【手続補正書】
【提出日】令和2年8月27日(2020.8.27)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
２つの抗原結合部分を含む二パラトープ抗体または二パラトープ抗体断片であって、第１の抗原結合部分がプロペラドメイン１に結合し、第２の抗原結合部分が同じＬＲＰ６受容体のプロペラドメイン３に結合し、前記二パラトープ抗体または二パラトープ抗体断片がプロペラ１とプロペラ３によって媒介されるＬＲＰ６シグナル伝達の両方を阻害し、かつ、Ｗｎｔ１およびＷｎｔ３シグナリングを増強しない、二パラトープ抗体または二パラトープ抗体断片。
【請求項２】
前記第１および第２の抗原結合部分が、ＩｇＧ抗体、ＦａｂもしくはＦａｂ断片、Ｆ（ａｂ）２断片、Ｆｖフラグメント、ｄＡｂフラグメント、一本鎖抗体（ｓｃＦｖ）もしくはｓｃＦｖ断片、抗体可変領域、シングルドメイン抗体またはナノ抗体を独立して含む、請求項１に記載の二パラトープ抗体または二パラトープ抗体断片。
【請求項３】
前記第１の抗原結合部分がＩｇＧであり、前記第２の抗原結合部分がｓｃＦｖであるか、または、前記第１の抗原結合部分がｓｃＦｖであり、前記第２の抗原結合部分がＩｇＧである、請求項１に記載の二パラトープ抗体または二パラトープ抗体断片。
【請求項４】
前記ｓｃＦｖが、前記ＩｇＧのＦｃのＣ末端またはＮ末端に連結される、請求項３に記載の二パラトープ抗体または二パラトープ抗体断片。
【請求項５】
前記ｓｃＦｖが、グリシンおよびセリン残基からなるかあるいはグリシンおよびセリン残基を含むペプチドリンカーを介して前記ＩｇＧに連結される、請求項４に記載の二パラトープ抗体または二パラトープ抗体断片。
【請求項６】
前記第１の抗原結合部分が第１の抗体可変領域であり、前記第２の抗原結合部分が第２の抗体可変領域である、請求項１に記載の二パラトープ抗体または二パラトープ抗体断片。
【請求項７】
前記第１および／または第２の抗原結合部分が単一の可変ドメインを含む、請求項１に記載の二パラトープ抗体または二パラトープ抗体断片。
【請求項８】
前記第１および／または第２の抗原結合部分がそれぞれ単一の可変ドメインまたはＶＨＨを含む、請求項１に記載の二パラトープ抗体または二パラトープ抗体断片。
【請求項９】
前記第１および／または第２の抗原結合部分がＶＨＨドメインである、請求項１に記載の二パラトープ抗体または二パラトープ抗体断片。
【請求項１０】
前記第１および／または第２の抗原結合部分がドメイン抗体またはナノ抗体である、請求項１に記載の二パラトープ抗体または二パラトープ抗体断片。
【請求項１１】
前記第１および／または第２の抗原結合部分がラクダナノ抗体である、請求項９に記載の二パラトープ抗体または二パラトープ抗体断片。
【請求項１２】
前記第１の抗原結合部分と前記第２の抗原結合部分がリンカーによって分離されている、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の二パラトープ抗体または二パラトープ抗体断片。
【請求項１３】
前記リンカーがＧｌｙおよびＳｅｒを含み、前記リンカーが（Ｇｌｙ４Ｓｅｒ）４または（Ｇｌｙ４Ｓｅｒ）３を含む、請求項１２に記載の二パラトープ抗体または二パラトープ抗体断片。
【請求項１４】
二価もしくは多価の抗体またはその断片である、請求項１に記載の二パラトープ抗体または二パラトープ抗体断片。
【請求項１５】
前記第１および／または第２の抗原結合部分が、ｒＰＥＧ、アルブミン、アルブミンのドメイン、アルブミン結合タンパク質またはＦｃドメインと遺伝的に融合している、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の二パラトープ抗体または二パラトープ抗体断片。
【請求項１６】
Ｆｃドメインをさらに含む、請求項１または３〜１４のいずれか一項に記載の二パラトープ抗体または二パラトープ抗体断片。
【請求項１７】
血清タンパク質と結合する部分をさらに含む、請求項１または３〜１４のいずれか一項に記載の二パラトープ抗体または二パラトープ抗体断片。
【請求項１８】
前記血清タンパク質が、アルブミン、ＩｇＧ、ＦｃＲｎまたはトランスフェリンである、請求項１７に記載の二パラトープ抗体または二パラトープ抗体断片。
【請求項１９】
前記血清タンパク質がアルブミンである、請求項１７に記載の二パラトープ抗体または二パラトープ抗体断片。
【請求項２０】
ＬＲＰ６標的受容体の２つの異なる結合部分に対する少なくとも２つの抗原結合部分を含む二パラトープ抗体またはその二パラトープ抗体断片であって、第１の抗原結合部分が前記ＬＲＰ６標的受容体のβ−プロペラ１ドメインに結合し、第２の抗原結合部分が同じＬＲＰ６標的受容体のβ−プロペラ３ドメインに結合し、前記第１と第２の抗原結合部分が、各々シングルドメイン抗体、単一の可変ドメイン、ＶＨＨまたはラクダ抗体を含み、かつ、前記二パラトープ抗体またはその二パラトープ抗体断片が、
（i）β−プロペラ１によって媒介されるＷｎｔ１シグナリングおよびβ−プロペラ３によって媒介されるＷｎｔ３ａシグナリングを阻害し、かつ、Ｗｎｔシグナルの有意な増強を示さず、さらに
（ii）アルブミンに結合する部分さらに含み、前記第１および第２の抗原結合部分の両方が、前記第１および第２の抗原結合部分との両方が前記LRP6標的受容体に結合することを許容する空間分布によって前記部分に連結している、
二パラトープ抗体または二パラトープ抗体断片。
【請求項２１】
ＬＲＰ６標的受容体の２つの異なる結合部分に対する少なくとも２つの抗原結合部分を含む二パラトープ抗体またはその二パラトープ抗体断片であって、第１の抗原結合部分が前記ＬＲＰ６標的受容体のβ−プロペラ１ドメインに結合し、第２の抗原結合部分が同じＬＲＰ６標的受容体のβ−プロペラ３ドメインに結合し、前記第１と第２の抗原結合部分が、各々シングルドメイン抗体、単一の可変ドメイン、ＶＨＨまたはラクダ抗体を含み、かつ、前記二パラトープ抗体またはその二パラトープ抗体断片が、
（i）β−プロペラ１によって媒介されるＷｎｔ１シグナリングおよびβ−プロペラ３によって媒介されるＷｎｔ３ａシグナリングを阻害し、かつ、Ｗｎｔシグナルの有意な増強を示さず、さらに
（ii）Ｆｃドメインをさらに含み、前記第１および第２の抗原結合部分の両方が、前記第１および第２の抗原結合部分との両方が、前記LRP6標的受容体に結合することを許容する空間分布によって前記Ｆｃドメインに連結している、
二パラトープ抗体またはその二パラトープ抗体断片。
【請求項２２】
アルブミンに結合する部分が、シングルドメイン抗体、単一の可変ドメイン、ＶＨＨまたはラクダ抗体を含む、請求項２０に記載の二パラトープ抗体または二パラトープ抗体断片。
【請求項２３】
下記の一方または両方：
（ｉ）前記第１の抗原結合部分が、ＬＲＰ６のβ−プロペラ１ドメインへの結合に関してＬＲＰ６のβ−プロペラ１へ結合する参照抗体と競合し、前記参照抗体がＭＯＲ０８１６８、ＭＯＲ０８５４５もしくはＭＯＲ０６７０６から選択される、または
（ｉｉ）前記第２の抗原結合部分が、ＬＲＰ６のβ−プロペラ３ドメインへの結合に関してＬＲＰ６のβ−プロペラ３へ結合する参照抗体と競合し、前記参照抗体がＭＯＲ０６４７５、ＭＯＲ０８１９３もしくはＭＯＲ０８４７３から選択される
である、請求項１〜２２のいずれか一項に記載の二パラトープ抗体または二パラトープ抗体断片。
【請求項２４】
下記の一方または両方：
（ｉ）前記第１の抗原結合部分が、ＬＲＰ６のβ−プロペラ１ドメインへの結合に関して参照抗体と競合し、前記参照抗体が、配列番号１の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号２の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号４の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号５の軽鎖可変領域ＣＤＲ２および配列番号６の軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む、または
（ｉｉ）前記第２の抗原結合部分が、ＬＲＰ６のβ−プロペラ３ドメインへの結合に関して参照抗体と競合し、前記参照抗体が、配列番号６９の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号７０の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号７１の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号７２の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号７３の軽鎖可変領域ＣＤＲ２および配列番号７４の軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む
である、請求項１〜２３のいずれか一項に記載の二パラトープ抗体または二パラトープ抗体断片。
【請求項２５】
下記の一方または両方：
（ｉ）前記第１の抗原結合部分が、ＬＲＰ６のβ−プロペラ１ドメインへの結合に関して参照抗体と競合し、前記参照抗体が、配列番号１４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域配列と、配列番号１３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域配列を含む、または
（ｉｉ）前記第２の抗原結合部分が、ＬＲＰ６のβ−プロペラ３ドメインへの結合に関して参照抗体と競合し、前記参照抗体が、配列番号８２または８９のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域配列と、配列番号８１または９０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域配列を含む
である、請求項１〜２４のいずれか一項に記載の二パラトープ抗体または二パラトープ抗体断片。
【請求項２６】
前記第１もしくは第２の抗原結合部分、または前記第１および第２の抗原結合部分の両方が、前記参照抗体と同一または同様のエピトープに結合する、請求項２３〜２５のいずれか一項に記載の二パラトープ抗体または二パラトープ抗体断片。
【請求項２７】
ＬＲＰ６のβ−プロペラ３に結合する前記参照抗体が、Ｒ６３８、Ｗ８５０、Ｓ８５１、Ｒ８５２およびＲ８５３残基を含むエピトープに結合する、請求項２６に記載の二パラトープ抗体または二パラトープ抗体断片。
【請求項２８】
前記第１の抗原結合部分が、配列番号１の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号２の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号３の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号４の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号５の軽鎖可変領域ＣＤＲ２および配列番号６の軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む、および／または、前記第２の抗原結合部分が、配列番号６９の重鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号７０の重鎖可変領域ＣＤＲ２、配列番号７１の重鎖可変領域ＣＤＲ３、配列番号７２の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、配列番号７３の軽鎖可変領域ＣＤＲ２および配列番号７４の軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む、請求項１〜２２のいずれか一項に記載の二パラトープ抗体または二パラトープ抗体断片。
【請求項２９】
前記第１の抗原結合部分が、配列番号１４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域配列と、配列番号１３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域配列を含む、および／または、前記第２の抗原結合部分が、配列番号８２または８９のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域配列と、配列番号８１または９０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域配列を含む、請求項１〜２２のいずれか一項に記載の二パラトープ抗体または二パラトープ抗体断片。
【請求項３０】
前記第１の抗原結合部分が、配列番号１５０、１５２、１５４もしくは１５６のアミノ酸配列、または配列番号１５０、１５２、１５４もしくは１５６のアミノ酸配列と少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含む、および／または、前記第２の抗原結合部分が、配列番号１４４、１４２、１４６もしくは１４８のアミノ酸配列、または配列番号１４４、１４２、１４６もしくは１４８のアミノ酸配列と少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含む、請求項１〜２２のいずれか一項に記載の二パラトープ抗体または二パラトープ抗体断片。
【請求項３１】
Ｆｃドメインまたはアルブミンと結合する部分をさらに含む、請求項２３〜３０のいずれか一項に記載の二パラトープ抗体または二パラトープ抗体断片。
【請求項３２】
ＬＲＰ６を発現する癌を処置する方法に用いるための医薬組成物であって、請求項１〜３１のいずれか一項に記載の二パラトープ抗体または二パラトープ抗体断片を含む、医薬組成物。
【請求項３３】
前記ＬＲＰ６を発現する癌が、乳癌、肺癌、多発性骨髄腫、卵巣癌、肝臓癌、膀胱癌、胃癌、前立腺癌、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、骨肉腫、扁平上皮癌および黒色腫からなる群から選択される、請求項３２に記載の医薬組成物。
【請求項３４】
前記ＬＲＰ６を発現する癌が腸上皮の恒常性の喪失の結果によるものであるか、または前記ＬＲＰ６を発現する癌が結腸直腸癌である、請求項３２または３３に記載の医薬組成物。
【請求項３５】
前記二パラトープ抗体または二パラトープ抗体断片が静脈注入によって投与される、請求項３２〜３４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項３６】
前記二パラトープ抗体または二パラトープ抗体断片が他の療法と組み合わせて投与される、請求項３２〜３５のいずれか一項に記載の医薬組成物。