(57)【要約】本発明は、デヒドロエピアンドロステロン、その１又は複数の類似体もしくは塩をそれ自身又は医薬的もしくは獣医学的に許容できる担体もしくは希釈剤と共に含んで成り、そして粒子サイズが約0．1μm〜約１００μmを有する粉末状製剤が入っている密封された容器に関連する。この製剤は、喘息、慢性閉塞性疾患、肺炎、及び他の呼吸器系の疾患又は症状を治療するために使用することができうる。この製剤は、ジェット微粉砕によって調製されて良く、そして噴霧器を使用することで気管支又は他の経路を通じてデリバリーされて良い。前記密封された容器は、装置及び/又は治療キットにて提供されている。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ある剤を含んで成る粉末状医薬組成物を含む密封容器であって、当該剤は、式（Ｉ）、（II）、（III）、（IV）もしくは（Ｖ）に記載されたような化合物、又は医薬的もしくは獣医学的に許容できるそれらの塩、又はそれらの水和物形態；
【化１】
2005537296.tif 000024
（式中、
破線は単結合又は二重結合を示し；
Rは水素又はハロゲンであり；
５位におけるHはαもしくはβ配置中に存在するかあるいは式（Ｉ）の化合物は両方の配置の異性体もしくはラセミ混合物のいずれかを含んで成り；
そしてR1は水素又は化学式（Ｉ）の化合物に対して共有結合した多価無機もしくは有機ジカルボン酸である）；
【化２】
2005537296.tif 000025
（式中、
R1、R2、R3、R4、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14及びR19は独立してH、OH、ハロゲン、C1〜10アルキル又はC1〜10アルコキシであり；
R5はH、OH、ハロゲン、C1〜10アルキル、C1〜10アルコキシもしくはOSO2R20であり；
R15は（１）R16がC（O）OR21である場合、H、ハロゲン、C1〜10アルキルもしくはC1〜10アルコキシである、又は（２）R16がH、ハロゲン、OHもしくはC1〜10アルキルである場合、H、ハロゲン、OHもしくはC1〜10アルキルである、又は（３）R16がOHである場合、H、ハロゲン、C1〜10アルキル、C1〜10アルケニル、C1〜10アルキニル、ホルミル、C1〜10アルカノイルもしくはエポキシであり；
又はR15とR16は一緒に＝Oであり；
R17及びR18は独立して（１）R16がH、OH、ハロゲン、C1〜10アルキルもしくは−C（O）OR21である場合、H、OH、ハロゲン、C1〜10アルキルもしくはC1〜10アルコキシであり、又は（２）R15とR16が一緒に＝Oである場合、H、（C1〜10アルキル）nアミノ、（C1〜10アルキル）nアミノ−C1〜10アルキル、C1〜10アルコキシ、ヒドロキシ−C1〜10アルキル、C1〜10アルコキシ−C1〜10アルキル、（ハロゲン）m−C1〜10アルキル、C1〜10アルカノイル、ホルミル、C1〜10カルボアルコキシもしくはC1〜10アルカノイルオキシであり；
又はR17とR18は一緒に＝Oであるかあるいは一緒に炭素原子に対して結合し酸素原子を０又は１個含む３〜６員環を形成し；
又はR15とR17は一緒に炭素原子に結合しエポキシド環を形成し；
R20はOH、医薬的に許容できるエステル又は医薬的に許容できるエーテルであり；
R21は、H、（ハロゲン）m−C1〜10アルキル又はC1〜10アルキニルであり；
nは、０、１又は２であり；
mは１、２又は３であり、但し、
（a）R3は、R1、R2、R4、R6、R7、R9、R10、R12、R13、R14、R17及びR19がHであり、そしてR5がOHもしくはC1〜10アルコキシでありR8がH、OHもしくはハロゲンであり、そしてR11がHもしくはOHであり、そしてR18がH、ハロゲンもしくはメチルでありそしてR15がHでありそしてR16がOHである場合、H、OHもしくはハロゲンではなく；
（b）R3は、R1、R2、R4、R6、R7、R9、R10、R12、R13、R14、及びR19がHでありそしてR5がOHであるかもしくはC1〜10アルコキシであり、そしてR8がH、OHもしくはハロゲンであり、そしてR11がHもしくはOHであり、そしてR18がH、ハロゲンもしくはメチルであり、そしてR15とR16が一緒に＝Oである場合、H、OHもしくはハロゲンではなく；
（c）R5は、R1、R2、R3、R4、R6、R7、R8、R9、R10、R12、R13、R14及びR17がHであり、そしてR11がH、ハロゲン、OHもしくはC1〜10アルコキシであり、そしてR18がHもしくはハロゲンであり、そしてR15とR16が一緒に＝Oである場合、H、ハロゲン、C1〜10アルコキシもしくはOSO2R20ではなく；そして、
（d）R5は、R1、R2、R3、R4、R6、R7、R8、R9、R10、R12、R13、R14、及びR17がHであり、そしてR11がH、ハロゲン、OHもしくはC1〜10アルコキシであり、そしてR18がH、もしくはハロゲンであり、そしてR15がHであり、そしてR16がH、OHもしくはハロゲンである場合、H、ハロゲン、C1〜10アルコキシもしくはOSO2R20ではない）；
【化３】
2005537296.tif 000026
（式中、RはA−CH（OH）−C（O）−であり、そしてAは水素又は（C1〜C22）アルキルもしくはアルケニル基であり、ここで（C1〜C22）アルキルもしくはアルケニル基は置換されない又は１もしくは複数の（C1〜C4）アルキル基、フェニル、ハロゲンもしくはヒドロキシル基により置換されて良く、当該フェニル基は置換されない又は１もしくは複数のハロゲン、HOもしくはCH3Oにより置換されて良い）
を含んで成り、ここで前記粉末状医薬組成物は、呼吸可能又吸入可能なサイズの粒子である、密封容器。
【請求項２】
前記多価無機酸が、SO2OM、リン酸塩又は炭酸塩であり、ここでMは、H、Na、スルファチド
【化４】
2005537296.tif 000027
及びフォスファチド
【化５】
2005537296.tif 000028
（式中、R2及びR3は、同じ又は異なっても良く、直鎖状もしくは枝分かれした（C1〜C14）アルキルもしくはグルクロニド
【化６】
2005537296.tif 000029
である）
からなる群から選択されており、ここで当該多価有機ジカルボン酸がコハク酸塩、マレイン酸塩、又はフマル酸塩である、請求項１に記載の密封容器。
【請求項３】
前記粉末状医薬組成物が更に、医薬的又は獣医学的に許容できる賦形剤を含んで成る、請求項１に記載の密封容器。
【請求項４】
前記賦形剤が、ラクトース、ヒトタンパク質、ウシ血清アルブミン、ゼラチン、免疫グロブリン、ガラクトース、D−マンノース、ソルボース、トレハロース、スクロース、シクロデキストリン、ラフィノース、マルトデキストリン、デキストラン、グルタミン酸ナトリウム、グリシン、アラニン、アルギニン又はヒスチジン、トリプトファン、チロシン、ロイシン、フェニルアラニン、ベタイン、硫酸マグネシウム、ステアリン酸マグネシウム、グリセリン、エリトリトール、グリセロール、アラビトール、キシリトール、ソルビトール、マンニトール；プロピレングリコール；ポリエチレングリコール；プルロニクス（pluronics）；界面活性剤（脂質及び非脂質界面活性剤）及びそれらの組み合わせから選択された１つである、請求項２に記載の密封容器。
【請求項５】
前記賦形剤がラクトースである、請求項３に記載の密封容器。
【請求項６】
前記剤が化学式（II）：
【化７】
2005537296.tif 000030
によって記載された化合物を含んで成る、請求項１に記載の密封容器。
【請求項７】
前記粉末医薬組成物は、噴霧器、乾燥粉末吸入器、吸入器、又はエアロゾルもしくはスプレー生成器を使用しデリバリー可能である、請求項１に記載の密封容器。
【請求項８】
前記粉末医薬組成物がジェット微粉砕化により生産されている、請求項１に記載の密封容器。
【請求項９】
８０％超の粒子が直径約０.１μm〜約１００μmである、請求項１に記載の密閉容器。
【請求項１０】
８０％超の粒子が約０.１μm〜約５０μmである、請求項９に記載の密閉容器。
【請求項１１】
８０％超の粒子が約０.１μm〜約１０μmである、請求項１０に記載の密閉容器。
【請求項１２】
９０％超の粒子が約０.１μm〜約５μmである、請求項１１に記載の密閉容器。
【請求項１３】
アデノシンA1レセプターの阻害物質、アデノシンA2bレセプターの阻害物質、アデノシンA3レセプターの阻害物質、アデノシンA2aレセプター刺激剤、抗炎症剤、抗細菌剤、抗敗血症剤、腎臓活性維持又は回復剤、及び肺血管収縮、炎症、アレルギー、喘息、呼吸障害、呼吸窮迫症候群、疼痛、のう胞性繊維症（CF）、肺高血圧症、肺血管収縮、気腫、慢性閉塞性肺疾患（COPD）、アレルギー性鼻炎（AR）、SARS、及び肺ガンから選択された治療剤を更に含んで成る、請求項１に記載の密封容器。
【請求項１４】
前記密封容器が、真空密封されている請求項１に記載の密封容器。
【請求項１５】
請求項１に記載の密封容器及び医薬組成物のための医薬的に許容できる推進剤を含む第二密封容器を含んで成るキット。
【請求項１６】
更に噴霧器を含んで成る、請求項１５に記載のキット。
【請求項１７】
喘息の予防もしくは治療を必要とする対象者に対して治療上有効な量の粉末状医薬組成物を請求項１に記載の密封容器から投与することを含んで成る、喘息の予防もしくは治療するための方法。
【請求項１８】
慢性閉塞性肺疾患の予防もしくは治療を必要とする対象者に対して治療上有効な量の粉末状医薬組成物を請求項１に記載の密封容器から投与することを含んで成る、慢性閉塞性肺疾患の予防もしくは治療するための方法。
【請求項１９】
対象者の組織のアデノシンを減少もしくは枯渇せしめるための治療を必要とする対象者に対して治療上有効な量の粉末状医薬組成物を請求項１に記載の密封容器から投与し、対象者の組織におけるアデノシンレベルを減少もしくは枯渇せしめることを含んで成る、対象者の組織中の、アデノシンを減少もしくは枯渇せしめるための方法。
【請求項２０】
前記対象者が、気道炎症、アレルギー、喘息、呼吸障害、のう胞性繊維症、慢性閉塞性肺疾患、アレルギー性鼻炎、急性呼吸窮迫症候群、微生物感染症、SARS、肺高血圧症、肺炎、気管支炎、気道閉塞、又は気管支収縮を患う、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
患者の組織中の高レベルのアデノシン、もしくは患者の組織中のアデノシンに対する感受性に関連した疾患もしくは症状の予防もしくは治療のための方法であって、かかる予防もしくは治療を必要とする対象者に対して治療上有効な量の粉末状医薬組成物を請求項１に記載の密封容器から投与し、対象者の組織中のアデノシンレベルを下げて疾患を予防もしくは治療することを含んで成る、予防もしくは治療のための方法。
【請求項２２】
前記疾患又は症状が、気道炎症、アレルギー、喘息、呼吸障害、のう胞性繊維症、慢性閉塞性肺疾患、アレルギー性鼻炎、急性呼吸窮迫症候群、微生物感染症、SARS、肺高血圧症、肺炎、気管支炎、気道閉塞、又は気管支収縮である、請求項２１に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の背景
本願は、２００２年６月１７日に提出された米国特許出願第60/389,242号の優先権を主張し；２００３年６月１１日に提出された米国特許出願（代理人整理番号02486.0077PZUS00）の非仮出願の優先権を主張する。
【０００２】
発明の分野
本発明は、噴霧可能形態において密封されている、医薬的もしくは獣医学的に許容できる担体及びデヒドロエピアンドロステロン（DHEA）、DHEA類似体、又は医薬的もしくは獣医学的に許容できるその塩を含んで成る吸入可能乾燥粉末状製剤に関連する。そしてまた、前記乾燥粉末状製剤を調製及びデリバリーするための方法及び喘息、慢性閉塞性疾患（COPD）、又は他の呼吸器系の疾患もしくは症状、例えば、微生物（細菌など）もしくはウィルスにより生じた呼吸器系の疾患、例えば、重症急性呼吸器症候群（SARS）を治療するための方法に関連する。前記密封された製剤は、キットの形態にて提供されている。
【背景技術】
【０００３】
背景の説明
喘息及びCOPD及び、様々な疾患及び症状を伴う、呼吸器系の他の病気は、一般的集団に非常に共通し、そして所定の民族集団、例えば、アフリカ系アメリカ人などに特に共通する。呼吸器系の病気には、微生物感染症又はウィルス感染症（SARSなど）が含まれる。多くの場合、それらは炎症を伴い、それにより肺の状態が悪化する。例えば、喘息は文明諸国において最も共通する疾患の一つである。米国では、それがヘルスケアコストの１％を占めるとされている。過去１０年に渡り、喘息の流行と死亡率の両方の驚くべき増加が報じられており、そして喘息は次の十年間でも突出した支配的肺疾患であろうと予測されている。しかも、先進工業諸国での喘息の死亡率の増加は、喘息の内在原因の理解が乏しいままであり、この疾患の治療においてβアゴニストに依存することが原因であろう。
【０００４】
喘息は、気道の可変性の、多くの場合は可逆性閉塞を特徴とする症状である。この過程は、肺の炎症及びある場合には肺アレルギーと関連する。多くの患者が「喘息発作」に言及される急性のエピソードを有し、その一方で、慢性症状に悩まされている者もいる。この喘息の過程は、ある場合においては、敏感な対象者による抗原の吸入によって誘発されると考えられている。この症状は一般に「外因性喘息」に言及されている。他の喘息は、症状に対する内因性の素因を有し、従って、それは「内因性喘息」に言及されており、そして起源が様々な症状、例えば、１又は複数のアデノシンレセプターによって介在されるもの、免疫IgE介在反応によって介在されるアレルギー症状などからなる。全ての喘息はある群の症状を有し、それらはこの症状の特徴である：気管支収縮、肺の炎症及び肺の界面活性物質の減少である。既存の気管支拡張剤及び抗炎症剤が現在商業上入手可能であり、そしてそれは喘息の治療のために処方されている。最も共通する抗炎症薬、即ち、コルチコステロイドは有意な副作用を有するが、それにもかかわらずそれらは普通に処方されている。喘息の治療のために使用可能な薬物の大部分は、更に重要なこととして、ある少数の患者においては殆ど効かないことである。
【０００５】
慢性閉塞性肺疾患（COPD）は、気道における空流の連続的な閉塞を生じる。COPDは、慢性気管支炎、気腫、又はその両方によって一般に生じる気流の閉塞を特徴とする。共通して、気道閉塞は大部分が不可逆的である。慢性気管支炎において、気道閉塞は、気道粘液の異常な慢性的且つ過剰な分泌、炎症、気管支痙攣、及び感染症によりもたらされる。慢性気管支炎は、慢性の咳、粘液生産、又はその両方をも特徴とし、慢性の咳の他の原因が除外されている場合、それらが連続する２年以上のうちで３月以上に渡る場合を特徴とする。気腫では、終末細気管支における構造的要素（エラスチン）が破壊され、気道壁の崩壊をもたらして「淀んだ」空気を吐き出すことが不可能になる。気腫では、肺胞の永続的な破壊がある。気腫は、気管支の壁の破壊を伴い且つ明らかな繊維症は伴わない、気管支末端に対して遠位の空気空間の異常な永続的な拡大を特徴とする。COPDは二次的な肺高血圧症をも生じうる。二次的な肺高血圧症はそれ自身、肺動脈の血圧が異常に高くなる疾患である。重篤なケースでは、心臓の右側が、高い圧に対して血液を送り込むために通常よりも激しく働かなければならない。もしこれが長く続けば、右の心臓は肥大して機能が乏しくなり、そして流体は足間接（浮腫）及び腹部に集まる。最終的に左の心臓が衰え始める。肺疾患によって生じる心臓疾患は、肺性心とよばれる。
【０００６】
COPDは特徴として中年及び老齢の人々に影響を及ぼし、そして世界的な罹患率及び死亡率をもたらす１つである。米国では、それにより１４００万人が影響を受けており、そして第４番目に死亡の原因をもたらし、そして第３番目に米国における身体障害の原因をもたらす。しかしながら、罹患率及び死亡率は両方とも上昇しつつある。米国において、これらの疾患の蔓延率は１９８２年以来４１％増加し、そして年齢調整罹患率は１９６６〜１９８５年の間に７１％上昇した。このことは、同時期における、全ての原因に由来する年齢調整死亡率における低下（２２％低下した）、及び心臓疾患に由来する年齢調整死亡率における低下（４５％低下した）とは対照的である。１９９８年において、米国では、COPDにより１１２，５８４人が死亡したと計算されている。
【０００７】
しかし、COPDは予防可能であり、その理由は、その主原因がタバコの煙に対する曝露であると考えられるからだ。長期喫煙は、COPDの往々にして最もな原因である。それは全ケースの８０〜９０％を占める。喫煙者は非喫煙者よりもCOPDによる死の可能性が１０倍高い。この疾患は、非喫煙者の生涯においては希であり、環境的なタバコの煙に対する曝露が少なくともいくつかの気道閉塞の説明となる。病因の他の案としては、気道高反応性又は過敏症、周囲の空気の汚染、及びアレルギーが挙げられる。COPDにおける気道閉塞は、通常、喫煙を続ける人々においては進行性である。これは、早期の機能障害及び寿命の短縮をもたらす。喫煙を止めることで、非喫煙者の値へと肺機能の低下が反転する。他の危険因子としては：遺伝、二次喫煙、仕事及び環境における汚染空気に対する曝露、及び幼児期における呼吸器系感染症の病歴、が挙げられる。COPDの症状としては：慢性の咳、胸の締め付け、息継ぎが短くなること、息継ぎをするための労力が増えること、粘液生産増加、及び頻繁な喉の清浄化、が挙げられる。
【０００８】
COPDの症状を緩和し、悪化を防ぎ、至適な肺機能を維持し、そして日常活動及び生活の質を向上させるためのものは現在殆ど入手できない。多くの患者は、彼らの残りの人生のために慢性的に薬物を使用し、悪化する間に投与量の増加及び更なる薬物が必要となるだろう。COPD患者のために現在処方されている薬物としては：即効性β２アゴニスト、抗コリン作用性の気管支拡張剤、長期作用性気管支拡張剤、抗生物質、及び去痰薬である。COPDの治療のために現在使用可能な物の中で、短期的な利点のみならず、長期効果を有するものがその進行により、抗コリン作用性薬物、β２アドレナリンアゴニスト、及び経口ステロイドの投与から発見された。
【０００９】
短期及び長期的に作用する吸入型β２アドレナリン作用性アゴニストは短期的な気管支拡張作用を達成し且つCOPD患者においていくつかの症状緩和を供するが、疾患の進行に対して有意義な効果の持続を示さない。短期作用性β２アドレナリン作用性アゴニストはCOPD患者の症状を改善し、それは例えば、運動能力を高めること及びある程度の気管支拡張であり、そして更にはある重篤なケースにおいて肺機能を高めることである。より新しい長期作用性吸入型β２アドレナリン作用性アゴニストの最大の効果は、短期作用性β２アドレナリン作用性アゴニストに匹敵することが発見された。サルメテロールは、症状を改善して生活の質を向上することが発見されたが、肺機能においては変化を僅かに生み出すかあるいは変化を生み出さない。しかし、喘息において、β２アドレナリン作用性アゴニストは、死の危険性の増加、喘息の制御悪化、及び肺機能の悪化に関連してきた。アルブテロールなどのβ２アゴニストは狭くなった気道を開くために役立つ。β２アゴニストの使用は逆説的に気管支痙攣を生み出しえ、それはCODP患者の生命を脅かしうる。加えて、β２アゴニストの使用は心血管効果、例えば、パルス速度、血圧及び心電図結果の変化を生み出しえる。希な場合に、β２アゴニストの使用は、過敏症反応、例えば、蕁麻疹、血管浮腫、性急及び口腔咽頭浮腫を生じうる。これらの場合、β２アゴニストの使用は中止されるべきだ。気管支拡張剤イプラトロピウムプロミド又はフェノテロールによる喘息及びCOPD患者の継続的治療は、必要性に基づいて供された治療を供された場合と比較して、肺機能の低下をより早くもたらし、従ってそれらは維持治療に適していないことが示唆される。他方、β２アドレナリン作用性アゴニストの最も共通する即時有害効果は、震顫であり、それは高い投与量での結晶のカリウムの低下、不整脈、及び動脈酸素張力の減少により生じうる。β２アドレナリン作用性アゴニストと抗コリン作用性薬物の併用は、いずれかを単独で使用した場合に比べて、更なる気管支拡張効果を殆ど供さない。しかし、吸入型β２アドレナリン作用性アゴニストの標準投与量に対して約９０日に渡りイパラトロピウムを加えることで、安定COPD患者において、いずれの薬物を単独で使用した場合を越えるいくつかの改善が生み出される。抗コリン作用性薬剤は、COPDを伴う人々において、β２アドレナリンアゴニストよりも抗コリン作用性薬剤との組み合わせにおいて、より大きな気管支拡張を生み出すことが発見された。概して、β２アドレナリン作用性アゴニストによる有害な効果、例えば、震顫及び不整脈の発生は、抗コリン作用性剤によるよりも頻度が高い。従って、抗コリン作用性薬もβ２アドレナリン作用性アゴニストもCOPDを有する全ての人々に対して効果がないばかりか、２つの薬剤を組み合わせても効果がない。
【００１０】
抗コリン作用薬は、COPDを伴う人々において短期的な気管支拡張を達成し、そしていくつかの症状緩和をもたらすが、吸入型製品でさえも長期予後は改善されていない。COPD患者の大部分は、イパラトロピウムブロミドによって幾分軽減される気道閉塞の指標を少なくともいくつか有する。「肺健康研究」により、男性及び女性の喫煙者において早期COPDのスパイロメトリーサインが発見された。３つの治療を５年に渡り比較し、イパラトロピウムブロミドは患者の肺の機能的有効体積の低下に対して有意な効果を有さず、一方で喫煙中止により肺の機能的有効体積の低下が緩やかになったことが発見された。しかし、イパラトロピウムブロミドは、深刻な副作用、例えば、心臓の症状、高血圧、皮膚の発疹、及び尿閉を生み出す。抗コリン作用性気管支拡張剤の例えば、イパラトロピウムブロミド、及びテオフィリン誘導体は狭くなった気道を開けるために役立つ。長期作用性気管支拡張剤は気道閉塞の軽減に役立ち且つCOPD関連する気管支痙攣を予防するのに役立つ。テオフィリンはCOPD患者において気管支拡張効果を少し有するが、その一方でそれらはいくつかの共通する有害な効果を有し、そしてそれらは至適効果のためには１５〜２０mg/lの血中濃度が必要であることなど治療範囲が狭い。有害な効果とは、吐き気、下痢、頭痛、興奮性、発作、及び心不整脈が挙げられ、そしてそれらは非常に変わりやすい血中濃度で生じ、多くの人々において、それらは治療範囲内で生じる。テオフィリンの用量は、喫煙習慣、感染症、及び他の治療に従い個別に調節されなければならず、厄介だ。テオフィリンは、喘息において、特により低い用量で、抗炎症効果を有することが主張されているが、COPDにおいては何ら報告されていない。しかしそれらの短期的な気管支拡張効果は、統計上、偽薬とは異なる。テオフィリンの有害な効果及び頻繁にモニタリングする必要性がそれらの実用性を制限する。抗コリン作用性薬剤が肺機能の低下に影響を及ぼすという証拠はなく、そして粘液溶解薬は悪化の進行を減らすことが示されてきたが、肺の機能に対する有害な効果の可能性を伴う。β２アドレナリン作用性アゴニスト、経口コルチコステロイド、及び抗生物質の長期効果は評価されてきていないが、現在まで疾患の進行及び生存に影響を及ぼす他の薬物は示されていない。
【００１１】
経口コルチコステロイドは安定COPD患者の基底機能有効体積においていくつかの改善を導く一方で、全身性コルチコステロイドは、少なくともいくつかの骨粗鬆症を生み出し且つ明らかな糖尿病を導き有害であることが発見された。経口コルチコステロイドの長期投与はCOPDにおいて有用でありうるが、それらの実用性はそれらの実質上の副作用に対して重み付けされなければ成らない。吸入型コルチコステロイドは、ヒスタミンに対する気道の超反応性に対し実際上の短期効果を有さないことが発見されているが、肺機能、例えば、前気管支拡張機能有効体積（pre-bronchodilator functional effective volume）に対する僅かな短期効果を有することが発見されている。COPD患者のフルチカゾン治療は、穏和且つ深刻な（軽度ではない）悪化における有意な減少を示し、そして僅かにだが肺機能及び６分歩行距離における有意な改善を示した。経口プレドニゾロン、吸入型ベクロメタゾン又はその両方は、COPD患者における効果を有していないが、肺機能は経口コルチコステロイドによって改善された。粘液溶解薬は、悪化の頻度及び期間に対して僅かに有利な効果を及ぼすが肺機能に対して有害な効果を及ぼす。しかし、Ｎ−アセチルシステインも他の粘液溶解薬もどちらも、悪化の頻度をより大きく下げることが証明されているにもかかわらず、重度のCOPDを伴う人々（機能的有効体積＜５０％）において有意な効果を有する。Ｎ−アセチルシステインは胃腸副作用を生み出した。低酸素COPD及び鬱血性心臓疾患患者に対して投与される長期酸素治療は、それらの死亡率に対して最初の５００日程度に渡り殆ど効果がないが、結局、男性の生存率は増加しそして次の５年に渡り定常を保った。しかし、女性において、研究全体を通じて、酸素は死亡率を下げた。１９.３年に渡る、低酸素COPD患者（機能的有効体積＜７０％と予測される）の連続的酸素治療は死亡の全体的な危険性を下げた。しかしながら、今日迄、ライフスタイルのみが変化し、喫煙期間及び酸素による長期治療（低酸素症における）が、COPDの長期経過を変えることが発見されている。
【００１２】
抗生物質は呼吸器系の感染症の最初のサインにおいて、疾患にかかった肺において更なるダメージ及び感染症を予防するためにも与えられている。去痰薬は、気道からの粘液分泌を緩め且つ排除し、そして呼吸をより簡単にするのに役立つ。
【００１３】
加えて、COPDに伴う症状を管理するために他の医薬が処方されて良い。これらには：利尿薬（右の心臓が欠損することに伴い水が過剰に滞留するのを避けるための治療として与えられている）、ジギタリス（鼓動の力を強化する）、鎮痛剤、咳抑制剤、及び睡眠性ピルが挙げられる。この後に列挙した医薬はCOPDに伴う症状を緩和するのに役立つが、COPDを治療することはない。
【００１４】
従って、COPDの症状を緩和し、悪化を予防し、至適肺機能を維持し、そして日々の生活活動及び生活の質を向上するために現在使用可能なものは殆どない。
【００１５】
重症急性呼吸器症候群（SARS）は、最近、アジア、北アメリカ、及びヨーロッパで報じられている呼吸器系の病気である。一般に、SARS患者は最初に１００．４°F超（＞３８℃）の発熱を経験する。これには頭痛、全体的なだるさの感じ、及び体の痛みが伴うかあるいは続く。所定の患者は呼吸器系の症状をも経験する。SARS患者は、２〜７日後に、乾いた咳をも発症し、そして呼吸困難を経験する。SARSは主に密接したヒト対ヒトへの接触によって広がるようだ。SARS患者の大部分は、SARSを伴う他人を看病し又は共に生活し巻き添えになった人々であるかあるいは他のSARSを伴う患者からの感染性物質（例えば呼吸器系の分泌物）との直接接触をした人々のようだ。SARSが広がりうる潜在経路としては、感染性の滴で汚染されている他の人々の皮膚又は対象に触れ、そして自分の１又は複数の目、鼻、又は口を触ることが挙げられる。このことは、SARSを伴い病気になっている誰かが咳をするかあるいはくしゃみの滴を自分自身、他人、又は表層近くに落とすことによって生じうる。
【００１６】
Centers for Disease Control and Prevention（CDC）及び他の研究機関の科学者が、従来は認められていなかったコロナウィルス：SARS−CoVを、SARSを伴う患者において検出した。それはSARSの原因に関する仮説をもたらした（ウェブサイト、http：//www.sciencemag.org./cgi/rapipdf/1085952v1.pdf＞）を参照のこと。SARS−CoVの配列は決定されており、リーダー配列を除いて、その配列の全てはウィルスRNAに直接由来した。SARSコロナウィルスのゲノムは長さ２９，７２７ヌクレオチドであり、そしてゲノム機構は他のコロナウィルスのものと似ている。オープンリーディングフレームが同定され、それは予測されたポリメラーゼタンパク質（ポリメラーゼ１a、１b）、スパイクタンパク質（S）、小膜タンパク質（E）、膜タンパク質（M）及びヌクレオカプシドタンパク質（N）に対応する（http：//www.cdc.gov./ricidod/pdf/nucleoseq.pdf＞）を参照のこと。
【００１７】
世界中の研究者が躍起になってSARSのための治療を開発している。現在、SARSに関連したSARS-CoVコロナウィルスを止める効果的な治療は発見されていない。SARSを治療するために現在使用されている、又は考えられている抗ウィルス薬としては、リバビリン、６−アザウリジン、ピラゾフリン、マイコフェノリン酸、及びグリシルリジンである。しかし、これらの薬物は全て深刻な副作用（例えば、グリシルリジンの副作用としては、血圧上昇及びカリウムレベルの低下などの副作用）を有する。抗炎症薬メチルプレドニゾロンでの治療は、SARS患者においてある種の改善を達成したとこが示されている（So, L.K.ら、“Development of a standerd treatment protocol for seuere acute respiratory syndrome”, Lancet Vol. 361 (No.9369): pp.1615〜7, 2003）。
【００１８】
デヒドロエピアンドロステロンは非グルココルチコイドステロイドである。DHEAは、５−アンドロステン−３β−オル−１７−オン及びDHEA硫酸塩（DHEA−S）、DHEAの硫酸化形態としても知られており、それらは霊長類及びわずかな種類の非霊長類における副腎皮質によって、ACTHの放出に応答して、分泌される内生ホルモンである。DHEAはいくつかの内分泌過程において重要なアンドロゲン及びエストロゲンステロイドホルモンの前駆体である。DHEAの、現在の臨床使用は制御された臨床トライアル、及び食品添加物として、に限定されており、そしてそれは中枢神経系（CNS）、及び精神科、内分泌、婦人科、産科、免疫、及び心臓機能におけるDHEAのレベルにおいて役割を有すると考えられている。
【００１９】
DHEA−S又はその医薬的に許容できる塩は、晩期妊娠において子宮頸部成熟及びオキシトシンに対する子宮筋感受性を改善することが考えられている。DHEA−S及びその医薬的に許容できる塩は、痴呆、高脂血症、骨粗鬆症、潰瘍、及び高レベルのアデノシンに関連した疾患、又はアデノシンに対する高感受性に関連した疾患、例えば、ステロイド依存性喘息、並びに他の呼吸器系及び肺疾患を治療するために有効であると考えられている。デヒドロエピアンドロステロンはそれ自身、従来は、静脈内、皮下、経皮、膣内、局所的及び経口的に臨床トライアルにおいてに投与されていた。しかしながら、前処方研究において、無水物形態のDHEA硫酸ナトリウム（DHEA−SNa）は、湿気に対して不安定であり、そしてその二水和物形態（DHEA−SNa）は、通常の湿度条件下で一層安定していることが発見された。
【００２０】
周知のとおり、様々な方法が、医薬的工程の間に医薬剤に対して行われて良く、それは往々にして化合物の物理化学的な特性及び安定性に対して影響を及ぼす。デヒドロエピアンドロステロン硫酸ナトリウム二水和物の微粉化を延長すると結晶性が低下し、そして水和水のロスが生み出され、即ち後者は、保存安定性を下げ、そしてその分解産物であるDHEAをもたらすことになる。
【００２１】
従って、デヒドロエピアンドロステロン化合物、それらの類似体及び塩の粉末状製剤に対する要請が在り、それは良い分散性及び自己安定性、並びに適切な吸入特性を示す。かかる製剤は、デヒドロエピアンドロステロン化合物、それらの類似体及び塩を非常に効率的且つコスト上有効にデリバリーすることを可能にする。
【００２２】
米国特許第５，５２７，７８９号は、デヒドロエピアンドロステロン（DHEA）又はDHEA類縁化合物を対象者に対して投与することによって患者のガンと戦う方法、及びユビキノンを投与することによって当該DHEA又はDHEAにより誘導される心疾患と戦う方法が開示されている。
【００２３】
米国特許第６，０８７，３５１号は、デヒドロエピアンドロステロン（DHEA）又はDHEA類縁化合物を対象者に対して投与することによって、患者の組織におけるアデノシンを減らす又は枯渇させるin vivo方法を開示している。米国特許第６，０８７，３５１号は、超微粉砕化された活性化合物の吸入可能乾燥粒子を含む固体粒状組成物は、乾燥活性化合物をモーター及びすりこぎで微粉化し、そして微粉化された組成物を４００メッシュスクリーンに通し、巨大凝集体を破壊又は分離することによって調製されうる。そしてまた、活性化合物からなる固体粒状組成物は任意に、エアロゾルの形成を促す働きをする分散剤を含んでも良く；そして適切な分散剤はラクトースであり、それは任意の適切な比（例えば、重量で１：１の比）で活性化合物と混合されて良い。
【００２４】
DHEA及びDHEA−Sは、COPDを治療することが記載されてきた（米国特許第１０／４５４，０６１号（提出２００３年６月３日）及び国際特許出願ＰＣＴ／ＵＳ０２／１２５５５（提出２００２年４月２１日、２００２年１０月２１日刊行）。
【発明の開示】
【００２５】
発明の概要
本発明は、ある剤及び医薬的もしくは獣医学的に許容できる担体もしくは希釈剤を含んで成る粉末医薬組成物を含む密封された容器に関連し、ここで当該剤は、噴霧可能形態において密封された、デヒドロエピアンドロステロン（DHEA）化合物、もしくはその類似体、のもしくはその水和形態を含んで成り、ここで前記乾燥粉末医薬組成物は、呼吸可能又は吸入可能なサイズの粒子である。好適に、前記剤は、デヒドロアンドロステロン硫酸塩（DHEA−S）であり、ここで、当該硫酸塩はDHEAに対して共有結合している。一層好適に、前記剤は、デヒドロエピアンドロステロン硫酸塩二水和物である。好適に、前記乾燥粉末医薬組成物は、粒子であってその約８０％超が約０．１μm〜約１００μmの直径を有する粒子を有する。前記デヒドロエピアンドロステロン化合物、もしくはその類似体、は化学式（Ｉ）、（II）、（III）、（IV）及び（Ｖ）の化合物を含んで成り、単独又は粉末、液状もしくは気体状担体との組み合わせにおいて処方されている。前記医薬組成物は、賦形剤を更に含んでも含まなくとも良い。前記製剤は対象者に対して他の１又は複数の治療剤と一緒に、同じ組成物において、又は個別の組成物の共同投与（joint administration）によって投与されて良い。
【００２６】
好適に、前記剤は、二水和物形態（DHEA−S・2H2O）におけるDHEA−Sである。DHEA−Sの二水和物形態は、DHEA−Sの無水物形態よりも一層安定である。DHEA−Sの無水物形態は、DHEA−Sの二水和物形態よりも一層、熱に不安定である。好適に前記担体はラクトースである。好適に、前記剤は、粉末形態である。好適に、前記剤は結晶質形態である。一層好適に、前記剤は、結晶質粉末形態である。
【００２７】
好適に、前記密封された容器は真空密封されており、そして、治療上有効な量の粉末医薬組成物を、予防もしくは治療を必要とする患者もしくは対象者に投与される噴霧器のために使用可能である。
【００２８】
本発明の他の観点は、喘息の予防もしくは治療のための方法であり、かかる予防もしくは治療を必要とする対象者に対して治療上有効な量の前記粉末状医薬組成物を投与することを含んで成る。
【００２９】
本発明の他の観点は、慢性閉塞性肺疾患を予防もしくは治療するための方法であり、かかる予防もしくは治療を必要とする対象者に対して治療上有効な量の前記粉末状医薬組成物を投与することを含んで成る。
【００３０】
本発明の他の観点は、対象者の組織おけるアデノシンを減少もしくは枯渇せしめる方法であり、対象者の組織におけるアデノシンを減少又は枯渇せしめるために、かかる治療を必要とする対象者に対して治療上有効な量の前記粉末状医薬組成物を投与することを含んで成る。
【００３１】
本発明の他の観点は、患者の組織におけるアデノシンが高レベルであること、もしくはアデノシンに対する高感受性に関連した疾患もしくは症状を予防もしくは治療するための方法であり、患者の組織におけるアデノシンレベルを減らし且つ当該疾患を予防もしくは治療するために、かかる予防もしくは治療を必要とする対象者に対して治療上有効な量の前記粉末状医薬組成物を投与することを含んで成る。
【００３２】
好適に、前記対象者は、気道の炎症、アレルギー、喘息、呼吸の制限、のう胞性繊維症、慢性閉塞性肺疾患（COPD）、アレルギー性鼻炎、急性呼吸窮迫症候群、微生物感染症、ウィルス感染症、例えばSARS、肺高血圧症、肺炎症、気管支炎、気道閉塞、又は気管支収縮を患らっている。
【００３３】
好適に、前記乾燥粉末状製剤は、乾燥医薬製剤から出発し、例えば、流体エネルギー微粉砕、篩い分け、均一化顆造粒、及び/又は当業者に公知の他の方法などの微粉砕化によって、当該剤の粒子サイズを変え、約８０％超の粒子が約０．１〜約１００μの直径である粉末状製剤を形成させることによって調製されている。
【００３４】
本発明の粉末状製剤は、それ自身からかあるいは粉末状、液体状もしくは気体状担体もしくは推進剤とともに、装置からの直接投与により気道を通じて投与されて良い。好適に、前記装置は、当該装置によらずには前記粉末状製剤を吸入することができない患者又は対象者に対して当該粉末状製剤を投与できる装置である。本明細書中で記載の製剤は、任意の疾患；例えば、呼吸器系に関連したもの及び肺疾患、例えば、気道閉塞、１又は複数のアレルギー、喘息、肺炎症、慢性閉塞性肺疾患（COPD）、アレルギー性鼻炎、ARDS、のう胞性繊維症、ガン及び炎症などを治療するために適している。
【００３５】
本発明の他の観点は、喘息、COPD、肺炎症、任意の呼吸器系の疾患もしくは症状を予防もしくは治療するため、又は患者の組織におけるアデノシンを減少もしくは枯渇せしめるための医薬の製造におけるデヒドロエピアンドステロン化合物、もしくはその類似体、もしくはその水和物形態の使用である。本発明の他の観点は、前記対象者に対して粉末状医薬組成物をデリバリーするための装置を含んで成るキットである。好適に、前記装置は、噴霧器又エアロゾル化装置であり、いずれも、粉末状製剤を含んで成り圧縮されて良い。好適に、前記キットは、更に、前記製剤を伴う１もしくは複数のカプセル、カートリッジもしくはブリスターを含んで成り、ここで当該カプセル、カートリッジ又はブリスターは当該装置に対して使用前に挿入されている。
【発明を実施するための最良の形態】
【００３６】
好適な実施態様の詳細な説明
用語解説
用語「剤」とは、本明細書中で使用される場合、化学化合物、化学化合物の混合物、合成化合物、治療化合物、有機化合物、無機化合物、核酸、オリゴヌクレオチド（オリゴ）、タンパク質、生物分子、マクロ分子、脂質、油、充填剤、溶液、細胞又は組織を意味する。剤はDHEA、その誘導体又は医薬的もしくは獣医学的に許容できるその塩である、１又は複数の活性化合物を意味する。剤は、活性化合物を含んで成る製剤を調製するために加えられて良く、そして医薬的もしくは獣医学的使用における製剤中又はキットにおいて使用されて良い。
【００３７】
用語「気道」とは、本明細書中で使用される場合、対象者の空気に対して曝される呼吸器系の一部又は全体を意味する。気道としては、喉、気管、鼻腔、副鼻腔、気管支、肺、及び肺裏層などが挙げられるがそれらに限定はされない。気道は、気管、気管支、細気管支、終末細気管支、呼吸細気管支、肺胞管、及び肺胞のうをも含む。
【００３８】
用語「気道炎症」とは、本明細書中で使用される場合、対象者の気道の炎症に関連した疾患又は症状を意味する。気道炎症は、１又は複数のアレルギー、喘息、呼吸障害、繊維性のう胞（CF）、慢性閉塞性肺疾患（COPD）、アレルギー性鼻炎（AR）、急性呼吸障害症候群（ARDS）、微生物又はウィルス感染症、肺高血圧症、肺炎症、気管支炎、気道閉塞、及び気管支収縮によって生じるかあるいはそれを伴いうる。
【００３９】
用語「担体」とは、本明細書中で使用される場合、目的とする様々な投与経路のために適している、気体状、液体状、固体状担体、及びそれらの混合物の形態における生物学的に許容できる担体を意味する。好適に、当該担体は医薬的又は獣医学的に許容できる。
【００４０】
組成物は、任意に、当業界で公知の、症状又は疾患を治療するための他の治療化合物、例えば、抗酸化物質、香料、着色剤、充填剤、揮発性油、緩衝剤、分散剤、界面活性剤、RNA不活性化剤、推進剤及び防腐剤、並びに治療組成物中で使用されることが知られている他の剤を含んで成る。
【００４１】
「組成物」とは、本明細書中で使用される場合、本発明において使用される活性化合物及び担体を含んで成る乾燥粉末状製剤を含む混合物を意味する。組成物は他の剤を含んでも良い。組成物は好適に医薬組成物又は獣医学的組成物である。
【００４２】
「有効な量」とは、本明細書中で使用される場合、治療又は予防上の利益を供する量である。
【００４３】
用語「予防すること」又は「予防」とは、本明細書中で使用される場合、対象者が疾患もしくは病気の症状の症候を獲得する前に予防処置を講じ、従って、それにより対象者に疾患の症候もしくはそれに関連した症状を避けさせることができることを意味する。
【００４４】
用語「呼吸器系の疾患」とは、本明細書中で使用される場合、呼吸器系に伴う疾患又は症状を意味する。例としては、気道炎症、１又は複数のアレルギー、喘息、呼吸障害（impeded respination）、繊維性のう胞（CF）、慢性閉塞性肺疾患（COPD）、アレルギー性鼻炎（AR）、急性呼吸障害症候群（ARDS）、肺高血圧症、肺炎症、気管支炎、気道閉塞、及び気管支収縮、微生物及びウィルス感染症、例えば、SARSが挙げられるがそれらに限定はされない。
【００４５】
「標的」とは、本明細書中で使用される場合、１もしくは複数の活性化合物が影響を与えそして疾患もしくは症状と関連する気管又は組織を意味する。
【００４６】
用語「治療」又は「治療すること」とは、本明細書中で使用されている場合、かかる治療を投与される対象者が疾患又は症状の明らかな減少を示すだろうような治療を意味する。
【００４７】
本発明は、DHEA、その誘導体、及び/又はその医薬的もしくは獣医学的に許容できる塩、又はその水和形態を、単独で、又は医薬的もしくは獣医学的に許容できる担体もしくは希釈剤と共に含んで成る粉末状製剤を提供し、ここで約８０％の割合の製剤粒子、例えば、約８０％超の粒子が直径約０.１〜約２００μmである。本発明中で使用するために適したDHEA、その類似体及びその塩の例は、下に示すような化学式（Ｉ）、（II）、（III）、（IV）及び（Ｖ）によって示される。１つの基は、化学式
【化１】
2005537296.tif 000002
（式中、RはH又はハロゲンを含んで成り；５位におけるHはαもしくはβ配置もしくは両配置のラセミ混合物において存在して良く；そしてR1はH、又は当該化合物に対して共有結合した多価の無機もしくは有機カルボン酸を含んで成る）
の化合物である。好適に、前記多価無機もしくは有機カルボン酸は、SO2OM、リン酸塩又は炭酸塩である。好適に、前記多価有機ジカルボン酸は、コハク酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、又は適切なジカルボン酸塩である。
【００４８】
Mはカウンターイオン、例えば、H、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、アルミニウム、亜鉛、カルシウム、リチウム、アンモニウム、アミン、アルギニン、リジン、ヒスチジン、トリエチルアミン、エタノールアミン、コリン、トリエタノールアミン、プロカイン、ベンザチン、トロメタニン、ピロリジン、ピペラジン、ジエチルアミン、スルファチド
【化２】
2005537296.tif 000003
又はフォスファチド
【化３】
2005537296.tif 000004
（式中、R2及びR3は同じ又は異なっても良く、直鎖又は枝分かれした（C1〜C14）アルキルもしくはグルクロニド；
【化４】
2005537296.tif 000005
を含んで成る）
及び医薬的に許容できるその塩を含んで成る。
【００４９】
R1は、DHEAに対して共有結合した酸性又は塩基性化合物でありうる。もしR1が酸性化合物であれば、塩が、塩基を前記剤に対して加えることによって形成される。好適に、前記塩基は、当該剤の塩の形成をもたらすだろう任意の適切な塩基、例えば、水酸化ナトリウム、水酸化カリウムなどである。もしR1が塩基性化合物であれば、塩は、酸を前記剤に対して加えることによって形成される。好適に、前記酸は、剤の塩の形成をもたらすだろう任意の適切な塩基、例えば、有機酸の、例えば、フマル酸、マレイン酸、乳酸、又は無機酸の例えば、塩化水素酸、硝酸、硫酸などである。
【００５０】
好適に、前記剤は、二水和物形態（DHEA−S・2H2O）におけるDHEA−Sである。DHEA−Sの前記二水和物形態は、DHEA−Sの無水物形態よりも一層安定である。DHEA−Sの無水物形態は、DHEA−Sの二水和物形態よりも一層熱に不安定である。好適に、前記担体はラクトースである。好適に、前記剤は粉末形態にある。好適に、前記剤は結晶質形態にある。一層好適に、前記剤は、結晶質粉末状形態にある。
【００５１】
本発明は、医薬組成物中二水和物形態におけるDHEA−Sを使用する最初の報告であり、そして二水和物形態におけるDHEA−Sは無水DHEA−Sよりも、意外な、より良い安定性の特性、特により高い温度、例えば、５０℃以上でのよりよい安定性の特性を有する。ラクトースと混合された無水DHEA−Sは、ラクトースと混合された結晶質二水和物DHEA−Sよりも安定性が非常に低い、この発見は、この出願における最初に報じられている（例３及び５を参照のこと）。
【００５２】
上の式（Ｉ）に説明する化合物は、それ自身デヒドロエピアンドロステロン（DHEA）（式中、R及びR1は各々Hであり、そして二重結合が存在する）；１６−αブロモエピアンドロステロン（式中、RはBrを含んで成り、R1はHを含んで成り、そして二重結合が存在する）；１６−α−フルオロエピアンドロステロン（式中、RはFを含んで成り、R1はHを含んで成り、そして二重結合が存在する）；エチオコラノロン（式中、R及びR1は各々水素を含んで成り、そして二重結合が不在である）；デヒドロエピアンドロステロン硫酸塩（式中、RはHを含んで成り、R1はSO2OMを含んで成り、そしてMは上に規定したスルファチドを含んで成り、そして二重結合が存在する）；デヒドロアンドロステロン硫酸ナトリウム二水和物（式中、RはHであり、R1はSO2OMであり、そしてMは上に規定したナトリウム基であり、そして二重結合が存在する）などをとりわけ含む。式（Ｉ）の化合物において、Rは好適に、ハロゲンの例えば、ブロモ、クロロ、又はフルオロを含んで成り、R1はHを含んで成り、そして二重結合が存在し、一層好適には式（Ｉ）の化合物は１６−α−フルオロエピアンドロステロンを含んで成り、式（Ｉ）の化合物は、ここで、RがHを含んで成り、R1はSO2OMを含んで成り、Mはスルファチドを含んで成り、そして二重結合が存在し、そして一層好適に、式（Ｉ）の化合物は下の化学式（II）のデヒドロエピアンドロステロン硫酸ナトリウムの二水和物形態（DHEA−S・２H2O）である。
【化５】
2005537296.tif 000006
【００５３】
式（Ｉ）及び（II）の化合物は、公知の手順又は当業者に周知のその変形に従い合成されうる。例えば、米国特許第4,956,396号；英国特許第2,240,472号；EPO公開特許第429,187号；PCT公開特許91/0430；M.Abou-Gharbiaら、J.Pharm.Sci.vol.70、pp.1154〜1157（1981）；Merck Index Monograph No.7710；第１１版（1989）を参照のこと。
【００５４】
デヒドロエピアンドロステロン誘導体の他の例は、下に示されているような化学式III、IV及びＶの化合物、及びそれらの医薬的又は獣医学的に許容できる塩によって示されている。
【化６】
2005537296.tif 000007
（式中、
R1、R2、R3、R4、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14及びR19は独立してH、OH、ハロゲン、C1〜10アルキル又はC1〜10アルコキシであり；
R5はH、OH、ハロゲン、C1〜10アルキル、C1〜10アルコキシ又はOSO2R20を含んで成り；
R15は（１）R16がC（O）OR21を含んで成る場合、H、ハロゲン、C1〜10アルキルもしくはC1〜10アルコキシを、又は（２）R16がH、ハロゲン、OHもしくはC1〜10アルキルである場合、H、ハロゲン、OHもしくはC1〜10アルキルを、又は（３）R16がOHを含んで成る場合H、ハロゲン、C1〜10アルキル、C1〜10アルケニル、C1〜10アルキニル、ホルミル、C1〜10アルカノイルもしくはエポキシを含んで成り；又はR15とR16は一緒に＝Oを含んで成り；
R17及びR18は独立して（１）R16がH、OH、ハロゲン、C1〜10アルキルもしくは−C（O）OR21を含んで成る場合、H、OH、ハロゲン、C1〜10アルキルもしくはC1〜10アルコキシを、又は（２）R15とR16が一緒に＝Oを含んで成る場合、H、（C1〜10アルキル）nアミノ、（C1〜10アルキル）nアミノ−C1〜10アルキル、C1〜10アルコキシ、ヒドロキシ−C1〜10アルキル、C1〜10アルコキシ−C1〜10アルキル、（ハロゲン）m−C1〜10アルキル、C1〜10アルカノイル、ホルミル、C1〜10カルボアルコキシもしくはC1〜10アルカノイルオキシを含んで成り；又は
R17とR18は一緒に＝Oを含んで成る又は一緒に炭素原子に対して結合し酸素原子を０又は１個含んで成る３〜６員環を形成する；又は
R15及びR17は一緒に炭素原子に結合しエポキシド環を形成し、
R20はOH、医薬的に許容できるエステル又は医薬的に許容できるエーテルを含んで成り、
R21は、H、（ハロゲン）m−C1〜10アルキルもしくはC1〜10アルキニルであり、
nは、0、１もしくは２であり；そして
mは１、２又は３であり；但し、
（a）R3は、R1、R2、R4、R6、R7、R9、R10、R12、R13、R14、R17及びR19がHでありそしてR5がOHであるかはあるいはC1〜10アルコキシであり、そしてR8がH、OHもしくはハロゲンであり、そしてR11がHもしくはOHであり、そしてR18がH、ハロゲンもしくはメチルであり、そしてR15がHであり、そしてR16がOHである場合、H、OHもしくはハロゲンではなく；
（b）R3は、R1、R2、R4、R6、R7、R9、R10、R12、R13、R14、及びR19がHであり、そしてR5がOHであるもしくはC1〜10アルコキシであり、そしてR8がH、OHもしくはハロゲンであり、そしてR11がHもしくはOHであり、そしてR18がH、ハロゲンもしくはメチルであり、そしてR15とR16が一緒に＝Oである場合、H、OHもしくはハロゲンではなく；
（c）R5は、R1、R2、R3、R4、R6、R7、R8、R9、R10、R12、R13、R14、及びR17がHであり、そしてR11がH、ハロゲン、OHもしくはC1〜10アルコキシであり、そしてR18がH、もしくはハロゲンであり、そしてR15とR16が一緒に＝Oである場合、H、ハロゲン、C1〜10アルコキシもしくはOSO2R20ではなく；そして、
（d）R5は、R1、R2、R3、R4、R6、R7、R8、R9、R10、R12、R13、R14、及びR17がHであり、そしてR11がH、ハロゲン、OHでもしくはC1〜10アルコキシであり、そしてR18がHもしくはハロゲンであり、そしてR15がHであり、そしてR16がH、OHもしくはハロゲンである場合、H、ハロゲン、C1〜10アルコキシもしくはOSO2R20ではない）；又は化学式
【化７】
2005537296.tif 000008
（式中、RはA−CH（OH）−C（O）−であり、そしてAは水素又は（C1〜C22）アルキルもしくはアルケニルを含んで成り、それは１もしくは複数の（C1〜C4）アルキル、フェニル、ハロゲン、もしくはOH基により置換されて良く、当該フェニル基は、任意に１もしくは複数のハロゲン、HOもしくはCH3Oにより置換されて良い）
の化合物又は、医薬的もしくは化粧品学的に許容できるその塩を含む。
【００５５】
一般式（III）、（IV）及び（Ｖ）の化合物は、米国特許第4,898,694号；5,001,119号、5,028,631号；5,175,154号；6,187,767号；及び6,284,750号に記載のように合成され、それに対応する部分は本明細書中に参照によって組み込まれている。一般式（III）、（IV）及び（Ｖ）によって示される化合物は、様々な立体異性体として存在し、そしてこれらの式は、各個々の立体異性体及びそれらの混合物を包含する目的がある。
【００５６】
一般式（III）、（IV）及び（Ｖ）の範囲内にある代表的な化合物の例としては、５α−アンドロスタン−１７−オン；１６α−フルオロ−５α−アンドロスタン−１７−オン；３β−メチル−５α−アンドロスタン−１７−オン；１６α−フルオロ−５α−アンドロスタン−１７−オン；１７β−ブロモ−５−アンドロスタン−１６−オン；１７β−フルオロ−３β−メチル−５−アンドロステン−１６−オン；１７α−フルオロ−５α−アンドロスタン−１６−オン；３β−ヒドロキシ−５−アンドロスタン−１７−オン；１７α−メチル−５α−アンドロスタン−１６−オン；１６α−メチル−５−アンドロスタン−１７−オン；１７β，１６α−ジメチル−５−アンドロステン−１７−オン；３β，１７α−ジメチル−５−アンドロステン−１６−オン；１６α−ヒドロキシ−５−アンドロステン−１７−オン；１６α−フルオロ−１６β−メチル−５−アンドロステン−１７−オン；１６α−メチル−５α−アンドロスタン−１７−オン；１６−ジメチルアミノメチル−５α−アンドロスタン−１７−オン；１６β−メトキシ−５−アンドロステン−１７−オン；１６α−フルオロメチル−５−アンドロステン−１７−オン；１６−メチレン−５−アンドロステン−１７−オン；１６−シクロプロピル−５α−アンドロスタン−１７−オン；１６−シクロブチル−５−アンドロステン−１７−オン；１６−ヒドロキシメチレン−５−アンドロステン−１７−オン；３α−ブロモ−１６α−メトキシ−５−アンドロステン−１７−オン；１６−オキシメチレン−５−アンドロステン−１７−オン；３β−メチル−１６．ｘｉ．−トリフルオロメチル−５α−アンドロスタン−１７−オン；１６−カルボメトキシ−５−アンドロステン−１７−オン；３β−メチル−１６β−メトキシ−５α−アンドロスタン−１７−オン；３β−ヒドロキシ−１６α−ジメチルアミノ−５−アンドロステン−１７−オン；１７α−メチル−５−アンドロステン−１７β−オル；１７α−エチニル−５α−アンドロスタン−１７β−オル；１７β−ホルミル−５α−アンドロスタン−１７β−オル；２０，２１−エポキシ−５α−プレグナン−１７α−オル；３β−ヒドロキシ−２０，２１−エポキシ−５α−プレグナン−１７α−オル；１６α−フルオロ−１７α−エテニル−５−アンドロステン−１７α−オル；１６α−ヒドロキシ−５−アンドロステン−１７α−オル；１６α−メチル−５α−アンドロスタン−１７α−オル；１６α−メチル−１６β−フルオロ−５α−アンドロスタン−１７α−オル；１６α−メチル−１６β−フルオロ−３−ヒドロキシ−５−アンドロステン−１７α−オル；３β，１６β−ジメチル−５−アンドロステン−１７β−オル；３β，１６，１６−トリメチル−５−アンドロステン−１７β−オル；３β，１６，１６−トリメチル−５−アンドロステン−１７−オン；３β−ヒドロキシ−４α−メチル−５−アンドロステン−１７α−オル；３β−ヒドロキシ−４α−メチル−５−アンドロステン−１７−オン；３α−ヒドロキシ−１α−メチル−５−アンドロステン−１７−オン；３α−エトキシ−５α−アンドロスタン−１７β−オル；５α−プレグナン−２０−オン；３β−メチル−５α−プレグナン−２０−オン；１６α−メチル−５−プレグナン−２０−オン；１６α−メチル−３β−ヒドロキシ−５−プレグナン−２０−オン；１７α−フルオロ−５−プレグネン−２０−オン；２１−フルオロ−５α−プレグナン−２０−オン；１７α−メチル−５−プレグネン−２０−オン；２０−アセトキシ−シス−１７（２０）−５α−プレグネン；３α−メチル−１６，１７−エポキシ−５−プレグネン−２０−オンが挙げられる。
【００５７】
本発明中で使用される化合物はそれ自体又は医薬的及び獣医学的に許容できる塩の形態において投与されて良く；これらの全ては「活性化合物」に言及される。医薬的もしくは獣医学的に許容できる担体もしくは希釈剤としては、当業界で公知の生物学的に許容できる担体、例えば、ラクトース及び他の不活性物質もしくは気体状、液体状、又は固体形態におけるＧ．Ｒ．Ａ．Ｓ．（一般に安全とされる）剤であり、ここで製剤の最終形態は粉末としてかあるいは加圧下でありうる推進剤もしくは共溶媒を伴う粉末である。
【００５８】
粉末状製剤は、デヒドロエピアンドロステロン、その類似体、その塩もしくはその混合物を含んで成る乾燥製品から出発し、当該剤の粒子サイズを変化せしめ、直径において、粒子サイズが約０．０１μm〜約５００μmの乾燥製剤を形成し；そして約８０％以上又は超、約８５％、約９０％、約９５％、もしくは約１００％が約０．０１μm、０．１μmもしくは０．５μm〜約１００μmもしくは２００μmの粒子を含んで成る製剤の粒子を選択することで調製される。粒子サイズは約２００μm、好適には、約０．０５μm、約０．１μm、約１μm、約２μm〜約５μm、約６μm、約８μm、約１０μm、約２０μm、約５０μm、約１００μmの範囲である。好適に、直径約０．１〜約２００μmの製剤の粒子が選択される。一層好適に、直径約０．１〜約１００μmの製剤の粒子が選択される。更に好適には直径約０．１〜約１０の製剤の粒子が選択される。更に好適には、直径約０．１〜約８μmの製剤の粒子が選択される。更に一層好適には、直径約０．１〜約５μmの製剤の粒子が選択される。
【００５９】
乾燥している剤の粒子サイズは、製剤の吸入により、実質量の当該剤が肺の中へと吸入されることを可能にするように変化せしめられて良い。医薬の粒子サイズは、当業界で公知の任意の方法、例えば、微粉砕化又は超微粉砕化によって下げられて良い。典型的に、前記剤に関する粒子サイズは、前記乾燥している剤を単独で又は製剤成分との組み合わせにおいて適切な平均粒子サイズ、好適には、約０．０５μm、約５μmの範囲（吸入）又は約１０μm〜約５０μm（鼻腔デリバリー又は肺点滴注入法）に変化せしめられる。流体エネルギー微粉砕化としても知られているジェット微粉砕化が使用されて良く、そして公知の装置を使用することで注目の粒子サイズを与える手順のなかで好適である。ジェット微粉砕化は好適な方法である。大部分％の粒子が所望の狭い範囲内にあるが、これは全部の粒子には当てはまらないことを理解するべきである。従って、全体粒子範囲は、上記の好適な範囲よりも広くあって良い。好適な範囲内の粒子の割合は、特定の製剤の要請に応じて、約８０％超、約８５％、約９０％、約９５％超などであって良い。
【００６０】
粒子サイズは、篩い分け、ホモジナイズ、及び/又は造粒などによっても変化せしめられて良い。これらの技術は、個別に又は他との組み合わせにおいて使用されて良い。典型的に、微粉砕化、ホモジナイズ及び造粒が好適に適用され、しかる後に、乾燥した変更がなされた粒子サイズの製剤を獲得するために篩い分けが適用される。これらの手順は、各成分に対して個別に、又は一緒に加えられて処方される成分に対して適用されて良い。
【００６１】
使用されて良い製剤成分の例としては、賦形剤、防腐剤、安定化剤、粉末流動性改質剤、粘着性改質剤、界面活性剤、他の生物反応性剤、着色剤、芳香剤、抗酸化物質、充填剤、揮発性油、分散剤、香料、緩衝剤、バルキング剤、推進剤又は防腐剤が挙げられるが、それらに限定はされない。ある好適な製剤は、もしくは活性剤及び１もしくは複数の賦形剤及び/又は１もしくは複数の推進剤を含んで成る。
【００６２】
粒子サイズは、乾雰囲気中でのみならず、溶液、懸濁、又はエマルション中で、中間段階において活性剤を配置することによっても変化せしめられて良い。活性剤は、溶液、懸濁、又はエマルション中に、当該活性剤の粒子サイズを変化せしめる前、後のいずれに配置されて良い。この実施態様の例は活性剤を適切な溶媒溶液中に溶かし、そして適切な温度へと加熱することによって行われて良い。この温度は、結晶が形成されるのを可能にする所定の時間に渡り、適切な温度付近で維持されうる。次いで、この溶液及び新生結晶は、第二のより低い温度へと冷却され、それらを当業者に公知のように、ある時間に渡り第二の温度で維持することによって、成長させられる。次いで、結晶は、再結晶化が完了して剤の結晶が十分に成長した場合に、室温に至らしめられる。剤の粒子サイズは、試料沈殿によっても変えられて良く、それは１もしくは複数の十分な溶媒中の溶液、懸濁もしくはエマルションから行われる。
【００６３】
スプレー乾燥も粒子サイズを変化せしめることにおいて有用である。「スプレー乾燥化又はスプレー乾燥」とは、前記剤又は組成物が本明細書中で「プレ−スプレー製剤」とよばれる、溶媒中の剤又は組成物の均一混合物を、噴霧器、例えば、２流体ノズル、回転プレート又は同等の装置を介し、微細な滴として、加熱された雰囲気中へと又は冷却流体中へと導入する方法によって調製されることを意味する。この溶液は、水性溶液、懸濁、エマルション、スラリーなどであって良く、それが、溶液中での物質の均一な分布が確保され、そして最後には、粉末状製剤において確実に均一に分布する限り、水性溶液、懸濁、エマルション、スラリーなどであって良い。各滴は、加熱された気体又は空気中へとスプレーされた場合、乾燥して固体粒子になる。剤を冷流体中へとスプレーすることで、溶媒が蒸発することによって粒子を形成する噴霧された液滴の迅速形成がもたらされる。粒子は回収され、そして残りの溶媒が取り除かれ、一般に、真空において昇華させること（凍結乾燥）によって取り除かれて良い。下で論じるように、粒子は、乾燥させる前に温度を上昇させることによって成長しうる。これにより特異的なサイズと特性の粒子を伴う微細な乾燥粉末が生み出され、それは以下に一層十分に論じられている。適切なスプレー乾燥法は、以下に記載されている。例えば、米国特許第3,963,559号；6,51,359号；及び6,458,738号を参照のこと。それらの対応する部分は本明細書中に参照によって組み込まれている。
【００６４】
用語「粉末」とは、本明細書中で使用される場合、吸入又は乾燥粉末装置中で比較的自由に流動し且つ容易に分散し、そして患者によって吸入され肺の意図した領域に到達できる微細に分散した固体粒子を意味する。従って、粉末は「呼吸可能」であり、そして肺デリバリーに適している。次の剤又は製剤の粒子サイズが１０μmを超える場合、粒子は、粒子の良い割合が鼻腔に沈着し、そしてそこを通じて吸収されるサイズである。
【００６５】
用語「分散性」とは、乾燥粉末状製剤が分散されて良い、即ち、空気の流れの中で懸濁され、当該分散された粒子が対象者の鼻腔の壁を通じて肺中へと呼吸又は吸入される程度を意味する。従って、僅か２０％分散性である粉末は、粒子の質量のたった２０％が肺中への吸入のために懸濁されうる。本発明の製剤は、好適に約１〜９９％の分散性を有するが、他の分散性も適切である。
【００６６】
前記乾燥粉末状製剤は、多くのパラメーターに基づくことを特徴としており、それは、平均粒子サイズ、粒子サイズの範囲、微細粉末画分（FPF）、平均粒子密度、及び質量中央値空気動力学的直径（MMAD）が当業界で公知であるが、それらには限定されない。
【００６７】
好適な実施態様において、剤は、二水和物結晶質形態におけるDHEA−Sである。このDHEA−Sは最初に二水和物形態へと結晶化される。次いで、結晶は、それを粉末形態において生産するために、ジェット微粉砕を通過させられる。調製物は更にラクトースを含んで成り、それは個別に篩い分けされるかあるいは微粉砕化されそして粉末状結晶質二水和物DHEA−Sと混合されて良い。
【００６８】
好適な実施態様において、本発明の粉末状製剤はそれらの、上記の、平均粒子サイズを特徴としている。粉末状剤又は製剤の平均粒子サイズは、常用の技術によって質量平均直径（MMD）として測定されて良い。用語「約」とは、約１０％の数的値の範囲においてエラーを有するだろう数的値を意味する。本発明の乾燥粉末状製剤は、その微細粒子画分（FPF）に基づくことをも特徴とする。FPFとは、粉末のエアロゾル性能の測定基準であり、画分値は、より高いほどより良いとされる。FPFは、乾燥粉末吸入器（Dryhalter（登録商標）、Dura Pharmacuticals）を通じガラススロートを伴う多段階液体インピンジャー（MLSI、Astra、Copley Instrument、Nottingham、UK）を使用することで測定した場合、６．８μm未満の空動力学的質量中央値直径を有する粉末として規定される。従って、本発明の乾燥粉末状製剤は、好適に約１０％以上のFPFを有し、そして約２０％以上が好適であり、そして約３０％以上が特に好適である。いくつかの系が４０％〜５０％のオーダーの、非常に高いFPFを可能にしうる。
【００６９】
乾燥粉末状製剤は、本発明の剤を含む粒子の密度に基づくことをも特徴とする。好適な実施態様において、前記粒子は約０．８g/cm3未満のタップ密度を有し、約０．４g/cm3未満のタップ密度が好適であり、約０．１g/cm3未満のタップ密度が特に好適である。乾燥粉末状粒子のタップ密度は、当業者に公知のようにGeoPyc（登録商標）（Micrometrics Instruments Inc.）を使用することで測定されて良い。Tap密度はエンベロープ質量密度（envelope mass density）の標準測定基準であり、エンベロープ質量密度は一般に、最小球体エンベロープ体積（この中に粒子が包み込まれて良い）によって分られる粒子の質量として規定されている。
【００７０】
他の好適な実施態様において、乾燥粉末状製剤の空気動力学的粒子サイズは、一般に例において概略を説明したように特徴決定されて良い。類似して、粒子の質量中央値空気動力学的直径（MMAD）は、当業界で公知の方法を使用することで測定されて良い。粒子はそれらの全体形態学に基づくことをも特徴としうる。
【００７１】
用語「乾燥」とは、製剤がある含水率を有し、従って粒子が吸入装置においてエアロゾルを形成するために容易に分散することを意味する。本発明の乾燥粉末状製剤は好適に、幾分凝集が、特に長期保存期により生じうるが、実質的に活性を有する化合物を含んで成る。多くの乾燥粉末状製剤に関して知られているように、乾燥粉末状製剤の物質の数％が凝集する可能性があり、これは幾分活性のロスをもたらす。従って、乾燥粉末状製剤は約７０重量％（即ち、存在する合計化合物の%）の活性化合物を有すること、約８０重量%の活性化合物が好適であり、そして約９０重量%の活性化合物を有することが特に好適である。一層高い活性を有する化合物又は剤も熟考されており、そして本発明の方法によって調製、即ち、約９５%以上の活性に調製されて良い。存在する合計化合物の測定は、化合物に依存し、そして一般に、当業者に公知のように、活性アッセイ基づくだろう。剤の活性の測定は、化合物に依存し、そして当業者によって理解されるように、適切な生物活性アッセイが行われるだろう。
【００７２】
スプレー乾燥において、個々のストレス事象が、噴霧化（せん断ストレス及び空気−液体界面ストレス）、冷却又は加熱時間、任意に凍結（氷−水界面ストレス及びせん断ストレス）、及び/又は乾燥により生じうる。抗凍結剤及び凍結保護剤（lyoprotectant）が、凍結乾燥の間に凍結による不安定化に、そして脱水及び長期保存による不安定化にそれぞれ対抗するために使用されてきた。抗凍結剤分子、例えば、糖、アミノ酸、ポリオールなどが、氷結晶化に関連し、非常に濃縮された未凍結液体中で活性化合物を安定化させるために広く使用されてきた。
【００７３】
活性化合物を含んで成る乾燥粉末状製剤は、賦形剤を含んでも含まなくても良い。「賦形剤」又は「保護剤」とは、抗凍結剤及び凍結保護剤など、希釈剤として加えられるかあるいは活性化合物の流動性及びエアロゾル分散性をスプレー乾燥段階の間に高め、そしてその後、粉末状製品の長期分散性のための化合物又は物質を意味する。適切な賦形剤は、一般に比較的自由に流動する粒子固体であり、水と接触することで密になったり又はポリマー化せず、患者の気管支に配置された場合基本的に無害であり、そして生物活性を変えるような態様で活性化合物と実質上相互作用はしない。
【００７４】
適切な賦形剤としては、タンパク質の例えば、ヒト及びウシ血清アルブミン、ゼラチン、免疫グロブリン、炭水化物の例えば、単糖類（ガラクトース、D−マンノースなど）、二糖類（ラクトース、トレハロース、スクロースなど）、シクロデキストリン、及び多糖類（ラフィノース、マルトデキストリン、デキストランなど）；アミノ酸の例えば、グルタミン酸ナトリウム、グリシン、アラニン、アルギニン又はヒスチジン、並びに疎水性アミノ酸（トリプトファン、チロシン、ロイシン、フェニルアラニンなど）；潤滑剤の例えば、ステアリン酸マグネシウム；メチルアミンの例えば、ベタイン；賦形剤の例えば、硫酸マグネシウム；ポリオールの例えば、三価アルコール又は高次糖アルコール、例えば、グリセリン、エリトリトール、グリセロール、アラビトール、キシリトール、ソルビトール、及びマンニトール；プロピレングリコール；ポリエチレングリコール；プルロニクス（pluronics）；界面活性剤（脂質及び非脂質界面活性剤）及びそれらの組み合わせが挙げられるが、それらに限定はされない。好適な賦形剤は、トレハロース、スクロース、ソルビトール、又はラクトース並びにそれらの混合物である。賦形剤が使用される場合、それらは一般に約０.１、約０.２、約１、約２、約５、約１０〜約１５、約１０、約１５、約２０、約４０、約６０、約９９重量％組成物の範囲の量において使用されている。ラクトースを含む、又は少量の賦形剤もしくは他の成分を含む製剤が好適である。
【００７５】
他の好適な実施態様において、本発明の乾燥粉末状製剤は、実質的に賦形剤を含まない。この場合、「実質的に含まない」とは、この場合、製剤が、約１０重量%未満、好適には約５%未満、一層好適には約２〜３%未満、そして更に一層好適には約１%未満の、剤ではない任意の成分を含むことを意味する。一般に、本発明の目的に関して、製剤は推進剤及び共溶媒、緩衝剤又は塩、及び残留水を含んで良い。好適な実施態様において、乾燥粉末状製剤（下に論じるように、バルキング剤を加える前）は、主成分として剤とタンパク質からなり、そして少量の１又は複数の緩衝剤、１又は複数の塩及び残留水を伴う。一般に、この実施態様において、前記スプレー乾燥法は、下に十分に概略を説明したように、乾燥段階の前に温度上昇段階を伴う。
【００７６】
他の実施態様において、プレ−スプレー乾燥製剤、即ち、スプレー乾燥段階において使用される溶液製剤は、溶液、例えば、水溶液中に、活性剤、そして無視できる量の緩衝剤又は他の化合物を含んで成る。賦形剤を殆ど含まないかあるいは含まない前記プレ−スプレー乾燥製剤は、長期に渡り非常に安定ではありえない。従って、このスプレー乾燥段階を、プレ乾燥製剤が生産された後、適度な短時間以内で行うことが望ましい。しかし、賦形剤を殆ど使用しないかあるいは使用しない前記プレスプレー乾燥製剤は、非常に安定でありえないが、それから製造された乾燥粉末は、例において示されているように、おそらくそして一般に、どちらも以外にも安定でありそして非常に分散性がある。
【００７７】
本発明の製剤を形成するためにスプレー乾燥されている剤は、当該剤及び任意に緩衝剤を含んで成り、そして更なる塩を含んでも含まなくても良い。溶液中での緩衝剤のpHの適切な範囲は、当業者によって容易に確認されて良い。一般に、これは生理pHの範囲であるが、本発明の剤はより広い範囲のpH、例えば酸性のpHで安定である。従って、プレスプレー乾燥製剤の好適なpHの範囲は、約１、約３、約５、約６〜約７、約８、約１０であり、そして約７のpHが特に好適である。当業者に周知のように、多くの適切な使用されて良い緩衝剤がある。適切な緩衝剤としては、酢酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム、コハク酸ナトリウム、リン酸ナトリウム、炭酸アンモニウム及び炭酸塩が挙げられるがそれらに限定はされない。一般に、約１mM、約２mM〜約２００mM、約１０mM、約０.５M、約１M、約２Mのモル濃度で使用されており、約５０Mが特に好適である。
【００７８】
水、緩衝剤又は溶媒が調製方法の間に使用される場合、既に示したように、それらは更に塩を含んで良い。
【００７９】
加えて、本発明の乾燥粉末状製剤は、一般に「安定化剤」を実質上含まない。しかし、製剤は、それ自身、肺の呼吸器系に対して予防又は治療効果を有する更なる界面活性剤を含みうる。これらの剤は、肺界面活性剤のロスを補うかあるいは一般に他の機構によって作用する。本発明の乾燥粉末状製剤は、一般にミクロスフィア形成ポリマー（WO97/44013；米国特許第5,019,400を参照のこと）を実質上含まない。即ち、本発明の粉末は一般に１又は複数の活性剤及び賦形剤を含んで成り、構造的又は他の目的のためのポリマーの使用を要さない。本発明の乾燥粉末状製剤は、好適に安定でもある。「安定性」とは２つの事項、生物活性の維持及び経時分散性の維持のうち１つを意味し、好適な実施多様は両方の領域において安定性を示す。
【００８０】
本発明の乾燥粉末状製剤は、一般に経時生物活性、例えば、保存による物理的及び化学的安定性及び完全性を維持する。生物活性のロスは一般に、凝集、及び/又は剤粒子の酸化による。しかし、剤が賦形剤の粒子周辺で凝集する場合、生じる凝集体は、非常に安定且つ活性が高い。当業者に明らかなように、スプレー乾燥の結果、この方法において使用される極端な温度が理由で、生物活性の最初のロスがありうる。しかし、一度これが生じると、粉末が製造される時間から測定して、更なる活性のロスが無視できる。更に、本発明の乾燥粉末状製剤は、経時分散性を維持することが発見されており、経時高FPFの維持によって定量した場合、僅かに凝集し、ひび割れ又は凝集が時間が経つにつれて確認された。
【００８１】
本発明の１又は複数の剤は、当業者に公知の方法によって調製されている。例えば、米国特許第6,087,351号；及び6,284,750号を参照のこと、前記プレ−スプレー乾燥組成物は、安定性のために液体又は固体状製剤として処方されて良い。スプレー乾燥のために、液体製剤は一般に、当業者に公知のように、緩衝剤交換（又は除去）及び/又は濃度調節するために、必要に応じて、ジアフィルタレーション及び/又は限外ろ過に委ねられる。プレ−スプレー乾燥製剤は、約１mg/l、約５mg/l、約５mg/l、約１０mg/l、約２０mg/l〜約６０mg/l、約７５mg/lの剤を含んで成る。緩衝剤及び賦形剤は、もし存在すれば、上記の濃度で存在する。次いで、プレ−乾燥製剤は、剤を熱い空気又は気体中へと分散させることによって、又は剤を、冷却もしくは凍結した、液体もしくは気体などの流体中へとスプレーすることによってスプレー乾燥される。前記プレ−スプレー乾燥製剤は、当業者に公知のように、例えば、ろ過された加圧空気を使用することで２流体又は超音波ノズルを介して流体中へと入れることによって噴霧化されうる。スプレー乾燥装置が使用されて良い（Buchi；Niro Yamato；Okawara；Kakoki）。一般に、ノズルを僅かに加熱することが好適であり、それは例えば、冷流体が使用される場合にノズルヘッドが凍結するのを防ぐために、ヒーティングテープで当該ノズルをラッピングすることによる。前記プレ−スプレー乾燥製剤は、約−２００℃〜約−１００℃、約−８０℃の温度で冷却された流体中へと噴霧されて良い。流体は液体の例えば、液体窒素もしくは他の不活性流体、又は気体の例えば、冷却されている空気であって良い。エタノール中のドライアイスも超臨界流体として使用されて良い。ある実施態様において、液体を、噴霧化過程が生じるにつれて撹拌することが好適であるが、これは必要とされなくとも良い。
【００８２】
超微粉砕化技術は、バルクの薬物を適切な微粉砕化装置中へと入れることをも伴う。かかる微粉砕化装置は、DT産業、Bristol,PaなどからSTOKES（登録商標）の商用名で市販され入手可能である。簡潔に、前記バルクの薬物を閉鎖されたキャビティに配置し、そして内部の部品、例えば、プレート、ブレード、ハンマー、ボール、小石を動かすことに由来する機械的な力など、およびそのような力に委ねられる。バルク薬物を攻撃する部品に代わりに、またはそれに加えて、前記バルク薬物が、移動する部品に対して強制的に向けられるように前記キャビティを取り囲むハウジングが旋回（turn）又は回転（totate）しても良い。いくつかの微粉砕化装置、例えば、流体エネルギー微粉砕化装置又は空気−ジェット微粉砕化装置は、例えば、バルク粉末を内部部品に対して接触させるために前記閉鎖されたキャビティ内の空気へと向ける、高圧気流を伴う。薬物の所定のサイズと形状が一度達成されたら、方法は止められて良く、そして適切なサイズと形状を有する薬物が回収される。しかしながら、一般に、所望の粒子サイズ範囲を有する粒子が水簸に基づいて連続的に回収される。
【００８３】
粒子のサイズを下げるために使用できうる多くの種類の様々なサイズ低下技術がある。粒子のサイズを約１００μmに下げることができるカッター微粉砕化装置を使用する切断方法がある。粒子のサイズを約５０μm未満に下げることができるエンドルーナー微粉砕化装置を使用する圧縮法がある。粒子のサイズを約１μmに下げることができる振動微粉砕化装置又は粒子のサイズを約８μmに下げることができるハンマー微粉砕化装置を使用するインパクト法がある。粒子のサイズを約１μmに下げることができるローラーを使用する磨砕法がある。粒子のサイズを約１０μmに下げることができるピン微粉砕化装置、粒子のサイズを約１μmに下げることができるボール微粉砕化装置、粒子のサイズを約１μmに下げることができる流体エネルギー微粉砕化装置（又はジェット微粉砕化装置）を使用する、インパクト及び磨砕法の組み合わせがある。当業者は、慣用の実験を通じて、所望の粒子サイズの組成物を生産するために、粒子サイズ減少方法及び手段を決定することができる。
【００８４】
超臨界流体法は、剤の粒子のサイズを変形せしめるために使用されて良い。超臨界流体法は、超臨界溶媒の急速な膨張による沈殿、気体アンチ溶媒過程、及び気体飽和した溶媒からの沈殿を伴う。超臨界流体は、その臨界温度（Tc）及び臨界圧（Pc）よりも大きい温度及び圧力で適用される、又は液体状態で圧縮された流体である。臨界温度付近で、流体密度及び気体状〜液状への移動特性の大幅な変化は臨界圧（０.９〜１．５Pc）付近の比較的穏やか圧力変化から生じうるということが知られている。液体は殆ど圧縮不可能でありそして分散性が低いが、気体はより高い分散性と低い溶媒力を有す。超臨界流体は、これらの特性の至適組み合わせを有するように調製することができうる。超臨界流体の、液体様溶媒力及び液体よりも優れた輸送特性（液体と比べてより高い分散性、より低い粘度及びより低い表面張力）と組みになった高い圧縮可能性（流体密度の大幅な変化は圧力の比較的小さな変化によってもたらされ、溶媒力を非常に制御可能にすることを意味する）により、溶質（例えば、薬物）を含む溶媒と超臨界流体の間での質量移動（混合すること）を制御するための手段が提供される。
【００８５】
粒子形成のための超臨界流体の使用し且つ最近過去において注目を浴びた２つの方法は：（１）超臨界流体の急速膨張（RESS）（Tom、J.W.Debebedetti、P.G.、1991、The formation of bioerodible polymeric microspheres and microparticles by rapid expansion of supercritical solutions. BioTechnol.Prog.7：pp.403〜411）、及び（２）気体アンチ溶媒（GAS）再結晶化（Gallangher、P.M.、Coffey、M.P.、Krukonis、V.J.、及びKlasutis、N.、1989、GAS antisolvent recrystallization：new process to recrystallize comounds in soluble and supercritical fluids. Am.Chem.Sypm.Ser.、No.406；Yeoら（1993）；Krukonisらの米国特許第5,360,478号；Gallagherらの米国特許第5,389,263号）である。RESS法において、溶質（これから粒子が形成される）は、超臨界CO2中に可溶化され溶液が形成される。次いで、この溶液は、例えば、ノズルを介して低圧気体状媒質中へとスプレーされる。このノズルを介する超音速での溶液の膨張により溶液の急速な減圧が生じる。この急速な膨張及びCO2密度及び溶媒力の減少は溶液の超飽和及びその後の、実質上汚染物質を伴わない粒子の再結晶化をもたらす。しかし、このRESS法は、極性化合物からの粒子形成には適しておらず、その理由は、薬物を含むかかる化合物は超臨界CO2に対して殆ど可溶性を示さないからだ。共溶媒（メタノールなど）はCO2に対して、極性化合物の溶解度を高めるために加えられて良い。しかしこれは製品の純度に影響を及ぼし、あるいはRESS法の本来環境にやさしい性質に影響を及ぼす。RESS法は、ノズルに粒子が集積することよる、そして大幅な圧力の低下を伴うJoule-Tompson効果によって生じるCO2の凍結によりノズルが詰まることを伴う操作上及びスケールアップ上の問題にも脅かされる。
【００８６】
GAS法において、溶液における又は溶液を形成するために常用の溶媒に溶かされている注目の溶質（典型的に薬物）はスプレーされ、典型的に常用のスプレーノズル、例えば、オリフィス又はキャピラリーチューブを介して、スプレー滴の中へと分散し、溶媒の膨張を生じさせる超臨界CO2中へとスプレーされる。CO2膨張された溶媒は、純粋な溶媒よりも溶解化させる能力が低く、混合物は非常に過飽和状態になって良くそして溶質は沈殿又は結晶化させられる。GAS法はRESS法を超える多くの利点を享受する。利点としては、より高い溶質ローディング（スループット）、溶媒選択の柔軟さ、及びRESS法に比べて操作上の問題が殆どないことである。他の常用の方法に比べて、GAS技術は、方法のパラメーターの設定において一層柔軟性があり、そして多くの要素を再利用する可能性を有し、従って一層環境上許容できる。更に、この方法で使用される高圧（最大で２，５００psig）は潜在的に、処理された薬物粒子のための媒質を滅菌することを供するが；しかし、この方法は実行可能であるべきで、選定の超臨界流体は少なくとも部分的に有機溶媒と混和性であるべきであり、そして溶質は好適に超臨界流体に不溶性であるべきだ。
【００８７】
Gallagherら（1989）は、バッチ体積のニトログアニジン溶液を膨張させて溶けている溶質の粒子を再結晶化するための超臨界CO2の使用を教示している。次の研究は、Yaoら（1993）によって開示され、有機溶液をCO2中にスプレーするためにレーザーで穴を空けた２５〜３０μmのキャピラリーノズルが使用された。１００μm及び１５１μmのキャピラリーカラムの使用も報じられている（Dixon, D.J. and Johnston, K.P., 1993, Formation of microporous polymer fibers and oriented fibrils by precipitation with a compressed fluid antisolvent. J. App. Polymer Sci. vol.50: pp.1929〜1942; Dixon, D.G., Luna-Barcenas, G., and Johnson, K.P., 1994, Microcellular microspheres and microballoons by precipitation with a vapor-liquid compressed fluid antisolvent. Polymer, vol.35: pp.3998〜4005)。
【００８８】
溶媒の例は、二酸化炭素（CO2）、窒素（N2）、ヘリウム（He）、酸素（O2）、エタン、エチレン、エチレン、エタン、メタノール、エタノール、トリフルオロメタン、一酸化窒素、二酸化窒素、フルオロホルム（CHF3）、ジメチルエーテル、プロパン、ブタン、イソブタン、プロピレン、クロロトリフルオロメタン（CClF3）、六フッ化硫黄（SF6）、ブロモトリフルオロメタン（CBrF3）、クロロジフルオロメタン（CHClF2）、ヘキサフルオロエタン、四フッ化炭素二酸化炭素、１，１，１，２−テトラフルオロエタン、１，１，１，２，３，３，３−ヘプタフルオロプロパン、キセノン、アセトニトリル、ジメチルジスルホキシド（DMSO）、ジメチルホルムアミド（DMF）、及びそれらの２以上の混合物から選択される。
【００８９】
噴霧化の条件、例えば、噴霧化気体流速、噴霧化気体圧、液体流速などは、一般に制御され、平均直径約０．５μm、約１μm、約５μm〜約１０μm、約３０μm、約５０μm、約１００μmを有する液滴が生み出され、そして平均サイズ約１０μm及び約５μmの滴が好適である。常用のスプレー乾燥装置が一般的に使用されている（Buchi、Niro Yamamoto、Okawara、Kakokiなど）。一度滴が生み出されると、それらは水を取り除くことによって乾燥されそして活性剤、１又は複数の賦形剤、及び１又は複数の残留緩衝剤、１又は複数の溶媒又は１又複数の塩が残される。これは様々な方法、例えば、当業者に周知のように、凍結乾燥、即ち、液滴としてではなくケーキとして凍結させることによって行われうる。一般に、そして好適に、真空が適用され、例えば、凍結が生じるのと同じような温度で適用される。しかし、真空を適用する前又は間に、凍結される粒子の温度を上昇させることによって剤に対する凍結のいくつかのストレスを緩和することが可能である。「アニ−リング」と命名されたこの方法は、剤が不活性化することを下げ、そして１又は複数の段階において、例えば、温度が、２回以上の熱増加を使用する好適な態様により、真空の乾燥段階の前又は間のいずれかに１又は数回上昇されて良い。粒子はある時間に渡り、一般には熱平衡に到達する時間に渡りインキュベートされて良く、即ち、試料のサイズ及び熱交換の効率に依存し、１時間〜数時間に渡り、真空の適用前にインキュベートされて良く、そして真空が適用され、そして他のアニ−リング段階が行われる。この粒子は結晶構造に関連しない水の大部分を除去するために十分な時間に渡り凍結乾燥されて良く、実際の時間は、温度、真空強度、サンプルサイズなどに依存する。
【００９０】
球体化（Spheronizatoin）は、実質上球形の粒子の形成を伴い、そして当業者に周知である。薬物を球体化するための市販され入手可能な機械は当業者に公知であり、そして、例えば、LCI corp.（Charlotte、N.C.）のNarumerizer及びVector Corp（Marison、Iowa）のCF-造粒装置が挙げられる。かかる機械には、廃棄ポートを有する閉鎖されたキャビティー、環状プレート、及び当該プレートを回転させるためのモーターなどの手段を伴う。バルク薬物又は薬物の湿粒は、ミキサー及び/又は造粒器から回転するプレート上に供給され、プレートは湿粒を前記閉鎖されたキャビティーの内部の壁に押し付ける。この方法により球形状の粒子がもたらされる。使用されて良い代わりの球体化法としては、制御された条件下でスプレー乾燥を使用することが挙げられる。スプレー乾燥技術を使用することで粒子を球体化するために欠かせないこの条件は、当業者に公知であり、そして関連文献及びテキスト、例えば、Remington：The Science and Practice of Pharmacy、第１２版（Eastonら：Mack Publishing Co. 2000）に記載されている。
【００９１】
好適な実施態様において、第二凍結乾燥段階は、更に水を、約０℃、約１０℃、〜約２０℃、〜約２５℃の温度で除去するために行われており、約２０度が好適である。次いで、粉末は常用の技術を使用することで回収され、そしてもし所望されれば、バルキング剤が加えられても良いが、必要ではない。本発明の乾燥粉末状製剤は、一度調製されると、乾燥粉末吸入装置によって容易に分散され、その後、患者によって吸入され、従って、粒子が肺の標的領域中へと浸透する。本発明の粉末は、治療上有効な量の活性剤を含んで成り、そして患者に対するデリバリーのために、例えば、呼吸器系及び肺疾患の予防及び治療のために使用される単位投与形態へと処方されて良い。
【００９２】
本発明の乾燥粉末状製剤は、治療される疾患の種類、個々の患者の臨床症状、活性剤が予防又は治療目的で投与されるかどうか、投与形態における活性剤の濃度、以前の治療、患者の臨床的歴史及び彼/彼女の活性剤に対する反応、投与の経路、投与の計画、主治医の裁量、及び医者に公知の他の因子を考慮して、良い医療実施を伴う態様において処方及び投与されて良い。このような患者を目的とするための活性化合物の「有効な量」又は「治療上有効な量」とは、予防及び治療投与を含み、そして活性剤の同一性に依存するだろうし、そして従って、かかる考慮によって決定され、そしてそれは治療される対象者の、関連する、好ましい生物反応を高める量である。活性剤は適切に、患者に対して一度に又は治療一式に渡り、好適には一日に一度、投与され、そして患者に対して診断が進んでから任意の時に投与されて良い。「単位投与量」とは、とは本明細書中で使用される場合、治療上有効な量の微粉砕化された活性剤が入っている単位投与量容器を意味する。投与容器とは、適切な吸入装置内にフィットし、乾燥粉末状製剤のエアロゾル化を、気体粒中への分散によって可能にし、エアロゾルを形成させるものである。これらは、カプセル、ホイルパウチ、ブリスター、バイアルなどであって良い。この容器は多くの様々な材料から形成されて良く、それは例えば、プラスチック、ガラス、ホイルなどであり、そしてディスポーザブル又は充填されたカプセル、パウチ、ブリスターなどが挿入されることで再充填可能であって良い。この容器は一般に、乾燥粉末状製剤を維持し、そして使用のための使用法を伴う。単位投与容器は、粉末を患者に対してデリバリーするだろう吸入装置を伴いうる。これらの吸入装置は任意に粉末が分散され、患者による吸入に適したチャンバーを有する。
【００９３】
本発明乾燥粉末状製剤は、更に他の方法にて例えば、持続放出組成物、例えば移植体、パッチなどとして処方されて良い。持続放出組成物の適切な例としては、造形品、例えば、フィルム又はマイクロカプセルの形態における半透過性ポリマーマトリクスが挙げられる。持続放出マトリクスとしては多糖類が挙げられる。例えば、米国特許第3,773,919号；EP 58,481号参照のこと。Ｌ−グルタミン酸をγ−エチル−Ｌ−グルタミン酸塩のコポリマーも適切である。Sidmanら、Biopolymers vol.22: pp.547〜556 (1983）などを参照のこと。ポリ２−ヒドロキシエチルメタクリレートについて、Langerら、J. Biomed.Mater. Res. vol.15: pp.167〜277 (1981); Langer, Chem. Tech., vol.12: pp.98〜105（1982）を参照のこと。そしてまたエチレンビニル酢酸塩及びポリ−Ｄ−（−）−３−ヒドロキシブチル酸も適切である。Langerら、supra; (EP 133,988）を参照のこと。持続放出組成物はリポソームにより包括された剤も挙げられ、それは公知の方法によって調製されて良い。例えば、DE 3,218,121; Epsteinら、Proc. Natl. Acad. Sci. USA vol.82: pp.3688〜3692（1985); Hwangら、Proc. Natl. Acad. Sci. USA vol.77: pp.4030〜4034 (1980); EP 52,322; EP 36,676; EP 88,046; EP 143,949; EP 142,641; 日本国特許出願83−118008号；米国特許第4,485,045号及び4,544,545号；EP 102,324号を参照のこと。全ての参照技術の対応する部分は、本明細書中に組み込まれている。本来、リポソームは約２００〜８００Åの小さな単一ラメラリポソームであり、その脂質含量はコレステロールの約３０mol％超であり、選定の割合に、至適治療のために調節されている。
【００９４】
好適な実施態様において、本発明の乾燥粉末状製剤は、吸入されるのみならず、比較的新しい注射装置及び当該粉末を注射するための方法を使用することで、乾燥粉末として注射されて良い。この実施態様において、粉末の分散性及び呼吸可能性は重要ではなく、そして粒子サイズは、例えば、約１０μmより大きく、約２０μm〜約４０μm、約５０μm〜約７０μm、約１００μmであって良い。本発明の乾燥粉末状製剤は注射のために再構築されても良い。本発明の粉末は分散性が優れているので、それは、希釈剤を使用することで液体形態へと再構築され、そして肺を介さない投与経路、例えば、注射、皮下的、静脈内などによって使用されて良い。公知の希釈剤、例えば、生理学的塩類溶液、他の緩衝剤、塩、並びに非水性液体などが使用されて良い。本発明の乾燥粉末を再構築して肺デリバリーのため、鼻腔もしくは肺内投与のため又は吸入のための液体エアロゾルを形成するために使用されて良い。本明細書中で使用される場合、用語「治療」とは、治療的及び維持治療並びに予防及び予防的手段を意味する。治療する必要がある人々とは、疾患を有すると診断された人々並びに疾患の傾向を有する人々及び疾患が予防されるべき人々を意味する。連続的な治療又は投与とは、少なくとも毎日が基本の、１又は複数日の治療の中断を伴わない治療である。断続的な治療もしくは投与、又は断続的な態様での治療もしくは投与とは、連続的ではなく、むしろ本来周期的な治療を意味する。本明細書中、治療計画は、連続的もしくは断続的もしくは任意の他の適切な態様であって良い。乾燥粉末状製剤は、例えば、篩い分けすること、凍結乾燥すること（lyophilization）、スプレー凍結乾燥すること、スプレー乾燥すること、及び凍結乾燥すること（freeze drying）によって獲得されうる。これらの方法は、効果を高めるために組み合わされて良い。フィルターは、当業者に公知の様に、篩い分けをするために使用されて良い。剤粒子サイズの変更及び選択は単一段階で行われて良く、好適には、先に記載されたように、所望の粒子サイズを達成するために有効な条件下で微細化することによって行われて良い。
【００９５】
次いで、乾燥粉末状製剤は、温度、湿度、光などが制御された条件下で、剤の流動性が維持される限り、保存されて良い。保存することによる剤の安定性は、選定の温度で選定の時間に渡り測定されて良く、そして条件が実施されるマトリクスを迅速にスクリーニングするために、例えば、２〜８℃、３０℃及び時には４０℃で、２、４及び２４週に渡り測定されて良い。製剤が安定であるべき時間の長さ及び条件は、上記の多くの因子、バッチあたりの調製される量、保存条件、製品のターンオーバーなどに依存する。これらの試験は通常、３８％の相対湿度（rh）で行われる。これらの条件下で、剤は一般に、１８月に渡り生物活性を約３０％未満ロスし、時には約２０％未満、又は約１０％未満ロスする。本発明の乾燥粉末状製剤は、FPFを約５０％未満ロスし、ある場合は、約３０％未満、そしてある場合は、約２０％未満ロスする。
【００９６】
本発明の乾燥粉末状製剤は、製剤成分の例えば、患者に対してデリバリーされる乾燥粉末状製剤中の剤の濃度を下げるために使用されるバルキング剤又は担体と組み合わされて良い。これらの成分を製剤に対して加えることは必要なことではないが、しかし、ある場合、より高い物質の体積/単位投与量を有するために望ましい。バルキング剤は、分散装置内での粉末の流動性及び分散性を向上させるため、又は粉末の操作特性を向上させるために使用されて良い。これは、バルキング剤又は担体の所定の粒子サイズ低下方法（スプレー乾燥など）の間での使用から識別可能である。適切なバルキング剤又は賦形剤は一般に結晶質（水の吸収を避けるために）であり、ラクトース及びマンニトールなどが挙げられるがそれらに限定はされない。もしラクトースが約９９：約１：約５：活性成分の量でバルキング剤に対して加えられれば、〜約１：９９にすることが好適であり、そして約５〜約５：そして約１：１０〜約１：２０が好適である。
【００９７】
本発明の乾燥粉末状製剤は、他の薬物、例えば、治療剤の組み合わせを含んで良く一緒に処理、例えばスプレー乾燥されて良い、もしくは個別に処理されて組み合わされて良い、もしくは１つの成分がスプレー乾燥されて他のものはそのようにされず、一方で本明細書中で可能にされた他の態様の一つにおいて処理されて良い。薬物の組み合わせは、当業者に公知のように、薬物が与えられる疾患に依存する。本発明の乾燥粉末状製剤は、製剤成分として、賦形剤、防腐剤、デタージェント、界面活性剤、抗酸化剤、などをも含んで成りえ、そして任意の適切な手段によって剤を気道に対して輸送する任意の手段によって投与されて良く、しかし好適には呼吸可能製剤として、一層好適には、剤粒子、及び任意に他の治療剤及び製剤成分を含んで成るエアロゾル又はスプレーの形態において、呼吸器系を通じて投与されて良い。
【００９８】
他の実施態様において、前記乾燥粉末状製剤は、本発明の乾燥医薬剤及び１又は複数の界面活性剤を含んで成りうる。本発明において使用される活性化合物の摂取を増強するための適切な界面活性剤又は界面活性剤成分としては、合成及び天然並びに完全及びトランケーション形態の界面活性タンパク質A、界面活性タンパク質B、界面活性剤タンパク質C、界面活性剤タンパク質D、界面活性剤タンパク質E、二飽和フォスファチジルコリン（ジパルミトイルではく）、ジパルミトイルフォスファチヂルコリン、フォスファチジルコリン、フォスファチジルグリセロール、フォスファチジルイノシトール、フォスファチジルエタノールアミン、フォスファチジルセリン、フォスファチジン酸、ユビキノン、リソフォスファチジルエタノールアミン、リソフォスファチジルコリン、パルミトイル−リソフォスファチジルコリン、デヒドロエピアンドロステロン、ドリコール、スルファチジン酸、グリセロール−３−リン酸塩、ジヒドロキシアセトンフォスフェート、グリセロール、グリセロ−３−フォスフォコリン、ジヒドロキシアセトン、パルミチン酸塩、シチジン二リン酸塩（CDP）、ジアシルグリセロール、CDPコリン、コリン、コリンリン酸塩、；並びに界面活性剤の成分のための天然担体ビヒクルである天然及び人工のラメラ体、オメガ−３−脂肪酸、ポリエン酸、ポリエノン酸（polyenoic acid）、レシチン、パルミチン酸、酸化エチレン又は酸化プロピレンの非イオン性ブロックコポリマー、ポリオキシプロピレン、モノマー性及びポリマー性物質、ポリオキシエチレン、モノマー性及びポリマー性物質、デキストラン及び/又はアルカノイル側鎖を伴うポリ（ビニルアミン）、Brij35（登録商標）、Triron-X（登録商標）、及び合成界面活性剤ALEC（登録商標）、Exosurf（登録商標）、Survan（登録商標）、及びAtovaquone（登録商標）などである。これらの界面活性剤は、単一でもしくは製剤中の多数成分界面活性剤の一部として、又は活性化合物に対して共有結合した添加物として使用されて良い。
【００９９】
本発明の製剤中で使用するための他の治療剤の例は、鎮痛剤の、例えば、アセトアミノフェン、アニレルジン、アスピリン、ブプレノルフィン、ブタビタル、ブトルファノール（Butorpphanol）、サリチル酸コリン、コデイン、デゾシン、ジクロフェナク、ジフルニサル、ジヒドロコデイン、エルカトニニン、テトドラク、フェノプロフェン、ヒドロコデイン、ヒドロモルフォン、イブプロフェン、ケトプロフェン、ケトロラク、レボルファノール、サリチル酸マグネシウム、メクロフェナメート、メフェナミン酸（Mefenamic Acid）、メペリジン、メタドン、メトトリメプラジン、モルヒネ、ナルブフィン、ナプロキセン、オピウム、オキシコドン、オキシモルホン、ペンタゾシン、フェノバルビタル、プロポキシフェン、サルサレート、サリチル酸ナトリウム、上記列挙したものに加えて、トラマドール及び麻酔性鎮痛剤、が挙げられる。Mosby's Physician's GenRxを参照のこと。
【０１００】
抗うつ剤も有用であり、例えば、アルプラゾウム、ブロマゼパム、ブスピロン、クロルジアゼポキシド、クロルメザノン、クロラゼペート、ジアゼパム、ハラゼパム、ヒドロキサジン、ケタスゾラム、ロラゼパム、メプロバメート、オキサゼパム及びプラゼパムなどが挙げられる。精神的衰退に関連する抗うつ剤としては、例えば、クロルジアゼポキシド、アミトリプチリン、ロキサピン、マプロチリン及びペルフェナジンなどが挙げられる。抗炎症剤の例えば、非リウマチ用のアスピリン、サリチル酸コリン、ジクロフェナク、ジフルニサル、エトドラク、フェノプロフェン、フロクタフェニン、フルビプロフェン、イブプロフェン、インドメタシン、ケトプロフェン、サリチル酸マグネシウム、メクロフェナメート、メフェナム酸、ナブメトロン、ナプロキセン、オキサプロジン、フェニルブタゾン、ピロキシカム、サルサラート、サリチル酸ナトリウム、スリンダク、テノキシカム、チアプロフェン酸、トルメチン、眼科治療のための抗炎症剤の例えば、ジクロフェナク、フルビプロフェン、インドメタシン、ケトロラク、リメキソロン（一般に手術後治療のため）、非感染性鼻腔用途のための抗炎症剤の例えば、ベクロメタキソン、ブデソニド、デキサメタゾン、フルニソリド、トリアムシノロンなどが挙げられる。スポリフィク（抗不眠／睡眠誘導剤）の例えば不眠症の治療のために使用されるもの、例えばアルプラゾラム、ブロマゼパム、ジアゼパム、ジフェニルヒドラミン、ドキシルアミン、三環系抗うつ薬、例えば、アミトリプチリンHCl（Elavil）、アミトリプチリンHCl、ペルフェナジン（Triavil）及びドキセピンHCl（Sinequan）などでの治療が挙げられる。精神安定剤の例は、エスタゾラム、フルラゼパム、ハラゼパム、ケタゾウム、ロラゼパム、ニトラゼパム、プラゼパム、クアゼパム、テマゼパム、トリアゾウム、ゾルピデム及びソピクロンなどが挙げられる。鎮静剤としては、ジフェンヒドラミン、ヒドロキシジン、メトトリメプラジン、プロメタジン、プロポホル、メラトニン、トリメプラジンなどが挙げられる。
【０１０１】
小マル（mal）及び震えなどの症状の治療のために使用される鎮静剤としては、例えば、アミトリプチリンHCl；クロルジアゼポキシド、アモバルビタール；セコバルビターム、アプロバルビタール、ブタバルビタール、エトキオルビノール、グルテチミド、Ｌ−トリプトファン、メフォバルビタール、メトヘキシタールNa、ミダゾウムHCl、オキサゼパム、ペントバルビタールNa、フェノバルビタール、セコバルビタールNa、チアミラルNaなどが挙げられる。頭部外傷（脳損傷／虚血）の治療において使用される剤は、エナドリンHCl（例えば重度の頭部損傷；希少疾患状態（orphan status)、Warer Lambertの治療のため）、細胞保護剤、更年期障害、更年期症状の治療のための剤（治療）の例えば、エルゴタミン、ベラドンナアルカロイド及びフェノバルビタル、更年期の血管運動神経の症状の治療のための、例えば、クロニジン、接合したエストロゲン及びメドロキシプロゲステロン、エストラジオール、エストラジオールシピオネート、吉草酸、エストラジオール、エストロゲン、接合したエストロゲン、エステル化したエストロン、エストロピペート及びエチニルエストラジオールが挙げられる。月経前症候群（PMS）のため剤の例は、プロゲステロン、プロゲスチン、ゴナドトロピン放出ホルモン、経口避妊薬、ダナゾール、酢酸ルプロリド、ビタミンB6が挙げられる。感情／精神医学的治療のための剤、抗うつ剤及び抗不安剤の例は、ジアゼパム（Valium）、ロラゼパム（Ativan）、アルプラゾウム（Xanax）、SSRI（選択的セロトニン再摂取阻害剤）、フルオキセチンHCl（Prozac）、セタリンHCl（Zoloft）、パロキセチンHCl（Paxil）、マレイン酸フルボキサミン（Luvox）、ベンラファクシンHCl（Effexor）、セロトニン、セロトニンアゴニスト（Fenfluramine）、及び他の大衆（OTC）医薬が挙げられる。
【０１０２】
他のかかる組み合わせ治療製剤は、多くの常用の技術を使用することで製造されて良い。活性化合物及び任意の担体を、もし適切（即ち、オーダーされた混合物（ordered mixture）が意図されていない）ならば適切な微粉砕装置、例えば、この方法におけるいくつかの段階におけるジェット微粉砕装置中で、一次粒子を下方の呼吸管に最大限沈着させるために適した範囲（即ち、約０．１μm〜約１０μm）のサイズにて生産するために、超微粉砕化することが必須でありうる。例えば、当業者は、DHEAと担体を乾燥混合し、そして適宜、物質を一緒に混合することができ；代わりに、物質は個別に超微粉砕化され、そして混合されても良い。混合されるべき化合物が異なる物理特性、例えば、硬度及び輝度を有する場合、超微粉砕化に対する抵抗は変わり、そしてそれらを破壊して適切な粒子サイズにするためには様々な圧が必要となりうる。従って、一緒に超微粉砕化される場合、ある成分の獲得される粒子のサイズは満足がいくものではないだろう。かかる場合、異なる成分を最初に個別に超微粉砕化し、次いでそれらを混合することが有利であろう。
【０１０３】
活性化合物を最初に、オーダーされた混合物が意図されていない場合、任意の担体を、適切な溶媒、例えば、水の中へ溶解させ、分子レベルで混合を達成することも可能である。この手順により、pHの値を所望のレベルに調節することも可能になりうる。吸入製品のための医薬的に許容できるpHの限界３．０〜８．５は、考慮されなければならず、何故なら、この限界を外れるpHを有する製品は、気道の炎症及び閉塞を誘導しうるからだ。粉末を獲得するために、溶媒は、DHEAの生物活性を維持する方法によって取り除かれなければならない。適切な乾燥方法としては、真空濃縮、開放乾燥（open drying）、スプレー乾燥、凍結乾燥及び超臨界流体の使用が挙げられる。５０℃を超える温度で数分以上渡る乾燥は一般に避けられるべきであり、何故なら、DHEAの分解が幾らか生じるである。乾燥段階の後、固体状物質は、もし必要なら、粗粉末を獲得するために粉砕され、そしてもし必要なら、超微粉砕化されて良い。
【０１０４】
もし所望されれば、超微粉砕化された粉末は、それらが、目的の吸入装置中へと組み込まれる前、流動特性を向上させるために、例えば、乾燥造粒によって処理され、より優れた操作特性を伴う球状凝集体が形成させられて良い。かかる場合、装置は、凝集体が当該装置を出る前に、前記凝集体を実質的に脱凝集化し、従って患者の呼吸管に入る粒子は大まかに所望のサイズ範囲にあるように設計されるだろう。オーダーされた混合が所望される場合、もし所望されれば、特定のサイズ範囲内の粒子を獲得するために、活性化合物は、例えば、超微粉砕化によって処理されて良い。担体も、所望のサイズ及び所望の表層特性、例えば特定の表層：重量比、又は所定の質感を獲得するため、そしてオーダーされた混合における至適接着力を確保するために、処理されて良い。オーダーされた混合物のかかる物理的要求は、前記要請を満たす、オーダーされた混合物を獲得する様々な手段として周知であり、そして当業者によって容易に決定されて良い。
【０１０５】
本発明の乾燥粉末状製剤は、呼吸管中へと、呼吸可能なサイズの粒子の製剤として、即ち、吸入、鼻腔投与又は肺咽頭注入によって、鼻、口、咽頭又は肺を通過するために十分に小さいサイズの粒子として、気管支及び肺胞に対して投与されて良い。一般に、呼吸可能な粒子範囲は、約０．１μm〜約１００μm、そして吸入可能粒子は、約０．１μm〜約１０μm、〜約５μmのサイズである。エアロゾル内に含まれている呼吸不可能サイズの粒子の大部分は、吸入された場合、喉に沈着し、そして飲み込まれる傾向にあり、そのことはエアロゾル中の呼吸可能粒子の量を減らす。鼻腔投与のために、約１０μm〜約２０μm、約５０μm、約６０μm、又は約１００μmの範囲の粒子サイズが鼻腔における保持を確保するために好適である。
【０１０６】
粒子のサイズ及び形状は、適切な粒子形態を決定して確保するための公知の技術を使用することで分析されて良い。例えば、当業者は、粒子を顕微鏡下で視覚的に調べそして/又はそれらをメッシュスクリーンに通すことによって粒子サイズを決定することができる。粒子の視覚化のための好適な技術としては、走査型電子顕微鏡（SEM）及び透過型電子顕微鏡（TEM）が挙げられる。粒子サイズ分析は、レーザー回折法を使用することで行われて良い。レーザー回折によって粒子サイズ分析をするために市販されて入手可能なシステム（HELOSH1006）は、Clausthal-Zellerfeldから入手可能である。
【０１０７】
本発明の乾燥粉末状製剤は、固体粒子エアロゾルを生成する任意の装置、例えば、エアロゾル発生装置又はスプレー発生装置など任意の装置によりデリバリーされて良い。これらの装置は、上に説明したように、呼吸可能粒子を生産し、そして、予め計量された投与量の医薬を含むある体積のエアロゾル又はスプレーを、ヒト又は動物投与に適した速度で生成する。固体粒子エアロゾル又はスプレー生成装置の一つの例となる種類は、吸入器であり、それらは微細に粉砕された粉末の投与のために適している。後者は、鼻で吸う態様において鼻腔中に摂取されても良い。吸入器において、粉末、例えば、本明細書中に記載された治療を行うために有効な、計量された投与量の剤がカプセル又はカートリッジに入っている。これらのカプセル又はカートリッジは、典型的にゼラチン、ホイル又はプラスチックからできており、そしてin situで穴あけ又は開放され、そして粉末は、吸入により装置を通じて空気によって引っ張られるかあるいは手動で操作されるポンプによってデリバリーされて良い。吸入器において使用される乾燥粉末状製剤は、単一の剤又は当該剤を含んで成る混合された粉末のいずれかからなって良く、そして典型的に、当該剤は０．０１〜１００重量％の製剤を含んで成る。乾燥粉末状製剤は、一般に活性化合物を約０．０１重量％、約１重量％、約５重量％、〜約２０重量％、約４０重量％、約９９．９９重量％の量で含む。しかし他の成分、及び他の量の剤も、本発明の範囲内で適している。
【０１０８】
好適な実施態様において、乾燥粉末状製剤は、噴霧器によってデリバリーされている。これは、自身の活動の下では乾燥粉末医薬組成物を吸入もしくは呼吸できない患者もしくは対象者のために特に有用である。深刻なケースでは、患者又は対象者は人工呼吸器により生命を維持している。噴霧器は任意の医薬的又は獣医学的に許容できる担体、例えば、薄い塩類溶液を使用することもできる。好適に前記薄い塩類溶液は、NaClが約１．０又は０．５％未満である。一層好適に、前記薄い塩類溶液はNaClが０．２％又は０．１５％未満である。一層更に好適に、前記薄い塩類溶液はNaClが約０．１２%未満である。噴霧器は、粉末状医薬組成物が患者又は対象者の気道における標的に対してデリバリーされる手段である。無水化合物、例えば、無水DHEA−Sの安定性は、密封容器、例えば、化合物が入るバイアル内の含水を除去することもしくは下げることによって維持されるもしくは高められる。好適に、化合物に加えて、それは密封容器内の真空である。
【０１０９】
本発明の製剤は、様々な投与の方法及びデリバリーの経路のためにあつらえられた様々な形態で提供されてもいる。熟考された製剤は、例えば、賦形剤並びに他の剤であって、及び皮膚、口、鼻、膣、肛門、目、及び体の他の腔の腹腔内を介して、持続放出製剤として、髄腔内、経脈管的に、吸入によって、鼻腔に、肺内に、器官中へと、移植によって、座薬によって、クリーム、ゲルなどとして、そして当業者に公知の方法によってデリバリーするために適した他の剤を含む経皮製剤である。ある実施態様において、乾燥粉末状製剤は、呼吸可能製剤、例えば、エアロゾル又は粉末を含んで成る。本発明の乾燥粉末状製剤は、バルクで、単位形態において、並びに移植物の形態、カプセル、ブリスター又はカーリッジにおいて提供されており、それらは当業者に公知のように開放可能又は貫通可能である。キットも提供されており、それはデリバリー装置を含んで成り、そして個別の容器中に、本発明の乾燥粉末状製剤を、そして任意に他の賦形剤及び治療剤を含んで成り、そして当該キット成分を使用するための教示を含んで成る。
【０１１０】
好適な実施態様において、剤は、懸濁定量投与量吸入（MDI）製剤を使用することでデリバリーされている。かかるMDI製剤は、ヒドロフルロアルカン（HFA）などの推進剤を使用するデリバリー装置を使用することでデリバリーされて良い。好適に、前記HFA推進剤は、水を１００ppm（PPM）未満含む。N.C Miller（Respiratory Drug Delivery、P.R. Bryon（出版社.）CRC press 、Boca Raton 1990、pp.249〜257）は含水率がMDI懸濁の結晶成長に及ぼす効果を概観している。無水DHEA−Sは、水に曝された場合水和し、そして最終的に巨大な粒子を形成する。この水和過程は、ある含水率を有するHFA推進剤中の無水DHEA−Sの懸濁において生じうる。この水和過程により、強力な分子間結合の形成により結晶成長を加速させて巨大な粒子の形成を生じるだろう。対照的に、二水和物形態は既に水和されており、当該二水和物形態は更により大きな粒子を形成しないので、従って、MDIの無水物形態よりも、一層安定であり、従って一層好適である。もしDHEA−Sが、二水和物形態よりも低いエネルギーを有するHFA推進剤と溶媒和物を形成すれば、このDHEA−S溶媒物は最も安定であろうし、そしてMDIを形成するために一層好適である。
【０１１１】
１つの好適な実施態様において、デリバリー装置は、単一又複数投与の製剤をデリバリーする乾燥粉末吸入器（DPI）を含んで成る。この単一投与吸入器は、一回適用のために十分な製剤を無菌的に予め搭載されたディスポーザブルキットとして提供されて良い。吸入器は加圧吸入器として提供されて良く、そして製剤は穴あけ可能もしくは開放可能カプセルもしくはカートリッジとにおいて提供されて良い。キットは任意に、個別の容器中に、他の治療化合物、賦形剤、界面活性剤（治療剤並びに製剤成分を目的として）、抗酸化物質、着色剤及び芳香剤、充填剤、揮発性油、分散剤、緩衝剤、界面活性剤、抗酸化物質、芳香剤、バルキング剤、推進剤、防腐剤及び様々な製剤のための適切な他の添加剤などの剤をも含んで成りうる。本発明の乾燥粉末状製剤は、それ自身又は組成物もしくは様々な製剤の形態において、例えば、気道閉塞、１又は複数のアレルギー、肺ガン及び/もしくは炎症に関連した疾患もしくは症状の治療及び/もしくは予防で使用されて良い。疾患の例は、気道の炎症、１又は複数のアレルギー、喘息、呼吸障害、CF、COPD、AR、ARDS、肺高血圧症、肺炎症、気管支炎、気道閉塞、気管支閉塞、微生物感染症、ウィルス感染症（SARSなど）などである。明らかに、本発明の製剤は、患者へ、上記の例を伴い悪影響を及ぼす全ての疾患を治療するために投与されて良い。典型的に、乾燥粉末状製剤は、剤のための有効な量の剤において、これらの疾患の徴候もしくは症状を軽減もしくは改善するために投与されて良い。
【０１１２】
乾燥粉末状製剤は、１又は複数の肺に対して直接、好適には呼吸可能粉末、エアロゾル又はスプレーとして投与されて良い。治療される対象者の教示に従いこの患者の体重により投与されるべき乾燥粉末状製剤の量をどのようにして滴定するかは当業者には明らかだろうが、剤は好適に、約０.０５〜約１０μM剤の、そして一層好適には最大で約５μMの細胞間濃度を達成する有効な濃度で投与される。推進剤は加圧下で使用されて良く、そして共溶媒をも担持して良い。本発明の乾燥粉末状製剤は、その方法は、経皮又は全身経路、経口、腔内、鼻腔内、肛門内、膣内、経皮、頬内、静脈内、皮下、筋内、腫瘍内、腺内へ、多くの方法のうちの１つにおいて投与されて良く、移植によって、経皮的、そして他の多くの、例えば、移植、徐放、経皮放出、持続放出製剤及び１又は複数のマクロ分子により被覆して標的組織に到達する前に剤が崩壊するのを避ける方法である。この剤で治療されうる対象者は、一般にヒト及び他の動物、詳細には、脊椎動物であり、そしてこれらの中でとりわけて哺乳動物が、そして一層詳細且つ小さく且つ広くは、野生及び家畜、海洋及び牧場の動物であり、そして好適にはヒト及び家畜及び牧場の動物及びペットである。
【０１１３】
以下の説明は、上記発明を使用する態様を一層十分に記載するため、並びに本発明の様々な観点を実行するために熟考された最良の形態を開示するために役立つ。これらの例は本発明の真の範囲を限定することはなく、本発明を説明する目的である。本明細書中で引用された全刊行物の対応する部分は、その全体を参照によって組み込まれている。これらの例において、μMとはマイクロモーラー、mMとはミリモーラー、mlとはミリリットルμm又はミクロンとはマイクロメーター、mmとはミリメーター、cmとはセンチメーター、℃とはセルシウス温度、μgとはマイクログラム、mgとはミリグラム、gとはグラム、kgとはキログラム、Mとはモーラー及びhとは時間を意味する。
【実施例】
【０１１４】
実施例
実施例１
無水DHEA−Sの空気ジェット微粉砕化及び呼吸可能投与量の決定
DHEA−Sを、コルチコステロイド吸入治療に代わる１日１回喘息療法として評価する。コルチコステロイド吸入治療はこの種類の治療との関連で安全性を共有することが期待されない。DHEA−S、ナトリウムデヒドロエピアンドロステノン硫酸塩（NaDHEA−S）又はナトリウムプラステロン硫酸塩の固体状態の安全性はバルク及び粉砕した物質の両方について研究されてきた（Nakagawa, H., Yoshiteru, T., 及びFujimoto, Y.(1981) Chem. Pharm, Bull. vol.29 (No.5) pp.1466〜1469; Nakagawa, H., Yoshiteru, T., and Sugimoto, I.(1982) Chem. Pharm. Bull. vol.30 (No.1) pp.242〜248）。DHEA−Sは二水和物形態の場合最も安定であり且つ結晶質である。DHEA−S無水物形態は結晶性が低く、そして非常に吸湿性である。DHEA−S無水物形態は、保存により水を含まない限り安定だ。水分を含まない部分的に結晶質物質を維持するには、特別の製造及びパッキング技術が必要となる。堅固な製品のために、水分に対する感度を最小化することは開発過程において必須である。
（１）DHEA−Sの超微粉砕化
無水DHEA硫酸塩をジェット微粉砕化（ジェット−Ｏ−Mizer Series ＃００、１００〜１２０PSI窒素）を使用することで超微粉砕化した。およそ１gの試料をジェット微粉砕化装置に一度通し、そしておよそ２μgの試料を二度ジェット微粉砕化装置に通した。各微粉砕化ランからの粒子をヘキサン中で懸濁させた。このヘキサンにはDHEA−Sが不溶性であり、そして凝集を防止するためにSpa85界面活性剤を加えている。生じる溶液を３分に渡り超音波処理しそして見掛け上完全に分散させた。この分散した溶液を、小体積サンプラー（SVS）アタッチメントを伴うMalvern Mastesizerにより試験した。分散した物質のある試料を５回試験した。微粉砕化されなかった粒子の中央値粒子サイズ又はD（v、０.５）は、５２.５６μmであり、そしてそして%RSD（相対標準偏差）は５つの値について７.６１であった。ジェット微粉砕化装置の一度通過に関するD（v、０.５）は３.９０μmであり、そして%RSDは、１．２７であり、そしてジェット微粉砕化装置からの二重通過D（v、０．５）は３．２５μmであり、そして％RSDは３.１０であった。このことにより、DHEA−Sは、吸入に適したサイズの粒子へとジェット微粉砕化されることが証明された。
【０１１５】
（２）HPLC分析
超微粉砕化した薬物の２つのバイアル（A；一回通過：１５０mg）及び（B；二回通過；６００mg）はジェット微粉砕化超微粉砕化の間の分解を決定するために使用可能だった。バイアルA及びBからの重量測定したDHEA−Sのアリコートを、アセトニトリル−水溶液（１：１）における微粉砕化されなかったDHEA−S（１０mg/ml）の標準溶液と比較した。微粉砕化されなかった薬物標準溶液（１０mg/ml）のHPLCアッセイのクロマトグラフピークエリアは、２３,４２７の値を与えた。バイアルA及びBからの超微粉砕化されたDHEA−Sの重量を測定したアリコートをアセトニトリル−水溶液（１：１）中で調製した。バイアルA及びBに関するクロマトグラフピークエリアはそれぞれ、１１，９７９及び１１，６７７であった。明らかに、ジェット微粉砕化超微粉砕化の間の検出可能な分解はなかった。
【０１１６】
放出された投与量の研究
DHEA−S粉末をNephele管に回収してHPLCによってアッセイした。３回の実験を、試験した３つの乾燥粉末吸入器（Rotahaler、Diskhaker及びIDL’s DPI装置）のそれぞれに関し各気流速において行った。Nephele管の１つの末端をガラスフィルター（Gelman Science、タイプ A/E、２５μm）と接続し、それを順番に、気流ラインに対して接続しそれぞれの試験される乾燥粉末吸入器から放出された薬物の投与量を回収した。試験されるそれぞれの乾燥粉末吸入器のマウスピースを受け入れる開口部を有するシリコーンアダプターをNephele管のもう一方の末端で固定した。Nephele管を通じ、所望の流速３０、６０又は９０L/分を達成した。各乾燥粉末吸入器のマウスピースをシリコーンゴムアダプター中に挿入し、そして気流を約４秒に渡り続け、その後管を取り外して各管の末端にエンドキャップをねじ込んだ。フィルターを含んでいないチューブのエンドキャップを取り外して１０mlのHPLC等級の水−アセトニトリル（１：１）溶液をこの管に対して加え、エンドキャップを再度つけ、そして管を１〜２分に渡り振った。次いで、エンドキャップを管から外し、そして溶液をフィルター（Cameo 13Nシリンジフィルター、ナイロン、０．２２μm）を接続してある１０mlのプラスチックシリンジに移した。この溶液のアリコートを、後のHPLCによる薬物アッセイのためにHPLCバイアル中に直接ろ過して入れた。放射される投与量の実験をゼラチンカプセル（Rotahaler）又はVentodiskブリスター（Diskhaler及び単位投与量DPI（IDL））のいずれかの中に配置されている超微粉砕化されたDHEA−S（約１２．５又は２５mg）により行った。超微粉砕化されたDHEA−S（バイアルBのみ使用した）を、ゼラチンカプセル又はブリスター中に配置するために重量を測定した場合、当該超微粉砕化された粉末に僅かに凝集が見られた。３０、６０及び８７．８L/分の気流速で行った放出された投与量試験の結果を表１〜４に示している。表１は、３つの異なる流速におけるRotahaler実験の結果であり、表２は３つの異なる流速でのDiskhaler実験の結果を含み、そして表３は３つの異なる流速における複数投与実験の結果を含む。表４にこれらの実験の結果を要約する。
【０１１７】
【表１】
2005537296.tif 000009
【０１１８】
【表２】
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【０１１９】
【表３】
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【０１２０】
【表４】
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【０１２１】
（４）呼吸可能投与量研究
呼吸可能投与量（呼吸可能画分）研究を、標準的なサンプラーカスケードインパクター（Andersen）を使用することで行った。この装置は、インレットコーン（インパクタープレセパレーターはここで交換される）、９つのステージ、８つの回収プレート、及び３つのスプリングクランプ及びガスケットOリングシールによって一緒に維持されている８つのアルミニウムステージ内のバックアップフィルターからなり、ここで各々のインパクターステージは複数の正確に穴があいているオリフィスを含む。空気がサンプラーを下に向かうと、各ステージにおける空気の複数のジェットが、全ての空中粒子を前記ステージのための回収プレートの表層へと向ける。ジェットのサイズは各ステージで一定であるが、各連続するステージでより小さくなる。粒子は任意のステージ上でインパクトを受けるかどうかはその空気動力学的直径に依存する。各ステージ上で回収される粒子のサイズの範囲は、ステージのジェット速度に依存し、そして前のステージのカットオフ点に依存する。第一番目のステージ上で回収されなかった粒子の全ては、次のステージへプレートのエッジを取り囲む気流をたどる。次のステージでは、粒子はインパクトを受けるかあるいは連続するステージ上へ移り、そのようにして、ジェットの速度がインパクトに十分になるまで続く。カスケードインパクト試験の間に粒子が跳ねるのを防ぐために、個々のインパクタープレートをヘキサングリース（高真空）溶液（１００：１比）で覆った。上記したように、インパクタープレート上の粒子サイズカットオフは、様々な流速で変わった。例えば、ステージ２は、６０L/分で６.２μm粒子よりも大きい、そして３０L/分で５.８μmの粒子よりも大きいカットオフ値に対応し、そしてステージ３は９０L/分で５.６μmよりも大きい粒子サイズカットオフ値を有した。従って、類似するカットオフ値は好適に、即ち、５.６〜６.２μmの比較可能な気流速で使用される。ガラススロート（５０mlの丸底フラスコに変更を加えた）に対して接続されたマウスピースアダプター（この場合シリコーン）及びプレセパレーターの頂点につながるガラス遠位咽頭（インダクションポート）及びAndersenサンプラーからなる乾燥粉末吸入器を試験するための設定は、United States pharmacopieaによって推奨されている。プレセパレーター試料は、マウスピースアダプター、ガラススロート、遠位咽頭、及びプレセパレーターからの洗浄物を含む。５mlのアセトニトリル：水（１：１比）溶媒を、カスケードインパクター実験を行う前にプレセパレーター中に配置し、カスケードインパクター実験を３つの異なる乾燥粉末吸入装置により、そして３つの気流速、３０、６０及び９０L/分で行った。カスケードインパクタープレート上で回収された薬物をHPLCによって評価し、そして薬物の質量バランスを各ディスク吸入器について行い、そして多投与カスケードインパクター実験、（ブリスター中に残った薬物の量、装置中に残る薬物の量（ディスク吸入器のみ）、シリコーンゴムマウスピースアダプター、ガラススロート、ガラス遠位咽頭及びプレセパレーター上に維持される呼吸できない量の投与量、ある試料中に結合して入った全て、及び呼吸可能投与量を決定すること即ち、３０及び６０L/分の気流速度についてのステージ２〜フィルターインパクタープレート、及び９０/分のステージ１〜フィルターインパクタープレート実験からなる）を行った。
【０１２２】
【表５】
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【０１２３】
以下の結論が、放出された投与量及びカスケードインパクター実験から導かれた。カスケードインパクター実験において達成された低い呼吸可能投与量値は、薬物粒子が凝集したことが理由であり、凝集は、試験した最も高い気流速においてさえも分離されなかったのだろう。我々は、薬物粒子の凝集が、粒子サイズを低下させるため使用した機械的微粉砕法の間に構築された静電気チャージの結果であると考え、そしてこの状況は粒子のその後の水分吸収によって更に複雑になると考える。静電気チャージがより少ない又は水分吸収がより少ない、十分に水和された結晶質形態のDHEA−S（即ち、二水和物形態）を生産する超微粉砕化法は、凝集する可能性がより少ないより自由に流動する粉末を提供するべきである。
【０１２４】
実施例２
無水DHEA硫酸塩のスプレー乾燥及び呼吸可能投与量の決定
（１）薬物の超微粉砕化
１.５gの無水DHEA硫酸塩を１００mlの５０％エタノール：水に対して溶かし、１.５％溶液を作る。この溶液をB-191ミニスプレー乾燥機（Buchi、Flawil、Switzerland）により、入口温度５５℃、出口温度４０℃、１００％アスピレーター、１０％ポンプ、N流４０mbar及びスプレー流６００ユニットで噴霧乾燥させた。このスプレー乾燥させた産物をヘキサン及びために凝集を減らすために加えたSpan85界面活性剤中を懸濁させた。分散体を３〜５分に渡り冷却しながら超音波に掛けて、完全に分散させ、そしてこの分散した溶液を、小体積サンプラー（SVS）付属物を有するMalvern Masteristerにより試験した。
【０１２５】
２バッチのスプレー乾燥させた物質は、約５.０７±０.７０μm及び６.６６±０.９１μmの平均粒子サイズを有することが発見された。各バッチの分散体の光学顕微鏡による視覚実験により、スプレー乾燥で小さな呼吸可能サイズの粒子が生み出されたことを確認した。平均粒子サイズは各バッチについてそれぞれ２.４μm及び２.０μmであった。このことは、DHEA−Sは吸入に適した粒子サイズへスプレー乾燥できうることが示される。
【０１２６】
（２）呼吸可能投与量研究
カスケードインパクター試験を実施例１に記載のように行った。４つのカスケードインパクター実験を行い、３つをIDL多投与量装置でそして１つをディスク吸入器により、全て９０L/分で行った、カスケードインパクター実験の結果を下の表６に示す。
【０１２７】
【表６】
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【０１２８】
これらの実験において生産したスプレー乾燥した無水物質は、呼吸可能投与量を、無水DHEA−Sに比べて２倍増加させた。ジェット微粉砕化に比べて、スプレー乾燥により、見掛け上、呼吸可能投与量は増加するが、％呼吸可能投与量は依然として低い。これは、無水物形態の水分吸収の結果同様凝集が理由である。
【０１２９】
実施例３
DHEA−S二水和物（DHEA−S・２H2O）の空気ジェット微粉砕化及び呼吸可能等投与量の決定
（１）DHEA−S二水和物の再結晶化
無水DHEA−Sを９０％エタノール/水の沸騰混合物中に溶かした。この溶液をドライアイス/メタノールバス中で急速冷却してDHEA−Sを再結晶化させた。この結晶をろ過し、冷エタノールで２度洗浄し、真空デシケーター中に室温で合計３６時間に渡り置いた。乾燥過程中、巨大な凝集体を破壊するために物質を定期的にへらで混合した。乾燥後、物質を５００μmの篩に掛けた。
【０１３０】
（２）超微粉砕化及び物理化学的試験
DHEA−S二水和物をジェット微粉砕化装置中、弁チュリ圧４０PSI、微粉砕化圧８０PSI、供給設定２５及び産物供給速度約１２０〜１７５g/時間で窒素ガスにより超微粉砕化した。表面積を５点BET解析を使用することで測定し、この解析は、Micromeritics TriStar表層分析装置を使用することで吸収ガスとして窒素ガス（P/P0＝０．０５〜０．３０）により行った。粒子サイズ分布を、Micromeritics Saturn Digisizerを使用することでレーザー回折により行った。ここで、粒子は、分散剤としてナトリウムジオクチルナトリウムスルホサクシネートを伴う鉱物油中に懸濁されている。薬物物質含水率をKarl Fischer滴定（Schott Titroline KF）により測定した。純水を標準として使用し、そして３重に行った実験に関する関係する標準偏差は１％未満である。粉末を滴定媒体に対して直接加える。DHEA−S二水和物の超微粉砕化前後の物理化学的特性を表７にまとめている。
【０１３１】
【表７】
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粒子サイズにおいてのみ有意な変化が測定された。水の有意な喪失及び不純物の有意な増加がなかった。超微粉砕化された物質の表面積は、３〜４ミクロンの中央値サイズを有する不規則な形状の粒子と一致する。超微粉砕化により、固体状態の化学において測定される有意な変化を伴わず、吸入に適した範囲へと粒子サイズを首尾良く減らせる。
【０１３２】
（３）DHEA−S二水和物のエアロゾル化
単一投与量Acu-Breathe装置をDHEA−S二水和物を評価するために使用する。およそ１０mgの生DHEA−S二水和物粉末を充填してホイルブリスター中へと封入した。これらのブリスターをAndersen 8ステージカスケードインパクターにおいて、ガラスツインインピンジャースロートにより３０〜７５L/分の範囲の流速で作動するようにした。Andersenインパクターのステージ１〜５を一緒にすすいで微粒子画分を見積もることを達成した。複数のステージから回収された薬物をあるアッセイのためにプールし、より一層感度の高い方法にする。この一組の実験の結果を図１に示す。
【０１３３】
全流速で、二水和物は、実質上無水物質よりもより非常に微細な粒子画分をもたらした。二水和物粉末は、単一投与量吸入器を使用することでエアロゾル化されているので、そのエアロゾル特性が実質上無水物よりも有意に優れていると結論づけることは非常に理にかなう。より高い結晶質性及び安定な含水率は、二水和物の優れたエアロゾル特性に寄与する可能性の最もある因子である。DHEA−Sのこの独特の特徴は、従来のいかなる文献においても報じられていない。
【０１３４】
DHEA−Sのエアロゾル性能を二水和物形態により改善することが有意である一方で、生薬物物質は至適製剤で有りえない。典型的に、より大きな粒子サイズの担体を使用することで、超微粉砕化された薬物物質のエアロゾル特性が改良される。
【０１３５】
実施例４
ラクトース有無での無水DHEA−S及びDHEA−S二水和物の安定性
初期純度（時間＝０）を無水DHEA−S及びDHEA−S二水和物について、高圧液体クロマトグラフィー（HPLC）によって決定した。次いで、DHEA−Sの両形態を、ラクトースと５０：５０の比で混合するかあるいは生粉末として使用し、オープンガラスバイアル中に置き、そして５０℃で最大４週に渡り維持した。これらの条件を使用し、製剤にストレスを与えて、長期安定性結果を予測した。DHEA−S（無水又は二水和物）のみを含むコントロールバイアルを密封して２５℃で最大４週に渡り維持した。試料を採取してHPLCによって分析し、そしてまた０、１、２、及び４週で、分解の量をDHEAの形成により測定したようにして、測定した。
【０１３６】
一週間後、ラクトースと混合し（５０重量％）、密封したガラスバイアル中５０℃で保存した実質上無水DHEA−Sは茶色に色づく。その色は、ラクトース混合物に関してより暗い。このような色の変化は、図１に示すようにクロマトグラムにおける有意な変化をともなう。一次分解体はデヒドロエピアンドロステロン又はDHEAである。図２から定量的に、混合物中のDHEAの量は、他の２つの試料よりも高い。試料中の％DHEAを定量的に見積もるために、DHEAピークに関するエリアをDHEA−S及びDHEAピークに関する合計エリアで割る（図８を参照のこと）。混合物に関する分解速度がより高いことが、ラクトースと実質上無水のDHEA−Sの特異的相互作用を示す。粉末の茶色は、促進保存によるDHEAの増加と平行して、経時的に増加した。化学分析のために試料の重量を測定する間に凝集することにより明らかにされるように、促進保存により物質は経時的に一層接着するようになる。これらの結果に基づいて、実質上無水物のDHEA−Sをラクトースと共に処方することは不可能である。これはかなり不利なことであり、何故なら、ラクトースは乾燥粉末状製剤のための最も使用されている吸入賦形剤であるからだ。実質上無水物形態を続けることは、製剤を生粉末に限定すること又は新規賦形剤を使用するために一層包括的な安全な研究を行うことを意味するだろう。
【０１３７】
【表８】
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【０１３８】
図２とは対照的に、実質上DHEAは５０℃で１週の渡る保存では生じなかった（図３を参照のこと）。更に、物質の色の変化はない。DHEA−S二水和物の含水率は５０℃で一週間後実質上無変化を維持する。促進保存後の含水率は、開始値８.８％に対して８.６６％である。この安定性プログラムの経過の間に測定した％DHEAを図９に示す。
【０１３９】
【表９】
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【０１４０】
当業者は、図１及び２及び表８及び９を比較することによって、DHEA−Sの二水和物形態は更なる研究に進むために一層安定な形態であることがわかる。DHEA−S二水和物形態とラクトースの、実質上無水物質を超える、優れた適合性は、特許又は調査刊行物において報じられていない。この物質の可溶性を、次のセクションで噴霧器溶液のための開発研究の一部として報じている。
【０１４１】
実施例５
DHEA−S二水和物/ラクトース混合物、呼吸可能投与量及び安定性の決定
（１）DHEA−S二水和物/ラクトース混合物
等しい重量のDHEA−Sと吸入等級のラクトース（Foremost Aero Flo95）を手で混合し、ついで５００μmのスクリーンを通過させ、プレ混合物を調製した。次いで、このプレ混合物を、残留ラクトースをともなうBelArt Micro-Millに配置し、DHEA−S１０重量％の混合物を得た。この混合装置を可変電圧源につなぎ、インペラスピードを制御した。混合装置電圧をそれぞれフル電圧の３０％、４０％、４５％及び３０％に１、３、１.５、及び１.５分に渡り周期的に変えた。混合物の含量が一定なことをHPLCによって測定した。表１０は、この混合物に関する含量の均一性の結果を示す。目標値はDHEA−S１０重量％である。混合物含量は、標的値及び含量均一性に十分に近い。
【０１４２】
【表１０】
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【０１４３】
（２）DHEA−S水和物/ラクトース混合物のエアロゾル化
およそ２５mgのこの粉末をホイルブリスターに充填して密封し、そして単一投与量装置を６０L/分で使用することでエアロゾル化した。２つのブリスターを各試験のために使用し、そして微粒子画分（ステージ１〜５上の物質）に関する結果を表１１に示している。
【０１４４】
【表１１】
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【０１４５】
このプレ粉末混合物に関するエアロゾル結果は呼吸ドラッグデリバリーシステムのために十分である。非常により微細な粒子が、粉末混合物及びブリスター/装置形状を至適化することにより可能である。試験２の全体粒子サイズ分布を表１２に示している。
【０１４６】
【表１２】
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【０１４７】
このエアロゾルに関するDHEA−Sの中央値直径は約２.５μmである。直径は、レーザー回折により測定した超微粉砕化DHEA−S二水和物に関する中央値直径よりも小さい。不規則な形状の粒子は空気力学的により小さな粒子と類似する挙動を示し、それはそれらの最も長い寸法が、気流場にそろう傾向があるからだ。従って、２つの方法の間での違いを確認することは共通する。回折測定は入口物質に関する質のコントロール試験であり、一方で、カスケードインパクションは、新鮮製品に関する質のコントロール試験である。
【０１４８】
（３）DHEA−S二水和物/ラクトース混合物の安定性
このラクトース製剤を５０℃での促進安定性プログラムにも置いた。DHEA−S含量に関する結果を表１３に示している。コントロールは室温で保存した混合物である。
【０１４９】
【表１３】
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【０１５０】
DHEA−S含量がいずれ条件で時間と共に変化する傾向はなく、そして全結果は含量均一性試験に関して回収した試料の範囲内である（表１３を参照のこと）。更に、色の変化又は不規則性がクロマトグラムでは確認されなかった。混合物は化学的に安定なようである。
【０１５１】
実施例６
DHEA−Sの噴霧器製剤
DHEA−Sの溶解度
「Recrestrallization of DHEA−S・Dihydrate（例４）」に従い調製した過剰のDHEA−S二水和物を溶媒媒質に対して加え、そしていくつかの周期的な振とうを伴いながら１４時間に渡り平衡に至らしめた。次いで、この懸濁を、０．２ミクロンシリンジフィルターに通してろ過し、そしてすぐにHPLC分析ために希釈した。冷蔵された試料を調製するために、シリンジとフィルターを、使用前、冷蔵庫に１時間に渡り保存する。
【０１５２】
純水の吸入は咳刺激を生み出しうる。従って、ハロゲン化物イオンを、最も共通に使用されている塩であるNaClと共に噴霧器製剤に対して加えることは重要である。DHEA−Sはナトリウム塩であるので、NaClは共通のイオン効果により溶解度を下げる。DHEA−Sの、NaCl濃度の関数としての室温（２４〜２６℃）での溶解度及び冷蔵条件（７〜８℃）での溶解度を図４に示している。
【０１５３】
DHEA−Sの溶解度は、NaCl濃度により減少する。保存温度を下げることで、溶解度はNaClの、全濃度で下がる。温度効果は、高NaCl濃度ではより弱い。三重データに関して、約２５℃及び０％NaClでの溶解度は、相対標準偏差２．７％を伴い１６．５〜１７．４mg/mLの範囲である。０．９％NaCl冷蔵条件下で、三重データに関する範囲は、相対標準偏差８．３%を伴い、１．１〜１．３mg/mLである。
【０１５４】
DHEA−Sの固体状態と溶液状態における平衡は：
NaDHEA−S固体←→DHEA−S-＋Na+
K＝［DHEA−S-］［Na+］/［NaDHEA−S］固体
である。
【０１５５】
固体におけるDHEA−Sの濃度は一定である（即ち、物理的に安定な二水和物）ので、平衡の式は簡略化され：
Ksp＝［DHEA−S-］［Na+］
である。
【０１５６】
この推定に基づき、合計ナトリウム陽イオン濃度の逆数に対するDHEA−S溶解度のプロットは、Kspと等しい勾配を有し直線状である。これを図５及び６において、それぞれ、室温及び冷蔵での平衡について示している。
【０１５７】
相関係数に基づいて、このモデルは、平衡定数が、それぞれ、２２３６mM2及び６６５mMである室温及び冷蔵温度でのデータに対する妥当なフィットである。溶解度を最大にするために、NaClの量はできる限り低い必要がある。噴霧器溶液に関する最小ハロゲン化物濃度は、２０mM又は０．１２％NaClであるべきだ。
【０１５８】
この溶液に関するDHEA−S濃度を見積もるために、使用する間に噴霧器中、１０℃の温度低下（即ち、１５℃）が予測される。絶対温度の逆数に対する平衡定数の間での補間をすることで、１５℃でのKspは約１３１６mM2になるだろう。DHEA−Sの各モル数は、溶液に対するナトリウム陽イオンのモル数に寄与し、故に：
Ksp＝［DHEA−S-］［Na+］＝［DHEA−S-］［Na+＋DHEA−S-］
＝［DHEA−S-］2＋［Na+］［DHEA−S-］
であり、それは二次式を使用することで［DHEA−S-］について解かれる。１３１６mM2のKspを伴い２０mMNa+のこの溶液に関して、２７．５mMDHEA−S-又は１０．７mg/mLである。従って、０．１２％NaCl中１０mg/mL DHEA−Sを、更なる試験へと進むために良い候補製剤として選択している。この式に関する見積もりは、噴霧器から水が蒸発することによる任意の濃度効果を説明はしない。
【０１５９】
０．１２％NaClを伴う１０mg/mlDHEA−S溶液のpHは、４．７〜５．６の範囲である。これは、吸入製剤のために許容できるpHレベルであろう一方で、２０mMリン酸塩緩衝剤を使用することでの効果を評価する。室温でもたらされた緩衝化された溶液及び緩衝化されていない溶液に関する溶解度結果を図７に示している。
【０１６０】
製剤中での緩衝剤の存在は、溶解度を抑制し、特に低いNaClレベルで溶解度を抑制する。図８に示されるように、緩衝化された溶液に関する溶解データは、緩衝化されていない溶液に関する同じ平衡線上で落ちる。緩衝剤による溶解度の減少は、更なるナトリウム陽イオン含量による。
【０１６１】
溶解度を最大にすることは、重要な目的であり、そして製剤を緩衝化することで溶解度が下がる。更に、Ishihara及びSugimoto（（１９７９）Drug Dev.Indust.Pharm.No.5（Vol.3）pp.263〜275）は、中性pHでのNaDHEA−S安定性における有意な向上を示さない。
【０１６２】
安定性の研究
１０mg/mLのDHEA−S製剤を、短期安定性計画のために、０．１２％NaCl中で調製する。この溶液のアリコートを透明ガラスバイアル中に入れ、そして室温（２４〜２６℃）で、そして４０℃で保存した。試料を毎日、DHEA−S含量、DHEA含量、及び概観についてチェックする。各時点において二重の試料を回収し、そして各バイアルから希釈した。この研究の期間に渡るDHEA−S含量を図９及び１０に示している。
【０１６３】
この溶液は、促進条件下で、より早い分解速度を示し、そして保存の２日後に濁った。室温で保存した溶液は一層安定であり、そして僅かな沈殿が３日目に確認された。この研究を３日で止めた。DHEA−S分解は、図１０に示すようにDHEA含量の増加を伴う。
【０１６４】
DHEAは水に不溶性であるので、濁った溶液（促進保存）又は結晶質沈殿（室温保存）を作り出すには、それは製剤中ほんの少量を要する。このことは、DHEA−S溶解度のより早い視覚評価によりなぜ化合物の溶解度が大幅に過小評価されるか、即ち、少量のDHEAが実験者にDHEA−Sの溶解限度は超えているにという結論に至らせるのだろうか説明する。これは有望な市販製剤ではないが、溶液は臨床トライアルにおける再構築の日のために容易に適しているべきだ。以下のセクションではこの製剤のエアロゾル特性を記載する。
【０１６５】
噴霧器の研究
DHEA−S溶液をPari ProNeb Ultraコンプレッサー及びLC Plus噴霧器を使用することで噴霧する。実験の設定に関する概略を図１１に示す。噴霧器を５mlの溶液で満たし、そして噴霧化を生産物が視覚的に些少になるまで（４か1/2〜５分）続ける。噴霧化溶液をUSPスロートを伴うCalifornia Instruments AS−6 6ステージインパクターを使用することで試験する。１分の噴霧時間の後に試料を回収するためにインパクターを３０L/分で８秒に渡り動かす。実験の他の時間全てで、エアロゾルをバイパスコレクターを介しておよそ３３L/分で引き出す。回収装置、噴霧器、及びインパクターを流動相ですすぎ、そしてHPLCによってアッセイする。０.１２％NaCl中５mLのDHEA−Sをネブライザー中で使用する。この体積を、臨床研究において使用するための実際の上限として選択する。最初の５つの噴霧化実験に関する結果を下に示す。
【０１６６】
【表１４】
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【０１６７】
噴霧器＃１を約５分で乾燥させ、他方、噴霧器＃２は４.５分より僅かに短い。各場合、噴霧器中に残留する液体の体積はおよそ２mLである。この液体は噴霧器から取り出した後最初に濁り、そして３〜５分以内で透明になる。この後でさえ、１０mg/mLの溶液は、見掛け上少量の粗い沈殿を有した。液体中の微細気泡により最初の濁りを生じる。DHEA−Sは見掛け上表層活性（即ち、発泡の促進）があり、そしてこれにより気泡が液体内で安定化される。１０mg/mL溶液における沈殿は、この薬物物質の溶解度は噴霧器環境において上回っていることを示す。従って、表１５における更なる噴霧化実験を低濃度で行っている。
【０１６８】
表１５は、溶液濃度に対する「投与量」線形性の更なるデータを示す。
【０１６９】
【表１５】
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【０１７０】
噴霧器＃３は乾燥に達するまで４．５分より僅かに短い。バイパスコレクター中の質量を、図１２において初期溶液濃度に対してプロットしている。
【０１７１】
半定量的に、０〜７.５mg/mLの良い線形性があり、回収された量は見掛け上、量が下がり始める。冷却することによる溶解度の減少を１０mg/mL溶液の計算に含めている一方で、薬物に対する任意の濃度効果及びNaCl含量は無視した。従って、沈殿を、噴霧器液体の超臨界化により形成することが可能である。図１２におけるデータ及び噴霧化の後の１０mg/mL溶液におけるいくつかの粒子の観察は、臨床トライアル製剤の概念に耐える最高溶液濃度がおよそ７.５mg/mLであることを示す。
【０１７２】
エアロゾル試料を、粒子サイズ分析のためにカスケードインパクター中に引き込む。溶液濃度又は噴霧器数による粒子サイズ分布における検出可能傾向はない。全噴霧化実験に関する平均粒子サイズ分布を図１３に示している。エアロゾル粒子サイズ測定値は、この噴霧器に関する刊行された/広告された結果（即ち、中央値直径約２μm）と一致する。
【０１７３】
in vitro実験により、噴霧器製剤は呼吸可能DHEA−Sエアロゾルをデリバリーできる一方で、製剤は不安定であり、そして連続噴霧化には４〜５分要することが証明される。従って、安定なDPI製剤は有意な利点を有する。DHEA−S・二水和物を、DPI製剤のために最も安定な固体状態として同定している。無水物形態も、もしその安定性が、噴霧化前に水との接触を取り除くことによって維持されているなら、噴霧器により投与するためにも適している。
【０１７４】
至適噴霧器製剤は、DHEA−Sに関する臨床トライアルのために、０.１２％NaCl中、７.５mg/mLのDHEA−Sが至適噴霧器製剤である。製剤のpHは、緩衝剤系を伴わずに、許容できる。DHEA−Sの水性溶解度は、ナトリウム陽イオン濃度を最小化することによって最大化される。緩衝剤を伴わない最小塩化ナトリウムレベルによりこの目標が達成される。これは、噴霧化の間に沈殿しないだろう２０mMのCl-による最高の薬物濃度である。この製剤は、１日以上に渡り室温に適している。
【０１７５】
本発明は、本発明の好適な実施態様を参照に記載されており、本発明の精神から逸脱することなく様々な変更が作成されて良いことが理解されるだろう。
【０１７６】
全ての刊行物、特許、及び特許出願、及びウェブサイトは本明細書中、その全体を、あたかもそれぞれ個々の刊行物、特許、又は特許出願が特異的且つ個別にその全体を参照によって組み込まれるべきことを示すように参照によって組み込まれている。
【図面の簡単な説明】
【０１７７】
【図１】流速の関数としての、単一投与Acu−投与量Acu−呼吸吸入器からデリバリーされた生超微粉砕化DHEA−S・2H2Oの微粒子画分である。結果を、DHEA−Sとして表している。実質上無水の超微粉砕化されたDHEA−S上によるIDLデータもこの図に示しており、３０L/分の結果を０に設定した。何故なら、検出できる質量がインパクターに入っていなかったからだ。
【図２】実質上無水のDHEA−Sバルクの、生及びラクトース混合物の５０℃で１週間に渡る保存後のHPLCクロマトグラムである。コントロールは、室温で保存した生DHEA−Sである。
【図３】DHEA−S・2H2Oバルクの生及びラクトース混合物として５０℃で１週間に渡り保存した後のHPLCクロマトグラムである。コントロールは、室温で保存した生DHEA−S・2H2Oである。
【図４】DHEA−Sの溶解度を、２つの温度において、NaClの関数として表している。
【図５】２４〜２５℃におけるDHEA−Sの溶解度を、ナトリウム陽イオン濃度の逆数の関数として表している。
【図６】７〜８℃におけるDHEA−Sの溶解度を、ナトリウム陽イオン濃度の逆数の関数として表している。
【図７】室温におけるDHEA−Sの溶解度を、緩衝剤有無でのNaCl濃度の関数として表している。
【図８】２４〜２５℃におけるDHEA−Sの溶解度を、緩衝剤有無でのナトリウム陽イオン濃度の逆数の関数として表している。
【図９】DHEA−Sの溶液濃度対時間を、２つの保存条件で示している。
【図１０】DHEAの溶液濃度対時間を、２つの保存条件で示している。
【図１１】噴霧化実験の概略図を示す。
【図１２】バイパスコレクターに沈着したDHEA−Sの質量を噴霧器中に配置された初期溶液濃度の関数として表している。
【図１３】DHEA−S噴霧器溶液のカスケードインパクションによる粒子サイズを示す。呈示したデータは、全７つの噴霧化実験の平均である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【国際調査報告】
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