(57)【要約】  骨形成を助け、骨形成後の摘出が容易な骨・組織再生誘導用メンブレンを提供する。基材となるポリエステルまたはポリアミドの親水化フィルムと、該フィルムの両面または片面に設けたコラーゲンまたは熱変性コラーゲンからなるコラーゲン層と、該コラーゲン層の上に被せたリン酸カルシウム層とを含んでなる骨・組織再生誘導用メンブレンとその製造方法。【特許請求の範囲】
【請求項１】
基材となるポリエステルまたはポリアミドの親水化フィルムと、該フィルムの両面または片面に設けたコラーゲンまたは熱変性コラーゲンからなるコラーゲン層と、該コラーゲン層の上に被せたリン酸カルシウム層とを含んでなる骨・組織再生誘導用メンブレン。
【請求項２】
ポリエステルまたはポリアミドの親水化フィルムへコラーゲンまたは熱変性コラーゲンを固定してコラーゲン層を生成する第一固定化工程と、コラーゲン層の上にリン酸カルシウム層を置く積層工程とを含んでなる骨・組織再生誘導用メンブレンの製造方法。
【請求項３】
前記積層工程が、該コラーゲン層へウレアーゼを固定する第２固定化工程と、ウレアーゼを固定化したコラーゲン層の上にリン酸カルシウムを析出させる析出工程とを含んでなる、請求項２に記載の骨・組織再生誘導用メンブレンの製造方法。
【請求項４】
前記積層工程が、該コラーゲン層の表面にリン酸カルシウムからなるアパタイト核形成剤が固定化されてなる該コラーゲン層とリン酸カルシウム過飽和溶液を接触させることを含む、請求項２に記載の骨・組織再生誘導用メンブレンの製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、歯科あるいは外科分野において用いられる骨・組織再生関連材料に関し、特に、骨・組織再生誘導用メンブレンとその製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
形成外科分野における外傷や疾病による骨欠損部の再生、歯科における歯周病により失われた組織の再生、歯科インプラント治療におけるインプラント埋入部位の骨の増量は、それぞれの分野において重要な課題である。一般的に、骨再生を望んでも、骨よりもその周囲の上皮組織または粘膜の方が成長のスピードが速いため、骨を再生または増量しようとする部位が肉組織で覆われてしまい、骨再生が難しい。そこで、遮蔽用のメンブレンを利用して骨再生を促す技術が開発されている。【０００３】
歯科の分野では、中等度以上の歯周病で失われた組織や骨を元通りに戻す歯周組織再生治療がある。歯周病が進行すると、歯の周りの骨と歯根膜という歯根の周りの組織が破壊されるが、この歯根膜組織と骨を再生する治療がある。その方法としては、メンブレンを使用するＧＴＲ法(Guided Tissue Regeneration)や、メンブレンを用いて骨再生のスペースを作り、その中に移植骨、骨代替材等の誘導因子などを封入して、骨を再生させるＧＢＲ法（Guided Bone Regeneration）がある。ＧＢＲ法においては、自己由来の海綿骨もしくは皮質骨、異種または同種の骨移植片、ヒドロキシアパタイト又はリン酸三カルシウムの顆粒、サンゴ、コラーゲンのような天然ポリマー、骨形態形成タンパク質のような骨誘導タンパク質などが用いられる。【０００４】
このようなメンブレンとしては、非吸収性メンブレンと吸収性メンブレンの２種類が知られている。非吸収性メンブレンとしては、生体とのなじみがよく変形が容易なチタンのメッシュや、延伸加工したポリテトラフルオロエチレン（ePTFE）が知られている。このタイプのメンブレンは、骨生成が完了したあと、手術により除去する必要がある。そして、吸収性メンブレンとしては、乳酸とグリコール酸の共重合体やコラーゲンなどが使用される。このタイプのメンブレンは、ある程度の時間がたつと生体内で分解されて吸収されるので、除去手術の必要がない一方、組織再生の状況のコントロールと確認が困難である。最近では、特許文献１にあるような、生体吸収性のコラーゲンメンブレンとハイドロキシアパタイト（水酸アパタイト）との２層あるいは、それにさらに治癒促進用の濃縮血小板ゲルを重ねたものも知られており、非特許文献1にあるようなハイドロキシアパタイト（水酸アパタイト）、コラーゲン、ポリ乳酸などからなる吸収性の三層膜が知られている。【０００５】
非吸収性メンブレンは、骨再生完了後に周辺組織と不必要な癒着を起こすことなく、患部からスムーズに摘出できることが求められているが、上記のチタンメッシュでは、メッシュのわずかな間隙にも骨が貫入し、骨再生後のチタンメッシュの摘出が困難になる場合がある。特許文献１に記載されているハイドロキシアパタイト（水酸アパタイト）及びコラーゲンからなる２層のメンブレン、又は非特許文献１に記載されているハイドロキシアパタイト（水酸アパタイト）、コラーゲン及びポリ乳酸からなる３層のメンブレンでは、体内での吸収が骨形成よりも速いために、上皮の侵入を許してしまい、歯槽骨が最初のメンブレンの埋入位置まで再生できないという問題がある。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】特開2007-160011号公報
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】亘理文夫ら、傾斜機能材料論文集 vol. 20 (2006), 35-40「骨組織再生用傾斜機能型ＧＴＲ膜の試作」
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明は、骨形成を助け、骨形成後の摘出が容易な骨・組織再生誘導用メンブレンを提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明の骨・組織再生誘導用メンブレンは、ポリエステルまたはポリアミドの親水化フィルムの基材と、該フィルムの両面または片面に設けたコラーゲンまたは熱変性コラーゲンからなるコラーゲン層と、該コラーゲン層の上に被せたリン酸カルシウム層とを含んでなる。【００１０】
本発明の骨・組織再生誘導用メンブレンの製造方法は、ポリエステルまたはポリアミドの親水化フィルムへコラーゲンまたは熱変性コラーゲンを固定してコラーゲン層を生成する第一固定化工程と、コラーゲン層の上にリン酸カルシウム層を置く積層工程とを含んでなる。【００１１】
ポリエステルとは、一般に、多価カルボン酸（ジカルボン酸）とポリアルコール（ジオール）との重縮合体をいう。ポリアルコール（アルコール性の基−ＯＨを複数有する化合物）と、多価カルボン酸（カルボキシル基−ＣＯＯＨを複数有する化合物）を反応（脱水縮合）させて作ることを基本とするものである。ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリエチレンナフタレート、ポリブチレンテレフタレート、ポリトリメチレンテレフタレート、ポリブチレンナフタレートなどがあるが、中でも最も多く生産されているものはテレフタル酸とエチレングリコールから製造されるポリエチレンテレフタレートである。ポリエステル以外の材料としては、ナイロンや、アラミドのようなポリアミドを使用することができる。ポリアミドは、モノマー内にアミド基を持つポリマーの総称である。ポリエステルもポリアミドも、下に記す親水化処理を施すことによって、コラーゲンとの固定化に必要なカルボキシル基を提供することができるからである。【００１２】
ここで使用できるコラーゲンまたは熱変性コラーゲン(ゼラチンなど)としては、ウシ、ブタまたは魚類由来のI型、II型またはIII型のアテロコラーゲンといったタイプのものがある。このコラーゲンは、コラーゲンペプチドといったポリペプチドで代替でき、本願においては、コラーゲンという用語は、このようなポリペプチドを包含する広い意味で使用する。このコラーゲンは、リン酸カルシウム層とポリエステルの接着の役割を果たすとともに、骨芽細胞に対しては増殖のための環境形成の助けになることが知られている。【００１３】
また、リン酸カルシウムは、カルシウムイオンとリン酸基（ＰＯ４３−）またはピロリン酸基（Ｐ２Ｏ７４−）からなる物質である。水素やヒドロキシ基を持つこともある。骨の約７０％は、リン酸カルシウム系のセラミックスの一種であるハイドロキシアパタイト（水酸アパタイト）（Ｃａ５（ＰＯ４）３（ＯＨ））からできている。リン酸の持つ三個の水素原子(H)とカルシウムがそれぞれ置換されて、次の三種類の異なったリン酸塩となる。水素原子一個がカルシウムと置き換った場合には、第一リン酸カルシウムＣａ（Ｈ２ＰＯ４）２となり、水素原子二個がカルシウムと置き換った場合には、第二リン酸カルシウムＣａＨＰＯ４、水素原子三個がカルシウムと置き換ると第三リン酸カルシウムＣａ３（ＰＯ４）２となる。
【発明の効果】
【００１４】
本発明の骨・組織再生誘導用メンブレンによれば、順調な骨組織の成長が期待できるとともに、骨形成後の摘出が容易である。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
【図１】本発明の一実施形態のメンブレンとそれ以外のメンブレンを用いた場合と、メンブレンを用いなかった場合とを比較したラット頭蓋骨欠損部のマイクロＣＴ写真を示す。
【図２】本発明の一実施形態のメンブレンとそれ以外のメンブレンを用いた場合を比較したメンブレン埋入部分の組織切片画像を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
本発明の一つの実施形態を下記に説明する。この実施形態のメンブレンは、（１）基材となるポリエステルまたはポリアミドのフィルムの表面の親水化と、（２）フィルム表面へのコラーゲンの固定化と、（３）フィルム上に固定されたコラーゲンへのウレアーゼの固定化と、（４）このコラーゲンの表面上へのリン酸カルシウムの析出との４工程により製造することができる。
【００１７】
まず、１０〜３００μｍ程度の厚さ、好ましくは２０〜１００μｍの厚さのポリエステルまたはポリアミドのフィルムを０．１〜１０ｍｏｌ／Ｌのアルカリ性水溶液（水酸化ナトリウムなど）に浸し、６０〜１００℃の温度で１５分〜６時間程度保持する。これにより、ポリエステルフィルムの表面が加水分解し、ヒドロキシ基（−ＯＨ）とカルボキシル基（−ＣＯＯＨ）が表面に現れる。なお、ポリエステルまたはポリアミドのフィルムの厚さは、フィルム自体の剛性、骨欠損部の大きさ、外部組織からの応力を支えるために求められる剛性、取り扱いやすさといった要素を検討して決めるべきものである。あまり薄いと外部組織からの応力を支えきれずに骨形成のための空間を維持することができなくなるし、あまり厚いと摘出の際の切開部を大きくしなければならなくなる。親水化には、電子線処理、酸溶液処理、酸化剤処理、親水性官能基のグラフト処理、シランカップリング処理、陽極酸化処理、粗面化処理など、アルカリ水溶液を用いるほかにもいくつかの方法が知られている。また、すでに親水化処理の済んだフィルム素材も販売されている。
【００１８】
次に、コラーゲンまたは熱変性コラーゲン(ゼラチンなど)を分散した水溶液に、カルボジイミドなどの架橋剤を溶かし、これに親水化フィルムを浸して、２０〜５０℃の温度で６〜７２時間保持する。この過程で、ポリエステル表面のカルボキシル基（−ＣＯＯＨ基）とコラーゲンのアミノ基（−ＮＨ２）が脱水縮合し、ペプチド結合（−ＣＯＮＨ−）することによって、コラーゲンがポリエステル表面に固定化される。
【００１９】
次いで、このコラーゲンが固定されたフィルムを、ウレアーゼとカルボジイミドを溶かした水溶液に入れ、２０〜５０℃の温度、好ましくは３０〜４０℃の温度で６〜７２時間保持する。この過程で、コラーゲンの表面のカルボキシル基またはアミノ基と、ウレアーゼのアミノ基またはカルボキシル基が脱水縮合し、コラーゲン表面にウレアーゼが固定化される。
【００２０】
最後に、このウレアーゼが固定されているコラーゲンの表面に、リン酸カルシウムを析出させる。すなわち、カルシウムイオン１〜１００ｍｍｏｌ／Ｌ、リン酸イオン１〜１００ｍｍｏｌ／Ｌ、尿素１０〜１００ｍｍｏｌ／Ｌを含む水溶液に。先の工程で準備されたウレアーゼを固定化したフィルムを浸し、２０〜５０℃の温度で１５分から２４時間保持する。この過程で、ウレアーゼの作用により尿素がアンモニアに変わり，アンモニアはリン酸カルシウムをフィルムの表面に選択的に析出させる。その結果、フィルムの基体と、フィルムの上のリン酸カルシウムとの３層構造を有しているメンブレンを得ることができる。
【００２１】
上記の過程では、ポリエステルフィルムの両面にコラーゲンとリン酸カルシウムが付着することになるが、片面だけに付着させたい場合には、予めポリエステルフィルムを２枚重ねておくか、１枚のポリエステルフィルムの１面を別のポリマーフィルムで覆っておくなどして、上記の工程が終了後に重なったフィルムを剥がせばよい。
【００２２】
その結果得られるメンブレンは、コラーゲンの層の厚さが、一般的に、約１〜１００μｍであり、約５〜２０μｍであることが好ましい。リン酸カルシウムの層の厚さは、一般的に、約１〜１００μｍであり、約２０〜７０μｍであるのが好ましい。コラーゲン層の厚さが１μｍより薄いと、リン酸カルシウム層の接着性に劣るといった問題があり、１００μｍより厚いとコラーゲン層自体が剥がれやすいという問題が生じる。また、リン酸カルシウム層の厚さは、１μｍより薄いと、骨組織の成長を促す効果に乏しくなり好ましくなく、１００μｍより厚いとコラーゲン層から剥がれやすくなるので好ましくない。このようなコラーゲン層およびリン酸カルシウム層の厚さには幅があってもよく、からならずしも高い均一性が求められるものではなく、ある程度のムラがあってもかまわない。
【００２３】
また、ポリエステルに固定したコラーゲン上にリン酸カルシウムを析出させる方法としては、ウレアーゼを用いる方法以外にも、少なくともカルシウムまたはリン酸のイオンを含む溶液で基材を処理し、溶液が付着した基材を水を含む媒体で処理し乾燥させ、水処理後のいずれかのイオンを吸着した基材を少なくともリンまたはカルシウムを含む溶液で処理して、水を含む媒体で基材を処理し乾燥させる方法(特許文献２)や、その表面が親水性を有する基材表面にリン酸カルシウムからなるアパタイト核形成剤が固定化されてなる基材とリン酸カルシウム過飽和溶液を接触させるアパタイト複合体の製造方法(特許文献３)などを利用することができる。
【００２４】
【特許文献２】特開2005-112716号公報
【特許文献３】特開2005-111255号公報
【００２５】
この別法においては、親水性を有するコラーゲンの表面にリン酸カルシウムからなるアパタイト核形成剤を固定化する。コラーゲンの表面にアパタイト核形成剤を固定化するには、次の工程を組み合わせる方法が好ましい。すなわち、（イ）コラーゲン層を有するフィルムを、少なくともカルシウムを含む溶液で処理する工程と、（ロ）カルシウム溶液が付着したフィルムを、水を含む媒体で処理し乾燥する工程と、（ハ）水処理後のカルシウムイオン吸着フィルムを、少なくともリンを含む溶液で処理する工程と、（ニ）リン溶液が付着したフィルムを、水を含む媒体で処理し乾燥する工程とからなる方法である。
【００２６】
（イ）の工程は、まず、コラーゲンの表面にカルシウムイオンを吸着させることを主眼としたものであり、通常、ＣａＣl２水溶液などのカルシウムイオンを含む溶液にフィルムを浸漬することにより行われる。浸漬時間は通常１秒〜１００分好ましくは１０〜６０秒である。また基材の引き上げ速度は、通常１〜１００cm/分、好ましくは１５〜６０cm/分である。カルシウムイオンの濃度は特に限定されないが、通常１〜１０００mM、好ましくは１００〜５００mM、さらに好ましくは２００〜２５０mMである。
【００２７】
（ロ）の工程は、（イ）の工程でコラーゲンの表面に付着したカルシウム溶液を表面から除くことを主眼としたものである。この工程により、水素結合等により吸着したカルシウムイオンが、表面に選択的に残存するようになる。この水処理工程を欠くと、アパタイト核形成剤が厚く形成されてしまうので、その上に設けられるアパタイト層とコラーゲン層との接着強度が弱くなるだけでなく、リン酸カルシウム以外の結晶も多量に析出してしまう。（ロ）の工程は通常、水を含む媒体中に、カルシウム溶液が付着したフィルムを浸漬することにより行われる。浸漬時間は通常１〜６０秒、好ましくは１〜５秒である。またフィルムの引き上げ速度は、通常１〜１００cm/分、好ましくは１５〜６０cm/分である。乾燥時間は、通常１０秒〜６０分、好ましくは１〜１０分である。
【００２８】
（ハ）の工程は、前記（ロ）の工程で得られたコラーゲンの表面に吸着したカルシウムイオンとリン酸イオンを反応させて、リン酸カルシウムからなるアパタイト核形成剤を得ることを主眼としたものである。浸漬時間は通常１秒〜１００分好ましくは１０〜６０秒である。またフィルムの引き上げ速度は、通常１〜１００cm/分、好ましくは１５〜６０cm/分である。リン酸イオンの濃度は特に限定されないが、通常１〜１０００mM、好ましくは１００〜５００mM、さらに好ましくは２００〜２５０mMである。
【００２９】
（ニ）の工程は通常、水を含む媒体中に、リン溶液が付着したフィルムを浸漬することにより行われる。浸漬時間は通常１〜６０秒、好ましくは１〜５秒である。またフィルムの引き上げ速度は、通常１〜１００cm/分、好ましくは１５〜６０cm/分である。乾燥時間は、通常１０秒〜６０分、好ましくは１〜１０分である。この工程により、表面にアパタイト核形成剤が固定化される。
【００３０】
この場合、カルシウム溶液とリン溶液への浸漬順序は上記のような態様に特に限定されるものではなく、カルシウム溶液とリン溶液への浸漬の順番を下記のごとく変更し、アパタイト核形成剤の固定化手段として、次の工程をとっても良い。すなわち、（イ）少なくともリンを含む溶液で処理する工程と、（ロ）水を含む媒体で処理し乾燥する工程と、（ハ）少なくともカルシウムを含む溶液で処理する工程と、（ニ）水を含む媒体で処理し乾燥する工程とからなる方法である。
【００３１】
通常、前記（イ）→（ロ）→（ハ）→（二）の工程順により行われるが、アパタイト核形成剤の導入量を多くし、また親水性の十分高くない基材表面にも確実に、かつ基材の表面全面にアパタイト核形成剤を固定化するためには、工程（イ）〜（二）の浸漬工程を、（イ）→（ロ）→（ハ）→（二）→（イ）→（ロ）・・・の如く所定回数繰り返せばよい。ただし、繰り返す回数を多くすると、基材と、その表面に形成されるアパタイト層の間の接着強度が低くなってしまうので、繰り返す回数は通常１回以上、４回以内とするのが好ましい。
【００３２】
［実験例］
以下に、本発明のメンブレンを用いて、ラット頭蓋骨の骨誘導再生を行った実験例を記す。ポリエステルフィルム基材にはＰＥＴフィルムを用いた。ＰＥＴフィルムは、東洋紡績株式会社製の厚さ50μｍの製品を用いた（製品名A4100）。このＰＥＴフィルムを25mm×50mmの大きさに切り取ったものを3.0ｍｏｌ／Ｌの濃度の水酸化ナトリウム水溶液に浸し、約70℃の温度で3時間程度保持して親水化を行った。また、コラーゲンは、株式会社高研製のウシ真皮由来アテロコラーゲン溶液I-PC 50（5mg/mL）を用いた。このコラーゲン溶液2mLに純水48mLと再構成用緩衝溶液5mL（炭酸水素ナトリウム50mmol/L、水酸化ナトリウム260mmol/L、HEPES 200mmol/Lを含むもの）を加え、37℃で4時間保持してコラーゲンをゲル化（フィブリル化）させた。このゲルをホモジナイザーでせん断して分散させたものを遠心分離で取り出し、pH5.8のリン酸緩衝溶液で2回洗浄した。洗浄後のコラーゲンフィブリルをpH5.8のリン酸緩衝溶液50mLに入れて分散させ、コラーゲンフィブリル濃度10mg/50mLの濃度にした水溶液に、カルボジイミドを0.150g加え、これに親水化ポリエステルを浸して、約37℃の温度で18時間保持して、コラーゲンをＰＥＴフィルムに固定した。さらに、ウレアーゼは、関東化学株式会社の製品（タチナタ豆由来、5000U/g）を用いた。このウレアーゼ0.030gとカルボジイミド0.150gをpH 5.8のリン酸緩衝溶液50mLに溶かした水溶液に、コラーゲンを固定化したPETフィルムを入れ、約37℃の温度で24時間保持した。そして、リン酸カルシウムを析出させるために、硝酸カルシウム四水和物10.0mmol/L、リン酸二水素アンモニウム6.0mmol/L、尿素10.0mmol/Lを含む水溶液に、先の工程で準備されたウレアーゼを固定化したＰＥＴフィルムを浸し、約37℃の温度で1時間保持した。その結果、コラーゲンの層の厚さは、約10μｍ、ハイドロキシアパタイト（水酸アパタイト）の層の厚さは、約30μｍであった。以下、ｃｏｌはコラーゲン、ＨＡはリン酸カルシウムの一種のハイドロキシアパタイト（水酸アパタイト）を表す。
【００３３】
８週齢Wister系ラット雄の頭頂部に、硬膜を傷つけないように直径５ｍｍの骨欠損を形成し、メンブレンなし（第１群）、未処理ＰＥＴフィルム（ＰＥＴフィルム単独）（第２群）、ＰＥＴフィルムをコラーゲンで被覆したもの（第３群、PET-col被覆）、ＰＥＴフィルムをコラーゲンとハイドロキシアパタイト（水酸アパタイト）で被覆したもの（第４群、PET-col-HA被覆）の各群に３匹ずつ使用した。メンブレンで骨欠損部分を覆い、その上で、開口部を縫合し、メンブレンが完全に頭皮の下にある状態で経過を観察した。メンブレンで覆われた骨欠損部は、血餅で満たされていた。メンブレンを埋入してから１週間後に摘出し、マイクロＣＴにより骨欠損部を観察し、組織切片の観察を行った。図１にその結果を示す。なお、いずれの例でも、被覆がある場合は、その被覆はＰＥＴフィルムの両面に行った。
【００３４】
図１には、ラット頭蓋骨欠損部のマイクロＣＴ写真を示す。それぞれ、（Ａ）が第１群、（Ｂ）第２群、（Ｃ）第３群、（Ｄ）第４群である。図中の波線は、天然骨と骨欠損部との境界線である。第１群と第２群（図１（Ａ）、（Ｂ））では、境界線が明確であり、骨形成はほとんど進行していないことがわかる。これに対して第３群と第４群（図１（Ｃ）、（Ｄ））では、欠損部に向かって新生骨が成長している様子が観察される。またメンブレン摘出の際、第３群には骨膜が強固に付着していたが、第４群には骨膜の付着がなく、滑らかに摘出することができた。このメンブレン摘出の容易性は特筆すべきであり、メンブレンの一端あるいは一部をつまんで、小さな開口からメンブレンを容易に引き出すことができる。そのため、メンブレンを摘出する際の切開の大きさを限定することができ、患者の身体への侵襲を最小化することができる。第３群の摘出の容易性は劣っていたが、これは、コラーゲンが骨とも上皮組織などとも親和性がいいことが原因であると考えられる。
【００３５】
本メンブレンが新生骨の形成を促進している様子は、メンブレンを摘出後、脱灰した組織の切片観察からも示された。図２にその結果を示す。図２には、メンブレン埋入部分の組織切片画像を示す。（Ａ）は、第２群、（Ｂ）第３群、（Ｃ）第４群である。図中のＡはメンブレンが埋入されていた領域を示し、Ｂは欠損部側、Ｃは骨膜側、Ｄはこの領域の小さな点は炎症を表す。Ｅは新生骨であり、Ｆはメンブレンから溶解したリン酸カルシウムと骨芽細胞、Ｇは新生血管である。
【００３６】
未処理のＰＥＴメンブレンを使用した第２群（図２（Ａ））では、新生骨の生成が見られず、骨膜中にはＤのように炎症の痕跡が観察される。PET-colメンブレンを使用した第３群（図２（Ｂ））では、Ｅの部分に新生骨の形成が観察されるが、Ｄの付近に炎症が見られる。PET-col-HAメンブレンを使用した第４群（図２（Ｃ））では、Ｅの領域に厚く新生骨形成が認められ、炎症の痕跡がない。Ｆの領域は、メンブレンから溶解したリン酸カルシウムによって、骨芽細胞が旺盛に増殖していることを示している。さらにＧ付近には新生血管の形成が認められる。つまり、本発明のメンブレンは、生体内において、基材と骨表面に挟まれている部分においては、リン酸カルシウムの層が溶けず、メンブレン摘出の際のメンブレンの剥離性を高める一方、骨欠損部に接している部分では、リン酸カルシウムの層は溶解して、コラーゲンの作用と相まって、骨芽細胞の活性を高めることができる。以上の結果より、本発明のメンブレンの有効性が示されている。
【図１】
2011155243.tif 000002
【図２】
2011155243.tif 000003
【国際調査報告】
2011155243.tif 000004
2011155243.tif 000005
2011155243.tif 000006
2011155243.tif 000007