(57)【要約】本発明は、凍結水性マトリクス中に医薬または化粧品の粒子が懸濁された形態の、水難溶性の医薬または化粧品の安定な懸濁液の組成物、およびその調製方法を開示する。この組成物は、長期間（好ましくは６ヶ月以上）にわたり安定であり、そして非経口（ｐａｒｅｎｔｅｒａｌ）経路、経口経路、または非経口（ｎｏｎ−ｏｒａｌ）経路（例えば、肺投与（吸入）、眼投与、または局所投与）に適する。好ましくは、上記医薬の粒子サイズは、５０ｎｍ〜５０ミクロンである【特許請求の範囲】
【請求項１】
凍結水性マトリクス中に懸濁された化合物の粒子を含む、水難溶性化合物の懸濁液の組成物。
【請求項２】
前記化合物が、１０．０ｍｇ／ｍｌ未満の水溶性を有する、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記化合物が、結晶相医薬、非晶質相医薬、結晶相化粧品、および非晶質相化粧品からなる群より選択される、請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
前記医薬が、治療剤および診断剤からなる群より選択される、請求項１に記載の組成物。
【請求項５】
請求項４に記載の組成物であって、ここで、前記治療剤が、鎮痛薬、抗炎症剤、駆虫薬、抗不整脈剤、抗生物質、抗凝固剤、抗鬱剤、抗糖尿病剤、抗痙攣薬、抗真菌剤、抗ヒスタミン剤、抗高血圧薬、抗ムスカリン剤、抗ミコバクテリア剤、抗新生物剤、抗原生動物剤、免疫抑制剤、免疫刺激剤、抗甲状腺剤、抗ウイルス剤、抗不安鎮静薬、収れん薬、βアドレナリン受容体遮断薬、造影剤、コルチコステロイド、咳抑制剤、診断剤、診断造影剤、利尿薬、ドーパミン作用薬、止血剤、免疫製剤、脂質調節因子、筋弛緩剤、副交感神経様作用剤、副甲状腺カルシトニン、プロスタグランジン、放射性医薬、性ホルモン、抗アレルギー剤、興奮薬、交感神経様作用剤、甲状腺因子、血管拡張剤、ワクチン、およびキサンチンからなる群より選択される、組成物。
【請求項６】
前記治療剤が、イトラコナゾール、ナブメトン、およびブデソニドからなる群より選択される、請求項４に記載の組成物。
【請求項７】
前記医薬が、前記組成物の総重量に基づき約０．０１重量％〜約５０重量％の量で存在する、請求項１に記載の組成物。
【請求項８】
前記医薬の粒子サイズが、５０ｎｍ〜５０ミクロンである、請求項１に記載の組成物。
【請求項９】
前記医薬の粒子の平均直径が約５０ｎｍ〜２ミクロンである、請求項１に記載の組成物。
【請求項１０】
前記粒子の９９％より多くが、約５ミクロン未満の粒子サイズを有する、請求項１に記載の組成物。
【請求項１１】
界面調節剤、ｐＨ調整剤、結晶成長調節剤、低温保存剤、浸透圧調節剤、共溶媒、および粘度調節剤からなる群より選択される１つ以上の賦形剤をさらに含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項１２】
前記界面調節剤が、陰イオン性界面活性剤、陽イオン性界面活性剤、非イオン性界面活性剤および生物学的界面調節剤からなる群より選択される、請求項１１に記載の組成物。
【請求項１３】
請求項１２に記載の組成物であって、ここで、前記非イオン性界面活性剤が、以下：ポリオキシエチレン脂肪アルコールエーテル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン誘導体化脂質（例えば、ｍＰＥＧ−ＰＳＰＣ（パルミトイル−ステアロイル−ホスファチジルコリン）、ｍＰＥＧ−ＰＳＰＥ（パルミトイル−ステアロイル−ホスファチジルエタノールアミン））、ソルビタンエステル、グリセロールモノステアレート、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、セチルアルコール、セトステアリルアルコール、ステアリルアルコール、アリルアルキルポリエーテルアルコール、ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレンコポリマー、ポラキサミン、メチルセルロース、ヒドロキシセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、非晶質性セルロース、多糖、デンプン、デンプン誘導体、ヒドロキシエチルデンプン、ポリビニルアルコール、およびポリビニルピロリドンからなる群より選択される、組成物。
【請求項１４】
請求項１２に記載の組成物であって、ここで、前記陰イオン性界面活性剤が、ラウリン酸カリウム、トリエタノールアミンステアレート、ラウリル硫酸ナトリウム、ドデシル硫酸ナトリウム、アルキルポリオキシエチレンスルフェート、アルギン酸ナトリウム、スルホコハク酸ジオクチルナトリウム、グリセリルエステル、カルボキシメチルセルロースナトリウム、胆汁酸およびその塩、コール酸、デオキシコール酸、グリココール酸、タウロコール酸、グリコデオキシコール酸、およびカルボキシメチルセルロースカルシウムからなる群より選択される、組成物。
【請求項１５】
前記陽イオン性界面活性剤が、四級アンモニウム化合物、塩化ベンザルコニウム、臭化セチルトリメチルアンモニウム、キトサン、および塩化ラウリルジメチルベンジルアンモニウムからなる群より選択される、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１６】
前記生物学的界面調節剤が、アルブミン、カゼイン、ヘパリン、ヒルジン、または他のタンパク質からなる群より選択される、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１７】
請求項１１に記載の組成物であって、ここで、前記ｐＨ調整剤が、緩衝剤、水酸化ナトリウム、塩酸、トリス、クエン酸、酢酸、乳酸、メグルミン、アミノ酸、およびタウリンからなる群より選択され、該アミノ酸が、グリシン、アラニン、ロイシン、イソロイシン、リジン、メチオニン、チロシン、フェニルアラニン、トリプトファン、ヒスチジン、プロリン、セリン、グルタミン酸、アスパラギン酸、アスパラギン、グルタミン、システインからなる群より選択される、組成物。
【請求項１８】
前記低温保存剤が、炭水化物、グリセロール、ポリアルコキシエーテル、ＰＥＧ−脂肪酸およびＰＥＧ−脂質、生物ベースの界面活性剤、および他の界面活性剤からなる群より選択される、請求項１１に記載の組成物。
【請求項１９】
前記炭水化物が、糖、二糖、および糖アルコールからなる群より選択される、請求項１８に記載の組成物。
【請求項２０】
前記二糖がスクロースである、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２１】
前記糖アルコールが、マンニトールである、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２２】
前記界面活性剤が、ポリソルベート（Ｔｗｅｅｎ）、グリセロール、ポリアルコキシエーテル、ＰＥＧ−脂肪酸、ＰＥＧ−脂質、アルブミン、デンプン、およびジメチルスルホキシドからなる群より選択される、請求項１８に記載の組成物。
【請求項２３】
前記粘度調節剤が、炭水化物、ポリマー、およびタンパク質からなる群より選択される、請求項１１に記載の組成物。
【請求項２４】
前記賦形剤が、前記組成物の総重量に基づき、約０．００１重量％〜約２０重量％の量で存在する、請求項１１に記載の組成物。
【請求項２５】
前記賦形剤が、前記組成物の総重量に基づき、約０．０１重量％〜約５重量％の量で存在する、請求項１１に記載の組成物。
【請求項２６】
前記懸濁液が、少なくとも６ヶ月間安定である、請求項１に記載の組成物。
【請求項２７】
水性マトリクス中の水難溶性化合物の懸濁液を安定化させるための方法であって、該方法は、以下の工程：
水性マトリクス中の懸濁液を提供する工程；および
該水性懸濁液を凍結する工程、
を包含する、方法。
【請求項２８】
前記化合物が、１０．０ｍｇ／ｍｌ未満の水溶性を有する、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
前記化合物が、結晶相医薬、非晶質相医薬、結晶相化粧品、および非晶質相化粧品からなる群より選択される、請求項２７に記載の方法。
【請求項３０】
前記医薬が、治療剤および診断剤からなる群より選択される、請求項２７に記載の方法。
【請求項３１】
請求項３０に記載の方法であって、ここで、前記治療剤が、抗真菌剤、鎮痛薬、抗炎症剤、駆虫薬、抗不整脈剤、抗生物質、抗凝固剤、抗鬱剤、抗糖尿病剤、抗痙攣薬、抗ヒスタミン剤、抗高血圧薬、抗ムスカリン剤、抗原生動物剤、抗ミコバクテリア剤、抗新生物剤、免疫抑制剤、免疫刺激剤、抗甲状腺剤、抗ウイルス剤、抗不安鎮静薬、収れん薬、βアドレナリン受容体遮断薬、造影剤、コルチコステロイド、咳抑制剤、診断剤、診断造影剤、利尿薬、ドーパミン作用剤、止血剤、免疫製剤、脂質調節因子、筋弛緩剤、副交感神経様作用剤、副甲状腺カルシトニン、プロスタグランジン、放射性医薬、性ホルモン、抗アレルギー剤、興奮薬、交感神経様作用薬、甲状腺因子、血管拡張薬、ワクチン、およびキサンチンからなる群より選択される、方法。
【請求項３２】
前記治療剤が、イトラコナゾール、ブデソニド、およびナブメトンからなる群より選択される、請求項３０に記載の方法。
【請求項３３】
前記医薬が、前記組成物の総重量に基づき約０．０１重量％〜約５０重量％の量で存在する、請求項２７に記載の方法。
【請求項３４】
前記医薬の粒子サイズが、５０ｎｍ〜５０ミクロンである、請求項２７に記載の方法。
【請求項３５】
前記医薬の粒子の平均直径が約５０ｎｍ〜２ミクロンである、請求項２７に記載の方法。
【請求項３６】
前記粒子の９９％より多くが、約５ミクロン未満の粒子サイズを有する、請求項２７に記載の方法。
【請求項３７】
凍結の前にろ過滅菌による滅菌工程をさらに包含する、請求項２７に記載の方法。
【請求項３８】
凍結の前に加熱滅菌による滅菌工程をさらに包含する、請求項２７に記載の方法。
【請求項３９】
γ線照射による滅菌工程をさらに包含する、請求項２７に記載の方法。
【請求項４０】
請求項２７に記載の方法であって、前記懸濁液を提供する工程が、以下：
水性媒体中の医薬を沈殿させて、プレ懸濁液を得る工程；および
水性媒体中に医薬を懸濁してプレ懸濁液を得る工程、
からなる群より選択される方法である、方法。
【請求項４１】
請求項４０に記載の方法であって、ここで、前記沈殿させる工程が、微小沈殿、乳濁液エバポレーション、溶媒反溶媒沈殿、超臨界流体沈殿、温度シフト沈殿、ｐＨシフト沈殿、およびシーディングからなる群より選択される、方法。
【請求項４２】
前記懸濁する工程が、前記水性媒体に前記医薬を添加する工程を包含する、請求項４０に記載の方法。
【請求項４３】
前記医薬または前記プレ懸濁液にエネルギーを加える工程をさらに包含する、請求項４２に記載の方法。
【請求項４４】
請求項４３に記載の方法であって、前記医薬にエネルギーを加える工程が、超音波、ホモジナイゼーション、マイクロフルイダイゼーション、向流ホモジナイゼーションからなる群より選択される方法、および衝撃力、剪断力、もしくはキャビテーション力を提供する方法、または連続的な様式でかもしくは温度変化によってかのいずれかでの熱エネルギーインプットを実施する工程を包含する、方法。
【請求項４５】
請求項４３に記載の方法であって、前記医薬は、エネルギー付与工程の前の第一の平均粒子サイズおよびエネルギー付与工程の後の第二の平均粒子サイズの粒子を有し、ここで、該第二の平均粒子サイズが、該第一の平均粒子サイズより小さい、方法。
【請求項４６】
請求項４０に記載の方法であって、前記プレ懸濁液が、界面調節剤、ｐＨ調整剤、結晶成長調節剤、低温保存剤、浸透圧調節剤、共溶媒、および粘度調節剤からなる群より選択される１つ以上の賦形剤をさらに含む、方法。
【請求項４７】
前記界面調節剤が、陰イオン性界面活性剤、陽イオン性界面活性剤、非イオン性界面活性剤および生物学的界面調節剤からなる群より選択される、請求項４６に記載の方法。
【請求項４８】
請求項４５に記載の方法であって、ここで、前記非イオン性界面活性剤が、以下：ポリオキシエチレン脂肪アルコールエーテル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン誘導体化脂質（例えば、ｍＰＥＧ−ＰＳＰＣ（パルミトイル−ステアロイル−ホスファチジルコリン）、ｍＰＥＧ−ＰＳＰＥ（パルミトイル−ステアロイル−ホスファチジルエタノールアミン））、ソルビタンエステル、グリセロールモノステアレート、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、セチルアルコール、セトステアリルアルコール、ステアリルアルコール、アリルアルキルポリエーテルアルコール、ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレンコポリマー、ポラキサミン、メチルセルロース、ヒドロキシセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、非晶質性セルロース、多糖、デンプン、デンプン誘導体、ヒドロキシエチルデンプン、ポリビニルアルコール、およびポリビニルピロリドンからなる群より選択される、方法。
【請求項４９】
請求項４７に記載の方法であって、ここで、前記陰イオン性界面活性剤が、ラウリン酸カリウム、トリエタノールアミンステアレート、ラウリル硫酸ナトリウム、ドデシル硫酸ナトリウム、アルキルポリオキシエチレンスルフェート、アルギン酸ナトリウム、スルホコハク酸ジオクチルナトリウム、グリセリルエステル、カルボキシメチルセルロースナトリウム、胆汁酸およびその塩、コール酸、デオキシコール酸、グリココール酸、タウロコール酸、グリコデオキシコール酸、およびカルボキシメチルセルロースカルシウムからなる群より選択される、方法。
【請求項５０】
前記陽イオン性界面活性剤が、四級アンモニウム化合物、塩化ベンザルコニウム、臭化セチルトリメチルアンモニウム、キトサン、および塩化ラウリルジメチルベンジルアンモニウムからなる群より選択される、請求項４７に記載の方法。
【請求項５１】
前記生物学的界面調節剤が、アルブミン、カゼイン、ヘパリン、ヒルジン、または他のタンパク質からなる群より選択される、請求項４７に記載の方法。
【請求項５２】
請求項４６に記載の方法であって、ここで、前記ｐＨ調整剤が、水酸化ナトリウム、緩衝剤、塩酸、トリス、クエン酸、酢酸、乳酸、メグルミン、アミノ酸、およびタウリンからなる群より選択され、該アミノ酸が、グリシン、アラニン、ロイシン、イソロイシン、リジン、メチオニン、チロシン、フェニルアラニン、トリプトファン、ヒスチジン、プロリン、セリン、グルタミン酸、アスパラギン酸、アスパラギン、グルタミン、システインからなる群より選択される、方法。
【請求項５３】
前記低温保存剤が、炭水化物、グリセロール、ポリアルコキシエーテル、ＰＥＧ−脂肪酸およびＰＥＧ−脂質、生物ベースの界面活性剤、および他の界面活性剤からなる群より選択される、請求項４６に記載の方法。
【請求項５４】
前記炭水化物が、糖、二糖、および糖アルコールからなる群より選択される、請求項５３に記載の方法。
【請求項５５】
前記二糖がスクロースである、請求項５４に記載の方法。
【請求項５６】
前記糖アルコールが、マンニトールである、請求項５４に記載の方法。
【請求項５７】
前記界面活性剤が、ポリソルベート（Ｔｗｅｅｎ）、グリセロール、ポリアルコキシエーテル、ＰＥＧ−脂肪酸、ＰＥＧ−脂質、アルブミン、デンプン、およびジメチルスルホキシドからなる群より選択される、請求項５３に記載の方法。
【請求項５８】
前記粘度調節剤が、炭水化物、ポリマー、およびタンパク質からなる群より選択される、請求項４６に記載の方法。
【請求項５９】
前記賦形剤が、前記プレ懸濁液の総重量に基づき、約０．００１重量％〜約２０重量％の量で存在する、請求項４６に記載の方法。
【請求項６０】
前記賦形剤が、前記プレ懸濁液の総重量に基づき、約０．０１重量％〜約５重量％の量で存在する、請求項４６に記載の方法。
【請求項６１】
請求項４３に記載の方法であって、前記プレ懸濁液にエネルギーを加える工程が、超音波、ホモジナイゼーション、マイクロフルイダイゼーション、向流ホモジナイゼーションからなる群より選択される方法、および衝撃力、剪断力、もしくはキャビテーション力を提供する方法、または、連続的な様式でかもしくは温度変化によってかのいずれかの熱エネルギーインプットを実施する工程を包含する、方法。
【請求項６２】
請求項４１に記載の方法であって、前記乳濁液エバポレーション方法が、以下の工程：
前記医薬を、揮発性水非混和性溶媒に溶解して、溶液を形成する工程；
該溶液を、水性媒体と合わせて、乳濁液を形成する工程；
該乳濁液を混合して、マイクロエマルジョンを形成する工程；および
マイクロエマルジョン中の該揮発性水非混和性溶媒を除去して、水性懸濁液を形成する工程、
を包含する、方法。
【請求項６３】
前記水性懸濁液が、界面調節剤、ｐＨ調整剤、結晶成長調節剤、低温保存剤、浸透圧調節剤、共溶媒、および粘度調節剤からなる群より選択される１つ以上の賦形剤をさらに含む、請求項６２に記載の方法。
【請求項６４】
前記界面調節剤が、陰イオン性界面活性剤、陽イオン性界面活性剤、非イオン性界面活性剤および生物学的界面調節剤からなる群より選択される、請求項６３に記載の方法。
【請求項６５】
請求項６４に記載の方法であって、ここで、前記非イオン性界面活性剤が、以下：ポリオキシエチレン脂肪アルコールエーテル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン誘導体化脂質（例えば、ｍＰＥＧ−ＰＳＰＣ（パルミトイル−ステアロイル−ホスファチジルコリン）、ｍＰＥＧ−ＰＳＰＥ（パルミトイル−ステアロイル−ホスファチジルエタノールアミン））、ソルビタンエステル、グリセロールモノステアレート、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、セチルアルコール、セトステアリルアルコール、ステアリルアルコール、アリールアルキルポリエーテルアルコール、ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレンコポリマー、ポラキサミン、メチルセルロース、ヒドロキシセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、非晶質性セルロース、多糖、デンプン、デンプン誘導体、ヒドロキシエチルデンプン、ポリビニルアルコール、およびポリビニルピロリドンからなる群より選択される、方法。
【請求項６６】
請求項６４に記載の方法であって、ここで、前記陰イオン性界面活性剤が、ラウリン酸カリウム、トリエタノールアミンステアレート、ラウリル硫酸ナトリウム、ドデシル硫酸ナトリウム、アルキルポリオキシエチレンスルフェート、アルギン酸ナトリウム、スルホコハク酸ジオクチルナトリウム、グリセリルエステル、カルボキシメチルセルロースナトリウム、胆汁酸およびその塩、コール酸、デオキシコール酸、グリココール酸、タウロコール酸、グリコデオキシコール酸、およびカルボキシメチルセルロースカルシウムからなる群より選択される、方法。
【請求項６７】
前記陽イオン性界面活性剤が、四級アンモニウム化合物、塩化ベンザルコニウム、臭化セチルトリメチルアンモニウム、キトサン、および塩化ラウリルジメチルベンジルアンモニウムからなる群より選択される、請求項６４に記載の方法。
【請求項６８】
前記生物学的界面調節剤が、アルブミン、カゼイン、ヘパリン、ヒルジン、または他のタンパク質からなる群より選択される、請求項６４に記載の方法。
【請求項６９】
請求項６３に記載の方法であって、ここで、前記ｐＨ調整剤が、緩衝剤、水酸化ナトリウム、塩酸、トリス、クエン酸、酢酸、乳酸、メグルミン、アミノ酸、およびタウリンからなる群より選択され、該アミノ酸が、グリシン、アラニン、ロイシン、イソロイシン、リジン、メチオニン、チロシン、フェニルアラニン、トリプトファン、ヒスチジン、プロリン、セリン、グルタミン酸、アスパラギン酸、アスパラギン、グルタミン、システインからなる群より選択される、方法。
【請求項７０】
前記低温保存剤が、炭水化物、グリセロール、ポリアルコキシエーテル、ＰＥＧ−脂肪酸およびＰＥＧ−脂質、生物ベースの界面活性剤、および他の界面活性剤からなる群より選択される、請求項６３に記載の方法。
【請求項７１】
前記炭水化物が、糖、二糖、および糖アルコールからなる群より選択される、請求項７０に記載の方法。
【請求項７２】
前記二糖がスクロースである、請求項７１に記載の方法。
【請求項７３】
前記糖アルコールが、マンニトールである、請求項７１に記載の方法。
【請求項７４】
前記界面活性剤が、ポリソルベート（Ｔｗｅｅｎ）、ポリアルコキシエーテル、ＰＥＧ−脂肪酸、ＰＥＧ−脂質、アルブミン、デンプン、グリセロール、およびジメチルスルホキシドからなる群より選択される、請求項７０に記載の方法。
【請求項７５】
前記調節剤が、炭水化物、ポリマー、およびタンパク質からなる群より選択される、請求項６３に記載の方法。
【請求項７６】
前記賦形剤が、前記懸濁液の総重量に基づき、約０．００１重量％〜約２０重量％の量で存在する、請求項６３に記載の方法。
【請求項７７】
前記賦形剤が、前記懸濁液の総重量に基づき、約０．０１重量％〜約５重量％の量で存在する、請求項６３に記載の方法。
【請求項７８】
請求項６２に記載の方法であって、前記揮発性水非混和性溶媒が、５以上の炭素数の直鎖状、分枝鎖、もしくは環状のアルカン、５以上の炭素数の直鎖状、分枝鎖、もしくは環状のアルケン、５以上の炭素数の直鎖状、分枝鎖、もしくは環状のアルキン；芳香族炭化水素、完全にかもしくは部分的にハロゲン化した炭化水素、エーテル、エステル、ケトン、モノグリセリド、ジグリセリド、もしくはトリグリセリド、天然油、アルコール、アルデヒド、酸、アミン、直鎖状または環状のシリコーン、ヘキサメチルジシロキサン、またはこれらの溶媒の任意の組み合わせからなる群より選択される、方法。
【請求項７９】
前記揮発性水非混和性溶媒が、塩化メチレンである、請求項６２に記載の方法。
【請求項８０】
前記乳濁液を約４℃まで冷却する工程をさらに包含する、請求項６２に記載の方法。
【請求項８１】
請求項６２に記載の方法であって、前記混合する工程が、超音波、ホモジナイゼーション、マイクロフルイダイゼーション、向流ホモジナイゼーションからなる群より選択される方法、および衝撃力、剪断力、もしくはキャビテーション力を提供する方法、または連続的な様式でかもしくは温度変化によってかのいずれかでの熱インプットによりエネルギーを与える工程を包含する、方法。
【請求項８２】
前記揮発性水非混和性溶媒を除去する工程が、超音波による、請求項６２に記載の方法。
【請求項８３】
前記揮発性水非混和性溶媒を除去する工程が、マイクロエマルジョンを高度の減圧下におくことによる、請求項６２に記載の方法。
【請求項８４】
前記医薬の粒子が、ほぼ球形の形状である、請求項６２に記載の方法
【請求項８５】
請求項３９に記載の方法であって、前記溶媒反溶媒法が、以下の工程：
水混和性溶媒中に前記医薬を溶解して、非水性溶液を形成する工程；および
該非水性溶媒を水性媒体と合わせて該医薬を沈殿させ、プレ懸濁液を得る工程、
を包含する、方法。
【請求項８６】
前記プレ懸濁液を撹拌して懸濁液を形成する工程をさらに包含する、請求項８５に記載の方法。
【請求項８７】
前記撹拌する工程が、前記プレ懸濁液にエネルギーを与える工程を含む、請求項８６に記載の方法。
【請求項８８】
請求項８７に記載の方法であって、ここで、前記エネルギ付与工程が、超音波、ホモジナイゼーション、マイクロフルイダイゼーション、向流ホモジナイゼーションからなる群より選択される方法、および衝撃力、剪断力、もしくはキャビテーション力を提供する方法、または連続的な様式でかもしくは温度変化によってかのいずれかでの熱エネルギーインプットを用いて前記プレ懸濁液にエネルギーを移動させる工程を含む、方法。
【請求項８９】
前記水性懸濁液が、界面調節剤、ｐＨ調整剤、結晶成長調節剤、低温保存剤、浸透圧調節剤、共溶媒、および粘度調節剤からなる群より選択される１つ以上の賦形剤をさらに含む、請求項８５に記載の方法。
【請求項９０】
前記界面調節剤が、陰イオン性界面活性剤、陽イオン性界面活性剤、非イオン性界面活性剤および生物学的界面調節剤からなる群より選択される、請求項８９に記載の方法。
【請求項９１】
請求項８４に記載の方法であって、ここで、前記非イオン性界面活性剤が、以下：ポリオキシエチレン脂肪アルコールエーテル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン誘導体化脂質（例えば、ｍＰＥＧ−ＰＳＰＣ（パルミトイル−ステアロイル−ホスファチジルコリン）、ｍＰＥＧ−ＰＳＰＥ（パルミトイル−ステアロイル−ホスファチジルエタノールアミン））、ソルビタンエステル、グリセロールモノステアレート、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、セチルアルコール、セトステアリルアルコール、ステアリルアルコール、アリルアルキルポリエーテルアルコール、ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレンコポリマー、ポラキサミン、メチルセルロース、ヒドロキシセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、非晶質性セルロース、多糖、デンプン、デンプン誘導体、ヒドロキシエチルデンプン、ポリビニルアルコール、およびポリビニルピロリドンからなる群より選択される、方法。
【請求項９２】
請求項９０に記載の方法であって、ここで、前記陰イオン性界面活性剤が、ラウリン酸カリウム、トリエタノールアミンステアレート、ラウリル硫酸ナトリウム、ドデシル硫酸ナトリウム、アルキルポリオキシエチレンスルフェート、アルギン酸ナトリウム、スルホコハク酸ジオクチルナトリウム、グリセリルエステル、カルボキシメチルセルロースナトリウム、胆汁酸およびその塩、コール酸、デオキシコール酸、グリココール酸、タウロコール酸、グリコデオキシコール酸、およびカルボキシメチルセルロースカルシウムからなる群より選択される、方法。
【請求項９３】
前記陽イオン性界面活性剤が、四級アンモニウム化合物、塩化ベンザルコニウム、臭化セチルトリメチルアンモニウム、キトサン、および塩化ラウリルジメチルベンジルアンモニウムからなる群より選択される、請求項９０に記載の方法。
【請求項９４】
前記生物学的界面調節剤が、アルブミン、カゼイン、ヘパリン、ヒルジン、または他のタンパク質からなる群より選択される、請求項９０に記載の方法。
【請求項９５】
請求項８９に記載の方法であって、ここで、前記ｐＨ調整剤が、緩衝剤、水酸化ナトリウム、塩酸、トリス、クエン酸、酢酸、乳酸、メグルミン、アミノ酸、およびタウリンからなる群より選択され、該アミノ酸が、グリシン、アラニン、ロイシン、イソロイシン、リジン、メチオニン、チロシン、フェニルアラニン、トリプトファン、ヒスチジン、プロリン、セリン、グルタミン酸、アスパラギン酸、アスパラギン、グルタミン、システインからなる群より選択される、方法。
【請求項９６】
前記低温保存剤が、炭水化物、グリセロール、ポリアルコキシエーテル、ＰＥＧ−脂肪酸およびＰＥＧ−脂質、ならびに生物ベースの界面活性剤からなる群より選択される、請求項８９に記載の方法。
【請求項９７】
前記炭水化物が、糖、二糖、および糖アルコールからなる群より選択される、請求項９６に記載の方法。
【請求項９８】
前記二糖がスクロースである、請求項９７に記載の方法。
【請求項９９】
前記糖アルコールが、マンニトールである、請求項９７に記載の方法。
【請求項１００】
前記界面活性剤が、ポリソルベート（Ｔｗｅｅｎ）、ポリアルコキシエーテル、ＰＥＧ−脂肪酸、ＰＥＧ−脂質、アルブミン、デンプン、グリセロール、およびジメチルスルホキシドからなる群より選択される、請求項９６に記載の方法。
【請求項１０１】
前記粘度調節剤が、炭水化物、ポリマー、およびタンパク質からなる群より選択される、請求項８８に記載の方法。
【請求項１０２】
前記賦形剤が、前記プレ懸濁液の重量に基づき、約０．００１重量％〜約２０重量％の量で存在する、請求項８８に記載の方法。
【請求項１０３】
前記賦形剤が、前記プレ懸濁液の重量に基づき、約０．０１重量％〜約５重量％の量で存在する、請求項８８に記載の方法
【請求項１０４】
患者に凍結水性マトリクス中の水難溶性の医薬または化粧品の懸濁液を投与するための方法であって、該方法は、以下の工程：
該医薬または化粧品の凍結懸濁液を提供する工程；
該凍結懸濁液を解凍する工程；および
非経口注射（静脈注射、動脈注射、包膜内注射、腹膜注射、眼内注射、関節内注射、硬膜内注射、筋内注射、皮内注射、または皮下注射）、経口、肺、眼、または局所からなる群より選択される経路により、該患者に該解凍した懸濁液を投与する工程、
を包含する、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連出願に対する相互参照）
本願は、仮出願番号６０／３４７，５４８、２００１年１０月１９日出願、から優先権を主張し、これは、本明細書中で参考として援用され、その一部をなす。
【０００２】
（連邦政府による委託研究または委託開発）
非適用
（技術分野）
本発明は、凍結水溶性マトリックス中に懸濁した化合物の粒子を含む、水に不十分に溶解する化合物の安定な懸濁液の組成物およびその調製のための方法を開示する。この組成物は、長期間、好ましくは６ヶ月以上安定である。
【背景技術】
【０００３】
（背景分野）
水溶性溶液中の低溶解性または不溶性である多くの処方医薬化合物が、増加傾向にある。このような化合物は、投与可能な形態でそれらを供給することが困難である。水に不溶性の薬剤は、サブミクロン粒子の安定な懸濁液として処方される場合、大きな利点を有し得る。粒子の大きさの正確な制御は、これら処方物の安全かつ有効な使用に必須である。粒子は、塞栓を引き起こさずに毛細管を安全に通過するように、直径が７ミクロン未満でなければならない（Ａｌｌｅｎら、１９８７；ＤａｖｉｓおよびＴａｕｂｅ、１９７８；Ｓｃｈｒｏｅｄｅｒら、１９７８；Ｙｏｋｅｌら、１９８１）。この問題に対する１つの解決策は、不溶性薬剤候補の極度に小さい粒子の製造およびマイクロ粒子またはナノ粒子懸濁液の創作である。この方法によって、水溶性系において処方されることが以前では不可能であった薬剤は、静脈内投与に適合され得る。静脈内投与に対する適合性は、小さい粒子の大きさ（＜７μｍ）、低毒性（毒性処方化合物または残存する溶媒からのもの）、および投与後の薬剤粒子のバイオアベイラビリティーを含む。
【０００４】
懸濁液は、経口、筋肉内、肺性、局所的または皮下投与に対してもまた適当であり得る。これらの経路による投与の場合、５〜１００ミクロンの範囲の粒子の大きさを有することが望ましい。
【０００５】
懸濁液は、延長された期間に保存される場合、十分な物理的および化学的安定性を欠き得る。物理的な不安定性は、粒子がより大きい粒子を形成するように凝集する場合に起こる。これは、一般的に小さい粒子の大きさの結果である。オストワルド熟成は、小さい粒子の半径およびそれに伴う表面活性（すなわち、溶解性）の増加のために起こり得る。特に、ナノ粒子は、溶解速度および可溶性を増強する非常に高い表面／体積比を有する。結果として、その粒子は、懸濁液中に可溶化し、次いで、再結晶化して大きい結晶を形成し得る。凝集および結晶成長により、より大きいおよび種々の粒子の大きさのナノ粒子の懸濁液が生成する。７μｍより大きい粒子を有する懸濁液は、もはや静脈内投与に適当でない。
【０００６】
懸濁液中で、活性な成分は、分解もまた起こし得、そして懸濁溶媒との相互作用によって、時間と共に活性が減少する。わずかな分解でさえ、活性の成分の分解を促進し得る。化学的分解の割合は、粒子の大きさ、固有の溶解度、および活性な成分の化学的性質に依存する。
【０００７】
物理的安定性および化学的安定性の両方の点から、長い有効期間、好ましくは最短６ヶ月間で水性懸濁液の医薬調製物を有することが高く望まれる。
【０００８】
物理的安定性および有効期間を改良するために懸濁液中のナノ粒子の凝集および結晶成長を制限するいくつかの方法が、先行技術において記載される。１つの方法は、その調製物に表面安定剤を加える工程を包含する。適当な表面安定剤としては、界面活性剤、ポリマー、くもり点修飾因子（米国特許第５，２９８，２６１号；同第５，３４６，７０２号；および同第５，４７０，５８３号を参照のこと）、結晶成長調節剤（米国特許第５，６６５，３３１号を参照のこと）および凍結防止剤（米国特許第５，３０２，４０１号を参照のこと）が挙げられる。これらのアプローチは、制限された粒子凝集および結晶成長に成功したことが見出されたが、適当な表面活性剤は、室温か、または冷蔵庫内かのいずれかにおいて液体の状態で懸濁液の延長された保存を可能にすることが見出されていない場合もある。または、安定薬剤が見出される場合、それらは不要な毒性の性質を所有しうる。
【０００９】
ナノ粒子の凝集および結晶成長を阻害するための別のアプローチは、Ｌｉｖｅｒｓｉｄｇｅらによって米国特許第６，２６７，９８９号に記載されるように、粒子の平均の大きさを約１５０ｎｍ〜約３５０ｎｍの狭い範囲に制限することである。‘９８９特許は、粒子が、この大きさの範囲内である場合、凝集および結晶成長が、最小になることを開示する。しかし、この粒子の大きさの狭い範囲は、その応用を制限する。ある適用に対して、４００ｎｍを超える粒子の大きさのナノ粒子懸濁液を有することが望まれ得る。これらの適用として、望ましい粒子の大きさが、５〜１００ミクロンであり得る、経口、皮下または筋肉内投与が挙げられるが、これらに限定されない。他の処方では、望ましい粒子の大きさは、１００ｎｍより小さいことであり得る。例えば、これは、ＲＥＳ（細網内皮系）を回避するように設計される粒子に対してあてはまる。このような長く循環する粒子も、ある癌性腫瘍に関連するような遊離した、開窓脈管構造をこえて移動し得る。これは、そのような腫瘍の受動的な標的化を促進し得る。
【００１０】
Ｙｉｖらは、米国特許第６，２４５，３４９号において脂肪親和性でかつ両親媒性の薬剤の脂質ナノ粒子の安定な処方を開示する。この処方は、リン脂質、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、界面活性剤および水からなる水中油マイクロエマルジョンである。トリグリセリドのような油性成分は、任意である。その成分は、エマルジョンを形成するために混合される。粒子の平均の大きさは、フィルター滅菌される調製物について２００ｎｍより小さいべきである。この組成物は、濃縮した形態か、または低濃度の形態かのいずれかで保存され得る。その低濃度の形態は、水溶性の緩衝液を含み、そして約−５０℃〜約４０℃の温度範囲で安定である。実施例１では、組成物は、相分離、粒子の大きさの変化または薬剤の結晶化の証拠無しで、２１日間−２０℃で保存された。しかし、この方法は、２００ｎｍより小さい粒子を有する水中油分散に限定され、その中で、すべての成分は、液体である。このような分散は、一般的に分散が、２２０ｎｍの穴の大きさを有するフィルターを通過することを必要とするフィルター滅菌によって滅菌される。
【００１１】
先行技術は、延長された保存のためにナノ粒子調製物の化学的安定性を改良する方法もまた記載する。一般的なアプローチは、凍結乾燥によって水溶性溶媒を除去することおよび乾燥した、凍結乾燥した形態でナノ粒子を保存することである。例は、米国特許第５，０９１，１８７号の実施例６に開示される。透析は、一般的に塩のような不要な任意の溶質を除去するため、または凍結乾燥の工程の間のこのようなの溶質の濃縮を防止するために、凍結乾燥前に、必要とされる。透析および凍結乾燥の工程の追加は、透析が非常に時間を浪費する工程であり、そして凍結乾燥が、エネルギーを浪費する工程であるので、生産経費を増加させる。さらに凍結乾燥させた調製物は、投与（静脈内、粘膜内または皮下投与）か、または経口かのいずれかによる投与の前に適当な分散溶媒による再構成の必要がある。これらは、医薬薬剤の投与および再構成の間に起こり得る、潜在的な人為的誤りの導入において、より多くの労働が要求される。
【００１２】
これらの懸濁液の安定化に対する新しい方法の開発のための努力の一部として、本発明者らは、凍結が、凍結した水溶性マトリックス内に薬剤粒子を入れることによって、これらの不安定化メカニズムを回避し得ることを見出した。そのような低い温度において、薬剤可溶性は、減少し、そして水性媒体の高い粘性は、固体粒子からの溶質薬剤の拡散を嫌う。これは、核形成、結晶成長およびオストワルド熟成を含む。より低い温度は、また水溶性溶媒中の薬剤分解を減速することによって、化学的安定性を増加する。水の結晶化はまた、例えば、混合物の共晶点以下で起こり得、これによって第二の核形成、結晶成長およびオストワルド熟成を起こし得る薬剤を含む溶液相を形成する可能性を排除する。
【００１３】
本発明においてナノ粒子は、当該分野で公知の任意の方法によって調製され得る。１つのアプローチは、薬剤を送達する粒子の大きさの減少を中心とする。米国特許第６，２２８，３９９号；同第６，０８６，３７６号；同第５，９２２，３５５号；および同第５，６６０，８５８号を含む、そのような特許の１つにおいて、Ｐａｒｉｋｈらは、超音波処理が、水不溶性化合物のマイクロ粒子を調整するために使用され得ることを開示する。これらの特許の中で、米国特許第５，９２２，３５５号は、より小さい粒子を作るために超音波処理を使用する方法に対する改良を開示する。その改良は、単相の水溶性系において、リン脂質および界面活性剤と活性な薬理学的な薬剤を混合し、そしてより小さい粒子を製造する系にエネルギーを適用することを含む。しかし、凍結による懸濁液の安定化は、開示していない。
【００１４】
Ｈａｙｎｅｓに対して発行された米国特許第５，０９１，１８８号は、薬理学的に活性の水不溶性薬剤の粒子の大きさの減少および固体の形態を与える粒子に対する脂質被覆の使用もまた、開示する。この特許は、約０．０５〜約１０ミクロンの直径を有する薬剤の固体粒子の水溶性懸濁液から本質的になる医薬組成物に関する。粒子の表面に添加した脂質被覆は、それらを安定させるように作用する。この組成物は、膜形成脂質界面活性剤の存在下で水に薬剤が加えられ、次いで水溶性懸濁液中の粒子の大きさを減少することによって製造される。しかし、その懸濁液を凍結することは、安定化方法として開示されていない。
【００１５】
米国特許第５，８５８，４１０号は、非経口的投与に対して適当な医薬ナノ懸濁液を開示する。この‘４１０特許は、溶媒内に分散させた少なくとも１つの治療的に活性の固体の化合物を光量子相関分析法（ＰＣＳ）によって１０ｎｍ〜１０００ｎｍと決定される（全集団内で５ミクロンより大きい粒子の比率（クールター計数機で決定された数分布）は、０．１％未満である）平均直径を有する粒子を融解物となる前に形成するために、ピストンギャップホモジナイザー内での高圧均質化に供することを開示し、ここで、活性の化合物は、室温では固体であり、そして水、水溶性溶媒および／または有機溶媒に対して不溶性、ほんの少し可溶性または適度に可溶性である。‘４１０特許における実施例は、均質化の前にジェット粉砕することを開示する。
【００１６】
米国特許第５，１４５，６８４号は、粒子の大きさを減少させることによって、非経口的な送達のための、不溶性薬剤のナノ粒子を提供するための別のアプローチを開示する。‘６８４特許は、４００ｎｍ未満の効果的な平均粒子の大きさを有する薬剤粒子を提供するための界面調節剤の存在下で不溶性薬剤での湿式粉砕を開示する。この‘６８４特許は、その工程において、いかなる溶媒も使用しないことが好ましいことを強調する。‘６８４特許は、界面調節剤が、より大きい粒子に凝集することを防止するために十分な量の薬剤粒子の表面に吸着されることを開示する。
【００１７】
薬剤の粒子の大きさを物理的に減少し、そして表面安定剤で粒子を覆うことに加えて、ナノ粒子は、種々の沈殿方法によっても調整され得る。これらの方法は、連続相として溶媒中に薬剤を溶解し、次いで不連続相に溶液の状態を変化させることを含む。その結果、薬剤の細密な粒子は、代表的に不連続相に沈殿する。被覆薬剤または表面安定化剤は、粒子を安定化させるために薬剤と共沈するように、通常使用される。これらの沈殿方法の例は、溶媒微少析出および非溶媒微少析出、相変換沈殿、ｐＨ変化沈殿、超臨界流体沈殿および温度変化沈殿である。
【００１８】
適当な沈殿技術の例としては、本明細書中で参考として援用し、本明細書の一部をなす、米国特許出願番号６０／２５８，１６０；０９／８７４，７９９；０９／８７４，６３７；０９／８７４，４９９；および０９／９５３，９７９に開示されるように、ナノ粒子懸濁液を調製することが挙げられる。これらの出願は、粒子の格子構造を変化させるか、または粒子の大きさを減少させるために、水混和性有機溶媒中に有機化合物を溶解し、次いでその前に懸濁液を形成するための水溶性溶媒中で有機溶媒を沈殿させ、次いで粒子の被服を安定化するためにその前に懸濁液にエネルギーを加えることによって有機化合物の小さい粒子を形成することを開示する。この工程は、好ましくは、不十分な水溶解性、薬学的に活性な化合物の懸濁液を調製するために使用される。
【００１９】
米国特許第５，１１８，５２８号は、溶媒反溶媒（ａｎｔｉ−ｓｏｌｖｅｎｔ）沈殿によりナノ粒子を調製するプロセスを開示する。このプロセスは、以下の工程を包含する：（１）一つ以上の界面活性剤を加え得る、溶媒または溶媒混合物中での物質の液相の調製に対する工程、（２）非溶媒または非溶媒混合物の第二の液相の調製に対する工程、（この非溶媒は、この物質に対する溶媒または溶媒混合物と混和性である。）（３）攪拌しながら（１）の溶液と（２）の溶液を一緒に加える工程；および（４）ナノ粒子のコロイド状の懸濁液を生成するために、望まない溶媒を除去する工程。’５２８号特許は、エネルギー供給なしに５００ｎｍより小さな物質の粒子を生成することを開示する。特に、’５２８号特許は、例えば超音波処理器およびホモジナイザーといった高いエネルギー機器の使用は望ましくないことを記載する。
【００２０】
米国特許第４，８２６，６８９号は、水不溶性薬物または他の有機化合物から均一な大きさの粒子を生成する方法を開示する。まず、適切な固体有機化合物が有機溶媒に溶解され、その溶液が非溶媒で希釈され得る。次に、水性沈殿性液体が注入され、非凝集粒子（実質的に均一な平均径を有する）を沈殿する。次いで、その粒子は、有機溶媒から分離される。有機化合物および所望の粒子サイズに依存して、温度のパラメーター、有機溶媒に対する非溶媒の比率、注入速度、攪拌速度、および容量が発明に応じて異なり得る。’６８９号特許は、このプロセスが熱理学的に不安定である準安定状態で薬物を形成することを開示す。’６８９号特許は、結晶化インヒビター（例えば、ポリビニルピロリジノン）および界面活性剤（例えば、ポリ（オキシエチレン）−ｃｏ−オキシプロピレン）を用いることによって、準安定状態に薬剤を補捉し、準安定沈殿物を、遠心分離、膜濾過または逆浸透によって分離するのに十分安定であることを開示する。
【００２１】
米国特許第５，７８０，０６２号は、以下によって不溶性薬物の小さな粒子を調製する方法を開示する：（１）水混和性の第１の溶媒中で、薬物を溶解する工程（２）水性の第２の溶媒中でポリマーおよび両親媒性物質の第２の溶液を調製する工程、（この水性の第２の溶媒中では、薬物は実質的に不溶性であり、それによってポリマー／両親媒性物質複合体が形成される工程）（３）第１の工程および第２の工程からの溶液を混合し、薬剤およびポリマー／両親媒性物質複合体の凝集体を沈殿させる工程。
【００２２】
米国特許第４，９９７，４５４号は、固体化合物から均一のサイズの粒子を生成する方法を開示する。’４５４号特許の方法は、適した溶媒中で固体化合物を溶解した後に沈殿液を注入し、その結果、実質的に均一な平均直径をもつ非凝集粒子を沈殿させる工程を包含する。次いで、この粒子は、溶媒から分離される。’４５４号特許は、沈殿化手順の間に、粒子サイズの分布範囲が拡大するので、結晶が溶解および再結晶され得、それによって、結晶状態で粒子形成することを妨げる。’４５４号特許は、沈殿手順の間に、熱力学的に不安定な粒子の状態で粒子を補捉することを促進する。
【００２３】
米国特許第６，２３５，２２４  Ｂ１号および同第６，１４３，２１１号（共にＭａｔｈｉｏｗｉｔｚら、に発行された）は、マイクロカプセル化微粒子を沈殿させるための、相反転（ｐｈａｓｅ  ｉｎｖｅｒｓｉｏｎ）現象の使用を開示する。この方法は、溶媒とポリマーおよび薬物を混合する工程を包含する。この混合物は、混和性非溶媒の有効量に導入され、それによりマイクロカプセル生成物の自発的形成が起こる。
【００２４】
ｐＨ変化による微小沈殿は、ナノ粒子医薬品の分散を調製するために使用される別の技術である。例えば、米国特許第５，７６６，６３５号；同第５，７１６，６４２号；同第５，６６５，３３１号；同第５，６６２，８８３号；同第５，５６０，９３２号；および同第４，６０８，２７８号参照のこと。この技術は、非中性のｐＨを有する水性塩基中に薬学的化合物を溶解し、次いで、水性塩基中にその化合物を沈殿させるために中和される工程を含有する。
【００２５】
さらに別のアプローチ（例えば、米国特許第５，７６６，６３５号（Ｓｐｅｎｌｅｎｈａｕｅｒら、に発行された）に開示されるアプローチ）では、ナノ粒子は、ポリエチレンオキシドおよび／またはポリプロピレンオキシド／ポリアクチドコポリマーを有機溶媒中で溶解する工程、水溶液とこのように生成された有機溶液を混合し、ナノ粒子を溶液外に沈殿させる工程および界面活性剤を使わず、懸濁液を微小流動化させる工程により、調製される。固体ポリマーマトリックスから成る運搬粒子は、このようにして形成され、この中に共沈殿している医薬品が取りこまれ得る。
【００２６】
超臨界流体による沈殿は、Ｋｒｕｋｏｎｉｓら、の米国特許第５，３６０，４７８号および同５，３８９，２６３号ならびにＪｏｈｎｓｔｏｎのＷＯ９７／１４４０７により開示される。この技術は、溶媒反溶媒沈殿法と類似する。この場合、その臨界点を越えた圧力および温度の条件において気体または液体であり得る超臨界流体が、反溶媒として働く。溶媒中の溶質の溶液への超臨界流体の添加は、溶質を飽和状態に達させるまたは近づける、そして微小粒子として沈殿させる。
【００２７】
温度変化沈殿は、Ｄｏｍｂの米国特許第５，１８８，８３７号に開示される。この方法は，熱的に安定な薬物をポリマーに添加する工程を含む。ポリマーは、しばしば油ベース（例えば、リン脂質、合成ワックス）であり、低い融点を有する。薬物は、融解したポリマー中で、薬物の暖かい乳濁液を生成するために、ポリマーの融点より少し上までポリマーと共に熱せられる。次いで、乳濁液は、冷たい非溶媒（例えば、水）の浴に乳濁液を加え、激しく振盪し、乳濁液を水滴形成させる、そして懸濁液中に活性剤を閉じこめることによって、急に冷やされる。
【００２８】
わずかに水溶性の有機化合物のサブミクロン粒子を調製するためのさらに他のアプローチは，化合物の乳濁液の生成である。有機化合物は、有機層中に溶解される。有機層は、水層を有する乳濁液を生成する。乳濁液蒸発法は、米国特許出願番号０９／９６４，２７３に開示される。この方法は、以下の工程を包含する：（１）有機層（中に薬学的に有効な化合物を有している）および水層を有する多層システムを提供する；および（２）超音波処理し、有機層の一部を蒸発させ、水層中の化合物を沈殿させ、そして約４００ｎｍ未満の平均的な有効粒子サイズを有するようにする。
【００２９】
米国特許第５，６０５，７８５号は写真用に有効な化合物のナノ非晶質分散を生成するプロセスを開示する。ナノ非晶質分散を生成するプロセスは、任意の公知の乳化のプロセスを含む。この乳化のプロセスは、非晶質粒子を有する分散層を生成する。
【００３０】
薬学的に活性な化合物のサブミクロンサイズのナノ粒子懸濁液を調製する、なおさらに別のアプローチは、望ましい形態の結晶を生成するために沈殿のプロセスの間のいくつかの点で微小な種晶を入れることによる。（米国特許出願番号１０／０３５，８２１を参照のこと。）この方法は、第１溶液を生成するため、薬学的に活性な化合物の第１の量を水混和性の第１の有機溶媒中に溶解する工程を包含する。そのとき第１の溶液は、微小な種晶を入れられる。あるいは、第２の溶液が、微小な種晶を入れられ得る。この沈殿の工程の間の他の点においても、種化合物を利用することは可能であり得る。第１の溶液は、第２の溶液と混合され得る。第１溶液と第２溶液の混合によって、所望の形態学的形態の薬学的に活性な化合物の沈殿を生じる。
【００３１】
別のアプローチは、タンパク質で覆われている懸濁された粒子の生成に関する。Ｄｅｓａｉに発行された米国特許第５，９１６，５９６号は、その中に分散した薬学的に活性な薬剤を有する有機層および生体適合性ポリマーを含む水性媒体の混合物への高剪断の適用を開示する。この混合物は、高圧ホモジナイザー内で、約３，０００〜３０，０００ｐｓｉの範囲の圧力で、剪断される。’５９６号特許は、実質的に界面活性剤を含まない混合物を必要とする。なぜなら、タンパク質と併用した界面活性剤の使用は、保存の間にサイズが増加する、大きく、針様の結晶粒子の形成をもたらすからである。欄１７〜１８、実施例４を参照のこと。
【００３２】
Ｓｏｏｎ−Ｓｈｉｏｎｇら、に発行された米国特許第５，５６０，９３３号は、インビボ送達のための、水不溶性薬剤のまわりの重合体シェルの形成を開示する。この方法は、重合体を含む水性媒体およびその中に分散した実質的に水不溶性薬剤を有する分散剤を含む混合物への超音波処理の適用を開示する。この参考文献では、超音波処理は、ジスルフィド結合の形成を重合体の中で促進し、その重合体を架橋して、薬物のまわりに重合シェルを生成するために使用される。超音波処理は、ジスルフィド結合を形成するために十分な時間、行われる。
【００３３】
米国特許第５，６６５，３８３号において、Ｇｒｉｎｓｔａｆｆら、は、免疫刺激剤をインビボ送達のための重合シェル内にカプセル化するために、単相Ｂ（例えば、水性媒体）への超音波の適用を開示する。超音波は、ジスルフィド結合による、カプセル剤の架橋を促進して、シェルを形成する。
【００３４】
米国特許第５，９８１，７１９号および同第６，２６８，０５３号は、１０ミクロン未満の粒子サイズをもつ高分子の微粒子調製の方法を開示する。高分子は、可溶性重合体または可溶性重合体の混合物（例えば、アルブミン）と、高分子の等電点に近いｐＨで、エネルギー、好ましくは熱の存在下で、所定時間、混合される。このプロセスで生成した高分子は、液体流体を進入させ得、そして高分子および重合体を可溶化して、微粒子から出し、短期間または長期間の動力学を示すよう作成され得る。そのことにより、急速な高分子の放出かまたは、持続した高分子の放出が提供される。
【発明の開示】
【課題を解決するための手段】
【００３５】
（発明の要旨）
水性ナノ粒子懸濁液の欠点の一つは、乏しい物理的安定性および化学的安定性である。物理的な不安定性は、粒子凝集および結晶成長による。化学的な不安定性は、懸濁した固相で平衡状態である周囲の溶液中で可溶化された活性成分の分解による。この分解は、活性成分と賦形剤（例えば、界面活性剤および緩衝液）の相互作用により増強され得る。これらの安定性の問題により、多くの水性ナノ粒子系が医薬品の調製としての使用に適していない。例えば、溶解した活性化合物が加水分解により化学的に不安定な場合、例えば、溶液中の分解が化学的平衡を進行する分解および活性物質の欠失方向に移し得る。
【００３６】
本発明者は、凍結することは、薬物粒子を凍った水性マトリックスに入れることで、これらの不安定なメカニズムを回避し得ることを発見した。このように低い温度で、薬剤の溶解度は減少され、また水性媒体の非常に高い粘性が固体粒子から溶けた薬剤の拡散を阻害する。これは、核生成、結晶成長およびオストワルド熟成を含む。低温はまた、化学的安定性を良くする水性媒体中の薬剤分子の自然分解もまた低下させる。低温は、賦形剤との相互作用による活性物質の分解も低下させる。水の結晶化もまた、例えば混合物の共融点の低下を起こし得るため、二次的核生成、結晶成長およびオストワルド熟成を受け得る薬剤を含む溶液層生成の可能性が除去される。
【００３７】
本発明は、水性マトリックスにおいて、不十分な水溶性医薬の安定したナノ粒子懸濁液の組成物およびその組成物の調製法を提供する。本発明は、他の化合物（例えば、化粧品、写真用に有用な物質など）の安定した懸濁液を提供することを企図する。この化合物は、長期、好ましくは６ヶ月かそれ以上保存され得る。
【００３８】
本発明は、当該分野で公知で任意のナノ粒子系に応用され得る。ナノ粒子懸濁液は、例えば、物理的粉砕、ホモジナイゼーション、高剪断混合、乳濁液蒸発沈殿、溶媒反溶媒沈殿、超臨界流体沈殿、温度変化沈殿、ｐＨ変化沈殿、融解沈殿、およびシーディングのような公知の方法のいずれかから調製され得る。
【００３９】
本発明はまた、広範な組成物（例えば、界面調節剤、ｐＨ調整剤、結晶成長調節剤、凍結保存剤、浸透性圧調節剤、共溶媒および粘性調節剤を含む）をもつナノ粒子システムに適用される。
【００４０】
本組成物は、使用前に適切な分散剤による再構成を必要とせず、注射（静脈、筋肉、皮下）、肺、眼科、局所および経口を含むが、これに限定されない、様々な投与経路に適用され得る。
【００４１】
本発明およびその他の局面および特性は、以下の図面および付随の明細書に言及して議論され得る。
【００４２】
（本発明の詳細な記載）
本発明は多くの異なる形の実施形態をとり、そして本明細書中で詳細に記載されるが、本発明の好ましい実施形態は、本開示が本発明の原理の例示としてみなされ、本発明の広い側面を例証する実施形態に限定する企図はないという理解をもって開示される。
【００４３】
本発明は、静脈内投与または経口投与のための薬学的組成物および水性マトリックスにおけるナノ粒子懸濁液としての組成物の調製方法を開示する。非経口投与としては以下が挙げられる：静脈内注射、動脈内注射、くも膜下腔内注射、腹腔内注射、眼内注射、関節内注射、硬膜内注射、筋肉内注射、皮内注射または皮下注射。本組成物はまた、例えば局所、眼、経鼻、舌下、吸入、直腸などを含むその他の非経口投与経路にも適している。
【００４４】
医薬品は、好ましくは、低水溶性の化合物である。本組成物は、冷蔵庫内または室温に長時間、好ましくは1年以上保存される場合、物理的および化学的に不安定である。安定化は、水性ナノ粒子懸濁液を凍結するか、または冷凍状態で組成物を保存することにより達成され得る。このような低温下では、薬物の可溶性が減少され、水性溶媒の非常に高い粘度は、薬物を含む固形粒子からの薬物溶質拡散を妨げる。これは、核形成、結晶成長およびオストワルドの成熟を含む。低温はまた、それらの化学安定性を向上するために、水性溶媒中の薬物分子の自然分解を減速する。例えば混合物の共融点より下の温度で、水の結晶化も起こり得、従って、二次的な核形成、結晶成長およびオストワルドの成熟を起こし得る薬物を含有する液相形成の可能性を排除する。
【００４５】
本発明はまた、例えば撮影に有用な化合物を含む、医薬品でない他の低水溶性の物質の懸濁液を用いても実施可能である。
【００４６】
（Ａ．ナノ粒子懸濁液組成物）
本発明の組成物は、凍結水性マトリックスに懸濁された医薬品のナノ粒子を含む。特定の医薬品、ナノ粒子懸濁液の調製方法、および投与経路に依存して、１つ以上の賦形剤が所望される場合、組成物中に含まれ得る。
【００４７】
（１．医薬品）
本発明は、治療薬、診断薬または化粧品であり得る、多種多様の医薬品を用いて実施可能である。これらは、有機化合物および無機化合物ならびにタンパク質、ペプチド、糖類、多糖類、ポリペプチド、ヌクレオチドおよびオリゴヌクレオチドなどの生物製剤を含む。
【００４８】
医薬品は、結晶相中または非晶質性の非晶質相中に存在し得る。本薬剤は、好ましくは低水溶性である。「低水溶性」によって、医薬品が１０ｍｇ／ｍｌ未満の、好ましくは１ｍｇ／ｍｌの水への溶解性を有することが意味される。これらの低水溶性剤は、水性ナノ粒子懸濁液の調製に最も適している。これは、水性溶媒中でこれらの薬剤を形成する代替法は制限されるからである。
【００４９】
本発明はまた、固形キャリアマトリックス（例えばポリラクテートポリグリコレートコポリマー、アルブミン、デンプン）にこれらの医薬品を捕捉することにより、または医薬品に不透過性である周囲ベシクルにこれらの医薬品をカプセル化することにより、水溶性医薬品を用いても実施可能である。このカプセル化ベシクルは、ポリアクリレートのようなポリマーコートであり得る。さらに、これらの水溶性医薬品から調製されたナノ粒子およびマイクロ粒子は、化学安定性を向上し、また粒子からの薬剤の放出を制御することにより、薬剤の薬物動態学的な性質を制御するために、改変され得る。水溶性医薬品の例は、単純有機化合物、タンパク質、ペプチド、ヌクレオチド、オリゴヌクレオチドおよび炭水化物を含むが、これらに限定されない。
【００５０】
治療薬は、多種の既知の医薬品分類から選択され得、医薬品分類としては以下が挙げられる：鎮痛薬、抗炎症薬、駆虫薬、抗不整脈薬、抗生物質（ペニシリンを含む）、抗凝固剤、抗鬱剤、抗糖尿病剤、抗痙攣薬、抗真菌薬、抗ヒスタミン薬、抗高血圧薬、抗ムスカリン剤、抗ミコバクテリア剤、抗新生物剤、抗原生動物剤、免疫抑制剤、免疫刺激剤、抗甲状腺剤、抗ウイルス剤、抗不安鎮静薬（睡眠薬および神経遮断薬）、収れん薬、βアドレナリン受容体遮断薬、血液製剤および代用品、強心薬、造影剤、コルチコステロイド、咳抑制剤（去痰薬および粘液溶解薬）、診断薬、診断造影剤、利尿薬、ドーパミン作用薬（抗パーキンソン病薬）、止血剤、免疫製剤、脂質調節因子、筋弛緩剤、副交感神経様作用剤、副甲状腺カルシトニンおよびビフォスフォネート（ｂｉｐｈｏｓｐｈｏｎａｔｅ）、プロスタグランジン、放射性医薬品、性ホルモン（ステロイドを含む）、抗アレルギー薬、賦活薬および食欲抑制剤、交換神経興奮剤、甲状腺剤、血管拡張剤、ワクチンならびにキサンチン。
【００５１】
診断剤は、Ｘ線造影剤および造影溶媒を含む。Ｘ線造影剤の例は、ジアトリゾ酸（ｄｉａｔｒｉｚｏｉｃ  ａｃｉｄ）（ＥＥＤＡ）のエチルエステルとしても知られているＷＩＮ−８８８３（エチル  ３，５−ジアセトアミド（ｄｉａｃｅｔａｍｉｄｏ）−２，４，６−トリヨードベンゾエート）、ＷＩＮ  ６７７２２すなわち(６−エトキシ−６−オキソへキシル−３，５−ビス（アセトアミド）−２，４，６−トリヨードベンゾエート；エチル−２−（３，５−ビス（アセトアミド）−２，４，６−トリヨードベンゾイルオキシ）ブチレート（ＷＩＮ  １６３１８）；エチルジアトリゾキシアセテート（ＷＩＮ  １２９０１）；エチル  ２−（３，５−ビス（アセトアミド）−２，４，６−トリヨードベンゾイルオキシ）プロピオネート（ＷＩＮ  １６９２３）；Ｎ−エチル  ２−（３，５−ビス（アセトアミド）−２，４，６−トリヨードベンゾイルオキシアセトアミド（ＷＩＮ  ６５３１２）；イソプロピル  ２−（３，５−ビス（アセトアミド）−２，４，６−トリヨードベンゾイルオキシ）アセトアミド（ＷＩＮ  １２８５５）；ジエチル  ２−（３，５−ビス（アセトアミド）−２，４，６−トリヨードベンゾイルオキシマロネート（ＷＩＮ  ６７７２１）；エチル  ２−（３，５−ビス（アセトアミド）−２，４，６−トリヨードベンゾイルオキシ）フェニルアセテート（ＷＩＮ  ６７５８５）；プロパン二酸、［［３，５−ビス（アセチルアミノ）−２，４，５−トリヨードベンゾイル］オキシ］ビス（１−メチル）エステル（ＷＩＮ  ６８１６５）；および安息香酸、３，５−ビス（アセチルアミノ）−２，４，６−トリヨード−４−（エチル−３−エトキシ−２−ブテノエート）エステル（ＷＩＮ  ６８２０９）を含む。好ましい造影剤は、生理的条件下で比較的迅速に崩壊することが期待されており、従って炎症応答に関係する任意粒子を最小限に抑えるようなものを含む。崩壊は、酵素加水分解、生理的ｐＨにおけるカルボン酸の可溶化、または他の機構によって起こり得る。従って、ＷＩＮ  ６７７２１、ＷＩＮ  １２９０１、ＷＩＮ  ６８１６５およびＷＩＮ  ６８２０９などの加水分解に不安定なヨウ素化化学種に加えて、ヨージパミド、ジアトリゾ酸およびメトリゾ酸（ｍｅｔｒｉｚｏｉｃ  ａｃｉｄ）のような低溶性ヨード標識カルボン酸が好まれ得る。
【００５２】
抗腫瘍剤または抗癌剤は、パクリタキセルおよび誘導化合物、ならびにアルカロイド、代謝拮抗剤、アルキル化剤および抗生物質からなる群から選択された他の抗腫瘍剤を含むが、これに限定されない。
【００５３】
好ましい治療薬または好ましい診断薬は、経口投与および静脈内投与のために意図されたものを含む。これらの分類の治療剤および診断薬の記載ならびに、それぞれの分類に含まれる化学種の列挙は、本明細書中に参考として援用され、そして本明細書の一部を構成するＭａｒｔｉｎｄａｌｅ（Ｔｈｅ  Ｅｘｔｒａ  Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ  第２９版、Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓ、Ｌｏｎｄｏｎ、１９８９）に見出され得る。治療薬および診断薬は、商業的に入手可能であり、そして／または当業者に公知の技術によって調製され得る。
【００５４】
化粧品（ｃｏｓｍｅｔｉｃ  ａｇｅｎｔ）は、美容活性を有すことが可能な活性成分である。これらの活性成分の例は、特に、緩和薬、湿潤剤、フリーラジカル阻害剤、抗炎症剤、ビタミン剤、脱色剤、抗アクネ剤、抗脂漏剤、角質溶解剤、スリミング剤、皮膚着色剤（ｓｋｉｎ  ｃｏｌｏｒｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）および日焼け止め剤、ならびに特に、リノール酸、レチノール、レチノール酸、アスコルビン酸アルキルエステル、ポリ不飽和脂肪酸、ニコチン酸エステル、ニコチン酸トコフェロール、米、大豆、またはシアバターノキの不けん化物、セラミド、グリコール酸のようなヒドロキシ酸、セレン誘導体、抗酸化剤、β−カロチン、γ−オリザノール（ｏｒｉｚａｎｏｌ）、およびステアリルグリセレートであり得る。化粧品は、商業的に入手可能であり、そして／または当業者に公知の技術によって調製され得る。
【００５５】
医薬品は、組成物の重量の約０．０１％〜約５０％、より好ましくは約０．１％〜約３０％、そして最も好ましくは約０．１％〜約５％の量で存在し得る。
【００５６】
（２．賦形剤）
本発明における賦形剤は、任意的である。１つ以上の賦形剤が組成物中に含まれ得る。賦形剤の例としては、以下が挙げられる：緩衝液、界面調節剤、ｐＨ調節剤、結晶成長調節剤、凍結保護剤、浸透物質、共溶媒、および粘度調節剤。
【００５７】
適切な界面調節剤は、好ましくは、陰イオン界面活性剤、陽イオン界面活性剤、非イオン界面活性剤または生体の表面活性分子のような、既知の有機および無機医薬品賦形剤から選択され得る。
【００５８】
適切な陰イオン界面活性剤は、以下を含むがこれに限定されない：ラウリン酸カリウム、ラウリル硫酸ナトリウム、ドデシル硫酸ナトリウム、ポリオキシエチレン硫酸アルキル、アルギン酸ナトリウム、ジオクチルナトリウムサルホサクシネート、グリセリルエステル、カルボキシメチルセルロースナトリウム、コール酸および他の胆汁酸（例えば、コール酸、デオキシコール酸、グリココール酸、タウロコール酸、グリコデオキシコール酸）、ならびにこれらの塩（例えばデオキシコール酸ナトリウム塩など）。適切な陽イオン界面活性剤は、以下を含むがこれに限定されない：塩化ベンザルコニウム、臭化セチルトリメチルアンモニウム、塩化ラウリルジメチルベンジルアンモニウム、アシルカルニチン塩酸塩、またはピリジニウムハロゲン化物アルキルのような４級アンモニウム化合物。
【００５９】
適切な非イオン界面活性剤は、以下を含む：ポリオキシエチレン脂肪アルコールエーテル（ＭａｃｒｏｇｏｌおよびＢｒｉｊ）、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル（Ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ）、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル（Ｍｙｒｊ）、ポリオキシエチレン誘導体化脂質またはポリオキシエチレン誘導体化リン脂質、ソルビタンエステル（Ｓｐａｎ）、グリセロ−ルモノステアレート、ポリエチレングリコール、ポリプロピルレングリコール、セチルアルコール、セトステアリールアルコール、ステアリールアルコール、アリールアルキルポリエーテルアルコール、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンコポリマー（ポロキサマー）、ポロキサミン、メチルセルロース、ヒドロキシセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、非晶質セルロース、ヒドロキシエチルスターチ（ＨＥＳ）のようなデンプンおよびデンプン誘導体を含むポリサッカライド、ポリビニルアルコールならびにポリビニルピロリドン。本発明の好ましい形態では、非イオン界面活性剤はポリオキシエチレンおよびポリオキシプロピレンコポリマーであり、好ましくはプロピレングリコールおよびエチレングリコールのブロックコポリマーである。このようなポリマーは、ＰＯＬＯＸＡＭＥＲという商品名で販売され（ときどきＰＬＵＲＯＮＩＣ（登録商標）と称される）、Ｓｐｅｃｔｒｕｍ  ＣｈｅｍｉｃａｌおよびＲｕｇｅｒを含むいくつかの納入業者から販売される。ポリオキシエチレン脂肪酸エステルの中には、短アルキル鎖を有するものも含まれる。このような界面活性剤の一つの例は、ＢＡＳＦ  Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ製のＳＯＬＵＴＯＬ（登録商標）ＨＳ  １５、ポリエチレン−６６０−ヒドロキシステアレートである。
【００６０】
表面活性生体分子は、アルブミン、カゼイン、ヘパリン、ヒルジンまたは他の適切なタンパク質のような分子が含まれる。
【００６１】
界面調節剤のその他の代表的な例としては、以下が挙げられる：ゼラチン、カゼイン、アラビアゴム、コレステロール、トラガカント、ステアリン酸、塩化ベンザルコニウム、ステアリン酸カルシウム、モノステアリン酸グリセロ−ル、セトステアリールアルコール、セトマクロゴール乳化蝋、ソルビタンエステル、ポリオキシエチレンアルキルエーテル（例えば、セトマクロゴール１０００のようなマクロゴールエーテル）、ポリオキシエチレンヒマシ油誘導体、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル（例えば市販のＴｗｅｅｎｓＴＭ）、ポリエチレングリコール、ポリオキシエチレンステアレート、コロイド質二酸化ケイ素、リン酸、ドデシル硫酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロースカルシウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、非晶質セルロース、マグネシウムアルミニウムケイ酸塩、トリエタノールアミン、ポルビニルアルコール、およびポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）。これらの界面調節剤の多くは、公知の医薬品賦形剤であり、本明細書中に参考として援用され、本明細書の一部を構成する、ｔｈｅ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ（ｔｈｅ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  ＡｓｓｏｃｉａｔｉｏｎおよびＴｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｏｆ  Ｇｒｅａｔ  Ｂｒｉｔａｉｎによる共同出版、ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓ、１９８６）に詳細に記載されている。
【００６２】
界面調節剤は、市販されており、そして／または当該分野で公知の技術によって調製され得る。２つ以上の界面調節剤が、組み合わせて使用され得る。
【００６３】
適切なｐＨ調整剤としては、緩衝液、水酸化ナトリウム、塩酸、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン（ｔｒｉｓ）、クエン酸塩、酢酸塩、乳酸塩、メグルミンなどが挙げられるが、これらに限定されない。緩衝液としてはまた、アミノ酸（例えば、グリシン、ロイシン、アラニン、リジンなど）が挙げられるが、これらに限定されない。
【００６４】
適切な結晶成長調節剤は、米国特許第５，６６５，３３１号に記載される。結晶成長調節剤は、共沈プロセス中に、薬剤の微量沈殿した結晶の構造中に取り込まれ、これにより、微晶沈殿物の成長または拡大を妨げる（オストワルド熟成プロセスと呼ばれる）化合物として定義される。いくつかの結晶成長調節剤は、分子に基づいて、薬剤と構造が類似し得る。ポリマー（例えば、米国特許第４，８２６，６８９に開示されるような結晶化阻害剤のポリビニルピロリドン）もまた、結晶調節剤として適切である。結晶成長調節剤はまた、過飽和状態の溶質と複合体を形成し、それにより結晶の核形成および／または成長を妨害または阻害することによって作用し得る。
【００６５】
ナノ粒子懸濁液で使用される凍結防止剤は、米国特許第５，３０２，４０１号に開示される。この’４０１特許において、凍結防止剤は、凍結乾燥プロセス中に、ナノ粒子の凝集を阻害する。適切な凍結防止剤の例としては、糖質（例えば、スクロース、キシロース、グルコース）、および糖アルコール（例えば、マンニトールおよびソルビトール）、改変活性剤（例えば、ポリソルベート（Ｔｗｅｅｎ））、ならびにグリセロールおよびジメチルスルホキシドが挙げられる。凍結防止剤としてはまた、水溶性ポリマー（例えば、ポロビニルピロリジノン（ＰＶＰ））、デンプン、およびポリアルコキシエーテル（例えば、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコールおよびポロキソマー）が挙げられ得る。生物学的に誘導される凍結防止剤としては、アルブミンが挙げられる。さらに別の種類の凍結防止剤としては、ペグ化脂質（例えば、Ｓｏｌｕｔｏｌ）が挙げられる。好ましい凍結防止剤は、糖質である。好ましい糖質は、単糖類または二糖類である。好ましい二糖類は、スクロースである。別の好ましい凍結防止剤としては、ポリマー（例えば、上記のポリマーであるが、これらに限定されない）が挙げられる。さらに別の好ましい凍結防止剤は、アルブミンである。
【００６６】
粘度調節剤は、組成物の粘度に影響を与える薬剤である。調節剤の例は、糖質（例えば、セルロース、ゴム、糖、糖アルコール）、ポリマー（例えば、ポロキサマー、ポロキサミン、ポリビニルピロリドン）、タンパク質（例えば、アルブミン、乳汁タンパク質）である。これらの薬剤は、Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ａｄｄｉｔｉｖｅｓ（Ｇｏｗｅｒにより、Ｔｈｉｃｋｅｎｅｒｓ，Ｖｉｓｃｏｓｉｔｙ  ｃｏｎｔｒｏｌ  ａｇｅｎｔｓ，Ｃｃｏｎｓｉｓｔｅｎｃｙ  ｒｅｇｕｌａｔｏｒｓ，Ｂｏｄｙｉｎｇ  ａｇｅｎｔｓ，Ａｎｔｉｇｅｌｌａｎｔｓの節で刊行されている）（これは、本明細書中で参考として援用され、そして本明細書の一部を構成する）に列挙されている。
【００６７】
適切な浸透圧調節剤（ｏｓｍｏｔｉｃ  ａｇｅｎｔ）としては、糖（例えば、デキストロース、スクロース）、糖アルコール（例えば、マンニトール、ソルビトール）、塩（例えば、塩化ナトリウム）、グリセロールおよびグリセロール誘導体などが挙げられる。
【００６８】
適切な共溶媒の例は、エチルアルコール、ジメチルスルホキシドおよびＮ−メチル−２−ピロリドン（いわゆる、Ｎ−メチル−２−ピロリドン）である。他の例としては、乳酸、酢酸および他の液体カルボン酸が挙げられる。
【００６９】
賦形剤は、組成物の約０．００１重量％〜約２０重量％、好ましくは約０．０１重量％〜約５重量％の量で存在し得る。
【００７０】
賦形剤（単数または複数）は、ナノ粒子の調製プロセス中に、水性媒体に添加され得るか、または水性媒体と混合する前に、薬剤に直接添加され得る。この薬剤が、水性反溶媒（ａｎｔｉ−ｓｏｌｖｅｎｔ）と混合する前に、有機相に溶解される場合、賦形剤（単数または複数）は、沈殿の前に、この有機相に添加され得る。
【００７１】
（３．ナノ粒子の粒子サイズおよび形状）
本発明において、粒子サイズは、動的光散乱法（例えば、光相関分光法、レーザー回折、低角レーザー光散乱（ＬＡＬＬＳ）、中角レーザー光散乱（ＭＡＬＬＳ）、光オブスキュレーション（ｏｂｓｃｕｒａｔｉｏｎ）方法（例えば、Ｃｏｕｌｔｅｒ法）、レオロジーまたは、上記の範囲内の顕微鏡（光学顕微鏡または電子顕微鏡））によって測定される。本発明は、広範な粒子サイズのナノ粒子および微粒子の懸濁液に適用可能である。この粒子の好ましい平均有効粒子サイズは、約１００μｍ未満であり、より好ましくは約７μｍ未満であり、より好ましくは約２μｍ未満であり、最も好ましくは約４００ｎｍ未満であり、さらにより好ましくは２００ｎｍ未満であるか、またはこれらの範囲内の任意の範囲または組合せである。
【００７２】
（４．ナノ粒子懸濁液の調製方法）
薬剤の水性ナノ粒子懸濁液は、活性剤の機械的粉砕を包含する任意の方法によって、沈殿技術によって、または薬剤の懸濁方法によって、調製され得る。機械的粉砕としては、ジェットミリング、パールミリング、ボールミリング、ハンマーミリング、流体エネルギーミリングまたは湿式製粉技術（例えば、米国特許第５，１４５，６８４号（これは本明細書中で参考として援用され、そして明細書の一部をなす）に開示される技術）のような技術が上げられる。
【００７３】
沈殿工程は、粒子懸濁液を作製するために使用され得、この粒子懸濁液は、エネルギー付加工程にさらに供される。このエネルギー付加工程は、粒子懸濁液を、マイクロフルイダイザー（ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｚｅｒ）、ピストンギャップホモジナイザーまたはカウンター向流ホモジナイザー（例えば、米国特許第５，０９１，１８８号（これは本明細書中で参考として援用され、そして本明細書の一部をなす）に記載されるようなもの）を使用して、高剪断条件（キャビテーション、剪断力または衝撃力を含む）に供する工程を包含する。適切なピストンギャップホモジナイザーは、例えば、ＡｖｅｓｔｉｎによりＥＭＵＬＳＩＦＬＥＸとの製品名で、およびＳｐｅｃｔｒｏｎｉｃ  ＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓによりＦｒｅｎｃｈ  Ｐｒｅｓｓｕｒｅ  Ｃｅｌｌｓとの製品名で市販されている。適切なマイクロフルイダイザーは、Ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃｓ  Ｃｏｒｐ．から入手可能である。以下に記載される結晶シード添加工程は、高剪断条件に溶液を供するプロセスの間の任意の時点で実施され得、最も好ましくは、エネルギー付加工程の前に実施される。
【００７４】
エネルギーを付加する工程はまた、超音波処理技術を使用して達成され得る。超音波処理工程は、任意の適切な超音波処理デバイス（例えば、Ｂｒａｎｓｏｎ  Ｍｏｄｅｌ  Ｓ−４５０ＡまたはＣｏｌｅ−Ｐａｒｍｅｒ  ５００／７５０  Ｗａｔｔ  Ｍｏｄｅｌ）を用いて実施され得る。このようなデバイスは、当業界で周知である。代表的には、この超音波処理デバイスは、薬物含有溶液に挿入されて、この溶液中に音響エネルギーを放出する超音波処理ホーンまたはプローブを有する。この超音波処理デバイスは、本発明の好ましい形態において、約１ｋＨｚ〜約９０ｋＨｚの周波数、より好ましくは約２０ｋＨｚ〜約４０ｋＨｚの周波数、またはその中の任意の範囲または範囲の組合せで作動する。プローブのサイズは、変動し得、好ましくは、１／２インチまたは１／４インチなどのような別個のサイズである。超音波処理の間に、この溶液を室温よりも下の温度まで冷却することが望まれ得る。以下に記載される結晶シード添加工程は、この溶液を高剪断条件に供する工程の間の任意の時点で実施され得、最も好ましくはエネルギー付加工程の前に実施される。
【００７５】
（沈殿方法）
沈殿方法において、薬剤を溶媒に溶解して、溶液を得る。次いで、この溶液を、水性媒体を混合して、この薬剤の微粒子のプレ懸濁液を得る。この水性媒体は、必要に応じて、界面調節剤、ｐＨ調整剤、凍結防止剤、結晶成長調節剤、浸透圧調節剤、共溶媒および粘度調節剤の群から選択される１つ以上の賦形剤を含み得る。これらの賦形剤はまた、沈殿工程の前に、この薬剤が溶解される溶媒に含まれていてもよい。エネルギーは、薬剤のコーティングを安定化するため、格子構造を変更するため、または沈殿物の粒子のサイズをさらに減少させるために、必要に応じてこのプレ懸濁液に印加され得る。エネルギー源としては、超音波処理、均質化、微小流動化、向流均質化、または衝撃力、剪断力またはキャビテーション力を提供する他の方法が挙げられるが、これらに限定されない。このエネルギー源はまた、加熱または冷却の形態で連続した熱出力を提供するため、または温度変化（例えば、循環）による方法を含む。
【００７６】
いくつかの公知の沈殿プロセスは、エマルジョンエバポレーション沈殿、微小沈殿、溶媒−反溶媒沈殿、超臨界流体沈殿、温度移動沈殿、ｐＨ移動沈殿およびシード添加である。
【００７７】
（エマルジョンエバポレーション沈殿）
エマルジョンエバポレーション方法は、米国特許出願番号０９／９６４，２７３号（これは、本明細書中で参考として援用され、そして本明細書の一部をなす）に開示される。このプロセスは、以下の工程を包含する：（１）有機相および水相を有する多相系を提供する工程であって、この有機相は、その中に薬学的に有効な化合物を有する、工程；および（２）この系を超音波処理して、この有機相の一部をエバポレートし、水相中の、約２μｍ未満の平均有効粒子サイズを有する化合物を沈殿させる工程。多相系を提供する工程は、以下の工程を包含する：（１）水混和性溶媒（油相）と、薬学的に有効な化合物とを混合して、有機溶液を規定する工程、（２）１種以上の界面活性分子を用いて、水ベースの溶液を調製する工程、および（３）この有機溶液とこの水溶液とを混合して、多相系を形成する工程。この多相系は、粗エマルジョンを形成するために、撹拌または混合され得る。この粗エマルジョンは、約１μｍ未満の直径のサイズの水中の油滴を有する。この粗エマルジョンは、微小エマルジョンを規定するため、そして最終的にはサブミクロンの粒子懸濁液を規定するために、超音波処理される。
【００７８】
水混和性溶媒は、以下からなる群から選択される：直鎖、分枝鎖または環状の５以上の炭素数を有するアルカン、分枝鎖または環状の、５以上の炭素数を有するアルケン、直鎖、分枝鎖または環状の５以上の炭素数を有するアルキン、芳香族炭化水素、完全にかまたは部分的にハロゲン化された炭化水素、エーテル、エステル、ケトン、モノグリセリド、ジグリセリドもしくはトリグリセリド、天然油、アルコール、アルデヒド、酸、アミン、直鎖または環状のシリコーン、ヘキサメチルジシロキサン、またはこれらの溶媒の任意の組合せ。好ましい水混和性溶媒は、塩化メチレンである。
【００７９】
超音波処理工程は、エネルギーを提供する任意の他の手段により置き換えられ得、そして他のエネルギー源の例は、超音波処理、均一化、微小均一化、向流均一化、または衝撃力、剪断力もしくはキャビテーション力を提供する他の方法である。
【００８０】
（微小沈殿）
微小沈殿の方法は、米国特許出願番号第６０／２５８，１６０号；同第０９／８７４，７９９号；同第０９／８７４，６３７号；同第０９／８７４，４９９号；および同第０９／９５３，９７９号に開示される。有機化合物の小粒子は、水性媒体中の有機化合物を沈殿させて、プレ懸濁液を形成し、次いで、エネルギーを付加して、粒子のコーティングを安定化するかまたは粒子の格子構造を変更することによって、形成される。このプロセスは、好ましくは、非経口投与または経口投与に適切な水溶性の乏しい、薬学的に活性な化合物の懸濁液を調製するために使用される。
【００８１】
このプロセスは、２つのカテゴリー（方法Ａおよび方法Ｂ）にさらに分けられ得る。
【００８２】
（方法Ａ）
方法Ａにおいて、有機化合物（「薬物」）が、初めに、第１の溶媒に溶解されて、第１の溶液が規定される。この有機化合物は、第１の溶媒に対するこの有機化合物の溶解度に依存して、約０．１％（ｗ／ｖ）〜約５０％（ｗ／ｖ）で添加され得る。第１の溶媒中に化合物全てを確実に溶解するために、濃縮物を、約３０℃〜約１００℃で加熱する必要があり得る。
【００８３】
第２の水溶液は、この水溶液に加えられる１つ以上の任意の界面調節剤（例えば、陰イオン性界面活性剤、陽イオン性界面活性剤、非イオン性界面活性剤、または生物学的界面活性分子）によって提供される。
【００８４】
第２溶液（例えば、緩衝液、水酸化ナトリウム、塩酸、ＴＲＩＳ緩衝液、クエン酸塩、酢酸塩、乳酸塩、メグルミンなど）に対するｐＨ調整剤を添加することもまた所望され得る。他の緩衝液としては、グリシン、ロイシン、アラニン、リジン、などのようなアミノ酸が挙げられる。第２の溶液は、約２〜約１１の範囲のｐＨを有するべきである。
【００８５】
本発明の好ましい形態において、有機化合物のサブミクロンの大きさである粒子を調製する方法は、この第２の溶液に第１の溶液を添加する工程を包含する。添加速度は、バッチサイズに依存し、そして、有機化合物に対する沈降速度論に依存する。代表的には、小規模実験プロセス（１リットルの調製物）に関して、この添加速度は、１分あたり約０．０５ｃｃから１分間あたり約１０ｃｃである。この添加の間に、この溶液は、一定の攪拌下にあるべきである。光学顕微鏡を使用して、非晶質粒子、半結晶性固体または過冷却液体が形成されて、プレ懸濁液（ｐｒｅ−ｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎ）を規定することが観察された。この方法は、このプレ懸濁液をアニーリング工程に供して、この非晶質粒子、過冷却液体または半結晶性固体を結晶性のより安定な固体状態に変換する工程をさらに包含する。この得られた粒子は、上述の範囲にある、動的光散乱法（例えば、光相関分光器、レーザー回折、低角光散乱（ＬＡＬＬＳ）、中角光散乱（ＭＡＬＬＳ）、光不明瞭化法（ｌｉｇｈｔ  ｏｂｓｃｕｒａｔｉｏｎ  ｍｅｔｈｏｄ）（例えば、Ｃｏｕｌｔｅｒ法）、レオロジーまたは（光または電子による）顕微鏡分析法）によって測定されるような、平均有効粒径を有する。
【００８６】
エネルギー付加工程は、超音波処理、均質化処理、逆電流均質化処理（ｃｏｕｎｔｅｒｃｕｒｒｅｎｔ  ｆｌｏｗ  ｈｏｍｏｇｅｎｉｚａｔｉｏｎ）、ミクロ流体化、または衝撃力、せん断力またはキャビテーション力を提供する他の方法を介してエネルギーを付加することを含む。サンプルは、この段階の間に冷却または加熱され得る。本発明の１つの好ましい形態において、このアニーリング工程は、製品名ＥｍｕｌｓｉＦｌｅｘ  Ｃ１６０の下、Ａｖｅｓｔｉｎ  Ｉｎｃ．によって販売されるホモジェナイザーのようなピストンギャップホモジェナイザーによって与えられる。本発明の別の好ましい形態において、このアニーリングは、Ｓｏｎｉｃｓ  ａｎｄ  Ｍａｔｅｒｉａｌｓ，Ｉｎｃ．製のＶｉｂｒａ−Ｃｅｌｌ  Ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ  Ｐｒｏｃｅｓｓｏｒ（６００Ｗ）のような超音波プロセッサを使用する超音波処理によって、達成され得る。本発明の別の好ましい実施形態において、このアニーリングは、米国特許第５，７２０，５５１号（これは、本明細書中において、参考として援用され、本明細書の一部をなす）に記載されるような乳化装置の使用によって達成され得る。
【００８７】
アニーリングの速度に依存して、処理されたサンプルの温度を約−３０℃〜３０℃の範囲に調節することが所望され得る。あるいは、処理した固体における所望される相変化を与えるために、このプレ懸濁液を、このアニーリング工程の間に約３０℃〜約１００℃の範囲の温度まで加熱する必要があり得る。
【００８８】
非晶質粒子に、半結晶固体または過冷却液体に加えて、プレ懸濁液はまた、沈殿前のそれらの固体状態よりも容易に粉砕される破砕性結晶からなり得る。この場合、エネルギー付加工程によって、これらの粒子が所望のサイズまで破砕される。
【００８９】
（方法Ｂ）
方法Ｂは、以下の点において方法Ａとは相違する。この第１の差異は、界面活性剤または界面活性剤の組み合わせが、第１の溶液に添加されることである。これらの界面活性剤は、非イオン性界面活性剤、陰イオン性活性剤、および陽イオン性活性剤からなる群より選択され得る。
【００９０】
非晶質粒子、半結晶固体または過冷却液体に加えて、プレ懸濁液はまた、沈殿前のそれらの固体状態よりも容易に粉砕される破砕性結晶からなり得る。この場合、エネルギー付加工程によって、これらの粒子が所望のサイズまで破砕される。
【００９１】
１つの適切なエマルジョン沈殿技術は、同時継続かつ同一人に譲渡された米国特許出願０９／９６４，２７３号（これは、本明細書中で、援用され、かつ本明細書の一部をなす）に開示される。このアプローチにおいて、このプロセスは、以下の工程を包含する：（１）有機相および水相を有する多相系を提供する工程であって、ここで、この有機相が薬学的に有効な化合物をその中に有する、工程；および（２）この系に対して超音波処理を行い、有機相の一部分をエバポレートして、水相中に約２μｍ未満の平均有効粒径を有する化合物の沈殿を生じさせる工程。多相系を提供する工程は、以下の工程を包含する：薬学的に有効な化合物と、水に混ざり合わない溶媒を混合して、有機溶液を規定する、工程；（２）１以上の表面活性化合物を伴う水ベースの溶液（ａｑｕｅｏｕｓ  ｂａｓｅｄ  ｓｏｌｕｔｉｏｎ）を調製する工程、および（３）この水溶液と上記の有機溶液を混合して多相系を形成する工程。この有機相および水相を混合する工程は、ピストンギャップホモジェナイザー、コロイドミル（ｍｉｌｌ）、高速攪拌装置、押し出し成形装置、手動による攪拌、または振とう装置、マイクロフルイダイザー（ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｚｅｒ）あるいは高せん断条件を提供する他の装置または技術の使用を包含する。この粗エマルジョンは、この系を超音波処理することよりも直径にして１μｍ未満のサイズの水の中の油滴を有する。この粗エマルジョンは、超音波処理されてマイクロエマルジョンを規定し、かつサブミクロンサイズの粒子懸濁物を実質的に規定する。
【００９２】
以下に詳細が議論される必要に応じた多形制御工程が、これらの工程のいずれかの間に実施され得る。この多形制御工程は、この系の超音波処理の前またはその後において実施され得る。本発明の最も好ましい形態において、この多形制御工程が、超音波処理工程の間で実施される。
【００９３】
サブミクロンサイズの粒子を調製するための別のアプローチは、同時係属かつ同一人に譲渡された米国特許第１０／１８３，０３５号（これは、本明細書中において、参考として援用され、そして、本明細書の部分を構成する）において開示される。このプロセスは、以下の工程を包含する：（１）有機相および水相を有する多相系の粗分散物を提供する工程であって、この有機相はその中に薬学的組成物を有している、工程；（２）エネルギーを上記の粗分散物に提供して、微細な分散物を形成する工程；（３）上記の微細な分散物を凍結する工程；および  （４）この精製した分散物を凍結乾燥して、薬学的化合物のサブミクロンサイズの粒子を取得する工程。多相系を提供する工程は、以下の工程を包含する：（１）薬学的に有効な化合物と水不溶性溶媒とを混合して、有機溶液を規定する工程；（２）１以上の表面活性化合物を用いて水ベースの溶液を調製する工程；ならびに（３）この水性溶液と上記の有機溶液とを混合して多相系を形成する工程。この有機相と水相とを混合する工程は、ピストンギャップホモジェナイザー、コロイドミル（ｍｉｌｌ）、高速攪拌装置、押し出し成形装置、手動による攪拌、または振とう装置、マイクロフルイダイザー（ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｚｅｒ）あるいは高せん断条件を提供する他の装置または技術の使用を包含する。
【００９４】
以下に詳細に議論されるように多形制御工程は、これらのいずれかの工程の間に実施され得る。本発明の最も好ましい形態において、この多形制御工程は、多相を提供する工程である混合工程（３）で実施される。
【００９５】
（溶媒抗溶媒沈殿）
適切な溶媒抗溶媒沈殿技術は、米国特許第５，１１８，５２８号および同５，１００，５９１号（これらは、本明細書中において、参考として援用され、そして、その一部分をなす）において開示されている。このプロセスは、以下の工程を包含する：（１）溶媒または１以上の界面活性剤が添加され得る溶媒の混合物中で生物学的活性な基質の液相を調製する工程；（２）非溶媒または非溶媒の混合物の第２の液相を調製する工程であって、この非溶媒は、その基質に関する溶媒または溶媒の混合物と混和性である工程；（３）攪拌しつつ（１）および（２）の溶液を一緒にして添加する工程；ならびに（４）所望しない溶媒を取り除いて、ナノ粒子のコロイド性懸濁物を産生する工程。エネルギーを供給することなしに、５００ｎｍよりも小さい物質の粒子を生成することが、’５２８号特許によって、開示される。
【００９６】
上記のように、以下で詳細が議論される必要に応じた多形制御工程が、これらの工程のいずれかの間において実施され得る。本発明の最も好ましい形態において、多形制御工程が、溶液（１）および（２）を一緒に添加する前に工程（３）において実施される。
【００９７】
（位相反転沈殿）
１つの適切な位相反転沈殿は、米国特許第６，２３５，２２４号、同第６，１４３，２１１号、および米国特許出願第２００１／００４２９３２号に開示されている。これらの文献は、本明細書中で参考として援用され、本明細書の一部をなす。位相反転は、連続相溶媒系に溶解させたポリマーが、ポリマーが連続相である固体高分子網に転化させる物理的現象を記載するのに使用される用語である。位相反転を誘導する１つの方法は、連続相への非溶媒の添加による。ポリマーは、単一相から不安定な二相混合物（ポリマーの豊富な画分とポリマーの乏しい画分）へと遷移する。ポリマーの豊富な相における非溶媒のミセル滴は、核生成部位として機能し、そしてポリマーでコーティングされる。第２２４号特許は、特定の条件下でのポリマー溶液の位相反転が別個の微粒子（ナノ粒子を含む）の同時の形成を引き起こし得ることを開示する。第２２４号特許は、溶媒中でのポリマーの溶解または分散を開示している。薬学的薬剤もまた、この溶媒中に溶解または分散される。このプロセスにおいて有効な任意の多形制御工程のために、その薬剤が溶媒中に溶解していることが望ましい。ポリマー、薬剤、および溶媒はひとつになって、連続相を有する混合物を形成する（この溶媒は連続相である）。次いで、この混合物は、少なくとも１０倍過剰の混和性非溶媒中に導入され、１０ｎｍと１０μｍとの間の平均粒子サイズを有する薬剤のマイクロカプセル化微粒子の同時形成を引き起こす。この粒子サイズは、溶媒：非溶媒の容積比、ポリマー濃度、ポリマー−溶媒溶液の粘度、ポリマーの分子量、および溶媒−非溶媒対の特性により影響を受ける。このプロセスは、溶媒の微小滴（ｍｉｃｒｏｄｒｏｐｌｅｔ）を生成する工程（例えば、エマルジョンを形成することによる）を排除する。このプロセスはまた、攪拌力および／または剪断力を回避する。
【００９８】
以下で詳細に議論される任意の多形制御工程は、これらの任意の工程の間に実施され得る。本発明の最も好ましい形態において、多形制御工程は、連続相への非溶媒の添加の前またはその最中に実施される。
【００９９】
（ｐＨシフト沈殿）
ｐＨシフト沈殿技術は、代表的に、薬物が溶解し得るｐＨを有する溶液中に薬物を溶解させる工程、その後に、薬物がこれ以上溶解し得ない点にまでｐＨを変化させる工程を包含する。ｐＨは、特定の薬学的化合物に依存して、酸性または塩基性であり得る。次いで、この溶液は、薬学的に活性な化合物のサブミクロンサイズの粒子のプレ懸濁物を形成するために中性化される。１つの適切なｐＨシフト沈殿プロセスは、米国特許第５，６５５，３３１号に開示されている。この文献は、本明細書中に参考として援用され、本明細書の一部をなす。このプロセスは、アルカリ溶液中に、結晶成長調節剤（ＣＧＭ）と共に薬学的薬剤を溶解する工程、次いで、適切な表面修飾表面活性化剤の存在下で、酸によってこの溶液を中和し、薬学的薬剤の微細な粒子分散物を形成する工程を包含する。沈殿工程の後に、分散物のダイアフィルトレーション洗浄工程、次いで、所望のレベルまで分散物濃度を調節する工程が続き得る。このプロセスは、報告されている通り、フォトン相関スペクトルにより測定される場合、４００ｎｍより小さいＺ平均直径の微結晶粒子をもたらす。
【０１００】
以下で詳細に議論される任意の多形制御工程は、これらの任意の工程の間に実施され得る。本発明の好ましい形態において、多形制御工程は、中和工程の前またはその最中に実施される。
【０１０１】
ｐＨシフト沈殿方法の他の例は、米国特許第５，７１６，６４２号；同第５，６６２，８８３号；同第５，５６０，９３２号；および同第４，６０８，２７８号に開示される。これらの文献は、本明細書中に参考として援用され、そして本明細書の一部をなしている。
【０１０２】
（注入沈殿法）
適切な注入沈殿技術は、米国特許第４，９９７，４５４号および同第４，８２６，６８９号に開示されている。これらの文献は、本明細書中に参考として援用され、そして本明細書の一部をなしている。第１に、適切な固体化合物が、適切な有機溶媒に溶解され、溶媒混合物が形成される。次いで、有機溶媒と混和性の沈殿非溶媒は、約−１０℃と約１００℃との間の温度、および５０ｍｌの容量あたり、約０．０１ｍｌ／分〜約１０００ｍｌ／分の注入速度で溶媒混合物中に注入され、１０μｍ未満の実質的に均一な平均直径を有する化合物の沈殿非凝集固体粒子の懸濁物が生成される。沈殿非溶媒と共に注入される溶液の攪拌（ａｇｉｔａｔｉｏｎ）（例えば、攪拌（ｓｔｉｒｒｉｎｇ）による）が好ましい。非溶媒は、凝集に対して粒子を安定化させるために界面活性剤を含み得る。次いで、この粒子は、溶媒から分離される。固体化合物および所望の粒子サイズに依存して、温度、溶媒に対する非溶媒の比、注入速度、攪拌速度、および容量のパラメータは、本発明に従って変更され得る。粒子サイズは、非溶媒容量：溶媒の比および注入温度に比例し、そして注入速度および攪拌速度に反比例する。沈殿非溶媒は、化合物の相対的な溶解性および所望の懸濁ビヒクルに依存して、水性または非水性であり得る。
【０１０３】
以下で詳細に議論される任意の多形制御工程は、これらの任意の工程の間に実施され得る。本発明の好ましい形態において、多形制御工程は、非溶媒の注入の前またはその最中に実施される。
【０１０４】
（温度シフト沈殿）
温度シフト沈殿技術（ホットメルト技術としても公知である）は、Ｄｏｍｂに対する米国特許第５，１８８，８３７号に開示される。この文献は、本明細書中に参考として援用され、本明細書の一部をなす。本発明の１つの実施形態において、リポスフィアは、以下の工程によって調製される：（１）溶融ビヒクル中で、薬物のような送達されるべき物質を溶融または溶解して、送達されるべき物質の液体を形成する工程；（２）物質またはビヒクルの溶融温度よりも高い温度で、溶融物質またはビヒクルに、水性媒体と共にリン脂質を添加する工程；（３）均一な微細な調製物が得られるまで、ビヒクルの溶融温度よりも高い温度で懸濁物を混合する工程；次いで（４）調製物を室温またはそれ以下まで急速に冷却する工程。
【０１０５】
以下で詳細に議論される任意の多形制御工程は、これらの任意の工程の間に実施され得る（ただし、処理温度が、薬物の溶融点を超えない限り）。本発明の最も好ましい形態において、多形制御工程は、高温薬物懸濁物を冷却する工程の前に実施される。
【０１０６】
（溶媒蒸発沈澱）
溶媒蒸発沈澱技術は、本明細書中に参考として援用され、本明細書の一部を構成する米国特許第４，９７３，４６５号に開示される。‘４６５号特許は、以下の工程を包含する、微結晶を調製するための方法を開示する：（１）通常の有機溶媒または溶媒の組み合わせ中に溶解された薬学的組成物およびリン脂質の溶液を提供する工程、（２）溶媒を蒸発させる工程、および（３）溶媒の蒸発によって得られるフィルムを、激しく攪拌することによって、水溶液中に懸濁する工程。この溶媒を、充分量の溶媒を蒸発させるようにこの溶液にエネルギーを付加して除去し、この化合物の沈澱を引き起こし得る。この溶媒はまた、他の周知の技術によって（例えば、減圧をこの溶液に適用することまたは窒素をこの溶液に吹き込むことによって）除去され得る。以下に詳細に考察される任意の最適な多形制御工程は、これらの工程のいずれかの間に実施され得る。本発明の最も好ましい形態では、この多形制御工程は、蒸発工程の前に実施される。
【０１０７】
（反応沈澱）
反応沈澱は、薬学的化合物を適切な溶媒に溶解して、溶液を形成する工程を包含する。この化合物は、この溶媒中でのこの化合物の飽和点以下の量で添加されるべきである。この化合物は、修飾された化合物が、溶媒中でより低い溶解度を有し、そしてこの溶液中で沈澱するように、化学薬剤と反応させることによって、またはエネルギー（例えば、熱またはＵＶ光など）の付加に応答した改変によって改変される。以下に詳細に考察されるこの任意の多形制御工程は、これらの工程のいずれかの間に実施され得る。本発明の最も好ましい形態では、この多形制御工程は、沈澱工程の前またはその間に実施される。
【０１０８】
（圧縮流体沈澱）
圧縮流体によって沈澱させるために適切な技術は、Ｊｏｈｎｓｔｏｎに対するＷＯ  ９７／１４４０７（これは、本明細書中に参考として援用され、本明細書の一部を構成する）に開示される。この方法は、水不溶性薬物を溶媒中に溶解して溶液を形成する工程を包含する。次いで、この溶液は、圧縮流体中にスプレーされ、圧縮流体は、気体、液体または超臨界流体であり得る。溶媒中の溶質の溶液への圧縮流体の添加は、溶質が超飽和状態となるようにするかこの状態に近づけ、微細な粒子として沈澱させる。この場合、この圧縮流体は、薬物が溶解している溶媒の凝集エネルギー密度を低下させる、抗溶媒として作用する。
【０１０９】
あるいは、この薬物は、圧縮流体中に溶解され得、これは次いで、水相中にスプレーされる。この圧縮流体の迅速な膨張は、この流体の溶媒力を低下させ、次いで、溶質が水相中で微細な粒子として沈澱することを引き起こす。この場合、この圧縮流体は、溶媒として作用する。
【０１１０】
粒子を凝集に対して安定化するために、界面調節剤（例えば、界面活性剤）が、この技術に含まれる。この技術によって調製される粒子は一般に、５００ｎｍ以下である。
【０１１１】
以下に詳細に考察する任意の多形制御工程は、これらの工程のいずれかの間に実施され得る。本発明の最も好ましい形態では、この多形制御工程は、粒子形成工程の前またはその間に実施される。
【０１１２】
（懸濁方法）
水性のナノ粒子懸濁物の他の調製方法は、懸濁方法である。この方法では、薬学的薬剤の粒子は、粒子を水性媒体中に直接的に添加して予備懸濁物（ｐｒｅ−ｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎ）を誘導することによって、水性媒体中に分散される。粒子は通常、界面調節剤を用いてコーティングされて、粒子の凝集が阻害される。１以上の他の賦形剤は、薬学的薬剤または水性媒体のいずれかに添加され得る。
【０１１３】
エネルギーは、薬学的薬剤または予備懸濁物に添加されて、薬学的薬剤の粒子サイズを所望の粒子サイズまで減少させ得る。エネルギー源の例としては、超音波処理、ホモジナイゼーション、マイクロフルイダイゼーション（ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｚａｔｉｏｎ）、向流ホモジナイゼーション、または衝撃力、剪断力もしくはキャビテーション力を提供する他の方法が挙げられるがこれらに限定されない。
【０１１４】
（多形制御）
懸濁液を調製する方法は、さらに、薬物の結晶構造を制御するために結晶シード添加の工程を包含する。用語「結晶構造」によって意味されるのは、結晶格子内の分子の配置および／またはコンフォメーションである。異なる結晶構造に結晶化し得る化合物は、多形であるといわれる。多形の同定は、薬物処方における重要な工程である。なぜなら、同じ薬剤の異なる多形が、溶解度、治療活性、バイオアベイラビリティー、および懸濁安定性における差異を示し得るからである。同様に、同じ賦形剤の異なる多形は、溶解度、送達される薬物との適合性、化学安定性および懸濁安定性において差異を示し得る。従って、生成物純度およびバッチ間での再現性を保証するために、化合物の多形形態を制御することが重要である。
【０１１５】
上で考察されるプロセスにおける化合物の多形形態は、シード添加のさらなる工程によって制御され得る。シード添加は、シード化合物を使用すること、またはシード化合物を形成するためのエネルギーを加えることを包含する。本発明の好ましい形態において、シード化合物は、所望の多形形態の薬学的に活性な化合物である。あるいは、シード化合物はまた、所望の多形の構造と類似した構造を有する不活性な不純物または有機化合物であり得る。
【０１１６】
シード化合物は、上記プロセスのいずれかの薬物含有溶液から沈殿され得る。この方法は、過飽和溶液を作製するために、薬学的に活性な化合物の第１溶液中の溶解度を超えるのに十分な量で、薬学的に活性な化合物を添加する工程を包含する。過飽和溶液を処理して、所望の多形形態の薬学的に活性な化合物を沈殿させる。過飽和溶液を処理することは、結晶の形成が観測されて、シード添加混合物を作製するまでの時間、溶液をエージングすることを包含する。溶液を処理することはまた、この溶液を温度変化またはｐＨ変化に供することを包含する。エネルギーを過飽和溶液に加えて、薬学的に活性な化合物を、溶液から所望の多形で沈殿させることもまた可能である。エネルギーは、上記のエネルギー付加工程を含む種々の方法で加えられ得る。懸濁液前駆体を加熱するか、あるいは電磁エネルギー源、粒子ビーム源または電子ビーム源に曝露することによって、さらなるエネルギーが加えられ得る。電磁エネルギーは、レーザービーム、動電磁気エネルギー、または他の照射供給源を使用することを包含する。エネルギー付加供給源として、超音波、静電場、および静磁場を使用することもさらに企図される。
【０１１７】
本発明の好ましい形態において、エージングされた過飽和溶液からシード結晶を作製するための方法は、以下の工程を包含する：（ｉ）ある量の薬学的に活性な化合物を薬物溶液に添加して、過飽和溶液を作製する工程；（ｉｉ）過飽和溶液をエージングさせて、検出可能な結晶を形成し、シード添加混合物を作製する工程；および（ｉｉｉ）シード添加混合物を沈殿させて、懸濁液前駆体を作製する工程。次いで、この懸濁液前駆体は、本明細書中において記載されるように、さらに処理されて、所望の多形および所望のサイズ範囲の薬学的に活性な化合物の水性懸濁液を提供し得る。
【０１１８】
シード添加はまた、第１溶液または懸濁液前駆体にエネルギーを加えて、シード化合物を形成することによって達成され得るが、但し、曝露される液体は、薬学的化合物またはシード物質を含む。エネルギーは、過飽和溶液について上記される様式と同じ様式で添加され得る。
【０１１９】
従って、本発明は、特定されていない多形を本質的に含まない所望の多形形態の薬学的化合物の組成物を提供する。本発明の方法が、多くの薬学的化合物について所望の多形を選択的に生じるように使用されて適用され得ることが企図される。
【０１２０】
（６．組成物の滅菌）
この組成物は、組成物の特定の成分の熱安定性および組成物の粒径に依存して、熱滅菌または濾過され、次いで、凍結前に無菌処理され得る。滅菌生成物の作製のための好ましい方法は、選択された化合物を濾過し、続いて、凍結の前に無菌の製造プロセスを行うことである。本発明のための滅菌の代替の方法は、凍結工程の前または後のγ線照射によるものである。
【実施例１】
【０１２１】
（均質化、続く、懸濁液の凍結を伴うＭｉｃｒｏｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｏｎ  Ｍｅｔｈｏｄ  Ａを用いることによる、イトラコナゾール懸濁液の調製）
界面活性剤溶液：４Ｌのフラスコに３５００ｍｌの蒸留水、２２ｇのグリセリン、２２ｇのポロキサマー４０７、および２２ｇのポロキサマー１８８を加える。この界面活性剤溶液を加熱し、撹拌して固体に溶解した。この界面活性剤溶液を、冷却し、蒸留水で４Ｌに希釈した。
イトラコナゾール濃縮物：１００ｍＬビーカーに、１５ｇのイトラコナゾールおよび６７．５ｇの乳酸を混合した。この混合物を熱して固体に溶かした。このイトラコナゾール
濃縮物を室温に冷却した。
懸濁液前駆体：イトラコナゾール濃縮物を６０ｍｌシリンジに移した。１．５Ｌの界面活性剤溶液を、被覆付き均質化ホッパーに移した。オーバーヘッド撹拌器を、混合するブレードが完全に浸かるまで、希釈液中に配置した。シリンジポンプを用いて、イトラコナゾール濃縮物を、混合している希釈溶液にゆっくりと加えた。
均質化された懸濁液：懸濁液前駆体を直ちにおよそ２０分間均質化（１０，０００ｐｓｉ）した。
最終懸濁液：過剰の乳酸を２０分間均質化された懸濁液を遠心分離機にかけることで除いた。上澄み液を廃棄し、固体を新鮮な界面活性剤溶液からなる界面活性剤溶液中で再懸濁した。この懸濁液を混合し、続いて２０分間遠心分離機にかけた。上澄み液を廃棄し、固体を新鮮な界面活性剤溶液からなる界面活性剤溶液中に再懸濁した。再懸濁液のサンプルを、１０，０００ｐｓｉでおよそ２０分間均質化した。懸濁液の最終ｐＨは、およそ４であった。この懸濁液は、５０ｍＬのボトルに集め、Ｔｅｆｌｏｎ（登録商標）表面ストッパーで封じた。
凍結懸濁液：最終懸濁液の３〜５０ｍＬサンプルを、−２０℃の冷凍庫に入れ、最終懸濁液の３〜５０ｍＬのサンプルを、２〜８℃で保管した。およそ一ヶ月後、サンプルを、−２０℃の保管から解放し、周囲の条件下で解凍した。サンプルを、２℃〜８℃に移した。相分離、目に見える凝集または固化は、観察されなかった。凍結させたサンプルおよび２℃〜８℃で保管したコントロールを、レーザー光散乱による粒子サイズ分布について試験した。凍結されたサンプルとコントロールとの間に、粒子サイズ分布における認識できる差はなかった。（下を参照のこと）
【０１２２】
【表１】
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これらの保管条件下で、一年以上凍結された懸濁液が安定であると予測するのは理にかなっている。
【実施例２】
【０１２３】
（無定形のイトラコナゾールナノ懸濁液は、−７０℃での保管により安定である）
イトラコナゾール（４．０ｇ）を、２０ｍｌの塩化メチレンに溶解し、（２５％から希釈された）４００ｍＬの５％アルブミン溶液に混合した。混合した溶液は、二つの液体の分散をもたらすよう、手を用いて振った。この粗製ののエマルジョンを、６分間（４０％強度で１”プローブを用いて３０秒毎に超音波処理する）超音波処理した（Ｔ＝５℃）。超音波処理された溶液は、約０．５時間の間ハウス真空（〜１００ｔｏｒｒ）下で，続いて約２時間の間ポンプ真空（＜２０ｔｏｒｒ）でロトベープ（ｒｏｔｏｖａｐｅ）した。ロトベープされた生産物を、光散乱検出器（Ｈｏｒｉｂａ）により分析し、平均直径４０６ｎｍを有する粒子を明らかにした。この生成物を、続いてＧＣのための上部空き高分析のためのＧａｌｂｒａｉｔｈ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．に送り、１２．３ｐｐｍまでの塩化メチレン濃度を明らかにした。可視光顕微鏡検査法による観察は、結晶度の証拠なく形が球形であるような粒子を示した。加えて、この方法により作製された粒子上のＸ線粉末回折分析より、粒子が完全に無定形であることを確かめた。
【０１２４】
およそ３５ｍＬの生成物は、３２日間、−７０℃で保管した。ＨＯＲＩＢＡ光散乱検出および微小検査による、懸濁液の再分析によって粒子のサイズ（平均値４２７ｎｍ)に本質的に変化がないことが示された。これらの保管条件で一年以上の間凍結した懸濁液が安定であると予測するのは理にかなっている。
【実施例３】
【０１２５】
（ＰＥＧ−リン脂質界面活性剤系での１％ブデソナイド）
成分：
１％ブデソナイド
１．２％ｍＰＥＧ−ＰＳＰＥ，ＭＷ  ２０００
２．２５％グリセリン
０．１４％二塩基性リン酸ナトリウム
ｍＰＥＧ−ＰＳＰＥ（パルミトイル−ステアロイル−ホスファチジルエタノールアミン）の計測された量およびｐＨ８．６で２．２５％グリセリンおよび０．１４％二塩基性リン酸ナトリウムを含むある量の先に調製された水溶液を、合わせ、そして高剪断混合器を用いて混合した。薬物物質を加え、その混合物を、懸濁液前駆体を形成するよう高剪断下で混合した。懸濁液前駆体は、２５，０００ｐｓｉの圧力で３０の別々のパスにより均質化された。
【０１２６】
サンプルの一部分を、２４時間の間−２０℃で凍結し、続いて室温で完全に溶かした。
【０１２７】
粒子のサイズの結果（レーザー回折法により計測した）
【０１２８】
【表２】
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【実施例４】
【０１２９】
（アルブミン界面活性剤を有する１％ナブメトン）
成分：
５％ヒトアルブミン
１％ナブメトン
ある量のアルブミン溶液および計測された量の薬物物質を合わせ、懸濁液前駆体を形成する高剪断下で混合した。懸濁液前駆体を、２５，０００ｐｓｉの圧力下で３０の別々のパスにより均質化した。
【０１３０】
サンプルの一部分を、２４時間−２０℃で均質化し、続いて室温で完全に溶かした。
【０１３１】
粒子のサイズの結果（レーザー回折法により計測した）
【０１３２】
【表３】
2005506999.tif 000004
【実施例５】
【０１３３】
（ポリアルコキシエーテル界面活性剤および胆汁酸塩を有する１％ナブメトン）
成分：
２．２％ポロキサマー１８８
０．１％デオキシコール酸ナトリウム
２．２％グリセリン
１％ナブメトン
計測された量の薬物物質ならびにｐＨ８．７に調節されたある量の２．２％ポロキサマー１８８、０．１％デオキシコール酸ナトリウム、および２．２％グリセリンを含む溶液を、合わせ、懸濁液前駆体を形成するために高剪断下、混合した。懸濁液前駆体は、２５，０００ｐｓｉの圧力で２０の別々のパスにより均質化した。
【０１３４】
サンプルの一部分は、２４時間−２０℃で凍結し、続いて室温で完全に溶かした。
【０１３５】
粒子のサイズの結果（レーザー回折法によって計測された）
【０１３６】
【表４】
2005506999.tif 000005
【実施例６】
【０１３７】
（ＰＥＧ−脂質酸エステルを有する１％ブデソニド）
成分：
０．１２５％ソリュートル
２．２５％グリセリン
１％ブデソニド
計測された量の薬物物質およびｐＨ８．７に調節された０．１２５％ソリュートルおよび２．２５％グリセリンを含むある量の溶液を合わせ、懸濁液前駆体を形成する高剪断混合下においた。懸濁液前駆体は、２５，０００ｐｓｉの圧力下で３０の別々のパスにより均質化した。
【０１３８】
サンプルの一部分を、２４時間−２０℃で凍結し、続いて室温で完全に解凍した。
【０１３９】
粒子のサイズの結果（レーザー回折法により計測された）
【０１４０】
【表５】
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【実施例７】
【０１４１】
１％ビタミンＥ  ＴＰＧＳ（ｄ−α  トコフェリル  ポリエチレン  グリコール  １０００コハク酸塩）
１％ナブメトン
２．２５％グリセリン
０．１４％二塩基性リン酸ナトリウム
計測された量のビタミンＥ  ＴＰＧＳおよびｐＨ８．６での２．２５％グリセリンおよび０．１４％二塩基性リン酸ナトリウムを含むある量の予め調製された水溶液を合わせた。ビタミンＥ  ＴＰＧＳが溶けるまで、ボルテックスにより混合物を撹拌した。薬物物質を加え、懸濁液前駆体を作るため、その混合物をウルトラタラックス（Ｕｌｔｒａｔｕｒｒａｘ）した。２５，０００ｐｓｉの圧力で３０の別々のパスによりＡｖｅｓｔｉｎ  Ｂ３ホモジナイザーを用いて懸濁液前駆体を均質化した。
【０１４２】
２４時間−２０℃でサンプルの一部分を凍結させ、続いて室温で完全に解凍した。
【０１４３】
粒子サイズ結果：
【０１４４】
【表６】
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特定の実施形態が例示され、記載される一方、数多くの改変が、発明の精神から離れることなく発明され、保護の範囲は、添付のクレームの範囲によってのみ限定される。
【国際公開パンフレット】
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【国際調査報告】
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