【手続補正書】
【提出日】令和2年7月29日(2020.7.29)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
そのゲノム内に、
マウス免疫グロブリン軽鎖定常領域配列に作動可能に連結された、ちょうど２つの再構成されていないヒト免疫グロブリンＶκ遺伝子セグメントと、５つの再構成されていないヒト免疫グロブリンＪκ遺伝子セグメントと
を含むように遺伝子改変されたマウス胚性幹（ＥＳ）細胞であって、該２つの再構成されていないヒト免疫グロブリンＶκ遺伝子セグメントがヒトＶκ１−３９遺伝子セグメントおよびヒトＶκ３−２０遺伝子セグメントである、遺伝子改変されたマウスＥＳ細胞。
【請求項２】
そのゲノム内に、
内因性重鎖遺伝子座においてマウス免疫グロブリン重鎖定常領域配列に作動可能に連結された、１つまたは複数の再構成されていないヒト免疫グロブリンＶＨ遺伝子セグメントと、１つまたは複数の再構成されていないヒト免疫グロブリンＤＨ遺伝子セグメントと、１つまたは複数の再構成されていないヒト免疫グロブリンＪＨ遺伝子セグメントと
をさらに含む、請求項１に記載の遺伝子改変されたマウスＥＳ細胞。
【請求項３】
前記ＥＳ細胞の前記ゲノムが、再構成して免疫グロブリン重鎖可変領域を形成できる内因性マウス免疫グロブリンＶＨ遺伝子セグメントを含まない、請求項２に記載の遺伝子改変されたＥＳ細胞。
【請求項４】
前記遺伝子改変されたマウスＥＳ細胞の前記ゲノムが、非機能的な免疫グロブリンλ軽鎖遺伝子座を含む、請求項１または請求項２に記載の遺伝子改変されたＥＳ細胞。
【請求項５】
前記２つの再構成されていないヒト免疫グロブリンＶκ遺伝子セグメントと、５つの再構成されていないヒト免疫グロブリンＪκ遺伝子セグメントが、内因性免疫グロブリンκ軽鎖遺伝子座に存在する、請求項１〜４のいずれか一項に記載の遺伝子改変されたＥＳ細胞。
【請求項６】
前記遺伝子改変されたマウスＥＳ細胞の前記ゲノムが、機能的なλ軽鎖遺伝子座を含まない、請求項１または請求項２に記載の遺伝子改変されたＥＳ細胞。
【請求項７】
前記５つの再構成されていないヒト免疫グロブリンＪκ遺伝子セグメントが、ヒトＪκ１遺伝子セグメント、ヒトＪκ２遺伝子セグメント、ヒトＪκ３遺伝子セグメント、ヒトＪκ４遺伝子セグメントおよびヒトＪκ５遺伝子セグメントである、請求項１〜６のいずれか一項に記載の遺伝子改変されたマウスＥＳ細胞。
【請求項８】
前記マウス軽鎖定常領域がマウスＣκ定常領域である、請求項１または請求項２に記載の遺伝子改変されたマウスＥＳ細胞。
【請求項９】
前記マウスＣκ定常領域が内因性マウスＣκ定常領域である、請求項８に記載の遺伝子改変されたマウスＥＳ細胞。
【請求項１０】
前記遺伝子改変されたマウスＥＳ細胞のゲノム内の前記ヒトＶκ１−３９遺伝子セグメントがヒト生殖系列Ｖκ１−３９遺伝子セグメントであり、前記遺伝子改変されたマウスＥＳ細胞の前記ゲノム内の前記ヒトＶκ３−２０遺伝子セグメントがヒト生殖系列Ｖκ３−２０遺伝子セグメントである、請求項１または請求項２に記載の遺伝子改変されたマウスＥＳ細胞。
【請求項１１】
前記遺伝子改変されたマウスＥＳ細胞の前記ゲノムが、前記ヒトＶκ１−３９遺伝子セグメント、前記ヒトＶκ３−２０遺伝子セグメント、前記ヒトＪκ１遺伝子セグメント、前記ヒトＪκ２遺伝子セグメント、前記ヒトＪκ３遺伝子セグメント、前記ヒトＪκ４遺伝子セグメント、および、前記ヒトＪκ５遺伝子セグメントを順に含む、請求項１または請求項２に記載の遺伝子改変されたマウスＥＳ細胞。
【請求項１２】
前記遺伝子改変されたマウスＥＳ細胞の前記ゲノムが、ＤＬＣ−５Ｊ遺伝子座を含み、該ＤＬＣ−５Ｊ遺伝子座が、配列番号３８〜４９より選択されるｈＶκ／ｈＪκ／ｍＣκ接合部配列を含む、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の遺伝子改変されたマウスＥＳ細胞。
【請求項１３】
請求項１または請求項２に記載の遺伝子改変されたＥＳ細胞に由来するマウス胚。
【請求項１４】
代理母において請求項１３に記載のマウス胚を懐胎させ、該代理母に、全体的にまたは部分的に前記遺伝子改変されたＥＳ細胞に由来する子孫を出産させることを含む、マウスを作製する方法。
【請求項１５】
遺伝子改変されたマウスＥＳ細胞を作製する方法であって、ＥＳ細胞を、そのゲノム内に、
マウス免疫グロブリン軽鎖定常領域配列に作動可能に連結された、ちょうど２つの再構成されていないヒト免疫グロブリンＶκ遺伝子セグメントと、５つの再構成されていないヒト免疫グロブリンＪκ遺伝子セグメントと
を含むように遺伝子改変することを含み、ここで、該２つの再構成されていないヒト免疫グロブリンＶκ遺伝子セグメントがヒトＶκ１−３９遺伝子セグメントおよびヒトＶκ３−２０遺伝子セグメントである、方法。
【請求項１６】
前記遺伝子改変されたマウスＥＳ細胞が、そのゲノム内に、
内因性重鎖遺伝子座においてマウス免疫グロブリン重鎖定常領域配列に作動可能に連結された、１つまたは複数の再構成されていないヒト免疫グロブリンＶＨ遺伝子セグメントと、１つまたは複数の再構成されていないヒト免疫グロブリンＤＨ遺伝子セグメントと、１つまたは複数の再構成されていないヒト免疫グロブリンＪＨ遺伝子セグメントと
をさらに含む、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記５つの再構成されていないヒト免疫グロブリンＪκ遺伝子セグメントが、ヒトＪκ１遺伝子セグメント、ヒトＪκ２遺伝子セグメント、ヒトＪκ３遺伝子セグメント、ヒトＪκ４遺伝子セグメントおよびヒトＪκ５遺伝子セグメントである、請求項１５または請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記マウス軽鎖定常領域がマウスＣκ定常領域である、請求項１５または請求項１６に記載の方法。
【請求項１９】
前記マウス軽鎖定常領域が内因性マウスＣκ定常領域である、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記遺伝子改変されたＥＳ細胞の前記ゲノムが、再構成して免疫グロブリン重鎖可変領域を形成できる内因性マウス免疫グロブリンＶＨ遺伝子セグメントを含まない、請求項１６に記載の方法。
【請求項２１】
前記２つの再構成されていないヒト免疫グロブリンＶκ遺伝子セグメントと、５つの再構成されていないヒト免疫グロブリンＪκ遺伝子セグメントが、内因性免疫グロブリンκ軽鎖遺伝子座に存在する、請求項１５〜２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２】
前記遺伝子改変されたマウスＥＳ細胞の前記ゲノムが非機能的な免疫グロブリンλ軽鎖遺伝子座を含む、請求項１５または請求項１６に記載の方法。
【請求項２３】
前記遺伝子改変されたマウスＥＳ細胞の前記ゲノムが機能的なλ軽鎖遺伝子座を含まない、請求項１５または請求項１６に記載の方法。
【請求項２４】
前記遺伝子改変されたマウスＥＳ細胞の前記ゲノム内の前記ヒトＶκ１−３９遺伝子セグメントがヒト生殖系列Ｖκ１−３９遺伝子セグメントであり、前記遺伝子改変されたマウスＥＳ細胞の前記ゲノム内の前記ヒトＶκ３−２０遺伝子セグメントがヒト生殖系列Ｖκ３−２０遺伝子セグメントである、請求項１５または請求項１６に記載の方法。
【請求項２５】
前記遺伝子改変されたマウスＥＳ細胞の前記ゲノムが、前記ヒトＶκ１−３９遺伝子セグメント、前記ヒトＶκ３−２０遺伝子セグメント、前記ヒトＪκ１遺伝子セグメント、前記ヒトＪκ２遺伝子セグメント、前記ヒトＪκ３遺伝子セグメント、前記ヒトＪκ４遺伝子セグメント、および、前記ヒトＪκ５遺伝子セグメントを順に含む、請求項１７に記載の方法。
【請求項２６】
前記遺伝子改変されたマウスＥＳ細胞が、ＤＬＣ−５Ｊ遺伝子座を含み、該ＤＬＣ−５Ｊ遺伝子座が、配列番号３８〜４９より選択されるｈＶκ／ｈＪκ／ｍＣκ接合部配列を含む、請求項１５〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２７】
遺伝子改変されたマウスを作製する方法であって、マウスの生殖系列ゲノムを、
マウス免疫グロブリン軽鎖定常領域配列に作動可能に連結された、ちょうど２つの再構成されていないヒト免疫グロブリンＶκ遺伝子セグメントと、５つの再構成されていないヒト免疫グロブリンＪκ遺伝子セグメントと
を含むように遺伝子改変することを含み、ここで、該２つの再構成されていないヒト免疫グロブリンＶκ遺伝子セグメントがヒトＶκ１−３９遺伝子セグメントおよびヒトＶκ３−２０遺伝子セグメントである、方法。
【請求項２８】
前記遺伝子改変されたマウスが、そのゲノム内に、
内因性重鎖遺伝子座においてマウス免疫グロブリン重鎖定常領域配列に作動可能に連結された、１つまたは複数の再構成されていないヒト免疫グロブリンＶＨ遺伝子セグメントと、１つまたは複数の再構成されていないヒト免疫グロブリンＤＨ遺伝子セグメントと、１つまたは複数の再構成されていないヒト免疫グロブリンＪＨ遺伝子セグメントと
をさらに含む、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
前記５つの再構成されていないヒト免疫グロブリンＪκ遺伝子セグメントが、ヒトＪκ１遺伝子セグメント、ヒトＪκ２遺伝子セグメント、ヒトＪκ３遺伝子セグメント、ヒトＪκ４遺伝子セグメントおよびヒトＪκ５遺伝子セグメントである、請求項２７または請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
前記マウス軽鎖定常領域がマウスＣκ定常領域である、請求項２８または請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
前記マウス軽鎖定常領域が内因性マウスＣκ定常領域である、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
前記遺伝子改変されたマウスの前記ゲノムが、再構成して免疫グロブリン重鎖可変領域を形成できる内因性マウス免疫グロブリンＶＨ遺伝子セグメントを含まない、請求項２８に記載の方法。
【請求項３３】
前記２つの再構成されていないヒト免疫グロブリンＶκ遺伝子セグメントと、５つの再構成されていないヒト免疫グロブリンＪκ遺伝子セグメントが、内因性免疫グロブリンκ軽鎖遺伝子座に存在する、請求項２７〜３２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３４】
前記遺伝子改変されたマウスの前記ゲノムが非機能的な免疫グロブリンλ軽鎖遺伝子座を含む、請求項２７または請求項２８に記載の方法。
【請求項３５】
前記遺伝子改変されたマウスの前記ゲノムが機能的なλ軽鎖遺伝子座を含まない、請求項２７または請求項２８に記載の方法。
【請求項３６】
前記遺伝子改変されたマウスの前記ゲノム内の前記ヒトＶκ１−３９遺伝子セグメントがヒト生殖系列Ｖκ１−３９遺伝子セグメントであり、前記遺伝子改変されたマウスの前記ゲノム内の前記ヒトＶκ３−２０遺伝子セグメントがヒト生殖系列Ｖκ３−２０遺伝子セグメントである、請求項２７または請求項２８に記載の方法。
【請求項３７】
前記遺伝子改変されたマウスの前記ゲノムが、前記ヒトＶκ１−３９遺伝子セグメント、前記ヒトＶκ３−２０遺伝子セグメント、前記ヒトＪκ１遺伝子セグメント、前記ヒトＪκ２遺伝子セグメント、前記ヒトＪκ３遺伝子セグメント、前記ヒトＪκ４遺伝子セグメント、および、前記ヒトＪκ５遺伝子セグメントを順に含む、請求項２９に記載の方法。
【請求項３８】
前記遺伝子改変されたマウスが、ＤＬＣ−５Ｊ遺伝子座を含み、該ＤＬＣ−５Ｊ遺伝子座が、配列番号３８〜４９より選択されるｈＶκ／ｈＪκ／ｍＣκ接合部配列を含む、請求項２７〜３７のいずれか一項に記載の方法。