(57)【要約】  シワ形成を抑制及び／又は改善する作用を有する新規組成物であって、レチノイド類のような副作用がなく、光安定性が高い組成物を開発する。  本発明は、Ｄ−グルタミン酸と、その誘導体及び／又は塩とからなる群から選択される１種類又は２種類以上の化合物を含む、シワ形成軽減経口組成物を提供する。本発明は、前記化合物を含む、経口シワ形成予防組成物を提供する。本発明は、本発明のシワ形成軽減経口組成物又はシワ形成予防経口組成物を含む、医薬品組成物及び食品組成物を提供する。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｄ−グルタミン酸と、その誘導体及び／又は塩とからなる群から選択される１種類又は２種類以上の化合物を含むことを特徴とする、シワ形成軽減経口組成物。
【請求項２】
Ｄ−グルタミン酸と、その誘導体及び／又は塩とからなる群から選択される１種類又は２種類以上の化合物を含むことを特徴とする、シワ形成予防経口組成物。
【請求項３】
請求項１又は２の経口組成物を含むことを特徴とする、医薬品組成物。
【請求項４】
請求項１又は２の経口組成物を含むことを特徴とする、食品組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、Ｄ−グルタミン酸と、その誘導体及び／又は塩とからなる群から選択される１種類又は２種類以上の化合物を含む、シワ形成軽減経口組成物及びシワ形成予防経口組成物と、前記化合物を投与するステップを含む、シワ形成を軽減する方法及びシワ形成を予防する方法とに関する。
【背景技術】
【０００２】
シワ形成は、通常の老化及び光老化に伴う皮膚真皮の機能低下によって進行し、肌あれのような皮膚表皮の機能障害や、紫外線照射その他の酸化ストレスによって増悪することが知られている。従来、コラーゲン産生を促進することが、シワ形成を抑制及び／又は改善することにつながると考えられてきた。実際、ビタミンＡの誘導体であるレチノイド類は通常の老化及び光老化を起こした顔及び上腕の皮膚に適用して薬効があることが知られている（非特許文献１及び２）。しかし、レチノイド類には、光感作や、レチノイド反応として知られる炎症性反応のような副作用がある（非特許文献３）。また、レチノイド類は一般に光反応性が高く、安定に保存するためには遮光する必要があり、通常の生活条件では皮膚投与後体内に透過する光で分解しやすい。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００３】
【非特許文献１】Ｋｌｉｇｍａｎ，Ａ．Ｍ．ら、Ｊ．Ａｍ．Ａｃａｄ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．、１５：８３６（１９８６）
【非特許文献２】Ｋｌｉｇｍａｎ，Ａ．Ｍ．ら、Ｊ．Ａｍ．Ａｃａｄ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．、２９：２５（１９９３）
【非特許文献３】Ｍｕｋｈｅｒｊｅｅ，Ｓ．ら、Ｃｌｉｎ．Ｉｎｔｅｒｖ．Ａｇｉｎｇ、１：３２７（２００６）
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
そこで、シワ形成を抑制及び／又は改善する作用を有する新規組成物であって、レチノイド類のような副作用がなく、光安定性が高い組成物を開発する必要がある。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明は、Ｄ−グルタミン酸と、その誘導体及び／又は塩とからなる群から選択される１種類又は２種類以上の化合物を含む、シワ形成軽減経口組成物を提供する。【０００６】
本発明は、Ｄ−グルタミン酸と、その誘導体及び／又は塩とからなる群から選択される１種類又は２種類以上の化合物を含む、経口シワ形成予防組成物を提供する。【０００７】
本発明は、本発明のシワ形成軽減経口組成物又はシワ形成予防経口組成物を含む、医薬品組成物を提供する。【０００８】
本発明は、本発明のシワ形成軽減経口組成物又はシワ形成予防経口組成物を含む、食品組成物を提供する。【０００９】
本発明は、Ｄ−グルタミン酸と、その誘導体及び／又は塩とからなる群から選択される１種類又は２種類以上の化合物を含む、シワ形成軽減経口組成物を投与するステップを含む、シワ形成を軽減する方法を提供する。【００１０】
本発明は、Ｄ−グルタミン酸と、その誘導体及び／又は塩とからなる群から選択される１種類又は２種類以上の化合物を含む、シワ形成予防経口組成物を投与するステップを含む、シワ形成を予防する方法を提供する。【００１１】
本発明のシワ形成を軽減する方法及び／又はシワ形成を予防する方法において、前記シワ形成軽減経口組成物及び／又はシワ形成予防経口組成物は医薬品組成物の場合がある。【００１２】
本発明のシワ形成を軽減する方法及び／又はシワ形成を予防する方法において、前記シワ形成軽減経口組成物及び／又はシワ形成予防経口組成物は食品組成物の場合がある。【００１３】
本明細書において「シワ」とは、肌のトラブルの一種であって、皮表の線状陥没が作り出す紋様が、特定の領域に集中して、かつ、大きさ及び配列の不規則性をもって存在する状態を指す。【００１４】
本明細書において「皮膚バリア機能」とは、皮膚を正常な状態を保持する機能であって、体内への異物侵入や体内からの水分喪失を防止する機能を指す。【００１５】
本明細書においてＤ−グルタミン酸の「塩」とは、Ｄ−グルタミン酸のシワ形成軽減効果を損なわないことを条件として、金属塩、アミン塩等を含むいずれかの塩をいう。前記金属塩は、アルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩等を含む場合がある。前記アミン塩は、トリエチルアミン塩、ベンジルアミン塩等を含む場合がある。【００１６】
本明細書においてＤ−グルタミン酸の「誘導体」とは、Ｄ−グルタミン酸のシワ形成軽減効果を損なわないことを条件として、Ｄ−グルタミン酸分子が、アミノ基か、カルボキシル基か、側鎖かにおいて、いずれかの原子団と共有結合したものを指す。前記いずれかの原子団は、Ｎ−フェニルアセチル基、４，４’−ジメトキシトリチル（ＤＭＴ）基等のような保護基と、タンパク質、ペプチド、糖、脂質、核酸等のような生体高分子と、ポリスチレン、ポリエチレン、ポリビニル、ポリエステル等のような合成高分子と、エステル基等のような官能基とを含むがこれらに限定されない。前記エステル基は、例えば、メチルエステル、エチルエステルその他の脂肪族エステルか、芳香族エステルかを含む場合がある。【００１７】
アミノ酸には光学異性体としてＬ−体とＤ−体とがあるが、天然のタンパク質はＬ−アミノ酸がペプチド結合したものであり、細菌の細胞壁などの例外を除きＬ−アミノ酸のみが利用されていることから、ヒトを始めとする哺乳類にはＬ−アミノ酸のみが存在し、Ｌ−アミノ酸のみを利用していると考えられてきた。（木野内忠稔ら、蛋白質  核酸  酵素、５０：４５３−４６０  （２００５）、レーニンジャーの新生化学［上］第２版  ｐｐ１３２−１４７  （１９９３）  廣川書店、ハーパー・生化学  原書２２版  ｐｐ２１−３０（１９９１）  丸善）したがって、従前より、学術的にも産業的にもアミノ酸としてはＬ−アミノ酸のみが専ら使用されてきた。【００１８】
例外的にＤ−アミノ酸が使用されるケースとしては、細菌に産生させる抗生物質の原料として使用する場合、およびアミノ酸を化学合成した際に等量得られるＬ−アミノ酸とＤ−アミノ酸混合物からＬ−アミノ酸のみを分取するコストを省くために、そのままＤＬ−アミノ酸混合物としてＤ−アミノ酸を使用している食品添加物の例がある。しかし、生理活性を有する物質として、Ｄ−アミノ酸だけを産業的に使用している例は従来なかった。【００１９】
Ｄ−セリンやＤ−アスパラギン酸はＤ体の割合が高いことから比較的研究が進んでいる。Ｄ−セリンは大脳、海馬に局在し、脳内のＮＭＤＡ受容体の調節因子であることが明らかにされている。Ｄ−アスパラギン酸は精巣や松果体に局在が認められ、ホルモン分泌の制御に関与していることが示されている（特開２００５−３５５８号公報）。しかし、Ｄ−グルタミン酸のシワ形成軽減及び／又は抑制効果は明らかにされていない。【００２０】
以下の実施例に示すＤ−グルタミン酸のシワ形成軽減効果はこれまで知られていなかった。したがって、本発明のＤ−グルタミン酸を含む本発明の組成物は新規発明である。【００２１】
近年、ｄｄＹマウスに１０ｍＭのＤ−アミノ酸水溶液を２週間自由摂取させた後、各器官でＤ−アミノ酸濃度を測定したところ、松果体では松果体１腺あたり３−１０００ｐｍｏｌであり、脳組織では湿重量１グラムあたり２−５００ｎｍｏｌであることが報告された（Ｍｏｒｉｋａｗａ，Ａ．ら、Ａｍｉｎｏ  Ａｃｉｄｓ，３２：１３−２０（２００７））。これに基づいて、以下に説明する本発明の組成物に含まれるＤ−グルタミン酸の一日摂取量の下限が算出された。【００２２】
本発明のＤ−グルタミン酸は、以下の実施例に示すとおり、マウスに対して１０ｍＭの水溶液濃度の経口組成物でシワ形成軽減効果を有する。したがって、本発明の経口シワ形成軽減組成物及び食品組成物に含まれるＤ−グルタミン酸の量は、この濃度のＤ−グルタミン酸が生体皮膚組織の線維芽細胞に送達されることを条件として、いかなる含有量であってもかまわない。本発明の組成物が内服剤の場合におけるＤ−グルタミン酸の含有量は、０．００００００１重量％〜１００重量％の範囲であればよい。本発明の組成物が内服剤の場合におけるＤ−グルタミン酸の含有量は、０．０００００１重量％〜８０重量％が望ましく、０．００００１重量％〜６０重量％であることが最も望ましい。なお、本発明の組成物に含まれるＤ−グルタミン酸の一日摂取量の下限は体重１ｋｇあたり０．０１ｎｇであればよく、０．１ｎｇが好ましく、１ｎｇがより好ましい。【００２３】
本発明の組成物は、Ｄ−グルタミン酸、Ｄ−グルタミン酸の塩及び／又は生体内で薬物代謝酵素その他によってＤ−グルタミン酸を放出できる誘導体に加えて、Ｄ−グルタミン酸のシワ形成軽減効果を損なわないことを条件として、さらに１種類又は２種類以上の薬学的に許容される添加物を含む場合がある。前記添加物は、希釈剤及び膨張剤と、結合剤及び接着剤と、滑剤と、流動促進剤と、可塑剤と、崩壊剤と、担体溶媒と、緩衝剤と、着色料と、香料と、甘味料と、防腐剤及び安定化剤と、吸着剤と、当業者に知られたその他の医薬品添加剤とを含むが、これらに限られない。【００２４】
本発明の食品組成物は、Ｄ−グルタミン酸、Ｄ−グルタミン酸の塩及び／又は生体内で薬物代謝酵素その他によってＤ−グルタミン酸を放出できる誘導体に加えて、Ｄ−グルタミン酸のシワ形成軽減効果を損なわないことを条件として、調味料、着色料、保存料その他の食品として許容される成分を含む場合がある。【００２５】
本発明の食品組成物は、例えば、キャンディー、クッキー、味噌、フレンチドレッシング、マヨネーズ、フランスパン、醤油、ヨーグルト、ふりかけ、調味料・納豆のたれ、納豆、もろみ黒酢等、従来食品組成物に用いるものであればいずれでもよく、前記例示に限定されるものでない。
【図面の簡単な説明】
【００２６】
【図１】テープストリッピングが施されたマウスの皮膚肥厚に対するＤ−グルタミン酸の効果を示すグラフ。
【図２】テープストリッピングが施されたマウスのシワ形成に対するＤ−グルタミン酸の効果を示すグラフ。
【図３】紫外線照射マウスのバリア機能に対するＤ−グルタミン酸の効果を示すグラフ。
【図４】紫外線照射マウスのシワ形成に対するＤ−グルタミン酸の効果を示すグラフ。
【発明を実施するための形態】
【００２７】
以下に説明する本発明の実施例は例示のみを目的とし、本発明の技術的範囲を限定するものではない。本発明の技術的範囲は特許請求の範囲の記載によってのみ限定される。
【００２８】
本明細書において言及される全ての文献はその全体が引用により本明細書に取り込まれる。
【００２９】
以下の実施例に説明する実験は、アメリカ国立衛生研究所（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ（ＮＩＨ））のガイドラインに従って資生堂リサーチセンターの倫理委員会によって承認された後に実施された。
【実施例１】
【００３０】
実験動物
５週齢の雄性ＨＲ−１ヘアレスマウス（株式会社星野試験動物飼育所）を用いた。【００３１】
Ｄ−グルタミン酸の投与
１０ｍＭのＤ−グルタミン酸を添加した飲用水が給水瓶にて４週間投与された。陰性対照として、Ｄ−グルタミン酸を添加しない飲料水が用いられた。【００３２】
皮膚バリアの破壊
シワ形成のために、テープストリッピングは松永らの方法（Ｍａｔｓｕｎａｇａ，Ｙ．ら、Ｂｒ．Ｊ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．、１５６：８８４（２００７））でＤ−グルタミン酸の投与開始５日後から週３回行われた。簡潔には、ヘアレスマウス（ＨＲ−１系；星野動物、東京）の背部の長さに合わせて切った２４ｍｍ幅のセロファンテープ（セロテープ（登録商標）、ニチバン株式会社）を、背部全面にまんべんなく貼付したのち、剥離した。このテープの貼付・剥離サイクルの回数は、バリア破壊の程度は角層水分蒸散量が約４〜８ｍｇ／ｃｍ2／ｈになるよう水分蒸散測定器（Ｍｅｅｃｏ社、米国ペンシルバニア州、Ｗａｒｒｉｎｇｔｏｎ）を用いて測定しながら調節された。例えば、未処置のヘアレスマウスに前記貼付・剥離サイクル操作を施す場合には、初回の処置においては４回、２、３回目の処置においては５〜６回、２週目以降の処置においては６〜８回繰り返すことで、角層水分蒸散量が約４〜８ｍｇ／ｃｍ2／ｈにまで上昇した。前記貼付・剥離サイクル操作を週に３回ずつ継続的に行うと、ヘアレスマウス背部に正中線に対し垂直なしわがおよそ３週目あたりから誘導される。【００３３】
肥厚した皮膚の測定方法
Ｄ−グルタミン酸投与開始から４週間後に、皮膚厚をシックネスゲージを用いて測定した。皮膚厚の測定値は、シックネスゲージで皮膚を挟み込んで測定したため、「皮膚厚×２」として表した。【００３４】
シワ形成の評価方法
Ｄ−グルタミン酸投与開始から４週間後に、マウス背部の写真を撮影し、ビセットらの方法（Ｂｉｓｓｅｔｔ，Ｄ．Ｌ．ら、Ｐｈｏｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｐｈｏｔｏｂｉｏｌｏｇｙ、４６：３６７（１９８７））の変法でシワの程度を下記の表１に示す評価基準に従って評価した。シワの評価作業は４名の測定者が個別に行い、その後合議によって、シワの生成の度合いについての評点（以下、単に「評点」という。）を決定した。【００３５】
【表１】
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【００３６】
皮膚厚の測定結果
図１にテープストリッピングによる皮膚の肥厚に対するＤ−グルタミン酸の効果を調べた実験の結果を示す。各実験条件の誤差棒は同一条件で６回繰り返した実験結果の測定値の標準偏差を示す。また、アステリスク（＊＊＊）はＳｔｕｄｅｎｔの独立ｔ検定（ｕｎｐａｉｒｅｄ  ｔ−ｔｅｓｔ）でｐが０．１％未満であることを示す。皮膚厚の平均値は、陰性対照群では１．２であり、Ｄ−グルタミン酸投与群では１．０５であった。以上の結果から、テープストリッピングによる皮膚の肥厚は、Ｄ−グルタミン酸によって統計的に有意に軽減されることが示された。【００３７】
シワ形成の評価結果
図２にテープストリッピングによるシワ形成に対するＤ−グルタミン酸の効果を調べた実験の結果を示す。各実験条件の誤差棒は同一条件で６回繰り返した実験結果の測定値の標準偏差を示す。また、アステリスク（＊＊）はＭａｎｎ−Ｗｈｉｔｎｅｙ  Ｕ−検定でｐが１％で未満あることを示す。シワ評点は、対照群では３．５であり、Ｄ−グルタミン酸投与群では１．５であった。以上の結果から、テープストリッピングによるシワ形成は、Ｄ−グルタミン酸によって統計的に有意に軽減されることが示された。
【実施例２】
【００３８】
ヘアレスマウスを用いた紫外線障害によるシワ形成抑制試験
実験動物
６週齢のＳｋｈ−１ヘアレスマウス（雄性）を用いた。【００３９】
Ｄ−グルタミン酸の投与
１０ｍＭのＤ−グルタミン酸を添加した飲用水が給水瓶にて４週間投与された。陰性対照として、Ｄ−グルタミン酸を添加しない飲料水が用いられた。【００４０】
紫外線照射
紫外線照射は、シュワルツらの方法（Ｈａｒａｔａｋｅ，Ａ．ら、Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．１０８：７６９（１９９７））を一部変更して、ＵＶ−Ｂを繰り返し照射する方法（Ｎａｇａｎｕｍａ，Ｍ．ら、Ｊ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．Ｓｃｉ．２５：２９（２００１）、Ｓｃｈｗａｒｔｚ，Ｅ．Ｊ．、Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．９１：１５８（１９８８））に準じて紫外線を照射した。すなわち背部にＵＶ−Ｂ（光源；東芝エレクトリック製  東芝  ＦＬ−２０  ＳＥ蛍光ランプ）を週３回、４週間照射した。総照射量は１．４Ｊ／ｃｍ2であった。紫外線量はＵＶＲＡＤＩＯＭＥＴＥＲ（ＵＶＲ−３０５／３６５Ｄ（ＩＩ）、トプコン）にて測定した値を用いた。【００４１】
経皮水分蒸散量の測定
Ｄ−グルタミン酸投与開始から４週間後、経皮水分蒸散量が常法に従って測定された。【００４２】
経皮水分蒸散量の測定結果
図３に皮膚バリア機能に対するＤ−グルタミン酸の効果を調べた実験の結果を示す。各実験条件の誤差棒は同一条件で６回繰り返した実験結果の測定値の標準偏差を示す。また、記号（＋）はＳｔｕｄｅｎｔの独立ｔ検定（ｕｎｐａｉｒｅｄ  ｔ−ｔｅｓｔ）でｐが１０％未満であることを示す。経皮水分蒸散量は、対照群では１６であり、Ｄ−グルタミン酸投与群では１３であった。【００４３】
シワ形成の評価方法
シワ形成は実施例１と同じ方法で評価された。【００４４】
シワ形成の評価結果
図４に紫外線照射によるシワ形成に対するＤ−グルタミン酸の効果を調べた実験の結果を示す。各実験条件の誤差棒は同一条件で６回繰り返した実験結果の測定値の標準偏差を示す。また、アステリスク（＊＊）はＭａｎｎ−Ｗｈｉｔｎｅｙ  Ｕ−検定でｐが１％未満であることを示す。シワ評点は、対照群では４．９であり、Ｄ−グルタミン酸投与群では３．３であった。以上の結果から、紫外線照射によるシワ形成は、Ｄ−グルタミン酸によって統計的に有意に軽減されることが示された。【００４５】
本発明にもとづいてＤ−グルタミン酸を含む、錠剤、ソフトカプセル、顆粒、ドリンク、キャンディー、クッキー、味噌、フレンチドレッシング、マヨネーズ、フランスパン、醤油、ヨーグルト、ふりかけ、調味料・納豆のたれ、納豆及びもろみ黒酢の配合例を以下に示す。これらの配合例は例示を目的として列挙されるものであって本発明の技術的範囲を限定することを意図するものではない。【００４６】
配合例１（錠剤）
（組成物）                              配合量（ｍｇ／１錠中）
Ｄ−グルタミン酸                              ３６０．５
乳糖                                          １０２．４
カルボキシメチルセルロースカルシウム            ２９．９
ヒドロキシプロピルセルロース                      ６．８
ステアリン酸マグネシウム                          ５．２
結晶セルロース                                  １０．２

５１５．０【００４７】
配合例２（錠剤）
（組成物）                            配合量（ｍｇ／１錠中）
ショ糖エステル                                ７０
結晶セルロース                                ７４
メチルセルロース                              ３６
グリセリン                                    ２５
Ｄ−グルタミン酸Ｎａ                        ４７５
Ｎ−アセチルグルコサミン                    ２００
ヒアルロン酸                                １５０
ビタミンＥ                                    ３０
ビタミンＢ６                                  ２０
ビタミンＢ２                                  １０
α−リポ酸                                    ２０
コエンザイムＱ１０                            ４０
セラミド（コンニャク抽出物）                  ５０
Ｌ−プロリン                                ３００

１５００【００４８】
配合例３（ソフトカプセル）
（組成物）                          配合量（ｍｇ／１カプセル中）
食用大豆油                                ５３０
トチュウエキス                              ５０
ニンジンエキス                              ５０
Ｄ−グルタミン酸Ｎａ                      １００
ローヤルゼリー                              ５０
マカ                                        ３０
ＧＡＢＡ                                    ３０
ミツロウ                                    ６０
ゼラチン                                  ３７５
グリセリン                                １２０
グリセリン脂肪酸エステル                  １０５

１５００【００４９】
配合例４（ソフトカプセル）
（組成物）                          配合量（ｍｇ／１カプセル中）
玄米胚芽油                                ６５９
Ｄ−グルタミン酸Ｎａ                      ５００
レスベラトロール                              １
ハス胚芽エキス                            １００
エラスチン                                １８０
ＤＮＡ                                      ３０
葉酸                                        ３０

１５００【００５０】
配合例５（顆粒）
（組成物）                        配合量（ｍｇ／１包中）
Ｄ−グルタミン酸Ｎａ                    ４００
ビタミンＣ                              １００
大豆イソフラボン                        ２５０
還元乳糖                                ３００
大豆オリゴ糖                              ３６
エリスリトール                            ３６
デキストリン                              ３０
香料                                      ２４
クエン酸                                  ２４

１２００【００５１】
配合例６（ドリンク）
（組成物）                          配合量（ｇ／６０ｍＬ中）
トチュウエキス                              １．６
ニンジンエキス                              １．６
Ｄ−グルタミン酸                            ０．３
還元麦芽糖水飴                            ２８
エリスリトール                              ８
クエン酸                                    ２
香料                                        １．３
Ｎ−アセチルグルコサミン                    １
ヒアルロン酸Ｎａ                            ０．５
ビタミンＥ                                  ０．３
ビタミンＢ６                                ０．２
ビタミンＢ２                                ０．１
α−リポ酸                                  ０．２
コエンザイムＱ１０                          １．２
セラミド（コンニャク抽出物）                ０．４
Ｌ−プロリン                                ２
精製水                                      残余

６０【００５２】
配合例７（キャンディー）
（組成物）                      配合量（重量％）
砂糖                                  ５０
水飴                                  ４８
Ｄ−グルタミン酸                        １
香料                                    １

１００【００５３】
配合例８（クッキー）
（組成物）                        配合量（重量％）
薄力粉                                  ４５．０
バター                                  １７．５
グラニュー糖                            ２０．０
Ｄ−グルタミン酸Ｎａ                      ４．０
卵                                      １２．５
香料                                      １．０

１００．０【００５４】
配合例８（クッキー）の製造方法
バターを撹拌しながらグラニュー糖を徐々に添加し、卵、Ｄ−グルタミン酸Ｎａ及び香料を添加して撹拌した。十分に混合した後、均一に振るった薄力粉を加えて低速で撹拌し、塊状で冷蔵庫で寝かせた。その後、成型し１７０°Ｃ１５分間焼成しクッキーとした。【００５５】
配合例９（味噌）
（組成物）                  配合量（ｇ）
大豆                              １０００
米麹                              １０００
塩                                  ４２０
Ｄ−グルタミン酸                    １５８
水                                    残余

４０００【００５６】
配合例９（味噌）の製造方法
米こうじと塩とをよく混ぜ合わせる。洗浄した大豆を３倍量の水に一晩つけた後に水を切り、新しい水を加えながら煮込み、ざるにあける。煮汁（種水）を集め、Ｄ−グルタミン酸を１０％ｗ／ｖとなるように溶解する。煮あがった豆を直ちにすりつぶし、塩を混ぜた米麹を加えて、上記のＤ−グルタミン酸を溶解した種水を足しながら粘土程の固さになるまでむらなく混ぜ合わせる。団子状に丸めたものを桶に隙間のない様に隅々まで、しっかりと詰め込み、表面を平らにしてラップで覆い密封する。３箇月後に容器を移し変え、表面を平らにしてラップで覆う。なお、Ｄ−グルタミン酸を種水に加える代わりに、Ｄ−グルタミン酸を多く産生する米麹を用いてもよい。当該米麹を得るには、特開２００８−１８５５５８に記載の方法でＤ−グルタミン酸を定量することにより選抜することができる。また、市販の味噌にＤ−グルタミン酸またはその塩を加えてもよい。【００５７】
配合例１０（フレンチドレッシング）
（組成物）                    配合量（ｇ）
サラダ油                            ２７．７
酢                                  ３０．０
塩化ナトリウム                        ０．９
Ｄ−グルタミン酸                      ０．４
胡椒                                  １．０

６０．０【００５８】
配合例１０（フレンチドレッシング）の製造方法
酢に塩化ナトリウム及びＤ−グルタミン酸を加えた後に、よく攪拌して溶解する。サラダ油を加えて、よく攪拌し胡椒を加える。【００５９】
配合例１１（マヨネーズ）
（組成物）                  配合量（ｇ）
サラダ油                          １３４．５
酢                                    ５
塩化ナトリウム                        ０．９
Ｄ−グルタミン酸                      ０．５
卵黄                                １８
砂糖                                  ０．２
胡椒                                  ０．９

１６０．０【００６０】
配合例１１（マヨネーズ）の製造方法
卵黄（室温）に酢、塩化ナトリウム、Ｄ−グルタミン酸及び胡椒を加えて、泡立て器で十分に攪拌する。サラダ油を少しずつ加えながら攪拌を継続してエマルジョンにする。最後に砂糖を加えて攪拌する。【００６１】
配合例１２（フランスパン）
（組成物）                    配合量（ｇ）
強力粉                              １４０
薄力粉                                ６０
塩化ナトリウム                          ３
砂糖                                    ６
Ｄ−グルタミン酸Ｎａ                    ２
ドライイースト                          ４
ぬるま湯                            １２８

３４３【００６２】
配合例１２（フランスパン）の製造方法
ぬるま湯に砂糖１ｇ及びドライイーストを入れて予備発酵させる。強力粉、薄力粉、塩化ナトリウム、砂糖５ｇ及びＤ−グルタミン酸Ｎａをボウルに入れ、その中に予備発酵させたイーストを入れる。十分捏ねた後に球状にして３０°Ｃで一次発酵させる。生地を再度捏ねてから休ませた後に適当な形に整形して電子発酵機を用いて最終発酵させる。クープを入れて２２０°Ｃのオーブンで３０分間焼く。【００６３】
配合例１３（醤油）
（組成物）                      配合量（ｇ）
市販の醤油                            ９９７
Ｄ−グルタミン酸Ｎａ                      ３

１０００【００６４】
配合例１３（醤油）の製造方法
市販の醤油にＤ−グルタミン酸Ｎａを加えてよく攪拌する。また、Ｄ−グルタミン酸やその塩を加える代わりに、Ｄ−グルタミン酸を多く産生する麹を用いて醤油を醸造してもよい。当該種麹を得るには、特開２００８−１８５５５８に記載の方法でＤ−グルタミン酸を定量することにより選抜することができる。【００６５】
配合例１４（ヨーグルト）
（組成物）                      配合量（ｇ）
牛乳                                  ８９７
Ｌ．ブルガリカス菌                      ５０
Ｓ．サーモフィルス菌                    ５０
Ｄ−グルタミン酸Ｎａ                      ３

１０００【００６６】
配合例１４（ヨーグルト）の製造方法
４０°Ｃ〜４５°Ｃで発酵させる。他の市販の種菌を用いてもよく、市販のヨーグルトにＤ−グルタミン酸Ｎａを加えてもよい。また、Ｄ−グルタミン酸やその塩を加える代わりに、Ｄ−グルタミン酸を多く産生する菌を用いてもよい。当該菌を得るには、特開２００８−１８５５５８に記載の方法でＤ−グルタミン酸を定量することにより選抜することができる。【００６７】
配合例１５（ふりかけ）
（組成物）                    配合量（ｇ）
Ｄ−グルタミン酸Ｎａ                ５０
のり                                １５
Ｌ−グルタミン酸Ｎａ                １０
塩化ナトリウム                        ２
煎りごま                            １０
さば削り節                          １０
砂糖                                  １
醤油                                  ２

１００【００６８】
配合例１６（調味料・納豆のたれ）
（組成物）                    配合量（ｇ）
市販の納豆のたれ                    ９．９６
Ｄ−グルタミン酸Ｎａ                ０．０４

１０【００６９】
配合例１７（納豆）
（組成物）                      配合量（ｇ）
市販の納豆                            １９．９
Ｄ−グルタミン酸Ｎａ                    ０．１

２０【００７０】
配合例１７（納豆）の製造方法
Ｄ−グルタミン酸又はその塩を加える代わりに、Ｄ−グルタミン酸を多く産生する菌を用いて納豆を作ってもよい。当該菌を得るには、特開２００８−１８５５５８に記載の方法でＤ−グルタミン酸を定量することにより選抜することができる。【００７１】
配合例１８（もろみ黒酢）
（組成物）                  配合量（ｇ）
市販のもろみ黒酢                  ９９８
Ｄ−グルタミン酸                      ２

１０００【００７２】
配合例１８（もろみ黒酢）の製造方法
Ｄ−グルタミン酸又はその塩を加える代わりに、Ｄ−グルタミン酸を多く産生する菌を用いて酢、黒酢、もろみを作ってもよい。当該菌を得るには、特開２００８−１８５５５８に記載の方法でＤ−グルタミン酸を定量することにより選抜することができる。
【図１】
2011040166.tif 000004
【図２】
2011040166.tif 000005
【図３】
2011040166.tif 000006
【図４】
2011040166.tif 000007
【国際調査報告】
2011040166.tif 000008
2011040166.tif 000009
2011040166.tif 000010
2011040166.tif 000011