(57)【要約】【課題】【解決手段】本発明は、アントシアニン含有生成物の製造方法を提供する。前記方法は、アントシアニン水溶液を陽イオン交換樹脂に充填し；前記樹脂を水で流し；アントシアニンがそこから溶離し始めるまで酸性アルカノール溶離液を前記樹脂に適用し、その後、非酸性アルカノール溶離液を前記樹脂に適用し；アントシアニン含有溶出液を前記樹脂から集め；アルカノールを前記溶出液から蒸発させ、水及び、もし必要なら、抗凝固剤を前記溶出液に添加し、別のアントシアニン水溶液、好ましくは、少なくとも２つのアントシアニンを含有する溶液を調製し；前記溶液を噴霧乾燥させ；任意に、噴霧乾燥された生成物をコーティングすることを含む。【特許請求の範囲】
【請求項１】
アントシアニン含有生成物の製造方法であり、
前記方法は、
アントシアニン水溶液を陽イオン交換樹脂に充填し；
前記樹脂を水で流し；
アントシアニンがそこから溶離し始めるまで酸性アルカノール溶離液を前記樹脂に適用し、その後、非酸性アルカノール溶離液を前記樹脂に適用し；
アントシアニン含有溶出液を前記樹脂から集め；
アルカノールを前記溶出液から蒸発させ、水及び、もし必要なら、抗凝固剤を前記溶出液に添加し、別のアントシアニン水溶液、好ましくは、少なくとも２つのアントシアニンを含有する溶液を調製し；
前記溶液を噴霧乾燥させ；
任意に、噴霧乾燥された生成物をコーティングすることを含む製造方法。
【請求項２】
前記噴霧乾燥された生成物が、さらにアントシアニンと混合され、コーティングされる請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記アントシアニン水溶液が、シアニジン−３−Ｏ−β−グルコシド；シアニジン−３−Ｏ−β−ガラクトシド；シアニジン−３−Ｏ−α−アラビノシド；シアニジン−３−Ｏ−β−キシロシド；シアニジン−３−Ｏ−（６’’−Ｏ−α−ラムノシル−β−グルコシド）；シアニジン−３−Ｏ−（２’’−Ｏ−β−グルコシル−β−ガラクトシド）；シアニジン−３−Ｏ−（２’’−Ｏ−β−グルコシル−β−グルコシド）；シアニジン−３−Ｏ−（２’’−Ｏ−β−キシロシル−β−グルコシド）；シアニジン−３−Ｏ−（２’’−Ｏ−β−キシロシル−β−ガラクトシド）；シアニジン−３，５−ジ−Ｏ−β−グルコシド；シアニジン−３−Ｏ−β−ガラクトシド−５−Ｏ−β−グルコシド；シアニジン−３−Ｏ−α−アラビノシド−５−Ｏ−β−グルコシド；シアニジン−３−Ｏ−（２’’−Ｏ−β−キシロシル−β−グルコシド）−５−Ｏ−β−グルコシド；シアニジン−３−Ｏ−（２’’−Ｏ−β−キシロシル−６’’−Ｏ−β−グルコシル−β−ガラクトシド）；ペラルゴニジン−３−Ｏ−β−グルコシド；ペラルゴニジン−３−Ｏ−（６’’−Ｏ−α−ラムノシル−β−グルコシド）；ペラルゴニジン−３，５−ジ−Ｏ−β−グルコシド；ペオニジン−３−Ｏ−β−グルコシド；ペオニジン−３−Ｏ−α−アラビノシド；ペオニジン−３，５−ジ−Ｏ−β−グルコシド；デルフィニジン−３−Ｏ−β−グルコシド；デルフィニジン−３−Ｏ−（６’’−Ｏ−α−ラムノシル−β−グルコシド）；デルフィニジン−３−Ｏ−（２’’−Ｏ−β−キシロシル−β−グルコシド）；ペツニジン−３−Ｏ−β−グルコシド；マルビジン−３−Ｏ−β−グルコシド；マルビジン−３，５−ジ−Ｏ−β−グルコシド；及びマルビジン−３−Ｏ−α−アラビノシド−５−Ｏ−β−グルコシドから選択される少なくとも１つのアントシアニンを含む請求項１及び２のいずれかに記載の方法。
【請求項４】
前記アントシアニン水溶液が、シアニジン−３−Ｏ−（６’’−Ｏ−（Ｅ−ｐ−クマリル）−２’’−Ｏ−β−キシロシル−β−グルコシド）；シアニジン−３−Ｏ−（６’’−Ｏ−（Ｅ−ｐ−クマリル）−２’’−Ｏ−β−キシロシル−β−グルコシド）−５−Ｏ−β−グルコシド；シアニジン−３−Ｏ−（２’’−Ｏ−β−キシロシル−６’’−Ｏ−（Ｅ−フェルロイル−β−グルコシル）−β−ガラクトシド）；シアニジン−３−Ｏ−（２’’−Ｏ−β−キシロシル−６’’−Ｏ−［Ｅ−クマリル−β−グルコシル］−β−ガラクトシド）；及びペツニジン−３−Ｏ−（６’’−Ｏ−（４’’’−Ｏ−Ｅ−クマリル）−α−ラムノシル−β−グルコシド）−５−Ｏ−β−グルコシドから選択される少なくとも１つのアントシアニンを含む請求項１〜３のいずれか１つに記載の方法。
【請求項５】
前記噴霧乾燥された生成物が、コーティングされ、少なくとも４つのアントシアニンを含み、その少なくとも１つが単糖類であり、その少なくとも１つが二糖類である、生成物を製造する請求項１〜４のいずれか１つに記載の方法。
【請求項６】
前記アントシアニン水溶液が、サクランボ、ビルベリー、ブルーベリー、クロフサスグリ、カーラント、ブドウ、ツルコケモモ、イチゴ及びリンゴから選択される果実からの液状抽出物である請求項１〜５のいずれか１つに記載の方法。
【請求項７】
前記アントシアニン水溶液が、ワクシニウム・ミュルティルス（Vaccinium myrtillus）の果実からの液状抽出物である請求項１〜６のいずれか１つに記載の方法。
【請求項８】
前記アントシアニン水溶液が、リベス・ニグルム（Ribes nigrum）の果実からの液状抽出物である請求項１〜７のいずれか１つに記載の方法。
【請求項９】
前記噴霧乾燥された生成物が、コーティングされ、用量あたり７０〜１６０ｍｇのアントシアニンを含有する用量単位を製造する請求項１〜８のいずれか１つに記載の方法。
【請求項１０】
前記アントシアニン水溶液が、０．５：１から１：０．５の重量比で、ワクシニウム・ミュルティルス（Vaccinium myrtillus）及びリベス・ニグルム（Ribes nigrum）からのアントシアニンからの液状抽出物である請求項１〜９のいずれか１つに記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、アントシアニンの混合物を含む栄養補給食品（nutraceutical）を製造する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
アントシアニンは、フラビリウム塩の配糖体である。各アントシアニンは、従って、３つの構成要素部分：ヒドロキシル化核（アグリコン）；糖単位；及び対イオンを含む。アントシアニンは、多くの草花及び果実に存在する天然の色素であり、個々のアントシアニンは、塩化物として市販で、例えば、ポリフェノール・ラボラトリーズＡＳ（Polyphenols Laboratories AS, Sandnes, ノルウエー）から入手可能である。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
個々の化合物として、アントシアニンは、酸化防止剤（例えば、フリーラジカルスカベンジャーとして）として、脈管系の治療のための使用が提案されてきた。
【課題を解決するための手段】
【０００４】
我々は、個々のアントシアニンの薬効が、個々のアントシアニンの代わりに、異なるアントシアニンの組み合わせ、特にアントシアニンの単糖類及び二糖類の両方を含む組み合わせを経口投与すると、増大されることを見出した。相乗効果は、少なくとも幾分は、異なるアントシアニンの異なる溶解性と異なる摂取から生じると考えられる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００５】
しかし、異なるアントシアニンの組み合わせが、本発明の中心である一方、また、それらの異なる物理化学的特性により生じる問題も示す。 市販で入手可能な個々のアントシアニンは、容易に混合してさらさらの粉末を形成するものではなく、錠剤化またはカプセルに充填するのに特に適するようなものである。アントシアニンを含有する標準の果実抽出物は、粘着性の塊を生じる代わりに、噴霧乾燥されて、さらさらの粉末にすることはできない。我々は、アントシアニン溶液から、遊離糖及び酸、植物由来の脂質及び巨大分子、特にレクチンを除去すれば、噴霧乾燥が成功することを見出した。
【０００６】
従って、本発明の１観点から見れば、アントシアニン含有生成物の製造方法が提供され、その方法は、アントシアニン水溶液（例えば、液状植物抽出物）を陽イオン交換樹脂に充填し；前記樹脂を水で流し；アントシアニンがそこから溶離し始めるまで酸性アルカノール溶離液を前記樹脂に適用し、その後、非酸性アルカノール溶離液を前記樹脂に適用し；アントシアニン含有溶出液を前記樹脂から集め；アルカノールを前記溶出液から蒸発させ、水及び、もし必要なら、抗凝固剤を前記溶離液に添加し、別のアントシアニン水溶液、好ましくは少なくとも２つのアントシアニンを含有する溶液を調製し；前記溶液を噴霧乾燥し；任意に、噴霧乾燥された生成物をコーティングする（任意に、更なる生理学的に許容される構成要素、例えば、ビタミンＣ、更なるアントシアニン等と混合した後、及び／又は錠剤化の後）ことを含む。
【０００７】
本発明の方法の生成物は、少なくとも４つのアントシアニンを含み、その少なくとも１つが単糖類であり、その少なくとも１つが二糖類である、コーティングされた噴霧乾燥材料を含む、経口的に摂取可能な組成物、例えば、栄養補給食品が好ましい。
【０００８】
この生成物は、少なくとも３つの単糖類アントシアニンを含むのが好ましい。さらに、少なくとも１つの単糖類アントシアニン（その糖類は、アラビノースである）を含むのが好ましい。
【０００９】
この生成物は、少なくとも１つの二糖類アントシアニン（その二糖類は、ルチノース（すなわち、６−ラムノシル−グルコース）である）を含むのが好ましい。
【００１０】
さらに、この生成物は、好ましくは少なくとも２つ、より好ましくは少なくとも４つの異なるアグリコンを有するアントシアニンを含む。
【００１１】
この生成物は、そのアグリコン単位が、シアニジン、ペオニジン、デルフィニジン、ペツニジン、マルビジン及び任意にペラルゴニジンである、アントシアニンを含むのが特に好ましい。
【００１２】
１つの好ましい実施態様において、この生成物は、少なくとも１つの三糖類アントシアニンを含む。
【００１３】
本発明の使用に適するアントシアニンの例には、シアニジン−３−Ｏ−β−グルコシド；シアニジン−３−Ｏ−β−ガラクトシド；シアニジン−３−Ｏ−α−アラビノシド；シアニジン−３−Ｏ−β−キシロシド；シアニジン−３−Ｏ−（６’’−Ｏ−α−ラムノシル−β−グルコシド）；シアニジン−３−Ｏ−（２’’−Ｏ−β−グリコシル−β−ガラクトシド）；シアニジン−３−Ｏ−（２’’−Ｏ−β−グリコシル−β−グルコシド）；シアニジン−３−Ｏ−（２’’−Ｏ−β−キシロシル−β−グルコシド）；シアニジン−３−Ｏ−（２’’−Ｏ−β−キシロシル−β−ガラクトシド）；シアニジン−３，５−ジ−Ｏ−β−グルコシド；シアニジン−３−Ｏ−β−ガラクトシド−５−Ｏ−β−グルコシド；シアニジン−３−Ｏ−α−アラビノシド−５−Ｏ−β−グルコシド；シアニジン−３−Ｏ−（２’’−Ｏ−β−キシロシル−β−グルコシド）−５−Ｏ−β−グルコシド；シアニジン−３−Ｏ−（２’’−Ｏ−β−キシロシル−６’’−Ｏ−β−グルコシル−β−ガラクトシド）；ペラルゴニジン−３−Ｏ−β−グルコシド；ペラルゴニジン−３−Ｏ−（６’’−Ｏ−α−ラムノシル−β−グルコシド）；ペラルゴニジン−３，５−ジ−Ｏ−β−グルコシド；ペオニジン−３−Ｏ−β−グルコシド；ペオニジン−３−Ｏ−α−アラビノシド；ペオニジン−３，５−ジ−Ｏ−β−グルコシド；デルフィニジン−３−Ｏ−β−グルコシド；デルフィニジン−３−Ｏ−（６’’−Ｏ−α−ラムノシル−β−グルコシド）；デルフィニジン−３−Ｏ−（２’’−Ｏ−β−キシロシル−β−グルコシド）；ペツニジン−３−Ｏ−β−グルコシド；マルビジン−３−Ｏ−β−グルコシド；マルビジン−３，５−ジ−Ｏ−β−グルコシド；及びマルビジン−３−Ｏ−α−アラビノシド−５−Ｏ−β−グルコシドが含まれる。
【００１４】
もし所望であれば、アントシアニン中の、特に糖単位の、１又はそれ以上のヒドロキシル基は、アシル化されていてもよく、例えば、C1-12、より好ましくはＣ3-9飽和又は不飽和アシル基、例えば、モノ−又はジカルボン酸残基、例えば、マロニル、p-クマリル又はフェルロイルイル基を有する。従って、例えば、そのようなアシル化された化合物には、シアニジン−３−Ｏ−（６’’−Ｏ−（Ｅ−ｐ−クマリル）−２’’−Ｏ−β−キシロシル−β−グルコシド）；シアニジン−３−Ｏ−（６’’−Ｏ−（Ｅ−ｐ−クマリル）−２’’−Ｏ−β−キシロシル−β−グルコシド）−５−Ｏ−β−グルコシド；シアニジン−３−Ｏ−（２’’−Ｏ−β−キシロシル−６’’−Ｏ−（Ｅ−フェルロイル−β−グルコシル）−β−ガラクトシド）；シアニジン−３−Ｏ−（２’’−Ｏ−β−キシロシル−６’’−Ｏ−［Ｅ−クマリル−β−グルコシル］−β−ガラクトシド）；及びペツニジン−３−Ｏ−（６’’−Ｏ−（４’’’−Ｏ−Ｅ−クマリル）−α−ラムノシル−β−グルコシド）−５−Ｏ−β−グルコシドを含む。
【００１５】
本発明の生成物中のアントシアニン中の対イオンは、生理学的に許容できる対アニオン、例えば、塩化物、コハク酸塩、フマル酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、クエン酸塩等であってもよい。しかし、この対イオンは、果実酸アニオン、特にクエン酸塩であるのが好ましく、これにより、特に快い味覚を有する生成物になる。
【００１６】
アントシアニンとして特に適する供給源としては、果実、例えば、サクランボ、ビルベリー、ブルーベリー、クロフサスグリ、カーラント、ブドウ、ツルコケモモ、イチゴ及びリンゴ、並びに野菜、例えば、赤チャベツである。ビルベリー、特にワクシニウム・ミュルティルス（Vaccinium myrtillus）及び、クロフサスグリ、特にリベス・ニグルム（Ribes nigrum）は、特に適する。ワクシニウム・ミュルティルス（V. myrtillus）のベリーは、１５の単糖類アントシアニン、すなわち、アグリコン：シアニジン、ペオニジン、デルフィニジン、ペツニジン及びマルビジンと、グルコース、ガラクトース及びアラビノースとの糖組み合わせを含む。リベス・ニグルム（R. nigrum）のカラントは、４つのアントシアニン、すなわち、シアニジン及びデルフィニジンの３−グルコシド及び３−ルチノシドを含む。
【００１７】
二糖類アントシアニンは、単糖類より水溶性である；さらに、シアニジンアントシアニン及びデルフィニジンアントシアニンは、その中で最も水溶性なアントシアニンである。
【００１８】
アントシアニンの他にも、本発明の方法の生成物は、望ましくは、さらなる有益又は不活性な成分、例えば、ビタミン（特にビタミンＣ）、フラボン、イソフラボン、抗凝固剤（例えば、マルトデキストリン、シリカ等）、乾燥剤等を含んでもよい。しかし、望ましくは、アントシアニンは、コーティング材料を除いて、少なくとも５０重量％の生成物組成物を構成する。
【００１９】
本発明の方法において、噴霧乾燥は、不活性雰囲気、例えば、窒素雰囲気中に、１３０〜１６０℃の入口温度で、５〜１２Ｌ／時間の流速で噴霧することにより、使用が効果的になり好ましい。噴霧乾燥された生成物が粘着性であれば、そのときは、流速及び入口温度を増加させること、並びに／又は抗凝固剤含有量を増加させること、並びに／又は噴霧器回転速度を増加させることにより、非粘着性生成物を生じる。最適な温度、流速等は、各々個別のアントシアニン源について、このようにして決定することができる。噴霧乾燥されるアントシアニン溶液は、望ましくは、乾燥固体ベースで、５〜１５重量％、より好ましくは８〜１２重量％のアントシアニンを含有する水溶液である。
【００２０】
噴霧乾燥された生成物は、コーティングされるのが好ましい。これは、アントシアニンの吸湿性のため、重要である。コーティングは、噴霧乾燥された生成物の錠剤化の後の通常のコーティング技術により行うことができる；代わりに、コーティングは、噴霧乾燥された生成物をカプセルに充填することにより成し遂げることができ、これが好ましい。通常のゼラチンカプセルを用いると同時に、セルロースカプセル、例えば、カプスゲルSA（Capsugel SA, ベルギー）からのブイキャップ（Vcaps）を用いるのが好ましい。
【００２１】
コーティングされた組成物は、用量単位（例えば、カプセル）毎に、好ましくは５０〜２５０ｍｇ、より好ましくは７０〜１６０ｍｇのアントシアニンを含む。
【００２２】
ヒト消費者の用量は、１日当たり５０〜２５０ｍｇのアントシアニン、例えば１日当たり１又は２つの７５ｍｇのアントシアニン・カプセルが好ましい。これは、新鮮なベリーの１又は２カップのアントシアニン含有量にほぼ相当する。
【００２３】
上述のように、生成物組成物は、アントシアニンのグラム当たり、ビタミンＣ、例えば、１０〜１０００ｍｇ、好ましくは２０〜２００ｍｇを含むのが好ましい。
【００２４】
アントシアニンの他に、この生成物は、噴霧乾燥工程において、凝固を予防するために、噴霧乾燥される前記アントシアニン溶液に添加されて、抗凝固剤、例えば、マルトデキストリン、乳糖又はシリカも通常、含む。典型的には、前記抗凝固剤は、アントシアニンのグラム当たり、０．３〜０．８ｇ、特に約０．５ｇ存在するであろう。
【００２５】
１以上の植物源からのアントシアニンが、生成物に含まれる場合、それらは、噴霧乾燥後に混合されるのが好ましい。従って、例えば、この生成物組成物は、噴霧乾燥後に、（好ましくは０．５：１〜１：０．５、特に約１：１の重量比の）混合されたワクシニウム・ミュルティルス（V. myrtillus）及びリベス・ニグルム（R. nigrum）からのアントシアニンを含むのが好ましい。
【００２６】
上述のように、市販で入手可能で、研究で用いられ、薬剤の主薬としての個々のアントシアニンは、いわばさらさらの粉末（錠剤化又はカプセル充填に特に適する）に予め調製されていない。このことは、取扱い及び処方において都合が悪く、本発明の噴霧乾燥方法は、そのような化合物を、容易に取扱い可能なさらさらの粉末に変換するのに、容易に用いることができる。これにより、本発明のさらなる観点が形成される。
【００２７】
本発明を、以下の非制限的な実施例を参照して、さらに説明する。
【実施例１】
【００２８】
アントシアニン抽出
原料として、ワクシニウム・ミュルティルス（V. myrtillus）及びリベス・ニグルム（R. nigrum）からの果汁圧搾中の、廃生成物として生じた果実皮のケーキ状物を用いた。果汁生産者は、通常、レクチナーゼ（lectinase）を圧搾の前に果実に加え、製造された汁にアントシアニンを遊離させる;しかし、そのケーキ状物には、依然として、高いアントシアニン含有量を有する。
【００２９】
２００Ｌのメタノール（０．１ｗｔ％のＨＣｌ含有量）を、１２０ｋｇの果実皮ケーキ状物に添加した。この混合物を、周囲温度（２０〜２５℃）で２４時間の間、放置した。その後、メタノールを排出した。１５０Ｌのメタノール（０．１％ ＨＣｌ）を、その後、その果実皮に加えた。その混合物を、２４時間、周囲温度（２０〜２５℃）で放置し、その後、そのメタノールを排出した。さらなる１５０Ｌのメタノール（０．１％ＨＣｌ）を、その後、その果実皮に加えた。その混合物を、２４時間、周囲温度（２０〜２５℃）で放置した。その後、そのメタノールを排出した。そのメタノール性溶液を合わせ、３００Ｄの除外範囲でナノフィルター（nanofilter）膜（例えば、オスモニクス（Osmonics）から入手可能である）上で３０％まで濃縮した。
【００３０】
所望であれば、エタノールをメタノールの代わりに用いることもでき、レクチナーゼを浸漬工程のため、メタノールに添加してもよい。
【００３１】
濃縮されたメタノール性溶液は、さらに、ロータリーエバポレーターで、５重量％の乾燥固形含有量まで濃縮した。
【００３２】
イオン交換水（５〜１０Ｌ）を、濃縮物に添加し、水溶液を実質的に製造し、その後、約１：１の容量で、酢酸エチルで完全に混合した。相を分離し、少量の酢酸エチルをアントシアニン含有水相から蒸発させた。
【００３３】
この水相を、その後、イオン交換カラム（例えば、アンバーライトＸＡＤ７）に充填し、イオン交換水で流した。
【００３４】
メタノール（０．２５ｗｔ％クエン酸）を、その後、アントシアニンがその溶出液に現れ始めるまで、そのカラムに加え、その後、溶離を純粋なメタノールで続けた。この方法で、集められた溶出液は、実質的に遊離クエン酸を含まない。
【００３５】
この溶出液を、ロータリーエバポレータで１０重量％の乾燥固形含有量まで蒸発させた。水を添加し、残存するメタノールを、１０重量％の乾燥固形含有量まで蒸発させた。マルトデキストリンをその後添加し、１５重量％まで乾燥固形含有量を上昇させた。
【実施例２】
【００３６】
噴霧乾燥
実施例１で製造された水溶液を、ニロＡ／Ｓ（Niro A/S, コペンハーゲン、デンマーク）からの製薬の噴霧乾燥機（型ＳＤ−４−Ｒ−ＣＣ）中で、窒素雰囲気中、回転噴霧器を用い、１３０〜１６０℃の入口温度で、５〜１２Ｌ／時間の流速で、噴霧乾燥した。
【００３７】
この生成物は、さらさらで、深い紫色の粉末であり、乾燥雰囲気中で保管されるべきである。
【実施例３】
【００３８】
カプセル剤
実施例２で製造された、ワクシニウム・ミュルティルス（V. myrtillus）及びリベス・ニグルム（R. nigrum）からの噴霧乾燥された生成物（５重量％未満の水含有量）を、１：１の重量比で混合し、セルロースカプセル（ブイキャップ）中に充填し、カプセル毎に７５ｍｇ又は１５０ｍｇのアントシアニン含有量を製造した。このカプセル剤は、その後、ブリスターパック中に包装した。
【国際調査報告】
2005510512.tif 000002
2005510512.tif 000003
2005510512.tif 000004