(57)【要約】  本発明は、物質乱用障害および依存を治療するための組成物と方法を示す。特に、本発明は、低用量のベンゾジアゼピン系薬例えばオキサゼパムと組み合わせた、低用量のコルチゾール合成阻害剤、例えばメチラポンからなる配合剤を示す。本発明の組成物と方法は、動物およびヒトを治療するのに安全かつ有効である医薬組成物と方法を包含する。【選択図】図１Ａ
2019504867.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
メチラポンまたはその医薬上許容される塩と、オキサゼパムまたはその医薬上許容される塩とを含む組成物であって、物質乱用障害の治療に有効である組成物。
【請求項２】
前記組成物がヒトにおける物質乱用障害の治療に有効である、請求項１の組成物。
【請求項３】
前記組成物が単位剤形の形である、請求項１の組成物。
【請求項４】
前記組成物が経口投与用剤形である、請求項１の組成物。
【請求項５】
前記組成物が非経口投与用である、請求項１の組成物。
【請求項６】
前記組成物が静脈内投与用である、請求項１の組成物。
【請求項７】
前記単位剤形が経口投与用である、請求項３の組成物。
【請求項８】
前記単位剤形が即放型剤形である、請求項７の組成物。
【請求項９】
前記単位剤形が徐放型剤形である、請求項７の組成物。
【請求項１０】
前記組成物が約270 mgのメチラポンを含む、請求項１の組成物。
【請求項１１】
前記組成物が約540 mgのメチラポンを含む、請求項１の組成物。
【請求項１２】
前記組成物が720 mgのメチラポンを含む、請求項１の組成物。
【請求項１３】
前記組成物が約12 mgのオキサゼパムを含む、請求項１の組成物。
【請求項１４】
前記組成物が約24 mgのオキサゼパムを含む、請求項１の組成物。
【請求項１５】
前記組成物が(i) 約270 mgのメチラポンおよび(ii) 約12 mgのオキサゼパムを含む、請求項１の組成物。
【請求項１６】
前記組成物が(i) 約540 mgのメチラポンおよび(ii) 約24 mgのオキサゼパムを含む、請求項１の組成物。
【請求項１７】
前記組成物が(i) 約720 mgのメチラポンおよび(ii) 約24 mgのオキサゼパムを含む、請求項１の組成物。
【請求項１８】
治療の必要な患者において物質乱用障害を治療する方法であって、有効量の請求項１の組成物を投与することを含む方法。
【請求項１９】
治療の必要な患者においてコカイン依存を治療する方法であって、有効量の請求項１の組成物を投与することを含む方法。
【請求項２０】
前記患者が重度の有害事象を経験しない、請求項１８の方法。
【請求項２１】
前記患者が中程度の有害事象を経験しない、請求項１８の方法。
【請求項２２】
前記患者が軽度の有害事象を経験しない、請求項１８の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
連邦支援の研究
本発明は、国立薬物乱用研究所（the National Institute on Drug Abuse）により助成された米国公衆衛生局認可第1R01DA030932-01号の下での政府支援を受けて行われた。
【０００２】
本発明は、依存（嗜癖）、不安、抑うつ、統合失調症といった神経精神疾患および関連障害（例えば不眠症）をはじめとする様々な状態や障害を治療する方法に関し、より一般的には、神経系と内分泌系の中の特定組織を標的とする医薬製剤の製造および使用方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
科学者は数十年に渡り精神運動刺激報酬系の神経生物学を研究してきたが、コカインやメタンフェタミン乱用に対するFDAに認可された治療法はいまだ存在しない。ほぼ30年間の従来のラボ研究は、ストレスと、その後の視床下部・下垂体・副腎（HPA）軸の活性化や精神運動刺激の強化との関連性に集中している。この研究は、コカインや他の物質使用障害の有力な薬理学的療法として、低用量のコルチゾール合成阻害剤であるメチラポンと、ベンゾジアゼピン系のオキサゼパムとの併用療法の開発に至った。実際、試験的臨床実験は、この併用がコカインへの渇望やコカイン常用を減弱できることを実証した。この効果を裏付ける仮説は、メチラポンとオキサゼパムの併用が、HPA軸内の活性を低下させることにより、コカイン探索とコカイン摂取を低減するというものであった。たとえそうでも、コカイン摂取と探索行動を一貫して減少させたメチラポンとオキサゼパムの併用投与は、確実には血漿コルチコステロン（または試験的臨床試験におけるコルチゾール）を変化させなかった。さらに、その後の研究により、この薬剤併用が副腎摘出ラットにおいて有効であることが実証され、それらの効果が副腎のレベルの上流で調節されるに違いないことを示唆した。発展中の仮説は、メチラポンとオキサゼパムの併用が、内側前頭前皮質と扁桃体における神経活性ステロイド（最も顕著にはテトラヒドロデオキシコルチコステロン）のレベルを増加させることによってその効果を発揮するというものである。
【０００４】
過去数年間にわたり、神経運動刺激強化におけるストレスとそれによる視床下部・下垂体・副腎（HPA）軸の活性化との複雑な関係に関して相当な研究が行われた（Goeders, 2002, 2007; Majewska, 2002; Winhusen & Somoza, 2001; Sarnyai他, 2001）。これに関連して、コカイン自己投与によるHPA軸活性化、消滅したコカイン探索行動の薬物誘発性および刺激（キュー）誘発性再燃を軽減する薬剤の効果に関して研究が行われている（Goeders, 2004, 2007）。
【０００５】
この分野での初期の研究は、ラットにおいて静注コカイン自己投与に対するベンゾジアゼピン受容体アゴニストの効果を調べた。このクラスの薬剤は、それらが最も広く処方される不安治療用薬剤（Uhlenhuth他、1995; Baldessarini, 1996）の中に存するという理由だけでなく、それらの薬剤が血漿コルチコステロン（Keim & Sigg, 1977）、コルチゾールおよびACTH（Meador-Woodruff & Greden, 1988; Torpy他、1993）を低下させかつコカイン誘発性の血漿コルチコステロン増加（Yang他、1992）を軽減することもできるという理由で同定された。最初にクロルジアゼポキシドでの前処置が静脈コカイン自己投与を有意に減らしたと報告された（Goeders他、1989）。コカインの単位用量を増加させるとこの効果は弱められたため、クロルジアゼポキシドは強化剤としてコカインの効力を弱めると示唆された。しかしながら、このような薬物摂取の減少はラットの反応能力の非特異的破たんに起因する可能性もあるので、別のベンゾジアゼピン受容体アゴニストであるアルプラゾラムを使って静脈コカイン投与および餌強化の多元スケジュールのもとでラットの反応を調べることによる追加の実験が行われた（Goeders他、1993）。初期には、アルプラゾラムが餌とコカインの両方により維持される反応を減弱させた。しかしながら、食餌維持反応に対するアルプラゾラムの鎮静作用に急速な耐性が発生したのに対し、コカイン自己投与を減少させるアルプラゾラムの効力には耐性が認められなかった。このことは、ベンゾジアゼピン系薬の効果が反応に対する非特異的作用よりもむしろコカイン強化に対する特異的作用に起因しうることを示唆している。コカイン自己投与に対するコルチコステロン合成阻害剤の効果に焦点をあてた研究も行われている。メチラポンはコルチコステロン生成過程における11β-ヒドロキシル化反応を遮断し、血漿ホルモン濃度を減少させる（Haleem他、1988; Haynes, 1990）。メチラポンでの前処置は、ラットにおいてコカイン自己投与行動と血漿コルチコステロン濃度の用量依存的減少を引き起こした（Goeders他、1996）。しかしながら、そのような効果がコカイン強化に特異的であったのか、ラットの反応能力に対する非特異的作用の結果であったのか以前と同様はっきりしなかったので、餌提示とコカイン自己投与の別の交互の多元スケジュールを使って、この時はケトコナゾールでの前処置の後に、この課題に取り組むための追加の実験を実施した。ケトコナゾールは広域活性スペクトルと低毒性を有する経口投与用抗真菌薬であり（Sonino, 1987; Thienpont他、1979）、副腎皮質ステロイドの合成における11β-ヒドロキシル化と18β-ヒドロキシル化段階を阻害する（Engelhardt他、1985）。これらの実験では、毎日２時間のセッションにおいてラットに餌強化とコカイン自己投与への15分間アクセスを交互に施した。ケトコカインでの前処置は、餌強化反応に影響を与えずにコカイン自己投与行動を減少させた。このことは、コルチコステロン合成阻害剤が非特異的運動効果を発生しない用量でコカイン強化を減少させることを示す。
【０００６】
かくして、ベンゾジアゼピン受容体アゴニストとコルチコステロン合成阻害剤がコカイン自己投与を減らすことが証明された。しかしながら、どちらのクラスの薬剤も、コカイン依存の治療に際しての有用性を限定させてしまうような潜在的副作用を有する。例えば、ベンゾジアゼピン系薬剤は、乱用の可能性があり（Chouinard, 2004; Lilja他、2001; O’Brien, 2005）、それらの薬剤の使用が二次的依存症を引き起こしうるという懸念を生じる（Wesson & Smith, 1985）ため、コカイン依存症に対する最適な治療法として一般に推奨されない。コルチコステロン合成阻害剤は、他のものの中でも特に、副腎機能障害を誘起する可能性があり、このためこのクラスの薬剤の有用性を限定させうる。しかしながら、これらの２クラスの薬剤により生じる副作用の発生率は、用量を減らすことによって軽減することができる。具体的には、分岐した（異なる）機序を通してHPA軸活性に作用する薬剤を組み合わせることにより、コカイン摂取行動を削減しながらそれらの潜在的な毒性と望ましくない副作用を最小化することが可能であろう。この理論を、メチラポンとオキサゼパムを併用することにより下記実施例に記載の通りに確かめた。
【発明の概要】
【０００７】
本発明は、一部は、様々な精神神経疾患および関連障害、例えば依存（例えば薬物などの物質への依存、またはギャンブルなどの活動への依存）を治療するためにある特定のタイプの治療薬を併用することができるという発見に基づいている。より詳しくは、本発明によれば、メチラポンとオキサゼパムの併用がヒトに対して安全でかつ十分に耐容性を有することが証明され、従ってヒトにおける物質乱用障害および依存（嗜癖）の安全かつ有効に治療できる強力な可能性を有する。その上、これらの薬剤は、ヒトの摂食障害；抑うつ；破壊的行動障害（例えば注意不足障害および過活動障害（ADHD））；統合失調症；不安（例えば外傷後ストレス障害の状況で経験する不安）；睡眠障害；および／または関連のもしくは結果として生じる状態を治療するために、安全に使用することができる可能性を有する。本発明はまた、肥満や様々な摂食障害を治療するために使用することができる組成物および方法にも関する。この組成物は、ストレスやストレス関連障害（例えば不安）に伴う状態に対して独立的にまたは関連して起こりうる、不眠症の治療または予防に使用することもできる。より詳しくは、それらの状態は、副腎皮質機能亢進、視床下部・下垂体・副腎（HPA）軸内の別の活性と関連するもの（例えば副腎皮質刺激ホルモン(ACTH)の変性調節）または前頭前野皮質および／または交感神経系の過活動として説明することができる。
【０００８】
従って、本発明は、調製することができかつ患者に投与（例えば規定のまたは自己投与）することができる医薬組成物および方法を特徴とする。本明細書に記載の治療薬は、単剤（例えば単一の錠剤、カプセル剤等、これらは持続性放出および徐放性を生じるように薬物設計することができる）に製剤化することができ、そして経口投与することができる。しかしながら、本発明はそれに限定されず、治療薬を組み合わせそして投与するための代表的な選択肢を下記に記載する（例えば液剤を静脈投与することができる）。
【０００９】
正確な処方または形状に関係なく、本発明組成物は、視床下部・下垂体・副腎（HPA）軸を標的とした少なくとも１つの活性成分と、前頭前野皮質を標的とした少なくとも１つの活性成分（例えば前頭前野皮質中のGABAA受容体を標的とすることによる）とを含むことができる。より詳しくは、該組成物はコルチコトロピン放出ホルモン（CRH）を阻害する；副腎皮質刺激ホルモン（ACTH）を阻害する；および／またはコルチゾールを阻害する、少なくとも１つの第一活性薬剤を含むことができる。例えば、この第一剤は、下垂体からのACTHの放出を刺激するCRHの能力を減少させ；副腎からのコルチゾールの放出を刺激するACTHの能力を減少させ；またはコルチゾール合成、分泌もしくは活性を阻害することができる。例えば、本発明組成物は、いずれかの特定の機序により効果を発揮するものに限定されず、コルチゾール活性を阻害する剤は、糖質コルチコイド受容体結合を目当てにコルチゾールと競合作用することにより、そして／または糖質コルチコイド応答要素を介した受容体の活性化、二量化もしくは転写シグナル伝達といった下流の事象を遮断することにより、その効果を果たしてもよい。これらの剤は別のタイプの副腎皮質ステロイド受容体、例えば鉱質コルチコイド受容体に結合する剤、および／または鉱質コルチコイド受容体結合に続いて起こる下流の事象を阻害する剤であってもよい。
【００１０】
当該組成物は、例えば、γ-アミノ酪酸（GABA）の発現または活性を増加させる；GABAを模倣する；前頭前野皮質におけるGABA代謝を抑制する；そして／または他の方法で前頭前野皮質におけるGABAシグナル伝達を刺激することにより、前頭前野皮質を標的とする少なくとも１つの第二の活性薬剤をさらに含むことができる。上述した通り、当該組成物は、例えば徐放性製剤中への薬剤自体の物理的配合によって（例えば混合物としてまたは懸濁液中に）、第一剤と第二剤を含むことができる。別の態様では、該組成物は共通包装によって配合することができる（例えば、所望により該当週の日付および／または該当日の時間を表示するようにマークした、第一活性薬剤を含む錠剤と第二活性薬剤を含む錠剤を１つのブリスター包装において配合することができる）。静脈投与用液剤は、第一剤を含む第一溶液と第二剤を含む第二溶液とを、同時または連続投与の指示書と一緒に、同時に包装することができる。該組成物は、例えば、γ−アミノ酪酸（GABA）の発現または活性を増加させる；GABAを模倣する；前頭前野皮質のGABA代謝を阻害する；そして／または前頭前野皮質におけるGABAシグナル伝達を刺激することにより、前頭前野皮質を標的とする少なくとも１つの第二の活性薬剤をさらに含むことができる。記載した通り、当該組成物は、例えば徐放性製剤において、薬剤それ自体の物理的配合（例えば混合物中または懸濁液中）によって、それらの第一剤と第二剤を含むことができる。別の態様では、該組成物は共通包装によって配合することができる（例えば、所望により該当週の日付および／または該当日の時間を表示するようにマークした、第一の活性薬剤を含む錠剤と第二の活性薬剤を含む錠剤を１つのブリスター包装において配合することができる。静脈投与用液剤は、第一剤を含む第一溶液と第二剤を含む第二溶液とを、同時または連続投与の指示書と一緒に、同時に包装することができる）。静脈投与用液剤は、第一剤を含む第一溶液と第二剤を含む第二溶液とを、同時または連続投与の指示書と一緒に、同時に包装することができる。
【００１１】
特定の態様では、当該組成物は下表中の第一列に列挙した薬剤種の中の１または複数と、第二列に列挙した薬剤種の中の１または複数とを含有することができる。
【００１２】
TABLE-US-00001  第一の活性薬剤  第二の活性薬剤  CRHを阻害する薬剤、HPA軸またはCNSに直接もしくは間接的に作用する剤、前頭前野皮質のGABAを刺激する剤、前頭前野皮質のACTHを阻害する剤、下垂体中のGABAを模倣する剤、コルチゾールを阻害する剤、副腎のGABA代謝を阻害する剤。
【００１３】
それらのタイプの剤の一方または両方を、交感神経系の活性を阻害する剤（例えばβ−遮断薬、例えばプロプラノロール（インデラルInderal（登録商標）〕と組み合わせることができる。「第三」剤として含めることができるβ−遮断薬および他の薬剤（例えば抗不安薬）を下記に記載する。このように、当該組成物または併用薬物療法は、（例えば該受容体に結合しそして該受容体とエピネフリンとの相互作用を阻害することにより）β−アドレナリン作動性受容体を阻害する剤または他の方法で抗高血圧薬もしくは抗不安薬として作用する剤を含むことができる。
【００１４】
特定の態様では、CRHを阻害する剤を、前頭前野皮質でGABAを刺激する剤および交感神経系の活性を阻害する剤と併用することができ；ACTHを阻害する剤を、前頭前野皮質のGABAを刺激する剤および交感神経系の活性を阻害する剤と併用することができ；コルチゾールを阻害する剤を、前頭前野皮質のGABAを刺激する剤および交感神経系の活性を阻害する剤と併用することができ；そして、副腎皮質ステロイド受容体に結合する１もしくは複数の剤を、交感神経系の活性を阻害する剤と併用することができる。それらの例示的態様のいずれにおいても、言及する剤は本明細書中に記載されるものである〔例えば、GABAを刺激する剤は、前頭前野皮質のGABAを直接的にまたは間接的に刺激する剤；前頭前野皮質のGABAを模倣する剤（例えばGABA受容体（例えばGABAA）アゴニスト）；またはGABA代謝を抑制する剤〕であることができる。
【００１５】
GABAは、受容体結合後に抑制されたニューロンを過分極化する抑制性神経伝達物質である。この結合は、直接的にまたは間接的にCl−カリウムチャンネルを開く。代謝調節型受容体が中間体Ｇタンパク質を介してイオンチャンネルを活性化させるＧタンパク質共役受容体であるのに対して、活性化イオンチャンネル型受容体はそれ自体がイオンチャンネルである。どちらのタイプの受容体も、GABAを模倣する作用をすることで前頭前野皮質を標的とする剤によって活性化されうる。別の剤もGABA合成を増加させることにより作用することができる。例えば、合成酵素Ｌ−グルタミン酸デヒドロゲナーゼをコードする核酸、またはそれの生物活性断片もしくは他の変異体を、本明細書に記載の方法から恩恵を受けると思われる患者（例えば依存があると明示された患者または診断された患者）に投与することができる（治療に適している別の患者は本明細書中のどこかに記載される）。
【００１６】
別の態様では、治療組成物は、CRHを阻害する剤；ACTHを阻害する剤；コルチゾールを阻害する（またはアドレノコルチコイド受容体と結合する）剤；前頭前野皮質で直接的にもしくは間接的にGABAを刺激する剤；前頭前野比率のGABAを模倣模倣する剤；GABA代謝を阻害する剤；および交感神経系の活性を抑制する剤、のうちの少なくとも２つまたは３つ（例えば２，３または４つ）の組み合わせであることができる。
【００１７】
文脈中異なって指摘しない限り、「剤」という用語は、臨床的に有用な方法で（例えば、１または複数の条件付け環境刺激（キュー）に患者を暴露した後のHPA軸活性化を抑制するような方法で）、標的分子（例えばリガンド、または該分子が結合する受容体）に作用するかまたは脳もしくは内分泌系の標的領域に作用する、任意の物質を指すために広範囲に用いられる。例えば、メチラポン（メトピロンMetopirone（登録商標））のような化合物を「剤」と呼ぶことができる。用語「化合物」とは、通常の化合物（例えば小さな有機または無機分子）を指すのに用いられる。「剤」は、タンパク質またはタンパク質ベースの分子、例えば変異型リガンドもしくは抗体であってよい。他の有用な剤としては、核酸または核酸ベースの物質、例えばアンチセンスオリゴヌクレオチドまたはRNAiを媒介するRNA分子、およびそれらの送達に用いられるベクターが挙げられる。例えば、CRHをコードするRNAと特異的に相互作用してそれの翻訳を阻害する核酸（例えばsiRNAまたはshRNA）またはCRHに特異的に結合してその活性を変更する（例えば抑制する）抗体を、CRHを阻害する「剤」と呼ぶことができる。CRHは標的とすることができる分子の１つに過ぎず、ACTH、コルチゾールおよびGABAは、CRHに関して本明細書中に記載するタイプの剤のいずれによっても標的とすることができる。本発明に有用な化合物としては、コルチゾール受容体に結合するものが挙げられる。暫定的結果は、依存症動物モデルにおいてコルチコステロンが増加することを示している。
【００１８】
本発明の組成物において有用な剤を下記にさらに記載するが、HPA中のCRHを阻害することのできる剤としては、CRH発現を抑制する剤（例えば核酸）；負のフィードバックループへの関与によってCRH産生または分泌を阻害する剤；CRHに特異的に結合しCRHを阻害する抗体；CRH受容体アンタゴニスト（例えば、CRH受容体に結合してシグナル伝達を阻害するか、またはCRH受容体結合に応答して通常生成される二次メッセンジャーを阻害する働きをするタンパク質（抗体を含む）；CRHまたはCRH受容体の発現、分泌または活性を阻害する化合物（例えば小分子）（例えば下垂体中の同種受容体へのCRHの結合力を抑制する化合物）；およびCRH代謝を亢進する剤が挙げられる。記載の通り、別の剤もACTHを阻害することができる。例えば、本発明の組成物は、ACTH発現を阻害する剤（例えば核酸）；負のフィードバックループにおける関与によってACTH産生または分泌を阻害する剤；ACTHに特異的に結合しACTHを阻害する抗体；ACTH受容体アンタゴニスト（例えばACTH受容体に結合しシグナル伝達を阻害するか、またはACTH受容体結合に応答して一般に生成される二次メッセンジャーを分子内的に阻害する働きをするタンパク質）；ACTHまたはACTH受容体の発現、分泌または活性を阻害する化合物（例えば副腎中の同族受容体へのACTHの結合力を抑制する化合物）；およびACTH代謝を亢進する剤を包含する。
【００１９】
CRHを阻害する剤としては、[Met18, Lys23, Glu27, 29, 40, Ala32, 41, Leu33, 36, 38]CRF9-41であって、α-ヘリックスCRF(9-41)と略記され Asp-Leu-Thr-Phe-His-Leu-Leu-Arg-Glu-Met-Leu-Glu-Met-Ala-Lys-Ala-Glu-Gln-Glu-Ala-Glu-Gln-Ala-Ala-Leu-Asn-Arg-Leu-Leu-Leu-Glu-Glu-Ala（配列番号１）の配列を有する剤、およびそれの生物活性断片または変異体が挙げられる（River他、Science 224:889, 1984）。CRHを阻害する別の剤は、[D-Phe12, Nle21,38, (αMetLeu37)] CRF(12-41)であって、D-Phe CRF12-41と略記される剤、およびそれの生物活性断片または変異体が挙げられる。CRHを阻害する別の剤には、アストレシンAstressin（登録商標）；CP-154,526; NB127914, アンタラルミンAntalarmin（登録商標）；CRA1000；CRA1001およびアンチサウバジン30（Antisauvagine-30）が挙げられる。米国特許第6,326,463号；同第6,323,312号；同第4,594,329号および同第4,605,642号明細書を参照のこと。CRFから幾つかのＮ末端アミノ酸残基を削除するとCRFアンタゴニストを生成することが従来知られており、それらのアンタゴニスト（例えばCRF(8-41), CRF(9-41)およびCRF(10-41)）は本発明の組成物および方法に使用することができる。CRFを阻害する環状ペプチドが米国特許第6,323,312号明細書に記載されており、それを本発明組成物および方法に用いることができる。
【００２０】
ACTHを阻害するために、フィードバック阻害を通してACTHを阻害するかまたはACTH受容体をダウンレギュレートするのに十分な量のACTHを投与することができる。
【００２１】
コルチゾールを阻害する化合物としては、メチラポン、ケトコナゾールおよびアミノグルテチミドが挙げられる。本明細書中に具体的に記載されたものおよび／または当業界で既知である他のものを包含する、有用な化合物および剤は、HPA軸に沿ったいずれかのポイントの所で作用して、コルチゾールの効果を直接的に（例えば標的に結合して抑制することにより）または間接的に（例えばHPA軸に沿って標的から下流で作用する分子を阻害することにより）ダウンレギュレートすることができる。
【００２２】
サブスタンスＰアンタゴニストおよびバソプレシン阻害剤も、HPA軸内の活性を阻害するために本発明の組成物および方法に用いることができる。サブスタンスＰは、ニューロキニン１受容体に結合する11アミノ酸残基の神経ペプチドである。そのアンタゴニストとしては、化学療法誘発性の吐き気に現在適応されているアプレピタントAprepitant（登録商標）、および抗うつ薬でありサブスタンスＰ受容体アンタゴニストであるMK-0869が挙げられる。[D-Arg1,D-Pro2, D-Trp7,9, Leu11]SPはサブスタンスＰアンタゴニストとして静脈投与されている。
【００２３】
内在性カンナビノイドのシグナル伝達を増大する剤もHPA軸の活性を阻害するために用いることができ、本発明の組成物および方法に有用である。それらの剤は、内在性カンナビノイドの発現または活性を刺激することができ、例えば内在性カンナビノイドであるかまたはそれを模倣してもよい（Patel他、Endocrinol. 145:5431-5438, 2004）。本発明は、特定の機序により本明細書中に記載の障害または他の状態に対してプラス効果を発揮する剤に限定されず、内在性カンナビノイドは下垂体後葉からのバソプレシンの放出を阻害することができることに注目すべきである（Tasker, Endocrinol. 145:5429-5430, 2004）。外来性カンナビノイドはHPAを刺激することが示されているが、少なくとも１つのそのような化合物CP55940は、それどころかHPAホルモンのストレス誘発性分泌を減少させうる（Thomas他、J. Pharmacol. Exp. Ther. 285:285-292, 1998）。
【００２４】
前頭前野皮質のGABAを直接的にまたは間接的に刺激する剤は、GABAの合成、放出または活性を直接的にまたは間接的に増加させることによりそれを達成してよい。例えば、GABAと同種受容体との間の相互作用を増強することによって活性が増強されうる。この相互作用を増強するためには様々な方法があり、例えばGABAの濃度を高めること、受容体アゴニストを提供すること、または受容体結合とシグナル伝達の動態を変更することなどが含まれる。ここでGABA濃度は、GABA合成を増強するかまたはGABA代謝を阻害することにより増大させることができる。GABA濃度は、実際には、GABAを模倣する剤の投与によっても増大させることができる。間接的刺激に関しては、前頭前野皮質のドーパミン作動性またはノルアドレナリン作動性を選択的に増大させる任意の剤（例えば抗うつ薬）が、前頭前野皮質のGABAに間接的に作用する（すなわち刺激する）ことができる。ミルタザピンは間接的にGABAを刺激するのに使用できる抗うつ薬の一例である。アトモキセチンは同様に使用できる別のタイプの剤の一例である。ガバペンチン（ニューロンチンNeurontinTM）はGABAの作用を模倣する剤の一例である。間接的刺激薬は、任意のベンゾジアゼピン系〔例えばオキサゼパム（セラックスSerax（登録商標））またはクロルジアゼポキシドまたはアルプラゾラム（キサナクスXanax（登録商標））〕を包含する。他の有用な剤、例えばムシモールやバクロフェンも、それぞれGABAAまたはGABAB受容体を介してGABAを刺激することができる。別のGABAアゴニストまたは模倣薬としては、プロガビド、リルゾール、バクロフェン、ビガバトリン、バルプロ酸（デパコートDepakoteTM）、チアガビン（ガビトリルGabitrilTM）、ラモトリジン（ラミクタールLamictalTM）、フェニトイン（ディランチンDilantinTM）、カルバマゼピン（テグレトールTegretolTM）およびトピラマート（トパマックスTopamaxTM）が挙げられる。
【００２５】
用量は下記に記載するが、本発明の組成物において使用される剤が現在既知であって患者を処置するのに使用されているものである場合、併用療法という状況において要求される少なくとも１つの剤の用量は、現在および典型的に処方されているものの用量よりも低用量であるだろう。例えば、本発明組成物が不安の治療に現在使用されているベンゾジアゼピン系薬を含む場合、依存症の治療のために患者に投与される化合物の量は、医師が不安の治療のために典型的に処方しているよりも低用量であることができる。ある場合には、本発明組成物中の薬剤の両方の用量が、それらの剤の典型的用量よりも低いであろう。本発明の組成物は特定の利点をもつものに限られず、低用量製剤を使用できることにより、それらの剤の一部に関連した副作用の発生や乱用の可能性を削減することができる。患者によって、所定の薬物治療の特定用量に対する感受性がより高い場合や低い場合があることが認識されている。この場合、一般的に言われるように、患者および患者の医療従事者は所望の効果について治療をモニターすることができ、用量をさまざまに調節することができる（例えば徐々に時間をかけて）。
【００２６】
当該組成物中の化合物の量は様々に異なることができる。例えば、患者は規定された間隔で所定の第一剤約１〜1000 mgと所定の第二剤約１〜1000 mgを投与される。第三剤が含められる場合、製剤は１〜1000 mgの第三剤を含み、それが患者に投与される。例えば、患者はある一定時間毎に投与され（例えば約2, 4, 6, 8, 12または24時間毎に）、ある一定日数毎に（例えば１日１回、２日に１回、３日に１回）またはある一定週間毎に（例えば一週間に１回）処置される。例えば、患者は少なくともまたは約５〜1,500 mg（例えば少なくともまたは約5, 10, 25, 50, 100, 200, 250, 300, 400, 450, 500, 550, 600, 650, 700, 750, 800, 850, 900, 1000, 1250または1500 mg）の第一剤と、少なくともまたは約５〜500 mg（例えば少なくともまたは約1, 5, 10, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 100, 200, 250, 300, 400, 450, 500 mg）の第二剤を、１日１回〜４回投与される。そのような処方の下では、患者は少なくともまたは約10〜6000 mgの第一剤（例えば少なくともまたは約25〜1500 mg; 50〜1250 mg; 100〜1250 mg; 100〜1000 mg; 250〜1000 mg; 500〜1000 mg; 750〜1000 mg（例えば約750 mgまたは約1000 mg）の第一剤、例えばメチラポンまたはケトコナゾールが投与される。同一または異なる処方の下で、患者は約５〜100 mg（例えば約５〜50 mg; 約５〜40 mg; 約５〜30 mg; 約５〜20 mg; 約５〜10 mg; 約10〜50 mg; 約10〜40 mg; 約10〜30 mg; 約20〜50 mg; 約20〜40 mg; 約20〜30 mg; 約30〜50 mg; または約30〜40 mg）の第二剤を投与される。上述した通り、第二剤はベンゾジアゼピン系薬、例えばオキサゼパムであることができる。記載した通り、適当な用量を徐放性製剤からゆっくりと送達させることができ、該製剤を毎日または毎週投与することができる。特定の製剤または装置を使用する場合（例えば輸液ポンプ）、投与は患者の治療介入の必要なしに長期間進めることができる。
【００２７】
医薬製剤中の剤の量は同一または異なることができる（例えば、第一剤対第二剤の比が、少なくともまたは約100:1; 90:1, 80:1, 75:1, 70:1; 65:1; 55:1; 50:1, 45:1; 40:1; 35:1; 30:1; 25:1; 20:1; 15:1; 10:1; 9:1; 8:1; 7:1; 6:1; 5:1; 4:1; 3:1; 2:1;または約1:1であることができる）。例えば、組成物は約１当量のオキサゼパム対約25〜50当量のメチラポン；約25〜50当量のケトコナゾール対約１当量のアルプラゾラム；約25〜50当量のケトコナゾール対約１当量のオキサゼパム；約25当量のメチラポン対約１当量のアルプラゾラム；約１当量のムシモール対約25〜50当量のCP-154,526；または約１当量のムシモール対約25〜50当量のメチラポンを含有することができる。当量は重量（例えばミリグラム）単位であることができる。しかしながら、上記比率は、第二剤の量が第一剤の量を超えるように（例えば記載した変動範囲により）自由に異なってよい。活性成分の相対量は百分率で表すこともできる。例えば、互いに相対して、第二剤の量は第二剤の量の少なくともまたは約１〜99％であることができる。交感神経系を抑制するため第三剤が含められる場合、その剤の相対量は第一剤と第二剤に関して異なることができる。例えば、互いに相対して、第三剤の量は第一剤または第二剤の量の少なくともまたは約１〜99％であることができる。第三剤を組成物中に包める場合および／または治療計画に用いる場合、第三剤の非存在下での効能について予測されるよりもまたは必要とされるよりも低い量で、第一剤および／または第二剤のいずれかの使用が可能であろう。
【００２８】
後述する医薬組成物は、担体や保存剤といった標準成分を含むことができる。該組成物は活性成分の溶解度を高めるための物質（例えばポリエチレングリコール）を含むこともできる。典型的には、活性成分は全組成物の中の少量の割合を占めるだろう。例えば、第一、第二および／または第三剤は医薬組成物の約１〜50％（例えば医薬組成物の約１〜40％；１〜30％；１〜20％；１〜10％；２〜40％；２〜30％；２〜20％；２〜10％；２〜５％；３〜40％；３〜30％；３〜20％；３〜10％；３〜５％；４〜40％；４〜30％；４〜20％；４〜10％；４〜５％；１〜２％；１〜３％；１〜４％；２〜４％；２〜３％または３〜４％）であることができる。
【００２９】
剤が患者の神経系または内分泌系中の一領域を「標的とする」とき、その剤は患者に有益性を与えるような形でその領域内の細胞の活性に作用する。例えば、患者がある物質または行為への依存があるとき、その物質または行為への患者の関与行為を減らすことができる。例えば、患者は、無治療の場合に予測されるよりもより低い程度にまたは治療前よりも低い程度に、またはより低い頻度で、その物質を使用するかまたはその行為を行うであろう。従って、上記の有益性は、条件付け環境刺激（キュー）の存在下であっても、再燃（relapse）のリスクの減弱として特徴づけられる。臨床的有益性は、患者がある物質または行為への渇望の低減を報告できるという点で主観的でありうる。ゆえに、本発明の化合物および方法は、無治療の場合に予測されるよりも長い離脱または離脱期間を促進するために使用することができる。検出できる改善を得ることは、本発明組成物および方法による依存の「治療」の構成要素となる；完全な回復が成立してもよいが、治療の構成要素となるのに要求はされない。別の適応に関しても同じことが当てはまる。例えば、不安関連障害；摂食障害、睡眠障害、統合失調症、または更年期の不快症状における検出できる改善が治療の構成要素となる。いずれかの困難の完全な消失は要求されない。
【００３０】
治療の過程で発生する何らかの事象が解明されている場合、本発明の組成物は特定の細胞機序に影響を及ぼすことにより作用するものに限定されない。１つの仮説は、依存症に関して、望ましくない行動（例えば常習行為）への再燃を誘発する刺激（キュー）が、前頭前野皮質のニューロン活動に作用するHPA軸の条件付け活性化を通してそのような行動（または行動への欲求）を発生させるというものである。より詳しくは、HPA軸の条件付け活性化が、コルチコトロピン放出ホルモン（CRH）、副腎皮質刺激ホルモン（ACTH）およびコルチゾール（ラットの場合コルチコステロン）の分泌を増大させ、続いて、それらのホルモンが、報酬、判断および再発する傾向に関連する他の行動に関与する脳領域である前頭前野皮質（ラットでは中心前頭前野皮質）における活性に作用する。依存症を治療するために投与する時、本明細書に記載の併用療法はHPA軸および／または前頭前野皮質中の活性を減少させることにより再燃の可能性を減らすと考えられる。これは、ある物質または望ましくない行為への依存に関連する渇望を惹起させるには低すぎるレベルにまで、CRH、ACTHおよび／またはコルチゾールの刺激（キュー）誘発性分泌を減弱させる。それらのホルモン（CRH、ACTHおよびコルチゾール）が前頭前野皮質の活性に作用すると、続いて前頭前野の活動も同様に減衰し、本発明組成物の第二剤がその減衰を亢進することができる。
【００３１】
上述した通り、本発明組成物の活性成分は単一製剤（単剤）にまたはそれらの包装によって一緒にする（配合する）ことができる。従って、本発明は、単一製剤および／または二成分包装製剤をそれらの説明書と一緒に含むキットに関する。例えば、該組成物は、単一の錠剤もしくはカプセル剤の中に一緒に配合するかまたは複数錠剤に分割することができ、そして所望によりそれを服用すべき日の日付または時間を示すようにマークしたブリスター包装の中に収容することができる。
【００３２】
上述した通り、当該組成物は、様々な化合物または活動への依存を治療するために（すなわち物質乱用を治療するために）用いることができる。例えば、当該組成物は、興奮剤（例えばコカイン、アンフェタミン、メタンフェタミン、メチルフェニデートおよび関連興奮剤）、鎮静剤（例えばヘロイン、コデイン、ヒドロコドンおよび関連オピオイド薬）、ニコチン、アルコール、処方薬（例えばペルコダンPercodan（登録商標）またはパーコセットPercocet（登録商標）のような疼痛処置のために処方された医薬）、および天然の植物由来薬剤（例えばマリファナ、タバコ、およびその中に含まれる依存性薬剤）への依存を治療するために用いることができる。メタドン処置されている患者も、本発明組成物での治療のための候補である。本発明組成物は、そのような患者がメタドン使用を減らし断薬するのを助けるだろう。該患者はギャンブル、セックスまたは食物への依存症を罹患していてもよい。それらの各障害では、条件付刺激が再発を誘発または持続させると思われる。
【００３３】
あるいは、またはそれに加えて、本明細書に記載の組成物は、HPA軸活動および前頭前野に関連する別の精神神経疾患を治療するために用いることができる。そのような障害は、不安（パニック障害に関連する不安を含むがそれに限定されない）、強迫性障害（OCD）、外傷後ストレス障害（PTSD）、社会不安障害、全般性不安障害および肥満を包含する。うつ病と診断された患者も治療することができる。それらのうつ病は、必ずしもそうとは言えないが、大うつ病性障害、気分変調、双極性うつ病、健康状態に関連したうつ病、物質乱用に関連したうつ病に関連付けることができる。
【００３４】
治療に適している他の状態としては肥満および様々な摂食障害、例えばプラダーウイリ症候群（Prader Willi Syndrome）が挙げられる。治療に適する別の患者には、統合失調症を罹患している者；破壊行動障害を有する者（例えば注意力欠如障害(ADD)またはADHD）；更年期を経験している者；月経周期関連症候群（例えばPMS）を患っている者が含まれる。治療に適する他の状態は不眠症および様々な睡眠障害である。
【００３５】
本発明の１または複数の態様の詳細は、添付の図面と下記の説明に示される。本発明の別の特徴、目的および利点は、明細書と図面並びに請求の範囲から明白であろう。
【図面の簡単な説明】
【００３６】
【図１Ａ】図１Ａおよび１Ｂは、ラットにおける静脈コカイン自己投与に対するメチラポンとオキサゼパムの併用の効果を表す棒グラフである。コカイン注入の数が図１Ａにプロットされ、そしてベースラインの百分率として表された注入数が図１Ｂにプロットされる。
【図１Ｂ】図１Ａおよび１Ｂは、ラットにおける静脈コカイン自己投与に対するメチラポンとオキサゼパムの併用の効果を表す棒グラフである。コカイン注入の数が図１Ａにプロットされ、そしてベースラインの百分率として表された注入数が図１Ｂにプロットされる。
【図２Ａ】図２Ａおよび２Ｂは、ラットにおける３用量のコカインの静脈自己投与に対するメチラポンとオキサゼパムの併用の効果を表す棒グラフである。セッション毎の注入数が図１Ａにプロットされ、そしてベースラインの百分率として表された同結果が図２Ｂにプロットされる。
【図２Ｂ】図２Ａおよび２Ｂは、ラットにおける３用量のコカインの静脈自己投与に対するメチラポンとオキサゼパムの併用の効果を表す棒グラフである。セッション毎の注入数が図１Ａにプロットされ、そしてベースラインの百分率として表された同結果が図２Ｂにプロットされる。
【図３】図３は、ラットにおける静脈コカイン自己投与に対するケトコナゾールとアルプラゾラムの併用の効果を表す棒グラフである。注入数がプロットされる。
【図４】図４は、ラットにおける３用量のコカインの静脈自己投与に対するケトコナゾールとアルプラゾラムの併用の効果を表す棒グラフである。
【図５】図５は、ラットにおけるコカインの静脈自己投与に対するケトコナゾールとオキサゼパムの併用の効果を表す棒グラフである。注入数がベースラインの百分率として表される。
【図６】図６は、ラットにおける静脈コカイン自己投与に対するCP-154,526とオキサゼパムの併用の効果を表す棒グラフである。注入がベースラインの百分率として表される。
【図７】図７は、ラットにおける静脈コカイン自己投与に対するメチラポンとアルプラゾラムの併用の効果を表す棒グラフである。注入がベースラインの百分率としてプロットされる。
【図８】図８は、ラットにおける静脈コカイン自己投与に対するムシモールとCP-154,526の併用の効果を表す棒グラフである。注入数がベースラインの百分率としてプロットされる。
【図９】図９は、ラットにおける静脈コカイン自己投与に対するムシモールとメチラポンの併用の効果を表す棒グラフである。注入数がベースラインの百分率としてプロットされる。
【図１０】図１０は、ラットにおける消滅したコカイン探索行動の刺激誘発性再燃に対するメチラポンとオキサゼパムの併用の効果を表す棒グラフである。
【図１１】図１１は、ラットにおける消滅したコカイン探索行動の刺激誘発性再燃に対するメチラポンの慢性注入の効果を表す棒グラフである。
【図１２】図１２は、ラットにおける消滅したコカイン探索行動の刺激誘発性再燃に対するCP-154,526とオキサゼパムの併用の効果を表す棒グラフである。
【図１３】図１３は、メチラポンの合成経路を表す略図である。
【図１４】図１４は、コカイン、メチラポンおよびオキサゼパムの薬物動態分析の試験条件と結果を要約した表である。
【００３７】
表１は、物質乱用障害のための有効治療としてのメチラポンとオキサゼパムの合剤の安全性と薬物動態の第１相単回投与および複数回漸増投与試験のための計画とデモグラフィックを示す表である。
表２は、物質乱用障害のための有効治療としてのメチラポンとオキサゼパムの合剤の安全性と薬物動態の第１相単回投与および複数回漸増投与試験の安全性（忍容性）結果を示す表である。
表３は、物質乱用障害のための有効治療としてのメチラポンとオキサゼパムの合剤の安全性と薬物動態の第１相単回投与および複数回漸増投与試験のHPA検査結果、徴候および症状を示す表である。
表４は、物質乱用障害のための有効治療としてのメチラポンとオキサゼパムの合剤の安全性と薬物動態の第１相単回投与および複数回漸増投与試験の薬物動態結果を示す表である。
【発明を実施するための形態】
【００３８】
発明の詳細な説明
本明細書に記載の組成物および方法は、依存症、他の精神神経障害および非依存または関連状態の治療用の薬剤を包含する。該製剤中に含まれる１または複数の剤は、現在使われているが中の説明書（指示書）に現在処方されない剤であることができる。例えば、メチラポンは副腎の機能障害を診断するために一般に使用され、そしてオキサゼパムは不安や関連障害を治療するために用いられるベンゾジアゼピン系薬である。それらの薬剤はともに、ストレスおよびそれに続くHPA軸の活性化に関連する生理学症状に作用する。あるいは、本明細書に記載の教示に従って１以上の薬剤を新たに作ることができる。例えば、１または複数の標的の配列〔Let, CRH, ACTH, GABA受容体（例えば、本明細書に記載の任意の「第二」剤により標的することができる、GABAAまたはGABAA受容体複合体の一成分）またはβアドレナリン作動性受容体〕が発見されれば、RNAiを媒介するアンチセンスオリゴヌクレオチドまたはRNA分子を製造することができる。それらの標的の配列は、当業界の者には既知であるかまたは容易に入手可能であり、アンチセンスオリゴヌクレオチドおよびRNA分子の製造方法と同様である。すでに入手可能かまたは新たに製造されるかいずれにせよ、別の有用な剤としては、本明細書中に同定されるリガンド（例えばCRH, ACTHまたはGABA）にまたは条件付環境刺激に応答して活性化される受容体（例えばCRH、ACTH、コルチゾールまたはGABAの受容体）に特異的に結合する抗体が挙げられる。交感神経系の活動を抑制するために薬剤を使用する場合、それは化合物、例えば本明細書中に与えられるもの、または別のタイプの剤であることができる。例えば、βアドレナリン作動性受容体またはそれらの受容体に特異的に結合し拮抗作用する抗体の発現を阻害するための核酸または核酸ベースの剤を投与することができる。特異的に結合すると、そのような抗体は、結合した物質のアゴニストまたはアンタゴニストとして作用することができる。例えば、CRHに特異的に結合する抗体はCRHアンタゴニストとして作用することができ；GABA受容体に特異的に結合する抗体はGABA受容体アゴニストとして作用することができ；βアドレナリン作動性受容体に特異的に結合する抗体はアドレナリンアンタゴニストとして作用することができ；糖質コルチコイド受容体に特異的に結合する抗体はコルチゾールを阻害するアンタゴニストとして作用することができる等々である。
【００３９】
以前の臨床試験はHPA軸が薬物依存に重要な役割を果たすことを立証した（Goeders, Psychoneuroendocrinology 22:237, 1997; Goeders, J. Pharmacol. Exp. Ther. 301: 785-789, 2002; Goeders, Psychoneuroendocrinology 27:13-33, 2002; Goeders, Eur. Neuropsychopharmacology 3:435-441, 2003）。そして現在、ある種の薬剤の併用（例えばメチラポンとオキサゼパムの合剤）が依存症を治療するのに有効であることを示すデータがある（コカイン報酬行動を減らすことにより証明されたように）。従って、本発明は、併用治療薬〔例えば神経系および／または内分泌系の領域（例えばHPA軸および交感神経系）を標的とする２または３つの剤の合剤〕、およびそれらの剤により患者を治療する方法（例えば「第一」と「第二」剤、または「第一」と「第三」剤により）を特徴とする。
【００４０】
患者が依存する物質または行為に関係なく、依存の程度は異なることができ；それは多かれ少なかれ日常生活の出来事に参加するまたは対処する患者の能力に影響を与えうる。そしてそれは異なる頻度で再発することがある（例えば、患者はまれな再燃、かなり規則的なおよび／または頻繁な再燃を経験することがある）。
【００４１】
前記剤はさまざまな方法で分類することができ、本発明の組成物は同一または異なるタイプの２以上の剤を含むことができる。例えば、前記剤は、化合物として（例えばメチラポンおよびトピラメート）；タンパク質またはタンパク質ベースの分子、例えば変異型リガンド（例えばそれの同族受容体に結合するがそれを活性化しないまたは完全には活性化しないリガンド）として；抗体として；核酸または核酸ベースの物質として、例えばアンチセンスオリゴヌクレオチドとしてまたはRNAiを媒介するRNA分子として分類することができる。よって、本発明の組成物は、２以上の化合物；２以上の別個のタンパク質またはタンパク質ベースの実体；２以上の別個の核酸または核酸ベースの実体を含むことができる。同様に、患者を治療する方法は、２以上の化合物；２以上の別個のタンパク質またはタンパク質ベースの分子；２以上の別個の核酸または核酸ベースの物質；またはそれらの様々なタイプの剤の任意の組み合わせ（例えばタンパク質と核酸）の投与を含むことができる。
【００４２】
HPA軸を標的とする剤と前頭前野皮質を標的とする剤の一方または両方を、交感神経系の活性を抑制する剤と併用することができる。それらのタイプの剤の一方または両方をβ遮断薬（その例は下記に与える）または別のタイプの抗高血圧薬および／または抗不安薬（例えばカンデサルタンのようなアンギオテンシンII阻害剤）と併用することができる。第三剤（すなわちHPA軸を標的とする剤および／または前頭前野皮質を標的とする剤に追加して用いられる剤）は、SSRI（選択的セロトニン再取り込み阻害薬）クラスの任意の剤をはじめとする抗うつ薬であることもできる。
【００４３】
有用な化合物：HPA軸を標的とするのに有用な剤としてはメチラポンとケトコナゾールが挙げられる。メチラポンは副腎皮質ステロイドの合成過程の中の11β−ヒドロキシル化段階を阻害することにより、コルチコステロン合成を阻害する（Sonino, hi: Agarwal編、Hormone antagonists, Walter de Gruyter, Berlin, 421-429頁, 1982; Haleem他、Brain Res. 458, 339-347, 1988; Haynes, Gilman他編、The Pharmacological Basis of Therapeutics, 第８版, Pergamon Press, New York, 1431-1462頁, 1990）。
【００４４】
メチラポンは市販されており、委託製造業者（例えば医薬品業務会社）により合成することができる。１つの方策としては、出発物質を紫外光に暴露するという二段階法においてメチラポンを合成することができる（例えば図１３に図示した合成経路を参照のこと）。
【００４５】
メチラポン投与の効果は、血漿コルチコステロン濃度を測定することにより評価することができる。コルチコステロン合成阻害剤であるメチラポンとケトコナゾールのコカイン自己投与に対する効果も検討した（下記参照）。メチラポンでの前処置は、血漿コルチコステロンと継続中のコカイン自己投与の両方に対して有意な用量依存的低下をもたらした。このことは、コルチコステロンがコカイン報酬系に関係していることを示唆する（Goeders他、Brain Res. 722:145-152, 1996も参照のこと）。
【００４６】
ケトコナゾールは、真菌性疾患の治療に用いられる幅広い活性スペクトルと低毒性を有する経口抗真菌薬である（Sonino, Agarwal編、Hormone Antagonists, Walter de Gruyter, Berlin, 421-429頁, 1982; Thienpont他, Experientia 35:606-607, 1979）。この薬剤も副腎皮質ステロイドの合成過程の中の11β−ヒドロキシル化と18−ヒドロキシル化段階を阻害し（Engelhardt他、Klin. Wochenschr. 63:607-612, 1985）、糖質コルチコイド受容体アンタゴニストとしても機能することができる（Loose他、J. Clin. Invest. 72:404-408, 1983）。さらに、臨床試験において、ケトコナゾール（メチラポンも同様）が標準的抗うつ療法に抵抗性である副腎皮質機能亢進性うつ病の治療に有効であることが示唆されている（Ghadirian他、Biol. Psychiatry 37:369-375, 1995; Murphy他、J. Clin. Psychopharmacol. 11:121-126, 1991; Wolkowitz他、Am. J. Psychiatry 150: 810-812, 1993）。
【００４７】
CRHを阻害する剤としては、[Met18, Lys23, Glu27,29,40, Ala32,41, Leu33,36,38]CRF9-41〔これはαヘリックスCRF(9-41)と略記され、配列Asp-Leu-Thr-Phe-His-Leu-Leu-Arg-Glu-Met-Leu-Glu-Met-Ala-Lys-Ala-Glu-Gln-Glu-Ala-Glu-Gln-Ala-Ala-Leu-Asn-Arg-Leu-Leu-Leu-Glu-Glu-Ala（配列番号１）を有する〕、およびそれの生物活性断片または変異体が挙げられる（Rivier他、Science 224:889, 1984）。CRHを阻害する別の剤は、[D-Phe12, Nle21,38,(αMeLeu37)] CRF(12-41)〔これはD-Phe CRF12-41と略記される〕およびそれの生物学的活性断片または変異体である。CRHを阻害する別の剤としては、アストレシンAstressin（登録商標）；CP-154,526；NB127914；アンタランニンAntalannin（登録商標）；CRA1000；CRA1001；およびアンチサウバシン-30 Antisauvagine-30が挙げられる。米国特許第6,326,463号；同第6,323,312号および同第4,594,329号明細書も参照されたい。
【００４８】
ACTHを阻害するために、フィードバック阻害を通してACTHを阻害するかまたはACTH受容体をダウンレギュレートするのに十分な量のACTHを投与することができる。化合物は、例えばラット下垂体前葉細胞を使った細胞培養アッセイをはじめとする様々な方法で、ACTHに作用する能力について試験することができる（Endocrinol. 91:562, 1972）。
【００４９】
HPA軸内の活性を阻害する剤には、サブスタンスＰアンタゴニスト（例えば[D-Arg1, D-Pro2, D-Trp7,9, Leu11]SP）およびバソプレシンアンタゴニストも含まれる。
【００５０】
上述したように、メチラポン、ケトコナゾールまたはHPA軸を阻害する別の剤に加えて、本発明の治療薬は、GABAを標的することによって前頭前野皮質を標的する１または複数の剤を含むことができる。ベンゾジアゼピン系薬（例えばオキサゼパム）はその点で有用な薬剤の１クラスである。ベンゾジアゼピン系薬は、不安の薬理学的管理のための最も広範に処方されている医薬に属する（Baldessarini, Hardman他編、Goodman & Gilman’s The Pharmacological Basis of Therapeutics, McGraw-Hill, New York, 399-430頁, 1996）。コカイン離脱に関連する主症状には、重度の不安、情緒不安および動揺がしばしば伴う（Crowley, Fisher他編、Cocaine: Clinical and Biobehavioral Aspects, Oxford University Press, New York, 193-211, 1987; Gawin & Ellinwood, Ann. Rev. Med. 40:149-161, 1989; Tarr & Macklin, Pediatric Clinics of North America 34:319-331, 1987）ので、離脱の初期に起こるそれらの不快な症状を緩和するのにベンゾジアゼピン系薬は有用であり、本明細書に記載の併用療法に組み込まれるベンゾジアゼピン系薬は、依存という面からも別の事象（例えば別の神経精神病学的事象、更年期症状、またはPMS）に関連してでも、それらの症状や類似症状を発現する患者を治療するのに用いることができる。急性過剰摂取後にしばしばけいれん発作が現れるので、それらの薬剤はコカイン中毒に伴う何らかの医学的合併症の治療のための緊急治療室においても有用である。そのような発作は静注ジアゼパム（バリウムValium（登録商標））で効果的に治療することができる（Gay, J. Psychoactive Drugs 13:297-318, 1981; Tarr & Macklin, Pediatric Clinics of North America 34:319-331, 1987）ので、ジアゼパムは本明細書に記載の併用療法において用いることができる。ベンゾジアゼピン受容体発現は、当業界で既知の方法を使って評価することができる。例えば、受容体を[3H]PK11195で標識することができる（Javaid他、Biol. Psychiatry 36:44-50, 1994; Chesley他、J. Clin. Psychiatry 51:404-406, 1990も参照のこと）。後述するデータは、ベンゾジアゼピン系薬がラットにおけるコカイン強化の或る局面を媒介することを更に示唆する。
【００５１】
有用なベンゾジアゼピン系薬または前頭前野皮質を標的とする剤としては、前述したようなオキサゼパム、並びにクロルジアゼポキシド、ミルタザピン、アトモキセチン、ガバペンチン（ニューロンチンNeurontinTM）、ムシモール、プロガビド、リルゾール、バクロフェン、ビガバトリン、バルプロ酸（デパコートDepakote（登録商標））、チアガビン（ガビトリルGabitrilTM）、ラモトリギン（ラミクタールLamictalTM）、フェニトイン（ディランチンDilantinTM）、カルバマゼピン（テグレトールTegretolTM）、およびトピラメート（トパマックスTopamaxTM）が挙げられる。
【００５２】
別の有用なベンゾジアゼピン系薬としては、ロラゼパム（アチバンAtivan（登録商標））、プラゼパム（セントラックスCentrax（登録商標））、フルラゼパム（ダルマンDalmane（登録商標））、クロナゼパム（クロノピンKlonopin（登録商標））、クロルジアゼポキシド（リブリウムLibrium（登録商標））、ハラゼパム（パキシパムPaxipam（登録商標））、テメゼパム（レストリルRestoril（登録商標））、クロルアザペート（トランキセンTranxene（登録商標））、ジアゼパム（バリウムValium（登録商標））およびアルプラゾラム（キサナックスXanax（登録商標））が挙げられる。
【００５３】
交感神経系の活性を阻害する剤が含められる場合、その剤はβ遮断薬または別のタイプの抗高血圧薬であることができる。より詳しくは、その剤はソタロール（ベタパスBetapace（登録商標））、イモロール（ブロカドレンBlocadren（登録商標））、カルテオロール（カルトロールCartrol（登録商標））、カルベジロール（コレグCoreg（登録商標））、ナドロール（コルガードCorgard（登録商標））、ナドール／ベンドロフルアザイド（コルザイドCorzide（登録商標））、プロプラノロール（インデラルInderal（登録商標））、プロプラノロール／HCTZ（インデリドInderide（登録商標））、ベタキソロール（ケルロンKerlone（登録商標））、ペンブトロール（レバトールLevatol（登録商標））、メトプロロール（ロプレッサーLopressor（登録商標））、ラベタロール（ノルモダインNormodyne（登録商標））、アセブトロール（セクトラールSectral（登録商標））、アテノロール／HCTZ（テノレチックTenoretic（登録商標））、アテノロール（テノーミンTenormin（登録商標））、チモロール／HCTZ（チモリドTimolide（登録商標））、メトプロロール（トプロールToprol（登録商標））、ラベタロール（トランデートTrandate（登録商標））、ピンドロール（ビスケンVisken（登録商標））、ビソプロロール（ゼベタZebeta（登録商標））、ビソプロロール／HCTZ（ジアックZiac（登録商標））、エスモロール（ブレビブロックBrevibloc（登録商標））、またはそれらの組み合わせであることができる。
【００５４】
代わりにまたはそれに加えて、交感神経系の活性を阻害する剤が含められる場合、それはSSRIであることができる。本発明組成物および方法において用いることができる任意の現在入手可能なSSRIまたはそれの合剤としては、シタロプラム（セレキサCelexa（登録商標））、エスシタロプラムシュウ酸塩（レクサプロLexapro（登録商標））、フルボキサミン（ルボックスLuvox（登録商標））、パロキセチン（パキシルPaxil（登録商標））、フルオキセチン（プロザックProzac（登録商標））およびセルトラリン（ゾロフトZoloft（登録商標））が挙げられる。
【００５５】
交感神経系を標的としそして抗不安薬として分類されうる別の有用な剤は、アンギオテンシンII阻害薬であり、そのような剤にはカンダサルタン（アタカンドAtacand（登録商標））、エプロサルタン（テベテンTeveten（登録商標））、イルベサルタン（アバプロAvapro（登録商標））、ロサルタン（コザールCozaar（登録商標））、テルミサルタン（ミカルディスMicardis（登録商標））またはバルサルタン（ディオバンDiovan（登録商標））が含まれる。
【００５６】
ベンゾジアゼピン系薬は抗不安薬であり、それらは前頭前野皮質を標的とする剤および／または交感神経系を抑制する剤のいずれかとして本発明組成物中に含めることができる。
【００５７】
本発明は、結晶として提供されるかまたはナノ結晶として粉砕され安定化されるか、または非晶質形であるかいずれにせよ、本発明化合物（すなわち、併用について本明細書中に一般的にまたは具体的に示唆される任意の化合物）のいずれかの医薬上許容される塩、溶媒和物または水和物、プロドラッグ、代謝産物、構造類似体、多形体、並びに他の医薬上有用なその変異体に関する。それらの他の変異体は、例えば、化合物（例えばメチラポン）と、後述するような標的指向成分または検出可能マーカーとを含有する複合体であることができる（例えば化合物を蛍光化合物と結合させてもよく、または化合物に放射性同位体を組み込んでもよい）。プロドラッグの形であるとき、化合物は患者にまたは培養液中の細胞に投与された後に生体内で（例えば細胞内的に）改変されてもよい。改変された化合物（すなわち体内処理されたプロドラッグ）は、本明細書に記載の化合物と同一であり、そして生体内で活性であるかまたは臨床的有益性があるのに十分な位の活性を有するであろう。代謝産物にも同じことが当てはまり；ある特定の化合物は細胞内で改変されるが、臨床的に有用であるのに十分なほどの生物活性を依然保持しているであろう。
【００５８】
核酸ベースの治療薬：本明細書に記載の状態を治療するのに有用な治療薬は核酸であることもできる。それらの核酸は、CRH、ACTHまたはコルチゾールの発現を直接的にまたは間接的に阻害することによってHPA軸を標的とする第一剤として働くことができ、そしてGABAを増大させることによって前頭前野皮質を標的とする第二剤として働くこともできる。第一剤と第二剤の一方または両方が、交感神経系を抑制する第三剤と組み合わせて使用される場合、その「第三」剤は、交感神経系内の神経伝達物質またはそれの同族受容体の発現を抑制する核酸であることができる（例えば、該核酸がβアドレナリン作動性受容体の発現を抑制することができる）。
【００５９】
当該核酸は「単離」または「精製」されたものであることができる（すなわち、該核酸が生体内で生来結合している隣接核酸配列または細胞成分の一部もしくは全部ともはや結合していない）。例えば、該核酸がかつて生来結合していた細胞、組織または生物体に関して、治療薬として有用な核酸配列は少なくとも50％の純度（例えば60％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、98％または99％の純度）であることができる。天然のまたは改変された核酸配列（例えばcDNA）が投与される場合、それは天然の遺伝子に結合した５′または３′非コード配列の一部または全部を含んでもよい。例えば、単離された核酸（DNAまたはRNA）は、コード配列（例えばmRNAに転写されるDNA配列、またはmRNA中のプロモーターもしくはエンハンサーとなるRNA配列）に隣接する５′または３′非コード配列の一部もしくは全部を含むことができる。例えば、単離された核酸は、該核酸が天然に存在している細胞中の核酸分子に生来隣接している５′および／または３′配列の約5 kb未満（例えば約4 kb, 3 kb, 2 kb, 1 kb, 0.5 kbまたは0.1 kb未満）を含むことができる。核酸がRNAまたはmRNAである場合、それが細胞内で生来結合している細胞成分を実質的に含有せず、かつ細胞を培養した場合は該細胞を培養した培地と細胞成分を実質的に含有しない時（例えばRNAまたはmRNAが他の細胞成分または培地の約20％、10％、５％、１％またはそれ未満を含む形である時）、天然源（例えば組織）または細胞培養物から「単離」または「精製」されている。化学的に合成される場合、核酸（DNAまたはRNA）がそれの合成に用いられる化学物質前駆体または他の化学物質を実質的に含有しない時、「単離」または「精製」されている（例えば核酸が化学物質前駆体または他の化学物質の約20％、10％、５％、１％またはそれ未満を含む形である時）。
【００６０】
本明細書に記載の組成物と方法において有用な核酸は、二本鎖または一本鎖であることができ、従ってセンス鎖、アンチセンス鎖、またはセンスもしくはアンチセンス鎖のいずれかの一部分（すなわち断片）であることができる。核酸は、標準的なヌクレオチドを使って、あるいは相補的配列と対合するまたはヌクレアーゼに抵抗する核酸の能力を変更しうるヌクレオチド類似体もしくは誘導体（例えばイノシン、ホスホロチオエートまたはアクリジン置換ヌクレオチド）を使って合成することができる。核酸の安定性または溶解性は、例えば核酸の塩基成分、糖成分またはリン酸エステル結合骨格を修飾することにより改変する（例えば向上させる）ことができる。例えば、本発明の核酸はToulmeにより教示されたように（Nature Biotech. 19:17, 2001）改変することができ、そして核酸のデオキシリボースリン酸エステル結合骨格を改変してペプチド核酸を作製することができる（PNAs；Hyrup他、Bioorganic & Medicinal Chemistry 4:5-23, 1996）。
【００６１】
PNAは核酸「模倣薬」であり；これは分子の天然型骨格が偽ペプチド骨格により置き換えられ、４つのヌクレオチド塩基だけが保持されている。これは低イオン強度条件下でのDNAまたはRNAへの特異的ハイブリダイゼーションを可能にする。PNAは、例えばHyrup他（前掲）およびPerry-O’Keefe他（Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93:14670-675）により記載されたような標準的固相ペプチド合成プロトコルを使って合成することができる。本明細書に記載の核酸のPNAを治療および診断用途に用いることができる。例えば、転写もしくは翻訳の停止を誘導するかまたは複製を阻害することによる遺伝子発現の配列特異的調節のためのアンチセンスまたはアンチジーン薬として、PNAを用いることができる。
【００６２】
当該核酸は患者への投与前にベクター（例えば自己複製性プラスミドまたはウイルス）中に組み込むことができ、そのようなベクターは本発明の範囲内である。本発明は、本発明の核酸をセンス方向またはアンチセンス方向にて含有する遺伝子構成物（例えばプラスミド、コスミド、および核酸を輸送する他のベクター）も包含する。核酸は、該核酸の発現を促進する調節配列（例えばプロモーター、エンハンサーまたは他の発現制御配列、例えばポリアデニル化シグナル）に作用可能に連結させることができる。ベクターは自己複製することができるかまたは宿主ゲノム中に組み込むことができ、例えば複製欠損レトロウイルス、アデノウイルスまたはアデノ関連ウイルスのようなウイルスベクターであることができる。加えて、調節配列は、存在する場合には核酸の構成的または組織特異的発現を指令することができる。
【００６３】
核酸はアンチセンスオリゴヌクレオチドであることもできる。標的とされる配列のコード鎖に対して「アンチセンス」である場合、それらは必ずしもコード配列に結合しなくてよく、それらは非コード領域（例えば５′または３′非翻訳領域）に結合することもできる。例えば、アンチセンスオリゴヌクレオチドは、mRNAの翻訳開始部位を取り囲む領域（例えば着目の標的遺伝子の−10〜＋10領域またはポリアデニル化シグナルの中のもしくは周囲の−10〜＋10領域）に相補的であることができる。さらに、調節領域（例えばプロモーターおよび／またはエンハンサー）に相補的なヌクレオチド配列を標的とし、標的細胞中の該遺伝子の転写を防止する三重らせん構造を形成させることにより、遺伝子発現を抑制することができる（一般的に、Helene, Anticancer Bioassays Drug Des. 6:569-84, 191; Helene, Ann. N.Y. Acad. Sci. 660:27-36, 1992; およびMaher, 14:807-15, 1992参照）。この方法で上手く標的指向できる配列は、いわゆる「スイッチバック」核酸を構築することにより増幅される。スイッチバック分子は、それらが二本鎖のうちの第一鎖と塩基対合し、次いで第二鎖と塩基対合して、二本鎖の第一鎖上のプリンもしくはピリミジン塩基の相当な長さの領域の必要性を排除するように、５′−３′方向と３′−５′方向の交互方式において合成される。
【００６４】
９〜10ヌクレオチド（例えば12〜14、15〜17、18〜20、21〜23、または24〜27ヌクレオチド；siRNAは典型的には21ヌクレオチドを有する）ほどの小さい断片が有用であり、本発明の範囲内に含まれる。
【００６５】
別の態様では、アンチセンス核酸はアノマー核酸であることができ、これは通常のｂユニットとは異なり、二本鎖が互いに平行に走っているように、相補的RNAと特異的二本鎖ハイブリッドを形成する（Gaultier他、Nucleic Acids Res. 15:6625-6641, 1987; Tanaka他、Nucl. Acids Res. 22:3069-3074, 1994も参照のこと）。あるいは、アンチセンス核酸は２′−Ｏ−メチルリボヌクレオチド（Inoue他、Nucleic Acids Res. 15:6131-6148, 1987）またはキメラRNA-DNA類似体（Inoue他、FESS Lett.215:327-330, 1987）であることができる。
【００６６】
抗体：抗体およびそれの抗原結合性断片は本発明の治療薬として有用である。それらの抗体はＧクラスのもの（IgG）であってよいが、IgM、IgD、IgAおよびIgE抗体であることもできる；要求される点は、該抗体が本明細書に記載の標的と特異的に結合し、かつその標的を改変すること―何らかの知見に従って、それらが投与される患者に対して臨床的有益性を付与するような方法で、その活性を増強または阻害することによって―である。抗体はポリクローナルでもモノクローナルでもよく、１または複数の「抗体」という用語は、完全抗体、または完全抗体の抗原結合領域であるか抗原結合領域を含む、抗体の断片を指すのに用いられる。例えば、有用な抗体はFc領域を欠くことができ；一本鎖抗体であることができ；または抗体の可変抗原結合領域からなる（または本質的にからなる）断片であることができる。抗体はヒト化されてもよく（例えばCDR移植により）または完全にヒトであってもよい。
【００６７】
抗体を生産する方法は当業界で周知である。例えば、上述した通り、マウスのものではなくヒトの免疫グロブリン遺伝子を担持しているトランスジェニックマウスにおいて、ヒトモノクローナル抗体を作製することができる。それらのマウスより得られた脾細胞を使って（着目の抗原で免疫処置した後）、ヒトタンパク質からのエピトープに対して特異的な親和性を有するヒトmAbを分泌するハイブリドーマを産生させることができる（例えば、WO91/00906, WO91/10741; WO92/03918; WO92/03917; Lonberg他、Nature 368:856-859, 1994; Green他、Nature Genet. 7:13-21, 1994; Morrison他、Proc. Natl. Acad. Sci. USA 81:6851-6855, 1994; Bruggeman他、Immunol. 7:33-40, 1993; Tuaillon他、Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:3720-3724, 1993; およびBruggeman他、Eur. J. Immunol. 21:1323-1326, 1991を参照のこと）。
【００６８】
抗体は、可変領域またはその一部分（例えばCDR）が非ヒト生物（例えばラットまたはマウス）において産生されるものであることもできる。よって、本発明は、キメラ抗体、CDR移植抗体、ヒト化抗体、並びに非ヒト生物にて産生され次いでヒトに対する抗原性を減少させるように改変された（例えば可変フレームワーク領域または定常領域中が改変された）抗体を包含する。キメラ抗体（すなわち、異なる部分が異なる動物種より誘導される抗体（例えばマウスmAbの可変領域とヒト免疫グロブリンの定常領域）は、当業界で周知の組み換え技術により作製することができる。例えば、マウス（または別の種）のモノクローナル抗体分子のFc定常領域をコードする遺伝子を制限酵素で消化して、マウスFcをコードする領域を削除し、次いでヒトのFc定常領域をコードする遺伝子の同等部分をそれと置換することができる（欧州特許出願第125,023号；同第184,187号；同第171,496号；同第173,494号明細書参照；さらにWO 86/01533；米国特許第4,816,567号明細書；Better他、Science 240:1041-1043, 1988; Liu他、Proc. Natl. Acad. Sci. USA 84:3439-3443, 1987; Liu他、J. Immunol. 139:3521-3526, 1987; Sun他、Proc. Natl. Acad. Sci. USA 84:214-218,1987; Nishimura他、Cancer Res. 47:999-1005, 1987; Wood他、Nature 314:446-449, 1985; Shaw他、J. Natl. Cancer Inst. 80:1553-1559, 1988; Morrison他、Proc. Natl. Acad. Sci. USA 81:6851, 1984; Neuberger他、Nature 312:604, 1984; およびTakeda他、Nature 314:452, 1984も参照のこと）。
【００６９】
本発明の抗原結合性断片は、(i) Ｆab断片（すなわちＶL、ＶH、ＣLおよびＣH1領域からなる一価断片）；(ii) Ｆ(ab’)2断片（すなわちヒンジ領域のところでジスルフィド結合により連結した２個のＦab断片を含む二価断片）；(iii) ＶHとＣH1ドメインからなるＦd断片；(iv) 抗体の単一アームのＶLドメインとＶHドメインからなるＦv断片；(v) ＶH
ドメインからなるdAb断片（Ward他、Nature 341:544-546, 1989）；および(vi) 単離された相補性決定領域（CDR）であることができる。
【００７０】
発現ベクターを用いて本発明のタンパク質（抗体を含む）を生体外で（例えば本発明のタンパク質を本明細書に記載のような発現系から精製することができる）または生体内で（例えば完全な生物体中で）生産させることが可能である。
【００７１】
製剤および投薬：HPA軸、前頭前野皮質および／または交感神経系を標的とする同定された剤は、本明細書に記載の障害または疾患（例えば依存、肥満、外傷後ストレス障害または関連した疾患）のいずれかを予防、治療または緩和するのに治療上有効な量において患者に投与することができる。治療上有効な量は、前記障害または疾患の兆候または症状の少なくとも１つを改善するのに十分な剤または剤の組み合わせ（合剤）の量のことを指す。
【００７２】
本発明の範囲内で有用な剤の多くは、別の理由で患者を治療するために従来用いられている。投薬情報が入手できる場合、本明細書に記載の組成物におけるそのような剤の有効量を決定するのに利用できる。本明細書に記載の別の障害の１つである依存症および／または関連疾患に対して患者を治療するのに用いる用量は、別の適応症に従来より用いられている用量と同じであることができる。その用量は異なることもできる。例えば、本明細書に記載の併用療法に関連して要求される有効量は、安全性と有効性が以前実証されたものよりも低いことがある。
【００７３】
本明細書に記載の剤の毒性および治療効果は、必要に応じて、細胞培養物または実験動物における標準的な薬学的手法により決定することができる。例えば、げっ歯類や非ヒト霊長類のような実験動物を使ってLD50（個体数の50％に致死的な用量）とED50（個体数の50％に治療効果のある用量）を決定することができる。毒性効果と治療効果の用量比が治療指数であり、それはLD50：ED50比として表すことができる。典型的には、大きい治療指数を示す化合物が好ましい。
【００７４】
細胞培養アッセイと動物実験から得られたデータは、ヒトへの使用のための投与量範囲を定式化する（調剤する）のに利用することができる。そのような化合物の投与量は、好ましくは、ほとんどまたは全く毒性を示さないED50を含む循環濃度の範囲内にある。その投与量は、使用する剤形および投与経路に依存して、この範囲内で異なることができる。本発明方法で用いられるどの化合物についても、治療有効量は初めに細胞培養アッセイ〔核酸、核酸ベースの医薬、または抗体などのタンパク質が、阻害（または刺激）しようとするリガンドまたは受容体の発現や活性を実際に阻害（または刺激）するかどうかを決定するために策定されたアッセイ〕から評価することができる。
【００７５】
用量は、IC50（すなわち症状の最大抑制の半値を達成する試験化合物の濃度）を含む循環血漿濃度域を達成するように動物モデルにおいて公式化することができる。そのような情報は、ヒトでの有効量（例えば治療有効量）をより正確に決定するのに利用できる。例えば、高性能液体クロマトグラフィーにより血漿レベルを測定することができる。
【００７６】
薬物依存の治療に際しての最大の懸念の１つは高い常習性率である。この現象は回復期の間に動物試験することができる。それは薬物摂取行動への再燃傾向についての広く認められている前臨床モデルであり、再発の動物モデルは、本明細書に記載の剤の有効量を更に決定し規定するために利用することができる。例えば、安定した薬剤摂取が維持され次いで長期間の断薬訓練または禁制を受けさせることができる。消去（extinction）の基準が満たされた場合、または特定期間の断薬後、薬剤輸液の送達に以前関連付けられたマニピュランダム（操作子）に対する反応を回復させる特定の刺激因子の能力を、薬物探査行動の尺度として取り扱う。この薬物探査行動の再発は、ラットおよびサルにおける薬物自体のpriming注入により（Stewart, J. Psychiatr.Neurosci. 25:125-136, 2000）またはラットにおける短時間の間欠性電気フットショックへの暴露により（Shaham他、Brain Res. Rev. 33:13-33, 2000; Stewart, J. Psychiatr. Neurosci.  25:125-136, 2000）により惹起させることができる。自己投与薬物への急性再暴露（de Wit, Exp. Clin. Psychopharmacol. 4:5-10, 1996）およびストレスへの暴露（Shiffman & Wills, Coping and Substance Abuse, Academic Press, Orland, 1985; Lamon & Alonzo, Addict. Behav. 22:195-205, 1997; Brady  &  Sonne,  Alc.  Res.  Health  23:263-271,  1999;  Sinha,  Psychopharmacol. 158:343-359, 2001; およびSinha他、Psychopharmacol. 142:343-351, 1999）または単純にストレス関連画像の提示（Sinha他、Psychopharmacol. 158:343-359, 2000）も、ヒトでの薬物探査行動への再燃を誘起させる有力な事象として同定されている。
【００７７】
後述する研究において、メチラポンとオキサゼパムの各々の投与量が他の行動に対する非特異的な減弱効果を与えることなくコカイン自己投与を抑制することを最初に発見した。次いでこの投与量を各剤の用量がもはやコカイン自己投与や他のいずれの観察可能な行動に対しても何も効果を与えない（すなわち無効量）と認められるまで、半分ずつ減量した。次いで２剤の無効量を組み合わせると、コカイン自己投与が抑制された。このことは、２剤は異なる機序でそれらの効果を発揮するけれども、その効果は相加的であることを示唆している。よって、異なる機序によりHPA軸に作用する薬剤を組み合わせることが、コカイン報酬系に対する相加効果または相乗効果をもたらすようである。さらに、薬剤を単独で投与したときに全く効果がないような濃度でそれらの剤を組み合わせることにより、それらの化合物に関連しうる潜在的な毒性副作用（例えばメチラポンによる血漿コルチゾールの過剰な低下、およびベンゾジアゼピン系薬による乱用易罹病性）を最小化することができる。従って、本発明の組成物は治療薬の組み合わせであって、その治療薬の一方または両方が各剤を単独で投与した場合の効果を達成するのに要求されるはずのレベルよりも低い投与量レベルで存在する、治療薬の組み合わせを含む。
【００７８】
本発明に従って用いられる医薬組成物は、１または複数の生理学的に許容される担体または賦形剤を使って任意の従来方式で製剤化することができる。ここで、化合物並びにそれの生理学的に許容される塩および溶媒和物を包含するそれらの剤は、経口投与用または非経口投与用に製剤化することができる。
【００７９】
経口投与用には、医薬組成物は、例えば、医薬上許容される賦形剤、例えば結合剤（例えばゼラチン化トウモロコシでんぷん、ポリビニルピロリドンまたはヒドロキシプロピルメチルセルロース）；充填剤（例えば乳糖、微結晶セルロースまたはリン酸水素カルシウム）；滑沢剤（例えばステアリン酸マグネシウム、タルクまたはシリカ）；崩壊剤（例えばジャガイモデンプンまたはデンプングリコール酸ナトリウム）；または湿潤剤（例えばラウリル硫酸ナトリウム）と共に常用手段によって調製された錠剤もしくはカプセル剤の形をとることができる。錠剤は当業界で周知の方法によりコーティングすることができる。経口投与用液体製剤は、例えば、液剤、シロップ剤または懸濁液剤の形をとることができ、または水や他の適当な賦形剤による使用前の再構成のために乾燥製剤として提供することができる。そのような液体製剤は、懸濁化剤（例えばソルビトールシロップ、セルロース誘導体または水素化食用油脂）；乳化剤（例えばレシチンまたはアカシア）；非水性賦形剤（例えばアーモンド油、石油エステル、エチルアルコールまたは分留した植物油）；および保存剤（例えばｐ−ヒドロキシ安息香酸メチルもしくはプロピルエステル、またはソルビン酸）を用いて常用手段により製剤できる。それらの製剤は適当ならばバッファー塩、矯味薬、着色剤および甘味剤も含むことができる。
【００８０】
経口投与用製剤は、活性化合物（本明細書中では「治療薬」と称する場合がある）の徐放性を与えるように適切に製剤化することができる。化合物を含む剤（例えば有機小分子）は注入による（例えばボーラス注入または持続注入による）非経口投与用に製剤化することができる。注射剤は、付随の保存剤と共に単位剤形中（例えばアンプル中または頻回投与容器中）に提供することができる。組成物は油性または水性賦形剤中の懸濁液、溶液または乳液のような形態をとることができ、懸濁化剤、安定化剤および／または分散剤のような調合剤を含むことができる。あるいは、活性成分は適当な賦形剤（例えば発熱物質不含有の無菌注射用水）での用事溶解のために粉末形であることができる。
【００８１】
上述した製剤に加えて、薬剤はデポー製剤として製剤化することもできる。そのような持続作用製剤は、移植（例えば皮下または筋内移植）によりまたは筋肉注射により投与することができる。例えば、そのような剤は、適当な重合性もしくは疎水性材料（例えば許容される油中の乳剤として）またはイオン交換樹脂と一緒に、または難溶性誘導体、例えば難溶性塩として製剤化することができる。
【００８２】
組成物は他の投与経路、例えば鼻腔内、局所および粘膜（例えば舌下投与による）用に製剤化することもできる。
【００８３】
該組成物は、所望により、活性成分を含有する１または複数の単位剤形を収容することができるパックまたはディスペンサー装置に提供することができる。パックは例えば金属またはプラスチック製ホイル、例えばブリスターパックを含む。パックまたはディスペンサー装置には投与の指示書を添付することができる。様々な提示形態（例えばパックおよびディスペンサーによる提示）が本発明の範囲内である。
【００８４】
アンチセンス核酸を含む核酸は、全身投与することが可能であり、そのような場合には、HPA軸、前頭前野皮質および／または交感神経系内の特定の細胞を標的指向するように改変（修飾）することができる。例えば、核酸は、標的細胞タイプに関連する細胞表面受容体または他の成分に特異的に結合するであろう抗体または他のタンパク質（例えば受容体リガンド）に連結させることができる。同様に、核酸は細胞膜を貫通する（例えば、Letsinger他、Proc. Natl. Acad. Sci. USA 86:6553-6556, 1989; Lemaitre他、Proc. Natl. Acad. Sci. USA 84:648-652, 1987およびWO 88/09810を参照）または血液脳関門を貫通する（WO 89/10134参照）それらの輸送を促進する剤を含むことができる。その上、核酸は挿入剤により改変することができる（Zon, Pharm. Res. 5:539-549, 1988）。アンチセンス核酸は本明細書中に記載のベクターを使って細胞に送達させることもできる。アンチセンス核酸の十分な細胞内濃度を達成するために、それらを強力なプロモーター（例えば強力なpol IIまたはpol IIIプロモーター）を有するベクター中で発現させることが可能である。
【００８５】
特定の態様では、本発明は、HPA軸を標的とする第一剤と前頭前野皮質を標的とする第二剤とを含む医薬組成物に関する。第一剤はCRHを阻害する、ACTHを阻害する、そして／またはコルチゾールを阻害する剤であることができ、第二剤はGABAの発現、分泌または活性を増大させる、GABA模倣薬である、そして／またはGABA代謝を抑制する剤であることができる。例えば、第一剤および／または第二剤のいずれかが化合物であることができる。例えば、第一剤がメチラポン（メトピロン Metopirone（登録商標））もしくはケトコナゾール（ニゾラール Nizoral（登録商標））またはそれの塩、溶媒和物、水和物、プロドラッグ、構造類似体もしくは多形体であることができる。第二剤はベンゾジアゼピン系薬（例えばオキサゼパムまたはクロルジアゼポキシド）またはそれの塩、溶媒和物、水和物、プロドラッグ、構造類似体もしくは多形体であることができる。第二剤はミルタザピンもしくはアトモキセチンまたはそれの塩、溶媒和物、水和物、プロドラッグ、構造類似体もしくは多形体であることもできる。別の有用な第二剤はガバペンチン（ニューロンチン NeurontinTM）またはそれの塩、溶媒和物、水和物、プロドラッグ、構造類似体もしくは多形体であることができ、あるいはムシモールもしくはバクロフェンまたはそれの塩、溶媒和物、水和物、プロドラッグ、構造類似体もしくは多形体であることができる。追加の有用な第二剤は次のものである：プロガビド、リルゾール、バクロフェン、ビガバトリン、バルプロ酸（デパコート DepakoteTM）、チアガビン（ガビトリル GabitrilTM）、ラモトリギン（ラミクタール LamictalTM）、フェニトイン（ディランチン DilantinTM）、カルバマゼピン（テグレトール TegretolTM）およびトピラメート（トパマックス TopamaxTM）またはそれの塩、溶媒和物、水和物、プロドラッグ、構造類似体もしくは多形体。いずれの医薬組成物も経口投与用または静脈内投与用に製剤化することができる。単位用量（１回量）の中の第一剤の量または第二剤の量は、同じ単位用量を必要とする患者に現在または典型的に処方される第一剤または第二剤の量よりも少なくすることができる。剤を併用することにより、現在一般的に処方される規定の投与量よりも少ない用量で投与することが可能になるだろう。例えば、医薬組成物は、単位剤形中に約5〜60 mgのオキサゼパムと約250〜1000 mgのメチラポン（メトピロン Metopirone（登録商標））を含有することができる。それらの組成物はいずれも、交感神経系の活性を抑制する第三剤を更に含むことができる。第三剤はβ遮断薬（例えばソタロール（ベタパース Betapace（登録商標））、イモロール（ブロカドレン Blocadren（登録商標））。カルテオロール（カルトコール Cartrol（登録商標））、カルベジロール（コレグ Coreg（登録商標））、ナドロール（コルガード Corgard（登録商標））、ナドール／ベンドロフルメタザイド（コルザイド Corzide（登録商標））、プロプラノロール（インデラル）、プロプラノロール／HCTZ（インデリド Inderide（登録商標））、ベタキソロール（ケルロンKerlone（登録商標））、ペンブトロール（レバトール Levatol（登録商標））、メトプロロール（ロプレッサー Lopressor（登録商標））、ラベタロール（ノルモダインNormodyne（登録商標））、アセブトロール（セクトラール Sectral（登録商標））、アテノロール／HCTZ（テノレチック Tenoretic（登録商標））、アテノロール（テノルミン Tenormin（登録商標））、チモロール／HCTZ（チモリド Timolide（登録商標））、メトプロロール（トプロール Toprol（登録商標））、ラベタロール（トランデート Trandate（登録商標））、ピンドロール（ビスケン Visken（登録商標））、ビソプロロール（ゼベタ Zebeta（登録商標））、ビソプロロール／HCTZ（ジアック Ziac（登録商標））、ビソプロロール／HCTZ
（Ziac（登録商標））、エスモロール（ブレビブロックBrevibloc（登録商標））または別の抗不安性化合物〔例えばシタロプラム（セレキサ Celexa（登録商標））、エスシタロプラムシュウ酸塩（レキサプロ Lexapro（登録商標））、フルボキサミン（ルボックス Luvox（登録商標））、パロキセチン（パキシル Paxil（登録商標））、フルオキセチン（プロザック Prozac（登録商標））またはセルトラリン（ゾロフト Zoloft（登録商標））などのSSRI〕であることができる。抗不安性化合物または抗不安薬は、アンギオテンシンII阻害薬（例えばカンダサルタン（アタカンド Atacand（登録商標））、エプロサルタン（テベテン Teveten（登録商標））、イルベサルタン（アバプロ Avapro（登録商標））、イオサルタン（コザール Cozaar（登録商標））、テルミサルタン（ミカルディス Micardis（登録商標））またはバルサルタン（ディオバン Diovan（登録商標））であることもできる。
【００８６】
輸送、貯蔵または後の希釈に適当な濃縮組成物も本発明の範囲内である。
【００８７】
上記医薬組成物は、後述のものを含む本明細書に記載の方法において、後述の使用目的に（例えば医薬品の調製におよび／または後述の障害もしくは疾患の治療薬の調製に）利用することができる。
【００８８】
治療法：上述したように、当該組成物は、HPA軸の異常活性に関連する障害を有する患者を治療するために用いることができる。治療法には様々な段階が含まれるが、その１つは治療の必要な患者を同定することを成している。医師は、依存および／または本明細書に記載の疾患の他のものを罹患している疑いのある患者を検査し診断することが十分できる。診断に従って（代替手段で行ってもよい）、医師は組成物（例えば、HPA軸を標的とする第一剤と前頭前野皮質を標的とする第二剤とを含む医薬組成物）の治療上有効な量を処方することができる。患者は、アルコール、化学刺激物質、処方の（または処方された）鎮痛薬または天然の植物由来薬物といった物質（薬物）への依存があるか、または依存があると診断されている。化学刺激物質は、コカイン、アンフェタミン、メタンフェタミン、結晶塩酸メチルアンフェタミン、またはメチルフェニデートであることができる。特定薬剤の類似体が依存性である場合には、それらの類似体への依存も治療することができる。
【００８９】
薬物はバルビツレート（例えばチアミル（スリタール Surital（登録商標））、チオペンタール（ペントサル Pentothal（登録商標））、アモバルビタール（アミタ Amyta（登録商標））、ペントバルビタール（ネンブタール Nembutal（登録商標））、セコバルビタール（セコナール Seconal（登録商標））、ツイナール（アモバルビタール／セコバルビタール合剤）、ブタルビタール（フィオリナ Fiorina（登録商標））、ブタバルビタール（ブチゾール Butisol（登録商標））、タルブタール（ロツセート Lotusate（登録商標））、アプロバルビタール（アルレート Alurate（登録商標））、フェノバルビタール（ルミナール Luminal（登録商標））およびメフォバルビタール（メバラル Mebaral（登録商標））またはアヘン剤（例えばヘロイン、コデイン、ヒドロコドン）であることもできる。
【００９０】
天然の植物由来薬物としてはマリファナおよびタバコが挙げられる。当該組成物は、それらの物質に全般的におよび／またはその中のより特定の成分（例えばタバコの中のニコチン）に依存している患者を治療するために用いることができる。依存は、ギャンブル、セックスもしくは性行為、または過食（これは摂食障害と関連付けられることもありまたは肥満に至ることもある）といった行為への依存として現れることもある。より一般的には、本発明組成物での治療に適するものの中に摂食および睡眠障害がある。摂食障害には、神経性無食欲症（拒食症）、神経性大食症（過食症）、むちゃ食い障害、および特定不能の摂食障害（EDNOS）が含まれる。幾つかの研究は神経性無食欲症におけるHPA軸の機能を調べている。主な知見は、上昇したコルチコトロピン放出ホルモンレベルと正常な血中副腎皮質刺激ホルモンレベルに関連付けられる、副腎皮質機能亢進症のものである。神経性無食欲症は診断が難しい場合があるが、この障害を持つ患者はしばしば、無月経、温度調節の異常、異常な成長ホルモンレベルおよび異常な摂食行動として顕著に現れる、内分泌機能不全を呈する。本発明方法は、治療の必要な患者を同定する段階を含むことができ、これらの特徴は、神経性無食欲症を診断するのに医師が使用するものであるか、またはおそらくその中に含まれるだろう。
【００９１】
本発明組成物は、プラダ−ウィリ症候群（Prader Willi syndrome）を有する患者を治療するのに利用でき、そのような患者の治療法は本発明の範囲内である。
【００９２】
睡眠障害には、不眠症、睡眠無呼吸障害、むずむず脚症候群（RLS）および周期性四肢運動障害（PLMD）およびナルコレプシーが含まれる。
【００９３】
治療に適する他の患者には、不安を患っている患者〔パニック障害、強迫神経症（OCD）、外傷後ストレス障害（PTSD）、社会不安障害に関連するか、または全般的不安障害であってもよい〕が含まれる。その状態が抑うつである場合、それは大うつ病性障害もしくは気分変調、双極性うつ病に関連づけられてもよく、あるいは医療行為または薬物乱用に関連付けられてもよい。うつまたは他の主な情動障害を発病するリスクは、遺伝的感受性、環境暴露および加齢の間の複雑な相互作用により決定される。
【００９４】
治療に適する他の患者には、統合失調症；注意力欠損障害（例えばADDまたはADHD）を有する者；更年期を経験している者；および月経周期関連症候群（例えばPMS）に罹患している者が含まれる。
【００９５】
本明細書に記載の障害および事象は様々に分類され、様々な方法で互いに関連付けられる。例えば、社会不安は摂食障害の一因となることがあり；他の不安関連疾患（例えばPTDS）は睡眠障害として現れることがある。臨床的にうつ病性と診断された患者も睡眠障害を経験することがある。進行性疾患として特徴づけられている依存症は、別の精神神経障害の症状を緩和するための処方薬または非処方薬の自己投与から始まることがある。例えば、患者は抑うつまたは不安の状況においてアルコールやマリファナを自己投与する場合があり、または結果としての睡眠困難を治療するために睡眠補助薬を自己投与する場合がある。そのような障害と関連疾患や症状との間の関係は、逆方向にも流れる場合がある。例えば、不眠症におけるHPA軸の慢性的活性化は、不眠症の者を精神障害（すなわち慢性不安および抑うつ）だけでなく、そのような活性化に関連する有意疾病率の危険にさらす。不眠症は、医療の場面で圧倒的に最も一般的に直面する睡眠障害である。様々な精神疾患もしくは医学的疾患の症状として、またはストレスフルな状態の結果として起こる、重篤な慢性不眠症は、患者には別の特別な障害として受け取られている（Vgontzas他、J. Clin. Endocrinol. Metabl. 86:3787-3794, 2006）。不眠症を含む睡眠障害は、更年期の最中にまたは患者がPMSを罹患している時に起こりうる。
【００９６】
本明細書に記載の適応症の分類にいくらかの重複があるように、施される薬剤の性質および／またはそれらを分類するやり方において、いくらかの重複があるであろう。例えば、上述したように、ベンゾジアゼピン系薬は前頭前野皮質を標的とする「第二」剤として使用することができる。ベンゾジアゼピン系薬は抗不安薬としても分類できるので、本明細書に記載の「第三」剤としても適当である。
【００９７】
治療の成功は、様々な方法で評価することができる。例えば、客観的尺度（例えば患者が物質または行為への依存がある場合、薬物自己投与またはほかの依存行為の頻度または重症度の低減）、一般的な健康の改善（例えば血圧、腎機能、肝機能または血球数の改善）および／または主観的尺度〔例えば患者による物質もしくは行為への渇望の減弱の報告、または幸福感の増大（例えば、患者が不安または不安関連障害を罹患している場合、不安の減少、気分の改善、幸福感の増大、または日々のストレスに耐える能力の改善）〕。治療される疾患が摂食障害または睡眠障害である場合、正常な摂食または睡眠パターンへの効果的な回復（または回復傾向）を評価することにより、治療を評価することができる。
【００９８】
特定の態様では、本発明はHPA軸の異常活性に関連した障害に罹患している患者を治療する方法に関する。この方法は、(a) 治療の必要な患者を同定する段階；および(b) 該患者に当該組成物の治療上有効な量を投与する段階を含むことができる。前記障害は依存、不安、統合失調症または抑うつを含み；その障害は物質〔例えば化学刺激物質、例えばアヘン系麻薬（例えばヘロイン、コカイン、ヒドロコドンまたはその類似体）、ニコチン、アルコール、処方鎮痛薬または天然の植物由来薬、例えばニコチン〕への依存であることができる。化学刺激物質はコカイン、アンフェタミン、メタンフェタミン、メチルフェニデートまたはその類似体であることもできる。前記障害はギャンブルまたは性行為または過食といった行為への依存であることもできる。
【００９９】
患者が不安を患っている場合、その不安はパニック障害、強迫性障害（OCD）、外傷後ストレス障害（PTSD）、社会不安障害または全般性不安障害に関連付けられうる。患者が抑うつを患っている場合、その抑うつは大うつ病性障害もしくは気分変調、双極性うつ病、または内科的障害もしくは薬物乱用に関連付けることができる。上述したように、前記障害は摂食障害または睡眠障害または破壊行動障害であることもできる。
【０１００】
当該方法は、更年期の不快症状または月経周期の不快症状を有する患者を、(a) 治療の必要な患者を同定し；そして(b) 該患者に本発明組成物の治療的有効量を投与することにより治療する際に実施することができる。施される組成物の量は治療的有効量であり、その有効性は不安、抑うつまたは睡眠困難をはじめとする症状の軽減により判断される。
【０１０１】
本発明は、薬剤の調製における本発明組成物の使用に関する。本発明はさらに、状況に関係なく、肥満；摂食障害；睡眠障害；抑うつ；破壊行動障害；統合失調症；および／または不安の治療薬の調製における本発明組成物の使用に関する。
【実施例】
【０１０２】
実施例１
ラットにおけるコカイン自己投与に対する低用量併用薬物療法の効果
ここに記載する実験は、本明細書に記載のものと同一の、依存症（より具体的にはコカイン乱用）の治療のための併用薬物療法を検討する。このアプローチを使って、異なる作用機序を利用するがストレス要因への身体反応に対して同様な効果を発揮する２つの化合物を、単独では無効であるかまたはかなり効果が小さい用量で、一緒に投与する。成体雄Wistarラットを、コカイン自己投与と餌自己投与の交互の多元スケジュールのもと訓練した。このスケジュールはコカインアクセス期間と餌強化期間の交互の期間から成った。ある場合には、下記に更に記載するように、３用量のコカイン（0.125、0.25または0.50 mg/kg/注入）を試験した。ラットは、同一セッションの間、生理食塩水置換（コカイン消去）と餌消去により周期的に訓練した。
【０１０３】
これらの実験は、コルチコステロン合成阻害剤メチラポンとケトコナゾール；ベンゾジアゼピン系薬クロルジアゼポキシド、アルプラゾラムおよびオキサゼパム；およびCRH受容体アンタゴニストCP-154,526での前処置が、いずれもラットにおけるコカイン自己投与とコカイン探査行動の再発を低減させた。併用薬物療法はHPA軸内の活性の刺激（キュー）誘発性増加を弱めることにより、再燃の可能性を減らし、それによりCRH、ACTHおよびコルチゾール（コルチコステロン）の刺激誘発性分泌を減少させ、そして前頭前野皮質における活性の刺激誘発性変調を減少させることが可能である。
【０１０４】
試験した組み合わせ：試験した薬剤の組み合わせは以下のものを含む：(1) メチラポンとオキサゼパム；(2) ケトコナゾールとアルプラゾラム；(3) ケトコナゾールとオキサゼパム；(4)メチラポンとアルプラゾラム；(5) ムシモールとCP-154,526；および(6) ムシモールとメチラポン。この薬剤組み合わせは各クラスからの少なくとも１つの剤から成る（例えばメチラポンとオキサゼパム）。記載したように、それらの剤は通常の有効量より低い用量で組み合わされ、相加効果または相乗効果が現れた。
【０１０５】
コカイン自己投与訓練：１モデルでは、ラットに15分間ずつの交互のコカイン自己投与と餌強化へのアクセスを施した。薬剤の単剤と組合せ剤の潜在的な非特異的運動失調効果を抑制するために餌を使った。理想的な薬剤または薬剤合剤は、食餌によって維持される反応に影響を与えずにコカイン自己投与行動を減弱させるものである。使用した別の前臨床モデルは、消滅した（extinguished）コカイン探索再燃モデルの刺激誘発性再発である。このモデルでは、ラットをコカイン自己投与するよう訓練し、消滅した反応を再発させる環境内条件付け刺激（キュー）の能力を評価し、それを再発の指標として取り扱った。
【０１０６】
より詳しくは、成体雄Wistarラットに慢性頸静脈カテーテルを埋め込んだ。手術からの回復後、ラットを餌強化とコカイン自己投与の交互の多元スケジュールのもとで反応訓練した。食餌維持反応を、諸種の治療による非特異的な運動への影響（motor effect）を制御するのに使った。該スケジュールの食餌コンポーネントの間、食餌反応レバーの上に設置された刺激光が光り、餌強化の利用性（アベイラビリティ）を示した。最初に、マウスが食餌反応レバーを押し下げると餌刺激光が一瞬暗くなり（0.6秒）、餌ペレット（45 mg）の供給が行われた。各餌ペレットの供給後に25秒の中断（タイムアウト）を設けた。この中断の間、刺激光を暗くし、餌レバーの反応をカウントしたが、何も結果をもたらさなかった。食餌期間の間の別の（コカイン）レバー押し反応も何も結果を与えなかった。食餌レバー押しの反応条件を、連続的強化から定率（FR）４スケジュールまで、数セッションに渡って漸増させ、それにより食餌提示に４回のレバー押し反応が必要となるようにした。15分間の餌へのアクセスの後、チャンバー内の刺激光を１分間の中断の間暗くした。この中断の後、コカイン反応レバーの上の刺激光を照らしてコカイン（0.125, 0.25または0.5 mg/kg）の利用性を示した。最初に、マウスがコカイン反応レバーを押し下げると刺激光が一瞬暗くなり、コカインの微量注入（5.6秒間に200μLが供給される）が行われた。各注入後に20秒の中断を設けた。コカインの反応条件を、定率（FR）４強化スケジュールへと漸増させた。15分間のコカインへのアクセスと１分間の中断の後、ラットに再度該スケジュールの食餌コンポーネントへの15分間のアクセスを許した。餌へのアクセスとコカインへのアクセスを、この方法で２時間の行動セッションの間15分ごとに交互に繰り返し、各ラットが４回×15分間の餌とコカインに暴露されるようにした。各行動セッションは、餌かコカインのいずれかへの15分間のアクセスによって開始し、これを毎日交互に行った。コカインと餌の提示の合計数、並びに各セッション４回の暴露の間の各提示の回数が、３連続セッションの間10％未満変動するときに、安定なベースラインが確立された。少なくとも３用量のコカイン（例えば0.125, 0.25および0.5 mg/kg/注入）を試験した。まず0.25 mg/kg/注入を自己投与するようにラットを訓練し、その量は使用するコカインの標準量であった。安定して反応したら、用量を適宜0.125または0.5 mg/kg/注入に変更した。この中程度の用量のコカイン（すなわち0.25 mg/kg/注入）でのラットの訓練は、低用量（すなわち0.125 mg/kg/注入）での安定化を早めることが分かった。安定した反応のベースラインが得られたら、様々な化合物についての用量応答曲線を各ラットについて個別に作成した。各試験の間に点在させた最低２日間の基準コカイン自己投与において各用量を少なくとも２回処置した。各グループのラットを２つのみの試験化合物で試験し、潜在的な持越し効果を最小限にとどめた。食餌維持反応（すなわち高用量）に影響を与えることなく少なくとも50％コカイン自己投与を低減させる最小有効量を、各化合物について求めた。薬剤併用実験のために選択された用量は、最小有効量の２分の１であり、この用量はコカイン自己投与の10％未満の減少（すなわち無効量）を生じなければならなかった。最小有効量の半分がコカイン自己投与を10％超減少させた場合、その用量を再び半分減らした。例えば、ケトコナゾールの最小有効量が25 mg/kgであったとき、アルプラゾラムとオキサゼパムを使った実験において12.5 mg/kgの用量が好結果に使われた。この用量（12.5 mg/kg）は、単独で使用した時のコカイン反応または食餌維持反応に対して全く影響を与えなかったが、同様に無効量のアルプラゾラム（すなわち1.0 mg/kg, ip）またはオキサゼパム（10 mg/kg, ip）を併用した時のコカイン自己投与行動を有意に減少させた。この理論的根拠は、薬物併用研究における各化合物の用量の選択の指針となった。各実験グループは３〜10匹のラットから構成された。
【０１０７】
消滅したコカイン探索行動の刺激（キュー）誘発性再発：ここに記載の実験は、コカイン自己投与の減少に有効であると同定された薬剤組み合わせが、消滅したコカイン探索行動を再発させる条件付け刺激の能力も遮蔽するかどうかを調べるために計画された。成体雄Wistarラットに慢性頸静脈カテーテルを埋め込み、毎週５日間だけ行われる毎日２時間のセッションの間の定率４（FR4）強化スケジュールのもとで、実験チャンバー内の反応レバーの１つ（すなわち「アクティブ」または「コカイン」レバー）を押すことによりコカイン（0.25 mg/kg）を自己投与するよう訓練した。各セッションの開始時、２つのレバーを実験箱内に延長し、アクティブレバーの上の刺激光を照らし、コカインの利用性を表示した。最初に、アクティブレバーを各回押し下げることが、コカインの静脈内注入と、実験箱内の光と音の複合刺激の同時提示（すなわち条件付刺激または二次強化子）を発生させた。各注入後に20秒の中断期間を設けた。中断期間の間は、アクティブレバーの上の刺激光と箱内の光と音の複合刺激を停止し、そして中断期間の終了時にアクティブレバーの上の光を１回照らした。アクティブレバー押しの反応が連続２日間で20％未満変化した時、反応要件をFR2に増加させた。FR2スケジュールまたは強化の下で同様な安定性が観察された時、反応要件をFR4の最終定率に増加させた。FR4強化スケジュールのもとでの反応の安定基準は、少なくとも連続３日間行われ反応が10％未満変動した時にこのスケジュールに最低10日暴露することであった。インアクティブレバー押し反応をカウントしたが、どの回も予定された結果を生じなかった。安定したコカイン自己投与が観察されたら、ラットを消去（extinction）過程に暴露した；ラットを行動チャンバーに入れたが、「コカイン」（アクティブ）レバー押しの反応は何も予定された結果を生じなかった。反応がベースライン自己投与の20％未満に低下するまで、消去訓練を続けた。次いで再発試験にゆだねた。ラットを実験箱に移し、両方の反応レバーを箱内に延長し、自己投与訓練の時と同じように「アクティブ」レバーの上の刺激光を照らした。再発の間、「アクティブ」レバー押しの反応は条件性強化子（すなわち、自己投与中にコカインと組み合わされていた箱内の光と音の複合刺激）の5.6秒提示を施した。「インアクティブ」レバー押し反応をカウントしたが、何ら予定された結果をもたらさなかった。再発試験の間の「アクティブ」レバー押し反応を、コカイン探索行動の指標として取り扱った。各実験グループは0.8〜10ラットから構成された。
【０１０８】
コカインの静脈自己投与に対するメチラポンとオキサゼパムの効果：これらの実験は、餌強化とコカイン自己投与の交互の多元スケジュールのもとで反応するラットの静脈コカイン自己投与行動に対するメチラポンとオキサゼパムの併用の効果を調べるために計画された。結果は図１Ａのグラフに描写される。左から１番目のバー（「Ext」）は、「アクティブ」レバー押し反応が単に生理食塩水のみを注入させる時の消去過程（extinction）の結果を示す。２番目のバー（「Veh」）は、治療薬に代わり賦形剤（５％Emulphor（登録商標）／0.9％生理食塩水）での前処置後に自己投与されたコカイン注入の数を表す。「Met-high」バーは、高用量のメチラポン（25〜175 mg/kg, ip）での前処置後のコカイン注入の数を示し、一方で「OX-high」バーは、高用量のオキサゼパム（５〜80 mg/kg, ip）での前処置後に自己投与されたコカイン注入の数を表す。
【０１０９】
メチラポンとオキサゼパムの両方が、上記用量で食餌維持反応に悪影響を及ぼさずにコカイン自己投与行動を減少させた。「Met-low」および「OX-low」バーは、単独での低用量の無効量（オキサゼパム5〜25 mg/kg, ip；メチラポン25〜50 mg/kg, ip）のメチラポンとオキサゼパムでの前処置後の反応を表す。明らかに、これらの用量は単独で投与した時のコカイン自己投与（または餌維持反応）行動に有意な影響を与えなかった。「COM-low」バーは、併用薬物療法の供給（すなわち、無効量のメチラポンとオキサゼパムからなる注射）後に自己投与されたコカイン注入の回数を表す。図から分かるように、メチラポンとオキサゼパムから成る併用薬物療法が、消去期間の間、アクティブレバーが押されて生理食塩水のみが投与された時に観察されたレベルにまで、コカイン自己投与を減らした。併用薬物療法は、食餌維持反応に影響を与えずにコカイン自己応答を消去レベルにまで減少させ、このことは、この薬剤の組み合わせが別の強化子（すなわち餌）への反応またはモチベーションに影響を与えずに、コカイン探索のモチベーションを低下させたことを示唆する。
【０１１０】
図１Ｂは、図１Ａに示されるのと同じデータを表すが、試験した条件の下でのベースライン注入の％としてデータが表される。「高」用量のメチラポンとオキサゼパムはベースライン自己投与の50％未満にコカイン自己投与を減少させたが、「低」用量のものは自己投与を10％未満だけ減少させた。図１Ａと同様に、低用量のオキサゼパムとメチラポンの組み合わせが、消去過程の間に観察されるレベルにまでコカイン自己投与を減少させた。
【０１１１】
図２Ａは、諸種のグループのラットを諸種の用量のコカインを自己投与するように訓練した時の、コカイン自己投与に対する無効量のメチラポンとオキサゼパムの併用の効果を調べるために設計された実験を表す。より高用量のコカインが利用可能であるとき、ラットがその合剤の効果を克服してしまうかどうかを決定することが重要である。これは、コカイン中毒者がその者のコカイン摂取量を増加させて併用薬物療法の効果を乗り越えてしまうことに類似している。Ｘ軸上の数字は、自己投与されたコカインの３用量を表す。「Saline」は、シリンジ中に生理食塩水のみが含まれたときに（すなわち消去の時）自己投与された注入の数を示す。「Vehicle」は、コカイン自己投与セッション開始前に賦形剤（５％Emulphor／0.9％生理食塩水）を供給した時に自己投与されたコカイン注入の数を表す。「Combo」は、無効量のメチラポンとオキサゼパムの合剤での前処理後に自己投与されたコカイン注入の数を表す。明らかに、この組み合わせは、自己投与に利用可能であったコカインの用量に関係なく、コカイン自己投与を消去レベルにまで減少させた。このことは、併用薬物療法の効果がコカインの摂取または用量を増加させることによって容易に克服できないだろうということを示す。
【０１１２】
図２Ｂは、図２Ａと同じデータを表すが、異なる条件下でのベースライン注入の百分率としてデータが与えられる。図２Ａは、低用量のオキサゼパムとメチラポンの組み合わせが、コカイン自己投与に利用可能であったコカインの用量に関係なく、消去の間に観察されるレベルにまでコカイン自己投与を減らしたことを示す。
【０１１３】
ラットにおける消滅したコカイン自己投与の刺激（キュー）誘発性再発に対するメチラポンとオキサゼパムの合剤の効果を調べるために、実験を行った。コカイン探索行動への再発の動物モデルを使った。図10に関して、「SA」と表示されたバーは、コカイン自己投与中「アクティブ」レバーに行われる反応の数を表す。「EXT」と表示されたバーは、このレバー押しの反応が生理食塩水の注入のみを引き起こしたときの消去過程の間の「アクティブ」レバーへの反応の数を表す。３番目のバー「VEH」は、コカイン自己投与セッションの開始前に治療薬に代わり賦形剤（５％Emulphor／0.9％生理食塩水）を投与した時の、自己投与されたコカイン注入の数を表す。最後のバー「COMBO」は、併用薬物療法（すなわち、コカイン自己投与実験において決定されたような（図１Ａ参照）メチラポンとオキサゼパムの無効量からなる注入剤）の供給後の再発試験の間の「アクティブ」レバーに対する反応の数を表す。この併用薬物療法は、消去の間アクティブレバーが押されて生理食塩水のみが供給された時に観察されるレベルにまでコカイン探索行動（すなわち、再発の間のアクティブレバー押し反応）を減らした。この併用療法は、餌維持反応に影響を及ぼさずに消去レベルにまで再発（再燃）を減少させた。このことは、この組み合わせが別の強化子（すなわち餌）への反応または動機付け（モチベーション）に影響を及ぼさずにコカイン探索への動機づけを減らしたことを示唆する。
【０１１４】
コカインの静脈自己投与に対するケトコナゾールとアルプラゾラムの効果：これらの実験は、餌強化とコカイン自己投与の交互の多元スケジュールのもとで反応するラットの静脈コカイン自己投与行動に対するケトコナゾールとアルプラゾラムの併用の効果を調べるために計画された。データは図３に与えられる。立体のバー（「VEH」）は、賦形剤（５％Emulphor／0.9％生理食塩水）での前処置後の自己投与されたコカイン注入の数を表す。白抜きのバー（「EXT」）は、「アクティブ」レバー押し反応が生理食塩水の注入のみを生じた時の消去（extinction）の結果を示す。「ALP」（縞模様）および「KETO」（薄い陰影付）バーは、単独での低用量の無効量（アルプラゾラム0.2〜2 mg/kg, ip；ケトコナゾール5〜75 mg/kg, ip）のアルプラゾムとケトコナゾールでの前処置後の自己投与を表す。明らかに、そのような用量は、単独で投与した時にコカイン自己投与（または食餌維持反応）に有意な影響を及ぼさなかった。「COMBO」（細かい縞模様）バーは、併用薬物療法（すなわち、無効量のアルプラゾラムとケトコナゾールからなる注入剤）の供給後に自己投与されたコカイン注入の数を表す。明らかに分かるように、アルプラゾムとケトコナゾールから成る併用薬物療法が、消去期間の間、アクティブレバーが押されて生理食塩水のみが投与された時に観察されるレベルにまで、コカイン自己投与を減らした。併用薬物療法は、食餌維持反応に影響を与えずにコカイン自己投与を消去レベルにまで減少させ、このことは、薬剤の併用が別の強化子（すなわち餌）への反応またはモチベーションに影響を与えずに、コカイン探索のモチベーションを低下させたことを示唆する。これらのデータは、少なくとも２つの異なるコルチコステロン合成阻害剤と２つの異なるベンゾジアゼピン系薬において、併用薬物療法の効果が観察されることを更に証明する。
【０１１５】
図４は、異なるグループのラットを異なる用量のコカインを自己投与するように訓練した時に、コカイン自己投与に対する無効量のケトコナゾール（例えば12.5 mg/kg, ip）とアルプラゾラム（例えば1 mg/kg, ip）の組合せ剤の効果を調べるために計画された実験の結果を示す。これは、メチラポンとオキサゼパムを使った上記の研究において提示したのと同じ理由で重要である。Ｘ軸上の数字は、自己投与されたコカインの３用量を表す。「Vehicle」は、賦形剤（５％Emulphor／0.9％生理食塩水）を供給した時に自己投与されたコカイン注入の数を表す。「Keto 12.5」は、無効量のケトコナゾール（すなわち12.5 mg/kg, ip）の供給後に自己投与されたコカイン注入の数を表し、「Alp」は無効量のアルプラゾラムの供給後に自己投与されたコカイン注入の数を表す。「Keto/Alp」は、無効量のケトコナゾールとアルプラゾラムの組み合わせでの前処置後に自己投与されたコカイン注入の数を表す。明らかに、この組み合わせは、自己投与に利用可能であったコカインの用量に関係なく、コカイン自己投与を消去レベルにまで減少させた。このことは、併用薬物療法の効果がコカインの摂取または用量を増加させることによって容易に克服できないということを示す。
【０１１６】
コカインの静脈自己投与に対するケトコナゾールとオキサゼパムの効果：これらの実験は、餌強化とコカイン自己投与の交互の多元スケジュールのもとで反応するラットの静脈コカイン自己投与行動に対するケトコナゾールとオキサゼパムの併用の効果を調べるために計画された。図５に関して、バー（「VEH」）は、治療薬に代わり賦形剤（５％Emulphor／0.9％生理食塩水）での前処置後の自己投与されたコカイン注入の数を表す。白抜きのバー（「EXT」）は、「アクティブ」レバー押し反応が生理食塩水の注入のみを生じた時の消去（extinction）の結果を示す。縞模様のバー（「OX」）および薄い陰影付のバー（「KETO」）は、単独での低用量の無効量（オキサゼパム 10 mg/kg, ip；ケトコナゾール 12.5 mg/kg, ip）のオキサゼパムとケトコナゾールでの前処置後の自己投与を表す。これらの用量は、単独で投与した時のコカイン自己投与（または食餌維持反応）に有意な影響を及ぼさなかった。細かい縞模様のバー（「COMBO」）は、併用薬物療法（すなわち、無効量のオキサゼパムとケトコナゾールからなる注入剤）の供給後に自己投与されたコカイン注入の数を表す。図５から分かるように、オキサゼパムとケトコナゾールから成る併用薬物療法が、消去期間の間アクティブレバーが押されて生理食塩水のみが投与される時に観察されたレベルにまで、コカイン自己投与を減らした。併用薬物療法は、食餌維持反応に影響を与えずにコカイン自己投与を消去レベルにまで減少させ、このことは、この配合剤が別の強化子（すなわち餌）への反応またはモチベーションに影響を与えずに、コカイン探索のモチベーションを低下させたことを示唆する。これらのデータは、少なくとも異なるコルチコステロン合成阻害剤と異なるベンゾジアゼピン系薬において、併用薬物療法の効果が観察されることを更に証明する。
【０１１７】
コカインの静脈自己投与に対するCP-154,526とオキサゼパムの効果：
これらの実験は、餌強化とコカイン自己投与の交互の多元スケジュールのもとで反応するラットの静脈コカイン自己投与行動に対するCP-154,526とオキサゼパムの併用の効果を調べるために計画された。結果は、試験した条件下でのベースライン注入に対する百分率（％）として図６に示される。白抜きのバー（「Ext」）は、「アクティブ」レバー押し反応が単に生理食塩水の注入のみを生じた時の消去（extinction）の結果を示す。「CP-high」と表示されたバーは、高用量のCP-154,526（10〜80 mg/kg, ip）での前処置後の自己投与された注入の数を表し、「OX-high 」と表示されたバーは、高用量のオキサゼパム（５〜25 mg, ip）での前処置後の自己投与されたコカイン注入の数を表す。CP-154,526もオキサゼパムも共に、上記の用量で食餌維持反応に影響を及ぼさずにコカイン自己投与を低減させた。「CP-low」および「OX-low」バーは、単独での低用量の無効量（CP-154,526 ５〜25 mg/kg, ip；オキサゼパム５〜25 mg/kg, ip）のCP-154,526とオキサゼパムでの前処置後の反応を表す。そのような用量は、単独で投与した時のコカイン自己投与または食餌維持反応に有意な影響を及ぼさなかった。「COM-low」バーは、併用薬物療法（すなわち、無効量のCP-154,526とオキサゼパムからなる注射剤）の供給後に自己投与されたコカイン注入の数を表す。図６から明らかに分かるように、CP-154,526とオキサゼパムから成る併用薬物療法が、消去期間の間、アクティブレバーが押されて生理食塩水のみが投与される時に観察されたレベルにまで、コカイン自己投与を減らした。この併用薬物療法は、食餌維持反応に影響を与えずにコカイン自己応答を消去レベルにまで減少させ、このことは、この薬剤の組み合わせが別の強化子（例えば餌）への反応またはモチベーションに影響を与えずに、コカイン探索のモチベーションを低下させたことを示唆する。これらのデータは、ベンゾジアゼピン系薬とCRH受容体アンタゴニストの組み合わせにおいて併用薬物用法の効果が観察されることを証明する。
【０１１８】
コカインの静脈自己投与に対するメチラポンとアルプラゾラムの効果：
これらの実験は、餌強化とコカイン自己投与の交互の多元スケジュールのもとで反応するラットの静脈コカイン自己投与行動に対するメチラポンとアルプラゾラムの併用の効果を調べるために計画された。図７に関して、最も左側のバー（「Veh」）は、治療薬に代わり賦形剤（５％Emulphor／0.9％生理食塩水）での前処置後の自己投与されたコカイン注入の数を表す。「Ext」と表示されたバーは、「アクティブ」レバー押し反応が生理食塩水の注入のみを生じた時の消去（extinction）の結果を示す。「Met-H」のバーは、高用量のメチラポン（25〜175 mg/kg, jp）での前処置後に自己投与されたコカイン注入の数を示し；一方「ALP-H」のバーは、高用量のアルプラゾラム（１〜5 mg/kg, ip）
での前処置後に自己投与されたコカイン注入の数を示す。メチラポンもアルプラゾラムも共にそれらの用量で食餌維持反応に影響を及ぼさずにコカイン自己投与を低減させた。
「Met-L」および「ALP-L」バーは、低用量の無効量（メチラポン 25〜50 mg/kg, ip；アルプラゾラム 0.5〜2 mg/kg, ip）のメチラポンとアルプラゾラムでの前処置後の反応を表す。そのような用量は、単独で投与した時のコカイン自己投与または食餌維持反応に有意な影響を及ぼさなかった。「COMBO」バーは、併用薬物療法（すなわち、無効量のメチラポンとアルプラゾラムからなる注入剤）の供給後に自己投与されたコカイン注入の数を表す。メチラポンとアルプラゾラムから成る併用薬物療法が、消去期間の間アクティブレバーが押されて生理食塩水のみが供給される時に観察されたレベルにまで、コカイン自己投与を減らした。この併用薬物療法は、餌維持反応に影響を与えずにコカイン自己投与を消去レベルにまで減少させ、このことは、この薬剤の組み合わせが別の強化子（例えば餌）への反応または動機づけ（モチベーション）に影響を与えずに、コカイン探索の動機付けを減弱させたことを示唆する。
【０１１９】
コカインの静脈自己投与に対するムシモールとCP-154,526の効果：
これらの実験は、餌強化とコカイン自己投与の交互の多元スケジュールのもとで反応するラットの静脈コカイン自己投与行動に対するCP-154,526とムシモールの併用の効果を調べるために計画された。結果を図８に示す。「Ext」と表示されたバーは、「アクティブ」レバー押し反応が生理食塩水の注入のみを生じた時の消去の結果を示す。「Mus-high」のバーは、高用量のムシモール（１〜４ mg/kg, jp）での前処置後に自己投与されたコカイン注入の数を示し；一方「CP-high」のバーは、高用量のCP-154,526（10〜80 mg/kg, ip）での前処置後に自己投与されたコカイン注入の数を示す。ムシモールもCP-154,526も共にそれらの用量で食餌維持反応に影響を及ぼさずにコカイン自己投与を低減させた。「Mus-low」および「CP-low」バーは、低用量の無効量のムシモール（0.5〜2.0 mg/kg, ip）とCP-154,526（５〜25 mg/kg, ip）での前処置後の自己投与を表す。そのような用量は、単独で投与した時のコカイン自己投与または食餌維持反応に有意な影響を及ぼさなかった。「COM-low」バーは、併用薬物療法（すなわち、無効量のムシモールとCP-154,526からなる注入剤）の供給後に自己投与されたコカイン注入の数を表す。図８から分かるように、ムシモールとCP-154,526から成る併用薬物療法が、消去期間の間アクティブレバーが押されて生理食塩水のみが投与される時に観察されたレベルにまで、コカイン自己投与を減らした。この併用薬物療法は、食餌維持反応に影響を与えずにコカイン自己投与を消去レベルにまで減少させたことから、この合剤が別の強化子（すなわち餌）への反応または動機づけに影響を与えずに、コカイン探索の動機付けを減弱させたことが示唆される。
【０１２０】
コカインの静脈自己投与に対するムシモールとメチラポンの効果：
これらの実験は、餌強化とコカイン自己投与の多元の交互スケジュールのもとで反応するラットの静脈コカイン自己投与行動に対するムシモールとメチラポンの併用の効果を調べるために計画された。結果を図９に示す。「Ext」と表示されたバーは、「アクティブ」レバー押し反応が生理食塩水の注入のみを生じた時の消去の結果を示す。「Mus-high」のバーは、高用量のムシモール（１〜４ mg/kg, jp）での前処置後に自己投与されたコカイン注入の数を示し；一方「Met-high」のバーは、高用量のメチラポン（25〜175 mg/kg, ip）での前処置後に自己投与されたコカイン注入の数を示す。ムシモールもメチラポンも共にそれらの用量で食餌維持反応に影響を及ぼさずにコカイン自己投与を低減させた。「Mus-low」および「Met-low」バーは、低用量の無効量のムシモール（0.5〜2.0 mg/kg, ip）とメチラポン（25〜50 mg/kg, ip）での前処置後の自己投与を表す。そのような用量は、単独で投与した時のコカイン自己投与または食餌維持反応に有意な影響を及ぼさなかった。「COM-low」バーは、併用薬物療法（すなわち、無効量のムシモールとメチラポンからなる注入剤）の供給後に自己投与されたコカイン注入の数を表す。図９から分かるように、ムシモールとメチラポンから成る併用薬物療法が、消去期間の間アクティブレバーが押されて生理食塩水のみが投与される時に観察されたレベルにまで、コカイン自己投与を減らした。この併用薬物療法は、食餌維持反応に影響を与えずにコカイン自己投与を消去レベルにまで減少させたことから、GABAA受容体アゴニストとコルチコステロン合成阻害剤の合剤が別の強化子（すなわち餌）への反応または動機づけに影響を与えずに、コカイン探索の動機付けを減弱させたことが示唆される。
【０１２１】
消滅したコカイン探索行動の刺激誘発性再発に対するメチラポンの慢性注入の効果：これらの実験は、ラットにおける消滅したコカイン探索行動の刺激誘発性再発に対するメチラポンの慢性投与の効果を調べるために計画した。コカイン探索行動の再発モデルを用いた。これは、併用薬物療法が一般に慢性的な基準でコカイン依存者に投与されることになっているために重要な実験である。図11に関して、「SA」と表示されたバーは、コカイン自己投与の間に「アクティブ」レバーが押される反応の数を表す。「EXT」と表示されたバーは、このレバー押し反応が生理食塩水の注入のみを生じさせる消去過程の「アクティブ」レバーの反応数を表す。「VEH」と表示されたバーは、賦形剤（5％Emulphor／0.9％生理食塩水）での前処置後の再発試験の間に行われる「アクティブ」レバー押し反応を表す。「Metyrapone」と表示されたバーは、メチラポンの慢性投与（50 mg/kg, ip, １日１回14日間）後の再発試験の間に行われる「アクティブ」レバー押しの反応数を表す。図11から分かるように、メチラポンの慢性投与は、消去期間の間の生理食塩水のみが投与されてアクティブレバーが押される時に観察されたレベルにまで、コカイン探索行動を低減させた。これらのデータは、メチラポンが慢性投与後のコカイン探索行動の再発（再燃）を抑制するのに依然有効であることを証明する。
【０１２２】
消滅したコカイン探索行動の刺激誘発性再発に対するCP-154,526とオキサゼパムの併用の効果：これらの実験は、ラットにおける消滅したコカイン探索行動の刺激誘発性再発に対するCP-154,526とオキサゼパムの併用の効果を調べるために計画した。図12に関して、「Self-Admin」と表示されたバーのセットは、コカイン自己投与の間の「アクティブ」レバーと第二の「インアクティブ」レバーに行われる反応数を表す。このセットの中の最初の２つのバーは、再発試験の間に治療薬として賦形剤（５％Emphor／0.9％生理食塩水）が最終的に投与されたラットの反応を表す。三番目と四番目のバーは、再発試験の間に最終的に併用薬物療法（すなわち、コカイン自己投与実験において決定された無効量のCP-154,526とオキサゼパムからなる注射剤）を受けたラットの反応を表す。ラットに再発試験のセッションの開始の30分前に、賦形剤または併用治療薬を１回だけ注射した。自己投与および消去（extinction）の間の反応は図12だけに与えられ、この図は処置群間の反応に全く有意な差がなかったことを示す。どの時点でも、「インアクティブ」レバーへの反応は何もプログラム可能な結果を生じなかった。「Extinction」と表示された第二セットのバーは、「アクティブ」レバー押し反応が生理食塩水の注入のみを提供する消去の期間の「アクティブ」レバーと「インアクティブ」レバー押しの反応数を表す。「Reinstatement」と表示された第三セットのバーは、併用治療薬（すなわち、コカイン自己投与実験で決定された無効量のCP-154,526とオキサゼパムからなる注射剤）の投与後の再発試験の間の「アクティブ」レバーと「インアクティブ」レバー押しの反応数を表す。明らかに分かるように、CP-156,526とオキサゼパムからなる併用薬物療法は、消去過程のアクティブレバーが押されると生理食塩水が供給される時に観察されたレベルにまで、コカイン探索行動（すなわち再発期間のアクティブレバー押し反応）を低減させた。この併用薬物療法は、食餌維持反応に影響を及ぼすことなく消去レベルにまで再発（再燃）を減弱させた。このことから、この合剤が別の強化子（すなわち餌）に対する反応またはモチベーションに影響を及ぼさずに、コカインを探索するモチベーションを減弱させたことが示唆される。
【０１２３】
コカイン、メチラポンおよびオキサゼパムの間に薬物動態的な相互作用のエビデンスなし：成体の雄Wistarラット（90〜120日齢）に、慢性留置頸静脈カテーテルを埋め込み、次いで手術から回復させた。試験当日に、コカイン注射剤を投与する30分前にオキサゼパムとメチラポンの様々な組合せ剤（図14の表に示されるような）または賦形剤（5％Emulphor／生理食塩水）の腹腔内注射でラットを前処置した。オキサゼパム／メチラポン合剤は、それらの合剤が食餌維持反応に影響を与えずにコカイン自己投与または消滅したコカイン探索の刺激誘発性再発を減少させることを実証した行動研究の中から選択された。この配合剤または賦形剤の注射の30分後に、ラットに１時間の間２分毎にコカイン（0.25 mg/kg/注入）の静注を行った。コカインの最終注射後、コカイン並びにその代謝産物であるエクゴニンメチルエステルとベンゾイルエクゴニンの分析用にカテーテルから採血した。メチラポンおよびメチラポール並びにオキサゼパムの濃度も測定した。すべての薬剤濃度はGCMS法を使って測定した。この試験の結果は、オキサゼパムとメチラポンの併用がコカインまたはその代謝産物の血漿濃度に対して全く効果がないことを示した。この試験はまた、メチラポンとオキサゼパムが互いの血漿濃度に影響を与えないことも示した。これらのデータは、ラットにおいて観察される行動への効果が、種々の薬剤間の薬物動態的な相互作用の結果によるものでないことを示唆する。
【０１２４】
抑うつの動物モデルである強制水泳試験におけるオキサゼパムとメチラポンの併用：強制水泳試験（Forced Swim Test）は、薬剤の抗うつ効果を評価するための予測妥当性を有する動物モデルである。対象動物を逃避不能な命に関わる状況に暴露して学習性無力を惹起させる。これを果たすために、ラットを水で満たしたシリンダーの中に置き、そこから逃避できず水に浮かんでいるために泳がなければならない状況にした。ラットがその状況を希望がないと「自覚する（realize）」時点で、絶望に似た行動が現れ、逃避しようとしたり泳いだりしようとするよりむしろ、動かなくなる。この無動姿勢にある時間が、絶望として評価される行動である。ベンゾジアゼピン系薬であるオキサゼパムと、コルチコステロン合成の11-β阻害剤であるメチラポンは、それぞれ抗不安効果および抗うつ効果を有することが分かっている。単独でまたは一緒に急性的にまたは慢性的に投与されるオキサゼパムとメチラポンの潜在的抗うつ性を、FSTを使って雄Wistarラットにおいて評価した。ラットに薬剤の単剤（5 mg/kgまたは10 mg/kgのオキサゼパム、25 mg/kgまたは50 mg/kgメチラポン）または２つの合剤を、試験後第１日に１回と、試験前の第２日（急性投与）に１回または第１日に試験を開始する前の14日間（慢性投与）注射した。単剤または合剤での薬剤の急性および慢性投与は、FSTでの無動状態を減少させるのに有効であった。このことは、この薬物療法が抗うつ活性を有することを示す。
【０１２５】
学習性無力は、抑うつのモデルとしてFSTを使用する妥当性をベースとした構成概念である。ヒトでは、学習性無力はしばしば抑うつの症状として現れ、対処能力の低下として現れる。この理由のため、FSTでの無動状態の時間を減らす効果をもつ薬剤は、ヒトの抑うつモデルに認められる対処能力の低下を軽減するための候補として可能性があると仮定される。別の実験において、オキサゼパムとメチラポンをFSTにおいて単独でまたは併用して試験し、それらの薬剤が抗うつ活性を示すかどうかを調べた。
【０１２６】
試験のパラメーターは前に概説した通りであった。より詳しくは、体重275〜400グラムのハーラン（Harlan）からの雄Wistarラットを使った。試験を行う前に到着後少なくとも１日動物資源施設（Animal Resources Facility）でラットを順応させておいた。FSTを実施するために、プレキシグラス（Plexiglas）シリンダー（高さ40 cm×直径18 cm）に新鮮な25℃の水を20 cmの深さにまで満たした。これは、ラットが底に触れないくらい十分な深さであり、その上ラットが逃避しないように上縁から十分離れている。ラットに賦形剤、オキサゼパムとメチラポンの単剤またはその組合せ剤を、試験後第１日と、試験前の第２日（急性投与）に１回または第１日に試験を開始する前の14日間（慢性投与）注射した。第１日にラットをカゴから取り出し、水に入れ、15分間観察した。一般に、最初の15分間、ラットは足を水面の上に向けてばたつかせながら泳ぎ、鼻をクンクンさせ、水に飛び込み、シリンダーから外に飛び出そうとした。そのような行動は回避行動と見なされた。回避行動の後に、ラットが逃避を試みるのを中断することにより特徴づけられる或る時間があった。一般的に、ラットは立ち泳ぎをし、かろうじて頭を水面上に保つ程度の活力を使い、または鼻だけが水面上にくるように浮遊していた。この行動の第二相を無動姿勢とみなした。回避行動と無動姿勢にある時間の長さを記録した。次いでラットを水から取り出し、タオルで乾かし、もとのケージに戻した。第２日にこの手順を５分間繰り返し、回避行動と無動姿勢に従事している時間の長さを記録した。第２日の無動状態の時間を異なる個体群間で比較した。一方向ANOVAを用いてｐ＜0.05で投薬群を賦形剤注入対照群と比較した。賦形剤群に比較して投薬群の無動時間が統計的に有意であった場合、薬剤の併用が抗うつ薬様効果を示すと見なした。
【０１２７】
オキサゼパムとメチラポンの慢性投与の効果は、併用処置群においてより顕著であった。個々の薬剤を投与した群のうち唯一の群Met50群だけが無動時間の軽減を示した。これは、両薬剤が同時に投与されると相乗作用を有することを示唆している。この相乗作用は、おそらく、メチラポンの代謝副産物により誘導されるGABAA受容体へのオキサゼパムのアゴニスト作用の増加により説明することができる。メチラポンがコルチコステロン合成を阻害する時、コルチコステロンの上流の２つの前駆体、11−デオキシコルチコステロン（11-DOC）とプロゲステロン（Prog）の濃度が増加する。この増加は、アロプレグナノロンやテトラヒドロデオキシコルチコステロンのようなGABAA活性神経ステロイドの生産の方に経路を切り替えるだろう。それらの２つの神経ステロイドはGABAA受容体に結合すると、細胞内へのClの流入を増加させ、過分極と神経興奮性低下を引き起こす。可能な転帰（アウトカム）は、オキサゼパム（直接結合による）とメチラポン（神経ステロイドを介して間接的に）がともにアロステリック機序を介してGABAAの流れに影響を及ぼす。作用機序に関係なく、Ox10／Met50の組み合わせが無動時間の最大減少を引き起こしたことは明白である。慢性投与群、特にOxまたはMetの一方のみを投与した群に耐性が形成されたと思われる。これは、それらの群の平均が賦形剤に等しいかまたはそれを上回ったという知見により明らかである。
【０１２８】
実施例２
ヒトにおけるメチラポン（MET）とオキサゼパム（OX）の配合剤の安全性と薬物動態を評価するために実験を計画した。この実験で投与されるMET／OX組合せ剤（ここではEMB-001と称する）は、コルチゾール合成阻害剤であるメチラポン（MET）と、ベンゾジアゼピン系薬であるオキサゼパム（OX）との組合せ剤である。METは下垂体機能の試験薬として１日限りの使用がFDAにより認可されており、OXは様々な不安障害の急性および慢性処置への使用が認可されている。しかしどちらの薬剤も依存症または物質乱用障害の治療用には現在認可されていない。以前の動物実験では、EMB-001はラットにおけるコカインおよびニコチン自己投与を低減し、コカインおよびメタンフェタミン刺激反応性を減弱させた。コカイン依存性被験者におけるヒト試験において、EMB-001はコカイン使用を有意に減少させた。
【０１２９】
方法：これは単回および複数回漸増投与試験であった。喫煙する年齢18〜65歳の健康なボランティアに、第１日に単回AM投与、第３〜９日にBID投与および第10日に単回AM投与を受けてもらった。８人の被験者（薬剤６人、プラセボ２人）からなる３つの順次投薬群に、それぞれ次の用量のMETとOXを投与した：270 mgと12 mg；540 mgと24 mg；および720 mgと24 mg。BID投与日にはそれらの量を二倍にして合計１日量を倍増した。第一義的転帰は、MET、それの活性代謝産物（メチラポール）およびOXの安全性と薬物動態であった。安全性尺度はバイタルサイン、ECGおよび標準安全性検査値を含んだ。コルチゾールおよび他のHPA軸パラメーターを試験中入念にモニターした。
【０１３０】
結果：最も頻繁な有害事象は眠気であった。大部分の有害事象は穏和であり、すべてが軽度または中程度であった。重篤な有害事象は１つもなく、有害事象による中断もなかった。初回投与後２〜４時間は血清コルチゾールが減少したが、これはMetの既知薬理学と一致しており、翌朝以降および追跡調査時にはベースライン値に戻った。バイタルサイン、ECGまたは別の安全性検査値には臨床的に有意な変化は見られなかった。投薬群２（Dose Cohort 2）中の１被験者は、スクリーニング値に比較して＞50％の早朝コルチゾール値の減少があったが、無症候であった。試験薬を１日与えずにおき（第８日）、その間のACTH刺激試験は有意な副腎反応を示した。投薬を再開し、次いで被験者は試験を終えた。MET、OXおよびメチラポールの半減期はそれぞれ約２、7.5および８時間であった。用量を増加させて暴露を増やした。反復投与では中程度の累積が見られた。
【０１３１】
結論：EMB-001は本試験において十分忍容性があり、新たな安全上の警告は同定されなかった。薬物動態結果は、１日２回投与が、物質乱用障害や他の依存症の治療の有効性のための適当な暴露期間を提供しうることを示唆している。
【０１３２】
実施例３
【表１】
2019504867.tif 000003
【０１３３】
実施例４
【表２】
2019504867.tif 000004
【０１３４】
実施例５
【表３】
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【０１３５】
・試験中コルチゾールとACTHを評価した。
・ある被験者にはコルチゾールの低下が認められたが、試験薬または治療の中止が必要な副腎機能障害の症状は全く認められなかった。
・投薬群２（Dose Cohort 2）中の１人の被験者にスクリーニング値に対して＞50％の朝コルチゾール値の増加が見られた。試験薬を１日与えずに置き（第８日）、その後のACTH刺激試験は十分な副腎反応を呈した。翌日投薬を再開し、被験者は試験を終えた。
・日常副腎機能不全検査チェックリスト（AIRC）の返答には、全く臨床上有意な徴候または症状を示さなかった。
・投薬後２〜４時間はコルチゾールが用量依存的に低下したが、翌朝およびBID投薬の週の後の早朝には正常に戻った。
【０１３６】
実施例６
【表４】
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【０１３７】
本発明の諸種の態様を記載してきた。それにもかかわらず、本発明の精神および範囲から逸脱せずに様々な変更を成しうることは理解されよう。従って、別の態様も本発明の請求の範囲の中に含まれる。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【国際調査報告】
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