【手続補正書】
【提出日】令和2年3月23日(2020.3.23)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
SEQ ID NO：1、2、および3に示す配列をそれぞれ有するCDR1、CDR2、およびCDR3を有する重鎖可変（VH）領域と、
SEQ ID NO：4に示す配列、配列GTN、およびSEQ ID NO：5またはSEQ ID NO：60に示す配列をそれぞれ有するCDR1、CDR2、およびCDR3を有する軽鎖可変（VL）領域と
を含むヒト化結合領域を含み、
SEQ ID NO:10のラムダ軽鎖中の位置R23およびA35に対応する位置のアミノ酸が、それぞれRおよびAではない、
ヒトCD3に結合する抗体。
【請求項２】
SEQ ID NO：6に示す配列を有する重鎖可変(VH)領域およびSEQ ID NO：10に示す配列を有する軽鎖可変（VL）領域を含むヒト化結合領域を含み、
SEQ ID NO:10の位置R23およびA35のアミノ酸が、それぞれRおよびAではない、
請求項1記載の抗体。
【請求項３】
SEQ ID NO:10のラムダ軽鎖中の位置R23およびA35に対応する位置のアミノ酸が、それぞれAおよびPである、請求項1または2記載の抗体。
【請求項４】
全長抗体である、請求項1〜3のいずれか一項記載の抗体。
【請求項５】
第1および第2免疫グロブリン重鎖を含むFc領域を含む、請求項1〜4のいずれか一項記載の抗体。
【請求項６】
第1および第2重鎖が、IgG1、IgG2、IgG3、およびIgG4からなる群より選択されるアイソタイプのものである、請求項1〜5のいずれか一項記載の抗体。
【請求項７】
(a)抗体へのC1qの結合が野生型抗体と比較して少なくとも70％、少なくとも80％、少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも97％、もしくは100％低減するように修飾されたFc領域を含み、
C1q結合がELISAによって決定されるか、
(b)野生型抗体と比較して少なくとも50％、少なくとも60％、少なくとも70％、少なくとも80％、少なくとも90％、少なくとも99％、もしくは100％低減したFc媒介T細胞増殖を前記抗体が媒介するように修飾されたFc領域を含み、
該T細胞増殖が末梢血単核球（PBMC）に基づく機能アッセイにおいて測定されるか、または
(c)野生型抗体と比較した場合に前記抗体がFc媒介CD69発現を少なくとも50％、少なくとも60％、少なくとも70％、少なくとも80％、少なくとも90％、少なくとも99％、もしくは100％低減させるように修飾されたFc領域を含み、
Fc媒介CD69発現がPBMCに基づく機能アッセイにおいて決定される、
請求項1〜6のいずれか一項記載の抗体。
【請求項８】
第1および第2免疫グロブリン重鎖を含み、
該第1および該第2免疫グロブリン重鎖の少なくとも一方において、ヒトIgG1重鎖中の位置L234、L235、D265、N297、およびP331に対応する位置にある1つまたは複数のアミノ酸が、それぞれL、L、D、N、およびPではない、
請求項1〜7のいずれか一項記載の抗体。
【請求項９】
(a)第1および第2重鎖の少なくとも一方において、ヒトIgG1重鎖中の位置D265に対応する位置のアミノ酸がDではない、
(b)第1および第2重鎖の少なくとも一方において、ヒトIgG1重鎖中の位置N297に対応する位置のアミノ酸がNではない、
(c)第1および第2重鎖の少なくとも一方において、ヒトIgG1重鎖中の位置L234およびL235に対応する位置のアミノ酸がそれぞれLおよびLではない、
(d)第1および第2重鎖の少なくとも一方において、ヒトIgG1重鎖中の位置L234およびL235に対応する位置のアミノ酸が、それぞれFおよびEである、
(e)第1および第2重鎖の少なくとも一方において、少なくともヒトIgG1重鎖中の位置L234およびL235に対応する位置のアミノ酸がそれぞれAおよびAである、
(f)第1および第2重鎖の少なくとも一方において、ヒトIgG1重鎖中の位置L234、L235、およびD265に対応する位置のアミノ酸がそれぞれL、L、およびDではない、
(g)第1および第2重鎖の少なくとも一方において、ヒトIgG1重鎖中の位置L234、L235、およびD265に対応する位置のアミノ酸が、それぞれF、E、およびAである、
(h)第1および第2重鎖の少なくとも一方において、ヒトIgG1重鎖中の位置L234、L235、およびD265に対応する位置のアミノ酸が、それぞれA、A、およびAである、または
(i)第1および第2重鎖の少なくとも一方において、ヒトIgG1重鎖中の位置L234、L235、D265、N297、およびP331に対応する位置のアミノ酸が、それぞれF、E、A、Q、およびSである、
請求項8記載の抗体。
【請求項１０】
軽鎖（LC）を含み、SEQ ID NO:10のラムダ軽鎖中の位置T41に対応する位置のアミノ酸がTではない、請求項1〜9のいずれか一項記載の抗体。
【請求項１１】
SEQ ID NO:10のラムダ軽鎖中の位置T41に対応する位置のアミノ酸がKである、請求項10記載の抗体。
【請求項１２】
SEQ ID NO:10のラムダ軽鎖中の位置F10に対応する位置のアミノ酸がFではなく、かつ、SEQ ID NO:10のラムダ軽鎖中の位置T41、K55、およびL97に対応するアミノ酸の位置の1つまたは複数がそれぞれT、K、およびLではない、請求項1〜10のいずれか一項記載の抗体。
【請求項１３】
SEQ ID NO:10のラムダ軽鎖中の位置F10、T41、K55、およびL97に対応する位置のアミノ酸がそれぞれF、T、K、およびLではない、請求項12記載の抗体。
【請求項１４】
SEQ ID NO:10のラムダ軽鎖中の位置F10、T41、K55、およびL97に対応する位置のアミノ酸がそれぞれL、K、N、およびHである、請求項13記載の抗体。
【請求項１５】
SEQ ID NO:10のラムダ軽鎖中の位置F10、R47、D71、A82、D83、S86、I87、およびF89に対応する位置のアミノ酸がそれぞれF、R、D、A、D、S、I、およびFではない、請求項1〜14のいずれか一項記載の抗体。
【請求項１６】
SEQ ID NO:10のラムダ軽鎖中の位置F10、R47、D71、A82、D83、S86、I87、およびF89に対応する位置のアミノ酸がそれぞれL、T、G、P、E、A、E、およびYである、請求項15記載の抗体。
【請求項１７】
（i）SEQ ID NO:10のラムダ軽鎖中の位置F10に対応する位置のアミノ酸がFではないか、または
（ii）SEQ ID NO:10のラムダ軽鎖中の位置K55に対応する位置のアミノ酸がKではないか、または
（iii）SEQ ID NO:10のラムダ軽鎖中の位置F10に対応する位置のアミノ酸がFではなく、かつ、SEQ ID NO:10のラムダ軽鎖中の位置K55に対応する位置のアミノ酸がKではない、
請求項1〜16のいずれか一項記載の抗体。
【請求項１８】
（i）SEQ ID NO:10のラムダ軽鎖中の位置F10に対応する位置のアミノ酸がLであるか、または
（ii）SEQ ID NO:10のラムダ軽鎖中の位置K55に対応する位置のアミノ酸がNであるか、または
（iii）SEQ ID NO:10のラムダ軽鎖中の位置F10に対応する位置のアミノ酸がLであり、かつ、SEQ ID NO:10のラムダ軽鎖中の位置K55に対応する位置のアミノ酸がNである、
請求項17記載の抗体。
【請求項１９】
定常重鎖（HC）および定常軽鎖（LC）を含み、
SEQ ID NO:15のヒトIgG1重鎖中の位置L234、L235、およびD265に対応する位置がそれぞれF、E、およびAであり、かつ
SEQ ID NO:15のヒトIgG1重鎖中のF405に対応する位置がLであり、かつ、
（i）SEQ ID NO:10のラムダ軽鎖中の位置F10、T41、K55、およびL97に対応する位置がそれぞれL、K、N、およびHであるか、または
（ii）SEQ ID NO:10のラムダ軽鎖中の位置T41に対応する位置がKである、
請求項1〜18のいずれか一項記載の抗体。
【請求項２０】
請求項1〜19のいずれか一項記載の抗体の第1結合領域と、該第1抗原結合領域とは異なるターゲットに結合する第2結合領域とを含む、二重特異性抗体。
【請求項２１】
第1および第2重鎖を含む、請求項20記載の二重特異性抗体。
【請求項２２】
（a）二重特異性抗体が、請求項7に従って修飾されたFc領域を含むか、または
（b）第1および第2重鎖の少なくとも一方が、請求項8〜19のいずれか一項に記載するように修飾された1つまたは複数のアミノ酸を含む、
請求項21記載の二重特異性抗体。
【請求項２３】
第1および第2重鎖のそれぞれが、少なくともヒンジ領域、CH2およびCH3領域を含み、
該第1重鎖において、ヒトIgG1重鎖中のT366、L368、K370、D399、F405、Y407、およびK409からなる群より選択される位置に対応する位置のアミノ酸の少なくとも1つが置換されており、
該第2重鎖において、ヒトIgG1重鎖中のT366、L368、K370、D399、F405、Y407、およびK409からなる群より選択される位置に対応する位置のアミノ酸の少なくとも1つが置換されており、
該第1および該第2重鎖が同じ位置では置換されていない、
請求項20〜22のいずれか一項記載の二重特異性抗体。
【請求項２４】
ヒトIgG1重鎖中のF405に対応する位置のアミノ酸が第1重鎖ではLであり、かつヒトIgG1重鎖中のK409に対応する位置のアミノ酸が第2重鎖ではRであるか、またはその逆である、請求項23記載の二重特異性抗体。
【請求項２５】
第1結合領域が請求項1または2に従い、第2結合領域が該第1結合領域とは異なるターゲットに結合する、請求項20〜24のいずれか一項記載の二重特異性抗体。
【請求項２６】
第2結合領域がヒトHER2またはヒトCD20に結合する、請求項25記載の二重特異性抗体。
【請求項２７】
第2結合領域がヒトCD20に結合する、請求項26記載の二重特異性抗体。
【請求項２８】
ヒトCD20に結合する第2結合領域が、
（i）SEQ ID NO:34のVH CDR1領域、SEQ ID NO:35のVH CDR2領域、SEQ ID NO:36のVH CDR3領域、SEQ ID NO:37のVL CDR1領域、DASのVL CDR2領域、およびSEQ ID NO:38のVL CDR3領域、
（ii）SEQ ID NO:41のVH CDR1領域、SEQ ID NO:42のVH CDR2領域、SEQ ID NO:43のVH CDR3領域、SEQ ID NO:44のVL CDR1領域、DASのVL CDR2領域、およびSEQ ID NO:45のVL CDR3領域、
（iii）SEQ ID NO:48のVH CDR1領域、SEQ ID NO:49のVH CDR2領域、SEQ ID NO:50のVH CDR3領域、SEQ ID NO:51のVL CDR1領域、DASのVL CDR2領域、およびSEQ ID NO:52のVL CDR3領域、または
（iv）SEQ ID NO:55のVH CDR1領域、SEQ ID NO:56のVH CDR2領域、SEQ ID NO:57のVH CDR3領域、SEQ ID NO:58のVL CDR1領域、DASのVL CDR2領域、およびSEQ ID NO:59のVL CDR3領域
を含む、請求項27記載の二重特異性抗体。
【請求項２９】
ヒトCD20に結合する第2結合領域が、
（i）SEQ ID NO:29に示すアミノ酸配列に対して少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも97％、もしくは少なくとも99％のアミノ酸配列同一性を有するVH配列、および、SEQ ID NO:30に示すアミノ酸配列に対して少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも97％、もしくは少なくとも99％のアミノ酸配列同一性を有するVL配列、
（ii）SEQ ID NO:39に示すアミノ酸配列に対して少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも97％、もしくは少なくとも99％のアミノ酸配列同一性を有するVH配列、および、SEQ ID NO:40に示すアミノ酸配列に対して少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも97％、もしくは少なくとも99％のアミノ酸配列同一性を有するVL配列、
（iii）SEQ ID NO:46に示すアミノ酸配列に対して少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも97％、もしくは少なくとも99％のアミノ酸配列同一性を有するVH配列、および、SEQ ID NO:47に示すアミノ酸配列に対して少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも97％、もしくは少なくとも99％のアミノ酸配列同一性を有するVL配列、または
（iv）SEQ ID NO:53に示すアミノ酸配列に対して少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも97％、もしくは少なくとも99％のアミノ酸配列同一性を有するVH配列、および、SEQ ID NO:54に示すアミノ酸配列に対して少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも97％、もしくは少なくとも99％のアミノ酸配列同一性を有するVL配列
を含む、請求項27または28記載の二重特異性抗体。
【請求項３０】
ヒトCD20に結合する第2結合領域が、
（i）SEQ ID NO:29のVH配列およびSEQ ID NO:30のVL配列、
（ii）SEQ ID NO:39のVH配列およびSEQ ID NO:40のVL配列、
（iii）SEQ ID NO:46のVH配列およびSEQ ID NO:47のVL配列、または
（iv）SEQ ID NO:53のVH配列およびSEQ ID NO:54のVL配列
を含む、請求項29記載の二重特異性抗体。
【請求項３１】
表1に示す1つまたは複数のアミノ酸配列をコードする、核酸コンストラクト。
【請求項３２】
（i）請求項1〜30のいずれか一項記載の抗体の重鎖配列をコードする核酸配列、
（ii）請求項1〜30のいずれか一項記載の抗体の軽鎖配列をコードする核酸配列、または
（iii）（i）と（ii）の両方
を含む発現ベクター。
【請求項３３】
請求項32記載の発現ベクターを含む、宿主細胞。
【請求項３４】
組換え真核宿主細胞、組換え原核宿主細胞、または組換え微生物宿主細胞である、請求項33記載の宿主細胞。
【請求項３５】
請求項1〜19のいずれか一項記載の抗体または請求項20〜30のいずれか一項記載の二重特異性抗体を含む、組成物。
【請求項３６】
請求項1〜19のいずれか一項記載の抗体または請求項20〜30のいずれか一項記載の二重特異性抗体と、薬学的に許容される担体とを含む、薬学的組成物。
【請求項３７】
医薬として使用するための、請求項1〜19のいずれか一項記載の抗体、請求項20〜30のいずれか一項記載の二重特異性抗体、請求項35記載の組成物、または請求項36記載の薬学的組成物。
【請求項３８】
疾患の処置に使用するための、請求項1〜19のいずれか一項記載の抗体、請求項20〜30のいずれか一項記載の二重特異性抗体、請求項35記載の組成物、または請求項36記載の薬学的組成物。
【請求項３９】
疾患が、がん、感染性疾患、または自己免疫疾患である、請求項38記載の抗体、二重特異性抗体、組成物、または薬学的組成物。
【請求項４０】
対象に投与された、請求項1〜19のいずれか一項記載の抗体、請求項20〜30のいずれか一項記載の二重特異性抗体、請求項35記載の組成物、または請求項36記載の薬学的組成物とCD3発現細胞との結合を検出する工程を含み、
任意で該抗体または該二重特異性抗体が検出可能な作用物質で標識されている、
CD3発現細胞の関与または蓄積を特徴とする疾患について検査するための方法。
【請求項４１】
（a）請求項33または34記載の宿主細胞を培養する工程、および
（b）培養培地から抗体を精製する工程
を含む、請求項1〜19のいずれか一項記載の抗体または請求項20〜30のいずれか一項記載の二重特異性抗体を生産するための方法。
【請求項４２】
請求項1〜19のいずれか一項記載の抗体または請求項20〜30のいずれか一項記載の二重特異性抗体を含む、診断用組成物。
【請求項４３】
（a）試料を、請求項1〜19のいずれか一項記載の抗体または請求項20〜30のいずれか一項記載の二重特異性抗体と、該抗体または二重特異性抗体とCD3との複合体の形成が可能な条件下で接触させる工程、および
（b）複合体が形成されたかどうかを解析する工程
を含む、試料中のCD3抗原の存在またはCD3を発現する細胞の存在を検出するための方法。
【請求項４４】
（i）請求項1〜19のいずれか一項記載の抗体または請求項20〜30のいずれか一項記載の二重特異性抗体、および
（ii）キットの使用説明書
を含む、試料中のCD3抗原の存在またはCD3を発現する細胞の存在を検出するためのキット。
【請求項４５】
請求項1〜19のいずれか一項記載の抗体に結合する抗イディオタイプ抗体。