(57)【要約】疾患及び他の症状、例えば、自己免疫疾患及びアレルギーを治療及び改善するための方法及び組成物が提供されている。この方法は、動物及び植物の免疫反応を選択的に刺激するためにcAGPを使用する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
対象者における感染症、自己免疫疾患又はアレルギー症状を改善又は実質的に予防するための方法であって、当該対象者と有効な量の式：
【化１】
2005523902.tif 000011
(式中、
Xは-O-及び-NH-から成る群から選択されたメンバーであり；
Yは-O-及び-S-からなる群から選択されたメンバーであり；
R1、R2、及びR3はそれぞれ独立して（C2〜C20）アシルからなる群から選択されたメンバーであり；
R4は-H及び-PO3R7R8からなる群から選択されたメンバーであり、ここでR7及びR8はそれぞれ独立して-H及び（C1〜C4）脂肪族基からなる群から選択されたメンバーであり；
R5は-H、-CH3及び-PO3R9R10からなる群から選択されたメンバーであり、ここでR9及びR10はそれぞれ独立して-H及び（C1〜C4）脂肪族基から選択されたメンバーであり；
R6はH、OH、（C1〜C4）オキシ脂肪族基、-PO3R11R12、-0PO3R11R12、-SO3R11、-OSO3R11、-NR11R12、-SR11、-CN、-NO2、-CHO、-CO2R11、及び-CONR11R12から選択され、ここでR11及びR12はそれぞれ独立して、H及び（C1〜C4）脂肪族基から選択され；
そして但しR4及びR5のうち１つがリンを含む基であり且つR4が-PO3R7R8である場合、R5は-PO3R9R10ではなく；
ここで「*1」、「*2」、「*3」及び「**」はキラル中心を示し；
ここでn、m、p及びqはそれぞれ独立して０〜６の整数を示し、但しpとmの合計は０〜６である）
を有する１又は複数の化合物及び医薬的に許容できるそれらの塩を接触せしめることを含んで成る方法。
【請求項２】
X及びYが-O-であり、R4がPO3R7R8であり、R5及びR6はHであり、そしてn、m、p及びqは０〜３の整数である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
R7及びR8が-Hである請求項２に記載の方法。
【請求項４】
n、m、p及びqが０〜２である請求項２に記載の方法。
【請求項５】
nが１であり、mが２であり、そしてp及びqが０である請求項２に記載の方法。
【請求項６】
R1、R2及びR3がそれぞれC6〜C14アシルである、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
R1、R2及びR3がそれぞれC6〜C12アシルである、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
R1、R2及びR3がそれぞれデカノイル残基である、請求項５に記載の方法。
【請求項９】
R1、R2及びR3がそれぞれドデカノイル残基である、請求項５に記載の方法。
【請求項１０】
R1、R2及びR3がそれぞれテトラデカノイル残基である、請求項５に記載の方法。
【請求項１１】
「*1」、「*2」及び「*3」がR配置中にある、請求項５に記載の方法。
【請求項１２】
Yがエクアトリアル位にある請求項５に記載の方法。
【請求項１３】
「**」がS配置中にある請求項５に記載の方法。
【請求項１４】
「*1」、「*2」及び「*3」がR配置中にあり、ここでYがエクアトリアル位にあり、そして「**」がS配置中にある、請求項５に記載の方法。
【請求項１５】
前記感染症が細菌、ウィルス、寄生生物、又は真菌によって生じている、請求項１の方法。
【請求項１６】
前記細菌が、グラム陰性細菌、又はグラム陽性細菌である、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記感染症が、シュードモナス（Pseudomonas）、エシェリキア（Escherichia）、クレブシエラ（Klebsiella）、エンテロバクター（Enterobacter）、プロテウス（Proteus）、セラチア（Serratia）、カンジダ（Candida）、バチルス(Bacillus)、及びスタフィロコッカス(Staphylococcus)からなる群から選択された細菌によって生じている、請求項１５に記載の方法。
【請求項１８】
前記感染症が肺炎である請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記肺炎が院内肺炎である請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記肺炎がHIV陽性患者における肺炎である、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記感染症が慢性感染症である請求項１に記載の方法。
【請求項２２】
前記慢性感染症が、慢性肝炎、ヒトパピローマウィルス、口腔又は膣カンジダ症、歯周病又は真菌のコロニー化による慢性副鼻腔炎である、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
前記アレルギー症状が、喘息、アトピー性皮膚炎、季節性アレルギー疾患及び慢性副鼻腔炎からなる群から選択されている、請求項１に記載の方法。
【請求項２４】
前記自己免疫疾患が、炎症性大腸疾患、リューマチ性関節炎、慢性関節炎、多発性硬化症及び乾癬からなる群から選択されている、請求項１に記載の方法。
【請求項２５】
前記化合物は前記動物に対して、非経口、経口、静脈内、注入、鼻腔内、吸入、経皮及び経粘膜からなる群から選択された経路によって投与されている、請求項１に記載の方法。
【請求項２６】
対象者における細菌又はウィルス感染症の予防処置のための方法であって、当該対象者と有効な量の式：
【化２】
2005523902.tif 000012
(式中、
Xは-O-及び-NH-から成る群から選択されたメンバーであり；
Yは-O-及び-S-からなる群から選択されたメンバーであり；
R1、R2、及びR3はそれぞれ独立して（C2〜C20）アシルからなる群から選択されたメンバーであり；
R4は-H及び-PO3R7R8からなる群から選択されたメンバーであり、ここでR7及びR8はそれぞれ独立して-H及び（C1〜C4）脂肪族基からなる群から選択されたメンバーであり；
R5は-H、-CH3及び-PO3R9R10からなる群から選択されたメンバーであり、ここでR9及びR10はそれぞれ独立して-H及び（C1〜C4）脂肪族基から選択されたメンバーであり；
R6はH、OH、（C1〜C4）オキシ脂肪族基、-PO3R11R12、-0PO3R11R12、-SO3R11、-OSO3R11、-NR11R12、-SR11、-CN、-NO2、-CHO、-CO2R11、及び-CONR11R12から選択され、ここでR11及びR12はそれぞれ独立して、H及び（C1〜C4）脂肪族基から選択され；
そして但しR4及びR5のうち１つがリンを含む基であり且つR4が-PO3R7R8である場合、R5は-PO3R9R10ではなく、
ここで「*1」、「*2」、「*3」及び「**」はキラル中心を示し；
ここでn、m、p及びqはそれぞれ独立して０〜６の整数を示し、但しpとmの合計は０〜６である）
を有する１又は複数の化合物及び医薬的に許容できるそれらの塩を接触せしめることを含んで成る方法。
【請求項２７】
X及びYが-O-であり、R4がPO3R7R8であり、R5及びR6はHであり、そしてn、m、p及びqは０〜３の整数である、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
R7及びR8が-Hである請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
n、m、p及びqが０〜２である請求項２７に記載の方法。
【請求項３０】
nが１であり、mが２であり、そしてp及びqが０である請求項２８に記載の方法。
【請求項３１】
R1、R2及びR3がそれぞれC6〜C14アシルである、請求項２６に記載の方法。
【請求項３２】
R1、R2及びR3がそれぞれC6〜C12アシルである、請求項２６に記載の方法。
【請求項３３】
R1、R2及びR3がそれぞれデカノイル残基である、請求項３０に記載の方法。
【請求項３４】
R1、R2及びR3がそれぞれドデカノイル残基である、請求項３０に記載の方法。
【請求項３５】
R1、R2及びR3がそれぞれテトラデカノイル残基である、請求項３０に記載の方法。
【請求項３６】
「*1」、「*2」及び「*3」がR配置中にある、請求項３０に記載の方法。
【請求項３７】
Yがエクアトリアル位にある請求項３０に記載の方法。
【請求項３８】
「**」がS配置中にある請求項３０に記載の方法。
【請求項３９】
「*1」、「*2」及び「*3」がR配置中にあり、ここでYがエクアトリアル位にあり、そして「**」がS配置中にある、請求項３０に記載の方法。
【請求項４０】
前記感染症が細菌、ウィルス、寄生生物又は真菌によって生じている、請求項２６の方法。
【請求項４１】
前記細菌が、グラム陰性細菌、又はグラム陽性細菌である、請求項４０に記載の方法。
【請求項４２】
前記感染症が、シュードモナス、エシェリキア、クレブシエラ、エンテロバクター、プロテウス、セラチア、カンジダ、バチルス、及びスタフィロコッカスからなる群から選択された細菌によって生じている、請求項４０に記載の方法。
【請求項４３】
前記感染症が肺炎である請求項４２に記載の方法。
【請求項４４】
前記肺炎が院内肺炎である請求項４３に記載の方法。
【請求項４５】
医薬的に許容できる担体との組み合わせにおける、式：
【化３】
2005523902.tif 000013
(式中、
Xは-O-及び-NH-から成る群から選択されたメンバーであり；
Yは-O-及び-S-からなる群から選択されたメンバーであり；
R1、R2及びR3はそれぞれ独立して（C2〜C20）アシルからなる群から選択されたメンバーであり；
R4は-H及び-PO3R7R8からなる群から選択されたメンバーであり、ここでR7及びR8はそれぞれ独立して-H及び（C1〜C4）脂肪族基からなる群から選択されたメンバーであり；
R5は-H、-CH3及び-PO3R9R10からなる群から選択されたメンバーであり、ここでR9及びR10はそれぞれ独立して-H及び（C1〜C4）脂肪族基から選択されたメンバーであり；
R6はH、OH、（C1〜C4）オキシ脂肪族基、-PO3R11R12、-0PO3R11R12、-SO3R11、-OSO3R11、-NR11R12、-SR11、-CN、-NO2、-CHO、-CO2R11、及び-CONR11R12から選択され、ここでR11及びR12はそれぞれ独立して、H及び（C1〜C4）脂肪族基から選択され；
そして但しR4及びR5のうち１つがリンを含む基であり且つR4が-PO3R7R8である場合、R5は-PO3R9R10ではなく；
ここで「*1」、「*2」、「*3」及び「**」はキラル中心を示し；
ここでn、m、p及びqはそれぞれ独立して０〜６の整数を示し、但しpとmの合計は０〜６である）
を有する１又は複数の化合物、及び医薬的に許容できるそれらの塩を含んで成る、外来抗原の不在下で処方及び投与される組成物。
【請求項４６】
X及びYが-O-であり、R4がPO3R7R8であり、R5及びR6はHであり、そしてn、m、p及びqは０〜３の整数である、請求項４５に記載の医薬組成物。
【請求項４７】
R7及びR8が-Hである請求項４６に記載の医薬組成物。
【請求項４８】
n、m、p及びqが０〜２である請求項４６に記載の医薬組成物。
【請求項４９】
nが１であり、mが２であり、そしてp及びqが０である請求項４７に記載の医薬組成物。
【請求項５０】
R1、R2及びR3がそれぞれC6〜C14アシルである、請求項４５に記載の医薬組成物。
【請求項５１】
R1、R2及びR3がそれぞれC6〜C12アシルである、請求項４５に記載の医薬組成物。
【請求項５２】
R1、R2及びR3がそれぞれデカノイル残基である、請求項４９に記載の医薬組成物。
【請求項５３】
R1、R2及びR3がそれぞれドデカノイル残基である、請求項４９に記載の医薬組成物。
【請求項５４】
R1、R2及びR3がそれぞれテトラデカノイル残基である、請求項４９に記載の医薬組成物。
【請求項５５】
「*1」、「*2」及び「*3」がR配置中にある、請求項４９に記載の医薬組成物。
【請求項５６】
Yがエクアトリアル位にある請求項４９に記載の医薬組成物。
【請求項５７】
「**」がS配置中にある請求項４９に記載の医薬組成物。
【請求項５８】
「*1」、「*2」及び「*3」がR配置中にあり、ここでYがエクアトリアル位にあり、そして「**」がS配置中にある、請求項４９に記載の医薬組成物。
【請求項５９】
１又は複数の界面活性剤を更に含んで成る、請求項４５に記載の医薬組成物。
【請求項６０】
前記１又は複数の界面活性剤が、ジミリストイルフォスファチジルグリセロール(DPMG)、ジパルミトイルフォスファチジルグリセロール(DPPG)、ジステアロイルフォスファチジルグリセロール(DSPG)、ジミリストイルフォスファチジルコリン(DPMC)、ジパルミトイルフォスファチジルコリン(DPPC)、ジステアロイルフォスファチジルコリン(DSPC)；ジミリストイルフォスファチジン酸(DPMA)、ジパルミトイルフォスファチジン酸(DPPA)、ジステアロイルフォスファチジン酸(DSPA)；ジミリストイルフォスファチジルエタノールアミン(DPME)、ジパルミトイルフォスファチジルエタノールアミン(DPPE)及びジステアロイルフォスファチジルエタノールアミン(DSPE)からなる群から選択されている、請求項５９に記載の医薬組成物。
【請求項６１】
対象者における感染症、自己免疫疾患又はアレルギー症状を緩和又は実質的に予防するための当該対象者と有効な量のサイクリックAGPを接触せしめる方法。
【請求項６２】
前記サイクリックAGPがN−［（R）−３−ドデカノイルオキシテトラデカノイル］−（S）−２−ピロリジニルメチル ２−デオキシ−４−O−フォスフォノ−２−［（R）−３−ドデカノイルオキシ−テトラデカノイルアミノ］−３−O−［（R）−３−ドデカノイルオキシテトラデカノイル］−β−D−グルコピラノシド又は医薬的に許容できるその塩である、請求項６１に記載の方法。
【請求項６３】
前記サイクリックAGPがN−［（R）−３−デカノイルオキシテトラデカノイル］−（S）−２−ピロリジニルメチル ２−デオキシ−４−O−フォスフォノ−２−［（R）−３−デカノイルオキシテトラデカノイルアミノ］−３−O−［（R）−３−ドデカノイルオキシテトラデカノイル］−β−D−グルコピラノシド又は医薬的に許容できるその塩である、請求項６１に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
発明の背景
先天性免疫系は病原体に対する炎症反応を、微生物によって専ら合成される分子のクラスを同定するレセプターを介し自己と非自己を識別する系によって調整する。これらのクラスは、病原体に関連した分子型（PAMP）に言及され、そして例えば、リポポリサッカライド（LPS）、ペプチドグリカン、リポテイコ酸、及び細菌リポタンパク質（BLP）が挙げられる。
【０００２】
LPS、即ち、グラム陰性細菌に由来する豊富な細胞外壁構成成分は、先天性免疫系によって認識される。LPSの化学構造はある場合に関しては知られているが、血清タンパク質及び/又は細胞によるLPS認識の基礎となる分子は今日になってようやく解明された。一連の最近の報告において、Toll様レセプター（TLR）に言及されるレセプターのファミリーは、LPS及び他の微生物成分に対する有力な先天性免疫反応に結びついている。TLRは、１回膜貫通ドメインを有する膜タンパクである。細胞質ドメインはおよそ２００個のアミノ酸でありそしてIL−１レセプターの細胞質ドメインと類似性を共有する。細胞外ドメインは比較的大きく（約５５０〜９８０個のアミノ酸）、そして多重リガンド結合部位を含みうる。
【０００３】
LPSに対する免疫応答におけるTLRの重要性は、少なくとも２つのToll様レセプター、Tlr2及びTlr4について詳細に証明されてきた。例えば、胚性腎細胞によるトランスフェクション研究によりヒトTlr2はLPSに対する反応を与えるのに十分であることが明らかになった（Yangら、Nature vol.395：pp.284〜288（1988）；Kischnigら、J Exp.Med vol.11:pp.2091〜97（1988））。LPSによる強力な反応は見掛け上、LPS結合タンパク質（LBP）及びCD14（高い親和性でLPSと結合する）を両方必要とする。LPSのTlr2に対する直接結合は、比較的低い親和性で確認され、このことはアクセサリータンパク質が、LPSによるTlr2の結合及び/又は活性化をin vivoで促す可能性があることを示唆している。
【０００４】
LPSに対する免疫反応におけるTlr4の重要性は、lps突然変異マウス系統におけるポジショナルクローニングに関連して証明されている。マウスlps遺伝子の２つの突然変異アレルが同定されており、C3H/HeJ系統において誘発する半優性アレル及び第二番目に、C57BL/10ScN及びC57BL/10ScCr系統において存在する劣勢アレルが同定されている。lpsの突然変異アレルに同型接合性であるマウスはグラム陰性細菌による感染に対し感受性であり且つLPSが誘導する感染性ショックに対して耐性がある。これらの系統からlps座がクローン化され、そして突然変異がマウスTlr4遺伝子を両方の場合において変化させたということが証明された（Portorakら、Science vol.282：pp.2085〜2088（1988）；Qureshiら、J Exp Med.4:pp.615〜625（1999））。これらの報告から、Tlr4遺伝子はLPSに対する反応のために必要であることが結論付けられる。
【０００５】
LPSの生物活性内毒素サブ構造成分（substructural moiety）は、リン酸化された脂質A、即ち、グラム陰性細菌の外膜において全体構造を固定する働きをする多重脂肪酸アシル化グルコサミンジサッカライドである。我々は以前に、脂質Aの毒性効果は、脂質Aの選択的化学修飾をし、モノフォスフォリル脂質A化合物（MPL（登録商標）免疫賦活剤；Corixa Corporation；Seatlle、WA）を生産することによって改善できることを報じた。MPL（登録商標）、及び構造上似た化合物を、ワクチンアジュバント及び他の用途のために製造して使用する方法が記載されている（例えば、米国特許第4,436,727号；4,877,611号；4,866,034号及び4,913,094号;4,987,237号；Jonsonら、J Med Chem vol.42：pp.4640〜4649（1999）；Vaccine DesignにおけるUlrich及びMyers：The Subunit and Adjuvant Approach；Powell及びNewmans著；Plemium：New York、pp.495〜524、1995）。詳細に、これら及び他の参考文献が、MPL（登録商標）免疫賦活物質及び類縁化合物は、ワクチン製剤中でタンパク質及び炭水化物抗原と共に使用された場合、抗原に対する体液性及び/又は細胞介在免疫に対し有意なアジュバント活性を有することを示している。
【０００６】
MPL（登録商標）免疫賦活物質と構造を共有する合成モノサッカライド分子及びジサッカライド分子は、アミノアルキルグルコサミニドリン酸塩（AGP）に言及されて記載されており、例えば、米国特許第6,113,918号、米国特許第6,303,347号及び1998年10月12日に刊行されたWO98/50399号を参照のこと。これらの化合物はワクチン組成物中で抗原と共に処方された場合有意なアジュバント特性を維持し、そしてモノフォスフォリル脂質Aと比較した場合類似する又は向上した毒性プロファイルを有する。これらの化合物は、ワクチン製剤中での抗原との組み合わせ（米国特許第6,113,918号）及び抗原不在下、単剤療法（monotherapies）（2001年10月29日に刊行されたWO01/90129）における使用について記載されている。
【０００７】
サイクリックアミノアルキルグルコサミドリン酸塩「サイクリックAGP」は、PCT特許出願PCT/US01/24284に記載されている。これらのサイクリックAGPは、ワクチン抗原に対する体液性及び細胞性免疫反応を高める有効な免疫効果分子である。本明細書中で使用されている場合、用語「サイクリックAGP」とはアザシクロアルキル又は（アザシクロアルキル）アルキルグルコサミドリン酸塩を意味し、ここで２−デオキシ−２−アミノ−ｂ−Ｄ−グルコピラノース（グルコサミン）はアザシクロアルキル又は（アザシクロアルキル）アルキル（アグリコン）基に対してグリコシド結合している。
【０００８】
本発明は、外来抗原の不在下で処方及び投与される、感染症、自己免疫疾患及びアレルギーなど植物及び動物の疾患及び症状を予防及び／又は治療処置するための単剤療法物を提供する。本発明の単剤療法物は、１又は複数のサイクリックAGPを含んで成る。本発明のこれら及び他の観点は、詳細な説明及び添付した図を参照にすることにより明らかになるだろう。
【発明の開示】
【０００９】
発明の概要
１つの観点において、本発明は、動物における疾患又は症状を、有効な量の式（Ｉ）：
【化１】
2005523902.tif 000002
（式中、
Xは-O-又は-NH-であり、そしてYは-O-又は-S-であり；
R1、R2、及びR3はそれぞれ独立して（C2〜C20）アシル基、例えば、飽和、不飽和及び分枝アシル基であり；
R4は-H又は-PO3R7R8であり、ここでR7及びR8はそれぞれ独立してH又は（C1〜C4）脂肪族基であり；
R5は、-H、-CH3又は-PO3R9R10であり、ここでR9及びR10はそれぞれ独立してH及び（C1〜C4）脂肪族基から選択され；
R6はそれぞれ独立してH、OH、（C1〜C4）オキシ脂肪族基、-PO3R11R12、-0PO3R11R12、-SO3R11、-OSO3R11、-NR11R12、-SR11、-CN、-NO2、-CHO、-CO2R11、及び-CONR11R12から選択され、ここでR11及びR12はそれぞれ独立して、H及び（C1〜C4）脂肪族基から選択され；
そして但しR4及びR5のうち１つがリンを含む基であり且つR4が-PO3R7R8である場合、R5は-PO3R9R10ではなく、ここで「*1〜3」及び「**」はキラル中心を示し；
ここで添え字のn、m、p及びqはそれぞれ独立して０〜６の整数を示し、但しpとmの合計は０〜６である）
を有する化合物及び医薬的に許容できるその塩を投与することによって、治療、改善又は実質的に予防する方法を供する。
【００１０】
ある実施態様において、本発明の化合物はX及びYに-0-を含み、そしてR4がPO3R7R8であり、R5及びR6はHであり、そして添え字のn、m、p及びqは０〜３の整数である。一層好適な実施態様において、R7及びR8は-Hである。ある実施態様において、添え字nは１であり、添え字mは２であり、そして添え字p及びqは０である。他の実施態様において、R1、R2、及びR3は（C6〜C14）アシル、（C6〜C12）又は（C6〜C8）アシル基であり、特定の実施態様においては（C6〜C12）アシル基が供される。更なる実施態様は、*1〜3はR配置中であり、Yはエクアトリアル位にあり、そしてS配置における**を供する。
【００１１】
代表的な実施態様としては、N−［（R）−３−テトラデカノイルオキシテトラデカノイル］−（S）−２−ピロリジニルメチル ２−デオキシ−４−O−フォスフォノ−２−［（R）−３−テトラデカノイルオキシテトラデカノイルアミノ］−３−O−［（R）−３−テトラデカノイルオキシテトラデカノイル］−β−D−グルコピラノシド及びそれらの医薬的に許容できる塩；式II
【化２】
2005523902.tif 000003
、
N−［（R）−３−ドデカノイルオキシテトラデカノイル］−（S）−２−ピロリジニルメチル ２−デオキシ−４−O−フォスフォノ−２−［（R）−３−ドデカノイルオキシテトラデカノイルアミノ］−３−O−［（R）−３−ドデカノイルオキシテトラデカノイル］−β−D−グルコピラノシド及びそれらの医薬的に許容できる塩；式III
【化３】
2005523902.tif 000004
及び、
N−［（R）−３−デカノイルオキシテトラデカノイル］−（S）−２−ピロリジニルメチル ２−デオキシ−４−O−フォスフォノ−２−［（R）−３−デカノイルオキシテトラデカノイルアミノ］−３−O−［（R）−３−デカノイルオキシテトラデカノイル］−β−D−グルコピラノシド及びそれらの医薬的に許容できる塩；式IV
【化４】
2005523902.tif 000005
が挙げられる。
【００１２】
本発明の所定の実例となる観点において、上記の方法は、感染症、自己免疫疾患及びアレルギーを治療、改善又は実質的に予防することにおいて使用されている。
【００１３】
本発明は、他の観点において、１又は複数の上記化合物を適切な賦形剤中に含んで成り、外来抗原の不在下で処方及び／又は投与される医薬製剤を提供する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１４】
本発明の実例となる実施態様の説明
予防及び治療用途の実例
本発明は、本明細書中に記載された１もしくは複数の化合物又は１もしくは複数のかかる化合物を含んで成る医薬組成物を投与することによって、所定の疾患及び他の病状を処置する予防及び治療方法を広く考える。所定のサイクリックAGP化合物は、ワクチン製剤中で体外投与される抗原との組み合わせにおけるアジュバントとしての使用について、並びに所定の他の用途における使用について記載されてきた一方で、本発明は、好適に単剤療法適用、即ち、体外投与される抗原の不在において化合物を使用する新規治療方法を提供する。
【００１５】
１つの観点において、本発明は、真核生物対象者、特に動物、好適にはヒトにおける感染症を治療、改善及び／又は実質的に予防するための方法を供する。微生物チャレンジに対する体液性免疫のTLR介在シグナル伝達の重要性を考えれば、かかる経路を選択的に刺激し且つ最小の毒性伴う能力は、幅広い感染因子に対する予防及び／又は治療処置様相ための強力な方法を示す。
【００１６】
本明細書中に記載されている方法は、本質的に全ての種類の感染因子、例えば、細菌、ウィルス、寄生生物、及び真菌に対して適用可能である。説明のため、本発明は、細菌感染症の予防及び／又は治療処置をするために有用である。その感染症は、シュードモナス（Pseudomonas）、エシェリキア（Escherichia）、クレブシエラ（Klebsiella）、エンテロバクター（Enterobacter）、プロテウス（Proteus）、セラチア（Serratia）、カンジダ（Candida）、スタフィロコクチ（Staphylococci）、ストレプトコッシ（Streptococci）、クラミジア（Chlamydia）、マイコプラズマ（Mycoplasma）、バチルス（Bacillus）などの多くの種によるものである。本発明により治療されうるウィルス症状の具体例は、例えば、インフルエンザウィルス、アデノウィルス、パラインフルエンザウィルス、ライノウィルス、呼吸器シンシチウムウィルス（RSV）、ヘルペスウィルス、サイトメガロウィルス、肝炎ウィルス、例えばB型肝炎及びC型肝炎ウィルスなどにより生じるものである。具体的な真菌は、例えば、アスペルジルス（Aspergillis）、カンジダ・アルビカンス（Candida albicans）、クリプトコッカス・ネオフォルマンス（Cryptococcus neoformans）、コクチジオイド・イミタス（coccidioides immitus）などである。
【００１７】
１つの具体的な実施態様において、本発明は、対象者、特に免疫不全の対象者であって、院内細菌感染症及び院内ウィルス感染症などの感染症を発症しているかあるいは発症する危険にある対象者を治療するための方法を供する。毎年４０００万人の入院患者のうち約２百万人が入院中に院内感染症を発症し、そしてこのうちの約１％、又は院内肺炎を発症する約４００，０００人の患者のうち７０００人超が死ぬ。このことにより入院が必要な感染症において死をもたらす院内肺炎が起こってしまう。従って、このような実施態様により院内感染症の治療において有効な予防方法に対する有意な要請が満たされる。
【００１８】
関連した実施態様において、本発明は免疫不全患者であって、日和見感染から又は抑制もしくは潜在感染症の再活性化のいずれかにより肺炎を発症しているかあるいは発症する危険にある例えば、HIV陽性患者のための治療方法を供する。１９９２年には、AIDS患者におけるニューモシスチスカリニ（Pneumocystis carini）感染症が米国だけで約２０，０００件報告されている。加えて、全てのAIDS患者の６０〜７０％が、彼らが病気中、同時に、P.カリニに感染する。従って、本発明は、この実施態様において、このような、危険な状態にある集団のための効果的な予防方法を供する。
【００１９】
他の関連する実施態様において、本発明の方法は、免疫不全でありうるそして／又は感染疾患を発症する危険にある他の患者集団、例えば、嚢胞性繊維症、慢性の閉塞性疾患を伴う患者並びに他の免疫不全及び／又は施設に入っている患者、を治療するための方法である。
【００２０】
本発明の他の観点において、本明細書中で記載された化合物は、アレルギー疾患及び症状、例えば、副鼻腔炎、慢性の鼻詰まり（rhinosinusitus）、喘息、アトピー性皮膚炎及び乾癬を治療、改善又は実質的に予防するための方法において使用されている。この方法は、少なくともある部分において、IL-4生産を特徴とする又はIL-4活性に対する過敏症を特徴とする典型的なアレルギー型のサイトカイン反応と競合でき、標的細胞からサイトカインの生産を活性化する化合物の能力に基づいている。本明細書中に記載されている所定の化合物を投与することで、抗原プロセシング及び提示細胞から、並びに他の細胞からのIFNγ及びIL-12の発現をもたらし、IL-4、5、6、10及び13などのアレルギー反応に関連したサイトカインの下方制御がもたらされる。
【００２１】
本発明の他の観点において、化合物は自己免疫疾患及び症状を治療するための方法において使用されている。この実施態様で使用するための化合物は、典型的に、拮抗すること、阻害すること、又はさもなくば１もしく複数のTool様レセプター、詳細にはTlr2及び/又はTlr4を消極的に調節し、それによってある症状に関連した自己免疫反応を改善するかあるいは実質的に予防することができるのもから選択されるだろう。具体例として、この実施態様によって提供される方法は、炎症性大腸炎、リューマチ性関節炎、慢性関節炎、多発性硬化症及び乾癬などの症状の治療において使用できる。
【００２２】
理論にとらわれることが望ましくない一方で、上に記載された予防及び治療用途の効率は、少なくとも、ある部分において、Toll様レセプター活性の調節に前記化合物が関連することに基づいている。詳細には、Toll様レセプター、Tlr2、Tlr4などは、本明細書中で開示されている無毒性LPS誘導体及びミメチクスによって特異的に活性化され、競合阻害されるかあるいはそれ以外、影響を受けると考えられている。従って、本発明の方法は、動物における体液性免疫経路を、それらの経路を通常刺激するような天然の細菌成分に往々にして関連する毒性を生じさせることなく、調節するための有効且つ選択的な方法を供する方法に関連する。
【００２３】
具体的なサイクリックAGP化合物
上の予防及び治療用途において使用されている具体的な化合物は、式（Ｉ）：
【化５】
2005523902.tif 000006
（式中、
Xは-O-又は-NH-であり、そしてYは-O-又は-S-であり；
R1、R2、及びR3は各々独立して（C2〜C20）アシル基、例えば、飽和、不飽和及び分枝アシル基であり；
R4は-H又は-PO3R7R8であり、ここでR7及びR8はそれぞれ独立してH又は（C1〜C4）脂肪族基であり；
R5は、-H、-CH3又は-PO3R9R10であり、ここでR9及びR10はそれぞれ独立して-H及び（C1〜C4）脂肪族基から選択され；
R6はH、OH、（C1〜C4）オキシ脂肪族基、-PO3R11R12、-0PO3R11R12、-SO3R11、-OSO3R11、-NR11R12、-SR11、-CN、-NO2、-CHO、-CO2R11、及び-CONR11R12であり、ここでR11及びR12はそれぞれ独立して、H及び（C1〜C4）脂肪族基から選択され；
但しR4及びR5のうち１つがリンを含む基であり且つR4が-PO3R7R8である場合、R5は-PO3R9R10ではなく、ここで「*1〜3」及び「**」はキラル中心を示し；
ここで添え字のn、m、p及びqはそれぞれ独立して０〜６の整数を示し、但しpとmの合計は０〜６である）
の化合物及び医薬的に許容できるその塩を含んで成る。
【００２４】
式Ｉのヘキソピラのシドはグルコ配置において示されているが、他のグルコシドも本発明の範囲内である。例えば、グリコピラノシド、例えば他のヘキソピラノシド（例えば、アロ、アルトロ、マンノ、グロ、イド、ガラクト、タロ）などは本発明の範囲内である。
【００２５】
上の一般式において、通常の脂肪アシル残基が結合している３’−立体中心（「*1」及び「*2」及び「*3」で規定されている）の配置は、R又はSであるが、好適にはRである。R6及びグルコサミンユニットが直接的又は間接的に結合しているサイクリックアグリコンユニットの炭素原子（「**」で規定されている）の絶対立体化学は、R又はSでありうる。上の一般式において、Yはエクアトリアル又はアクシアル位にあって良いが、エクアトリアルが好適である。全ての立体異性体、エナンチオマー、ジアステレオマー及びそれらの混合物は本発明の範囲内であると考えられている。
【００２６】
本発明のある具体例となる実施態様において、X及びYは-0-であり、そしてR4はフォスフォノであり、R5及びR6はHであり、そして添え字のn、m、p及びqは０〜３の数字であり、そして一層好適には０〜２である。具体例となる実施態様において、整数nは１であり、整数mは２であり、そして整数p及びqは０である。この実施態様において、本発明の化合物は、一般式（V）：
【化６】
2005523902.tif 000007
を有する２−ピロリジニルメチルβ−D-グルコサミニド４−フォスフェートである。
【００２７】
本発明の他の具体的な実施態様において、式（III）のR1、R2、及びR3はテトラデカノイル残基であり、それらが結合している３’−立体中心（「*1〜3」で示されている）の配置はRであり、Yはエクアトリアル位にあり、そしてピロリジン立体中心（「**」）の絶対立体化学はSである。
【００２８】
他の具体例となる実施態様としては、N−［（R）−３−テトラデカノイルオキシテトラデカノイル］−（S）−２−ピロリジニルメチル ２−デオキシ−４−O−フォスフォノ−２−［（R）−３−テトラデカノイルオキシテトラデカノイルアミノ］−３−O−［（R）−３−テトラデカノイルオキシテトラデカノイル］−β−D−グルコピラノシド、及びそれらの医薬的に許容できる塩、式II：
【化７】
2005523902.tif 000008
、
N−［（R）−３−ドデカノイルオキシテトラデカノイル］−（S）−２−ピロリジニルメチル ２−デオキシ−４−O−フォスフォノ−２−［（R）−３−ドデカノイルオキシテトラデカノイルアミノ］−３−O−［（R）−３−テトラデカノイルオキシテトラデカノイル］−β−D−グルコピラノシド及びそれらの医薬的に許容できる塩；式III、
【化８】
2005523902.tif 000009
及び、
N−［（R）−３−デカノイルオキシテトラデカノイル］−（S）−２−ピロリジニルメチル ２−デオキシ−４−O−フォスフォノ−２−［（R）−３−デカノイルオキシテトラデカノイルアミノ］−３−O−［（R）−３−デカノイルオキシテトラデカノイル］−β−D−グルコピラノシド及びそれらの医薬的に許容できる塩；式IV
【化９】
2005523902.tif 000010
である。
【００２９】
本発明の化合物は、Johnsonら、Bioorg.Med.Chem.Lett.vol.9：p.2273、1999及びPCT/WO98/50399及びそれらの参考文献に概略が記載されている方法を使用することで調製できる。一般に、上に引用した参考文献に記載されている合成方法は、様々なアシル基を有する化合物及び下位物質(subdivisions)の調製のために幅広く適用可能である。例えば、本発明において有用である所定の化合物が米国仮出願第60/223,056号及び国際特許出願PCT/US01/24284に記載されている。一般に、上に引用された参考文献に記載された合成方法は本明細書中、そして他の合成方法は、これらの化合物を調製するために幅広く適用されている。例えば、様々なアシル基及び置換基を有する化合物の作製において、当業者は、それに記載されている集囲包括的な方法を、代替のアシル化剤を使用するために変更することができる、又は適切なアシル基が結合した商業上入手できる物質で始めることができることを当業者は理解するだろう。
【００３０】
用語「アシル」とは、脂肪族有機酸から、当該酸のヒドロキシ部分の除去により由来する基を意味する。従って、アシルとは、例えば、アセチル、プロピオニル、ブチリル、及びピバロイルを意味する。
【００３１】
「（C2〜C20）アシル」とは、２〜２０個の炭素を有するアシル基を意味する。類似して、（C6〜C14）、（C6〜C12）、（C9〜C12）及び（C6〜C8）アシルとは、それぞれ、６〜１４個の炭素、６〜１２個の炭素、９〜１２個の炭素、及び６〜８個の炭素を有するアシル基である。そしてまた用語「アシル」に含まれるのは、例えば、ヒドロキシ、ケトなどの典型的な置換基を有する基である。
【００３２】
用語「脂肪族」はそれ自身又は他の置換基の一部として、特に断らない限り、直鎖状又は枝分かれした鎖状又は環状炭化水素成分、例えば、所定数の命名された炭素原子（即ち、C1〜C4は１〜４の炭素を意味する）を有する、完全に飽和した又はモノもしくはポリ不飽和していて良い、環状及び直鎖状成分の両方を含む成分が挙げられうる。飽和炭化水素成分の例としては、例えば、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、n-ブチル、t-ブチル、イソブチル、sec-ブチル、シクロプロピル、シクロプロピルメチル、メチレン、エチレン、及びn-ブチレンが挙げられる。不飽和アルキル基は１又は複数の二重及び/又は三重結合を有するものである。不飽和アルキル基の例は、ビニル、2-プロペニル、クロチル、1-プロピニル及び2-（ブタジエニル）である。
【００３３】
用語「オキシ脂肪族」とは、酸素原子を介して残りの分子に結合した脂肪族基を有する基を意味する。
【００３４】
各々の上の用語(例えば、「脂肪族」「アシル」)は、示された成分の飽和及び不飽和形態の両方を含むことを意味する。各種類の基に関する好適な置換基が下に供されている。
【００３５】
脂肪族基に関する置換基は、以下のものから選択される様々な基でありうる。
それは、０〜(２m’+１)(式中、m’はかかる基の炭素原子の合計数である)の数における-OR’、＝O、＝S、＝NR’、＝N-OR'、-NR’R''、-SR’、-ハロゲン、SiR’R''R'''、-OC(O)R’、-C(O)R’、-CO2R’、-CONR’R''、-OC(O)NR’R''、-NR''C(O)R’、-NR’-C(O)NR''R'''、-NR''C(O)2R’、-NH-C(NH2)＝NH、-NR’C(NH2)＝NH、-NH-C(NH2)＝NR’、-S(O)R'、-S(O)2R’、-S(O)2NR’R''、-CN及び-NO2である。R'、R''及びR'''はそれぞれ独立して水素及び置換されていない(C1〜C8)脂肪族基を意味する。R’とR''が同じ原子に対して結合している場合、それらは窒素原子と結合でき、５、６又は７員環を形成する。例えば、-NR’R''は１−ピロリジニル及び４−モルホリニルを含むことを意味する。置換基の上の論議から、当業者は用語「脂肪族」が、例えばハロアルキル(例えば、-CF3及び-CH2CF3)などの基を含むことを意味すると理解するだろう。
【００３６】
用語「ハロ」又は「ハロゲン」とはそれ自身又は他の置換基の一部として、特に断りがない限り、フッ素、塩素、臭素、又はヨウ素原子を意味する。ハロゲン置換基を有する化合物において、前記ハロゲンは同じ又は異なっていて良い。
【００３７】
用語「医薬的に許容できる塩」とは、本明細書中に記載された化合物上で見出される特定の置換基に依存し、比較的無毒な酸又は塩基により調製されている活性化合物の塩を含むこと意味する。本発明の化合物が比較的に酸性の官能価を有する場合、塩基付加塩は、生（neat）又は適切な不活性溶媒のいずれかの中で、所望の塩基の付加によって獲得できうる。医薬的に許容できる塩基付加塩の例としては、ナトリウム、カリウム、カルシウム、アンモニウム、有機アミノ、もしくはマグネシウム塩、又は類似する塩が挙げられる。本発明の化合物が比較的塩基性の官能価を有する場合、酸付加塩は、生又は適切な不活性溶媒中、所望の酸の付加によって獲得できうる。医薬的に許容できる酸付加塩の例としては、無機酸、例えば、塩酸、臭化水素酸、硝酸、炭酸、１価炭化水素酸(monohydrogencarbonic)、リン酸、１価リン酸(monohydrogenphosphoric)、２価リン酸(dihydrogenphosphoric)、硫酸、１価硫酸(monohydrogensulfric)、ヨウ化水素酸、亜リン酸などに由来するもの、並びに比較的無毒性の有機酸、例えば、酢酸、プロピオン酸、イソブチル酸、シュウ酸、マレイン酸、マロン酸、安息香酸、コハク酸、スベリン酸、フマル酸、マンデル酸、フタル酸、ベンゼンスルホン酸、p-トリスルホン酸、クエン酸、酒石酸、メタンスルホン酸などが挙げられる。アルギン酸塩などのアミノ酸の塩、及びグルクロン酸又はガラクツロン酸などの有機酸の塩なども挙げられる(例えば、Berge、S.Mら、「Pharmaceutical Salts」、Jurnal of Pharmaceutical Science、1977、vol.66、pp.1〜99を参照のこと)。本発明の所定の特異的な化合物は、当該化合物が塩基又は酸付加塩のいずれかに転換されることを可能にするような塩基性及び酸性の官能価の両方を含む。
【００３８】
前記化合物の天然形態は、塩と塩基又は酸を接触させ、そして常用の方法で親化合物を単離することによって再生されうる。前記化合物の親形態は、様々な塩形態とは所定の物理特性、例えば、極性溶媒における溶解度において異なるが、本来、塩は、本発明の目的のための化合物の親形態に対して同等である。
【００３９】
塩形態に加えて、本発明はプロドラッグ形態にある化合物を提供する。本明細書中で記載されている化合物のプロドラッグは、本発明の化合物を提供する物理条件下で化学変化を既に受けている化合物である。更に、プロドラッグは本発明の化合物へ、ex vivo環境下での化学的又は生化学的方法によって転換することができうる。例えば、プロドラッグは、適切な酵素及び化学試薬と共に経皮パッチリザーバーに置かれた場合、本発明の化合物に徐々に変化しうる。
【００４０】
本発明の所定の化合物は非溶解形態並びに溶解形態、例えば、水和形態として存在できる。一般に、溶解形態は、非溶解形態と同等であり、そして本発明の範囲内に含まれていることを意味する。本発明の所定の化合物は、複数の結晶又は非晶質形態において存在しうる。一般に、全ての物理形態は、本発明によって熟考された使用について同等であり、そして本発明の範囲内に含まれている。
【００４１】
本発明の所定の化合物は不斉炭素原子（光学中心）又は二重結合を有し；ラセミ体、ジアステレオマー及び個々の異性体は、本発明の範囲内に含まれていることを意味する。
【００４２】
本発明の化合物は、かかる化合物を構成する１又は複数の原子において原子同位体の非天然部分をも有する。例えば、前記化合物は、放射性同位体、例えば、トリチウム（3H）、ヨウ素125（125I）又は炭素14（14C）で放射性標識されて良い。本発明の化合物の全てのアイソトープ変態（isotopic variation）は、放射性によらず、本発明の範囲内に含まれることを意味する。
【００４３】
例示となる医薬組成物及びそれらのデリバリー
他の実施態様において、本発明は、外来抗原の不在下で処方及び投与される１又は複数の化合物を含んで成る医薬組成物に関連し、それらは即ち、単一療法用途において、医薬的に許容できる担体又は賦形剤との組み合わせにおいて使用される。かかる医薬組成物は、細胞、組織、動物もしくは植物に対し、単独、又は１もしくは複数の他の療法の様相との組み合わせにおける投与のために有用である。多くのかかる実施多様に関して、本発明の医薬組成物は、本明細書中で記載した１又は複数の化合物を含んで成るだろう。
【００４４】
用語「医薬的に許容できる」とは、ヒトに対して投与された場合に、アレルギー又は類似する不都合な反応を生み出さない分子実体及び組成物を意味する。本明細書中で使用されている場合、「担体」又は「賦形剤」とは任意及び全ての溶媒、分散培地、ビヒクル、被覆物、希釈剤、抗生剤及び抗真菌剤、等張及び吸収遅延剤、緩衝剤、担体溶液、懸濁、コロイドなどを含む。かかる媒体及び剤の医薬活物質のための使用は当業界で公知である。任意の常用の媒体又は試薬が活性成分と不適合である場合を除いては、その治療組成物中での使用は熟考されている。
【００４５】
医薬組成物を処方することにおいて使用するための例示となる担体は、例えば、水中油又は油中水エマルション、静脈内（IV）使用のために適切な有機共溶媒（co-solvent）を含む又は含まない水性組成物、リポソーム又は界面活性剤含有ビヒクル、ミクロスフィア、ミクロビーズ及びミクロソーム、粉末、錠剤、カプセル、座薬、水性懸濁、エアロゾル、通常当業者に明らかなの他の担体が挙げられる。
【００４６】
所定の実施態様において、医薬組成物は、１又は複数の緩衝剤(例えば、天然緩衝塩類溶液又はリン酸緩衝塩類溶液)、炭水化物(例えば、グルコース、マンノース、スクロース又はデキストラン)、マンニトール、タンパク質、ポリペプチド又はアミノ酸の例えば、グリシン、抗酸化物質、殺菌剤、キレート剤の例えば、EDTA又はグルタチオン、アジュバント(例えば、水酸化アルミニウム)、受容者の血液による等張、低張又は弱低張を提供する溶質、懸濁化剤、増粘剤及び/又は防腐剤を含んで成るだろう。
【００４７】
所定の用途のために、水性製剤、特に有効な量の１又は複数の界面活性剤を含んで成るものが好適であろう。例えば、組成物は１以上の適切な界面活性剤、例えば、リン脂質界面活性剤を含んで成るミセル様分散体の形態でありうる。例示となるリン脂質の例としては、ジアシルフォスファチジルグリセロール、例えば、ジミリストイルフォスファチジルグリセロール(DPMG)、ジパルミトイルフォスファチジルグリセロール(DPPG)、及びジステアロイルフォスファチジルグリセロール(DSPG)、ジアシルフォスファチジルコリン、例えば、ジミリストイルフォスファチジルコリン(DPMC)、ジパルミトイルフォスファチジルコリン(DPPC)、及びジステアロイルフォスファチジルコリン(DSPC)；ジアシルフォスファチジン酸、例えば、ジミリストイルフォスファチジン酸(DPMA)、ジパルミトイルフォスファチジン酸(DPPA)、及びジステアロイルフォスファチジン酸(DSPA)；及びジアシルフォスファチジルエタノールアミン、例えば、ジミリストイルフォスファチジルエタノールアミン(DPME)、ジパルミトイルフォスファチジエタノールアミン(DPPE)及びジステアロイルフォスファチジルエタノールアミン(DSPE)が挙げられる。典型的に、水性製剤中での界面活性剤：モノ/ジサッカライドモル比は約１０：１〜約１：１０であり、一層典型的には、約５：１〜約１：５であり、しかし任意の有効な量の界面活性剤も注目の特異的な対象に最適に合わせるために水性製剤中で使用されて良い。
【００４８】
本明細書中で使用されている場合「有効な量」とは、ビヒクル又はネガティブコントロールを超える(over and avobe)反応を示す量である。上に論じたように、本発明の対象の化合物の正確な量が投与の経路、医薬組成物、及び患者に依存して投与されるべきだ。
【００４９】
本発明の化合物及び医薬組成物は、本質的に任意の投与の経路、例えば、注射、口又は鼻経路による吸入、直腸、膣又は気管内注入、摂取、又は経皮もしくは経粘膜経路などのために処方されている。このようにして、本発明の方法及び組成物により達成可能な治療効果としては、例えば、全身、局所、組織特異的など、本発明のある用途の特異的なニーズに依存するものであるうる。
【００５０】
例示となる製剤を処方し、非経口的に、即ち、腹腔内、皮下、筋内又は静脈内に投与できうる。静脈内使用するための担体の１つの例示となる例は、１０％USPエタノール、４０％USPプロピレングリコール又はポリエチレングリコール600と注射のためのバランスUSP水(WFI)の混合物が挙げられる。他の例示となる担体としては、１０％USPエタノールとUSP WFI；USP WFI中０．０１〜０．１％トリエタノールアミン；又はUSP WFI中０．０１〜０．２％ジパルミトイルジフォスファチジルコリン；及び１〜１０％スクアレン又は非経口水中植物油エマルションが挙げられる。医薬的に許容できる非経口溶媒は一般にそれらが、活性成分を除去することなく０．２２ミクロンのフィルターを通じてろ過されて良い水溶液又は分散体を提供するように選択されるだろう。
【００５１】
皮下又は筋内使用のための例示となる担体の例としては、リン酸緩衝塩類(PBS)溶液、WFI中５％デキストロース及び５％デキストロース中０．０１〜０．１％トリエタノールアミン又はUSP WFI中０．９％塩化ナトリウム、又は１０％USPエタノール、４０％プロピレングリコールとバランスの許容できる等張溶液、例えば５％デキストロース又は０．９％塩化ナトリウムの１：２又は１：４混合物；又はUSP WFI中０．０１〜０．２％のジパルミトイルジフォスファチジルコリンと１〜１０％セクアレン又は非経口水中植物油エマルションである。
【００５２】
粘膜表層を介して投与するための担体の例は、特定の経路、例えば、経口、舌下、腸などに依存する。経口的に投与された場合、例示となる例としては、医薬等級のマンニトール、デンプン、ラクトース、ステアリン酸マグネシウム、ナトリウムサッカライド、セルロース、炭酸マグネシウムが挙げられ、そしてマンニトールが好適である。鼻腔内に投与される場合、例示となる例としては、ポリエチレングリコール、リン脂質、グリコール及び糖脂質、スクロース及び/又はメチルセルロース、ラクトースなどのバルキング剤及び塩化ベンザルコニウムなどの防腐剤、EDTAが有無の粉末懸濁が挙げられる。特に例示となる実施態様において、リン脂質１,２ジパルミトイル−sn−グリセロ−３−フォスフォコリン(DPPC)が等張水性担体として、約０．１〜３．０mg/mlの濃度での本発明の対象の化合物の鼻腔内投与のために約０．０１〜０．２％で使用されている。
【００５３】
吸入により投与される場合、例示となる担体としては、ポリエチレングリコール又はグリコール、DPPC、メチルセルロース、粉末状分散化剤、及び防腐剤が挙げられ、そしてポリエチレングリコール及びDPPCが好適である。多くの場合、吸入によって投与される場合は、噴霧状形態にある化合物が好適であろう。例示として、デリバリーは、一回使用(single-use)デリバリー装置、霧噴霧器、呼吸により活性化される粉末吸入器(breath-activated powder inhaler)、エアロゾル定量吸入器(MDI)又は他の任意の、当業界で入手可能な多くの噴霧デリバリー装置が挙げられる。加えて、ミストテント又は気管内チューブを介しての直接投与も使用されて良い。気管内又は鼻咽頭態様を介してのデリバリーは、所定の適応症のために効果的であるだろう。
【００５４】
当業者は上の記載が包括的ではなく例示であることに気付くだろう。実際に、多くの更なる処方技術及び医薬的に許容できる賦形剤及び担体溶液が当業者に公知であり、そのまま様々な治療計画において本明細書中に記載された特定の組成物を使用するための適切な投与及び治療計画の発達につながる。
【００５５】
化合物は様々なアッセイ形式で評価されて良く、その形式は例えば、本明細書中、本発明のある用途のために最も適した特性を有するものを同定及び選択するためのものである。例えば、動物モデルは、サイクリックAGP化合物の投与の後に全身循環に入るサイトカイン放出プロファイルを同定及び評価するために使用できる。加えて、注目の特異的な免疫反応を誘導するために最も適した化合物を同定するために、様々な抗原成分に対する免疫反応を１又は複数の観点において変化を検証するための様々なin vitro及びin vivoモデルが存在する。例えば、化合物は標的細胞、例えばマクロファージ、樹状細胞又はランゲルハンス細胞とin vitroで接触することができ、そして合成されたサイトカインが測定されて良い。加えて、遺伝子発現アレーを使用して、注目の特定のサイクリックAGPによって活性化又は阻害される特定の経路を同定することができうる。
【００５６】
もし所望されれば、本明細書中で開示された化合物は、他の治療方法、例えば、抗微生物、抗ウィルス及び抗真菌化合物又は治療方法、様々なDNAベースの治療方法、RNAベースの治療方法、ポリペプチドベースの治療方法との、そして/又は他の免疫効果物質との組み合わせにおいて投与されて良いことが理解されるだろう。実際に、更なる１又は複数の成分が標的細胞又は宿主組織と接触することによって有意な有害効果を生じることがない場合、本質的に任意の他の成分も含まれて良い。従って、組成物は様々な他の因子と共に、本発明の１又は複数の特定の実施態様が行われるために要求又は所望されている場合、デリバリーされて良い。
【００５７】
例示として、本発明の医薬組成物は、１又は複数の治療タンパク質をコードするDNA、アンチセンスRNA、リボザイムを含むかあるいはそれらとの結合において使用されて良い。DNAは当業界で公知の任意の様々なデリバリーシステム、例えば、核酸発現系、細菌及びウィルス発現系内に存在して良い。多くの遺伝子デリバリー技術が当業界で公知であり、例えばRolland、Crit.Rev.Therap.Drug Carrier System vol.15：pp143〜198.1998、及びその引用文献によって記載されているものなどである。適切な核酸発現系は、患者の中で発現するための必須DNA配列(例えば、適切なプロモーター及び終結シグナル)を含む。好適な実施態様において、DNAはウィルス発現系(例えば、ワクチニア又は他の天然痘ウィルス、レトロウィルス、又はアデノウィルス)を使用することで導入されて良く、それには非病原性(不完全)、複製可能ウィルスの使用が伴われうる。適切な系は、例えば、Fischer-Hochら、Proc. Natl.Acad. Sci. USA vol.86:pp.317〜321、1989；Flexnerら、Ann.N.Y.Acad. Sci.vol.569:pp.86〜103、1989；Flexnerら、Vaccine.vol.8:pp.17〜21、1990；米国特許第4,603,112号、4,769,330号及び5,017,487号；WO89/01973；米国特許4,777,127；GB2,200,651号；EP0,345,242；WO91/02805；Berkner、Biotechniques vol6.pp.616〜627、1988；Resenfeldら、Science vol.252：pp.431〜434、1991；Kollsら、Proc.Natl.Acad.Sci.USA vol.91:pp.215〜219、1994；Kass-Eislerら、Proc.Natl.Acad.Sci.USA vol.90：pp.11498〜11502、1993；Guzmanら、Circulation vol.88：pp.2838〜2848、1993；及びGuzmanら、Cir.Res.vol.73：pp.1202〜1207、1993に開示されている。DNAをかかる発現系へと導入するための技術は当業者に周知である。
【００５８】
DNAは、例えば、Ulmerら、Science vol.259：pp.1745〜1749、1993及びCohenによるレビュー、Science vol.259：pp.1691〜1692、1993に記載されているように「裸」であっても良い。裸のDNAの摂取はDNAを、細胞内に効率的に輸送される生分解ビーズ上へと被覆することによって増えうる。見掛け上、本発明の医薬組成物はポリヌクレオチド及びタンパク質成分の両方を含んで成りうる。
【００５９】
全ての様々な更なる免疫刺激物質が本発明の組成物中に含まれうる。例えば、サイトカインのGM-CSF、インターフェロン又はインターロイキンは注目の免疫反応を更に調節する。例えば、所定の実施態様において、更なる成分が、Th1型のサイトカイン(例えば、IFN-γ、TNFα、IL-2及びIL-12)の高レベルの誘導を更に増強するために組成物中に含まれて良い。代わりに、又は加えて、高レベルのTh-2型のサイトカイン(例えば、IL-4、IL-5、IL-6及びIL-10)が所定の治療用途のために所望されうる。これらのサイトカインレベルは、標準的なアッセイを使用することで容易に評価されて良い。サイトカインのファミリーを概観するために、Mosmann及びCoffman、Ann.Rev.Immunol.vol.7：pp.145〜173、1989を参照のこと。
【００６０】
Th-1型のサイトカインの誘導において使用するための例示となる組成物としては、例えば、WO96/02555、WO99/33488及び米国特許第6,008,200及び5,856,462号に記載されているCpG含有オリゴヌクレオチドの組み合わせ(ここではCpGオリゴヌクレオチドはメチル化されていない)が挙げられる。免疫刺激DNA配列も、例えば、Satoら、Science vol.273：p352 1996に記載されている。他の適切な免疫刺激物質は、サポニン、例えばQS21(Aquila Biopharmaceuticals Inc.、Framingham、MA)、GPI-100(Marcianiら、Vaccine vol.18：p3141、2000、米国特許6,080,725号)及び類縁サポニン誘導体及びそれらのミメティクスが挙げられる。
【００６１】
本発明のとの組み合わせにおいて使用することができうる他の例示となる免疫刺激物質としては、Montanide ISA 720(Seppic、France)、SAF(Chiron、California、United States)、ISCOMS(CSL)、MF-59(Chiron)、SBASシリーズのアジュバント(例えば、SBAS-2又はSBAS-4、SmithKline Beecham、Rxensart、Belgiumから入手可能)及びEnhanzyn(登録商標)免疫刺激物質(Corixa、Hamilton、MT)が挙げられる。ポリオキシエチレンエーテル免疫刺激物質はWO99/52549A1に記載されている。
【００６２】
本発明は更に以下の限定することがない例によって説明されるだろう。
【実施例】
【００６３】
実施例
実施例１
N−［（R）−３−テトラデカノイルオキシテトラデカノイル］−（S）−２−ピロリジニルメチル ２−デオキシ−４−O−フォスフォノ−２−［（R）−３−テトラデカノイルオキシテトラデカノイルアミノ］−３−O−［（R）−３−テトラデカノイルオキシテトラデカノイル］−β−D−グルコピラノシドトリエチルアンモニウム塩；式(II)の化合物のトリエチルアンモニウム塩の調製
(１a)無水１，２−ジクロロエタン(１０mL)中の２−デオキシ−４−O−ジフェニルフォスフォノ−３−O−[(R)−３−テトラデカノイルオキシテトラデカノイル]−６−O−(２，２，２−トリクロロ−１，１−ジメチルエトキシカルボニル)−２−(２，２，２−トリクロロエトキシカルボニルアミノ)−β−D−グルコピラノシルブロミド(１．０５g、０．１８mmol)の溶液に対して、４Å分子篩(０．５g)、無水CaSO4(２．２g、１６mmol)、及びN−[(R)−３−テトラデカノイルオキシテトラデカノイル]−(S)−２−ピロリジンメタノール(０．４０g、０．７５mmol)を加えた。生じる混合物を室温で１時間に渡り撹拌し、Hg(CN)2(１．０２ｇ、４．０５mmol)で処理し、加熱して１６時間に渡り暗中で還流させた。冷却した反応混合物をCH2Cl2で希釈し、そしてろ過した。ろ過物を１NのKI水で洗浄し、乾燥させ(Na2SO4)、そして濃縮した。シリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィー(勾配溶離、１５→２０％ EtOAc/ヘキサン)により０．６０５g(４３％)のN−［（R）−３−テトラデカノイルオキシテトラデカノイル］−（S）−２−ピロリジニルメチル ２−デオキシ−４−O−ジフェニルフォスフォノ−３−O−［（R）−３−テトラデカノイルオキシテトラデカノイル］−６−O−［２，２，２−トリクロロ−１，１−ジメチルオキシカルボニル］−２−(２，２，２−トリクロロエトキシカルボニルアミノ)−β−D−グルコピラノシドを非晶質固体として獲得した。
【００６４】
(１b)上の(１a)で調製した化合物(０.５０g、０.２９mmol)のAcOH(１０mL)中の６０℃における溶液を亜鉛粉(０.９８g、１５mmol)により３等量(three equal portion)で１時間に渡り処理した。冷却した反応混合物を超音波処理し、セライトのパッドを通してろ過し、そして濃縮した。生じる残留物をCH2Cl2〜飽和NaHCO3水で分離し、そして層を分離させた。有機層を乾燥(Na2SO4)させて濃縮した。獲得した粗製のアミノアルコールと(R)−３−テトラデカノイルオキシトテラデカン酸(０.１５５g、０.３４mmol)のCH2Cl2(３.５mL)中での溶液を粉末状４Åの分子篩(０.２５g)と０.５時間に渡り撹拌し、そして２−エトキシ−１−エトキシカルボニルー１，２−ジヒドロキノリン(０.１１g、０.４４mmol)で処理した。生じる混合物を室温で８時間に渡り撹拌し、セライトを通してろ過し、そして濃縮した。５０％EtOAc/ヘキサンを伴うシリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィーにより０．３５５g(６８％)のN−［（R）−３−テトラデカノイルオキシテトラデカノイル］−（S）−２−ピロリジニルメチル ２−デオキシ−４−O−ジフェニルフォスフォノ−２−［（R）−３−テトラデカノイルオキシテトラデカノイルアミノ］−３−O−［(R)−３−テトラデカノイルオキシデカノイル］−β−D−グルコピラノシドを無色シロップとして獲得した。
【００６５】
(１c)AcOH(1mL)とテトラヒドロフラン(９mL)の混合物中上の(１b)で調製した化合物(０.３００g、０.１６６mmol)の溶液をPtO2(０.１５g)の存在下室温及び７０psigで１８時間に渡り水素化した。この反応混合物を２：１CHCl3−MeOH(５０mL)で希釈して素早く超音波に掛けた。触媒を回収して２：１CHCl3−MeOHで洗浄して組み合わさったろ過物と洗浄物を濃縮した。CHCl3−MeOH−H2O−Et3N(９０：１０：０．５：０．５)を伴うシリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィーにより、部分的に精製された産物を得、それを氷冷２：１CHCl3−MeOH(３０mL)で溶かし、そして氷冷０．１N HCl水溶液(１２mL)で洗浄した。有機層をろ過して２％Et3N水(５mL、病原体フリー)より凍結乾燥し、０．２２８g(７９％)のN−［（R）−３−テトラデカノイルオキシテトラデカノイル］−（S）−２−ピロリジニルメチル ２−デオキシ−４−O−フォスフォノ−２−［（R）−３−テトラデカノイルオキシテトラデカノイルアミノ］−３−O−［(R)−３−テトラデカノイルオキシテトラデカノイル］−β−D−グルコピラノシドトリエチルアンモニウム塩を無色粉末として獲得した。融点６７〜７０℃；IR(フィルム)３３０６，２９５５，２９２３，２８５３，１７３６，１７３２，１６４４，１５４８,１４６６，１３７８，１２４５，１１７７，１１１０，１０５３，８４４cm-1；1H NMR(CDCl3−CD3OD)δ０．８８(m，１８H)，１．０−１．２．０５(mH)、２．２０−２．７０(m，１２H)，３．０６(q，６H,J＝７.２Hz)，３．３−３２５(mH)、４．５２(d，１H，J＝８Hz)，５．０５−５．２８(m，４H)７．４４(d，１H，J＝９Hz)；13C NMR(CDCl3)δ１７３．３，１７３．０，１７０．３，１６９．６，１６８．６，１０１．８，１００．４，７５．８，７２．５，７２．４，７０．９，７０．８，７０．３，７０．２，６９．９，６９．３，６７．９，６６．６，５６．５，５６．３，５４．５，４７．４，４５．８，４４．６，４１．４，４１．０，３９．７，３９．２，３９．０，３４．５，３４．３，３４．１，３２．０，２９．７，２９．４，２８．１，２７．３，２５．７，２５．３，２５．２，２５．１，２４．０，２２．７，２１．６，１４．１，８．６
C101H194N3O17P・H2Oについて分析、計算：C,６８．４７；H,１１．１５；N,２．３７；P，１．７５
発見；C，６８．７９；H，１１．００；N，２．２４；P，１．９７
【００６６】
実施例２
N−［（R）−３−ドデカノイルオキシテトラデカノイル］−（S）−２−ピロリジニルメチル ２−デオキシ−４−O−フォスフォノ−２−［（R）−３−デカノイルオキシ−テトラデカノイルアミノ］−３−O−［（R）−３−ドデカノイルオキシテトラデカノイル］−β−D−グルコピラノシドトリエチルアンモニウム塩；式(III)のトリエチルアンモニウム塩の調製
(２a)無水１，２−ジクロロエタン(３．２mL)中の２−デオキシ−４−O−ジフェニルフォスフォノ−３−O−[(R)−３−ドデカノイルオキシテトラデカノイル]−６−O−(２，２，２−トリクロロ−１，１−ジメチルエトキシカルボニル)−２−(２，２，２−トリクロロエトキシカルボニルアミノ)−α−D−グルコピラノシルブロミド(１．６０g、１．２７mmol)の溶液に対して、４Å分子篩(０．６g)、無水CaSO4(１．０g、７．３mmol)、及びN−[(R)−３−ドデカノイルオキシテトラデカノイル]−(S)−２−ピロリジンメタノール(０．５８g、１．１４mmol)を加えた。生じる混合物を室温で１時間に渡り撹拌し、Hg(CN)2(０．５８ｇ、２．３mmol)で処理し、６時間に渡り暗中で加熱し、還流した。冷却した反応混合物をCH2Cl2で希釈し、そしてセライトの床を通してろ過した。ろ過物を１NのKI水で洗浄し、乾燥 (Na2SO4)させ、そして濃縮した。シリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィー(勾配溶離、２５→３５％ EtOAc/ヘキサン)により１．７２g(８２％)のN−［（R−３−ドデカノイルオキシテトラデカノイル］−（S）−２−ピロリジニルメチル ２−デオキシ−４−O−ジフェニルフォスフォノ−３−O−［（R）−３−ドデカノイルオキシテトラデカノイル］−６−O−［２，２，２−トリクロロ−１，１−ジメチルオキシカルボニル］−２−(２，２，２−トリクロロエトキシカルボニルアミノ)−β−D−グルコピラノシドを無色油として獲得した。
【００６７】
(２b)上の(１a)で調製した化合物(１.５８g、０.８０６mmol)のAcOH(４０mL)中の６０℃における溶液を亜鉛粉(２．６g、４０mmol)において３等量で１時間に渡り処理した。冷却した反応混合物を超音波処理し、セライトのパッドを通してろ過し、そして濃縮した。生じる残留物をEtOAc〜飽和NaHCO3水で分離し、そして層を分離させた。有機層を塩水で洗浄し、乾燥(Na2SO4)させて濃縮し、１．３gの白色固体を獲得した。獲得した粗製のアミノアルコールと(R)−３−テトラデカノイルオキシテトラデカノイン酸(０.４５g、１.０５mmol)のCH2Cl2(２０mL)中での溶液を２−エトキシ−１−エトキシカルボニル−１，２−ジヒドロキノリン(０.３０g、１.２１mmol)で処理した。生じる混合物を室温で１８時間に渡り撹拌して濃縮した。４０→５０％EtOAc/ヘキサンを伴うシリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィーにより０．８９g(５６％)のN−［（R）−３−ドデカノイルオキシテトラデカノイル］−（S）−２−ピロリジニルメチル ２−デオキシ−４−O−ジフェニルフォスフォノ−２−［（R）−３−テトラデカノイルオキシテトラ−デカノイルアミノ］−３−O−［(R)−３−ドデカノイルオキシトテラデカノイル］−β−D−グルコピラノシドを白色泡沫として獲得した。
【００６８】
(２c)AcOH(４．５mL)とテトラヒドロフラン(４５mL)の混合物中上の(２b)で調製した化合物(０.７５g、０.４４mmmol)の溶液をPtO2(０.４５g)の存在下室温及び７０psigで１８時間に渡り水素化した。この反応混合物を２：１CHCl3−MeOH(３５mL)で希釈して素早く超音波に掛けた。触媒を回収して２：１CHCl3−MeOHで洗浄して組み合わさったろ過物と洗浄物を濃縮した。CHCl3−MeOH−H2O−Et3N(勾配溶離；９６：４：０．３：０．３→９０：１０：０．５：０．５)を伴うシリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィーにより、部分的に精製された産物(０．５１g)を獲得し、それを氷冷２：１CHCl3−MeOH(５０mL)に溶かし、そして氷冷０．１NHCl水溶液(２０mL)で洗浄した。有機層をろ過して濃縮した。獲得した白色ろうを２％Et3N(７０mL、病原体フリー)より凍結乾燥し、０．５４g(７８％)のN−［（R）−３−ドデカノイルオキシテトラデカノイル］−（S）−２−ピロリジニルメチル ２−デオキシ−４−O−フォスフォノ−２−［（R）−３−ドデカノイルオキシテトラデカノイルアミノ］−３−O−［(R)−３−ドデカノイルオキシ−テトラデカノイル］−β−D−グルコピラノシドトリエチルアンモニウム塩を白色粉末として獲得した。融点１４６〜１５１℃；IR(フィルム)３２９２，３１００，２９５８，２９２２，２８５２，１７３９，１７３１，１６５９，１６５１，１６４４，１５６２，１５５５，１４６８，１４５５，１４３３，１３７７，１３３９，１３１０，１２５３，１２３８，１１８３，１１６０，１１０７，１０８０，１０４７，９６０，８５６，７２２cm-1；1H NMR(CDCl3−CD3OD)δ０．８８(m，１８H)，１．０−２．１０(mH)、２．２０−２．７５(m，１２H)，３．０４(q，６H,J＝７.２Hz)，３．３−４．３(mH)、４．４５(d，１H，J＝８．５Hz)，５．０−５．２８(m，４H)；13C NMR(CDCl3)δ１７３．９，１７３．４，１７３．２，１７０．６，１７０．１，１６９．２，１０１．４，７５．５，７４．０，７０．８，７０．７，７０．２，６８．５，６０．５，５６．６，５３．６，４７．４，４５．６，４０．９，３９．６，３８．８，３４．５，３４．３，３４．２，３４．１，３１．９，２９．７，２９．６，２９．５，２９．４，２９．３，２９．２，２７．３，２５．２，２５．０，２３．６，２２．７，２１．６，１４．０，８．３．
[M＋Na]+について計算されたMALDI-MS 1590.1900、発見1590.1866；C95H182N3O17P・3H2Oについて分析、計算：C,６６．２０；H,１０．９９；N,２．４４。発見：C，６６．３６；H，１０．６９；N，２．１５.
【００６９】
実施例３
N−［（R）−３−デカノイルオキシテトラデカノイル］−（S）−２−ピロリジニルメチル ２−デオキシ−４−O−フォスフォノ−２−［（R）−３−デカノイルオキシテトラデカノイルアミノ］−３−O−［（R）−３−デカノイルオキシテトラデカノイル］−β−D−グルコピラノシドトリエチルアンモニウム塩；式(IV)のトリエチルアンモニウム塩の調製
(３a)無水１，２−ジクロロエタン(３．５mL)中の２−デオキシ−４−O−ジフェニルフォスフォノ−３−O−[(R)−３−デカノイルオキシテトラデカノイル]−６−O−(２，２，２−トリクロロ−１，１−ジメチルエトキシカルボニル)−２−(２，２，２−トリクロロエトキシカルボニルアミノ)−α−D−グルコピラノシルブロミド(１．７０g、１．３８mmol)の溶液に対して、４Å分子篩(０．６g)、無水CaSO4(１．２g、８．８mmol)、及びN−[(R)−３−テトラデカノイルオキシテトラデカノイル]−(S)−２−ピロリジンメタノール(０．６０g、１．２４mmol)を加えた。生じる混合物を室温で１時間に渡り撹拌し、Hg(CN)2(０．６３ｇ、２．５mmol)で処理し、そして６時間に渡り暗中で加熱し還流させた。冷却した反応混合物をCH2Cl2で希釈してセライトの床を通してろ過した。ろ過物を１NのKI水で洗浄し、乾燥 (Na2SO4)させ、そして濃縮した。シリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィー(勾配溶離２５→４０％ EtOAc/ヘキサン)により１．８２g(８０％)のN−［（R）−３−デカノイルオキシテトラデカノイル］−（S）−２−ピロリジニルメチル ２−デオキシ−４−O−ジフェニルフォスフォノ−３−O−［（R）−３−デカノイルオキシテトラデカノイル］−６−O−［２，２，２−トリクロロ−１，１−ジメチルオキシカルボニル］−２−(２，２，２−トリクロロエトキシカルボニルアミノ)−β−D−グルコピラノシドを無色油として獲得した。
【００７０】
(３b)上の(３a)で調製した化合物(１.６７g、１.０２mmol)のAcOH(５０mL)中の６０℃における溶液を亜鉛粉(３．３３g、５１mmol)において３等量で１時間に渡り処理した。冷却した反応混合物を超音波処理し、セライトのパッドを通してろ過し、そして濃縮した。生じる残留物をEtOAc〜飽和NaHCO3で分離し、そして層を分離させた。有機層を塩水で洗浄し、乾燥(Na2SO4)させて濃縮し１．２５gの白色固体を獲得した。獲得した粗製のアミノアルコールと(R)−３−デカノイルオキシトテラデカノイン酸(０.５３g、１.３３mmol)のCH2Cl2(２０mL)中での溶液を２−エトキシ−１−エトキシカルボニル−１，２−ジヒドロキノリン(０.３８g、１.５３mmol)で処理した。生じる混合物を室温で１８時間に渡り撹拌し、そして濃縮した。４０→５０％EtOAc/ヘキサンを伴うシリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィーにより１．２３g(７４％)のN−［（R）−３−デカノイルオキシテトラデカノイル］−（S）−２−ピロリジニルメチル ２−デオキシ−４−O−ジフェニルフォスフォノ−２−［（R）−３−テトラデカノイルオキシテトラデカノイルアミノ］−３−O−［(R)−３−デカノイルオキシテトラデカノイル］−β−D−グルコピラノシドを白色泡沫として獲得した。
【００７１】
(３c)AcOH(６．５mL)とテトラヒドロフラン(６５mL)の混合物中上の(３b)で調製した化合物(１.０７g、０.６５４mmol)の溶液をPtO2(０.６６g)の存在下室温及び７０psigで１８時間に渡り水素化した。この反応混合物を２：１CHCl3−MeOH(５０mL)で希釈して素早く超音波に掛けた。触媒を回収して２：１CHCl3−MeOHで洗浄して組み合わさったろ過物と洗浄物を濃縮した。生じるろう状の獲得された固体を２％トリエチルアミン水より凍結乾燥し、約１gの粗製のトリエチルアンモニウム塩を白色粉末として獲得した。CHCl3−MeOH−H2O−Et3N(勾配溶離；９６：４：０．３：０．３→８８：１２：１：０．６)を伴うシリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィーにより、部分的に精製された産物(０．８４g)を獲得し、それを氷冷２：１CHCl3−MeOH(１６８mL)に溶かし、そして氷冷０．１NHCl水溶液(６７mL)で洗浄した。有機層をろ過して濃縮した。獲得した白色ろう(約０．７g)を２％Et3N(５mL、病原体フリー)より凍結乾燥し、０．７９g(７９％)のN−［（R）−３−デカノイルオキシテトラデカノイル］−（S）−２−ピロリジニルメチル ２−デオキシ−４−O−フォスフォノ−２−［（R）−３−デカノイルオキシテトラデカノイルアミノ］−３−O−［(R)−３−デカノイルオキシテトラデカノイル］−β−D−グルコピラノシドトリエチルアンモニウム塩を白色粉末として獲得した。融点１２１〜１２２℃；IR(フィルム)３２８７，３０９３，２９６１，２９１３，２８５０，１７４５，１７３８，１７３２，１７１６，１６６６，１６６０，１６５１，１６４４，１６３５，１５６５，１５５６，１５３８，１４７０，１４５５，１４３４，１４１６，１３７８，１３３７，１３１１，１２４８，１１８４，１１０４，１０８１，１０２１，９６４，７２１cm-1；1H NMR(CDCl3−CD3OD)δ０．８８(m，１８H)，１．０−２．１５(mH)、２．２０−２．７５(m，１２H)，３．０４(q，６H,J＝７.２Hz)，３．３−４．３(mH)、４．４５(d，１H，J＝８．５Hz)，５．０−５．２８(m，４H)；13C NMR(CDCl3)δ１７３．７，１７３．４，１７３．２，１７０．５，１７０．１，１６９．１，１０１．４，７５．６，７４．０，７０．８，７０．２，６８．７，６０．４，５６．６，５３．８，４７．４，４５．６，４１．０，３９．６，３８．９，３４．５，３４．３，３４．２，３４．１，３１．９，２９．７，２９．６，２９．５，２９．４，２９．４，２９．３，２９．２，２７．３，２５．３，２５．０，２３．７，２２．７，２１．６，１４．１，８．４．
[M＋Na]+について計算されたMALDI-MS 1506.0961、発見1506.1008；C89H170N3O17Pについて分析、計算：C,６７．４３；H,１０．８１；N,２．６５。発見：C，６７．２６；H，１０．８５；N，２．４７.
【００７２】
実施例４
マウスリステリアモノサイトゲネス(Listeria Monocytogenes)チャレンジモデル
この例は、例１、２及び３で調製した化合物を使用することで行ったマウスリステリアモノサイトゲネスチャレンジモデルにおける非特異的耐性の誘導を評価する実験を提供する。マウス(５匹/群)を静脈において、０．２％トリエタノールアミン(TEOA)中で可溶化した１μgのサイクリックAGP又はMPLで処理した。２日後、マウスを静脈内に約１０5モノサイトゲネス10403セロタイプ(Jory Baldridge、Washington State University、Pullman、WA.によって提供されたストック培養物)で処理した。このチャレンジの２日後、マウスを犠牲にして個々のマウスの脾臓におけるコロニー形成単位(CFU)を、脾臓ホモジネートの１０倍連続希釈物をトリプシンソイアガープレート上塗布することによって測定した。AGP又はMPLによって与えられた保護の程度の計算は、ある化合物により処理されたマウスの群における脾臓(log10値)あたりの細菌の平均数をL.モノサイトゲネスでチャレンジする前にビヒクル(０.２％TEOA)で処理した「シャム」コントロール群における脾臓(log10値)あたりの細菌の平均数から引くことによって行った。
【００７３】
試験した化合物のうちで、例３のものが最大活性であり、例えば保護は、MPLに匹敵した(約０．９log10ユニット)。例２の化合物は僅かに低い保護を誘導し、そして例１のものは最小の保護(それぞれ０．７及び０．２logユニット)を供した。
【００７４】
例５
サイクリックAGPの予防的投与による致死インフルエンザチャレンジに対する保護
この例は、サイクリックAGPで処理したマウスにおけるインフルエンザでの致死チャレンジに対する保護を評価する実験を供する。BALB/cマウス(１０匹のマウス/群)を例１、２及び３の化合物又はMPL２０μgで、又はインフルエンザA/HK/68(５LD５０)の致死鼻腔内チャレンジする４８時間前に鼻腔内処理した。保護を、生存、臨床症状(波立った毛並み、猫背の姿勢及び苦しい呼吸)の確認、及びチャレンジ後２１日に渡る体重減の阻止により評価した。
【００７５】
リステリアモデルに見られるように、例２及び３の化合物は、ビヒクルコントロールと比べた場合保護の増強を供した。例３の化合物で処理したマウスは６０％の生存率を有し；例２の化合物で処理したものは４０％の生存率を有し、そしてMPLで処理したものは３０％の生存率を有した。例１の化合物で処理したマウスは生存しなかった。このデータにより、例３の化合物は優れた保護を供し、そして例２及び１のものが続く。
【００７６】
本明細書中で引用した全ての刊行物及び出願特許は参照によってその全体が組み込まれている。従来の発明が幾分詳細に理解を明確にする目的の例示及び例により記載されているが、所定の変更及び修飾は添付の請求の範囲の精神又は範囲から逸脱することなく、本発明の教示を示すことにおいて当業者には明らかであろう。
【手続補正書】
【提出日】平成17年2月4日(2005.2.4)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】請求項６３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項６３】
前記サイクリックAGPがN−［（R）−３−デカノイルオキシテトラデカノイル］−（S）−２−ピロリジニルメチル ２−デオキシ−４−O−フォスフォノ−２−［（R）−３−デカノイルオキシテトラデカノイルアミノ］−３−O−［（R）−３−デカノイルオキシテトラデカノイル］−β−D−グルコピラノシド又は医薬的に許容できるその塩である、請求項６１に記載の方法。
【国際調査報告】
2005523902.tif 000014