(57)【要約】下記構造式（Ｉ）：【化１】2005504003.tif 000260［式中、ｕはＣＨまたはＮであり、Ｑは１）−Ｎ（Ｒ２５）ＣＨ（Ｒ３０）−（ここで、窒素原子はＲ１に結合しており、Ｒ２５及びＲ３０は独立して水素、Ｃ３−６シクロアルキル及びＣ１−６アルキルからなる群から選択され、または２）【化２】2005504003.tif 000261（ここで、窒素原子はＲ１に結合しており、ｍは０、１または２である）である］を有する本発明の化合物は、トロンビン及び関連トロンビン閉塞を阻害するのに有用である。
2005504003.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式：
【化１】
2005504003.tif 000247
［式中、
ｕはＣＨまたはＮであり；
Ｑは
１）−Ｎ（Ｒ２５）ＣＨ（Ｒ３０）−（式中、窒素原子はＲ１に結合しており、Ｒ２５及びＲ３０は独立して水素、Ｃ３−６シクロアルキル及びＣ１−６アルキルからなる群から選択される）、または
２）
【化２】
2005504003.tif 000248
（式中、窒素原子はＲ１に結合しており、ｍは０、１または２である）
であり；
Ｒ１は
１）
【化３】
2005504003.tif 000249
（式中、Ｒ４及びＲ５は独立して水素、ハロゲン、Ｃ１−４アルコキシ、Ｃ１−４アルキル、−ＯＨ及びシアノからなる群から選択され、Ｘは結合、Ｏ、ＣＨ２、ＳまたはＮＨである）、
２）
【化４】
2005504003.tif 000250
｛式中、Ｒ６は
ｄ）水素、
ｅ）−ＯＨ、及び
ｆ）−ＮＲ１９Ｒ２０（式中、Ｒ１９及びＲ２０は独立して１）水素、２）未置換であるか−ＯＨ−、ＣＯＯＨ、Ｃ３−７シクロアルキルまたはＣＯＯＲ１７（ここで、Ｒ１７はＣ１−４アルキルである）の１つ以上で置換されたＣ１−６アルキル、３）Ｃ３−７シクロアルキル、４）Ｃ（Ｏ）ＯＲ１８、５）Ｃ（Ｏ）Ｒ１８、６）Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ１８、７）ＳＯ２Ｒ１８、８）Ｃ（Ｏ）ＮＨ２及び９）ＣＮ（ここで、Ｒ１８はＣ１−４アルキル、アリール及びＣ３−７シクロアルキルからなる群から選択される）からなる群から選択される）
からなる群から選択され、
Ｒ７及びＲ８は独立して
ａ）水素、
ｂ）−ＣＦ３、
ｃ）未置換Ｃ１−６アルキル、
ｄ）
【化５】
2005504003.tif 000251
（式中、Ｒ９１及びＲ９９は独立して１）水素、２）ハロゲン、３）Ｃ１−４アルコキシ、４）Ｃ１−４アルキル、５）ヒドロキシ、６）ＣＦ３及び７）シアノからなる群から選択される）
からなる群から選択される環、
ｅ）Ｃ３−６シクロアルキル、
ｆ）１）Ｃ３−６シクロアルキル、２）−ＣＯＯＨ、３）−ＯＨ、
【化６】
2005504003.tif 000252
（式中、Ｒ９及びＲ１０は独立してaa)水素、bb)ハロゲン、cc)Ｃ１−４アルコキシ、dd)Ｃ１−４アルキル、ee)ヒドロキシ、ff)ＣＦ３及びgg)シアノからなる群から選択される）
からなる群の１つで置換されたＣ１−６アルキル
からなる群から選択される｝、及び
３）
【化７】
2005504003.tif 000253
（式中、ｙは０、１または２であり、Ｒ３５及びＲ４０は独立して水素及びＣ１−６アルキルからなる群から選択される）
からなる群から選択され；
Ｒ２は
１）水素、
２）ハロゲン、
３）Ｃ１−４アルキル、
４）Ｃ３−７シクロアルキル、
５）ＣＦ３、
６）ＯＣＦ３、
７）Ｃ１−４アルコキシ、及び
８）シアノ
からなる群から選択され：
Ｒ１２は
１）未置換であるかまたは１つの環原子がＣ１−６アルキルまたはハロゲンで置換されている２〜４個のヘテロ原子（ただし、少なくとも２個のヘテロ原子はＮであり、ヘテロ原子の多くとも１個がＳまたはＯである）を有する５員ヘテロアリール環、または
２）未置換であるかまたはＣ１−６アルキルまたはハロゲンで置換されている１〜２個の窒素原子を有する６員ヘテロアリール環、
である］
を有する化合物またはその医薬的に許容され得る塩。
【請求項２】
Ｑが
【化８】
2005504003.tif 000254
（式中、窒素原子はＲ１に結合している）
からなる群から選択され、Ｘが結合であり、Ｒ２が水素、ＣｌまたはＦであり、ｙが１または２である請求の範囲第１項に記載の化合物またはその医薬的に許容され得る塩。
【請求項３】
Ｒ２が独立して
【化９】
2005504003.tif 000255
からなる群から選択される請求の範囲第２項に記載の化合物またはその医薬的に許容され得る塩。
【請求項４】
Ｒ１が独立して
【化１０】
2005504003.tif 000256
からなる群から選択される請求の範囲第３項に記載の化合物またはその医薬的に許容され得る塩。
【請求項５】
【化１１】
2005504003.tif 000257
2005504003.tif 000258
2005504003.tif 000259
からなる群から選択される請求の範囲第４項に記載の化合物またはその医薬的に許容され得る塩。
【請求項６】
請求の範囲第１項に記載の化合物及び医薬的に許容され得る担体を含む血液中での血栓形成を阻害するための組成物。
【請求項７】
治療有効量の請求の範囲第５項に記載の化合物を患者に投与することを含む患者における血栓形成の阻害方法。
【請求項８】
治療有効量の請求の範囲第１項に記載の化合物を血液に添加することを含む血液中でのトロンビンの阻害方法。
【請求項９】
治療有効量の請求の範囲第１項に記載の化合物を患者に投与することを含む患者における血小板凝集物形成の阻害方法。
【請求項１０】
治療有効量の請求の範囲第１項に記載の化合物を患者に投与することを含む患者における血栓形成の阻害方法。
【請求項１１】
哺乳動物におけるトロンビンの阻害、血栓形成の阻害、血栓形成の治療または血栓形成の予防のための医薬品の製造における請求の範囲第１項に記載の化合物またはその医薬的に許容され得る塩の使用。
【請求項１２】
治療有効量の請求の範囲第１項に記載の化合物を哺乳動物に投与することを含む哺乳動物における静脈血栓塞栓症及び肺塞栓症の治療または予防方法。
【請求項１３】
治療有効量の請求の範囲第１項に記載の化合物を哺乳動物に投与することを含む哺乳動物における深静脈血栓症の治療または予防方法。
【請求項１４】
治療有効量の請求の範囲第１項に記載の化合物を哺乳動物に投与することを含むヒト及び他の哺乳動物における血栓塞栓性卒中の治療または予防方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
トロンビンは、プロトロンビンという前駆体の形態で血漿中に存在するセリンプロテアーゼである。トロンビンは、可溶性血漿タンパク質のフィブリノーゲンの不溶性フィブリンへの変換による血液凝固のメカニズムにおいて中心的役割を果たす。
【背景技術】
【０００２】
Ｅｄｗａｒｄｓら，Ｊ．Ａｍｅｒ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１１４巻，１８５４−６３ページ（１９９２）には、セリンプロテアーゼヒト白血球エラスターゼ及びブタ膵エラスターゼの可逆性阻害剤であるペプチジルα−ケトベンゾオキサゾール類が記載されている。
【０００３】
欧州特許出願公開第３６３２８４号明細書には、基質ペプチドの切断されやすいアミド基の窒素原子が水素または置換カルボニル部分で置換されてなるペプチダーゼ基質の類似体が記載されている。
【０００４】
オーストラリア特許出願公開第８６２４５６７７号明細書には、フルオロメチレンケトンまたはα−ケトカルボキシル誘導体のような活性化求電子性ケトン部分を有するペプチダーゼ阻害剤も記載されている。
【０００５】
Ｒ．Ｊ．Ｂｒｏｗｎら，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，３７巻，１２５９−１２６１ページ（１９９４）には、トリフルオロメチルケトン及びピリジノン部分を含むヒト白血球エラスターゼの経口的に活性な非ペプチド阻害剤が記載されている。
【０００６】
Ｈ．Ｍａｃｋら，Ｊ．Ｅｎｚｙｍｅ  Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ，９巻，７３−８６ページ（１９９５）には、中心コア構造としてピリジノン部分を含む剛性なアミジノ−フェニルアラニントロンビン阻害剤が記載されている。
【発明の開示】
【０００７】
本発明は、ヘテロビアリール置換基を有するプロリンベースの化合物に関する。
【０００８】
本発明は、医薬的に許容され得る担体中に本発明の化合物を含む哺乳動物における血小板減少の阻害、血小板凝集物形成の阻害、フィブリン形成の阻害、血栓形成の阻害及び塞栓形成の阻害のための組成物を包含する。前記組成物は、場合により抗凝固薬、抗血小板薬及び血栓溶解薬を含んでいてもよい。前記組成物は、所望の阻害を得るために血液、血液産物または哺乳動物臓器に添加することができる。
【０００９】
本発明は、哺乳動物における不安定型狭心症、難治性狭心症、心筋梗塞、一過性虚血発作、心房細動、血栓性卒中、塞栓性卒中、深静脈血栓症、播種性血管内凝固、眼内フィブリン蓄積及び再疎通血管の再閉塞または再狭窄を予防または治療するための組成物をも包含し、該組成物は医薬的に許容され得る担体中に本発明化合物を含む。前記組成物は、場合により抗凝固薬、抗血小板薬及び血栓溶解薬を含んでいてもよい。
【００１０】
本発明は、哺乳動物における表面の血栓形成性を減ずる方法をも包含し、該方法は当該表面に対して本発明化合物を共有的にまたは非共有的に結合させることを含む。
【００１１】
本発明化合物はトロンビン阻害剤として有用であり、例えば冠動脈疾患を予防するために治療上有用である。本発明は、下記構造式：
【００１２】
【化１】
2005504003.tif 000003
を有する化合物及びその医薬的に許容され得る塩を包含する。
上記式中、
ｕはＮまたはＣＨであり；
Ｑは
１）−Ｎ（Ｒ２５）ＣＨ（Ｒ３０）−（式中、窒素原子はＲ１に結合しており、Ｒ２５及びＲ３０は独立して水素、Ｃ３−６シクロアルキル及びＣ１−６アルキルからなる群から選択される）、または
２）
【００１３】
【化２】
2005504003.tif 000004
（式中、窒素原子はＲ１に結合しており、ｍは０、１または２である）
であり；
Ｒ１は
１）
【００１４】
【化３】
2005504003.tif 000005
（式中、Ｒ４及びＲ５は独立して水素、ハロゲン、Ｃ１−４アルコキシ、Ｃ１−４アルキル、−ＯＨ及びシアノからなる群から選択され、Ｘは結合、Ｏ、ＣＨ２、ＳまたはＮＨである）、
２）
【００１５】
【化４】
2005504003.tif 000006
｛式中、Ｒ６は
ｄ）水素、
ｅ）−ＯＨ、及び
ｆ）−ＮＲ１９Ｒ２０（式中、Ｒ１９及びＲ２０は独立して１）水素、２）未置換であるか−ＯＨ−、ＣＯＯＨ、Ｃ３−７シクロアルキルまたはＣＯＯＲ１７（ここで、Ｒ１７はＣ１−４アルキルである）の１つ以上で置換されたＣ１−６アルキル、３）Ｃ３−７シクロアルキル、４）Ｃ（Ｏ）ＯＲ１８、５）Ｃ（Ｏ）Ｒ１８、６）Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ１８、７）ＳＯ２Ｒ１８、８）Ｃ（Ｏ）ＮＨ２及び９）ＣＮ（ここで、Ｒ１８はＣ１−４アルキル、アリール及びＣ３−７シクロアルキルからなる群から選択される）からなる群から選択される）
からなる群から選択され、
Ｒ７及びＲ８は独立して
ａ）水素、
ｂ）−ＣＦ３、
ｃ）未置換Ｃ１−６アルキル、
ｄ）
【００１６】
【化５】
2005504003.tif 000007
（式中、Ｒ９１及びＲ９９は独立して１）水素、２）ハロゲン、３）Ｃ１−４アルコキシ、４）Ｃ１−４アルキル、５）ヒドロキシ、６）ＣＦ３及び７）シアノからなる群から選択される）
からなる群から選択される環、
ｅ）Ｃ３−６シクロアルキル、
ｆ）１）Ｃ３−６シクロアルキル、２）−ＣＯＯＨ、３）−ＯＨ、
【００１７】
【化６】
2005504003.tif 000008
（式中、Ｒ９及びＲ１０は独立してaa)水素、bb)ハロゲン、cc)Ｃ１−４アルコキシ、dd)Ｃ１−４アルキル、ee)ヒドロキシ、ff)ＣＦ３及びgg)シアノからなる群から選択される）
からなる群の１つで置換されたＣ１−６アルキル
からなる群から選択される｝、及び
３）
【００１８】
【化７】
2005504003.tif 000009
（式中、ｙは０、１または２であり、Ｒ３５及びＲ４０は独立して水素及びＣ１−６アルキルからなる群から選択される）
からなる群から選択され；
Ｒ２は
１）水素、
２）ハロゲン、
３）Ｃ１−４アルキル、
４）Ｃ３−７シクロアルキル、
５）ＣＦ３、
６）ＯＣＦ３、
７）Ｃ１−４アルコキシ、及び
８）シアノ
からなる群から選択され：
Ｒ１２は
１）未置換であるかまたは１つの環原子がＣ１−６アルキルまたはハロゲンで置換されている２〜４個のヘテロ原子（ただし、少なくとも２個のヘテロ原子はＮであり、ヘテロ原子の多くとも１個がＳまたはＯである）を有する５員ヘテロアリール環、または
２）未置換であるかまたはＣ１−６アルキルまたはハロゲンで置換されている１〜２個の窒素原子を有する６員ヘテロアリール環、
である。
【００１９】
本発明の化合物類において、Ｑは
【００２０】
【化８】
2005504003.tif 000010
（式中、窒素原子はＲ１に結合している）
からなる群から選択され、Ｘは結合であり、Ｒ２は水素、ＣｌまたはＦであり、ｙは１または２である。
【００２１】
上記した化合物類の亜群において、Ｒ１２は独立して
【００２２】
【化９】
2005504003.tif 000011
からなる群から選択される。
【００２３】
上記した亜群において、Ｒ１は
【００２４】
【化１０】
2005504003.tif 000012
からなる群から選択される。
【００２５】
本発明化合物の例には、
【００２６】
【化１１】
2005504003.tif 000013
2005504003.tif 000014
2005504003.tif 000015
及びその医薬的に許容され得る塩が含まれる。
【００２７】
本発明化合物はキラル中心を有し得、ラセミ体、ラセミ混合物及び個別のジアステレオマーまたはエナンチオマーとして存在し得、全ての異性体が本発明に包含される。本発明化合物は多形結晶形態を有し得、全ての多形結晶形態が本発明に包含される。
【００２８】
変数が構成要素または式Ｉ中に複数回存在するとき、その定義は各回独立している。また、置換基及び／または変数の組合せにより安定な化合物が生ずるならば、前記組合せも許容され得る。
【００２９】
本明細書に記載されている幾つかの略号は以下の通りである：
名称
ＢｕＬｉ      ブチルリチウム、
ＣＨ２Ｃｌ２    ジクロロメタン、
ＤＩＥＡ      ジイソプロピルエチルアミン、
ＤＭＡ        ジメチルホルムアミド、
ＥＤＣ        １−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩、
ＥｔＯＡｃ    酢酸エチル、
ＥｔＯＨ      エタノール、
ＨＣｌ        塩酸、
ＨＡＴＵ      ヘキサフルオロホスフェート、
ＨＯＡＴ      １−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール、
ＬｉＣｌ      塩化リチウム、
ＬｉＯＨ      水酸化リチウム、
ＭｅＯＨ      メタノール、
ＭｇＳＯ４      硫酸マグネシウム、
ＮＨ４ＯＨ      水酸化アンモニウム、
ＮａＨＣＯ３    炭酸水素ナトリウム、
Ｎａ２ＳＯ４    硫酸ナトリウム、
Ｐｄ−Ｃ      活性炭担持パラジウム触媒、
ＴＨＦ        テトラヒドロフラン。
【００３０】
本明細書中、特記しない限り、「アルキル」は、特定数の炭素原子を有する直鎖もしくは分枝鎖の飽和脂肪族炭化水素基を指す（Ｍｅはメチル、Ｅｔはエチル、Ｐｒはプロピル、Ｂｕはブチルである）。「アルコキシ」は、酸素橋を介して結合した指定数の炭素原子を有する直鎖もしくは分枝鎖アルキル基を指す。本明細書中、「ハロゲン」は、フルオロ、クロロ、ブロモ及びヨードを指し、「対イオン」は、小さな１つの負に帯電した種、例えばクロリド、ブロミド、ヒドロキシド、アセテート、トリフルオロアセテート、ペルクロレート、ニトレート、ベンゾエート、マレエート、スルフェート、タータレート、ヘミタータレート、ベンゼンスルホネート等を指す。
【００３１】
用語「シクロＣ３−７アルキル」には、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル等が含まれる。
【００３２】
本明細書中、特記しない限り、用語「アリール」は、安定な６〜１０員の単環式または二環式環系、例えばフェニルまたはナフチルを指す。アリール環は未置換であっても、１つ以上のＣ１−４低級アルキル、ヒドロキシ、アルコキシ、ハロゲン、アミノで置換されていてもよい。
【００３３】
本発明化合物のピリジルＮ−オキシド部分は慣用の表示法を用いて構造的に表される。
【００３４】
【化１２】
2005504003.tif 000016
は同等の意味を有する。
【００３５】
本明細書中、メチル置換基は
【００３６】
【化１３】
2005504003.tif 000017
により表され得る。例えば、構造
【００３７】
【化１４】
2005504003.tif 000018
は同等の意味を有する。
【００３８】
式Ｉを有する化合物の医薬的に許容され得る塩（水溶性もしくは水分散性物質、または油溶性もしくは油分散性物質）には、例えば無機酸（例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、スルファミン酸、リン酸、硝酸等）から誘導される塩のような慣用の非毒性塩、または無機もしくは有機の酸または塩基から形成される４級アンモニウム塩が含まれる。前記酸付加塩の例には、酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、重硫酸塩、酪酸塩、クエン酸塩、ショウノウ酸塩、ショウノウスルホン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、フマル酸塩、グルコヘプタン酸塩、グリセロリン酸塩、半硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、メタンスルホン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、シュウ酸塩、パモ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、トシル酸塩及びウンデカン酸塩が含まれる。塩基塩には、アンモニウム塩、アルカリ金属塩（例えば、ナトリウム塩及びカリウム塩）、アルカリ土類金属塩（例えば、カルシウム塩及びマグネシウム塩）、有機塩基との塩（例えば、ジシクロヘキシルアミン塩及びＮ−メチル−Ｄ−グルカミン）、アミノ酸（例えば、アルギニン、リシン等）との塩が含まれる。また、塩基性窒素含有基は、低級アルキルハライド（例えば、塩化メチル，エチル，プロピル及びブチル、臭化メチル，エチル，プロピル及びブチル、並びにヨウ化メチル，エチル，プロピル及びブチル）、ジアルキルスルフェート（例えば、ジメチル，ジエチル，ジブチル及びジアミルスルフェート）、長鎖ハライド（例えば、塩化デシル，ラウリル，ミリスチル及びステアリル、臭化デシル，ラウリル，ミリスチル及びステアリル、並びにヨウ化デシル，ラウリル，ミリスチル及びステアリル）、アルアルキルハライド（例えば、臭化ベンジル及びフェネチル）等のような物質を用いて４級化され得る。
【００３９】
トロンビン阻害剤−治療用途−使用方法
抗凝固治療は、各種血栓状態、特に冠動脈及び脳血管疾患の治療及び予防のために適応される。当分野の経験者ならば抗凝固治療が必要な状況を容易に認識することができる。本明細書中「患者」は、ヒト、ヒツジ、ウマ、ウシ、ブタ、イヌ、ネコ、ラット及びマウスを含めた霊長類のような哺乳動物を指す。
【００４０】
トロンビン阻害は、血栓状態の個体の抗凝固治療において有用であり、また保存全血の凝固の予防や試験または保存用の他の生物学的サンプルでの凝固の予防のような血液凝固を阻害しなければならない場合にも有用である。従って、トロンビン阻害剤は、トロンビンを含有しているかまたは含有していると疑われ、哺乳動物血液を血管移植片、ステント、整形外科人工装具、人工心臓及び体外循環システムからなる群から選択されるマテリアルと接触させるときのように血液凝固の阻害が望まれる媒体に添加され得るか、前記媒体と接触させ得る。
【００４１】
本発明化合物は、哺乳動物における静脈血栓塞栓症（例えば、剥離した血栓による静脈の閉塞または閉鎖、剥離した血栓による肺動脈の閉塞または閉鎖）、心臓血管塞栓症（例えば、剥離した血栓による心臓の閉塞または閉鎖）、動脈血栓症（例えば、動脈により供給される組織の梗塞を引き起こし得る動脈内での血栓の形成）、アテローム性動脈硬化症（例えば、不規則に分布する脂質沈着物により特徴づけられる動脈硬化症）の治療または予防のために、及び血液と接触すると血液が凝固するデバイスの傾向を低下させるために有用である。
【００４２】
本発明化合物を用いて治療または予防され得る静脈血栓塞栓症の例には、静脈の閉塞、肺動脈の閉塞（肺塞栓症）、深静脈血栓症、ガン及びガン化学療法に伴う血栓症、タンパク質Ｃ欠乏、タンパク質Ｓ欠乏、アンチトロンビンＩＩＩ欠乏及び因子Ｖライデンのような血栓発現傾向疾患を有する血栓症、及び全身性エリテマトーデス（炎症性結合組織疾患）のような後天性血栓発現傾向疾患による血栓症が含まれる。静脈血管塞栓症の場合にも、本発明化合物は留置カテーテルの開通性を維持するためにも有用である。
【００４３】
本発明化合物を用いて治療または予防され得る心臓血栓塞栓症の例には、血栓形成性の卒中（剥離した血栓が脳血液供給障害に関連する神経学的疾患を起こす）、心房細動に伴う心臓血栓塞栓症（上心室筋フィブリルの迅速で不規則な変化(twitching)）、機械的心臓弁のような人工心臓弁に伴う心臓血栓塞栓症、及び心疾患に伴う心臓血栓塞栓症が含まれる。
【００４４】
動脈血栓症の例には、不安定型狭心症（冠動脈に起因する胸の重篤な収縮痛）、心筋梗塞（不十分な血液供給により生ずる心筋細胞死）、虚血性心疾患（血液供給の例えば動脈狭窄による閉塞に起因する局所的貧血）、経皮的経管冠血管形成中またはその後の再閉塞、経皮的経管冠血管形成後の再発狭窄症、冠動脈バイパスグラフトの閉塞、及び閉塞的脳血管疾患が含まれる。動脈血栓症の場合にも、本発明化合物は動静脈カテーテルの開通性を維持するためにも有用である。
【００４５】
アテローム性動脈硬化症の例には、動脈硬化症が含まれる。
【００４６】
血液と接触するデバイスの例には、血管移植片、ステント、整形外科人工装具、人工心臓、及び体外循環システムが含まれる。
【００４７】
本発明のトロンビン阻害剤は、錠剤、カプセル剤（いずれも徐放性または時間調節放出性製剤を含む）、ピル剤、散剤、顆粒剤、エリキシル剤、チンキ剤、懸濁剤、シロップ剤及び乳剤のような経口投与用剤型で投与され得る。また、本発明のトロンビン阻害剤は、製薬業界の当業者に公知の静注（ボーラスまたは注入）、腹腔内、皮下または筋肉内投与の剤型で投与され得る。所望される化合物の非毒性有効量が抗凝集剤として使用され得る。眼内フィブリン蓄積を治療するためには、本発明化合物は眼内または局所投与され得、経口または非経口投与してもよい。
【００４８】
本発明のトロンビン阻害剤は、活性成分を持続的に放出できるように処方され得るデポ注射剤またはインプラント製剤の形態で投与することができる。この場合、活性成分はペレットまたは小円柱に圧縮され、デポ注射剤またはインプラントとして皮下または筋肉内に植え付けられ得る。インプラントには、生分解性ポリマーまたは合成シリコーン（例えば、Ｓｉｌａｓｔｉｃ、シリコーンラバーまたはダウ・コーニング社製の他のポリマー）のような不活性材料を用いてもよい。
【００４９】
本発明のトロンビン阻害剤は、リポソーム送達系、例えば小さな単一ラメラ層小胞、大きな単一ラメラ層小胞及び多ラメラ層小胞の形態でも投与され得る。リポソームは、各種リン脂質、例えばコレステロール、ステアリルアミンまたはホスファチジルコリンから製造され得る。
【００５０】
トロンビン阻害剤を、化合物分子をカップリングさせる担体としてモノクローナル抗体を用いて送達させることもできる。トロンビン阻害剤を、標的可能な薬物担体として可溶性ポリマーとカップリングさせることもできる。前記ポリマーには、ポリビニルピロリドン、ピランコポリマー、ポリヒドロキシ−プロピルメタクリルアミド−フェノール、ポリヒドロキシエチル−アスパルタミド−フェノール、またはパルミトイル残基で置換されたポリエチレンオキシド−ポリリシンが含まれる。更に、トロンビン阻害剤を、薬物の徐放を達成するために有用な各種生分解性ポリマー、例えばポリ乳酸、ポリグリコール酸、ポリ酢酸−ポリグリコール酸コポリマー、ポリε−カプロラクトン、ポリヒドロキシ酪酸、ポリオルトエステル、ポリアセタール、ポリジヒドロピラン、ポリシアノアクリレート、及びヒドロゲルの架橋もしくは両親媒性ブロックコポリマーにカップリングさせることもできる。
【００５１】
トロンビン阻害剤を使用する投与レジメは、各種要因、例えば患者のタイプ、種、年齢、体重、性別及び医学的状態、治療対象の症状の重篤度、投与経路、患者の腎及び肝機能、並びに使用する特定化合物またはその塩に応じて選択される。医師または獣医師ならば、症状の進行の予防、阻止または抑制に必要な薬物の有効量を容易に決定、処方することができる。
【００５２】
所望の効果を得るために使用されるトロンビン阻害剤の経口投与量は、１日当たり体重１ｋｇ当たり約０．０１ｍｇ（ｍｇ／ｋｇ／日）〜約３０ｍｇ／ｋｇ／日、好ましくは０．０２５〜７．５ｍｇ／ｋｇ／日、より好ましくは０．１〜２．５ｍｇ／ｋｇ／日、最も好ましくは０．１〜０．５ｍｇ／ｋｇ／日である（特記しない限り、活性成分の量は遊離塩基基準である）。例えば、８０ｋｇの患者には、約０．８ｍｇ／日〜２．４ｇ／日、好ましくは２〜６００ｍｇ／日、より好ましくは８〜２００ｍｇ／日、最も好ましくは８〜４０ｍｇ／日投与される。従って、１日１回投与するために適当に調製された薬剤は０．８ｍｇ〜２．４ｇ、好ましくは２〜６００ｍｇ、より好ましくは８〜２００ｍｇ、最も好ましくは８〜４０ｍｇ（例えば、８ｍｇ、１０ｍｇ、２０ｍｇ及び４０ｍｇ）を含有する。トロンビン阻害剤を１日２〜４回に分けて投与することが有利である。１日２回投与する場合、適当に調製された薬剤は０．４ｍｇ〜４ｇ、好ましくは１〜３００ｍｇ、より好ましくは４〜１００ｍｇ、最も好ましくは４〜２０ｍｇ（例えば、４ｍｇ、５ｍｇ、１０ｍｇ及び２０ｍｇ）を含有する。
【００５３】
静注の場合、０．０２５〜７．５ｍｇ／ｋｇ／日、好ましくは０．１〜２．５ｍｇ／ｋｇ／日、より好ましくは０．１〜０．５ｍｇ／ｋｇ／日を送達するのに十分な量の活性成分が患者に投与される。前記量は多数の好適方法で、例えば大容量の低濃度活性成分を長時間かけてまたは１日数回に分けて投与したり、小容量の高濃度活性成分を短期間、例えば１日１回投与し得る。典型的には、活性成分を約０．０１〜１．０ｍｇ／ｍｌ（例えば、０．１ｍｇ／ｍｌ、０．３ｍｇ／ｍｌ及び０．６ｍｇ／ｍｌ）の濃度で含有する一般的な静脈製剤が調製され、１日あたり０．０１〜１０．０ｍｌ／ｋｇ−患者体重（例えば、０．１ｍｌ／ｋｇ、０．２ｍｌ／ｋｇ及び０．５ｍｌ／ｋｇ）の量で投与され得る。１つの例では、８０ｋｇの患者に対して活性成分濃度が０．５ｍｇ／ｍｌの静脈製剤を１日２回８ｍｌ投与すると、１日あたり８ｍｇの活性成分が投与される。グルクロン酸、Ｌ−乳酸、酢酸、クエン酸、または静脈投与のために許容され得るｐＨ範囲で合理的な緩衝能を有する医薬的に許容され得る酸／共役塩基を緩衝液として使用することもできる。選択する際には、薬物の溶解度を考慮しなければならない。当業者ならば、製剤の適当な緩衝液及びｐＨを投与する薬物の溶解度に応じて容易に選択することができる。
【００５４】
本発明化合物は、当業者に公知の経皮パッチの形態を用いて、適当な鼻内賦形剤を局所使用することによりまたは経皮ルートにより鼻内形態でも投与され得る。経皮送達系の形態で投与するためには、投与レジメの間、間欠的よりむしろ連続的に投与する方がよい。
【００５５】
本発明のトロンビン阻害剤は通常、適当な医薬用希釈剤、賦形剤または担体（本明細書では、これらをまとめて「担体」と称する）と混合される活性成分として投与され得る。担体は、所望の投与剤型、すなわち経口用錠剤、カプセル剤、エリキシル剤、シロップ剤等により一般的な製薬プラクティスに合わせて選択される。
【００５６】
例えば、錠剤またはカプセル剤の形態での経口投与の場合、活性薬物成分は経口用の医薬的に許容され得る非毒性不活性担体、例えばラクロース、スターチ、スクロース、グルコース、メチルセルロース、ステアリン酸マグネシウム、リン酸ジカルシウム、硫酸カルシウム、マンニトール、ソルビトール等と組合せられ得る。液体形態での経口投与の場合、経口用薬物成分は任意の経口用の医薬的に許容され得る非毒性不活性担体、例えばエタノール、グリセロール、水等と組合せられ得る。更に、所望もしくは所要により、適当な結合剤、滑沢剤、崩壊剤及び着色剤をも混合物に配合することができる。適当な結合剤には、スターチ、ゼラチン、天然糖（例えば、グルコースまたはβ−ラクトース）、コーン甘味料、天然及び合成ゴム（例えば、アラビアゴム、トラガカントガムまたはアルギン酸ナトリウム）、カルボキシメチルセルロース、ポリエチレングリコール、ワックス等が含まれる。上記した投与剤型で使用される滑沢剤には、オレイン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウム等が含まれる。崩壊剤には、スターチ、メチルセルロース、寒天、ベントナイト、キサンタンガム等が含まれるが、これらに限定されない。
【００５７】
本発明は、本発明化合物を含む組成物で患者を治療することを含む患者における炎症性疾患の治療方法をも包含する。前記疾患には、腎炎、全身性エリテマトーデス、関節リウマチ、糸球体腎炎及びサルコイドーシスが含まれるが、これらに限定されない。
【００５８】
本発明は、本発明化合物及びＮＳＡＩＤ（例えば、ＣＯＸ−２阻害剤）の配合剤で患者を治療することを含む患者における炎症性疾患の治療方法をも包含する。前記疾患には、腎炎、全身性エリテマトーデス、関節リウマチ、糸球体腎炎、血管炎及びサルコイドーシスが含まれるが、これらに限定されない。
【００５９】
本発明は、治療有効量の本発明化合物を患者に投与することを含む各種症状（例えば、腎炎、全身性エリテマトーデス、関節リウマチ、糸球体腎炎、サルコイドーシス、リウマチ熱、インフルエンザや他のウイルス疾患に関連する症状、風邪、腰痛、頸痛、月経困難痛、頭痛、歯痛、捻挫及び挫傷、筋炎、神経痛、滑膜炎、関節リウマチを含めた関節炎、変形性関節炎（骨関節炎）、痛風、強直性脊椎炎、滑液包炎、火傷、手術や歯科処置後の損傷）の疼痛、熱及び炎症の緩和方法をも包含する。トロンビン阻害剤は初老性及び老人性痴呆を含めた痴呆、特にアルツハイマー型痴呆の治療にも有用であり得る。
【００６０】
フィブリン形成が顕著な炎症性疾患では、フィブリンが病態の決定因子であり得る。フィブリンはマトリックスとして機能し、該マトリックス上には炎症細胞が遊走、付着し得る（Ｓｈｅｒｍａｎら，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．，１４５：７６−８５（１９７７）、Ａｌｔｉｅｒｉら，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．，７８：９６８−９７６（１９８６）、Ｗｒｉｇｈｔら，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，８５：７７３４−７７３８（１９８３）、Ａｌｔｉｅｒｉら，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２６８：１８４７−１８５３（１９９３）参照）。フィブリンはまたヒト末梢血単核細胞によるＩＬ−１受容体アンタゴニストの発現を抑え、炎症性サイトカインＩＬ−１βの発現を増強する（Ｐｅｒｅｚ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１５４：１８７９−１８８７（１９９５）参照）。抗凝固剤のワルファリン及びヘパリンは動物において遅延型過敏症及び実験的腎炎を緩解する（Ｊａｓａｉｎら，Ｉｍｍｕｎｏｐａｔｈｏｇｅｎｓｉｓ  ｏｆ  Ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ  Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ，Ｇ．Ｓ．Ｐａｎａｙｉら編，英国サリーに所在のＲｅｅｄｂｏｏｋｓ，Ｌｔｄ．発行及びＨａｌｐｅｒｎら，Ｎａｔｕｒｅ，２０５：２５７−２５９（１９６５）参照）。アンクロッドでの酵素脱フィブリル化は、動物において実験的腎炎（Ｎａｉｓｈら，Ｃｌｉｎ．Ｓｃｉ．，４２：６４３−６４６（１９９２））、全身性エリテマトーデス（Ｃｏｌｅら，Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔ．，３７：２９−３５（１９９０））及び関節リウマチ（Ｂｕｓｓｏら，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．，１０２：４１−５０（１９９８）参照）を緩解し、ヒトにおいて糸球体腎炎（Ｋｉｍら，Ｑ．Ｊ．Ｍｅｄ．，６９：８７９−９０５（１９８８）参照）を緩解する。更に、フィブリンで免疫化した家兎においてフィブリンを関節内注射すると関節炎が誘発され（Ｄｕｍｏｎｄｅら，Ｂｒｉｔｉｓｈ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ，ＸＬＩＩＩ：３７３−３８３（１９６１））、抗原誘発関節炎は線溶性滑液フィブリンが妥協しているウロキナーゼ欠乏マウスでは憎悪する（Ｂｕｓｓｏら，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．，１０２：４１−５０（１９９８）参照）。
【００６１】
本発明によれば、フィブリン沈着が特徴の疾患では、本発明化合物の投与によりフィブリンの定常濃度を低下させると前記疾患に関連する病理的炎症応答が抑えられる。前記疾患には、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、糸球体腎炎、血管炎及びサルコイドーシスが含まれるが、これらに限定されない。
【００６２】
また、本発明化合物は、現在製剤中に他の薬剤または成分と併用されている慣用のＮＳＡＩＤの部分または完全代替物として有用である。従って、本発明は、更なる態様で、非毒性治療有効量の上記した本発明化合物及び１つ以上の成分、例えばアセトアミノフェンやフェナセチンを含めた別の疼痛緩和薬；カフェインを含めた増強剤；Ｈ２アンタゴニスト、水酸化アルミニウムまたはマグネシウム、シメチコン；フェニレフリン、フェニルプロパノールアミン、偽エフェドリン、オキシメタゾリン、エピネフリン、ナファゾリン、キシロメタゾリン、プロピルヘキセドリンまたはレボ−デソキシエフェドリンを含めた充血除去剤；コデイン、ヒドロコドン、カラミフェン、カルベタペンタンまたはデキストロメトルファンを含めた抗組織剤；利尿剤；鎮静または非鎮静性抗ヒスタミン剤を含む上記疾患を治療するための医薬組成物を包含する。更に、本発明は、治療を要する患者に対して非毒性治療有効量の本発明化合物を場合により直ぐ上にリストした成分の１つ以上と共に投与することを含む炎症性疾患の治療方法をも包含する。
【００６３】
本発明は、治療有効量の本発明化合物と共に治療有効量のＮＳＡＩＤ（例えば、ＣＯＸ−２阻害剤）を哺乳動物、より具体的にはヒトに投与することを含む新規な併用療法をも包含する。前記併用療法は炎症性疾患を治療するために使用される。
【００６４】
本発明化合物と共にＮＳＡＩＤ（例えば、ＣＯＸ−２阻害剤）を含む本発明の医薬配合剤の場合、本発明化合物及びＮＳＡＩＤの両方を含有する単一の医薬剤型として投与しても各成分をそれぞれの医薬剤型の形態で投与してもよい。別個の剤型を使用するときは本発明化合物及びＮＳＡＩＤは本質的に同時にまたは逐次投与され得る。「本発明の医薬配合剤」には前記レジメのすべてが含まれると理解されたい。本発明化合物及びＮＳＡＩＤの有利な薬理効果が患者により実質的に同時に達成されるならば本発明では各種投与方法が好適である。前記した有利な効果は、好ましくは各活性薬物の標的血液レベル濃度が実質的に同時に維持されるときに達成される。本発明化合物及びＮＳＡＩＤを１回／日の投与スケジーュールで同時に投与することが好ましいが、本発明化合物を１回／日投与し、ＮＳＡＩＤを１回以上／日投与するか、またはＮＳＡＩＤを１回／日投与し、本発明化合物を１回以上／日投与するように投与スケジュールを変更してもよい。本発明化合物及びＮＳＡＩＤを含む単一経口剤型が好ましい。患者にとっては単一剤型が便利である。
【００６５】
本発明は、治療有効量の本発明化合物またはその医薬的に許容され得る塩と治療有効量のＮＳＡＩＤまたはその医薬的に許容され得る塩の組合せ及び医薬的に許容され得る担体を含む医薬組成物をも提供する。本発明の組成物の１実施態様は、治療有効量の本発明化合物、治療有効量のＣＯＸ−２阻害剤及び医薬的に許容され得る担体を含む経口投与用単一組成物である。前記配合剤は、各剤型が活性成分の１つを有する別々の剤型で投与してもよい。別々の剤型で投与する場合、各活性成分の有利効果が患者により実質的な同時に達成されるように各剤型が投与される。
【００６６】
慣用のＮＳＡＩＤには、サリチレート、例えばアスピリン、サリチル酸ナトリウム、コリンサリチレート、サリチルサリチル酸、ジフルニサル及びサルサラート；インドール酢酸、例えばインドメタシン及びスリンダク；ピラゾール、例えばフェニルブタゾン、オキシフェンブタゾン；ピロールアルカノン酸、例えばトルメチン；フェニル酢酸、例えばイブプロフェン、フェノプロフェン、フルルビプロフェン及びケトプロフェン；フェナメート、例えばメフェナム酸及びメクロフェナメート；オキシカム、例えばピロキシカム；及びナフタレン酢酸、例えばナプロキセンが含まれる。ＣＯＸ−１及びＣＯＸ−２阻害剤のようなシクロオキシゲナーゼ阻害剤もＮＳＡＩＤである。
【００６７】
援用により本明細書に含まれるとするＣ．Ｂｒｉｄｅａｕら，Ｉｎｆｌａｍｍ．Ｒｅｓ．，４５：６８−７４（１９９６）に記載されているヒト全血ＣＯＸ−１アッセイ及びヒト全血ＣＯＸ−２アッセイを用いたとき、好ましくは本発明化合物はヒト全血ＣＯＸ−２アッセイで約２μＭ未満のシクロオキシゲナーゼ−２  ＩＣ５０を有するが、ヒト全血ＣＯＸ−１アッセイでは約５μＭ以上のシクロオキシゲナーゼ−１  ＩＣ５０を有する。本発明化合物のシクロオキシゲナーゼ−１阻害に対するシクロオキシゲナーゼ−２阻害の選択率が少なくとも１０、より好ましくは少なくとも４０であることも好ましい。前記選択率は、通常のＮＳＡＩＤ誘発副作用の発現率を低下させる可能性を示し得る。
【００６８】
シクロオキシゲナーゼ−２阻害剤は、ＮＳＡＩＤに関する慣用投与レベル以下の投与レベルで投与され得る。好適な用量は選択したシクロオキシゲナーゼ−２阻害剤の抗炎症効果に依存するが、通常好適量は約０．００１〜５０ｍｇ／ｋｇ／日、好ましくは０．００５〜３０ｍｇ／ｋｇ／日、特に０．０５〜１０ｍｇ／ｋｇ／日である。本発明化合物は最高６回／日、好ましくは１〜４回／日、特に１回／日の投与レジメに基づいて投与され得る。
【００６９】
本発明化合物をＮＳＡＩＤと併用する投与レジメは、患者のタイプ、種、年令、体重、性別及び医学的状態；治療対象の症状の重篤度；投与ルート；患者の腎及び肝機能；及び使用する特定化合物またはその塩もしくはエステルを含めた各種因子に従って選択される。２つの別種の活性成分を併合療法で使用しているので、各成分の力価及び両成分を配合することにより生ずる相互作用をも考慮しなければならない。これらの因子は、状態の進行を予防、阻止または抑制するのに必要な治療有効量または予防有効量を決定する目的で通常臨床医の範囲内で十分考慮される。
【００７０】
患者への配合剤の投与は、患者自身によるか他人による患者への投与が含まれる。
【００７１】
追加の活性成分を単一製剤の形態で本発明化合物と共に使用してもよく、または同時または逐次投与し得る別個の製剤の形態で患者に投与してもよい。使用し得る追加の活性成分の例には、ＨＭＧ−ＣｏＡシンターゼ阻害剤；スクアレンエポキシダーゼ阻害剤；スクアレンシンターゼ阻害剤（スクアレン合成阻害剤としても公知）；アシル補酵素Ａ：コレステロールアシルトランスフェラーゼ（ＡＣＡＴ）阻害剤；プロブコール；ナイアシン；フィブレート、例えばクロフィブレート、フェノフィブレート及びジェムフィブリゾール；コレステロール吸収阻害剤；胆汁酸封鎖剤；ＬＤＬ（低密度リポタンパク質）受容体誘導剤；ビタミンＢ６（ピリドキシンとしても公知）及びその医薬的に許容され得る塩、例えばＨＣｌ塩；ビタミンＢ１２（シアノコバラミンとしても公知）；β−アドレナリン作動性受容体ブロッカー；葉酸またはその医薬的に許容され得る塩またはエステル、例えばナトリウム塩及びメチルグルカミン塩；及び酸化防止性ビタミン、例えばビタミンＣ及びＥ、β−カロチンが含まれるが、これらに限定されない。
【００７２】
トロンビン阻害剤を適当な抗血小板薬と一緒に投与することもできる。前記抗血小板薬には、フィブリノーゲン受容体アンタゴニスト（例えば、不安定型狭心症を治療または予防するため、または血管形成術及び再発狭窄症後の再閉塞を予防するため）、アスピリンのような抗凝固薬、各種血管病態の治療において相乗効果を得るためにプラスミノーゲンアクチベータまたはストレプトキナーゼのような血栓溶解薬、アテローム性動脈硬化症を治療または予防するために抗高コレステロール血症剤（例えば、ロバスタチンやシムバスタチンのようなＨＭＧ  ＣｏＡレダクターゼ阻害剤、ＨＭＧ  ＣｏＡシンターゼ阻害剤等）が含まれるが、これらに限定されない。例えば、冠動脈疾患を罹患している患者や血管形成術を受けた患者に対してフィブリノーゲン受容体アンタゴニスト及びトロンビン阻害剤を併用することは有利である。また、トロンビン阻害剤により、組織プラスミノーゲンアクチベーター媒介血栓溶解再潅流の効率が増強される。血栓形成後にまずトロンビン阻害剤を投与し、その後組織プラスミノーゲアクチベーターまたは他のプラスミノーゲンアクチベーターを投与してもよい。
【００７３】
他の好適な抗血小板薬、抗凝固薬または血栓溶解薬と併用するときの本発明のトロンビン阻害剤の典型的な用量は、患者の治療の必要性に応じて、追加の抗血小板薬、抗凝固薬または血栓溶解薬と併用せずに投与されるトロンビン阻害剤の量と同一であっても、または追加の抗血小板薬、抗凝固薬または血栓溶解薬と併用せずに投与されるトロンビン阻害剤の用量より実質的に少なくてもよい。
【００７４】
特記しない限り、ＮＭＲはすべて４００ＭＨｚ磁場強度を用いて測定した。
【００７５】
【化１５】
2005504003.tif 000019
【００７６】
【化１６】
2005504003.tif 000020
【００７７】
【化１７】
2005504003.tif 000021
【００７８】
本発明化合物を製造するために有用な中間体は以下のようにして製造され得る。
【００７９】
（実施例Ｉ−１）
２−［１，２，３］チアジアゾル−４−イル−ベンジルアミン
【００８０】
【化１８】
2005504003.tif 000022
【００８１】
ステップＡ：Ｎ’−（１−ｏ−トリル−エチリデン）−ヒドラジンカルボン酸エチルエステル（Ｉ−１−１）
トルエン（３０ｍｌ）中に２’−メチルアセトフェノン（０．９８ｍｌ，７．４ミリモル）、エチルカルバゼート（０．８１ｇ，７．８ミリモル）及びｐ−トルエンスルホン酸１水和物（７０ｍｇ，０．３７ミリモル）を含む溶液をＤｅａｎ−Ｓｔａｒｋ装置において還流温度で２時間加熱した。溶媒を蒸発させ、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝８０：２０）にかけると、Ｎ’−（１−ｏ−トリル−エチリデン）−ヒドラジンカルボン酸エチルエステルが生じた。
【００８２】
【化１９】
2005504003.tif 000023
【００８３】
ステップＢ：４−ｏ−トリル−［１，２，３］チアジアゾール（Ｉ−１−２）
０℃に冷却した塩化チオニル（１ｍｌ）にＮ’−（１−ｏ−トリル−エチリデン）−ヒドラジンカルボン酸エチルエステルを添加した。反応混合物を６０℃に１時間加熱した。溶媒を蒸発させると、４−ｏ−トリル−［１，２，３］チアジアゾールが生じた。
【００８４】
【化２０】
2005504003.tif 000024
【００８５】
ステップＣ：４−（２−ブロモメチル−フェニル）−［１，２，３］チアジアゾール（Ｉ−１−３）
クロロホルム（１０ｍｌ）中に４−ｏ−トリル−［１，２，３］チアジアゾール（１００ｍｇ，０．５７ミリモル）、Ｎ−ブロモスクシンイミド（１００ｍｇ，０．５７ミリモル）及び２，２’−アゾビスイソブチロニトリル（９．４ｍｇ，０．０５７ミリモル）を含む溶液を還流温度で〜１８時間加熱した。更にクロロホルムを添加し、混合物を水、５％チオ硫酸ナトリウム及びブラインで洗浄した。乾燥し、溶媒を蒸発させると、４−（２−ブロモメチル−フェニル）−［１，２，３］チアジアゾールが生じた。
【００８６】
【化２１】
2005504003.tif 000025
【００８７】
ステップＤ：４−（２−アジドメチル−フェニル）−［１，２，３］チアジアゾール（Ｉ−１−４）
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２００ｍｌ）中に４−（２−ブロモメチル−フェニル）−［１，２，３］チアジアゾール（７．０ｇ，０．０２７モル）及びアジ化ナトリウム（５．３ｇ，０．０８１モル）を含む溶液を室温で一晩撹拌した。酢酸エチルを添加し、反応混合物を水及びブラインで洗浄した。乾燥し、溶媒を蒸発させると油状物が生じた。これをシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝９６：４）にかけると、４−（２−アジドメチル−フェニル）−［１，２，３］チアジアゾールが生じた。
【００８８】
【化２２】
2005504003.tif 000026
【００８９】
ステップＥ：２−［１，２，３］チアジアゾル−４−イル−ベンジルアミン（Ｉ−１−５）
テトラヒドロフラン（２０ｍｌ）中に４−（２−アジドメチル−フェニル）−［１，２，３］チアジアゾール（１．０ｇ，４．６ミリモル）、トリフェニルホスフィン（１．４ｇ，５．５ミリモル）及び水（０．１２ｍｌ，６．９ミリモル）を含む溶液を室温で一晩撹拌した。溶媒を蒸発させ、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（クロロホルム：２−プロパノール＝９５：５〜９２：８）にかけると、２−［１，２，３］チアジアゾル−４−イル−ベンジルアミンが得られた。
【００９０】
【化２３】
2005504003.tif 000027
【００９１】
（実施例Ｉ−２）
２−ピラゾル−１−イル−ベンジルアミントリフルオロ酢酸塩
【００９２】
【化２４】
2005504003.tif 000028
【００９３】
ステップＡ：２−ピラゾル−１−イル−安息香酸（Ｉ−２−１）
水（６３０ｍｌ）中に２−ヒドラジノ安息香酸塩酸塩（５０ｇ，０．２７モル）及びマロンアルデヒドビスジメチルアセタール（４３ｍｌ，０．２７モル）を含む混合物を激しく撹拌し、ここに濃ＨＣｌ（３０ｍｌ）を徐々に添加した。反応混合物を２時間還流し、メタノールを蒸発させた。無色になるまで無機層をチャーコールで処理し、冷却し、２時間放置し、濾過した。残渣を冷水で洗浄し、空気中で乾燥すると、２−ピラゾル−１−イル−安息香酸が生じた。
ＭＳ（ＥＳ＋）  Ｍ＋１：１８９．４（Ｃ１０Ｈ１８Ｎ２Ｏ２）。
【００９４】
ステップＢ：２−ピラゾル−１−イル−ベンズアミド（Ｉ−２−２）
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．７５ｍｌ）中に２−ピラゾル−１−イル安息香酸（５０ｍｇ，０．２６ミリモル）、塩化アンモニウム（２８ｍｇ，０．５２ミリモル）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（１００ｍｇ，０．５２ミリモル）、１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール（７１ｍｇ，０．５２ミリモル）及びジイソプロピルエチルアミン（０．１７ｍｌ，１．０ミリモル）を含む溶液を室温で５時間撹拌した。水を添加し、反応混合物を酢酸エチルで抽出した。乾燥し、溶媒を蒸発させると、２−ピラゾル−１−イル−ベンズアミドが生じた。
【００９５】
【化２５】
2005504003.tif 000029
【００９６】
ステップＣ：２−ピラゾル−１−イル−ベンジルアミントリフルオロ酢酸塩（Ｉ−２−３）
テトラヒドロフラン（２ｍｌ）中に２−ピラゾル−１−イル−ベンズアミド（６８ｍｇ）及びボラン−テトラヒドロフラン複合体（１Ｍ  テトラヒドロフラン溶液，１．４ｍｌ，１．４ミリモル）を含む溶液を還流温度で２時間加熱した。塩酸（１Ｍ  水溶液，２．８ｍｌ）を添加し、反応混合物を還流温度で３０分間加熱した。溶液を１Ｎ  水酸化ナトリウムで中和し、濃縮してテトラヒドロフランを除去し、クロロホルムで抽出した。乾燥し、溶媒を蒸発させると、油状物が生じた。逆相分取ＨＰＬＣ（０．１％  ＴＦＡ含有水中ＣＨ３ＣＮ  ５→９５％，Ｃ１８ＰＲＯ  ＹＭＣ  ２０×１５０ｍｍ）にかけると、２−ピラゾル−１−イル−ベンジルアミントリフルオロ酢酸塩が得られた。
【００９７】
【化２６】
2005504003.tif 000030
【００９８】
（実施例Ｉ−３）
２−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ベンジルアミン
【００９９】
【化２７】
2005504003.tif 000031
【０１００】
ステップＡ：２−シアノ−ベンズイミド酸エチルエステル塩酸塩（Ｉ−３−１）
エタノール（１００ｍｌ）及びクロロホルム（２００ｍｌ）中にフタロニトリル（７０ｇ，０．５５モル）を含む懸濁液を加温した後０℃に冷却した。反応混合物にＨＣｌ（ｇ）を飽和した後０℃で２週間エージングした。生じた沈殿を濾過し、クロロホルムで洗浄した。濾液をエーテルで希釈すると、更に２−シアノ−ベンズイミド酸エチルエステル塩酸塩が生じた。
【０１０１】
ステップＢ：２−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ベンゾニトリル塩酸塩（Ｉ−３−２）
メタノール（４３０ｍｌ）中に２−シアノ−ベンズイミド酸エチルエステル塩酸塩（４３ｇ，０．２０モル）及び２，２−ジエトキシ−エチルアミン（３０ｍｌ，０．２１モル）を含む溶液を室温で１時間エージングした。反応混合物を濃縮してメタノールを除去し、濃硫酸（１１０ｍｌ）を添加した。スチーム浴上で１．５時間加熱後、反応混合物を水（７００ｍｌ）で希釈し、クロロホルムで抽出した。水性相を水酸化ナトリウムを用いて強塩基とし、クロロホルムで抽出した。ｐＨ３〜４まで１２Ｎ  塩酸を添加し、タール物を濾過し、濾液を濃縮した。生じた褐色固体を２００〜２２０℃で昇華させた。精製固体を６Ｎ  塩酸溶液（１１０ｍｌ）に溶解し、副生成物を濾過し、濾液を濃縮した。残渣を１２Ｎ  塩酸（１ｍｌ）含有エタノール（１００〜２００ｍｌ）で希釈し、軽く沸騰させ、濾過した。濾液を更に濃縮し、冷却すると、２−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ベンゾニトリル塩酸塩（１．５ｇ）が生じた。濾液を更に濃縮し、アセトンで希釈した。濾過すると、２−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−安息香酸塩酸塩（７．３ｇ）が生じた。濾液をアセトンで希釈し、生じた固体を濾過すると、更に２−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ベンゾニトリル塩酸塩が生じた。融点  ２００〜２０４℃。ＩＲ  ４．５μ。
【０１０２】
ステップＣ：２−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ベンゾニトリル（Ｉ−３−３）
水（２０ｍｌ）中に２−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ベンゾニトリル塩酸塩（３ｇ，０．１１４モル）を含む溶液に２．５Ｎ  水酸化ナトリウム溶液（５ｍｌ）を添加した。生じた沈殿を濾過し、酢酸エチルから再結晶すると、２−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ベンゾニトリルが生じた。
2005504003.tif 000032
【０１０３】
ステップＤ：２−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ベンジルアミン（Ｉ−３−４）
アンモニアを飽和したエタノール（５ｍｌ）中に２−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ベンゾニトリル（５０ｍｇ、０．３０モル）を含む溶液を水素雰囲気下ラネーニッケル（水中５０％スラリー，エタノールで洗浄，触媒量）の存在下で２時間撹拌した。反応混合物をセライトを介して濾過し、濃縮すると、２−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）−ベンジルアミンが得られた。
【０１０４】
【化２８】
2005504003.tif 000033
【０１０５】
（実施例Ｉ−４）
２−（１Ｈ−ピラゾル−３−イル）−ベンジルアミン塩酸塩
【０１０６】
【化２９】
2005504003.tif 000034
【０１０７】
ステップＡ：１−（テトラヒドロピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール（Ｉ−４−１）
ピラゾール（１４．３ｇ，０．２１モル）に３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン（２９ｍｌ，０．３１５モル）を添加し、完全に溶解させた後生じた溶液にトリフルオロ酢酸（０．１ｍｌ，０．００１３モル）を添加した。反応混合物を５時間還流し、水素化ナトリウム（０．２ｇ，０．００８モル）を添加し、混合物を蒸留すると、１−（テトラヒドロピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾールが生じた。沸点  〜６０−６５℃／０．５−１トル。
【０１０８】
ステップＢ：１Ｈ−ピラゾル−３−イルボロン酸（Ｉ−４−２）
乾燥ＴＨＦ（５０ｍｌ）中に１−（テトラヒドロピラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール（７．６１ｇ，０．０５２５モル）を含む溶液にＢｕＬｉの１．６Ｍ  ヘキサン溶液（３３ｍｌ）を−７０℃で滴下した。直ちに白色の嵩高沈殿が形成された。ホウ酸トリイソプロピル（１２．７ｍｌ，０．０５５モル）を同一温度で１０分かけて添加し、この温度を１時間保持した。その後、混合物を激しく撹拌しながら２Ｍ  ＨＣｌ（２当量）を用いて分解すると、白色の嵩高沈殿が生じた。分解中温度は−７０から２０℃に上昇した。沈殿を濾別し、（典型的な臭いが消えるまで）水及びベンゼンで洗浄すると、１Ｈ−ピラゾル−３−イルボロン酸が得られた。
【０１０９】
【化３０】
2005504003.tif 000035
【０１１０】
ステップＣ：２−ブロモベンジルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（Ｉ−４−３）
ジメチルホルムアミド（５０ｍｌ）中に２−ブロモベンジルアミン塩酸塩（１１．１２ｇ，０．０５モル）を含む溶液にジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート（１０．９１ｇ，０．０５モル）及びトリエチルアミン（３．６６ｍｌ，０．０５モル）を添加した。反応混合物を室温で一晩撹拌した。飽和炭酸ナトリウム溶液を添加し、混合物を酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄した。乾燥し、溶媒を蒸発させると、２−ブロモベンジルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルが得られた。ＭＳ（ＥＳ＋）  Ｍ＋１：２８６．４（Ｃ１２Ｈ１８ＢｒＮＯ２）。
【０１１１】
ステップＤ：２−（１Ｈ−ピラゾル−３−イル）ベンジルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（Ｉ−４−４）
ジメチルホルムアミド（２ｍｌ）中に１Ｈ−ピラゾル−３−イルボロン酸（１５６ｍｇ，１．４ミリモル）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（２４２ｍｇ，０．２１ミリモル）及び炭酸ナトリウム（２２２ｍｇ，２．１ミリモル）を含む溶液に２−ブロモベンジルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（２００ｍｇ，０．６９９ミリモル）を添加した。懸濁液を１００℃で２時間撹拌し、室温に冷却し、飽和炭酸水素ナトリウムに注ぎ、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を飽和塩化ナトリウムで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、真空中で濃縮した。粗生成物をシリカ（ＩＳＣＯ；０〜３０％  酢酸エチル／ヘキサン）に通すと、２−（１Ｈ−ピラゾル−３−イル）ベンジルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルが得られた。ＭＳ（ＥＳ＋）  Ｍ＋１：２７４．１（Ｃ１５Ｈ１９Ｎ３Ｏ２）。
【０１１２】
ステップＥ：２−（１Ｈ−ピラゾル−３−イル）−ベンジルアミン塩酸塩（Ｉ−４−５）
酢酸エチル（５ｍｌ）中に２−（１Ｈ−ピラゾル−３−イル）ベンジルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（６０ｍｇ，０．２２０ミリモル）を含む０℃溶液に塩化水素ガスを２分間通し、４０分間撹拌した。沈殿が生じ、懸濁液を真空中で濃縮すると、２−（１Ｈ−ピラゾル−３−イル）−ベンジルアミン塩酸塩が得られた。ＭＳ（ＥＳ＋）  Ｍ＋１：２７４．１（Ｃ１０Ｈ１１Ｎ３）。
【０１１３】
（実施例Ｉ−５）
２−イミダゾル−１−イル−ベンジルアミン
【０１１４】
【化３１】
2005504003.tif 000036
【０１１５】
ステップＡ：２−イミダゾル−１−イル−ベンゾニトリル（Ｉ−５−１）
ジメチルホルムアミド（８ｍｌ）中に１Ｈ−イミダゾール（０．６１ｇ，９．０ミリモル）を含む溶液に水素化ナトリウム（油中６０％，０．３６ｇ，９．０ミリモル）を添加し、反応混合物を室温で４０分間撹拌した。２−フルオロベンゾニトリル（０．９ｍｌ，８．２ミリモル）を添加し、反応物を室温で４５分間撹拌し、６０℃に４５分間加熱した後室温で一晩撹拌した。酢酸エチルを添加し、混合物を水及びブラインで洗浄した。乾燥し、溶媒を蒸発させると、２−イミダゾル−１−イル−ベンゾニトリルが得られた。
【０１１６】
【化３２】
2005504003.tif 000037
【０１１７】
ステップＢ：２−イミダゾル−１−イル−ベンジルアミン（Ｉ−５−２）
アンモニアを飽和したエタノール（２０ｍｌ）中に２−イミダゾル−１−イル−ベンゾニトリル（２００ｇ，１．２ミリモル）を含む溶液を水素雰囲気下ラネーニッケル（水中５０％スラリー，エタノールで洗浄，触媒量）の存在下で４時間撹拌した。反応混合物をセライトを用いて濾過し、濃縮すると、２−イミダゾル−１−イル−ベンジルアミンが得られた。
【０１１８】
【化３３】
2005504003.tif 000038
【０１１９】
（実施例Ｉ−６）
２−（１Ｈ−テトラゾル−５−イル）−ベンジルアミン塩酸塩
【０１２０】
【化３４】
2005504003.tif 000039
【０１２１】
ステップＡ：２−アジドメチル−ベンゾニトリル（Ｉ−６−１）
ジメチルホルムアミド（１０ｍｌ）中に２−ブロモメチル−ベンゾニトリル（１．０ｇ，５．１ミリモル）及びアジ化ナトリウム（０．４０ｇ，６．１ミリモル）を含む溶液を室温で２時間撹拌した。酢酸エチルを添加し、反応混合物を水及びブラインで洗浄した。乾燥し、溶媒を蒸発させると、２−アジドメチル−ベンゾニトリルが得られた。
【０１２２】
【化３５】
2005504003.tif 000040
【０１２３】
ステップＢ：（２−シアノベンジル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（Ｉ−６−２）
メタノール（１６ｍｌ）及びテトラヒドロフラン（８ｍｌ）中に２−アジドメチルベンゾニトリル（０．５９ｇ，３．７ミリモル）、塩化錫（ＩＩ）（１．０ｇ，５．５ミリモル）及びジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート（１．２ｇ，５．５ミリモル）を含む溶液を室温で１時間撹拌した。濃縮し、シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝８５：１５）にかけると、（２−シアノベンジル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルが得られた。
【０１２４】
【化３６】
2005504003.tif 000041
【０１２５】
ステップＣ：［２−（１Ｈ−テトラゾル−５−イル）−ベンジル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（Ｉ−６−３）
ジメチルホルムアミド（０．５ｍｌ）中に（２−シアノベンジル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（３５ｍｇ，０．１５ミリモル）、アジ化ナトリウム（４９ｍｇ，０．７５ミリモル）及び塩化アンモニウム（４０ｍｇ，０．７５ミリモル）を含む溶液を１１０℃に８時間加熱した。室温に冷却後、酢酸エチルを添加し、生じた固体を濾過した。濾液を濃縮すると、［２−（１Ｈ−テトラゾル−５−イル）−ベンジル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルが得られた。
【０１２６】
【化３７】
2005504003.tif 000042
【０１２７】
ステップＤ：２−（１Ｈ−テトラゾル−５−イル）−ベンジルアミン塩酸塩（Ｉ−６−４）
酢酸エチル（１５ｍｌ）中に［２−（１Ｈ−テトラゾル−５−イル）−ベンジル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（３３ｍｇ）を含む溶液を０℃に冷却し、この溶液にＨＣｌ（ｇ）を５分間通した。反応物を室温で０．５時間撹拌した。反応混合物に窒素を通し、エーテルを添加した。濾過すると、２−（１Ｈ−テトラゾル−５−イル）−ベンジルアミン塩酸塩が得られた。
【０１２８】
【化３８】
2005504003.tif 000043
【０１２９】
（実施例Ｉ−７）
２−（１−メチル−１Ｈ−テトラゾル−５−イル）−ベンジルアミン塩酸塩
【０１３０】
【化３９】
2005504003.tif 000044
【０１３１】
ステップＡ：［２−（１−メチル−１Ｈ−テトラゾル−５−イル）−ベンジル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（Ｉ−７−１）
ジメチルホルムアミド（４．７ｍｌ）中に［２−（１Ｈ−テトラゾル−５−イル）−ベンジル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（０．２３ｇ，０．８４ミリモル，実施例Ｉ−６のステップＣに記載したように製造した）、砕いた炭酸カリウム（０．５８ｇ，４．２ミリモル）及びヨードメタン（０．２６ｍｌ，４．２ミリモル）を含む溶液を室温で１時間撹拌した。水を添加し、反応混合物をクロロホルムで抽出した。乾燥し、溶媒を蒸発させると、位置異性体の混合物が生じた。分離し、逆相分取ＨＰＬＣ（０．１％  ＴＦＡ含有水中５→９５％  ＣＨ３ＣＮ，Ｃ１８ＰＲＯ  ＹＭＣ  ２０×１５０ｍｍ）により精製すると、［２−（１−メチル−１Ｈ−テトラゾル−５−イル）−ベンジル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【０１３２】
【化４０】
2005504003.tif 000045
及び［２−（２−メチル−２Ｈ−テトラゾル−５−イル）−ベンジル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
【０１３３】
【化４１】
2005504003.tif 000046
が得られた。
【０１３４】
ステップＢ：２−（１−メチル−１Ｈ−テトラゾル−５−イル）−ベンジルアミン塩酸塩（Ｉ−７−２）
酢酸エチル（５ｍｌ）中に［２−（１−メチル−１Ｈ−テトラゾル−５−イル）−ベンジル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１０ｍｇ）を含む溶液を０℃に冷却し、ここにＨＣｌ（ｇ）を５分間通した。反応物を室温で０．５時間撹拌した。反応混合物に窒素を通した。酢酸エチルから濃縮すると、２−（１−メチル−１Ｈ−テトラゾル−５−イル）−ベンジルアミン塩酸塩が得られた。
【０１３５】
【化４２】
2005504003.tif 000047
【０１３６】
（実施例Ｉ−８）
２−（２−メチル−２Ｈ−テトラゾル−５−イル）−ベンジルアミン塩酸塩（Ｉ−８−１）
【０１３７】
【化４３】
2005504003.tif 000048
【０１３８】
ステップＡ：２−（２−メチル−２Ｈ−テトラゾル−５−イル）−ベンジルアミン塩酸塩（Ｉ−８−１）
酢酸エチル（５ｍｌ）中に［２−（２−メチル−２Ｈ−テトラゾル−５−イル）−ベンジル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１５ｍｇ，実施例Ｉ−７のステップＡに記載したように製造した）を含む溶液を０℃に冷却し、ここにＨＣｌ（ｇ）を５分間通した。反応物を室温で０．５時間撹拌した。反応混合物に窒素を通した。酢酸エチルから濃縮すると、２−（２−メチル−２Ｈ−テトラゾル−５−イル）−ベンジルアミン塩酸塩が得られた。
【０１３９】
【化４４】
2005504003.tif 000049
【実施例１】
【０１４０】
２−テトラゾル−１−イル−ベンジルアミン
【０１４１】
【化４５】
2005504003.tif 000050
【０１４２】
ステップＡ：２−テトラゾル−１−イル−安息香酸
氷酢酸（１５０ｍｌ）中に２−アミノ安息香酸（６．０ｇ，０．０４４モル）、ｏ−ギ酸トリメチル（１４．２ｍｌ，０．１３モル）及びアジ化ナトリウム（８．４ｇ，０．１３モル）を含む懸濁液を室温で２時間撹拌した。濾過し、トルエンから濃縮すると、２−テトラゾル−１−イル−安息香酸が得られた。
【０１４３】
【化４６】
2005504003.tif 000051
【０１４４】
ステップＢ：２−テトラゾル−１−イル−ベンズアミド
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１５ｍｌ）中に２−テトラゾル−１−イル−安息香酸（１．０ｇ，５．２ミリモル）、塩化アンモニウム（０．５６ｇ，１０．４ミリモル）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（２．０ｇ，１０．４ミリモル）、１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール（１．４ｇ，１０．４ミリモル）及びジイソプロピルエチルアミン（３．６ｍｌ，２０．８ミリモル）を含む溶液を室温で一晩撹拌した。水を添加し、反応混合物を酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄した。乾燥し、溶媒を蒸発させると、２−テトラゾル−１−イル−ベンズアミドが得られた。
【０１４５】
【化４７】
2005504003.tif 000052
【０１４６】
ステップＣ：２−テトラゾル−１−イル−ベンゾニトリル
テトラヒドロフラン（５０ｍｌ）中に２−テトラゾル−１−イル−ベンズアミド（１．５ｇ，７．９ミリモル）を含む溶液に水酸化（メトキシカルボニルスルファモイル）アンモニウム内部塩（２．８ｇ，１１．８ミリモル）を１．５時間かけて３回に分けて添加した。水を添加し、反応混合物を酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄した。乾燥し、溶媒を蒸発させると、２−テトラゾル−１−イル−ベンゾニトリルが得られた。
【０１４７】
【化４８】
2005504003.tif 000053
【０１４８】
ステップＤ：２−テトラゾル−１−イル−ベンジルアミン
アンモニアを飽和したエタノール（１２５ｍｌ）中に２−テトラゾル−１−イル−ベンゾニトリル（１．３ｇ，７．６ミリモル）を含む溶液を水素雰囲気下ラネーニッケル（水中５０％スラリー、エタノールで洗浄、触媒量）の存在下で一晩撹拌した。反応混合物をセライトを介して濾過し、濃縮すると、２−テトラゾル−１−イル−ベンジルアミンが得られた。
【０１４９】
【化４９】
2005504003.tif 000054
【実施例２】
【０１５０】
５−クロロ−２−テトラゾル−１−イル−ベンジルアミン
【０１５１】
【化５０】
2005504003.tif 000055
【０１５２】
ステップＡ：５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）安息香酸
氷酢酸（１０５ｍｌ）中に２−アミノ−５−クロロ安息香酸（５．０ｇ，０．０２９モル）、ｏ−ギ酸トリメチル（９．５ｍｌ，０．０８７モル）及びアジ化ナトリウム（５．６ｇ，０．０８７モル）を含む懸濁液を室温で２時間撹拌した。濾過し、トルエンから濃縮すると、５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）安息香酸（４．０ｇ，６２％）が得られた。
【０１５３】
【化５１】
2005504003.tif 000056
【０１５４】
ステップＢ：５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンズアミド
ＤＭＦ（２６ｍｌ）中に５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）安息香酸（２．０ｇ，８．９ミリモル）、塩化アンモニウム（０．９５ｇ，１７．８ミリモル）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（３．４ｇ，１７．８ミリモル）、ＨＯＡｔ（２．４ｇ，１７．８ミリモル）及びＤＩＥＡ（６．２ｍｌ，３５．６ミリモル）を含む溶液を室温で一晩撹拌した。水を添加し、反応混合物を酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄した。乾燥し、溶媒を蒸発させると、５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンズアミド（２．３ｇ）が得られた。
【化５２】
2005504003.tif 000057
ステップＣ：５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンゾニトリル
ＴＨＦ（２９ｍｌ）中に５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンズアミド（１．０ｇ，４．５ミリモル）を含む溶液に水酸化（メトキシカルボニルスルファモイル）アンモニウム内部塩（２．１ｇ，８．８ミリモル）を５時間かけて５回に分けて添加した。水を添加し、反応混合物を酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄した。乾燥し、溶媒を蒸発させると、５−クロロ−２−テトラゾル−１−イル−ベンゾニトリル（０．８３ｇ，９０％）が得られた。
【０１５５】
【化５３】
2005504003.tif 000058
【０１５６】
ステップＤ：５−クロロ−２−テトラゾル−１−イル−ベンジルアミン
アンモニアを飽和したエタノール（２０ｍｌ）中に５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンゾニトリル（１１３ｍｇ，０．５５ミリモル）を含む溶液を水素雰囲気下ラネーニッケル（水中５０％スラリー，エタノールで洗浄，触媒量）の存在下で一晩撹拌した。反応混合物をセライトを介して濾過し、濃縮すると、５−クロロ−２−テトラゾル−１−イル−ベンジルアミン（５８ｍｇ，５０％）が得られた。
【０１５７】
【化５４】
2005504003.tif 000059
【実施例３】
【０１５８】
Ｃ−（３−［１，２，４］トリアゾル−１−イル−ピリジン−２−イル）−メチルアミン二塩酸塩
【０１５９】
【化５５】
2005504003.tif 000060
【０１６０】
ステップＡ：３−［１，２，４］トリアゾル−１−イル−ピリジン−２−カルボニトリル
ＤＭＦ（３０ｍｌ）中に２−シアノ−３−フルオロピリジン（２．９９ｇ，２４．４９ミリモル，１９９９年６月４日出願のケース２０４４３に記載されているように製造した）（２．９９ｇ，２４．４９ミリモル）を含む溶液に炭酸セシウム（２．０３ｇ，２９．３９ミリモル）及び１，２，４−トリアゾール（２．０３ｇ，２９．３９ミリモル）を添加し、反応混合物を６５℃で４時間撹拌した。室温に冷却後、混合物を水で希釈し、ＥｔＯＡｃで３回抽出した。水性層をＬｉＣｌで飽和し、更にＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、真空中で濃縮した。粗生成物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２中に１０％ＮＨ４ＯＨ含有のＭｅＯＨ  ２→６％）にかけると、３−［１，２，４］トリアゾル−１−イル−ピリジン−２−カルボニトリルが生じた。
【０１６１】
【化５６】
2005504003.tif 000061
【０１６２】
ステップＢ：（３−［１，２，４］トリアゾル−１−イル−ピリジン−２−イルメチル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
ＮＨ３を飽和したＭｅＯＨ（２００ｍｌ）中にラネーニッケル（水中懸濁液約３ピペット，ＥｔＯＨで数回洗浄／デカント）を含む懸濁液に３−［１，２，４］トリアゾル−１−イル−ピリジン−２−カルボニトリル（３．７５４ｇ，２１．８８ミリモル）を添加した。混合物を５５Ｐｓｉ下で１８時間水素化した。反応混合物をアルゴン流下セライトを介して濾過し、濾液を真空中で濃縮した。ＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍｌ）及びＭｅＯＨ（１０ｍｌ）中に粗生成物を含む溶液にジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート（６．２ｇ，２８．４ミリモル）を添加し、反応混合物を室温で３０分間撹拌した。真空中で濃縮して得られた粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル，ＣＨ２Ｃｌ２中に１０％ＮＨ４ＯＨ含有のＭｅＯＨ  ２→６％）にかけると、（３−［１，２，４］トリアゾル−１−イル−ピリジン−２−イルメチル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルが得られた。
【０１６３】
【化５７】
2005504003.tif 000062
【０１６４】
ステップＣ：Ｃ−（３−［１，２，４］−トリアゾル−１−イル−ピリジン−２−イル）−メチルアミン二塩酸塩
ＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍｌ）及びＭｅＯＨ（１０ｍｌ）中に（３−［１，２，４］トリアゾル−１−イル−ピリジン−２−イルメチル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（４．０８ｇ）を含む溶液を０℃に冷却し、この溶液にＨＣｌ（ｇ）を１０分間通した。フラスコを密封し、反応混合物を室温で１８時間撹拌した。反応混合物に窒素を５分間通し、反応混合物を濃縮すると、Ｃ−（３−［１，２，４］−トリアゾル−１−イル−ピリジン−２−イル）−メチルアミン二塩酸塩が白色固体として得られた。
【０１６５】
【化５８】
2005504003.tif 000063
【実施例４】
【０１６６】
５−クロロ−２−［１，２，４］トリアゾル−１−イル−ベンジルアミン
【０１６７】
【化５９】
2005504003.tif 000064
【０１６８】
ステップＡ：５−クロロ−２−［１，２，４］トリアゾル−１−イル−ベンゾニトリル
ＤＭＦ（１００ｍｌ）中に２，５−ジクロロベンゾニトリル（１０ｇ，５８．１ミリモル）を含む溶液に炭酸セシウム（２２．７ｇ，６９．８ミリモル）及び１，２，４−トリアゾール（４．８ｇ，６９．８ミリモル）を添加し、反応混合物を６５℃で５．５時間、７５℃で１６時間、８５℃で７時間撹拌した。更に１，２，４−トリアゾール（５ｇ）を添加し、反応混合物を８５℃で１８時間、１００℃で４時間撹拌した。室温に冷却後、混合物を水で希釈し、ＥｔＯＡｃで３回抽出した。合わせた有機層を水性ＬｉＣｌで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、真空中で濃縮すると、５−クロロ−２−［１，２，４］トリアゾル−１−イル−ベンゾニトリルが白色固体として得られた。これを更に精製することなく次ステップで使用した。
【０１６９】
ステップＢ：５−クロロ−２−［１，２，４］トリアゾル−１−イル−ベンジルアミン
ＮＨ３を飽和したＥｔＯＨ（５００ｍｌ）中に５−クロロ−２−［１，２，４］トリアゾル−１−イル−ベンゾニトリル（１１．８７ｇ，５８ミリモル）を含む懸濁液にラネーニッケル（水中懸濁液約５ピペット，ＥｔＯＨで数回洗浄／デカント）を添加した。混合物を１気圧下で２６時間水素化した。反応混合物をアルゴン流下セライトを介して濾過し、濾液を真空中で乾燥した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル，ＣＨ２Ｃｌ２中に１０％ＮＨ４ＯＨ含有のＭｅＯＨ  ２→１０％）にかけると、５−クロロ−２−［１，２，４］トリアゾル−１−イル−ベンジルアミンが白色固体として得られた。
【０１７０】
【化６０】
2005504003.tif 000065
【実施例５】
【０１７１】
２−（１，２，４−トリアゾル−１−イル）ベンジルアミン
【０１７２】
【化６１】
2005504003.tif 000066
【０１７３】
ステップＡ：２−（１，２，４−トリアゾル−４−イル）シアノベンゼン
ＤＭＦ（７５ｍｌ）中に２−フルオロシアノベンゼン（５．０ｇ，４１ミリモル）を含む溶液を撹拌し、ここに１，２，４−トリアゾール（３．０ｇ，４３ミリモル）及び炭酸セシウム（１４ｇ，４３ミリモル）を添加した。混合物を５０℃に加温し、不活性雰囲気下１８時間撹拌した。混合物を周囲温度に冷却し、等容量のＥｔＯＡｃで希釈し、濾過し、濾液溶媒を減圧下で除去した。残渣をエーテル（５０ｍｌ）と水（１００ｍｌ）に分配した。吸引濾過により未溶解固体を回収し、減圧下で乾燥すると、２−（１，２，４−トリアゾル−１−イル）シアノベンゼン（ｈｐｌｃ保持時間＝２．２９分（方法Ｘ）；ＴＬＣ  Ｒｆ＝０．６，ＥｔＯＡｃ）と２−（１，２，４−トリアゾル−４−イル）シアノベンゼン（ｈｐｌｃ保持時間＝１．９１分（方法Ｘ）；ＴＬＣ  Ｒｆ＝０．１，ＥｔＯＡｃ）の１０：１混合物（４．６ｇ）が得られた。混合物を０：１００→５：９５  ＭｅＯＨ：ＥｔＯＡｃで勾配溶離するフラッシュクロマトグラフィーにより分離して、２−（１，２，４−トリアゾル−１−イル）シアノベンゼン
【０１７４】
【化６２】
2005504003.tif 000067
質量分析  ｍ／ｚ＝１７１（Ｍ＋＋Ｈ）、及び
２−（１，２，４−トリアゾル−４−イル）シアノベンゼン（０．３８ｇ）
【０１７５】
【化６３】
2005504003.tif 000068
質量分析  ｍ／ｚ＝１７１（Ｍ＋＋Ｈ）、及び
が共に白色固体として得られた。
【０１７６】
ステップＢ：２−（１，２，４−トリアゾル−１−イル）ベンジルアミン
エタノール（７５ｍｌ）中に２−（１，２，４−トリアゾル−１−イル）シアノベンゼン（５０８ｍｇ，２．９９ミリモル）及び１０％のパラジウム（２５重量％）／炭素触媒（１３４ｍｇ）を含む溶液をＰＡＲＲ水素化装置に入れ、水素雰囲気中５５ｐｓｉ下で一晩放置した。混合物をセライトを介して濾過し、濃縮すると、２−（１，２，４−トリアゾル−１−イル）ベンジルアミンが得られた。
【０１７７】
【化６４】
2005504003.tif 000069
【実施例６】
【０１７８】
２−（１，２，４−トリアゾル−４−イル）ベンジルアミン
【０１７９】
【化６５】
2005504003.tif 000070
【０１８０】
エタノール（７５ｍｌ）中で実施例５のステップＡで得た２−（１，２，４−トリアゾル−４−イル）シアノベンゼン（０．３ｇ，１．７６ミリモル）を１０％のパラジウム（３０重量％）／炭素触媒（１００ｍｇ）と合わせ、ＰＡＲＲ水素化装置に入れ、水素雰囲気中５５ｐｓｉ下で４８時間放置した。混合物をセライトを介して濾過し、濃縮すると、２−（１，２，４−トリアゾル−４−イル）ベンジルアミンが得られた。
【０１８１】
【化６６】
2005504003.tif 000071
【実施例７】
【０１８２】
３−（テトラゾル−１−イル）−２−アミノメチルピリジン
【０１８３】
【化６７】
2005504003.tif 000072
【０１８４】
ステップＡ：３−（テトラゾル−１−イル）シアノピリジン
ＤＭＦ（１５０ｍｌ）中にテトラゾール（１．０ｇ，１４ミリモル）を含む溶液を撹拌し、ここに４０％  水性水酸化テトラブチルアンモニウム（７．８ｇ，１２ミリモル）を添加した。溶媒を減圧下で除去した。水酸化テトラブチルアンモニウム溶液から水を完全ら除去するために、残渣をＤＭＦに再溶解し、溶液を減圧下で蒸発させた。この手順を全部で３回繰り返した。次いで、残渣をＤＭＦ（６０ｍｌ）に溶解し、３−フルオロ−２−シアノピリジン（１．５ｇ，１２ミリモル）を添加した。反応物を不活性雰囲気下周囲温度で４日間撹拌した。この時点でｈｐｌｃ分析したところ３−フルオロ−２−シアノピリジンの約６５％が新しい物質に変換されていた。溶媒を減圧下で除去し、残渣をＥｔＯＡｃと水に分配した。ＥｔＯＡｃ層を分離し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過した。溶媒を減圧下で除去し、残渣を１：４→１００：０  ＥｔＯＡｃ：ヘキサンで勾配溶離するフラッシュクロマトグラフィーにかけると、３−（テトラゾル−１−イル）シアノピリジンが白色結晶性固体が得られた。ＴＬＣ  Ｒｆ＝０．５，ＥｔＯＡｃ：ヘキサン＝１：１；ｈｐｌｃ保持時間＝２．０４分（方法Ｘ）。
【０１８５】
【化６８】
2005504003.tif 000073
【０１８６】
ステップＢ：３−（テトラゾル−１−イル）−２−アミノメチルピリジン
エタノール（７５ｍｌ）中に３−（テトラゾル−１−イル）シアノピリジン（２５０ｍｇ，１４５ミリモル）及び１０％のパラジウム（４５重量％）／炭素触媒（１００ｍｇ）を含む溶液をＰＡＲＲ水素化装置に入れ、水素雰囲気中５５ｐｓｉ下で一晩放置した。混合物をセライトを介して濾過し、濃縮すると、３−（テトラゾル−１−イル）−２−アミノメチルピリジンが得られた。
【０１８７】
【化６９】
2005504003.tif 000074
【実施例８】
【０１８８】
Ｄ−フェニルアラニル−Ｎ−［２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド塩酸塩
【０１８９】
【化７０】
2005504003.tif 000075
【０１９０】
ステップＡ：Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−フェニルアラニル−Ｎ−［２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミドトリフルオロ酢酸塩
ジメチルホルムアミド（０．５ｍｌ）中に１−［２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）フェニル］メタンアミン（６０ｍｇ，０．１８ミリモル）、ＥＤＣ（４８ｍｇ，０．２５ミリモル）及びＢｏｃ−Ｄ−Ｐｈｅ−Ｐｒｏ−ＯＨ（Ｂａｃｈｅｍから市販されている）（６０ｍｇ，０．１７ミリモル）を含む溶液にＨＯＡＴ（３２ｍｇ，０．１８ミリモル）を添加した。この溶液を一晩撹拌し、分取ＨＰＬＣにより精製すると、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−フェニルアラニル−Ｎ−［２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミドトリフルオロ酢酸塩が得られた。質量分析  ＥＳ（Ｍ＋１）＝５２１．１。
【０１９１】
ステップＢ：Ｄ−フェニルアラニル−Ｎ−［２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド塩酸塩
酢酸エチル（０．５００ｍｌ）中にＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−フェニルアラニル−Ｎ−［２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミドトリフルオロ酢酸塩（８３ｍｇ，０．１６ミリモル）を含む０℃溶液にＨＣｌガスを２分間通した。１時間撹拌し、真空中で濃縮して、Ｄ−フェニルアラニル−Ｎ−［２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミドＨＣｌが得られた。質量分析  ＥＳ（Ｍ＋１）＝４２０．１。
【０１９２】
下記化合物は、実施例８に記載の手順と同様にして製造した。
【実施例９】
【０１９３】
Ｄ−フェニルアラニル−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド塩酸塩
【０１９４】
【化７１】
2005504003.tif 000076
質量分析  ＥＳ（Ｍ＋１）＝４５４．２。
【実施例１０】
【０１９５】
Ｄ−フェニルアラニル−Ｎ−［２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド二塩酸塩
【０１９６】
【化７２】
2005504003.tif 000077
質量分析  ＥＳ（Ｍ＋１）＝４１９．２。
【実施例１１】
【０１９７】
Ｄ−フェニルアラニル−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド二塩酸塩
【０１９８】
【化７３】
2005504003.tif 000078
質量分析  ＥＳ（Ｍ＋１）＝４５３．２。
【実施例１２】
【０１９９】
Ｄ−フェニルアラニル−Ｎ−｛［３−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）ピリジニウム−２−イル］メチル｝−Ｌ−プロリンアミド二塩酸塩
【０２００】
【化７４】
2005504003.tif 000079
質量分析  ＥＳ（Ｍ＋１）＝４２０．２。
【実施例１３】
【０２０１】
フェニルアラニル−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド二塩酸塩
【０２０２】
【化７５】
2005504003.tif 000080
質量分析  ＥＳ（Ｍ＋１）＝４２１．３。
【実施例１４】
【０２０３】
３−ピリジニウム−２−イル−Ｄ−アラニル−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−４−イウム−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミドトリクロリド
【０２０４】
【化７６】
2005504003.tif 000081
【０２０５】
ステップＡ：Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ピリジン−２−イル−Ｌ−アラニル−Ｌ−プロリン
ＤＭＦ（７ｍｌ）中にＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ピリジン−２−イル−Ｌ−アラニン（１．０ｇ，３．８ミリモル）を含む溶液にＬ−プロリン酸メチル塩酸塩（０．６２ｇ，３．８ミリモル）、トリエチルアミン（０．５２ｍｌ，３．８ミリモル）、ＨＯＡｔ（０．５１ｇ，０．３８ミリモル）及びＥＤＣ（１．１ｇ，５．７ミリモル）を添加した。室温で３時間後、反応混合物をＥｔＯＡｃ（３０ｍｌ）で希釈し、２００ｍｌずつの飽和ＮａＨＣＯ３溶液、水及びブラインで洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空中で濃縮した。自動フラッシュクロマトグラフィー（ＩＳＣＯコンビフラッシュ，シリゲル７０ｇ，３０分かけて５０→１００％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサンに直線勾配した後、２〜１０％  ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃで溶離，６０ｍｌ／分）すると、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ピリジン−２−イル−Ｌ−アラニル−Ｌ−プロリン０．９ｇが得られた。このうち０．４４ｇ（１．２ミリモル）をＭｅＯＨ（７ｍｌ）に溶解した。ここに１Ｍ  ＬｉＯＨ水溶液（１．２ｍｌ，１．２ミリモル）を添加し、反応混合物を６時間撹拌した後１Ｍ  ＬｉＯＨ水溶液（０．１２ｍｌ，０．１２ミリモル）を添加し、反応混合物を更に１６時間撹拌し、１２Ｍ  濃ＨＣｌ水溶液（０．１２ｍｌ，１．４４ミリモル）を添加し、反応物を泡状物まで濃縮した。
【０２０６】
【化７７】
2005504003.tif 000082
エレトクロスプレー質量分析  ３６４。
【０２０７】
ステップＢ：３−ピリジニウム−２−イル−Ｄ−アラニル−Ｎ−［５−クロロ−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−４−イウム−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミドトリクロリド
Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ピリジン−２−イル−Ｄ−アラニル−Ｌ−プロリン及び３−クロロ−２−［１，２，４］トリアゾル−１−イル−ベンジルアミンから上記した手順と同様にして標記化合物を製造した。
【０２０８】
【化７８】
2005504003.tif 000083
ＨＲＭＳ（エレクトロスプレー）  Ｍ＋Ｈ：計算値（Ｃ２２Ｈ２５ＣｌＮ７Ｏ２）  ４５４．１７５３、実測値  ４５４．１７５４；ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．３８（ジクロロメタン／メタノール／濃水酸化アンモニウム＝８０：１０：１）。
【実施例１５】
【０２０９】
３−ピリジニウム−２−イル−Ｄ−アラニル−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミドジクロリド
【０２１０】
【化７９】
2005504003.tif 000084
【０２１１】
Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ピリジン−２−イル−Ｄ−アラニル−Ｌ−プロリン及び１−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）フェニル］メタンアミンから上記した手順と同様にして標記化合物を製造した。
【０２１２】
【化８０】
2005504003.tif 000085
ＨＲＭＳ（エレクトロスプレー）  Ｍ＋Ｈ：計算値（Ｃ２１Ｈ２４ＣｌＮ８Ｏ２）  ４５５．１７０５、実測値  ４５５．１７０７；ＴＬＣ：Ｒｆ＝０．３９（ジクロロメタン／メタノール／濃水酸化アンモニウム＝８０：１０：１）。
【実施例１６】
【０２１３】
Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−１−［（９−ヒドロキシ−９Ｈ−フルオレン−９−イル）カルボニル］−Ｄ−プロリンアミド
【０２１４】
【化８１】
2005504003.tif 000086
【０２１５】
ステップＡ：９−ヒドロキシ−９−フルオレニルカルボニル−Ｌ−プロリンベンジルエステル
【０２１６】
【化８２】
2005504003.tif 000087
【０２１７】
Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３０ｍｌ）中に９−ヒドロキシ−９−フルオレンカルボン酸（５．０４ｇ，２２．３ミリモル）を含む溶液を窒素下で０℃に冷却し、ここに（Ｏ−７−アザベンゾトリアゾル−４−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロリン酸塩（ＨＡＴＵ）（９．３２ｇ，２４．５ミリモル）、Ｌ−プロリンベンジルエステル塩酸塩（５．９３ｇ，２４．５ミリモル）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（８．５ｍｌ，４８．８ミリモル）を添加した。混合物を０℃で３時間撹拌した後、濃縮し、シリカゲル（酢酸エチル／ヘキサン＝１：２）で精製すると、９−ヒドロキシ−９−フルオレニルカルボニル−Ｌ−プロリンベンジルエステルが得られた。ＨＰＬＣ＝９６％；Ｒ．Ｔ．＝３．７分；質量分析（エレクトロスプレー）  Ｍ＋１＝４１４．１。
【０２１８】
ステップＢ：９−ヒドロキシ−９−フルオレニルカルボニル−Ｌ−プロリン
【０２１９】
【化８３】
2005504003.tif 000088
【０２２０】
酢酸エチル（１００ｍｌ）中に上記ステップＡからの９−ヒドロキシ−９−フルオレニルカルボニル−Ｌ−プロリンベンジルエステル（３．８ｇ，９．３ミリモル）及び１０％  パラジウム／炭素（３９０ｍｇ）を含む混合物を水素雰囲気（バルーン圧）下で２４時間撹拌した。混合物をセライトを介して濾過し、真空中で濃縮すると、９−ヒドロキシ−９−フルオレニルカルボニル−Ｌ−プロリンが得られた。ＨＰＬＣ＝９０％；Ｒ．Ｔ．＝２．９７分；Ｍ＋１＝３２４．１。
【０２２１】
【化８４】
2005504003.tif 000089
【０２２２】
ＨＰＬＣ方法
移動相：
勾配：４．５分間かけて９５：５→０：１００  Ａ：Ｂ。ここで、Ａは０．１％  ＴＦＡ含有水、Ｂは０．１％  ＴＦＡ含有アセトニトリル。流速は３．０ｍｌ／分とした。
固定相：Ｚｏｒｂａｘ  Ｃ８カラム（内径４．５ｍｍ×７．５ｃｍ）、３．５ミクロン。
【０２２３】
ステップＣ：Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−１−［（９−ヒドロキシ−９Ｈ−フルオレン−９−イル）カルボニル］−Ｄ−プロリンアミド
【０２２４】
【化８５】
2005504003.tif 000090
【０２２５】
９−ヒドロキシ−９−フルオレニルカルボニル−Ｌ−プロリン及び１−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）フェニル］メタンアミンから実施例８に記載の手順と同様にして製造した。質量分析（エレクトロスプレー）  Ｍ＋１＝５１５．２。
【実施例１７】
【０２２６】
Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）ベンジル］−１−［（９−ヒドロキシ−９Ｈ−フルオレン−９−イル）カルボニル］−Ｌ−プロリンアミド
【０２２７】
【化８６】
2005504003.tif 000091
【０２２８】
ＤＭＦ（１ｍｌ）中に１−［（９−ヒドロキシ−９Ｈ−フルオレン−９−イル）カルボニル］−Ｌ−プロリン（実施例１６のステップＢ，０．０５ｇ，０．１６ミリモル）を含む溶液を撹拌し、ここに１−［５−クロロ−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）フェニル］メタンアミン（実施例４，０．０４ｇ，０．２ミリモル）及びＢＯＰ試薬（０．０９ｇ，０．１９ミリモル）を添加し、Ｎ−メチルモルホリンを用いてｐＨ８に調節した。反応は一時間で完了した。この時点でＨＰＬＣによれば出発物質はなくなっていた。その後、反応物を濾過し、分取ＨＰＬＣにより精製した。プールしたフラクションを凍結乾燥して、Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）ベンジル］−１−［（９−ヒドロキシ−９Ｈ−フルオレン−９−イル）カルボニル］−Ｌ−プロリンアミドの固体ＴＦＡ塩（０．０６ｇ；ＨＰＬＣ  ＲＴ＝３．１７分（方法Ａ）；ＬＣＭＳ  ｍ／ｚ＝５１４）が得られた。
【０２２９】
【化８７】
2005504003.tif 000092
【実施例１８】
【０２３０】
１−［（３−クロロフェニル）（ヒドロキシ）ピリジン−３−イルアセチル］−Ｎ−［２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
【０２３１】
【化８８】
2005504003.tif 000093
【０２３２】
ステップＡ：（３−クロロフェニル）（オキソ）酢酸エチル
シュウ酸ジエル（４．４ｇ，３０．２ミリモル）を乾燥エチルエーテル（３０ｍｌ）及び蒸留したばかりのＴＨＦ（３０ｍｌ）に溶解し、窒素雰囲気下撹拌しながら−７８℃に冷却した。その後温度を−７５〜−７８℃に維持しながら臭化３−クロロフェニルマグネシウム（ＴＨＦ中０．５Ｍ，７２．５ｍｌ，３６．２ミリモル）を滴下漏斗を介して滴下した。添加には約９０分を要した。３時間後、−７８℃で２Ｎ  硫酸（５０ｍｌ，９１ミリモル）を滴下して反応をクエンチした。添加が完了したら混合物を室温に戻した。混合物をエチルエーテルで３回抽出し、合わせたエーテル抽出物をブラインで２回洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、真空中で蒸発させ、真空乾燥させると、（３−クロロフェニル）（オキソ）酢酸エチル（６．５ｇ；ＨＰＬＣ  ＲＴ＝３．４６分（方法Ａ）；；ＬＣＭＳ  ｍ／ｚ＝２１３）が得られた。
【０２３３】
ステップＢ：（３−クロロフェニル）（オキソ）酢酸
エチルアルコール（８０ｍｌ）中に（３−クロロフェニル）（オキソ）酢酸エチル（６．５ｇ，３０．５ミリモル）を含む溶液を撹拌し、ここに５０％  水酸化ナトリウム溶液（１．９４ｍｌ，３６．６ミリモル）を添加し、室温で２４時間混合し続けた、その後、混合物を濃塩酸で中和し、真空中で蒸発させ、トルエンと共沸させ、乾燥させると、（３−クロロフェニル）（オキソ）酢酸（７．３ｇ，理論収量＝５．６ｇ，残部はＮａＣｌ；ＨＰＬＣ  ＲＴ＝２．３９分（方法Ａ））が得られた。
【０２３４】
ステップＣ：１−［（３−クロロフェニル）（オキソ）アセチル］−Ｌ−プロリン酸ｔｅｒｔ−ブチル
ＤＭＦ（５５ｍｌ）中に上記ステップＢからの（３−クロロフェニル）（オキソ）酢酸（３０．２ミリモル）を含む溶液を撹拌し、ここにＨ−Ｐｒｏ−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル（６．５ｇ，３８．１ミリモル）、ＨＯＢｔ（４．９ｇ，３６．３ミリモル）、ＥＤＣ（８．１ｇ，４２．３ミリモル）及びｐＨ  ６．５までＮ−メチルモルホリンを添加した。反応物を室温で２４時間撹拌し、真空中で蒸発させ、ＥｔＯＡｃと飽和炭酸水素ナトリウム溶液に分配した。層を分離し、有機層を水で２回洗浄し、真空中で蒸発させ、真空乾燥し、固定層としてシリカゲル、移動層としてＥｔＯＡｃとヘキサンの１：３混合物を用いて精製した。純粋フラクションを合わせ、乾燥すると、１−［（３−クロロフェニル）（オキソ）アセチル］−Ｌ−プロリン酸ｔｅｒｔ−ブチル（８．８ｇ；ＨＰＬＣ  ＲＴ＝３．６５分（方法Ａ）；ＬＣＭＳ  ｍ／ｚ＝２８２；ｔ−ブチル基なし）が得られた。
【０２３５】
ステップＤ：１−［（３−クロロフェニル）（ヒドロキシ）ピリジン−３−イルアセチル］−Ｌ−プロリン酸ｔｅｒｔ−ブチル
１−［（３−クロロフェニル）（オキソ）アセチル］−Ｌ−プロリン酸ｔｅｒｔ−ブチル（２．２ｇ，６．４６ミリモル）をＴＨＦ（１０ｍｌ）に溶解し、窒素雰囲気下で−７８℃に冷却した（容器Ａ）。別の容器に収容したエチルエーテル（５０ｍｌ）中に３−ブロモピリジン（０．６８ｍｌ，７．１ミリモル）を含む溶液を−７８℃に冷却し、ここにｎ−ＢｕＬｉ（ヘキサン中２．５Ｍ，３．１ｍｌ，７．７ミリモル）を添加し、混合物を１時間撹拌した（容器Ｂ）。容器Ｂの内容物を−７８℃でカニューレを介して容器Ａに加えた。温度は０℃に上昇し、混合物を２．５時間撹拌した。次いで、混合物を飽和塩化アンモニウム溶液（４０ｍｌ）でクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出した。ＥｔＯＡｃを真空中で蒸発させ、残渣を乾燥し、固定層としてシリカゲル、移動層としてＥｔＯＡｃとヘキサンの１：１混合物、その後２：１混合物を用いて精製した。プールしたフラクションを乾燥すると、１−［（３−クロロフェニル）（ヒドロキシ）ピリジン−３−イルアセチル］−Ｌ−プロリン酸ｔｅｒｔ−ブチルの非極性異性体（０．４３ｇ；ＨＰＬＣ  ＲＴ＝３．０１分（方法Ａ）；ＬＣＭＳ  ｍ／ｚ＝４１７）及び１−［（３−クロロフェニル）（ヒドロキシ）ピリジン−３−イルアセチル］−Ｌ−プロリン酸ｔｅｒｔ−ブチルの極性異性体（０．１２ｇ；ＨＰＬＣ  ＲＴ＝２．９６分（方法Ａ）；ＬＣＭＳ  ｍ／ｚ＝４１７）が得られた。
【０２３６】
ステップＥ：１−［（３−クロロフェニル）（ヒドロキシ）ピリジン−３−イルアセチル］−Ｌ−プロリン
１−［（３−クロロフェニル）（ヒドロキシ）ピリジン−３−イルアセチル］−Ｌ−プロリン酸ｔｅｒｔ−ブチルの非極性異性体（０．０８７ｇ０．２１ミリモル）をジクロロメタン（４ｍｌ）及びトリフルオロ酢酸（１ｍｌ）に溶解し、室温で４時間撹拌した。次いで、混合物を真空中で蒸発させ、真空乾燥すると、１−［（３−クロロフェニル）（ヒドロキシ）ピリジン−３−イルアセチル］−Ｌ−プロリンの非極性異性体（０．０４ｇ；ＨＰＬＣ  ＲＴ＝２．５１分（方法Ａ）；ＬＣＭＳ  ｍ／ｚ＝３６１）が得られた。
【０２３７】
１−［（３−クロロフェニル）（ヒドロキシ）ピリジン−３−イルアセチル］−Ｌ−プロリン酸ｔｅｒｔ−ブチルの極性異性体（０．０５９ｇ，０．１４ミリモル）をＴＨＦ（１ｍｌ）及び６Ｎ  塩酸（２ｍｌ）に溶解し、室温で２４時間撹拌した。次いで、混合物を真空中で蒸発させ、真空乾燥すると、１−［（３−クロロフェニル）（ヒドロキシ）ピリジン−３−イルアセチル］−Ｌ−プロリンの非極性異性体（０．０５１ｇ；ＨＰＬＣ  ＲＴ＝２．３９９分（方法Ａ）；ＬＣＭＳ  ｍ／ｚ＝３６１）が得られた。
【０２３８】
ステップＦ：１−［（３−クロロフェニル）（ヒドロキシ）ピリジン−３−イルアセチル］−Ｎ−［２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
イソプロピルアルコール（１ｍｌ）中に１−［（３−クロロフェニル）（ヒドロキシ）ピリジン−３−イルアセチル］−Ｌ−プロリンの非極性異性体（０．０４ｇ，０．１１ミリモル）を含む溶液を撹拌し、ここに１−［２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）フェニル］メタンアミン（０．０２７ｇ，０．１６ミリモル）、ＢＯＰ試薬（０．０６３ｇ，０．１４ミリモル）及びｐＨ８までのＮ−メチルモルホリンを添加した。ＨＰＬＣにより反応を完了まで追跡し、２４時間後反応物を真空中で蒸発させ、Ｇｉｌｓｏｎ分取ＨＰＬＣにより精製すると、１−［（３−クロロフェニル）（ヒドロキシ）ピリジン−３−イルアセチル］−Ｎ−［２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミドの非極性異性体のＴＦＡ塩（０．０１４ｇ；ＨＰＬＣ  ＲＴ＝２．７１分（方法Ａ）；ＬＣＭＳ  ｍ／ｚ＝５１８）が得られた。
【０２３９】
【化８９】
2005504003.tif 000094
【０２４０】
イソプロピルアルコール（１．５ｍｌ）中に１−［（３−クロロフェニル）（ヒドロキシ）ピリジン−３−イルアセチル］−Ｌ−プロリンの極性異性体（０．０５１ｇ，０．１４ミリモル）を含む溶液を撹拌し、ここに２−（テトラゾル−１−イル）−ベンジルアミン（０．０２５ｇ，０．１５ミリモル）、ＢＯＰ試薬（０．０５５ｇ，０．１３ミリモル）及びｐＨ８までのＮ−メチルモルホリンを添加した。ＨＰＬＣにより反応を完了まで追跡し、２４時間後真空中で蒸発させ、Ｇｉｌｓｏｎ分取ＨＰＬＣにより精製すると、１−［（３−クロロフェニル）（ヒドロキシ）ピリジン−３−イルアセチル］−Ｎ−［２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミドの極性異性体のＴＦＡ塩（０．０１３ｇ；ＨＰＬＣ  ＲＴ＝２．６２分（方法Ａ）；ＬＣＭＳ  ｍ／ｚ＝５１８）が得られた。
【０２４１】
【化９０】
2005504003.tif 000095
【実施例１９】
【０２４２】
１−［（３−クロロフェニル）（ヒドロキシ）（１−オキシドピリジン−３−イル）アセチル］−Ｎ−［２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
【０２４３】
【化９１】
2005504003.tif 000096
【０２４４】
１−［（３−クロロフェニル）（ヒドロキシ）ピリジン−３−イルアセチル］−Ｎ−［２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミドの極性異性体のＴＦＡ塩（０．０１ｇ，０．０２ミリモル）をＥｔＯＡｃと飽和炭酸水素ナトリウム溶液に分配し、ＥｔＯＡｃで抽出して遊離塩基を回収した。ジクロロメタン（１ｍｌ）中に１−［（３−クロロフェニル）（ヒドロキシ）ピリジン−３−イルアセチル］−Ｎ−［２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミドの乾燥遊離塩基（０．００９ｇ，０．０１７ミリモル）を含む溶液を撹拌し、０℃に冷却し、ここに７０％  ３−クロロペルオキシ安息香酸（０．００６ｇ，０．０２６ミリモル）を添加した。２時間後、反応物を真空中で蒸発させ、Ｇｉｌｓｏｎ分取ＨＰＬＣにより精製した。純粋なフラクションを合わせ、凍結乾燥すると、１−［（３−クロロフェニル）（ヒドロキシ）（１−オキシドピリジン−３−イル）アセチル］−Ｎ−［２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミドの固体ＴＦＡ塩（０．００３ｇ；ＨＰＬＣ  ＲＴ＝２．７０分（方法Ａ）；ＬＣＭＳ  ｍ／ｚ＝５３４）が得られた。
【実施例２０】
【０２４５】
１−［（９−ヒドロキシ−９Ｈ−フルオレン−９−イル）カルボニル］−Ｎ−［２−（４Ｈ−１，２，４−トリアゾル−４−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
【０２４６】
【化９２】
2005504003.tif 000097
【０２４７】
ＤＭＦ（１ｍｌ）中に１−［（９−ヒドロキシ−９Ｈ−フルオレン−９−イル）カルボニル］−Ｌ−プロリン（実施例１６のステップＢ，０．０６ｇ，０．１９ミリモル）を含む溶液を撹拌し、ここに１−［２−（４Ｈ−１，２，４−トリアゾル−４−イル）フェニル］メタンアミン（実施例５のステップＡ，０．０５ｇ，０．３１ミリモル）、ＢＯＰ試薬（０．１１ｇ，０．２４ミリモル）及びｐＨ８までのＮ−メチルモルホリンを添加した。混合物を窒素雰囲気下室温で１時間撹拌し、濾過し、Ｇｉｌｓｏｎ分取ＨＰＬＣにより精製して、固体の１−［（９−ヒドロキシ−９Ｈ−フルオレン−９−イル）カルボニル］−Ｎ−［２−（４Ｈ−１，２，４−トリアゾル−４−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド（０．０６５ｇ；ＨＰＬＣ  ＲＴ＝２．７７分（方法Ａ）；ＬＣＭＳ  ｍ／ｚ＝４８０）が得られた。
【０２４８】
【化９３】
2005504003.tif 000098
【実施例２１】
【０２４９】
１−［（９−ヒドロキシ−９Ｈ−フルオレン−９−イル）カルボニル］−Ｎ−［２−（１Ｈ−イミダゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
【０２５０】
【化９４】
2005504003.tif 000099
【０２５１】
ＤＭＦ（１ｍｌ）中に１−［（９−ヒドロキシ−９Ｈ−フルオレン−９−イル）カルボニル］−Ｌ−プロリン（実施例１６のステップＢ，０．０６ｇ，０．１９ミリモル）を含む溶液を撹拌し、ここに１−［２−（１Ｈ−イミダゾル−１−イル）フェニル］メタンアミン（実施例Ｉ−５，０．０５ｇ，０．３０ミリモル）、ＢＯＰ試薬（０．１１ｇ，０．２４ミリモル）及びｐＨ８までのＮ−メチルモルホリンを添加した。混合物を窒素雰囲気下室温で３時間撹拌し、濾過し、Ｇｉｌｓｏｎ分取ＨＰＬＣにより精製して、１−［（９−ヒドロキシ−９Ｈ−フルオレン−９−イル）カルボニル］−Ｎ−［２−（１Ｈ−イミダゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミドの固体ＴＦＡ塩（０．０７ｇ；ＨＰＬＣ  ＲＴ＝２．６４分（方法Ａ）；ＬＣＭＳ  ｍ／ｚ＝４７９）が得られた。
【０２５２】
【化９５】
2005504003.tif 000100
【実施例２２】
【０２５３】
１−［（９−ヒドロキシ−９Ｈ−フルオレン−９−イル）カルボニル］−Ｎ−［２−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
【０２５４】
【化９６】
2005504003.tif 000101
【０２５５】
ＤＭＦ（１ｍｌ）中に１−［（９−ヒドロキシ−９Ｈ−フルオレン−９−イル）カルボニル］−Ｌ−プロリン（実施例１６のステップＢ，０．０４ｇ，０．１２ミリモル）を含む溶液を撹拌し、ここに１−［２−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）フェニル］メタンアミン（実施例Ｉ−３，０．０３２ｇ，０．１８ミリモル）、ＢＯＰ試薬（０．０７５ｇ，０．１７ミリモル）及びｐＨ８までのＮ−メチルモルホリンを添加した。混合物を窒素雰囲気下室温で２．５時間撹拌し、濾過し、Ｇｉｌｓｏｎ分取ＨＰＬＣにより精製して、１−［（９−ヒドロキシ−９Ｈ−フルオレン−９−イル）カルボニル］−Ｎ−［２−（１Ｈ−イミダゾル−２−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミドの固体ＴＦＡ塩（０．０３２ｇ；ＨＰＬＣ  ＲＴ＝２．７３分（方法Ａ）；ＬＣＭＳ  ｍ／ｚ＝４７９）が得られた。
【０２５６】
【化９７】
2005504003.tif 000102
【実施例２３】
【０２５７】
１−［（９−ヒドロキシ−９Ｈ−フルオレン−９−イル）カルボニル］−Ｎ−（２−ピラジン−２−イルベンジル）−Ｌ−プロリンアミド
【０２５８】
【化９８】
2005504003.tif 000103
【０２５９】
ステップＡ：２−ピラジン−２−イルベンズアルデヒド
無水ＤＭＥ（６０ｍｌ）中にＰｄ（ＰＰｈ３）４（３３０ｍｇ，０．２８ミリモル）及びクロロピラジン（９８７μｌ，１１．０ミリモル）を含む溶液をＮ２雰囲気下室温で２０分間撹拌した。生じた赤橙色混合物をＨ２Ｏ（１５ｍｌ）中にＮａ２ＣＯ３（１．０５ｍｇ，３．３０ミリモル）を含む溶液及び２−ホルムベンゼンボロン酸（１．５０ｍｇ，９．９０ミリモル）で順次処理すると、白色沈殿が生じた。混合物を１．５時間還流加熱した。次いで、ＤＭＥを真空中で除去し、残留懸濁液をＣＨ２Ｃｌ２で２回抽出した。合わせた有機抽出物を乾燥し（無水Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮すると、標記化合物が赤橙色固体として得られた。この固体を真空中で１６時間乾燥し、更に精製することなく使用した。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：１８５．０２。
【０２６０】
ステップＢ：（２−ピラジン−２−イルフェニル）メタノール
０℃において無水ＭｅＯＨ（１００ｍｌ）中にステップＡからの２−ピラジン−２−イルベンズアルデヒド（９．９ミリモル）を含む懸濁液を撹拌し、ここにホウ水素化ナトリウム（４２０ｍｇ，１１．１ミリモル）を少しずつ添加した。混合物を室温まで加温し、Ｎ２雰囲気下で２時間撹拌した。溶媒を真空中で除去し、残渣を飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液で処理した。混合物をＥｔＯＡｃで２回抽出し、合わせた有機抽出物をＨ２Ｏ及びブラインで順次洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、濃縮すると、褐色油状物が生じた。シリカゲルクロマトグラフィー（７０％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）にかけると、標記化合物が淡赤褐色油状物として得られた。
【０２６１】
【化９９】
2005504003.tif 000104
ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：１８６．９。
【０２６２】
ステップＣ：２−［２−（アジドメチル）フェニル］ピラジン
０℃において無水ＴＨＦ（１２．５ｍｌ）中に（２−ピラジン−２−イルフェニル）メタノール（１．１４ｇ，６．１３ミリモル）を含む溶液を撹拌し、ここにＤＰＰＡ（１．５９ｍｌ，７．３６ミリモル）及びＤＢＵ（１．０１ｍｌ，６．７５ミリモル）を添加した。生じた曇った黄色混合物を室温まで加温し、３．５時間後８０℃に３時間加温した。次いで、混合物を室温に冷却し、ＴＨＦを真空中で除去した。残渣をＥｔＯＡｃとＨ２Ｏに分配した。層を分離し、水性層を更にＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物を１０％  クエン酸水溶液、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液及びブラインで順次洗浄した。有機溶液を乾燥し（無水Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、黄褐色油状物まで濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー（４０％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）にかけると、標記化合物が淡黄色油状物として得られた。
【０２６３】
【化１００】
2005504003.tif 000105
ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：２１２．１。
【０２６４】
ステップＤ：１−（２−ピラジン−２−イルフェニル）メタンアミン塩酸塩
室温においてＴＨＦ（９２ｍｌ）中に２−［２−（アジドメチル）フェニル］ピラジン（１．０１ｇ，４．７９ミリモル）を含む溶液を撹拌し、ここにトリフェニルホスフィン（２．５１ｇ，９．５７ミリモル）を添加した。溶液を１０分間撹拌した後Ｈ２Ｏ（１８ｍｌ）で処理した。透明溶液を６０℃に加熱し、この温度で１６時間撹拌した。溶媒を真空中で除去した。残渣をＥｔＯＡｃ（２０ｍｌ）に取り、冷飽和ＨＣｌ−ＥｔＯＡｃ溶液でもはや沈殿が生じなくなるまで処理した。固体を濾過により回収し、ＥｔＯＡｃ及びＥｔ２Ｏで洗浄し、真空中で１６時間乾燥すると、標記化合物が淡黄色固体として得られた。
【０２６５】
【化１０１】
2005504003.tif 000106
ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：１８６．０。
【０２６６】
ステップＥ：１−［（９−ヒドロキシ−９Ｈ−フルオレン−９−イル）カルボニル］−Ｎ−（２−ピラジン−２−イルベンジル）−Ｌ−プロリンアミド
ＤＭＦ（１．１ｍｌ）中に１−（２−ピラジン−２−イルフェニル）メタンアミン塩酸塩（５９ｍｇ，０．２２ミリモル）、１−［（９−ヒドロキシ−９Ｈ−フルオレン−９−イル）カルボニル］−Ｌ−プロリン（実施例１６のステップＢ，６６ｍｇ，０．２０ミリモル）、ＥＤＣ（５９ｍｇ，０．３１ミリモル）、ＨＯＡｔ（１４ｍｇ，０．１０ミリモル）及びＥｔ３Ｎ（６１μｌ，０．４４ミリモル）を含む混合物を室温で５時間撹拌した。混合物にＨ２Ｏを滴下すると、沈殿が生じた。淡黄色固体を濾過により回収し、Ｈ２Ｏで洗浄し、真空中で乾燥した。シリカゲルクロマトグラフィー（７０％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン→１００％  ＥｔＯＡｃ）にかけると白色フィルムが生じた。このフィルムをＥｔＯＡｃに溶解し、Ｅｔ２Ｏ中１Ｍ  ＨＣｌ溶液で処理した。生じた沈殿を濾過により回収し、Ｅｔ２Ｏで洗浄し、真空中で乾燥すると、標記化合物が淡黄色固体として得られた。
【０２６７】
【化１０２】
2005504003.tif 000107
ＨＲＭＳ（ＡＰＣＩ，Ｍ＋Ｈ）：実測値  ４９１．２０７６、計算値  ４９１．２０７８。
【実施例２４】
【０２６８】
（｛（１Ｒ）−２−［（２Ｓ−２−（｛［５−クロロ−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）ベンジル］アミノ｝カルボニル）アゼチジン−１−イル）］−１−シクロヘキシル−２−オキソエチル）アミノ）酢酸エチル
【０２６９】
【化１０３】
2005504003.tif 000108
【０２７０】
ステップＡ：（１Ｒ）−２−［（２Ｓ−２−（｛［５−クロロ−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）ベンジル］アミノ｝カルボニル）アゼチジン−１−イル］−１−シクロヘキシル−２−オキソエチルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル
ＤＭＦ（２．０ｍｌ）中に（２Ｓ）−１−１｛（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−２−シクロヘキシルエタノイル｝アゼチジン−２−カルボン酸（国際特許出願公開第９７２３４９９号パンフレットの方法で製造，１００ｍｇ，０．２９ミリモル）、１−［５−クロロ−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）フェニル］メタンアミン（６１ｍｇ，０．２９ミリモル）、ＥＤＣ（５６ｍｇ，０．２９ミリモル）、ＨＯＢｔ（４０ｍｇ，０．０２９ミリモル）及びＮＭＭ（９７μＬ，０．８８ミリモル）を含む混合物を周囲温度で１６時間撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（１５ｍｌ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３、水及びブラインで洗浄した。有機層を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、濃縮乾固した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（１００％  ＥｔＯＡｃ→１５％  ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃ）により精製すると、標記化合物（１４８ｍｇ）が得られた。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：５３１．２。
【０２７１】
ステップＢ：（２Ｓ）−１−［（２Ｒ）−２−アミノ−２−シクロヘキシルエタノイル］−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）ベンジル］アゼチジン−２−カルボキサミド塩酸塩
ＥｔＯＡｃ（１０ｍｌ）中にステップＡからの（１Ｒ）−２−［（２Ｓ−２−（｛［５−クロロ−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）ベンジル］アミノ｝カルボニル）アゼチジン−１−イル］−１−シクロヘキシル−２−オキソエチルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１４０ｍｇ，０．２６ミリモル）を含む冷（０℃）溶液にＨＣｌガスを３分間通した。室温で２時間撹拌した後、反応混合物を固体まで濃縮した。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：４３１．２。
【０２７２】
ステップＣ：（｛（１Ｒ）−２−［（２Ｓ−２−（｛［５−クロロ−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）ベンジル］アミノ｝カルボニル）アゼチジン−１−イル）］−１−シクロヘキシル−２−オキソエチル｝アミノ）酢酸エチル
１：１  ＴＨＦ／ＤＭＦ中に（２Ｓ−１−［（２Ｒ）−２−アミノ−２−シクロヘキシルエタノイル］−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）ベンジル］アゼチジン−２−カルボキサミド塩酸塩（５０ｍｇ，０．１１ミリモル）、ブロモ酢酸エチル（１２μｌ，０．１１ミリモル）及びＫ２ＣＯ３（４４ｍｇ，０．３２ミリモル）を含む溶液を室温で１６時間撹拌した。更に０．０２当量ずつのブロモ酢酸エチル及びＫ２ＣＯ３を添加し、混合物を更に６時間撹拌して、反応を完結させた。シリカゲルクロマトグラフィー（１００％  ＥｔＯＡｃ→１０％  ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃ）にかけると、標記化合物が得られた。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：５１７．２。
【０２７３】
【化１０４】
2005504003.tif 000109
【実施例２５】
【０２７４】
（｛（１Ｒ）−２−［（２Ｓ）−２−（｛［５−クロロ−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル］ベンジルアミノ｝カルボニル）アゼチジン−１−イル］−１−シクロヘキシル−２−オキソエチル｝アミノ）酢酸
【０２７５】
【化１０５】
2005504003.tif 000110
【０２７６】
ステップＡ：（｛（１Ｒ）−２−［（２Ｓ）−２−（｛［５−クロロ−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）ベンジル］アミノ｝カルボニル）アゼチジン−１−イル］−１−シクロヘキシル−２−オキソエチル｝アミノ）酢酸ｔｅｒｔ−ブチル
ＴＨＦ中に（２Ｓ）−１−［（２Ｒ）−２−アミノ−２−シクロヘキシルエタノイル］−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）ベンジル］アゼチジン−２−カルボキサミド塩酸塩（実施例２４のステップＢ，２５ｍｇ．０．０５ミリモル）、ブロモ酢酸ｔ−ブチル（９μｌ，０．０６ミリモル）及びＫ２ＣＯ３（３７ｍｇ，０．２７ミリモル）を含む混合物を室温で１６時間撹拌した。更に０．０２当量ずつのブロモ酢酸ｔ−ブチル及びＫ２ＣＯ３を添加し、混合物を更に３時間撹拌して、反応を完結させた。シリカゲルクロマトグラフィー（１００％  ＥｔＯＡｃ→１５％  ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃ）にかけると、標記化合物が得られた。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：５４５．３。
【０２７７】
ステップＢ：（｛（１Ｒ）−２−［（２Ｓ）−２−（｛［５−クロロ−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）ベンジル］アミノ｝カルボニル）アゼチジン−１−イル］−１−シクロヘキシル−２−オキソエチル｝アミノ）酢酸
０℃においてＣＨ２Ｃｌ２（５ｍｌ）中に（｛（１Ｒ）−２−［（２Ｓ）−２−（｛［５−クロロ−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）ベンジル］アミノ｝カルボニル）アゼチジン−１−イル］−１−シクロヘキシル−２−オキソエチル｝アミノ）酢酸ｔｅｒｔ−ブチル（２２ｍｇ，０．０４ミリモル）を含む溶液にＴＦＡ（５ｍｌ）を添加した。１６時間撹拌した後、反応混合物を濃縮した。逆相ＨＰＬＣにより標記化合物を単離した。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：４８９．３。
【０２７８】
【化１０６】
2005504003.tif 000111
【実施例２６】
【０２７９】
２−メチルロイシル−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
【０２８０】
【化１０７】
2005504003.tif 000112
【０２８１】
ステップＡ：２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２，４−ジメチルペンタン酸
ジオキサン（１５ｍｌ）中にＤ，Ｌ−α−メチルロイシン（１．０ｇ，６．９ミリモル）を含む溶液を撹拌し、ここに水性ＮａＯＨ（２．５Ｍ溶液２．８ｍｌ，７．０ミリモル）及びジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート（１．６ｇ，７．３ミリモル）を添加した。混合物を周囲温度で撹拌した。更にジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート（各０．８ｇ，３．７ミリモル）を２回２４時間間隔で添加した。生じた混合物を周囲温度で２４時間撹拌した後、最後にジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネートを添加した。溶媒を真空中で除去し、残渣を水（２５ｍｌ）とエーテル（２０ｍｌ）に分配した。水性層を分離し、ＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍｌ）と共に撹拌しながら固体クエン酸（２ｇ，１０ミリモル）を添加した。ＣＨ２Ｃｌ２層を分離し、水性層を更にＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍｌ）で抽出した。合わせたＣＨ２Ｃｌ２層を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で除去すると、標記化合物がワックス状固体として得られた。
【０２８２】
ステップＢ：Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
ＤＭＦ（５ｍｌ）中に１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−プロリン（１．０３ｇ，４．７７ミリモル）、１−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）フェニル］メタンアミン（実施例２，１．００ｇ．４．７７ミリモル，１．０当量）、ＥＤＣ（１．３７ｇ，７．１６ミリモル，１．５当量）及びＨＯＡｔ（３２５ｍｇ，２．３９ミリモル，０．５当量）を含む混合物にＨｕｎｉｇ塩基を添加してｐＨ８とし、室温で１８時間撹拌した。反応物を水で希釈し、ＥｔＯＡｃで３回抽出した。合わせた有機層を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー（７０％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン→ＥｔＯＡｃ）にかけると、白色固体が生じた。この固体を４．０Ｍ  ＨＣｌ−エーテル（２ｍｌ）に取った。溶解を助けるためにメタノールを滴下し、溶液にＨＣｌガスを３０秒間通した。溶液を１時間撹拌した。溶媒を真空中で除去し、残渣をエーテルと２回共沸させると、標記化合物が吸湿性黄色固体として得られた。
【０２８３】
【化１０８】
2005504003.tif 000113
ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：３０７．１。
【０２８４】
ステップＣ：Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−２−メチルロイシル−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
ＤＭＦ（１ｍｌ）中に２−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２，４−ジメチルペンタン酸（１２０ｍｇ，０．４９ミリモル）、Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド（１５０ｍｇ，０．４９ミリモル，１．０当量）、ＥＤＣ（１４１ｍｇ，０．７３ミリモル，１．５当量）及びＨＯＡｔ（３３ｍｇ，０．２４ミリモル，０．５当量）を含む混合物にＨｕｎｉｇ塩基を添加してｐＨ８とし、室温で１８時間撹拌した。溶媒を真空中で除去し、生じた油状物をシリカゲルクロマトグラフィー（５０％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン→７０％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン→ＥｔＯＡｃ）にかけると、別個の２つのジアステレオマーが白色固体として生じた。
【０２８５】
ジアステレオマーＡ（低極性）：
【０２８６】
【化１０９】
2005504003.tif 000114
ジアステレオマーＢ（高極性）：
【０２８７】
【化１１０】
2005504003.tif 000115
ジアステレオマー混合物のＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：５３４．０。
【０２８８】
ステップＤ：２−メチルロイシル−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−２−メチルロイシル−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミドの各ジアステレオマー（Ａ：８６ｍｇ，０．１６１ミリモル、Ｂ：８４ｍｇ，０．１５８ミリモル）を２：１  ＣＨ２Ｃｌ２／ＴＦＡ溶液（３ｍｌ）に溶解し、１時間撹拌した。両反応物を油状物まで濃縮した。逆相クロマトグラフィー［９５：５  水（＋０．１％  ＴＦＡ）／ＣＨ３ＣＮ（＋０．１％  ＴＦＡ）→５：９５  水（＋０．１％  ＴＦＡ）／ＣＨ３ＣＮ（＋０．１％  ＴＦＡ）］により精製すると、各ジアステレオマーが透明油状物として得られた。
【０２８９】
ジアステレオマーＡ：
【０２９０】
【化１１１】
2005504003.tif 000116
ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：４３４．０。ジアステレオマーＢ：
【化１１２】
2005504003.tif 000117
ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：４３４．０。
【実施例２７】
【０２９１】
３−メチル−Ｄ−バリル−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
【０２９２】
【化１１３】
2005504003.tif 000118
【０２９３】
ステップＡ：Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）ベンジル］−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−プロリンアミド
ＤＭＦ（５ｍｌ）中に［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−プロリン（３．２３ｇ，９．５９ミリモル）、１−［５−クロロ−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）フェニル］メタンアミン（実施例４，２．００ｇ，９．５９ミリモル，１．０当量）、ＥＤＣ（２．７６ｇ，１４．３８ミリモル，１．５当量）及びＨＯＡｔ（６５２ｍｇ，４．７９ミリモル，０．５当量）を含む混合物にＨｕｎｉｇ塩基を添加してｐＨ６とし、室温で１８時間撹拌した。反応物を水で希釈し、ＥｔＯＡｃで３回抽出した。合わせた有機層を乾燥し（無水Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮した。生じた油状物を水に懸濁し、激しく撹拌し、濾過すると、標記化合物が白色固体として得られた。
【０２９４】
【化１１４】
2005504003.tif 000119
ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：５２８．０。
【０２９５】
ステップＢ：Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
ＤＭＦ（２０ｍｌ）中にＮ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）ベンジル］−［（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシ）カルボニル］−Ｌ−プロリンアミド（５．０６ｇ，９．５９ミリモル）及びピペリジン（８２ｍｇ，９．５９ミリモル，１当量）を含む溶液を室温で３時間撹拌した後、真空中で濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ→８：１：１  ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ）にかけると、粘稠な黄色固体が生じた。この固体をＥｔＯＡｃに溶解し、０℃においてＨＣｌガスで１時間処理した。溶媒を真空中で除去し、残渣を激しく撹拌しながらエーテルに懸濁させた。生じた沈殿を濾過し、エーテルで洗浄すると、標記化合物がオフホワイト色の吸湿性粉末として得られた。
【０２９６】
【化１１５】
2005504003.tif 000120
ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：３０６．０。
【０２９７】
ステップＣ：３−メチル−Ｄ−バリル−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
ＤＭＦ（１ｍｌ）中にＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−メチル−Ｄ−バリン（５３ｍｇ，０．２３ミリモル）、Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド（８７ｍｇ，０．２３ミリモル，１．０当量）、ＥＤＣ（６６ｍｇ，０．３４ミリモル，１．５当量）及びＨＯＡｔ（１６ｍｇ，０．１１ミリモル，０．５当量）を含む混合物にＨｕｎｉｇ塩基を添加してｐＨ６とし、室温で１８時間撹拌した。溶媒を真空中で除去し、生じた残渣を２：１  ＣＨ２Ｃｌ２／ＴＦＡ（３ｍｌ）に溶解し、１時間撹拌した。溶媒を再び真空中で除去し、逆相クロマトグラフィー［９５：５  水（＋０．１％  ＴＦＡ）／ＣＨ３ＣＮ（０．１％  ＴＦＡ）→５０：５０  水（＋０．１％  ＴＦＡ）／ＣＨ３ＣＮ（０．１％  ＴＦＡ）］により精製すると、標記化合物が透明油状物として得られた。
【０２９８】
【化１１６】
2005504003.tif 000121
ＨＲＭＳ（ＡＰＣＩ）  Ｍ＋Ｈ：計算値（Ｃ２０Ｈ２７Ｎ６Ｏ２Ｃｌ）＋  ４１９．１９５７、実測値  ４１９．１９３５。
【実施例２８】
【０２９９】
３−メチル−Ｄ−バリル−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
【０３００】
【化１１７】
2005504003.tif 000122
【０３０１】
ＤＭＦ（１ｍｌ）中のＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−メチル−Ｄ−バリン（５３ｍｇ，０．２３ミリモル）、Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド（実施例２６のステップＢ，８４ｍｇ，０．２３ミリモル，１．０当量）、ＥＤＣ（６６ｍｇ，０．３４ミリモル，１．５当量）及びＨＯＡｔ（１６ｍｇ，０．１１ミリモル，０．５当量）から標記化合物を製造した後、本質的に実施例２６のステップＣに記載の手順に従ってＴＦＡ−ＣＨ２Ｃｌ２中で脱保護した。逆相クロマトグラフィー［９５：５  水（＋０．１％  ＴＦＡ）／ＣＨ３ＣＮ（０．１％  ＴＦＡ）→５０：５０  水（＋０．１％  ＴＦＡ）／ＣＨ３ＣＮ（０．１％  ＴＦＡ）］により精製し、フラクションを凍結乾燥すると、標記化合物が白色粉末として得られた。
【０３０２】
【化１１８】
2005504003.tif 000123
ＨＲＭＳ（ＡＰＣＩ）  Ｍ＋Ｈ：計算値（Ｃ１９Ｈ２６Ｎ７Ｏ２Ｃｌ）＋  ４２０．１９１０、実測値  ４２０．１９１５。
【実施例２９】
【０３０３】
４−メチル−Ｄ−ロイシル−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
【０３０４】
【化１１９】
2005504003.tif 000124
【０３０５】
ＤＭＦ（１ｍｌ）中のＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−４−メチル−Ｄ−ロイシン（３２ｍｇ，０．１３ミリモル）、Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド（実施例２７のステップＢ，５０ｍｇ，０．２１ミリモル，１．０当量）、ＥＤＣ（３８ｍｇ，０．２０ミリモル，１．５当量）及びＨＯＡｔ（９ｍｇ，０．０７ミリモル，０．５当量）から標記化合物を製造した後、本質的に実施例２７のステップＣに記載の手順に従ってＴＦＡ−ＣＨ２Ｃｌ２中で脱保護した。逆相クロマトグラフィー［９５：５  水（＋０．１％  ＴＦＡ）／ＣＨ３ＣＮ（＋０．１％  ＴＦＡ）→５０：５０  水（＋０．１％  ＴＦＡ）／ＣＨ３ＣＮ（＋０．１％  ＴＦＡ）］により精製し、フラクションを凍結乾燥すると、標記化合物が白色粉末として得られた。
【０３０６】
【化１２０】
2005504003.tif 000125
ＨＲＭＳ（ＡＰＣＩ）  Ｍ＋Ｈ：計算値（Ｃ２１Ｈ２９Ｎ６Ｏ２Ｃｌ）＋  ４３３．２１１３、実測値  ４３３．２１０４。
【実施例３０】
【０３０７】
４−メチル−Ｄ−ロイシル−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
【０３０８】
【化１２１】
2005504003.tif 000126
【０３０９】
ＤＭＦ（１ｍｌ）中のＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−４−メチル−Ｄ−ロイシン（３２ｍｇ，０．１３ミリモル）、Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−１，２，４−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド（実施例２６のステップＢ，５０ｍｇ，０．２１ミリモル，１．０当量）、ＥＤＣ（３８ｍｇ，０．２０ミリモル，１．５当量）及びＨＯＡｔ（９ｍｇ，０．０７ミリモル，０．５当量）から標記化合物を製造した後、本質的に実施例２７のステップＣに記載の手順に従ってＴＦＡ−ＣＨ２Ｃｌ２中で脱保護した。逆相クロマトグラフィー［９５：５  水（＋０．１％  ＴＦＡ）／ＣＨ３ＣＮ（＋０．１％  ＴＦＡ）→５０：５０  水（＋０．１％  ＴＦＡ）／ＣＨ３ＣＮ（＋０．１％  ＴＦＡ）］により精製し、フラクションを凍結乾燥すると、標記化合物が白色粉末として得られた。
【０３１０】
【化１２２】
2005504003.tif 000127
ＨＲＭＳ（ＡＰＣＩ）  Ｍ＋Ｈ：計算値（Ｃ２０Ｈ２８Ｎ７Ｏ２Ｃｌ）  ＋４３４．２０６６、実測値  ４３４．２０６５。
【実施例３１】
【０３１１】
３−シクロプロピル−Ｄ−アラニル−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−１，２，３−トリアゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
【０３１２】
【化１２３】
2005504003.tif 000128
【０３１３】
ステップＡ：（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］ペンタ−４−エン酸
１Ｍ  ＮａＯＨ（３４ｍｌ，３４ミリモル）中に（２Ｒ）−２−アミノペンタ−４−エン酸（３．７ｇ，３２．１ミリモル）を含む冷（０℃）溶液を撹拌し、ここにジオキサン（１１ｍｌ）中にＢＯＣ無水物（７．７２ｇ，３５．４ミリモル）を含む溶液を滴下した。添加開始からすぐに、冷却浴を外した、アリコートを取り出し、減圧下で濃縮し、ＮＭＲで分析することにより反応の進行をモニターした。４時間後、更にＢＯＣ無水物（７７０ｍｇ，３．５４ミリモル）及び１Ｍ  ＮａＯＨ（３．２ｍｌ，３．２ミリモル）を添加し、２．５時間撹拌し続けた。ジオキサンを減圧下で除去し、氷を添加することにより残渣を冷却し、２Ｍ  ＨＣｌ（２５ｍｌ）を添加して酸性化した。生じた混合物をＥｔＯＡｃで２回抽出し、合わせた有機抽出物を水、ブラインで乾燥し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮すると、標記化合物（４．２７ｇ）が僅かに着色した油状物として得られた。
【０３１４】
【化１２４】
2005504003.tif 000129
【０３１５】
ステップＢ：Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−シクロプロピル−Ｄ−アラニン酸メチル
ＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍｌ）及びＭｅＯＨ（２０ｍｌ）中に（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］ペンタ−４−エン酸（２．１５ｇ，１０．０ミリモル）を含む溶液を撹拌し、ここにヘキサン中トリメチルシリルジアゾメタンの２．０Ｍ  溶液（１０ｍｌ）を滴下した。黄色が続き、ガスの発生が止んだら、溶液を１５分間撹拌し、ＨＯＡｃ（２滴）でクエンチした。反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ３で洗浄し、水性層をＣＨ２Ｃｌ２で抽出し、合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、活性炭で処理し、減圧下で濃縮すると、（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］―ペンタ−４−エン酸メチル（２．２ｇ）が黄色油状物として生じた。この生成物をエーテル（２０ｍｌ）に溶解し、［０℃においてエーテル（３５ｍｌ）及び２５％  ＫＯＨ（１０ｍｌ）の混合物を撹拌しながら１−メチル−３−ニトロ−１−ニトロソグアニジン（３．３２ｇ，２２．５ミリモル）で少しずつ処理することにより製造した］ジアゾメタン溶液で処理した。生じた冷（０℃）溶液を撹拌し、これを極少量のＰｄ（ＯＡｃ）２で処理した。激しくガスが発生した。冷却浴を外し、１時間撹拌し続けた。反応混合物をＳｉＯ２の１ｃｍパッドを介して濾過し、エーテルで溶離させた。濾液を濃縮すると黄色油状物が生じ、これをＲｅｄｉ−Ｓｅｐカラム（１１０ｇ）で４０分間で０→４０％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン勾配を用いて４０ｍｌ／分でクロマトグラフィーにかけた。純粋フラクションを合わせ、減圧下で濃縮すると、標記化合物（１．０ｇ）が無色油状物として得られた。
【０３１６】
【化１２５】
2005504003.tif 000130
【０３１７】
ステップＣ：Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−シクロプロピル−Ｄ−アラニン
０℃においてＭｅＯＨ（２５ｍｌ）中にＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−シクロプロピル−Ｄ−アラニン酸メチル（１．０ｇ，４．１ミリモル）を含む溶液を撹拌し、ここに１Ｍ  ＮａＯＨ（５．０ｍｌ，５．０ミリモル）を滴下した。１時間後、冷却浴を外し、反応をＨＰＬＣで追跡した。５．５時間後、メタノールを減圧下で除去し、残渣を水（１５ｍｌ）で希釈し、エーテルで洗浄した。水性層を冷２Ｍ  ＨＣｌで酸性化し、ＥｔＯＡｃで３回抽出した。合わせた有機層を水及びブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮すると、標記化合物（９２９ｍｇ）が無色油状物として得られた。
【０３１８】
【化１２６】
2005504003.tif 000131
【０３１９】
ステップＤ：Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−シクロプロピル−Ｄ−アラニル−Ｎ−［５−クロロ−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
ＤＭＦ（３ｍｌ）中にＮ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド（実施例２７のステップＢ，０．０４６ｇ，０．１２１ミリモル）、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−シクロプロピル−Ｄ−アラニン（３０ｍｇ，０．１２１ミリモル）及びＨＯＢｔ水和物（２０ｍｇ，０．１４５ミリモル）を含む溶液を撹拌し、ここにＥＤＣ（０．０２８ｍｇ，０．１４５ミリモル）を添加した。ジイソプロピルエチルアミン（０．０８３ｍｌ，０．４８４ミリモル）を添加し、混合物を周囲温度で１８時間撹拌した。この時点でＨＰＬＣ分析によればプロリン出発物質が完全に消費されていた。ＤＭＦを減圧下で除去し、残渣をＥｔＯＡｃ（５０ｍｌ）と１０％  水性Ｎａ２ＣＯ３に分配した。ＥｔＯＡｃ層を分離し、水及びブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過した。濾液溶媒を減圧下で除去すると、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−シクロプロピル−Ｄ−アラニル−Ｎ−［５−クロロ−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド（０．０５８ｇ）がガムとして得られた。ＨＰＬＣ  ＲＴ＝２．１８分（方法Ｂ）、ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：５１７，５１９。
【０３２０】
ステップＥ：３−シクロプロピル−Ｄ−アラニル−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
ステップＤからのＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−シクロプロピル−Ｄ−アラニル−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド（０．０５８ｇ，０．１１２ミリモル）をＥｔＯＡｃ（２ｍｌ）に溶解し、撹拌しながら０℃に冷却した。ＨＣｌ／ＥｔＯＡｃ（３．５５Ｍ，１．５ｍｌ）を添加した。浴を外し、混合物を２時間撹拌した。ＨＰＬＣ分析によれば反応が完結していた。溶媒を減圧下で除去した。残渣をＥｔＯＡｃと粉砕し、濾過すると、３−シクロプロピル−Ｄ−アラニル−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミドの塩酸塩（０．０４５ｇ）が得られた。ＨＰＬＣ  ＲＴ＝１．０４分（方法Ｂ）、ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：４１７，４１９。
【０３２１】
【化１２７】
2005504003.tif 000132
【実施例３２】
【０３２２】
Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−１−［（２Ｒ）−２−ヒドロキシ−３，３−ジメチルブタノイル］−Ｌ−プロリンアミド
【０３２３】
【化１２８】
2005504003.tif 000133
【０３２４】
ステップＡ：２Ｒ−ヒドロキシ−３，３−ジメチル酪酸
−１０℃において１Ｎ  硫酸（８０ｍｌ）中に２Ｒ−アミノ−３，３−ジメチル酪酸（５．０ｇ，３８．１ミリモル）を含む溶液を撹拌し、ここに水（２５ｍｌ）中に亜硝酸ナトリウム（５．２６ｇ，７６．２ミリモル）を含む溶液をゆっくり滴下した。添加後、反応物を２０時間かけて周囲温度までゆっくり平衡化した。塩化ナトリウム（１０ｇ）を添加し、溶液をジエチルエーテル（１００ｍｌ）で２回抽出した。合わせた有機抽出物を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過した。濾液溶媒を減圧下で除去した。残渣を固定相としてキラルパックＡＤカラム（５ｃｍ×５０ｃｍ）、移動相として５％  エタノール／９５％  ヘキサン＋０．２％  ＴＦＡを８０ｍｌ／分の流速で用いる分取ＨＰＬＣにより精製した。生成物含有フラクションを真空中で濃縮した。２Ｒ−ヒドロキシ−３，３−ジメチル酪酸が油状物として得られ、これを放置すると結晶化した（２．２ｇ）。
【０３２５】
【化１２９】
2005504003.tif 000134
【０３２６】
ステップＢ：Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−１−［（２Ｒ）−２−ヒドロキシ−３，３−ジメチルブタノイル］−Ｌ−プロリンアミド
Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド塩酸塩（実施例２６のステップＢ，５５ｍｇ，０．１６ミリモル）及び（２Ｒ）−ヒドロキシ−３，３−ジメチル酪酸（２２ｍｇ，０．１６ミリモル）から、本質的に実施例２７のステップＣに記載のＥＤＣカップリング法（ただし、脱保護ステップは省略）に従って標記化合物を製造した。混合物を周囲温度で１８時間撹拌した後、真空中で濃縮した。残渣を、固定相としてＷａｔｅｒｓ  Ｘｔｅｒｒａ  ＲＰ８カラム（１．９ｃｍ×３０ｃｍ）、移動相として３０分間で９５：５  水／ＭｅＣＮ→１００％  ＭｅＣＮ＋０．１％  ＴＦＡの勾配溶離を２０ｍｌ／分の流速で用いる半分取ＨＰＬＣにより直接精製した。生成物含有フラクションを真空中で濃縮すると、標記化合物（６２ｍｇ）が白色結晶性固体として得られた。ＨＰＬＣ  ＲＴ＝２．８６分（方法Ａ）；ＬＣＭＳ  ｍ／ｚ＝４２１．３。
【０３２７】
【化１３０】
2005504003.tif 000135
【実施例３３】
【０３２８】
３−シクロヘキシル−Ｄ−アラニル−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
【０３２９】
【化１３１】
2005504003.tif 000136
【０３３０】
ステップＡ：Ｎ１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−３−シクロヘキシル−Ｄ−アラニル−Ｎ２−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
Ｂｏｃ−Ｄ−シクロヘキシル−Ａｌａ（５４ｍｇ，０．２０ミリモル）及びＮ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド（実施例２６のステップＢ，７６ｍｇ，０．０２ミリモル）から、本質的に実施例２７のステップＣに記載のＥＤＣカップリング法（ただし、脱保護ステップは省略）に従って標記化合物を製造した。溶媒を真空中で除去した。シリカゲルクロマトグラフィー（５％  ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ３）にかけると、無色ガムが得られた。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：５６０．７。
【０３３１】
ステップＢ：３−シクロヘキシル−Ｄ−アラニル−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
ＣＨ２Ｃｌ２（２．０ｍｌ）中に上記ステップＡからのＮ１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−３−シクロアルキル−Ｄ−アラニル−Ｎ２−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミドを含む溶液に過剰のＴＦＡ（０．５ｍｌ）を加えた。溶媒を真空中で除去し、残留油を逆相ＨＰＬＣにより精製すると、標記化合物のＴＦＡ塩が泡状白色固体として得られた。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：４６０．２。
【０３３２】
【化１３２】
2005504003.tif 000137
【実施例３４】
【０３３３】
３−シクロヘキシル−Ｄ−アラニル−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−トリアゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
【０３３４】
【化１３３】
2005504003.tif 000138
【０３３５】
Ｂｏｃ−Ｄ−シクロヘキシル−Ａｌａ（２２ｍｇ，０．０８ミリモル）及びＮ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド（実施例２７のステップＢ，２７ｍｇ，０．０８ミリモル）から、本質的に上記実施例３３に記載の手順に従って標記化合物を製造し、泡状白色固体として単離した。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：４５９．２。
【０３３６】
【化１３４】
2005504003.tif 000139
【実施例３５】
【０３３７】
３−シクロヘキシル−Ｄ−アラニル−Ｎ−［２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
【０３３８】
【化１３５】
2005504003.tif 000140
【０３３９】
ステップＡ：Ｎ−［２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
１−［２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）フェニル］メタンアミン（実施例１，１．５５ｍｇ，０．３１ミリモル）及びＢｏｃ−Ｌ−プロリン（６７ｍｇ，０．３１ミリモル）を用い、本質的に実施例２６に記載のＥＤＣカップリング法に従って標記化合物を製造した後、中間体をシリカゲルクロマトグラフィー（５０〜７０％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）により精製し、ジオキサン中４．０Ｍ  ＨＣｌを用いて脱保護した。標記化合物の塩酸塩が無色ガムとして単離された。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：２７３．１。
【０３４０】
【化１３６】
2005504003.tif 000141
【０３４１】
ステップＢ：Ｎ１−（ｔｅｒｔ−ブトキシルボニル）−３−シクロヘキシル−Ｄ−アラニル−Ｎ２−［２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
Ｎ−［２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド塩酸塩（２５ｍｇ，０．０８ミリモル）及びＢｏｃ−Ｄ−シクロヘキシル−Ａｌａ（２２ｍｇ，０．０８ミリモル）から、本質的に実施例２７のステップＣに記載のＥＤＣカップリング法（ただし、脱保護ステップは省略）に従って標記化合物を製造した。粗生成物を直接脱保護にかけた。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：５２６．２。
【０３４２】
ステップＣ：３−シクロヘキシル−Ｄ−アラニル−Ｎ−［２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
Ｎ１−（ｔｅｒｔ−ブトキシルボニル）−３−シクロヘキシル−Ｄ−アラニル−Ｎ２−［２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド（４２ｍｇ，０．０８ミリモル）を実施例３３のステップＢに記載されているようにＴＦＡを用いて脱保護すると、標記化合物が淡黄色固体として得られた。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：４２６．２。
【０３４３】
【化１３７】
2005504003.tif 000142
【実施例３６】
【０３４４】
Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−１−（２−ヒドロキシ−２−ピリジン−２−イルプロパノイル）−Ｌ−プロリンアミド
【０３４５】
【化１３８】
2005504003.tif 000143
【０３４６】
ステップＡ：２−ヒドロキシ−２−（２−ピリジル）酢酸エチル
窒素雰囲気下でＴＨＦ（１５ｍｌ）中に２−オキソ−（ピリジン−２−イル）酢酸エチル（１．０ｇ，５．６ミリモル）を含む溶液を撹拌しながら−７８℃に冷却した。この溶液にＴＨＦ中の臭化メチルマグネシウム（１．０Ｍ溶液６．２ｍｌ，６．２ミリモル）を５分間かけて滴下した。冷却浴を外し、混合物を撹拌しながら２時間かけて周囲温度まで加温した。水（３０ｍｌ）を添加し、混合物をＥｔＯＡｃ（５０ｍｌ）で抽出した。有機相をブラインで洗浄し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、溶媒を減圧下で除去した。残渣を１：２  ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを溶離液とする加圧シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製した。生成物含有フラクションを合わせ、溶媒を減圧下で除去すると、２−ヒドロキシ−２−（２−ピリジル）酢酸エチル（０．９０ｇ，８３％）が無色液体として得られた。ＨＰＬＣ  ＲＴ＝１．４６分（方法Ａ）、ＴＬＣ  Ｒｆ＝０．３（１：２  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）、ＬＣＭＳ  ｍ／ｚ＝１９６。
【０３４７】
【化１３９】
2005504003.tif 000144
【０３４８】
ステップＢ：２−ヒドロキシ−２−（２−ピリジル）酢酸
エタノール（５ｍｌ）中に２−ヒドロキシ−２−（２−ピリジル）酢酸エチル（０．５ｇ，２．５６ミリモル）を含む溶液を撹拌し、ここに水中２．０Ｍ  ＮａＯＨ（１．４ｍｌ，２．８ミリモル）を添加した。生じた溶液を周囲温度で１８時間撹拌した。ＴＬＣ分析によれば、出発エステルは完全に消費されていた。水中６．０Ｍ  ＨＣｌ（０．４６ｍｌ，２．８ミリモル）を添加し、溶媒を減圧下で除去し、生じた固体を真空中で１８時間乾燥すると、２−ヒドロキシ−２−（２−ピリジル）酢酸がナトリウム塩との混合物として得られた。
【０３４９】
ステップＣ：Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−１−（２−ヒドロキシ−２−ピリジン−２−イルプロパノイル）−Ｌ−プロリンアミド
ＤＭＦ（５ｍｌ）中に上記ステップからの２−ヒドロキシ−２−（２−ピリジル）酢酸（１６０ｍｇ，ＮａＣｌとの１：１混合物，０．７１ミリモル）、Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド（２１５ｍｇ，０．７１ミリモル，ＨＰＬＣ  ＲＴ＝２．２５分（方法Ａ））及びＨＯＢｔ水和物（１１０ｍｇ，０．７１ミリモル）を含む溶液にＥＤＣ（１７５ｍｇ，０．９２ミリモル）を添加した。次いで、湿潤Ｅ．Ｍｅｒｃｋ  ｐＨインジケーターストリップで測定して溶液のｐＨが６〜７になるようにジイソプロピルエチルアミン（全部で〜０．１ｍｌ）を少しずつゆっくり添加した。混合物を周囲温度で１８時間撹拌し、溶媒を減圧下で除去した。残渣をＥｔＯＡｃ（７５ｍｌ）と飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（２０ｍｌ）に分配した。ＥｔＯＡｃ層を分離し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過した。濾液溶媒を減圧下で除去し、残渣をジクロロメタン中２％、３％、４％、５％、６％  ＭｅＯＨで勾配溶離する加圧シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製した。生成物含有フラクションを合わせ、溶媒を減圧下で除去すると、標記化合物の２つのジアステレオマーが共に非晶質固体として得られた。
【０３５０】
第１溶離ジアステレオマー：９６ｍｇ；ＴＬＣ  Ｒｆ＝０．３（９６：４  ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ）；ＨＰＬＣ  ＲＴ＝２．３２分（方法Ａ）；ＬＣＭＳ  ｍ／ｚ＝４５６。
【０３５１】
第２溶離ジアステレオマー：ＴＬＣ  Ｒｆ＝０．２（９６：４  ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ）；ＨＰＬＣ  ＲＴ＝２．３３分（方法Ａ）；ＬＣＭＳ  ｍ／ｚ＝４５６。
【実施例３７】
【０３５２】
Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−１−［（２Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−フェニルエタノイル］−Ｌ−プロリンアミド
【０３５３】
【化１４０】
2005504003.tif 000145
【０３５４】
ＤＭＦ（３ｍｌ）中にＲ−マンデル酸（６０ｍｇ，０．３９ミリモル）、Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド（実施例２６のステップＢ，１２０ｍｇ，０．３９ミリモル；ＨＰＬＣ  ＲＴ＝２．２５分（方法Ａ））及びＨＯＢｔ水和物（６０ｍｇ，０．３９ミリモル）を含む溶液にＥＤＣ（９８ｍｇ，０．５１ミリモル）を添加した。次いで、湿潤Ｅ．Ｍｅｒｃｋ  ｐＨインジケーターストリップで測定して溶液のｐＨが６〜７になるようにジイソプロピルエチルアミン（全部で〜０．０５ｍｌ）を少しずつゆっくり添加した。混合物を周囲温度で１８時間撹拌し、溶媒を減圧下で除去した。残渣をＥｔＯＡｃ（５０ｍｌ）と飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（１０ｍｌ）に分配した。ＥｔＯＡｃ層を分離し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過した。濾液溶媒を減圧下で除去し、残渣をＥｔＯＡｃを溶離液とする加圧シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製した。生成物含有フラクションを合わせ、溶媒を減圧下で除去すると、標記化合物が非晶質固体として生じた。ＴＬＣ  Ｒｆ＝０．６（ＥｔＯＡｃ）；ＨＰＬＣ  ＲＴ＝２．８２分（方法Ａ）；ＬＣＭＳ  ｍ／ｚ＝４４１。
【実施例３８】
【０３５５】
Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−１−［（３Ｓ）−３−ヒドロキシロイシル］−Ｌ−プロリンアミド
【０３５６】
【化１４１】
2005504003.tif 000146
【０３５７】
ステップＡ：Ｎ−Ｂｏｃ−（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｄ−ロイシン
ジオキサン（１０ｍｌ）中に（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｄ−ロイシン（０．２５ｇ，１．７ミリモル）を含む溶液を撹拌し、ここに水性ＮａＯＨ（２．０Ｍ溶液０．９０ｍｌ，１．８ミリモル）及びジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート（０．４４ｇ，２．０ミリモル）を添加した。混合物を周囲温度で２４時間撹拌した。溶媒を真空中で除去し、残渣を水（２０ｍｌ）とエーテル（２０ｍｌ）に分配した。水性層を分離し、ＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍｌ）と共に撹拌しながら固体クエン酸（０．９６ｇ，５ミリモル）を添加した。ＣＨ２Ｃｌ２層を分離し、水性層を別のＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍｌ）で抽出した。合わせたＣＨ２Ｃｌ２層を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、溶媒を真空中で除去すると、Ｎ−Ｂｏｃ−（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｄ−ロイシン（０．３０ｇ）が泡状物として得られた。ＨＰＬＣ  ＲＴ＝２．６７分（方法Ａ）。
【０３５８】
【化１４２】
2005504003.tif 000147
【０３５９】
ステップＢ：１−（２Ｒ，３Ｓ−２−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ−３−ヒドロキシ−４−メチルペンタノイル）−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
ＤＭＦ（６ｍｌ）中に上記ステップからのＮ−Ｂｏｃ−（３Ｓ）−３−ヒドロキシ−Ｄ−ロイシン（１７０ｍｇ，０．６８ミリモル）、Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド（実施例２６のステップＢ，２００ｍｇ，０．６６ミリモル；ＨＰＬＣ  ＲＴ＝２．２５分（方法Ａ））及びＨＯＢｔ水和物（１１０ｍｇ，０．７８ミリモル）を含む溶液にＥＤＣ（１７７ｍｇ，０．９２ミリモル）を添加した。次いで、湿潤Ｅ．Ｍｅｒｃｋ  ｐＨインジケーターストリップで測定して溶液のｐＨが６〜７になるようにジイソプロピルエチルアミン（全部で〜０．１ｍｌ）を少しずつゆっくり添加した。混合物を周囲温度で２時間撹拌し、溶媒を減圧下で除去した。残渣をＥｔＯＡｃ（７５ｍｌ）と飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（２０ｍｌ）に分配した。ＥｔＯＡｃ層を分離し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過した。濾液溶媒を減圧下で除去し、残渣をＥｔＯＡｃを溶離液とする加圧シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製した。生成物含有フラクションを合わせ、溶媒を減圧下で除去すると、１−（２Ｒ，３Ｓ−２−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ−３−ヒドロキシ−４−メチルペンタノイル）−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド（２４０ｍｇ，７１％）が得られた。ＴＬＣ  Ｒｆ＝０．５（ＥｔＯＡｃ）；ＨＰＬＣ  ＲＴ＝３．１７分（方法Ａ）；ＬＣＭＳ  ｍ／ｚ＝５３６。
【０３６０】
ステップＣ：１−（２Ｒ，３Ｓ−２−アミノ−３−ヒドロキシ−４−メチルペンタノイル）−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
０℃においてＥｔＯＡｃ（３０ｍｌ）中に上記ステップからの１−（２Ｒ，３Ｓ−２−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ−３−ヒドロキシ−４−メチルペンタノイル）−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド（２４０ｍｇ，０．４５ミリモル）を含む溶液にＨＣｌ（ｇ）を５分間通した。溶液を０℃で１５分間撹拌し、真空中で濃縮すると、１−（２Ｒ，３Ｓ−２−アミノ−３−ヒドロキシ−４−メチルペンタノイル）−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド（０．２１ｇ）が白色粉末として得られた。ＨＰＬＣ  ＲＴ＝３２．４２分（方法Ａ）；ＬＣＭＳ  ｍ／ｚ＝４３６．３。
【０３６１】
【化１４３】
2005504003.tif 000148
【実施例３９】
【０３６２】
３−イソプロピルプロリル−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
【０３６３】
【化１４４】
2005504003.tif 000149
【０３６４】
ステップＡ：３−イソプロピルピロリジン−２，２−ジカルボン酸ジエチル
４−メチル−２−ペンテナール（１．０３ｍｌ，８．８２ミリモル）から、本質的に４−エチル−５，５−ジカルボエトキシ−２−ピロリンの製造に関するＭｏｒｇａｎ，Ｂ．Ａ．及びＳｃｈａｆｅｒ，Ｄ．Ｊ．の米国特許第４，０６０，６０３号明細書（１９９７年１１月２９日）に記載の手順に従って標記化合物を製造した。ただし、中間体の３−イソプロピルピロリジン−２，２−ジカルボン酸ジエチルは粗生成物のまま使用した。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：２５６．１。
【０３６５】
ステップＢ：３−イソプロピル−ｄｌ−プロリン
３−イソプロピルピロリジン−２，２−ジカルボン酸ジエチル（３．０６ｇ，１２．０ミリモル）から、本質的に２，２−ジカルボエトキシ−３−エチルピロリジンからの３−エチル−ｄｌ−プロリンの製造に関するＭｏｒｇａｎ，Ｂ．Ａ．及びＳｃｈａｆｅｒ，Ｄ．Ｊ．の米国特許第４，０６０，６０３号明細書（１９９７年１１月２９日）に記載の塩基加水分解法に従って標記化合物を製造した。生成物が黄色固体として単離された。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：１５８．０。
【０３６６】
【化１４５】
2005504003.tif 000150
【０３６７】
ステップＣ：１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−イソプロピル−ｄｌ−プロリン
０℃においてＨ２Ｏ（１２．０ｍｌ）、１Ｎ  ＮａＯＨ（１３．０ｍｌ）及びジオキサン（３４．０ｍｌ）中にｔｒａｎｓ−３−イソプロピル−ｄｌ−プロリン（１．８８ｇ，１２．０ミリモル）を含む溶液を撹拌し、ここにＢＯＣ無水物（２．８８ｇ，１３．２ミリモル）を少しずつ添加した。反応物を室温まで加温し、７２時間撹拌した。溶媒を真空中で除去した。残りの残渣をＨ２Ｏに取り、１Ｎ  ＨＣｌを用いてｐＨ２に酸性化した。水性層をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、黄色油状物まで濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー（５０〜１００％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）にかけると、標記化合物が黄色固体として得られた。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ−Ｂｏｃ）：１５７．９。
【０３６８】
【化１４６】
2005504003.tif 000151
【０３６９】
ステップＤ：１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−イソプロピルプロリル−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
ＤＭＦ（１．５ｍｌ）中に１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−イソプロピル−ｄｌ−プロリン（７７ｍｇ，０．３０ミリモル）、Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド（実施例２７のステップＢ，１１３ｍｇ，０．３０ミリモル）、ＨＯＡｔ（２０ｍｇ，０．１５ミリモル）、ＥＤＣ（８６ｍｇ，０．４５ミリモル）及びＥｔ３Ｎ（８０μｌ，０．６０ミリモル）を含む混合物を室温で撹拌した。ジアステレオマー生成物を逆相ＨＰＬＣ（３０分間で９５：５  Ｈ２Ｏ（＋０．１％  ＴＦＡ）／ＣＨ３ＣＮ（＋０．１％  ＴＦＡ）→５：９５  Ｈ２Ｏ（＋０．１％  ＴＦＡ）／ＣＨ３ＣＮ（＋０．１％  ＴＦＡ）により分離し、直接脱保護にかけた。
【０３７０】
ジアステレオマーＡ  ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：５４５．５、
ジアステレオマーＢ  ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：５４５．５。
【０３７１】
ステップＥ：３−イソプロピルプロリル−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
ジオキサン（５．０ｍｌ）中に１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−イソプロピルプロリル−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミドのジアステレオマーＡ（９６ｍｇ，０．１８ミリモル）を含む溶液を撹拌し、ここにジオキサン中４．０Ｎ  ＨＣｌを過剰に添加した。１時間後、溶媒を真空中で除去すると、標記化合物のＨＣｌ塩が黄色固体として得られた。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：４４５．３。
【０３７２】
【化１４７】
2005504003.tif 000152
【０３７３】
ジアステレオマーＢ（８０ｍｇ，０．１５ミリモル）を同様に脱保護すると、標記化合物のＨＣｌ塩が黄色固体として得られた。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：４４５．４。
【０３７４】
【化１４８】
2005504003.tif 000153
【実施例４０】
【０３７５】
Ｄ−プロリル−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
【０３７６】
【化１４９】
2005504003.tif 000154
【０３７７】
ステップＡ：１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−プロリル−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
ＤＭＦ（５００μｌ）中の１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−プロリン（４９ｍｇ，０．２３ミリモル）、Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド（実施例２６のステップＢ，７０ｍｇ，０．２３ミリモル，１．０当量）、ＥＤＣ（６６ｍｇ，０．３４ミリモル，１．５当量）及びＨＯＡｔ（１６ｍｇ，０．１１ミリモル，０．５当量）から、本質的に実施例２６のステップＣに記載の手順に従って標記化合物を製造した。分取逆相ＨＰＬＣ［９５：５  水（＋０．１％  ＴＦＡ）／ＣＨ３ＣＮ（＋０．１％  ＴＦＡ）→５：９５  水（＋０．１％  ＴＦＡ）／ＣＨ３ＣＮ（＋０．１％  ＴＦＡ）で勾配溶離］にかけると、標記化合物が透明油状物として得られた。
【０３７８】
【化１５０】
2005504003.tif 000155
ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：５０４．３。
【０３７９】
ステップＢ：Ｄ−プロリル−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｄ−プロリル−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド（１２０ｍｇ，０．２３ミリモル）から、本質的に実施例２７のステップＣに記載の手順に従って標記化合物を製造した。逆相クロマトグラフィー［９５：５  水（＋０．１％  ＴＦＡ）／ＣＨ３ＣＮ（＋０．１％  ＴＦＡ）→５：９５  水（＋０．１％  ＴＦＡ）／ＣＨ３ＣＮ（＋０．１％  ＴＦＡ）］により精製すると、標記化合物が透明油状物として得られた。
【０３８０】
【化１５１】
2005504003.tif 000156
ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：４０４．３。
【実施例４１】
【０３８１】
Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−１−［（２Ｒ）−ピペリジン−２−イルカルボニル］−Ｌ−プロリンアミド
【０３８２】
【化１５２】
2005504003.tif 000157
【０３８３】
ステップＡ：Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−１−［１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−（２Ｒ）−ピペリジン−２−イルカルボニル］−Ｌ−プロリンアミド
ＤＭＦ（５００μｌ）中の（２Ｒ）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペリジン−２−カルボン酸（５２ｍｇ，０．２３ミリモル）、Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド（実施例２６のステップＢ，７０ｍｇ，０．２３ミリモル，１．０当量）、ＥＤＣ（６６ｍｇ，０．３４ミリモル，１．５当量）及びＨＯＡｔ（１６ｍｇ，０．１１ミリモル，０．５当量）から、本質的に実施例２７のステップＣに記載の手順に従って標記化合物を製造した。逆相ＨＰＬＣ［９５：５  水（＋０．１％  ＴＦＡ）／ＣＨ３ＣＮ（＋０．１％  ＴＦＡ）→５：９５  水（＋０．１％  ＴＦＡ）／ＣＨ３ＣＮ（＋０．１％  ＴＦＡ）］により精製すると、標記化合物が透明油状物として得られた。
【０３８４】
【化１５３】
2005504003.tif 000158
ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：５１８．３。
【０３８５】
ステップＢ：Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−１−［（２Ｒ）−ピペリジン−２−イルカルボニル］−Ｌ−プロリンアミド
Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−１−［１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−（２Ｒ）−ピペリジン−２−イルカルボニル］−Ｌ−プロリンアミド（１２０ｍｇ，０．２３ミリモル）から、本質的に実施例２７のステップＣに記載の脱保護法に従って標記化合物を製造した。逆相クロマトグラフィー［９５：５  水（＋０．１％  ＴＦＡ）／ＣＨ３ＣＮ（＋０．１％  ＴＦＡ）→５：９５  水（＋０．１％  ＴＦＡ）／ＣＨ３ＣＮ（＋０．１％  ＴＦＡ）］により精製すると、標記化合物が透明油状物として得られた。
【０３８６】
【化１５４】
2005504003.tif 000159
ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：４１８．４。
【実施例４２】
【０３８７】
３−イソプロピルプロリル−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
【０３８８】
【化１５５】
2005504003.tif 000160
【０３８９】
ステップＡ：３−イソプロピルプロリン
６Ｍ  ＨＣｌ（５０ｍｌ）中に３−イソプロピルピロリジン−２，２−ジカルボン酸ジエチル（実施例３９のステップＡ，２．２７ｇ，８．８１ミリモル）を含む溶液を還流加熱した。酸を添加すると溶液は淡黄色から橙色に変化し、加熱すると褐色となった。混合物を５０℃で一晩撹拌した。溶媒を真空中で除去すると、標記化合物（４つのジアステレオマーの混合物）が褐色油状物として得られた。粗生成物のまま使用した。
ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：１５８．０。
【０３９０】
ステップＢ：１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−イソプロピルプロリン
３−イソプロピルプロリン（１．７８ｇ，１１．３２ミリモル）から、実施例３９のステップＣに記載のＢＯＣ保護法に従って標記化合物を製造した。シリカゲルクロマトグラフィー（７０〜１００％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）にかけると、１ＨＮＭＲによるとｔｒａｎｓとｃｉｓ異性体の１：１．５混合物が得られた（Ｃ２でラセミ体、よって全部で４つのジアステレオマーが存在する）。ｔｒａｎｓ異性体の１Ｈ  ＮＭＲは実施例３９のステップＣに記載した通りであり、ｃｉｓ異性体の１Ｈ  ＮＭＲは次の通りである。
【０３９１】
【化１５６】
2005504003.tif 000161
【０３９２】
ステップＣ：３−イソプロピルプロリル−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−プロリンアミド
ＤＭＦ（１ｍｌ）中の上記ステップからの１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−イソプロピルプロリン（２５２ｍｇ，０．９８ミリモル）、Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド（実施例２６のステップＢ，３００ｍｇ，０．９８ミリモル，１．０当量）、ＥＤＣ（２８２ｍｇ，１．４７ミリモル，１．５当量）及びＨＯＡｔ（６７ｍｇ，０．４９ミリモル，０．５当量）から、本質的に実施例３９のステップＤに記載の手順に従って１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−イソプロピルプロリル−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミドが得られた。逆相クロマトグラフィー［９５：５  水（＋０．１％  ＴＦＡ）／ＣＨ３ＣＮ（＋０．１％  ＴＦＡ）→５：９５  水（＋０．１％  ＴＦＡ）／ＣＨ３ＣＮ（＋０．１％  ＴＦＡ）］にかけると、４つの別個のジアステレオマーが透明油状物として得られた。次いで、各ジアステレオマーを２：１  ＣＨ２Ｃｌ２／ＴＦＡ（３ｍｌ）に溶解し、１時間撹拌した。すべての反応物を油状物まで濃縮した。各ジアステレオマーを逆相クロマトグラフィー［９５：５  水（＋０．１％  ＴＦＡ）／ＣＨ３ＣＮ（＋０．１％  ＴＦＡ）→５０：５０  水（＋０．１％  ＴＦＡ）／ＣＨ３ＣＮ（＋０．１％  ＴＦＡ）］にかけると、ジアステレオマーが透明油状物として得られた。
【０３９３】
ジアステレオマーＡ（最も極性）：
【０３９４】
【化１５７】
2005504003.tif 000162
ＨＲＭＳ（ＡＰＣＩ）  Ｍ＋Ｈ：計算値（Ｃ２１Ｈ２８Ｎ７Ｏ２Ｃｌ）＋  ４４６．２０６６、実測値  ４４６．２０５５。
【０３９５】
ジアステレオマーＢ：
【０３９６】
【化１５８】
2005504003.tif 000163
ＨＲＭＳ（ＡＰＣＩ）  Ｍ＋Ｈ：計算値（Ｃ２１Ｈ２８Ｎ７Ｏ２Ｃｌ）＋  ４４６．２０６６、実測値  ４４６．２０５７。
【０３９７】
ジアステレオマーＣ：
【０３９８】
【化１５９】
2005504003.tif 000164
ＨＲＭＳ（ＡＰＣＩ）  Ｍ＋Ｈ：計算値（Ｃ２１Ｈ２８Ｎ７Ｏ２Ｃｌ）＋  ４４６．２０６６、実測値  ４４６．２０５３。
【０３９９】
ジアステレオマーＤ（最低の極性）：
【０４００】
【化１６０】
2005504003.tif 000165
ＨＲＭＳ（ＡＰＣＩ）  Ｍ＋Ｈ：計算値（Ｃ２１Ｈ２８Ｎ７Ｏ２Ｃｌ）＋  ４４６．２０６６、実測値  ４４６．２０５４。
【実施例４３】
【０４０１】
３−メチルプロリル−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
【０４０２】
【化１６１】
2005504003.tif 000166
【０４０３】
ステップＡ：３−メチルピロリジン−２，２−ジカルボン酸ジエチル
クロトンアルデヒド（０．８０ｍｌ，９．７ミリモル）から、本質的に４−エチル−５，５−ジカルボエトキシ−２−ピロリンの製造に関するＭｏｒｇａｎ，Ｂ．Ａ．及びＳｃｈａｆｅｒ，Ｄ．Ｊ．の米国特許第４，０６０，６０３号明細書（１９９７年１１月２９日）に記載の手順に従って標記化合物を製造した。ただし、中間体の３−メチルピロリジン−２，２−ジカルボン酸ジエチルは粗生成物のまま使用した。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：２３０．０。
【０４０４】
ステップＢ：ｔｒａｎｓ−３−メチル−ｄｌ−プロリン
３−メチルピロリジン−２，２−ジカルボン酸ジエチルを、２，２−ジカルボエトキシ−３，３−ジメチルピロリジンからの３，３−ジメチル−ｄｌ−プロリンの製造に関するＭｏｒｇａｎ，Ｂ．Ａ．及びＳｃｈａｆｅｒ，Ｄ．Ｊ．の米国特許第４，０６０，６０３号明細書に記載の手順に従って酸加水分解すると、標記化合物が得られた。
【０４０５】
ステップＣ：１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−メチル−ｄｌ−プロリン
ｔｒａｎｓ−３−メチル−ｄｌ−プロリン（２．０ｇ，１５．５ミリモル）を上記実施例３９のステップＣに記載の手順に従ってＢＯＣ保護した。シリカゲルクロマトグラフィー（５０〜１００％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）にかけると、標記化合物が黄色油状物として得られた。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：２３０．６。
【０４０６】
【化１６２】
2005504003.tif 000167
【０４０７】
ステップＤ：１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−メチルプロリル−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−メチル−ｄｌ−プロリン（１６ｍｇ，０．０７ミリモル）及びＮ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド（実施例２６のステップＢ，２１ｍｇ，０．０７ミリモル）から、本質的に実施例３９のステップＤに記載のＥＤＣカップリング法に従って標記化合物をジアステレオマー混合物として製造した。ジアステレオマー生成物を逆相ＨＰＬＣにより分離し、直接脱保護にかけた。
【０４０８】
ジアステレオマーＡ  ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：５１８．２、
ジアステレオマーＢ  ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：５１８．３。
【０４０９】
ステップＥ：３−メチルプロリル−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
室温においてＣＨ２Ｃｌ２（１．０ｍｌ）中に１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−メチルプロリル−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミドのジアステレオマーＡ（１７ｍｇ，０．０３ミリモル）を含む溶液を撹拌し、ここに過剰のＴＦＡを添加した。溶媒を真空中で除去すると、標記化合物のＴＦＡ塩が得られた。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：４１８．２。
【０４１０】
【化１６３】
2005504003.tif 000168
【０４１１】
ジアステレオマーＢ（１０ｍｇ，０．０２ミリモル）を同様に脱保護すると、標記化合物のＴＦＡ塩が得られた。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：４１８．２。
【０４１２】
【化１６４】
2005504003.tif 000169
【実施例４４】
【０４１３】
（３Ｓ）−３−メチル−Ｄ−プロリル−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
【０４１４】
【化１６５】
2005504003.tif 000170
【０４１５】
ステップＡ：（Ｒ）−ブタ−３−エニル−（１−フェニル−エチル）アミン
本質的にＬｏｒｔｈｉｏｉｓ，Ｅ．，Ｍａｒｅｋ，Ｉ．，Ｎｏｒｍａｎｔ，Ｊ．Ｆ．，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，６３，２４４２−２４５０（１９９８）に記載の手順に従って標記化合物を製造した。
【０４１６】
ステップＢ：（Ｒ）−［ブタ−３−エニル−（１−フェニル−エチル）−アミノ］酢酸ベンジルエステル
本質的にＫａｒｏｙａｎ，Ｐ．，Ｃｈａｓｓａｉｎｇ，Ｇ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ：Ａｓｙｍｍ．，８，２０２５−２０３２（１９９７）に記載の手順に従って標記化合物を製造した。
【０４１７】
ステップＣ：（３Ｓ）−３−メチル−１−（１−フェニル−エチル）−Ｄ−プロリン酸ベンジル
（Ｒ）−［ブタ−３−エニル−（１−フェニル−エチル）−アミノ］酢酸ベンジルエステルから、本質的にＫａｒｏｙａｎ，Ｐ．，Ｃｈａｓｓａｉｎｇ，Ｇ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ：Ａｓｙｍｍ．，８，２０２５−２０３２（１９９７）に記載の環化プロトコルに従って標記化合物を製造した。ただし、次の修正を加えた。ＬＤＡを−４０℃で添加した後、溶液を０℃に１０分間加温し、臭化亜鉛の添加のために再度−４０℃に冷却した。トランスメタル化ステップを省き、アニオンを直接２：１  飽和ＮＨ４Ｃｌ／水酸化アンモニウムでクエンチした。抽出（Ｅｔ２Ｏ）後処理すると橙色油状物が生じ、この油状物をシリカゲルクロマトグラフィー（５〜１０％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）により精製すると、標記化合物が黄色油状物として得られた。
【０４１８】
【化１６６】
2005504003.tif 000171
【０４１９】
ステップＤ：（３Ｓ）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−メチル−Ｄ−プロリン
ＴＨＦ（１２５ｍｌ）中に（３Ｓ）−３−メチル−１−（１−フェニル−エチル）−Ｄ−プロリン酸ベンジル（１．３９ｇ，４．２９ミリモル）、ＢＯＣ無水物（２．０６ｇ，９．４３ミリモル）及び１０％  Ｐｄ／Ｃ（２５０ｍｇ）を含む混合物を水素雰囲気（バルーン）下で１６時間撹拌した。混合物をセライトを介して濾過し、濾過ケーキをＭｅＯＨで洗浄した。濾液を蒸発させると、粘性淡黄色油状物が得られた。この油状物をＥｔＯＨ（５０ｍｌ）に再溶解し、Ｐｅａｒｌｍａｎ触媒（５６０ｍｇ）を添加し、混合物をＰａｒｒ水素化装置において４０ｐｓｉ水素圧下で１６時間振盪した。混合物をセライトを介して濾過し、油状物まで濃縮し、その油状物をシリカゲルクロマトグラフィー（４０％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン→３％  ＡｃＯＨ／ＥｔＯＡｃ）により精製した。生成物含有フラクションを濃縮し、残渣をトルエンと共沸して残留酢酸を除去した。標記化合物が粘性油状物として単離された。
【０４２０】
【化１６７】
2005504003.tif 000172
【０４２１】
ステップＥ：（３Ｓ）−３−メチル−Ｄ−プロリル−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
ＤＭＦ（１ｍｌ）中の（３Ｓ）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−メチル−Ｄ−プロリン（１５ｍｇ，０．０７ミリモル）、Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド（実施例２６のステップＢ，２０ｍｇ，０．０７ミリモル，１．０当量）、ＥＤＣ（１９ｍｇ，０．１０ミリモル，１．５当量）及びＨＯＡｔ（５ｍｇ，０．０３ミリモル，０．５当量）から標記化合物を製造し、その後本質的に実施例２７のステップＣに記載の手順に従ってＴＦＡ−ＣＨ２Ｃｌ２中で脱保護した。逆相クロマトグラフィー［９５：５  水（＋０．１％  ＴＦＡ）／ＣＨ３ＣＮ（＋０．１％  ＴＦＡ）→５０：５０  水（＋０．１％  ＴＦＡ）／ＣＨ３ＣＮ（＋０．１％  ＴＦＡ）］にかけると、標記化合物が透明油状物として得られた。
【０４２２】
【化１６８】
2005504003.tif 000173
ＨＲＭＳ（ＡＰＣＩ）  Ｍ＋Ｈ：計算値（Ｃ１９Ｈ２４Ｎ７Ｏ２Ｃｌ）＋  ４１８．１７５３、実測値  ４１８．１７４１。
【実施例４５】
【０４２３】
３，３−ジメチルプロリル−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
【０４２４】
【化１６９】
2005504003.tif 000174
【０４２５】
ステップＡ：３，３−ジメチル−ｄｌ−プロリン
Ｍｏｒｇａｎ，Ｂ．Ａ．及びＳｃｈａｆｅｒ，Ｄ．Ｊ．の米国特許第４，０６０，６０３号明細書（１９７７年１１月２９日）に記載の３，３−ジメチル−ｄｌ−プロリンの製造方法を繰り返した。ただし、以下の修正を加えた。中間体の２，２−ジカルボエトキシ−３，３−ジメチルピロリジンを５０％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを溶離液とするシリカゲルカラムクロマトグラフィーにかけた。前記中間体を米国特許第４，０６０，６０３号明細書に記載のように酸加水分解すると、粗な３，３−ジメチル−ｄｌ−プロリンが褐色固体として得られた。
【０４２６】
【化１７０】
2005504003.tif 000175
【０４２７】
ステップＢ：１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３，３−ジメチル−ｄｌ−プロリン
３，３−ジメチル−ｄｌ−プロリン（１．００ｇ，６．９８ミリモル）を実施例３９のステップＣに記載の手順に従ってＢＯＣ保護した。シリカゲルクロマトグラフィー（３０％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン→１００％  ＥｔＯＡｃ→５％  ＡｃＯＨ／ＥｔＯＡｃで勾配溶離）にかけると、生成物が褐色固体として得られた。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：２４４．１。
【０４２８】
【化１７１】
2005504003.tif 000176
【０４２９】
ステップＣ：１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３，３−ジメチルプロリル−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３，３−ジメチル−ｄｌ−プロリン（６１ｍｇ，０．２５ミリモル）及びＮ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド（実施例２６のステップＢ，９５ｍｇ，０．２５ミリモル）から、本質的に実施例３９のステップＤに記載のＥＤＣカップリング法に従って標記化合物をジアステレオマー混合物として製造した。ジアステレオマー生成物を逆相ＨＬＣにより分離し、直接脱保護にかけた。
【０４３０】
ジアステレオマーＡ  ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：５３２．３、
ジアステレオマーＢ  ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：５３２．０。
【０４３１】
ステップＤ：３，３−ジメチルプロリル−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
室温においてＣＨ２Ｃｌ２（約１ｍｌ）中に１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３，３−ジメチルプロリル−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミドのジアステレオマーＡ（６４ｍｇ，０．１２ミリモル）を含む溶液を撹拌し、ここに過剰のＴＦＡを添加した。溶媒を真空中で除去し、残渣を逆相ＨＰＬＣにより精製すると、標記化合物のＴＦＡ塩が得られた。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：４３２．２。
【０４３２】
【化１７２】
2005504003.tif 000177
【０４３３】
ジアステレオマーＢを同様に脱保護すると、標記化合物のＴＦＡ塩が得られた。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：４３２．２。
【０４３４】
【化１７３】
2005504003.tif 000178
【実施例４６】
【０４３５】
Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−１−［（２−メチルアゼチジン−２−イル）カルボニル］−Ｌ−プロリンアミド
【０４３６】
【化１７４】
2005504003.tif 000179
【０４３７】
ステップＡ：Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−１−［（１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−２−メチルアゼチジン−２−イル）カルボニル］−Ｌ−プロリンアミド
ＤＭＦ（１．１ｍｌ）中に１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−２−メチルアゼチジン−２−カルボン酸（０．１４３ｇ，０．３６ミリモル）を含む溶液を撹拌し、ここにＥＤＣ（０．１０４ｇ，０．５４ミリモル）、ＨＯＡｔ（２４．６ｍｇ，０．１８ミリモル）、ＮＭＭ（０．０７９ｍｌ，０．７２ミリモル）及びＮ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド塩酸塩（実施例２６のステップＢ，０．１４３ｇ，０．４２ミリモル）を添加した。室温で３時間後、反応物をＥｔＯＡｃと水に分配した。有機層をブラインで洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、真空中で濃縮した。２つのジアステレオマーを分離し、逆相ＨＰＬＣにより精製した。
【０４３８】
高極性のジアステレオマーを真空中で濃縮した。Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−１−［（１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−２−メチルアゼチジン−２−イル）カルボニル］−Ｌ−プロリンアミド（ジアステレオマーＡ）がガラスとして得られた。ＭＳ  ｍ／ｚ＝４０４．６。
【０４３９】
低極性のジアステレオマーを真空中で濃縮した。Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−１−［（１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−２−メチルアゼチジン−２−イル）カルボニル］−Ｌ−プロリンアミド（ジアステレオマーＢ）が透明油状物として得られた。ＭＳ  ｍ／ｚ＝４０４．６。
【０４４０】
ステップＢ：Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−１−［（２−メチルアゼチジン−２−イル）カルボニル］−Ｌ−プロリンアミド
ＣＨ２Ｃｌ２（６．０ｍｌ）中にＮ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−１−［（１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−２−メチルアゼチジン−２−イル）カルボニル］−Ｌ−プロリンアミド（ジアステレオマーＡ，４６ｍｇ，０．０９１ミリモル）を含む溶液を撹拌し、ここにＴＦＡ（３．０ｍｌ）を添加した。１時間後、混合物を真空中で濃縮し、残渣を逆相ＨＰＬＣ（Ｃ１８，アセトニトリル／０．１％  ＴＦＡ／水で溶離）により精製した。Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−１−［（２−メチルアゼチジン−２−イル）カルボニル］−Ｌ−プロリンアミド（ジアステレオマーＡ）のＴＦＡ塩がガラスとして得られた。ＭＳ  ｍ／ｚ＝４０４．６１。
【０４４１】
【化１７５】
2005504003.tif 000180
【０４４２】
Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−１−［（１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−２−メチルアゼチジン−２−イル）カルボニル］−Ｌ−プロリンアミド（ジアステレオマーＢ）（６１ｍｇ，０．１２１ミリモル）を同様に脱保護し、精製した。Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−１−［（２−メチルアゼチジン−２−イル）カルボニル］−Ｌ−プロリンアミド（ジアステレオマーＢ）のＴＦＡ塩がガラスとして得られた。ＭＳ  ｍ／ｚ＝４０４．６。
【０４４３】
【化１７６】
2005504003.tif 000181
【実施例４７】
【０４４４】
１−（アゼチジン−２−イルカルボニル）−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
【０４４５】
【化１７７】
2005504003.tif 000182
【０４４６】
ステップＡ：１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアゼチジン−２−イルカルボニル）−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド塩酸塩（実施例２６のステップＢ，８０．１ｍｇ，０．２３ミリモル）をラセミ体１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アゼチジン−２−カルボン酸（４２．５ｍｇ，０．２１ミリモル）にカップリングさせた後、実施例４６のステップＡに記載の手順を用いて精製した。逆相ＨＰＬＣにより、低極性の１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアゼチジン−２−イルカルボニル）−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミドのジアステレオマー（Ａ）がガラスとして得られた。ＭＳ  ｍ／ｚ＝３９０．６。
【０４４７】
逆相ＨＰＬＣにより、高極性のジアステレオマー（Ｂ）がガラスとして得られた。ＭＳ  ｍ／ｚ＝３９０．６。
【０４４８】
ステップＢ：１−（アゼチジン−２−イルカルボニル）−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアゼチジン−２−イルカルボニル）−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド（ジアステレオマーＡ，３１ｍｇ，０．０６３ミリモル）を実施例４６のステップＢに記載の手順を用いて脱保護した。１−（アゼチジン−２−イルカルボニル）−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド（ジアステレオマーＡ）のＴＦＡ塩がガラスとして得られた。ＭＳ  ｍ／ｚ＝３９０．６。
【０４４９】
【化１７８】
2005504003.tif 000183
【０４５０】
１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアゼチジン−２−イルカルボニル）−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド（ジアステレオマーＢ，０．０２２ｇ，０．０４５ミリモル）を同様にして脱保護し、精製した。１−（アゼチジン−２−イルカルボニル）−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド（ジアステレオマーＢ）のＴＦＡ塩がガラスとして得られた。ＭＳ  ｍ／ｚ＝３９０．６。
【０４５１】
【化１７９】
2005504003.tif 000184
【実施例４８】
【０４５２】
３−シクロプロピル−Ｄ−アラニル−Ｎ−［５−フルオロ−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
【０４５３】
【化１８０】
2005504003.tif 000185
【０４５４】
ステップＡ：５−フルオロ−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）ベンゾニトリル
ＤＭＦ（１０ｍｌ）中に２，５−ジフルオロベンゾニトリル（５００ｍｇ，３．６ミリモル）、１，２，４−トリアゾール（２７３ｍｇ，３．９ミリモル）及びＣｓ２ＣＯ３（１．２７ｇ，３．９ミリモル）を含む混合物を８０℃で２日間加熱した。溶媒を減圧下で除去した。残渣をＨ２ＯとＥｔＯＡｃに分配した。層を分離し、水性層をＥｔＯＡｃで３回抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮すると、標記化合物がオフホワイト色の固体（５９６ｍｇ）として少量のビスアルキル化副生成物と共に得られた。
【０４５５】
【化１８１】
2005504003.tif 000186
【０４５６】
ステップＢ：１−［５−フルオロ−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）フェニル］メタンアミン
アンモニアを飽和したメタノール（３０ｍｌ）中に５−フルオロ−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）ベンゾニトリル（２００ｍｇ，１．０ミリモル）を含む懸濁液を水素雰囲気（バルーン）下ラネーニッケル（水中５０％スラリー，メタノールで洗浄，触媒量）の存在下で２日間撹拌した。反応混合物をセライトを介して濾過し、濃縮すると、標記化合物（１５０ｍｇ）が明緑色泡状物として得られた。
【０４５７】
【化１８２】
2005504003.tif 000187
【０４５８】
ステップＣ：Ｎ−［５−フルオロ−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
ＤＭＦ（６ｍｌ）中に１−［５−フルオロ−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）フェニル］メタンアミン（２４５ｍｇ，１．０６ミリモル）、１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−プロリン（２３６ｍｇ，１．１ミリモル）及びＨＯＢｔ水和物（１４３ｍｇ，１．０６ミリモル）を含む溶液を撹拌し、ここにＥＤＣ（２０３ｍｇ，１．０６ミリモル）を添加した。次いで、湿潤Ｅ．Ｍｅｒｃｋ  ｐＨインジケーターストリップで測定して溶液のｐＨが６〜７になるようにジイソプロピルエチルアミン（全部で〜０．６ｍｌ）を少しずつゆっくり添加した。混合物を周囲温度で４時間撹拌し、この時点でＨＰＬＣ分析によればプロリン出発物質は完全に消費されていた。ＤＭＦを減圧下で除去し、残渣をＥｔＯＡｃと飽和ＮａＨＣＯ３水溶液に分配した。ＥｔＯＡｃ層を分離し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過した。濾液溶媒を減圧下で除去し、油状残渣をＲｅｄｉ−Ｓｅｐカラム（１０ｇ）及び５％  ＣＨ３ＯＨ／ＥｔＯＡｃを用いて４０分間分取クロマトグラフィーにより精製した。生成物フラクションを合わせ、溶媒を減圧下で除去すると、油状物（２１９ｍｇ；ＨＰＬＣ  ＲＴ＝１．７１分（方法Ａ）；ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）  ｍ／ｅ＝３９０）が得られた。前記油状物をＥｔＯＡｃ（２ｍｌ）に溶解し、５．５Ｎ  ＨＣｌ／ＥｔＯＡｃ（１ｍｌ）で処理した。混合物を室温で３日間撹拌した。溶媒を真空中で除去し、残渣をＥｔＯＡｃと粉砕すると、標記化合物が塩酸塩（１３７ｍｇ；ＨＰＬＣ  ＲＴ＝０．１７分（方法Ａ）；ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）  ｍ／ｅ＝２９０）として得られた。
【０４５９】
ステップＤ：Ｎ−｛ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル｝−３−シクロプロピル−Ｄ−アラニル−Ｎ−［５−フルオロ−２−｛１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル｝ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
ＤＭＦ（２ｍｌ）中にＮ−［５−フルオロ−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド（８６ｍｇ，０．２５ミリモル）、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−シクロプロピル−Ｄ−アラニン（実施例３１のステップ７，５７ｍｇ，０．２５ミリモル）及びＨＯＢｔ水和物（３３ｍｇ，０．２５ミリモル）を含む溶液を撹拌し、ここにＥＤＣ（４８ｍｇ，０．２５ミリモル）を添加した。次いで、湿潤Ｅ．Ｍｅｒｃｋ  ｐＨインジケーターストリップで測定して溶液のｐＨが６〜７になるようにジイソプロピルエチルアミン（全部で０．１ｍｌ）を少しずつゆっくり添加した。混合物を周囲温度で４時間撹拌した。ＤＭＦを減圧下で除去し、残渣をＥｔＯＡｃと飽和ＮａＨＣＯ３水溶液に分配した。ＥｔＯＡｃ層を分離し、無水ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過した。濾液溶媒を減圧下で除去し、油状残渣を、３０分間で９５：５→５：９５  １％ＴＦＡ＋Ｈ２Ｏ／ＣＨ３ＣＮの勾配で１５ｍｌ／分の流速で溶離させる分取逆相ＨＰＬＣにより精製した。生成物フラクションを合わせ、凍結乾燥すると、標記化合物（３５ｍｇ）が得られた。
【０４６０】
【化１８３】
2005504003.tif 000188
【０４６１】
ステップＥ：３−シクロプロピル−Ｄ−アラニル−Ｎ−［５−フルオロ−２−｛１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル｝ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
ＥｔＯＡｃ（１ｍｌ）中にＮ−｛ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル｝−３−シクロプロピル−Ｄ−アラニル−Ｎ−［５−フルオロ−２−｛１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル｝ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド（３５ｍｇ，０．０６９ミリモル）を含む溶液を３．５Ｎ  ＨＣｌ／ＥｔＯＡｃ（１ｍｌ）を用いて０℃で１時間、室温で３時間処理した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をＥｔＯＡｃと粉砕すると、標記化合物（２２ｍｇ）が塩酸塩として得られた。
【０４６２】
【化１８４】
2005504003.tif 000189
【実施例４９】
【０４６３】
３−シクロプロピル−Ｄ−アラニル−Ｎ−［５−フルオロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
【０４６４】
【化１８５】
2005504003.tif 000190
【０４６５】
ステップＡ：１−［５−フルオロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）フェニル］メタンアミン
２−アミノ−５−フルオロ安息香酸から、本質的に実施例１に記載の手順に従って標記化合物を製造した。
【０４６６】
【化１８６】
2005504003.tif 000191
【０４６７】
ステップＢ：Ｎ−［５−フルオロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
１−［５−フルオロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）フェニル］メタンアミン及びＢｏｃ−Ｌ−プロリンから、本質的に実施例２６のステップＢに記載の手順に従って標記化合物を製造した。
【０４６８】
ステップＣ：３−シクロプロピル−Ｄ−アラニル−Ｎ−［５−フルオロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
Ｎ−［５−フルオロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド及びＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−シクロプロピル−Ｄ−アラニン（実施例３１のステップＣ）から標記化合物を製造後、本質的に実施例３１のステップＤ及びＥに記載の手順に従ってＨＣｌ−ＥｔＯＡｃで脱保護した。ＨＰＬＣ  ＲＴ＝０．９３分（方法Ｂ）；ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：４０２。
【０４６９】
【化１８７】
2005504003.tif 000192
【実施例５０】
【０４７０】
４−メチル−Ｄ−ロイシル−Ｎ−［２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
【０４７１】
【化１８８】
2005504003.tif 000193
【０４７２】
ステップＡ：２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）ベンゾニトリル及び２−（２Ｈ−テトラゾル−２−イル）−５−（トリフルオロメチル）ベンゾニトリル
無水ＤＭＦ（５ｍｌ）中に２−フルオロ−５−（トリフルオロメチル）ベンゾニトリル（６６１ｍｇ，３．５ミリモル）及びテトラゾール（３１８ｍｇ，４．５ミリモル）を含む溶液を撹拌し、ここに炭酸セシウム（１．４８ｇ，４．５ミリモル）を添加した。混合物を予熱した９０℃油浴に浸し、ブラストシールドの後ろで窒素雰囲気下で１時間加熱した。次いで、暗色混合物を室温まで冷却し、砕いた氷に注いだ。混合物をＥｔ２Ｏで２回抽出した。合わせた有機層を乾燥し（無水Ｎａ２ＳＯ４）、橙色油状物まで濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー（２５％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）にかけると、２つの主要生成物、すなわち最初に２−（２Ｈ−テトラゾル−２−イル）−５−（トリフルオロメチル）ベンゾニトリル、次いで２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）ベンゾニトリルが共に橙黄色固体として分離された。
【０４７３】
【化１８９】
2005504003.tif 000194
【０４７４】
２−（２Ｈ−テトラゾル−２−イル）−５−（トリフルオロメチル）ベンゾニトリル
【０４７５】
【化１９０】
2005504003.tif 000195
【０４７６】
ステップＢ：１−［２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）フェニル］メタンアミン
飽和エタノール性アンモニア（１２ｍｌ）中に２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）ベンゾニトリル（１６６ｍｇ，０．６９ミリモル）を含む溶液にラネーニッケル（水中５０％スラリー，使用前に水をデカントし、触媒をＥｔＯＡｃで３回濯いだ）を添加した。混合物を直ぐに脱ガスし、Ａｒをパージした後Ｈ２雰囲気（バルーン）下に置き、１６時間撹拌した。次いで、混合物をセライトを介して濾過し、濾過ケーキをＥｔＯＨで十分に濯いだ。濾液を褐色油状物まで濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー（７０％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン→５％  ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ３）にかけると、標記化合物が橙褐色固体として得られた。
【０４７７】
【化１９１】
2005504003.tif 000196
ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：２４３．９。
【０４７８】
ステップＣ：１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ−［２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
ＤＭＦ（１ｍｌ）中に１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−プロリン（３９ｍｇ，０．１８ミリモル）、１−［２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）フェニル］メタンアミン（４２ｍｇ，０．１７ミリモル）、ＥＤＣ（４９ｍｇ，０．２６ミリモル）及びＨＯＡｔ（１２ｍｇ，０．０９ミリモル）を含む混合物を室温で２時間撹拌した。粗生成物を逆相ＨＰＬＣにより精製後、化合物の水性スラリーを飽和Ｋ２ＣＯ３水溶液で中和し、生じた水性混合物をＥｔＯＡｃで数回抽出した（各抽出前に水性層をＮａＣｌで飽和した）。合わせた有機抽出物を乾燥（無水Ｎａ２ＳＯ４）し、濃縮すると、標記化合物が油状物として得られた。この油状物を直接脱保護ステップ（以下のステップＤ）にかけた。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：４４１．２。
【０４７９】
ステップＤ：Ｎ−［２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
ＥｔＯＡｃ（１ｍｌ）中に１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ−［２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド（９２ｍｇ，０．２０９ミリモル）を含む冷（０℃）溶液を撹拌し、ここに製造したばかりのＥｔＯＡｃ中飽和ＨＣｌ溶液（６ｍｌ）を添加した。混合物を室温で２時間撹拌した。溶媒を真空中で除去し、残渣をジエチルエーテルと共沸させると、標記化合物の塩酸塩がオフホワイト色固体として得られた。
【０４８０】
【化１９２】
2005504003.tif 000197
ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：３４１．１。
【０４８１】
ステップＥ：Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−４−メチル−Ｄ−ロイシル−Ｎ−［２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
ＤＭＦ（１．２ｍｌ）中にＮ−［２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド塩酸塩（３５ｍｇ，０．０９ミリモル）、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−４−メチル−Ｄ−ロイシン（２４ｍｇ，０．１０ミリモル）、ＥＤＣ（２７ｍｇ，０．１４ミリモル）、ＨＯＡｔ（６．３ｍｇ，０．０５ミリモル）及びＨｕｎｉｇ塩基（３４ｍｌ，０．２０ミリモル）を含む混合物を室温で１６時間撹拌した。抽出（ＥｔＯＡｃ）し、シリカゲルクロマトグラフィー（６０〜８０％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）にかけると、標記化合物が油状泡状物として単離された。この泡状物を直接脱保護ステップにかけた。
【０４８２】
【化１９３】
2005504003.tif 000198
ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：５６８．３。
【０４８３】
ステップＦ：４−メチル−Ｄ−ロイシル−Ｎ−［２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
乾燥ＣＨ２Ｃｌ２（３ｍｌ）中にＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−４−メチル−Ｄ−ロイシル−Ｎ−［２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド（３２ｍｇ，０．０６ミリモル）を含む溶液にＴＦＡ（１ｍｌ）を添加した。溶液を室温で３０分間撹拌した後真空中で濃縮した。逆相ＨＰＬＣにかけると、標記化合物が白色泡状物として単離された。
【０４８４】
【化１９４】
2005504003.tif 000199
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ，Ｍ＋Ｈ）：実測値  ４６８．２２３４、計算値  ４６８．２３３５。
【実施例５１】
【０４８５】
４−メチル−Ｄ−ロイシル−Ｎ−［２−（２Ｈ−テトラゾル−２−イル）−５−（トリフルオロメチル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
【０４８６】
【化１９５】
2005504003.tif 000200
【０４８７】
２−（２Ｈ−テトラゾル−２−イル）−５−（トリフルオロメチル）ベンゾニトリル（実施例５０のステップＡ）から、本質的に上記実施例５０に記載の手順に従って標記化合物を製造し、白色泡状物として単離した。
【０４８８】
【化１９６】
2005504003.tif 000201
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ，Ｍ＋Ｈ）：実測値  ４６８．２３２５、計算値  ４６８．２３３５。
【実施例５２】
【０４８９】
１−［（２Ｒ）−２−アミノ−２−シクロヘキシルエタノイル］−Ｎ−［５−クロロ−２−（４−クロロ−１，２，５−チアジアゾル−３−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
【０４９０】
【化１９７】
2005504003.tif 000202
【０４９１】
ステップＡ：４−クロロ−２−メチルベンズアルデヒド
Ｅｔ２Ｏ（１９０ｍｌ）中に４−クロロ−２−メチルベンゾニトリル（５．００ｇ，３２．９８ミリモル）を含む−７８℃溶液を撹拌し、ここにＴＨＦ中１Ｍ  ＤＩＢＡＬ（６６．０ｍｌ）を１０分間かけて添加した。５時間後、更にＴＨＦ中１Ｍ  ＤＩＢＡＬ（３．３０ｍｌ）を滴下し、溶液を１時間撹拌した。水及び濃Ｈ２ＳＯ４を順次添加して反応をクエンチし、室温で１６時間撹拌した。溶液をＥｔ２Ｏで抽出し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、真空中で減量した。４−クロロ−２−メチルベンズアルデヒドが黄色油状物として単離された。
【０４９２】
【化１９８】
2005504003.tif 000203
【０４９３】
ステップＢ：アミノ−（４−クロロ−２−メチルフェニル）アセトニトリル
水（２０ｍｌ）中にメタ重亜硫酸ナトリウム（２．０７ｇ，１０．９ミリモル）を含む溶液を４−クロロ−２−メチルベンズアルデヒド（３．３７ｇ，２１．８ミリモル）に添加した。濃水酸化アンモニウム（４．２５ｍｌ，６２．９ミリモル）を添加し、溶液を１５分間撹拌した。シアン化ナトリウム（１．０７ｇ，２１．８ミリモル）を添加し、溶液を１６時間撹拌した。メタノール（２０ｍｌ）を添加し、生じた溶液を周囲温度で１６時間撹拌した。溶液をＥｔＯＡｃで抽出し、有機層を１０％  水酸化アンモニウム水溶液で洗浄した後、１Ｍ  ＨＣｌで抽出した。水性層を固体炭酸ナトリウムを用いて塩基性とし、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機相を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、真空中で減量した。生じた固体をＥｔＯＡｃ中に含む溶液にジオキサン中４Ｍ  ＨＣｌ（２．１ｍｌ）を添加した。アミノ−（４−クロロ−２−メチルフェニル）アセトニトリルが塩酸塩として単離された。
【０４９４】
【化１９９】
2005504003.tif 000204
【０４９５】
ステップＣ：３−クロロ−４−（４−クロロ−２−メチルフェニル）−１，２，５−チアジアゾール
ＤＭＦ（３．６ｍｌ）中に硫黄一塩化物（１．９３ｍｌ，２４．１０ミリモル）を含む溶液を撹拌し、ここに少量のＤＭＦ中にアミノ−（４−クロロ−２−メチルフェニル）アセトニトリル塩酸塩（１．７４４ｇ，８．０３ミリモル）を含む溶液を滴下した。１６時間後、溶液を水でクエンチし、エーテルで抽出した。有機相を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、真空中で減量した。生じた固体をシリカフラッシュクロマトグラフィー（１→４％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで勾配溶離）により精製した。３−クロロ−４−（４−クロロ−２−メチルフェニル）−１，２，５−チアジアゾールが固体として単離された。
【０４９６】
【化２００】
2005504003.tif 000205
【０４９７】
ステップＤ：３−［２−（ブロモメチル）−４−クロロフェニル］−４−クロロ−１，２，５−チアジアゾール
四塩化炭素（５．０ｍｌ）中に３−クロロ−４−（４−クロロ−２−メチルフェニル）−１，２，５−チアジアゾール（０．２１１ｇ，０．８６ミリモル）、ＮＢＳ（０．１５３ｇ，０．８６ミリモル）及び過酸化ベンゾイル（１０．４ｍｇ，０．０４ミリモル）を含む混合物を１時間還流した。更に過酸化ベンゾイル（１０．４ｍｇ，０．０４ミリモル）を添加し、溶液を更に１６時間還流した。生じた懸濁液を濾過し、エーテルで濯いだ。濾液を１０％  亜硫酸ナトリウム水溶液、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液及びブラインで洗浄した。エーテル層を分離し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、真空中で減量した。残渣をシリカフラッシュクロマトグラフィー（１→３％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで勾配溶離）により精製した。３−［２−（ブロモメチル）−４−クロロフェニル］−４−クロロ−１，２，５−チアジアゾールが黄色油状物として単離された。
【０４９８】
【化２０１】
2005504003.tif 000206
【０４９９】
ステップＥ：３−［２−（アジドメチル）−４−クロロフェニル］−４−クロロ−１，２，５−チアジアゾール
ＤＭＦ（０．６ｍｌ）中に３−［２−（ブロモメチル）−４−クロロフェニル］−４−クロロ−１，２，５−チアジアゾール（０．１９３ｇ，０．６０ミリモル）及びアジ化ナトリウム（３８．７ｍｇ，０．６０ミリモル）を含む溶液を６０℃で１６時間撹拌した。溶液を水とエーテルに分配した。有機相を分離し、ブラインで洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、真空中で減量した。３−［２−（アジドメチル）−４−クロロフェニル］−４−クロロ−１，２，５−チアジアゾールが油状物として単離された。ＭＳ  ｍ／ｚ＝２５８．５。
【０５００】
ステップＦ：１−［５−クロロ−２−（４−クロロ−１，２，５−チアジアゾル−３−イル）フェニル］メタンアミン
ＴＨＦ（１．５ｍｌ）中に３−［２−（アジドメチル）−４−クロロフェニル］−４−クロロ−１，２，５−チアジアゾール（０．２０５ｇ，０．７２ミリモル）及び水（０．０１ｍｌ，０．７２ミリモル）を含む溶液を撹拌し、ここにトリフェニルホスフィン（０．１８８ｇ，０．７２ミリモル）を添加した。溶液を１時間還流した後周囲温度で１６時間撹拌した。溶液を真空中で減量し、残渣をＭｅＯＨに溶解させた。ＫＯＨ（１ペレット）を添加し、溶液を５分間還流した、溶液を真空中で減量し、１Ｍ  ＨＣｌとＥｔＯＡｃに分配した。水性相を分離し、１Ｍ  ＮａＯＨを用いて塩基性とし、エーテルで抽出した。有機相を分離、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、真空中で減量した。残渣をシリカフラッシュクロマトグラフィー（５→１０％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで勾配溶離後、０．９％  ＭｅＯＨ／０．１％  ＮＨ４ＯＨ／クロロホルムで溶離）により精製した。１−［５−クロロ−２−（４−クロロ−１，２，５−チアジアゾル−３−イル）フェニル］メタンアミンが黄色油状物として単離された。ＭＳ  ｍ／ｚ＝２６０．５。
【０５０１】
ステップＧ：１−｛（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−２−シクロヘキシルエタノイル｝−Ｎ−［５−クロロ−２−（４−クロロ−１，２，５−チアジアゾル−３−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
ＤＭＦ（１．０ｍｌ）中に１−［５−クロロ−２−（４−クロロ−１，２，５−チアジアゾル−３−イル）フェニル］メタンアミン（２８．１ｍｇ，０．１１ミリモル）、１−｛（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−２−シクロヘキシルエタノイル｝−Ｌ−プロリン（一般的なペプチドカップリングプロトコルにより製造，３８．３ｍｇ，０．１１ミリモル）及びＨＯＡｔ（１９．１ｍｇ．０．１４ミリモル）を含む溶液を撹拌し、ここにＥＤＣ（２６．９ｇ，０．１４ミリモル）を添加した。１６時間後、混合物をＥｔＯＡｃと水に分配した。有機相をブラインで洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、真空中で減量した。残渣をＨＰＬＣ（Ｃ１８，アセトニトリル／水／０．１％  ＴＦＡで勾配溶離）により精製した。１−｛（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−２−シクロヘキシルエタノイル｝−Ｎ−［５−クロロ−２−（４−クロロ−１，２，５−チアジアゾル−３−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミドが固体として得られた。ＬＣＭＳ  ｍ／ｚ＝５９６．５。
【０５０２】
ステップＨ：１−［（２Ｒ）−２−アミノ−２−シクロヘキシルエタノイル］−Ｎ−［５−クロロ−２−（４−クロロ−１，２，５−チアジアゾル−３−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
ＣＨ２Ｃｌ２（１．０ｍｌ）中に１−｛（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−２−シクロヘキシルエタノイル｝−Ｎ−［５−クロロ−２−（４−クロロ−１，２，５−チアジアゾル−３−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド（４１．１ｍｇ，０．０７ミリモル）を含む０℃溶液を撹拌し、ここにＨＣｌガスを１５分間通した。溶液を真空中で減量した。１−［（２Ｒ）−２−アミノ−２−シクロヘキシルエタノイル］−Ｎ−［５−クロロ−２−（４−クロロ−１，２，５−チアジアゾル−３−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミドが固体として単離された。ＬＣＭＳ  ／ｚ＝４９６．５。
【実施例５３】
【０５０３】
１−［（２Ｒ）−２−アミノ−２−シクロヘキシルエタノイル］−Ｎ−［５−クロロ−２−（１，２，５−チアジアゾル−３−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
【０５０４】
【化２０２】
2005504003.tif 000207
【０５０５】
ステップＡ：３−（４−クロロ−２−メチルフェニル）−１，２，５−チアジアゾール
ＴＨＦ（５．０ｍｌ）中に３−クロロ−４−（４−クロロ−２−メチルフェニル）−１，２，５−チアジアゾール（０．５０３ｇ，２．０５ミリモル）を含む溶液を撹拌し、ここにＴＨＦ中２Ｍ  ホウ水素化リチウム（２．０５ｍｌ，４．１０ミリモル）を添加した。反応物を周囲温度で１５分間撹拌した後、水でクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機相を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、真空中で減量した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（１→１５％  ＣＨ２Ｃｌ２／ヘキサンで勾配溶離）により精製した。３−（４−クロロ−２−メチルフェニル）−１，２，５−チアジアゾールが固体として単離された。
【０５０６】
【化２０３】
2005504003.tif 000208
ＭＳ  ｍ／ｚ＝２１１．４。
【０５０７】
ステップＢ：３−［４−クロロ−２−（ジブロモメチル）フェニル］−１，２，５−チアジアゾール
四塩化炭素（５．０ｍｌ）中に３−（４−クロロ−２−メチルフェニル）−１，２，５−チアジアゾール（０．２７８ｇ，１．３２ミリモル）、ＮＢＳ（０．２３５ｇ，１．３２ミリモル）及び過酸化ベンゾイル（１６．０ｍｇ，０．０７ミリモル）を含む混合物を１時間還流した。更に過酸化ベンゾイル（１６．０ｍｇ，０．０７ミリモル）を添加し、溶液を１６時間還流した、更にＮＢＳ（０．２３５ｇ，１．３２ミリモル）及び過酸化ベンゾイル（３２．０ｍｇ，０．１４ミリモル）を添加し、溶液を更に１６時間還流した。生じた懸濁液を濾過し、エーテルで濯いだ。濾液を１０％  亜硫酸ナトリウム水溶液、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液及びブラインで洗浄した。有機層を分離し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、真空中で減量した。３−［４−クロロ−２−（ジブロモメチル）フェニル］−１，２，５−チアジアゾールが黄色固体として単離された。
【０５０８】
【化２０４】
2005504003.tif 000209
ＭＳ  ｍ／ｚ＝２８７．７。
【０５０９】
ステップＣ：５−クロロ−２−（１，２，５−チアジアゾル−３−イル）ベンズアルデヒド
濃Ｈ２ＳＯ４（２０．０ｍｌ）中に３−［４−クロロ−２−（ジブロモメチル）フェニル］−１，２，５−チアジアゾール（０．４５２ｇ，１．２３ミリモル）及び硫酸カリウム（０．３３４，２．４５ミリモル）を含む溶液を撹拌し、この溶液を９０℃に１．５時間加熱した。溶液を氷水に注ぎ、飽和炭酸ナトリウム水溶液を用いて塩基性とし、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機相を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、真空中で減量した。５−クロロ−２−（１，２，５−チアジアゾル−３−イル）ベンズアルデヒドが固体として単離された。
【０５１０】
【化２０５】
2005504003.tif 000210
【０５１１】
ステップＤ：Ｎ−［５−クロロ−２−（１，２，５−チアジアゾル−３−イル）ベンジル］−Ｎ−（４−メトキシベンジル）アミン
１，２−ジクロロエタン（５．２ｍｌ）中に５−クロロ−２−（１，２，５−チアジアゾル−３−イル）ベンズアルデヒド（０．１５５ｇ，０．６９ミリモル）、４−メトキシベンジルアミン（０．０９ｍｌ，０．６９ミリモル）及び酢酸（０．０５ｍｌ，０．８３ミリモル）を含む溶液を撹拌し、ここにトリアセトキシホウ水素化ナトリウム（０．７３１ｇ，３．４５ミリモル）を添加した。溶液を周囲温度で１６時間撹拌した後、ＣＨ２Ｃｌ２と飽和炭酸水素ナトリウム水溶液に分配した。有機相を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、真空中で減量した。残渣を自動化分取シリカクロマトグラフィー（５→５０％  ＥｔＯＡｃ／ＣＨ２Ｃｌ２／ヘキサンで勾配溶離）により精製した。Ｎ−［５−クロロ−２−（１，２，５−チアジアゾル−３−イル）ベンジル］−Ｎ−（４−メトキシベンジル）アミンが油状物として単離された。
【０５１２】
【化２０６】
2005504003.tif 000211
ＭＳ  ｍ／ｚ＝３４６．５。
【０５１３】
ステップＥ：５−クロロ−２−（１，２，５−チアジアゾル−３−イル）ベンジルアンモニウムトリフルオロ酢酸塩
ＣＨ３ＣＮ（５．０ｍｌ）中にＮ−［５−クロロ−２−（１，２，５−チアジアゾル−３−イル）ベンジル］−Ｎ−（４−メトキシベンジル）アミン（０．１０４ｇ，０．３０ミリモル）を含む０℃溶液を撹拌し、ここに水（１０．０ｍｌ）中にＣＡＮ（０．９９０ｇ，１．８１ミリモル）を含む溶液を添加した。溶液を周囲温度で１時間撹拌した後、ＥｔＯＡｃと１０％  ＮＨ４ＯＨ水溶液に分配した。生じた懸濁液を濾過し、ＥｔＯＡｃ層を分離し、１０％  亜硫酸ナトリウム及びブラインで洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、真空中で減量した。生じた固体をＨＰＬＣ（Ｃ１８，アセトニトリル／水／０．１％  ＴＦＡで勾配溶離）により精製した。５−クロロ−２−（１，２，５−チアジアゾル−３−イル）ベンジルアンモニウムトリフルオロ酢酸塩が固体として単離された。
【０５１４】
【化２０７】
2005504003.tif 000212
ＭＳ  ｍ／ｚ＝２２６．５。
【０５１５】
ステップＦ：１−｛（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−２−シクロヘキシルエタノイル｝−Ｎ−［５−クロロ−２−（１，２，５−チアジアゾル−３−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
ＤＭＦ（０．５ｍｌ）中に５−クロロ−２−（１，２，５−チアジアゾル−３−イル）ベンジルアンモニウムトリフルオロ酢酸塩（４０．９ｍｇ，０．１３ミリモル）、１−｛（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−２−シクロヘキシルエタノイル｝−Ｌ−プロリン（一般的なペプチドカップリングプロトコルにより製造，４５．０ｍｇ，０．１３ミリモル）、ＨＯＡｔ（２２．５ｍｇ，０．１７ミリモル）及びＮ−メチルモルホリン（０．０３ｍｌ，０．２５ミリモル）を含む溶液を撹拌し、ここにＥＤＣ（３１．７ｍｇ，０．１７ミリモル）を添加した。１６時間後、溶液をＥｔＯＡｃと水に分配した。有機相をブラインで洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、真空中で減量した。１−｛（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−２−シクロヘキシルエタノイル｝−Ｎ−［５−クロロ−２−（１，２，５−チアジアゾル−３−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミドが固体として単離された。ＭＳ  ｍ／ｚ＝５６２．６。
【０５１６】
ステップＧ：１−［（２Ｒ）−２−アミノ−２−シクロヘキシルエタノイル］−Ｎ−［５−クロロ−２−（１，２，５−チアジアゾル−３−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
ＣＨ２Ｃｌ２（１．０ｍｌ）中に１−｛（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−２−シクロヘキシルエタノイル｝−Ｎ−［５−クロロ−２−（４−クロロ−１，２，５−チアジアゾル−３−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド（４１．１ｍｇ，０．０７ミリモル）を含む０℃溶液を撹拌し、ここにＨＣｌガスを１５分間通した。溶液を真空中で減量した。生じた固体をＥｔＯＡｃと粉砕し、濾過した。１−［（２Ｒ）−２−アミノ−２−シクロヘキシルエタノイル］−Ｎ−［５−クロロ−２−（１，２，５−チアジアゾル−３−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミドが固体として単離された。
【０５１７】
【化２０８】
2005504003.tif 000213
ＭＳ  ｍ／ｚ＝４６２．６。
【実施例５４】
【０５１８】
１−［（２Ｒ）−２−アミノ−２−シクロヘキシルエタノイル］−Ｎ−［５−クロロ−２−（１，２，３−チアジアゾル−４−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
【０５１９】
【化２０９】
2005504003.tif 000214
【０５２０】
ステップＡ：１−（４−クロロ−２−メチルフェニル）エタノン
ジエチルエーテル（４４ｍｌ）中に４−クロロ−２−メチルベンゾニトリル（５．００ｇ，３３．０ミリモル）を含む溶液を撹拌し、ここに臭化メチルマグネシウム（６．２９ｇ，５２．８ミリモル）を添加した。混合物を４０℃に加熱した。７２時間後、混合物を室温に冷却し、無水ジエチルエーテル（１２０ｍｌ）、氷水（１００ｍｌ）及び１０％  水性ＨＣｌ（１００ｍｌ）の撹拌混合物に注いだ。水性層を分離し、１時間還流下で撹拌した後、室温に冷却し、ジエチルエーテル（５０ｍｌ）で４回抽出した。有機層を合わせ、飽和ＮａＨＣＯ３及びブラインで洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、真空中で濃縮した。１−（４−クロロ−２−メチルフェニル）エタノンが固体として得られた。
【０５２１】
【化２１０】
2005504003.tif 000215
【０５２２】
ステップＢ：（２Ｅ）−２−［１−（４−クロロ−２−メチルフェニル）エチリデン］ヒドラジンカルボン酸エチル
トルエン（５０ｍｌ）中に１−（４−クロロ−２−メチルフェニル）エタノン（４．８１ｇ，２８．５３ミリモル）を含む溶液を撹拌し、ここにカルバジン酸エチル（２．９７０ｇ，２８．５３ミリモル）及びｐ−トルエンスルホン酸一水和物（４．４５６ｇ，２８．５３ミリモル）を添加した。混合物をＤｅａｎ−Ｓｔａｒｋ装置において還流加熱した。２時間後、溶液を蒸発させ、粘性の赤橙色油状物をシリカフラッシュクロマトグラフィー（５→４０％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで勾配溶離）により精製した。（２Ｅ）−２−［１−（４−クロロ−２−メチルフェニル）エチリデン］ヒドラジンカルボン酸エチルが白色結晶として得られた。ＭＳ  ｍ／ｚ＝２５５．６。
【０５２３】
【化２１１】
2005504003.tif 000216
【０５２４】
ステップＣ：４−（４−クロロ−２−メチルフェニル）−１，２，３−チアジアゾール
（２Ｅ）−２−［１−（４−クロロ−２−メチルフェニル）エチリデン］ヒドラジンカルボン酸エチル（０．６３ｇ，２．４５ミリモル）を塩化チオニル（１ｍｌ，１３．７０ミリモル）と一緒に６０℃で１時間撹拌した。混合物を室温に冷却し、真空中で濃縮した。４−（４−クロロ−２−メチルフェニル）−１，２，３−チアジアゾールが赤色固体として単離された。ＭＳ  ｍ／ｚ＝２１１．５。
【０５２５】
【化２１２】
2005504003.tif 000217
【０５２６】
ステップＤ：４−［２−（ブロモメチル）−４−クロロフェニル］−１，２，３−チアジアゾール
ＣＨＣｌ３（８２ｍｌ）中に４−（４−クロロ−２−メチルフェニル）−１，２，３−チアジアゾール（０．８２ｇ，３．８９ミリモル）を含む混合物を撹拌し、ここにＮＢＳ（０．８２ｇ，５．６２ミリモル）及びＡＩＢＮ（０．０７７ｇ，０．４７ミリモル）を添加した。１６時間後、更にＡＩＢＮ（０．１５４ｇ，０．９４ミリモル）及びＮＢＳ（０．８２ｇ，５．６２ミリモル）を添加し、更に２時間後混合物を室温に冷却し、ＣＨＣｌ３で希釈し、水、５％  チオ硫酸ナトリウム及びブラインで洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、真空中で濃縮した。生成物をシリカフラッシュクロマトグラフィー（１→２０％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで勾配溶離）により精製すると、淡黄色固体が得られた。これを次ステップに使用した。
【０５２７】
ステップＥ：４−［２−（アジドメチル）−４−クロロフェニル］−１，２，３−チアジアゾール
ＤＭＦ（２２ｍｌ）中にステップＤの生成物を含む溶液を撹拌し、ここにアジ化ナトリウム（０．５６ｇ，８．６１ミリモル）を添加した。１６時間後、混合物をＥｔＯＡｃと水に分配した。有機層をブラインで洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、真空中で濃縮した。生成物をシリカフラッシュクロマトグラフィー（１→１０％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで勾配溶離）により精製すると、淡黄色固体が得られた。これを次ステップに使用した。
【０５２８】
ステップＦ：１−［５−クロロ−２−（１，２，３−チアジアゾル−４−イル）フェニル］メタンアミン
無水ＴＨＦ（８．８ｍｌ）中にステップＥからの生成物を含む溶液を撹拌し、ここにトリフェニルホスフィン（０．３９０ｇ，１．４９ミリモル）及び脱イオン水（０．０２ｍｌ，１．１８ミリモル）を添加した。１６時間後、混合物を真空中で濃縮し、残渣をシリカフラッシュクロマトグラフィー（クロロホルム／１０％  ＮＨ４ＯＨ，ＭｅＯＨで溶離）により精製した。１−［５−クロロ−２−（１，２，３−チアジアゾル−４−イル）フェニル］メタンアミンが橙色ガラスとして得られた。ＭＳ  ｍ／ｚ＝２２６．５。
【０５２９】
【化２１３】
2005504003.tif 000218
【０５３０】
ステップＧ：１−｛（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−２−シクロヘキシルエタノイル｝−Ｎ−［５−クロロ−２−（１，２，３−チアジアゾル−４−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
ＤＭＦ（７．８ｍｌ）中に１−［５−クロロ−２−（１，２，３−チアジアゾル−４−イル）フェニル］メタンアミン（０．３５１ｇ，１．５５５ミリモル）を含む溶液を撹拌し、ここにＥＤＣ（０．３８８ｇ，２．０２ミリモル）、ＨＯＡｔ（０．２７５ｇ，２．０２ミリモル）及び１−｛（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−２−シクロヘキシルエタノイル｝−Ｌ−プロリン（一般的なペプチドカップリングプロトコルにより製造，０．５５１ｇ，１．５５ミリモル）を添加した。１６時間後、混合物をＥｔＯＡｃと水に分配した。有機層をブラインで洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、真空中で濃縮した。生成物をシリカフラッシュクロマトグラフィー（１→１００％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで勾配溶離）により精製した。１−｛（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−２−シクロヘキシルエタノイル｝−Ｎ−［５−クロロ−２−（１，２，３−チアジアゾル−４−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミドが固体として得られた。ＭＳ  ｍ／ｚ＝５６２．６。
【０５３１】
ステップＨ：１−［（２Ｒ）−２−アミノ−２−シクロヘキシルエタノイル］−Ｎ−［５−クロロ−２−（１，２，３−チアジアゾル−４−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド
０℃においてＣＨ２Ｃｌ２中に１−｛（２Ｒ）−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−２−シクロヘキシルエタノイル｝−Ｎ−［５−クロロ−２−（１，２，３−チアジアゾル−４−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド（０．２５ｇ，０．４４５ミリモル）を含む溶液を撹拌し、ここにＨＣＬガスを通した。１５分後、溶液を窒素を用いて脱ガスし、真空中で濃縮した。残渣を逆相ＨＰＬＣ（Ｃ１８，アセトニトリル／０．１％  ＴＦＡ／水で勾配溶離）により精製した。１−［（２Ｒ）−２−アミノ−２−シクロヘキシルエタノイル］−Ｎ−［５−クロロ−２−（１，２，３−チアジアゾル−４−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミドのＴＦＡ塩がガラスとして得られた。ＭＳ  ｍ／ｚ＝４６２．６。
【０５３２】
【化２１４】
2005504003.tif 000219
【実施例５５】
【０５３３】
４−メチル−Ｄ−ロイシル−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−アゼチジンアミド
【０５３４】
【化２１５】
2005504003.tif 000220
【０５３５】
ステップＡ：（２Ｓ）−２−（｛［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］アミノ｝カルボニル）アゼチジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル
（２Ｓ）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アゼチジン−２−カルボン酸（２４０ｍｇ，１．１９ミリモル）及びＮ−５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジルアミン（２５０ｍｇ，１．１９ミリモル）から、本質的に実施例２６のステップＢに記載のＥＤＣカップリング法（ただし、ＨＣｌ脱保護ステップを省略）に従って標記化合物を製造した。水及び飽和Ｋ２ＣＯ３水溶液を混合物に添加した。水性層をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層をブラインで洗浄した。合わせた水性層をＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。合わせた有機抽出物をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、黄色油状物まで濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー（５０〜８０％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）にかけると、標記化合物が黄色油状物として得られた。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：３９３．１。
【０５３６】
【化２１６】
2005504003.tif 000221
【０５３７】
ステップＢ：４−［２−（｛［（２Ｓ）−アゼチジニウム−２−イルカルボニル］アミノ｝メチル）−４−クロロフェニル］−４Ｈ−テトラゾル−１−イウム二塩酸塩
０℃においてＥｔＯＡｃ（２４．０ミリモル）中に（２Ｓ）−２−（｛［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］アミノ｝カルボニル）アゼチジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（４６７ｍｇ，１．１９ミリモル）を含む溶液にＨＣｌ（ｇ）を１０分間通した。溶媒を真空中で除去すると、標記化合物が黄色固体として得られた。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：２９３．０。
【０５３８】
【化２１７】
2005504003.tif 000222
【０５３９】
ステップＣ：Ｎ１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−４−メチル−Ｄ−ロイシル−Ｎ２−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−アゼチジンアミド
４−［２−（｛［（２Ｓ）−アゼチジニウム−２−イルカルボニル］アミノ｝メチル）−４−クロロフェニル］−４Ｈ−テトラゾル−１−イウムジクロリド（４４ｍｇ，０．１２ミリモル）及びＢｏｃ−Ｄ−ｔ−Ｂｕ−Ａｌａ（２９ｍｇ，０．１２ミリモル）から、本質的に実施例３９のステップＤに記載のＥＤＣカップリング法に従って標記化合物を製造した。反応混合物を逆相ＨＰＬＣにより精製すると、泡状白色固体が得られた。これを直接脱保護にかけた。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：５２０．３。
【０５４０】
ステップＤ：４−メチル−Ｄ−ロイシル−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−アゼチジンアミド
Ｎ１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−４−メチル−Ｄ−ロイシル−Ｎ２−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−アゼチジンアミドをＣＨ２Ｃｌ２（２．０ｍｌ）に取り、ＴＦＡ（１．０ｍｌ）を過剰に添加した。溶媒を真空中で除去し、残留油を逆相ＨＰＬＣにより精製すると、標記化合物のＴＦＡ塩が白色泡状固体が得られた。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：４２０．１。
【０５４１】
【化２１８】
2005504003.tif 000223
【実施例５６】
【０５４２】
４−メチル−Ｄ−ロイシル−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−ピペリジンアミド
【０５４３】
【化２１９】
2005504003.tif 000224
【０５４４】
ステップＡ：（２Ｓ）−２−（｛［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］アミノ｝カルボニル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル
ＤＭＦ（７ｍｌ）中に（２Ｓ）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペリジン−２−カルボン酸（２９９ｍｇ，１．３０ミリモル）、１−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）フェニル］メタンアミン（２９３ｍｇ，１．４０ミリモル）、ＥＤＣ（３７６ｍｇ，１．９６ミリモル）及びＨＯＡｔ（８９ｍｇ，０．６５ミリモル）を含む混合物を室温で１６時間撹拌した。水及び飽和Ｋ２ＣＯ３水溶液を添加し、混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、合わせた水性層をＣＨ２Ｃｌ２で１回抽出した。合わせた有機抽出物を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、黄色油状物まで濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー（６５％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）にかけると、標記化合物が薄黄色泡状物として得られた。
【０５４５】
【化２２０】
2005504003.tif 000225
【０５４６】
ステップＢ：（２Ｓ）−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］ピペリジン−２−カルボキサミド
ＥｔＯＡｃ（２４ｍｌ）中に（２Ｓ）−２−（｛［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］アミノ｝カルボニル）ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（５０６ｍｇ，１．２０ミリモル）を含む冷（０℃）溶液にＨＣｌガスを５分間通した。混合物を０℃で１５分間撹拌し、溶媒を真空中で除去した。Ｅｔ２Ｏから繰り返し濃縮すると、標記化合物の塩酸塩が薄黄色泡状物として得られた。
【０５４７】
【化２２１】
2005504003.tif 000226
【０５４８】
ステップＣ：４−メチル−Ｄ−ロイシル−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−ピペリジンアミド
（２Ｓ）−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］ピペリジン−２−カルボキサミド及びＢｏｃ−Ｄ−ｔ−Ｂｕ−Ａｌａから、本質的に実施例３９のステップＤに記載のカップリング法に従って標記化合物を製造後、実施例５５のステップＤに記載の手順に従って脱保護した。粗生成物を逆相ＨＰＬＣにより精製すると、標記化合物のＴＦＡ塩が泡状白色固体として得られた。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：４４８．２。
【０５４９】
【化２２２】
2005504003.tif 000227
【実施例５７】
【０５５０】
４−メチル−Ｄ−ロイシル−Ｎ１−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｎ２−シクロプロピルグリシンアミド
【０５５１】
【化２２３】
2005504003.tif 000228
【０５５２】
ステップＡ：２−ブロモ−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］アセトアミド
０℃において無水ＴＨＦ（３．３ｍｌ）中に１−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）フェニル］メタンアミン（１５０ｍｇ，０．７２ミリモル）及びＨｕｎｉｇ塩基（１３７μｌ，０．７９ミリモル）を含む溶液を撹拌し、ここに臭化ブロモアセチル（６９μｌ，０．７９ミリモル）を滴下した。生じた橙黄色懸濁液をＮ２雰囲気下０℃で２０分間撹拌した。混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、Ｈ２Ｏで２回、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で２回、水で１回洗浄した。有機層を乾燥し（無水Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、褐色油状物まで濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー（７０％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）にかけると、標記化合物が黄色油状物として得られた。この油状物を真空中で乾燥すると、褐色泡状物がゆっくり形成された。
【０５５３】
【化２２４】
2005504003.tif 000229
【０５５４】
ステップＢ：Ｎ１−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｎ２−シクロプロピルグリシンアミド
室温においてＣＨ２Ｃｌ２（２．５ｍｌ）中に２−ブロモ−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］アセトアミド（２０６ｍｇ，０．６２ミリモル）を含む溶液を撹拌し、ここにシクロプロピルアミン（５００μｌ，７．２２ミリモル）を添加した。生じた黄色溶液をＮ２雰囲気で１時間撹拌した。溶媒を真空中で除去し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ、次いで１０％  ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃで勾配溶離）により精製すると、真空中で乾燥後標記化合物が黄色固体として得られた。
【０５５５】
【化２２５】
2005504003.tif 000230
【０５５６】
ステップＣ：Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−４−メチル−Ｄ−ロイシル−Ｎ１−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｎ２−シクロプロピルグリシンアミド
ＤＭＦ（１．４ｍｌ）中にＮ１−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｎ２−シクロプロピルグリシンアミド（５０ｍｇ，０．１６ミリモル）、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−４−メチル−Ｄ−ロイシン（４２ｍｇ，０．１７ミリモル）、ＥＤＣ（４９ｍｇ，０．２６ミリモル）及びＨＯＡｔ（１６ｍｇ，０．１２ミリモル）を含む混合物を室温で１６時間撹拌した。標記化合物が逆相ＨＰＬＣにより白色泡状物として単離され、これを直接脱保護にかけた。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：５３４．１。
【０５５７】
ステップＤ：４−メチル−Ｄ−ロイシル−Ｎ１−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｎ２−シクロプロピルグリシンアミド
ＣＨ２Ｃｌ２（６ｍｌ）中にＮ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−４−メチル−Ｄ−ロイシル−Ｎ１−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｎ２−シクロプロピルグリシンアミド（８０ｍｇ，０．１５ミリモル）を含む溶液にＴＦＡ（３ｍｌ）を添加した。溶液を室温で３０分間撹拌した後、溶媒を真空中で除去した。残渣をＤＭＦに取り、逆相ＨＰＬＣにより精製した、生成物フラクションを合わせ、真空中で減量し、残量油状物を繰り返しＥｔ２Ｏから濃縮すると、標記化合物が白色泡状物として得られた。
【０５５８】
【化２２６】
2005504003.tif 000231
ＨＲＭＳ（ＡＰＣＩ，Ｍ＋Ｈ）：実測値  ４３４．２０５５、計算値  ４３４．２０６６。
【実施例５８】
【０５５９】
Ｎ１−［（１Ｓ）−１−（｛［５−クロロ−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）ベンジル］アミノ｝カルボニル）プロピル］−４−メチル−Ｄ−ロイシンアミド
【０５６０】
【化２２７】
2005504003.tif 000232
【０５６１】
ステップＡ：（１Ｓ）−１−（｛［５−クロロ−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）ベンジル］アミノ｝カルボニル）プロピルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル
Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−α−アミノ酪酸（１０７ｍｇ，０．５３ミリモル）及び１−［５−クロロ−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）フェニル］メタンアミン（１１１ｍｇ，０．５３ミリモル）から、本質的に実施例５６のステップＡに記載のＥＤＣカップリング法に従って標記化合物を製造した。シリカゲルクロマトグラフィー（５０〜８０％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）にかけると、淡黄色油状物が得られた。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：３９４．１。
【０５６２】
【化２２８】
2005504003.tif 000233
【０５６３】
ステップＢ：（２Ｓ）−２−アミノ−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）ベンジル］ブタンアミド
ＥｔＯＡｃ（２．６ｍｌ）中に（１Ｓ）−１−（｛［５−クロロ−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）ベンジル］アミノ｝カルボニル）プロピルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（２０８ｍｇ，０．５３ミリモル）を含む溶液を撹拌し、ここにジオキサン中４Ｍ  ＨＣｌ（０．５ｍｌ，過剰）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌した。溶媒を真空中で除去すると、標記化合物の塩酸塩が白色泡状固体として得られた。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：２９４．０。
【０５６４】
【化２２９】
2005504003.tif 000234
【０５６５】
ステップＣ：Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ１−［（１Ｓ）−１−（｛［５−クロロ−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）ベンジル］アミノ｝カルボニル）プロピル］−４−メチル−Ｄ−ロイシンアミド
ＤＭＦ（１．０ｍｌ）中にＢｏｃ−Ｄ−ｔ−ブチルアラニン（４９ｍｇ，０．２０ミリモル）、（２Ｓ）−２−アミノ−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）ベンジル］ブタンアミド（６６ｍｇ，０．２０ミリモル）、ＨＯＡｔ（２７ｍｇ，０．２０ミリモル）、ＥＤＣ（５７ｍｇ，０．３０ミリモル）及びＥｔ３Ｎ（２８μｌ，０．２０ミリモル）を含む混合物を室温で一晩撹拌した。溶解を助けるために少量のＭｅＯＨを使用した。溶媒を真空中で除去すると、標記化合物が得られた。これを直接脱保護にかけた。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：５２１．２。
【０５６６】
ステップＤ：Ｎ１−［（１Ｓ）−１−（｛［５−クロロ−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）ベンジル］アミノ｝カルボニル）プロピル］−４−メチル−Ｄ−ロイシンアミド
室温においてＣＨ２Ｃｌ２（１ｍｌ）中にＮ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ１−［（１Ｓ）−１−（｛［５−クロロ−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）ベンジル］アミノ｝カルボニル）プロピル］−４−メチル−Ｄ−ロイシンアミド（１０４ｍｇ，０．２０ミリモル）を含む溶液を撹拌し、ここにＴＦＡ（０．５ｍｌ，過剰）を添加し、混合物を一晩撹拌した。溶媒を真空中で除去し、残留黄色油状物を逆相ＨＰＬＣにより精製すると、標記化合物のＴＦＡ塩が白色固体として得られた。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：４２１．２。
【０５６７】
【化２３０】
2005504003.tif 000235
【実施例５９】
【０５６８】
Ｎ１−［（１Ｓ）−１−（｛［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］アミノ｝カルボニル）プロピル］−４−メチル−Ｄ−ロイシンアミド
【０５６９】
【化２３１】
2005504003.tif 000236
【０５７０】
ステップＡ：（１Ｓ）−１−（｛［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］アミノ｝カルボニル）プロピルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル
Ｎ−Ｂｏｃ−Ｌ−α−アミノ酪酸（１２２ｍｇ，０．６０ミリモル）及び１−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）フェニル］メタンアミン（１２６ｍｇ，０．６０ミリモル）から、本質的に実施例５６のステップＡに記載のＥＤＣカップリング法に従って標記化合物を製造した。シリカゲルクロマトグラフィー（５０％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）にかけると、標記化合物が無色油状物として得られた。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：３４９．９。
【０５７１】
【化２３２】
2005504003.tif 000237
【０５７２】
ステップＢ：（２Ｓ）−２−アミノ−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］ブタンアミド
室温においてＥｔＯＡｃ（３．５ｍｌ）中に（１Ｓ）−１−（｛［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］アミノ｝カルボニル）プロピルカルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（２３７ｍｇ，０．６０ミリモル）を含む溶液を撹拌し、ここにジオキサン中４Ｍ  ＨＣｌ（０．６ｍｌ，過剰）を添加した。３０分後、生成物を溶解状態に保つために少量のＭｅＯＨを添加した。３時間後、更に４Ｍ  ＨＣｌ／ジオキサン（０．６ｍｌ）を添加し、室温で一晩撹拌し続けた。溶媒を真空中で除去すると、標記化合物が泡状黄色固体として得られた。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：２９５．０。
【０５７３】
【化２３３】
2005504003.tif 000238
【０５７４】
ステップＣ：Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ１−［（１Ｓ）−１−（｛［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］アミノ｝カルボニル）プロピル］−４−メチル−Ｄ−ロイシンアミド
ＤＭＦ（１．０ｍｌ）中にＢｏｃ−Ｄ−ｔｅｒｔ−ブチル−アラニン（７４ｍｇ，０．３０ミリモル）、（２Ｓ）−２−アミノ−Ｎ−［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］ブタンアミド（９９ｍｇ，０．３０ミリモル）、ＨＯＡｔ（４１ｍｇ，０．３０ミリモル）、ＥＤＣ（８６ｍｇ，０．４５ミリモル）及びＥｔ３Ｎ（４２μｌ，０．３０ミリモル）を含む混合物を室温で一晩撹拌した。溶解を助けるために少量のＭｅＯＨを添加した。溶媒を真空中で除去すると、標記化合物が得られた。これを直接脱保護にかけた。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：５２２．０。
【０５７５】
ステップＤ：Ｎ１−［（１Ｓ）−１−（｛［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］アミノ｝カルボニル）プロピル］−４−メチル−Ｄ−ロイシンアミド
０℃においてＣＨ２Ｃｌ２（１．０ｍｌ）中に  Ｎ２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎ１−［（１Ｓ）−１−（｛［５−クロロ−２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］アミノ｝カルボニル）プロピル］−４−メチル−Ｄ−ロイシンアミドを含む溶液を撹拌し、ここにＴＦＡ（１．０ｍｌ，過剰）を添加した。反応物を撹拌しながら一晩室温に加温した。溶媒を真空中で除去した。残渣をＤＭＦに取り、逆相ＨＰＬＣにより精製すると、標記化合物のＴＦＡ塩が黄色固体として得られた。ＬＣＭＳ（Ｍ＋Ｈ）：４２２．０。
【０５７６】
【化２３４】
2005504003.tif 000239
【実施例６０】
【０５７７】
４−メチル−Ｄ−ロイシル−Ｎ１−［５−クロロ−２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−バリンアミド
【０５７８】
【化２３５】
2005504003.tif 000240
【０５７９】
Ｂｏｃ−Ｌ−バリンから、本質的に実施例５８に記載の手順に従って標記化合物を製造した。
【０５８０】
【化２３６】
2005504003.tif 000241
ＨＲＭＳ（ＦＡＢ）  Ｍ＋Ｈ：計算値（Ｃ２１Ｈ３１Ｎ６Ｏ２Ｃｌ）＋  ４３５．２１９７、実測値  ４３５．２２７１。
【実施例６１】
【０５８１】
ＨＰＬＣ条件
ＨＰＬＣ方法は以下のように定義される。
【０５８２】
方法ＡまたはＸ
固定相：Ｈｅｗｌｅｔｔ−Ｐａｃｋａｒｄ  Ｚｏｒｂａｘ  ＳＢ−Ｃ８カラム（７５×４．６ｍｍ），３．５ミクロン
移動相：
Ａ＝０．１容量％のＴＦＡ含有Ｈ２Ｏ
Ｂ＝０．１容量％のＴＦＡ含有ＣＨ３ＣＮ
勾配＝４．５分間で９５：５→０：１００  Ａ：Ｂ
流速＝３．０ｍｌ／分
２１５ｎｍでＵＶ検出。
【０５８３】
方法Ｂ
固定相：Ｗａｔｅｒｓ  Ｘｔｅｒｒａ  ＲＰ１８カラム（５０×４．６ｍｍ），３．５ミクロン
移動相：
Ａ＝０．１容量％のＨ３ＰＯ４含有Ｈ２Ｏ
Ｂ＝ＣＨ３ＣＮ
勾配＝４．０分間で９５：５→５：９５  Ａ：Ｂ
流速＝４．０ｍｌ／分
２１５ｎｍでＵＶ検出。
【０５８４】
トロンビン阻害剤を投与するのに適した典型的な錠剤コアは下記する量の標準成分から構成されるが、これらに限定されない。
【０５８５】
【表１】
2005504003.tif 000242
【０５８６】
マンニトール、微結晶セルロース及びステアリン酸マグネシウムの代わりに別の医薬的に許容され得る賦形剤を使用してもよい。
【０５８７】
プロテイナーゼ阻害を測定するためのインビトロアッセイ
ヒトα−トロンビン及びヒトトリプシンのアッセイを、Ｓ．Ｄ．Ｌｅｗｉｓら，Ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，Ｉｓｓｕｅ  Ｎｏ．７０，ｐ．１７３（１９９３）に実質的に記載されている方法により実施した。
【０５８８】
前記アッセイを０．０５Ｍ  ＴＲＩＳ緩衝液（ｐＨ７．４）、０．１５Ｍ  ＮａＣｌ、０．１％  ＰＥＧ中２５℃で実施した。トリプシンアッセイには１ｍＭ  ＣａＣｌ２も含めた。ｐ−ニトロアニリド（ｐｎａ）基質の加水分解率を測定するアッセイでは、Ｔｈｅｒｍｏｍａｘ９６ウェルプレートリーダーを用いてｐ−ニトロアニリンの生成を経時的に（４０５ｎｍで）測定した。ｓａｒ−ＰＲ−ｐｎａを用いてヒトα−トロンビン（Ｋｍ＝１２５μＭ）及びウシトリプシン（Ｋｍ＝１２５μＭ）をアッセイした。３４２ｎｍでの吸光度測定値から８２７０ｃｍ−１Ｍ−１の吸光係数を用いてｐ−ニトロアニリド基質濃度を求めた。
【０５８９】
トロンビン阻害度が高い強力な阻害剤（Ｋｉ＜１０ｎＭ）を用いる試験では、感度活性のより高いアッセイを使用した。このアッセイでは、蛍光原基質Ｚ−ＧＰＲ−ａｆｃ（Ｋｍ＝２７μＭ）のトロンビン触媒加水分解率を、７−アミノ−４−トリフルオロメチルクマリンの生成に伴う５００ｎｍ（４００ｎｍで励起）での蛍光の増加から測定した。Ｚ−ＧＰＲ−ａｆｃのストック溶液のアリコートがトロンビンにより完全加水分解したときに生成する７−アミノ−４−トリフルオロメチルクマリンの３８０ｎｍでの吸光度を測定して、該ストック溶液の濃度を調べた。
【０５９０】
活性アッセイは、酵素または阻害剤で平衡化した酵素を含有する溶液に基質のストック溶液を少なくとも１０倍希釈して≦０．１Ｋｍの最終濃度とすることにより実施した。酵素と阻害剤の平衡を得るのに要する時間をコントロール実験で求めた。阻害剤の非存在下（Ｖ０）または阻害剤の存在下（Ｖｉ）での生成物形成の初期速度を測定した。競合阻害であり、Ｋｍ／［Ｓ］、［Ｉ］／ｅ及び［Ｉ］／ｅ（ここで［Ｓ］、［Ｉ］及びｅはそれぞれ基質、阻害剤及び酵素の全濃度を表す）に比して単位元が無視できると仮定すると、酵素からの阻害剤の解離の平衡常数（Ｋｉ）は、下記式に示すようにＶ０／Ｖｉの［Ｉ］に対する依存から求めることができる。
【０５９１】
Ｖ０／Ｖｉ＝１＋［Ｉ］／Ｋｉ              （１）
このアッセイで調べた活性は、本発明化合物が不安定型狭心症、難治性狭心症、心筋梗塞、一過性虚血発作、心房細動、血栓性脳卒中、塞栓性卒中、深静脈血栓症、播種性血管内凝固及び再疎通血管の再閉塞または再狭窄を患っている患者の様々な状態の治療に有用であることを示す。
【実施例６２】
【０５９２】
錠剤製造
下記活性化合物を２５．０ｍｇ、５０．０ｍｇ及び１００．０ｍｇ含有する錠剤を以下のように製造する（組成物Ａ〜Ｃ）。活性化合物ＩはＤ−フェニルアラニル−Ｎ−［２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド塩酸塩である。
【０５９３】
【表２】
2005504003.tif 000243
【０５９４】
活性成分、セルロース及びコーンスターチの一部を混合し、造粒して１０％コーンスターチペーストとする。生じた顆粒を篩い分けし、乾燥し、コーンスターチの残部及びステアリン酸マグネシウムと混合する。次いで、生じた顆粒を圧縮して、１錠あたり２５．０ｍｇ、５０．０ｍｇ及び１００．０ｍｇの活性成分を含有する錠剤とする。
【実施例６３】
【０５９５】
錠剤製造
Ｄ−フェニルアラニル−Ｎ−［２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド塩酸塩（活性化合物Ｉ）を含む錠剤の例を以下に示す。
【０５９６】
【表３】
2005504003.tif 000244
【０５９７】
２ｍｇ、１０ｍｇ及び５０ｍｇの錠剤にヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース及び酸化チタンの水性分散液を用いてフィルムコーティングを施し、２．４％の公称重量増加を与えた。
【０５９８】
直接圧縮による錠剤製剤
活性化合物Ｉ、マンニトール及び微結晶セルロースを特定サイズ（通常２５０〜７５０μｍ）のメッシュスクリーンを用いて篩い分けし、適当なブレンダーにおいて混合した。その後、薬物が生じた乾燥粉末ブレンド中に均一に分散されるまで混合物をブレンドした（通常１５〜３０分間）。ステアリン酸マグネシウムを篩い分けし、ブレンダーに添加した。その後、次の混合まで錠剤ブレンドを予備圧縮した（通常２〜１０分間）。次いで、予備圧縮した錠剤ブレンドを、許容され得る崩壊時間（圧縮錠剤のサイズ及び力価により異なる）で適当な物理的強度を有する錠剤を与えるのに十分な力（通常０．５〜２．５メートルトン）を加えて圧縮した。２、１０及び５０ｍｇの錠剤の場合には、錠剤を再びダスティングし、水溶性ポリマー及び顔料の水性分散液を用いてフィルムコーティングした。
【０５９９】
乾式造粒による錠剤製剤
乾燥粉末ブレンドを適度な力で圧縮し、再粉砕して、特定の粒径を有する顆粒とする。次いで、この顆粒を上記と同様にしてステアリン酸マグネシウムと混合し、錠剤化する。
【実施例６４】
【０６００】
静注製剤
Ｄ−フェニルアラニル−Ｎ−［２−（１Ｈ−テトラゾル−１−イル）ベンジル］−Ｌ−プロリンアミド塩酸塩（活性化合物Ｉ）の静注製剤を一般的な静注製剤手順に従って製造した。
【０６０１】
【表４】
2005504003.tif 000245
【０６０２】
例示組成物Ａ〜Ｃは以下の通りである：
【０６０３】
【表５】
2005504003.tif 000246
【０６０４】
グルクロン酸の代わりに他の緩衝酸、例えばＬ−乳酸、酢酸、クエン酸、または静注投与のために許容され得るｐＨ範囲で十分な緩衝能を有する他の医薬的に許容され得る酸／共役塩基を使用することができる。
【国際公開パンフレット】
2005504003.tif 000262
2005504003.tif 000263
2005504003.tif 000264
2005504003.tif 000265
2005504003.tif 000266
2005504003.tif 000267
2005504003.tif 000268
2005504003.tif 000269
2005504003.tif 000270
2005504003.tif 000271
2005504003.tif 000272
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