(57)【要約】  本発明は、カシューナッツ殻油を取り扱いやすいコート製剤に製剤化することを課題とする。また、本発明は、カシューナッツ殻油によるかぶれを防止することを課題とする。さらに、本発明は、ルーメン内でのカシューナッツ殻油の放出に適した製剤を提供することを課題とする。上記課題を解決するために、カシューナッツ殻油、アナカルド酸またはカルダノールを吸油剤に吸着させ、これを造粒し、粒子表面を硬化油またはコート剤で被覆してなるコート製剤を提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
カシューナッツ殻油、アナカルド酸またはカルダノールを吸油剤に吸着させ、これを造粒し、粒子表面を硬化油またはコート剤で被覆してなるコート製剤。
【請求項２】
請求項１に記載のコート製剤を含有することを特徴とする飼料添加剤。
【請求項３】
請求項１に記載のコート製剤または請求項２に記載の飼料添加剤を含有することを特徴とする飼料。
【請求項４】
請求項３に記載の飼料を摂取させることを特徴とする家畜の飼育方法。
【請求項５】
カシューナッツ殻油、アナカルド酸またはカルダノールを吸油剤に吸着させること、これを造粒すること、及び粒子表面を硬化油またはコート剤で被覆することを含む、コート製剤の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、カシューナッツ殻油（ＣＮＳＬ）を吸油剤に吸着させ、これを造粒し、粒子表面を被覆してなるコート製剤に関する。本発明はまた、コート製剤を含有する飼料添加剤、飼料及びこれらを用いた家畜などの飼育方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
カシューナッツ殻油には、抗菌作用（非特許文献１）、コクシジウム症軽減作用(特許文献１−３)が知られている。さらに、反芻動物のルーメン機能改善効果に関しては、アナカルド酸を用いた試験管試験結果（非特許文献２）が報告されている。また、カシューナッツ殻油がStaphylococcus aureus、Streptococcus mutans、Bacillus subtilis、Bacillus ammoniagenesのようなグラム陽性菌に抗菌作用があり、Escherichia coli、Enterobacter aerogenes、Pseudomonas aeruginosaのようなグラム陰性菌およびSaccharomyces cerevisiae、Candida utilis、Penichillium chrysogenumのような真菌に抗菌作用が無いことが報告されている（非特許文献３）。
カシューナッツ殻油は室温で液体または固体であるため、飼料に均一に混和するために製剤化することが好ましい。さらにカシューナッツはうるし科の植物のため、使用者にかぶれを引き起こすこともある。このためカシューナッツ殻油が表面に露出しておらず、反芻動物のルーメン内でカシューナッツ殻油が放出される製剤にすることが好ましい。かぶれを防止するためには、製剤の表面をコーティングすることが好ましい。
硬化油でコーティングした飼料はルーメンバイパス飼料としては報告されているが、ルーメン中に有効成分を放出する飼料は報告されていない。たとえば硬化油でコーティングしたビタミンＥ含有飼料はルーメンをバイパスしてしまう（特許文献４）。また、硬化油でコーティングしたビタミンＫ３含有飼料は粒径が５０〜１０００μｍと小さく、牛が反芻しても崩壊せず、ルーメン内でも消化されないため、ルーメンをバイパスしてしまう（特許文献５）。さらに、動物脂、植物油および硬化油からなりしかも融点が４０〜５０℃に調整された油脂混合物で被覆した事を特徴とする油脂被覆固形飼料が報告されている（特許文献６）。しかしながら、ルーメン内での放出については記載が無い。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】特開2003-238400号公報
【特許文献２】特開2001-151675号公報
【特許文献３】特開平8-231410号公報
【特許文献４】特開2005-278442号公報
【特許文献５】特開平6-237700号公報
【特許文献６】特開平6-217707号公報
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】Muroi, H. et al. Bioorganic & Medicinal Chemistry 12,583-587(2004)
【非特許文献２】Van Nevel C.J., et al, Applied Microbiology 21, 365-366 (1971)
【非特許文献３】Himejima M. and Kubo I., J.Agric.Food Chem., 39, 418-421 (1991)
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は、カシューナッツ殻油を取り扱いやすいコート製剤に製剤化することを課題とする。また、本発明は、カシューナッツ殻油によるかぶれを防止することを課題とする。さらに、本発明は、ルーメン内でのカシューナッツ殻油の放出に適した製剤を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者らは、上記課題を解決すべく鋭意研究を行った結果、カシューナッツ殻油を吸油剤に吸着させ、これを造粒し、硬化油またはコート剤で粒子表面を被覆することにより、カシューナッツ殻油を取り扱いやすいコート製剤に製剤化でき、かつ、カシューナッツ殻油によるかぶれを防止できることを見出した。
本発明者らはまた、本発明のコート製剤が、優れた取扱性およびかぶれ防止機能を有することに加えて、優れたルーメン機能改善効果を有することを見出した。
本発明者らは、このようにして、本発明を完成するに至った。【０００７】
すなわち、本発明は以下のとおりである。
（１）カシューナッツ殻油、アナカルド酸またはカルダノールを吸油剤に吸着させ、これを造粒し、粒子表面を硬化油またはコート剤で被覆してなるコート製剤。
（２）（１）に記載のコート製剤を含有することを特徴とする飼料添加剤。
（３）（１）に記載のコート製剤または（２）に記載の飼料添加剤を含有することを特徴とする飼料。
（４）（３）に記載の飼料を摂取させることを特徴とする家畜の飼育方法。
（５）カシューナッツ殻油、アナカルド酸またはカルダノールを吸油剤に吸着させること、これを造粒すること、及び粒子表面を硬化油またはコート剤で被覆することを含む、コート製剤の製造方法。
【発明の効果】
【０００８】
カシューナッツ殻油を、ハンドリング性が良く、かぶれのないコート製剤に加工することにより、飼料への混和が容易になるとともに使用者にとって安全な製剤になる。
本発明のコート製剤は、食下時にルーメンにおいて、カシューナッツ殻油を放出することができる。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
本発明のコート製剤は、カシューナッツ殻油、アナカルド酸またはカルダノールを吸油剤に吸着させ、これを造粒し、粒子表面を硬化油またはコート剤で被覆してなる製剤である。
【００１０】
カシューナッツ殻油は、カシューナッツ ツリー(Anacardium occidentale L.)の実の殻に含まれる油状の液体である。カシューナッツ殻油は、その成分として、アナカルド酸、カルダノール、カルドールを含むものである。一般に、アナカルド酸は加熱処理することによりカルダノールに変換される。
カシューナッツの殻を圧搾することにより抽出された非加熱カシューナッツ殻油は、J.Agric.Food Chem. 2001, 49, 2548-2551に記載されるように、アナカルド酸を５５〜８０質量％、カルダノールを５〜２０質量％、カルドールを５〜３０質量％含むものである。
非加熱カシューナッツ殻油を１３０℃以上で加熱処理して得られる加熱カシューナッツ殻油は、非加熱カシューナッツ殻油の主成分のアナカルド酸が脱炭酸しカルダノールに変換され、アナカルド酸を０〜１０質量％、カルダノールを５５〜８０質量％、カルドールを５〜３０質量％含むものとなる。
【００１１】
カシューナッツ殻油は、カシューナッツの殻を圧搾することにより抽出された植物油として得ることができる。また、カシューナッツ殻油は、抽出により、例えば、カシューナッツ殻を溶剤抽出して得ることもできる。さらに、カシューナッツ殻油は、特開平８−２３１４１０号公報に記載されている方法によって、例えば、溶剤抽出法によって得ることができる。
カシューナッツ殻油は、市販品を用いることもできる。
本発明のカシューナッツ殻油は、上記のようにして得られた非加熱カシューナッツ殻油を、７０℃以上、好ましくは１３０℃以上に加熱することによって得た加熱カシューナッツ殻油であってもよい。
本発明のカシューナッツ殻油は、カシューナッツの殻から圧搾抽出（非加熱カシューナッツ殻油）し、これを１３０℃に加熱処理して得たものでもよい。
本発明のコート製剤は、カシューナッツ殻油の代わりに、アナカルド酸またはカルダノールを含んでいてもよい。
【００１２】
本発明のコート製剤におけるカシューナッツ殻油の含有量は、コート製剤の全量基準で、１５質量％〜７０質量％、好ましくは２０質量％〜６０質量％、さらに好ましくは２５質量％〜５５質量％である。１５質量％以上であればルーメン発酵改善効果を効率的に奏することができ、７０質量％以下であれば作業上、手のかぶれが解消され、コート製剤の取扱性を維持することができるので好ましい。
【００１３】
本発明の飼料添加剤中のカシューナッツ殻油の含有量は、好ましくは０．０２質量％〜９０質量％、より好ましくは０．０４質量％〜８０質量％、さらに好ましくは０．０６質量％〜７０質量％である。０．０２質量％以上であればルーメン発酵改善効果を効率的に奏することができ、９０質量％以下であれば取扱性を維持することができるため好ましい。
【００１４】
本発明の飼料中のカシューナッツ殻油の含有量は、好ましくは０．０２質量％〜４．０質量％、より好ましくは０．０４質量％〜２．０質量％、さらに好ましくは０．０６質量％〜１．０質量％である。０．０２質量％以上であればルーメン発酵改善効果を効率的に奏することができ、４．０質量％以下であれば取扱性を維持することができるため好ましい。
【００１５】
本発明において使用されるアナカルド酸としては、天然物アナカルド酸、合成アナカルド酸、それらの誘導体が挙げられる。また、市販のアナカルド酸を用いてもよい。アナカルド酸は、特開平８−２３１４１０号公報に記載されるように、カシューナッツの殻を有機溶剤で抽出処理して得られたカシューナッツ油を、例えば、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いてｎ−ヘキサン、酢酸エチルおよび酢酸の混合溶媒の比率を変えて溶出することによって得ることができる（特開平３−２４０７２１号公報、特開平３−２４０７１６号公報など）。このようなアナカルド酸は、カシューナッツ殻油と同様の含有量で、コート製剤、飼料添加剤、飼料に含めることができる。
【００１６】
本発明において使用されるカルダノールとしては、天然物カルダノール、合成カルダノール、それらの誘導体が挙げられる。また、本発明において使用されるカルダノールは、カシューナッツ殻油の主成分のアナカルド酸を脱炭酸することにより、得ることができる。このようなカルダノールは、カシューナッツ殻油と同様の含有量で、コート製剤、飼料添加剤、飼料に含めることができる。
なお、加熱カシューナッツ殻油を用いる場合、加熱カシューナッツ殻油中のアナカルド酸とカルダノールとの質量比は、好ましくは、０：１００〜２０：８０である。
【００１７】
本発明において使用される吸油剤としては、ベントナイト、ゼオライト、アタパルジャイト、セピオライト、パーライト、珪藻土、シリカ、活性炭、活性白土、酸性白土が挙げられ、粒子状のものが好ましい。本発明の吸油剤としては、１００ｇ当たり５０〜３００ｇの油を吸着する吸油剤であることが好ましい。また、粒径が２００μｍを超えると粒子が粗くなり分離してくるため、粒径が２〜２００μｍであるものが好ましい。
【００１８】
本発明のコート製剤は、例えば、次のようにして得ることができる。
吸油剤およびカシューナッツ殻油を混合した後、通常の押し出し造粒機を用いて造粒することができ、その後、必要に応じて、打錠する。
また、吸油剤およびカシューナッツ殻油の混合物は、ブリケットマシーンで打錠成型することもできる。
なお、穀物粉などの飼料成分を前記吸油剤およびカシューナッツ殻油に混合し、一緒に造粒することもできる。
造粒後は、ペレットの角をとり、面取りをするために、まるめ処理を行うことができる。まるめ処理は、例えばマルメライザーを使用して行うことができる。
【００１９】
本発明において、造粒後、必要に応じて、まるめ処理を行った後、例えば硬化油またはコート剤によるコート処理を行い、本発明のコート製剤を製造することができる。
本発明において使用される硬化油としては、大豆極度硬化油、パーム極度硬化油、および菜種極度硬化油のような極度硬化油が挙げられるが、ルーメン中にカシューナッツ殻油、アナカルド酸、またはカルダノールを放出できる限り、限定されない。
本発明において使用されるコート剤としては、ゼイン（小林香料（株）製品）、セラック（（株）岐阜セラック製品）、ＨＰＭＣ（ヒドロキシプロピルメチルセルロース：商品名メトローズ、信越化学工業（株）製品）、プルラン（（株）林原商事製品）、およびヘミロース（フロイント産業（株）製品）、ショ糖、乳糖、トレハロースなどの糖類、オブラート、水解紙などの水溶性のシート類が挙げられるが、ルーメン中にカシューナッツ殻油、アナカルド酸、またはカルダノールを放出できる限り、限定されない。
また、顆粒又は錠剤は、パウダー状のコート剤でコートすることもできる。このようなコート剤として、デンプン、小麦粉などの穀物粉、上述した吸油剤に用いる原料が挙げられる。
硬化油を用いてコート処理する場合には、造粒後、以下の工程を実施することが好ましい。
・溶解した硬化油中に粒子を投入後粒子のみ取り出し冷却する。
・コート処理を繰り返すことにより厚さを調整する。
コート剤を用いてコート処理する場合には、造粒後、以下の工程を実施することが好ましい。
・粒子にコート剤の水溶液もしくはエタノール溶液を吹き付けた後乾燥する。
・コート処理を繰り返すことにより厚さを調節する。
【００２０】
本発明のコート製剤において、粒子と、硬化油またはコート剤との好ましい質量比は、８５〜９９．９：１５〜０．１である。
【００２１】
コートは２種以上の硬化油および／またはコート剤をそれぞれ塗り重ねた複数層であっても良い。硬化油またはコート剤を用いてコート処理する前に、カシューナッツ殻油と吸着剤の混合物のべとつき防止のために、ベントナイト、ゼオライト、アタパルジャイト、セピオライト、パーライト、珪藻土、シリカ、活性炭、活性白土、酸性白土等の吸油剤を塗布することが好ましい。
コート剤は、ゼイン、セラック、ＨＰＭＣ（ヒドロキシプロピルメチルセルロース）、プルランおよびヘミロースが好ましい。
また、上記吸油剤の塗布および硬化油またはコート剤の塗布はそれぞれ複数回塗り重ねても良い。
【００２２】
本発明のコート製剤は、反芻動物用のルーメン発酵改善剤、鼓脹症予防剤、鼓脹症治療剤、アシドーシス治療剤、クロストリディウムによる病害の防除剤、コクシジウムによる病害の防除剤、家畜の増体剤としても好適に用いられる。
【００２３】
本発明の飼料添加剤は、本発明のコート製剤を含むものであれば特に制限されないが、その他に、反芻動物の成長促進に有効な成分、栄養補助成分、保存安定性を高める成分等の任意成分をさらに含むものであってもよい。このような任意成分としては、例えば、エンテロコッカス属細菌、バチルス属細菌、ビフィズス菌等の生菌剤；アミラーゼ、リパーゼ等の酵素；Ｌ−アスコルビン酸、塩化コリン、イノシトール、葉酸等のビタミン；塩化カリウム、クエン酸鉄、酸化マグネシウム、リン酸塩類等のミネラル、ＤＬ−アラニン、ＤＬ−メチオニン、Ｌ−リジン等のアミノ酸；フマル酸、酪酸、乳酸、酢酸等の有機酸及びそれらの塩；エトキシキン、ジブチルヒドロキシトルエン、ブチルヒドロキシアニソール、フェルラ酸、ビタミンＣ、ビタミンＥ等の抗酸化剤；プロピオン酸カルシウム等の防カビ剤；ＣＭＣ、カゼインナトリウム、ポリアクリル酸ナトリウム等の粘結剤；レシチン、グリセリン脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル等の乳化剤；アスタキサンチン、カンタキサンチン等の色素；各種エステル、エーテル、ケトン類等の着香料が挙げられる。
【００２４】
また、本発明の飼料添加剤は、通常の飼料に用いられる他の飼料成分と混合して、飼料とすることができる。飼料の種類や、コート製剤以外の成分は、特に制限されない。飼料は、好ましくは反芻動物用である。
【００２５】
本発明の飼料は、牛、ヤギ、羊などの反芻動物の飼育に好適である。摂取させる飼料の量は、動物の種類、体重、年齢、性別、健康状態、飼料の成分などにより適宜調節することができ、このとき飼料に含まれるカシューナッツナッツ殻油が好ましくは0.005〜500ｇ／頭・日、より好ましくは0.05〜100ｇ／頭・日、さらに好ましくは0.5〜50ｇ／頭・日である。
飼料を摂取させる方法及び飼育する方法は、動物の種類に応じて、通常用いられる方法をとることができる。
【実施例】
【００２６】
カシュー・トレーディング（株）よりカシューナッツの殻５００ｋｇを入手し、圧搾することによりカシューナッツ殻油（非加熱ＣＮＳＬ）１５８ｋｇを製造した。また、加熱処理によりアナカルド酸をカルダノールに変換した加熱処理カシューナッツ殻油（加熱ＣＮＳＬ）を、カシュー・トレーディング（株）より入手した。
ＣＮＳＬの組成は以下の方法で測定した。すなわち、HPLC（Waters600、日本ウォーターズ（株））、検出機（Waters490E、日本ウォーターズ（株））、プリンタ(クロマトパックＣ−Ｒ６Ａ、島津製作所)、カラム（SUPELCOSIL LC18、SUPELCO社）を用いた。アセトニトリル：水：酢酸が８０：２０：１（用量比）の溶媒を用い、流速は２ｍｌ／分とした。２８０ｎｍの吸光度で検出した。
非加熱カシューナッツ殻油には、アナカルド酸が６１．８質量％、カルダノールが８．２質量％、カルドールが１９．９質量％、加熱カシューナッツ殻油には、アナカルド酸が０．０質量％、カルダノールが７１．４質量％、カルドールが１４．４質量％含まれていた。【００２７】
１．比較例
シリカ（Ｓｉｐｅｒｎａｔ２２、エボニック デグサ ジャパン（株）製品）６００ｇと非加熱ＣＮＳＬ １，２００ｇを混練後、押し出し造粒（φ３．０ｍｍ）した。丸め処理にはマルメライザーＱ４００型（（株）テクノパウダルトン社製品）を用いた。５１０ｒｐｍで６０秒間丸め処理を行った。粒子同士が付着しやすく、粒径が増大した（製剤Ｇ、比較例１）。
シリカ（Ｓｉｐｅｒｎａｔ２２、エボニック デグサ ジャパン（株）製品）１，１７０ｇと非加熱ＣＮＳＬ ２，３４０ｇを混練後、押し出し造粒（φ３．０ｍｍ）した。丸め処理にはマルメライザーＱ４００型（（株）テクノパウダルトン社製品）を用いた。５１０ｒｐｍで３０秒間丸め処理後にベントナイト（Ｎａ型ベントナイト、クニミネ工業（株）製品）を９５ｇ、３０秒後にベントナイトを９５ｇ添加した。さらに３０秒丸め処理を継続し、ベントナイトで表面をコートしたφ３〜４ｍｍの製剤Ｈ（比較例２）を製造した。【００２８】
２．実施例
セラック（（株）岐阜セラック製品）２ｇをエタノール１００ｍｌに溶解させた。製剤Ｈ（比較例２）１００ｇにハンドスプレーで噴霧させながら表面にセラックを均一に付着させた。付着量は６．０ｇであった。５０℃で１時間乾燥させた。上記操作を４回繰り返し、最終的に０．５質量％セラックでコートされたコート製剤Ａ（実施例１）を得た。
ゼイン（小林香料（株）製品）２ｇを７０質量％のエタノール水溶液１００ｍｌに溶解させた。製剤Ｈ（比較例２）１００ｇにハンドスプレーで噴霧させながら表面にゼインを均一に付着させた。付着量は５．３ｇであった。５０℃で１時間乾燥させた。上記操作を４回繰り返し、最終的に０．５質量％ゼインでコートされたコート製剤Ｂ（実施例２）を得た。
ＨＰＭＣ（ヒドロキシプロピルメチルセルロース：商品名メトローズ、信越化学工業（株）製品）２ｇを純水１００ｍｌに溶解させた。製剤Ｈ（比較例２）１００ｇにハンドスプレーで噴霧させながら表面にＨＰＭＣを均一に付着させた。付着量は１０ｇであった。５０℃で１時間乾燥させた。上記操作を２回繰り返し、最終的に０．６質量％ＨＰＭＣでコートされたコート製剤Ｃ（実施例３）を得た。
プルラン（（株）林原商事製品）２ｇを純水１００ｍｌに溶解させた。製剤Ｈ（比較例２）１００ｇにハンドスプレーで噴霧させながら表面にプルランを均一に付着させた。付着量は８．６ｇであった。５０℃で１時間乾燥させた。上記操作を２回繰り返し、最終的に０．６質量％プルランでコートされたコート製剤Ｄ（実施例４）を得た。
ヘミロース（フロイント産業（株）製品）９ｇをエタノール１０ｍｌに溶解させた。純水７９．２ｍｌに上記ヘミロースエタノール溶液を溶解した。更にＤ−ソルビトール０．９ｇ、蔗糖脂肪酸エステル（Ｓ−１１７０、三菱化学フーズ（株）製品）０．９ｇを溶解させた。製剤Ｈ（比較例２）１００ｇにハンドスプレーで噴霧させながら表面に上記コーティング液を均一に付着させた。付着量は５．０ｇであった。５０℃で１時間乾燥させた。上記操作を繰り返し、最終的に０．９質量％ヘミロースでコートされたコート製剤Ｅ（実施例５）を得た。
パーム極度硬化油（横関油脂工業（株）製品）１．０ｇを２００ｍｌのプラスチックビーカーに入れ、６０℃に加温し溶解させた。製剤Ｈ（比較例２）５０ｇを加え混合し、表面に硬化油を均一に付着させた。室温に冷却する事により、硬化油でコートされた製剤を得た。上記操作を１０回繰り返し、最終的に１３質量％硬化油でコートされたコート製剤Ｆ（実施例６）を得た。
比較例の製剤および実施例のコート製剤の物性を表１に示す。【００２９】
製剤およびコート製剤の物性
完全にぱらぱらしていてべとつき感無し                      ０
非常に軽度のべとつき感有り                                １
べとつき感有り                                            ２
製剤同士がくっついてしまい玉を形成してしまう              ３
粘土状                                                    ４
最高点  ４【００３０】
【表１】
2011013592.tif 000002
【００３１】
成人を対象として、製剤およびコート製剤のかぶれに及ぼす影響について検討した。対照として非加熱ＣＮＳＬ ５０μＬを４０代男性の左腕に乗せ３０秒後にふき取った。前記の実施例１〜６、３粒を40代男性の左腕に乗せ３０秒後に取り除いた。同様に、前記比較例１および２の製剤およびコート製剤３粒を40代男性の左腕に乗せ３０秒後に取り除いた。１週間毎日観察し、以下の基準に基づき皮膚反応を評価した。【００３２】
紅斑および痂皮の形成
紅斑なし                                                  ０
非常に軽度の紅斑（かろうじて識別できる）                  １
はっきりした紅斑                                          ２
中程度ないし高度紅斑                                      ３
高度紅斑から僅かな痂皮の形成（深部損傷）まで              ４
最高点  ４【００３３】
【表２】
2011013592.tif 000003
【００３４】
コート剤もしくは硬化油でコートすることによりかぶれを防ぐことが出来ることがわかる。【００３５】
３．ルーメン機能改善例
（１）培養
培養イノキュラムには、肉牛よりルーメンカニューレを用いて経口採取したルーメン液（２重ガーゼろ液）を用いた。イノキュラムはMcDougalの人工唾液（pH 6.8）で2倍に希釈して使用した。
McDougalの人工唾液（pH 6.8）の組成を以下に示す。
蒸留水                １Ｌ
ＭｇＣｌ2・６Ｈ2Ｏ    ０．１３ｇ
Ｎａ2ＨＰＯ4          ３．６８ｇ
ＣａＣｌ2・２Ｈ2Ｏ    ０．０５３ｇ
ＫＣｌ                ０．５７ｇ
ＮａＣｌ              ０．４７ｇ
ＮａＨＣＯ3          ９．８０ｇ／ｐＨ６．８【００３６】
非加熱ＣＮＳＬの試験培養液濃度を５００ｍｇ／Ｌとして実施した。ＣＮＳＬ、０．０５ｇを１ｍｌのエタノールに溶解し、１００μｌをねじ口試験管に添加した。数時間放置することでエタノールを揮散させた。ここに培養基質としてコーンスターチ０．１５ｇ、配合飼料粉末０．０２５ｇおよびオーチャードグラス乾草粉末０．０２５ｇを加えた。上記の希釈ルーメン液を10ml加え、ヘッドスペースに窒素ガスを吹き込みながらブチルゴムキャップとプラスチックスクリューキャップを施し、７０ｒｐｍにて揺とうしながら嫌気培養した（37℃、18時間）。
飼料に混和した製剤は家畜に噛み砕かれると想定される。それをモデル化するために、製剤を乳鉢ですりつぶした。製剤Ｈ（比較例２）の試験培養液濃度は非加熱ＣＮＳＬ最終濃度を５００ｍｇ／Ｌとなるよう、乳鉢ですりつぶした後、０．００７９ｇをねじ口試験管に添加し、以下同様に試験を行った。実施例６のコート製剤Ｆも同様に乳鉢ですりつぶした後０．００８９ｇをねじ口試験管に添加し、以下同様に試験を行った。
処理は無添加（エタノールのみ：対照区）、非加熱ＣＮＳＬ区、製剤区、コート製剤区とし、それぞれ５連の培養とした。【００３７】
（２）分析
メタンはＦＩＤガスクロマトグラフィーにて分析した。すなわち、ガスクロマトグラフィー（ＧＣ−９Ａ、（株）島津製作所）、クロマトパック（Ｃ−Ｒ４Ａ、（株）島津製作所）、カラム（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｓｉｅｖｅ５Ａ；６０−８０ｍｅｓｈ；２．５ｍ×３．０ｍｍ；ステンレスカラム、信和化工（株））、キャリアガスはＮ2を用いた。総揮発性脂肪酸（ＶＦＡ）濃度と組成はＦＩＤガスクロマトグラフィーで分析した。すなわち、カラム（Ｒｅｏｐｌｅｘ４００；１０％；ＣｈｒｏｍｏｓｏｒｂＷ；８０−１００ｍｅｓｈ；ＡＷ−ＤＭＣＳ；２．１ｍ×３．２ｍｍ；ガラスカラム、信和化工（株））を用いた以外、メタンと同様に測定した。【００３８】
（３）結果
（ｉ）ガス生成（表３）
メタンが本発明のコート製剤添加で有意に減少し、減少程度は非加熱ＣＮＳＬと同程度であった。【００３９】
【表３】
2011013592.tif 000004
【００４０】
（ｉｉ）揮発性脂肪酸（ＶＦＡ）の生成（表４）
総揮発性脂肪酸濃度はコート製剤を添加しても変化しなかった（発酵そのものの抑制はない）。しかし発酵パターンは顕著に変化し、酢酸および酪酸生成が有意に減り、プロピオン酸生成が有意に増え、増加程度は非加熱ＣＮＳＬと同程度であった。【００４１】
【表４】
2011013592.tif 000005
【００４２】
表３および表４より本発明のコート製剤のルーメン機能改善効果は非加熱ＣＮＳＬと同程度であり、コート製剤から非加熱ＣＮＳＬは培養液中に放出されていることが分かる。
【産業上の利用可能性】
【００４３】
本発明のコート製剤は、粒剤に加工する事により、ＣＮＳＬが粘稠な液体でべたべたして餌に混合するのが難しいという欠点を解消し、ハンドリング性を向上させることができる。また、ＣＮＳＬ原液は皮膚に付着すると取れずかぶれるが、吸油剤に吸着させ、被覆することにより皮膚に油が接触しなくなり、かぶれを防ぐことができる。
本発明のコート製剤は、ルーメン発酵改善効果、鼓脹症予防効果、鼓脹症治療効果、アシドーシス治療効果、クロストリディウムによる病害防除効果、コクシジウムによる病害防除効果、および家畜の増体効果を有する。
【手続補正書】
【提出日】平成24年7月17日(2012.7.17)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
カシューナッツ殻油、アナカルド酸またはカルダノールを吸油剤に吸着させ、これを造粒し、粒子表面を硬化油またはコート剤で被覆してなるコート製剤。
【請求項２】
前記コート剤は、糖類、ゼイン、セラック、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、オブラート及びデンプンから選択される、請求項１に記載のコート製剤。
【請求項３】
前記糖類はヘミロース、ショ糖、乳糖およびトレハロースから選択される、請求項２に記載のコート製剤。
【請求項４】
さらにカルボキシメチルセルロース及び／又はポリアクリル酸ナトリウムを含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載のコート製剤。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれか一項に記載のコート製剤を含有することを特徴とする飼料添加剤。
【請求項６】
請求項１〜４のいずれか一項に記載のコート製剤または請求項５に記載の飼料添加剤を含有することを特徴とする飼料。
【請求項７】
請求項６に記載の飼料を摂取させることを特徴とする家畜の飼育方法。
【請求項８】
カシューナッツ殻油、アナカルド酸またはカルダノールを吸油剤に吸着させること、これを造粒すること、及び粒子表面を硬化油またはコート剤で被覆することを含む、コート製剤の製造方法。
【請求項９】
前記コート剤は、糖類、ゼイン、セラック、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、オブラート及びデンプンから選択される、請求項８に記載のコート製剤の製造方法。
【請求項１０】
前記糖類はヘミロース、ショ糖、乳糖およびトレハロースから選択される、請求項９に記載のコート製剤の製造方法。
【請求項１１】
さらにカルボキシメチルセルロース及び／又はポリアクリル酸ナトリウムを添加する工程
を含む、請求項８〜１０のいずれか一項に記載のコート製剤の製造方法。
【国際調査報告】
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