(57)【要約】  本発明は、式（Ｉ）（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、明細書中に定義の意味を有する）を有する化合物；それらの製造方法；それらを含有する医薬組成物；該医薬組成物を製造する方法；および療法でのそれらの使用を提供する。    【化１】2005515998.tif 000079
2005515998.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）
【化１】
2005515998.tif 000073
［式中、Ｒ１は、窒素、酸素および硫黄より選択される少なくとも一つの環ヘテロ原子を含む５員または６員ヘテロ芳香環であり、該環は、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ（各々、ハロゲン、アミノ、ヒドロキシルおよびトリフルオロメチルより選択される少なくとも一つの置換基で置換されていてもよい）、ハロゲン、ニトロ、シアノ、−ＮＲ５Ｒ６、カルボキシル、ヒドロキシル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニル、Ｃ１−Ｃ６アルキルカルボニル、Ｃ１−Ｃ６アルキルカルボニルアミノ、フェニルカルボニル、−Ｓ（Ｏ）ｍＣ１−Ｃ６アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ７Ｒ８、−ＳＯ２ＮＲ７ａＲ８ａ、ならびに窒素、酸素および硫黄より選択される少なくとも一つの環ヘテロ原子を含んでよい不飽和の５〜６員環（該環自体が、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ（各々、ハロゲン、アミノ、ヒドロキシルおよびトリフルオロメチルより選択される少なくとも一つの置換基で置換されていてもよい）、ハロゲン、ニトロ、シアノ、−ＮＲ９Ｒ１０、カルボキシル、ヒドロキシル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニル、Ｃ１−Ｃ６アルキルカルボニル、Ｃ１−Ｃ６アルキルカルボニルアミノ、フェニルカルボニル、−Ｓ（Ｏ）ｎＣ１−Ｃ６アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１１Ｒ１２および−ＳＯ２ＮＲ１１ａＲ１２ａより選択される少なくとも一つの置換基で置換されていてよい）より選択される少なくとも一つの置換基で置換されていてよく；
ｍは、０、１または２であり；
ｎは、０、１または２であり；
Ｒ２は、Ｃ１−Ｃ４アルキル基であって、ハロゲン、ヒドロキシルおよびＣ１−Ｃ３アルコキシより選択される少なくとも一つの置換基で置換されていてよいものであり；
Ｒ３は、水素、ハロゲンまたはトリフルオロメチルであり；
Ｒ４は、窒素、酸素および硫黄より選択される少なくとも一つの環ヘテロ原子を含む５員ヘテロ芳香環であり、該環は、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ（各々、ハロゲン、アミノ、ヒドロキシルおよびトリフルオロメチルより選択される少なくとも一つの置換基で置換されていてもよい）、ハロゲン、ニトロ、シアノ、−ＮＲ１３Ｒ１４、カルボキシル、ヒドロキシル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシカルボニル、Ｃ１−Ｃ４アルキルカルボニル、Ｃ１−Ｃ４アルキルカルボニルアミノ、フェニルカルボニル、−Ｓ（Ｏ）ｐＣ１−Ｃ４アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１５Ｒ１６および−ＳＯ２ＮＲ１５ａＲ１６ａより選択される少なくとも一つの置換基で置換されていてよく；
ｐは、０、１または２であり；
Ｒ５およびＲ６は、各々独立して、水素、Ｃ１−Ｃ４アルキルまたはＣ３−Ｃ６シクロアルキルであり、あるいはＲ５およびＲ６は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、４〜６員飽和複素環を形成し；
Ｒ７およびＲ８は、各々独立して、水素、Ｃ１−Ｃ４アルキルまたはＣ３−Ｃ６シクロアルキルであり、あるいはＲ７およびＲ８は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、４〜６員飽和複素環を形成し；
Ｒ７ａおよびＲ８ａは、各々独立して、水素、Ｃ１−Ｃ４アルキルまたはＣ３−Ｃ６シクロアルキルであり、あるいはＲ７ａおよびＲ８ａは、それらが結合している窒素原子と一緒になって、４〜６員飽和複素環を形成し；
Ｒ９およびＲ１０は、各々独立して、水素、Ｃ１−Ｃ４アルキルまたはＣ３−Ｃ６シクロアルキルであり、あるいはＲ９およびＲ１０は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、４〜６員飽和複素環を形成し；
Ｒ１１およびＲ１２は、各々独立して、水素、Ｃ１−Ｃ４アルキルまたはＣ３−Ｃ６シクロアルキルであり、あるいはＲ１１およびＲ１２は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、４〜６員飽和複素環を形成し；
Ｒ１１ａおよびＲ１２ａは、各々独立して、水素、Ｃ１−Ｃ４アルキルまたはＣ３−Ｃ６シクロアルキルであり、あるいはＲ１１ａおよびＲ１２ａは、それらが結合している窒素原子と一緒になって、４〜６員飽和複素環を形成し；
Ｒ１３およびＲ１４は、各々独立して、水素、Ｃ１−Ｃ４アルキルまたはＣ３−Ｃ６シクロアルキルであり、あるいはＲ１３およびＲ１４は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、４〜６員飽和複素環を形成し；
Ｒ１５およびＲ１６は、各々独立して、水素、Ｃ１−Ｃ４アルキルまたはＣ３−Ｃ６シクロアルキルであり、あるいはＲ１５およびＲ１６は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、４〜６員飽和複素環を形成し；そして
Ｒ１５ａおよびＲ１６ａは、各々独立して、水素、Ｃ１−Ｃ４アルキルまたはＣ３−Ｃ６シクロアルキルであり、あるいはＲ１５ａおよびＲ１６ａは、それらが結合している窒素原子と一緒になって、４〜６員飽和複素環を形成する］
を有する化合物；
またはその薬学的に許容しうる塩もしくは溶媒和化合物。
【請求項２】
Ｒ１が、窒素、酸素および硫黄より選択される少なくとも一つの環ヘテロ原子を含む５員または６員ヘテロ芳香環であり、該環が、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ（各々、ヒドロキシルより選択される少なくとも一つの置換基で置換されていてもよい）、ハロゲン、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ７Ｒ８、Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニル、ならびに窒素および酸素より選択される少なくとも一つの環ヘテロ原子を含んでよい不飽和の５〜６員環（該環自体が、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ（各々、ハロゲンより選択される少なくとも一つの置換基で置換されていてもよい）、ハロゲンおよびシアノより選択される少なくとも一つの置換基で置換されていてよい）より選択される少なくとも一つの置換基で置換されていてよく；ここにおいて、Ｒ７およびＲ８は、双方とも水素であり、またはＲ７およびＲ８は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、４〜６員飽和複素環を形成する請求項１に記載の化合物；またはその薬学的に許容しうる塩もしくは溶媒和化合物。
【請求項３】
Ｒ１が、ピリジル、イミダゾリル、イソキサゾリル、ピラゾリル、フリル、ピラジニル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピロリルまたはチエニルであり；該ピリジル、イミダゾリル、イソキサゾリル、ピラゾリル、フリル、ピラジニル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピロリルおよびチエニルが、メチル、イソプロピル、ヒドロキシメチル、メトキシ、クロロ、ブロモ、カルバモイル、メトキシカルボニル、ピロリジン−１−イルカルボニル、フェニルおよびピリジルより選択される少なくとも一つの置換基で置換されていてよく；該フェニルまたはピリジルが、メチル、トリフルオロメチル、メトキシ、エトキシ、トリフルオロメトキシ、フルオロ、クロロ、ブロモおよびシアノより選択される少なくとも一つの置換基で置換されていてよい請求項１または請求項２に記載の化合物；またはその薬学的に許容しうる塩もしくは溶媒和化合物。
【請求項４】
Ｒ２がＣ１−Ｃ４アルキル基である請求項１〜３のいずれか１項に記載の化合物；またはその薬学的に許容しうる塩もしくは溶媒和化合物。
【請求項５】
Ｒ３が、水素またはハロゲンである請求項１〜４のいずれか１項に記載の化合物；またはその薬学的に許容しうる塩もしくは溶媒和化合物。
【請求項６】
Ｒ４が、窒素より選択される少なくとも一つの環ヘテロ原子を含む５員ヘテロ芳香環であり、該環が、Ｃ１−Ｃ６アルキルおよびＣ３−Ｃ６シクロアルキルより選択される少なくとも一つの置換基で置換されていてよい請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物；またはその薬学的に許容しうる塩もしくは溶媒和化合物。
【請求項７】
Ｒ４中において、５員ヘテロ芳香環がピラゾリルであり、該環が、メチル、エチル、イソプロピル、プロピル、ｔ−ブチルおよびシクロプロピルより選択される少なくとも一つの置換基で置換されていてよい請求項６に記載の化合物；またはその薬学的に許容しうる塩もしくは溶媒和化合物。
【請求項８】
Ｒ１が、ピリド−２−イル、ピリド−３−イル、ピリド−４−イル、２−メトキシピリド−５−イル、２−シアノピリド−５−イル、３−ブロモピリド−５−イル、３−（ピリド−２−イル）ピリド−５−イル、４−（ピリド−２−イル）ピリド−２−イル、３−クロロピリド−２−イル、３−メチルピリド−２−イル、６−メチルピリド−２−イル、５，６−ジメチルピリド−２−イル、イミダゾール−４−イル、イミダゾール−５−イル、３−メチルイソキサゾール−５−イル、５−メチルイソキサゾール−３−イル、３−イソプロピルイソキサゾール−５−イル、３−メトキシカルボニルイソキサゾール−５−イル、３−（ヒドロキシメチル）イソキサゾール−５−イル、３−カルバモイルイソキサゾール−５−イル、３−（ピロリジン−１−イルカルボニル）イソキサゾール−５−イル、３−フェニルイソキサゾール−５−イル、３−（ピリド−２−イル）イソキサゾール−５−イル、３−（２−メトキシピリド−３−イル）イソキサゾール−５−イル、３−（２−メトキシフェニル）イソキサゾール−５−イル、３−（３−メトキシフェニル）イソキサゾール−５−イル、３−（２−エトキシフェニル）イソキサゾール−５−イル、３−（２−トリフルオロメチルフェニル）イソキサゾール−５−イル、３−（２−トリフルオロメトキシフェニル）イソキサゾール−５−イル、３−（２−クロロフェニル）イソキサゾール−５−イル、３−（２−ブロモフェニル）イソキサゾール−５−イル、３−（２−メチルフェニル）イソキサゾール−５−イル、３−（２−フルオロフェニル）イソキサゾール−５−イル、３−（２−シアノフェニル）イソキサゾール−５−イル、５−メチルピラゾール−４−イル、フル−２−イル、フル−３−イル、５−メチルフル−２−イル、ピラジン−２−イル、２−メチルピラジン−５−イル、ピリダジン−３−イル、ピリミジン−４−イル、１−メチルピロール−２−イルおよびチエン−３−イルであり；
Ｒ２が、メチル、エチルおよびプロピルであり；
Ｒ３が、水素、クロロまたはブロモであり；そして
Ｒ４が、５−メチルピラゾール−３−イル、５−エチルピラゾール−３−イル、５−イソプロピルピラゾール−３−イル、５−プロピルピラゾール−３−イル、５−ｔ−ブチルピラゾール−３−イルおよび５−シクロプロピルピラゾール−３−イルである請求項１に記載の化合物；またはその薬学的に許容しうる塩もしくは溶媒和化合物。
【請求項９】
５−ブロモ−２−（３−メチルイソキサゾール−５−イルメチルアミノ）−４−（５−シクロプロピル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピリミジン、
５−クロロ−２−（３−フェニルイソキサゾール−５−イルメチルアミノ）−４−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピリミジン、
５−クロロ−２−（３−ピリド−２−イルイソキサゾール−５−イルメチルアミノ）−４−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピリミジン、
５−ブロモ−２−（３−ピリド−２−イルイソキサゾール−５−イルメチルアミノ）−４−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピリミジン、
５−クロロ−２−（３−メチルイソキサゾール−５−イルメチルアミノ）−４−（５−tert−ブチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピリミジン、
５−ブロモ−２−（３−メチルイソキサゾール−５−イルメチルアミノ）−４−（５−エチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピリミジン、
５−クロロ−２−［３−（２−フルオロフェニル）イソキサゾール−５−イルメチルアミノ］−４−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピリミジン、
５−ブロモ−２−［３−（２−フルオロフェニル）イソキサゾール−５−イルメチルアミノ］−４−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピリミジン、
５−クロロ−２−［３−（２−フルオロフェニル）イソキサゾール−５−イルメチルアミノ］−４−（５−tert−ブチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピリミジン、
５−ブロモ−４−（５−イソプロピル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）−２−（ピリド−２−イルメチルアミノ）ピリミジン、
５−ブロモ−２−（３−メチルイソキサゾール−５−イルメチルアミノ）−４−（５−プロピル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピリミジン、
５−ブロモ−２−（３−メチルイソキサゾール−５−イルメチルアミノ）−４−（５−イソプロピル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピリミジン、
５−クロロ−２−［３−（ピリド−２−イル）イソキサゾール−５−イルメチルアミノ］−４−（５−tert−ブチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピリミジン、
５−ブロモ−２−［３−（ピリド−２−イル）イソキサゾール−５−イルメチルアミノ］−４−（５−tert−ブチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピリミジン、および
５−ブロモ−２−（３−ブロモピリド−５−イルメチルアミノ）−４−（５−tert−ブチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピリミジン
より選択される化合物、およびそのいずれか一つの薬学的に許容しうる塩および溶媒和化合物。
【請求項１０】
請求項１に記載の化合物の製造方法であって、
（ｉ）式
【化２】
2005515998.tif 000074
（式中、Ｌ１は脱離基であり、Ｒ３およびＲ４は、式（Ｉ）に定義の通りである）
を有する化合物と、式（III）Ｈ２Ｎ−Ｒ２−Ｒ１（式中、Ｒ１およびＲ２は、式（Ｉ）に定義の通りである）を有する化合物とを反応させること；または
（ii）式
【化３】
2005515998.tif 000075
（式中、Ｌ２は脱離基であり、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、式（Ｉ）に定義の通りである）
を有する化合物と、式（Ｖ）Ｈ２Ｎ−Ｒ４（式中、Ｒ４は式（Ｉ）に定義の通りである）を有する化合物とを反応させること；または
（iii）式
【化４】
2005515998.tif 000076
（式中、Ｒ１およびＲ２は、式（Ｉ）に定義の通りである）
を有する化合物と、式
【化５】
2005515998.tif 000077
（式中、Ｘは酸素原子であり且つｑは１であり、またはＸは窒素原子であり且つｑは２であり、Ｒ２０は各々独立して、Ｃ１−Ｃ６アルキル基であり、Ｒ３およびＲ４は、式（Ｉ）に定義の通りである）
を有する化合物とを反応させること；または
（iv）Ｒ４が置換されたピラゾリルである場合、式
【化６】
2005515998.tif 000078
（式中、Ｒ２１は、Ｃ１−Ｃ６アルキル基またはＣ３−Ｃ６シクロアルキル基であり、そしてＲ１、Ｒ２およびＲ３は、式（Ｉ）に定義の通りである）
を有する化合物とヒドラジンとを反応させること；
を含む方法、
ここで、（ｉ）、（ii）、（iii）または（iv）の後に、下記の一つ以上を行ってもよい：
・得られた化合物を、請求項１に記載の更に別の化合物に変換すること
・該化合物の薬学的に許容しうる塩または溶媒和化合物を形成すること。
【請求項１１】
請求項１〜９のいずれか１項に記載の式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容しうる塩もしくは溶媒和化合物を、薬学的に許容しうるアジュバント、希釈剤または担体と一緒に含む医薬組成物。
【請求項１２】
請求項１１に記載の医薬組成物の製造方法であって、請求項１〜９のいずれか１項に記載の式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容しうる塩もしくは溶媒和化合物と、薬学的に許容しうるアジュバント、希釈剤または担体とを混合することを含む方法。
【請求項１３】
療法で用いるための請求項１〜９のいずれか１項に記載の式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容しうる塩もしくは溶媒和化合物。
【請求項１４】
癌の処置で用いるための薬剤の製造における、請求項１〜９のいずれか１項に記載の式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容しうる塩もしくは溶媒和化合物の使用。
【請求項１５】
インスリン様成長因子１受容体活性を調節するのに用いるための薬剤の製造における、請求項１〜９のいずれか１項に記載の式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容しうる塩もしくは溶媒和化合物の使用。
【請求項１６】
癌を処置する方法であって、請求項１〜９のいずれか１項に記載の式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容しうる塩もしくは溶媒和化合物の治療的有効量を患者に投与することを含む方法。
【請求項１７】
インスリン様成長因子１受容体活性を調節する方法であって、それを必要としている患者に、請求項１〜９のいずれか１項に記載の式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容しうる塩もしくは溶媒和化合物の治療的有効量を投与することを含む方法。
【請求項１８】
Ｒ１中において、５員または６員ヘテロ芳香環が、チエニル、ピラゾリル、イソキサゾリル、チアジアゾリル、ピロリル、フラニル、チアゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、イミダゾリル、ピラジニル、ピリダジニル、ピリミジニルおよびピリジルより選択される請求項１に記載の化合物；またはその薬学的に許容しうる塩もしくは溶媒和化合物。
【請求項１９】
Ｒ１中において、５員または６員ヘテロ芳香環が、チエニル、ピラゾリル、イソキサゾリル、チアジアゾリル、ピロリル、フラニル、チアゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、イミダゾリル、ピラジニルおよびピリジルより選択される請求項１に記載の化合物；またはその薬学的に許容しうる塩もしくは溶媒和化合物。
【請求項２０】
Ｒ１中において、不飽和の５員または６員環が、フェニル、シクロペンテニル、シクロヘキセニル、チエニル、ピラゾリル、イソキサゾリル、チアジアゾリル、ピロリル、フラニル、チアゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、イミダゾリル、ピラジニル、ピリダジニル、ピリミジニルおよびピリジルより選択される請求項１に記載の化合物；またはその薬学的に許容しうる塩もしくは溶媒和化合物。
【請求項２１】
Ｒ１中において、不飽和の５員または６員環が、フェニル、シクロペンテニル、シクロヘキセニル、チエニル、ピラゾリル、イソキサゾリル、チアジアゾリル、ピロリル、フラニル、チアゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、イミダゾリル、ピラジニルおよびピリジルより選択される請求項１に記載の化合物；またはその薬学的に許容しうる塩もしくは溶媒和化合物。
【請求項２２】
Ｒ３がハロゲン原子である請求項１に記載の化合物；またはその薬学的に許容しうる塩もしくは溶媒和化合物。
【請求項２３】
Ｒ４中において、５員ヘテロ芳香環が、チエニル、ピラゾリル、イソキサゾリル、チアジアゾリル、ピロリル、フラニル、チアゾリル、トリアゾリル、テトラゾリルおよびイミダゾリルより選択される請求項１に記載の化合物；またはその薬学的に許容しうる塩もしくは溶媒和化合物。
【請求項２４】
Ｒ４中において、５員ヘテロ芳香環がピラゾリルである請求項１に記載の化合物；またはその薬学的に許容しうる塩もしくは溶媒和化合物。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本発明は、ピリミジン誘導体、それらの製造方法、それらを含有する医薬組成物、それら医薬組成物を製造する方法、および療法でのそれらの使用に関する。
インスリン様成長因子（ＩＧＦ）軸は、リガンド、受容体、結合タンパク質およびプロテアーゼから成る。ＩＧＦ−ＩおよびＩＧＦ−IIという二つのリガンドは、ヘテロ四量体細胞表面受容体である１型インスリン様成長因子受容体（ＩＧＦ−１Ｒ）との相互作用によってシグナルを与えるマイトジェンペプチドである。どちらかのリガンドの結合は、β鎖の細胞内領域中のチロシンキナーゼドメインの活性化を刺激し、いくつかのチロシン残基をリン酸化して、種々のシグナル伝達分子の補充および活性化を引き起こす。この細胞内ドメインは、細胞における有糸分裂誘発、生存、形質転換および分化のためのシグナルを伝達することが分かっている。ＩＧＦ−１Ｒの構造および機能は、Adams et al（Cellular and Molecular Life Sciences, 57, 1050-1093, 2000）によって概説されている。ＩＧＦ−IIＲ（マンノース６−リン酸受容体としても知られる）は、このようなキナーゼドメインを有していないし、有糸分裂誘発のシグナルを与えないが、細胞表面におけるリガンドアベイラビリティを制御（regulate)するように作用して、ＩＧＦ−１Ｒの作用に反作用することがありうる。ＩＧＦ結合タンパク質（ＩＧＦＢＰ）の循環性ＩＧＦコントロールアベイラビリティと、これらからのＩＧＦの放出は、タンパク質分解切断によって媒介されることがありうる。ＩＧＦ軸のこれら他の成分は、Collett-Solberg and Cohen（Endocrine, 12, 121-136, 2000）によって概説されている。
【０００２】
ＩＧＦシグナリングを、細胞性形質転換および腫瘍の発生および進行と関連させる重要な証拠が存在する。ＩＧＦは、癌遺伝子に誘発される細胞死から防御する主要生存因子として識別されている（Harrington et al, EMBO J, 13, 3286-3295, 1994）。ＩＧＦ−１Ｒを欠いた細胞は、該当する野生型細胞を効率よく形質転換するいくつかの異なった癌遺伝子（ＳＶ４０Ｔ抗原およびｒａｓを含めた）による形質転換に不応性であることが分かっている（Sell et al., Mol. Cell Biol., 14, 3604-12,1994）。ＩＧＦ軸の成分のアップレギュレーションは、いろいろな腫瘍細胞系および組織、具体的には、乳房（Surmacz, Journal of Mammary Gland Biology & Neoplasia, 5, 95-105, 2000）、前立腺（Djavan et al, World J. Urol., 19, 225-233, 2001, and O’Brien et al, Urology, 58, 1-7, 2001）および結腸（Guo et al, Gastroenterology, 102, 1101-1108, 1992）の腫瘍において記載されている。逆に、ＩＧＦ−IIＲは、腫瘍サプレッサーとして関係していて、若干の癌で欠失している（DaCosta et al, Journal of Mammary Gland Biology & Neoplasia, 5, 85-94, 2000）。増加した循環性ＩＧＦ（またはＩＧＦ−１対ＩＧＦＢＰ３の増加した比率）を癌の危険と関連させる疫学的研究はますます増えている（Yu and Rohan, J. Natl.Cancer Inst. , 92, 1472-1489, 2000）。トランスジェニックマウスモデルも、腫瘍細胞増殖の開始におけるＩＧＦシグナリングに関係している（Lamm and Christofori, Cancer Res. 58, 801-807, 1998, Foster et al, Cancer Metas. Rev., 17, 317-324, 1998, and DiGiovanni et al, Proc. Natl. Acad. Sci., 97, 3455-3460, 2000）。
【０００３】
いくつかの in vitro および in vivo 戦略は、ＩＧＦ−１Ｒシグナリングの阻害が、形質転換された表現型を逆行させ、腫瘍細胞増殖を阻害する主たる証拠を与えている。これらには、中和性抗体（Kalebic et al Cancer Res., 54, 5531-5534, 1994）、アンチセンスオリゴヌクレオチド（Resnicoff et al, Cancer Res., 54, 2218-2222, 1994）、三重らせん形成性オリゴヌクレオチド（Rinninsland et al, Proc. Natl. Acad. Sci., 94, 5854-5859, 1997）、アンチセンスｍＲＮＡ（Nakamura et al, Cancer Res., 60, 760-765, 2000）およびドミナントネガティブ受容体（D’Ambrosio et al., Cancer Res., 56, 4013-4020, 1996）が含まれる。アンチセンスオリゴヌクレオチドは、ＩＧＦ−１Ｒ発現の阻害が、in vivo で細胞のアポトーシスを誘発するということを示しており（Resnicoff et al, Cancer Res., 55, 2463-2469, 1995）、ヒトに利用されている（Resnicoff et al, Proc. Amer. Assoc. Cancer Res., 40 Abs 4816, 1999）。しかしながら、これらアプローチには、主な充実性腫瘍疾患の処置に特に魅力的であるものがない。
【０００４】
ＩＧＦシグナリングの増加は腫瘍細胞の増殖および生存に関係し、ＩＧＦ−１Ｒ機能をブロックすることでこれを逆行させ得るので、ＩＧＦ−１Ｒチロシンキナーゼドメインの阻害は癌を処置するのに適当な療法である。ドミナントネガティブＩＧＦ−１Ｒ変異型の使用を伴う in vitro および in vivo 研究は、これを支持する。具体的には、受容体チロシンキナーゼ活性をブロックするＡＴＰ結合部位における点突然変異は、腫瘍細胞増殖を妨げのに有効であると証明されている（Kulik et al, Mol. Cell. Biol., 17, 1595-1606, 1997）。いくつかの証拠は、正常細胞は、ＩＧＦシグナリングの阻害によって引き起こされるアポトーシスへの感受性がより少ないということを示唆し、このような処置で治療的利点が可能であるということを示している（Baserga, Trends Biotechnol., 14, 150-2,1996）。
【０００５】
選択的ＩＧＦ−１Ｒチロシンキナーゼ阻害剤について、少数の報告がある。Parrizas et al. は、in vitro および in vivo で若干の効力を有したチルホスチン（tyrphostins）を記載した（Parrizas et al., Endocrinology, 138:1427-33 (1997)）。これら化合物は、適度な効力およびインスリン受容体にまさる選択性を有した。Telik Inc. は、インスリン受容体にまさる選択性を有するが、in vitro の腫瘍細胞に対する効力がなお中等度であるヘテロアリール−アリール尿素を記載している（公開ＰＣＴ特許出願ＷＯ００／３５４５５号）。
【０００６】
本発明により、式（Ｉ）
【０００７】
【化１】
2005515998.tif 000003
【０００８】
［式中、Ｒ１は、窒素、酸素および硫黄より選択される少なくとも一つの環ヘテロ原子を含む５員または６員ヘテロ芳香環であり、この環は、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ（各々、ハロゲン、アミノ（−ＮＨ２）、ヒドロキシルおよびトリフルオロメチルより選択される少なくとも一つの置換基で置換されていてもよい）、ハロゲン、ニトロ、シアノ、−ＮＲ５Ｒ６、カルボキシル、ヒドロキシル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニル、Ｃ１−Ｃ６アルキルカルボニル、Ｃ１−Ｃ６アルキルカルボニルアミノ、フェニルカルボニル、−Ｓ（Ｏ）ｍＣ１−Ｃ６アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ７Ｒ８、−ＳＯ２ＮＲ７ａＲ８ａ、ならびに窒素、酸素および硫黄より選択される少なくとも一つの環ヘテロ原子を含んでよい不飽和の５〜６員環（該環自体が、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ（各々、ハロゲン、アミノ（−ＮＨ２）、ヒドロキシルおよびトリフルオロメチルより選択される少なくとも一つの置換基で置換されていてもよい）、ハロゲン、ニトロ、シアノ、−ＮＲ９Ｒ１０、カルボキシル、ヒドロキシル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニル、Ｃ１−Ｃ６アルキルカルボニル、Ｃ１−Ｃ６アルキルカルボニルアミノ、フェニルカルボニル、−Ｓ（Ｏ）ｎＣ１−Ｃ６アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１１Ｒ１２および−ＳＯ２ＮＲ１１ａＲ１２ａより選択される少なくとも一つの置換基で置換されていてよい）より選択される少なくとも一つの置換基で置換されていてよく；
ｍは、０、１または２であり；
ｎは、０、１または２であり；
Ｒ２は、Ｃ１−Ｃ４アルキル基であって、ハロゲン、ヒドロキシルおよびＣ１−Ｃ３アルコキシより選択される少なくとも一つの置換基で置換されていてよいものであり；
Ｒ３は、水素、ハロゲンまたはトリフルオロメチルであり；
Ｒ４は、窒素、酸素および硫黄より選択される少なくとも一つの環ヘテロ原子を含む５員ヘテロ芳香環であり、この環は、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ（各々、ハロゲン、アミノ（−ＮＨ２）、ヒドロキシルおよびトリフルオロメチルより選択される少なくとも一つの置換基で置換されていてもよい）、ハロゲン、ニトロ、シアノ、−ＮＲ１３Ｒ１４、カルボキシル、ヒドロキシル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシカルボニル、Ｃ１−Ｃ４アルキルカルボニル、Ｃ１−Ｃ４アルキルカルボニルアミノ、フェニルカルボニル、−Ｓ（Ｏ）ｐＣ１−Ｃ４アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１５Ｒ１６および−ＳＯ２ＮＲ１５ａＲ１６ａより選択される少なくとも一つの置換基で置換されていてよく；
ｐは、０、１または２であり；
Ｒ５およびＲ６は、各々独立して、水素、Ｃ１−Ｃ４アルキルまたはＣ３−Ｃ６シクロアルキルであり、あるいはＲ５およびＲ６は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、４〜６員飽和複素環を形成し；
Ｒ７およびＲ８は、各々独立して、水素、Ｃ１−Ｃ４アルキルまたはＣ３−Ｃ６シクロアルキルであり、あるいはＲ７およびＲ８は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、４〜６員飽和複素環を形成し；
Ｒ７ａおよびＲ８ａは、各々独立して、水素、Ｃ１−Ｃ４アルキルまたはＣ３−Ｃ６シクロアルキルであり、あるいはＲ７ａおよびＲ８ａは、それらが結合している窒素原子と一緒になって、４〜６員飽和複素環を形成し；
Ｒ９およびＲ１０は、各々独立して、水素、Ｃ１−Ｃ４アルキルまたはＣ３−Ｃ６シクロアルキルであり、あるいはＲ９およびＲ１０は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、４〜６員飽和複素環を形成し；
Ｒ１１およびＲ１２は、各々独立して、水素、Ｃ１−Ｃ４アルキルまたはＣ３−Ｃ６シクロアルキルであり、あるいはＲ１１およびＲ１２は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、４〜６員飽和複素環を形成し；
Ｒ１１ａおよびＲ１２ａは、各々独立して、水素、Ｃ１−Ｃ４アルキルまたはＣ３−Ｃ６シクロアルキルであり、あるいはＲ１１ａおよびＲ１２ａは、それらが結合している窒素原子と一緒になって、４〜６員飽和複素環を形成し；
Ｒ１３およびＲ１４は、各々独立して、水素、Ｃ１−Ｃ４アルキルまたはＣ３−Ｃ６シクロアルキルであり、あるいはＲ１３およびＲ１４は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、４〜６員飽和複素環を形成し；
Ｒ１５およびＲ１６は、各々独立して、水素、Ｃ１−Ｃ４アルキルまたはＣ３−Ｃ６シクロアルキルであり、あるいはＲ１５およびＲ１６は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、４〜６員飽和複素環を形成し；そして
Ｒ１５ａおよびＲ１６ａは、各々独立して、水素、Ｃ１−Ｃ４アルキルまたはＣ３−Ｃ６シクロアルキルであり、あるいはＲ１５ａおよびＲ１６ａは、それらが結合している窒素原子と一緒になって、４〜６員飽和複素環を形成する］
を有する化合物；
またはその薬学的に許容しうる塩もしくは溶媒和化合物を提供する。
【０００９】
本発明の文脈中、特に断らない限り、アルキル置換基または置換基中のアルキル部分は、直鎖状であってよいしまたは分岐状であってよい。Ｒ５およびＲ６、またはＲ７およびＲ８、またはＲ７ａおよびＲ８ａ、またはＲ９およびＲ１０、またはＲ１１およびＲ１２、またはＲ１１ａおよびＲ１２ａ、またはＲ１３およびＲ１４、またはＲ１５およびＲ１６、またはＲ１５ａおよびＲ１６ａが飽和複素環である場合、存在する唯一のヘテロ原子は、Ｒ５およびＲ６、またはＲ７およびＲ８、またはＲ７ａおよびＲ８ａ、またはＲ９およびＲ１０、またはＲ１１およびＲ１２、またはＲ１１ａおよびＲ１２ａ、またはＲ１３およびＲ１４、またはＲ１５およびＲ１６、またはＲ１５ａおよびＲ１６ａが結合している窒素原子であるということは理解されるはずである。Ｒ１の定義中、不飽和の５〜６員環は、脂環式または芳香族の性質を有してよいということは留意されるはずである。
【００１０】
「Ｃ１−Ｃ６アルキル」および「Ｃ１−Ｃ４アルキル」の例には、メチル、エチル、イソプロピルおよびｔ-ブチルが含まれる。「Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニル」の例には、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、ｎ−およびｔ−ブトキシカルボニルが含まれる。「Ｃ１−Ｃ６アルコキシ」および「Ｃ１−Ｃ３アルコキシ」の例には、メトキシ、エトキシおよびプロポキシが含まれる。「Ｃ１−Ｃ６アルキルカルボニルアミノ」の例には、ホルムアミド、アセトアミドおよびプロピオニルアミノが含まれる。「Ｓ（Ｏ）ｍＣ１−Ｃ６アルキル」（式中、ｍは０〜２である）の例には、メチルチオ、エチルチオ、メチルスルフィニル、エチルスルフィニル、メシルおよびエチルスルホニルが含まれる。「Ｃ１−Ｃ６アルキルカルボニル」の例には、プロピオニルおよびアセチルが含まれる。「Ｃ２−Ｃ６アルケニル」の例には、ビニル、アリルおよび１−プロペニルが含まれる。「Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル」の例には、シクロプロピル、シクロペンチルおよびシクロヘキシルが含まれる。
【００１１】
「窒素、酸素および硫黄より選択される少なくとも一つの環ヘテロ原子を含む５員または６員ヘテロ芳香環」は、少なくとも一つが、窒素、酸素および硫黄より選択されるヘテロ原子である５個または６個の原子を含有する完全不飽和の芳香族単環式環であって、特に断らない限り、炭素または窒素結合していてよいものである。好適には、「窒素、酸素および硫黄より選択される少なくとも一つの環ヘテロ原子を含む５員または６員ヘテロ芳香環」は、ピリジル、イミダゾリル、イソキサゾリル、ピラゾリル、フリル、ピラジニル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピロリルまたはチエニルであり；このピリジル、イミダゾリル、イソキサゾリル、ピラゾリル、フリル、ピラジニル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピロリルまたはチエニル。
【００１２】
「窒素、酸素および硫黄より選択される少なくとも一つの環ヘテロ原子を含んでよい不飽和の５〜６員環」は、少なくとも一つが、窒素、酸素および硫黄より選択されるヘテロ原子であってよい５個または６個の原子を含有する完全または部分不飽和の単環式環であり、特に断らない限り、炭素または窒素結合していてよい。好適には、「窒素、酸素および硫黄より選択される少なくとも一つの環ヘテロ原子を含んでよい不飽和の５〜６員環」は、フェニルまたはピリジルである。
【００１３】
「窒素、酸素および硫黄より選択される少なくとも一つの環ヘテロ原子を含む５員ヘテロ芳香環」は、少なくとも一つが、窒素、酸素および硫黄より選択されるヘテロ原子である５個の原子を含有する完全不飽和の芳香族単環式環であり、特に断らない限り、炭素または窒素結合していてよい。好適には、「窒素、酸素および硫黄より選択される少なくとも一つの環ヘテロ原子を含む５員ヘテロ芳香環」は、ピラゾリルである。
【００１４】
Ｒ１は、窒素、酸素および硫黄より選択される少なくとも一つの環ヘテロ原子（例えば、独立して、１個、２個、３個または４個の環ヘテロ原子）を含む、置換されていてよい５員または６員ヘテロ芳香環である。ヘテロ芳香環の例には、チエニル（例えば、３−チエニル）、ピラゾリル（例えば、４−ピラゾリル）、イソキサゾリル（例えば、５−イソキサゾリル）、チアジアゾリル、ピロリル（例えば、２−ピロリル）、フラニル（２−または３−フラニル）、チアゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、イミダゾリル（例えば、４−イミダゾリル）、ピラジニル（例えば、２−ピラジニル）、ピリダジニル（例えば、３−ピリダジニル）、ピリミジニル（例えば、４−または５−ピリミジニル）およびピリジル（２−、３−または４−ピリジル）が含まれる。
【００１５】
Ｒ１中において、５員または６員ヘテロ芳香環は、Ｃ１−Ｃ６、特に、Ｃ１−Ｃ４アルキル（メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、tert−ブチル、ｎ−ペンチルまたはｎ−ヘキシルなど）、Ｃ１−Ｃ６、特に、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ（メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、ｎ−ブトキシ、tert−ブトキシ、ｎ−ペントキシまたはｎ−ヘキソキシなど）（このＣ１−Ｃ６アルキルおよびＣ１−Ｃ６アルコキシ置換基は各々、ハロゲン（フッ素、塩素、臭素またはヨウ素など）、アミノ、ヒドロキシルおよびトリフルオロメチルより選択される少なくとも一つの置換基（例えば、独立して、１個、２個、３個または４個の置換基）で置換されていてよい）、ハロゲン（フッ素、塩素、臭素またはヨウ素など）、ニトロ、シアノ、−ＮＲ５Ｒ６、カルボキシル、ヒドロキシル、Ｃ２−Ｃ６、特にＣ２−Ｃ４アルケニル（エテニルなど）、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル（シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルおよびシクロヘキシル）、Ｃ１−Ｃ６特に、Ｃ１−Ｃ４アルコキシカルボニル（メトキシカルボニルまたはエトキシカルボニルなど）、Ｃ１−Ｃ６特に、Ｃ１−Ｃ４アルキルカルボニル（メチルカルボニル、エチルカルボニル、ｎ−プロピルカルボニル、イソプロピルカルボニル、ｎ−ブチルカルボニル、ｎ−ペンチルカルボニルまたはｎ−ヘキシルカルボニルなど）、Ｃ１−Ｃ６、特にＣ１−Ｃ４アルキルカルボニルアミノ（メチルカルボニルアミノまたはエチルカルボニルアミノなど）、フェニルカルボニル、−Ｓ（Ｏ）ｍＣ１−Ｃ６、特にＣ１−Ｃ４アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ７Ｒ８、−ＳＯ２ＮＲ７ａＲ８ａ、ならびに、窒素、酸素および硫黄より選択される少なくとも一つの環ヘテロ原子（例えば、独立して、１個、２個、３個または４個の環ヘテロ原子）を含んでよい、置換されていてよい不飽和の５〜６員環より選択される少なくとも一つの置換基（例えば、独立して、１個、２個、３個または４個の置換基）で置換されていてよい。
【００１６】
この不飽和の５〜６員環の例には、フェニル、シクロペンテニル、シクロヘキセニル、チエニル（例えば、３−チエニル）、ピラゾリル（例えば、４−ピラゾリル）、イソキサゾリル（例えば、５−イソキサゾリル）、チアジアゾリル、ピロリル（例えば、２−ピロリル）、フラニル（２−または３−フラニル）、チアゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、イミダゾリル（例えば、４−イミダゾリル）、ピラジニル（例えば、２−ピラジニル）、ピリダジニル（例えば、３−ピリダジニル）、ピリミジニル（例えば、４−または５−ピリミジニル）およびピリジル（２−、３−または４−ピリジル）が含まれる。この環は、それ自体、Ｃ１−Ｃ６、特にＣ１−Ｃ４アルキル（メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、tert−ブチル、ｎ−ペンチルまたはｎ−ヘキシルなど）、Ｃ１−Ｃ６、特にＣ１−Ｃ４アルコキシ（メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、ｎ−ブトキシ、tert−ブトキシ、ｎ−ペントキシまたはｎ−ヘキソキシなど）（このＣ１−Ｃ６アルキルおよびＣ１−Ｃ６アルコキシ置換基は各々、ハロゲン（フッ素、塩素、臭素またはヨウ素など）、アミノ、ヒドロキシルおよびトリフルオロメチルより選択される少なくとも一つの置換基（例えば、独立して、１個、２個、３個または４個の置換基）で置換されていてよい）、ハロゲン（フッ素、塩素、臭素またはヨウ素など）、ニトロ、シアノ、−ＮＲ９Ｒ１０、カルボキシル、ヒドロキシル、Ｃ２−Ｃ６、特にＣ２−Ｃ４アルケニル（エテニルなど）、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル（シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルおよびシクロヘキシル）、Ｃ１−Ｃ６、特にＣ１−Ｃ４アルコキシカルボニル（メトキシカルボニルまたはエトキシカルボニルなど）、Ｃ１−Ｃ６、特にＣ１−Ｃ４アルキルカルボニル（メチルカルボニル、エチルカルボニル、ｎ−プロピルカルボニル、イソプロピルカルボニル、ｎ−ブチルカルボニル、ｎ−ペンチルカルボニルまたはｎ−ヘキシルカルボニルなど）、Ｃ１−Ｃ６、特に、Ｃ１−Ｃ４アルキルカルボニルアミノ（メチルカルボニルアミノまたはエチルカルボニルアミノなど）、フェニルカルボニル、−Ｓ（Ｏ）ｎＣ１−Ｃ６、特に、Ｃ１−Ｃ４アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１１Ｒ１２および−ＳＯ２ＮＲ１１ａＲ１２ａより選択される少なくとも一つの置換基（例えば、独立して、１個、２個、３個または４個の置換基）で置換されていてもよい。
【００１７】
可変基の具体的な意味は、次の通りである。このような意味は、本明細書中の前にまたは以下に明記される定義、請求の範囲または態様のいずれかについて適当なところで用いることができる。
【００１８】
本発明の一つの態様において、Ｒ１は、窒素および酸素より選択される１個または２個の環ヘテロ原子を含む５員または６員ヘテロ芳香環であり、この環は、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、ハロゲン、ニトロ、シアノ、−ＮＲ５Ｒ６、カルボキシル、ヒドロキシル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニル、Ｃ１−Ｃ６アルキルカルボニル、Ｃ１−Ｃ６アルキルカルボニルアミノ、フェニルカルボニル、−Ｓ（Ｏ）ｍＣ１−Ｃ６アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ７Ｒ８、−ＳＯ２ＮＲ７ａＲ８ａ、および１個の環窒素原子を含んでよい不飽和の６員環（それ自体が、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、ハロゲン、ニトロ、シアノ、−ＮＲ９Ｒ１０、カルボキシル、ヒドロキシル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニル、Ｃ１−Ｃ６アルキルカルボニル、Ｃ１−Ｃ６アルキルカルボニルアミノ、フェニルカルボニル、−Ｓ（Ｏ）ｎＣ１−Ｃ６アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１１Ｒ１２および−ＳＯ２ＮＲ１１ａＲ１２ａより選択される少なくとも一つの置換基で置換されていてよい）より選択される少なくとも一つの置換基で置換されていてよい。
【００１９】
本発明のもう一つの態様において、Ｒ１は、窒素および酸素より選択される１個または２個の環ヘテロ原子を含む５員または６員ヘテロ芳香環であり、この環は、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、ハロゲン、フェニルおよびピリジルより選択される少なくとも一つの置換基で置換されていてよく、このフェニルおよびピリジル置換基は各々、それ自体、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシおよびハロゲンより選択される少なくとも一つの置換基で置換されていてよい。
【００２０】
更に別の側面において、Ｒ１は、窒素、酸素および硫黄より選択される少なくとも一つの環ヘテロ原子を含む５員または６員ヘテロ芳香環であり、この環は、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ（各々、ヒドロキシルより選択される少なくとも一つの置換基で置換されていてもよい）、ハロゲン、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ７Ｒ８、Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニル、ならびに窒素および酸素より選択される少なくとも一つの環ヘテロ原子を含んでよい不飽和の５〜６員環（それ自体が、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ（各々、ハロゲンより選択される少なくとも一つの置換基で置換されていてもよい）、ハロゲンおよびシアノより選択される少なくとも一つの置換基で置換されていてよい）より選択される少なくとも一つの置換基で置換されていてよく；ここにおいて、Ｒ７およびＲ８は、双方とも水素であり、またはＲ７およびＲ８は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、４〜６員飽和複素環を形成する。
【００２１】
更にもう一つの側面において、Ｒ１は、ピリジル、イミダゾリル、イソキサゾリル、ピラゾリル、フリル、ピラジニル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピロリルまたはチエニルであり；このピリジル、イミダゾリル、イソキサゾリル、ピラゾリル、フリル、ピラジニル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピロリルおよびチエニルは、メチル、イソプロピル、ヒドロキシメチル、メトキシ、クロロ、ブロモ、カルバモイル、メトキシカルボニル、ピロリジン−１−イルカルボニル、フェニルおよびピリジルより選択される少なくとも一つの置換基で置換されていてよく；このフェニルまたはピリジルは、メチル、トリフルオロメチル、メトキシ、エトキシ、トリフルオロメトキシ、フルオロ、クロロ、ブロモおよびシアノより選択される少なくとも一つの置換基で置換されていてよい。
【００２２】
更にもう一つの側面において、Ｒ１は、ピリド−２−イル、ピリド−３−イル、ピリド−４−イル、２−メトキシピリド−５−イル、２−シアノピリド−５−イル、３−ブロモピリド−５−イル、３−（ピリド−２−イル）ピリド−５−イル、４−（ピリド−２−イル）ピリド−２−イル、３−クロロピリド−２−イル、３−メチルピリド−２−イル、６−メチルピリド−２−イル、５，６−ジメチルピリド−２−イル、イミダゾール−４−イル、イミダゾール−５−イル、３−メチルイソキサゾール−５−イル、５−メチルイソキサゾール−３−イル、３−イソプロピルイソキサゾール−５−イル、３−メトキシカルボニルイソキサゾール−５−イル、３−（ヒドロキシメチル）イソキサゾール−５−イル、３−カルバモイルイソキサゾール−５−イル、３−（ピロリジン−１−イルカルボニル）イソキサゾール−５−イル、３−フェニルイソキサゾール−５−イル、３−（ピリド−２−イル）イソキサゾール−５−イル、３−（２−メトキシピリド−３−イル）イソキサゾール−５−イル、３−（２−メトキシフェニル）イソキサゾール−５−イル、３−（３−メトキシフェニル）イソキサゾール−５−イル、３−（２−エトキシフェニル）イソキサゾール−５−イル、３−（２−トリフルオロメチルフェニル）イソキサゾール−５−イル、３−（２−トリフルオロメトキシフェニル）イソキサゾール−５−イル、３−（２−クロロフェニル）イソキサゾール−５−イル、３−（２−ブロモフェニル）イソキサゾール−５−イル、３−（２−メチルフェニル）イソキサゾール−５−イル、３−（２−フルオロフェニル）イソキサゾール−５−イル、３−（２−シアノフェニル）イソキサゾール−５−イル、５−メチルピラゾール−４−イル、フル−２−イル、フル−３−イル、５−メチルフル−２−イル、ピラジン−２−イル、２−メチルピラジン−５−イル、ピリダジン−３−イル、ピリミジン−４−イル、１−メチルピロール−２−イルおよびチエン−３−イルである。
【００２３】
Ｒ２は、Ｃ１−Ｃ４アルキル基（メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチルまたは tert−ブチルなど）であって、ハロゲン（例えば、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素）、ヒドロキシルおよびＣ１−Ｃ３アルコキシ（例えば、メトキシ、エトキシおよびｎ−プロポキシ）より選択される少なくとも一つの置換基（例えば、独立して、１個、２個、３個または４個の置換基）で置換されていてよいものである。
【００２４】
本発明の一つの態様において、Ｒ２は、ＣＨ２または（ＣＨ２）２である。
もう一つの態様において、Ｒ２はＣ１−Ｃ４アルキル基である。
更に別の態様において、Ｒ２は、メチル、エチルおよびプロピルである。
【００２５】
Ｒ３は、水素、ハロゲン（例えば、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素）またはトリフルオロメチルである。
本発明の一つの態様において、Ｒ３は、塩素または臭素である。
【００２６】
もう一つの態様において、Ｒ３は、水素またはハロゲンである。
更に別の態様において、Ｒ３は、水素、クロロまたはブロモである。
Ｒ４は、窒素、酸素および硫黄より選択される少なくとも一つの環ヘテロ原子（例えば、独立して、１個、２個、３個または４個の環ヘテロ原子）を含む、置換されていてよい５員ヘテロ芳香環である。環の例には、チエニル（例えば、３−チエニル）、ピラゾリル（例えば、４−ピラゾリル）、イソキサゾリル（例えば、５−イソキサゾリル）、チアジアゾリル、ピロリル（例えば、２−ピロリル）、フラニル（２−または３−フラニル）、チアゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、イミダゾリル（例えば、４−イミダゾリル）が含まれる。
【００２７】
Ｒ４中の５員ヘテロ芳香環は、Ｃ１−Ｃ６、特にＣ１−Ｃ４アルキル（メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、tert−ブチル、ｎ−ペンチルまたはｎ−ヘキシルなど）、Ｃ１−Ｃ６、特にＣ１−Ｃ４アルコキシ（メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、ｎ−ブトキシ、tert−ブトキシ、ｎ−ペントキシまたはｎ−ヘキソキシなど）（このＣ１−Ｃ６アルキルおよびＣ１−Ｃ６アルコキシ置換基は各々、ハロゲン（フッ素、塩素、臭素またはヨウ素など）、アミノ、ヒドロキシルおよびトリフルオロメチルより選択される少なくとも一つの置換基（例えば、独立して、１個、２個、３個または４個の置換基）で置換されていてよい）、ハロゲン（フッ素、塩素、臭素またはヨウ素など）、ニトロ、シアノ、−ＮＲ１３Ｒ１４、カルボキシル、ヒドロキシル、Ｃ２−Ｃ６、特にＣ２−Ｃ４アルケニル（エテニルなど）、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル（シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルおよびシクロヘキシル）、Ｃ１−Ｃ４、特にＣ１−Ｃ３アルコキシカルボニル（メトキシカルボニルまたはエトキシカルボニルなど）、Ｃ１−Ｃ４、特にＣ１−Ｃ３アルキルカルボニル（メチルカルボニル、エチルカルボニル、ｎ−プロピルカルボニル、イソプロピルカルボニルまたはｎ−ブチルカルボニルなど）、Ｃ１−Ｃ４、特にＣ１−Ｃ３アルキルカルボニルアミノ（メチルカルボニルアミノまたはエチルカルボニルアミノなど）、フェニルカルボニル、−Ｓ（Ｏ）ｐＣ１−Ｃ４、特にＣ１−Ｃ２アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１５Ｒ１６および−ＳＯ２ＮＲ１５ａＲ１６ａより選択される少なくとも一つの置換基（例えば、独立して、１個、２個、３個または４個の置換基）で置換されていてよい。
【００２８】
本発明の一つの態様において、Ｒ４は、窒素および酸素より選択される１個または２個の環ヘテロ原子を含む５員ヘテロ芳香環であり、この環は、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、ハロゲン、ニトロ、シアノ、−ＮＲ１３Ｒ１４、カルボキシル、ヒドロキシル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシカルボニル、Ｃ１−Ｃ４アルキルカルボニル、Ｃ１−Ｃ４アルキルカルボニルアミノ、フェニルカルボニル、−Ｓ（Ｏ）ｐＣ１−Ｃ４アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１５Ｒ１６および−ＳＯ２ＮＲ１５ａＲ１６ａより選択される少なくとも一つの置換基で置換されていてよい。
【００２９】
本発明のもう一つの態様において、Ｒ４は、２個の環窒素原子を含む５員ヘテロ芳香環であり、この環は、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、ハロゲンおよびＣ３−Ｃ６シクロアルキルより選択される少なくとも一つの置換基で置換されていてよい。
【００３０】
更に別の態様において、Ｒ４は、窒素より選択される少なくとも一つの環ヘテロ原子を含む５員ヘテロ芳香環であり、この環は、Ｃ１−Ｃ６アルキルおよびＣ３−Ｃ６シクロアルキルより選択される少なくとも一つの置換基で置換されていてよい。
【００３１】
更にもう一つの態様において、Ｒ４はピラゾリルであり、この環は、メチル、エチル、イソプロピル、プロピル、ｔ−ブチルおよびシクロプロピルより選択される少なくとも一つの置換基で置換されていてよい。
【００３２】
更にもう一つの態様において、Ｒ４は、５−メチルピラゾール−３−イル、５−エチルピラゾール−３−イル、５−イソプロピルピラゾール−３−イル、５−プロピルピラゾール−３−イル、５−ｔ−ブチルピラゾール−３−イルおよび５−シクロプロピルピラゾール−３−イルである。
【００３３】
Ｒ５およびＲ６は、各々独立して、水素、Ｃ１−Ｃ４、特にＣ１−Ｃ２アルキル（メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチルまたは tert−ブチルなど）またはＣ３−Ｃ６シクロアルキル（シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルおよびシクロヘキシル）であり、あるいはＲ５およびＲ６は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、４〜６員飽和複素環（ピロリジニルまたはピペリジニルなど）を形成する。
【００３４】
Ｒ７およびＲ８は、各々独立して、水素、Ｃ１−Ｃ４、特にＣ１−Ｃ２アルキル（メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチルまたは tert−ブチルなど）またはＣ３−Ｃ６シクロアルキル（シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルおよびシクロヘキシル）であり、あるいはＲ７およびＲ８は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、４〜６員飽和複素環（ピロリジニルまたはピペリジニルなど）を形成する。
【００３５】
Ｒ７ａおよびＲ８ａは、各々独立して、水素、Ｃ１−Ｃ４、特にＣ１−Ｃ２アルキル（メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチルまたは tert−ブチルなど）またはＣ３−Ｃ６シクロアルキル（シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルおよびシクロヘキシル）であり、あるいはＲ７ａおよびＲ８ａは、それらが結合している窒素原子と一緒になって、４〜６員飽和複素環（ピロリジニルまたはピペリジニルなど）を形成する。
【００３６】
Ｒ９およびＲ１０は、各々独立して、水素、Ｃ１−Ｃ４、特にＣ１−Ｃ２アルキル（メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチルまたは tert−ブチルなど）またはＣ３−Ｃ６シクロアルキル（シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルおよびシクロヘキシル）であり、あるいはＲ９およびＲ１０は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、４〜６員飽和複素環（ピロリジニルまたはピペリジニルなど）を形成する。
【００３７】
Ｒ１１およびＲ１２は、各々独立して、水素、Ｃ１−Ｃ４、特にＣ１−Ｃ２アルキル（メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチルまたは tert−ブチルなど）またはＣ３−Ｃ６シクロアルキル（シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルおよびシクロヘキシル）であり、あるいはＲ１１およびＲ１２は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、４〜６員飽和複素環（ピロリジニルまたはピペリジニルなど）を形成する。
【００３８】
Ｒ１１ａおよびＲ１２ａは、各々独立して、水素、Ｃ１−Ｃ４、特にＣ１−Ｃ２アルキル（メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチルまたは tert−ブチルなど）またはＣ３−Ｃ６シクロアルキル（シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルおよびシクロヘキシル）であり、あるいはＲ１１ａおよびＲ１２ａは、それらが結合している窒素原子と一緒になって、４〜６員飽和複素環（ピロリジニルまたはピペリジニルなど）を形成する。
【００３９】
Ｒ１３およびＲ１４は、各々独立して、水素、Ｃ１−Ｃ４、特にＣ１−Ｃ２アルキル（メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチルまたは tert−ブチルなど）またはＣ３−Ｃ６シクロアルキル（シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルおよびシクロヘキシル）であり、あるいはＲ１３およびＲ１４は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、４〜６員飽和複素環（ピロリジニルまたはピペリジニルなど）を形成する。
【００４０】
Ｒ１５およびＲ１６は、各々独立して、水素、Ｃ１−Ｃ４、特にＣ１−Ｃ２アルキル（メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチルまたは tert−ブチルなど）またはＣ３−Ｃ６シクロアルキル（シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルおよびシクロヘキシル）であり、あるいはＲ１５およびＲ１６は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、４〜６員飽和複素環（ピロリジニルまたはピペリジニルなど）を形成する。
【００４１】
Ｒ１５ａおよびＲ１６ａは、各々独立して、水素、Ｃ１−Ｃ４、特にＣ１−Ｃ２アルキル（メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチルまたは tert−ブチルなど）またはＣ３−Ｃ６シクロアルキル（シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルおよびシクロヘキシル）であり、あるいはＲ１５ａおよびＲ１６ａは、それらが結合している窒素原子と一緒になって、４〜６員飽和複素環（ピロリジニルまたはピペリジニルなど）を形成する。
【００４２】
本発明の態様において、
Ｒ１が、窒素および酸素より選択される１個または２個の環ヘテロ原子を含む５員または６員ヘテロ芳香環であり、この環が、Ｃ１−Ｃ３アルキル、ピリジル、およびフェニル（メトキシで置換されていてよい）より選択される少なくとも一つの置換基で置換されていてよく；
Ｒ２がＣ１−Ｃ２アルキル基であり；
Ｒ３が、塩素または臭素であり；そして
Ｒ４が、ピラゾリルであって、Ｃ１−Ｃ４アルキルおよびシクロプロピルより選択される少なくとも一つの置換基で置換されているものである一連の式（Ｉ）の化合物、およびそれらの薬学的に許容しうる塩および溶媒和化合物を提供する。
【００４３】
本発明のもう一つの側面において、
Ｒ１が、窒素、酸素および硫黄より選択される少なくとも一つの環ヘテロ原子を含む５員または６員ヘテロ芳香環であり、この環が、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ（各々、ヒドロキシルより選択される少なくとも一つの置換基で置換されていてもよい）、ハロゲン、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ７Ｒ８、Ｃ１−Ｃ６アルコキシカルボニル、ならびに窒素および酸素より選択される少なくとも一つの環ヘテロ原子を含んでよい不飽和の５〜６員環（それ自体が、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ（各々、ハロゲンより選択される少なくとも一つの置換基で置換されていてもよい）、ハロゲンおよびシアノより選択される少なくとも一つの置換基で置換されていてよい）より選択される少なくとも一つの置換基で置換されていてよく；ここにおいて、Ｒ７およびＲ８は、双方とも水素であり、またはＲ７およびＲ８は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、４〜６員飽和複素環を形成し；
Ｒ２がＣ１−Ｃ４アルキル基であり；
Ｒ３が、水素またはハロゲンであり；そして
Ｒ４が、窒素より選択される少なくとも一つの環ヘテロ原子を含む５員ヘテロ芳香環であり、この環が、Ｃ１−Ｃ６アルキルおよびＣ３−Ｃ６シクロアルキルより選択される少なくとも一つの置換基で置換されていてよい（上に示される）式（Ｉ）の化合物；
またはその薬学的に許容しうる塩もしくは溶媒和化合物を提供する。
【００４４】
本発明の更に別の側面において、
Ｒ１が、ピリド−２−イル、ピリド−３−イル、ピリド−４−イル、２−メトキシピリド−５−イル、２−シアノピリド−５−イル、３−ブロモピリド−５−イル、３−（ピリド−２−イル）ピリド−５−イル、４−（ピリド−２−イル）ピリド−２−イル、３−クロロピリド−２−イル、３−メチルピリド−２−イル、６−メチルピリド−２−イル、５，６−ジメチルピリド−２−イル、イミダゾール−４−イル、イミダゾール−５−イル、３−メチルイソキサゾール−５−イル、５−メチルイソキサゾール−３−イル、３−イソプロピルイソキサゾール−５−イル、３−メトキシカルボニルイソキサゾール−５−イル、３−（ヒドロキシメチル）イソキサゾール−５−イル、３−カルバモイルイソキサゾール−５−イル、３−（ピロリジン−１−イルカルボニル）イソキサゾール−５−イル、３−フェニルイソキサゾール−５−イル、３−（ピリド−２−イル）イソキサゾール−５−イル、３−（２−メトキシピリド−３−イル）イソキサゾール−５−イル、３−（２−メトキシフェニル）イソキサゾール−５−イル、３−（３−メトキシフェニル）イソキサゾール−５−イル、３−（２−エトキシフェニル）イソキサゾール−５−イル、３−（２−トリフルオロメチルフェニル）イソキサゾール−５−イル、３−（２−トリフルオロメトキシフェニル）イソキサゾール−５−イル、３−（２−クロロフェニル）イソキサゾール−５−イル、３−（２−ブロモフェニル）イソキサゾール−５−イル、３−（２−メチルフェニル）イソキサゾール−５−イル、３−（２−フルオロフェニル）イソキサゾール−５−イル、３−（２−シアノフェニル）イソキサゾール−５−イル、５−メチルピラゾール−４−イル、フル−２−イル、フル−３−イル、５−メチルフル−２−イル、ピラジン−２−イル、２−メチルピラジン−５−イル、ピリダジン−３−イル、ピリミジン−４−イル、１−メチルピロール−２−イルおよびチエン−３−イルであり；
Ｒ２が、メチル、エチルおよびプロピルであり；
Ｒ３が、水素、クロロまたはブロモであり；そして
Ｒ４が、５−メチルピラゾール−３−イル、５−エチルピラゾール−３−イル、５−イソプロピルピラゾール−３−イル、５−プロピルピラゾール−３−イル、５−ｔ−ブチルピラゾール−３−イルおよび５−シクロプロピルピラゾール−３−イルである（上に示される）式（Ｉ）の化合物；
またはその薬学的に許容しうる塩もしくは溶媒和化合物を提供する。
【００４５】
本発明の化合物には、
５−ブロモ−２−（３−メチルイソキサゾール−５−イルメチルアミノ）−４−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピリミジン、
５−クロロ−２−（３−メチルイソキサゾール−５−イルメチルアミノ）−４−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピリミジン、
５−ブロモ−２−（３−メチルイソキサゾール−５−イルメチルアミノ）−４−（５−シクロプロピル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピリミジン、
５−クロロ−２−（３−イソプロピルイソキサゾール−５−イルメチルアミノ）−４−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピリミジン、
５−クロロ−２−（３−フェニルイソキサゾール−５−イルメチルアミノ）−４−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピリミジン、
５−ブロモ−２−［３−（２−メトキシフェニル）イソキサゾール−５−イルメチルアミノ］−４−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピリミジン、
５−クロロ−２−［３−（２−メトキシフェニル）イソキサゾール−５−イルメチルアミノ］−４−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピリミジン、
５−クロロ−２−（３−ピリド−２−イルイソキサゾール−５−イルメチルアミノ）−４−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピリミジン、
５−ブロモ−２−（３−ピリド−２−イルイソキサゾール−５−イルメチルアミノ）−４−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピリミジン、
５−ブロモ−２−（３−メチルイソキサゾール−５−イルメチルアミノ）−４−（５−tert−ブチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピリミジン、
５−クロロ−２−（３−メチルイソキサゾール−５−イルメチルアミノ）−４−（５−tert−ブチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピリミジン、
５−ブロモ−２−（３−メチルイソキサゾール−５−イルメチルアミノ）−４−（５−エチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピリミジン、
５−ブロモ−２−（２−フル−２−イルエチルアミノ）−４−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピリミジン、
５−ブロモ−２−（ピリド−３−イルメチルアミノ）−４−（５−tert−ブチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピリミジン、
５−クロロ−２−（ピリド−３−イルメチルアミノ）−４−（５−tert−ブチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピリミジン、
５−クロロ−２−（ピリド−２−イルメチルアミノ）−４−（５−tert−ブチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピリミジン、
５−ブロモ−２−（ピリド−３−イルメチルアミノ）−４−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピリミジン、
５−ブロモ−２−［２−（イミダゾール−４−イルエチル）アミノ］−４−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピリミジン、
５−ブロモ−２−（ピリド−２−イルメチルアミノ）−４−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピリミジン、
５−クロロ−２−［２−（ピリド−２−イル）エチルアミノ］−４−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピリミジン、
５−ブロモ−２−［２−（ピリド−３−イル）エチルアミノ］−４−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピリミジン、
５−ブロモ−２−（５−メチルピラジン−２−イルメチルアミノ）−４−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピリミジン、
５−ブロモ−２−（ピリド−３−イルメチルアミノ）−４−（５−シクロプロピル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピリミジン、および
それらのいずれか一つの薬学的に許容しうる塩および溶媒和化合物が含まれる。
【００４６】
本発明のもう一つの側面において、本発明の具体的な化合物は、実施例３、５、８、９、１１、１２、３４、３９、４０、４１、４７、４８、６８、７０および７９のいずれか一つまたはそれらのいずれか一つの薬学的に許容しうる塩および溶媒和化合物である。
【００４７】
本発明のもう一つの側面において、本発明の具体的な化合物は、これら実施例のいずれか一つまたはそれらのいずれか一つの薬学的に許容しうる塩および溶媒和化合物である。
本発明は、更に、上に定義の式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容しうる塩もしくは溶媒和化合物の製造方法であって、下記の（ｉ）、（ii）、（iii）または（iv）を含む方法を提供する：
（ｉ）式
【００４８】
【化２】
2005515998.tif 000004
【００４９】
（式中、Ｌ１は脱離基（例えば、ハロゲン、またはメタンスルホニルオキシまたはトルエン−４−スルホニルオキシなどのスルホニルオキシ）であり、Ｒ３およびＲ４は、式（Ｉ）に定義の通りである）
を有する化合物と、式（III）Ｈ２Ｎ−Ｒ２−Ｒ１（式中、Ｒ１およびＲ２は、式（Ｉ）に定義の通りである）を有する化合物とを反応させること；または
（ii）式
【００５０】
【化３】
2005515998.tif 000005
【００５１】
（式中、Ｌ２は脱離基（例えば、ハロゲン、またはメタンスルホニルオキシまたはトルエン−４−スルホニルオキシなどのスルホニルオキシ）であり、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、式（Ｉ）に定義の通りである）
を有する化合物と、式（Ｖ）Ｈ２Ｎ−Ｒ４（式中、Ｒ４は式（Ｉ）に定義の通りである）を有する化合物とを反応させること；または
（iii）式
【００５２】
【化４】
2005515998.tif 000006
【００５３】
（式中、Ｒ１およびＲ２は、式（Ｉ）に定義の通りである）
を有する化合物と、式
【００５４】
【化５】
2005515998.tif 000007
【００５５】
（式中、Ｘは酸素原子であり且つｑは１であり、またはＸは窒素原子であり且つｑは２であり、Ｒ２０は各々独立して、Ｃ１−Ｃ６アルキル基であり、Ｒ３およびＲ４は、式（Ｉ）に定義の通りである）
を有する化合物とを反応させること；または
（iv）Ｒ４が置換されたピラゾリルである場合、式
【００５６】
【化６】
2005515998.tif 000008
【００５７】
（式中、Ｒ２１は、Ｃ１−Ｃ６アルキル基またはＣ３−Ｃ６シクロアルキル基であり、そしてＲ１、Ｒ２およびＲ３は、式（Ｉ）に定義の通りである）
を有する化合物とヒドラジンとを反応させること；
そして、（ｉ）、（ii）、（iii）または（iv）の後に、次の、
・得られた化合物を、本発明の更に別の化合物に変換すること
・この化合物の薬学的に許容しうる塩または溶媒和化合物を形成すること
の一つ以上を行ってもよい。
【００５８】
工程（ｉ）および（ii）は、好都合には、次のように、
（ａ）適当な溶媒、例えば、アセトンなどのケトン；またはエタノール若しくはブタノールなどのアルコール；またはトルエン若しくはＮ−メチルピロリド−２−オンなどの芳香族炭化水素の存在下、随意に、適当な酸、例えば、塩酸若しくは硫酸などの無機酸；または酢酸若しくはギ酸などの有機酸（または適当なルイス酸）の存在下において、０℃〜還流温度の範囲内の温度、具体的には、還流温度で；または
（ｂ）標準的な Buchwald 条件下（例えば、J. Am. Chem. Soc., 118, 7215; J. Am. Chem. Soc., 119, 8451; J. Org. Chem., 62, 1568 and 6066 を参照されたい）、例えば、酢酸パラジウムの存在下、適当な溶媒、例えば、トルエン、ベンゼンまたはキシレンなどの芳香族溶媒中において、適当な塩基、例えば、炭酸セシウムなどの無機塩基またはカリウム−ｔ−ブトキシドなどの有機塩基と一緒に、２，２’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−１，１’−ビナフチルなどの適当なリガンドの存在下において２５〜８０℃の範囲内の温度で行うことができる。
【００５９】
工程（iii）は、好都合には、Ｎ−メチルピロリジノンまたはブタノールなどの適当な溶媒中において１００〜２００℃の範囲内、特に、１５０〜１７０℃の範囲内の温度で行うことができる。好ましくは、この反応は、例えば、ナトリウムメトキシドまたは炭酸カリウムなどの適当な塩基の存在下で行われる。
【００６０】
工程（iv）は、適当な溶媒、例えば、エタノールまたはブタノールなどのアルコール中において５０〜１２０℃の範囲内、特に、７０〜１００℃の範囲内の温度で行うことができる。
【００６１】
式（II）、（III）、（IV）、（Ｖ）、（VI）、（VII）および（VIII）の化合物は、商業的に入手可能であるか、参考文献で知られているか、または既知の技法を用いて製造することができる。
【００６２】
式（Ｉ）の化合物は、標準法を用いて、更に別の式（Ｉ）の化合物に変換することができる。用いることができる変換反応のタイプ例には、芳香族置換反応による置換基の導入、置換基の還元、置換基のアルキル化、および置換基の酸化が含まれる。このような手順のための試薬および反応条件は、化学技術分野において周知である。芳香族置換反応の具体的な例には、濃硝酸を用いたニトロ基の導入；例えば、フリーデル・クラフツ条件下においてアシルハライドおよびルイス酸（三塩化アルミニウムなど）を用いたアシル基の導入；フリーデル・クラフツ条件下においてアルキルハライドおよびルイス酸（三塩化アルミニウムなど）を用いたアルキル基の導入；およびハロゲノ基の導入が含まれる。還元反応の具体的な例には、ニッケル触媒での接触水素添加による、または加熱を伴う塩酸の存在下の鉄での処理によるニトロ基のアミノ基への還元が含まれ；そして酸化反応の具体的な例には、アルキルチオのアルキルスルフィニルまたはアルキルスルホニルへの酸化が含まれる。
【００６３】
本発明の方法において、出発試薬または中間体化合物中のヒドロキシル基またはアミノ基などの若干の官能基が、保護基で保護される必要がありうるということは当業者によって理解されるであろう。したがって、式（Ｉ）の化合物の製造は、いろいろな段階で、一つまたはそれを超える保護基の付加および除去を伴うことがありうる。
【００６４】
官能基の保護および脱保護は、'Protective Groups in Organic Chemistry', edited by J.W.F. McOmie, Plenum Press (1973) および 'Protective Groups in Organic Synthesis', 2nd edition, T.W. Greene and P.G.M. Wuts, Wiley-Interscience (1991) に記載されている。
【００６５】
上の式（Ｉ）の化合物は、それらの薬学的に許容しうる塩または溶媒和化合物に、好ましくは、塩酸塩、臭化水素酸塩、リン酸塩、酢酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、酒石酸塩、クエン酸塩、シュウ酸塩、メタンスルホン酸塩またはｐ−トルエンスルホン酸塩などの酸付加塩、またはナトリウム塩またはカリウム塩などのアルカリ金属塩に変換することができる。
【００６６】
式（Ｉ）の若干の化合物は、立体異性体で存在することができる。本発明が、全ての式（Ｉ）の化合物の幾何異性体および光学異性体（アトロプ異性体を含めた）、およびラセミ化合物を含めたそれらの混合物の使用を包含するということは理解されるであろう。互変異性体およびそれらの混合物の使用も、本発明の側面を成している。例えば、Ｒ４がピラゾリルである場合、ピラゾリル−５−イルおよびピラゾリル−３−イルは、同じ化合物の互変異性体である。
【００６７】
これら式（Ｉ）の化合物は、薬剤として、具体的には、インスリン様成長因子１受容体（ＩＧＦ−１Ｒ）活性のモジュレーターまたは阻害剤としての活性を有し、そして例として次の癌が含まれる増殖性および過増殖性疾患／状態の処置に用いることができる。
【００６８】
（１）膀胱癌、脳癌、乳癌、結腸癌、腎臓癌、肝癌、肺癌、卵巣癌、膵臓癌、前立腺癌、胃癌、頸癌、結腸癌、甲状腺癌および皮膚癌を含めた癌；
（２）急性リンパ性白血病、Ｂ細胞リンパ腫およびバーキット（Burketts）リンパ腫を含めたリンパ系の造血性腫瘍；
（３）急性および慢性の骨髄性白血病および前骨髄球性白血病を含めた骨髄系の造血性腫瘍；
（４）線維肉腫および横紋筋肉腫を含めた間葉起原の腫瘍；および
（５）黒色腫、精上皮腫、テトラトカルシノーマ（tetratocarcinoma）、神経芽細胞腫および神経膠腫を含めた他の腫瘍。
【００６９】
本発明の化合物は、乳房および前立腺の腫瘍の処置に特に有用である。
したがって、本発明は、療法で用いるための、本明細書中の前に定義の式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容しうる塩もしくは溶媒和化合物を提供する。
【００７０】
もう一つの側面において、本発明は、療法で用いるための薬剤の製造における、本明細書中の前に定義の式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容しうる塩もしくは溶媒和化合物の使用を提供する。
【００７１】
本明細書の文脈中、「療法」という用語には、特にそうでないと示されなければ、「予防」も含まれる。「治療的」および「治療的に」という用語は、それに応じて解釈されるはずである。
【００７２】
本発明は、更に、癌を処置する方法であって、それを必要としている患者に、本明細書中の前に定義の式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容しうる塩もしくは溶媒和化合物の治療的有効量を投与することを含む方法を提供する。
【００７３】
本発明は、また更に、インスリン様成長因子１受容体（ＩＧＦ−１Ｒ）活性を調節する（modulate）方法であって、それを必要としている患者に、本明細書中の前に定義の式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容しうる塩もしくは溶媒和化合物の治療的有効量を投与することを含む方法を提供する。
【００７４】
これら式（Ｉ）の化合物、およびそれらの薬学的に許容しうる塩および溶媒和化合物は、それだけで用いることができるが、概して、式（Ｉ）の化合物／塩／溶媒和化合物（活性成分）が、薬学的に許容しうるアジュバント、希釈剤または担体と一緒になっている医薬組成物の形で投与されるであろう。投与様式に依存して、この医薬組成物は、好ましくは、全て全組成物に基づく重量百分率で０．０５〜９９％ｗ（重量パーセント）、より好ましくは、０．０５〜８０％ｗ、なお一層好ましくは、０．１０〜７０％ｗ、なお一層好ましくは、０．１０〜５０％ｗの活性成分を含むであろう。
【００７５】
本発明は、更に、本明細書中の前に定義の式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容しうる塩もしくは溶媒和化合物を、薬学的に許容しうるアジュバント、希釈剤または担体と一緒に含む医薬組成物を提供する。
【００７６】
本発明は、更に、本発明の医薬組成物の製造方法であって、本明細書中の前に定義の式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容しうる塩もしくは溶媒和化合物と、薬学的に許容しうるアジュバント、希釈剤または担体とを混合することを含む方法を提供する。
【００７７】
これら医薬組成物は、局所に（例えば、皮膚にまたは肺および／または気道に）、例えば、クリーム剤、液剤、懸濁剤、ヘプタフルオロアルカンエアゾル剤および乾燥粉末製剤の形で；または全身に、例えば、錠剤、カプセル剤、シロップ剤、散剤または顆粒剤の形での経口投与によって；または液剤または懸濁剤の形での非経口投与によって；または皮下投与によって；または坐剤の形での直腸投与によって；または経皮によって投与することができる。
【００７８】
本発明の組成物は、当該技術分野において周知の慣用的な医薬賦形剤を用いて、慣用法によって得ることができる。したがって、経口使用を予定した組成物は、例えば、一つまたはそれを超える着色剤、甘味剤、着香剤および／または保存剤を含有してよい。
【００７９】
錠剤製剤に適した薬学的に許容しうる賦形剤には、例えば、ラクトース、炭酸ナトリウム、リン酸カルシウムまたは炭酸カルシウムなどの不活性希釈剤；トウモロコシデンプンまたはアルギン酸（algenic acid）などの造粒剤および崩壊剤；デンプンなどの結合剤；ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸またはタルクなどの滑沢剤；ｐ−ヒドロキシ安息香酸エチルまたはプロピルなどの保存剤；およびアスコルビン酸などの酸化防止剤が含まれる。錠剤製剤は、未コーティングであってよいし、または胃腸管内でのそれらの崩壊およびその後の活性成分の吸収を変更するためにかまたはそれらの安定性および／または外観を改善するために、どちらの場合も当該技術分野において周知の慣用的なコーティング剤および手順を用いて、コーティングされていてよい。
【００８０】
経口使用のための組成物は、活性成分が、不活性固体希釈剤、例えば、炭酸カルシウム、リン酸カルシウムまたはカオリンと混合されているゼラチン硬カプセル剤の形であってよいし、または活性成分が、ラッカセイ油、流動パラフィンまたはオリーブ油などの油または水と混合されているゼラチン軟カプセル剤としてあってよい。
【００８１】
水性懸濁剤は、概して、微粉の形の活性成分を、一つまたはそれを超える懸濁化剤、例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、トラガカントゴムおよびアラビアゴム；分散助剤または湿潤剤、例えば、レシチン、またはアルキレンオキシドと脂肪酸との縮合生成物（例えば、ポリオキシエチレンステアラート）、またはエチレンオキシドと長鎖脂肪族アルコールとの縮合生成物、例えば、ヘプタデカエチレンオキシセタノール、またはエチレンオキシドと、脂肪酸およびヘキシトールから誘導される部分エステルとの縮合生成物、例えば、ポリオキシエチレンソルビトールモノオレアート、またはエチレンオキシドと、脂肪酸および無水ヘキシトールから誘導される部分エステルとの縮合生成物、例えば、ポリエチレンソルビタンモノオレアートと一緒に含有する。これら水性懸濁剤は、一つまたはそれを超える保存剤（ｐ−ヒドロキシ安息香酸エチルまたはプロピルなど）、酸化防止剤（アスコルビン酸など）、着色剤、着香剤および／または甘味剤（スクロース、サッカリンまたはアスパルテームなど）も含有してよい。
【００８２】
油状懸濁剤は、活性成分を、植物油（ラッカセイ油、オリーブ油、ゴマ油またはヤシ油など）中にまたは鉱油（流動パラフィンなど）中に懸濁させることによって製剤化することができる。これら油状懸濁剤は、蜜蝋、硬パラフィンまたはセチルアルコールなどの増粘剤も含有してよい。着香剤および上に挙げられたような甘味剤を加えて、風味のよい経口製剤を与えることができる。これら組成物は、アスコルビン酸などの酸化防止剤の添加によって保存することができる。
【００８３】
水の添加による水性懸濁剤の製造に適した分散性散剤および顆粒剤は、概して、活性成分を、分散助剤または湿潤剤、懸濁化剤および一つまたはそれを超える保存剤と一緒に含有する。適当な分散助剤または湿潤剤および懸濁化剤は、上に既述されたものによって代表される。甘味剤、着香剤および着色剤などの追加の賦形剤も存在してよい。
【００８４】
本発明の医薬組成物は、水中油エマルジョンの形であってもよい。その油状相は、オリーブ油またはラッカセイ油などの植物油、または鉱油、例えば、流動パラフィンなど、またはいずれかのこれらの混合物であってよい。適当な乳化剤は、例えば、アラビアゴムまたはトラガカントゴムなどの天然に存在するガム、ダイズ、レシチンなどの天然に存在するホスファチド、脂肪酸および無水ヘキシトールから誘導されるエステルまたは部分エステル（例えば、ソルビタンモノオレアート）、およびそれら部分エステルとエチレンオキシドとの縮合生成物、例えば、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレアートであってよい。これらエマルジョンは、甘味剤、着香剤および保存剤も含有してよい。
【００８５】
シロップ剤およびエリキシル剤は、グリセロール、プロピレングリコール、ソルビトール、アスパルテームまたはスクロースなどの甘味剤と一緒に製剤化することができ、粘滑剤、保存剤、着香剤および／または着色剤も含有してよい。
【００８６】
これら医薬組成物は、滅菌注射可能水性または油状懸濁剤の形であってもよく、それらは、上に述べられた一つまたはそれを超える適当な分散助剤または湿潤剤および懸濁化剤を用いて、既知の手順にしたがって製剤化することができる。滅菌注射可能製剤は、無毒性の非経口的に許容しうる希釈剤または溶媒中の滅菌注射可能液剤または懸濁剤、例えば、１，３−ブタンジオール中の液剤であってもよい。
【００８７】
坐剤製剤は、常温では固体であるが、直腸温度で液体であり、したがって、直腸内で溶融して薬物を放出するであろう適当な非刺激性賦形剤と活性成分を混合することによって製造することができる。適当な賦形剤には、例えば、カカオ脂およびポリエチレングリコールが含まれる。
【００８８】
クリーム剤、軟膏剤、ゲル剤および水性または油状液剤または懸濁剤などの局所用製剤は、概して、当該技術分野において周知の慣用法を用いて、活性成分を、慣用的な局所的に許容しうるビヒクルまたは希釈剤と一緒に製剤化することによって得ることができる。
【００８９】
吹入による投与用の組成物は、例えば、３０μまたはそれよりはるかに小さい平均直径の粒子を含有する微粉であって、それ自体が、ラクトースなどの一つまたはそれを超える生理学的に許容しうる担体で希釈されたかまたは単独の活性成分を含む微粉の形であってよい。次に、この吹入用粉末は、既知のナトリウムクロモグリケート剤の吹入に用いられるようなターボ吸入装置で用いるために、例えば、１〜５０ｍｇの活性成分を含有するカプセル中に好都合に保持される。
【００９０】
吸入による投与用の組成物は、微粉固体かまたは液体粒子を含有するエアゾル剤として活性成分を分配するように配置された慣用的な加圧エアゾルの形であってよい。揮発性フッ素化炭化水素または炭化水素などの慣用的なエアゾル噴射剤を用いてよく、エアゾル装置は、一定計量の活性成分を分配するように好都合に配置される。
【００９１】
製剤に関する追加の情報については、読者は、Chapter 25.2 in Volume 5 of Comprehensive Medicinal Chemistry (Corwin Hansch; Chairman of Editorial Board), Pergamon Press 1990 を参照する。
【００９２】
本発明の化合物の治療目的のための用量サイズは、当然ながら、周知の医学原則にしたがって、状態の性状および重症度、動物または患者の年齢および性別、および投与経路によって異なるであろう。
【００９３】
概して、本発明の化合物は、必要ならば分割用量で与えられる、例えば、０．５ｍｇ〜７５ｍｇ活性成分／ｋｇ体重の範囲内の１日用量が与えられるように投与されるであろう。概して、非経口経路を用いる場合、より少ない用量が投与されるであろう。したがって、例えば、静脈内投与には、例えば、０．５ｍｇ〜３０ｍｇ活性成分／ｋｇ体重の範囲内の用量が、概して用いられるであろう。同様に、吸入による投与には、例えば、０．５ｍｇ〜２５ｍｇ活性成分／ｋｇ体重の範囲内の用量が、概して用いられるであろう。しかしながら、経口投与が好適である。例えば、ヒトへの経口投与を予定した製剤は、概して、例えば、０．５ｍｇ〜２ｇの活性成分を含有するであろう。
【００９４】
Routes of Administration and Dosage Regimes についての更なる情報について、読者は、Chapter 25.3 in Volume 5 of Comprehensive Medicinal Chemistry (Corwin Hansch; Chairman of Editorial Board), Pergamon Press 1990 を参照する。
【００９５】
実施例
本発明を、ここで、次の説明的な実施例に関して更に記載するが、特に断らない限り、
（ｉ）温度は、摂氏度（℃）で与えられ；操作は、室温または周囲温度で、すなわち、１８〜２５℃の範囲内の温度で行った；
（ii）有機溶液は、無水硫酸マグネシウム上で乾燥させ；溶媒の蒸発は、ロータリーエバポレーターを用いて、減圧下（６００〜４０００パスカル；４．５〜３０ｍｍＨｇ）において６０℃までの浴温度で行った；
（iii）クロマトグラフィーは、シリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィーを意味し；薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）は、シリカゲルプレート上で行った；
（iv）概して、反応経過はＴＬＣによって追跡したが、反応時間は、単に例示のために与えられる；
（ｖ）最終生成物は、納得のいくプロトン核磁気共鳴（ＮＭＲ）スペクトルおよび／または質量スペクトルデータを有した；
（vi）収率は、単に例示のために与えられ、高度な方法開発によって得ることができるものでは必ずしもなく；より多くの材料が必要とされた場合、製造を反復した；
（vii）与えられている場合、ＮＭＲデータは、特に断らない限り、ＤＭＳＯ−ｄ６＋ＣＤ３ＣＯＯＤ中において３００ＭＨｚで決定される、内部標準としてのテトラメチルシラン（ＴＭＳ）に相対する百万分率（ｐｐｍ）で与えられる、主な診断用プロトンについてのδ値の形である；
（viii）化学記号は、それらの通常の意味を有し；ＳＩ単位および記号が用いられ；
（ix）溶媒比は、容量：容量（ｖ／ｖ）という用語で与えられ；そして
（ｘ）質量スペクトルは、化学イオン化（ＣＩ）様式において直接暴露プローブを用いて７０電子ボルトの電子エネルギーで行った；指定された場合、イオン化は、電子衝撃（ＥＩ）、高速原子衝撃（ＦＡＢ）またはエレクトロスプレー（ＥＳ）によって行った；ｍ／ｚの値が与えられ；概して、親質量を示すイオンだけが報告され；そして特に断らない限り、引用される質量イオンは（ＭＨ）＋である；
（xii）次の略語を用いた。
ＴＨＦ      テトラヒドロフラン；
ＤＭＦ      Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド；
ＥｔＯＡｃ  酢酸エチル；
ＤＣＭ      ジクロロメタン；および
ＤＭＳＯ    ジメチルスルホキシド。
【００９６】
実施例１
５−ブロモ−２−（３−メチルイソキサゾール−５−イルメチルアミノ）−４−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピリミジン
１−ブタノール（１０ｍｌ）中の５−アミノメチル−３−メチルイソキサゾール塩酸塩（８９０ｍｇ，６．０ｍｍｏｌ）、５−ブロモ−２−クロロ−４−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピリミジン（製法１；５７８ｍｇ，２．０ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１．４ｍｌ，８．０ｍｍｏｌ）の混合物を、１２０℃で１８時間加熱した。その混合物を周囲温度に冷却させ、揮発物を蒸発によって除去した。残留物をエーテルで研和し、生成物を濾過によって集めて、標題化合物（２２５ｍｇ，３１％）を生じた。
【００９７】
【化７】
2005515998.tif 000009
【００９８】
実施例２〜１２
実施例１と同様の手順にしたがって、適当なピリミジン（ＳＭ１）およびアミン（ＳＭ２）を代用後、次の化合物を合成した（ＮＭＲは、ＤＭＳＯ−ｄ６中で記録した）。出発物質が示されていない場合、この化合物は商業的に入手可能である。
【００９９】
【表１】
2005515998.tif 000010
【０１００】
【表２】
2005515998.tif 000011
【０１０１】
実施例１３
５−ブロモ−２−（２−フル−２−イルエチルアミノ）−４−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピリミジン
５−ブロモ−２−クロロ−４−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピリミジン（製法１；２９０ｍｇ，１．０ｍｍｏｌ）、２−（２−アミノエチル）フラン（３３０ｍｇ，３．０ｍｍｏｌ）および１−ブタノール（５ｍｌ）の混合物を、１２０℃で５時間加熱した。その混合物を周囲温度に冷却させ、揮発物を蒸発によって除去した。残留物をＤＣＭ中に溶解させ、水で洗浄後、ブラインで洗浄した。有機層を分離し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を蒸発によって除去した。残留物をエーテルで研和し、固体生成物を集め、そしてシリカゲル上のカラムクロマトグラフィーによってＤＣＭ／メタノール（９５：５）で溶離して精製して、標題化合物（８０ｍｇ，２２％）を生じた。
【０１０２】
【化８】
2005515998.tif 000012
【０１０３】
実施例１４〜１０６
実施例１３と同様の手順にしたがって、適当なピリミジン（ＳＭ１）およびアミン（ＳＭ２）出発物質を代用後、次の化合物を合成した。出発物質が示されていない場合、この化合物は商業的に入手可能である。
【０１０４】
【表３】
2005515998.tif 000013
【０１０５】
【表４】
2005515998.tif 000014
【０１０６】
【表５】
2005515998.tif 000015
【０１０７】
【表６】
2005515998.tif 000016
【０１０８】
【表７】
2005515998.tif 000017
【０１０９】
【表８】
2005515998.tif 000018
【０１１０】
【表９】
2005515998.tif 000019
【０１１１】
【表１０】
2005515998.tif 000020
【０１１２】
【表１１】
2005515998.tif 000021
【０１１３】
【表１２】
2005515998.tif 000022
【０１１４】
【表１３】
2005515998.tif 000023
【０１１５】
【表１４】
2005515998.tif 000024
【０１１６】
【表１５】
2005515998.tif 000025
【０１１７】
【表１６】
2005515998.tif 000026
【０１１８】
【表１７】
2005515998.tif 000027
【０１１９】
【表１８】
2005515998.tif 000028
【０１２０】
実施例１０７
５−ブロモ−２−（３−カルバモイルイソキサゾール−５−イルメチルアミノ）−４−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピリミジン
５−ブロモ−２−［３−（メトキシカルボニル）イソキサゾール−５−イルメチルアミノ］−４−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピリミジン（実施例１０４；５０ｍｇ，０．１１ｍｍｏｌ）を、７Ｎメタノール性アンモニア（５ｍｌ）中に懸濁させ、周囲温度で１８時間撹拌した。揮発物を蒸発によって除去し、残留物をＤＣＭ／ジエチルエーテル（５０：５０）で研和し、生成物を濾過によって集めて、標題化合物（３５ｍｇ，７６％）を生じた。
【０１２１】
【化９】
2005515998.tif 000029
【０１２２】
出発物質の製造：
上の実施例のための出発物質は、商業的に入手可能であるかまたは、既知の材料から標準法によって容易に製造する。例えば、次の反応は、上の反応で用いられる若干の出発物質の例示であるが、制限するものではない。
【０１２３】
製法１
５−ブロモ−２−クロロ−４−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピリミジン
１−ブタノール（８０ｍｌ）中の５−ブロモ−２，４−ジクロロピリミジン（１０．０ｇ，４４ｍｍｏｌ）、３−アミノ−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール（６．０ｇ，６２ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（９．２０ｍｌ，５３ｍｍｏｌ）の溶液を、８５℃で１２時間加熱した。その混合物を周囲温度に冷却させ、得られた沈殿を濾過によって集めた。固体生成物をエタノールで洗浄し、乾燥させて、副題化合物（１０．８ｇ，８５％）を生じた。
【０１２４】
【化１０】
2005515998.tif 000030
【０１２５】
製法２
２−オキソブチルニトリル
アセトニトリル（１３．７ｍｌ，２６０ｍｍｏｌ）を、プロピオン酸エチル（２２．３ｇ，２２０ｍｍｏｌ）および無水１，４−ジオキサン（２００ｍｌ）中の水素化ナトリウム（１０．４ｇの鉱油中６０％懸濁液，２６０ｍｍｏｌ）の懸濁液に周囲温度で加えた。その混合物を１００℃で１２時間加熱後、冷却させた。水を加え、その混合物を濃塩酸でｐＨ２．０に調整し、ＤＣＭで抽出した。抽出物を一緒にし、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、揮発物を蒸発によって除去した。残留物を、シリカゲル上のカラムクロマトグラフィーによってＤＣＭで溶離して精製して、標題化合物（２０ｇ，９４％）を油状物として生じた。
【０１２６】
【化１１】
2005515998.tif 000031
【０１２７】
製法３〜５
次の化合物を、適当な出発物質を用いて製法２の手順によって製造した。
【０１２８】
【表１９】
2005515998.tif 000032
【０１２９】
製法６
３−アミノ−５−エチル−１Ｈ−ピラゾール
ヒドラジン一水和物（１１．３ｇ，２３０ｍｍｏｌ）を、エタノール（５０ｍｌ）中の３−オキソブチロニトリル（製法２；２０．０ｇ，２１０ｍｍｏｌ）の溶液に加え、その混合物を７０℃で１２時間加熱した。揮発物を蒸発によって除去し、残留物をシリカゲル上のカラムクロマトグラフィーによってＤＣＭ／メタノール（９０：１０）で溶離して精製して、標題化合物を油状物として生じた。（１０．２ｇ，４４％）。
【０１３０】
【化１２】
2005515998.tif 000033
【０１３１】
製法７〜９
次の化合物を、適当な出発物質を用いて製法６の手順によって製造した。
【０１３２】
【表２０】
2005515998.tif 000034
【０１３３】
製法１０
２，５−ジクロロ−４−（５−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−イルアミノ）ピリミジン
１−ブタノール（５０ｍｌ）中の２，４，５−トリクロロピリミジン（６．０ｇ，３２．６ｍｍｏｌ）、３−アミノ−５−メチル−１Ｈ−ピラゾール（３．１８ｇ，３２．７ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（６．３０ｍｌ，３６．２ｍｍｏｌ）の溶液を、１００℃で２時間加熱した。揮発物を蒸発によって除去し、残留物をＤＣＭで研和して、標題化合物（５．７ｇ，７２％）を白色固体として与えた。
【０１３４】
【化１３】
2005515998.tif 000035
【０１３５】
製法１１〜２１
次の化合物を、適当な出発物質を用いて製法１０の手順によって製造した。
【０１３６】
【表２１】
2005515998.tif 000036
【０１３７】
製法２２
α−クロロベンズアルデヒドオキシム
Ｎ−クロロスクシンイミド（５．５０ｇ，４１．３ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（３４ｍｌ）中のベンズアルデヒドオキシム（５．０ｇ，４１．３ｍｍｏｌ）の溶液に、温度が３５℃を超えて上昇しないように少量ずつ加えた。混合物を周囲温度で２時間撹拌後、氷浴で冷却した。水を加え、水性混合物をエーテルで抽出した。有機層を一緒にし、水およびブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を蒸発によって除去して、標題化合物（６．４３ｇ，１００％）を油状物として生じた。
【０１３８】
【化１４】
2005515998.tif 000037
【０１３９】
製法２３〜３３
次の化合物を、適当な出発物質を用いて製法２２の手順によって製造した。
【０１４０】
【表２２】
2005515998.tif 000038
【０１４１】
製法３４
α−クロロピリド−３−イルカルバルデヒドオキシムを、Tetrahedron 2000, 56, 1057-1064 に記載の方法にしたがって製造した。
【０１４２】
製法３５
３−メトキシベンズアルデヒドオキシム
蒸留水（２０ｍｌ）中のヒドロキシルアミン塩酸塩（１０ｇ，０．１４４ｍｏｌ）の溶液を、２０％（ｗ／ｖ）水酸化ナトリウム水溶液（２８ｍｌ）に加えた。３−メトキシベンズアルデヒド（１４ｍｌ，０．１２ｍｏｌ）を少量ずつ加え、その混合物を０〜５℃で２時間撹拌した。混合物をｐＨ７に調整し、ジクロロメタンで抽出した。抽出物を一緒にし、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を蒸発によって除去して、標題化合物（１８．７ｇ，１００％）を無色油状物として生じた。
【０１４３】
【化１５】
2005515998.tif 000039
【０１４４】
製法３６〜４２
次の化合物を、適当な出発物質を用いて製法３５の手順によって製造した。
【０１４５】
【表２３】
2005515998.tif 000040
【０１４６】
製法４３
５−（tert−ブトキシカルボニルアミノメチル）−３−フェニルイソキサゾール
ＴＨＦ（１３ｍｌ）中のα−クロロベンズアルデヒドオキシム（製法２２；１ｇ，６．４ｍｍｏｌ）の溶液を、氷浴で冷却されたＴＨＦ（２５ｍｌ）中のＮ−tert−ブトキシカルボニルプロパルギルアミン（０．５ｇ，３．２ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（０．９ｍｌ，６．４ｍｍｏｌ）の溶液に滴加した。その混合物を周囲温度に暖め、２日間撹拌した。揮発物を蒸発によって除去し、残留物をＤＣＭ中に溶解させた。その溶液を、水およびブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を蒸発によって除去した。残留物をイソヘキサン／エーテル（９：１）で研和し、濾過によって集めて、標題化合物（４７３ｍｇ，５４％）を生じた。
【０１４７】
【化１６】
2005515998.tif 000041
【０１４８】
製法４４〜５５
次の化合物を、適当な出発物質を用いて製法４３の手順によって製造した。
【０１４９】
【表２４】
2005515998.tif 000042
【０１５０】
製法５６
５−アミノメチル−３−フェニルイソキサゾール
トリフルオロ酢酸（１．７ｍｌ，２．６ｍｍｏｌ）を、氷浴中で冷却されたＤＣＭ（８ｍｌ）中の５−（tert−ブトキシカルボニルアミノメチル）−３−フェニルイソキサゾール（製法４３；４７３ｍｇ，１．７３ｍｍｏｌ）の溶液に滴加した。その混合物を周囲温度に加温し、１８時間撹拌し、そして揮発物を蒸発によって除去した。残留物をエーテルで研和して、標題化合物（４２７ｍｇ，８６％）を生じた。
【０１５１】
【化１７】
2005515998.tif 000043
【０１５２】
製法５７〜６８
次の化合物を、適当な出発物質を用いて製法５６の手順によって製造した。
【０１５３】
【表２５】
2005515998.tif 000044
【０１５４】
製法６９
５−（tert−ブトキシカルボニルアミノメチル）−３−（ピリド−２−イル）イソキサゾール
次亜塩素酸ナトリウム（１６ｍｌの１４％ｗ／ｖ水溶液，２９．５ｍｍｏｌ）を、氷浴中で冷却されたＤＣＭ（３０ｍｌ）中の２−ピリジンアルドキシム（２ｇ，１６．４ｍｍｏｌ）およびＮ−tert−ブトキシカルボニルプロパルギルアミン（５．６ｇ，３６．１ｍｍｏｌ）の溶液に滴加した。その混合物を激しく撹拌し、周囲温度に暖め、１８時間撹拌した。水性層を分離し、ＤＣＭで抽出した。合わせた有機抽出物を一緒にし、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を蒸発によって除去した。残留物を、シリカゲル上のカラムクロマトグラフィーによってジエチルエーテル／イソヘキサン（１：１）で溶離して精製して、標題化合物（１．９３ｇ，４３％）を生じた。
【０１５５】
【化１８】
2005515998.tif 000045
【０１５６】
製法７０
５−アミノメチル−３−（ピリド−２−イル）イソキサゾール
５−（tert−ブトキシカルボニルアミノメチル）−３−（ピリド−２−イル）イソキサゾール（製法６９）を、製法５６に記載のように処理して、５−アミノメチル−３−（２−ピリジル）イソキサゾールを生じた。
【０１５７】
【化１９】
2005515998.tif 000046
【０１５８】
製法７１
３−メチル−５−（１−フタルアミドエチル）イソキサゾール
トルエン（１５ｍｌ）中のトリエチルアミン（０．３５ｍｌ，２．５ｍｍｏｌ）の溶液を、トルエン（６５ｍｌ）中のフェニルイソシアネート（５．４３ｍｌ，５０ｍｍｏｌ）、ニトロエタン（２．１５ｍｌ，３０ｍｍｏｌ）およびＮ−（ブト−１−イン−３−イル）フタルアミド（５．０ｇ，２５ｍｍｏｌ）の溶液に周囲温度で滴加した。その混合物を１８時間撹拌し、濾過し、揮発物を蒸発によって除去した。残留物をエーテルで研和し、生成物を濾過によって集めて、標題化合物（５．３５ｇ，８９％）を生じた。
【０１５９】
【化２０】
2005515998.tif 000047
【０１６０】
製法７２
５−（１−アミノエチル）−３−メチルイソキサゾール
３−メチル−５−（１−フタルアミドエチル）イソキサゾール（製法７１；３．５５ｇ，１３．９ｍｍｏｌ）、ヒドラジン一水和物（０．７５ｍｌ，１５．３ｍｍｏｌ）およびエタノール（５０ｍｌ）の混合物を、還流しながら４時間加熱した。その混合物を周囲温度に冷却させ、氷酢酸（８．８ｍｌ，１５３ｍｍｏｌ）を加えた後、その混合物を還流しながら２時間加熱した。混合物を周囲温度に冷却させ、そして５０％水酸化ナトリウム水溶液で混合物を中和し、水で希釈し、ＤＣＭで抽出し、そして合わせた抽出物を水で、次にブラインで洗浄した。有機層を分離し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を蒸発によって除去した。残留物をエタノール中に溶解させ、過剰の１Ｎエーテル性塩化水素で処理し、揮発物を蒸発によって除去して、標題化合物（１．５２ｇ，８７％）を生じた。
【０１６１】
【化２１】
2005515998.tif 000048
【０１６２】
製法７３
３−エトキシカルボニル−５−［Ｎ−（tert−ブチルオキシカルボニル）アミノメチル］イソキサゾール
ＴＨＦ（２００ｍｌ）中のクロロオキシイミド酢酸エチル（１０ｇ，６６ｍｍｏｌ）の溶液を、テトラヒドロフラン（１００ｍｌ）中のＮ−（tert−ブチルオキシカルボニル）プロパルギルアミン（２０．５ｇ，１３１ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（１１．２ｍｌ，８０ｍｍｏｌ）の混合物に、３時間にわたって滴加した。その混合物を周囲温度で１８時間撹拌後、揮発物を蒸発によって除去した。残留物をＤＣＭ中に溶解させ、水で、次にブラインで洗浄した。有機層を分離し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を蒸発によって除去した。残留物を、シリカゲル上のカラムクロマトグラフィーによってイソヘキサン／ジエチルエーテル（８０：２０の後、５０：５０）で溶離して精製して、標題化合物（１０．６ｇ，６０％）を生じた。
【０１６３】
【化２２】
2005515998.tif 000049
【０１６４】
製法７４
３−エトキシカルボニル−５−アミノメチルイソキサゾール
トリフルオロ酢酸（２．１ｍｌ，２９ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ（１５ｍｌ）中の３−エトキシカルボニル−５−［Ｎ−（tert−ブチルオキシカルボニル）アミノメチル］イソキサゾール（製法７３；７９０ｍｇ，２．９ｍｍｏｌ）の溶液に加えた。その混合物を周囲温度で４時間撹拌後、揮発物を蒸発によって除去した。残留物をジエチルエーテルで研和して、標題化合物（７６３ｇ，９３％）を生じた。
【０１６５】
【化２３】
2005515998.tif 000050
【０１６６】
製法７５
３−ヒドロキシメチル−５−［Ｎ−（tert−ブチルオキシカルボニル）アミノメチル］イソキサゾール
水素化ホウ素ナトリウム（６１０ｍｇ，１６ｍｍｏｌ）を、エタノール（１５ｍｌ）中の３−エトキシカルボニル−５−［Ｎ−（tert−ブチルオキシカルボニル）アミノメチル］イソキサゾール（製法７３；１．６２ｇ，６ｍｍｏｌ）の溶液に窒素雰囲気下において０℃で少量ずつ加えた。その混合物を周囲温度で４時間撹拌後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で急冷した。混合物をＥｔＯＡｃで抽出し、有機層をブラインで洗浄後、乾燥させた（ＭｇＳＯ４）。溶媒を蒸発によって除去して、標題化合物（１．２５ｇ，９１％）を生じた。
【０１６７】
【化２４】
2005515998.tif 000051
【０１６８】
製法７６
３−ヒドロキシメチル−５−アミノメチルイソキサゾール
トリフルオロ酢酸（４ｍｌ，５４ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ（４０ｍｌ）中の３−ヒドロキシメチル−５−［Ｎ−（tert−ブチルオキシカルボニル）アミノメチル］イソキサゾール（製法７５；１．２５ｇ，５．４ｍｍｏｌ）の溶液に加えた。その混合物を周囲温度で１８時間撹拌後、揮発物を蒸発によって除去した。残留物を、ＳＣＸ−２カラム（５０ｇ）上のクロマトグラフィーによって、メタノールで、次にメタノール中の７Ｎアンモニアで溶離して精製して、標題化合物（６７６ｍｇ，９６％）を生じた。
【０１６９】
【化２５】
2005515998.tif 000052
【０１７０】
製法７７
３−（ピロリジン−１−イルカルボニル）−５−［Ｎ−（tert−ブチルオキシカルボニル）アミノメチル］イソキサゾール
３−エトキシカルボニル−５−［Ｎ−（tert−ブチルオキシカルボニル）アミノメチル］イソキサゾール（製法７３；５００ｍｇ，１．８５ｍｍｏｌ）を、ピロリジン（４ｍｌ）中に溶解させ、その混合物を８５℃で３時間加熱した。揮発物を蒸発によって除去し、残留物をジエチルエーテルで研和して、標題化合物（４３２ｍｇ，７９％）を白色固体として生じた。
【０１７１】
【化２６】
2005515998.tif 000053
【０１７２】
製法７８
３−（ピロリジン−１−イルカルボニル）−５−アミノメチル］イソキサゾール
３−（ピロリジン−１−イルカルボニル）−５−［Ｎ−（tert−ブチルオキシカルボニル）アミノメチル］イソキサゾール（製法７７）を、製法７４に記載のように脱保護して、標題化合物をそのトリフルオロ酢酸塩（４２８ｍｇ，９５％）として生じた。
【０１７３】
【化２７】
2005515998.tif 000054
【０１７４】
製法７９
５−［Ｎ−（tert−ブトキシカルボニル）アミノメチル］−３−（２−ヨードフェニル）イソキサゾール
２−ヨードベンズアルデヒドオキシム（製法４２）を、製法２２および製法４３に記載のように処理して、標題化合物を生じた。
【０１７５】
製法８０
５−［Ｎ−（tert−ブトキシカルボニル）アミノメチル］−３−（２−シアノフェニル）イソキサゾール
シアン化銅（Ｉ）（２．４９ｇ，２７．８ｍｍｏｌ）、tetra−ｎ−ブチルアンモニウムシアニド（１．８７ｇ，６．９５ｍｍｏｌ）、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（０）（０．２４７ｇ，０．２８ｍｍｏｌ）およびジフェニルホスフィノフェロセン（０．６１９ｇ，１．１２ｍｍｏｌ）を、窒素下の１，４−ジオキサン（３５ｍｌ）中の５−［Ｎ−（tert−ブトキシカルボニル）アミノメチル］−３−（２−ヨードフェニル）イソキサゾール（製法７９；２．７８ｇ，６．９５ｍｍｏｌ）の脱気溶液に加えた。その混合物を、還流しながら３時間加熱し、周囲温度に冷却し、ＥｔＯＡｃで希釈し、珪藻土を介して濾過した。その濾液を、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液およびブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、溶媒を蒸発によって除去した。残留物を、シリカゲル上のカラムクロマトグラフィーによってＥｔＯＡｃ／イソヘキサン（１５：８５〜２５：７５へと極性が増加する）で溶離して精製して、標題化合物（１．２９ｇ，６２％）を生じた。
【０１７６】
【化２８】
2005515998.tif 000055
【０１７７】
製法８１
５−アミノメチル−３−（２−シアノフェニル）イソキサゾール
５−［Ｎ−（tert−ブトキシカルボニル）アミノメチル］−３−（２−シアノフェニル）イソキサゾール（製法８０；１．２８ｇ，４．２８ｍｍｏｌ）を、製法５６に記載のように処理して、標題化合物（１．３４ｇ，１００％）を生じた。
【０１７８】
【化２９】
2005515998.tif 000056
【０１７９】
製法８２
３−メチル−５−｛２−［ビス−（Ｎ−tert−ブトキシカルボニル）アミノ］エチル｝イソキサゾール
J. Am. Chem. Soc. 1987 (109), 2765 で合成されるビス−Ｎ−tert−ブトキシカルボニル−３−ブチン（２．２ｇ，８．２ｍｍｏｌ）を、製法７１に記載のように処理して、標題化合物（０．５９ｇ，２２％）を生じた。
【０１８０】
【化３０】
2005515998.tif 000057
【０１８１】
製法８３
３−メチル−５−（２−アミノエチル）イソキサゾール
トリフルオロ酢酸（２．５ｍｌ，３．８ｍｍｏｌ）を、０℃に冷却されたＤＣＭ（１０ｍｌ）中の３−メチル−５−｛２−［ビス−（Ｎ−tert−ブトキシカルボニル）アミノ］エチル｝イソキサゾール（製法８２；０．５８９ｇ，１．８ｍｍｏｌ）の溶液に滴加した。その混合物を周囲温度に暖め、４８時間撹拌した。揮発物を蒸発によって除去し、残留物を、ＳＣＸ−２イオン交換カラム上のクロマトグラフィーによって、メタノールで、次にメタノール中７Ｎアンモニアで溶離して精製した。精製された生成物を、過剰の１．０Ｍエーテル性塩化水素（３．５ｍｌ）で処理して、標題化合物をその塩酸塩（０．２４ｇ，８２％）として生じた。
【０１８２】
【化３１】
2005515998.tif 000058
【０１８３】
製法８４
３−アジドメチル−５−メチルイソキサゾール
３−クロロメチル−５−メチルイソキサゾール（５００ｍｇ，３．８ｍｍｏｌ）およびアジ化ナトリウム（４９４ｍｇ，７．６ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（１０ｍｌ）中において６０℃で６時間加熱した。その反応混合物を、水で希釈後、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機抽出物を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、揮発物を蒸発によって除去して、標題化合物（３８７ｍｇ，７３％）を油状物として生じた。
【０１８４】
【化３２】
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【０１８５】
製法８５
３−アミノメチル−５−メチルイソキサゾール
３−アジドメチル−５−メチルイソキサゾール（製法８４；３８４ｍｇ，２．８ｍｍｏｌ）およびポリスチレンポリマーに支持されたトリフェニルホスフィン（４．２ｇ，４．２ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ（１７ｍｌ）および蒸留水（０．５８ｍｌ）の混合物中で一緒に２４時間撹拌した。反応混合物を濾過し、その樹脂を、ジエチルエーテルで、次にＤＣＭで洗浄した。合わせた濾液を蒸発させ、残留物を、ＳＣＸ−２カラム上においてメタノールで、次に７Ｎメタノール性アンモニアで溶離して精製して、標題化合物（２１１ｍｇ，６７％）を油状物として生じた。
【０１８６】
【化３３】
2005515998.tif 000060
【０１８７】
製法８６
α−メチルピリジン−３−イルカルバルデヒドオキシム
ヒドロキシルアミン塩酸塩（９．４６ｇ，１３６．２ｍｍｏｌ）を、メタノール（１００ｍｌ）中の３−アセチルピリジン（１１．０２ｇ，９０．７ｍｍｏｌ）の溶液に加え、反応混合物を還流しながら３０分間加熱した。揮発物を蒸発によって除去し、残留物を水中に溶解させた。その溶液を０℃に冷却し、２Ｎ水酸化ナトリウム水溶液でｐＨ１２へと塩基性にした後、その混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。抽出物を一緒にし、飽和ブラインで洗浄し、乾燥させた（Ｎａ２ＳＯ４）。溶媒を蒸発によって除去して、標題生成物（１１．６ｇ，９４％）を固体として生じた。
【０１８８】
【化３４】
2005515998.tif 000061
【０１８９】
製法８７〜８９
次の化合物を、適当な出発物質を用いて製法８６の手順によって製造した。
【０１９０】
【表２６】
2005515998.tif 000062
【０１９１】
製法９０
３−（１−アミノエチル）ピリジン
ラネーニッケルの水中５０％懸濁液（１．１ｇ）を、α−メチルピリジン−３−イルカルバルデヒドオキシム（製法８６；１０．６ｇ，７７．９ｍｍｏｌ）および２０％エタノール性アンモニア（５００ｍｌ）の溶液に加え、その反応混合物を、４０ｐｓｉおよび４０℃において気体水素で、理論気体容量が消費されるまで水素化した。その反応混合物を、珪藻土の層を介して濾過し、そのフィルターパッドを水およびエタノールで洗浄した。濾液を蒸発によって除去して、標題生成物（８．０５ｇ，８５％）を油状物として生じた。
【０１９２】
【化３５】
2005515998.tif 000063
【０１９３】
製法９１〜９３
次の化合物を、適当な出発物質を用いて製法９０の手順によって製造した。
【０１９４】
【表２７】
2005515998.tif 000064
【０１９５】
製法９４
２−アミノメチル−６−クロロピリジン
ＴＨＦ中の１Ｍ水素化アルミニウムリチウム溶液（２．８８ｍｌ，２．８８ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ（１０ｍｌ）中の６−クロロ−２−シアノピリジン（５３２ｍｇ，３．８４ｍｍｏｌ）の溶液に、窒素雰囲気下において−５℃で滴加した。その混合物を−５℃で２時間撹拌し、そして水（０．１ｍｌ）、１５％水酸化ナトリウム水溶液（０．１ｍｌ）、そして次に水（０．３ｍｌ）の注意深い逐次的添加によって反応を急冷した。その混合物を０℃で１時間撹拌し、不溶物を濾過によって除去し、そのフィルターパッドをメタノールで充分に洗浄した。得られた溶液を蒸発させ、残留物を、シリカゲル上のカラムクロマトグラフィーによってＤＣＭ／メタノール／アンモニア（９５：５：０〜９０：１０：１へと極性が増加する）で溶離して精製して、標題化合物（２１５ｍｇ，４０％）を油状物として生じた。
【０１９６】
【化３６】
2005515998.tif 000065
【０１９７】
製法９５〜９７
次の化合物を、適当な出発物質を用いて製法９４の手順によって製造した。
【０１９８】
【表２８】
2005515998.tif 000066
【０１９９】
製法９８
２−（Ｎ−オキソピリジン−４−イル）ピリジン
３−クロロ過安息香酸（５７％〜８６％活性強度）（７．５ｇ，４３ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ（５０ｍｌ）中の２−（ピリジン−４−イル）ピリジン（４．７８ｇ，３０．６ｍｍｏｌ）の溶液に０℃で少量ずつ加えた。２時間撹拌後、メタ重亜硫酸ナトリウムを、過剰の過酸化物が全て破壊されるまで少量ずつ加えた。固体を濾過によって除去し、濾液を固体炭酸カリウムで塩基性にした。混合物を濾過し、濾液を蒸発させ、残留物を、シリカゲル上のカラムクロマトグラフィーによってメタノール／アセトン（１０：９０）で溶離して精製して、標題化合物（４．２ｇ，８０％）を白色固体として生じた。
【０２００】
【化３７】
2005515998.tif 000067
【０２０１】
製法９９
２−（２−シアノピリジン−４−イル）ピリジン
トリメチルシリルシアニド（１．９ｍｌ，１４．５ｍｍｏｌ）を、アセトニトリル（５ｍｌ）中の２−（Ｎ−オキソピリジン−４−イル）ピリジン（製法９８；１ｇ，５．８ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（１．２ｍｌ，８．７ｍｍｏｌ）の懸濁液に滴加した。その混合物を１１０℃で１８時間加熱し、周囲温度に冷却後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で希釈した。その混合物をＤＣＭで抽出し、抽出物を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、そして揮発物を蒸発によって除去した。残留物をシリカ上に予め吸着させ、そしてシリカゲル上のカラムクロマトグラフィーによってヘキサン：ＥｔＯＡｃ（１：１）で溶離して精製した。精製された生成物をジエチルエーテルで研和して、標題化合物（６２７ｍｇ，６０％）を白色固体として生じた。
【０２０２】
【化３８】
2005515998.tif 000068
【０２０３】
製法１００
２−（２−アミノメチルピリジン−４−イル）ピリジン
２−（２−シアノピリジン−４−イル）ピリジン（製法９９；５６３ｍｇ，３．１１ｍｍｏｌ）を、無水ＴＨＦ（１０ｍｌ）中に窒素雰囲気下で溶解させ、０℃に冷却した。ＬｉＡｌＨ４（２．３ｍｌのＴＨＦ中１Ｍ溶液，２．３ｍｍｏｌ）を滴加し、その反応を０℃で３時間撹拌した。水（０．１ｍｌ）の後、１５％水酸化ナトリウム溶液（０．１ｍｌ）、次に水（０．３ｍｌ）で反応を急冷した。その混合物を濾過し、フィルターパッドをメタノールで洗浄した。揮発物を蒸発によって濾液から除去して、標題化合物（５７０ｍｇ，９９％）をガムとして生じた。
ｍ／ｚ１８６（ＭＨ）＋
【０２０４】
製法１０１
２−（３−シアノピリジン−５−イル）ピリジン
ＴＨＦ（１０ｍｌ）中の２−（３−ブロモピリジン−５−イル）ピリジン（２ｇ，１０．９ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ（１０ｍｌ）中の２−ピリジル亜鉛ブロミド（２２ｍｌのＴＨＦ中０．５Ｍ溶液，１１ｍｍｏｌ）の溶液に窒素雰囲気下で滴加した。テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（６３０ｍｇ，０．５４ｍｍｏｌ）を加え、反応を周囲温度で１８時間撹拌した。飽和塩化アンモニウム水溶液で反応を急冷後、揮発物を蒸発によって除去した。残留物を水中に懸濁後、ＤＣＭで抽出した。有機抽出物を一緒にし、水で洗浄後、相分離紙を介して濾過し、揮発物を蒸発によって除去した。残留物を、シリカゲル上のカラムクロマトグラフィーによってヘキサン：ＥｔＯＡｃ（２：１）で溶離して精製した。精製された生成物をジエチルエーテルで研和して、標題化合物（０．９８ｇ，５０％）を白色固体として生じた。
【０２０５】
【化３９】
2005515998.tif 000069
【０２０６】
製法１０２
２−（３−アミノメチルピリジン−５−イル）ピリジン
２−（３−シアノピリジン−５−イル）ピリジン（製法１０１；０．９８ｇ，５．４ｍｍｏｌ）を、エタノール（４５ｍｌ）およびメタノール（３０ｍｌ）の混合物中に溶解させた。濃塩酸（１．２ｍｌ）および１０％炭素上パラジウム触媒（５７５ｍｇ）を加え、その混合物を水素雰囲気下で４時間撹拌した。その混合物を、珪藻土を介して濾過し、フィルターパッドをエタノールで洗浄し、そして揮発物を蒸発によって濾液から除去した。粗製固体を少量のメタノール中に懸濁させ、濾過して、標題化合物（７９４ｍｇ，６６％）を橙色固体として生じた。
【０２０７】
【化４０】
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【０２０８】
薬理学的分析
Ｉｇｆ−１ｒキナーゼ活性および下流シグナリングの阻害、およびインスリン受容体キナーゼおよびＥｇｆｒシグナリングにまさる選択性を検出する方法
用いられた略語
ＰＢＳ（ＰＢＳ／Ｔ）は、リン酸緩衝化生理食塩水、ｐＨ７．４（０．０５％ Tween ２０を含む）である。
ＨＥＰＥＳは、Ｎ−［２−ヒドロキシエチル］ピペラジン−Ｎ’−［２−エタンスルホン酸］である。
ＤＴＴは、ジチオトレイトールである。
ＴＭＢは、テトラメチルベンジジンである。
ＤＭＳＯは、ジメチルスルホキシドである。
ＢＳＡは、ウシ血清アルブミンである。
ＡＴＰは、アデノシン三リン酸である。
ＤＭＥＭは、ダルベッコ修飾イーグル培地（Dulbecco’s modified Eagle’s Medium）である。
ＦＢＳ／ＦＣＳは、ウシ胎児／ウシ血清である。
ＨＢＳＳは、ハンクスの平衡塩類溶液（Hanks Balanced Salts Solution）である。
ＨＲＰは、西洋ワサビペルオキシダーゼである。
ＳＤＳは、ドデシル硫酸ナトリウムである。
ＩＧＦ−Ｉ（ＩＧＦ−１Ｒ）は、インスリン様成長因子−Ｉ（ＩＧＦ−１受容体）である。
ＥＧＦは、上皮増殖因子である。
【０２０９】
ＩＧＦ−１Ｒキナーゼ活性
（ａ）タンパク質のクローニング、発現および精製
グルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼ（ＧＳＴ）、トロンビン切断部位およびＩＧＦ−１Ｒ細胞内ドメイン（アミノ酸９３０−１３６７）を含有する、後にＧＳＴ−ＩＧＦＲと称される融合タンパク質をコードしているＤＮＡ分子を、標準的な分子生物学技術（Molecular Cloning - A Laboratory Manual, Second Edition 1989; Sambrook, Fritsch and Maniatis; Cold Spring Harbour Laboratory Press）を用いて構築し、ｐＦａｓｔＢａｃ１（Life Technologies Ltd, UK）中にクローン化した。
【０２１０】
組換えウイルスの製造は、製造者のプロトコールにしたがって行った。簡単にいうと、ＧＳＴ−ＩＧＦＲを含有するｐＦａｓｔＢａｃ−１ベクターを、バキュロウイルスゲノム（ｂａｃｍｉｄＤＮＡ）を含有する大腸菌（E. coli）ＤＨ１０Ｂａｃ細胞中に形質転換し、そしてそれら細胞中の転位イベントによって、ゲンタマイシン耐性遺伝子と、バキュロウイルスポリヘドリンプロモーターを含めたＧＳＴ−ＩＧＦＲ発現カセットを含有するｐＦａｓｔＢａｃベクターの領域を、そのｂａｃｍｉｄＤＮＡ中に直接的に転位させた。ゲンタマイシン、カナマイシン、テトラサイクリンおよびＸ−ｇａｌについての選択により、得られた白色コロニーは、ＧＳＴ−ＩＧＦＲをコードしている組換えｂａｃｍｉｄＤＮＡを含有するはすである。ｂａｃｍｉｄＤＮＡを、いくつかのＢＨ１０Ｂａｃ白色コロニーの小規模培養物から抽出し、そしてＣｅｌｌＦＥＣＴＩＮ試薬（Life Technologies Ltd, UK）を製造者の指示にしたがって用いて、１０％血清を含有するＴＣ１００培地（Life Technologies Ltd, UK）中で増殖させたスポドプテラ・フルジペルダ（Spodoptera frugiperda）Ｓｆ２１細胞中にトランスフェクションさせた。トランスフェクション後７２時間に細胞培養培地を集めることによって、ウイルス粒子を採取した。０．５ｍｌの培地を用いて、１ｘ１０７個／ｍｌの細胞を含有する１００ｍｌのＳｆ２１懸濁培養物に感染させた。感染後４８時間に細胞培養培地を採取し、そしてウイルス力価を、標準的なプラーク検定法を用いて決定した。ウイルス原液を用いて、Ｓｆ９および「High ５」細胞に感染多重度（ＭＯＩ）３で感染させて、組換えＧＳＴ−ＩＧＦＲの発現を確かめた。
【０２１１】
ＧＳＴ−ＩＧＦＲタンパク質は、グルタチオン−セファロース上のアフィニティークロマトグラフィー後、グルタチオンでの溶離によって精製した。簡単にいうと、以下、溶解緩衝液と称される、５０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ  ｐＨ７．５（Sigma，Ｈ３３７５）、２００ｍＭ  ＮａＣｌ（Sigma，Ｓ７６５３）、Complete Protease Inhibitor 混合物（Roche，１８７３５８０）および１ｍＭ  ＤＴＴ（Sigma，Ｄ９７７９）中に、細胞を溶解させた。清澄化された溶解産物上澄みを、Glutathione Sepharose（Amersham Pharmacia Biotech UK Ltd.）を充填したクロマトグラフィーカラムを介して装填した。そのマトリックスから混入物を溶解緩衝液で、２８０ｎｍでのＵＶ吸光度がベースラインに戻るまで洗浄した。溶離は、２０ｍＭ還元グルタチオン（Sigma，Ｄ２８０４）を含有する溶解緩衝液で行い、ＧＳＴ融合タンパク質を含有する画分をプールし、そして５０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ，ｐＨ７．５、２００ｍＭ  ＮａＣｌ、１０％グリセロール（ｖ／ｖ）、３ｍＭ還元グルタチオンおよび１ｍＭ  ＤＴＴを含むグリセロール含有緩衝液中に透析した。
【０２１２】
（ｂ）キナーゼ活性検定
精製された酵素の活性を、９６ウェルフォーマットでのＥＬＩＳＡ検出システムを用いて、合成ポリＧｌｕＡｌａＴｙｒ（ＥＡＹ）６：３：１ペプチド（Sigma-Aldrich Company Ltd, UK，Ｐ３８９９）のリン酸化によって測定した。
ｂ．（ｉ）使用試薬
原液
【０２１３】
【表２９】
2005515998.tif 000071
【０２１４】
酵素溶液
ＧＳＴ−ＩＧＦ−１Ｒ融合タンパク質を、１００ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．４、５ｍＭ  ＤＴＴ、０．２５ｍＭ  Ｎａ３ＶＯ４、０．２５％ Triton Ｘ−１００、０．２５ｍｇ／ｍｌのＢＳＡ中に７５ｎｇ／ｍｌで新たに調製。
【０２１５】
補因子溶液
１００ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．４、６０ｍＭ  ＭｎＣｌ２、５ｍＭ  ＡＴＰ
ポリＥＡＹ基質
Sigma 基質ポリ（Ｇｌｕ，Ａｌａ，Ｔｙｒ）６：３：１（Ｐ３８９９）
ＰＢＳ中で１ｍｇ／ｍｌに調製し、−２０℃で貯蔵
検定プレート
Nunc Maxisorp ９６ウェルイムノプレート（Life Technologies Ltd, UK）
抗体
Upstate Biotechnology Inc., NY, USA 製の単クローン性の抗ホスホチロシン抗体（ＵＢＩ０５−３２１）。検定プレートにつき１１ｍｌのＰＢＳ／Ｔ＋０．５％ＢＳＡ中で３μｌを希釈する。
Amersham Pharmacia Biotech UK Ltd. 製のヒツジ抗マウスＩｇＧ  ＨＲＰ結合二次抗体（ＮＸＡ９３１）。検定プレートにつき１１ｍｌのＰＢＳ／Ｔ＋０．５％ＢＳＡ中に２０μｌの原液を希釈する。
【０２１６】
ＴＭＢ溶液
１ｍｇのＴＭＢ錠（Sigma Ｔ５５２５）を、１ｍｌのＤＭＳＯ（Sigma，Ｄ８７７９）中に暗所において室温で１時間溶解させる。この溶液を、９ｍｌの新たに調製された５０ｍＭリン酸クエン酸緩衝液ｐＨ５．０＋０．０３％過ホウ酸ナトリウム［１００ｍｌの蒸留水に１個の緩衝剤カプセル（Sigma Ｐ４９２２）］に加える。
停止溶液は、１Ｍ  Ｈ２ＳＯ４（Fisher Scientific UK. Cat. No. Ｓ／９２００／ＰＢ０８）である。
【０２１７】
試験化合物
ＤＭＳＯ中で１０ｍＭに溶解後、蒸留水中で希釈して、検定ウェル中において１〜２％ＤＭＳＯ中に２００〜０．００２６μＭの範囲の最終濃度を与える。
【０２１８】
ｂ．（ii）検定プロトコール
ポリＥＡＹ基質を、ＰＢＳ中で１μｇ／ｍｌに希釈後、９６ウェルプレート中に１００μｌ／ウェルの量で分配した。このプレートを密封し、４℃で一晩インキュベートした。余分のポリＥＡＹ溶液を捨て、プレートを洗浄し（２ｘＰＢＳ／Ｔ；２５０μｌ／ウェルのＰＢＳ）、洗浄の間に吸取乾燥させた。次に、このプレートを再度洗浄し（１ｘ５０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ，ｐＨ７．４；２５０μｌ／ウェル）、吸取乾燥させた（これは、バックグラウンドリン酸塩レベルを除去するために重要である）。１０μｌの試験化合物溶液を、４０μｌのキナーゼ溶液と一緒に、各々のウェルに加えた。次に、５０μｌの補因子溶液を各ウェルに加え、プレートを室温で６０分間インキュベートした。
【０２１９】
そのプレートを空にし（すなわち、内容物を捨て）、ＰＢＳ／Ｔ（２５０μｌ／ウェル）で２回洗浄し、各々の洗浄の間に吸取乾燥させた。１００μｌ／ウェルの希釈された抗ホスホチロシン抗体を加え、プレートを室温で６０分間インキュベートした。
【０２２０】
そのプレートを再度空にし、ＰＢＳ／Ｔ（２５０μｌ／ウェル）で２回洗浄し、各々の洗浄の間に吸取乾燥させた。１００μｌ／ウェルの希釈されたヒツジ抗マウスＩｇＧ抗体を加え、プレートを室温で６０分間放置した。内容物を捨て、プレートをＰＢＳ／Ｔ（２５０μｌ／ウェル）で２回洗浄し、各々の洗浄の間に吸取乾燥させた。１００μｌ／ウェルのＴＭＢ溶液を加え、プレートを室温で５〜１０分間インキュベートした（溶液は、西洋ワサビペルオキシダーゼの存在下で青色になる）。
【０２２１】
５０μｌ／ウェルのＨ２ＳＯ４で反応を止め（青色溶液を黄色にする）、そのプレートを、Versamax プレートリーダー（Molecular Devices Corporation, CA, USA）または類似のものにおいて４５０ｎｍで読み取った。
【０２２２】
実施例の化合物は、上の試験において１００μＭ未満のＩＣ５０を有することが判明した。
【０２２３】
ＩＧＦで刺激される細胞増殖の阻害
ヒトＩＧＦ−１受容体を過発現するネズミ線維芽細胞（ＮＩＨ３Ｔ３）の構築は、Lammers et al (EMBO J, 8, 1369-1375, 1989) によって記載されている。これら細胞は、ＩＧＦ−Ｉへの増殖応答を示すが、これは、新たに合成されたＤＮＡ中へのＢｒｄＵ取込みによって測定することができる。化合物がＩＧＦで刺激される増殖の阻害を引き起こす効力をもつことが、次の検定において確認された。
【０２２４】
ａ．（ｉ）使用試薬：
Cell Proliferation ＥＬＩＳＡ，ＢｒｄＵ（比色）［Boehringer Mannheim (Diagnostics and Biochemicals) Ltd, UK. Cat no. １６４７２２９］。
ＤＭＥＭ、ＦＣＳ、グルタミン、ＨＢＳＳ（全て、Life Technologies Ltd., UK 製）。
Charcoal/Dextran Stripped ＦＢＳ（HyClone ＳＨ３００６８．０２，Perbio Science UK Ltd）。
ＢＳＡ（Sigma，Ａ７８８８）。
ヒト組換えＩＧＦ−１動物／培地グレード（GroPep Limited ABN 78 008 176 298, Australia. Cat No. ＩＵ１００）。
【０２２５】
ＩＧＦの製造および貯蔵
１００μｇの凍結乾燥されたＩＧＦを、１００ｕｌの１０ｍＭ  ＨＣｌ中で再構成させた。
４００μｌのＰＢＳ中１ｍｇ／ｍｌのＢＳＡを加える。
２５μｌアリコート＠２００μｇ／ｍｌのＩＧＦ−１
−２０℃で貯蔵する
検定用：
１６０ｎｇ／ｍｌの８Ｘ原液を生じるための１０μｌのＩＧＦ原液＋１２．５ｍｌの増殖培地。
【０２２６】
完全増殖培地
ＤＭＥＭ、１０％ＦＣＳ、２ｍＭグルタミン
飢餓培地
ＤＭＥＭ、１％木炭／デキストランで除去済みのＦＣＳ、２ｍＭグルタミン
試験化合物
化合物を、最初にＤＭＳＯ中で１０ｍＭに溶解させた後、ＤＭＥＭ＋１％ＦＣＳ＋グルタミン中で希釈して、検定ウェル中において１〜０．０００４５％ＤＭＳＯ中で１００〜０．０．４５μＭの範囲の最終濃度を生じる
【０２２７】
ａ．（ii）検定プロトコール
１日目
指数的に増殖しているＮＩＨ３Ｔ３／ＩＧＦＲ細胞を採取し、そして平底９６ウェル組織培養グレードプレート（Costar ３５２５）中の完全増殖培地中に、１００μｌの容量中、１．２ｘ１０４個細胞／ウェルで播種した。
【０２２８】
２日目
各々のウェルから、マルチチャンネルピペットを用いて、増殖培地を注意深く除去した。ウェルを、注意深く２００μｌのＨＢＳＳで３回すすぎ洗浄した。１００μｌの飢餓培地を各々のウェルに加え、プレートを２４時間再インキュベートした。
【０２２９】
３日目
５０μｌの４Ｘ濃度の試験化合物を、適当なウェルに加えた。細胞と化合物単独とを、３０分間インキュベート後、ＩＧＦを加えた。ＩＧＦで処理された細胞について、適当な容量（すなわち、２５μｌ）の飢餓培地を加えて、１６０ｎｇ／ｍｌでのＩＧＦ−１のウェル毎の最終容量を２００μｌに、次に２５μｌに調製した（最終濃度２０ｎｇ／ｍｌ）。ＩＧＦで刺激されていない対照細胞にも、ウェル毎の最終容量を２００μｌに調製するように適当な容量（すなわち、５０μｌ）の飢餓培地を加えた。プレートを２０時間再インキュベートした。
【０２３０】
４日目
細胞中のＢｒｄＵの取込み（４時間の取込み時間後）を、ＢｒｄＵ Cell Proliferation Elisa を製造者のプロトコールにしたがって用いて評価した。
実施例の化合物は、上の試験において５０μＭ未満のＩＣ５０を有することが判明した。
【０２３１】
作用機構検定
ＩＧＦ−ＩＲに媒介されるシグナル伝達の阻害を、ＭＣＦ−７細胞（ＡＴＣＣ  Ｎｏ．ＨＴＢ−２２）のＩＧＦ−Ｉ刺激に応答したＩＧＦ−ＩＲ、ＡｋｔおよびＭＡＰＫ（ＥＲＫ１および２）のリン酸化の変化を測定することによって決定した。同じ細胞系におけるＥＧＦに応答したＭＡＰＫリン酸化への作用を選択性の尺度とした。
【０２３２】
ａ．（ｉ）使用試薬：
ＲＰＭＩ１６４０培地、フェノールレッド不含のＲＰＭＩ１６４０培地、ＦＣＳ、グルタミン（全て、Life Technologies Ltd., UK 製）
Charcoal/Dextran Stripped ＦＢＳ（HyClone ＳＨ３００６８．０２，Perbio Science UK Ltd）
ＳＤＳ（Sigma，Ｌ４３９０）
２−メルカプトエタノール（Sigma，Ｍ６２５０）
ブロモフェノールブルー（Sigma，Ｂ５５２５）
Ponceau Ｓ（Sigma，Ｐ３５０４）
トリス塩基（ＴＲＩＺＭＡＴＭ塩基，Sigma，Ｔ１５０３）
グリシン（Sigma，Ｇ７４０３）
メタノール（Fisher Scientific UK. Cat. No. Ｍ／３９５０／２１）
粉乳（ＭａｒｖｅｌＴＭ，Premier Brands UK Ltd.）
ヒト組換えＩＧＦ−１動物／培地グレード（GroPep Limited ABN 78 008 176 298, Australia. Cat No. ＩＵ１００）。
【０２３３】
ヒト組換えＥＧＦ（Promega Corporation, WI, USA. Cat. No. Ｇ５０２１）
完全増殖培地
ＲＰＭＩ１６４０、１０％ＦＣＳ、２ｍＭグルタミン
飢餓培地
フェノールレッド不含のＲＰＭＩ１６４０培地、１％木炭／デキストランで除去済みのＦＣＳ、２ｍＭグルタミン
試験化合物
化合物を、最初にＤＭＳＯ中で１０ｍＭに溶解させた後、フェノールレッド不含のＲＰＭＩ１６４０培地＋１％ＦＣＳ＋２ｍＭグルタミン中で希釈して、検定ウェル中における最終濃度を、１〜０．０００４５％ＤＭＳＯ中で１００〜０．０．４５μＭの範囲にした。
【０２３４】
ウェスタン転移緩衝液
５０ｍＭトリス塩基、４０ｍＭグリシン、０．０４％ＳＤＳ、２０％メタノール
Laemmli 緩衝液ｘ２：
１００ｍＭトリス−ＨＣｌ  ｐＨ６．８、２０％グリセロール、４％ＳＤＳ
試料緩衝液ｘ４：
２００ｍＭ  ２−メルカプトエタノール、蒸留水中０．２％ブロモフェノールブルー。
【０２３５】
一次抗体
ウサギ抗ヒトＩＧＦ−１Ｒβ（Santa Cruz Biotechnology Inc., USA, Cat. No ｓｃ−７１３）
ウサギ抗インスリン／ＩＧＦ−１Ｒ  ［ｐＹｐＹ１１６２／１１６３］Dual Phosphospecific（BioSource International Inc, CA, USA. Cat No. ４４−８０４１）
マウス抗ＰＫＢα／Ａｋｔ（Transduction Laboratories, KY, USA. Cat. No. Ｐ６７２２０）
ウサギ抗Ｐｈｏｓｐｈｏ−Ａｋｔ（Ｓｅｒ４７３）（Cell Signalling Technology Inc, MA, USA. Cat. No.＃９２７１）
ウサギ抗ｐ４４／ｐ４２  ＭＡＰキナーゼ（Cell Signalling Technology Inc, MA, USA. Cat. No.＃９１０２）
ウサギ抗Ｐｈｏｓｐｈｏ  ｐ４４／ｐ４２  ＭＡＰキナーゼ（Cell Signalling Technology Inc, MA, USA. Cat. No.＃９１０１）
マウス抗アクチンクローンＡＣ−４０（Sigma-Aldrich Company Ltd, UK，Ａ４７００）
抗体希釈物
【０２３６】
【表３０】
2005515998.tif 000072
【０２３７】
二次抗体
ヤギ抗ウサギＨＲＰ結合（Cell Signalling Technology Inc, MA, USA. Cat. No.＃７０７４）
ヒツジ抗マウスＩｇＧ  ＨＲＰ結合（Amersham Pharmacia Biotech UK Ltd. Cat. No. ＮＸＡ９３１）
抗ウサギを、ＰＢＳＴ＋５％乳中で１：２０００に希釈する
抗マウスを、ＰＢＳＴ＋５％乳中で１：５０００に希釈する
【０２３８】
ａ．（ii）検定プロトコール
細胞処理
ＭＣＦ−７細胞を、２４ウェルプレート中の１ｍｌの完全増殖培地中において１ｘ１０５個細胞／ウェルでプレーティングした。そのプレートを２４時間インキュベートして、細胞を定着させた。培地を除去し、プレートを、２ｍｌ／ウェルのＰＢＳで静かに３回洗浄した。１ｍｌの飢餓培地を各々のウェルに加え、プレートを２４時間インキュベートして、細胞を血清飢餓にさせた。
【０２３９】
次に、各２５μｌの化合物希釈物を加え、細胞および化合物を３７℃で３０分間インキュベートした。３０分間の化合物インキュベーション後、各々のウェルに適宜、２５μｌのＩＧＦ（２０ｎｇ／ｍｌの最終濃度について）またはＥＧＦ（０．１ｎｇ／ｍｌの最終濃度について）を加え、それら細胞をＩＧＦまたはＥＧＦと一緒に３７℃で５分間インキュベートした。培地を（ピペッティングによって）除去後、１００μｌの２ｘ Laemmli 緩衝液を加えた。プレートを４℃で、細胞が採取されるまで貯蔵した。（採取は、Laemmli 緩衝液を細胞に添加後２時間以内に行われるべきである。）
【０２４０】
細胞を採取するために、ピペットを用いて、Laemmli 緩衝液／細胞配合物を繰り返し吸引放出し、１．５ｍｌ Eppendorf 管に移した。採取された細胞溶解産物を、必要とされるまで−２０℃で保持した。各々の溶解産物のタンパク質濃度は、ＤＣタンパク質検定キット（Bio-Rad Laboratories, USA，製造者の指示にしたがう）を用いて決定されうる。
【０２４１】
ウェスタンブロット法
細胞試料を、４ｘ試料緩衝液で調製し、２１ゲージ針で注入し、５分間煮沸した。試料を等容量で、および分子量ラダーを、４〜１２％ Bis-Tris ゲル（Invitrogen BV, The Netherlands）上に載せ、それらゲルを、与えられた溶液を含む Xcell SureLockＴＭ Mini-Cell 装置（Invitrogen）中において製造者の指示にしたがって実験した。それらゲルを、Hybond C ExtraＴＭ膜（Amersham Pharmacia Biotech UK Ltd.）上に、Xcell SureLockＴＭMini-Cell 装置においてウェスタン転移緩衝液を用いて３０ボルトで１時間ブロッティングした。ブロッティングされた膜を、０．１％ Ponceau Ｓで染色して、転移されたタンパク質を可視化後、多数の抗体インキュベーションのために、分子量標準によって水平にストリップを切断された。ＩＧＦ−１Ｒ、Ａｋｔ、ＭＡＰＫおよびアクチン対照の検出のために、別個のストリップを用いた。
【０２４２】
それら膜を、ＰＢＳＴ＋５％乳溶液中において室温で１時間ブロックした。次に、膜を、４ウェルプレート中の３ｍｌの一次抗体溶液中に入れ、プレートを４℃で一晩インキュベートした。膜を、５ｍｌのＰＢＳＴ中において各５分間の洗浄で３回洗浄した。ＨＲＰ結合二次抗体溶液を調製し、５ｍｌ／膜を加えた。それら膜を室温で撹拌しながら１時間インキュベートした。膜を、５ｍｌのＰＢＳＴ中において各５分間の洗浄で３回洗浄した。ＥＣＬ溶液（SuperSignal ECL, Pierce, Perbio Science UK Ltd）を調製し、膜と一緒に（製造者の指示にしたがって）１分間インキュベート後、感光性フィルムへの暴露および現像を行った。
【０２４３】
実施例の化合物は、上の試験において２０μＭ未満のＩＣ５０を有することが判明した。
【国際調査報告】
2005515998.tif 000080
2005515998.tif 000081
2005515998.tif 000082
2005515998.tif 000083
2005515998.tif 000084