶解される物質は、胃管を通して、重量％で１０ｍｌ/ｋｇの量を投与される。体重あたり１０ｍｌ／ｋｇの溶剤のみを与え、試験物質を与えず、そのほかはまったく同様な方法で処理される動物群をコントロール群として使用する。
【０１９０】
物質の最初の投与前に、静脈(retroorbital venous plexus)から穿刺によってそれぞれのマウスから血液サンプルをとり、ＡｐｏＡ１、血清コレステロール、ＨＤＬ−Ｃおよび血清トリグリセリド（ＴＧ）を決定する(zero value とするため)。次に、胃管を用いて、試験物質を最初に動物に投与する。物質の最後の投与の２４時間後に（最初の処理から８日目）、もう一つの血液サンプルをそれぞれの動物から、静脈穿刺によって得、同様のパラメーターを決定する。血液サンプルは遠心分離の後、血清を得、コレステロールおよびＴＧを、ＥＰＯＳアナライザー  ５０６０（Eppendorf-Geraetebau,Netheler & Hinz Gmbh, Hamburg）を用いて、光度計により決定する。上記の決定は、市販の酵素試薬・試験法（commercial enzyme tests）（Boehringer Mannheim, Mannheim）を用いて行われる。
【０１９１】
ＨＤＬ−Ｃを決定するには、ＨＤＬ−Ｃでないフラクションを、０．２Ｍのグリシンバッファー（ＰＨ：１０）中の２０％ＰＥＧ８０００を用いて、沈殿させる。上澄み液から、コレステロール値は商業的に手に入る試薬（Ecoline 25, Merck, Darmstadt)、を用いて、９６のウエルプレートで、ＵＶ測光（UV-photometrically)によって決定する。
【０１９２】
Ｈｕｍａｎ  Ｍｏｕｓｅ  ＡｐｏＡ１は、ポリクローナル  ａｎｔｉｈｕｍａｎ  ＡｐｏＡ１  およびモノクローナル  ａｎｔｉｈｕｍａｎ  ＡｐｏＡ１抗体（Biodesighn International,USA)を用いて、Ｓａｎｄｗｉｃｈ  ＥＬＩＳＡ法で決定される。定量については、ペルオキシダーゼ−カップルド  アンチ−マウス−IGG 抗体（peroxidase-coupled anti-mouse-IGG antibodies)(ＫＰＬ，ＵＳＡ）およびペルオキシダーゼ  サブストレート（peroxidase substrate)（KPL,USA)を用いて、ＵＶ測光（UV-photometrically)（BIO-TEK Instrument,USA)によっておこなわれる。
【０１９３】
試験物質のＨＤＬ−Ｃ濃度に対する効果は、２番目の血液サンプル（処理後）の測定値から最初の血液サンプル（zero value)の測定値を差し引くことによって決定される。ひとつの群のすべてのＨＤＬ−Ｃ値の平均の差（mean of difference)を決定し、コントロールの差の平均と比較する。
【０１９４】
統計学的評価は、ばらつき（variances)を均質化（homogeneity)するためのチェックをした後、t-testを用いておこなう。
【０１９５】
処理された動物のＨＤＬ−Ｃを有意（ｐ＜０．０５）に少なくても１５％増加させる物質は、コントロール群と比較して、薬理学的に効果があるとみなされる。
【０１９６】
効果にある物質が、メタボリック症候群（metabolic syndrome)への影響を検討するには、インシュリン抵抗性を有し、かつ血中のグルコースレベルを増加させる動物が使用される。この目的のためには、Ｃ５７Ｂ１／６Ｊ  Ｌｅｐ＜ｏｂ＞マウスが、トランスジェニックＡｐｏＡ１マウスのためと同様のプロトコールを用いて、処理される。血清脂質は、上記に述べられているように決定される。これらの動物において、血清中のグルコースは、血中のグルコースのパラメーターとして、付加的に決定される。血清グルコースは、商業上利用可能な酵素試験方法・試薬（Boehringer Mannheim)を用い、ＥＰＯＳ  Ａｎａｌｙｚｅｒ  ５０６０（上記参照）において、酵素学的に決定される。
【０１９７】
試験物質の血中のグルコース低下効果は、２番目の血液サンプル（処理後）の測定値から最初の血液サンプル（zero value)の測定値を差し引くことによって決定される。ひとつの群のすべて血清グルコース値の平均の差（mean of difference)を決定し、コントロールの差の平均と比較する。
【０１９８】
統計学的評価は、ばらつき（variances)を均質（homogeneity)のためにチェックした後、t-testを用いておこなう。
【０１９９】
処理された動物の血清グルコースを有意（ｐ＜０．０５）に少なくても１０％低下させる物質は、コントロール群と比較して、薬理学的に効果があるとみなされる。
【国際公開パンフレット】
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2005506379.tif 000083
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2005506379.tif 000169
2005506379.tif 000170
【国際調査報告】
2005506379.tif 000171
2005506379.tif 000172
2005506379.tif 000173
2005506379.tif 000174
2005506379.tif 000175
2005506379.tif 000176
2005506379.tif 000177
2005506379.tif 000178