(57)【要約】  本発明は、生理活性ペプチドと、基剤としての酢酸セルロースを含有する当該生理活性ペプチドの経鼻吸収に優れた粉末状経鼻投与用組成物を提供する。
2011115264.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
生理活性ペプチドと、基剤としての酢酸セルロースを含有する粉末状経鼻投与用組成物。
【請求項２】
前記生理活性ペプチドが基剤内に含浸されてなる、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
酢酸セルロースのアセチル化の程度が３２〜４０％である請求項１又は２に記載の組成物。
【請求項４】
前記生理活性ペプチドが分子量２万以下のペプチドである請求項１〜３のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項５】
前記生理活性ペプチドがヒトグルカゴン様ペプチド−１、ヒト副甲状腺ホルモン（ｈＰＴＨ）、ヒト副甲状腺ホルモンｈＰＴＨ（１−３４）、ヒトモチリン、ヒトモチリン誘導体、ヒトグレリン、ヒト心房性ナトリウム利尿ペプチド、脳性ナトリウムペプチド（ＢＮＰ）、又はＣ型ナトリウムペプチド（ＣＮＰ）である請求項４に記載の組成物。
【請求項６】
生理活性ペプチド、酢酸セルロース及び水を混合した後、続いて当該混合物を乾燥することで粉末状経鼻投与用組成物が製造される、請求項１〜５のいずれか１項に記載の組成物の製造方法。
【請求項７】
生理活性ペプチドと酢酸セルロースと水の混合において、使用される水の量が酢酸セルロースに対して重量比２０％以上である請求項６に記載の組成物の製造方法。
【請求項８】
生理活性ペプチドと酢酸セルロースと水の混合において、使用される水の量が酢酸セルロースに対して重量比２０％以上、２５０％以下である請求項７に記載の組成物の製造方法。
【請求項９】
生理活性ペプチドと酢酸セルロースと水の混合において、使用される水の量が酢酸セルロースに対して重量比１００％以上、２５０％以下である請求項８に記載の組成物の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、主にペプチド性の薬物を含浸してなる酢酸セルロース粉末に関するものであり、酢酸セルロース粉末を基剤として使用することにより、鼻などの粘膜からの薬物吸収が促進された組成物に関する。更に詳しくは、主剤である生理活性ペプチドに酢酸セルロースと水を添加し混合することにより製造される、鼻などの粘膜からの薬物吸収が向上した組成物を作製する技術に関する。
【背景技術】
【０００２】
現在、インスリン、成長ホルモン、心房性ナトリウム利尿ペプチド、カルシトニン、ＬＨ−ＲＨ誘導体、副甲状腺ホルモン、副腎皮質刺激ホルモン誘導体などの種々の生理活性ペプチドあるいは生理活性タンパク質製剤が、医薬品として販売されている。しかしながら、これらの生理活性ペプチドあるいは生理活性タンパク質は、消化管内のプロテアーゼによる分解で不活性化されることから、経口投与製剤としての開発は困難であり、そのほとんどが非経口投与製剤として、主に注射剤としての製剤形態で供されている。しかしながら、注射剤による投与は患者の通院を必要とし、苦痛を伴うことから、在宅、無痛投与できるような、非経口の経粘膜投与製剤が望まれている。【０００３】
非経口の経粘膜投与に適した製剤形態の１つとして経鼻投与がある。投与対象部位である鼻腔粘膜は発達した血管網を有していること、また上鼻甲介、中鼻甲介、下鼻甲介の粘膜を有しており表面積が広い構造となっていることから、経鼻投与は口腔粘膜、直腸粘膜、肺粘膜投与と比較しても薬物の吸収が高いことが期待される。しかしながら鼻腔粘膜からペプチド薬物が吸収される過程においては粘膜を通過する透過性の低さ、粘液中に存在する酵素による生理活性ペプチドの分解などの種々の障壁が存在することの問題があり、物質の血液中への移行の程度の指標として用いられるバイオアベイラビリティー（以下、ＢＡとする）は決して満足できるものではない。そのため、経鼻投与におけるペプチドの吸収を向上させるために種々の経鼻製剤の工夫がなされている。【０００４】
経鼻投与における生理活性ペプチドの吸収を向上させる従来の方法には、１）鼻腔粘膜上での生理活性ペプチドの吸収を促進させる物質を投与用組成物に添加または配合する方法、２）生理活性ペプチドが鼻粘膜上で分解されることを阻害する物質を添加または配合する方法、あるいは３）鼻腔粘膜上での生理活性物質の滞留時間を延長することにより、生理活性ペプチドの吸収を向上させる方法が挙げられる。【０００５】
１）生理活性ペプチドの鼻腔粘膜上での吸収性を促進させる物質を添加または配合する方法に関しては、粘膜吸収促進剤として粘液溶解剤を添加または配合する方法がある。ＷＯ２００４/０７８２１１号公報には、サイトカイン、ペプチドホルモン、成長因子などの生理活性物質と、基剤として非吸水性かつ難水溶性のセルロース誘導体（例えばエチルセルロース、酢酸セルロース、ニトロセルロースなど）およびN-アセチル-L-システインなどのシステイン誘導体または活性SH基含有アルコールなどの粘液溶解剤を添加または配合することにより吸収性の改善された粉末経鼻投与製剤が開示されている。当該発明では、経鼻投与製剤が鼻腔内に噴霧／吸入された際、基剤としての非吸水性かつ難水溶性物質の存在により、生理活性ペプチド、粘液溶解剤が鼻腔粘膜に付着して滞留し、微量の粘液に溶解し、生理活性ペプチド、粘液溶解剤の局所的高濃度溶液を生じると記載がある。N-アセチル-L-システインの作用として粘液ムコ多糖のジスルフィド結合を開裂させることが報告されている（非特許文献１）ことから、当該発明では、粘液溶解剤であるN-アセチル-L-システインが速やかに粘液層を液状化させることによる、薬物の効率的な拡散を利用した発明であり、基剤としての酢酸セルロースが薬剤の吸収やＢＡに及ぼす効果についての開示はない。【０００６】
２）生理活性ペプチドの分解阻害剤を添加または配合した製剤については、鼻腔粘膜上に存在するプロテアーゼに対する阻害剤を添加または配合する方法がある。特開平７−２０６６９９号公報では、セリンプロテアーゼ阻害活性を有するメシル酸ガベキサートやメシル酸ファモスタットを配合したペプチド経鼻および蛋白質経鼻製剤が開示され、該製剤においてはＢＡが改善することが開示されている。【０００７】
しかしながら、１）の課題解決手段である粘液溶解剤の添加または配合、及び２）の課題解決手段であるプロテアーゼ阻害活性を有する物質を添加または配合する方法については添加又は配合する物質による鼻粘膜刺激性などの報告があることから安全性に対する課題があり、従ってより安全性にすぐれ、生理活性ペプチドの高いＢＡを発揮するような経鼻製剤の組成物が求められていた。【０００８】
３）鼻粘膜上での滞留時間を延長する方法では、とりわけ基剤の選択が重要な要素となる。従来技術では、基剤として生理活性ペプチドの粘膜付着性を高めるために増粘性を付加することが挙げられている。特公昭６２−４２８８８号公報には、生理活性を有するポリペプチド類と、結晶セルロース、α-セルロース、架橋カルボキシメチルセルロースナトリウムなどの水吸収性でかつ水難溶性の基剤からなる粉末経鼻投与用組成物が記載されている。水吸収性でかつ水難溶性の基剤を用いることによって、鼻腔内に投与された時、先ず鼻粘膜上の水分を吸収して、粒子が粘稠な液体状態になって流動することなく適度に分散し、粒子が鼻粘膜の付着部位に滞留して、高分子量のポリペプチド類は鼻粘膜と良好に接触し、これがためにポリペプチド類の高い吸収性を示すことが開示されている。【０００９】
特開平１０−５９８４１号公報には、生理活性ペプチドと結晶セルロースなどの水吸収性でかつ水難溶性の基剤に、一定量のヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシメチルセルロースなどの水吸収性でゲル形成性の基剤とを組み合わせたことにより、また、基剤の粒子径が水吸収性でかつ水難溶性の基剤については１０ミクロン〜３５０ミクロン、水吸収性でゲル形成性の基剤の場合に粒子径が１０ミクロン〜１００ミクロンの基剤を用いることにより、鼻腔内に投与された場合に鼻腔内の広範に生理活性ペプチドが分布し、且つゲル形成性の基剤がゲル化することにより鼻腔内に滞留し、結果として薬物の最高血中濃度を増加させることが開示されている。【００１０】
このように従来より、生理活性ペプチドの高いＢＡを示す基剤として、水吸収性でかつ水難溶性のセルロース誘導体、特に結晶セルロースを使用することが好ましいとされていた。しかしながら、水吸収性、水難溶性の基剤では、鼻腔に噴霧された場合に、粘膜の水分を吸収することから鼻腔のムズムズ感などの不快感を生じさせる可能性があり、経鼻製剤としてのコンプライアンスの点からも課題があると考えられていた。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１１】
【特許文献１】ＷＯ２００４/０７８２１１号
【特許文献２】特開平７−２０６６９９号公報
【特許文献３】特開平１０−５９８４１号公報
【特許文献４】公報特公昭６２−４２８８８号公報
【非特許文献】
【００１２】
【非特許文献１】Melville GN et al. Respiration 1980 ;40(6) :329-336
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１３】
従って、本発明は、生理活性ペプチドの吸収性を向上させる基剤を用いた粉末状経鼻投与用組成物の提供を目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１４】
本発明者らは、生理活性ペプチドのＢＡを高めた経鼻製剤の開発を目的として、基剤となる物質の選択、製剤の製法および基剤粒子内部における生理活性ペプチドの分布に関する検討について鋭意検討を行った。本発明者は、これらの検討事項の中でも、基剤の選択がとりわけ重要であると考え、生理活性ペプチドの経鼻投与における高いＢＡを示すという製剤にとって望ましい基剤の特性として、鼻粘膜上での適度な滞留性および吸水性があり、且つ生理活性ペプチドの保持と遊離のタイミングに優れているなどの条件を満足する必要があるとの仮説のもと、酢酸セルロースに着目した。【００１５】
経鼻粘膜に投与された製剤が鼻腔内にとどまるのは１０から１５分程度であり、ムコシリアリークリアランスにより徐々に鼻腔奥に排出されると考えられる。従来技術では、生理活性ペプチドの経鼻製剤の作製方法としては、一般的に主剤である生理活性ペプチドの安定性を勘案し、乾燥した基剤と生理活性ペプチドを混合する固体混合法が用いられてきた。しかしながら、このような製剤化の方法では、生理活性ペプチドは基剤の粒子表面に付着するにすぎず、該製剤が経鼻投与された場合には基剤表面の生理活性ペプチドが鼻腔粘液中に速やかに拡散してしまうため、投与部位での生理活性ペプチドの高濃度を保つことは困難である。本発明者は、１）吸水性が低い酢酸セルロースに対して適当な量の水を添加することによって、生理活性ペプチドを基剤粒子の内部にも保持した形態を有する酢酸セルロース製剤が作製できること、２）生理活性ペプチドが粒子内部にも保持された状態の製剤は鼻腔内に投与された場合に、生理活性ペプチドと基剤を固体混合法で作製された経鼻製剤のＢＡに比較して、高いＢＡを示すこと、３）またその製造方法について、高いＢＡを得るためには酢酸セルロースの重量に対する添加する水の量が極めて重要な要素であることを明らかにして、生理活性ペプチドの効率的な粉末状経鼻投与用組成物として本発明を完成させるに至った。【００１６】
従って、本願は以下の発明を包含する：
１）生理活性ペプチドと、基剤としての酢酸セルロースを含有する経鼻投与用組成物。
２）前記生理活性ペプチドが基剤内に含浸されてなる、１）の組成物。
３）酢酸セルロースのアセチル化の程度が３２〜４０％である１）又は２）の組成物。
４）前記生理活性ペプチドが分子量２万以下のペプチドである１）〜３）のいずれかの組成物。
５）前記生理活性ペプチドがヒトグルカゴン様ペプチド−１（ＧＬＰ−１）、ヒト副甲状腺ホルモン、ヒト副甲状腺ホルモン１−３４（ｈＰＴＨ（１−３４））、ヒトモチリン、ヒトモチリン誘導体、ヒトグレリン、ヒト心房性ナトリウム利尿ペプチド、脳性ナトリウムペプチド（ＢＮＰ）、又はＣ型ナトリウムペプチド（ＣＮＰ）である４）の組成物。
６）生理活性ペプチド、酢酸セルロース及び水を混合した後、続いて当該混合物を乾燥することで粉末状経鼻投与用組成物が製造される、１）〜５）のいずれかの組成物の製造方法。
７）生理活性ペプチドと酢酸セルロースと水の混合において、使用される水の量が酢酸セルロースに対して重量比２０％以上である６）の製造方法。
８）生理活性ペプチドと酢酸セルロースと水の混合において、使用される水の量が酢酸セルロースに対して重量比２０％以上、２５０％以下である、７）の製造方法。
９）生理活性ペプチドと酢酸セルロースと水の混合において、使用される水の量が酢酸セルロースに対して重量比１００％以上、２５０％以下である、８）の製造方法。
【発明の効果】
【００１７】
経鼻投与用組成物において生理活性ペプチドが高いＢＡを発揮するための望ましい基剤の特性として鼻粘膜上での滞留性が必要であることから、水難溶性であり且つ結晶セルロースよりは低いが適度な吸水特性があり、更に生理活性ペプチドの保持と乖離のタイミングに優れているなどの条件が必要である。本発明によれば、かかる条件を満足する基剤として、酢酸セルロースを採用したことにより、その他に添加または配合する物質を要せず、より安全で使用感にも優れ、また生理活性ペプチドの吸収性が向上した組成物が提供される。
【図面の簡単な説明】
【００１８】
【図１】図1は、ＧＬＰ−１と酢酸セルロースの溶液混合組成物（実施例1）、ＧＬＰ−１と酢酸セルロースの固体混合組成物（比較例1）及びＧＬＰ−１と結晶性セルロースの溶液混合組成物（比較例2）をカニクイザルに経鼻投与した場合の血漿中ＧＬＰ−１濃度の経時変化を示す。
【図２】図2は、ｈＰＴＨ（１−３４）と酢酸セルロースの溶液混合組成物（実施例2）、ｈＰＴＨ（１−３４）と酢酸セルロースの固体混合組成物（比較例3）及びｈＰＴＨ（１−３４）と結晶性セルロースの溶液混合組成物（比較例4）をカニクイザルに経鼻投与した場合の血漿中ＰＴＨ濃度の経時変化を示す。
【図３】図3は、モチリン誘導体と酢酸セルロースの溶液混合組成物（実施例3）、モチリン誘導体と酢酸セルロースの固体混合組成物（比較例5）及びモチリン誘導体と結晶セルロースの溶液混合組成物（比較例6）をカニクイザルに経鼻投与した場合の血漿中モチリン誘導体濃度の経時変化を示す。
【図４】図4は、モチリン誘導体と酢酸セルロースを酢酸セルロースの25〜500重量%の精製水中で混合した溶液混合組成物（実施例4〜7）、モチリン誘導体と酢酸セルロースを酢酸セルロースの５％重量％の精製水中で混合した溶液組成物（比較例７）及びモチリン誘導体と酢酸セルロースの固体混合組成物（比較例 8）をカニクイザルに経鼻投与した場合の血漿中モチリン誘導体濃度の経時変化を示す。
【図５】図5は、モチリン誘導体とアセチル基含有率32.0％である酢酸セルロースの溶液混合組成物（実施例8）をカニクイザルに経鼻投与した場合の血漿中モチリン誘導体濃度の経時変化を示す。
【図６】図6は、蛍光修飾したモチリン誘導体を用いて、酢酸セルロース製剤粒子に薬物がどのように分布しているかの観察結果を示す。左列：酢酸セルロース粉末；中央列：実施例10の組成物；右列：比較例9の組成物；上行：透過光映像；中央行：蛍光映像；下行：透過光映像と蛍光映像の重ね合わせ。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
本発明は、基剤である酢酸セルロースと、生理活性ペプチドと水とを混合し、その後に乾燥処理方法により作製された粉末状経鼻投与用組成物であり、該組成物により、生理活性ペプチドが生体内で活性を示すのに充分な高いＢＡが得られる組成物を提供するものである。
【００２０】
本発明の組成物は、基剤である酢酸セルロースの吸水作用を利用して基剤内部に生理活性ペプチドを含浸させることで、生理活性ペプチドを基剤表面のみならず、その内部に保持することができる。当該組成物は、生理活性ペプチド、酢酸セルロース及び水を混合した後、続いて当該混合物を乾燥することで製造することができる。生理活性ペプチド、酢酸セルロース及び水を混合する順序は限定されないが、製造工程により、例えば、以下の順序が考えられる。１）生理活性ペプチドと酢酸セルロースとの混合物に水を添加し混合する。２）生理活性ペプチドを水に溶解した後、酢酸セルロースを添加し混合する。または３）酢酸セルロースと水を混合し、該混合物に生理活性ペプチドを添加し混合する。その後、引き続きこれらの混合物を乾燥する。本発明において、基剤と生理活性ペプチドの混合とは、手技による混合、高速撹拌装置を用いた混合、公転／自転方式の撹拌装置を用いた混合、2軸遊星方式の混合混練機を用いた混合などがあるが、いずれも採用できこれらに限定するものではない。
【００２１】
本発明の組成物は、鼻腔内などの粘膜上に噴霧または吸入された際、基剤である酢酸セルロースにより、粘膜に付着して滞留させることができる。そして、粘膜上に滞留した酢酸セルロースの粒子が、粘膜表面から粘液をわずかに吸収し、その粘液に酢酸セルロースの内部に保持されていた生理活性ペプチドが溶解することにより、生理活性ペプチドの局所的高濃度領域が生じる。この状態で、生理活性ペプチドの濃度勾配を利用し、効率よく生理活性ペプチドを粘膜から近傍に存在する血管網に到達させることができ、生理活性ペプチドの粘膜吸収を向上させることができる。
【００２２】
本発明における酢酸セルロースとは、一般的に天然の高分子であるセルロースを酢酸エステル化することにより得られる半合成高分子である。セルロースはグルコースが、β−１，４−グルコシド結合した長鎖の天然多糖である。セルロースの持つ水酸基を修飾し、エステル化やエーテル化を行うと、熱可塑性になったり、水溶性や有機溶媒可塑性となって、成形体を容易に作れるようになる。セルロース誘導体の水吸収特性に関しては、セルロースの分子中に、例えばメチル基を導入することでセルロースの水酸基同士の水素結合を妨げ、セルロース分子が水和する性質が付与されるため、その水溶性が向上するといわれている。すなわち、セルロースの水酸基がアセチル化している程度（アセチル基含有率）とセルロース鎖の重合度の違いにより、水吸収特性等、性質の異なる酢酸セルロースが存在する。本発明の目的に沿う限り、任意のアセチル基含有率および重合度の酢酸セルロースを使用することができるが、適度な水親和性及び吸水性を有する点からアセチル基含有率32〜40％の酢酸セルロースを用いることが望ましい。
【００２３】
酢酸セルロースは、市販されている粉末製品をそのまま使用してもよいが、市販の粉末製品を更に加工して、所望の粒子径、形状として使用することもできる。
【００２４】
基剤である酢酸セルロースを加工する方法としては、慣用の微粒子形成法を適宜使用することができ、例えば、ジェットミル粉砕、ハンマーミル粉砕、回転型ボールミル粉砕、振動ボールミル粉砕、ビーズミル粉砕、シェーカーミル粉砕、ロッドミル粉砕、チューブミル粉砕等により物理的に粉砕する方法、酢酸セルロースを一旦溶媒に溶解後、温度変化、溶媒組成の変更等を行なって晶析させ、遠心分離或いはろ過等の方法で回収する晶析法、酢酸セルロースを一旦溶媒に溶解後、スプレーノズルを用いてスプレードライヤーの乾燥室内に噴霧し、短時間に噴霧液内の溶媒を揮発させるスプレードライ法等が採用される。
【００２５】
酢酸セルロースは、粒子径のバラツキを抑えるために、篩過、重力沈降式分級、遠心力分級、気流の流れによる慣性力式分級等の方法で粒子径が一定範囲になるように、処理を行なってもよい。粒子径の測定は、例えばレーザー回折式粒度分布測定装置、篩い分け分級装置、或いは画像解析式粒子径測定装置を用いて行うことができる。
【００２６】
酢酸セルロースの平均粒子径は、組成物に含まれる生理活性ペプチドの種類にもよるが、通常０．１〜１０００μｍの範囲であればよく、鼻腔内に広く拡散する１〜５００μｍの範囲であるのが好ましく、２０〜２００μｍの範囲であるのが更に好ましい。
【００２７】
本発明の生理活性ペプチドを内部に保持した酢酸セルロースは、例えば、好ましい量の水に溶解させた生理活性ペプチドの水溶液と酢酸セルロースを混合し乾燥させることによって得られる。また、粉末状態の生理活性ペプチドと酢酸セルロースを混合した後、あるいは混合と同時に好ましい量の水を添加し、乾燥することによっても得られる。生理活性ペプチドを含む水を添加した酢酸セルロース粉末を乾燥する方法としては、本発明の目的に沿う限りいかなる方法を用いてもよいが、真空乾燥、あるいは凍結乾燥法を用いることが望ましい。
【００２８】
本発明においては生理活性ペプチドと基剤である酢酸セルロースの混合時に、水を使用することが好ましい。また、酢酸セルロースを溶解することがなく且つ水と混合可能な溶媒を添加することができる。例えば、上記の条件を満たす任意の割合のアルコール類、アセトニトリル、アセトン等と水との混合液を用いることができる。
【００２９】
本発明において、水の混合量は酢酸セルロースの重量に対して０．２〜５００倍（２０〜５００％）であるのが好ましく、さらには０．２〜２．５倍（２０〜２５０％）、特に混合時の組成物の取り扱いの容易さから、１〜２．５倍（１００％〜２５０％）であるのが好ましい。
【００３０】
また、公知公用の手法によって、内部に生理活性ペプチドを保持した酢酸セルロースの粉末を作製した後に、再度所望の粒子径になるよう粉砕、篩過してもよい。
【００３１】
本発明において、基材としての酢酸セルロースは、主剤である任意の生理活性ペプチドと組み合わせて使用される。本発明において生理活性ペプチドとは、生体内で所望の効果を奏する任意の物質を意味し、特に限定されない。しかしながら、生理活性ペプチド、特に分子量2万以下のサイズを有する生理活性ペプチドは、粘膜からの吸収が比較的高いことから酢酸セルロースと好適に組み合わされる。本発明において、粘膜透過性が亢進されるペプチドとしては、種々のペプチド性薬物を挙げることができるが、特に、ヒトグルカゴン様ペプチド−１（ＧＬＰ−１）、ヒト副甲状線ホルモン（ｈＰＴＨ）およびそのＮ末断片ｈＰＴＨ（１−３４）、ヒトモチリン、ヒトグレリン、ヒト心房性ナトリウム利尿ペプチド、脳性ナトリウムペプチド（ＢＮＰ）、Ｃ型ナトリウムペプチド（ＣＮＰ）、ヒトインスリン、レプチン、レジスチン、グルカゴン、リラキシン、ガラニン、ガストリン、アペリン、セレクチン、カルシトニン、アドレノメデュリン、アミリン、ヒューマニン、チモシン、エンドルフィン、エンドモルフィン、ノシスタチン、エンケファリン、ニューロペプチドＹ、ニューロペプチドＳ、ニューロメジンＵ、アンジオテンシン、エンドセリン、グアニリン、サリューシン、ウロテンシン、オキシトシン、バソプレシン、ニューロフィジン、メラニン細胞刺激ホルモン、ウロコルチン、リポトロピン、黄体形成ホルモン放出ホルモン、メスタチン、プロラクチン放出ペプチド、ソマトスタチン、コルチスタチン、甲状腺刺激ホルモン放出ホルモン、サブスタンスＰ、ニューロキニン、エンドキニン、ニューロテンシン、ニューロメジンＮ、オベスタチン、オレキシンインスリン様成長因子１（ＩＧＦ−１）、メラニン凝集ホルモン、副腎刺激ホルモン放出ホルモン、エクセンジン−４、カタカルシン、コレシストキニン、コルチコトロピン、メラノトロピン、ニューロメジンＣ、コペプチン、下垂体アデニル酸シクラーゼ活性化ペプチド（ＰＡＣＡＰ）、ペプチドＹＹ、チロリベリン又は当該生理活性ペプチドの誘導体は、酢酸セルロースと組み合わされることで、他の基剤を用いた場合と比較してＢＡの向上が期待できる。ここで誘導体とは、天然のペプチド配列を基に１乃至数個の天然アミノ酸の置換、特に保存的置換、及び／又は欠失、付加された生理活性ペプチドをいう。当該ペプチドは、市販のものを使用してもよいし、あるいは、例えば、化学合成、L型天然アミノ酸のみからなるペプチドの場合は組換えDNA技術、又はそれらを組み合わせることにより製造したものを使用してもよい。
【００３２】
また、本発明の組成物は、投与後直ぐに生理活性ペプチドが鼻腔粘膜下の血管から体内に吸収され、薬効発現迄の時間が短いため、薬物の投与後、薬効が発現するまでのオンセット時間が短いことが治療上有用である生理活性ペプチドには好適に使用することができる。
【００３３】
本発明の組成物における酢酸セルロースと生理活性ペプチドの配合比率は、生理活性ペプチドの種類や組成物の使用形態等様々な要因にもよるが、生理活性ペプチドが組成物全体の０．０１〜５０重量％、酢酸セルロース粉末が全体の５０〜１００重量％の範囲で使用することができる。
【００３４】
本発明の組成物の噴霧または吸入による投与量は通常０．１〜５００ｍｇ／回、好ましくは１〜１００ｍｇ／回である。このような少ない投与量でも、本発明の組成物は優れたＢＡの増加作用を示すため、生理活性作用を発現させるために比較的大きな体内吸収量（１ｍｇ／人／回程度）が必要な生理活性ペプチドであっても、薬効発現に必要な量を吸収させることができる。
【００３５】
本発明における組成物は、上記生理活性ペプチドと、基剤としての酢酸セルロースとの組み合わせのみでＢＡの向上を達成できる。しかしながら、本発明の目的上悪影響を及ぼさない限りにおいて、賦形剤、保存剤、防腐剤等を加えることができる。例えば、滑沢剤としてタルク、ステアリン酸およびナトリウム塩、カルシウム塩などの塩、カープレックス等、結合剤としてデンプン、デキストリン等、ｐＨ調節剤としてクエン酸、グリシン等、保存剤としてアスコルビン酸等、防腐剤としてパラオキシ安息香酸エステル類、塩化ベンザルコニウム、フェノール、クロロブタノール等、矯臭剤としてメントール、カンキツ香料等を挙げることができる。
【００３６】
１回の噴霧または吸入で投与される生理活性物質の量のバラツキを抑制するために、賦形剤として、基剤として使用している酢酸セルロースを添加することもできる。
【００３７】
また同目的で、生理活性ペプチドおよび酢酸セルロース以外の固形成分として粘膜に悪影響がなく、かつ、生理活性ペプチドの吸収を妨げないものであれば、当該成分を適量添加することもできる。
【００３８】
本発明の組成物は、鼻腔内に噴霧することによって投与することができ、所定量を空気又は人体に悪影響のないガス（空気、窒素ガス、アルゴンガス、二酸化炭素ガス、代替フロンガス等）で鼻腔内に噴霧すればよい。
【００３９】
噴霧する方法としては、慣用の経鼻または経肺の投与用器具などを何れも使用することができ、例えば、定量噴射式の加圧投与用器具に本発明の組成物を充填し、一定量ずつ鼻腔内や気管内などに噴霧する方法、本発明の組成物を一定量ずつカプセル等に充填し、必要時に、そのまま加圧投与用器具に装着し、穿孔等により組成物を噴霧できるようにした上で、空気又は人体に悪影響のないガスで鼻腔内や気管内などに噴霧する方法等が考えられる。
【００４０】
更に、本発明の組成物を鼻腔内に投与する場合は、吸引のみにより行うことも可能であり、本発明の組成物を一定量ずつカプセルやブリスターパックなどに充填し、必要時に、そのまま吸引器具に装着して吸引することにより、鼻腔内に組成物を到達させることもできる。
【００４１】
なお、本発明の組成物は、経鼻投与に限定されず、経肺投与、経咽頭粘膜、経気管支粘膜投与などにも使用することができ、投与方法に応じた慣用の投与器具を用いて、投与することができる。
【実施例】
【００４２】
次に、実施例を挙げて本発明を具体的に説明するが、本発明の範囲はこれらに限定されるものではない。【００４３】
（実験方法１）
カニクイザルを用いた経鼻投与用組成物の吸収性試験
1-1.経鼻投与用組成物の調製
生理活性ポリペプチドとして、グルカゴン様ペプチド（以下、GLP-1）、ヒト副甲状腺ホルモン1-34（以下、ｈPTH（１−３４））、モチリン誘導体を使用した。実施例１〜１０および比較例１〜９に記載した方法に従って、各種ペプチドを含有する経鼻吸収用組成物を調製した。各ペプチドの量が約500 μgになるように2号ゼラチンカプセルに充填した。ＧＬＰ−１およびｈＰＴＨ（１−３４）は公知技術の遺伝子組換え法により製造し、試験に使用した。モチリンは22個のアミノ酸からなるペプチドであり、本発明ではモチリン誘導体の一例として、式（Ｉ）で示されるペプチドを公知の遺伝子組換え法で製造し、試験に使用した。
Phe-Val-Pro-Ile-Phe-Thr-Tyr-Gly-Glu-Leu-Gln-Arg-Leu-Gln-Glu-Lys-Glu-Arg-Asn-Lys-Pro-Gln      （Ｉ）（配列番号１）【００４４】
1-2. 噴霧方法
体重6 kg前後のカニクイザル（ハムリー株式会社）を用いた。試験前日から絶食し、試験当日にモンキーチェアに固定した。投与には鼻腔内噴霧デバイス（日立オートモティブシステム）を用いた。１カプセルを経鼻製剤用デバイスにセットし、吸気に合わせて5回ポンピングすることによりカニクイザルに経鼻投与した。投与後5、10、15、20、30、60、120、180分後に橈側皮静脈から下記の方法で採血を行った。【００４５】
1-3. 血液処理方法
1-3-1. GLP-1経鼻投与用組成物を投与した場合の血液処理
ヘパリンナトリウムを浸潤させた注射筒にディスポーサブル注射針を装着し採血した。採血後速やかに1/100容量の10%EDTA・2Na・2H2O-生理食塩液及び1/100容量のDPP IV Inhibitorを加え、攪拌した後に氷冷し、遠心分離(4℃)して血漿を得た。【００４６】
1-3-2. ｈＰＴＨ（１−３４）経鼻投与用組成物を投与した場合の血液処理
ヘパリンナトリウムを浸潤させた注射筒にディスポーサブル注射針を装着し採血した。採取後速やかに1/100容量の10%EDTA・2Na・2H2O-生理食塩液を加え、攪拌した後に氷冷し、遠心分離(4℃)して血漿を得た。得られた血漿には、血漿量の1/10量のアプロチニン溶液を加えて攪拌した。【００４７】
1-3-3. モチリン誘導体経鼻投与用組成物を投与した場合の血液処理
ヘパリンナトリウムを浸潤させた注射筒にディスポーサブル注射針を装着し採血した。採取後速やかに1/100容量の10%EDTA・2Na・2H2O-生理食塩液を加え、攪拌した後に氷冷し、遠心分離(4℃)して血漿を得た。得られた血漿には、血漿量の1/10量のアプロチニン溶液を加えて攪拌した。【００４８】
1-4. 血漿中薬物濃度測定
採取した血漿の血漿中薬物濃度測定を下記の方法で行った。【００４９】
1-4-1. 血漿中GLP-1濃度測定
GLP-1ELISAキット(Linco)を用い、エンザイムイムノアッセイ法（ＥＬＩＳＡ法）で血漿中ＧＬＰ−１濃度を測定した。キットのプロトコールに従って処理を行い、355 nm / 460 nmの吸光度を測定した。ＢＡは、経鼻投与後の血漿中濃度時間−曲線下面積（ＡＵＣ）を、5%マンニトール溶液に溶かしたGLP-1の静脈内投与後のAUCと比較して算出した。【００５０】
1-4-2. 血漿中ｈＰＴＨ（１−３４）濃度測定
ラジオイムノアッセイ法（ＲＩＡ法）を用いて、血漿中ｈＰＴＨ（１−３４）濃度を測定した。血漿試料に抗PTH抗体を加えたのち、[125I-Tyr34］hPTH(1-34)を加えて競合反応させた。これに二次抗体を加えて抗PTH抗体に結合したhPTH（1-34）を沈殿させ、上清分離後に沈殿画分中の放射能をγ-カウンター（パッカード社製）で測定した。ＢＡは、経鼻投与後の血漿中濃度時間-曲線下面積（ＡＵＣ）を、5%マンニトール溶液に溶かしたPTHの静脈内投与後のAUCと比較して算出した。【００５１】
1-4-3. 血漿中モチリン誘導体濃度測定
モチリン誘導体の血漿中濃度測定は、抗ヒトモチリン抗体を用いたラジオイムノアッセイ法（RIA法）により実施した。すなわち、血漿試料に抗ヒトモチリン抗体を加えたのち、125I−ヒトモチリンを加えて競合反応させた。これに二次抗体を加えて抗ヒトモチリン抗体に結合したヒトモチリンを沈殿させ、上清分離後に沈殿画分中の放射能をγ-カウンター（パーキンエルマー社製）で測定した。ＢＡは、経鼻投与後の血漿中濃度時間−曲線下面積（ＡＵＣ）を、5%マンニトール溶液に溶かしたモチリン誘導体の静脈内投与後のAUCと比較して算出した。【００５２】
酢酸セルロース（イーストマンケミカル製、CA398、アセチル基含有率39.8%）をハンマーミル（ホソカワミクロン社、ACM-15H）を用いて粉砕した。粉砕した酢酸セルロースは減圧吸引型篩い分け装置（ホソカワミクロン社、200LS-N）を用いて篩い分けを行い、40〜100 μmの画分を得た。以下、特に記載のない限り、この画分で得られた酢酸セルロースを基剤として試験に用いた。【００５３】
また、結晶セルロース（旭化成ケミカルズ製、セオラスPH-101）を同様に減圧吸引型篩い分け装置を用いて篩い分けを行い、40〜100 μmの画分を得た。以下、特に記載のない限り、この画分の結晶セルロースを基剤として試験に用いた。【００５４】
（実施例１）
GLP-1 100 mgを精製水4 mLに溶解させた。ビーカー中でこの溶液と酢酸セルロース4 gを、スパーテルを用いて練合した後、乾燥して、組成物（GLP-1溶液混合組成物）を得た。【００５５】
（比較例１）
GLP-1 100 mgと酢酸セルロース 4 gを乳鉢に加えた。乳棒で30秒間混合した後、30秒間放冷するサイクルを3回繰り返し、組成物（GLP-1固体混合組成物）を得た。【００５６】
（比較例２）
GLP-1 100 mgを精製水4 mLに溶解させた。ビーカー中でこの溶液と結晶セルロース 4 gを、スパーテルを用いて練合した後、乾燥して、組成物(GLP-1結晶セルロース組成物)を得た。【００５７】
実験方法1に従って、実施例1並びに比較例1および比較例2で得られた組成物のサル経鼻吸収性を評価した。その結果を図1に示す。また、実施例１と比較例１と比較例2の組成物のＢＡはそれぞれ57.9%と48.4%と38.2%であった。ＧＬＰ−１溶液混合組成物（実施例１）は、ＧＬＰ−１固体混合組成物（比較例１）やＧＬＰ−１結晶セルロース組成物（比較例２）と比較して、良好な吸収性を示すことが分かった。【００５８】
（実施例２）
ｈＰＴＨ（１−３４）100 mgを精製水4 mLに溶解させた。ビーカー中でこの溶液と酢酸セルロース 4 gを、スパーテルを用いて練合した後、乾燥して、組成物（ｈＰＴＨ溶液混合組成物）を得た。【００５９】
（比較例３）
ｈＰＴＨ（１−３４） 100 mgと酢酸セルロース 4 gを乳鉢に加えた。乳棒で30秒間混合した後、30秒間放冷するサイクルを3回繰り返し、組成物（ｈＰＴＨ固体混合組成物）を得た。【００６０】
（比較例４）
ｈＰＴＨ（１−３４） 100 mgを精製水4 mLに溶解させた。ビーカー中でこの溶液と結晶セルロース 4 gを、スパーテルを用いて混合した後、乾燥して、組成物(ｈＰＴＨ結晶セルロース組成物)を得た。【００６１】
実験方法１に従って、実施例２並びに比較例３および比較例４で得られた組成物のサル経鼻吸収性を評価した。その結果を図２に示す。また、実施例２と比較例３と比較例４の組成物のＢＡはそれぞれ3.8%と2.8%と2.3%であった。ｈＰＴＨ溶液混合組成物（実施例２）は、ｈＰＴＨ固体混合組成物（比較例３）やｈＰＴＨ結晶セルロース組成物（比較例４）と比較して良好な吸収性を示すことが分かった。【００６２】
（実施例３）
モチリン誘導体100 mgを精製水4 mLに溶解させた。ビーカー中でこの溶液と結晶性セルロース 4 gを、スパーテルを用いて練合した後、乾燥して、組成物（モチリン誘導体溶液混合組成物）を得た。【００６３】
（比較例５）
モチリン誘導体100 mgと結晶セルロース4 gを乳鉢に加えた。乳棒で30秒間混合した後、30秒間放冷するサイクルを3回繰り返し、組成物（モチリン誘導体固体混合組成物）を得た。【００６４】
（比較例６）
モチリン誘導体100 mgを精製水4 mLに溶解させた。ビーカー中でこの溶液と結晶セルロース 4 gを、スパーテルを用いて練合した後、乾燥して、組成物(モチリン誘導体結晶セルロース組成物)を得た。【００６５】
実験方法1に従って、実施例3並びに比較例5および比較例6で得られた組成物のサル経鼻吸収性を評価した。その結果を図3に示す。また、実施例3と比較例5と比較例6の組成物のＢＡはそれぞれ4.6%と4.0%と3.3%であった。モチリン誘導体溶液混合組成物（実施例３）は、モチリン誘導体固体混合組成物（比較例５）やモチリン誘導体結晶セルロース組成物（比較例６）と比較して良好な吸収性を示すことが分かった。【００６６】
（実施例４）
モチリン誘導体300 mgと酢酸セルロース 12 gを、高速攪拌造粒装置（樋口商会、PalmXer）を用いて混合した後、攪拌を続けながら精製水2.4 mLを滴下して練合した。その後、乾燥して組成物を得た。【００６７】
（実施例５）
モチリン誘導体300 mgを精製水12 mLに溶解させた。遊星式攪拌装置（PRIMIX、HIVIS MIX）を用いて、酢酸セルロース12 gにこの溶液を徐々に加えて練合した後、乾燥して組成物を得た。【００６８】
（実施例６）
モチリン誘導体25mgを精製水2.5 mLに溶解させた。ビーカー中でこの溶液と酢酸セルロース 1 gを、スパーテルを用いて練合した後、乾燥して、組成物を得た。【００６９】
（実施例７）
モチリン誘導体12.5 mgを精製水2.5 mLに溶解させた。ビーカー中でこの溶液と酢酸セルロース0.5 gを、スパーテルを用いて練合した後、乾燥して、組成物を得た。【００７０】
（比較例７）
モチリン誘導体10 mgと酢酸セルロース0.4 gを乳鉢に加えた。乳棒で30秒間混合した後、30秒間放冷するサイクルを3回繰り返し、組成物を得た。【００７１】
（比較例８）
モチリン誘導体50 mgと酢酸セルロース 2 gを乳鉢に加えた。乳棒で30秒間混合した後、30秒間放冷するサイクルを3回繰り返した後、精製水0.1 mLを加え混合後、乾燥して、組成物を得た。【００７２】
実施例4〜7および比較例7〜8の組成物はいずれも、モチリン誘導体に対する酢酸セルロースの重量を１：４０とし、混合時に用いる水の量を変化させ混合したのち、乾燥し、経鼻投与用組成物を調製した。カニクイザルを用い、各組成物につき１回の投与量がモチリン誘導体として約500μｇとなるように経鼻投与し、経時的に血液を採取した。その結果を、図4および表1に示す。実施例4〜7の組成物はＢＡが5％以上となったのに対して、比較例7〜8の組成物は4％以下であった。このことから、酢酸セルロースに対する水の添加量は20%以上が好ましいことが分かった。【００７３】
【表１】
2011115264.tif 000003
【００７４】
（実施例８）
基剤として上記の酢酸セルロースとはアセチル基含有率の異なる酢酸セルロース（イーストマンケミカル社、アセチル基含有率32.0%）を用いて組成物を作製した。当該酢酸セルロースを、ピンミル（奈良機械製作所、サンプルミル）で粉砕した。粉砕した酢酸セルロースは減圧吸引型篩い分け装置（ホソカワミクロン社、200LS-N）を用いて篩い分けを行い、40〜100μmの画分を得た。得られた酢酸セルロース粉末0.5 gと、モチリン誘導体12.5 mgを精製水0.5 mLに溶解した溶液をビーカーに加え、スパーテルを用いて練合した後、乾燥して、組成物を得た。【００７５】
実験方法1に従って、実施例8で得られたアセチル基含有率32.0%の酢酸セルロースを基剤として用いた粉末組成物のサル経鼻吸収性を評価した。その結果を図5に示す。また、実施例8の組成物のＢＡは6.7%であった。アセチル基含有率が32.0%または39.8%のいずれの酢酸セルロースを用いても、良好なＢＡを示すことが分かった。【００７６】
（実施例９）
実施例3などで使用したモチリン誘導体を以下の方法で蛍光標識した。まず、リン酸緩衝液（pH 8.3）にモチリン誘導体（化合物ＭＴ１１４）100 mgを溶解し、これにジメチルスルホキシドに溶解したFluorescein-5-EX N-hydroxysuccinimide ester（シグマ−アルドリッチ）10 mgを加えて混合した。反応後、得られた溶液からSep-Pak Plus CM Cartridges（ウォーターズ）およびSep-Pak Plus C18 Environmental Cartridges（ウォーターズ）を用いて固相抽出した後、凍結乾燥して、モチリン誘導体蛍光標識体37 mgを得た。その後、モチリン誘導体と蛍光標識モチリン誘導体を50:1の割合で混合し、水に溶解した後、凍結乾燥して実施例10および比較例9の組成物の調製に使用した。【００７７】
（実施例１０）
実施例9で調製した蛍光標識モチリン誘導体を用いて、実施例5と同様に組成物を調製した。【００７８】
（比較例９）
実施例9で調製した蛍光標識モチリン誘導体を用いて、比較例7と同様に組成物を調製した。【００７９】
酢酸セルロースおよび実施例10および比較例9で調製した組成物を、共焦点レーザー顕微鏡LSM700（ツァイス）により観察した。その結果を図6に示す。酢酸セルロース粉末には蛍光は観察されなかった。また、実施例10の組成物には、粒子内部に均一な蛍光が観察された。また、比較例9の組成物には、粒子表面に粒状に蛍光が観察された。このことから、水を用いて組成物を調製する場合は、粒子内部に薬物が浸透し、結果として粒子内部に生理活性物質を含有する組成物が得られるのに対して、水を用いない場合は、粒子表面に生理活性物質が付着した組成物が得られることが分かった。【００８０】
酢酸セルロースの安全性を検討するため、酢酸セルロースを用いカニクイザルの鼻粘膜に対する刺激性を検討した。酢酸セルロース 20 ｍｇを1日3回、2週間経鼻投与し、鼻粘膜の組織学的観察を行った。その結果、鼻粘膜の異常は観察されず、安全性に問題はなかった。
【産業上の利用可能性】
【００８１】
本発明の酢酸セルロースを基剤とする組成物は、鼻腔内などの粘膜上に噴霧または吸入された際、主剤である生理活性ペプチドのバイオアベイラビリティーを向上させることができる。その結果、これまで注射剤としての製剤形態でのみ供されていた生理活性ペプチドについて、本組成物により在宅でかつ無痛投与の製剤形態である経鼻投与が可能な組成物を提供できる。また、酢酸セルロースは水吸収性が低いため、結晶セルロースなどの高い水吸収性の基剤を使用した場合の鼻腔のムズムズ感などの不快感を回避でき、安全性にも優れた経鼻投与用組成物を提供できる。
【図１】
2011115264.tif 000004
【図２】
2011115264.tif 000005
【図３】
2011115264.tif 000006
【図４】
2011115264.tif 000007
【図５】
2011115264.tif 000008
【図６】
2011115264.tif 000009
【配列表】
2011115264000001.app
【手続補正書】
【提出日】平成24年1月18日(2012.1.18)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
生理活性ペプチドと、基剤としての酢酸セルロースを含有する粉末状経鼻投与用組成物であって、１）当該生理活性ペプチド、当該酢酸セルロース、及び、当該酢酸セルロースに対して重量比２０％以上の量の水を混合し、２）当該混合物を乾燥することで得られる、粉末状経鼻投与用組成物。
【請求項２】
生理活性ペプチドと酢酸セルロースと水の混合において、使用される水の量が酢酸セルロースに対して重量比２０％以上、２５０％以下である、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
生理活性ペプチドと酢酸セルロースと水の混合において、使用される水の量が酢酸セルロースに対して重量比１００％以上、２５０％以下である請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
酢酸セルロースのアセチル化の程度が３２〜４０％である、請求項１〜３のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項５】
前記生理活性ペプチドが分子量２万以下のペプチドである、請求項１〜４のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項６】
前記生理活性ペプチドがヒトグルカゴン様ペプチド−１、ヒト副甲状腺ホルモン（ｈＰＴＨ）、ヒトモチリン、ヒトグレリン、ヒト心房性ナトリウム利尿ペプチド、脳性ナトリウムペプチド（ＢＮＰ）、若しくはＣ型ナトリウムペプチド（ＣＮＰ）、又はその誘導体である、請求項５に記載の組成物。
【請求項７】
前記生理活性ペプチドの誘導体が、ヒト副甲状腺ホルモンｈＰＴＨ（１−３４）又は配列番号１のアミノ酸配列から成るヒトモチリン誘導体である、請求項６に記載の組成物。
【請求項８】
生理活性ペプチドと、基剤としての酢酸セルロースを含有する粉末状経鼻投与用組成物の製造方法であって、
１）当該生理活性ペプチド、当該酢酸セルロース、及び、当該酢酸セルロースに対して重量比２０％以上の量の水を混合し、２）当該混合物を乾燥することを含んでなる、当該粉末状経鼻投与用組成物の製造方法。
【請求項９】
生理活性ペプチドと酢酸セルロースと水の混合において、使用される水の量が酢酸セルロースに対して重量比２０％以上、２５０％以下である、請求項８に記載の製造方法。
【請求項１０】
生理活性ペプチドと酢酸セルロースと水の混合において、使用される水の量が酢酸セルロースに対して重量比１００％以上、２５０％以下である、請求項９に記載の製造方法。
【請求項１１】
酢酸セルロースのアセチル化の程度が３２〜４０％である、請求項８〜１０のいずれか１項に記載の製造方法。
【請求項１２】
前記生理活性ペプチドが分子量２万以下のペプチドである、請求項８〜１１のいずれか１項に記載の製造方法。
【請求項１３】
前記生理活性ペプチドがヒトグルカゴン様ペプチド−１、ヒト副甲状腺ホルモン（ｈＰＴＨ）、ヒトモチリン、ヒトグレリン、ヒト心房性ナトリウム利尿ペプチド、脳性ナトリウムペプチド（ＢＮＰ）、若しくはＣ型ナトリウムペプチド（ＣＮＰ）、又はその誘導体である、請求項８〜１２のいずれか１項に記載の製造方法。
【請求項１４】
前記生理活性ペプチドの誘導体が、ヒト副甲状腺ホルモンｈＰＴＨ（１−３４）又は配列番号１のアミノ酸配列から成るヒトモチリン誘導体である、請求項１３に記載の製造方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１７】
で３０秒間混合した後、３０秒間放冷するサイクルを３回繰り返し、組成物（ｈＰＴＨ固体混合組成物）を得た。
［００６０］
（比較例４）
ｈＰＴＨ（１−３４）１００ｍｇを精製水４ｍＬに溶解させた。ビーカー中でこの溶液と結晶セルロース４ｇを、スパーテルを用いて混合した後、乾燥して、組成物（ｈＰＴＨ結晶セルロース組成物）を得た。
［００６１］
実験方法１に従って、実施例２並びに比較例３および比較例４で得られた組成物のサル経鼻吸収性を評価した。その結果を図２に示す。また、実施例２と比較例３と比較例４の組成物のＢＡはそれぞれ３．８％と２．８％と２．３％であった。ｈＰＴＨ溶液混合組成物（実施例２）は、ｈＰＴＨ固体混合組成物（比較例３）やｈＰＴＨ結晶セルロース組成物（比較例４）と比較して良好な吸収性を示すことが分かった。
［００６２］
（実施例３）
モチリン誘導体１００ｍｇを精製水４ｍＬに溶解させた。ビーカー中でこの溶液と酢酸セルロース４ｇを、スパーテルを用いて練合した後、乾燥して、組成物（モチリン誘導体溶液混合組成物）を得た。
［００６３］
（比較例５）
モチリン誘導体１００ｍｇと酢酸セルロース４ｇを乳鉢に加えた。乳棒で３０秒間混合した後、３０秒間放冷するサイクルを３回繰り返し、組成物（モチリン誘導体固体混合組成物）を得た。
［００６４］
（比較例６）
モチリン誘導体１００ｍｇを精製水４ｍＬに溶解させた。ビーカー中でこの溶液と結晶セルロース４ｇを、スパーテルを用いて練合した後、乾燥して、組成物（モチリン誘導体結晶セルロース組成物）を得た。
［００６５］
実験方法１に従って、実施例３並びに比較例５および比較例６で得られた組成物のサル経鼻吸収性を評価した。その結果を図３に示す。また、実施例３と比較例５と比較例６の組成物のＢＡはそれぞれ４．６％と４．０％と３．３％であった。モチリン誘導体溶液混合組成物（実施例３）は、モチリン誘導体固体混合組成物
【国際調査報告】
2011115264.tif 000010
2011115264.tif 000011