(57)【要約】本発明は、ヒトのニューロトロフィンのアゴニストとして作用する、一般式（Ｉ）の３−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン誘導体、及び／又はその一般式（ＩＩ）及び（ＩＩＩ）の二量体を活性化合物として含有する医薬組成物に関する。したがって、式（Ｉ）、（ＩＩ）、及び（ＩＩＩ）のこのような化合物は、ニューロトロフィン機能、特に神経成長因子（ＮＧＦ）機能が欠損している疾患、例えば、中枢神経系（ＣＮＳ）の神経変性疾患、ＮＧＦの生体内利用能力の低下による後天性免疫不全症、あるいは新脈管形成プロセスの刺激が好適な病的症状、の治療に有用である。
2005530834.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（Ｉ）の３−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン誘導体、又はその一般式（ＩＩ）及び（ＩＩＩ）の二量体、又はそれらの混合物のうち少なくとも１つを有効成分として含有する、医薬組成物：
【化１】
2005530834.tif 000024
式中、
Ｒ１及びＲ’１は互いに同じであっても異なっていてもよく、Ｈ、Ｃ１−８アルキル、Ｃ２−８アルケニル、Ｃ２−８アルキニル、シクロアルキル、アリール、複素環、アリールＣ１−８アルキル；複素環Ｃ１−８アルキル、ＲＲ’Ｎ−Ｃ１−８アルキル、ＲＲ’Ｎ−アリール、ＦｍｏｃＮＲ’−アリール、ＢｏｃＮＲ’−アリール、ＣＢｚＮＲ’−アリール、ＲＯ−アリール、Ｒ（Ｏ）Ｃ−アリール、ＲＯ（Ｏ）Ｃ−アリール、ＲＲ’Ｎ（Ｏ）Ｃ−アリール；ＦｍｏｃＮＲ’−Ｃ１−８アルキル、ＢｏｃＮＲ’−Ｃ１−８アルキル、ＣｂｚＮＲ’−Ｃ１−８アルキル、ＦｍｏｃＮＲ’−Ｃ１−８アリール、ＢｏｃＮＲ’−Ｃ１−８アリール、及びＣｂｚＮＲ’−Ｃ１−８アリールからなる群より選択され、
Ｒ２及びＲ’２は互いに同じであっても異なっていてもよく、Ｈ、Ｃ１−８アルキル、Ｃ２−８アルケニル、Ｃ２−８アルキニル、シクロアルキル、アリール、アリールＣ１−８アルキル、複素環Ｃ１−８アルキル、アミノＣ１−８アルキル、アミノアリール、Ｃ１−８アルキルオキシアリール、ヒドロキシアリール、ヒドロキシＣ１−８アルキル、カルボキシＣ１−８アルキル、メチルオキシカルボニルＣ１−８アルキル、カルボキシアリール、カルボアルキルオキシアリール、アルキルカルバモイルアリール、及び（アミノ酸の側鎖）からなる群より選択されるか、あるいは、
Ｒ１とＲ２が一緒になって、そしてＲ１’とＲ２’が一緒になって、Ｃ１−４アルキル、Ｃ２−４アルケニル、シクロアルキル又はベンゼン縮合シクロアルキルであって３、４、５、６項間の架橋を形成し、
Ｒ３及びＲ３’は、Ｈ、Ｃ１−８アルキル、Ｃ２−８アルケニル、Ｃ２−８アルキニル、シクロアルキル、アリール、アリールＣ１−８アルキル、複素環Ｃ１−８アルキル、ＲＲ’ＮＣ１−８アルキル、ＲＲ’Ｎアリール、ＲＯ−Ｃ１−８アルキル、ＲＯ（Ｏ）Ｃ−Ｃ１−８アルキル、Ｒ（Ｏ）Ｃ−Ｃ１−８アルキル、ＲＣ（Ｏ）Ｏ−Ｃ１−８アルキル、ＲＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）Ｃ１−８アルキル、ＲＯ−アリール、ＲＯ（Ｏ）Ｃ−アリール、Ｒ（Ｏ）Ｃ−アリール、ＲＣ（Ｏ）Ｏ−アリール、ＲＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）アリール、−ＣＨ（アミノ酸側鎖）ＣＯ２Ｒ、−ＣＨ（アミノ酸側鎖）Ｃ（Ｏ）ＮＲ、−ＣＨ（ＣＯ２Ｒ）−アミノ酸側鎖、ＣＨ（ＣＯＮＲＲ’）−アミノ酸側鎖、Ｆｍｏｃ、Ｂｏｃ、及びＣｂｚからなる群より選択され、
Ｒ４、Ｒ’４、Ｒ５、及びＲ’５は互いに同じであっても異なっていてもよく、Ｈ、Ｃ１−８アルキル、Ｃ２−８アルケニル、Ｃ２−８アルキニル、シクロアルキル、アリール、複素環、アリールＣ１−８アルキル、及び複素環Ｃ１−８アルキルからなる群より選択され、
Ｒ６は、Ｈ、Ｃ１−８アルキル、Ｃ２−８アルケニル、Ｃ２−８アルキニル、シクロアルキル、アリール、アリールＣ１−８アルキル、複素環、複素環Ｃ１−８アルキル；−Ｃ（Ｏ）Ｒ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲＲ’、ＣＨ２ＯＲ、ＣＨ２ＮＲＲ’、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−ＣＨ（アミノ酸側鎖）Ｃ（Ｏ）ＯＲ、ＣＨ２ＮＲ−Ｆｍｏｃ、ＣＨ２ＮＲ−Ｂｏｃ、及びＣＨ２ＮＲ−ＣＢｚからなる群より選択され、
Ｒ及びＲ'は互いに同じであっても異なっていてもよく、Ｈ、Ｃ１−８アルキル、Ｃ２−８アルケニル、Ｃ２−８アルキニル、シクロアルキル、アリール、複素環、アリールＣ１−８アルキル；複素環Ｃ１−８アルキル；保護基、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ−（アミノ酸側鎖）−ＮＨＴ、−ＮＨ−ＣＨ（アミノ酸側鎖）ＣＯＯＴ、及びＣＨ（アミノ酸側鎖）ＣＯＯＴからなる群より選択され、
式中、ＴはＨ及びＣ１−８アルキルから選択され；
Ｘ及びＸ’は、ａが二重結合である場合には、互いに同じであっても異なっていてもよく、Ｏ及びＳから選択され、また、
Ｘ及びＸ’は、ａが単結合である場合にはいずれもＨであり、
Ｙ及びＺは、互いに同じであっても異なっていてもよく、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２及びＮ−Ｒからなる群より選択され、式中のＲは上記で定義されているとおりであり；
Ｑは、Ｃ＝Ｏ、ＣＨ２、ＣＯ−ＮＨ−ＣＨ（アミノ酸側鎖）−ＣＯ、ＣＯＮＲ（ＣＨ２）ｎＣＯ、ＣＯＮＲ−Ｃ２−８アルケニル−ＣＯ、Ｃ（Ｏ）Ｏ（ＣＨ２）ｎＣＯ、ＣＨ２ＯＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｎＣＯ、及びＣＨ２ＮＲＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｎＣＯからなる群より選択され、式中のｎは２〜６の間に含まれ、そしてＲは上記で定義されているとおりであり、
Ｑ’は、Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ２、Ｃ（Ｏ）ＮＲＣＨ２、ＣＨ２ＯＣ（Ｏ）、ＣＨ２ＮＲＣ（Ｏ）、ＣＯＮＲ（ＣＨ２）ｎＮＲＣＯ、ＣＯＮＲ−Ｃ２−８アルケニル−ＮＲＣＯ、Ｃ（Ｏ）Ｏ（ＣＨ２）ｎＮＲＣＯ、ＣＯＮＲ（ＣＨ２）ｎＯＣ（Ｏ）、ＣＨ２ＯＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｎＯＣ（Ｏ）ＣＨ２、ＣＨ２ＮＲＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｎＮＲＣ（Ｏ）ＣＨ２、ＣＨ２ＯＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｎＮＲＣ（Ｏ）ＣＨ２、ＣＨ２ＮＲＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｎＯＣ（Ｏ）ＣＨ２、ＣＨ２ＮＲ（ＣＨ２）ｎＮＲＣＨ２、ＣＨ２Ｏ（ＣＨ２）ｎＯＣＨ２、ＣＨ２Ｏ（ＣＨ２）ｎＮＲＣＨ２、及びＣＨ２ＮＲ（ＣＨ２）ｎＯＣＨ２からなる群より選択され、式中のｎは２〜６の間に含まれ、そしてＲは上記で定義されているとおりであり、
そして、前記アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、シクロアルキル基、アリール基、及び複素環基は置換されていてもよい。
【請求項２】
式（Ｉ）の３−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン誘導体、又はその一般式（ＩＩ）の二量体においてＺがＯである、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
前記アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、シクロアルキル基、アリール基、及び複素環基が、ハロゲン、シアノ、ニトロ、アミノ、ヒドロキシ、カルボン酸、カルボニル、及びＣ１−６アルキルからなる群より選択される１つ以上の部分で置換されていてもよい、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項４】
式（Ｉ）の３−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン誘導体、又はその一般式（ＩＩ）及び（ＩＩＩ）の二量体が、以下の化学式を有している化合物から選択される、請求項１に記載の医薬組成物。
【表１】
2005530834.tif 000025
【表２】
2005530834.tif 000026
【表３】
2005530834.tif 000027
【表４】
2005530834.tif 000028
【表５】
2005530834.tif 000029
【表６】
2005530834.tif 000030
【表７】
2005530834.tif 000031
【表８】
2005530834.tif 000032
【表９】
2005530834.tif 000033
【表１０】
2005530834.tif 000034
【表１１】
2005530834.tif 000035
【表１２】
2005530834.tif 000036
【表１３】
2005530834.tif 000037
【表１４】
2005530834.tif 000038
【表１５】
2005530834.tif 000039
【表１６】
2005530834.tif 000040
【表１７】
2005530834.tif 000041
【表１８】
2005530834.tif 000042
【請求項５】
医薬的に受容可能な賦形剤及び／又は希釈剤を更に含有している、請求項１〜４に記載の医薬組成物。
【請求項６】
以下を治療する医薬組成物の調製のための、請求項１〜４に記載の式（Ｉ）の３−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン誘導体、その一般式（ＩＩ）又は（ＩＩＩ）の二量体、及びそれらの混合物の使用：
ｉ）中枢、末梢、又は自律神経系の神経変性疾患、炎症性疾患、毒性疾患、外傷性疾患、又は血管障害、低酸素、虚血、火傷、化学療法、種々の起源からの毒性化合物（アルコールを含む）、感染物、外傷（外科手術による外傷を含む）に起因する運動ニューロン軸索切断に伴う神経損傷、感覚神経、運動神経、又は感覚運動神経の障害、あるいは種々の病因に伴う自律神経の機能障害、遺伝病、種々の原因による神経疾患、一部の眼病、種々の原因による角膜疾患、消化管の運動低下又は膀胱緊張減退症による疾患、内分泌系の腫瘍性の疾患、学習過程の刺激が有効である臨床状態、更には、神経細胞のアポトーシスプロセスによって生じる全ての病的状態；
ｉｉ）ＮＧＦの生体内利用能力の低下又は欠如が原因である後天性免疫不全疾患；
ｉｉｉ）新脈管形成の刺激が有効である症状；
ｉｖ）ある種の眼病。
【請求項７】
前記中枢、末梢、又は自律神経系の神経変性疾患、炎症性疾患、毒性疾患、外傷性疾患、又は血管障害が、アルツハイマー病（ＡＤ）、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、ハンチントン病、多発性硬化症、癲癇、ダウン症、感音難聴、メニエール病から選択される、請求項６に記載の式（Ｉ）の３−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン誘導体、その一般式（ＩＩ）又は（ＩＩＩ）の二量体、及びそれらの混合物の使用。
【請求項８】
前記感染物に伴う神経損傷が、ポリオ及びＨＩＶウイルスから選択される、請求項６に記載の式（Ｉ）の３−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン誘導体、その一般式（ＩＩ）又は（ＩＩＩ）の二量体、及びそれらの混合物の使用。
【請求項９】
前記遺伝病が、シャルコー−マリー−ツース病、レフサム病、無β−リポタンパク血症、ダンジアー病、クラッベ病、異染性白質萎縮症、ファブリー病、ドゥジュリーヌ−ソッタ病から選択される、請求項６に記載の式（Ｉ）の３−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン誘導体、その一般式（ＩＩ）又は（ＩＩＩ）の二量体、及びそれらの混合物の使用。
【請求項１０】
前記種々の原因による神経疾患が、大脳皮質のびまん性萎縮、レヴィー小体痴呆、ピックス病、メゾリンボコルチカル痴呆（ｍｅｓｏｌｉｍｂｏｃｏｒｔｉｃａｌ  ｄｅｍｅｎｔｉａ）、神経セロイドリポフスチノーシス、視床変性、皮質線条体脊椎変性、皮質基部神経節変性、大脳−小脳変性、痙性不全対麻痺を伴う家族性痴呆、ポリグルコサン小体の疾患（ｐｏｌｙｇｌｕｃｏｓａｎ  ｂｏｄｉｅｓ  ｄｉｓｅａｓｅ）、シャイ−ドレーガー症候群、オリーブ橋小脳萎縮、進行性核上性麻痺、変形性筋ジストロフィー、ハレルフォルデン−シュパッツ症候群、メージュ症候群、家族性の震え、ジル・ド・ラ・ツレット症候群、舞踏病有棘赤血球増加症、フリートライヒ運動失調、ホームズ小脳皮質家族性萎縮症（Ｈｏｌｍｅｓ’ｃｏｒｔｉｃｏｃｅｒｅｂｅｌｌａｒ  ｆａｍｉｌｉａｌ  ａｔｒｏｐｈｙ）、ゲルストマン−シュトロイスラー−シャインカー症候群、進行性脊髄性筋萎縮症、痙性対麻痺、腓骨筋萎縮症、肥厚性間質性多発性ニューロパシー、及び遺伝性の多発性運動失調症から選択される、請求項６に記載の式（Ｉ）の３−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン誘導体、その一般式（ＩＩ）又は（ＩＩＩ）の二量体、及びそれらの混合物の使用。
【請求項１１】
前記眼病が、視神経のニューロパシー、網膜変性、眼筋麻痺及び緑内障から選択され、前記種々の原因の角膜疾患が、神経栄養性潰瘍、外傷後及び感染後の角膜疾患から選択される、請求項６に記載の式（Ｉ）の３−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン誘導体、その一般式（ＩＩ）又は（ＩＩＩ）の二量体、及びそれらの混合物の使用。
【請求項１２】
前記消化管の運動低下又は膀胱緊張減退症による疾患が、間質性膀胱炎又は糖尿病性膀胱炎から選択される、請求項６に記載の式（Ｉ）の３−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン誘導体、その一般式（ＩＩ）又は（ＩＩＩ）の二量体、及びそれらの混合物の使用。
【請求項１３】
前記新脈管形成の刺激が有効である症状が、心筋梗塞、脳卒中、脳内動脈瘤、胃−十二指腸潰瘍、創傷治癒、又は末梢血管症から選択される、請求項６に記載の式（Ｉ）の３−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン誘導体、その一般式（ＩＩ）又は（ＩＩＩ）の二量体、及びそれらの混合物の使用。
【請求項１４】
前記後天性免疫不全疾患が老化による免疫不全である、請求項６に記載の式（Ｉ）の３−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン誘導体、その一般式（ＩＩ）又は（ＩＩＩ）の二量体、及びそれらの混合物の使用。
【請求項１５】
神経細胞の増殖、及び／あるいはインビボ、インビトロ、又はエキソビボでの生存を促進するための試薬としての、請求項１〜４に記載の式（Ｉ）の３−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン誘導体、その一般式（ＩＩ）又は（ＩＩＩ）の二量体、及びそれらの混合物の使用。
【請求項１６】
前記神経細胞が、ドーパミン作用性ニューロン、コリン作用性ニューロン、感覚ニューロン、線条体細胞、皮質細胞、線条体の細胞、海馬の細胞、小脳の細胞、嗅球の細胞、抹消水道周囲細胞、縫線核の細胞、青斑核の細胞、後根神経節の細胞、交感神経ニューロン、下位運動ニューロン、神経幹細胞、あるいは神経プラークから何らかの方法で生じる細胞からなる群より選択される、請求項１５に記載の式（Ｉ）の３−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン誘導体、その一般式（ＩＩ）又は（ＩＩＩ）の二量体、及びそれらの混合物の使用。
【請求項１７】
移植目的の外植された角膜の保存に有用な培地及び保存媒体の調製のための、請求項１〜４に記載の式（Ｉ）の３−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン誘導体、その一般式（ＩＩ）又は（ＩＩＩ）の二量体、及びそれらの混合物の使用。
【請求項１８】
適切な試薬（造影剤、放射性同位元素、蛍光試薬等）で標識され、ニューロトロフィンレセプターを含む組織及び臓器の画像診断において医療的な画像化目的のために有用な手順によって処理することができる、請求項１〜４に記載の式（Ｉ）の３−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン誘導体、その一般式（ＩＩ）又は（ＩＩＩ）の二量体、及びそれらの混合物の使用。
【請求項１９】
薬剤の使用及び効力をモニタリングするため、又はニューロトロフィンレセプターが関係している哺乳動物の疾患の診断のための、請求項１８に記載の式（Ｉ）の３−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン誘導体、その一般式（ＩＩ）又は（ＩＩＩ）の二量体、及びそれらの混合物の使用。
【請求項２０】
以下の番号で示され、かつ請求項４に記載されている化合物を除く、請求項１に記載の式（Ｉ）の３−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン誘導体、及びその一般式（ＩＩ）又は（ＩＩＩ）の二量体：
１、２、５、７、８、９、１０、１２、１３、１７、１９、２０、２１、３２、３４、３５、３６、３８、４０、４４、５８、６０、６４、６５、６６、７０、７５、７６、
７７、７８、７９、８３、８７、９１、９５、９９、１０１、１０３、１３８、１４５、１５２、１５４、１６３、１６４、１６８、１７２、１７４、１７６、１７８、１８４、１８６、１９２、３２２、３２４。
【請求項２１】
以下の番号で示され、かつ請求項４に記載されている化合物から選択される、請求項２０に記載の式（Ｉ）の３−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン誘導体、及びその一般式（ＩＩ）又は（ＩＩＩ）の二量体：
３、４、６、１１、１４−１６、１８、２２−３１、３３、３７、３９、４１−４３、４５−５７、５９、６１−６３、６７−６９、７１−７４、８０−８２、８４−８６、８８−９０、９２−９４、９６−９８、１００、１０２、１０４−１３７、１３９−１４４、１４６−１５１、１５３、１５５−１６２、１６５−１６７、１６９−１７１、１７３、１７５、１７７、１７９−１８３、１８５、１８７−１９１、１９３−３２１、３２３、３２５−４６１。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、一般式（Ｉ）の３−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン誘導体、以下に記載されるその一般式（ＩＩ）又は（ＩＩＩ）の二量体、あるいはそれらの混合物を含む医薬組成物に関し、これは、ニューロトロフィン機能、特に神経成長因子（ＮＧＦ）のニューロトロフィン機能が変化している病状の治療に有用である。
【背景技術】
【０００２】
多数のタンパク質及びポリペプチド因子により、細胞増殖及び／又は生存が調節されている。そのような因子のうちで最初に同定され機能が特徴付けられたものがＮＦＧである。追って同じＮＧＦファミリーに属する他のタンパク質が同定され、これらは別の神経細胞の集団に対してその活性を発揮する。これらのタンパク質の全てをまとめて「ニューロトロフィン」と呼ぶ。
【０００３】
ＮＧＦは、特異的な表面レセプターと相互作用すると、胚発生の間及び成体の生涯にわたって神経細胞死を妨げる。ＮＧＦの投与は病的状態、例えば、中枢神経系（ＣＮＳ）の変性疾患及び虚血性障害、脊髄損傷、及び興奮性アミノ酸の毒性において有効であると証明された。実際、他の神経栄養因子と共に、ＮＧＦはニューロンの再生を促進し、そしてニューロンの機能を支援する。
【０００４】
ＮＧＦの治療上の使用は、その血液脳関門を通過する能力が低いことにより限られており、その原因の一部は本来の因子である分子サイズにある。従って、この天然リガンドの活性を特異的に模倣できる非ペプチド化合物の開発が、このような限界をうまく回避するための有用なアプローチである。このような化合物の適切な例は：ａ）ＰＫＣｃ活性を変化させることによりおそらくＮＧＦを模倣する、ホルボールエステル類；ｂ）後根神経節、又は他の交感神経、ニューロンからの神経成長を促進する、ガングリオシド及び他の無関係な脂質化合物；ｃ）ＰＣ１２細胞の生存を支援し、その中での神経成長を誘導することができる小さい化合物である、Ｔｒｉａｐ（１，１，３−トリシアノ−２−アミノ−１−プロペン）である。上記の全ての化合物に関して、分子の活性はＮＧＦレセプターとの相互作用によっては影響されない。それゆえ、ヒトのニューロトロフィンの特異的レセプターと相互作用できる、したがってアゴニスト又はアンタゴニストとして作用する、新しい非ペプチド化合物の開発が最も重要であり、なぜならそれらは、ニューロトロフィンの活性の不足又は過剰が関係している疾患の治療のための薬剤として使用できる可能性があるからである。
【特許文献１】欧州特許出願第００１０４１３５．９−２１１７号
【特許文献２】国際特許出願番号第ＷＯ０１／６４６８６号
【非特許文献１】Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９９９、６４、７３４７、Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｌｅｔｔｅｒｓ、２０００、２、３９８７−３９９０
【非特許文献２】Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ  ＆  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  ２００１、９、１６２５−１６３２
【非特許文献３】Ｅｕｒ、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．２００２、８７３−８８０
【非特許文献４】Ｌｕｃａｓ  Ｈ．Ｊ．，Ｂａｕｍｇａｒｔｅｎ  Ｗ．，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１９４１，６３，１６５４
【非特許文献５】Ｋｅｒｍａｋ，Ｗ．Ｏ．；Ｐｅｒｋｉｎ，Ｗ．Ｈ．；Ｒｏｂｉｎｓｏｎ，Ｒ．、Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，Ｔｒａｎｓ，１９２２，１２１，１８７２
【非特許文献６】Ｔｈｏｍｐｓｏｎ，Ｄ．Ｋ．；Ｈｕｂｅｒｔ，Ｃ．Ｎ．；Ｗｉｇｈｔｍａｎ，Ｒ．Ｈ．  Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  １９９３，４９，３８２７−３８４０
【非特許文献７】Ｒ  Ｓｉｍｏｎｏｆｆ及びＷ．Ｈ  Ｈａｒｔｕｎｇ，Ｊ．Ａｍ．Ｐｈａｒｍ．Ａｓｓｏｃ．，３５，３０６，１９４６
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
ここで出願人らは、以下に記載される一般式（Ｉ）の３−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン誘導体とその一般式（ＩＩ）及び（ＩＩＩ）の二量体がヒトのニューロトロフィンのアゴニストとして有効であり、従って、それらがニューロトロフィン機能、特にＮＧＦ機能が欠損している疾患の治療用の医薬組成物の製造に有用であることを思いがけなく発見した。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
従って、本発明の目的は、一般式（Ｉ）の３−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン誘導体、又はその一般式（ＩＩ）及び（ＩＩＩ）の二量体、又はそれらの混合物のうち少なくとも１つを有効成分として含有している医薬組成物である。
【０００７】
【化２】
2005530834.tif 000003
【０００８】
式中、
Ｒ１及びＲ’１は互いに同じであっても異なっていてもよく、Ｈ、Ｃ１−８アルキル、Ｃ２−８アルケニル、Ｃ２−８アルキニル、シクロアルキル、アリール、複素環、アリールＣ１−８アルキル；複素環Ｃ１−８アルキル、ＲＲ’Ｎ−Ｃ１−８アルキル、ＲＲ’Ｎ−アリール、ＦｍｏｃＮＲ’−アリール、ＢｏｃＮＲ’−アリール、ＣＢｚＮＲ’−アリール、ＲＯ−アリール、Ｒ（Ｏ）Ｃ−アリール、ＲＯ（Ｏ）Ｃ−アリール、ＲＲ’Ｎ（Ｏ）Ｃ−アリール；ＦｍｏｃＮＲ’−Ｃ１−８アルキル、ＢｏｃＮＲ’−Ｃ１−８アルキル、ＣｂｚＮＲ’−Ｃ１−８アルキル、ＦｍｏｃＮＲ’−Ｃ１−８アリール、ＢｏｃＮＲ’−Ｃ１−８アリール及びＣｂｚＮＲ’−Ｃ１−８アリールからなる群より選択され、
Ｒ２及びＲ’２は互いに同じであっても異なっていてもよく、Ｈ、Ｃ１−８アルキル、Ｃ２−８アルケニル、Ｃ２−８アルキニル、シクロアルキル、アリール、アリールＣ１−８アルキル、複素環Ｃ１−８アルキル、アミノＣ１−８アルキル、アミノアリール、Ｃ１−８アルキルオキシアリール、ヒドロキシアリール、ヒドロキシＣ１−８アルキル、カルボキシＣ１−８アルキル、メチルオキシカルボニルＣ１−８アルキル、カルボキシアリール、カルボアルキルオキシアリール、アルキルカルバモイルアリール、及び（アミノ酸の側鎖）からなる群より選択されるか、あるいは、
Ｒ１とＲ２が一緒になって、そしてＲ１’とＲ２’が一緒になって、Ｃ１−４アルキル、Ｃ２−４アルケニル、シクロアルキル又はベンゼン縮合シクロアルキルであって３、４、５、６項間の架橋を形成し、
Ｒ３及びＲ３’は、Ｈ、Ｃ１−８アルキル、Ｃ２−８アルケニル、Ｃ２−８アルキニル、シクロアルキル、アリール、アリールＣ１−８アルキル、複素環Ｃ１−８アルキル、ＲＲ’ＮＣ１−８アルキル、ＲＲ’Ｎアリール、ＲＯ−Ｃ１−８アルキル、ＲＯ（Ｏ）Ｃ−Ｃ１−８アルキル、Ｒ（Ｏ）Ｃ−Ｃ１−８アルキル、ＲＣ（Ｏ）Ｏ−Ｃ１−８アルキル、ＲＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）Ｃ１−８アルキル、ＲＯ−アリール、ＲＯ（Ｏ）Ｃ−アリール、Ｒ（Ｏ）Ｃ−アリール、ＲＣ（Ｏ）Ｏ−アリール、ＲＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ）アリール、−ＣＨ（アミノ酸側鎖）ＣＯ２Ｒ、−ＣＨ（アミノ酸側鎖）Ｃ（Ｏ）ＮＲ、−ＣＨ（ＣＯ２Ｒ）−アミノ酸側鎖、ＣＨ（ＣＯＮＲＲ’）−アミノ酸側鎖、Ｆｍｏｃ、Ｂｏｃ、及びＣｂｚからなる群より選択され、
Ｒ４、Ｒ’４、Ｒ５、及びＲ’５は互いに同じであっても異なっていてもよく、Ｈ、Ｃ１−８アルキル、Ｃ２−８アルケニル、Ｃ２−８アルキニル、シクロアルキル、アリール、複素環、アリールＣ１−８アルキル、及び複素環Ｃ１−８アルキルからなる群より選択され、
Ｒ６は、Ｈ、Ｃ１−８アルキル、Ｃ２−８アルケニル、Ｃ２−８アルキニル、シクロアルキル、アリール、アリールＣ１−８アルキル、複素環、複素環Ｃ１−８アルキル；−Ｃ（Ｏ）Ｒ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲＲ’、ＣＨ２ＯＲ、ＣＨ２ＮＲＲ’、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−ＣＨ（アミノ酸側鎖）Ｃ（Ｏ）ＯＲ、ＣＨ２ＮＲ−Ｆｍｏｃ、ＣＨ２ＮＲ−Ｂｏｃ、及びＣＨ２ＮＲ−ＣＢｚからなる群より選択され、
Ｒ及びＲ'は互いに同じであっても異なっていてもよく、Ｈ、Ｃ１−８アルキル、Ｃ２−８アルケニル、Ｃ２−８アルキニル、シクロアルキル、アリール、複素環、アリールＣ１−８アルキル；複素環Ｃ１−８アルキル；保護基、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ−（アミノ酸側鎖）−ＮＨＴ、−ＮＨ−ＣＨ（アミノ酸側鎖）ＣＯＯＴ、及びＣＨ（アミノ酸側鎖）ＣＯＯＴからなる群より選択され、
式中、ＴはＨ及びＣ１−８アルキルから選択され；
Ｘ及びＸ’は、ａが二重結合である場合には、互いに同じであっても異なっていてもよく、Ｏ及びＳから選択され、また、
Ｘ及びＸ’は、ａが単結合である場合にはいずれもＨであり、
Ｙ及びＺは、互いに同じであっても異なっていてもよく、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２及びＮ−Ｒからなる群より選択され、式中のＲは上記で定義されているとおりであり；
Ｑは、Ｃ＝Ｏ、ＣＨ２、ＣＯ−ＮＨ−ＣＨ（アミノ酸側鎖）−ＣＯ、ＣＯＮＲ（ＣＨ２）ｎＣＯ、ＣＯＮＲ−Ｃ２−８アルケニル−ＣＯ、Ｃ（Ｏ）Ｏ（ＣＨ２）ｎＣＯ、ＣＨ２ＯＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｎＣＯ、及びＣＨ２ＮＲＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｎＣＯからなる群より選択され、式中のｎは２〜６の間に含まれ、そしてＲは上記で定義されているとおりであり；
Ｑ’は、Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ２、Ｃ（Ｏ）ＮＲＣＨ２、ＣＨ２ＯＣ（Ｏ）、ＣＨ２ＮＲＣ（Ｏ）、ＣＯＮＲ（ＣＨ２）ｎＮＲＣＯ、ＣＯＮＲ−Ｃ２−８アルケニル−ＮＲＣＯ、Ｃ（Ｏ）Ｏ（ＣＨ２）ｎＮＲＣＯ、ＣＯＮＲ（ＣＨ２）ｎＯＣ（Ｏ）、ＣＨ２ＯＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｎＯＣ（Ｏ）ＣＨ２、ＣＨ２ＮＲＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｎＮＲＣ（Ｏ）ＣＨ２、ＣＨ２ＯＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｎＮＲＣ（Ｏ）ＣＨ２、ＣＨ２ＮＲＣ（Ｏ）（ＣＨ２）ｎＯＣ（Ｏ）ＣＨ２、ＣＨ２ＮＲ（ＣＨ２）ｎＮＲＣＨ２、ＣＨ２Ｏ（ＣＨ２）ｎＯＣＨ２、ＣＨ２Ｏ（ＣＨ２）ｎＮＲＣＨ２、及びＣＨ２ＮＲ（ＣＨ２）ｎＯＣＨ２からなる群より選択され、式中のｎは２〜６の間に含まれ、そしてＲは上記で定義されているとおりであり；
そして、上記に記載されたアルキル基、アルケニル基、アルキニル基、シクロアルキル基、アリール基、及び複素環基は置換されていてもよい。
【０００９】
本発明の更なる目的は、上記の一般式（Ｉ）の新規の３−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン誘導体、ならびにその一般式（ＩＩ）及び（ＩＩＩ）の二量体である。
【００１０】
本発明の更なる目的は、上記の一般式（Ｉ）の３−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン誘導体、ならびにその一般式（ＩＩ）及び（ＩＩＩ）の二量体を以下の治療に有効な医薬組成物の調製に使用することである：
ｉ）中枢神経系の神経変性疾患、例えば、アルツハイマー病（ＡＤ）、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、ハンチントン病、ニューロパシー、低酸素、虚血、又は外傷により生じる神経障害、これらは神経細胞のアポトーシスを引き起こす；
ｉｉ）ＮＧＦの生体内利用能力の低下が関係している後天性免疫不全疾患、例えば、老化による免疫不全；
ｉｉｉ）新脈管形成の刺激が結果的に有効である疾患、例えば、心筋梗塞、脳卒中、又は末梢血管症；
ｉｖ）ある種の眼病、例えば、多様な原因による角膜炎、緑内障、網膜の変性状態又は炎症症状。
【００１１】
本発明の更なる目的は、上記の一般式（Ｉ）の３−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン誘導体、その一般式（ＩＩ）及び（ＩＩＩ）の二量体、ならびにそれらの混合物を、移植目的で外植された角膜の保存に有用な培地及び保存媒体の調製に使用すること、ならびに、神経細胞のインビボ、インビトロ、又はエキソビボでの増殖及び／又は生存を促進するために使用することである。
【００１２】
本発明の主題は、適切な試薬（造影剤、放射性同位元素、蛍光試薬等）で標識され、そして医療的な画像化目的に有用な任意の手順で処理された、上記の一般式（Ｉ）の新規の３−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン誘導体、その一般式（ＩＩ）及び（ＩＩＩ）の二量体、ならびにそれらの混合物の使用であり、その目的は、ニューロトロフィンレセプターを含む組織及び臓器のインビトロ又はインビボのいずれかでの画像診断であり、特に薬剤の使用及び効力をモニタリングすること、更には、ニューロトロフィンレセプターが関係している哺乳動物の疾患の診断である。
【００１３】
本発明の医薬組成物の特徴及び利点は、以下の説明に詳細に記載される。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１４】
本発明においては、表現「アミノ酸側鎖」によって、自然界に存在しているＬ又はＤアミノ酸、あるいは希なアミノ酸又は自然界には存在しないアミノ酸の側鎖部分が意味される。
【００１５】
特に断りがなければ、用語アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アリールアルキル、シクロアルキル、及び複素環は、本発明で使用される場合には、望ましくは以下を意味する：
−Ｃ１−８アルキル、Ｃ２−８アルケニル、及びＣ２−８アルキニルは、それぞれ、単結合のみ、二重結合を少なくとも１つ、三重結合を少なくとも１つ有している直鎖又は分岐鎖のアルキルラジカルをいう。本発明のアルキル基の例としては、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、へプチル、オクチルを挙げることができるが、これらに限定されない。本発明のアルケニル基の例としては、エテニル、プロペニル、１−ブテニル、シス−２−ブテニル、トランス−２−ブテニル、２−メチル−１−プロペニル、１−ペンテニル、シス−２−ペンテニル、トランス−２−ペンテニル、２−メチル−２−ブテニルを挙げることができるが、これらに限定されない。本発明のアルキニル基の例としては、エチニル、プロピニル、１−ブチニル、２−ブチニル、１−ペンチニル、３−メチル−１−ブチニルを挙げることができるが、これらに限定されない；
−用語“シクロアルキル”によって、通常は３〜８員環、好ましくは５〜６員環である、炭素原子を含む環が意味される。シクロアルキル基の例としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロへプチル、シクロオクチル、ノルボルナニル、カンファニル、アダマンタニルを挙げることが出来るが、これらに限定されない；
−用語“アリール”は、１つ以上の不飽和環を含む基を意味し、それぞれの環は５〜８員環、好ましくは、５又は６員環である。アリール基の例としては、フェニル、ビフェニル、及びナフチルを挙げることができるが、これらに限定されない；
−用語“複素環”は、１つ以上のヘテロ原子、好ましくは１つ以上のＮ原子を含む、飽和又は芳香族複素環をいう。複素環の例としては、ピリジン、イミダゾール、ピロール、インドール、トリアゾール、ピロリジン、ピペリジンを挙げることができるが、これらに限定されない；
−用語「アリールアルキル」は、上記で定義されたアルキル及びアリール置換基を有している基をいう。アリールアルキルの例としては、エチルフェニル、イソブチルフェニル、ベンジル、エチルベンジル、プロピルベンジル、イソプロピルベンジル、ブチルベンジル、イソブチルベンジル、シクロエキシルベンジル（ｃｙｃｌｏｅｘｙｌｂｅｎｚｙｌ）、スチレニル、及びビフェニルを挙げることができるが、これらに限定されない。
【００１６】
本発明では、フルオレニルメトキシカルボニル基、ｔ−ブチルオキシカルボニル基、カルボキシベンジル基、ベンジル基、フェニル基、及びアセチル基は、それぞれ慣用用語Ｆｍｏｃ、Ｂｏｃ、Ｃｂｚ、Ｂｎ、Ｐｈ、及びＡｃを使用して示される。
【００１７】
ＺがＯである式（Ｉ）、（ＩＩ）、及び（ＩＩＩ）の本発明の化合物が好ましい。
【００１８】
本発明によれば、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基、シクロアルキル基、アリール基、及び複素環基は、１つ以上の部分、好ましくは、ハロゲン、シアノ、ニトロ、アミノ、ヒドロキシ、カルボン酸、カルボニル、及びＣ１−６アルキルからなる群より選択される１つ又は２つの部分で置換されていてもよい。用語「ハロゲン」は、フッ素、塩素、臭素、及びヨウ素をいう。
【００１９】
本発明の一般式（Ｉ）、（ＩＩ）、及び（ＩＩＩ）の化合物のうち、ニューロトロフィン、特に、ヒトＮＧＦに対するそのアゴニスト活性を特に目的として得られた特異的な化合物が、以下の表１〜４に示される。従って、これら化合物は本発明の医薬組成物の調製に好ましく使用される。
【００２０】
【表１９】
2005530834.tif 000004
【００２１】
【表２０】
2005530834.tif 000005
【００２２】
【表２１】
2005530834.tif 000006
【００２３】
【表２２】
2005530834.tif 000007
【００２４】
【表２３】
2005530834.tif 000008
【００２５】
【表２４】
2005530834.tif 000009
【００２６】
【表２５】
2005530834.tif 000010
【００２７】
【表２６】
2005530834.tif 000011
【００２８】
【表２７】
2005530834.tif 000012
【００２９】
【表２８】
2005530834.tif 000013
【００３０】
【表２９】
2005530834.tif 000014
【００３１】
【表３０】
2005530834.tif 000015
【００３２】
【表３１】
2005530834.tif 000016
【００３３】
【表３２】
2005530834.tif 000017
【００３４】
【表３３】
2005530834.tif 000018
【００３５】
【表３４】
2005530834.tif 000019
【００３６】
【表３５】
2005530834.tif 000020
【００３７】
【表３６】
2005530834.tif 000021
【００３８】
具体的には、式（ＩＩ）及び（ＩＩＩ）の二量体が関係している限りは、全ての可能な立体異性体の可能性があるが、上記の表３及び表４には正確には特定されていない。
【００３９】
更に、本発明は、出願人らにより調製され、初めて本出願書に記載された３−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタンの誘導体及びその二量体に関する。すなわち、上記で定義された３−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン誘導体（Ｉ）とその一般式（ＩＩ）及び（ＩＩＩ）の二量体であって、ただし以下の化合物を除くものに関する：１、２、５、７、８、９、１０、１２、１３、１７、１９、２０、２１、３２、３４、３５、３６、３８、４０、４４、５８、６０、６４、６５、６６、７０、７５、７６、７７、７８、７９８３、８７、９１、９５、９９、１０１、１０３、１３８、１４５、１５２、１５４、１６３、１６４、１６８、１７２、１７４、１７６、１７８、１８４、１８６、１９２、３２２、３２４。
【００４０】
上記の化合物は、非特許文献１（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．１９９９、６４、７３４７、Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｌｅｔｔｅｒｓ、２０００、２、３９８７−３９９０）、非特許文献２（Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ  ＆  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  ２００１、９、１６２５−１６３２）、非特許文献３（Ｅｕｒ、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．２００２、８７３−８８０）、及び特許文献１（欧州特許出願第００１０４１３５．９−２１１７号）、及び特許文献２（国際特許出願番号第ＷＯ０１／６４６８６号）にすでに実際に記載されている。それらの化合物の調製方法もそのような文献に記載されている。
【００４１】
一般式（Ｉ）の３−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタンの新規の誘導体、ならびにその一般式（ＩＩ）及び（ＩＩＩ）の二量体は、以下の方法で調製してよい。初めて本出願書に記載された一般式（Ｉ）の新規の化合物とそれらに対応する式（ＩＩ）及び（ＩＩＩ）の二量体は、以下の反応図式１に示される手順に従って調製することができる：
【００４２】
【化３】
2005530834.tif 000022
【００４３】
保護されているα−アミノアルデヒド（３ａ）又はα−アミノケトン（３ｂ）又はα−アミノアルコール（３ｃ）を、酒石酸の活性化誘導体、例えばジアセチルオキシ酒石酸無水物４（Ｒ，Ｒ又はＳ，Ｓ）と、又は酒石酸の酸誘導体、例えばそれの保護されているモノ−メチルエステル６（Ｒ，Ｒ又はＳ，Ｓ）と、カップリング剤及び活性化剤の存在下で反応させるか、あるいは、エリスロラクトール５（Ｄ−アラビノースから調製されたＲ，Ｒ、又はＬ−アラビノースから調製されたＳ，Ｓ）の保護されている誘導体と還元的アミノ化によって反応させた。対応するアミド７及び９は、反応図式１ではＲ，Ｒエナンチオマーのみが示されているが、エナンチオマーＳ，Ｓも同様に調製され、またアミン８は、反応図式１ではＲ，Ｓエナンチオマーのみが示されているが、Ｓ，Ｒエナンチオマーも同様に調製される。アミドアルコール９の場合には、対応するアルデヒド又はケトン１０が酸化によって得られる。アミン８中のＲ３がＨである場合は、Ｆｍｏｃ保護を行うことができる。化合物７，８、及び１０（反応図式１）の更なる環化は、ＳＯＣｌ２及びＭｅＯＨでの処理によって起こり（反応条件ｉ）、その後、還流トルエン中でＳｉＯ２上に吸着させられた硫酸で処理するか（反応条件ｉｉ）、又は純トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）で、もしくは塩化メチレン中（反応条件ｉｉｉ）で処理する。このように、アミド７及び１０から開始すると、Ｘ＝Ｏ及びＲ６＝−ＣＯＯＭｅがエキソ配置である化合物Ｉが調製される。アミン８の場合には、Ｘ＝Ｈ、Ｈ、及び基Ｒ６＝−ＣＨ２ＯＨがエンド配置である化合物Ｉが調製される。Ｃ−１橋頭及びＣ−７（カルボン酸基又はヒドロキシメチル基を有している）の立体中心での配置Ｒ，Ｒ又はＳ，Ｓは、酒石酸の立体配置又は最初のエリスロラクトールの立体配置による。化合物Ｉは、反応図式２に従って修飾してもよい。
【００４４】
【化４】
2005530834.tif 000023
【００４５】
Ｘ＝Ｏである式（Ｉ）（アミド型）の化合物は、錯体ＢＨ３硫化ジメチルを用いることにより、対応するアミノエステルＩ（Ｘ＝Ｈ、Ｈ、Ｒ６＝ＣＯＯＭｅ）又は対応するアミノアルコールＩ（Ｘ＝Ｈ、Ｈ、Ｒ６＝ＣＨ２ＯＨ）へと還元してよい。このような化合物は、窒素原子へと脱保護される。アミノエステルＩ（Ｘ＝Ｈ、Ｈ、Ｒ６＝ＣＯＯＭｅ）の加水分解は、酸条件又は塩基条件のいずれかで行ってよく、対応するアミノ酸Ｉ（Ｘ＝Ｈ、Ｈ、Ｒ６＝ＣＯＯＨ）を生じる。このアミノ酸はまた、Ｊｏｎｅｓ酸化によって、又はＤＭＦ中のＰＤＣを用いて、アミノアルコールＩ（Ｘ＝Ｈ、Ｈ、Ｒ６＝ＣＨ２ＯＨ）から、またベンジル基をＢｏｃ又はＦｍｏｃに転換してから得てもよい。カルボキシル基の活性化により、アミンＮＨＲ７Ｒ８又はアミノ酸とのアミド結合が形成される。あるいは、アミノ酸Ｉの活性化されたカルボキシル基を、脱保護された窒素を有するＩの別のユニットと反応させると、表３に示される一般式（ＩＩ）の二量体が生じる。
【００４６】
あるいは、それぞれの形態の式（Ｉ）の化合物の２つのユニットをスペーサーＱと反応させると、一般式（ＩＩＩ）の二量体が生じる。反応図式２に示される例には、ジアミン（Ｑ）が２つのユニットの活性化されたカルボン酸と反応して表４に示される式（ＩＩＩ）の二量体を生じる反応が挙げられているが、これに限定されない。
【００４７】
本発明の一般式（Ｉ）の３−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン誘導体、ならびにその一般式（ＩＩ）及び（ＩＩＩ）の二量体は、遊離の形態又は医薬的に受容可能な塩の形態で、通常の医薬品製造方法により医薬組成物の調製に使用することができる。
【００４８】
このような医薬品組成物は従来法で製剤してよく、また１つ以上の賦形剤及び／又は医薬的に受容可能な希釈剤を含んでもよい。
【００４９】
このような製剤の投与は通常の経路のいずれか（例えば、非経口により、液剤又は懸濁剤の形態で、経口、眼、鼻、局所等）で行うことができる。
【００５０】
本発明の式（Ｉ）の３−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン誘導体、ならびに（ＩＩ）及び式（ＩＩＩ）のその二量体の製剤としては、錠剤、カプセル剤、丸剤、小丸薬、液剤、分散剤、懸濁剤、リポソーム製剤、マイクロスフェア、ナノスフェア、クリーム剤、及び軟膏、乳剤及びエアゾールを挙げることができる。また、これらは、活性化合物の徐放又は遅延放出ができる方法で調製することもできる。
【００５１】
このような医薬組成物は、式（Ｉ）、（ＩＩ）、及び（ＩＩＩ）の本発明の化合物、又はそれらの混合物のうち少なくとも１つを活性主薬として含有すればよく、更には、病的状態により選択される他の活性主薬又は補助アジュバントと組み合わせて含有してもよい。
【００５２】
本発明の化合物を含む医薬組成物は、ニューロトロフィンの活性に関係している病的状態の医薬品治療に適している。
【００５３】
本発明の一般式（Ｉ）の３−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン誘導体及びその一般式（ＩＩ）の二量体は、ニューロトロフィンアゴニスト活性、特にＮＧＦのアゴニスト活性を示した。なぜなら、これらは、明確な親和性レベルでＮＧＦレセプター複合体と相互作用する性質を有しているからである。このアゴニスト化合物は、ニューロトロフィンの生物学的シグナルを誘導する性質を有している。このニューロトロフィンのアゴニスト化合物は、例えば以下の治療に有効な医薬組成物の調製に適している：
ｉ）中枢、末梢、又は自律神経系の神経変性疾患、炎症性疾患、毒性疾患、外傷性疾患、又は血管障害（例えば、アルツハイマー病（ＡＤ）、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、ハンチントン病、多発性硬化症、癲癇、ダウン症、感音難聴、メニエール病）、低酸素、虚血、火傷、化学療法、種々の起源からの毒性化合物（アルコールを含む）、感染物（例えば、ポリオウイルス又はＨＩＶウイルス）、外傷（外科手術による外傷を含む）に起因する運動ニューロン軸索切断に伴う神経損傷、感覚、運動、又は感覚運動の神経障害、あるいは種々の病因に伴う自律神経の機能障害（例えば、糖尿病、腎不全、又は他の全身性疾患）、遺伝病（例えばシャルコー−マリー−ツース病、レフサム病、無β−リポタンパク血症、ダンジアー病、クラッベ病、異染性白質萎縮症、ファブリー病、ドゥジュリーヌ−ソッタ病）、種々の原因による神経疾患（例えば、大脳皮質のびまん性萎縮、レヴィー小体痴呆、ピックス病、メゾリンボコルチカル痴呆、神経セロイドリポフスチノーシス、視床変性、皮質線条体脊椎変性、皮質基部神経節変性、大脳−小脳変性、痙性不全対麻痺症を伴う家族性痴呆、ポリグルコサン小体の疾患（ｐｏｌｙｇｌｕｃｏｓａｎ  ｂｏｄｉｅｓ  ｄｉｓｅａｓｅ）、シャイ−ドレーガー症候群、オリーブ橋小脳萎縮、進行性核上性麻痺、変形性筋ジストロフィー、ハレルフォルデン−シュパッツ症候群、メージュ症候群、家族性の震え、ジル・ド・ラ・ツレット症候群、舞踏病有棘赤血球増加症、フリートライヒ運動失調、ホームズ小脳皮質家族性萎縮症（Ｈｏｌｍｅｓ’  ｃｏｒｔｉｃｏｃｅｒｅｂｅｌｌａｒ  ｆａｍｉｌｉａｌａｔｒｏｐｈｙ）、ゲルストマン−シュトロイスラー−シャインカー症候群、進行性脊髄性筋萎縮症、痙性対麻痺、腓骨筋萎縮症、肥厚性間質性ニューロパシー、遺伝性の多発性運動失調症（ｐｏｌｙｎｅｕｒｉｔｉｃ  ａｔａｘｉｃ  ｈｅｒｅｄｏｐａｔｈｙ）、一部の眼病（例えば、視神経のニューロパシー、網膜変性、眼筋麻痺、緑内障）、種々の原因の角膜疾患（例えば、神経栄養性潰瘍、外傷後又は感染後の角膜疾患）、消化管の運動低下又は膀胱緊張減退症による疾患（例えば、間質性膀胱炎又は糖尿病による膀胱炎）、内分泌系の腫瘍性の疾患（例えば、プロラクチノーマ）、学習過程の刺激が有効である臨床状態（具体的には、痴呆症及び外傷後の症状）、更に神経細胞のアポトーシスプロセスによって生じる全ての病的状態；
ｉｉ）ＮＧＦの生体内利用能力の低下及び欠如が原因である後天性免疫不全疾患（例えば、老化による免疫不全）；
ｉｉｉ）新脈管形成の刺激が有効である症状（例えば、心筋梗塞、脳卒中、脳内動脈瘤、胃−十二指腸潰瘍、創傷治癒、又は末梢血管症）；
ｉｖ）ある種の眼病（例えば、多様な原因による角膜疾患及び緑内障）。
【００５４】
上記の一般式（Ｉ）の３−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン誘導体、ならびにその一般式（ＩＩ）及び（ＩＩＩ）の二量体はまた、移植目的の外植された角膜の保存に有用な培地及び保存媒体の調製に適している。
【００５５】
更に、適切な試薬（造影剤、放射性同位元素、蛍光試薬等）で標識され、そして医療的な画像診断目的に有用な任意の他の手順によって処理されている場合には、一般式（Ｉ）の本発明の３−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン誘導体、ならびにその一般式（ＩＩ）及び（ＩＩＩ）の二量体を、ニューロトロフィンレセプターを含む組織及び臓器のインビトロ又はインビボのいずれかでの画像診断に使用してよい。特に、このような標識された化合物は、薬剤の使用及び効力をモニタリングするため、又はニューロトロフィンレセプターが関係している哺乳動物の疾患の診断のために使用してよい。
【００５６】
一般的に本化合物は、ニューロトロフィンアゴニスト活性、特に、ＮＧＦアゴニスト活性を有し、代役としてニューロトロフィン及びＮＧＦの生物学的活性を十分に果たすことが証明された。
【００５７】
更に、本発明のニューロトロフィンアゴニスト化合物を使用すれば、インビボ、インビトロ、又はエキソビボでの神経細胞の増殖及び／又は生存の促進が可能であり、その神経細胞としてはドーパミン作用性ニューロン、コリン作用性ニューロン、感覚ニューロン、線条体細胞、皮質細胞、線条体の細胞、海馬の細胞、小脳の細胞、嗅球の細胞、中脳水道周囲細胞、縫線核の細胞、青斑核の細胞、後根神経節の細胞、交感神経ニューロン、下位運動ニューロン、神経幹細胞、あるいは神経プラークから何らかの方法で生じる細胞が挙げられるが、これらに限定されない。
【００５８】
以下の実施例記載により、本発明の非限定的な説明を行う。
【実施例１】
【００５９】
３−ベンジル−２−オキソ−（１Ｓ，５Ｓ，７Ｒ）−６，８−ジオキサ−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−７−エキソ−カルボン酸メチル（Ｘ＝Ｏ、Ｒ１＝Ｈ、Ｒ２＝Ｂｎ、Ｒ６＝（Ｒ）−ＣＯＯＭｅである式（Ｉ）の化合物）（化合物１）の調製
Ｒ，Ｒ無水酒石酸４（４ｇ）（非特許文献４：Ｌｕｃａｓ  Ｈ．Ｊ．，Ｂａｕｍｇａｒｔｅｎ  Ｗ．，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１９４１，６３，１６５４に記載されているように調製した）の無水ジクロロメタン（２３ｍｌ）中溶液と、記載されている（非特許文献５：Ｋｅｒｍａｋ，Ｗ．Ｏ．；Ｐｅｒｋｉｎ，Ｗ．Ｈ．；Ｒｏｂｉｎｓｏｎ，Ｒ．、Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，Ｔｒａｎｓ，１９２２，１２１，１８７２）ように調製した３ａ（式中、Ｘ＝Ｘ＝ＯＭｅ、Ｒ１＝Ｈ、Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝Ｂｎ）（３ｇ）とを室温で１５時間反応させた。溶媒を蒸発させると、７ａ（７ｇ）が油状物として得られた。ＣＨ３ＯＨ（４０ｍｌ）中の粗生成物７ａに塩化チオニルを０℃で一滴ずつ添加し（０．８ｍｌ）、その後、混合液を６０℃で１５時間加熱した。溶媒を蒸発させた後、すぐに、トルエン（８ｍｌ）中に溶解させた粗生成物を、トルエン（１２．５ｍｌ）中のＨ２ＳＯ４／ＳｉＯ２（３０重量％がＨ２ＳＯ４）（１．６ｇ）の還流懸濁物に添加した。１５分後、溶媒の３分の１を留去し、残りの熱い混合液をＮａＨＣＯ３の短いパッド上で濾過した。溶媒を蒸発させた後、粗生成物をクロマトグラフィーにより精製すると、純粋な表題化合物（２．８ｇ）が得られた。
【００６０】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ７．３２−７．１６（ｍ，５Ｈ），５．８４（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），４．９６（ｓ，１Ｈ），４．７４（ｓ，１Ｈ），４．５２（ｓ，２Ｈ），３．７７（ｓ，３Ｈ），３．３４（ｄｄ，Ｊ１＝１２．０Ｈｚ，Ｊ２＝２．０Ｈｚ，２Ｈ），３．０８（Ｊ＝１２．０Ｈｚ，１Ｈ）。Ｐ．ｆ．８２，［α］２５Ｄ＝−４９（ｃ１．０，ＣＨＣｌ３）。
【実施例２】
【００６１】
（１Ｒ，５Ｒ，７Ｓ）−３−ベンジル−２−オキソ−６，８−ジオキサ−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−７−エキソ−カルボン酸メチル（Ｘ＝Ｏ、Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝Ｂｎ、Ｒ６＝（Ｓ）−ＣＯＯＭｅである式（Ｉ）の化合物）（化合物１９１）の調製
実施例１と同じ手順に従って、無水Ｓ，Ｓ酒石酸４から出発して表題化合物を得た。
【００６２】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ７．４０−７．１０（ｍ，５Ｈ），５．８５（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），４．９７（ｓ，１Ｈ），４．７４（ｓ，１Ｈ），４．５２（ｓ，２Ｈ），３．７９（ｓ，３Ｈ），３．３４（ｄｄ，Ｊ１＝１２．０Ｈｚ，Ｊ２＝２．０Ｈｚ，２Ｈ），３．０９（Ｊ＝１２．０Ｈｚ，１Ｈ）。Ｐ．ｆ．８３，［α］２５Ｄ＝＋４８（ｃ１．０，ＣＨＣｌ３）。
【実施例３】
【００６３】
（１Ｓ，５Ｓ，７Ｒ）−３−ベンジル−６，８−ジオキサ−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−７−エキソ−カルボン酸メチル（Ｘ＝Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝Ｂｎ、Ｒ６＝（Ｒ）−ＣＯＯＭｅである式（Ｉ）の化合物）（化合物４０）の調製
ＢＨ３・Ｍｅ２Ｓの溶液（１Ｍ、２．５ｍｌ）を、０℃で、上記の実施例１で記載したように調製したＸ＝Ｏ、Ｒ１＝Ｈ、Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝Ｂｎ、Ｒ６＝（Ｒ）−ＣＯＯＭｅである式（Ｉ）の化合物（化合物１）（２．８ｇ）の無水ＴＨＦ（６５ｍｌ）中の溶液にゆっくりと添加した。混合液を室温で１８時間攪拌し、その後、エタノール（３ｍｌ）、ＮａＯＨ溶液（３Ｍ、２ｍｌ）及びＨ２Ｏ（１５０ｍｌ）を添加した。ジエチルエーテルでの抽出後、有機相を分離し、蒸発させた。クロマトグラフィー後に、純粋な表題化合物（２ｇ）が無色の油状物として得られた。
【００６４】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ７．３０−７．２３（ｍ，５Ｈ），５．６２（ｓ，１Ｈ），４．７８（ｓ，１Ｈ），４．６０（ｓ，１Ｈ），３．７４（ｓ，３Ｈ），３．５５（ｐｄ，２Ｈ），２．８４（ｄ，Ｊ＝１３Ｈｚ，１Ｈ），２．７６（ｄ，Ｊ＝１０Ｈｚ，１Ｈ），２．５０（ｄｄ，Ｊ１＝１０Ｈｚ，Ｊ２＝２Ｈｚ，１Ｈ），２．３０（ｄ，Ｊ＝１１Ｈｚ，１Ｈ）。［α］２５Ｄ＝−６０（ｃ１．０，ＣＨＣｌ３）。
【実施例４】
【００６５】
（１Ｓ，５Ｓ，７Ｒ）−６，８−ジオキサ−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−７−エキソ−カルボン酸メチル（Ｘ＝Ｒ１＝Ｒ２＝Ｒ３＝Ｈ、Ｒ６＝（Ｒ）−ＣＯＯＭｅである式（Ｉ）の化合物）（化合物３４）の調製
実施例３に記載したように調製した式（Ｉ）の化合物（式中、Ｘ＝Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝Ｂｎ、Ｒ６＝（Ｒ）−ＣＯＯＭｅ）（化合物４０）（２ｇ）とＰｄ／Ｃ１０％（１．３ｇ）のメタノール（４０ｍｌ）中の懸濁液に対して、ギ酸アンモニウム（２．４ｇ）を添加した。混合液を１時間還流させ、セライト上を通過させて濾過し、ＣＨ３ＯＨで洗浄した。溶液を蒸発させると、表題化合物（１．３ｇ）が無色の油状物として得られた。
【００６６】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ５．５３（ｓ，１Ｈ），４．７２（ｓ，１Ｈ），４．４９（ｓ，１Ｈ），３．７１（ｓ，３Ｈ），３．１７（ｄｄ，Ｊ１＝１３．６Ｈｚ，Ｊ２＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），２．８３（ｍ，２Ｈ），２．６８（ｄ，Ｊ＝１３．６Ｈｚ，１Ｈ），２．５５（ｂｒ，１Ｈ）。［α］２５Ｄ＝−５５（ｃ０．７，ＣＨＣｌ３）。
【実施例５】
【００６７】
（１Ｓ，５Ｓ，７Ｒ）−６，８−ジオキサ−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−７−エキソ−カルボン酸（Ｘ＝Ｒ１＝Ｒ２＝Ｒ３＝Ｈ，Ｒ６＝（Ｒ）−ＣＯＯＨである式（Ｉ）の化合物）（化合物３２）の調製
実施例４に記載したように調製したＸ＝Ｒ１＝Ｒ２＝Ｒ３＝Ｈ，Ｒ６＝（Ｒ）−ＣＯＯＭｅである式（Ｉ）の化合物（化合物３４）（０．５ｇ）を、ＨＣｌ溶液（４Ｎ，１２ｍｌ）中に溶解させた。室温で１８時間後、溶液を蒸発させると、表題化合物がＨＣｌ塩として得られた（０．５ｇ）。
【００６８】
［α］２５Ｄ−３８．３（ｃ１．１，Ｈ２Ｏ）；１Ｈ−ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）δ５．９５（ｓ，１Ｈ），５．０６（ｓ，１Ｈ），５．０４（ｓ，１Ｈ），３．５８（ｍ，２Ｈ），３．３４（ｍ，２Ｈ）。
【実施例６】
【００６９】
（１Ｓ，５Ｓ，７Ｒ）−３−ｔｅｒ−ブトキシカルボニル−６，８−ジオキサ−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−７−エキソ−カルボン酸メチル（Ｘ＝Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝Ｂｏｃ、Ｒ６＝（Ｒ）−ＣＯＯＭｅである式（Ｉ）の化合物）（化合物４２）の調製
ＤＩＰＥＡ（０．８ｍｌ）及び（ＢＯＣ）２Ｏ（１．１ｇ）を、実施例４に記載したように調製したＸ＝Ｒ１＝Ｒ２＝Ｒ３＝Ｈ、Ｒ６＝（Ｒ）−ＣＯＯＭｅである式（Ｉ）の化合物（化合物３４）（０．８ｇ）の、無水ＣＨ２Ｃｌ２（９ｍｌ）及びエタノール（３ｍｌ）中の溶液に添加した。反応混合物を室温に１８時間放置し、溶媒を蒸発させて残渣をＮａＨＳＯ３（５％）の溶液で処理し、ジエチルエーテルで抽出した。溶媒を蒸発させた後、粗生成物をクロマトグラフィーで精製すると、表題化合物（０．８ｇ）が白色固体として得られた。
【００７０】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ５．６４及び５．５８（回転異性体）（ｓ，１Ｈ），４．６５及び４．６０（回転異性体）（ｓ，１Ｈ），４．５１（ｓ，１Ｈ），３．７２（ｓ，３Ｈ），４．００−３．６０（ｍ，２Ｈ），３．２０（ｍ，１Ｈ），２．９２（ｍ，１Ｈ），１．４３（ｓ，９Ｈ）。
【実施例７】
【００７１】
（１Ｓ，５Ｓ，７Ｒ）−３−ｔｅｒ−ブトキシカルボニル−６，８−ジオキサ−７−エキソ−ヒドロキシメチル−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン（Ｘ＝Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝Ｂｏｃ、Ｒ６＝（Ｒ）−ＣＨ２ＯＨである式（Ｉ）の化合物）（化合物６２）の調製
実施例６に記載したように調製したＸ＝Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝Ｂｏｃ、Ｒ６＝（Ｒ）−ＣＯＯＭｅである式（Ｉ）の化合物（化合物４２）（０．８ｇ）のＭｅＯＨ（１５ｍｌ）中の溶液に、０℃でＮａＢＨ４（０．６ｇ）を少量ずつ添加した。室温で１０分後、混合物を蒸発させ、粗生成物をクロマトグラフィーによって精製すると、表題化合物（０．５ｇ）が無色の油状物として得られた。［α］２５Ｄ−３０（ｃ１．０，ＭｅＯＨ）。
【００７２】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ５．５０及び５．４４（回転異性体）（ｓ，１Ｈ），４．３２及び４．２７（回転異性体）（ｓ，１Ｈ），４．１８（ｍ，１Ｈ），３．８８−３．６７（ｍ，２Ｈ），３．５６（ｄ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，２Ｈ），３．２１（ｍ，１Ｈ），２．９６（ｍ，１Ｈ），１．９２（ｂ，１Ｈ），１．４３（ｓ，９Ｈ）。
【実施例８】
【００７３】
（１Ｓ，５Ｓ，７Ｒ）−３−（９−フルオレニルメトキシカルボニル）−７−エンド−ヒドロキシメチル−６，８−ジオキサ−３−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン（Ｘ＝Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝Ｆｍｏｃ、Ｒ６＝（Ｒ）−ＣＨ２ＯＨである式（Ｉ）の化合物）（化合物６１）の調製
２，３−Ｏ−イソプロピリデン−Ｄ−エリスロース（Ｒ，Ｒ）５（１．８ｇ）のＴＨＦ中の溶液（非特許文献６：Ｔｈｏｍｐｓｏｎ，Ｄ．Ｋ．；Ｈｕｂｅｒｔ，Ｃ．Ｎ．；Ｗｉｇｈｔｍａｎ，Ｒ．Ｈ．  Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  １９９３，４９，３８２７−３８４０によって記載されているようにＤ−アラビノースから調製した）に対して、２，２−ジエトキシエチルアミン３ａ（式中、Ｗ＝Ｗ＝ＯＥｔ、Ｒ１＝Ｒ２＝Ｒ３＝Ｈ）（１．７ｍｌ）及びＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（３．１ｇ）を０℃で少量ずつ添加した。室温で１８時間後、混合物をＮａＨＣＯ３の飽和溶液で希釈し、酢酸エチルで抽出した。有機相を蒸発させて油状物を得た。これをクロマトグラフィーにかけて生成物８ａ（式中、Ｗ＝Ｗ＝ＯＥｔ、Ｒ１＝Ｒ２＝Ｒ３＝Ｈ）を黄色みがかった油状物として得た（１．９ｇ）。
【００７４】
［α］２０Ｄ−８．４（ｃ０．５４，ＣＨＣｌ３）；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ４．８３（ｂｒ，２Ｈ），４．５９（ｔ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，１Ｈ），４．３２（ｍ，２Ｈ），３．７５−３．４５（ｍ，６Ｈ），３．０５−２．８３（ｍ，２Ｈ），２．７９（ｄ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，２Ｈ），１．４４（ｓ，３Ｈ），１．３４（ｓ，３Ｈ），１．２１（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，６Ｈ）。
【００７５】
８ａ（式中、Ｗ＝Ｗ＝ＯＥｔ、Ｒ１＝Ｒ２＝Ｒ３＝Ｈ）（１．７ｇ）のアセトン（４０ｍｌ）中の溶液に、Ｆｍｏｃ−Ｏ−Ｓｕ（２．１ｇ）及びＮａ２ＣＯ３・Ｈ２Ｏの水溶液（４０ｍｌ中０．７５ｇ）を０℃で添加した。混合液を室温に１８時間置き、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出し、その後、溶媒を蒸発させて残渣をクロマトグラフィーにかけた。生成物８ａ（式中、Ｗ＝Ｗ＝ＯＥｔ、Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝Ｆｍｏｃ）を黄色みがかった油状物として得た。
【００７６】
［α］２０Ｄ−３４（ｃ０．３８，ＭｅＯＨ）；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ７．７３（ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ），７．５６（ｍ，２Ｈ），７．３４（ｍ，４Ｈ），４．６３（ｍ，２Ｈ），４．４７−４．１４（ｍ，３Ｈ），４．１９（ｔ，Ｊ＝４．９Ｈｚ，１Ｈ），３．７４−３．０２（ｍ，１０Ｈ），１．４２−１．０４（ｍ，１２Ｈ）。
【００７７】
トリフルオロ酢酸（８ｍｌ）中に溶解させた化合物８ａ（式中Ｗ＝Ｗ＝ＯＥｔ、Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝Ｆｍｏｃ）（１．９ｇ）を室温に１８時間放置した。ＴＦＡを蒸発させた後、粗化合物をＭｅＯＨ中に溶解させ、ＮａＨＣＯ３の短いパッド上を通過させて濾過し、その後、溶媒を蒸発させ、残渣をクロマトグラフィーにかけた。表題化合物が白色固体として得られた（１ｇ）。
【００７８】
Ｍ．ｐ．４１−４２℃；［α］２０Ｄ−３２（ｃ０．５，ＣＨＣｌ３）；１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ７．７７（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ），７．５７（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ），７．３８（ｍ，４Ｈ），５．５１（ｓ，１Ｈ），４．９２−２．９５（ｍ，１２Ｈ）。
【実施例９】
【００７９】
（１Ｓ，５Ｓ，７Ｓ）−３−（９−フルオレニルメトキシカルボニル）−６，８−ジオキサ−３−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン−７−エンドカルボン酸（Ｘ＝Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝Ｆｍｏｃ、Ｒ６＝（Ｓ）−ＣＯＯＨである式（Ｉ）の化合物）（化合物３９）の調製
実施例８に従って調製したＸ＝Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝Ｆｍｏｃ、Ｒ６＝（Ｒ）−ＣＨ２ＯＨである式（Ｉ）の化合物（化合物６１）（０．９ｇ）のアセトン（７５ｍｌ）中の溶液に対して、Ｊｏｎｅｓ試薬（ＣｒＯ３（１．５ｇ）のＨ２Ｏ（２０ｍｌ）溶液に対してＨ２ＳＯ４（２．８ｍｌ）を０℃でゆっくりと添加することによって調製した）を０℃で添加した。混合液を室温に１８時間放置し、その後、イソプロパノールを添加し、セライト上を通過させて濾過し、蒸発させた。粗生成物をＥｔＯＡｃ（４５ｍｌ）中に溶解させ、１０％のＮａＨＣＯ３水溶液で抽出した。分離後、水相をＨＣｌでｐＨ１になるように酸性化し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機相を蒸発させて粗生成物を得た。これをクロマトグラフィーにかけると、表題化合物（０．７ｇ）が白色固体として得られた。
【００８０】
Ｍ．ｐ．７９−８２℃；［α］２０Ｄ−５３（ｃ０．５，ＣＨＣｌ３），１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ７．７５（ｍ，２Ｈ）；７．５３（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ）；７．３８（ｍ，４Ｈ）；５．５６（ｓ，１Ｈ）；４．７４−４．４５（ｍ，４Ｈ）；４．２３−３．９１（ｍ，４Ｈ）；３．２９−３．１１（ｍ，２Ｈ）。
【実施例１０】
【００８１】
（１Ｒ，５Ｒ，７Ｒ）−３−（９−フルオレニルメトキシカルボニル）−６，８−ジオキサ−３−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン−７−エンドカルボン酸（Ｘ＝Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝Ｆｍｏｃ、Ｒ６＝（Ｒ）−ＣＯＯＨである式（Ｉ）の化合物）（化合物２１８）の調製
上記の実施例８に記載したものと同じ手順を用いて（Ｓ，Ｓ）エリスロース５（Ｌ−アラビノースから出発して得た）から調製した（１Ｒ，５Ｒ，７Ｓ）−３−（９−フルオレニルメトキシカルボニル）−７−エンド−ヒドロキシメチル−６，８−ジオキサ−３−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン（Ｘ＝Ｒ１＝Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝Ｆｍｏｃ、Ｒ６＝（Ｓ）−ＣＨ２ＯＨである式（Ｉ）の化合物）（１．８ｇ）の溶液を、そのエナンチオマーについて、上記の実施例９に記載したように処理した。１．４ｇの表題化合物が白色固体として得られた。
【００８２】
Ｍ．ｐ．７１−８１℃；［α］２０Ｄ＋５２．９（ｃ０．５０，ＣＨＣｌ３）。
【実施例１１】
【００８３】
３−ベンジル−５−フェニル−２−オキソ−（１Ｓ，５Ｓ，７Ｒ）−６，８−ジオキサ−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−７−エキソ−カルボン酸メチル（Ｘ＝Ｏ、Ｒ１＝Ｐｈ、Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝Ｂｎ、Ｒ６＝（Ｒ）−ＣＯＯＭｅである式（Ｉ）の化合物）（化合物２７）の調製
（非特許文献７：Ｒ  Ｓｉｍｏｎｏｆｆ及びＷ．Ｈ  Ｈａｒｔｕｎｇ，Ｊ．Ａｍ．Ｐｈａｒｍ．Ａｓｓｏｃ．，３５，３０６，１９４６に記載されている手順に従って調製した）３ｂ（２．４ｇ）（式中、Ｘ＝Ｏ、Ｒ１＝Ｐｈ、Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝Ｂｎ）の無水ＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍｌ）中の溶液に対して、（Ｒ，Ｒ）酒石酸誘導体６（２．４９ｇ、５．３３ｍｍｏｌ）及びＤＩＰＥＡ（５．４ｍｌ）を添加した。この溶液を室温で２時間攪拌し、溶媒を蒸発させると油状物が得られた。これを酢酸エチルで抽出した。この溶液を５％ＫＨＳＯ４及び５％ＮａＨＣＯ３の水溶液で洗浄した。溶媒を蒸発させた後、残渣をクロマトグラフィーによって精製すると、８ｂ（式中、Ｘ＝Ｏ、Ｒ１＝Ｐｈ、Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝Ｂｎ）（３．２ｇ）が無色の油状物として得られた。
【００８４】
１Ｈ−ＮＭＲ  δ７．９０−７．８５（ｍ，２Ｈ），７．６１−７．２２（ｍ，８Ｈ），５．３９（ｄ，Ｊ＝５．１Ｈｚ，１Ｈ），５．１１（ｄ，Ｊ＝５．１Ｈｚ，１Ｈ），４．８８−４．１０（ｍ，４Ｈ），３．８０（ｓ，３Ｈ），１．４９（ｓ，３Ｈ），１．３１（ｓ，３Ｈ）。
【００８５】
８ｂ（３．２ｇ）（式中、Ｘ＝Ｏ、Ｒ１＝Ｐｈ、Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝Ｂｎ）のトルエン（８０ｍｌ）中の溶液を、Ｈ２ＳＯ４／ＳｉＯ２（３０％ｗ／ｗ、１．４ｇ）のトルエン中の懸濁液に対して還流（１２０ｍｌ）下で添加した。１５分後、溶媒の３分の１を蒸留し、残っている熱い混合液を、ＮａＨＣＯ３の短いパッドの上を通過させて濾過した。溶媒を蒸発させた後、残渣をクロマトグラフィーによって精製すると、２．４ｇの表題化合物が無色の固体として得られた。
【００８６】
Ｍ．ｐ．１１３−１１４℃．［α］２５Ｄ−６４．０（ｃ１，ＣＤＣｌ３）．１Ｈ−ＮＭＲ  δ７．６２−７．５９（ｍ，２Ｈ），７．４１−７．２４（ｍ，８Ｈ），５．１６（ｓ，１Ｈ），４．９２（ｓ，１Ｈ），４．６１（ｍ，２Ｈ），３．７４（ｓ，３Ｈ），３．４６（ｍ，２Ｈ）。
【実施例１２】
【００８７】
３−ベンジル−５−フェニル−（１Ｓ，５Ｓ，７Ｒ）−６，８−ジオキサ−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−７−エキソ−カルボン酸メチル（Ｘ＝Ｒ２＝Ｈ，Ｒ１＝Ｐｈ、Ｒ３＝Ｂｎ、Ｒ６＝（Ｒ）−ＣＯＯＭｅである式（Ｉ）の化合物）（化合物１２０）の調製
無水ＴＨＦ（２５ｍｌ）中の実施例１１に記載したように調製した式（Ｉ）の化合物（式中、Ｘ＝Ｏ、Ｒ１＝Ｐｈ、Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝Ｂｎ、Ｒ６＝（Ｒ）−ＣＯＯＭｅ）（化合物２７）（２．５ｍｍｏｌ）の溶液に対して、０℃で、ＢＨ３・Ｍｅ２Ｓ（１０Ｍ、０．５ｍｌ、４．９ｍｍｏｌ）を一滴ずつ添加した。混合液を１６時間静置し、その後、ＥｔＯＨ（１ｍｌ）、３ＭのＮａＯＨ（１ｍｌ）、及びＨ２Ｏ（２０ｍｌ）を添加した。ジエチルエーテルで抽出した後、溶媒を蒸発させて、残渣をクロマトグラフィーによって精製した。１ｇの表題化合物が無色の固体として得られた。
【００８８】
Ｍ．ｐ．９７℃．［α］２５Ｄ＝１３．０（ｃ１，ＣＨＣｌ３）．１Ｈ−ＮＭＲ  δ７．７２−７．５８（ｍ，２Ｈ），７．５２−７．１９（ｍ，８Ｈ），５．００（ｓ，１Ｈ），４．８６（ｓ，１Ｈ），３．７５（ｍ２Ｈ），３．７８（ｓ，３Ｈ），３．６２（ｍ，２Ｈ），３．１６（ｄ，Ｊ＝１１．２，４Ｈ），２．９３（ｄ，Ｊ＝１１．６，２Ｈ），２．６３（ｄ，Ｊ＝１１．０，２Ｈ）。
【実施例１３】
【００８９】
（１Ｓ，４Ｓ，７Ｒ）−３，４−ジベンジル−２−オキソ−６，８−ジオキサ−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン−７−エキソ−カルボン酸メチル（Ｘ＝Ｏ、Ｒ１＝Ｈ、Ｒ２＝（Ｓ）Ｂｎ、Ｒ３＝Ｂｎ、Ｒ６＝（Ｒ）−ＣＯＯＭｅである式（Ｉ）の化合物）（化合物１２）の調製
ＭｅＯＨ（１５０ｍｌ）中のＬ−フェニルアラニノール３ｃ（式中、Ｗ＝Ｈ、Ｗ＝ＯＨ、Ｒ１＝Ｈ、Ｒ２＝Ｂｎ、Ｒ３＝Ｈ）（５ｇ）の溶液に対して、ベンズアルデヒド（３．３ｍｌ）を添加した。反応混合液を室温で１時間攪拌し、その後、１．２ｇのＮａＢＨ４を少量ずつ２時間かけて０℃で添加した。溶媒を蒸発させて、残渣を５０ｍｌのＨＣｌ（ｐＨ＝２）で抽出した。水溶液をＥｔ２Ｏで抽出し、Ｎａ２ＣＯ３でｐＨ＝９になるまで処理し、その後ＣＨＣｌ３で抽出した。有機相を蒸発させると、Ｎ−ベンジル−（Ｌ）−フェニルアラニノール３ｃが白色固体（７ｇ）（式中、Ｗ＝Ｈ、Ｗ＝ＯＨ、Ｒ１＝Ｈ、Ｒ２＝Ｂｎ、Ｒ３＝Ｂｎ）として得られた。
【００９０】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ  ｐｐｍ：７．３４−７．０６（ｍ，１０Ｈ），３．７３（ｓ，２Ｈ），３．３１（ｄｄ，Ｊ＝６．２，１２．５Ｈｚ，１Ｈ），３．００−２．８１（ｍ，１Ｈ），２．８０−２．６６（ｍ，２Ｈ）．２．６２（ｄｄ，Ｊ＝６．２，１２．５Ｈｚ，１Ｈ）。
【００９１】
Ｎ−ベンジル−（Ｌ）−フェニニアラニノール３ｃ（２．８ｇ）の２３ｍｌＣＨＣｌ３中の溶液に対して、０℃で、ＤＩＰＥＡ（４ｍｌ）、ＨＯＢｔ（２．１ｍｌ）、及び（２Ｒ，３Ｒ）−２，３−Ｏ−イソプロピリデン酒石酸のメチルエステル（６）（２．４ｇ）の２３ｍｌＣＨＣｌ３中の溶液を添加した。その後、１．７ｇのＤＩＰＣを添加した。室温で７２時間後、溶媒を蒸発させ、粗生成物である残渣をクロマトグラフィーによって精製した。黄色みがかった固体（２．４ｇ）９ｃ（式中、Ｗ＝Ｈ、Ｗ＝ＯＨ、Ｒ１＝Ｈ、Ｒ２＝Ｂｎ、Ｒ３＝Ｂｎ）が得られた。
【００９２】
［α］２５Ｄ−７２（ｃ＝０．５，ＣＨＣｌ３）。１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ  ｐｐｍ：（回転異性体の２：１混合物）主たるδ７，４０−７，０５（ｍ，１０Ｈ），５，２８（ｄ，Ｊ＝６，０Ｈｚ，１Ｈ），４，８１（ｄ，Ｊ＝６，０Ｈｚ，１Ｈ），４，７５（ｄ，Ｊ＝１６，４Ｈｚ，１Ｈ），４，０（ｄ，Ｊ＝１６，４Ｈｚ，１Ｈ），３，７９（ｓ，３Ｈ），３，７０（ｍ，１Ｈ），３，６０（ｍ，１Ｈ），３，４６（ｍ，１Ｈ），３，０４（ｍ，１Ｈ），１，５２（ｓ，３Ｈ），１，４９（ｓ，３Ｈ）。
【００９３】
化合物９ｃ（式中、Ｗ＝Ｈ、Ｗ＝ＯＨ、Ｒ１＝Ｈ、Ｒ２＝Ｂｎ、Ｒ３＝Ｂｎ）を、Ｓｗｅｒｎ酸化によって１０（式中、Ｗ＝Ｏ、Ｗ＝Ｏ、Ｒ１＝Ｈ、Ｒ２＝Ｂｎ、Ｒ３＝Ｂｎ）へと酸化させた。２０ｍｌのＣＨ２Ｃｌ２中の４．５ｇのアルコール体（９ｃ）を、塩化オキサリル、ＤＭＳＯ、及びＤＩＰＥＡでの処理によって従来どおりに酸化させた。通常の作業を行うと、化合物（１０）（５ｇ）が黄色い固体として得られた。
【００９４】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ  ｐｐｍ：９，４４（ｓ，１Ｈ），７，４０−７，００（ｍ，１０Ｈ），５，３３（ｄ，Ｊ＝６，２Ｈｚ，１Ｈ），４，９２（ｄ，Ｊ＝６，２Ｈｚ，１Ｈ），４，８９（ｄ，Ｊ＝１８，７Ｈｚ，１Ｈ），３，７９（ｓ，３Ｈ），３，５３（ｄｄ，Ｊ＝９，８，４，３Ｈｚ，１Ｈ），３，４４（ｄ，Ｊ＝１８，７Ｈｚ，１Ｈ），３，４１（ｄｄ，Ｊ＝１３，９，４，３Ｈｚ，１Ｈ），３，１２（ｄｄ，Ｊ＝１３，９，９，８Ｈｚ，１Ｈ），１，５４（ｓ，３Ｈ），１，４５（ｓ，３Ｈ）。
【００９５】
生成物をトルエン（１５ｍｌ）に添加して、３０ｍｌの還流トルエン中の２．５ｇのＳｉＯ２及びＨ２ＳＯ４の懸濁液とした。３０分後、１５分後、溶媒の３分の１を留去させて、残っている熱い混合液をＮａＨＣＯ３の短いパッドの上を通過させて濾過した。溶媒を蒸発させた後、残渣をクロマトグラフィーによって精製すると、３．２ｇの表題化合物が得られた。
【００９６】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ  ｐｐｍ：７．４０−７．１５（ｍ，８Ｈ），７．０３（ｍ，２Ｈ），５．５１（ｓ，１Ｈ），５．３３（ｄ，Ｊ＝１５．０Ｈｚ，１Ｈ），４．９７（ｓ，１Ｈ），４．７１（ｓ，１Ｈ），４．０３（ｄ，Ｊ＝１５．０Ｈｚ，１Ｈ），３．７５（ｓ，３Ｈ），３．３２（ｄｄ，Ｊ＝１０．７，３．７Ｈｚ，３Ｈ），３．１５（ｄｄ，Ｊ＝１３．５，３．７Ｈｚ，１Ｈ），２．７５（ｄｄ，Ｊ＝１３．５，１０．７Ｈｚ，１Ｈ）
【実施例１４】
【００９７】
（１Ｓ，４Ｓ，７Ｒ）−３，４−ジベンジル−６，８−ジオキサ−７−エキソ−ヒドロキシメチル３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン（Ｘ＝Ｒ１＝Ｈ、Ｒ２＝（Ｓ）Ｂｎ、Ｒ３＝Ｂｎ、Ｒ６＝（Ｒ）−ＣＨ２ＯＨである式（Ｉ）の化合物）（化合物１８４）の調製
実施例１３に記載したように調製した１００ｍｌの無水ＴＨＦ中の式（Ｉ）の化合物（式中、Ｘ＝Ｏ、Ｒ１＝Ｈ、Ｒ２＝（Ｓ）Ｂｎ、Ｒ３＝Ｂｎ、Ｒ６＝（Ｒ）−ＣＯＯＭｅ）（化合物１２）（４ｇ）の溶液に対して、ＢＨ３・ＳＭｅ２（３ｍｌ、１０Ｍ）のＴＨＦ溶液を添加した。室温で３８時間後、反応混合液を無水ＥｔＯＨ（６ｍｌ）と１０％のＮａＯＨ（６ｍｌ）で処理し、その後、５０ｍｌの水で希釈し、Ｅｔ２Ｏで抽出した。溶媒を蒸発させた後、残渣をクロマトグラフィーによって精製すると、１．７ｇの表題化合物を黄色みがかった固体として得た。［α］２５Ｄ−５９（ｃ＝０，２，ＣＨＣｌ３）。
【００９８】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ  ｐｐｍ：７，４０−７，００（ｍ，１０Ｈ），５，１１（ｓ，１Ｈ），４，３９（ｔ，Ｊ＝５，１Ｈｚ，１Ｈ），４，２４（ｓ，１Ｈ），３，８１（ｄ，Ｊ＝１３，６Ｈｚ，１Ｈ），３，６３（ｄ，Ｊ＝１３，６Ｈｚ，１Ｈ）３，５２（ｍ，２Ｈ），３，００（ｍ，１Ｈ）３，００−２，８０（ｍ，２Ｈ），２，９４（ｄ，Ｊ＝１１，６Ｈｚ，１Ｈ），２，４５（ｄｄ，Ｊ＝１１，６，１，８Ｈｚ，１Ｈ）
【実施例１５】
【００９９】
Ｒ１＝Ｒ１’＝Ｈ、Ｒ２＝Ｒ３＝Ｒ２’＝Ｂｎ、Ｒ６＝（Ｒ）−ＣＯＯＭｅである式（ＩＩ）の二量体（化合物３４８）の調製
０．１ｍｌのＤＩＰＥＡを、実施例５の手順に従って対応するメチルエステル（化合物１７２）の加水分解によって得た式（Ｉ）の化合物（式中、Ｘ＝Ｒ１＝Ｈ、Ｒ２＝（Ｓ）−Ｂｎ、Ｒ３＝Ｂｎ、Ｒ６＝（Ｒ）−ＣＯＯＨ）（化合物１８８）（０．１ｇ）の０．３ｍｌのＣＨ２Ｃｌ２中の溶液に添加した。その後、０℃で、０．２ｇのＰｙＢｒｏＰ及び０．０５ｇ（０．２０９ｍｍｏｌ）の式（Ｉ）の化合物（式中、Ｘ＝Ｒ１＝Ｒ３＝Ｈ、Ｒ２＝（Ｓ）−Ｂｎ、Ｒ６＝（Ｒ）−ＣＯＯＭｅ）（化合物１７８）を添加した。混合液を一晩攪拌し、溶媒を蒸発させ、残渣を５０ｍｌのＡｃＯＥｔ中に溶解させた。溶媒を蒸発させた後、クロマトグラフィーによって精製すると、０．０７ｇの表題化合物が白色固体として得られた。
【実施例１６】
【０１００】
Ｘ＝Ｏ、Ｒ１＝Ｒ１’＝ｐ−ＮＯ２Ｐｈ、Ｒ２＝Ｒ２’＝Ｈ、Ｒ３＝Ｒ’３＝Ｐｈ、Ｑ’＝（ＣＯＮＨ（ＣＨ２）６ＣＯＮＨ）である式（ＩＩＩ）の二量体（化合物４４１）の調製
２０ｍｇの式（Ｉ）の（１Ｒ，５Ｓ，７Ｒ）−５−（４−ニトロ−フェニル）−３−フェニル−６，８−ジオキサ−３−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン−７−カルボン酸メチルエステル（化合物３１）（０．０５４ｍｍｏｌ）を、１２５．５ｍｇ（１．０８ｍｍｏｌ、２０等量）の１，６−ジアミノ−ヘキサンに添加し、混合物を６５℃で一晩加熱した。粗生成物をクロマトグラフィーによって精製した（ＣＨ２Ｃｌ２−ＭｅＯＨ、２０：１＋ＮＥｔ３  １％）。これにより、（１Ｒ，５Ｓ，７Ｒ）−５−（４−ニトロフェニル）−３−フェニル−６，８−ジオキサ−３−アザ−ビシクロ［３．２．１］オクタン−７−（６−アミノ−ヘキシル）−アミド、すなわち、Ｘ＝Ｏ、Ｒ１ｐ−ＮＯ２Ｐｈ、Ｒ２＝Ｈ、Ｒ３＝Ｐｈ、Ｒ６＝ＣＯＮＨ（ＣＨ２）６ＮＨ２である式（Ｉ）の化合物（化合物１８９）に相当する８ｍｇ（０．０１８ｍｍｏｌ、３４％）の黄色い固体（Ｒｆ＝０．３２）と、式（ＩＩＩ）の表題二量体化合物に相当する４ｍｇ（０．００５１ｍｍｏｌ、１０％）のオレンジ色の固体（Ｒｆ＝０．６７）が得られた。
【０１０１】
−化合物１８９：１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，δ）：８．３２（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．４Ｈｚ），７．８３（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），７．３０−７．２２（ｍ，２Ｈ），６．９０−６．７９（ｍ，３Ｈ），６．２５（ｍ，１Ｈ），５．０５（ｓ，１Ｈ），４．７４（ｓ，１Ｈ），３．８１−３．７０（ｍ，２Ｈ），３．２８（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝９．８Ｈｚ，），３．２０−３．１０（ｍ，２Ｈ），２．９２（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝１１．６Ｈｚ），２．６１（ｍ，２Ｈ），１．７８−１．１５（ｍ，１０Ｈ）。
【０１０２】
−式（ＩＩＩ）の表題二量体化合物：１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，δ）：８．３１（ｄ，４Ｈ，Ｊ＝８．８Ｈｚ），７．８２（ｄ，４Ｈ，Ｊ＝１０Ｈｚ），７．３１−７．２４（ｍ，４Ｈ），６．９１−６．８０（ｍ，６Ｈ），６．２５（ｍ，２Ｈ），５．０５（ｓ，２Ｈ），４．７５（ｓ，２Ｈ），３．８１−３．７１（ｍ，４Ｈ），３．２９（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１１．６Ｈｚ，），３．２０−３．１０（ｍ，４Ｈ），２．９２（ｄ，２Ｈ，Ｊ＝１１．６Ｈｚ），１．５４（ｍ，４Ｈ），１．２３（ｍ，４Ｈ）。
【０１０３】
生物学的活性
式（Ｉ）の３−アザ−ビシクロ（３．２．１）オクタン、ならびにその式（ＩＩ）及び（ＩＩＩ）の二量体の生物学的活性を、種々のアッセイで評価した：無血清条件下でのＰＣ１２細胞の生存の誘導、ＰＣ３前立腺ガン細胞株中での増殖活性の誘導、ＶＧＦポリペプチドの合成の誘導、表面特異的レセプターへの１２５Ｉ−ＮＧＦの結合の置き換え、及びＴｒｋ−Ａ自己リン酸化の誘導。これらのアッセイの全てにおいて、ヒトの組み換え（ｈｒ）ＮＧＦを内部標準として使用した。
【０１０４】
無血清条件下でのＰＣ１２細胞の生存に対する化合物の作用
式（Ｉ）の３−アザ−ビシクロ（３．２．１）オクタン、ならびにその式（ＩＩ）及び（ＩＩＩ）の二量体の生物学的活性を、内部標準としてｈｒＮＧＦを使用することにより、無血清条件下でのＰＣ１２細胞の生存を誘導する能力として試験した。
【０１０５】
ＰＣ１２細胞を、ＰＢＳ−ＥＤＴＡ（エチレンジアミノ四酢酸を添加した生理食塩水）を用いて組織フラスコから引き剥がし、ＰＢＳで１回洗浄して残っている血清を除いた。その後、細胞を、ペニシリンとストレプトマイシンを追加したフェノールレッドを含まないＲＰＭＩ−１６４０培地中で希釈し、９６ウェルプレート中で最終濃度５×１０３／ウェルで培養した。それの三連の各培地にｈｒＮＧＦを１〜２５ｎｇ／ｍｌの範囲内の異なる濃度で添加して標準曲線を作製した。代わって、化合物を１、１０、１００μＭの最終濃度となるように三連の各培地に添加した。次いで、細胞を３７℃で６０時間、加湿した５％ＣＯ２雰囲気中で培養した。その後、１０μｌの（３−［４．５−ジメチルチアゾール−２イル］−２．５−臭化ジフェニルテトラゾリウム（ＭＴＴ、イソプロパノール中０．５ｍｇ／ｍｌ）をそれぞれのウェルに添加し、プレートを光から保護して３７℃で４時間静置した。インキュベーションの終了後、１００μｌの５０％ジメチルホルムアミド（２０％ＳＤＳ中、ｐＨ７．４）をそれぞれのウェルに添加した。比色反応を、９６ウェルプレートリーダーを用いて５７０ｎｍでの吸光度を読み取ることにより検出した。結果を、化合物によって誘導された生存／自然な状態での生存＊１００として表す。
【０１０６】
図１は、１０μＭの最も代表的な化合物での、及び１ｎＭのｈｒＮＧＦでの結果を示す。
【０１０７】
ＰＣ３細胞株の増殖活性に対する化合物の効果
式（Ｉ）の３−アザ−ビシクロ（３．２．１）オクタン、ならびに表１〜表４に記載したように置換されている式（ＩＩ）及び（ＩＩＩ）のその二量体について、ＰＣ３細胞株の増殖を誘導する能力を、無血清条件下で、内部標準としてｈｒＮＧＦを使用することにより試験した。
【０１０８】
ＰＣ３細胞を、ＲＰＭＩ  １６４０培地中で１０４細胞／ｍｌの最終濃度（最終容量５００μｌ）で、１、１０、１００μＭの化合物、又は種々の濃度（１〜２５ｎｇ／ｍｌの間）の内部標準としてのｈｒＮＧＦの存在下で、あるいはそれらを含まない条件下で、２４ウェルプレート中に三連で培養した。細胞を、６０時間、加湿した５％ＣＯ２雰囲気中でインキュベートした。インキュベーションの終了後、０．５μＣｉの３Ｈ−チミジンをそれぞれのウェルに８時間かけて添加した。その後、細胞をＰＢＳで６回洗浄し、０．１％のＴｒｉｔｏｎ−Ｘ１００を含む０．１Ｍのリン酸緩衝液中で溶解させ、放射活性をb−シンチレーションカウンターで記録した。結果は、刺激した培養物の３Ｈ−チミジンの取り込み（平均±ＳＤ）と刺激を与えなかった培養物の３Ｈ−チミジンの取り込みとの比として表す。図２は、１０μＭの選択した化合物を用いて、又は１ｎＭのｈｒＮＧＦを内部標準として用いて得られた結果を示す。
【０１０９】
ＰＣ１２細胞によるＶＧＦ生産の誘導
式（Ｉ）の３−アザ−ビシクロ（３．２．１）オクタン、ならびに表１〜表４に記載したように置換されている式（ＩＩ）及び（ＩＩＩ）のその二量体について、ＰＣ１２細胞によるＶＧＦの生産を誘導する能力についても試験した。５×１０６個のＰＣ１２細胞を、１、１０、１００μＭの化合物、又は種々の濃度（１〜２５ｎｇ／ｍｌの間）の内部標準としての４ｎＭのｈｒＮＧＦの存在下で、あるいはそれらを含まない条件下で、２４時間、加湿した５％ＣＯ２雰囲気中で培養した。細胞を、０．２５％のＮＰ−４０を含む、１ｍＭのＰＭＳＦ（フェニル−メチル）及び１ｍＭのロイペプチンを加えたＰＢＳ中で溶解させ、タンパク質濃度をＢｒａｄｆｏｒｄアッセイによってそれぞれのサンプルについて測定した。等量のタンパク質（３０μｇ）を８％のＳＤＳ−ポリアクリルアミドゲルに加え、電気泳動し、ニトロセルロースメンブレン上にブロットし、そしてモノクローナル坑ＶＧＦ抗体で、その後ペルオキシダーゼ結合坑マウスＩｇＧで染色した。反応を、製造業者の説明書に従ってＥＣＬ試薬（Ｅｎｈａｎｃｅｄ  Ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｉｓｃｅｎｔ  Ｒｅａｇｅｎｔ、Ａｍｅｒｓｈａｍ）によって眼に見えるようにした。
【０１１０】
図３は、１０μＭの選択した化合物（ｎ．９１、９、３２３、２７０）を用いて、又は１０ｎＭのｈｒＮＧＦを用いて得られた結果を示す。ＶＧＦは、ｈｒＮＧＦと同じ程度に選択した化合物によって誘導された。
【０１１１】
ＰＣ１２細胞への１２５Ｉ−ＮＧＦの結合の置換
選択した化合物について、特異的な標的レセプターに対するＮＧＦの結合に取って代わる能力を、典型的なヨウ素化リガンドの結合技術によって評価した。
【０１１２】
ＰＣ１２細胞を、ＰＢＳ−ＥＤＴＡを用いて組織フラスコから引き剥がし、ＨＫＲ培地（１０ｍＭのＨｅｐｅｓ、１２５ｍＭのＮａＣｌ、４．８ｍＭのＫＣｌ、１．３ｍＭのＣａＣｌ２、１．２ｍＭのＭｇＳＯ４、１．２ｍＭのＫＨ２ＰＯ４、１ｇ／ｌのグルコース、１ｇ／ｌのＢＳＡ）で洗浄し、０．１ｎＭの１２５Ｉ−ＮＧＦを加えたＨＫＲ培地中で、種々の濃度の測定対象化合物又は内部標準としてのｈｒＮＧＦの存在下で、あるいはそれらを含まない条件下で、三連でインキュベートした。置換曲線を、適切なソフトウェア（Ｇｒａｐｈｉｔ  ４）を用いて、化合物又はｈｒＮＧＦの存在下で得られた細胞に結合した放射活性を分析することによって作製した。
【０１１３】
図４は、競合剤として使用した化合物ｎ．９を用いて得られた置換曲線を示す。データの分析により、１６５ｎＭ±０．０５のＫｄが明らかになった。図４ｂは、競合剤としてｈｒＮＧＦを使用することにより得られた置換曲線を示す。データの分析により、すでに報告されているものと同じ１１４ｐＭ±０．０１のＫｄが明らかになった。
【０１１４】
Ｔｒｋ−Ａの自己リン酸化
式（Ｉ）の化合物３−アザ−ビシクロ（３．２．１）オクタン、ならびに表１〜表４に記載した式（ＩＩ）及び（ＩＩＩ）のそれらの二量体について、Ｔｒｋ−Ａの自己リン酸化を誘導する能力を評価するために、ＰＣ１２細胞を、５％のＦＢＳを加えた培地中で４８時間培養し、洗浄し、無血清培地中で２時間平衡化させた。その後、２．５×１０６個の細胞を１０μＭの選択した化合物で３０分間、又はポジティブコントロールとしての１０ｎＭのｈｒＮＧＦで刺激した。次いで、細胞を０．５％のＴｒｉｔｏｎ−Ｘ１００で、プロテアーゼインヒビター（ＰＭＳＦ、アプロチニン、ペプスタチン、ロイペプチン）とホスファターゼインヒビターを加えたＰＢＳ中で溶解させた。それぞれのサンプル中のタンパク質濃度をＢｒａｄｆｏｒｄアッセイによって評価し、等量（５０μｇ）のタンパク質をＳＤＳ−ポリアクリルアミドゲル上に加え、電気泳動し、ニトロセルロースメンブレン上にブロットした。メンブレンをウサギ坑（Ｔｙｒ４９０及びＴｙｒ６７４／６７５）リン酸化Ｔｒｋ−Ａ（Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）を最終希釈１：１０００で用いて染色した。洗浄後、メンブレンをＨＲＰ結合坑ウサギＩｇＧで染色し、反応を、製造業者の説明書に従ってＥＣＬ試薬を使用することによって眼に見えるようにした。
【０１１５】
図５は、化合物２７２、３２５、９、９１を用いて、及び内部標準としてｈｒＮＧＦを用いて得られた結果を示す。選択した化合物はＴｒｋ−Ａの自己リン酸化を誘導することができ、したがって生物学的シグナルの伝達を始動することができる。
【０１１６】
相乗活性
式（Ｉ）の３−アザ−ビシクロ（３．２．１）オクタン、ならびに式（ＩＩ）及び（ＩＩＩ）のその二量体形態の複数の組み合わせの相乗活性を、無血清条件下でのＰＣ１２生存分析において評価した。
【０１１７】
ＰＣ１２細胞を、５×１０３細胞／ウェルの濃度で９６ウェルプレートに播種し、５μＭの選択した化合物、又は１０μＭの最終濃度でそれらの化合物の複数の組み合わせが存在する条件下で、あるいはそれらを含まない条件下で、三連で培養した。０．５ｎＭのｈｒＮＧＦを内部標準として使用した。加湿した５％ＣＯ２雰囲気中、３７℃で６０時間後、１０μｌの（３−［４．５−ジメチルチアゾール−２イル］−２．５−臭化ジフェニルテトラゾリウム（ＭＴＴ、イソプロパノール中０．５ｍｇ／ｍｌ）をそれぞれのウェルに添加し、プレートを光から保護して、３７℃で４時間静置した。インキュベーションの終了後、１００μｌの５０％ジメチルホルムアミド（２０％ＳＤＳ、ｐＨ７．４中）をそれぞれのウェルに添加した。比色反応を、９６ウェルプレートリーダーを用いて５７０ｎｍでの吸光度を記録することにより検出した。結果は、化合物により誘導した生存性／自然な状態での生存性＊１００として表す。図６から、選択した２つの化合物（９１と３２５）の組み合わせが誘導する生存活性は、化合物単独によって誘導された活性の増大よりも大きいことが示されている。
【図面の簡単な説明】
【０１１８】
【図１】図１は、無血清条件下でのＰＣ１２細胞の生存に対する本発明化合物の効果を、後に記載される「生物学的活性」の段落に従って内部標準としてｈｒＮＧＦを使用することにより示す。結果は、ｘ軸上に示した化合物について、化合物によって誘導された生存／自然な状態での生存＊１００として示される。
【図２】図２は、無血清条件下でのＰＣ３細胞株の増殖活性に対する本発明の化合物の効果を示し、これは、「生物学的活性」の段落に従って内部標準としてｈｒＮＧＦを使用することにより評価した。結果は、ｘ軸上に示した化合物について、刺激した培養物の３Ｈチミジンの取り込み（平均±ＳＤ）と刺激を与えなかった培養物の３Ｈチミジンの取り込みとの間の比として刺激指数として表される。
【図３】図３は、ＰＣ１２細胞によるＶＧＦの生産を誘導する本発明の化合物（Ｉ）、（ＩＩ）、及び（ＩＩＩ）の能力を示し、これは、後の「生物学的活性」の段落に記載したように評価し、ｈｒＮＧＦと比較した。コントロールは６８ｋＤａのＶＧＦである。
【図４】図４ａ及び４ｂは、ＰＣ１２細胞に結合している１２５Ｉ−ＮＧＦに取って代わる本発明の化合物の能力を、本発明の化合物の存在下で、又はｈｒＮＧＦの存在下での結果として生じた細胞に結合した放射能を、「生物学的活性」の段落に従って適切なソフトウェア（Ｇｒａｐｈｉｔ  ４）を用いて分析することによって得られた置換曲線により示す。図４ａは、競合因子として本発明の化合物９を用いて得られた置換曲線を示す。データの分析により、Ｋｄが１６５ｎＭ±０．０５であることが明らかになった。図４ｂは、競合因子としてｈｒＮＧＦを用いて得られた置換曲線を示す。データの分析により、Ｋｄが１１４ｐＭ±０．０１であることが明らかになった。
【図５】図５は、本発明の化合物２７２、３２５、９、及び９１についてのＴｒｋ−Ａ自己リン酸化を誘導する能力を示し、これは、「生物学的活性」の段落に従って内部標準としてｈｒＮＧＦを用いることにより行った。
【図６】図６は、本発明の化合物９及び３２５について、更にはこれらの２つの化合物の組み合わせについて、「生物学的活性」の段落に従って無血清条件下でのＰＣ１２生存分析で得られた結果を示す。結果は、化合物によって誘導された生存／自然な状態での生存＊１００として示される。
【図１】
2005530834.tif 000043
【図２】
2005530834.tif 000044
【図３】
2005530834.tif 000045
【図４】
2005530834.tif 000046
【図５】
2005530834.tif 000047
【図６】
2005530834.tif 000048
【国際調査報告】
2005530834.tif 000049
2005530834.tif 000050
2005530834.tif 000051