(57)【要約】  一つの局面において、本発明は、本明細書中に開示される少なくとも２つの化学保護剤を各々含有する化学保護剤組成物を提供する。本発明の化学保護剤組成物は、例えば、化学療法の少なくとも１つの有害な効果の改善に有用である。別の局面において、本発明は、化学療法の少なくとも１つの有害な効果を改善する方法を提供し、この方法は、化学療法を受けている被験体に化学療法の少なくとも１つの有害な効果を改善するために有効な量の化学保護剤組成物を投与する工程を各々包含する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
化学保護剤組成物であって、該組成物は、メチオニン、Ｎ−アセチル−ＤＬ−メチオニン、Ｓ−アデノシルメチオニン、システイン、ホモシステイン、シスタチオン、シスタミン、Ｎ−アセチルシステイン、グルタチオン、グルタチオンエチルエステル、グルタチオンジエチルエステル、グルタチオントリエチルエステル、シスタミン、ＤｉＮＡＣ、ＲｉｂＣｙｓ、ＲｉｂＣｙｓｔ、β−ＬａｃｔＣｙｓ、α−ＬａｃｔＣｙｓ、ＭｅｌｉＣｙｓ、ＭａｌｔＣｙｓ、ＣｅｌｌＣｙｓ、ＯＴＣＡ、アロプリノール、１−メチルアロプリノール、２−メチルアロプリノール、５−メチルアロプリノール、７−メチルアロプリノール、１，５−ジメチルアロプリノール、２，５−ジメチルアロプリノール、１，７−ジメチルアロプリノール、２，７−ジメチルアロプリノール、５，７−ジメチルアロプリノール、２，５，７−トリメチルアロプリノール、１−エトキシカルボニルアロプリノール、１−エトキシカルボニル−５−メチルアロプリノール，２−フェニル−１，２−ベンゾイソセレナゾール−３（２Ｈ）−オン、および６−ジＳｅＣＤから成る群より選択される少なくとも２つの化学保護剤を含む、化学保護剤組成物。
【請求項２】
請求項１に記載の化学保護剤組成物であって、該組成物は、アロプリノール、２−フェニル−１，２−ベンゾイソセレナゾール−３（２Ｈ）−オン、およびＮ−アセチルシステインから成る群より選択される少なくとも２つの化学保護剤を含む、化学保護剤組成物。
【請求項３】
アロプリノール、２−フェニル−１，２−ベンゾイソセレナゾール−３（２Ｈ）−オンを含む、請求項１に記載の化学保護剤組成物。
【請求項４】
アロプリノールおよびＮ−アセチルシステインを含む、請求項１に記載の化学保護剤組成物。
【請求項５】
２−フェニル−１，２−ベンゾイソセレナゾール−３（２Ｈ）−オン、およびＮ−アセチルシステインを含む、請求項１に記載の化学保護剤組成物。
【請求項６】
少なくとも１つの化学療法の有害効果を改善する方法であって、該方法は、化学治療を受けている被験体に化学保護剤組成物を投与する工程を含み、該化学保護組成物は、少なくとも１つの化学療法の有害効果を改善するために有効であり、該化学保護剤組成物は、Ｌ−メチオニン、Ｎ−アセチル−ＤＬ−メチオニン、Ｓ−アデノシルメチオニン、システイン、ホモシステイン、シスタチオン、シスタミン、Ｎ−アセチルシステイン、グルタチオン、グルタチオンエチルエステル、グルタチオンジエチルエステル、グルタチオントリエチルエステル、シスタミン、ＤｉＮＡＣ、ＲｉｂＣｙｓ、ＲｉｂＣｙｓｔ、β−ＬａｃｔＣｙｓ、α−ＬａｃｔＣｙｓ、ＭｅｌｉＣｙｓ、ＭａｌｔＣｙｓ、ＣｅｌｌＣｙｓ、ＯＴＣＡ、アロプリノール、１−メチルアロプリノール、２−メチルアロプリノール、５−メチルアロプリノール、７−メチルアロプリノール、１，５−ジメチルアロプリノール、２，５−ジメチルアロプリノール、１，７−ジメチルアロプリノール、２，７−ジメチルアロプリノール、５，７−ジメチルアロプリノール、２，５，７−トリメチルアロプリノール、１−エトキシカルボニルアロプリノール、１−エトキシカルボニル−５−メチルアロプリノール、２−フェニル−１，２−ベンゾイソセレナゾール−３（２Ｈ）−オン、および６−ジＳｅＣＤから成る群より選択される化学保護剤を含む、方法。
【請求項７】
前記化学保護剤組成物が、アロプリノール、２−フェニル−１，２−ベンゾイソセレナゾール−３（２Ｈ）−オン、およびＮ−アセチルシステインから成る群より選択される化学保護剤を含む、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記化学保護剤組成物が、アロプリノールおよび２−フェニル−１，２−ベンゾイソセレナゾール−３（２Ｈ）−オンを含む、請求項６に記載の方法。
【請求項９】
前記アロプリノールが、１０〜２４００ｍｇ／日量で投与され、そして前記２−フェニル−１，２−ベンゾイソセレナゾール−３（２Ｈ）−オンが５〜５０００ｍｇ／日量で投与される、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
前記化学保護剤組成物が、アロプリノールおよびＮ−アセチルシステインを含む、請求項６に記載の方法。
【請求項１１】
前記アロプリノールが、１０〜２４００ｍｇ／日量で投与され、そして前記Ｎ−アセチルシステインが、５〜５０００ｍｇ／日量で投与される、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記化学保護剤組成物が、２−フェニル−１，２−ベンゾイソセレナゾール−３（２Ｈ）−オンおよびＮ−アセチルシステインを含む、請求項６に記載の方法。
【請求項１３】
前記２−フェニル−１，２−ベンゾイソセレナゾール−３（２Ｈ）−オンが、５〜５０００ｍｇ／日量で投与され、そして前記Ｎ−アセチルシステインが、５〜５０００ｍｇ／日量で投与される、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
化学保護剤組成物であって、該化学保護剤組成物は、以下：
（ａ）メチオニン、Ｎ−アセチル−ＤＬ−メチオニン、Ｓ−アデノシルメチオニン、システイン、Ｎ−アセチルシステイン、グルタチオン、グルタチオンエチルエステル、グルタチオンジエチルエステル、グルタチオントリエチルエステル、ＤｉＮＡＣ、ＲｉｂＣｙｓ、ホモシステイン、シスタチオン、シスタミン、ＯＴＣＡおよびＲｉｂＣｙｓｔから成る群より選択される、化学保護剤；
（ｂ）アロプリノール、１−メチルアロプリノール、２−メチルアロプリノール、５−メチルアロプリノール、７−メチルアロプリノール、１，５−ジメチルアロプリノール、２，５−ジメチルアロプリノール、１，７−ジメチルアロプリノール、２，７−ジメチルアロプリノール、５，７−ジメチルアロプリノール、２，５，７−トリメチルアロプリノール、１−エトキシカルボニルアロプリノール、および１−エトキシカルボニル−５−メチルアロプリノールから成る群より選択される、化学保護剤；および
（ｃ）Ｅｂｓｅｌｅｎおよび６−ジＳｅＣＤから成る群より選択される、化学保護剤、
を含む、化学保護剤組成物。
【請求項１５】
薬学的組成物であって、該薬学的組成物は、以下：
（ａ）メチオニン、Ｎ−アセチル−ＤＬ−メチオニン、Ｓ−アデノシルメチオニン、システイン、ホモシステイン、シスタチオン、シスタミン、Ｎ−アセチルシステイン、グルタチオン、グルタチオンエチルエステル、グルタチオンジエチルエステル、グルタチオントリエチルエステル、シスタミン、ＤｉＮＡＣ、ＲｉｂＣｙｓ、ＲｉｂＣｙｓｔ、β−ＬａｃｔＣｙｓ、α−ＬａｃｔＣｙｓ、ＭｅｌｉＣｙｓ、ＭａｌｔＣｙｓ、ＣｅｌｌＣｙｓ、ＯＴＣＡ、アロプリノール、１−メチルアロプリノール、２−メチルアロプリノール、５−メチルアロプリノール、７−メチルアロプリノール、１，５−ジメチルアロプリノール、２，５−ジメチルアロプリノール、１，７−ジメチルアロプリノール、２，７−ジメチルアロプリノール、５，７−ジメチルアロプリノール、２，５，７−トリメチルアロプリノール、１−エトキシカルボニルアロプリノール、１−エトキシカルボニル−５−メチルアロプリノール、２−フェニル−１，２−ベンゾイソセレナゾール−３（２Ｈ）−オン、および６−ジＳｅＣＤから成る群より選択される、化学保護剤；および
（ｂ）化学治療剤
を含む、薬学的組成物。
【請求項１６】
前記化学治療剤が白金を含む、請求項１５に記載の薬学的組成物。
【請求項１７】
前記化学治療剤がシスプラチンを含む、請求項１６に記載の薬学的組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（発明の分野）
本発明は、化学療法（例えばシスプラチンを使用する化学治療）の所望されない効果を改善する方法および組成物に関する。
【０００２】
（発明の背景）
癌の処置の１つのアプローチは、化学療法であり、その化学療法において、癌細胞に有毒な、または別の点で有害な１つ以上の化学物質が、癌を罹患した個体に投与される。不運なことに、ほとんどの（全部ではないが）化学治療剤が、患者の健康に悪影響を与える所望されない効果を引き起こす。
【０００３】
一例として、化学療法剤シスプラチン（シス−ジアミンジクロロ白金）は、シス位に２つの塩素原子および２つのアンモニア分子に囲まれた中心原子として白金を有する、重金属複合体である。シスプラチンは、急速に分裂する細胞のＤＮＡにおいてストランド間のおよびストランド内の架橋を生成し、そのためにＤＮＡ、ＲＮＡ、および／またはタンパク質の合成を阻害する。
【０００４】
シスプラチンは、代表的に転移性精巣腫、転移性卵巣腫瘍、子宮内膜癌、膀胱癌、頭部の癌、または頚部の癌を有する患者を処置するために（しばしば他の化学療法剤（例えば、パクリタキセル、シクロホスホミド、ビンブラスチン、ドキソルビシンおよびブレオマイシン）と組み合わせて）使用される。不運なことに、シスプラチンは、多くの有害影響（例えば、発作、末梢神経障害、聴器毒性、聴覚障害、聴覚消失、眩暈、めまい感、視力障害（ｂｌｕｒｒｅｄ  ｖｉｓｉｏｎ）、悪心、嘔吐、食欲不振、下痢、便秘、骨髄抑制、血小板減少症、貧血、好中球減少症、および腎毒性）を引き起こす。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
従って、化学療法の所望されない効果を改善するかまたは除去する組成物および方法に対する必要性が残る。特に、１つ以上、または全てのシスプラチン化学療法の所望されない効果を改善するまたは除去する組成物および方法に対する必要性が残る。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
（本発明の要旨）
一つの局面において、本発明は、本明細書中に開示された少なくとも２つの化学保護剤を各々含む化学保護剤組成物を提供する。本発明の化学保護剤組成物は、例えば、少なくとも１つの化学療法の有害な効果の改善に対して有用である。
【０００７】
別の局面において、本発明は、各々が以下を含む薬学的組成物を提供する：（ａ）メチオニン、Ｎ−アセチル−ＤＬ−メチオニン、Ｓ−アデノシルメチオニン、システイン、ホモシステイン、シスタチオン、シスタミン、Ｎ−アセチルシステイン、グルタチオン、グルタチオンエチルエステル、グルタチオンジエチルエステル、グルタチオントリエチルエステル、シスタミン、ＤｉＮＡＣ、ＲｉｂＣｙｓ、ＲｉｂＣｙｓｔ、β−ＬａｃｔＣｙｓ、α−ＬａｃｔＣｙｓ、ＭｅｌｉＣｙｓ、ＭａｌｔＣｙｓ、ＣｅｌｌＣｙｓ、ＯＴＣＡ、アロプリノール、１−メチルアロプリノール、２−メチルアロプリノール、５−メチルアロプリノール、７−メチルアロプリノール、１，５−ジメチルアロプリノール、２，５−ジメチルアロプリノール、１，７−ジメチルアロプリノール、２，７−ジメチルアロプリノール、５，７−ジメチルアロプリノール、２，５，７−トリメチルアロプリノール、１−エトキシカルボニルアロプリノール、１−エトキシカルボニル−５−メチルアロプリノール、２−フェニル−１，２−ベンゾイソセレナゾール−３（２Ｈ）−オン、および６−ジＳｅＣＤから成る群より選択される化学保護剤；および（ｂ）化学治療剤。
【０００８】
別の局面において、本発明は、化学療法の少なくとも１つの有害な効果を改善する方法を提供する。この方法は、化学療法を受けている患者に、化学療法の少なくとも１つの有害な効果を改善するために有効な一定量の化学保護剤組成物を投与する工程を各々包含する。化学保護剤組成物は、本明細書中に開示された１つ以上（例えば少なくとも２つ）の化学保護剤を含有する。
（好ましい実施形態の詳細な説明）
本明細書中で使用される場合、用語「化学保護剤」は、化学療法の少なくとも１つの有害な効果を改善し得る化学物質を言う。
【０００９】
本明細書中で使用される場合、用語「化学保護剤組成物」は、少なくとも１つの化学保護剤を含有し、そして１つを越える化学保護剤を含み得る組成物を言う。化学保護剤組成物はまた、１つ以上の化学保護剤に加え、哺乳動物の被験体に対する化学保護剤組成物の投与を容易にする、薬学的に受容可能なキャリアも含有し得る。
【００１０】
本明細書中で使用される場合、用語「化学療法の少なくとも１つの有害な効果を改善する」は、以下を包含する：（ａ）化学療法の少なくとも１つの有害な効果の大きさおよび／または持続期間の減少；ならびに／あるいは（ｂ）化学療法の少なくとも１つの有害な効果の完全な除去；ならびに／あるいは（ｃ）本発明の化学保護剤組成物の投与なしに生じる、１つ以上の化学療法の有害な効果の発生の防止。
【００１１】
本明細書中で使用される場合、用語「化学治療剤」は、癌細胞を破壊する、そうでなければ有害な影響を与えるために哺乳動物の被験体に投与される薬剤である。
【００１２】
一つの局面において、本発明は、化学療法の少なくとも１つの有害な効果を改善する方法を提供する。この方法は、化学療法を受けている患者に、化学療法の少なくとも１つの有害な効果を改善するために有効なある量の化学保護剤組成物を投与する工程を包含する。本発明の方法は、任意の形式の化学療法を受ける任意の哺乳動物の被験体（例えば、ヒト被験体）に適用可能である。
【００１３】
化学保護剤組成物は、１つまたは１つを越える化学保護剤を含有し得る。他に述べられていない場合、本明細書中に開示された任意の化学保護剤の任意の異性体または互変異性体が本発明で使用され得る。本発明の化学保護剤組成物中に含まれ得るいくつかの化学保護剤は、１つ以上の硫黄含有基（例えば、スルフヒドリル基またはチオール基）を含む。１つ以上の硫黄含有基を含む化学保護剤の代表的な例は以下である：メチオニン；Ｎ−アセチル−ＤＬ−メチオニン；Ｓ−アデノシルメチオニン；システイン；ホモシステイン；シスタチオン；シスタミン；Ｎ−アセチルシステイン；グルタチオン；グルタチオンエチルエステル；グルタチオンジエチルエステル；グルタチオントリエチルエステル；シスタミン；Ｎ，Ｎ’−ジアセチル−Ｌ−シスチン（ＤｉＮＡＣ）；２（Ｒ，Ｓ）−Ｄ−リボ−（１’，２’，３’，４’−テトラヒドロキシブチル）−チアゾリジン−４（Ｒ）−カルボン酸（ＲｉｂＣｙｓ）；２−アルキルチアゾリジン  ２（Ｒ，Ｓ）−Ｄ−リボ−（１’，２’，３’，４’−テトラヒドロキシブチル）−チアゾリジン（ＲｉｂＣｙｓｔ）；２（Ｒ，Ｓ）−Ｄ−グルコ−（１’，２’，４’，５’−テトラヒドロキシペンチル−３’−Ｏ−Ｄ−ガラクトピラノシル）チアゾリジン−４（Ｒ）−カルボン酸（β−ＬａｃｔＣｙｓ）；２（Ｒ，Ｓ）−Ｄ−グルコ−（１’，２’，４’，５’−テトラヒドロキシペンチル−３’−Ｏ−α−Ｄ−ガラクトピラノシル）チアゾリジン−４（Ｒ）−カルボン酸（α−ＬａｃｔＣｙｓ）；２（Ｒ，Ｓ）−Ｄ−グルコ−（１’，２’，４’，５’−テトラヒドロキシペンチル−５’−Ｏ−α−Ｄ−ガラクトピラノシル）チアゾリジン−４（Ｒ）−カルボン酸（ＭｅｌｉＣｙｓ）；２（Ｒ，Ｓ）−Ｄ−グルコ−（１’，２’，３’，４’−テトラヒドロキシペンチル−３’−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル）チアゾリジン−４（Ｒ）−カルボン酸（ＭａｌｔＣｙｓ）；２（Ｒ，Ｓ）−Ｄ−グルコ−（１’，２’，４’，５’−テトラヒドロキシペンチル−３’−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシル）チアゾリジン−４（Ｒ）−カルボン酸（ＣｅｌｌＣｙｓ）；および２−オキソ−Ｌ−チアゾリジン−４−カルボン酸（ＯＴＣＡ）。
【００１４】
アロプリノール（Ｃ５Ｈ４Ｎ４Ｏ）およびその互変異性体もまた、本発明の実施における化学保護剤として有用である。以下の代表的なアロプリノール誘導体は、本発明の実施における化学保護剤として有用である：１−メチルアロプリノール；２−メチルアロプリノール；５−メチルアロプリノール；７−メチルアロプリノール；１，５−ジメチルアロプリノール；２，５−ジメチルアロプリノール；１，７−ジメチルアロプリノール；２，７−ジメチルアロプリノール；５，７−ジメチルアロプリノール；２，５，７−トリメチルアロプリノール；１−エトキシカルボニルアロプリノール；および１−エトキシカルボニル−５−メチルアロプリノール。
【００１５】
本発明の実施における有用な化学保護剤の他の例としては、２−フェニル−１，２−ベンゾイソセレナゾール−３（２Ｈ）−オン（Ｅｂｓｅｌｅｎ）、および６Ａ，６Ｂ−ジセレン酸−６Ａ’，６Ｂ’−セレニウム架橋β−シクロデキストリン（６−ジＳｅＣＤ）が挙げられる。
【００１６】
表１は、本明細書中に記載されるいくつかの化学保護剤についての代表的な有効投薬量範囲を示す。表１に示す化学保護剤は、好ましくは経口的にまたは静脈内に投与される。哺乳動物の被験体への１つ以上の化学治療剤の投与前、投与の間または投与の後に、表１に示す化学保護剤が、この哺乳動物の被験体に投与され得る。従って、哺乳動物の被験体は、代表的に化学治療剤の各用量に対して化学保護剤の１つの用量を受ける。
【００１７】
本発明のいくつかの実施形態において、哺乳動物の被験体への１つ以上の化学治療剤の投与前１８時間から哺乳動物の被験体への１つ以上の化学治療剤の投与後１８時間まで及ぶ期間の間、任意の時間に、表１に示した１つ以上の化学保護剤が、この哺乳動物の被験体に投与される。本発明のいくつかの実施形態において、哺乳動物の被験体への１つ以上の化学治療剤の投与前１時間から哺乳動物の被験体への１つ以上の化学治療剤の投与後１時間まで及ぶ期間の間、任意の時間に、表１に示す１つ以上の化学保護剤が、この哺乳動物の被験体に投与される。本発明のいくつかの実施形態において、哺乳動物の被験体への１つ以上の化学治療剤の投与前１０分から哺乳動物の被験体への１つ以上の化学治療剤の投与後１０分まで及ぶ期間の間、任意の時間に、表１に示す１つ以上の化学保護剤が、この哺乳動物の被験体に投与される。本発明のいくつかの実施形態において、哺乳動物の被験体への１つ以上の化学治療剤の投与と同時に、表１に示す１つ以上の化学保護剤が、この哺乳動物の被験体に投与される。
【００１８】
略語「ｍｇ」は、ミリグラムを意味する。
【００１９】
【表１−１】
2005510537.tif 000002
【００２０】
【表１−２】
2005510537.tif 000003
化学保護剤組成物は、１つまたは１つを越える化学保護剤を含有し得る。従って、本発明の化学保護剤組成物は、本明細書中で開示される任意の個々の化学保護剤の任意の組み合わせを含み得る。１つを越える化学保護剤を含有する化学保護剤組成物のいくつかの実施形態において、化学保護剤組成物は、表１に示すような、個々の成分化学保護剤の有効投薬量を提供するために処方される。例えば、表１に示すように、メチオニンおよびＮ−アセチル−メチオニン両方の現在の好ましい投薬量は、５ｍｇ〜５０００ｍｇ／日である。従って、本発明のいくつかの化学保護剤組成物は、各５ｍｇ〜５０００ｍｇ／日の投薬量でメチオニンおよびＮ−アセチル−メチオニンを提供するように処方される。
【００２１】
別の局面において、本発明は、本明細書中で開示される少なくとも２つ（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９または１０）の個々の化学保護剤を各々含む化学保護剤組成物を提供する。例えば、いくつかの化学保護剤組成物は群Ａから選択される少なくとも１つの化学保護剤、群Ｂから選択される少なくとも１つの化学保護剤、および群Ｃから選択される少なくとも１つの化学保護剤を含有し、ここで群Ａ、ＢおよびＣは以下の化学保護剤を含む：
群Ａ（グルタチオンまたはグルタチオン前駆体）：メチオニン；Ｎ−アセチル−ＤＬ−メチオニン；Ｓ−アデノシルメチオニン；システイン；Ｎ−アセチルシステイン；グルタチオン；グルタチオンエチルエステル；グルタチオンジエチルエステル；グルタチオントリエチルエステル；ＤｉＮＡＣ；ＲｉｂＣｙｓ；ホモシステイン；シスタチオン；シスタミン；ＯＴＣＡおよびＲｉｂＣｙｓｔ。
【００２２】
群Ｂ（強抗酸化防止剤）：アロプリノール；１−メチルアロプリノール；２−メチルアロプリノール；５−メチルアロプリノール；７−メチルアロプリノール；１，５−ジメチルアロプリノール；２，５−ジメチルアロプリノール；１，７−ジメチルアロプリノール；２，７−ジメチルアロプリノール；５，７−ジメチルアロプリノール；２，５，７−トリメチルアロプリノール；１−エトキシカルボニルアロプリノール；および１−エトキシカルボニル−５−メチルアロプリノール。
【００２３】
群Ｃ（グルタチオンペルオキシダーゼ模倣物）：Ｅｂｓｅｌｅｎおよび６−ジＳｅＣＤ。
【００２４】
本発明の化学保護剤組成物は、例えば、化学療法の少なくとも１つの有害な効果を改善するために有用である。本発明の化学保護剤組成物は、化学療法の少なくとも１つの有害な効果を改善する本発明の方法において使用され得る。
【００２５】
本発明の化学保護剤は、化学療法を受ける被験体に投与された場合、化学療法の１つ以上の有害な効果を改善するために有効な投薬量を提供するように処方され得る。例えば、いくつかの実施形態において、化学保護剤組成物は表１に示されるような個々の化学保護剤の有効な投薬量を提供するように処方される。
【００２６】
本発明の化学保護剤組成物の投与は、任意の有効な経路（例えば、経口経路または非経口経路）により達成される。非経口送達の方法としては、局所的な、動脈内、皮下の、骨髄内の、静脈内の、または鼻腔内の投与が挙げられる。１つ以上の化学保護剤に加えて、化学保護剤組成物は、賦形剤および化学療法を受けている哺乳動物の被験体への化学保護剤組成物の投与を容易にする他の化合物を含む、適切な薬学的に受容可能なキャリアを含み得る。処方および投与の技術に関する、さらなる詳細は、「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ」（Ｍａａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ）の最新版において見出され得る。
【００２７】
経口投与の化学保護剤組成物は、当該分野において周知の薬学的に受容可能なキャリアを用いて、経口投与に適する投薬量で処方され得る。このようなキャリアは、化学保護剤組成物が、被験体による摂取に適した錠剤、丸剤、糖剤、カプセル剤、液体、ゲル、シロップ、スラリー、懸濁液等として、処方されることを可能にする。
【００２８】
経口使用のための化学保護剤組成物は、例えば、１つ以上の化学保護剤と固形賦形剤の組み合わせにより、必要に応じて、生じた混合物の粉砕により、そして所望の場合、適した添加化合物を加えた後に、顆粒剤の混合物を処理し、錠剤または糖剤コアを得ることによって得られ得る。適した増量剤は、炭水化物増量剤またはタンパク質増量剤である。これらとしては、ラクトース、サッカロース、マンニトール、またはソルビトールを含む糖、トウモロコシ、コムギ、コメ、ジャガイモ、または他の植物由来のデンプン；メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチル−セルロース、またはカルボキシメチルセルロースナトリウムのようなセルロース；ならびにアラビアゴムおよびトラガカントゴムを含むゴム；ならびにゼラチンおよびコラーゲンといったタンパク質が挙げられるが、これらに限定されない。所望の場合、崩壊した薬剤または可溶化した薬剤は、例えば、架橋したポリビニルピロリドン、寒天、アルギン酸、またはその塩（例えば、アルギン酸ナトリウム）を添加され得る。
【００２９】
糖剤コアは、濃縮糖液のような適切な被覆を提供され、この濃縮糖液はまた、アラビアゴム、タルク、ポリビニルピロリドン、カルボポル（ｃａｒｂｏｐｏｌ）ゲル、ポリエチレングリコール、および／または二酸化チタン、ラッカー溶液、および適切な有機溶媒または溶媒混合物を含み得る。染料または色素は、生成物識別のための錠剤被覆または糖剤被覆に、あるいは活性化合物の定量（すなわち、投薬量）を特徴付けるために添加され得る。
【００３０】
経口で使用され得る、化学保護剤組成物は、例えば、ゼラチンでできたプッシュ−フィット（ｐｕｓｈ−ｆｉｔ）カプセル剤、ならびにゼラチンでできた柔密封カプセル剤および被覆（例えば、グリセロールまたはソルビトール）として処方され得る。プッシュ−フィットカプセル剤は、増量剤または結合剤（例えば、ラクトースまたはデンプン）、潤滑剤（例えば、タルクまたはステアリン酸マグネシウム）および、必要に応じて、安定剤をと混合された化学保護剤を含み得る。柔カプセル剤において、化学保護剤は、適した液体（例えば、脂肪油、液体パラフィン、または液体ポリエチレングリコール）に、安定剤を有してまたは有さずに、溶解または懸濁され得る。
【００３１】
非経口的投与のための化学保護剤組成物は、１つ以上の化学保護剤の水溶液を含む。注射のために、本発明の化学保護剤組成物は、水溶液中で、好ましくは生理学的に適合する緩衝液（例えば、ハンクス液、リンガー液または生理学的緩衝化生理食塩水）中で処方され得る。水溶性注射懸濁液は、懸濁液の粘度を高める物質（例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ソルビトール、またはデキストラン）を含み得る。加えて、化学保護剤の懸濁液は、適切な油性注射懸濁液として調製され得る。適した親油性溶媒またはビヒクルとしては、脂肪油（例えば、ごま油）、または合成脂肪酸エステル（例えば、オレイン酸エチルまたはトリグリセリド）、あるいはリポソームが挙げられる。必要に応じて、懸濁液はまた、化合物の溶解度を高め、高濃度溶液の調製を可能にする適切な安定剤または薬剤を含み得る。
【００３２】
局所投与または鼻投与について、特定の障壁を浸透するために適した浸透剤が、処方物において代表的に使用される。このような浸透剤は、一般的に当該分野において公知である。
【００３３】
本発明の化学保護剤組成物は、当該分野において公知の方法と同様の方法（例えば、従来の混合、溶解、顕粒化、糖剤製造、すりつぶし、乳化、カプセル化、閉じ込め、凍結乾燥プロセスによって）で製造され得る。化学保護剤組成物はまた、従来の方法（例えば、被覆）によって適切な放出特性（例えば、徐放性放出または標的化放出）を提供するために修飾され得る。
【００３４】
化学保護剤組成物は、塩として提供され得、そして多くの酸と形成され得る。この酸としては、塩化水素酸、硫酸、酢酸、乳酸、酒石酸、リンゴ酸、コハク酸等が挙げられるが、これらに限定されない。塩は、水性溶媒または他のプロトン性溶媒中において、対応する遊離塩基型より可溶性となる傾向がある。
【００３５】
受容可能なキャリア中に処方された、このような化学保護剤組成物が調製された後、これらは適したコンテナ内に置かれ得、そして使用のために標識され得る。
【００３６】
実際に投与した量は、処置が適用されるべき個体に依存し、そして好ましくは、重大な副作用なしに所望の効果が達成されるような最適量である。有効な投薬量の決定は、充分に当業者の能力の範囲内である。当然ながら、当業者は、分割用量および部分的用量もまた本発明の範囲内であることを理解する。
【００３７】
任意の化学保護剤組成物に対し、有効な用量が細胞培養アッセイまたは任意の適切な動物モデル（例えば、霊長類、ラットおよびモルモットならびに他の小さな実験室動物）のいずれかにおいて、初めに推定され得る。動物モデルはまた、所望の濃度範囲および投与経路を実現するために、代表的に使用され得る。次にこのような情報は、有用な投薬量およびヒトまたは他の哺乳動物における投与の経路を決定するために使用され得る。
【００３８】
化学保護剤組成物の治療効力およびありうる毒性は、標準的な薬学的手順によって、細胞培養または実験動物（例えば、ＥＤ５０、集団の５０％において治療的に有効な投薬量；およびＬＤ５０、集団の５０％に対して致死の投薬量）において決定され得る。治療的効果と毒性効果との間の投薬量比率は、治療的指標であり、そして比率ＥＤ５０／ＬＤ５０として表され得る。大きな治療的指数を示す化学保護剤組成物は、好ましい。細胞培養アッセイおよび動物研究から得られたデータは、ヒトまたは他の哺乳動物において使用するための投薬量の範囲の処方において使用される。このような化合物の投薬量は、好ましくは、ほとんど毒性がないかまたは毒性のないＥＤ５０を含む循環濃度の範囲内である。投薬量は、代表的に、使用される投薬形態、患者の感受性、および投与の経路に依存するこの範囲内で変化する。
【００３９】
別の局面において、本発明は、以下を各々含む化学保護剤組成物を提供する：（ａ）メチオニン、Ｎ−アセチル−ＤＬ−メチオニン、Ｓ−アデノシルメチオニン、システイン、ホモシステイン、シスタチオン、シスタミン、Ｎ−アセチルシステイン、グルタチオン、グルタチオンエチルエステル、グルタチオンジエチルエステル、グルタチオントリエチルエステル、シスタミン、ＤｉＮＡＣ、ＲｉｂＣｙｓ、ＲｉｂＣｙｓｔ、β−ＬａｃｔＣｙｓ、α−ＬａｃｔＣｙｓ、ＭｅｌｉＣｙｓ、ＭａｌｔＣｙｓ、ＣｅｌｌＣｙｓ、ＯＴＣＡ、アロプリノール、１−メチルアロプリノール、２−メチルアロプリノール、５−メチルアロプリノール、７−メチルアロプリノール、１，５−ジメチルアロプリノール、２，５−ジメチルアロプリノール、１，７−ジメチルアロプリノール、２，７−ジメチルアロプリノール、５，７−ジメチルアロプリノール、２，５，７−トリメチルアロプリノール、１−エトキシカルボニルアロプリノール、１−エトキシカルボニル−５−メチルアロプリノール，２−フェニル−１，２−ベンゾイソセレナゾール−３（２Ｈ）−オン、ならびに６−ジＳｅＣＤ；および（ｂ）化学療法剤。
【００４０】
本発明の薬学的組成物において有用な化学療法剤として、シスプラチン、カルボプラチン、オキシプラチン、ビンブラスチン、ドキソルビシン、ブレオマイシン、パクリタキセル、シクロホスファミド（ｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈｏｍｉｄｅ）、アドリアマイシン、アルトレタミン（ａｌｔｒｅｔａｍｉｎｅ）、メトトレキサート、およびフルオロウラシルが挙げられる。いくつかの実施形態において、化学治療剤は、白金を含む。白金を含む化学治療剤の例は、シスプラチン、カルボプラチンおよびオキシプラチンである。薬学的組成物は、癌細胞を殺すのに有効な、またはそうでなければ有害な影響を与える、１つ以上の化学治療剤の用量を提供するためにブレンドされる。薬学的組成物はまた、化学治療剤の少なくとも１つの所望されない効果を改善するために有効な１つ以上の化学保護剤の用量を提供するためにブレンドされる。前記化学保護剤の各々の望ましい１日の用量の例は、表１に示される。シスプラチンの１日の用量の例は、週に一回、５０〜２００ｍｇ／ｍ２／投薬量で、４〜６週の化学療法と同時の投与である。本発明の薬学的組成物は、受容者にある投薬量の１つ以上の化学治療剤とある投薬量の１つ以上の化学保護剤とを同時に提供するという利点を有する。
【００４１】
本発明の化学保護剤組成物、薬学的組成物、および方法は、任意の化学治療剤を使用した化学療法の任意の有害な効果を改善するために使用され得る。本発明に従って使用される場合、本発明のいくつかの化学保護剤組成物、および薬学的組成物は、化学療法の有害な効果の大部分またはすべてを改善する。一例として、本発明の組成物および方法は、任意の以下の化学治療剤の、１つの、いくつかの、または全ての有害な効果を改善するために使用され得る：シスプラチン、カルボプラチン、オキシプラチン、ビンブラスチン、ドキソルビシン、ブレオマイシン、パクリタキセル、シクロホスファミド（ｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈｏｍｉｄｅ）、アドリアマイシン、アルトレタミン、メトトレキサート、およびフルオロウラシル。前記の化学治療剤の主な有害な効果は：腎毒性、神経毒性、聴器毒性、骨髄抑制、脱毛症、体重減少、嘔吐、悪心および免疫抑制である。特定の化学治療剤の１つ以上の有害な効果の改善に対する本発明の最も有効な化学保護剤組成物は、当業者による慣用的な実験により容易に決定され得る。
【００４２】
以下の実施例は、本発明の実施を企図する、現在最良の形態を単に説明するが、本実験に限定して解釈されるべきではない。本明細書中の全ての引用文献は、参考として特に援用される。
【実施例】
【００４３】
（実施例１）
この実施例は、Ｎ−アセチルシステイン、Ｅｂｓｅｌｅｎおよびアロプリノール（単独で、または組み合わせた）が、ＭＴＳ細胞生存可能性アッセイを使用して測定された場合、シスプラチンの能力を阻害せず、培養ＮｕＴｕ−１９卵巣癌腫瘍細胞を殺すことを示す。
【００４４】
ＮｕＴｕ−１９細胞を、９６ウェル培養皿において１ウェルに対して３，０００細胞の密度でプレーティングし、そして５％二酸化炭素存在下３７℃で、２４時間インキュベートした。Ｎ−アセチルシステイン、Ｅｂｓｅｌｅｎまたはアロプリノールを１時間、または４時間ＮｕＴｕ−１９細胞と共にインキュベートし、次にシスプラチンをさらに５％二酸化炭素存在下３７℃で、２４時間インキュベートした培養物に添加した。Ｎｕｔｕ−１９細胞を次に、培地でリンスし、そしてシスプラチン存在下、さらに２４時間インキュベートした。
【００４５】
ＮｕＴｕ−１９細胞を次に、リン酸緩衝化生理食塩水（ＰＢＳ）で二回リンスし、そして生存している細胞の数を測定するためにＭＴＳアッセイを実施した。ＭＴＳは、（３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−５−（３−カルボキシメトキシフェニル）−２−（４−スルホフェニル）−２Ｈ−テトラゾリウムの略語である。ＭＴＳアッセイは、組織培養培地中に可溶性であるホルマザン産物に対するＭＴＳの生理学的異化に基づいて、生存可能な細胞の数を測定するための、比色定量の方法である。４９０ｎｍでのホルマザン産物の吸光度を、プレートリーダーを使用して、９６ウェルプレートから直接測定し得る。４９０ｎｍでの増加した吸光度は、ウェル内の増加したホルマザン産物に関連する。これは、代表的に、ウェル内に存在する、より生存可能な細胞に起因する。
【００４６】
図１は、培養培地中のシスプラチンの濃度に対する生存培養ＮｕＴｕ−１９卵巣癌細胞のパーセンテージのプロットを示す。図１に示すデータは、シスプラチンの存在下で２４時間インキュベーションした後、培養ＮｕＴｕ−１９卵巣癌細胞が殺傷されたことを示す。
【００４７】
図２は、培養培地中のＮ−アセチルシステインの濃度に対する生存培養ＮｕＴｕ−１９卵巣癌細胞のパーセンテージのプロットを示す。Ｎ−アセチルシステイン存在下であるがシスプラチン非存在下で培養されたＮｕＴｕ−１９細胞の生存能力は、上のグラフで示される。Ｎ−アセチルシステインおよびシスプラチン両方の存在下（４３μＭの濃度）で培養されたＮｕＴｕ−１９細胞の生存能力は、下のグラフで示される。図２に示したデータは、Ｎ−アセチルシステインが、シスプラチンの能力を阻害せず、培地中でＮｕＴｕ−１９卵巣癌腫瘍細胞を殺傷することを示している。
【００４８】
図３は、培養培地中のＥｂｓｅｌｅｎの濃度に対する生存培養ＮｕＴｕ−１９卵巣癌細胞のパーセンテージのプロットを示す。Ｅｂｓｅｌｅｎ存在下であるがシスプラチン非存在下で培養されたＮｕＴｕ−１９細胞の生存能力は、上のグラフで示される。Ｅｂｓｅｌｅｎおよびシスプラチン両方の存在下（４３μＭの濃度）で培養されたＮｕＴｕ−１９細胞の生存能力は、下のグラフで示される。図３に示したデータは、Ｅｂｓｅｌｅｎが、シスプラチンの能力を阻害せず、培地内でＮｕＴｕ−１９卵巣癌腫瘍細胞を殺傷することを示している。
【００４９】
図４は、培養培地中のアロプリノールの濃度に対する生存培養ＮｕＴｕ−１９卵巣癌細胞のパーセンテージのプロットを示す。アロプリノール存在下であるがシスプラチン非存在下で培養されたＮｕＴｕ−１９細胞の生存能力は、上のグラフで示される。アロプリノールおよびシスプラチン両方の存在下（４３μＭの濃度）で培養されたＮｕＴｕ−１９細胞の生存能力は、下のグラフで示される。図４に示したデータは、アロプリノールが、シスプラチンの能力を阻害せず、培地中でＮｕＴｕ−１９卵巣癌腫瘍細胞を殺傷することを示している。
図５は、培養培地中のＮ−アセチルシステインの濃度に対する生存培養ＮｕＴｕ−１９卵巣癌細胞のパーセンテージのプロットを示す。Ｎ−アセチルシステインおよびＥｂｓｅｌｅｎ存在下（４７μＭの濃度）であるがシスプラチン非存在下で培養されたＮｕＴｕ−１９細胞の生存能力は、上のグラフで示される。Ｎ−アセチルシステイン、Ｅｂｓｅｌｅｎ（４７μＭの濃度）およびシスプラチン（４３μＭの濃度）存在下で培養されたＮｕＴｕ−１９細胞の生存能力は、下のグラフで示される。図５に示したデータは、Ｎ−アセチルシステインおよびＥｂｓｅｌｅｎの組み合わせが、シスプラチンの能力を阻害せず、培地中でＮｕＴｕ−１９卵巣癌腫瘍細胞を殺傷することを示している。
【００５０】
図６は、培養培地中のアロプリノールの濃度に対する生存培養ＮｕＴｕ−１９卵巣癌細胞のパーセンテージのプロットを示す。アロプリノールおよびＥｂｓｅｌｅｎ存在下（４７μＭの濃度）であるがシスプラチン非存在下で培養されたＮｕＴｕ−１９細胞の生存能力は、上のグラフで示される。アロプリノール、Ｅｂｓｅｌｅｎ（４７μＭの濃度）およびシスプラチン（４３μＭの濃度）存在下で培養されたＮｕＴｕ−１９細胞の生存能力は、下のグラフで示される。図６に示したデータは、アロプリノールおよびＥｂｓｅｌｅｎの組み合わせが、シスプラチンの能力を阻害せず、培地中でＮｕＴｕ−１９卵巣癌腫瘍細胞を殺傷することを示している。
（実施例２）
この実施例は、Ｅｂｓｅｌｅｎが、インビトロにおいてシスプラチンによる損傷から内耳有毛細胞を保護することを示す。
【００５１】
１つの処理に対して３つの蝸牛（Ｐ３〜４子マウスから得られた）を、Ｂ２７サプリメントを加えたＮｅｕｒｏＢａｓａｌ  Ａ培地を含む０．４マイクロメーターＭｉｌｌｉＣｅｌｌ−ＣＭ挿入物において培養した。培養の２４時間後、培地にＥｂｓｅｌｅｎを添加し、１０分間インキュベートし、そして次いで最終濃度４３μＭでシスプラチンを培地に添加した。最初のコントロール処理は、４３μＭシスプラチンを含んだ。２番目のコントロール処理は、シスプラチンの添加なしに、４７μＭ  Ｅｂｓｅｌｅｎを含んだ。全ての培養を、５％二酸化炭素中３７℃で、２４時間インキュベートした。
【００５２】
次いで外植片を回収し、固定し、そしてカルビンジン（有毛細胞を検出する）およびＤＡＰＩ（４‘６−ジアミジノ（Ｄｉａｍｉｎｄｉｎｏ）−２−フェニルインドール；核ＤＮＡの検出のため）で染色した。図７は、インビトロで、４３μＭシスプラチン（１０）、または４３μＭシスプラチンおよび４７μＭ  Ｅｂｓｅｌｅｎ（１２）、または４７μＭ  Ｅｂｓｅｌｅｎ（１４）存在下で培養された、マウス蝸牛中の内耳有毛細胞の数を示す。図７に示したデータは、Ｅｂｓｅｌｅｎが、インビトロにおいてシスプラチンによる損傷から内耳有毛細胞を保護することを示す。
【００５３】
この実施例において記述された実験で使用されたシスプラチンおよびＥｂｓｅｌｅｎの濃度は、実施例１において記述した細胞培養アッセイで使用したシスプラチンおよびＥｂｓｅｌｅｎの同じ濃度である。従って、実施例１および実施例２で一緒に報告された実験は、これらの実験で使用した濃度において、Ｅｂｓｅｌｅｎはシスプラチンの毒性効果からＮｕＴｕ−１９卵巣癌腫瘍細胞を保護しないが、シスプラチンの毒性効果から内耳有毛細胞を保護することを示す。
【００５４】
（実施例３）
この実施例は、ＥｂｓｅｌｅｎおよびＥｂｓｅｌｅｎとアロプリノールとの組み合わせが、インビボにおいて、シスプラチンによる損傷からラットの内耳有毛細胞を保護することを示す。
【００５５】
シスプラチンおよび化学保護剤にさらす前および後に、ラットにおいて聴覚を評価するために、聴性誘発脳幹応答（Ａｕｄｉｔｏｒｙ  Ｅｖｏｋｅｄ  Ｂｒａｉｎｓｔｅｍ  Ｒｅｓｐｏｎｓｅ）（ＡＢＲ）を使用した。１６ｍｇ／ｋｇ体重の投薬量で、シスプラチンの腹腔内投与の１時間前に、ＥｂｓｅｌｅｎまたはＤＭＳＯ（コントロールビヒクル）を、ラットの腹腔内に導入した。シスプラチンの送達７２時間後、ＡＢＲデータを集め、動物を屠殺し、蝸牛を回収し、解剖し、ＦＩＴＣ−ファロイジン（有毛細胞においてＦ−アクチンを検出するため）で染色し、そしてＤＡＰＩ（核ＤＮＡを検出するため）で染色した。
【００５６】
図８は、Ｅｂｓｅｌｅｎ（１６ｍｇ／ｋｇ体重の投薬量）存在下（２２）、または生理食塩水およびＤＭＳＯ（コントロール）存在下（２０）で、シスプラチン（１６ｍｇ／ｋｇ体重の投薬量）で処理したラットの８ｋＨｚ、１６ｋＨｚ、２４ｋＨｚおよび３２ｋＨｚでの聴力における永久閾値変更（ＰＴＳ）を示す。１処理につき１０個の蝸牛が試験された。ＰＴＳは、聴力損失の指標である。図８に示されたデータは、Ｅｂｓｅｌｅｎなしでシスプラチンで処理したラットと比較して、Ｅｂｓｅｌｅｎおよびシスプラチンの組み合わせで処理したラットにおいては、ＰＴＳがより少ない（すなわち、より少ない聴力損失がある）ことを示す。
【００５７】
図９は、アロプリノール（１６ｍｇ／ｋｇ体重の投薬量）存在下（３０）、またはアロプリノール（８ｍｇ／ｋｇ体重の投薬量）とＥｂｓｅｌｅｎ（８ｍｇ／ｋｇ体重の投薬量）との組み合わせ存在下（３２）で、シスプラチン（１６ｍｇ／ｋｇ体重の投薬量）で処理したラットの、８ｋＨｚ、１６ｋＨｚ、２４ｋＨｚおよび３２ｋＨｚでの聴力における永久閾値変更（ＰＴＳ）を示す。１処理につき４個の蝸牛が試験された。図９に示されたデータは、Ｅｂｓｅｌｅｎなしでアロプリノールで処理したラットと比較して、Ｅｂｓｅｌｅｎとアロプリノールとの組み合わせで処理したラットにおいては、ＰＴＳがより少ないことを示す。
【００５８】
加えて、この実施例中に記述したように、シスプラチンとＥｂｓｅｌｅｎとの組み合わせで処理したラットから、蝸牛を摘出した。シスプラチンならびに生理食塩水およびＤＭＳＯ（コントロール）で処理したラットからもまた、蝸牛を摘出した。摘出した蝸牛における外聴性有毛細胞の数を、蝸牛間０．１ｍｍの間隔で数えた。コントロールラットおよび処理ラットからの代表的な結果は、それぞれ図１０Ａおよび図１０Ｂに示される。図１０Ａおよび図１０Ｂに示されたデータは、シスプラチンとＥｂｓｅｌｅｎとの組み合わせで処理したラット由来の蝸牛における外有毛細胞損失のパーセンテージは、シスプラチンで処理されるが、Ｅｂｓｅｌｅｎを処理されないラット由来の蝸牛における外有毛細胞損失のパーセンテージよりも少ないことを示す。
【００５９】
本発明の好ましい実施形態が図示および記載されるが、本発明の精神および範囲から逸脱することなく本明細書中において様々な変更がなされ得ることが理解される。
【図面の簡単な説明】
【００６０】
本発明の前記の局面および多くの伴う利点は、添付の図面と共に理解される場合、以下の詳細な説明を参考にすることにより良好に理解されると同様に、より容易に理解される。
【図１】図１は、培養培地中のシスプラチンの濃度に対して、生存する培養ＮｕＴｕ−１９卵巣癌細胞のパーセンテージのプロットを示す。シスプラチン存在下で、２４時間細胞を培養した後、生存する細胞の数が測定された。
【図２】図２は、培養培地中のＮ−アセチル−システイン（ＮＡＣ）の濃度（μＭを単位にして）に対して、生存する培養ＮｕＴｕ−１９卵巣癌細胞のパーセンテージのプロットを示す。Ｎ−アセチルシステイン存在下であるがシスプラチン非存在下で培養されたＮｕＴｕ−１９細胞の生存は、上のグラフにより示される。Ｎ−アセチルシステインおよびシスプラチン両方の存在下（４３μＭの濃度）で培養されたＮｕＴｕ−１９細胞の生存能力は、下のグラフにより示される。
【図３】図３は、培養培地中のＥｂｓｅｌｅｎ濃度に対して、生存する培養ＮｕＴｕ−１９卵巣癌細胞のパーセンテージのプロットを示す。Ｅｂｓｅｌｅｎ存在下であるがシスプラチン非存在下で培養されたＮｕＴｕ−１９細胞の生存は、上のグラフにより示される。Ｅｂｓｅｌｅｎおよびシスプラチン両方の存在下（４３μＭの濃度）で培養されたＮｕＴｕ−１９細胞の生存能力は、下のグラフにより示される。
【図４】図４は、培養培地中のアロプリノール濃度に対して、生存する培養ＮｕＴｕ−１９卵巣癌細胞のパーセンテージのプロットを示す。アロプリノール存在下であるがシスプラチン非存在下で培養されたＮｕＴｕ−１９細胞の生存能力は、上のグラフにより示される。アロプリノールおよびシスプラチン両方の存在下（４３μＭの濃度）で培養されたＮｕＴｕ−１９細胞の生存能力は、下のグラフにより示される。
【図５】図５は、培養培地中のＮ−アセチルシステイン濃度に対して、生存する培養ＮｕＴｕ−１９卵巣癌細胞のパーセンテージのプロットを示す。Ｎ−アセチルシステインおよびＥｂｓｅｌｅｎ存在下（４７μＭの濃度）であるがシステイン非存在下で培養されたＮｕＴｕ−１９細胞の生存能力は、上のグラフにより示される。Ｎ−アセチルシステイン、Ｅｂｓｅｌｅｎ（４７μＭの濃度）およびシスプラチン（４３μＭの濃度）の存在下で培養されたＮｕＴｕ−１９細胞の生存能力は、下のグラフにより示される。
【図６】図６は、培養培地中のアロプリノール濃度に対して、生存する培養ＮｕＴｕ−１９卵巣癌細胞のパーセンテージのプロットを示す。アロプリノールおよびＥｂｓｅｌｅｎ存在下（４７μＭの濃度）であるがシステイン非存在下で培養されたＮｕＴｕ−１９細胞の生存能力は、上のグラフにより示される。アロプリノールおよびＥｂｓｅｌｅｎ（４７μＭの濃度）およびシスプラチン（４３μＭの濃度）の存在下で培養されたＮｕＴｕ−１９細胞の生存能力は、下のグラフにより示される。
【図７】図７は、インビトロにおいて、４３μＭシスプラチン（１０）、または４３μＭシスプラチン＋４７μＭ  Ｅｂｓｅｌｅｎ（１２）、または４７μＭ  Ｅｂｓｅｌｅｎ（１４）存在下で培養されたラット蝸牛の内耳有毛細胞の数を示すグラフを示す。
【図８】図８は、Ｅｂｓｅｌｅｎ（１６ｍｇ／ｋｇ体重の投薬量）存在下（２２）で、生理食塩水およびＤＭＳＯ（ビヒクルコントロール）（２０）、またはシスプラチン（１６ｍｇ／ｋｇ体重の投薬量）で処理したラットの、８ｋＨｚ、１６ｋＨｚ、２４ｋＨｚおよび３２ｋＨｚでの聴力における永久閾値変更（ＰＴＳ）を示す。１処理につき１０個の蝸牛が試験された。
【図９】図９は、アロプリノール（１６ｍｇ／ｋｇ体重の投薬量）存在下（３０）、またはアロプリノール（８ｍｇ／ｋｇ体重の投薬量）とＥｂｓｅｌｅｎ（８ｍｇ／ｋｇ体重の投薬量）との組み合わせの存在下（３２）で、シスプラチン（１６ｍｇ／ｋｇ体重の投薬量）で処理したラットの、８ｋＨｚ、１６ｋＨｚ、２４ｋＨｚおよび３２ｋＨｚでの聴力における永久閾値変更（ＰＴＳ）を示す。１処理につき４個の蝸牛が試験された。
【図１０Ａ】図１０Ａは、シスプラチン、生理食塩水およびＤＭＳＯの組み合わせで処理されたラットの左蝸牛における、蝸牛の頂点からの距離に対してプロットされた蝸牛外有毛細胞の損失のパーセンテージを示す。
【図１０Ｂ】図１０Ｂは、シスプラチンおよびＥｂｓｅｌｅｎとの組み合わせで処理されたラットの左蝸牛における、蝸牛の頂点からの距離に対してプロットされた蝸牛外有毛細胞の損失のパーセンテージを示す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
2005510537.tif 000012
【図１０Ａ】
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【図１０Ｂ】
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【国際調査報告】
2005510537.tif 000015
2005510537.tif 000016
2005510537.tif 000017