(57)【要約】本発明は、ヒドロキシフェニル誘導体、その製造方法及びそれを含む薬学的組成物に関するものであり、より詳細には、本発明の化合物は、Tリンパ球細胞キナーゼのSH2ドメインによるTリンパ球の活性を特異的に阻害して、臓器移植拒絶症状、自己免疫症状、炎症性疾患等の治療、予防及び/または診断に有用に使用できる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記の式1で示される誘導体及びその薬学的に許容される塩：
式1
2005522523.tif 000017
式中、R1、R2、R3、R4及びR5は、互いにそれぞれ独立して、この中で少なくとも一つがヒドロキシ基であり、残りは水素；ハロゲン原子；C1〜C3のアルコシキ基；アルデヒド基；カルボキシル基；アミノ基；トリフルオロメチル基；及びニトロ基からなる群より選択され；
R6、R7、R8、R9及びR10は、互いにそれぞれ独立して、この中で少なくとも一つがヒドロキシ基であり、残りは水素；ハロゲン原子；C1〜C3のアルコシキ基；アルデヒド基；カルボキシル基；アミノ基；トリフルオロメチル基；及びニトロ基からなる群より選択され；
X1は、O；S；-NH；-N(CH3)-；-N(CH2CH3)-；または-NHNH-であり；
X2は、-CH2-；-C(=O)-；-C(=S)-；または-C(=O)-NH-であり；
X3は、
2005522523.tif 000018
；
2005522523.tif 000019
；及び-(CH2)m-からなる群より選択され；ここで、A1は、水素；C1〜C4の直鎖または側鎖状のアルキル基；チオール基；フェニル基；シアノ基；またはC1〜C3のアルコキシカルボニル基であり、A2は、水素；またはC1〜C4の直鎖または側鎖状のアルキル基であり、nは0、1または2であり、mは0、1または2である；
Y1は、水素；-CH2-；-C(=O)-；-C(=S)-；C1〜C4の直鎖または側鎖状のアルキル基またはアリル基で置換されたアミン；
2005522523.tif 000020
；及び
2005522523.tif 000021
からなる群より選択され；
Y2は、不在か；-NZ11Z12；-O-Z2；または-S-Z2であり；
前記Z11またはZ12は、互いにそれぞれ独立して、水素；選択的にt-ブトキシカルボニル基で置換されたアミン；C1〜C12の直鎖または側鎖状のアルキル基；アリル基；シクロアルキル基；またはヘテロアルキル基でもよく；
Z2は、水素；C1〜C12の直鎖または側鎖状のアルキル基；アリル基；シクロアルキル基；またはヘテロアルキル基であり；
Bは、水素またはアルキル基であり；
*は、不斉炭素を示す。
【請求項２】
Y1とY2が結合してC1〜C5の直鎖または側鎖状のアルコキシカルボニル基またはアミド基になる、請求項1記載の誘導体またはその塩。
【請求項３】
式1の誘導体が、
1) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸メチルエステル；
2) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸；
3) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸エチルエステル；
4) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸プロピルエステル；
5) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸イソプロピルエステル；
6) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸tert-ブチルエステル；
7) N-[カルバモイル-2-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-エチル]-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリルアミド；
8) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸メチルエステル；
9) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸；
10) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸エチルエステル；
11) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸プロピルエステル；
12) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸イソプロピルエステル；
13) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸tert-ブチルエステル；
14) N-[カルバモイル-2-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-エチル]-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリルアミド；
15) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオン酸メチルエステル；
16) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオン酸；
17) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオン酸エチルエステル；
18) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオン酸プロピルエステル；
19) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオン酸イソプロピルエステル；
20) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオン酸tert-ブチルエステル；
21) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオンアミド；
22) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオン酸メチルエステル；
23) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオン酸；
24) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオン酸エチルエステル；
25) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオン酸プロピルエステル；
26) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオン酸イソプロピルエステル；
27) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオン酸tert-ブチルエステル；
28) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオンアミド；
29) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-{[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイル]-メチル-アミノ}-プロピオン酸メチルエステル；
30) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-{[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイル]-メチル-アミノ}-プロピオン酸；
31) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-{[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイル]-メチル-アミノ}-プロピオン酸エチルエステル；
32) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-{[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイル]-メチル-アミノ}-プロピオン酸プロピルエステル；
33) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-{[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイル]-メチル-アミノ}-プロピオン酸イソプロピルエステル；
34) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-{[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイル]-メチル-アミノ}-プロピオン酸tert-ブチルエステル；
35) N-[1-カルバモイル-2-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-エチル]-(R)-3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-N-メチル-アクリルアミド；
36) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-{[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイル]-メチル-アミノ}-プロピオン酸メチルエステル；
37) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-{[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイル]-メチル-アミノ}-プロピオン酸；
38) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-{[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイル]-メチル-アミノ}-プロピオン酸エチルエステル；
39) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-{[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイル]-メチル-アミノ}-プロピオン酸プロピルエステル；
40) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-{[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイル]-メチル-アミノ}-プロピオン酸イソプロピルエステル；
41) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-{[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイル]-メチル-アミノ}-プロピオン酸tert-ブチルエステル；
42) N-[1-カルバモイル-2-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-エチル]-(S)-3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-N-メチル-アクリルアミド；
43) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-N-[2-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-エチル] -アクリルアミド；
44) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-N-[2-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-エチル]-N-メチル -アクリルアミド；
45) (R)-2-[トランス-3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-3-(4-ヒドロキシ-フェニル)-プロピオン酸メチルエステル；
46) (R)-2-[トランス-3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-3-(4-ヒドロキシ-フェニル)-プロピオン酸；
47) (R)-2-[トランス-3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-3-(4-ヒドロキシ-フェニル)-プロピオン酸メチルエステル；及び
48) (S)-2-[トランス-3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-3-(4-ヒドロキシ-フェニル)-プロピオン酸
49) (S)-2-[3-(3,4-ジヒドロキシ-ベンジル)-ウレイド]-3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-プロピオン酸メチルエステル；
50) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-2-[2-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アセチルアミノ]-プロピオン酸メチルエステル；
51) 2-(3,4-ジヒドロキシ-ベンゾイルアミノ)-3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-プロピオン酸メチルエステル；
52) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-2-[3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-プロピオニルアミノ]-プロピオン酸メチルエステル；
53) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-2-[3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アリルアミノ]-プロピオン酸メチルエステル；
54) (R)-3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリル酸2-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-1-メトキシカルボニルエチルエステル；
55) (R)-3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリル酸2-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-1-プロポキシカルボニルエチルエステル；
56) (R)-3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリル酸2-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-1-tert-ブトキシカルボニルエチルエステル；
57) (R)-3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリル酸2-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-1-カルバモイルエチルエステル；及び
58) (R)-3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリル酸2-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-1-tert-ブトキシカルボニルエチルエステルからなる群より選択される、請求項1記載の誘導体またはその塩。
【請求項４】
請求項1記載の誘導体またはその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する、Tリンパ球細胞キナーゼのsrc相同領域2ドメインの活性抑制用薬学的組成物。
【請求項５】
請求項1記載の誘導体またはその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する、免疫抑制用薬学的組成物。
【請求項６】
臓器または組織の移植拒絶反応、慢性移植拒絶反応、または移植片対宿主疾患(GVHD)の治療、診断、または予防を目的に使用される、請求項5記載の薬学的組成物。
【請求項７】
自己免疫疾患の治療、診断または予防を目的に使用される、請求項5記載の薬学的組成物。
【請求項８】
自己免疫疾患が、紅斑性狼瘡、全身性紅斑性狼瘡、リューマチ性関節炎、糖尿病、重症筋無力症、多発性硬化症、または乾癬を含む、請求項7記載の薬学的組成物。
【請求項９】
一つまたはそれ以上の免疫抑制剤をさらに含む、請求項5記載の薬学的組成物。
【請求項１０】
免疫抑制剤が、シクロスポリンA及びその類似体、FK506及びその類似体、コルチコステロイド、アザチオプリン、ミコフェノール酸、ラパマイシン、15-ジオキシスパガリン、ミゾリビン、レフルノミド、OKT3、IL-2受容体に対する抗体、ミソプロストール、メトトレキサート、シクロフォスファミド、抗リンパ球/胸線細胞血清、プレドニソン、及びメチルプレドニソンからなる群より選択される、請求項9記載の薬学的組成物。
【請求項１１】
式1の誘導体またその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する、抗炎症用薬学的組成物。
【請求項１２】
一つまたはそれ以上の一般的な抗炎症剤をさらに含む、請求項11記載の薬学的組成物。
【請求項１３】
抗炎症剤が、アスピリン、イブプロフェン、ナプロクセン、インドメタシン、ジクロフェナック、スリンダク、ピロキシカン、エトドラク、ケトプロフェン、メクロフェナメート、スプロフェン、及びトルメチンを含む非ステロイド抗炎症剤の群から選択される、請求項12記載の薬学的組成物。
【請求項１４】
式1の誘導体またはその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する、関節炎治療用薬学的組成物。
【請求項１５】
カップリング試薬及び塩基の存在下での式3のカルボキシル化合物と式2のアミン化合物との縮合反応による分子構造内アミド結合を含む請求項1記載の誘導体を製造する方法：
化学反応1
2005522523.tif 000022
式中、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、X1、X2、X3、Y1、Y2、B、及び*は請求項1で定義したものと同様である。
【請求項１６】
カップリング試薬が、ベンゾリアゾール-1-イル-オキシトリピロリジンホスホニウムヘキサフルオロホスファート及びブロモ-1-トリピロリジンホスホニウムヘキサフルオロホスファートからなる群より選択される、請求項15記載の方法。
【請求項１７】
塩基が、パラ-ジメチルアミノピリジン、トリエチルアミン及びジイソエチルアミンからなる群より選択される、請求項15記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、下記の式1で示される誘導体、その製造方法及びそれを含む薬学的組成物に関するものである。
式1
2005522523.tif 000002
(式中、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、X1、X2、X3、Y1、Y2、B及び*は、明細書内に記載したのと同様である。)
【背景技術】
【０００２】
免疫抑制剤は、臓器拒絶反応及び自己免疫疾患の治療に広く利用されている。免疫反応時には、Tリンパ球、Bリンパ球及び多形核細胞 (polymorphonuclear cell)等を含む白血球の数が急増する。大部分の免疫抑制剤は、この点に着眼して作られたものであり、細胞の代謝活動を阻害することにより免疫細胞の分裂及び活性化による免疫反応を抑制する。一般的に免疫抑制剤は、代謝抑制剤とサイトカイン(cytokine)遺伝子の発現を抑制するステロイド系統に分けられる(ユン・ヨンシク、大韓腎臓学会紙、1994年、第13巻付録8号、S66-S85； N. Perico及びG. Remuzzi. Drugs 1997年、第54(4)巻、 P.533-570 )。DNA及びRNA合成を抑制する免疫抑制剤には、アザチオプリン(azathioprine)、ミコフェノリン酸(mycophenolic acid)、ブレキナ(brequinar)、ジオキシスパガリン (deoxyspergualin)等があり、ステロイド系統としては、コルチコステロイド (corticosteroid)、プレドニソン(prednisone)等がある。しかし、このような免疫抑制剤は、特定細胞に対する選別力がないため免疫システム細胞の他にも異なる細胞の代謝活動も抑制する。したがって、旺盛な分裂が必要な血球の生成及び分化に損傷を与える等、心臓、肝臓、腎臓の機能悪化等の副作用を伴う。1980年代以後に発見されたシクロスポリンA(cyclosporin A)及びFK506、(rapamycin)等は、Tリンパ球受容体及びIL-2受容体を通じた活性化シグナル伝達を遮断することによりTリンパ球の機能を抑制する。シクロスポリンAとFK506は、Tリンパ球受容体シグナル伝達下流でカルシヌリン(calcineurin)の脱リン酸化機能を抑制することにより転写活性因子のNF-ATの核への移動とそれによるIL-2の発現を抑制する(C.T. Walshら、J. Biol. Chem., 1992年、第267巻、P.13115； S. L. Schreiber及びG.R. Crabtree. Immunol. Today. 1992年、第13巻、P.136)。ラパマイシンは、Tリンパ球受容体シグナル伝達によるIL-2発現は抑制しないけれど、IL-2受容体を通じたシグナル伝達に重要な役割をするmTorに結合してシグナル伝達を遮断することにより、Tリンパ球のG1でS期(S phase)への進入を抑制する。シクロスポリンA (cyclosporin A)及びFK506、ラパマイシン(rapamycin)等は、Tリンパ球の活性過程に必要なシグナル伝達を遮断するという点で代謝抑制剤よりは副作用がずっと少ないけれど、これらが作用する対象物質がやはり異なる細胞にもあり、長期服用時に各種心臓、腎臓、肝及び胃腸疾患等を避けられないものとして報告された。
【０００３】
現在、同種移植拒絶反応の調節に使用される免疫抑制剤としては、シクロスポリンA(cyclosporine A)、アザチオプリン(azathioprine)、プレドニソン(prednisone)またはメチルプレドニソン(methylprednison)のようなコルチコステロイド(corticosteroids)及びシクロフォスファミド(cyclophosphamide)等がある。この中で、シクロスポリンAは最も強力で多く使用される免疫抑制剤で、臓器移植外科医療分野に革新をもたらした。FK506、ラパマイシン (rapamycin)、ミコフェノーン酸(mycophenolic acid)、15-ジオキシスパガリン (15-deoxyspergualin)、ミゾリビン(mizoribine)、ミソプロストール(misoprostol)、OKT3、インターロイキン-2(interleukin-2、以下「IL-2」と略称する)受容体に対する抗体等、その他免疫抑制剤も臓器移植拒絶反応の治療または予防に使用されてきた(Briggs, Immunology letters Jul. 1991年、第29(1-2)巻、Ｐ.89-94； FASEB 1989年、第3巻、Ｐ.3411)。
【０００４】
自己免疫疾患の一種である関節炎治療剤は、上で言及した普遍的な免疫抑制剤の他にも、非ステロイド系(non-steroidal anti-inflammatroy drugs； NSAID)及び病変形関節炎治療剤(disease modifying anti-rhuematic drugs； DMARD)等を含む(J.P. Case, Am. J. Ther., 2001年、第8巻、P.123-143； P.163-179)。非ステロイド系関節炎治療剤は、炎症反応に重要な役割をするシクロオキシゲナーゼ(cyclooxygenase； COX)の機能を抑制することにより関節炎を鎮静する効果を有しているが、根本的な関節炎原因を防ぐことはできないため窮極的には関節炎治療剤と共に使用しなければならず、関節炎発病初期に関節炎の悪化を防ぎ痛症を緩和させるために使用される。窮極的な関節炎の治療は、DMARD系統の薬を使用することによりなされるが、細胞代謝抑制剤及びTNF-αの作用を抑制するための抗TNF-α抗体及び受容性TNF-α受容体等が含まれる。現在使用されている関節炎治療剤には、ステロイド、NSAID系統の イブプロフェン(ibuprofen)、ジクロフェナック(diclofenac)、カトプロフェン (ketoprofen)、ナプロゼン(naproxen)、またはNSAID系統にも炎症反応に重要な役割をするCOX-2に選択的に作用するセレコキシブ(celecoxib)、レフェコキシブ(refecoxib)、Tリンパ球シグナル伝達抑制剤のシクロスポリン、代謝抑制剤の メトトレキサート(methotrexate)、レフルノマイド(leflunomide)、アザチオプリン(azathioprine)、シクロフォスファミド(cyclophosphamide)及びTNF-α 作用阻害抗体のエタネルセプト(etanercept)、インフリキシマブ(infliximab)等が使用されている。
【０００５】
上述したように免疫抑制剤の窮極的な作用細胞は、白血球でその作用機序が代謝の抑制なのか信号情報伝達の抑制なのかによって対象物質及び細胞の範囲が変わるため、副作用の随伴可能性が異なる。したがって、免疫反応に中枢的な役割をするTリンパ球にだけ選択的にある物質を通じてTリンパ球の活性を抑制することができれば副作用を最小化できる。免疫細胞のT細胞の活性はT細胞受容体(T cell receptor、以下「TCR」と略称する)が仲介するシグナル伝達過程により開始されるが、Tリンパ球細胞キナーゼ (lymphocyte cell kinase、以下「lck」と略称する)は、T細胞に特異的なSrc系チロシンキナーゼとしてTCRが仲介するシグナル伝達とT細胞の活性化、増殖及び分化において核心的役割をする(Xu及びLittman, Cell 1993年、第74巻、P.633-643)。このようなlckの必須的役割が修行されるためには、lckのキナーゼ活性を有するドメイン (domain)だけではなく、lckに存在するSH2またはSH3ドメインを通じたシグナル伝達下流タンパク質との相互作用がとても重要である。これはストラウス(Straus)等によりLckのSH2ドメインを変形させホスホチロシン(phosphotyrosine)を認知できないようにした時、Tリンパ球の活性化過程が抑制されることを観察することにより証明された。即ち、Lck SH2ドメインの機能抑制時、Tリンパ球受容体(T cell receptor)刺激によるξ鎖及びZAP70のリン酸化及び細胞内Ca++の移動、IL-2プロモータ(promoter)の活性がすべて抑制された(Strausら, J. Biol. Chem., 1996年、第271巻、P.9976-9981； Lewisら, J. Immunol., 1997年、第159巻、P.2292-2300)。したがって、lckのSH2ドメインと特異的に結合するタンパク質との相互作用を阻害することにより免疫細胞であるT細胞活性を選択的に阻害でき、Lck SH2を通じたシグナル伝達抑制剤はTリンパ球の無節制な過多反応によって起きる各種疾患の治療に応用できる。
【発明の開示】
【０００６】
発明の開示
本発明の目的は、式1で示される化合物、これらの薬学的に許容される塩及びその製造方法を提供することである。
【０００７】
また、本発明のまた別の目的は、上記化合物を有効成分として含むTリンパ球細胞キナーゼ(lymphocyte cell kinase, lck)に存在するSH2ドメインの活性抑制用薬学的組成物を提供することである。
【０００８】
また、本発明のまた別の目的は、上記化合物を有効成分として含む免疫抑制用薬学的組成物を提供することである。
【０００９】
また、本発明のまた別の目的は、上記化合物を有効成分として含む抗炎症用薬学的組成物を提供することである。
【００１０】
また、本発明のまた別の目的は、上記化合物を有効成分として含む自己免疫疾患による関節炎治療用薬学的組成物を提供することである。
【００１１】
上記目的を達成するために、本発明は、下記の式1で示される化合物及び薬学的に許容されるその塩を提供する。
【００１２】
式1
2005522523.tif 000003
【００１３】
上記式1で、R1、R2、R3、R4及びR5は、互いにそれぞれ独立して、この中で少なくとも一つがヒドロキシ基であり、残りは水素；ハロゲン原子；C1〜C3のアルコシキ基；アルデヒド基；カルボキシル基；アミノ基；トリフルオロメチル基；及びニトロ基からなる群より選択され；
R6、R7、R8、R9及びR10は、互いにそれぞれ独立して、この中で少なくとも一つがヒドロキシ基であり、残りは水素；ハロゲン原子；C1〜C3のアルコシキ基；アルデヒド基；カルボキシル基；アミノ基；トリフルオロメチル基；及びニトロ基からなる群より選択され；
X1は、O；S；-NH；-N(CH3)-；-N(CH2CH3)-；または-NHNH-であり；
X2は、-CH2-；-C(=O)-；-C(=S)-；または-C(=O)-NH-であり；
X3は、
2005522523.tif 000004
；
2005522523.tif 000005
；及び-(CH2)m-からなる群より選択され；ここで、A1は、水素；C1〜C4の直鎖または側鎖状のアルキル基；チオール基；フェニル基；シアノ基；またはC1〜C3のアルコキシカルボニル基であり、A2は、水素；またはC1〜C4の直鎖または側鎖状のアルキル基であり、nは0、1または2であり、mは0、1または2である；
Y1は、水素；-CH2-；-C(=O)-；-C(=S)-；C1〜C4の直鎖または側鎖状のアルキル基またはアリル基で置換されたアミン；
2005522523.tif 000006
；及び
2005522523.tif 000007
からなる群より選択され；
Y2は、不在か；-NZ11Z12；-O-Z2；または-S-Z2であり；
前記Z11またはZ12は、互いにそれぞれ独立して、水素；選択的にt-ブトキシカルボニル基で置換されたアミン；C1〜C12の直鎖または側鎖状のアルキル基；アリル基；シクロアルキル基；またはヘテロアルキル基でもよく；
Z2は、水素；C1〜C12の直鎖または側鎖状のアルキル基；アリル基；シクロアルキル基；またはヘテロアルキル基であり；
Bは、水素またはアルキル基であり；
*は、不斉炭素を示す。
【００１４】
また、前記式1の化合物は、RまたはSの光学異性体であり、本発明は、これら光学異性体とラセミ混合物をすべて含む。
【００１５】
好ましくは、R2、R3、R8及びR9がヒドロキシである。
【００１６】
さらに好ましくは、R1、R4及びR5が水素であり；R2及びR3がヒドロキシであり；R6、R7及びR10が水素であり；R8及びR9がヒドロキシであり；X1がO；S；-NH；または-N(CH3)-であり；X2が-CH2-；-C(=O)-；または-C(=S)-であり；X3が-CH=CH-であり；Y1は不在かOであり；Y2はC1〜C4のアルコキシ；-NH2またはヒドロキシであり；BはOである。
【００１７】
最も好ましくは、式1の化合物には、
1) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸メチルエステル；
2) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸；
3) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸エチルエステル；
4) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸プロピルエステル；
5) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸イソプロピルエステル；
6) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸tert-ブチルエステル；
7) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオンアミド；
8) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸メチルエステル；
9) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸；
10) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸エチルエステル；
11) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸プロピルエステル；
12) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸イソプロピルエステル；
13) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸tert-ブチルエステル；
14) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオンアミド；
15) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオン酸メチルエステル；
16) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオン酸；
17) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオン酸エチルエステル；
18) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオン酸プロピルエステル；
19) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオン酸イソプロピルエステル；
20) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオン酸tert-ブチルエステル；
21) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオンアミド；
22) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオン酸メチルエステル；
23) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオン酸；
24) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオン酸エチルエステル；
25) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオン酸プロピルエステル；
26) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオン酸イソプロピルエステル；
27) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオン酸tert-ブチルエステル；
28) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオンアミド；
29) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-{[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイル]-メチル-アミノ}-プロピオン酸メチルエステル；
30) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-{[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイル]-メチル-アミノ}-プロピオン酸；
31) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-{[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイル]-メチル-アミノ}-プロピオン酸エチルエステル；
32) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-{[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイル]-メチル-アミノ}-プロピオン酸プロピルエステル；
33) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-{[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイル]-メチル-アミノ}-プロピオン酸イソプロピルエステル；
34) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-{[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイル]-メチル-アミノ}-プロピオン酸tert-ブチルエステル；
35) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイル]-メチル-アミノ]-プロピオンアミド；
36) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-{[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイル]-メチル-アミノ}-プロピオン酸メチルエステル；
37) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-{[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイル]-メチル-アミノ}-プロピオン酸；
38) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-{[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイル]-メチル-アミノ}-プロピオン酸エチルエステル；
39) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-{[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイル]-メチル-アミノ}-プロピオン酸プロピルエステル；
40) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-{[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイル]-メチル-アミノ}-プロピオン酸イソプロピルエステル；
41) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-{[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイル]-メチル-アミノ}-プロピオン酸tert-ブチルエステル；
42) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイル]-メチル-アミノ]-プロピオンアミド；
43) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-N-[2-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-エチル] -アクリルアミド；
44) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-N-[2-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-エチル]-N-メチル-アクリルアミド；
45) (R)-2-[トランス-3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-3-(4-ヒドロキシ-フェニル)-プロピオン酸メチルエステル；
46) (R)-2-[トランス-3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-3-(4-ヒドロキシ-フェニル)-プロピオン酸；
47) (S)-2-[トランス-3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-3-(4-ヒドロキシ-フェニル)-プロピオン酸メチルエステル；
48) (S)-2-[トランス-3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-3-(4-ヒドロキシ-フェニル)-プロピオン酸；
49) (S)-2-[3-(3,4-ジヒドロキシ-ベンジル)-ウレイド]-3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-プロピオン酸メチルエステル；
50) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-2-[2-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アセチルアミノ]-プロピオン酸メチルエステル；
51) 2-(3,4-ジヒドロキシ-ベンゾイルアミノ)-3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-プロピオン酸メチルエステル；
52) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-2-[3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-プロピオニルアミノ]-プロピオン酸メチルエステル；
53) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-2-[3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アリルアミノ]-プロピオン酸メチルエステル；
54) (R)-3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリル酸2-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-1-メトキシカルボニルエチルエステル；
55) (R)-3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリル酸2-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-1-プロポキシカルボニルエチルエステル；
56) (R)-3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリル酸2-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-1-tert-ブトキシカルボニルエチルエステル；
57) (R)-3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリル酸2-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-1-カルバモイルエチルエステル；及び
58) (R)-3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリル酸2-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-1-tert-ブトキシカルボニルエチルエステルが挙げられる。
【００１８】
好ましい実施態様によると、本発明の式1で示される誘導体の化学構造とその活性との相関関係を調べるために、lckのSH2ドメインと前記ドメインに特異的に結合するペプチド間の結合抑制効果を調べた結果、前記誘導体の両フェニル環に少なくとも1個、好ましくは、少なくとも2個のヒドロキシ基が必要であり、X1、X2及びX3が互いに平面をなすほどさらに優秀な活性を示す。また、X1とX2がアミド基、チオアミド基またはエステルを形成する場合にはその活性度が互いに類似だった。X3が二重結合を有している時、lckのSH2ドメインと特異的に結合するシグナル伝達下流タンパク質との相互作用を強く阻害することを確認できた。
【００１９】
そして、Y1とY2が結合してアミド基になる場合には、カルボキシ末端基を有する場合より試験管内活性実験でもう少し優秀な免疫活性を示し、メチルエステル基、イソプロピルエステル基、n-プロピルエステル、tert-ブチルエステル、エチルエステル基を形成する場合、その活性がカルボキシ末端基を有する場合よりさらに優秀だった。したがって、本発明の誘導体は、カルボキシ末端基の変化がlckのSH2ドメインとの結合には大きく影響を及ぼさず、代わりに疏水性の増加によって試験管内細胞に対する活性度を増加させるものと分かった。反面、Y1とY2がカルボキシル基を持たない場合、即ち除去される場合、比較的に免疫抑制活性が大きく減少することが分かった。X1及びX2がアミド基を形成する場合、光学異性体のR形態がS形態に比べてペプチド間の結合抑制能力がより優秀であると現れたが、それ以外の化合物ではほぼ同等な数値を示し、光学異性体がIL-2プロモータにはそれほど大きい影響を及ぼさないことが分かった。
【００２０】
また他の好ましい実施態様によると、本発明の化合物はコラーゲン(collagen)と完全フロイントのアジュバンド(complete Freunds adjuvant)混合物投与によるDBAマウスでの関節炎発病を抑制または軽減させた。実施例の化合物は関節が腫れ上がり始めた頃から投与することにより、関節炎予防及び治療効能があることが分かった。
【００２１】
好ましくは、本発明の式1の化合物は、薬学的に許容される塩の形態で使用でき、塩としては、薬学的に許容される遊離酸(free acid)により形成される酸付加塩が有用である。式1の化合物は当該技術分野で通常的な方法によって薬剤学的に許容される酸付加塩を形成できる。遊離酸としては、有機酸と無機酸を使用でき、無機酸としては、塩酸、臭素酸、硫酸、リン酸等を使用でき、有機酸としては、クエン酸、酢酸、乳酸、酒石酸、マレイン酸、フマル酸(fumaric acid)、ギ酸、プロピオン酸(propionic acid)、シュウ酸、トリフルオロアセト酸、ベンゾ酸、グルコン酸、メタンスルホン酸、グリコール酸、コハク酸、4-トルエンスルホン酸、ガラクツロン酸、エンボン酸、グルタミン酸またはアスパラギン酸等を使用できる。
【００２２】
また、本発明は、式1の化合物の製造方法を提供する。
【００２３】
最終生成物の構造式中のY1とY2が結合してアミドになる場合、アミン化合物とカルボキシル化合物との縮合反応による分子構造内アミド結合を含む式1の化合物を製造できる。
【００２４】
好ましい実施態様にとると、アミド結合を含む式1の化合物は下記の化学反応1に示すように、カップリング試薬(coupling reagent)及び塩基の存在下での式3のカルボキシル基化合物と式2のアミン化合物との縮合反応による分子構造内アミド結合を含む式1の化合物を製造する。
【００２５】
化学反応1
2005522523.tif 000008
式中、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、X1、X2、X3、Y1、Y2、B及び*は上記で定義したものと同様である。
【００２６】
カップリング試薬は、通常的に使用されるベンゾリアゾール-1-イル-オキシトリピロリジンホスホニウムヘキサフルオロホスファート(benzotriazole-1-yl-oxytripyrollidine phosphonium hexafluorophosphate, PyBOP)及びブロモ-1-トリピロリジンホスホニウムヘキサフルオロホスファート(bromo-1-tripyrrolidine phosphonium hexafluorophosphate, PyBroP)からなる群より選択され、本発明では限定しない。
【００２７】
塩基としては、パラ-ジメチルアミノピリジン (p-dimethylaminopyridine, DMAP)、トリエチルアミン(triethylamine, TEA)またはジイソエチルアミン(diisopropylamine)等を触媒量使用して前記縮合反応を促進させる。
【００２８】
前記式2の化合物は、ジヒドロキシルアラニン(dihydroxylphenylalanine)、チロシン(tyrosine)、ドーパミン(dopamine)等から公知の方法を利用して多様な作用基を変換させ式1で示される化合物を合成できる。
【００２９】
また、本発明のまた別の実施様態によると、多様なエステル化反応またはアミド生成反応等を通して式2のカルボキシル化合物を変換させた後、化学反応1で提示した製造方法と同様の反応で式3の化合物と反応させ、本発明の化合物を得られる。
【００３０】
好ましい実施例様態によると、チオ(C=S)結合を含む式1の化合物は：式3の化合物のカルボキシル基及びヒドロキシ基を保護基で保護して、ロウェンソン試薬(Lawensson's reagent)を使用してカルボニル基をC=S基に変換させ、続けて保護基を除去して式1の化合物を製造する。
【００３１】
前記ロウェンソン試薬は、カルボニル基をチオ基に変換させるのに使用する一般的な化合物であり、2,4-ビス(4-メトキシフェニル)-1,3-ジチア-2,4-ジフォスフェテイン-2,4-ジスルファイドに代表される。
【００３２】
また、本発明では、式1の化合物または薬学的に許容されるそれらの塩を有効成分としてする薬学的組成物を提供する。
【００３３】
本発明の化合物は、lck SH2ドメインとこれに特異的に結合するペプチド間の試験管内結合を阻害する。より詳細には、本発明の化合物はlckのSH2ドメインを選択的に阻害し、一つ以上のSH2ドメインとその自然的リガンドを含むタンパク質のシグナル伝達複合体の形成を防いだり不安定にするため、前記シグナル伝達複合体が仲介する疾患の予防または治療に有用に使用できる。このように本発明の化合物はSrc系タンパク質チロシンキナーゼのSH2ドメインが仲介する細胞機能を阻害する用途に使用できる。前記Src系のタンパク質チロシンキナーゼは、Src、Fyn、Yes、Lyn及びBlkを含む。
【００３４】
また、移植拒絶反応だけではなく自己免疫疾患のようなT細胞が仲介する免疫病理現象においても、T細胞活性化とその作用機能を阻害することにより予防及び治療できる。抗原特異的T細胞活性化は、TCRが仲介するシグナル伝達過程により開始され、前記シグナル伝達過程には様々なチロシンキナーゼまたはリン酸化タンパク質が関連している。活性化されたT細胞が細胞増殖につながる過程は、IL-2とIL-2受容体の相互作用により調節される。
【００３５】
本発明では、IL-2遺伝子発現水準に関する本発明の化合物の効果を調べるためにIL-2プロモータ分析(IL-2 promoter analysis)を実施した。優秀な免疫抑制剤は、IL-2遺伝子発現を抑制するためにlckのSH2ドメインに強く結合して細胞膜をよく透過して安定でなければならない。
【００３６】
好ましい実施態様によると、lck-SH2ドメインの結合度及びIL-2遺伝子発現抑制効果を測定した結果、本発明の化合物は細胞膜を透過してlck-SH2ドメインに強く結合してIL-2遺伝子発現を抑制することによりT細胞増殖を抑制して、T細胞が仲介する病理現象を抑制することを確認した(実験例1及び2 参照)。
【００３７】
また別の好ましい実施態様によると、IL-2遺伝子発現抑制効果を確認するために移植皮膚の生存時間を測定する生体内標準薬理テストを実施した結果、本発明の化合物で処理した実験群において拒絶反応が対照群に比べてずっと低い結果を確認した(実験例3参照)。
【００３８】
また別の好ましい実施態様によると、自己免疫疾患による関節炎の治療効果を調べるために、マウスを利用した関節炎指数を測定した結果、本発明の化合物で処理した実験群が公知のメトトレキサートと同等以上の効果を示すことを確認した(実験例4参照)。
【００３９】
前記結果を総合してみると、本発明の化合物は臓器移植、例えば心臓、腎臓、肺、肝臓、皮膚、骨髄等や組織移植により起きる移植拒絶症状、慢性移植拒絶反応を抑制するのに有用である。前記T細胞が仲介する病理現象としては、GVHD、紅斑性狼瘡(lupus erythematous)、全身性紅斑性狼瘡(systemic erythematosus)、リューマチ性関節炎、糖尿病、重症筋無力症(myasthenia gravis)、多発性硬化症(multiple sclerosis)、乾癬のような自己免疫疾患； 皮膚炎、湿疹、脂漏、炎症性腸疾患のような炎症性疾患；及び真菌感染等の治療、診断、または予防に有用である。 
【００４０】
本発明の薬学的組成物は、本発明の化合物以外に薬学的に許容される担体を含むことができる。必要に応じて多様な非ステロイド抗炎症剤を組み合わせて調剤できる。詳細には、前記非ステロイド抗炎症剤としては、アスピリン、イブプロフェン(ibuprofen)、ナプロクセン(naproxen)、インドメタシン(indomethacin)、ジクロフェナック(diclofenac)、スリンダク(sulindac)、ピロキシカン(piroxicam)、エトドラク(etodolac)、ケトプロフェン(ketoprofen)、メクロフェナメート(meclofenamate)、スプロフェン(suprofen)及びトルメチン(tolmetin)を含む群から選択され、哺乳類の器官移植拒絶反応、GVHD、乾癬、自己免疫疾患及び慢性炎症疾患を治療したり予防するために本発明の化合物及び前記非ステロイド抗炎症剤を組み合わせて投与できる。
【００４１】
前記薬学的組成物は、臨床投与時に経口、静脈、皮下(subcutaneous)、鼻内 (intranasal)、気管支内(intrabronchial)、直腸(rectal)に投与が可能であり、一般的な医薬品製剤の形態で使用できる。
【００４２】
即ち、本発明の化合物は、実際臨床投与時に経口及び非経口の様々な剤形で投与できる。製剤化する場合には普通に使用する充填剤、増量剤、結合剤、湿潤剤、崩解剤、界面活性剤等の稀釈制または賦形剤を使用して調剤する。経口投与のための固形製剤には、錠剤、丸剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤等が含まれ、このような固形製剤は、一つ以上の化合物に少なくとも1個の賦形剤、例えば、澱粉、炭酸カルシウム、蔗糖またはラクトース(Lactose)、ゼラチン等を混ぜて調剤される。また、単純な賦形剤以外にステアリン酸マグネシウム、タルクのような潤滑剤も使用される。経口のための液状製剤としては、懸濁剤、内用液剤、乳剤、シロップ剤等が該当し、よく使用される単純稀釈制の水、リキッドパラフィン以外に様々な賦形剤、例えば湿潤剤、甘味剤、芳香剤、保存剤等が含まれる。非経口投与のための製剤には、滅菌された水溶液、非水性溶剤、懸濁剤、乳剤、凍結乾燥製剤、座剤が含まれる。非水性溶剤、懸濁溶剤としては、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、オリーブオイルのような植物性油、オレイン酸エチルのような注射可能なエステル等が使用できる。座薬の基剤としては、ハードファット(witepsol)、マクロゴール、ツイーン(tween)61、カカオ脂、ラウリン脂、グリセロゼラチン等が使用できる。
【００４３】
本発明の化合物は、筋肉注射で投与する場合、有効量は0.05〜200 mg/kg/dayで、経口投与時の有効量は0.5〜500mg/kg/dayである。
【００４４】
以下、本発明を実施例によりさらに詳細に説明する。
但、下記の実施例は本発明の内容を例示するだけのもので、本発明の範囲が実施例により限定されるものではない。
【００４５】
実施例1
3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸メチルエステルの製造
(工程1) 3,4-ジヒドロキシフェニル-D-アラニンメチルエステルの製造
メタノール(40ml)にD-DOPA(D-3,4-Dihydroxyphenylalanine、2.0g、10.14mmol、1当量)を添加した溶液に塩化チオニル(7.4ml、101.4mmol、10当量)を0℃で滴下した。反応混合物は窒素雰囲気下で18時間の間撹拌した後、過量のメタノールと塩化チオニルを減圧蒸留した。残渣はメタノールとエチルアセテートで再結晶させてDOPAメチルエステル(93％)を得た。
【００４６】
TLC(クロロホルム：アセトン：メタノール：水 = 8：8：3：1) Rf=0.49
【００４７】
(工程2) 3-(3,4-ジヒドロキシフェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸メチルエステルの製造
前記工程1で得たDOPAメチルエステル(2.0g、8.07mmol、1当量)をDMF(N,N-dimethylformamide、10ml)に溶かし反応混合物にカフェイン酸 (caffeic acid、1.45g、8.07mmol、1当量)を添加後、塩化メチレン(20ml)で稀釈した。0℃で前記反応混合物にPyBOP(4.2g、8.07mmol、1当量)とトリエチルアミン(3.4ml、24.21mmol、3当量)を加えた後、窒素雰囲気下で18時間の間撹拌した。過量の塩化メチレンは減圧濃縮してエチルアセテート(10ml)で稀釈した後、1NのHCl水溶液(3×10ml)、10％ NaHCO3(1×10ml)、蒸留水(1×10ml)、塩水(1×10ml)で洗浄した。洗浄した有機溶媒は無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、ろ過して減圧濃縮した。生成物はフラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィー(flash silicagel column chromatography)で分離して80％の目的化合物を得た。(規定溶離液、n-ヘキサン：エチルアセテート：メタノール=4：5：1)
【００４８】
TLC(n-ヘキサン：エチルアセテート：メタノール=4：5：1)生成物 Rf=0.40、副生成物 Rf=0.23及び0.14
M/z 374 (M+H), 396 (M+Na)
1H NMR (DMSO-d6) δ8.62, 8.67, 9.07, 9.31 (4H, br, -OH), 8.75 (1H, d, J = 8.0 Hz, NH), 7.20 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 6.93 (1H, d, J = 1.8Hz, 芳香族), 6.74 (1H, d, J = 8.1 Hz, 芳香族), 6.62 (1H, d, J = 1.8 Hz, 芳香族), 6.61 (1H, J = 7.8 Hz, 芳香族), 6.57 (1H, d, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.41 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 4.48 (1H, m, CH), 2.90 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 2.72 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 3.80 (3H, s, CH3)
【００４９】
実施例2
3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸の製造
実施例1で合成された、3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸メチルエステル70mgをアセトンと水(4：25、v/v)混合液50mlに溶解した後、HCl溶液 8mlを入れた後、オイルバスで一日中加熱還流した後、アセトンを減圧蒸留してエチルアセテートを添加後、抽出して目的化合物を得た。全体収率54％。
【００５０】
TLC(n-ヘキサン：エチルアセテート：メタノール= 4：5：1)生成物 Rf=0.28.
M/z 360.1 (M+H)
1H NMR (DMSO-d6) δ8.62, 8.67, 9.07, 9.31 (4H, br, -OH), 8.75 (1H, d, J = 8.0 Hz, NH), 7.20 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 6.93 (1H, d, J = 1.8Hz, 芳香族), 6.74 (1H, d, J = 8.1 Hz, 芳香族), 6.62 (1H, d, J = 1.8 Hz, 芳香族), 6.61 (1H, J = 7.8 Hz, 芳香族), 6.57 (1H, d, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.41 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 4.48 (1H, m, CH), 2.90 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 2.72 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2)
【００５１】
実施例3
3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸エチルエステルの製造
前記実施例1の工程1で反応溶媒にエタノールを使用してD-DOPAエチルエステルを合成した後、これを出発物質にして、前記実施例1と同様の方法で 目的化合物を合成した。
【００５２】
M/z 388.8 (M+H)
1H NMR (DMSO-d6) δ8.62, 8.67, 9.07, 9.31 (4H, br, -OH), 8.75 (1H, d, J = 8.0 Hz, NH), 7.20 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 6.93 (1H, d, J = 1.8Hz, 芳香族), 6.74 (1H, d, J = 8.1 Hz, 芳香族), 6.62 (1H, d, J = 1.8 Hz, 芳香族), 6.61 (1H, J = 7.8 Hz, 芳香族), 6.57 (1H, d, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.41 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 4.48 (1H, m, CH), 2.90 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 2.72 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2) 4.12 (2H, q, J= 10.1, CH2) 1.30 (3H, t, J= 10.1, CH3)
【００５３】
実施例4
3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸プロピルエステルの製造
前記実施例1の工程1で反応溶媒にn-プロピルアルコールを使用して合成したD-DOPAプロピルエステルを出発物質に使用することを除いて、実施例1と同様の方法で目的化合物を合成した。
【００５４】
M/z 402.15 (M+H)
1H NMR (DMSO-d6) δ8.62, 8.67, 9.07, 9.31 (4H, br, -OH), 8.75 (1H, d, J = 8.0 Hz, NH), 7.20 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 6.93 (1H, d, J = 1.8Hz, 芳香族), 6.74 (1H, d, J = 8.1 Hz, 芳香族), 6.62 (1H, d, J = 1.8 Hz, 芳香族), 6.61 (1H, J = 7.8 Hz, 芳香族), 6.57 (1H, d, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.41 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 4.48 (1H, m, CH), 2.90 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 2.72 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2) 4.08 (2H, t, J= 10.1 Hz, CH2) 1.61 (2H, d, J= 10.1, 4.90 Hz, CH2) 0.96 (3H, t, J= 10.1, 4.90 Hz, CH3)
【００５５】
実施例5
3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸イソプロピルエステルの製造
前記実施例1の工程1で反応溶媒にイソプロピルアルコールを使用して合成したD-DOPAイソプロピルエステルを出発物質に使用することを除いて、実施例1と同様の方法で目的化合物を合成した。
【００５６】
M/z 402.15 (M+H)
1H NMR (DMSO-d6) δ8.62, 8.67, 9.07, 9.31 (4H, br, -OH), 8.75 (1H, d, J = 8.0 Hz, NH), 7.20 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 6.93 (1H, d, J = 1.8Hz, 芳香族), 6.74 (1H, d, J = 8.1 Hz, 芳香族), 6.62 (1H, d, J = 1.8 Hz, 芳香族), 6.61 (1H, J = 7.8 Hz, 芳香族), 6.57 (1H, d, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.41 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 4.48 (1H, m, CH), 2.90 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 2.72 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2) 4.31 (1H, br, CH) 1.35 (3H, s, CH3) 1.35 (3H, s, CH3)
【００５７】
実施例6
3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸tert-ブチルエステルの製造
前記実施例2の目的化合物を出発物質にして、前記物質をテトラヒドロフラン溶媒下で溶解した後、トルエンスルホン酸を入れた後、亜イソブチレンガスをドライアイスで凝縮溶液化させ反応させた。得られた生成物をprep用逆相カラムを装着したHPLCを利用して目的化合物を分離した。
【００５８】
M/z 416.15 (M+H)
1H NMR (DMSO-d6) δ8.62, 8.67, 9.07, 9.31 (4H, br, -OH), 8.75 (1H, d, J = 8.0 Hz, NH), 7.20 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 6.93 (1H, d, J = 1.8Hz, 芳香族), 6.74 (1H, d, J = 8.1 Hz, 芳香族), 6.62 (1H, d, J = 1.8 Hz, 芳香族), 6.61 (1H, J = 7.8 Hz, 芳香族), 6.57 (1H, d, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.41 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 4.48 (1H, m, CH), 2.90 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 2.72 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2) 1.40 (3H, s, CH3) 1.40 (3H, s, CH3)1.40 (3H, s, CH3)
【００５９】
実施例7
N-[カルバモイル-2-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-エチル]-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリルアミドの製造
実施例1で合成した目的化合物200mgをアンモニアガスで充填された塩化メチレンに溶解した後、一日中撹拌させた。過量の溶媒は減圧蒸留して除去後、エチルアセテート(30ml)に溶かし1NのHCl水溶液(3×10ml)、10％NaHCO3 (1×10ml)、蒸留水(1×10ml)、塩水(1×10ml)で洗浄した。洗浄した有機溶媒は無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、ろ過して減圧濃縮した。生成物はフラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィーで分離して80％の目的化合物を得た。(規定溶離液, n-ヘキサン：エチルアセテート：メタノール= 3：5：1)   
【００６０】
TLC(n-ヘキサン：エチルアセテート：メタノール= 4：5：1)生成物 Rf=0.30,
M/z 359.15 (M+H)
1H NMR (DMSO-d6) δ8.62, 8.67, 9.07, 9.31 (4H, br, -OH), 8.75 (1H, d, J = 8.0 Hz, NH), 7.20 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 6.93 (1H, d, J = 1.8Hz, 芳香族), 6.74 (1H, d, J = 8.1 Hz, 芳香族), 6.62 (1H, d, J = 1.8 Hz, 芳香族), 6.61 (1H, J = 7.8 Hz, 芳香族), 6.57 (1H, d, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.41 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 4.48 (1H, m, CH), 2.90 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 2.72 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2) 
【００６１】
実施例8
3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸メチルエステルの製造
出発物質をD-DOPAの代わりにL-DOPAを使用することを除いて、前記実施例1と同様の方法で目的化合物を製造した。
【００６２】
TLC(n-ヘキサン：エチルアセテート：メタノール= 4：5：1)生成物 Rf=0.40
M/z 374 (M+H), 396 (M+Na)；
1H NMR (DMSO-d6) δ 8.62, 8.67, 9.07, 9.31 (4H, br, -OH), 8.75 (1H, d, J = 8.0 Hz, NH), 7.20 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 6.93 (1H, d, J = 1.8Hz, 芳香族), 6.74 (1H, d, J = 8.1 Hz, 芳香族), 6.62 (1H, d, J = 1.8 Hz, 芳香族), 6.61 (1H, J = 7.8 Hz, 芳香族), 6.57 (1H, d, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.41 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 4.48 (1H, m, CH), 2.90 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 2.72 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 3.80 (3H, s, CH3)
【００６３】
実施例9
3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸の製造
実施例8で合成した、3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸メチルエステルを出発物質にして、実施例2の方法と同様の方法で目的化合物を得た。
【００６４】
TLC(n-ヘキサン：エチルアセテート：メタノール= 4：5：1)生成物 Rf=0.28
M/z 360.1 (M+H)
1H NMR (DMSO-d6) δ8.62, 8.67, 9.07, 9.31 (4H, br, -OH), 8.75 (1H, d, J = 8.0 Hz, NH), 7.20 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 6.93 (1H, d, J = 1.8Hz, 芳香族), 6.74 (1H, d, J = 8.1 Hz, 芳香族), 6.62 (1H, d, J = 1.8 Hz, 芳香族), 6.61 (1H, J = 7.8 Hz, 芳香族), 6.57 (1H, d, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.41 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 4.48 (1H, m, CH), 2.90 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 2.72 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2)
【００６５】
実施例10
3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸エチルエステルの製造
前記実施例1の工程1で提示した方法で反応溶媒にエタノールを使用し 、L-DOPAを出発物質に使用することを除いて、前記実施例1と同様の方法で目的化合物を合成した。
【００６６】
M/z 388.8 (M+H)
1H NMR (DMSO-d6) δ8.62, 8.67, 9.07, 9.31 (4H, br, -OH), 8.75 (1H, d, J = 8.0 Hz, NH), 7.20 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 6.93 (1H, d, J = 1.8Hz, 芳香族), 6.74 (1H, d, J = 8.1 Hz, 芳香族), 6.62 (1H, d, J = 1.8 Hz, 芳香族), 6.61 (1H, J = 7.8 Hz, 芳香族), 6.57 (1H, d, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.41 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 4.48 (1H, m, CH), 2.90 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 2.72 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2) 4.12 (2H, q, J= 10.1, CH2) 1.30 (3H, t, J= 10.1, CH3)
【００６７】
実施例11
3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸プロピルエステルの製造
前記実施例1の工程1で反応溶媒にn-プロピルアルコールを使用して出発物質にL-DOPAを使用することを除いて、実施例1と同様の方法で目的化合物を合成した。
【００６８】
M/z 402.15 (M+H)
1H NMR (DMSO-d6) δ8.62, 8.67, 9.07, 9.31 (4H, br, -OH), 8.75 (1H, d, J = 8.0 Hz, NH), 7.20 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 6.93 (1H, d, J = 1.8Hz, 芳香族), 6.74 (1H, d, J = 8.1 Hz, 芳香族), 6.62 (1H, d, J = 1.8 Hz, 芳香族), 6.61 (1H, J = 7.8 Hz, 芳香族), 6.57 (1H, d, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.41 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 4.48 (1H, m, CH), 2.90 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 2.72 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2) 4.08 (2H, t, J= 10.1 Hz, CH2) 1.61 (2H, d, J= 10.1, 4.90 Hz, CH2) 0.96 (3H, t, J= 10.1, 4.90 Hz, CH3)
【００６９】
実施例12
3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸イソプロピルエステルの製造
前記実施例1の工程1で反応溶媒にイソプロピルアルコールを使用し、L-DOPAを出発物質に使用することを除いて、前記実施例1と同様の方法で目的化合物を合成した。
【００７０】
M/z 402.15 (M+H)
1H NMR (DMSO-d6) δ8.62, 8.67, 9.07, 9.31 (4H, br, -OH), 8.75 (1H, d, J = 8.0 Hz, NH), 7.20 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 6.93 (1H, d, J = 1.8Hz, 芳香族), 6.74 (1H, d, J = 8.1 Hz, 芳香族), 6.62 (1H, d, J = 1.8 Hz, 芳香族), 6.61 (1H, J = 7.8 Hz, 芳香族), 6.57 (1H, d, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.41 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 4.48 (1H, m, CH), 2.90 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 2.72 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2) 4.31 (1H, br, CH) 1.35 (3H, s, CH3) 1.35 (3H, s, CH3)
【００７１】
実施例13
3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸tert-ブチルエステルの製造
前記実施例2と同様の方法で合成した、(S)立体性を有する目的化合物を出発物質にして、前記物質をテトラヒドロフラン溶媒下で溶解した後、トルエンスルホン酸を入れた後、亜イソブチレンガスをドライアイスで凝縮溶液化させ 反応させた。得られた生成物をprep用逆相カラムを装着したHPLCを利用して目的化合物を分離した。
【００７２】
M/z 416.15 (M+H)
1H NMR (DMSO-d6) δ8.62, 8.67, 9.07, 9.31 (4H, br, -OH), 8.75 (1H, d, J = 8.0 Hz, NH), 7.20 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 6.93 (1H, d, J = 1.8Hz, 芳香族), 6.74 (1H, d, J = 8.1 Hz, 芳香族), 6.62 (1H, d, J = 1.8 Hz, 芳香族), 6.61 (1H, J = 7.8 Hz, 芳香族), 6.57 (1H, d, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.41 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 4.48 (1H, m, CH), 2.90 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 2.72 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2) 1.40 (3H, s, CH3) 1.40 (3H, s, CH3)1.40 (3H, s, CH3)
【００７３】
実施例14
N-[カルバモイル-2-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-エチル]-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリルアミドの製造
実施例8で合成した目的化合物200mgをアンモニアガスで充填された塩化メチレンに溶かし一日中撹拌させた。過量の溶媒は減圧蒸留で除去後、エチルアセテート(30ml)に溶解した後、1NのHCl水溶液(3×10ml)、10％NaHCO3 (1×10ml)、蒸留水(1×10ml)、塩水(1×10ml)で洗浄した。洗浄した有機溶媒は無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、ろ過して減圧濃縮した。生成物はフラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィーで分離して80％の目的化合物を得た。(規定溶離液, n-ヘキサン：エチルアセテート：メタノール= 3：5：1)
【００７４】
TLC(n-ヘキサン：エチルアセテート：メタノール= 4：5：1)生成物 Rf=0.30
M/z 359.15 (M+H)
1H NMR (DMSO-d6) δ8.62, 8.67, 9.07, 9.31 (4H, br, -OH), 8.75 (1H, d, J = 8.0 Hz, NH), 7.20 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 6.93 (1H, d, J = 1.8Hz, 芳香族), 6.74 (1H, d, J = 8.1 Hz, 芳香族), 6.62 (1H, d, J = 1.8 Hz, 芳香族), 6.61 (1H, J = 7.8 Hz, 芳香族), 6.57 (1H, d, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.41 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 4.48 (1H, m, CH), 2.90 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 2.72 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2) 
【００７５】
実施例15
3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオン酸メチルエステルの製造
(工程1) N-(3',4'-ジヒドロキシ-トランス-シナモイル)-3-(3,4-ジヒドロキシフェニル)-D-アラニンメチルエステルのテトラ(t-ブチルジメチルシリル)エーテルの製造
N-(3',4'-ジヒドロキシ-トランス-シナモイル)-3-(3,4-ジヒドロキシフェニル)-D-アラニンメチルエステル(2.44g、6,54mmol、1当量)を塩化メチレン(40ml)に溶かし反応混合物にトリエチルアミン(5.45ml、39.24mmol、6当量)とt-ブチルジメチルシリルトリフルオロメタンスルホナート(TBDMSOTf, 7.51ml, 32.7mmol, 5当量)を窒素雰囲気下で添加した。反応混合物は窒素雰囲気下で18時間の間撹拌した後、常温で1NのHCl水溶液(20ml)を添加して反応を終わらせた。過量の塩化メチレンは減圧濃縮して残った混合物はエチルアセテート(3×20ml)で抽出した後、有機溶媒は蒸留水(1×50ml)、塩水(1×50ml)で洗浄して 無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧濃縮した。生成物はフラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィー(規定溶離液, n-ヘキサン：エチルアセテート = 5：1)で精製して33％の目的化合物を得た。
【００７６】
TLC(n-ヘキサン：エチルアセテート=5：1)生成物 Rf=0.37
M/z 830.5 (M+H)
1H NMR (DMSO-d6) δ 8.75 (1H, d, J = 8.0 Hz, NH), 7.20 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 6.93 (1H, d, J = 1.8Hz, 芳香族), 6.74 (1H, d, J = 8.1 Hz, 芳香族), 6.62 (1H, d, J = 1.8 Hz, 芳香族), 6.61 (1H,d, J = 7.8 Hz, 芳香族), 6.57 (1H, d, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.41 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 4.48 (1H, m, CH), 2.90 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 2.72 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 3.80 (3H, s, CH3), 0.22 (12H, s, CH3), 0.23 (12H, s, CH3), 0.99 (18H, s, CH3), 1.00 (18H, s, CH3)
【００７７】
(工程2) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオン酸メチルエステルのテトラ(t-ブチルジメチルシリル)エーテルの製造
前記工程1で得た純粋な化合物(1.8g、2,17mmol、1当量)をTHF (tetrahydrofuran, 20ml)に溶かしロウェンソン試薬(Lawensson's reagent, 1.3g、3.25mmol、1.5当量)を添加した。反応混合物は70℃で硫酸カルシウム管を使用して無水状態で17時間の間加熱還流した。前記反応物は減圧濃縮してエチルアセテート(20ml)で稀釈した。有機層に10％のNaHCO3(20ml)を添加した 後、混合物をエチルアセテート(3×20ml)で抽出して蒸留水(1×60ml)、塩水(1×60ml)で洗浄した後、無水硫酸マグネシウムで水を除去して減圧濃縮した。 生成物はフラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィー(規定溶離液, n-ヘキサン：エチルアセテート = 15：1)で精製して77％の目的化合物を得た。
【００７８】
TLC(n-ヘキサン：エチルアセテート = 15：1)生成物 Rf=0.40
M/z 846.4 (M+H)
1H NMR (DMSO-d6) δ 8.75 (1H, d, J = 8.0 Hz, NH), 7.20 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 6.93 (1H, d, J = 1.8Hz, 芳香族), 6.74 (1H, d, J = 8.1 Hz, 芳香族), 6.62 (1H, d, J = 1.8 Hz, 芳香族), 6.61 (1H,d, J = 7.8 Hz, 芳香族), 6.57 (1H, d, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.41 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 4.48 (1H, m, CH), 2.90 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 2.72 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 3.80 (3H, s, CH3), 0.22 (12H, s, CH3), 0.23 (12H, s, CH3), 0.99 (18H, s, CH3), 1.00 (18H, s, CH3)
【００７９】
(工程3) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオン酸メチルエステルの製造
前記工程2で得たテトラ(t-ブチルジメチルシリル)エーテル-N-(3',4'-ジヒドロキシ-3-フェニル-2-プロピレンチオカルボニル)-3-(3,4-ジヒドロキシフェニル)-D-アラニンメチルエステル(1.42g、1.68mmol、1当量)をTHF (30ml)に溶かし、反応混合物に1MのTBAF溶液(10.07ml、10.07mmol、6当量)を添加した。反応混合物は窒素雰囲気下で18時間の間撹拌して常温で1NのHCl水溶液(20ml)を添加して反応を終わらせた。過量のTHFは減圧濃縮して水層はエチルアセテート(3×20ml)で洗浄した。抽出した有機層は蒸留水(1×60ml)、塩水(1×60ml)で洗浄した後、無水硫酸マグネシウムで水を除去して減圧濃縮した。生成物はフラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィー(規定溶離液, n-ヘキサン：エチルアセテート：メタノール= 4：5：1)で精製して62％の目的化合物を得た。
【００８０】
TLC(n-ヘキサン：エチルアセテート：メタノール= 4：5：1)生成物 Rf=0.50   
M/z 390.1 (M+H)
1H NMR (DMSO-d6) δ 8.75 (1H, d, J = 8.0 Hz, NH), 7.20 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 6.93 (1H, d, J = 1.8Hz, 芳香族), 6.74 (1H, d, J = 8.1 Hz, 芳香族), 6.62 (1H, d, J = 1.8 Hz, 芳香族), 6.61 (1H, d, J = 7.8 Hz, 芳香族), 6.57 (1H, d, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.41 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 4.48 (1H, m, CH), 2.90 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 2.72 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 3.80 (3H, s, CH3)
【００８１】
実施例16
3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオン酸の製造
実施例2と同様の方法で、3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオン酸メチルエステルを加水分解して目的化合物を得た。 
【００８２】
TLC(n-ヘキサン：エチルアセテート：メタノール= 4：5：1)生成物 Rf=0.37
M/z 376.1 (M+H)；
1H NMR (DMSO-d6) δ 8.75 (1H, d, J = 8.0 Hz, NH), 7.20 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 6.93 (1H, d, J = 1.8Hz, 芳香族), 6.74 (1H, d, J = 8.1 Hz, 芳香族), 6.62 (1H, d, J = 1.8 Hz, 芳香族), 6.61 (1H, d, J = 7.8 Hz, 芳香族), 6.57 (1H, d, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.41 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 4.48 (1H, m, CH), 2.90 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 2.72 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2)
【００８３】
実施例17
3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオン酸エチルエステルの製造
実施例3で合成した、3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸エチルエステルを使用することを除いて、実施例15と同様の方法でチオアミド誘導体を合成した。
【００８４】
M/z 404.1 (M+H)
1H NMR (DMSO-d6) δ8.62, 8.67, 9.07, 9.31 (4H, br, -OH), 8.75 (1H, d,  J = 8.0 Hz, NH), 7.20 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 6.93 (1H, d, J = 1.8Hz, 芳香族), 6.74 (1H, d, J = 8.1 Hz, 芳香族), 6.62 (1H, d, J = 1.8 Hz, 芳香族), 6.61 (1H, J = 7.8 Hz, 芳香族), 6.57 (1H, d, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.41 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 4.48 (1H, m, CH), 2.90 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 2.72 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2) 4.12 (2H, q, J= 10.1, CH2) 1.30 (3H, t, J= 10.1, CH3)
【００８５】
実施例18
3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオン酸プロピルエステルの製造
実施例4で合成した、3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸プロピルエステルを使用することを除いて、実施例15と同様の方法でチオアミド誘導体を合成した。
【００８６】
M/z 418.15 (M+H)
1H NMR (DMSO-d6) δ8.62, 8.67, 9.07, 9.31 (4H, br, -OH), 8.75 (1H, d, J = 8.0 Hz, NH), 7.20 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 6.93 (1H, d, J = 1.8Hz, 芳香族), 6.74 (1H, d, J = 8.1 Hz, 芳香族), 6.62 (1H, d, J = 1.8 Hz, 芳香族), 6.61 (1H, J = 7.8 Hz, 芳香族), 6.57 (1H, d, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.41 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 4.48 (1H, m, CH), 2.90 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 2.72 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2) 4.08 (2H, t, J= 10.1 Hz, CH2) 1.61 (2H, d, J= 10.1, 4.90 Hz, CH2) 0.96 (3H, t, J= 10.1, 4.90 Hz, CH3)
【００８７】
実施例19
3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオン酸イソプロピルエステルの製造
実施例5で合成した、3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸イソプロピルエステルを使用することを除いて、実施例15と同様の方法でチオアミド誘導体を合成した。
【００８８】
M/z 418.15 (M+H)
1H NMR (DMSO-d6) δ8.62, 8.67, 9.07, 9.31 (4H, br, -OH), 8.75 (1H, d, J = 8.0 Hz, NH), 7.20 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 6.93 (1H, d, J = 1.8Hz, 芳香族), 6.74 (1H, d, J = 8.1 Hz, 芳香族), 6.62 (1H, d, J = 1.8 Hz, 芳香族), 6.61 (1H, J = 7.8 Hz, 芳香族), 6.57 (1H, d, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.41 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 4.48 (1H, m, CH), 2.90 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 2.72 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2) 4.31 (1H, br, CH) 1.35 (3H,s, CH3) 1.35 (3H, s, CH3)
【００８９】
実施例20
3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオン酸tert-ブチルエステルの製造
実施例6で合成した、3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸tert-ブチルエステルを使用することを除いて、実施例15と同様の方法でチオアミド誘導体を合成した。
【００９０】
M/z 432.25 (M+H)
1H NMR (DMSO-d6) δ8.62, 8.67, 9.07, 9.31 (4H, br, -OH), 8.75 (1H, d, J = 8.0 Hz, NH), 7.20 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 6.93 (1H, d, J = 1.8Hz, 芳香族), 6.74 (1H, d, J = 8.1 Hz, 芳香族), 6.62 (1H, d, J = 1.8 Hz, 芳香族), 6.61 (1H, J = 7.8 Hz, 芳香族), 6.57 (1H, d, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.41 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 4.48 (1H, m, CH), 2.90 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 2.72 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2) 1.40 (3H, s, CH3) 1.40 (3H, s, CH3)1.40 (3H, s, CH3)
【００９１】
実施例21
3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオンアミドの製造
実施例7で合成した、N-[カルバモイル-2-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-エチル]-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリルアミドを出発物質に使用することを除いて、実施例15と同様の方法で目的化合物を合成した。
【００９２】
M/z 375.10 (M+H)
1H NMR (DMSO-d6) δ8.62, 8.67, 9.07, 9.31 (4H, br, -OH), 8.75 (1H, d, J = 8.0 Hz, NH), 7.20 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 6.93 (1H, d, J = 1.8Hz, 芳香族), 6.74 (1H, d, J = 8.1 Hz, 芳香族), 6.62 (1H, d, J = 1.8 Hz, 芳香族), 6.61 (1H, J = 7.8 Hz, 芳香族), 6.57 (1H, d, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.41 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 4.48 (1H, m, CH), 2.90 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 2.72 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2) 
【００９３】
実施例22
3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオン酸メチルエステルの製造
実施例8で合成した、3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸メチルエステルを出発物質に使用することを除いて、実施例15と同様の方法で目的化合物を合成した。
【００９４】
M/z 390.1 (M+H)
1H NMR (DMSO-d6) δ 8.75 (1H, d, J = 8.0 Hz, NH), 7.20 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 6.93 (1H, d, J = 1.8Hz, 芳香族), 6.74 (1H, d, J = 8.1 Hz, 芳香族), 6.62 (1H, d, J = 1.8 Hz, 芳香族), 6.61 (1H, d, J = 7.8 Hz, 芳香族), 6.57 (1H, d, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.41 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 4.48 (1H, m, CH), 2.90 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 2.72 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 3.80 (3H, s, CH3)
【００９５】
実施例23
3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオン酸の製造
実施例22で得た、3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオン酸メチルエステルを出発物質にして、、実施例2と同様の方法で加水分解して目的化合物を得た。 
【００９６】
M/z 376.1 (M+H)
1H NMR (DMSO-d6) δ 8.75 (1H, d, J = 8.0 Hz, NH), 7.20 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 6.93 (1H, d, J = 1.8Hz, 芳香族), 6.74 (1H, d, J = 8.1 Hz, 芳香族), 6.62 (1H, d, J = 1.8 Hz, 芳香族), 6.61 (1H, d, J = 7.8 Hz, 芳香族), 6.57 (1H, d, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.41 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 4.48 (1H, m, CH), 2.90 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 2.72 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2)
【００９７】
実施例24
3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオン酸エチルエステルの製造
実施例10で合成した、3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸エチルエステルを出発物質に使用することを除いて、実施例15と同様の方法で目的化合物を得た。
【００９８】
M/z 404.1 (M+H)
1H NMR (DMSO-d6) δ8.62, 8.67, 9.07, 9.31 (4H, br, -OH), 8.75 (1H, d, J = 8.0 Hz, NH), 7.20 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 6.93 (1H, d, J = 1.8Hz, 芳香族), 6.74 (1H, d, J = 8.1 Hz, 芳香族), 6.62 (1H, d, J = 1.8 Hz, 芳香族), 6.61 (1H, J = 7.8 Hz, 芳香族), 6.57 (1H, d, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.41 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 4.48 (1H, m, CH), 2.90 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 2.72 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2) 4.12 (2H, q, J= 10.1, CH2) 1.30 (3H, t, J= 10.1, CH3)
【００９９】
実施例25
3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオン酸プロピルエステルの製造
実施例11で合成した、3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸プロピルエステルを出発物質に使用することを除いて、実施例15と同様の方法で目的化合物を得た。
【０１００】
M/z 418.15 (M+H)   
1H NMR (DMSO-d6) δ8.62, 8.67, 9.07, 9.31 (4H, br, -OH), 8.75 (1H, d, J = 8.0 Hz, NH), 7.20 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 6.93 (1H, d, J = 1.8Hz, 芳香族), 6.74 (1H, d, J = 8.1 Hz, 芳香族), 6.62 (1H, d, J = 1.8 Hz, 芳香族), 6.61 (1H, J = 7.8 Hz, 芳香族), 6.57 (1H, d, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.41 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 4.48 (1H, m, CH), 2.90 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 2.72 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2) 4.08 (2H, t, J= 10.1 Hz, CH2) 1.61 (2H, d, J= 10.1, 4.90 Hz, CH2) 0.96 (3H, t, J= 10.1, 4.90 Hz, CH3)
【０１０１】
実施例26
3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオン酸イソプロピルエステルの製造
実施例12で合成した、3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸イソプロピルエステルを出発物質に使用使用することを除いて、実施例15と同様の方法で目的化合物を得た。
【０１０２】
M/z 418.15 (M+H)
1H NMR (DMSO-d6) δ8.62, 8.67, 9.07, 9.31 (4H, br, -OH), 8.75 (1H, d, J = 8.0 Hz, NH), 7.20 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 6.93 (1H, d, J = 1.8Hz, 芳香族), 6.74 (1H, d, J = 8.1 Hz, 芳香族), 6.62 (1H, d, J = 1.8 Hz, 芳香族), 6.61 (1H, J = 7.8 Hz, 芳香族), 6.57 (1H, d, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.41 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 4.48 (1H, m, CH), 2.90 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 2.72 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2) 4.31 (1H, br, CH) 1.35 (3H,s, CH3) 1.35 (3H, s, CH3)
【０１０３】
実施例27
3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオン酸tert-ブチルエステルの製造
実施例13で合成した、3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸tert-ブチルエステルを出発物質に使用することを除いて、実施例15と同様の方法で目的化合物を得た。
【０１０４】
M/z 432.25 (M+H)
1H NMR (DMSO-d6) δ8.62, 8.67, 9.07, 9.31 (4H, br, -OH), 8.75 (1H, d, J = 8.0 Hz, NH), 7.20 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 6.93 (1H, d, J = 1.8Hz, 芳香族), 6.74 (1H, d, J = 8.1 Hz, 芳香族), 6.62 (1H, d, J = 1.8 Hz, 芳香族), 6.61 (1H, J = 7.8 Hz, 芳香族), 6.57 (1H, d, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.41 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 4.48 (1H, m, CH), 2.90 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 2.72 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2) 1.40 (3H, s, CH3) 1.40 (3H, s, CH3)1.40 (3H, s, CH3)
【０１０５】
実施例28
3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオンアミドの製造
実施例14で合成した、N-[カルバモイル-2-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-エチル]-(S)-2- [3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリルアミドを出発物質に使用することを除いて、実施例15と同様の方法で目的化合物を合成した。
【０１０６】
M/z 375.10 (M+H)
1H NMR (DMSO-d6) δ8.62, 8.67, 9.07, 9.31 (4H, br, -OH), 8.75 (1H, d, J = 8.0 Hz, NH), 7.20 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 6.93 (1H, d, J = 1.8Hz, 芳香族), 6.74 (1H, d, J = 8.1 Hz, 芳香族), 6.62 (1H, d, J = 1.8 Hz, 芳香族), 6.61 (1H, J = 7.8 Hz, 芳香族), 6.57 (1H, d, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.41 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 4.48 (1H, m, CH), 2.90 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 2.72 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2)
【０１０７】
実施例29
3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-{[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイル]-メチル-アミノ}-プロピオン酸メチルエステルの製造
(工程1) メチル N-(ジフェニルメチレン)-D-3-ヒドロキシチロシンの製造
D-DOPAメチルエステル(6.09mmol、1.5g)とベンゾフェノンイミン(benzophenone imine, 6.09mmol、1.1g)を塩化メチレン(22ml)に溶解した後、室温で24時間の間撹拌した。反応終了を確認した後、ろ過して減圧濃縮した。残渣を再びジエチルエーテルに溶解した後、ろ過した後、有機層を水で洗浄して減圧濃縮した。生成された固体をエチルアセテートとジエチルエーテルで再結晶させて84％の白い固体を得た。
【０１０８】
TLC(n-ヘキサン：エチルアセテート = 7：3) Rf = 0.2, (M+H)+ 375.93
【０１０９】
上で合成した、シフ塩基(Schiff's base, 2.03mmol、0.76g)をTHF (tetrahydrofuran, 20ml)に溶かし、前記溶液にTHFに溶解している1MのNaBH3CN(3.2mmol、3.2ml)を添加した後、アセト酸で溶液のpHを5〜7に調節した。20分後、37％ホルムアルデヒド(8mmol)とTHFに溶解している1MのNaBH3CN(12mmol、12ml)を添加して、アセト酸で再びpHを5〜7に調節した。5〜6時間後、溶液をジエチルエーテルで薄めた後、炭酸水素ナトリウム溶液と塩水で洗浄して濃縮した。シリカゲルカラム(n-ヘキサン/エチルアセテート, 6：4)で精製して目的化合物を81％得た。
【０１１０】
TLC(n-ヘキサン/エチルアセテート, 1：1) Rf = 0.7 (M+H)+ 391.09
【０１１１】
(工程2) N-メチル-3,4-ジヒドロキシフェニル-D-アラニンメチルエステルの製造
前記工程1で合成した化合物(1.7mmol、0.67g)をメタノール(17ml)に溶解した後、Pd/C(0.07g)を添加して水素下で反応させた。6時間後、セライト (celite)をろ過し、ろ液を濃縮した後、真空減圧下で乾燥した後、精製しないで次の反応に使用した。(M+H)+ 226.03
【０１１２】
(工程3) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-{[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイル]-メチル-アミノ}-プロピオン酸メチルエステルの製造
前記工程2で合成した、N-メチルD-DOPAメチルエステルと3,4-ジヒドロキシケイ皮酸(3,4-Dihydroxy cinnamic acid, 0.3g, 1.7mmol)をDMF(13ml)に溶解した後、PyBroP(2.04mmol、0.95g)とトリエチルアミン(3.4mmol)、DMAP(1.7mmol、0.24g)を順に添加して5〜6時間反応させた。反応終了後、実施例1と同様の方法で処理してシリカゲルカラムを使用して精製した(n-ヘキサン：エチルアセテート：メタノール= 4：5：1)。純度は、RP分析用HPLC(Aは1％TFAを含んだ水、Bは1％TFAを含んだアセトニトリル)を使用して確認した(24％、0-30％(B)/30min、1ml/1min)。
【０１１３】
TLC(n-ヘキサン：エチルアセテート：メタノール= 4：5：1) Rf = 0.45
(M-H)- 385.92, M/z 388.2 (M+H)
1H NMR (DMSO-d6) δ8.62, 8.67, 9.07, 9.31 (4H, br, -OH), 8.75 (1H, d, J = 8.0 Hz, NH), 7.20 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 6.93 (1H, d, J = 1.8Hz, 芳香族), 6.74 (1H, d, J = 8.1 Hz, 芳香族), 6.62 (1H, d, J = 1.8 Hz, 芳香族), 6.61 (1H, J = 7.8 Hz, 芳香族), 6.57 (1H, d, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.41 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 4.48 (1H, m, CH), 2.90 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 2.72 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 3.70 (3H, s, CH3), 3.80 (3H, s, CH3)
【０１１４】
実施例30
3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-{[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイル]-メチル-アミノ}-プロピオン酸の製造
実施例29で得た、3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-{[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイル]-メチル-アミノ}-プロピオン酸メチルエステルを出発物質に使用して、実施例2と同様の方法で加水分解して目的化合物を得た。
【０１１５】
M/z 374.1 (M+H)；
1H NMR (DMSO-d6) δ8.62, 8.67, 9.07, 9.31 (4H, br, -OH), 8.75 (1H, d, J = 8.0 Hz, NH), 7.20 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 6.93 (1H, d, J = 1.8Hz, 芳香族), 6.74 (1H, d, J = 8.1 Hz, 芳香族), 6.62 (1H, d, J = 1.8 Hz, 芳香族), 6.61 (1H, J = 7.8 Hz, 芳香族), 6.57 (1H, d, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.41 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 4.48 (1H, m, CH), 2.90 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 2.72 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 3.80 (3H, s, CH3)
【０１１６】
実施例31
3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-{[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイル]-メチル-アミノ}-プロピオン酸エチルエステルの製造
前記実施例3のD-DOPAエチルエステルを出発物質に使用して、実施例29と同様の方法で目的化合物を合成した。
【０１１７】
M/z 402.8 (M+H)
1H NMR (DMSO-d6) δ8.62, 8.67, 9.07, 9.31 (4H, br, -OH), 8.75 (1H, d, J = 8.0 Hz, NH), 7.20 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 6.93 (1H, d, J = 1.8Hz, 芳香族), 6.74 (1H, d, J = 8.1 Hz, 芳香族), 6.62 (1H, d, J = 1.8 Hz, 芳香族), 6.61 (1H, J = 7.8 Hz, 芳香族), 6.57 (1H, d, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.41 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 4.48 (1H, m, CH), 2.90 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 2.72 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2) 4.12 (2H, q, J= 10.1, CH2) 1.30 (3H, t, J= 10.1, CH3) 3.80 (3H, s, CH3)
【０１１８】
実施例32
3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-{[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイル]-メチル-アミノ}-プロピオン酸プロピルエステルの製造
前記実施例4のD-DOPAプロピルエステルを出発物質にして、実施例29と同様の方法で目的化合物を合成した。
【０１１９】
M/z 416.8 (M+H)
1H NMR (DMSO-d6) δ8.62, 8.67, 9.07, 9.31 (4H, br, -OH), 8.75 (1H, d, J = 8.0 Hz, NH), 7.20 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 6.93 (1H, d, J = 1.8Hz, 芳香族), 6.74 (1H, d, J = 8.1 Hz, 芳香族), 6.62 (1H, d, J = 1.8 Hz, 芳香族), 6.61 (1H, J = 7.8 Hz, 芳香族), 6.57 (1H, d, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.41 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 4.48 (1H, m, CH), 2.90 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 2.72 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2) 4.08 (2H, t, J= 10.1 Hz, CH2) 1.61 (2H, d, J= 10.1, 4.90 Hz, CH2) 0.96 (3H, t, J= 10.1, 4.90 Hz, CH3) 3.80 (3H, s, CH3)
【０１２０】
実施例33
3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-{[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイル]-メチル-アミノ}-プロピオン酸イソプロピルエステルの製造
前記実施例5のD-DOPAイソプロピルエステルを出発物質にして、実施例29と同様の方法で目的化合物を合成した。
【０１２１】
M/z 416.8 (M+H)
1H NMR (DMSO-d6) δ8.62, 8.67, 9.07, 9.31 (4H, br, -OH), 8.75 (1H, d, J = 8.0 Hz, NH), 7.20 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 6.93 (1H, d, J = 1.8Hz, 芳香族), 6.74 (1H, d, J = 8.1 Hz, 芳香族), 6.62 (1H, d, J = 1.8 Hz, 芳香族), 6.61 (1H, J = 7.8 Hz, 芳香族), 6.57 (1H, d, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.41 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 4.48 (1H, m, CH), 2.90 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 2.72 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2) 4.31 (1H, br, CH) 1.35 (3H,s, CH3) 1.35 (3H, s, CH3) 3.80 (3H, s, CH3)
【０１２２】
実施例34
3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-{[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイル]-メチル-アミノ}-プロピオン酸tert-ブチルエステルの製造
前記実施例6のD-DOPAtert-ブチルエステルを出発物質にして、実施例29と同様の方法で目的化合物を合成した。
【０１２３】
M/z 430.2 (M+H)
1H NMR (DMSO-d6) δ8.62, 8.67, 9.07, 9.31 (4H, br, -OH), 8.75 (1H, d, J = 8.0 Hz, NH), 7.20 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 6.93 (1H, d, J = 1.8Hz, 芳香族), 6.74 (1H, d, J = 8.1 Hz, 芳香族), 6.62 (1H, d, J = 1.8 Hz, 芳香族), 6.61 (1H, J = 7.8 Hz, 芳香族), 6.57 (1H, d, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.41 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 4.48 (1H, m, CH), 2.90 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 2.72 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2) 1.40 (3H, s, CH3) 1.40 (3H, s, CH3)1.40 (3H, s, CH3) 3.80 (3H, s, CH3)
【０１２４】
実施例35
N-[1-カルバモイル-2-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-エチル]-(R)-3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-N-メチル-アクリルアミドの製造
実施例29で得た、3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-{[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイル]-メチル-アミノ}-プロピオン酸メチルエステルを出発物質にして、、実施例7と同様の方法で目的化合物を合成した。
【０１２５】
M/z 372.15 (M+H)
1H NMR (DMSO-d6) δ8.62, 8.67, 9.07, 9.31 (4H, br, -OH), 8.75 (1H, d, J = 8.0 Hz, NH), 7.20 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 6.93 (1H, d, J = 1.8Hz, 芳香族), 6.74 (1H, d, J = 8.1 Hz, 芳香族), 6.62 (1H, d, J = 1.8 Hz, 芳香族), 6.61 (1H, J = 7.8 Hz, 芳香族), 6.57 (1H, d, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.41 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 4.48 (1H, m, CH), 2.90 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 2.72 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 3.80 (3H, s, CH3)
【０１２６】
実施例36
3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-{[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイル]-メチル-アミノ}-プロピオン酸メチルエステルの製造
L-DOPAメチルエステルを出発物質にして、実施例29と同様の方法で目的化合物を得た。
【０１２７】
M/z 388.1 (M+H)
1H NMR (DMSO-d6) δ8.62, 8.67, 9.07, 9.31 (4H, br, -OH), 8.75 (1H, d, J = 8.0 Hz, NH), 7.20 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 6.93 (1H, d, J = 1.8Hz, 芳香族), 6.74 (1H, d, J = 8.1 Hz, 芳香族), 6.62 (1H, d, J = 1.8 Hz, 芳香族), 6.61 (1H, J = 7.8 Hz, 芳香族), 6.57 (1H, d, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.41 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 4.48 (1H, m, CH), 2.90 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 2.72 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 3.70 (3H, s, CH3), 3.80 (3H, s, CH3)
【０１２８】
実施例37
3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-{[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイル]-メチル-アミノ}-プロピオン酸の製造
実施例36で得た、3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-{[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイル]-メチル-アミノ}-プロピオン酸メチルエステルを出発物質にして、実施例2と同様の方法で加水分解して目的化合物を得た。
【０１２９】
M/z 374.1 (M+H)
1H NMR (DMSO-d6) δ8.62, 8.67, 9.07, 9.31 (4H, br, -OH), 8.75 (1H, d, J = 8.0 Hz, NH), 7.20 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 6.93 (1H, d, J = 1.8Hz, 芳香族), 6.74 (1H, d, J = 8.1 Hz, 芳香族), 6.62 (1H, d, J = 1.8 Hz, 芳香族), 6.61 (1H, J = 7.8 Hz, 芳香族), 6.57 (1H, d, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.41 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 4.48 (1H, m, CH), 2.90 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 2.72 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 3.80 (3H, s, CH3)
【０１３０】
実施例38
3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-{[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイル]-メチル-アミノ}-プロピオン酸エチルエステルの製造
前記実施例3と同様の方法で合成したL-DOPAエチルエステルを出発物質にして、実施例29と同様の方法で目的化合物を合成した。
【０１３１】
M/z 402.8 (M+H)
1H NMR (DMSO-d6) δ8.62, 8.67, 9.07, 9.31 (4H, br, -OH), 8.75 (1H, d, J = 8.0 Hz, NH), 7.20 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 6.93 (1H, d, J = 1.8Hz, 芳香族), 6.74 (1H, d, J = 8.1 Hz, 芳香族), 6.62 (1H, d, J = 1.8 Hz, 芳香族), 6.61 (1H, J = 7.8 Hz, 芳香族), 6.57 (1H, d, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.41 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 4.48 (1H, m, CH), 2.90 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 2.72 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2) 4.12 (2H, q, J= 10.1, CH2) 1.30 (3H, t, J= 10.1, CH3) 3.80 (3H, s, CH3)
【０１３２】
実施例39
3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-{[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイル]-メチル-アミノ}-プロピオン酸プロピルエステルの製造
前記実施例4と同様の方法で合成したL-DOPAプロピルエステルを出発物質にして、実施例29と同様の方法で目的化合物を合成した。
【０１３３】
M/z 416.8 (M+H)
1H NMR (DMSO-d6) δ8.62, 8.67, 9.07, 9.31 (4H, br, -OH), 8.75 (1H, d, J = 8.0 Hz, NH), 7.20 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 6.93 (1H, d, J = 1.8Hz, 芳香族), 6.74 (1H, d, J = 8.1 Hz, 芳香族), 6.62 (1H, d, J = 1.8 Hz, 芳香族), 6.61 (1H, J = 7.8 Hz, 芳香族), 6.57 (1H, d, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.41 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 4.48 (1H, m, CH), 2.90 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 2.72 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2) 4.08 (2H, t, J= 10.1 Hz, CH2) 1.61 (2H, d, J= 10.1, 4.90 Hz, CH2) 0.96 (3H, t, J= 10.1, 4.90 Hz, CH3) 3.80 (3H, s, CH3)
【０１３４】
実施例40
3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-{[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイル]-メチル-アミノ}-プロピオン酸イソプロピルエステルの製造
前記実施例5と同様の方法で合成したL-DOPAイソプロピルエステルを出発物質にして、実施例29と同様の方法で目的化合物を合成した。
【０１３５】
M/z 416.8 (M+H)
1H NMR (DMSO-d6) δ8.62, 8.67, 9.07, 9.31 (4H, br, -OH), 8.75 (1H, d, J = 8.0 Hz, NH), 7.20 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 6.93 (1H, d, J = 1.8Hz, 芳香族), 6.74 (1H, d, J = 8.1 Hz, 芳香族), 6.62 (1H, d, J = 1.8 Hz, 芳香族), 6.61 (1H, J = 7.8 Hz, 芳香族), 6.57 (1H, d, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.41 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 4.48 (1H, m, CH), 2.90 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 2.72 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2) 4.31 (1H, br, CH) 1.35 (3H,s, CH3) 1.35 (3H, s, CH3) 3.80 (3H, s, CH3)
【０１３６】
実施例41
3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-{[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイル]-メチル-アミノ}-プロピオン酸tert-ブチルエステルの製造
前記実施例6と同様の方法で合成したL-DOPAtert-ブチルエステルを出発物質にして、実施例29と同様の方法で目的化合物を合成した。
【０１３７】
M/z 430.2 (M+H)
1H NMR (DMSO-d6) δ8.62, 8.67, 9.07, 9.31 (4H, br, -OH), 8.75 (1H, d, J = 8.0 Hz, NH), 7.20 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 6.93 (1H, d, J = 1.8Hz, 芳香族), 6.74 (1H, d, J = 8.1 Hz, 芳香族), 6.62 (1H, d, J = 1.8 Hz, 芳香族), 6.61 (1H, J = 7.8 Hz, 芳香族), 6.57 (1H, d, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.41 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 4.48 (1H, m, CH), 2.90 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 2.72 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2) 1.40 (3H, s, CH3) 1.40 (3H, s, CH3)1.40 (3H, s, CH3) 3.80 (3H, s, CH3)
【０１３８】
実施例42
N-[1-カルバモイル-2-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-エチル]-(S)-3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-N-メチル-アクリルアミドの製造
実施例36で得た、3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-{[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイル]-メチル-アミノ}-プロピオン酸メチルエステルを出発物質にして、実施例7と同様の方法で目的化合物を合成した。
【０１３９】
M/z 372.15 (M+H)
1H NMR (DMSO-d6) δ8.62, 8.67, 9.07, 9.31 (4H, br, -OH), 8.75 (1H, d, J = 8.0 Hz, NH), 7.20 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 6.93 (1H, d, J = 1.8Hz, 芳香族), 6.74 (1H, d, J = 8.1 Hz, 芳香族), 6.62 (1H, d, J = 1.8 Hz, 芳香族), 6.61 (1H, J = 7.8 Hz, 芳香族), 6.57 (1H, d, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.41 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 4.48 (1H, m, CH), 3.29 (1H, t, J=4.9, CH2), 2.90 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 2.72 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 3.80 (3H, s, CH3)
【０１４０】
実施例43
3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-N-[2-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-エチル]-アクリルアミドの製造
ドーパミン(Dopamine)を出発物質にして、実施例1の工程2と同様の方法でカフェイン酸(caffeic acid)と反応させて目的化合物を得た。
【０１４１】
M/z 316.15 (M+H)
1H NMR (DMSO-d6) δ8.62, 8.67, 9.07, 9.31 (4H, br, -OH), 8.75 (1H, d, J = 8.0 Hz, NH), 7.20 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 6.93 (1H, d, J = 1.8Hz, 芳香族), 6.74 (1H, d, J = 8.1 Hz, 芳香族), 6.62 (1H, d, J = 1.8 Hz, 芳香族), 6.61 (1H, J = 7.8 Hz, 芳香族), 6.57 (1H, d, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.41 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 4.48 (1H, m, CH), 3.29 (2H, t, CH2) 2.90 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 2.72 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2)
【０１４２】
実施例44
3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-N-[2-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-エチル]-N-メチル-アクリルアミドの製造
実施例29と同様の方法でN-メチルドーパミンを合成した後、これを出発物質にして、実施例1の工程2と同様の方法で目的化合物を合成した。
【０１４３】
M/z 330.15 (M+H)
1H NMR (DMSO-d6) δ8.62, 8.67, 9.07, 9.31 (4H, br, -OH), 8.75 (1H, d, J = 8.0 Hz, NH), 7.20 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 6.93 (1H, d, J = 1.8Hz, 芳香族), 6.74 (1H, d, J = 8.1 Hz, 芳香族), 6.62 (1H, d, J = 1.8 Hz, 芳香族), 6.61 (1H, J = 7.8 Hz, 芳香族), 6.57 (1H, d, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.41 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 4.48 (1H, m, CH), 3.29 (2H, t, CH2) 2.90 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 2.72 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2) 3.80 (3H, s, CH3)
【０１４４】
実施例45
(R)-2-[トランス-3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-3 -(4-ヒドロキシ-フェニル)-プロピオン酸メチルエステルの製造
(工程1) D-チロシンメチルエステル 塩酸塩の製造
D-チロシン(2.7mmol、0.5g)を0℃で塩化チオニル(27mmol、1.8ml)とメタノール(10ml)の混合溶液に溶解した後、15〜18時間の間反応させた。得られた反応液を濃縮した後、真空減圧し乾燥して得た。
【０１４５】
(工程2) (R)-2-[トランス-3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-3-(4-ヒドロキシ-フェニル)-プロピオン酸メチルエステルの製造
前記工程1で合成した、D-チロシンメチルエステル塩酸塩をDMF(14ml)に溶解した後、カフェイン酸(2.9mmol、0.522g)、PyBOP(3.2mmol、1.68g)、トリエチルアミン(6.75mmol、0.94ml)を添加して、室温で15〜18時間反応させた。エチルアセテートで稀釈後、5％HCl溶液と塩水で洗浄して濃縮した。残渣は、シリカゲルカラムで精製して目的化合物を得た(n-ヘキサン：エチルアセテート：メタノール= 5：4：1)。純度は、RP分析用HPLC(Aは1％TFAを含んだ水、Bは1％TFAを含んだアセトニトリル)を使用して確認した(23％、0〜30％(B)/30min、1ml/1min)。全体収率：81％
【０１４６】
TLC(n-ヘキサン：エチルアセテート：メタノール= 5：4：1) Rf = 0.5
M/z 358 (M+H), 370 (M+Na)
1H NMR (DMSO-d6) δ8.62, 8.67, 9.05 (4H, br, -OH), 8.75 (1H, d, J = 8.0 Hz, NH), 7.20 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 6.93 (1H, d, J = 1.8Hz, 芳香族), 6.74 (1H, d, J = 8.1 Hz, 芳香族), 6.62 (1H, d, J = 1.8 Hz, 芳香族), 6.61 (1H, J = 7.8 Hz, 芳香族), 6.57 (1H, d, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.51 (1H, d, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.41 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 4.48 (1H, m, CH), 2.90 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 2.72 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 3.80 (3H, s, CH3)
【０１４７】
実施例46
(R)-2-[トランス-3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-3-(4-ヒドロキシ-フェニル)-プロピオン酸の製造
実施例45で合成した、(R)-2-[トランス-3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-3-(4-ヒドロキシ-フェニル)-プロピオン酸メチルエステルを出発物質にして、実施例2と同様の方法で目的化合物を合成した。
【０１４８】
M/z 344.3 (M+H), 366.2 (M+Na)
1H NMR (DMSO-d6) δ8.62, 8.67, 9.05 (4H, br, -OH), 8.75 (1H, d, J = 8.0 Hz, NH), 7.20 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 6.93 (1H, d, J = 1.8Hz, 芳香族), 6.74 (1H, d, J = 8.1 Hz, 芳香族), 6.62 (1H, d, J = 1.8 Hz, 芳香族), 6.61 (1H, J = 7.8 Hz, 芳香族), 6.57 (1H, d, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.51 (1H, d, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.41 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 4.48 (1H, m, CH), 2.90 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 2.72 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2)
【０１４９】
実施例47
(R)-2-[トランス-3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-3 -(4-ヒドロキシ-フェニル)-プロピオン酸メチルエステルの製造
L-チロシンを出発物質にして、実施例45の製造方法と同様の方法で80％の(R)-2-[3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-3-(4-ヒドロキシ-フェニル)-プロピオン酸メチルエステルを合成した。
【０１５０】
TLC(n-ヘキサン：エチルアセテート：メタノール= 5：4：1) Rf=0.5
M/z 358 (M+H), 370 (M+Na)
1H NMR (DMSO-d6) δ8.62, 8.67, 9.05 (4H, br, -OH), 8.75 (1H, d, J = 8.0 Hz, NH), 7.20 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 6.93 (1H, d, J = 1.8Hz, 芳香族), 6.74 (1H, d, J = 8.1 Hz, 芳香族), 6.62 (1H, d, J = 1.8 Hz, 芳香族), 6.61 (1H, J = 7.8 Hz, 芳香族), 6.57 (1H, d, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.51 (1H, d, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.41 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 4.48 (1H, m, CH), 2.90 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 2.72 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 3.80 (3H, s, CH3)
【０１５１】
実施例48
(S)-2-[トランス-3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-3-(4-ヒドロキシ-フェニル)-プロピオン酸の製造
実施例47で合成した、(S)-2-[トランス-3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-3-(4-ヒドロキシ-フェニル)-プロピオン酸メチルエステルを出発物質にして、実施例2と同様の方法で目的化合物を合成した。
【０１５２】
M/z 344.1 (M+H)
1H NMR (DMSO-d6) δ8.62, 8.67, 9.05 (4H, br, -OH), 8.75 (1H, d, J = 8.0 Hz, NH), 7.20 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 6.93 (1H, d, J = 1.8Hz, 芳香族), 6.74 (1H, d, J = 8.1 Hz, 芳香族), 6.62 (1H, d, J = 1.8 Hz, 芳香族), 6.61 (1H, J = 7.8 Hz, 芳香族), 6.57 (1H, d, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.51 (1H, d, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.41 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 4.48 (1H, m, CH), 2.90 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 2.72 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2)
【０１５３】
実施例49
2-[3-(3,4-ジヒドロキシ-ベンジル)-ウレイド]-3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-プロピオン酸メチルエステルの製造
3,4-ジメチルフェニルアセト酸(1g、5.1mmol)を反応溶媒SOCl2(2.65ml)と反応させて、真空減圧後、濃縮して得られた残渣をアセトンに溶解させた。前記反応物にアジ化ナトリウム(55.9mmol)を蒸留水1.5mLに溶解した溶液を徐々に滴下して0℃で24時間の間反応させた。
【０１５４】
反応終了後、溶媒を真空減圧し除去して得られた残渣をエチルアセテートで抽出した後、硫酸マグネシウムを入れ乾燥後、ろ過した。ろ液を減圧濃縮して得られた残渣をベンゼン(30ml)に溶解させた後、80℃で16時間の間反応させた。反応終了後、真空減圧して溶媒を除去してイソシアナート化合物を製造した。前記得られた化合物をジクロロメタン40mlに溶解させた後、そこにジメチルホルムアミド2.5mlに溶解したL-DOPAメチルエステル(1.717g)溶液及びトリエチルアミン3.38mlを添加した後、常温で32時間の間反応させた。反応終了後、減圧下で反応溶液内溶媒を除去して固体状態の3-(3,4-ジヒドロキシフェニル)-2-[3,3-ジメトキシベンジルウレイド]プロピオン酸メチルエステルを製造した。前記得られた化合物は特別な精製なしに次の反応に使用した。
【０１５５】
前記化合物を-40℃に維持された反応器に入れた後、ジクロロメタンに溶解した1M BBr3溶液12.7mlを注入して温度を維持しながら2時間の間反応させた。反応終了後、反応器の温度を徐々に上げて4℃で蒸留水10mlを注入した後、同一温度で2時間の間さらに反応させた後、反応器内溶媒を減圧蒸留で除去した。得られた残渣をエチルアセテート50mlに溶解させた後、水100ml及びかん水(brine)100mlの順に洗浄した後、減圧して目的化合物を合成した(収率25％)。
【０１５６】
M/z 375.1 (M-H-)
1H NMR(200 MHz, DMSO) δ6.68-6.09(m, 6H), 4.40(t, 1H), 4.03(s, 2H), 3.60(s, 3H), 2.78(d, 2H)
【０１５７】
実施例50
3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-2-[2-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アセチルアミノ]-プロピオン酸メチルエステル
3,4-ジヒドロキシルフェニルアセト酸を出発物質にして、実施例1と同様の方法で目的化合物を合成した。 
【０１５８】
M/z 360.1 (M-H-)
1H NMR(200 MHz, DMSO) δ6.68-6.09(m, 6H), 4.40(t, 1H), 3.93(s, 2H), 3.60(s, 3H), 2.78(d, 2H)
【０１５９】
実施例51
2-(3,4-ジヒドロキシ-ベンゾイルアミノ)-3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-プロピオン酸メチルエステル
3,4-ジヒドロキシルベンゾ酸を出発物質にして、実施例1と同様の方法で目的化合物を合成した。 
【０１６０】
M/z 346.1 (M-H-)
1H NMR(200 MHz, DMSO) δ6.68-6.09(m, 6H), 4.40(t, 1H), 3.60(s, 3H), 2.78(d, 2H)
【０１６１】
実施例52
3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-2-[3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-プロピオニルアミノ]-プロピオン酸メチルエステル
反応器に実施例1で製造した、3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸メチルエステル10gをメタノール10mlに溶解させた後、Pd-Cを0.3当量比程度入れた後、水素ガスを充填して常温で18時間の間反応させた。得られた生成物をセライトで処理して不純物を除去した後、減圧し、溶媒を除去して得られた残渣を逆相カラムを装着したprep-HPLCを利用して目的化合物を精製した。
【０１６２】
M/z 374.1 (M-H-)
1H NMR(200 MHz, DMSO) δ6.68-6.09(m, 6H), 4.40(t, 1H), 3.60(s, 3H), 2.78(d, 2H), 2.80(t, 2H), 2.47(t, 2H)
【０１６３】
実施例53
3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-2-[3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アリルアミノ]-プロピオン酸メチルエステルの製造
反応器に実施例1で製造した、3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸メチルエステル0.9g(3.6mmol, 1.3eq.)をTHF20mlに溶解させた後、アセト酸200μl(1％)を添加した。続けて4-ヒドロキシ-3-メトキシシンナムアルデヒド0.5g(2.8mmol, 1eq.)を添加した後、常温で1時間の間撹拌させた後、NaCNBH3(1M溶液 in THF)0.53ml(8.4mmol, 3eq.)を徐々に添加した後、8時間の間常温で反応させた。
【０１６４】
反応終了後、減圧して溶媒を除去した後、得られた残渣をエチルアセテート、1M HClで各々2回及びブリンで1回洗浄した。続いて生成物を硫酸マグネシウムで乾燥させた後、ろ過後真空減圧させ得られた残渣をシリカゲルカラム(CHCl3：MeOH：AcOH：H2O = 600：16：2.5：0.5)を通過させ中間体350mg(収率33.4％)を製造した。
【０１６５】
-40℃に維持された反応器に前記の得られた中間体350mg(0.93mmol, 1 eq)をジクロロメタン20mlに溶解させた後、ジクロロメタンに溶解した1M BBr3溶液1.6ml(9.3mmol, 10eq.)を滴下した後、5時間の間反応させ、続いて温度を室温に徐々に上げた。反応器に冷却水10mlを注入して反応を終結させ、反応器内ジクロロメタン溶液を除去した後、エチルアセテートで2回、1M HClで2回及びブリンで1回洗浄した。続いて硫酸マグネシウムで乾燥した後、ろ過、減圧して得られた残渣をシリカゲルカラム(CHCl3：MeOH：AcOH：H2O=250：16：2.5：0.5)を通過させ目的化合物80mg(収率24％)を得た。
【０１６６】
M/z 358.1 (M-H-)
1H NMR(200 MHz, DMSO) δ6.68-6.09(m, 6H), 3.93(s, 2H), 3.60(s, 3H), 3.12 (d, 2H), 2.78(d, 2H)
【０１６７】
実施例54
(R)-3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリル酸2-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-1-メトキシカルボニルエチルエステルの製造
ロズマリン酸(50mg,0.136mmol)を10mLメチルアルコールに溶解した後、塩化チオニル(3eq, 98.86mg, 72μl)を0℃で滴下した。反応混合物は窒素雰囲気下で18時間の間撹拌した後、過量のメチルアルコールと塩化チオニルを減圧蒸留した。生成物をメタノールに溶かしてprep用逆相カラムを装着したHPLCを利用して目的化合物を分離した。
【０１６８】
TLC(n-ヘキサン：エチルアセテート：メタノール=4：5：1)生成物 Rf=0.69
M/z 371.15 (M+H) +
1H NMR (DMSO-d6) δ8.72, 8.78, 9.15, 9.64 (4H, br, -OH), 7.46 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 7.05 (1H, d, J = 1.8Hz, 芳香族), 7.00 (1H, dd, J = 8.1 Hz, 1.5 Hz 芳香族), 6.76 (1H, d, J = 1.8 Hz, 芳香族), 6.67 (1H, J = 2.0Hz, 芳香族), 6.63 (1H, J = 6.2 Hz, 芳香族), 6.51 (1H, dd, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.23 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 4.48 (1H, m, CH), 2.90 (1H, dd, J = 13.7, 4.9 Hz, CH2), 2.72 (1H, dd, J = 13.7, 4.9 Hz, CH2) 3.19 (3H, s, CH3)
【０１６９】
実施例55
(R)-3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリル酸2-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-1-プロポキシカルボニルエチルエステルの製造
ロズマリン酸(50mg、0.136mmol)を10mL 1-プロピルアルコールに溶解した後、塩化チオニル(3eq, 98.86mg, 72μl)を0℃で滴下した。反応混合物は窒素雰囲気下で18時間の間撹拌した後、過量の1-プロピルアルコールと塩化チオニルを減圧蒸留した。生成物をメタノールに溶かしてprep用逆相カラムを装着したHPLCを利用して目的化合物を分離した。
【０１７０】
TLC(CHCl3：アセトン：MeOH：H2O=8：8：3：1)Rf=0.72
M/z 403.15 (M+H) +
1H NMR (DMSO-d6) δ8.72, 8.78, 9.15, 9.64 (4H, br, -OH), 7.46 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 7.05 (1H, d, J = 1.8Hz, 芳香族), 7.00 (1H, dd, J = 8.1 Hz, 1.5 Hz 芳香族), 6.76 (1H, d, J = 1.8 Hz, 芳香族), 6.67 (1H, J = 2.0Hz, 芳香族), 6.63 (1H, J = 6.2 Hz, 芳香族), 6.51 (1H, dd, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.23 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 4.48 (1H, m, CH), 2.90 (1H, dd, J = 13.7, 4.9 Hz, CH2), 2.72 (1H, dd, J = 13.7, 4.9 Hz, CH2) 3.12 (2H, t, CH2) 1.61 (2H, m, CH2), 1.03 (3H, t, CH3)
【０１７１】
実施例56
(R)-3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリル酸2-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-1-tert-ブトキシカルボニルエチルエステルの製造
ロズマリン酸(100mg,0.278mmol)を出発物質にして、前記物質を5mLテトラヒドロフラン溶媒下で溶解した後、硫酸200ulを入れた後、亜イソブチレンガスをドライアイスで凝縮溶液化させて3日間反応させた。得られた生成物をprep用逆相カラムを装着したHPLCを利用して目的化合物を分離した。
【０１７２】
TLC(n-ヘキサン：エチルアセテート：メタノール= 4：5：1)生成物 Rf=0.8
M/z 417.15 (M+H) +
1H NMR (DMSO-d6) δ8.72, 8.78, 9.15, 9.64 (4H, br, -OH), 7.46 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 7.05 (1H, d, J = 1.8Hz, 芳香族), 7.00 (1H, dd, J = 8.1 Hz, 1.5 Hz 芳香族), 6.76 (1H, d, J = 1.8 Hz, 芳香族), 6.67 (1H, J = 2.0Hz, 芳香族), 6.63 (1H, J = 6.2 Hz, 芳香族), 6.51 (1H, dd, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.23 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 4.48 (1H, m, CH), 2.90 (1H, dd, J = 13.7, 4.9 Hz, CH2), 2.72 (1H, dd, J = 13.7, 4.9 Hz, CH2) 1.40 (9H, s, (CH3)3)
【０１７３】
実施例57
(R)-3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリル酸2-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-1-カルバモイルエチルエステルの製造
ロズマリン酸(50mg、0.136mmol)をアンモニアガスで充填された10mL テトラヒドロフランに溶解した後、一日中撹拌させた。過量の溶媒は減圧蒸留して除去した後、得られた生成物をメタノールに溶かしてprep用逆相カラムを装着したHPLCを利用して目的化合物を分離した。
【０１７４】
TLC(n-ヘキサン：エチルアセテート：メタノール=4：5：1)生成物 Rf=0.43,
M/z 360.15 (M+H) +
1H NMR (DMSO-d6) δ8.72, 8.78, 9.15, 9.64 (4H, br, -OH), 7.46 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 7.05 (1H, d, J = 1.8Hz, 芳香族), 7.00 (1H, dd, J = 8.1 Hz, 1.5 Hz 芳香族), 6.76 (1H, d, J = 1.8 Hz, 芳香族), 6.67 (1H, J = 2.0Hz, 芳香族), 6.63 (1H, J = 6.2 Hz, 芳香族), 6.51 (1H, dd, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.23 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 4.48 (1H, m, CH), 2.90 (1H, dd, J = 13.7, 4.9 Hz, CH2), 2.72 (1H, dd, J = 13.7, 4.9 Hz, CH2)
【０１７５】
実施例58
(R)-3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリル酸2-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-1-イソプロピルカルバモイルエチルエステルの製造
ロズマリン酸(100mg、0.278mmol)を10mLテトラヒドロフランに溶解した後、塩化チオニル(3eq、98.86mg、72μl)を0℃で滴下した後、500uLのイソプロピルアミン(347mg、5.8mmol)を徐々に滴下した後、撹拌した。反応混合物は窒素雰囲気下で18時間の間撹拌した後、過量の溶媒、アミン、塩化チオニルを減圧蒸留した。生成物をメタノールに溶かしてprep用逆相カラムを装着したHPLCを利用して目的化合物を分離した。
【０１７６】
TLC(CHCl3：アセトン：MeOH：H2O = 8：8：3：1) Rf = 0.70
M/z 402.15 (M+H) +
1H NMR (DMSO-d6) δ8.72, 8.78, 9.15, 9.64 (4H, br, -OH), 7.46 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 7.05 (1H, d, J = 1.8Hz, 芳香族), 7.00 (1H, dd, J = 8.1 Hz, 1.5 Hz 芳香族), 6.76 (1H, d, J = 1.8 Hz, 芳香族), 6.67 (1H, J = 2.0Hz, 芳香族), 6.63 (1H, J = 6.2 Hz, 芳香族), 6.51 (1H, dd, J = 7.9, 1.8 Hz, 芳香族), 6.23 (1H, d, J = 15.7 Hz, CH), 4.48 (1H, m, CH), 2.90 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2), 2.72 (1H, dd, J = 13. 7, 4.9 Hz, CH2) 4.31 (1H, br, CH) 1.32 (3H, s, (CH3)2)
【０１７７】
本発明の薬学的組成物は非経口及び経口で投与でき、下記に示すように非経口用剤形として注射剤、経口用剤形としてシロップ剤及び錠剤に製造した。
【０１７８】
<製剤例1> 注射液剤の製造方法
有効成分10mgを含む注射液剤は、下記の方法で製造した。
実施例1の化合物1g、塩化ナトリウム0.6g及びアスコルビン酸0.1gを蒸留水に溶解させて100mlにした。この溶液をビンに入れ20℃で30分間加熱して滅菌した。
【０１７９】
前記注射液剤の構成成分を下記に示す。
実施例1の化合物 ・・・・・・・・・・・・・・・・・1g
塩化ナトリウム・・・・・・・・・・・・・・・・・0.6g
アスコルビン酸・・・・・・・・・・・・・・・・・0.1g
蒸留水・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・定量
【０１８０】
<製剤例2> シロップ剤の製造方法
本発明の化合物の酸付加塩及び薬学的に許容されるその塩を有効成分として2％(重量/体積)含有するシロップは、下記の方法で製造する。
実施例1の化合物の酸付加塩、サッカリン、糖を温水80gに溶解させた。この溶液を冷却した後、ここにグリセリン、サッカリン、香味料、エタノール、ソルビン酸及び蒸留水からなる溶液を製造して混合した。この混合物に水を添加して100mlになるようにした。 
【０１８１】
前記シロップ剤の構成成分を下記に示す。
実施例1の化合物の酸付加塩 ・・・・・・・・・・2g
サッカリン・・・・・・・・・・・・・・・・・・0.8g
糖・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・25.4g
グリセリン・・・・・・・・・・・・・・・・・・8.0g
香味料・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・0.04g
エタノール・・・・・・・・・・・・・・・・・・4.0g
ソルビン酸・・・・・・・・・・・・・・・・・・0.4g
蒸留水・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・定量
【０１８２】
<製剤例3> 錠剤の製造方法
有効成分15mgを含んだ錠剤は、次の方法で製造する。
実施例1の化合物250gをラクトース175.9g、ジャガイモ澱粉180g及びコロイド性硅酸32gと混合した。この混合物に10％ゼラチン溶液を添加させた後、粉砕して14メッシュ体を通過させた。これを乾燥させてそこにジャガイモ澱粉160g、滑石50g及びステアリン酸マグネシウム5gを添加して得られた混合物を錠剤に製造した。
【０１８３】
前記錠剤の構成成分を下記に示す。
実施例1の化合物 ・・・・・・・・・・・・・・・250g
ラクトース・・・・・・・・・・・・・・・・・・175.9g
ジャガイモ澱粉・・・・・・・・・・・・・・・・180g
コロイド性硅酸・・・・・・・・・・・・・・・・32g
10％ゼラチン溶液
ジャガイモ澱粉・・・・・・・・・・・・・・・・160g
滑石・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・50g
ステアリン酸マグネシウム・・・・・・・・・・・5g
【０１８４】
前記実施例1〜53による本発明の化合物のlckのSH2ドメインに対する活性抑制効果及びT細胞の増殖を惹起するIL-2遺伝子の発現抑制効果を調べるために下記の実験を実施した。
【０１８５】
実験例1：本発明の化合物の試験管内lckのSH2ドメインとそのドメインに特異的に結合するペプチド間の結合抑制効果
本発明では、試験管内結合分析システム(BIAcore 2000)を使用してGST(Glutathione transferase)と結合したlckのSH2ドメインと特異的に結合するpYEEIと同様の配列を含むペプチドSGSGEEPQpYEEIPIとの相互作用に対するフェニル誘導体の結合阻害活性を測定した。
【０１８６】
まず、前記ペプチドをビオチン化してBIAcore分析機器表面に固定化させた後、GST-lckSH2タンパク質を流し加えた。前記ペプチドに対するGST-lckSH2結合の測定値は、共鳴ユニット(resonance units, 以下「RU」と略称する)で表わされ、1,000RUは結合したタンパク質1ng/1mm2流面(flow surface)を意味する。固定化されたペプチドにGST-lckSH2が結合する場合、難溶インデックス(refractory index)を変化させRUが増加され、固定化されたペプチドにGST-lckSH2の結合が阻害されるとRUの値が減少する。前記実験結果は、表1に示した。下記の表1から本発明の化合物のGST-lckSH2と固定化されたペプチド間の結合抑制能力は、IC50値(50％ inhibition concentration)で、+：25-50uM； ++：10-25uM； +++：10uMで示した。
【０１８７】
（表１）lck SH2-pYEEEI相互作用に対するフェニル誘導体の活性抑制効果
2005522523.tif 000009
2005522523.tif 000010
2005522523.tif 000011
【０１８８】
前記表1から分かるように、特に本発明の化合物中のY1とY2がエステルまたはアミドを形成する場合、lckのSH2-pYEEEIと特異的に結合するペプチドの結合阻害活性が高く、X1が-NH-または-O-であり； X2が-C(=O)-または-C(=S)-であり； X3が
2005522523.tif 000012
の時、結合阻害活性が高い。このようにGST-lckSH2と強い結合を有する本発明の化合物は、lckのSH2ドメインと結合するタンパク質との結合を阻害することにより、これらシグナル伝達複合体の形成を防ぎ前記シグナル伝達複合体が仲介する疾患を予防または治療できる。
【０１８９】
実験例2：試験管内IL-2 遺伝子発現に対する抑制効果
本発明の化合物が細胞膜を透過してT細胞の増殖を惹起するIL-2遺伝子の発現を抑制するかどうか調べるために、IL-2プロモータ下流に融合されているルシフェラーゼ活性を測定することによりT細胞活性を確認した。
【０１９０】
IL-2プロモータ活性を測定するためにIL-2のプロモータ部位とルシフェラーゼの構造遺伝子部位を融合したプラスミド1×106ジャーカット(Jurkat)T細胞をSuperfect TM (Qiagen Inc.)を使用してトランスフェクションさせた。24時間の間培養した後、T細胞を活性化させる前に多様な濃度(1μM〜50μM)の化合物を2時間の間処理して5μg/ml anti-CD3抗体で塗布された35mm皿で16時間の間培養することによりT細胞を活性化させた。ルシフェラーゼ活性は、Berthold光度測定機(luminometer) LB953で測定した。IL-2プロモータ活性に対する本発明の化合物の50％阻害濃度(IC50、50％ inhibition concentration)を下記の表2に示した。
【０１９１】
（表２）
2005522523.tif 000013
【０１９２】
前記表2から分かるように、本発明の化合物は1〜25uMの濃度でIL-2プロモータの活性を効果的に抑制した。特に実施例1、3、7、10、11、17及び54〜58の化合物は強力にIL-2プロモータの活性を抑制した。
【０１９３】
このように本発明の化合物がT細胞の活性化及び増殖を惹起するTCRが仲介するシグナル伝達を抑制することにより、自己免疫疾患や慢性炎症疾患のようなT細胞仲介性反応に関連した病気を予防したり治療するのに利用できる。
【０１９４】
実験例3：皮膚移植拒絶反応に対する抑制効果
本発明のフェニル誘導体の皮膚移植拒絶反応に対する抑制効能は動物移植皮膚の生存時間を測定する、生体内標準薬理テストで確認した。
【０１９５】
同種移植拒絶反応は、同種異系Balb/C(H-2d)マウスの尾の皮膚をC57BL/6(H-2b)マウスに移植して行なった。1化合物に対して7匹のマウスを1群に分類して実験した。すべてのフェニル誘導体は、100％エタノールに溶解した後、オリーブ油と混合してエタノールの最終濃度が5％以上にならないように製造した。100mg/kg/dayで本発明の化合物を移植した日から拒絶する日まで腹腔内(i.p)投薬した。処理をしていないマウスは、拒絶対照群としてオリーブ油エタノールを投与した。移植皮膚の生存時間は、7〜9日目に包帯を除去した後、皮膚移植組織を毎日観察した。移植組織の80％以上がネクロシス(necrosis)を起こす時、拒絶反応を起こすものとみなした。得られた実験結果を下記の表3に示した。
【０１９６】
（表３）皮膚移植拒絶抑制効果
2005522523.tif 000014
【０１９７】
前記表3によると、本発明の化合物が免疫抑制を惹起して皮膚移植拒絶を防止することが分かった。具体的に本発明の化合物で処理した実験群では、拒絶対照群で拒絶反応を起こす9〜10日の間には、拒絶反応が観察されず、皮膚移植組織の20％より小さい部位で傷が黒くシワが入ったカサブタが生じる拒絶反応を示し、皮膚移植生存を3〜5日延長させる効果を示した。 
【０１９８】
併用投与効果は、実施例1の化合物を準最適量(suboptimal dose)の50 mg/kg/dayを投与して既存の免疫抑制剤として使用されるラパマイシンを適正量(optimal dosage)の4mg/kg/dayの25％量を投与した場合、ラパマイシン単独で使用時の免疫抑制効果より飛び抜けた結果を得ることができた。
【０１９９】
このように本発明の化合物がT細胞増殖を惹起するIL-2遺伝子発現を抑制することにより移植拒絶症状等、T細胞仲介性反応に関連した病気を予防したり治療するのに利用できることが分かる。
【０２００】
実験例4：試験管内コラーゲン誘導された関節炎抑制効果
DBA/1LacJマウス(オス8週齢)に100μg ウシII型コラーゲン(CII)とCFAエマルジョンを尾基底部に皮下注射してコラーゲンで関節炎(collagen-induced arthritis)を誘発させた。2週後、50μg CII/IFAで免疫増強(booster immunization)した。一次免疫後、3週目になる日から15〜20日間試薬を群当り6〜8匹に反復的に腹腔注射した。
【０２０１】
対照群は、5％エタノール・オリーブ油混合対照群を使用して100μL/day 用量で毎日一回ずつ計15〜20回注射した。広く使用されている関節炎治療剤のメトトレキサート(Methotrexate)はPBSに溶かして1mg/kg/day用量で一日おきに計8〜10回注射した。また、本発明の化合物(調査群)は、エタノールに溶かして最終濃度が5％になるようにオリーブ油にエマルジョン化した後、50mg/kg/day用量で注射した。
【０２０２】
一次免疫後、3週目になる日から関節の腫脹と浮腫程度を毎日観察して関節炎点数を決定した。マウスの各足に対する関節炎指数の基準は、下の表4のとおりで、表4では各化合物の関節炎抑制効果をマウス一個体当り、各足の関節炎指数をすべて合計した後、([関節炎指数最高4点/足] × [4足/マウス] = 個体当り最高関節炎指数は16点)他のマウスの関節炎指数との平均値±標準偏差で表示した。その結果を下記の表5に示した。
【０２０３】
（表４）
2005522523.tif 000015
【０２０４】
（表５）関節炎抑制効果
2005522523.tif 000016
【０２０５】
前記表5によると、ヒドロキシルフェニル誘導体は大部分効果的な関節炎治療を示した。先に例示したIL-2プロモータ分析と同様にヒドロキシルフェニル誘導体はカルボキシル残基にメチル、エチル残基を添加した場合さらに効果が増加されることを知ることができた。これは、結合アッセイ(binding assay)では大差を示さないので、残基の添加による細胞透過力の向上のためであると思慮される。
【０２０６】
実験例5：ラットに対する経口投与急性毒性実験
式1で示される本発明の化合物の急性毒性を調べるために、下記の実験を行なった。
【０２０７】
6週齢の特定病原不在(SPF)SD系ラットを使用して、急性毒性実験を実施した。群当り2匹ずつの動物に本発明の化合物を各々0.5％メチルセルロース溶液に懸濁して1g/kg/15mlの用量で単回経口投与した。試験物質投与後、動物の斃死有無、臨床症状及び体重変化等を観察して血液学的検査と血液生化学的検査を実施した。剖検して肉眼で腹腔臓器と胸腔臓器の異常有無を観察した。試験の結果、試験物質を投与したすべての動物で特記に値する臨床症状は見られず、斃死した動物もなかった。また、体重変化、血液検査、血液生化学検査、剖検所見等でも毒性変化は観察されなかった。以上の結果、実験した化合物はすべてラットにおいて500mg/kgまで毒性変化を示さなかったので経口投与最少致死量(LD50)は、1g/kg以上の安全な物質と判断され、前記結果から本発明の式1で示される化合物は、静脈、皮下(subcutaneous)、鼻(intranasal)、気管支(intrabronichial)、直腸(rectal)だけではなく経口投与しても副作用が少ないことが分かった。
【０２０８】
以上、詳細に説明したように、本発明による化合物は、lckのSH2ドメインの活性を阻害して免疫反応を惹起する細胞内IL-2遺伝子発現を抑制して試験管内及び生体内免疫反応を阻害する。したがって、本発明の化合物は、lckのSH2ドメインまたはSrc系タンパク質チロシンキナーゼのSH2ドメインを抑制するのに有用に使用できるだけではなく、臓器移植拒絶症状、自己免疫症状、炎症等を緩和するのに使用でき、活性効果が優れ投与量を減らすことができ、関節炎治療剤より経口投与時の副作用が少ないため新しい炎症疾患治療剤または関節炎治療剤として有用に使用できる。
【０２０９】
本発明を実例の方式で記載したが、使用した専門用語は、制限することではなくむしろ説明することの本質に存在するのが目的であることは理解される。本発明において、上記技術の観点から多くの改変及び変更が可能である。従って、本発明が、添付の特許請求の範囲内で、具体的な記述とは別の方法で実施されてもよいことは理解される。
【手続補正書】
【提出日】平成16年12月14日(2004.12.14)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記の式1で示される誘導体及びその薬学的に許容される塩：
式1
2005522523.tif 000023
式中、R1、R2、R3、R4及びR5は、互いにそれぞれ独立して、この中で少なくとも一つがヒドロキシ基であり、残りは水素；ハロゲン原子；C1〜C3のアルコシキ基；アルデヒド基；カルボキシル基；アミノ基；トリフルオロメチル基；及びニトロ基からなる群より選択され；
R6、R7、R8、R9及びR10は、互いにそれぞれ独立して、この中で少なくとも一つがヒドロキシ基であり、残りは水素；ハロゲン原子；C1〜C3のアルコシキ基；アルデヒド基；カルボキシル基；アミノ基；トリフルオロメチル基；及びニトロ基からなる群より選択され；
X1は、O；S；-NH；-N(CH3)-；-N(CH2CH3)-；または-NHNH-であり；
X2は、-CH2-；-C(=O)-；-C(=S)-；または-C(=O)-NH-であり；
X3は、
2005522523.tif 000024
；
2005522523.tif 000025
；及び-(CH2)m-からなる群より選択され；ここで、A1は、水素；C1〜C4の直鎖または側鎖状のアルキル基；チオール基；フェニル基；シアノ基；またはC1〜C3のアルコキシカルボニル基であり、A2は、水素；またはC1〜C4の直鎖または側鎖状のアルキル基であり、nは0、1または2であり、mは0、1または2である；
Y1は、水素；-CH2-；-C(=O)-；-C(=S)-；C1〜C4の直鎖または側鎖状のアルキル基またはアリル基で置換されたアミン；
2005522523.tif 000026
；及び
2005522523.tif 000027
からなる群より選択され；但し、 Y1が水素の時、X1は-NH-ではなく；
Y2は、不在か；-NZ11Z12；-O-Z2；または-S-Z2であり；
前記Z11またはZ12は、互いにそれぞれ独立して、水素；選択的にt-ブトキシカルボニル基で置換されたアミン；C1〜C12の直鎖または側鎖状のアルキル基；アリル基；シクロアルキル基；またはヘテロアルキル基であり、但し、X1がOであり、Y1が-C(=O)-の時、Z2は水素、-CH2CH3または-CH(CH3)2ではなく；
Z2は、水素；C1〜C12の直鎖または側鎖状のアルキル基；アリル基；シクロアルキル基；またはヘテロアルキル基であり；
Bは、水素またはアルキル基であり；
*は、不斉炭素を示す。
【請求項２】
Y1が-C(=O)-であり、かつY2がNH2または-O-Z2であり、ここでZ2はC1〜C5の直鎖または側鎖状のアルキル基である、請求項1記載の誘導体またはその塩。 
【請求項３】
式1の誘導体が、
1) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸メチルエステル；
2) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸；
3) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸エチルエステル；
4) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸プロピルエステル；
5) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸イソプロピルエステル；
6) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸tert-ブチルエステル；
7) N-[カルバモイル-2-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-エチル]-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリルアミド；
8) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸メチルエステル；
9) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸；
10) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸エチルエステル；
11) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸プロピルエステル；
12) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸イソプロピルエステル；
13) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-プロピオン酸tert-ブチルエステル；
14) N-[カルバモイル-2-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-エチル]-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリルアミド；
15) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオン酸メチルエステル；
16) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオン酸；
17) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオン酸エチルエステル；
18) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオン酸プロピルエステル；
19) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオン酸イソプロピルエステル；
20) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオン酸tert-ブチルエステル；
21) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオンアミド；
22) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオン酸メチルエステル；
23) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオン酸；
24) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオン酸エチルエステル；
25) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオン酸プロピルエステル；
26) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオン酸イソプロピルエステル；
27) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオン酸tert-ブチルエステル；
28) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-チオアクリロイルアミノ]-プロピオンアミド；
29) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-{[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイル]-メチル-アミノ}-プロピオン酸メチルエステル；
30) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-{[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイル]-メチル-アミノ}-プロピオン酸；
31) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-{[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイル]-メチル-アミノ}-プロピオン酸エチルエステル；
32) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-{[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイル]-メチル-アミノ}-プロピオン酸プロピルエステル；
33) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-{[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイル]-メチル-アミノ}-プロピオン酸イソプロピルエステル；
34) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(R)-2-{[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイル]-メチル-アミノ}-プロピオン酸tert-ブチルエステル；
35) N-[1-カルバモイル-2-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-エチル]-(R)-3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-N-メチル-アクリルアミド；
36) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-{[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイル]-メチル-アミノ}-プロピオン酸メチルエステル；
37) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-{[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイル]-メチル-アミノ}-プロピオン酸；
38) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-{[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイル]-メチル-アミノ}-プロピオン酸エチルエステル；
39) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-{[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイル]-メチル-アミノ}-プロピオン酸プロピルエステル；
40) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-{[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイル]-メチル-アミノ}-プロピオン酸イソプロピルエステル；
41) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-(S)-2-{[3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイル]-メチル-アミノ}-プロピオン酸tert-ブチルエステル；
42) N-[1-カルバモイル-2-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-エチル]-(S)-3-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-N-メチル-アクリルアミド；
43) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-N-[2-トランス-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-エチル] -アクリルアミド；
44) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-N-[2-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-エチル]-N-メチル -アクリルアミド；
45) (R)-2-[トランス-3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-3-(4-ヒドロキシ-フェニル)-プロピオン酸メチルエステル；
46) (R)-2-[トランス-3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-3-(4-ヒドロキシ-フェニル)-プロピオン酸；
47) (R)-2-[トランス-3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-3-(4-ヒドロキシ-フェニル)-プロピオン酸メチルエステル；及び
48) (S)-2-[トランス-3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリロイルアミノ]-3-(4-ヒドロキシ-フェニル)-プロピオン酸
49) (S)-2-[3-(3,4-ジヒドロキシ-ベンジル)-ウレイド]-3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-プロピオン酸メチルエステル；
50) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-2-[2-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アセチルアミノ]-プロピオン酸メチルエステル；
51) 2-(3,4-ジヒドロキシ-ベンゾイルアミノ)-3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-プロピオン酸メチルエステル；
52) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-2-[3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-プロピオニルアミノ]-プロピオン酸メチルエステル；
53) 3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-2-[3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アリルアミノ]-プロピオン酸メチルエステル；
54) (R)-3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリル酸2-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-1-メトキシカルボニルエチルエステル；
55) (R)-3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリル酸2-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-1-プロポキシカルボニルエチルエステル；
56) (R)-3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリル酸2-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-1-tert-ブトキシカルボニルエチルエステル；
57) (R)-3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリル酸2-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-1-カルバモイルエチルエステル；及び
58) (R)-3-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-アクリル酸2-(3,4-ジヒドロキシ-フェニル)-1-tert-ブトキシカルボニルエチルエステルからなる群より選択される、請求項1記載の誘導体またはその塩。
【請求項４】
請求項1記載の誘導体またはその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する、Tリンパ球細胞キナーゼのsrc相同領域2ドメインの活性抑制用薬学的組成物。
【請求項５】
請求項1記載の誘導体またはその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する、免疫抑制用薬学的組成物。
【請求項６】
臓器または組織の移植拒絶反応、慢性移植拒絶反応、または移植片対宿主疾患(GVHD)の治療、診断、または予防を目的に使用される、請求項5記載の薬学的組成物。
【請求項７】
自己免疫疾患の治療、診断または予防を目的に使用される、請求項5記載の薬学的組成物。
【請求項８】
自己免疫疾患が、紅斑性狼瘡、全身性紅斑性狼瘡、リューマチ性関節炎、糖尿病、重症筋無力症、多発性硬化症、または乾癬を含む、請求項7記載の薬学的組成物。
【請求項９】
一つまたはそれ以上の免疫抑制剤をさらに含む、請求項5記載の薬学的組成物。
【請求項１０】
免疫抑制剤が、シクロスポリンA及びその類似体、FK506及びその類似体、コルチコステロイド、アザチオプリン、ミコフェノール酸、ラパマイシン、15-ジオキシスパガリン、ミゾリビン、レフルノミド、OKT3、IL-2受容体に対する抗体、ミソプロストール、メトトレキサート、シクロフォスファミド、抗リンパ球/胸線細胞血清、プレドニソン、及びメチルプレドニソンからなる群より選択される、請求項9記載の薬学的組成物。
【請求項１１】
式1の誘導体またその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する、抗炎症用薬学的組成物。
【請求項１２】
一つまたはそれ以上の一般的な抗炎症剤をさらに含む、請求項11記載の薬学的組成物。
【請求項１３】
抗炎症剤が、アスピリン、イブプロフェン、ナプロクセン、インドメタシン、ジクロフェナック、スリンダク、ピロキシカン、エトドラク、ケトプロフェン、メクロフェナメート、スプロフェン、及びトルメチンを含む非ステロイド抗炎症剤の群から選択される、請求項12記載の薬学的組成物。
【請求項１４】
式1の誘導体またはその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する、関節炎治療用薬学的組成物。
【請求項１５】
カップリング試薬及び塩基の存在下での式3のカルボキシル化合物と式2のアミン化合物との縮合反応による分子構造内アミド結合を含む請求項1記載の誘導体を製造する方法：
化学反応1
2005522523.tif 000028
式中、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、X1、X2、X3、Y1、Y2、B、及び*は請求項1で定義したものと同様である。
【請求項１６】
カップリング試薬が、ベンゾリアゾール-1-イル-オキシトリピロリジンホスホニウムヘキサフルオロホスファート及びブロモ-1-トリピロリジンホスホニウムヘキサフルオロホスファートからなる群より選択される、請求項15記載の方法。
【請求項１７】
塩基が、パラ-ジメチルアミノピリジン、トリエチルアミン及びジイソエチルアミンからなる群より選択される、請求項15記載の方法。
【国際調査報告】
2005522523.tif 000029
2005522523.tif 000030