(57)【要約】【課題】血液から白血球を除去する際に、フィルタによる白血球の除去率を向上する。【解決手段】血液バックに収容された血液に遠心分離による遠心力を与えて、白血球の濃度勾配がある複数の分離層を形成する。分離層を白血球濃度の低い方から順番にフィルタに通して、分離層から白血球を除去する。白血球が除去された分離層を第１の血液成分バックに収容する。
2011115291.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
体液から所定の細胞を除去する方法であって、
第１のバックに収容された体液に遠心分離による遠心力を与えて、前記所定の細胞の濃度勾配を有する分離層を形成する工程と、
前記分離層を前記所定の細胞の濃度勾配に従って前記所定の細胞の濃度が低い側から順にフィルタに通して、前記分離層から前記所定の細胞を除去する工程と、
前記所定の細胞が除去された前記分離層を第２のバックに収容する工程と、を有する、細胞除去方法。
【請求項２】
前記遠心分離による遠心力を用いて、前記分離層を前記フィルタに通す、請求項１に記載の細胞除去方法。
【請求項３】
前記分離層を前記フィルタに通す際に、前記所定の細胞の濃度に応じて通過速度を変える、請求項１又は２に記載の細胞除去方法。
【請求項４】
前記第２のバックには、前記分離層から前記所定の細胞が除去されて生成された所定の体液成分が収容され、
前記体液成分を保存するための保存液を、前記フィルタに通す前の前記分離層に加える、請求項１〜３のいずれかに記載の細胞除去方法。
【請求項５】
前記遠心力により分離された、前記分離層以外の他の分離層を、前記分離層とは別の第３のバックに収容する、請求項１〜４のいずれかに記載の細胞除去方法。
【請求項６】
前記所定の細胞は、病原物質である、請求項１〜５のいずれかに記載の細胞除去方法。
【請求項７】
前記体液は、血液であり、
前記所定の細胞は、白血球であり、
前記分離層から所定の細胞が除去されて、赤血球を主成分とする血液成分が生成される、請求項１〜６のいずれかに記載の細胞除去方法。
【請求項８】
遠心分離機に搭載されて、体液から所定の細胞を除去する細胞除去システムであって、
体液を収容する体液バックと、
体液中の相対的に細胞濃度の高い第１の体液成分を収容する第１の体液成分バックと、
体液中の相対的に細胞濃度の低い第２の体液成分を収容する第２の体液成分バックと、
前記第１の体液成分バックと前記体液バックを接続する第１の流路と、
前記第２の体液成分バックと前記体液バックを接続する第２の流路と、
前記第１の流路に設けられ、当該流路を通過する体液成分から所定の細胞を除去するフィルタと、
前記第１の流路の開閉を行う第１の開閉弁と、
前記第２の流路の開閉を行う第２の開閉弁と、を有し、
前記第１の流路と前記第２の流路は、前記体液バックにおける、前記遠心分離機に搭載された際の当該遠心分離機による遠心力方向側の端部に接続されている、細胞除去システム。
【請求項９】
遠心分離機に搭載されて、体液から所定の細胞を除去する細胞除去システムであって、
体液を収容する体液バックと、
体液中の相対的に細胞濃度の高い第１の体液成分を収容する第１の体液成分バックと、
体液中の相対的に細胞濃度の低い第２の体液成分を収容する第２の体液成分バックと、
前記第１の体液成分バックと前記体液バックを接続する第１の流路と、
前記第２の体液成分バックと前記体液バックを接続する第２の流路と、
前記第１の流路に設けられ、当該流路を通過する体液成分から所定の細胞を除去するフィルタと、
前記第１の流路の開閉を行う第１の開閉弁と、
前記第２の流路の開閉を行う第２の開閉弁と、を有し、
前記第１の流路は、前記体液バックにおける、前記遠心分離機に搭載された際の当該遠心分離機による遠心力方向側の端部に接続され、
前記第２の流路は、前記体液バックにおける、前記遠心分離機に搭載された際の当該遠心分離機による遠心力方向の逆側の端部に接続されている、細胞除去システム。
【請求項１０】
前記第２の流路には、当該流路を通過する体液成分から所定の細胞を除去する他のフィルタが設けられている、請求項８又は９に記載の細胞除去システム。
【請求項１１】
前記第１の流路の前記フィルタより前記体液バック側に、前記第１の体液成分を保存するための保存液を供給するための保存液供給回路をさらに有する、請求項８〜１０のいずれかに記載の細胞除去システム。
【請求項１２】
前記所定の細胞は、病原物質である、請求項８〜１１のいずれかに記載の細胞除去システム。
【請求項１３】
前記体液は、血液であり、
前記第１の体液成分は、赤血球を主成分とする血液成分であり、
前記第２の体液成分は、血漿を主成分とする血液成分であり、
前記所定の細胞は、白血球である、請求項８〜１２のいずれかに記載の細胞除去システム。
【請求項１４】
赤血球と白血球を含む体液から白血球を除去する方法であって、
第１のバックに収容された体液に遠心分離による遠心力を与えて、少なくとも前記赤血球と前記白血球を含み、前記白血球の濃度勾配を有する分離層を形成する工程と、
前記分離層を前記白血球の濃度勾配に従って前記白血球の濃度が低い側から順にフィルタに通して、前記分離層から前記白血球を除去する工程と、
前記白血球が除去された前記分離層を第２のバックに収容する工程と、を有する、白血球除去方法。
【請求項１５】
前記分離層を前記フィルタに通す際に、前記白血球の濃度に応じて通過速度を変える、請求項１４に記載の白血球除去方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、細胞除去方法、細胞除去システム及び白血球除去方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
例えば成分輸血を行うためには、血液から濃厚赤血球成分や血漿成分などの血液成分を分離して、血液成分製剤を生成する必要がある。血液成分製剤の生成は、例えば遠心分離機に搭載可能なシステムを用いて行われている。当該システムは、例えば人体から採取された血液を収容する採血バックや、血液バック、分離された血液成分を収容する血液成分バック、それらを接続するチューブ等により構成されている（特許文献１参照）。【０００３】
血液成分製剤を生成する際には、例えば採血バックの血液が、重力落差を用いてフィルタに通されて病原物質である白血球が除去され、血液バックに収容される。その後、血液成分生成システムが遠心分離機に搭載され、当該遠心分離機により、血液バック内の血液が、細胞濃度の違いにより例えば血漿成分層と、赤血球成分層に遠心分離される。その後、例えば前記システムが、血液成分分離装置に搭載され、血液バック内の血漿成分層が血液成分バックに押し出されて収容され、血漿製剤が生成される。【０００４】
また、血液バック内の残りの赤血球成分層は、血液成分分離装置により、別の血液成分バックに押し出されて収容され、濃厚赤血球製剤が生成される。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開２００９−９０１３６号公報
【特許文献２】特開２００２−３２０６６９号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
ところで、例えば上述の血液成分製剤の生成において、白血球による成分輸血の副作用等の発生をより確実に防ぐために、フィルタによる白血球の除去率をさらに高める必要がある。また、フィルタによる白血球の除去率を高めることにより、フィルタを小型化することもでき、フィルタを小型化すると、フィルタに捉えられ無駄になる赤血球などの有用成分の量を低減することができる。【０００７】
本発明は、かかる点に鑑みてなされたものであり、血液などの体液から白血球などの所定の細胞を除去する際に、フィルタによる細胞の除去率を上げることをその目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
上記目的を達成するための本発明は、体液から所定の細胞を除去する方法であって、第１のバックに収容された体液に遠心分離による遠心力を与えて、前記所定の細胞の濃度勾配を有する分離層を形成する工程と、前記分離層を前記所定の細胞の濃度勾配に従って前記所定の細胞の濃度が低い側から順にフィルタに通して、前記分離層から前記所定の細胞を除去する工程と、前記所定の細胞が除去された前記分離層を第２のバックに収容する工程と、を有する、細胞除去方法である。なお、ここでいう所定の細胞の濃度は、質量濃度である。【０００９】
本発明によれば、遠心力により所定の細胞の濃度勾配を有する分離層を形成し、その細胞の濃度勾配を有する分離層を前記所定の細胞の濃度が低い側から順にフィルタに通過させ、分離層の所定の細胞の濃度が最も高い側を最後にフィルタに通すことができる。これにより、細胞濃度が一様な体液成分をフィルタに通す場合にみられる、ろ過の進行に伴う吸着座席数の経時的な低下による所定の細胞に対する除去性能の低下を抑制しながらろ過を持続させることができる。この結果、かかる場合に比べて、フィルタによる所定の細胞の除去率を上げることができる。【００１０】
前記遠心分離による遠心力を用いて、前記分離層を前記フィルタに通すようにしてもよい。かかる場合、分離層の分離状態を確実に保ちながら、分離層をフィルタに通すことができる。また、体液を分離層に分離する遠心分離中、或いはその直後に、分離層をフィルタに通すことができるので、細胞除去処理の時間を短縮できる。また、体液成分をフィルタに流すための専用の装置が不要となり、細胞除去処理を低コスト化できる。【００１１】
前記分離層を前記フィルタに通す際に、前記所定の細胞の濃度に応じて通過速度を変えるようにしてもよい。かかる場合、分離層の細胞濃度に応じて、最適な速度で分離層を通過させることができるので、フィルタの性能を効果的に発揮させて、フィルタによる所定細胞の除去率を向上できる。【００１２】
前記第２のバックには、前記分離層から前記所定の細胞が除去されて生成された体液成分が収容され、前記体液成分を保存するための保存液を、前記フィルタに通す前の前記分離層に加えるようにしてもよい。かかる場合、所定の細胞を除去する処理において、保存液を加えることができるので、別途保存液を加える処理を行う必要がない。また、分離層が保存液で希釈されるので、フィルタを通過しやすくなり、フィルタへの負担を低減し、フィルタの寿命を延ばすことができる。【００１３】
前記遠心力により分離された、前記分離層以外の他の分離層を、前記分離層とは別の第３のバックに収容するようにしてもよい。【００１４】
前記所定の細胞は、病原物質であってもよい。また、前記体液は、血液であり、前記所定の細胞は、白血球であり、前記分離層から所定の細胞が除去されて、赤血球を主成分とする血液成分が生成されてもよい。【００１５】
別の観点による本発明は、遠心分離機に搭載されて、体液から所定の細胞を除去する細胞除去システムであって、体液を収容する体液バックと、体液中の相対的に細胞濃度の高い第１の体液成分を収容する第１の体液成分バックと、体液中の相対的に細胞濃度の低い第２の体液成分を収容する第２の体液成分バックと、前記第１の体液成分バックと前記体液バックを接続する第１の流路と、前記第２の体液成分バックと前記体液バックを接続する第２の流路と、前記第１の流路に設けられ、当該流路を通過する体液成分から所定の細胞を除去するフィルタと、前記第１の流路の開閉を行う第１の開閉弁と、前記第２の流路の開閉を行う第２の開閉弁と、を有し、前記第１の流路と前記第２の流路は、前記体液バックにおける、前記遠心分離機に搭載された際の当該遠心分離機による遠心力方向側の端部に接続されている。【００１６】
本発明によれば、第１の流路と第２の流路が体液バックの遠心力方向側の端部に接続されているので、遠心分離機によって遠心力方向に沿って分離された、所定の細胞の濃度勾配がある分離層を、第１の流路に近い側から順にフィルタに通すことができる。これにより、分離層を所定の細胞の濃度が低い側から順にフィルタに通すことができる。この結果、除去細胞の濃度が一様な体液成分をフィルタに通す場合に比べて、フィルタによる細胞の除去率を高めることができる。また、第１の体液成分を含有する分離層以外の第２の体液成分を含有する分離層も、第２の流路を用いて第２の体液成分バックに収容することができる。また、第１の流路と第２の流路が体液バックの遠心力方向側の端部に接続されているので、体液バックにおける体液の分離だけでなく、第１の流路と第２の流路を用いた体液成分バックへの送液も、遠心分離機の遠心力を用いて行うことができる。これにより、体液の分離から体液成分の生成までの処理時間を短縮できる。【００１７】
別の観点による本発明は、遠心分離機に搭載されて、体液から所定の細胞を除去する細胞除去システムであって、体液を収容する体液バックと、体液中の相対的に細胞濃度の高い第１の体液成分を収容する第１の体液成分バックと、体液中の相対的に細胞濃度の低い第２の体液成分を収容する第２の体液成分バックと、前記第１の体液成分バックと前記体液バックを接続する第１の流路と、前記第２の体液成分バックと前記体液バックを接続する第２の流路と、前記第１の流路に設けられ、当該流路を通過する体液成分から所定の細胞を除去するフィルタと、前記第１の流路の開閉を行う第１の開閉弁と、前記第２の流路の開閉を行う第２の開閉弁と、を有し、前記第１の流路は、前記体液バックにおける、前記遠心分離機に搭載された際の当該遠心分離機による遠心力方向側の端部に接続され、前記第２の流路は、前記体液バックにおける、前記遠心分離機に搭載された際の当該遠心分離機による遠心力方向の逆側の端部に接続されている。【００１８】
本発明によれば、第１の流路が体液バックの遠心力方向側の端部に接続されているので、遠心分離機によって遠心力方向に沿って分離された、所定の細胞の濃度勾配がある分離層を、第１の流路に近い側から順にフィルタに通すことができる。これにより、分離層を所定の細胞の濃度が低い側から順にフィルタに通すことができる。この結果、除去細胞の濃度が一様な体液成分をフィルタに通す場合に比べて、フィルタによる細胞の除去率を高めることができる。また、第１の体液成分を含有する分離層以外の第２の体液成分を含有する分離層も、第２の流路を用いて第２の体液成分バックに収容することができる。また、第１の流路が体液バックの遠心力方向側の端部に接続されているので、体液バックにおける体液の分離だけでなく、第１の流路を用いた分離層の第１の体液成分バックへの送液も、遠心分離機の遠心力を用いて行うことができる。これにより、体液の分離から体液成分の生成までの処理時間を短縮できる。【００１９】
前記第２の流路には、当該流路を通過する体液成分から所定の細胞を除去する他のフィルタが設けられていてもよい。かかる場合、細胞濃度の低い体液成分からも所定の細胞を除去できる。【００２０】
以上の細胞除去システムは、前記第１の流路の前記フィルタより前記体液バック側に、前記第１の体液成分を保存するための保存液を供給するための保存液供給回路をさらに有していてもよい。かかる場合、保存液の供給を、所定の細胞の除去と共に行うことができる。また、第１の流路を通る体液成分が保存液で希釈されるので、フィルタを通過しやすくなり、フィルタへの負担を低減し、フィルタの寿命を延ばすことができる。【００２１】
前記所定の細胞は、病因物質であってもよい。また、前記体液は、血液であり、前記第１の体液成分は、赤血球を主成分とする血液成分であり、前記第２の体液成分は、血漿を主成分とする血液成分であり、前記所定の細胞は、白血球であってもよい。【００２２】
別の観点による本発明は、赤血球と白血球を含む体液から白血球を除去する方法であって、第１のバックに収容された体液に遠心分離による遠心力を与えて、少なくとも前記赤血球と前記白血球を含み、前記白血球の濃度勾配を有する分離層を形成する工程と、前記分離層を前記白血球の濃度勾配に従って前記白血球の濃度が低い側から順にフィルタに通して、前記分離層から前記白血球を除去する工程と、前記白血球が除去された前記分離層を第２のバックに収容する工程と、を有する。【００２３】
前記白血球除去方法において、前記分離層を前記フィルタに通す際に、前記白血球の濃度に応じて通過速度を変えてもよい。
【発明の効果】
【００２４】
本発明によれば、体液から所定の細胞を除去する際に、フィルタによる所定の細胞の除去率を向上させることができる。また、この所定の細胞の除去率の向上により、フィルタを小型化することができ、それによって、フィルタに捉えられ無駄になる有用成分の量を低減し、有用な体液成分の回収率を上げることができる。
【図面の簡単な説明】
【００２５】
【図１】細胞除去システムの構成の概略を示す説明図である。
【図２】遠心分離機の構成の概略を示す縦断面図である。
【図３】遠心分離機の構成の概略を示す平面図である。
【図４】押圧機構の構成を示す説明図である。
【図５】第１の流路と第２の流路が血液バックの第１の端部に接続されている場合の細胞除去システムの説明図である。
【図６】第２の流路にフィルタが設けられている場合の細胞除去システムの説明図である。
【図７】第１の流路に保存液供給回路が接続されている場合の細胞除去システムの説明図である。
【図８】遠心分離機への血液バックの設置方向が異なる場合の説明図である。
【図９】全血製剤を生成する場合の細胞除去システムの説明図である。
【発明を実施するための形態】
【００２６】
以下、図面を参照して、本発明の好ましい実施の形態について説明する。図１は、本実施の形態に係る細胞除去システム１の構成の概略を示す説明図である。
【００２７】
細胞除去システム１は、後述の遠心分離機２に搭載可能であり、例えば第１のバックとしての血液バック１０と、第２のバックとしての第１の血液成分バック１１と、第３のバックとしての第２の血液成分バック１２と、第１の流路１３と、第２の流路１４と、フィルタ１５等を有している。
【００２８】
血液バック１０は、例えば軟質樹脂などにより形成され、変形自在になっている。血液バック１０には、採血用流路２０が接続されており、人体から採取された血液を収容できる。採血用流路２０には、当該流路２０を開閉する開閉弁２１が設けられている。
【００２９】
第１の血液成分バック１１及び第２の血液成分バック１２は、例えば軟質樹脂などにより形成され、変形自在になっている。
【００３０】
第１の流路１３及び第２の流路１４には、例えば軟質のチューブが用いられている。第１の流路１３は、血液バック１０と第１の血液成分バック１１を接続している。第１の流路１３は、例えば血液バック１０における、血液バック１０が遠心分離機２に搭載された際の当該遠心分離機２による遠心力方向Ｆ側の第１の端部１０ａに接続されている。第１の流路１３には、当該流路１３の開閉を行う第１の開閉弁３０が設けられている。
【００３１】
第２の流路１４は、血液バック１０と第２の血液成分バック１２を接続している。第２の流路１４は、例えば血液バック１０における、血液バック１０が遠心分離機２に搭載された際の当該遠心分離機２による遠心力方向Ｆの逆側の第２の端部１０ｂに接続されている。第２の流路１４には、当該流路１４の開閉を行う第２の開閉弁３１が設けられている。なお、上述の採血用流路２０も血液バック１０の第２の端部１０ｂに接続されている。
【００３２】
フィルタ１５は、第１の流路１３に設けられている。フィルタ１５は、所定の細胞としての病原物質である白血球を濾過可能な例えば多孔質体により形成されている。フィルタ１５は、第１の開閉弁３０と第１の血液成分バック１１の間に設けられている。
【００３３】
遠心分離機２は、例えば図２及び図３に示すように筺体５０内に、モータなどの回転駆動部５１と、回転駆動部５１により回転され、複数の細胞除去システム１を搭載可能な回転容器５２などを有している。回転容器５２には、例えば細胞除去システム１の血液バック１０を、第１の流路１３が接続された第１の端部１０ａが外側（遠心力方向Ｆ側）を向き、第２の流路１４が接続された第２の端部１０ｂが中心側（遠心力方向Ｆの逆側）を向くように設置できる。なお、本実施の形態において、血液バック１０は、バックの長手方向（図４の左右方向）を遠心力方向Ｆに向け、バックの厚み方向（図４の上下方向）を回転方向に向けるように設置される。
【００３４】
例えば回転容器５２には、例えば血液バック１０を側面から押圧するための押圧機構５３が設けられている。押圧機構５３は、例えば図４に示すように血液バック１０を両側面から挟む一対の押圧板５４、５５を有している。一方の押圧板５４は、シリンダなどの押圧駆動部５６により他方の押圧板５５側に水平移動して、間にある血液バック１０を押圧することができる。これにより、血液バック１０内の血液を、第１の流路１３や第２の流路１４側に押し出すことができる。
【００３５】
次に、以上のように構成された細胞除去システム１を用いた血液の細胞除去方法について説明する。
【００３６】
先ず、人体から採取された血液が採血用流路２０を通じて血液バック１０に導入され、収容される。このとき、第１の開閉弁３０と第２の開閉弁３１は閉鎖されている。次に、細胞除去システム１が遠心分離機２の回転容器５２に搭載される。このとき、血液バック１０は、例えば図４に示すように押圧板５４と押圧板５５の間に、第１の端部１０ａが遠心力方向Ｆ側を向き第２の端部１０ｂ側が遠心力方向Ｆの逆側を向くように設置される。
【００３７】
次に、遠心分離機２が作動し、回転駆動部５１により回転容器５２が回転され、図１に示すように血液バック１０内の血液が、遠心力により、遠心力方向Ｆに沿って例えば白血球の細胞の濃度勾配がある分離層Ａ、Ｂ、Ｃと、他の分離層としての分離層Ｄに分離される。白血球の細胞濃度は、例えば分離層Ｃ、Ｂ、Ａのこの順に高く（Ａ＜Ｂ＜Ｃ）なる。なお、分離層Ｄの白血球の細胞濃度は、分離層Ｃより低くなる。分離層Ａ、Ｂ、Ｃは、赤血球細胞を多く含む成分層で、相対的に細胞濃度が高い濃厚細胞層になる。分離層Ｄは、血漿を主成分とする成分層で、相対的に細胞濃度の低い貧細胞層になる。また、赤血球の細胞濃度は、分離層Ａ、Ｂ、Ｃのこの順に高くなり（Ａ＞Ｂ＞Ｃ）、分離層Ｃには、多くの血小板が含まれている。
【００３８】
次に、第２の開閉弁３１が開放され、押圧機構５３が作動し、押圧板５４、５５により血液バック１０が押圧される。これにより、遠心力方向Ｆの逆側の第２の端部１０ｂに近い分離層Ｄが、血液バック１０から押し出され、図１に示す第２の流路１４を通じて第２の血液成分バック１２に送られる。これにより、第２の血液成分バック１２には、第２の体液成分としての血漿成分が収容される。これが、血漿製剤となる。
【００３９】
分離層Ｄが全て血液バック１０から押し出された後、次に第２の開閉弁３１が閉鎖され、第１の開閉弁３０が開放される。その後、血液バック１０が押圧板５４、５５によりさらに押圧され、分離層Ａ、Ｂ、Ｃが、第１の端部１０ａに近い順に第１の流路１３に押し出される。これにより、白血球の細胞濃度の低い順、つまり分離層Ａ、Ｂ、Ｃの順で、第１の流路１３に押し出される。先ず白血球の細胞濃度が最も低い分離層Ａが、フィルタ１５を通過し、白血球が除去されて、第１の血液成分バック１１に収容される。次に、白血球の細胞濃度が次に低い分離層Ｂが、フィルタ１５を通過し、白血球が除去されて、第１の血液成分バック１１に収容される。最後に、白血球の細胞濃度が最も高い分離層Ｃが、フィルタ１５を通過し、白血球が除去されて、第１の血液成分バック１１に収容される。こうして、第１の血液成分バック１１には、第１の体液成分として赤血球を主成分とする濃厚赤血球成分が収容される。これが、濃厚赤血球製剤となる。その後、第１の開閉弁３０が閉鎖され、血液の細胞除去処理が終了する。
【００４０】
以上の実施の形態によれば、遠心力により、所定の細胞である白血球の濃度勾配を有する分離層Ａ、Ｂ、Ｃを形成し、その分離層Ａ、Ｂ、Ｃを白血球濃度の低い側から順にフィルタ１５に通過させ、白血球濃度の最も高い側を最後にフィルタ１５に通すことができる。これにより、細胞濃度が一様な体液成分をフィルタに通す場合にみられる、ろ過の進行に伴う吸着座席数の経時的な低下による白血球に対する除去性能の低下を抑制しながら、ろ過を持続させることができる。この結果、フィルタ１５による白血球の除去率を上げることができる。
【００４１】
なお、上記実施の形態において、分離層Ｄを分離層Ａ〜Ｃより先に血液バック１０から押し出していたが、分離層Ｄを分離層Ａ〜Ｃより後に押し出すようにしてもよい。
【００４２】
また、上記実施の形態では、第１の流路１３が血液バック１０の遠心力方向Ｆの第１の端部１０ａ側に接続されている。よって、分離層Ａ〜Ｃを血液バック１０から第１の血液成分バック１１に送り出す際に、遠心分離機２の遠心力を用いてもよい。こうすることにより、分離層Ａ〜Ｃの分離状態を確実に保ちながら、フィルタ１５を通過させることができる。また、血液を分離層Ａ〜Ｄに分離する遠心分離中、或いはその直後に、分離層Ａ〜Ｃをフィルタ１５に通すことができるので、細胞除去処理の時間を短縮できる。
【００４３】
また、上記実施の形態において、分離層Ｄも遠心分離機２の遠心力を用いて第２の血液成分バック１２に送り出すことができるようにしてもよい。かかる場合、図５に示すように第２の流路１４は、血液バック１０の第１の端部１０ａ側に接続される。そして、遠心分離機２の遠心力により、分離層Ａ〜Ｃが第１の流路１３を通じて第１の血液成分バック１１に送られた後に、分離層Ｄが第２の流路１４を通じて第２の血液成分バック１２に送られる。かかる場合、分離層Ａ〜Ｄを押し出す押圧機構５３などの専用の装置が必要なくなるので、細胞除去処理を低コスト化できる。また、血液の遠心分離中或いはそれに続いて、血液成分バック１１、１２への供給を行うことができるので、細胞除去処理の時間をさらに短縮できる。
【００４４】
以上の実施の形態において、例えば図６に示すように必要に応じて第２の流路１４に、例えば白血球を除去するフィルタ８０を設けるようにしてもよい。かかる場合、分離層Ｄが第２の流路１４を通過する際に、フィルタ８０により分離層Ｄから白血球を除去することができる。このため、分離層Ｄに白血球が含まれている場合には、白血球が除去された血漿製剤を生成できる。なお、この例は、図５に示すように第２の流路１４が血液バック１０の第１の端部１０ａ側に接続されている場合にも適用できる。
【００４５】
以上の実施の形態において、フィルタ１５に通す前の分離層Ａ〜Ｃに、最終的に生成される濃厚赤血球製剤を保存するための保存液を加えるようにしてもよい。例えば、図７に示すように第１の流路１３のフィルタ１５よりも血液バック１０側に、保存液を供給するための保存液供給回路１００が接続される。保存液供給回路１００は、例えば保存液バック１０１と、当該保存液バック１０１と第１の流路１３を接続する保存液供給流路１０２と、当該流路１０２を開閉する開閉弁１０３を有している。例えば分離層Ａ〜Ｃが血液バック１０から押し出されるときに、開閉弁１０３が開放され、保存液バック１０１から第１の流路１３に保存液供給流路１０２を通じて保存液が供給される。これにより、第１の流路１３を流れる分離層Ａ〜Ｃの血液成分に保存液が加えられ、その後分離層Ａ〜Ｃがフィルタ１５を通過する。
【００４６】
かかる例によれば、濃厚赤血球製剤への保存液の添加を、白血球の除去処理と共に行うことができる。また、分離層Ａ〜Ｃが保存液で希釈されるので、フィルタ１５を通過しやすくなり、フィルタ１５への負担を低減できる。これにより、フィルタ１５の寿命を延ばすことができる。なお、この例は、図５に示すように第２の流路１４が血液バック１０の第１の端部１０ａ側に接続されている場合にも適用できる。
【００４７】
以上の実施の形態において、分離層Ａ〜Ｃをフィルタ１５に通す際に、白血球の細胞濃度に応じて通過速度を変えてもよい。例えば押圧機構５３により分離層Ａ〜Ｃをフィルタ１５側に押し出している場合には、押圧機構５３の押圧板５４、５５による血液バック１０の押圧速度を変えることにより、各分離層Ａ〜Ｃのフィルタ１５の通過速度を変えてもよいし、遠心分離機２の遠心力を用いて分離層Ａ〜Ｃをファイル１５側に押し出している場合には、遠心力を変えることにより、各分離層Ａ〜Ｃのフィルタ１５の通過速度を変えてもよい。例えば、白血球濃度が高い分離層Ｃがフィルタ１５を通過する際には、通過速度を遅くし、白血球濃度が低い分離層Ａがフィルタ１５を通過する際には、通過速度を速く、白血球濃度が中間の分離層Ｂがフィルタ１５を通過する際には、通過速度を中間にしてもよい。こうすることにより、フィルタ１５に過度の負荷をかけずに、各分離層Ａ〜Ｃの白血球を適切に除去することができる。
【００４８】
以上、添付図面を参照しながら本発明の好適な実施の形態について説明したが、本発明はかかる例に限定されない。当業者であれば、特許請求の範囲に記載された思想の範疇内において、各種の変更例または修正例に想到し得ることは明らかであり、それらについても当然に本発明の技術的範囲に属するものと了解される。
【００４９】
例えば、以上の実施の形態は、細胞除去システム１が遠心分離機２に搭載される際に、血液バック１０が、バックの長手方向（図１の上下方向）が遠心力方向Ｆを向くように設置される場合の例であったが、図８に示すように血液バック１０が、バックの厚み方向（図８の左右方向）が遠心力方向Ｆを向くように設置されるようにしてもよい。かかる場合、第１の流路１３と第２の流路１４は、血液バック１０の厚み方向のいずれかの端部側に接続される。また、押圧機構５３は、血液バック１０を厚み方向側から押圧できるようにしてもよい。
【００５０】
以上の実施の形態において、白血球が除去されて第１の血液成分バック１１に収容される血液成分が、濃厚赤血球製剤であったが、全血製剤、濃厚血小板製剤や、それらの中間生成物などであってもよい。例えば濃厚血小板製剤の場合、例えば血小板を含む分離層Ｃ、Ｄが、分離層Ｄ、Ｃの順で第１の流路１３を介してフィルタ１５を通過し、濃厚血小板製剤が第１の血液成分バック１１に収容される。
【００５１】
また、全血製剤の場合、上記細胞除去システム１等を用いてもよいが、図９に示すように、第２の流路１４及び第２の血液成分バック１２がなく、第１の流路１３、第１の血液成分バック１１のみがある細胞除去システム１１０を用いてもよい。かかる場合、すべての分離層Ａ〜Ｄが、例えば分離層Ｄ、Ｃ、Ｂ、Ａの順で第１の流路１３を介してフィルタ１５を通過し、全血製剤が第１の血液成分バック１１に収容される。
【００５２】
以上の実施の形態では、分離層が主に４層で、そのうちのフィルタ１５を通過し白血球の濃度勾配がある分離層が主に３層の場合であったが、これらの層の数はこれに限られない。また、除去される細胞も白血球に限られず、血小板や赤血球などの他の細胞であってもよい。さらにフィルタ１５は、白血球などの病原物質に加えて、寄生虫などの他の病因物質も除去できるものであってもよい。また、以上の実施の形態では、細胞を除去する体液が血液であったが、骨髄、臍帯血などの他の体液の場合にも本発明は適用できる。
【実施例】
【００５３】
以下、フィルタの除去性能を評価した実験結果を示す。
本実験で使用したフィルタの作成方法は、次の通りである。
（１）ろ材の作製：
フィルタの材質として次のポリマーを使用した。
２−ヒドロキシエチルメタクリレート（ＨＥＭＡ）とジメチルアミノエチルメタクリレート（ＤＭ）からなるランダムポリマー（ＨＥＭＡとＤＭのモル組成比は９７：３。以下「ＨＭ−３」と略す。）。
ＨＭ−３は、エタノール中のモノマー濃度を１モル／Ｌとし、開始剤として２，２’−アゾビス（２，４−ジメチルバレロニトリル）（和光純薬工業社製、商品名Ｖ−６５）を０．００５モル／Ｌの存在下、６０℃で８時間ランダム重合することによって合成された。
まずＨＭ−３を水／エタノールの混合溶媒（水／エタノールの重量比が５／９５）に溶解し、０．１重量％の溶液を調製した。この溶液に以下のＡ、Ｂの不織布を浸し、余分な液を除去した後、４０℃で１６時間真空乾燥を行った。
Ａ: 平均繊維直径１．８μｍのメルトブロー法により製造されたポリエステル不織布
Ｂ: 平均繊維直径１．２μｍのメルトブロー法により製造されたポリエステル不織布
（２）フィルタの作製
前記のＨＭ−３によりコーティングされた平均繊維直径１．８μｍのメルトブロー法により製造されたポリエステル不織布を充填密度０．１８ｇ／ｃｍ３、厚み１．５ｍｍに、その下層に同様の平均繊維直径１．２μｍのポリエステル不織布を充填密度０．２ｇ／ｃｍ３ 、厚み３ｍｍになるように、有効濾過面積６７ｍｍ×６７ｍｍの容器に充填した。【００５４】
（実施例１）
上記フィルタを用いた実施例１の血液の遠心ろ過方法は次の通りである。
（１）健常人から２５０ｍＬのＣＰＤ（Citrate-Phosphate-Dextrose）を加えた新鮮全血（以下、「全血」とする。）を血液バッグに採取した。
（２）全血を２５０ｍＬの遠心用ボトルに移し、遠心カップに挿入し、１２５０Ｇで５分間遠心後、遠心カップから遠心用ボトルを取り出した。
（３）ボトル中には、約１４０ｍＬの赤血球濃厚層と、約１１０ｍＬの多血小板血漿層が形成されていた。
（４）約１１０ｍＬの多血小板血漿層を吸引し、ボトルに回収した。このとき、赤血球濃厚層との界面への影響がないよう、吸引は注意深く行われた。
（５）ボトル中に残った赤血球濃厚層を上部から３５ｍＬ注意深く吸引採取し、それを赤血球濃厚液の第一層とした。白血球の濃度（ミクロセルカウンターによって計測した）は、４６９×１０ｅ２/μＬであり、ヘマトクリットは３０．５％であり、血小板の濃度は２９．１×１０ｅ４/μＬであった。
（６）さらにボルト中に残った赤血球濃厚層を上部から３５ｍＬ注意深く吸引採取し、それを赤血球濃厚液の第二層とした。白血球の濃度は、１４１×１０ｅ２/μＬであり、ヘマトクリットは５３．５％であり、血小板の濃度は９．１×１０ｅ４/μＬであった。
（７）つぎにボトル中に残っている赤血球濃厚層を上部から３０ｍＬ採取し、５ｍＬのＳＡＧＭ液（赤血球保存液）と混和して、３５ｍＬの赤血球濃厚液の第三層とした。白血球の濃度は、２２×１０ｅ２/μＬであり、ヘマトクリットは６０．２％であり、血小板の濃度は４×１０ｅ４/μＬであった。なお希釈率から、SAGM液を添加する前の白血球濃度は２６×１０ｅ２/μＬであり、ヘマトクリットは７０．２％、血小板濃度は５×１０ｅ４/μＬであった。
（８）つぎにボトル中の残りの赤血球濃厚層を、上部から２６ｍＬ採取し、９ｍＬのSAGM液と混和して、３５ｍＬの赤血球濃厚液の第四層とした。白血球の濃度は、９．３×１０ｅ２/μＬであり、ヘマトクリットは６１．３％であり、血小板の濃度は２×１０ｅ４/μＬであった。なお希釈率から、SAGM液を添加する前の白血球濃度は１２．５×１０ｅ２/μＬであり、ヘマトクリットは８２．５％、血小板濃度は３×１０ｅ４/μＬであった。
（９）つぎにボトル中の残りの赤血球濃厚層を、上部から１８ｍＬ採取し、８ｍＬのSAGM液と混和して、２６ｍＬの赤血球濃厚液の第五層とした。白血球の濃度は、７．６×１０ｅ２/μＬであり、ヘマトクリットは６０．５％であり、血小板の濃度は１×１０ｅ４/μＬであった。なお希釈率から、SAGM液を添加する前の白血球濃度は１１．０×１０ｅ２/μＬであり、ヘマトクリットは８７．４％、血小板濃度は１×１０ｅ４/μＬであった。
（１０）上記白血球除去フィルタの入口側に、五口に別れた軟質塩化ビニル製導管を接続した。フィルタの出口側には、回収用血液バッグを末端に接続した同様の導管を接続した。前述の赤血球濃厚液の第一層から第五層のそれぞれを容量５０ｍＬの５つのシリンジに移し、導管の五口の接続口にそれぞれのシリンジを接続した。各シリンジ内の赤血球濃厚液が均一になるように、シリンジを十分転倒混和した後に、流速２０ｍＬ/分に設定されたシリンジポンプに設置した。
（１１）赤血球濃厚液の第五層の入ったシリンジに対しシリンジポンプのスイッチを入れ、第五層を送液してフィルタによる濾過を開始した。第五層の赤血球濃厚液がシリンジ内になくなったら、第四層の赤血球濃厚液の送液を行った。その後、第三層、第二層、第一層の赤血球濃厚液の送液を順に行った。このようにして、白血球濃度の低い第五層から白血球濃度の高い第一層まで順に送液してフィルタを通し、回収用血液バックに回収した。
（１２）最終的に回収用血液バッグに回収された赤血球濃厚液は、１４５ｍＬであった。混和後サンプリングして計測した白血球の濃度（フローサイトメーター装置を用いてカウントした）は、３．０１個/μLであり、ヘマトクリットは５７．６％であり、血小板は検出されなかった。最終的に回収された白血球除去赤血球濃厚液１４５ｍＬ中の総白血球数は０．４４×１０ｅ６個であった。【００５５】
（比較例１）
上記フィルタを用いた比較例１の血液の遠心ろ過方法は次の通りである。
（１）健常人から２５０ｍＬのＣＰＤを加えた全血を血液バッグに採取した。
（２）全血を２５０ｍＬの遠心用ボトルに移し、遠心カップに挿入し、１２５０Ｇで５分間遠心後、遠心カップから遠心用ボトルを取り出した。
（３）ボトル中には、約１４０ｍＬの赤血球濃厚層と、約１１０ｍＬの多血小板血漿層が形成されていた。
（４）約１１０ｍＬの多血小板血漿層を吸引し、ボトルに回収した。このとき、赤血球濃厚層との界面への影響がないよう、吸引は注意深く行われた。
（５）ボトル中に残った赤血球濃厚層にSAGM液を２２ｍＬ添加した後均一になるよう混和し、１６２ｍＬの赤血球濃厚液を調製した。白血球の濃度は、１３２×１０ｅ２/μＬであり、ヘマトクリットは５３．７％であり、血小板の濃度は２７．３×１０ｅ４/μＬであった。調製された赤血球濃厚液１６２ｍＬ中の総白血球数は２．１×１０ｅ９と計算された。
（６）赤血球濃厚液を３５ｍＬ×４本と２２ｍＬ×１本のシリンジに分注し、実施例１と同じ方法で作成した白血球除去フィルタの入口側に、五口に別れた軟質塩化ビニル製導管を接続した。出口側には、回収用血液バッグを末端に接続した同様の導管を接続した。その後、各シリンジを、導管の五口の接続口にそれぞれ接続した。各シリンジ内の赤血球濃厚液が均一になるように、シリンジを十分転倒混和した後に、流速２０ｍＬ/分に設定されたシリンジポンプに設置した。全シリンジには、同じ白血球濃度の赤血球濃厚液が入っている。
（７）赤血球濃厚液が入った第一本目のシリンジに対しシリンジポンプのスイッチを入れ、赤血球濃厚液を送液してフィルタによる濾過を開始した。第一本目の赤血球濃厚液がシリンジ内になくなったら、第二本目のシリンジの送液を開始した。このようにして、全五本のシリンジの赤血球濃厚液をフィルタに通し、回収用血液バックに回収した。
（８）最終的に回収用血液バッグに回収された赤血球濃厚液は、１４５ｍＬであった。混和後サンプリングして計測した白血球の濃度（フローサイトメーター装置を用いてカウントした）は、７．４６個/μLであり、ヘマトクリットは５３．７％であり、血小板は検出されなかった。最終的に回収された白血球除去赤血球濃厚液１４５ｍＬ中の総白血球数は１．０８×１０ｅ６個であった。【００５６】
（比較例２）
上記フィルタを用いた比較例２の血液の遠心ろ過方法は次の通りである。
（１）健常人から２５０ｍＬのＣＰＤを加えた全血を血液バッグに採取した。
（２）全血を２５０ｍＬの遠心用ボトルに移し、遠心カップに挿入し、１２５０Ｇで５分間遠心後、遠心カップから遠心用ボトルを取り出した。
（３）ボトル中には、約１４０ｍＬの赤血球濃厚層と、約１１０ｍＬの多血小板血漿層が形成されていた。
（４）約１１０ｍＬの多血小板血漿層を吸引し、ボトルに回収した。このとき、赤血球濃厚層との界面への影響がないよう、吸引は注意深く行われた。
（５）ボトル中に残った赤血球濃厚層を上部から３５ｍＬ注意深く吸引採取し、それを赤血球濃厚液の第一層とした。白血球の濃度（ミクロセルカウンターによって計測した）は、４６９×１０ｅ２/μＬであり、ヘマトクリットは３０．５％であり、血小板の濃度は２９．１×１０ｅ４/μＬであった。
（６）さらにボルト中に残った赤血球濃厚層を上部から３５ｍＬ注意深く吸引採取し、それを赤血球濃厚液の第二層とした。白血球の濃度は、１４１×１０ｅ２/μＬであり、ヘマトクリットは５３．５％であり、血小板の濃度は９．１×１０ｅ４/μＬであった。
（７）つぎにボトル中に残っている赤血球濃厚層を上部から３０ｍＬ採取し、５ｍＬのＳＡＧＭ液（赤血球保存液）と混和して、３５ｍＬの赤血球濃厚液の第三層とした。白血球の濃度は、２２×１０ｅ２/μＬであり、ヘマトクリットは６０．２％であり、血小板の濃度は４×１０ｅ４/μＬであった。なお希釈率から、SAGM液を添加する前の白血球濃度は２６×１０ｅ２/μＬであり、ヘマトクリットは７０．２％、血小板濃度は５×１０ｅ４/μＬであった。
（８）つぎにボトル中の残りの赤血球濃厚層を、上部から２６ｍＬ採取し、９ｍＬのSAGM液と混和して、３５ｍＬの赤血球濃厚液の第四層とした。白血球の濃度は、９．３×１０ｅ２/μＬであり、ヘマトクリットは６１．３％であり、血小板の濃度は２×１０ｅ４/μＬであった。なお希釈率から、SAGM液を添加する前の白血球濃度は１２．５×１０ｅ２/μＬであり、ヘマトクリットは８２．５％、血小板濃度は３×１０ｅ４/μＬであった。
（９）つぎにボトル中の残りの赤血球濃厚層を、上部から１８ｍＬ採取し、８ｍＬのSAGM液と混和して、２６ｍＬの赤血球濃厚液の第五層とした。白血球の濃度は、７．６×１０ｅ２/μＬであり、ヘマトクリットは６０．５％であり、血小板の濃度は１×１０ｅ４/μＬであった。なお希釈率から、SAGM液を添加する前の白血球濃度は１１．０×１０ｅ２/μＬであり、ヘマトクリットは８７．４％、血小板濃度は１×１０ｅ４/μＬであった。
（１０）上記白血球除去フィルタの入口側に、五口に別れた軟質塩化ビニル製導管を接続した。フィルタの出口側には、回収用血液バッグを末端に接続した同様の導管を接続した。前述の赤血球濃厚液の第一層から第五層のそれぞれを容量５０ｍＬの５つのシリンジに移し、導管の五口の接続口にそれぞれのシリンジを接続した。各シリンジ内の赤血球濃厚液が均一になるように、シリンジを十分転倒混和した後に、流速２０ｍＬ/分に設定されたシリンジポンプに設置した。
（１１）赤血球濃厚液の第一層の入ったシリンジに対しシリンジポンプのスイッチを入れ、第一層を送液してフィルタによる濾過を開始した。第一層の赤血球濃厚液がシリンジ内になくなったら、第二層の赤血球濃厚液の送液を行った。その後、第三層、第四層、第五層の赤血球濃厚液の送液を順に行った。このようにして、白血球濃度の高い第一層から白血球濃度の低い第五層まで順に送液してフィルタを通し、回収用血液バックに回収した。
（１２）最終的に回収用血液バッグに回収された赤血球濃厚液は、１４５ｍＬであった。混和後サンプリングして計測した白血球の濃度（フローサイトメーター装置を用いてカウントした）は、３８．２個/μLであり、ヘマトクリットは５８．７％であり、血小板は検出されなかった。最終的に回収された白血球除去赤血球濃厚液１４５ｍＬ中の総白血球数は５．５４×１０ｅ６個であった。
【産業上の利用可能性】
【００５７】
本発明は、体液から所定の体液成分を分離する際に、フィルタによる所定の細胞の除去率を上げる際に有用である。
【符号の説明】
【００５８】
１  細胞除去システム
２  遠心分離機
１０  血液バック
１０ａ  第１の端部
１０ｂ  第２の端部
１１  第１の血液成分バック
１２  第２の血液成分バック
１３  第１の流路
１４  第２の流路
１５  フィルタ
３０  第１の開閉弁
３１  第２の開閉弁
Ａ〜Ｄ  分離層
Ｆ  遠心力方向
【図１】
2011115291.tif 000003
【図２】
2011115291.tif 000004
【図３】
2011115291.tif 000005
【図４】
2011115291.tif 000006
【図５】
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【図６】
2011115291.tif 000008
【図７】
2011115291.tif 000009
【図８】
2011115291.tif 000010
【図９】
2011115291.tif 000011
【国際調査報告】
2011115291.tif 000012
2011115291.tif 000013
2011115291.tif 000014