(57)【要約】  コラーゲンの産生を促進する作用を有する新規組成物であって、レチノイド類のような副作用がなく、光安定性が高い組成物を開発する。  本発明は、Ｄ−アスパラギン酸及びＤ−アラニンと、それらの誘導体及び／又は塩とからなる群から選択される１種類又は２種類以上の化合物を含む、コラーゲン産生促進組成物を提供する。前記組成物は皮膚状態を抑制及び／又は改善するために用いられる場合がある。前記皮膚状態は、光老化及び／又はシワを含むが、これらに限定されない。前記組成物は、皮膚外用剤又は食品として用いられる場合がある。前記組成物はＩ型コラーゲン産生促進組成物の場合がある。【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｄ−アスパラギン酸及びＤ−アラニンと、それらの誘導体及び／又は塩とからなる群から選択される１種類又は２種類以上の化合物を含むことを特徴とする、コラーゲン産生促進組成物。
【請求項２】
皮膚状態を抑制及び／又は改善するために用いられることを特徴とする、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記皮膚状態は、光老化及び／又はシワであることを特徴とする、請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
皮膚外用剤として用いられることを特徴とする、請求項１ないし３のいずれか１つに記載の組成物。
【請求項５】
食品として用いられることを特徴とする、請求項１ないし３のいずれか１つに記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、Ｄ−アスパラギン酸及びＤ−アラニンと、それらの誘導体及び／又は塩とからなる群から選択される１種類又は２種類以上の化合物を含む、コラーゲン産生促進組成物と、前記化合物を投与するステップを含む皮膚状態を抑制及び／又は改善する方法とに関する。
【背景技術】
【０００２】
Ｉ型コラーゲンは皮膚の主要タンパク質の1つで、２本のα１（Ｉ）鎖と１本のα２（Ｉ）鎖とからなる３本鎖タンパク質である。Ｉ型コラーゲンは皮膚の真皮層の線維芽細胞で産生され、該線維芽細胞を包埋する細胞外マトリクスを形成する。通常の（intrinsic）老化及び光老化のいずれにおいても、コラーゲン産生の低減と、コラーゲン分解酵素活性の増大とを伴う（非特許文献１−３）。そこで、コラーゲン産生を促進することは、通常の老化及び光老化による皮膚状態、例えば、シワ形成を抑制及び／又は改善することにつながると考えられてきた。実際、ビタミンＡの誘導体であるレチノイド類は通常の老化及び光老化を起こした顔及び上腕の皮膚に適用して薬効があることが知られている（非特許文献４及び５）。しかし、レチノイド類には、光感作や、レチノイド反応として知られる炎症性反応のような副作用がある（非特許文献６）。また、レチノイド類は一般に光反応性が高く、安定に保存するためには遮光する必要があり、通常の生活条件では皮膚投与後体内に透過する光で分解しやすい。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００３】
【非特許文献１】Ｔａｋｅｄａ，  Ｋ．ら、Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．、１５３：４５０（１９９２）
【非特許文献２】Ｖａｒａｎｉ，  Ｊ．ら、Ａｍ．Ｊ．Ｐａｔｈｏｌ．、１５８：９３１（２００１）
【非特許文献３】Ｖａｒａｎｉ，  Ｊ．ら、Ａｍ．Ｊ．Ｐａｔｈｏｌ．、１６８：１８６１（２００６）
【非特許文献４】Ｋｌｉｇｍａｎ，Ａ．Ｍ．ら、Ｊ．Ａｍ．Ａｃａｄ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．、１５：８３６（１９８６）
【非特許文献５】Ｋｌｉｇｍａｎ，Ａ．Ｍ．ら、Ｊ．Ａｍ．Ａｃａｄ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．、２９：２５（１９９３）
【非特許文献６】Ｍｕｋｈｅｒｊｅｅ，Ｓ．ら、Ｃｌｉｎ．Ｉｎｔｅｒｖ．Ａｇｉｎｇ１：３２７（２００６）
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
そこで、コラーゲンの産生を促進する作用を有する新規組成物であって、レチノイド類のような副作用がなく、光安定性が高い組成物を開発する必要がある。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明は、Ｄ−アスパラギン酸及びＤ−アラニンと、それらの誘導体及び／又は塩とからなる群から選択される１種類又は２種類以上の化合物を含む、コラーゲン産生促進組成物を提供する。【０００６】
本発明のコラーゲン産生促進組成物は皮膚状態を抑制及び／又は改善するために用いられる場合がある。【０００７】
本発明のコラーゲン産生促進組成物において、前記皮膚状態は、光老化及び／又はシワを含むが、これらに限定されない。【０００８】
本発明のコラーゲン産生促進組成物は皮膚外用剤として用いられる場合がある。【０００９】
本発明のコラーゲン産生促進組成物は食品として用いられる場合がある。【００１０】
本発明のコラーゲン産生促進組成物はＩ型コラーゲン産生促進組成物の場合がある。【００１１】
本発明は、Ｄ−アスパラギン酸及びＤ−アラニンと、それらの誘導体及び／又は塩とからなる群から選択される１種類又は２種類以上の化合物を含む、コラーゲン産生促進組成物を投与するステップを含む、皮膚状態を抑制及び／又は改善する方法を提供する。【００１２】
本発明の方法によって抑制及び／又は改善される皮膚状態は、光老化及び／又はシワを含むが、これらに限定されない。【００１３】
本発明の方法において、前記コラーゲン産生促進組成物は皮膚外用剤の場合がある。【００１４】
本発明の方法において、前記コラーゲン産生促進組成物は食品組成物の場合がある。【００１５】
本発明の方法において、前記コラーゲン産生促進組成物はＩ型コラーゲン産生促進組成物の場合がある。【００１６】
本明細書においてＤ−アスパラギン酸及びＤ−アラニンの「塩」とは、Ｄ−アスパラギン酸及びＤ−アラニンのコラーゲン産生の促進効果を損なわないことを条件として、金属塩、アミン塩等を含むいずれかの塩をいう。前記金属塩は、アルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩等を含む場合がある。前記アミン塩は、トリエチルアミン塩、ベンジルアミン塩等を含む場合がある。【００１７】
本明細書においてＤ−アスパラギン酸及びＤ−アラニンの「誘導体」とは、Ｄ−アスパラギン酸及びＤ−アラニンのコラーゲン産生の促進効果を損なわないことを条件として、Ｄ−アスパラギン酸及びＤ−アラニンの分子が、アミノ基か、カルボキシル基か、側鎖かにおいて、いずれかの原子団と共有結合したものを指す。前記いずれかの原子団は、Ｎ−フェニルアセチル基、４，４’−ジメトキシトリチル（ＤＭＴ）基等のような保護基と、タンパク質、ペプチド、糖、脂質、核酸等のような生体高分子と、ポリスチレン、ポリエチレン、ポリビニル、ポリエステル等のような合成高分子と、エステル基等のような官能基とを含むがこれらに限定されない。前記エステル基は、例えば、メチルエステル、エチルエステルその他の脂肪族エステルか、芳香族エステルかを含む場合がある。【００１８】
アミノ酸には光学異性体としてＬ−体とＤ−体とがあるが、天然のタンパク質はＬ−アミノ酸がペプチド結合したものであり、細菌の細胞壁などの例外を除きＬ−アミノ酸のみが利用されていることから、ヒトを始めとする哺乳類にはＬ−アミノ酸のみが存在し、Ｌ−アミノ酸のみを利用していると考えられてきた。（木野内忠稔ら、蛋白質  核酸  酵素、５０：４５３−４６０  （２００５）、レーニンジャーの新生化学［上］第２版  ｐｐ１３２−１４７  （１９９３）  廣川書店、ハーパー・生化学  原書２２版  ｐｐ２１−３０（１９９１）  丸善）したがって、従前より、学術的にも産業的にもアミノ酸としてはＬ−アミノ酸のみが専ら使用されてきた。【００１９】
例外的にＤ−アミノ酸が使用されるケースとしては、細菌に産生させる抗生物質の原料として使用する場合、およびアミノ酸を化学合成した際に等量得られるＬ−アミノ酸とＤ−アミノ酸混合物からＬ−アミノ酸のみを分取するコストを省くために、そのままＤＬ−アミノ酸混合物としてＤ−アミノ酸を使用している食品添加物の例がある。しかし、Ｌ−アミノ酸を含まないＤ−アミノ酸だけを生理活性物質として産業的に使用している例は従来なかった。【００２０】
Ｄ−セリンやＤ−アスパラギン酸はＤ体の割合が高いことから比較的研究が進んでいる。Ｄ−セリンは大脳、海馬に局在し、脳内のＮＭＤＡ受容体の調節因子で明らかにされている。Ｄ−アスパラギン酸は精巣や松果体に局在が認められ、ホルモン分泌の制御に関与していることが示されている（特開２００５−３５５８号公報）。しかし、皮膚におけるＤ−アスパラギン酸及びＤ−アラニンの生理作用は明らかにされていない。【００２１】
以下の実施例に示すとおり、Ｄ−アスパラギン酸及びＤ−アラニンがコラーゲン産生量を増大する効果はこれまで知られていなかった。したがって、Ｄ−アスパラギン酸及び／又はＤ−アラニンを含む本発明のコラーゲン産生促進組成物は新規発明である。【００２２】
近年、ｄｄＹマウスに１０ｍＭのＤ−アミノ酸水溶液を２週間自由摂取させた後、各器官でＤ−アミノ酸濃度を測定したところ、松果体では松果体１腺あたり３−１０００ｐｍｏｌであり、脳組織では湿質量１グラムあたり２−５００ｎｍｏｌであることが報告された（Ｍｏｒｉｋａｗａ，Ａ．ら、Ａｍｉｎｏ  Ａｃｉｄｓ，３２：１３−２０（２００７））。これに基づいて、以下に説明する本発明の組成物に含まれるＤ−アスパラギン酸及びＤ−アラニンの一日摂取量の下限が算出された。【００２３】
本発明のＤ−アスパラギン酸は、以下の実施例に示すとおり、培養ヒト線維芽細胞に対して０．０１〜３２０μＭの濃度範囲でコラーゲン産生を促進する効果を有する。したがって、本発明の組成物に含まれるＤ−アスパラギン酸の量は、この濃度範囲のＤ−アスパラギン酸が生体皮膚組織の線維芽細胞に送達されることを条件として、いかなる含有量であってもかまわない。本発明の組成物が外用剤の場合におけるＤ−アスパラギン酸の含有量は、本発明の組成物全量中０．００００００１質量％から５０質量％か配合可能な最大質量濃度かまでの範囲であればよい。すなわち前記組成物が外用剤の場合におけるＤ−アスパラギン酸の含有量は、０．０００００１質量％〜３０質量％が望ましく、０．００００１質量％〜３質量％が最も望ましい。本発明の組成物が内服剤の場合におけるＤ−アスパラギン酸の含有量は、０．００００００１質量％〜１００質量％の範囲であればよい。本発明の組成物が内服剤の場合におけるＤ−アスパラギン酸の含有量は、０．００００００２質量％〜８０質量％が望ましく、０．０００００１質量％〜６０質量％であることが最も望ましい。なお、本発明の組成物に含まれるＤ−アスパラギン酸の一日摂取量の下限は体重１ｋｇあたり０．０１ｎｇであればよく、０．１ｎｇが好ましく、１ｎｇがより好ましい。【００２４】
本発明のＤ−アラニンは、以下の実施例に示すとおり、培養ヒト線維芽細胞に対して０．０１〜１０００μＭの濃度範囲でコラーゲン産生を促進する効果を有する。したがって、本発明の皮膚症状改善剤と、皮膚外用剤と、食品組成物とに含まれるＤ−アラニンの量は、この濃度範囲のＤ−アラニンが生体皮膚組織の線維芽細胞に送達されることを条件として、いかなる含有量であってもかまわない。本発明の組成物が外用剤の場合におけるＤ−アラニンの含有量は、本発明の組成物全量中０．０００００１質量％から５０質量％か配合可能な最大質量濃度かまでの範囲であればよい。すなわち前記組成物が外用剤の場合におけるＤ−アラニンの含有量は、０．００００１質量％〜３０質量％が望ましく、０．０００１質量％〜１０質量％が最も望ましい。本発明の組成物が内服剤の場合におけるＤ−アラニンの含有量は、０．０００００１質量％〜１００質量％の範囲であればよい。本発明の組成物が内服剤の場合におけるＤ−アラニンの含有量は、０．００００１質量％〜８０質量％が望ましく、０．０００１質量％〜６０質量％であることが最も望ましい。なお、本発明の組成物に含まれるＤ−アラニンの一日摂取量の下限は体重１ｋｇあたり０．０１ｎｇであればよく、０．１ｎｇが好ましく、１ｎｇがより好ましい。【００２５】
本発明の組成物は、Ｄ−アスパラギン酸及びＤ−アラニン、Ｄ−アスパラギン酸及びＤ−アラニンの塩、及び／又は、生体内で薬物代謝酵素その他によってＤ−アスパラギン酸及びＤ−アラニンを放出できる誘導体に加えて、Ｄ−アスパラギン酸及びＤ−アラニンのコラーゲン産生の促進効果を損なわないことを条件として、さらに１種類又は２種類以上の薬学的に許容される添加物を含む場合がある。前記添加物は、希釈剤及び膨張剤と、結合剤及び接着剤と、滑剤と、流動促進剤と、可塑剤と、崩壊剤と、担体溶媒と、緩衝剤と、着色料と、香料と、甘味料と、防腐剤及び安定化剤と、吸着剤と、当業者に知られたその他の医薬品添加剤とを含むが、これらに限られない。【００２６】
本発明の組成物は、有効成分として、Ｄ−アスパラギン酸及びＤ−アラニン、Ｄ−アスパラギン酸及びＤ−アラニンの塩、及び／又は、生体内で薬物代謝酵素その他によってＤ−アスパラギン酸及びＤ−アラニンを放出できる誘導体のみを使用して調製することも可能であるが、通常本発明の効果を損なわない範囲で、医薬部外品を含む化粧品や医薬品等の皮膚外用剤等に用いられる他の成分を、必要に応じて適宜配合することができる。前記他の成分（任意配合成分）としては、例えば、油分、界面活性剤、粉末、色材、水、アルコール類、増粘剤、キレート剤、シリコーン類、酸化防止剤、紫外線吸収剤、保湿剤、香料、各種薬効成分、防腐剤、ｐＨ調整剤、中和剤等が挙げられる。【００２７】
本発明の皮膚状態を抑制及び／又は改善するために用いられるコラーゲン産生促進組成物（以下、「皮膚状態改善剤」という。）の剤型は、例えば軟膏、クリーム、乳液、ローション、パック、ジェル剤、貼付剤等の外用剤と、例えば粉末、顆粒、ソフトカプセル、錠剤等の経口剤と、例えば経鼻スプレー等の経鼻剤と、注射剤とを含む、従来の医薬部外品組成物及び医薬品組成物に用いるものであればいかなるものでもかまわない。【００２８】
本発明の皮膚外用剤の剤型は、例えば軟膏、クリーム、乳液、ローション、パック、ジェル剤、貼付剤等を含む、従来の皮膚外用剤に用いるものであればいかなるものでもかまわない。【００２９】
本発明の食品組成物は、Ｄ−アスパラギン酸及びＤ−アラニン、Ｄ−アスパラギン酸及びＤ−アラニンの塩、及び／又は、生体内で薬物代謝酵素その他によってＤ−アスパラギン酸及びＤ−アラニンを放出できる誘導体に加えて、Ｄ−アスパラギン酸及びＤ−アラニンのコラーゲン産生の促進効果を損なわないことを条件として、調味料、着色料、保存料その他の食品として許容される成分を含む場合がある。【００３０】
本発明の食品組成物は、例えば、キャンディー、クッキー、味噌、フレンチドレッシング、マヨネーズ、フランスパン、醤油、ヨーグルト、ふりかけ、調味料・納豆のたれ、納豆、もろみ黒酢等の従来食品組成物に用いるものであればいずれでもよく、前記例示に限定されるものでない。
【図面の簡単な説明】
【００３１】
【図１】正常ヒト真皮線維芽細胞でのＩ型コラーゲン産生に対するＤ−アスパラギン酸の効果を示すグラフ。
【図２】正常ヒト真皮線維芽細胞でのＩ型コラーゲン産生に対するＤ−アラニンの効果を示すグラフ。
【図３】正常ヒト真皮線維芽細胞でのＩ型コラーゲン産生に対するＬ−及びＤ−アスパラギン酸の効果を示すグラフ。
【図４】正常ヒト真皮線維芽細胞でのＩ型コラーゲン産生に対するＬ−及びＤ−アラニンの効果を示すグラフ。
【図５】正常ヒト真皮線維芽細胞でのＩ型アテロコラーゲン産生に対するＤ−アスパラギン酸及びＤ−アラニンの効果を示すグラフ。
【図６】正常ヒト真皮線維芽細胞でのＩ型アテロコラーゲン産生に対するＤ−アラニンの効果を示すグラフ。
【発明を実施するための形態】
【００３２】
以下に説明する本発明の実施例は例示のみを目的とし、本発明の技術的範囲を限定するものではない。本発明の技術的範囲は特許請求の範囲の記載によってのみ限定される。
【００３３】
本明細書において言及される全ての文献はその全体が引用により本明細書に取り込まれる。
【実施例１】
【００３４】
Ｄ−アスパラギン酸のコラーゲン産生促進効果
方法
細胞培養
細胞は、市販のヒト新生児真皮線維芽細胞（Ｃｒｙｏ  ＮＨＤＦ−Ｎｅｏ、三光純薬）が用いられた。前記細胞は、市販の２４ウェルプレートに１ウェルあたり２ｘ１０5個となるように播種され、市販の細胞培養用培地（Ｄ−ＭＥＭ（１ｇ／Ｌグルコース）、和光純薬）に牛胎児血清を１０％添加した培地（以下、「通常培地」という。）を用いて、３７°Ｃ、５％ＣＯ2及び飽和水蒸気雰囲気下で４時間培養された。【００３５】
アミノ酸の添加
その後前記細胞を培養する培地が市販の細胞培養用培地（Ｄ−ＭＥＭ（１ｇ／Ｌグルコース）、和光純薬）に牛胎児血清を０．５％添加した培地（以下、「低血清培地」という。）に切り換えられ、３７°Ｃ、５％ＣＯ2及び飽和水蒸気雰囲気下で約１日間培養された。ここで、Ｄ−アスパラギン酸（和光純薬工業、０１８−０４８２１）は、０．０１μＭ、０．１μＭ、１０μＭ、１００μＭ又は３２０μＭとなるように前記低血清培地に添加された。陽性対照として、ビタミンＣ前駆体のリン酸Ｌ−アスコルビルマグネシウム（Ｌ−Ａｓｃｏｒｂｉｃ  Ａｃｉｄ  Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ  Ｍａｇｎｅｓｉｕｍ  Ｓａｌｔ  ｎ−Ｈｙｄｒａｔｅ、以下「ＡＰＭ」という。和光純薬工業、０１３−１９６４１）が、１５０μＭ、２５０μＭ又は５００μＭとなるように前記低血清培地に添加された。また、陰性対照として、ＡＰＭ及びＤ−アスパラギン酸を添加しない前記低血清培地が用いられた。【００３６】
Ｉ型コラーゲン産生量の定量
２日間の培養終了後、培養上清を採取してヒト新生児真皮線維芽細胞が産生するＩ型プロコラーゲンのＣ末端ペプチド（以下、「ＰＩＰ」という。）濃度をＰｒｏｃｏｌｌａｇｅｎ  ｔｙｐｅ  Ｉ  Ｃ−ｐｅｐｔｉｄｅ  ＥＩＡ  ｋｉｔ（タカラバイオ社製）により製造者の指示書に従って測定した。【００３７】
定量結果
図１にヒト新生児真皮線維芽細胞でのＩ型コラーゲン産生に対するＤ−アスパランギン酸添加の効果を調べた実験結果を示す。各実験条件の誤差棒は同一条件で４−６回繰り返した実験結果の測定値の標準偏差を示す。また、アステリスク（＊＊）はＢｏｎｆｅｒｒｏｎｉ／Ｄｕｎｎ検定でｐ値が１％未満であることを示す。【００３８】
陰性対照のＰＩＰ濃度は、５８３ｎｇ／ｍＬであった。１５０μＭ、２５０μＭ又は５００μＭのＡＰＭを添加した場合（陽性対照）のＰＩＰ濃度は、それぞれ、１１８３ｎｇ／ｍＬ、１６６６ｎｇ／ｍＬ又は１４１６ｎｇ／ｍＬに増大した。０．０１μＭ、０．１μＭ、１０μＭ、１００μＭ又は３２０μＭのＤ−アスパラギン酸を添加した場合のＰＩＰ濃度は、それぞれ、１２８６ｎｇ／ｍＬ、１１５９ｎｇ／ｍＬ、１１１７ｎｇ／ｍＬ、１１１９ｎｇ／ｍＬ又は１００７ｎｇ／ｍＬであった。ＡＰＭ及びＤ−アスパラギン酸を添加した培地では、全ての濃度条件で、陰性対照と比較してＩ型コラーゲン産生促進効果が統計的に有意であった。また、０．０１−１００μＭの濃度のＤ−アスパラギン酸のＩ型コラーゲン産生促進効果はＡＰＭの最低濃度である１５０μＭと同等であり、Ｄ−アスパラギン酸がＡＰＭよりはるかに強力なＩ型コラーゲン産生促進効果を有することが示された。
【実施例２】
【００３９】
Ｄ−アラニンのコラーゲン産生促進効果
方法
細胞培養、アミノ酸の添加及びＩ型コラーゲン産生量の定量は、実施例１と同様に行われた。アミノ酸は、０．０１μＭ、０．１μＭ、１０μＭ、１０００μＭ、１７４００μＭのＤ−アラニン（ペプチド研究所、２８０１）が用いられた。また、陰性対照として、ＡＰＭ及びＤ−アラニンを添加しない前記低血清培地が用いられた。【００４０】
定量結果
図２にヒト新生児真皮線維芽細胞でのＩ型コラーゲン産生に対するＤ−アラニン添加の効果を調べた実験結果を示す。各実験条件の誤差棒は同一条件で４−６回繰り返した実験結果の測定値の標準偏差を示す。また、Ｂｏｎｆｅｒｒｏｎｉ／Ｄｕｎｎ検定において、アステリスク（＊）はｐ値が５％未満、アステリスク（＊＊）はｐ値が１％未満であることを示す。【００４１】
陰性対照のＰＩＰ濃度は、５５１ｎｇ／ｍＬであった。１５０μＭ、２５０μＭ又は５００μＭのＡＰＭを添加した場合（陽性対照）のＰＩＰ濃度は、それぞれ、１１８３ｎｇ／ｍＬ、１６６６ｎｇ／ｍＬ又は１４１６ｎｇ／ｍＬに増大し、Ｉ型コラーゲン産生が促進された。０．０１μＭ、０．１μＭ、１０μＭ、１０００μＭ又は１７４００μＭのＤ−アラニンを添加した場合のＰＩＰ濃度は、それぞれ、７５０ｎｇ／ｍＬ、７８９ｎｇ／ｍＬ、８７６ｎｇ／ｍＬ、８２３ｎｇ／ｍＬ又は７９９ｎｇ／ｍＬであった。ＡＰＭ及びＤ−アラニンを添加した培地では、全ての濃度条件で、陰性対照と比較してＩ型コラーゲン産生促進効果が統計的に有意であった。
【実施例３】
【００４２】
Ｌ−及びＤ−アスパラギン酸のコラーゲン産生促進効果
方法
細胞培養、アミノ酸の添加及びＩ型コラーゲン産生量の定量は、実施例１と同様に行われた。アミノ酸は、０．１μＭのＤ−アスパラギン酸（和光純薬工業、０１８−０４８２１）と、０．１μＭのＬ−アスパラギン酸（和光純薬工業、０１３−０４８３２）とが用いられた。また、陰性対照として、Ｌ−及びＤ−アスパラギン酸を添加しない前記低血清培地が用いられた。【００４３】
定量結果
図３にヒト新生児真皮線維芽細胞でのＩ型コラーゲン産生に対するＬ−及びＤ−アスパラギン酸添加の効果を調べた実験結果を示す。各実験条件の誤差棒は同一条件で６−１２回繰り返した実験結果の測定値の標準偏差を示す。また、Ｂｏｎｆｅｒｒｏｎｉ／Ｄｕｎｎ検定において、アステリスク（＊＊）はｐ値が１％未満であることを示す。【００４４】
陰性対照のＰＩＰ濃度は、３６１ｎｇ／ｍＬであった。０．１μＭのＬ−及びＤ−アスパラギン酸を添加した場合のＰＩＰ濃度は、それぞれ、４０６ｎｇ／ｍＬ及び４５６ｎｇ／ｍＬであった。以上の結果から、Ｉ型コラーゲン産生は、０．１μＭのＤ−アスパラギン酸の添加によって統計的に有意に促進される一方、０．１μＭのＬ−アスパラギン酸の添加によって促進されないことが示された。
【実施例４】
【００４５】
Ｌ−及びＤ−アラニンのコラーゲン産生促進効果
方法
細胞培養、アミノ酸の添加及びＩ型コラーゲン産生量の定量は、実施例１と同様に行われた。アミノ酸は、０．１μＭ及び１５０μＭのＤ−アラニン（ペプチド研究所、２８０１）と、０．１μＭ及び１５０μＭのＬ−アラニン（ペプチド研究所、２７０１）とが用いられた。また、陰性対照として、Ｌ−及びＤ−アラニンを添加しない前記低血清培地が用いられた。【００４６】
定量結果
図４にヒト新生児真皮線維芽細胞でのＩ型コラーゲン産生に対するＬ−及びＤ−アラニン添加の効果を調べた実験結果を示す。各実験条件の誤差棒は同一条件で６−１２回繰り返した実験結果の測定値の標準偏差を示す。また、Ｂｏｎｆｅｒｒｏｎｉ／Ｄｕｎｎ検定において、アステリスク（＊）及び（＊＊）は、それぞれ、ｐ値が５％未満及び１％未満であることを示す。【００４７】
陰性対照のＰＩＰ濃度は、３６１ｎｇ／ｍＬであった。０．１μＭ及び１５０μＭのＤ−アラニンを添加した場合のＰＩＰ濃度は、それぞれ、５０２ｎｇ／ｍＬ及び４５０ｎｇ／ｍＬであった。０．１μＭ及び１５０μＭのＬ−アラニンを添加した場合のＰＩＰ濃度は、それぞれ、４０５ｎｇ／ｍＬ及び４１３ｎｇ／ｍＬであった。以上の結果から、Ｉ型コラーゲン産生は、０．１μＭ及び１５０μＭのＤ−アラニンの添加によって統計的に有意に促進される一方、０．１μＭ及び１５０μＭのＬ−アラニンの添加によって促進されないことが示された。
【実施例５】
【００４８】
Ｄ−アスパラギン酸及びＤ−アラニンのコラーゲン産生促進効果
方法
細胞培養及びアミノ酸の添加は、実施例１と同様に行われた。アミノ酸は、０．１μＭのＤ−アスパラギン酸（和光純薬工業、０１８−０４８２１）と、０．１μＭ及び０．００１μＭのＤ−アラニン（ペプチド研究所、２８０１）とが用いられた。また、陰性対照として、Ｄ−アスパラギン酸及びＤ−アラニンを添加しない前記低血清培地が用いられた。陽性対照として、ＡＰＭが２５０μＭとなるように前記低血清培地に添加された。Ｉ型コラーゲンの産生量を評価するために、ヒト新生児真皮線維芽細胞が産生するＩ型プロコラーゲン及びトロポコラーゲンをペプシン（８００−２５００  Ｕｎｉｔ／ｍｇ、ＳＩＧＭＡ、Ｐ７０００）で処理した後、Ｉ型アテロコラーゲンの濃度が、ヒトコラーゲン  タイプ１  ＥＬＩＳＡ（ＥＣ１−Ｅ１０５、株式会社エーシーバイオテクノロジーズ）により製造者の指示書に従って測定された。【００４９】
定量結果（１）
図５にヒト新生児真皮線維芽細胞でのＩ型アテロコラーゲン産生に対するＤ−アスパラギン酸及びＤ−アラニン添加の効果を調べた実験結果を示す。各実験条件の誤差棒は同一条件で５−６回繰り返した実験結果の測定値の標準偏差を示す。また、Ｂｏｎｆｅｒｒｏｎｉ／Ｄｕｎｎ検定において、アステリスク（＊）及び（＊＊）は、それぞれ、ｐ値が５％未満及び１％未満であることを示す。【００５０】
陰性対照のＩ型アテロコラーゲン濃度は１．８μｇ／ｍＬであった。２５０ｍＭのＡＰＭを添加した場合（陽性対照）のＩ型アテロコラーゲン濃度は、３．９μｇ／ｍＬに増大し、Ｉ型コラーゲン産生が促進された。０．１μＭのＤ−アラニンを添加した場合のＩ型アテロコラーゲン濃度は４．０μｇ／ｍＬであった。０．１μＭのＤ−アスパラギン酸を添加した場合のＩ型アテロコラーゲン濃度は３．８μｇ／ｍＬであった。以上の結果から、Ｉ型コラーゲン産生は、０．１μＭのＤ−アスパラギン酸及びＤ−アラニンの添加によって統計的に有意に促進された。【００５１】
定量結果（２）
図６にヒト新生児真皮線維芽細胞でのＩ型アテロコラーゲン産生に対するＤ−アラニン添加の効果を調べた実験結果を示す。各実験条件の誤差棒は同一条件で２回繰り返した実験結果の測定値の標準偏差を示す。【００５２】
陰性対照のＩ型アテロコラーゲン濃度は１．７μｇ／ｍＬであった。２５０ｍＭのＡＰＭを添加した場合（陽性対照）のＩ型アテロコラーゲン濃度は、２．６μｇ／ｍＬに増大し、Ｉ型コラーゲン産生が促進された。０．００１μＭのＤ−アラニンを添加した場合のＩ型アテロコラーゲン濃度は２．１μｇ／ｍＬであった。
【実施例６】
【００５３】
本発明にもとづいてＤ−アスパラギン酸及び／又はＤ−アラニンを含む、乳液製剤、貼付剤、錠剤、ソフトカプセル、顆粒、ドリンク、キャンディー、クッキー、味噌、フレンチドレッシング、マヨネーズ、フランスパン、醤油、ヨーグルト、ふりかけ、調味料・納豆のたれ、納豆、もろみ黒酢、クリーム、ボディー用クリーム、ジェル剤、ピールオフマスク、含浸マスク、乳液、化粧水及びエアゾール剤の配合例を以下に示す。これらの配合例は例示を目的として列挙されるものであって本発明の技術的範囲を限定することを意図するものではない。【００５４】
配合例１（乳液製剤）
（組成物）                        配合量（質量％）
Ｄ−アスパラギン酸                        ０．４
ベヘニルアルコール                        ０．２
セタノール                                ０．５
グリセリンモノ脂肪酸エステル              １．８
硬化ヒマシ油ＰＯＥ（６０）                １．０
白色ワセリン                              ２．０
流動パラフィン                          １０．０
ミリスチン酸イソプロピル                  ３．０
メチルポリシロキサン（６ｃｓ）            １．５
濃グリセリン                            １３．０
ジプロピレングリコール                    ２．０
カルボキシビニルポリマー                  ０．２５
ヒアルロン酸ナトリウム                    ０．００５
水酸化カリウム                            適量
乳酸                                      適量
エデト酸ナトリウム                        適量
エチルパラベン                            適量
精製水                                    残余

１００．０００【００５５】
配合例２（乳液製剤）
（組成物）                          配合量（質量％）
Ｄ−アラニン                            １０
ベヘニルアルコール                        ０．２
セタノール                                ０．５
グリセリンモノ脂肪酸エステル              １．８
硬化ヒマシ油ＰＯＥ（６０）                １．０
白色ワセリン                              ２．０
流動パラフィン                          １０．０
ミリスチン酸イソプロピル                  ３．０
メチルポリシロキサン（６ｃｓ）            １．５
濃グリセリン                            １３．０
ジプロピレングリコール                    ２．０
カルボキシビニルポリマー                  ０．２５
ヒアルロン酸ナトリウム                    ０．００５
水酸化カリウム                            適量
乳酸                                      適量
エデト酸ナトリウム                        適量
エチルパラベン                            適量
精製水                                    残余

１００．０００【００５６】
配合例３（貼付剤）
（組成物）                              配合量（質量％）
Ｄ−アスパラギン酸                              ０．３
ポリアクリル酸                                  ３．０
ポリアクリル酸ナトリウム                        ２．５
ゼラチン                                        ０．５
カルボキシメチルセルロースナトリウム            ４．０
ポリビニルアルコール                            ０．３
濃グリセリン                                  １４．０
１，３−ブチレングリコール                    １２．０
水酸化アルミニウム                              ０．１
エデト酸ナトリウム                              ０．０３
メチルパラベン                                  ０．１
精製水                                          残余

１００．００【００５７】
配合例４（貼付剤）
（組成物）                                配合量（質量％）
Ｄ−アラニン                                  １５．０
ポリアクリル酸                                  ３．０
ポリアクリル酸ナトリウム                        ２．５
ゼラチン                                        ０．５
カルボキシメチルセルロースナトリウム            ４．０
ポリビニルアルコール                            ０．３
濃グリセリン                                  １４．０
１，３−ブチレングリコール                    １２．０
水酸化アルミニウム                              ０．１
エデト酸ナトリウム                              ０．０３
メチルパラベン                                  ０．１
精製水                                          残余

１００．００【００５８】
配合例５（錠剤）
（組成物）                            配合量（ｍｇ／１錠中）
Ｄ−アスパラギン酸
及び／又はＤ−アラニン                        ３６０．５
乳糖                                          １０２．４
カルボキシメチルセルロースカルシウム            ２９．９
ヒドロキシプロピルセルロース                      ６．８
ステアリン酸マグネシウム                          ５．２
結晶セルロース                                  １０．２

５１５．０【００５９】
配合例６（錠剤）
（組成物）                          配合量（ｍｇ／１錠中）
ショ糖エステル                                ７０
結晶セルロース                                ７４
メチルセルロース                              ３６
グリセリン                                    ２５
Ｄ−アスパラギン酸
及び／又はＤ−アラニン                      ４７５
Ｎ−アセチルグルコサミン                    ２００
ヒアルロン酸                                １５０
ビタミンＥ                                    ３０
ビタミンＢ６                                  ２０
ビタミンＢ２                                  １０
α−リポ酸                                    ２０
コエンザイムＱ１０                            ４０
セラミド（コンニャク抽出物）                  ５０
Ｌ−プロリン                                ３００

１５００【００６０】
配合例７（ソフトカプセル）
（組成物）                      配合量（ｍｇ／１カプセル中）
食用大豆油                                ５３０
トチュウエキス                              ５０
ニンジンエキス                              ５０
Ｄ−アスパラギン酸
及び／又はＤ−アラニン                    １００
ローヤルゼリー                              ５０
マカ                                        ３０
ＧＡＢＡ                                    ３０
ミツロウ                                    ６０
ゼラチン                                  ３７５
グリセリン                                １２０
グリセリン脂肪酸エステル                  １０５

１５００【００６１】
配合例８（ソフトカプセル）
（組成物）                      配合量（ｍｇ／１カプセル中）
玄米胚芽油                                ６５９
Ｄ−アスパラギン酸
及び／又はＤ−アラニン                    ５００
レスベラトロール                              １
ハス胚芽エキス                            １００
エラスチン                                １８０
ＤＮＡ                                      ３０
葉酸                                        ３０

１５００【００６２】
配合例９（顆粒）
（組成物）                      配合量（ｍｇ／１包中）
Ｄ−アスパラギン酸
及び／又はＤ−アラニン                  ４００
ビタミンＣ                              １００
大豆イソフラボン                        ２５０
還元乳糖                                ３００
大豆オリゴ糖                              ３６
エリスリトール                            ３６
デキストリン                              ３０
香料                                      ２４
クエン酸                                  ２４

１２００【００６３】
配合例１０（ドリンク）
（組成物）                        配合量（ｇ／６０ｍＬ中）
トチュウエキス                              １．６
ニンジンエキス                              １．６
Ｄ−アスパラギン酸                          ０．２
還元麦芽糖水飴                            ２８
エリスリトール                              ８
クエン酸                                    ２
香料                                        １．３
Ｎ−アセチルグルコサミン                    １
ヒアルロン酸Ｎａ                            ０．５
ビタミンＥ                                  ０．３
ビタミンＢ６                                ０．２
ビタミンＢ２                                ０．１
α−リポ酸                                  ０．２
コエンザイムＱ１０                          １．２
セラミド（コンニャク抽出物）                ０．４
Ｌ−プロリン                                ２
精製水                                      残余

６０【００６４】
配合例１１（ドリンク）
（組成物）                        配合量（ｇ／６０ｍＬ中）
トチュウエキス                              １．６
ニンジンエキス                              １．６
Ｄ−アラニン                                ８
還元麦芽糖水飴                            ２８
エリスリトール                              ８
クエン酸                                    ２
香料                                        １．３
Ｎ−アセチルグルコサミン                    １
ヒアルロン酸Ｎａ                            ０．５
ビタミンＥ                                  ０．３
ビタミンＢ６                                ０．２
ビタミンＢ２                                ０．１
α−リポ酸                                  ０．２
コエンザイムＱ１０                          １．２
セラミド（コンニャク抽出物）                ０．４
Ｌ−プロリン                                ２
精製水                                      残余

６０【００６５】
配合例１２（キャンディー）
（組成物）                    配合量（質量％）
砂糖                                  ５０
水飴                                  ４８
Ｄ−アスパラギン酸
及び／又はＤ−アラニン                  １
香料                                    １

１００【００６６】
配合例１３（クッキー）
（組成物）                        配合量（質量％）
薄力粉                                  ４５．０
バター                                  １７．５
グラニュー糖                            ２０．０
Ｄ−アスパラギン酸
及び／又はＤ−アラニン                    ４．０
卵                                      １２．５
香料                                      １．０

１００．０【００６７】
配合例１３（クッキー）の製造方法
バターを撹拌しながらグラニュー糖を徐々に添加し、卵と、Ｄ−アスパラギン酸及び／又はＤ−アラニンと、香料とを添加して撹拌した。十分に混合した後、均一に振るった薄力粉を加えて低速で撹拌し、塊状で冷蔵庫で寝かせた。その後、成型し１７０°Ｃ１５分間焼成しクッキーとした。【００６８】
配合例１４（味噌）
（組成物）                      配合量（ｇ）
大豆                              １０００
米麹                              １０００
塩                                  ４２０
Ｄ−アスパラギン酸
及び／又はＤ−アラニン              １５８
水                                    残余

４０００【００６９】
配合例１４（味噌）の製造方法
米こうじと塩とをよく混ぜ合わせる。洗浄した大豆を３倍量の水に一晩つけた後に水を切り、新しい水を加えながら煮込み、ざるにあける。煮汁（種水）を集め、Ｄ−アスパラギン酸及び／又はＤ−アラニンを１０％ｗ／ｖとなるように溶解する。煮あがった豆を直ちにすりつぶし、塩を混ぜた米麹を加えて、上記のＤ−アスパラギン酸及び／又はＤ−アラニンを溶解した種水を足しながら粘土程の固さになるまでむらなく混ぜ合わせる。団子状に丸めたものを桶に隙間のない様に隅々まで、しっかりと詰め込み、表面を平らにしてラップで覆い密封する。３箇月後に容器を移し変え、表面を平らにしてラップで覆う。なお、Ｄ−アスパラギン酸及び／又はＤ−アラニンを種水に加える代わりに、Ｄ−アスパラギン酸及び／又はＤ−アラニンを多く産生する米麹を用いてもよい。前記米麹を得るには、特開２００８−１８５５５８に記載の方法でＤ−アスパラギン酸及び／又はＤ−アラニンを定量することにより選抜することができる。また、市販の味噌にＤ−アスパラギン酸及び／又はＤ−アラニンか、その塩かを加えてもよい。【００７０】
配合例１５（フレンチドレッシング）
（組成物）                        配合量（ｇ）
サラダ油                            ２７．４５
酢                                  ３０．４５
塩化ナトリウム                        ０．９
Ｄ−アスパラギン酸                    ０．２
胡椒                                  １．０

６０．０【００７１】
配合例１６（フレンチドレッシング）
（組成物）                        配合量（ｇ）
サラダ油                            ２７．０
酢                                  ３０．０
塩化ナトリウム                        ０．９
Ｄ−アラニン                          １．１
胡椒                                  １．０

６０．０【００７２】
配合例１５及び１６（フレンチドレッシング）の製造方法
酢に塩化ナトリウムと、Ｄ−アスパラギン酸又はＤ−アラニンとを加えた後に、よく攪拌して溶解する。サラダ油を加えて、よく攪拌し胡椒を加える。【００７３】
配合例１７（マヨネーズ）
（組成物）                      配合量（ｇ）
サラダ油                          １３４．５
酢                                    ５
塩化ナトリウム                        ０．９
Ｄ−アスパラギン酸                    ０．５
卵黄                                １８
砂糖                                  ０．２
胡椒                                  ０．９

１６０．０【００７４】
配合例１８（マヨネーズ）
（組成物）                      配合量（ｇ）
サラダ油                          １３４．０
酢                                    ５
塩化ナトリウム                        ０．９
Ｄ−アラニン                          １
卵黄                                １８
砂糖                                  ０．２
胡椒                                  ０．９

１６０．０【００７５】
配合例１７及び１８（マヨネーズ）の製造方法
卵黄（室温）に酢と、塩化ナトリウムと、Ｄ−アスパラギン酸又はＤ−アラニンと、胡椒とを加えて、泡立て器で十分に攪拌する。サラダ油を少しずつ加えながら攪拌を継続してエマルジョンにする。最後に砂糖を加えて攪拌する。【００７６】
配合例１９（フランスパン）
（組成物）                      配合量（ｇ）
強力粉                              １４０
薄力粉                                ６０
塩化ナトリウム                          ３
砂糖                                    ６
Ｄ−アスパラギン酸                      ２
ドライイースト                          ４
ぬるま湯                            １２８

３４３【００７７】
配合例２０（フランスパン）
（組成物）                      配合量（ｇ）
強力粉                              １４０
薄力粉                                ６０
塩化ナトリウム                          ３
砂糖                                    ６
Ｄ−アラニン                          １７
ドライイースト                          ４
ぬるま湯                            １２０

３５０【００７８】
配合例１９及び２０（フランスパン）の製造方法
ぬるま湯に砂糖１ｇ及びドライイーストを入れて予備発酵させる。強力粉と、薄力粉と、塩化ナトリウムと、砂糖５ｇと、Ｄ−アスパラギン酸又はＤ−アラニンとをボウルに入れ、その中に予備発酵させたイーストを入れる。十分捏ねた後に球状にして３０°Ｃで一次発酵させる。生地を再度捏ねてから休ませた後に適当な形に整形して電子発酵機を用いて最終発酵させる。クープを入れて２２０°Ｃのオーブンで３０分間焼く。【００７９】
配合例２１（醤油）
（組成物）                        配合量（ｇ）
市販の醤油                            ９９６
Ｄ−アスパラギン酸                        ４

１０００【００８０】
配合例２２（醤油）
（組成物）                        配合量（ｇ）
市販の醤油                            ９００
Ｄ−アラニン                          １００

１０００【００８１】
配合例２１及び２２（醤油）の製造方法
市販の醤油にＤ−アスパラギン酸又はＤ−アラニンを加えてよく攪拌する。また、Ｄ−アスパラギン酸又はＤ−アラニンか、その塩かを加える代わりに、Ｄ−アスパラギン酸又はＤ−アラニンを多く産生する麹を用いて醤油を醸造してもよい。前記麹を得るには、特開２００８−１８５５５８に記載の方法でＤ−アスパラギン酸又はＤ−アラニンを定量することにより選抜することができる。【００８２】
配合例２３（ヨーグルト）
（組成物）                        配合量（ｇ）
牛乳                                  ８９８
Ｌ．ブルガリカス菌                      ５０
Ｓ．サーモフィルス菌                    ５０
Ｄ−アスパラギン酸                        ２

１０００【００８３】
配合例２４（ヨーグルト）
（組成物）                        配合量（ｇ）
牛乳                                  ８５０
Ｌ．ブルガリカス菌                      ５０
Ｓ．サーモフィルス菌                    ５０
Ｄ−アラニン                            ５０

１０００【００８４】
配合例２３及び２４（ヨーグルト）の製造方法
４０°Ｃ〜４５°Ｃで発酵させる。他の市販の種菌を用いてもよく、市販のヨーグルトにＤ−アスパラギン酸又はＤ−アラニンを加えてもよい。また、Ｄ−アスパラギン酸又はＤ−アラニンか、その塩かを加える代わりに、Ｄ−アスパラギン酸又はＤ−アラニンを多く産生する菌を用いてもよい。前記菌を得るには、特開２００８−１８５５５８に記載の方法でＤ−アスパラギン酸又はＤ−アラニンを定量することにより選抜することができる。【００８５】
配合例２５（ふりかけ）
（組成物）                    配合量（ｇ）
Ｄ−アスパラギン酸
及び／又はＤ−アラニン              ５０
のり                                １５
Ｌ−グルタミン酸Ｎａ                １０
塩化ナトリウム                        ２
煎りごま                            １０
さば削り節                          １０
砂糖                                  １
醤油                                  ２

１００【００８６】
配合例２６（調味料・納豆のたれ）
（組成物）                      配合量（ｇ）
市販の納豆のたれ                    ９．８
Ｄ−アスパラギン酸                  ０．２

１０【００８７】
配合例２７（調味料・納豆のたれ）
（組成物）                    配合量（ｇ）
市販の納豆のたれ                    ９
Ｄ−アラニン                        １

１０【００８８】
配合例２８（納豆）
（組成物）                        配合量（ｇ）
市販の納豆                            １９．９
Ｄ−アスパラギン酸
及び／又はＤ−アラニン                  ０．１

２０【００８９】
配合例２８（納豆）の製造方法
Ｄ−アスパラギン酸及び／又はＤ−アラニンか、その塩かを加える代わりに、Ｄ−アスパラギン酸及び／又はＤ−アラニンを多く産生する菌を用いて納豆を作ってもよい。前記菌を得るには、特開２００８−１８５５５８に記載の方法でＤ−アスパラギン酸及び／又はＤ−アラニンを定量することにより選抜することができる。【００９０】
配合例２９（もろみ黒酢）
（組成物）                    配合量（ｇ）
市販のもろみ黒酢                  ９９６
Ｄ−アスパラギン酸                    ４

１０００【００９１】
配合例３０（もろみ黒酢）
（組成物）                  配合量（ｇ）
市販のもろみ黒酢                  ９００
Ｄ−アラニン                      １００

１０００【００９２】
配合例２９及び３０（もろみ黒酢）の製造方法
Ｄ−アスパラギン酸又はＤ−アラニンか、その塩かを加える代わりに、Ｄ−アスパラギン酸又はＤ−アラニンを多く産生する菌を用いて酢、黒酢、もろみを作ってもよい。前記菌を得るには、特開２００８−１８５５５８に記載の方法でＤ−アスパラギン酸又はＤ−アラニンを定量することにより選抜することができる。【００９３】
配合例３１（クリーム）
（組成物）                                        配合量（質量％）
流動パラフィン                                            ３
ワセリン                                                  １
ジメチルポリシロキサン                                    １
ステアリルアルコール                                      １．８
ベヘニルアルコール                                        １．６
グリセリン                                                ８
ジプロピレングリコール                                    ５
マカデミアナッツ油                                        ２
硬化油                                                    ３
スクワラン                                                ６
ステアリン酸                                              ２
ヒドロキシステアリン酸コレステリル                        ０．５
２−エチルヘキサン酸セチル                                ４
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油                            ０．５
自己乳化型モノステアリン酸グリセリン                      ３
水酸化カリウム                                            ０．１５
ヘキサメタリン酸ナトリウム                                ０．０５
トリメチルグリシン                                        ２
α−トコフェロール  ２−Ｌ−アスコルビン酸
リン酸ジエステルカリウム    １
酢酸トコフェロール                                        ０．１
Ｄ−アスパラギン酸                                        ０．４
パラベン                                                  適量
エデト酸３ナトリウム                                      ０．０５
４−ｔ−ブチル−４’−メトキシジベンゾイルメタン          ０．０５
ジパラメトキシ桂皮酸モノ−２−エチルヘキサン酸グリセリル  ０．０５
色剤                                                      適量
カルボキシビニルポリマー                                  ０．０５
精製水                                                    残余

１００．００【００９４】
配合例３２（クリーム）
（組成物）                                        配合量（質量％）
流動パラフィン                                            ３
ワセリン                                                  １
ジメチルポリシロキサン                                    １
ステアリルアルコール                                      １．８
ベヘニルアルコール                                        １．６
グリセリン                                                ８
ジプロピレングリコール                                    ５
マカデミアナッツ油                                        ２
硬化油                                                    ３
スクワラン                                                ６
ステアリン酸                                              ２
ヒドロキシステアリン酸コレステリル                        ０．５
２−エチルヘキサン酸セチル                                ４
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油                            ０．５
自己乳化型モノステアリン酸グリセリン                      ３
水酸化カリウム                                            ０．１５
ヘキサメタリン酸ナトリウム                                ０．０５
トリメチルグリシン                                        ２
α−トコフェロール  ２−Ｌ−アスコルビン酸
リン酸ジエステルカリウム    １
酢酸トコフェロール                                        ０．１
Ｄ−アラニン                                            １０
パラベン                                                  適量
エデト酸３ナトリウム                                      ０．０５
４−ｔ−ブチル−４’−メトキシジベンゾイルメタン          ０．０５
ジパラメトキシ桂皮酸モノ−２−エチルヘキサン酸グリセリル  ０．０５
色剤                                                      適量
カルボキシビニルポリマー                                  ０．０５
精製水                                                    残余

１００．００【００９５】
配合例３３（ボディー用クリーム）
（組成物）                                        配合量（質量％）
ジメチルポリシロキサン                                    ３
デカメチルシクロペンタシロキサン                        １３
ドデカメチルシクロヘキサシロキサン                      １２
ポリオキシエチレン・メチルポリシロキサン共重合体          １
エタノール                                                ２
イソプロパノール                                          １
グリセリン                                                ３
ジプロピレングリコール                                    ５
ポリエチレングリコール６０００                            ５
ヘキサメタリン酸ナトリウム                                ０．０５
酢酸トコフェロール                                        ０．１
Ｄ−アスパラギン酸                                        ０．４
ウイキョウエキス                                          ０．１
ハマメリスエキス                                          ０．１
ニンジンエキス                                            ０．１
Ｌ−メントール                                            適量
パラオキシ安息香酸エステル                                適量
エデト酸三ナトリウム                                      ０．０５
ジモルホリノピリダジノン                                  ０．０１
トリメトキシ桂皮酸メチルビス（トリメチルシロキシ）
シリルイソペンチル  ０．１
黄酸化鉄                                                  適量
チタン酸コバルト                                          適量
ジメチルジステアリルアンモニウムヘクトライト              １．５
ポリビニルアルコール                                      ０．１
ヒドロキシエチルセルロース                                ０．１
トリメチルシロキシケイ酸                                  ２
香料                                                      適量
精製水                                                    残余

１００．００【００９６】
配合例３４（ボディー用クリーム）
（組成物）                                        配合量（質量％）
ジメチルポリシロキサン                                    ３
デカメチルシクロペンタシロキサン                        １３
ドデカメチルシクロヘキサシロキサン                      １２
ポリオキシエチレン・メチルポリシロキサン共重合体          １
エタノール                                                ２
イソプロパノール                                          １
グリセリン                                                ３
ジプロピレングリコール                                    ５
ポリエチレングリコール６０００                            ５
ヘキサメタリン酸ナトリウム                                ０．０５
酢酸トコフェロール                                        ０．１
Ｄ−アラニン                                            １０
ウイキョウエキス                                          ０．１
ハマメリスエキス                                          ０．１
ニンジンエキス                                            ０．１
Ｌ−メントール                                            適量
パラオキシ安息香酸エステル                                適量
エデト酸三ナトリウム                                      ０．０５
ジモルホリノピリダジノン                                  ０．０１
トリメトキシ桂皮酸メチルビス（トリメチルシロキシ）
シリルイソペンチル  ０．１
黄酸化鉄                                                  適量
チタン酸コバルト                                          適量
ジメチルジステアリルアンモニウムヘクトライト              １．５
ポリビニルアルコール                                      ０．１
ヒドロキシエチルセルロース                                ０．１
トリメチルシロキシケイ酸                                  ２
香料                                                      適量
精製水                                                    残余

１００．００【００９７】
配合例３５（ジェル剤）
（組成物）                                        配合量（質量％）
ジメチルポリシロキサン                                    ５
グリセリン                                                ２
１，３−ブチレングリコール                                ５
ポリエチレングリコール１５００                            ３
ポリエチレングリコール２００００                          ３
オクタン酸セチル                                          ３
クエン酸                                                  ０．０１
クエン酸ナトリウム                                        ０．１
ヘキサメタリン酸ナトリウム                                ０．１
グリチルリチン酸ジカリウム                                ０．１
Ｄ−アスパラギン酸                                        ０．４
酢酸トコフェロール                                        ０．１
オウゴンエキス                                            ０．１
ユキノシタエキス                                          ０．１
エデト酸三ナトリウム                                      ０．１
キサンタンガム                                            ０．３
アクリル酸・メタクリル酸
アルキル共重合体（ペミュレンＴＲ−２）        ０．０５
寒天末                                                    １．５
フェノキシエタノール                                      適量
ジブチルヒドロキシトルエン                                適量
精製水                                                    残余

１００．００【００９８】
配合例３６（ジェル剤）
（組成物）                                        配合量（質量％）
ジメチルポリシロキサン                                    ５
グリセリン                                                ２
１，３−ブチレングリコール                                ５
ポリエチレングリコール１５００                            ３
ポリエチレングリコール２００００                          ３
オクタン酸セチル                                          ３
クエン酸                                                  ０．０１
クエン酸ナトリウム                                        ０．１
ヘキサメタリン酸ナトリウム                                ０．１
グリチルリチン酸ジカリウム                                ０．１
Ｄ−アラニン                                            １０
酢酸トコフェロール                                        ０．１
オウゴンエキス                                            ０．１
ユキノシタエキス                                          ０．１
エデト酸三ナトリウム                                      ０．１
キサンタンガム                                            ０．３
アクリル酸・メタクリル酸
アルキル共重合体（ペミュレンＴＲ−２）        ０．０５
寒天末                                                    １．５
フェノキシエタノール                                      適量
ジブチルヒドロキシトルエン                                適量
精製水                                                    残余

１００．００【００９９】
配合例３７（ピールオフマスク）
（組成物）                                        配合量（質量％）
エタノール                                              １０
１，３−ブチレングリコール                                ６
ポリエチレングリコール４０００                            ２
オリーブ油                                                １
マカデミアナッツ油                                        １
ヒドロキシステアリン酸フィトステリル                      ０．０５
乳酸                                                      ０．０５
乳酸ナトリウム                                            ０．１
Ｌ−アスコルビン酸硫酸エステル２ナトリウム                ０．１
α−トコフェロール  ２−Ｌ−アスコルビン酸
リン酸ジエステルカリウム    ０．１
Ｄ−アスパラギン酸                                        ０．４
魚コラーゲン                                              ０．１
コンドロイチン硫酸トリウム                                ０．１
カルボキシメチルセルロースナトリウム                      ０．２
ポリビニルアルコール                                    １２
パラオキシ安息香酸エステル                                適量
香料                                                      適量
精製水                                                    残余

１００．００【０１００】
配合例３８（ピールオフマスク）
（組成物）                                        配合量（質量％）
エタノール                                              １０
１，３−ブチレングリコール                                ６
ポリエチレングリコール４０００                            ２
オリーブ油                                                １
マカデミアナッツ油                                        １
ヒドロキシステアリン酸フィトステリル                      ０．０５
乳酸                                                      ０．０５
乳酸ナトリウム                                            ０．１
Ｌ−アスコルビン酸硫酸エステル２ナトリウム                ０．１
α−トコフェロール  ２−Ｌ−アスコルビン酸
リン酸ジエステルカリウム    ０．１
Ｄ−アラニン                                            １５
魚コラーゲン                                              ０．１
コンドロイチン硫酸トリウム                                ０．１
カルボキシメチルセルロースナトリウム                      ０．２
ポリビニルアルコール                                    １２
パラオキシ安息香酸エステル                                適量
香料                                                      適量
精製水                                                    残余

１００．００【０１０１】
配合例３９（含浸マスク）
（組成物）                            配合量（質量％）
グリセリン                                    １
１，３−ブチレングリコール                    ８
キシリット                                    ２
ポリエチレングリコール１５００                ２
ローズマリー油                                ０．０１
セージ油                                      ０．１
クエン酸                                      ０．０２
クエン酸ナトリウム                            ０．０８
ヘキサメタリン酸ナトリウム                    ０．０１
ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン    ０．１
Ｄ−アスパラギン酸                            ０．２５
バーチエキス                                  ０．１
ラベンダー油                                  ０．０１
キサンタンガム                                ０．０５
カルボキシビニルポリマー                      ０．１５
パラオキシ安息香酸エステル                    適量
精製水                                        残余

１００．００【０１０２】
配合例４０（含浸マスク）
（組成物）                              配合量（質量％）
グリセリン                                    １
１，３−ブチレングリコール                    ８
キシリット                                    ２
ポリエチレングリコール１５００                ２
ローズマリー油                                ０．０１
セージ油                                      ０．１
クエン酸                                      ０．０２
クエン酸ナトリウム                            ０．０８
ヘキサメタリン酸ナトリウム                    ０．０１
ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン    ０．１
Ｄ−アラニン                                  ８
バーチエキス                                  ０．１
ラベンダー油                                  ０．０１
キサンタンガム                                ０．０５
カルボキシビニルポリマー                      ０．１５
パラオキシ安息香酸エステル                    適量
精製水                                        残余

１００．００【０１０３】
配合例４１（乳液）
（組成物）                                  配合量（質量％）
流動パラフィン                                      ７
ワセリン                                            ３
デカメチルシクロペンタシロキサン                    ２
ベヘニルアルコール                                  １．５
グリセリン                                          ５
ジプロピレングリコール                              ７
ポリエチレングリコール１５００                      ２
ホホバ油                                            １
イソステアリン酸                                    ０．５
ステアリン酸                                        ０．５
ベヘニン酸                                          ０．５
テトラ２−エチルヘキサン酸ペンタエリスリット        ３
２−エチルヘキサン酸セチル                          ３
モノステアリン酸グリセリン                          １
モノステアリン酸ポリオキシエチレングリセリン        １
水酸化カリウム                                      ０．１
ヘキサメタリン酸ナトリウム                          ０．０５
グリチルレチン酸ステアリル                          ０．０５
Ｄ−アスパラギン酸                                  ０．２
ローヤルゼリーエキス                                ０．１
酵母エキス                                          ０．１
酢酸トコフェロール                                  ０．１
アセチル化ヒアルロン酸ナトリウム                    ０．１
エデト酸三ナトリウム                                ０．０５
４−ｔ−ブチル−４’−メトキシジベンゾイルメタン    ０．１
パラメトキシ桂皮酸２−エチルヘキシル                ０．１
カルボキシビニルポリマー                            ０．１５
パラベン                                            適量
香料                                                適量
精製水                                              残余

１００．００【０１０４】
配合例４２（乳液）
（組成物）                                  配合量（質量％）
流動パラフィン                                      ７
ワセリン                                            ３
デカメチルシクロペンタシロキサン                    ２
ベヘニルアルコール                                  １．５
グリセリン                                          ５
ジプロピレングリコール                              ７
ポリエチレングリコール１５００                      ２
ホホバ油                                            １
イソステアリン酸                                    ０．５
ステアリン酸                                        ０．５
ベヘニン酸                                          ０．５
テトラ２−エチルヘキサン酸ペンタエリスリット        ３
２−エチルヘキサン酸セチル                          ３
モノステアリン酸グリセリン                          １
モノステアリン酸ポリオキシエチレングリセリン        １
水酸化カリウム                                      ０．１
ヘキサメタリン酸ナトリウム                          ０．０５
グリチルレチン酸ステアリル                          ０．０５
Ｄ−アラニン                                        ５
ローヤルゼリーエキス                                ０．１
酵母エキス                                          ０．１
酢酸トコフェロール                                  ０．１
アセチル化ヒアルロン酸ナトリウム                    ０．１
エデト酸三ナトリウム                                ０．０５
４−ｔ−ブチル−４’−メトキシジベンゾイルメタン    ０．１
パラメトキシ桂皮酸２−エチルヘキシル                ０．１
カルボキシビニルポリマー                            ０．１５
パラベン                                            適量
香料                                                適量
精製水                                              残余

１００．００【０１０５】
配合例４３（乳液）
（組成物）                                配合量（質量％）
ジメチルポリシロキサン                            ２
ベヘニルアルコール                                １
バチルアルコール                                  ０．５
グリセリン                                        ５
１，３−ブチレングリコール                        ７
エリスリトール                                    ２
硬化油                                            ３
スクワラン                                        ６
テトラ２−エチルヘキサン酸ペンタエリスリット      ２
イソステアリン酸ポリオキシエチレングリセリル      １
モノステアリン酸ポリオキシエチレングリセリン      １
Ｄ−アスパラギン酸                                ０．３
水酸化カリウム                                    適量
ヘキサメタリン酸ナトリウム                        ０．０５
フェノキシエタノール                              適量
カルボキシビニルポリマー                          ０．１
精製水                                            残余

１００．００【０１０６】
配合例４４（乳液）
（組成物）                                配合量（質量％）
ジメチルポリシロキサン                            ２
ベヘニルアルコール                                １
バチルアルコール                                  ０．５
グリセリン                                        ５
１，３−ブチレングリコール                        ７
エリスリトール                                    ２
硬化油                                            ３
スクワラン                                        ６
テトラ２−エチルヘキサン酸ペンタエリスリット      ２
イソステアリン酸ポリオキシエチレングリセリル      １
モノステアリン酸ポリオキシエチレングリセリン      １
Ｄ−アラニン                                    １０
水酸化カリウム                                    適量
ヘキサメタリン酸ナトリウム                        ０．０５
フェノキシエタノール                              適量
カルボキシビニルポリマー                          ０．１
精製水                                            残余

１００．００【０１０７】
配合例４５（化粧水）
（組成物）                                        配合量（質量％）
エチルアルコール                                          ５
グリセリン                                                １
１，３−ブチレングリコール                                ５
ポリオキシエチレンポリオキシプロピレン
デシルテトラデシルエーテル      ０．２
ヘキサメタリン酸ナトリウム                                ０．０３
トリメチルグリシン                                        １
ポリアスパラギン酸ナトリウム                              ０．１
α−トコフェロール  ２−Ｌ−アスコルビン酸
リン酸ジエステルカリウム    ０．１
チオタウリン                                              ０．１
Ｄ−アスパラギン酸                                        ０．３
ＥＤＴＡ３ナトリウム                                      ０．１
カルボキシビニルポリマー                                  ０．０５
水酸化カリウム                                            ０．０２
フェノキシエタノール                                      適量
香料                                                      適量
精製水                                                    残余

１００．００【０１０８】
配合例４６（化粧水）
（組成物）                                        配合量（質量％）
エチルアルコール                                          ５
グリセリン                                                １
１，３−ブチレングリコール                                ５
ポリオキシエチレンポリオキシプロピレン
デシルテトラデシルエーテル      ０．２
ヘキサメタリン酸ナトリウム                                ０．０３
トリメチルグリシン                                        １
ポリアスパラギン酸ナトリウム                              ０．１
α−トコフェロール  ２−Ｌ−アスコルビン酸
リン酸ジエステルカリウム    ０．１
チオタウリン                                              ０．１
Ｄ−アラニン                                            １０
ＥＤＴＡ３ナトリウム                                      ０．１
カルボキシビニルポリマー                                  ０．０５
水酸化カリウム                                            ０．０２
フェノキシエタノール                                      適量
香料                                                      適量
精製水                                                    残余

１００．００【０１０９】
配合例４７（化粧水）
（組成物）                                配合量（質量％）
エタノール                                      １０
ジプロピレングリコール                            １
ポリエチレングリコール１０００                    １
ポリオキシエチレンメチルグルコシド                １
ホホバ油                                          ０．０１
トリ２−エチルヘキサン酸グリセリル                ０．１
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油                    ０．２
ジイソステアリン酸ポリグリセリル                  ０．１５
Ｎ−ステアロイル−Ｌ−グルタミン酸ナトリウム      ０．１
クエン酸                                          ０．０５
クエン酸ナトリウム                                ０．２
水酸化カリウム                                    ０．４
グリチルリチン酸ジカリウム                        ０．１
塩酸アルギニン                                    ０．１
Ｌ−アスコルビン酸  ２−グルコシド                ２
Ｄ−アスパラギン酸                                ０．２
エデト酸三ナトリウム                              ０．０５
パラメトキシ桂皮酸２−エチルヘキシル              ０．０１
ジブチルヒドロキシトルエン                        適量
パラベン                                          適量
海洋深層水                                        ３
香料                                              適量
精製水                                            残余

１００．００【０１１０】
配合例４８（化粧水）
（組成物）                              配合量（質量％）
エタノール                                      １０
ジプロピレングリコール                            １
ポリエチレングリコール１０００                    １
ポリオキシエチレンメチルグルコシド                １
ホホバ油                                          ０．０１
トリ２−エチルヘキサン酸グリセリル                ０．１
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油                    ０．２
ジイソステアリン酸ポリグリセリル                  ０．１５
Ｎ−ステアロイル−Ｌ−グルタミン酸ナトリウム      ０．１
クエン酸                                          ０．０５
クエン酸ナトリウム                                ０．２
水酸化カリウム                                    ０．４
グリチルリチン酸ジカリウム                        ０．１
塩酸アルギニン                                    ０．１
Ｌ−アスコルビン酸  ２−グルコシド                ２
Ｄ−アラニン                                    １２
エデト酸三ナトリウム                              ０．０５
パラメトキシ桂皮酸２−エチルヘキシル              ０．０１
ジブチルヒドロキシトルエン                        適量
パラベン                                          適量
海洋深層水                                        ３
香料                                              適量
精製水                                            残余

１００．００【０１１１】
配合例４９（エアゾール尿素外用剤原液）
（組成物）                          配合量（質量％）
エタノール                                １５．０
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油５０          １．５
ジフェンヒドラミン                          １．０
ジブカイン                                  ２．０
酢酸トコフェロール                          ０．５
Ｄ−アスパラギン酸                          ０．１
イソステアリン酸                            ０．１
１，３−ブチレングリコール                  ３．０
ポリエチレングリコール４００                ３．０
カンフル                                    ０．０５
尿素                                      ２０．０
精製水                                      残余

１００．００【０１１２】
配合例５０（エアゾール尿素外用剤原液）
（組成物）                          配合量（質量％）
エタノール                                １５．０
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油５０          １．５
ジフェンヒドラミン                          １．０
ジブカイン                                  ２．０
酢酸トコフェロール                          ０．５
Ｄ−アラニン                                ５
イソステアリン酸                            ０．１
１，３−ブチレングリコール                  ３．０
ポリエチレングリコール４００                ３．０
カンフル                                    ０．０５
尿素                                      ２０．０
精製水                                      残余

１００．００【０１１３】
配合例５１（エアゾール尿素噴射剤）
（組成物）                      配合量（質量％）
エアゾール尿素外用剤原液              ６５．０
ジメチルエーテル                      ３５．０

１００．００【０１１４】
配合例５１（エアゾール尿素噴射剤）の充填方法
エアゾール尿素外用剤原液及びジメチルエーテルを内面テフロン（登録商標）コート処理耐圧エアゾールアルミ缶に充填してエアゾール剤を調製する。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【国際調査報告】
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