(57)【要約】一般式（I）を有する2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体は、アルツハイマー病の治療に有用であることが証明された。これを製造する方法、および該方法に使用される中間体についても記述する。【化１】2005522502.tif 000071
2005522502.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（I）を有する2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体：
【化１】
2005522502.tif 000064
ここで、
R1は、下記からなる群から選択される置換基を表し；
・水素、
・1〜5個の炭素原子を有する飽和もしくは不飽和で且つ直鎖もしくは分岐鎖の
アルキル基、および
・電子吸引誘導効果を有する置換基
R2およびR3は、夫々が他から独立して、1〜5個の炭素原子を与える飽和もしくは不飽和で且つ直鎖もしくは分岐鎖のアルキル基を表し；
R4およびR5は、夫々が他から独立して、下記からなる群から選択される置換基を表し；
・水素、
・1〜5個の炭素原子を与える飽和もしくは不飽和で且つ直鎖もしくは分岐鎖の
アルキル基、
・OMe、および
・SMe；
Xは、下記からなる群から選択される基を表し；
・-HC=CH-、
・-HC=N-、
・-S-、
・-O-、および
・-NH-；
Tは、1〜4個の炭素原子を与える飽和もしくは不飽和で且つ直鎖もしくは分岐鎖の
アルキル基を表し；
Zは、2〜13個の炭素原子を与える飽和もしくは不飽和で且つ直鎖もしくは分岐鎖のアルキル基を表す。
【請求項２】
請求項１に記載の一般式（I）を有する2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体であって、R1が下記からなる群から選択される置換基を表すベンゾキノン誘導体：
・水素、
・電子吸引誘導効果を有する置換基。
【請求項３】
請求項１に記載の一般式（I）を有する2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体であって、
R1は下記からなる群から選択される置換基を表し；
・水素、
・ハロゲン、
・NO2、および
・MeO
R2およびR3は、夫々が他から独立して、水素、または1〜4個の炭素原子を有する飽和もしくは不飽和で且つ直鎖もしくは分岐鎖のアルキル基を表し；
R4およびR5は、夫々が他から独立して、下記からなる群から選択される置換基を表し；
・水素、
・炭素原子が1〜5個の、飽和もしくは不飽和で且つ直鎖もしくは分岐鎖の
アルキル基
Tは、1〜3個の炭素原子を与える飽和もしくは不飽和で且つ直鎖もしくは分岐鎖のアルキル基を表し；
Zは、2〜12個の炭素原子を与える飽和もしくは不飽和で且つ直鎖もしくは分岐鎖のアルキル基を表す。
【請求項４】
請求項１に記載の一般式（I）を有する2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体であって、
R1は下記からなる群から選択される置換基を表し；
・水素、
・ハロゲン、
・MeO
R2およびR3は、夫々が他から独立して、水素、または1〜2個の炭素原子を有する飽和もしくは不飽和で且つ直鎖もしくは分岐鎖のアルキル基を表し；
R4およびR5は、夫々が他から独立して、下記からなる群から選択される置換基を表し；
・水素、
・炭素原子が1〜4個の、飽和もしくは不飽和で且つ直鎖もしくは分岐鎖の
アルキル基
Xは、-HC=CH-基または-O-基を表し；
Tは、-CH2-基を表し；
Zは、2〜7個の炭素原子を与える飽和もしくは不飽和で且つ直鎖もしくは分岐鎖のアルキル基を表す。
【請求項５】
請求項３に記載の一般式（I）を有する2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体であって、
R3は、水素を表し；
R4およびR5は、夫々が他から独立して、下記からなる群から選択される置換基を表し；
・水素、
・炭素原子が1〜5個の、飽和もしくは不飽和で且つ直鎖もしくは分岐鎖の
アルキル基
・炭素原子が3〜4個の分岐アルキル基
Zは、2〜7個の炭素原子を与える飽和の直鎖アルキル基を表す。
【請求項６】
R1がTに対して2ー位にある、請求項１〜４の何れか１項に記載の一般式（I）を有する2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体。
【請求項７】
Zが2〜7個の炭素原子を与える飽和の直鎖アルキル基を表す、請求項１〜５の何れか１項に記載の一般式（I）を有する2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体。
【請求項８】
2,5-bis-6-[エチル-(2-メトキシ-ベンジル)-アミノ]-ヘキシルアミノ-[1,4]ベンゾキノン（XVI）。
【請求項９】
2,5-bis-3-[エチル-(2-メトキシ-ベンジル)-アミノ]-プロピルアミノ-[1,4]ベンゾキノン（XII）。
【請求項１０】
2,5-bis-[6-(ベンジル-エチル-アミノ)-ヘキシルアミノ]-[1,4]ベンゾキノン（XVII）。
【請求項１１】
2,5-bis-6-[エチル-(3-メトキシ-ベンジル)-アミノ]-ヘキシルアミノ-[1,4]ベンゾキノン（XXXIII）。
【請求項１２】
2,5-bis-6-[エチル-(4-メトキシ-ベンジル)-アミノ]-ヘキシルアミノ-[1,4]ベンゾキノン（XXXVII）。
【請求項１３】
2,5-bis-2-[エチル-(2-メトキシ-ベンジル)-アミノ]-エチルアミノ-[1,4]ベンゾキノン（XLV）。
【請求項１４】
2,5-bis-7-[エチル-(2-メトキシ-ベンジル)-アミノ]-ヘプチルアミノ-[1,4]ベンゾキノン（IL）。
【請求項１５】
2,5-bis-6-[(2-メトキシ-ベンジル)-メチルアミノ]-ヘキシルアミノ-[1,4]-ベンゾキノン（LIV）。
【請求項１６】
2,5-bis-6-[エチル-(2-メトキシ-ベンジル)-アミノ]-ヘキシルアミノ-3,6-ジメチル-[1,4]-ベンゾキノン（LV）。
【請求項１７】
2,5-bis-[6-(2-メトキシ-ベンジルアミノ)-ヘキシルアミノ]-[1,4]-ベンゾキノン（LI）。
【請求項１８】
2,5-bis-[6-(エチル-フラン-2-イルメチル-アミノ)-ヘキシルアミノ]-[1,4]ベンゾキノン（XLI）。
【請求項１９】
2,5-bis-6-[エチル-(2-ニトロ-ベンジル)-アミノ]-ヘキシルアミノ-[1,4]ベンゾキノン（XXIX）。
【請求項２０】
2,5-bis-6-[エチル-(2-クロロ-ベンジル)-アミノ]-ヘキシルアミノ-[1,4]ベンゾキノン（XVIII）。
【請求項２１】
医薬として使用するための、請求項１〜１９の何れか１項に記載の2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体。
【請求項２２】
哺乳類におけるアルツハイマー病を治療するための、請求項１〜２０の何れか１項に記載の2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体。
【請求項２３】
請求項１〜２０の何れか１項に記載の2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体またはその薬学的に許容可能な塩、および薬学的に許容可能な賦形剤および／または希釈剤を含有することを特徴とする薬学的製剤。
【請求項２４】
請求項１〜２０の何れか１項に記載の2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体を調製するための方法であって、一般式（I）を有する2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体を得るために、一般式（VIII）を有するp-ベンゾキノン上において、一般式（VII）を有する第一の中間体化合物での置換が行われる求核置換段階を含んでなる方法。
【化２】
2005522502.tif 000065
【化３】
2005522502.tif 000066
【請求項２５】
請求項24に記載の方法であって、前記一般式（VII）を有する第一の中間体化合物を得るために、下記一般式（VI）を有する第二の中間体化合物が加水分解される加水分解段階を含んでなる方法：
一般式(VI)：
【化４】
2005522502.tif 000067
ここでのDは、塩基性環境において実質的に安定なBnまたは他の保護基を表す。
【請求項２６】
請求項２５に記載の方法であって、一般式（VI）を有する前記第二の中間体化合物を得るために、下記一般式（IV）を有する第三の中間体化合物が、
【化５】
2005522502.tif 000068
塩基の存在下において、下記一般式（V）を有する化合物と反応される追加の段階を含んでなる方法： 
(V)            (R2)fA、
ここで、Aは電子吸引基であり、fは1または2である。
【請求項２７】
請求項２６に記載の方法であって、一般式（IV）を有する前記第三の中間体化合物を得るために、下記一般式（II）を有する保護された(アミノ-アルキル)-カルバミン酸を、
【化６】
2005522502.tif 000069
下記一般式（III）を有する化合物に加える第二の添加段階を含んでなる方法：
【化７】
2005522502.tif 000070
ここで、Eは下記からなる群から選択される残基を表す：
・=O、
・-Cl、
・-Br、または
・-I；
ただし、Eが=Oを表す場合、前記方法は一般式（IV）を有する前記第三の中間体化合物を得るための還元段階を含むことを条件とする。
【請求項２８】
請求項２４に記載の一般式（VII）を有する中間体化合物。
【請求項２９】
請求項２５に記載の一般式（VI）を有する化合物。
【請求項３０】
請求項２４に記載の一般式(IV)を有する化合物。
【請求項３１】
哺乳類におけるアルツハイマー病を治療する薬学的製剤を製造するための、請求項１〜２０の何れか１項に記載の2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体の使用。
【請求項３２】
哺乳類におけるβ-アミロイドタンパク質(Aβ)の沈着を特徴とする病気を治療する薬学的製剤を製造するための、請求項１〜２０の何れか１項に記載の2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体の使用。
【請求項３３】
哺乳類における神経系変性疾患を治療する薬学的製剤を製造するための、請求項１〜２０の何れか１項に記載の2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体の使用。
【請求項３４】
哺乳類におけるアルツハイマー病を治療する方法であって、前記哺乳類に対して、有効量の請求項１〜２０の何れか１項に記載の2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体を投与することを含んでなる方法。
【請求項３５】
哺乳類におけるβ-アミロイドタンパク質(Aβ)の沈着を特徴とする病気を治療する方法であって、前記哺乳類に対して、有効量の請求項１〜２０の何れか１項に記載の2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体を投与することを含んでなる方法。
【請求項３６】
哺乳類における神経系変性疾患を治療する方法であって、前記哺乳類に対して、有効量の請求項１〜２０の何れか１項に記載の2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体を投与することを含んでなる方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規な2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体に関する。本発明はまた、特にアルツハイマー病を治療するための医薬としての該化合物の使用、アルツハイマー病を治療する薬学的製剤を製造するためのその使用、それを含有する医薬、それを製造する方法、および該方法の中間体に関する。
【０００２】
本発明はまた、β-アミロイド(Aβ)タンパク質の抗凝集特性を有する薬学的製剤を製造するための、および神経系変性疾患を治療するための、2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体の使用に関する。
【背景技術】
【０００３】
アルツハイマー病(AD)は、一般に加齢にリンクした神経変性症候群であり、認識機能および行動機能の進行性劣化に患者を導く。ADの症例の大多数は、現在は未だ実質的に知られていない原因を有している。また、最近では、特に認識機能の制御を目的とした幾つかの薬物が市販されているが、上記の理由により、該疾患の進行を停止させ得る治療法は現在存在していない。これらの薬物、即ち、タクリン(Tacrine)（Cognex(登録商標)）、ドネペジル(Donepezil)（Aricept(登録商標)）およびリバスチグミン(Rivastigmine)（Exelon(登録商標)）は同じ作用機構を共有しており、該作用機構はアセチルコリンエステラーゼ（AchE）の阻害である。
【０００４】
AchEの阻害に基づく治療的アプローチは、ADに関連したニューロン変性が、ADに関連した神経変性がコリン作動性ニューロンによって神経支配された大脳領域に一般に生じるとの所見に基づいている。これら領域（特に皮質および海馬）におけるコリン作動性活性の喪失は、ADに典型的な認識機能障害の原因であろう。AChEは、コリン作動性の神経伝達物質であるアセチルコリン（ACh）を不活性化する酵素であり、この酵素の機能をブロックすることにより、受容体の刺激を延長して、コリン作動性の神経伝達を強化することができるであろうとの仮説が表明されている。上記で述べた既知の薬物は、「コリン作動性仮説」（Bartus, R. T.；Dean, R. L., 3rd；Beer, B.；Lippa, A. S. 老人性記憶障害のコリン作動性仮説. Science 1982, Vol. 217, p. 408-414）と呼ばれる該仮設の応用に由来する。しかしながら、実質的に当該疾患の進行に対する作用の欠陥および望ましくない付随的効果の存在からなる該アプローチの限界を看過することはできない。これは投与量を制限し、また上記で述べた薬剤のうちの一つの服用を中断するように患者を誘導する可能性がある。
【０００５】
AchEの阻害によるコリン作動性伝達の強化は、ADに付随する認識病徴の治療に対する有用なアプローチであるが、最近になって、ニューロン喪失およびその結果としての認識病徴の出現が、一定の大脳領域におけるβ-アミロイドタンパク質の過剰産生に関連した生化学的事象のカスケードの結果であるとの提案がなされている。該タンパク質は凝集して細胞外沈着を形成する傾向があり、これはAD患者の脳に見られる典型的な病巣（老人性プラーク）を生じる。これらプラークの存在は、周囲組織において炎症性および酸化性のタイプの応答を生じ、炎症酵素の活性化および酸素付加されたラジカル種の形成に起因して、タウタンパク質のリン酸化の増大を含む毒性事象の連鎖をトリガーする。神経変性の進行は、これらの有害な影響の広がりを制御することが不可能であることに由来する。従って、神経変性カスケードにおいて、可能な限り上流にまで作用することができる薬理学的装置を発見することが必要である。更に、アルツハイマー病以外にも、Aβの沈着を特徴とする他の病気の存在を強調することが重要である。これらの病気には、ダウン症候群、「オランダ型」アミロイドーシスに関連した遺伝性脳出血症、慢性炎症に関連したアミロイドーシス、多発性骨髄腫および他のBリンパ性造血細胞の悪液質に関連したアミロイドーシス、II型糖尿病に関連したアミロイドーシス、並びにクロイッツフェルト-ヤコブ病、ゲルツマン-シュトラウスラー症候群、羊におけるクールーおよびスクラピー（Kuru and scrapie）（WO 02/00603）のようなプリオンに由来する疾患に関連したアミロイドーシスが含まれる
上記のことから、ADの治療のため、およびAβの沈着を特徴とする病気の治療のために利用可能な医薬を作製することについての、顕著な必要性が未だ存在している。
【発明の開示】
【０００６】
従って、本発明の目的は、ADの治療およびAβの蓄積に関連した他の全ての症候群の治療、特に前記蓄積の防止、並びに神経系の変性病徴に役立つように使用できる物質を提供することである。
【０００７】
本発明によれば、下記一般式（I）を有する2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体が実現される：
【化８】
2005522502.tif 000003
【０００８】
ここで、
R1は、下記からなる群から選択される置換基を表し；
・水素、
・1〜5個の炭素原子を有する飽和もしくは不飽和で且つ直鎖もしくは分岐鎖の
アルキル基、および
・電子吸引誘導効果を有する置換基
R2およびR3は、夫々が他から独立して、1〜5個の炭素原子を与える飽和もしくは不飽和で且つ直鎖もしくは分岐鎖のアルキル基を表し；
R4およびR5は、夫々が他から独立して、下記からなる群から選択される置換基を表し；
・水素、
・1〜5個の炭素原子を与える飽和もしくは不飽和で且つ直鎖もしくは分岐鎖の
アルキル基、
・OMe、および
・SMe；
Xは、下記からなる群から選択される基を表し；
・-HC=CH-、
・-HC=N-、
・-S-、
・-O-、および
・-NH-；
Tは、1〜4個の炭素原子を与える飽和もしくは不飽和で且つ直鎖もしくは分岐鎖の
アルキル基を表し；
Zは、2〜13個の炭素原子を与える飽和もしくは不飽和で且つ直鎖もしくは分岐鎖のアルキル基を表す。
【０００９】
好ましくは、R1は、
・水素、
・電子吸引誘導効果を有する置換基。
【００１０】
からなる群から選択される置換基を表す。
【００１１】
好ましくは、一般式（I）を有する2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体において、R1は下記からなる群から選択される置換基を表し；
・水素、
・ハロゲン、
・NO2、および
・MeO
R2およびR3は、夫々が他から独立して、水素、または1〜4個の炭素原子を有する飽和もしくは不飽和で且つ直鎖もしくは分岐鎖のアルキル基を表し；
R4およびR5は、夫々が他から独立して、下記からなる群から選択される置換基を表し；
・水素、
・炭素原子が1〜5個の、飽和もしくは不飽和で且つ直鎖もしくは分岐鎖の
アルキル基
Xは、下記からなる群から選択される基を表し；
・-HC=CH-、
・-HC=N-、
・-S-、
・-O-、および
・-NH-；
Tは、1〜3個の炭素原子を与える飽和もしくは不飽和で且つ直鎖もしくは分岐鎖のアルキル基を表し；
Zは、2〜12個の炭素原子を与える飽和もしくは不飽和で且つ直鎖もしくは分岐鎖のアルキル基を表す。
【００１２】
一般式（I）を有する2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体において、特に好ましい態様によれば、
R1は、下記からなる群から選択される置換基を表し； 
・水素、
・ハロゲン、
・MeO；
R2は、水素、または1〜2個の炭素原子を与える飽和の直鎖アルキル基を表し；R3は、水素を表し；
R4およびR5は、夫々が他から独立して、下記からなる群から選択される置換基を表し；
・水素、
・1〜5個の炭素原子を与える飽和もしくは不飽和で且つ直鎖もしくは分岐鎖の
アルキル基
・3〜4個の炭素原子を与える分岐アルキル基
Xは、-HC=CH-基または-O-基を表し；
Tは、-CH2-基を表し；
Zは、2〜7個の炭素原子を与える飽和の直鎖アルキルを表す。
【００１３】
特に好ましいのは、一般式（I）を有する2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体において、R1がTに対して2位にある態様である。Zが2〜7個の炭素原子を与える飽和の直鎖アルキル基を表す態様、およびXが-CH=CH-基を表す態様もまた好ましい。
【００１４】
更に好ましいのは、2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体が、後述の実施例に例示された2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体類からなる群から選択される態様である。
【００１５】
一般式（I）を有する2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体は、エナンチオマーまたはジアステレオ異性体のような異なる立体異性体の形態で存在することができる。本発明は、エナンチオマーおよびジアステレオ異性体の両者、またはそれらの混合物に関する。これらの混合物は、既知の方法によって、それらの立体異性的に均一な成分に分離することができる。
【００１６】
本発明によれば、一般式（I）を有する2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体は、医薬として使用するために提供される。
【００１７】
本発明によれば、一般式（I）を有する2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体は、哺乳類におけるアルツハイマー病の治療のために提供される。
【００１８】
本発明によれば、哺乳類におけるアルツハイマー病を治療する方法であって、前記哺乳類に対して、有効量の一般式（I）を有する2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体を投与することを含んでなる方法が提供される。
【００１９】
本発明によれば、一般式（I）を有する2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体またはその薬学的に許容可能な塩、および薬学的に許容可能な賦形剤および／または希釈剤を含有することを特徴とする薬学的製剤が提供される。
【００２０】
本発明によれば、一般式（I）を有する2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体の使用であって、哺乳類におけるアルツハイマー病の治療のための薬学的製剤を製造するための使用が提供される。
【００２１】
本発明によれば、一般式（I）を有する2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体を調製するための方法であって、一般式（I）を有する2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体を得るために、一般式（VIII）を有するp-ベンゾキノン上において、一般式（VII）を有する第一の中間体化合物での置換が行われる求核置換段階を含んでなる方法が提供される。
【化９】
2005522502.tif 000004
【化１０】
2005522502.tif 000005
【００２２】
本発明によれば、請求項８〜２０に従う化合物もまた提供される。
【００２３】
本発明の更なる側面に従えば、一般式（I）を有する2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体の使用であって、哺乳類におけるβ-アミロイドタンパク質（Aβ）のチン約をい特長とする病気を治療するための薬学的製剤を製造するための使用が提供される。
【００２４】
本発明によれば、哺乳類におけるβ-アミロイドタンパク質（Aβ）の沈着を特徴とする病気を治療する方法であって、前記哺乳類に対して、有効量の式（I）を有する2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体を投与することを含んでなる方法が提供される。
【００２５】
本発明の更なる側面に従えば、一般式（I）を有する2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体の使用であって、哺乳類における神経系変性疾患を治療する薬学的製剤を製造するための使用が提供される。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２６】
次に、限定を伴わずに実施形態の例を示す添付の図面を参照して、本発明を説明する。
【００２７】
上記の一般式（I）によって表される2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体は、例えば、下記の一般式（II）を有する保護された(アミノ-アルキル)-カルバミン酸から出発して調整することができる。
【化１１】
2005522502.tif 000006
【００２８】
ここで、Dはベンジル基（Bn）または塩基性環境において安定な他の保護基である。この(アミノ-アルキル)-カルバミン酸（II）に、下記の一般式（III）を有する化合物を加える。
【化１２】
2005522502.tif 000007
【００２９】
ここで、Eは、一般式（IV）を有する中間体化合物を得るように、=O、-Cl、-Brまたは-Iを表す：
【化１３】
2005522502.tif 000008
【００３０】
ただし、Eが =Oを表すとき、当該反応は適切な還元剤の存在下で生じる。
【００３１】
好ましくは、前記還元剤はNaBH4であり、該反応はプロトン性有機溶媒（例えばエタノール）中において、15〜35℃、特に実質的に25℃の温度で分子篩（特に4Åのもの）の存在下で実現される。
【００３２】
この時点において、化合物（IV）は、塩基の存在下で、下記一般式（V）を有する化合物と既に反応されている。
【００３３】
（V）    (R2)fA、
ここで、Aは電子吸引性基であり、fは1または2であり、下記一般式（VI）を有する中間体化合物を得る：
【化１４】
2005522502.tif 000009
【００３４】
好ましくは、化合物（V）は(R2)2SO4、特にEt2SO4であり、また該反応は、反応条件を変化させない不活性有機溶媒中において、80℃〜170℃、特に実質的に111℃の温度で行われる。
【００３５】
使用できる溶媒には次のものが含まれる：エーテル、例えばジエチルエーテル、またはテトラヒドロフラン；ハロゲン化された炭化水素、例えばジクロロメタン、トリクロロメタン、テトラクロロメタン、1,2-ジクロロエタン、トリクロロエタン、テトラクロロエタン、1,2-ジクロロエチレン、またはトリクロロエチレン；炭化水素、例えばベンゼン、キシレン、トルエン、ヘキサン、シクロヘキサン、または石油エーテル；ニトロメタン：ジメチルホルムアミド：アセトン：またはアセトニトリル。また、上記溶媒の混合物を使用することも可能である。トルエンは、この反応のための特に好ましい溶媒である。
【００３６】
この時点において、下記一般式（VII）を有する化合物を得るために、化合物（VI）中においてカルバミン官能基は加水分解される。
【化１５】
2005522502.tif 000010
【００３７】
加水分解は、好ましくは酸性環境において生じ、また使用される溶媒は酢酸である。特に好ましい態様に従えば、HBrが加水分解のために使用される。
【００３８】
この時点において、一般式（VIII）を有するp-ベンゾキノン上では：
【化１６】
2005522502.tif 000011
【００３９】
一般式（I）を有する2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体を得るために、化合物（VII）での置換が生じる。
【００４０】
驚くべきことに、一般式（I）を有する2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体は、哺乳類におけるアルツハイマー病（AD）を治療するための比較的高い活性を示した。
【００４１】
更に驚くべきことに、一般式（I）を有する2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体は、比較的に非常に高いアセチルコリンエステラーゼ（AChE）酵素の阻害活性を示した。
【００４２】
特に、一般式（I）を有する2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体は、同じ2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体（I）がブチルコリンエステラーゼ（BuChE）に対して示す阻害活性よりも遥かに高いAChE阻害活性を示した。
【００４３】
この点に関して、2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体（I）がBuChEよりもAchEに優先的に結合する能力は、2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体（I）がその主要な目的（即ちAchE）から逸らされるのを回避することを強調するのが重要である。従来は、BuChEが、偽の基質に対してAchEを保護する酵素系として作用するとの仮定がなされていた。
【００４４】
更に、一般式（I）を有する2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体は、驚くべきことに、AchEによって誘導されたAβの凝集に対する阻害活性を示す。
【００４５】
キノン官能基は、Aβの集積による酸化ストレスに対して保護的な、抗酸化活性を示すことを強調するのが重要である。Aβの凝集に対する阻害活性および抗酸化活性は、驚くべきことに、相乗的に組合されて、Aβの沈着を特徴とする病気に冒された患者の症状を実質的に改善する。
【００４６】
特に、比較的非常に高いAchE阻害活性、比較的低いBuChE阻害活性、Aβの凝集に対する阻害活性、および抗酸化活性は、驚くべきことに、相乗的に組み合わされて、ADに冒された患者の症状を実質的に改善することを強調することが重要である。
【００４７】
2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体（I）またはその薬学的に許容可能な塩は、純粋な化合物として投与することができるが、それらは好ましくは、薬学的処方剤の形態で提示される。適切な薬学的処方剤の非限定的例を以下に列挙する。
【００４８】
2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体（I）は、経口投与、非経腸的投与、または直腸投与のために処方することができ、または吸入もしくはガス注入(insufflation)（経口および経鼻の両方）による投与に適した形態で処方することができる。経口投与または非経腸的投与のための処方剤が好ましい。
【００４９】
経口投与については、薬学的製剤は、例えば、結合剤（例えば予備ゼラチン化されたコーンスターチ、ポリビニルピロリドンまたはメチルセルロース）；充填剤（例えばラクトース、微結晶セルロースまたは燐酸水素カルシウム）；添加剤（例えばステア燐酸マグネシウム、タルク、シリカ）；崩壊剤（例えばジャガイモ澱粉）；および／または滑沢剤（例えばラウリル硫酸ナトリウム）のような薬学的観点から許容可能な賦形剤と共に既知の方法で調製された、錠剤もしくはカプセルの形態であることができる。錠剤は既知の方法でコーティングすることができる。経口投与のための液体製剤は、例えば、シロップ溶液もしくは懸濁液の形態であることができ、或いは、使用前に水もしくは他の液体中に溶解できる乾燥製品の形態であることができる。これらの製剤は、懸濁剤（例えばソルビトール、セルロース誘導体、食用水素添加脂肪）；乳化剤（例えばレシチンもしくはアカシア）；非水性液体（例えばアーモンド油、油性エステル、エチルアルコールまたは分画された植物油）；および／または保存剤（例えばp-ヒドロキシ安息香酸メチルもしくはプロピル、ソルビン酸またはアスコルビン酸）のような薬学的に許容可能な添加剤を用いて、既知の方法で調製することができる。当該製剤はまた、適切な場合には、緩衝塩、着色剤、芳香剤および／または甘味剤を含有することができる。
【００５０】
経口投与のための製剤は、活性化合物の制御された放出を与えるように、既知の方法で処方することができる。
【００５１】
2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体（I）は、注射または連続投与による非経腸的投与のために、既知の方法で処方することができる。注射のための処方剤は単回投与量形態（例えばアンプル）であってもよく、保存剤を含有する多回投与量容器の形態であってもよい。当該組成物は、水性または油性の液体中の懸濁液の形態であってもよく、また分散剤および安定剤のような処方要素を含有してもよい。或いは、当該活性化合物は、使用前に適切な液体（例えば滅菌水）中に直接溶解される粉末形態であってもよい。
【００５２】
この2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体（I）は、例えば、ココアバターまたは他の脂肪のような既知のタイプの座剤用賦形剤を含有する座剤または高位浣腸法のような、直腸投与のために処方することができる
当該2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体（I）はまた、既知の方法で、放遅延放出タイプの組成物として処方することもできる。この遅延放出タイプの組成物は、インプラント（例えば皮下または筋肉内）によって、または筋肉注射によって投与することができる。従って、例えば、2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体（I）は、適切なポリマー材料または疎水性材料（例えばエマルジョンもしくは油）、またはイオン交換樹脂、または比較的可溶性の乏しい誘導体（例えば比較的溶解性の乏しい塩）と共に処方することができる。
【００５３】
鼻腔投与の場合、2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体（I）は、例えば適切なキャリアと共に粉末形態で、既知の装置により投与するために処方することができる。
【００５４】
2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体（I）の投与量は、患者の年齢および症状に依存するであろう。従って、正確な投与量は、その時々に医者によって決定されなければならない。また、投与量は投与の手段および選択される特定の化合物にも依存する。使用可能な投与量は、例えば、１日あたり0.1mg/Kg体重〜400mg/Kg体重である。
【００５５】
2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体(I)は、１以上の適切な治療剤と組合わせて投与することができ、また全て既知で使用可能な方法で処方することができる。
【００５６】
本発明の更なる特徴は、限定を伴わずに純粋に実施例として採用される態様を参照した以下の説明から、更に明瞭になるであろう。、
【実施例】
【００５７】
例１
この例では、下式を具備する[3-(2-メトキシ-ベンジルアミノ)-プロピル]-カルバミン酸ベンジルエステル(IX)の合成について記述する：
【化１７】
2005522502.tif 000012
【００５８】
分子篩(4Å)を含んだ50mLのエタノール中の(3-アミノ-プロピル)-カルバミンベンジルエステル酸(1.04g，5mmol)の溶液に2-メトキシベンズアルデヒド(0.75g，5.5mmol)を添加した。この混合物を周囲温度(e.t.)で撹拌し、次いで低温時にNaBH4を添加した(0.2g，5mmol)。６時間反応させ、HCl 2Nを用いて慎重に酸性にし、上記分子篩をろ過し、溶媒を蒸発させた；残渣を再びH2Oを用いて取り出し、ジエチルエーテルを用いて抽出した(3×10mL)。次いでこの水溶液をNaOH 40％を用いて塩基性にし、CHCl3を用いて抽出した（4×20mL)。無水化し(anhydrified)蒸発させた有機抽出物から、TLC(溶出剤：CHCl3/EtOH/NH4OH 9.0：1.0：0.1)で1.5gの化合物IXを純粋な透明な油状物で得た。収率90％；1H NMR(遊離塩基；CDCl3)δ：1.61-1.79(m, 2H＋1H D2Oで交換可能), 2.70(t, 2H), 3.32(q, 2H), 3.78(s, 2H), 3.84(s, 3H), 5.11(s, 2H), 5.73(広がったs, 1H D2Oで交換可能), 6.84-6.95(m, 2H), 7.19-7.40(m, 7H)。
【００５９】
例２
この例では下式を有する3-[エチル-(2-メトキシ-ベンジル)-アミノ]-プロピル-カルバミン酸ベンジルエステル(X)の合成について記述する：
【化１８】
2005522502.tif 000013
【００６０】
70mLのトルエン中の[3-(2-メトキシ-ベンジルアミノ)-プロピル]-カルバミンベンジルエステル酸(1.4g；4.3mmol)の溶液に硫酸ジエチル(1.24mL；9.5mmol)を添加し、還流により24時間加熱した。この反応混合物をe.t.で冷却し、濃NaOH(50mL)とともに撹拌した。有機相を分離した後、無水化および蒸発により粗製物質を得、これをフラッシュクロマトグラフィにより精製した。CH2Cl2／石油のエーテル／MeOH／NH4OH 4.6：5.0：0.4：0.04を用いて溶出し、TLC(溶出剤：CHCl3/MeOH/NH4OH 9.5：0.5：0.05)で1.4gの化合物Xを純粋な透明な油状物で得た。収率91％；1H NMR(遊離塩基；CDCl3)δ：1.08(t, 3H), 1.61-1.79(m, 2H), 2,53-2.75(m, 4H), 3.32(q, 2H), 3.78(s, 2H), 3.84(s, 3H), 5.11(s, 2H), 5.73(広がったs, 1H D2Oで交換可能), 6.84-6.95(m, 2H), 7.19-7.40(m, 7H)。
【００６１】
例3
この例では下式を有するN1-エチル-N1-(2-メトキシ-ベンジル)-プロパン-1,3-ジアミン(XI)の合成について記述する：
【化１９】
2005522502.tif 000014
【００６２】
15mLの氷（glacial)CH3COOH中の3-[エチル-(2-メトキシ-ベンジル)-アミノ]-プロピル-カルバミンベンジルエステル酸(1.4g；3.9mmol)の溶液に、3.5mLのCH3COOH中のHBrの33％溶液を慎重に添加した。これを２時間撹拌し、次いで100mLのジエチルエーテルを用いて臭化水素酸塩を沈殿させた。形成された白色の固体をH2O中に溶解させ、NaOH 2N を用いて塩基性にし、CHCl3を用いて抽出した(5×20mL)。無水化された有機相を減圧下で蒸発させ、TLC(溶出剤CHCl3/MeOH/NH4OH 9.0：1.0：0.1)で0.87gの化合物XI を純粋な透明な油状物で得た；定量的収率(quantity yield)；1H NMR(遊離塩基；CDCl3)δ：1.07(t, 3H), 1.50(広がったs, 2H D2Oで交換可能), 1.57-1.71(m, 2H), 2,55(q, 4H), 2.73(t, 2H), 3.60(s, 2H), 3.84(s, 3H), 6.83-6.99(m, 2H), 7.19-7.44(m, 2H)。
【００６３】
例４
この例では下式を有する2,5-bis-3-[エチル-(2-メトキシ-ベンジル)-アミノ]-プロピルアミノ-[1,4]ベンゾキノン(XII)の合成について記述する：
【化２０】
2005522502.tif 000015
【００６４】
70mLのMeOH中のp-ベンゾキノン(0.1g；0.92mmol)の溶液に、低温時にN1-エチル-N1-(2-メトキシ-ベンジル)-プロパン-1,3-ジアミン(0.45g；2.0mmol)を添加した。この反応混合物をe.t. で撹拌し、６時間暗所に置き、真空下で蒸発させて粗製物質を得、これをフラッシュクロマトグラフィにより精製した。CH2Cl2/MeOH/NH4OH 9.75：0.25：0.025を用いて溶出し、TLC(溶出剤：CHCl3/MeOH/NH4OH 9.5：0.5：0.05)で0.23gの化合物XIIを純粋な赤色の固体で得た。収率45％；1H NMR(遊離塩基；CDCl3)δ：1.11(t, 6H), 1.72-1.85(m, 4H), 2,56(q, 8H), 3.18(q, 4H), 3.62(s, 4H), 3.82(s, 6H), 5.26(s, 2H), 6.83-6.95(m, 4H), 7.19-7.43(m, 4H＋2H D2Oで交換可能)；EI-MS：m/z＝548(M+)。
【００６５】
例５
この例では[6-(2-メトキシ-ベンジルアミン-ヘキシル]-カルバミン酸ベンジルエステル(XIII)の合成について記述する：
【化２１】
2005522502.tif 000016
【００６６】
上記化合物XIIIを(6-アミノ-ヘキシル)-カルバミン酸ベンジルエステル(2,50g，10mmol)から例１の記載と同様の手順に従い、透明な油状物で得た；収率81％；1H NMR(遊離塩基；CDCl3)δ：1.22-1.38(m, 4H), 1,41-1.57(m. 4H), 1.65(広がったs, 1H D2Oで交換可能), 2,58(t, 2H), 3.18(q, 2H), 3.77(s, 2H), 3.84(s, 3H), 4.76(広がったs, 1H D2Oで交換可能), 5.09(s, 2H), 6.82-6.93(m, 2H), 7.20-7.40(m, 7H)。
【００６７】
例６
この例では6-[エチル-(2-メトキシ-ベンジル)-アミノ]-ヘキシル-カルバミン酸ベンジルエステル(XIV)の合成について記述する：
【化２２】
2005522502.tif 000017
【００６８】
上記化合物XIVを[6-(2-メトキシ-ベンジルアミノ)-ヘキシル]-カルバミン酸ベンジルエステル(2.91g，7.85mmol)から例２の記載と同様の手順に従い、透明な油状物で得た。収率76％；1H NMR(遊離塩基；CDCl3)δ：1.05(t, 3H), 1.21-1.32(m, 4H), 1,40-1.57(m. 4H), 2.41-2,59(m, 4H), 3.16(q, 2H), 3.60(s, 2H), 3.80(s, 3H), 4.73(広がったs, 1H D2Oで交換可能), 5.08(s, 2H), 6.82-6.94(m, 2H), 7.18-7.42(m, 7H)。
【００６９】
例７  この例ではN1-エチル-N1-(2-メトキシ-ベンジル)-ヘキサン-1,6-ジアミン(XV)の合成について記述する：
【化２３】
2005522502.tif 000018
【００７０】
上記化合物XVを、6-[エチル-(2-メトキシ-ベンジル)-アミノ]-ヘキシル-カルバミン酸ベンジルエステル(2.31g；6.01mmol)から例３の記載と同様の手順にしたがい、透明な油状物で得た。収率98％；1H NMR(遊離塩基；CDCl3)δ：1.04(t, 3H), 1.12-1,48(m, 8H +2H D2Oで交換可能), 2.41-2,53(m, 4H), 2.65(t, 2H), 3.57(s, 2H), 3.81(s, 3H), 6.82-6.94(m, 2H), 7.16-7.42(m, 2H)。
【００７１】
例８
この例ではの合成について記述する2,5-bis-6-[エチル-(2-メトキシ-ベンジル)-アミノ]-ヘキシルアミノ-[1,4]ベンゾキノン(XVI)：
【化２４】
2005522502.tif 000019
【００７２】
上記化合物XVIをN1-エチル-N1-(2-メトキシ-ベンジル)-ヘキサン-1,6-ジアミン(1.05g；4mmol)及びp-ベンゾキノン(0.2g；1.84mmol)から、例４の記載と同様の手順に従い、赤色の固体で得た。収率17％；1H NMR(遊離塩基；CDCl3)δ：1.04(t, 6H), 1.14-1.38(m, 8H), 1,43-1.53(m, 4H), 1.57-1.65(m, 4H), 2.41-2,56(m, 8H), 3.10(q, 4H), 3.57(s, 4H), 3.81(s, 6H), 5.28(s, 2H), 6.59(広がったt, 2H D2Oで交換可能), 6.83-6.95(m, 4H), 7.21(t, 2H), 7.39(d, 2H)。EI-MS：m/z＝632(M+)。
【００７３】
例９  この例では2,5-bis-[6-(ベンジル-エチル-アミノ)-ヘキシルアミノ]-[1,4]ベンゾキノン(XVII)の合成について記述する：
【化２５】
2005522502.tif 000020
【００７４】
上記化合物XVIIをN1-エチル-N1-ベンジル-ヘキサン-1,6-ジアミン(0.47g；2mmol)及びp-ベンゾキノン(0.1g；0.92mmol)から、例８の記載と同様の手順に従い、赤色の固体で得た。収率20％；1H NMR(遊離塩基；CDCl3)δ：1.05(t, 6H), 1.14-1.39(m, 8H), 1,43-1.53(m, 4H), 1.58-1.65(m, 4H), 2.41-2,56(m, 8H), 3.10(q, 4H), 3.71(s, 4H), 5.28(s, 2H), 6.44(広がったt, 2H D2Oで交換可能), 7.10-7.24(m, 10H)。EI-MS：m/z＝572(M+)。N1-エチル-N1-ベンジル-ヘキサン-1,6-ジアミンを、対応する出発化合物を用いて例１〜４の記載と同様の手順により得た。。
【００７５】
例10  この例では2,5-bis-6-[エチル-(2-クロロ-ベンジル)-アミノ]-ヘキシルアミノ-[1,4]ベンゾキノン(XVIII)の合成について記述する：
【化２６】
2005522502.tif 000021
【００７６】
上記化合物XVIIIを、N1-エチル-N1-(2-クロロ-ベンジル)-ヘキサン-1,6-ジアミン(0.54g；2mmol)及びp-ベンゾキノン(0.1g；0.92mmol)から、例８の記載と同様の手順に従い、赤色の固体で得た。収率15％；1H NMR(遊離塩基；CDCl3)δ：1.04(t, 6H), 1.10-1.35(m, 8H), 1,43-1.53(m, 4H), 1.57-1.65(m, 4H), 2.41-2,56(m, 8H), 3.08(q, 4H), 3.46(s, 4H), 5.28(s, 2H), 6.59(広がったt, 2H D2Oで交換可能), 7.05-7.23(m, 6H), 7.45(d, 2H)。EI-MS：m/z＝641(M+)。N1-エチル-N1-(2-クロロ-ベンジル)-ヘキサン-1,6-ジアミンを、対応する出発化合物を用いて例１〜４の記載と同様の手順に従って得た。
【００７７】
例11
この例では2,5-ジ-tert-ブチル-3,6-bis-3-[エチル-(2-メトキシ-ベンジル)-アミノ]-プロピルアミノ-[1,4]ベンゾキノン(XIX)の合成について記述する：
【化２７】
2005522502.tif 000022
【００７８】
上記化合物XIXを、式XIを具備する化合物(90mg；0.40mmol)及び2,5-ジ-tert-ブチル-[1,4]ベンゾキノン(40mg；0.18mmol)から、例８の記載と同様の手順に従い、明るい赤紫色の固体で得た。収率10％；1H NMR(遊離塩基；CDCl3)δ：1.09(t, 6H), 1.15(s, 9H), 1.27(s, 9H), 1.70-1.83(m, 4H), 2,52-2.64(m, 8H), 3.15(s, 3H), 3.54-3.71(m, 4H), 3.83(s, 3H), 6.81-6.96(m, 4H), 7.18-7.44(m, 4H)。EI-MS：m/z＝660(M+)。
【００７９】
例12
この例では下式を有する[6-ベンジルアミノ-ヘキシル]-カルバミン酸ベンジルエステル(XX)の合成について記述する：
【化２８】
2005522502.tif 000023
【００８０】
上記化合物XXを、(6-アミノ-ヘキシル)-カルバミン酸ベンジルエステル(4.00g，16mmol)から例１の記載と同様の手順に従い、透明な油状物で得た。定量的収率；1H NMR(遊離塩基；CDCl3)δ：1,22-1,57(m, 6H＋1H D2Oで交換可能), 1,78-1,97(m, 2H), 2,75(t, 2H), 3,18(q, 2H), 4,05(s, 2H), 5,01(広がったt, 1H D2Oで交換可能), 5,15(s, 2H), 7,30-7,45(m, 8H), 7,57-7,65(m, 2H)。
【００８１】
例13
この例では[6-(エチル-ベンジル-アミノ)-ヘキシル]-カルバミン酸ベンジルエステル(XXI)の合成について記述する：
【化２９】
2005522502.tif 000024
【００８２】
上記化合物XXIを、[6-ベンジルアミノ-ヘキシル]-カルバミン酸ベンジルエステル(5.00g，14mmol)から例２の記載と同様の手順に従い透明な油状物で得た。収率30％；1H NMR(遊離塩基；CDCl3)δ：1,10(t, 3H), 1,22-1,40(m, 4H), 2,40-2,62(m, 4H), 3,16(q, 2H), 3,58(s, 2H), 5,05(広がったs, 1H D2Oで交換可能), 5,18(s, 2H), 7,22-7,40(m, 10H)。
【００８３】
例14
この例ではN1-エチル-N1-ベンジル-ヘキサン-1,6-ジアミン(XXII)の合成について記述する：
【化３０】
2005522502.tif 000025
【００８４】
上記化合物XXIIを、6-[エチル-ベンジル-アミノ]-ヘキシル-カルバミン酸ベンジルエステル(0.9g；2.45mmol)から例３の記載と同様の手順にしたがい、透明な油状物で得た。定量的収率；1H NMR(遊離塩基；CDCl3)δ：1,03(t, 3H), 1,15(広がったs, 2H D2Oで交換可能), 1,21-1,58(m, 8H), 2,37-2,58(m, 4H), 2,65(t, 2H), 3,56(s, 2H), 7,20-7,38(m, 5H)。
【００８５】
例15
この例では[6-(2-クロロ-ベンジルアミノ-ヘキシル]-カルバミン酸ベンジルエステル(XXIII)の合成について記述する：
【化３１】
2005522502.tif 000026
【００８６】
上記化合物XXIIIを(6-アミノ-ヘキシル)-カルバミン酸ベンジルエステル(4.00g，16mmol)から、例１の記載と同様の手順に従い、透明な油状物で得た。収率65％；1H NMR(遊離塩基；CDCl3)δ：1,23-1,60(m, 8H), 2,41(br, s 1H D2Oで交換可能), 2,61(t, 2H), 3,17(q, 2H), 3,89(s, 2H), 4,84(広がったs, 1H D2Oで交換可能), 5,12(s, 2H), 7,18-7,40(m, 9H)。
【００８７】
例16
この例では6-[エチル-(2-クロロ-ベンジル)-アミノ]-ヘキシル-カルバミン酸ベンジルエステル(XXIV)の合成について記述する：
【化３２】
2005522502.tif 000027
【００８８】
上記化合物XXIVを[6-(2-クロロ-ベンジルアミノ)-ヘキシル]-カルバミン酸ベンジルエステル(2.00g，5.35mmol)から例２の記載と同様の手順に従い、透明な油状物で得た。収率40％；1H NMR(遊離塩基；CDCl3)δ：1,08(t, 3H), 1,21-1,58(m, 8H), 2,40-2,62(m, 4H), 3,15(q, 2H), 3,63(s, 2H), 4,82(広がったs, 1H D2Oで交換可能), 5,12(s, 2H), 7,10-7,41(m, 8H), 7,57(d, 1H)。
【００８９】
例17
この例ではN1-エチル-N1-(2-クロロ-ベンジル)-ヘキサン-1,6-ジアミン(XXV)の合成について記述する：
【化３３】
2005522502.tif 000028
【００９０】
上記化合物XXVを、6-[エチル-(2-クロロ-ベンジル)-アミノ]-ヘキシル-カルバミン酸ベンジルエステル(0.80g；1.99mmol)から例３の記載と同様の手順にしたがい、黄色の油状物で得た。収率98％；1H NMR(遊離塩基；CDCl3)δ：1,05(t, 3H), 1,12-1,54(m, 8H＋2H D2Oで交換可能), 2,38-2,66(m, 6H), 3,61(s, 2H), 7,05-7,37(m, 3H), 7,53(d, 1H)。
【００９１】
例18
この例では[6-(2-ニトロ-ベンジルアミノ)-ヘキシル]-カルバミン酸ベンジルエステル(XXVI)の合成について記述する：
【化３４】
2005522502.tif 000029
【００９２】
上記化合物XXVIを、(6-アミノ-ヘキシル)-カルバミン酸ベンジルエステル(5.00g，20mmol)から例１の記載と同様の手順に従い、透明な油状物で得た。収率95％；1H NMR(遊離塩基；CDCl3)δ：1,27-1,38(m, 4H), 1,42-1,60(m, 4H＋1H D2Oで交換可能), 2,62(t, 2H), 3,18(q, 2H), 4,02(s, 2H), 4,89(広がったs, 1H D2Oで交換可能), 5,12(s, 2H), 7,24-7,42(m, 6H), 7,58-7,66(m, 2H), 7,95(d, 1H)。
【００９３】
例19
この例では6-[エチル-(2-ニトロ-ベンジル)-アミノ]-ヘキシル-カルバミン酸ベンジルエステル(XXVII)の合成について記述する：
【化３５】
2005522502.tif 000030
【００９４】
上記化合物XXVIIを、[6-(2-ニトロ-ベンジルアミノ)-ヘキシル]-カルバミン酸ベンジルエステル(3.00g，7.79mmol)から例２の記載と同様の手順に従い、緑色がかった油状物で得た。収率40％；1H NMR(遊離塩基；CDCl3)δ：1,02(t, 3H), 1,20-1,57(m, 8H), 2,37-2,56(m, 4H), 3,18(q, 2H), 3,83(s, 2H), 4,76(広がったs, 1H D2Oで交換可能), 5,12(s, 2H), 7,29-7,41(m, 6H), 7,50-7,61(m, 1H), 7,66-7,72(m, 1H), 7,79-7,83(m, 1H)。
【００９５】
例20
この例ではN1-エチル-N1-(2-ニトロ-ベンジル)-ヘキサン-1,6-ジアミン(XXVIII)の合成について記述する：
【化３６】
2005522502.tif 000031
【００９６】
上記化合物XXVIIIを、6-[エチル-(2-ニトロ-ベンジル)-アミノ]-ヘキシル-カルバミン酸ベンジルエステル(0.80g；2.00mmol)から例３の記載と同様の手順にしたがい、黄色の油状物で得た。収率98％；1H NMR(遊離塩基；CDCl3)δ：1.02(t, 3H), 1,20-1,57(m, 8H), 2,05(広がったs, 2H D2Oで交換可能), 2,37-2,56(m, 4H), 2,73(t, 2H), 3,83(s, 2H), 7,32-7,41(m, 1H), 7,50-7,61(m, 1H), 7,70-7,76(m, 1H), 7,79-7,83(m, 1H)。
【００９７】
例21
この例では2,5-bis-6-[エチル-(2-ニトロ-ベンジル)-アミノ]-ヘキシルアミノ-[1,4]ベンゾキノン(XXIX)の合成について記述する：
【化３７】
2005522502.tif 000032
【００９８】
上記化合物XXIXを、N1-エチル-N1-(2-ニトロ-ベンジル)-ヘキサン-1,6-ジアミン(0.65g；2.33mmol)及びp-ベンゾキノン(0.12g；1.1mmol)から、例４の記載と同様の手順に従い、ワックス状の赤色の固体で得た。収率15％；1H NMR(遊離塩基；CDCl3)δ：0,98(t, 6H), 1,19-1,50(m, 12H), 1,52-1,72(m, 4H), 2,35-2,57(m, 8H), 3,13(q, 4H), 3,83(s, 4H), 5,30(s, 2H), 6,58-6,66(広がったt, 2H D2Oで交換可能), 7,32-7,41(m, 2H), 7,48-7,58(m, 2H), 7,62-7,70(m, 2H), 7,78-7,82(m, 2H)。MS(ESI+) m/z＝663(M＋H)+。
【００９９】
例22
この例では[6-(3-メトキシ-ベンジルアミノ-ヘキシル]-カルバミン酸ベンジルエステル(XXX)の合成について記述する：
【化３８】
2005522502.tif 000033
【０１００】
上記化合物XXXを、(6-アミノ-ヘキシル)-カルバミン酸ベンジルエステル(4.00g，16mmol)から例１の記載と同様の手順に従い、透明な油状物で得た。収率76％；1H NMR(遊離塩基；CDCl3)δ：1.22-1.38(m, 4H), 1,41-1.62(m, 4H), 2,58(広がったs, 1H D2Oで交換可能), 2.62(t, 2H), 3.18(q, 2H), 3.78(s, 2H), 3.81(s, 3H), 4.83(広がったs, 1H D2Oで交換可能), 5.08(s, 2H), 6.79-6.95(m, 3H), 7.20-7.41(m, 6H)。
【０１０１】
例23
この例では6-[エチル-(3-メトキシ-ベンジル)-アミノ]-ヘキシル-カルバミン酸ベンジルエステル(XXXI)の合成について記述する：
【化３９】
2005522502.tif 000034
【０１０２】
上記化合物XXXIを、[6-(3-メトキシ-ベンジルアミノ)-ヘキシル]-カルバミン酸ベンジルエステル(2.91g，7.85mmol)から例２の記載と同様の手順に従い、透明な油状物で得た。収率50％；1H NMR(遊離塩基；CDCl3)δ：1.05(t, 3H), 1.21-1.38(m, 4H), 1,40-1.57(m, 4H), 2.43(t, 2H), 2.73(t, 2H), 3.18(q, 2H), 3.56(s, 2H), 3.80(s, 3H), 4.83(広がったs, 1H D2Oで交換可能), 5.09(s, 2H), 6.79-6.82(m, 1H), 6.85-6.88(m, 2H), 7.22(t, 1H), 7.29-7.42(m, 5H)。
【０１０３】
例24
この例ではN1-エチル-N1-(3-メトキシ-ベンジル)-ヘキサン-1,6-ジアミン(XXXII)の合成について記述する：
【化４０】
2005522502.tif 000035
【０１０４】
上記化合物XXXIIを、6-[エチル-(3-メトキシ-ベンジル)-アミノ]-ヘキシル-カルバミン酸ベンジルエステル(2.31g；6.01mmol)から例３の記載と同様の手順にしたがい、透明な油状物で得た。収率90％；1H NMR(遊離塩基；CDCl3)δ：1.04(t, 3H), 1.22-1.65(m, 8H＋2H D2Oで交換可能), 2.38-2,58(m, 4H), 2.65(t, 2H), 3.58(s, 2H), 3.82(s, 3H), 6.72-6.92(m, 3H), 7.16-7.29(m, 1H)。
【０１０５】
例25
この例では2,5-bis-6-[エチル-(3-メトキシ-ベンジル)-アミノ]-ヘキシルアミノ-[1,4]ベンゾキノン(XXXIII)の合成について記述する：
【化４１】
2005522502.tif 000036
【０１０６】
上記化合物XXXIIIを、N1-エチル-N1-(3-メトキシ-ベンジル)-ヘキサン-1,6-ジアミン(1.0g；4.24mmol)及びp-ベンゾキノン(0.2g；1.84mmol)から例４の記載と同様の手順に従い、ワックス状の赤色の固体で得た。収率15％；1H NMR(遊離塩基；CDCl3)δ：1.04(t, 6H), 1.24-1.57(m, 12H), 1.60-1.75(m, 4H), 2.39-2.60(m, 8H), 3.09(q, 4H), 3.57(s, 4H), 3.81(s, 6H), 5.32(s, 2H), 6.63(広がったt, 2H D2Oで交換可能), 6.76-6.95(m, 6H), 7.18-7.28(t, 2H)。MS(ESI+) m/z＝633(M＋H)+。
【０１０７】
例26
この例では[6-(4-メトキシ-ベンジルアミノ-ヘキシル]-カルバミン酸ベンジルエステル(XXXIV)の合成について記述する：
【化４２】
2005522502.tif 000037
【０１０８】
上記化合物XXXIVを、(6-アミノ-ヘキシル)-カルバミン酸ベンジルエステル(2,50g，10mmol)から例１の記載と同様の手順に従い、黄色の油状物で得た；収率90％；1H NMR(遊離塩基；CDCl3)δ：1.25-1.38(m, 4H), 1,41-1.57(m, 4H＋1H D2Oで交換可能), 2.62(t, 2H), 3.19(q, 2H), 3.75(s, 2H), 3.82(s, 3H), 4.76(広がったs, 1H D2Oで交換可能), 5.12(s, 2H), 6.82-6.93(m, 2H), 7.20-7.43(m, 7H)。
【０１０９】
例27
この例では6-[エチル-(4-メトキシ-ベンジル)-アミノ]-ヘキシル-カルバミン酸ベンジルエステル(XXXV)の合成について記述する：
【化４３】
2005522502.tif 000038
【０１１０】
上記化合物XXXVを、[6-(2-メトキシ-ベンジルアミノ)-ヘキシル]-カルバミン酸ベンジルエステル(2.91g，7.85mmol)から例２の記載と同様の手順に従い、透明な油状物で得た。収率40％；1H NMR(遊離塩基；CDCl3)δ：1.07(t, 3H), 1.23-1.38(m, 4H), 1,42-1.57(m, 4H), 2.42(t, 2H), 2,56(q, 2H), 3.21(q, 2H), 3.52(s, 2H), 3.82(s, 3H), 4.83(広がったs, 1H D2Oで交換可能), 5.12(s, 2H), 6.84(d, 2H), 7.25(d, 2H), 7.32-7.42(m, 5H)。
【０１１１】
例28
この例ではN1-エチル-N1-(4-メトキシ-ベンジル)-ヘキサン-1,6-ジアミン(XXXVI)の合成について記述する：
【化４４】
2005522502.tif 000039
【０１１２】
上記化合物XXXVIを、6-[エチル-(4-メトキシ-ベンジル)-アミノ]-ヘキシル-カルバミン酸ベンジルエステル(2.31g；6.01mmol)から例３の記載と同様の手順にしたがい、透明な油状物で得た。定量的収率；1H NMR(遊離塩基；CDCl3)δ：1.06(t, 3H), 1.22-1.56(m, 8H＋2H D2Oで交換可能), 2.38-2,57(m, 4H), 2.66(t, 2H), 3.55(s, 2H), 3.81(s, 3H), 6.82-6.94(m, 2H), 7.20-7.31(m, 2H)。
【０１１３】
例29
この例では2,5-bis-6-[エチル-(4-メトキシ-ベンジル)-アミノ]-ヘキシルアミノ-[1,4]ベンゾキノン(XXXVII)の合成について記述する：
【化４５】
2005522502.tif 000040
【０１１４】
上記化合物XXXVIIを、N1-エチル-N1-(4-メトキシ-ベンジル)-ヘキサン-1,6-ジアミン(1.05g；4mmol)及びp-ベンゾキノン(0.2g；1.84mmol)から例４の記載と同様の手順に従い、ワックス状の赤色の固体で得た。収率12％；1H NMR(遊離塩基；CDCl3)δ：1.04(t, 6H), 1.22-1.56(m, 12H), 1.58-1.72(m, 4H), 2.38-2,56(m, 8H), 3.12(q, 4H), 3.47(s, 4H), 3.79(s, 6H), 5.32(s, 2H), 6.59(広がったt, 2H D2Oで交換可能), 6.82-6.93(m, 4H), 7.21-7.30(m, 4H)。MS(ESI+) m/z＝633(M＋H)+。
【０１１５】
例30
この例では6-[(フラン-2-イルメチル)アミノ]-ヘキシル-カルバミン酸ベンジルエステル(XXXVIII)の合成について記述する：
【化４６】
2005522502.tif 000041
【０１１６】
上記化合物XXXVIIIを、(6-アミノ-ヘキシル)-カルバミン酸ベンジルエステル(4.00g，16mmol)から例１の記載と同様の手順に従い、茶色の固体で得た。収率72％；1H NMR(遊離塩基；CDCl3)δ：1.22-1.50(m, 8H), 1.73-1.98(m, 2H＋1H D2Oで交換可能), 2.69-2.94(m, 2H), 3.18(q, 2H), 4.28(s, 2H), 4.99-5.18(m, 2H＋1H D2Oで交換可能), 6.39-6.42(m, 1H), 6.72-6.79(m, 1H), 7.28-7.40(m, 5H), 7.46-7.50(m, 1H)。P.f.＝132-135℃。
【０１１７】
例31
この例では[6-(エチル-フラン-2-イルメチル-アミノ)-ヘキシル]-カルバミン酸ベンジルエステル(XXXIX)の合成について記述する：
【化４７】
2005522502.tif 000042
【０１１８】
上記化合物XXXIXを、6-[(フラン-2-イルメチル)アミノ]-ヘキシル-カルバミン酸ベンジルエステル(2.70g，8.18mmol)から例２の記載と同様の手順に従い、黄色の油状物で得た。収率35％；1H NMR(遊離塩基；CDCl3)δ：1.15-1.60(m, 9H), 1.82-1.99(m, 2H), 2.79-2.88(m, 2H), 2.99(q, 2H), 3,21(q, 2H), 4.22(s, 2H), 4.96(広がったs, 1H D2Oで交換可能), 5.15(s, 2H), 6.43-6.49(m, 1H), 6.62-6.68(m, 1H), 7.32-7.41(m, 5H), 7.53-7.56(m, 1H)。
【０１１９】
例32
この例ではN1-エチル-N1-フラン-2-イルメチル-ヘキサン-1,6-ジアミン(XL)の合成について記述する：
【化４８】
2005522502.tif 000043
【０１２０】
上記化合物XLを、[6-(エチル-フラン-2-イルメチル-アミノ)-ヘキシル]-カルバミン酸ベンジルエステル(1.05g；2.92mmol)から例３の記載と同様の手順にしたがい、透明な油状物で得た。収率85％；1H NMR(遊離塩基；CDCl3)δ：1.08(t, 3H), 1.22-1.58(m, 8H＋2H D2Oで交換可能), 2.38-2.61(m, 4H), 2.67(t, 2H), 3.62(s, 2H), 6.18-6.20(m, 1H), 6.32-6.38(m, 1H), 7.38-7.42(m, 1H)。
【０１２１】
例33
この例では2,5-bis-[6-(エチル-フラン-2-イルメチル-アミノ)-ヘキシルアミノ]-[1,4]ベンゾキノン(XLI)の合成について記述する：
【化４９】
2005522502.tif 000044
【０１２２】
上記化合物XLIを、N1-エチル-N1-フラン-2-イルメチル-ヘキサン-1,6-ジアミン(0.55g；2.45mmol)及びp-ベンゾキノン(0.14g；1.23mmol)から例４の記載と同様の手順に従い、ワックス状の赤色の固体で得た。収率16％；1H NMR(遊離塩基；CDCl3)δ：1.09(t, 6H), 1.22-1.58(m, 12H), 1.60-1.73(m, 4H), 2.43(t, 4H), 2,57(q, 4H), 3.18(q, 4H), 3.63(s, 4H), 5.32(s, 2H), 6.18-6.22(m, 2H), 6.32-6.39(m, 2H), 6.62(広がったt, 2H D2Oで交換可能), 7.38-7.41(m, 2H)。MS(ESI+) m/z＝553(M＋H)+。
【０１２３】
例34
この例では[2-(2-メトキシ-ベンジルアミノ-エチル]-カルバミン酸ベンジルエステル(XLII)の合成について記述する：
【化５０】
2005522502.tif 000045
【０１２４】
上記化合物XLIIを、(2-アミノ-エチル)-カルバミン酸ベンジルエステル(5.00g，25.8mmol)から例１の記載と同様の手順に従い、黄色の油状物で得た。収率80％；1H NMR(遊離塩基；CDCl3)δ：1.63(広がったs, 1H D2Oで交換可能), 2.75(t, 2H), 3.33(q, 2H), 3.78(s, 2H), 3.83(s, 3H), 5.18(s, 2H), 5.38(広がったs, 1H D2Oで交換可能), 6.82-6.93(m, 2H), 7.20-7.41(m, 7H)。
【０１２５】
例35
この例では2-[エチル-(2-メトキシ-ベンジル)-アミノ]-エチル-カルバミン酸ベンジルエステル(XLIII)の合成について記述する：
【化５１】
2005522502.tif 000046
【０１２６】
上記化合物XLIIIを、[2-(2-メトキシ-ベンジルアミノ)-エチル]-カルバミン酸ベンジルエステル(2.00g，19.7mmol)から例２の記載と同様の手順に従い、透明な油状物で得た。収率45％；1H NMR(遊離塩基；CDCl3)δ：1.05(t, 3H), 2,58(q, 2H), 2.62(t, 2H), 3.38(q, 2H), 3.62(s, 2H), 3.82(s, 3H), 5.20(s, 2H), 5.78(広がったs, 1H D2Oで交換可能), 6.85-6.99(m, 2H), 7.23-7.44(m, 7H)。
【０１２７】
例36
この例ではN1-エチル-N1-(2-メトキシ-ベンジル)-エタン-1,2-ジアミン(XLIV)の合成について記述する：
【化５２】
2005522502.tif 000047
【０１２８】
上記化合物XLIVを、2-[エチル-(2-メトキシ-ベンジル)-アミノ]-エチル-カルバミン酸ベンジルエステル(1.50g；4.35mmol)から例３の記載と同様の手順にしたがい、透明な油状物で得た。収率98％；1H NMR(遊離塩基；CDCl3)δ：1.04(t, 3H), 2.00(広がったs, 2H D2Oで交換可能), 2.65(q, 2H), 2.98(t, 2H), 3.21(t, 2H), 3.78(s, 2H), 3.85(s, 3H), 6.85-7.01(m, 2H), 7.20-7.42(m, 2H)。
【０１２９】
例37
この例では2,5-bis-2-[エチル-(2-メトキシ-ベンジル)-アミノ]-エチルアミノ-[1,4]ベンゾキノン(XLV)の合成について記述する：
【化５３】
2005522502.tif 000048
【０１３０】
上記化合物XLVを、N1-エチル-N1-(2-メトキシ-ベンジル)-エタン-1,2-ジアミン(1,40g；6.27mmol)及びp-ベンゾキノン(0.34g；3.12mmol)から例４の記載と同様の手順に従い、暗赤色の固体で得た。収率10％；1H NMR(遊離塩基；CD3OD)δ：1.15(t, 6H), 2.64(q, 4H), 2.79(t, 4H), 3.71(s, 4H), 3.82(s, 6H), 5.28(s, 2H), 6.88-6.99(m, 4H), 7.21-7.38(m, 4H)。MS(ESI+) m/z＝521(M＋H)+. Pf：127-130℃。
【０１３１】
例38
この例では[7-(2-メトキシ-ベンジルアミノ-ヘプチル]-カルバミン酸ベンジルエステル(XLVI)の合成について記述する：
【化５４】
2005522502.tif 000049
【０１３２】
上記化合物XLVIを、(7-アミノ-ヘプチル)-カルバミン酸ベンジルエステル(2,50g，9.4mmol)から例１の記載と同様の手順に従い、黄色の油状物で得た。収率90％；1H NMR(遊離塩基；CDCl3)δ：1.22-1.38(m, 6H), 1.38-1.64(m, 4H＋1H D2Oで交換可能), 2.62(t, 2H), 3.13(q, 2H), 3.81(s, 3H), 3.84(s, 2H), 5.09(s, 2H), 5.22(広がったs, 1H D2Oで交換可能), 6.80-6.93(m, 2H), 7.19-7.40(m, 7H)。
【０１３３】
例39
この例では7-[エチル-(2-メトキシ-ベンジル)-アミノ]-ヘプチル-カルバミン酸ベンジルエステル(XLVII)の合成について記述する：
【化５５】
2005522502.tif 000050
【０１３４】
上記化合物XLVIIを、[7-(2-メトキシ-ベンジルアミノ)-ヘプチル]-カルバミン酸ベンジルエステル(3.30g，8.0mmol)から例２の記載と同様の手順に従い、透明な油状物で得た。収率35％；1H NMR(遊離塩基；CDCl3)δ：1.12(t, 3H), 1.25-1.38(m, 6H), 1,43-1.61(m, 4H), 2.45-2.61(m, 4H), 3.20(q, 2H), 3.65(s, 2H), 3.83(s, 3H), 5.02(広がったs, 1H D2Oで交換可能), 5.19(s, 2H), 6.84-7.02(m, 2H), 7.21-7.51(m, 7H)。
【０１３５】
例40
この例ではN1-エチル-N1-(2-メトキシ-ベンジル)-heptan-1,7-ジアミン(XLVIII)の合成について記述する：
【化５６】
2005522502.tif 000051
【０１３６】
上記化合物XLVIIIを、7-[エチル-(2-メトキシ-ベンジル)-アミノ]-ヘプチル-カルバミン酸ベンジルエステル(1.10g；2,50mmol)から例３の記載と同様の手順にしたがい、黄色の油状物で得た。定量的収率；1H NMR(遊離塩基；CDCl3)δ：0.98(t, 3H), 1.12-1.53(m, 10H＋2H D2Oで交換可能), 2.35-2,52(m, 4H), 2,55-2.63(m, 2H), 3.55(s, 2H), 3.72(s, 3H), 6.72-6.80(m, 1H), 6.83(t, 1H), 7.14(t, 1H), 7.38(d, 1H)。
【０１３７】
例41
この例では2,5-bis-7-[エチル-(2-メトキシ-ベンジル)-アミノ]-ヘプチルアミノ-[1,4]ベンゾキノン(IL)の合成について記述する：
【化５７】
2005522502.tif 000052
【０１３８】
上記化合物ILを、N1-エチル-N1-(2-メトキシ-ベンジル)-ヘプタン-1,7-ジアミン(0.90g；3.23mmol)及びp-ベンゾキノン(0.17g；1.57mmol)から例４の記載と同様の手順に従い、赤色の油状物で得た。収率12％；1H NMR(遊離塩基；CDCl3)δ：1.08(t, 6H), 1.28-1,42(m, 12H), 1,45-1.60(m, 4H), 1.62-1.75(m, 4H), 2.48(t, 4H), 2,58(q, 4H), 3.18(q, 4H), 3.62(s, 4H), 3.83(s, 6H), 5.35(s, 2H), 6.62(広がったt, 2H D2Oで交換可能), 6.85-6.90(m, 2H), 6.97(t, 2H), 7.22(t, 2H), 7.43(d, 2H)。MS(ESI+) m/z＝661(M＋H)+。
【０１３９】
例42
この例ではN-(2-メトキシ-ベンジル)-ヘキサン-1,6-ジアミン(L)の合成について記述する：
【化５８】
2005522502.tif 000053
【０１４０】
上記化合物Lを、[6-(2-メトキシ-ベンジルアミノ-ヘキシル]-カルバミン酸ベンジルエステル(2.0g；5.40mmol)から例３の記載と同様の手順にしたがい、黄色の油状物で得た。収率65％；1H NMR(遊離塩基；CDCl3)δ：1.12-1,42(m, 8H＋3H D2Oで交換可能), 2.38-2,56(m, 4H), 3.60(s, 2H), 3.62(s, 3H), 6.63-6.79(m, 2H), 7.01-7.15(m, 2H)。
【０１４１】
例43
この例では2,5-bis-[6-(2-メトキシ-ベンジルアミノ)-ヘキシルアミノ]-[1,4]-ベンゾキノン(LI)の合成について記述する：
【化５９】
2005522502.tif 000054
【０１４２】
上記化合物LIを、N-(2-メトキシ-ベンジル)-ヘキサン-1,6-ジアミン(0.70g；2.96mmol)及びp-ベンゾキノン(0.15g；1.38mmol)から例４の記載と同様の手順に従い、赤色の固体で得た。収率18％；1H NMR(遊離塩基；CDCl3)δ：1.28-1,42(m, 8H), 1.52-1.76(m, 8H), 2.63(t, 4H), 3.16(q, 4H), 3.78-3.85(m, 10＋2H D2Oで交換可能), 5.32(s, 2H), 6.62(広がったt, 2H D2Oで交換可能), 6.85-6.96(m, 4H), 7.22-7.35(m, 4H)。MS(ESI+) m/z＝577(M＋H)+. Pf：205℃。
【０１４３】
例44
この例では6-[(2-メトキシ-ベンジル)-メチル-アミノ]-ヘキシル-カルバミン酸ベンジルエステル(LII)の合成について記述する：
【化６０】
2005522502.tif 000055
【０１４４】
8mLのH2O 中の[6-(2-メトキシ-ベンジルアミノ-ヘキシル]-カルバミン酸ベンジルエステル(5.0g；13.5mmol)の懸濁物に、HCOOH(1.6mL；40.5mmol)及びHCHO(3.1mL；40.5mmol)を添加した。還流により6時間、及びe.t. で一晩撹拌し、次いでこの水溶液をNaOH 40％を用いて塩基性にし、CHCl3を用いて抽出した(3×100mL)。回収され無水化された(anhydrified)有機抽出物を真空下で蒸発させ、得られた残渣をフラッシュクロマトグラフィにより精製した。CHCl3／石油のエーテル／MeOH/NH4OH(8：2：0.7：0.05)を用いて溶出し、1.6gの化合物LII を黄色の油状物で得た。収率75％；1H NMR(遊離塩基, CDCl3)δ：1,23-1,39(m, 4H), 1,40-1,63(m, 4H), 2,23(s, 3H), 2,44(t, 2H), 3,17(q, 2H), 3,58(s, 2H), 3,82(s, 3H), 5,12(s, 2H), 5,22(広がったs, 1H D2Oで交換可能), 6,82-7,00(m, 2)；7,20-7,38(m, 7)。
【０１４５】
例45
この例ではN1-(2-メトキシ-ベンジル)-N1-メチル-1,6 ヘキサンジアミン(LIII)の合成について記述する：
【化６１】
2005522502.tif 000056
【０１４６】
上記化合物LIIIを、6-[(2-メトキシ-ベンジル)-メチル-アミノ]-ヘキシル-カルバミン酸ベンジルエステル(1.60g；4.20mmol)から例３の記載と同様の手順にしたがい、黄色の油状物で得た。定量的収率；1H NMR(遊離塩基；CDCl3)δ：1.18-1.56(m, 8H＋2H D2Oで交換可能), 2.18(s, 3H), 2.38(t, 2H), 2.62(t, 2H), 3.45(s, 2H), 3.78(s, 3H), 6.78-6.92(m, 2H), 7.19(t, 1H), 7.28-7.31(m, 1H)。
【０１４７】
例46
この例では2,5-bis-6-[(2-メトキシ-ベンジル)-メチルアミノ]-ヘキシルアミノ-[1,4]-ベンゾキノン(LIV)の合成について記述する。
【化６２】
2005522502.tif 000057
【０１４８】
上記化合物LIVを、N1-(2-メトキシ-ベンジル)-N1-メチル-1,6 ヘキサンジアミン(0.90g；3.60mmol)及びp-ベンゾキノン(0.18g；1.66mmol)から例４の記載と同様の手順に従い、ワックス状の赤色の固体で得た。収率10％；1H NMR(遊離塩基；CDCl3)δ：1.31-1,48(m, 16H), 2.22(s, 6H), 2.41(t, 4H), 3.15(q, 4H), 3.52(s, 4H), 3.83(s, 6H), 5.32(s, 2H), 6.62(広がったt, 2H D2Oで交換可能), 6.83-6.99(m, 4H), 7.19-7.38(m, 4H)。MS(ESI+) m/z＝605(M＋H)+。
【０１４９】
例47
この例では2,5-bis-6-[エチル-(2-メトキシ-ベンジル)-アミノ]-ヘキシルアミノ-3,6-ジメチル-[1,4]-ベンゾキノン(LV)の合成について記述する。
【化６３】
2005522502.tif 000058
【０１５０】
上記化合物LVを、N1-(2-メトキシ-ベンジル)-N1-エチル-1,6-ヘキサンジアミン(0.82g；3.10mmol)及び2,5-ジメチル-ベンゾキノン(0.20g；1.85mmol)から例４の記載と同様の手順に従い、赤色の油状物で得た。収率10％；1H NMR(遊離塩基；CDCl3)δ：1,12(t, 6H), 1.22-1,43(m, 8H), 1,45-1,63(m, 8), 2.11(s, 6H), 2,48-2.62(m, 8H), 3.53(q, 4H), 3.63(s, 4H), 3.83(s, 6H), 6.72(広がったt, 2H D2Oで交換可能), 6.83-7,01(m, 4H), 7.23(t, 2H), 7,42(m, 2H)。MS(ESI+) m/z＝661(M＋H)+。
【０１５１】
例48
この例では、化合物XVIおよびXIIの阻害能力および選択性の決定、並びにこれら特性の市販されている幾つかの薬物との比較について記述する。
【０１５２】
阻害力（IC50）は、エルマンの分光学的方法（Ellman’s spectrophotometric method）を使用して測定した（Ellman, G.L.；Courtney, K.D.；Andres, V.；Featherstone, R.M. A New and Rapid Colorimetric Determination of Acetylcholinesterase Activity. Biochem. Pharmacol. 1961, Vol. 7, p. 88-95）。
【０１５３】
IC50の値は、一定濃度の基質および酵素を用い、かつ阻害剤の濃度を連続的に増大するように変化させて測定した。この方法において、酵素の活性は、陰イオン性着色分子種（2-ニトロ 4-チオベンゾエート)(λmax＝412 nm）形成の顕色に基づいて決定され、これはアセチルチオコリンの酵素的加水分解の生成物であるチオコリン（AChEの基質）またはブチリルチオコリン（BuChEの基質）と、5,5’-ジチオ-bis-ニトロ安息香酸との間の反応（Ellmanの反応）に従って得られる。412 nmにおける吸光度の変化（即ち、2-ニトロ-4-チオベンゾエートの412 nmでの1分間当りの吸収の変化（ΔA／分）（酵素速度）は、ミカエリス・メンテンの速度論に従って、基質濃度ならびにAChE（ヒト赤血球由来、両親媒性形、EC 3.1.1.7）およびBuChE（ヒト血清由来、EC 3.1.1.8）の酵素活性に依存する。
【０１５４】
IC50を計算するために、一定濃度の飽和基質、即ち、最大酵素速度（Vmax）および不変の酵素比率（enzyme rates）を生じることが可能な基質濃度を使用した。次いで、Vmaxの20％〜80％の阻害を誘導できる研究対象化合物を、５段階で増大させた濃度で試験した。次に、阻害剤濃度のナノモル濃度の常用対数の関数として、Vmaxの阻害パーセントをグラフ上にプロッティングすることにより、阻害線を得た。夫々の線について線形回帰パラメータを評価し、それぞれの線上での補間により得られたIC50（最大酵素活性を50％不活性化できる濃度）を評価した。
【表１】
2005522502.tif 000059
【０１５５】
a 3回反復された二つの独立の測定の平均；
b Sugimoto, H.；Yamanishi, Y.；Iimura, Y.；Kawakami, Y.；
Donepezil hydrochloride(E2020) and other Acetylcholinesterase 
Inhibitor. Current Medicinal Chemistry 2000, vol. 7, p.303-339。
【０１５６】
表１は、上記で述べた方法を使用して得た、化合物XVI、XII、タクリンおよびドネペジルに関するIC50を示している。AChEのIC50はIC50(AChE)として示され、BuChEのIC50 はIC50(BuChE)として示されている。選択性は、IC50(AChE)とIC50(BuChE)の間の比として定義され、BuChEにではなくAChEに優先的に結合する阻害剤の能力を示す。
【０１５７】
化合物XVIおよびXIIは、相対的に非常に良好なIC50(AChE)を示し（表I）、タクリン（Cognex(登録商標)）のIC50(AChE)よりも2倍小さく、ドネペジル（Aricept(登録商標))よりも実質的に低かった。
【０１５８】
選択性は相対的に非常に良好であり、タクリンの選択性よりも高く、ドネペジルの選択性に匹敵するものであった。
【０１５９】
例49
この例では、化合物XVIの阻害定数（Ki）の測定について述べる。
【０１６０】
阻害剤の速度論の評価は、酵素と阻害剤の間の結合の性質、結合の部位、およびKiで表される結合の定量的有効性に関して重要な情報を提供することができる。実際に、Kiは、遊離の酵素（特定の場合はAChE、ヒト赤血球由来EC 3.1.1.7）、阻害剤（特定の場合は化合物XVI）および酵素-阻害剤複合体の間の平衡状態を記述し、酵素-阻害剤の解離定数を表している。
【０１６１】
AChE-化合物XVI複合体のKiの測定は、Lineweaver-Burkの方法（Dixon, M., Webb, E.C., Enzymes, Second Edition, Chapter VIII, p. 315, Longmans, Green and Co. Ltd, 1964, London, UK）を使用して行った。夫々の濃度の化合物XVIについて、基質であるアセチルチオコリンの濃度を変化させながら（111-550 μM）評価した。酵素活性について得られたデータを、基質濃度の逆数の関数としてグラフ上にプロットすることにより（図１）、化合物XVIの各濃度について速度の逆数が示される。次いで、各濃度の阻害剤について得られた線の勾配の値を、対応する阻害剤濃度の関数としてグラフ上にプロットした。得られた線のＸ軸との交点（ゼロを通らない）のＸ座標は、化合物XVIの2.6 nMに等しいKiの値を与える。
【０１６２】
Lineweaver-Burkのグラフ（図１）の解析から、勾配が増大する線を見ることができ、これらは阻害剤の存在下におけるVmax およびKiの両方の変化を示している。この挙動は、おそらくは混合タイプの競争阻害を示しており、これは遊離酵素およびアセチル化された酵素の両者と化合物XVIとの顕著な相互作用から生じるものである。これらの結果から、化合物XVIは、活性部位とだけでなく、酵素の周縁部位によって提示され得る他の修飾部位との間でも、相対的に強い相互作用を有するように思える。従って、化合物XVIは比較的強力で、可逆性で、迅速な、混合タイプの競争阻害剤であり、これは実質的にミカエリス・メンテンの反応速度論に従う。
【０１６３】
例50
以下の表における化合物を、エルマンの方法（例48参照）を用いて、組換えヒトAChE（HuAChE、EC 3.1.1.7）およびBuChE（ヒト血清由来、EC 3.1.1.8）に対して試験した。
【０１６４】
この表はまた、同じ実験条件下で試験された二つの参照化合物（タクリンおよびドネペジル）の阻害力、並びに化合物XVIおよびXIIの阻害力に関するデータを示している。
【表Ａ】
2005522502.tif 000060
* 三回反復された二つの独立の測定の平均
例51
この例では、化合物XVIのアミロイド抗凝集力の決定について説明する。
【０１６５】
AChEによるAベータのフィブリルの形成の誘導は、酵素の周辺部位とペプチドとの間の相互作用によって生じるように思え（Inestrosa, N. C.；Alvarez, A.；Perez, C. A.；Moreno, R. D.；Vicente, M. et al. Acetylcholinesterase accelerates assembly of アミロイド-beta-peptides into Alzheimer's fibrils：possible role of the peripheral site of the enzyme. Neuron 1996, Vol. 16, p. 881-891）、また化合物XVIはこの部位に結合するように思えるので、酵素とAβとの間の相互作用を阻害する（従ってAChEによって誘導されたフィブリルの形成をブロックする）化合物XVIの能力を評価した。これを行うために、ペプチドAβのフィブリル形成を促進するAChEの能力を強調できる蛍光測定方法を使用した（1-40）。
【０１６６】
最初に、Aβ（230μM）を酵素（2.3μM）と共に100：1のモル比で、周囲温度において酸緩衝水溶液（pH＝8.0、0.215 M）中でインキュベートした。AChEにより誘導されたフィブリルの形成を評価するために、インキュベートした溶液を、チオフラビンT（1.5μM）を含有するグリシン-水酸化ナトリウム（50 mM）で構成された2 mLのバッファー（pH＝8.5）中に移した。チオフラビンTは、ベータコンホメーションのAβのフィブリルと選択的に相互作用し、特徴的な蛍光を発生する。300秒後に、この溶液の蛍光（λem＝490 nm）の強度を取得し、λexc＝446 nmに固定する。次いで、300 sの蛍光走査を行って蛍光信号の安定な値を得、これからチオフラビンTの基本蛍光への寄与を差引いた。チオフラビンTのアミロイドフィブリルとの相互作用にのみ関係する蛍光強度の値を得るために、同じ条件で個別にインキュベートされたAβおよびAChEからなる白色の寄与を差引いた。
【０１６７】
次いで、AChEによって誘導されたβAの凝集条件をチェックした後に、同じ条件で、化合物XVIの抗凝集力をチェックした。この化合物を、上記で述べたのと同じ条件で、AβおよびAChEと共にインキュベートした。化合物XVIの濃度は、10μMと250μMの間で変化させた。化合物XVIの存在下では、Aβのフィブリルと錯化したチオフラビンの蛍光強度の特異的信号が低下して、アミロイド抗凝集効果を示した。この蛍光信号は、化合物XVIの濃度の底が10の対数に直接比例した。蛍光の信号を50％だけ低下させる化合物XVIの濃度は、28.3±0.3 μMであった（図3）。
【０１６８】
上記の条件で試験された他のAChE阻害化合物（即ち、タクリン、ドネペジル、フィゾスチグミン、プロピジウム、デカメトニウム）の中で、プロピジウムだけが化合物XVIの阻害力と同じ大きさの阻害力（IC50＝12.6±0.3 μM）を示した。この点に関して、プロピジウムは、当該酵素の周辺部位と選択的に結合できるAChEの非競争的阻害剤として記載されていることを強調するのが重要である（Taylor, P.；Lappi, S. Interaction of fluorescence probes with acetylcholinesterase。The site and specificity of propidium binding. Biochemistry 1975, Vol. 14, p. 1989-1997）。従って、化合物XVIの抗凝集特性は、この分子が、Aβについての高い親和性を有するAChE周辺部位との結合性相互作用を確立できることを確認する。
【０１６９】
例52
先の例に記載したのと同様の以下の方法に従って、濃度100μMの化合物XIIが、AChE％により誘導される凝集に対して約90％の阻害を作用させることが実験的に決定された。
【０１７０】
例53
この例では一般式（I）によって表される2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体と、下記一般式（LVI）を有する既知化合物との間のpIC50の比較について述べる。
【化６４】
2005522502.tif 000061
【表２】
2005522502.tif 000062
【０１７１】
（一般式LVIを有する化合物は、Melchiorre et al., Acetylcholinesterase noncovalent Inhibitor based on a polyamine backbone for potential use against Alzheimer’s disease, J. Med. Chem. 1998, vol. 41, 4186-4189に記載されている）。
【０１７２】
表２からは、一般式（I）で表される2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体 が、一般式（LVI）を有する既知化合物よりも低いIC50(AChE)および高い選択性を示すことを見て取ることができる。
【０１７３】
例54
この例では、動物モデルにおける化合物XVIの活性の評価について述べる。
【０１７４】
インビボでの試験は、人間のアルツハイマー病に非常に類似したフェノタイプを呈する、最近になって実現された動物モデル（Ruberti F, et al., J Neurosci 2000, Vol. 20, p. 2589-2601）を使用して行われた。特に、このモデルは、神経成長因子（NGF）に対する抗体を発現し、結果として皮質において広範なニューロンの喪失、βアミロイド班の形成および細胞内神経原繊維の縺れ、並びに行動機能不全を示す形質転換マウスである。
【０１７５】
特に、抗NGF形質転換マウス（AD11）を作製するために、抗NGFモノクローナル抗体αD11の軽鎖および重鎖の可変領域を、ヒト定常領域κおよびγ1に連結して、キメラヒト／ラット抗体αD11を生じさせ、次いで、これをヒトサイトメガロウイルス（CMV）の早熟領域プロモータの転写制御下に置いた。当該軽鎖を発現するマウス（CMV-VKαD11）を、当該重鎖を発現するマウス（CMV-VH αD11）と交配させることにより、機能性の抗NGF抗体を発現するマウス（AD11マウス）が得られた。
【０１７６】
該AD11マウスを、1.5月齢から2月齢までの15日間、毎日副腔内注射により化合物XVI（塩水溶液中の7mg/kg）で処理した。二つの対照群を考慮した：塩水溶液で処理された同腹仔のAD11マウスと、同じ株および同齢の非形質転換マウスである。
【０１７７】
免疫組織化学的試験を次のようにして行った。化合物XVIで処理されたAD11マウス（抗NGF抗体を発現したマウス）、非トランスジェニックマウスを、過剰投与量の含水クロラールで麻酔した。脳を除去し、リン酸緩衝液（PBS）中の4％パラホルムアルデヒド中で24時間固定し、次いで30％蔗糖中で凍結保護した。前脳基底核および嗅内皮質の冠状切片を暑さ40μmで切断し、PBS中の1％パラホルムアルデヒドを含有する6細胞プレートの中に回収した。免疫組織化学的分析のために、次の一次抗体を使用した：抗コリンアセチルトランスフェラーゼ（1：500、Chemicon Inc., Temecula, CA）、抗リン酸化タウタンパク質（クローンAT8、Innogenetics N.V. Zwijnaarde, Belgium）、および抗アミロイドタンパク質前駆体（クローン2.F2.19B4 Chemicon Inc.）。一次抗体と共にインキュベーションした後、ヤギIgG（1：200, Vector Laboratories, Burlingame, CA）またはマウスIgG（Dako A/S, Glostrup, Denmark）に対するビオチン化抗体を添加する前に、前記切片を洗浄した。
【０１７８】
立体解析学的分析を行って、コリンアセチルトランスフェラーゼ（ChAT）に対して陽性の、コリン作動性ニューロンの数を測定した。MichelおよびCruz-Olive（J Microsc 1988, Vol. 150, p. 117-146）の方法によって、並びにPeterson et al.（J Comp Neurol 1999, Vol. 404, p. 1-20）の方法によって、前脳基底核の容積を計算する一方、光学的分画法（West MJ, Neurobiol Aging 1993, Vol. 14, p. 275-285 ；Peterson DA, et al., J Comp Neurol 1999, Vol. 404, p. 1-20）を使用して、ChATに対する陽性ユーロンの合計数の評価を得た。
【０１７９】
XVIが前脳基底核およびマイネルトの基底核におけるChAT陽性ニューロンの喪失を防止できるかどうかを決定するために、該化合物を、神経変性の非常に早期の段階のAD11マウスに毎日投与した（1.5ヶ月から2ヶ月；n＝6）。図４Ａ〜図４Ｃから、この処理が前脳基底核におけるコリン作動性欠陥を防止できたことが分かる；同じ結果が、図５のグラフに纏められた立体解析学的計算から定量することができる。更に、図６におけるグラフに示されたデータによって示されるように、XVIは、マイネルトの基底核におけるコリン作動性ニューロンの喪失を防止する上で効果的である。
【０１８０】
他のADマーカーに関しては、2月のAD11マウスにおけるアミロイドβ前駆体タンパク質（APP）の沈着、およびタウタンパク質の過リン酸化に対するXVIの効果を調べた。2月齢での大脳血管内におけるAPP沈着は、対照マウスにおいては存在しなかった（図７Ａ）が、AD11マウスにおいては重要であった（図７Ｂ）。大脳血管内におけるAPP沈着は、XVIの投与後に比較的防止された（図７Ｃ）。図７Ａ、図７Ｂおよび図７Ｃの比較から、化合物XVIは、15日間の投与後にAPPの大脳血管沈着を顕著に低減できると推測し得る。化合物XVIが皮質におけるタウ過リン酸化を防止または回復できるか同かを決定するために、2月齢の治療されたAD11マウスおよび担体だけで処置されたマウスから得られた切片について、免疫組織化学的試験を行った。対照マウスは細胞体樹状突起細胞区画における過リン酸化タウを示さない（図８Ａ）のに対して、治療されなかったかまたは担体で処置されたAD11動物は、ニューロン本体において強いマーキングを示した（図４Ｂ）。タウリン酸化は、XVIの投与の値に部分的に防止された（図４Ｃ）
ADの形質転換モデルにおいてインビボで行われた実験検査の結論では、本発明の化合物は、コリン作動性機能の回復に匹敵する活性プロファイルを呈し、またADマーカーの減少（ＡＰＰの大脳血管チン逆およびタウ過リン酸化の減少）を示した。
【０１８１】
例55  この例では、動物モデルにおける化合物XVIのインビボ活性の更なる評価について説明する。
【０１８２】
投与の量および手段
化合物XVIを、動物に投与するものよりも50倍以上濃縮した投与量でエタノール中に溶解、次いで、腹腔内注射のために塩水溶液中に希釈し、または経口投与のために水中に希釈した。
【０１８３】
その経口投与後の効力を試験するために、化合物XVIを7mg/kg/日の投与量で15月齢のAD11マウスに投与した。
【０１８４】
6月齢および12月齢でのAD11マウスにおける認識欠乏の治療、およびスコポラミンに誘導された健忘症の防止（Weiss B, Heller A. Methodological problems in evaluating the role of cholinergic mechanisms in behavior. Fed Proc 28, 135-146, 1969）における化合物XVIの効力を分析するために、15mg/kg/日の投与量を使用して15日間投与した。
【０１８５】
2月齢および6月齢において、AD11マウスにおけるアルツハイマーフェノタイプの改善における化合物XVIの能力を、AChEおよびNGFの他の阻害剤と比較した。マウスは毎日、7mg/kgの投与量で化合物XVIの注射を受けた。行動分析の事例においてのみ、経口で15mg/kg/日の投与量を受けた。
【０１８６】
タクリンは、1.5月齢から15日間、腹腔内注射（0.1mg/kg/日および3.5mg/kg/日）によって投与されたのに対して、ガランタミンは、6月齢から同じ期間だけ、腹腔内注射を受けた。更に、2月齢から4月間、経口で投与された（3.5mg/kg/日）。
【０１８７】
全ての実験において、対照マウスは塩水溶液溶液を投与され、または化合物XVIの溶液中に同じパーセンテージのエタノールを含有する水を腹腔内注射で投与された、月齢の一致した非形質転換マウス、月齢の一致したAD11マウスであった。
【０１８８】
組織学および神経立体解析学
治療の終了時に、マウスを8μl/grの含水クロラールで麻酔した。脳を取り出して、氷冷されたぺトリ皿に載置した。脳を、リン酸緩衝液中の4％パラホルムアルデヒドの中で24時間固定化し、次いでリン酸緩衝液中の30％蔗糖溶液の中で耐冷凍保護を行った。
【０１８９】
摺動型冷凍ミクロトームを用いて脳の冠状切片を得た。一連の切片を、リン酸緩衝液中の1％パラホルムアルデヒド溶液中に回収した。
【０１９０】
形態学的変化に対する影響を評価するために、次の一次抗体と共にインキュベートした：コリンアセチルトランスフェラーゼに対する抗体（Anti-ChAT；Chemicon）、アミロイド前駆体タンパク質APに対する抗体（Chemicon）、タウタンパク質のリン酸化画分に対する抗体（clone AT8；Innogenetics）、βアミロイドのN末端に対する抗体（Santa Cruz）。
【０１９１】
前脳基底核および嗅内皮質に対して、光学的分画方法（West M.J., Neurobiol Aging 14, 275-285, 1993；Peterson D.A. et al. J Comp Neurol 404, 1-20, 1999；Michel R.P. & Cruz-Orive L.M. J. Microsc. 150, 117-136, 1988）を使用して、神経立体解析学的定量分析を実施した。
【０１９２】
Schenkによって使用された方法（Schenk D., Nature 400, 173-177, 1999）に従って、APPの細胞外沈着の密度を計算した。ここでは、細胞外沈着が占める皮質面積の嗅内皮質の合計面積に対するパーセンテージを計算する。
【０１９３】
βアミロイド陽性細胞クラスターの数を、光学的分画法を用いて海馬の尾側部分において定量した。
【０１９４】
対象認識試験
AD11マウスにおける行動欠陥の救済における化合物XVIの効力を、対象認識試験を使用して分析した。この分析は、新たな対象と馴染みのある対象とを識別する能力を評価することからなっている（Bartus, RT. On neurodegenerative diseases, models, and treatment strategies：lessons learned and lessons forgotten a generation following the cholinergic hypothesis. Exp Neurol 163, 495-529, 2000）。AD11マウスは、新たな対象を篩対象から区別する能力の漸進的な低下を示す（Capsoni, S, Ugolini,g，Comparini, A, Ruberti, F, Berardi, N & Cattaneo, A. Alzheimer-like neurodegeneration in antinerve growth factor transgenic mice. Proc Natl Acad Sci USA 97, 6826-6831, 2000）。
【０１９５】
試験を開始する前に、6月齢および12月齢のマウスを、経口の15/mg/kg/日の投与量の化合物XVIで15日間治療した。対照は、水および同じパーセンテージのエタノール（2％）で処置された、月齢の一致する非形質転換マウスおよび形質転換AD11マウスであった。
【０１９６】
また、2月の非形質転換マウス群においても、0.5mg/kgのスコポラミン、ムスカりん受容体アンタゴニストの皮下投与によって認識欠陥が誘導された（Weiss B, Heller A. Methodological problems in evaluating the role of cholinergic mechanisms in behavior. Fed Proc 28, 135-146, 1969）。第二群の動物は、スコポラミン注射の20分前に、化合物XVI（per os, 15mg/kg）を投与された。第三群の非形質転換マウスは、処置されていない非形質転換マウスによって形成された。
【０１９７】
AD11マウスにおける行動欠陥の救済におけるガランタミンの効力を、2月齢から開始して6月齢まで、3.5mg/kg/日の経口投与の後に分析した。
【０１９８】
この実験を行うために、マウスをプレキシガラス（Plexiglas）製の箱（60cm×60cm×60cm）の中に配置した。この箱の壁および床を、不透明な洗浄可能な材料で覆った。この試験に使用した箱および対象もまた洗浄可能であった。箱および対象を、試験と試験の間え洗浄して、臭いの発生を停止させた。マウスは、当該装置に慣れるように、10分間継続する3回のセッションだけ空の箱の中に収容された。この試験の間、夫々のマウスはこの箱の中に戻されて、二つの同一の対象（対照A1およびA2、例えば12cm幅の二つのキューブ）に10分間だけ晒された。この実験では、二つの二つの対象の夫々を探索するのに費やされる合計時間を測定した。次いで、マウスをその檻に戻した。1分、1時間および24時間のインターバルの間、対象を箱から取り出し、2回のうちの1回はその同一のコピー（A3）で置換える一方、もう１回は完全に新しい対象（対象B）で置き換えた。1分、1時間および24時間の後、マウスを箱の中に戻し、馴染みのある対象A3および新しい対象Bに10分間だけ晒した。これらの対象は先の対象と同じ位置に配置された。この実験でも、二つの対象の夫々を探索するのに費やされた合計時間を測定した。探索時間は、対象から2cm以下の距離で、マウスが直接その頭で対象に向けて注意を払っている時間として操作的に定義される。式（N-F／N＋F）を使用して識別指数を計算した。ここでのNは新しい対象を探索するのに費やされた時間であり、Fは馴染みのある対象を探索するのに費やされた時間である。
【０１９９】
結果
（ａ）経口投与後の老齢AD11マウスにおける、コリン作動性不足、タウリン酸化およびβ-アミロイド凝集の阻止における効果
AD11マウスにおける神経変性は月齢と共に悪化し、15月例において完全に開花する。この月齢においては、AD11マウスの脳において以下の事象が見られる：ニューロンの死、コリン欠乏（Melchiorre, C, Andrisano, V, Bolognesi, ML, Budriesi, R, Cavalli, A, Cavrini, V, Rosini, M, Tumiatti, V & Recanatini, M. Acetylcholinesterase noncovalent inhibitor based on a polyamine backbone for potential use against Alzheimer's disease . J Med Chem 41, 4186-4189, 1998；Selkoe, DJ. Alzheimer's disease：genes, protains, and therapy. Physiol Rev 81, 741-766, 2001）、細胞外β-アミロイド班の存在（Inestrosa, NC, Alvarez A, Perez CA, Moreno RD, Vicente M, Linker C, Casanueva OI, Soto C, Garrido J. Acetylcholinesterase accelerates assembly of amyloid-beta-peptides into Alzheimer's fibrils：possible role of the peripheral site of the enzyme. Neuron 16, 881-91,1996）、ジストロフィー性神経炎、および過リン酸化形態のタウタンパク質で構成される細胞内の縺れ。
【０２００】
化合物XVIは、15月齢のAD11マウスに１月間、7mg/kg/日の投与量で経口により投与された（n＝6、nは使用したマウスの数）。この治療は、前脳基底核におけるコリン作動性ニューロンの数における改善をもたらした（図９）。
【０２０１】
化合物XVIで治療されたマウスにおける過リン酸化されたタウの細胞内蓄積（図１０Ｃ）は、プラセボで処理されたマウス（図１０Ｂ）に比較して減少した。細胞体樹状突起コンパートメントにおける過リン酸化されたタウを含有する細胞の数は、月齢が一致する非形質転換マウスのものと略同じであった（図１０Ａ）。
【０２０２】
化合物XVIの投与は、プラセボ処理されたマウス（図１１Ｂ）に比較して、AD11マウスにおけるβ-アミロイド班（図１１Ｃ）の数を減少させた。プラークの数は月齢が一致する非形質転換マウス（図１１Ａ）で観察できるレベルには達しなかったが、プラークの形態は、プラセボ処理されたマウスで観察されたものとは異なっていた：化合物XVIで処置されたマウス（図１１Ｃ）でのプラークに関連する細胞の数は、プラセボ処理されたマウス（図１１Ｂ）におけるものよりも少なかった。
【０２０３】
結論として、上述した結果は、経口投与後でさえも化合物XVIは活性であること、および病気が完全に発症し且つ進行した段階にある老齢マウスにおいても、化合物XVIは神経変性を改善できることを示している。
【０２０４】
（ｂ）A11マウスおよびスコポラミンで処置されたマウスにおける行動欠陥に対する化合物XVIの影響
AD11マウスにおける行動欠陥の治療における化合物XVIの効力を、対象認識試験を使用して分析した。この分析は、新たな対象と馴染みのある対象とを識別する能力を評価することからなっている（Bartus, RT. On neurodegenerative diseases, models, and treatment strategies：lessons learned and lessons forgotten a generation following the cholinergic hypothesis. Exp Neurol 163, 495-529, 2000）。AD11マウスは、新たな対象を篩対象から区別する能力の漸進的な低下を示す（Capsoni, S, Ugolini,g，Comparini, A, Ruberti, F, Berardi, N & Cattaneo, A. Alzheimer-like neurodegeneration in antinerve growth factor transgenic mice. Proc Natl Acad Sci USA 97, 6826-6831, 2000）。
【０２０５】
化合物XVIの投与（15mg/kg/日、経口）は、6月齢（n＝10, 図12）および12月齢（n＝8；図13）のAD11における欠陥の改善を可能にした。
【０２０６】
この同じ試験を、スコポラミン投与の20分前に化合物XVIで処置した非形質転換マウスに適用した。この化合物XVIで処置されたマウスは、健忘症の如何なる兆候も示さず、また馴染みのある対象を新しい対象から識別することができた（図１４）。
【０２０７】
結論として、化合物XVIは、形質転換マウスにおいてNGF欠乏により定義された、および非形質転換マウスにおいてスコポラミン投与により定義された認識欠陥を改善することができた。
【０２０８】
（ｃ）他のAChE阻害剤の効果と比較したときの、AD11マウスへの化合物XVIの投与の効果
化合物XVI、ガランタミンおよびタクリンを、AD11マウスに毎日投与した。個いれらの薬物は、経口（化合物XVIおよびガランタミン）または腹腔内注射（化合物XVI、ガランタミンおよびタクリン）により投与された。これらは1.5月齢から初めて2月齢まで投与された。化合物XVIおよびガランタミンでの治療は、前脳基底核におけるコリン作動性ニューロンの数を減少させたのに対して、タクリンはコリン欠乏を悪化させた（図１５）
化合物XVI、ガランタミンおよびカプロクタミンもまた、6月齢から15日間だけAD11マウスに投与された。化合物XVIおよびガランタミンは前脳基底核におけるコリン作動性欠乏を救済できたが、カプロクタミンはコリン作動性ニューロンの数に影響しなかった（図１６）
1.5月齢または6月齢から開始して15日間の化合物XVIで治療した後、化合物XVIはリン酸化タウでラベルされたニューロンの数を減少させた（図１７および図１８）。ガランタミン（図１８および図１８）およびカプロクタミン（図１８）は効果がなかった。
【０２０９】
6月齢のAD11マウスにおいて、化合物XVIおよびガランタミンの投与は、APPの細胞外沈着を減少させたのに対して、カプロクタミンは無効であった（図１９）。
【０２１０】
6月齢で開始した化合物XVIでの治療は、AD11マウスの海馬においてベータアミロイドタンパク質を集積する細胞の数を減少させることができた。ガランタミンを使用して同じ結果が得られるのに対して、カプロクタミンは効果がなかった（図２０）。
【０２１１】
6月齢から2週間の化合物XVIの投与では行動欠陥の顕著な改善が見られ、ガランタミンでも見られた（図２１）。
【０２１２】
結論として、化合物XVIはガランタミンと同様に有効であるが、タウ過リン酸化にリンクした神経変性の側面を反転させることにおいてはこれよりも優れている。カプロクタミンは、アルツハイマー性の神経変性の全ての側面において無効であった。 
なお、添付の図における“*”でマークしたデータは、P＜0.05を表す。
【０２１３】
例56
適切な実験的変更の後のRandox Laboratories（登録商標）Ltd(UK)のキット（Total antioxidant status）［Rice-Evans C. and Miller N.J. Total antioxidant status in plasma and body fluids, Meshods Enzymol. 234(1994) 279-293］を使用して、酸素ラジカルを捕捉する能力として表されたTXVIの抗酸化力を試験した。
【０２１４】
遊離ラジカルを中和する能力を評価するために使用された方法は、比色法である。この方法はペルオキシダーゼ化合物、メトミオグロビン(methmyoglobin)（6.1 μM）（HXFe 3+）の反応性に基づいており、これは生理学的pHの水性緩衝液中の過酸化水素の存在下において酸素ラジカルの形成を促進し、フェリミオグロビン（・X-[Fe 4+=O]）の形態で該ラジカルと複合化する。フェリミオグロビンはカチオン（ABTS(登録商標)）（2,2’-アジノ-ジ-[3-エチルベンゾチアゾリンスルホネート]）(610 μM)空電子を引き抜いてメトミオグロビンに戻り、ABTS（登録商標）を600nmで検出可能な着色したラジカルに変化させる。
【０２１５】
溶液中に存在する抗酸化剤による遊離酸素ラジカルの捕捉は、固定された時間で、着色種の形成および対応する600nmでの吸収を低下させる。
【０２１６】
濃度に依存した仕方で発色反応を阻害できる基準抗酸化剤として、ビタミンEの水溶性誘導体、Trolox（6-ヒドロキシ-2,5,7,8-テトラメチルクロマン-2-カルボン酸）を使用した。
【０２１７】
白色は、37℃でインキュベートされたリン酸緩衝液（80 mM, pH7.4）、メトミオグロビンおよびABTS（登録商標）で構成され、参照は追加でTroloxを含有するのに対して、サンプルは追加で化合物XVIを含有する。各試験において基質H2O2を添加し、固定時間（t0 および3分後）において600 nmの吸光度を読み取った。白色の色喪失パーセントを、試験したサンプルの抗酸化剤活性の指標として使用することができる。
【０２１８】
％阻害＝ΔAbswhite−ΔAbstest／ΔAbswhite×100
次のデータが得られた：
【表３】
2005522502.tif 000063
【０２１９】
* ３回反復された二つの独立した測定の平均
示された方法の修飾は、その溶解および夫々の白色を補助するための、化合物XVIを含有するサンプル中へのヒト血清アルブミン（25 μM）の添加に関する。
【０２２０】
説明したシステムにおいて、化合物XVIは、着色ラジカル種の形成を阻害したので、抗酸化剤活性（遊離ラジカルの捕捉）を示した。化合物XVIの抗酸化力は、Troloxよりも約6倍低い。しかし、化合物XVIは、酸化されたキノン形態で試験されたことが強調されなければならない。これは、インビボでは酵素的還元系に接触しており、より活性なヒドロキノン還元形に変換されることができる。
【図面の簡単な説明】
【０２２１】
【図１】図１は、Lineweaver-Burkの実験グラフを示している。
【図２】図２は、一般式（I）を有する2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体の濃度に関して、図１のグラフにおける線の勾配関数を表す実験グラフである。；
【図３】図３は、種々の濃度の一般式（I）を有する2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体の存在下において、Aβのフィブリルと錯化したチオフラビンの蛍光強度（蛍光単位で表されたもの）を示している。
【図４】図４におけるA、BおよびCは、それぞれ、非形質転換マウス、塩水溶液で処理された形質転換マウス（AD11）、および一般式（I）を有する2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体で処理された形質転換マウス（AD11）の前脳基底核の冠状切片を示している。
【図５】図５は、前脳基底核におけるコリン作動性ニューロンの合計数を示している。
【図６】図６は、マイネルトの基底核におけるコリン作動性ニューロンの合計数を示している。
【図７】図７におけるA、BおよびCは、それぞれ、非形質転換マウス、塩水溶液で処理された形質転換マウス（AD11）、および一般式（I）を有する2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体で処理された形質転換マウス（AD11）の大脳血管におけるAPPの沈着を示している。
【図８】図８におけるA、BおよびCは、それぞれ、非形質転換マウス、塩水溶液で処理された形質転換マウス（AD11）、および一般式（I）を有する2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体で処理された形質転換マウス（AD11）の嗅内皮質の冠状切片をそれぞれ示している。
【図９】図９におけるA、BおよびCは、それぞれ、非形質転換マウス、形質転換マウス（AD11）、および一般式（I）を有する2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体で処理された形質転換マウス（AD11）の前脳基底核の冠状切片をそれぞれ示している。
【図１０】図１０におけるA、BおよびCは、それぞれ、非形質転換マウス、形質転換マウス（AD11）、および一般式（I）を有する2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体で処理された形質転換マウス（AD11）の嗅内皮質の冠状切片をそれぞれ示している。
【図１１】図１１におけるA、BおよびCは、それぞれ、非形質転換マウス、形質転換マウス（AD11）、および一般式（I）を有する2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体で処理された形質転換マウス（AD11）の海馬の切片をそれぞれ示している。
【図１２】図１２は、実験において見出された識別指数を示している。
【図１３】図１３は、実験において見出された識別指数を示している。
【図１４】図１４は、実験において見出された識別指数を示している。
【図１５】図１５は、前脳基底核において見出されたコリン作動性ニューロンの合計数を示している。
【図１６】図１６は、前脳基底核において見出されたコリン作動性ニューロンの合計数を示している。
【図１７】図１７は、嗅内皮質においてホスホタウ（phospho-tau）を発現するコリン作動性ニューロンの合計数を示している。
【図１８】図１８は、嗅内皮質においてホスホタウ（phospho-tau）を発現するコリン作動性ニューロンの合計数を示している。
【図１９】APPの細胞外変化を示している。
【図２０】図２０は、β-アミロイドによって集積された細胞の数を示している。
【図２１】図２１は、実験において見出された識別指数を示している。
【図１】
2005522502.tif 000072
【図２】
2005522502.tif 000073
【図３】
2005522502.tif 000074
【図４】
2005522502.tif 000075
【図５】
2005522502.tif 000076
【図６】
2005522502.tif 000077
【図７】
2005522502.tif 000078
【図８】
2005522502.tif 000079
【図９】
2005522502.tif 000080
【図１０】
2005522502.tif 000081
【図１１】
2005522502.tif 000082
【図１２】
2005522502.tif 000083
【図１３】
2005522502.tif 000084
【図１４】
2005522502.tif 000085
【図１５】
2005522502.tif 000086
【図１６】
2005522502.tif 000087
【図１７】
2005522502.tif 000088
【図１８】
2005522502.tif 000089
【図１９】
2005522502.tif 000090
【図２０】
2005522502.tif 000091
【図２１】
2005522502.tif 000092
【手続補正書】
【提出日】平成16年4月19日(2004.4.19)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項１】
一般式（I）を有する2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体：
【化１】
2005522502.tif 000093
ここで、
R1は、下記からなる群から選択される置換基を表し；
・水素、
・1〜5個の炭素原子を有する飽和もしくは不飽和で且つ直鎖もしくは分岐鎖の
アルキル基、および
・電子吸引誘導効果を有する置換基
R2およびR3は、夫々が他から独立して、1〜5個の炭素原子を与える飽和もしくは不飽和で且つ直鎖もしくは分岐鎖のアルキル基を表し；
R4およびR5は、夫々が他から独立して、下記からなる群から選択される置換基を表し；
・水素、
・1〜5個の炭素原子を与える飽和もしくは不飽和で且つ直鎖もしくは分岐鎖の
アルキル基、
・OMe、および
・SMe；
Xは、下記からなる群から選択される基を表し；
・-HC=CH-、
・-HC=N-、
・-S-、
・-O-、および
・-NH-；
Tは、1〜4個の炭素原子を与える飽和もしくは不飽和で且つ直鎖もしくは分岐鎖のアルキルを表し；
Zは、2〜13個の炭素原子を与える飽和もしくは不飽和で且つ直鎖もしくは分岐鎖のアルキルを表す。
【手続補正２】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項２】
請求項１に記載の一般式（I）を有する2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体であって、R1が下記からなる群から選択される置換基を表すベンゾキノン誘導体：
・水素、
・電子吸引誘導効果を有する置換基。
【手続補正３】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項３】
請求項１に記載の一般式（I）を有する2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体であって、
R1は下記からなる群から選択される置換基を表し；
・水素、
・ハロゲン、
・NO2、および
・MeO
R2およびR3は、夫々が他から独立して、水素、または1〜4個の炭素原子を有する飽和もしくは不飽和で且つ直鎖もしくは分岐鎖のアルキルを表し；
R4およびR5は、夫々が他から独立して、下記からなる群から選択される置換基を表し；
・水素、
・炭素原子が1〜5個の、飽和もしくは不飽和で且つ直鎖もしくは分岐鎖の
アルキル基
Tは、1〜3個の炭素原子を与える飽和もしくは不飽和で且つ直鎖もしくは分岐鎖のアルキルを表し；
Zは、2〜12個の炭素原子を与える飽和もしくは不飽和で且つ直鎖もしくは分岐鎖のアルキルを表す。
【手続補正４】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項４】
請求項１に記載の一般式（I）を有する2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体であって、
R1は下記からなる群から選択される置換基を表し；
・水素、
・ハロゲン、
・MeO
R2およびR3は、夫々が他から独立して、水素、または1〜2個の炭素原子を有する飽和もしくは不飽和で且つ直鎖もしくは分岐鎖のアルキル基を表し；
R4およびR5は、夫々が他から独立して、下記からなる群から選択される置換基を表し；
・水素、
・炭素原子が1〜4個の、飽和もしくは不飽和で且つ直鎖もしくは分岐鎖の
アルキル基
Xは、-HC=CH-基または-O-基を表し；
Tは、-CH2-基を表し；
Zは、2〜7個の炭素原子を与える飽和もしくは不飽和で且つ直鎖もしくは分岐鎖のアルキルを表す。
【手続補正５】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項５】
請求項３に記載の一般式（I）を有する2,5-bis-ジアミン-[1,4]ベンゾキノン誘導体であって、
R3は、水素を表し；
R4およびR5は、夫々が他から独立して、下記からなる群から選択される置換基を表し；
・水素、
・炭素原子が1〜5個の、飽和もしくは不飽和で且つ直鎖もしくは分岐鎖の
アルキル基
・炭素原子が3〜4個の分岐アルキル基
Zは、2〜7個の炭素原子を与える飽和の直鎖アルキルを表す。
【国際調査報告】
2005522502.tif 000094
2005522502.tif 000095
2005522502.tif 000096