(57)【要約】本発明は、神経外傷疾患、癌、慢性神経変性、痛み、偏頭痛および心臓肥大の治療用の医薬、特にＲａｆキナーゼ阻害剤としての化合物およびその使用に関する。
2005504794.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
2005504794.tif 000044
［式中：
Ｘは、Ｏ、ＣＨ２、ＣＯ、ＳまたはＮＨであるか、あるいはＸ−Ｒ１基は水素であり；
Ｙ１およびＹ２は、独立して、ＣＨまたはＮであり；
Ｒ１は、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−７シクロアルキル、アリール、アリールＣ１−６アルキル−、ヘテロサイクリル、ヘテロサイクリルＣ１−６アルキル−、ヘテロアリールまたはヘテロアリールＣ１−６アルキル−であり、水素を除くこれらのいずれも置換されていてもよく；
Ｒ２は、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−７シクロアルキル、ヘテロサイクリル、ヘテロサイクリルＣ１−６アルキル−、ヘテロＣ１−６アルキル−またはＣ１−６アルキルヘテロＣ１−６アルキル−であり、これらはいずれも置換されていてもよく；
Ａｒは、式ａ）またはｂ）：
【化２】
2005504794.tif 000045
（式中、Ａは、Ｏ、ＳおよびＮＲ５から選択される２個までのヘテロ原子を含有していてもよい縮合５−〜７−員環であり、ここに、Ｒ５は水素またはＣ１−６アルキルであり、該環は、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルコキシまたはケトから選択される２個までの置換基により置換されていてもよい）
で示される基であり；
Ｒ３およびＲ４は、水素、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル、アリール、アリールＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルコキシＣ１−６アルキル、ハロＣ１−６アルキル、アリールＣ１−６アルコキシ、ヒドロキシ、ニトロ、シアノ、アジド、アミノ、モノ−およびジ−Ｎ−Ｃ１−６アルキルアミノ、アシルアミノ、アリールカルボニルアミノ、アシルオキシ、カルボキシ、カルボキシ塩、カルボキシエステル、カルバモイル、モノ−およびジ−Ｎ−Ｃ１−６アルキルカルバモイル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、ウレイド、グアニジノ、Ｃ１−６アルキルグアニジノ、アミジノ、Ｃ１−６アルキルアミジノ、スルホニルアミノ、アミノスルホニル、Ｃ１−６アルキルチオ、Ｃ１−６アルキルスルフィニルｏｒＣ１−６アルキルスルホニルから独立して選択され；
Ｘ１およびＸ２の一方は、Ｏ、ＳまたはＮＲ１１から選択され、他方はＣＨであり、ここにＲ１１は水素、Ｃ１−６アルキル、アリールまたはアリールＣ１−６アルキルである］
で示される化合物またはその医薬上許容される塩。
【請求項２】
Ｘ−Ｒ１が水素である請求項１記載の化合物。
【請求項３】
Ａが、Ｏ、ＳおよびＮＲ５から選択される２個までのヘテロ原子を含有していてもよい縮合５員環であり、ここに、Ｒ５が水素またはＣ１−６アルキルであり、該環がハロゲン、Ｃ１−６アルキル、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルコキシまたはケトから選択される２個までの置換基により置換されていてもよい上記請求項いずれか１項記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ２が置換されていてもよいヘテロサイクリル、ヘテロサイクリル（Ｃ１−６）アルキル−またはＣ１−６アルキルヘテロＣ１−６アルキルである上記請求項いずれか１項記載の化合物。
【請求項５】
実施例１または６２記載の化合物。
【請求項６】
請求項１〜５いずれか１項記載の化合物またはその医薬上許容される塩および医薬上許容される担体を含んで成る医薬組成物。
【請求項７】
ヒトまたは哺乳類における神経外傷事象により悪化されるか、または引き起こされるいずれの病態の予防または治療のための医薬の製造における、請求項１〜５いずれか１項記載の化合物またはその医薬上許容される塩の使用。
【請求項８】
癌の予防または治療のための医薬の製造における請求項１〜５いずれか１項記載の化合物またはその医薬上許容される塩の使用。
【請求項９】
癌が結腸直腸癌または黒色腫である請求項８記載の使用。
【請求項１０】
慢性神経変性、痛み、偏頭痛または心臓肥大の予防または治療のための医薬の製造における、請求項１〜５いずれか１項記載の化合物またはその医薬上許容される塩の使用。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明により、式（Ｉ）：
【化１】
2005504794.tif 000003
［式中：
Ｘは、Ｏ、ＣＨ２、ＣＯ、ＳまたはＮＨであるか、あるいはＸ−Ｒ１基は水素であり；
Ｙ１およびＹ２は、独立して、ＣＨまたはＮであり；
Ｒ１は、水素、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−７シクロアルキル、アリール、アリールＣ１−６アルキル−、ヘテロサイクリル、ヘテロサイクリルＣ１−６アルキル−、ヘテロアリールまたはヘテロアリールＣ１−６アルキル−であり、水素を除くそれらはいずれも置換されていてもよく；
Ｒ２は、Ｃ１−６アルキル、Ｃ３−７シクロアルキル、ヘテロサイクリル、ヘテロサイクリルＣ１−６アルキル−、ヘテロＣ１−６アルキル−またはＣ１−６アルキルヘテロＣ１−６アルキル−であり、それらはいずれも置換されていてもよく；
Ａｒは、式ａ）またはｂ）：
【化２】
2005504794.tif 000004
（式中、Ａは、Ｏ、ＳおよびＮＲ５から選択される２個までのヘテロ原子を含有していてもよい縮合５〜７−員環であり、ここに、Ｒ５は水素またはＣ１−６アルキルであり、該環は、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルコキシまたはケトから選択される２個までの置換基により置換されていてもよい）
で示される基であり；
Ｒ３およびＲ４は、独立して、水素、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル、アリール、アリールＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルコキシＣ１−６アルキル、ハロＣ１−６アルキル、アリールＣ１−６アルコキシ、ヒドロキシ、ニトロ、シアノ、アジド、アミノ、モノ−およびジ−Ｎ−Ｃ１−６アルキルアミノ、アシルアミノ、アリールカルボニルアミノ、アシルオキシ、カルボキシ、カルボキシ塩、カルボキシエステル、カルバモイル、モノ−およびジ−Ｎ−Ｃ１−６アルキルカルバモイル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、ウレイド、グアニジノ、Ｃ１−６アルキルグアニジノ、アミジノ、Ｃ１−６アルキルアミジノ、スルホニルアミノ、アミノスルホニル、Ｃ１−６アルキルチオ、Ｃ１−６アルキルスルフィニルまたはＣ１−６アルキルスルホニルから選択され；
Ｘ１およびＸ２の一方はＯ、ＳまたはＮＲ１１から選択され、他方はＣＨであり、ここにＲ１１は水素、Ｃ１−６アルキル、アリールまたはアリールＣ１−６アルキルである］
で示される化合物またはその医薬上許容される塩を提供する。
【０００２】
本明細書で用いられる場合、式（Ｉ）の点線により示される二重結合は、本発明の範囲内に含まれる化合物の可能性ある部位異性体環形態を意味し、該二重結合は非ヘテロ原子間に存在する。
ヒドロキシイミノ基は、ａ）およびｂ）の非芳香環のいずれの炭素原子上に存在することができる。
【０００３】
ヒドロキシイミノ基は、ＥもしくはＺ異性体または両方の混合物のいずれとしても存在することができる。本明細書において、別個に、または大きな基、例えばアルコキシの一部として用いられる、アルキルおよびアルケニル基は、６個までの炭素原子を含有し、アリール、ヘテロアリール、ヘテロサイクリル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルチオ、アリールＣ１−６アルコキシ、アリールＣ１−６アルキルチオ、アミノ、モノ−またはジ−Ｃ１−６アルキルアミノ、シクロアルキル、シクロアルケニル、カルボキシおよびそのエステル、アミド、スルホンアミド、ウレイド、グアニジノ、Ｃ１−６アルキルグアニジノ、アミジノ、Ｃ１−６アルキルアミジノ、Ｃ１−６アシルオキシ、アジド、ヒドロキシ、ヒドロキシイミドおよびハロゲンから成る群から選択される１つまたはそれ以上の基により置換されていてもよい直鎖または分枝鎖であってもよい。
【０００４】
本明細書において用いられるシクロアルキルおよびシクロアルケニル基は、３〜７個の環炭素原子を有し、アルキルおよびアルケニル基に関して上記したものにより置換されていてもよい基を含む。
本明細書で用いられる場合、「アリール」なる用語は、特記しない限り、適当には、各々の環に４〜７個、好ましくは５または６個の環原子を含有する単環および縮合環を含み、該環は、各々、非置換であるか、または例えば３個までの置換基により置換されていてもよい。
適当なアリール基は、フェニルおよびナフチル、例えば１−ナフチルまたは２−ナフチルを含む。
【０００５】
アルキル、アルケニル、シクロアルキルおよびシクロアルケニル基に対する任意の置換基は、アリール、ヘテロアリール、ヘテロサイクリル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルチオ、アリールＣ１−６アルコキシ、アリールＣ１−６アルキルチオ、アミノ、モノ−またはジ−Ｃ１−６アルキルアミノ、アミノスルホニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、カルボキシおよびそのエステル、アミド、ウレイド、クアニジノ、Ｃ１−６アルキルクアニジノ、アミジノ、Ｃ１−６アルキルアミジノ、Ｃ１−６アシルオキシ、ヒドロキシおよびハロゲンまたはそのいずれかの組み合わせを含む。好ましくは、置換基は、モノ−またはジ−Ｃ１−６アルキルアミノ、ヘテロシクロＣ１−６アルキルアミノまたはＣ２−６アシルアミノである。
別法として、任意の置換基は、水溶性基を含み、適当な水溶性基は当業者には明らかであり、ヒドロキシおよびアミン基を含む。さらにより好ましくは、任意の置換基は、ヘテロサイクリルまたはヒドロキシまたはその組み合わせを含有する、アミノ、モノ−またはジ−Ｃ１−６アルキルアミノ、アミンを含む。
【０００６】
本明細書で用いられる場合、「ヘテロサイクリル」なる用語は、特記しない限り、非芳香族、単環および縮合環を含み、該環は、飽和であっても、または不飽和環であってもよく、適当には、各々の環に、各々Ｏ、ＮおよびＳから選択される４個までのヘテロ原子を含有し、該環は、例えば非置換であっても、または例えば３個までの置換基により置換されていてもよい。各々のヘテロサイクリック環は、適当には、４〜７個、好ましくは５または６個の環原子を有する。縮合ヘテロサイクリック環系は、カルボサイクリック環を含んでいてもよく、単に１個のヘテロサイクリック環だけを含む必要がある。ヘテロサイクリル基の例としては、ピロリジン、ピペリジン、ピペラジン、モルホリン、チオモルホリン、イミダゾリジンおよびピラゾリジンが挙げられ、ピペリジン、ピペラジン、モルホリンおよびチオモルホリン基のいずれか１つは少なくとも１つの二重結合を有することができる。
【０００７】
本明細書で用いられる場合、「ヘテロアリール」なる用語は、特記しない限り、各々Ｏ、ＮおよびＳから選択される４個まで、好ましくは、１または２個のヘテロ原子を含有する単環式および二環式ヘテロ芳香環系を含む。各々の環は、４〜７個、好ましくは５または６個の環原子を有していてもよい。二環式ヘテロ芳香環系は、カルボサイクリック環を含んでいてもよい。ヘテロアリール基の例としては、ピロール、キノリン、イソキノリン、ピリジル、ピリミジン、オキサゾール、チアゾール、チアジアゾール、トリアゾール、イミダゾールおよびベンズイミダゾールが挙げられる。
本明細書で用いられる場合、ヘテロＣ１−６アルキル−は、鎖の末端炭素原子がＮ、ＯまたはＳから選択されるヘテロ原子に置換されているＣ１−６炭素鎖、例えばＣ１−６アルキルアミノ、Ｃ１−６アルキルオキシまたはＣ１−６アルキルチオを意味する。
Ｃ１−６アルキルヘテロＣ１−６アルキルは、炭素原子の１個がＮ、ＯまたはＳから選択されるヘテロ原子により置換されているＣ３−１３アルキル鎖、例えばＣ１−６アルキルアミノＣ１−６アルキルｏｒＣ１−６アルキルアミノジＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルオキシＣ１−６アルキル−、Ｃ１−６アルキルチオＣ１−６アルキル−またはＣ１−６アルキルチオジＣ１−６アルキルを意味する。
【０００８】
アリール、ヘテロサイクリルおよびヘテロアリール基は、好ましくは３個までの置換基により置換されていてもよい。適当な置換基は、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルキル、アリール、アリールＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルコキシＣ１−６アルキル、ハロＣ１−６アルキル、アリールＣ１−６アルコキシ、ヒドロキシ、ニトロ、シアノ、アジド、アミノ、モノ−およびジ−Ｎ−Ｃ１−６アルキルアミノ、アシルアミノ、アリールカルボニルアミノ、アシルオキシ、カルボキシ、カルボキシ塩、カルボキシエステル、カルバモイル、モノ−およびジ−Ｎ−Ｃ１−６アルキルカルバモイル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、ウレイド、グアニジノ、Ｃ１−６アルキルグアニジノ、アミジノ、Ｃ１−６アルキルアミジノ、スルホニルアミノ、アミノスルホニル、Ｃ１−６アルキルチオ、Ｃ１−６アルキルスルフィニル、Ｃ１−６アルキルスルホニル、ヘテロサイクリル、ヘテロアリール、ヘテロサイクリルＣ１−６アルキル、ヒドロキシイミド−Ｃ１−６アルキルおよびヘテロアリールＣ１−６アルキルならびにその組み合わせを含む。
【０００９】
好ましくは、任意の置換基は、水溶性基を含有し；ここに、適当な水溶性基は当業者には明らかであり、ヒドロキシおよびアミン基を含む。さらにより好ましくは、任意の置換基は、ヘテロサイクリルおよびヒドロキシまたはその組み合わせを含有する、アミノ、モノ−またはジ−Ｃ１−６アルキルアミノ、アミンを含む。
【００１０】
本明細書で用いられる場合、ハロなる法後は、負クロロ、クロロ、ブロモまたはヨウドを意味する。
Ｘは、好ましくはＮＨであるか、あるいはＸ−Ｒ１は、好ましくは水素であり、ＸがＮＨである場合、Ｒ１は、好ましくは水素またはＣ１−６アルキルである。
Ｙ１およびＹ２がＣＨである場合、Ｘ−Ｒ１は、好ましくは水素である。
Ｙ２がＮである場合、Ｒ１は、好ましくはＨまたはＣ１−６アルキルである。
最も好ましくは、Ｘ−Ｒ１は水素である。
好ましくは、Ｘ１またはＸ２はＳまたはＯ、より好ましくはＯである。
好ましくは、Ｒ１１は水素である。
Ａは、好ましくは、Ｏ、ＳおよびＮＲ５から選択される２個までのヘテロ原子を含有していてもよい縮合５員環であり、ここにＲ５は水素またはＣ１−６アルキルであり、該環はハロゲン、Ｃ１−６アルキル、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルコキシまたはケトから選択される２個までの置換基により置換されていてもよい。
さらにより好ましくは、Ａは、縮合５員環である。
好ましくは、Ｒ２は、置換されていてもよいヘテロサイクリル、ヘテロサイクリル（Ｃ１−６）アルキル−またはＣ１−６アルキルヘテロＣ１−６アルキルである。
【００１１】
より好ましくは、本発明の化合物は式（ＩＩ）：
【化３】
2005504794.tif 000005
［式中、Ｒ１、Ｘ、Ｙ１、Ｙ２、Ｒ３、Ｘ１、Ｘ２、Ｒ２およびＲ４は式（Ｉ）で示される化合物の記載と同意義である］
で示される化合物である。
式（Ｉ）で示される化合物は、好ましくは、８００未満の分子量を有する。
Ａｒ基に対する好ましい置換基は、ハロ、ヒドロキシ、ヒドロキシＣ１−６アルキル、ヒドロキシイミド−Ｃ１−６アルキルおよびＣ１−６アルコキシを含む。
【００１２】
本発明の特定の化合物は、実施例に記載するものおよびそれらの医薬上許容される塩を含む。本明細書で用いられる場合、「医薬上許容される誘導体」は、患者に投与する場合に、式（Ｉ）で示される化合物またはその活性代謝物または残基を（直接的または関節的に）投与することができる、式（Ｉ）で示される化合物のいずれの医薬上許容される塩、エステルまたはかかるエステルの塩を含む。
医薬において用いるために、式（Ｉ）で示される化合物の塩は医薬上許容されるべきであることは明らかだろう。適当な医薬上許容される塩は当業者には明らかであり、J. Pharm. Sci., 1977, 66, 1-19に記載されているもの、例えば無機酸、例えば塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸またはリン酸；および有機酸、例えばコハク酸、マレイン酸、酢酸、フマル酸、クエン酸、酒石酸、安息香酸、ｐ−トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸またはナフタレンスルホン酸と形成される酸付加塩を含む。他の塩、例えばシュウ酸塩も、例えば式（Ｉ）で示される化合物の単離に用いることができ、それは本発明の範囲内に含まれる。
【００１３】
本発明の化合物は、結晶形態または非結晶形態であってもよく、結晶形態である場合、水和または溶媒和されていてもよい。本発明は、化学量論的水和物ならびに種々の量の水を含有する化合物も範囲内に含む。
本発明は、式（Ｉ）で示される化合物の、エナンチオマーおよびその混合物、例えばラセミ体を含む立体異性体および幾何異性体を含むすべての異性体形態も範囲に含む。異なる異性体形態は、慣用的な方法により別のものから１つを分離するか、または分割することができ、所定の異性体はいずれも慣用的な合成法または立体異性または不斉合成により得ることができる。
【００１４】
式（Ｉ）で示される化合物は医薬組成物における使用を意図するので、これらは各々、好ましくは実質的に純粋な形態、例えば少なくとも６０％の純度、より適当には少なくとも７５％の純度、好ましくは少なくとも８５％、特に少なくとも９８％の純度（％は重量／重量に基づく）で提供されることは容易に理解できるだろう。純粋でない化合物の調製物は、医薬組成物で用いるより純粋な形態を調製するために用いることができる。
【００１５】
式（Ｉ）で示される化合物は、フラン、ピロールおよびチオフェン誘導体であり、それらは当業者によく知られた方法を用いて、市販されているか、またはよく知られた方法と類似の方法により調製することができる出発物質から容易に調製することができる。例えば、A.R. Katritzky, C.W. ReesおよびE.F.V. ScrivenのComprehensive Heterocyclic Chemistry II, volume 2, series eds中のW. Friedrichsen（ｐ３５１、フラン）、R.J. Sundberg（ｐ１１９、ピロール）およびJ. Nakayama（ｐ６０７、チオフェン）を参照のこと。
【００１６】
典型的には、本発明の化合物は、１，４−ジカルボニル前駆体から、Ｐａａｌ−Ｋｎｏｒｒ合成により、スキーム１（式中、Ｒ１Ｘ、Ｒ３およびＲ４基は水素であり、Ｙ１およびＹ２はＣＨである）で概説するように調製することができる。例えば、メチル−ケトン誘導体のピリジル−４−カルボキシアルデヒドとの塩基（例えば、ジエチルアミン）介在縮合により、カルコン誘導体（１、S.E. deLaszloら、Bioorg. Med. Chem. Lett., 1999, 9, 641を参照のこと）を形成する。カルコン（１）とインダン−１−オン-5-カルボキシアルデヒドの適当に保護された（例えば、メトキシイミン、ＰＧ＝ＭｅＯＮ）誘導体および触媒シアン化ナトリウムとの、Ｓｔｅｔｔｅｒ条件下（H. StetterおよびK. Kuhlmann、Org. React., 1991, 40, 407）での逐次反応により、上記の１，４−ジカルボニル前駆体（２）が生成する。ついで、適当な条件下での環化により、所望のフラン（例えば、五酸化リン−メタンスルホン酸または濃硫酸またはＨＣｌ／アセトン／ジオキサン）、ピロール（例えば、酢酸アンモニウム、酢酸）またはチオフェン（例えば、Ｌａｗｅｓｓｏｎ試薬）環系（３）を形成する。その後、Ｒ２’基を、他のＲ２基に、慣用的な官能基相互変換法を用いて変換することができ、保護ＰＧは（４）チユのヒドロキシイミノ基に変換される。また、アルデヒド成分を、逆の順番で利用して、カルコン誘導体（５）、続いて部位異性体ヘテロサイクル（６）を生成できることは当業者には明らかだろう。
【００１７】
【化４】
2005504794.tif 000006
【００１８】
また、本発明の化合物は、スキーム２に示すように、2,3-ジハロヘテロサイクルでの逐次遷移金属触媒クロスカップリング反応により調製することができる。これは、フラン または チオフェン誘導体である場合, すなわち、X1 または X2 の一方がはO または Sである場合特に適用できる。 例えば、ピリジル-4-ボロン酸の2,3-ジブロモフラン誘導体(7)とのスズキカップリングは、選択的に、2-(4-ピリジル)-3-ブロモ-フラン (8)を形成する。Subsequent Suzuki reaction with an indanone ボロン酸 derivative (9, wherein PG is O, N-OMe or another ケトン protecting group) generates the derivative (10).  Thereafter, the group R2' may be converted into a group R2 using appropriate conventional functional group interconversion procedures.  For example, treatment of (10, where R2' is 水素) with n-ブチル lithium generates the corresponding metallated derivative (10, where R2' is Li) which can be reacted with a variety of electrophiles (such as N,N-ジメチルホルムアミド) generating derivatives (10, where R2' is CHO) which allow further modification by, for example, reductive-amination procedures.  Subsequently the group PG can also be converted into an ヒドロキシイミド group as in (11).  It will also be appreciated, to one skilled in the art, that the above cross-coupling reactions may be carried out in reverse order giving access to the regioisomeric ヘテロcycles (12).
【００１９】
【化５】
2005504794.tif 000007
【００２０】
式（Ｉ）で示される化合物の合成の間、中間体化合物中の不安定な官能基、例えばヒドロキシ、カルボキシおよびアミノ基は保護することができる。種々の不安的な官能基を保護することができる方法および得られた保護誘導体を開裂する方法することができる方法の包括的な議論は、例えば、Protective Groups in Organic Chemistry, T.W. GreeneおよびP.G.M. Wuts, (Wiley-Interscience, New York, 2nd edition, 1991)に与えられている。
【００２１】
式（Ｉ）で示される化合物は、単一または少なくとも２種、例えば５〜１０００種の化合物、より好ましくは１０〜１００の式（Ｉ）で示される化合物から成る化合物ライブラリーとして調製することができる。式（Ｉ）で示される化合物のライブラリーは、コンビナトリアル「スプリットアンドミックス（split and mix）」法によるか、または当業者によく知られた方法による液相または固相化学を用いる多重パラレル合成により調製することができる。
【００２２】
かくして、本発明のさらなる態様により、少なくとも２種の式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される塩を含んで成る化合物ライブラリーを提供する。
医薬上許容される塩は、慣用的には、適当な酸または酸誘導体と反応させることにより調製することができる。
【００２３】
また、式（Ｉ）で示される化合物の合成における中間体として用いられる式（ＩＩＩ）で示される新規アルデヒドも本発明の一部を形成する。
【化６】
2005504794.tif 000008
［式中、Ｘ、Ｙ１、Ｙ２、Ｒ１、Ｒ３、Ａｒ、Ｘ１およびＸ２は式（Ｉ）で示される化合物の記載と同意義であり、Ｒは水素、Ｃ１−６アルキルまたはアリールＣ１−６アルキルである］
【００２４】
上記したように、式（Ｉ）で示される化合物およびその医薬上許容される誘導体は、Ｒａｆキナーゼ、特にＢ−Ｒａｆキナーゼが関与する障害の治療および／または予防に有用である。
本発明のさらなる態様により、式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される塩のＢ−Ｒａｆキナーゼの阻害剤としての使用を提供する。
上記したように、式（Ｉ）で示される化合物およびその医薬上許容される誘導体は、虚血事象、癌から生じる神経変性に付随する障害ならびに慢性神経変性、痛み、偏頭痛および心臓肥大の治療および／または予防に有用である。
【００２５】
本発明のさらなる態様により、神経外傷疾患の治療または予防を必要とする哺乳類における該疾患の治療または予防方法であって、該哺乳類に有効量の式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される誘導体を投与することを含む方法を提供する。
本発明のさらなる態様により、ヒトまたは他の哺乳類の、神経外傷事象により悪化するか、または引き起こされるいずれの病状の予防または治療のための医薬の製造における式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される誘導体の使用を提供する。
【００２６】
本明細書に記載の神経外傷疾患／事象は、例えば外科手術により引き起こされる開放性または貫通性頭部外傷、あるいは例えば頭部への傷害により引き起こされる閉鎖性頭部外傷傷害の両方を含む。また、虚血性卒中、特に脳領域に対する虚血性卒中、冠状バイパス後の一時的な虚血発作および他の一時的な虚血状態後の認識低下もこの定義に含まれる。
虚血性卒中は、通常、血管の塞栓、血栓または局所的なアテローム性閉鎖の結果としての、特定の脳領域への不十分な血液供給により生じる局所的な神経学的障害として定義される。この領域におけるストレス刺激（例えば酸素欠乏症）、レドックス傷害、過剰神経興奮性刺激および炎症性サイトカインの役割が明らかになっており、本発明は、これらの傷害の可能性ある治療方法を提供する。これらのような急性傷害に対して利用できる治療は比較的少ない。
【００２７】
また、本発明の化合物は、癌の治療または予防に用いることができる。化合物が、Ｂ−Ｒａｆ変異体（Ｖ５９９Ｅ）を活性化する腫瘍ならびにＲａｓ変異体により活性化される腫瘍に効果的であることが示唆されている。変異は、変異Ｇ１３Ｄにより、Ｒａｓファミリーメンバーで生じうる。さらに、本発明の化合物は結腸直腸癌および黒色腫の治療または予防において用いることができる。
【００２８】
本発明のさらなる態様により、癌を患っているか、またはそれに感受的な哺乳類の治療または予防方法であって、該哺乳類に有効量の式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される誘導体を投与することを含む方法を提供する。
本発明のさらなる態様により、癌の予防または治療のための医薬の製造における式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される誘導体を提供する。
【００２９】
式（Ｉ）で示される化合物およびその医薬上許容される誘導体は、単独で、または上記した症状の治療用の他の治療剤と組み合わせて用いることができる。特に、抗癌剤治療において、他の化学療法剤、ホルモン剤または抗体剤との組み合わせは、外科治療および放射線治療との組み合わせと同様に認識する。かくして、本発明の組み合わせ治療は、少なくとも１種の式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される誘導体を投与すること、および少なくとも１種の他の癌治療法の使用を含む。好ましくは、本発明による組み合わせ治療少なくとも１種の式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される誘導体および少なくとも１種の医薬活性化学療法剤の投与を含む。これらは、既存および将来の化学療法剤を含む。式（Ｉ）で示される化合物（複数でも可）および他の活性化学療法剤（複数でも可）は、単一の医薬組成物で一緒に投与するか、または別個に投与することができ、別個に投与する場合、これは同時、またはいずれの順番で別個に行ってもよい。かかる逐次投与は、時間が接近していても、離れていてもよい。式（Ｉ）で示される化合物（複数でも可）およびその医薬上活性な化学療法剤（複数でも可）の量、および投与の相対的なタイミングは、所望の組み合わせ治療効果を達成するように選択されるだろう。
【００３０】
式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される誘導体と組み合わせるのに有用でありうる医薬上活性な化学療法剤は、限定するものではないが以下のものである：
（１）限定するものではないが、ジテルペノイド、例えばパクリタキセルおよびそのアナログドセタキセル（docetaxel）；チューブリン毒、例えばタクソール／タキサンまたはビンカアルカノイド、例えばビンプラスチン、ビンクリスチン、ビンデシンおよびビノレルビン；エピポドフィロトキシン、例えばエトポシドおよびテニポシド（teniposide）；フルオロピリミジン、例えば５−フルオロウラシルおよびフルオロデオキシウリジン；代謝拮抗剤、例えばアロピロノール、フルダラビン、メトトレキサート、クラドリビン、シタラビン、メルカプトプリン、ゲムシタビンおよびチオグアニン；およびカンプトセシン、例えば９−アミノカンプトセシン、イリノテカン、トポテカンおよび７−（４−メチルピペラジノ−メチレン）−１０，１１−エチレンジオキシ−２０−カンプトセシンの種々の光学形態を含む、細胞周期特異的抗腫瘍剤；
【００３１】
（２）限定するものではないが、アルキル化剤、例えばメルファラン、クロラムブシル、シクロホスファミド、メクロレタミン、ヘキサメチルメラミン、ブスルファン、カルムスチン、ロムスチン、ダカルバジンおよびニトロ源；抗腫瘍抗生物質、例えばドキソルビシン、ダウノマイシン、エピルビシン、マイトマイシン−Ｃ、ダクチノマイシン（dacttinomycin）、ブレオマイシンおよびミトラマイシン；およびプラチナ配位複合体、例えばシスプラチン、カルボプラチンおよびオキサリプラチンを含む、細胞毒性化学療法剤；および
【００３２】
（３）限定するものではないが、抗エストロゲン、例えばタモキシフェン、トレミフェン、ラロキシフェン、ドロロキシフェン（droloxifene）およびヨードキシフェン（iodoxyfene）；プロゲストロゲン（progestrogen）、例えば酢酸メゲストロール； アロマターゼ阻害剤、例えばアナストロゾール、レトラゾール（letrazole）、ボラゾール（vorazole）およびエクセメスタン；抗アンドロゲン剤、例えばフルタミド、ニルタミド（nilutamide）、ビカルタミドおよび酢酸シプロテロン；ＬＨＲＨアゴニストおよびアンタゴニスト、例えば酢酸ゴセレニンおよびリュープリン、テストステロン５α−ジヒドロレダクターゼ阻害剤、例えばフィナステライド；メタロプロテーゼ阻害剤、例えばマリマスタット；抗プロゲストロゲン（antiprogestrogen）；ミトザントロン、１−アスパラギナーゼ、ウロキナーゼプラスミノゲンアクチベーター受容体機能阻害剤；阻害剤またはｃ−ｋｉｔおよびｂｃｒ／ａｂｌチロシンキナーゼ（例えば、グリーベック（Gleevec））、免疫療法、免疫コンジュゲート、サイトカイン（例えばＩＬ−２、ＩＦＮαおよびβ）、腫瘍ワクチン（樹状細胞ワクチンを含む）、サリドマイド、ＣＯＸ−２阻害剤、グルココルチコイド（例えば、プレドニゾンおよびデカドロン）、放射線増感剤（例えば、テマゾラミド（temazolamide）、成長因子機能阻害剤、例えば肝細胞成長因子機能阻害剤；ｅｒｂ−Ｂ２、ｅｒｂ−Ｂ４、表皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）および血小板由来成長因子受容体（ＰＤＧＦＲ）；血管新生阻害剤、例えばエフリン受容体機能阻害剤（例えば、ＥｐｈＢ４）、血管内皮成長因子受容体（ＶＥＧＦＲ）およびアンギオポイエチン受容体（Ｔｉｅ１およびＴｉｅ２）；および他のキナーゼ阻害剤、例えばＣＤＫ２およびＣＤＫ４の阻害剤を含む、他の化学療法剤。
【００３３】
抗腫瘍剤は、細胞周期特異的手段で、すなわち、相特異的であり、細胞周期の特定の相で作用するか、あるいはＤＮＡに結合し、非細胞周期特異的手段で作用し、すなわち、非細胞周期特異的であり、他の機構により操作されて、抗腫瘍効果を誘発することができる。
【００３４】
本発明のさらなる態様により、慢性神経変性、痛み、偏頭痛または心臓肥大の治療または予防を必要とする哺乳類における該治療または予防方法であって、該哺乳類に有効量の式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される誘導体を投与することを含む方法を提供する。
本発明のさらなる態様により、慢性神経変性、痛み、偏頭痛または心臓肥大の予防または治療のための医薬の製造における式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される誘導体の使用を提供する。
【００３５】
治療において式（Ｉ）で示される化合物を用いるために、これらは、通常、標準的な医薬手法に従って医薬組成物に処方されるだろう。
本発明のさらなる態様により、式（Ｉ）で示される化合物またはその医薬上許容される誘導体および医薬上許容される担体を含んでなる医薬組成物を提供する。
【００３６】
式（Ｉ）で示される化合物は、有利には、薬剤の投与に慣用的に用いられるいずれの投与経路、例えば、非経口、経口、局所または吸入により投与することができる。式（Ｉ）で示される化合物は、それを標準的な医薬担体と、慣用的な方法に従って組み合わせることにより調製される慣用的な剤形で投与することができる。また、式（Ｉ）で示される化合物は、公知の第２の治療活性化合物と組み合わせて慣用的な投与量で投与することができる。これらの方法は、所望の調製法に応じて、成分を混合、造粒および圧搾または溶解することを含む。医薬上許容される担体の形態および特性は、それと組み合わせる式（Ｉ）で示される化合物の量、投与経路および他の公知の可変要素により決定される。担体（複数でも可）は、処方の他の成分と適合し、その需要者に有害でないという意味で「許容され」なければならない。
【００３７】
用いられる医薬担体は、例えば、固体または液体のいずれであってもよい。固体担体の例としては、ラクトース、テラアルバ、シュークロース、タルク、ゼラチン、寒天、ペクチン、アカシア、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸等が挙げられる。液体担体の例としては、シロップ、ピーナッツ油、オリーブ油、水等が挙げられる。同様に、担体または希釈剤は、当該分野でよく知られた時間遅延物質、例えばグリセリルモノステアレートまたはグリセリルジステアレート単独またはワックスとの混合物を含んでいてもよい。
【００３８】
広範囲の医薬形態を用いることができる。かくして、固体担体を用いる場合、調合物を錠剤化し、粉末またはペレット形態でハードゼラチンカプセル中に入れるか、あるいはトローチまたはロゼンジの形態とすることができる。固体担体の量は広範囲に変化するだろうが、好ましくは、約２５ｍｇ〜約１ｇだろう。液体担体を用いる場合、調合物はシロップ、エマルジョン、ソフトゼラチンカプセル、滅菌注射用液体、例えばアンプルまたは非水性液体懸濁物だろう。
【００３９】
好ましくは、式（Ｉ）で示される化合物は、非経口で、すなわち静脈内、筋肉内、皮下、舌下、鼻腔内、直腸内、膣内または腹腔内投与する。非経口投与の静脈内形態が一般的には好ましい。化合物をボーラスとして投与するか、あるいは例えば６時間〜３日までの間、連続輸液としてとして投与してもよい。かかる投与に適した剤形は、慣用的な方法により調製することができる。
【００４０】
また、式（Ｉ）で示される化合物は、経口投与することができる。かかる投与に適した剤形は、慣用的な方法により製造することができる。
また、式（Ｉ）で示される化合物は、吸入により、すなわち鼻腔内および経口吸入により投与することができる。エアロゾル処方のようなかかる投与に適した剤形は、慣用的な方法により製造することができる。
また、式（Ｉ）で示される化合物は、局所投与、すなわち非全身性投与により投与することができる。これは、化合物が有意に血流中に入らないように、阻害剤を表皮または口腔に外面的に適用すること、およびかかる化合物を耳、目および鼻に滴下することを含む。
【００４１】
本明細書に開示したすべての使用方法に関して、１日の経口投与計画は、好ましくは、総体重の、約０．１〜約８０ｍｇ／ｋｇ、好ましくは約０．２〜３０ｍｇ／ｋｇ、より好ましくは約０．５〜１５ｍｇ／ｋｇだろう。１日の非経口投与計画は、総体重の、約０．１〜約８０ｍｇ／ｋｇ、好ましくは約０．２〜３０ｍｇ／ｋｇ、より好ましくは約０．５〜１５ｍｇ／ｋｇだろう。１日の局所投与計画は、好ましくは、総体重の、０．１ｍｇ〜１５０ｍｇ／ｋｇを１日１〜４回、好ましくは１日２または３回だろう。１日の吸入投与計画は、好ましくは、１日あたり約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約１ｍｇ／ｋｇだろう。また、阻害剤の最適量および個々の投与間隔は治療する症状の性質および程度、投与の形態、経路および部位、ならびに治療される特定の患者により決定され、かかる最適値は慣用的な方法により決定することができることは、当業者により理解されるだろう。また、治療の最適なコース、すなわち所定の日数の間の１日あたりの所定の阻害剤の投与回数を、当業者により慣用的な治療決定試験コースを用いて確認できることは、当業者により理解されるだろう。医薬上許容される塩の場合、上記値は式（Ｉ）で示される親化合物として計算される。
式（Ｉ）で示される化合物を上記した投与量範囲で投与する場合、毒性効果は示されず／予想されない。
【００４２】
限定するものではないが、特許および特許出願を含む、本明細書において示されるすべての刊行物は、出典明示により本明細書に組み入れる。
【００４３】
以下の実施例は、本発明の医薬活性化合物の製造方法を説明し、以下の記載は、これらの化合物の調製に用いられる中間体の製造方法を説明する。
本明細書で用いる略語は以下の通りである；
ＴＨＦはテトラヒドロフランを意味する。
ＤＭＦはＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを意味する。
ＬＤＡは、リチウムジイソプロピルアミドを意味する。
ＴＢＡＦは、テトラブチルアンモニウムフルオライドを意味する。
ＤＭＳＯは、メチルスルホキシドを意味する。
【００４４】
記載１：５−（２−ピリジン−４−イル−フラン−３−イル）−インダン−１−オンＯ−メチルオキシム
工程１．５−ブロモ−インダン−１−オンＯ−メチルオキシム
エタノール（５００ｍｌ）中の５−ブロモ−インダン−１−オン（１００ｇ、０．４７ｍｏｌ）およびメトキシルアミン塩酸塩（５６．ｇ、０．７ｍｏｌ）の溶液を、ピリジル（５７ｍｌ、０．７ｍｏｌ）で処理した。室温で３０分間撹拌した後、混合物を８０℃で３時間加熱した。室温に冷却した後、溶液を減圧下で濃縮し、残渣を酢酸エチルおよび飽和重炭酸ナトリウム溶液で希釈した。有機相を水およびブラインで洗浄し、乾燥し、減圧下で濃縮して、標題化合物を（１０９ｇ、９６％）を得た；1H NMR (CDCl3) 7.52 (1H, d, J 8.3Hz), 7.43 (1H, d, J 1Hz), 7.35 (1H, dd, J 8.3, 1Hz), 3.97 (3H, s), 2.99 (2H, m), 2.85 (2H, m)。
【００４５】
工程２．１−メトキシイミド−インダン−５−ボロン酸
ＴＨＦ（１Ｌ）中の工程１の生成物（４８．０ｇ、０．２ｍｏｌ）の溶液を、アルゴン雰囲気下−７８℃で、ｎ−ブチルリチウム（１３８ｍｌ、ヘキサン中１．６Ｍ、０．２２ｍｏｌ）を滴下して処理した。−７８℃で３０分間撹拌した後、トリメチルボレート（４９ｍｌ、０．４４ｍｏｌ）を加え、溶液を室温に１６時間にわたって加温した。混合物を減圧下で濃縮し、ｐＨ１に５ＮのＨＣｌで酸性化し、室温で１時間撹拌した。ついで、混合物を４０％の水酸化ナトリウムで塩基性化し、溶液を、ジエチルエーテルで３回洗浄した。水相を再びｐＨ１に酸性化し、混合物を酢酸エチルで５回抽出した。有機抽出物を合し、ブラインで洗浄し、乾燥し、減圧下で濃縮して黄色固体を得た。固体をヘキサンでトリチュレートし、濾過し、ヘキサンで、ついで、少量のエーテルで洗浄して、標題化合物（２３．６ｇ、５８％）を得た；ＭＳ（ＡＰ−）ｍ／ｅ２０４［Ｍ−Ｈ］−。
【００４６】
工程３．４−（３−ブロモ−フラン−２−イル）−ピリジル
エチレングリコールジメチルエーテル（３００ｍｌ）および水（１５０ｍｌ）中の２，３−ジブロモフラン（１１．３ｇ、５０ｍｍｏｌ）、４−ピリジルボロン酸（M. Lamotheら、J. Med. Chem., 1997, 40, 3542）（６．１５ｇ、５０ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（５５ｇ、０．４ｍｏｌ）の脱気混合物を、トリフェニルホスフィン（１．３１ｇ、５ｍｍｏｌ）および酢酸パラジウム（６２５ｍｇ、２．５ｍｍｏｌ）で処理し、ついで１８時間加熱還流した。室温に冷却した後、混合物をフィルターで濾過し、濾液を水および酢酸エチルで希釈した。有機相を分離し、水およびブラインで洗浄し、乾燥し、減圧下で濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物（６．０ｇ、５４％）を得た；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ２２４／２２６［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００４７】
工程４．５−（２−ピリジン−４−イル−フラン−３−イル）−インダン−１−オンＯ−メチルオキシム
エチレングリコールジメチルエーテル（７０ｍｌ）および水（３０ｍｌ）中の工程３の生成物（２．７ｇ、１２ｍｍｏｌ）、工程２の生成物（２．５ｇ、１２ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（１３．２ｇ、９６ｍｍｏｌ）の脱気混合物を、トリフェニルホスフィン（３１４ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）および酢酸パラジウム（１３５ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）で処理し、ついで１時間加熱還流した。室温に冷却した後、混合物をフィルターで濾過し、濾液を水および酢酸エチルで希釈した。有機相を分離し、水およびブラインで洗浄し、乾燥し、減圧下で濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して標題化合物（２．９ｇ、７４％）を得た；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ３０５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００４８】
記載２４−（１−メトキシイミド−インダン−５−イル）−５−ピリジン−４−イル−フラン−２−カルボアルデヒド
ＴＨＦ（１０ｍｌ）中の記載１（１．０ｇ、３．３ｍｍｏｌ）の生成物の溶液を、アルゴン雰囲気下、−７８℃で、ＬＤＡ（２ｍｌ、３．９ｍｍｏｌ、エチルベンゼン／ヘプタン／ＴＨＦ中２Ｍの溶液）で処理した。−７８℃で１５分間撹拌した後、ＴＨＦ（１ｍｌ）中のＤＭＦ（０．３ｍｌ）の溶液を加えた。１５分後、飽和塩化アンモニウム溶液を加え、反応混合物を室温に加温した。混合物を酢酸エチルで抽出し、有機相を水およびブラインで洗浄し、乾燥し、減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を無色の固体として（６１５ｍｇ、５６％）得た；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ３３３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００４９】
記載３：５−（１−メトキシイミド−インダン−５−イル）−４−ピリジン−４−イル−フラン−２−カルボアルデヒド
工程１．４，５−ジブロモ−フラン−２−カルボニルクロライド
オキサリルクロライド（１０．４ｍｌ、０．１２ｍｏｌ）を、ジメチルホルムアミド（０．１ｍｌ）を含有するジクロロメタン（３００ｍｌ）中の４，５−ジブロモ−２−フロ酸（２７ｇ、０．１ｍｏｌ）の懸濁液に加えた。混合物を室温で４時間撹拌し、ついで、減圧下で濃縮した。残渣をジクロロメタン中に溶解し、減圧下で濃縮し、これを繰り返して標題化合物を得、これを次の工程に直接用いた。
【００５０】
工程２．４，５−ジブロモ−フラン−２−カルボン酸メトキシ−メチル−アミド
ジクロロメタン（３００ｍｌ）中の工程１の生成物（０．１ｍｏｌ）の溶液を、０℃に冷却し、Ｎ，Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩（１１．７ｇ、０．１２ｍｏｌ）、ついで、トリエチルアミン（３６ｍｌ、０．３６ｍｏｌ）で処理した。混合物を室温に加温し、３０分間撹拌した。溶媒を減圧下で蒸発させ、残渣を酢酸エチルおよび水間で分配した。層を分離した後、有機相を、連続して２Ｍの塩酸、水およびブラインで洗浄し、乾燥し、減圧下で濃縮した。生成物を酢酸エチル／ヘキサン（１：１）で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物（３０．１ｇ、９６％）を得た；1H NMR (CDCl3) 7.12 (1H, s), 3.78 (3H, s), 3.31 (3H, s)。
【００５１】
工程３．４，５−ジブロモ−フラン−２−カルボアルデヒド
水素化ジイソブチルアルミニウム（８０ｍｌ、トルエン中の１Ｍの溶液）を、テトラヒドロフラン（１６０ｍｌ）中の工程２（２０ｇ、６３．４ｍｍｏｌ）からの生成物の溶液に−７８℃で加えた。混合物を−７８℃で１．５時間撹拌し、ついで、飽和塩化アンモニウム水溶液（４０ｍｌ）でクエンチした。反応物を室温に加温し、酢酸エチルおよび５Ｍの塩酸（２０ｍｌ）で希釈し、３０分間撹拌した。有機層を分離し、水、ついでブラインで２回洗浄し、乾燥し、減圧下で濃縮して、標題化合物（１２．９ｇ、８１％）を得た；1H NMR (CDCl3) 9.52 (1H, s), 7.21 (1H, s)。
【００５２】
工程４．４−ブロモ−５−（１−メトキシイミド−インダン−５−イル）−フラン−２−カルボアルデヒド
エチレングリコールジメチルエーテル（１５０ｍｌ）および水（７５ｍｌ）中の工程３の生成物（６．６ｇ、２６．０ｍｍｏｌ）、１−メトキシイミド−インダン−５−ボロン酸（５．３ｇ、２６．０ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（２８ｇ、２０２ｍｍｏｌ）の脱気混合物を、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）クロライド（１．０５ｇ、１．５ｍｍｏｌ）で処理し、ついで６時間加熱還流した。室温に冷却した後、混合物をセライトを通して濾過し、濾液を水および酢酸エチルで希釈した。有機相を分離し、水およびブラインで洗浄し、乾燥し、減圧下で濃縮し、残渣を、ジクロロメタンで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物（３．０６ｇ、３５％）を得た；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ３３４／３３６［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００５３】
工程５．５−（１−メトキシイミド−インダン−５−イル）−４−ピリジン−４−イル−フラン−２−カルボアルデヒド
トルエン（１００ｍｌ）中の工程４の生成物（２．０ｇ、６．０ｍｍｏｌ）および４−トリブチルスタニルピリジル（２．５ｇ、６．８ｍｍｏｌ）の脱気混合物を、トリフェニルホスフィン（１５６ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）および酢酸パラジウム（６７ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）で処理し、ついで、６０時間加熱還流した。反応混合物を減圧下で濃縮し、生成物を、酢酸エチル／ヘキサン（１：１）、ついで、酢酸エチルにより溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物（１．３７ｇ、６９％）を得た；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ３３３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００５４】
実施例１：５−（５−モルホリン−４−イルメチル−２−ピリジン−４−イル−フラン−３−イル）−インダン−１−オンオキシム
【化７】
2005504794.tif 000009
工程１．５−（５−モルホリン−４−イルメチル−２−ピリジン−４−イル−フラン−３−イル）−インダン−１−オンＯ−メチル−オキシム
酢酸（０．２ｍｌ）を含むメタノール（５ｍｌ）中の記載２の生成物（１５６ｍｇ、９ｍｍｏｌ）、モルホリン（５３ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）および重合体結合トリメチルアンモニウムシアノボロヒドリド（２５０ｍｇ、１ｍｍｏｌ、４ｍｍｏｌ／ｇ）の混合物を、を２４時間室温で撹拌した。ついで、反応混合物を濾過し、樹脂をメタノールで洗浄した。濾液を減圧下で濃縮した。残渣を、０．８８０アンモニア溶液：エタノール：クロロホルムの０．１：１：２５混合物で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物（１６２ｍｇ、６１％）を固体として得た；ＭＳ（ＡＰ＋）ｍ／ｅ４０４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００５５】
工程２．５−（４−モルホリン−４−イルメチル−２−ピリジン−４−イル−フラン−３−イル）−インダン−１−オン
ジオキサン（２ｍｌ）／アセトン（５ｍｌ）中の工程１の生成物（１６２ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）および５ＭのＨＣｌ（１ｍｌ）の混合物を、１００℃で２時間加熱した。ついで、混合物を室温に冷却し、溶媒を減圧下で蒸発させた。残渣をアセトン（２×２０ｍｌ）およびエタノール／アセトン（１：１、２０ｍｌ）と同時に蒸発させて、標題化合物（１８０ｍｇ）を二塩酸塩として得、これを次の工程に直接用いた；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ３７５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００５６】
工程３．５−（５−モルホリン−４−イルメチル−２−ピリジン−４−イル−フラン−３−イル）−インダン−１−オンオキシム
水性ヒドロキシルアミン（２ｍｌ、水中５０％）を含有するエタノール（４ｍｌ）中の工程２の生成物（１８０ｍｇ、０．４ｍｍｏｌ）を１時間加熱還流した。室温に冷却した後、混合物を減圧下で濃縮し、残渣をエタノール（３×５ｍｌ）と同時に蒸発させた。残渣を、０．８８０アンモニア溶液：エタノール：クロロホルムの０．１：１：２０混合物で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物（１００ｍｇ、６４％）を得た；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ３９０［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００５７】
以下の実施例を、記載２の生成物から、実施例１に記載の一般的な３工程の方法により調製した。
【表１】
2005504794.tif 000010
【００５８】
実施例９：５−（５−｛［１−（２−メトキシ−エチル）−ピペリジン−４−イルアミノ］−メチル｝−３−ピリジン−４−イル−フラン−２−イル）−インダン−１−オンオキシム
【化８】
2005504794.tif 000011
工程１．［１−（２−メトキシ−エチル）−ピペリジン−４−イル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
エタノール（２０ｍｌ）中の４−アミノ−１−Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル−ピペリジン（３．０ｇ、１５．０ｍｍｏｌ）の溶液を、炭酸カリウム（３．７ｇ、２６．８ｍｍｏｌ）および２−ブロモエチルメチルエーテル（２．３ｇ、１６．５ｍｍｏｌ）で処理した。反応混合物を２４時間加熱還流し、冷却し、ついで濾過した。濾液を減圧下で濃縮し、残渣を、クロロホルム／エタノール／０．８８０アンモニア溶液（９５：４．５：０．５）で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物（２．０２ｇ、５２％）を得た；1H NMR (CD3OD) 4.04 (2H, m), 3.49 (2H, t, J 5.2Hz), 3.31 (3H, s), 2.76 (2H, t, J 5.2Hz), 2.62 (3H, m), 1.88 (2H, m), 1.44 (9H, s), 1.19 (2H, m)。
【００５９】
工程２：１−（２−メトキシ−エチル）−ピペリジン−４−イルアミン
ジクロロメタン（５ｍｌ）中の工程１からの生成物（５００ｍｇ、１．９４ｍｍｏｌ）の溶液を、０℃に冷却し、トリフルオロ酢酸（２ｍｌ）で処理した。混合物を室温に加温し、さらに１時間撹拌した。溶媒を減圧下で蒸発させた後、残渣をジクロロメタンおよび炭酸ナトリウム水溶液間で分配した。相を分離した後、水相を再びジクロロメタンで６回抽出し、乾燥し、減圧下で濃縮して、標題化合物（１４５ｍｇ、４７％）を得た；1H NMR (CD3OD) 3.49 (2H, t, J 5.2Hz), 3.35 (3H, s), 3.30 (2H, m), 3.10 (1H, s), 2.80 (2H, t, J 5.2Hz), 2.68 (2H, m), 1.91 (2H, m), 1.30 (2H, m)。
【００６０】
工程３．５−（５−｛［１−（２−メトキシ−エチル）−ピペリジン−４−イルアミノ］−メチル｝−３−ピリジン−４−イル−フラン−２−イル）−インダン−１−オンＯ−メチル−オキシム
工程２の生成物および記載３の生成物から、実施例１工程１に記載のように、標題化合物を調製した；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ４７６［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００６１】
工程４．５−（５−｛［１−（２−メトキシ−エチル）−ピペリジン−４−イルアミノ］−メチル｝−３−ピリジン−４−イル−フラン−２−イル）−インダン−１−オン
工程３の生成物から、実施例１工程２に記載のように標題化合物を調製した；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ４４６［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００６２】
工程５．５−（５−｛［１−（２−メトキシ−エチル）−ピペリジン−４−イルアミノ］−メチル｝−３−ピリジン−４−イル−フラン−２−イル）−インダン−１−オンオキシム
工程４の生成物から、実施例１工程３に記載のように標題化合物を調製した；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ４６１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００６３】
以下の実施例を、記載３の生成物から、実施例１に記載の一般的な３工程の方法を用いて調製した。
【表２】
2005504794.tif 000012
【００６４】
【表３】
2005504794.tif 000013
【００６５】
実施例２７：５−（５−ピペリジン−１−イルメチル−２−ピリミジン−４−イル−フラン−３−イル）−インダン−１−オンオキシム
【化９】
2005504794.tif 000014
工程１．１−（４，５−ジブロモ−フラン−２−イルメチル）−ピペリジン
記載３工程３の生成物（１．３３ｇ、５．２３ｍｍｏｌ）およびピペリジン（０．５３４ｇ、６．２８ｍｍｏｌ）から、実施例１工程１に記載のように調製して標題化合物（１．１５ｇ、６８％）を調製した；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ３２２／３２４／３２６［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００６６】
工程２．４−（３−ブロモ−５−ピペリジン−１−イルメチル−フラン−２−イル）−２−メチルスルファニル−ピリミジン
乾燥トルエン（１０ｍｌ）中のビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）クロライド（０．２２６ｇ、０．３２３ｍｍｏｌ）を、工程１の生成物（１．１５ｇ、３．５６ｍｍｏｌ）の溶液に加えた。２−メチルスルファニル−４−トリメチルスタナニル−ピリミジン（K.Undheimら、Tetrahedron, 1994, 50(1), 275）（０．９３９ｇ、３．２３ｍｍｏｌ）をこの溶液に加え、ついで、反応物を１００℃に１８時間加熱した。室温に冷却した後、溶媒を減圧下で除去し、残渣を、０．８８０アンモニア／メタノール／ジクロロメタン（０．３：２．７：９７）の混合物で溶出するシリカゲルのクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物（０．２２０ｇ、０．５９７ｍｍｏｌ）を得た；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ３７０／３７２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００６７】
工程３．５−［２−（２−メチルスルファニル−ピリミジン−４−イル）−５−ピペリジン−１−イルメチル−フラン−３−イル］−インダン−１−オンＯ−メチル−オキシム
トルエン（１０ｍｌ）中の工程２からの生成物（０．６ｇ、１．６２ｍｍｏｌ）および記載１工程２からの生成物（０．３６７ｇ、１．８ｍｍｏｌ）の混合物を、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）クロライド（０．１１３ｇ、０．１６２ｍｍｏｌ）および２Ｍの水性炭酸ナトリウム（０．２ｍｌ、３．９３ｍｍｏｌ）で処理し、１８時間加熱還流した。室温に冷却した後、混合物を酢酸エチルに注ぎ、飽和重炭酸ナトリウム水溶液およびブラインで洗浄し、乾燥し、減圧下で減少させた。粗標題化合物（０．３１０ｇ）を、さらに精製することなしに次の工程に用いた；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ４４９［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００６８】
工程４．５−［２−（２−メチルスルファニル−ピリミジン−４−イル）−５−ピペリジン−１−イルメチル−フラン−３−イル］−インダン−１−オン
ジオキサン（３ｍｌ）／アセトン（１ｍｌ）中の工程３からの生成物（０．３１０ｇ、０．６９２ｍｍｏｌ）および５ＭのＨＣｌ（３ｍｌ）の混合物を、１００℃で１時間加熱した。ついで、混合物を室温に冷却し、酢酸エチル中に注ぎ、飽和重炭酸ナトリウム水溶液で洗浄した。ついで、酢酸エチルを乾燥し、溶媒を減圧下で蒸発させ、残渣を、０．８８０アンモニア／メタノール／ジクロロメタン（０．５：４．５：９５）の混合物で溶出するシリカゲルのクロマトグラフィーに付して、標題化合物（０．１４５ｇ、０．３４５ｍｍｏｌ）を得た；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ４２０［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００６９】
工程５．５−（５−ピペリジン−１−イルメチル−２−ピリミジン−４−イル−フラン−３−イル）−インダン−１−オン
エタノール（１５ｍｌ）および水（５ｍｌ）中の工程４の生成物（０．１３５ｇ、０．３２９ｍｍｏｌ）およびラネーニッケル（０．２６２ｇの懸濁液）の混合物を２０時間１００℃で加熱した。ついで、混合物を室温に冷却し、セライトを通して濾過し、濾液を減圧下で減少させた。ついで、残渣を、０．８８０アンモニア／メタノール／ジクロロメタン（０．５：４．５：９５）で溶出するシリカゲルのクロマトグラフィーにより精製し、標題化合物（０．０１６ｇ、０．３４５ｍｍｏｌ）を得た；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ３７４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００７０】
工程６．５−（５−ピペリジン−１−イルメチル−２−ピリミジン−４−イル−フラン−３−イル）−インダン−１−オンオキシム
工程５の生成物から、実施例１工程３に記載のように標題化合物（０．０１６ｇ、０．０４１ｍｍｏｌ）を調製した；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ３８９［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００７１】
実施例２８：５−［２−（２−アミノ−ピリミジン−４−イル）−５−ピペリジン−１−イルメチル−フラン−３−イル］−インダン−１−オンオキシム
【化１０】
2005504794.tif 000015
工程１．５−［２−（２−メタンスルホニル−ピリミジン−４−イル）−５−ピペリジン−１−イルメチル−フラン−３−イル］−インダン−１−オン
３０％の過酸化水素（０．１３８ｇ、１．２２ｍｍｏｌ）、ついで、タングステン酸ナトリウム（０．００６７ｇ、０．０２０３ｍｍｏｌ）を、ＨＣｌ（５．４ｍｌ、０．８１ｍｍｏｌ、０．１５Ｍ）中の実施例２７工程４の生成物（０．１７０ｇ、０．４０５ｍｍｏｌ）の懸濁液に加えた。混合物を室温で一晩撹拌し、ついで、水に注ぎ、飽和チオ硫酸ナトリウム溶液で処理した。ついで、水性混合物を飽和重炭酸ナトリウム水溶液で中和し、ついで、ジクロロメタンで数回抽出した。ついで、有機抽出物を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で減少させた。得られた黄色固体残渣（０．１５０ｇ）を、さらに精製することなく次の工程に直接用いた；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ４５２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００７２】
工程２．５−［２−（２−アミノ−ピリミジン−４−イル）−５−ピペリジン−１−イルメチル−フラン−３−イル］−インダン−１−オン
０．８８０アンモニア溶液（５ｍｌ）を、ＴＨＦ（１ｍｌ）中の工程１からの残渣（０．０４５ｇ、０．１ｍｍｏｌ）に加えた。ついで、反応混合物を、オートクレーブで１００℃で１８時間加熱し、ついで０℃に冷却し、クロロホルムで抽出した。ついで、有機抽出物を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で減少させた。残渣を、０．８８０アンモニア／メタノール／クロロホルム（０．６：５．４：９４）の混合物により溶出するシリカゲルのクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物（０．０１３ｇ、０．０３６ｍｍｏｌ）を得た；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ３８９［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００７３】
工程３．５−［２−（２−アミノ−ピリミジン−４−イル）−５−ピペリジン−１−イルメチル−フラン−３−イル］−インダン−１−オンオキシム
工程２の生成物（０．０１１ｇ、０．０２８ｍｍｏｌ）から、実施例１工程３に記載のように、標題化合物（０．０１０ｇ、０．０２５ｍｍｏｌ）を調製した；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ４０５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００７４】
実施例２９．５−［５−（４−ヒドロキシ−ピペリジン−４−イル）−２−ピリジン−４−イル−フラン−３−イル］−インダン−１−オンオキシム
【化１１】
2005504794.tif 000016
工程１．４−ヒドロキシ−４−［４−（１−メトキシイミド−インダン−５−イル）−５−ピリジン−４−イル−フラン−２−イル］−ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチルエステル
ＴＨＦ（１５ｍｌ）中の記載１の生成物（８４０ｍｇ、２．７５ｍｍｏｌ）の溶液を、アルゴン雰囲気下−７８℃で、ＬＤＡ（１．６５ｍｌ、３．３ｍｍｏｌ、エチルベンゼン／ヘプタン／ＴＨＦ中の２Ｍの溶液）で処理した。−７８℃で１５分間撹拌した後、ＴＨＦ（４ｍｌ）中の４−オキソ−ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチルエステル（５５０ｍｇ、２．７５ｍｍｏｌ）の溶液を、１５分間にわたって加え、反応混合物を室温に１８時間にわたって加温した。ついで、飽和塩化アンモニウム溶液を加え、混合物を酢酸エチルで抽出し、有機相を水およびブラインで洗浄し、乾燥し、減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して標題化合物（６１８ｍｇ、４５％）を得た；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ５０４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００７５】
工程２．５−［５−（４−ヒドロキシ−ピペリジン−４−イル）−２−ピリジン−４−イル−フラン−３−イル］−インダン−１−オン
ジオキサン（３ｍｌ）／アセトン（１０ｍｌ）中の工程１の生成物（３５０ｍｇ、０．７ｍｍｏｌ）および５ＭのＨＣｌ（３ｍｌ）の混合物を、１００℃で４時間加熱した。ついで、混合物を室温に冷却し、溶媒を減圧下で蒸発させた。残渣をアセトン（２×２０ｍｌ）およびエタノール／アセトン（１：１、２０ｍｌ）と同時に蒸発させて、標題化合物を二塩酸塩として得、これを次の工程に直接用いた；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ３７５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００７６】
工程３．５−［５−（４−ヒドロキシ−ピペリジン−４−イル）−２−ピリジン−４−イル−フラン−３−イル］−インダン−１−オンオキシム
水性ヒドロキシルアミン（２ｍｌ、水中の５０％）を含有するエタノール（４ｍｌ）中の工程２の生成物（２００ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ）を、１時間加熱還流した。室温に冷却した後、混合物を減圧下で濃縮し、残渣をエタノール（３×５ｍｌ）と同時に蒸発させた。残渣を、０．８８０アンモニア溶液：エタノール：クロロホルムの１：９：９０混合物で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物（８６ｍｇ、４０％）を調製した；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ３９０［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００７７】
実施例３０：５−［２−ピリジン−４−イル−５−（１，２，３，６−テトラヒドロ−ピリジン−４−イル）−フラン−３−イル］−インダン−１−オンオキシム
【化１２】
2005504794.tif 000017
工程１．４−［−４−（１−メトキシイミド−インダン−５−イル）−５−ピリジン−４−イル−フラン−２−イル］−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−ピリジル−１−カルボン酸ｔｅｒｔブチルエステル
ＴＨＦ（２５ｍｌ）中の実施例２９、工程１の生成物（１．０６ｇ、２．０ｍｍｏｌ）の溶液を、０℃で、（メトキシカルボニルスルファモイル）−トリエチルアンモニウムヒドロキシド内部塩（Ｂｕｒｇｅｓｓ試薬、９５２ｍｇ、４ｍｍｏｌ）で処理した。室温で１８時間後、混合物を、酢酸エチルおよび水で希釈した。有機相を水およびブラインで洗浄し、乾燥し、減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して標題化合物（４５０ｍｇ、４６％）を得た；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ４８６［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００７８】
工程２．５−［２−ピリジン−４−イル−５−（１，２，３，６−テトラヒドロ−ピリジン−４−イル）−フラン−３−イル］−インダン−１−オンオキシム
工程１の生成物から、実施例１、工程２および３に記載の方法を用いて標題化合物を調製した；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ３７２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００７９】
実施例３１．５−（５−ピペリジン−４−イル−２−ピリジン−４−イル−フラン−３−イル）−インダン−１−オンオキシム
【化１３】
2005504794.tif 000018
工程１．１−メトキシイミド−インダン−５−カルボアルデヒド
ＴＨＦ（１５００ｍｌ）中の記載１の生成物（１１２ｇ、０．４６ｍｏｌ）の溶液を、アルゴン雰囲気下−６０℃で１時間にわたって、ｎ−ＢｕＬｉ（３２５ｍｌ、ヘキサン中１．６Ｍ、０．５２ｍｏｌ）で処理した。−６０℃で１時間撹拌した後、ＴＨＦ（５０ｍｌ）中のＤＭＦ（３９．７ｍｌ）の溶液を１時間にわたって滴下した。反応物をさらに１時間にわたって−６０℃で撹拌し、ついで、室温に加温した。反応物を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液でクエンチし、酢酸エチルに抽出した。有機相を分離し、乾燥し、減圧下で濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して標題化合物（５７ｇ、６５％）を得た；1H NMR (CDCl3) 10.0(1H,s), 7.83-7.73 (3H, m), 4.02 (3H, s), 3.10 (2H, m), 2.92 (2H, m)。
【００８０】
工程２．４−［（Ｅ）−３−（１−メトキシイミド−インダン−５−イル）−アラノイル］−ピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル
メタノール（１００ｍｌ）中の工程１の生成物（４．８ｇ、２５ｍｍｏｌ）、ナトリウムメトキシド（１．３５ｇ、２５ｍｍｏｌ）および４−アセチル−ピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル（６．４ｇ、２５ｍｍｏｌ）（ＷＯ９７／０５８７７）の混合物を、８時間加熱還流した。室温に冷却した後、溶液を減圧下で濃縮し、残渣を酢酸エチルおよび水で希釈した。有機相を水およびブラインで洗浄し、乾燥し、減圧下で濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物（６．９２ｇ、６４％）を得た；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ４３３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００８１】
工程３．４−［３−（１−メトキシイミド−インダン−５−イル）−４−オキソ−４−ピリジン−４−イル−ブタノイル］−ピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル
ＤＭＦ（１５ｍｌ）中のシアン化ナトリウム（２４０ｍｇ、４．８ｍｍｏｌ）の溶液を、ＤＭＦ（２５ｍｌ）中のピリジル−４−カルボアルデヒド（１．７１ｇ、１６ｍｍｏｌ）の溶液で処理した。１５分後、ＤＭＦ（２０ｍｌ）中の工程２の生成物（６．９２ｇ、１６ｍｍｏｌ）の溶液を滴下した。室温で１８時間撹拌した後、混合物を飽和重炭酸ナトリウム溶液および酢酸エチルで希釈した。有機相を水およびブラインで洗浄し、乾燥し、減圧下で濃縮して、残渣をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して標題化合物（５．６ｇ、６５％）を得た；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ５４０［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００８２】
工程４．５−（５−ピペリジン−４−イル−２−ピリジン−４−イル−フラン−３−イル）−インダン−１−オンＯ−メチル−オキシム
工程３の生成物（３．０ｇ、５．５ｍｍｏｌ）を、乾燥メタンスルホン酸（５０ｍｌ）中の五酸化リン（８ｇ）の撹拌懸濁液に加えた。室温で４時間撹拌した後、反応混合物を撹拌氷冷５０％水酸化ナトリウム水溶液（最終ｐＨ１０）に注意深く注いだ。混合物をクロロホルムで抽出し、水およびブラインで洗浄し、乾燥し、減圧下で濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物（０．６６ｇ、３２％）を得た；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ３８８［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００８３】
工程５．５−（５−ピペリジン−４−イル−２−ピリジン−４−イル−フラン−３−イル）−インダン−１−オン
工程４の生成物から、実施例１工程２に記載の方法を用いて標題化合物を調製した；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ３５９［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００８４】
工程６．５−（５−ピペリジン−４−イル−２−ピリジン−４−イル−フラン−３−イル）−インダン−１−オンオキシム
工程５の生成物から、実施例１工程３に記載の方法を用いて標題化合物を調製した；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ３７４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００８５】
実施例３２．５−｛５−［１−（２−メトキシエチル）−ピペリジン−４−イル］−２−ピリジン−４−イル−フラン−３−イル｝−インダン−１−オンオキシム
【化１４】
2005504794.tif 000019
酢酸（０．２ｍｌ）を含有するメタノール（５ｍｌ）中の、実施例３１（０．１４９ｇ、０．４ｍｍｏｌ）の生成物、メトキシ−アセトアルデヒド（０．０３７ｇ、０．５ｍｍｏｌ）（E.M. Actonら、J. Med. Chem., 1986, 29, 2074）および重合体結合トリメチルアンモニウムシアノボロヒドリド（２００ｍｇ、０．８ｍｍｏｌ、４ｍｍｏｌ／ｇ）の混合物を、室温で２４時間撹拌した。ついで、反応混合物を濾過し、樹脂をメタノールで洗浄した。濾液を減圧下で濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、０．８８０アンモニア溶液：エタノール：クロロホルムの１：９：９０混合物により標題化合物（０．１０３ｇ、６０％）を得た；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ４３２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００８６】
実施例３３：５−（５−｛１−［２−（４−クロロ−フェノキシ）−エチル］−ピペリジン−４−イル｝−２−ピリジン−４−イル−フラン−３−イル）−インダン−１−オンオキシム
【化１５】
2005504794.tif 000020
工程１：５−（５−｛１−［２−（４−クロロ−フェノキシ）−エチル］−ピペリジン−４−イル｝−２−ピリジン−４−イル−フラン−３−イル）−インダン−１−オン
実施例３１工程５の生成物および（４−クロロフェノキシ）アセトアルデヒド（Maguireら、J. Chem. Soc.,1954, 3669）から、実施例３２の方法を用いて標題化合物（０．１４０ｇ、６５％）を調製した；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ５１３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００８７】
工程２：５−（５−｛１−［２−（４−クロロ−フェノキシ）−エチル］−ピペリジン−４−イル｝−２−ピリジン−４−イル−フラン−３−イル）−インダン−１−オンオキシム
工程１の生成物から、実施例１工程３に記載の方法を用いて標題化合物（０．１１５ｇ、８８％）を調製した；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ５２８［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００８８】
以下の実施例を、実施例３１工程５の生成物から、実施例３３、工程１および２に記載の一般的な２工程の方法を用いて調製した。
【表４】
2005504794.tif 000021
【００８９】
実施例３７：５−［５−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イル）−２−ピリジン−４−イル−フラン−３−イル］−インダン−１−オンオキシム
【化１６】
2005504794.tif 000022
工程１．５−［５−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イル）−２−ピリジン−４−イル−フラン−３−イル］−インダン−１−オンＯ−メチル−オキシム
実施例３１、工程３の生成物（３．０ｇ、５．５ｍｍｏｌ）を、乾燥メタンスルホン酸（５０ｍｌ）中の五酸化リン（８ｇ）の撹拌懸濁液に加えた。室温で４時間撹拌した後、反応混合物を、撹拌氷冷５０％水酸化ナトリウム水溶液に注意深く注いだ（最終ｐＨ１０）。混合物をクロロホルムで抽出し、水およびブラインで洗浄し、乾燥し、減圧下で濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物（１．０４ｇ、５０％）を得た；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ４６６［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００９０】
工程２：５−［５−（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イル）−２−ピリジン−４−イル−フラン−３−イル］−インダン−１−オンオキシム
工程１の生成物から、実施例１工程２および３に記載の方法を用いて標題化合物を調製した；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ４５２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００９１】
実施例３８：５−｛５−［１−（２−ジメチルアミノ−エタノイル）−ピペリジン−４−イル］−２−ピリジン−４−イル−フラン−３−イル｝−インダン−１−オンオキシム
【化１７】
2005504794.tif 000023
工程１．５−｛５−［１−（２−ジメチルアミノ−エタノイル）−ピペリジン−４−イル］−２−ピリジン−４−イル−フラン−３−イル｝−インダン−１−オン
実施例３１工程５からの生成物（０．１７ｇ、０．４７ｍｍｏｌ）、Ｎ−シクロヘキシルカルボジイミド、Ｎ’−メチルポリスチレン樹脂（０．４ｇ、０．６５ｍｍｏｌ、１．７ｍｍｏｌ／ｇ）および１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（０．０８１ｇ、０．６ｍｍｏｌ）の混合物を、ＤＭＦ（４ｍｌ）中に懸濁させ、トリエチルアミン（０．０８４ｍｌ、０．６ｍｍｏｌ）およびジメチルアミノ−酢酸（０．０４８ｇ、０．４７ｍｍｏｌ）で処理した。反応物を室温で１６時間撹拌し、１０ｇのＳＣＸカートリッジ（Ｖａｒｉａｎ Ｍｅｇａ Ｂｏｎｄ Ｅｌｕｔｅ）で濾過した。ついで、カートリッジをメタノールで、ついで、１：９の０．８８０アンモニア：メタノール溶液で洗浄した。ついで、フラクションを含有するアンモニアを減圧下で減少させ、残渣を、０．８８０アンモニア／メタノール／クロロホルム（０．５：４．５：９５）の混合物で溶出するシリカゲルのクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物（０．０９７ｇ、４７％）を得た；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ４４４（Ｍ＋Ｈ）＋。
【００９２】
工程２．５−｛５−［１−（２−ジメチルアミノ−エタノイル）−ピペリジン−４−イル］−２−ピリジン−４−イル−フラン−３−イル｝−インダン−１−オンオキシム
工程１の生成物から、実施例１工程３に記載の方法を用いて標題化合物（０．０５３ｇ、６３％）を調製した；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ４５９［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００９３】
以下の実施例を、実施例３１工程５の生成物から、実施例３８に記載の方法を用いて調製した。
【表５】
2005504794.tif 000024
【００９４】
実施例４０：５−（５−ピペリジン−４−イル−３−ピリジン−４−イル−フラン−２−イル）−インダン−１−オンオキシム
【化１８】
2005504794.tif 000025
工程１．４−［（Ｅ）−３−ピリジン−４−イル−アラノイル］−ピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル
乾燥ピリジル（８ｍｌ）およびピリジル−４−カルボキシアルデヒド（３．７５ｇ、３５ｍｍｏｌ）の溶液を、４−アセチル−ピペリジン１−カルボン酸ベンジルエステル（９．１ｇ、３５ｍｍｏｌ）およびジエチルアミン（３．９ｍｌ、３５ｍｍｏｌ）で処理した。この溶液を１８時間加熱還流し、室温に冷却し、塩酸を含有する氷水に注いだ。得られた溶液を、塩酸を添加することによりｐＨ９に調整し、混合物を酢酸エチルで抽出し、および有機相を水およびブラインで洗浄し、乾燥し、減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物（４．２ｇ、３４％）を得た；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ３５０［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００９５】
工程２．４−［４−（１−メトキシイミド−インダン−５−イル）−４−オキソ−３−ピリジン−４−イル−ブタノイル］−ピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル
工程１の生成物および実施例３１工程１の生成物から、実施例３１工程３に記載の方法を用いて標題化合物を調製した；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ５４０［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００９６】
工程３．５−（５−ピペリジン−４−イル−３−ピリジン−４−イル−フラン−２−イル）−インダン−１−オンＯ−メチル−オキシム
濃硫酸（１０ｍｌ）の撹拌溶液を、工程２の生成物（１．０８ｇ、２ｍｍｏｌ）で処理した。３０分後、反応混合物を５０％の水酸化ナトリウム水溶液を含有する氷水に注ぎｐＨをｐＨ１１に調整した。この懸濁液をセライトを通して濾過し、濾液を水およびクロロホルムで処理した。ついで、濾過パッドをメタノールで洗浄し、濾液を減圧下で濃縮し、残渣を、１：１０：４０の０．８８０アンモニア溶液：エタノール：クロロホルムの混合物により溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物（５２３ｍｇ、４２％）を得た；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ３８８［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００９７】
工程４．５−（５−ピペリジン−４−イル−３−ピリジン−４−イル−フラン−２−イル）−インダン−１−オン
工程３の生成物から、実施例１工程２に記載の方法を用いて標題化合物を得た；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ３５９［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００９８】
工程５．５−（５−ピペリジン−４−イル−３−ピリジン−４−イル−フラン−２−イル）−インダン−１−オンオキシム
工程４の生成物から、実施例１工程３に記載の方法を用いて標題化合物を調製した；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ３７４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００９９】
実施例４１：５−｛５−［１−（２−メトキシエチル）ピペリジン−４−イル］−３−ピリジン−４−イルフラン−２−イル｝インダン−１−オンオキシム
【化１９】
2005504794.tif 000026
工程１．５−｛５−［１−（２−メトキシエチル）ピペリジン−４−イル］−３−ピリジン−４−イルフラン−２−イル｝インダン−１−オン
実施例４０工程４の生成物およびメトキシアセトアルデヒド（０．０３５ｇ、０．５６ｍｍｏｌ）（E.M. Actonら、J. Med. Chem., 1986, 29, 2074）から、実施例３２の方法を用いて標題化合物（０．０８６ｇ、３７％）を調製した；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ４１７［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１００】
工程２．５−｛５−［１−（２−メトキシエチル）ピペリジン−４−イル］−３−ピリジン−４−イルフラン−２−イル｝インダン−１−オンオキシム
工程１の生成物から、実施例１工程３に記載の方法を用いて、標題化合物（０．０８０ｇ、９８％）を調製した；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ４３２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１０１】
以下の実施例を、実施例４０工程４の生成物から、実施例４１に記載の一般的な２工程の方法により調製した。
【表６】
2005504794.tif 000027
【０１０２】
実施例４５：｛４−［５−（１−ヒドロキシイミドインダン−５−イル）−４−ピリジン−４−イルフラン−２−イル］ピペリジン−１−イル｝アセトニトリル
【化２０】
2005504794.tif 000028
乾燥ジクロロメタン（１０ｍｌ）および乾燥ジメチルホルムアミド（０．５ｍｌ）中の実施例４０工程５の生成物（０．１３ｇ、０．３５ｍｍｏｌ）の溶液を、ブロモアセトニトリル（０．０２７ｍｌ、０．３９ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（０．０５４ｍｌ、０．３９ｍｍｏｌ）で処理し、外界温度で一晩撹拌した。粗反応混合物をＳＣＸカラムで、メタノール、ついで、０．８８０アンモニア／メタノール（１：１０）の混合物で溶出して精製した。塩基性のフラクションを合して、減圧下で濃縮し、ジエチルエーテルでトリチュレートして標題化合物（０．１３ｇ、９０％）を得た；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ４１３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１０３】
実施例４６：５−｛５−［１−（２−ヒドロキシエチル）ピペリジン−４−イル］−３−ピリジン−４−イルフラン−２−イル｝インダン−１−オンオキシム
【化２１】
2005504794.tif 000029
工程１．５−（５−｛１−［２−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシラニルオキシ）エチル］ピペリジン−４−イル｝−３−ピリジン−４−イルフラン−２−イル）インダン−１−オン
実施例４０工程４の生成物およびｔ−ブチルジメチルシラニルオキシアセトアルデヒドから、実施例３２の方法を用いて標題化合物（０．１４ｇ、６５％）を調製した；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ５１７［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１０４】
工程２．５−｛５−［１−（２−ヒドロキシエチル）ピペリジン−４−イル］−３−ピリジン−４−イルフラン−２−イル）インダン−１−オン
乾燥テトラヒドロフラン（５ｍｌ）中の工程１の生成物（０．１３５ｇ、０．２６ｍｍｏｌ）の溶液を、０℃に冷却し、テトラブチルアンモニウムフルオライド（テトラヒドロフラン中の１．０Ｍの溶液、０．０７８ｍｌ、０．７８ｍｍｏｌ）で処理し、室温に加温した。２時間撹拌した後、反応混合物を水で希釈し、ジクロロメタンで抽出した。ついで、有機層を飽和食塩水で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）し、減圧下で蒸発させた。残渣を、０．８８０アンモニア／メタノール／ジクロロメタン（０．５：４．５：９５）で溶出するシリカゲルのクロマトグラフィーに付して、標題化合物（０．０２７ｇ、２６％）を得た；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ４０３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１０５】
工程３．５−｛５−［１−（２−ヒドロキシエチル）ピペリジン−４−イル］−３−ピリジン−４−イルフラン−２−イル｝インダン−１−オンオキシム
工程２の生成物から、実施例１工程３の方法を用いて標題化合物（０．０８０ｇ、７７％）を調製した；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ４１８［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１０６】
実施例４７：５−｛５−［１−（２−モルホリン−４−イルエタノイル）ピペリジン−４−イル］−３−ピリジン−４−イルフラン−２−イル｝インダン−１−オンオキシム
【化２２】
2005504794.tif 000030
工程１．５−｛５−［１−（２−クロロエタノイル）ピペリジン−４−イル］−３−ピリジン−４−イルフラン−２−イル｝インダン−１−オン
乾燥ジクロロメタン（１０ｍｌ）中の実施例４０工程４の生成物（０．９ｇ、２．５ｍｍｏｌ）の溶液を０℃に冷却し、トリエチルアミン（０．３８ｍｌ、２．７ｍｍｏｌ）およびクロロアセチルクロライド（０．２２ｍｌ、２．７ｍｍｏｌ）で処理し、１０時間外界温度で撹拌した。反応混合物をジクロロメタンに注ぎ、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液および飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）し、減圧下で蒸発させて、標題化合物（０．９７ｇ、８９％）を得た；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ４３５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１０７】
工程２．５−｛５−［１−（２−モルホリン−４−イルエタノイル）ピペリジン−４−イル］−３−ピリジン−４−イルフラン−２−イル｝インダン−１−オン
乾燥ジクロロメタン（３ｍｌ）中の工程１の生成物（０．１５ｇ、０．３５ｍｍｏｌ）の溶液を、モルホリン（０．０６０ｍｌ、０．７６ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（０．１１ｍｌ、０．７６ｍｍｏｌ）で処理し、外界温度で１８時間撹拌した。反応混合物を、ジクロロメタンで希釈し、水および飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）し、減圧下で蒸発させた。残渣を、０．８８０アンモニア／メタノール／ジクロロメタン（０．５：４．５：９５）の混合物で溶出するシリカゲルのクロマトグラフィーを標題化合物（０．０５ｇ、２９％）として得た；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ４８６［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１０８】
工程３．５−｛５−［１−（２−モルホリン−４−イルエタノイル）ピペリジン−４−イル］−３−ピリジン−４−イルフラン−２−イル｝インダン−１−オンオキシム
工程２の生成物から、実施例１工程３の方法を用いて標題化合物（０．０３６ｇ、７２％）を調製した；1H NMR (CDCl3) 主異性体 10.96 (1H, s), 8.55 (2H, d, J 7 Hz) 7.52 (1H, d, J 8Hz), 7.47 (1H, s), 7.37 (2H, d, J 7Hz), 7.30 (1H, d, J 8Hz), 6.57 (1H, s), 4.35 (1H, br d, J 13 Hz), 4.09 (1H, br d, J 13 Hz), 3.57 (5H, m), 3.47-2.63 (8H, m), 2.42 (4H, m), 2.03 (2H, m), 1.80-1.35 (2H, m)。
【０１０９】
実施例４８：５−｛５−［１−（２−ピペリジン−１−イルエタノイル）ピペリジン−４−イル］−３−ピリジン−４−イルフラン−２−イル｝インダン−１−オンオキシム
【化２３】
2005504794.tif 000031
工程１．５−｛５−［１−（２−ピペリジン−１−イルエタノイル）ピペリジン−４−イル］−３−ピリジン−４−イルフラン−２−イル｝インダン−１−オン
実施例４７工程１の生成物およびピペリジンから、実施例４７工程２の方法を用いて標題化合物（０．０３ｇ、１８％）を調製した；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ４８４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１１０】
工程２．５−｛５−［１−（２−ピペリジン−１−イルエタノイル）ピペリジン−４−イル］−３−ピリジン−４−イルフラン−２−イル｝インダン−１−オンオキシム
工程１の生成物から、実施例１工程３の方法を用いて標題化合物（０．０３ｇ、１００％）を調製した；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ４９９［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１１１】
実施例４９：５−｛５−［１−（２−ピペラジン−１−イルエタノイル）ピペリジン−４−イル］−３−ピリジン−４−イルフラン−２−イル｝インダン−１−オンオキシム
【化２４】
2005504794.tif 000032
工程１．５−｛５−［１−（２−ピペラジン−１−イルエタノイル）ピペリジン−４−イル］−３−ピリジン−４−イルフラン−２−イル｝インダン−１−オン
実施例４７工程１の生成物およびピペラジンから、実施例４７工程２の方法を用いて標題化合物（０．０４７ｇ、１７％）を調製した；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ４８５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１１２】
工程２．５−｛５−［１−（２−ピペラジン−１−イルエタノイル）ピペリジン−４−イル］−３−ピリジン−４−イルフラン−２−イル｝インダン−１−オンオキシム
工程１の生成物から、実施例１工程３の方法を用いて、標題化合物（０．０４３ｇ、８６％）を調製した；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ５００［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１１３】
実施例５０．５−（５−ピペリジン−３−イル−２−ピリジン−４−イル−フラン−３−イル）−インダン−１−オンオキシム
【化２５】
2005504794.tif 000033
工程１．３−（メトキシ−メチル−カルバモイル）−ピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル
ジメチルホルムアミド（５７ｍｌ）中のピペリジン−１，３−ジカルボン酸１−ベンジルエステル（G. Taylorら、Tetrahedron Lett., 1996, 37, 8, 1297）（１５ｇ、５７ｍｍｏｌ）の溶液を、１，１’−カルボニルジイミダゾール（１５．７ｇ、９７ｍｍｏｌ）で処理した。３０分間撹拌した後、Ｎ，Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩（１０．０ｇ、１０２ｍｍｏｌ）を加え、混合物をさらに１時間撹拌した。反応混合物を２Ｍの塩酸に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。有機層を、連続して、水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、水およびブラインで洗浄し、乾燥し、減圧下で濃縮して、標題化合物（１６．９ｇ、９７％）を得た；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ３０７［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１１４】
工程２．３−アセチル−ピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル
テトラヒドロフラン（３００ｍｌ）中の工程１の生成物（１６．８５ｇ、５５ｍｍｏｌ）の冷溶液を、−１０℃で臭化メチルマグネシウム（３７ｍｌ、３Ｍのジエチルエーテル中溶液、１１１ｍｍｏｌ）で処理した。この反応物を室温に加温し、さらに３０分間撹拌した。ついで、混合物を２Ｍの塩酸中に注ぎ、生成物を酢酸エチルに抽出した。有機層を水およびブラインで洗浄し、乾燥し、濃縮して標題化合物（１３．４ｇ、９３％）を得た；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ２８４［Ｍ＋Ｎａ］＋。
【０１１５】
工程３．３−［（Ｅ）−３−（１−メトキシイミド−インダン−５−イル）−アラノイル］−ピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル
工程２（８．６５ｇ、３３．１ｍｍｏｌ）の生成物から、実施例３１工程２の方法を用いて標題化合物（６．２０ｇ、４３％）を調製した；ＭＳ（ＥＳ−）ｍ／ｅ４３１［Ｍ−Ｈ］−。
【０１１６】
工程４．３−［３−（１−メトキシイミド−インダン−５−イル）−４−オキソ−４−ピリジン−４−イル−ブタノイル］−ピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル
実施例３１、工程３の方法により工程３の生成物から標題化合物（５．２ｇ、６７％）を調製した；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ５４０［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１１７】
工程５．３−［４−（１−オキソ−インダン−５−イル）−５−ピリジン−４−イル−フラン−２−イル］−ピペリジン−１−カルボン酸ベンジルエステル
１，４−ジオキサン（１００ｍｌ）およびアセトン（２５０ｍｌ）中の工程４の生成物（４．０ｇ、７．４２ｍｍｏｌ）を、５Ｍの塩酸（５０ｍｌ）で処理し、混合物を９０℃で５時間加熱した。室温に冷却した後、反応物を濃縮し、再びクロロホルムおよび飽和炭酸水素ナトリウム水溶液中に溶解した。有機相を乾燥し、減圧下で濃縮し、酢酸エチル／ジクロロメタン（４：６）で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物（２．５０ｇ、６９％）を得た；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ４９３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１１８】
工程６．５−（５−ピペリジン−３−イル−２−ピリジン−４−イル−フラン−３−イル）−インダン−１−オン
エタノール（１００ｍｌ）およびシクロヘキサン（６０ｍｌ）中の工程５の生成物（２．３ｇ、４．６７ｍｍｏｌ）の溶液を、１０％の炭素担持パラジウム（０．８ｇ）で処理し、９０℃で１．５時間加熱した。室温に冷却した後、反応混合物をセライトを通して濾過し、エタノールで数回抽出した。濾液を減圧下で蒸発させ、残渣を、クロロホルム／エタノール／０．８８０アンモニア溶液（９５：４．５：０．５）、ついで、（９０：９：１）で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物（１．４７ｇ、８８％）を得た；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ３５９［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１１９】
工程７．５−（５−ピペリジン−３−イル−２−ピリジン−４−イル−フラン−３−イル）−インダン−１−オンオキシム
工程６の生成物から、実施例１工程３に記載の方法を用いて標題化合物を調製した；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ３７４［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１２０】
実施例５１．５−［５−（１−メチル−ピペリジン−３−イル）−２−ピリジン−４−イル−フラン−３−イル］−インダン−１−オンオキシム
【化２６】
2005504794.tif 000034
工程１．５−［５−（１−メチル−ピペリジン−３−イル）−２−ピリジン−４−イル−フラン−３−イル］−インダン−１−オン
アセトン（１０ｍｌ）中の実施例５０工程６の生成物（１００ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）の溶液を、炭酸カリウム（１１６ｍｇ、０．８４ｍｍｏｌ）、ついで、ヨウ化メチル（０．０１９ｍｌ、０．３１ｍｍｏｌ）で、０℃で処理した。この反応物を室温に加温し、さらに１８時間撹拌した。混合物をクロロホルムで希釈し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥し、減圧下で濃縮した。残渣を、クロロホルム／エタノール／０．８８０アンモニア溶液（９８：１．８：０．２）で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物（４０ｍｇ、３８％）を得た；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ３７３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１２１】
工程２．５−［５−（１−メチル−ピペリジン−３−イル）−２−ピリジン−４−イル−フラン−３−イル］−インダン−１−オンオキシム
工程１の生成物から、実施例１工程３に記載の方法を用いて標題化合物を調製した；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ３８８［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１２２】
実施例５２．Ｎ−ヒドロキシ−２−｛３−［４−（１−ヒドロキシイミド−インダン−５−イル）−５−ピリジン−４−イル−フラン−２−イル］−ピペリジン−１−イル｝−アセとアミジン
【化２７】
2005504794.tif 000035
工程１．｛３−［４−（１−オキソ−インダン−５−イル）−５−ピリジン−４−イル−フラン−２−イル］−ピペリジン−１−イル｝−アセトニトリル
ジクロロメタン（１０ｍｌ）中の実施例５０工程６の生成物（１５０ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）の溶液を、トリエチルアミン（０．０６４ｍｌ、０．４６ｍｍｏｌ）およびブロモアセトニトリル（５５ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ）で処理した。反応物を室温で１８時間撹拌し、ついで、クロロホルムで希釈し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄し、乾燥し、減圧下で濃縮した。残渣を、クロロホルム／エタノール／０．８８０アンモニア溶液（９８：１．８：０．２）で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物（１２６ｍｇ、７６％）を得た；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ３９８［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１２３】
工程２．Ｎ−ヒドロキシ−２−｛３−［４−（１−ヒドロキシイミド−インダン−５−イル）−５−ピリジン−４−イル−フラン−２−イル］−ピペリジン−１−イル｝−アセとアミジン
工程１の生成物から、実施例１工程３に記載の方法により標題化合物を調製した；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ４４６［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１２４】
実施例５３．５−｛５−［１−（２−メトキシ−エチル）−ピペリジン−３−イル］−２−ピリジン−４−イル−フラン−３−イル｝−インダン−１−オンオキシム
【化２８】
2005504794.tif 000036
工程１．５−｛５−［１−（２−メトキシ−エチル）−ピペリジン−３−イル］−２−ピリジン−４−イル−フラン−３−イル｝−インダン−１−オン
実施例５０工程６の生成物およびメトキシアセトアルデヒド｛E.M. Actonら、J.Med.Chem., 1986, 29, 2074｝から、実施例３２に記載の方法を用いて標題化合物を調製した；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ４１７［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１２５】
工程２．５−｛５−［１−（２−メトキシ−エチル）−ピペリジン−３−イル］−２−ピリジン−４−イル−フラン−３−イル｝−インダン−１−オンオキシム
工程１の生成物から、実施例１工程３に記載の方法を用いて標題化合物を調製した；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ４３２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１２６】
実施例５４．５−［５−（１−シクロプロピルメチル−ピペリジン−３−イル）−２−ピリジン−４−イル−フラン−３−イル］−インダン−１−オンオキシム
【化２９】
2005504794.tif 000037
工程１．５−［５−（１−シクロプロピルメチル−ピペリジン−３−イル）−２−ピリジン−４−イル−フラン−３−イル］−インダン−１−オン
実施例５０工程６の生成物およびシクロプロパンカルボキシアルデヒドから、実施例３２に記載の方法を用いて標題化合物を調製した；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ４１３［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１２７】
工程２．５−［５−（１−シクロプロピルメチル−ピペリジン−３−イル）−２−ピリジン−４−イル−フラン−３−イル］−インダン−１−オンオキシム
工程１の生成物から、実施例１工程３に記載の方法を用いて標題化合物を調製した。；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ４２８［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１２８】
実施例５５：５−｛５−［１−（２−モルホリン−４−イル−エタノイル）−ピペリジン−３−イル］−２−ピリジン−４−イル−フラン−３−イル｝−インダン−１−オンオキシム
【化３０】
2005504794.tif 000038
工程１．５−｛５−［１−（２−クロロ−エタノイル）−ピペリジン−３−イル］−２−ピリジン−４−イル−フラン−３−イル｝−インダン−１−オン
乾燥ジクロロメタン中の実施例５０工程６の生成物（８００ｍｇ、２．２３ｍｍｏｌ）の溶液を０℃に冷却し、トリエチルアミン（０．３３ｍｌ、２．３７ｍｍｏｌ）およびクロロアセチルクロライド（０．１９ｍｌ、２．３８ｍｍｏｌ）で処理した。反応物を室温に加温し、ジクロロメタン中に注ぎ、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液およびブラインで洗浄し、乾燥し、減圧下で濃縮した。残渣を、クロロホルム／エタノール／０．８８０アンモニア溶液（９８：１．８：０．２）で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物（７００ｍｇ、７２％）を得た；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ４３５／４３７［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１２９】
工程２．５−｛５−［１−（２−モルホリン−４−イル−エタノイル）−ピペリジン−３−イル］−２−ピリジン−４−イル−フラン−３−イル｝−インダン−１−オン
乾燥ジクロロメタン（１０ｍｌ）中の工程１の生成物（１４０ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）の溶液を、モルホリン（０．０３１ｍｌ、０．３５ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（０．０４９ｍｌ、０．３５ｍｍｏｌ）で処理し、３時間加熱還流した。反応混合物をジクロロメタンで希釈し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄した。有機相を乾燥し、減圧下で濃縮し、ついで、クロロホルム／エタノール／０．８８０アンモニア溶液（９８：１．８：０．２）で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物（８５ｍｇ、５５％）を得た；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ４８６［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１３０】
工程３．５−｛５−［１−（２−モルホリン−４−イル−エタノイル）−ピペリジン−３−イル］−２−ピリジン−４−イル−フラン−３−イル｝−インダン−１−オンオキシム
工程２の生成物から、実施例１工程３に記載の方法を用いて標題化合物を調製した；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ５０１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１３１】
以下の実施例を、実施例５５工程１の生成物から、実施例５５工程２および３に記載の一般的な２工程の方法を用いて調製した。
【表７】
2005504794.tif 000039
【０１３２】
以下の実施例を、実施例２９の生成物から、実施例３２に記載の一般的方法を用いて調製した。
【表８】
2005504794.tif 000040
【０１３３】
実施例６２：５−（５−ヒドロキシメチル−２−ピリジン−４−イル−フラン−３−イル）インダン−１−オンオキシム
【化３１】
2005504794.tif 000041
工程１．（４，５−ジブロモフラン−２−イル）−メタノール
テトラヒドロフラン（２００ｍｌ）中の４，５−ジブロモフロ酸（１３．４９ｇ、５０ｍｍｏｌ）およびＮ−メチルモルホリン（６．０５ｍｌ、５５ｍｍｏｌ）の溶液を、クロロギ酸イソブチル（６．８１ｍｌ、５３ｍｍｏｌ）で処理した。０℃で４５分間撹拌した後、ボロヒドリドナトリウム（１１．３５ｇ、３００ｍｍｏｌ）を、ついで、飽和重炭酸ナトリウム溶液（２ｍｌ）を滴下し、混合物を１６時間にわたって室温に戻した。この溶液を減圧下で蒸発させて、固体残渣を酢酸エチル中で撹拌した。固体を濾過し、酢酸エチルで洗浄した。合した濾液を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下で濃縮した。残渣を、ジクロロメタンで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題生成物を無色の固体（１０ｇ、７８％）として得た；1H NMR (CDCl3) 6.38 (1H, s), 4.56 (2H, d, J 6.4 Hz), 1.80 (1H, t, J 6.4 Hz)。
【０１３４】
工程２．（４−ブロモ−５−ピリジン−４−イル−フラン−２−イル）−メタノール
トルエン（５０ｍｌ）中の工程１からの生成物（２．５５ｇ、１０ｍｏｌ）、４−ピリジルトリブチルスタナン（３．８６ｇ、１０ｍｍｏｌ）およびビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）クロライド（３５１ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）を１８時間加熱還流した。冷却した後、溶液を減圧下で濃縮し、残渣を、ジクロロメタン中の５％のメタノールで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題生成物（７３７ｍｇ）を得、これを直接工程３に用いた；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ２５４、２５６。
【０１３５】
工程３．５−（５−ヒドロキシメチル−２−ピリジン−４−イル−フラン−３−イル）インダン−１−オン
工程２からの生成物（７３７ｍｇ、２．９ｍｍｏｌ）、５−（４，４，５，５−テトラメチル−［１，３，２］−ジオキサボロラン−２−イル）インダノン（０．２５ｇ、１ｍｍｏｌ）（ＷＯ９８／４５２６５）（７５０ｍｇ、２．９ｍｍｏｌ）、酢酸カリウム（８５４ｍｇ、８．７ｍｍｏｌ）、トリフェニルホスフィン（７９ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）および酢酸パラジウム（ＩＩ）（３４ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）を、１：１：１のエタノール：水：Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１０ｍｌ）中で、９５℃で１６時間加熱した。冷却した後、溶液を酢酸エチル／水で分配し、水相を酢酸エチル（×３）で抽出した。合した有機抽出物を、水（×３）、ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下で濃縮した。残渣を、酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題生成物（３８３ｍｇ、４３％）を得た；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ３０６［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１３６】
工程４．５−（５−ヒドロキシメチル−２−ピリジン−４−イル−フラン−３−イル）インダン−１−オンオキシム
工程３の生成物（１５０ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）を、５０％の水性ヒドロキシルアミン（１ｍｌ）を含有するエタノール（１０ｍｌ）中で２時間加熱還流した。溶液を減圧下で濃縮し油を得、１：９：９０の．８８０アンモニア：エタノール：ジクロロメタンで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題生成物（１２８ｍｇ、８１％）を得た；ＭＳ（ＥＳ＋）ｍ／ｅ３２１［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１３７】
本願は上記した特定のおよび好ましいサブグループのすべての組み合わせを含むことは理解できるだろう。
【０１３８】
生物学的実施例
Ｂ−Ｒａｆ阻害剤としての式（Ｉ）で示される化合物の活性は下記のインビトロアッセイにより測定することができる：
【０１３９】
蛍光異方性キナーゼ結合アッセイ
キナーゼ酵素、蛍光リガンドおよび可変の濃度の試験化合物を一緒にインキュベートして、試験化合物非存在下で蛍光リガンドが有意に（＞５０％）酵素結合し、十分な濃度（＞１０ｘＫｉ）の強力な阻害剤の存在下で未結合蛍光リガンドの異方性が結合した蛍光リガンドの異方性と適度に異なるような条件下で、熱力学的平衡にする。
好ましくは、キナーゼ酵素の濃度は≧１ｘＫｆであるべきである。必要とされる蛍光リガンドの濃度は、使用する装置、蛍光および物理化学的特性に依存するだろう。使用濃度は、キナーゼ酵素の濃度よりも低くなくてはならず、好ましくは、キナーゼ酵素の濃度の半分未満である。典型的なプロトコールは：
すべての化合物を、アッセイに関して、連続して、ＤＭＳＯにて希釈し、ついで、５０ｍＭのＨＥＰＥＳ、薬学的ｐＨ７．５、１ｍＭのＣＨＡＰＳ、１０ｍＭのＭｇＣｌ２の比較のためのバッファーに一工程にて希釈する。
Ｂ−Ｒａｆ酵素濃度：１ｎＭ
蛍光リガンド濃度：０．５ｎＭ
試験化合物濃度：０．５ｎＭ〜１００μＭ
成分を、平衡に達するまで（３時間以上、３０時間まで）、ＬＪＬ ＨＥ ３８４タイプＢ黒色マイクロタイタープレートで１０μｌの最終体積でインキュベートする。
蛍光異方性をＬＪＬ Ａｃｑｕｅｓｔリーダーで読み取る。
【０１４０】
定義：Ｋｉ＝阻害剤結合に関する解離定数
Ｋｆ＝蛍光リガンド結合に関する解離定数
蛍光リガンドは下記化合物である：
【化３２】
2005504794.tif 000042
これは５−［２−（４−アミノメチルフェニル）−５−ピリジン−４−イル−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］−２−クロロフェノールおよびローダミングリーンから誘導される。
本発明の化合物は１μＭ未満のＫｄを有する。
【０１４１】
Ｒａｆキナーゼアッセイ（アッセイ１）
ヒト組換えＢ−Ｒａｆ蛋白の活性は、公知のＢ−Ｒａｆの生理的基質である、組換えＭＡＰキナーゼキナーゼ（ＭＥＫ）に放射性標識ホスフェートを組み込んでアッセイすることにより、インビトロにて評価した。触媒活性ヒト組換えＢ−Ｒａｆ蛋白を、ヒトＢ−Ｒａｆ組換えバキュロウイルス発現ベクターに感染したｓｆ９昆虫細胞から精製することにより得た。すべての基質のリン酸化がＢ−Ｒａｆ活性から生じることを確実にするために、触媒的に不活性な形態のＭＥＫを利用した。この蛋白は、グルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼとの融合蛋白として変異不活性ＭＥＫ変異体（ＧＳＴ−ｋｄＭＥＫ）を発現する細菌細胞から精製した。
【０１４２】
方法：Ｂ−Ｒａｆ触媒活性の標準的なアッセイ条件は、全反応容量３０μｌ中３μｇのＧＳＴ−ｋｄＭＥＫ、１０ｕＭのＡＴＰおよび２ｕＣｉ３３Ｐ−ＡＴＰ、５０ｍＭのＭＯＰＳ、０．１ｍＭのＥＤＴＡ、０．１Ｍのシュークロース、１０ｍＭのＭｇＣｌ２プラス０．１％のジメチルスルホキシド（適宜、化合物を含む）を用いた。反応物を２５℃で９０分間インキュベートし、エチレンジアミンテトラ酢酸（ＥＤＴＡ）を添加することにより反応を停止させ、最終濃度５０μＭとした。１０μｌの反応物をＰ３０ホスホセルロースペーパーにスポットし、風乾した。１０％の氷冷トリクロロ酢酸、０．５％のリン酸で４回洗浄した後、ペーパーを風乾し、ついで、液体シンチラントを添加し、シンチレーションカウンターで放射活性を測定した。
【０１４３】
結果：実施例の化合物は、ＧＳＴ−ｋｄＭＥＫ基質のＢ−Ｒａｆ媒介リン酸化の阻害に効果的であり、３μＭ未満のＩＣ５０を有することが見出された。
【０１４４】
また、Ｒａｆ阻害剤としての化合物の活性は、ＷＯ９９／１０３２５；McDonald, O.B., Chen, W.J., Ellis, B., Hoffman, C., Overton, L., Rink, M., Smith, A., Marshall, C.J. and Wood, E.R. (1999) A scintillation proximity assay for the Raf/MEK/ERK kinase cascade: high throughput screening and identification of selective enzyme inhibitors, Anal. Biochem. 268: 318-329 and AACR meeting New Orleans 1998 Poster 3793に記載のアッセイにより測定することができる。
【０１４５】
Ｂ−Ｒａｆ阻害剤の神経保護特性は、下記のインビトロアッセイにより測定することができる：
ラット海馬スライス培養物におけるＢ−Ｒａｆ阻害剤の神経保護特性
器官型培養物は、解離した神経細胞培養物と酸素およびグルコース喪失（ＯＧＤ）のインビボモデルの間の中間体を提供する。大部分のグリア−ニューロン相互作用およびニューロン回路は、培養海馬スライスにおいて維持されており、それにより、インビボ状態に類似したモデルにおいて異なる細胞型間の死滅のパターンの研究を容易にする。これらの培養物は、遅延細胞損傷および傷害後２４時間またはそれ以上時間後の死滅を研究することを可能にし、培養条件の長期間の変化の結果の評価を可能にする。多くの研究所が、海馬の器官型培養物におけるＯＧＤに対する遅延神経損傷を報告している（Vornovら、Stroke, 1994, 25, 57-465; Newellら、Brain Res., 1995, 676, 38-44）。ＥＡＡアンタゴニスト（Strasserら、Brain Res., 1995, 687, 167-174）、Ｎａチャンネル遮断剤（Taskerら、J. Neurosci., 1992, 12, 98-4308）およびＣａチャンネル遮断剤（Pringleら、Stroke, 1996, 7, 2124-2130）を含む、いくつかの群の化合物は、このモデルにおいて保護することが示されている。現在まで、このモデルにおいて神経細胞の死滅における細胞内キナーゼ媒介シグナリング経路の役割はあまり知られていない。
【０１４６】
方法：器官型海馬スライス培養物をStoppiniら、J. Neurosci. Methods, 1995, 37, 173-182の方法を用いて調製した。つまり、生後７〜８日目のスプレーグー・ドーリー・ラットの海馬から調製した４００ミクロンの断片を、半多孔性膜上で９〜１２日間培養する。ついで、ＯＧＤを、嫌気性チャンバー中、血清およびグルコース不含培地中で４５分間インキュベートすることにより誘発する。ついで、分析の前に、培養物を空気／ＣＯ２インキュベーターに２３時間戻し、ついで、分析を行なう。ヨウ化プロピジウム（ＰＩ）を、細胞死の指標として使用する。ＰＩはニューロンに対して非毒性であり、細胞生存度を確認するために多くの研究において用いられている。損傷したニューロンに中にＰＩが侵入し、核酸に結合する。結合ＰＩは、５４０ｎｍで励起された場合、６３５ｎｍでの発光が増加する。一のＰＩ蛍光イメージおよび一の白色光イメージを得、細胞死の割合を分析する。領域ＣＡ１の面積を白色光イメージから測定し、ＰＩイメージに重ねる。ＰＩシグナルは閾値であり、ＰＩ損傷の面積はＣＡ１面積のパーセンテージとして表される。ＰＩ蛍光と組織学的に確認される細胞死との間の相互関係は、クレシルファストバイオレットを用いたＮｉｓｓｉ染色により以前に確認されている（Newellら、J. Neurosci., 1995, 15, 7702-7711）。
【０１４７】
本発明の化合物の抗癌特性は、以下のインビトロアッセイにより測定することができる：
メチレンブルー成長阻害アッセイ（アッセイ２）
正常なヒト包皮線維芽細胞（ＨＦＦ）、ヒト黒色腫（Ａ３７５Ｐ、ＳＫＭＥＬ２、ＳＫＩＭＥＬ３）、結腸癌（Ｃｏｌｏ２０５）を、以下の成長培地：Ａ３７５Ｐ、Ｃｏｌｏ２０５、すなわち、１０％のウシ胎仔血清（ＦＢＳ）を含有するRoswell Park Memorial Institute（ＲＰＭＩ）１６４０（Life Technologies 22400-089）；ＨＦＦ、すなわち、１０％のＦＢＳを含有するダルベッコ修飾イーグル培地（ＤＭＥＭ）（Life Technologies 12320-032）；ＳＫＭＥＬ２およびＳＫＭＥＬ３、すなわち、１Ｘ非必須アミノアミノ酸（Life Technologies 11140-050）および１０％のFBSを含有する最小必須培地（ＭＥＭ、Life Technologies 11095-080）てに培養した。細胞を、０．２５％のトリプシン／１ｍＭのＥＤＴＡを用いて採取し、血球計を用いて計数し、９６ウェル組織培養プレート（Ｆａｌｃｏｎ３０７５）中の１００マイクロリットルの適当な培地で、下記の密度で平板培養した：ＨＦＦおよびＡ３７５Ｐは、５，０００細胞／ウェル；他のすべての細胞株は、１０，０００細胞／ウェル。翌日、化合物を、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）中の１０ｍＭの貯蔵溶液からの１００マイクログラム／ｍｌのゲンタマイシンを含有するＲＰＭＩ中に、最終必要濃度の２倍の濃度で希釈した。ウェルあたり１００マイクロリットルのこれらの希釈液を、細胞プレート上の１００マイクロリットルの培地に加えた。０．６％のＤＭＳＯを含有するＲＰＭＩを対照ウェルに加えた。化合物を希釈した。すべてのウェルのＤＭＳＯの最終濃度は０．３％であった。細胞を３７℃、５％のＣＯ２下で３日間インキュベートした。培地を吸引して除去した。細胞バイオマスを、ウェルあたり９０μｌのメチレンブルー（Sigma M9140、５０：５０のエタノール：水中０．５％）で細胞を染色し、少なくとも３０分間室温でインキュベートすることにより評価した。染色液を除去し、プレートを、脱イオン水に浸漬することにより洗浄し、風乾した。細胞から染色液を分離するために、１００μｌの可溶化溶液を加え（リン酸緩衝化生理食塩水（ＰＢＳ）中の１％のＮ−ラウロイルサルコシンナトリウム塩、Sigma L5125）、プレートを室温で３０分間インキュベートした。６２０ｎＭでの光学密度をマイクロプレートリーダーで測定した。細胞成長のパーセント阻害を、ビヒクル処理した対照ウェルに対して計算した。細胞成長の５０％を阻害する化合物の濃度（ＩＣ５０）を、非線形回帰法（Levenberg-Marquardt法）および式、ｙ＝Ｖｍａｘ＊（１−（ｘ／（Ｋ＋ｘ）））＋Ｙ２（式中、「Ｋ」はＩＣ５０と等価であった）を用いて補間した。
【０１４８】
哺乳類の培養細胞に関するＸＴＴ７２時間成長阻害プロトコール（アッセイ３）
ヒト二倍体包皮線維芽細胞（ＨＦＦ）または結腸癌（Ｃｏｌｏ２０１）細胞を、１０％のウシ胎仔血清（ＦＢＳ）および抗生物質ペニシリン（１００ユニット／ｍｌ）およびストレプトマイシン（１００マクログラム／ｍｌ）（Invitrogen／Life Technologies）を含有するダルベッコ修飾イーグル培地（ＤＭＥＭ）（Invitrogen／Life Technologies）で成長させた。７５ｃｍ２プラスチックフラスコ中で、湿った５％のＣＯ２インキュベーター中３７℃で成長させた。細胞を、０．２５％のトリプシン／１ｍＭのエチレンジアミンテトラ酢酸（ＥＤＴＡ）を用いて採取し、成長培地中に再懸濁し、血球計を用いて計数した。平底９６ウェルプレートに、トリプシン処理した指数関数的に成長する培養物からの２００μｌの容量中２×１０３細胞／ウェルで接種した。「ブランク」ウェルになんら加えることなく成長培地を添加した。細胞を一晩インキュベートして、付着を可能にした。
翌日、細胞を含有するウェルの培地を、１８０マイクロリットルの新しい培地と交換した。ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）中に溶解した化合物の貯蔵溶液からの試験化合物の適当な希釈液をウェルに加えた。すべてのウェルにおいて最終ＤＭＳＯ濃度は０．２％であった。細胞と化合物を、通常の成長条件下３７℃でさらに７２時間インキュベートした。ついで、細胞を、標準的なＸＴＴ／ＰＭＳ＊を用いて生存度に関してアッセイした。５０マイクロリットルのＸＴＴ／ＰＭＳ溶液を各々のウェルに加え、プレートを３７℃で９０分間インキュベートした。ついで、４５０ｎＭでの吸光度を、９６ウェルＵＶプレートリーダー（Molecular Devices）で測定した。これらの条件下で、未処理の対照細胞の４５０ｎＭでの吸光度は、少なくとも１．０光学密度ユニット／ｍｌであった。各々のウェルの細胞のパーセント生存率をこれらのデータ（バックグラウンド吸光度に関して修正した）から計算した。それは、
１００×（Ａ４５０試験ウェル／Ａ４５０未処理対照ウェル）
（Ａ４５０は３回の測定の平均である）
に等しい。ＩＣ５０は、濃度対パーセント生存率のプロットから測定されるように、細胞生存率を対照（未処理）生存率の５０％に減少させる化合物の濃度である。
＊ＸＴＴ／ＰＭＳ溶液の調製（アッセイの直前）
各々の９６ウェルプレートに関して、プレートあたり８ｍｇのＸＴＴ（２，３−ビス［２−メトキシ−４−ニトロ−５−スルホフェニル］−２Ｈ−テトラゾリウム−５−カルボキサニリド）（Sigma Chemical Co.）を１００μｌのＤＭＳＯ中に溶解した。３．９ｍｌのＨ２Ｏを加えてＸＴＴを溶解し、冷凍したアリコート貯蔵溶液（３．３ｍｌのリン酸緩衝生理食塩水（Invitrogen／Life Technologies）中の１０ｍｇのＰＭＳ）からの２０μｌのＰＭＳ（フェナジンメトサルフェート、Sigma Chemical Co.）貯蔵用液（３０ｍｇ／ｍｌ）を加えた(これらの貯蔵液は使用まで−２０℃で慣用的に冷凍される）。
【０１４９】
正常なヒト包皮線維芽細胞（ＨＦＦ）は、阻害されないまたはそれほど感受性でない対照正常細胞株である。
【表９】
2005504794.tif 000043
Ａ３７５、Ｃｏｌｏ２０５およびＳＫＭＥＬは、文献においてＲａｓ状態に関して野生型（ｗｔ）として報告されている。
Ｖ５９９Ｅは、細胞株が活性化ＢＲａｆ変異体（Ｖ５９９Ｅ）を有することを示す。
ＮＤは測定していないことを示す。
【０１５０】
特記しない限り、明細書および特許請求の範囲の全体にわたって、「含む」なる語は、記載の整数値または工程または整数値の群を意味するものであるが、他のいずれの整数値または工程あるいは整数値または工程の群を排除するものではないことは理解できるだろう。
【０１５１】
本願明細書およびクレームは、いずれの後願に対して優先権の基礎として用いることができる。かかる後願のクレームは、本明細書に記載されたいずれの特徴またはその組み合わせに関してもよい。それらは組成物、方法または使用の形態であってもよく、例えば、本願のクレームに限定されることなしにこれを含みうる。
【国際公開パンフレット】
2005504794.tif 000046
2005504794.tif 000047
2005504794.tif 000048
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【国際調査報告】
2005504794.tif 000090
2005504794.tif 000091