【手続補正書】
【提出日】令和2年5月8日(2020.5.8)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
１つ以上のアミノ酸置換を含む修飾キャプシドタンパク質を含む、組換えアデノ随伴ウイルス（rAAV）粒子であって、１つ以上のアミノ酸置換が:
配列番号3に示す野生型AAV3キャプシドタンパク質の
(a) S459V、S663V、T492V、K528R、K533R、K545E、またはK545R；
(b) Y701FおよびS663V；
(c) Y705FおよびS663V；または
(d) S663V、T492V、およびK533R；
もしくは、それぞれ配列番号1、配列番号2、配列番号4、配列番号5、配列番号6、配列番号7、配列番号8、配列番号9、もしくは配列番号10に示す野生型AAV1、AAV2、AAV4、AAV5、AAV6、AAV7、AAV8、AAV9、またはAAV10キャプシドタンパク質のいずれか一つにおける前記（ａ）−（ｄ）に示される置換に対応するアミノ酸置換、またはそれらの任意の組み合わせ、から選択される；
または、１つ以上のアミノ酸置換が：
配列番号2に示す野生型AAV2キャプシドタンパク質の
(e) Y252FおよびY730F；
(f) Y272FおよびY730F；
(g) Y444FおよびY730F；
(h) Y500FおよびY730F；
(i) Y700FおよびY730F；
(j) Y704FおよびY730F；
(k) Y444FおよびT550F；
(l) S458FおよびS492V；
(m) Y272F、Y444F、Y500F、およびY730F；
(n) Y272F、Y444F、Y500F、Y700F、およびY730F；
(o) Y272F、Y444F、Y500F、Y704F、およびY730F；
(p) Y444F、Y500F、Y730F、T550V、およびT491V；
(q) Y444F、Y500F、Y730F、T659V、およびT491V；
(r) Y252F、Y272F、Y444F、Y500F、Y704F、およびY730F；
(s) Y272F、Y444F、Y500F、Y700F、Y704F、およびY730F；または
(t) Y252F、Y272F、Y444F、Y500F、Y700F、Y704F、およびY730F、
または、それぞれ配列番号1、配列番号3、配列番号4、配列番号5、配列番号6、配列番号7、配列番号8、配列番号9、もしくは配列番号10に示す野生型AAV1、AAV3、AAV4、AAV5、AAV6、AAV7、AAV8、AAV9、またはAAV10キャプシドタンパク質のいずれか一つにおける前記（e）−（t）に示される置換に対応するアミノ酸置換、またはそれらの任意の組み合わせ、から選択される；
組換えアデノ随伴ウイルス粒子。
【請求項２】
前記粒子を含むビリオンの形質導入効率が、選ばれた哺乳動物宿主細胞において、対応する無修飾のrAAV粒子を含むビリオンの形質導入効率より2〜50倍高い、請求項１に記載のrAAV粒子。
【請求項３】
前記粒子を含むビリオンの形質導入効率が、選ばれた哺乳動物宿主細胞において、対応する無修飾のrAAV粒子を含むビリオンの形質導入効率より6〜40倍高い、請求項１または２に記載のrAAV粒子。
【請求項４】
前記粒子を含むビリオンの形質導入効率が、選ばれた哺乳動物宿主細胞において、対応する無修飾のrAAV粒子を含むビリオンの形質導入効率より8〜30倍高い、請求項１−３のいずれか一項に記載のrAAV粒子。
【請求項５】
前記粒子を含むビリオンが、哺乳動物細胞中に導入された時に、対応する無修飾のrAAV粒子を含むビリオンよりユビキチン化を受けにくい、請求項１−４のいずれか一項に記載のrAAV粒子。
【請求項６】
前記粒子を含む適切な宿主細胞において診断剤、治療剤、または化学療法剤をコードする核酸セグメントを発現させる能力を有するプロモーターに作動的に連結された前記核酸セグメントをさらに含む、請求項１−５のいずれか一項に記載のrAAV粒子。
【請求項７】
前記核酸セグメントが、前記核酸セグメントに作動的に連結されたエンハンサー、転写後調節配列、ポリアデニル化シグナル、またはそれらの任意の組み合わせをさらに含む、請求項６に記載のrAAV粒子。
【請求項８】
前記核酸セグメントに作動的に連結された少なくとも1つの第1哺乳類イントロン配列をさらに含む、請求項６または７に記載のrAAV粒子。
【請求項９】
前記プロモーターが、異種プロモーター、組織特異的プロモーター、細胞特異的プロモーター、構成的プロモーター、誘導性プロモーター、またはそれらの任意の組み合わせである、請求項６−８のいずれか一項に記載のrAAV粒子。
【請求項１０】
前記プロモーターが、肝臓特異的プロモーター、腫瘍細胞特異的プロモーター、またはそれらの組み合わせである、請求項６−９のいずれか一項に記載のrAAV粒子。
【請求項１１】
前記核酸セグメントが、ポリペプチド、ペプチド、リボザイム、ペプチド核酸、siRNA、RNAi、アンチセンスオリゴヌクレオチド、アンチセンスポリヌクレオチド、抗体、抗原結合フラグメント、またはそれらの任意の組み合わせを発現し、またはコードする、
請求項６−１０のいずれか一項に記載のrAAV粒子。
【請求項１２】
前記核酸セグメントが化学療法剤をコードする、請求項６−１１のいずれか一項に記載のrAAV粒子。
【請求項１３】
前記診断剤、治療剤または化学療法剤が、アゴニスト、アンタゴニスト、抗アポトーシス因子、阻害因子、受容体、サイトカイン、細胞毒、赤血球新生因子、糖タンパク質、成長因子、成長因子受容体、ホルモン、ホルモン受容体、インターフェロン、インターロイキン、インターロイキン受容体、神経成長因子、向神経活性ペプチド、向神経活性ペプチド受容体、プロテアーゼ、プロテアーゼ阻害因子、タンパク質デカルボキシラーゼ、プロテインキナーゼ、タンパク質キナーゼ阻害因子、酵素、受容体結合タンパク質、輸送タンパク質またはその阻害因子、セロトニン受容体またはその取り込み阻害因子、セルピン、セルピン受容体、腫瘍抑制因子、細胞毒性因子、細胞分裂阻害因子、抗炎症因子、またはそれらの任意の組み合わせである、請求項６−１２のいずれか一項に記載のrAAV粒子。
【請求項１４】
rAAV粒子がrAAV3粒子またはrAAV2粒子である、請求項１−１３のいずれか一項に記載のrAAV粒子。
【請求項１５】
請求項１−１４のいずれか一項に記載のrAAV粒子を含む単離された哺乳動物宿主細胞。
【請求項１６】
幹細胞、造血細胞、血液細胞、神経細胞、網膜細胞、上皮細胞、内皮細胞、膵臓細胞、がん細胞、筋細胞、血管細胞、横隔膜細胞、胃細胞、肝臓細胞、腫瘍細胞、またはCD34+細胞である、請求項１５に記載の単離された哺乳動物宿主細胞。
【請求項１７】
（I）請求項１−１４のいずれか一項に記載のrAAV粒子
と、
（II）医薬上許容される緩衝剤、希釈剤、または賦形剤と
を含む組成物。
【請求項１８】
限定するわけではないがHCCなどの肝がんを含む、哺乳動物の疾患、傷害、障害、外傷または機能不全の1つ以上の症状を診断し、防止し、処置し、または改善するためのキットに含まれる、請求項１７に記載の組成物。
【請求項１９】
脂質、リポソーム、脂質複合体、エトソーム、ニオソーム、ナノ粒子、マイクロ粒子、リポスフェア、ナノカプセル、またはそれらの任意の組み合わせをさらに含む、請求項１７または請求項１８に記載の組成物。
【請求項２０】
治療または予防に使用するための、請求項１７−１９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２１】
ヒトがんの治療または予防に使用するための、請求項１７−２０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２２】
請求項１−１４のいずれか一項に記載のrAAV粒子および
限定するわけではないがヒトにおける肝がんを含む、哺乳動物の疾患、傷害、障害、外傷または機能不全の1つ以上の症状の診断、防止、処置、または改善における前記構成要素の使用説明書、
とを含むキット。
【請求項２３】
限定するわけではないが哺乳動物のがんを含む、哺乳動物の疾患、傷害、障害、外傷または機能不全の1つ以上の症状を診断し、防止し、処置し、または改善するための医薬の製造における、請求項１７に記載の組成物の使用。
【請求項２４】
ヒト肝がんの１つ以上の症状を処置しまたは改善するための医薬の製造における、請求項２３に記載の使用。
【請求項２５】
請求項１−１４のいずれか一項に記載のrAAV粒子を含む医薬組成物であって、rAAV粒子が診断有効量または治療有効量で哺乳動物に与えられ、かつ診断有効量または治療有効量の前記rAAV粒子を前記哺乳動物に与えるのに有効な時間にわたって与える、医薬組成物。
【請求項２６】
限定するわけではないが哺乳動物におけるHCCを含む肝がんを含む、哺乳動物の疾患、傷害、障害、外傷または機能不全の少なくとも1つ以上の症状を診断し、防止し、処置し、または改善するための、
請求項１−１４のいずれか一項に記載のrAAV粒子を含む、組成物。
【請求項２７】
前記哺乳動物がヒトである、請求項２６に記載の組成物。
【請求項２８】
ヒトにおける肝臓細胞または肝腫瘍細胞の集団に形質導入するための方法における使用のための、請求項１−１４のいずれか一項に記載のrAAV粒子の有効量を含む医薬組成物であって、該方法が、前記ヒトに、前記医薬組成物を、肝臓細胞または肝腫瘍細胞の集団に形質導入するのに有効な時間にわたって投与することを含む、医薬組成物。
【請求項２９】
前記ヒトが、HCCと診断された、HCCを有する、またはHCCを有すると疑われている、請求項２８に記載の医薬組成物。