(57)【要約】KSPの活性を調節させることによって細胞増殖性疾患および障害を治療するために有用な化合物、組成物、および方法を開示する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Iで示される化合物であって：
【化１】
2005536475.tif 000020
式中：
W、X、Y、およびZは独立に-N=または-C=であって、W、X、Y、およびZのうちの少なくとも1つが-N=であるが2つ以上が-N=ではなく；
R1、R2、R3、およびR4は独立に水素、ヒドロキシ、任意に置換されたアルキル、任意に置換されたアルコキシ、ハロゲン、またはシアノであって、W、X、Y、またはZが-N=の場合にはR1、R2、R3、またはR4はそれぞれ存在せず；
R5は任意に置換されたアルキル、または任意に置換されたアリールであり；
R6およびR6'は独立に水素、任意に置換されたアルキル、もしくは任意に置換されたアリールであるか、または、R6はR6'と一緒になって、環の原子数が5から7個である、任意に置換されたシクロアルキル、または任意に置換されたヘテロシクロアルキルであり；
R7は任意に置換されたアルキル、または任意に置換されたアリールであり；および
R8は水素、-C(O)-R9、-S(O)2-R9、-CH2-R9、-C(O)-O-R9、-C(O)-NH-R9、もしくは-S(O)2-NH-R9であって、これらの式中：
R9は水素、任意に置換されたアルキル、任意に置換されたアリール、もしくは任意に置換されたヘテロアリールであるか；
または、R7はR8と一緒になって任意に置換されたイミダゾリルもしくは任意に置換されたイミダゾリニルである、
化合物、またはそれらの薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物。
【請求項２】
R6がメチルである場合にはR5が任意に置換されたフェニル以外のものである、請求項1に記載の化合物、塩、または溶媒和物。
【請求項３】
R6およびR6'が異なるものであり、R6が結合する立体中心が(R)-配置のものである、請求項2に記載の化合物、塩、または溶媒和物。
【請求項４】
以下の1つ以上を有する：
X、Y、もしくはZは-N=、又はWおよびZは-N=であり；
R1、R2、R3、およびR4は独立に水素、ハロ、低級アルキル、置換された低級アルキル、低級アルコキシ、シアノ、または存在せず； 
R5は任意に置換されたアラルキルであり；
R6は低級アルキルであり；
R6'は水素であり；
R7は置換されたアルキルであり；
R8は-C(O)-R9であって、このR9はアルキル、アルコキシアルキル、ハロアルキル、任意に置換されたアリール、任意に置換されたアラルキル、アリールオキシアルキル、任意に置換されたヘテロアリール、任意に置換されたヘテロアラルキル、もしくは任意に置換されたヘテロアリールオキシアルキルであるか；
またはR8は、-C(O)-OR9であって、このR9は任意に置換されたアリールもしくは任意に置換されたヘテロアリールである、
請求項3に記載の化合物、塩、または溶媒和物。
【請求項５】
以下の1つ以上を有する：
X、Y、またはZは-N=であり；
R1、R2、R3、およびR4は独立に水素、クロロ、フルオロ、低級アルキル、置換された低級アルキル、メトキシ、シアノ、または存在せず；
R5はベンジルまたは置換されたベンジルであり；
R6はエチル、i-プロピル、c-プロピル、もしくはt-ブチルであり；および/または
R7は1級アミノで置換された低級アルキル、２級アミノで置換された低級アルキル、もしくは3級アミノで置換された低級アルキルであり；および/または
R8は-C(O)-R9であり、このR9は低級アルコキシアルキル、任意に置換されたフェニル、任意に置換されたベンジル、フェニルビニル、フェノキシ低級アルキル、任意に置換されたヘテロアリール、任意に置換されたヘテロアラルキル、もしくは任意に置換されたヘテロアリールオキシアルキルであるか； 
または、R8は-C(O)-OR9であり、このR9は任意に置換されたフェニルまたは任意に置換されたヘテロアリールである、
請求項4に記載の化合物、塩、または溶媒和物。
【請求項６】
以下の1つ以上を有する：
R1、R2、R3、およびR4は独立に水素、クロロ、フルオロ、メチル、メトキシ、シアノ、または存在せず；
R5はベンジルであり；
R8は-C(O)-R9であり、このR9は低級アルコキシアルキル、低級アルキルで置換されたフェニル、低級アルコキシで置換されたフェニル、ハロで置換されたフェニル、任意に置換されたベンジル、フェノキシ低級アルキル、任意に置換されたヘテロアリール、任意に置換されたヘテロアラルキル、もしくは任意に置換されたヘテロアリールオキシアルキルであるか；
または、R8は-C(O)-OR9であり、このR9は低級アルキルで置換されたフェニル、低級アルコキシで置換されたフェニル、ハロで置換されたフェニル、もしくは任意に置換されたヘテロアリールである、
請求項5に記載の化合物、塩、または溶媒和物。
【請求項７】
R1、R2、R3、およびR4のうちの3つが水素であるか、またはR1、R2、R3、およびR4のうちの2つが水素で第3番目のものがハロ、メトキシ、もしくはシアノであり、第4番目のものが存在しない、請求項6に記載の化合物、塩、または溶媒和物。
【請求項８】
R6'は水素であり；
R8は-C(O)-R9であり、このR9は低級アルコキシアルキル、低級アルキルで置換されたフェニル、低級アルコキシで置換されたフェニル、もしくはハロで置換されたフェニルであるか；
または、R8は-C(O)-OR9であり、このR9は低級アルキルで置換されたフェニル、低級アルコキシで置換されたフェニル、ハロで置換されたフェニル、もしくは任意に置換されたヘテロアリールである、
請求項7に記載の化合物、塩、または溶媒和物。
【請求項９】
以下の1つ以上を有する：
R1ならびにR2、R3、およびR4のうちの2つは水素であり、第4番目のものは存在せず； 
R5はベンジルであり；
R6はi-プロピルであり；
R8は-C(O)-R9であり、このR9はメトキシ-メチル、低級アルキルで置換されたフェニル、低級アルコキシで置換されたフェニル、もしくはハロで置換されたフェニルであるか；
または、R8は-C(O)-OR9であり、このR9は低級アルキルで置換されたフェニル、低級アルコキシで置換されたフェニル、ハロで置換されたフェニル、もしくは任意に置換されたヘテロアリールである、
請求項8に記載の化合物、塩、または溶媒和物。
【請求項１０】
R8が-C(O)-R9であり、このR9がメトキシ-メチル、またはp-トリルである、請求項9に記載の化合物、塩、または溶媒和物。
【請求項１１】
R1ならびにR2、R3、およびR4のうちの2つは水素であり、第4番目のものは存在せず； 
R5はベンジルであり；
R6はi-プロピルであり；および
R7はn-あみの-ぷろぴるである、
請求項10に記載の化合物、塩、または溶媒和物。
【請求項１２】
R8が-S(O)2-R9であり、このR9が：C1-C13アルキル；ヘテロアリール；ナフチル；もしくは、任意にハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ニトロ、メチレンジオキシ、フェニル、あるいはトリフルオロメチルで置換されたフェニルであるか；または
R8が-CH2-R9であり、このR9が：C1-C13アルキル；置換された低級アルキル；ベンジル；ヘテロシクリル；ナフチル；もしくは任意にハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ニトロ、メチレンジオキシ、フェニル、あるいはトリフルオロメチルで置換されたフェニルである、
請求項3に記載の化合物、塩、または溶媒和物。
【請求項１３】
以下の1つ以上を有する：
X、Y、またはZは-N=であり；
R1、R2、R3、およびR4は独立に水素、クロロ、フルオロ、低級アルキル、置換された低級アルキル、メトキシ、シアノ、または存在せず；
R5はベンジルまたは置換されたベンジルであり；
R6はエチル、i-プロピル、c-プロピル、またはt-ブチルであり；
R7は1級アミノで置換された低級アルキル、２級アミノで置換された低級アルキル、もしくは3級アミノで置換された低級アルキルである、
請求項12に記載の化合物、塩、または溶媒和物。
【請求項１４】
R9がヘテロシクリル；ナフチル；またはハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ニトロ、メチレンジオキシ、フェニル、もしくはトリフルオロメチルで置換されたフェニルである、請求項13に記載の化合物、塩、または溶媒和物。
【請求項１５】
R7がR8と一緒になって2-(任意に置換された)-4,4-(任意に2つが置換された)-4,5-ジヒドロ-イミダゾール-1-イル、2-(任意に置換されたフェニル)-イミダゾール-1-イル、または4-(任意に置換されたアルキル)-2-(任意に置換されたアリール)-イミダゾール-1-イルである、請求項3に記載の化合物、塩、または溶媒和物。
【請求項１６】
以下の1つ以上を有する：
X、Y、またはZは-N=であり；
R1、R2、R3、およびR4は独立に水素、クロロ、フルオロ、低級アルキル、置換された低級アルキル、メトキシ、シアノ、または存在せず；
R5はベンジルまたは置換されたベンジルであり；
R6はエチル、i-プロピル、c-プロピル、またはt-ブチルである、
請求項15に記載の化合物、塩、または溶媒和物。
【請求項１７】
R7はR8と一緒になって2-(4-メチルフェニル)-4,5-ジヒドロ-イミダゾール-1-イル、2-(3-フルオロ-, 4-メチルフェニル)-4,5-ジヒドロ-イミダゾール-1-イル、2-(4-メチルフェニル)-4,4-ジメチル-4,5-ジヒドロ-イミダゾール-1-イル、2-(3-フルオロ-, 4-メチルフェニル)-4,4-ジメチル-4,5-ジヒドロ-イミダゾール-1-イル、2-フェニル-イミダゾール-1-イル、2-p-トルオイル-イミダゾール-1-イル、2-(4-フルオロフェニル)-イミダゾール-1-イル、2-(4-クロロフェニル)-イミダゾール-1-イル、2- (3-フルオロ-4-メチルフェニル)-イミダゾール-1-イル、4- (2-アミノ-エチル)-2-フェニル-イミダゾール-1-イル、4-(2-アミノ-エチル)-2-p-トリル-イミダゾール-1-イル、4-(2-アミノ-エチル)-2-(4-フルオロ-フェニル)-イミダゾール-1-イル、4-(2-アミノ-エチル)-2-(4-クロロ-フェニル)-イミダゾール-1-イル、4-(2-アミノ-エチル)-2-(3-フルオロ-4-メチルフェニル)-イミダゾール-1-イル、4-(アミノメチル)-2-フェニル-イミダゾール-1-イル、4-(アミノメチル)-2-ｐ-トリル-イミダゾール-1-イル、4-(アミノメチル)-2-(4-フルオロ-フェニル)-イミダゾール-1-イル、4-(アミノメチル)-2-(4-クロロ-フェニル)-イミダゾール-1-イル、または4-(アミノメチル)-2-(3-フルオロ-4-メチル-フェニル)-イミダゾール-1-イルである、請求項16に記載の化合物、塩、または溶媒和物。
【請求項１８】
薬学的に許容される添加物および請求項1から17のいずれか1項に記載の化合物、塩、または溶媒和物の有効量を含んでなる医薬製剤。
【請求項１９】
請求項1から17のいずれか1項に記載の化合物、塩、または溶媒和物の有効量を細胞増殖性疾患に罹患している患者に投与することを含んでなる、治療方法。
【請求項２０】
該疾患による影響を受けている細胞内のKSPキネシン活性を調節するために十分な量の該化合物、塩、または溶媒和物を投与することを含んでなる、請求項19に記載の方法。
【請求項２１】
該細胞増殖性疾患が、癌、過形成、再閉塞、心肥大、免疫疾患、または炎症である、請求項19に記載の方法。
【請求項２２】
請求項1から17のいずれか1項に記載の化合物、塩、または溶媒和物、および該化合物、塩、または溶媒和物のKSPキネシン阻害量を投与することによる細胞増殖性疾患の治療の手引きを含んでいる添付文書またはその他の表示物を含んでなるキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は2002年5月23日に同時係属中の仮米国出願一連番号第60/382,737号の出願の利益を主張し、これは本明細書中に参照により組み入れる。
【０００２】
本発明はヘテロ環縮合ピリミジノン誘導体（heterocyclic-fused pyrimidinone derivatives）に関し、それはキネシン(kinesin)KSPの阻害剤で細胞増殖性疾患、例えば癌、過形成、再閉塞、心肥大、免疫疾患、および炎症などの治療に有用である。
【背景技術】
【０００３】
有糸分裂の際の紡錘糸はゲノムの複製コピーを2つの娘細胞のそれぞれに分配し、それによって細胞分裂がもたらされる。紡錘糸を分断させると細胞分裂を阻害して細胞死を誘発させることができる。微小管は紡錘糸の主要な構造エレメントである；微小管は、癌の治療用として現在用いられているある種の治療剤、例えばタキサンおよびビンカ・アルカロイドなどの作用部位となっている。しかし、微小管は他のタイプの細胞構造中においてもエレメントとして存在している(そのようなものとしては神経突起における細胞内輸送用のトラックが含まれる)。従って、微小管を標的とした治療は細胞の増殖に加えてプロセスを調節させ、それによってそのような薬剤の有用性を制限するような副作用をもたらす。
【０００４】
癌治療用の薬剤の特異性を改善することは、それらの薬剤の投与に伴う副作用を低減しうるのであれば得られると考えられる治療上の利益のゆえに、大きな興味の対象となっている。新規の機作を介して作用する治療剤の同定によって癌治療の劇的な改良がなされてきている。このことの例としては、タキサンのみならず、カンプトテシンクラスのトポイソメラーゼIインヒビターも含まれる。
【０００５】
新規の抗増殖作用の1機作においては、紡錘糸のアセンブリーと機能に必須であるが、通常は神経突起内などの他の微小管構造の一部とはなっていない、キネシンの選択的な阻害を必要とする。例えば「細胞骨格タンパク質および運動タンパク質のガイドブック」, KreisとVale編, pp.389-394(Oxford University Press 1999)を参照せよ。キネシンは有糸分裂の全ての相において不可欠な役割を果たしている。これらの酵素は、ATPの加水分解によって放出されるエネルギーを、微小管に沿った細胞の積み荷(cellular cargo)の方向を持った動きを駆動する機械的な力へと変換する「分子モーター」である。この仕事を行うために十分な触媒ドメインは約340個のアミノ酸からなるコンパクトな構造である。有糸分裂の際に、キネシンは微小管を紡錘糸の2極構造へと組織化する。キネシンは染色体の紡錘糸微小管に沿う動きを媒介するとともに、有糸分裂の特定の相に伴う紡錘糸中の構造的変化を媒介する。有糸分裂性キネシンの機能を実験的に混乱させると、紡錘糸の変形または機能不全が生じ、それによって多くの場合、細胞周期の停止および細胞死をもたらす。有糸分裂性キネシンは新規の抗有糸分裂性化学療法剤の発見と開発の魅力的な標的である。
【０００６】
これまでに同定された有糸分裂性キネシンの1つがKSPである。KSPは、進化の上では、plus ecd指向性の微小管モーターの保存されたキネシンサブファミリーに属し、それは逆平行ホモ2量体からなる双極性の4量体にアセンブルされる。有糸分裂の際に、KSPは紡錘糸の微小管と会合する。KSPに対する抗体をヒト細胞中にマイクロインジェクションすると前中期の紡錘糸の両極への分離を阻害し、単極性の紡錘糸が生じ、有糸分裂の停止とプログラムされた細胞死の誘導が起こる。KSPとヒト以外の生物体のキネシンは微小管を逆平行に束ね、微小管を互い違いにスライドさせて2つの紡錘糸の極を引き離す。KSPはまた、後期Bでの紡錘糸伸長と、紡錘糸の極での微小管の集中をも媒介する。
【０００７】
ヒトKSP(HsEg5とも呼ばれる)については、既に報告されており[Blangyら, Cell, 83:1159-69(1995)；Whiteheadら, Arthritis Rheum., 39:1635-42(1996)；Galgioら, J. Cell. Biol., 135:339-414(1996)；Blangyら, J. Biol. Chem., 272:19418-24(1997)；Blangyら, Cell Motif. Cytoskeleton, 40:174-82(1998)；WhiteheadとRattner, J. Cell Sci., 111:2551-61(1998)；Kaiserら, JBC 274:18925-31(1999)；GenBank 登録番号：X85137, NM0045233, U37426]、KSP遺伝子の断片(TRIP5)についても報告されている[Leeら, Mol. Endocrinol., 9:243-54(1995)；GenBank登録番号：L40372]。XenopusのKSP同族体(Eg5)、ならびにDrosophila KLP61F/KRP130も報告されている。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
最近、細胞増殖性疾患の治療用として、ある種の置換キナゾリノンがキネシンのインヒビターとして報告されている(WO 01/30768とWO 01/98278)。本発明の目的はKSP(特にヒトKSP)などのキネシンの新規のインヒビター（阻害剤）を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明の要旨
本発明はキネシン、特にKSP(さらに特にヒトKSP)の阻害に有用な、化合物、組成物、および方法を提供する。該化合物は細胞増殖性疾患の治療に用いることができ、そのような化合物としては、ピリド[α,β-γ]ピリミジン-δ-オン、ピリミド[α,β-γ]ピリミジン-δ-オン、およびプテリジン-4-オンなどのヘテロ環縮合ピリミジノン誘導体が含まれる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
1態様においては、本発明は式Iによって示される群から選択された1種以上の化合物に関する：
【化１】
2005536475.tif 000002
【００１１】
式中：
W、X、Y、およびZは独立に-N=または-C=であって、W、X、Y、およびZのうちの少なくとも1つが-N=であるが2つ以上が-N=ではなく；
R1、R2、R3、およびR4は独立に水素、ヒドロキシ、任意に置換されたアルキル、任意に置換されたアルコキシ、ハロゲン、またはシアノであって、W、X、Y、またはZが-N=の場合にはR1、R2、R3、またはR4はそれぞれ存在せず；
R5は任意に置換されたアルキル、または任意に置換されたアリールであり；
R6およびR6'は独立に水素、任意に置換されたアルキル、もしくは任意に置換されたアリールであるかまたは、R6はR6'と一緒になって、環の原子数が5から7個である、任意に置換されたシクロアルキル、または任意に置換されたヘテロシクロアルキルであり；
R7は任意に置換されたアルキル、または任意に置換されたアリールであり；
R8は水素、-C(O)-R9、-S(O)2-R9、-CH2-R9、-C(O)-O-R9、-C(O)-NH-R9、または-S(O)2-NH-R9であってこれらの式中：
R9は水素、任意に置換されたアルキル、任意に置換されたアリール、または任意に置換されたヘテロアリールであり；
または、R7はR8と一緒になって任意に置換されたイミダゾリルまたは任意に置換されたイミダゾリニルであり、
それらの立体異性体の1種、立体異性体の混合物、ならびに薬学的に許容される塩、溶媒和物、および薬学的に許容される塩の溶媒和物が含まれる。本発明の化合物は該治療方法の実施、および本発明の医薬品の剤型を含んでいる組成物の製造において活性作用物として有用であり、また、そのような活性作用物の合成の際の中間体としても有用であろう。
【００１２】
本発明の特定の態様の1つにおいて、本発明は式Iで示される化合物であってR6がメチルである場合にR5が任意に置換されたフェニル以外のものであり、任意に以下の1つ以上を有する：
X、Y、もしくはZは-N=、又はWおよびZは-N=であり；
R1、R2、R3、およびR4は独立に水素、ハロ(特にクロロおよびフルオロ)、低級アルキル(特にメチル)、置換された低級アルキル、低級アルコキシ(特にメトキシ)、シアノ、または存在せず；さらに特にR1、R2、R3、およびR4のうちの3つが水素であるか、またはR1、R2、R3、およびR4のうちの2つが水素で第3のものがハロ、メトキシ、またはシアノで、第4のものが存在せず；
R5は任意に置換されたアラルキル(特にベンジルまたは置換されたベンジル；さらに特にベンジル)であり；
R6は低級アルキル(特にエチル、i-プロピル、c-プロピル、またはt-ブチル)であり；
R6'は水素であり；
R7は置換されたアルキル(特に1級アミノが置換された低級アルキル、２級アミノが置換された低級アルキル、または3級アミノが置換された低級アルキル)；さらに特に3-アミノプロピルであり；および/または、
R8は-C(O)-R9であって、このR9は任意に置換されたアルキル(特に低級アルキル、ハロアルキル、および低級アルコキシアルキル)、任意に置換されたアリール(特にフェニル、低級アルキル、低級アルコキシ、および/またはハロで置換されたフェニル)、任意に置換されたアラルキル(特に任意に置換されたベンジルおよびフェニルビニル)、アリールオキシアルキル(特にフェノキシ低級アルキル)、任意に置換されたヘテロアリール、任意に置換されたヘテロアラルキル、または任意に置換されたヘテロアリールオキシアルキル；さらに特にR9はメトキシメチルまたはp-トリルであり；
またはR8は、-C(O)-OR9であって、このR9は任意に置換されたアリール(特にフェニル、低級アルキル、低級アルコキシ、および/またはハロで置換されたフェニル)もしくは任意に置換されたヘテロアリールである。
【００１３】
本発明の特定の態様のうちの1態様においては、本発明は式Iで示される化合物であってR6がメチルである場合にR5が任意に置換されたフェニル以外のものであり、任意に以下の1つ以上を有する：
R8は-S(O)2-R9であって、このR9はC1-C13アルキル；ヘテロアリール；ナフチル；ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ニトロ、メチレンジオキシ、フェニル、もしくはトリフルオロメチルで任意に置換されたフェニル；または、
R8は-CH2-R9であって、このR9はC1-C13アルキル；置換された低級アルキル；ベンジル；ヘテロシクリル；ナフチル；またはヘテロアリール；ナフチル；ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ニトロ、メチレンジオキシ、フェニル、もしくはトリフルオロメチルで任意に置換されたフェニル；または、
R7はR8と一緒になって2-(任意に置換された)-4,4-(任意に2つが置換された)-4,5-ジヒドロイミダゾール-1-イル、2-(任意に置換されたフェニル)-イミダゾール-1-イル、または4-(任意に置換されたアルキル)-2-(任意に置換されたアリール)-イミダゾール-1-イルであって、
任意に以下の1つ以上を有している：
X、Y、またはZは-N=であり；
R1、R2、R3、およびR4は独立に水素、クロロ、フルオロ、低級アルキル、置換された低級アルキル、メトキシ、シアノ、または存在せず；
R5はベンジルまたは置換されたベンジルであり；
R6はエチル、i-プロピル、c-プロピル、またはt-ブチルであって；および/または
R7は1級アミノで置換された低級アルキル、２級アミノで置換された低級アルキル、または3級アミノで置換された低級アルキルであり；
特に次のものである：
R9はヘテロシクリル；ナフチル；またはハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ニトロ、メチレンジオキシ、フェニル、もしくはトリフルオロメチルで任意に置換されたフェニル；または、
R7はR8と一緒になって2-(4-メチルフェニル)-4,5-ジヒドロ-イミダゾール-1-イル、2-(3-フルオロ-, 4-メチルフェニル)-4,5-ジヒドロ-イミダゾール-1-イル、2-(4-メチルフェニル)-4,4-ジメチル-4,5-ジヒドロ-イミダゾール-1-イル、2-(3-フルオロ-, 4-メチルフェニル)-4,4-ジメチル-4,5-ジヒドロ-イミダゾール-1-イル、2-フェニル-イミダゾール-1-イル、2-p-トルオイル-イミダゾール-1-イル、2-(4-フルオロフェニル)-イミダゾール-1-イル、2-(4-クロロフェニル)-イミダゾール-1-イル、2- (3-フルオロ-4-メチルフェニル)-イミダゾール-1-イル、4- (2-アミノ-エチル)-2-フェニル-イミダゾール-1-イル、4-(2-アミノ-エチル)-2-p-トリル-イミダゾール-1-イル、4-(2-アミノ-エチル)-2-(4-フルオロ-フェニル)-イミダゾール-1-イル、4-(2-アミノ-エチル)-2-(4-クロロ-フェニル)-イミダゾール-1-イル、4-(2-アミノ-エチル)-2-(3-フルオロ-4-メチルフェニル)-イミダゾール-1-イル、4-(アミノメチル)-2-フェニル-イミダゾール-1-イル、4-(アミノメチル)-2-ｐ-トリル-イミダゾール-1-イル、4-(アミノメチル)-2-(4-フルオロ-フェニル)-イミダゾール-1-イル、4-(アミノメチル)-2-(4-クロロ-フェニル)-イミダゾール-1-イル、または4-(アミノメチル)-2-(3-フルオロ-4-メチル-フェニル)-イミダゾール-1-イルである。
【００１４】
本発明の特定の態様のうちの別の1態様においては、本発明は、R6とR6'が異なり、R6が結合している立体中心が(R)-の配置であるような式Iによって示される化合物を用いた、化合物、方法、および組成物に関する。
【００１５】
1態様においては、本発明は、治療上有効な量の式Iの化合物またはそれらの薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物を投与することによる、細胞増殖性疾患の治療、KSPキネシン活性を調節することによって治療することのできる疾患の治療、およびKSPキネシンの阻害のための方法に関する。本発明の化合物での治療に応答する疾患および障害としては、癌、過形成、再閉塞、心肥大、免疫疾患、炎症、および類似のものが含まれる。
【００１６】
本発明の別の1態様においては、該組成物は治療上有効な量の式Iの化合物、またはそれらの薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物、ならびに少なくとも1種の薬学的に許容される添加物を含んでいる医薬品製剤である。
【００１７】
本発明の別の1態様は、式Iの化合物、式Iの化合物の塩もしくは溶媒和物、および添付文書もしくはその他の標示物を有するキットに関し、その添付文書もしくはその他の標示物には該化合物、塩、もしくは溶媒和物のKSPキネシンを阻害する量を投与することによる細胞増殖性疾患の治療の方法が含まれている。
【００１８】
別の1態様においては、本発明はKSPキネシンに結合する化合物、例えば本発明の化合物の結合を置き換える、または競合する化合物のスクリーニング方法を提供する。それらの方法は、本発明の標識化合物であるKSPキネシン、および少なくとも1種の候補作用剤を組み合わせ、その候補作用剤のKSPキネシンへの結合を測定することを含んでいる。
【００１９】
さらに別の1態様においては、本発明はKSPキネシン活性のモジュレーターのスクリーニング方法を提供する。それらの方法は本発明の化合物、KSPキネシン、および少なくとも1種の候補作用剤を組み合わせ、その候補作用剤のKSPキネシン活性に及ぼす影響を測定することを含んでいる。
【００２０】
発明の詳細な説明
本発明はキネシン、特にKSP(さらに特にヒトKSP)の阻害に有用な化合物、組成物、および方法を提供する。それらの化合物は細胞増殖性疾患の治療に用いることができ、そのようなものとしてはある種のヘテロ環縮合ピリミジノン誘導体、例えば：ピリド[α,β-γ]ピリミジン-δ-オン、ピリミド[α,β-γ]ピリミジン-δ-オン、ピリミド[α,β-γ]ピリダジン-δ-オン、およびプテリジン-4-オンなどが含まれる。本発明はさらに、本発明の化合物を含んでなる医薬品製剤、およびそのような化合物または組成物を用いる治療方法に関する。
【００２１】
定義
本明細書で用いている下記の用語とフレーズは、それらが用いられている文脈中で特に断らない限りは、一般的には下記に示す意味を有するものであることを意図している。下記の略語および用語は本明細書全体を通じて次に示した意味を有する：
Ac = アセチル
Boc = t-ブチルオキシカルボニル
Bu = ブチル
c- = シクロ
CBZ = カルボベンゾキシ = ベンジルオキシカルボニル
DCM = ジクロロメタン = 塩化メチレン = CH2Cl2
DCE =ジクロエタン
DIEA = N,N-ジイソプロピルエチルアミン
DMF = N,N-ジメチルホルムアミド
DMSO = ジメチルスルホキシド
Et = エチル
GC = ガスクロマトグラフィー
Me = メチル
メシル = メタンスルホニル
rt = 室温
sat'd = 飽和した
s- = 第2級の
t- = 第3級の
TFA = トリフルオロ酢酸
THF = テトラヒドロフラン
「任意の」または「任意に」という用語は、その用語の後に記載された事象または状況が起こるかもしれないが、そうでないかもしれず、その説明にはそのような事象または状況が起こる場合と起こらない場合が含まれることを意味している。例えば、下記で定義するとおり、「任意に置換されたアルキル」には、「アルキル」および「置換されたアルキル」が含まれる。当業者であれば、1つ以上の置換を含んでいるいかなる基についてもそのような基に立体化学的に見て実際的でない、合成ができない、および/または本質的に不安定であるような置換または置換パターンを導入することは意図されていないことが理解できよう。
【００２２】
「アルキル」という用語には直鎖状、分枝、または環状の脂肪族炭化水素(特に炭素原子を20個まで有するもの、さらに特にC13までのもの)が含まれることを意図している。低級アルキルとは、炭素原子が1個から5個(特に1個から4個)のアルキル基を意味している。低級アルキル基の例としては、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、s-およびt-ブチル、ならびに類似のものが含まれる。シクロアルキルはアルキルのサブセットの１つで、炭素原子が3個から13個の脂肪族環状炭化水素基が含まれる。シクロアルキル基の例としては、c-プロピル、c-ブチル、c-ペンチル、ノルボルニル、アダマンチル、および類似のものが含まれる。本出願においては、アルキルとは、アルカニル、アルケニル、およびアルキニル残基を意味する；シクロヘキシルメチル、ビニル、アリル、イソプレニル、および類似のものを含むことを意図している。アルキレン、アレケニレン、およびアルキニレンはアルキルの別のサブセットであり、アルキルと同じ残基であるが2カ所に付加物を有している。アルキレンの例としては、エチレン(-CH2CH2-)、エテニレン(-CH=CH-)、プロピレン(-CH2CH2CH2-)、ジメチルプロピレン(-CH2C(CH3)2CH2-)、およびシクロヘキシルプロピレン(-CH2CH2CH (C6H13)-)が含まれる。ある特定の数の炭素を有するアルキル残基を名付ける場合には、その特定の数の炭素を有する残基の幾何異性体は全て含まれることを意味し；従って、例えば、「ブチル」はn-ブチル、sec-ブチル、イソブチル、およびt-ブチルが含まれ；「プロピル」にはn-プロピルおよびイソプロピルが含まれる。
【００２３】
「アルコキシ」または「アルコキシル」という用語は、-O-アルキル基を意味し、特に直鎖状、分枝、もしくは環状構造、またはそれらの組み合わせの炭素原子が1個から8個のものが含まれる。例としては、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、シクロプロピルオキシ、シクロヘキシルオキシ、および類似のものが挙げられる。低級アルコキシとは、炭素原子を1個から5個含んでいるアルコキシ基を意味する。
【００２４】
「置換されたアルコキシ」という用語は-O-(置換されたアルキル)基を意味する。特別な置換されたアルコキシ基の1つは「ポリアルコキシ」すなわち-O-(任意に置換されたアルキレン)-(任意に置換されたアルコキシ)であり、そのようなものとしては、-OCH2CH2OCH3、ならびにポリエチレングリコールおよび-O(CH2CH2O)XCH3などのグリコールエーテルがあるが、ここでxは約2〜20の整数で、特に約2〜10、さらに特に約2〜5の整数である。別の置換されたアルコキシ基の特別なものはヒドロキシアルコキシすなわち-OCH2(CH2)YOHで、ここでyは約1〜10、特に約1〜4の整数である。
【００２５】
「アシル」とは、直鎖状、分子、もしくは環状構造、またはそれらの組み合わせ中に1〜8個の炭素原子を有する基、またはカルボニル官能基を介して親の構造に結合された水素原子を意味する。そのような基は、飽和または不飽和、脂肪族または芳香族のものとすることができる。親の構造への結合の位置がカルボニルのままである限りは、そのようなアシル残基中の1個以上の炭素原子は窒素、酸素、またイオウで、置換することができる。例としては、ホルミル、アセチル、ベンゾイル、ポロピオニル、イソブチル、t-ブトキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニル、アミノカルボニル、および類似のものが挙げられる。低級アシルとは、1から5個の炭素原子を含んでいるアシル基を意味する。「置換されたアシル」とは、置換されていない状態では炭素原子、窒素原子、またはイオウ原子と結合している1個以上の水素が置換されていて、その置換の親の構造への結合位置がカルボニルのままであるようなアシル基を意味する。
【００２６】
「アシルオキシ」という用語は、-O-アシル基を意味する。「置換されたアシルオキシ」という用語は-O-置換されたアシル基を意味する。
【００２７】
「アミジノ」という用語は-C(=NH)-NH2基を意味する。「置換されたアミジノ」という用語は、-C(=NR)-NRRの式であって各Rが独立に次の基から選択されたものであるものを意味する：水素、任意に置換されたアルキル、任意に置換されたアルコキシ、任意に置換されたアミノカルボニル、任意に置換されたアリール、任意に置換されたヘテロアリール、任意に置換されたヘテロシクリル、アシル、アルコキシカルボニル、スルファニル、スルフィニル、およびスルホニル、ここでRの少なくとも1つは水素ではない。
【００２８】
「アミノ」という用語は-NH2基を意味する。「置換されたアミノ」という用語は-NHRまたは-NRRであって、各Rが独立に次の基から選択されたものであるものを意味する：任意に置換されたアシル、任意に置換されたアルキル、任意に置換されたアルコキシ、任意に置換されたアミノ、任意に置換されたアリール、任意に置換されたヘテロアリール、任意に置換されたヘテロシクリル、スルファニル、スルフィニル、およびスルホニル、例えばメチルアミノ、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、メチルスルホにルアミノ、フラニル-オキシ-スルホンアミノ、グアニジノ。
【００２９】
「アリール」および「ヘテロアリール」とは、5員または6員の芳香環またはヘテロ芳香環であって、O、N、またはSから選択された1〜4個のヘテロ原子を含んでいるもの；2環の9員または10員の芳香環またはヘテロ芳香環であって、O、N、またはSから選択された1〜4個(またはそれ以上)のヘテロ原子を含んでいるもの；または3環の13員または14員の芳香環またはヘテロ芳香環であって、O、N、またはSから選択された1〜4個(またはそれ以上)のヘテロ原子を含んでいるものを意味する。芳香族の6員から14員の炭素環のものとしては、例えば、ベンゼン、ナフタレン、インダン、テトラリン、およびフルオレンが含まれ、5員から10員の芳香族のヘテロ環のものとしては、例えば、イミダゾール、ピリジン、インドール、チオフェン、ベンゾピラノン、チアゾール、フラン、ベンズイミダゾール、キノリン、イソキノリン、キノキサリン、ピリミジン、ピラジン、テトラゾール、およびピラゾールが含まれ；特にイミダゾールとイミダゾリンが挙げられる。
【００３０】
「アラルキル」とは、アリール部分がアルキル残基を介して親の構造に結合している残基を意味する。例としては、ベンジル、フェネチル、フェニルビニル、フェニルアリル、および類似のものが含まれる。「ヘテロアラルキル」とは、ヘテロアリール部分がアルキル残基を介して親の構造に結合している残基を意味する。例としては、フラニルメチル、ピリジニルメチル、ピリミジニルエチル、および類似のものが含まれる。
【００３１】
「アリールオキシ」という用語は、-O-アリール基を意味する。同様に「アラルコキシ」および「ヘテロアラルコキシ」とはそれぞれ、アルコキシ残基を介して親の構造に結合されたアリールまたはヘテロアリール部分を意味する。
【００３２】
「ハロゲン」または「ハロ」とはフッ素、塩素、臭素、またはヨウ素(特にフッ素、塩素、および臭素)を意味する。ジハロアリール、ジハロアルキル、トリハロアリールなどは複数のハロゲンで置換されたアリールおよびアルキルを意味し、それらのハロゲンは必ずしも複数の同一のハロゲンである必要はなく；従って4-クロロ-3-フルオロフェニルはジハロアリールの範囲内に含まれる。
【００３３】
「ヘテロ環」または「ヘテロシクリル」とは、炭素原子のうちの1〜4個が酸素、窒素、またはイオウなどのヘテロ原子で置換されているシクロアルキルまたはアリール残基を意味する(すなわち、ヘテロシクロアルキルおよびヘテロアリールを包含する)。本発明の範囲内に入るヘテロシクリル残基の例としては、イミダゾリル、イミダゾリニル、ピロリジニル、ピラゾリル、ピロリル、インドリル、キノリニル、イソキノリニル、テトラヒドロイソキノリニル、ベンゾフラニル、ベンゾジオキサニル、ベンゾジオキソリル(一般的には置換基として存在する場合には、メチレンジオキシフェニルと呼ばれる)、テトラゾリル、モルホリニル、チアゾリル、ピリジニル、ピリダジニル、ピリミジニル、チオフェニル、フラニル、オキサゾリル、イソキサゾリル、ジオキサニル、トトラヒドロフラニル、および類似のものが含まれる。「N-ヘテロシクリル」とは、置換残基としての窒素含有のヘテロ環を意味する。N-ヘテロシクリル残基の例としては、4-モルホリニル、4-チオモルホリニル、1-ピペリジニル、1-ピロリジニル、3-チアゾリジニル、ピペラジニル、および4-(3,4-ジヒドロベンゾキサジニル)が含まれる。置換されたヘテロシクリルとしては、4-メチル-1-ピペラジニル、および4-ベンジル-1-ピペリジニルが含まれる。
【００３４】
「ヘテロアリールオキシ」および「ヘテロシクロオキシ」という用語はそれぞれ、-O-ヘテロアリール、および-O-ヘテロシクリル基を意味する。
【００３５】
「溶媒和物」という用語は、ある1つの化合物(例えば式Iの化合物またはそれらの薬学的に許容される塩)が薬学的に許容される溶媒の1個以上の分子と物理的に会合していることを意味する。「式Iの化合物またはそれらの薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物」などのフレーズが、式Iの化合物、その化合物の薬学的に許容される塩、その化合物の溶媒和物、およびその化合物の薬学的に許容される塩の溶媒和物を包含することを意図していることは理解されよう。
【００３６】
「置換された」という用語は、例えばアシル、アルキル、アリール、ヘテロアリール、およびヘテロシクリルに関して用いられている場合には、1個以上(約5個まで、特に約3個まで)の水素が次の基から独立に選択された置換基によって置換されている、アシル、アルキル、アリール、ヘテロアリール、またはヘテロシクリル部分を意味する：任意に置換されたアシル(例えば、アミノカルボニルおよびアルコキシカルボニル、または「エステル」)、任意に置換されたアシルオキシ(例えば、酸エステル、カルバミン酸エステル、カルボン酸エステル、およびチオカルボン酸エステル)、任意に置換されたアルキル(例えば、フルオロアルキル)、任意に置換されたアルコキシ(例えばメトキシおよびメトキシメトキシ)、アルキレンジオキシ(例えば、メチレンジオキシ)、任意に置換されたアミノ(例えば、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、カルボニルアミノ、ベンジルオキシカルボニルアミノすなわち「CBZ-アミノ」、およびカルボキサミド)、任意に置換されたアミジノ、任意に置換されたアリール(例えば、フェニル、および4-メチル-フェニルすなわち「トリル」)、任意に置換されたアラルコキシ(例えば、ベンジルオキシ)、任意に置換されたヘテロアリール、任意に置換されたヘテロアラルキル、任意に置換されたヘテロアリールオキシ、任意に置換されたヘテロアラルコキシ、カルボキシ(-COOH)、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシ、ニトロ、フルファニル、スルフィニル、スルホニル、およびチオ。
【００３７】
「スルファニル」という用語は、次の基を意味する：-S-(任意に置換されたアルキル)、-S-(任意に置換されたアリール)、および-S-(任意に置換されたヘテロシクリル)。
【００３８】
「スルフィニル」という用語は、次の基を意味する：-S(O)-H、-S(O)-(任意に置換されたアルキル)、-S(O)-(任意に置換されたアミノ)、および-S(O)-(任意に置換されたヘテロシクリル)。
【００３９】
「スルフォニル」という用語は、次の基を意味する：-S(O2)-H、-S(O2)-(任意に置換されたアルキル)、-S(O2)-(任意に置換されたアミノ)、-S(O2)-(任意に置換されたアリール)、-S(O2)-(任意に置換されたヘテロアリール)、-S(O2)-(任意に置換されたヘテロシクリル)、-S(O2)-(任意に置換されたアルコキシ)、-S(O2)-(任意に置換されたアリールオキシ)、-S(O2)-(任意に置換されたヘテロアリールオキシ)、および-S(O2)-(任意に置換されたヘテロシクリルオキシ)。
【００４０】
「異性体」とは同じ分子式を有する異なる化合物である。「立体異性体」とは原子の空間での配置のみが異なる異性体である。「エナンチオマー」はお互いを重ね合わすことのできない鏡像となっている立体異性体の1組である。エナンチオマーのペアの1:1の混合物は「ラセミ」混合物である。「(.±.)」はそれが適切である場合にはラセミ混合物を示すために用いられている。「ジアステレオマー」は少なくとも2個の不斉原子を有するがそれらがお互いに鏡像の関係ではない、立体異性体である。絶対立体配置はカーン-インゴールド-プレローグR-S表示法に従って特定される。ある化合物が純粋なエナンチオマーである場合には、各キラル炭素の位置での立体配置はRまたはSのいずれかで特定することができる。絶対立体配置が未知の、分けられた化合物はその化合物がナトリウムのD線の波長で平面偏光を回転させる方向(右旋性または左旋性)によって(+)または(-)が指定される。「実質的に純粋な」とは化学的純度が少なくとも約95％であって不純物の単一の成分で約1％を越えるものがないことを意味している。「実質的に光学的に純粋な」または「実質的にエナンチオマーとして純粋な」という用語は、単一のエナンチオマーが少なくとも約95％を超えることを意味している。本発明は、実質的に光学的に純粋なエナンチオマーの使用が通常は最も適してはいるが、純粋なエナンチオマーおよびエナンチオマーの混合物を用いることを意図しており、その混合物としては、ラセミ混合物が含まれている。
【００４１】
「紡錘糸形成」とは、キネシンによる、微小管の2極構造への組織化を意味する。「紡錘糸機能不全」とは、有糸分裂の停止、単極構造の紡錘糸形成、または紡錘糸形成不全を意味し、この文脈で「形成不全」とは紡錘糸極のゆがみ(splaying)、またはその他の紡錘糸の形態的な混乱を生じさせることを包含する。「阻害する」という用語は紡錘糸形成に関連して用いる場合には、紡錘糸形成に変化を与えることを意味し、それには紡錘糸形成の低下、および紡錘糸極の分離の増大もしくは低下が含まれる。「抗有糸分裂性」とは、例えば上述したような、有糸分裂を阻害すること、または阻害する可能性を有することを意味する。
【００４２】
「薬学的に許容される塩」という用語は、酸付加および塩基付加塩の双方を含むことを意味する。「薬学的に許容される酸付加塩」とは、遊離塩基の生物学的有効性を保持し、かつ生物学的またはその他の点で好ましからざるものではなく、無機酸、例えば塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸、および類似のものなど、または有機酸、例えば酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、シュウ酸、マレイン酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、桂皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、p-トルエンスルホン酸、サリチル酸、および類似のものなどとの間で形成された塩を意味する。「薬学的に許容される塩基付加塩」としては、ナトリウム、カリウム、リチウム、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、鉄、亜鉛、銅、マンガン、アルミニウム塩および類似のものなどの無機塩基由来のものが含まれる。特に適切なものは、アンモニウム、カリウム、ナトリウム、カルシウム、およびマグネシウム塩である。薬学的に許容される有機の無毒な塩基由来の塩としては、第1級、2級、および3級アミン、天然の置換アミンを含む置換されたアミン、環状アミン、および塩基性イオン交換樹脂で、イソプロピルアミン、トリメチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、トリプロピルアミン、およびエタノールアミンなどが含まれる。
【００４３】
「治療上有効な量」または「有効量」という用語は、下記に定義する治療を必要としている患者に投与したとき、その治療が有効なものとなるのに十分な、式Iの化合物の量を意味している。治療上有効な量は、治療しようとする患者と病状、その患者の体重と年齢、その病状の重篤度、選択した式Iの特定の化合物、薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物、従うべき投与計画、投与時点、投与方法、および類似の事項の如何によって変わることとなるが、それらの全ては当業者であれば容易に決定することができる。
【００４４】
「治療」または「治療すること」という用語は、患者の疾患のいかなる治療をも意味し、そのようなものとしては：
a) 疾患の防止、すなわち、その疾患の臨床症状が発現しないようにすること；
b) 疾患の阻止、すなわち、臨床症状の発現を遅延させる、または停止させること；
c) 疾患の軽減、すなわち、臨床症状を軽減させること、
が含まれる。
【００４５】
本発明では「患者」としては、ヒトおよびヒト以外の動物、特に哺乳類、ならびにその他の生物体が含まれる。従って、該方法はヒトの治療および獣医学的適用の双方に利用することができる。特定の1実施形態においては、該患者は哺乳類、とりわけヒトである。
【００４６】
本発明の化合物
本発明はヘテロ環縮合ピリミジノン誘導体を提供し、それは例えば：ピリド[α,β-γ]ピリミジン-δ-オン、ピリミド[α,β-γ]ピリミジン-δ-オン、ピリミド[α,β-γ]ピリダジン-δ-オン、およびプテリジン-4-オンなどである。該化合物は1種以上のキネシンの阻害剤である。有糸分裂に関わるキネシン、とくにKSPを阻害することによって細胞増殖の特異的な阻害が行われるが、その他のキネシン(輸送キネシン)では阻害しない。従って本発明は有糸分裂に関わるキネシンの機能を混乱させることによって紡錘糸の形成不全または機能不全が生じ、それはしばしば細胞サイクルの停止および細胞死をもたらす、との知見を利用したものである。
【００４７】
それ故に、本発明は式Iで示された群から選択された1種以上の化合物に関する：
【化２】
2005536475.tif 000003
【００４８】
式中：
W、X、Y、およびZは独立に-N=または-C=であって、W、X、Y、およびZのうちの少なくとも1つが-N=であるが2つ以上が-N=ではなく；
R1、R2、R3、およびR4は独立に水素、ヒドロキシ、任意に置換されたアルキル、任意に置換されたアルコキシ、ハロゲン、またはシアノであって、W、X、Y、またはZが-N=の場合にはR1、R2、R3、またはR4はそれぞれ存在せず；
R5は任意に置換されたアルキル、または任意に置換されたアリールであり；
R6およびR6'は独立に水素、任意に置換されたアルキル、もしくは任意に置換されたアリールであるかまたは、R6はR6'と一緒になって、環の原子数が5から7個である、任意に置換されたシクロアルキル、または任意に置換されたヘテロシクロアルキルであり；
R7は任意に置換されたアルキル、または任意に置換されたアリールであり；
R8は水素、-C(O)-R9、-S(O)2-R9、-CH2-R9、-C(O)-O-R9、-C(O)-NH-R9、または-S(O)2-NH-R9であってこれらの式中：
R9は水素、任意に置換されたアルキル、任意に置換されたアリール、または任意に置換されたヘテロアリールであり；
または、R7はR8と一緒になって任意に置換されたイミダゾリルまたは任意に置換されたイミダゾリニルであり、
ならびに、それらの薬学的に許容される塩および溶媒和物である。
【００４９】
本明細書中に記載した化合物の多くは1個以上の不斉中心(例えば、R6とR6'が異なる場合のR6とR6'が結合する炭素)を含んでおり、従ってエナンチオマー、ジアステレオマー、およびその他の、絶対立体配置では(R)-、または(S)-と定義される立体異性体を生じうる。本明細書に記載の化合物がオレフィン性の二重結合、またはその他の幾何的不斉中心を含んでいる場合には、特に断らない限りは、そのような化合物にはEおよびZ 幾何異性体を含むことを意図している。互変異性体もその全てを含めることを意図している。本発明はそのような存在する可能性のある異性体の全て、それらにはラセミ混合物、中間の混合物、光学的に純粋な形態、実質的に光学的に純粋な形態、実質的にエナンチオマーとして純粋な形態、および実質的に純粋な形態、例えば、特定の実施形態においては、R6とR6'が異なりR6が結合する立体中心が(R)-構造である。
【００５０】
命名法
本明細書中では、ピリド[α,β-γ]ピリミジン-δ-オン、ピリミド[α,β-γ]ピリミジン-δ-オン、およびピリミド[α,β-γ]ピリダジン-δ-オンという名称中の符号α、β、γ、およびδは、それらの化合物中の窒素および二重結合の種々の位置を一般的に記載することを意図したものであり、例えば、ピリミド[4,5-c]ピリダジン-5-オン、およびピリミド[5,4-c]ピリダジン-8-オンなどである。
【００５１】
式Iの化合物は下記のとおり名付け番号を付する(例えば、ISIS-DRAWまたはChemDraw中のAutoNom version 2.1を用いて)ことができる。例えば、式IAの化合物は：
【化３】
2005536475.tif 000004
【００５２】
すなわち、式Iの化合物で、式中W、X、およびYが-C=であり；Zが-N=であり；R1、R2、およびR3がHであり；R4が存在せず；R5がベンジルであり；R6がi-プロピルであり；R7がアミノ-プロピル-であり；ならびにR8が-C(O)-R9であってここでR9がp-メチル-フェニルであるものは、N-(3-アミノ-プロピル)-N-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリド[2,3-d]ピリミジン-2-イル)-2-メチル-プロピル]-4-メチル-ベンズアミドと名付けることができる。
【００５３】
式IBの化合物：
【化４】
2005536475.tif 000005
【００５４】
すなわち、式Iの化合物で、式中W、X、およびZが-C=であり；Yが-N=であり；R1、R2、およびR4がHであり；R3が存在せず；R5がベンジルであり；R6がi-プロピルであり；R7がアミノ-プロピル-であり；ならびにR8が-C(O)-R9であってここでR9がp-メチル-フェニルであるものは、N-(3-アミノ-プロピル)-N-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリド[3,4-d]ピリミジン-2-イル)-2-メチル-プロピル]-4-メチル-ベンズアミドと名付けることができる。
【００５５】
式ICの化合物：
【化５】
2005536475.tif 000006
【００５６】
すなわち、式Iの化合物で、式中WおよびZが-N=であり；XおよびYが-C=であり；R1およびR4が存在せず；R2が塩素で、R3が水素であり；R5がベンジルであり；R6がi-プロピルであり；R6'が水素であり；R7がアミノ-プロピル-であり；ならびにR8が-S(O)-R9であってここでR9がp-メチル-フェニルであるものは、N-(3-アミノ-プロピル)-N-[1-(3-ベンジル-6-クロロ-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-プテリジン-2-イル)-2-メチル-プロピル]-4-メチル-ベンゼンスルホンアミドと名付けることができる。
【００５７】
式IDの化合物：
【化６】
2005536475.tif 000007
【００５８】
すなわち、式Iの化合物で、式中WおよびZが-N=であり；XおよびYが-C=であり；R1およびR4が存在せず；R2が水素であり；R3が塩素であり；R5がベンジルであり；R6がイソプロピルであり；R6'が水素であり；R7がR8と一緒になって2-(3-フルオロ-4-メチル-フェニル)-4,4-ジメチル-4,5-ジヒドロ-イミダゾール-1-イルであるものは、(±)-3-ベンジル-7-クロロ-2-{1-[2-(3-フルオロ-4-メチル-フェニル）-4,4-ジメチル-4,5-ジヒドロ-イミダゾール-1-イル]-2-メチル-プロピル}-3H-プテリジン-4-オンと名付けることができる。
【００５９】
式IEの化合物：
【化７】
2005536475.tif 000008
【００６０】
すなわち、式Iの化合物で、式中WおよびYが-C=であり；XおよびZが-N=であり；R1が水素であり；R2が存在せず；R3が塩素であり；R4が存在せず；R5がベンジルであり；R6がイソプロピルであり；R6'が水素であり；R7がR8と一緒になって4-(2-アミノ-エチル)-2-p-トリル-イミダゾール-1-イル-であるものは、(±)-2-{1-[4-(2-アミノ-エチル)-2-p-トリル-イミダゾール-1-イル]-2-エチルブチル}-3-ベンジル-7-クロロ-3H-ピリミド[4,5-d]ピリミジン-4-オンと名付けることができる。
【００６１】
式IFの化合物：
【化８】
2005536475.tif 000009
【００６２】
すなわち、式Iの化合物で、式中W、X、およびZが-C=であり；Yが-N=であり；R1、R2、およびR4が水素であり；R3が存在せず；R5がベンジルであり；R6はR6'と一緒になって4,4-ジメチル-シクロヘキシルであり；R7がアミノ-エチル-であり；R8が-C(O)-R9でありここでR9がフェニルであるものは、N-(2-アミノ-エチル)-N-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリド[3,4-d]ピリミジン-2-イル)-4,4-ジメチル-シクロヘキシル]-ベンズアミドと名付けることができる。
【００６３】
合成反応のパラメーター
「溶媒」、「不活性有機溶媒」、または「不活性溶媒」とは、該反応条件に関連して記載されている場合に、その反応条件下では不活性な溶媒を意味する(そのようなものとしては、例えば、ベンゼン、トルエン、アセトニトリル、テトラヒドロフラン(“THF”)、ジメチルホルムアミド(“DMF”)、クロロホルム、塩化メチレン(またはジクロロメタン)、 ジエチルエーテル、メタノール、ピリジン、および類似のものが含まれる)。特に断らない限りは、本発明の反応に用いられる溶媒は不活性有機溶媒である。 
「q.s.」という用語は、言及している機能を達成するため、例えばある溶液を所望の容量とする(すなわち100％)ために十分な量を添加することを意味する。
【００６４】
本明細書中に記載している化合物と中間体の単離と精製は、所望により、例えば、ろ過、抽出、結晶化、カラムクロマトグラフィー、薄層クロマトグラフィーもしくは厚層クロマトグラフィー、またはそれらの方法の組み合わせなどの適切な分離もしくは精製方法のいずれかによって行うことができる。適切な分離および単離方法についての特別な説明は下記に示す実施例を参照することによって得られる。しかし、当然のことながら、その他の分離もしくは単離方法も、用いることができる。
【００６５】
(R)-および(S)-異性体は、所望により、当業者には既知の方法によって分割することができ、そのような方法としては、例えば、ジアステレオマーの塩もしくは複合体を形成させ、それを例えば結晶化によって分離する方法；ジアステレオマーの誘導体を形成させ、それを例えば、結晶化、気体-液体もしくは液体クロマトグラフィーによって分離する方法、；一方のエナンチオマーをエナンチオマー特異的試薬、例えば酵素的酸化もしくは還元で、選択的に反応させた後、その修飾されたエナンチオマーと修飾されていないものとを分離する方法；キラル環境下、例えばキラルリガンドを結合させたシリカなどのキラル支持体上で、またはキラル溶媒の存在下で、気体-液体もしくは液体クロマトグラフィーを行う方法が挙げられる。例えば、式Iの化合物を低級アルカノール中に溶解させ、ヘキサン中に70％ EtOAcを含んでいる液で60分間なじませたChiralpak AD (205 x 20 mm)カラム(Chiral Technologies, Inc.)上に置くことができる。上述の分離方法の1つで所望のエナンチオマーを別の1種の化学物質へと変換させる場合には、所望のエナンチオマーの形態を遊離させるためにはさらに別のステップがおそらく必要であることは理解されよう。あるいはまた、光学的に活性な試薬、基質、触媒、もしくは溶媒を用いて不斉合成で、または1つのエナンチオマーを不斉変換によってもう一方のエナンチオマーに変換することによって、特定のエナンチオマーを合成することができる。
【００６６】
式Iの化合物の合成
式Iの化合物は米国特許出願第10/366,828号および対応するPCT出願第US03/04713号；ならびにPCT公開第WO 01/30768号および第WO 01/98278号に記載の方法に従い、任意に置換されたアントラニル酸に代えて、任意に置換されたアミノニコチン酸、アミノ-イソニコチン酸、アミノ-ピリジン-カルボン酸、アミノ-ピラジン-カルボン酸、アミノ-ピリダジン-カルボン酸、またはアミノ-ピリミジン-カルボン酸を用いることにより、調製した。式Iの化合物の合成は反応スキーム1から5を参照して下記にも記載している。
【００６７】
反応スキームの簡単な説明
反応スキーム1は式Iの化合物の合成を説明しており、式中、R7は任意に置換されたアルキル、または任意に置換されたアリールであり、R8は水素、-C(O)-R9、-S(O)2-R9、-CH2-R9、-C(O)-O-R9、-C(O)-NH-R9、または-S(O)2-NH-R9である。
【００６８】
反応スキーム2は式Iの化合物の合成を説明しており、式中、R7はR8と一緒になって任意に置換されたイミダゾリンである(任意に置換された置換基はRa、Rb、Rcで示している)。
【００６９】
反応スキーム3は式Iの化合物の合成を説明しており、式中、R7はR8と一緒になって任意に置換されたイミダゾールである(任意に置換された置換基はRcで示している)。
【００７０】
反応スキーム4は式Iの化合物の合成を説明しており、式中、R7はR8と一緒になって任意に置換されたジ-置換イミダゾールである(任意に置換された置換基は1,3-ジオキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル、またはアミノ-プロピルとして示しており、他の任意に置換された置換基はRcで示している)。
【００７１】
反応スキーム5は式Iの化合物の合成を説明しており、式中、R7は任意に置換されたアルキル、または任意に置換されたアリールであり、R8は水素、-C(O)-R9、-S(O)2-R9、-CH2-R9、-C(O)-O-R9、-C(O)-NH-R9、または-S(O)2-NH-R9であり、これは式IでXが=N-である場合の化合物の合成には特に適している。
【００７２】
反応スキーム1および5は立体化学的に濃縮されたまたは純粋な化合物を得るための合成法を示している。反応スキーム2、3、および4の合成法は、対応する式107の立体化学的に特異的な出発物質(例えば反応スキーム1および5の式107aと示した(R)-エナンチオマー)を用いることによって、同様に立体化学的に濃縮された、または純粋な生成物を提供することができる。
【００７３】
出発物質
式101の任意に置換されたアミノニコチン酸、アミノ-イソニコチン酸、アミノ-ピリジン-カルボン酸、アミノ-ピラジン-カルボン酸、アミノ-ピリダジン-カルボン酸、およびアミノ-ピリミジン-カルボン酸、ならびにその他の反応物は、例えば、Aldrich Chemical Company, Milwaukee, WIから市販されており、または、当業者であれば一般的に用いられている合成方法を用いて容易に調製することができる。
【化９】
2005536475.tif 000010
2005536475.tif 000011
【００７４】
式103の化合物の調製
反応スキーム1、ステップ1では、炭酸水素ナトリウムおよび脱水剤(Na2SO4など)の存在下で不活性な有機溶媒(THFなど)中に溶解した、任意に置換された：アミノニコチン酸、アミノ-イソニコチン酸、アミノ-ピリジン-カルボン酸、アミノ-ピラジン-カルボン酸、アミノ-ピリダジン-カルボン酸、およびアミノ-ピリミジン-カルボン酸(2-アミノ-ニコチン酸など − 式101の化合物で式中W、X、およびYが-C=；Zが-N=；R1、R2、およびR3が水素；R4が存在しないもの)に、モル濃度でわずかに過剰の任意に置換された酸塩化物(例えば3-メチルブチリルクロリドまたはイソバレリルクロリド − 式102の化合物で式中R6はi-プロピルでR6'は水素である)を添加し、ほぼ室温で保持する。反応の完了には2時間かかり、それは例えば、TLCでモニターする。次いで、溶媒を無水酢酸で置換し、その液を、反応の完了をモニターしつつ(例えばTLCによって)、約90〜100℃で約16時間加熱した後、真空下で約80〜100℃で無水酢酸を除去する。その反応混液を冷却し、対応する任意に置換された式103の化合物(例えば、2-i-プロピル-ピリド[2,3-d][1,3]オキサジン-4-オン−この化合物では式中W、X、およびYが-C=；Zが-N=；R1、R2、およびR3が水素；R4が存在せず；R6はi-プロピル；R6'は水素である、などである)が単離され精製される。式103の化合物の一般的命名法は次のとおり：
2-置換-ピリド[3,2-d][1,3]オキサジン-4-オン(式中Wは-N=であり、X、Y、およびZは-C=である)、
2-置換-ピリド[4,3-d][1,3]オキサジン-4-オン(式中Xは-N=であり、W、Y、およびZは-C=である)、
2-置換-ピリド[3,4-d][1,3]オキサジン-4-オン(式中Yは-N=であり、W、X、およびZは-C=である)、
2-置換-ピリド[2,3-d][1,3]オキサジン-4-オン(式中Zは-N=であり、W、X、およびY-C=である)、
6-置換-7-オキサ-1,2,5-トリアザ-ナフタレン-8-オン(式中WおよびXは-N=であり、YおよびZは-C=である)、
2-置換-ピリダジノ[4,5-d][1,3]オキサジン-4-オン(式中XとYは-N=であり、WとZは-C=である)、
7-置換-ピリダジノ[3,4-d][1,3]オキサジン-5-オン(式中YとZは-N=であり、WとXは-C=である)、
2-置換-ピラジノ[2,3-d][1,3]オキサジン-4-オン(式中WとZは-N=であり、XとYは-C=である)、
2-置換-ピリミド[α,β-d][1,3]オキサジン-4-オン(式中WとYは-N=であり、XとZは-C=である)、
式104の化合物の調製
反応スキーム1、ステップ2では、不活性の有機溶媒(トルエンまたはクロロホルムなど)中に式R5-NH2、式中R5は上述のとおりであるが(ベンジルアミンなど)、この式の第一級アミンの約1.5 Mと、式103の化合物の1 Mを含む液を加熱して還流させる。この反応は1〜5時間かけて起こるが、好ましくは3時間である。水を除去した後、その反応混液にエチレングリコールおよび水酸化ナトリウム(または炭酸ナトリウム)を添加し温度を110〜120℃に上げる。反応の完了は例えば、TLCでモニターする。対応する、任意に置換された式104の化合物(2-i-プロピル-3-ベンジル-3H-ピリド[2,3-d]ピリミジン-4-オン−、式中W、X、およびYが-C=；Zが-N=；R1、R2、およびR3が水素；R4が存在せず；R5はベンジル；R6はi-プロピル；R6'は水素である、などである)が単離され精製される。式104の化合物の一般的命名法は次のとおり：
3-(R5-置換)-2-(R6-置換)-3H-ピリド[3,2-d]ピリミジン-4-オン (式中Wは-N=であり、X、Y、およびZは-C=である)、
3-(R5-置換)-2-(R6-置換)-3H-ピリド[4,3-d]ピリミジン-4-オン (式中Xは-N=であり、W、Y、およびZは-C=である)、
3-(R5-置換)-2-(R6-置換)-3H-ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-オン (式中Yは-N=であり、W、X、およびZは-C=である)、
3-(R5-置換)-2-(R6-置換)-3H-ピリド[2,3-d]ピリミジン-4-オン (式中Zは-N=であり、W、X、およびYは-C=である)、
7-(R5-置換)-6-(R6-置換)-7H-ピリミド[5,4-c]ピリダジン-8-オン (式中WとXは-N=であり、YとZは-C=である)、
3-(R5-置換)-2-(R6-置換)-3H-ピリミド[5,4-c]ピリダジン-8-オン (式中XとYは-N=であり、WとZは-C=である)、
6-(R5-置換)-7-(R6-置換)-3H-ピリミド[4,5-c]ピリダジン-5-オン (式中YとZは-N=であり、WとXは-C=である)、
3-(R5-置換)-2-(R6-置換)-3H-プテリジン-4-オン (式中WとZは-N=であり、XとYは-C=である)、
3-(R5-置換)-2-(R6-置換)-3H-ピリミド[5,4-d]ピリミジン-4-オン (式中WとYは-N=であり、XとZは-C=である)、
3-(R5-置換)-2-(R6-置換)-3H-ピリミド[4,5-d]ピリミジン-4-オン (式中XとZは-N=であり、WとYは-C=である)。
【００７５】
式105の化合物の調製
反応スキーム1、ステップ3では、酢酸ナトリウムの存在下で酢酸中に溶解した式104の化合物を30〜50℃まで加熱した後、酢酸中の臭素のモル濃度がわずかに過剰のものを2から4時間かけて添加(撹拌しつつ)する。反応の完了は、例えばTLCでモニターする；出発材料がまだ存在している場合には、反応完了まで温度を50℃へ上昇させる。対応する任意に置換された式105の化合物(2-(1-ブロモ-i-プロピル)-3-ベンジル-3H-ピリド[2,3-d]ピリミジン-4-オン−、式中W、X、およびYは-C=であり；Zは-N=であり；R1、R2、およびR3は水素であり；R4は存在せず；R5はベンジルであり；R6はi-プロピルであり；R6'は水素であるものなどである)が単離され、精製される。式105のその他の化合物は(1-ブロモ-R6-置換)誘導体であり、その他の点では式104の一般的命名法に従うものである。
【００７６】
式106の化合物の調製
反応スキーム1、ステップ4では、不活性有機溶媒(DMFなど)中の1.5 Mのアジ化ナトリウムに1 Mの式105の化合物を徐々に添加する。反応は40〜60℃の温度で撹拌しつつ3〜10時間かけて行われる。反応の完了は、例えばTLCでモニターする。対応する任意に置換された式106の化合物(2-(1-アジド-i-プロピル)-3-ベンジル-3H-ピリド[2,3-d]ピリミジン-4-オン − 式中W、X、およびYは-C=であり；Zは-N=であり；R1、R2、およびR3は水素であり；R4は存在せず；R5はベンジルであり；R6はi-プロピルであり；R6'は水素であるもの、などである)が単離され、精製される。式106のその他の化合物は(1-アジド-R6-置換)誘導体であり、その他の点では式104の一般的命名法に従うものである。
【００７７】
式107の化合物の調製
反応スキーム1、ステップ5では、不活性有機溶媒(THFなど)中に溶解させたトリフェニルホスフィン溶液に式106のアジドを15分間かけて何回かに分けて添加する。温度を20℃に維持し撹拌しつつ5分間から2時間かけて反応させる。その反応混液を酸性化し、溶媒を除去した後、従来法で、対応する任意に置換された式107の化合物(2-(1-アミノ-i-プロピル)-3-ベンジル-3H-ピリド[2,3-d]ピリミジン-4-オン−、式中W、X、およびYは-C=であり；Zは-N=であり；R1、R2、およびR3は水素であり；R4は存在せず；R5はベンジルであり；R6はi-プロピルであり；R6'は水素であるもの、などである)の塩酸塩が得られ、それを単離し精製する。式107のその他の化合物は(1-アミノ-R6-置換)誘導体であり、その他の点では式104の一般的命名法に従うものである。
【００７８】
式107aの化合物の調製
本発明のある種の化合物では、R6置換基として特定の立体配置、例えば(R)-異性体などを選択することができ、それは例えば、反応スキーム1のステップ5aに示したような方法で得ることができる。不活性有機溶媒(IPAなど)中に式107のアミンを溶解させ、60℃に加温する。別の容器に、分解剤(ジベンゾイル-D-酒石酸など)を、好ましくは同じ加温した溶媒中に、溶解し、次いで迅速に加温したアミン溶液中に添加する(撹拌しつつ)。その反応混液を撹拌を継続しつつ室温まで冷却して16時間かけて結晶化させる。所望の異性体、例えば、式107aに示した(R)異性体が単離され、精製される。
【００７９】
式108の化合物の調製
式Iの化合物の合成の残りの説明を簡潔なものとするために、対応する生成物を得るためには単一の異性体または異性体の混合物のいずれかを用いることができることは理解されるべきである。その点に関して、式108のR6置換基は波腺によって結合が示されており、それは単一の異性体または異性体の何らかの混合物のいずれかであることを意味しており、R6'置換体はこれ以降は水素として示されている。
【００８０】
反応スキーム1、ステップ6では、式107の化合物(または式107aなどの単一の異性体)を、水素化ホウ素酢酸アルカリ金属[Na(OAc)3BHなど]をモル濃度がわずかに過剰なものの存在下で不活性溶媒(ジクロロメタンなど)中に溶解し、その溶液を10℃に冷却する。この溶液に式R7=Oの1.4 MのR7アルデヒド、式中R7は上述のとおりのものまたはそのような置換基の防護された前駆体[例えば、(3-オキソ-プロピル)-カルバミン酸tert-ブチルエステル、または3(1,3-ジオキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-プロピオンアルデヒド]であるが、そのR7アルデヒドを、何回かに分けて添加する；その溶液を室温まで加温する。反応の完了には3時間かかり、例えば、TLCでモニターする。対応する任意に置換された式108の化合物(N-{3-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリド[2,3-d]ピリミジン-2-イル)-2-メチル-プロピルアミノ]-プロピル}-カルバミン酸tert-ブチルエステル − 式中W、X、およびYは-C=であり；Zは-N=であり；R1、R2、およびR3は水素であり；R4は存在せず；R5はベンジルであり；R6はi-プロピルであり；R7は3-Boc-アミノ-プロピルであるもの、などである)が精製され、単離される。式108のその他の化合物は(置換-アミノ-R6-置換)誘導体であり、それらの命名は保護基が付いているか否かによって変わる。
【００８１】
保護基の付いたR7置換基はこの時点で保護基の除去を行って(例えば、モル濃度で大過剰のTFAと反応させることによって)、対応する式108の化合物を得ることができ、それは式Iの化合物でR8が水素のものでもある。あるいはまた、式108の化合物(R7が防護されているかいないかに関わらず、適切でさえあれば)は下記のとおり先へ進め、さらに誘導体化して式IでR8が水素以外の化合物とすることができる。
【００８２】
R8が-C(O)-R9、-S(O2)-R9、-CH2-R9、-C(O)-O-R9、-C(O)-NH-R9、または-S(O)2-NH-R9である式Iの化合物の調製
反応スキーム1、ステップ7では、式108の1化合物と不活性溶媒(ジクロロメタンなど)を2 Mを超えるDIPEAの存在下で溶解するまで撹拌する。この溶液にR8塩化物[例えば、Cl-C(O)-R9、Cl-S(O2)-R9、Cl-CH2-R9、Cl-C(O)-O-R9、Cl-C(O)-NH-R9、またはCl-S(O)2-NH-R9など]またはR8イソチオシアナート(O=C=N-R9)または無水物(O[C(O)R9]2またはO[S(O)2R9]2)、式中R9は上述のとおり例えば塩化トルオイルであるが、それらのモル濃度でわずかに過剰量を添加する。その反応は撹拌しつつ室温から50℃へ4から6時間かけて行われる。反応の完了は、例えば、TLCでモニターする。対応する式Iの化合物の保護基を除去し(必要に応じて)単離し精製する。命名は上述の命名法の項に示した例に従う。
【化１０】
2005536475.tif 000012
【００８３】
反応スキーム2、ステップ1では、式107のアミン(例えば、反応スキーム1で記載したように調製したもの)を(2-オキソ-エチル)-カルバミン酸tert-ブチルエステル、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム、およびジクロロメタンを用いて還元的アミノ化を行って式201の化合物を得る；この反応は室温で4時間かけて行われる。ステップ2ではBoc保護基をジクロロメタン-トリフルオロ酢酸(4:1)と接触させて除去して式202の化合物を得る；この反応は室温で16時間かけて行われる。ステップ3では、式202の第1級アミンを、式RcC(O)Clの塩化アシル、トリエチルアミン、およびジクロロメタンの存在下で化学選択的にアシル化する；この反応は室温で3時間かけて行われ、式203のアミドが得られる。ステップ4ではそのアミドをオキシ塩化リンと還流させつつ接触させて脱水して環状化する；この反応は8時間かけて行われ、対応する式Iのイミダゾリンが得られる。
【００８４】
あるいはまた、式202の第1級アミンを、式RcC(O)Clの塩化アシル、トリエチルアミン、およびジクロロメタンの存在下で化学選択的にアシル化した後、還流しつつ酢酸が媒介する環状化を行い、式203のアミド中間体の単離を行うことなく、式Iのイミダゾリンが得られる。
【化１１】
2005536475.tif 000013
【００８５】
反応スキーム3、ステップ1では、式107のアミンをブロモアセトアルデヒドジメチルアセタールおよび炭酸カリウムと接触させる；この反応は135℃で18時間かけて行われ、式301のジメトキシエチルアミンが得られる。式301の第2級アミンを式RcC(O)Clの塩化アシル、トリエチルアミン、およびジクロロメタンと接触させる；この反応は室温で18時間かけて行われ式302の第3級アミンが得られる。式302の第3級アミンを酢酸中の酢酸アンモニウムを用いて環状化する；この反応は還流しつつ2時間かけて行われ、式Iの置換されたイミダゾリル化合物が得られる。
【化１２】
2005536475.tif 000014
【００８６】
反応スキーム4、ステップ1では、式107のアミンを式X-CH2-C(O)-CH2CH2-N-PG[式中、Xは脱離基(特にブロモ)でPGはアミノ保護基(特にフタルイミド)である]および炭酸カリウムと接触させる；この反応は室温で1.5時間かけて行われ、この結果得られる式401の第2級アミンはそれ以上精製することなく次のステップに進めることができる。ステップ2では、式401の第2級アミンを式RcC(O)Clの塩化アシル、トリエチルアミン、およびジクロロメタンと接触させる；この反応は室温で2時間かけて行われ、式402の第3級アミンが得られる。式402の第3級アミンは酢酸中の酢酸アンモニウムを用いて環状化する；この反応は還流しつつ6時間かけて行われ、式403のジ-置換イミダゾリル化合物が得られる(これは式Iで示されるものの範囲にはいる化合物である)。ステップ4では、式403の化合物の保護基を除去して対応する式Iの第1級アミンが得られる。式403のアミンがフタルイミドとして保護されている場合には、保護基の除去は、例えばエタノール中のヒドラジンと接触させることによって行うことができる；この反応は還流しつつ3時間かけて行われる。
【化１３】
2005536475.tif 000015
2005536475.tif 000016
【００８７】
式502の化合物の調製
反応スキーム5、ステップ1では、式501のN-ベンジルオキシカルボニルアミノ酸(好ましくはD-バリンなどのキラルアミノ酸)を有機溶媒(例えば、ジクロロメタン)中に溶解し、フッ化シアヌル(0.75 M)と接触させ、16時間撹拌する。ろ過後、残った溶液を洗い、乾燥させ、溶媒を蒸発させて式502の酸フッ化物が得られる。
【００８８】
式504の化合物の調製
反応スキーム5、ステップ2では、式503の保護された4-アミノ-ヘテロアリール-カルボキシアルデヒドを溶媒(例えば、メタノール)中に溶解し、モル濃度で大過剰のN-ヨードスクシニミドおよび炭酸カリウムと接触させる。この反応は室温で撹拌しつつ1時間かけて行われ、その後、飽和Na2S2O3で反応を停止させる。式504のメチルエステルが単離され、精製される。
【００８９】
式505の化合物の調製
反応スキーム5、ステップ3では、式504のメチルエステルの保護基を例えばTFA(例えば、TFA/DCMの50/50溶液中に溶解して)除去する。この反応は室温で撹拌しつつ2時間かけて行われる。従来法で処理した後に、対応する式505の保護基が除去されたメチルエステルが得られる。
【００９０】
式506の化合物の調製
反応スキーム5、ステップ4では、式505の保護基を除去されたメチルエステルをモル濃度でわずかに過剰のジイソプロピルエチルアミンと一緒になって溶媒(例えば、ジクロロメタン)中に溶解する。モル濃度でわずかに過剰の式502の酸フッ化物を添加する。この反応は室温で撹拌しつつ16時間かけて行われる。減圧下で溶媒を除去し、フラッシュシリカゲルクロマトグラフィーで精製して対応する式506のアミドをが得られる。
【００９１】
式507の化合物の調製
反応スキーム5、ステップ5では、式506のアミドを溶媒中に溶解し、水酸化ナトリウムのモル濃度で2倍過剰量と接触させる。この反応は室温で撹拌しつつ1時間かけて行われ、その後、撹拌をさらに10分間続けつつシリカゲルを添加する。そのシリカゲルをろ過して除き、溶媒を蒸発させて対応する式507のカルボン酸が得られる。
【００９２】
式508および509の化合物の調製
反応スキーム5、ステップ6では、式507の酸を溶解し(例えば、ジクロロメタン中に)、モル濃度でわずかに過剰のEDCなどのカプリング試薬と接触させる。その溶液を、逆相HPLCで観察するとき出発物質が完全に消費されるまで室温で2時間撹拌する。式R5-NH2の第1級アミン(ベンジルアミンなど)のモル濃度で2倍過剰量を添加する。この反応は室温で撹拌しつつ16時間かけて行われる。この混合物を真空下で濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィーで精製して式508の非環状生成物および式509の環状でエナンチオマーとして純粋な生成物が分離される。
【００９３】
式107a、108a、および式Iの化合物の調製
反応スキーム5、ステップ7では、式509のエナンチオマーとして純粋な、環状化合物の保護基を例えばHBr/酢酸の溶液中に溶解することによって除去する。この反応は室温で撹拌しつつ2時間かけて行われる。溶媒を除去すると、対応するエナンチオマーとして純粋な、保護基が除去された式107aのアミンが得られ、それをさらに、例えば反応スキーム1、ステップ6および7に記載したようなステップで、式108aおよび式Iの対応するエナンチオマーとして純粋な第2級および第3級アミンとすることができる。
【００９４】
本発明の上述のプロセスで調製された化合物は、例えば検出可能な量の式106、107、107a、108、108a、203、302、402、403、または509の存在によって同定することができる。医薬品が承認を得るおよび/または販売を行うには薬局方の基準に合致しなければならないこと、合成試薬、前駆体、反応生成物(式Iのフタルイミドで保護された化合物の、ヒドラジンによる保護基除去の結果得られる反応生成物である、2,3-ジヒドロ-フタラジンなど)が薬局方の基準に定められた限度値を超えてはならないことはよく知られているが、本発明のプロセスによって最終的に得られる化合物中には少量ながら検出可能なそのような物質が、例えば、純度が95％程度であって不純物の単一の成分で約1％を越えるものがないようなレベルで存在している可能性がある。そのような不純物の存在について医薬用化合物の純度をモニターすることは重要であり、そのような不純物の存在は本発明のプロセスの検出目的での使用方法としてさらに開示されている。
【００９５】
任意に行いうる特別なプロセスおよび最終ステップ
式108の化合物：
【化１４】
2005536475.tif 000017
【００９６】
(式中R7は任意に保護されたものである)を、モル濃度でわずかに過剰のR8塩化物[Cl-C(O)-R9、Cl-S(O2)-R9、Cl-CH2-R9、Cl-C(O)-O-R9、およびCl-S(O)2-NH-R9など]またはR8イソシアナート(O=C=N-R9など)、または無水物(O[C(O)R9]2もしくはO[S(O)2R9]2など)と接触させて、対応する任意に保護された式Iの化合物が得られる。
【００９７】
式IのR7-保護化合物の保護基を除去する。
【００９８】
式203、302、または402の化合物を酢酸が媒介する環状化で環状化合物とする。
【００９９】
式Iのフタルイミドで保護された化合物を、例えばヒドラジンと接触させることによって、対応する式Iの第1級アミンへと変換する。
【０１００】
式Iの化合物の異性体のラセミ混合物をクロマトグラフィーカラムにかけて(R)-および(S)-エナンチオマーに分離する。
【０１０１】
式Iの化合物を薬学的に許容される酸と接触させて対応する酸付加塩を形成させる。
【０１０２】
式Iの薬学的に許容される酸付加塩を塩基と接触させて対応する式Iの遊離塩基を形成させる。
【０１０３】
特定の化合物
式Iの化合物、それらの薬学的に許容される塩および溶媒和物、本発明の医薬品製剤、製造方法、および使用方法の特定の実施形態には、式I中の下記の組み合わせおよび置換基の交換が含まれる(より特定性の程度が強くなる順番でインデント/サブグループ化をそれぞれ行っている)：
R1、R2、R3、およびR4は、水素、ハロ(特にクロロおよびフルオロ)、低級アルキル(特にメチル)、置換された低級アルキル、低級アルコキシ(特にメトキシ)、およびシアノ、から選択されたものであるか、またはそれらは存在しない。
【０１０４】
R1、R2、R3、およびR4のうちの2つまたは3つは水素である。
【０１０５】
R1、R2、R3、およびR4のうちの3つが水素であるか、またはR1、R2、R3、およびR4のうちの2つが水素であって第3のものがハロ、低級アルコキシ、またはシアノである。
【０１０６】
ハロはクロロであり、低級アルコキシはメトキシである。
【０１０７】
R3は水素、クロロ、メトキシ、またはシアノである。
【０１０８】
R1、R2、R3、およびR4のうちの3つが水素であり第4のものが存在しない。
【０１０９】
R5は任意に置換されたアラルキルである。
【０１１０】
R5はベンジルまたは置換されたベンジルである。
【０１１１】
R5はベンジルである。
【０１１２】
R6とR6'は異なるものであり、R6が結合している立体中心は(R)-配置のものである。
【０１１３】
W、X、Y、またはZは、-N=であるか、またはWおよびZが-N=である。
【０１１４】
W、Y、またはZは、-N=である。
【０１１５】
R6とR6'は異なるものであり、R6が結合している立体中心は(R)-配置のものである。
【０１１６】
YまたはZは-N=である。
【０１１７】
R1、R2、R3、およびR4は水素、ハロ(特にクロロおよびフルオロ)、低級アルキル(特にメチル)、置換された低級アルキル、低級アルコキシ(特にメトキシ)、およびシアノ、から選択されたものであるか、またはそれらは存在しない。
【０１１８】
R1、R2、R3、およびR4のうちの3つが水素であり第4のものが存在しない。
【０１１９】
R6は任意に置換されたアルキルである。
【０１２０】
R6は低級アルキルである。
【０１２１】
低級アルキルは、エチル、i-プロピル、c-プロピル、またはt-ブチルである。  
R6とR6'は異なるものであり、R6が結合している立体中心は(R)-配置のものである。
【０１２２】
R6とR6'は異なるものであり、R6が結合している立体中心は(R)-配置のものである。
【０１２３】
R6'は水素である。
【０１２４】
R6'は水素である。
【０１２５】
R6'は水素である。
【０１２６】
R7は置換されたアルキルである。
【０１２７】
R7は第1級、2級、または3級アミンで置換されたアルキルである。
【０１２８】
R8は-C(O)-R9または-C(O)-OR9である。
【０１２９】
R8は-C(O)-R9であり、この式でR9は：任意に置換されたアリール(特にフェニル、ならびに低級アルキル-、低級アルコキシ-、および/またはハロ-置換フェニル)、任意に置換されたアラルキル(特に、任意に置換されたベンジルおよびフェニルビニル)、アリールオキシアルキル(特にフェノキシ低級アルキル)、任意に置換されたヘテロアリール、任意に置換されたヘテロアラルキル、または任意に置換されたヘテロアリールオキシアルキルである。
【０１３０】
R9は任意に置換されたアルキル、任意に置換されたアリール、または任意に置換されたアラルキルである。
【０１３１】
R9は低級アルコキシアルキル、低級アルキル-置換フェニル、低級アルコキシ-置換フェニル、ハロ-置換フェニル、任意に置換されたベンジル、フェノキシ低級アルキル、任意に置換されたヘテロアリール、任意に置換されたヘテロアラルキル、または任意に置換されたヘテロアリールオキシアルキルである。
【０１３２】
R9は低級アルコキシアルキル、または置換されたフェニルである。
【０１３３】
R9はメトキシ-メチル、またはp-トリルである。
【０１３４】
R8は-C(O)-OR9であり、この式でR9は：任意に置換されたアリール(特にフェニル、ならびに低級アルキル-、低級アルコキシ-、および/またはハロ-置換フェニル)、または任意に置換されたヘテロアリールである。
【０１３５】
R7はR8と一緒になって任意に置換されたイミダゾールまたは任意に置換されたイミダゾリンである。
【０１３６】
R7はR8と一緒になって2-(任意に置換された)-4,4-(任意に2つが置換された)-4,5-ジヒドロ-イミダゾール-1-イルである。
【０１３７】
R7はR8と一緒になって2-(任意に置換されたアリール)-4,5-ジヒドロ-イミダゾール-1-イル、または2-(任意に置換されたアリール)-4,4-ジメチル-4,5-ジヒドロ-イミダゾール-1-イルである。
【０１３８】
R7はR8と一緒になって2-(置換されたフェニル)-4,5-ジヒドロ-イミダゾール-1-イル、または2-(置換されたフェニル)-4,4-ジメチル-4,5-ジヒドロ-イミダゾール-1-イルである。
【０１３９】
R7はR8と一緒になって2-(4-メチルフェニル)-4,5-ジヒドロ-イミダゾール-1-イル、2-(3-フルオロ-4-メチルフェニル)-4,5-ジヒドロ-イミダゾール-1-イル、2-(4-メチルフェニル)-4,4-ジメチル-4,5-ジヒドロ-イミダゾール-1-イル、または2-(3-フルオロ-4-メチルフェニル)-4,4-ジメチル-4,5-ジヒドロ-イミダゾール-1-イルである。
【０１４０】
R7はR8と一緒になって2-および/または4-置換-イミダゾール-1-イルである。
【０１４１】
R7はR8と一緒になって2-置換-イミダゾール-1-イルである。
【０１４２】
R7はR8と一緒になって2-(任意に置換されたフェニル)-イミダゾール-1-イルである。
【０１４３】
R7はR8と一緒になって2-フェニル-イミダゾール-1-イル、2-p-トリル-イミダゾール-1-イル、2-(4-フルオロ-フェニル)-イミダゾール-1-イル、2-(4-クロロ-フェニル)-イミダゾール-1-イル、または2-(3-フルオロ-4-メチル-フェニル)-イミダゾール-1-イルである。
【０１４４】
R7はR8と一緒になって2,4-2つの置換-イミダゾール-1-イルである。
【０１４５】
R7はR8と一緒になって4-(任意に置換されたアルキル)-2-(任意に置換されたアリール)-イミダゾール-1-イルである。
【０１４６】
R7はR8と一緒になって4-(Ω-アミノ-低級アルキル)-2-(任意に置換されたフェニル)-イミダゾール-1-イル、特に：4-(2-アミノ-エチル)-2-フェニル-イミダゾール-1-イル、4-(2-アミノ-エチル)-2-p-トリル-イミダゾール-1-イル、4-(2-アミノ-エチル)-2-(4-フルオロ-フェニル)-イミダゾール-1-イル、4-(2-アミノ-エチル)-2-(4-クロロ-フェニル)-イミダゾール-1-イル、4-(2-アミノ-エチル)-2-(3-フルオロ-4-メチル-フェニル)-イミダゾール-1-イル、4-(アミノメチル)-2-フェニル-イミダゾール-1-イル、4-(アミノメチル)-2-p-トリル-イミダゾール-1-イル、4-(アミノメチル)-2-(4-フルオロ-フェニル)-イミダゾール-1-イル、4-(アミノメチル)-2-(4-クロロ-フェニル)-イミダゾール-1-イル、または4-(アミノメチル)-2-(3-フルオロ-4-メチル-フェニル)-イミダゾール-1-イルである。
【０１４７】
R6とR6'は異なるものであり、R6が結合している立体中心は(R)-配置のものである。
【０１４８】
W、X、Y、またはZは-N=であるか、またはWおよびZが-N=である。
【０１４９】
X、Y、またはZは-N=である。
【０１５０】
R6とR6'は異なるものであり、R6が結合している立体中心は(R)-配置のものである。
【０１５１】
YまたはZは-N=である。
【０１５２】
R1、R2、R3、およびR4は、水素、ハロ(特にクロロおよびフルオロ)、低級アルキル(特にメチル)、置換された低級アルキル、低級アルコキシ(特にメトキシ)、およびシアノ、から選択されたものであるか、またはそれらは存在しない。
【０１５３】
R1、R2、R3、およびR4のうちの3つが水素であり第4のものが存在しない。
【０１５４】
R6は任意に置換されたアルキルである。
【０１５５】
R6は低級アルキルである。
【０１５６】
低級アルキルは、エチル、i-プロピル、c-プロピル、またはt-ブチルである。
【０１５７】
R6とR6'は異なるものであり、R6が結合している立体中心は(R)-配置のものである。
【０１５８】
R6とR6'は異なるものであり、R6が結合している立体中心は(R)-配置のものである。
【０１５９】
R6'は水素である。
【０１６０】
R6'は水素である。
【０１６１】
R7は置換されたアルキルである。
【０１６２】
R7は第1級、2級、または3級アミンで置換されたアルキルである。
【０１６３】
R8は-C(O)-R9または-C(O)-OR9である。
【０１６４】
R8は-C(O)-R9であり、この式でR9は：任意に置換されたアリール(特にフェニル、ならびに低級アルキル-、低級アルコキシ-、および/またはハロ-置換フェニル)、任意に置換されたアラルキル(特に、任意に置換されたベンジルおよびフェニルビニル)、アリールオキシアルキル(特にフェノキシ低級アルキル)、任意に置換されたヘテロアリール、任意に置換されたヘテロアラルキル、または任意に置換されたヘテロアリールオキシアルキルである。
【０１６５】
R9は任意に置換されたアルキル、任意に置換されたアリール、または任意に置換されたアラルキルである。
【０１６６】
R9は低級アルコキシアルキル、低級アルキル-置換フェニル、低級アルコキシ-置換フェニル、ハロ-置換フェニル、任意に置換されたベンジル、フェノキシ低級アルキル、任意に置換されたヘテロアリール、任意に置換されたヘテロアラルキル、または任意に置換されたヘテロアリールオキシアルキルである。
【０１６７】
R9は低級アルコキシアルキル、または置換されたフェニルである。
【０１６８】
R9はメトキシ-メチル、またはp-トリルである。
【０１６９】
R8は-C(O)-OR9であり、この式でR9は：任意に置換されたアリール(特にフェニル、ならびに低級アルキル-、低級アルコキシ-、および/またはハロ-置換フェニル)、または任意に置換されたヘテロアリールである。
【０１７０】
R7はR8と一緒になって任意に置換されたイミダゾールまたは任意に置換されたイミダゾリンである。
【０１７１】
R7はR8と一緒になって2-(任意に置換された)-4,4-(任意に2つが置換された)-4,5-ジヒドロ-イミダゾール-1-イルである。
【０１７２】
R7はR8と一緒になって2-(任意に置換されたアリール)-4,5-ジヒドロ-イミダゾール-1-イル、または2-(任意に置換されたアリール)-4,4-ジメチル-4,5-ジヒドロ-イミダゾール-1-イルである。
【０１７３】
R7はR8と一緒になって2-(置換されたフェニル)-4,5-ジヒドロ-イミダゾール-1-イル、または2-(置換されたフェニル)-4,4-ジメチル-4,5-ジヒドロ-イミダゾール-1-イルである。
【０１７４】
R7はR8と一緒になって2-(4-メチルフェニル)-4,5-ジヒドロ-イミダゾール-1-イル、2-(3-フルオロ-4-メチルフェニル)-4,5-ジヒドロ-イミダゾール-1-イル、2-(4-メチルフェニル)-4,4-ジメチル-4,5-ジヒドロ-イミダゾール-1-イル、または2-(3-フルオロ-4-メチルフェニル)-4,4-ジメチル-4,5-ジヒドロ-イミダゾール-1-イルである。
【０１７５】
R7はR8と一緒になって2-および/または4-置換-イミダゾール-1-イルである。
【０１７６】
R7はR8と一緒になって2-置換-イミダゾール-1-イルである。
【０１７７】
R7はR8と一緒になって2-(任意に置換されたフェニル)-イミダゾール-1-イルである。
【０１７８】
R7はR8と一緒になって2-フェニル-イミダゾール-1-イル、2-p-トリル-イミダゾール-1-イル、2-(4-フルオロ-フェニル)-イミダゾール-1-イル、2-(4-クロロ-フェニル)-イミダゾール-1-イル、または2-(3-フルオロ-4-メチル-フェニル)-イミダゾール-1-イルである。
【０１７９】
R7はR8と一緒になって2,4-2つの置換-イミダゾール-1-イルである。
【０１８０】
R7はR8と一緒になって4-(任意に置換されたアルキル)-2-(任意に置換されたアリール)-イミダゾール-1-イルである。
【０１８１】
R7はR8と一緒になって4-(Ω-アミノ-低級アルキル)-2-(任意に置換されたフェニル)-イミダゾール-1-イル、特に：4-(2-アミノ-エチル)-2-フェニル-イミダゾール-1-イル、4-(2-アミノ-エチル)-2-p-トリル-イミダゾール-1-イル、4-(2-アミノ-エチル)-2-(4-フルオロ-フェニル)-イミダゾール-1-イル、4-(2-アミノ-エチル)-2-(4-クロロ-フェニル)-イミダゾール-1-イル、4-(2-アミノ-エチル)-2-(3-フルオロ-4-メチル-フェニル)-イミダゾール-1-イル、4-(アミノメチル)-2-フェニル-イミダゾール-1-イル、4-(アミノメチル)-2-p-トリル-イミダゾール-1-イル、4-(アミノメチル)-2-(4-フルオロ-フェニル)-イミダゾール-1-イル、4-(アミノメチル)-2-(4-クロロ-フェニル)-イミダゾール-1-イル、または4-(アミノメチル)-2-(3-フルオロ-4-メチル-フェニル)-イミダゾール-1-イルである。
【０１８２】
R6は任意に置換されたアルキルである。
【０１８３】
R6は低級アルキルである。
【０１８４】
低級アルキルは、エチル、i-プロピル、c-プロピル、またはt-ブチルである。  
R6とR6'は異なるものであり、R6が結合している立体中心は(R)-配置のものである。
【０１８５】
R6とR6'は異なるものであり、R6が結合している立体中心は(R)-配置のものである。
【０１８６】
R6'は水素である。
【０１８７】
R6'は水素である。
【０１８８】
R5は任意に置換されたフェニル以外のものである。
【０１８９】
R6はメチルである。
【０１９０】
R6'は水素である。
【０１９１】
R7は置換されたアルキルである。
【０１９２】
R7は第1級、2級、または3級アミンで置換されたアルキルである。
【０１９３】
R8は-C(O)-R9または-C(O)-OR9である。
【０１９４】
R8は-C(O)-R9であり、この式でR9は：任意に置換されたアリール(特にフェニル、ならびに低級アルキル-、低級アルコキシ-、および/またはハロ-置換フェニル)、任意に置換されたアラルキル(特に、任意に置換されたベンジルおよびフェニルビニル)、アリールオキシアルキル(特にフェノキシ低級アルキル)、任意に置換されたヘテロアリール、任意に置換されたヘテロアラルキル、または任意に置換されたヘテロアリールオキシアルキルである。
【０１９５】
R9は任意に置換されたアルキル、任意に置換されたアリール、または任意に置換されたアラルキルである。
【０１９６】
R9は低級アルコキシアルキル、低級アルキル-置換フェニル、低級アルコキシ-置換フェニル、ハロ-置換フェニル、任意に置換されたベンジル、フェノキシ低級アルキル、任意に置換されたヘテロアリール、任意に置換されたヘテロアラルキル、または任意に置換されたヘテロアリールオキシアルキルである。
【０１９７】
R9は低級アルコキシアルキル、または低級アルキル-置換されたフェニルである。
【０１９８】
R9はメトキシ-メチル、またはp-トリルである。
【０１９９】
R8は-C(O)-OR9であり、この式でR9は：任意に置換されたアリール(特にフェニル、ならびに低級アルキル-、低級アルコキシ-、および/またはハロ-置換フェニル)、または任意に置換されたヘテロアリールである。
【０２００】
R8は-S(O)2-R9、-CH2-R9、-C(O)-NH-R9、または-S(O)2-NH-R9である。
【０２０１】
R8は-S(O)2-R9であり、この式でR9は：C1-C13アルキル；ナフチル；ビフェニリル；またはヘテロアリールであるか；または任意にハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ニトロ、メチレンジオキシ、もしくはトリフルオロメチルである。
【０２０２】
R9は置換されたフェニルまたはナフチルである。
【０２０３】
R8は-CH2-R9であり、この式でR9は：C1-C13アルキル；置換された低級アルキル；フェニル；ナフチル；フェニル；ハロ、低級アルキル、低級アルコキシ、ニトロ、メチレンジオキシ、もしくはトリフルオロメチルで置換されたフェニル；ビフェニリル、ベンジルもしくはヘテロシクリルである。
【０２０４】
R9は置換されたフェニル、ヘテロシクリル、またはナフチルである。
【０２０５】
R7はR8と一緒になって任意に置換されたイミダゾールまたは任意に置換されたイミダゾリンである。
【０２０６】
R7はR8と一緒になって2-(任意に置換された)-4,4-(任意に2つが置換された)-4,5-ジヒドロ-イミダゾール-1-イルである。
【０２０７】
R7はR8と一緒になって2-(任意に置換されたアリール)-4,5-ジヒドロ-イミダゾール-1-イル、または2-(任意に置換されたアリール)-4,4-ジメチル-4,5-ジヒドロ-イミダゾール-1-イルである。
【０２０８】
R7はR8と一緒になって2-(置換されたフェニル)-4,5-ジヒドロ-イミダゾール-1-イル、または2-(置換されたフェニル)-4,4-ジメチル-4,5-ジヒドロ-イミダゾール-1-イルである。
【０２０９】
R7はR8と一緒になって2-(4-メチルフェニル)-4,5-ジヒドロ-イミダゾール-1-イル、2-(3-フルオロ-4-メチルフェニル)-4,5-ジヒドロ-イミダゾール-1-イル、2-(4-メチルフェニル)-4,4-ジメチル-4,5-ジヒドロ-イミダゾール-1-イル、または2-(3-フルオロ-4-メチルフェニル)-4,4-ジメチル-4,5-ジヒドロ-イミダゾール-1-イルである。
【０２１０】
R7はR8と一緒になって2-および/または4-置換-イミダゾール-1-イルである。
【０２１１】
R7はR8と一緒になって2-置換-イミダゾール-1-イルである。
【０２１２】
R7はR8と一緒になって2-(任意に置換されたフェニル)-イミダゾール-1-イルである。
【０２１３】
R7はR8と一緒になって2-フェニル-イミダゾール-1-イル、2-p-トリル-イミダゾール-1-イル、2-(4-フルオロ-フェニル)-イミダゾール-1-イル、2-(4-クロロ-フェニル)-イミダゾール-1-イル、または2-(3-フルオロ-4-メチル-フェニル)-イミダゾール-1-イルである。
【０２１４】
R7はR8と一緒になって2,4-2つの置換-イミダゾール-1-イルである。
【０２１５】
R7はR8と一緒になって4-(任意に置換されたアルキル)-2-(任意に置換されたアリール)-イミダゾール-1-イルである。
【０２１６】
R7はR8と一緒になって4-(Ω-アミノ-低級アルキル)-2-(任意に置換されたフェニル)-イミダゾール-1-イルである。
【０２１７】
R7はR8と一緒になって4-(2-アミノ-エチル)-2-フェニル-イミダゾール-1-イル、4-(2-アミノ-エチル)-2-p-トリル-イミダゾール-1-イル、4-(2-アミノ-エチル)-2-(4-フルオロ-フェニル)-イミダゾール-1-イル、4-(2-アミノ-エチル)-2-(4-クロロ-フェニル)-イミダゾール-1-イル、4-(2-アミノ-エチル)-2-(3-フルオロ-4-メチル-フェニル)-イミダゾール-1-イル、4-(アミノメチル)-2-フェニル-イミダゾール-1-イル、4-(アミノメチル)-2-p-トリル-イミダゾール-1-イル、4-(アミノメチル)-2-(4-フルオロ-フェニル)-イミダゾール-1-イル、4-(アミノメチル)-2-(4-クロロ-フェニル)-イミダゾール-1-イル、または4-(アミノメチル)-2-(3-フルオロ-4-メチル-フェニル)-イミダゾール-1-イルである。
【０２１８】
W、X、Y、もしくはZは、-N=であるか、またはWおよびZが-N=である。
【０２１９】
R6とR6'は異なるものであり、R6が結合している立体中心は(R)-配置のものである。
【０２２０】
W、Y、またはZは、-N=である。
【０２２１】
R6とR6'は異なるものであり、R6が結合している立体中心は(R)-配置のものである。
【０２２２】
YまたはZは-N=である。
【０２２３】
R1、R2、R3、およびR4は水素、ハロ(特にクロロおよびフルオロ)、低級アルキル(特にメチル)、置換された低級アルキル、低級アルコキシ(特にメトキシ)、およびシアノ、から選択されたものであるか、またはそれらは存在しない。
【０２２４】
R1、R2、R3、およびR4のうちの3つが水素であり第4のものが存在しない。  
R5は任意に置換されたアラルキルである。
【０２２５】
R5はベンジルまたは置換されたベンジルである。
【０２２６】
R5はベンジルである。
【０２２７】
R6は任意に置換されたアルキルである。
【０２２８】
R6は低級アルキルである。
【０２２９】
低級アルキルは、エチル、i-プロピル、c-プロピル、またはt-ブチルである。  
R6とR6'は異なるものであり、R6が結合している立体中心は(R)-配置のものである。
【０２３０】
R6とR6'は異なるものであり、R6が結合している立体中心は(R)-配置のものである。
【０２３１】
R6'は水素である。
【０２３２】
R6'は水素である。
【０２３３】
R6'は水素である。
【０２３４】
R7は置換されたアルキルである。
【０２３５】
R7は第1級、2級、または3級アミンで置換されたアルキルである。
【０２３６】
R8は-C(O)-R9または-C(O)-OR9である。
【０２３７】
R8は-C(O)-R9であり、この式でR9は：任意に置換されたアリール(特にフェニル、ならびに低級アルキル-、低級アルコキシ-、および/またはハロ-置換フェニル)、任意に置換されたアラルキル(特に、任意に置換されたベンジルおよびフェニルビニル)、アリールオキシアルキル(特にフェノキシ低級アルキル)、任意に置換されたヘテロアリール、任意に置換されたヘテロアラルキル、または任意に置換されたヘテロアリールオキシアルキルである。
【０２３８】
R9は任意に置換されたアルキル、任意に置換されたアリール、または任意に置換されたアラルキルである。
【０２３９】
R9は低級アルコキシアルキル、低級アルキル-置換フェニル、低級アルコキシ-置換フェニル、ハロ-置換フェニル、任意に置換されたベンジル、フェノキシ低級アルキル、任意に置換されたヘテロアリール、任意に置換されたヘテロアラルキル、または任意に置換されたヘテロアリールオキシアルキルである。
【０２４０】
R9は低級アルコキシアルキル、または置換されたフェニルである。
【０２４１】
R9はメトキシ-メチル、またはp-トリルである。
【０２４２】
R8は-C(O)-OR9であり、この式でR9は：任意に置換されたアリール(特にフェニル、ならびに低級アルキル-、低級アルコキシ-、および/またはハロ-置換フェニル)、または任意に置換されたヘテロアリールである。
【０２４３】
R7はR8と一緒になって任意に置換されたイミダゾールまたは任意に置換されたイミダゾリンである。
【０２４４】
R7はR8と一緒になって2-(任意に置換された)-4,4-(任意に2つが置換された)-4,5-ジヒドロ-イミダゾール-1-イルである。
【０２４５】
R7はR8と一緒になって2-(任意に置換されたアリール)-4,5-ジヒドロ-イミダゾール-1-イル、または2-(任意に置換されたアリール)-4,4-ジメチル-4,5-ジヒドロ-イミダゾール-1-イルである。
【０２４６】
R7はR8と一緒になって2-(置換されたフェニル)-4,5-ジヒドロ-イミダゾール-1-イル、または2-(置換されたフェニル)-4,4-ジメチル-4,5-ジヒドロ-イミダゾール-1-イルである。
【０２４７】
R7はR8と一緒になって2-(4-メチルフェニル)-4,5-ジヒドロ-イミダゾール-1-イル、2-(3-フルオロ-4-メチルフェニル)-4,5-ジヒドロ-イミダゾール-1-イル、2-(4-メチルフェニル)-4,4-ジメチル-4,5-ジヒドロ-イミダゾール-1-イル、または2-(3-フルオロ-4-メチルフェニル)-4,4-ジメチル-4,5-ジヒドロ-イミダゾール-1-イルである。
【０２４８】
R7はR8と一緒になって2-および/または4-置換-イミダゾール-1-イルである。
【０２４９】
R7はR8と一緒になって2-置換-イミダゾール-1-イルである。
【０２５０】
R7はR8と一緒になって2-(任意に置換されたフェニル)-イミダゾール-1-イルである。
【０２５１】
R7はR8と一緒になって2-フェニル-イミダゾール-1-イル、2-p-トリル-イミダゾール-1-イル、2-(4-フルオロ-フェニル)-イミダゾール-1-イル、2-(4-クロロ-フェニル)-イミダゾール-1-イル、または2-(3-フルオロ-4-メチル-フェニル)-イミダゾール-1-イルである。
【０２５２】
R7はR8と一緒になって2,4-2つの置換-イミダゾール-1-イルである。
【０２５３】
R7はR8と一緒になって4-(任意に置換されたアルキル)-2-(任意に置換されたアリール)-イミダゾール-1-イルである。
【０２５４】
R7はR8と一緒になって4-(Ω-アミノ-低級アルキル)-2-(任意に置換されたフェニル)-イミダゾール-1-イルである。
【０２５５】
R7はR8と一緒になって4-(2-アミノ-エチル)-2-フェニル-イミダゾール-1-イル、4-(2-アミノ-エチル)-2-p-トリル-イミダゾール-1-イル、4-(2-アミノ-エチル)-2-(4-フルオロ-フェニル)-イミダゾール-1-イル、4-(2-アミノ-エチル)-2-(4-クロロ-フェニル)-イミダゾール-1-イル、4-(2-アミノ-エチル)-2-(3-フルオロ-4-メチル-フェニル)-イミダゾール-1-イル、4-(アミノメチル)-2-フェニル-イミダゾール-1-イル、4-(アミノメチル)-2-p-トリル-イミダゾール-1-イル、4-(アミノメチル)-2-(4-フルオロ-フェニル)-イミダゾール-1-イル、4-(アミノメチル)-2-(4-クロロ-フェニル)-イミダゾール-1-イル、または4-(アミノメチル)-2-(3-フルオロ-4-メチル-フェニル)-イミダゾール-1-イルである。
【０２５６】
上述のとおり、例えば、R5がアラルキルであってW、X、Y、もしくはZが-N=であるか、またはWおよびZが-N=である様な化合物の群に関して言えば、上述の置換基の群およびサブグループは独立に、および/または組み合わされて化合物、それらの薬学的に許容される塩および溶媒和物を表現し、それらは本発明の実施に特に適したものである。
【０２５７】
式Iの化合物、それらの薬学的に許容される塩および溶媒和物、組成物、それには医薬品製剤が含まれるが、それらおよび本発明の製造方法および使用方法の1群では、式Iの該化合物は次のものから選択されたものである：
・ N-(3-アミノ-プロピル)-N-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリド[2, 3-d]ピリミジン-2-イル-2-メチル-プロピル]-4-メチル-ベンズアミド、
・ N-(3-アミノ-プロピル)-N-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリド[4, 3-d]ピリミジン-2-イル)-2-メチル-プロピル]-4-メチル-ベンズアミド、
・N- (3-アミノ-プロピル)-N-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリド[3,4-d] ピリミジン-2-イル)-2-メチル-プロピル]-4-メチル-ベンズアミド、
・N- (3-アミノ-プロピル)-N-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリド[3,2-d] ピリミジン-2-イル)-2-メチル-プロピル]-4-メチル-ベンズアミド、
・ N-(3-アミノ-プロピル)-N-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-プテリジン-2-イル)-2-メチル-プロピル]-4-メチル-ベンズアミド、
・N-(3-アミノ-プロピル)-N- [1-(6-ベンジル-5-オキソ-5,6-ジヒドロ-ピリミド [4,5-c]ピリダジン-7-イル)-2-メチル-プロピル]-4-メチル-ベンズアミド、
・N-(3-アミノ-プロピル)-N-[1-(7-ベンジル-8-オキソ-7,8-ジヒドロ-ピリミド [5,4-c]ピリダジン-6-イル)-2-メチル-プロピル]-4-メチル-ベンズアミド、
・N- (3-アミノ-プロピル)-N-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリミド[4, 5-d]ピリダジン-2-イル)-2-メチル-プロピル]-4-メチル-ベンズアミド、
・N-(3-アミノ-プロピル)-N-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリミド[4, 5-d] ピリミジン-2-イル)-2-メチル-プロピル]-4-メチル-ベンズアミド、
・N-(3-アミノ-プロピル)-N-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリミド[5, 4-d] ピリミジン-2-イル)-2-メチル-プロピル]-4-メチル-ベンズアミド、
・N-(3-アミノ-プロピル)-N- [1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリド[2, 3-d] ピリミジン-2-イル-2-メチル-プロピル]-2-メトキシ-アセトアミド、
・N-(3-アミノ-プロピル)-N-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリド[4, 3-d]ピリミジン-2-イル)-2-メチル-プロピル]-2-メトキシ-アセトアミド、
・N-(3-アミノ-プロピル)-N-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリド[3, 4-d]ピリミジン-2-イル)-2-メチル-プロピル]-2-メトキシ-アセトアミド、
・N-(3-アミノ-プロピル)-N-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリド[3, 2-d]ピリミジン-2-イル)-2-メチル-プロピル]-2-メトキシ-アセトアミド、
・N-(3-アミノ-プロピル)-N-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-プテリジン-2-イル)-2-メチル-プロピル]-2-メトキシ-アセトアミド、
・N-(3-アミノ-プロピル)-N-[1-(6-ベンジル-5-オキソ-5,6-ジヒドロ-ピリミド[4,5-c]ピリダジン-7-イル)-2-メチル-プロピル]-2-メトキシ-アセトアミド、
・N-(3-アミノ-プロピル)-N- [1-(7-ベンジル-8-オキソ-7,8-ジヒドロ-ピリミド[5, 4-c]ピリダジン-6-イル)-2-メチル-プロピル]-2-メトキシ-アセトアミド、
・N-(3-アミノ-プロピル)-N-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリミド[4, 5-d]ピリダジン-2-イル)-2-メチル-プロピル]-2-メトキシ-アセトアミド、
・N-(3-アミノ-プロピル)-N-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリミド[4, 5-d]ピリミジン-2-イル)-2-メチル-プロピル]-2-メトキシ-アセトアミド、
・N-(3-アミノ-プロピル)-N- [1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリミド[5, 4-d]ピリミジン-2-イル)-2-メチル-プロピル]-2-メトキシ-アセトアミド、
・(±)-3-ベンジル-7-クロロ-2-{1-[2-(3-フルオロ-4-メチル-フェニル)-4,4-ジメチル-4,5-ジヒドロ-イミダゾール-1-イル]-2-メチル-プロピル}-3H-プテリジン-4-オン、
・(±)-3-ベンジル-2-{1-[2-(4-ブロモ-フェニル)-4,4-ジエチル-4,5-ジヒドロ-イミダゾール-1-イル]-2-メチル-プロピル}-3H-ピリド[3, 2-d]ピリミジン-4-オン、および
・(±)-2-{1-[4-(2-アミノ-エチル)-2-p-トリル-イミダゾール-1-イル]-2-エチルブチル}-3-ベンジル-7-クロロ-3H-ピリミド[4,5-d]ピリミジン-4-オン。
【０２５８】
式Iの化合物、それらの薬学的に許容される塩および溶媒和物、組成物、それには医薬品製剤が含まれるが、それらおよび本発明の製造方法および使用方法の1群では、式Iの該化合物は次のものから選択されたものである：
・N-(3-アミノ-プロピル)-N-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリド[2,3-d]ピリミジン-2-イル-2-メチル-プロピル]-4-メチル-ベンズアミド、
・N-(3-アミノ-プロピル)-N-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリド[3,4-d]ピリミジン-2-イル)-2-メチル-プロピル]-4-メチル-ベンズアミド、
・N-(3-アミノ-プロピル)-N-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリド[4,3-d]ピリミジン-2-イル)- 2-メチル-プロピル]-4-メチル-ベンズアミド、
・N-(3-アミノ-プロピル)-N-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリド[3,2-d]ピリミジン-2-イル)-2-メチル-プロピル]-4-メチル-ベンズアミド、
・ N-(3-アミノ-プロピル)-N-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-プテリジン-2-イル)-2-メチル-プロピル]-4-メチル-ベンズアミド、
・N-(3-アミノ-プロピル)-N-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリド[2,3-d]ピリミジン-2-イル-2-メチル-プロピル]-2-メトキシ-アセトアミド、
・N-(3-アミノ-プロピル)-N-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリド[3,4-d]ピリミジン-2-イル)-2-メチル-プロピル]-2-メトキシ-アセトアミド、
・N-(3-アミノ-プロピル)-N-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリド[4,3-d]ピリミジン-2-イル)-2-メチル-プロピル]-4-メトキシ-ベンズアミド、
・N-(3-アミノ-プロピル)-N-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリド[3,2-d]ピリミジン-2-イル)-2-メチル-プロピル]-2-メトキシ-アセトアミド、および
・N-(3-アミノ-プロピル)-N-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-プテリジン-2-イル)-2-メチル-プロピル]-2-メトキシ-アセトアミド、
特にそれらの(R)-エナンチオマー。
【０２５９】
式Iの化合物、それらの薬学的に許容される塩および溶媒和物、組成物、それには医薬品製剤が含まれるが、それらおよび本発明の製造方法および使用方法の別の1群では、式Iの該化合物は次のものから選択されたものである：
・N-(3-アミノ-プロピル)-N-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリド[4,3-d]ピリミジン-2-イル)-2-メチル-プロピル]-4-メチル-ベンズアミド、
・N-(3-アミノ-プロピル)-N-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリド[2,3-d]ピリミジン-2-イル-2-メチル-プロピル]-4-メチル-ベンズアミド、および
・N-(3-アミノ-プロピル)-N-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリド[3,4-d]ピリミジン-2-イル)-2-メチル-プロピル]-4-メチル-ベンズアミド、
特にそれらの(R)-エナンチオマー。
【０２６０】
有用性、試験、および適用法
本発明の化合物は種種の適用法で用いることができ、そのようなものとしては、治療方法の実践に際して、組成物中、特に医薬製剤中で、および医薬製剤の製造のための方法において、治療上有効な薬剤として、ならびにそのような治療用活性薬剤の合成の中間体としての使用が含まれる。
【０２６１】
当業者であれば理解できるとおり、有糸分裂は種々の方法で変化を与えることができる；すなわち、有糸分裂の経路のコンポーネントの活性を増大、低減、または妨害することによって有糸分裂に影響を及ぼすことができる。別の言い方をすれば、有糸分裂は特定の有糸分裂経路のコンポーネントを阻害または活性化することによって平衡状態を乱し、それによって有糸分裂に影響を及ぼす(例えば停止させる)ことができる。減数分裂に変化を与えるために類似の方法を用いることができる。
【０２６２】
本発明の化合物は紡錘糸の形成を阻害するために用いることができる。そのような阻害は、キネシンの微小管の2極構造への組織化を低下させること、紡錘糸の極への分離の増加または減少、および/または紡錘糸の機能不全の誘導の形態をとることができる。特に、本発明の化合物はキネシン、KSP、ヒト以外の生物体のKSPキネシンも用いることはできるが、特にヒトKSPへの結合、および/または活性の阻害に有用である。これらの目的での「KSP」の用語の定義に含まれてはいるが、KSPの変異体および/または断片も含まれている。米国特許第6,437,115号を参照せよ。これ以外のキネシンを本発明で用いることもできるが、本発明の化合物はKSPに特異性を有することが示されている。本発明の化合物をKSPキネシン、特にヒトKSPキネシンと接触させるとKSPが媒介するATP加水分解が低減され、およまたKSPが媒介する紡錘糸形成活性を低減させる。減数分裂の紡錘糸も同様に妨害される。
【０２６３】
別の1実施形態においては、本発明の化合物はKSPの阻害に加えて1種以上の他のキネシンを調節するために用いることができ、そのようなキネシンとしては：HSET (米国特許第6,361,993号参照); MCAK(米国特許第6,331,424号参照); CENP-E(PCT Publication No. WO 99/13061参照); Kif4(米国特許第6,440,684号参照); MKLP1(米国特許第6,448,025号参照); Kif15(米国特許第6,355,466号参照); Kid (米国特許第6,387,644号参照); MPP1, CMKrp, Kinl-3(米国特許第6,461,855号参照); Kip3a(PCT Publication No. WO 01/96593参照); Kip3d(米国特許第6,492,151号参照); およびRabK6が含まれる。
【０２６４】
本発明の化合物のキネシン阻害活性によってもたらされる治療的な使用としては、細胞増殖を伴う疾患の治療が含まれる。本明細書で提供する方法、医薬品製剤、および化合物で治療しうる疾病状態としては、限定はされないが、癌(下記に詳述する)、自己免疫疾患、関節炎、移植片拒絶反応、炎症性腸疾患、医学的処置、そのような処置としては、限定はされないが、手術、血管形成術、および類似のものが含まれるが、それらの処置後に誘発される増殖が含まれる。1実施形態においては、本発明には、これらの疾患または状態のいずれか1つに冒されている、またはそれに冒される状態が切迫している細胞または個体への適用が含まれる。
【０２６５】
本明細書で提供する化合物、医薬品製剤、および方法は、皮膚癌、乳癌、脳腫瘍、子宮頚部癌、精巣癌、その他などの固形癌を含む癌の治療に有用なものと考えられる。より具体的には、治療しうる癌としては、限定はされないが、下記のものが含まれる：
・心臓：肉腫(血管肉腫、線維肉腫、横紋筋肉腫、脂肪肉腫)、粘液腫、横紋筋腫、線維腫、脂肪腫、および奇形種；
・肺：気管支癌(扁平上皮、未分化小細胞、未分化大細胞、腺癌)、肺胞(細気管支)癌、気管支腺腫、肉腫、リンパ腫、軟骨過誤腫、中皮腫；
・胃腸：食道(扁平上皮癌、腺癌、平滑筋肉腫、リンパ腫)、胃(癌、リンパ腫、平滑筋肉腫)、膵臓(膵管腺癌、インスリン腫、グルカゴン産生腫瘍、ガストリン産生腫瘍、カルチノイド腫瘍、ビポーマ)、小腸(腺癌、リンパ腫、カルチノイド腫瘍、カポジ肉腫、平滑筋腫、血管腫、脂肪腫、神経線維腫、線維腫)、大腸(腺癌、管腺腫、絨毛性腺腫、過誤腫、平滑筋腫) ;
泌尿生殖器: 腎臓(腺癌、ウィルムス腫瘍[腎芽細胞腫]、リンパ腫、白血病)、膀胱と尿道(扁平上皮癌、移行上皮癌、腺癌)、前立腺(腺癌、肉腫)、精巣(精上皮腫、奇形種、胎芽性癌、奇形癌、絨毛癌、肉腫、間質性細胞癌、線維腫、線維腺腫、腺様腫瘍、脂肪腫) ;
肝臓: 肝臓癌(肝細胞癌)、胆管癌、肝芽細胞腫、血管肉腫、肝細胞腺腫、血管種:  
骨： 骨肉腫、線維肉腫、悪性線維性組織球腫、軟骨肉腫、ユーイング肉腫、悪性リンパ腫(細網肉腫)、多発性骨髄腫、悪性巨細胞脊索腫、骨軟骨腫、良性軟骨腫、軟骨芽腫、 chondromyxofibroma、類骨骨腫、および巨細胞腫瘍;
神経系 : 頭蓋(骨腫、血管種、肉芽腫、黄色腫、変形性骨炎)、髄膜(髄膜腫、髄膜肉腫、神経膠腫症)、脳(星状膠細胞腫、髄芽細胞腫、神経膠腫、上衣細胞腫、胚細胞腫[松果体腫]、多型性神経膠芽細胞腫、乏突起膠腫、神経鞘腫、網膜芽細胞腫、先天性腫瘍)、脊髄神経線維腫、髄膜腫、神経膠腫、肉腫);
婦人科領域: 子宮(子宮内膜癌)、子宮頚部(子宮頚部癌、前癌性子宮頚部異形成)、卵巣(卵巣癌[漿液性嚢胞腺癌、粘液性嚢胞腺癌、未分類の癌]、granulosa-thecal cell tumors、Sertoli-Leydig細胞腫瘍、未分化胚細胞腫、悪性奇形種)、外陰部(扁平上皮癌、上皮内癌、腺癌、線維肉腫、悪性黒色腫)、膣(明細胞癌、扁平上皮癌、ブドウ状肉腫(胎芽性横紋筋肉腫)、卵管(癌);
血液学領域 : 血液(骨髄性白血病[急性および慢性]、急性リンパ芽球性白血病、慢性リンパ性白血病、骨髄増殖性疾患、多発性骨髄腫、骨髄形成不全症候群)、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫(悪性リンパ腫)；
皮膚: 悪性黒色腫、基底細胞癌、扁平上皮癌、カポジ肉腫、異形成母斑、脂肪腫、血管種、皮膚線維腫、ケロイド、乾癬；および
副腎： 神経芽細胞腫。
【０２６６】
本明細書で用いている癌の治療とは、癌性の細胞の処理が含まれ、そのような細胞としては上記に示した状態のいずれかによって冒された細胞が含まれる。
【０２６７】
本発明の別の有用な1態様は、式Iの化合物、塩、または溶媒和物、ならびに該化合物、塩、または溶媒和物のKSPキネシン阻害量を投与することによる細胞増殖性疾患の治療の手引きを含んでいる添付文書またはその他の表示物を有するキットである。本発明のキット中の式Iの化合物、塩、または溶媒和物は、細胞増殖性疾患の治療のコースの1回以上の投与に用いるものとして提供され、各投与形態は医薬製剤からなっており、それには薬学的に許容される添加剤、および疾患関連KSPを阻害するのに十分な治療上有効な量の式Iの化合物、塩、または溶媒和物を含んでいる。
【０２６８】
試験
活性をアッセイするためには、通常はKSPまたは本発明の化合物を、拡散しないように、個別のサンプル受け入れ領域を有する不溶性の支持体と結合させる。不溶性の支持体は該化合物が結合することができ、可溶性物質から容易に分離でき、その他の点でスクリーニング方法全体にわたってその方法と両立しうるものであれば、同様な物質であっても良い。そのような支持体の表面は、固いものまたは有孔のものとすることができ、都合の良い形状であれば、どのようなものでも良い。適切な不溶性支持体の例としては、マイクロタイタープレート、アレイ、膜、およびビーズが含まれる。それらは典型的には、ガラス、プラスチック(例えば、ポリエチレン)、ポリ多糖、ナイロンもしくはニトロセルロース、テフロン(登録商標)、その他のものでできている。マイクロタイタープレートとアレイが特に好都合であるが、それは、これらが少量の試薬とサンプルを用いて多数のアッセイを同時に行うことができるからである。該化合物の支持体との結合は、それが、用いる試薬および本発明の方法全体と両立しうるものであり、該化合物の活性を維持し、拡散性のないものであるならば、特別な様式とすることは重要ではない。結合の特別な方法としては、抗体の使用(抗体が支持体と結合した際に、リガンド結合部位または活性配列を立体的にブロックしないものであること、「粘着性」または陰イオン性の支持体、化学的架橋、支持体表面上でのタンパク質または作用物の合成、その他が含まれる。該タンパク質または作用物を結合させた後、結合していない過剰の物質を洗って除去する。次いでウシ血清アルブミン(BSA)、カゼイン、またはその他の無害なタンパク質、またはその他のものとインキュベートしてサンプル受け入れ領域をブロックする。
【０２６９】
本発明の化合物それ自体をキネシン、特にKSPの活性を調節するために用いることができる。この実施形態では、本発明の化合物をKSPと組み合わせ、そのKSPの活性を測定する。測定可能なキネシンの活性とは、ATP加水分解に影響を与える能力；微小管との結合；すべり込み(gliding)および重合体化/重合体からの解離(微小管のダイナミックスに対する影響)；紡錘糸の他のタンパク質との結合；細胞サイクル制御に関与するタンパク質との結合；他の酵素、例えば、キナーゼまたはプロテアーゼなどの基質となる；ならびに特異的なキネシンの細胞性の活性、例えば紡錘糸極分離が含まれる。
【０２７０】
運動性のアッセイを行う方法は当業者にはよく知られている。[例えば、Hallら, (1996), Biophys. J.  71: 3467-3476、Turnerら,1996, Anal. Biochem. 242 (1): 20-5; Gittesら,1996, Biophys J. 70(1):418-29；Shirakawaら, 1995, J.Exp.BioL 198: 1809-15; Winkelmannら, 1995, Biophys. J. 68:2444-53; Winkelmannら, 1995, Biophys.J. 68:72Sを参照せよ。]
ATPase加水分解活性を測定するための方法として当業界で知られている方法も用いることができる。溶液をベースとしたアッセイが特に適している(米国特許第6,410,254号を参照せよ)；あるいはまた、従来法を用いることもできる。例えばキネシンからのPiの放出を定量することができる。1実施形態においては、ATPaseの加水分解活性のアッセイには0.3M PCA(過塩素酸)およびマラカイトグリーン試薬(8.27 mM モリブデン酸ナトリウムII、0.33 mM シュウ酸マラカイトグリーン、および0.8 mM Triton X-100)を用いる。このアッセイを行うために、10μLの反応液を90μLの冷0.3 M PCAで停止させる。リン酸標準品を用いるとデータを放出された無機リン酸のmMに変換することができる。全ての反応と標準品をPCA中で停止させ、100μLのマラカイトグリーン試薬を、例えばマイクロタイタープレート中の測定しようとするウエルに添加する。この混合液を10〜15分間発色させ、そのプレートを650nmの吸光度で読み取る。リン酸標準品を用いる場合には、吸光度の読みはmM Piに変換し、時間に対してプロットすることができる。さらに、当業界で既知のATPaseアッセイにはルシフェラーゼアッセイが含まれる。
【０２７１】
キネシンの運動性ドメインのATPase活性はキネシンの調節剤の効果をモニターするために用いることもできる。1実施形態においては、キネシンのATPaseアッセイは微小管の存在しない条件で行われる。別の1実施形態においては、ATPaseアッセイは微小管の存在下で行われる。上記のアッセイ法で種々のタイプの調節剤を検出することができる。特別な1実施形態においては、調節剤の効果は微小管およびATPの濃度に依存しない。別の1実施形態においては、キネシンのATPaseに及ぼす調節剤の影響は、ATP、微小管、またはその双方の濃度の増大に伴って減少する。また別の1実施形態においては、調節剤の影響はATP、微小管、またはその双方の濃度の増大に伴って増大する。
【０２７２】
KSPのin vitroでの生化学的活性を調節する調節剤をin vivoでスクリーニングすることができる。そのような調節剤をin vivoで試験する方法には、細胞サイクルの分布、細胞の生存性、または紡錘糸の存在、形態、活性、分布、または量のアッセイが含まれる。ある細胞集団での細胞サイクルの分布をモニターするための方法、例えば、フローサイトメトリー法は、当業者にはよく知られており、細胞の生存性を調べる方法も良く知られている。例えば、WO 01/31335、「細胞増殖の調節剤のスクリーニング方法および細胞増殖の状態を診断する方法」“Methods of Screening for Modulators of Cell Proliferation and Methods of Diagnosing Cell Proliferation States”を参照せよ。
【０２７３】
上述のアッセイに加えて紡錘糸形成および形成不全をモニターするための顕微鏡観察法も当業者にはよく知られている(例えば、WhiteheadとRattner(1998), J. Cell Sci. 111;2551-61; Gaigioら, (1996) J. Cell Biol. 135:399-414を参照せよ)。
【０２７４】
本発明の化合物はKSPキネシンを阻害する。阻害の1つの尺度はIC50であり、これはKSPの活性が50％低減するような化合物の濃度と定義される。特に適した化合物はそのIC50値が約1mM未満であり、さらに適した化合物ではそのIC50は約100nM未満である。約10 nM未満のIC50を示すものも本発明の化合物、ならびに薬学的に許容される塩および溶媒和物の中にはあり、IC50値がより小さいことが有利であると考えられている。IC50の測定はATPaseアッセイを用いて行われる。
【０２７５】
阻害の程度の別の尺度はKiである。IC50値が1μM未満の化合物では、KiまたはKdは供試化合物とKSPとの相互作用の解離速度定数として定義される。特に適した化合物はそのKi値が約100μM未満であり、さらに適した化合物ではそのKiは約10μM未満である。約10 nM未満のKiを示すものも本発明の化合物、ならびに薬学的に許容される塩および溶媒和物の中にはあり、Ki値がより小さいことが有利であると考えられている。ある化合物のKiはIC50値から3つの仮定に基づいて決定される。第1は、該酵素に結合する化合物の分子は1個のみであり、協同性はないことである。第2は、活性のある酵素と供試化合物の濃度が既知であることである(すなわち、標品中に不純物または不活性型のものが有意な量含まれていないことである)。第3は、その酵素-インヒビター複合体の触媒速度は0であることである。その速度(すなわち、化合物の濃度)データは次の式に適合する：
【数１】
2005536475.tif 000018
【０２７６】
式中、Vは観察された速度、Vmaxは酵素が遊離状態の場合の速度、I0はインヒビターの濃度、E0は酵素の濃度、Kdは酵素-インヒビター複合体の解離定数である。
【０２７７】
阻害の程度の別の尺度はGi50であり、それは細胞増殖速度の50％減少をもたらす化合物の濃度と定義される。癌の治療に臨床応用して成功を収めている抗増殖性化合物(癌化学療法剤)のGi50値は大きくばらついている。例えば、A549細胞では、パクリタキセルのGi50は4 nMであり、ドキソルビシンは63 nM、5-フルオロウラシルは1 μM、ヒドロキシ尿素は500 μMである(National Cancer Institute, Developmental Therapeutic Program, http://dtp.nci.nih.gov/から提供されたデータ)。従って、細胞増殖を事実上いかなる濃度で阻害する化合物でもおそらく有用である。特に適した化合物はそのGi50値が約1 mM未満であり、さらに適した化合物ではそのGi50は約10μM未満である。約10 nM未満のGi50を示すものも本発明の化合物、ならびに薬学的に許容される塩および溶媒和物の中にはあり、Ki値がより小さいことが有利であると考えられている。Gi50の測定は細胞増殖アッセイを用いて行われる。
【０２７８】
小分子のインヒビターのin vitroでの効力は、ヒト卵巣癌細胞(SKOV3)を用いて、それを化合物の９段階の希釈シリーズに72時間暴露させた後、その細胞の生存性をアッセイすることによって測定する。細胞の生存性は、MTS/PMS(市販の試薬)の生物還元によって形成された生成物であるホルマゾンの吸光度を測定することによって求められる。投与量-応答曲線の各ポイントを非処理の対照細胞の72時間後で値からバックグラウンドの吸光度を差し引いたものに対するパーセントとして計算する。
【０２７９】
KSPキネシンと結合する化合物をスクリーニングする方法で本発明の化合物を用いるために、KSPを支持体に結合させ、本発明の化合物または組成物をそのアッセイ系に添加する。あるいはまた、固体の支持体に結合させた本発明の化合物を含む組成物を作成し、KSPをそのアッセイ系に添加することができる。新規の結合物をその中から探索しようとする化合物のクラスとしては、特異的抗体、化学ライブラリーを好くリンニングして同定される非天然の結合剤、ペプチド類似体、その他が含まれる。特に興味深いのは、ヒトの細胞に対しての毒性の低い候補薬剤をスクリーニングするアッセイ法である。この目的には多様なアッセイ法を用いることができ、そのようなものとしては、標識in vitroタンパク質-タンパク質結合アッセイ法、電気泳動移動度シフトアッセイ法、タンパク質結合を調べるイムノアッセイ法、機能アッセイ法(リン酸化アッセイ、その他)および類似のものが含まれる。
【０２８０】
有糸分裂に作用する作用物のKSPへの結合の測定は多数の方法で行いうる。特定の1実施形態においては、本発明の化合物を標識、例えば蛍光または放射性物質で標識し、結合を直接的に測定する。例えば、このことはKSPの全てまたは一部を固体の支持体に付着させ、標識化合物を添加し(例えば、少なくとも1つの原子が検出可能な同位体で置換されているような本発明の化合物)、過剰の試薬を洗って除去し、標識の量が固体支持体上に存在している量か否かを測定することによって行われる。当業界で知られているとおり、種々のブロッキングおよび洗浄ステップを用いることができる。
【０２８１】
本明細書で「標識された」とは、該化合物が直接的または間接的のいずれかで、検出可能なシグナルを提供する標識、例えば、放射性同位元素、蛍光タグ、酵素、抗体、磁性粒子などの粒子、化学発光タグ、または特異的結合分子、その他などで標識されることを意味する。特異的結合分子としては、ビオチンとストレプトアビジン、ジゴキシンと抗ジゴキシン、その他などのペアが含まれる。上記で概説したとおり、既知の特異的結合メンバーに対して、補助的メンバーは通常は上述のとおり既知の方法に従っておこなわれる検出に用いられる分子で標識される。そのような標識は直接的または間接的に検出可能なシグナルを提供する。
【０２８２】
いくつかの実施形態においては、コンポーネントのうちの1つのみが標識される。例えば、該キネシンタンパク質をチロシンの位置で125Iを用いて、またはフルオロフォアを用いて標識することができる。あるいはまた、2つ以上のコンポーネントを異なる標識で標識することができる；例えばタンパク質には125Iを用い、抗有糸分裂剤にはフルオロフォアを用いる。
【０２８３】
本発明の化合物はまた、別の薬剤候補品のスクリーニングのために競合物として用いることもできる。本明細書中で用いている「候補薬剤」または「薬剤候補品」またはそれらと文法的に等価であるものは、例えば、タンパク質、オリゴペプチド、小さな有機分子、ポリ多糖、ポリヌクレオチド、その他などの、生物活性を試験されることとなる何らかの分子を意味する。それらの分子は直接的または間接的に細胞増殖の表現型、または細胞増殖配列の発現に変化を与えることのできるものであり、そのようなものとしては核酸配列およびタンパク質配列の双方が含まれる。別の場合には、細胞増殖性タンパク質の結合および/または活性の変化がスクリーニングされる。この種のスクリーニングは微小管の存在している状態または存在しない状態のいずれかで行うことができる。タンパク質の結合または活性をスクリーニングする場合には、特定の実施形態では、そのタンパク質に結合することが既知の分子、例えば、微小管などのポリマー構造、およびATPなどのエネルギー源は除外している。アッセイ法の特別な実施形態では、内在性の天然の状態の細胞増殖性タンパク質とは結合しない候補薬剤は“外因性”の薬剤と呼ぶ。別の特別な1実施形態では、外因性の薬剤としてはさらにKSPに対する抗体を除外する。
【０２８４】
候補薬剤としては、典型的には有機分子、特に分子量が100を超え約2,500ダルトン未満であるような小さな有機分子であるが、非常に多数の化学的クラスのものをも包含したものとすることができる。候補薬剤は、タンパク質との構造的な相互作用、特に水素結合および親油性結合に必要な官能基を含んでなり、典型的には少なくとも1個のアミン、カルボニル、ヒドロキシル、エーテル、またはカルボキシル基、特に少なくとも2個の官能基を含んでいる。候補薬剤は多くの場合、1個以上の上述の官能基で置換された、環状炭素化合物もしくはヘテロ環構造および/または芳香環もしくはポリ芳香環構造を含んでなるものである。候補薬剤はまた、ペプチド、糖類、脂肪酸、ステロイド、プリン、ピリミジン、それらの誘導体、構造的な類似体、またはそれらの組み合わせを含む生体分子中にも見出される。
【０２８５】
候補薬剤は、合成または天然の化合物のライブラリーを含む多様なソースから得られる。例えば、多様な有機化合物および生体分子のランダムな、および方向を定めた合成のために用いることのできる方法は多数あり、そのような方法には無作為に選択したオリゴヌクレオチドの発現が含まれる。あるいはまた、細菌、真菌、植物、および動物からの抽出物の形態の天然化合物のライブラリーが利用できるかまたは容易に作成することができる。さらに、天然のまたは合成で作成したライブラリーと化合物は従来の化学的、物理的、および生化学的方法を用いて容易に修飾することができる。既知の医薬品用の薬剤を、それの構造的類似体を作成するために、アシル化、アルキル化、エステル化、アミド化などの、方向を定めた、またはランダムな化学的修飾を行うことができる。
【０２８６】
競合的スクリーニングアッセイは、第1のサンプル中でKSPと候補薬剤を混合して行うことができる。第2のサンプルは本発明の化合物、KSP、および候補薬剤を混合して作成することができる。この試験は微小管の存在する条件または不在の条件のいずれかで行うことができる。2つのサンプルでの候補薬剤の結合を測定し、2つのサンプル間で結合の変化または相違があれば、それはKSPと結合することのでき、その活性を調節させる能力のある作用物の存在を示している。すなわち、第2のサンプルで候補薬剤の結合が第1のサンプルとは異なっている場合には、その候補薬剤はKSPと結合する能力を有している。
【０２８７】
特に適切な1実施形態においては、候補薬剤の結合は競合的結合アッセイによって測定される。この実施形態においては、競合物はKSPと結合することが既知である結合物であり、それは例えば抗体、ペプチド、結合パートナー、リガンド、その他のものである。一定の状況下では、候補薬剤とその結合物との間の競合的結合と同様に、その結合物が候補薬剤に取って代わる競合的結合がありうる。
【０２８８】
1実施形態においては、該候補薬剤は標識される。該候補薬剤、または競合物のいずれか、またはその双方が、まずKSPに、結合に十分なだけの時間、添加される。インキュベーションは最適な活性が得られる温度であればどのような温度でも良いが、典型的には4℃から40℃の間である。インキュベーション時間は最適な活性が得られるように選択されるが、迅速で高スループットなスクリーニングが行われるように最適化することもできる。過剰な試薬は通常は除去されるか洗い流される。次いで第2のコンポーネントが添加され、標識化合物の存在または不在を調べ、結合の有無を調べる。
【０２８９】
特に適切な1実施形態においては、該競合物はまず最初に添加され、その後に候補薬剤が添加される。その競合物が取って代わられていることはその候補薬剤がKSPと結合していることを示し、従ってその候補薬剤がKSPと結合してKSPの活性を調節することのできる可能性を示している。従って、例えば、その競合物が標識されている場合には、洗浄液中に標識が存在すればそのことは候補薬剤が取って代わったことを示している。あるいはまた、候補薬剤が標識されている場合には、支持体上の標識の存在はその候補薬剤が取って代わったことを示している。
【０２９０】
別の1実施形態においては、該候補薬剤がまず添加され、インキュベーションと洗浄を行った後に、競合物が添加される。その競合物による結合がない場合には、おそらくその候補薬剤がKSPと高いアフィニティーで結合していることを示すものであろう。従って、候補薬剤が標識されている場合には、支持体上に標識が存在することと競合体の結合が見られないことが同時に起こればそのことはおそらく、候補薬剤がKSPと結合することができることを示すものであろう。
【０２９１】
KSPの結合部位を同定することは価値があろう。そのことは種々の方法で行うことができる。1実施形態においては、KSPが該化合物を結合することが見出されれば、KSPを断片化または修飾し、結合に必要なコンポーネントを同定するために上述のアッセイを再度行う。
【０２９２】
上述のとおりの、候補薬剤をKSPと結合させるステップ、およびKSPの生物活性の変化を測定するステップを含んでなる、KSPの活性を調節する能力のある候補薬剤のスクリーニングによってKSPの調節を試験する。従って、この実施形態においては、該候補薬剤はKSPと結合すること(このことは必要でないかもしれないが)、およびここで定義したKSPの生物学的または生化学的活性に変化を与えることの双方を行えるはずである。そのような方法にはin vitroスクリーニング法とin vivoスクリーニング法の双方が含まれ、そのin vivoスクリーニング法は、細胞サイクルの分布、細胞の生存性、または紡錘糸の存在、形態、活性、分布、もしくは量の変化について細胞をスクリーニングするもので、上記に一般的に概説したとおりである。
【０２９３】
あるいはまた、天然のKSPには結合するが修飾されたKSPには結合できない候補薬剤を同定するために示差的(ディファレンシャル)スクリーニングを用いることができる。
【０２９４】
これらのアッセイには陽性対照および陰性対照を用いることができる。対照および供試サンプルでの試験は少なくとも3回重複して行って統計学的に有意な結果を得ることが好ましい。全てのサンプルのインキュベーションはその薬剤の該タンパク質への結合に十分な時間行う。インキュベーション後に、全てのサンプルで非特異的に結合している物質を洗って除去し、結合している薬剤、それは通常は標識されているが、その薬剤の量を測定する。例えば、放射性標識を用いる場合には、サンプルをシンチレーションカウンターで計数して結合している化合物の量を測定することができる。
【０２９５】
それらのスクリーニングアッセイ法には、他の種々の試薬を含めることができる。そのような試薬としては、タンパク質-タンパク質の結合を最適化する、および/または非特異的もしくはバックグラウンドの相互作用を低減するために用いることのできる、塩類、アルブミンなどの中性タンパク質、界面活性剤、その他が含まれる。別のやり方でアッセイの効率を改善する試薬、例えばプロテアーゼインヒビター、ヌクレアーゼインヒビター、抗微生物剤、その他も用いることができる。コンポーネントの混合物は必要とされる結合を提供するものであればいかなる順番でも添加することができる。
【０２９６】
剤型と投与
式Iの化合物、薬学的に許容される塩および溶媒和物は、治療上有効な投与量、例えば、前述の疾病状態に対する治療を提供するために十分な投与量で、投与される。ヒトの投与量レベルは、典型的には、現行のFDAのGood Clinical Practice(臨床試験実施に関する基準)および各国のガイドラインに従って、投与量を漸増させて投与量範囲を定める研究を行って決定される。投与される活性化合物の量は、当然のことながら、治療しようとする被験者および疾病の状態、病状の重篤度、投与スケジュールの様式、ならびに担当医の判断の如何によって変わる。
【０２９７】
本発明の化合物および医薬品製剤の投与は種々の方法によって行うことができ、そのような方法としては、限定はされないが、経口、皮下、静脈内、鼻腔内、経皮、腹腔内、筋肉内、肺内、膣内、直腸内、または眼球内投与が含まれる。場合によっては例えば、創傷および炎症の治療では、該化合物または組成物は溶液またはスプレーとして直接的に適用される。
【０２９８】
医薬品製剤には、式Iの化合物またはそれらの薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物、ならびに1種以上の薬学的に許容される添加物が含まれている。当業界では知られているとおり、医薬品添加物は様々な投与形態(例えば、錠剤、カプセル剤、および液剤などの経口投与形態；皮膚、眼、耳などの局所適用形態；坐剤；注射剤；呼吸器官に適用する形態、および類似のものなど)において薬物の送達を可能とする、または増強する機能を有する二次的成分である。医薬品添加物としては、活性成分の医学的効果に対して実質的に貢献する不活性の成分、共力薬(synergist)、化学物質が含まれる。例えば、医薬品添加物は、流動性の改善、製品の均一性、安定性、テイスト、もしくは外観を改善するため、取り扱いと投与を容易とするため、使用に便利なものとするため、またはバイオアベイラビリティーを調節するために機能させることができる。医薬品添加物は一般的には不活性であるとされているが、当業界では、医薬品添加物の性質とその添加物を含有している投与形態との間に関連性があることが知られている。
【０２９９】
担体または溶解剤として用いるために適した医薬品添加物は当業界ではよく知られており、種々の剤型で用いることができる。例えば、Remington's Pharmaceutical Sciences, 18版, A. R. Gennaro編, Mack Publishing Company (1990); Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 20版, A.R. Gennaro編, Lippincott Williams & Wilkins (2000); Handbook of Pharmaceutical Excipients, 3版, A. H. Kibbe編, American Pharmaceutical Association, and Pharmaceutical Press (2000);および Handbook of Pharmaceutical Additives, MichaelとIrene Ash編, Gower (1995)。ある製剤中の治療上の活性を有する薬剤の濃度は多様であり、その製剤の性質の如何によって重量％で約0.1％から99.9％と広範囲に変わる。
【０３００】
錠剤などの経口用の固形の投与形態は、典型的には、1種以上の医薬品添加物を含んでなり、その添加物は例えば、錠剤に対して満足すべき加工性と圧縮性を与え、またはさらに別の望ましい物理的性質を与えることを助けることのできるものである。そのような医薬品添加物は溶解剤、結合剤、流動促進剤、滑沢剤、崩壊剤、着色剤、甘味剤、ポリマー、ロウ(wax)、またはその他の溶解性調節物質から選択したものとすることができる。
【０３０１】
非経口投与のための投与形態は、通常は、液体のもの、特に静脈内用液体、すなわち糖類、アミノ酸、または電解質などの単純な化学物質の無菌溶液を含んでなり、それらの化学物質は循環系によって容易に運ばれ、吸収される。そのような液体は典型的には米国薬局方注射用水を用いて調製される。静脈内投与(IV)用に通常用いられる液体については、Remington, The Science and Practice of Pharmacy [全体の引用は前述している]中に述べられており、また次のものが含まれる: 
・アルコール、例えば、5％アルコール(例えば、ブドウ糖と水(“D/W”)または生理食塩液中のD/W(“NSS”)にアルコールを含む液、5％ ブドウ糖と水(“D5/W)、またはNSS中のD5/Wにアルコールを含む液も含まれている); 
・Aminosyn、FreAmine、Travasolなどの合成アミノ酸で、例えばそれぞれ、3.5または7％; 8.5％; 3.5、5.5、または8.5％のものなど;
・塩化アンモニウム、例えば2.14％ ;
・デキストラン40、NSS中に例えば10％、またはD5/W中に例えば、10％のもの;
・デキストラン70、NSS中に例えば6％、またはD5/W中に例えば6％のもの;
・ブドウ糖(D5/W)、例えば2.5〜50％;
・ブドウ糖と塩化ナトリウム、例えば5〜20％ブドウ糖および0.22〜0.9％ NaCl;
・乳酸加リンゲル液(ハルトマン液)、たとえばNaCl 0.6％、KCl 0.03％、CaCl2 0.02％;
・乳酸塩 0.3％ ;
・マンニトール、例えば 5％、任意にブドウ糖の例えば10％と、またはNaClの例えば15もしくは20％と組み合わせる；
・複合電解質溶液、これは電解質、ブドウ糖、、果糖、転換糖、リンゲル液、例えばNaCl 0.86％、KCl 0.03％、CaCl2 0.033％を様々に組み合わせたもの;
・炭酸水素ナトリウム、例えば5％のもの；
・塩化ナトリウム、例えば0.45％、0.9％、3％、または5％のもの;
・乳酸ナトリウム、例えば、1/6 M ;および
・滅菌注射用水
このようなIV用液体のpHは、典型的には当業界で知られているとおり、3.5から8である。
【０３０２】
本発明の化合物、薬学的に許容される塩および溶媒和物は単独で、またはその他の治療、すなわち、放射線照射、またはその他の治療用剤、例えば微小管形成に作用すると考えられるタキサンのクラスの薬剤、またはトポイソメラーゼIのインヒビターであるカンプトテシンのクラスの薬剤などと組み合わせて投与することができる。そのように用いる場合には、他の治療用剤は本発明の活性薬剤の投与の前、同時(投与形態としては別々のものまたは組み合わせた配合剤の形態のいずれでも良いが)、またはその後に投与することができる。
【０３０３】
下記の実施例は本発明の上述の事項の使用方法をさらに詳細に説明するとともに、本発明の種々の態様を行おうとする際の最上の方法を説明ために役立つものである。これらの実施例は本発明の真の範囲を限定するものではなく、むしろ説明の目的で提示されていることが理解されよう。
【実施例】
【０３０４】
（実施例1）
N-3-アミノ-プロピル)-N-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリド[2,3-d]ピリミジン-2-イル)-2-メチル-プロピル]-4-メチル-ベンズアミド
1A  R1からR3が水素であり；R6がi-プロピルであり；R6が水素であり；W、X、およびYが-C=であり；Zが-N=である式103の化合物の調製：
2アミノニコチン酸(5.53 g, 40.04ミリモル)、 DIEA(13.92 mL, 80.08 ミリモル) およびDMF(25 mL)の混合物に塩化イソバレリル(7.32 mL, 60.06ミリモル)を滴下して添加した。その反応混液を出発物質が消費されるまで室温で3日間撹拌した。その混合物を氷水中に注ぎ入れ、ジクロロメタンで抽出した。有機相を飽和炭酸水素ナトリウムおよび塩水で洗い、乾燥し(Na2SO4)、濃縮した。得られた固形物(9.50gのイソバレルアミド)をそれ以上精製することなく用い、まず無水酢酸(33 mL)中に溶解した。その反応混液を120℃で4時間撹拌した。その反応混液を60℃に冷却し、過剰の無水酢酸を減圧下で蒸留して除去した。残査を室温まで冷却し、ヘキサンで破砕して所望の生成物である式103の2-イソブチル-ピリド[2,3-d][1,3]オキサジン-4-オンを得た。この物質をそれ以上精製することなく次のステップに用いた。
【０３０５】
1B   R1からR3が水素であり；R5がベンジルであり；R6がi-プロピルであり；R6'が水素であり；W、X、およびYが-C=であり；Zが-N=である式104の化合物の調製:
2-i-ブチル- ピリド[2,3-d][1,3]オキサジン-4-オン(6.85 g, 33.56ミリモル)、ベンジルアミン(4.47 mL, 40.96ミリモル)、およびクロロホルム(25 mL)の混合物を一晩還流した。式103の化合物が完全に消費された後、クロロホルムを減圧下で除去した。エチレングリコール(25 mL)およびNaOHのペレット(0.27 g, 6.71ミリモル)を残査に添加し、そのフラスコにClaisen-蒸留ヘッドとマグネティックスターラーのバーを取り付けた。そのフラスコをオイルバス中に浸漬し、生成される水分を蒸留して除きつつ激しく撹拌しながら120℃で4時間再加熱した。反応の完了後、その反応混液を室温まで冷却し、氷水中に注ぎ入れた。沈殿物をろ過して集め、ヘキサン-EtOAc(2:1)を溶出液として用いてシリカゲルでカラムクロマトグラフィーを行い、所望の生成物である3-ベンジル-2-イソブチル-3-H-ピリド[2,3-d]ピリミジン-4-オン(8.07 g, 82％)を得た。
【０３０６】
1C  R1からR3が水素であり；R5がベンジルであり；R6がi-プロピルであり；R6'が水素であり；W、X、およびYが-C=であり；Zが-N=である式105の化合物の調製:
3-ベンジル-2-イソブチル-3-H-ピリド[2,3-d]ピリミジン-4-オン(2.82 g, 9.603ミリモル)、NaOAc(1.18 g, 14.41ミリモル)、および酢酸(40 mL)の混合物を40℃で撹拌し、それに臭素(2.31g, 14.41ミリモル)を滴下して添加した。その反応混液を出発材料の完全な消費がTLCで観察されるまで40℃で1時間撹拌した。その反応間液を氷水(500mL)中に注ぎ入れ、室温で2時間撹拌した。沈殿物をろ過して単離し、温水で洗って痕跡量の酢酸を除去し、少量のイソプロパノールで洗った。真空下で乾燥して所望の生成物である3-ベンジル-2-(1-ブロモ-2-メチル-プロピル)-3-H-ピリド[2,3-d]ピリミジン-4-オンを白色の固形物として得て、それをさらに精製することなく用いた。
【０３０７】
1D  R1からR3が水素であり；R5がベンジルであり；R6がi-プロピルであり；R6'が水素であり；W、X、およびYが-C=であり；Zが-N=である式106の化合物の調製:
3-ベンジル-2-(1-ブロモ-2-メチル-プロピル)-3-H-ピリド[2,3-d]ピリミジン-4-オン(9.603ミリモル)、NaN3(1.25 g, 19.206ミリモル)、およびDMF(25 mL)の混合物を60℃で一晩撹拌し、減圧下で濃縮した。残査をジクロロメタン中に溶解し、水および塩水で洗い、乾燥し(Na2SO4)、濃縮した。所望の生成物である2-(1-アジド-2-メチル-プロピル)-3-ベンジル-3-H-ピリド[2,3-d]ピリミジン-4-オンをシロップとして得て、それ以上精製することなく用いた。
【０３０８】
1E   R1からR3が水素であり；R5がベンジルであり；R6がi-プロピルであり；R6'が水素であり；W、X、およびYが-C=であり；Zが-N=である式107の化合物の調製:
2-(1-アジド-2-メチル-プロピル)-3-ベンジル-3-H-ピリド[2,3-d]ピリミジン-4-オン(9.603ミリモル)、トリフェニルホスフィン(3.03 g, 11.556ミリモル)、およびTHF(25 mL)の混合物に0℃で2N HClを添加した。その反応混液を室温で8時間撹拌した後、濃縮した。残査を、ヘキサン-EtOAc(1:1)、次いでEtOAcを用いてフラッシュシリカゲルクロマトグラフィーにかけ、最後にEtOAc-MeOH-Et3N(90:10:1)を溶出液として所望の生成物である、2-(1-アミノ-2-メチル-プロピル)-3-ベンジル-3-H-ピリド[2,3-d]ピリミジン-4-オンを白色の固形物(2.10g, 3ステップで68％)を得た。
【０３０９】
1F   R1からR3が水素であり；R5がベンジルであり；R6がi-プロピルであり；R6'が水素であり；R7がN-t-Boc-アミノプロピル-であり；W、X、およびYが-C=であり；Zが-N=である式108の化合物の調製:
2-(1-アミノ-2-メチル-プロピル)-3-ベンジル-3-H-ピリド[2,3-d]ピリミジン-4-オン(983 mg, 3.188ミリモル)、Na(OAc)3BH(1.352 g, 6.376ミリモル)、およびジクロロメタン(25 mL)の混合物に、ジクロロメタン(25 mL)中にt-ブチル-N-(3-オキソプロピル)-カルバメート(714 mg, 3.51ミリモル)を含む液を滴下して添加した。この反応混液を室温で30分間撹拌し、100 mLのジクロロメタンで希釈し、飽和炭酸水素ナトリウム、水、および塩水で洗い、乾燥(Na2SO4)した。濃縮後、所望の生成物である式108の化合物N-{3-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリド[2,3-d]ピリミジン-2-イル)-2-メチル-プロピルアミノ]-プロピル)-カルバミン酸tert-ブチルエステルを白色の固形物として得た(1.45 g, 98％)。
【０３１０】
1G   R1からR3が水素であり；R5がベンジルであり；R6がi-プロピルであり；R6'が水素であり；R8が-C(O)R9であり、ここでR9がp-トリルであり；W、X、およびYが-C=であり；Zが-N=である式Iの化合物の調製:
N-{3-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリド[2,3-d]ピリミジン-2-イル)-2-メチル-プロピルアミノ]-プロピル}-カルバミン酸tert-ブチルエステル(110 mg, 0.236ミリモル)、DIEA(82μL, 0.473ミリモル)、およびジクロロメタン(2 mL)の混合物に、塩化p-トルオイル(47μL, 0.354ミリモル)を滴下して添加した。この反応混液を室温で一晩撹拌した後、ジクロロメタンで希釈し、飽和炭酸水素ナトリウム、水、および塩水で洗った。濃縮後、ヘキサン-EtOAc(1:2)およびEtOAc-MeOH(20:1)を溶出液として用いてフラッシュシリカゲルクロマトグラフィーにかけて、対応するアシル化粗生成物である{3-[[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリド[2,3-d]ピリミジン-2-イル)-2-メチル-プロピル]-(4-メチル-ベンゾイル)-アミノ]-プロピル}-カルバミン酸tert-ブチルエステルを得て、次いでそれをジクロロメタン(3 mL)中の30％ TFAで15分間処理し、ジクロロメタンで希釈し、飽和炭酸水素ナトリウム、水、および塩水で洗い、乾燥(Na2SO4)した。ジクロロメタン溶液を濃縮して標題の生成物であるN-(3-アミノ-プロピル)-N-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリド[2,3- d]ピリミジン-2-イル)-2-メチル-プロピル]-4-メチル-ベンズアミドを白色の固形物として得た(89 mg, 78％)。
【０３１１】
1H  式Iの化合物のキラル分解:
エタノール中のN-(3-アミノ-プロピル)-N-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリド[2,3-d]ピリミジン-2-イル)-2-メチル-プロピル]-4-メチル-ベンズアミドをChiralpak AD(205 x 20 mm)カラム(CHIRAL Technologies, INC.)にかけ、ヘキサン中の70％ EtOAcの条件下に60分間置いた。(S)-エナンチオマーは14.2分の位置に溶出された。(R)-エナンチオマーは19.9分の位置で溶出された。
【０３１２】
（実施例2）
式Iのその他の化合物
2A  式103の化合物:
実施例1Aに記載の方法に従って2-アミノ-ニコチン酸を下記のもの：
・4-アミノ-ニコチン酸、
・3-アミノ-イソニコチン酸、
・3-アミノ-ピリジン-2-カルボン酸、
・3-アミノ-ピラジン-2-カルボン酸、
・3-アミノ-ピリダジン-4-カルボン酸、
・4-アミノ-ピリダジン-3-カルボン酸、
・5-アミノ-ピリダジン-4-カルボン酸、
・4-アミノ-ピリミジン-5-カルボン酸、および
・5-アミノ-ピリミジン-4-カルボン酸、
で置換することにより、次の対応する式103の化合物が得られる：
・2-イソブチル-ピリド[4,3-d][1,3]オキサジン-4-オン、
・2-イソブチル-ピリド[3,4-d][1,3]オキサジン-4-オン、
・2-イソブチル-ピリド[3,2-d][1,3]オキサジン-4-オン、
・2-イソブチル-ピラジノ[2,3-d][1,3]オキサジン-4-オン、
・7-イソブチル-ピリダジノ[3,4-d][1,3]オキサジン-5-オン、
・2-イソブチル-7-オキサ-1,2,5-トリアザ-ナフタレン-8-オン、
・2-イソブチル-ピリダジノ[4,5-d][1,3]オキサジン-4-オン、
・2-イソブチル-ピリミド[4,5-d][1,3]オキサジン-4-オン、および
・2-イソブチル-ピリミド[5,4-d][1,3]オキサジン-4-オン。
【０３１３】
2B  式104の化合物:
実施例1Bに記載の方法に従い、2-イソブチル-ピリド[2,3-d][1,3]オキサジン-4-オンを実施例2Aで得られた化合物で置換すると、次のそれぞれの化合物が得られる：
・3-ベンジル-2-イソブチル-3H-ピリド[4,3-d]ピリミジン-4-オン、
・3-ベンジル-2-イソブチル-3H-ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-オン、
・3-ベンジル-2-イソブチル-3H-ピリド[3,2-d]ピリミジン-4-オン、
・3-ベンジル-2-イソブチル-3H-プテリジン-4-オン、
・6-ベンジル-7-イソブチル-6H-ピリミド[4,5-c]ピリダジン-4-オン、
・7-ベンジル-6-イソブチル-7H-ピリミド[5,4-c]ピリダジン-4-オン、
・3-ベンジル-2-イソブチル-3H-ピリミド[4,5-d]ピリダジン-4-オン、
・3-ベンジル-2-イソブチル-3H-ピリミド[4,5-d]ピリミジン-4-オン、および
・3-ベンジル-2-イソブチル-3H-ピリミド[5,4-d]ピリミジン-4-オン。
【０３１４】
2C  式105の化合物:
実施例1Cに記載の方法に従い、3-ベンジル-2-イソブチル-3H-ピリド[2,3-d]ピリミジン-4-オンを実施例2Bで得られた化合物で置換すると、それぞれ式105の臭化化合物が得られる。
【０３１５】
2D  式106の化合物:
実施例1Dに記載の方法に従い、3-ベンジル-2-(1-ブロモ-2-メチル-プロピル)-3H-ピリド[2,3-d]ピリミジン-4-オンを実施例2Cで得られた化合物で置換すると、それぞれ式106のアジド化合物が得られる。
【０３１６】
2E  式107の化合物:
実施例1Eに記載の方法に従い、2-(1-アジド-2-メチル-プロピル)-3-ベンジル-3H-ピリド[2,3-d]ピリミジン-4-オンを実施例2Dで得られた化合物で置換すると、それぞれ式107のアミン化合物が得られる。
【０３１７】
2F  式108の化合物:
実施例1Fに記載の方法に従い、2-(1-アミノ-2-メチル-プロピル)-3-ベンジル-3H-ピリド[2,3-d]ピリミジン-4-オンを実施例2Eで得られた化合物で置換すると、それぞれ式108のt-Boc-アミノプロピル-アミンが得られる。
【０３１８】
2G  式Iの化合物:
実施例1Gに記載の方法に従い、N-{3-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリド[2,3-d]ピリミジン-2-イル)-2-メチル-プロピルアミノ]-プロピル}-カルバミン酸tert-ブチルエステルを実施例2Fで得られた化合物で置換すると、次のそれぞれの化合物が得られる： 
・ N-(3-アミノ-プロピル)-N-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリド[4, 3-d]ピリミジン-2-イル)-2-メチル-プロピル]-4-メチル-ベンズアミド、
・N- (3-アミノ-プロピル)-N-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリド[3,4-d] ピリミジン-2-イル)-2-メチル-プロピル]-4-メチル-ベンズアミド、
・N- (3-アミノ-プロピル)-N-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリド[3,2-d] ピリミジン-2-イル)-2-メチル-プロピル]-4-メチル-ベンズアミド、
・ N-(3-アミノ-プロピル)-N-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-プテリジン-2-イル)-2-メチル-プロピル]-4-メチル-ベンズアミド、
・N-(3-アミノ-プロピル)-N- [1-(6-ベンジル-5-オキソ-5,6-ジヒドロ-ピリミド [4,5-c]ピリダジン-7-イル)-2-メチル-プロピル]-4-メチル-ベンズアミド、
・N-(3-アミノ-プロピル)-N-[1-(7-ベンジル-8-オキソ-7,8-ジヒドロ-ピリミド [5,4-c]ピリダジン-6-イル)-2-メチル-プロピル]-4-メチル-ベンズアミド、
・N- (3-アミノ-プロピル)-N-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリミド[4, 5-d]ピリダジン-2-イル)-2-メチル-プロピル]-4-メチル-ベンズアミド、
・N-(3-アミノ-プロピル)-N-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリミド[4, 5-d]ピリミジン-2-イル)-2-メチル-プロピル]-4-メチル-ベンズアミド、および
・N-(3-アミノ-プロピル)-N-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリミド[5, 4-d]ピリミジン-2-イル)-2-メチル-プロピル]-4-メチル-ベンズアミド。
【０３１９】
2H  式Iの化合物:
実施例1Hに記載の方法に従い、N-(3-アミノ-プロピル)-N-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリド[2,3-d]ピリミジン-2-イル-2-メチル-プロピル]-4-メチル-ベンズアミドを実施例2Gで得られた化合物で置換すると、それぞれ式Iの(R)-および(S)-エナンチオマーが個々に得られる。
【０３２０】
2I  R8がメトキシ-アセチルである式Iの化合物
実施例1および2Aから2Gまでの方法に従い、塩化p-トルオイルを実施例1Gおよび2Gの塩化メトキシアセチルで置換すると、次の化合物が得られる：
・N-(3-アミノ-プロピル)-N- [1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリド[2, 3-d] ピリミジン-2-イル-2-メチル-プロピル]-2-メトキシ-アセトアミド、
・N-(3-アミノ-プロピル)-N-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリド[4, 3-d]ピリミジン-2-イル)-2-メチル-プロピル]-2-メトキシ-アセトアミド、
・N-(3-アミノ-プロピル)-N-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリド[3, 4-d]ピリミジン-2-イル)-2-メチル-プロピル]-2-メトキシ-アセトアミド、
・N-(3-アミノ-プロピル)-N-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリド[3, 2-d]ピリミジン-2-イル)-2-メチル-プロピル]-2-メトキシ-アセトアミド、
・N-(3-アミノ-プロピル)-N-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-プテリジン-2-イル)-2-メチル-プロピル]-2-メトキシ-アセトアミド、
・N-(3-アミノ-プロピル)-N-[1-(6-ベンジル-5-オキソ-5,6-ジヒドロ-ピリミド[4,5-c]ピリダジン-7-イル)-2-メチル-プロピル]-2-メトキシ-アセトアミド、
・N-(3-アミノ-プロピル)-N- [1-(7-ベンジル-8-オキソ-7,8-ジヒドロ-ピリミド[5, 4-c]ピリダジン-6-イル)-2-メチル-プロピル]-2-メトキシ-アセトアミド、
・N-(3-アミノ-プロピル)-N-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリミド[4, 5-d]ピリダジン-2-イル)-2-メチル-プロピル]-2-メトキシ-アセトアミド、
・N-(3-アミノ-プロピル)-N-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリミド[4, 5-d]ピリミジン-2-イル)-2-メチル-プロピル]-2-メトキシ-アセトアミド、
・N-(3-アミノ-プロピル)-N-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリミド[5, 4-d]ピリミジン-2-イル)-2-メチル-プロピル]-2-メトキシ-アセトアミド。
【０３２１】
（実施例3）
(±)-3-ベンジル-7-クロロ-2-{1-[2-(3-フルオロ-4-メチル-フェニル）-4,4-ジメチル-4,5-ジヒドロ-イミダゾール-1-イル]-2-メチル-プロピル}-3H-プテリジン-4-オン
3A  R2が水素であり；R3が塩素であり；R5がベンジルであり；R6がイソプロピルであり；R6'が水素であり；RaとRbがメチルであり；WとZが-N=であり；XとYが-C=である式201の化合物：
ジクロロメタン(80 mL)中の2-(1-アミノ-2-メチル-プロピル)-3-ベンジル-7-クロロ-3H-プテリジン-4-オン(1. 10 g, 3.19ミリモル)および(1,1-ジメチル-2-オキソ-エチル)-カルバミン酸tert-ブチルエステル(Sekiら, Chem. Pharm. Bull. 1996,44, 2061)(0.59 g, 3.19ミリモル) の溶液に、トリアセトキシボロハイドライドナトリウム(1.01 g, 4.79ミリモル)を添加する。得られた混合物を室温で4時間維持し、その時点で塩水(75 mL)で反応を停止させ、10分間激しく撹拌する。水層をジクロロメタン(50 mL)で抽出し、抽出物を併せて硫酸マグネシウム上で乾燥し、ろ過し、減圧下で濃縮して(±)-{2-[1-(3-ベンジル-7-クロロ-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-プテリジン-2-イル)-2-メチル-プロピルアミノ]-1,1-ジメチル-エチル}-カルバミン酸tert-ブチルエステルを得て、それをさらに精製することなく次のステップに用いる。
【０３２２】
3B  R2が水素であり；R3が塩素であり；R5がベンジルであり；R6がイソプロピルであり；R6'が水素であり；RaとRbがメチルであり；WとZが-N=であり；XとYが-C=である式202の化合物：
ジクロロメタン(40 mL)中の(±)-{2-[1-(3-ベンジル-7-クロロ-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-プテリジン-2-イル)-2-メチル-プロピルアミノ]- 1,1-ジメチル-エチル}-カルバミン酸tert-ブチルエステル(1.63 g, 3.16ミリモル)の溶液に、トリフルオロ酢酸(10 mL)を添加する。得られた溶液を室温で一晩維持し、減圧下で濃縮する。残査をジクロロメタン(50 mL)中に溶解し、飽和炭酸水素ナトリウム(40 mL)で洗う。水層をジクロロメタン(50 mL)で抽出し、抽出物を併せ、硫酸マグネシウム上で乾燥し、ろ過し、減圧下で濃縮して(±)-2-[1-(2-アミノ-2-メチル-プロピルアミノ)-2-メチル-プロピル]-3-ベンジル-7-クロロ-3H-プテリジン-4-オンを得て、それをさらに精製することなく次のステップに用いる。
【０３２３】
3C  R2が水素であり；R3が塩素であり；R5がベンジルであり；R6がイソプロピルであり；R6'が水素であり；RaとRbがメチルであり；Rcが3-フルオロ-4-メチル-フェニル-であり；WとZが-N=であり；XとYが-C=である式203の化合物：
ジクロロメタン(3 mL)中の(±)-2-[1-(2-アミノ-2-メチル-プロピルアミノ)-2-メチル-プロピル]-3-ベンジル-7-クロロ-3H-プテリジン-4-オン(133 mg, 0.32ミリモル)の溶液に、トリエチルアミン(90μL, 0.64ミリモル)を添加した後、塩化3-フルオロ-4-メチルベンゾイル(51μL, 0.35ミリモル)を添加する。得られた溶液を室温で3時間撹拌し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液(5 mL)で反応を停止させ、ジクロロメタン(5 mL)で希釈する。水層をジクロロメタン(5 mL)で抽出し、抽出物を併せ、硫酸マグネシウム上で乾燥し、ろ過し、減圧下で濃縮する。残査をシリカゲルクロマトグラフィー(10-20％ 酢酸エチル/ヘキサン)にかけて(±)-N-{2-[1-(3-ベンジル-7-クロロ-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-プテリジン- 2-イル)-2-メチル-プロピルアミノ]-1,1-ジメチル-エチル}-3-フルオロ-4-メチル-ベンズアミドを得る。
【０３２４】
3D  R2が水素であり；R3が塩素であり；R5がベンジルであり；R6がイソプロピルであり；R6'が水素であり；R7とR8が一緒になって2-(3-フルオロ-4-メチル-フェニル)-4,4-ジメチル-4,5-ジヒドロ-イミダゾール-1-イルであり；WとZが-N=であり；XとYが-C=である、式Iの化合物：
オキシ塩化リン(2 mL)中の(±)-N-{2-[1-(3-ベンジル-7-クロロ-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-プテリジン- 2-イル)-2-メチル-プロピルアミノ]-1,1-ジメチル-エチル}-3-フルオロ-4-メチル-ベンズアミド(121 mg, 0.219ミリモル)の溶液を還流しつつ加熱する。8時間後にその反応混液を室温まで冷却し、減圧下で濃縮する。残査をジクロロメタン(10 mL)中に溶解し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液10 mLで2回洗う。ジクロロメタンで抽出した水層を併せ、抽出物を硫酸マグネシウム上で乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮する。残査をシリカゲルクロマトグラフィー(3％ メタノール/ジクロロメタン)で精製して、標題の化合物である(±)-3-ベンジル-7-クロロ-2-{1-[2-(3-フルオロ-4-メチル-フェニル)-4,4-ジメチル-4,5-ジヒドロ-イミダゾール-1-イル]-2-メチル-プロピル}-3H-プテリジン-4-オンを得る。
【０３２５】
（実施例4）
(±)-3-ベンジル-2-{1-[2-(4-ブロモ-フェニル)-4,4-ジエチル-4,5-ジヒドロ-イミダゾール-1-イル]-2-メチル-プロピル}-3H-ピリド[3,2-d]ピリミジン-4-オン
ジクロロメタン(10 mL)中の(±)-2-[1-(2-アミノ-2-メチル-プロピルアミノ)-2-メチル-プロピル]-3-ベンジル-3H-ピリド[3,2-d]ピリミジン-4-オン(250 mg)の溶液にトリエチルアミン(295μL)を添加した後、塩化4-ブロモベンゾイル(105 mg)を添加する。得られた溶液を室温で2時間撹拌した後、減圧下で蒸発させる。得られた固形物を氷酢酸(10 mL)で処理した後、得られた懸濁液を還流しつつ48時間加熱する。その反応液を室温まで冷却し、その後減圧下で蒸発させ、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液(10 mL)、および塩水(5 mL)で反応を停止させる。ジクロロメタンで抽出した水層を併せ、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮する。残査をシリカゲルクロマトグラフィー(5-10％ 酢酸エチル/ヘキサン)で精製して、標題の化合物である(±)-3-ベンジル-2-{1-[2-(4-ブロモ-フェニル)-4,4-ジエチル-4,5-ジヒドロ-イミダゾール-1-イル]-2-メチル-プロピル}-3H-ピリド[3,2-d]ピリミジン-4-オンをえる。
【０３２６】
（実施例5）
2-[2-メチル-1-(2-フェニル-イミダゾール- 1-イル)-プロピル]-3-ナフタレン-1-イルメチル-3H-ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-オン
5A  R1、R2およびR4が水素であり；R5がナフタレン-1-イルメチル-であり；R6がイソプロピルであり；R6'が水素であり；W、X、およびZが-C=であり；Yが-C=である、式301の化合物：
DMF(30 mL)中の2-(1-アミノ-2-メチル-プロピル)-3-ナフタレン-1-イルメチル-3H-ピリド[3,4-d]ピリジン-4-オン(1.96 g, 5.48ミリモル)の溶液に、ブロモアセトアルデヒドジメチルアセタール(2.78 g, 16.44ミリモル)および炭酸カリウム(2.27 g, 16.44ミリモル)を添加し、得られた懸濁液を135℃で18時間加熱する。冷却した反応液を真空中で濃縮し、塩化メチレンで破砕して固形物を全て除去し、ろ液を真空中で濃縮する。残査をフラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル；2:1 ヘキサン:酢酸エチル)で精製して標題の化合物である2-[1-(2,2-ジメトキシ-エチルアミノ)-2-メチル-プロピル]-3-ナフタレン-1-イルメチル-3H-ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-オンを得る。
【０３２７】
5B  R1、R2およびR4が水素であり；R5がナフタレン-1-イルメチル-であり；R6がイソプロピルであり；R6'が水素であり；Rcがフェニルであり；W、X、およびZが-C=であり；Yが-C=である、式302の化合物：
塩化メチレン(10 mL)中の2-[1-(2,2-ジメトキシ-エチルアミノ)-2-メチル-プロピル]-3-ナフタレン- 1-イルメチル-3H-ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-オン(522 mg, 1.17ミリモル)、塩化ベンゾイル(247 mg, 1.76ミリモル)、およびトリエチルアミン(179 mg, 1.76ミリモル)の溶液を室温で18時間撹拌する。その反応液を0.5N HCl、水、5％ NaHCO3、水、および塩水で順次洗う。有機層を乾燥し(Na2SO4)、濃縮して標題の化合物であるN-(2,2-ジメトキシ-エチル)-N-[2-メチル-1-(3-ナフタレン-1-イルメチル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリド[3,4-d]ピリミジン-2-イル)-プロピル]-ベンズアミドをえる。
【０３２８】
5C  R1、R2およびR4が水素であり；R5がナフタレン-1-イルメチル-であり；R6がイソプロピルであり；R6'が水素であり；R7とR8が一緒になって2-フェニル-イミダゾール-1-イル-であり；W、X、およびZが-C=であり；Yが-C=である、式Iの化合物：
酢酸(4.0 mL)中のN-(2,2-ジメトキシ-エチル)-N-[2-メチル-1-(3-ナフタレン-1-イルメチル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリド[3,4-d]ピリミジン-2-イル)-プロピル]-ベンズアミド(296 mg, 0.539ミリモル)および酢酸アンモニウム(374 mg, 4.85ミリモル)の溶液を2.0時間還流する。その反応液を真空中で濃縮し、残査を酢酸エチル中で溶解し、飽和炭酸ナトリウム、水、および塩水で順次洗う。有機層を乾燥し(Na2SO4)、真空中で濃縮し、エタノールから再結晶させて標題の化合物である2-[2-メチル-1-(2-フェニル-イミダゾール- 1-イル)-プロピル]-3-ナフタレン-1-イルメチル-3H-ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-オンを得る。
【０３２９】
（実施例6）
R7とR8が一緒になってイミダゾール-1-イルである、式Iの他の化合物
実施例5に記載の方法に従い、塩化ベンゾイルを次のもの：
・塩化p-トルオイル、
・塩化4-フルオロベンゾイル、
・塩化4-クロロベンゾイル、および
・塩化3-フルオロ-4-メチルベンゾイル、
で置換することによって、次の対応する式Iの化合物が得られる：
・2-[2-メチル-1-(2-p-トルオイル-イミダゾール-1-イル)-プロピル]-3-ナフタレン-1-イルメチル-3H- ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-オン、
・2-{2-メチル-1-[2-(4-フルオロフェニル)-イミダゾール-1-イル]-プロピル}-3-ナフタレン-1-イルメチル-3H-ピリド[3,4-d] ピリミジン-4-オン、
・2-{2-メチル-1-[2-(4-クロロフェニル)-イミダゾール-1-イル]-プロピル}-3-ナフタレン-1-イルメチル-3H-ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-オン、および
・2-{2-メチル-1-[2-(3-フルオロ-4-メチルフェニル)-イミダゾール-1-イル}-プロピル}-3-ナフタレン-1-イルメチル-3H-ピリド[3,4-d]ピリミジン-4-オン。
【０３３０】
（実施例7）
(±)-2-{-1-[4-(2-アミノ-エチル)-2-p-トリル-イミダゾール-1-イル]-2-エチル-ブチル}-3-ベンジル-7-クロロ-3H-ピリミド[4,5-d]ピリミジン-4-オン
7A  R1が水素であり；R3が塩素であり；R5がベンジルであり；R6がイソプロピルであり；R6'が水素であり；WとYが-C=であり；XとZが-N=である、式401の化合物：
DMF(14 mL)中の2-(1-アミノ-2-エチル-ブチル)-3-ベンジル-7-クロロ-3H-ピリミド[4,5-d]ピリミジン-4-オン(1.09 g, 2.93ミリモル)、2-(4-ブロモ-3-オキソ-ブチル)-イソインドール-1,3-ジオン(867 mg, 2.93ミリモル, WO 89/10360に記載のとおり調製したもの)、および炭酸カリウム(405 mg, 2.93ミリモル)の懸濁液を室温で80分間撹拌する。その反応液を水で希釈し、得られた生成物2-{4-[1-(3-ベンジル-7-クロロ-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリミド[4,5-d]ピリミジン-2-イル)-2-エチル-ブチルアミノ]-3-オキソ-ブチル}-イソインドール-1,3-ジオンをそれ以上精製することなく次のステップに用いる。
【０３３１】
7B   R1が水素であり；R3が塩素であり；R5がベンジルであり；R6がイソプロピルであり；R6'が水素であり；Rcがp-トリルであり；WとYが-C=であり；XとZが-N=である、式402の化合物：
塩化メチレン(10 mL)中の2-{4-[1-(3-ベンジル-7-クロロ-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリミド[4,5-d]ピリミジン-2-イル)-2-エチル-ブチルアミノ]-3-オキソ-ブチル}-イソインドール-1,3-ジオン(1.58 g, 2.69ミリモル)、トリエチルアミン(245 mg, 2.42ミリモル)、および塩化p-トルオイル(374 mg, 2,42ミリモル)の溶液を室温で2.0時間撹拌する。その反応液を0.5N HCl、水、5％ NaHCO3、水、および塩水で順次洗い、乾燥する(Na2SO4)。ろ液を真空中で濃縮し、フラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル, 3:2 ヘキサン：EtOAcを溶出液とする)で精製し、標題の化合物であるN-[1-(3-ベンジル-7-クロロ-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリミド[4,5-d]ピリミジン-2-イル)-2-エチル-ブチル]-N-[4-(1,3-ジオキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-2-オキソ-ブチル]-4-メチル-ベンズアミドを得る。 
7C   R1が水素であり；R3が塩素であり；R5がベンジルであり；R6がイソプロピルであり；R6'が水素であり；Rcがp-トリルであり；WとYが-C=であり；XとZが-N=である、式403の化合物：
酢酸(30 mL)中のN-[1-(3-ベンジル-7-クロロ-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリミド[4,5-d]ピリミジン-2-イル)-2-エチル-ブチル]-N-[4-(1,3-ジオキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-2-オキソ-ブチル]-4-メチル-ベンズアミド(669 mg, 0.948ミリモル)および酢酸アンモニウム(3.65 g, 47.4ミリモル)の溶液を、Dean-Starkとラップとコンデンサーを用いて6.0時間還流する。その反応液を真空中で濃縮し、残査を水で破砕し、Buchner漏斗で乾燥し、エタノールから再結晶させて標題の化合物である2-(2-{1-[1-(3-ベンジル-7-クロロ-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリミド[4,5-d]ピリミジン-2-イル)-2-エチル-ブチル]-2-p-トリル-1H-イミダゾール-4-イル}-エチル)-イソインドール-1,3-ジオンを得る。 
R1が水素であり；R3が塩素であり；R5がベンジルであり；R6がイソプロピルであり；R6'が水素であり；R7とR8が一緒になって4-(2-アミノ-エチル)-2-p-トリル-イミダゾール-1-イル-であり；WとYが-C=であり；XとZが-N=である、式Iの化合物：
EtOH(12 mL)中の2-(2-{1-[1-(3-ベンジル-7-クロロ-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリミド[4,5-d]ピリミジン-2-イル)-2-エチル-ブチル]-2-p-トリル-1H-イミダゾール-4-イル}-エチル)-イソインドール-1,3-ジオン(290 mg, 0.423ミリモル)および無水ヒドラジン(98 mg, 3.06ミリモル)の溶液を3.0時間還流する。その反応液を5℃まで冷却し、沈殿物をろ過して除く。そのろ液を真空中で濃縮し、フラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、90:9:1  塩化メチレン:メタノール:水酸化アンモニウムを溶出液として)で精製して、標題の化合物である(±)-2-{-1-[4-(2-アミノ-エチル)-2-p-トリル-イミダゾール-1-イル]-2-エチル-ブチル}-3-ベンジル-7-クロロ-3H-ピリミド[4,5-d]ピリミジン-4-オンを得る。
【０３３２】
（実施例8）
(R)-N-(3-アミノ-プロピル)-N-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリド[4,3-d]ピリミジン-2-イル)- 2-メチル-プロピル]-4-メチル-ベンズアミド
8A  R6がイソプロピルでR6'が水素である式502の化合物:
ジクロロメタン(100mL)とN-ベンジルオキシカルボニルD-バリン(9 g, 35.8ミリモル)の溶液に、フッ化シアヌル(2.4 mL, 26.1ミリモル)を添加した。その反応混液を一晩撹拌し、セライトを通過させてろ過した。残存する溶液を氷水で洗い、硫酸ナトリウム上で乾燥した。溶媒を減圧下で蒸発させて実質的に純粋な式502の酸フッ化物である、(1-フルオロカルボニル-2-メチル-プロピル)-カルバミン酸ベンジルエステル (7.94 g, 87.6％)をえた。
【０３３３】
8B  R1、R3、およびR4が水素であり；W、Y、およびZが-C=であり；Xが-N=である、式504の化合物:
メタノール(100 mL)およびN-Boc-4-アミノ-3-ピリジンカルボキシアルデヒド(8.3 g, 37.3ミリモル)の溶液に、N-ヨードスクシンイミド(21.0 g, 93.4ミリモル)および炭酸カリウム(12.9 g, 93.4ミリモル)を室温で添加した。その混合液を1時間撹拌した後、飽和Na2SO3溶液(100 mL)中に注ぎ入れた。さらに水(100 mL)で希釈した後、その混合液をジクロロメタン(3 x 100 mL)で抽出した。有機層を併せ、硫酸ナトリウム上で乾燥し、減圧下で濃縮して純粋な所望のメチルエステルである、4-tert-ブトキシカルボニルアミノ-ニコチン酸メチルエステル(9.0 g, 96％)を得た。MS (CI) m/e: 253.1。
【０３３４】
8C  R1、R3、およびR4が水素であり；W、Y、およびZが-C=であり；Xが-N=である、式505の化合物:
4-tert-ブトキシカルボニルアミノ-ニコチン酸メチルエステル(9.08 g, 36.0ミリモル)を50/50 TFA/DCM(100 mL)溶液中に溶解し、室温で2時間撹拌した。その混合液を減圧下で濃縮した後、DCM(100 mL)中に再溶解し、飽和炭酸水素ナトリウムで洗い、硫酸ナトリウム上で乾燥し、減圧下で濃縮した。対応する式505の保護基を除去した生成物である、4-アミノ-ニコチン酸メチルエステル(5.43 g, 99.1％)芽、次のステップに進めるために十分な純度で得られた。MS(CI) M/E: 153.1。
【０３３５】
8D  R1、R3、およびR4が水素であり；R6がイソプロピルであり；R6'が水素であり；W、Y、およびZが-C=であり；Xが-N=である、式506の化合物:
ジクロロメタン(100 mL)、4-アミノ-ニコチン酸メチルエステル(4.60 g, 30.2ミリモル)、およびジイソプロピルエチルアミン(8.25 mL, 46.7ミリモル)の溶液に、(1-フルオロカルボニル-2-メチル-プロピル)-カルバミン酸ベンジルエステル(11.8 g, 46.7ミリモル)を室温で添加し、その混合液を一晩撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、残査をヘキサン-EtOAc(3:1から1:1へと階段勾配で)を溶出液として用いてフラッシュシリカゲルクロマトグラフィーで精製し、所望の式506のアミドである、4-(2-ベンジルオキシカルボニルアミノ-3-メチル-ブチリルアミノ)-ニコチン酸メチルエステル(10.5 g, 90.1％)。MS (CI) M/E: 386.2。
【０３３６】
8E  R1、R3、およびR4が水素であり；R6がイソプロピルであり；R6'が水素であり；W、Y、およびZが-C=であり；Xが-N=である、式507の化合物:
MeOHと水(2:1, 150 mL)および4-(2-ベンジルオキシカルボニルアミノ-3-メチル-ブチリルアミノ)-ニコチン酸メチルエステル(10.5 g, 27.2ミリモル)の溶液に水酸化ナトリウム(2.18 g, 54.5ミリモル)を添加した。その混合液を1時間撹拌した後、シリカゲル(20 g)を溶液中に添加した。この混合液を10分間撹拌した後、そのシリカゲルをろ過して取り除き、溶媒を減圧下で蒸発させた。対応する式507のカルボン酸である、4-(2-ベンジルオキシカルボニルアミノ-3-メチル-ブチリルアミノ)-ニコチン酸(10.0 g, 99％)を次のステップで用いるために十分な純度で得た。MS (CI) M/E: 372.3。
【０３３７】
8F  R1、R3、およびR4が水素であり；R5がベンジルであり；R6がイソプロピルであり；R6'が水素であり；W、Y、およびZが-C=であり；Xが-N=である、式508および式509の化合物:
ジクロロメタン(200 mL)、4-(2-ベンジルオキシカルボニルアミノ-3-メチル-ブチリルアミノ)-ニコチン酸(10.0 g, 26. 9ミリモル)、およびEDC(7.74 g, 40.4ミリモル)の溶液を、逆相HPLCで出発材料の完全な消費が観察されるまで室温で2時間撹拌した。次いでベンジルアミン(5.88 mL, 53.8ミリモル)を添加し、その混合液を室温で一晩撹拌した。その混合液を真空下で濃縮し、ヘキサン-EtOAc(3:1から1:2への階段勾配で)を溶出液としてシリカゲルクロマトグラフィーで精製して式508の環状化していない生成物である、[1-(3-ベンジルカルバモイル-ピリジン-4-イルカルバモイル)-2-メチル-プロピル]カルバミン酸ベンジルエステル(4.45 g, 35.9％)および式509の環状化した生成物である、[1-(3-ベンジル- 4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリド[4,3-d]ピリミジン-2-イル)-2-メチル-プロピル]-カルバミン酸ベンジルエステル(1.85 g, 15.5％)を得た。 508 : MS (CI) M/E: 461.2 ; 509: MS (CI) M/E: 443.2。
【０３３８】
8G  R1、R3、およびR4が水素であり；R5がベンジルであり；R6がイソプロピルであり；R6'が水素であり；W、Y、およびZが-C=であり；Xが-N=である、式107aの化合物:
[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリド[4,3-d]ピリミジン-2-イル)-2-メチル-プロピル]- カルバミン酸ベンジルエステル(0.850 g, 1.92ミリモル)をHBr/酢酸(16 mL, 30％ 重量％)の溶液中に溶解し、その混合液を室温で2時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去して対応する保護基が除去された式107aのアミンである、2-(1-アミノ-2-メチル-プロピル)-3-ベンジル-3H-ピリド[4,3-d]ピリミジン-4-オンを固体のHBr塩として得て、それをさらに精製することなく用いた。MS (CI) M/E: 309.3。
【０３３９】
8H  R1、R3、およびR4が水素であり；R5がベンジルであり；R6がイソプロピルであり；R6'が水素であり；R7が3-Boc−アミノ-プロピル-であり；W、Y、およびZが-C=であり；Xが-N=である、式108aの化合物:
ジクロロメタン(100 mL)、2-(1-アミノ-2-メチル-プロピル)-3-ベンジル-3H-ピリド[4,3-d]ピリミジン-4-オン(1.92ミリモル)、およびNa(OAc)3BH(0.814 g, 3.84ミリモル)の溶液にt-ブチル-N-(3-オキソプロピル)-カルバメート(0.400 g, 2.30ミリモル)を室温で添加した。その混合液を室温で3時間撹拌した後、ジクロロメタン(100 mL)で希釈し、飽和炭酸水素ナトリウム、水、および塩水で洗い、硫酸ナトリウム上で乾燥した。減圧下で乾燥した後、所望の生成物である{3-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリド[4,3-d]ピリミジン-2-イル)-2-メチル-プロピルアミノ]-プロピル}-カルバミン酸tert-ブチルエステル(0.850 g, 95％)を次のステップに進めるのに十分に純粋な形で得た。MS (CI) M/E: 466.2。
【０３４０】
8I  R1、R3、およびR4が水素であり；R5がベンジルであり；R6がイソプロピルであり；R6'が水素であり；R7が3-アミノ-プロピルであり；R8が-C(O)-R9であってこのR9がp-メチル-フェニル-であり；W、Y、およびZが-C=であり；Xが-N=である、式Iの化合物:
ジクロロメタン(100 mL)、{3-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリド[4,3-d]ピリミジン-2-イル)-2-メチル-プロピルアミノ]-プロピル}-カルバミン酸tert-ブチルエステル(0.500 mg, 1.07ミリモル)およびDIEA(373 μL, 2.14ミリモル) の溶液に、塩化p-トルオイル(199μL, 1.50ミリモル)を滴下して添加した。その反応混液を室温で3時間撹拌し、減圧下で濃縮した。ヘキサン-EtOAc(3:1から1:2への階段勾配で)を溶出液としてシリカゲルクロマトグラフィーで精製して、標題の化合物のBocで保護された前駆体である、{3-[[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリド[4,3-d]ピリミジン-2-イル)-2-メチル-プロピル]-(4-メチル-ベンゾイル)-アミノ]-プロピル}-カルバミン酸tert-ブチルエステル(0.198 g, 38.3％)を得た。 MS (Cl) M/E: 584.3。
【０３４１】
このBocで保護された前駆体をTFA/DCM(50/50)(50 mL)と共に1時間撹拌し、ジクロロメタンで希釈した。その混合液を飽和炭酸水素ナトリウム、水、および塩水で洗い、硫酸ナトリウム上で乾燥した。そのジクロロメタン溶液を濃縮して、式Iの標題の化合物である、(R)-N-(3-アミノ-プロピル)-N-[1-(3-ベンジル)-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリド[4,3-d]ピリミジン-2-イル)-2-メチル-プロピル]-4-メチル-ベンズアミドを白色の固形物(160 mg, 式108aからの収率は37％)を得た。 MS (CI) M/E: 484.2。 
8J  R1、R3、およびR4が水素であり；R5がベンジルであり；R6がイソプロピルであり；R6'が水素であり；R7が3-アミノ-プロピルであり；R8が-C(O)-R9であってこのR9がp-メチル-フェニル-であり；W、Y、およびZが-C=であり；Xが-N=である、式Iの化合物の別の調製法:
式Iの化合物のフタルイミドで保護されたものである、N-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリド[4,3-d]ピリミジン-2-イル)-2-メチル-プロピル]-N-[3-(1,3-ジオキソ-1,3-ジヒドロ-イソインドール-2-イル)-プロピル]-4-メチル-ベンズアミド (300 mg, 0.488ミリモル)と無水ヒドラジン(98 mg, 3.06ミリモル)をEtOH(12 mL)中に含む液を3.0時間還流する。その反応液を5℃まで冷却し、沈殿物をろ過して除去する。そのろ液を真空中で濃縮し、フラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、90:9:1  塩化メチレン:メタノール:水酸化アンモニウムを溶出液として)で精製して標題の化合物である、N-(3-アミノ-プロピル)-N-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-ピリド[4,3-d]ピリミジン- 2-イル)-2-メチル-プロピル]-4-メチル-ベンズアミドを得る。
【０３４２】
（実施例9）
N-(3-アミノ-プロピル)-N-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-プテリジン-2-イル)-2-メチル-プロピル]-4-メチル-ベンズアミド
9A  3-(3-メチル-ブチリルアミノ)-ピラジン-2-カルボン酸ベンジルアミド:
DMF(200 mL)、3-アミノピラジン-2-カルボン酸(10.0 g, 71.9ミリモル)、およびジイソプロピルエチルアミン(25.0 mL, 144ミリモル)の溶液に、塩化イソバレリル(12.4 mL, 86.3ミリモル)を室温で滴下して添加した。この反応混液を室温で2時間撹拌した後、溶媒を減圧下で除去し、残査を真空下で1晩おいて乾燥させて3-(3-メチル-ブチリルアミノ)-ピラジン-2-カルボン酸を固形物の残査として得た。その固形物を無水酢酸(200 mL)中に溶解し、その混合液を100℃で1晩撹拌した。過剰の無水酢酸を減圧下で蒸留して除去し、残査を室温まで冷却し、ヘキサンで洗って対応する式103のオキサジノン化合物である、2-イソブチル-ピラジノ[2,3-d][1,3]-オキサジン-4-オンを得て、それをさらに精製することなく用いた。クロロホルム(200 mL)、式103のオキサジノン、およびベンジルアミン(16.0 mL, 144ミリモル)の溶液を60℃で2時間撹拌した。逆相HPLCでモニターしてオキサジノンが完全に消費された後、クロロホルムを減圧下で除去し、残査をヘキサン-EtOAc(1:2)を溶出液としてシリカゲルクロマトグラフィーで精製して標題のビスアミドである、3-(3-メチル-ブチリルアミノ)-ピラジン-2-カルボン酸ベンジルアミド(4.5 g 20.0％, 3ステップでの収率)を得た。 MS (CI) M/E: 313.1。
【０３４３】
9B  R2およびR3が水素であり；R5がベンジルであり；R6がイソプロピルであり；R6'が水素であり；XとYが-C=であり；WとZが-N=である、式104の化合物:
DMF(100 mL)、3-(3-メチル-ブチリルアミノ)-ピラジン-2-カルボン酸ベンジルアミド(3.0 g, 9.60ミリモル) 、および炭酸ナトリウム(1.30 g, 12.3ミリモル)の溶液を120℃で1晩撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、残査をヘキサン-EtOAc(2:1)を溶出液としてシリカゲルクロマトグラフィーで精製して、所望の式104のピラゾピリミジノン生成物である、3-ベンジル-2-イソブチル-3H-プテリジン-4-オン(0.948 g, 33.0％)を得た。MS (CI) M/E: 295.1。
【０３４４】
9C  R2およびR3が水素であり；R5がベンジルであり；R6がイソプロピルであり；R6'が水素であり；XとYが-C=であり；WとZが-N=である、式105の化合物：
3-ベンジル-2-イソブチル-3H-プテリジン-4-オン(2.46 g, 8.36ミリモル)、NaOAc (0.823 g, 100ミリモル)、および酢酸(50 mL)の混合液に臭素(0.47 mL, 919ミリモル)を滴下して添加した。その反応混液を、逆相HPLCで観察して出発材料が完全に消費されるまで50℃で3時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、残査をヘキサン-EtOAc(2:1)を溶出液としてシリカゲルクロマトグラフィーで精製して、所望の式105の臭化化合物である、3-ベンジル-2-(1-ブロモ-2-メチル-プロピル)-3H-プテリジン-4-オン (2.40 g, 76.9％)を得た。 MS (Cl) M/E: 373.0。
【０３４５】
9D  R2およびR3が水素であり；R5がベンジルであり；R6がイソプロピルであり；R6'が水素であり；XとYが-C=であり；WとZが-N=である、式106の化合物：
3-ベンジル-2-(1-ブロモ-2-メチル-プロピル)-3H-プテリジン-4-オン(1.4 g, 3.75ミリモル)およびアジ化ナトリウム(0.488 g, 7.50ミリモル)のDMF(50 mL)用液を60℃で2時間撹拌し、減圧下で濃縮した。残査をジクロロメタン中に溶解し、水と塩水で洗い、硫酸ナトリウム上で乾燥し、真空中で濃縮して所望の式106のアジド生成物である、2-(1-アジド-2-メチル-プロピル)-3-ベンジル-3H-プテリジン-4-オンを得て、これをさらに精製することなく用いた。MS (Cl) M/E: 336.1。
【０３４６】
9E  R2およびR3が水素であり；R5がベンジルであり；R6がイソプロピルであり；R6'が水素であり；XとYが-C=であり；WとZが-N=である、式107の化合物：
THF(100 ML)、2-(1-アジド-2-メチル-プロピル)-3-ベンジル-3H-プテリジン-4-オン(3.75 ミリモル)、およびトリフェニルホスフィン(0.984 g, 3.75ミリモル)の溶液に、2N HCl(15 mL)を添加した。その反応混液を室温で2時間撹拌した後、減圧下で濃縮した。残査をEtOAc-MeOH(50:1から10:1)を溶出液としてフラッシュシリカゲルクロマトグラフィーで精製して、所望の式107のアミノ生成物である、2-(1-アミノ-2-メチル- プロピル)-3-ベンジル-3H-プテリジン-4-オン(0.880g, 76％ 式105からの収率)を得た。 MS (CI) M/E: 310.2。
【０３４７】
9F  R2およびR3が水素であり；R5がベンジルであり；R6がイソプロピルであり；R6'が水素であり；R7が3-Boc-アミノ-プロピル-であり；XとYが-C=であり；WとZが-N=である、式108の化合物：
ジクロロメタン(100 mL)、2-(1-アミノ-2-メチル- プロピル)-3-ベンジル-3H-プテリジン-4-オン(780 mg, 2.52ミリモル)、およびNa(OAc)3BH(1.07 g, 5.04ミリモル)の溶液に、t-ブチル-N- 3-オキソプロピル)-カルバメート(611 mg, 3.53 ミリモル)を室温で添加した。その反応混液を室温で3時間撹拌し、100 mLのジクロロメタンで希釈し、飽和炭酸水素ナトリウム、水、および塩水で洗い、硫酸ナトリウム上で乾燥した。有機層を濃縮して所望の式108のBocアミノ生成物である、{3- [1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-プテリジン-2-イル)-2-メチル-プロピルアミノ]-プロピル}-カルバミン酸tert-ブチルエステル(1.15 g, 98％)を得た。MS (CI) M/E: 467.3。 
9G  R2およびR3が水素であり；R5がベンジルであり；R6がイソプロピルであり；R6'が水素であり；R7が3-Boc-アミノ-プロピル-であり；R8が-C(O)-R9であり、このR9がp-メチル-フェニル-であり；XとYが-C=であり；WとZが-N=である、式Iの化合物：
ジクロロメタン(100 mL)、{3- [1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-プテリジン-2-イル)-2-メチル-プロピルアミノ]-プロピル}-カルバミン酸tert-ブチルエステル(390 mg, 0.836ミリモル)、およびDIEA(218 μL, 1.25ミリモル)の溶液に、塩化p-トルオイル(165μL, 1.25ミリモル)を滴下して添加した。その反応混液を50℃で3時間撹拌した後、ジクロロメタンで希釈し、飽和炭酸水素ナトリウム、水、および塩水で洗った。減圧下で濃縮した後、残査を逆相HPLCで精製して対応するトルアミド生成物である、{3-[[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-プテリジン-2-イル)-2-メチル-プロピル]-(4-メチル-ベンゾイル)-アミノ]-プロピル}-カルバミン酸tert-ブチルエステル(185 mg, 37.8％)を得た。 MS (Cl) M/E: 585.3 
9H  R2およびR3が水素であり；R5がベンジルであり；R6がイソプロピルであり；R6'が水素であり；R7が3-Boc-アミノ-プロピル-であり；R8が-C(O)-R9であり、このR9がp-メチル-フェニル-であり；XとYが-C=であり；WとZが-N=である、式Iの化合物：
トルアミド  {3-[[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-プテリジン-2-イル)-2-メチル-プロピル]-(4-メチル-ベンゾイル)-アミノ]-プロピル}-カルバミン酸tert-ブチルエステルをTFA/H2O(95/5)(50 mL)中に溶解し、室温で1時間撹拌した後、ジクロロメタンで希釈し、飽和炭酸水素ナトリウム、水、および塩水で洗い、硫酸ナトリウム上で乾燥した。このジクロロメタン溶液を濃縮して標題の生成物である、(±)-N-(3-アミノ-プロピル)-N-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-プテリジン-2-イル)-2-メチル-プロピル]-4-メチル-ベンズアミドを白色の固形物(150 mg, 98.0％)として得た。 MS (CI) M/E : 485.2。
【０３４８】
(±)-N-(3-アミノ-プロピル)-N-[1-(3-ベンジル-4-オキソ-3,4-ジヒドロ-プテリジン-2-イル)-2-メチル-プロピル]-4-メチル-ベンズアミドのキラル分離を次の条件で行って(R)-および(S)-エナンチオマーを得た：カラム-CHIRALPAK AD(250 x 20 mm)(Chiral Technologies, INC.)、サンプル EtOH中に0.5 mg/mL、条件-ヘキサン中でEtOAcを70％として60分間。
【０３４９】
（実施例10）
KSPインヒビターで処理された細胞集団への有糸分裂停止の導入
DNA含量を測定することによる、細胞サイクルステージ決定のためのFACS分析は次のとおり行われる。10 cmの皿にプレートするためにSkov-3細胞(ヒト卵巣癌細胞)を1:10に分割し、5％のウシ胎児血清(FBS)を含有するRPMI 1640培地でサブコンフルエンスとなるまで増殖させる。次いでその細胞を10 nMのパクリタクセル、400 nMの供試化合物、200 nMの供試化合物、または0.25％のDMSO(化合物のヴィークル)のいずれかで24時間処理する。パクリタクセルなどのよく知られた抗有糸分裂剤を陽性対照として用いる。次いで細胞を5 mMのEDTA含有のPBSで洗ってプレートから外し、ペレット化し、1％ FCS含有のPBSで1度洗った後、85％エタノール中で4℃で一晩かけて固定させる。分析前に細胞をペレット化し、1度洗い、1mLあたり10μgのポピドンヨードと250μgのリボヌクレアーゼ(RNAse)Aの溶液中で37℃で30分間染色する。フローサイトメトリー分析をBecton-Dickinson FACScanで行い、1サンプルあたり10,000個の細胞から得られたデータをModfitソフトウェアで分析する。
【０３５０】
式Iの化合物はこの細胞集団で細胞サイクルのG0/G1期(DNA含量は2n)から細胞サイクルのG2/M期(DNA含量は4n)へのシフトを起こさせる。
【０３５１】
KSPインヒビター適用後の単極性の紡錘糸形成 
G2/M期への細胞の集積の性質を調べるために、ヒト腫瘍細胞系統Skov-3(卵巣癌)、HeLa(子宮頚癌)、およびA549(肺癌)を、細胞4,000個/ウエル(Skov-3およびHeLa)、または8,000個/ウエル(A549)の密度で、96ウエルのプレートに蒔き、24時間付着させ、種々の濃度の供試化合物で24時間処理する。細胞を4％のホルムアルデヒド中で固定し、抗チューブリン抗体(その後、蛍光標識した二次抗体を用いて認識させることによって)およびHoechst染料(これはDNAを染色する)で染色する。
【０３５２】
肉眼的に観察すると本発明の供試化合物が有糸分裂の前中期で細胞サイクルの停止を起こさせることが判る。DNAは濃縮され、紡錘糸形成は開始されているが、停止した細胞では一様に単極性の紡錘糸が認められ、このことは紡錘糸の極体の分離の阻害が起こっていることを示している。抗KSP抗体をマイクロインジェクションしても有糸分裂の停止が起こり、その際、停止した細胞では単極性の紡錘糸が認められる。
【０３５３】
（実施例11）
KSPで処理された腫瘍細胞系統での細胞増殖の阻害
細胞を96ウエルのプレートに1000〜2500個/ウエルの密度(細胞系統によって異なる)で蒔き、24時間付着/増殖させる。次いでそれらの細胞を種々の濃度の供試化合物で48時間処理する。供試化合物が添加された時点をT0とする。試薬3-(4,5-ジメチルチアゾール-2-イル)-5-(3-カルボキシメトキシフェニル)-2-(4-スルホフェニル)-2H-テトラゾリウム(MTS)(米国特許第5,185,450号)(Promegaの製品カタログ#G3580, CellTiteR96 (登録商標) AQueous One Solution Cell Proliferation Assay)を、T0での生細胞数と48時間化合物に暴露された後の数を測定する。48時間後に残存している細胞数を供試化合物添加の時点での生細胞数と比較し、増殖阻害の計算を行う。
【０３５４】
ヴィークル(0.25％ DMSO)のみで処理した対照のウエル内での48時間後の細胞の増殖を100％の増殖と見なし、これと、供試化合物の入ったウエルでの細胞の増殖とを比較する。式IのKSPインヒビターは次の腫瘍のタイプのヒト腫瘍細胞系統の細胞増殖を阻害する：肺癌(NCI-H460, A549)、乳癌(MDA-MB-231, MCF-7, MCF-7/ADR-RES)、結腸癌(HT29, HCT15)、卵巣癌(SKOV-3, OVCAR3)、白血病(HL-60(TB), K-562)、中枢神経系(SF-268)、腎臓癌(A498)、骨肉腫(U2-OS)、および子宮頚癌(HeLa)。さらに、マウスの腫瘍細胞系統(B16, 悪性黒色腫)もこれらの化合物が存在すると増殖が阻害される。
【０３５５】
Gi50値は化合物の濃度をμMとし、それに対して処理したウエル内での細胞の増殖のパーセンテージをプロットすることによって計算される。これらの化合物についてこのように計算したGi50値は、対照と比較して増殖が50％阻害される推定濃度、すなわち、
100 x [(処理された細胞の増殖48−T0) / (対照の細胞の増殖48−T0)] = 50
このような状態の濃度を示す。
【０３５６】
供試化合物の全濃度について2回重複測定し、対照については12ウエルの平均をとる。これと非常に類似した96ウエルのプレートのレイアウトとGi50の計算スキームがNational Cancer Instituteで用いられている(Monksら, J. Natl. Cancer Inst. 83:757-766(1991)を参照せよ)。しかし、National Cancer Instituteが細胞数の定量に用いている方法ではMTSは使用しておらず、その替わりに別の方法をとっている。
【０３５７】
IC50の計算
ある化合物のKSP活性に対するIC50の測定にはATPaseアッセイを用いる。次の溶液を用いる：溶液1は3 mMのホスホエノールピルビン酸カリウム塩(Sigma P-7127)、 2 mM ATP(Sigma A-3377)、1 mM IDTT(Sigma D-9779)、5 μM パクリタクセル(Sigma T-7402)、10 ppmの消泡剤289(Sigma A- 8436)、25 mM Pipes/KOH pH 6.8(Sigma P6757)、2 mM MgC12(VWR JT400301)、および1 mM EGTA (Sigma E3889)からなる。溶液2は1 mM NADH(Sigma N8129)、0.2 mg/mL BSA(Sigma A7906)、ピルビン酸キナーゼ 7U/mL、L-乳酸デヒドロゲナーゼ 10 U/mL(Sigma P0294)、100 nM KSP モータードメイン、50μg/mL 微小管、1 mM DTT(Sigma D9779)、5 μM パクリタクセル(Sigma T-7402)、10 ppm 消泡剤289(Sigma A-8436)、25 mM Pipes/KOH pH 6.8(Sigma P6757)、2 mM MgC12(VWR JT4003-01)、および1 mM EGTA(Sigma E3889)からなる。溶液1を用いて供試化合物の順次希釈(8〜12倍希釈)を96ウエルのマイクロタイタープレート(Corning CostaR3695)中に作成する。順次希釈後、各ウエルには溶液1が50μL入っている。50μLの溶液2を各ウエルに添加することによって反応を開始する。このことはマルチチャンネルピペッターを用いて、手動で、または自動液体操作器具で行うことができる。次いでこのマイクロタイタープレートをマイクロプレート吸光度リーダーに移し、340nmでの多重吸光度測定を反応速度解析モード(kinetic mode)で各ウエルについて行う。ここで観察された変化速度、それはATPaseの生成速度に比例しているが、それを化合物の濃度の関数としてプロットする。標準IC50決定のために、得られたデータを次のパラメーター4個の等式にノンリニアフィッティングプログラム(例えば、Grafit 4)を用いてフィットさせる：
【数２】
2005536475.tif 000019
【０３５８】
式中、yは観察された速度であり、xは化合物の濃度である。
【０３５９】
式IのKSPインヒビター化合物は種々の細胞系統の増殖を阻害するが、そのような細胞系統には、P-糖タンパク質(多剤耐性、またはMDR＋としても知られている)を発現する細胞系統(MCF-7/ADR-RES, HCT1 5)が含まれ、このP-糖タンパク質はパクリタクセルなどの他の化学療法剤に対する耐性をもたらすものである。従って、式IのKSPインヒビター化合物は、細胞増殖を阻害するが、薬剤耐性の腫瘍細胞系統によるMDR＋の過剰発現による耐性の出現はない。
【０３６０】
本発明は特定の実施例を参照して説明してきたが、当業者であれば本発明の精神と範囲から乖離することなく種々の変更を行うことができ、等価のもので置き換えることが可能なことは理解されるべきである。さらに、ある特定の状況、材料、物質の組成、プロセス、プロセスステップもしくは複数のステップに適合させるために、本発明の目的、精神ｋ、および範囲に対して多数の改変を行うことができる。そのような改変は全て付属の特許請求の範囲の範囲内にあることを意図している。
【０３６１】
本明細書中に引用した全ての公表物、それらには、限定はされないが、特許および特許申請が含まれるが、それらの公表物は、あたかもそれらの個々の公表物が特別におよび個別に本明細書中に参照により組み入れられているのと同じ度合いで、その全体を本明細書中に参照により組み入れることとする。
【国際調査報告】
2005536475.tif 000021