(57)【要約】（Ａ）イソプロピルメチルフェノールを含有し実質的にエタノール無含有の液体口腔用組成物に、（Ｂ）Ｅ.Ｏ.４０〜１００モルのポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、（Ｃ）（Ｃ−１）デカグリセリンモノ脂肪酸エステル及び（Ｃ−２）トリ脂肪酸グリセリル、（Ｄ）グリセリン、プロピレングリコール、平均分子量１９０〜６３０のポリエチレングリコールから選ばれる多価アルコールを配合し、｛（Ｂ）及び（Ｃ−１）｝／｛（Ｃ−２）｝の質量比を０．７７〜１．８７、（Ｄ）の配合量を５〜１５質量％とし、グリセリンを０．００３質量％以上含有する、歯周病原性バイオフィルムへの浸透殺菌効果及びイソプロピルメチルフェノールの口腔内滞留性が高く、外観安定性が良好で低刺激性の乳化型液体口腔用組成物を提供する。  また、（Ａ）、（Ｂ）及び（Ｄ）成分を配合後、（Ｃ）成分をエマルジョンとして添加する上記組成物の製造方法も提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
（Ａ）イソプロピルメチルフェノールを含有し、実質的にエタノールを含有しない液体口腔用組成物に、
（Ｂ）エチレンオキサイドの平均付加モル数が４０〜１００モルのポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、
（Ｃ）（Ｃ−１）デカグリセリンモノ脂肪酸エステル及び（Ｃ−２）トリ脂肪酸グリセリル、
（Ｄ）グリセリン、プロピレングリコール、平均分子量１９０〜６３０のポリエチレングリコールから選ばれる少なくとも１種の多価アルコール
を配合し、｛（Ｂ）成分と（Ｃ−１）成分のデカグリセリンモノ脂肪酸エステルとの合計量｝／｛（Ｃ−２）成分のトリ脂肪酸グリセリル量｝の質量比を０．７７〜１．８７とし、かつ（Ｄ）成分の配合量を５〜１５質量％とし、かつグリセリンを０．００３質量％以上含有してなることを特徴とする乳化型液体口腔用組成物。
【請求項２】
（Ｃ）成分が、（Ｃ−１）デカグリセリンモノ脂肪酸エステル、（Ｃ−２）トリ脂肪酸グリセリル、（Ｃ−３）グリセリン及び水からなる平均粒径５０〜５００ｎｍのエマルジョンとして配合されたものである請求項１記載の乳化型液体口腔用組成物。
【請求項３】
（Ｂ）成分のポリオキシエチレン硬化ヒマシ油と（Ｃ−１）成分のデカグリセリンモノ脂肪酸エステルとの合計配合量が組成物全体の０．１８〜０．４９質量％である請求項１又は２記載の乳化型液体口腔用組成物。
【請求項４】
（Ｃ−１）成分のデカグリセリンモノ脂肪酸エステルの脂肪酸の炭素数が１２〜１６であり、（Ｃ−２）トリ脂肪酸グリセリルの脂肪酸の炭素数が６〜１２である請求項１、２又は３記載の乳化型液体口腔用組成物。
【請求項５】
（Ｄ）成分が、グリセリンとポリエチレングリコール４００、又はグリセリンとプロピレングリコールとポリエチレングリコール４００との組み合わせである請求項１乃至４のいずれか１項記載の乳化型液体口腔用組成物。
【請求項６】
組成物中のエタノール含有量が１００ｐｐｍ以下である請求項１乃至５のいずれか１項記載の乳化型液体口腔用組成物。
【請求項７】
更に、（Ｅ）ビタミンＥ類を配合した請求項１乃至６のいずれか１項記載の乳化型液体口腔用組成物。
【請求項８】
（Ｅ）成分を０．０５〜０．２質量％配合した請求項７記載の乳化型液体口腔用組成物。
【請求項９】
イソプロピルメチルフェノールを含有し、実質的にエタノールを含有しない液体口腔用組成物の製造方法であって、
（Ａ）イソプロピルメチルフェノール、
（Ｂ）エチレンオキサイドの平均付加モル数が４０〜１００モルのポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、及び
（Ｄ）グリセリン、プロピレングリコール、平均分子量１９０〜６３０のポリエチレングリコールから選ばれる少なくとも１種の多価アルコールを５〜１５質量％
配合した後、（Ｃ）（Ｃ−１）デカグリセリンモノ脂肪酸エステル、（Ｃ−２）トリ脂肪酸グリセリル、（Ｃ−３）グリセリン及び水からなる平均粒径５０〜５００ｎｍのエマルジョンを添加し、｛（Ｂ）成分と（Ｃ−１）成分のデカグリセリンモノ脂肪酸エステルとの合計量｝／｛（Ｃ−２）成分のトリ脂肪酸グリセリル量｝の質量比を０．７７〜１．８７としたことを特徴とする乳化型液体口腔用組成物の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、エタノールを無配合とし、かつ特定のエマルジョンを配合することで、薬用成分の口腔内滞留性を高め、かつ歯周病原性バイオフィルムに対する高い浸透殺菌効果を発揮し、高温及び低温保存時における外観安定性が良好で、使用時の刺激も緩和された、イソプロピルメチルフェノールを含有するノンアルコールタイプの乳化型液体口腔用組成物及びその製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
歯周病に限らず、う触及び口臭等の原因もバイオフィルム中の各種細菌によるものと考えられ、口腔内疾患の予防、改善に有効な手段として、バイオフィルム細菌の殺菌が口腔疾患の予防に重要であることから、非イオン性殺菌剤やカチオン性殺菌剤が口腔ケア製品に配合されてきた。特に、口腔ケア製品に配合される殺菌剤の中でイソプロピルメチルフェノール等の非イオン性殺菌剤は、カチオン性殺菌剤と比較して抗菌スペクトルが広い傾向にある特徴を有することから、幾つかの口腔用組成物に配合され、上市されている。中でもイソプロピルメチルフェノールは、他の殺菌成分にはない、歯周病原性バイオフィルムの中まで浸透し殺菌する優れた作用を有することから、歯周病予防において重要な成分である。また、これら殺菌剤や、抗炎症や血行促進、抗酸化といった効能を持つ薬用成分を口腔内に長時間滞留させておくことが、口腔内疾患の予防により重要である。【０００３】
従来、洗口剤等の液体口腔用組成物は、清涼感の補助、べたつき改善の目的のためエタノールが配合されているが、エタノールの配合により刺激が強いといった不快感が生じ、その使用を中止する使用者も多く見受けられる。また近年、口腔乾燥症といった口腔内が重度に渇いており、刺激に対して非常に敏感な人や、口腔乾燥症でなくてもエタノール特有の刺激に敏感な人が増えてきている。このような口腔乾燥症やエタノールに過敏な人には、使用時の簡便さや効果の点から洗口剤を使用する機会が増えてきているものの、エタノール配合の製剤を避ける傾向にある。【０００４】
このような状況で、近年、エタノール無配合の液体口腔用組成物が普及してきたが、このような製品では清涼感や口臭予防実感がどうしてもエタノール配合の洗口剤等の液体口腔用組成物と比較すると劣っていた。また、上記のようなイソプロピルメチルフェノール等の非イオン性殺菌成分は油溶性であるため、エタノールを配合せずに液体口腔用組成物に安定配合するには、エタノール配合組成よりも多量の界面活性剤の配合が必要となり、それによって低温及び高温保存における外観安定性とバイオフィルム殺菌力との両立が困難となり、また、界面活性剤による洗口剤使用時のぴりぴりとした刺激が生じるなどの問題があった。【０００５】
一方、出願人は、エタノールを配合した製剤にエマルジョンを配合することで、エタノール特有の刺激を緩和し、かつ口腔内に薬剤を長く滞留させる技術を提案した（特許文献１参照）。しかし、この技術はエタノール含有組成に関するものであり、洗口し吐き出した後の刺激においてはある程度緩和されるが、使用者、特に上記のような口腔乾燥者などが、口中に含んで洗口時にエタノール特有の刺激が感じられ、また、エタノール配合というイメージの点からも上記製剤は使用が敬遠される傾向があった。更には、この特許文献１では、油溶性の有効成分を一緒に乳化させることで、口腔粘膜にエマルジョンが滞留して有効成分の滞留性が向上するものであるが、有効成分がエマルジョン中に含まれているため殺菌効果が十分に発揮され難く、バイオフィルムへの殺菌力が低下し、う触・歯周病・口臭予防効果が十分発揮されるとは言い難いものであった。また、外観安定性においても、高温長期保存や低温長期保存（凍結保存）においてエマルジョンが崩壊し易く、製剤の外観安定性についても未だ満足し難く、これらの点で改善の余地があった。【０００６】
以上の問題点から、歯周病等の口腔疾患の予防効果が高く、かつ、口腔乾燥者が使用しても洗口時の刺激が低く、外観安定性も良好なノンアルコールタイプの液体口腔用組成物の開発が望まれる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】特開２００５−１７９２３１号公報
【特許文献２】国際公開第０７／１４８５５１号パンフレット
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明は上記事情に鑑みなされたもので、歯周病原性バイオフィルムに対する高い浸透殺菌効果を発揮し、薬剤の口腔内滞留性も高く、かつ高温保存及び低温（凍結）保存における外観安定性も良好で、低刺激性である、イソプロピルメチルフェノールを含有するノンアルコールタイプの液体口腔用組成物及びその製造方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明者らは、鋭意検討を重ねた結果、殺菌成分として（Ａ）イソプロピルメチルフェノールを含有し、実質的にエタノールを含まない液体口腔用組成物に、（Ｂ）エチレンオキサイドの平均付加モル数が４０〜１００モルのポリオキシエチレン硬化ヒマシ油と、（Ｃ）（Ｃ−１）デカグリセリンモノ脂肪酸エステル及び（Ｃ−２）トリ脂肪酸グリセリルと、（Ｄ）グリセリン、プロピレングリコール、平均分子量１９０〜６３０のポリエチレングリコールから選ばれる１種又は２種以上の多価アルコールとを配合し、かつノニオン性界面活性剤である（Ｂ）成分のポリオキシエチレン硬化ヒマシ油と（Ｃ）成分中の（Ｃ−１）デカグリセリンモノ脂肪酸エステルとの合計量と、油性成分である（Ｃ）成分中の（Ｃ−２）トリ脂肪酸グリセリルの量との質量比を適切な割合とし、（Ｄ）成分の多価アルコールの配合量を適切にし、グリセリンを０．００３質量％以上含有することによって、上記目的を達成できることを見出した。
また、イソプロピルメチルフェノールを含有し、実質的にエタノールを含有しない液体口腔用組成物の製造方法において、上記（Ａ）、（Ｂ）及び（Ｄ）成分を適切に配合した後、（Ｃ）成分として上記（Ｃ−１）成分、（Ｃ−２）成分、（Ｃ−３）グリセリン及び水からなるエマルジョンを添加し、｛（Ｂ）成分と（Ｃ−１）成分との合計量｝／｛（Ｃ−２）成分量｝の質量比を適切にすることによって、上記乳化型液体口腔用組成物を製造できることを見出した。
本発明によれば、歯周病原性バイオフィルムへの高い浸透殺菌力が発揮され、薬用成分であるイソプロピルメチルフェノールの口腔内滞留性も高く、しかも、高温や低温で保存しても外観安定性が良好であり、口腔内の刺激に過敏な人が使用しても刺激を感じることがほとんどない低刺激性の乳化型液体口腔用組成物が得られる。【００１０】
出願人は、バイオフィルム殺菌力と外観安定性を両立する技術として、イソプロピルメチルフェノールを含有する液体口腔用組成物に、特定のアニオン性界面活性剤、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリオキシエチレンアルキルエーテルから選ばれる非イオン性界面活性剤、多価アルコールを配合し、かつ組成物中の水分量を７０質量％以上とし、エタノール無配合とした液体口腔用組成物を提案した（特許文献２参照）が、この技術では、口腔乾燥者が使用した場合は未だ洗口時の刺激を感じ、また、薬用成分の口腔内滞留性についても改善の余地があった。【００１１】
そこで、本発明者らは、イソプロピルメチルフェノールを含有し、エタノールを実質的に含有しないノンアルコールタイプの液体口腔用組成物について更に検討を進めた。その結果、上記液体口腔用組成物に、可溶化剤としての特定のポリオキシエチレン硬化ヒマシ油と、乳化剤として上記（Ｃ）成分とを併用し、特に（Ｃ）成分を予め調製した特定平均粒径のエマルジョンとして配合し、両成分中のノニオン性界面活性剤の総量とエマルジョン中に含まれる油性成分との割合が適切になるように配合し、かつ特定の多価アルコールを適切に配合することによって、上記エマルジョンが安定配合され、上記課題を解決して歯周病原性バイオフィルム殺菌力と外観安定性が両立し、かつ低刺激性となることを見出した。本発明では、その作用機序は不明であるが、おそらく、油溶性のイソプロピルメチルフェノールを最初から乳化させて配合するのとは異なり、上記エマルジョンを後添加することによって、イソプロピルメチルフェノールが完全にはエマルジョン中に取り込まれることなく製剤中に安定に配合されると推測される。このため、イソプロピルメチルフェノールに由来する口腔内バイオフィルムの殺菌力低下が抑制でき高い殺菌力が発揮される上、高温や低温で３ヶ月間保存しても、エマルジョンが安定に維持され、これにより、乳化が不安定になって製剤の色調が退色したり、油性成分が分離して液分離することがなく、製剤の外観安定性に優れるものと考えられる。更に、（Ｄ）成分を適切に配合することによって、界面活性剤による刺激も抑えることができる。しかも、本発明では、エタノールを配合せず、更に界面活性剤を多く配合しなくてもよいので、使用時、例えば洗口時において低刺激性の製剤とすることもできる。
なお、本発明では、上記（Ｃ）成分を、（Ｂ）成分、更には（Ｄ）成分と組み合わせ適切に配合することで本発明の作用効果が達成されるものであり、不適切なエマルジョンを配合しても、あるいは上記必須要件の何れかを欠いても、本発明の目的は達成されない。
本発明の液体口腔用組成物は、口腔乾燥症といった口腔内が重度に渇いていたり、刺激に対して非常に敏感な人や、エタノールに過敏な人など、口腔内の刺激に過敏な人でも使用し易く、歯周病等の口腔内疾患の予防又は改善に有効である。【００１２】
従って、本発明は、下記の乳化型液体口腔用組成物を提供する。
請求項１：
（Ａ）イソプロピルメチルフェノールを含有し、実質的にエタノールを含有しない液体口腔用組成物に、
（Ｂ）エチレンオキサイドの平均付加モル数が４０〜１００モルのポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、
（Ｃ）（Ｃ−１）デカグリセリンモノ脂肪酸エステル及び（Ｃ−２）トリ脂肪酸グリセリル、
（Ｄ）グリセリン、プロピレングリコール、平均分子量１９０〜６３０のポリエチレングリコールから選ばれる少なくとも１種の多価アルコール
を配合し、｛（Ｂ）成分と（Ｃ−１）成分のデカグリセリンモノ脂肪酸エステルとの合計量｝／｛（Ｃ−２）成分のトリ脂肪酸グリセリル量｝の質量比を０．７７〜１．８７とし、かつ（Ｄ）成分の配合量を５〜１５質量％とし、かつグリセリンを０．００３質量％以上含有してなることを特徴とする乳化型液体口腔用組成物。
請求項２：
（Ｃ）成分が、（Ｃ−１）デカグリセリンモノ脂肪酸エステル、（Ｃ−２）トリ脂肪酸グリセリル、（Ｃ−３）グリセリン及び水からなる平均粒径５０〜５００ｎｍのエマルジョンとして配合されたものである請求項１記載の乳化型液体口腔用組成物。
請求項３：
（Ｂ）成分のポリオキシエチレン硬化ヒマシ油と（Ｃ−１）成分のデカグリセリンモノ脂肪酸エステルとの合計配合量が組成物全体の０．１８〜０．４９質量％である請求項１又は２記載の乳化型液体口腔用組成物。
請求項４：
（Ｃ−１）成分のデカグリセリンモノ脂肪酸エステルの脂肪酸の炭素数が１２〜１６であり、（Ｃ−２）トリ脂肪酸グリセリルの脂肪酸の炭素数が６〜１２である請求項１、２又は３記載の乳化型液体口腔用組成物。
請求項５：
（Ｄ）成分が、グリセリンとポリエチレングリコール４００、又はグリセリンとプロピレングリコールとポリエチレングリコール４００との組み合わせである請求項１乃至４のいずれか１項記載の乳化型液体口腔用組成物。
請求項６：
組成物中のエタノール含有量が１００ｐｐｍ以下である請求項１乃至５のいずれか１項記載の乳化型液体口腔用組成物。
請求項７：
更に、（Ｅ）ビタミンＥ類を配合した請求項１乃至６のいずれか１項記載の乳化型液体口腔用組成物。
請求項８：
（Ｅ）成分を０．０５〜０．２質量％配合した請求項７記載の乳化型液体口腔用組成物。
請求項９：
イソプロピルメチルフェノールを含有し、実質的にエタノールを含有しない液体口腔用組成物の製造方法であって、
（Ａ）イソプロピルメチルフェノール、
（Ｂ）エチレンオキサイドの平均付加モル数が４０〜１００モルのポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、及び
（Ｄ）グリセリン、プロピレングリコール、平均分子量１９０〜６３０のポリエチレングリコールから選ばれる少なくとも１種の多価アルコールを５〜１５質量％
配合した後、（Ｃ）（Ｃ−１）デカグリセリンモノ脂肪酸エステル、（Ｃ−２）トリ脂肪酸グリセリル、（Ｃ−３）グリセリン及び水からなる平均粒径５０〜５００ｎｍのエマルジョンを添加し、｛（Ｂ）成分と（Ｃ−１）成分のデカグリセリンモノ脂肪酸エステルとの合計量｝／｛（Ｃ−２）成分のトリ脂肪酸グリセリル量｝の質量比を０．７７〜１．８７としたことを特徴とする乳化型液体口腔用組成物の製造方法。
【発明の効果】
【００１３】
本発明によれば、イソプロピルメチルフェノールを含有し、エタノール無配合の液体口腔用組成物において、歯周病原性バイオフィルムに対して高い浸透殺菌効果が発揮され、イソプロピルメチルフェノールの口腔内滞留性が高まる上、低温及び高温保存時の経時の外観安定性が良好で、洗口時の口腔内刺激がほとんどない低刺激性の乳化型液体口腔用組成物を得ることができる。従って、本発明組成物は、歯周病の予防又は抑制用として、特に口腔乾燥症状等で口腔内が重度に乾いていたり、エタノール特有の刺激に敏感であるといった口腔内の刺激に対して過敏な使用者にも有効である。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
以下、本発明につき更に詳細に説明すると、本発明の乳化型液体口腔用組成物は、殺菌成分として（Ａ）イソプロピルメチルフェノールを含有し、実質的にエタノールを含有しない液体口腔用組成物に、可溶化剤として（Ｂ）エチレンオキサイドの平均付加モル数が４０〜１００モルのポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、乳化剤として（Ｃ）（Ｃ−１）デカグリセリンモノ脂肪酸エステル及び（Ｃ−２）トリ脂肪酸グリセリル、多価アルコールとして（Ｄ）グリセリン、プロピレングリコール、平均分子量１９０〜６３０のポリエチレングリコールから選ばれる少なくとも１種を配合したものである。この場合、（Ｃ）成分は、（Ｃ−１）デカグリセリンモノ脂肪酸エステル、（Ｃ−２）トリ脂肪酸グリセリル、（Ｃ−３）グリセリン及び水からなる平均粒径５０〜５００ｎｍのエマルジョンとして配合されることが好ましい。
【００１５】
本発明の乳化型液体口腔用組成物において、（Ａ）イソプロピルメチルフェノールの配合量は特に限定されないが、歯周病原性バイオフィルムへの浸透殺菌効果及び外観安定性の点で、組成物全体の０．０１〜０．１％（質量％、以下同様。）、特に０．０３〜０．０８％が好ましい。配合量が０．０１％未満では口腔バイオフィルムに対して満足な浸透殺菌力が発揮されない場合があり、０．１％を超えると外観安定性を損ねる場合がある。
【００１６】
（Ｂ）成分のポリオキシエチレン硬化ヒマシ油は、エチレンオキサイドの平均付加モル数が４０〜１００モル、好ましくは６０〜１００モルのものである。平均付加モル数が４０モル未満では、低温保存時に析出してしまい、１００モルを超えるものは一般に市販されていない。
【００１７】
（Ｂ）成分の配合量は、（Ａ）成分の可溶化、歯周病原性バイオフィルムへの殺菌力、及び外観安定性の点で、組成物全体の０．１５〜０．４０％、特に０．２０〜０．３０％が好ましい。配合量が０．１５％未満では外観安定性に劣る場合があり、０．４０％を超えると歯周病原性バイオフィルムへの殺菌力を損ねる場合がある。
【００１８】
（Ｃ）成分は、（Ｃ−１）デカグリセリンモノ脂肪酸エステル及び（Ｃ−２）トリ脂肪酸グリセリルであり、（Ｃ−１）デカグリセリンモノ脂肪酸エステル、（Ｃ−２）トリ脂肪酸グリセリル、（Ｃ−３）グリセリン及び水からなる平均粒径５０〜５００ｎｍのエマルジョンとして配合することができる。油性成分がトリ脂肪酸グリセリル、グリセリンであり、水性成分が水であり、ノニオン性界面活性剤であるデカグリセリンモノ脂肪酸エステルを使用して混合し、エマルジョンを調製することができる。
なお、本発明において、（Ａ）成分のイソプロピルメチルフェノールは組成物中に油性成分として配合されるもので、上記エマルジョン調整時には含有しない。
【００１９】
上記エマルジョンにおいて、デカグリセリンモノ脂肪酸エステルとしては、脂肪酸の炭素数が１２〜１６のものが好適であり、例えばモノミリスチン酸デカグリセリル、モノラウリン酸デカグリセリル等が挙げられる。
デカグリセリンモノ脂肪酸エステルの配合量は、通常、エマルジョン中に５〜１５％として用いることができる。５％未満では油性成分が分離し、１５％を超えるとゲル化を生じる場合がある。
【００２０】
また、エマルジョン中のトリ脂肪酸グリセリルとしては、炭素鎖長６〜１２のものが好適であり、例えばトリカプリル酸グリセリル、トリカプリン酸グリセリル、トリ（カプリル・カプリン酸）グリセリル等が挙げられる。
トリ脂肪酸グリセリルは１種又は２種以上が用いられ、その配合量は、通常、エマルジョン中に４０〜６０％とすることができる。４０％未満ではエマルジョンが形成できず、６０％を超えると油性成分が分離し、外観安定性を損ねる場合がある。
【００２１】
更に、エマルジョン中のグリセリンの含有量は、１〜３０％、特に１０〜２０％とすることができる。１％未満では界面活性剤の均一溶解が煩雑になり、３０％を超えると油性成分が分離する場合がある。
【００２２】
エマルジョンの平均粒径は５０〜５００ｎｍであり、特に１００〜３００ｎｍであることが好ましい。平均粒径が上記範囲外であると、外観安定性に劣り、本発明の目的を達成できない場合がある。なお、エマルジョンの平均粒径の測定法は実施例に記載の方法による。
【００２３】
エマルジョンの形態はＯ／Ｗ型である。その調製方法は、例えば所定量のデカグリセリンモノ脂肪酸エステル、グリセリン及び半量の水をホモミキサーで撹拌後、トリ脂肪酸グリセリルを加え、エマルジョンを形成させ、最後に残りの水を加えて調製することができる。その後、作成したエマルジョンを、高圧ホモジナイザーを用いて平均粒径を調節する方法が好ましく採用し得る。このように調製したエマルジョンを液体口腔用組成物に所定量添加することにより、目的の口腔用組成物が得られる。
なお、かかるエマルジョンとして、市販品、例えば日光ケミカルズ製ＮＥＴ−ＴＥ−５０等を使用することができる。
【００２４】
（Ｃ）成分のエマルジョンの配合量は、組成物全体の０．３〜０．９％、特に０．４〜０．７％が好ましい。配合量が０．３％未満では、高温保存において組成物の色調が退色（透明化）し、外観安定性を損なう場合があり、０．９％を超えると歯周病原性バイオフィルムへの殺菌力や外観安定性を損なう場合がある。
【００２５】
本発明組成物では、ノニオン性界面活性剤である（Ｂ）成分のポリオキシエチレン硬化ヒマシ油及び（Ｃ）成分中に含まれる（Ｃ−１）デカグリセリンモノ脂肪酸エステルの合計量と、（Ｃ）成分中に含まれる（Ｃ−２）トリ脂肪酸グリセリルの量との割合、即ち｛（Ｂ）成分と（Ｃ）成分中の（Ｃ−１）デカグリセリンモノ脂肪酸エステルとの合計量｝／｛（Ｃ）成分中の（Ｃ−２）トリ脂肪酸グリセリル量｝の質量比を０．７７〜１．８７、好ましくは１．００〜１．２０とする。上記割合が０．７７に満たないと、低温（凍結）保存においてエマルジョンが崩壊し、油が分離して外観安定性を損ねる場合があり、１．８７を超えると高温保存において色調が退色し、外観安定性を損ねる場合がある。
【００２６】
更に、（Ｂ）成分のポリオキシエチレン硬化ヒマシ油と（Ｃ）成分のデカグリセリンモノ脂肪酸エステルとの合計配合量は、組成物全体の０．１８〜０．４９％、特に０．２〜０．３７％であることが好ましい。合計配合量を上記範囲とすることが、歯周病原性バイオフィルムへの高い浸透殺菌力が発揮され、しかも、高温や低温で保存しても外観安定性が良好な組成物を得るのにより有効である。配合量が０．１８％に満たないと低温（凍結）保存において、油が分離して外観安定性を損ねる場合があり、０．４９％を超えると歯周病原性バイオフィルムへの殺菌力を損ねる場合がある。
【００２７】
（Ｄ）成分の多価アルコールとしては、グリセリン、プロピレングリコール、平均分子量１９０〜６３０のポリエチレングリコールから選ばれるものを、１種単独で又は２種以上を組み合わせて使用する。
【００２８】
なお、上述した平均分子量は、医薬部外品原料規格２００６記載の平均分子量を示し、これはピリジン中で無水フタル酸と反応させてフタル酸エステルとし、水酸化ナトリウムで滴定することにより測定した平均分子量である。
平均分子量１９０〜６３０のポリエチレングリコールとしてはポリエチレングリコール２００（平均分子量１９０〜２１０）、ポリエチレングリコール３００（平均分子量２９０〜３１０）、ポリエチレングリコール４００（平均分子量３９０〜４１０）、ポリエチレングリコール６００（５９０〜６１０）が該当する。商品によってはポリエチレングリコール♯２００のように、ポリエチレングリコールと数値の間に♯がつく場合がある。
【００２９】
更に、（Ｄ）成分の配合種は使用時の刺激と外観安定性の点から２種以上用いることが好ましく、３種以上用いることがより好ましい。２種での組合せとしては、グリセリンとポリエチレングリコール４００、３種の組み合わせとしては、グリセリンとプロピレングリコールとポリエチレングリコール４００の組み合わせが好ましい。
【００３０】
（Ｄ）成分の総配合量は、組成物全体の５〜１５％であり、特に低温及び高温での外観安定性及び使用時の刺激の点で６〜１３％が好ましい。配合量が５％未満では低温及び高温での外観安定性を維持するのが難しく、また、界面活性剤に由来する刺激を抑えられない場合があり、１５％を超えると色調が退色し、外観安定性を損ねる場合がある。
【００３１】
（Ｄ）成分として配合する場合、グリセリンは組成物全体の０．５％以上、プロピレングリコールは組成物全体の１％以上、ブチレングリコールは組成物全体の１％以上、平均分子量１９０〜６３０のポリエチレングリコールは組成物全体の１％以上配合することが好ましい。
なお、グリセリンの組成物中の含有量は０．００３質量％以上である。
【００３２】
本発明の液体口腔用組成物には、更に（Ｅ）ビタミンＥ類を配合することが好ましく、これにより上記優れた特性を奏すると共に、血行促進効果を向上させることもできる。本発明においてビタミンＥ類としては、トコフェロール、トコトリエールや、トコフェロール酢酸エステル、トコフェロールニコチン酸エステル等のトコフェロールエステル誘導体が挙げられ、これらから選ばれる１種又は２種以上を使用できる。（Ｅ）成分の配合量は、組成物全体の０．０５〜０．２％、特に０．０５〜０．１５％が好ましく、配合量が０．０５％未満では血行促進効果が満足に得られず、０．２％を超えると製剤が分離して外観安定性を損ねる場合がある。
【００３３】
本発明の液体口腔用組成物は、実質的にエタノールを含まないものである。ここで、「実質的にエタノールを含まない」とは、組成物中のエタノール量が組成全体に対して好ましくは１００ｐｐｍ以下、より好ましくは５０ｐｐｍ以下、特に好ましくは１０ｐｐｍ以下のものであり、下限値は０ｐｐｍである。なお、本発明の液体口腔用組成物は、エタノールを無配合であるが、組成物中に配合される香料中に原料由来のエタノールが微量含有される場合などがあるため、これらの理由を考慮した上で、香料中などに微量含有されるエタノール以外にエタノールを含まないものである。
【００３４】
本発明の液体口腔用組成物は、洗口剤、液体歯磨などとして調製、適用することができ、その剤型に応じて、本発明の効果を妨げない範囲で、上記成分に加えてその他の適宜な公知成分を配合することができる。例えば、溶剤、（Ｄ）成分の多価アルコール以外の湿潤剤、増粘剤、（Ｂ）成分及び（Ｃ）成分の界面活性剤以外の界面活性剤、溶剤、更に必要により、ｐＨ調整剤、防腐剤、甘味剤、香料、（Ａ）成分及び（Ｅ）成分以外の有効成分、着色料等を含有できる。
【００３５】
湿潤剤としては、（Ｄ）成分の多価アルコール以外のもの、例えばソルビトール、キシリット、マルチット、ラクチット等の糖アルコール、エチレングリコールなどが挙げられる。これら湿潤剤を配合する場合は、（Ｄ）成分の多価アルコールを含めた配合量が５〜１５％となる範囲が望ましい。
【００３６】
増粘剤としては、キサンタンガム、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルアルコール等を本発明の効果を妨げない範囲で含有することができる（配合量は通常０〜５％で、配合する場合は０．０１〜５％。）。
【００３７】
ｐＨ調整剤としては、フタル酸、リン酸、クエン酸、コハク酸、酢酸、フマル酸、リンゴ酸及び炭酸並びにそれらのカリウム塩、ナトリウム塩及びアンモニウム塩、リボ核酸及びその塩類、更に水酸化ナトリウムなどの１種又は２種以上を用いることができ、特にリン酸、クエン酸とそれらのナトリウム塩を組み合わせたものが好ましい。特に、本発明の液体口腔用組成物は、２５℃におけるｐＨを５．５〜７．５に調整することが好ましく、この付近のｐＨ調整剤としてリン酸二水素ナトリウムとリン酸一水素ナトリウム、あるいはクエン酸とクエン酸ナトリウムを組み合わせたものを用いることが好ましい。
溶剤としては、通常、精製水が用いられる。溶剤の配合量は通常６０〜９４．４９％である。
【００３８】
防腐剤としては、安息香酸ナトリウム、メチルパラベン、エチルパラベン、プロピルパラベン、ブチルパラベン等のパラオキシ安息香酸エステル、塩酸アルキルジアミノエチルグリシン、ソルビン酸カリウム等を含有することができる。
【００３９】
また、甘味剤としてはサッカリンナトリウム、ステビオサイト、スクラロース、還元パラチノース、エリスリトール等を含有することができる。
【００４０】
香料としては、ペパーミント油、スペアミント油、ユーカリ油、ウィンターグリーン油、クローブ油、タイム油、セージ油、カルダモン油、ローズマリー油、マジョラム油、レモン油、ナツメグ油、ラベンダー油、パラクレス油等の天然精油、及びｌ−カルボン、１，８−シネオール、メチルサリシレート、オイゲノール、チモール、リナロール、リモネン、メントン、メンチルアセテート、シトラール、カンファー、ボルネオール、ピネン、スピラントール等の上記天然精油中に含まれる香料成分、また、エチルアセテート、エチルブチレート、イソアミルアセテート、ヘキサナール、ヘキセナール、メチルアンスラニレート、エチルメチルフェニルグリシデート、ベンツアルデヒド、バニリン、エチルバニリン、フラネオール、マルトール、エチルマルトール、ガンマ／デルタデカラクトン、ガンマ／デルタウンデカラクトン、Ｎ−エチル−ｐ−メンタン−３−カルボキサミド、メンチルラクテート、エチレングリコール−ｌ−メンチルカーボネート等の香料成分、更には、いくつかの香料成分や天然精油を組み合わせて（エタノールを含まない）なる、アップル、バナナ、ストロベリー、ブルーベリー、メロン、ピーチ、パイナップル、グレープ、マスカット、ワイン、チェリー、スカッシュ、コーヒー、ブランデー、ヨーグルト等の調合フレーバーの１種又は２種以上を、本発明の組成物中０．００００１〜３％、本発明の効果を妨げない範囲で使用することができる。
【００４１】
上記（Ｂ）成分、（Ｃ）成分としてのノニオン性界面活性剤以外の界面活性剤としては、例えば、アルキル硫酸塩（例えばラウリル硫酸ナトリウム、ラウリル硫酸カリウム、ミリスチル硫酸ナトリウム、ミリスチル硫酸カリウムなどのアルキル基が１２〜１６のアルキル硫酸のアルカリ金属塩）、アシル基の炭素数が１２〜１６のＮ−アシルアミノ酸アルカリ金属塩、ラウロイルメチルタウリン、アシルアミノ酸塩、ドデシルベンゼンスルホン酸ナトリウム、α−スルホ脂肪酸アルキルエステル・ナトリウム、アルキルリン酸エステル塩等のアニオン性界面活性剤、アルキルジメチルアミノ酢酸ベタイン、脂肪酸アミドプロピルジメチルアミノ酢酸ベタインなどの酢酸ベタイン型両性界面活性剤、Ｎ−脂肪酸アシル−Ｎ−カルボキシメチル−Ｎ−ヒドロキシエチルエチレンジアミン塩などのイミダゾリン型両性界面活性剤、Ｎ−脂肪酸アシル−Ｌ−アルギネート塩等のアミノ酸型界面活性剤等の両性界面活性剤などが挙げられ、本発明の効果を妨げない範囲で１種単独又は２種以上を組み合わせて配合できる。なお、本発明では、上記（Ｂ）成分と（Ｃ）成分としてのノニオン性界面活性剤以外の界面活性剤、特にノニオン性界面活性剤は、配合しなくてもよく、０％でもよいが、配合する場合は組成全体の０．０１〜１％が望ましい。
【００４２】
有効成分としては、イソプロピルメチルフェノール、更にはトコフェロール酢酸エステルに加えて、その他の成分、例えばトリクロサン、塩化セチルピリジニウム等の殺菌剤、トラネキサム酸、イプシロン−アミノカプロン酸などの抗炎症剤、デキストラナーゼ、アミラーゼ、プロテアーゼ、ムタナーゼ、リゾチーム、溶菌酵素、リテックエンザイム等の酵素、フッ化ナトリウム、モノフルオロリン酸ナトリウム、フッ化第一錫等のフッ化物、アルミニウムクロルヒドロキシアラントイン、アラントイン、アズレン、塩化リゾチーム、アスコルビン酸等のビタミンＣ類、ジヒドロコレステロール、グリチルレチン塩類、グリチルレチン酸類、ヒドロコレステロール、クロロフィル、銅クロロフィリンナトリウム、タイム、オウゴン、チョウジ、ハマメリス等の植物抽出物、グルコン酸銅、カロペプタイド、ポリリン酸ナトリウム、水溶性無機リン酸化合物、ポリビニルピロリドン、ラウロイルサルコシンナトリウム、歯石防止剤、歯垢防止剤、硝酸カリウム、乳酸アルミニウム等を添加することができる。なお、これらの有効成分の配合量は、本発明の効果を妨げない範囲で含有することができる。
【００４３】
着色料として、青色１号、緑色３号、黄色４号、赤色１０５号など安全性の高い水溶性色素を添加することができる
【００４４】
容器としては、ＰＥＴ（ポリエチレンテレフタレート）、ガラス、ポリプロピレン、ポリエチレンが使用できるが、非イオン性殺菌剤及び香料の吸着抑制の点からＰＥＴとガラスの使用が好ましい。
【実施例】
【００４５】
以下、実験例、実施例及び比較例を示し、本発明を具体的に説明するが、本発明は下記の実施例に制限されるものではない。【００４６】
各例の液体口腔用組成物の調製には、イソプロピルメチルフェノール（大阪化成社製）、ポリオキシエチレン（６０）硬化ヒマシ油（日光ケミカルズ社製）、ポリオキシエチレン（８０）硬化ヒマシ油（日光ケミカルズ社製）、エマルジョン（平均粒径２００ｎｍ、ＮＥＴ−ＴＥ５０、日光ケミカルズ社製）、グリセリン（１００％、阪本薬品工業社製）、プロピレングリコール（旭硝子社製）、ポリエチレングリコール♯４００（ライオンケミカル社製）、トコフェロール酢酸エステル（ＤＳＭニュートリジャパン社製）、クエン酸（扶桑化学社製）、クエン酸ナトリウム（扶桑化学社製）を用いた。また、トリクロサン（チバ・スペシャルティ・ケミカルズ社製）、ポリオキシエチレン（３０）硬化ヒマシ油（日光ケミカルズ社製）、エマルジョン（比較エマルジョン、平均粒径１０ｎｍ、日光ケミカルズ社製）、エタノール（日本アルコール販売社製）を比較例に使用した。なお、表中のＰＯＥはポリオキシエチレンを示し、下記に示す％は特に断らない限りいずれも質量％を意味する。また、上記エマルジョンの組成を以下に示す。【００４７】
［エマルジョン（平均粒径２００ｎｍ）の組成］
モノミリスチン酸デカグリセリル                                １０％
トリ（カプリル・カプリン酸）グリセリル                        ５０
グリセリン                                                    １５
水                                                            ２５  
合計                                                      １００％【００４８】
［比較例エマルジョン（平均粒径１０ｎｍ）の組成及び調製法］
モノラウリン酸デカグリセリル                                  １０％
オリーブ油                                                    ５０
グリセリン                                                    １５
水                                                            ２５  
合計                                                      １００％
グリセリン、半量の水、モノラウリン酸デカグリセリルを予備撹拌後、オリーブ油を加えて、ホモミキサーで撹拌し、最後に残りの水を加えて調製した。【００４９】
エマルジョンの平均粒径は、下記方法で測定した。
［平均粒径の測定方法］
ＢＥＣＫＭＡＮ  ＣＯＵＬＴＥＲ社製、動的光散乱光度計Ｎ５を用いて、エマルジョンを精製水で１００倍に希釈し、セルに入れて２５℃での平均粒径を測定した。【００５０】
〔実験例１〕
表１〜５に示す組成の液体口腔用組成物（洗口剤）を常法により調製し、最後にエマルジョンを分散させ、下記評価を行った。結果を表１〜５に示す。【００５１】
外観安定性の評価：
サンプルの液体口腔用組成物を満注量４５０ｍＬのＰＥＴ容器（ポリエチレンテレフタレート容器  吉野工業所製）に４５０ｍＬ充填し、５０℃恒温槽に３ヶ月保存後、又は−１０℃恒温槽に３ヶ月保存後の安定性について、対照品（実施例３の初期品）との比較で下記基準に則り、目視判定した。
外観安定性（５０℃、３ヶ月）の評価基準
◎：製剤の色調に変化が認められない。
○：僅かに製剤の色調の退色が進んでいるが問題ないレベルである。
△：製剤の色調の退色が進んでいる。
×：対照品と比較しなくても著しく製剤の色調が退色している。
なお、上記評価及び下記評価において退色が進むとは、製剤の調製直後の色調が白色であったものが透明に退色していく状態であり、その原因は、詳細は不明であるが、製剤中の遊離界面活性剤による可溶化と考えられる。
外観安定性（−１０℃、３ヶ月）の評価基準
◎：変化が認められない。
○：ごく僅かに分離が見られるが問題ないレベルである。
△：分離が進んでいる。
×：かなりの分離が認められ、製剤の色調の退色も進んでいる。【００５２】
〔実験例２〕
表１〜５に示す液体口腔用組成物について、歯周病原性バイオフィルム浸透殺菌力を下記方法で評価した。結果を表１〜５に示す。
バイオフィルム浸透殺菌力の評価：
（１）モデル歯周病原性バイオフィルムの作製方法
直径７ｍｍ×厚さ３．５ｍｍのハイドロキシアパタイト（ＨＡ）板（旭光学社製）を０．４５μｍのフィルターでろ過したヒト無刺激唾液で４時間処理したものをモデルバイオフィルム作製の担体に用い、培養液は、トリプチケースソイブロス（Ｄｉｆｃｏ社製）３０ｇを１Ｌの精製水に溶解した液にヘミン（シグマ社製）５ｍｇ、メナジオン（シグマ社製）０．５ｍｇを添加したものを用いた。モデルバイオフィルムを作製するために、口腔常在細菌としてストレプトコッカス  ゴルドニアイ  ＡＴＣ５１６５６株及びアクチノマイセス  ナエスランディ  ＡＴＣＣ５１６５５株、病原性細菌としてポルフィロモナス  ジンジバリス  ＡＴＣＣ３３２７７株を用いた。これら３菌種をそれぞれ２×１０7ｃｆｕ／ｍＬ（ｃｆｕ：ｃｏｌｏｎｙ  ｆｏｒｍｉｎｇ  ｕｎｉｔｓ）になるように上述の培養液に接種し、唾液処理したＨＡ担体と共に３７℃、嫌気条件下（５容量％炭酸ガス、９５容量％窒素）で２週間連続培養（培養液の置換率は１０容量％とした）を行い、ＨＡ表面に３菌種混合のモデルバイオフィルムを形成させた。【００５３】
（２）モデルバイオフィルムに対する浸透殺菌効果
形成させたモデルバイオフィルムを表に示したサンプル（液体口腔用組成物）２ｍＬに３分間浸漬し、滅菌生理食塩水１ｍＬで６回洗浄した。その後、滅菌生理食塩水４ｍＬで超音波処理（２００μＡ、１０秒間）によりモデルバイオフィルムを分散し、１０％綿羊脱繊血含有トリプチケースソイ寒天平板（Ｄｉｆｃｏ社製）及び硫酸カナマイシン（２００ｍｇ／Ｌ：シグマ社製）含有トリプチケースソイ血液寒天平板に５０μＬ塗沫し、嫌気性条件下で培養した。生育したコロニーを計測し、残存するポルフィロモナス  ジンジバリス菌の生菌数（ｃｆｕ）を求め、下記基準に則り、判定した。
判定基準
◎：１０6未満
○：１０6以上１０7未満
△：１０7以上１０8未満
×：１０8以上【００５４】
〔実験例３〕
表１〜５に示す液体口腔用組成物について、イソプロピルメチルフェノールの口腔内残存率を下記方法で評価した。結果を表１〜５に示す。
また、表４に示す液体口腔用組成物をサンプルとして用い、トコフェロール酢酸エステルの口腔内残存率を下記方法で評価した。実験法及び残存率の算出法はイソプロピルメチルフェノールと同様である。結果を表４に示す。【００５５】
イソプロピルメチルフェノールの口腔内残存率：
表に示したサンプル（液体口腔用組成物）１０ｍＬを口に含み、３０秒間すすいだ吐出液中に含まれるイソプロピルメチルフェノール濃度を液体クロマトグラフ法により測定し、得られたイソプロピルメチルフェノール濃度と配合濃度及び吐出液量から口腔内残存率を算出した。
液体クロマトグラフ測定サンプルは、吐出液を精密に量り、内部標準物質としてパラオキシ安息香酸イソアミル（東京化成工業社製）０．３ｇを６０％エタノール（９９．５）（関東化学社製）水溶液２００ｍＬに溶解させた液１ｍＬを加えたあと、液体クロマトグラフィー（試料注入量２０μＬ）により測定し、イソプロピルメチルフェノールの量を定量した。液体クロマトグラフィーの移動相はメタノール・精製水・リン酸混液（容量比１３００：７００：１）を用い、ポンプ：日本分光（株）  ＰＵ−９８０、試料導入部：日本分光（株）  ＡＳ−９５０、検出器：日本分光（株）  ＵＶ−９７０（測定波長２８０ｎｍに設定）、記録装置：システムインスツルメント（株）  Ｃｈｒｏｍａｔｏｃｏｒｄｅｒ２１Ｊ、カラム高温槽：日本分光（株）  ＣＯ−９６６（５０℃に設定）、カラム：関東化学（株）  Ｍｉｇｈｔｙｓｉｌ  ＲＰ−１８  ＧＰ（５μｍ）を使用した。イソプロピルメチルフェノール／内部標準物質のピーク面積比より、下記計算式を用いて口腔内のイソプロピルメチルフェノール残存率を算出し、下記判定基準により残存率を評価した。
計算式；
イソプロピルメチルフェノール口腔内残存率（％）＝
［（（洗口剤投与量×イソプロピルメチルフェノール配合濃度）−（吐出液量×吐出液中のイソプロピルメチルフェノール濃度））÷（洗口剤投与量×イソプロピルメチルフェノール配合濃度）］×１００【００５６】
イソプロピルメチルフェノールの口腔内残存率の判定基準
◎：２０％以上
○：１５％以上２０％未満
△：１２％以上１５％未満
×：１２％未満【００５７】
トコフェロール酢酸エステルの口腔内残存率：
液体クロマトグラフ測定サンプルは、吐出液を精密に量り、内部標準物質としてエルゴカルシフェロール（関東化学工業社製）０．０２ｇをメタノール（関東化学工業社製）２００ｍＬに溶解させた液２ｍＬを加えたあと、液体クロマトグラフィー（試料注入量２０μＬ）により測定し、トコフェロール酢酸エステルの量を定量した。液体クロマトグラフィーの移動相はメタノールを用い、ポンプ：日本分光（株）  ＰＵ−９８０、試料導入部：日本分光（株）  ＡＳ−９５０、検出器：日本分光（株）  ＵＶ−９７０（測定波長２８４ｎｍに設定）、記録装置：システムインスツルメント（株）  Ｃｈｒｏｍａｔｏｃｏｒｄｅｒ２１Ｊ、カラム高温槽：日本分光（株）ＣＯ−９６６（５０℃に設定）、カラム：ナカライテスクＣＯＳＭＯＳＩＬ  ５Ｃ１８  Ｗａｔｅｒｓ（４．６ｍｍφ×１５０ｍｍ）を使用した。トコフェロール酢酸エステル／内部標準物質のピーク面積比より、上記と同じ計算式を用いて口腔内のトコフェロール酢酸エステル残存率を算出し、上記と同じ判定基準より残存率を評価した。【００５８】
〔実験例４〕
表１〜５に示す液体口腔用組成物について、洗口時の刺激性を下記方法で評価した。結果を表１〜５に示す。
洗口時の刺激性の評価：
口腔乾燥を感じる被験者１０名で、サンプル（液体口腔用組成物）１０ｍＬを口に含み３０秒間すすいだ後、洗口時の刺激について、比較例６を対照にして比較し下記の３段階で評価し、１０名の平均点を次の基準に従い、判定した。
洗口時の刺激性
３：ほとんど刺激を感じなかった。
２：やや刺激の低減が認められたが、まだ若干の刺激が認められた。
１：同等以上の刺激が認められた。
刺激評価基準
○：平均点２．０点以上
△：平均点１．５点以上２．０点未満
×：平均点１．０点以上１．５点未満【００５９】
〔実験例５〕
表４に示す液体口腔用組成物について、血行促進力を下記方法で測定し、血行促進効果を評価した。結果を表４に示す。
血行促進効果の評価：
被験者１０名に、表４に示したサンプルを１０ｍＬ口に含み３０秒間すすいだ後の上顎ハグキの血流量を測定した。測定は洗口前と洗口３０分後にレーザードップラー法（モンテシステム社製  ｍｏｏｒＬＤＩ）にて血流測定を行った。洗口前の血流量との相対血流量として１０名の増加率の平均値を次の基準に従い判定した。
血流増加率
○：１５％以上
△：１０％以上１５％未満
×：１０％未満【００６０】
【表１】
2011077847.tif 000002
＊  ：ノニオン性界面活性剤であるＰＯＥ硬化ヒマシ油とエマルジョン中に
含まれるデカグリセリンモノ脂肪酸エステルとの合計量（以下、同様
）。
＊＊：＊のノニオン性界面活性剤の総量／エマルジョン中に含まれるトリ脂
肪酸グリセリル量（以下、同様）。【００６１】
【表２】
2011077847.tif 000003
【００６２】
【表３】
2011077847.tif 000004
【００６３】
【表４】
2011077847.tif 000005
【００６４】
【表５】
2011077847.tif 000006
【国際調査報告】
2011077847.tif 000007
2011077847.tif 000008
2011077847.tif 000009
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