(57)【要約】  （＋）パンクラチスタチンをテトラアセテイトで選択的に保護し、保護されたパンクラチスタチンをジベンジルクロロフォスフェイトでリン酸化し、その後、２当量のナトリュームメトキシドと反応させてジナトリューム（＋）パンクラチスタチンフォスフェイトを生じながら、ナトリュームメトキシドでアセテイトとベンジル保護基を分割することによってパンクラチスタチンプロドラッグを合成する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
（＋）パンクラチスタチンをテトラアセテイトで選択的に保護し、その後該保護されたパンクラチスタチンをジベンジルクロロフォスフェイトでリン酸化し、その後、２当量のナトリュームメトキシドと反応させてジナトリューム（＋）パンクラチスタチンフォスフェイトを生じながら、ナトリュームメトキシドでアセテイトとベンジル保護基を分割することから成るフォスフェイトプロドラッグを合成する方法。
【請求項２】
アセテイトとベンジル保護基は室温において分割される請求項１の方法。
【請求項３】
ナトリュームメトキシドは、リチューム、カリューム、リスビジューム、セシューム、マグネシューム、カルシューム、亜鉛、マンガン、ピペラジン、モルフォリン、ピリジン、イミダゾール、キニンおよびキニジンから成る群から選ばれた適当な金属塩（カーボネイトまたはアセテイト）またはアミンフリー塩基によって置き換えられる請求項１の方法。
【請求項４】
アセテイトとベンジル保護基は室温において分割される請求項３の方法。
【請求項５】
出発物質としてパンクラチスタチンを選びそしてジベンジルクロロフォスファイトテクニックを利用することによって保護フォスフェイト中間体を得ることから成るパンクラチスタチンプロドラッグを合成する改良方法。
【請求項６】
該パンクラチスタチンのＣ環ヒドロキシル基を選択的にアセチル化してペンタアセトキシ誘導体を得る段階から成る請求項５による方法。
【請求項７】
該ペンタアセトキシ誘導体をテトラアセテイト誘導体に変換する段階から成る請求項６による方法。
【請求項８】
四塩化炭素の存在において該テトラアセテイトを該ジベンジルフォスファイトと反応させてジベンジルフォスフェイト誘導体を得る段階から成る請求項７による方法。
【請求項９】
該ジベンジルフォスフェイトはナトリュームメトキシドの存在において脱アセチル化された請求項８による方法。
【請求項１０】
該脱アセチル化ジベンジルフォスフェイトの触媒水素化の段階から成る請求項９による方法。
【請求項１１】
該リン酸誘導体をナトリュームメトキシドで処理してジナトリュームフォスフェイトパンクラチスタチンプロドラッグを得る段階から成る請求項９による方法。
【請求項１２】
該プロドラッグリン酸プレカーサー（６）は、リン酸水素原子を図１に２ａ〜２ｏとして表示した構造の群から選ばれたイオンまたは分子で置き換えるように、適当な塩基で処理される請求項９による方法。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】  本件は２００１年４月１８日に提出したＳｅｒｉａｌ  Ｎｏ．６０／２８４，７１７のＵＳ特許出願に基づく。
（序文）
本発明は、概して（＋）−パンクラチスタチンフォスフェイトプロドラッグと１４金属およびそのアンモニュームカチオン誘導体の新しい有効な合成の発見に関する。図１に２ａで表示したパンクラチスタチンフォスフェイトプロドラッグは水に優れた可溶性を有し、従ってヒトのガンの治療に容易に投与できることが発見された。
この研究は、一部Ｄｉｖｉｓｉｏｎ  ｏｆ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ，Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，ＤＨＨＳによって授与されたＯｕｔｓｔａｎｄｉｎｇ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｏｒ  Ｇｒａｎｔ  ＣＡ−４４３４４−０１−１１によっている。合衆国政府はこの発明に権利を有する。
【０００２】  （発明の背景）
制ガン剤フェナンスリドン（＋）−パンクラチスタチン（１ａ）はＨａｗａｉａｎ  Ｈｙｍｅｎｏｃａｌｌｉｓ（公式にはＰａｎｃｒａｔｉｕｍ）ｌｉｔｔｏｒａｌｉｓのバルブから遊離された（Ｐｅｔｔｉｔ  ｅｔ  ａｌ．，１９８４ａ，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｓｏｃｉｅｔｙ，Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ，１６９３；Ｐｅｔｔｉｔ  ｅｔ  ａｌ．，１９８４ｂ，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｎａｔｕｒａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ，４７，１０１８）。その構造はＮＭＲ分光法によって決定され、その７−メトキシ誘導体（１ｂ）のＸ−線結晶分析によって確認された。
【０００３】  次に、パンクラチスタチン（１ａ）は、ガン細胞ラインのＵ．Ｓ．Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ（ＮＣＩ）パネルに対して包含するｉｎ  ｖｔｒｏ（生体外）における強力なガン細胞成長抑制活（Ｐｅｔｔｉｔ  ｅｔ  ａｌ．，１９８６，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｎａｔｕｒａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ，４９，９９５；１９９３  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｎａｔｕｒａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ，５６，１６８２）および一連のｉｎ  ｖｉｖｏ（生体内）実験的ガンシステムを発揮することが発見された。関係分野の見込みはある範囲のＲＮＡウイルスに対するその活性を包含する（Ｇａｂｒｉｅｌｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９２，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｎａｔｕｒａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ，５５，１５６９）。比較的低い自然発生量（乾燥バルブ〜０．０３９％）および臨床的に有用な抗ガン剤としてのその増大するポテンシャルにより、パンクラチスタチンは全合成に対する重要なターゲットとなった。（±）−パンクラチスタチンの最初の全合成は１９８９年に報告された（Ｄａｎｉｓｈｅｆｓｋｙ  ａｎｄ  Ｙｏｎ  Ｌｅｅ，１９８９，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  １１１，４８２９）。天然の（＋）−パンクラチスタチン（１ａ）の六つの立体特異性の合成がその後完成された（Ｔｉａｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｓｏｃｉｅｔｙ，１１７，３６４３；Ｔｒｏｓｔ  ａｎｄ  Ｐｕｌｌｅｙ，１９９５，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｓｏｃｉｅｔｙ，１１７，１０１４３；Ｈｕｄｌｉｃｋｙ  ｅｔ  ａｌ．，１９９６，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｓｏｃｉｅｔｙ，１１８，１０７５２；Ｄｏｙｌｅ  ｅｔ  ａｌ．，１９９７，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ，５３，１１１５３；Ｍａｇｎｕｓ  ａｎｄ  Ｓｅｂｈａｔ，１９９８，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ，５４，１５５０９；Ｐｅｔｉｔ  ｅｔ  ａｌ．，２０００，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，ｉｎ  ｐｒｅｐｒａｔｉｏｎ）。一方、いくつかの部分合成が記載された（Ｌｏｐｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９２，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔｅｒｓ，３３，６７７５；Ａｎｇｌｅ  ａｎｄ  Ｌｏｕｉｓ，１９９３，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔｅｒｓ，３４，４７５１；Ｇｒｕｂｂ  ｅｔ  ａｌ．，１９９９，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔｅｒｓ，４０，２６９１）。
【０００４】  パンクラチスタチン（１ａ）の臨床的開発は以前はその水溶性の低さ（５３μｇ／ｍｌ）によって妨害された。この問題は、著しく改良された水溶特性を発揮したフォスフェイトプロドラッグの合成を開発することによって解決され（Ｐｅｔｔｉｔ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５ａ，Ａｎｔｉ−Ｃａｎｃｅｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ，１０，２４３）、マウスＰ３８８リンパ性白血病細胞に対し均等な活性を発揮することが発見された。おそらく、ヒトの非時異性のホスホターゼはフォスフェイトプロドラッグを加水分解し続いて（＋）パンクラチスタチン（１ａ）を放出するので、フォスフェイトの結合もまた生体内システムに対して有益である。比較的不安定なリン酸化剤ジベンジル−（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルアミド）−フォスフィンは、我々がフォスフェイト（２ａ）の最初の合成に使用したものであるが、決して望ましくなく、それ自体可変を示すリン酸化反応を生じるので（価値のある出発物質の回収なしに（５）の収率０〜９１％）、我々はより有効なアプローチを調査した。ここに、パンクラチスタチンプロドラッグ（２ａ）のより簡単な合成を記載する。この新しい合成は前臨床現象に対する量の面で純粋薬物（２ａ）を提供するのに使用されるだろう。更に、ヒトのガン細胞の生長および溶解性（水に対する）についての効果を評価するために、一連のフォスフェイト金属とアンモニュームカチオン塩誘導体（２ｂ−ｏ）を製造した。
【０００５】  以下に見られるこれらの目的は、以下の詳細な記載から容易に認められるように、著しく予期されない態様において本発明によって容易に達成される。
【０００６】  （好ましい具体例の詳細な説明）
（＋）−パンクラチスタチン（１ａ）は前記のごとくＨｙｍｅｎｏｃａｌｌｉｓ  ｌｉｔｔｏｒａｌｉｓから単離した（Ｐｅｔｔｉｔ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５ｂ，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｎａｔｕｒａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ，５８，３７）。無水酢酸、ピリジン、ジベンジルフォスファイト、Ｎ−エチルジイソｐロピルアミンおよび１０％パラジューム炭素触媒はＬａｎｃａｓｔｅｒ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｉｎｃ．から購入した。四塩化炭素、４−ジメチルアミノピリジン、無水硫酸マグネシュウム（ＭｇＳＯ４ジヒドロゲンフォスフェイトカリューム、フォスフォモリブデン酸および酢酸亜鉛二水加物はＳｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．から購入した。ナトリュームメトキシド、水酸化リチューム一水加物、ピペラジン（無水）およびモルフォリンはＡｃｒｏｓ  Ｏｒｇａｎｉｃｓから購入した。酢酸カルシュームおよび酢酸マンガンはＦｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｃｏ．から、酢酸マグネシュームキニン、キニジンおよびイミダゾールはＪ．Ｔ．Ｂａｋｅｒ  Ｃｈｅｍ．から購入した。炭酸ルビジュームおよび炭酸セシュームはＡｌｆａ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ，Ｉｎｃ．から、そして酢酸カリュームはＭａｌｌｉｎｃｋｒｏｄｔから供給された。溶剤はすべて使用前に再蒸留し、必要に応じ乾燥した。水溶液の溶剤抽出物は硫酸マグネシュームで乾燥した。金属塩の１．０Ｍ溶液は蒸留水で、アミンの１．０Ｍ溶液は乾燥メタノールで製造した。
【０００７】  反応はすべて特に示さない限り窒素気中で行われ、その進行はＡｎａｌｔｅｃｈシリカゲルＧＨＬＦ  Ｕｎｉｐｌａｔｅｓ（長−および短−波ＵＶ下で見える）を使用する薄層クロマトグラフィによって確認され、そしてフォスフォモリブジック酸試薬のエタノール溶液中で行われた。コラムンクロマトグラフィはＥ．Ｍｅｒｃｋからシリカゲル６０（２３０〜４００メッシュ）で行われた。Ｓｅｐｈａｄｅｘ  Ｒ  Ｇ−１０は（使用前に）１Ｎ苛性ソーダ、水、１Ｎ酢酸で洗い、最後にｐＨが中性まで水洗した。
【０００８】  融点はすべてＥｌｅｃｔｒｏｔｈｅｒｍａｌデジタル融点装置モデルＩＡ９２００で測定した。補正せず。光学回転値はＰｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ２４１偏光計を用いて記録した。ＩＲスペクトルはＮｉｃｏｌｅｔ  ＦＴＩＲモデルＭＸ−１装置から記録した。ＥＩＭＳスペクトルはＭＡＴ３１２マススペクトロメーターで得た。高−および低−解像ＦＡＢスペクトルはグリセロール−トリグリセロールマトリックスを用いてＫｒａｔｏｓ  ＭＳ−５０マススペクトロメーター（Ｍｉｄｗｅｓｔ  Ｃｅｎｔｅｒ  ｆｏｒ  Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ，Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｎｅｂｒａｓｋａ，Ｌｉｎｃｏｌｎ，ＮＥ）で得られた。１Ｈ−，１３Ｃ−および３１Ｐ−ＮＭＲスペクトルはＶａｒｉａｎ  Ｇｅｍｉｎｉ３００，４００または５００ＭＨｚ装置で記録した。元素分析はＧａｌｂｒａｉｔｈ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．（Ｋｎｏｘｖｉｌｌｅ，ＴＮ）によって測定した。
【０００９】  １，２，３，４−Ｏ−テトラアセトキシ−パンクラチスタチン（４）
次の方法は我々の以前の方法に対し有用な改良を表す（Ｐｅｔｔｉｔ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５ａ，Ａｎｔｉ−Ｃａｎｃｅｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ，１０，２４３）。ピリジン（５０ｍｌ）中（＋）パンクラチスタチン（１ａ，純度８２％、８．６ｇ，２１．７ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に室温において無水酢酸（４５ｍｌ，０．４８ｍｏｌ）と４−ジメチルアミノピリジン（２００ｍｇ，１．６ｍｍｏｌ）を加えた。１６時間攪拌の後、混合物に氷（１００ｍｌ）を加え、更に１時間攪拌を続けた。得られた混合物をジクロロエタン（２ｘ１００ｍｌ）で抽出し、そして混合した有機抽出物は乾燥し、ろ過し、真空で乾固した。褐色油状の残留物（１４．３ｇ）にピリジン（８０ｍｌ）と水（４０ｍｌ）とを加え、その混合物を１時間還流下で加熱した。氷（５０ｍｌ）を加え、冷却した混合物をジクロロメタン（２ｘ１００ｍｌ）で抽出した。混合した有機抽出物は乾燥し、ろ過し、真空で乾燥した。得られた残留物は、ジクロロメタン中１．５％メタノールで抽出するシリカゲル上カラムクロマトグラフィによって精製して白色無定形の粉末を得た。これをエタノールから再結晶して表題の化合物を無色針状物として得た（４、７．１ｇ，６６％）；ｍ．ｐ．２４０℃｛ｍ．ｐ．ｌｉｔ．（Ｐｅｔｔｉｔ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５ａ  Ａｎｔｉ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ，１０，２４３）２４３−２４６℃｝：［α］Ｄ２７＋３１．５°（ｃ１．０４，ＤＣＭ）｛［α］Ｄ  ｌｉｔ．（ｐｅｔｔｉｔ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５ａ，Ａｎｔｉ−Ｃａｎｃｅｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ，１０，２４３）＋３０．４°（ｃ０．７２，ＤＣＭ）｝．得られたＩＲ，１Ｈ−ＮＭＲおよび１３Ｃ−ＮＭＲは前に報告した通りである。
【００１０】  １，２，３，４−Ｏ−テトラアセトキシ−７−Ｏ−ジベンジルオキシフォスフォリル−パンクラチスタチン（５）
−３０℃（エチレングリコール／ドライアイス）に冷却したアセトニトリル（３０ｍｌ）中１，２，３，４−Ｏ−テトラアセトキシ−パンクラチスタチン（４，２．６０ｇ，５．２７ｍｏｌ）の溶液に、四塩化炭素（２．６ｍｌ，２６．９ｍｍｏｌ），Ｎ−エチルジイソプロピルアミン（２．０ｍｌ，１１．６ｍｍｏｌ）と４−ジメチルアミノピリジン（７１ｍｇ，０．５８ｍｍｏｌ）を加えた。続いてジベンジルフォスファイト（１．８０ｍｌ，８．１５ｍｍｏｌ）を徐々にて滴下添加し、混合物を３時間攪拌した。反応はカリュームジハイドロゼンフォスフェイトの水溶液（０．５Ｍ，５０ｍｌ）の添加で終わり、室温で３０分攪拌した。得られた混合物はジクロロメタン（２ｘ５０ｍｌ）で抽出し、混合した有機抽出物は乾燥し、ろ過し、溶媒は真空で蒸発した。得られた黄色の油は、低温（４℃）において、シリカゲル上カラムクロマトグラフィによりそしてジクロロメタン中０．８％メタノールで抽出して精製した。与えられた処置により、出発物質１，２，３，４−Ｏ−テトラアセトキシ−パンクラチスタチン（４，０．３０ｇ，１１％）を、続いて無色の結晶性固体としてそのジベンジルフォスフェイト誘導体（５，３．４４ｇ，８７％）を回収した。
ｍ．ｐ．１１９℃［ｍ．ｐ．ｌｉｔ．（Ｐｅｔｔｉｔ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５ａ，Ａｎｔｉ−Ｃａｎｃｅｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ，１０，２４３）１１９−１２１℃］；［α］Ｄ２７＋５９．３°（ｃ１．３３，ＤＣＭ）｛［α］Ｄ３３ｌｉｔ．（Ｐｅｔｔｉｔ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５ａ，Ａｎｔｉ−Ｃａｎｃｅｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ，１０，２４３）＋６９．１°（ｃ０．８９，ＤＣＭ）｝；ｖｍａｘ（ＫＢｒ  ｄｉｓｃ）２９１０ｗ，１７５５ｓ，１６７４ｓ，１４８５ｓ，１３７３ｓ，１２２１ｓ，１０３７ｂ，８７１ｗ，７３８ｗ，４９３ｗ  ｃｍ−１；δＨ／ｐｐｍ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）２．０４（３Ｈ，ｓ，ＯＡｃ），２．０６（３Ｈ，ｓ，ＯＡｃ），２．０７（３Ｈ，ｓ，ＯＡｃ），２．１６（３Ｈ，ｓ，ＯＡｃ），３．４０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ３，１３Ｈｚ，Ｈ−１０ｂ），４．２６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ１１，１３Ｈｚ，Ｈ−４ａ），５．１３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ３，１１Ｈｚ，Ｈ−４），５．２０（１Ｈ，ｔ，Ｊ３  Ｈｚ，Ｈ−２），５．２３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ７，１２Ｈｚ，ＣＨＡＨＢＰｈ），５．２６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ７，１２Ｈｚ，ＣＨＡＨＢＰｈ），５．３１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ７，１２Ｈｚ，ＣＨＣＨＤＰｈ），５．４１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ７，１２Ｈｚ，ＣＨＣＨＤＰｈ），５．４３（１Ｈ，ｔ，Ｊ３  Ｈｚ，Ｈ−３），５．５４（１Ｈ，ｔ，Ｊ３  Ｈｚ，Ｈ−１），５．９２（１Ｈ，ｄ，Ｊ１  Ｈｚ，ＯＣＨＡＨＢＯ），５．９５（１Ｈ，ｄ，Ｊ１  Ｈｚ，ＯＣＨＡＨＢＯ），６．１０（１Ｈ，ｂｓ，５−ＮＨ），６．４３（１Ｈ，ｓ，Ｈ−１０），７．３０−７．４２（１０Ｈ，ｂｍ，２ｘ  Ｐｈ）；δｃ／ｐｐｍ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）１７０．１（Ｃ−１においてＣ＝Ｏ），１６９．７（Ｃ−３においてＣ＝Ｏ），１６９．０（Ｃ−４においてＣ＝Ｏ），１６８．２（Ｃ−２においてＣ＝Ｏ），１６２．６（Ｃ−６），１５２．４（Ｃ−９），１３９．３（ｄ，ＪＰＣ４Ｈｚ，Ｃ−８），１３６．０（ｄ，ＪＰＣ８Ｈｚ，Ｃ  ｏｆ  Ｐｈ），１３５．９（ｄ，ＪＰＣ８Ｈｚ，Ｃ  ｏｆ  Ｐｈ），１３４．１（ｄ，ＪＰＣ７Ｈｚ，Ｃ−７），１３３．０（Ｃ−１０ａ），１２８．４２（ＣＨ  ｏｆ  Ｐｈ），１２８．３７（ＣＨ  ｏｆ  Ｐｈ），１２８．３（ＣＨ  ｏｆ  Ｐｈ），１２７．９（ＣＨ  ｏｆ  Ｐｈ），１２７．７（ＣＨ  ｏｆ  Ｐｈ），１１７．０（Ｃ−６ａ），１０２．７（ＯＣＨ２Ｏ），１０１．５（Ｃ−１０），７１．６（Ｃ−４），７０．１（ｄ，ＪＰＣ５Ｈｚ，ＣＨ２Ｐｈ），７０．０（ｄ，ＪＰＣ６Ｈｚ，ＣＨ２Ｐｈ），６７．６（Ｃ−２），６６．７（Ｃ−３），６６．４（Ｃ−１），４７．６（Ｃ−４ａ），４０．３（Ｃ−１０ｂ），２０．７６（Ｃ−２においてＣＨ３），２０．７３（Ｃ−３においてＣＨ３），２０．６７（Ｃ−４においてＣＨ３），２０．５（Ｃ−１においてＣＨ３）；δＰ／ｐｐｍ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３，８５％Ｈ３ＰＯ４に対して）−６．６１（ｓ，１Ｈ分離）；ｍ／ｚ（ＥＩ）４９３［Ｍ−Ｐ（Ｏ）（ＯＢｎ）２，１０％］，２７１（３５），９１（４０），６１（４０，４４（１００）．
【００１１】  ジナトリューム７−Ｏ−フォスフォリル−パンクラチスタチン（２ａ）
メタノール（５０ｍｌ）中ジベンジルパンクラチスタチンフォスフェイト（５ａ，２．００ｇ，２．６６ｍｍｏｌ）の溶液にナトリュームメトキシド（８７ｍｇ，１．６１ｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で２時間攪拌し水（５０ｍｌ）を加えた。この水溶性の混合物をジクロロメタン（５ｘ５０ｍｌ）で抽出し、混合した有機抽出物は乾燥し、ろ過し、真空で蒸発（加熱なし）して、白色粉末（１．８ｇ）として租の脱アセチル化誘導体を得た。残渣は直ちにエタノール（５０ｍｌ）に溶解し、１０％Ｐｄ／Ｃ触媒（２０１ｍｇ）を加えた。混合物は１気圧の水素下で２時間攪拌し、フルートろ紙を通してろ過した。触媒はメタノール（５０ｍｌ）で十分に洗い、ろ液は真空で蒸発（加熱なし）して租脱ベンジル化リン酸（６）を白色粉末（１，３ｇ）として得た。ｍ．ｐ．１９５℃  ｄｅｃ．δＨ／ｐｐｍ（３００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）６．７０（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−１０），５．９６（１Ｈ，ｓ，ＯＣＨＡＨＢＯ），５．９３（１Ｈ，ｓ，ＯＣＨＡＨＢＯ），４．２９（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−１），４．０３（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−２），３．８７（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−３），３．７４（１Ｈ，ｍ，Ｈ−４），３．６７（１Ｈ，ｔ，Ｊ１１  Ｈｚ，Ｈ−４ａ），３．００（１Ｈ，ｄ，Ｊ１２Ｈｚ，Ｈ−１０ｂ）；ｍ／ｚ（ＦＡＢ）４０６［（Ｍ＋Ｈ）＋，２０％］，４０５［Ｍ＋，２５］，１５４（１００）；Ｃ１４Ｈ１６ＮＯ１１Ｐ４０５．０４６１に対する計算値ＨＲＦＡＢ４０５，０４６７．
【００１２】  リン酸（６）は直ちにメタノール（５０ｍｌ）中で再蒸留し、ナトリュームメトキシド（３６１ｍｇ，６．７３ｍｏｌ）を加えた。混合物は一夜攪拌し、それから真空（熱なし）で濃縮して白色のペースト（１．６ｇ）を得た。残渣はＳｅｐｈａｄｅｘ  Ｒ  Ｇ−１０カラムで精製し水で抽出した。蛍光精留物は混合し凍結乾燥してジ−ナトリュームパンクラチスタチンプロドラッグ（２ａ）をふわふわした粉末（１．１ｇ，９２％）として得た。ｍ．ｐ．２０６℃（ｄｅｃ）；［α］Ｄ２８＋７８．４°（ｃ１．０２，Ｈ２Ｏ）；ｖｍａｘＫＢｒ  ｄｉｓｃ）３５００−３０００ｂ，２３６０Ｗ，１６７０ｂｓ，１４８０ｓ，１３５０ｗ，１０９０ｓ，９８０ｍ，７２０ｍ  ｃｍ−１；δＨ／ｐｐｍ（４００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）６．５９（１Ｈ，ｓ，Ｈ−１０），５．９６（１Ｈ，ｓ，ＯＣＨＡＨＢＯ），５．８７（１Ｈ，ｓ，ＯＣＨＡＨＢＯ），４．３９（１Ｈ，ｓ，Ｈ−１），４．１１（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−２），３．９３（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−３），３．８１（１Ｈ，ｂｄ，Ｊ９Ｈｚ，Ｈ−４），３．７３（１Ｈ，ｂｔ，Ｊ１２Ｈｚ，Ｈ−４ａ），３．００（１Ｈ，ｂｄ，Ｊ１２Ｈｚ，Ｈ−１０ｂ）；δＣ／ｐｐｍ（１００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）１７１．２（Ｃ＝Ｏ），１５２．３（Ｃ−９），１３９．１（Ｃ−８），１３７．３（Ｃ−７），１３５．３（Ｃ−１０ａ），１１７．６（Ｃ−６ａ），１０２．４（Ｏ−ＣＨ２−Ｏ），１０１．０（Ｃ−１０），７２．７（Ｃ−３），７０．７（Ｃ−２），７０．３（Ｃ−４），６８．８（Ｃ−１），４９．１（Ｃ−４ａ），４０．７（Ｃ−１０ｂ）；δＰ／ｐｐｍ（１６２ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ，８５％Ｈ３ＰＯ４に対して）０．９０（ｓ，１Ｈ分離）；ｍ／ｚ（ＦＡＢ）４４９（Ｍ＋，２０％）４２７［（Ｍ−Ｎａ）＋，２０］，１５４（１００）．
【００１３】  パンクラチスタチンプロドラッグ（２ｂ−ｏ）の合成の一般的方法
パンクラチスタチンのリン酸誘導体の水性メタノール溶液（６，１ｍｌの水またはメタノール中５０ｍｇ）に、適当な金属塩（炭酸塩または酢酸塩）またはアミン遊離塩基の１．０Ｍ溶液（２５０μｌ）を加えた。溶液は濁り、混合物は６時間攪拌した。混合物は冷凍乾燥（または蒸発）して所望のプロドラッグ塩（２ｂ−ｏ）を得た。この塩を湿潤したメタノールおよび／またはジエチルエーテルと一緒に摩砕することによってさらに精製して未反応の出発物質を除いた。
ジリチューム  パンクラチスタチン７−Ｏ−燐酸塩（２ｂ）：
黄色みがかった粉末（６１ｍｇ）；ｍ．ｐ．２４０℃  ｄｅｃ．：δＨ／ｐｐｍ（３００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）６．６２（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−１０），６００（１Ｈ，ｓ，ＯＣＨＡＨＢＯ），５．９０（１Ｈ，ｓ，ＯＣＨＡＨＢＯ），４．４４（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−１），４．１５（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−２），３．９７（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−３），３．８０（２Ｈ，ｍ，Ｈ−４，Ｈ−４ａ），３．０７（１Ｈ，ｄ，Ｊ１２Ｈｚ，Ｈ−１０ｂ）．
ジカリューム  パンクラチスタチン７−Ｏ−燐酸塩（２ｃ）：
無色の粉末（６６ｍｇ）；ｍ．ｐ．２８０℃  ｄｅｃ．；δＨ／ｐｐｍ（３００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）６．６８（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−１０），６．００（１Ｈ，ｓ，ＯＣＨＡＨＢＯ），５．５９（１Ｈ，ｓ，ＯＣＨＡＨＢＯ），４．４５（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−１），４．１６（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−２），３．７９（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−３），３．８９（１Ｈ，ｍ，Ｈ−４），３．７８（１Ｈ，ｍ，Ｈ−４ａ），３．１３（１Ｈ，ｄ，Ｊ１２Ｈｚ，Ｈ−１０ｂ）．
ジルビジューム  パンクラチスタチン７−Ｏ−燐酸塩（２ｄ）：
無色の粉末（０．１１ｇ）；ｍ．ｐ．２００℃（ｄｅｃ．）；δＨ／ｐｐｍ（３００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）６．６３（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−１０），６．００（１Ｈ，ｓ，ＯＣＨＡＨＢＯ），５．９０（１Ｈ，ｓ，ＯＣＨＡＨＢＯ），４．４５（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−１），４．１６（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−２），３．９８（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−３），３．８０（２Ｈ，ｍ，Ｈ−４，Ｈ−４ａ），３．１０（１Ｈ，ｄ，Ｊ１２Ｈｚ，Ｈ−１０ｂ）；ｍ／ｚ（ＦＡＢ）５７３．９［（Ｍ＋Ｈ）＋，５％］，２９８．９（３５），２１５．１（２５），１３５．１（１００）；Ｃ１４Ｈ１５ＮＯ１１ＰＲｂ２５７３．８６１９に対する計算値ＨＲＦＡＢ５７３．８５９８．
ジセシューム  パンクラチスタチン７−Ｏ−燐酸塩（２ｅ）：
黄色いオイル（０．２２ｇ）；δＨ／ｐｐｍ（３００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）６．６３（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−１０），６．０１（１Ｈ，ｓ，ＯＣＨＡＨＢＯ），５．９０（１Ｈ，ｓ，ＯＣＨＡＨＢＯ），４．４６（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−１），４．１７（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−２），３．９８（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−３），３．８５（１Ｈ，ｍ，Ｈ−４），３．７９（１Ｈ，ｍ，Ｈ−４ａ），３．０８（１Ｈ，ｄ，Ｊ１２Ｈｚ，Ｈ−１０ｂ）；ｍ／ｚ（ＦＡＢ）６６９．９［（Ｍ＋Ｈ）＋，５０％］，２２５．０（１００）；Ｃ１４Ｈ１５ＮＯ１１ＰＣＳ２６６９．８４９１に対する計算値ＨＲＦＡＢ６６９．８４６８．
マグネシューム  パンクラチスタチン７−Ｏ−燐酸塩（２ｆ）：
無色の粉末（６４ｍｇ）；ｍ．ｐ．２２０℃  ｄｅｃ．；δＨ／ｐｐｍ（３００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）６．６６（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−１０），６．０１（１Ｈ，ｓ，ＯＣＨＡＨＢＯ），５．９４（１Ｈ，ｓ，ＯＣＨＡＨＢＯ），４．４４（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−１），４．１６（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−２），３．９８（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−３），３．８０（２Ｈ，ｍ，Ｈ−４，Ｈ−４ａ），３．０７（１Ｈ，ｄ，Ｊ１２Ｈｚ，Ｈ−１０ｂ）．
カルシューム  パンクラチスタチン７−Ｏ−燐酸塩（２ｇ）：無色の粉末（７７ｍｇ）；ｍ．ｐ．２３０℃（ｄｅｃ．）；δＨ／ｐｐｍ（３００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）６．６４（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−１０），５．９９（１Ｈ，ｓ，ＯＣＨＡＨＢＯ），５．９６（１Ｈ，ｓ，ＯＣＨＡＨＢＤ），４．４１（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−１），４．１４（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−２），３．９７（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−３），３．７６（２Ｈ，ｍ，Ｈ−４，Ｈ−４ａ），３．４１（１Ｈ，ｄ，Ｊ１１Ｈｚ，Ｈ−１０ｂ）．亜鉛  パンクラチスタチン７−Ｏ−燐酸塩（２ｈ）：無色の結晶構造粉末（７６ｍｇ）；ｍ．ｐ．１９０℃（ｄｅｃ．）；δＨ／ｐｐｍ（３００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）６．６９（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−１０），５．９６（２Ｈ，ｂｓ，ＯＣＨ２Ｏ），４．４４（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−１），４．１５（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−２），３．９８（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−３），３．８０（２Ｈ，ｍ，Ｈ−４，Ｈ−４ａ），３．１２（１Ｈ，ｄ，Ｊ１２Ｈｚ，Ｈ−１０ｂ）．
マンガン  パンクラチスタチン７−Ｏ−燐酸塩（２ｉ）：無色の粉末（８８ｍｇ）；ｍ．ｐ．２４０℃（ｄｅｃ．）；δＨ／ｐｐｍ（３００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）６．６５（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−１０），６．００（１Ｈ，ｓ，ＯＣＨＡＨＢＯ），５．９５（１Ｈ，ｓ，ＯＣＨＡＨＢＯ），４．４４（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−１），４．１５（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−２），３．９９（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−３），３．７９（２Ｈ，ｍ，Ｈ−４，Ｈ−４ａ），３．０８（１Ｈ，ｄ，Ｊ１２Ｈｚ，Ｈ−１０ｂ）．ピペラジン  パンクラチスタチン７−Ｏ−燐酸塩（２ｊ）：無色の粉末（７８ｍｇ）；ｍ．ｐ．２００℃（ｄｅｃ．）；δＨ／ｐｐｍ（３００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）６．６２（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−１０），５．９９（１Ｈ，ｓ，ＯＣＨＡＨＢＯ），５．８８（１Ｈ，ｓ，ＯＣＨＡＨＢＯ），４．４４（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−１），４．１５（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−２），３．９６（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−３），３．８４（１Ｈ，ｍ，Ｈ−４），３．７７（１Ｈ，ｍ，Ｈ−４ａ），３．１０（１Ｈ，ｄ，Ｊ１２Ｈｚ，Ｈ−１０ｂ），２．９９−３．０１（８Ｈ，ｍ，４ｘＣＨ２ピペラジン）；ｍ／ｚ（ＦＡＢ）４９２．２［（Ｍ＋Ｈ）＋，３０％］，４６０．１（８５），１５４．１（１００）；Ｃ１８Ｈ２７Ｎ３Ｏ１１Ｐ４９２．１３８３に対する計算値ＨＲＦＡＢ４９２．１３７３．
モルフォリン  パンクラチスタチン７−Ｏ−燐酸塩（２ｋ）：無色の粉末（７１ｍｇ）；ｍ．ｐ．１８０℃（ｄｅｃ．）；δＨ／ｐｐｍ（３００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）６．６３（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−１０），５．９９（１Ｈ，ｓ，ＯＣＨＡＨＢＯ），５．８９（１Ｈ，ｓ，ＯＣＨＡＨＢＯ），４．４４（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−１），４．１５（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−２），３．９６（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−３），３．７８−３．８２（６Ｈ，ｍ，Ｈ−４，Ｈ−４ａ，２ｘＣＨ２Ｎモルフォリン），３．１０−３．１４（５Ｈ，ｍ，Ｈ−１０ｂ，２ｘＣＨ２Ｏモルフォリン）；ｍ／ｚ（ＦＡＢ）４９３．２［（Ｍ＋Ｈ）＋，１５％］，４０６．１（３０），１５４．１（００）；Ｃ１８Ｈ２６Ｎ２Ｏ１２Ｐ４９３．１２２２に対する計算値ＨＲＦＡＢ４９３．１２１５．
ピリジン  パンクラチスタチン７−Ｏ−燐酸塩（２ｌ）：無色の粉末（６３ｍｇ）；ｍ．ｐ．２７０℃（ｄｅｃ．）；δＨ／ｐｐｍ（３００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）８．６６（２Ｈ，ｄ，Ｊ７Ｈｚ，Ｈ−２及びＨ−６ピリミジン），８．４９（１Ｈ，ｔ，Ｊ７Ｈｚ，Ｈ−４ピリミジン），７．９７（２Ｈ，ｔ，Ｊ７Ｈｚ，Ｈ−３及びＨ−５ピリミジン），６．４５（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−１０），５．９５（２Ｈ，ｓ，ＯＣＨ２Ｏ），４．４１（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−１），４．１５（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−２），３．９７（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−３），３．８９（１Ｈ，ｍ，Ｈ−４），３．８４（１Ｈ，ｍ，Ｈ−４ａ），３．１０（１Ｈ，ｄ，Ｊ１２Ｈｚ，Ｈ−１０ｂ）．
イミダゾール  パンクラチスタチン７−Ｏ−燐酸塩（２ｍ）：無色の粉末（７１ｍｇ）；ｍ．ｐ．２５０℃（ｄｅｃ．）；δＨ／ｐｐｍ（３００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）８．２１（１Ｈ，ｓ，Ｈ−２イミダゾール），７．２１（２Ｈ，ｂｓ，Ｈ−４及びＨ−５イミダゾール），６．６５（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−１０），６．００（１Ｈ，ｓ，ＯＣＨＡＨＢＯ），５．９５（１Ｈ，ｓ，ＯＣＨＡＨＢＯ），４．４４（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−１），４．１５（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−２），３．９７（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−３），３．８５（１Ｈ，ｍ，Ｈ−４），３．７５（１Ｈ，ｍ，Ｈ−４ａ），３．３８（１Ｈ，ｄ，Ｊ１２Ｈｚ，Ｈ−１０ｂ）．
キニン  パンクラチスタチン７−Ｏ−燐酸塩（２ｎ）：白色のふわふわした粉末（０．１１ｇ）；ｍ．ｐ．１７３−１７５℃；δＨ／ｐｐｍ（３００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）８．５９（１Ｈ，ｄ，Ｊ４．５Ｈｚ，Ｈ−２’キニン），７．８６（１Ｈ，ｄ，Ｊ９Ｈｚ，Ｈ−８’キニン），７．５７（１Ｈ，ｄ，Ｊ４．５Ｈｚ，Ｈ−３’キニン），７．３６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ２，９Ｈｚ，Ｈ−５’キニン），７．２３（１Ｈ，ｍ，Ｈ−７’キニン），６．３４（１Ｈ，ｓ，Ｈ−１０），５．９１（１Ｈ，ｓ，ＯＣＨＡＨＢＯ），５．８７（１Ｈ，ｓ，ＯＣＨＡＨＢＯ），５．６６（１Ｈ，ｍ，Ｈ−１０キニン），５．５９（１Ｈ，ｍ，Ｈ−９キニン），４．９８（１Ｈ，ｄ，Ｊ１７Ｈｚ，Ｈ−１１ａキニン），４．９３（１Ｈ，ｄ，Ｊ１１Ｈｚ，Ｈ−１１ｂキニン），４．３５（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−１），４．１２（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−２），３．９５（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−３），３．８３−３．８７（５Ｈ，ｍ，ＯＭｅキニン，Ｈ−４，Ｈ−４ａ），３．８０（１Ｈ，ｍ，Ｈ−６ａキニン），３．２２（２Ｈ，ｍ，Ｈ−８キニン，Ｈ−２ａキニン），２．９３（１Ｈ，ｄ，Ｊ１２Ｈｚ，Ｈ−１０ｂ），２．７７（２Ｈ，ｍ，Ｈ−２ｂキニン，Ｈ−６ｂキニン），２．０４（１Ｈ，ｍ，Ｈ−３キニン），１．９３（２Ｈ，ｍ，Ｈ−５ａキニン，Ｈ−７ａキニン），１．８６（１Ｈ，ｍ，Ｈ−４キニン），１．６２（１Ｈ，ｍ，Ｈ−５ｂキニン），１．２７（１Ｈ，ｍ，Ｈ−７ｂキニン）；ｍ／ｚ（ＦＡＢ）７３０．２［（Ｍ＋Ｈ）＋，６０％］，３２５．２（１００）；Ｃ３４Ｈ４１Ｎ３Ｏ１３Ｐ７３０．２３７７に対する計算値ＨＲＦＡＢ７３０．２３７２．
キニジン  パンクラチスタチン７−Ｏ−燐酸塩（２ｏ）：無色の粉末（０．１４ｇ）；ｍ．ｐ．１８３−１８５℃；δＨ／ｐｐｍ（３００ＭＨｚ，Ｄ２Ｏ）８．６２（１Ｈ，ｄ，Ｊ４．５Ｈｚ，Ｈ−２’キニジン），７．８８（１Ｈ，ｄ，Ｊ９Ｈｚ，Ｈ−８’キニジン），７．６１（１Ｈ，ｄ，Ｊ４．５Ｈｚ，Ｈ−３’キニジン），７．４１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ２，９Ｈｚ，Ｈ−５’キニジン），７．２５（１Ｈ，ｍ，Ｈ−７’キニジン），６．３４（１Ｈ，ｓ，Ｈ−１０），５．８９（２Ｈ，ｓ，ＯＣＨ２Ｏ），５．６６（１Ｈ，ｍ，Ｈ−１０キニジン），５．５９（１Ｈ，ｍ，Ｈ−９キニジン），５．０９（１Ｈ，ｄ，Ｊ１７Ｈｚ，Ｈ−１１ａキニジン），４．９５（１Ｈ，ｄ，Ｊ１１Ｈｚ，Ｈ−１１ｂキニジン），４．３５（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−１），４．１４（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−２），３．９５（１Ｈ，ｂｓ，Ｈ−３），３．８５−３．８９（５Ｈ，ｍ，ＯＭｅキニジン，Ｈ−４，Ｈ−４ａ），３．７９（１Ｈ，ｍ，Ｈ−６ａキニジン），３．２３（２Ｈ，ｍ，Ｈ−８及びＨ−２ａキニジン），２．９３（１Ｈ，ｄ，Ｊ１２Ｈｚ，Ｈ−１０ｂ），２．６５（２Ｈ，ｍ，Ｈ−２ｂ及びＨ−６ｂキニジン），２．０４（１Ｈ，ｍ，Ｈ−３キニジン），１．８８（２Ｈ，ｍ，Ｈ−５ａ及びＨ−７ａキニジン），１．８６（１Ｈ，ｍ，Ｈ−４キニジン），１．６９（１Ｈ，ｍ，Ｈ−５ｂキニジン），１．４４（１Ｈ，ｍ，Ｈ−７ｂキニジン）；ｍ／ｚ（ＦＡＢ）７３０［（Ｍ＋Ｈ）＋，５％］，３２５（６５），１５４（１００）；Ｃ３４Ｈ４１Ｎ３Ｏ１３Ｐ７３０．２３７７に対する計算値ＨＲＦＡＢ７３０．２３８４．
【００１４】  結果と検討
発端から、リン酸塩中間体（５）へのより直接的アプローチが求められた。この点において、我々のグループ（Ｐｅｔｔｉｔ  ｅｔ  ａｌ．，１９９８，Ａｎｔｉ−Ｃａｎｃｅｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ，１３，９８１）によるジベンジルフォスファイト技術の利用（Ｓｉｌｖｅｒｂｅｒｇ  ｅｔ  ａｌ．，１９９６，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔｅｒｓ，３７，７７１）はアルキルアミドフォスファインメソード（Ｐｅｒｒｉｃｈ  ａｎｄ  Ｊｏｈｎｓ，１９８８，Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，１４２）に計り知れない手段であることを証明した。有機溶媒におけるその貧弱な溶解性およびＣ−環における四つの第二アルコール基の存在に依って、我々の注意深く調査したジベンジルフォスファイト法を適用する時、（＋）−パンクラチスタチン（１ａ）の直接フォスフォリレイションは生成物の非常に複雑な混合物並びに若干の未反応出発物質を与えた。従って、私たちの注目は、より可溶性で部分的に保護されたフォスフォリレイションの出発物質を与えるパンクラチスタチンのＣ−環ヒドロキシ基の選択的アセチル化に向けられた。パンクラチスタチン（１ａ）をピリジン中無水酢酸および４−ジメチルアミノピリジンと容易に反応させて１，２，３，４，７−Ｏ−ペンタアセトキシ誘導体（３）を得、次いで環流する水−ピリジン中で加熱することによって直ちに所望の１，２，３，４−Ｏ−ペンタアセトキシ（４）に変換（収率６６％）する時、その目的は容易に実現された。四塩化炭素、Ｎ−エチルジイソプロピルアミンおよび４−ジメチルアミノピリジンの存在下における後者とジベンジルフォスファイトとの反応は８７％の収率で感熱性のパンクラチスタチン７−Ｏ−ジベンジルフォスフェイト（５）を与えた。（５）の熱および／またはシリカゲルとの接触はフォスフェトクリービジュを（４）に戻した。ベンジルフォスファイト（５）は次にナトリウムメトキシドの存在において脱アセチル化した。接触水素化を用いてベンジルエステル基をクリーブして対応するリン酸誘導体（６）を得た。この酸は直ちに２当量のナトリュームメトキシドで処理してジナトリュームリン酸塩プロドラッグ（２ａ）（９２％）を得た。
【００１５】  （＋）−パンクラチスタチンプロドラッグ（２ａ）のこのより実用的合成は取りかかっていたが、私たちは親リン酸塩の種々のカチオン誘導体を合成し評価することに取りかかった。このプロドラッグリン酸プレカーサー（６）を適当な塩基で処理することによって、所要の塩（２ｂ−ｏ）が形成された。プロドラッグ（２ａ）のナトリュームカチオンを種々のカチオンで置き換えることによって、私たちは水溶性特性（ｍｇ／ｍｌ）を評価することができた。アンモニュームカチオンあるものもまた、ｐ−グリコプロテイン機構での障害による多剤耐性を無効にする能力を有する安定な水溶性薬剤を得る目的で、調査された（Ｓａｔｏ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５，Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ  ａｎｄ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，３５，２７１）。
【００１６】  すべての合成製品はネズミＰ３８８のリンパ性白血病細胞ラインおよびヒトのガン細胞ラインに対して評価された。プロドラッグ誘導体の大部分は（＋）−パンクラチスタチン（１ａ）およびナトリュームプロドラッグ（２ａ）に類似の活性を発揮した。マンガン（２ｉ）およびモルフォリン（２ｋ）誘導体は活性において１０〜２０倍の増加を示したけれども、その貧弱な水溶性が可能性あるプロドラッグとしてのさらに臨床前の進行に対しその使用を疑問視させた。その結果、ナトリューム誘導体（２ａ）は、その高い活性、適当な水溶性およびここに記載の効率的合成のため好ましい選択品であり続ける。
【００１７】  以上の記載から、新しく有用な抗新生成物薬の製造がここに記載され説明され、上記の目的のすべてを果たすことが容易に明らかである。この開示に対応する人に容易に起こるごとき修正、変更、適応は、本発明の範囲にあることは勿論理解されるべきである。
【図面の簡単な説明】  図１は本発明の合成をステップーバイーステップに示す。
【図１】
2005515958.tif 000002
【国際調査報告】
2005515958.tif 000003