(57)【要約】  本発明は、ヒトＩＬ−１７Ｃに結合する抗体または抗体断片を提供する。詳細には、本発明は、複合的な有益な特性を有し、したがって、例えばアトピー性皮膚炎または乾癬を有するヒトの治療のために有用である、抗体または抗体断片に関する。【選択図】図１
2019511910.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＩＬ−１７Ｃに特異的な抗体または抗体断片において、
（ａ）配列番号７のＨＣＤＲ１領域、配列番号８のＨＣＤＲ２領域、配列番号９のＨＣＤＲ３領域、配列番号１３のＬＣＤＲ１領域、配列番号１４のＬＣＤＲ２領域、および配列番号１５のＬＣＤＲ３領域、または
（ｂ）配列番号２０のＨＣＤＲ１領域、配列番号２１のＨＣＤＲ２領域、配列番号２２のＨＣＤＲ３領域、配列番号２６のＬＣＤＲ１領域、配列番号２７のＬＣＤＲ２領域、および配列番号２８のＬＣＤＲ３領域
を含む抗体と交差競合することを特徴とする抗体または抗体断片。
【請求項２】
ＩＬ−１７Ｃに特異的な抗体または抗体断片において、
（ａ）配列番号７のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１領域、配列番号８のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２領域、配列番号９のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３領域、配列番号１３のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１領域、配列番号１４のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２領域、および配列番号１５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３領域、または
（ｂ）配列番号２０のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１領域、配列番号２１のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２領域、配列番号２２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３領域、配列番号２６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１領域、配列番号２７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２領域、および配列番号２８のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３領域
を含むことを特徴とする抗体または抗体断片。
【請求項３】
前記抗体または抗体断片が、
（ａ）配列番号７のＨＣＤＲ１領域、配列番号８のＨＣＤＲ２領域、配列番号９のＨＣＤＲ３領域、配列番号１３のＬＣＤＲ１領域、配列番号１４のＬＣＤＲ２領域、および配列番号１５のＬＣＤＲ３領域、または
（ｂ）配列番号２０のＨＣＤＲ１領域、配列番号２１のＨＣＤＲ２領域、配列番号２２のＨＣＤＲ３領域、配列番号２６のＬＣＤＲ１領域、配列番号２７のＬＣＤＲ２領域、および配列番号２８のＬＣＤＲ３領域
を含むことを特徴とする請求項２に記載の抗体または抗体断片。
【請求項４】
前記抗体または抗体断片が、ヒトＩＬ−１７Ｃに特異的であることを特徴とする請求項１〜３のいずれか一項に記載の抗体または抗体断片。
【請求項５】
前記抗体または抗体断片が、ヒトＩＬ−１７Ｃ、カニクイザルＩＬ−１７Ｃ、およびマウスＩＬ−１７Ｃに特異的であることを特徴とする請求項４に記載の単離された抗体または抗体断片。
【請求項６】
前記抗体または抗体断片が、ヒト、ヒト化、またはキメラ抗体または抗体断片であることを特徴とする請求項１〜５のいずれか一項に記載の抗体または抗体断片。
【請求項７】
前記抗体または抗体断片が、配列番号１７の重鎖および配列番号１６の軽鎖を含むことを特徴とする請求項１〜６のいずれか一項に記載の抗体または抗体断片。
【請求項８】
前記抗体または抗体断片が、配列番号３０の重鎖および配列番号２９の軽鎖を含むことを特徴とする請求項１〜７のいずれか一項に記載の抗体または抗体断片。
【請求項９】
前記抗体または抗体断片が、単離された抗体または抗体断片であることを特徴とする請求項１〜８のいずれか一項に記載の抗体または抗体断片。
【請求項１０】
前記抗体または抗体断片が、組換え抗体または抗体断片であることを特徴とする請求項１〜９のいずれか一項に記載の抗体または抗体断片。
【請求項１１】
それを必要とする対象の治療における使用のためのものであることを特徴とする請求項１〜１０のいずれか一項に記載の抗体または抗体断片。
【請求項１２】
請求項１〜１１のいずれか一項に記載の抗体または抗体断片をコードする核酸配列または複数の核酸配列を含むことを特徴とする核酸組成物。
【請求項１３】
請求項１２の核酸配列または複数の核酸配列を含むベクターまたは複数のベクターを含むことを特徴とするベクター組成物。
【請求項１４】
請求項１３のベクター組成物を含むことを特徴とする細胞。
【請求項１５】
請求項１〜１１のいずれか一項に記載の抗体または抗体断片と、薬学的に許容し得る担体または賦形剤とを含むことを特徴とする医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本願は、ヒトＩＬ−１７Ｃと相互作用する抗体または抗体断片に関する。本発明はまた、前記抗体またはその断片を発現する能力がある核酸、ベクター、および宿主細胞、前記抗体またはその断片を含む医薬組成物、ならびに特定の疾患の治療のための前記抗体またはその断片の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
ＩＬ−１７Ｃは、ＩＬ１７タンパク質ファミリーの分泌型ホモ二量体である。ＩＬ−１７Ｃが、単球細胞株ＴＨＰ−１からのＴＮＦ−αおよびＩＬ−１βの放出を刺激することが、インビトロで示されている（Ｌｉ  ｅｔ  ａｌ．（２０００）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９７，７７３−８）。ＩＬ−１７Ｃは腹腔滲出細胞（ＰＥＣＳ）および３Ｔ３細胞株におけるＩＬ−１β、ＩＬ−６、およびＩＬ−２３などの炎症性サイトカインのｍＲＮＡ発現を誘発することができる（Ｙａｍａｇｕｃｈｉ  ｅｔ  ａｌ．（２００７）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ  １７９，７１２８−３６）。
【０００３】
宿主防御に適した炎症性サイトカインとしてのＩＬ−１７Ｃの役割が、いくつかの研究において仮定された（Ｃｈａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．（２０１１）Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ３５，６１１−６２１、Ｓｏｎｇ  ｅｔ  ａｌ．（２０１１）Ｎａｔｕｒｅ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  １２，１２、Ｒａｍｉｒｅｚ−Ｃａｒｒｏｚｚｉ  ｅｔ  ａｌ．（２０１１）Ｎａｔｕｒｅ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  １２，１２）。最近、特定の腫瘍および癌組織の進行における潜在的役割も示された（Ｘｉｎｙａｎｇ  Ｓｏｎｇ（２０１４）Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ４０，１４０−１５２）。
【０００４】
最近、国際公開第２０１３／０５７２４１号パンフレットにおいて、ＩＬ−１７Ｃの阻害が、炎症性疾患を治療するための有望な手法であることが、実験に基づいて評価された。しかし、国際公開第２０１３／０５７２４１号パンフレットにおいて使用されたそれぞれの抗体は、マウスＩＬ−１７Ｃに対して特異的な代替抗体であったが、ヒトＩＬ−１７Ｃに対して反応性であることは全く示されなかった。さらに、ＩＬ−１７Ｃと拮抗するさらなる抗体が、既に（例えば国際公開第１９９９／０６０１２７号パンフレットにおいて）示唆されているが、マウスＩＬ−１７Ｃのみと特異的に結合するポリクローナル血清または代替抗体である。
【０００５】
したがって、ヒトＩＬ−１７Ｃに結合してヒトにおけるＩＬ−１７Ｃ関連疾患または障害を改善する抗体を研究および特定する必要性が存在する。
【発明の概要】
【０００６】
本開示は、新規の抗体および抗体断片を提供する。本明細書に開示した抗体および抗体断片は、ヒトＩＬ−１７Ｃに結合し、また、カニクイザルおよびマウス由来のＩＬ−１７Ｃと交差反応する。さらに、開示した抗体は、８０ｐＭ以下のＩＣ５０濃度で、関連する種−ヒト、マウス、およびカニクイザル−全体にわたって、ＩＬ−１７Ｃのその受容体への結合を阻害する。本明細書に開示および例示した通り、前記抗体は、アトピー性皮膚炎および乾癬についての様々なインビボマウスモデルにおいて有効であることが判明した。
【０００７】
したがって、開示した抗体または抗体断片は、有効性の観点から優れており、例えばアトピー性皮膚炎または乾癬を有するヒトの治療のための、よく適したかつ有望な化合物を提供する。
【０００８】
本開示は、本明細書の表１に記載のＣＤＲ領域を有するヒトＩＬ−１７Ｃに結合する抗体または抗体断片を提供する。本開示はまた、本明細書の表１に記載のアミノ酸配列を含む可変の重鎖領域および可変の軽鎖ＣＤＲ領域を有する特定の抗体または抗体断片を提供する。
【０００９】
本開示はまた、本明細書に開示した特定の抗体または抗体断片と競合する特定の抗体または抗体断片を提供する。本開示はまた、本明細書に開示した特定の抗体または抗体断片と同じエピトープに結合する特定の抗体または抗体断片を提供する。
【００１０】
本開示はまた、医薬品における使用のための、本開示の単離された抗体または抗体断片を提供する。
【００１１】
本開示はまた、本開示の有効量の抗体または抗体断片を前記対象に投与することによって、炎症性疾患などの障害を患う対象を治療するための方法を提供する。好ましくは、前記対象は、ヒトである。
【００１２】
本開示はまた、本開示の単離された抗体または抗体断片と、薬学的に許容し得る担体とを含む医薬組成物を提供する。
【００１３】
本開示はまた、本開示の抗体または抗体断片をコードする核酸を提供する。
【００１４】
本開示はまた、本開示の抗体または抗体断片をコードする核酸を含むベクターを提供する。
【００１５】
本開示はまた、本開示の抗体または抗体断片をコードするベクターまたは核酸を含む宿主細胞を提供する。
【００１６】
特許請求される抗体または抗体断片における有用性が存在する。さらに、こうした抗体または断片を特定するための、特許請求される方法における有用性が存在する。
【００１７】
特許請求される抗体または抗体断片の利用性は、ヒトＩＬ−１７Ｃの生物活性を変えることである。具体的には、特許請求される抗体または抗体断片は、例えば関節リウマチ、乾癬、肺炎症、ＣＯＰＤのような炎症性疾患の治療、および／またはアトピー性皮膚炎（ＡＤ）（中等度から重度のＡＤが含まれる）の治療などの治療的使用のためのものである。
【図面の簡単な説明】
【００１８】
【図１】図１において、ＭＡＢ＃１は、耳の皮膚へのＭＣ９０３の局所適用によって誘発される耳の肥厚を、用量依存的に予防する。データは、平均値±平均値の標準誤差（ＳＥＭ）（ｎ＝８／群）として表す。ＭＣ９０３＋ＭＯＲ０３２０７に対する統計学的有意差は、ＡＮＯＶＡおよびダネットの多重比較検定：＊ｐ＜０．０５；＊＊ｐ＜０．０１；＊＊＊ｐ＜０．００１を使用して算出した。（ＤＥＸ：デキサメタゾン；ＥｔＯＨ：エタノール）
【図２】図２において、ＭＡＢ＃１は、耳の皮膚へのＭＣ９０３の局所適用によって誘発される耳の炎症を用量依存的に軽減する。耳の炎症は、インビボイメージングを使用して、５日目に評価した。左パネル：耳におけるシグナル強度の定量化。それぞれのデータ点（ｎ＝８／群）は、両方の耳の平均強度に相当する；データは、平均値（水平線）±ＳＥＭとしても示される。ＭＣ９０３＋ＭＯＲ０３２０７に対する統計学的有意差は、ＡＮＯＶＡおよびダネットの多重比較検定：＊ｐ＜０．０５；＊＊ｐ＜０．０１；＊＊＊ｐ＜０．００１を使用して算出した。右パネル：異なる治療群からの動物からのマウスの耳の代表的な画像を、Ｐｒｏｓｅｎｓｅ  ６８０プローブの注射の２４時間後に、Ｂｒｕｋｅｒ社のインビボＸｔｒｅｍｅ撮像装置で獲得した（ＤＥＸ：デキサメタゾン；ＥｔＯＨ：エタノール）。
【図３】図３において、ＭＡＢ＃１は、耳の皮膚へのＭＣ９０３の局所適用によって誘発される表皮および真皮皮膚層の肥厚を用量依存的に低下させる。データは、それぞれのデータ点（ｎ＝８／群）および平均値（水平線）±ＳＥＭとして表す。ＭＣ９０３＋ＭＯＲ０３２０７に対する統計学的有意差は、ＡＮＯＶＡおよびダネットの多重比較検定：＊ｐ＜０．０５；＊＊ｐ＜０．０１；＊＊＊ｐ＜０．００１を使用して算出した。左パネル：表皮厚さについてのデータ；右パネル：真皮厚さについてのデータ。
【図４】図４において、ＭＡＢ＃１は、耳におけるＴＳＬＰおよびＩＬ−３３発現ならびに血漿中のＴＡＲＣレベルの、ＭＣ９０３介在性の増大を用量依存的に阻害する。データは、それぞれのデータ点（ｎ＝８／群）および平均値（水平線）±ＳＥＭとして表す。ＭＣ９０３＋ＭＯＲ０３２０７群に対する統計学的有意差は、ＡＮＯＶＡおよびダネットの多重比較検定：＊ｐ＜０．０５；＊＊ｐ＜０．０１；＊＊＊ｐ＜０．００１を使用して算出した。左上パネル：耳におけるＴＳＬＰタンパク質発現についてのデータ；左下パネル：耳におけるＩＬ−３３タンパク質発現についてのデータ；右上パネル：血漿中のＴＡＲＣタンパク質レベルについてのデータ。
【図５】図５において、ＭＡＢ＃１の治療的投与は、耳の皮膚へのＭＣ９０３の局所適用によって誘発される耳の肥厚を用量依存的に低下させる。データは、平均値±ＳＥＭ（ｎ＝１０／群）として表す。ＭＣ９０３＋ＭＯＲ０３２０７に対する統計学的有意差は、ＡＮＯＶＡおよびダネットの多重比較検定：＊ｐ＜０．０５；＊＊ｐ＜０．０１；＊＊＊ｐ＜０．００１を使用して算出した。ＤＥＸ：デキサメタゾン；ＥｔＯＨ：エタノール。
【図６】図６において、ＭＡＢ＃１の治療的投与は、耳の皮膚へのＭＣ９０３の局所適用によって誘発される耳の炎症を用量依存的に軽減する。耳の炎症は、インビボイメージングを使用して、１２日目に評価し、耳におけるシグナル強度を、グラフによって表す。それぞれのデータ点（ｎ＝１０／群）は、両方の耳の平均強度に相当する；データは、平均値（水平線）±ＳＥＭとしても示される。ＭＣ９０３＋ＭＯＲ０３２０７に対する統計学的有意差は、ＡＮＯＶＡおよびダネットの多重比較検定：＊ｐ＜０．０５；＊＊ｐ＜０．０１；＊＊＊ｐ＜０．００１を使用して算出した。ＤＥＸ：デキサメタゾン；ＥｔＯＨ：エタノール。
【図７】図７において、ＭＡＢ＃１の治療的投与は、耳の皮膚へのＭＣ９０３の局所投与によって誘発される表皮および真皮皮膚層の肥厚を用量依存的に低下させる。データは、それぞれのデータ点（ｎ＝１０／群）および平均値（水平線）±ＳＥＭとして表す。ＭＣ９０３＋ＭＯＲ０３２０７に対する統計学的有意差は、ＡＮＯＶＡおよびダネットの多重比較検定：＊ｐ＜０．０５；＊＊ｐ＜０．０１；＊＊＊ｐ＜０．００１を使用して算出した。左パネル：表皮厚さについてのデータ；右パネル：真皮厚さについてのデータ。ＤＥＸ：デキサメタゾン；ＥｔＯＨ：エタノール。
【図８】図８において、ＭＡＢ＃１の治療的投与は、好酸球、Ｔ細胞、およびマスト細胞の真皮浸潤を用量依存的に低下させる。データは、それぞれのデータ点（ｎ＝１０／群）および平均値（水平線）±ＳＥＭとして表す。ＭＣ９０３＋ＭＯＲ０３２０７に対する統計学的有意差は、ＡＮＯＶＡおよびダネットの多重比較検定：＊ｐ＜０．０５；＊＊ｐ＜０．０１；＊＊＊ｐ＜０．００１を使用して算出した。左上パネル：好酸球についてのデータ；右上パネル：マスト細胞についてのデータ；左下パネル：Ｔ細胞についてのデータ。ＤＥＸ：デキサメタゾン；ＥｔＯＨ：エタノール。
【図９】図９において、ＭＡＢ＃１の治療的投与は、１６日目（ＭＣ９０３適用を停止した１１日後）でも依然として増大していたＩＬ−３３、ＩＬ−４、およびＳ１００Ａ９の発現を低下させる。データは、それぞれのデータ点（ｎ＝１０／群）および平均値（水平線）±ＳＥＭとして表す。ＭＣ９０３＋ＭＯＲ０３２０７に対する統計学的有意差は、ＡＮＯＶＡおよびダネットの多重比較検定：＊ｐ＜０．０５；＊＊ｐ＜０．０１；＊＊＊ｐ＜０．００１を使用して算出した。左上パネル：耳におけるＳ１００Ａ９  ｍＲＮＡ発現についてのデータ；左下パネル：耳におけるＩＬ−４  ｍＲＮＡ発現についてのデータ；右上パネル：耳におけるＩＬ−３３タンパク質レベルについてのデータ。
【図１０】図１０において、ＭＡＢ＃１は、自然発生＆慢性フレーキーテイル（Ｆｌａｋｙ  Ｔａｉｌ）モデルにおけるＡＤ様炎症の肉眼的臨床徴候を軽減する。各マウスについての皮膚炎症の臨床的スコア付けを、治療の開始時（０週目）に、また治療の最後（６週目）に行った。データは、各治療群（ｎ＝８／群）についての平均±ＳＤである。アイソタイプ抗体で治療された群に対する統計学的有意差は、ＡＮＯＶＡおよびダネットの多重比較検定（＊ｐ＜０．０５；＊＊ｐ＜０．０１；＊＊＊ｐ＜０．００１）を使用して算出した。
【図１１】図１１において、ＭＡＢ＃１は、自然発生＆慢性フレーキーテイルモデルにおける湿疹様の眼瞼炎症を軽減する。皮膚の眼瞼炎症は、治療の最後（６週目）にスコア付けした。データは、各治療群（ｎ＝８／群）についての平均±ＳＤである。アイソタイプ抗体で治療された群に対する統計学的有意差は、ＡＮＯＶＡおよびダネットの多重比較検定（＊ｐ＜０．０５；＊＊ｐ＜０．０１；＊＊＊ｐ＜０．００１）を使用して算出した。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
本開示は、ヒトＩＬ−１７Ｃを認識する、いくつかの抗体または抗体断片に関する。
【００２０】
定義：
用語「ＩＬ−１７Ｃ」は、インターロイキン１７Ｃとして公知のタンパク質を指す。
【００２１】
ヒトＩＬ−１７Ｃは、（ＵｎｉＰｒｏｔ  Ｑ９Ｐ０Ｍ４）：
2019511910.tif 000003
のアミノ酸配列を有する。
【００２２】
マウスＩＬ−１７Ｃは、（ＵｎｉＰｒｏｔ  Ｑ８Ｋ４Ｃ５）：
2019511910.tif 000004
のアミノ酸配列を有する。
【００２３】
カニクイザルＬ−１７Ｃは、（ＸＰ＿００５５９２８２５．１）：
2019511910.tif 000005
のアミノ酸配列を有する。
【００２４】
用語「ＩＬ１７ＲＡ」は、インターロイキン１７受容体Ａとして公知のタンパク質を指す。ヒトＩＬ１７ＲＡは、（ＵｎｉＰｒｏｔ  Ｑ９６Ｆ４６）：
2019511910.tif 000006
のアミノ酸配列を有する。
【００２５】
用語「ＩＬ１７ＲＥ」は、インターロイキン１７受容体Ｅとして公知のタンパク質を指す。ヒトＩＬ１７ＲＥは、（ＵｎｉＰｒｏｔ  Ｑ８ＮＦＲ９）：
2019511910.tif 000007
のアミノ酸配列を有する。
【００２６】
マウスＩＬ１７ＲＥは、（ＵｎｉＰｒｏｔ  Ｑ８ＢＨ０６）：
2019511910.tif 000008
のアミノ酸配列を有する。
【００２７】
用語「ＩＬ−１７Ｃのアンタゴニスト」および「ＩＬ−１７Ｃアンタゴニスト」は、本明細書で交換可能に使用され、ＩＬ−１７Ｃの活性または機能を阻害する、あらゆる分子を指す。用語「ＩＬ−１７Ｃアンタゴニスト」としては、限定はされないが、ＩＬ−１７Ｃに特異的に結合する抗体または抗体断片が挙げられる。好ましくは、本開示におけるＩＬ−１７Ｃアンタゴニストは、ヒトＩＬ−１７Ｃに特異的な抗体である。こうした抗体は、マウス、ラット、キメラ、ヒト化、またはヒト抗体などの、あらゆる種のものであり得る。
【００２８】
本明細書で使用する場合の用語「抗体」は、抗原と相互作用する、ジスルフィド結合によって相互連結された少なくとも２つの重（Ｈ）鎖および２つの軽（Ｌ）鎖を含むタンパク質を指す。各重鎖は、重鎖可変領域（本明細書ではＶＨと省略される）および重鎖定常領域から構成される。重鎖定常領域は、３つのドメイン、ＣＨ１、ＣＨ２、およびＣＨ３から構成される。各軽鎖は、軽鎖可変領域（本明細書ではＶＬと省略される）および軽鎖定常領域から構成される。軽鎖定常領域は、１つのドメイン、ＣＬから構成される。ＶＨおよびＶＬ領域は、より保存される領域（フレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれる）が散在する、相補性決定領域（ＣＤＲ）と呼ばれる高頻度可変性（ｈｙｐｅｒｖａｒｉａｂｉｌｉｔｙ）の領域に、さらに細かく分けることができる。各ＶＨおよびＶＬは、アミノ末端からカルボキシ末端まで次の順序：ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、およびＦＲ４で配列される、３つのＣＤＲおよび４つのＦＲからなる。重鎖および軽鎖の可変領域は、抗原と相互作用する結合ドメインを含有する。抗体の定常領域は、免疫グロブリンと、宿主組織または因子（免疫系の種々の細胞（例えばエフェクター細胞）が含まれる）および古典的補体系の第１成分（Ｃｌｑ）との結合を媒介することができる。用語「抗体」には、例えば、モノクローナル抗体、ヒト抗体、ヒト化抗体、ラクダ化（ｃａｍｅｌｉｓｅｄ）抗体、およびキメラ抗体が含まれる。抗体は、あらゆるアイソタイプ（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡ、およびＩｇＹ）、クラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１、およびＩｇＡ２）、またはサブクラスのものであり得る。軽鎖も重鎖も、構造および機能的に相同な領域に分けられる。
【００２９】
語句「抗体断片」は、本明細書で使用する場合、抗原と（例えば、結合、立体障害、空間分布の安定化によって）特異的に相互作用する能力を保持する、抗体の１つ以上の部分を指す。結合断片の例としては、限定はされないが、Ｆａｂ断片、すなわち、ＶＬ、ＶＨ、ＣＬ、およびＣＨ１ドメインからなる一価の断片；Ｆ（ａｂ）２断片、すなわち、ヒンジ領域でのジスルフィド架橋によって連結された２つのＦａｂ断片を含む二価の断片；ＶＨおよびＣＨ１ドメインからなるＦｄ断片；抗体の単一のアームのＶＬおよびＶＨドメインからなるＦｖ断片；ＶＨドメインからなるｄＡｂ断片（Ｗａｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８９）Ｎａｔｕｒｅ  ３４１：５４４−５４６）；ならびに単離された相補性決定領域（ＣＤＲ）が挙げられる。さらに、Ｆｖ断片の２つのドメイン、ＶＬおよびＶＨは、別の遺伝子によってコードされるが、これらが単一のタンパク質鎖（ここでは、ＶＬ領域およびＶＨ領域が対合して、一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）として公知の一価の分子を形成する）としてふるまうことを可能にする合成のリンカーによって、組換え方法を使用して、これらを連結することができる；例えば、Ｂｉｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８８）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４２：４２３−４２６；およびＨｕｓｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８８）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．８５：５８７９−５８８３）を参照のこと。こうした一本鎖抗体も、用語「抗体断片」内に包含されることが意図される。これらの抗体断片は、当業者に公知の従来の技術を使用して得られ、これらの断片は、インタクトな抗体と同じ方式で、有用性についてスクリーニングされる。抗体断片はまた、単一ドメイン抗体、マキシ抗体（ｍａｘｉｂｏｄｙ）、ミニ抗体（ｍｉｎｉｂｏｄｙ）、細胞内抗体、二重特異性抗体、三重特異性抗体、四重特異性抗体、ｖ−ＮＡＲ、およびｂｉｓ−ｓｃＦｖに組み込むこともできる（例えば、Ｈｏｌｌｉｎｇｅｒ  ａｎｄ  Ｈｕｄｓｏｎ，（２００５）Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ２３：１１２６−１１３６を参照のこと）。抗体断片は、フィブロネクチンＩＩＩ型（Ｆｎ３）などの、ポリペプチドをベースにする骨格に繋ぎ合わせることができる（フィブロネクチンポリペプチドモノボディ（ｍｏｎｏｂｏｄｙ）を記載している米国特許第６，７０３，１９９号明細書を参照のこと）。抗体断片は、相補的な軽鎖ポリペプチドと共に一対の抗原結合部位を形成する、一対のタンデムＦｖセグメント（ＶＨ−ＣＨ１−ＶＨ−ＣＨ１）を含む一本鎖分子に組み込むことができる（Ｚａｐａｔａ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９５）Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇ．８：１０５７−１０６２；および米国特許第５，６４１，８７０号明細書）。
【００３０】
「ヒト抗体」または「ヒト抗体断片」には、本明細書で使用する場合、フレームワークもＣＤＲ領域もヒト起源の配列に由来する可変領域を有する抗体および抗体断片が含まれる。さらに、抗体が定常領域を含有する場合、定常領域も、こうした配列に由来する。ヒト起源には、例えば、ヒト生殖細胞系列配列もしくは変異型のヒト生殖細胞系列配列、または、ヒトフレームワーク配列分析から得られるコンセンサスフレームワーク配列を含有する抗体（例えば、Ｋｎａｐｐｉｋ  ｅｔ  ａｌ．，（２０００）Ｊ  Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ  ２９６：５７−８６に記載されている通り）が含まれる。
【００３１】
免疫グロブリン可変ドメイン、例えばＣＤＲの構造および位置は、周知のナンバリングスキーム、例えばＫａｂａｔナンバリングスキーム、Ｃｈｏｔｈｉａナンバリングスキーム、またはＫａｂａｔとＣｈｏｔｈｉａの組み合わせを使用して定義することができる（例えば、Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  Ｈｕｍａｎ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ（１９９１），ｅｄｓ．Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．；Ｌａｚｉｋａｎｉ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９７）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏ．２７３：９２７−９４８）；Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９１）Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ  ｅｄｉｔ．，ＮＩＨ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ  ｎｏ．９１−３２４２  Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  Ｈｕｍａｎ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ；Ｃｈｏｔｈｉａ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８７）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１−９１７；Ｃｈｏｔｈｉａ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８９）Ｎａｔｕｒｅ  ３４２：８７７−８８３；およびＡｌ−Ｌａｚｉｋａｎｉ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９７）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２７３：９２７−９４８を参照のこと）。
【００３２】
「ヒト化抗体」または「ヒト化抗体断片」は、本明細書では、ヒト起源の配列に由来する定常の抗体領域と、可変の抗体領域またはその一部とを有する、またはＣＤＲのみが別の種に由来する抗体分子と定義される。例えば、ヒト化抗体は、ＣＤＲグラフトすることができ、ここでは、可変ドメインのＣＤＲは、非ヒト起源由来であるのに対して、可変ドメインの１つ以上のフレームワークは、ヒト起源のものであり、定常ドメイン（もしあれば）は、ヒト起源のものである。
【００３３】
用語「キメラ抗体」または「キメラ抗体断片」は、本明細書では、ある種に見られる配列に由来する、または相当する定常の抗体領域と、別の種に由来する可変抗体領域とを有する抗体分子と定義される。好ましくは、定常の抗体領域は、ヒトに見られる配列に由来し、または相当し、可変の抗体領域（例えばＶＨ、ＶＬ、ＣＤＲ、またはＦＲ領域）は、非ヒト動物、例えばマウス、ラット、ウサギ、またはハムスターに見られる配列に由来する。
【００３４】
用語「単離された」は、例えば、異なる抗原特異性を有する他の抗体または抗体断片を実質的に含まない抗体または抗体断片であり得る化合物を指す。さらに、単離された抗体または抗体断片は、他の細胞材料および／または化学物質を実質的に含まない可能性がある。したがって、いくつかの態様では、提供される抗体は、異なる特異性をもつ抗体から分離されている、単離された抗体である。単離された抗体は、モノクローナル抗体であり得る。単離された抗体は、組換えモノクローナル抗体であり得る。しかし、例えば他の種（例えば、種の相同体）由来の、エピトープ、アイソフォーム、または標的のバリアントに特異的に結合する、単離された抗体は、他の関連抗原との交差反応性を有することができる。
【００３５】
用語「組換え抗体」には、本明細書で使用する場合、自然界には存在しない手段によって調製、発現、作製、または分離される、すべての抗体が含まれる。例えば、その抗体を発現するように形質転換された宿主細胞から単離された抗体、組換え型のコンビナトリアルヒト抗体ライブラリから選択および単離された抗体、いずれかの他の手段（ヒト免疫グロブリン遺伝子、他のＤＮＡ配列に対する配列のすべてまたは一部のスプライシングを含む）によって調製、発現、作製、または分離された抗体、または動物（例えばマウス）から単離された抗体（ヒト免疫グロブリン遺伝子に対してトランスジェニックまたは染色体導入的（ｔｒａｎｓｃｈｒｏｍｏｓｏｍａｌ）である）、またはそこから調製されたハイブリドーマ。好ましくは、こうした組換え抗体は、フレームワークおよびＣＤＲ領域がヒト生殖細胞系列免疫グロブリン配列に由来する可変領域を有する。しかし、ある種の実施形態では、こうした組換えヒト抗体を、インビトロ変異誘発（または、ヒトＩｇ配列に対してトランスジェニックな動物が使用される場合には、インビボ体細胞変異誘発）にかけることができ、したがって、組換え抗体のＶＨおよびＶＬ領域のアミノ酸配列は、ヒト生殖細胞系列ＶＨおよびＶＬ配列に由来するおよび関連するが、インビボのヒト抗体生殖細胞系列レパートリー内に天然には存在しない可能性がある配列である。組換え抗体は、モノクローナル抗体であり得る。一実施形態では、本明細書に開示した抗体および抗体断片は、どちらも参照によって本明細書に組み込まれる米国特許出願第１３／３２１，５６４号明細書または米国特許出願第１３／２９９，３６７号明細書に開示されている通りのＹｌａｎｔｈｉａ（登録商標）抗体ライブラリから単離される。
【００３６】
本明細書で使用する場合の用語「モノクローナル抗体」は、単一分子組成の抗体分子の調製を指す。モノクローナル抗体組成物は、特定のエピトープに特有の結合特異性および親和性を有する特有の結合部位を示す。
【００３７】
本明細書で使用する場合、用語「〜に特異的に結合する」、「特異的に〜に結合する」、「〜に対して／〜に特異的である」、または「特異的に〜を認識する」などは、生体分子を含めた分子の不均一集団の存在下で標的の存在を決定するものである、標的と抗体または抗体断片との間の結合などの、測定可能かつ再現可能な相互作用を指す。例えば、特異的に標的（これは抗原または抗原のエピトープであり得る）に結合する抗体または抗体断片は、これが他の標的に結合するよりも大きな親和性で、アビディティで、より即座に、および／またはより長期間、この標的と結合する抗体または抗体断片である。ある種の実施形態では、抗体または抗体断片は、特異的に、異なる種由来のタンパク質間で保存されるタンパク質上のエピトープに結合する。別の実施形態では、特異的結合は、排他的結合を含むことができるが、必要ではない。本明細書に開示した抗体または抗体断片は、特異的に、ヒトＩＬ−１７Ｃに結合する。好ましくは、ヒトＩＬ−１７Ｃに特異的な開示した抗体または抗体断片は、特異的に、マウス、ラット、アカゲザル、および／またはカニクイザル由来のＩＬ−１７Ｃなどの、別の種のＩＬ−１７Ｃに結合する。本明細書に開示したさらにいっそう好ましい抗体または抗体断片は、ヒトＩＬ−１７Ｃ、カニクイザルＩＬ−１７Ｃ、およびマウスＩＬ−１７Ｃに特異的である。２つの分子が特異的に結合するかどうかを決定するための方法は、当技術分野で周知であり、例えば、標準のＥＬＩＳＡアッセイが挙げられる。スコア付けは、標準の顕色（例えば、西洋ワサビペルオキシド（ｈｏｒｓｅｒａｄｉｓｈ  ｐｅｒｏｘｉｄｅ）を伴う二次抗体および過酸化水素を伴うテトラメチルベンジジン）によって実施することができる。ある種のウェルにおける反応を、例えば４５０ｎｍで、光学密度によってスコア付けする。典型的なバックグラウンド（＝陰性反応）は、０．１ＯＤであり得；典型的な陽性反応は、１ＯＤであり得る。これは、陽性／陰性差が、５倍超であり得ることを意味する。一般的に、結合特異性の決定は、単一の基準抗原ではなく、一連の約３〜５種の無関係の抗原（粉乳、ＢＳＡ、トランスフェリンなど）を使用することによって実施される。
【００３８】
用語「アビディティ」は、タンパク質間の複数の結合相互作用の複合強度を説明するために使用される。アビディティは、単一の結合の強度を説明する親和性とは異なる。したがって、アビディティは、結合の合計ではなく、結合親和性（機能的親和性）の複合的な相乗的強度である。本開示の抗体を用いると、ＶＨ／ＶＬ対由来の抗原結合部位は両方とも、ＩＬ−１７Ｃと同時に相互作用する。それぞれの単一の結合相互作用は、（相対的親和性に応じて）容易に破壊することができるが、多くの結合相互作用が同時に存在するので、単一の部位の一過性の結合解除は、分子を拡散させず、その部位の結合は復活する可能性が高い。この全体的効果が、抗体への抗原の相乗的な強い結合である。
【００３９】
本明細書で使用する場合、用語「親和性」は、単一部位でのポリペプチドとその標的との間の相互作用の強さを指す。各部位内では、ポリペプチドの結合領域は、弱い非共有結合性の力を通じて、多数の部位で、その標的と相互作用する；相互作用が多いほど、親和性が強くなる。
【００４０】
用語「ＫＤ」は、本明細書で使用する場合、Ｋａに対するＫｄの比（すなわちＫｄ／Ｋａ）から得られ、モル濃度（Ｍ）として表される、解離定数を指す。例えばモノクローナル抗体のような抗原結合部分についてのＫＤ値は、当技術分野で十分に確立された方法を使用して決定することができる。例えばモノクローナル抗体のような抗原結合部分のＫＤを決定するための方法は、ＳＥＴ（溶液平衡抗体価測定（ｓｏｌｕｔｉｏｎ  ｅｑｕｉｌｉｂｒｉｕｍ  ｔｉｔｒａｔｉｏｎ））、または、Ｂｉａｃｏｒｅ（登録商標）システムなどのバイオセンサーシステムを使用する表面プラズモン共鳴である。本開示では、ＩＬ−１７Ｃに対して特異的な抗体は、一般的に、５×１０−２Ｍ未満、１０−２Ｍ未満、５×１０−３Ｍ未満、１０−３Ｍ未満、５×１０−４Ｍ未満、１０−４Ｍ未満、５×１０−５Ｍ未満、１０−５Ｍ未満、５×１０−６Ｍ未満、１０−６Ｍ未満、５×１０−７Ｍ未満、１０−７Ｍ未満、５×１０−８Ｍ未満、１０−８Ｍ未満、５×１０−９Ｍ未満、１０−９Ｍ未満、５×１０−１０Ｍ未満、１０−１０Ｍ未満、５×１０−１１Ｍ未満、１０−１１Ｍ未満、５×１０−１２Ｍ未満、１０−１２Ｍ未満、５×１０−１３Ｍ未満、１０−１３Ｍ未満、５×１０−１４Ｍ未満、１０−１４Ｍ未満、５×１０−１５Ｍ未満、または１０−１５Ｍ未満、またはそれよりも低い解離速度定数（ＫＤ）（ｋｏｆｆ／ｋｏｎ）を有する。
【００４１】
「交差競合する」は、抗体、抗体断片、または他の抗原結合部分が、標準の競合的結合アッセイにおいて、特異的な抗原への、他の抗体、抗体断片、または抗原結合部分の結合を妨げる能力を意味する。抗体、抗体断片、または他の抗原結合部分が、特異的な抗原への、別の抗体、抗体断片、または抗原結合部分の結合を妨げる能力または程度、したがって、これを本発明に従って交差競合すると言うことができるかどうかは、標準の競合結合アッセイを使用して決定することができる。ある適切なアッセイは、（例えば、ＢＩＡｃｏｒｅ  ３０００装置（Ｂｉａｃｏｒｅ，Ｕｐｐｓａｌａ，Ｓｗｅｄｅｎ）を使用することによる）Ｂｉａｃｏｒｅ技術（これは、表面プラズモン共鳴技術を使用して、相互作用の程度を測定することができる）の使用を含む。交差競合を測定するための別のアッセイは、ＥＬＩＳＡに基づく手法を使用する。その交差競合に基づく、「エピトープ結合」抗体のためのハイスループットなプロセスは、国際公開第２００３／４８７３１号パンフレットに記載されている。交差競合は、調査中の抗体または抗体断片が、表１に記載する抗体のうちの１つの、ＩＬ−１７Ｃへの結合を、６０％以上、具体的には７０％以上、より具体的には８０％以上低下させる場合に、また表１に記載する抗体のうちの１つが、前記抗体または抗体断片のＩＬ−１７Ｃへの結合を、６０％以上、具体的には７０％以上、より具体的には８０％以上低下させる場合に存在する。
【００４２】
用語「エピトープ」には、抗体またはその断片、またはＴ細胞受容体、またはある分子と相互作用するその他のものによって特異的に認識される、いずれかのタンパク質性領域が含まれる。一般に、エピトープは、アミノ酸または炭水化物または糖側鎖などの分子の、化学的に活性な表面集団（ｇｒｏｕｐｉｎｇ）のものであり、一般に、特異的な三次元構造特性、ならびに特異的な電荷特性を有することができる。当業者には理解されるであろう通り、実質的には、抗体が特異的に結合できるものは何でも、エピトープであり得る。
【００４３】
「〜と同じエピトープに結合する」は、抗体、抗体断片、または他の抗原結合部分が、特異的な抗原に結合する、かつ抗体を比較するための同じエピトープマッピング技術を使用する場合に、例示した抗体と同じエピトープに結合する能力を意味する。例示した抗体および他の抗体のエピトープは、エピトープマッピング技術を使用して決定することができる。エピトープマッピング技術は、当技術分野で周知である。例えば、立体構造的エピトープは、例えば水素／重水素交換、Ｘ線結晶学、および二次元核磁気共鳴によって、アミノ酸の空間構造を決定することによって容易に特定される。
【００４４】
本開示の組成物は、治療または予防用途のために使用することができる。したがって、本開示は、本明細書に開示した抗体（または機能性抗体断片）と、そのための薬学的に許容し得る担体または賦形剤とを含有する医薬組成物を含む。関連態様では、本開示は、炎症性疾患を治療するための方法を提供する。こうした方法は、本明細書で記載または企図される抗体（または機能性抗体断片）を含有する有効量の医薬組成物を、それを必要とする対象に投与するステップを含有する。
【００４５】
本開示は、開示した通りの治療有効量のＩＬ−１７Ｃ抗体の、こうした治療を必要とする対象への投与を含む、治療方法を提供する。「治療有効量」または「有効量」は、本明細書で使用する場合、所望の生物学的応答を誘発するのに必要なＩＬ−１７Ｃ抗体の量を指す。対象発明によれば、治療的有効量は、疾患を治療および／または予防するのに必要なＩＬ−１７Ｃ抗体の量である。
【００４６】
「対象」または「種」は、この文脈で使用される場合、マウスまたはラットなどのげっ歯類、およびカニクイザル（マカク・ファシキュラリス（Ｍａｃａｃａ  ｆａｓｃｉｃｕｌａｒｉｓ））、アカゲザル（マカク・ムラータ（Ｍａｃａｃａ  ｍｕｌａｔｔａ））、またはヒト（ホモ・サピエンス（Ｈｏｍｏ  ｓａｐｉｅｎｓ））などの霊長類を含めた、あらゆる哺乳類を指す。好ましくは、対象は、霊長類であり、最も好ましくはヒトである。
【００４７】
実施形態：
一実施形態では、本開示は、ＩＬ−１７Ｃに特異的な抗体または抗体断片において、
（ａ）配列番号７のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１領域、配列番号８のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２領域、配列番号９のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３領域、配列番号１３のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１領域、配列番号１４のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２領域、および配列番号１５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３領域、または
（ｂ）配列番号２０のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１領域、配列番号２１のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２領域、配列番号２２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３領域、配列番号２６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１領域、配列番号２７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２領域、および配列番号２８のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３領域
を含む、抗体または抗体断片を指す。
【００４８】
一実施形態では、本開示は、ＩＬ−１７Ｃに特異的な抗体または抗体断片において、
配列番号７のＨＣＤＲ１領域、配列番号８のＨＣＤＲ２領域、配列番号９のＨＣＤＲ３領域、配列番号１３のＬＣＤＲ１領域、配列番号１４のＬＣＤＲ２領域、および配列番号１５のＬＣＤＲ３領域、または
配列番号２０のＨＣＤＲ１領域、配列番号２１のＨＣＤＲ２領域、配列番号２２のＨＣＤＲ３領域、配列番号２６のＬＣＤＲ１領域、配列番号２７のＬＣＤＲ２領域、および配列番号２８のＬＣＤＲ３領域
を含む、抗体または抗体断片を指す。
【００４９】
別の実施形態では、本開示は、ＩＬ−１７Ｃに特異的な抗体または抗体断片において、
（ａ）配列番号１０のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１領域、配列番号１１のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２領域、配列番号１２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３領域、配列番号１３のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１領域、配列番号１４のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２領域、および配列番号１５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３領域、または
（ｂ）配列番号２３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１領域、配列番号２４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２領域、配列番号２５のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３領域、配列番号２６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１領域、配列番号２７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２領域、および配列番号２８のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３領域
を含む、抗体または抗体断片を指す。
【００５０】
さらなる実施形態では、本開示は、ＩＬ−１７Ｃに特異的な抗体または抗体断片において、
配列番号１０のＨＣＤＲ１領域、配列番号１１のＨＣＤＲ２領域、配列番号１２のＨＣＤＲ３領域、配列番号１３のＬＣＤＲ１領域、配列番号１４のＬＣＤＲ２領域、および配列番号１５のＬＣＤＲ３領域、または
配列番号２３のＨＣＤＲ１領域、配列番号２４のＨＣＤＲ２領域、配列番号２５のＨＣＤＲ３領域、配列番号２６のＬＣＤＲ１領域、配列番号２７のＬＣＤＲ２領域、および配列番号２８のＬＣＤＲ３領域
を含む、抗体または抗体断片を指す。
【００５１】
一実施形態では、本開示は、ＩＬ−１７Ｃに特異的な抗体または抗体断片において、
（ａ）配列番号７のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１領域、配列番号８のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２領域、配列番号９のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３領域、配列番号１３のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１領域、配列番号１４のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２領域、および配列番号１５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３領域、または
（ｂ）配列番号１０のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１領域、配列番号１１のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２領域、配列番号１２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３領域、配列番号１３のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１領域、配列番号１４のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２領域、および配列番号１５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３領域、または
（ｃ）配列番号２０のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１領域、配列番号２１のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２領域、配列番号２２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３領域、配列番号２６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１領域、配列番号２７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２領域、および配列番号２８のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３領域。
（ｄ）配列番号２３のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１領域、配列番号２４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２領域、配列番号２５のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３領域、配列番号２６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１領域、配列番号２７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２領域、および配列番号２８のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３領域
を含む、抗体または抗体断片を指す。
【００５２】
一実施形態では、本開示は、ＩＬ−１７Ｃに特異的な抗体または抗体断片において、
配列番号７のＨＣＤＲ１領域、配列番号８のＨＣＤＲ２領域、配列番号９のＨＣＤＲ３領域、配列番号１３のＬＣＤＲ１領域、配列番号１４のＬＣＤＲ２領域、および配列番号１５のＬＣＤＲ３領域、または
配列番号１０のＨＣＤＲ１領域、配列番号１１のＨＣＤＲ２領域、配列番号１２のＨＣＤＲ３領域、配列番号１３のＬＣＤＲ１領域、配列番号１４のＬＣＤＲ２領域、および配列番号１５のＬＣＤＲ３領域、または
配列番号２０のＨＣＤＲ１領域、配列番号２１のＨＣＤＲ２領域、配列番号２２のＨＣＤＲ３領域、配列番号２６のＬＣＤＲ１領域、配列番号２７のＬＣＤＲ２領域、および配列番号２８のＬＣＤＲ３領域、または
配列番号２３のＨＣＤＲ１領域、配列番号２４のＨＣＤＲ２領域、配列番号２５のＨＣＤＲ３領域、配列番号２６のＬＣＤＲ１領域、配列番号２７のＬＣＤＲ２領域、および配列番号２８のＬＣＤＲ３領域
を含む、抗体または抗体断片を指す。
【００５３】
本開示の別の実施形態では、抗体または抗体断片は、ヒトＩＬ−１７Ｃに特異的に結合する。
【００５４】
本開示の別の実施形態では、抗体または抗体断片は、モノクローナル抗体または抗体断片である。
【００５５】
本開示の別の実施形態では、抗体または抗体断片は、ヒト、ヒト化またはキメラ抗体または抗体断片である。本開示の別の実施形態では、抗体または抗体断片は、ＩｇＧアイソタイプのものである。別の実施形態では、抗体または抗体断片は、ＩｇＧ１である。
【００５６】
一実施形態では、本開示は、ＩＬ−１７Ｃに特異的な抗体または抗体断片において、
配列番号７のＨＣＤＲ１領域、配列番号８のＨＣＤＲ２領域、配列番号９のＨＣＤＲ３領域、配列番号１３のＬＣＤＲ１領域、配列番号１４のＬＣＤＲ２領域、および配列番号１５のＬＣＤＲ３領域を含み、かつ配列番号１７の重鎖または配列番号１６の軽鎖をさらに含む、または
配列番号１０のＨＣＤＲ１領域、配列番号１１のＨＣＤＲ２領域、配列番号１２のＨＣＤＲ３領域、配列番号１３のＬＣＤＲ１領域、配列番号１４のＬＣＤＲ２領域、および配列番号１５のＬＣＤＲ３領域を含み、かつ配列番号１７の重鎖または配列番号１６の軽鎖をさらに含む、または
配列番号２０のＨＣＤＲ１領域、配列番号２１のＨＣＤＲ２領域、配列番号２２のＨＣＤＲ３領域、配列番号２６のＬＣＤＲ１領域、配列番号２７のＬＣＤＲ２領域、および配列番号２８のＬＣＤＲ３領域を含み、かつ配列番号３０の重鎖または配列番号２９の軽鎖をさらに含む、または
配列番号２３のＨＣＤＲ１領域、配列番号２４のＨＣＤＲ２領域、配列番号２５のＨＣＤＲ３領域、配列番号２６のＬＣＤＲ１領域、配列番号２７のＬＣＤＲ２領域、および配列番号２８のＬＣＤＲ３領域を含み、かつ配列番号３０の重鎖または配列番号２９の軽鎖をさらに含む、
抗体または抗体断片を指す。
【００５７】
一実施形態では、本開示は、ＩＬ−１７Ｃに特異的な抗体または抗体断片において、配列番号１７の重鎖および配列番号１６の軽鎖を含む、抗体または抗体断片を指す。
【００５８】
一実施形態では、本開示は、ＩＬ−１７Ｃに特異的な抗体または抗体断片において、配列番号３０の重鎖および配列番号２９の軽鎖を含む、抗体または抗体断片を指す。
【００５９】
さらなる実施形態では、本開示は、ＩＬ−１７Ｃに特異的な抗体または抗体断片において、配列番号４３の重鎖および配列番号４２の軽鎖を含む、抗体または抗体断片を指す。
【００６０】
一実施形態では、本開示は、ＩＬ−１７Ｃに特異的な抗体または抗体断片において、配列番号５６の重鎖および配列番号５５の軽鎖を含む、抗体または抗体断片を指す。
【００６１】
本開示の別の実施形態では、抗体または抗体断片は、単離された抗体または抗体断片である。
【００６２】
本開示の別の実施形態では、抗体または抗体断片は、組換え抗体または抗体断片である。
【００６３】
一実施形態では、本開示は、ＩＬ−１７Ｃの望ましくない存在と関連する障害または状態の治療における使用のための、ＩＬ−１７Ｃに特異的な抗体または抗体断片を指す。
【００６４】
一実施形態では、本開示は、ＩＬ−１７Ｃに特異的な抗体または抗体断片において、
配列番号７のＨＣＤＲ１領域、配列番号８のＨＣＤＲ２領域、配列番号９のＨＣＤＲ３領域、配列番号１３のＬＣＤＲ１領域、配列番号１４のＬＣＤＲ２領域、および配列番号１５のＬＣＤＲ３領域、または
配列番号１０のＨＣＤＲ１領域、配列番号１１のＨＣＤＲ２領域、配列番号１２のＨＣＤＲ３領域、配列番号１３のＬＣＤＲ１領域、配列番号１４のＬＣＤＲ２領域、および配列番号１５のＬＣＤＲ３領域、または
配列番号２０のＨＣＤＲ１領域、配列番号２１のＨＣＤＲ２領域、配列番号２２のＨＣＤＲ３領域、配列番号２６のＬＣＤＲ１領域、配列番号２７のＬＣＤＲ２領域、および配列番号２８のＬＣＤＲ３領域、または
配列番号２３のＨＣＤＲ１領域、配列番号２４のＨＣＤＲ２領域、配列番号２５のＨＣＤＲ３領域、配列番号２６のＬＣＤＲ１領域、配列番号２７のＬＣＤＲ２領域、および配列番号２８のＬＣＤＲ３領域
を含む抗体または抗体断片をコードする核酸配列または複数の核酸配列を含む核酸組成物を指す。
【００６５】
別の実施形態では、本開示は、表１に開示した通りの抗体または抗体断片をコードする核酸配列または複数の核酸配列を含むベクターまたは複数のベクターを含む、ベクター組成物を指す。
【００６６】
一実施形態では、本開示は、表１に開示した通りの抗体または抗体断片をコードする核酸配列または複数の核酸配列を含むベクターまたは複数のベクターを含む、ベクター組成物を含む細胞を指す。
【００６７】
別の実施形態では、本開示は、表１に開示した通りの抗体または抗体断片と、薬学的に許容し得る担体または賦形剤とを含む医薬組成物を指す。
【００６８】
一実施形態では、ＩＬ−１７Ｃに特異的な前記抗体または抗体断片は、ＩＬ−１７Ｃの、ＩＬ−１７Ｃの受容体への結合をブロックする。さらなる実施形態では、ＩＬ−１７Ｃに特異的な前記抗体または抗体断片は、ＩＬ−１７Ｃの、ＩＬ−１７Ｃの受容体への結合をブロックし、ここで前記受容体はＩＬ１７ＲＥである。別の実施形態では、本開示は、ＩＬ−１７Ｃに特異的な抗体または抗体断片において、ＩＬ−１７Ｃの、ＩＬ１７ＲＥへの結合をブロックする、抗体または抗体断片を指す。別の実施形態では、前記抗体または抗体断片は、配列番号７のＨＣＤＲ１領域、配列番号８のＨＣＤＲ２領域、配列番号９のＨＣＤＲ３領域、配列番号１３のＬＣＤＲ１領域、配列番号１４のＬＣＤＲ２領域、および配列番号１５のＬＣＤＲ３領域、または
配列番号１０のＨＣＤＲ１領域、配列番号１１のＨＣＤＲ２領域、配列番号１２のＨＣＤＲ３領域、配列番号１３のＬＣＤＲ１領域、配列番号１４のＬＣＤＲ２領域、および配列番号１５のＬＣＤＲ３領域、または
配列番号２０のＨＣＤＲ１領域、配列番号２１のＨＣＤＲ２領域、配列番号２２のＨＣＤＲ３領域、配列番号２６のＬＣＤＲ１領域、配列番号２７のＬＣＤＲ２領域、および配列番号２８のＬＣＤＲ３領域、または
配列番号２３のＨＣＤＲ１領域、配列番号２４のＨＣＤＲ２領域、配列番号２５のＨＣＤＲ３領域、配列番号２６のＬＣＤＲ１領域、配列番号２７のＬＣＤＲ２領域、および配列番号２８のＬＣＤＲ３領域を含む。
【００６９】
別の実施形態では、前記抗体または抗体断片は、配列番号１７の重鎖および配列番号１６の軽鎖、または配列番号３０の重鎖および配列番号２９の軽鎖、または配列番号１７または３０の重鎖とのまたは配列番号１６または２９の軽鎖との少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する重鎖および軽鎖を含む。
【００７０】
別の実施形態では、本開示は、ＩＬ−１７Ｃに特異的な抗体または抗体断片において、ＩＬ−１７Ｃホモ二量体に二価結合して、前記抗体または抗体断片と１つのＩＬ−１７Ｃホモ二量体とからなる複合体を形成する、かつ、ＩＬ−１７Ｃの、ＩＬ１７ＲＥへの結合をブロックする、抗体または抗体断片を指す。
【００７１】
ある種の実施形態では、ＩＬ−１７Ｃに特異的な前記抗体または抗体断片は、ＩＬ−１７Ｃの、ＩＬ−１７Ｃの１つ以上の受容体への結合をブロックする。別の実施形態では、前記抗体または抗体断片は、配列番号７のＨＣＤＲ１領域、配列番号８のＨＣＤＲ２領域、配列番号９のＨＣＤＲ３領域、配列番号１３のＬＣＤＲ１領域、配列番号１４のＬＣＤＲ２領域、および配列番号１５のＬＣＤＲ３領域、または
配列番号１０のＨＣＤＲ１領域、配列番号１１のＨＣＤＲ２領域、配列番号１２のＨＣＤＲ３領域、配列番号１３のＬＣＤＲ１領域、配列番号１４のＬＣＤＲ２領域、および配列番号１５のＬＣＤＲ３領域、または
配列番号２０のＨＣＤＲ１領域、配列番号２１のＨＣＤＲ２領域、配列番号２２のＨＣＤＲ３領域、配列番号２６のＬＣＤＲ１領域、配列番号２７のＬＣＤＲ２領域、および配列番号２８のＬＣＤＲ３領域、または
配列番号２３のＨＣＤＲ１領域、配列番号２４のＨＣＤＲ２領域、配列番号２５のＨＣＤＲ３領域、配列番号２６のＬＣＤＲ１領域、配列番号２７のＬＣＤＲ２領域、および配列番号２８のＬＣＤＲ３領域を含む。
【００７２】
別の実施形態では、前記抗体または抗体断片は、配列番号１７の重鎖および配列番号１６の軽鎖、または配列番号３０の重鎖および配列番号２９の軽鎖、または配列番号１７または３０の重鎖とのまたは配列番号１６または２９の軽鎖との少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する重鎖および軽鎖を含む。
【００７３】
代替実施形態では、ＩＬ−１７Ｃの受容体に特異的な前記抗体または抗体断片は、ＩＬ−１７Ｃの、ＩＬ−１７Ｃの受容体（ここでは、ＩＬ−１７Ｃの受容体には、ＩＬ１７ＲＥおよびＩＬ１７ＲＡが含まれる）への結合をブロックする。代替実施形態では、ＩＬ−１７Ｃの受容体に特異的な前記抗体または抗体断片は、ＩＬ−１７Ｃの、ＩＬ１７ＲＥおよびＩＬ１７ＲＡへの結合をブロックする。ある種の実施形態では、ＩＬ−１７Ｃに特異的な前記抗体または抗体断片は、１００ｎＭ、９０ｎＭ、８０ｎＭ、７０ｎＭ、６０ｎＭ、５０ｎＭ、４０ｎＭ、３０ｎＭ、２０ｎＭ、１０ｎＭ、９ｎＭ、８ｎＭ、７ｎＭ、６ｎＭ、５ｎＭ、４ｎＭ、３ｎＭ、２ｎＭ、１ｎＭ、１００ｐＭ、９０ｐＭ、８０ｐＭ、７０ｐＭ、６０ｐＭ、５０ｐＭ、４０ｐＭ、３０ｐＭ、２０ｐＭ、１０ｐＭ、９ｐＭ、８ｐＭ、７ｐＭ、６ｐＭ、５ｐＭ、４ｐＭ、３ｐＭ、２ｐＭ、または１ｐＭ未満のＩＣ５０濃度で、ＩＬ−１７Ｃの、ＩＬ１７ＲＥへの結合をブロックする。ある種の態様では、ＩＣ５０濃度は、ＥＬＩＳＡ；ＳＥＴ、ＦＡＣＳ、またはＭＳＤ（Ｍｅｓｏ  Ｓｃａｌｅ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ）によって決定することができる。別の態様では、ＩＣ５０濃度は、本明細書で実施例３に記載する通りの方法によって決定することができる。別の実施形態では、前記抗体または抗体断片は、配列番号１７の重鎖および配列番号１６の軽鎖、または配列番号３０の重鎖および配列番号２９の軽鎖、または配列番号１７または３０の重鎖とのまたは配列番号１６または２９の軽鎖との少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する重鎖および軽鎖を含む。
【００７４】
一実施形態では、開示した抗体または抗体断片は、ヒトＩＬ−１７Ｃに特異的である。さらなる実施形態では、ＩＬ−１７Ｃに特異的な、開示した抗体または抗体断片は、マウス、ラット、アカゲザル、および／またはカニクイザル由来のＩＬ−１７Ｃなどの、別の種のＩＬ−１７Ｃと交差反応性である。別の実施形態では、抗体または抗体断片は、ヒトＩＬ−１７Ｃ、カニクイザルＩＬ−１７Ｃ、およびマウスＩＬ−１７Ｃに特異的である。さらなる実施形態では、抗体または抗体断片は、ヒトＩＬ−１７Ｃ、カニクイザルＩＬ−１７Ｃ、およびマウスＩＬ−１７Ｃに特異的である。別の実施形態では、抗体または抗体断片は、ヒトＩＬ−１７Ｃ、カニクイザルＩＬ−１７Ｃ、およびマウスＩＬ−１７Ｃに特異的であり、ここでは、前記抗体または抗体断片は、
配列番号７のＨＣＤＲ１領域、配列番号８のＨＣＤＲ２領域、配列番号９のＨＣＤＲ３領域、配列番号１３のＬＣＤＲ１領域、配列番号１４のＬＣＤＲ２領域、および配列番号１５のＬＣＤＲ３領域、または
配列番号１０のＨＣＤＲ１領域、配列番号１１のＨＣＤＲ２領域、配列番号１２のＨＣＤＲ３領域、配列番号１３のＬＣＤＲ１領域、配列番号１４のＬＣＤＲ２領域、および配列番号１５のＬＣＤＲ３領域、または
配列番号２０のＨＣＤＲ１領域、配列番号２１のＨＣＤＲ２領域、配列番号２２のＨＣＤＲ３領域、配列番号２６のＬＣＤＲ１領域、配列番号２７のＬＣＤＲ２領域、および配列番号２８のＬＣＤＲ３領域、または
配列番号２３のＨＣＤＲ１領域、配列番号２４のＨＣＤＲ２領域、配列番号２５のＨＣＤＲ３領域、配列番号２６のＬＣＤＲ１領域、配列番号２７のＬＣＤＲ２領域、および配列番号２８のＬＣＤＲ３領域
を含む。別の実施形態では、前記抗体または抗体断片は、配列番号１７の重鎖および配列番号１６の軽鎖、または配列番号３０の重鎖および配列番号２９の軽鎖、または配列番号１７または３０の重鎖とのまたは配列番号１６または２９の軽鎖との少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する重鎖および軽鎖を含む。
【００７５】
さらに別の実施形態では、開示した抗体または抗体断片は、ヒトＩＬ−１７Ｃ、カニクイザルＩＬ−１７Ｃ、およびマウスＩＬ−１７Ｃに特異的に結合し、かつヒトＩＬ−１７Ｃ、カニクイザルＩＬ−１７Ｃ、およびマウスＩＬ−１７Ｃの、その特異的な受容体ＩＬ１７ＲＥへの結合を、１００ｎＭ、９０ｎＭ、８０ｎＭ、７０ｎＭ、６０ｎＭ、５０ｎＭ、４０ｎＭ、３０ｎＭ、２０ｎＭ、１０ｎＭ、９ｎＭ、８ｎＭ、７ｎＭ、６ｎＭ、５ｎＭ、４ｎＭ、３ｎＭ、２ｎＭ、１ｎＭ、１００ｐＭ、９０ｐＭ、８０ｐＭ、７０ｐＭ、６０ｐＭ、５０ｐＭ、４０ｐＭ、３０ｐＭ、２０ｐＭ、１０ｐＭ、９ｐＭ、８ｐＭ、７ｐＭ、６ｐＭ、５ｐＭ、４ｐＭ、３ｐＭ、２ｐＭ、または１ｐＭ未満のＩＣ５０濃度でブロックする。別の態様では、前記抗体は、ＩｇＧ１型である。別の実施形態では、前記ＩＣ５０濃度は、本明細書で実施例３に記載する通りの受容体阻害アッセイ（Ｒｅｃｅｐｔｏｒ  Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  Ａｓｓａｙ）において決定される。
【００７６】
さらに別の実施形態では、開示した抗体または抗体断片は、ヒトＩＬ−１７Ｃに特異的に結合し、かつヒトＩＬ−１７Ｃの、ヒトＩＬ１７ＲＥへの結合を、１００ｎＭ、９０ｎＭ、８０ｎＭ、７０ｎＭ、６０ｎＭ、５０ｎＭ、４０ｎＭ、３０ｎＭ、２０ｎＭ、１０ｎＭ、９ｎＭ、８ｎＭ、７ｎＭ、６ｎＭ、５ｎＭ、４ｎＭ、３ｎＭ、２ｎＭ、１ｎＭ、１００ｐＭ、９０ｐＭ、８０ｐＭ、７０ｐＭ、６０ｐＭ、５０ｐＭ、４０ｐＭ、３０ｐＭ、２０ｐＭ、１０ｐＭ、９ｐＭ、８ｐＭ、７ｐＭ、６ｐＭ、５ｐＭ、４ｐＭ、３ｐＭ、２ｐＭ、または１ｐＭ未満のＩＣ５０濃度でブロックする。別の態様では、前記抗体は、ＩｇＧ１型である。別の実施形態では、前記ＩＣ５０濃度は、本明細書で実施例３に記載する通りの受容体阻害アッセイにおいて決定される。
【００７７】
さらに別の実施形態では、開示した抗体または抗体断片は、カニクイザルＩＬ−１７Ｃに特異的に結合し、かつカニクイザルＩＬ−１７Ｃの、カニクイザルＩＬ１７ＲＥへの結合を、１００ｎＭ、９０ｎＭ、８０ｎＭ、７０ｎＭ、６０ｎＭ、５０ｎＭ、４０ｎＭ、３０ｎＭ、２０ｎＭ、１０ｎＭ、９ｎＭ、８ｎＭ、７ｎＭ、６ｎＭ、５ｎＭ、４ｎＭ、３ｎＭ、２ｎＭ、１ｎＭ、１００ｐＭ、９０ｐＭ、８０ｐＭ、７０ｐＭ、６０ｐＭ、５０ｐＭ、４０ｐＭ、３０ｐＭ、２０ｐＭ、１０ｐＭ、９ｐＭ、８ｐＭ、７ｐＭ、６ｐＭ、５ｐＭ、４ｐＭ、３ｐＭ、２ｐＭ、または１ｐＭ未満のＩＣ５０濃度でブロックする。別の態様では、前記抗体は、ＩｇＧ１型である。別の実施形態では、前記ＩＣ５０濃度は、本明細書で実施例３に記載する通りの受容体阻害アッセイにおいて決定される。
【００７８】
さらに別の実施形態では、開示した抗体または抗体断片は、ヒトＩＬ−１７Ｃ、カニクイザルＩＬ−１７Ｃ、およびマウスＩＬ−１７Ｃに特異的に結合し、かつヒトＩＬ−１７Ｃ、カニクイザルＩＬ−１７Ｃ、およびマウスＩＬ−１７Ｃの、それぞれヒトＩＬ１７ＲＥ、カニクイザルＩＬ１７ＲＥ、およびマウスＩＬ１７ＲＥへの結合を、それぞれ１００ｎＭ、９０ｎＭ、８０ｎＭ、７０ｎＭ、６０ｎＭ、５０ｎＭ、４０ｎＭ、３０ｎＭ、２０ｎＭ、１０ｎＭ、９ｎＭ、８ｎＭ、７ｎＭ、６ｎＭ、５ｎＭ、４ｎＭ、３ｎＭ、２ｎＭ、１ｎＭ、１００ｐＭ、９０ｐＭ、８０ｐＭ、７０ｐＭ、６０ｐＭ、５０ｐＭ、４０ｐＭ、３０ｐＭ、２０ｐＭ、１０ｐＭ、９ｐＭ、８ｐＭ、７ｐＭ、６ｐＭ、５ｐＭ、４ｐＭ、３ｐＭ、２ｐＭ、または１ｐＭ未満のＩＣ５０濃度でブロックする。好ましい実施形態では、前記抗体または抗体断片は、
配列番号７のＨＣＤＲ１領域、配列番号８のＨＣＤＲ２領域、配列番号９のＨＣＤＲ３領域、配列番号１３のＬＣＤＲ１領域、配列番号１４のＬＣＤＲ２領域、および配列番号１５のＬＣＤＲ３領域、または
配列番号１０のＨＣＤＲ１領域、配列番号１１のＨＣＤＲ２領域、配列番号１２のＨＣＤＲ３領域、配列番号１３のＬＣＤＲ１領域、配列番号１４のＬＣＤＲ２領域、および配列番号１５のＬＣＤＲ３領域、または
配列番号２０のＨＣＤＲ１領域、配列番号２１のＨＣＤＲ２領域、配列番号２２のＨＣＤＲ３領域、配列番号２６のＬＣＤＲ１領域、配列番号２７のＬＣＤＲ２領域、および配列番号２８のＬＣＤＲ３領域、または
配列番号２３のＨＣＤＲ１領域、配列番号２４のＨＣＤＲ２領域、配列番号２５のＨＣＤＲ３領域、配列番号２６のＬＣＤＲ１領域、配列番号２７のＬＣＤＲ２領域、および配列番号２８のＬＣＤＲ３領域
を含む。別の実施形態では、前記抗体または抗体断片は、配列番号１７の重鎖および配列番号１６の軽鎖、または配列番号３０の重鎖および配列番号２９の軽鎖、または配列番号１７または３０の重鎖とのまたは配列番号１６または２９の軽鎖との少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する重鎖および軽鎖を含む。別の態様では、前記抗体は、ＩｇＧ１型である。別の実施形態では、前記ＩＣ５０濃度は、本明細書で実施例３に記載する通りの受容体阻害アッセイにおいて決定される。
【００７９】
さらに別の実施形態では、開示した抗体または抗体断片は、１００ｐＭ、９０ｐＭ、８０ｐＭ、７０ｐＭ、６０ｐＭ、５０ｐＭ、４０ｐＭ、３０ｐＭ、２０ｐＭ、１０ｐＭ、９ｐＭ、８ｐＭ、７ｐＭ、６ｐＭ、５ｐＭ、４ｐＭ、３ｐＭ、２ｐＭ、または１ｐＭ未満のＩＣ５０濃度で、ヒトＩＬ−１７Ｃ、カニクイザルＩＬ−１７Ｃ、およびマウスＩＬ−１７Ｃによって駆動されるＮＩＨ３Ｔ３細胞におけるＮＦ−κＢレポーター遺伝子の活性化を阻害する。好ましい実施形態では、前記抗体または抗体断片は、
配列番号７のＨＣＤＲ１領域、配列番号８のＨＣＤＲ２領域、配列番号９のＨＣＤＲ３領域、配列番号１３のＬＣＤＲ１領域、配列番号１４のＬＣＤＲ２領域、および配列番号１５のＬＣＤＲ３領域、または
配列番号１０のＨＣＤＲ１領域、配列番号１１のＨＣＤＲ２領域、配列番号１２のＨＣＤＲ３領域、配列番号１３のＬＣＤＲ１領域、配列番号１４のＬＣＤＲ２領域、および配列番号１５のＬＣＤＲ３領域、または
配列番号２０のＨＣＤＲ１領域、配列番号２１のＨＣＤＲ２領域、配列番号２２のＨＣＤＲ３領域、配列番号２６のＬＣＤＲ１領域、配列番号２７のＬＣＤＲ２領域、および配列番号２８のＬＣＤＲ３領域、または
配列番号２３のＨＣＤＲ１領域、配列番号２４のＨＣＤＲ２領域、配列番号２５のＨＣＤＲ３領域、配列番号２６のＬＣＤＲ１領域、配列番号２７のＬＣＤＲ２領域、および配列番号２８のＬＣＤＲ３領域
を含む。別の実施形態では、前記抗体または抗体断片は、配列番号１７の重鎖および配列番号１６の軽鎖、または配列番号３０の重鎖および配列番号２９の軽鎖、または配列番号１７または３０の重鎖とのまたは配列番号１６または２９の軽鎖との少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する重鎖および軽鎖を含む。別の態様では、前記抗体は、ＩｇＧ１型である。別の実施形態では、前記ＩＣ５０濃度は、本明細書で実施例４に記載する通りのＩＬ−１７Ｃ駆動性のＮＦ−κＢレポーターアッセイにおいて決定される。
【００８０】
一実施形態では、開示した抗体または抗体断片は、配列番号１のアミノ酸配列によってコードされるヒトＩＬ−１７Ｃに特異的である。一実施形態では、開示した抗体または抗体断片は、配列番号１のアミノ酸配列を含むポリペプチドに特異的である。さらなる実施形態では、前記モノクローナル抗体または抗体断片は、配列番号１のアミノ酸配列からなるポリペプチドに特異的なモノクローナル抗体である。別の実施形態では、開示した抗体または抗体断片は、配列番号１のアミノ酸配列によってコードされるヒトＩＬ−１７Ｃに特異的であり、かつ、モノクローナル抗体または抗体断片である。
【００８１】
一実施形態では、ＩＬ−１７Ｃに特異的な、開示した抗体または抗体断片は、モノクローナル抗体または抗体断片である。
【００８２】
一実施形態では、ＩＬ−１７Ｃに特異的な、開示した抗体または抗体断片は、ヒト、ヒト化、またはキメラ抗体である。ある種の実施形態では、ＩＬ−１７Ｃに特異的な、前記抗体または抗体断片は、単離された抗体または抗体断片である。別の実施形態では、前記抗体または抗体断片は、組換え抗体または抗体断片である。さらなる実施形態では、前記抗体または抗体断片は、組換えヒト抗体または抗体断片である。さらなる実施形態では、前記組換えヒト抗体または抗体断片は、単離された組換えヒト抗体または抗体断片である。さらなる実施形態では、前記組換えヒト抗体または抗体断片または単離された組換えヒト抗体または抗体断片は、モノクローナルである。
【００８３】
別の実施形態では、開示された抗体または抗体断片は、配列番号１７の重鎖および配列番号１６の軽鎖、または配列番号３０の重鎖および配列番号２９の軽鎖、または配列番号１７または３０の重鎖とのまたは配列番号１６または２９の軽鎖との少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する重鎖および軽鎖を含む。
【００８４】
一実施形態では、開示した抗体または抗体断片は、ヒト重鎖定常領域およびヒト軽鎖定常領域を含む。さらなる実施形態では、前記ヒト重鎖定常領域が配列番号１７のアミノ酸配列を含み、かつヒト軽鎖定常領域が配列番号１６のアミノ酸配列を含む、または前記ヒト重鎖定常領域が配列番号３０のアミノ酸配列を含み、かつヒト軽鎖定常領域が配列番号２９のアミノ酸配列を含む。
【００８５】
一実施形態では、開示した抗体または抗体断片は、ＩｇＧアイソタイプのものである。別の実施形態では、前記抗体は、ＩｇＧ１である。
【００８６】
一実施形態では、前記抗体断片は、二価の抗体断片である。
【００８７】
別の実施形態では、本開示は、表１に記載する抗体と交差競合する抗体または抗体断片を指す。一実施形態では、本開示は、抗体または抗体断片において、表１における抗体のうちの１つの、Ｋａｂａｔによって定義される６つのＣＤＲを含む抗体または抗体断片と交差競合する、抗体または抗体断片を指す。別の実施形態では、本開示は、ヒトＩＬ−１７Ｃに特異的な抗体または抗体断片において、ＩＬ−１７Ｃホモ二量体に二価結合して、前記抗体または抗体断片と１つのＩＬ−１７Ｃホモ二量体とからなる複合体を形成する、かつ、表１における抗体のうちの１つの、Ｋａｂａｔによって定義される６つのＣＤＲを含む抗体または抗体断片と交差競合する、抗体または抗体断片を指す。
【００８８】
別の実施形態では、本開示は、抗体または抗体断片において、６つのＣＤＲ（ここでは、ＨＣＤＲ１は配列番号７のアミノ酸配列であり、ＨＣＤＲ２は配列番号８のアミノ酸配列であり、ＨＣＤＲ３は配列番号９のアミノ酸配列であり、ＬＣＤＲ１は配列番号１３のアミノ酸配列であり、ＬＣＤＲ２は配列番号１４のアミノ酸配列であり、ＬＣＤＲ３は配列番号１５のアミノ酸配列である）を含む抗体または抗体断片と交差競合する、抗体または抗体断片を指す。別の実施形態では、本開示は、抗体または抗体断片において、配列番号１７と一致するＶＨおよび配列番号１６と一致するＶＬを含む抗体または抗体断片と交差競合する、抗体または抗体断片を指す。
【００８９】
別の実施形態では、本開示は、抗体または抗体断片において、６つのＣＤＲ（ここでは、ＨＣＤＲ１は配列番号２０のアミノ酸配列であり、ＨＣＤＲ２は配列番号２１のアミノ酸配列であり、ＨＣＤＲ３は配列番号２２のアミノ酸配列であり、ＬＣＤＲ１は配列番号２６のアミノ酸配列であり、ＬＣＤＲ２は配列番号２７のアミノ酸配列であり、ＬＣＤＲ３は配列番号２８のアミノ酸配列である）を含む抗体または抗体断片と交差競合する、抗体または抗体断片を指す。別の実施形態では、本開示は、抗体または抗体断片において、配列番号３０と一致するＶＨおよび配列番号２９と一致するＶＬを含む抗体または抗体断片と交差競合する、抗体または抗体断片を指す。
【００９０】
別の実施形態では、本開示は、表１に記載する抗体と交差競合する抗体または抗体断片を指す。一実施形態では、本開示は、抗体または抗体断片において、表１における抗体のうちの１つの、Ｃｈｏｔｈｉａによって定義される６つのＣＤＲを含む抗体または抗体断片と交差競合する、抗体または抗体断片を指す。別の実施形態では、本開示は、ヒトＩＬ−１７Ｃに特異的な抗体または抗体断片において、ＩＬ−１７Ｃホモ二量体に二価結合して、前記抗体または抗体断片と１つのＩＬ−１７Ｃホモ二量体とからなる複合体を形成する、かつ、表１における抗体のうちの１つの、Ｃｈｏｔｈｉａによって定義される６つのＣＤＲを含む抗体または抗体断片と交差競合する、抗体または抗体断片を指す。
【００９１】
別の実施形態では、本開示は、抗体または抗体断片において、６つのＣＤＲ（ここでは、ＨＣＤＲ１は配列番号１０のアミノ酸配列であり、ＨＣＤＲ２は配列番号１１のアミノ酸配列であり、ＨＣＤＲ３は配列番号１２のアミノ酸配列であり、ＬＣＤＲ１は配列番号１３のアミノ酸配列であり、ＬＣＤＲ２は配列番号１４のアミノ酸配列であり、ＬＣＤＲ３は配列番号１５のアミノ酸配列である）を含む抗体または抗体断片と交差競合する、抗体または抗体断片を指す。別の実施形態では、本開示は、抗体または抗体断片において、配列番号１７と一致するＶＨおよび配列番号１８と一致するＶＬを含む抗体または抗体断片と交差競合する、抗体または抗体断片を指す。
【００９２】
別の実施形態では、本開示は、抗体または抗体断片において、６つのＣＤＲ（ここでは、ＨＣＤＲ１は配列番号２３のアミノ酸配列であり、ＨＣＤＲ２は配列番号２４のアミノ酸配列であり、ＨＣＤＲ３は配列番号２５のアミノ酸配列であり、ＬＣＤＲ１は配列番号２６のアミノ酸配列であり、ＬＣＤＲ２は配列番号２７のアミノ酸配列であり、ＬＣＤＲ３は配列番号２８のアミノ酸配列である）を含む抗体または抗体断片と交差競合する、抗体または抗体断片を指す。別の実施形態では、本開示は、抗体または抗体断片において、配列番号３０と一致するＶＨおよび配列番号２９と一致するＶＬを含む抗体または抗体断片と交差競合する、抗体または抗体断片を指す。
【００９３】
ある種の実施形態では、本開示は、表１に記載する抗体と交差競合し、かつ表１に記載する抗体のうちの１つの特異的結合を、ＥＬＩＳＡに基づく交差競合アッセイにおいて少なくとも７０％、８０％、または９０％低下させる、抗体または抗体断片を指す。ある種の実施形態では、本開示は、表１に記載する抗体と交差競合し、かつ表１に記載する抗体のうちの１つの、ＩＬ−１７Ｃへの特異的結合を、ＥＬＩＳＡに基づく交差競合アッセイにおいて少なくとも７０％、８０％、または９０％低下させる、モノクローナル抗体または抗体断片を指す。代表的なアッセイ手順を、本開示における実施例６に例示する。
【００９４】
別の実施形態では、本開示は、表１における抗体のうちの１つと同じエピトープに（例えば、結合、安定化、空間分布によって）結合する抗体または抗体断片を指す。さらなる実施形態では、前記抗体または抗体断片は、表１における抗体のうちの１つの、Ｋａｂａｔによって定義される６つのＣＤＲを含む抗体または抗体断片と同じエピトープに（例えば、結合、安定化、空間分布によって）結合する。さらに別の実施形態では、前記抗体または抗体断片は、表１における抗体のうちの１つの、Ｋａｂａｔによって定義される６つのＣＤＲを含む抗体または抗体断片と同じ、ＩＬ−１７Ｃのエピトープに（例えば、結合、安定化、空間分布によって）結合する。さらに別の実施形態では、前記抗体または抗体断片は、表１における抗体のうちの１つのＫａｂａｔによって定義される６つのＣＤＲを含む抗体または抗体断片と同じ、配列番号１のアミノ酸配列を含むポリペプチドのエピトープに（例えば、結合、安定化、空間分布によって）結合する。
【００９５】
別の実施形態では、本開示は、抗体または抗体断片において、６つのＣＤＲ（ここでは、ＨＣＤＲ１は配列番号１０のアミノ酸配列であり、ＨＣＤＲ２は配列番号１１のアミノ酸配列であり、ＨＣＤＲ３は配列番号１２のアミノ酸配列であり、ＬＣＤＲ１は配列番号１３のアミノ酸配列であり、ＬＣＤＲ２は配列番号１４のアミノ酸配列であり、ＬＣＤＲ３は配列番号１５のアミノ酸配列である）を含む抗体または抗体断片と同じエピトープに結合する抗体または抗体断片を指す。別の実施形態では、本開示は、抗体または抗体断片において、配列番号１７と一致するＶＨおよび配列番号１８と一致するＶＬを含む抗体または抗体断片と同じエピトープに結合する抗体または抗体断片を指す。
【００９６】
別の実施形態では、本開示は、抗体または抗体断片において、６つのＣＤＲ（ここでは、ＨＣＤＲ１は配列番号２３のアミノ酸配列であり、ＨＣＤＲ２は配列番号２４のアミノ酸配列であり、ＨＣＤＲ３は配列番号２５のアミノ酸配列であり、ＬＣＤＲ１は配列番号２６のアミノ酸配列であり、ＬＣＤＲ２は配列番号２７のアミノ酸配列であり、ＬＣＤＲ３は配列番号２８のアミノ酸配列である）を含む抗体または抗体断片と同じエピトープに結合する抗体または抗体断片を指す。別の実施形態では、本開示は、抗体または抗体断片において、配列番号３０と一致するＶＨおよび配列番号２９と一致するＶＬを含む抗体または抗体断片と同じエピトープに結合する抗体または抗体断片を指す。
【００９７】
エピトープを含む所与のポリペプチドの領域は、当技術分野で周知のいくつものエピトープマッピング技術を使用して特定することができる。例えば、Ｅｐｉｔｏｐｅ  Ｍａｐｐｉｎｇ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．６６（Ｇｌｅｎｎ  Ｅ．Ｍｏｒｒｉｓ，Ｅｄ．，１９９６）Ｈｕｍａｎａ  Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，Ｎｅｗ  Ｊｅｒｓｅｙを参照のこと。例えば、エピトープは、例えば、固形状支持体上に多数のペプチド（これらのペプチドは、タンパク質分子の一部に相当する）を同時に合成し、これらのペプチドを、支持体に引き続き付着させたまま抗体と反応させることによって決定することができる。こうした技術は、当技術分野で公知であり、例えば、米国特許第４，７０８，８７１号明細書；Ｇｅｙｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８４）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８：３９９８−４００２；Ｇｅｙｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８５）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８２：７８−１８２；Ｇｅｙｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８６）Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２３：７０９−７１５に記載されている。同様に、エピトープは、例えば水素／重水素交換、Ｘ線結晶学、および二次元核磁気共鳴によって、アミノ酸の空間構造を決定することによって容易に特定される。例えば、Ｅｐｉｔｏｐｅ  Ｍａｐｐｉｎｇ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ（上記）を参照のこと。タンパク質の抗原性領域はまた、例えば、Ｏｘｆｏｒｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｇｒｏｕｐから入手できるＯｍｉｇａ  ｖｅｒｓｉｏｎ１．０ソフトウェアプログラムを使用して算出されるものなどの、標準の抗原性および疎水性（ｈｙｄｒｏｐａｔｈｙ）プロットを使用して特定することができる。このコンピュータプログラムは、抗原性プロフィールを決定することについてはＨｏｐｐ／Ｗｏｏｄｓ方法、Ｈｏｐｐ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８１）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ  ＵＳＡ  ７８：３８２４−３８２８、疎水性プロットについてはＫｙｔｅ−Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅ技術、Ｋｙｔｅ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８２）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１５７：１０５−１３２を用いる。
【００９８】
一実施形態では、本開示は、表１における抗体のいずれかの、Ｋａｂａｔによって定義される６つのＣＤＲを含む抗体または抗体断片を指す。別の態様では、本開示は、表１における抗体のそれぞれの、Ｋａｂａｔによって定義される６つのＣＤＲを含む単離されたモノクローナル抗体またはその断片に関する。
【００９９】
別の実施形態では、本開示は、表１における抗体のいずれかの、Ｃｈｏｔｉａによって定義される６つのＣＤＲを含む抗体または抗体断片を指す。別の態様では、本開示は、表１における抗体のそれぞれの、Ｃｈｏｔｉａによって定義される６つのＣＤＲを含む単離されたモノクローナル抗体またはその断片に関する。
【０１００】
ある種の実施形態では、本開示は、表１に開示した抗体または抗体断片において、約１００ｎＭ未満、より好ましくは約６０ｎＭ未満、いっそうさらに好ましくは約３０ｎＭ未満の親和性でＩＬ−１７Ｃに結合することができる、抗体または抗体断片を指す。さらに好ましいのは、約１０ｎＭ未満、より好ましくは約３ｎＭ未満の親和性でＩＬ−１７Ｃに結合する抗体または抗体断片である。
【０１０１】
ある種の実施形態では、本開示は、表１に開示した抗体または抗体断片において、約１００ｎＭ未満、より好ましくは約６０ｎＭ未満、いっそうさらに好ましくは約３０ｎＭ未満の一価の親和性でＩＬ−１７Ｃに結合することができる、抗体または抗体断片を指す。さらに好ましいのは、約１０ｎＭ未満、より好ましくは約３ｎＭ未満の一価の親和性でＩＬ−１７Ｃに結合する抗体または抗体断片である。
【０１０２】
別の実施形態では、本開示は、ＩＬ−１７Ｃに特異的な抗体または抗体断片において、５×１０−２Ｍ未満、１０−２Ｍ未満、５×１０−３Ｍ未満、１０−３Ｍ未満、５×１０−４Ｍ未満、１０−４Ｍ未満、５×１０−５Ｍ未満、１０−５Ｍ未満、５×１０−６Ｍ未満、１０−６Ｍ未満、５×１０−７Ｍ未満、１０−７Ｍ未満、５×１０−８Ｍ未満、１０−８Ｍ未満、５×１０−９Ｍ未満、１０−９Ｍ未満、５×１０−１０Ｍ未満、１０−１０Ｍ未満、５×１０−１１Ｍ未満、１０−１１Ｍ未満、５×１０−１２Ｍ未満、１０−１２Ｍ未満、５×１０−１３Ｍ未満、１０−１３Ｍ未満、５×１０−１４Ｍ未満、１０−１４Ｍ未満、５×１０−１５Ｍ未満、または１０−１５Ｍ未満の解離速度定数（ＫＤ）を伴う、ＩＬ−１７Ｃに対する一価の親和性を有する前記抗体または抗体断片、および一価の型における解離速度定数（ＫＤ）よりも少なくとも２倍、５倍、１０倍、１００倍、１０００倍、１００００倍、１０００００倍低い解離速度定数（ＫＤ）を伴う、ＩＬ−１７Ｃに対する親和性を有する二価の型の抗体または抗体断片を指す。さらなる実施形態では、前記抗体または抗体断片の二価の親和性は、ＩｇＧ型において決定され、ここでは、前記抗体または抗体断片の一価の親和性は、Ｆａｂ型において決定される。
【０１０３】
本開示の組成物は、好ましくは、本明細書に開示した通りのＩＬ−１７Ｃに特異的な抗体または抗体断片と、薬学的に許容し得る担体、希釈剤、または賦形剤とを含む、炎症性疾患または癌の治療のための医薬組成物である。こうした担体、希釈剤、および賦形剤は、当技術分野で周知であり、当業者は、本開示のＩＬ−１７Ｃ抗体または抗体断片を用いて対象を治療するのに最適な製剤および投与経路を見いだすであろう。
【０１０４】
別の実施形態では、本開示は、ＩＬ−１７Ｃの望ましくない存在と関連する障害または状態の治療における使用のための、本明細書に開示した通りのＩＬ−１７Ｃに特異的な抗体または抗体断片を含む医薬組成物を指す。別の実施形態では、ＩＬ−１７Ｃの望ましくない存在と関連する前記状態は、炎症性疾患または癌である。別の実施形態では、前記炎症性疾患は、関節リウマチ、乾癬、肺炎症、ＣＯＰＤ、および／またはアトピー性皮膚炎（ＡＤ）（中等度から重度のＡＤが含まれる）である。好ましい実施形態では、前記炎症性疾患は、アトピー性皮膚炎（ＡＤ）および／または中等度から重度のＡＤである。
【０１０５】
別の実施形態では、本開示は、ＩＬ−１７Ｃの望ましくない存在と関連する障害または状態の治療のための医薬品の調製における、本明細書に開示した通りのＩＬ−１７Ｃに特異的な抗体または抗体断片を含む前記医薬組成物の使用を指す。別の実施形態では、ＩＬ−１７Ｃの望ましくない存在と関連する前記状態は、炎症性疾患または癌である。別の実施形態では、前記炎症性疾患は、関節リウマチ、乾癬、肺炎症、ＣＯＰＤ、および／またはアトピー性皮膚炎（ＡＤ）（中等度から重度のＡＤが含まれる）である。好ましい実施形態では、前記炎症性疾患は、アトピー性皮膚炎（ＡＤ）および／または中等度から重度のＡＤである。
【０１０６】
別の実施形態では、本開示は、ＩＬ−１７Ｃの望ましくない存在と関連する障害または状態の治療のための前記医薬組成物の使用を指す。別の実施形態では、ＩＬ−１７Ｃの望ましくない存在と関連する前記状態は、炎症性疾患または癌である。別の実施形態では、前記炎症性疾患は、関節リウマチ、乾癬、肺炎症、ＣＯＰＤ、および／またはアトピー性皮膚炎（ＡＤ）（中等度から重度のＡＤが含まれる）である。好ましい実施形態では、前記炎症性疾患は、アトピー性皮膚炎（ＡＤ）および／または中等度から重度のＡＤである。
【０１０７】
別の態様では、本明細書で提供されるのは、対象におけるアトピー性皮膚炎（ＡＤ）および／または中等度から重度のアトピー性皮膚炎（ＡＤ）を治療する方法において、治療有効量の本開示のＩＬ−１７Ｃ抗体または抗体断片を含む医薬組成物を投与することを含む方法である。一実施形態では、前記対象は、副腎皮質ステロイド外用薬（ＴＣＳ）またはカルシニューリン阻害剤による治療に対して抵抗性、非応答性、または不適切に応答性である。別の実施形態では、対象は、それを必要とする対象である。好ましい実施形態では、前記対象は、ヒトである。代替態様では、前記対象は、ラットまたはマウスなどのげっ歯類である。
【０１０８】
別の実施形態では、本開示は、対象における炎症性疾患の予防のための方法において、前記対象にＩＬ−１７Ｃアンタゴニストを投与することを含む前記方法を指す。この文脈において使用される「予防」は、疾患の発症を予防することを目的とする、または疾患の発症を遅延させる方法を指す。いくつかの実施形態では、前記対象は、ヒトである。代替態様では、前記対象は、ラットまたはマウスなどのげっ歯類である。
【０１０９】
いくつかの実施形態では、本開示のＩＬ−１７Ｃに特異的な抗体または抗体断片は、皮下に投与される。他の態様では、本開示のＩＬ−１７Ｃに特異的な抗体または抗体断片は、静脈内、関節内、または脊髄内投与される。
【０１１０】
一実施形態では、本開示は、表１における抗体のいずれかのＶＨおよびＶＬを含む、単離されたモノクローナル抗体またはその断片に関する。
【０１１１】
別の実施形態では、本開示は、表１における抗体のいずれかの重鎖（ＩｇＧ１）および軽鎖を含む、単離されたモノクローナル抗体またはその断片に関する。
【０１１２】
別の実施形態では、本開示は、ＩＬ−１７Ｃに結合する抗体の重鎖配列および／または軽鎖配列をコードする単離された核酸において、
配列番号５８のＨＣＤＲ１領域、配列番号５９のＨＣＤＲ２領域、配列番号６０のＨＣＤＲ３領域、配列番号６４のＬＣＤＲ１領域、配列番号６５のＬＣＤＲ２領域、および配列番号６６のＬＣＤＲ３領域、または
配列番号６１のＨＣＤＲ１領域、配列番号６２のＨＣＤＲ２領域、配列番号６３のＨＣＤＲ３領域、配列番号６４のＬＣＤＲ１領域、配列番号６５のＬＣＤＲ２領域、および配列番号６６のＬＣＤＲ３領域、または
配列番号３３のＨＣＤＲ１領域、配列番号３４のＨＣＤＲ２領域、配列番号３５のＨＣＤＲ３領域、配列番号３９のＬＣＤＲ１領域、配列番号４０のＬＣＤＲ２領域、および配列番号４１のＬＣＤＲ３領域、または
配列番号３６のＨＣＤＲ１領域、配列番号３７のＨＣＤＲ２領域、配列番号３８のＨＣＤＲ３領域、配列番号３９のＬＣＤＲ１領域、配列番号４０のＬＣＤＲ２領域、および配列番号４１のＬＣＤＲ３領域、または
配列番号４６のＨＣＤＲ１領域、配列番号４７のＨＣＤＲ２領域、配列番号４８のＨＣＤＲ３領域、配列番号５２のＬＣＤＲ１領域、配列番号５３のＬＣＤＲ２領域、および配列番号５４のＬＣＤＲ３領域、または
配列番号４９のＨＣＤＲ１領域、配列番号５０のＨＣＤＲ２領域、配列番号５１のＨＣＤＲ３領域、配列番号５２のＬＣＤＲ１領域、配列番号５３のＬＣＤＲ２領域、および配列番号５４のＬＣＤＲ３領域
を含む核酸を指す。
【０１１３】
別の実施形態では、本開示は、単離されたモノクローナル抗体またはその断片をコードする核酸において、配列番号１９のＶＨ領域および配列番号１８のＶＬ領域、または配列番号１９のＶＨ領域および／または配列番号１８のＶＬ領域に対する少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有するＶＨ領域およびＶＬ領域を含む核酸を指す。
【０１１４】
別の実施形態では、本開示は、単離されたモノクローナル抗体またはその断片をコードする核酸において、配列番号６８のＶＨ領域および配列番号６７のＶＬ領域、または配列番号６８のＶＨ領域および／または配列番号６７のＶＬ領域に対する少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有するＶＨ領域およびＶＬ領域を含む核酸を指す。
【０１１５】
別の実施形態では、本開示は、単離されたモノクローナル抗体またはその断片をコードする核酸において、配列番号３２のＶＨ領域および配列番号３１のＶＬ領域、または配列番号３２のＶＨ領域および／または配列番号３１のＶＬ領域に対する少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有するＶＨ領域およびＶＬ領域を含む核酸を指す。
【０１１６】
別の実施形態では、本開示は、単離されたモノクローナル抗体またはその断片をコードする核酸において、配列番号４５の重鎖（ＩｇＧ１）および配列番号４４の軽鎖を含む核酸を指す。
【０１１７】
別の実施形態では、本開示は、単離されたモノクローナル抗体またはその断片をコードする核酸において、配列番号７０の重鎖（ＩｇＧ１）および配列番号６９の軽鎖を含む核酸を指す。
【０１１８】
別の実施形態では、本開示は、単離されたモノクローナル抗体またはその断片をコードする核酸において、配列番号７１の重鎖（ＩｇＧ１）および配列番号５７の軽鎖を含む核酸を指す。
【０１１９】
別の実施形態では、本開示は、単離されたモノクローナル抗体またはその断片をコードする核酸において、表１における抗体のいずれかのＶＨおよびＶＬを含む核酸を指す。
【０１２０】
別の実施形態では、本開示は、単離されたモノクローナル抗体またはその断片をコードする核酸において、表１における抗体のいずれかの重鎖（ＩｇＧ１）および軽鎖を含む核酸を指す。
【０１２１】
別の実施形態では、本開示は、表１における抗体のいずれかの、単離されたモノクローナル抗体またはその断片を産生する方法を指す。
2019511910.tif 000009
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2019511910.tif 000015
2019511910.tif 000016
【実施例】
【０１２２】
略語のリスト
ＡＮＯＶＡ    分散分析
ＢＳＡ    ウシ血清アルブミン
ＢＷ    体重
ＣＤＲ    相補性決定領域
ＤＬＳ    動的光散乱法
ＤＭＥＭ    ダルベッコ変法イーグル培地
ＥＣ５０    ５０％有効濃度
ＥＣＤ    細胞外ドメイン
ＥＣＬ    電気化学発光法
ＥＬＩＳＡ    酵素結合免疫吸着測定法
ＥｔＯＨ    エタノール
Ｆａｂ    抗原結合性フラグメント
ＦＢＳ    ウシ胎児血清
Ｆｃ    定常の断片
ＨＰＬＣ    高速液体クロマトグラフィー
ｉ．ｐ．    腹腔内
ｉ．ｖ．    静脈内
ＩＣ５０    ５０％阻害濃度
ＩＦＮ−γ    インターフェロン−ガンマ
Ｉｇ    免疫グロブリン
ＩＨＣ    免疫組織化学
ＩＬ−１７Ｒ    インターロイキン１７受容体
ＩＬ−ｘｘ    インターロイキンｘｘ
ＫＤ    解離定数
ＭＣ９０３    カルシポトリオール
ＭＰＥＫ    マウス初代角化細胞
ｍＲＮＡ    伝令リボ核酸
ＮＦ−κＢ    核内因子カッパＢ
ｐ．ｏ．    ｐｅｒ  ｏｓ、経口的に
ＰＢＳ    リン酸緩衝生理食塩水
ｑＰＣＲ    定量的ポリメラーゼ連鎖反応法
ｑＲＴ−ＰＣＲ    定量的リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応法
ＳＥＭ    平均値の標準誤差
Ｔｈ２    ２型ヘルパーＴ細胞
【０１２３】
実施例１：抗原、Ｆａｂ断片、および抗体の生成
１．１  抗原生成および品質管理
ヒト、カニクイザル、およびマウス由来のＩＬ−１７Ｃのアミノ酸配列を整列させた。
【０１２４】
リーダー配列を除けば、３つすべての種の間に７９％の相同性が存在する。
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【０１２５】
異なる種由来のＩＬ−１７Ｃを、異なる提供者から購入し、または社内で産生し、必要であれば可溶化した。１００μｇタンパク質あたり、ＥＣＬ（商標）ビオチン化モジュールの４μｌビオチン化試薬を添加し、穏やかに撹拌しながら、暗所で、室温で６０分間インキュベートした。続いて、Ｚｅｂａ（商標）脱塩スピンカラムを使用して、ビオチン化されたタンパク質を精製し、ＯＤ２８０ｎｍを決定した。
【０１２６】
抗原を、ＥＣＬ（商標）ビオチン化モジュール（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ；＃１０６１９１８）を使用して、ビオチン化した。ビオチン化後、生成物を、Ｚｅｂａ（商標）脱塩スピンカラム（Ｐｉｅｒｃｅ；＃８９８８９）を使用して精製した。
【０１２７】
ビオチン化されたおよびビオチン化されていないマウス、カニクイザル、およびヒトＩＬ−１７Ｃを、ＳＤＳ−ＰＡＧＥにおける変性、還元および変性、非還元条件下での、および、高圧−サイズ排除クロマトグラフィー（ＨＰ−ＳＥＣ）および動的光散乱法（ＤＬＳ）による天然状態での分析を含む、品質管理にかけた。
【０１２８】
ＨＰ−ＳＥＣは、Ｗｙａｔｔ  ｍｉｎｉＤＡＷＮ  ＴｒｅｏｓおよびＷｙａｔｔ  Ｏｐｔｉｌａｂ  ｒＥＸ（Ｗｙａｔｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｅｕｒｏｐｅ，Ｄｅｒｎｂａｃｈ，Ｇｅｒｍａｎｙ）と組み合わせた、Ｄｉｏｎｅｘ  ＵｌｔｉＭａｔｅ  ３０００チタンＨＰＬＣシステム（Ｄｉｏｎｅｘ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｇｅｒｍｅｒｉｎｇ，Ｇｅｒｍａｎｙ）上で実施した。分離のために、Ｔｏｓｏｈ  ＴＳＫ−Ｇｅｌ  Ｇ３０００ＳＷｘｌカラム（Ｔｏｓｏｈ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ，Ｓｔｕｔｔｇａｒｔ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を使用した。各試料に対して、１５μｇのタンパク質をカラムに負荷し、０．５ｍｌ／分の流速で分離を実施し、２８０ｎｍでのＵＶ吸収の分析を記録した。泳動用緩衝液は、４９ｍＭ  ＮａＨ２ＰＯ４、５１ｍＭ  Ｎａ２ＨＰＯ４、１００ｍＭ  Ｋ２ＳＯ４、０．０００５％  Ｔｗｅｅｎ−８０（ｐＨ６．８）から構成されていた。
【０１２９】
すべてのＤＬＳ実験は、０．２〜１．０ｍｇ／ｍｌのタンパク質濃度を用いるＤｙｎａＰｒｏ  Ｔｉｔａｎキュベットシステム（Ｗｙａｔｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｅｕｒｏｐｅ，Ｄｅｒｎｂａｃｈ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を使用して実施した。沈殿または粒子形成が生じた場合、試料を、実験前に５分間、１０．０００ｇで遠心分離した。
【０１３０】
マウスＩＬ−１７受容体Ｅ（ＵｎｉＰｒｏｔ  Ｑ８ＢＨ０６、アイソフォーム１）およびヒトＩＬ−１７受容体Ｅ（ＵｎｉＰｒｏｔ  Ｑ８ＮＦＲ９）の細胞外ドメイン（ＥＣＤ）を、ＫｐｎＩおよびＥｃｏＲＶを使用して、発現ベクターｐＭＡＸ＿ｖｋ＿Ｆｃ２＿Ｈｉｓにクローン化し、Ｃ末端Ｆｃ２＿Ｈ融合コンストラクトをもたらした。天然のリーダー（ＡＧ００１５８）に加えて、Ｖκ−リーダーを伴う第２のコンストラクトを生成した（ＡＧ００１５９）。
【０１３１】
両方のコンストラクトを、ＨＫＢ１１細胞で一過性発現させた。細胞懸濁液を、トランスフェクションの３日後にスケールアップし、細胞培養上清を、トランスフェクションの６日後に回収した。滅菌濾過後、溶液を、プロテインＡアフィニティクロマトグラフィーにかけた。ＰＢＳへの緩衝液交換を実施し、試料を滅菌濾過（孔径０．２μｍ）した。タンパク質濃度は、ＵＶ−分光光度法によって決定した。生成物の純度は、ＳＤＳ−ＰＡＧＥにおける変性、還元および変性、非還元条件下で、および、ＨＰ−ＳＥＣおよびＤＬＳによる天然状態で分析した。
【０１３２】
１．２．パニングおよびＦａｂ／抗体生成
抗体生成のために、ＭｏｒｐｈｏＳｙｓ  Ｙｌａｎｔｈｉａ（登録商標）ライブラリを使用して、ヒトＩＬ−１７Ｃに対するＦａｂ断片を選択した。ＭｏｒｐｈｏＳｙｓ  Ｙｌａｎｔｈｉａ（登録商標）ライブラリ（Ｔｉｌｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．ｍＡｂｓ  ５：３，１−２６；Ｍａｙ／Ｊｕｎｅ（２０１３）および米国特許第８，７２８，９８１号明細書）は、市販品として入手可能なファージミドライブラリであり、ファージ表面上にＦａｂを提示するために、ＣｙｓＤｉｓｐｌａｙ（登録商標）技術を用いている（Ｌｏｈｎｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，国際公開第２００１／０５９５０号パンフレット）。
【０１３３】
ＩＬ−１７Ｃ特異的な抗体を特定するために、様々なパニング戦略を使用した。各パニング戦略は、ヒトＩＬ−１７Ｃ（配列番号１）およびマウスＩＬ−１７Ｃを含めた各抗原に対する、少なくとも３つのそれぞれのラウンドのパニングを含んでいた。
【０１３４】
特定された単離されたクローンを、親和性および／または機能性を増大させるために、成熟させ、操作し、および／または生殖細胞系挿入（ｇｅｒｍｌｉｎｅ）した。その後、数百のクローンをスクリーニングし、インビトロアッセイ（例えば、ヒト、カニクイザル、およびマウスＩＬ−１７Ｃへの結合の、ＳＥＴによる評価、ヒト、カニクイザル、およびマウスＩＬ−１７ＣのそのそれぞれのＩＬ−１７ＲＥへの結合の阻害、およびＩＬ−１７Ｃの機能的阻害（マウスＮＩＨ３Ｔ３細胞におけるＩＬ−１７ＲＥ駆動性のＮＦ−κＢレポーターアッセイ、およびマウス初代角化細胞（ＭＰＥＫ）におけるＩＬ−１７Ｃ介在性のＣＳＦ３発現）を含む）において機能性を厳密に試験した。
【０１３５】
最後に、２つの好ましいリード分子（ＭＡＢ＃１およびＭＡＢ＃２）を選択し、下に概説する実施例にさらに記載する。
【０１３６】
実施例２：一価のＦａｂおよび二価のＩｇＧ型での親和性決定
一価のＦａｂおよび二価のＩｇＧ親和性は、ＳＥＴによって決定した。したがって、精製されたＦａｂを、ＫＤの決定のために、ヒト、カニクイザル、またはマウスＩＬ−１７Ｃに対して抗体価測定した。それぞれ精製されたＩｇＧを、ＥＣ５０決定のために、ヒト、カニクイザル、またはマウスＩＬ−１７Ｃに対して抗体価測定した。
【０１３７】
溶液平衡抗体価測定（ＳＥＴ）を、基本的に文献（Ｆｒｉｑｕｅｔ  ｅｔ  ａｌ．，（１９８５）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈ．７７：３０５−１９）に記載された通りに実施した。ＳＥＴ方法の感度および精度を向上させるために、これを、古典的ＥＬＩＳＡからＥＣＬに基づく技術に変更した（Ｈａｅｎｅｌ  ｅｔ  ａｌ．（２００５）Ａｎａｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．３３９．１：１８２−８４）。
【０１３８】
ＭＡＢ＃１およびＭＡＢ＃２についての各結果を、それぞれ表２および表３に示す。
【０１３９】
実施例３：受容体阻害活性に関するＩＬ−１７Ｃ特異的ＦａｂまたはＩｇＧの特徴付け
精製されたＩＬ−１７Ｃ特異的ＦａｂまたはＩｇＧを、それぞれ、ＩＬ−１７Ｃの、その特異的受容体ＩＬ−１７ＲＥへの結合を阻害するその能力について試験した。したがって、ＭＡ６０００  ３８４ウェルプレート（Ｍｅｓｏ  Ｓｃａｌｅ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ，ＭＳＤ）を、３０μｌのマウスＩＬ１７ＲＥ／Ｆｃキメラタンパク質（ＰＢＳ  １ｍｌあたり７５ｎｇ）で、４℃で一晩コーティングした。翌日、抗体段階希釈物（０．００１〜１００ｎＭの濃度）を、等体積のビオチン化されたヒト／カニクイザルまたはマウスＩＬ−１７Ｃと共に、室温で３０分間プレインキュベートして、受容体結合阻害についてのＩＣ５０濃度を決定した。２．５％  ＢＳＡ（ＰＢＳＴ中）での１時間のプレートのブロッキング後、あらかじめ形成させた抗体−リガンド複合体を１時間添加して、ＩＬ１７ＲＥ／Ｆｃをコーティングし、ＭＳＤ  Ｓｅｃｔｏｒ撮像装置を使用するストレプトアビジン−ＥＣＬによって受容体結合を検出した。
【０１４０】
両抗体（ＭＡＢ＃１およびＭＡＢ＃２）は、Ｆａｂ型およびＩｇＧ型で、ヒト／カニクイザルまたはマウスＩＬ−１７ＣとＩＬ−１７ＲＥとの相互作用を等しく阻害した。ＩｇＧ型の両抗体について、３つすべての臨床的に関連する種全体を通して、２桁のｐＭ範囲のＩＣ５０濃度が観察された。結果を、表２および表３内の第３および４行目に、それぞれ示す。
【０１４１】
実施例４：ＩＬ−１７Ｃ駆動性のＮＦ−κＢレポーターアッセイにおける機能試験
精製されたＩＬ−１７Ｃ特異的ＩｇＧを、マウスＩＬ−１７ＲＥを過剰発現しているＮＩＨ３Ｔ３細胞におけるＮＦ−κＢレポーター遺伝子の、ＩＬ−１７Ｃによって駆動される活性化を観察する、機能性細胞に基づくアッセイにおいて、ヒト、マウス、およびカニクイザルＩＬ−１７Ｃの生物活性を阻害するその能力についてさらに試験した。
【０１４２】
ＮＩＨ３Ｔ３細胞は、３７℃、５％  ＣＯ２で、１０％  ＦＢＳおよび１％  Ｐｅｎ／Ｓｔｒｅｐを添加したＤＭＥＭで培養した。このアッセイのために、ＮＩＨ３Ｔ３細胞を、Ｐｏｌｙｐｌｕｓ  ｊｅｔ−ＰＥＩ  トランスフェクション剤を使用して、１００ｎｇの総量のＤＮＡ（２０ｎｇマウスＩＬ−１７ＲＥ発現コンストラクト、５０ｎｇ  ＮＦ−κＢルシフェラーゼレポーターコンストラクト、および３０ｎｇ  ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ）を含む懸濁液中でトランスフェクションさせた。簡単に言うと、ＤＮＡを、５μｌ  １５０ｍＭ  ＮａＣｌ（ウェルあたり）で希釈し、０．２μｌ  ｊｅｔ−ＰＥＩを８μｌ  １５０ｍＭ  ＮａＣｌに入れたもの（ウェルあたり）を調製した。室温での５分のインキュベーション後、このＤＮＡ溶液に、ＪｅｔＰＥＩ（登録商標）溶液を添加し、室温で２０〜３０分間、さらにインキュベートした。ＮＩＨ３Ｔ３細胞を、８７μｌ培地中に約４０，０００細胞を有するように希釈した。このＤＮＡ−ＪｅｔＰＥＩ  Ｉ（登録商標）ミックスに、細胞を添加し（８７μｌ細胞および１３μｌ  ＤＮＡ−ＪｅｔＰＥＩ  Ｉ（登録商標）ミックス／ウェル）、最終体積を９６ウェルプレートに移した。
【０１４３】
加湿された５％  ＣＯ２インキュベーター中での３７℃での一晩のインキュベーション後、培地を除去し、ｊｅｔＰＥＩ（登録商標）を、５％  ＦＢＳおよび１％  Ｐｅｎ／Ｓｔｒｅｐを含有する９０μｌ培地と置き換えた。ＤＰＢＳで作製された１０μｌの抗体段階希釈物を、等体積の精製された組換えＩＬ−１７Ｃ（ヒトＩＬ−１７Ｃ（Ｎｏｖｕｓ  ＃ＮＢＰ１−４２９１０）、マウスｍＩＬ−１７Ｃ（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  ＃２３０６−ｍｌ−０２５）、またはカニクイザルＩＬ−１７Ｃ（社内で産生）のいずれか）と共に室温で３０分間プレインキュベートし、細胞に添加した。ＩＬ−１７Ｃの最終濃度は、０．５ｎｇ／ｍｌであった。
【０１４４】
ＣＯ２インキュベーター内で３７℃でプレートをインキュベートした後、１００μｌ  ＳｔｅａｄｙＬｉｔｅ  Ｐｌｕｓ（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）を添加し、それに続いてＥｎｖｉｓｉｏｎ（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）上で発光の読み取りを行う。
【０１４５】
どちらの抗体も、ヒト、マウス、およびカニクイザルＩＬ−１７Ｃの存在下で、ＩＬ−１７ＲＥによって媒介されるＮＦ−κＢレポーター遺伝子活性化を効果的に低下させた。それぞれの結果は、それぞれ表２および表３の第５行目で参照することができる。
【０１４６】
実施例５：初代ヒト角化細胞におけるＩＬ−１７Ｃによって駆動される遺伝子発現
角化細胞は、ＩＬ−１７ＲＥおよびＩＬ−１７ＲＡ受容体（これらは両方とも、ＩＬ−１７Ｃの機能性シグナル伝達のために必要とされる）を内因的に発現する。したがって、健康な個人から得られるヒト初代角化細胞およびＣ５７ＢＬ／６マウスから得られるマウス初代角化細胞を使用して、より生理学的な意味で、ＭＡＢ＃１  ＩｇＧ１およびＭＡＢ＃２  ＩｇＧ１がそれぞれヒトおよびマウスＩＬ−１７Ｃの生物活性を阻害する能力を決定した。
【０１４７】
ＮＨＥＫ（正常ヒト表皮角化細胞）は、Ｌｏｎｚａから入手し、製造業者のプロトコルに従って、サプリメント（ＫＧＭ−Ｇｏｌｄ（商標）Ｂｕｌｌｅｔキット、Ｌｏｎｚａ）と共に角化細胞増殖培地で培養した。第３代まで継代し凍結保存したＮＨＥＫを、解凍し、９６ウェル細胞培養プレートのＫＧＭ細胞培地に３０，０００細胞／ウェルで、直ちに播種した。２日後、培地を除去し、ＫＧＭ−Ｇｏｌｄ  ｗ／ｏヒドロコルチゾンに変え、その後、ｈＩＬ−１７Ｃ（Ｎｏｖｕｓ  ＃ＮＢＰ１−４２９１０）およびｈＴＮＦα（Ｐｅｐｒｏｔｅｃｈ  ＃３００−０１Ａ）を添加して、それぞれ１０ｎｇ／ｍｌの最終濃度とした。
【０１４８】
抗体の試験については、ヒトＩＬ−１７Ｃを、ＤＰＢＳで作製された等体積の抗体の段階希釈物と共に、室温で３０分間、最初にプレインキュベートした。細胞を、ＴＮＦαの存在下で、組換えＩＬ−１７Ｃ（抗体の希釈物と共にまたは伴わずにプレインキュベートされたもの）で刺激した。ＩＬ−１７ＣおよびＴＮＦαでの同時刺激は、様々な遺伝子の相乗的な誘発をもたらすことが公知であり、また、ＩＬ−１７Ｃ単独では調査される遺伝子の発現に対する効果が制限されることから、必須であることが示された。
【０１４９】
細胞を、４８時間培養し、次いで、ＲＮｅａｓｙ  ９６  Ｋｉｔ（Ｑｉａｇｅｎ）を使用して全ＲＮＡを抽出し、Ｔａｑｍａｎ（登録商標）Ｒｅｖｅｒｓｅ  Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ試薬（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を使用して逆転写させ、ベータディフェンシン２  ＤＥＦＢ４Ａ（ヒト）またはＣＳＦ３（マウス）遺伝子の発現を、定量的ポリメラーゼ連鎖反応法（ｑＰＣＲ）によって決定した。簡単に言うと、１０μｌ  ＰＣＲ反応物を、Ｔａｑｍａｎ（登録商標）ｕｎｉｖｅｒｓａｌ  ＰＣＲマスターミックス／Ｎｏ  ＡｍｐＥｒａｓｅ（登録商標）ＵＮＧ、およびあらかじめ設計されたアッセイ−オンデマンド式の遺伝子発現プライマー／プローブセット（ＤＥＦ４ＢまたはＣＳＦ３用）（＃Ｈｓ００８２３６３８＿ｍ１、すべてＡｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を使用して調製した。ｑＰＣＲは、ＶｉｉＡ７（商標）Ｒｅａｌ−Ｔｉｍｅ  ＰＣＲ装置（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）で実施した。遺伝子発現を、ハウスキーピング遺伝子β−アクチン（Ｔａｑｍａｎプライマーセット＃４３１０８８１Ｅ）またはＧＡＰＤＨ（Ｔａｑｍａｎプライマーセット＃４３１０８９３Ｅ）に対して正規化した。
【０１５０】
どちらの抗体（ＭＡＢ＃１およびＭＡＢ＃２）も、それぞれ、２  ＤＥＦＢ４Ａ（ヒト）またはＣＳＦ３（マウス）遺伝子発現を効果的に低下させることが示され、また、ヒトＩＬ−１７Ｃ、またマウスＩＬ−１７Ｃ（表２および表３）の生物活性を無効化させるその能力が裏付けられた。
【０１５１】
機能性インビトロ特徴付けの総括：
インビトロ試験における各結果を、ＭＡＢ＃１については表２に、ＭＡＢ＃２については表３に、まとめて示す。これらの２種の抗体の可変領域およびＣＤＲのアミノ酸および核酸配列は、表１に示す。どちらの抗体も、それぞれの基準を満たし、臨床開発のための潜在的分子とみなされた。
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【０１５２】
実施例６：ＥＬＩＳＡに基づく交差競合アッセイ
抗ＩＬ−１７Ｃ抗体または別のＩＬ−１７Ｃ結合剤の交差競合は、以下の標準の手順によるＥＬＩＳＡアッセイを使用することによって検出することができる。
【０１５３】
ＥＬＩＳＡアッセイの一般的原理は、ＥＬＩＳＡプレートのウェル上への抗ＩＬ−１７Ｃ抗体（ＭＡＢ＃１またはＭＡＢ＃２など）のコーティングを含む。次いで、過剰量の、潜在的に交差競合性の第２の抗ＩＬ−１７Ｃ抗体を、溶液に添加する（すなわち、ＥＬＩＳＡプレートには結合されない）。続いて、次に、一定限度の量のＩＬ−１７Ｃ−Ｆｃを、ウェルに添加する。
【０１５４】
ウェル上にコーティングされた抗体と、溶液中の抗体とは、限られた数のＩＬ−１７Ｃ分子の結合をめぐって競合することとなる。次いで、プレートを洗浄して、コーティングされた抗体に結合されていないＩＬ−１７Ｃ分子を除去し、また、第２の溶液相抗体、ならびに第２の溶液相抗体とＩＬ−１７Ｃとの間に形成されたあらゆる複合体を除去する。次いで、結合されたＩＬ−１７Ｃの量を、適切なＩＬ−１７Ｃ検出試薬を使用して測定する。したがって、ＩＬ−１７Ｃを、適切なタグ特異的薬剤を介して検出することができるタグ、例えばＦｃ、Ｆｌａｇなどと融合させることができる。
【０１５５】
コーティングされた抗体に対して交差競合性である、溶液中の抗体は、コーティングされた抗体が結合することができるＩＬ−１７Ｃ分子の数を、コーティングされた抗体が第２の溶液相抗体の非存在下で結合することができるＩＬ−１７Ｃ分子の数と比較して減少させる可能性があるであろう。
【０１５６】
このアッセイを、Ａｂ−ＸおよびＡｂ−Ｙと称される２種の抗体に関して、さらに下で、より詳細に記載する。Ａｂ−Ｘが、固定される抗体に選ばれる場合、これを、ＥＬＩＳＡプレートのウェル上にコーティングし、その後、続いて添加される試薬の非特異的結合を最小限にするために、このプレートを適切なブロッキング溶液でブロックする。次いで、このＥＬＩＳＡプレートに、ウェルあたりのＡｂ−Ｙ  ＩＬ−１７Ｃ結合部位のモルが、ＥＬＩＳＡプレートのコーティング中にウェルあたりに使用されるＡｂ−Ｘ  ＩＬ−１７Ｃ結合部位のモルの少なくとも１０倍となるように、過剰量のＡｂ−Ｙを添加する。ＩＬ−１７Ｃは、ウェルあたりに添加されるＩＬ−１７Ｃのモルが、各ウェルをコーティングするために使用されるＡｂ−Ｘ  ＩＬ−１７Ｃ結合部位のモルの少なくとも２５倍低くなるように添加する。適切なインキュベーション期間の後、ＥＬＩＳＡプレートを洗浄し、ＩＬ−１７Ｃ抗原に特異的な検出試薬を添加して、コーティングされた抗ＩＬ−１７Ｃ抗体（この場合にはＡｂ−Ｘ）によって特異的に結合されたＩＬ−１７Ｃ分子の量を測定する。このアッセイについてのバックグラウンドシグナルは、コーティングされた抗体（この場合にはＡｂ−Ｘ）、第２の溶液相抗体（この場合にはＡｂ−Ｙ）、緩衝液のみ（すなわちＩＬ−１７Ｃなし）、および検出試薬を含むウェルにおいて得られるシグナルと定義される。このアッセイについての陽性対照シグナルは、コーティングされた抗体（この場合にはＡｂ−Ｘ）、第２の溶液相抗体の緩衝液のみ（すなわち第２の溶液相抗体なし）、ＩＬ−１７Ｃ検出試薬を含むウェルにおいて得られるシグナルと定義される。このＥＬＩＳＡアッセイは、陽性対照シグナルが、バックグラウンドシグナルの少なくとも６倍であるような方式で実行される必要がある。
【０１５７】
コーティング抗体として使用する抗体と、第２の（競合者）抗体として使用する抗体の選択に起因する、いずれかの人為結果（例えば、ＩＬ−１７Ｃに対するＡｂ−ＸとＡｂ−Ｙとの間の有意に差のある親和性）を回避するために、クロスブロッキングアッセイを、２つの形式で実行する必要がある：１）形式１は、Ａｂ−Ｘが、ＥＬＩＳＡプレート上にコーティングされる抗体であり、Ａｂ−Ｙが、溶液中である競合者抗体である場合である、２）形式２は、Ａｂ−Ｙが、ＥＬＩＳＡプレート上にコーティングされる抗体であり、Ａｂ−Ｘが、溶液中である競合者抗体である場合である。
【０１５８】
実施例７：マウスにおけるＩＬ−２３誘発性乾癬モデル
インビボでの有効性および治療可能性を検討するために、両方の候補抗体を、マウスにおけるＩＬ−２３誘発性乾癬モデルにおいて、さらに評価した。
【０１５９】
マウスにおけるＩＬ−２３誘発性乾癬モデルは、基本的にＲｉｚｚｏ  Ｈ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ（２０１１）Ｖｏｌ．１８６（３）ｐｐ．１４９５−１５０２によって記載されている通りに実施した。
【０１６０】
簡単に言うと、４日間連続で（１日目〜４日目）、耳へのＩＬ−２３の皮内注射（１μｇ）によって、Ｂａｌｂ／Ｃマウスにおいて皮膚病変を誘発させた。耳全体の厚さの測定を、５日目まで毎日行い、５日目にマウスを屠殺した。屠殺時に、耳介を採取し、縦方向に２つに切断した。半分は、耳の皮膚の表皮／真皮厚さの徹底的な組織学的分析のために、ホルマリン中で固定した。もう半分は、疾患関連のＩＬ−１７Ａ、ＩＬ−２２、およびＩＬ−１β炎症性サイトカイン、およびＬＣＮ２、Ｓ１００Ａ８、およびＳ１００Ａ９抗微生物タンパク質のｍＲＮＡ発現レベルの定量的逆転写ポリメラーゼ連鎖反応（ｑＲＴ−ＰＣＲ）分析のために、ＲＮＡｌａｔｅｒに浸した。ＩＬ−２３注射マウスの群（ｎ＝１０）は、ＭＡＢ＃１またはＭＡＢ＃２抗体（これらは、１０ｍｇ／ｋｇの用量で、ｉ．ｐ．で２回（最初のＩＬ−２３皮内注射の３日前に１回、および最初のＩＬ−２３皮内注射の直前に１回）投与した）で治療した。
【０１６１】
各抗体は、３つの異なる研究に分けられる、２回の独立した実験において試験した。各研究には、次の対照群（それぞれｎ＝１０）が含められた。
【０１６２】
対照群のマウスは、ＩＬ−２３の毎日の注射を受けなかったが、代わりに同体積のＢＳＡ／ＰＢＳ溶液の毎日の皮内注射を受けた。この群は、陰性対照のアイソタイプ抗体ＭＯＲ０３２０７（２×１０ｍｇ／ｋｇ、ｉ．ｐ．）で治療した。
【０１６３】
これらの研究のそれぞれについて、耳全体の厚さおよび表皮の厚さを、時間と共に追跡し、動物ごとの個々のデータ点を使用して、ＩＬ−２３介在性の肥厚の予防率（％）を決定した。ｑＰＣＲ発現データは、ハウスキーピング遺伝子として使用されるシクロフィリンＡ発現レベルに対する正規化後に、Ｒｑ（相対量）算出式（Ｒｑ＝２−ΔＣｔ（ここでは、ΔＣｔ＝Ｃｔ（対象となる遺伝子）−Ｃｔ（ハウスキーピング遺伝子）））を使用して表した。すべての測定について、群の平均±ＳＥＭデータを、一元配置分散分析（ＡＮＯＶＡ）およびダネット多重比較・事後検定（ＰＲＩＳＭソフトウェアを使用）を用いて比較した。＜０．０５の「ｐ」値は、統計的に有意であるとみなされた（＊：ｐ＜０．０５；＊＊：ｐ＜０．０１；＊＊＊：ｐ＜０．００１；ｎｓ：有意ではない）。
【０１６４】
要約すると、候補ＩｇＧ、ＭＡＢ＃１とＭＡＢ＃２（２×１０ｍｇ／ｋｇ）の投与はどちらも、ＩＬ−２３誘発性皮膚炎症を改善し、両抗体の、インビボでの有効性および治療可能性が実証された。両抗体は、ＩＬ−２３誘発性表皮肥厚のレベルでの類似の効果、およびＩＬ−２３誘発性遺伝子発現のレベルでの類似の影響を有していた。（表４参照）。
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【０１６５】
実施例８：アトピー性皮膚炎のＭＣ９０３マウスモデル
アトピー性皮膚炎におけるＭＡＢ＃１抗体の有効性を、アトピー性皮膚炎の非感染性皮膚炎症マウスモデルにおいて検討した。ここでは、低い血漿カルシウム上昇性の（ｌｏｗ−ｃａｌｃｅｍｉｃ）ビタミンＤ３類似体ＭＣ９０３（カルシポトリオール）の局所適用が、表皮過形成、および様々な細胞型の真皮浸潤、ならびに皮膚におけるＴｈ２サイトカインの増加、および血清ＩｇＥ上昇を伴う、赤い鱗状の皮膚を特徴とするアトピー性皮膚炎様皮膚病変を誘発する（Ｌｉ  Ｍ  ｅｔ  ａｌ．Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ（２００６）Ｖｏｌ．１０３（３１）ｐｐ．１１７３６−１１７４１；Ｌｉ  Ｍ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ  Ｉｎｖｅｓｔ  Ｄｅｒｍａｔｏｌ．（２００９）Ｖｏｌ．１２９（２）．ｐｐ．４９８−５０２）。
【０１６６】
８．１  動物
ＢＡＬＢ／ｃマウス（雌、８週齢）を、Ｊａｎｖｉｅｒ  Ｌａｂｓ（フランス）から入手した。マウスは、１２時間の明／暗周期（０７００〜１９００）に置いた。温度は、２２℃に維持し、食料および水は、自由摂食で提供された。
【０１６７】
８．２．実験手順
ＡＤ様反応を誘発するために、２ｎｍｏｌ  ＭＣ９０３（Ｔｏｃｒｉｓ、エタノールに溶解）を、５日間連続で、マウスの両耳に２０μＬの体積で局所適用した。非疾患対照群は、同量のエタノール（ＥｔＯＨ）を与えられた。
【０１６８】
皮膚炎症（紅斑および肥厚）の重症度を、毎日観察した。耳の厚さは、電子ノギス（Ｍｉｔｕｔｏｙｏ）を用いて測定した。炎症を、インビボイメージング技術を使用して、さらに評価した。この目的で、Ｐｒｏｓｅｎｓｅ  ６８０プローブ（１．６ｎｍｏｌ、Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）を、イメージングの２４時間前に、腹腔内経路によって投与した。イメージングは、Ｂｒｕｋｅｒ  Ｉｎ−ｖｉｖｏ  Ｘｔｒｅｍｅ  Ｉｍａｇｉｎｇ  Ｓｙｓｔｅｍを用いて実施した。画像は、十分に冷却した４ＭＰ  ＣＣＤカメラ（ｆ−ストップ１．１、ビニング２×２、収集時間５秒、Ｅｘ  ６３０ｎｍ、Ｅｍ  ７００ｎｍ）によって取り込んだ。解剖学的な同時記録のために、リフレクタンス画像を撮影した（ｆ−ストップ２．８、収集時間０．１７５秒）。すべての画像は、１９０×１９０視野で撮影し、画像は、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｉｍａｇｉｎｇ  Ｓｏｆｔｗａｒｅバージョン７．１（Ｂｒｕｋｅｒ  Ｂｉｏｓｐｉｎ，Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ，ＭＡ，ＵＳＡ）を使用して解析した。各群について、各マウスについての左耳と右耳の平均値を使用して、平均値および平均値の標準誤差（ｓｅｍ）を算出した。
【０１６９】
屠殺時に、耳の皮膚からの試料を収集し、４％ホルムアルデヒド中で固定し、その後パラフィンに包埋した。４μｍ厚の切片を、Ｓｉｓｎ’Ｃｏｍソフトウェア（フランス）を用いる画像分析による表皮厚さの組織形態計測的評価のために、ヘマトキシリンおよびエオシンで染色した（Ｈ＆Ｅ染色）。１つの耳あたり、上から下まで耳全体をカバーする５つの視野（×２０の高倍率視野）を測定し、５つの値を耳ごとにおよびマウスごとに（左／右耳）平均した。抗ＩＬ−１７Ｃビオチン化ＭＡＢ抗体（およびビオチン化されたＭＯＲ０３２０７アイソタイプ陰性対照抗体）を使用するＩＬ−１７ＣのＩＨＣ染色のために、組織切片の追加のセットを調製した。処理および染色は、基本的に、上に記載した通りに行った。
【０１７０】
耳の皮膚試料をまた、ｑＰＣＲまたはＥＬＩＳＡを使用するサイトカイン発現の分析のために採取した。ｑＰＣＲ遺伝子分析のための耳組織片を、ＲＮＡＬａｔｅｒ（登録商標）安定化溶液（Ａｍｂｉｏｎ）に浸して、−２０℃で保管した。タンパク質レベルでの定量化のための耳の皮膚試料を、液体Ｎ２中で直ちに瞬間凍結させ、−８０℃で保管した。遺伝子発現分析のために、Ｐｒｅｃｅｌｌｙｓホモジナイザー（１．４ｍｍセラミドビーズを充填したマイクロチューブ、６０００ｒｐｍで１５秒の３サイクルを３回）を使用して、組織を破壊し、ＲＮＡ溶解溶液中で溶解させた。製造業者のガイドライン（Ｍａｃｈｅｒｅｙ−Ｎａｇｅｌ）に従ってＮｕｃｌｅｏＳｐｉｎ（登録商標）ＲＮＡ  Ｋｉｔを使用して、全ＲＮＡをさらに抽出し、Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ（商標）Ｈｉｇｈ−Ｃａｐａｃｉｔｙ  ｃＤＮＡ  Ｒｅｖｅｒｓｅ  Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ  Ｋｉｔを使用して、３００ｎｇを逆転写させた。５μＬの１０倍希釈したｃＤＮＡを、Ｑｉａｇｅｎからの遺伝子特異的プライマーを用いるＳＹＢＲ  Ｇｒｅｅｎ技術を使用するリアルタイム定量的ＰＣＲ反応に使用した。ｑＰＣＲは、ＶｉｉＡ（商標）７  Ｒｅａｌ−Ｔｉｍｅ  ＰＣＲ  Ｓｙｓｔｅｍ（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）上で実施した。遺伝子発現を、３つの異なるハウスキーピング遺伝子（シクロフィリン、ｂ−アクチン、およびＧＡＰＤＨ）の発現に対して正規化し、２−ΔＣｔ方法（ΔＣｔ＝Ｃｔ遺伝子−Ｇｅｏｍｅａｎ  Ｃｔ値（ハウスキーピング遺伝子）を用いる）を使用して得られる特定の遺伝子発現の相対的ｍＲＮＡレベルとして表した。タンパク質レベルでの発現の定量化のために、Ｐｒｅｃｅｌｌｙｓホモジナイザー（２．８ｍｍ金属ビーズを充填したマイクロチューブ、４℃で１４０００ｒｐｍ１０分）を使用して、組織を最初に破壊し、２５０μＬ溶解緩衝液（Ｐｒｏｔｅａｓｅ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  Ｃｏｃｋｔａｉｌ（Ｒｏｃｈｅ）およびＨａｌｔ（商標）Ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  Ｃｏｃｋｔａｉｌ（Ｐｉｅｒｃｅ）を添加したＴ−ＰＥＲ（商標）Ｔｉｓｓｕｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ  Ｒｅａｇｅｎｔ（Ｐｉｅｒｃｅ））中で溶解させた。Ｒ＆Ｄ  ＳｙｓｔｅｍからのＴＳＬＰマウスＤｕｏＳｅｔ  ＥＬＩＳＡキットを使用して、耳におけるＴＳＬＰの量を決定した。この量を、溶解物中の全タンパク質含有量（これは、ＢＳＡタンパク質標準を参照して、Ｃｏｏｍａｓｓｉｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ａｓｓａｙ  Ｒｅａｇｅｎｔ（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ）を使用して決定された）に対して正規化した。データは、次の式を使用して算出された、耳におけるサイトカインの量として表した：試料中のサイトカイン濃度／試料中のタンパク質の濃度×耳の全タンパク質含有量。
【０１７１】
読み取りのそれぞれに対する、治療の効果の有意性を、ＭＣ９０３＋ＭＯＲ０３２０７対照群に対して、一元配置ＡＮＯＶＡ、それに続くダネットの多重比較・事後検定を使用して、Ｐｒｉｓｍ（登録商標）Ｓｏｆｔｗａｒｅを用いて評価した（＊：ｐ＜０．０５；＊＊：ｐ＜０．０１；＊＊＊：ｐ＜０．００１）。
【０１７２】
８．３．アトピー性皮膚炎のマウスモデルにおけるＭＡＢ＃１の有効性（予防的）
ＭＣ９０３アトピー性皮膚炎モデルにおける様々な用量のＭＡＢ＃１の有効性を、予防的設定で評価した。簡単に言うと、皮膚病変は、５日間連続の両耳への２ｎｍｏｌ  ＭＣ９０３（エタノールに溶解）の局所投与によって、ＢＡＬＢ／ｃマウスにおいて誘発させ；８日目にマウスを屠殺した。ＭＡＢ＃１は、３回、すなわち、最初のＭＣ９０３適用の３日前、適用の開始時、および４日後に、ｉ．ｐ．投与した。耳介腫脹、耳の炎症、表皮過形成、真皮厚さ、および遺伝子発現に対する効果を評価した。アイソタイプ陰性対照抗体（ＭＯＲ０３２０７）を与えられたマウスの群は、対照群（ｃｏｍｐａｒａｔｏｒ）としての役割を果たした。デキサメタゾン（５ｍｇ／ｋｇ（０．５％メチルセルロース中）、ＭＣ９０３適用の初日から、経口経路（ｐ．ｏ．）によって毎日投与）を、実対照薬（ａｃｔｉｖｅ  ｃｏｍｐａｒａｔｏｒ）として使用した。マウスは、ランダムに等しい群（ｎ＝１０）に分けた。
【０１７３】
皮膚炎症（紅斑および肥厚）の重症度を、実験の経過中、追跡した。耳全体の厚さは、実験の経過中、Ｍｉｔｕｔｏｙｏ厚さゲージを使用して測定した。炎症を、８．２に記載した通りに、インビボイメージング技術を使用して、５日目にさらに評価した。
【０１７４】
（ビヒクル対照としての）エタノールは、耳に対して影響を与えなかった。対照的に、ＭＣ９０３処置した耳は、赤くなり腫大した。２ｍｇ／ｋｇ以上の用量でのＭＡＢ＃１での治療は、耳の肥厚を有意に予防した。ＭＡＢ＃１の効果は、１０ｍｇ／ｋｇの用量で最大であり、デキサメタゾンの効果に匹敵していた（図１）。これらの観察に従うと、耳の炎症（５日目でのインビボイメージングにより評価）は、ＭＣ９０３処置動物では明らかに増大し、ＭＡＢ＃１によって、有意な、かつ１０ｍｇ／ｋｇの用量で観察されるほぼ最大の効果を伴って軽減された（図２）。
【０１７５】
ＭＡＢ＃１による耳の厚さの減少を確認するために、８日目に採取した耳の組織学的切片を、表皮および真皮厚さの組織形態計測的評価のために、ヘマトキシリンおよびエオシンで染色した。１つの耳あたり、上から下まで耳全体をカバーする５つの視野の値を獲得し、マウスごとに平均した。１０ｍｇ／ｋｇおよびそれ以上の用量のＭＡＢ＃１は、表皮層と真皮層両方の厚さの増大を有意に予防した（図３）。
【０１７６】
８．３．１  遺伝子発現に対するＭＡＢ＃１の効果
ＭＣ９０３アトピー性皮膚炎様皮膚炎症モデルにおけるＭＡＢ＃１の効果をさらに特徴付けるために、種々のアトピー性皮膚炎関連遺伝子の発現を、ｑＰＣＲによってｍＲＮＡレベルで、または酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）によってタンパク質レベルで分析した。耳におけるＴＳＬＰおよびＩＬ−３３タンパク質発現、ならびに血漿中のＴＡＲＣレベルは、ＭＣ９０３適用によって増大し、１０ｍｇ／ｋｇ以上の用量のＭＡＢ＃１での治療時に有意に阻害された（図４）。ＭＡＢ＃１を用いて、ＩＬ−３１（アトピー性皮膚炎における痒みに関連するサイトカイン）、Ｔｈ２−サイトカインＩＬ−４のような、ＭＣ９０３処置された耳において上方調節されたいくつかの他の遺伝子、ならびにＳ１００Ａ８／９およびＩＦＮ−γのような、ヒトアトピー性皮膚炎において上方調節されることが示されている他の遺伝子に対する同様の阻害効果が観察された。逆に、ＭＡＢ＃１は、ＭＣ９０３処置された耳におけるＦＬＧ２の下方調節を予防することが示され、これは、バリア機能を回復させることにおけるＭＡＢ＃１の潜在的役割を示唆する可能性がある。
【０１７７】
８．４  アトピー性皮膚炎のマウスモデルにおけるＭＡＢ＃１の有効性（治療的）
ＭＣ９０３アトピー性皮膚炎モデルにおける様々な用量のＭＡＢ＃１の有効性を、より疾患に関連する治療的設定で評価した。簡単に言うと、皮膚病変は、５日間連続の両耳への２ｎｍｏｌ  ＭＣ９０３（エタノールに溶解）の局所投与によって、あらゆる治療の開始前に、ＢＡＬＢ／ｃマウスにおいて誘発させた。ＭＡＢ＃１は、４回（ＭＣ９０３皮膚適用の最終日（５日目）の最初の投与、および続いて８日目、１２日目、および１５日目に）、ｉ．ｐ．投与した。マウスは、１６日目に屠殺した。耳介腫脹、耳の炎症、表皮過形成、真皮厚さ、および遺伝子発現に対する効果を評価した。さらに、免疫細胞（好酸球、Ｔ細胞、およびマスト細胞）の流入に対する効果も評価した。アイソタイプ陰性対照抗体（ＭＯＲ０３２０７）を与えられたマウスの群は、対照群としての役割を果たした。デキサメタゾン（１ｍｇ／ｋｇ（０．５％メチルセルロース中）、５日目のＭＣ９０３適用の最終日から開始し、その後、８日目から１２日目まで、および１５日目から１６日目まで、経口で投与）を、実対照薬として使用した。
【０１７８】
８．４．１  耳全体の厚さおよび炎症に対するＭＡＢ＃１の効果
耳全体の厚さは、実験の経過中、Ｍｉｔｕｔｏｙｏ厚さゲージを使用して測定した。ＭＣ９０３の耳への局所適用は、（ＭＣ９０３に対するビヒクル対照としての）エタノールで処置した耳と比較すると、３日目からの耳の厚さの顕著な増大を誘発した。疾患活性は、５日目（すなわち最初の治療の日）で十分に誘発され、陰性対照抗体ＭＯＲ０３２０７で治療された群では、耳介腫脹の継続する増大から明らかであるように、その後（ＭＣ９０３適用が停止されても）発達し続けた（図５）。０．４ｍｇ／ｋｇ以上の用量でのＭＡＢ＃１での治療は、１２日目から耳の肥厚を有意に低下させ、より高い用量のＭＡＢ＃１は、より強い効果を有し、より早い時点でさえ（５０ｍｇ／ｋｇのＭＡＢ＃１については８日目から、１０および２ｍｇ／ｋｇの用量については１０日目から））、耳の厚さを有意に低下させた。これらの観察に従うと、（８．２に記載される通りに）インビボイメージングによって評価される１２日目の耳の炎症は、陰性対照抗体で治療された動物では、依然として増大し、すべての用量レベルで、ＭＡＢ＃１によって、２ｍｇ／ｋｇの用量で観察される最大の効果を伴って有意に軽減された（図６）。
【０１７９】
８．４．２  耳の表皮／真皮厚さに対するＭＡＢ＃１の効果
ＭＡＢ＃１による耳の厚さの減少を確認するために、１６日目に採取した耳の組織学的切片を、表皮および真皮厚さの組織形態計測的評価のために、ヘマトキシリンおよびエオシンで染色した。２ｍｇ／ｋｇおよびそれ以上の用量のＭＡＢ＃１は、耳全体の厚さの測定と一致して、表皮層と真皮層両方の厚さの増大を強力に低下させた（図７）。
【０１８０】
８．４．３  真皮細胞浸潤に対するＭＡＢ＃１の効果
ＭＣ９０３アトピー性皮膚炎モデルにおける、ＭＡＢ＃１の疾患進行に対する効果をさらに特徴付けるために、本発明者らは、細胞浸潤に対する効果を評価した。より具体的には、本発明者らは、免疫組織化学（ＩＨＣ）、およびそれに続く、好酸球・ペルオキシダーゼ、Ｔ細胞マーカー・ＣＤ３、およびマスト細胞・トリプターゼを検出する抗体でそれぞれ染色された面積の定量化によって、好酸球、Ｔ−リンパ球、およびマスト細胞に対する効果を評価した（詳細については、（Ｍａｒｓａｉｓ，２０１６）を参照のこと）。炎症および耳の厚さの増大と一致して、好酸球、Ｔ細胞、および比較的程度は低いがマスト細胞の浸潤が、疾患活性がＭＣ９０３によって誘発されたマウスの耳において、１６日目に依然として顕著であった。ＭＡＢ＃１の治療は、検討された３つすべての細胞型の真皮浸潤を低下させた（図８）。試験されたすべてのＭＡＢ＃１用量で、浸潤した好酸球およびＴ細胞の数の有意な減少が認められ、５０ｍｇ／ｋｇという、より高い用量は、より強い効果を有し、これらの細胞型の流入を、デキサメタゾンの効果に匹敵するレベルまで低下させた。マスト細胞浸潤に対する効果は、一般に、より弱いが、それでも有意であった：流入は、５０および１０ｍｇ／ｋｇという、より高い用量のＭＡＢ＃１によって、有意に低下した。
【０１８１】
８．４．４  遺伝子発現に対するＭＡＢ＃１の効果
発現は、１６日目に採取した耳の皮膚試料または血漿に対して、８．２に記載した通り、８つの疾患関連遺伝子についてはｑＰＣＲによって、またはＴＳＬＰ、および耳において産生されたＩＬ−３３、および血漿中のＴＡＲＣについてはＥＬＩＳＡによって分析した。
【０１８２】
ＥｔＯＨ処置された非疾患対照マウスと、最初の５日間のＭＣ９０３の適用によって疾患が誘発されたマウスとの間には、分析された遺伝子のほとんどについて、有意な発現差は認められなかった可能性がある。ＩＬ−３３タンパク質のレベル、ならびにＩＬ−４、Ｓ１００Ａ９、およびＩＦＮ−γ  ｍＲＮＡ発現レベルのみ、依然として増大した。これらの遺伝子（ＩＦＮ−γ以外）についての発現レベルの増大は、すべての用量レベルで、図９に示す通り、ＭＡＢ＃１治療によって低下した。
【０１８３】
８．５．結果
ＭＡＢ＃１は、３×１０ｍｇ／ｋｇで腹腔内に（ｉ．ｐ．）予防的に投与された場合に、表皮および真皮肥厚、炎症、ならびに２型ヘルパーＴ細胞（Ｔｈ２）様遺伝子発現に対する有意な効果を伴い、ＭＣ９０３モデルにおけるアトピー性皮膚炎様皮膚炎症の発生を予防した。耳全体の厚さに対する有意な効果は、３×２ｍｇ／ｋｇ（ｉ．ｐ．）の用量で、このモデルにおいて既に観察された。また、治療的ＭＣ９０３モデルでは、ＭＡＢ＃１は、皮膚炎症を改善した。４×０．４ｍｇ／ｋｇ（ｉ．ｐ．）の用量、最大４×２〜１０ｍｇ／ｋｇ（ｉ．ｐ．）の用量で、耳全体の厚さ、表皮肥厚、炎症、ならびに好酸球およびＴ細胞の流入に対する有意な治療効果が認められた。
【０１８４】
実施例９：アトピー性皮膚炎のフレーキーテイルマウスモデル
ＭＡＢ＃１抗体の有効性を、フレーキーテイルモデルにおいて評価した。フレーキーテイルマウスは、皮膚バリア機能不全をもたらす、ＦｌｇおよびＭａｔｔ（Ｍａｔｔｍａ／ｍａＦｌｇｆｔ／ｆｔ）遺伝子の変異を有する。これらのマウスは、混合型のＴｈ２／Ｔｈ１７炎症性表現型を特徴とするアトピーおよび進行性の皮膚炎を自然に発症し、ヒトにおけるＡＤの基本的特徴を再現する。
【０１８５】
９．１．動物＆実験手順
コンジェニックＣ５７ＢＬ／６Ｊバックグラウンドに対するフレーキーテイル（Ｍａｔｔｍａ／ｍａＦｌｇｆｔ／ｆｔ）マウスを、Ｆａｌｌｏｎ  ｅｔ  ａｌ（２００９）Ｎａｔ  Ｇｅｎｅｔ．４１（５）：６０２−６０８およびＳａｕｎｄｅｒｓ  ｅｔ  ａｌ（２０１３）Ｊ  Ａｌｌｅｒｇｙ  Ｃｌｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １３２（５）：１１２１−１１２９に記載されている通りに使用した。雌のフレーキーテイルマウス（９〜１０週齢）を、無作為に４つの群（８匹のマウス／群）に分け、次の通りに６週間治療した。
−第Ｉ群：アイソタイプ陰性対照抗体（ＭＯＲ０３２０７）（３０ｍｇ／ｋｇ、ｉｐ、週２回×６週）
−第ＩＩ群：ＭＡＢ＃１（３ｍｇ／ｋｇ、ｉｐ、週２回×６週）
−第ＩＩＩ群：ＭＡＢ＃１（３０ｍｇ／ｋｇ、ｉｐ、週２回×６週）
−第ＩＶ群：デキサメタゾン２ｍｇ／ｋｇ（ｉｐ、１週間に２回×６週）、実対照薬として
【０１８６】
ＡＤ様皮膚炎症の重症度を、Ｓａｕｎｄｅｒｓ  ｅｔ  ａｌ（２０１３）Ｊ  Ａｌｌｅｒｇｙ  Ｃｌｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １３２（５）：１１２１−１１２９に記載されている通りに、ＮＣ／Ｎｇａマウスモデルにおける皮膚炎症の評価から適合させた肉眼的診断基準を使用してスコア付けした。簡単に言うと、紅斑、表皮剥離、および鱗屑化の徴候に対して、スコア付けシステム（０：なし；１：軽度；２：中等度；３：顕著）を適用した。各マウスについての合計スコア（最大値は９である）を、３つのパラメータのそれぞれに対する個々のスコアの合計から算出した。
【０１８７】
眼瞼皮膚における湿疹病変の出現を、研究の最後に観察し、眼瞼炎を、その重症度について、個別にスコア付けした（０：正常、１：眼瞼紅斑および／または浮腫、２：眼瞼紅斑、浮腫、および鱗屑化、３：眼瞼紅斑、浮腫、鱗屑化、びらん）。各マウスについての最大の眼瞼炎スコア（両眼の平均）は、３である。
【０１８８】
９．２．ＡＤの自然発生＆慢性フレーキーテイルマウスモデルにおけるＭＡＢ＃１の有効性
皮膚炎症の臨床的スコア付けは、フレーキーテイルマウスが、治療の開始時に自然発生の湿疹様皮膚炎の徴候を既に有しており、これは、治療されていない動物では、６週の追跡調査期間中に、顕性の皮膚炎にさらに進行したことを示す。ＭＡＢ＃１での治療は、進行を低下させ、最も高い３０ｍｇ／ｋｇの試験用量では、デキサメタゾンの効果に匹敵する有意な効果が認められる（図１０）。治療の最後には、眼瞼炎のレベルで、ＭＡＢ＃１抗体の同様の効果が認められる（図１１）。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【配列表】
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【手続補正書】
【提出日】平成31年1月9日(2019.1.9)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＩＬ−１７Ｃに特異的な抗体または抗体断片において、
（ａ）配列番号７のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１領域、配列番号８のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２領域、配列番号９のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３領域、配列番号１３のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１領域、配列番号１４のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２領域、および配列番号１５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３領域、または
（ｂ）配列番号２０のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１領域、配列番号２１のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２領域、配列番号２２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３領域、配列番号２６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１領域、配列番号２７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２領域、および配列番号２８のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３領域
を含むことを特徴とする抗体または抗体断片。
【請求項２】
前記抗体または抗体断片が、ヒトＩＬ−１７Ｃに特異的であることを特徴とする請求項１に記載の抗体または抗体断片。
【請求項３】
前記抗体または抗体断片が、ヒトＩＬ−１７Ｃ、カニクイザルＩＬ−１７Ｃ、およびマウスＩＬ−１７Ｃに特異的であることを特徴とする請求項２に記載の単離された抗体または抗体断片。
【請求項４】
前記抗体または抗体断片が、ヒト、ヒト化、またはキメラ抗体または抗体断片であることを特徴とする請求項１〜３のいずれか一項に記載の抗体または抗体断片。
【請求項５】
前記抗体または抗体断片が、配列番号１７の重鎖アミノ酸配列および配列番号１６の軽鎖アミノ酸配列を含むことを特徴とする請求項１〜４のいずれか一項に記載の抗体または抗体断片。
【請求項６】
前記抗体または抗体断片が、配列番号３０の重鎖アミノ酸配列および配列番号２９の軽鎖アミノ酸配列を含むことを特徴とする請求項１〜５のいずれか一項に記載の抗体または抗体断片。
【請求項７】
前記抗体または抗体断片が、単離された抗体または抗体断片であることを特徴とする請求項１〜６のいずれか一項に記載の抗体または抗体断片。
【請求項８】
前記抗体または抗体断片が、組換え抗体または抗体断片であることを特徴とする請求項１〜７のいずれか一項に記載の抗体または抗体断片。
【請求項９】
請求項１〜８のいずれか一項に記載の抗体または抗体断片と、薬学的に許容し得る担体または賦形剤とを含むことを特徴とする医薬組成物。
【請求項１０】
ＩＬ−１７Ｃに特異的な抗体または抗体断片において、配列番号７のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１領域、配列番号８のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２領域、配列番号９のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３領域、配列番号１３のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１領域、配列番号１４のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２領域、および配列番号１５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３領域を含むことを特徴とする抗体または抗体断片。
【請求項１１】
ＩＬ−１７Ｃに特異的な抗体または抗体断片において、配列番号２０のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１領域、配列番号２１のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２領域、配列番号２２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３領域、配列番号２６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１領域、配列番号２７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２領域、および配列番号２８のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３領域を含むことを特徴とする抗体または抗体断片。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１８８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１８８】
９．２．ＡＤの自然発生＆慢性フレーキーテイルマウスモデルにおけるＭＡＢ＃１の有効性
皮膚炎症の臨床的スコア付けは、フレーキーテイルマウスが、治療の開始時に自然発生の湿疹様皮膚炎の徴候を既に有しており、これは、治療されていない動物では、６週の追跡調査期間中に、顕性の皮膚炎にさらに進行したことを示す。ＭＡＢ＃１での治療は、進行を低下させ、最も高い３０ｍｇ／ｋｇの試験用量では、デキサメタゾンの効果に匹敵する有意な効果が認められる（図１０）。治療の最後には、眼瞼炎のレベルで、ＭＡＢ＃１抗体の同様の効果が認められる（図１１）。
また、本発明は以下を提供する。
［１］
ＩＬ−１７Ｃに特異的な抗体または抗体断片において、
（ａ）配列番号７のＨＣＤＲ１領域、配列番号８のＨＣＤＲ２領域、配列番号９のＨＣＤＲ３領域、配列番号１３のＬＣＤＲ１領域、配列番号１４のＬＣＤＲ２領域、および配列番号１５のＬＣＤＲ３領域、または
（ｂ）配列番号２０のＨＣＤＲ１領域、配列番号２１のＨＣＤＲ２領域、配列番号２２のＨＣＤＲ３領域、配列番号２６のＬＣＤＲ１領域、配列番号２７のＬＣＤＲ２領域、および配列番号２８のＬＣＤＲ３領域
を含む抗体と交差競合することを特徴とする抗体または抗体断片。
［２］
ＩＬ−１７Ｃに特異的な抗体または抗体断片において、
（ａ）配列番号７のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１領域、配列番号８のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２領域、配列番号９のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３領域、配列番号１３のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１領域、配列番号１４のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２領域、および配列番号１５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３領域、または
（ｂ）配列番号２０のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１領域、配列番号２１のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ２領域、配列番号２２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３領域、配列番号２６のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１領域、配列番号２７のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２領域、および配列番号２８のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３領域
を含むことを特徴とする抗体または抗体断片。
［３］
前記抗体または抗体断片が、
（ａ）配列番号７のＨＣＤＲ１領域、配列番号８のＨＣＤＲ２領域、配列番号９のＨＣＤＲ３領域、配列番号１３のＬＣＤＲ１領域、配列番号１４のＬＣＤＲ２領域、および配列番号１５のＬＣＤＲ３領域、または
（ｂ）配列番号２０のＨＣＤＲ１領域、配列番号２１のＨＣＤＲ２領域、配列番号２２のＨＣＤＲ３領域、配列番号２６のＬＣＤＲ１領域、配列番号２７のＬＣＤＲ２領域、および配列番号２８のＬＣＤＲ３領域
を含むことを特徴とする［２］に記載の抗体または抗体断片。
［４］
前記抗体または抗体断片が、ヒトＩＬ−１７Ｃに特異的であることを特徴とする［１］〜［３］のいずれか一項に記載の抗体または抗体断片。
［５］
前記抗体または抗体断片が、ヒトＩＬ−１７Ｃ、カニクイザルＩＬ−１７Ｃ、およびマウスＩＬ−１７Ｃに特異的であることを特徴とする［４］に記載の単離された抗体または抗体断片。
［６］
前記抗体または抗体断片が、ヒト、ヒト化、またはキメラ抗体または抗体断片であることを特徴とする［１］〜［５］のいずれか一項に記載の抗体または抗体断片。
［７］
前記抗体または抗体断片が、配列番号１７の重鎖および配列番号１６の軽鎖を含むことを特徴とする［１］〜［６］のいずれか一項に記載の抗体または抗体断片。
［８］
前記抗体または抗体断片が、配列番号３０の重鎖および配列番号２９の軽鎖を含むことを特徴とする［１］〜［７］のいずれか一項に記載の抗体または抗体断片。
［９］
前記抗体または抗体断片が、単離された抗体または抗体断片であることを特徴とする［１］〜［８］のいずれか一項に記載の抗体または抗体断片。
［１０］
前記抗体または抗体断片が、組換え抗体または抗体断片であることを特徴とする［１］〜［９］のいずれか一項に記載の抗体または抗体断片。
［１１］
それを必要とする対象の治療における使用のためのものであることを特徴とする［１］〜［１０］のいずれか一項に記載の抗体または抗体断片。
［１２］
［１］〜［１１］のいずれか一項に記載の抗体または抗体断片をコードする核酸配列または複数の核酸配列を含むことを特徴とする核酸組成物。
［１３］
［１２］の核酸配列または複数の核酸配列を含むベクターまたは複数のベクターを含むことを特徴とするベクター組成物。
［１４］
［１３］のベクター組成物を含むことを特徴とする細胞。
［１５］
［１］〜［１１］のいずれか一項に記載の抗体または抗体断片と、薬学的に許容し得る担体または賦形剤とを含むことを特徴とする医薬組成物。
【国際調査報告】
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2019511910.tif 000033
2019511910.tif 000034