(57)【要約】本発明は、コレステロールレベルを低下させるための、ペルセア・アメリカーナ変種ドリミフォリアを含む組成物に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
コレステロールレベルを下げるのに有効な量のペルセア・アメリカーナ変種ドリミフォリア葉を含むことを特徴とする組成物。
【請求項２】
前記組成物が、お茶の形態である請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記組成物が、食餌補助食品である請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
前記組成物が、全血中コレステロールレベルを約10%〜約40%低下させる請求項１に記載の組成物。
【請求項５】
前記ペルセア・アメリカーナ変種ドリミフォリア葉が、約11μの平均粒径を有する請求項１に記載の組成物。
【請求項６】
前記ペルセア・アメリカーナ変種ドリミフォリア葉が、約0.01%〜約0.05%の量で存在する請求項１に記載の組成物。
【請求項７】
前記ペルセア・アメリカーナ変種ドリミフォリア葉が、約0.04%の量で存在する請求項１に記載の組成物。
【請求項８】
前記ペルセア・アメリカーナ変種ドリミフォリア葉が、約9μ〜約28μの平均粒径を有する請求項１に記載の組成物。
【請求項９】
約0.1mg/ml〜約0.5mg/mlのペルセア・アメリカーナ変種ドリミフォリア葉を含むことを特徴とするお茶。
【請求項１０】
有効量のペルセア・アメリカーナ変種ドリミフォリア葉を被験者に投与することを特徴とするコレステロールレベルを低下させる方法。
【請求項１１】
前記ペルセア・アメリカーナ変種ドリミフォリア葉が、全血中コレステロールレベルを約10%〜約35%低下させる請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記ペルセア・アメリカーナ変種ドリミフォリア葉の有効量が、約0.01%〜約0.05%である請求項１０に記載の方法。
【請求項１３】
コレステロール低下組成物の調製方法であって、以下の工程、
(a)ペルセア・アメリカーナ変種ドリミフォリア葉を乾燥させる工程、
(b)前記葉を約9μ〜約28μの平均粒径に製粉する工程、及び
(c)約0.1mg/ml〜約0.5mg/mlの沸騰水中で、製粉された葉を加熱する工程、
を含むことを特徴とする方法。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
（技術分野）
本発明は、コレステロールを低下させる組成物及び方法に関する。更に具体的に述べれば、本発明は、ヒトのコレステロールレベルを低下させるペルセア・アメリカーナ変種ドリミフォリア(Persea americana var. drymifolia)種（以下「ドリミフォリア」を意味する）のアボカドの葉を有する組成物及び方法に関する。
（背景技術）
コレステロールは、血流及びヒト体内の細胞内の脂質に見出される柔らかで、蝋質の物質である。コレステロールは、必須の身体上の機能を果たすが、血中の高すぎるコレステロールレベルは、心疾患の危険性を増加させるため、ヒトの健康に有害となり得る。高コレステロールは、ヒトの全血中コレステロールレベルが、240mg/dlより大きいか又はヒトの低密度リポタンパク質レベルが、160mg/dlより大きいことを一般的に意味する（Cleeman, James I. , Executive Summary of the Third Report of the National Cholesterol Education Program (NCEP) Expert Panel on Detection, Evaluation, and Treatment of High Blood Cholesterol in Adults (Adult Treatment Panel III), JAMA 285 (19): 2486-2497 (2001)を参照されたい。）。約4千130万人のアメリカ人が、240mg/dL以上の全血中コレステロールレベルを有する（American Heart Association, Biostatistical Fact Sheet, www. americanheart. org (2002)を参照されたい。）。血中コレステロールがこれらの高レベルに達すると、コレステロールは、血中に溶解しないので動脈壁上に蓄積し得る。むしろ、コレステロールは、低密度リポタンパク質(LDL)及び高密度タンパク質(HDL)と呼ばれる特別なキャリヤーによって細胞へ及び細胞から輸送されなくてはならない。HDLは、コレステロールを動脈から運び去り、従って「良性コレステロール」と考えられる。過剰のLDLコレステロールは、心臓へ向かう動脈を詰まらせ得、また従って「悪性コレステロール」と考えられる。アテローム性動脈硬化症と呼ばれるこの状態は、血栓、心臓麻痺及び脳梗塞を増加させる。
【０００２】
従って、体内のコレステロールレベルの制御についてかなりの興味が存在する。スタチン(statin)と呼ばれるいくつかの分類の有用な脂質-制御薬理学的な仲介物が存在する。ある共通のスタチンは、Lipitor（登録商標）である。これらの薬剤は、臨床試験で安全であることが証明されているが、いかなる薬物のように副作用をもたらす危険性を有する。最も顕著な副作用は、筋肉の痛み及び衰弱のような現象となる筋障害である。さらに、患者がスタチン治療を受ける場合、副作用又は薬物相互作用の可能性を最小にすることが重要である（Davidson, Michael H. , Treatment of the Elderly with 3-Hydroxy-3-Methylglutaryl Coenzyme A Reductase Inhibitors: Focus on Drug Interactions,J Cardiovasc Pharmacol Therapeut, 6 (3): 219-229 (2001)を参照されたい。）。成人治療委員会(Adult Treatment Panel)において、国立コレステロール教育プログラム(the National Cholesterol Education Program)は、異脂肪血症(dyslipidemias)について、アジュバント療法において植物由来の物質の使用を薦める（上記Cleemanを参照されたい）。従って、有効かつ安全なコレステロール減少の天然代替物が望まれている。
（本発明の開示）
本発明は、変種ドリミフォリアに由来するアボカド葉を含む、コレステロールレベルを減少させる組成物である。一つの態様において、この葉は、茶葉としての消費のために乾燥され、また製粉される。驚くべきことに、ドリミフォリアの葉は、Lipitor（登録商標）に匹敵するコレステロール低下効果及び、北アメリカで通常育成するアボカドであるペルセア・ヌビゲナ変種グアタマレンシスcv.ナバル(Persea nubigena var. guatamalensis cv. Nabal)及びペルセア・ヌビゲナ変種グアタマレンシスcv.ハス(Persea nubigena var. guatamalensis cv. Haas)より一層大きいコレステロール低下効果を示す。
本発明のこれらの及び他の特徴及び利点は、図面及び好ましい態様の詳細な説明に言及することにより一層理解されるだろう。他に記載されない限り、本明細書及び添付の特許請求の範囲に示される全ての割合は、質量%を意味することに注意すべきである。
【０００３】
（本発明の実施のベストモード）
本発明は、変種、ペルセア・アメリカーナ変種ドリミフォリア（「ドリミフォリア」）から由来するアボカド葉を含む。この品種は、北アルゼンチンで入手できる。コレステロール低下を生じさせる葉の特定の物質は、まだ理解されていない。しかし、生の植物/ハーブの活性成分は、植物/ハーブが死ぬ又は腐敗するに従って、一般分解するか、有効性が減少することは、ハーブ産業において通常理解される原理である。アルゼンチンから米国への出荷において、生のドリミフォリアのコレステロール減少能力を維持するために、生のドリミフォリア葉は好ましくは約15℃(60°F)〜約26℃(80°F)の平均室温で空気乾燥される。この温度範囲が、葉が消費のため準備されるまで維持される。驚くべきことに、このプリコンディショニング工程は、コレステロール低下において、ドリミフォリアの有効性を持続する。
一旦乾燥されると、葉は、好ましく手で粉砕される。この手で粉砕された葉は、ペルセア・ヌビゲナ変種グアタマレンシスcv.ナバル（「ナバル」）の果実及び葉、及びペルセア・ヌビゲナ変種グアタマレンシスcv.ハス（「ハス」）の葉よりコレステロール低下活性を示す。更に好ましくは、乾燥させた葉を2mmスクリーンを使用して製粉し、約28μの平均粒径までこの葉を製粉する。より更に好ましくは、この葉を1mmスクリーンを使用して２回製粉し、約9μの平均粒径を提供しても良い。最も好ましくは、乾燥された葉は、1mmスクリーンで製粉し、約11μの平均粒径を提供してもよい。製粉は、GlenMills hammer mill bench top unit (Mot. KM 80-60, Culatti Typ MFC)を使用して実施され得る。製粉されたドリミフォリア葉は、手で粉砕されたドリミフォリア葉より大きいコレステロール減少を示した。製粉された及び乾燥された葉は、お茶、カプセル、錠剤、クリーム、ゲル、液体、及び食品の形態で使用され得ることは企図される。しかし、模範的な目的のために、お茶の形態の調製及び消費を記載する。
【０００４】
このお茶は、1mlの水あたり10mgの手で粉砕されたドリミフォリア葉又は製粉されたドリミフォリア葉10mgを調製することにより、1%抽出物として調製される。一つの態様において、100mgのドリミフォリア葉を、10mlの水中に置き、お茶を形成する。このお茶を約1分〜約10分間沸騰させる。更に好ましくは、このお茶を約3分〜約7分間及び、最も好ましくは、約5分間沸騰させる。ドリミフォリア葉を水に浸漬させた後又は時点で水を沸騰させてもよい。沸騰時間はお茶の容積によって変化する事は当業者であれば理解できるだろう。
（ドリミフォリアの比較研究）
約11μの平均粒径を有する製粉されたドリミフォリア葉を含むドリミフォリア茶の有効性を試験するために、手で粉砕されたドリミフォリア葉を含む茶、Lipitor（登録商標）、ハスの果実、及び製粉されたハスの葉及び約11μの平均粒径を有するナバルを使用して比較試験を実施した。Lipitor（登録商標）をメタノール/緩衝溶液中で調製し、アトロバスタチン、すなわちLiptor（登録商標）(400mg活性/600mg錠剤)の活性成分を可溶化する。すべての試験材料を変化する分量で血清培養液に適用した。
約11μの平均粒径を有するドリミフォリア葉を含む茶をDulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM, Catalogue #; 11965, In Vitrogen Corporation, 1600 Faraday Avenue, P. O. Box 6482, Carlsbad, California 92008)に最終濃度約0.1mg/ml〜約0.5mg/mlのドリミフォリアまで連続希釈法（又は0.01%〜0.05%のドリミフォリア葉）によって添加した。更に好ましくは、最終濃度は、約0.2mg/ml〜約0.4mg/mlのドリミフォリア葉及び、最も好ましくは約0.4mg/mlのドリミフォリア葉である。この培養液は、コレステロール合成を含む細胞維持に対して全ての必要な栄養素を提供する。
【０００５】
【表１】
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【０００６】
分泌されたコレステロール及びコレステロールエステルの量を、蛍光指示薬Amplex Redを使用してアセテート供給した肝細胞培養液から測定した。図１に示されるように、製粉されたドリミフォリア葉の効果は、Lipitor（登録商標）の効果に匹敵する。結果は約11μの平均粒径を有する製粉されたドリミフォリア葉は、水抽出がそれぞれなされる場合、手で粉砕されたドリミフォリア葉より有利な結果を有することをさらに示す。肝細胞の応答は、治療後の細胞生存がMTT (3- [4, 5-ジメチルチアゾール-2イル] -2, 5-ジフェニルテトラゾリウム ブロミド、ミズーリ州、セントルイスのシグマ社)減少アッセイで評価される場合、治療される投与量に関連する毒性をほとんど又は全く示さない。
図２は、製粉されたドリミフォリア葉の製粉されたハス及びナバルの葉に対する効果を示す。図２は、ドリミフォリア葉は、コレステロール合成/分泌の減少において、ハス又はナバルより有利な効果を有することを示す。
図３は、ハス果実のコレステロール阻害効果が、製粉されたドリミフォリア葉のその効果と比較して評価され、製粉された葉は、果実より一層好ましい応答を再び発揮する。
上記は、発明の好ましい態様であると現在考えられているものを説明するが、当業者であれば、変化及び改良が、本発明の意図から離脱さずにさらになされることを理解するだろう。本発明の真の範囲内にあるいかなるそのような変化及び改良が、特許請求の範囲に企図される。
【図面の簡単な説明】
【０００７】
【図１】コレステロール放出において、Lipitor（登録商標）と比較した、手で粉砕された及び製粉されたドリミフォリアの葉に対する肝細胞G2細胞の投与量特異的な応答を示すグラフである。
【図２】コレステロール放出において、ペルセア・ヌビゲナ変種グアタマレンシスcv.ナバルの製粉された葉及びペルセア・ヌビゲナ変種グアタマレンシスcv.ハスの製粉された葉と比較した、製粉されたドリミフォリアの葉に対する肝細胞G2細胞の投与量特異的応答を示すグラフである。
【図３】コレステロール放出において、ペルセア・ヌビゲナ変種グアタマレンシスcv.ハスの果実と比較した、製粉されたドリミフォリアの葉に対する肝細胞G2細胞の投与量特異的応答を示すグラフである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【国際調査報告】
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