(57)【要約】【課題】本発明の態様はポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ組成物を含む。【解決手段】ある例では、前記組成物は凍結乾燥された貯蔵安定組成物である。ある例では、この凍結乾燥された組成物は、緩衝液、塩、および糖の１つ以上を含む。本発明の態様は更に前記組成物を製造する方法を含む。前記組成物は、例えば、被験者の腫瘍状態の治療などの様々用途において使用法が見出される。【選択図】図１
2019521179.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
凍結乾燥された貯蔵安定組成物であって：
リンカーによりアスパラギナーゼに共有結合的に結合したポリアルキレンオキシド基を含むポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ；
緩衝液；
塩および
糖
を含む組成物。
【請求項２】
前記ポリアルキレンオキシド基がポリエチレングリコール基を含む、請求項１に記載の凍結乾燥された貯蔵安定組成物。
【請求項３】
ポリエチレングリコール基が２，０００〜１０，０００ダルトンの分子量を有する、請求項２に記載の凍結乾燥された貯蔵安定組成物。
【請求項４】
前記ポリエチレングリコール基が５，０００ダルトンの分子量を有する、請求項３に記載の凍結乾燥された貯蔵安定組成物。
【請求項５】
前記アスパラギナーゼが大腸菌アスパラギナーゼである、請求項１〜４のいずれかに記載の凍結乾燥された貯蔵安定組成物。
【請求項６】
前記リンカーがウレタン・リンカーである、上記の請求項のいずれかに記載の凍結乾燥された貯蔵安定組成物。
【請求項７】
前記リンカーがコハク酸リンカーである、上記の請求項のいずれかに記載の凍結乾燥された貯蔵安定組成物。
【請求項８】
前記ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼの５００〜１，０００ＩＵ／ｇの範囲の量が存在する、上記の請求項のいずれかに記載の凍結乾燥された貯蔵安定組成物。
【請求項９】
前記緩衝液がリン酸緩衝液を含む、上記の請求項のいずれかに記載の凍結乾燥された貯蔵安定組成物。
【請求項１０】
前記リン酸緩衝液が二塩基性リン酸ナトリウムおよび一塩基性リン酸ナトリウムを含む、請求項９に記載の凍結乾燥された貯蔵安定組成物。
【請求項１１】
前記二塩基性リン酸ナトリウムの０．１〜０．５ｗｔ．％の範囲の量が存在する、請求項１０に記載の凍結乾燥された貯蔵安定組成物。
【請求項１２】
前記一塩基性リン酸ナトリウムの０．０１〜０．１ｗｔ．％の範囲の量が存在する、請求項１０または１１に記載の凍結乾燥された貯蔵安定組成物。
【請求項１３】
前記塩が塩化ナトリウムである、上記の請求項のいずれかに記載の凍結乾燥された貯蔵安定組成物。
【請求項１４】
前記塩化ナトリウムの０．１〜１ｗｔ．％の範囲の量が存在する、請求項１３に記載の凍結乾燥された貯蔵安定組成物。
【請求項１５】
前記糖が二糖類を含む、上記の請求項のいずれかに記載の凍結乾燥された貯蔵安定組成物。
【請求項１６】
前記二糖類がショ糖を含む、請求項１５に記載の凍結乾燥された貯蔵安定組成物。
【請求項１７】
前記糖が１〜１０ｗｔ．％の範囲の量ショ糖を含む、請求項１５または１６に記載の凍結乾燥された貯蔵安定組成物。
【請求項１８】
前記組成物が単位用量容器内に存在する、上記の請求項のいずれかに記載の凍結乾燥された貯蔵安定組成物。
【請求項１９】
前記単位用量容器がバイアルである、請求項１８に記載の凍結乾燥された貯蔵安定組成物。
【請求項２０】
前記バイアルが密封されたガラスバイアルである、請求項１９に記載の凍結乾燥された貯蔵安定組成物。
【請求項２１】
請求項１〜５、または８〜２０のいずれかに記載の凍結乾燥された貯蔵安定組成物であって：
前記ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼが７５０ＩＵ／ｇの量で存在し；
前記ポリアルキレンオキシド基が５，０００ダルトンの分子量を持つポリエチレングリコール基を含み；
前記アスパラギナーゼが大腸菌アスパラギナーゼであり；
前記リンカがウレタン・リンカーであり；
前記緩衝液は０．２５〜０．３ｗｔ．％の範囲の量の二塩基性リン酸ナトリウム、および０．０５〜０．０７ｗｔ．％の範囲の量の一塩基性リン酸ナトリウムのを含むリン酸緩衝液を含み；
前記塩は、０．４〜０．４５ｗｔ．％の範囲の量の塩化ナトリウムを含み；および
前記糖は４〜５ｗｔ．％の範囲の量のショ糖を含む
凍結乾燥された貯蔵安定組成物。
【請求項２２】
請求項１〜５、または８〜２０のいずれかに記載の凍結乾燥された貯蔵安定組成物であって：
前記ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼが７５０ＩＵ／ｇの量で存在し；
前記ポリアルキレンオキシド基が５，０００ダルトンの分子量を持つポリエチレングリコール基を含み；
前記アスパラギナーゼが大腸菌アスパラギナーゼであり；
前記リンカがコハク酸リンカーであり；
前記緩衝液は０．２５〜０．３ｗｔ．％の範囲の量の二塩基性リン酸ナトリウム、および０．０５〜０．０７ｗｔ．％の範囲の量の一塩基性リン酸ナトリウムのを含むリン酸緩衝液を含み；
前記塩は、０．４〜０．４５ｗｔ．％の範囲の量の塩化ナトリウムを含み；および
前記糖は４〜５ｗｔ．％の範囲の量のショ糖を含む
凍結乾燥された貯蔵安定組成物。
【請求項２３】
凍結乾燥された貯蔵安定組成物であって：
ウレタン・リンカーによりアスパラギナーゼに共有結合的に結合したポリエチレングリコール基を含むポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ；
リン酸緩衝液；
塩および
二糖類
を含む組成物。
【請求項２４】
凍結乾燥された貯蔵安定組成物であって：
コハク酸リンカーにより大腸菌アスパラギナーゼに共有結合的に結合したポリエチレングリコール基を含むポリエチレングリコール-アスパラギナーゼ；
リン酸緩衝液；
塩；および
二糖類
を含む、凍結乾燥された貯蔵安定組成物。
【請求項２５】
前記ポリエチレングリコール基が２，０００〜１０，０００ダルトンの範囲の分子量を持つ請求項２３または２４に記載の凍結乾燥された貯蔵安定組成物。
【請求項２６】
前記ポリエチレングリコール基が５，０００ダルトンの分子量を有する、請求項２５に記載の凍結乾燥された貯蔵安定組成物。
【請求項２７】
前記ポリエチレングリコール−アスパラギナーゼの範囲の５００〜１，０００ＩＵ／ｇの量が存在する、請求項２３〜２６のいずれかに記載の凍結乾燥された貯蔵安定組成物。
【請求項２８】
前記リン酸緩衝液が、二塩基性リン酸ナトリウムおよび一塩基性リン酸ナトリウムを含む、請求項２３〜２７のいずれかに記載の凍結乾燥された貯蔵安定組成物。
【請求項２９】
前記二塩基性リン酸ナトリウムの０．１〜０．５ｗｔ．％の範囲の量が存在する、請求項２８に記載の凍結乾燥された貯蔵安定組成物。
【請求項３０】
前記一塩基性リン酸ナトリウムの０．０１〜０．１ｗｔ．％の範囲の量が存在する、請求項２８または２９に記載の凍結乾燥された貯蔵安定組成物。
【請求項３１】
前記塩が塩化ナトリウムである、請求項２３〜３０のいずれかに記載の凍結乾燥された貯蔵安定組成物。
【請求項３２】
前記塩化ナトリウムの０．１〜１ｗｔ．％範囲の量が存在する、請求項３１に記載の凍結乾燥された貯蔵安定組成物。
【請求項３３】
前記二糖類がショ糖を含む、請求項２３〜３２のいずれかに記載の凍結乾燥された貯蔵安定組成物。
【請求項３４】
前記二糖類が範囲の量１〜１０ｗｔ．％の範囲のショ糖を含む、請求項３３に記載の凍結乾燥された貯蔵安定組成物。
【請求項３５】
前記組成物が単位用量容器内に存在する、請求項２３〜３４のいずれかに記載の凍結乾燥された貯蔵安定組成物。
【請求項３６】
前記単位用量容器がバイアルである、請求項３５に記載の凍結乾燥された貯蔵安定組成物。
【請求項３７】
前記バイアルが密封されたガラスバイアルである、請求項３６に記載の凍結乾燥された貯蔵安定組成物。
【請求項３８】
凍結乾燥された貯蔵安定組成物であって：
ｉ）大腸菌アスパラギナーゼに、ウレタン・リンカーにより共有結合的に結合したポリエチレングリコールを含むポリエチレングリコール-アスパラギナーゼを含み、前記ポリアルキレンオキシド-アスパラギナーゼは７５０ＩＵ／ｇの量で存在し、および前記ポリエチレングリコール基は５，０００ダルトンの分子量を有し；
ｉｉ）０．２７９ｗｔ．％の二塩基性リン酸ナトリウムおよび０．０６ｗｔ．％の一塩基性リン酸ナトリウムを含むリン酸緩衝液を含む緩衝液；
ｉｉｉ）０．４２５ｗｔ．％の塩化ナトリウム；および
ｉｖ）４．５ｗｔ．％の量のショ糖を
含む、凍結乾燥された貯蔵安定組成物。
【請求項３９】
凍結乾燥された貯蔵安定組成物であって：
ｉ）大腸菌アスパラギナーゼに、コハク酸リンカーにより共有結合的に結合したポリエチレングリコールを含むポリエチレングリコール-アスパラギナーゼを含み、前記ポリアルキレンオキシド-アスパラギナーゼは７５０ＩＵ／ｇの量で存在し、および前記ポリエチレングリコール基は５，０００ダルトンの分子量を有し；
ｉｉ）０．２７９ｗｔ．％の二塩基性リン酸ナトリウムおよび０．０６ｗｔ．％の一塩基性リン酸ナトリウムを含むリン酸緩衝液を含む緩衝液；
ｉｉｉ）０．４２５ｗｔ．％の塩化ナトリウム；および
ｉｖ）４．５ｗｔ．％の量のショ糖
を含む、凍結乾燥された貯蔵安定組成物。
【請求項４０】
液体組成物であって：
ｉ）大腸菌アスパラギナーゼに、ウレタン・リンカーにより共有結合的に結合したポリエチレングリコールを含むポリエチレングリコール-アスパラギナーゼを含み、前記ポリアルキレンオキシド-アスパラギナーゼは７５０ＩＵ／ｇの量で存在し、および前記ポリエチレングリコール基は５，０００ダルトンの分子量を有し；
ｉｉ）０．５５８ｗｔ．％の二塩基性リン酸ナトリウムおよび０．１２９ｗｔ．％の一塩基性リン酸ナトリウムを含むリン酸緩衝液を含む緩衝液；および
ｉｉｉ）０．８５ｗｔ．％の塩化ナトリウム；
を含む液体組成物。
【請求項４１】
被験者中のアスパラギンを脱アミノ化する方法であって：投与単位の形態の請求項４０の組成物を、前記被験者中のアスパラギンを脱アミノ化するために前記被験者に投与することを含む方法。
【請求項４２】
被験者中のアスパラギンを脱アミノ化する方法であって：
再構成された投与単位を作成するために、請求項１〜３９のいずれかに記載の凍結乾燥された貯蔵安定組成物を再構成すること；および
前記再構成された投与単位を被験者中のアスパラギンを脱アミノ化するために前記被験者に投与すること
を含む方法。
【請求項４３】
前記再構成することが、前記凍結乾燥された貯蔵安定組成物を注射用水（ＷＦＩ）と混合することを含む、請求項４２に記載の方法。
【請求項４４】
前記投与単位が７００〜８００ＩＵ／ｍＬのポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼを含む、請求項４１〜４３のいずれかに記載の方法。
【請求項４５】
前記投与単位が２．５〜６ｍｇ／ｇの二塩基性リン酸ナトリウムを含む、請求項４１〜４４のいずれかに記載の方法。
【請求項４６】
前記投与単位が０．４５〜１．５ｍｇ／ｇの一塩基性リン酸ナトリウムを含む、請求項４１〜４５のいずれかに記載の方法。
【請求項４７】
前記投与単位が、４〜９ｍｇ／ｇの塩化ナトリウムを含む、請求項４１〜４６のいずれかに記載の方法。
【請求項４８】
前記投与単位が、ショ糖を含む、請求項４１〜４７のいずれかに記載の方法。
【請求項４９】
前記ショ糖の４０〜５０ｍｇ／ｇの範囲の量が存在する、請求項４８に記載の方法。
【請求項５０】
１，５００〜３，０００ＩＵ／ｍ２のポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼを前記被験者に送達する、請求項４１〜４９のいずれかに記載の方法。
【請求項５１】
２，０００〜２，７５０ＩＵ／ｍ２のポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼを前記被験者に送達する、請求項５０に記載の方法。
【請求項５２】
前記被験者の腫瘍状態を治療するための方法である、請求項４１〜５１のいずれかに記載の方法。
【請求項５３】
前記腫瘍状態が癌である、請求項５２に記載の方法。
【請求項５４】
前記腫瘍状態が白血病である、請求項５３に記載の方法。
【請求項５５】
前記白血病が急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）である、請求項５４に記載の方法。
【請求項５６】
前記白血病が急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）である、請求項５４に記載の方法。
【請求項５７】
前記被験者が誘導相、連結相および維持相を含む治療投薬計画を処方される、請求項５２〜５６のいずれかに記載の方法。
【請求項５８】
単回の投与単位を被験者に前記誘導相で投与すること、および複数の投与単位を前記維持相の間に投与することを含む、請求項５７に記載の方法。
【請求項５９】
投与単位を被験者に３週間ごとに投与することにより、複数の投与単位を被験者に投与することを含む、請求項５８に記載の方法。
【請求項６０】
投与単位を被験者に２週間ごとに投与することにより、複数の投与単位を被験者に投与することを含む、請求項５８に記載の方法。
【請求項６１】
前記被験者が年少者である、請求項４１〜６０のいずれかに記載の方法。
【請求項６２】
前記被験者が成人である、請求項４１〜６０のいずれかに記載の方法。
【請求項６３】
請求項４１〜６２のいずれかに記載の方法であって：
前記ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼが７５０ＩＵ／ｍＬの量で存在し；
前記ポリアルキレンオキシド基が５，０００ダルトンの分子量を持つポリエチレングリコール基を含み；前記アスパラギナーゼが大腸菌アスパラギナーゼであり；前記リンカがウレタン・リンカーであり；
前記緩衝液は２．５〜３ｍｇ／ｇの範囲の量の二塩基性リン酸ナトリウム、および０．５〜０．７ｍｇ／ｇの範囲の量の一塩基性リン酸ナトリウムを含むリン酸緩衝液を含み；
前記塩は、４〜４．５ｍｇ／ｇの範囲の量の塩化ナトリウムを含み；および
前記糖は４０〜５０ｍｇ／ｇの範囲の量のショ糖を含む
凍結乾燥された貯蔵安定組成物。
【請求項６４】
請求項４１〜６２のいずれかに記載の方法であって：
前記ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼが７５０ＩＵ／ｍＬの量で存在し；
前記ポリアルキレンオキシド基が５，０００ダルトンの分子量を持つポリエチレングリコール基を含み；
前記アスパラギナーゼが大腸菌アスパラギナーゼであり；前記リンカがコハク酸リンカーであり；前記緩衝液は２．５〜３ｍｇ／ｇの範囲の量の二塩基性リン酸ナトリウム、および０．５〜０．７ｍｇ／ｇの範囲の量の一塩基性リン酸ナトリウムを含むリン酸緩衝液を含み；
前記塩は、４〜４．５ｍｇ／ｇの範囲の量の塩化ナトリウムを含み；および
前記糖は４０〜５０ｍｇ／ｇの範囲の量のショ糖を含む
凍結乾燥された貯蔵安定組成物。
【請求項６５】
前記二塩基性リン酸ナトリウムが２．７９ｍｇ／ｇの量であり；
前記一塩基性リン酸ナトリウムが０．６ｍｇ／ｇの量であり；
前記塩化ナトリウムが４．２５ｍｇ／ｇの量であり；および
前記ショ糖が４５ｍｇ／ｇの量である、請求項６３または６４のいずれかに記載の方法。
【請求項６６】
凍結乾燥されたポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ組成物を作成する方法であって：
（ｉ）リンカーによりアスパラギナーゼに共有結合的に結合したポリアルキレンオキシド基を含むポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ；
（ｉｉ）緩衝液；
（ｉｉｉ）塩；および
（ｉｉｉ）糖；
を含む水性濃縮組成物を、凍結乾燥された貯蔵安定ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ組成物を製造するために十分な様式で、凍結乾燥することを含む方法。
【請求項６７】
前記水性濃縮組成物が１，５００〜３，０００ＩＵ／ｍＬのポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼを含む、請求項６６に記載の方法。
【請求項６８】
前記水性濃縮組成物が０．１〜０．５ｗｔ．％の二塩基性リン酸ナトリウムを含む、請求項６６または６７に記載の方法。
【請求項６９】
前記水性濃縮組成物が０．０１〜０．１ｗｔ．％の一塩基性リン酸ナトリウムを含む、請求項６６〜６８のいずれかに記載の方法。
【請求項７０】
前記水性濃縮組成物が０．１〜１ｗｔ．％塩化ナトリウムを含む、請求項６６〜６９のいずれかに記載の方法。
【請求項７１】
前記水性濃縮組成物がショ糖を含む、請求項６６〜７０のいずれかに記載の方法。
【請求項７２】
前記ショ糖が、１〜１０ｗｔ．％の範囲の量で存在する、請求項７１に記載の方法。
【請求項７３】
前記方法が更に前記水性濃縮組成物を製造することを含む、請求項６６〜７２のいずれかに記載の方法。
【請求項７４】
前記水性濃縮組成物を単位用量容器内に導入し、および前記水性濃縮組成物を前記単位用量容器中で凍結乾燥することを更に含む、請求項６６〜７３のいずれかに記載の方法。
【請求項７５】
前記単位用量容器がバイアルである、請求項７４に記載の方法。
【請求項７６】
前記単位用量容器がガラスバイアルである、請求項７５に記載の方法。
【請求項７７】
前記凍結乾燥された組成物を前記単位用量容器で密封することを更に含む、請求項７４〜７６のいずれかに記載の方法。
【請求項７８】
前記ポリアルキレンオキシド基がポリエチレングリコール基を含む、請求項６６〜７７のいずれかに記載の方法。
【請求項７９】
前記ポリエチレングリコール基が２，０００〜１０，０００ダルトンの範囲の分子量を有する、請求項７８に記載の方法。
【請求項８０】
前記ポリエチレングリコール基が５，０００ダルトンの分子量を有する、請求項７９に記載の方法。
【請求項８１】
前記アスパラギナーゼが大腸菌アスパラギナーゼである、請求項６６〜８０のいずれかに記載の方法。
【請求項８２】
前記リンカーがウレタン・リンカーである、請求項６６〜８１のいずれかに記載の方法。
【請求項８３】
前記リンカーがコハク酸リンカーである、請求項６６〜８２のいずれかに記載の方法。
【請求項８４】
請求項６６〜８１のいずれかに記載の方法であって：
前記ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼが７５０ＩＵ／ｇの量で存在し；
前記ポリアルキレンオキシド基が５，０００ダルトンの分子量を持つポリエチレングリコール基を含み；
前記アスパラギナーゼは大腸菌アスパラギナーゼであり；
前記リンカーはウレタン・リンカーであり；
前記緩衝液は０．２５〜０．３ｗｔ．％の範囲の量の二塩基性リン酸ナトリウム、および０．０５〜０．０７ｗｔ．％の範囲の量の一塩基性リン酸ナトリウムのを含むリン酸緩衝液を含み；
前記塩は、０．４〜０．４５ｗｔ．％の範囲の量の塩化ナトリウムを含み；および前記糖は４〜５ｗｔ．％の範囲の量のショ糖を含む方法。
【請求項８５】
前記方法請求項６６〜８１のいずれかに記載の方法であって：
前記ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼが７５０ＩＵ／ｇの量で存在し；
前記ポリアルキレンオキシド基が５，０００ダルトンの分子量を持つポリエチレングリコール基を含み；
前記アスパラギナーゼは大腸菌アスパラギナーゼであり；
前記リンカーはコハク酸リンカーであり；
前記緩衝液は０．２５〜０．３ｗｔ．％の範囲の量の二塩基性リン酸ナトリウム、および０．０５〜０．０７ｗｔ．％の範囲の量の一塩基性リン酸ナトリウムのを含むリン酸緩衝液を含み；
前記塩は、０．４〜０．４５ｗｔ．％の範囲の量の塩化ナトリウムを含み；および前記糖は４〜５ｗｔ．％の範囲の量のショ糖を含む方法。
【請求項８６】
被験者の急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）を治療する方法であって：
被験者のＡＭＬを治療するために有効な量のポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼの用量を被験者に投与することを含み、前記ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼが、リンカーにより共有結合的にアスパラギナーゼに結合したポリアルキレンオキシド基を含む方法。
【請求項８７】
前記ポリアルキレンオキシド基がポリエチレングリコール基を含む、請求項８６に記載の方法。
【請求項８８】
前記ポリエチレングリコール基が２，０００〜１０，０００ダルトンの範囲の分子量を有する、請求項８７に記載の方法。
【請求項８９】
前記ポリエチレングリコール基が５，０００ダルトンの分子量を有する、請求項８８に記載の方法。
【請求項９０】
前記アスパラギナーゼが大腸菌アスパラギナーゼである、請求項８６〜８９のいずれかに記載の方法。
【請求項９１】
前記リンカーがウレタン・リンカーである、請求項８６〜９０のいずれかに記載の方法。
【請求項９２】
前記リンカーがコハク酸リンカーである、請求項８６〜９０のいずれかに記載の方法。
【請求項９３】
前記用量が７００〜８００ＩＵ／ｍＬの前記ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼを含む、請求項８６〜９２のいずれかに記載の方法。
【請求項９４】
前記用量が更に緩衝液および塩を含む、請求項８６〜９３のいずれかに記載の方法。
【請求項９５】
前記緩衝液がリン酸緩衝液を含む、請求項９４に記載の方法。
【請求項９６】
前記リン酸緩衝液が二塩基性リン酸ナトリウムおよび一塩基性リン酸ナトリウムを含む、請求項９５に記載の方法。
【請求項９７】
前記用量が５．２５〜５．７５ｍｇ／ｇの二塩基性リン酸ナトリウムを含む、請求項９６に記載の方法。
【請求項９８】
前記用量が１〜１．５ｍｇ／ｇの一塩基性リン酸ナトリウムを含む、請求項９５〜９７のいずれかに記載の方法。
【請求項９９】
前記塩が塩化ナトリウムである、請求項８６〜９８のいずれかに記載の方法。
【請求項１００】
前記用量が８〜９ｍｇ／ｇの塩化ナトリウムを含む、請求項９９に記載の方法。
【請求項１０１】
前記用量が、７５０ＩＵ／ｇのポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼを含み、前記ポリエチレングリコール基は５，０００ダルトンの分子量を持ち、前記アスパラギナーゼは大腸菌アスパラギナーゼであり、前記リンカーはウレタン・リンカーであり、前記緩衝液は５．２５〜５．７５ｍｇ／ｇの二塩基性リン酸ナトリウム、および１〜１．５ｍｇ／ｇの一塩基性リン酸ナトリウムを含むリン酸緩衝液を含み、および前記塩は、８〜９ｍｇ／ｇの塩化ナトリウムを含む請求項８６に記載の方法。
【請求項１０２】
前記用量が５．５８ｍｇ／ｇの二塩基性リン酸ナトリウムおよび１．２９ｍｇ／ｇの一塩基性リン酸ナトリウムを含むリン酸緩衝液を含み、および前記塩が８．５ｍｇ／ｇの塩化ナトリウムを含む、請求項１０１に記載の方法。
【請求項１０３】
前記用量が、７５０ＩＵ／ｇのポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼを含み、前記ポリエチレングリコール基は５，０００ダルトンの分子量を持ち、前記アスパラギナーゼは大腸菌アスパラギナーゼであり、前記リンカーはコハク酸リンカーであり、前記緩衝液は５．２５〜５．７５ｍｇ／ｇの二塩基性リン酸ナトリウム、および１〜１．５ｍｇ／ｇの一塩基性リン酸ナトリウムを含むリン酸緩衝液を含み、および前記塩は、８〜９ｍｇ／ｇの塩化ナトリウムを含む請求項８６に記載の方法。
【請求項１０４】
前記用量が５．５８ｍｇ／ｇの二塩基性リン酸ナトリウムおよび１．２９ｍｇ／ｇの一塩基性リン酸ナトリウムを含むリン酸緩衝液を含み、および前記塩が８．５ｍｇ／ｇの塩化ナトリウムを含む、請求項１０３に記載の方法。
【請求項１０５】
前記用量が更に緩衝液、塩および糖を含む、請求項８６〜９３のいずれかに記載の方法。
【請求項１０６】
前記緩衝液がリン酸緩衝液を含む、請求項１０５に記載の方法。
【請求項１０７】
前記リン酸緩衝液が二塩基性リン酸ナトリウムおよび一塩基性リン酸ナトリウムを含む、請求項１０６に記載の方法。
【請求項１０８】
前記用量が２．５〜３ｍｇ／ｇの二塩基性リン酸ナトリウムを含む、請求項１０７に記載の方法。
【請求項１０９】
前記用量が０．４５〜０．７５ｍｇ／ｇの一塩基性リン酸ナトリウムを含む、請求項１０７または１０８に記載の方法。
【請求項１１０】
前記塩が塩化ナトリウムである、請求項１０５〜１０９のいずれかに記載の方法。
【請求項１１１】
前記用量が４〜４．５ｍｇ／ｇの食塩を含む、請求項１１０に記載の方法。
【請求項１１２】
前記糖が二糖類を含む、請求項１０５〜１１１のいずれかに記載の方法。
【請求項１１３】
前記二糖類がショ糖を含む、請求項１１２に記載の方法。
【請求項１１４】
前記ショ糖の４０〜５０ｍｇ／ｇの範囲の量が存在する請求項１１３に記載の方法。
【請求項１１５】
前記用量が、７５０ＩＵ／ｇのポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼを含み、前記ポリエチレングリコール基は５，０００ダルトンの分子量を持ち、前記アスパラギナーゼは大腸菌アスパラギナーゼであり、前記リンカーはウレタン・リンカーであり、前記緩衝液は２．５〜３．０ｍｇ／ｇの二塩基性リン酸ナトリウム、および０．５〜０．７ｍｇ／ｇの一塩基性リン酸ナトリウムを含むリン酸緩衝液を含み、および前記塩は、４〜４．５ｍｇ／ｇの塩化ナトリウムを含み、および前記糖は４０〜５０ｍｇ／ｇのショ糖を含む、請求項１０５に記載の方法。
【請求項１１６】
前記用量が２．７９ｍｇ／ｇの二塩基性リン酸ナトリウム、および０．６ｍｇ／ｇの一塩基性リン酸ナトリウムを含むリン酸緩衝液を含み、前記塩が４．２５ｍｇ／ｇの量の塩化ナトリウムを含み、および前記糖が４５ｍｇ／ｇの量のショ糖を含む請求項１１５に記載の方法。
【請求項１１７】
前記用量が、７５０ＩＵ／ｇのポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼを含み、前記ポリエチレングリコール基は５，０００ダルトンの分子量を持ち、前記アスパラギナーゼは大腸菌アスパラギナーゼであり、前記リンカーはコハク酸リンカーであり、前記緩衝液は２．５〜３．０ｍｇ／ｇの二塩基性リン酸ナトリウム、および０．５〜０．７ｍｇ／ｇの一塩基性リン酸ナトリウムを含むリン酸緩衝液を含み、および前記塩は、４〜４．５ｍｇ／ｇの塩化ナトリウムを含み、および前記糖は４０〜５０ｍｇ／ｇのショ糖を含む、請求項１０５に記載の方法。
【請求項１１８】
前記用量が２．７９ｍｇ／ｇの二塩基性リン酸ナトリウム、および０．６ｍｇ／ｇの一塩基性リン酸ナトリウムを含むリン酸緩衝液を含み、前記塩が４．２５ｍｇ／ｇの量の塩化ナトリウムを含み、および前記糖が４５ｍｇ／ｇの量のショ糖を含む請求項１１７に記載の方法。
【請求項１１９】
凍結乾燥された貯蔵安定組成物を再構成することにより前記用量を製造することを更に含む、請求項１０５〜１１８のいずれかに記載の方法。
【請求項１２０】
前記用量が１，５００〜３，０００ＩＵ／ｍ２のポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼを前記被験者に送達する、請求項８６〜１１９のいずれかに記載の方法。
【請求項１２１】
前記用量が２，０００〜２，７５０ＩＵ／ｍ２のポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼを前記被験者に送達する、請求項１２０に記載の方法。
【請求項１２２】
前記被験者が誘導相、連結相および維持相を含む治療投薬計画を処方される、請求項８６〜１２１のいずれかに記載の方法。
【請求項１２３】
単回の投与単位を被験者に前記誘導相で投与すること、および複数の投与単位を前記維持相の間に投与することを含む、請求項１２２に記載の方法。
【請求項１２４】
投与単位を被験者に３週間ごとに投与することにより、複数の投与単位を被験者に投与することを含む、請求項１２３に記載の方法。
【請求項１２５】
投与単位を被験者に２週間ごとに投与することにより、複数の投与単位を被験者に投与することを含む、請求項１２３に記載の方法。
【請求項１２６】
前記被験者が年少者である、請求項８６〜１２５のいずれかに記載の方法。
【請求項１２７】
前記被験者が成人である、請求項８６〜１２５のいずれかに記載の方法。
【請求項１２８】
それぞれが、リンカーによりアスパラギナーゼに共有結合的に結合したポリアルキレンオキシド基を含むポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ；
緩衝液；および
塩
を含む組成物を含む、１つ以上の単位用量容器を含むキット。
【請求項１２９】
それぞれが、リンカーによりアスパラギナーゼに共有結合的に結合したポリアルキレンオキシド基を含むポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ；
緩衝液；
塩；および
糖
を含む凍結乾燥された貯蔵安定組成物を含む、１つ以上の単位用量容器を含むキット。
【請求項１３０】
前記ポリアルキレンオキシド基がポリエチレングリコール基を含む、請求項１２８または１２９に記載のキット。
【請求項１３１】
前記ポリエチレングリコール基が２，０００〜１０，０００ダルトンの範囲の分子量を有する、請求項１３０に記載のキット。
【請求項１３２】
前記ポリエチレングリコール基が５，０００ダルトンの分子量を有する、請求項１３１に記載のキット。
【請求項１３３】
前記アスパラギナーゼが大腸菌アスパラギナーゼである、請求項１２８〜１３２のいずれかに記載のキット。
【請求項１３４】
前記リンカーがウレタン・リンカーである、請求項１２８〜１３３のいずれかに記載キット。
【請求項１３５】
前記リンカーがコハク酸リンカーである、請求項１２８〜１３３のいずれかに記載のキット。
【請求項１３６】
前記ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼの５００〜１，０００ＩＵ／ｇの範囲の量が存在する、を含む、請求項１２８〜１３３のいずれかに記載のキット。
【請求項１３７】
前記緩衝液がリン酸緩衝液を含む、請求項１２８〜１３６のいずれかに記載のキット。
【請求項１３８】
前記リン酸緩衝液が二塩基性リン酸ナトリウムおよび一塩基性リン酸ナトリウムを含む、請求項１３７に記載のキット。
【請求項１３９】
前記二塩基性リン酸ナトリウムの０．１〜０．６ｗｔ．％の範囲の量が存在する、請求項１３８に記載のキット。
【請求項１４０】
前記一塩基性リン酸ナトリウムの０．０１〜０．２ｗｔ．％の範囲の量が存在する、請求項１３８または１３９に記載のキット。
【請求項１４１】
前記塩が塩化ナトリウムである、請求項１２８〜１４０のいずれかに記載のキット。
【請求項１４２】
塩化ナトリウムの０．１〜１ｗｔ．％の範囲の量が存在する、請求項１４１に記載のキット。
【請求項１４３】
前記糖が二糖類を含む、請求項１２８〜１４２のいずれかに記載のキット。
【請求項１４４】
前記二糖類がショ糖を含む、請求項１４３に記載のキット。
【請求項１４５】
前記糖がショ糖の１〜１０ｗｔ．％の範囲の量を含む、請求項１４３または１４４のいずれかに記載のキット。
【請求項１４６】
前記単位用量容器がバイアルである、請求項１２８〜１４５のいずれかに記載のキット。
【請求項１４７】
前記単位用量容器がガラスバイアルである、請求項１４６に記載のキット。
【請求項１４８】
前記単位用量容器が密封される、請求項１２８〜１４７のいずれかに記載のキット。
【請求項１４９】
請求項１２９〜１３３または１３６〜１４８のいずれかに記載のキットであって：
前記ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼが７５０ＩＵ／ｇの量で存在し；
前記ポリアルキレンオキシド基が５，０００ダルトンの分子量を持つポリエチレングリコール基を含み；
前記アスパラギナーゼは大腸菌アスパラギナーゼであり；
前記リンカーはウレタン・リンカーであり；
前記緩衝液は０．２５〜０．３ｗｔ．％の範囲の量の二塩基性リン酸ナトリウム、および０．０５〜０．０７ｗｔ．％の範囲の量の一塩基性リン酸ナトリウムのを含むリン酸緩衝液を含み；
前記塩は、０．４〜０．４５ｗｔ．％の範囲の量の塩化ナトリウムを含み；および
前記糖は４〜５ｗｔ．％の範囲の量のショ糖を含む、キット。
【請求項１５０】
請求項１２９〜１３３または１３６〜１４８に記載のキットであって：
前記ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼが７５０ＩＵ／ｇの量で存在し；
前記ポリアルキレンオキシド基が５，０００ダルトンの分子量を持つポリエチレングリコール基を含み；
前記アスパラギナーゼは大腸菌アスパラギナーゼであり；
前記リンカーはコハク酸リンカーであり；
前記緩衝液は０．２５〜０．３ｗｔ．％の範囲の量の二塩基性リン酸ナトリウム、および０．０５〜０．０７ｗｔ．％の範囲の量の一塩基性リン酸ナトリウムのを含むリン酸緩衝液を含み；
前記塩は、０．４〜０．４５ｗｔ．％の範囲の量の塩化ナトリウムを含み；および
前記糖は４〜５ｗｔ．％の範囲の量のショ糖を含む、キット。
【請求項１５１】
請求項１２８〜１３３または１３６〜１４８のいずれかに記載のキットであって：
前記ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼが７５０ＩＵ／ｇの量で存在し；
前記ポリアルキレンオキシド基が５，０００ダルトンの分子量を持つポリエチレングリコール基を含み；
前記アスパラギナーゼが大腸菌アスパラギナーゼであり；
前記リンカがウレタン・リンカーであり；
前記緩衝液は５．２５〜６．０ｗｔ．％の範囲の量の二塩基性リン酸ナトリウム、および１．０〜１．７５ｗｔ．％の範囲の量の一塩基性リン酸ナトリウムのを含むリン酸緩衝液を含み；
前記塩は、８．０〜９．０ｗｔ．％の範囲の量の塩化ナトリウムを含む、キット。
【請求項１５２】
請求項１２８〜１３３または１３６〜１４８のいずれかに記載のキットであって：
前記ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼが７５０ＩＵ／ｇの量で存在し；
前記ポリアルキレンオキシド基が５，０００ダルトンの分子量を持つポリエチレングリコール基を含み；
前記アスパラギナーゼが大腸菌アスパラギナーゼであり；前記リンカがコハク酸リンカーであり；
前記緩衝液は５．２５〜６．０ｗｔ．％の範囲の量の二塩基性リン酸ナトリウム、および１．０〜１．７５ｗｔ．％の範囲の量の一塩基性リン酸ナトリウムのを含むリン酸緩衝液を含み；
前記塩は、８．０〜９．０ｗｔ．％の範囲の量の塩化ナトリウムを含む、キット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
［関連出願の相互参照および参照による組み入れ］
本出願は、２０１６年６月１日に出願された米国仮特許出願第６２／３４４，２４９号、２０１６年６月１日に出願された米国仮特許出願第６２／３４４，２５２号、および２０１６年６月１日に出願された米国仮特許出願第６２／３４４，２５６号による優先権を主張し、これらのそれぞれは、その全体が参照により本出願に組み入れられる。
【背景技術】
【０００２】
［初めに］
Ｌ-アスパラギナーゼは、アミノ酸であるＬ-アスパラギンを脱アミノ化反応を経由して加水分解し、Ｌ-アスパラギン酸およびアンモニアを生成する酵素である。大腸菌は、２種類のアスパラギナーゼ・アイソザイムである、Ｌ-アスパラギナーゼＩおよびＬ-アスパラギナーゼＩＩを含む。Ｌ-アスパラギナーゼＩは、サイトゾルに存在し、およびアスパラギンに対して低い親和性を有する。しかしながら、Ｌ-アスパラギナーゼＩＩは、ペリプラズムに存在し、Ｌ-アスパラギンに対して高い親和性を有する。大腸菌Ｌ-アスパラギナーゼＩＩは、同一のサブユニットの４量体である。大腸菌Ｌ-アスパラギナーゼＩＩは、Ｌ-アスパラギンアミドハイドロラーゼ、タイプＥＣ-２，ＥＣ３．５．１．１としても知られている。
【０００３】
Ｌ-アスパラギナーゼは白血病に対する治療価値を有することが知られている。Ｌ-アスパラギナーゼは、Ｌ-アスパラギンのＬ-アスパラギン酸およびアンモニアへの反応を触媒するアミノヒドロラーゼである。これは、Ｌ-アスパラギンの植物、動物および微生物における代謝において主要な役割を果たす。現在では、この酵素の治療活性が、Ｌ-アスパラギン合成能力に障害のある腫瘍（白血病）細胞の増殖および生存のための必須栄養素である、循環するＬ-アスパラギンの枯渇／除去により引き起こされることが確立されている。Ｌ-アスパラギン合成能力は正常細胞では障害を受けていない。
【０００４】
Ｌ-アスパラギナーゼの白血病患者への投与は、Ｌ-アスパラギンの加水分解による腫瘍細胞の選択的な死を誘発し、悪性腫瘍の治療をもたらす。ある場合には、L-アスパラギナーゼそれ自身が、高いクリアランスおよびこの酵素で治療されている患者に免疫反応を引き起こす可能性などのタンパク質治療薬の典型的な不利益をこうむる。これらの欠陥に対処するために、Ｌ-アスパラギナーゼのポリエチレングリコール-結合誘導体（ＰＥＧ-アスパラギナーゼ）を用い得る。大腸菌から抽出したＬ-アスパラギナーゼＩＩを用いてＰＥＧ-アスパラギナーゼを生成することができ、これは実質的に非抗原性であり、患者の循環からのクリアランスの速度の減少を示している。
【０００５】
ＰＥＧ-アスパラギナーゼ液体注射製剤（Ｏｎｃａｓｐａｒ（登録商標））は、既に米国食品医薬品局により、商業的マーケティングが承認されている。Ｏｎｃａｓｐａｒ（登録商標）は、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）患者の、多剤化学療法投薬計画の第一選択薬の一成分としてとして承認されている。加えて、Ｏｎｃａｓｐａｒ（登録商標）は、アスパラギナーゼ（例えば、Ｌ-アスパラギナーゼの天然型）に過敏なＡＬＬ患者の治療のために承認されている。
【発明の概要】
【０００６】
本発明の態様は、ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ組成物を含む。ある例では、この組成物は１つ以上の緩衝液および塩を含む。他の態様では、この組成物は、凍結乾燥された貯蔵安定組成物である。ある例では、この凍結乾燥された組成物は、１つ以上の緩衝液、塩および糖を含む。本発明の態様はこの組成物を作成する方法をさらに含む。この組成物には、例えば、被験者における腫瘍性の病態の治療における等の様々な用途が見出される。
【図面の簡単な説明】
【０００７】
【図１】図１は、本開示の実施形態に従う凍結乾燥された貯蔵安定組成物の製造方法のためのプロセスのフローダイヤグラムを示す。
【図２】図２は、本開示の実施形態に従う凍結乾燥された貯蔵安定組成物の４０°Ｃにおける純度（％）対時間（週）のグラフを示す。
【図３】図３は、本開示の実施形態に従う凍結乾燥された貯蔵安定組成物の４０°Ｃにおける効力（ＩＵ／ｍＬ）対時間（週）のグラフを示す。
【図４】図４は、本開示の実施形態に従う凍結乾燥された貯蔵安定組成物の２５°Ｃにおける純度（％）対時間（週）のグラフを示す。
【図５】図５は、本開示の実施形態に従う凍結乾燥された貯蔵安定組成物の２５°Ｃにおける効力（ＩＵ／ｍＬ）対時間（週）のグラフを示す。
【図６】図６は、本開示の実施形態に従う凍結乾燥された貯蔵安定組成物作成のプロセスのフローダイヤグラムを示す。最終的な製剤およびろ過のステップが示される。
【図７】図７は、本開示の実施形態に従う凍結乾燥された貯蔵安定組成物作成のプロセスのフローダイヤグラムを示す。無菌充填および凍結乾燥ステップが示される。
【図８】図８は、２〜８°Ｃ（例えば、５°Ｃ）で保存された本開示の実施形態に従う凍結乾燥された組成物のＧＦ-ＨＰＬＣによる純度（％）対時間（月）のグラフを示す。
【図９】図９は、２〜８°Ｃ（例えば、５°Ｃ）で保存された本開示の実施形態に従う凍結乾燥された組成物の効力（活性）（ＩＵ／ｍＬ）対時間（月）のグラフを示す。
【図１０】図１０は、２〜８°Ｃ（例えば、５°Ｃ）で保存された本開示の実施形態に従う凍結乾燥された組成物のＧＦ-ＨＰＬＣによる合計の凝集物対時間（月）のグラフを示す。
【図１１】図１１は、加速された条件（２５±３°Ｃ；６０％±５％ＲＨ）下で保存された本開示の実施形態に従う凍結乾燥された組成物のＧＦ-ＨＰＬＣによる純度（％）対時間（月）のグラフを示す。
【図１２】図１２は、加速された条件（２５±３°Ｃ；６０％±５％ＲＨ）下で保存された本開示の実施形態に従う凍結乾燥された組成物の効力（活性）（ＩＵ／ｍＬ）対時間（月）のグラフを示す。
【図１３】図１３は、加速された条件（２５±３°Ｃ；６０％±５％ＲＨ）下で保存された本開示の実施形態に従う凍結乾燥された組成物のＧＦ-ＨＰＬＣによる全凝集物対時間（月）のグラフを示す。
【図１４】図１４は、熱ストレス条件下（４０±２°Ｃ；７５％±５％ＲＨ）で保存された本開示の実施形態に従う凍結乾燥された組成物のＧＦ-ＨＰＬＣによる純度（％）対時間（月）のグラフを示す。
【図１５】図１５は、熱ストレス条件下（４０±２°Ｃ；７５％±５％ＲＨ）で保存された本開示の実施形態に従う凍結乾燥された組成物の効力（活性）（ＩＵ／ｍＬ）対時間（月）のグラフを示す。
【図１６】図１６は、熱ストレス条件下（４０±２°Ｃ；７５％±５％ＲＨ）で保存された本開示の実施形態に従う凍結乾燥された組成物のＧＦ-ＨＰＬＣによる全凝集物対対時間（月）のグラフを示す。
【発明を実施するための形態】
【０００８】
［定義］
本開示の実施形態の記載において、以下の用語が使用され、および以下に示されるように定義することを意図している。
【０００９】
「実質的に精製された」は、ある物質が存在していた場所のサンプルの大部分を含むことを意味する。例えば、実質的に精製されたサンプルは５０％以上の目的の物質を含むなど、６０％以上の目的の物質を含むなど、７５％以上の目的の物質を含むなど、９０％以上の目的の物質を含むなど、９５％以上の目的の物質を含むなど、９９％以上の目的の物質を含むことも含まれる。任意の便利な手順を目的の物質の精製に用いることができ、および限定はされないが、それにはろ過（例えば、ディスフィルトレーション、限外ろ過等）、選択的沈殿、結晶化、イオン交換クロマトグラフィ、アフィニティクロマトグラフィおよび密度に従う沈降が含まれる。
【００１０】
「単離された」は、目的の化合物が、その化合物が自然に生じている環境とは違う環境にあることを意味する。「単離された」は、サンプル中の目的の化合物が、実質的に富化されているか、および／または目的の化合物が、精製されているか、もしくは実質的に精製されていることを意味する。
【００１１】
用語「患者」および「被験者」は交換可能に用いられ、その従来の意味で、本開示の組成物の投与により予防できるか、もしくは治療できる病態に罹患しているか、または罹患する傾向がある生きている生命体を指し、ヒトおよびヒト以外の動物の両方を含む。被験者の例は、限定はされないが、ヒト、チンパンジーおよび他のサル類およびサル属；ウシ、ヒツジ、ブタ、ヤギおよびウマ等の家畜；イヌおよびネコなどの家畜化された哺乳類；マウス、ラット、モルモットなどの齧歯類を含む実験動物；ニワトリ、シチメンチョウおよび他の家禽鳥、アヒル、ガチョウ等の家禽、野生および狩猟鳥を含む鳥類を含む。この用語は特定の年齢を示さない。従って、成長した、年少および新生の個体が対象になる。
【００１２】
「薬学的に有効な量」および「治療的に有効な量」は、特定の病気もしくは疾患もしくはその１つ以上の症状を治療するか、および／またはその病気もしくは疾患を予防するために十分な化合物または組成物の量を指す。腫瘍状態に関しては、薬学的に、または治療的に有効な量は、とりわけ、患者における癌の量および／または発生の減少を引き起こすか、および／または癌の増殖速度を減少させるために十分な量を指す。
【００１３】
本明細書で用いられる用語「治療すること」または「治療」は、哺乳類（例えば、ヒト）などの患者の疾患または医学的状態を治療すること、もしくはそれらの治療を意味し、以下を含む：（ａ）被験者の予防的治療などの、疾患または医学的状態の発生を防止すること；（ｂ）患者の疾患または医学的状態の除去または軽減を引き起こすなどの疾患または医学的状態を緩和すること；（ｃ）例えば、患者の疾患または医学的状態の進展を遅延させるかまたは停止させることにより疾患または医学的状態を抑制すること；または（ｄ）患者の疾患または医学的状態の症状を緩和すること。
【００１４】
用語「生理学的状態」は、生きている細胞に適合する条件を包含することを意味しており、例えば、生きている細胞に適合する、ｐＨ、塩分濃度の主に水性条件を意味する。
【００１５】
本開示の実施形態が、その詳細にわたって記載される前に、実施形態は変化し得るので、本明細書に記載される特定の実施形態に限定されないことを理解されたい。本明細書において用いられ専門用語は、特定の実施形態のみを記載する目的で用いられ、およびその専門用語は制限することを意図していないことも理解されたい。本開示の実施形態の範囲は、添付された特許請求の範囲によってのみ限定される。他のように定義されていない限り、本明細書において用いられる全ての技術的および科学的用語は、本発明が属する技術分野の当業者により通常理解されるものと同じ意味を有する。値の範囲が提供されている場合、文脈が明白に他のことを指示していない限り、範囲の上限と下限の間に介在する値、および言明された範囲の中の他の任意の言明されたか、または介在する値は、それらの下限の１０分の１の単位まで、全て本開示の実施形態の中に包含されることを理解されたい。これらの、より小さな範囲の上限および下限は独立して、このより小さな範囲に含まれ、および本開示の実施形態にも包含され、言明された範囲から特定の除去された限界の支配を受ける。言明された範囲が限界の１つまたは両方を含む場合、それらに含まれる限界のいずれか、または両方を除外した範囲も本発明に含まれる。本明細書においてける特定の範囲が、用語「約」（ａｂｏｕｔ）が接頭辞としてついた数値で表される。本明細書において用いられる用語「約」は、それが先行する厳密な数字に、それに近い数字または概算の数字を提供するための文字的な支援をする。
列挙された数字に、ある数字が近いか、または概算であるかを決定するために、近いか、または概算である数字は、それが表される文脈において、特定の列挙された数字の実質的な等価物を提供する。
【００１６】
本明細書において言及される全ての刊行物、特許および特許出願は、個々の刊行物、特許および特許出願のそれぞれが、参照により組み込まれるために、あたかも明確に、および個々に参照により示されるのと同程度に、参照により本明細書に組み込まれる。更に、それぞれの列挙された刊行物、特許および特許出願は、刊行物が引用された対象を開示しおよび記載するために、参照により本明細書に組み入れられる。引用された刊行物は、単に本出願の出願日に先立つ開示として提供され、本明細書中の発明が、先行発明の理由で、かかる刊行物に先立つ資格がないことの承認と解釈されるべきではない。更に、提供されている刊行日は、個々に確認される必要のある実際の刊行日と異なることがあり得る。
【００１７】
特許請求の範囲が、なんらかの随意的な要素を排除するために起草されていることに注意されたい。そのような言明は、特許請求範囲の要素、または「否定的な」制限の使用との関連において、除外的な用語「もっぱら」（ｓｏｌｅｌｙ）、「唯一の」（ｏｎｌｙ）等の使用のための前例の根拠として機能することが意図されている。当業者が本開示を読んだときに明白なように、本明細書に記載され、説明される個別の実施形態のそれぞれが、本開示の実施形態の範囲および趣旨を逸脱することなく、他の実施形態の要素および特徴から容易に分離されるか、またはそれらと組み合わされる、別々の要素および特徴を有している。任意の列挙された方法は、列挙された事象の順番に従って、または論理的に可能な任意の順番に従って遂行できる。本明細書に記載されるものと同様の、または等しい任意の方法および物質も本開示の実施形態の実施または試験において用いることができる。代表的な説明的な方法および物質が開示される。
【００１８】
［発明の詳細な説明］
本発明の態様は、ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ組成物を含む。ある例では、この組成物は１つ以上の緩衝液および塩を含む。本発明の態様はこの組成物を作成する方法をさらに含む。この組成物には、例えば、被験者における腫瘍性の病態の治療における等の、様々な用途が見出される。
【００１９】
他の態様では、この組成物は、凍結乾燥された貯蔵安定組成物である。本発明の態様は凍結乾燥された貯蔵安定ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ組成物を含む。ある例では、この凍結乾燥された組成物は、１つ以上の緩衝液、塩および糖を含む。本発明の態様は更にこの組成物を作成する方法を含む。この組成物には、例えば、被験者における腫瘍状態（例えば、被験者の急性骨髄性白血病（ＡＭＬ））の治療等の、様々な用途が見出される。
【００２０】
本発明の態様は有効なポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼの用量を投与することを含む。本発明の態様は、被験者の治療に用いることができるポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼを含む組成物およびキットを更に含む。
【００２１】
本開示の実施形態を更に記載することの中で、組成物（例えば、液体および凍結乾燥された）が、最初に詳細に記載される。次いで、作成法および使用法ならびに組成物を含むキットについて記載される。
【００２２】
［組成物］
本開示の態様は、リンカーによりアスパラギナーゼに共有結合的に結合したポリアルキレンオキシド基を含むポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼの組成物を含む。この組成物は、１つ以上の緩衝液および塩も含むことができる。特定の実施形態では、この組成物は凍結乾燥された貯蔵安定組成物である。凍結乾燥された貯蔵安定組成物は、１つ以上の、塩および糖も含むことができる。
【００２３】
本明細書に記載され、本開示の組成物ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼを含むことができる。ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼは、１つ以上のポリアルキレンオキシド基にリンカーにより共有結合的に結合したアスパラギナーゼを含む。アスパラギナーゼは、４つの同一のサブユニットにより構成され、４量体ごとに１つの活性サイトを有する酵素である。例えば、アスパラギナーゼ酵素は、Ｌ-アスパラギナーゼ（例えば、Ｌ-アスパラギナーゼＩＩ）であることができ、これは以下の反応に従い、アミノ酸であるＬ-アスパラギン（（Ｓ）-２，４-ジアミノ-４-オキソブタン酸、またはアスパラギニンとしても知られ、ＡｓｎまたはＮと省略される）からＬ-アスパラギン酸（（Ｓ）-２-アミノコハク酸としても知られる）およびアンモニアを生成する：
【化１】
2019521179.tif 000003
【００２４】
ある場合には、アスパラギナーゼは、以下の反応に従い、アミノ酸であるＬ-グルタミン（（Ｓ）-２，５-ジアミノ-５-オキソペンタン酸としても知られ、ＧｌｎまたはＱと略される）から、Ｌ-グルタミン酸（（Ｓ）-２-アミノペンタンジオイック酸としても知られる）およびアンモニアを生成する：
【化２】
2019521179.tif 000004
【００２５】
Ｌ-アスパラギナーゼにより媒介される上記の反応は、脱アミノ化反応とも称される。ある例では、組成物中のＬ-アスパラギナーゼは、限定はされないが、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ．）を含む微生物などの原核生物のソースから導出される。その場合、対象の組成物中のアスパラギナーゼ大腸菌アスパラギナーゼである。ある場合には、アスパラギナーゼは大腸菌により発現される。このアスパラギナーゼはアスパラギナーゼを発現する大腸菌を含む培地から回収され、精製される。野生型のアスパラギナーゼに加えて、アスパラギナーゼは非天然型のアスパラギナーゼおよび／または合成的に生産されたアスパラギナーゼおよび／または天然型および／または合成アスパラギナーゼの活性フラグメントであることもできる。本発明の実施形態において用いることができるアスパラギナーゼは、限定はされないが以下において記載されているものである：９，３２２，００８；９，１２７，２６６；９，０５１，５６１；８，６１７，８６８；７，８０７，４３６；６，９９１，７８８；６，５３７，５４７；６，４３６，３９６；６，３６８，８４５；６，２７４，３６７；６，２５１，３８８；６，１６５，７３５；６，１４０，１０１；６，０８７，１５１；６，０４２，８２５；５，８５４，０５１；５，３１０，６７０；４，７２９，９５７および４，６１７，２７１；これらの開示は参照により本明細書に組み入れられる。
【００２６】
上記のように、ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ組成物中のアスパラギナーゼは、１つ以上のポリアルキレンオキシド基に共有結合的に結合したアスパラギナーゼである。例えば、このアスパラギナーゼは、翻訳後のプロセスにおいて、１つ以上のポリアルキレンオキシド基に共有結合的に結合したアスパラギナーゼを含むことができる。ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼは、アスパラギナーゼの１つ以上の位置において１つ以上のポリアルキレンオキシド基に共有結合的に結合したアスパラギナーゼを含み得る。例えば、ポリアルキレンオキシド基は、アスパラギナーゼのアミノ酸残基に共有結合的に結合できる。ある場合には、このポリアルキレンオキシド基はアスパラギナーゼのアミノ酸残基のアミノ基に共有結合的に結合できる。いくつかの実施形態では、このポリアルキレンオキシド基は、アスパラギナーゼのＮ-末端アミノ酸のアミノ酸側鎖に共有結合的に結合している。いくつかの実施形態では、このポリアルキレンオキシド基は、アスパラギナーゼ中のリジン（Ｋ）のε−アミノ基に共有結合的に結合している。いくつかの実施形態ではこのポリアルキレンオキシド基は、アスパラギナーゼのＮ−末端アミノ酸のアミノ酸側鎖およびリジン（Ｋ）のε−アミノ基に共有結合的に結合している。
ある場合には、このポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼは実質的に非抗原性である。「非抗原性」または「実質的に非抗原性」は、その組成物が被験者に投与されたときに、顕著な免疫反応を引き出さないことを意味する。ある例では、ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼは、修飾されていないアスパラギナーゼに比べて、被験者の循環からの低下したクリアランス速度を有する。例えば、ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼの排出半減期は１日以上、２日以上、または３日以上、または４日以上、または５日以上、または６日以上、または７日以上、または８日以上、または９日以上、または１０日以上、または１１日以上、または１２日以上、または１３日以上、または１４日以上、または１５日以上、または１６日以上、または１７日以上、または１８日以上、または１９日以上、または２０日以上等であり得る。いくつかの実施形態ではポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼの排出半減期は３日以上である。いくつかの実施形態ではポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼの排出半減期は５日以上である。
【００２７】
アスパラギナーゼに結合しているポリアルキレンオキシド基は、生理学的に許容可能な任意のポリアルキレンオキシド基であってよい。ポリ（アルキレンオキシド）（ＰＡＯ）は、ポリオキシアルキレン（ＰＯＡ）としても知られるが、これはアルキレンオキシド（例えば、エチレンオキシド、プロピレンオキシド、ブチレンオキシド）の重合により合成される。ホモポリマーが、ただ１種類のアルキレンオキシドから合成される一方で、共重合体は２つ以上の異なるアルキレンオキシドから合成され、アルキレンオキシド共重合体（ＡＯＣ）として知られる。前者の例は、エチレンオキシド（ＥＯ）のポリマーであるポリ（エチレンオキシド）（ＰＥＯ、およびプロピレンオキシド（ＰＯ）のポリマーであるポリ（プロピレンオキシド）（ＰＰＯ）である。ポリ（エチレンオキシド）は、通常はポリエチレングリコール（ＰＥＧ）またはポリオキシエチレン（ＰＯＥ）としても知られる。このようなポリマーの分子量は、一般的には長さ（または反復単位）の平均として特徴づけられる。標準の線形の形状に加えて、分枝または星形のポリ（アルキレンオキシド）が、それぞれが、ポリマー鎖の成長の開始点として機能する、複数の水酸基、アミノ基、またはチオール基を持った多官能性の開始剤により重合反応を開始することにより合成できる。例えば、グリセリン（３つの水酸基を持つ）を開始剤として使用すると、３本腕の枝分かれポリマーをもたらす一方で、ペンタエリスリトールは、４本腕のポリマーをもたらす。従来、この種の３〜１０本の腕のポリマーは、「分枝した」と呼ばれる一方、１０本腕以上のものは、「星」ポリマーと呼ばれる。「櫛形」共重合体は、分枝および星形と同様であるが、櫛形共重合体の開始剤は、それぞれがポリマー鎖の成長の開始点として機能する、複数の水酸基、アミノ基、またはチオール基が、開始剤の骨格に沿って配置されている多官能性ポリマーである。「グラフト」共重合体は、ペンダントポリマー鎖を、不飽和のC=C結合を有するポリマー骨格に沿って付加するか、またはペンダント鎖を、反応性の単官能性ポリマー鎖を用いて付加できるペンダント官能基(例えば、水酸基)に付加して合成できる。すべてのポリ(アルキレンオキシド)は、アルキレンオキシドから誘導される反復単位に加えて、ポリマー合成の開始に用いられた分子に対応する単一残基を含む。 線形ポリマーについては、合成に用いられたアルキレンオキシドに対応するアルキレングリコール (例えば、それぞれエチレングリコールおよびエチレンオキシド、)であることができ、および従って開始剤から導出された残基は、そのポリマー鎖の他の反復単位から区別できない。アルキレングリコール以外の低分子が、しばしば開始剤として使用され、その例は、メタノールまたはＮ-ブタノール（線形ポリマーについて）およびトリメチロールプロパン、グリセロール、およびペンタエリスリトール（分枝ポリマーについて）またはエチレンジアミン含む。最終的ポリマー鎖の質量に比較した開始剤の質量は、一般的に大変小さく、通常は無視できる。従って、用語ポリ（アルキレンオキシド）は、本明細書においては慣例的な意味で用いられ、およびアルキレングリコール分子から開始されたポリ(アルキレンオ��シド)および他の低分子から開始されたポリ(アルキレンオキシド)の両方を含む。
【００２８】
特定の実施形態では、生理学的に許容できるポリアルキレンオキシド基は、生きている細胞と両立できる条件、例えば、生きている細胞と両立できる、大部分が水性状態の温度、ｐH、塩濃度では実質的に安定である。特定の実施形態では、ポリアルキレンオキシド基は水溶性である。用語「水溶性ポリマー」は、被験者の体内に見出される水性状態などで、実質的に水に溶解性のポリアルキレンオキシド基を指す。興味のあるポリアルキレンオキシド基は、限定はされないが直鎖ポリアルキレングリコールを含む。本発明の特定の実施形態で用いられる直鎖ポリアルキレングリコールは、以下の化学式のものである：
【化３】
2019521179.tif 000005
【００２９】
式中、Ｒは、水素、低級アルキルおよびそれらの混合物から成る群から選ばれ、Ｒ１は水素および低級アルキルから成る群から選ばれ、およびｎは正の整数である。「低級アルキル」とは、１〜４個の炭素原子を有するアルキル、すなわちメチル、エチル、プロピル、ブチルおよびそれらの異性体を意味する。Ｒは水素、メチル、およびそれらの混合物より成る群から選ばれることができ、Ｒ１は水素およびメチルより成る群から選ばれることができ、およびｎは所望のポリマーのサイズを提供するために選ばれる正の整数であることができる。
【００３０】
ある例では、本発明の実施形態において用いられるポリ（アルキレングリコール）は、ポリ（エチレングリコール）、ポリ（プロピレングリコール）、それらの混合物、およびポリ（エチレングリコール）およびポリ（プロピレングリコール）の共重合体であり、ポリマーの末端水酸基の１つは低級アルキル基により置換され得る。いくつかの実施形態ではポリアルキレンオキシドはポリエチレングリコール（ＰＥＧである。特定の実施形態では、このポリエチレングリコール（ＰＥＧ）１，０００〜２０，０００ダルトンの分子量を有する。特定の実施形態では、このＰＥＧは、１，０００〜２０，０００の分子量ダルトン、または１，０００〜１９，０００ダルトン、または１，０００〜１８，０００ダルトン、または１，０００〜１７，０００ダルトン、または１，０００〜１６，０００ダルトン、または１，０００〜１５，０００ダルトン、または１，０００〜１４，０００ダルトン、または１，０００〜１３，０００ダルトン、または１，０００〜１２，０００ダルトン、または１，０００〜１１，０００，または１，０００〜１０，０００，または１，５００〜１０，０００ダルトン、または２，０００〜１０，０００ダルトン、または２，０００〜９，０００ダルトン、または２，０００〜８，０００ダルトン、または２，０００〜７，０００ダルトン、または２，０００〜６，０００ダルトン、または３，０００〜６，０００ダルトンまたは４，０００〜６，０００ダルトン、または４，５００〜５，５００ダルトンの分子量を有する。特定の実施形態では、前記ＰＥＧは２，０００〜１０，０００ダルトンの分子量を有する。特定の実施形態では、前記ＰＥＧはｆ４，０００〜６，０００ダルトンの分子量を有する。特定の実施形態では、前記ＰＥＧは５，０００ダルトンの分子量を有する。ある例では、前記ポリエチレングリコールは、メトキシポリエチレングリコール（例えば、モノメトキシポリエチレングリコール、または「ｍＰＥＧ」）である。
【００３１】
上述したように、ポリアルキレンオキシド基は、アスパラギナーゼに共有結合的に結合できる。ある場合には、前記ポリアルキレンオキシド基は、リンカーによりアスパラギナーゼに共有結合的に結合する。その場合、このポリアルキレンオキシド基は、リンカーを介してアスパラギナーゼに共有結合的に結合できる。このリンカーは、ポリアルキレンオキシド基のアスパラギナーゼへの結合を可能にする任意の便利なリンカーであってよい。．例えば、ポリエチレンオキシド基およびアスパラギナーゼの間の共有結合を提供する反応性官能基を含み得る。ある場合には、このリンカーはポリエチレンオキシド基およびアスパラギナーゼのアミノ酸残基のアミノ酸の間に共有結合を提供する反応性官能基を含む。例えば、このリンカーはポリエチレンオキシド基およびアスパラギナーゼのアミノ酸残基のアミノ基との間の共有結合を提供する反応性官能基を含み得る。そのような反応性官能基の例は、限定はされないが、p-ニトロフェノキシ、チアゾリジニルチオン、Ｎ-ヒドロキシスクシンイミジル、または限定はされないが、Ｎ-ヒドロキシベンゾトリアゾリル、ハロゲン、Ｎ-ヒドロキシフタリミジル、イミダゾリル、Ｏ-アシル尿素、ペンタフルオロフェノールまたは２，４，６-トリクロロフェノール等の他の適した反応性官能基を含む。ある場合には、前記リンカーの反応性官能基は、Ｎ-ヒドロキシスクシンイミジルである。従って、それによるポリアルキレンオキシド基のアスパラギナーゼへの共有結合では、このリンカーは、限定はされないが、ウレタン・リンカー（カルバメート・リンカーとしても知られる）、コハク酸リンカー等の官能基を含み得る。
【００３２】
特定の実施形態では、上記リンカーはウレタン・リンカー（カルバメート・リンカーとしても知られる）を含む。例えば、ウレタン（カルバメート）を介するメトキシポリエチレングリコール（ｍＰＥＧ）のポリペプチド（例えば、アスパラギナーゼ）のアミノ酸のアミノ基への結合反応が以下に示される。
【化４】
2019521179.tif 000006
【００３３】
上に示される反応では、メトキシポリエチレングリコールサクシンイミドイルカーボネート（ＳＣ-ＰＥＧとも称される）が、ポリペプチド（例えば、アスパラギナーゼ）のアミノ酸のアミノ基と反応しウレタン（カルバメート）リンカーを持つポリエチレングリコール-アスパラギナーゼを生成する。ＳＣ-ＰＥＧ-アスパラギナーゼは、Ａｎｇｉｏｌｉｌｌｏ， ＡＬ．， ｅｔ ａｌ．，「Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃ （ＰＫ） ａｎｄ ｐｈａｒｍａｃｏｄｙｎａｍｉｃｓ （ＰＤ） ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｏｆ ＳＣ−ＰＥＧ Ｅ． ｃｏｌｉ １−ａｓｐａｒａｇｉｎａｓｅ （ＥＺＮ−２２８５） ｉｎ ｔｈｅ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ Ｇｒｏｕｐ （ＣＯＧ） ｓｔｕｄｙ ＡＡＬＬ０７Ｐ４」， ２０１２ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｓｏｃｉｅｔｙ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ （ＡＳＣＯ） Ａｎｎｕａｌ Ｍｅｅｔｉｎｇ， Ｐｏｓｔｅｒ ９５４３；；およびＡｎｇｉｏｌｉｌｌｏ， ＡＬ．， ｅｔ ａｌ．， 「Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃ ａｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｏｄｙｎａｍｉｃ Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｏｆ ペグアスパラガーゼ Ｐｅｇｏｌ Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ Ｌ−Ａｓｐａｒａｇｉｎａｓｅ ｉｎ ｔｈｅ Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｐａｔｉｅｎｔｓ Ｗｉｔｈ Ａｃｕｔｅ Ｌｙｍｐｈｏｂｌａｓｔｉｃ Ｌｅｕｋｅｍｉａ： Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｆｒｏｍ Ｃｈｉｌｄｒｅｎ’ｓ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ Ｇｒｏｕｐ Ｓｔｕｄｙ ＡＡＬＬ０７Ｐ４」， Ｊ Ｃｌｉｎ． Ｏｎｃｏｌｏｇｙ， ３２（３４），２０１４，３８７４−３８８２にも記載されている。
【００３４】
特定の実施形態では、前記リンカーは、コハク酸リンカー（サクシニル・リンカーとも呼ばれる）である。例えば、コハク酸リンカーを介した、メトキシポリエチレングリコール（ｍＰＥＧ）のポリペプチド（例えば、アスパラギナーゼ）のアミノ酸のアミノ基への結合が以下に示される。
【化５】
2019521179.tif 000007
【００３５】
上に示された反応では、メトキシポリエチレングリコールサクシンイミジルサクシネート（ＳＳ-ＰＥＧとも称される）が、ポリペプチド（例えば、アスパラギナーゼ）のアミノ酸のアミノ基と反応して、コハク酸リンカーを持つポリエチレングリコール-アスパラギナーゼを生成する。ＳＳ-ＰＥＧ-アスパラギナーゼは、米国特許第５，１２２，６１４号；５，３２４，８４４号；および５，６１２，４６０号にも記載されており、それぞれの開示は参照により本明細書に組み入れられる。
【００３６】
特定の実施形態では、ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼを含む組成物は脱水された組成物である。本明細書で用いられる、脱水された組成物は、カール・フィッシャー（Ｋａｒｌ Ｆｉｓｃｈｅｒ（ＫＦ））滴定法により、２５％以下、または２０％以下、または１５％以下、または１０％以下、または９％以下、または８％以下、または７％以下、または６％以下、または５％以下、または４％以下、または３％以下、または２％以下、または１％以下の水分などの低い量の水を含む組成物である。ある場合には、脱水された組成物は、カール・フィッシャー滴定により３％以下の水分を含む。ある場合には、脱水された組成物は、カール・フィッシャー滴定により１％以下の水分を含む。ある場合には、脱水された組成物は、カール・フィッシャー滴定により０．５％以下の水分を含む。脱水された組成物を製造するために、組成物の温度を増大する（例えば、加熱）、圧力を低下する、凍結乾燥（フリーズドライとしても知られる）等およびそれらの組み合わせ等の任意の便利な手順を用い得る。
【００３７】
特定の実施形態では、凍結乾燥が脱水された組成物の製造に用いられ、および従ってこの組成物（例えば、ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼを含む組成物）は凍結乾燥された組成物である。ある例では凍結乾燥された組成物は、組成物から昇華により水が除去された組成物であり、そこでは組成物中の水は固体から気体への相転移を受ける。例えば、凍結乾燥された組成物は、組成物を凍結し（例えば、組成物中の水を凍結する）、および次いで、組成物の周囲の圧力を、組成物中の水が昇華するように低下させることにより水を除去した組成物であることができる。上述したように、凍結乾燥された組成物は、カール・フィッシャー滴定により測定されたものとして、２５％以下、または２０％以下、または１５％以下、または１０％以下、または９％以下、または８％以下等の、または７％以下、または６％以下、または５％以下、または４％以下、または３％以下、または２％以下、または１％以下、または０．５％以下、または０．２５％以下、または０．１％以下の等の水分量を含み得る。特定の実施形態では、凍結乾燥された組成物は、カール・フィッシャー滴定により測定されたものとして、約０．１％〜約２５％、または約０．２５％〜約２０％、または約０．５％〜約１５％、または約１％〜約１０％、または約２％〜約９％、または約３％〜約８％、または約４％〜約７％、または約５％〜約６％等の低い水分量を含み得る。実施形態では、凍結乾燥された組成物は、カール・フィッシャー滴定により測定されたものとして、約０．１％〜約５％、または約０．２５％〜約４％、または約０．５％〜約３％、または約１％〜約２％等の低い水分量を含み得る。ある場合には、凍結乾燥された組成物は、カール・フィッシャー滴定により測定されたものとして、３％以下の水分を含む。ある場合には、凍結乾燥された組成物は、カール・フィッシャー滴定により測定されたものとして、１％以下の水分を含む。ある場合には、凍結乾燥された組成物は、カール・フィッシャー滴定により測定されたものとして、０．５％以下の水分を含む。
【００３８】
凍結乾燥された組成物の低い水分含量に起因して、上述したように、凍結乾燥された組成物は固体の形状であることができる。ある場合には、固体の凍結乾燥された組成物は粉末である。ある場合には、凍結乾燥された組成物は、長時間の期間の組成物の保存を容易にする（例えば、同じ組成物の液体製剤と比較して）。例えば、凍結乾燥された組成物は貯蔵安定組成物（例えば、凍結乾燥された貯蔵安定組成物）であることができこの組成物は長時間の期間、実質的に安定である。「安定な」もしくは「実質的に安定な」または「保存安定な」は、顕著に分解しない組成物および／または延長された期間にわたって活性を失わない組成物を意味する。例えば、貯蔵安定組成物は、長時間の期間にわたって、組成物の分解に起因する１０％以下の不純物、または９％以下、または８％以下、または７％以下、または６％以下、または５％以下、または４％以下、または３％以下、または２％以下、または１％以下等の分解生成物等の顕著な不純物を含まないことができる。特定の実施形態では、貯蔵安定組成物は、長時間の期間にわたって、約１％〜約１０％、または約２％〜約９％、または約３％〜約８％、または約４％〜約７％、または約６％〜約５％未満の分解生成物を有し得る。特定の例では、貯蔵安定組成物は、長時間の期間にわたって、５％以下の不純物を有する。ある場合には、貯蔵安定組成物は、長時間の期間にわたって、その活性の１００％、または９９％以上、または９８％以上、または９７％以上、または９６％以上、または９５％以上、または９４％以上、または９３％以上、または９２％以上、または９１％以上、または９０％以上、または８５％以上、または８０％以上、または７５％以上の活性を長時間の期間にわたって保持する等、長時間の期間にわたってその活性を実質的に保持する。いくつかの実施形態では、貯蔵安定組成物は、約７５％〜約１００％、または約８０％〜約９９％、または約８５％〜約９８％、または約９０％〜約９７％、または約９１〜約９６％、または約９２％〜約９５％、または約９３％〜約９４％以上のその活性を長時間の期間にわたって保持する等、長時間の期間にわたってその活性を実質的に保持する。例えば、貯蔵安定組成物は、長時間の期間にわたって、その活性の９０％以上を実質的に保持する。ある場合には、貯蔵安定組成物は、長時間の期間にわたって、その活性の９５％以上を実質的に保持する。長時間の期間は１週間以上、または２週間以上、または３週間以上、または１ヵ月以上、または２ヵ月以上、または３ヵ月以上、または４ヵ月以上、または６ヵ月以上、または９ヵ月以上、または１年以上、または１．５年（例えば、１８ヵ月）以上、または２年以上、または２．５年（例えば、３０ヵ月）以上、または３年以上、または３．５年（例えば、４２ヵ月）以上、または４年以上、または４．５年（例えば、５４ヵ月）以上、または５年以上の時間の期間である。例えば、長時間の期間は６ヵ月以上であり得る。ある場合には、長時間の期間は９ヵ月以上であり得る。ある場合には、長時間の期間は１年（例えば、１２ヵ月）以上であり得る。ある場合には、長時間の期間は１．５年（例えば、１８ヵ月）以上であり得る。ある場合には、２年（例えば、２４ヵ月）以上であり得る。いくつかの実施形態では長時間の期間は約１〜約３週間、または約１ヵ月〜約６ヵ月、または約６ヵ月〜約９ヵ月、または約１年〜約１．５年、または約１年〜約２年、または約１年〜約３年、または約１年〜約４年、または約１年〜約５年であり得る。いくつかの実施形態では貯蔵安定組成物は、２０〜４０°Ｃ、または２５〜３５°Ｃ、または２５〜３０°Ｃ等の温度の室温において長時間の期間にわたって実質的に安定である。ある例では、貯蔵安定組成物は、０〜２０°Ｃ、０〜１５°Ｃ、０〜１０°Ｃ、または２〜８°Ｃ等の室温より低い温度において長時間の期間にわたって実質的に安定である。
【００３９】
ある場合には、前記組成物は、ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼの治療的に有効な量を含む。ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼの酵素活性は、国際単位（ＩＵ）により測定され、７．３のｐＨおよび３７°Ｃの温度において、１分ごとに１μｍｏｌのアンモニアを生成するために必要な酵素量に相当する。ある場合には、前記ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼは、組成物中に、５００〜４，５００ＩＵ／ｇ、または５００〜４，０００ＩＵ／ｇ、または５００〜３，５００ＩＵ／ｇ、または５００〜３，０００ＩＵ／ｇ、または５００〜２，５００ＩＵ／ｇ、または５００〜２，０００ＩＵ／ｇ、または５００〜１，５００ＩＵ／ｇ、または５００〜１，０００ＩＵ／ｇ、または６００〜９００ＩＵ／ｇ、または７００〜８００ＩＵ／ｇ等の（例えば、このポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼが効力（活性）を有する）１００〜５，０００ＩＵ／ｇの範囲の量で存在できる。特定の例では、このポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼは、組成物中に５００〜１，０００ＩＵ／ｇの量で存在することができる。例えば、このポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼは、組成物中に５００〜１，０００ＩＵ／ｇの効力（活性）で存在する。特定の例では、このポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼは、組成物中に７００〜８００ＩＵ／ｇの範囲の量で存在する。例えば、このポリアルキレンオキシド-アスパラギナーゼは、７００〜８００ＩＵ／ｇの範囲の効力（活性）を有することができる。特定の例では、このポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼは組成物中に７５０ＩＵ／ｇの量で存在する。例えば、このポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼは、７５０ＩＵ／ｇの効力（活性）を有し得る。
【００４０】
ある場合には、この組成物中に治療的に有効な量のポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼが存在し、このポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼは、５５ＩＵ／ｍｇタンパク質以上、または６０ＩＵ／ｍｇタンパク質以上、または６５ＩＵ／ｍｇタンパク質以上、または７０ＩＵ／ｍｇタンパク質以上、または７５ＩＵ／ｍｇタンパク質以上、または８０ＩＵ／ｍｇタンパク質以上、または８５ＩＵ／ｍｇタンパク質以上、または９０ＩＵ／ｍｇタンパク質以上、または９５ＩＵ／ｍｇタンパク質以上、または１００ＩＵ／ｍｇタンパク質以上、または１０５ＩＵ／ｍｇタンパク質以上、または１１０ＩＵ／ｍｇタンパク質以上、または１１５ＩＵ／ｍｇタンパク質以上、または１２０ＩＵ／ｍｇタンパク質以上、または１２５ＩＵ／ｍｇタンパク質以上、または１３０ＩＵ／ｍｇタンパク質以上、または１３５ＩＵ／ｍｇタンパク質以上、または１４０ＩＵ／ｍｇタンパク質以上、または１４５ＩＵ／ｍｇタンパク質以上、または１５０ＩＵ／ｍｇタンパク質以上等の、５０ＩＵ／ｍｇタンパク質以上比活性を有する。例えば、この組成物中のポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼは、８５ＩＵ／ｍｇタンパク質以上の比活性を有し得る。いくつかの実施形態では組成物中のポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼは、５０〜１５０ＩＵ／ｍｇタンパク質、または５５〜１４５ＩＵ／ｍｇタンパク質、または６０〜１４０ＩＵ／ｍｇタンパク質、または６５〜１３５ＩＵ／ｍｇタンパク質、または７０〜１３０ＩＵ／ｍｇタンパク質、または７５〜１２５ＩＵ／ｍｇタンパク質、または８０〜１２０ＩＵ／ｍｇタンパク質、ＩＵ／ｍｇタンパク質、または９５〜１０５ＩＵ／ｍｇタンパクの比活性を有する。ある場合には、組成物中のポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼは、６５〜１４０ＩＵ／ｍｇタンパク質、または７０〜１３５ＩＵ／ｍｇタンパク質、または７５〜１３０ＩＵ／ｍｇタンパク質、または７５〜１２５ＩＵ／ｍｇタンパク質等の、５０〜１５０ＩＵ／ｍｇタンパク質の比活性を有する。例えば、組成物中のポリアルキレンオキシド-アスパラギナーは、７５〜１２５ＩＵ／ｍｇタンパク質の範囲の比活性を有し得る。
【００４１】
特定の実施形態では、組成物中に、治療的に有効な量のポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼが存在し、組成物中に、ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼは、１．５ｍｇ／ｍＬ〜１４．５ｍｇ／ｍＬ、または２ｍｇ／ｍＬ〜１４ｍｇ／ｍＬ、または２．５ｍｇ／ｍＬ〜１３．５ｍｇ／ｍＬ、または３ｍｇ／ｍＬ〜１３ｍｇ／ｍＬ、または３．５ｍｇ／ｍＬ〜１２．５ｍｇ／ｍＬ、または４ｍｇ／ｍＬ〜１２ｍｇ／ｍＬ、または４．５ｍｇ／ｍＬ〜１１．５ｍｇ／ｍＬ、または４．５ｍｇ／ｍＬ〜１１ｍｇ／ｍＬ、または４．５ｍｇ／ｍＬ〜１０．５ｍｇ／ｍＬ、または４．５ｍｇ／ｍＬ〜１０ｍｇ／ｍＬ、または４．５ｍｇ／ｍＬ〜９．５ｍｇ／ｍＬ、または４．５ｍｇ／ｍＬ〜９ｍｇ／ｍＬ、または４．５ｍｇ／ｍＬ〜８．５ｍｇ／ｍＬ、または５ｍｇ／ｍＬ〜８ｍｇ／ｍＬ等の、１ｍｇ／ｍＬ〜１５ｍｇ／ｍＬの範囲の量で存在する。ある場合には、組成物中にアルキレンオキシド-アスパラギナーゼは４．５ｍｇ／ｍＬ〜８．５ｍｇ／ｍＬの範囲の量で存在する。
【００４２】
被験者に投与されたときに、この組成物は、５００〜５，０００ＩＵ／ｍ２または５００〜４，５００ＩＵ／ｍ２、または５００〜４，０００ＩＵ／ｍ２、または５００〜３，５００ＩＵ／ｍ２または５００〜３，０００ＩＵ／ｍ２、または１，０００〜３，０００ＩＵ／ｍ２、または１，５００〜３，０００ＩＵ／ｍ２、または１，７５０〜３，０００ＩＵ／ｍ２、または２，０００〜３，０００ＩＵ／ｍ２、または２，０００〜２，７５０ＩＵ／ｍ２または２，２５０〜２，７５０ＩＵ／ｍ２のポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ等の、１００〜５，０００ＩＵ／ｍ２のポリアルキレンオキシド-アスパラギナーゼを被験者に送達するために十分な量のポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼを含むことができる。例えば、この組成物は、１，５００〜３，０００ＩＵ／ｍ２のポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼを被験者に送達するために十分な量のポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼを含み得る。特定の例では、この組成物は、２，０００〜２，７５０ＩＵ／ｍ２のポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼを被験者に送達するために十分な量のポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼを含み得る。特定の例では、この組成物は、２，２５０〜２，７５０ＩＵ／ｍ２のポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼを被験者に送達するために十分な量のポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼを含み得る。例えば、この組成物は、２，５００ＩＵ／ｍ２のポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼを被験者に送達するために十分な量のポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼを含み得る。
【００４３】
特定の実施形態では、被験者に投与される剤形は液体剤形であり、例えば、水性剤形である。いくつかの実施形態ではポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼに加えて、この剤形は緩衝液および塩を含む。
【００４４】
本開示の組成物は、ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼに加えて、追加的な構成成分を含み得る。例えば、この組成物は、緩衝液を含み得る。本開示の組成物における使用に適した緩衝液は、ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼと両立し、および例えば、注射または静脈内投与等による被験者への投与に適した緩衝液を含む。適切な緩衝液の例としては限定はされないが、リン酸緩衝液（例えば、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ））、ダルベッコ（Ｄｕｌｂｅｃｃｏ）のリン酸緩衝生理食塩水（ＤＰＢＳ）、ハンク（Ｈａｎｋ）の平衡食塩溶液（ＨＢＳＳ）、アール（Ｅａｒｌｅ）の平衡食塩溶液（ＥＢＳＳ）、Ｔｒｉｓ緩衝液、リンガー（Ｒｉｎｇｅｒ）の乳酸緩衝液等、およびその組み合わせが挙げられる。この組成物に含まれる緩衝液は、組成物のｐＨを６〜８の範囲のｐＨ、または約７のｐＨ、例えば７．２，７．３または７．４等の生理学的に許容できるｐＨに維持する緩衝液であることができる。ある例では、このはリン酸緩衝である。リン酸緩衝液は二塩基性リン酸ナトリウム（リン酸二ナトリウムまたはリン酸水素ナトリウム；Ｎａ２ＨＰＯ４としても知られる）を含むことができ、および／または一塩基性のリン酸ナトリウム（モノナトリウムリン酸；ＮａＨ２ＰＯ４としても知られる）を含むことができる。
【００４５】
ある場合には、組成物中の二塩基性リン酸ナトリウムの量は０．１〜４．５ｗｔ．％、または０．１〜４ｗｔ．％、または０．１〜３．５ｗｔ．％、または０．１〜３ｗｔ．％、または０．１〜２．５ｗｔ．％、または０．１〜２ｗｔ．％、または０．１〜１ｗｔ．％、または０．１〜０．９ｗｔ．％、または０．１〜０．８ｗｔ．％、または０．１〜０．７ｗｔ．％、または０．１〜０．６ｗｔ．％、または０．２〜０．６ｗｔ．％、または０．３〜０．６ｗｔ．％、または０．４〜０．６ｗｔ．％、または０．５〜０．６ｗｔ．％等の０．０５〜５ｗｔ．％の範囲である。例えば、二塩基性リン酸ナトリウムは組成物中に０．１〜１．０ｗｔ．％の範囲で存在できる。特定の例では，二塩基性リン酸ナトリウムは組成物中に０．２〜０．８ｗｔ．％の範囲で存在できる。特定の例では、二塩基性リン酸ナトリウムは組成物中に０．３〜０．６ｗｔ．％の範囲で存在できる。特定の例では、二塩基性リン酸ナトリウムは組成物中に０．５〜０．６ｗｔ．％の範囲で存在できる。例えば、二塩基性リン酸は、組成物中に、０．５６ｗｔ．％（または０．５５８ｗｔ．％）等、約０．６ｗｔ．％存在できる。特定の実施形態では、組成物中の一塩基性リン酸ナトリウムの量は、０．０１〜１．８ｗｔ．％、または０．０１〜１．６ｗｔ．％、または０．０１〜１．４ｗｔ．％、または０．０１〜１．２ｗｔ．％、または０．０１〜１．０ｗｔ．％、または０．０１〜０．８ｗｔ．％、または０．０１〜０．６ｗｔ．％、または０．０１〜０．４ｗｔ．％、または０．０１〜０．２ｗｔ．％、または０．０２〜０．１８ｗｔ．％、または０．０３〜０．１６ｗｔ．％、または０．０４〜０．１６ｗｔ．％、または０．０４５〜０．１５ｗｔ．％、または０．０４〜０．１４ｗｔ．％、または０．０５〜０．１４ｗｔ．％、または０．１〜０．２ｗｔ．％、または０．１〜０．１５ｗｔ．％等の０．００５〜２ｗｔ．％の範囲である。例えば、一塩基性リン酸ナトリウムは組成物中に０．０５〜０．２ｗｔ．％の範囲で存在できる。特定の例では、一塩基性リン酸ナトリウムは組成物中に０．０１〜０．２ｗｔ．％の範囲で存在できる。特定の例では、一塩基性リン酸ナトリウムは組成物中に０．０９〜０．１５ｗｔ．％の範囲で存在できる。特定の例では、一塩基性リン酸ナトリウムは組成物中に０．１〜０．２ｗｔ．％の範囲で存在できる。特定の例では、一塩基性リン酸ナトリウムは組成物中に０．１〜０．１５ｗｔ．％の範囲で存在できる。例えば、一塩基性リン酸ナトリウムは組成物中に０．１２ｗｔ．％（または０．１２９ｗｔ．％）の量が存在できる。
【００４６】
本開示の組成物に含まれ得る別の追加的な構成要素は塩である。本開示の組成物中での使用に適切な塩は、ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼと両立し、および例えば、注射または静脈内投与等による被験者への投与に適した塩を含む。適切な塩の例としては、限定はされないが、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化カルシウム、塩化マグネシウム等、およびそれらの組み合わせが挙げられる。特定の例では、この塩は塩化ナトリウムである。
【００４７】
ある場合には、組成物中の塩（例えば、塩化ナトリウム）の量は、０．０５〜４ｗｔ．％、または０．０５〜３ｗｔ．％、または０．０５〜２ｗｔ．％、または０．１〜５ｗｔ．％、または０．１〜４ｗｔ．％、または０．１〜３ｗｔ．％、または０．１〜２ｗｔ．％、または０．１〜１．５ｗｔ．％、または０．１〜１ｗｔ．％、または０．２〜１ｗｔ．％、または０．３〜１ｗｔ．％、または０．４〜１ｗｔ．％、または０．５〜１ｗｔ．％、または０．６〜１ｗｔ．％、または０．７〜１ｗｔ．％、または０．８〜１ｗｔ．％、または０．８〜０．９ｗｔ．％等の、０．０５〜５ｗｔ．％の範囲である。例えば、塩（例えば、食塩）は、組成物に０．５〜１ｗｔ．％の範囲で存在できる。例えば、塩（例えば、食塩）は、組成物に０．２〜２ｗｔ．％の範囲で存在できる。特定の例では、塩（例えば、食塩）は、組成物に０．７〜１ｗｔ．％の範囲で存在できる。特定の例では、塩（例えば、食塩）は、組成物に０．８〜０．９ｗｔ．％の範囲で存在できる。例えば、塩（例えば、塩化ナトリウム）は組成物中に０．８５ｗｔ．％の量が存在できる。
【００４８】
特定の実施形態では、ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼを含む組成物は凍結乾燥された組成物である。凍結乾燥された本開示の組成物は、ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼに加えて、緩衝液、塩、および糖も含み得る。例えば、本開示の態様は、アスパラギナーゼにリンカーにより共有結合的に結合したポリアルキレンオキシド基、緩衝液、塩、および糖を含むポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼの凍結乾燥された貯蔵安定組成物を含む。
【００４９】
凍結乾燥された本開示の組成物中での使用に適切な緩衝液は、ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼと両立し、および例えば、注射または静脈内投与等による被験者への投与に適した緩衝液を含む。適切な緩衝液の例は上述のものを含む。特定の実施形態では、リン酸緩衝液は二塩基性リン酸ナトリウムおよび一塩基性リン酸ナトリウムを含み得る。ある場合には、組成物の二塩基性リン酸ナトリウムの量は、０．１〜０．９ｗｔ．％、または０．１〜０．８ｗｔ．％、または０．１〜０．７ｗｔ．％、または０．１〜０．６ｗｔ．％、または０．１〜０．５ｗｔ．％、または０．１〜０．４ｗｔ．％、または０．２〜０．４ｗｔ．％、または０．２〜０．３ｗｔ．％、または０．２５〜０．３ｗｔ．％等の、０．０５〜１ｗｔ．％の範囲である。例えば、二塩基性リン酸ナトリウムは組成物中に０．１〜０．５ｗｔ．％の範囲の量が存在できる。特定の例では、二塩基性リン酸ナトリウムは組成物中に０．２〜０．４ｗｔ．％の範囲の量が存在できる。特定の例では、二塩基性リン酸ナトリウムは組成物中に０．２５〜０．３ｗｔ．％の範囲の量が存在できる。例えば、二塩基性リン酸ナトリウムは、組成物中に０．２８ｗｔ．％（または０．２７９ｗｔ．％）等の約０．３ｗｔ．％の量が存在できる。特定の実施形態では、組成物中の一塩基性リン酸ナトリウムの量は、０．０１〜０．９ｗｔ．％、または０．０１〜０．８ｗｔ．％、または０．０１〜０．７ｗｔ．％、または０．０１〜０．６ｗｔ．％、または０．０１〜０．５ｗｔ．％、または０．０１〜０．４ｗｔ．％、または０．０１〜０．３ｗｔ．％、または０．０１〜０．２ｗｔ．％、または０．０１〜０．１ｗｔ．％、または０．０２〜０．０９ｗｔ．％、または０．０３〜０．０８ｗｔ．％、または０．０４〜０．０８ｗｔ．％、または０．０４５〜０．０７５ｗｔ．％、または０．０４〜０．０７ｗｔ．％、または０．０５〜０．０７ｗｔ．％等の０．００５〜１ｗｔ．％の範囲である。例えば、一塩基性リン酸ナトリウムは、組成物中に０．０１〜０．１ｗｔ．％．の量が存在できる。特定の例では、一塩基性リン酸ナトリウムは、組成物中に０．０５〜０．０７ｗｔ．％．の量が存在できる。特定の例では、一塩基性リン酸ナトリウムは、組成物中に０．０４５〜０．０７５ｗｔ．％．の量が存在できる。例えば、一塩基性リン酸ナトリウムは組成物中に０．０６ｗｔ．％の量が存在できる。
【００５０】
特定の態様では、凍結乾燥された本開示の組成物は塩を含む。本開示の組成物中での使用に適切な塩は、ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼと両立し、および例えば、注射または静脈内投与等による被験者への投与に適した塩を含む。適切な塩の例は 上述のものを含む。特定の例ではこの塩は塩化ナトリウムである。
【００５１】
ある場合には、組成物中の塩（例えば、塩化ナトリウム）の量は、０．１〜０．９ｗｔ．％、または０．１〜０．８ｗｔ．％、または０．１〜０．７ｗｔ．％、または０．１〜０．６ｗｔ．％、または０．１〜０．５ｗｔ．％、または０．２〜０．５ｗｔ．％、または０．３〜０．５ｗｔ．％、または０．４〜０．５ｗｔ．％、または０．４〜０．４５ｗｔ．％．等の、０．０５〜１ｗｔ．％の範囲である。例えば、塩（例えば、塩化ナトリウム）は組成物中に０．１〜１ｗｔ．％の範囲の量が存在できる。特定の例では、塩（例えば、塩化ナトリウム）は組成物中に０．３〜０．５ｗｔ．％の範囲の量が存在できる。特定の例では、塩（例えば、塩化ナトリウム）は組成物中に０．４〜０．４５ｗｔ．％の範囲の量が存在できる。例えば、塩（例えば、塩化ナトリウム）は組成物中に０．４２５ｗｔ．％等の約０．４ｗｔ．％の量が存在できる。本開示の組成物に含まれ得る別の構成要素は糖である。本開示の組成物中での使用に適切な糖は、ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼと両立し、および例えば、注射または静脈内投与等による被験者への投与に適した糖を含む。適切な糖の例としては、限定はされないが、ショ糖、マンニトール、マルトース、トレハロース、２-ヒドロキシプロピル-β-シクロデキストリン（ＨＰＣＤ）、ラクトース、グルコース、フルクトース、ガラクトース、グルコサミン等、およびそれらの組み合わせが挙げられる。特定の例では、この糖は二糖類である。例えば、この二糖類はショ糖であってよい。
【００５２】
ある場合には、組成物中の糖（例えば、ショ糖）の量は、０．５〜２０ｗｔ．％、または１〜１５ｗｔ．％、または１〜１０ｗｔ．％、または１〜９ｗｔ．％、または１〜８ｗｔ．％、または２〜７ｗｔ．％、または２〜６ｗｔ．％、または３〜５ｗｔ．％、または４〜５ｗｔ．％等の、０．１〜２５ｗｔ．％の範囲である。例えば、糖（例えば、ショ糖）は組成物中に１〜１０ｗｔ．％の量が存在できる。特定の例では、糖（例えば、ショ糖）は組成物中に３〜５ｗｔ．％の量が存在できる。特定の例では、糖（例えば、ショ糖）は組成物中に４〜５ｗｔ．％の量が存在できる。例えば、糖（例えば、ショ糖）は組成物中に４．５ｗｔ．％の量が存在できる。
【００５３】
いくつかの実施形態では前記組成物は、５００〜１，０００ＩＵ／ｇの範囲の効力（活性）を有するポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ、０．１〜１．０ｗｔ．％の範囲の量の二塩基性リン酸ナトリウム、０．０１〜０．２ｗｔ．％の範囲の量の一塩基性リン酸ナトリウム、０．２〜２ｗｔ．％の範囲の量の塩（例えば、塩化ナトリウム）および水を、含むか、これらより本質的に構成されるか、またはこれらにより構成される。
【００５４】
いくつかの実施形態では、前記組成物は、７００〜８００ＩＵ／ｇの範囲の効力（活性）を有するポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ、０．２〜０．８ｗｔ．％の範囲の量の二塩基性リン酸ナトリウム、０．１〜０．１４ｗｔ．％の範囲の量の一塩基性リン酸ナトリウム、０．６〜１．０ｗｔ．％の範囲の量の塩（例えば、塩化ナトリウム）および水、を含むか、これらより本質的に構成されるか、またはこれらにより構成される。いくつかの実施形態では、前記組成物は、７００〜８００ＩＵ／ｇの範囲の効力（活性）を有するポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ、０．５〜０．６ｗｔ．％の範囲の量の二塩基性リン酸ナトリウム、０．０９〜０．１５ｗｔ．％の範囲の量の一塩基性リン酸ナトリウム、０．０９〜０．１５ｗｔ．％の範囲の量の塩（例えば、塩化ナトリウム）および、水を含むか、これらより本質的に構成されるか、またはこれらにより構成される。
【００５５】
いくつかの実施形態では、前記組成物は、７５０ＩＵ／ｇの効力（活性）を有するポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ、約０．６ｗｔ．％の量の二塩基性リン酸ナトリウム、約０．１ｗｔ．％の量の一塩基性リン酸ナトリウム、約０．９ｗｔ．％の量の塩（例えば、塩化ナトリウム）および水、を含むか、これらより本質的に構成されるか、またはこれらにより構成される。
【００５６】
いくつかの実施形態では、前記組成物は、７５０ＩＵ／ｇの効力（活性）を有するポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ、約０．５６ｗｔ．％の量の二塩基性リン酸ナトリウム、約０．１３ｗｔ．％（または０．１２９ｗｔ．％）の量の一塩基性リン酸ナトリウム、約０．８５ｗｔ．％の量の塩（例えば、塩化ナトリウム）および水、を含むか、これらより本質的に構成されるか、またはこれらにより構成される。
【００５７】
いくつかの実施形態では、前記組成物は、ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ、二塩基性リン酸ナトリウム、一塩基性リン酸ナトリウム、塩（例えば、塩化ナトリウム）および、水を含むか、これらより本質的に構成されるか、またはこれらにより構成される。
【００５８】
他の実施形態では、前記組成物は、ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ、二塩基性リン酸ナトリウム、一塩基性リン酸ナトリウム、塩（例えば、塩化ナトリウム）、糖(例えば、ショ糖)および、水を含むか、これらより本質的に構成されるか、またはこれらにより構成される。
【００５９】
いくつかの実施形態では前記組成物は、５００〜１，０００ＩＵ／ｇの範囲の効力（活性）を有するポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ、０．１〜０．５ｗｔ．％の範囲の量の二塩基性リン酸ナトリウム、０．０１〜０．１ｗｔ．％の範囲の量の一塩基性リン酸ナトリウム、０．１〜１ｗｔ．％の範囲の量の塩（例えば、塩化ナトリウム）、１〜１０ｗｔ．％の量の糖（例えば、ショ糖）および水を含むか、これらより本質的に構成されるか、またはこれらにより構成される。
【００６０】
いくつかの実施形態では前記組成物は、７００〜８００ＩＵ／ｇの範囲の効力（活性）を有するポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ、０．２〜０．４ｗｔ．％の範囲の量の二塩基性リン酸ナトリウム、０．０５〜０．０７ｗｔ．％の範囲の量の一塩基性リン酸ナトリウム、０．３〜０．５ｗｔ．％の範囲の量の塩（例えば、塩化ナトリウム）、３〜５ｗｔ．％の量の糖（例えば、ショ糖）および水、を含むか、これらより本質的に構成されるか、またはこれらにより構成される。
【００６１】
いくつかの実施形態では前記組成物は、７００〜８００ＩＵ／ｇの範囲の効力（活性）を有するポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ、０．２５〜０．３ｗｔ．％の範囲の量の二塩基性リン酸ナトリウム、０．０４５〜０．０７５ｗｔ．％の範囲の量の一塩基性リン酸ナトリウム、０．４〜０．４５ｗｔ．％の範囲の量の塩（例えば、塩化ナトリウム）、４〜５ｗｔ．％の量の糖（例えば、ショ糖）および水、を含むか、これらより本質的に構成されるか、またはこれらにより構成される。
【００６２】
いくつかの実施形態では前記組成物は、７５０ＩＵ／ｇの効力（活性）を有するポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ、約０．３ｗｔ．％の量の二塩基性リン酸ナトリウム、０．０６５ｗｔ．％の量の一塩基性リン酸ナトリウム、約０．４ｗｔ．％の量の塩（例えば、塩化ナトリウム）、約４.５ｗｔ．％の量の糖（例えば、ショ糖）および水、を含むか、これらより本質的に構成されるか、またはこれらにより構成される。
【００６３】
いくつかの実施形態では前記組成物は、７５０ＩＵ／ｇの効力（活性）を有するポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ、約０．２８ｗｔ．％（または０．２７９ｗｔ．％）の量の二塩基性リン酸ナトリウム、０．０６ｗｔ．％の量の一塩基性リン酸ナトリウム、約０．４３ｗｔ．％（または０．４２５ｗｔ．％）の量の塩（例えば、塩化ナトリウム）、約４．５ｗｔ．％の量の糖（例えば、ショ糖）および水、を含むか、これらより本質的に構成されるか、またはこれらにより構成される。
【００６４】
特定の例では、前記組成物（例えば、液体または凍結乾燥された組成物）は無菌の組成物である。「無菌の」は、例えば実質的に病原菌（例えば、真菌、細菌、ウイルス、胞子等）がない等の組成物中に実質的に免疫原性の構成要素がないことを意味する。ある場合には、前記組成物は容器中に存在する。組成物に容器を提供することは、組成物を無菌の組成物として維持することを容易にする。例えば、この容器は、組成物が無菌の環境中の容器中に封入されることを維持するために構成され得る。そのようなものとして、この容器は密封容器であることができ、例えばこの容器は、防水および／または気密なシール等のシールを含み得る。このシールは、ユーザーが容器の内容物にアクセスすることを可能にするために取り除き可能であり得る。ある例では、このシールは壊れやすいシールであることができ、または他の例では、 このシールは、このシールを容器から取り除くことなく、針、カニューレまたはシリンジを、容器の内側に挿入することが可能であるように構成され得る。ある場合には、シールを容器から取り外すことなく容器の内部にアクセスが可能であるように構成されたシールは、組成物の被験者への投与に先立ち、この容器の内容物（例えば、この容器中の組成物）を、無菌の環境に維持することを促進する。このシールのための適切な材料は、例えば、限定はされないが、シリコーンゴム、天然ゴム、スチレンブタジエンゴム、エチレン-プロピレン共重合体、ポリクロロプレン、ポリアクリレート、ポリブタジエン、ポリウレタン、スチレンブタジエン等、およびそれらの組み合わせ等のゴムまたはポリマーのシールを含む。例えば、特定の実施形態では、このシールは、針、シリンジ、またはカニューレで貫通できるセプタムである。このシールは、容器中のサンプルに便利なアクセスを提供することもできるとともに、容器の開口部に横たわる保護的なバリアーでもあることができる。ある例では、このシールは、容器の開口部に取り付けられるねじ式もしくはスナップオンの蓋または他の適切な密封要素等の除去可能なシールである。例えば、ねじ式の蓋は、容器にサンプルが加えられる前後に開口部にねじ操作で脱着できる。
【００６５】
ある場合には、この容器は単位用量容器である。単位用量容器とは被験者に投与するための１つ以上の単位の用量を含む容器を指す。いくつかの実施形態では単位用量容器には被験者での所望の効果を起こすために、計算された十分な量の被験者用組成物の所定の量を含む。組成物の特定の実施形態は、正確な用量の個別投与のために適切な単位用量容器中に提供されることができる。被験者に投与される活性組成物の量は、治療される被験者、苦痛の重篤性、および投与の様式に依存し得る。例えば、前記単位用量容器は、本明細書に開示されるように、治療される被験者に所望の効果を達成するための量の組成物量を含み得る。特定の例では、単位用量容器は、治療的に有効な量のポリアルキレンオキシド-アスパラギナーゼを有する組成物を含む。ポリアルキレンオキシド-アスパラギナーゼの治療的に有効な量は、上述されている。特定の実施形態では、単位用量容器はバイアルである。ある場合には、このバイアルは密封されたバイアルである（例えば、密封された容器に関して上述したような）。
【００６６】
前記容器は、組成物のポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼおよび他の構成要素と両立できる任意の便利な構成要素から構成されることができる。例えば、この容器は、固体（例えば、凍結乾燥された組成物）を含むために構成された固体と両立できる容器であり得る。ある例ではこの容器は液体を含むために構成された、液体と両立できる容器であり得る。この容器は、固体および液体と両立できるものでもあることができ、この容器は、固体および液体を含むために構成されている。ある場合には、この容器中の液体は、水溶液であることができ、およびこれらの場合には、前記容器は、水性組成物と両立できる。「両立できる」は、容器に接触する液体および／または組成物または他の構成成分に対して実質的に不活性（例えば、容器と顕著には反応しない）ことを意味する。適切な容器材料の例としては、限定はされないが、ガラスおよびプラスチックが挙げられる。例えば、前記容器は、限定はされないが、ケイ酸塩ガラス、ホウケイ酸ガラス、ホウケイ酸ナトリウムガラス（例えば、ＰＹＲＥＸＴＭ）、溶融石英ガラス、溶融シリカガラス等のガラスから構成され得る。容器の容器の他の適切な材料としては、限定はされないが、ポリプロピレン、ポリメチルペンテン、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）、パーフルオロエーテル（ＰＦＥ）、フッ素化エチレンプロピレン（ＦＥＰ）、パーフルオロアルコキシアルカン（ＰＦＡ）、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリエチレン（ＰＥ）、ポリエーテルエーテルケトン（ＰＥＥＫ）、ポリスチレン等のプラスチックが挙げられる。特定の例では、上述したように、前記容器はバイアルであることができ、およびそのような場合にはガラスバイアルであり得る。上述したように、前記容器は密閉容器であることができ、およびそのような場合には密閉されたガラスバイアルであり得る。
以下に、より詳細が記載されるように、液体または再構成された本開示の組成物は、被験者に例えば注射によりまたは静脈内的に投与され得る。特定の実施形態では、前記再構成された組成物の被験者への投与に先立ち、固体組成物は、例えば、上述したように、例えば注射または静脈内投与に適切な液体組成物を提供するために、液体と組み合わされ得る。ある場合には、組成物の被験者への投与に先立ち、固体組成物は、例えば、上述したように、例えば注射または静脈内投与に適切な液体組成物を提供するために、水（例えば、注射用水、ＷＦＩ）と組み合わされ得る。
【００６７】
例えば、凍結乾燥された組成物は、例えば被験者に注射または静脈内投与するために適切な再構成された投与単位を生成するために、水（例えば、注射用水、ＷＦＩ）により再構成されることができる。
本明細書において説明されるものとして、本開示の態様は、以下のものを含む組成物を含む：アスパラギナーゼにリンカーにより共有結合的に結合したポリアルキレンオキシド基を含むポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ；緩衝液および塩。特定の実施形態では、上述したように、前記ポリアルキレンオキシドはポリエチレングリコールである。特定の実施形態では、上述したように、このリンカーはウレタン（カルバメート）リンカーである。特定の実施形態では、上述したように、前記アスパラギナーゼは大腸菌アスパラギナーゼである。特定の実施形態では、上述したように、前記緩衝液はリン酸緩衝液である。特定の実施形態では、上述したように、は塩化ナトリウムである。従って、組成物の特定の実施形態は、ウレタン・リンカーにより共有結合的に大腸菌アスパラギナーゼに結合したポリエチレングリコール基；リン酸緩衝液および塩を含むポリエチレングリコール−アスパラギナーゼを含む。これらの組成物の各成分（例えば、ポリエチレングリコールの分子量、ポリエチレングリコール-アスパラギナーゼの量、リン酸緩衝液の種類および量、塩の種類および量）は、上記で詳細が記載されている通りである。
【００６８】
本明細書において説明されるものとして、本開示の態様は、凍結乾燥された以下のものを含む貯蔵安定組成物を含む：ポリアルキレンオキシド基にリンカーにより共有結合的に結合したアスパラギナーゼを含むポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ；緩衝液、塩および糖。特定の実施形態では、上述したように、前記ポリアルキレンオキシドはポリエチレングリコールである。特定の実施形態では、上述したように、前記リンカーはウレタン（カルバメート）リンカーである。特定の実施形態では、上述したように、前記アスパラギナーゼは、大腸菌アスパラギナーゼである。特定の実施形態では、上述したように、前記緩衝液はリン酸緩衝液である。特定の実施形態では、上述したように、前記塩は塩化ナトリウムである。特定の実施形態では、上述したように、前記糖は二糖類（例えば、ショ糖）である。従って、凍結乾燥された貯蔵安定組成物の特定の実施形態は、大腸菌アスパラギナーゼにウレタン・リンカーにより共有結合的に結合したポリエチレングリコール基を含むポリエチレングリコール-アスパラギナーゼ；リン酸緩衝液、塩および二糖類を含む。これらの組成物の各成分（例えば、ポリエチレングリコールの分子量、ポリエチレングリコール-アスパラギナーゼの量、リン酸緩衝液の種類および量、塩の種類および量）は、上記で詳細が記載されている通りである。
【００６９】
本開示の組成物は、追加的な薬学的に許容される添加剤または用量送達のための賦形剤等の他の構成成分を組成物の一部として含み得る。添加剤は、限定はされないが、炭水化物、無機塩、有機塩、抗菌薬、酸化防止剤、界面活性剤、水（例えば、注射用水（ＷＦＩ））、アルコール、ポリオール、グリセリン、野菜油、リン脂質、緩衝液、酸、塩基、および任意のそれらの組み合わせを含み得る。糖等の炭水化物、アルジトールなどの糖誘導体、アルドン酸、エステル化された糖、および／または糖ポリマーも用い得る。興味のあるいくつかの炭水化物添加剤は、例えば、フルクトース、マルトース、ガラクトース、グルコース、Ｄ-マンノース、ソルボース等の単糖類；ラクトース、ショ糖、トレハロース、セロビオース等の二糖類；ラフィノース、メレジトース、マルトデキストリン、デキストラン、デンプン等の多糖類；およびマンニトール、キシリトール、マルチトール、ラクチトール、キシリトール、ソルビトール（グルシトール）、ピラノシルソルビトール、ミオイノシトール等のアルジトールを含み得る。無機および有機塩は、限定はされないがクエン酸、塩化ナトリウム、塩化カリウム、硫酸ナトリウム、硝酸カリウム、一塩基性リン酸ナトリウム、二塩基性リン酸ナトリウム、および任意のそれらの組み合わせを含み得る。
【００７０】
特定の実施形態では、本開示の組成物は、例えば塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、ベンジルアルコール、塩化セチルピリジニウム、クロロブタノール、フェノール、フェニルエチルアルコール、硝酸フェニル水銀、チオメルサール、および任意のそれらの組み合わせ等の微生物の成長を防止または抑止するための抗菌薬も含み得る。
【００７１】
組成物は１つ以上の酸化防止剤も含み得る。酸化を減少または防止し、従って組成物の劣化を防止する酸化防止剤は、例えば、パルミチン酸アスコルビル、ブチル化ヒドロキシアニソール、ブチル化ヒドロキシトルエン、次亜リン酸、モノチオグリセロール、没食子酸プロピル、亜硫酸水素ナトリウム、ホルムアルデヒドスルホキシル酸ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、および任意のそれらの組み合わせを含み得る。
【００７２】
本開示の組成物は、１つ以上の界面活性剤を含み得る。例えば、適切な界面活性剤は、限定はされないが「Ｔｗｅｅｎ２０」および「Ｔｗｅｅｎ８０」等のポリソルベート、およびＦ６８およびＦ８８（ＢＡＳＦ、ニュージャージー州マウント・オリーブ）等のプルロリック；ソルビタンエステル；レシチンおよび他のホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン等のリン脂質、脂肪酸および脂肪酸エステル等の脂質；コレステロール等のステロイド；ＥＤＴＡ等のキレート剤；および亜鉛および他のカチオンが含まれ得る。
本開示の組成物中には酸または塩基も存在できる。例えば、酸は、限定はされないが塩酸、酢酸、リン酸、クエン酸、リンゴ酸、乳酸、ギ酸、トリクロロ酢酸、硝酸、過塩素酸、硫酸、フマル酸、および任意のそれらの組み合わせが含まれ得る。塩基の例は、限定はされないが水酸化ナトリウム、酢酸ナトリウム、水酸化アンモニウム、水酸化カリウム、酢酸アンモニウム、酢酸カリウム、リン酸ナトリウム、リン酸カリウム、クエン酸ナトリウム、ギ酸ナトリウム、硫酸ナトリウム、硫酸カリウム、フマル酸カリウム、および任意のそれらの組み合わせを含む。
【００７３】
組成物中の何らかの個別の添加剤の量は、添加剤の性質および機能、用量送達賦形剤ならびにその組成物の特定のニーズに応じて変化する。ある例では、個別の添加剤の最適量はルーチンの実験、すなわち、さまざまな量（低いものから高いものまでの範囲）の添加剤を含む組成物の安定性および他のパラメーターを試験し、次いで最適の成績が、顕著な有害効果なしで得られる範囲を決定する。しかしながら、一般的に、添加剤は組成物中に、重量により５％〜９８％等、添加剤の重量により１５％〜９５％等、重量により３０％以下を含み、または重量により２０％以下を含み、または重量により１０％以下を含む等の重量により１％〜９９％の量で存在する。添加剤とともに組成物中に用いることができる薬学的な添加物は、「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ＆ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ」，２２ｎｄ ｅｄ．，Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｌｉａｍｓ，（２０１２），ｔｈｅ 「Ｐｈｙｓｉｃｉａｎ’ｓ Ｄｅｓｋ Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ」，７０ｔｈ ｅｄ，ＰＤＲ Ｎｅｔｗｏｒｋ，Ｍｏｎｔｖａｌｅ，ＮＪ （２０１５），およびＲｏｗｅ，ＲＣ．，Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＥｘｃｉｐｉｅｎｔｓ，７ｔｈ ｅｄ．， Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐｒｅｓｓ， Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ， ＮＹ， （２０１２）に記載されており、これらの開示のそれぞれは、参照により本明細書に組み入れられる。
【００７４】
［使用法］
本開示の態様は、本明細書に記載される組成物（例えば、液体および凍結乾燥された）の使用法も含む。特定の実施形態では、この使用法は被験者中のアスパラギンを脱アミノ化する方法である。上述したように、アスパラギナーゼ酵素は、例えば、以下の反応に従って、アミノ酸アスパラギンが加水分解されてアスパラギン酸およびアンモニアを生成する、脱アミノ化反応を媒介する：
【化６】
2019521179.tif 000008
【００７５】
ある場合には、アスパラギナーゼの活性は、被験者中のアスパラギンの血漿中濃度を減少させる等、被験者中のアスパラギンを減少させる。被験者中のアスパラギンの枯渇は、タンパク質合成のためにアスパラギンの存在に依存する被験者中の細胞に有害に作用する。例えば、それ自身でアスパラギンを合成する能力を欠く細胞（例えば、酵素であるアスパラギンシンターゼを欠く細胞）中のタンパク質合成は、外因的なアスパラギンの欠如により有害な影響を受け、結果として細胞のアポトーシスを導き得る。ある例では、タンパク質合成のためにアスパラギンに依存する被験者中の細胞は、癌等の腫瘍状態を伴う可能性がある。従って、本開示の方法は、被験者の癌を治療する方法等の、被験者の腫瘍状態を治療する方法を含む。従って、ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼを含む本開示の組成物は、癌等の腫瘍状態の治療のために治療的に有効であり得る。特定の実施形態では、被験者中の非腫瘍性細胞は、本開示のポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ組成物により、顕著な影響を受けない。例えば、被験者中の非腫瘍性細胞は、酵素であるアスパラギンシンターゼを有することができ、従ってアスパラギンを合成する能力を保持する。
【００７６】
特定の実施形態では、被験者の治療されるべき腫瘍状態は、ポリアルキレンオキシド-アスパラギナーゼを被験者に投与することによる治療に適している例えば、外因的なアスパラギンに依存する腫瘍状態を含む。例えば、ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼを被験者に投与することにより治療可能な腫瘍状態は、固形腫瘍または液体腫瘍等の癌を含む。
【００７７】
特定の場合には、前記腫瘍状態は、固体腫瘍の存在により特徴づけられる。従って、いくつかの実施形態では、本開示の方法は、ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ（例えば、本開示の液体または再構成された凍結乾燥されたポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ組成物）を用いる被験者の固体腫瘍を治療する方法である。被験者の腫瘍状態を治療する方法は、上皮性悪性腫瘍および非上皮性悪性腫瘍を含む、広い種類の固体腫瘍を治療するために有用である。固体腫瘍の種類は、限定はされないが、すい臓がん、黒色腫、扁平上皮癌、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、大腸癌、乳癌、卵巣癌、子宮頸部癌、前立腺癌等を含む。例えば主題の方法を用いて治療可能な上皮性悪性腫瘍は、限定はされないが、食道癌、肝細胞癌、基底細胞癌（皮膚癌の一形態）、扁平上皮癌（様々な組織）、移行細胞癌（膀胱の悪性腫瘍）を含む膀胱癌、気管支癌、大腸癌、結腸直腸癌、胃癌、小細胞肺癌および非小細胞肺癌を含む肺癌、副腎皮質癌、甲状腺癌、膵臓癌、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、腺癌、汗腺癌、脂腺癌、乳頭癌、乳頭腺癌、嚢胞腺癌、髄様癌、腎細胞癌、上皮内乳管癌または胆管癌、絨毛癌、精上皮腫、胎生期癌、ウィルムス腫瘍、子宮頸癌、子宮癌、精巣癌、骨肉腫、上皮癌、および鼻咽頭癌等を含む。
【００７８】
主題の方法を用いて治療可能な非上皮性悪性腫瘍には、限定はされないが、線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、脊索腫、骨肉腫、骨肉腫、（ｏｓｔｅｏｇｅｎｉｃ ｓａｒｃｏｍａ，ｏｓｔｅｏｓａｒｃｏｍａ）血管肉腫、内皮肉腫、リンパ管肉腫、リンパ管内皮肉腫、滑液腫瘍、中皮腫、ユーイング肉腫、平滑筋肉、横紋筋肉腫、および他の軟部組織の肉腫が含まれる。
【００７９】
主題の方法を用いて治療可能な他の固形腫瘍は、限定はされないが、神経膠腫、星状細胞腫、髄芽細胞腫、頭蓋咽頭腫、上衣細胞腫、松果体腫、血管芽細胞腫、聴神経腫、乏突起膠腫、髄膜腫、黒色腫、神経芽細胞腫、および網膜芽細胞腫を含む。
【００８０】
特定の場合には、前記腫瘍状態は液体腫瘍の存在により特徴づけられる。例えば、液体腫瘍は転移性癌細胞（例えば、循環腫瘍細胞（ＣＴＣ））、血液癌等、およびそれらの組み合わせを含み得る。液体腫瘍の例は、限定はされないが、白血病、リンパ腫および骨髄腫を含み得る。ある例では、前記癌は白血病である。従って、いくつかの実施形態では前記方法は、ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ（例えば、本開示の組成物の液体または再構成された凍結乾燥されたポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ）を用いる被験者の白血病の治療法である。
【００８１】
白血病の様々な種類が、主題の方法を用いる治療に適し得る。例えば、この白血病は急性白血病であることができる。急性白血病は、未熟血球の急速な増加により特性化され得る。未熟血球の急速な増加は、密集状態をもたらし、それにより順に、骨髄による顕著に少ない健康な血球の産生を引き起こす。従って、本開示の方法は、例えば、被験者にポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ（例えば、液体または再構成された凍結乾燥されたポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ本開示の組成物）の被験者の急性白血病を治療するために十分な用量を投与することにより、被験者の急性白血病を治療する方法を含む。
【００８２】
他の例では、前記白血病が慢性白血病である場合には、慢性白血病は、比較的成熟しているが、異常な白血球の増加により特徴づけられる。慢性白血病は、進行するためにより長期の期間（例えば、数ヵ月または数年）を要し、異常な白血球が、正常なものよりも顕著に高い率で産生される。従って、本開示の方法は、被験者の慢性白血病を、例えば、被験者の慢性白血病を治療するために有効なポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ（例えば、本開示の組成物の液体または再構成された凍結乾燥されたポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ）の用量を被験者に投与することにより、被験者の慢性白血病を治療する方法を含む。
【００８３】
特定の実施形態では、前記白血病はリンパ芽球性白血病（リンパ性白血病とも称される）である。リンパ芽球性白血病は、白血病により影響される血球の種類により特徴づけられる。リンパ芽球性白血病では、血液細胞における異常な変化が、通常はリンパ球に成長する骨髄細胞に生じる。例えば、リンパ芽球性白血病はＢ細胞白血病であり得る。従って、本開示の方法は、例えば、被験者のリンパ芽球性白血病（リンパ性白血病）を治療するために有効なポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ（例えば、本開示の組成物の液体または再構成された凍結乾燥されたポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ）の用量を被験者に投与することにより、被験者のリンパ芽球性白血病（リンパ性白血病）を治療する方法を含む。例えば、主題の方法で治療可能なリンパ芽球性白血病の特定の種類は、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）を含む。これらの実施形態では、本開示の方法は、例えば、被験者の急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）を治療するために有効な量のポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ（例えば、本開示の組成物の液体または再構成された凍結乾燥されたポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ）の用量を被験者に投与することにより、被験者の急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）を治療する方法を含む。主題の方法を用いて治療可能な他の種類のリンパ芽球性白血病は、限定はされないが、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）である。これらの実施形態では、被験者の慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）を、例えば、被験者の慢性リンパ性白血病を治療するために有効なポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ（例えば、本開示の組成物の液体または再構成された凍結乾燥されたポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ）の用量を被験者に投与することにより、被験者のＣＬＬを治療する方法を含む。
【００８４】
他の実施形態では、前記白血病は骨髄性白血病（ｍｙｅｌｏｉｄ ｌｅｕｋｅｍｉａ）（骨髄性白血病（ｍｙｅｌｏｇｅｎｏｕｓ ｌｅｕｋｅｍｉａ）とも称される）である。骨髄性白血病は、白血病により影響を受ける血液細胞により特徴づけられることができる。骨髄性白血病では、通常は赤血球および／または血小板に成長する骨髄細胞において、血液細胞の異常な変化が生じる。従って、本開示の方法は、例えば、被験者の骨髄性白血病（骨髄性（ｍｙｅｌｏｇｅｎｏｕｓ）白血病）を治療するために有効なポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ（例えば、本開示の組成物の液体または再構成された凍結乾燥されたポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ）の用量を被験者に投与することにより、被験者の骨髄性（ｍｙｅｌｏｇｅｎｏｕｓ）白血病を治療する方法を含む。例えば、主題の方法を用いて治療可能な特定の種類のリンパ芽球性白血病は、限定はされないが、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）である。これらの実施形態では、本開示の方法は、例えば、被験者の急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）を治療するために有効なポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ（例えば、本開示の組成物の液体または再構成された凍結乾燥されたポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ）の用量を被験者に投与することにより、被験者のＡＭＬを治療する方法を含む。
【００８５】
ＡＭＬの例は、限定はされないが、反復性細胞遺伝学的転座を伴うＡＭＬ、多系列細胞異形成を伴うＡＭＬ、および他のＡＭＬを含む。例えば、反復性細胞遺伝学的転座を伴うＡＭＬは、特に、ｔ（８；２ｌ）（ｑ２２；ｑ２２）を伴うＡＭＬ、ＡＭＬＩ（ＣＢＦ-α）／ＥＴＯ、急性前骨髄球白血病（ｔ（ｌ５；ｌ７）（ｑ２２；ｑｌｌ-１２）およびバリアントを伴うＡＭＬ、ＰＭＬ／ＲＡＲ-α）、異常な骨髄好酸球を伴うＡＭＬ（ｉｎｖ（ｌ６）（ｐｌ３ｑ２２）またはｔ（ｌ６；１６）（ｐ１３；ｑｌ１）、ＣＢＦｂ／ＭＹＨｌＩＸ）、およびｌｑ２３（ＭＬＬ）異常を伴うＡＭＬを含む。
多系列細胞異形成を伴うＡＭＬの例は、以前の骨髄異形成症候群に付随するものおよびしないものを含むことができる。他の種類の急性骨髄性白血病は、例えば、最未分化型ＡＭＬ、未分化型ＡＭＬ、分化型ＡＭＬ、急性骨髄単球性白血病、急性単球性白血病、急性赤白血病、急性巨核球白血病、急性好塩基球性白血病、および急性骨髄線維症を伴う急性汎骨髄症を含むことができる。
【００８６】
主題の方法を用いて治療可能な他の種類の骨髄性白血病は、限定はされないが、慢性骨髄性（ｍｙｅｌｏｇｅｎｏｕｓ）白血病（ＣＭＬ）を含む。これらの実施形態では、本開示の方法は、例えば、被験者のＣＭＬを治療するために有効なポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ（例えば、液体または再構成された凍結乾燥されたポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ本開示の組成物）の用量を被験者に投与することにより、被験者の慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）を治療するための方法を含む。
【００８７】
特定の場合には、アスパラギナーゼグルタミンの脱アミノ化を媒介することができ、例えば、以下の反応に従って、アミノ酸であるグルタミンが加水分解されてグルタミン酸およびアンモニアを生成する：
【化７】
2019521179.tif 000009
【００８８】
ある場合には、アスパラギナーゼの活性は、被験者中の血漿グルタミン濃度を低下させる等、被験者中のグルタミンの濃度を低下させる。上記の議論と同様に、被験者中のグルタミンの枯渇は、タンパク質合成のためにグルタミンの存在に依存する被験者中の細胞に有害に作用する。例えば、それ自身でグルタミンを合成する能力を欠く細胞（例えば、酵素であるグルタミンシンターゼを欠く細胞）中のタンパク質合成は、外因的なグルタミンの欠如により有害な影響を受け、結果として細胞のアポトーシスを導き得る。ある例では、タンパク質合成のためにグルタミンに依存する被験者中の細胞は、癌等の腫瘍状態を伴う可能性がある。従って、本開示の方法は、被験者の癌を治療する方法等の、被験者の腫瘍状態を治療する方法を含む。従って、本開示の方法は、腫瘍状態が外因性のグルタミンに依存する可能性のある場合に、患者の癌を治療する方法等の、患者の腫瘍状態を治療する方法を含む。例えば、主題の方法の実施形態は、被験者中のグルタミンを脱アミノ化する方法を含む。特定の実施形態では、被験者中の非腫瘍性細胞は、被験者に投与されるポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ組成物により、顕著な影響を受けない。例えば、被験者中の非腫瘍性細胞は、酵素であるグルタミンシンターゼを有することができ、従ってグルタミンを合成する能力を保持する。
【００８９】
上述したように、本開示の組成は凍結乾燥された貯蔵安定組成物を含む。この組成物を被験者に投与する前に、凍結乾燥された組成物は、例えば注射または静脈内投与等の投与に適切な液体組成物を提供するために、液体と混合される。ある場合には、組成物の被験者への投与に先立ち、凍結乾燥された組成物は、例えば、上述したように、例えば注射または静脈内投与に適切な液体組成物を提供するために、水（例えば、注射用水、ＷＦＩ）と組み合わされ得る。例えば、本開示の方法は、本開示の凍結乾燥された組成物（例えば、凍結乾燥された貯蔵安定組成物）を再構成することを含み得る。凍結乾燥された組成物を再構成することは、再構成された投与単位を生成できる。ある場合には、この再構成された投与単位は、例えば注射または静脈内投与等による被験者への投与に適切である。特定の実施形態では、凍結乾燥された組成物の再構成は凍結乾燥された組成物（例えば、凍結乾燥された貯蔵安定組成物）を水（例えば、注射用水、ＷＦＩ）と組み合わせることを含む。
【００９０】
前記液体または再構成された投与単位は、被験者での所望の治療効果を起こすために、計算された十分な量の本開示の組成物の所定の量を含む。被験者に投与される投与単位（例えば、液体または再構成された）中の組成物の量は、治療される被験者、苦痛の重篤性、および投与の様式に依存し得る。例えば、投与単位は本明細書に開示されるように、治療的に有効な量の組成物の量を含み得る。
【００９１】
投与単位の特定の実施形態では、ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼの量は、５００〜４，５００ＩＵ／ｍＬ、または５００〜４，０００ＩＵ／ｍＬ、または５００〜３，５００ＩＵ／ｍＬ、または５００〜３，０００ＩＵ／ｍＬ、または５００〜２，５００ＩＵ／ｍＬ、または５００〜２，０００ＩＵ／ｍＬ、または５００〜１，５００ＩＵ／ｍＬ、または５００〜１，０００ＩＵ／ｍＬ、または６００〜９００ＩＵ／ｍＬ、または７００〜８００ＩＵ／ｍＬ等の、１００〜５，０００ＩＵ／ｍＬの範囲の量を含み得る。特定の例では、前記投与単位は、ポリアルキレンオキシド-アスパラギナーゼの５００〜１，０００ＩＵ／ｍＬの範囲の量を含み得る。特定の例では、前記投与単位は、ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼの７００〜８００ＩＵ／ｍＬの範囲の量を含み得る。例えば、前記投与単位は７５０ＩＵ／ｍのポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼを含み得る。
【００９２】
特定の実施形態では、前記投与単位は、５０ＩＵ／ｍｇタンパク質以上等の、５５ＩＵ／ｍｇタンパク質以上等の、または６０ＩＵ／ｍｇタンパク質以上、または６５ＩＵ／ｍｇタンパク質以上、または７０ＩＵ／ｍｇタンパク質以上、または７５ＩＵ／ｍｇタンパク質以上、または８０ＩＵ／ｍｇタンパク質以上、または８５ＩＵ／ｍｇタンパク質以上、または９０ＩＵ／ｍｇタンパク質以上、または９５ＩＵ／ｍｇタンパク質以上、または１００ＩＵ／ｍｇタンパク質以上、または１０５ＩＵ／ｍｇタンパク質以上、または１１０ＩＵ／ｍｇタンパク質以上、または１１５ＩＵ／ｍｇタンパク質以上、または１２０ＩＵ／ｍｇタンパク質以上、または１２５ＩＵ／ｍｇタンパク質以上、または１３０ＩＵ／ｍｇタンパク質以上、または１３５ＩＵ／ｍｇタンパク質以上、または１４０ＩＵ／ｍｇタンパク質以上、または１４５ＩＵ／ｍｇタンパク質以上、または１５０ＩＵ／ｍｇタンパク質以上等の、治療的に有効な量（例えば、比活性）のポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼを含む。
【００９３】
例えば、前記投与単位は、８５ＩＵ／ｍｇタンパク質以上の比活性を有し得る。いくつかの実施形態では前記投与単位は、５０〜１５０ＩＵ／ｍｇタンパク質の範囲の、または５５〜１４５ＩＵ／ｍｇタンパク質、または６０〜１４０ＩＵ／ｍｇタンパク質、または６５〜１３５ＩＵ／ｍｇタンパク質、または７０〜１３０ＩＵ／ｍｇタンパク質、または７５〜１２５ＩＵ／ｍｇタンパク質、または８０〜１２０ＩＵ／ｍｇタンパク質、または８５〜１１５ＩＵ／ｍｇタンパク質、または９０〜１１０ＩＵ／ｍｇタンパク質、または９５〜１０５ＩＵ／ｍｇタンパク質。ある場合には、前記投与単位は、６５〜１４０ＩＵ／ｍｇタンパク質、または７０〜１３５ＩＵ／ｍｇタンパク質、または７５〜１３０ＩＵ／ｍｇタンパク質、または７５〜１２５ＩＵ／ｍｇタンパク質等の範囲の比活性を有する。例えば、前記投与単位は７５〜１２５ＩＵ／ｍｇタンパク質の範囲の比活性を有し得る。
【００９４】
特定の実施形態では、前記投与単位１ｍｇ／ｍＬ〜１５ｍｇ／ｍＬ、１．５ｍｇ／ｍＬ〜１４．５ｍｇ／ｍＬ等の、または２ｍｇ／ｍＬ〜１４ｍｇ／ｍＬ、または２．５ｍｇ／ｍＬ〜１３．５ｍｇ／ｍＬ、または３ｍｇ／ｍＬ〜１３ｍｇ／ｍＬ、または３．５ｍｇ／ｍＬ〜１２．５ｍｇ／ｍＬ、または４ｍｇ／ｍＬ〜１２ｍｇ／ｍＬ、または４．５ｍｇ／ｍＬ〜１１．５ｍｇ／ｍＬ、または４．５ｍｇ／ｍＬ〜１１ｍｇ／ｍＬ、または４．５ｍｇ／ｍＬ〜１０．５ｍｇ／ｍＬ、または４．５ｍｇ／ｍＬ〜１０ｍｇ／ｍＬ、または４．５ｍｇ／ｍＬ〜９．５ｍｇ／ｍＬ、または４．５ｍｇ／ｍＬ〜９ｍｇ／ｍＬ、または４．５ｍｇ／ｍＬ〜８．５ｍｇ／ｍＬ、または５ｍｇ／ｍＬ〜８ｍｇ／ｍＬ等の、１ｍｇ／ｍＬ〜１５ｍｇ／ｍＬの範囲のポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼの治療的に有効な量（例えば、タンパク質濃度）を含む。ある場合には、前記投与単位は、４．５ｍｇ／ｍＬ〜８．５ｍｇ／ｍＬの範囲のポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼの量を含む。
【００９５】
被験者に投与されたときに、前記投与単位は、この投与単位が、５００〜５，０００ＩＵ／ｍ２、または５００〜４，５００ＩＵ／ｍ２、または５００〜４，０００ＩＵ／ｍ２、または５００〜３，５００ＩＵ／ｍ２、または５００〜３，０００ＩＵ／ｍ２、または１，０００〜３，０００ＩＵ／ｍ２、または１，５００〜３，０００ＩＵ／ｍ２、または１、７５０〜３，０００ＩＵ／ｍ２、または２，０００〜３，０００ＩＵ／ｍ２、または２，０００〜２，７５０ＩＵ／ｍ２、または２，２５０〜２，７５０ＩＵ／ｍ２等の、１００〜５，０００ＩＵ／ｍ２のポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼを被験者に送達するための、ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼの治療的に有効な量を含み得る。例えば、前記投与単位は、ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼの１，〜３，０００ＩＵ／ｍ２を被験者に送達し得る。特定の例では、前記投与単位はポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼの２，０００〜２，７５０ＩＵ／ｍ２を被験者に送達し得る。特定の例では、前記投与単位は、ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼの２，２５０〜２，７５０ＩＵ／ｍ２を被験者に送達し得る。例えば、前記投与単位はポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼの２，５００ＩＵ／ｍ２を被験者に送達し得る。
【００９６】
特定の実施形態では、前記投与単位は、上述された緩衝液のような緩衝液を含み得る。例えば、前記投与単位はリン酸緩衝液を含むことができ、およびそのようなものとして、二塩基性リン酸ナトリウムおよび一塩基性リン酸ナトリウムを含み得る。
【００９７】
ある場合には、前記投与単位リン酸緩衝液を含み、およびそのようなものとして、二塩基性リン酸ナトリウムおよび一塩基性リン酸ナトリウムを含む。特定の例では、前記投与単位は、二塩基性リン酸ナトリウムの、１〜９ｍｇ／ｇ、または１〜８ｍｇ／ｇ、または１〜７ｍｇ／ｇ、または２〜７ｍｇ／ｇ、または３〜６ｍｇ／ｇ、または４〜６ｍｇ／ｇ、または５〜６ｍｇ／ｇ等の、０．５〜１０ｍｇ／ｇの範囲の量を含む。例えば、前記投与単位は、二塩基性リン酸ナトリウムの４〜６ｍｇ／ｇの範囲の量を含み得る。特定の例では、前記投与単位は、二塩基性リン酸ナトリウムの５〜６ｍｇ／ｇの範囲の量を含み得る。例えば、前記投与単位は二塩基性リン酸ナトリウムを５．６ｍｇ／ｇ（または５．５８ｍｇ／ｇ）等の、約５．５ｍｇ／ｇの量を含み得る。特定の実施形態では、前記投与単位は、一塩基性リン酸ナトリウムの、０．１〜４．５ｍｇ／ｇ、または０．１〜４ｍｇ／ｇ、または０．１〜３．５ｍｇ／ｇ、または０．１〜３ｍｇ／ｇ、または０．１〜２．５ｍｇ／ｇ、または０．１〜２ｍｇ／ｇ、または０．５〜２ｍｇ／ｇ、または１〜２ｍｇ／ｇ、または１〜１．５ｍｇ／ｇ等の、０．０５〜５ｍｇ／ｇの範囲の量を含む。例えば、前記投与単位は、一塩基性リン酸ナトリウムの１〜２ｍｇ／ｇの範囲の量を含み得る。特定の例では、前記投与単位は、一塩基性リン酸ナトリウムの１〜１．５ｍｇ／ｇの範囲の量を含む。例えば、前記投与単位は一塩基性リン酸ナトリウムの１．２ｍｇ／ｇ（または１．２９ｍｇ／ｇ）の量を含み得る。
【００９８】
特定の実施形態では、前記投与単位は、塩を含む。前記投与単位において使用するために適切な塩は、ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼと両立し、および例えば、注射または静脈内投与により被験者に投与するために適切な塩を含む。適切な塩の例は、限定はされないが、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化カルシウム、塩化マグネシウム等、およびそれらの組み合わせを含む。特定の例では、前記投与単位は塩化ナトリウム等の塩を含む。ある場合には、前記投与単位は、塩（例えば、塩化ナトリウム）を、１〜１９ｍｇ／ｇ、または１〜１８ｍｇ／ｇ、または１〜１７ｍｇ／ｇ、または１〜１６ｍｇ／ｇ、または１〜１５ｍｇ／ｇ、または２〜１５ｍｇ／ｇ、または３〜１５ｍｇ／ｇ、または４〜１５ｍｇ／ｇ、または５〜１４ｍｇ／ｇ、または５〜１３ｍｇ／ｇ、または５〜１２ｍｇ／ｇ、または５〜１１ｍｇ／ｇ、または５〜１０ｍｇ／ｇ、または５〜９ｍｇ／ｇ、または６〜９ｍｇ／ｇ、または７〜９ｍｇ／ｇ、または８〜９ｍｇ／ｇ等の、１〜２０ｍｇ／ｇの範囲の量を含む。
【００９９】
例えば、前記投与単位は塩（例えば、塩化ナトリウム）の１〜１０ｍｇ／ｇの範囲の量を含み得る。特定の例では、前記投与単位は塩（例えば、塩化ナトリウム）の５〜１０ｍｇ／ｇの範囲の量を含み得る。特定の例では、前記投与単位は塩（例えば、塩化ナトリウム）の６〜９ｍｇ／ｇの範囲の量を含む。特定の例では、前記投与単位は塩（例えば、塩化ナトリウム）の８〜９ｍｇ／ｇの範囲の量を含む。例えば、前記投与単位は塩（例えば、塩化ナトリウム）を８．５ｍｇ／ｇの量で含む。
【０１００】
ある例では、被験者に投与される製剤は、米国食品医薬品局から商業的マーケティングが承認されたＯｎｃａｓｐａｒ（登録商標）として商業的に知られる、ＰＥＧ-アスパラギナーゼ液体注射製剤である。Ｏｎｃａｓｐａｒ（登録商標）（ペグアスパラガーゼ：ｐｅｇａｓｐａｒｇａｓｅ）はモノメトキシポリエチレングリコール（ｍＰＥＧ）と共有結合的に結合したＬ-アスパラギナーゼ（Ｌ-アスパラギンアミドヒドロラーゼ）であり、透明な無色の、保存剤を含まない、等張の無菌のリン酸緩衝食塩水中の、ｐＨ７．３の溶液である。各ミリリットルが７５０±１５０国際単位、二塩基性リン酸ナトリウム、ＵＳＰ（５．５８ｍｇ）、一塩基性リン酸ナトリウム、ＵＳＰ（１．２０ｍｇ）および塩化ナトリウム、ＵＳＰ（９．５ｍｇ）、注射用水中、ＵＳＰを含む。
【０１０１】
特定の実施形態では、被験者に投与される前記投与単位は、凍結乾燥された組成物、例えば本明細書に記載される凍結乾燥された貯蔵安定組成物から調製された投与単位である。凍結乾燥された組成物から調製された前記投与単位は液剤であり得る。ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼに加えて、前記投与単位（例えば、凍結乾燥された組成物から再構成された用量）の実施形態は緩衝液、塩および糖を含み得る。
【０１０２】
特定の実施形態では、前記再構成された投与単位は、上記に詳細が記載された緩衝液等の緩衝液を含む。ある場合には、前記再構成された投与単位は、二塩基性リン酸ナトリウムの、１〜９ｍｇ／ｇ、または１〜８ｍｇ／ｇ、または１〜７ｍｇ／ｇ、または１〜６ｍｇ／ｇ、または１〜５ｍｇ／ｇ、または１〜４ｍｇ／ｇ、または２〜４ｍｇ／ｇ、または２〜３ｍｇ／ｇ、または２．５〜３ｍｇ／ｇ等の、０．５〜１０ｍｇ／ｇの範囲の量を含む。例えば、前記再構成された投与単位は、二塩基性リン酸ナトリウムの１〜５ｍｇ／ｇの範囲の量を含み得る。特定の例では、前記再構成された投与単位は、二塩基性リン酸ナトリウムの２〜４ｍｇ／ｇの範囲の量を含み得る。特定の例では、前記再構成された投与単位は、二塩基性リン酸ナトリウムの２．５〜３ｍｇ／ｇの範囲の量を含み得る。例えば、前記再構成された投与単位は、二塩基性リン酸ナトリウムを、２．８ｍｇ／ｇ（または２．７９ｍｇ／ｇ）等の、約３ｍｇ／ｇを含み得る。特定の実施形態では、前記再構成された投与単位は、一塩基性リン酸ナトリウムの、０．１〜０．９ｍｇ／ｇ、または０．１〜０．８ｍｇ／ｇ、または０．２〜０．８ｍｇ／ｇ、または０．３〜０．８ｍｇ／ｇ、または０．４〜０．８ｍｇ／ｇ、または０．４５〜０．７５ｍｇ／ｇ、または０．５〜０．７ｍｇ／ｇ等の、０．０５〜１ｍｇ／ｇの範囲の量を含む。例えば、前記再構成されたは一塩基性リン酸ナトリウムの０．４５〜０．７５ｍｇ／ｇの範囲の量を含み得る。特定の例では、前記再構成された投与単位は一塩基性リン酸ナトリウムの０．５〜０．７ｍｇ／ｇの範囲の量を含む。例えば、前記再構成された投与単位は一塩基性リン酸ナトリウムの０．６ｍｇ／ｇの量を含む。
【０１０３】
特定の実施形態では、前記再構成された投単位は上記で詳細を記載した塩等の塩を含む。特定の例では、前記再構成された投与単位は塩化ナトリウム等の塩を含む。ある場合には、前記再構成された投与単位は塩（例えば、塩化ナトリウム）を、１〜９ｍｇ／ｇ、または１〜８ｍｇ／ｇ、または１〜７ｍｇ／ｇ、または１〜６ｍｇ／ｇ、または１〜５ｍｇ／ｇ、または２〜５ｍｇ／ｇ、または３〜５ｍｇ／ｇ、または４〜５ｍｇ／ｇ、または４〜４．５ｍｇ／ｇ等の、０．５〜１０ｍｇ／ｇの範囲の量を含む。例えば、前記再構成された投与単位は、塩（例えば、塩化ナトリウム）の１〜１０ｍｇ／ｇの範囲の量を含む。特定の例では、前記再構成された投与単位は、塩（例えば、塩化ナトリウム）の３〜５ｍｇ／ｇの範囲の量を含む。特定の例では、再構成された投与単位は塩（例えば、塩化ナトリウム）の４〜４．５５ｍｇ／ｇの範囲の量を含む。例えば、前記再構成された投与単位は塩（例えば、塩化ナトリウム）を、４．２５ｍｇ／ｇ等、約４ｍｇ／ｇ含む。
【０１０４】
特定の実施形態では、前記再構成された投与単位は上記で詳細を記載した糖等の糖を含む。特定の例では、前記再構成された投与単位は二糖類等の糖を含む。ある場合には、前記再構成された投与単位はショ糖等の糖を含む。ある場合には、前記再構成された投与単位は糖（例えば、ショ糖）を、５〜２００ｍｇ／ｇ、または１０〜１５０ｍｇ／ｇ、または１０〜１００ｍｇ／ｇ、または１０〜９０ｍｇ／ｇ、または１０〜８０ｍｇ／ｇ、または２０〜７０ｍｇ／ｇ、または２０〜６０ｍｇ／ｇ、または３０〜５０ｍｇ／ｇ、または４０〜５０ｍｇ／ｇ等の、１〜２５０ｍｇ／ｇの範囲の量を含む。例えば、前記再構成された投与単位糖（例えば、ショ糖）の１０〜１００ｍｇ／ｇの範囲の量を含む。特定の例では、前記再構成された投与単位は糖（例えば、ショ糖）の３０〜５０ｍｇ／ｇの範囲の量を含み得る。特定の例では、前記再構成された投与単位は糖（例えば、ショ糖）の４０〜５０ｍｇ／ｇの範囲の量を含み得る。例えば、前記再構成された投与単位は糖（例えば、ショ糖）の４５ｍｇ／ｇの量を含む。
【０１０５】
特定の実施形態では、前記投与単位（例えば、液体または再構成された）は生理学的状態と両立する範囲である。ある場合には、前記投与単位のｐＨは７〜８の範囲である。例えば、前記投与単位のｐＨは７〜７．５の範囲であってよい。ある場合には、前記投与単位のｐＨは７．２であるある場合には、前記投与単位のｐＨは７．３である。ある場合には、前記投与単位のｐＨは７．４である。
【０１０６】
特定の実施形態では、前記方法は被験者中のアスパラギンを脱アミノ化するために、前記投与単位を被験者に投与することを含み得る。投与の経路は、限定はされないが、治療されるべき病態、使用される組成物および／または機器の種類、治療されるべき被験者等の様々な因子に従い選択できる。開示された方法において有用な投与の経路は限定はされないが、経口および静脈内（ｉｖ）、腹腔内（ｉｐ）、筋肉内（ｉｍ）、直腸内、局所、眼内、経鼻、および経皮等の非経口の経路を含む。例えば、注射に適切な組成物は、静脈内、筋肉内、皮内、皮下、舌下、骨内、または他の投与経路により投与できる。
ある例では、前記投与単位を被験者に投与することは、前記投与単位被験者に静脈内投与することを含む。ある場合には、前記投与単位を被験者に投与することは、前記投与単位被験者に筋肉内投与することを含む。
【０１０７】
ある例では、前記再構成された投与単位を被験者に投与することは、前記再構成された投与単位被験者に静脈内投与することを含む。ある例では、前記再構成された投与単位を被験者に投与することは、前記再構成された投与単位被験者に筋肉内投与することを含む。
【０１０８】
特定の実施形態では、前記方法は、治療投薬計画に従って前記投与単位を投与することを含む。例えば、ある場合には、治療されるべき被験者は、ヘルスケア提供者から治療投薬計画を処方されることができる。る場合には、治療投薬計画は、限定される必要はないが、１日に５回の投与、１日に４回、１日に３回の投与、１日に２回、１日に１回、１週間に３回、１週間に２回、１週間に１回、２週間に１回、３週間に１回、１ヵ月に１回、５週間に１回、６週間に１回、７週間に１回、２か月ごとに１回、およびそれらの任意の組み合わせを含む。
【０１０９】
いくつかの実施形態では前記治療投薬計画は、１つ以上の用量を長期間にわたって投与することを含む。特定の場合には、単回投与（例えば、単回投与単位を被験者を投与し、および初回投与に続いて、１つ以上の用量を、続く時間の間に被験者に投与できる。ある例では、１回以上の用量（例えば、１つ以上の投与単位）を被験者に投与し、および初回投与に続いて、１つ以上の用量を、続く時間の間に被験者に投与できる。例えば、単回投与（例えば、単回投与単位）を被験者に投与することができ、およびこの単回投与に続いて、単回投与を続く時間の間に被験者に投与できる。ある場合には、１つ以上の用量(例えば、１つ以上の投与単位) を被験者に投与でき、最初の用量に続いて、後続の時点で、１つ以上の用量を被験者に投与できる。例えば、単回用量(例えば、単回投与単位) を被験者に投与でき、およびこの単回用量に続いて、後続の時点で、単回用量を被験者に投与できる。追加的な単回投与を続く時点で被験者に投与できる。他の場合には、単回投与（例えば、単回投与単位）を被験者に投与することができ、およびこの単回投与に続いて、２複数回投与を続く時点で投与できる。後続する時点で追加的な単回または複数の投与を投与できる。追加的な単回投与を続く時点で被験者に投与できる。
【０１１０】
他の場合には、単回投与（例えば、単回投与単位）を被験者に投与することができ、およびこの単回投与に続いて、２複数回投与を続く時点で投与できる。特定の例では、前記治療投薬計画は複数の相を含む。前記治療投薬計画は複数の相を含み、この投与スケジュールは、前記治療投薬計画の各相において異なる。ある場合には、被験者は誘導相および連結相の２つの相を持つ治療投薬計画を処方される。特定の例では、被験者は２つの相を持つ治療投薬計画を処方され、第一の相の投与スケジュールは、第二の相の投与スケジュールとは異なる。例えば、被験者は誘導相および連結相の２つの相を持つ治療投薬計画を処方され、誘導相の投与スケジュールは、連結相の投与スケジュールとは異なる。他の実施形態では、被験者は誘導相、連結相および維持相を含む３つの相を持つ治療投薬計画を処方される。ある例では、被験者は誘導相、連結相および維持相の３つの相を含む治療投薬計画を処方され、各相の投与スケジュールは他の相とはそれぞれ異なる。例えば、被験者は誘導相、連結相および維持相の３つの相を含む治療投薬計画を処方され、その場合各相の投与スケジュールは他の相とはそれぞれ異なる。
【０１１１】
特定の実施形態では、前記治療投薬計画の各相の治療時間の長さは同じであるか、または他の場合には異なることができる。例えば、前記誘導相の間の時間の長さは、２週間以上、または３週間以上、または４週間以上、または５週間以上、または６週間以上、または７週間以上、または８週間以上等と、１週間以上であることができる。ある場合には、前記誘導相の間の時間の長さは、4週間である。ある場合には、前記誘導相の間の時間の長さは５週間である。
【０１１２】
特定の実施形態では、連結相の間の時間の長さは、２週間以上、または３週間以上、または４週間以上、または５週間以上、または６週間以上、または７週間以上、または８週間以上、または９週間以上、または１０週間以上、または１１週間以上、または１２週間以上、または１３週間以上、または１４週間以上、または１５週間以上、または１６週間以上、または１７週間以上、または１８週間以上、または１９週間以上、または２０週間以上、または２１週間以上、または２２週間以上、または２３週間以上、または２４週間以上、または２５週間以上、または２６週間以上、または２７週間以上、または２８週間以上、または２９週間以上、または３０週間以上、または３１週間以上、または３２週間以上等の、１週間以上である。ある場合には、連結相の間の時間の長さは、８週間である。ある場合には、連結相の間の時間の長さは、２７週間である。ある場合には、連結相の間の時間の長さは、３０週間である。
【０１１３】
特定の実施形態では、維持相の間の時間の長さは、２週間以上、または３週間以上、または４週間以上、または５週間以上、または６週間以上、または７週間以上、または８週間以上、または９週間以上、または１０週間以上、または１２週間以上、または１６週間以上、または２０週間以上、または２４週間以上、または２８週間以上、または３２週間以上、または３６週間以上、または４０週間以上、または４４週間以上、または４８週間以上、または５２週間以上、または５６週間以上、または６０週間以上、または６４週間以上、または６８週間以上、または７２週間以上、または７６週間以上、または８０週間以上、または８４週間以上、または８８週間以上、または９２週間以上、または９６週間以上、または１００週間以上、または１０４週間以上、または１０８週間以上、または１１２週間以上、または１１６週間以上、または１２０週間以上、または１２４週間以上、または１２８週間以上、または１３２週間以上、または１３６週間以上、または１４０週間以上、または１４４週間以上、または１４８週間以上、または１５２週間以上、または１５６週間以上、または１６０週間以上、または１６４週間以上、または１６８週間以上、または１７２週間以上、または１７６週間以上、または１８０週間以上等の、１週間以上である。ある場合には、維持相の間の時間の長さは８週間である。ある場合には、維持相の間の時間の長さは８８週間である。ある場合には、維持相の間の時間の長さは１０４週間である。ある場合には、連結相の間の時間の長さは１４０週間である。ある場合には、維持相の間の時間の長さは１５６週間である。ある場合には、維持相の間の時間の長さはは８８〜１０４週間の範囲である。ある場合には、維持相の間の時間の長さは８８〜１４０週間の範囲である。ある場合には、維持相の間の時間の長さは８８〜１５６週間の範囲である。
【０１１４】
被験者に投与することができる前記治療投薬計画の例は、限定はされないが、本明細書に記載されているものを含む。特定の実施形態では、前記治療投薬計画は、誘導相において、被験者に単回の投与単位を投与すること、および複数の投与単位を維持相において投与することを含む。特定の実施形態では、前記治療投薬計画は、誘導相において、被験者に単回の投与単位を投与すること、および複数の投与単位を連結相において投与することを含む。例えば、前記複数の投与単位は、投与単位を（例えば、連結相の間に）３週間毎に被験者に投与することにより投与できる。ある場合には、単回の投与単位を、３週間毎に１回被験者に投与できる。上述したように、前記連結相は３０週間であることができ、および従って合計で１０投与単位を被験者に投与できる（例えば、単回の投与単位を３週間毎に１回、３０週間の間、被験者に投与できる）。追加的な（またはより少ない）投与単位を、記載されるように、またはヘルスケア提供者により処方されるように、誘導相および連結相の間に、または連結相の後に被験者に投与することができる。
【０１１５】
他の例では、前記治療投薬計画は、被験者に誘導相の間に単回の投与単位投与し、および連結相の間に複数の投与単位を投与することができ、複数の投与単位を、投与単位を被験者に２週間ごとに投与することにより、被験者に投与できる。．ある場合には、単回の投与単位を被験者に２週間ごとに投与する。上述したように、前記連結相は３０週間であることができ、および従って合計で１５投与単位を被験者に投与できる（例えば、単回の投与単位を２週間毎に１回、３０週間の間、被験者に投与できる）。追加的な（またはより少ない）投与単位を、記載されるように、またはヘルスケア提供者により処方されるように、誘導相および連結相の間に、または連結相の後に被験者に投与することができる。
【０１１６】
他の実施形態では、前記治療投薬計画は、被験者に単回の投与単位を誘導相の間に、複数の投与単位を連結相の間に、および複数の投与単位を維持相の間に投与することを含む。例えば、連結相の間の複数の投与単位は、連結相の開始に続く特定の日に被験者に投与できる。ある例では、この連結相の間の複数の投与単位を、２つ以上の投与単位を被験者に同時に投与することにより、被験者に投与できる。例えば、連結相の間のこの複数の投与単位を、連結相の開始に続く特定の日に２つ以上の投与単位を被験者に投与することにより投与でき、および２つ以上の投与単位を、連結相の間の、それに後続する日に投与できる。この種類の治療投薬計画の例は、連結相の開始に続く１５日目に２投与単位を被験者に投与し、および２投与単位を連結相の開始に続く４３日目に投与することを含み得る。追加的な（またはより少ない）投与単位を誘導相および連結相の間に被験者に投与できるか、またはヘルスケア提供者により所望または処方される場合には、連結相の後であるが、維持相の前に投与できる。
【０１１７】
特定の実施形態では、維持相の間の複数の投与単位を維持相の開始に続く特定の日に被験者に投与できる。ある例では、この維持相の間に複数の投与単位を、２つ以上の投与単位を被験者に同時に投与することにより、被験者に投与できる。例えば、維持相の間のこの複数の投与単位を、維持相の開始に続く特定の日に２つ以上の投与単位を被験者に投与でき、および２つ以上の投与単位を、維持相の間の、それに後続する日に投与できる。この種類の治療投薬計画の例は、維持相の開始に続く２日目に２投与単位を被験者に投与し、および２投与単位を維持相の開始に続く２２日目に投与することを含み得る。維持相の間の治療投薬計画の他の例は、維持相の開始に続く４日目に２投与単位を被験者に投与し、および２投与単位を維持相の開始に続く４３日目に投与することを含み得る。ある場合には、治療投薬計画は、複数の維持相を含み得る。特定の例では、この各維持相の間の投与スケジュールは同じであることができるか、または他の例では各維持相の間の投与スケジュールは異なることができる。ヘルスケア提供者により所望または処方される場合には、追加的な（またはより少ない）投与単位を連結相および維持相の間に、もしくは維持相の後で、または異なる維持相の間に被験者に投与できる。
【０１１８】
特定の実施形態では、本開示の投与単位を、例えば併用療法等における関連するか、または関連しない病態の治療のための他の活性薬剤に先立ち、それと同時に、またはその後で、投与できる。そのような追加的な治療の例は、放射線療法、外科的療法、および化学療法を含む。他の活性薬剤と同時に提供される場合、本開示の投与単位は、同じか、または異なる製剤で提供できる。例えば、併用療法は、特定の治療投薬計画に従い、組み合わせにより治療的に有効な用量を提供する、投与単位および少なくとも１つの化学療法剤等の他の活性薬剤を有する薬学的な組成物を投与することにより達成できる。別個の薬学的組成物の投与は、これらの物質の併用が治療を受ける被験者において治療的に有効な効果を引き起こす限り同時にか、または異なる時点で行うことができる（例えば、順次に、同じ日、または異なる日ににどちらかの順番で）。
【０１１９】
従って、本開示の態様は、更に併用療法を含む。特定の実施形態では、主題の方法は１つ以上の追加的な活性薬剤の治療的に有効量を投与することを含む。併用療法とは、ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ（例えば、本明細書に記載されるような）を、他の単独の疾患または病態を治療するための他の治療薬と併用できることを意味する。特定の実施形態では、本開示の化合物は、本開示の化合物を含む組成物の成分として、または異なる組成物の成分として他の治療薬の投与と同時に投与される。特定の実施形態では、本開示の化合物を含む組成物は、他の治療薬の投与に先立ち、またはそれに後続して投与される。
【０１２０】
主題の化合物は、抗癌剤および抗腫瘍剤等の腫瘍状態の治療に有用な任意の薬剤と合同で使用できる。興味ある抗癌剤の１つのクラスは、化学療法剤である。「化学療法」は、１つ以上の化学療法薬および／または他の薬剤を、静脈内、経口、筋肉内、腹腔内、膀胱内、皮下、経皮的、口腔的、または吸入を含むさまざまな方法で癌患者に投与することを意味する。主題の化合物と合同で用い得る興味ある薬剤は、限定はされないが、癌の化学療法剤、細胞の増殖を低下させるために作用する薬剤、代謝拮抗物質薬、微小管作用薬、ホルモン・モジュレーター、およびステロイド、天然物および例えば、以下により詳細が記載される、生物反応修飾物質を含む。
【０１２１】
癌の化学療法剤は、癌細胞の増殖を低下する非ペプチド性（すなわち、非タンパク性の）化合物を含み、および細胞毒性薬および細胞増殖抑制剤を包含する。化学療法剤の非制限的例は、アルキル化剤、ニトロソウレア、代謝拮抗剤、抗腫瘍性抗生物質、植物（ビンカ）アルカロイド、およびステロイドホルモン。ペプチド性化合物も用い得る。適切な癌化学療法剤は、ドラスチンならびにその活性アナログおよび誘導体；およびオーリスタチン（ａｕｒｉｓｔａｔｉｎ）ならびにその活性アナログおよび誘導体（例えば、モノメチルオーリスタチンＤ（ＭＭＡＤ）、モノメチルオーリスタチＥ（ＭＭＡＥ）、モノメチルオーリスタチＦ（ＭＭＡＦ）等）を含む。例えば、ＷＯ９６／３３２１２、ＷＯ９６／１４８５６、および米国特許６，３２３、３１５を参照されたい。例えば、ドラスタチン１０またはオーリスタチンＰＥは、本開示の抗体-薬物複合体に含まれることができる。適切な癌化学療法剤は、メイタンシノイドならびにその活性アナログおよび誘導体(例えば、ＥＰ１３９１２１３；およびＬｉｕ ｅｔ ａｌ （１９９６） Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳＡ ９３：８６１８-８６２３を参照されたい)；ズオカルマイシンならびにその活性アナログおよび誘導体（例えば、その合成アナログである、ＫＷ-２１８９およびＣＢ１-ＴＭｌを含む）；およびベンゾジアゼピンならびにその活性アナログおよび誘導体（例えば、ピロロベンゾジアゼピン（ＰＢＤ）も含む。
【０１２２】
細胞の増殖を低下させるために作用する薬剤は、当技術分野では周知でありおよび広く用いられている。そのような薬剤は、ナイトロジェン・マスタード、ニトロソウレア、エチレンイミン誘導体、スルホン酸アルキル、およびトリアジン等、および限定はされないが、メクロレタミン、サイクロホスファミド（ＣｙｔｏｘａｎＴＭ）、メルファラン（Ｌ-サルコリシン（ｓａｒｃｏｌｙｓｉｎ））、カルムスチン（ＢＣＮＵ）、ロムスチン（ＣＣＮＵ）、セムスチン（メチル-ＣＣＮＵ）、ストレプトゾシン、クロロゾトシン、ウラシル・マスタード、クロルメチン、イホスファミド、クロラムブシル、ピポブロマン、トリエチレンメラミン、トリエチレンチオホスフォラミン（ｔｒｉｅｔｈｙｌｅｎｅｔｈｉｏｐｈｏｓｐｈｏｒａｍｉｎｅ）、ブスルファン、ダカルバジン、およびテモゾロマイドを含むアルキル化剤を含む。
【０１２３】
代謝拮抗薬剤は、限定はされないが、シタラビン（ＣＹＴＯＳＡＲ-Ｕ）、シトシンアラビノシド、フルオロウラシル（５-ＦＵ）、フロクスウリジン（ＦｕｄＲ）、６-チオグアニン、６-メルカプトプリン（６-ＭＰ）、ペントスタチン、メトトレキサート、１０-プロパルギル-５，８-ジデアザ葉酸（ＰＤＤＦ、ＣＢ３７１７）、５，８-ジデアザテトラヒドロ葉酸（ＤＤＡＴＨＦ）、ロイコボリン、フルダラビンリン酸、ペントスタチン、およびゲムシタビンを含む、葉酸アナログ、ピリミジン・アナログ、プリン・アナログ、およびアデノシン・デアミナーゼ阻害剤を含む。
【０１２４】
適切な天然物およびそれらの誘導体（例えば、ビンカアルカロイド、抗腫瘍抗生物質、酵素、リンホカイン、およびエピポドフィロトキシン）は、限定はされないが、ａｒａ-Ｃ、パクリタキセル（Ｔａｘｏｌ（登録商標））、ドセタキセル（Ｔａｘｏｔｅｒｅ（登録商標））、デオキシコホルマイシン、マイトマイシン-Ｃ、アザチオプリン；ブレキナール（ｂｒｅｑｕｉｎａｒ）；アルカロイド、例えば、ビンクリスチン、ビンブラスチン、ビノレルビン、ビンデシン等；ポドフィロトキシン、例えば、エトポシド、テニポシド等；抗生物質、例えば、アントラサイクリン、ダウノルビシン塩酸塩（ダウノマイシン、ルビドマイシン、ＣｅｒｕｂｉｄｉｎｅＴＭ、イダルビシン、ドキソルビシン、エピルビシンおよびモルホリノ誘導体等；フェノキシゾン・ビス・シクロペプチド（ｐｈｅｎｏｘｉｚｏｎｅ ｂｉｓｃｙｃｌｏｐｅｐｔｉｄｅ）、例えば、ダクチノマイシン；塩基性グリコペプチド、例えば、ブレオマイシン；アントラキノン・グリコシド、例えば、プリカマイシン（ミトラマイシン）；アントラセンジオン、例えば、ミトキサントロン；アジリノピロ・インドールジオン、例えば、マイトマイシン；大環状免疫抑制剤、例えば、サイクロスポリン、ＦＫ-５０６（タクロリムス、プログラフ、ラパマイシン等を含む。
【０１２５】
他の抗増殖細胞毒性薬剤は、ナベルビン（ｎａｖｅｌｂｉｎｅ）、ＣＰＴ-１１、アナストラゾール（ａｎａｓｔｒａｚｏｌｅ）、レトロゾール、カペシタビン、レロキサフィン（ｒｅｌｏｘａｆｉｎｅ）、シクロホスファミド、イホスファミド、およびドロロキサフィン（ｄｒｏｌｏｘａｆｉｎｅ）である。抗増殖活性を有し、使用にも適切な微小管作用薬は、限定はされないが、アロコルヒチン（ａｌｌｏｃｏｌｃｈｉｃｉｎｅ）（ＮＳＣ４０６０４２）、ハリコンドリンＢ（ＮＳＣ６０９３９５）、コルヒチン（ＮＳＣ７５７）、コルヒチン誘導体（例えば、ＮＳＣ３３４１０）、ドラスタチン１０（ＮＳＣ３７６１２８）、メイタンシン（ＮＳＣ１５３８５８）、リゾキシン（ＮＳＣ３３２５９８）、パクリタキセル（Ｔａｘｏｌ（登録商標））、Ｔａｘｏｌ（登録商標）誘導体、ドセタキセル（Ｔａｘｏｔｅｒｅ（登録商標））、チオコルヒチン（ＮＳＣ３６１７９２）、トリチルシステイン、硫酸ビンブラスチン、硫酸ビンクリスチン、限定はされないが、エポチロンＡ、エポチロンＢ、ジスコデルモリドを含む。天然および合成エポチロン；エストラムスチン、ノコダゾール等を含む。
【０１２６】
使用に適切なホルモン・モジュレーターおよびステロイド（合成アナログを含む）はｉｎｃｌｕｄｅ、限定はされないが、副腎皮質ステロイド、例えば、プレドニゾン、デキサメタゾン等；エストロゲンおよびプロゲスチン、例えば、カプリル酸ヒドロキシプロゲステロン、酢酸メドロキシプロゲステロン、酢酸メゲストロール、エストラジオール、クロミフェン、タモキシフェン等；および副腎皮質抑制剤、例えば、アミノグルテチミド；ｌ７ａ-エチニルエストラジオール；ジエチルスチルベストロール、テストステロン、フルオキシメステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、テストラクトン、メチルプレドニゾロン、メチルテストステロン、プレドニゾロン、トリアムシノロン、クロロトリアニセン、ヒドロキシプロゲステロン、アミノグルテチミド、エストラムスチン、酢酸メドロキシプロゲステロン、ロイプロリド、フルタミド（Ｄｒｏｇｅｎｉｌ（登録商標））、トレミフェン（Ｆａｒｅｓｔｏｎ（登録商標））、およびＺｏｌａｄｅｘ（登録商標）を含む。エストロゲンは、増殖および分化を刺激する；従ってエストロゲン受容体に結合する化合物がこの活性をブロックするために用いられる。副腎皮質ステロイドはＴ細胞増殖を阻害し得る。
【０１２７】
他の適切な化学療法剤は金属錯体、例えば、シスプラチン（ｃｉｓ-ＤＤＰ）、カルボプラチン；尿素、例えば、ヒドロキシ尿素；およびヒドラジン、例えば、Ｎ-メチルヒドラジン；エピドフィロトキシン（ｅｐｉｄｏｐｈｙｌｌｏｔｏｘｉｎ）；トポイソメラーゼ阻害剤；プロカルバジン；ミトキサントロン；ロイコボリン；テガフール；等を含む。他の興味ある抗増殖性薬剤は、免疫抑制剤、例えば、ミコフェノール酸、サリドマイド、デソキシスペルグアリン（ｄｅｓｏｘｙｓｐｅｒｇｕａｌｉｎ）、アザセリン、レフルノミド、ミゾリビン、アザスピロン（ＳＫＦ１０５６８５）；Ｉｒｅｓｓａ（登録商標）（ＺＤ１８３９、４-（３-クロロ-４-フルオロフェニルアミノ）-７-メトキシ-６-（３-（４-モルホリニル）プロポキシ）キナゾリン）；等を含む。
【０１２８】
タキサンは使用に適切である。「タキサン」は、パクリタキセルと同様に、任意の活性タキサン誘導体またはプロドラッグを含む。「パクリタキセル」（本明細書では、例えば、ドセタキセル、ＴＡＸＯＬＴＭ、ＴＡＸＯＴＥＲＥＴＭ（ドセタキセルの製剤）、パクリタキセルの１０位の脱アセチル（１０−デスアセチル）アナログおよびパクリタキセルの３’Ｎ-デスベンゾイル-３’Ｎ-ｔ-ブトキシカルボニルアナログ等のアナログ、製剤、および誘導体を含むものとして理解されたい）は、当技術分野の当業者に周知の技法を用いて容易に合成できる（ＷＯ９４／０７８８２、ＷＯ９４／０７８８１、ＷＯ９４／０７８８０、ＷＯ９４／０７８７６、ＷＯ９３／２３５５５、ＷＯ９３／１００７６；米国特許第５，２９４，６３７；５，２８３，２５３；５，２７９，９４９；５，２７４，１３７；５，２０２，４４８；５，２００，５３４；５，２２９，５２９；およびＥＰ５９０，２６７も参照されたい）か、または例えば、ＳｉｇｍａＣｈｅｍｉｃａｌ社、ミズリー州セントルイス（タイヘイヨウイチイ（Ｔａｘｕｓ ｂｒｅｖｉｆｏｌｉａ）よりのＴ７４０２；または雲南紅豆杉（Ｔａｘｕｓ ｙａｎｎａｎｅｎｓｉｓ）よりのＴ-１９１２）を含む様々な商業的ソースから入手できる。パクリタキセルは、パクリタキセルから通常化学的に入手可能な形態のみを指すものと理解されるべきではなく、アナログおよび誘導体（例えば、上記のＴａｘｏｔｅｒｅＴＭドセタキセル）およびパクリタキセル複合体（例えば、パクリタキセル-ＰＥＧ、パクリタキセル-デキストラン、またはパクリタキセル-キシロース）を指す。用語「タキサン」に含まれるものは、親水性誘導体、および疎水性誘導体の両方を含む様々な既知の誘導体である。タキサン誘導体は、限定はされないが、国際特許出願ＷＯ９９／１８１１３号に記載されるガラクトースおよびマンノース誘導体；ＷＯ９９／１４２０９に記載されるピペラジノおよび他の誘導体；ＷＯ９９／０９０２１、ＷＯ９８／２２４５１および米国特許第５，８６９，６８０号に記載されるタキサン誘導体；ＷＯ９８／２８２８８に記載される６-チオ誘導体；米国特許第５，８２１，２６３号に記載されるスルホンアミド誘導体；および米国特許第５，４１５，８６９号に記載されるタキソール誘導体を含む。これは、更に限定はされないが、ＷＯ９８／５８９２７；ＷＯ９８／１３０５９；および米国特許第５，８２４，７０１号に記載されているものを含むパクリタキセルのプロドラッグを含む。
【０１２９】
使用に適切な生物反応修飾物質は、限定はされないが、（１）チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）活性の阻害剤；（２）セリン／スレオニンキナーゼ活性の阻害剤；（３）腫瘍抗原に特異的に結合する抗体等の腫瘍関連抗原のアンタゴニスト；（４）アポトーシス受容体アゴニスト；（５）インターロイキン-２；（６）ＩＦＮ-ａ；（７）ＩＦＮ-ｙ；（８）コロニー刺激因子；および（９）血管新生阻害剤を含む。
【０１３０】
本開示の方法および組成物により治療可能な被験者は、任意の年齢の被験者を含み得る。ある場合には、この被験者は成人であってよい。例えばヒトの成人被験者は、１８歳以上である。本開示の方法および組成物により治療可能な被験者は、年少の被験者を含み得る。例えばヒトの年少被験者は、１８歳未満であり得る。ある例では、被験者は、例えば、５年〜１６年等を含む２年〜１８年を含む、１年〜１８年等の１ヵ月〜１８年の年齢の範囲である。
【０１３１】
ある例では、前記方法は、被験者がＡＭＬに罹患しているかを診断することを含む。被験者は、任意の従来の手順を用いてＡＭＬを有するかを診断されることができる。ある例では、フランスの、アメリカの、およびイギリスの（ＦＡＢ）分類システムを急性骨髄性白血病の診断および分類に用い得る。急性骨髄性白血病の診断は、骨髄芽球が骨髄細胞または循環する白血球の３０％（または最新の世界保健機関（ＷＨＯ）の分類システムに基づいて２０％）以上を構成することを必要とする。この疾患の血液学的な性質は、以下に記載される様々なサブタイプを定義する。ＦＡＢ命名法（ＭｌからＭ７まで）は、急性骨髄性白血病のサブタイプを最も近く類似した正常な骨髄要素に従って分類する。ある例では、この方法は、ＡＭＬを有すると診断された被験者の、例えば、本明細書に記載されるような、ポリアルキレンオキシドアスパラギナーゼ組成物を用いる治療に対する適合性を決定する方法を含む。ある例では、この方法は治療の有効性をモニターすることを含む。治療の有効性は、任意の従来の手順を用いてモニターできる。
【０１３２】
［製造法］
本開示の態様は、本明細書に記載されるポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ組成物の製造法を含む。特定の場合には、前記方法は、本明細書に記載される液体ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ組成物を製造する方法である。前記方法は、リンカーによりアスパラギナーゼに共有結合的に結合したポリアルキレンオキシド基を有するポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ、緩衝液、および塩を含む水性組成物を製造する方法を含み得る。
【０１３３】
ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ組成物を製造する方法の実施形態は、水性濃縮組成物を生成することを含み得る。例えば、この水性濃縮組成物を製造する方法は、アスパラギナーゼ（例えば、Ｌ-アスパラギナーゼ）の溶液を調製すること；ポリアルキレンオキシド（例えば、ポリエチレングリコール）をアスパラギナーゼに結合すること；ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼを浄化すること；ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼの溶液をろ過し、および濃縮すること；ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼの溶液を希釈すること；ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼの溶液をろ過し、およびポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼの溶液を無菌の容器中に充填すること；およびポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼの溶液を保存すること；の１つ以上のステップを含み得る。
【０１３４】
水性濃縮組成物の製造のための前記方法では、アスパラギナーゼ（例えば、Ｌ-アスパラギナーゼ）の溶液が調製されることができる。このアスパラギナーゼは（例えば、緩衝化された水性溶液等の）水性溶液と混合できる。適切な緩衝液の例は限定はされないが、リン酸緩衝液、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）、ダルベッコのリン酸緩衝生理食塩水（ＤＰＢＳ）、ハンク（Ｈａｎｋ）の平衡食塩溶液（ＨＢＳＳ）、アール（Ｅａｒｌｅ）の平衡食塩溶液（ＥＢＳＳ）、Ｔｒｉｓ緩衝液、リンガー（Ｒｉｎｇｅｒ）の乳酸緩衝液、ホウ酸緩衝液等、およびその組み合わせが挙げられる。ある場合には、アスパラギナーゼはリン酸緩衝液と混合される。
【０１３５】
前記リン酸緩衝は、二塩基性リン酸ナトリウムおよび一塩基性リン酸ナトリウムを含み得る。ある場合には、水性濃縮組成物中の二塩基性リン酸ナトリウムの量は、０．１〜４．５ｗｔ．％、または０．１〜４ｗｔ．％、または０．１〜３．５ｗｔ．％、または０．１〜３ｗｔ．％、または０．１〜２．５ｗｔ．％、または０．１〜２ｗｔ．％、または０．１〜１ｗｔ．％、または０．１〜０．９ｗｔ．％、または０．１〜０．８ｗｔ．％、または０．１〜０．７ｗｔ．％、または０．１〜０．６ｗｔ．％、または０．２〜０．６ｗｔ．％、または０．３〜０．６ｗｔ．％、または０．４〜０．６ｗｔ．％、または０．５〜０．６ｗｔ．％等の、０．０５〜５ｗｔ．％の範囲の量である。例えば、二塩基性リン酸ナトリウムは、水性濃縮組成物中に０．１〜１ｗｔ．％の範囲の量で存在し得る。特定の例では、二塩基性リン酸ナトリウムは、組成物中に０．２〜０．８ｗｔ．％の量で存在できる。特定の例では、二塩基性リン酸ナトリウムは組成物中に０．３〜０．６ｗｔ．％の量で存在できる。特定の例では、二塩基性リン酸ナトリウムは組成物中に０．５〜０．６ｗｔ．％の量で存在できる。例えば、二塩基性リン酸ナトリウムは、組成物中に０．５６ｗｔ．％（または０．５５８ｗｔ．％）等の、約０．６ｗｔ．％の量で存在し得る。特定の実施形態では、水性濃縮組成物中の一塩基性リン酸ナトリウムの量は、、０．０１〜１．８ｗｔ．％、または０．０１〜１．６ｗｔ．％、または０．０１〜１．４ｗｔ．％、または０．０１〜１．２ｗｔ．％、または０．０１〜１．０ｗｔ．％、または０．０１〜０．８ｗｔ．％、または０．０１〜０．６ｗｔ．％、または０．０１〜０．４ｗｔ．％、または０．０１〜０．２ｗｔ．％、または０．０２〜０．１８ｗｔ．％、または０．０３〜０．１６ｗｔ．％、または０．０４〜０．１６ｗｔ．％、または０．０４５〜０．１５ｗｔ．％、または０．０４〜０．１４ｗｔ．％、または０．０５〜０．１４ｗｔ．％、または０．１〜０．２ｗｔ．％、または０．１〜０．１５ｗｔ．％等の、０．００５〜２ｗｔ．％の範囲の量が存在できる。例えば、一塩基性リン酸は、水性濃縮組成物中に０．０５〜０．２ｗｔ．％の範囲の量が存在できる。特定の例では、一塩基性リン酸ナトリウムは、組成物中に０．０１〜０．２ｗｔ．％の量で存在できる。特定の例では、一塩基性リン酸ナトリウムは、組成物中に０．０９〜０．１５ｗｔ．％の量で存在できる。特定の例では、一塩基性リン酸ナトリウムは、組成物中に０．０９〜０．２ｗｔ．％の量で存在できる。特定の例では、一塩基性リン酸ナトリウムは、組成物中に０．１〜０．１５ｗｔ．％の量で存在できる。例えば、一塩基性リン酸ナトリウムは組成物中に、０．１２ｗｔ．％（または０．１２９ｗｔ．％）の量で存在できる。
【０１３６】
水性濃縮組成物中に含まれ得る追加的な構成成分は塩を含む。適切な塩の例は、限定はされないが、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化カルシウム、塩化マグネシウム等、およびそれらの組み合わせを含む。特定の例では、この塩は塩化ナトリウムである。
【０１３７】
ある場合には、水性濃縮物中の組成物中の塩（例えば、塩化ナトリウム）の量は、０．０５〜４ｗｔ．％、または０．０５〜３ｗｔ．％、または０．０５〜２ｗｔ．％、または０．１〜５ｗｔ．％、または０．１〜４ｗｔ．％、または０．１〜３ｗｔ．％、または０．１〜２ｗｔ．％、または０．１〜１．５ｗｔ．％、または０．１〜１ｗｔ．％、または０．２〜１ｗｔ．％、または０．３〜１ｗｔ．％、または０．４〜１ｗｔ．％、または０．５〜１ｗｔ．％、または０．６〜１ｗｔ．％、または０．７〜１ｗｔ．％、または０．８〜１ｗｔ．％、または０．８〜０．９ｗｔ．％等の、０．０５〜５ｗｔ．％の範囲の量である。例えば、塩（例えば、塩化ナトリウム）は組成物中に０．５〜１ｗｔ．％の範囲の量が存在できる。例えば、組成物に塩（例えば、塩化ナトリウム）は、０．２〜２ｗｔ．％の範囲の量が存在できる。特定の例では、塩（例えば、塩化ナトリウム）０．７〜１．０ｗｔ．％の範囲の量が存在できる。特定の例では、組成物中に塩（例えば、塩化ナトリウム）は０．８〜０．９ｗｔ．％の範囲の量が存在できる。例えば、組成物中に塩（例えば、塩化ナトリウム）は０．８５ｗｔ．％の量で存在できる。
【０１３８】
本開示の他の態様は、本明細書に記載される凍結乾燥された貯蔵安定組成物を製造する方法を含む。特定の場合には、前記方法は本明細書に記載される凍結乾燥されたポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ組成物を製造する方法である。前記方法は、リンカーにより共有結合的にアスパラギナーゼに結合したポリアルキレンオキシド基を有するポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ、緩衝液、塩、および糖を含む水性組成物を、凍結乾燥された貯蔵安定ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ組成物を製造するために十分な様式で、凍結乾燥することを含み得る。
【０１３９】
特定の実施形態では、凍結乾燥することは、水性濃縮組成物を脱水するために用いられる。ある例では、凍結乾燥することは、水性濃縮組成物から水を除去することを含む。この水は組成物中の水を昇華することにより除去できる。例えば、組成物中の水は固体から気体への相転移を受けることができる。特定の場合には、凍結乾燥することは、組成物を凍結し（例えば、組成物中の水を凍結し）および次いで組成物中の水が昇華を受けるように組成物の周囲の圧力を低下することを含む。凍結乾燥の間、例えば組成物中の水の凝固点より低い温度まで、組成物の温度は低下されることができる。例えば、この組成物中の温度は、０°Ｃ以下、または-５°Ｃ以下、または-１０°Ｃ以下、または-１５°Ｃ以下、または-２０°Ｃ以下、または-２５°Ｃ以下、または-３０°Ｃ以下、または-３５°Ｃ以下、または-４０°Ｃ以下、または-４５°Ｃ以下、または-５０°Ｃ以下、または-５５°Ｃ以下、または-６０°Ｃ以下、または-６５°Ｃ以下、または-７５°Ｃ以下まで低下させることができる。ある場合には、この組成物中の温度は-４５°Ｃに低下される。ある場合には、この組成物中の温度は-３０°Ｃまで低下される。
【０１４０】
特定の実施形態では、この組成物の周囲の圧力は、標準大気圧未満まで低下される。例えば、この組成物の周囲の圧力は、２５０Ｔ以下、または１００Ｔ以下、または５０Ｔ以下、または１０Ｔ以下、または１Ｔ以下、または５００ｍＴ以下、または４００ｍＴ以下、または３００ｍＴ以下、または２００ｍＴ以下、または１００ｍＴ以下、または９０ｍＴ以下、または８０ｍＴ以下、または７０ｍＴ以下、または６０ｍＴ以下、または５０ｍＴ以下、または４０ｍＴ以下、または３０ｍＴ以下、または２０ｍＴ以下、または１０ｍＴ以下等の、５００Ｔ以下に低下させることができる。ある場合には、この組成物の周囲の圧力は、ｏ５０ｍＴ以下等、６０ｍＴ以下に低下される。
【０１４１】
いくつかの実施形態では凍結乾燥することは、この組成物の周囲の圧力を低下させながら、組成物中の温度を増加させることも含み得る。例えば、この組成物中の温度は、上述した最小の温度から、それより高い温度まで増加させることができる。ある場合には、この温度は、低下された周囲の圧力において、組成物中の水の昇華を促進するために、増加される。
【０１４２】
凍結乾燥されたポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ組成物を製造する方法の実施形態は、後続して凍結乾燥される水性濃縮組成物を製造することも含み得る。水性濃縮組成物の製造方法のプロセスのフローダイヤグラムを図１に示す。図１に示されるように、前記水性濃縮組成物の製造方法は以下の１つ以上のステップを含み得る：アスパラギナーゼ（例えば、Ｌ-アスパラギナーゼ）の溶液を調製すること（１０）；ポリアルキレンオキシド（例えば、ポリエチレングリコール）をアスパラギナーゼに結合させること（２０）；このポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼを浄化すること（３０）；ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼの溶液をろ過し、および濃縮すること（４０）；ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼの溶液を希釈すること（５０）；ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼの溶液をろ過し、およびポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼの溶液を無菌の容器に充填すること（６０）；ならびにポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼの溶液を保存すること（７０）。
【０１４３】
水性濃縮組成物の製造のための前記方法では、アスパラギナーゼ（例えば、Ｌ-アスパラギナーゼ）の溶液を調製できる。このアスパラギナーゼは、水性溶液（例えば、緩衝化された水性溶液）等の溶液と混合できる。適切な緩衝液の例は、限定はされないが、リン酸緩衝液、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）、ダルベッコのリン酸緩衝生理食塩水（ＤＰＢＳ）、ハンク（Ｈａｎｋ）の平衡食塩溶液（ＨＢＳＳ）、アール（Ｅａｒｌｅ）の平衡食塩溶液（ＥＢＳＳ）、Ｔｒｉｓ緩衝液、リンガー（Ｒｉｎｇｅｒ）の乳酸緩衝液、ホウ酸緩衝液、およびそれらの組み合わせを含む。ある場合には、このアスパラギナーゼはリン酸緩衝液と混合される。
【０１４４】
いくつかの実施形態ではこのリン酸緩衝は、二塩基性リン酸ナトリウムおよび一塩基性リン酸ナトリウムを含む。ある場合には、水性濃縮組成物中の二塩基性リン酸ナトリウムの量は、０．１〜０．９ｗｔ．％、または０．１〜０．８ｗｔ．％、または０．１〜０．７ｗｔ．％、または０．１〜０．６ｗｔ．％、または０．１〜０．５ｗｔ．％、または０．１〜０．４ｗｔ．％、または０．２〜０．４ｗｔ．％、または０．２〜０．３ｗｔ．％、または０．２５〜０．３ｗｔ．％等の、０．０５〜１ｗｔ．％の範囲の量である。例えば、二塩基性リン酸ナトリウムは水性濃縮組成物に０．１〜０．５ｗｔ．％の範囲の量が存在できる。特定の実施形態では、水性濃縮組成物中の一塩基性リン酸ナトリウムの量は、０．０１〜０．９ｗｔ．％、または０．０１〜０．８ｗｔ．％、または０．０１〜０．７ｗｔ．％、または０．０１〜０．６ｗｔ．％、または０．０１〜０．５ｗｔ．％、または０．０１〜０．４ｗｔ．％、または０．０１〜０．３ｗｔ．％、または０．０１〜０．２ｗｔ．％、または０．０１〜０．１ｗｔ．％、または０．０２〜０．０９ｗｔ．％、または０．０３〜０．０８ｗｔ．％、または０．０４〜０．０８ｗｔ．％、または０．０４５〜０．０７５ｗｔ．％、または０．０４〜０．０７ｗｔ．％、または０．０５〜０．０７ｗｔ．％等の、０．００５〜１ｗｔ．％の範囲の量である。例えば、この一塩基性リン酸ナトリウムは、水性濃縮組成物中に０．０１〜０．１ｗの範囲の量が存在できる。
【０１４５】
水性濃縮組成物に含まれ得る追加的な構成成分は塩を含む。適切な塩の例は、限定はされないが、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化カルシウム、塩化マグネシウム等、およびそれらの組み合わせを含む。特定の例では、この塩は塩化ナトリウムである。
【０１４６】
ある場合には、水性濃縮組成物中の塩（例えば、塩化ナトリウム）の量は、０．１〜０．９ｗｔ．％、または０．１〜０．８ｗｔ．％、または０．１〜０．７ｗｔ．％、または０．１〜０．６ｗｔ．％、または０．１〜０．５ｗｔ．％、または０．２〜０．５ｗｔ．％、または０．３〜０．５ｗｔ．％、または０．４〜０．５ｗｔ．％、または０．４〜０．４５ｗｔ．％等の、０．０５〜１ｗｔ．％の範囲の量である。例えば、塩（例えば、塩化ナトリウム）は、水性濃縮組成物中に０．１〜１ｗｔ．％の範囲の量が存在できる。
【０１４７】
この水性濃縮組成物中に含まれ得る他の構成成分は糖である。適切な糖の例は、限定はされないが、ショ糖、マンニトール、マルトース、トレハロース、２-ヒドロキプロピル-β-シクロデキストリン（ＨＰＣＤ）、ラクトース、グルコース、フルクトース、ガラクトース、グルコサミン等、およびそれらの組み合わせを含む。特定の例では、この糖二糖類である。例えば、この二糖類はショ糖であってよい。
【０１４８】
ある場合には、この水性濃縮組成物中の糖（例えば、ショ糖）の量は、０．５〜２０ｗｔ．％、または１〜１５ｗｔ．％、または１〜１０ｗｔ．％、または１〜９ｗｔ．％、または１〜８ｗｔ．％、または２〜７ｗｔ．％、または２〜６ｗｔ．％、または３〜５ｗｔ．％、または４〜５ｗｔ．％．等の、０．１〜２５ｗｔ．％の範囲の量である。例えば、この糖（例えば、ショ糖）水性濃縮組成物中に１〜１０ｗｔ．％の範囲の量が存在できる。
【０１４９】
アスパラギナーゼ溶液の調製の後に、ポリアルキレンオキシドが共有結合的にアスパラギナーゼに結合して、ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ複合体を生成できるようにアスパラギナーゼをポリアルキレンオキシド（例えば、ポリエチレングリコール）に結合できる。ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼの調製の後に、この溶液は浄化を受けることができる。ある場合には、浄化は、この溶液をフィルターを通過させてこの溶液から特定の物質を除去することを含む。ろ過のステップは、実質的に精製されたポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼを生成し得る。
【０１５０】
ある例では、このろ過されたポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ溶液は、次いでダイアフィルトレーションおよび濃縮ステップに付す。このポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ溶液は、限外ろ過膜を用いて透析ろ過することができ、および結果として生成するポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼの濃縮物を得ることができる。ダイアフィルトレーションステップからの濃縮物を、次いで溶液が所望の濃度のポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼを含むように希釈できる。希釈ステップのために有用な適切な緩衝液は上述のものを含む。特定の場合には、リン酸緩衝液をポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ溶液の希釈に用い、従って所望の水性濃縮組成物を生成する。例えば、ダイアフィルトレーションステップからの濃縮物は、生成する水性濃縮組成物が、５００〜４，５００ＩＵ／ｍＬ、または５００〜４，０００ＩＵ／ｍＬ、または５００〜３，５００ＩＵ／ｍＬ、または５００〜３，０００ＩＵ／ｍＬ、または１，０００〜３，０００ＩＵ／ｍＬ、または１，５００〜３，０００ＩＵ／ｍＬ等の１００〜５，０００ＩＵ／ｍＬの範囲の効力（活性）を有するような量のポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼを含むように希釈できる。特定の例では、この水性濃縮組成物は１，５００〜３，０００ＩＵ／ｍＬの範囲の量のポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼを含む。ある場合には、この水性濃縮組成物中のポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼの量は、本明細書に記載される再構成された凍結乾燥された組成物中のポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼの量より多い。
ある場合には、前記ダイアフィルトレーションは実質的に精製されたポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼを生成する。
【０１５１】
この水性濃縮組成物を、次いでろ過しおよび無菌の容器に充填できる。容器のための適切な容器材料の例は、限定はされないが、ポリプロピレン、ポリメチルペンテン、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）、パーフルオロエーテル（ＰＦＥ）、フッ素化エチレンプロピレン（ＦＥＰ）、パーフルオロアルコキシアルカン（ＰＦＡ）、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリエチレン（ＰＥ）、ポリエーテルエーテルケトン（ＰＥＥＫ）、ポリスチレン等のポリマーを含む。例えば、このは無菌のポリマーバッグであってよい。この水性濃縮組成物は、一定の時間、容器内に保存することができ、および凍結乾燥された貯蔵安定本開示の組成物に加工することができる。
【０１５２】
前記方法の実施形態は、水性濃縮組成物を遠隔地に出荷することを更に含み得る。「遠隔地」は、水性濃縮組成物が製造される場所とは異なる場所である。例えば、遠隔地は、同じ市内の他の場所（例えば、事務所実験室等、異なる市の別の場所、異なる州の別の場所、異なる国の別の場所、等であることができ、１つの項目が別のものから「遠隔である」と示される場合、意味されることは、２つの項目が同じ部屋にあるが、分離されているか、または少なくとも異なる部屋の中か、もしくはまたは異なる建物の中にあるかを意味し、および少なくとも１マイル、１０マイル、または１００マイル以上離れることができる。
【０１５３】
特定の実施形態では、上述したように、前記方法は水性濃縮組成物を、凍結乾燥された貯蔵安定ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ組成物を生成するために十分な様式で凍結乾燥することを含む。ある例では、この凍結乾燥は単位用量容器中で行える。水性濃縮組成物を単位用量容器中で凍結乾燥された貯蔵安定ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ組成物を製造するために凍結乾燥することは、例えば、別の容器中で水性濃縮組成物を凍結乾燥し、次いで凍結乾燥された組成物を別の容器から単位用量容器に移動する必要性を除去するので、単位用量容器の凍結乾燥された組成物の製造を容易にする。そのようなものとして、いくつかの実施形態では前記方法は、水性濃縮組成物を単位用量容器内に導入し、およびこの水性濃縮組成物を単位用量容器中で凍結乾燥することを含む。上述したように、前記単位用量容器は、ガラスバイアル等のバイアルであってよい。
【０１５４】
凍結乾燥後に、前記方法は、凍結乾燥された組成物を単位用量容器中に密封することを更に含み得る。例えば、シールまたは蓋を単位用量容器の開口部に取り付け、従って単位用量容器を密閉する密封された容器は、１週間以上、または２週間以上、または３週間以上、または１ヵ月以上、または２ヵ月以上、または３ヵ月以上、または４ヵ月以上、または６ヵ月以上、または９ヵ月以上、または１年以上、または１．５年（例えば、１８ヵ月）以上、または２年以上、または２．５年（例えば、３０ヵ月）以上、または３年以上、または３．５年（例えば、４２ヵ月）以上、または４年以上、または４．５年（例えば，５４ヵ月）以上、または５年以上等の長期間保存できる。例えば、長期間は６ヵ月以であってよい。ある場合には、この密封された容器は９ヵ月以上保存できる。ある場合には、この密封された容器は１年（例えば、１２ヵ月）以上保存できる。ある場合には、この密封された容器１．５年（例えば、１８ヵ月）以上保存できる。ある場合には、この密封された容器は２年（例えば、２４ヵ月）以上保存できる。
【０１５５】
［キット］
更に提供されるものは、主題の方法を実施するために用いられる、上記の液体および／または凍結乾燥された組成物の１つ以上を含むキットである。例えば、このキットは、本明細書に記載される液体組成物を収納する単位用量容器を含む。または、例えば、このキットは、本明細書に記載される凍結乾燥された組成物を収納する単位用量容器を含む。ある例では、このキットは、それぞれが本明細書に記載された液体組成物を収納する２つ以上の単位用量容器を含む。ある例では、このキットは、それぞれが本明細書に記載された凍結乾燥された組成物を収納する、２つ以上の単位用量容器を含む。いくつかの例では、このキットは、単位用量容器の１つ以上が、本明細書に記載される液体組成を収納し、および単位用量容器の１つ以上が、本明細書に記載される凍結乾燥された組成物を収納する、２つ以上の単位用量容器を含む。特定の実施形態では、このキットは、単位用量容器を収納するために構成された梱包材料を含む。この梱包材料は、無菌の密封された梱包材料等の密封された梱包材料であることができる。無菌の梱包材料は、外部の環境から密封されるように構成できるので、梱包材料内部に実質的に病原菌（真菌、細菌、ウイルス、胞子等）が存在しない。ある例では、この梱包材料は、随意的に気密および／または真空シールの下に水蒸気抵抗性梱包材料等で密封される。
【０１５６】
特定の実施形態では、このキットは緩衝液を含む。例えば、このキットは、被験者への投与等に適切な希釈液体、例えば、希釈緩衝液を含み得る。このキットは更に、例えば、主題の方法の実施において用途がある投与機器、液体源等の他の構成成分を含む。このキット中の様々な構成成分は、例えば、一緒にまたは別個に等、所望のように梱包できる。主題のキットの構成成分は、別個の容器中に存在できるか、または複数の構成成分が単一の容器内に存在でき、このキットの容器および／または梱包材料（もしくは、その一部分）は所望の場合、無菌であることができる。
【０１５７】
上述の構成成分に加えて、主題のキットは、主題の方法を実施するためのこのキットの構成成分を使用するための説明書を更に含み得る。主題の方法の実施のための説明書は、一般的には適切な記録媒体上に記録される。例えば、この説明書は紙またはプラスチック等の上に印刷されることができる。そのようなものとして、この説明書は、キット中に添付文書として、キット容器のラベル中に、またはその構成成分（すなわち、梱包材料または梱包材料の一部に付随する）中に存在できる。他の実施形態では、この説明書は、電子的な保存的データファイルとして、例えば、携帯フラッシュ・ドライブ、ＣＤ-ＲＯＭ、ＤＶＤ-ＲＯＭ、ブルーレイ等の適切なコンピュータ可読保存媒体上に存在する。更に他の実施形態は、実際の説明書はキット中には存在せずに、この説明書を入手するための指示が遠隔のソース、例えば、インターネットを経由して提供される。この実施形態の例は、説明書を閲覧および／またはダウンロードできるＵＲＬを含むキットである。説明書はダウンロードできる。説明書とともに、説明書を得るための実施形態も適切な媒体上に記録される。
【０１５８】
［効用］
主題の組成物（例えば、液体または凍結乾燥された貯蔵安定組成物）および方は、ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼの投与により、治療の可能性がある被験者の疾患または病態を治療する要望がある場合に、その用途を見出す。例えば、主題の組成物（例えば、液体または凍結乾燥された貯蔵安定組成物）および方法は、被験者の腫瘍状態の治療において用途を見出す。ある場合には、主題の組成物（例えば、液体または凍結乾燥された貯蔵安定組成物）および方法は、被験者の癌の治療において用途を見出す。主題の組成物（例えば、液体または凍結乾燥された貯蔵安定組成物）および方法を用いて治療できる可能性のある癌の種類の例は、限定はされないが、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）等の白血を含む。従って、主題の凍結乾燥された貯蔵安定組成物および方法は、限定はされないが、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）等の白血病を含む癌等の腫瘍状態に治療的に有効な治療を提供することに用途を見出す。
【０１５９】
前記凍結乾燥された貯蔵安定組成物および本開示の方法は、いかなる年齢の被験者を治療することにおいても適用の用途を見出す。ある場合には、主題の組成物（例えば、液体または凍結乾燥された貯蔵安定組成物）および方法は、成人を治療することに適用の用途を見出す。例えばヒト成人被験者は１８歳以上であることができる。他の場合には、前記組成物（例えば、液体または凍結乾燥された貯蔵安定組成物）および方法は、年少者を治療することに適用の用途を見出す。例えばヒト年少被験者は１８年歳未満であることができる。
【０１６０】
前記組成物および本開示の方法は、貯蔵安定組成物が望まれる場合に適用の用途を見出す。例えば、前記組成物および本開示の方法は、長期間安定である（例えば、実質的に分解しないおよび／または実質的にその全ての活性を保持する）貯蔵安定組成物を提供することに用途を見出す。例えば、前記組成物および本開示の方法は、１週間以上、または２週間以上、または３週間以上、または１ヵ月以上、または２ヵ月以上、または３ヵ月以上、または４ヵ月以上、または６ヵ月以上、または９ヵ月以上、または１年以上、または１．５年（例えば、１８ヵ月）以上、または２年以上、または２．５年（例えば、３０ヵ月）以上、または３年以上、または３．５年（例えば、４２ヵ月）以上、または４年以上、または４．５年（例えば，５４ヵ月）以上、または５年以上等の長期間安定な貯蔵安定組成物を提供することに用途を見出す。ある場合には、前記組成物および本開示の方法は、９ヵ月以上安定な貯蔵安定組成物を提供することに用途を見出す。ある場合には、前記組成物および本開示の方法は、１年（例えば、１２ヵ月）以上安定な貯蔵安定組成物を提供することに用途を見出す。ある場合には、前記組成物および本開示の方法は、１．５年（例えば、１８ヵ月）以上安定な貯蔵安定組成物を提供することに用途を見出す。ある場合には、前記組成物および本開示の方法は、２年（例えば、２４ヵ月）以上安定である貯蔵安定組成物を提供することに用途を見出す。特定の実施形態では、前記組成物および本開示の方法は、前記組成物の保存可能期間を、最大１週間、または２週間、または３週間、または１ヵ月、または２ヵ月、または３ヵ月、または４ヵ月、または６ヵ月、または９ヵ月、または１年、または１．５年（例えば、１８ヵ月）、または２年、または２．５年（例えば、３０ヵ月）、または３年、または３．５年（例えば、４２ヵ月）、または４年以上、または４．５年（例えば，５４ヵ月）、または５年増加させる貯蔵安定組成物を提供することに用途を見出す。特定の実施形態では、前記組成物および本開示の方法は、前記組成物の保存可能期間を、１ヵ月〜５年、または６ヵ月〜４年、または９ヵ月〜３年、または１年〜２年増加させる、貯蔵安定組成物を提供することに用途を見出す。
【０１６１】
特定の実施形態では、本開示の用量は、関連するか、または関連しない病態の治療のための、他の１つ以上の他の腫瘍状態の治療に、先立ち、それと同時に、またはそれに後続して投与できる。他の腫瘍状態治療と同時に提供される場合には特定の治療投薬計画に従い、組み合わせにより治療的に有効な用量を提供する、化学療法療薬等の少なくとも１つの他の活性薬剤を有する薬学的な組成物の投与により達成される。別個の薬学的な組成物または治療の投与は、これらの物質の併用が治療を受ける被験者において治療的に有効な効果を引き起こす限り、同時に、または異なる時間（例えば、順次に、どちらかの順番で、同じ日に、または異なる日）に行うことができる。従って、本開示の方法および組成物は、１つ以上の追加的な活性薬剤および／または治療（例えば、放射線、化学療法、免疫療法等）と組み合わせて、本開示のポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼの投与を含む併用療法を使用している被験者の治療において用途を見出す。
【０１６２】
上記に提供された開示から理解されるように、本開示の実施形態は、幅広い種類の用途を有する。従って、本明細書に提供される実施例は、説明の目的で提供され、および本開示の実施形態のいかなる方法においても、制限と解釈されることを意図していない。当技術分野の当業者は、様々な非本質的なパラメータが、本質的に同じ結果を算出するために、変更または修正され得ることを認識する。従って、以下の実施例は、当技術分野の当業者に、本開示の実施形態をどのように製造および使用するかの、完全な開示および記載を提供するために提示され、ならびに発明者が自分たちの発明を考える範囲を制限することを意図しておらず、またはそれらが、以下の実験の全て、または実験だけが行われたことを示すことを意図していない。使用されている数（例えば、量、温度等）に関する正確性を確実にする努力がはらわれているが、ある程度の実験誤差および偏差はその中に含まれるはずである。他に指示されない限り、部分は重量によるものであり、分子量は重量平均分子量であり、温度は摂氏の度であり、および圧力は大気圧または大気圧に近いものである。
【０１６３】
以下の実施例は、説明的な目的のみのために提供されており、および本開示の実施形態をいかなる方法においても制限することを意図していない。使用されている数（例えば、量、温度等）に関する正確性を確実にする努力がはらわれているが、ある程度の実験誤差および偏差は、もちろん許容される。
【実施例】
【０１６４】
実施例１
ＳＳ-ＰＥＧリンカーを有するポリエチレングリコール−アスパラギナーゼを含む濃縮されたバルク組成物が以下の手順に従って製造された。この濃縮されたバルク組成物の製造に続いて、凍結乾燥された組成物が、以下に記載される手順に従って濃縮されたバルク組成物から製造された。図１は、本開示の実施形態に従う凍結乾燥された保存安定組成物の作成方法のためのプロセスのフローダイヤグラムを示す。
【０１６５】
Ｌ-アスパラギナーゼ溶液の調製
処理のために必要なＬ-アスパラギナーゼの量が計算され、６Ｌのステンレス鋼のビーカー中に秤量され、５〜１０分間混合された。Ｌ-アスパラギナーゼを目的の濃度の５ｍｇ／ｍＬへ希釈するために必要なリン酸緩衝液量を計算し、および秤量した。このＬ-アスパラギナーゼを、次いでリン酸緩衝液に加え、および７ガロンのステンレス鋼の圧力容器中で１０〜１５分間混合した。サンプルを取り出してタンパク質および比活性試験に供した。
【０１６６】
ＰＥＧ化
このステップに必要なＳＳ-ＰＥＧの量を計算して秤量した。希釈されたＬ-アスパラギナーゼ溶液を含む７ガロンのステンレス鋼の圧力容器を穏やかな撹拌下に２９〜３１°Ｃに加熱した。Ｌ-アスパラギナーゼ溶液適切な温度範囲に達したら、ミキサーの速度を増加し、および滴下ポンプを開始した。ｐＨが、０．５ＮＮａＯＨで７．７〜７．９に調整されると、前記ＳＳ-ＰＥＧを７ガロンのステンレス鋼の圧力容器に加えた。３０分間後に、前記滴下ポンプを停止し、および温度ジャケットを外した。
【０１６７】
浄化
このプロセスの物質を、次いでダイアフィルトレーション蠕動ポンプを用いて、０．４５μｍフィルター（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ、マサチューセッツ州ビレリカ（Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ））を介して、他の７ガロンのステンレス鋼の圧力容器中にろ過して入れた。浄化後に、リン酸緩衝液を元の７ガロンのステンレス鋼の圧力容器に加え、および０．４５μｍフィルターを介して、リンスとして、７ガロンのステンレス鋼の圧力容器にポンプで加え入れた。
【０１６８】
ダイアフィルトレーション／濃縮
１５Ｘダイアフィルトレーションに必要なＰＢＳの量を計算し、およびダイアフィルトレーション・システムを作動した。前記７ガロンのステンレス鋼の圧力容器を秤の上に置いた。Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｐｅｌｌｉｃｏｎ（登録商標）-２ダイアフィルトレーションをダイアフィルトレーション蠕動ポンプおよび５ＬのＰＢＳを用いて前処理された１００，０００Ｄａの公称分子量限界の膜とともに設定した。緩衝液蠕動ポンプを含むレベル制御システムを次いで作動し、および前記７-ガロンのステンレス鋼の圧力容器を秤の上に置いた。コンディショニングのために、Ｐｅｌｌｉｃｏｎ（登録商標）-２システムを、ポリエチレングリコール-アスパラギナーゼで満たし、および５分間再循環した。コンディショニングに続いて、透過物排水ライン（ｐｅｒｍｅａｔｅ ｗａｓｔｅ ｌｉｎｅ）を開きおよびダイアフィルトレーションを開始した。１５および３０分間後に、透過物排水ラインからサンプルをバイアル中に得て、および活性およびタンパク質試験に供した。凍結乾燥向けの物質を透過ろ過し、次いで１８．０ｍｇ／ｍＬ以上、および１，８５０ＩＵ／ｍＬ以上に濃縮した。ダイアフィルトレーションが完了したときに、７ガロンのステンレス鋼の圧力容器の処理中の物質の容積を、適切な量の透過物を除去することにより目的の濃縮（凍結乾燥された製剤についての処理に対して１８．０ｍｇ／ｍＬ以上）に達するように調整した。次いでＰＢＳをポンプによりシステムを通過させて７ガロンのステンレス鋼の圧力容器中にリンスとして入れた。
【０１６９】
生成物の不純物プロファイルの決定を含む、ダイアフィルトレーション後の生成物の品質管理検定を行った。ダイアフィルトレーション膜により、生成物が保持されたことを確認するために、透過酵素の酵素活性（ＥＥＡ）を１５分および３０分後に測定した。遊離したＰＥＧおよびＮ-ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ）が、最終生成物中で測定された、処理に関連した不純物プロファイルの成分であった。ダイアフィルトレーション単位操作に対する公式の処理中の対照は以下の表１に示されている。
凍結乾燥向けの３つの製剤原料組成物（例えば、濃縮されたバルク製剤原料組成物）から生成されたＮＨＳおよび遊離ＰＥＧデータは、以下の表２に示される。生成されたデータは、ダイアフィルトレーション／濃縮プロセスでの小さな変化は生成物の品質に影響しないことを実証している。
【０１７０】
【表１】
2019521179.tif 000010
【０１７１】
【表２】
2019521179.tif 000011
【０１７２】
希釈
サンプルが活性およびタンパク質試験のために取り出される前に処理中の物質は７ガロンのステンレス鋼の圧力容器内で混合された。処理中の物質の容積は、次いでＰＢＳにより、タンパク質濃度が２：１８．０ｍｇ／ｍＬ（目標２０．０ｍｇ／ｍＬ）の目標値、凍結乾燥組成物向けの製剤原料に対しては（２：１８５０ＩＵ／ｍＬ活性）の目標値になるように希釈された。サンプルが品質保証試験のために取り出される前に、この希釈された処理中の物質は混合された（表１を参照されたい）。
【０１７３】
無菌ろ過
凍結乾燥のための濃縮された溶液は、凍結乾燥までの保存のための使い捨ての２０Ｌの無菌のバッグ中に、０．２μｍのフィルターによりろ過されて入れられた。サンプルが収集されおよび無菌試験に供された。この凍結乾燥のためのポリエチレングリコール-アスパラギナーゼを含むバルク製剤原料組成物は、凍結乾燥まで２０Ｌのバッグ中に、２〜８°Ｃで最大２ヵ月間、保存できる。
【０１７４】
容器封鎖
この凍結乾燥のための、ポリエチレングリコール-アスパラギナーゼを含むバルク製剤原料組成物は、以下の０．２μろ過ステップにおいて、凍結乾燥された組成物に加工され、および事前に殺菌された使い捨て２０Ｌバイオプロセス（ｂｉｏｐｒｏｃｅｓｓ）バッグ中に送達される。このバッグの構成材料は、低密度ポリエチレン（ＬＤＰＥ）の層、直鎖状低密度ポリエチレン（ＬＬＤＰＥ）、ナイロン、およびエチレンビニルアルコール（ＥＶＯＨ）を含んだ。製品に直接接触する表面（内部層）はＬＤＰＥであった。各バッグはバッグに固定されたチュービングを持つ２つの開口部を持ち、およびそれが凍結乾燥のためのポリエチレングリコール-アスパラギナーゼを含む製剤原料組成物のバルクを受け取る準備ができるまでは、クランプによりカール（ｃｒｉｍｐ）させる。このバッグは、２５〜４０ｋＧｙの曝露により照射されおよび開放され、およびカブトガニの血球溶解成分（Ｌｉｍｕｌｕｓ Ａｍｅｂｏｃｙｔｅ Ｌｙｓａｔｅ：ＬＡＬ）エンドトキシン試験、１００％可視シールおよび空気漏れ試験を受け、同様に、組み立て後に１００％可視検査を受けた。資格試験の結果は、このバッグの内部層は、ＵＳＰ＜８８＞クラスＩＶプラスチック試験、ＵＳＰ＜８７＞細胞毒性試験、およびＵＳＰ＜６６１＞の物理化学的特性の試験を含む、生物学的反応性試験に合格したことを示した。加えて、このバッグはＵＳＰ＜７８８＞注射における特定の事項（ｆｏｒ ｐａｒｔｉｃｕｌａｒ ｍａｔｔｅｒ ｉｎ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎｓ）を遵守し、および全ての抽出可能物試験は、製造者の要件を遵守した。
【０１７５】
製剤原料安定性待機時間
濃縮されたバルク製剤原料物質を、０、２、４、６、８、および１２週間、２〜８°Ｃでモニターした。安定性サンプルは、２５０ｍＬのポリエチレンの製品接触表面を持つサンプルバッグ中に保持された。試験計画からのデータは表３のロット１、表４のロット２、および表５のロット３に提示される。
凍結乾燥組成物向けの濃縮されたバルク製剤原料の安定性データは、１２週間試験計画を通じて合格基準を満たし、および濃縮されたバルク製剤原料製造から２ヵ月の待機時間を示し、および凍結乾燥された組成物の製造は許容された。
【０１７６】
【表３】
2019521179.tif 000012
【０１７７】
【表４】
2019521179.tif 000013
【０１７８】
【表５】
2019521179.tif 000014
【０１７９】
凍結乾燥された組成物
注射用の凍結乾燥された組成物粉末が、３，７５０ＩＵの活性ＰＥＧ化Ｌ-アスパラギナーゼ（５．２ｍＬのＷＦＩによる再構成後に７５０ＩＵ／ｍＬ）を含む単回使用バイアル中で製造された。凍結乾燥された組成物の構成成分は、再構成後に４．５％ショ糖、二塩基性リン酸ナトリウム、一塩基性リン酸ナトリウム、および塩化ナトリウムを含んでいた。この凍結乾燥された組成物の構成成分が表６に提供される。加えて、この凍結乾燥された組成物は、２０ｍｍアルミニウム・フリップオフ（ｆｌｉｐ-ｏｆｆ）シールを持った処理されたガラスバイアル容器（Ｎｉｐｒｏ Ｔｙｐｅ１）中に提供された。
【０１８０】
【表６】
2019521179.tif 000015
【０１８１】
凍結乾燥されたポリエチレングリコール-アスパラギナーゼの製剤開発
凍結乾燥されたポリエチレングリコール-アスパラギナーゼ製剤の開発の目的は、少なくとも１８ヵ月、２〜８°Ｃまたは２５°Ｃで保存するために適切な安定な凍結乾燥された組成物を実現することであった。
【０１８２】
ポリエチレングリコール-アスパラギナーゼの凍結乾燥された組成物の実現可能性を評価する初期の実験が行われた。凍結乾燥された組成物の５つのバリエーションが調査された。各製剤はｐＨ６．５の５０ｍＭリン酸緩衝液中に、５ｍｇ／ｍＬのポリエチレングリコール-アスパラギナーゼ、および５％ｗ／ｖの５つの異なる抗凍結剤（マンニトール、マルトース、ショ糖、トレハロース、および／または-ＨＰＣＤ）の１つを含んでいた。加えて、抗凍結剤を含まないポリエチレングリコール-アスパラギナーゼも凍結乾燥に付された。これらの６つの凍結乾燥された組成物は、これらの異なる製剤の調製に用いられた、液体製剤中のポリエチレングリコール-アスパラギナーゼ（Ｏｎｃａｓｐａｒ（登録商標））のロットと比較された。ＳＥＣ-純度（ＧＦ-ＨＰＬＣ）をポリエチレングリコール-アスパラギナーゼ組成物の品質を評価するために用いた。研究の結果を表に示す。表７からみられるように、ショ糖が、凍結乾燥の間にポリエチレングリコール-アスパラギナーゼの純度を保つために最も有効であることが見出された。５％ショ糖を含む凍結乾燥された組成物の純度（８３．０％）は、後続する凍結乾燥のための６つの製剤の調製のために用いられた液体ポリエチレングリコール-アスパラギナーゼ製剤の（８３．８％）に匹敵した。
【０１８３】
【表７】
2019521179.tif 000016
【０１８４】
いくつかの異なる添加剤（例えば、ショ糖、トレハロース、マンニトール、ポリソルベーと８０）が、凍結乾燥された組成物中に含ませるための潜在的な安定化薬剤であると評価された。それぞれが４つの異なる組成物を含む、４つの実験が行われた。小規模のパイロット・スケールの凍結乾燥されたポリエチレングリコール-アスパラギナーゼのバッチが異なる添加剤とともに調製され、および安定性が評価された。試験された製剤のリストが表８に示される。
【０１８５】
【表８】
2019521179.tif 000017
【０１８６】
表８に記載された全てのロットは、５°Ｃ、２５°Ｃおよび４０°Ｃの安定性試験で評価され、および試験のパネル（活性、比活性、タンパク質、ｐＨ、純度（ＧＦ-ＨＰＬＣ）、凝集体（ＧＦ-ＨＰＬＣ）、および微粒子）により評価され、それにより、ポリエチレングリコール-アスパラギナーゼの出荷時および安定性の主要品質特性が評価された。表８に記載された１６の異なる製剤から収集された、安定性データに基づき、ショ糖が適切な抗凍結剤（例えば、安定化剤）として特定された。
様々なショ糖濃度が、より強固な（すなわち、凍結乾燥手順への衝撃がより小さい）およびより安定な製品のために適切な濃度を評価するために試験された。表９にまとめられているように、追加的なパイロットスケールのショ糖の異なる濃度を含むバッチが調製された。表９に示されるショ糖およびＰＥＧ-アスパラギナーゼ濃度は、濃縮されたバルク製剤原料中に存在する量を示している。凍結乾燥処理の間、凍結乾燥の開始の前はバイアルは２．５ｍＬまで満たされている。これらの凍結乾燥されたバイアルは５．０ｍＬで再構成され、表に示されるものの大体半分である最終ショ糖およびＰＥＧ-アスパラギナーゼ濃度をもたらす。この研究は、糖含有量の増大が、より高い凍結乾燥温度を可能にし、凍結乾燥された製品に与えるストレスが少なく、および全体の凍結乾燥サイクル時間も減少させ、およびより乾燥した（より安定な）凍結乾燥された製品をもたらすことを実証した。
【０１８７】
【表９】
2019521179.tif 000018
【０１８８】
表９に記載される５つのロットは、５°Ｃ、２５°Ｃおよび４０°Ｃでの安定性試験においても評価された。活性、比活性、タンパク質、ｐＨ、純度（ＧＦ-ＨＰＬＣ）、凝集体（ＧＦ-ＨＰＬＣ）、および微粒子等の品質特性が、この安定性研究の間に評価された。これらのロットに対する加速された（２５°Ｃ）、およびストレスをかけた（４０°Ｃ）安定性研究からの、純度および効力の結果が、図２〜５に示される。これらの安定性データは、１０％ショ糖（ＷＦＩの５ｍＬ／バイアルによる最終製品の再構成後には５％ショ糖）を含む製剤が、純度および効力に関して最高の安定性を持った製品を提供することを示した。他の品質特性は、異なる製剤により、より少ない影響を受け、およびこの場合も１０％ショ糖を持ったロット中で安定であった。図２は、ロットＳＡ、ＳＢ、ＳＣ、ＳＤ、ＳＥおよびＩＡの凍結乾燥されたＰＥＧ-アスパラギナーゼ組成物の４０°Ｃでの純度（％）対時間（週）のグラフを示し、図３は、４０°ＣでのロットＳＣ、ＳＤ、ＳＥおよびＩＡの凍結乾燥されたＰＥＧ-アスパラギナーゼ組成物の効力（ＩＵ／ｍＬ）対時間（週）のグラフを示す。図４は、ロットＳＡ、ＳＢ、ＳＣ、ＳＤ、ＳＥおよびＩＡの凍結乾燥されたＰＥＧ-アスパラギナーゼ組成物の２５°Ｃでの純度（％）対時間（週）のグラフを示す。図５は、ロットＳＣ、ＳＤ、ＳＥおよびＩＡの凍結乾燥されたＰＥＧ-アスパラギナーゼ組成物の２５°Ｃでの効力（ＩＵ／ｍＬ）対時間（週）のグラフを示す。
【０１８９】
凍結乾燥
注射用水（ＷＦＩ）、二塩基性リン酸ナトリウム、一塩基性リン酸ナトリウム、塩化ナトリウム、およびショ糖を含む緩衝液を調製した。この緩衝液は濃縮されたバルク製剤原料の希釈に用いた。
【０１９０】
緩衝液溶液を作成するために必要な目的の重量の９０％のＷＦＩをビーカーに加えた。一塩基性リン酸ナトリウム、二塩基性リン酸ナトリウム、および塩化ナトリウムを、次いで個別に秤量し、ＷＦＩに加え、および溶解するまで混合した。必要な量のショ糖を秤量し、および混合緩衝液溶液に加えおよび溶解するまで混合した。次いで溶液のを測定し、およびＮａＯＨをゆっくり加えることで７．３±０．１に調整した。必要に応じてＷＦＩを衝液溶液に加え、および濃縮されたバルク溶液の密度を、そのバッチのサイズに必要な濃縮されたバルク溶液の必要な容積の秤量に用いた。ショ糖検定のために緩衝液のサンプルを収集した。この濃縮されたバルク溶液を前記緩衝液溶液に加え、およびこの最終溶液を少なくとも（ｎｏｔ ｌｅｓｓ ｔｈａｎ：ＮＬＴ）１０分間混合し、混合が完了したら、容器の最上部、中間部、底部から確認ｐＨ測定（７．３±０．１）を行い、およびサンプルをタンパク質、密度、ショ糖、およびろ過前のバイオバーデンの処理中の試験のために収集した。
【０１９１】
最終製剤に続いて、この溶液は無菌ろ過を受けた。あらかじめ殺菌された、ろ過チュービング組み立て品を製剤化されたバルク容器中に配置し、次いでこのバルクを、ろ過チュービング組み立て品上に配置された２つの０．２２μｍフィルターを通じてろ過して、予め殺菌された充填の準備ができた１０Ｌバイオプロセスのバッグ中に充填した。いったん全ての製品この１０Ｌバイオプロセスのバッグに移動すると、前記ろ過チュービング組み立て品をバイオプロセスのバッグから取り外し、および前記フィルターを完全性の確認のために試験した。２０ｍＬの凍結乾燥前のサンプルを１つ、フィルター上流（ろ過されていない）から収集し、および最終薬剤製品の規格に従って試験した。
【０１９２】
最終製剤および無菌のろ過処理ステップを説明するフローが図に示される。
【０１９３】
無菌充填および凍結乾燥
無菌ろ過の完了に続いて、このバルク原薬溶液を含む１０Ｌバイオバッグを、充填チュービング組み立て品に結合し、製品バイアルを、次いで２．５ｇ／バイアルの目標充填重量まで充填し、Ｆｌｅｘｉｃｏｎ ＦＭＢ２１０フィラーを用いて部分的に栓をした。充填作業の間に、充填されたトレー（処理限界：２．４３〜２．５７ｇ、警告限界：２．３８〜２．６２ｇ）ごとに最小の１回の重量チェック（１バイアル）を行うことにより充填重量をモニターした。充填作業が完了したときに、２０本の凍結乾燥前のバイアルを試験し、残りの全ての充填されたバイアルをステンレス鋼の凍結乾燥トレイに移動し、続いて、予め冷却した（５°Ｃ）凍結乾燥のための２７０ｆｔ２のハル凍結乾燥システム（Ｈｕｌｌ ｆｒｅｅｚｅ-ｄｒｙｉｎｇ ｓｙｓｔｅｍ）中に充填した。この凍結乾燥処理に含まれる相を表１０に示す。
【０１９４】
【表１０】
2019521179.tif 000019
【０１９５】
凍結乾燥サイクルが完了した後で、排気室を窒素ガスにより戻し充填し、およびバイアルに完全に栓をする。無菌充填および凍結乾燥処理ステップを示すフローダイヤグラムを図７に示す。前記完全に栓をしたバイアルをカートン（９０バイアル／カートン）に梱包し、次いで保存および／または出荷する。
【０１９６】
凍結乾燥された組成物の仕様
凍結乾燥された組成物に対する製品規格が表１１に示される。
【０１９７】
【表１１】
2019521179.tif 000020
【０１９８】
ロット分析
凍結乾燥された組成物製品ロットのロット分析が以下の表１２に提供される。全ての３つのロットの結果は出荷規格内であった。
【０１９９】
【表１２】
2019521179.tif 000021
【０２００】
安定性研究
凍結乾燥された薬剤製品ロット１、２、および３を長期（２〜８°Ｃ）ならびに加速された（２５±３°Ｃ；６０％±５％ＲＨ）安定性試験中に配置した。これらのロットを、製品の熱により誘導される分解プロファイルの評価のために、熱ストレス安定性試験（４０±２°Ｃ；７５％±５％ＲＨ）中にも配置した。
【０２０１】
長期安定性（２〜８°Ｃ）
長期（２〜８°Ｃ）条件下に保存された凍結乾燥された薬剤製品ロットで生成された安定性データは表１３〜１６に提供される。長期安定性データは、５±３°Ｃで保存された凍結乾燥された薬剤製品が、安定性のための全ての時点で合格基準内に良好にとどまったことを示した。水分量（ＫＦ）データは、２〜８°Ｃの保存状態で、０．９６％〜１．３５％（規格＝ＮＭＴ３．０％）の範囲で１２週間測定した。経時的に活性の増大および純度の減少が実証されている、市販の液体薬剤製品とは異なり、凍結乾燥された組成物ではこの傾向は観察されなかった。２〜８°Ｃにおける、純度についての安定性グラフ（図８）および効力（図９）と同様に凝集体（図１０）が付属する図に示される。
【０２０２】
【表１３】
2019521179.tif 000022
【０２０３】
【表１４】
2019521179.tif 000023
【０２０４】
【表１５】
2019521179.tif 000024
【０２０５】
【表１６】
2019521179.tif 000025
【０２０６】
加速された安定性（２５±３°Ｃ；６０％±５％ＲＨ）
加速された（２５±３°Ｃ；６０％±５％ＲＨ）状態下に保存された凍結乾燥された薬剤製品ロットの安定性データが表１７〜２０に提供される。安定性データは、加速された状態で保存された凍結乾燥された薬剤製品が全ての安定性のための時間のポイントで合格基準内に良好にとどまったことを示した。水分量（ＫＦ）データは、２５°Ｃの保存状態で、１．１２％〜１．２３％（規格＝ＮＭＴ３．０％）の範囲で４週間測定した。２５±３°Ｃでの安定性チャートは、品質特性の純度（図１１）、および効力（図１２）、同様に凝集体（図１３）が付属する図に示される。
【０２０７】
【表１７】
2019521179.tif 000026
【０２０８】
【表１８】
2019521179.tif 000027
【０２０９】
【表１９】
2019521179.tif 000028
【０２１０】
【表２０】
2019521179.tif 000029
【０２１１】
熱ストレス安定性（４０±２°Ｃ；７５％±５％ＲＨ）
ストレス（４０±２°Ｃ；７５％±５％ＲＨ）状態下に保存された凍結乾燥された薬剤製品ロットに対する安定性データが表２１〜２４に提供される。安定性データは、ストレスた状態で保存された凍結乾燥された薬剤製品が研究の期間内に、合格基準内に良好にとどまったことを示した。水分量（ＫＦ）データは、４０°Ｃの保存状態で、１．１６％〜１．４５％（規格＝ＮＭＴ３．０％）の範囲で４週間測定した。４０±２°Ｃでの安定性チャートは、効力（図１４）、および純度（図１５）、同様に凝集体（図１６）が付属する図に示される。
【０２１２】
【表２１】
2019521179.tif 000030
【０２１３】
【表２２】
2019521179.tif 000031
【０２１４】
【表２３】
2019521179.tif 000032
【０２１５】
【表２４】
2019521179.tif 000033
【０２１６】
実施例２
ＳＣ-ＰＥＧリンカー（すなわち、サクシニミジルカーボネートリンカー）を有するポリエチレングリコール-アスパラギナーゼを含む組成物、ペグアスパラガーゼ・ペゴル（サクシニミジルカーボネート−ポリエチレングリコール［ＳＣ−ＰＥＧ］大腸菌Ｌ−アスパラギナーゼ）が製造された。この組成物の成分が表２５に提供される。
【０２１７】
【表２５】
2019521179.tif 000034
【０２１８】
実施例３
濃縮されたバルク組成物の製造に続いて、ペグアスパラガーゼ・ペゴルの凍結乾燥された組成物を濃縮されたバルク組成から製造できる。図１は、本開示の実施形態に従う凍結乾燥された貯蔵安定組成物を製造するために使うことができるプロセスのフローダイヤグラムの実施例を示す。この注射用の凍結乾燥された組成物粉末は、３，７５０ＩＵの活性のペグアスパラガーゼ・ペゴルの５．２ｍＬのＷＦＩで再構成後に７５０ＩＵ／ｍＬ）を含む単回使用バイアル中で製造できる。この凍結乾燥された組成物の構成成分は再構成後に、４．５％ショ糖、二塩基性リン酸ナトリウム、一塩基性リン酸ナトリウム、および塩化ナトリウムを含む。凍結乾燥された組成物の構成成分が表２６に提供される。
【０２１９】
【表２６】
2019521179.tif 000035
【０２２０】
実施例４
本研究の目的は、ビーグル犬に１回（１日目）または１週間に１回を４週間（１、１５、２２、２９および３６日目）、静脈内的に、遅いボーラス注入により投与したときの液体ペグアスパラガーゼ（ＰＥＧ-Ｌ-アスパラギナーゼ；Ｏｎｃａｓｐａｒ（登録商標））および凍結乾燥されたペグアスパラガーゼの、薬物動態（ＰＫ）、薬力学（ＰＤ）および免疫原性の比較情報を提供することである。再構成された凍結乾燥されたペグアスパラガーゼは、ヒトに静脈内投与されるために、本研究では同じ投与経路が用いられた。単回投与および反復投与ＰＫ／ＰＤ研究が、液体および再構成された凍結乾燥されたバージョンの薬物動態および薬力学を等しい薬量で決定および比較するために必要であった。
【０２２１】
ビーグル犬（公称５匹／性別／群）に、５００ＩＵ／ｋｇの液体ペグアスパラガーゼまたは再構成された凍結乾燥されたペグアスパラガーゼを、静脈内注射により、０．６６７ｍＬ／ｋｇ（表２７を参照されたい）の投薬用量で投与した。このビーグルは、約６ヵ月の年齢で、７．２〜１０．７ｋｇのオスおよび５．６ｋｇ〜８．２ｋｇのメスであった。
【０２２２】
供給されたままの液体ペグアスパラガーゼ（ｐＨ７．２〜７．４５ｍＬの５０ｍＭリン酸および０．８５％生理食塩水を含むＰＢＳ緩衝液）が用いられ調製は必要なかった。７５０ＩＵ／ｍＬ濃度を達成するためにバイアルの内容物を５．２ｍＬの注射用水（ＷＦＩ）により、無菌技法を用いて再構成して、（２１ゲージの注射器を用いて）投与するために、凍結乾燥されたペグアスパラガーゼ（実施例１を参照されたい）を調製した。投与に先立ち、バイアルの内容物を、完全に混合するまで、穏やかに回転した。この混合物を、濁りや変色等の微粒子問題について、視認により検査した。用量の投与の日ごとに新鮮な製剤を調製し、室温で維持し、および調製から２時間以内に使用した。
【０２２３】
【表２７】
2019521179.tif 000036
【０２２４】
群１および３の動物は、単回投与の液体ペグアスパラガーゼまたは凍結乾燥されたペグアスパラガーゼを、それぞれ１日目に投与された。群２および４の動物は、液体ペグアスパラガーゼまたは凍結乾燥されたペグアスパラガーゼの反復投与をそれぞれ与えられた。試験品目の調製から２時間以内に、遅いボーラス（約２分間にわたる）静脈注射が投与された。留置カテーテル（非バタフライカテーテル）を用い、次いでカテーテルのキャップの何らかの残留している用量を生理食塩水で洗い流して清掃した。針の配置が２分間の持続時間の間一貫し続けたことを保証するためにまっすぐな針をカテーテルキャップに挿入した。
【０２２５】
薬物動態および薬力学分析のために、１および３６日目に全ての動物から血液サンプルが取得された。約１．０ｍＬの全血が各時点で取得された。採血に先立ち、動物は麻酔されず、絶食もされなかった。血液は、ヘパリンナトリウム抗凝固剤を含むチューブ中に採集され、および氷水中に直立に配置された。血液サンプルの採取開始から５分以内に血漿を得るために血液サンプルの遠心分離を５分間（約３０００ｒｐｍ、約４°Ｃ）行った。
【０２２６】
ＰＤ：１つの１２５μＬの血漿のアリコートを、アスパラギン決定のための１２５μＬのＳｅｒａＰｒｅｐが、あらかじめ充填されたクリオチューブ（ｃｒｙｏｔｕｂｅ）中にピペットで入れた。このチューブをＳｅｒａＰｒｅｐと混合するために３時間倒立し、および採取から１５分間以内に、液体窒素またはメタノール／ドライアイス血液サンプルにより直ちにフラッシュ凍結した。全てのＳｅｒａＰｒｅｐを含むアリコートは、質量分光検出を持つ高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）（ＬＣ-ＭＳ／ＭＳ）により、アスパラギン測定のために分析された。
【０２２７】
ＰＫ：血漿の残りをアスパラギナーゼ活性決定のために２つのクリオチューブに分割し、および血液サンプルの採取から３０分以内にフラッシュ凍結した。ＳｅｒａＰｒｅｐを含まない全てのアリコートは、アスパラギナーゼ活性について比色混合酵素反応により分析された。
【０２２８】
結果
前記処理期間に凍結乾燥されたペグアスパラガーゼについて行った分析は、適切な濃度（バッチ分析について；６．６ｍｇ／ｍＬおよび７４１ＩＵ／ｍＬの活性の予期されたタンパク質濃度）の投薬製剤が投与されたことを確定した（表２８）。
【０２２９】
【表２８】
2019521179.tif 000037
【０２３０】
第１日目のプールされたアスパラギナーゼの群平均血漿濃度（Ｃｍａｘ）、および第１日目の、投与後最大５５２時間までに推定された、プールされた群平均血漿アスパラギナーゼ濃度時間曲線下面積（ＡＵＣ０．５５２）、ならびに３６日目の反復投与に続くそれらの値が各群（オスとメスを合わせて）について表２９にまとめられる。
【０２３１】
【表２９】
2019521179.tif 000038
【０２３２】
本研究は、並行群デザインとして設計され、およびそのデータは分散分析技法を用いて統計的に解析された。両方の日からのＣｍａｘおよびＡＵＣ０．５５２データは、製剤、時間、性別およびそれらの相互作用を因子として用いたＡＮＯＶＡモデルにより解析された。
これらの２つのペグアスパラガーゼ製剤は、ＣｍａｘおよびＡＵＣ０．５５２に関して解析され、および幾何平均の比率に対応する両側９０％信頼区間が表３０にまとめられている。
【０２３３】
【表３０】
2019521179.tif 000039
【０２３４】
Ｃｍａｘに対しては、信頼区間（０．８６７〜０．９７０）が棄却域に含まれるために、生物学的等価性の証拠があった。ＡＵＣ０．５５２に対しては、信頼区間（０．８４１〜０．９９６）が棄却域に含まれるために、生物学的等価性の証拠があった。
【０２３５】
ペグアスパラガーゼの平均最大血漿濃度（Ｃｍａｘ）および、１日目の投与後最大５５２時間までに推定された、プールされた平均血漿アスパラギナーゼ濃度時間曲線下面積（ＡＵＣ０．５５２）、ならびに３６日目の反復投与に続くそれらの値が各群について（性別により）カッコ内の標準偏差とともに以下の表３１にまとめられる。
【０２３６】
【表３１】
2019521179.tif 000040
【０２３７】
凍結乾燥された製剤についての、アスパラギナーゼの平均最大血漿濃度（Ｃｍａｘ）と、血漿アスパラギナーゼ濃度時間曲線下面積（ＡＵＣ０．５５２）の関係、および用量レベルが、液体製剤と比較した比率として表され、および表３２に提示される。
【０２３８】
【表３２】
2019521179.tif 000041
【０２３９】
イヌのアスパラギナーゼへの全身曝露のＣｍａｘおよびＡＵＣ０．５５２の値は、１日目および後続する３６日目の反復投与で、再構成された凍結乾燥されたペグアスパラガーゼの投与は液体製剤と比較して同様であった。２つの製剤の間でＡＵＣ０．５５２が有意に異なるという証拠はなかったが、異なる製剤の間でＣｍａｘ値が異なるといういくつかの証拠があり、Ｃｍａｘは液体製剤として投与されたときよりも、凍結乾燥された製品の投与がわずかに低い（８％）。
【０２４０】
メスイヌのアスパラギナーゼへの全身曝露のＣｍａｘおよびＡＵＣ０．５５２の値は、一般的にはオスでの曝露の指標と同様であり、およびＣｍａｘまたはＡＵＣ０．５５２について、全身曝露において、統計的に有意な性別に関係する差があるという証拠はなかった。
【０２４１】
研究の間に評価された他のパラメータは：生存能力、臨床的観察、体重、摂餌量、呼吸速度、体温、血液学、凝固および血液化学であり；これらについて、試験品目に関係する有害効果は見られなかった。
反復静脈内投与（３６日目）後に、イヌのアスパラギナーゼへの全身曝露のＣｍａｘ値および範囲（ＡＵＣ０．５５２）は、単回投与（１日目）後の値よりも高く、これらの差異統計的に有意であった（ｐ＜０．００１）。ＡＵＣ０．５５２値（異なる動物がそれぞれの日にデータを提供したことに注意されたい）に基づいて計算された平均累積比率は、アスパラギナーゼの累積が液体ペグアスパラガーゼの反復静脈内投与の後に起きたことを示すものよりも大きかった。
【０２４２】
全体的に、幾何平均の率に対する対応する両側９０％信頼区間が、０．８〜１．２５の範囲の生物学的同等性の従来のマージン内に完全に収まるために、これら２つのペグアスパラガーゼ製剤は、ＣｍａｘおよびＡＵＣ０．５５２に関して生物学的に同等であることが示された。ＡＵＣ０．５５２に関して２つの製剤の間には有意な差はなかった。アスパラギナーゼへの全身曝露は２製品で同様であり、および反復投与により、両方の性で、いくらかの蓄積が起こった。アスパラギンは、全ての動物で最大３３６時間、完全に抑制され、およびその大部分で最大５５２時間まで抑制された。
【０２４３】
まとめとして、液体ペグアスパラガーゼまたは再構成された凍結乾燥されたペグアスパラガーゼの両方の５００ＩＵ／ｋｇの用量の間には重要な差異は存在せず、におよびそれらは同等の薬物動態、薬力学および免疫原性のプロファイルを有していた。
【０２４４】
［実施形態］
一実施形態では、本開示は、リンカーによりアスパラギナーゼに共有結合的に結合したポリアルキレンオキシド基を有するポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼを含む凍結乾燥された貯蔵安定組成物を提供する。この凍結乾燥された貯蔵安定組成物は、緩衝液、塩、および糖も含む。
【０２４５】
いくつかの実施形態ではこのポリアルキレンオキシド基はポリエチレングリコール基を含む。いくつかの実施形態ではこのポリエチレングリコール基は２，０００〜１０，０００ダルトンの範囲の分子量を有する。いくつかの実施形態ではこのポリエチレングリコール基は５，０００ダルトンの分子量を有する。
【０２４６】
いくつかの実施形態ではこのアスパラギナーゼは大腸菌アスパラギナーゼである。
【０２４７】
いくつかの実施形態ではこのリンカーはウレタン・リンカーである。いくつかの実施形態ではこのリンカーはコハク酸リンカーである。
【０２４８】
いくつかの実施形態ではこのポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼは、５００〜１，０００ＩＵ／ｇの範囲の量で存在する。
【０２４９】
いくつかの実施形態ではこの緩衝液はリン酸緩衝液を含む。いくつかの実施形態ではこのリン酸緩衝液は二塩基性リン酸ナトリウムおよび一塩基性リン酸ナトリウムを含む。いくつかの実施形態ではこの二塩基性リン酸ナトリウムは、０．１〜０．５ｗｔ．％の範囲の量が存在する。いくつかの実施形態ではこの一塩基性リン酸ナトリウムは０．０１〜０．１ｗｔ．％．の範囲の量が存在する。
【０２５０】
いくつかの実施形態ではこの塩は塩化ナトリウムである。いくつかの実施形態では塩化ナトリウム０．１〜１ｗｔ．％の範囲の量が存在する。
【０２５１】
いくつかの実施形態ではこの糖は二糖類である。いくつかの実施形態ではこの二糖類はショ糖を含む。いくつかの実施形態ではこの糖は、ショ糖を１〜１０ｗｔ．％の範囲の量を含む。
【０２５２】
いくつかの実施形態では前記組成物は単位用量容器中に存在する。いくつかの実施形態ではこのはバイアルである。いくつかの実施形態ではこのバイアルは、密封されたガラスバイアルである。
【０２５３】
いくつかの実施形態ではこのポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼは７５０ＩＵ／ｇの量が存在し、このポリアルキレンオキシド基は、５，０００ダルトンの分子量を持つポリエチレングリコール基を含み、このアスパラギナーゼは大腸菌アスパラギナーゼであり、このリンカーはウレタン・リンカーであり、この緩衝液は二塩基性リン酸ナトリウムの０．２５〜０．３ｗｔ．％範囲の量、および一塩基性リン酸ナトリウムの０．０５〜０．０７ｗｔ．％の範囲の量を含むリン酸緩衝液を含み、この塩は、０．４〜０．４５ｗｔ．％の範囲の量の塩化ナトリウムであり、およびこの糖は４〜５ｗｔ．％．の範囲の量のショ糖である。
【０２５４】
いくつかの実施形態ではこのポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼは７５０ＩＵ／ｇの量が存在し、このポリアルキレンオキシド基は、５，０００ダルトンの分子量を持つポリエチレングリコール基を含み、このアスパラギナーゼは大腸菌アスパラギナーゼであり、このリンカーはウレタン・リンカーであり、この緩衝液は二塩基性リン酸ナトリウムの０．２７９ｗｔ．％の量、および一塩基性リン酸ナトリウムの０．０６ｗｔ．％の量を含むリン酸緩衝液を含み、この塩は、０．４２５ｗｔ．％の量の塩化ナトリウムである。
【０２５５】
いくつかの実施形態ではこのポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼは７５０ＩＵ／ｇの量が存在し、このポリアルキレンオキシド基は、５，０００ダルトンの分子量を持つポリエチレングリコール基を含み、このアスパラギナーゼは大腸菌アスパラギナーゼであり、このリンカーはコハク酸リンカーであり、この緩衝液は二塩基性リン酸ナトリウムの０．２５〜０．３ｗｔ．％の範囲の量、および一塩基性リン酸ナトリウムの０．０５〜０．０７ｗｔ．％の範囲の量を含むリン酸緩衝液を含み、この塩は、０．４〜０．４５ｗｔ．％の範囲の量の塩化ナトリウムであり、およびこの糖は４〜５ｗｔ．％．の範囲の量のショ糖である。
【０２５６】
いくつかの実施形態ではこのポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼは７５０ＩＵ／ｇの量が存在し、このポリアルキレンオキシド基は、５，０００ダルトンの分子量を持つポリエチレングリコール基を含み、このアスパラギナーゼは大腸菌アスパラギナーゼであり、このリンカーはコハク酸リンカーであり、この緩衝液は二塩基性リン酸ナトリウムの０．２７９ｗｔ．％の量、および一塩基性リン酸ナトリウムの０．０６ｗｔ．％の量を含むリン酸緩衝液を含み、この塩は、０．４２５ｗｔ．％の量の塩化ナトリウムであり、およびこの糖は４．５ｗｔ．％．の量のショ糖である。
【０２５７】
いくつかの実施形態ではこのポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼは７５０ＩＵ／ｇの量が存在し、このポリアルキレンオキシド基は、５，０００ダルトンの分子量を持つポリエチレングリコール基を含み、このアスパラギナーゼは大腸菌アスパラギナーゼであり、このリンカーはウレタン・リンカーであり、この緩衝液は二塩基性リン酸ナトリウムの０．５５８ｗｔ．％の量、および一塩基性リン酸ナトリウムの０．１２９ｗｔ．％の量を含むリン酸緩衝液を含み、この塩は、０．８５ｗｔ．％の量の塩化ナトリウムである。
【０２５８】
別の実施形態では、本開示は、コハク酸リンカーにより大腸菌アスパラギナーゼに共有結合的に結合したポリエチレングリコール基を有する、ポリエチレングリコール-アスパラギナーゼを含む凍結乾燥された貯蔵安定組成物を提供する。別の実施形態では、本開示は、ウレタン・リンカーにより大腸菌アスパラギナーゼに共有結合的に結合したポリエチレングリコール基を有する、ポリエチレングリコール-アスパラギナーゼを含む凍結乾燥された貯蔵安定組成物を提供する。この凍結乾燥された貯蔵安定組成物は、上記の実施形態で概要が示されたリン酸緩衝液、塩、および随意的に二糖類も含み得る。
【０２５９】
別の実施形態では、本開示は本明細書に開示される組成物を投与することにより被験者中のアスパラギンを脱アミノ化する方法を提供する。
【０２６０】
いくつかの実施形態では前記方法は、再構成された投与単位を製造するために本開示に従う凍結乾燥された貯蔵安定組成物を再構成すること、および被験者中のアスパラギンを脱アミノ化するために被験者にこの再構成された投与単位を投与することを含む。いくつかの実施形態では前記再構成することは、この凍結乾燥された貯蔵安定組成物を注射用水（ＷＦＩ）と混合することを含む。
【０２６１】
いくつかの実施形態では前記投与単位は７００〜８００ＩＵ／ｍＬのポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼを含む。
【０２６２】
いくつかの実施形態では前記投与単位は２．５〜６ｍｇ／ｇの二塩基性リン酸ナトリウムを含む。いくつかの実施形態では前記投与単位、２．５〜３ｍｇ／ｇの二塩基性リン酸ナトリウムを含む。いくつかの実施形態では前記投与単位は、５〜６ｍｇ／ｇの二塩基性リン酸ナトリウムを含む。いくつかの実施形態では前記投与単位は５．２５〜５．７５ｍｇ／ｇの二塩基性リン酸ナトリウムを含む。
【０２６３】
いくつかの実施形態では前記投与単位は、０．４５〜１．５ｍｇ／ｇの一塩基性リン酸ナトリウムを含む。いくつかの実施形態では前記投与単位は、０．４５〜０．７５ｍｇ／ｇの一塩基性リン酸ナトリウムを含む。いくつかの実施形態では前記投与単位は、１〜２ｍｇ／ｇの一塩基性リン酸ナトリウムを含む。いくつかの実施形態では前記投与単位は１〜１．５ｍｇ／ｇの一塩基性リン酸ナトリウムを含む。
【０２６４】
いくつかの実施形態では前記投与単位は４〜９ｍｇ／ｇの塩化ナトリウムを含む。いくつかの実施形態では前記投与単位は４〜４．５ｍｇ／ｇの塩化ナトリウムを含む。いくつかの実施形態では前記投与単位は８〜９ｍｇ／ｇの塩化ナトリウムを含む。
【０２６５】
いくつかの実施形態では前記投与単位はショ糖を含む。いくつかの実施形態ではこのショ糖は、４０〜５０ｍｇ／ｇの範囲の量が存在する。
【０２６６】
いくつかの実施形態では前記再構成された投与単位は、１，５００〜３，０００ＩＵ／ｍ２のポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼを被験者に送達する。いくつかの実施形態ではこの再構成された投与単位２，０００〜２，７５０ＩＵ／ｍ２のポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼを被験者に送達する。
【０２６７】
いくつかの実施形態では前記方法は、被験者の腫瘍状態の治療法である。いくつかの実施形態ではこの腫瘍状態は癌である。いくつかの実施形態ではこの癌は白血病である。いくつかの実施形態ではこの白血病は急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）である。いくつかの実施形態ではこの白血病は急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）である。
【０２６８】
いくつかの実施形態では被験者は、誘導相、連結相および維持相を含む治療投薬計画を処方される。いくつかの実施形態では前記方法単回の再構成された投与単位を被験者に誘導相で投与すること、および複数の再構成された投与単位維持相の間に投与することを含む。いくつかの実施形態ではこの複数の再構成された投与単位は、再構成された投与単位被験者に3週間ごとに投与することにより被験者に投与される。いくつかの実施形態ではこの複数の再構成された投与単位は、再構成された投与単位被験者に２週間ごとに投与することにより被験者に投与される。
【０２６９】
いくつかの実施形態ではこの被験者は年少者である。いくつかの実施形態ではこの被験者は成人である。
【０２７０】
いくつかの実施形態ではこのポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼは７５０ＩＵ／ｇの量が存在し、このポリアルキレンオキシド基は、５，０００ダルトンの分子量を持つポリエチレングリコール基を含み、このアスパラギナーゼは大腸菌アスパラギナーゼであり、このリンカーはウレタン・リンカーであり、この緩衝液は二塩基性リン酸ナトリウムの２．５〜３ｍｇ／ｇの範囲の量、および一塩基性リン酸ナトリウムの０．５〜０．７ｍｇ／ｇの範囲の量を含むリン酸緩衝液であり、この塩は、４〜４．５ｍｇ／ｇの範囲の量の塩化ナトリウムであり、およびこの糖は４０〜５０ｍｇ／ｇの範囲の量のショ糖である。
【０２７１】
いくつかの実施形態ではこのポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼは７５０ＩＵ／ｇの量が存在し、このポリアルキレンオキシド基は、５，０００ダルトンの分子量を持つポリエチレングリコール基を含み、このアスパラギナーゼは大腸菌アスパラギナーゼであり、このリンカーはウレタン・リンカーであり、この緩衝液は二塩基性リン酸ナトリウムの２．７９ｍｇ／ｇの量、および一塩基性リン酸ナトリウムの０．６ｍｇ／ｇの量を含むリン酸緩衝液を含み、この塩は、４．２５ｍｇ／ｇの量の塩化ナトリウムであり、およびこの糖は４５ｍｇ／ｇの量のショ糖である。
【０２７２】
いくつかの実施形態ではこのポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼは７５０ＩＵ／ｇの量が存在し、このポリアルキレンオキシド基は、５，０００ダルトンの分子量を持つポリエチレングリコール基を含み、このアスパラギナーゼは大腸菌アスパラギナーゼであり、このリンカーはコハク酸リンカーであり、この緩衝液は二塩基性リン酸ナトリウムの２．５〜３ｍｇ／ｇの範囲の量、および一塩基性リン酸ナトリウムの０．５〜０．７ｍｇ／ｇの範囲の量を含むリン酸緩衝液であり、この塩は、４〜４．５ｍｇ／ｇの範囲の量の塩化ナトリウムであり、およびこの糖は４０〜５０ｍｇ／ｇの範囲の量のショ糖である。
【０２７３】
いくつかの実施形態ではこのポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼは７５０ＩＵ／ｇの量が存在し、このポリアルキレンオキシド基は、５，０００ダルトンの分子量を持つポリエチレングリコール基を含み、このアスパラギナーゼは大腸菌アスパラギナーゼであり、このリンカーはコハク酸リンカーであり、この緩衝液は二塩基性リン酸ナトリウムの２．７９ｍｇ／ｇの量、および一塩基性リン酸ナトリウムの０．６ｍｇ／ｇの量を含むリン酸緩衝液を含み、この塩は、４．２５ｍｇ／ｇの量の塩化ナトリウムであり、およびこの糖は４５ｍｇ／ｇの量のショ糖である。
【０２７４】
別の実施形態では、本開示は、水性濃縮組成物を凍結乾燥された貯蔵安定ポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ組成物を生成するために十分な様式で凍結乾燥することにより、凍結乾燥されたポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ組成物を製造する方法を提供する。この水性濃縮組成物は、リンカーによりアスパラギナーゼに共有結合的に結合したポリアルキレンオキシド基を有するポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ、緩衝液、塩、および糖を含む。
【０２７５】
いくつかの実施形態ではこの水性濃縮組成物は、１，５００〜３，０００ＩＵ／ｍＬのポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼを含む。
【０２７６】
いくつかの実施形態ではこの水性濃縮組成物は０．１〜０．５ｗｔ．％の二塩基性リン酸ナトリウムを含む。
【０２７７】
いくつかの実施形態ではこの水性濃縮組成物は０．０１〜０．１ｗｔ．％の一塩基性リン酸ナトリウムを含む。
【０２７８】
いくつかの実施形態ではこの水性濃縮組成物は０．１〜１ｗｔ．％の塩化ナトリウムを含む。
いくつかの実施形態ではこの水性濃縮組成物はショ糖を含む。
【０２７９】
いくつかの実施形態ではこのショ糖はの１〜１０ｗｔ．％．範囲の量が存在する。いくつかの実施形態では前記方法は、この水性濃縮組成物を製造する方法も含む。
【０２８０】
いくつかの実施形態では前記方法は、この水性濃縮組成物を単位用量容器中に導入し、およびこの単位用量容器中で水性濃縮組成物を凍結乾燥することも含む。いくつかの実施形態ではこの単位用量容器はバイアルである。いくつかの実施形態ではこのバイアルはガラスバイアルである。いくつかの実施形態では前記方法は、この単位用量容器中にこの凍結乾燥された組成物を密封することも含む。
【０２８１】
いくつかの実施形態ではこのポリアルキレンオキシド基はポリエチレングリコール基を含む。いくつかの実施形態ではこのポリエチレングリコール基は２，０００〜１０，０００ダルトンの範囲の分子量を含むいくつかの実施形態ではこのポリエチレングリコール基は５，０００ダルトンの分子量を含む。
【０２８２】
いくつかの実施形態ではこのアスパラギナーゼは大腸菌アスパラギナーゼである。
【０２８３】
いくつかの実施形態ではこのリンカーはウレタン・リンカーである。いくつかの実施形態ではこのリンカーコハク酸リンカーである。
【０２８４】
いくつかの実施形態ではこのポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼは、７５０ＩＵ／ｇの量で存在し、このポリアルキレンオキシド基は、５，０００ダルトンの分子量を持つポリエチレングリコール基を含み、このアスパラギナーゼは大腸菌アスパラギナーゼであり、このリンカーはウレタン・リンカーであり、この緩衝液は二塩基性リン酸ナトリウムの０．２５〜０．３ｗｔ．％の範囲の量を含み、および一塩基性リン酸ナトリウムの０．０５〜０．０７ｗｔ．％の範囲の量を含むリン酸緩衝液であり、この塩は、０．４〜０．４５ｗｔ．％の範囲の量の塩化ナトリウムであり、およびこの糖は４〜５ｗｔ．％．の範囲の量のショ糖である。
【０２８５】
いくつかの実施形態ではこのポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼは、７５０ＩＵ／ｇの量で存在し、このポリアルキレンオキシド基は、５，０００ダルトンの分子量を持つポリエチレングリコール基を含み、このアスパラギナーゼは大腸菌アスパラギナーゼであり、このリンカーはコハク酸リンカーであり、この緩衝液は二塩基性リン酸ナトリウムの０．２５〜０．３ｗｔ．％の範囲の量を含み、および一塩基性リン酸ナトリウムの０．０５〜０．０７ｗｔ．％の範囲の量を含むリン酸緩衝液であり、この塩は、０．４〜０．４５ｗｔ．％の範囲の量の塩化ナトリウムであり、およびこの糖は４〜５ｗｔ．％．の範囲の量のショ糖である。
【０２８６】
他の実施形態では、本開示はそれぞれが凍結乾燥された貯蔵安定組成物を含む２つ以上の単位用量容器を含むキットを提供する。この凍結乾燥された貯蔵安定組成物は、リンカーによりアスパラギナーゼに共有結合的に結合したポリアルキレンオキシド基を有するポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼ、緩衝液、塩、および糖を含む。
【０２８７】
いくつかの実施形態ではこのポリアルキレンオキシド基はポリエチレングリコール基を含む。いくつかの実施形態ではこのポリエチレングリコール基は２，０００〜１０，０００ダルトンの範囲の分子量を有する。いくつかの実施形態ではこのポリエチレングリコール基は５，０００ダルトンの分子量を有する。
【０２８８】
いくつかの実施形態ではこのアスパラギナーゼは大腸菌アスパラギナーゼである。
【０２８９】
いくつかの実施形態ではこのリンカーはウレタン・リンカーである。いくつかの実施形態ではこのリンカーコハク酸リンカーである。
【０２９０】
いくつかの実施形態ではこのポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼは、５００〜１，０００ＩＵ／ｇの範囲の量で存在する。
【０２９１】
いくつかの実施形態ではこの緩衝液はリン酸緩衝液を含む。いくつかの実施形態ではこのリン酸緩衝液は二塩基性リン酸ナトリウムおよび一塩基性リン酸ナトリウムを含む。いくつかの実施形態ではこの二塩基性リン酸ナトリウムは、０．１〜０．５ｗｔ．％の範囲の量が存在する。いくつかの実施形態ではこの一塩基性リン酸ナトリウムは０．０１〜０．１ｗｔ．％．の範囲の量が存在する。
【０２９２】
いくつかの実施形態ではこの塩は塩化ナトリウムである。いくつかの実施形態では塩化ナトリウム０．１〜１ｗｔ．％の範囲の量が存在する。
【０２９３】
いくつかの実施形態ではこの糖は二糖類である。いくつかの実施形態ではこの二糖類はショ糖を含む。いくつかの実施形態ではこの糖は、ショ糖を１〜１０ｗｔ．％の範囲の量を含む。
【０２９４】
いくつかの実施形態ではこの単位用量容器はバイアルである。いくつかの実施形態ではこの単位用量容器はガラスバイアルである。いくつかの実施形態ではこのバイアルは、密封されたガラスバイアルである。いくつかの実施形態ではこの単位用量容器は密封される。
【０２９５】
いくつかの実施形態ではこのポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼは７５０ＩＵ／ｇの量が存在し、このポリアルキレンオキシド基は、５，０００ダルトンの分子量を持つポリエチレングリコール基を含み、このアスパラギナーゼは大腸菌アスパラギナーゼであり、このリンカーはウレタン・リンカーであり、この緩衝液は二塩基性リン酸ナトリウムの０．２５〜０．３ｗｔ．％範囲の量、および一塩基性リン酸ナトリウムの０．０５〜０．０７ｗｔ．％の範囲の量を含むリン酸緩衝液を含み、この塩は、０．４〜０．４５ｗｔ．％の範囲の量の塩化ナトリウムであり、およびこの糖は４〜５ｗｔ．％．の範囲の量のショ糖である。
【０２９６】
いくつかの実施形態ではこのポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼは７５０ＩＵ／ｇの量が存在し、このポリアルキレンオキシド基は、５，０００ダルトンの分子量を持つポリエチレングリコール基を含み、このアスパラギナーゼは大腸菌アスパラギナーゼであり、このリンカーはコハク酸リンカーであり、この緩衝液は二塩基性リン酸ナトリウムの０．２５〜０．３ｗｔ．％範囲の量、および一塩基性リン酸ナトリウムの０．０５〜０．０７ｗｔ．％の範囲の量を含むリン酸緩衝液を含み、この塩は、０．４〜０．４５ｗｔ．％の範囲の量の塩化ナトリウムであり、およびこの糖は４〜５ｗｔ．％．の範囲の量のショ糖である。
【０２９７】
別の実施形態では、本開示は、被験者の急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）を治療する方法を含む。本開示の方法は、本開示の方法は、例えば、被験者の急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）を治療するために有効なポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼの用量を被験者に投与することを含み、このポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼはリンカーによりアスパラギナーゼに共有結合的に結合したポリアルキレンオキシドを有する。
【０２９８】
いくつかの実施形態ではこのポリアルキレンオキシド基はポリエチレングリコール基を含む。
【０２９９】
いくつかの実施形態ではこのポリエチレングリコール基は２，０００〜１０，０００ダルトンの範囲の分子量を含む。
【０３００】
いくつかの実施形態ではこのポリエチレングリコール基は５，０００ダルトンの分子量を含む。
【０３０１】
いくつかの実施形態ではこのアスパラギナーゼは大腸菌アスパラギナーゼである。
いくつかの実施形態ではこのリンカーはウレタン・リンカーである。いくつかの実施形態ではこのリンカーコハク酸リンカーである。
【０３０２】
いくつかの実施形態ではこの用量は、７００〜８００ＩＵ／ｇの範囲のポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼの量を含む。
【０３０３】
いくつかの実施形態ではこの用量は、緩衝液および塩を含む。いくつかの実施形態ではこの用量は、リン酸緩衝液を含む。いくつかの実施形態ではこのリン酸緩衝液は二塩基性リン酸ナトリウムおよび一塩基性リン酸ナトリウムを含む。いくつかの実施形態ではこの用量は５．２５〜５．７５ｍｇ／ｇの二塩基性リン酸ナトリウムを含む。いくつかの実施形態ではこの用量は１〜１．５ｍｇ／ｇの一塩基性リン酸ナトリウムを含む。いくつかの実施形態ではこの塩は塩化ナトリウムである。いくつかの実施形態ではこの用量は８〜９ｍｇ／ｇの塩化ナトリウムを含む。
【０３０４】
いくつかの実施形態では、この用量は、７５０ＩＵ／ｇのポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼを含み、このポリエチレングリコール基は５，０００ダルトンの分子量を持ち、このアスパラギナーゼは大腸菌アスパラギナーゼであり、このリンカーはウレタン・リンカーであり、この緩衝液は二塩基性リン酸ナトリウムの５．２５〜５．７５ｍｇ／ｇの範囲の量、および一塩基性リン酸ナトリウムの１〜１．５ｍｇ／ｇの範囲の量を含むリン酸緩衝液を含み、およびこの塩は、８〜９ｍｇ／ｇの塩化ナトリウムを含む。
【０３０５】
いくつかの実施形態では、この用量は、７５０ＩＵ／ｇのポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼを含み、このポリエチレングリコール基は５，０００ダルトンの分子量を持ち、このアスパラギナーゼは大腸菌アスパラギナーゼであり、このリンカーはウレタン・リンカーであり、この緩衝液は５．５８ｍｇ／ｇの二塩基性リン酸ナトリウム、および１．２９ｍｇ／ｇの一塩基性リン酸ナトリウムのを含むリン酸緩衝液を含み、およびこの塩は、８．５ｍｇ／ｇの塩化ナトリウムを含む。
【０３０６】
いくつかの実施形態では、この用量は、７５０ＩＵ／ｇのポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼを含み、このポリエチレングリコール基は５，０００ダルトンの分子量を持ち、このアスパラギナーゼは大腸菌アスパラギナーゼであり、このリンカーはコハク酸リンカーであり、この緩衝液は５．２５〜５．７５ｍｇ／ｇの二塩基性リン酸ナトリウム、および１〜１．５ｍｇ／ｇの一塩基性リン酸ナトリウムを含むリン酸緩衝液であり、およびこの塩は、８〜９ｍｇ／ｇの塩化ナトリウムを含む。
【０３０７】
いくつかの実施形態では、この用量は、７５０ＩＵ／ｇのポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼを含み、このポリエチレングリコール基は５，０００ダルトンの分子量を持ち、このアスパラギナーゼは大腸菌アスパラギナーゼであり、このリンカーはコハク酸リンカーであり、この緩衝液は５．５８ｍｇ／ｇの二塩基性リン酸ナトリウム、および１．２９ｍｇ／ｇの一塩基性リン酸ナトリウムのを含むリン酸緩衝液であり、およびこの塩は、８．５ｍｇ／ｇの塩化ナトリウムを含む。
【０３０８】
いくつかの実施形態ではこのリン酸緩衝液は二塩基性リン酸ナトリウムおよび一塩基性リン酸ナトリウムを含む。いくつかの実施形態ではこの用量は２．５〜３ｍｇ／ｇの二塩基性リン酸ナトリウムを含む。いくつかの実施形態ではこの用量は０．４５〜０．７５ｍｇ／ｇの一塩基性リン酸ナトリウムを含む。いくつかの実施形態ではこの塩は塩化ナトリウムである。いくつかの実施形態ではこの用量は４〜４．５ｍｇ／ｇの塩化ナトリウムを含む。いくつかの実施形態ではこの二糖類はショ糖を含む。いくつかの実施形態ではショ糖は、４０〜５０ｍｇ／ｇの範囲の量が存在する。
【０３０９】
いくつかの実施形態ではこの用量は、７５０ＩＵ／ｇのポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼを含み、このポリエチレングリコール基は５，０００ダルトンの分子量を持ち、このアスパラギナーゼは大腸菌アスパラギナーゼであり、このリンカーはウレタン・リンカーであり、この緩衝液は２．５〜３．５ｍｇの二塩基性リン酸ナトリウム、および０．５〜０．７ｍｇの一塩基性リン酸ナトリウムを含むリン酸緩衝液を含むリン酸緩衝液であり、この塩は、４〜４．５ｍｇ／ｇの塩化ナトリウムであり、およびこの糖は４０〜５０ｍｇ／ｇのショ糖である。
【０３１０】
いくつかの実施形態ではこの用量は、７５０ＩＵ／ｇのポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼを含み、このポリエチレングリコール基は５，０００ダルトンの分子量を持ち、このアスパラギナーゼは大腸菌アスパラギナーゼであり、このリンカーはウレタン・リンカーであり、この緩衝液は２．７９ｍｇ／ｇの二塩基性リン酸ナトリウムおよび０．６ｍｇ／ｇの一塩基性リン酸ナトリウムを含むリン酸緩衝液であり、この塩は４．２５ｍｇ／ｇの塩化ナトリウムを含み、およびこの糖は糖は４５ｍｇ／ｇのショ糖を含む。
【０３１１】
いくつかの実施形態ではこの用量は、７５０ＩＵ／ｇのポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼを含み、このポリエチレングリコール基は５，０００ダルトンの分子量を持ち、このアスパラギナーゼは大腸菌アスパラギナーゼであり、このリンカーはコハク酸リンカーであり、この緩衝液は２．５〜３．５ｍｇの二塩基性リン酸ナトリウム、および０．５〜０．７ｍｇの一塩基性リン酸ナトリウムを含むリン酸緩衝液を含むリン酸緩衝液であり、この塩は、４〜４．５ｍｇ／ｇの塩化ナトリウムであり、およびこの糖は４０〜５０ｍｇ／ｇのショ糖である。
【０３１２】
いくつかの実施形態ではこの用量は、７５０ＩＵ／ｇのポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼを含み、このポリエチレングリコール基は５，０００ダルトンの分子量を持ち、このアスパラギナーゼは大腸菌アスパラギナーゼであり、このリンカーはコハク酸リンカーであり、この緩衝液は２．７９ｍｇ／ｇの二塩基性リン酸ナトリウムおよび０．６ｍｇ／ｇの一塩基性リン酸ナトリウムを含むリン酸緩衝液であり、この塩は４．２５ｍｇ／ｇの塩化ナトリウムを含み、およびこの糖は糖は４５ｍｇ／ｇのショ糖を含む。
【０３１３】
いくつかの実施形態では前記方法は、凍結乾燥された貯蔵安定組成物を再構成することにより、用量を作成することも含む。
【０３１４】
いくつかの実施形態では、この用量は、１，５００〜３，０００ＩＵ／ｍ２のポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼを被験者に送達する。この用量は、２，０００〜２，７５０ＩＵ／ｍ２のポリアルキレンオキシド−アスパラギナーゼを被験者に送達する。
【０３１５】
いくつかの実施形態では被験者は、誘導相、連結相および維持相を含む治療投薬計画を処方される。いくつかの実施形態では前記方法は単回の再構成された投与単位を被験者に誘導相で投与すること、および複数の再構成された投与単位維持相の間に投与することを含む。いくつかの実施形態ではこの複数の再構成された投与単位は、再構成された投与単位を被験者に３週間ごとに投与することにより被験者に投与される。いくつかの実施形態ではこの複数の再構成された投与単位は、再構成された投与単位被験者に２週間ごとに投与することにより被験者に投与される。
【０３１６】
いくつかの実施形態ではこの被験者は年少者である。いくつかの実施形態ではこの被験者は成人である。
【０３１７】
上述の実施形態は、説明の手段としておよび実施例は理解の明瞭性の目的のために記載されているが、当技術分野の当業者には、本開示の教示を考慮すると、添付された発明の請求範囲の趣旨および範囲を逸脱することなく、それに対する特定の変更および修正を行い得ることは明白であろう。
【０３１８】
従って、上述のことは、単に本開示の実施形態の原理を説明するに過ぎない。明示的に本明細書に記載または示されていないにも関わらず、当業者が、本開示の実施形態の原理を具体化し、および本発明の趣旨および範囲に含まれる、様々な配列を考案できることが理解されるであろう。更に、本明細書に列挙される全ての実施例および条件的な文は、主に読者が本開示の実施形態の原則、および発明者が当技術を拡大することに貢献した概念を理解することを助けることを意図しており、およびそのような具体的に列挙された実施例および条件の制限を含まないと解釈されるべきである。更に、本開示の、原則、態様、および実施形態を列挙する本明細書の全ての言明は、その特定の実施例と同様に、その構造的、および機能的等価物の両方を包含することを意図している。加えて、そのような等価物は、現在の既知の等価物および将来開発される等価物の両方、すなわち、構造に関わらず、同じ機能を遂行する、開発されるいかなる要素をも含むことを意図している。本開示の実施形態の範囲は、従って、本明細書に示されおよび記載される実施形態に制限されることを意図していない。むしろ、本開示の実施形態の範囲および趣旨は添付されている特許請求の範囲により具体化される。
【図１】
2019521179.tif 000042
【図２】
2019521179.tif 000043
【図３】
2019521179.tif 000044
【図４】
2019521179.tif 000045
【図５】
2019521179.tif 000046
【図６】
2019521179.tif 000047
【図７】
2019521179.tif 000048
【図８】
2019521179.tif 000049
【図９】
2019521179.tif 000050
【図１０】
2019521179.tif 000051
【図１１】
2019521179.tif 000052
【図１２】
2019521179.tif 000053
【図１３】
2019521179.tif 000054
【図１４】
2019521179.tif 000055
【図１５】
2019521179.tif 000056
【図１６】
2019521179.tif 000057
【国際調査報告】
2019521179.tif 000058
2019521179.tif 000059