【手続補正書】
【提出日】令和2年10月8日(2020.10.8)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
第１対物レンズを含み、試料に含まれる蛍光物質を活性化させる第１光と、前記第１光と異なり活性化された前記蛍光物質を励起する第２光とを、前記試料に対して第１方向から照射する照明系と、
第２対物レンズを含み、前記第１光と前記第２光とが照射された前記試料から放射される蛍光を、前記第１方向とは異なる第２方向から検出する検出系と、
前記第１対物レンズの瞳面における前記第１光の強度分布と前記第２光の強度分布とが互いに異なるように、前記第１光及び前記第２光の少なくとも一方を成形するビーム成形部と、を備える顕微鏡。
【請求項２】
前記ビーム成形部は、前記第１対物レンズの瞳面又は瞳共役面において光が通る領域を規定するマスクを備える、請求項１に記載の顕微鏡。
【請求項３】
前記ビーム成形部は、前記第１対物レンズの瞳面における前記第１光及び前記第２光の少なくとも一方の位相の空間分布を不均一に設定することにより前記少なくとも一方の光をエアリービームに整形する、請求項１に記載の顕微鏡。
【請求項４】
試料に含まれる蛍光物質を励起する第１光と、前記第１光と異なり、励起された前記蛍光物質に誘導放出を生じさせる第２光とを、前記試料に対して第１方向から照射する照明系と、
前記試料から放射される蛍光を、前記第１方向とは異なる第２方向から検出する検出系と、
制御部と、を備え、
前記制御部は、前記照明系及び前記検出系を制御して、前記第１光のみを前記試料に照射し、前記試料から放射される第１の蛍光を検出する第１検出処理と、前記第１光及び前記第２光を前記試料に照射し、前記試料から照射される第２の蛍光を検出する第２検出処理とを順次実施する、顕微鏡。
【請求項５】
試料に含まれる蛍光物質を励起する第１光と、前記第１光と異なり、励起された前記蛍光物質に誘導放出を生じさせる第２光とを、前記試料に対して第１方向から照射する照明系と、
前記試料から放射される蛍光を、前記第１方向とは異なる第２方向から検出する検出系と、
前記第１光の強度と前記第２光の強度とを互いに異なる周波数で変調する変調部と、を備え、
前記検出系は、前記蛍光を検出するロックイン検出部を有する、顕微鏡。
【請求項６】
前記第１光及び前記第２光は、それぞれ、ガウスビーム、ベッセルビーム、又はエアリービームである、請求項１から請求項５のいずれか一項に記載の顕微鏡。
【請求項７】
前記第１光はガウスビームであり、前記第２光はベッセルビームである、請求項１から請求項５のいずれか一項に記載の顕微鏡。
【請求項８】
前記第１光及び前記第２光はガウスビームである、請求項１から請求項５のいずれか一項に記載の顕微鏡。
【請求項９】
前記第１光及び前記第２光はベッセルビームである、請求項１から請求項５のいずれか一項に記載の顕微鏡。
【請求項１０】
前記試料における前記第１光のサイドローブの位置は、前記試料における前記第２光のサイドローブの位置と異なる、請求項９に記載の顕微鏡。
【請求項１１】
前記照明系は、前記第１光及び前記第２光を前記試料上に集光し、
前記第１光及び前記第２光を、前記試料において前記第１方向及び前記第２方向のそれぞれと交差する方向に走査する走査部を備える、請求項１から請求項１０のいずれか一項に記載の顕微鏡。
【請求項１２】
前記照明系は、前記試料において前記第１方向及び前記第２方向に交差する方向に分布するシート状の前記第１光と前記第２光とを照射する、請求項１から請求項１０のいずれか一項に記載の顕微鏡。
【請求項１３】
第１対物レンズを含む照明系が、試料に含まれる蛍光物質を活性化させる第１光と、前記第１光と異なり活性化された前記蛍光物質を励起する第２光とを、前記試料に対して第１方向から照射することと、
第２対物レンズを含む検出系が、前記第１光と前記第２光とが照射された前記試料から放射される蛍光を、前記第１方向とは異なる第２方向から検出することと、
ビーム成形部が、前記第１対物レンズの瞳面における前記第１光の強度分布と前記第２光の強度分布とが互いに異なるように、前記第１光及び前記第２光の少なくとも一方を成形することと、を含む観察方法。
【請求項１４】
照明系が、試料に含まれる蛍光物質を励起する第１光と、前記第１光と異なり、励起された前記蛍光物質に誘導放出を生じさせる第２光とを、前記試料に対して第１方向から照射することと、
検出系が、前記試料から放射される蛍光を、前記第１方向とは異なる第２方向から検出することと、
制御部が、前記照明系及び前記検出系を制御して、前記第１光のみを前記試料に照射し、前記試料から放射される第１の蛍光を検出する第１検出処理と、前記第１光及び前記第２光を前記試料に照射し、前記試料から照射される第２の蛍光を検出する第２検出処理とを順次実施することと、を含む観察方法。
【請求項１５】
照明系が、試料に含まれる蛍光物質を励起する第１光と、前記第１光と異なり、励起された前記蛍光物質に誘導放出を生じさせる第２光とを、前記試料に対して第１方向から照射することと、
蛍光を検出するロックイン検出部を有する検出系が、前記試料から放射される前記蛍光を、前記第１方向とは異なる第２方向から検出することと、
変調部が、前記第１光の強度と前記第２光の強度とを互いに異なる周波数で変調することと、を含む観察方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００４】
本発明の第１の態様においては、顕微鏡が提供される。顕微鏡は、第１対物レンズを含み、試料に含まれる蛍光物質を活性化させる第１光と、第１光と異なり活性化された蛍光物質を励起する第２光とを、試料に対して第１方向から照射する照明系を備える。顕微鏡は、第２対物レンズを含み、第１光と第２光とが照射された試料から放射される蛍光を、第１方向とは異なる第２方向から検出する検出系を備える。顕微鏡は、第１対物レンズの瞳面における第１光の強度分布と第２光の強度分布とが互いに異なるように、第１光及び第２光の少なくとも一方を成形するビーム成形部を備える。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００５】
本発明の第２の態様においては、顕微鏡が提供される。顕微鏡は、試料に含まれる蛍光物質を励起する第１光と、第１光と異なり、励起された蛍光物質に誘導放出を生じさせる第２光とを、試料に対して第１方向から照射する照明系を備える。顕微鏡は、試料から放射される蛍光を、第１方向とは異なる第２方向から検出する検出系を備える。顕微鏡は、制御部を備える。制御部は、照明系及び検出系を制御して、第１光のみを試料に照射し、試料から放射される第１の蛍光を検出する第１検出処理と、第１光及び第２光を試料に照射し、試料から照射される第２の蛍光を検出する第２検出処理とを順次実施する。本発明の第３の態様においては、顕微鏡が提供される。顕微鏡は、試料に含まれる蛍光物質を励起する第１光と、第１光と異なり、励起された蛍光物質に誘導放出を生じさせる第２光とを、試料に対して第１方向から照射する照明系を備える。顕微鏡は、試料から放射される蛍光を、第１方向とは異なる第２方向から検出する検出系を備える。顕微鏡は、第１光の強度と第２光の強度とを互いに異なる周波数で変調する変調部を備える。検出系は、蛍光を検出するロックイン検出部を有する。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００６】
本発明の第４の態様においては、観察方法が提供される。観察方法は、第１対物レンズを含む照明系が、試料に含まれる蛍光物質を活性化させる第１光と、第１光と異なり活性化された蛍光物質を励起する第２光とを、試料に対して第１方向から照射することを含む。観察方法は、第２対物レンズを含む検出系が、第１光と第２光とが照射された試料から放射される蛍光を、第１方向とは異なる第２方向から検出することを含む。観察方法は、ビーム成形部が、第１対物レンズの瞳面における第１光の強度分布と第２光の強度分布とが互いに異なるように、第１光及び第２光の少なくとも一方を成形することを含む。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００７】
本発明の第５の態様においては、観察方法が提供される。観察方法は、照明系が、試料に含まれる蛍光物質を励起する第１光と、第１光と異なり、励起された蛍光物質に誘導放出を生じさせる第２光とを、試料に対して第１方向から照射することを含む。観察方法は、検出系が、試料から放射される蛍光を、第１方向とは異なる第２方向から検出することを含む。観察方法は、制御部が、照明系及び検出系を制御して、第１光のみを試料に照射し、試料から放射される第１の蛍光を検出する第１検出処理と、第１光及び第２光を試料に照射し、試料から照射される第２の蛍光を検出する第２検出処理とを順次実施することを含む。本発明の第６の態様においては、観察方法が提供される。観察方法は、照明系が、試料に含まれる蛍光物質を励起する第１光と、第１光と異なり、励起された蛍光物質に誘導放出を生じさせる第２光とを、試料に対して第１方向から照射することを含む。観察方法は、蛍光を検出するロックイン検出部を有する検出系が、試料から放射される蛍光を、第１方向とは異なる第２方向から検出することを含む。観察方法は、変調部が、第１光の強度と第２光の強度とを互いに異なる周波数で変調することを含む。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００９０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００９０】
ステップＳ３５において、顕微鏡１は、ステップＳ３２の検出結果とステップＳ３４の検出結果とに基づいて、画像を生成する。例えば、顕微鏡１（例、画像処理部）は、ステップＳ３２の第１検出処理で得られる第１画像と、ステップＳ３４の第２検出処理で得られる第２画像との比較によって第３画像（結果画像）を生成する。例えば、顕微鏡１は、第３画像として、第１画像と第２画像との差分に相当する画像を生成する。