(57)【要約】  αリポ酸Ｒ体もしくはαリポ酸Ｓ体、ジヒドロαリポ酸Ｒ体もしくはジヒドロαリポ酸Ｓ体、またはこれらのアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩を複合化したαリポ酸複合体、または該αリポ酸複合体の製造方法の提供。  αリポ酸Ｒ体もしくはαリポ酸Ｓ体、ジヒドロαリポ酸Ｒ体もしくはジヒドロαリポ酸Ｓ体、またはこれらのアルカリ金属塩またはアルカリ土類金属塩が溶解した水溶液にシクロデキストリンを加えること等により、αリポ酸Ｒ体もしくはαリポ酸Ｓ体、ジヒドロαリポ酸Ｒ体もしくはジヒドロαリポ酸Ｓ体、またはこれらのアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩を高確率で複合化することで、熱や人工胃酸溶液に安定で高純度なαリポ酸複合体を製造できる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
αリポ酸Ｒ体もしくはαリポ酸Ｓ体、またはジヒドロαリポ酸Ｒ体もしくはジヒドロαリポ酸Ｓ体を６．７％以上含有するαリポ酸複合体であって、αリポ酸Ｒ体もしくはαリポ酸Ｓ体、ジヒドロαリポ酸Ｒ体もしくはジヒドロαリポ酸Ｓ体、またはこれらのアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩が複合化されたαリポ酸複合体。
【請求項２】
αリポ酸Ｒ体もしくはαリポ酸Ｓ体、またはジヒドロαリポ酸Ｒ体もしくはジヒドロαリポ酸Ｓ体を１０％以上含有するαリポ酸複合体であって、αリポ酸Ｒ体もしくはαリポ酸Ｓ体、ジヒドロαリポ酸Ｒ体もしくはジヒドロαリポ酸Ｓ体、またはこれらのアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩が複合化されたαリポ酸複合体。
【請求項３】
次の１）および２）の工程を含む請求項１または２に記載のαリポ酸複合体の製造方法。
１）αリポ酸Ｒ体のアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩、またはαリポ酸Ｓ体のアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩を水に溶解させ、水溶液を得る工程
２）上記１）の水溶液を冷却して一定の温度に調整した後、シクロデキストリンを加えて、αリポ酸Ｒ体のアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩のシクロデキストリン複合体の溶解液もしくは懸濁液、またはαリポ酸Ｓ体のアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩のシクロデキストリン複合体の溶解液もしくは懸濁液を得る工程
【請求項４】
請求項３に記載のαリポ酸複合体の製造方法であって、さらに次の工程を含むαリポ酸複合体の製造方法。
３）上記２）の溶解液または懸濁液をそのまま、またはフィルター濾過して得た残留物を乾燥する工程
【請求項５】
請求項３に記載のαリポ酸複合体の製造方法であって、さらに次の工程を含むαリポ酸複合体の製造方法。
３）上記２）の溶解液または懸濁液をｐＨ４．０以下に調整し、攪拌し、懸濁液を得る工程
４）上記３）の懸濁液をそのまま、またはフィルター濾過して得た残留物を乾燥する工程
【請求項６】
次の１）および２）の工程を含む請求項１または２に記載のαリポ酸複合体の製造方法。
１）アルカリ金属塩またはアルカリ土類金属塩を滴下しながらαリポ酸Ｒ体またはαリポ酸Ｓ体を水に溶解させる工程
２）上記１）の水溶液を冷却して一定の温度に調整した後、シクロデキストリンを加えて、αリポ酸Ｒ体のアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩のシクロデキストリン複合体の溶解液もしくは懸濁液、またはαリポ酸Ｓ体のアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩のシクロデキストリン複合体の溶解液もしくは懸濁液を得る工程
【請求項７】
請求項６に記載のαリポ酸複合体の製造方法であって、さらに次の工程を含むαリポ酸複合体の製造方法。
３）上記２）の溶解液または懸濁液をそのまま、またはフィルター濾過して得た残留物を乾燥する工程
【請求項８】
請求項６に記載のαリポ酸複合体の製造方法であって、さらに次の工程を含むαリポ酸複合体の製造方法。
３）上記２）の溶解液または懸濁液をｐＨ４以下に調整し、懸濁液を得る工程
４）上記３）の懸濁液をそのまま、またはフィルター濾過して得た残留物を乾燥する工程
【請求項９】
次の１）〜３）の工程を含む請求項１または２に記載のαリポ酸複合体の製造方法。
１）シクロデキストリンを水に溶解させる工程
２）上記１）の溶解液または懸濁液を冷却して一定の温度に調整した後、ジヒドロαリポ酸Ｒ体またはジヒドロαリポ酸Ｓ体を加えて、ジヒドロαリポ酸Ｒ体またはジヒドロαリポ酸Ｓ体のシクロデキストリン複合体の懸濁液を得る工程
３）上記２）の懸濁液をそのまま、またはフィルター濾過して得た残留物を乾燥する工程
【請求項１０】
次の１）〜４）の工程を含む請求項１または２に記載のαリポ酸複合体の製造方法。
１）シクロデキストリンを水に溶解させる工程
２）上記１）の溶解液または懸濁液を冷却して一定の温度に調整した後、ジヒドロαリポ酸Ｒ体またはジヒドロαリポ酸Ｓ体を加えて、アルカリ金属塩またはアルカリ土類金属塩を滴下しながらジヒドロαリポ酸Ｒ体またはジヒドロαリポ酸Ｓ体を溶解させる工程
３）上記２）の溶解液または懸濁液にｐＨ４．０以下に調整し、攪拌し、懸濁液を得る工程
４）上記３）の懸濁液をそのまま、またはフィルター濾過して得た残留物を乾燥する工程
【請求項１１】
請求項３〜１０のいずれかに記載のαリポ酸複合体の製造方法であって、２）の工程における温度が４０℃以下であるαリポ酸複合体の製造方法。
【請求項１２】
請求項３〜１０のいずれかに記載のαリポ酸複合体の製造方法であって、αリポ酸Ｒ体もしくはαリポ酸Ｓ体、またはジヒドロαリポ酸Ｒ体もしくはジヒドロαリポ酸Ｓ体における、これらのアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩が、αリポ酸Ｒ体ナトリウム塩、αリポ酸Ｓ体ナトリウム塩、αリポ酸Ｒ体カリウム塩、αリポ酸Ｓ体カリウム塩、αリポ酸Ｒ体カルシウム塩、αリポ酸Ｓ体カルシウム塩、αリポ酸Ｒ体マグネシウム塩もしくはαリポ酸Ｓ体マグネシウム塩またはジヒドロαリポ酸Ｒ体ナトリウム塩、ジヒドロαリポ酸Ｓ体ナトリウム塩、ジヒドロαリポ酸Ｒ体カリウム塩、ジヒドロαリポ酸Ｓ体カリウム塩、ジヒドロαリポ酸Ｒ体カルシウム塩、ジヒドロαリポ酸Ｓ体カルシウム塩、ジヒドロαリポ酸Ｒ体マグネシウム塩もしくはジヒドロαリポ酸Ｓ体マグネシウム塩のいずれか一種以上であるαリポ酸複合体の製造方法。
【請求項１３】
請求項３〜１０のいずれかに記載のαリポ酸複合体の製造方法であって、シクロデキストリンがαシクロデキストリン、βシクロデキストリン、γシクロデキストリン、ヒドロキシプロピルβシクロデキストリン、スルフォブチルエーテルβシクロデキストリンまたは分岐鎖シクロデキストリンのいずれか一種以上であるαリポ酸複合体の製造方法。
【請求項１４】
請求項３〜１０のいずれかに記載のαリポ酸複合体の製造方法であって、１．０モルのαリポ酸Ｒ体もしくはαリポ酸Ｓ体、ジヒドロαリポ酸Ｒ体もしくはジヒドロαリポ酸Ｓ体、またはこれらのアルカリ金属塩またはアルカリ土類金属塩に対するシクロデキストリンのモル比が０．５モル〜１．４モルであるαリポ酸複合体の製造方法。
【請求項１５】
請求項３〜１０のいずれかに記載の製造方法によって製造され得たαリポ酸複合体。
【請求項１６】
請求項１、２または１５のいずれかに記載のαリポ酸複合体を有効成分として含む医薬品。
【請求項１７】
請求項１、２または１５のいずれかに記載のαリポ酸複合体を含む食品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はαリポ酸複合体および該αリポ酸複合体の製造方法に関する。さらに詳しくは、αリポ酸Ｒ体もしくはαリポ酸Ｓ体、ジヒドロαリポ酸Ｒ体もしくはジヒドロαリポ酸Ｓ体、またはこれらのアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩を高確率で複合化（包接化）して得られる高純度なαリポ酸複合体、およびαリポ酸複合体の製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
αリポ酸（チオクト酸）は、生体のエネルギー産生系において、ミトコンドリア酵素の補酵素として機能する物質である。αリポ酸は、１，２−ジチオラン環のＣ３位炭素原子にキラル中心があり、光学活性炭素を有する。天然物として、または生体内においては、αリポ酸Ｒ体のみが存在し、このαリポ酸Ｒ体は動物性食肉の肝臓、腎臓、心臓中に、特に多く存在している。また、このαリポ酸Ｒ体はホウレンソウ、トマトまたはブロッコリー等の野菜類においても低濃度であるが存在している。【０００３】
αリポ酸は、近年、医薬品や健康食品等の有効成分として利用されており、ヨーロッパでは欧州薬局方に収載されている。糖尿病治療薬もしくは糖尿病性ニューロパシーに関連した合併症の治療薬としてαリポ酸が使用されている。また、日本では、注射剤としてαリポ酸ナトリウム塩が日本薬局方に収載されている。
しかし、これらに利用されているαリポ酸は、工業的に容易かつ安価に製造できる、αリポ酸Ｒ体とαリポ酸Ｓ体を等量ずつ含むαリポ酸ラセミ体である場合がほとんどである。しかし、ヒトの体内において、有効に作用するのはαリポ酸Ｒ体のみである。そのため、αリポ酸ラセミ体を利用した薬剤等においては十分な効果を得るために多量の服用が必要となる。例えばドイツにおいては、一日当たり６００ｍｇと多量のαリポ酸ラセミ体を服用する必要があるとしている。薬剤を多量に摂取することは患者において負担が大きい。そこで、このような患者の負担を減らし、ＱＯＬ（Ｑｕａｌｉｔｙ  ｏｆ  ｌｉｆｅ）を向上させるために、αリポ酸Ｒ体を利用して、αリポ酸ラセミ体を利用する場合の半分の量で、同じ効果を得ることが望まれている。
血糖降下における、αリポ酸Ｒ体の作用機作は細胞中のＧＬＵＴ−４（４型グルコース輸送体）を発現し、インスリンの受容体を増加することによるが、αリポ酸Ｓ体はむしろＧＬＵＴ−４発現を抑制し、インスリンの受容体を減少すると報告されている。この報告からも、薬剤等の製造において、αリポ酸Ｓ体を含むαリポ酸ラセミ体よりもαリポ酸Ｒ体のみを利用する方が、格段に有効性が高い。
αリポ酸Ｒ体は、αリポ酸ラセミ体よりも抗炎症作用が１０倍強いという報告があることから、αリポ酸ラセミ体を利用するよりもさらに少ない量で十分な効果が得られる可能性もある。また、αリポ酸Ｓ体も、αリポ酸ラセミ体より鎮痛作用が５〜６倍強いことから（例えば、特許文献１参照）、αリポ酸ラセミ体よりもさらに有効に利用できる可能性が高い。【０００４】
αリポ酸Ｒ体やαリポ酸Ｓ体を工業的に単離することは可能である。しかし、αリポ酸Ｒ体は、融点（４６−４９℃）がαリポ酸ラセミ体の融点（６０−６２℃）に比較して低いため、熱安定性が悪い。また、αリポ酸Ｒ体は粘着性のポリマーを形成しやすい傾向があり、極めて不安定である。そこで、これらのαリポ酸Ｒ体等をシクロデキストリンやその誘導体で包接し、包接化合物として発泡錠剤、顆粒等に利用することが提案されている（例えば、特許文献２参照）。【０００５】
しかし、特許文献２では、αリポ酸Ｒ体やαリポ酸Ｓ体等を使用してシクロデキストリンやその誘導体で包接した包接化合物が製造できることを示唆しているものの、具体的に製造した例は記載されていない。例えば、特許文献２（例１等）ではβシクロデキストリンを４０℃で水に溶かした後、αリポ酸を溶解し、１５℃に冷却して１２時間後に濾別した調製物を乾燥させて、包接化合物を得ている。しかし、ここではラセミ体の代わりにαリポ酸Ｒ体やαリポ酸Ｓ体も“使用することができる”としているだけである。さらに、特許文献２の記載に基づいて、本発明者らはαリポ酸Ｒ体やαリポ酸Ｓ体のシクロデキストリンによる複合化を試みたが、本発明の比較例に示されたように収率も純度も低く、質、量ともに十分なαリポ酸Ｒ体やαリポ酸Ｓ体の複合体を得ることができなかった。【０００６】
他にもαリポ酸をシクロデキストリンで包接するものとして、シクロデキストリン／αリポ酸複合体の製造方法（例えば、特許文献３）や、リポ酸含有シクロデキストリン複合体の使用（例えば、特許文献４）等が開示されているが、αリポ酸Ｒ体やαリポ酸Ｓ体等を用いた複合体は製造されていない。
これらの文献では、αリポ酸とシクロデキストリンをアルカリ性（塩基性）の水溶液中で溶解させ、塩酸等の酸でｐＨを調整して、シクロデキストリン／αリポ酸複合体やリポ酸含有シクロデキストリン複合体を製造することが記載されている（特許文献３、［請求項１］、特許文献４、［請求項８］等）。
αリポ酸Ｒ体やαリポ酸Ｓ体等を用いた場合でも、これらの方法によって複合体が製造できると考えられたが、本発明者らが確認したところ、得られた生成物は僅かに黄色く着色し純度が低いものであった。そこで、本発明者らは、αリポ酸Ｒ体もしくはαリポ酸Ｓ体、ジヒドロαリポ酸Ｒ体もしくはジヒドロαリポ酸Ｓ体、またはこれらのアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩を高確率で複合化して得られる高純度なαリポ酸複合体の製造方法を見出した。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】ＵＳＰ５，７２８，７３５
【特許文献２】特許第３４０４４３５号
【特許文献３】特開２００６−１６９２５３号公報
【特許文献４】特表２００８−５２４１２４号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明はαリポ酸複合体および該αリポ酸複合体の製造方法の提供を課題とする。さらに詳しくは、αリポ酸Ｒ体もしくはαリポ酸Ｓ体、ジヒドロαリポ酸Ｒ体もしくはジヒドロαリポ酸Ｓ体またはこれらのアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩を高確率で複合化して得られる高純度なαリポ酸複合体、および該αリポ酸複合体の製造方法を提供することを課題とする。
さらに、本発明では、αリポ酸複合体を提供することにより、αリポ酸、ジヒドロαリポ酸、またはこれらのアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩が有するイオウ臭や、辛味（のどや舌が熱くなるような刺激）による服用のしにくさ、げっぷ時の不快感を除き、これらのαリポ酸等を容易に服用できるようにすることも課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明者らは上記課題を解決するために鋭意研究を行った結果、次の１）および２）の工程を有する製造方法（Ａ）〜（Ｃ）によって、αリポ酸Ｒ体のアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩またはαリポ酸Ｓ体のアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩を複合化に用いることで、高純度なαリポ酸複合体が製造できることを見出し、本発明を完成するに至った。
１）αリポ酸Ｒ体のアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩、またはαリポ酸Ｓ体のアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩を水に溶解させ、水溶液を得る工程
２）上記１）の水溶液を冷却して一定の温度に調整した後、シクロデキストリンを加えて、αリポ酸Ｒ体のアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩、またはαリポ酸Ｓ体のアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩のシクロデキストリン複合体の懸濁液を得る工程【００１０】
製造方法（Ａ）または製造方法（Ｂ）は、上記１）および２）の工程に加え、さらに、次の３）および４）の工程を有する製造方法である。
３）上記２）の溶解液または懸濁液をｐＨ４．０以下に調整し、攪拌し、懸濁液を得る工程
４）上記３）の懸濁液をそのまま、またはフィルター濾過して得た残留物を乾燥する工程【００１１】
また、製造方法（Ｃ）は、上記１）および２）の工程に加え、さらに、次の３）の工程を有する製造方法である。
３）上記２）の懸濁液を攪拌後、そのまま、またはフィルター濾過して得た残留物を乾燥する工程【００１２】
また、本発明者らは、次の１）および２）の工程を有する製造方法（Ｄ）、（Ｅ）によって、αリポ酸Ｒ体またはαリポ酸Ｓ体を複合化に用いることで、高純度なαリポ酸複合体が製造できることを見出し、本発明を完成するに至った。
１）アルカリ金属塩またはアルカリ土類金属塩を滴下しながらαリポ酸Ｒ体またはαリポ酸Ｓ体を水に溶解させる工程
２）上記１）の水溶液を冷却して一定の温度に調整した後、シクロデキストリンを加えて、αリポ酸Ｒ体のアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩のシクロデキストリン複合体の溶解液もしくは懸濁液、またはαリポ酸Ｓ体のアルカリ金属塩あるいはアルカリ土類金属塩のシクロデキストリン複合体の溶解液もしくは懸濁液を得る工程【００１３】
製造方法（Ｄ）は、上記１）および２）の工程に加え、さらに、次の３）および４）の工程を有する製造方法である。
３）上記２）の溶解液または懸濁液をｐＨ４以下に調整し、懸濁液を得る工程
４）上記３）の懸濁液をそのまま、またはフィルター濾過して得た残留物を乾燥する工程【００１４】
また、製造方法（Ｅ）は、上記１）および２）の工程に加え、さらに、次の３）の工程を有する製造方法である。
３）上記２）の溶解液または懸濁液をそのまま、またはフィルター濾過して得た残留物を乾燥する工程【００１５】
さらに、本発明者らは、次の製造方法（Ｆ）、（Ｇ）によって、ジヒドロαリポ酸Ｒ体またはジヒドロαリポ酸Ｓ体を複合化に用いることで、高純度なαリポ酸複合体が製造できることを見出し、本発明を完成するに至った。【００１６】
製造方法（Ｆ）は、次の１）〜３）の工程を有する製造方法である。
１）シクロデキストリンを水に溶解させる工程
２）上記１）の溶解液または懸濁液を冷却して一定の温度に調整した後、ジヒドロαリポ酸Ｒ体またはジヒドロαリポ酸Ｓ体を加えて、ジヒドロαリポ酸Ｒ体またはジヒドロαリポ酸Ｓ体のシクロデキストリン複合体の懸濁液を得る工程
３）上記２）の懸濁液をそのまま、またはフィルター濾過して得た残留物を乾燥する工程【００１７】
また、製造方法（Ｇ）は、次の１）〜４）の工程を有する製造方法である。
１）シクロデキストリンを水に溶解させる工程
２）上記１）の溶解液または懸濁液を冷却して一定の温度に調整した後、ジヒドロαリポ酸Ｒ体またはジヒドロαリポ酸Ｓ体を加えて、アルカリ金属塩またはアルカリ土類金属塩を滴下しながらジヒドロαリポ酸Ｒ体またはジヒドロαリポ酸Ｓ体を溶解させる工程
３）上記２）の溶解液または懸濁液にｐＨ４．０以下に調整し、攪拌し、懸濁液を得る工程
４）上記３）の懸濁液をそのまま、またはフィルター濾過して得た残留物を乾燥する工程【００１８】
本発明で見出したこれらの製造方法により得られるαリポ酸複合体は、αリポ酸Ｒ体もしくはαリポ酸Ｓ体、ジヒドロαリポ酸Ｒ体もしくはジヒドロαリポ酸Ｓ体、またはこれらのアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩を複合化したものであり、αリポ酸ラセミ体を複合の対象とするものではない。
本発明における製造方法では、水を溶媒として用い、得られた水溶液を冷却して一定の温度に調整した後、シクロテキストリンを加え、その温度のまま反応を行っている点等を特徴としている。これらの製造方法を行うことによって、αリポ酸を高確率で複合化でき、高純度なαリポ酸複合体を製造できる、本発明のαリポ酸複合体の製造方法が完成できたものと考えられる。【００１９】
本発明によって得られたこれらのαリポ酸複合体が、αリポ酸Ｒ体もしくはαリポ酸Ｓ体、ジヒドロαリポ酸Ｒ体もしくはジヒドロαリポ酸Ｓ体またはこれらのアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩を確実に複合化していることも核磁気共鳴スペクトル（ＮＭＲ）およびフーリエ赤外吸収スペクトル（ＦＴ−ＩＲ）等の物理化学的なデータにより本発明において証明されている。さらに、本発明のαリポ酸複合体は、αリポ酸Ｒ体もしくはαリポ酸Ｓ体、ジヒドロαリポ酸Ｒ体もしくはジヒドロαリポ酸Ｓ体、またはこれらのアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩を高確率で複合していることから、熱や人工胃酸溶液（第１５改正日本薬局方・製剤試験法・崩壊（溶質）試験第１液）等に対する安定性が高いことも確認されている。【００２０】
すなわち、本発明は次の（１）〜（１７）に記載のαリポ酸複合体、αリポ酸複合体の製造方法等に関する。
（１）αリポ酸Ｒ体もしくはαリポ酸Ｓ体、またはジヒドロαリポ酸Ｒ体もしくはジヒドロαリポ酸Ｓ体を６．７％以上含有するαリポ酸複合体であって、αリポ酸Ｒ体もしくはαリポ酸Ｓ体、ジヒドロαリポ酸Ｒ体もしくはジヒドロαリポ酸Ｓ体、またはこれらのアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩が複合化されたαリポ酸複合体。
（２）αリポ酸Ｒ体もしくはαリポ酸Ｓ体、またはジヒドロαリポ酸Ｒ体もしくはジヒドロαリポ酸Ｓ体を１０％以上含有するαリポ酸複合体であって、αリポ酸Ｒ体もしくはαリポ酸Ｓ体、ジヒドロαリポ酸Ｒ体もしくはジヒドロαリポ酸Ｓ体、またはこれらのアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩が複合化されたαリポ酸複合体。
（３）次の１）および２）の工程を含む上記（１）または（２）に記載のαリポ酸複合体の製造方法。
１）αリポ酸Ｒ体のアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩、またはαリポ酸Ｓ体のアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩を水に溶解させ、水溶液を得る工程
２）上記１）の水溶液を冷却して一定の温度に調整した後、シクロデキストリンを加えて、αリポ酸Ｒ体のアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩のシクロデキストリン複合体の溶解液もしくは懸濁液、またはαリポ酸Ｓ体のアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩のシクロデキストリン複合体の溶解液もしくは懸濁液を得る工程
（４）上記（３）に記載のαリポ酸複合体の製造方法であって、さらに次の工程を含むαリポ酸複合体の製造方法。
３）上記２）の溶解液または懸濁液をそのまま、またはフィルター濾過して得た残留物を乾燥する工程
（５）上記（３）に記載のαリポ酸複合体の製造方法であって、さらに次の工程を含むαリポ酸複合体の製造方法。
３）上記２）の溶解液または懸濁液をｐＨ４．０以下に調整し、攪拌し、懸濁液を得る工程
４）上記３）の懸濁液をそのまま、またはフィルター濾過して得た残留物を乾燥する工程
（６）次の１）および２）の工程を含む上記（１）または（２）に記載のαリポ酸複合体の製造方法。
１）アルカリ金属塩またはアルカリ土類金属塩を滴下しながらαリポ酸Ｒ体またはαリポ酸Ｓ体を水に溶解させる工程
２）上記１）の水溶液を冷却して一定の温度に調整した後、シクロデキストリンを加えて、αリポ酸Ｒ体のアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩のシクロデキストリン複合体の溶解液もしくは懸濁液、またはαリポ酸Ｓ体のアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩のシクロデキストリン複合体の溶解液もしくは懸濁液を得る工程
（７）上記（６）に記載のαリポ酸複合体の製造方法であって、さらに次の工程を含むαリポ酸複合体の製造方法。
３）上記２）の溶解液または懸濁液をそのまま、またはフィルター濾過して得た残留物を乾燥する工程
（８）上記（６）に記載のαリポ酸複合体の製造方法であって、さらに次の工程を含むαリポ酸複合体の製造方法。
３）上記２）の溶解液または懸濁液をｐＨ４以下に調整し、懸濁液を得る工程
４）上記３）の懸濁液をそのまま、またはフィルター濾過して得た残留物を乾燥する工程
（９）次の１）〜３）の工程を含む上記（１）または（２）に記載のαリポ酸複合体の製造方法。
１）シクロデキストリンを水に溶解させる工程
２）上記１）の溶解液または懸濁液を冷却して一定の温度に調整した後、ジヒドロαリポ酸Ｒ体またはジヒドロαリポ酸Ｓ体を加えて、ジヒドロαリポ酸Ｒ体のシクロデキストリン複合体の懸濁液、またはジヒドロαリポ酸Ｓ体のシクロデキストリン複合体の懸濁液を得る工程
３）上記２）の懸濁液をそのまま、またはフィルター濾過して得た残留物を乾燥する工程
（１０）次の１）〜４）の工程を含む上記（１）または（２）に記載のαリポ酸複合体の製造方法。
１）シクロデキストリンを水に溶解させる工程
２）上記１）の溶解液または懸濁液を冷却して一定の温度に調整した後、ジヒドロαリポ酸Ｒ体またはジヒドロαリポ酸Ｓ体を加えて、アルカリ金属塩またはアルカリ土類金属塩を滴下しながらジヒドロαリポ酸Ｒ体またはジヒドロαリポ酸Ｓ体を溶解させる工程
３）上記２）の溶解液または懸濁液にｐＨ４．０以下に調整し、攪拌し、懸濁液を得る工程
４）上記３）の懸濁液をそのまま、またはフィルター濾過して得た残留物を乾燥する工程
（１１）上記（３）〜（１０）のいずれかに記載のαリポ酸複合体の製造方法であって、２）の工程における温度が４０℃以下であるαリポ酸複合体の製造方法。
（１２）上記（３）〜（１０）のいずれかに記載のαリポ酸複合体の製造方法であって、αリポ酸Ｒ体もしくはαリポ酸Ｓ体、またはジヒドロαリポ酸Ｒ体もしくはジヒドロαリポ酸Ｓ体における、これらのアルカリ金属塩またはアルカリ土類金属塩が、αリポ酸Ｒ体ナトリウム塩、αリポ酸Ｓ体ナトリウム塩、αリポ酸Ｒ体カリウム塩、αリポ酸Ｓ体カリウム塩、αリポ酸Ｒ体カルシウム塩、αリポ酸Ｓ体カルシウム塩、αリポ酸Ｒ体マグネシウム塩もしくはαリポ酸Ｓ体マグネシウム塩、またはジヒドロαリポ酸Ｒ体ナトリウム塩、ジヒドロαリポ酸Ｓ体ナトリウム塩、ジヒドロαリポ酸Ｒ体カリウム塩、ジヒドロαリポ酸Ｓ体カリウム塩、ジヒドロαリポ酸Ｒ体カルシウム塩、ジヒドロαリポ酸Ｓ体カルシウム塩、ジヒドロαリポ酸Ｒ体マグネシウム塩もしくはジヒドロαリポ酸Ｓ体マグネシウム塩のいずれか一種以上であるαリポ酸複合体の製造方法。
（１３）上記（３）〜（１０）のいずれかに記載のαリポ酸複合体の製造方法であって、シクロデキストリンがαシクロデキストリン、βシクロデキストリン、γシクロデキストリン、ヒドロキシプロピルβシクロデキストリン、スルフォブチルエーテルβシクロデキストリンまたは分岐鎖シクロデキストリンのいずれか一種以上であるαリポ酸複合体の製造方法。
（１４）上記（３）〜（１０）のいずれかに記載のαリポ酸複合体の製造方法であって、１．０モルのαリポ酸Ｒ体もしくはαリポ酸Ｓ体、ジヒドロαリポ酸Ｒ体もしくはジヒドロαリポ酸Ｓ体、またはこれらのアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩に対するシクロデキストリンのモル比が０．５モル〜１．４モルであるαリポ酸複合体の製造方法。
（１５）上記（３）〜（１０）のいずれかに記載の製造方法によって製造され得たαリポ酸複合体。
（１６）上記（１）、（２）または（１５）のいずれかに記載のαリポ酸複合体を有効成分として含む医薬品。
（１７）上記（１）、（２）または（１５）のいずれかに記載のαリポ酸複合体を含む食品。
【発明の効果】
【００２１】
本発明により、αリポ酸Ｒ体もしくはαリポ酸Ｓ体、ジヒドロαリポ酸Ｒ体もしくはジヒドロαリポ酸Ｓ体、またはこれらのアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩を高確率で複合化することで、高純度なαリポ酸複合体を製造することが可能となった。本発明のαリポ酸複合体に含まれるαリポ酸、ジヒドロαリポ酸等は、Ｒ体またはＳ体としての光学活性を維持したまま、ラセミ化されることなく、製造されるαリポ酸複合体中に維持されており、それぞれの光学活性体が有する機能に応じて利用することができる。
本発明によって得られるαリポ酸複合体のうち、αリポ酸Ｒ体もしくはαリポ酸Ｓ体、ジヒドロαリポ酸Ｒ体もしくはジヒドロαリポ酸Ｓ体、またはこれらのアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩を複合化したαリポ酸複合体は熱や人工胃酸溶液に安定であり、特に、医薬品や、健康食品の成分として十分な効果を発揮することができる。
さらに、本発明によって得られるαリポ酸複合体は、シクロデキストリンによって包接されているため、不快なイオウ臭や辛味等がマスキングされ、服用が容易という利点もある。
【発明を実施するための形態】
【００２２】
本発明の「αリポ酸複合体」とは、αリポ酸Ｒ体もしくはαリポ酸Ｓ体、ジヒドロαリポ酸Ｒ体もしくはジヒドロαリポ酸Ｓ体、またはこれらのアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩をシクロデキストリンで複合化したもののことをいう。本発明の「αリポ酸複合体」には、αリポ酸ラセミ体、ジヒドロαリポ酸ラセミ体や、αリポ酸ラセミ体のアルカリ金属塩またはアルカリ土類金属塩をシクロデキストリンで複合化した物質は含まれない。
【００２３】
本発明の「αリポ酸複合体」は、従来のαリポ酸をシクロデキストリンで複合化したものと比べて、αリポ酸Ｒ体もしくはαリポ酸Ｓ体、ジヒドロαリポ酸Ｒ体もしくはジヒドロαリポ酸Ｓ体、またはこれらのアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩を高純度で含有するものであることが好ましい。
例えば、６．７％以上のαリポ酸Ｒ体もしくはαリポ酸Ｓ体、またはジヒドロαリポ酸Ｒ体もしくはジヒドロαリポ酸Ｓ体を含有するαリポ酸複合体であることが好ましく、７．５％以上のαリポ酸Ｒ体もしくはαリポ酸Ｓ体またはジヒドロαリポ酸Ｒ体もしくはジヒドロαリポ酸Ｓ体を含有するαリポ酸複合体であることがより好ましい。
さらに、１０％以上のαリポ酸Ｒ体もしくはαリポ酸Ｓ体、またはジヒドロαリポ酸Ｒ体もしくはジヒドロαリポ酸Ｓ体を含有するαリポ酸複合体であることが好ましく、より好ましくは１３％以上、特に好ましくは１６％以上のαリポ酸Ｒ体もしくはαリポ酸Ｓ体、またはジヒドロαリポ酸Ｒ体もしくはジヒドロαリポ酸Ｓ体を含有するαリポ酸複合体であることが好ましい。
これはαリポ酸Ｒ体もしくはαリポ酸Ｓ体、またはジヒドロαリポ酸Ｒ体もしくはジヒドロαリポ酸Ｓ体における、これらのアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩を複合化したαリポ酸複合体においても同様であり、これらのαリポ酸複合体において、換算した場合に、αリポ酸Ｒ体自体もしくはαリポ酸Ｓ体自体、またはジヒドロαリポ酸Ｒ体自体もしくはジヒドロαリポ酸Ｓ体自体を１０％以上含有していることが好ましい。
【００２４】
ここで、「αリポ酸Ｒ体もしくはαリポ酸Ｓ体、ジヒドロαリポ酸Ｒ体もしくはジヒドロαリポ酸Ｓ体、またはこれらのアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩」には、αリポ酸Ｒ体自体、αリポ酸Ｓ体自体、αリポ酸Ｒ体のアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩、またはαリポ酸Ｓ体のアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩が含まれる。
また、「αリポ酸Ｒ体」または「αリポ酸Ｓ体」の還元体であるジヒドロαリポ酸Ｒ体自体もしくはジヒドロαリポ酸Ｓ体自体、ジヒドロαリポ酸Ｒ体のアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩、またはジヒドロαリポ酸Ｓ体のアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩も含まれる。
これらのアルカリ金属塩またはアルカリ土類金属塩には、αリポ酸Ｒ体のアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩、αリポ酸Ｓ体のアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩、ジヒドロαリポ酸Ｒ体のアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩、またはジヒドロαリポ酸Ｓ体のアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩であればいずれのものも含まれる。
例えば、αリポ酸Ｒ体ナトリウム塩、αリポ酸Ｓ体ナトリウム塩、αリポ酸Ｒ体カリウム塩、αリポ酸Ｓ体カリウム塩、αリポ酸Ｒ体カルシウム塩、αリポ酸Ｓ体カルシウム塩、αリポ酸Ｒ体マグネシウム塩、αリポ酸Ｓ体マグネシウム塩等が挙げられる。また、ジヒドロαリポ酸Ｒ体ナトリウム塩、ジヒドロαリポ酸Ｓ体ナトリウム塩、ジヒドロαリポ酸Ｒ体カリウム塩、ジヒドロαリポ酸Ｓ体カリウム塩、ジヒドロαリポ酸Ｒ体カルシウム塩、ジヒドロαリポ酸Ｓ体カルシウム塩、ジヒドロαリポ酸Ｒ体マグネシウム塩、ジヒドロαリポ酸Ｓ体マグネシウム塩等が挙げられる。
【００２５】
これらのアルカリ金属塩またはアルカリ土類金属塩は水溶液中に先にアルカリ金属塩またはアルカリ土類金属塩を加えたものに、αリポ酸Ｒ体もしくはαリポ酸Ｓ体、またはジヒドロαリポ酸Ｒ体もしくはジヒドロαリポ酸Ｓ体を追加して対応する塩を調整しても良く、市販されているものを使用しても良い。
また、本発明のαリポ酸複合体の製造において利用する「αリポ酸Ｒ体」もしくは「αリポ酸Ｓ体」、または「ジヒドロαリポ酸Ｒ体」もしくは「ジヒドロαリポ酸Ｓ体」も市販されているものを使用しても良い。
【００２６】
本発明の「シクロデキストリン」には、ジャガイモ、コーン等の原料から従来知られている方法で製造されたαシクロデキストリン（シクロヘキサアミロース、６−グルコース単位から環状に構成されている）、βシクロデキストリン（シクロへプタアミロース、７−グルコース単位から環状に構成されている）またはγシクロデキストリン（シクロオクタアミロース、８−グルコース単位から環状に構成されている）等が含まれる。
さらに、本発明の「シクロデキストリン」には、ヒドロキシプロピルβシクロデキストリン、スルフォブチルエーテルβシクロデキストリン、分岐鎖シクロデキストリン等も含まれる。
ここで、分岐鎖シクロデキストリンとは、αシクロデキストリン、βシクロデキストリン、γシクロデキストリン等の公知のシクロデキストリンの分岐糖鎖誘導体であり、これらのシクロデキストリンにグルコース、マルトース、セロビオーズ、ラクトース、ショ糖、ガラクトース、グルコサミン等の単糖類や２糖類等の水溶性物質を分岐付加ないし結合させたものを言う。本発明における分岐鎖シクロデキストリンは、αシクロデキストリン、βシクロデキストリン、γシクロデキストリン等の分岐鎖シクロデキストリンを混合したものであってもよい。
【００２７】
分岐糖鎖は、単糖類から十糖類までの糖類からなる糖鎖であることが好ましく、単糖類から五糖類までの糖類からなる糖鎖がより好ましく、単糖類から三糖類までの糖類からなる糖鎖がさらに好ましく、そして、単糖類又は二糖類からなる糖鎖が最も好ましい。
例えば、単糖類からなる糖鎖には、グルコース、マンノース、ガラクトース、又はＮ−アセチルグルコサミンのような単糖類から誘導された糖鎖が含まれ、二糖類からなる糖鎖にはマルトシル等が含まれる。三糖以上の糖からなる糖鎖とは、単糖類３分子以上がグリコシド結合によって脱水縮合して生ずる糖から誘導された糖鎖であり、例えば、マルトトリオシル等のマルトオリゴシルが挙げられる。分岐糖鎖の数は、αシクロデキストリンの場合は１〜６、βシクロデキストリンの場合は１〜７、並びにγシクロデキストリンの場合は１〜８であり、いずれの場合も好ましくは１〜２である。
【００２８】
本発明における分岐鎖シクロデキストリンは、例えば、αグルコシルシクロデキストリン、βグルコシルシクロデキストリン又はγグルコシルシクロデキストリン、αジグルコシルシクロデキストリン、βジグルコシルシクロデキストリン又はγジグルコシルシクロデキストリン、αマルトシルシクロデキストリン、βマルトシルシクロデキストリン又はγマルトシルシクロデキストリン、αジマルトシルシクロデキストリン、βジマルトシルシクロデキストリン又はγジマルトシルシクロデキストリン、αマルトトリオシルシクロデキストリン、βマルトトリオシルシクロデキストリン又はγマルトトリオシルシクロデキストリン、αグルクロニルグルコシルシクロデキストリン、βグルクロニルグルコシルシクロデキストリン又はγグルクロニルグルコシルシクロデキストリン等、ならびにこれらの混合物が含まれる。
これらは市販されているものであっても良く、例えば、塩水港精糖社のマルトシルβＣＤ（製品名：Ｇ２βＣＤ）等が挙げられる。
複合化に当たり、これらのシクロデキストリンは、単一でも良いが、複数種混合して用いても良い。特にαシクロデキストリンまたはγシクロデキストリンを複合化に用いることが好ましく、γシクロデキストリンを用いることが特に好ましい。
【００２９】
本発明の「αリポ酸複合体の製造方法」は、αリポ酸Ｒ体もしくはαリポ酸Ｓ体またはジヒドロαリポ酸Ｒ体もしくはジヒドロαリポ酸Ｓ体を６．７％以上含有する、本発明の「αリポ酸複合体」が製造できる方法であれば、従来知られているいずれの方法であってもよい。このような本発明の「αリポ酸複合体の製造方法」として、次の製造方法が挙げられる。
【００３０】
次の１）および２）の工程を有するαリポ酸複合体の製造方法。
１）αリポ酸Ｒ体のアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩、またはαリポ酸Ｓ体のアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩を水に溶解させ、水溶液を得る工程
２）上記１）の水溶液を冷却して一定の温度に調整した後、シクロデキストリンを加えて、αリポ酸Ｒ体のアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩のシクロデキストリン複合体の懸濁液、またはαリポ酸Ｓ体のアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩のシクロデキストリン複合体の懸濁液を得る工程
【００３１】
このような工程を有するαリポ酸複合体の製造方法のうち、さらに、次の３）および４）の工程を有する製造方法を、製造方法（Ａ）または製造方法（Ｂ）として実施例に示した。
３）上記２）の溶解液または懸濁液をｐＨ４．０以下に調整し、攪拌し、懸濁液を得る工程
４）上記３）の懸濁液を攪拌後、そのまま、またはフィルター濾過して得た残留物を乾燥する工程
【００３２】
また、さらに、次の３）の工程を有する製造方法を、製造方法（Ｃ）として実施例に示した。
３）上記２）の懸濁液をそのまま、またはフィルター濾過して得た残留物を乾燥する工程
【００３３】
これらの「αリポ酸複合体の製造方法」において、１）の工程は、αリポ酸Ｒ体のアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩、またはαリポ酸Ｓ体のアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩を水に溶解させる工程である。αリポ酸Ｒ体のアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩、またはαリポ酸Ｓ体のアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩を溶解させた水が透明になるまで攪拌することが好ましい。
このようにして得られた水溶液は、アルカリ性の物質等で特にｐＨ調整しなくても、中性〜弱アルカリ性を示すことが好ましく、特にｐＨ１４．０以下を示す水溶液となることが好ましい。
【００３４】
また、２）の工程は、１）の工程で得られた水溶液にシクロデキストリンを加え、溶解液または懸濁液を得る工程である。
シクロデキストリンは、１）の工程で得られた水溶液を冷却して一定の温度に調整した後に加えることが好ましく、以降の工程も調整した温度のまま行うことが好ましい。温度は大気圧下において、４０℃以下であれば良い。好ましくは２５℃以下であり、より好ましくは１０℃未満であり、さらに好ましくは０℃〜９℃であり、０〜６℃であることが特に好ましい。この工程では水溶液を攪拌しながらシクロデキストリンを加えることが好ましい。攪拌は加えた後１時間以下行えば十分であり、好ましくは３０分間以下、特に好ましくは５〜１０分程度である。
【００３５】
ここで、水溶液に加えるシクロデキストリンは、αリポ酸Ｒ体のアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩（１．０モル）、またはαリポ酸Ｓ体のアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩（１．０モル）に対して、０．５モル〜１．４モルとなるように加えることが好ましく、０．５モル〜１．１モル、さらに０．６モル〜０．７モルとなるように加えることが特に好ましい。シクロデキストリンを加えるにつれ、溶解液または懸濁液中で、αリポ酸Ｒ体のアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩、またはαリポ酸Ｓ体のアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩のシクロデキストリン複合体が形成される。
αリポ酸Ｒ体のアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩、またはαリポ酸Ｓ体のアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩、およびシクロデキストリンは、この溶解液または懸濁液中に合わせて５〜５０ｗｔ％、好ましくは５〜３５ｗｔ％、特に好ましくは１０〜２５ｗｔ％含まれるように加えることが好ましい。５０ｗｔ％以上ではハンドリングが困難になるためである。
【００３６】
製造方法（Ａ）または（Ｂ）における３）の工程は、２）の工程によって得られた溶解液または懸濁液に、αリポ酸Ｒ体のアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩、またはαリポ酸Ｓ体のアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩に対して、等モルまたは等モル以上の酸を徐々に加え、ｐＨ４．０以下に調整する工程である。
これによって、αリポ酸Ｒ体のアルカリ金属塩またはアルカリ土類金属塩、またはαリポ酸Ｓ体のアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩を中和し、αリポ酸Ｒ体もしくはαリポ酸Ｓ体に変換することが可能となり、この工程を経ることでαリポ酸Ｒ体またはαリポ酸Ｓ体が複合化されたαリポ酸複合体を製造することが可能となる。
酸は溶解液または懸濁液を攪拌しながら加えることが好ましく、ｐＨ調整に利用できる酸であればいずれのものであっても良い。例えば、塩酸、硫酸、リン酸、酢酸等の無機酸または有機酸等が挙げられる。
酸は溶解液または懸濁液のｐＨが４．０以下になるまで加えることが好ましく、特にｐＨ３．５もしくは３．５以下になるまで均一に加えることが好ましい。例えば、αリポ酸Ｒ体ナトリウム塩を複合化させたαリポ酸複合体を製造する場合には、ｐＨ３．０〜３．５程度に調整することが極めて好ましい。酸を加えた後、得られた懸濁液を攪拌してもよく、この撹拌は１時間以下であっても十分であり、長くとも１８時間以下であることが好ましい。
【００３７】
製造方法（Ｃ）における３）の工程、および製造方法（Ａ）または（Ｂ）における４）の工程は、製造方法（Ｃ）における２）の工程、および製造方法（Ａ）または（Ｂ）における３）の工程によって得られた懸濁液に含まれるαリポ酸複合体を、そのまま乾燥するか、フィルター濾過してαリポ酸複合体が含まれる残留物を取り出し、これを乾燥する工程である。
製造方法（Ｂ）のように、懸濁液に含まれるαリポ酸複合体はフィルター濾過等をしなくても、そのまま乾燥することで、中和で生じたアルカリ塩含有のαリポ酸複合体として使用できる。また、製造方法（Ａ）、（Ｃ）のように、例えば濾過法、遠心分離法またはベルト濾過法等によってαリポ酸複合体が含まれる残留物を取り出し、これを水で洗浄し、乾燥することでアルカリ塩を除去したαリポ酸複合体を得ることもできる。濾過洗浄法以外にも、アルカリ塩の除去法として、イオン交換膜、逆浸透膜（ＲＯ膜）による方法など一般的に使用される実用的な方法を使用することもできる。
乾燥は、アルカリ塩の有無に関係なく、従来知られているいずれの方法で行っても良いが、例えば、減圧乾燥法、凍結乾燥法、噴霧乾燥法、オーブン乾燥法、ベルト乾燥法、パルス乾燥法等が挙げられる。
【００３８】
本発明の「αリポ酸複合体の製造方法」は、次の１）および２）の工程を有するαリポ酸複合体の製造方法であっても良い。
１）アルカリ金属塩またはアルカリ土類金属塩を滴下しながらαリポ酸Ｒ体またはαリポ酸Ｓ体を水に溶解させる工程
２）上記１）の水溶液を冷却して一定の温度に調整した後、シクロデキストリンを加えて、αリポ酸Ｒ体のアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩のシクロデキストリン複合体の溶解液もしくは懸濁液、またはαリポ酸Ｓ体のアルカリ金属塩あるいはアルカリ土類金属塩のシクロデキストリン複合体の溶解液もしくは懸濁液を得る工程
【００３９】
このような工程を有するαリポ酸複合体の製造方法のうち、さらに、次の３）および４）の工程を含むものを、製造方法（Ｄ）として実施例に示した。
３）上記２）の溶解液または懸濁液をｐＨ４以下に調整し、攪拌し、懸濁液を得る工程
４）上記３）の懸濁液をそのまま、またはフィルター濾過して得た残留物を乾燥する工程
【００４０】
また、このような工程を有するαリポ酸複合体の製造方法のうち、さらに、次の３）の工程を含むものを、製造方法（Ｅ）として実施例に示した。
３）上記２）の懸濁液をそのまま、またはフィルター濾過して得た残留物を乾燥する工程
【００４１】
これらの「αリポ酸複合体の製造方法」において、１）の工程は、アルカリ金属塩またはアルカリ土類金属塩を滴下しながらαリポ酸Ｒ体またはαリポ酸Ｓ体を水に溶解させる工程である。αリポ酸Ｒ体またはαリポ酸Ｓ体を溶解させた水が透明になるまで攪拌することが好ましい。また、この工程によって得られる溶解液のｐＨは９〜１４であることが望ましい。
【００４２】
また、２）の工程は、１）の工程で得られた水溶液にシクロデキストリンを加え、αリポ酸Ｒ体のアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩のシクロデキストリン複合体の溶解液もしくは懸濁液、またはαリポ酸Ｓ体のアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩のシクロデキストリン複合体の溶解液もしくは懸濁液を得る工程である。
シクロデキストリンは、１）の工程で得られた水溶液を冷却して一定の温度に調整した後に加えることが好ましく、以降の工程も調整した温度のまま行うことが好ましい。温度は大気圧下において、４０℃以下であれば良い。好ましくは２５℃以下であり、より好ましくは１０℃未満であり、さらに好ましくは０℃〜９℃であり、０〜６℃であることが特に好ましい。この工程では水溶液を攪拌しながらシクロデキストリンを加えることが好ましい。攪拌は１時間以下行えば十分であり、好ましくは３０分間以下、特に好ましくは５〜１０分程度である。
このようにして得られた水溶液または懸濁液は、アルカリ性の物質等で特にｐＨ調整しなくても、中性〜弱アルカリ性を示すことが好ましく、特にｐＨ９〜１４の水溶液となることが好ましい。
【００４３】
ここで、水溶液に加えるシクロデキストリンは、αリポ酸Ｒ体またはαリポ酸Ｓ体（１．０モル）に対して０．５モル〜１．４モルとなるように加えることが好ましく、０．５モル〜１．１モル、さらに０．６モル〜０．７モルとなるように加えることが特に好ましい。
シクロデキストリンを加えるにつれ、溶解液または懸濁液中で、αリポ酸Ｒ体またはαリポ酸Ｓ体のシクロデキストリン複合体が形成される。
αリポ酸Ｒ体またはαリポ酸Ｓ体およびシクロデキストリンは、この溶解液または懸濁液中に合わせて５〜５０ｗｔ％、好ましくは５〜３５ｗｔ％、さらに好ましくは１０〜２５ｗｔ％、２０〜２５ｗｔ％含まれるように加えることが特に好ましい。５０ｗｔ％以上ではハンドリングが困難になるためである。
【００４４】
製造方法（Ｅ）における３）の工程は、２）の工程によって得られたαリポ酸Ｒ体のアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩のシクロデキストリン複合体の溶解液もしくは懸濁液、またはαリポ酸Ｓ体のアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩のシクロデキストリン複合体の溶解液もしくは懸濁液に、αリポ酸Ｒ体のアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩、またはαリポ酸Ｓ体のアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩に対して等モルまたは等モル以上の酸を徐々に加え、ｐＨ４．０以下に調整する工程である。
これによって、αリポ酸Ｒ体のアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩、またはαリポ酸Ｓ体のアルカリ金属塩またはアルカリ土類金属塩を中和し、αリポ酸Ｒ体もしくはαリポ酸Ｓ体に変換することが可能となり、この工程を経ることでαリポ酸Ｒ体またはαリポ酸Ｓ体が複合化されたαリポ酸複合体を製造することが可能となる。
酸は溶解液または懸濁液を攪拌しながら加えることが好ましく、ｐＨ調整に利用できる酸であればいずれのものであっても良い。例えば、塩酸、硫酸、リン酸、酢酸等の無機酸または有機酸等が挙げられる。
酸は溶解液または懸濁液のｐＨが４．０以下になるまで加えることが好ましく、特にｐＨ３．５もしくは３．５以下になるまで均一に加えることが好ましい。例えば、αリポ酸Ｒ体ナトリウム塩を複合化させたαリポ酸複合体を製造する場合には、ｐＨ３．０〜３．５に調整することが極めて好ましい。酸を加えた後、得られた懸濁液を攪拌してもよく、この撹拌は１時間以下であっても十分であり、長くとも１８時間以下であることが好ましい。
【００４５】
製造方法（Ｅ）における３）の工程、および製造方法（Ｄ）における４）の工程は、製造方法（Ｅ）における２）の工程、および製造方法（Ｄ）における３）の工程によって得られた懸濁液に含まれるαリポ酸複合体を、そのまま乾燥するか、フィルター濾過してαリポ酸複合体が含まれる残留物を取り出し、これを乾燥する工程である。
製造方法（Ｅ）のように、懸濁液に含まれるαリポ酸複合体はフィルター濾過等をしなくても、そのまま乾燥することで、中和で生じたアルカリ塩含有のαリポ酸複合体として使用できる。また、製造方法（Ｄ）のように、例えば濾過法、遠心分離法またはベルト濾過法等によってαリポ酸複合体が含まれる残留物を取り出し、これを水で洗浄し、乾燥することでアルカリ塩を除去したαリポ酸複合体を得ることもできる。濾過洗浄法以外にも、アルカリ塩の除去法として、イオン交換膜、逆浸透膜（ＲＯ膜）による方法など一般的に使用される実用的な方法を使用することもできる。
乾燥は、アルカリ塩の有無に関係なく、従来知られているいずれの方法で行っても良いが、例えば、減圧乾燥法、凍結乾燥法、噴霧乾燥法、オーブン乾燥法、ベルト乾燥法、パルス乾燥法等が挙げられる。
【００４６】
さらに、本発明の「αリポ酸複合体の製造方法」は、次の１）〜３）の工程を含むものであっても良い。この方法は、製造方法（Ｆ）として実施例に示した。
１）シクロデキストリンを水に溶解させる工程
２）上記１）の溶解液または懸濁液を冷却して一定の温度に調整した後、ジヒドロαリポ酸Ｒ体またはジヒドロαリポ酸Ｓ体を加えて、ジヒドロαリポ酸Ｒ体のシクロデキストリン複合体の懸濁液、またはジヒドロαリポ酸Ｓ体のシクロデキストリン複合体の懸濁液を得る工程
３）上記２）の懸濁液をそのまま、またはフィルター濾過して得た残留物を乾燥する工程
【００４７】
さらに、本発明の「αリポ酸複合体の製造方法」は、次の１）〜４）の工程を含むものであっても良い。この方法は、製造方法（Ｇ）として実施例に示した。
１）シクロデキストリンを水に溶解させる工程
２）上記１）の溶解液または懸濁液を冷却して一定の温度に調整した後、ジヒドロαリポ酸Ｒ体またはジヒドロαリポ酸Ｓ体を加えて撹拌し、水酸化カリウムを滴下しながらジヒドロαリポ酸Ｒ体を溶解させる工程。
３）上記２）の溶解液または懸濁液に塩酸を滴下し、ｐＨを調整し、攪拌してジヒドロαリポ酸Ｒ体のシクロデキストリン複合体の懸濁液、またはジヒドロαリポ酸Ｓ体のシクロデキストリン複合体の懸濁液を得る工程
４）上記２）の懸濁液をそのまま、またはフィルター濾過して得た残留物を乾燥する工程
【００４８】
これらの「αリポ酸複合体の製造方法」において、１）の工程は、シクロデキストリンを水に溶解させる工程である。
ここで、水に溶解させるシクロデキストリンは、ジヒドロαリポ酸Ｒ体（１．０モル）またはジヒドロαリポ酸Ｓ体（１．０モル）に対して０．５モル〜１．４モルとなるように溶解させることが好ましく、０．５モル〜１．１モル、さらに０．６モル〜０．７モルとなるように溶解させることが特に好ましい。
また、この工程で得られる水溶液は、ジヒドロリポ酸の酸化を防止するために、窒素置換したり、脱気処理をしたりしておくことが好ましい。窒素置換や脱気処理は、従来知られている方法等によって行うことができる。
【００４９】
製造方法（Ｆ）における２）の工程は、１）の工程で得られた溶解液または懸濁液にジヒドロαリポ酸Ｒ体またはジヒドロαリポ酸Ｓ体を加え、ジヒドロαリポ酸Ｒ体のシクロデキストリン複合体の懸濁液、またはジヒドロαリポ酸Ｓ体のシクロデキストリン複合体の懸濁液を得る工程である。
また、製造方法（Ｇ）における２）の工程は、１）の工程で得られた溶解液または懸濁液にジヒドロαリポ酸Ｒ体またはジヒドロαリポ酸Ｓ体を加え、これらのアルカリ金属塩またはアルカリ土類金属塩のシクロデキストリン複合体の溶解液または懸濁液を得る工程である。
これらの工程では、ジヒドロαリポ酸Ｒ体またはジヒドロαリポ酸Ｓ体を加えるにあたり徐々に滴下していくことが望ましい。この滴下では、１）の工程で得られた溶解液または懸濁液を攪拌して滴下することが好ましく、この撹拌速度は３００〜５０００ｒｐｍであることが好ましい。より均一に分散させるためには、従来知られている方法により撹拌速度を速くする等により行うことができる。この工程において、滴下したジヒドロαリポ酸Ｒ体またはジヒドロαリポ酸Ｓ体がビーズ状になる場合には超音波処理を行い、均一に分散させることが好ましい。
また、この工程においては、ジヒドロαリポ酸Ｒ体またはジヒドロαリポ酸Ｓ体の滴下にあたり、上記１）の溶解液を冷却して一定の温度に調整しておくことが好ましく、以降の工程も調整した温度のまま行うことが好ましい。温度は大気圧下において、大気圧下において、４０℃以下であれば良い。好ましくは２５℃以下であり、より好ましくは１０℃未満であり、さらに好ましくは０℃〜９℃であり、０〜６℃であることが特に好ましい。
【００５０】
この工程により、シクロデキストリン溶解液または懸濁液中で、ジヒドロαリポ酸Ｒ体のシクロデキストリン複合体またはジヒドロαリポ酸Ｓ体のシクロデキストリン複合体が形成される。
ジヒドロαリポ酸Ｒ体またはジヒドロαリポ酸Ｓ体およびシクロデキストリンは、この溶解液または懸濁液中に合わせて５〜５０ｗｔ％、好ましくは５〜３５ｗｔ％、さらに好ましくは１０〜２５ｗｔ％、２０〜２５ｗｔ％含まれるように加えることが特に好ましい。５０ｗｔ％以上ではハンドリングが困難になるためである。
【００５１】
製造方法（Ｇ）における３）の工程は、２）の工程によって得られたジヒドロαリポ酸Ｒ体のアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属のシクロデキストリン複合体の溶解液もしくは懸濁液、またはジヒドロαリポ酸Ｓ体のアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属のシクロデキストリン複合体の溶解液あるいは懸濁液に、ジヒドロαリポ酸Ｒ体のアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩、またはジヒドロαリポ酸Ｓ体のアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩に対して、等モルもしくは等モル以上の酸を徐々に加え、ｐＨ４．０以下に調整する工程である。
これによって、ジヒドロαリポ酸Ｒ体のアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩、またはジヒドロαリポ酸Ｓ体のアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩を中和し、ジヒドロαリポ酸Ｒ体またはジヒドロαリポ酸Ｓ体に変換することが可能となり、この工程を経ることでジヒドロαリポ酸Ｒ体またはジヒドロαリポ酸Ｓ体が複合化されたαリポ酸複合体を製造することが可能となる。
酸は溶解液または懸濁液を攪拌しながら加えることが好ましく、ｐＨ調整に利用できる酸であればいずれのものであっても良い。例えば、塩酸、硫酸、リン酸、酢酸等の無機酸または有機酸等が挙げられる。
酸は溶解液または懸濁液のｐＨが４．０以下になるまで加えることが好ましく、特にｐＨ３．５もしくは３．５以下になるまで均一に加えることが好ましい。例えば、αリポ酸Ｒ体ナトリウム塩を複合化させたαリポ酸複合体を製造する場合には、ｐＨ３．０〜３．５に調整することが極めて好ましい。酸を加えた後、得られた懸濁液を攪拌してもよく、この撹拌は１時間以下であっても十分であり、長くとも１８時間以下であることが好ましい。
【００５２】
製造方法（Ｆ）における３）の工程、および製造方法（Ｇ）における４）の工程は、製造方法（Ｆ）における２）の工程、および製造方法（Ｇ）における３）の工程によって得られた懸濁液に含まれるαリポ酸複合体を、そのまま、またはフィルター濾過して得た残留物を乾燥する工程である。
乾燥は、アルカリ塩の有無に関係なく、従来知られているいずれの方法で行っても良いが、例えば、減圧乾燥法、凍結乾燥法、噴霧乾燥法、オーブン乾燥法、ベルト乾燥法、パルス乾燥法等が挙げられる。
【００５３】
本発明の製造方法によって得られたαリポ酸複合体は「医薬品」や「食品」に含むことができる。このような「医薬品」や健康食品等の「食品」は、例えば抗疲労作用、糖尿病治療薬または解毒剤等のαリポ酸が効果的に作用する全ての疾病や症状の治療、改善緩和、予防等に利用できる。
以下、本発明の詳細を実施例等で説明するが、本発明は必ずしもこれらに限定されるものではない。
【実施例】
【００５４】
＜αリポ酸複合体の製造＞
１．試料
αリポ酸およびシクロデキストリンは以下に示した市販または供与されたものを用いた。
１）αリポ酸
αリポ酸Ｒ体（Ｒ−Ａｌｐｈａ  Ｌｉｐｏｉｃ  Ａｃｉｄ  ）：Ｃｈａｎｇｓｈｕ  Ｆｕｓｈｉｌａｉ社
αリポ酸Ｒ体ナトリウム塩（Ｒ−（＋）−Ｌｉｐｏｉｃ  Ａｃｉｄ  Ｓｏｄｉｕｍ  Ｓａｌｔ）：Ｃｈａｎｇｓｈｕ  Ｆｕｓｈｉｌａｉ社
ジヒドロαリポ酸Ｒ体（Ｒ−Ｄｉｈｙｄｒｏ−ｌｉｐｏｉｃ  Ａｃｉｄ）：ＧｅｒｏＮｏｖａ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｉｎｃ．社
αリポ酸Ｓ体（Ｓ−Ａｌｐｈａ  Ｌｉｐｏｉｃ  Ａｃｉｄ  ）：Ｃｈａｎｇｓｈｕ  Ｆｕｓｈｉｌａｉ社
２）シクロデキストリン
αシクロデキストリン：ＣＡＶＡＭＡＸ  Ｗ６  Ｆｏｏｄ（ワッカー社）
βシクロデキストリン：ＣＡＶＡＭＡＸ  Ｗ７  Ｆｏｏｄ（ワッカー社）
γシクロデキストリン：ＣＡＶＡＭＡＸ  Ｗ８  Ｆｏｏｄ（ワッカー社）
マルトシルαシクロデキストリン（マルトシルαＣＤ混合物）：フジ日本精糖社
マルトシルβシクロデキストリン（Ｇ２−β−ＣＤ）：塩水港精糖社
マルトシルγシクロデキストリン混合物（マルトシルγＣＤ混合物）：フジ日本精糖社
イソエリートＰ：塩水港精糖社【００５５】
２．製造方法
αリポ酸複合体の製造方法（Ａ）〜（Ｇ）を以下に示した。なお、いずれの製造方法においても、乾燥はスプレードライ（ＳＤ）、減圧乾燥または凍結乾燥（ＦＤ）によって行った。【００５６】
αリポ酸複合体の製造方法（Ａ）
次の１）〜４）の工程により、αリポ酸複合体を製造した。
１）水を攪拌しながらαリポ酸Ｒ体ナトリウム塩またはαリポ酸Ｓ体ナトリウム塩を加え、αリポ酸Ｒ体ナトリウム塩またはαリポ酸Ｓ体ナトリウム塩を溶解させた。
２）上記１）の溶解液を冷却して一定の温度に調整した後、シクロデキストリンを加えて撹拌し、αリポ酸Ｒ体ナトリウム塩のシクロデキストリン複合体の溶解液もしくは懸濁液、またはαリポ酸Ｓ体ナトリウム塩のシクロデキストリン複合体の溶解液もしくは懸濁液を得た。この溶解液または懸濁液のｐＨはおおよそ７〜８であった。
３）上記２）の溶解液または懸濁液に塩酸（１Ｎ）を滴下し、ｐＨ４．０以下に調整し、攪拌して懸濁液を得た。
４）上記３）の懸濁液をフィルター（ＡＤＶＡＮＴＥＣ製、Ｐｏｌｙｍｅｒ：ＭＥＭＢＲＡＮＥ  ＦＩＬＴＥＲ  ＭＩＸＥＤ  ＣＥＬＬＵＬＯＳＥ  ＥＳＴＥＲ，  ｄ＝０．４５μｍ）濾過し、残留物を水で洗浄して、乾燥することにより、αリポ酸Ｒ体またはαリポ酸Ｓ体を含む目的とするαリポ酸複合体を製造した。
この製造方法では、塩酸（１Ｎ）滴下による中和を行うため、αリポ酸Ｒ体ナトリウム塩またはαリポ酸Ｓ体ナトリウム塩から、αリポ酸Ｒ体またはαリポ酸Ｓ体が複合化されたαリポ酸複合体が製造できた。【００５７】
αリポ酸複合体の製造方法（Ｂ）
αリポ酸複合体の製造方法（Ａ）と同様に、１）〜３）の工程を行った後、４）の工程を次のように行った。この製造方法では、製造方法（Ａ）と同様にαリポ酸Ｒ体またはαリポ酸Ｓ体が複合化されたαリポ酸複合体が製造できるが、懸濁液に含まれるαリポ酸複合体を水で洗浄しないため、アルカリ塩含有のαリポ酸複合体が得られることになる。
４）上記３）の懸濁液をそのまま乾燥し、αリポ酸複合体を製造した。【００５８】
αリポ酸複合体の製造方法（Ｃ）
αリポ酸複合体の製造方法（Ａ）と同様に、１）〜２）の工程を行った後、３）の工程において、懸濁液に塩酸（１Ｎ）の滴下を行わないまま攪拌し、４）の工程を行った。
この製造方法では、塩酸（１Ｎ）の滴下を行わないため、αリポ酸Ｒ体またはαリポ酸Ｓ体ではなく、αリポ酸Ｒ体ナトリウム塩またはαリポ酸Ｓ体ナトリウム塩が複合化されたαリポ酸複合体が製造できた。【００５９】
αリポ酸複合体の製造方法（Ｄ）
次の１）〜４）の工程により、αリポ酸複合体を製造した。
１）水を攪拌しながらαリポ酸Ｒ体またはαリポ酸Ｓ体を加え、水酸化カリウムを滴下しながらαリポ酸Ｒ体またはαリポ酸Ｓ体を溶解させた。
２）上記１）の溶解液を冷却して一定の温度に調整した後、シクロデキストリンを加えて撹拌し、αリポ酸Ｒ体カリウム塩のシクロデキストリン複合体の溶解液もしくは懸濁液、またはαリポ酸Ｓ体カリウム塩のシクロデキストリン複合体の溶解液もしくは懸濁液を得た。この溶解液または懸濁液のｐＨはおおよそ７〜９であった。
３）上記２）の溶解液または懸濁液に塩酸を滴下し、ｐＨ４．０以下に調整し、攪拌して懸濁液を得た。
４）上記３）の懸濁液をフィルター（ＡＤＶＡＮＴＥＣ製、Ｐｏｌｙｍｅｒ：ＭＥＭＢＲＡＮＥ  ＦＩＬＴＥＲ  ＭＩＸＥＤ  ＣＥＬＬＵＬＯＳＥ  ＥＳＴＥＲ，  ｄ＝０．４５μｍ）濾過し、残留物を水で洗浄して乾燥することにより、目的とするαリポ酸複合体を製造した。
この製造方法では、塩酸滴下による中和を行うため、αリポ酸Ｒ体カリウム塩またはαリポ酸Ｓ体カリウム塩をαリポ酸Ｒ体またはαリポ酸Ｓ体に変換できることから、αリポ酸Ｒ体またはαリポ酸Ｓ体が複合化されたαリポ酸複合体が製造できた。【００６０】
αリポ酸複合体の製造方法（Ｅ）
αリポ酸複合体の製造方法（Ｄ）と同様に、１）〜２）の工程を行った後、３）の工程において、懸濁液に塩酸の滴下を行わないまま攪拌し、４）の工程を行った。
この製造方法では、塩酸の滴下を行わないため、αリポ酸Ｒ体ではなく、αリポ酸Ｒ体カリウム塩またはαリポ酸Ｓ体カリウム塩が複合化されたαリポ酸複合体が製造できた。【００６１】
αリポ酸複合体の製造方法（Ｆ）
次の１）〜３）の工程により、αリポ酸複合体を製造した。
１）水を攪拌しながらシクロデキストリンを加えて溶解させた。
２）上記１）の溶解液または懸濁液を冷却して一定の温度に調整した後、ジヒドロαリポ酸Ｒ体またはジヒドロαリポ酸Ｓ体を加えて撹拌し、ジヒドロαリポ酸Ｒ体のシクロデキストリン複合体の懸濁液、またはジヒドロαリポ酸Ｓ体のシクロデキストリン複合体の懸濁液を得た。
３）上記２）の懸濁液を乾燥することにより目的とするジヒドロαリポ酸Ｒ体またはジヒドロαリポ酸Ｓ体を包接したαリポ酸複合体を製造した。【００６２】
αリポ酸複合体の製造方法（Ｇ）
次の１）〜３）の工程により、αリポ酸複合体を製造した。
１）水を攪拌しながらシクロデキストリンを加えて溶解させた。
２）上記１）の溶解液または懸濁液を冷却して一定の温度に調整した後、ジヒドロαリポ酸Ｒ体またはジヒドロαリポ酸Ｓ体を加えて撹拌し、水酸化カリウムを滴下しながらジヒドロαリポ酸Ｒ体またはジヒドロαリポ酸Ｓ体を溶解させた。この溶解液または懸濁液のｐＨはおおよそ９〜１０であった。
３）上記２）の溶解液または懸濁液に塩酸（１Ｎ）を滴下し、ｐＨを調整し、攪拌して懸濁液を得た。この溶解液または懸濁液のｐＨはおおよそ３〜４であった。
４）上記３）の懸濁液を乾燥することにより目的とするジヒドロαリポ酸Ｒ体を包接したαリポ酸複合体を製造した。【００６３】
［実施例１］
水２４０ｇに撹拌しながらαリポ酸Ｒ体ナトリウム塩１０ｇを加え溶解させた。冷却して反応温度を５℃に調整しαシクロデキストリン４６ｇを加えて撹拌すると、αリポ酸Ｒ体ナトリウム塩のαシクロデキストリン複合体の懸濁液が得られた。１０分間撹拌後、１規定の塩酸４８ｍｌを滴下し、溶液のｐＨを３．０に調整した。フィルター濾過し、残留物を水で洗浄して、減圧乾燥することにより５１．６ｇの目的物が得られた。【００６４】
［比較例］
βシクロデキストリン４５．４ｇを４０℃の水１５０ｇに加えて溶かした。そこへαリポ酸Ｒ体４ｇ（純度７９％：３．２ｇ）を加えて４０℃で２時間撹拌した。
不溶物を濾過し、ろ液を５℃に冷却して１２時間後に濾過した。濾過により得られた固体粉末を大気圧下で４０℃に加温して乾燥した。乾燥後の収量は２９．５ｇであった。【００６５】
［実施例２〜２４］
上記、αリポ酸複合体の製造方法（Ａ）〜（Ｅ）またはジヒドロαリポ酸の製造方法（Ｆ）、（Ｇ）に従い、もしくはαリポ酸Ｓ体、ジヒドロαリポ酸Ｒ体もしくはジヒドロαリポ酸Ｓ体、またはこれらのアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩を複合化したαリポ酸複合体を製造した。
実施例１〜２４における、各製造条件等は表１〜３に示した。
なお、実施例１〜６において用いたαリポ酸Ｒ体ナトリウム塩は純度が７９％であり、実施例７において用いたαリポ酸Ｒ体ナトリウム塩は純度が８５％であり、実施例８、９において用いたαリポ酸Ｒ体ナトリウム塩は純度が８０％であった。
実施例１０〜１７及び２３で使用したαリポ酸Ｒ体ナトリウム塩の純度は９０％、実施例１８〜２０で使用したαリポ酸Ｒ体の純度は９９％、実施例２１で使用したジヒドロαリポ酸Ｒ体の純度は９９％、実施例２２で使用したジヒドロαリポ酸Ｒ体の純度は９０％、実施例２４で使用したジヒドロリポ酸の純度は９２％であった。また、比較例において使用したαリポ酸Ｒ体も純度が７９％であった。【００６６】
［実施例２５］
上記、αリポ酸複合体の製造方法（Ａ）に従い、αリポ酸複合体を製造した。実施例２５における、各製造条件等は表１に示した。なお、実施例２５において用いたαリポ酸Ｓ体ナトリウム塩は純度が７６％であった。【００６７】
３．結果  実施例１〜２５によって製造されたαリポ酸複合体、αリポ酸複合体および比較例（比較）で製造した結晶の収量等を表１〜３にまとめて示した。
表１〜３において、試料として用いたαリポ酸Ｒ体ナトリウム塩、αリポ酸Ｓ体ナトリウム塩、αリポ酸Ｒ体またはジヒドロαリポ酸Ｒ体の純度に応じ、これらに含まれる純粋なαリポ酸Ｒ体量、αリポ酸Ｓ体量またはジヒドロαリポ酸Ｒ体量を＊として（  ）内に示した。【００６８】
【表１】
2012014746.tif 000002
【００６９】
【表２】
2012014746.tif 000003
【００７０】
【表３】
2012014746.tif 000004
【００７１】
［試験例］
実施例１〜２５および上記比較例において製造したαリポ酸複合体を用い、次の各試験を行った。  これらの試験により、各複合体におけるαリポ酸Ｒ体、αリポ酸Ｒ体ナトリウム塩、αリポ酸Ｓ体ナトリウム塩またはジヒドロαリポ酸Ｒ体の含有量、αリポ酸Ｒ体、αリポ酸Ｓ体またはジヒドロαリポ酸Ｒ体の複合化の程度、各複合体の熱安定性、人工胃酸溶液安定性および物性等を調べた。【００７２】
［試験例１］
高速液体クロマトグラフィー分析
高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）（島津製作所製、ＬＣ−２０１０Ｃ）により、次に示した手順に従い、実施例１〜２５において製造したαリポ酸複合体に含まれるαリポ酸Ｒ体、αリポ酸Ｓ体ナトリウム塩またはジヒドロαリポ酸Ｒ体の含有量を測定した。
使用したカラムは、キラルカラム（４．６ｍｍｘ１５０ｍｍ）（ダイセル化学工業、  ＣＨＩＲＡＬＰＡＫＡＤ−ＲＨ）であり、測定条件を表４に示した。この条件下でのαリポ酸Ｒ体の保持時間は約３７．６分であった。【００７３】
手順
５ｍＭリン酸二水素カリウムとアセトニトリルを体積比１：１で混合し、リン酸を用いてｐＨ３．５に調整したものを希釈溶媒とした。実施例１〜２５において製造したαリポ酸複合体（２０ｍｇ）をそれぞれ１０ｍｌのメスフラスコに測り取り、希釈溶媒を５ｍｌ加えて６０秒間超音波処理した。その溶液に上記希釈溶媒を加え全量で１０ｍｌとし、フィルター（メーカー名、製品名：ＡＤＶＡＮＴＥＣ  ＤＩＳＭＩＣ−１３ＨＰ  ＰＴＦＥ  ０．２０μｍ）処理して溶液を得た。これを用いてＨＰＬＣを行った。分析値より既知の標準から計算し、含有量を求めた。【００７４】
【表４】
2012014746.tif 000005
【００７５】
その結果、表５に示したように、比較例によって製造されたαリポ酸複合体と比べて、本発明の製造方法（Ａ）〜（Ｇ）によって製造されたαリポ酸複合体は、αリポ酸Ｒ体が６．７９％以上、ジヒドロαリポ酸Ｒ体が１３．４％以上、αリポ酸Ｓ体が１２．１％以上と高い純度で含有されていることが示された。
また、αリポ酸複合体の収率として、本発明のαリポ酸複合体の製造において、試料として用いたαリポ酸Ｒ体、αリポ酸Ｒ体ナトリウム塩、αリポ酸Ｓ体ナトリウム塩またはジヒドロαリポ酸Ｒ体の純度に応じ、これらの試料に含まれる純粋なαリポ酸Ｒ体、αリポ酸Ｓ体またはジヒドロαリポ酸Ｒ体が、最終的にどの程度反応に利用され、複合体に含まれたかをαリポ酸利用率として求めた。
その結果、表５に示したように、比較例によって製造されたαリポ酸複合体と比べて、本発明の製造方法（Ａ）〜（Ｇ）によって製造されたαリポ酸複合体は、７０％以上の高い収率を示した。
従って、この結果より、本発明の製造方法（Ａ）〜（Ｇ）が、αリポ酸Ｒ体、αリポ酸Ｒ体ナトリウム塩、αリポ酸Ｓ体ナトリウム塩またはジヒドロαリポ酸Ｒ体を効率的に利用して複合化できる、αリポ酸複合体の製造方法であることが確認された。【００７６】
【表５】
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【００７７】
表５において、αリポ酸複合体の収率＊２を求めるにあたり使用する「処方値」とは、試料として用いたαリポ酸Ｒ体、αリポ酸Ｒ体ナトリウム塩、αリポ酸Ｓ体ナトリウム塩またはジヒドロαリポ酸Ｒ体の純度に応じて求めた純粋なαリポ酸Ｒ体重量、αリポ酸Ｓ体重量またはジヒドロαリポ酸Ｒ体重量のことをいう。
各実施例または比較例におけるαリポ酸の処方値は、実施例１〜６が７．９ｇ、実施例７が８５０ｇ、実施例８が４ｇ、実施例９が２ｇ、比較例が３．２ｇであった。また、実施例１０〜１２が４ｇ、実施例１３が１７０ｋｇ、実施例１４〜１６が１．１ｇ、実施例１７が２．２ｇ、実施例１８〜２０が４．９ｇ、実施例２１が１．８５ｇ、実施例２２、２４が１．６１ｇ、実施例２３が１．１ｇ、実施例２５が７．６ｇであった。【００７８】
［試験例２］
熱安定性試験
上記の実施例１〜３において製造したαリポ酸Ｒ体を含むαリポ酸複合体と、比較として実施例において使用したαリポ酸Ｒ体自体またはαリポ酸Ｒ体ナトリウム塩自体を用い、飽和水蒸気圧下、７０℃、２時間の条件で保存した。その後、それぞれのαリポ酸Ｒ体含有量を試験例１と同様に、ＨＰＬＣを用いて測定した。
初期含有量を１００％に設定し、保存後の含有量を初期値に対する百分率で計算しそれを残存率とし、本発明で製造したαリポ酸複合体の熱安定性を調べた。
その結果、表６に示したように、本発明において製造したαリポ酸複合体はいずれもαリポ酸Ｒ体が高い割合で残存しており、熱安定性が高いことが示された。【００７９】
【表６】
2012014746.tif 000007
【００８０】
［試験例３］
人工胃酸溶液安定性試験
上記の実施例３および４において製造したαリポ酸Ｒ体を含むαリポ酸複合体と、比較として実施例において使用したαリポ酸Ｒ体自体またはαリポ酸Ｒ体ナトリウム塩自体を用い、それぞれ人工胃酸溶液（第１５改正日本薬局方・製剤試験法・崩壊（溶質）試験第１液：３４ｍＭ  ＮａＣｌ水溶液、ｐＨ＝１．２（ＨＣｌａｑにて調整））に懸濁させ、１分間超音波（ソニケーション）処理を行った。これをさらに３７℃の浴槽中で４分間かき混ぜたのち、希釈溶媒（５ｍＭリン酸二水素カリウムとアセトニトリルを体積比１：１で混合し、リン酸を用いてｐＨ３．５に調整したもの）を用いて希釈し、均一になるように懸濁した。この溶液部分に含まれるαリポ酸Ｒ体含有量を試験例１と同様に、ＨＰＬＣを用いて測定した。
人工胃酸溶液処理前のαリポ酸Ｒ体含有量を１００％に設定し、処理後の含有量を処理前に対する百分率で計算しそれを残存率とし、本発明で製造したαリポ酸複合体の人工胃酸溶液安定性を調べた。
その結果、表７に示したように、本発明において製造したαリポ酸複合体はαリポ酸Ｒ体が高い割合で残存しており、人工胃酸溶液安定性が高いことが示された。【００８１】
【表７】
2012014746.tif 000008
【００８２】
［試験例４］
αリポ酸の複合化の程度の検討
一例として上記の実施例１〜５、実施例１０〜１２において製造したαリポ酸Ｒ体を含むαリポ酸複合体と、比較として実施例において使用したαリポ酸Ｒ体自体を用い、αリポ酸の複合化の程度を示差走査熱量分析（ＤＳＣ）（島津製作所、ＤＳＣ−６０）により分析した。純粋なαリポ酸Ｒ体は４６−４９℃で融解するため、上記実施例１〜５、実施例１０〜１２において製造したαリポ酸複合体中に複合化されていないαリポ酸が存在すれば、５０℃付近に溶融ピークが観察されることになる。そして、このピークの曲線下面積（ＡＵＣ）から複合化されていないαリポ酸の溶融エネルギー（Ｊ／ｇ）を計算できる。
アルミニウム蓋付セルに、上記実施例１〜５、実施例１０〜１２において製造したαリポ酸複合体またはαリポ酸Ｒ体をそれぞれ入れ、測定温度３０℃から１００℃まで範囲を１０℃／ｍｉｎで昇温したときのＤＳＣ曲線を調べた。
その結果、表８に示したように、本発明において製造したいずれのαリポ酸複合体にも、複合化されていないαリポ酸Ｒ体が存在しないことが確認された。【００８３】
【表８】
2012014746.tif 000009
【００８４】
［試験例５］
物性データ
上記の実施例１〜３、実施例２２および実施例２４において製造したαリポ酸Ｒ体またはジヒドロαリポ酸Ｒ体を含むαリポ酸複合体について１Ｈ  ＮＭＲ、ＩＲ測定を行い、物性を調べた。１Ｈ  ＮＭＲスペクトルはＢＲＵＣＫＥＲ社ＤＰＸ４００  ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｅｒで測定し、化学シフト値はＭｅ４Ｓｉを内部標準としｐｐｍで表記した。ＩＲスペクトルはＴｈｅｒｍｏ  Ｎｉｃｏｌｅｔ社Ｎｉｃｏｌｅｔ．  Ａｖａｔａｒ  ３２０  ＦＴ−ＩＲ  ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｅｒで直接測定した。得られた各αリポ酸複合体の物性を表９に示した。【００８５】
【表９】
2012014746.tif 000010
【００８６】
［実施例５］
下記の組成を有する混合製剤を製造した。
上記の実施例１〜４と同様に製造した、αリポ酸Ｒ体を含むαリポ酸複合体（２５０ｇ）をそれぞれ、微細結晶セルロース７５０ｇと共に均一に粉砕した。これを篩過した混合物中に、澱粉２５０ｇ、ラクトース７３２．５ｇ、ステアリン酸マグネシウム１５ｇおよび酸化ケイ素２．５ｇを加えて、充分に混合した。この混合粉末を用いて、打錠機により重量４００ｍｇの錠剤を製造した。【００８７】
［試験例６］
αリポ酸複合体の経口吸収性の検討  本発明の製造方法によって得られるαリポ酸複合体の経口吸収性を検討した。一例として、上記の実施例３において製造した、αリポ酸Ｒ体を含むαリポ酸複合体と、比較として実施例において使用したαリポ酸Ｒ体自体を用いた。
ＳＤラット（７週齢）（チャールズリバー社）１８匹を７日間予備飼育した後、６匹を１ケージに入れ、固形飼料（ＭＦ、オリエンタル酵母工業株式会社製）と滅菌蒸留水をそれぞれ自由に与えた。ラットの個体識別は、ピクリン酸を被毛に塗布することにより行った。これらのラットは試験開始前日の１８時間前より絶食を行った。
上記のラットをそれぞれ６匹ずつからなる３群に分けた。３群のうちの１群のラットについてαリポ酸複合体及びαリポ酸Ｒ体自体（比較物）のいずれも投与することなく、エーテル麻酔下で、ヘパリン加注射筒を用いて頸動脈から採血をした（コントロール群）。得られた血液は採血後直ちに遠心し、ここで得られた血漿は−８０℃で保存された。【００８８】
残りの１群のうちのラットに対して、純水に溶解させたαリポ酸複合体の溶液を、αリポ酸量含有量に換算して３０ｍｇ／ｋｇ体重となるように経口投与した。また、残りの１群のラットに対しては、純水に溶解させたαリポ酸Ｒ体を、αリポ酸含有量に換算して３０ｍｇ／ｋｇ体重となるように経口投与した。
経口投与後０．５、１、２、３、及び４時間後に、各被験物質投与群及び各比較物質投与群のラットについて、コントロール群と同じ方法で採血した。各群のラットにける血漿中のαリポ酸Ｒ体の濃度を表１０に示した条件で、ＨＰＬＣで分離し、ＡＰＩ  ３２００（登録商標）  ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ  Ｓｙｓｔｅｍ  （ＡＢ  ＳＣＩＥＸ製）を用いて測定した。
その結果、本発明のαリポ酸Ｒ体を含むαリポ酸複合体を投与した群は、αリポ酸Ｒ体自体を投与した群に対して、経口吸収性が有意に向上した。【００８９】
【表１０】
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【００９０】
［試験例７］
αリポ酸複合体のラセミ化安定性の検討
本発明の製造方法によって得られるαリポ酸複合体に含まれるαリポ酸Ｒ体またはジヒドロαリポ酸Ｒ体が、製造工程においてラセミ化安定性を検討した。
一例として、上記の実施例１３において製造した、αリポ酸Ｒ体ナトリウム塩を含むαリポ酸複合体に含まれるαリポ酸Ｒ体と、製造に使用した原材料のαリポ酸Ｒ体ナトリウム塩の光学純度（％ｅｅ：（Ｒ−Ｓ）／Ｒ＋Ｓ＝％ｅｅ）を表４の測定条件を用いＨＰＬＣにて測定し、比較した。原材料のαリポ酸Ｒ体ナトリウム塩は、％ｅｅ＝９８．５％であった。実施例１３において製造したαリポ酸複合体に含まれるαリポ酸Ｒ体は、％ｅｅ＝９８．５％であった。この結果より、本発明の製造方法によって、αリポ酸Ｒ体がラセミ化することなくαリポ酸複合体を製造できることが確認された。【００９１】
［試験例８］
αリポ酸複合体の食味評価
本発明の製造方法によって得られるαリポ酸複合体の食味を評価した。
２０人のパネラーに、上記の実施例１３において製造したαリポ酸複合体を被験物質として、比較対照としてαリポ酸Ｒ体またはαリポ酸Ｒ体ナトリウム塩を摂食させ、それぞれ食味を評価させた。
食味評価は次のように行った。即ち、２０人のパネラーを１０人ずつの２群に分け２日間の試験期間中、各群に対して１日１回１種類のサンプルを摂食させた。朝１０時に水で口をすすいだ後、サンプルを舌の上に乗せて１分間味や刺激を評価させた後、水でうがいさせた。翌日に群を入れ替え、１日目とは別のサンプルについて同様に評価した。３日目には１日目および２日目とは別のサンプルについて同様に評価した。被験者一人に対して、被験物質としてαリポ酸複合体２００ｍｇ及び比較対照としてαリポ酸Ｒ体２０ｍｇまたはαリポ酸Ｒ体ナトリウム塩２０ｍｇをサンプルとして用い、被験者には事前にサンプルについての情報を知らせずに行った。
その結果、αリポ酸Ｒ体及びαリポ酸Ｒ体ナトリウム塩投与群では全てのパネラーにイオウ臭と辛味を有する独特のピリピリとした刺激が感じられたが、αリポ酸複合体投与群ではそのような臭いや刺激を全く感じられなかった。この結果について、パネラー間の差は認められなかった。この結果より、αリポ酸複合体では味が大幅に改良されていることが確かめられた。
【産業上の利用可能性】
【００９２】
本発明の製造方法によって得られる、αリポ酸Ｒ体もしくはαリポ酸Ｓ体、ジヒドロαリポ酸Ｒ体もしくはジヒドロαリポ酸Ｓ体またはこれらのアルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩を高確率で複合化しているαリポ酸複合体は、熱や人工胃酸溶液に安定であり十分な効果を発揮する成分として、医薬品や健康食品等に幅広く活用することができる。
【国際調査報告】
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