【手続補正書】
【提出日】令和2年8月4日(2020.8.4)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＡＡＶに結合する抗体を、測定又は定量するための方法において、以下：
（ａ）組換えベクターを包膜する感染性組換えＡＡＶ粒子を用意するステップであって、（ｉ）前記ベクターが、リポータトランスジーンを含み、（ｉｉ）前記リポータトランスジーンが、一本鎖若しくは自己相補的ゲノムを含むと共に、（ｉｉｉ）前記リポータトランスジーンが、１つ又は複数の発現調節エレメントに作動可能に連結され、かつ１つ又は複数のフランキングエレメントによってフランキングされている、ステップ；
（ｂ）前記感染性組換えＡＡＶ粒子に感染し得る細胞を用意するステップ；
（ｃ）（ａ）の感染性組換えＡＡＶ粒子を被験者からの生体サンプルと接触させるか、又はインキュベートし、これによって得られる混合物（Ｍ）を生成するステップ；
（ｄ）得られた混合物（Ｍ）と（ｂ）の細胞を、（ａ）の前記感染性組換えＡＡＶ粒子が、前記細胞中の前記リポータトランスジーンに感染して、これを発現させることを可能にする条件下で、接触させるステップ；
（ｅ）前記リポータトランスジーンの発現を測定するステップ；並びに
（ｆ）（ｅ）の前記リポータトランスジーン発現をＡＡＶに結合する抗体が欠失した陰性（−）対照のリポータトランスジーン発現と比較するステップであって、これによって、前記生体サンプル中のＡＡＶに結合する抗体を測定又は定量するステップ
を含む方法。
【請求項２】
前記細胞が、哺乳動物細胞を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記細胞が、ＡＡＶ複製及び／又はゲノム組込みのためのヘルパー機能をコードする核酸配列をもたらす、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記細胞が、ＡＡＶ血清型ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、ＡＡＶ１２、Ｒｈ７４、若しくはＲｈ１０、又はこれらＡＡＶ血清型のいずれかのハイブリッド若しくはキメラのＶＰ１、ＶＰ２若しくはＶＰ３配列と９０％以上同一のＶＰ１、ＶＰ２若しくはＶＰ３配列を含むＡＡＶ粒子に感染し得る、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記細胞が、ＨＥＫ−２９３、ＣＨＯ、ＢＨＫ、ＭＤＣＫ、１０Ｔ１／２、ＷＥＨＩ細胞、ＣＯＳ、ＢＳＣ  １、ＢＳＣ  ４０、ＢＭＴ  １０、ＶＥＲＯ、ＷＩ３８、ＭＲＣ５、Ａ５４９、ＨＴ１０８０、２９３、Ｂ−５０、３Ｔ３、ＮＩＨ３Ｔ３、ＨｅｐＧ２、Ｓａｏｓ−２、Ｈｕｈ７、ＨＥＲ、ＨＥＫ、ＨＥＬ、又はＨｅＬａ細胞を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記細胞が、ＡＡＶ  Ｅ４遺伝子を発現する、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記細胞が、２Ｖ６．１１細胞を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記リポータトランスジーンが、酵素、比色、蛍光、発光、化学発光、又は電気化学シグナルを賦与するタンパク質をコードする、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
前記リポータトランスジーンが、ルシフェラーゼ遺伝子を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
前記ルシフェラーゼ遺伝子が、ウミシイタケ（ｒｅｎｉｌｌａ）ルシフェラーゼ遺伝子又はホタル（ｆｉｒｅｆｌｙ）ルシフェラーゼ遺伝子を含む、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記リポータトランスジーンが、βガラクトシダーゼ遺伝子、βグルコロニダーゼ遺伝子、又はクロラムフェニコールトランスフェラーゼ遺伝子を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
前記リポータトランスジーンが、緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）、赤色蛍光タンパク質（ＲＦＰ）又はアルカリホスファターゼをコードする、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
前記組換えベクターが、ＡＡＶベクターを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
１６
前記ＡＡＶベクターが、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、ＡＡＶ１２、Ｒｈ７４、若しくはＲｈ１０ベクター、又はこれらＡＡＶベクターのいずれかのハイブリッド若しくはキメラを含む、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記発現調節エレメントが、哺乳動物細胞において作動可能なプロモータ及び／又はエンハンサー核酸配列を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１６】
前記リポータトランスジーンが、一本鎖ゲノムである、請求項１に記載の方法。
【請求項１７】
前記リポータトランスジーンが、自己相補的ゲノムである、請求項１に記載の方法。
【請求項１８】
前記フランキングエレメントが、１つ又は複数のＡＡＶ逆方向末端反復配列（ＩＴＲ）を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１９】
前記リポータトランスジーンが、１つ又は複数の５’及び／又は３’ＡＡＶ  ＩＴＲの間に位置する、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記組換えベクターが、ＡＡＶの第１の逆方向末端反復配列（ＩＴＲ）；哺乳動物細胞において作動可能なプロモータ；リポータトランスジーン；ポリアデニル化シグナル；及び任意選択でＡＡＶの第２のＩＴＲを含む請求項１に記載の方法。
【請求項２１】
前記組換えベクターが、哺乳動物細胞において、作動可能なプロモータの下流にリポータトランスジーンの挿入を可能にする制限部位を、また、該制限部位の下流に転写後調節エレメントを含み、ここで、前記プロモータ、前記制限部位及び前記転写後調節エレメントは、５’ＡＡＶ  ＩＴＲの下流に、また任意選択の３’ＡＡＶ  ＩＴＲの上流に位置する、請求項１に記載の方法。
【請求項２２】
前記感染性組換えＡＡＶ粒子が、霊長類に感染するＡＡＶ血清型を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項２３】
前記感染性組換えＡＡＶ粒子が、ヒト又はアカゲザル（ｒｈｅｓｕｓ  ｍａｃａｑｕｅ）に感染するＡＡＶ血清型を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項２４】
前記感染性組換えＡＡＶ粒子が、ＡＡＶ血清型ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、ＡＡＶ１２、Ｒｈ７４、若しくはＲｈ１０、又はこれらＡＡＶ血清型のいずれかのハイブリッド若しくはキメラのＶＰ１、ＶＰ２又はＶＰ３配列と９０％以上同一であるＶＰ１、ＶＰ２又はＶＰ３配列を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項２５】
前記生体サンプルが、血清を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項２６】
前記生体サンプルが、血漿を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項２７】
前記被験者が、哺乳動物である、請求項１に記載の方法。
【請求項２８】
前記被験者が、ヒトである、請求項１に記載の方法。
【請求項２９】
前記被験者が、タンパク質の不十分な発現又は活性に起因する障害に罹患している、請求項１に記載の方法。
【請求項３０】
前記被験者が、異常、欠陥若しくは望ましくないタンパク質の発現又は活性に起因する疾患に罹患している、請求項１に記載の方法。
【請求項３１】
前記被験者が、遺伝性疾患に罹患している、請求項１に記載の方法。
【請求項３２】
（ｈ）（ｅ）の前記リポータトランスジーン発現を陽性対照のリポータトランスジーン発現と比較するステップであって、前記陽性対照が、ＡＡＶに結合する既定量の抗体を有するステップをさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３３】
前記生体サンプル中のＡＡＶに結合する抗体の前記量を、前記被験者に関連する報告書に入力又は算入するステップをさらに含む、請求項１又は３２に記載の方法。
【請求項３４】
前記生体サンプル中のＡＡＶに結合する抗体の前記量をデータベースに入力し、これによって、データベースエントリー、すなわち前記被験者に関連するデータベースエントリーを作成するステップをさらに含む、請求項１又は３２に記載の方法。
【請求項３５】
測定又は定量される前記抗体が、ＡＡＶキャプシドタンパク質に結合する、請求項１又は３２に記載の方法。
【請求項３６】
測定又は定量される前記抗体が、ＡＡＶ血清型ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、ＡＡＶ１２、Ｒｈ７４、若しくはＲｈ１０、又は前記ＡＡＶ血清型のいずれかのハイブリッド若しくはキメラに結合する、請求項１又は３２に記載の方法。
【請求項３７】
前記既定量の抗体が、ＡＡＶ血清型ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、ＡＡＶ１２、Ｒｈ７４、若しくはＲｈ１０、又は前記ＡＡＶ血清型のいずれかのハイブリッド若しくはキメラに結合する、請求項３２に記載の方法。
【請求項３８】
前記生体サンプルを、（ａ）の感染性組換えＡＡＶ粒子との接触又はインキュベートの前に希釈する、請求項１に記載の方法。
【請求項３９】
前記生体サンプルの複数の希釈物を定量する、請求項１に記載の方法。
【請求項４０】
前記リポータトランスジーンの発現を測定する前に、前記細胞を溶解させる、請求項１に記載の方法。