(57)【要約】本発明は、式（１）【化１】2005523244.tif 000068に従うピラゾリル［１，２，４］トリアゾロ［４，３−α］キノキサリン誘導体または式（２）【化２】2005523244.tif 000069に従うピラゾリル−置換テトラゾロ［１，５−α］キノキサリンの形態であるそれの類似物に関する。このような形態またはそれらの薬学的に受け入れられる塩の形態の式１または２に従う物質は活性剤、特にアデノシン受容体のリガンドとして用いるに適する。
2005523244.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（１）
【化１】
2005523244.tif 000057
［式中、
Ｒ１からＲ４は、水素、線状もしくは分枝している飽和もしくは不飽和アルキル基、シクロアルキル基であるが、これは場合により１個以上のヘテロ原子、アリールもしくはヘテロアリール基、アルコキシ、ヒドロキシ、ハロゲン、アミノ、ニトロ、トリハロメチル、カルボキシ、アルコキシカルボニルまたはスルホ基を持っていてもよく、ここで、Ｒ１からＲ４は同じまたは異なり、或は縮合したアリールもしくはヘテロアリール基として存在していてもよいか或は相当するハロゲン置換もしくは部分ハロゲン置換系として存在していてもよく、置換基Ｒは、水素、または置換されているか或は置換されていない形態の線状もしくは分枝鎖飽和および／または不飽和炭素基、シクロアルキル基、アリールもしくはヘテロアリール基であり、ここで、置換基Ｒは基部と直接結合しているか或は１個以上の炭素原子がヘテロ原子、例えば酸素、硫黄または窒素などに置き換わっていてもよいアルキレン基を通して結合しており、置換基Ｒ５は、水素、Ｃ１−Ｃ８アルキル、アリル、アリールアルキル、（ヘテロ）アリールアルキルまたはアシルであり、そして基Ｒ６は、ハロゲンまたは水素である］
に従うが、Ｒ１からＲ５が水素に等しく、Ｒ６が塩素に等しくそしてＲがメチル、フェニル、ベンジル、２−フリル、２−チエニルまたは２−チエニルメチルに等しい化合物を除くピラゾリル置換［１，２，４−］トリアゾロ［４，３−ａ］キノキサリン。
【請求項２】
式（１）に従うピラゾリル−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］キノキサリンを製造する方法であって、式（Ｃ）
【化２】
2005523244.tif 000058
［式中、基Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は請求項１記載の意味を有し、Ｘ’は脱離基であり、そしてＸはハロゲンまたは水素である］
に従う置換１，２ジアジンに閉環反応を受けさせることで式（Ｄ）
【化３】
2005523244.tif 000059
に従うピラゾリル置換キノキサリンを生じさせた後、式（Ｅ）
【化４】
2005523244.tif 000060
に従う２−クロロキノキサリン誘導体を生じさせ、これを反応させて式（Ｆ）
【化５】
2005523244.tif 000061
に従う相当する２−ヒドラジノ誘導体を生じさせ、これからアシル化で式（Ｇ）
【化６】
2005523244.tif 000062
に従う化合物を得て、これから閉環反応で式（１）に従うピラゾリル［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］キノキサリンを得ることを特徴とする方法。
【請求項３】
前記閉環反応を相当するヒドラジンから出発して中間体であるヒドラジド生成物を単離することなく実施する請求項２記載の方法。
【請求項４】
置換２−クロロキノキサリンをヒドラジドと反応させることで前記式（Ｇ）に従う化合物を得る請求項２または３記載の方法。
【請求項５】
請求項２から４の１項に従う対称的に置換されているピラゾリル［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］キノキサリンを製造する方法であって、式（Ｂ）
【化７】
2005523244.tif 000063
［式中、基Ｒ１からＲ４は請求項１記載の意味を有する］
に従うｏ−フェニレンジアミンを活性３，６−ジハロピリダジン−４−カルボン酸と反応させることで請求項２記載の式（Ｃ）に従う置換ジアジンを得る方法。
【請求項６】
式（１）に従う非対称的に置換されているピラゾリル［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］キノキサリンを製造する方法であって、式（Ｈ）
【化８】
2005523244.tif 000064
に従うｏ−ニトロアニリン誘導体に３，６−ジハロピリダジン−４−カルボン酸クロライドによるＮ−アシル化を受けさせて式（Ｊ）
【化９】
2005523244.tif 000065
に従う化合物を生じさせ、ニトロ基に還元を受けさせることで前記式（Ｃ）に従う化合物中にアミン基を得ることで、請求項２記載の式（Ｃ）に従う置換ジアジンを得る方法。
【請求項７】
式（１）に従う非対称的に置換されている三環状化合物を製造する方法であって、アシル化反応に関して２個のアミノ基の中の少なくとも一方が活性または不活性であることで環系１つまたは２つ以上に選択的置換が起こるように反応性に影響を与える１個以上の置換基を有する非対称的に置換されているフェニレンジアミンを用いる方法。
【請求項８】
式（２）
【化１０】
2005523244.tif 000066
［式中、Ｒ１からＲ６に加えてＲは請求項１に示した意味を有する］
に従うピラゾリル置換テトラゾロ［１，５−ａ］キノキサリン。
【請求項９】
一般式（１）または（２）
【化１１】
2005523244.tif 000067
［式中、Ｒ５は水素に等しくない］
に従う化合物を製造することに加えて蓄積する異性体を分離する方法であって、Ｒ５が水素に等しい式（１）または（２）で表される化合物のいずれかにアルキル置換を受けさせるか或は置換基Ｒ５を請求項２に示した如き化合物（Ｄ）、（Ｅ）、（Ｆ）または（Ｇ）の段階で既に導入しておくが、２−クロロキノキサリン（Ｅ）を反応させる方が好適である方法。
【請求項１０】
請求項２に示した如き式（Ｅ）で表される化合物を生じさせた後にそれをヒドラゾ酸の塩と反応させる請求項９記載式（２）に従う化合物の製造方法。
【請求項１１】
薬学的活性材料、特にアデノシン受容体リガンドとしての単離されたか或は薬学的に適合し得る塩または溶媒和の形態の式（１）に従うピラゾリル［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］キノキサリンまたは式（２）に従うピラゾリル置換テトラゾロ［１，５−ａ］キノキサリン。
【請求項１２】
薬剤であって、式（１）に従うピラゾリル置換［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］キノキサリンおよび／または式（２）に従うピラゾリル置換テトラゾロ［１，５−ａ］キノキサリンおよび／またはこれらの薬学的に適合し得る塩を活性材料として含有する薬剤。
【請求項１３】
経口、直腸、吸入、経皮、経粘膜または大脳室内投与に適した形態で存在する請求項１２記載の薬剤。
【請求項１４】
移植、注入または注射に適した投与の形態で存在する請求項１２記載の薬剤。
【請求項１５】
腎臓領域の病気、例えば急性腎不全、腎炎、肝腎症候群などの治療、心臓の治療、好適には心臓不規則、虚血、心筋梗塞または狭心症の治療、中枢神経系（ＣＮＳ）の治療、好適には痴呆、アルツハイマー病、不安障害、テンカン、パーキンソン病、発作、鬱病、アヘン禁断症状または昏睡状態の治療、または肺の治療、好適には呼吸病、例えば喘息、気管支炎および膵臓線維症などの治療の目的で請求項１２から１４の１項記載の薬剤を製造する方法。
【請求項１６】
肺移植で使用可能な保護剤を薬剤として製造する請求項１２から１４の１項記載の薬剤製造方法。
【請求項１７】
高血圧、アレルギー性皮膚病、例えばじんま疹などまたは炎症を治療するための請求項１２から１４の１項記載の薬剤を製造する方法。
【請求項１８】
免疫刺激薬を薬剤として製造する請求項１２から１４の１項記載の薬剤製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ピラゾリル置換トリアゾロキノキサリン、これらの類似テトラゾロキノキサリンばかりでなくこれらの薬学的に適合し得る塩、それらの製造に加えて、それらを腎領域の病気を治療するための薬剤［Ｋ＋保持性利尿剤、急性腎不全治療用薬剤、腎炎治療用薬剤、肝腎症候群治療用薬剤］、心臓の治療［好適には心臓不規則（ｃａｒｄｉａｃ  ｉｒｒｅｇｕｌａｒｉｔｉｅｓ）、虚血、心筋梗塞または狭心症の場合の治療］、中枢神経系［痴呆、アルツハイマー病、不安障害、テンカン、パーキンソン病、発作、鬱病、アヘン禁断症状および昏睡状態］の治療、そして肺の治療［呼吸病、例えば喘息、気管支炎および膵臓線維症の治療ばかりでなく、肺移植用保護剤］の目的の薬剤として用いることに関する。加うるに、本発明は、高血圧、アレルギー性皮膚病（じんま疹）、炎症を治療するための薬剤、免疫刺激薬としての薬剤、精子運動性低下用薬剤（これによって避妊作用を引き出す）ばかりでなく診断剤も包含する。
【背景技術】
【０００２】
ヌクレオシドアデノシンは哺乳動物（人を包含）に存在する調節剤（ｍｏｄｕｌａｔｏｒ）であり、前記調節剤はジ−およびトリホスフェートの形態のエネルギーバランスと極めて密に結合することが知られている。アデノシン自身は神経系、心臓血管系、免疫系、呼吸系および代謝に影響を与えるが、それらが示す作用は一般に抑制的性質を有する、即ちその作用は鎮静作用、血管拡張作用、心拍数を下げる作用、そして利尿抑制作用ばかりでなく脂肪分解作用を有する。
【０００３】
今日までに異なる４種類のアデノシン受容体（これらはＧ蛋白質と結合することでアデニレートシクラーゼを活性にする）が同定されていて、Ａ１、Ａ２Ａ、Ａ２ＢおよびＡ３の名称を持つ。中枢神経系が特に高密度のアデノシン受容体を示すが、特にＡ１受容体およびＡ２Ｂ受容体はほとんど全部の種類の組織に存在する。アデノシン受容体は医学生理学的ばかりでなく薬理学的にも様々な重要性を有することから、それらは多くのケースで詳細な科学研究論文の主題である（例えば非特許文献１、２および３などを参照）。受容体サブタイプＡ１およびＡ２Ａは高い親和性を示し、既にナノモルの濃度で存在するアデノシンで刺激されるが、サブタイプＡ２ＢおよびＡ３が天然のリガンドに対して示す親和力は低い（ミクロモル）。このことが基になって、アデノシンの濃度が高くなるとそのような受容体が活性化すると言った考慮が疑われ始めており、このように、Ａ１受容体は生理学的に不活発な（ｄｏｒｍａｎｔ）濃度で基本的な活性化を与え、そして例外的なケース、例えば虚血性発作または心筋梗塞などのケースで、Ａ３受容体は主にアデノシンの濃度が非常に高くなるに伴ってそれの作用を及ぼす。
【０００４】
従って、アデノシンＡ１受容体はそのようにモデル化した説明に従うとほとんど絶えず活性化されていて、強壮的抑制監視（ｔｏｎｉｃ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ  ｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇ）［これは拮抗薬によって排除され得る］を及ぼし、これが例えばカフェインの興奮または脱水作用の薬理学的基本である。従って、アデノシンＡ１拮抗薬は下記の数多くの点で薬理学的活性材料として極めて有利である：
−  精神医学の範囲内で、痴呆状態の時に認識を向上させかつ抗鬱薬として、
−  心臓血管および泌尿器科学領域において、抗高血圧薬および抗不整脈薬として、
−  急性腎不全の治療（アデノシンＡ１遮断によって二次的血管収縮がなくなることで血液の供給が高くなり得る）［この場合、Ａ１拮抗薬による独立した利尿効果、特にカリウム保持ナトリウム排泄増加の助長が追加的に重要である、と言うのは、水が保持されると結果として循環系に対する応力が更に増すからである］、
−  肺の場合、アデノシンＡ１拮抗薬は、Ａ１受容体の活性化が介在して気管平滑筋が弛緩することで起こる気管支収縮に対抗する能力を有し、従って効力のある抗喘息薬である［その上、そのような活性材料は塩化物イオンを上皮細胞から放出されるのを助長することから膵臓線維症の臨床的症状に対して肯定的な作用を示すことも考察されている］。
【０００５】
脳ばかりでなく目の網膜の中でＡ２Ａ受容体が活性化されるとそれは顕著な様式でＡ１受容体に対して拮抗作用を示す。Ａ２Ａ拮抗薬は、アデノシンがいろいろなニューロペプチド、代謝親和性（ｍｅｔａｂｏｔｒｏｐｉｃ）およびイオン親和性（ｉｏｎｏｔｒｏｐｉｃ）グルタメート、ドーパミンおよびニコチン受容体の放出［これは逆に再びアセチルコリンおよびドーパミンの放出に影響を与える］ばかりでなくガンマ−アミノ酪酸（ＧＡＢＡ）の放出に対して示す調節作用に関連して（非特許文献４）、パーキンソン病の治療で効力のある治療薬に相当し、従って、脳のＡ１作動薬の作用を増強し得る（非特許文献５）。後者は発作を起こした患者および網膜虚血を伴う患者の治療で効力のある活性材料に相当する。しかしながら、アデノシンＡ２Ａ作動薬がアデノシンＡ１阻害剤の作用をなくす能力を有するか否かは現時点ではまだ未知である。しかしながら、Ａ１受容体およびＡ２Ａ受容体に対して匹敵する結合強度を有するリガンドは望ましくないと考えられている、と言うのは、その結果として起こる薬理学的作用が互いに対抗する可能性があるからである。
【０００６】
部分的にプリンもしくはキサンチン構造を有するアデノシン受容体拮抗薬は充分な親和性も選択性も示さないことが知られている。しかしながら、例えばトリアゾロキナゾリン、トリアゾロピリミジンおよびトリアゾロトリアジンの２−フラニル誘導体などを用いてそのようなパラメーターを有意に向上させることができ、それらは下記の構造式で表される（非特許文献６および７）：
【０００７】
【化１】
2005523244.tif 000003
【０００８】
９−クロロ−２−（２−フラニル）−［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ｃ］キナゾリン−５−アミン
【０００９】
【化２】
2005523244.tif 000004
【００１０】
２−（２−フラニル）−７−（２−フェニルエチル）−７Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｅ］［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ｃ］ピリミジン−５−アミン
【００１１】
【化３】
2005523244.tif 000005
【００１２】
４−［２−［［７−アミノ−２（２−フラニル）［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］［１，３，５］トリアジン−５−イル］アミノ］エチル］−フェノール。
【００１３】
しかしながら、この示した例はいろいろな薬理学的または（物理）化学的欠点を有する。このように、化合物ＣＧＳ−１５９４３を虚血発作用治療薬として開発することは選択性が充分でないことが理由で進展しなかった。しかしながら、化合物Ｓｃｈ−５２８６１は非常に高い受容体親和性と良好な選択性（ＫｉＡ２Ａ＝２．３ｎｍ；ＫｉＡ１＝１２１ｎｍ）を示しはするが、溶解度が充分でなくかつ経口による生利用度が劣ることで薬剤としての適切性が制限される。化合物ＺＭ−２４１３８５が示す選択率は約４００ではあるが、これが動物試験で用いられたのはＡ２Ａ受容体を可視化するためのトリチウム含有ラジオリガンド（ｒａｄｉｏｌｉｇａｎｄ）としてのみである。
【００１４】
他のトリアゾロ［１，５−ｃ］キナゾリンおよびトリアゾロ［１，５−ｃ］ピリミジンに加えて、また、トリアゾロ［４，３−ａ］キノキサリンも試験された。一方では、４−アミノ−６−ベンジルアミノ−１，２−ジヒドロ−２−フェニル−１，２，４−トリアゾロ［４，３−ａ］キノキサリン−１−オンは選択的Ａ２Ａ拮抗薬に相当し（非特許文献８）、他方では、８−クロロ−４−（シクロヘキシルアミノ）−１−（トリフルオロメチル）［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］キノキサリン（ＣＰ−６８，２４７）がＡ１受容体に対して非常に選択的な拮抗作用（ＩＣ５０値は２８ナノモルである）を及ぼす（非特許文献９）ことから、このような種類の化合物では、それらが示す薬理学的に逆の作用が互いに対してどれくらい密であるかが明らかに分かる。このような化合物の全部に関して、個々の受容体に対する作動またはある程度の作動作用は排除される、と言うのは、それには現在の最新知識に従ってヌクレオチド構造が無傷であることが要求されるばかりでなく如何なる場合にもリボース単位が本質的に無傷であることが要求されるからである（非特許文献１０およびこれに引用されている文献）。
【００１５】
下記の基礎を伴う化合物もまた文献から公知である（非特許文献１１）。
【００１６】
【化４】
2005523244.tif 000006
【００１７】
また、この種類の物質では、サブタイプ親和性が１位に位置する置換基に依存することも分かった。１−メチル誘導体がアデノシンＡ２Ａ受容体に対して示す親和性の方がそれがＡ１受容体に対して示す親和性よりも高い（Ａ２Ａ：Ｋｉ＝１．４３μｍ；Ａ１：Ｋｉ＝７．８５μｍ、即ち選択率は約５である）が、他の誘導体の場合にはアデノシンＡ１受容体の方が好適である（Ｒ＝２−チエニルメチルの場合のＫｉＡ１＝２００ｎｍ）。しかしながら、そのような結合親和性の絶対的値を他のアデノシン受容体拮抗薬が示すそれと比較することで、それに関しては前記種類の化合物の方が劣っており、従って、それを薬剤として用いることは恐らくできないであろうことが分かる。
【非特許文献１】Ｋ．  Ｎ．  Ｋｌｏｔｚ，  Ｎａｕｎｙｎ  Ｓｃｈｍｉｅｄｅｂｅｒｇｓ  Ａｒｃｈ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，  ３６２，  ３８２−９１  （２０００）
【非特許文献２】Ｐ．  Ｇ．  Ｂａｒａｌｄｉ  他．，  Ｍｅｄ．  Ｒｅｓ．  Ｒｅｖ．，  ２０，  １０３−２８  （２０００）
【非特許文献３】Ｃ．  Ｅ．  Ｍuｌｌｅｒ，  Ｆａｒｍａｃｏ，  ５６，  ７７−８０  （２００１）
【非特許文献４】Ｊ．  Ａ．  Ｒｉｂｅｉｒｏ，  Ｅｕｒ．  Ｊ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，  ３７５，  １０１−１１３  （１９９９）
【非特許文献５】Ｆ．  Ｐｅｄａｔａ  他．，  Ａｎｎ．  Ｎ．  Ｙ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．，  ９３９，  ７４−８４  （２００１）
【非特許文献６】Ｅ．  Ｏｎｇｉｎｉ  他．，  Ｎａｕｎｙｎ  Ｓｃｈｍｉｅｄｅｂｅｒｇｓ  Ａｒｃｈ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，  ３５９，  ７−１０  （１９９９）
【非特許文献７】Ｆａｒｍａｃｏ  ５６，  ８７−９０  （２００１）
【非特許文献８】Ｖ．  Ｃｏｌｏｔｔａ  他．，  Ａｒｃｈ．  Ｐｈａｒｍ．  Ｐｈａｒｍ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．，  ３３２，  ３９−４１  （１９９９）
【非特許文献９】Ｒ．  Ｓａｒｇｅｓ  他．，  Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．，  ３３，  ２２４０−２２５４  （１９９０）
【非特許文献１０】Ｃ．  Ｅ．  ＭuｌｌｅｒおよびＢ．  Ｓｔｅｉｎ，  Ｃｕｒｒ．  Ｐｈａｒｍ．  Ｄｅｓｉｇｎ，  ２，５０１−５３０  （１９９６）
【非特許文献１１】Ｂ．  Ｍａｔｕｓｚｃｚａｋ  他．，  Ａｒｃｈ．  Ｐｈａｒｍ．  Ｐｈａｒｍ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．，  ３３１，  １６３−１６９  （１９９８）
【発明の開示】
【００１８】
（発明の説明）
本発明の目的は、冒頭に記述したピラゾリル置換トリアゾロキノキサリンばかりでなくテトラゾロキノキサリンの形態の類似物が示す受容体活性を更に向上させることにある。
【００１９】
本発明に従い、Ｙ＝ＣＲの一般式（１）で表されるトリアゾロキノキサリン、特に４−（クロロピラゾリル）−１−（３−フェニルプロピル）−［１，２，４−］トリアゾロ［４，３−ａ］キノキサリンばかりでなくＹ＝Ｎの一般式（２）で表されるテトラゾロキノキサリン：
【００２０】
【化５】
2005523244.tif 000007
【００２１】
｛式中、Ｒ１からＲ４は、同じまたは異なり、水素、線状もしくは分枝している飽和もしくは不飽和アルキル基、シクロアルキル基［これらは場合により１個以上のヘテロ原子、アリールもしくはヘテロアリール基、アルコキシ、ヒドロキシ、ハロゲン、アミノ、ニトロ、トリハロメチル、カルボキシ、アルコキシカルボニルまたはスルホ基を持っていてもよい］であるか、或は縮合したアリールもしくはヘテロアリール基として存在していてもよいか或は相当するハロゲン置換もしくは部分ハロゲン置換系として存在していてもよく、置換基Ｒは、水素、または置換されているか或は置換されていない形態の線状もしくは分枝鎖飽和および／または不飽和炭素基、シクロアルキル基、アリールもしくはヘテロアリール基であり、ここで、置換基Ｒは基部と直接結合しているか或は１個以上の炭素原子がヘテロ原子、例えば酸素、硫黄または窒素などに置き換わっていてもよいアルキレン基を通して結合しており、置換基Ｒ５は、水素、Ｃ１−Ｃ８アルキル、アリル、アリールアルキル、（ヘテロ）アリールアルキルまたはアシルであり、そして基Ｒ６は、ハロゲンまたは水素である｝
を提案するが、Ｒ１からＲ５が水素に等しく、Ｒ６が塩素に等しくそしてＲがメチル、フェニル、ベンジル、２−フリル、２−チエニルまたは２−チエニルメチルに等しい化合物は除外する。
【００２２】
この種類の物質に関して組み立てることができた１番目の構造−活性関係は、文献（Ｂ．  Ｍａｔｕｓｚｃｚａｋ  他．，  Ａｒｃｈ．  Ｐｈａｒｍ．  Ｐｈａｒｍ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．，  ３３１，  １６３−１６９  （１９９８））に記述されているＡ１拮抗薬のファーマコフォアモデル（ｐｈａｒｍａｃｏｐｈｏｒｅ  ｍｏｄｅｌ）に従うそれであった。このような結果から、標準的Ａ１リガンドの構造−活性関係をそのような三環状化合物にも移し変えることができるはずであることが示唆された。従って、公知のファーマコフォアモデルを用いて、向上した受容体親和性を示すばかりでなく向上したサブタイプ選択性も示す化合物を開発することができるはずである。
【００２３】
しかしながら、ファーマコフォアモデルを用いてそのような受容体親和性を他の誘導体のそれに一致させることができないことが分かり、これは充分に驚くべきことであった。現時点まで受容体とリガンドの相互作用の設計に必須であると見なされていた個々の構成成分を除去しても受容体親和性が変化しないままであることを見いだしたことにより、受容体との結合に関しては類似性がないことが分かり、従って、構造−親和性の関係を他の種類の物質からそのような化合物に移し変えるのは不可能である。従って、また、文献で公知のファーマコフォアモデルをそのようなピラゾリル置換三環状化合物で用いるのも不可能であり、この種類の化合物はむしろ完全に新規な発明であると見なされるべきである。
【００２４】
本発明に従う化合物がアデノシン受容体に親和性および選択性を示すことからサブタイプに特異的なアデノシン拮抗薬の意味で薬剤として用いるに大きな度合で適することは、特に、文献で公知のファーマコフォアおよび受容体モデルを基にしたのでは予想外なことであった。
【００２５】
本発明の範囲内で考える類似物は、一般式（１）および（２）から出発して、同じ様式で、各場合とも互いに独立して、置換基Ｒ１からＲ４が水素、線状もしくは分枝している飽和もしくは不飽和アルキル基、例えばメチル、エチル、プロピル、ブチル、イソブチル、アリルなどまたはシクロアルキル基（場合により１個以上の炭素原子が窒素、酸素または硫黄に置き換わっていてもよく、或はアリールもしくはヘテロアリール、アルコキシ、ヒドロキシ、ハロゲン、アミノ、ニトロ、トリハロメチル、カルボキシ、アルコキシカルボニルまたはスルホ基で置換されていてもよい）である［ここで、置換基Ｒ１からＲ４は同じまたは異なっていてもよい］ことが当てはまる化合物である。
【００２６】
置換基Ｒは、水素、または有機基、例えばアルキル、シクロアルキル、アリールまたはヘテロアリール置換基であってもよく、これは基部と直接結合しているか或はアルキレンブリッジ（ｂｒｉｄｇｅ）［１個以上の炭素原子がヘテロ原子、例えば酸素、硫黄または窒素などに置き換わっていてもよい］を通して結合している。
【００２７】
有機基として、線状もしくは分枝鎖Ｃ１−からＣ６−アルキル基、例えばメチル、エチル、プロピル、ブチルまたはイソブチルなどが好適である。逆に、前記アルキル鎖もまた例えばハロゲン、アルコキシ、ヒドロキシル、アミノ（置換されていないか或は１個または２個のアルキル、アリールまたはアシル基で置換されている）、アルコキシカルボニル、カルボキシル、スルホまたはシアノで置換されていてもよい。このような置換基は、また、例えばアリル基などの場合のように、二重もしくは三重結合を１個以上含有していてもよい。
【００２８】
加うるに、そのような有機基はシクロアルキル置換基であってもよく、その環の大きさは炭素原子３から８個分である。前記環の中の１個以上の炭素原子はヘテロ原子、例えば窒素、酸素または硫黄などに置き換わっていてもよく、その上、そのような環（例えばピペラジン、Ｎ−メチルピペラジン、モルホリン、ジオソラン、ジオキサン、アダマンタンまたはノルアダマンタン基）はまた更に置換されていてもよい。
【００２９】
その上、また、アリールまたはヘテロアリール（例えばフリル、チエニルまたはピリジル）基も有機基として好適である。そのようなヘテロ（アリール）基は場合により置換基を１個以上持っていてもよい。興味の持たれる置換基として、特にハロゲン、置換されていないか或は置換されているアルキル（興味の持たれる置換アルキルの例として、例えばトリフルオロメチル）、アルコキシ、ヒドロキシ、置換されていないか或は置換されている（例えばまたアシル化されている）アミノ、アルコキシカルボニル、カルボキシル、スルホ、ニトロおよびシアノを用いる。
【００３０】
置換基Ｒ５は水素、線状もしくは分枝アルキル、アリル、（ヘテロ）アリールアルキルまたはアシル基であってもよい。このような置換基をピラゾール環が有する窒素原子の中の１つの上に存在させる。
【００３１】
基Ｒ６はハロゲン、例えばフッ素、塩素または臭素などまたは水素であってもよい。
【００３２】
加うるに、本発明は、本請求項に従って開示するように、化合物（１）および（２）の製造方法ばかりでなく後者を含有させた薬剤にも関する。
【実施例】
【００３３】
（発明を実施する方法）
以下の実験部分では、従来技術と比較した時にいくらか存在し得る差異を説明する。しかしながら、本実施例は単に説明の目的で用いるものであり、従って、本発明をそのような範囲に限定するものでない。
Ｉ．  置換基ＲおよびＲ１からＲ４が様々である式（１）に従う化合物を製造する方法
Ｉ．１  対称的に置換されている誘導体
【００３４】
【化６】
2005523244.tif 000008
【００３５】
［鍵］
Ｈｙｄｒａｚｉｎ＝ヒドラジン
Ａｃｙｌｉｅｒｕｎｇ＝アシル化
Ｃｙｃｌｉｓｉｅｒｕｎｇ＝環化
ＸおよびＸ’は、Ｘ’＝ハロゲンの制限を伴う前記定義の同じ基または異なる基であるが、一般式（１）の場合のＸはまたＲ６の意味も持つ。
【００３６】
Ｒ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、この上に示した説明に従って定義可能である。
【００３７】
この示した合成手順を用いて、キノキサリンの炭素環状部分が置換されていない化合物を入手することができるばかりでなくまた下記の種類：
【００３８】
【化７】
2005523244.tif 000009
【００３９】
［ここで、
ａ）Ｒ１からＲ４＝同じ置換基１（１  この場合の置換基はＲ≠Ｈを意味する）；
ｂ）Ｒ１およびＲ４＝同じ置換基そしてＲ２およびＲ３＝Ｈ；
ｃ）Ｒ２およびＲ３＝同じ置換基そしてＲ１およびＲ４＝Ｈ；
ｄ）Ｒ２およびＲ３＝同じ置換基そしてＲ１およびＲ４＝同じ置換基］
の対称的に置換されている化合物を製造することも可能である。
【００４０】
その必要な対称的に置換されているオルソ−フェニレンジアミンは購入可能であるか、文献に記述されているか、或は文献に記述されている誘導体に類似した様式で合成的に入手可能である。このような置換されているフェニレンジアミンの製造では、ニトロ化反応に続く還元反応が特に重要である。
【００４１】
そのように対称的に置換されている化合物（Ｘ＝ＣｌおよびＲ１＝Ｒ４＝ＨおよびＲ２＝Ｒ３＝ＣＨ３）の製造をジメチル誘導体を基にして説明する。しかしながら、この目的または示す実施例で選択した種類の物質は単に説明の目的で用いたものであり、本発明をそのような範囲に限定するものでない。
【００４２】
以下に、合成図１に示す化合物の製造に関する合成実施例を示す：
Ｎ−（２−アミノ−４，５−ジメチルフェニル）−３，６−ジクロロピリダジン−４−カルボキサミド＊（Ｃ−１）の合成
【００４３】
【化８】
2005523244.tif 000010
【００４４】
［＊  Ｍ．  Ｂａｎｅｋｏｖｉｃｈ，  ‘Ｐｙｒａｚｏｌｙｌ−ｓｕｂｓｔｉｔｕｉｅｒｔｅ  Ｃｈｉｎｏｘａｌｉｎｅ：    Ｄａｒｓｔｅｌｌｕｎｇ  ｎｅｕｅｒ  ｐｏｔｅｎｔｉｅｌｌｅｒ  ｓｅｒｏｔｏｎｉｎｒｅｚｅｐｔｏｒ−Ｌｉｇａｎｄｅｎ  ｕｎｄ  Ｕｎｔｅｒｓｕｃｈｕｎｇｅｎ  ｚｕｍ  Ｆｌｕｏｒｅｓｚｅｎｚ−Ｖｅｒｈａｌｔｅｎ  ［Ｐｙｒａｚｏｌｙｌ−Ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ  Ｑｕｉｎｏｘａｌｉｎｅｓ：    Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｎｅｗ  Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  Ｓｅｒｏｔｏｎｉｎ  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ  Ｌｉｇａｎｄｓ  ａｎｄ  Ｓｔｕｄｉｅｓ  ｏｎ  Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ  Ｂｅｈａｖｉｏｒ］，’  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｔｈｅｓｉｓ，  Ｉｎｎｓｂｒｕｃｋ，  １９９８に既に記述されている］
１０．４４０ｇ（７６．６５ミリモル、３当量）の４，５−ジメチル−ｏ−フェニレンジアミンと２５．５５ミリモルの塩基（例えばトリエチルアミン、ピリジン、Ｈｕｎｉｇ塩基など）を１５０ｍｌの無水ジクロロメタンに入れることで構成させた０℃の懸濁液に、窒素雰囲気下で、５．４０２ｇ（２５．５５ミリモル）の３，６−ジクロロピリダジン−４−カルボン酸クロライドを６０ｍｌの無水ジクロロメタンに入れることで構成させた溶液をゆっくり滴下する。次に、この反応バッチ（ｂａｔｃｈ）を室温で前記酸クロライドの反応が完了［約１６時間；ＴＬＣ（薄層クロマトグラム）監視：反応バッチの数滴を希塩酸と混合し、その溶液を飽和重炭酸ナトリウム溶液で中和した後、酢酸エチルで抽出、可動溶媒：酢酸エチル］するまで撹拌する。生じた結晶を吸引を伴わせて濾別し、ジクロロメタンで洗浄した後、乾燥機に入れて一定重量に到達するまで乾燥させる。
【００４５】
その濾液を各々２００ｍｌの氷冷希水酸化ナトリウム溶液で３回抽出し、その水相をジクロロメタンで洗浄した後、氷で冷却しながら濃塩酸で酸性にする。その結果として生じたジアシル化生成物の沈澱物を吸引を伴わせて濾別し、その水相をジクロロメタンで２回洗浄した後、飽和重炭酸ナトリウム溶液で中性にした。その中性にした溶液をジクロロメタンで徹底的に抽出した。その有機相を一緒にして飽和塩化ナトリウムで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾別した後、乾燥状態になるまで蒸発させた。
【００４６】
組成Ｃ１３Ｈ１２Ｃｌ２Ｎ４Ｏ  （３１１．１７）を有する生成物（明黄色結晶）（収率：９０％）はさらなる反応に充分な純度を示す。
【００４７】
融点：１９８℃から出発して分解
元素分析：          Ｃ                Ｈ                  Ｎ
計算値        ５０．１８％        ３．８９％        １８．０１％
測定値        ５０．２２％        ４．１２％          ７．９６％
ＩＲ  （ＫＢｒ）：３３８６，  ３１８３，  ３０１２，  １６７３  ｃｍ−１
１Ｈ−ＮＭＲ  （ＤＭＳＯ−ｄ６）  ９．９２  （ｓ，  １Ｈ，  ＮＨ），  ８．４７  （ｓ，  １Ｈ，  ピリダジン  Ｈ５），  ７．０１  （ｓ，  １Ｈ），  ６．５７  （ｓ，  １Ｈ）  （Ｈ５，  Ｈ６），  ５．１０  （ｓ，  ｂｒ，  ２Ｈ，  ＮＨ２），  ２．１０  （ｓ，  ３Ｈ，  ＣＨ３），  ２．０８  （ｓ，  ３Ｈ，  ＣＨ３）。
３−［３（５）−クロロ−１Ｈ−ピラゾール−５（３）−イル］−６，７−ジメチルキノキサリン−２（１Ｈ）オン＊（Ｄ−１）の合成
【００４８】
【化９】
2005523244.tif 000011
【００４９】
２．０００ｇ（６．４４ミリモル）のＮ−（２−アミノ−４，５−ジメチルフェニル）−３，６−ジクロロピリダジン−４−カルボキサミド（Ｃ−１）を５０ｍｌの無水溶媒（例えばＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド）に入れることで構成させた溶液に窒素雰囲気下で３当量の塩基（好適には水素化ナトリウム、６０％の懸濁液）を加えた後、この反応混合物を１００℃で反応が完了［反応時間は約１５分である；反応の監視：反応バッチの数滴を希塩酸と混合した後、酢酸エチルで抽出、可動溶媒：酢酸エチル、加うるに、反応溶液の色が暗赤色から褐色に変化することでも反応の完了を検出することができる］するまで撹拌する。
【００５０】
処理では、前記反応溶液を窒素ガスに接触させながら希塩酸に注意深く加える。この場合には結晶性である蓄積する生成物を単離し、水に加えて石油エーテルで洗浄した後、一定重量に到達するまで乾燥させる。この粗生成物の溶液をテトラヒドロフランに入れて活性炭で処理し、熱濾過しそして溶媒を蒸発させることで、この物質の精製を実施する。このようにして得た組成Ｃ１３Ｈ１１ＣｌＮ４Ｏ  （２７４．７１）を有する生成物（黄色結晶）（収率：９５％）はさらなる反応に充分な純度を有する。
融点：分解を起こしながら３２８℃
元素分析：          Ｃ                Ｈ                  Ｎ
計算値        ５６．８４％        ４．０４％          ０．３９％  
測定値        ５６．７５％        ４．３４％        ２０．１２％
ＩＲ  （ＫＢｒ）：３３１１，  １６６６  ｃｍ−１
１Ｈ−ＮＭＲ  （ＤＭＳＯ−ｄ６）  １３．６５  （ｓ，  １Ｈ，  ピラゾール  ＮＨ），  １２．６０  （ｓ，  １Ｈ，  キノキサリン  ＮＨ），  ７．５１  （ｓ，  １Ｈ，  キノキサリン  ＣＨ，  ７．１５  （ｄ，  Ｊ  ＝  １．４  Ｈｚ，  １Ｈ，  ピラゾール−ＣＨ），  ７．０７  （ｓ，  １Ｈ，  キノキサリン  ＣＨ），  ２．２９  （ｓ，  ３Ｈ，  ＣＨ-３），  ２．２７  （ｓ，  ３Ｈ，  ＣＨ-３-）．
２−クロロ−３−［３（５）−クロロ−１Ｈ−ピラゾール−５（３）−イル］−６，７−ジメチルキノキサリン＊（Ｅ−１）の合成
【００５１】
【化１０】
2005523244.tif 000012
【００５２】
［Ｍ．  Ｂａｎｅｋｏｖｉｃｈ，  ‘Ｐｙｒａｚｏｌｙｌ−ｓｕｂｓｔｉｔｕｉｅｒｔｅ  Ｃｈｉｎｏｘａｌｉｎｅ：    Ｄａｒｓｔｅｌｌｕｎｇ  ｎｅｕｅｒ  ｐｏｔｅｎｔｉｅｌｌｅｒ  Ｓｅｒｏｔｏｎｉｎｒｅｚｅｐｔｏｒ−Ｌｉｇａｎｄｅｎ  ｕｎｄ  Ｕｎｔｅｒｓｕｃｈｕｎｇｅｎ  ｚｕｍ  Ｆｌｕｏｒｅｓｚｅｎｚ−Ｖｅｒｈａｌｔｅｎ，’  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｔｈｅｓｉｓ，  Ｉｎｎｓｂｒｕｃｋ，  １９９８に既に記述］
２．６０１ｇ（９．４７ミリモル）の相当するキノキサリン−２−オン誘導体（Ｄ−１）を５０ｍｌのオキシ塩化燐と５ｍｌのピリジンで構成させた混合物に入れることで構成させた懸濁液を反応が完了［約３時間；ＴＬＣ監視：反応バッチの数滴を飽和重炭酸ナトリウム溶液と混合した後、酢酸エチルで抽出、可動溶媒：エーテル］するまで還流させる。この反応混合物を冷却した後、氷水に注意深く添加する。結晶化を向上させる目的で、例えば飽和重炭酸ナトリウム溶液をいくらか加える。その沈澱物を分離し、水に加えて石油エーテルで洗浄した後、乾燥機に入れて一定重量に到達するまで乾燥させる。精製では、この粗生成物をテトラヒドロフランに入れることで生じさせた溶液を活性炭と混合し、この混合物を短時間沸騰に加熱し、濾別した後、ロタベーパー（Ｒｏｔａｖａｐｏｒ）を用いて乾燥状態になるまで蒸発させる。このようにして得た組成Ｃ１３Ｈ１０Ｃｌ２Ｎ４  （２９３．１６）を有する生成物（ベージュ色の針）［収量：１．８６８ｇ（６７％）］はさらなる反応に充分な純度を示す。
【００５３】
融点：２９６−３００℃
元素分析：            Ｃ                Ｈ                Ｎ
計算値          ５３．２６％        ３．４４％      １９．１１％
測定値          ５３．３９％        ３．６１％      １９．２３％
ＩＲ  （ＫＢｒ）：３２２６  ｃｍ−１
１Ｈ−ＮＭＲ  （ＤＭＳＯ−ｄ６）  １３．９６  （ｓ，  １Ｈ，ピラゾール  ＮＨ），  ７．８９  （ｓ，  １Ｈ，  キノキサリン  ＣＨ，  ７．８４  （ｓ，  １Ｈ，  キノキサリン  ＣＨ），  ７．１９  （ｓ，  １Ｈ，  ピラゾール−ＣＨ），  ２．５０  （ｓ，  ６Ｈ，  ２ｘ  ＣＨ３）．
種類（Ｆ）の化合物の追加的合成で、クロロキノキサリン（Ｅ）の代わりに、また、塩素原子が他の脱離基、例えば臭素、ヨウ素またはメシレートなどに置き換わっている他の誘導体を用いることも可能である。
３−［３（５）−クロロ−１Ｈ−ピラゾール−５（３）−イル］−６，７−ジメチル−２−ヒドラジノキノキサリン（Ｆ−１）の合成
【００５４】
【化１１】
2005523244.tif 000013
【００５５】
１．０６１ｇ（３．６２ミリモル）の相当するクロロキノキサリン誘導体（Ｅ−１）を２０ｍｌの一水加ヒドラジンに入れて懸濁させた後、この混合物を反応が完了［約２時間；ＴＬＣ監視：反応バッチの数滴を水と混合した後、酢酸エチルで抽出、可動溶媒：酢酸エチル］するまで還流させる。この反応混合物を冷却した後、水を１５０ｍｌ添加し、その結果として生じた懸濁液を約４℃に約数時間放置することで結晶化を完了させる。次に、この結晶を単離した後、水に加えて石油エーテルで洗浄する。乾燥を一定重量に到達するまで行った後、その結晶をテトラヒドロフランに溶解させ、この溶液を活性炭と混合し、加熱して短時間沸騰させ、濾過した後、減圧下で乾燥状態になるまで蒸発させる。この得た組成Ｃ１３Ｈ１３ＣｌＮ６  （２８８．７４）を有する生成物（黄色粉末）［収量：０．６２９ｇ（８２％）］はさらなる反応に充分な純度を示したが、テトラヒドロフランを用いた再結晶化で分析的に高純度の化合物を得る。
【００５６】
融点：２８１−２８３℃
元素分析：            Ｃ                Ｈ                Ｎ
計算値          ５４．０８％        ４．５４％        ２９．１１％
測定値          ５４．３８％        ４．５８％        ２９．２５％
ＩＲ  （ＫＢｒ）：３３２０  ｃｍ−１
１Ｈ−ＮＭＲ  （ＤＭＳＯ−ｄ６）：７．５４  （ｓ，  １Ｈ），  ７．４０  （ｓ，  １Ｈ）  （Ｈ５，  Ｈ８），  ７．０４  （ｓ，  １Ｈ，  ピラゾール  Ｈ４），  ２．３６  （ｓ，  ３Ｈ，  ＣＨ３），  ２．３３  （ｓ，  ３Ｈ，  ＣＨ３）
種類（Ｇ−１）の２−アシルヒドラジノ−３−［３（５）−クロロ−１Ｈ−ピラゾール−５（３）−イル］−６，７−ジメチルキノキサリンの一般的製造操作指示
【００５７】
【化１２】
2005523244.tif 000014
【００５８】
１当量のヒドラジノキノキサリン（Ｆ−１）と１．２当量の塩基（例えばトリエチルアミン、ピリジンなど）を無水溶媒（例えば１，４−ジオキサン、ＴＨＦ、アセトニトリル）（ヒドラジノ誘導体Ｆ−１  １ミリモル当たり１０ｍｌ）に入れることで構成させた室温の懸濁液に、１．１当量の相当するアシル化剤（例えば塩化アセチル）を無水１，４−ジオキサン（アシル化剤１ミリモル当たり約２ｍｌ）に入れることで生じさせた溶液をゆっくり添加する。この添加が完了した後、この反応バッチを室温で反応が完了［約１２−１８時間；ＴＬＣ監視：反応バッチの数滴を水と混合した後、酢酸エチルで抽出、可動溶媒：例えば酢酸エチル］するまで撹拌する。処理では、反応溶液を水の中に注いだ後、結果として生じた生成物を単離する。単離の可能性は、結果として生じた沈澱物を分離した後に前記沈澱物を水に加えて石油エーテルで洗浄することにある。適切な有機溶媒を用いた抽出で生成物を単離することが代替の単離に相当し、この場合には、その後、アシル化生成物の溶液を水そして飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄することに加えて乾燥させた後、最後に有機溶媒を蒸留で除去する。
【００５９】
個々のアシル化誘導体の純度を高くしようとする場合には、適切な溶媒を含有する相当する生成物を一定重量に到達するまで乾燥させた後、再結晶化させる。必要ならば、その粗生成物を前以て適切な溶媒、例えばテトラヒドロフランなどに溶解させ、活性炭と混合し、沸騰させ、濾別した後、乾燥状態になるまで真空下で蒸発させておいてもよい。
２−アセチルヒドラジノ−３−［３（５）−クロロ−１Ｈ−ピラゾール−５（３）−イル］−６，７−ジメチルキノキサリン（Ｇ−１Ａ）の合成
【００６０】
【化１３】
2005523244.tif 000015
【００６１】
種類Ｇ−１の化合物の一般的製造操作指示に従い、下記の反応パラメーターまたは反応体を用いて、化合物Ｇ−１Ａの製造を実施する：
アシル化剤：塩化アセチル
反応時間：１４時間
外観：黄色結晶
収率：６１％
総和公式：Ｃ１５Ｈ１５ＣｌＮ６Ｏ  （３３０．７８）
融点：３１６−３２０ｏＣ  ［酢酸エチル−テトラヒドロフラン（１：１）で構成］
元素分析：            Ｃ                Ｈ                Ｎ
計算値：        ５４．４７％        ４．５７％        ２５．４１％
測定値：        ５４．３９％        ４．５９％        ２５．１５％
（ＫＢｒ）：３２６１，  １５００  ｃｍ−１
１Ｈ−ＮＭＲ  （ＤＭＳＯ−ｄ６  ＋  Ｄ２Ｏ）：７．６６  （ｓ，  １Ｈ），  ７．４７  （ｓ，  １Ｈ）  （Ｈ５，  Ｈ８），  ７．０９  （ｓ，  １Ｈ，  ピラゾールＨ４），  ２．３８  （ｓ，  ３Ｈ，  ＣＨ３），  ２．３７  （ｓ，  ３Ｈ，  ＣＨ３），  １．９８  （ｓ，  ３Ｈ，  ＣＨ３）．
一般式（１）に従う１−置換４−［３（５）−クロロ−１Ｈ−ピラゾール−５（３）−イル］−７，８−ジメチル−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］キノキサリンの一般的合成操作指示
【００６２】
【化１４】
2005523244.tif 000016
【００６３】
酸ヒドラジド誘導体（Ｇ−１）を１，２−ジクロロエタン（１ミリモル当たり２０ｍｌ）とオキシ塩化燐（１ミリモル当たり８ｍｌ）で構成させた混合物に入れることで生じさせた懸濁液を反応が完了［約２時間；ＴＬＣ監視：反応バッチの数滴を水と混合した後、酢酸エチルで抽出、可動溶媒：適切な有機溶媒または有機混合物、例えば酢酸エチル］するまで還流させる。
【００６４】
処理では、反応バッチを冷却した後、これを氷水に注意深く加え、結果として生じた結晶性生成物を単離した後、水に加えて石油エーテルで洗浄する。この生成物を乾燥させた後、テトラヒドロフランに溶解させ、活性炭と混合した後、この混合物を数分間還流させる。その濾液に蒸発を乾燥状態になるまで真空下で受けさせた後、残存する物質に再結晶化を適切な溶媒を用いて受けさせる。
４−［３（５）−クロロ−１Ｈ−ピラゾール−５（３）−イル］−１，７，８−トリメチル−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］キノキサリン（Ｉ．１．Ａ）の合成
【００６５】
【化１５】
2005523244.tif 000017
【００６６】
この上に記述した一般的操作指示を用いて、この化合物の合成を実施したが、反応時間は２時間である：
外観：明黄色粉末
収率：５７％
総和公式：Ｃ１５Ｈ１３ＣｌＮ６  （３１２．７６）
融点：２７８−２８１ｏＣ  （酢酸エチルで構成）
元素分析（Ｃ１５Ｈ１３ＣｌＮ６  ｘ  ０．１  Ｈ２Ｏ  ｘ  ０．１酢酸エチルに関して）：
Ｃ                Ｈ              Ｎ
計算値：  ５７．２０％        ４．３６％      ２５．９９％
測定値：  ５７．００％        ４．２７％      ２５．９８％
ＩＲ  （ＫＢｒ）：３４３１  ｃｍ−１
１Ｈ−ＮＭＲ  （ＤＭＳＯ−ｄ６）：１４．１０  （ｓ，  １Ｈ，  ＮＨ），  ８．０６  （ｓ，  １Ｈ），  ７．８０  （ｓ，  １Ｈ）  （Ｈ６，  Ｈ９），  ７．５４  （ｓ，  １Ｈ，ピラゾール  Ｈ４），  ３．１１  （ｓ，  ３Ｈ，  ＣＨ３），  ２．４５  （ｓ，  ３Ｈ，  ＣＨ３），  ２．３９  （ｓ，  ３Ｈ，  ＣＨ３）．
Ｉ．２  非対称的に置換されている誘導体
非対称的に置換されているオルソ−フェニレンジアミンを３，６−ジハロ−ピリダジン−４−カルボン酸クロライドと反応させると結果として一般に異性体混合物が生じそしてそのような異性体化合物の分離は一般に時間と材料の高い出費を伴うことから、この上に記述した方法を用いたのでは非対称的に置換されているトリアゾロキノキサリン誘導体を特に有効に入手するのは不可能である。しかしながら、以下に記述する代替合成方策を用いると異性体の純度が高い生成物を得ることができ、従って、現在の手順に比較してかなりの向上に相当する。
【００６７】
本発明に従うそのような方法は、主にオルソ−ニトロアニリン誘導体のＮ−アシル化を実施しそして次の段階で生じるのが第二級アミノ基のみであることで区別される。後者をニトロ基の還元で実施する。追加的反応段階は各々対称的に置換されている誘導体の製造に相当する：
【００６８】
【化１６】
2005523244.tif 000018
【００６９】
［鍵］
Ｒｅｄｕｋｔｉｏｎ＝還元
Ｈｙｄｒａｚｉｎ＝ヒドラジン
Ａｃｙｌｉｅｒｕｎｇ＝アシル化
Ｃｙｃｌｉｓｉｅｒｕｎｇ＝環化
ＸおよびＸ’は、Ｘ’＝ハロゲンの制限を伴う前記定義の同じ基または異なる基であるが、ＸはＲ６の意味を有する。
【００７０】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、この上に示した説明に従って定義可能である。
【００７１】
必要な置換されている２−ニトロアニリンは購入可能であるか、文献に記述されているか、或は文献に記述されている誘導体に類似した様式で合成的に入手可能である。この場合にはニトロ化反応が特に重要である。
【００７２】
そのような合成方策をモノメトキシ誘導体を例として以下により詳細に記述するが、本発明を後者に限定するものでない。
【００７３】
また、２個の窒素原子の中の一方に保護基を持たせることで一方ではアシル化の結果として異性体が１種類のみもたらされかつ他方では前記保護基が極めて穏やかな反応条件下で開裂し得ることが確保されるならば、置換オルソフェニレンジアミンの誘導体をオルソ−ニトロアニリン誘導体の代わりに用いることも可能である。適切な保護基は文献で公知であり、ここでは、例えばＮ，Ｏ−アセタール、Ｎ−ベンジル、Ｎ−ベンジルオキシカルボニル、Ｎ−ｔ−ブチル、Ｎ−［ジ−（ｐ−メトキシフェニル）メチル］−、Ｎ−（２，４−ジメトキシベンジル）−、Ｎ−［９−フェニルフルオレン−９−イル］−、Ｎ−シリル誘導体またはイミンを用いることができる。
Ｎ−（４−メトキシ−２−ニトロフェニル）−３，６−ジクロロ−４−ピリダジンカルボキサミド（Ｊ−１）の合成
【００７４】
【化１７】
2005523244.tif 000019
【００７５】
５．００ｇ（３２．８６ミリモル）の４−メトキシ−２−ニトロアニリンを６０ｍｌの無水ジクロロメタンに溶解させた後、３．９９ｇ（３９．４３ミリモル、１．２当量）のトリエチルアミンと混合した。窒素を導入した後、氷で冷却しつつ絶えず撹拌しながら、７．３０ｇ（３４．５１ミリモル、１．０５当量）の３，６−ジクロロピリダジン−４−カルボン酸クロライドを数ｍｌの無水ジクロロメタンに入れることで生じさせた溶液をゆっくり滴下する。次に、この反応バッチを室温にもってゆき、撹拌を反応が完了［約１２時間；ＴＬＣ監視：可動溶媒：ジクロロメタン／酢酸エチル＝９／１］するまで継続する。処理では、反応混合物を５０ｍｌのジクロロメタンで希釈した後、この有機相を各々１００ｍｌの希塩酸で数回洗浄する。この場合には生成物の一部が結晶形態（ＴＬＣで高純度）で蓄積し、これを吸引を伴わせて濾別することができる。
【００７６】
その有機相を一緒にして水そして飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾別した後、ロタベーパーを用いて乾燥状態になるまで蒸発させる。次に、その残留物を酢酸エチルから再結晶化させる。
【００７７】
外観：ほとんど無色の粉末
収量：８．３６ｇ（７４％）
融点：１９８−２０１℃
総和公式：Ｃ１２Ｈ８Ｃｌ２Ｎ４Ｏ４  （３４３．１３）
ＩＲ  （ＫＢｒ）：１７２０  ｃｍ−１
１Ｈ−ＮＭＲ  （ＤＭＳＯ−ｄ６）：８．３８  （ｓ，  １Ｈ，  ピリダジン  Ｈ），  ７．９９  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．８  Ｈｚ，  １Ｈ，  Ｈ６），  ７．７４  （ｄ，  Ｊ  ＝  ２．９  Ｈｚ，  １Ｈ，  Ｈ３），  ７．５１  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．８  Ｈｚ，  Ｊ  ＝  ２．９  Ｈｚ，  １Ｈ，  Ｈ５），  ３．８８  （ｓ，  ３Ｈ，  ＯＣＨ-３）。
Ｎ−（４−メトキシ−２−ニトロフェニル）−３，６−ジクロロ−４−ピリダジンカルボキサミド（Ｊ−１）の還元
【００７８】
【化１８】
2005523244.tif 000020
【００７９】
２．０００ｇ（５．８３ミリモル）のＮ−（４−メトキシ−２−ニトロフェニル）−３，６−ジクロロ−４−ピリダジンカルボキサミド（Ｊ−１）を５０ｍｌのテトラヒドロフランに溶解させる。この溶液に窒素雰囲気下で蟻酸アンモニウムを３．６７６ｇ（５８．２９ミリモル、１０当量）および活性炭に担持されているパラジウム（１０％）を０．８６４ｇ加えた後、この反応バッチを室温で反応が完了［約１８時間；ＴＬＣ監視：可動溶媒：ジクロロメタン／酢酸エチル＝３０／１］するまで撹拌する。
【００８０】
反応バッチの処理では、触媒を濾別した後、その濾液に蒸発を乾燥状態になるまで受けさせる。その残留物を水と混合した後、酢酸エチルで徹底的に抽出することで生成物を単離する。その有機相を集めて水に加えて飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄した後、硫酸ナトリウムで乾燥させる。溶媒を留出させた後、組成Ｃ１２Ｈ１０Ｃｌ２Ｎ４Ｏ２を有する黄色粉末が１．４０３ｇ（７７％）残存し、これを追加的精製なしに更に反応させることができる。
【００８１】
融点：１５０−１５５℃
１Ｈ−ＮＭＲ  （ＤＭＳＯ−ｄ６）：９．８６  （ｓ，  １Ｈ，  ＮＨ），  ８．４９  （ｓ，  １Ｈ，  ピリダジン  Ｈ５），  ７．１０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ８．８  Ｈｚ，１Ｈ），  ６．３４  （ｄ，  Ｊ  ＝  ２．６  Ｈｚ，  １Ｈ，  Ｈ３），  ６．１９  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．８  Ｈｚ，  Ｊ  ＝  ２．６  Ｈｚ，  １Ｈ，  Ｈ５），  ５．０８  （ｓ，  ２Ｈ，  ＮＨ２），  ３．６９  （ｓ，  ３Ｈ，  ＯＣＨ３）
３−（３−クロロ−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）−６−メトキシキノキサリン−２（１Ｈ）−オン（Ｄ−２）の合成
【００８２】
【化１９】
2005523244.tif 000021
【００８３】
０．６９５ｇ（２．２２ミリモル）のＮ−（２−アミノ−４−メトキシフェニル）−３，６−ジクロロ−４−ピリダジン−カルボキサミド（Ｃ−２）を２５ｍｌの無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドに入れることで生じさせた溶液を０．２６６ｇ（６．６６ミリモル、３当量）の水素化ナトリウムと一緒に窒素雰囲気下で混合する。この反応混合物を１００℃で反応が完了［反応時間：約１５分間；反応の監視では、反応バッチの数滴を希塩酸と混合した後、酢酸エチルで抽出、ＴＬＣ監視の抽出可動溶媒：酢酸エチル；加うるに、反応溶液の色が暗赤色から褐色に変わることでも反応の完了を検出することができる］するまで撹拌する。
【００８４】
処理では、反応溶液を７５ｍｌの希塩酸に窒素雰囲気下で注意深く加えた後、その結果として生じた懸濁液を４℃で数時間放置する。沈澱した結晶性生成物を吸引を伴わせて濾別した後、水に加えて石油エーテルで洗浄した。その残留物を一定重量に到達するまで乾燥させた後、精製を行う目的で、それをテトラヒドロフランに溶解させ、その溶液を活性炭と混合し、その混合物を短時間還流させ、濾別した後、ロタベーパーを用いて乾燥状態になるまで蒸発させた。この生成物はさらなる反応に充分な純度を有する。酢酸エチルを用いた再結晶化により、組成Ｃ１２Ｈ９ＣｌＮ４Ｏ２  （２７６．６８）を有する分析的に高純度の物質を黄色粉末として得る。
【００８５】
収量：０．４９０  ｇ  （８０％）．
融点：３２８−３３０ｏＣ
元素分析（Ｃ１２Ｈ９ＣｌＮ４Ｏ２  ｘ  ０．１酢酸エチルに関して）：
Ｃ                Ｈ                Ｎ
計算値          ５２．１７％        ３．４６％        １９．６２％
測定値          ５２．４７％        ３．６２％        １９．４９％
ＩＲ  （ＫＢｒ）：３３１７，  ２８１１，  １６６３  （Ｃ  ＝  ０）  ｃｍ−１
１Ｈ−ＮＭＲ  （ＤＭＳＯ−ｄ６）：１３．７４  （ｓ，  １Ｈ，ピラゾールＮＨ），  １２．７１  （ｓ，  １Ｈ，  キノキサリン  ＮＨ），  ７．３３−７．２０  （ｍ，  ４Ｈ，  Ｈ５，  Ｈ７，  Ｈ８，  ピラゾール−Ｈ４），  ３．８３  （ｓ，  ３Ｈ，  ＯＣＨ３）
２−クロロ−３−（３−クロロ−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）−６−メトキシキノキサリン（Ｅ−２）の合成
【００８６】
【化２０】
2005523244.tif 000022
【００８７】
０．９１０ｇ（３．２９ミリモル）の相当するキノキサリン−２−オン誘導体（Ｄ−２）を１５ｍｌのオキシ塩化燐に氷で冷却しながら溶解させた後、これを１．５ｍｌのピリジンと混合し、次に、この反応混合物を反応が完了［約３時間；ＴＬＣ監視：反応バッチの数滴を飽和重炭酸ナトリウムと混合した後、酢酸エチルで抽出、可動溶媒：エーテル］するまで還流させる。処理では、最初に反応バッチを０℃に冷却した後、それを水に注意深く加え、そして結晶化を向上させる目的で飽和重炭酸ナトリウム溶液で中和する。４℃で数時間放置した後、沈澱物を分離する。酢酸エチルを用いた再結晶化により、組成Ｃ１２Ｈ８Ｃｌ２Ｎ４Ｏ  （２９５．１３）を有する分析的に高純度の物質を黄色針の形態で得る。
【００８８】
収量：  ０．６６０  ｇ  （６８％）．
融点２４３−２４６ｏＣ
元素分析：                  Ｃ                Ｈ                  Ｎ
計算値：              ４８．８４％        ２．７３％          １８．９８％
測定値：              ４９．０４％        ２．９８％          １８．７６％
１Ｈ−ＮＭＲ  （ＤＭＳＯ−ｄ６）：１３．９９  （ｓ，  １Ｈ，  ピラゾール  ＮＨ），  ７．９８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ９．０  Ｈｚ，  １Ｈ，  Ｈ８），  ７．５８  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ９．０  Ｈｚ，  Ｊ  ＝  ２．９  Ｈｚ，  １Ｈ，  Ｈ７），  ７．４５  （ｄ，  Ｊ  ＝  ２．９  Ｈｚ，  １Ｈ，  Ｈ５），  ７．２２  （ｓ，  １Ｈ，  ピラゾール−Ｈ４），  ３．９８  （ｓ，  ３Ｈ，  ＯＣＨ３）
３−［３（５）−クロロ−１Ｈ−ピラゾール−５（３）−イル］−２−ヒドラジノ−６−メトキシキノキサリン（Ｆ−２）の合成
【００８９】
【化２１】
2005523244.tif 000023
【００９０】
０．６７０ｇ（２．２７ミリモル）の２−クロロ−３−（３−クロロ−１Ｈ−ピラゾール−５−イル）キノキサリン（Ｅ−２）の懸濁液を１５ｍｌの一水加ヒドラジンに入れて懸濁させた後、この反応混合物を反応が完了［反応時間：２時間；ＴＬＣ監視：反応バッチの数滴を水と混合した後、酢酸エチルで抽出、可動溶媒：エーテル］するまで還流させる。処理では、反応バッチを７５ｍｌの水に加えた後、約４℃で数時間放置する。生じた沈澱物を単離し、水そして石油エーテルで洗浄した後、真空下で一定重量に到達するまで乾燥させる。精製を行う目的で、その粗生成物をテトラヒドロフランに溶解させ、活性炭と混合した後、この混合物を数分間還流させる。前記活性炭を除去した後、溶媒を留出させ、次に、その結果として得た明るい残留物をエーテルに入れて懸濁させ、その固体を単離した後、エーテルで洗浄する。このようにして得た組成Ｃ１２Ｈ１１ＣｌＮ６Ｏ  （２９０．７１）を有する生成物は次の反応に充分な純度を示す。分析の目的で酢酸エチルを用いた再結晶化を実施し、それによって、ベージュ−緑色がかった粉末を６０％の収率（０．３９６ｇ）で得た。
【００９１】
融点：  ２１９−２２２ｏＣ
元素分析（Ｃ１２Ｈ１１ＣｌＮ６Ｏ  ｘ  ０．２酢酸エチルに関して）
Ｃ              Ｈ                Ｎ
計算値：          ４９．８６        ４．１２        ２７．２６
測定値：          ５０．１６        ４．１６        ２７．０１    
１Ｈ−ＮＭＲ  （ＤＭＳＯ−ｄ６  ＋  Ｄ２Ｏ）： ７．５８  （ｄ，  Ｊ  ＝  ９．０  Ｈｚ，  １Ｈ，  Ｈ８），  ７．２８−７．２５  （ｍ，  ２Ｈ，  Ｈ５，  Ｈ７），  ７．０８  （ｓ，  １Ｈ，  ピラゾール−Ｈ４），  ３．８６  （ｓ，  ３Ｈ，  ＯＣＨ３）
Ｇ−２の種類のヒドラジドを製造する目的で化合物Ｆ−２にアシル基を導入
【００９２】
【化２２】
2005523244.tif 000024
【００９３】
合成指示は種類Ｇ−１の化合物の一般的製造操作指示に相当する。
【００９４】
例として下記の合成実施例を用いて説明を行う。
３−［３（５）−クロロ−１Ｈ−ピラゾール−５（３）−イル］−６−メトキシ−２−（２−チエニルアセチル）−ヒドラジノキノキサリン（Ｇ−２Ａ）の合成
【００９５】
【化２３】
2005523244.tif 000025
【００９６】
０．２４０ｇ（０．６３ミリモル）のヒドラジノキノキサリンＦ−２を３０ｍｌの無水１，４−ジオキサンに入れて懸濁させた後、０．１００ｇ（０．９９ミリモル、１．２当量）のトリエチルアミンと混合する。保護ガス雰囲気下で、０．１４６ｇ（０．９１ミリモル、１．１当量）の２−チエニルアセチルクロライドを５ｍｌの無水１，４−ジオキサンに入れることで生じさせた溶液を室温でゆっくり滴下する。次に、この反応溶液を室温で反応が完了［約１４時間；反応の監視では、反応バッチの数滴を希塩酸と混合した後、酢酸エチルで抽出、可動溶媒：酢酸エチル］するまで撹拌する。処理では、反応バッチを７５ｍｌの水に加えた後、結晶化を向上させる目的で、その混合物を数ミリリットルの希塩酸と混合する。
【００９７】
約４℃で数時間放置した後、結晶性生成物を単離して、水に加えて石油エーテルで洗浄する。精製を行う目的で、その乾燥させた物質をテトラヒドロフランに溶解させた後、活性炭と混合する。この混合物を短時間還流させた後、それを濾過し、そして溶媒を蒸留で除去する。このようにして５７％の収率で得た組成Ｃ１８Ｈ１５ＣｌＮ６Ｏ２Ｓ  （４１４．８８）を有する生成物（黄色がかったベージュ色の粉末）は、さらなる反応に充分な純度を示す。
種類（１）の１−置換４−［３（５）−クロロ−１Ｈ−ピラゾール−５（３）−イル］−７−メトキシ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］−キノキサリンの合成
【００９８】
【化２４】
2005523244.tif 000026
【００９９】
この合成は種類Ｇ−１の化合物の環化操作指示に相当し、これを以下の合成実施例でより詳細に説明する。
４−［３（５）−クロロ−１Ｈ−ピラゾール−５（３）−イル］−７−メトキシ−１−（２−チエニルメチル）−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］−キノキサリン（Ｉ．２．Ａ）の合成：
【０１００】
【化２５】
2005523244.tif 000027
【０１０１】
０．１９５ｇ（０．４７ミリモル）の酸ヒドラジドＧ−２Ａを５ｍｌのオキシ塩化燐と約１５ｍｌの不活性な溶媒（例えば１，２−ジクロロエタンまたはアセトニトリル）で構成させた混合物に入れて反応が完了［約２時間；ＴＬＣ監視：反応バッチの数滴を水と混合し、この溶液を飽和重炭酸ナトリウム溶液で中和した後、酢酸エチルで抽出、可動溶媒：酢酸エチル］するまで還流させる。
【０１０２】
冷却後の反応混合物を１００ｍｌの氷水に注意深く加え、その結果として生じた結晶を単離し、水そして石油エーテルで洗浄した後、乾燥させる。その水性濾液を各々１００ｍｌの酢酸エチルで３回抽出し、その有機相を希水酸化ナトリウム溶液、水に加えて飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄した後、それを硫酸ナトリウムで乾燥させる。精製を行う目的で、溶媒留出後に残存する残留物をテトラヒドロフランに溶解させ、活性炭と混合した後、加熱して短時間沸騰させる。前記活性炭を除去した後に得た濾液に蒸発を乾燥状態になるまで受けさせる。その得た粗生成物をカラムクロマトグラフィー（固定相：シリカゲル、可動相：酢酸エチル）に加えて酢酸エチルを用いた再結晶化で精製する。
【０１０３】
外観：黄色がかった褐色粉末
収量：０．１７０  ｇ  （９１％）
総和公式：Ｃ１８Ｈ１３ＣｌＮ６ＯＳ  （３９６．８６）
融点：２０３−２０５ｏＣ
元素分析（Ｃ１８Ｈ１３ＣｌＮ６ＯＳ  ｘ  ０．４  ＴＨＦに関して）
Ｃ                Ｈ                Ｎ
計算値：        ５４．５８％        ３．７８％        １９．４５％
測定値：        ５４．４５％        ３．７０％             １９．３９％
１Ｈ−ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３）：７．９２  （ｄ，  Ｊ  ＝  ９．０  Ｈｚ，  １Ｈ，  Ｈ９），  ７．９０  （ｓ，  １Ｈ，  ピラゾール−４），  ７．７６  （ｄ，  Ｊ  ＝  ３．０  Ｈｚ，  １Ｈ，  Ｈ６），  ７．２３−７．２０  （ｍ，  １Ｈ），  ６．９４−６．００  （ｍ，  １Ｈ），  ６．７９−６．７８  （ｍ，  １Ｈ）  （チオフェン−Ｈ３，  −Ｈ４，  −Ｈ５），  ７．１３  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ９．０  Ｈｚ，  Ｊ  ＝  ３．０  Ｈｚ，  １Ｈ，  Ｈ８），  ５．０８  （ｓ，  ２Ｈ，  ＣＨ２），  ３．９１  （ｓ，  ３Ｈ，  ＯＣＨ３）
置換パターンに応じて、化合物のキノキサリン環に置換基を持たせるさらなる誘導化を受けさせることができる。そのように誘導化には、例えば、本分野の技術者に公知の方法、例えばアシル化、アルキル置換、ニトロ化、還元、ヒドロキシル化、エーテル開裂などが含まれる。
【０１０４】
その上、また、そのような置換基１個または２個以上がアシル化位置に影響を与えるならば、置換されているオルソ−フェニレンジアミンから出発して非対称的に置換されている誘導体を製造することも可能である。後者を例えば電子求引性置換基を存在させる時などに準備する。４−ニトロフェニレンジアミンから出発して非対称的に置換されている化合物（例えばＸ，Ｘ’＝ＣｌそしてＲ２＝ＮＯ２、Ｒ１＝Ｒ３＝Ｒ４＝Ｈ）を生じさせるそのような変法を以下に説明するが、しかしながら、それによって本発明をそのような範囲に限定するものでない。追加的反応段階をこの上に記述した如く実施する。
【０１０５】
【化２６】
2005523244.tif 000028
【０１０６】
［Ｒ２＝強力な電子求引置換基、例えばＮＯ２］
反対の効果を示す置換基、即ちアミノ基を活性化させる置換基を存在させる時にも同じ手順を用いることができる。また、置換基を複数有するフェニレンジアミンを用いる時にも両方の変法とも効果的である。
【０１０７】
置換パターンに応じて追加的修飾を後で実施することも可能である。特に、ニトロ基から出発してそれに還元を受けさせてアミノ基を生じさせるのが特に重要である。そのような官能基にさらなる誘導化、例えばアシル化またはアルキル置換などを受けさせてもよく、また、そのような官能基にジアゾニウム塩による修飾を受けさせることも可能である。
【０１０８】
この上に述べた合成システムを以下の合成実施例を基にしてより詳細に説明する。
Ｎ−（２−アミノ−５−ニトロフェニル）−３，６−ジクロロピリダジン−４−カルボキサミド（Ｃ−３）の合成
【０１０９】
【化２７】
2005523244.tif 000029
【０１１０】
等モル量の４−ニトロフェニレンジアミンと塩基（例えばピリジン、トリエチルアミン、Ｈｕｎｉｇ塩基）を無水溶媒（例えばテトラヒドロフラン、ジクロロメタン、１，４−ジオキサン、ＤＭＦなど）に入れることで生じさせた混合物を氷で冷却しながら、これに、窒素雰囲気下で、１当量の３，６−ジクロロ−４−ピリダジンカルボン酸クロライドを無水溶媒に入れることで生じさせた溶液をゆっくり滴下する。この反応バッチを室温または高温、即ち使用した溶媒が沸騰する温度に及ぶ温度で反応が完了するまで撹拌する。反応を加速させる目的で、また、反応バッチを超音波で数分間処理することも可能である［ＴＬＣ監視：反応バッチの数滴を希塩酸と混合し、その溶液を飽和重炭酸ナトリウムで中和した後、酢酸エチルで抽出、可動溶媒：適切な有機溶媒、例えば酢酸エチル］。次に、この反応生成物を単離するが、これの実施では、生じた結晶を分離するか或は有機溶媒を用いた抽出を行う。再結晶化で高純度の結晶を得る。
【０１１１】
外観：黄色がかったオレンジ色の結晶
融点：２４４℃（１，４−ジオキサンから）
収率：８９％
総和公式：Ｃ１１Ｈ７Ｃｌ２Ｎ５Ｏ３  （３２８．１２）
ＩＲ  （ＫＢｒ）：３４４８；  ３２５９  （ＮＨ２）；  １６７３  （Ｃ  ＝  Ｏ）
１Ｈ−ＮＭＲ  （ＤＭＳＯ−ｄ６）：１０．４１  （ｓ  （ｂｒ），  １  Ｈ，  ＮＨ，  Ｄ２Ｏと交換可能）；  ８．５３  （ｓ，  １  Ｈ，  ピリダジン−Ｈ５）；  ８．２７  （ｄ，  Ｊ  ＝  ２．６  Ｈｚ，  １  Ｈ，  フェニル−Ｈ３）；  ７．９４  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ９．２  Ｈｚ；  Ｊ  ＝  ２．６  Ｈｚ，  １  Ｈ，  フェニル−Ｈ５）；  ６．８３  （ｄ，  Ｊ  ＝  ９．２  Ｈｚ，  １  Ｈ，  フェニル−Ｈ６）；  ６．６８  （ｓ，  ２Ｈ，  ＮＨ２，  Ｄ２Ｏと交換可能）
３−（５−クロロ−２Ｈ−ピラゾール−３−イル）−７−ニトロ−１Ｈ−キノキサリン−２−オン（Ｄ−３）の合成
【０１１２】
【化２８】
2005523244.tif 000030
【０１１３】
１当量のＮ−（２−アミノ−５−ニトロフェニル）−３，６−ジクロロピリダジン−４−カルボキサミド（Ｃ−３）を無水溶媒（例えばＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド）に入れることで構成させた溶液に窒素雰囲気下で３当量の塩基（好適には６０％の水素化ナトリウム分散液）を加えた後、この反応混合物を１００℃で反応が完了［反応時間：約１５分間；反応の監視：反応バッチの数滴を希塩酸と混合した後、酢酸エチルで抽出、可動溶媒：酢酸エチル、加うるに、反応溶液の色が暗赤色から褐色に変わることでも反応の完了を検出することができる］するまで撹拌する。
【０１１４】
観：黄色結晶
融点：３４０℃
収率：８４％
総和公式：Ｃ１１Ｈ６ＣｌＮ５Ｏ３  （２９１．６６）
ＩＲ  （ＫＢｒ）：３２７４  （ＮＨ２）；  １６８７  （Ｃ  ＝  Ｏ）
１Ｈ−ＮＭＲ  （ＤＭＳＯ−ｄ６）：１３．９６  （ｓ，  １Ｈ，  ＮＨ）；  １３．０２  （ｓ，  １Ｈ，  ＮＨ）；  ８．１１−７．９３  （ｍ，  ３Ｈ，  フェニル−Ｈ）；  ７．２８  （ｓ，  １Ｈ，  ピラゾール−ＣＨ）
一般式（Ｅ）、（Ｆ）および（Ｇ）で表される化合物を中間体生成物として生じさせる［これらをまた既に記述した化合物（Ｅ−１）、（Ｆ−１）および（Ｇ−１）と正に同様にして生じさせることも可能である］ことを伴わせて一般式（１）で表される化合物の追加的反応を実施する。
ＩＩ．  置換基Ｒが様々である種類（１）の化合物を製造する方法
ＩＩ．１  １位に様々な置換基を有する誘導体
１位に様々な置換基（Ｒ≠Ｈ）を有する本発明に従う化合物を製造しようとする時、この上に記述しかつ従来技術と同様な様式で実施可能な合成方策を用いることができる。置換パターンに応じて、本分野の技術者に公知のさらなる誘導化、例えば酸化、還元、エーテル開裂、アシル化、アルキル置換、加水分解工程などを実施してもよい。１位に様々な置換基を有する本発明に従う化合物の製造を以下の実施例を基にして説明するが、本発明をそのような実施例に限定するものでない。ここに、アルキル、シクロアルキル、アリールまたはヘテロアリール基を持つ代表例を示すが、このような基は三環状化合物と直接またはスペーサー（ｓｐａｃｅｒ）を通して連結している。
ＩＩ．１．１  １位に（置換）アルキル基を有する誘導体の例
【０１１５】
【表１】
2005523244.tif 000031
【０１１６】
【表２】
2005523244.tif 000032
【０１１７】
【表３】
2005523244.tif 000033
【０１１８】
【表４】
2005523244.tif 000034
【０１１９】
【表５】
2005523244.tif 000035
【０１２０】
【表６】
2005523244.tif 000036
【０１２１】
【表７】
2005523244.tif 000037
【０１２２】
【表８】
2005523244.tif 000038
【０１２３】
【表９】
2005523244.tif 000039
【０１２４】
【表１０】
2005523244.tif 000040
【０１２５】
【表１１】
2005523244.tif 000041
【０１２６】
【表１２】
2005523244.tif 000042
【０１２７】
【表１３】
2005523244.tif 000043
【０１２８】
【表１４】
2005523244.tif 000044
【０１２９】
ＩＩ．２  １位に水素原子を有する一般式（１）に従う化合物の誘導体
置換基Ｒ（１位）が水素原子を表す誘導体をこの上に記述した方法に従って得るのは不可能である。後者の反応では、例えば相当するヒドラジノ化合物をオルト蟻酸トリメチルと反応させることなどで反応させる。そのような誘導体の生成を説明する一般的操作指示ばかりでなく３実施例を以下に示す。
【０１３０】
【化２９】
2005523244.tif 000045
【０１３１】
一般的操作指示
２．０ミリモルの相当するヒドラジノ化合物をオルト蟻酸トリメチル（１ミリモル当たり約１０ｍｌ）に入れることで構成させた懸濁液を反応が完了［ＴＬＣ監視：反応バッチの数滴を水と混合した後、生成物を酢酸エチルで抽出、可動溶媒：酢酸エチル］するまで還流させる。
【０１３２】
冷却を室温になるまで行った後、反応生成物を単離する。これを、結晶化させた生成物を吸引を伴わせて濾別するか或は反応バッチを水と混合した後に適切な有機溶媒（例えばジクロロメタン）を用いた抽出を行うことで実施する。その後、その単離した粗生成物に再結晶化を適切な溶媒、例えば酢酸エチル、テトラヒドロフラン、１，４−ジオキサン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドまたはアルコールなどを用いて受けさせることで精製を行う。
ＩＩ．２．Ａ．  ４−［３（５）−クロロ−１Ｈ−ピラゾール−５（３）−イル］−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］−キノキサリン（Ｒ＝Ｒ１＝Ｒ２＝Ｒ３＝Ｒ４＝Ｈ、Ｘ＝Ｃｌの一般式（１）で表される化合物）の合成
反応時間：２時間
収率：８０％（無色針）
総和公式：Ｃ１２Ｈ７ＣｌＮ６  （２７０．６８）
融点：３０２−３０４ｏＣ  （ＴＨＦ  ＋  ５％  ＤＭＦから）
１Ｈ−ＮＭＲ  （ＤＭＳＯ−ｄ６）：１４．２４  （ｓ，  １Ｈ，  ピラゾール  ＮＨ），  １０．２１  （ｓ，  １Ｈ，  Ｈ１），  ８．４９−８．４４  （ｍ，  １Ｈ），  ８．１４−８．０８  （ｍ，  １Ｈ），  ７．８８−７．７０  （ｍ，  ２Ｈ）  （Ｈ６，  Ｈ７，  Ｈ８，  Ｈ９）
ＩＩ．２．Ｂ．  ４−［３（５）−クロロ−１Ｈ−ピラゾール−５（３）−イル］−７，８−ジメチル−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］−キノキサリン（Ｒ＝Ｒ１＝Ｒ４＝Ｈ、Ｒ２＝Ｒ３＝ＣＨ３、Ｘ＝Ｃｌの一般式（１）で表される化合物）の合成
反応時間：４０分間
収率：９０％（無色粉末）
総和公式：Ｃ１４Ｈ１１ＣｌＮ６  （２９８．７４）
融点：３２０−３２３ｏＣ  （ＴＨＦから）
１Ｈ−ＮＭＲ  （ＤＭＳＯ−ｄ６）：１４．１３  （ｓ，  １Ｈ，  ピラゾール  ＮＨ），  １０．０４  （ｓ，  １Ｈ＜  Ｈ１），  ８．１７  （ｓ，  １Ｈ），  ７．７５  （ｓ，  １Ｈ）  （Ｈ６，  Ｈ９），  ７．５６  （ｓ，  １Ｈ，  ピラゾール−Ｈ４），  ２．４１  （ｓ，  ３Ｈ，  ＣＨ３），  ２．３８  （ｓ，  ３Ｈ，  ＣＨ３）
ＩＩ．２．Ｃ．  ４−［３（５）−クロロ−１Ｈ−ピラゾール−５（３）−イル］−７−メトキシ−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］−キノキサリン（Ｒ＝Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４＝Ｈ、Ｒ３＝ＯＣＨ３、Ｘ＝Ｃｌの一般式（１）で表される化合物）の合成
反応時間：４時間
収率：６７％（黄色粉末）
総和公式：Ｃ１３Ｈ９ＣｌＮ６Ｏ  （３００．７１）
融点：２８７−２９０ｏＣ  （２００ｏＣから出発して別の修飾形に変化）（酢酸エチル／ＴＨＦから）
１Ｈ−ＮＭＲ  （ＤＭＳＯ−ｄ６）：１４．２１  （ｓ，  １Ｈ，  ピラゾール  ＮＨ），  １０．１４  （ｓ，  １Ｈ，  Ｈ１），  ８．４０  （ｄ，  Ｊ  ＝  ９．０  Ｈｚ，  １Ｈ，  Ｈ９），  ７．６４  （ｓ，  １Ｈ，  ピラゾール−Ｈ４），  ７．５５  （ｄ，  Ｊ  ＝  ２．９  Ｈｚ，  １Ｈ，  Ｈ６），  ７．４７  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ９．０  Ｈｚ，  Ｊ  ＝  ２．９  Ｈｚ，  １Ｈ，  Ｈ８），  ３．９４  （ｓ，  ３Ｈ，  ＯＣＨ３）
ＩＩ．３  一般式（２）で表されるテトラゾロキノキサリン（１−アザ誘導体）：
本発明は、加うるに、この上に示した一般式（１）に従うトリアゾロキノキサリンのＮ−等配電子体、即ち環炭素が窒素に置き換わっている等配電子体であると考えることができる新規なテトラゾロキノキサリンにも関する。そのような誘導体は、１つの実施例を基にして示すように、相当するクロロキノキサリン誘導体から出発してそれをアジ化ナトリウムと反応させることを通して入手可能である。
【０１３３】
【化３０】
2005523244.tif 000046
【０１３４】
一般的操作指示：
等モル量の相当するクロロキノキサリン誘導体とアジ化ナトリウムを無水Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（塩素化合物１ミリモル当たり約１０ｍｌ）に入れて１３０℃で反応が完了するまで撹拌する。処理では、反応バッチを希塩酸（１ミリモル当たり約１００ｍｌ）に加え、蓄積する結晶性反応生成物を単離し、水に加えて石油エーテルで洗浄した後、一定重量に到達するまで乾燥させる。
【０１３５】
適切な溶媒を用いた再結晶化で分析的に高純度の生成物を得る。
ＩＩ．３．Ａ．  ４−［３（５）−クロロ−１Ｈ−ピラゾール−５（３）−イル］テトラアゾロ［１，５−ａ］キノキサリン（Ｒ１＝Ｒ２＝Ｒ３＝Ｒ４＝Ｈ、Ｘ＝Ｃｌの一般式（２）で表される化合物）の合成
反応時間：５時間
収率：８６％（明黄色結晶）
総和公式：Ｃ１１Ｈ６ＣｌＮ７  （２７１．６７）
融点：２５７−２５８ｏＣ  （酢酸エチルから）
元素分析：                  Ｃ                Ｈ                  Ｎ
計算値：              ４８．６３％        ２．２３％        ３６．０９％
測定値：              ４８．４５％        ２．１７％        ３５．９８％
１Ｈ−ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３）：１４．４９  （ｓ，  １Ｈ，  ＮＨ），  ８．６５−８．６０  （ｍ，  １Ｈ），  ８．３１−８．２７  （ｍ，  １Ｈ），  ８．０６−７．９１  （ｍ，  ２Ｈ）  （Ｈ６，  Ｈ７，  Ｈ８，  Ｈ９），  ７．６２  （ｓ，  １Ｈ，  ピラゾール  Ｈ４）
本発明に従う一般式（２）で表されるＮ−等配電子体では、また、以下のセクションＩＩＩおよびＩＶに記述する構造的修飾を用いることも可能である。
ＩＩＩ．  置換基Ｒ５が様々な種類（１）および（２）で表される化合物の製造方法：
本発明は、加うるに、ピラゾール環が２個の窒素原子の中の１個を持っていて遊離ＮＨ官能が存在しないで別の置換基、好適にはアルキル、アリル、（ヘテロ）アラルキルまたはアシルが存在することを特徴とする新規なパラゾリル置換［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］キノキサリン、即ち１−アザ−等配電子体にも関する。この置換基Ｒ５の導入を、好適には、Ｒ５が水素に等しい一般式（１）で表される化合物に次の誘導化、例えばアルキル置換などを受けさせることで実施する：
【０１３６】
【化３１】
2005523244.tif 000047
【０１３７】
ピラゾールの化学的性質が理由でＲ５位置異性体が生じることが予測されるが、適切な反応条件を選択するならば、そのようなＲ５位置異性体の中の１つを好適に生じさせることができるはずである。この上に示したように、本分野の技術者に公知の精製方法、例えば分別結晶化またはクロマトグラフィーによる分離方法などを用いて、任意選択で生じさせた生成物混合物を異性体的に高純度の一般式（１）で表されるＲ５置換生成物に分離することができる。
【０１３８】
いくつかの実施例を基にして、そのような構造的変形を示すが、しかしながら、本発明をそのような実施例に限定するものでなく、また、アルキル置換反応に関しても記述する操作方法以外の方法を用いることも可能である。
Ｎが置換されていない一般式（１）で表される誘導体にアルキル置換を受けさせる一般的操作指示
１当量の相当するＮが置換されていない一般式（１）で表される誘導体を約５ｍｌ／ミリモルの無水溶媒（例えばジメチルスルホキサイド、テトラヒドロフラン、１，４−ジオキサン、ＤＭＦ）に入れることで生じさせた溶液に窒素雰囲気下で塩基（例えば粉末にした水酸化カリウム、ナトリウム、水素化ナトリウム、カリウム−ｔ−ブタノラート）を２当量加えた後、この混合物を室温で１時間撹拌する。次に、アルキル化剤（好適にはハロゲン化アルキルまたはメシレート）を２当量加えた後、この反応混合物を室温で反応が完了［ＴＬＣ監視：反応バッチの数滴を希塩酸と混合した後、酢酸エチルで抽出、可動溶媒：例えばジクロロメタン／酢酸エチル＝１９／１］するまで撹拌する。処理では、反応バッチを希塩酸（約１００ｍｌ／ミリモル）に加える。生じた沈澱物を吸引を伴わせて濾別し、水に加えて石油エーテルで洗浄するか、或は有機溶媒を用いた抽出で抽出する。次に、その粗生成物を乾燥させた後、活性炭で処理することで予備精製を行う。次に、クロマトグラフィー、場合によりまた分別結晶化で位置異性体の精製／分離を実施する。
【０１３９】
これらの誘導体の構造は例えばｘ線構造解析などで明瞭に測定可能である。
【０１４０】
このような一般的操作指示を用いて下記の合成実施例を実施することで一般式（１）で表される化合物の製造を行う。
４−（５−クロロ−１Ｈ−メチル−ピラゾール−３−イル）−１−（２−チエニルメチル）−［１，２，４］トリラアゾロ［４，３−ａ］−キノキサリンの合成
【０１４１】
【化３２】
2005523244.tif 000048
【０１４２】
溶媒：無水ジメチルスルホキサイド
塩基：粉末にした水酸化カリウム
反応時間：１．５時間
外観：黄色の平らなひし形結晶
総和公式：Ｃ１８Ｈ１３ＣｌＮ６Ｓ  （３８０．８６）
融点：２０５−２０７ｏＣ  （酢酸エチルから）
１Ｈ−ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３）：８．３２−８．２７  （ｍ，  １Ｈ），  ８．０６−８．０１  （ｍ，  １Ｈ），  ７．６６−７．５０  （ｍ，  ２Ｈ）  （Ｈ６，  Ｈ７，  Ｈ８，  Ｈ９），  ７．８７  （ｓ，  １Ｈ，  ピラゾール  Ｈ４），  ７．２４−７．２２  （ｍ，  １Ｈ），  ６．９５−６．９０  （ｍ，  １Ｈ），  ６．８１−６．８０  （ｍ，  １Ｈ）  （チオフェン  Ｈ３，  Ｈ４，  Ｈ５），  ５．１１  （ｓ，  ２Ｈ，  ＣＨ２），  ４．０８  （ｓ，  ３Ｈ，  ＣＨ３）
４−［３（５）−クロロ−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−５（３）−イル］−１−（３−フェニルプロピル）−［１，２，４］トリラアゾロ［４，３−ａ］−キノキサリンの合成に加えてこれの位置異性体に分離
溶媒：無水ＴＨＦ
塩基：粉末にした水酸化カリウム
異性体分離：カラムクロマトグラフィー：
固定相：シリカゲル
可動相：１，４−ジオキサン＋ジイソプロピルエーテル＝１＋１
４−［５−クロロ−１−メチル−ピラゾール−３−イル］−異性体
【０１４３】
【化３３】
2005523244.tif 000049
【０１４４】
外観：無色結晶
精製：ＥＡから再結晶化
総和公式：Ｃ２２Ｈ１９ＣｌＮ６（４０２．８６）
収量：  ０．１４５  ｇ  （３２％）
融点：１７９−１８０ｏＣ
ＩＲ  ［ｃｍ−１］：３４３２，  ３１５８，  ２９５３  （ＮＨ）
１Ｈ−ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３）：８．２９  （ｄ，  Ｊ  ＝  ７．６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．８６−７．８０  （ｍ，  １Ｈ），  ７．６５−７．４８  （ｍ，  ２Ｈ）  ）  （Ｈ６，  Ｈ７，  Ｈ８，  Ｈ９），  ７．８６  （ｓ，  １Ｈ，  ピラゾール−Ｈ），  ７．３８−７．２０  （ｍ，  ５Ｈ，  フェニル−Ｈ），  ４．０７  （ｓ，  ３Ｈ，  ＣＨ３），  ３．５０  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．５  Ｈｚ，  ２Ｈ，  ＣＨ２），  ２．９３  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．０  Ｈｚ，  ２Ｈ，  ＣＨ２），  ２．４８−２．３３  （ｍ，  ２Ｈ，  ＣＨ２）
４−［３−クロロ−１−メチル−ピラゾール−５−イル］−異性体
【０１４５】
【化３４】
2005523244.tif 000050
【０１４６】
外観：無色結晶
精製：ＥＡから再結晶化
総和公式：Ｃ２２Ｈ１９ＣｌＮ６   （４０２．８６）
収量：０．２６０  ｇ  （５８％）
融点：１５８−１６０ｏＣ
ＩＲ  ［ｃｍ−１］：３４３２  （ＮＨ）
１Ｈ−ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３）：８．１２  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．１  Ｈｚ，  Ｊ  ＝  １．５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．８３  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  ８．１  Ｈｚ，  Ｊ  ＝  １．５  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．６９−７．５２  （ｍ，  ２Ｈ）  （Ｈ６，  Ｈ７，  Ｈ８，  Ｈ９），  ７．８８  （ｓ，  １Ｈ，  ピラゾール−Ｈ），    ７．３８−７．２１  （ｍ，  ５Ｈ，  フェニル−Ｈ），  ４．４０  （ｓ，  ３Ｈ，  ＣＨ３），  ３．４９  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．６  Ｈｚ，  ２Ｈ，  ＣＨ２），  ２．９３  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ２Ｈ，  ＣＨ２）
ピラゾール環が有する窒素原子に誘導化を受けさせることができるのはトリ−もしくはテトラゾロキノキサリン誘導体の段階ばかりでなくまたより早い段階で受けさせることも可能である。当該化合物では、種類（Ｄ）、（Ｅ）、（Ｆ）または（Ｇ）の化合物から出発して後者を実施することができる。以下の合成図にいろいろな可能性の組み合わせを示す。Ｒ１からＲ４が水素に等しい（Ｅ）にアシル基を導入する方法が文献（Ｂ．  Ｍａｔｕｓｚｃｚａｋ他，  Ｊ．  Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ  Ｃｈｅｍ．  ３５：    １１３−１１５，  １９９８）に記述されている。種類（Ｄ）の化合物から出発する場合には、窒素上にラクタム保護基を有する化合物に誘導化を受けさせることを組み込むのが好適である。
【０１４７】
【化３５】
2005523244.tif 000051
【０１４８】
［鍵：］
Ｅｉｎｆｕｈｒｕｎｇ  ｖｏｎ  Ｒ５＝Ｒ５の導入
Ｅから出発した置換基Ｒ５の導入を以下に１つの例を基にしてより詳細に記述する。当該発明をそれに限定するものでなく、場合により、反応条件を若干変えることでそれをまた他の置換基に移し変えることは容易に実施可能である。条件、特に溶媒、塩基、アルキル化剤、温度および任意の触媒を変えることで、２種類のＮ−異性体の比率を変えることができ、このようにして、個々のケースでまた所望の異性体に好都合のようにシフトさせることも可能である。
【０１４９】
【化３６】
2005523244.tif 000052
【０１５０】
［鍵：］
（Ｅ−Ａｌｋｙｌ）ａｌｓ  Ｉｓｏｍｅｒｅｎｇｅｍｉｓｃｈ＝異性体混合物として（Ｅ−アルキル）
ＴＲＥＮＮＵＮＧ＝分離
２−クロロ−３−［３（５）−クロロ−１Ｈ−ピラゾール−５（３）−イル］キノキサリンにアルキル置換を受けさせて（Ｅ−アルキル）型の化合物を製造
１当量の種類（Ｅ）のクロロキノキサリンを不活性な溶媒（例えばＴＨＦ、ＤＭＦ、１，４−ジオキサン、ＤＭＳＯ；各場合とも好適には無水溶媒）に入れることで生じさせた溶液または懸濁液に窒素雰囲気下で塩基（例えば粉末にした水酸化カリウム、ナトリウム、水素化ナトリウム、カリウム−ｔ−ブタノラート）を２当量および必要ならば無機ヨウ化物を触媒量で加える。この混合物を室温で１時間撹拌する。懸濁液が存在する場合には、超音波処理が脱プロトン化に対して有利な効果を示す可能性があり、従ってさらなる反応過程に有利な効果を示す可能性がある。次に、相当するアルキル化剤、例えばハロゲン化アルキルまたはメシレートなどを２当量加えた後、この反応混合物を反応が完了［必要な反応温度：室温から使用溶媒の沸騰範囲に及ぶ温度；反応過程をＴＬＣで追跡、この目的で反応バッチのサンプルを希塩酸と混合した後、酢酸エチルで抽出、可動溶媒：適切な溶媒もしくは混合物］するまで撹拌する。必要ならば、即ち反応が不完全であるか或は進行があまりにも遅い場合には、後で更に塩基および／またはアルキル化剤を添加してもよい。処理では、反応混合物を希塩酸に加えた後、反応生成物を単離する。これの実施では、生じた沈澱物を分離するか或は有機溶媒を用いた抽出を行った後に水を用いた洗浄を行う。異性体の分離に加えてそれらの精製をクロマトグラフィーおよび／または再結晶化で実施する。
【０１５１】
以下の実施例を基にして一般的操作指示をより詳細に説明する。
Ａ）  Ｒ５＝エチルである２−クロロ−３−［３（５）−クロロ−１−エチル−１Ｈ−ピラゾール−５（３）−イル］キノキサリンの合成
塩基：粉末にした水酸化カリウム
アルキル化剤：ヨウ化エチル
溶媒：無水ＴＨＦ
異性体分離：カラムクロマトグラフィー：
固定相：シリカゲル
可動相：ジクロロメタン＋エーテル＝４９＋１
総和公式：Ｃ１３Ｈ１０Ｃｌ２Ｎ４  （２９３．１６）
１番目の異性体：
外観：無色結晶
融点：  １４９ｏＣ  （ジイソプロピルエーテルから）
１Ｈ−ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３）：８．１５−７．８４  （ｍ，  ４Ｈ，  Ｈ６，  Ｈ７，  Ｈ８，  Ｈ９），  ６．７８  （ｓ，  １Ｈ，  ピラゾール  Ｈ４），  ４．３２  （ｑ，  Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ２Ｈ，  ＣＨ２），  １．４９  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ３Ｈ，  ＣＨ３）
２番目の異性体：
外観：黄色の平らなひし形結晶
融点：１２６ｏＣ  （ジイソプロピルエーテルから）
１Ｈ−ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３）：   ８．２３−８．１８  （ｍ，  １Ｈ），  ８．０６−８．０１  （ｍ，  １Ｈ），  ７．８２−７．７６  （ｍ，  ２Ｈ）  （Ｈ６，  Ｈ７，  Ｈ８，  Ｈ９），  ７．０４  （ｓ，  １Ｈ，  ピラゾール  Ｈ４），  ４．３８  （ｑ，  Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ２Ｈ，  ＣＨ２），  １．５４  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ３Ｈ，  ＣＨ３）
Ｂ）  Ｒ５＝メトキシエチルである２−クロロ−３−［３（５）−クロロ−１−（２−メトキシエチル）−１Ｈ−ピラゾール−５（３）−イル］−キノキサリンの合成
塩基：粉末にした水酸化カリウム
アルキル化剤：メタンスルホン酸（２−メトキシエチル）エステル
触媒：ヨウ化カリウム
溶媒：無水１，４−ジオキサン
異性体分離：カラムクロマトグラフィー：
固定相：シリカゲル
可動相：ジクロロメタン＋ジイソプロピルエーテル＝１＋１
総和公式：  Ｃ１４Ｈ１２Ｃｌ２Ｎ４Ｏ  （３２３．１８）
１番目の異性体：
外観：無色結晶
融点：８９−９０ｏＣ
１Ｈ−ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３）：   ８．１６−８．０２  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．９１−７．７９  （ｍ，  ２Ｈ）  （Ｈ６，  Ｈ７，  Ｈ８，  Ｈ９），  ６．７５  （ｓ，  １Ｈ，  ピラゾール  Ｈ４），  ４．５３  （ｔ，  Ｊ  ＝  ５．５  Ｈｚ，  ２Ｈ，  ＣＨ２），  ３．６５  （ｔ，  Ｊ  ＝  ５．５  Ｈｚ，  ２Ｈ，  ＣＨ２），  ３．１２  （ｓ，  ３Ｈ，  ＣＨ３）
２番目の異性体：
外観：無色針
融点：１２５ｏＣ
１Ｈ−ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３）：   ８．２２−８．１６  （ｍ，  １Ｈ），  ８．０６−８．０１  （ｍ，  １Ｈ），  ７．８３−７．７４  （ｍ，  ２Ｈ）  （Ｈ６，  Ｈ７，Ｈ８，  Ｈ９），  ７．０４  （ｓ，  １Ｈ，  ピラゾール  Ｈ４），  ４．４８  （ｔ，  Ｊ  ＝  ５．８  Ｈｚ，  ２Ｈ，  ＣＨ-２），  ３．８８  （ｔ，  Ｊ  ＝  ５．８  Ｈｚ，  ２Ｈ，  ＣＨ２），  ３．７６  （ｓ，  ３Ｈ，  ＣＨ３）
種類Ｌの化合物の製造：
反応では、相当する異性体が高純度の置換２−クロロキノキサリン（Ｅ−アルキル）を水加ヒドラジン（約１０ｍｌ／ミリモル）に入れることで生じさせた懸濁液を反応が完了（場合により高沸点溶媒、例えば１，４−ジオキサンなどを数ミリリットル添加してもよい）［反応の監視：反応バッチのサンプルを酢酸エチルで抽出してＴＬＣで監視、可動溶媒：適切な溶媒もしくは混合物］するまで還流させる。処理では、反応混合物を氷水に加えた後、生じた沈澱物を分離するか或は有機溶媒を用いた抽出を行った後に水を用いた洗浄を行うことで反応生成物を単離する。適切な溶媒を用いた再結晶化で分析的に高純度の生成物を得る。必要ならば、前以てクロマトグラフィーで粗生成物を精製しておいてもよい。
【０１５２】
以下の合成実施例を基にして前記一般的操作指示をより詳細に説明する。
３−［３（５）−クロロ−１−エチル−１Ｈ−ピラゾール−５（３）−イル］−２−ヒドラジノキノキサリンの合成
総和公式：Ｃ１３Ｈ１３ＣｌＮ６  （２８８．７４）
１番目の異性体：
外観：黄色がかった結晶
収率：８３％
融点：１４１−１４３ｏＣ
１Ｈ−ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ-３）：     ７．９６−７．９１  （ｍ，  １Ｈ），  ７．８３−７．７９  （ｍ，  １Ｈ），  ７．７２−７．６４  （ｍ，  １Ｈ），  ７．５４−７．４５  （ｍ，  １Ｈ）  （Ｈ６，  Ｈ７，  Ｈ８，  Ｈ９），  ６．６２  （ｓ，  １Ｈ，  ピラゾール  Ｈ４），  ４．３３  （ｑ，  Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ２Ｈ，  ＣＨ２），  ４．１８  （ｓ  ｂｒ，  ２Ｈ，  ＮＨ２），  １．４７  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ３Ｈ，  ＣＨ-３）
２番目の異性体：
外観：黄色がかった結晶
収率：９６％
融点：  ２０２−２０４ｏＣ
１Ｈ−ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３）：９．２９  （ｓ，  １Ｈ，  ＮＨ），  ７．９２−７．８７  （ｍ，  １Ｈ），  ７．７５−７．７０  （ｍ，  １Ｈ），  ７．６１−７．５３（ｍ，  １Ｈ），  ７．５３−７．３５  （ｍ，  １Ｈ）  （Ｈ６，  Ｈ７，  Ｈ８，  Ｈ９），  ７．１７  （ｓ，  １Ｈ，  ピラゾール  Ｈ４），  ４．３４−４．２３  （ｍ，  ４Ｈ，  ＮＨ２，  ＣＨ２），  １．５２  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ３Ｈ，  ＣＨ３）
種類Ｍおよび種類Ｎの化合物の製造：
Ｉ）  種類Ｌの化合物をオルトホルメートと反応させることで１位に水素原子を有する誘導体を製造。
【０１５３】
一般的操作指示（セクションＩＩ．２を参照）に従って、異性体が高純度の種類Ｌのヒドラジンを反応させることで製造を実施する。これに関連して下記の合成例を示す。
４−［３（５）−クロロ−１−エチル−１Ｈ−ピラゾール−５（３）−イル］−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］−キノキサリンの合成
総和公式：Ｃ１４Ｈ１１ＣｌＮ６    （２９８．７４）
１番目の異性体：
外観：無色結晶
融点：２８２−２８４ｏＣ  （ＴＨＦから）
１Ｈ−ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３）：   ９．３６  （ｓ，  １Ｈ，  ＣＨ），  ８．１９−８．１４  （ｍ，  １Ｈ），  ８．０１−７．９７  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．８２−７．６９  （ｍ，  ２Ｈ）  （Ｈ６，  Ｈ７，  Ｈ８，  Ｈ９，  ピラゾール  Ｈ４），  ４．３２  （ｑ，  Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ２Ｈ，  ＣＨ２），  １．４９  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ３Ｈ，  ＣＨ３）
２番目の異性体：
外観：無色結晶
融点：  １９１−１９２ｏＣ  （酢酸エチルから）
１Ｈ−ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３）：９．３６  （ｓ，  １Ｈ，  ＣＨ），  ８．３７−８．３１  （ｍ，  １Ｈ），  ７．９９−７．９３  （ｍ，  １Ｈ），  ７．７５−７．６５  （ｍ，  ２Ｈ），  （Ｈ６，  Ｈ７，  Ｈ８，  Ｈ９），  ７．８８  （ｓ，  １Ｈ，  ピラゾール  Ｈ４），  ４．４６  （ｑ，  Ｊ  ＝  ７．３  Ｈｚ，  ２Ｈ，  ＣＨ２），  １．５７  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．３  Ｈｚ，  ３Ｈ，  ＣＨ３）
ＩＩ）  種類Ｌの化合物と酸クロライドの反応
この上に既に記述した方法、即ちアシル化に続く環化［種類Ｇ−１および種類（１）の化合物の製造を参照］に従って、種類Ｌの化合物から出発して置換［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］キノキサリンを製造することができる。
【０１５４】
一般的操作指示（セクションＩＩ．２を参照）に従うか或は１槽方法、即ちヒドラジドを単離しないでそれにまた変換を直接受けさせて三環状化合物を生じさせる方法に従って、種類Ｌの異性体が高純度のヒドラジンを反応させることで製造を実施する。この方法をこの点でのみ記述するが、これはまたピラゾリルで置換されていない誘導体の製造で用いるにも適する。これに関しては、例えば下記を参照のこと。
４−［３（５）−クロロ−１−エチル−１Ｈ−ピラゾール−５（３）−イル］−１−（３−フェニルプロピル）−［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］−キノキサリンの合成
総和公式：Ｃ２３Ｈ２１ＣｌＮ６  （４１６．９２）
１番目の異性体：
アセトニトリルを溶媒として用いた１槽方法で製造。
【０１５５】
外観：無色結晶
融点：１７５−１７６ｏＣ  （酢酸エチルから）
１Ｈ−ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３）：８．１３−８．０８  （ｍ，  １Ｈ），  ７．８９  （ｓ，  １Ｈ），  ７．８６−７．８１  （ｍ，  １Ｈ），  ７．６９−７．５３  （ｍ，  ２Ｈ），  （Ｈ６，  Ｈ７，  Ｈ８，  Ｈ９，  ピラゾール  Ｈ４），  ７．３８−７．２１  （ｍ，  ５Ｈ，  フェニル−Ｈ），  ４．８５  （ｑ，  Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ２Ｈ，  ＣＨ２），  ３．４９  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．８  Ｈｚ，  ２Ｈ，  ＣＨ２），  ２．９４  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．１  Ｈｚ，  ２Ｈ，  ＣＨ２），  ２．４８−２．３３  （ｍ，  ２Ｈ，  ＣＨ２），  １．５５  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  ３Ｈ，  ＣＨ３）
２番目の異性体：
アセトニトリルを溶媒として用いて２段階、即ちアシル化に続く環化で製造。
【０１５６】
外観：無色針
融点：１４６−１４７ｏＣ  （ジイソプロピルエーテルから）
１Ｈ−ＮＭＲ  （ＣＤＣｌ３）：８．３３−８．２９  （ｍ，  １Ｈ），  ７．８６−７．ｌ８０  （ｎｍ，  ２Ｈ），  ７．６６−７．４８  （ｍ，  ２Ｈ））  （Ｈ６，  Ｈ７，  Ｈ８，  Ｈ９，  ピラゾール  Ｈ４），  ７．３８−７．２０  （ｍ，  ５Ｈ，  フェニル−Ｈ），  ４．４４  （ｑ，  Ｊ  ＝  ７．３  Ｈｚ，  ２Ｈ，  ｃＨ２），  ３．５０  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．７  Ｈｚ，  ２Ｈ，  ＣＨ２），  ２．９４  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．１  Ｈｚ，  ２Ｈ，  ＣＨ２），  ２．４８−２．３４  （ｍ，  ２Ｈ，  ＣＨ２），  １．５５  （ｔ，  Ｊ  ＝  ７．３  Ｈｚ，  ３Ｈ，  ＣＨ３）
ＩＶ．  基Ｘが様々な種類（１）または種類（２）の化合物を製造する方法：
本発明は、ピラゾール環と結合している塩素原子が他のハロゲンまたは水素に置き換わっている追加的ピラゾリル置換［１，２，４］トリアゾロ［４，３−ａ］キノキサリンまたはテトラゾロ誘導体にも関する。脱ハロゲンは例えば還元で実施可能である、即ち水素雰囲気下で反応を起こさせるか或は水素供給体（ｈｙｄｒｏｇｅｎ  ｄｅｌｉｖｅｒｅｒ）、例えば蟻酸アンモニウムなどを適切な触媒（例えば活性炭に担持されているパラジウム）の存在下で用いることで実施可能である（Ｂ．  Ｍａｔｕｓｚｃｚａｋ，  Ｋ．  Ｍｅｒｅｉｔｅｒ，  ‘Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｓｅｒｉｅｓ  ｏｆ  Ｐｙｒａｚｏｌｙｌ−Ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ  Ｑｕｉｎｏｘａｌｉｎｅｓ，’  Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｅｓ，  ４５，  ２４４９−２４６２  （１９９７））。この脱ハロゲン反応は反応を高温で行うと向上する：溶媒として、第一級アルコール、テトラヒドロフランばかりでなく１，４−ジオキサンも適切である。
【０１５７】
【化３７】
2005523244.tif 000053
【０１５８】
特に薬学的使用の場合には、場合により、塩の状態の化合物を無機もしくは有機酸との生理学的に適合し得る塩に変化させてもよい。この目的の酸として、例えばこはく酸、臭化水素、酢酸、フマル酸、マレイン酸、メタンスルホン酸、乳酸、燐酸、塩酸、硫酸、酒石酸またはクエン酸が考慮に入る。また、この上に記述した酸の混合物を用いることも可能である。
【０１５９】
酸官能が分子内に存在する場合、そのような化合物を薬学的使用の目的でまた生理学的に適合し得る塩に変化させることも可能である。その対イオンは無機および有機両方の性質を有するものであってもよい。この場合にはイオンをアルカリ金属、アルカリ土類金属、アンモニウムばかりでなくアンモニウム誘導体（水素の代わりに有機置換基、好適にはアルキル基が１から４個存在する）で構成させる。
【０１６０】
加うるに、また、本化合物を生理学的に適合し得る溶媒和、特に水化物の形態で存在させることも可能である。
【０１６１】
選択した代表例の生物学的試験のいくつかの結果を以下のセクションに挙げる。化合物番号は合成部分に記述した番号に相当する。
本発明に従う一般式（１）または（２）に従う化合物の生物学的試験に加えてそれらの評価
以下に示す生物学的試験のデータは、Ａ１、Ａ２Ａ、Ａ２ＢおよびＡ３アデノシン受容体（ＡＲ）とラジオリガンドの結合検定で得た結果である。
【０１６２】
下記の選択的ラジオリガンドを生物学的試験で用いる：
［３Ｈ］ＣＣＰＡ            （Ａ１  ＡＲの場合）    ［Ｋｌｏｔｚ他，  Ｎａｕｎｙｎ−Ｓｃｈｍｉｅｄｅｂｅｒｇ’ｓ  Ａｒｃｈ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，３４０，  ６７９  （１９８９）］
［３Ｈ］ＭＳＸ−２          （Ａ２Ａ  ＡＲの場合）    ［Ｍuｌｌｅｒ他，  Ｅｕｒ．  Ｊ．  Ｐｈａｒｍ．  Ｓｃｉ．，１０，  ２５９  （２０００）］
［３Ｈ］ＺＭ２４１３８５    （Ａ２Ｂ  ＡＲｓの場合）  ［Ｘ．−Ｄ．  Ｊｉ，  Ｋ．  Ａ．  Ｊａｃｏｂｓｏｎ，  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓ．  Ｄｉｓｃｏｖ．，  １６，  ２１７      （１９９９）］
［３Ｈ］ＰＳＢ−１１      （ヒトＡ３  ＡＲの場合の新規な拮抗性ラジオリガンド）  ［Ｍ．  Ｄｉｅｃｋｍａｎｎ，  Ｍ．  Ｔｈｏｒａｎｄ，  Ｖ．  Ｏｚｏｌａ，  Ｃ．  Ｅ．  Ｍuｌｌｅｒ，  Ｖｏｒｂｅｒｅｉｔｕｎｇ  ［Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ］  （２００１）］．
［１２５Ｉ］ＡＢ−ＭＥＣＡ    （ラット−Ａ３  ＡＲの場合）  ［Ｏｌａｈ他，  Ｍｏｌ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，  ４５，  ９７８  （１９９４）］．
物質の試験で用いた検定の説明
ラット脳に由来する組織標本の調製
標本作成の目的で、Ｐｅｌ  Ｆｒｅｅｚ  Ｃｏｍｐａｎｙ（Ｒｏｇｅｒｓ、アーカンサス、米国）の冷凍保存ラット脳を用いる。前記ラット脳を０．３２Ｍのサッカロース溶液に入れて解凍させ、皮質を切除した後、線条（ｓｔｒｉａｔａ）の標本を外側で作成した。
【０１６３】
ガラス−テフロン製ホモジェナイザー（ｇｌａｓｓ−Ｔｅｆｌｏｎ  ｈｏｍｏｇｅｎｉｚｅｒ）を用いて大脳皮質細胞分解を０．３２Ｍのサッカロース溶液中で起こさせる（５−６段階、１０秒間）。様々な遠心分離段階で膜を精製した。６００ｇの遠心分離を４℃で１０分間行うことでＰ１画分から細胞くずを多量に分離した後、上澄み液（Ｐ２画分）に下記のさらなる処理を受けさせる：次に、３段階の遠心分離段階（３５，０００ｇ；４℃；６０分）でペレットを生じさせ、Ｕｌｔｒａｔｕｒｒａｘを用いてそれを５０ミリモルのＴＲＩＳ緩衝液（ｐＨ７．４）の中に入れて再懸濁させ（３−４段階、３秒間）、個々の上澄み液を廃棄する。線条を冷ＴＲＩＳ緩衝液に加え、Ｕｌｔｒａｔｕｒｒａｘを用いて３から４段階で均一にし（３秒間）た後、３５，０００ｇの遠心分離に４℃で２０分間かける。その上澄み液を廃棄した後、そのペレットを５０ミリモルのＴＲＩＳ緩衝液（５０ミリモル、ｐＨ７．４）に入れて再懸濁させる。このような洗浄工程を更に２回繰り返す。この膜標本を−８０℃で貯蔵して、数カ月間保存する。この大脳皮質膜標本をＡ１ラジオリガンド結合試験で用いそして線条をＡ２Ａラジオリガンド結合試験で用いる。
細胞培養：
細胞培養物として、例えばヒトＡ１アデノシン受容体を発現するＣＨＯ細胞を用いる。
【０１６４】
栄養培地、トリプシンおよびＰＢＳ（燐酸塩緩衝食塩溶液）を３７℃の水浴で加熱する。集密度が約８０％から９０％のＣＨＯ細胞で覆われているフラスコから培地を吸引で除去する。ＰＢＳ緩衝液を加えた後、この後者を約５分間作用させる。次に、この緩衝液を吸引で除去した後、その細胞をトリプシン／ＥＤＴＡ溶液で覆う。約５分後、細胞をフラスコの下部から分離させる。前記トリプシン／ＥＤＴＡ溶液を少なくとも同じ量の培地で希釈する。この混合物を用いてフラスコの底を２から３回濯ぐことで、まだ粘着している細胞を分離させる。
【０１６５】
次に、この懸濁液を遠心分離用ガラスに入れて、１，０００ｇの遠心分離に２０℃で５分間かける。その上澄み液を吸引で除去した後、細胞のペレットを新鮮な培地で取り上げる。この細胞懸濁液を２０から２５と書き込まれていて培地で満たされている２０から２５個の細胞培養用フラスコの中に均一に分散させる。これらのフラスコを軽く振とうして前記細胞を充分に分散させた後、インキュベーター（３７℃、５％ＣＯ２）に入れて２から３日間インキュベートする。
【０１６６】
例えばＣＨＯ細胞の場合には下記の組成の培地を用いる：
下記の添加剤を添加しておいたＤＭＥＭ  Ｆ１２：
・  ウシ胎児血清を１０％
・  ペニシリン／ストレプトマイシンを１％（完成混合物のペニシリン量が１０，０００Ｕでストレプトマイシン量が１０ｍｇになるように）
・  Ｌ−グルタミン（ストック溶液：０．８５％ＮａＣｌ溶液中２００ミリモル）を２ミリモル
・  Ｇ４１８（硫酸ゲンチシン）を０．２ｍｇ／ｍｌ。
【０１６７】
Ａ２Ａアデノシン受容体を発現するＣＨＯ細胞の場合には、この上に記述したＡ１アデノシン受容体−ＣＨＯの培養に類似した様式で操作段階を実施する。培地にアデノシンデアミナーゼを０．５Ｕ／ｍｌ添加する。
【０１６８】
加うるに、Ａ２Ｂアデノシン受容体膜の標本を作成したが、ＨＥＫ細胞の完成した標本膜［これはヒトＡ２Ｂ受容体を高密度（蛋白質１ｍｇ当たり約４ピコモル）で発現する］を商業的に入手することができた（Ｒｅｃｅｐｔｏｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ＵＳＡ  ｖｉａ  Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，  Ｃｏｌｏｇｎｅ，  ドイツ）。
【０１６９】
Ａ３アデノシン受容体を発現するＣＨＯ細胞の場合にもまたＡ１アデノシン受容体−ＣＨＯの培養に類似した様式で操作段階を実施する。この上に記述した如き培地を用いる。
組換え型ヒト受容体の膜標本
Ａ１アデノシン受容体結合試験の目的でＣＨＯ細胞が発現する組換え型ヒトＡ１アデノシン受容体の標本を作成：
小型の組織培養皿に氷冷ＴＲＩＳ緩衝液（ｐＨ７．４；５０ミリモル）を２から３ｍｌ加える。ゴム製スクレーパー（ｓｃｒａｐｅｒ）を用いて細胞をプレートからかき落としてビーカーの中に集める。前記プレートを更に１から２ｍｌのＴＲＩＳ緩衝液（ｐＨ７．４；５０ミリモル）で濯いで、前記ビーカーに加える。この細胞懸濁液を遠心分離用管に分散させ、ホモジェナイザーを最も高いレベルで用いて均一にし（３から４秒間）た後、３５，０００ｇの遠心分離に４℃で２０分間かける。その上澄み液を廃棄した後、ガラス−テフロン製ホモジェナイザーを最も高いレベルで用いてペレットをＴＲＩＳ緩衝液（ｐＨ７．４；５０ミリモル）の中に３から４秒間再懸濁させる。この懸濁液を再び遠心分離にかける（４℃；３５，０００ｇ、２０分間）。この洗浄過程をもう１回繰り返す。得たペレットを可能な最小量のＴＲＩＳ緩衝液（ｐＨ７．４；５０ミリモル）に再懸濁させた後、一定分量（０．２５ｍｌおよび０．５ｍｌ）で送る。
【０１７０】
Ａ２Ａアデノシン受容体結合試験の目的でＣＨＯ細胞が発現する組換え型ヒトＡ２Ａアデノシン受容体の標本を作成：
組織培養皿に氷冷ＴＲＩＳ緩衝液（ｐＨ７．４；５０ミリモル）を２から３ｍｌ加える。ゴム製スクレーパーを用いて細胞をプレートからかき落としてビーカーの中に集める。前記プレートを更に１から２ｍｌのＴＲＩＳ緩衝液（ｐＨ７．４；５０ミリモル）で濯ぐ。この細胞懸濁液を遠心分離用管に分散させた後、３５，０００ｇの遠心分離に４℃で２０分間かける。その上澄み液を廃棄した後、ホモジェナイザーを最も高いレベルで用いてペレットをＴＲＩＳ緩衝液（ｐＨ７．４；５０ミリモル）の中に３から４秒間再懸濁させる。この懸濁液を再び遠心分離にかける。この洗浄過程をもう１回繰り返す。得たペレットを可能な最小量のＴＲＩＳ緩衝液（ｐＨ７．４；５０ミリモル）に再懸濁させた後、一定分量（０．２５ｍｌおよび０．５ｍｌ）で送る。
【０１７１】
前記組織を検定で用いる前にそれに再びＴＲＩＳ緩衝液（ｐＨ７．４；５０ミリモル）を用いた洗浄を４℃において３５，０００ｇで２０分間受けさせておく必要がある。そのようにすると非特異的結合の度合が低くなり得る。
【０１７２】
Ａ３アデノシン受容体結合研究の目的でＣＨＯ細胞が発現する組換え型ヒトＡ３アデノシン受容体の標本を作成：
組織培養皿に氷冷ＴＲＩＳ緩衝液（ｐＨ７．４；５０ミリモル）を２から３ｍｌ加える。ゴム製スクレーパーを用いて細胞をプレートからかき落としてビーカーの中に集める。前記プレートを更に１から２ｍｌのＴＲＩＳ緩衝液（ｐＨ７．４；５０ミリモル）で濯ぐ。この細胞懸濁液を遠心分離用管の中に入れて分散させた後、３５，０００ｇの遠心分離に４℃で２０分間かける。その上澄み液を廃棄した後、ホモジェナイザーを最も高いレベルで用いてペレットをＴＲＩＳ緩衝液（ｐＨ７．４；５０ミリモル）の中に３から４秒間再懸濁させる。この懸濁液を再び遠心分離にかける。この洗浄過程をもう１回繰り返す。得たペレットを可能な最小量のＴＲＩＳ緩衝液（ｐＨ７．４；５０ミリモル）に再懸濁させた後、一定分量（０．２５ｍｌおよび０．５ｍｌ）で送る。
ラジオリガンド−受容体結合研究
試験物質をＤＭＳＯに１０ミリモルになるように溶解させる。この検定ではＤＭＳＯの最終濃度をＡ１−およびＡ２Ａ−アデノシン受容体検定の場合には２．５％にしそしてＡ２Ｂ−およびＡ３−検定の場合には１−２％にする。前記ストック溶液を用いて試験物質の一連の希釈液を生じさせる。３桁の大きさから成る５から８種類の異なる試験濃度（例えば１ｎｍから１０００ｎｍ）を用いる。
［３Ｈ］ＣＣＰＡを用いたＡ１アデノシン受容体とラジオリガンドの結合研究：
全体積が１ｍｌの中にＤＭＳＯを２５μｌ（全結合）または２−クロロアデノシンを２５μｌ（ＤＭＳＯ中４００μモル、非特異的結合）またはＤＭＳＯに入っている試験物質を２５μｌ入れることに加えてＴＲＩＳ緩衝液（５０ミリモル、ｐＨ７．４）を７７５μｌ、［３Ｈ］ＣＣＰＡを１００μｌ（最終濃度：０．５ナノモル；ＫＤ値：０．２ナノモル）およびラット脳ホモジネート（ｈｏｍｏｇｅｎａｔｅ）（７０μｇ／ｍｌ）または膜標本［組換え型ヒトＡ１アデノシン受容体を発現するＣＨＯ細胞（３０−５０ｇ／ｍｌ）を５０ミリモルのＴＲＩＳ緩衝液（ｐＨ７．４）に入れて０．１２  Ｉ．Ｕ．のＡＤＡと混合することで構成させた］を１００μｌ含有させる。この混合物を２３℃の振動型水浴に入れて９０分間インキュベートする。次に、Ｂｒａｎｄｅｌ細胞収穫器（ｃｅｌｌ−ｈａｒｖｅｓｔｅｒ）を用いてそれを濾別した後、氷冷ＴＲＩＳ緩衝液［５０ミリモル、ｐＨ７．４（３ｍｌ）］で更に２回洗浄する。フィルター板をシンチレーションびんに移し、２．５ｍｌのＵｌｔｉｍａ  Ｇｏｌｄ  Ｓｃｉｎｔｉｌｌａｔｉｏｎカクテル（ｃｏｃｋｔａｉｌ）を加えて少なくとも６時間インキュベートした後、それらをシンチレーションカウンター（ｓｃｉｎｔｉｌｌａｔｉｏｎ  ｃｏｕｎｔｅｒ）で測定する。
Ａ２Ａアデノシン受容体に関する［３Ｈ］ＭＳＸ−２と受容体の結合検定：
ＤＭＳＯ、ＮＥＣＡ（８００μモル）または試験物質希釈液を２５μｌ
ＴＲＩＳ緩衝液（調製に関しては上を参照）を７７５μｌ
［３Ｈ］ＭＳＸ−２を１００μｌ（最終濃度：１ナノモル；ＫＤ値：８ナノモル）
ラット線条膜標本またはＣＨＯ細胞標本［これはヒトＡ２Ａ受容体を発現し、０．１２ＩＥのアデノシンデアミナーゼ（蛋白質濃度：２５−７５μｇ／ｍｌ）と一緒にインキュベートした］を１００μｌ、
最終体積：１０００μｌ
この上に挙げた量および溶液を考慮に入れて、検定を［３Ｈ］ＣＣＰＡと受容体の結合検定の指示に従って実施する。２３℃の振動型水浴の中で行うインキュベーション時間を３０分にする。ガラス繊維製フィルターを使用３０分前に０．５％のＰＥＩ溶液に入れておく。
ＨＥＫ細胞が発現する組換え型Ａ２Ｂアデノシン受容体に関する［３Ｈ］ＺＭ２４１３８５と受容体の結合検定：
ＤＭＳＯ、ＮＥＣＡ（１ミリモル）または試験物質希釈液を１０μｌ
１０ミリモルのＨＥＰＥＳ緩衝液（ｐＨ７．４）（調製に関しては上を参照）を７９０μｌ
［３Ｈ］ＺＭ２４１３８５を１００μｌ（最終濃度：５ナノモル；ＫＤ値：３３ナノモル）
膜標本［０．１２ＩＥのアデノシンデアミナーゼ（蛋白質濃度：４０μｇ／ｍｌ）と一緒に少なくとも１５分間インキュベートした］を１００μｌ、
最終体積：１０００μｌ
前記膜を解凍させた後、この上に挙げた量および溶液を考慮に入れて、以下に示す指示に従い、［３Ｈ］ＣＣＰＡと受容体の結合検定を実施する。この検定では希釈率を１：１００にする（ＤＭＳＯの濃度を高くすると不利な影響が生じることからＤＭＳＯの含有量を１％にまで低くする）。２３℃の振動型水浴の中で行うインキュベーション時間を３０分にする。ガラス製フィルターを使用３０分前に０．５％のＰＥＩ溶液に入れておく。
ＣＨＯ細胞が発現する組換え型Ａ３アデノシン受容体に関する［３Ｈ］ＰＳＢ−１１と受容体の結合検定：
ＤＭＳＯ、Ｒ−ＰＩＡ（１００μモル）または試験物質希釈液を１０μｌ
５０ミリモルのＴＲＩＳ緩衝液（ｐＨ７．４）（調製に関しては上を参照）を３５０μｌ
［３Ｈ］ＰＳＢ−１１を４０μｌ（最終濃度：０．５ナノモル；ＫＤ値：２ナノモル）
膜標本［０．１２ＩＥのアデノシンデアミナーゼ（蛋白質濃度：１００μｇ／ｍｌ）と一緒に少なくとも１５分間インキュベートした］を１００μｌ、
最終体積：５００μｌ
この上に挙げた量および溶液を考慮に入れて、受容体結合検定の下の指示に従い、［３Ｈ］ＣＣＰＡを用いた検定を実施する。この検定では希釈率を１：５０にする。ここでは、ＤＭＳＯの含有量を２％にする。２３℃の振動型水浴の中で行うインキュベーションの持続時間を４５分間にする。
［３５Ｓ］ＧＴＰγ検定：
ＤＭＳＯ、ＧＴＰγＳまたは試験物質希釈液を１０μｌ
［３５Ｓ］ＧＴＰγＳ検定用５０ミリモルのＴＲＩＳ緩衝液（ｐＨ７．４）（上を参照）を１５０μｌ
［３５Ｓ］ＧＴＰγＳを２０μｌ（最終濃度：０．１から０．５ナノモル；〜１２５０Ｃｉ／ミリモルに相当）
膜標本［０．１２ＩＥのアデノシンデアミナーゼ（蛋白質濃度：７５μｇ／ｍｌ）と一緒にインキュベートした］を２０μｌ、
最終体積：２００μｌ
最初に試験物質がＤＭＳＯに入っている溶液を所望濃度になるように調製する。曲線を１０の６から７乗の濃度範囲の７から８点の測定点（各場合とも三重に測定）で構成させる。ラジオリガンド［３５Ｓ］ＧＴＰγＳと膜標本（アデノシンデアミナーゼと混合しておいた）に５０ミリモルのＴＲＩＳ緩衝液（ｐＨ７．４）を５０ミリモルを加えることで、２００μｌの最終体積を達成する。２５℃の振動型水浴を用いたインキュベーションを４５分間実施する。その後、最初に冷洗浄用緩衝液（５０ミリモルのＴＲＩＳ、５ミリモルのＭｇＣｌ２ｘ２Ｈ２Ｏ、ｐＨ７．４）を２ｍｌ用いて反応を停止させた後、収穫器を用いて、その懸濁液をＧＦ／Ｂフィルターで濾過する。反応体が付着しているガラスを各々２ｍｌのカラム洗浄用緩衝液で２回濯ぐ。パンチトアウトプレート（ｐｕｎｃｈｅｄ−ｏｕｔ  ｐｌａｔｅ）を用いて前記フィルター板をシンチレーションびんに移し、それを２ｍｌのシンチレーションカクテルで満たす。前記びんを充分に振とうすることで濾紙を完全に湿らせる。インキュベーションを少なくとも３時間行った後、ＬＳカウンターを用いた２分間の測定で放射能を測定する。各場合とも曲線を３回再現させる。
【０１７３】
この検定では試験物質の溶液を１：２０に希釈し、かつこの検定ではＤＭＳＯの含有量を５％（体積／体積）にする。
ラジオリガンド結合研究の評価
独立して行った３回の実験の平均値を計算する。Ｃｈｅｎｇ−Ｐｒｕｓｏｆｆ式を用いてラジオリガンドの濃度およびＫＤ値からＩＣ５０およびＫＩ値を得る。計算では、ＧｒａｐｈＰａｄＰｒｉｓｍ（商標）、Ｖｅｒｓｉｏｎ  ３．０（ＧｒａｐｈＰａｄ、サンディエゴ、カリフォルニア、米国）プログラムを用いた。
【０１７４】
【表１５】
2005523244.tif 000054
【０１７５】
【表１６】
2005523244.tif 000055
【０１７６】
【表１７】
2005523244.tif 000056
【０１７７】
投薬および投与形態
本発明に従う一般式（１）または（２）で表される化合物は患者に経口、例えば錠剤、被覆錠剤、カプセルおよび飲料用溶液などでか、直腸、例えば座薬などでか、吸入、例えば濃度およびサイズ分布が限定されている粒子のエーロゾルの吸入などでか、経皮、例えば活性材料含有パッチ、擦り込み用溶液、ゲルなどでか、経粘膜、例えば口および鼻の粘膜による吸収の意味の経粘膜（口の空洞部の中で活性材料が唾液に入っている溶液によって放出されるか、或はスプレー溶液などで鼻の中に導入してもよい）でか、移植コンデンサ（ｉｍｐｌａｎｔｅｄ  ｃｏｎｄｅｎｓｅｒｓ）（これは例えば受動的浸透でか或はミニポンプなどで活性材料を制御様式で放出）でか、或は静脈内、筋肉内または皮下注射および大脳室内方法などで投与可能である。
【０１７８】
本活性材料を投与する時の典型的な投薬量は用いる化合物の種類に依存するが、平均的な成人に静脈内投与する場合には０．５−１００ｍｇ（好適には１−５０ｍｇ）の範囲であり、経口投与する場合には１−１０００ｍｇ（好適には５−５００ｍｇ）の範囲であり、そして経皮投与する場合には０．５−５０ｍｇ（好適には１−２０ｍｇ）の範囲である。
【０１７９】
本発明に従う一般式（１）または（２）で表される化合物は、多様な投与スペクトルを有することから、腎臓領域の病気、例えば急性腎不全、腎炎、肝腎症候群などの治療、心臓の治療、好適には心臓不規則、虚血、心筋梗塞または狭心症の治療、中枢神経系（ＣＮＳ）の治療、好適には痴呆、アルツハイマー病、不安障害、テンカン、パーキンソン病、発作、鬱病、アヘン禁断症状または昏睡状態の治療、または肺の治療、好適には呼吸病、例えば喘息、気管支炎および膵臓線維症などの治療、そして高血圧、アレルギー性皮膚病、例えばじんま疹などまたは炎症の治療用薬剤の製造で用いるに適する。
【０１８０】
加うるに、本発明に従う化合物（１）または（２）を用いて免疫刺激剤ばかりでなく保護剤（これは肺移植で用いられる）を製造することも可能である。
【国際調査報告】
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