(57)【要約】  安定な長期間の貯蔵が可能である高濃度抗体製剤が開示される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
患者への皮下投与に好適な抗体製剤であって、
ａ）  約５０〜２５０ｍｇ／ｍＬの抗ＣＸＣＲ５抗体またはそのフラグメント；
ｂ）  クエン酸緩衝液；
ｃ）  約０．０１％（ｗ／ｖ）を超える界面活性剤；
ｄ）  約５０ｍＭを超えるアミノ酸；および
ｅ）  約１％を超えるスクロース
を含み、
ここで、該製剤のｐＨは、約ｐＨ６である、前記抗体製剤。
【請求項２】
抗ＣＸＣＲ５抗体またはそのフラグメントが：
（ａ）配列番号１１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン、および配列番号１２のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン；
（ｂ）ＲＳＳＫＳＬＬＨＳＳＧＫＴＹＬＹ（配列番号５８）、ＲＭＳＮＬＡＳ（配列番号５９）、ＭＱＨＬＥＹＰＹＴ（配列番号６０）、ＧＦＳＬＩＤＹＧＶＮ（配列番号６１）、ＶＩＷＧＤＧＴＴＹ（配列番号６２）、およびＩＶＹ（配列番号６３）のアミノ酸配列；
（ｃ）配列番号１３、配列番号１４、もしくは配列番号１５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン、および配列番号１６のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン；
（ｄ）ＲＳＳＫＳＬＬＨＳＳＧＫＴＹＬＹ（配列番号５８）、ＲＬＳＮＬＡＳ（配列番号６４）、ＭＱＨＬＥＹＰＹＴ（配列番号６０）、ＧＦＳＬＩＤＹＧＶＮ（配列番号６１）、ＶＩＷＧＤＧＴＴＹ（配列番号６２）、およびＩＶＹ（配列番号６３）のアミノ酸配列；
（ｅ）ＲＳＳＫＳＬＬＨＳＳＧＫＴＹＬＹ（配列番号５８）、ＲＬＳＳＮＬＡＳ（配列番号６５）、ＭＱＨＬＥＹＰＹＴ（配列番号６０）、ＧＦＳＬＩＤＹＧＶＮ（配列番号６１）、ＶＩＷＧＤＧＴＴＹ（配列番号６２）、およびＩＶＹ（配列番号６３）のアミノ酸配列；
（ｆ）配列番号１７、配列番号１９、もしくは配列番号２１のアミノ酸配列を含む可変軽鎖（ＶＬ）、および配列番号２３のアミノ酸配列を含む可変重鎖（ＶＨ）；
（ｇ）配列番号３０、配列番号３１、もしくは配列番号３２のアミノ酸配列を含む可変軽鎖、および配列番号３３もしくは配列番号３４のアミノ酸配列を含む可変重鎖；
（ｈ）ＲＳＳＫＳＬＬＨＳＳＧＫＴＹＬＹ（配列番号５８）、ＲＭＳＮＬＡ（配列番号６６）、ＭＱＨＬＥＹＰＹＴ（配列番号６０）、ＧＦＳＬＩＤＹＧＶＮ（配列番号６１）、ＶＩＷＧＤＧＴＴＹ（配列番号６２）、およびＩＶＹ（配列番号６３）のアミノ酸配列；
（ｉ）ＲＳＳＫＳＬＬＨＳＳＧＫＴＹＬＹ（配列番号５８）、ＲＬＳＮＬＡ（配列番号６７）、ＭＱＨＬＥＹＰＹＴ（配列番号６０）、ＧＦＳＬＩＤＹＧＶＮ（配列番号６１）、ＶＩＷＧＤＧＴＴＹ（配列番号６２）、およびＩＶＹ（配列番号６３）のアミノ酸配列；
（ｊ）ＲＳＳＫＳＬＬＨＳＳＧＫＴＹＬＹ（配列番号５８）、ＲＬＳＳＬＡ（配列番号６８）、ＭＱＨＬＥＹＰＹＴ（配列番号６０）、ＧＦＳＬＩＤＹＧＶＮ（配列番号６１）、ＶＩＷＧＤＧＴＴＹ（配列番号６２）、およびＩＶＹ（配列番号６３）のアミノ酸配列；
（ｋ）配列番号３５のアミノ酸配列を含む可変軽鎖、および配列番号３７のアミノ酸配列を含む可変重鎖；
（ｌ）配列番号３９、配列番号４１、もしくは配列番号４３のアミノ酸配列を含む可変軽鎖、および配列番号４５もしくは配列番号４７のアミノ酸配列を含む可変重鎖；
（ｍ）配列番号５５のアミノ酸配列を含む可変軽鎖、および配列番号５６もしくは配列番号５７のアミノ酸配列を含む可変重鎖；または、
（ｎ）ＲＳＳＫＳＬＬＨＳＳＧＫＴＹＬＹＷ（配列番号６９）、ＲＭＳＮＬＡ（配列番号６６）、ＭＱＨＬＥＹＰＹＴ（配列番号６０）、ＧＦＳＬＩＤＹＧＶＮ（配列番号６１）、ＶＩＷＧＤＧＴＴＹ（配列番号６２）、およびＩＶＹ（配列番号６３）のアミノ酸配列
を含む、請求項１に記載の抗体製剤。
【請求項３】
アミノ酸がアルギニンまたはメチオニンである、請求項１に記載の抗体製剤。
【請求項４】
界面活性剤がポリソルベートである、請求項１に記載の抗体製剤。
【請求項５】
患者への皮下投与に好適な抗体製剤であって、
ａ）  約１００〜約１７５ｍｇ／ｍＬの抗体；
ｂ）  約１０ｍＭのクエン酸緩衝液；
ｃ）  約０．１％（ｗ／ｖ）の界面活性剤；
ｄ）  約２００ｍＭのアルギニン；および
ｅ）  約４．５〜９％のスクロース
を含み、
ここで、該製剤のｐＨは、約ｐＨ６である、前記抗体製剤。
【請求項６】
抗体が完全なヒト抗ＣＸＣＲ５抗体である、請求項５に記載の抗体製剤。
【請求項７】
抗体が、配列番号３３のアミノ酸配列を含む重鎖、および配列番号３２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、請求項６に記載の抗体製剤。
【請求項８】
抗体が単鎖Ｆｖを含む、請求項５に記載の抗体製剤。
【請求項９】
抗体が、ヒトＣＸＣＲ５の細胞外ドメインに特異的に結合する単離された抗体またはそのフラグメントである、請求項５に記載の抗体製剤。
【請求項１０】
単離された抗体またはそのフラグメントが、ＲＳＳＫＳＬＬＨＳＳＧＫＴＹＬＹ（配列番号５８）、ＲＬＳＳＬＡ（配列番号６８）、ＭＱＨＬＥＹＰＹＴ（配列番号６０）、ＧＦＳＬＩＤＹＧＶＮ（配列番号６１）、ＶＩＷＧＤＧＴＴＹ（配列番号６２）、およびＩＶＹ（配列番号６３）のアミノ酸配列を含む、請求項９に記載の抗体製剤。
【請求項１１】
界面活性剤がポリソルベートである、請求項５に記載の抗体製剤。
【請求項１２】
ポリソルベートがポリソルベート２０またはポリソルベート８０である、請求項５に記載の抗体製剤。
【請求項１３】
抗体製剤であって：
ａ）  約１７５ｍｇ／ｍＬのヒト化ＩｇＧ４抗ＣＸＣＲ５抗体；
ｂ）  約１０ｍＭのクエン酸緩衝液；
ｃ）  約１．０ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０；
ｄ）  約２００ｍＭのアルギニンＨＣｌ；および
ｅ）  約４５ｍｇ／ｍＬのスクロース
を含み、
ここで、該製剤のｐＨは、約ｐＨ６である、前記抗体製剤。
【請求項１４】
ヒト化ＩｇＧ４抗ＣＸＣＲ５抗体が、配列番号３３のアミノ酸配列を含む重鎖、および配列番号３２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、請求項１３に記載の抗体製剤。
【請求項１５】
請求項１〜１４のいずれか１項に記載の抗体製剤を含む容器。
【請求項１６】
容器が、プレフィルドシリンジ、バイアル、または自動注射器である、請求項１５に記載の容器。
【請求項１７】
凍結乾燥形態である請求項１〜１４のいずれか１項に記載の抗体製剤を含む容器。
【請求項１８】
請求項１５、１６、または１７のいずれか１項に記載の容器と、抗体製剤の投与および使用のためにラベルまたは説明書とを含むキット。
【請求項１９】
投与が注射によるものである、請求項１８に記載のキット。
【請求項２０】
ヒトまたは動物の体の診断または治療の方法において使用するための請求項１〜１４のいずれか１項に記載の抗体製剤。
【請求項２１】
請求項１〜１４のいずれか１項に記載の抗体製剤を、関節リウマチを治療する必要のある対象に投与することを含む、関節リウマチを治療するための方法。
【請求項２２】
凍結乾燥形態である請求項１〜１４のいずれか１項に記載の抗体製剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１６年７月５日に出願された米国仮特許出願第６２／３５８，４０４号の権益を主張する。本出願はまた、２０１７年８月３０日に出願された欧州特許出願第１６３０６０９０．８号の権益を主張する。これらの出願の各々は、参照によりその全体を本明細書に組み入れる。
【０００２】
本発明は、ガラス容器における延長した貯蔵安定性を有する抗体製剤に関する。
【背景技術】
【０００３】
バーキットリンパ腫受容体（ＢＬＲ１）、ＣＤ１８５、ＭＤＲ１５、およびＭＧＣ１１７３４７としても知られるＣＸＣＲ５は、ＣＸＣケモカイン受容体ファミリーのメンバーであるＧタンパク質共役型受容体である。ＣＸＣＲ５は、末梢リンパ節を欠き、パイエル板が少なく、かつＢ細胞レベルが低いＣＸＣＲ５ノックアウトマウスによって実証されているように、Ｂ細胞の遊走および組織局在に影響を及ぼす。ＢＬＣとしても知られるＣＸＣＬ１３はＣＸＣＲ５のリガンドである。ＣＸＣＬ１３はＢ細胞の化学誘引物質である。抗ＣＸＣＲ５結合剤は、治療上適切であり、それらは、炎症性疾患の治療のために対象、特にヒト対象に投与することができる薬物製品として製剤化されてきた。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
静脈内または皮下投与に好適な抗ＣＸＣＲ５結合剤を含む医薬製剤は、高濃度（約２０ｍｇ／ｍＬ〜約１００〜１５０ｍｇ／ｍＬ、および２５０ｍｇ／ｍＬまたはそれ以上まででさえある）であるべきである。しかしながら、そのような医薬製剤に伴う、高粘度、ｐＨシフト、および溶液色の変化を含む多くの問題は、高濃度において起こり得る。さらに、高い結合剤濃度において、可視および非可視（sub-visible）の粒子、結合剤の凝集体、および／または結合剤の半分子が形成される機会が増加する。なおさらに、高い結合剤濃度において、医薬製剤とその貯蔵容器とが相互作用する機会が増加する。したがって、これらの制限を回避する改善された医薬製剤への必要性が未だ存在する。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
ガラス貯蔵容器における増加した貯蔵安定性を有する抗ＣＸＣＲ５抗体医薬製剤が本明細書において提供される。
【０００６】
第１の態様において、本発明は、患者への皮下投与に好適な抗体製剤を提供する。製剤は、約５０〜約２５０ｍｇ／ｍＬの抗ＣＸＣＲ５抗体；クエン酸緩衝液；約０．０１％（ｗ／ｖ）を超える界面活性剤；約５０ｍＭを超えるアミノ酸；および約１％を超えるスクロースを含む。製剤のｐＨは、約ｐＨ６である。
【０００７】
第１の態様の一実施形態において、抗ＣＸＣＲ５抗体またはそのフラグメントは、（ａ）配列番号１１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン、および配列番号１２のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン；（ｂ）ＲＳＳＫＳＬＬＨＳＳＧＫＴＹＬＹ（配列番号５８）、ＲＭＳＮＬＡＳ（配列番号５９）、ＭＱＨＬＥＹＰＹＴ（配列番号６０）、ＧＦＳＬＩＤＹＧＶＮ（配列番号６１）、ＶＩＷＧＤＧＴＴＹ（配列番号６２）、およびＩＶＹ（配列番号６３）のアミノ酸配列；（ｃ）配列番号１３、配列番号１４、もしくは配列番号１５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン、および配列番号１６のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン；（ｄ）ＲＳＳＫＳＬＬＨＳＳＧＫＴＹＬＹ（配列番号５８）、ＲＬＳＮＬＡＳ（配列番号６４）、ＭＱＨＬＥＹＰＹＴ（配列番号６０）、ＧＦＳＬＩＤＹＧＶＮ（配列番号６１）、ＶＩＷＧＤＧＴＴＹ（配列番号６２）、およびＩＶＹ（配列番号６３）のアミノ酸配列；（ｅ）ＲＳＳＫＳＬＬＨＳＳＧＫＴＹＬＹ（配列番号５８）、ＲＬＳＳＮＬＡＳ（配列番号６５）、ＭＱＨＬＥＹＰＹＴ（配列番号６０）、ＧＦＳＬＩＤＹＧＶＮ（配列番号６１）、ＶＩＷＧＤＧＴＴＹ（配列番号６２）、およびＩＶＹ（配列番号６３）のアミノ酸配列；（ｆ）配列番号１７、配列番号１９、もしくは配列番号２１のアミノ酸配列を含む可変軽鎖（ＶＬ）、および配列番号２３のアミノ酸配列を含む可変重鎖（ＶＨ）；（ｇ）配列番号３０、配列番号３１、もしくは配列番号３２のアミノ酸配列を含む可変軽鎖、および配列番号３３もしくは配列番号３４のアミノ酸配列を含む可変重鎖；（ｈ）ＲＳＳＫＳＬＬＨＳＳＧＫＴＹＬＹ（配列番号５８）、ＲＭＳＮＬＡ（配列番号６６）、ＭＱＨＬＥＹＰＹＴ（配列番号６０）、ＧＦＳＬＩＤＹＧＶＮ（配列番号６１）、ＶＩＷＧＤＧＴＴＹ（配列番号６２）、およびＩＶＹ（配列番号６３）のアミノ酸配列；（ｉ）ＲＳＳＫＳＬＬＨＳＳＧＫＴＹＬＹ（配列番号５８）、ＲＬＳＮＬＡ（配列番号６７）、ＭＱＨＬＥＹＰＹＴ（配列番号６０）、ＧＦＳＬＩＤＹＧＶＮ（配列番号６１）、ＶＩＷＧＤＧＴＴＹ（配列番号６２）、およびＩＶＹ（配列番号６３）のアミノ酸配列；（ｊ）ＲＳＳＫＳＬＬＨＳＳＧＫＴＹＬＹ（配列番号５８）、ＲＬＳＳＬＡ（配列番号６８）、ＭＱＨＬＥＹＰＹＴ（配列番号６０）、ＧＦＳＬＩＤＹＧＶＮ（配列番号６１）、ＶＩＷＧＤＧＴＴＹ（配列番号６２）、およびＩＶＹ（配列番号６３）のアミノ酸配列；（ｋ）配列番号３５のアミノ酸配列を含む可変軽鎖、および配列番号３７のアミノ酸配列を含む可変重鎖；（ｌ）配列番号３９、配列番号４１、もしくは配列番号４３のアミノ酸配列を含む可変軽鎖、および配列番号４５もしくは配列番号４７のアミノ酸配列を含む可変重鎖；（ｍ）配列番号５５のアミノ酸配列を含む可変軽鎖、および配列番号５６もしくは配列番号５７のアミノ酸配列を含む可変重鎖；または、（ｎ）ＲＳＳＫＳＬＬＨＳＳＧＫＴＹＬＹＷ（配列番号６９）、ＲＭＳＮＬＡ（配列番号６６）、ＭＱＨＬＥＹＰＹＴ（配列番号６０）、ＧＦＳＬＩＤＹＧＶＮ（配列番号６１）、ＶＩＷＧＤＧＴＴＹ（配列番号６２）、およびＩＶＹ（配列番号６３）のアミノ酸配列を含む。
【０００８】
第１の態様の別の実施形態において、アミノ酸はアルギニンまたはメチオニンである。
【０００９】
第１の態様の一実施形態において、界面活性剤はポリソルベートである。
【００１０】
第２の態様において、本発明は、患者への皮下投与に好適な抗体製剤を提供する。製剤は、約１００〜約１７５ｍｇ／ｍＬの抗体；約１０ｍＭのクエン酸緩衝液；約０．１％（ｗ／ｖ）の界面活性剤；約２００ｍＭのアルギニン；および約４．５〜９％スクロースを含む。製剤のｐＨは、約ｐＨ６である。
【００１１】
第２の態様の一実施形態において、抗体は、完全なヒト抗ＣＸＣＲ５抗体である。
【００１２】
第２の態様の別の実施形態において、抗体は、配列番号３３のアミノ酸配列を有する重鎖、および配列番号３２のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。
【００１３】
第２の態様のさらなる実施形態において、抗体は単鎖Ｆｖを含む。
【００１４】
第２の態様の別の実施形態において、抗体は、ヒトＣＸＣＲ５の細胞外ドメインに特異的に結合する単離された抗体またはそのフラグメントである。
【００１５】
第２の態様の一実施形態において、単離された抗体またはそのフラグメントは、ＲＳＳＫＳＬＬＨＳＳＧＫＴＹＬＹ（配列番号５８）、ＲＬＳＳＬＡ（配列番号６８）、ＭＱＨＬＥＹＰＹＴ（配列番号６０）、ＧＦＳＬＩＤＹＧＶＮ（配列番号６１）、ＶＩＷＧＤＧＴＴＹ（配列番号６２）、およびＩＶＹ（配列番号６３）のアミノ酸配列を含む。
【００１６】
第２の態様の一実施形態において、界面活性剤はポリソルベートである。
【００１７】
第２の態様の別の実施形態において、ポリソルベートは、ポリソルベート２０またはポリソルベート８０である。
【００１８】
第３の態様において、本発明は、約１７５ｍｇ／ｍＬのヒト化ＩｇＧ４抗ＣＸＣＲ５抗体；約１０ｍＭのクエン酸緩衝液；約１．０ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０；約２００ｍＭのアルギニンＨＣｌ；および約４５ｍｇ／ｍＬのスクロースを含む抗体製剤を提供する。製剤のｐＨは、約ｐＨ６である。
【００１９】
第３の態様の一実施形態において、ヒト化ＩｇＧ４抗ＣＸＣＲ５抗体は、配列番号３３のアミノ酸配列を有する重鎖、および配列番号３２のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。
【００２０】
第４の態様において、本発明は、先行する態様または実施形態のいずれかによる抗体製剤を含む容器を提供する。
【００２１】
第４の態様の一実施形態において、容器は、プレフィルドシリンジ、バイアル、または自動注射器である。
【００２２】
第４の態様の別の実施形態において、容器は、凍結乾燥形態である先行する態様または実施形態のいずれかによる抗体製剤を含む。
【００２３】
第５の態様において、本発明は、第４の態様およびそのいずれかの実施形態の容器と、抗体製剤の投与および使用のためのラベルまたは説明書とを含むキットを提供する。
【００２４】
第５の態様の一実施形態において、投与は注射による。
【００２５】
第６の態様において、本発明は、ヒトまたは動物の体の診断または治療の方法において使用するための、先行する態様または実施形態のいずれかによる抗体製剤を提供する。
【００２６】
第７の態様において、本発明は、先行する態様または実施形態のいずれかによる抗体製剤を、関節リウマチを治療する必要のある対象に投与することを含む、関節リウマチを治療するための方法を提供する。
【００２７】
第８の態様において、本発明は、凍結乾燥形態である先行する態様または実施形態のいずれかによる抗体製剤を提供する。
【図面の簡単な説明】
【００２８】
【図１】図１は第１の抗ＣＸＣＲ５抗体製剤のプラセボのろ過後のセルロースフィルターの顕微鏡写真である。倍率は５０倍である。
【図２】図２は第２の抗ＣＸＣＲ５抗体製剤のプラセボのろ過後のセルロースフィルターの顕微鏡写真である。倍率は５０倍である。
【図３】図３は第３の抗ＣＸＣＲ５抗体製剤のプラセボのろ過後のセルロースフィルターの顕微鏡写真である。倍率は５０倍である。
【図４】図４は、Ｎａｌｇｅｎｅボトルに貯蔵された第１の抗ＣＸＣＲ５抗体薬物製品（ＤＰ；ＳＡＲ１１３２４４）のろ過後のセルロースフィルターの顕微鏡写真である。倍率は５０倍である。
【図５】図５は、２００倍の倍率での図４のセルロースフィルターの顕微鏡写真である。
【図６】図６は第２の抗ＣＸＣＲ５抗体ＤＰのろ過後のセルロースフィルターの顕微鏡写真である。倍率は５０倍である。
【図７】図７は第１の対照の抗ＣＸＣＲ５抗体ＤＰのろ過後のセルロースフィルターの顕微鏡写真である。倍率は５０倍である。第１の対照の抗ＣＸＣＲ５抗体ＤＰは、第１の抗ＣＸＣＲ５抗体と類似の粒子形成を示すが、スターダスト粒子とは類似しない、「スターダスト（Stardust）非含有」対照製剤（ＳＡＲ２５２０６７）である。そのような事象はスターダスト粒子分析の困難さを示している。
【図８】図８は、２００倍の倍率での図７のセルロースフィルターの顕微鏡写真である。
【図９】図９は、ＳＡＲ３４１４０３ＤＰのろ過後のセルロースフィルターの顕微鏡写真である。倍率は５０倍である。
【図１０】図１０は、２００倍の倍率での図９のセルロースフィルターの顕微鏡写真である。
【図１１】図１１は第２の対照の抗ＣＸＣＲ５抗体ＤＰ（ＳＡＲ３４１４０３）のろ過後のセルロースフィルターの顕微鏡写真である。倍率は５０倍である。第２の対照の抗ＣＸＣＲ５抗体ＤＰは、第１の抗ＣＸＣＲ５抗体と類似の粒子形成を示すが、スターダスト粒子とは類似しない、別の「スターダスト非含有」対照製剤であり、スターダスト粒子分析の困難さをさらに示している。
【図１２】図１２は、２００倍の倍率での図１１のセルロースフィルターの顕微鏡写真である。
【図１３】図１３は、プラスチックボトルで貯蔵したＤＰ  ＳＡＲ１１３２４４溶液（スターダスト非含有溶液）のＤＬＳ測定によるサイズ分布表である。
【図１４】図１４は、ガラスバイアルで貯蔵したＤＰ溶液（スターダスト含有溶液）のＤＬＳ測定によるサイズ分布表である。
【図１５】図１５は、サンプルからの粒子のＦＴ−ＩＲスペクトル（上のトレース）を示し；下のトレースは比較としてタンパク質のスペクトルを示し；３３００ｃｍ−１の広いバンドと１６５０ｃｍ−１、１５２０ｃｍ−１の２つのアミドバンドとは、それぞれタンパク質に典型的である。
【図１６】図１６は、タンパク質として同定された粒子のラマンスペクトルであり；第１のトレースはサンプルからの粒子のスペクトルを示し；第２のトレースは、サンプルからの粒子のバックグラウンドを減じたスペクトルを示し；第３のトレースはデータベース（タンパク質）からの最良の一致の比較を示す。
【図１７】図１７は、タンパク質として同定された粒子のＦＴ−ＩＲスペクトルを示す。第１のトレースは、サンプルからの粒子のＦＴ−ＩＲスペクトルを示し；第２のトレースは、データベース（ポリエチレン）からの最良の一致を示し；第３のトレースは、比較としてのタンパク質のスペクトルを示し；３３００ｃｍ−１の広いバンドと１６５０ｃｍ−１、１５２０ｃｍ−１の２つのアミドバンドとは、それぞれタンパク質に典型的である。
【図１８】図１８は、タンパク質として同定された粒子のラマンスペクトルを示す。第１のトレースはサンプルからの粒子のスペクトルを示し；第２のトレースは、サンプルからの粒子のバックグラウンドを減じたスペクトルを示し；第３のトレースはポリエチレンとして同定されたデータベースからの最良の一致の比較を示す。
【図１９】図１９は機械的応力試験中の粒子形成の結果を示し；濃い灰色＝可視粒子、薄い灰色＝１〜２個の粒子、点を打った白＝ほぼ透明な溶液、白＝粒子非含有溶液であり；バーは、左から右に、以下の示す：製剤Ａ、Ｈ、Ｂ、Ｃ、およびＤ（表１を参照）。
【図２０】図２０は機械的応力試験中の粒子形成の結果を示し；濃い灰色＝可視粒子、格子縞＝スターダストまたはスターダスト様粒子、薄い灰色＝１〜２個の粒子、点を打った白＝ほぼ透明な溶液、白＝粒子非含有溶液であり；バーは、左から右に、以下の示す：製剤Ａ、Ｈ、Ｅ、Ｆ、およびＧ（表１を参照）。
【発明を実施するための形態】
【００２９】
他に定義されない限り、本明細書において使用される全ての技術用語および科学用語は、当業者によって一般に理解されるのと同一の意味を有する。
【００３０】
本明細書および添付の特許請求の範囲において使用されるとき、単数形「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」は、その内容について別段の明確な指示がない限り、複数の指示対象をも含む。
【００３１】
用語「約（ａｂｏｕｔ）」または「およそ（ａｐｐｒｏｘｉｍａｔｅｌｙ）」は、所与の値または範囲の１０％以内、例えば５％以内（または１％もしくはそれ以下）を意味する。
【００３２】
用語「投与する」または「投与」は、患者に、粘膜、皮内、静脈内、皮下、筋肉内送達および／または、本明細書において記載されるか、または当業者に公知である、任意の他の物理的送達方法などによって、生体外に存在するような物質（例えば、本発明の製剤）を注射するか、またはそうでなければ物理的に送達する行為を指す。疾患またはその病状が治療されるとき、物質の投与は典型的には、疾患またはその病状の発生後になされる。疾患またはその病状が予防されるとき、物質の投与は典型的には、疾患またはその病状の発生前になされる。
【００３３】
ポリペプチドに関連して、用語「類似体」は、ＣＸＣＲ５ポリペプチド、ＣＸＣＲ５ポリペプチドのフラグメント、ＣＸＣＲ５エピトープ、または抗ＣＸＣＲ５抗体と同様または同一の機能を有するポリペプチドを指すが、必ずしもＣＸＣＲ５ポリペプチド、ＣＸＣＲ５ポリペプチドのフラグメント、ＣＸＣＲ５エピトープ、または抗ＣＸＣＲ５抗体と同様または同一のアミノ酸配列を含んでいる必要はなく、必ずしもＣＸＣＲ５ポリペプチド、ＣＸＣＲ５ポリペプチドのフラグメント、ＣＸＣＲ５エピトープ、または抗ＣＸＣＲ５抗体と同様または同一の構造を有している必要もない。
【００３４】
同様のアミノ酸配列を有するポリペプチドは、以下の少なくとも１つを満たすポリペプチドを指す：（ａ）本明細書において記載されるＣＸＣＲ５ポリペプチド、ＣＸＣＲ５ポリペプチドのフラグメント、ＣＸＣＲ５エピトープ、または抗ＣＸＣＲ５抗体のアミノ酸配列と少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列を有するポリペプチド；（ｂ）本明細書において記載される、少なくとも５アミノ酸残基、少なくとも１０アミノ酸残基、少なくとも１５アミノ酸残基、少なくとも２０アミノ酸残基、少なくとも２５アミノ酸残基、少なくとも４０アミノ酸残基、少なくとも５０アミノ酸残基、少なくとも６０アミノ酸残基、少なくとも７０アミノ酸残基、少なくとも８０アミノ酸残基、少なくとも９０アミノ酸残基、少なくとも１００アミノ酸残基、少なくとも１２５アミノ酸残基、または少なくとも１５０アミノ酸残基のＣＸＣＲ５ポリペプチド、ＣＸＣＲ５ポリペプチドのフラグメント、ＣＸＣＲ５エピトープ、または抗ＣＸＣＲ５抗体（またはそれらのＶＨもしくはＶＬ領域）をコードするヌクレオチド配列にストリンジェントな条件でハイブリダイズするヌクレオチド配列にコードされるポリペプチド（例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ等（２００１）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ、Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ、Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ、Ｎ．Ｙ．；Ｍａｎｉａｔｉｓ等（１９８２）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ、Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｐｒｅｓｓ、Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ、Ｎ．Ｙ．を参照）；および（ｃ）本明細書において記載されるＣＸＣＲ５ポリペプチド、ＣＸＣＲ５ポリペプチドのフラグメント、ＣＸＣＲ５エピトープ、または抗ＣＸＣＲ５抗体（またはそれらのＶＨもしくはＶＬ領域）をコードするヌクレオチド配列と少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９９％同一であるヌクレオチド配列によってコードされるポリペプチド。ＣＸＣＲ５ポリペプチド、ＣＸＣＲ５ポリペプチドのフラグメント、ＣＸＣＲ５エピトープ、または抗ＣＸＣＲ５抗体と同様の構造を有するポリペプチドは、ＣＸＣＲ５ポリペプチド、ＣＸＣＲ５ポリペプチドのフラグメント、ＣＸＣＲ５エピトープ、またはＣＸＣＲ５抗体と同様の二次、三次または四次構造を有するポリペプチドを指す。ポリペプチドの構造は、Ｘ線結晶学、核磁気共鳴、および結晶学的電子顕微鏡を含むが、これらに限定されない当業者に公知の方法によって決定できる。
【００３５】
「アンタゴニスト」または「阻害剤」は、標的分子の１つまたはそれ以上の生物活性を阻害できる分子を指す。アンタゴニストは、リガンドによって活性化された細胞を無力化または死滅させることによって、および／またはリガンド結合後の受容体もしくはリガンドの活性化（例えば、チロシンキナーゼ活性化）もしくはシグナル伝達を妨害することによって、受容体のリガンドへの結合を妨害でき、またはその逆も可能である。アンタゴニストは受容体−リガンド相互作用を完全に遮断でき、またはそのような相互作用を実質的に低減できる。アンタゴニストによる全てのそのような介入点は、本発明の目的に関して同等であると考えられるべきである。
【００３６】
例えば、ＣＸＣＲ５の「アンタゴニスト」または「阻害剤」は、ＣＸＣＲ５による１つまたはそれ以上の生物活性、例えばシグナル伝達を阻害できる。したがって、ＣＸＣＲ５、ＣＸＣＬ１３、または他のＣＸＣＲ５のリガンド、またはＣＸＣＲ５の複合体およびそのリガンド、例えばＣＸＣＬ１３に結合するアンタゴニスト（例えば、中和抗体）；ＣＸＣＲ５とリガンド、例えばＣＸＣＬ１３との相互作用をアンタゴナイズするＣＸＣＲ５またはＣＸＣＬ１３のアミノ酸配列バリアントまたは誘導体；場合によって、免疫グロブリン領域（例えば、イムノアドヘシン）等の異種分子に融合される可溶性ＣＸＣＲ５；別の受容体または生体分子と会合したＣＸＣＲ５の複合体；ＣＸＣＲ５に結合する合成または天然の配列のペプチドなどは本発明の範囲に包含される。
【００３７】
用語「抗体」、「免疫グロブリン」、または「Ｉｇ」は、本明細書において交換可能に使用し得る。用語、抗体は、合成抗体、モノクローナル抗体、組換えにより産生された抗体、多重特異性抗体（二重特異性抗体を含む）、ヒト抗体、ヒト化抗体、キメラ抗体、細胞内抗体、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）（例えば、単一特異性、二重特異性などを含む）、ラクダ化抗体、Ｆａｂフラグメント、Ｆ（ａｂ′）フラグメント、ジスルフィド結合Ｆｖ（ｓｄＦｖ）、抗イディオタイプ（ａｎｔｉ−Ｉｄ）抗体、および上述のいずれかのエピトープ結合フラグメントを含むがこれらに限定されない。特に、抗体は、免疫グロブリンタンパク質、および免疫学的に活性である免疫グロブリン分子の部分、すなわち、ＣＸＣＲ５抗原に特異的に結合する抗原結合部位（例えば、抗ＣＸＣＲ５抗体の１つまたはそれ以上の相補性決定領域（ＣＤＲ））を含む抗原結合ドメインまたは分子を含む。抗ＣＸＣＲ５抗体は、免疫グロブリン分子の任意の型（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡ、およびＩｇＹ）、任意のクラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１、およびＩｇＡ２）、または任意のサブクラス（例えば、ＩｇＧ２ａおよびＩｇＧ２ｂ）であり得る。いくつかの実施形態において、抗ＣＸＣＲ５抗体は、ヒト化モノクローナル抗ＣＸＣＲ５抗体のようにヒト化されている。ある特定の実施形態において、抗ＣＸＣＲ５抗体は、ＩｇＧ抗体であり、特にヒト化ＩｇＧ４抗体である。
【００３８】
本明細書において使用されるとき、用語「抗ＣＸＣＲ５抗体」は、本明細書において定義されるようなヒトＣＸＣＲ５に特異的に結合する抗体またはそれらに由来するポリペプチドを意味し、ＣＸＣＲ５によるそのリガンドに対する結合を阻害または実質的に低減、および／またはＣＸＣＲ５活性を阻害する分子を含むがこれらに限定されない。例えば、企図される抗ＣＸＣＲ５抗体は、全ての目的について参照により本明細書に組み入れる米国特許第８，６４７，６２２号に開示されるもののような、ヒトＣＸＣＲ５の細胞外ドメインに特異的に結合する単離された抗体またはそのフラグメントを含む。特に、本開示の企図される抗ＣＸＣＲ５抗体は、米国特許第８，６４７，６２２号の、配列番号３２のアミノ酸配列を含む可変軽鎖、および配列番号３３のアミノ酸配列を含む可変重鎖を有する。別の実施形態において、ヒトＣＸＣＲ５の細胞外ドメインに特異的に結合する単離された抗体またはそのフラグメントは、米国特許第８，６４７，６２２号の、ＲＳＳＫＳＬＬＨＳＳＧＫＴＹＬＹ（配列番号５８）、ＲＬＳＳＬＡ（配列番号６８）、ＭＱＨＬＥＹＰＹＴ（配列番号６０）、ＧＦＳＬＩＤＹＧＶＮ（配列番号６１）、ＶＩＷＧＤＧＴＴＹ（配列番号６２）、およびＩＶＹ（配列番号６３）のアミノ酸配列を含む。
【００３９】
用語「Ｂ細胞活性」は、通常のＢ細胞レベルより高いことを意味し、これは局所的であり得るか、またはＢ細胞の生物学的発現もしくは機能の証拠であり得、例えば、抗体発現、ブルトン型チロシンキナーゼの存在または活性、ＣＤ１９の発現または存在、Ｂ細胞活性化因子の発現または存在などである。
【００４０】
用語「結合剤」は、ＣＸＣＲ５またはそのバリアントもしくはフラグメントに結合または特異的に結合する、抗体、ｓｉＲＮＡ、核酸、アプタマー、タンパク質、または小分子有機化合物のいずれかを意味する。
【００４１】
用語「副産物」は、これは、所与の製剤中の抗体などの治療的／予防的結合剤の一定の割合を損なうか、または減少させる、望まれない産物を含む。例えば、典型的な副産物は、抗体の凝集体、抗体のフラグメント、例えば、脱アミド化もしくは加水分解による抗体の分解、またはそれらの混合物によって産生されるものを含む。典型的には、凝集体は、モノマーの抗体よりも大きな分子量を有する複合体である。抗体の分解産物は、例えば、抗体のフラグメント、例えば、脱アミド化または加水分解によってもたらされるものを含み得る。典型的には、分解産物は、モノマーの抗体よりも小さな分子量を有する複合体である。ＩｇＧ抗体の場合、そのような分解産物は約１５０ｋＤ未満である。
【００４２】
用語「組成物」および「製剤」は、場合によっては特定の量である特定の成分（例えば、抗ＣＸＣＲ５抗体）、および場合によっては特定の量である特定の成分の組み合わせによって直接的にまたは間接的に生じる任意の産物を含む産物を包含することを意図する。
【００４３】
用語「定常領域」および「定常ドメイン」は、抗体の抗原に対する結合に直接的に関与しないが、Ｆｃ受容体との相互作用などの様々なエフェクター機能を示す、軽鎖および重鎖のカルボキシ末端部分を指す。用語は、免疫グロブリンの他の部分、すなわち抗原結合部位を含む可変ドメインよりも保存されたアミノ酸配列を有する免疫グロブリン分子の一部を指す。定常ドメインは、重鎖のＣＨ１、ＣＨ２、およびＣＨ３ドメイン、ならびに軽鎖のＣＨＬドメインを含む。
【００４４】
用語「ＣＸＣＲ５」は、リンパ球、特にＢ細胞、および特にナイーブＢ細胞に見出される天然に存在する既知の分子に関し；そのような細胞から単離されたそのような分子に関し；ＣＸＣＲ５をコードする核酸を用いて、既知の物質および手段を用いて組換えで製造されたそのような分子に関し；および、ＣＸＣＬ１３結合などの本発明の実施に適切な性質および特性を保持するＣＸＣＲ５の部分、例えば細胞外（ＥＣ）ドメインに関する。可溶性ＣＸＣＲ５分子は、本質的にＣＸＣＲ５のＥＣドメインからなり、一般的に、分子の最初の約６０アミノ酸、すなわちＣＸＣＲ５のアミノ末端部分を含む。
【００４５】
ＣＸＣＲ５は、無差別的ではない受容体である。ＣＸＣＬ１３は、ＣＸＣＲ５のリガンドであり、濾胞樹状細胞などの間質細胞およびリンパ組織で構成的に発現する。ＣＸＣＬ１３は、Ｂ細胞、および、Ｂヘルパー濾胞性Ｔ細胞、ＴＦＨと呼ばれるＴ細胞の小さなサブセットを特異的に誘引する。免疫系におけるＴ細胞集団とＢ細胞集団との多くの相互作用を考慮すると、これは予想外のことではない可能性がある。さらに、活性化Ｔ細胞は、ＣＸＣＲ５発現を、誘導または上方制御する。三次異所性の胚中心（ＧＣ）へのリンパ球の浸潤は、そのような異型リンパ節様構造を呈するある種の障害における疾患重症度の増加および耐容性低下とよく相関することが見出されている。ＣＸＣＲ５−／−およびＣＸＣＬ１３−／−マウスなどのインビボマウスモデルを用いて、受容体またはリガンドのいずれかの非存在は、Ｔ細胞およびＢ細胞の局在の変化、ならびにおそらく相互作用のためにＧＣ微細構造の変化をもたらす。これらのマウスはまた、重度のコラーゲン誘発性関節炎（ＣＩＡ）の発症からも保護される。ＣＸＣＲ５は、ＲＡの発病に関連するマウスＢ細胞において選択的に発現し、この受容体の遮断は、罹患者の関節炎反応を調節する。バイオ医薬品（すなわち、抗ＴＮＦ−αおよび抗ＣＤ２０抗体、リタキシマブ）による関節リウマチの治療は、臨床的に有効であり、特に、Ｂ細胞指向療法を受けている患者は、臨床的徴候および病状において長期にわたる改善を示している。成熟Ｂ細胞およびＢヘルパーＴ細胞上でのみ発現するＣＸＣＲ５の選択的標的化は、Ｂ細胞発生に影響を与えず、また、患者を免疫無防備状態にすることもないであろう。リタキシマブと異なり、本発明の抗ＣＸＣＲ５抗体は、細胞の細胞傷害性を媒介しない中和抗体である。
【００４６】
「ＣＸＣＲ５疾患」は、ＣＸＣＬ１３または他のＣＸＣＲ５リガンドの過剰発現または増加したレベル、Ｂ細胞の増加したレベル、Ｂ細胞活性の増加したレベル、ＣＸＣＲ５の増加したレベル、またはＣＸＣＲ５の不適切な代謝および活性を特徴とするか、またはそれらによって引き起こされる病気、障害、疾患、状態、異常などである。
【００４７】
用語「エピトープ」は、抗体などの結合剤の１つまたはそれ以上の抗原結合領域に結合し得、哺乳動物、例えばヒトなどの動物において、免疫応答を引き起こす抗原活性または免疫原性活性を有する、ＣＸＣＲ５ポリペプチド、またはＣＸＣＲ５ポリペプチドフラグメントなどの抗原の表面の局所領域を指す。免疫原性活性を有するエピトープは、動物において抗体応答を引き起こすポリペプチドの一部である。抗原活性を有するエピトープは、例えばイムノアッセイなどの当該技術分野において周知の任意の方法によって決定されるときに、抗体が特異的に結合するポリペプチドの一部である。抗原性のエピトープは、必ずしも免疫原性であるとは限らない。エピトープは、通常、アミノ酸または糖側鎖などの分子の化学的に活性な表面群からなり、特定の三次元構造特性および特定の電荷特性を有する。エピトープに寄与するポリペプチドの領域は、ポリペプチドの連続的なアミノ酸であり得、またはエピトープは、ポリペプチドの２つまたはそれ以上の非連続的な領域が集まったものであり得る。エピトープは抗原の三次元の表面構成であってもなくてもよい。抗ＣＸＣＲ５抗体は、モノマーの（変性）形態のＣＸＣＲ５のエピトープ、トリマーの（天然）形態のＣＸＣＲのエピトープ、またはモノマーの（変性）形態とトリマーの（天然）形態のＣＸＣＲ５の両方に特異的に結合し得る。
【００４８】
用語「賦形剤」は、希釈剤、ビヒクル、保存剤、結合剤、安定化剤などとして薬物について一般に使用される不活性な物質を指し、タンパク質（例えば、血清アルブミンなど）、アミノ酸（例えば、アスパラギン酸、グルタミン酸、リジン、アルギニン、グリシン、ヒスチジンなど）、脂肪酸およびリン脂質（例えば、アルキルスルホネート、カプリレートなど）、界面活性剤（例えば、ＳＤＳ、ポリソルベート、非イオン性界面活性剤など）、サッカリド（例えば、スクロース、マルトース、トレハロースなど）、およびポリオール（例えば、マンニトール、ソルビトールなど）を含むがこれらに限定されない。全ての目的のためにその全体を参照により本明細書に組み入れる、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（１９９０）Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．、Ｅａｓｔｏｎ、Ｐａ．をもまた参照できる。
【００４９】
ペプチドまたはポリペプチドに関連して、用語「フラグメント」は、全長アミノ酸配列より少ないものを含むペプチドまたはポリペプチドを指す。そのようなフラグメントは、例えば、アミノ末端における短縮化、カルボキシ末端における短縮化、および／またはアミノ酸配列からの残基の内部での欠失により生じ得る。フラグメントは、例えば、選択的ＲＮＡスプライシング、またはインビボプロテアーゼ活性の結果生じ得る。ある特定の実施形態において、ｈＣＸＣＲ５フラグメントは、ＣＸＣＲ５ポリペプチドまたはＣＸＣＲ５ポリペプチドに特異的に結合する抗体のアミノ酸配列の少なくとも５の連続的なアミノ酸残基、少なくとも１０の連続的なアミノ酸残基、少なくとも１５の連続的なアミノ酸残基、少なくとも２０の連続的なアミノ酸残基、少なくとも２５の連続的なアミノ酸残基、少なくとも４０の連続的なアミノ酸残基、少なくとも５０の連続的なアミノ酸残基、少なくとも６０の連続的なアミノ酸残基、少なくとも７０の連続的なアミノ酸残基、少なくとも８０の連続的なアミノ酸残基、少なくとも９０の連続的なアミノ酸残基、少なくとも連続的な１００のアミノ酸残基、少なくとも１２５の連続的なアミノ酸残基、少なくとも１５０の連続的なアミノ酸残基、少なくとも１７５の連続的なアミノ酸残基、少なくとも２００の連続的なアミノ酸残基、または少なくとも２５０の連続的なアミノ酸残基を含むポリペプチドを含む。特定の実施形態において、ＣＸＣＲ５ポリペプチドまたはＣＸＣＲ５抗原に特異的に結合する抗体のフラグメントは、少なくとも１、少なくとも２、または少なくとも３のポリペプチドまたは抗体の機能を保持する。
【００５０】
用語「完全なヒト抗体」または「ヒト抗体」は、本明細書において交換可能に使用され、ヒト可変領域、および恐らくはヒトの定常領域を含む抗体を指す。特定の実施形態において、用語は、ヒト起源の可変領域および定常領域を含む抗体を指す。特定の実施形態において、抗体は完全なヒト抗体である。用語「完全なヒト抗体」は、Ｋａｂａｔ等（Ｋａｂａｔ等（１９９１）  Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ、Ｆｉｆｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ、Ｕ．Ｓ．  Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  Ｈｕｍａｎ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ、ＮＩＨ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ  Ｎｏ．  ９１−３２４２を参照）によって記載されるようなヒト生殖細胞系列免疫グロブリン配列に想到する可変および定常領域を有する抗体を含む。完全なヒト抗体の産生方法は当該技術分野において公知である。
【００５１】
語句「組換えヒト抗体」は、宿主細胞にトランスフェクトされた組換え発現ベクターを用いて発現された抗体、組み換えコンビナトリアルヒト抗体ライブラリーから単離された抗体、ヒト免疫グロブリン遺伝子についてトランスジェニックおよび／もしくはトランスクロモソームである動物（例えば、マウスまたはウシ）から単離された抗体（例えば、Ｔａｙｌｏｒ，Ｌ．  Ｄ．等（１９９２）Ｎｕｃｌ．  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．  ２０：６２８７〜６２９５頁を参照）、または、ヒト免疫グロブリン遺伝子配列から他のＤＮＡ配列へのスプライシングを含む任意の他の手段によって製造、発現、作出、もしくは単離された抗体などの、組換え手段によって製造、発現、作出、または単離されるヒト抗体を含む。そのような組換えヒト抗体は、ヒト生殖系列免疫グロブリン配列（Ｋａｂａｔ等、１９９１を参照）由来の様々な可変および定常領域を有し得る。しかしながら、ある特定に実施形態において、そのような組換えヒト抗体は、インビトロ変異導入（または、ヒトＩｇ配列の動物のトランスジェニックが用いられる場合、インビボ体細胞変異導入）に供され、したがって、組換え抗体のＶＨおよびＶＬ領域のアミノ酸配列は、ヒト生殖系列ＶＨおよびＶＬの配列由来であり、それらに関連するが、インビボのヒト抗体生殖系列のレパートリーに天然に存在しない可能性がある配列である。
【００５２】
「ＩｇＧ４結合剤」または「ＩｇＧ４  Ｆｃ領域の少なくとも一部を含む結合剤」の両方は、本明細書において記載されるＩｇＧ４  Ｆｃのフラグメントを少なくとも結合剤を指す。ある特定の実施形態において、フラグメントはＩｇＧ４  Ｆｃ領域の１０、２０、３０、４０、５０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、２００、２１０、または２２０のアミノ酸を含む。他の実施形態において、フラグメントは、ＩｇＧ４  Ｆｃ領域の１０〜５０、５０〜１００、１００〜１５０、または１５０〜２００のアミノ酸を含む。他の実施形態において、ＩｇＧ４  Ｆｃ領域の一部は、ＩｇＧ４  Ｆｃ領域に対して一定の相同性を有し得る。例えば、ＩｇＧ４結合剤は、ＩｇＧ４  Ｆｃ領域に対して、５０、６０、７０、８０、９０、９３、９５、９６、９７、９８、９９より大きいかまたは１００％の相同性を有するタンパク質の伊津部を含み得る。例示的なＩｇＧ４のＦｃ領域は、本明細書全体にわたって記載されている。
【００５３】
抗体に関して使用されるとき、用語「重鎖」は、重鎖定常ドメインのアミノ酸配列に基づいてアルファ（α）、デルタ（Δ）、イプシロン（ε）、ガンマ（γ）、およびミュー（μ）と呼ばれる５の異なる型を指す。重鎖のこれらの異なる型は当該技術分野において周知であり、５のクラスの抗体、それぞれ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、およびＩｇＭを生じ、４つのサブクラスのＩｇＧ、すなわちＩｇＧ１、ＩｇＧ１、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４を含む。いくつかの実施形態において、重鎖はヒト重鎖である。
【００５４】
非ヒト（例えばマウス）抗体の「ヒト化」形態は、ヒト抗体に対して、非ヒト免疫グロブリン由来の配列を含むキメラ免疫グロブリン、免疫グロブリン鎖、それらのフラグメント（例えば、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ）’または他の抗体の標的結合配列）である。一般的に、ヒト化抗体は、１つの、典型的には２つの可変領域の実質的に全てを含み、全てまたは実質的に全てのＣＤＲ領域は非ヒト免疫グロブリンのそれらに対応し、全てまたは実質的に全てのＦＲ領域は、ヒト免疫グロブリン配列のそれらであろう。ヒト化抗体はまた、免疫グロブリン定常領域（Ｆｃ）の少なくとも一部を、典型的には選択されたヒト免疫グロブリンテンプレートのそれを含み得る。一般的に、最終目的は、ヒトにおいて最小限の免疫原性である抗体分子を得ることである。したがって、１つまたはそれ以上のＣＤＲによるＣＸＣＲ５またはＣＸＣＬ１３に対する結合作用を実質的に最小化することなく、１つまたはそれ以上のＣＤＲにおける１つまたはそれ以上のアミノ酸を、ヒト宿主に対してより免疫原性の低いものに変更し得ることが可能である。代替的に、ＦＲは、非ヒトであり得るが、最も免疫原性の高いそのアミノ酸は、免疫原性の低いものと置き換えられている。それにもかかわらず、ＣＤＲ移植は、ヒト化抗体を得るための唯一の方法ではない。例えば、フレームワークの残基にとってＣＤＲループの三次元構造および抗体全体のそのリガンドに対する親和性を決定する役割を有することが珍しいことではないので、ＣＤＲ領域のみを改変することが不十分である場合がある。したがって、非ヒト親抗体分子が、ヒトに対して免疫原性が低いものになるように改変され、ヒト抗体との全体的な配列同一性が常に必要というわけではないように、任意の手段を実施することができる。したがって、ヒト化はまた、特に抗体分子上に露出し、分子内に埋没しているために宿主の免疫系によって容易に接近できないものではない、たった数残基のみの置換によってのみ達成することができる。そのような方法は、本明細書において、抗体分子の「モバイル」または「フレキシブル」残基の置換に関連して教示され、最終目的は、そのエピトープまたは決定基に対する抗体の特異性を含まずに、得られた分子の免疫原性を低減または抑制することである。例えば、Ｓｔｕｄｎｉｃｋａ等、Ｐｒｏｔ  Ｅｎｇ  ７（６）８０５〜８１４頁、１９９４；Ｌａｚａｒ等、Ｍｏｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．２００７  Ｍａｒ；４４（８）：１９８６〜９８頁（２００７）；Ｓｉｍｓ等、Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １５１：２２９６（１９９３）；Ｃｈｏｔｈｉａ等、Ｊ  Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ  １９６：９０１（１９８７）；Ｃａｒｔｅｒ等、Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ  ８９：４２８５（１９９２）；Ｐｒｅｓｔａ等、Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １５１：２６２３（１９９３）、ＷＯ２００６／０４２３３３、および米国特許第５，８６９，６１９号を参照できる。
【００５５】
「単離」または「精製」された結合剤、例えば抗体は、結合剤が由来する細胞もしくは組織源由来の細胞物質もしくは他の混入タンパク質を実質的に含まないか、または化学合成されたときの化学前駆体もしくは他の化学物質を実質的に含まない。例えば、文言「細胞物質を実質的に含まない」は、抗体が単離されるかまたは組換え的に産生される細胞の細胞成分から分離されている抗体の製造物を含む。したがって、細胞物質を実質的に含まない抗体は、約３０％、２０％、１０％、または５％（乾燥重量による）の未満の異種タンパク質（本明細書において、「混入タンパク質」とも呼ばれる）を含む抗体の製造物を含む。抗体が組換えによって作製されるとき、培地を実質的に含まないこともまた望ましく、すなわち、培地が、タンパク質製造物の容量の約２０％、１０％、または５％未満を示す。抗体が化学合成により産生されるとき、いくつかの実施形態において、それは化学前駆体または他の化学物質を実質的に含まない、すなわちそれはタンパク質の合成に関与する化学前駆体または他の化学物質から分離されている。したがって、そのような抗体の製造物は、約３０％、２０％、１０％、または５％（乾燥重量による）の対象の抗体以外の化学前駆体または化学物質を有する。いくつかの実施形態において、抗ＣＸＣＲ５抗体は、単離または精製されている。
【００５６】
用語「ヒトＣＸＣＲ５」、「ｈＣＸＣＲ５」、または「ｈＣＸＣＲ５ポリペプチド」、および同様の用語は、米国特許第８，６４７，６２２号に開示され、好適な細胞源から合成または単離されるポリペプチド（「ポリペプチド」、「ペプチド」、および「タンパク質」は、本明細書において交換可能に使用される）、または、関連するポリペプチドを指し、そのＳＮＰバリアントを含む。関連するポリペプチドは、対立遺伝子変異体（例えば、ＳＮＰ変異体）；スプライスバリアント；フラグメント；誘導体；置換、欠失、および挿入バリアント；融合ポリペプチド；種間同族体を含み、いくつかの実施形態において、それらはＣＸＣＲ５活性を保持し、かつ／または抗ＣＸＣＲ５免疫応答を生じるのに十分である。抗ＣＸＣＲ５免疫応答を生じるのに十分なＣＸＣＲ５の可溶性形態もまた包含される。エピトープは、より大きなポリペプチドフラグメントの一部であるより大きな抗原の一部であり、結果としてエピトープはより大きなポリペプチドの一部であるので、抗ＣＸＣＲ５結合剤、例えば抗体がＣＸＣＲ５ポリペプチド、ポリペプチドフラグメント、抗原、および／またはエピトープに結合し得ることを当業者は理解するであろう。
【００５７】
用語「Ｋａｂａｔのナンバリング」および同様の用語は、当該技術分野において認識され、抗体の重鎖および軽鎖の可変領域の他のアミノ酸残基よりも可変（すなわち超可変）であるアミノ酸残基、またはその抗原結合部分のナンバリングのシステムを指す（Ｋａｂａｔ等、（１９７１）Ａｎｎ．  ＮＹ  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．１９０：３８２〜３９１頁、およびＫａｂａｔ等（１９９１）を参照）。
【００５８】
抗体に関して使用されるとき、用語「軽鎖」は定常ドメインのアミノ酸配列に基づいてカッパ（κ）またはラムダ（λ）と呼ばれる２つの異なる型を指す。軽鎖アミノ酸配列は、当該技術分野において周知である。いくつかの実施形態において、軽鎖はヒト軽鎖である。
【００５９】
用語「管理する」、「管理すること」、および「管理」は、感染の治癒をもたらさない、治療（例えば、予防薬または治療薬）から対象が導き出す有益な効果を指す。ある特定の実施形態において、疾患の進行または悪化を防ぐのに、ＣＸＣＲ５媒介性疾患（例えば、慢性関節リウマチ）またはその１つもしくはそれ以上の病状を「管理する」ために、対象に１つまたはそれ以上の療法（例えば、本発明の製剤などの予防薬または治療薬）を投与する。
【００６０】
用語「モノクローナル抗体」は、同質または実質的に同質の抗体の集合より得られる抗体を指し、各々のモノクローナル抗体は、典型的に抗原上の単一のエピトープを認識する。いくつかの実施形態において、「モノクローナル抗体」は、単一のハイブリドーマまたは他の細胞によって産生される抗体である。用語「モノクローナル」は、抗体を作製する特定の方法に限定されない。例えば、モノクローナル抗体は、Ｋｏｈｌｅｒ等；Ｎａｔｕｒｅ、２５６：４９５（１９７５）によって記載されるようなハイブリドーマ法によって作製されるものであり得、またはファージライブラリーから単離されるものであり得る。クローン細胞株およびそれによって発現されるモノクローナル抗体の製造のための他の方法は、当該技術分野において周知である（例えば、Ｓｈｏｒｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ、（２００２）５ｔｈ  Ｅｄ．；Ａｕｓｕｂｅｌ等編、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋの１１章を参照）。
【００６１】
用語「薬学的に許容可能な」は、連邦政府または州政府の規制当局によって承認されること、または動物、より具体的にはヒトにおいて使用するために米国薬局方、欧州薬局方、またはその他の一般に認められた薬局方に記載されることを意味する。
【００６２】
「薬学的に許容可能な賦形剤」とは、許容できるか、または都合の良い剤形を製造するために、モノクローナル抗体などの活性分子と組み合わされる任意の不活性の物質を意味する。「薬学的に許容可能な賦形剤」は、用いられる用量および濃度で受容者に対して無毒であり、そしてモノクローナル抗体を含む製剤の他の成分と適合性のある賦形剤である。
【００６３】
用語「予防する」、「予防すること」、および「予防」は、本明細書において提供される療法または療法の併用（例えば、本発明の製剤などの予防薬または治療薬の併用）の適用によって生じる、ＣＸＣＲ５媒介性疾患および／またはそれに関連する病状の発症、再発、発生または蔓延を全体的または部分的な阻害を指す。
【００６４】
用語「予防薬」は、対象におけるＣＸＣＲ５媒介性疾患および／またはそれに関連する病状の発症、再発、発生または蔓延を全体的または部分的に阻害することができる薬剤を指す。ある特定の実施形態において、「予防薬」は、本発明の製剤を指す。ある特定の他の実施形態において、「予防薬」は、本発明の製剤以外の剤を指す。いくつかの実施形態において、予防薬は、ＣＸＣＲ５媒介性疾患および／またはそれに関連する病状を予防するため、またはＣＸＣＲ５媒介性疾患および／またはそれに関連する病状の発生、発症、進行および／または重症度を妨げるために有用であると知られているか、または今までに使用されているか、または現在使用されている剤である。特定の実施形態において、予防薬は、完全なヒトモノクローナル抗体などの完全なヒト抗体、またはヒト化抗ＣＸＣＲ５モノクローナル抗体などのヒト化抗ＣＸＣＲ５抗体である。
【００６５】
用語「ＣＸＣＲ５抗原」は、抗体等の結合剤が特異的に結合するＣＸＣＲ５ポリペプチドの部分を指す。ＣＸＣＲ５抗原はまた、抗体等の結合剤が特異的に結合するＣＸＣＲ５ポリペプチドの類似体もしくは誘導体またはそれらのフラグメントを指す。エピトープに寄与するＣＸＣＲ５ポリペプチドの領域は、ポリペプチドの連続的なアミノ酸であり得、またはエピトープは、ポリペプチドの２つまたはそれ以上の非連続的な領域が集まったものであり得る。エピトープは抗原の三次元の表面構成であってもなくてもよい。免疫応答を引き起こすことができるＣＸＣＲ５抗原表面の局所領域は、ＣＸＣＲ５エピトープである。エピトープは抗原の三次元の表面構成であってもなくてもよい。
【００６６】
用語「ＣＸＣＲ５媒介性疾患」および「ＣＸＣＲ５媒介性障害」は、交換可能に使用され、ＣＸＣＲ５によって完全にもしくは部分的に引き起こされるか、またはその結果である任意の疾患を指す。ある特定の実施形態において、ＣＸＣＲ５は、細胞表面で異常に（例えば、高く）発現する。いくつかの実施形態において、ＣＸＣＲ５は、特定の細胞型において異常に上方制御される場合がある。他の実施形態において、正常、異常、または過剰な細胞シグナル伝達が、ＣＸＣＲ５によるＣＸＣＲ５リガンドへの結合によって引き起こされる。ある特定の実施形態において、ＣＸＣＲ５リガンドはＣＸＣＬ１３である。ある特定の実施形態において、ＣＸＣＲ５媒介性疾患は関節リウマチ（ＲＡ）である。
【００６７】
用語「サッカリド」は、多価アルコールの誘導体である分子の類を指す。サッカリドは一般に炭水化物と呼ばれ、異なる量の糖（サッカリド）単位、例えば単糖類、二糖類、および多糖類を含み得る。
【００６８】
用語「特異的に結合する」または「特異的な結合」は、抗原またはそのフラグメントに特異的に結合し、他の抗原に特異的に結合しないことを意味する。例えば、抗原に特異的に結合する抗体は、他のペプチドまたはポリペプチドに対して、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）、酵素結合免疫吸着検査法（ＥＬＩＳＡ）、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）、または当該技術分野で公知の他のアッセイで決定されるとき、低親和性で結合し得る。抗原に特異的に結合する抗体またはそのバリアントもしくはフラグメントは、関連する抗原に交差し得る。いくつかの実施形態において、抗原に特異的に結合する抗体またはそのバリアントもしくはフラグメントは、関連する抗原に交差しない。ＣＸＣＲ５抗原に特異的に結合する抗体またはそのバリアントもしくはフラグメントは、例えば、イムノアッセイ、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）、または当業者に公知の他の技術によって同定することができる。典型的には、特異的または選択的な反応は、バックグラウンドシグナルまたはノイズの少なくとも２倍、より典型的には、バックグラウンドの１０倍を超えるものであろう。抗体の特異性に関する議論については、例えば、Ｐａｕｌ編、１９８９、Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  Ｓｅｃｏｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ、Ｒａｖｅｎ  Ｐｒｅｓｓ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、３３２〜３３６頁を参照できる。
【００６９】
「安定」または「安定化された」製剤は、抗体などの結合剤が、貯蔵時において、その物理的な安定性、同一性、完全性、および／または化学的な安定性、同一性、完全性、および／または生物活性を本質的に保持するものである。タンパク質の安定性を測定するための様々な技術は当該技術分野で利用可能であり、例えば、Ｐｅｐｔｉｄｅ  ａｎｄ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ、２４７〜３０１頁、Ｖｉｎｃｅｎｔ  Ｌｅｅ編、Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ、Ｉｎｃ．、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、Ｎ．Ｙ．、Ｐｕｂｓ．（１９９１）およびＪｏｎｅｓ，  Ａ．  Ａｄｖ．  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖ．１０：２９〜９０頁（１９９３）に概説がある。安定性は、選択された温度および他の貯蔵条件において選択された期間で測定できる。安定性は、目視検査、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ、ＩＥＦ、ＨＰＳＥＣ、ＲＦＦＩＴ、およびκ／λＥＬＩＳＡからなる群から選択される方法のうちの少なくとも１つによって決定し得る。例えば、抗体は、色および／もしくは透明度の目視検査によって、またはＵＶ光散乱、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ、もしくは（高圧）サイズ排除クロマトグラフィー（ＨＰＳＥＣ）による測定によって、凝集、沈殿、および／または変性の兆候を全く示さない場合、薬学的製剤において「物理的安定性を保持している」。いくつかの実施形態において、本発明の製剤を使用するとき、ＨＰＳＥＣまたは凝集体形成の測定のための任意の他の好適な方法によって測定されるとき、５％未満、典型的には４％未満、典型的には３％未満、より典型的には２％未満、そして特に１％未満の抗体が凝集体を形成する。例えば、ある特定の貯蔵条件下である所定の期間の後、特定の製剤中で抗体モノマーが、約９０％、典型的には約９５％、特に約９８％の純度を有している場合、抗体が特定の製剤中で安定であるとみなされる。化学安定性は、タンパク質の化学変成した形態を検出および定量することによって評価できる。化学変成は、例えば（ＨＰ）ＳＥＣ、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ、および／またはマトリクス支援レーザー脱離イオン化／飛行時間型質量分析（ＭＡＬＤＩ／ＴＯＦ  ＭＳ）を用いて評価できるサイズ改変（例えば切り出し）を含んでいてもよい。他のタイプの化学変成は、例えば、イオン交換クロマトグラフィーによって評価できる電荷変化（例えば、脱アミド化の結果として生じるもの）を含む。抗体は、例えば抗原結合アッセイまたはウイルス中和アッセイにおいて決定されるときに、所与の時間における抗体の生物活性が、医薬製剤が製造された時に示した生物活性の少なくとも約９０％（アッセイ誤差内）である場合、所与の時間における医薬製剤において「その生物活性を保持している」。
【００７０】
特定の実施形態において、抗体製剤は、「スターダスト粒子形成に対して安定」であり得、それは、６カ月の期間、加速条件下でガラス容器中に貯蔵されるとき、スターダスト粒子を形成しない抗体製剤を指す。
【００７１】
用語「対象」および「患者」は、交換可能に使用できる。本明細書において使用されるとき、対象は、典型的には、非霊長類などの哺乳動物（例えば、ウシ、ブタ、ウマ、ネコ、イヌ、ラットなど）であるか、または霊長類（例えば、サルおよびヒト）であり、いくつかの実施形態においてヒトである。一実施形態において、対象は、ＣＸＣＲ５媒介性疾患を有するヒトなどの哺乳動物である。別の実施形態において、対象は、ＣＸＣＲ５媒介性疾患を発症する危険性のあるヒトなどの哺乳動物である。
【００７２】
用語「治療有効量」は、は、所与の疾患の重症度および／または持続期間および／またはそれに関連する病状を軽減および／または緩和するのに十分な療法（例えば、本発明の製剤）の量を指す。この用語はまた、所与の疾患の進展もしくは進行の減少もしくは緩和、所与の疾患の再発、発症もしくは発生の減少もしくは緩和、および／または別の療法（例えば、本発明の製剤以外の療法）の予防もしくは治療の効果の改善もしくは増強に必要な量も包含する。いくつかの実施形態において、本発明の抗体の治療有効量は、約０．１ｍｇ／ｋｇ（対象のｋｇ重量あたり抗体のｍｇ）〜約１００ｍｇ／ｋｇである。ある特定の実施形態において、本明細書において提供される抗体の治療有効量は、約０．１ｍｇ／ｋｇ、約０．５ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇ、約１５ｍｇ／ｋｇ、約２０ｍｇ／ｋｇ、約２５ｍｇ／ｋｇ、約３０ｍｇ／ｋｇ、約３５ｍｇ／ｋｇ、約４０ｍｇ／ｋｇ、約４５ｍｇ／ｋｇ、約５０ｍｇ／ｋｇ、約６０ｍｇ／ｋｇ、約７０ｍｇ／ｋｇ、約８０ｍｇ／ｋｇ、約９０ｍｇ／ｋｇ、または約１００ｍｇ／ｋｇ（またはそれらの間の範囲）である。いくつかの実施形態において、本明細書において使用されるとき、「治療有効量」はまた、特定の結果（例えば、細胞のＣＸＣＲ５の生物活性、例えばＣＸＣＬ１３への結合を阻害する）を達成する本発明の抗体の量を指す。
【００７３】
用語「治療薬」は、ＣＸＣＲ５媒介性疾患および／またはそれに関連する病状の治療、管理または緩和に使用できる任意の剤を指す。ある特定の実施形態において、「治療薬」は、本発明の製剤を指す。ある特定の他の実施形態において、「治療薬」は、本発明の製剤以外の剤を指す。いくつかの実施形態において、治療薬は、ＣＸＣＲ５媒介性疾患および／またはその１つもしくはそれ以上の病状の治療、管理または緩和のために有用であると知られているか、または今までに使用されているか、または現在使用されている剤である。
【００７４】
用語「療法」は、疾患（例えば、ＩＢＤもしくはＧＶＨＤ）、またはＣＸＣＲ５媒介性疾患（例えば、関節リウマチ）の予防、管理、治療、および／または緩和において使用し得る、任意の手順、方法、および／または剤を指す。ある特定の実施形態において、用語「複数の療法」および「療法」は、生物学的療法、支持療法、および／または医療関係者などの当業者に公知のＣＸＣＲ５媒介性疾患の予防、管理、治療、および／または緩和に有用な他の療法を指す。
【００７５】
用語「治療する」、「治療」、および「治療すること」は、１つまたはそれ以上の療法の投与（本発明の製剤などの１つまたはそれ以上の予防薬または治療薬の投与を含むが、これらに限定されない）から生じるＣＸＣＲ５媒介性疾患（例えば、関節リウマチ）の進行、重症度、および／または持続期間の減少または緩和を指す。ＣＸＣＲ５に関する具体的な実施形態において、そのような用語は、ＣＸＣＲ５によるＣＸＣＬ１３への結合の低減もしくは阻害、および／または関節リウマチなどのＣＸＣＲ５媒介性疾患に関連した１つまたはそれ以上の病状の阻害もしくは低減を指す。
【００７６】
用語「可変領域」または「可変ドメイン」は、軽鎖および重鎖の一部、典型的には、重鎖のアミノ末端の約１２０〜１３０のアミノ酸、および、軽鎖の約１００〜１１０のアミノ酸を指し、それらは、配列において著しく異なり、各々の特定のその抗原に対する結合および特異性において使用される。配列における可変性は、相補性決定領域（ＣＤＲ）と呼ばれるそれらの領域に集中し、一方で、可変ドメイン中のより高度に保存された領域は、フレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれる。軽鎖および重鎖のＣＤＲは、抗体と抗原の相互作用を主に担う。アミノ酸の位置のナンバリングは、Ｋａｂａｔ等（１９９１）Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  ｉｎｔｅｒｅｓｔ．（Ｕ．Ｓ．  Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  Ｈｕｍａｎ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ、Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ、Ｄ．Ｃ．）５ｔｈ  ｅｄ．（「Ｋａｂａｔ等」）にあるような、ＥＵインデックスによる。いくつかの実施形態において、可変領域はヒト可変領域である。
【００７７】
本明細書において使用されるとき、用語「スターダスト」および「スターダスト粒子は、容器内の抗体製剤の存在に付随してガラス容器中に生じる粒子を指すのに交換可能に使用できる。
【００７８】
Ｂ．製剤
本開示の製剤は、抗ＣＸＣＲ５結合剤を含む液体および凍結乾燥粉末の形態で見出すことができる。さらに、そのような製剤は、結合剤、界面活性剤、等張化剤、アミノ酸、および他の賦形剤を含み得る。
【００７９】
結合剤
本発明のいくつかの実施形態において、抗ＣＸＣＲ５抗体は、ヒト化されているか、または完全なヒト抗体である。ヒト化および完全なヒト抗体のアイソタイプの例は、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、およびＩｇＭを含む。いくつかの実施形態において、抗ＣＸＣＲ５抗体は、ＩｇＧ抗体である。４つの形態のＩｇＧが存在する。いくつかの実施形態において、抗ＣＸＣＲ５抗体は、ＩｇＧ４抗体である。本発明のいくつかの実施形態において、抗ＣＸＣＲ５抗体は、ヒト化ＩｇＧ４抗体である。
【００８０】
本発明の製剤のある特定の実施形態はまた、抗体などの抗ＣＸＣＲ５結合剤のバリアントを含む。抗ＣＸＣＲ５抗体のバリアントは、その高い類似性に基づけば、類似の物理化学的性質を有している可能性があり、したがって本発明の範囲内にも含まれる。バリアントは、抗ＣＸＣＲ５抗体と少なくとも９５％、少なくとも９７％、例えば少なくとも９８％または９９％相同であるアミノ酸配列を有し、かつＣＸＣＲ５ポリペプチド、ＣＸＣＲ５ポリペプチドフラグメント、またはＣＸＣＲ５エピトープへの結合について競合することができる抗体として定義される。いくつかの実施形態において、バリアントは、ＣＸＣＲ５の生物活性（例えば、ＣＸＣＬ１３によるＣＸＣＲ５への結合）を緩和、中和、またはそうでなければ阻害する。標的への結合についての競合を決定することは、当業者に公知の日常的な方法によって実行できる。いくつかの実施形態において、バリアントはヒト抗体であり、いくつかの実施形態において、ＩｇＧ４分子である。いくつかの実施形態において、バリアントは、本明細書において開示される企図される抗体とアミノ酸配列において、少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一である。用語「バリアント」は、抗ＣＸＣＲ５抗体のアミノ酸配列と比べて１つまたはそれ以上のアミノ酸において改変されているアミノ酸配列を含む抗体を指す。バリアントは、アミノ酸置換、修飾、付加、および／または欠失を含む保存的な配列の修飾を有していてもよい。
【００８１】
修飾の例は、グリコシル化、アセチル化、ペグ化、リン酸化、アミド化、既知の保護基／遮断基による誘導体化、タンパク質分解的切断、および細胞リガンドまたは他のタンパク質への結合を含むがこれらに限定されない。アミノ酸修飾は、抗体をコードする核酸における部位特異的変異導入、分子クローニング、オリゴヌクレオチド特異的変異導入、およびランダムＰＣＲ媒介変異導入などの当技術分野において公知の標準的な技術によって導入することができる。保存的なアミノ酸置換は、アミノ酸残基が、同様の構造的または化学的特性を有するアミノ酸残基と置き換えられるものを含む。同様の側鎖を有するアミノ酸残基のファミリーは、当該技術分野において定義されている。これらのファミリーは、塩基性側鎖（例えば、リジン、アルギニン、ヒスチジン）、酸性側鎖（例えば、アスパラギン酸、グルタミン酸）、非荷電極性側鎖（例えば、アスパラギン、グルタミン、セリン、スレオニン、チロシン、システイン、トリプトファン）、非極性側鎖（例えば、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン）、β分岐側鎖（例えば、スレオニン、バリン、イソロイシン）、および芳香族側鎖（例えば、チロシン、フェニルアラニン、トリプトファン）を有するアミノ酸を含む。上で使用されるもの以外のアミノ酸残基のファミリーの分類もまた使用できることは、当業者に明らかであろう。さらに、バリアントは、非保存的なアミノ酸置換、例えば異なる構造的または化学的特性を有するアミノ酸残基によるアミノ酸の置換を有してもよい。同様の軽微な変異はまた、アミノ酸欠失もしくは挿入、またはその両方を含み得る。免疫学的活性を損なわずにどのアミノ酸残基を置換、修飾、挿入、または欠失することができるかを決定する際の目安は、当技術分野において周知のコンピュータープログラムを用いて見出すことができる。特に当業者に知られているコンピューターアルゴリズム、例えばＧａｐまたはＢｅｓｔｆｉｔを使用して、比較されるアミノ酸配列を最適に整列させ、類似または同一のアミノ酸残基を定義することができる。バリアントは、抗ＣＸＣＲ５抗体と比較して同一かまたは異なる、より高いかまたはより低い結合親和性を有し得るが、それでもまだＣＸＣＲ５に特異的に結合することができ、そして抗ＣＸＣＲ５抗体と同一、より高いまたはより低い生物活性を有し得る。
【００８２】
本発明の実施形態はまた、抗体などの抗ＣＸＣＲ５結合剤の抗原結合フラグメントを含む。用語「抗原結合ドメイン」、「抗原結合領域」、「抗原結合フラグメント」、および同様の用語は、抗原と相互作用するアミノ酸残基を含み、結合剤に抗原に対するその特異性と親和性を与える抗体の一部（例えば、相補性決定領域（ＣＤＲ））を指す。抗原結合領域は、げっ歯類（例えば、ウサギ、ラット、またはハムスター）およびヒトなどの任意の動物種に由来し得る。いくつかの実施形態において、抗原結合領域は、ヒト起源であろう。抗原結合フラグメントの非限定的な例は，Ｆａｂフラグメント、Ｆ（ａｂ′）２フラグメント、Ｆｄフラグメント、Ｆｖフラグメント、単鎖Ｆｖ  （ｓｃＦｖ）分子、ｄＡｂフラグメント、および抗体の超可変領域を模倣するアミノ酸残基からなる最小認識単位を含む。
【００８３】
いくつかの実施形態において、抗ＣＸＣＲ５結合剤（またはそのバリアントもしくはその抗原結合フラグメント）は、インビボでＣＸＣＲ５の生物活性（例えば、ＣＸＣＬ１３によるＣＸＣＲ５への結合）を緩和、中和、またはさもなければ阻害するであろう。
【００８４】
いくつかの実施形態において、抗ＣＸＣＲ５結合剤（またはそのバリアントもしくはその抗原結合フラグメント）は、インビボでＣＸＣＲ５の生物活性（例えば、ＣＸＣＬ１３によるＣＸＣＲ５への結合）を緩和、中和、またはさもなければ阻害するアンタゴニスト結合剤である。
【００８５】
いくつかの実施形態において、抗ＣＸＣＲ５結合剤（またはそのバリアントもしくはその抗原結合フラグメント）は、約５０〜約５００ｍｇ／ｍＬ、約２５〜約４００ｍｇ／ｍＬ、約５０〜約２５０ｍｇ／ｍＬ、約５ｍｇ／ｍＬ〜約２８０ｍｇ／ｍＬ、約５ｍｇ／ｍＬ〜約２００ｍｇ／ｍＬ、約５ｍｇ／ｍＬ〜約１２５ｍｇ／ｍＬ、約５ｍｇ／ｍＬ〜約７５ｍｇ／ｍＬ、約５ｍｇ／ｍＬ〜約５０ｍｇ／ｍＬ、および約５ｍｇ／ｍＬ〜約２５ｍｇ／ｍＬの量で製剤中に存在する。例えば、抗ＣＸＣＲ５結合剤は、約５ｍｇ／ｍＬ、約１０ｍｇ／ｍＬ、約１５ｍｇ／ｍＬ、約２０ｍｇ／ｍＬ、約２５ｍｇ／ｍＬ、約３０ｍｇ／ｍＬ、約３５ｍｇ／ｍＬ、約４０ｍｇ／ｍＬ、約４５ｍｇ／ｍＬ、約５０ｍｇ／ｍＬ、約５５ｍｇ／ｍＬ、約６０ｍｇ／ｍＬ、約６５ｍｇ／ｍＬ、約７０ｍｇ／ｍＬ、約７５ｍｇ／ｍＬ、約８０ｍｇ／ｍＬ、約８５ｍｇ／ｍＬ、約９０ｍｇ／ｍＬ、約９５ｍｇ／ｍＬ、約１００ｍｇ／ｍＬ、約１０５ｍｇ／ｍＬ、約１１０ｍｇ／ｍＬ、約１１５ｍｇ／ｍＬ、約１２０ｍｇ／ｍＬ、約１２５ｍｇ／ｍＬ、約１３０ｍｇ／ｍＬ、約１３５ｍｇ／ｍＬ、約１４０ｍｇ／ｍＬ、約１４５ｍｇ／ｍＬ、約１５０ｍｇ／ｍＬ、約１５５ｍｇ／ｍＬ、約１６０ｍｇ／ｍＬ、約１６５ｍｇ／ｍＬ、約１７０ｍｇ／ｍＬ、約１７５ｍｇ／ｍＬ、約１８０ｍｇ／ｍＬ、約１８５ｍｇ／ｍＬ、約１９０ｍｇ／ｍＬ、約１９５ｍｇ／ｍＬ、約２００ｍｇ／ｍＬ、約２０５ｍｇ／ｍＬ、約２１０ｍｇ／ｍＬ、約２１５ｍｇ／ｍＬ、約２２０ｍｇ／ｍＬ、約２２５ｍｇ／ｍＬ、約２３０ｍｇ／ｍＬ、約２３５ｍｇ／ｍＬ、約２４０ｍｇ／ｍＬ、約２４５ｍｇ／ｍＬ、約２５０ｍｇ／ｍＬ、約２５５ｍｇ／ｍＬ、約２６０ｍｇ／ｍＬ、約２６５ｍｇ／ｍＬ、約２７０ｍｇ／ｍＬ、約２７５ｍｇ／ｍＬ、または約２８０ｍｇ／ｍＬの量で製剤中に存在し得る。
【００８６】
代替的な実施形態において、抗ＣＸＣＲ５結合剤は、約５〜約２５ｍｇ／ｍＬ、約２６〜約５０ｍｇ／ｍＬ、約５１〜約７５ｍｇ／ｍＬ、約７６〜約１００ｍｇ／ｍＬ、約１０１〜約１２５ｍｇ／ｍＬ、約１２６〜約１５０ｍｇ／ｍＬ、約１５１〜約１７５ｍｇ／ｍＬ、約１７６〜約２００ｍｇ／ｍＬ、約２０１ｍｇ／ｍＬ〜約２２５ｍｇ／ｍＬ、約２２６ｍｇ／ｍＬ〜約２５０ｍｇ／ｍＬ、約２５１〜約２８０ｍｇ／ｍＬ、約５〜約２５ｍｇ／ｍＬ、約４０〜約６０ｍｇ／ｍＬ、約７５〜約８５ｍｇ／ｍＬ、または約９０〜約１１０ｍｇ／ｍＬの量で製剤中に存在し得る。
【００８７】
第１の特定の実施形態において、企図される抗体は、ヒトＣＸＣＲ５の細胞外ドメインに特異的に結合する単離された抗体またはそのフラグメントである。抗体またはそのフラグメントは、（ａ）配列番号１１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン、および配列番号１２のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン；（ｂ）ＲＳＳＫＳＬＬＨＳＳＧＫＴＹＬＹ（配列番号５８）、ＲＭＳＮＬＡＳ（配列番号５９）、ＭＱＨＬＥＹＰＹＴ（配列番号６０）、ＧＦＳＬＩＤＹＧＶＮ（配列番号６１）、ＶＩＷＧＤＧＴＴＹ（配列番号６２）、およびＩＶＹ（配列番号６３）のアミノ酸配列；（ｃ）配列番号１３、配列番号１４、もしくは配列番号１５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン、および配列番号１６のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン；（ｄ）ＲＳＳＫＳＬＬＨＳＳＧＫＴＹＬＹ（配列番号５８）、ＲＬＳＮＬＡＳ（配列番号６４）、ＭＱＨＬＥＹＰＹＴ（配列番号６０）、ＧＦＳＬＩＤＹＧＶＮ（配列番号６１）、ＶＩＷＧＤＧＴＴＹ（配列番号６２）、およびＩＶＹ（配列番号６３）のアミノ酸配列；（ｅ）ＲＳＳＫＳＬＬＨＳＳＧＫＴＹＬＹ（配列番号５８）、ＲＬＳＳＮＬＡＳ（配列番号６５）、ＭＱＨＬＥＹＰＹＴ（配列番号６０）、ＧＦＳＬＩＤＹＧＶＮ（配列番号６１）、ＶＩＷＧＤＧＴＴＹ（配列番号６２）、およびＩＶＹ（配列番号６３）のアミノ酸配列；（ｆ）配列番号１７、配列番号１９、もしくは配列番号２１のアミノ酸配列を含む可変軽鎖（ＶＬ）、および配列番号２３のアミノ酸配列を含む可変重鎖（ＶＨ）；（ｇ）配列番号３０、配列番号３１、もしくは配列番号３２のアミノ酸配列を含む可変軽鎖、および配列番号３３もしくは配列番号３４のアミノ酸配列を含む可変重鎖；（ｈ）ＲＳＳＫＳＬＬＨＳＳＧＫＴＹＬＹ（配列番号５８）、ＲＭＳＮＬＡ（配列番号６６）、ＭＱＨＬＥＹＰＹＴ（配列番号６０）、ＧＦＳＬＩＤＹＧＶＮ（配列番号６１）、ＶＩＷＧＤＧＴＴＹ（配列番号６２）、およびＩＶＹ（配列番号６３）のアミノ酸配列；（ｉ）ＲＳＳＫＳＬＬＨＳＳＧＫＴＹＬＹ（配列番号５８）、ＲＬＳＮＬＡ（配列番号６７）、ＭＱＨＬＥＹＰＹＴ（配列番号６０）、ＧＦＳＬＩＤＹＧＶＮ（配列番号６１）、ＶＩＷＧＤＧＴＴＹ（配列番号６２）、およびＩＶＹ（配列番号６３）のアミノ酸配列；（ｊ）ＲＳＳＫＳＬＬＨＳＳＧＫＴＹＬＹ（配列番号５８）、ＲＬＳＳＬＡ（配列番号６８）、ＭＱＨＬＥＹＰＹＴ（配列番号６０）、ＧＦＳＬＩＤＹＧＶＮ（配列番号６１）、ＶＩＷＧＤＧＴＴＹ（配列番号６２）、およびＩＶＹ（配列番号６３）のアミノ酸配列；（ｋ）配列番号３５のアミノ酸配列を含む可変軽鎖、および配列番号３７のアミノ酸配列を含む可変重鎖；（ｌ）配列番号３９、配列番号４１、もしくは配列番号４３のアミノ酸配列を含む可変軽鎖、および配列番号４５もしくは配列番号４７のアミノ酸配列を含む可変重鎖；（ｍ）配列番号５５のアミノ酸配列を含む可変軽鎖、および配列番号５６もしくは配列番号５７のアミノ酸配列を含む可変重鎖；または、（ｎ）ＲＳＳＫＳＬＬＨＳＳＧＫＴＹＬＹＷ（配列番号６９）、ＲＭＳＮＬＡ（配列番号６６）、ＭＱＨＬＥＹＰＹＴ（配列番号６０）、ＧＦＳＬＩＤＹＧＶＮ（配列番号６１）、ＶＩＷＧＤＧＴＴＹ（配列番号６２）、およびＩＶＹ（配列番号６３）のアミノ酸配列を含み得る。
【００８８】
第２の特定の実施形態において、企図される抗体は、ヒトＣＸＣＲ５の細胞外ドメインに特異的に結合する単離された抗体またはそのフラグメントである。抗体またはそのフラグメントは、配列番号３２のアミノ酸配列を含む可変軽鎖、および配列番号３３のアミノ酸配列を含む可変重鎖を含む。
【００８９】
第３の特定の実施形態において、企図される抗体は、ヒトＣＸＣＲ５の細胞外ドメインに特異的に結合する単離された抗体またはそのフラグメントである。抗体またはそのフラグメントは、ＲＳＳＫＳＬＬＨＳＳＧＫＴＹＬＹ（配列番号５８）、ＲＬＳＳＬＡ（配列番号６８）、ＭＱＨＬＥＹＰＹＴ（配列番号６０）、ＧＦＳＬＩＤＹＧＶＮ（配列番号６１）、ＶＩＷＧＤＧＴＴＹ（配列番号６２）、およびＩＶＹ（配列番号６３）のアミノ酸配列を含む。
【００９０】
上述の第１、第２、または第３の特定の実施形態のいずれかにおいて、抗体またはそのフラグメントは１つまたはそれ以上の定常領域をさらに含み得る。１つまたはそれ以上の定常領域ドメインは、ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３、および／またはＣＬからなり得る。１つまたはそれ以上の定常領域は、例えばＩｇＧ４抗体であり得るＩｇＧ抗体由来であり得る。
【００９１】
上述の第１、第２、または第３の特定の実施形態のいずれかにおいて、抗体またはそのフラグメントは単鎖Ｆｖであり得る。
【００９２】
一実施形態において、医薬組成物は、上述の第１、第２、または第３の特定の実施形態のいずれかの抗体またはそのフラグメントの治療有効量と、薬学的に許容可能な担体とを含むことを企図されている。
【００９３】
緩衝剤
本発明の製剤は、緩衝剤としてクエン酸緩衝液を含み得る。他の緩衝液も使用できる。緩衝剤は、生理学的に好適なｐＨを維持する。さらに、緩衝剤は、製剤の等張性および化学的安定性を増強する。いくつかの実施形態において、クエン酸緩衝液は、約０．５ｍＭ〜約５０ｍＭ、例えば、約５ｍＭ〜約１５ｍＭの濃度で製剤中に存在する。例えば、クエン酸緩衝液は、約５ｍＭ、約６ｍＭ、約７ｍＭ、約８ｍＭ、約９ｍＭ、約１０ｍＭ、約１１ｍＭ、約１２ｍＭ、約１３ｍＭ、約１４ｍＭ、約１５ｍＭ、約１６ｍＭ、約１７ｍＭ、約１８ｍＭ、約１９ｍＭ、約２０ｍＭ、約２１ｍＭ、約２２ｍＭ、約２３ｍＭ、約２４ｍＭ、約２５ｍＭ、約２６ｍＭ、約２７ｍＭ、約２８ｍＭ、約２９ｍＭ、約３０ｍＭ、約３１ｍＭ、約３２ｍＭ、約３３ｍＭ、約３４ｍＭ、約３５ｍＭ、約３６ｍＭ、約３７ｍＭ、約３８ｍＭ、約３９ｍＭ、約４０ｍＭ、約４１ｍＭ、約４２ｍＭ、約４３ｍＭ、約４４ｍＭ、約４５ｍＭ、約４６ｍＭ、約４７ｍＭ、約４８ｍＭ、約４９ｍＭ、または約５０ｍＭの濃度で製剤中に存在し得る。いくつかの実施形態において、クエン酸緩衝液は、約７ｍＭ〜約１３ｍＭ、例えば、約９ｍＭ〜約１１ｍＭの濃度で製剤中に存在する。いくつかの実施形態において、クエン酸緩衝液は、約１０ｍＭの濃度で存在する。
【００９４】
ある特定の実施形態において、本発明の製剤は、ｐＨ６またはそれ以下のｐＨを有する。いくつかの実施形態において、製剤のｐＨは、約５〜約６．０の範囲である。例えば、製剤のｐＨは、約５．０、約５．１、約５．２、約５．３、約５．４、約５．５、約５．６、約５．７、約５．８、約５．９、および約６．０であり得る。いくつかの実施形態において、製剤のｐＨは、約５．５〜約６．０の範囲であり得る。いくつかの実施形態において、ｐＨは約５．５または約６．０のいずれかである。製剤のｐＨは、当業者に公知の任意の手段で測定できる。ｐＨを測定するための手段は、微小電極を有するｐＨ計を使用することである。製剤のｐＨは、当業者に公知の任意の手段を用いて調整できる。製剤のｐＨを改変するための例示的な化学物質は、塩酸（ＨＣｌ）および水酸化ナトリウム（ＮａＯＨ）である。
【００９５】
ある特定の実施形態において、本発明の製剤は、抗体などの結合剤の等電点（ｐＩ）またはそれ以下のｐＨを有する。等電点は、特定の分子または表面が正味の電荷を帯びないｐＨである。抗ＣＸＣＲ５結合剤のｐＩは、当業者に公知の任意の手段で決定できる。いくつかの実施形態において、抗ＣＸＣＲ５抗体のｐＩは、変性等電点電気泳動法によって決定される。本明細書において企図される完全なヒトＩｇＧ４抗体のｐＩは、約６．９〜約９．１の範囲であり得る。
【００９６】
例えば、企図される製剤は抗ＣＸＣＲ５結合剤とクエン酸緩衝液とを含み、ここで、製剤のｐＨは、約ｐＨ６と結合剤の等電点（ｐＩ）の両方であるか、またはそれら未満である。本発明の製剤は、製剤中の結合剤の濃度の増加の際に望ましくない副産物を形成する従来のＩｇＧ４結合剤製剤（例えば、リン酸緩衝生理食塩水製剤）と比べて大幅な改善を提供する。特に、本発明の製剤は、凝集体、半分子、分解産物、低分子量タンパク質（ＬＭＷＰ）、高分子量タンパク質（ＨＭＷＰ）、および製剤中の結合剤の酸、塩基性、中性のアイソフォームの再配置の量が低減している。
【００９７】
界面活性剤
本発明の製剤は、場合により、安定化剤としても知られる界面活性剤をさらに含み得る。界面活性剤／安定化剤は、製剤中の生体分子および／または一般的な薬学的賦形剤と相互作用して安定化させる化合物である。ある特定の実施形態において、界面活性剤は、低温貯蔵と共に使用し得る。界面活性剤は、一般的に、空気／溶液界面によって誘発される応力、溶液／表面によって誘発される応力から結合剤を保護し、これらは、そうしなければタンパク質の凝集を引き起こす可能性がある。界面活性剤は、ポリソルベート、グリセリン、ジカルボン酸、シュウ酸、コハク酸、フマル酸、フタル酸、およびこれらの組み合わせを含み得るがこれらに限定されない。当業者は、他の界面活性剤、例えば、非イオン性またはイオン性界面活性剤もまた、それらが薬学的に許容可能である限り、すなわち、対象への投与に好適である限り、使用できることを認識する。界面活性剤は、いくつかの実施形態において、ポリソルベートである。ポリソルベートの例は、ポリソルベート２０、ポリソルベート４０、ポリソルベート６０、ポリソルベート６５、およびポリソルベート８０を含む。
【００９８】
例示的な実施形態において、界面活性剤は、約０．００１％〜約０．１％（ｗ／ｖ）の量で製剤中に存在する。例えば、界面活性剤は、約０．００１％（ｗ／ｖ）、約０．００２％（ｗ／ｖ）、約０．００３％（ｗ／ｖ）、約０．００４％（ｗ／ｖ）、約０．００５％（ｗ／ｖ）、約０．００６％（ｗ／ｖ）、約０．００７％（ｗ／ｖ）、約０．００８％（ｗ／ｖ）、約０．００９％（ｗ／ｖ）、約０．０１％（ｗ／ｖ）、約０．０２％（ｗ／ｖ）、約０．０３％（ｗ／ｖ）、約０．０４％（ｗ／ｖ）、約０．０５％（ｗ／ｖ）、約０．０６％（ｗ／ｖ）、約０．０７％（ｗ／ｖ）、約０．０８％（ｗ／ｖ）、約０．０９％（ｗ／ｖ）、および約０．１％（ｗ／ｖ）の量で製剤中に存在し得る。特定の実施形態において、界面活性剤は、約０．００３％〜約０．０５％（ｗ／ｖ）、約０．００４％〜約０．０２５％（ｗ／ｖ）、または約０．００５％〜約０．０２％（ｗ／ｖ）、例えば約０．００５％（ｗ／ｖ）で製剤中に存在する。例えばポリソルベート２０は、約０．００１％〜約０．１％（ｗ／ｖ）約０．００２％〜約０．０１％（ｗ／ｖ）、約０．００３％〜約０．００８％（ｗ／ｖ）、および約０．００４％〜約０．００６％（ｗ／ｖ）、例えば、約０．００５％（ｗ／ｖ）の量で存在し得る。代替的な実施形態において、ポリソルベート２０は、約０．００１％〜約０．１％（ｗ／ｖ）、約０．００５％〜約０．０５％（ｗ／ｖ）、および約０．００７５％〜約０．０２５％（ｗ／ｖ）、例えば約０．０１％（ｗ／ｖ）の量で存在する。さらなる代替的な実施形態において、ポリソルベート２０は、約０．００１％〜約０．１％（ｗ／ｖ）約０．００５％〜約０．０５％（ｗ／ｖ）、および約０．０１％〜約０．０３％（ｗ／ｖ）、例えば約０．０２％（ｗ／ｖ）の量で存在する。
【００９９】
等張化剤
本発明の製剤は、場合により、等張化剤をさらに含み得る。典型的には、等張化剤は、製剤の浸透圧を血液または血漿などの体液の浸透圧に近づけるために、製剤の浸透圧を調整または維持するために使用する。等張化剤はまた、製剤中の結合剤のレベルを維持し得る。部分的には、等張化剤は、製剤中に存在する治療的に活性な結合剤のレベル、比率、または割合を保存するのに寄与する。本明細書において使用されるとき、用語「等張性」は、流体環境または溶液中の生物学的成分の挙動を指す。等張液は、血漿と同一の浸透圧を有し、そして対象の血漿の浸透圧を変化させることなく対象に静脈内に注入し得る。実際、ある特定の実施形態において、等張化剤は、製剤を静脈内注入に適したものにするのに十分な量で存在する。しばしば、等張化剤は増量剤または安定化剤としても機能する。したがって、等張化剤は、結合剤が、凍結およびせん断などの様々なストレスを克服することを可能にし得る。等張化剤は、サッカリド、糖類、グリセリン、ソルビトール、マンニトール、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化マグネシウム、および他の無機塩を含み得るが、これらに限定されない。当業者は、他の等張化剤もまた、それらが薬学的に許容可能である限り、すなわち、対象への投与に好適である限り、使用できることを認識する。
【０１００】
ある特定の実施形態において、等張化剤は、約０．１％〜１０％（ｗ／ｖ）の量で製剤中に存在する。例えば、等張化剤は、約０．１％（ｗ／ｖ）、約０．２％（ｗ／ｖ）、約０．３％（ｗ／ｖ）、約０．４％（ｗ／ｖ）、約０．５％（ｗ／ｖ）、約０．６％（ｗ／ｖ）、約０．７％（ｗ／ｖ）、約０．８％（ｗ／ｖ）、約０．９％（ｗ／ｖ）、約１％（ｗ／ｖ）、約２％（ｗ／ｖ）、約３％（ｗ／ｖ）、約４％（ｗ／ｖ）、約４．５％（ｗ／ｖ）、約５％（ｗ／ｖ）、約５．５％（ｗ／ｖ）、約６％（ｗ／ｖ）、約７％（ｗ／ｖ）、約８％（ｗ／ｖ）、約２．０％（ｗ／ｖ）、約９％（ｗ／ｖ）、および約１０％（ｗ／ｖ）の量で製剤中に存在し得る。代替的に、等張化剤は、約２％〜約８％（ｗ／ｖ）、約３％〜約７％（ｗ／ｖ）、および約４％〜約６％（ｗ／ｖ）の量で製剤中に存在し得る。さらなる代替的な実施形態において、等張化剤は、約０．１％〜約１％、約０．１％〜約０．５％、約０．１〜約０．３％、および約０．２％の量で製剤中に存在し得る。
【０１０１】
ある特定の実施形態において、等張化剤はサッカリドである。サッカリドの例は、グルコース、スクロース（サッカロースとしても知られる）、マルトース、トレハロース、デキストロース、キシリトール、フルクトース、およびマンニトールを含む。例えば、マンニトールは、約１％〜約１０％（ｗ／ｖ）、約２％〜約８％（ｗ／ｖ）、または約３％〜約５％（ｗ／ｖ）、例えば、約４％（ｗ／ｖ）の量で存在し得る。代替的に、スクロース（サッカロースとしても知られる）は、約１％〜約１０％（ｗ／ｖ）、約３％〜約８％（ｗ／ｖ）、または約４％〜約６％（ｗ／ｖ）、例えば、約４．５、５、５．５、または６％（ｗ／ｖ）の量で存在し得る。
【０１０２】
ある特定の他の例示的な実施形態において、等張化剤は塩化ナトリウムである。例えば、塩化ナトリウムは、約０．１％（ｗ／ｖ）、約０．２％（ｗ／ｖ）、約０．３％（ｗ／ｖ）、約０．４％（ｗ／ｖ）、約０．５％（ｗ／ｖ）、約０．６％（ｗ／ｖ）、約０．７％（ｗ／ｖ）、約０．８％（ｗ／ｖ）、約０．９％（ｗ／ｖ）、および約１％（ｗ／ｖ）の量で存在し得る。代替的に、塩化ナトリウムは、約０．１％〜約１％、約０．１％〜約０．５％、約０．１〜約０．３％、および約０．２％の量で製剤中に存在し得る。
【０１０３】
さらなる例示的な実施形態において、製剤は１つまたはそれ以上の等張化剤を含み得る。例えば、製剤は、１つまたはそれ以上の上述の等張化剤を上述の濃度で含み得る。ある特定の実施形態において、製剤は、スクロースおよび塩化ナトリウムを含み得、ここで、スクロースと塩化ナトリウムの濃度の各々は、約０．１％〜約１０％（ｗ／ｖ）である。いくつかの実施形態において、スクロースの濃度は、約６％であり、塩化ナトリウムの濃度は約０．２％である。代替的に、スクロースの濃度は、約４．５％であり、塩化ナトリウムの濃度は約０．２％である。
【０１０４】
本発明のある特定の実施形態において、製剤の重量オスモル濃度は、約２００ｍＯｓｍ／ｋｇ〜約３５０ｍＯｓｍ／ｋｇ、約２７０ｍＯｓｍ／ｋｇ〜約３３０ｍＯｓｍ／ｋｇ、約２８０ｍＯｓｍ／ｋｇ〜約３２０ｍＯｓｍ／ｋｇ、または、約２９０ｍＯｓｍ／ｋｇ〜約３１０ｍＯｓｍ／ｋｇの範囲であり、例えば、約３００ｍＯｓｍ／ｋｇである。換言すると、本発明の製剤は、いくつかの実施形態において、実質的に等張性であり、すなわちヒト血液と実質的に同一の浸透圧を有する。重量モル浸透圧濃度は、当業者に公知の任意の手段、例えば蒸気圧または氷凍結型浸透圧計を使用することによって測定することができる。本発明の製剤の浸透圧は、例えば、本明細書において記載される１つまたはそれ以上の等張化剤によって調節することができる。
【０１０５】
アミノ酸
本発明の製剤は、場合により、アミノ酸をさらに含み得る。アミノ酸の例は、グリシン、アラニン、アスパラギン酸、リジン、セリン、チロシン、システイン、グルタミン、メチオニン、アルギニン、およびプロリンを含むがこれらに限定されない。例示的な実施形態において、アミノ酸は、約０．１％〜５％（ｗ／ｖ）の量で製剤中に存在する。例えば、アミノ酸は、約０．１％（ｗ／ｖ）、約０．２％（ｗ／ｖ）、約０．３％（ｗ／ｖ）、約０．４％（ｗ／ｖ）、約０．５％（ｗ／ｖ）、約０．６％（ｗ／ｖ）、約０．７％（ｗ／ｖ）、約０．８％（ｗ／ｖ）、約０．９％（ｗ／ｖ）、約１．０％（ｗ／ｖ）、約１．１％（ｗ／ｖ）、約１．２％（ｗ／ｖ）、約１．３％（ｗ／ｖ）、約１．４％（ｗ／ｖ）、約１．５％（ｗ／ｖ）、約１．６％（ｗ／ｖ）、約１．７％（ｗ／ｖ）、約１．８％（ｗ／ｖ）、約１．９％（ｗ／ｖ）、約２．０％（ｗ／ｖ）、約３％（ｗ／ｖ）、約４％（ｗ／ｖ）、および約５％（ｗ／ｖ）の量で製剤中に存在し得る。代替的に、アミノ酸は、約１．３％〜約１．８％（ｗ／ｖ）、または約１．４％〜約１．６％（ｗ／ｖ）、例えば、約１．５％（ｗ／ｖ）の量で製剤中に存在する。さらなる代替的な実施形態において、アミノ酸は、約０．５％〜約１．５％（ｗ／ｖ）、または約０．８％〜約１．２％（ｗ／ｖ）、例えば、約１．０％（ｗ／ｖ）の量で製剤中に存在する。例示的なアミノ酸はプロリンまたはアルギニンである。例えば、プロリンは、約１％〜約２％（ｗ／ｖ）、約１．３％〜約１．８％（ｗ／ｖ）、約１．４％〜約１．６％（ｗ／ｖ）、例えば、約１．５％（ｗ／ｖ）の量で製剤中に存在し得る。代替的に、アルギニンは、約０．５％〜約１．５％（ｗ／ｖ）、または約０．８％〜約１．２％（ｗ／ｖ）、例えば、約１．０％（ｗ／ｖ）の量で製剤中に存在する。
【０１０６】
他の賦形剤
さらに、本発明の製剤は、注射用水、希釈剤、可溶化剤、無痛化剤、追加の緩衝剤、無機または有機の塩、酸化防止剤などを含むがこれらに限定されない、他の賦形剤を含み得る。しかしながら、いくつかの実施形態において、本発明の製剤は、上述されるもの以外の他の賦形剤を含まない。Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  １６ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ、Ｏｓｏｌ、Ａ．編（１９８０）に記載されるもののような、他の薬学的に許容可能な担体、賦形剤、または安定化剤は、製剤の所望の特性に悪影響を及ぼさない限り、製剤中に含み得る。特定の実施形態において、製剤は、実質的に保存剤を含まないが、代替的な実施形態において、保存剤を必要に応じて添加できる。例えば、凍結保護剤または凍結乾燥保護剤を凍結乾燥製剤に含んでもよい。
【０１０７】
液体または凍結乾燥の製剤
本発明の製剤は、液体製剤または凍結乾燥製剤であり得る。いくつかの実施形態において、液体製剤は、液体製剤は注射の準備ができているものであり、または注射前に希釈することができる。代替的に、製剤は、凍結乾燥された粉末であり得る。いくつかの実施形態において、凍結乾燥された粉末は、投与の直前に所望の濃度に達するための複数の溶媒容量の一つと混合する準備ができている。
【０１０８】
例示的な製剤
本発明の一実施形態において、本発明は、皮下投与に好適な安定な液体であって、
ａ）  １００ｍｇ／ｍＬを超える、例えば約１００〜約１７５ｍｇ／ｍＬの、配列番号３３のアミノ酸配列を含む重鎖、および配列番号３２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む完全なヒト抗ＣＸＣＲ５抗体；
ｂ）  約１０ｍＭのクエン酸緩衝液；
ｃ）  約０．１％（ｗ／ｖ）ポリソルベート２０またはポリソルベート８０；ならびに
ｄ）  約２００ｍＭのアルギニン；
ｅ）  約４．５〜９％のスクロース
を含み、
ここで、製剤のｐＨは、約ｐＨ６である
抗体製剤を提供する。
【０１０９】
本発明の別の実施形態において、本発明は、
ａ）  約１５０〜約１７５ｍｇ／ｍＬの、配列番号３３のアミノ酸配列を含む重鎖、および配列番号３２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含むヒト化ＩｇＧ４抗ＣＸＣＲ５抗体；
ｂ）  約１０ｍＭのクエン酸緩衝液；
ｃ）  約０．１％（ｗ／ｖ）ポリソルベート８０；ならびに
ｄ）  約２００ｍＭのアルギニン；
ｅ）  約４．５％スクロース
を含み、
ここで、製剤のｐＨは、約ｐＨ６．０である
安定な抗体製剤を提供する。
【０１１０】
本発明の特定の実施形態において、本発明は、
ａ）  約１７５ｍｇ／ｍＬの、配列番号３３のアミノ酸配列を含む重鎖、および配列番号３２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含むヒト化ＩｇＧ４抗ＣＸＣＲ５抗体；
ｂ）  約１０ｍＭのクエン酸緩衝液；
ｃ）  約０．１％のポリソルベート８０；ならびに
ｄ）  約２００ｍＭのアルギニン；
ｅ）  約４．５％スクロース
を含み、ここで、製剤のｐＨは、約ｐＨ６．０である
安定な抗体製剤を提供する。
【０１１１】
安定性
企図される製剤は、５℃において、少なくとも約１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、もしくは１２カ月間またはそれ以上、および、典型的には少なくとも約１２、１８、もしくは２４カ月間またはそれ以上、安定である。例示的な実施形態において、それらは５℃で少なくとも６カ月またはそれ以上安定である。他の実施形態において、それらは５℃で少なくとも９カ月安定である。さらなる例示的な実施形態において、それらは５℃で、少なくとも１年間またはそれ以上、典型的には２年間を超えて、または４年間を超えて安定である。
【０１１２】
投与の様式
本発明のある特定の実施形態において、製剤は、非経口、静脈内、筋肉内、経皮、皮下、またはそれらの組み合わせの投与に好適である。本発明の製剤は、様々な技術による送達に好適である。
【０１１３】
用量および投与形態
本発明の製剤の有効量は、投与手段、標的部位、対象の生理学的状態、対象がヒトであるか動物であるか、投与される他の薬物、および治療が予防的または治療的であるかどうかを含む多くの種々の要素に依存して変動する。通常、対象はヒトであるが、トランスジェニック動物を含む非ヒト哺乳動物もまた処理できる。安全性と効能を最適化するために治療用量を滴定する必要があり得る。
【０１１４】
本発明の製剤は複数回投与することができる。単回投与間の間隔は、毎日、毎週、隔週、毎月または毎年であり得る。間隔は不規則でもあり得る。いくつかの方法においては、用量は、抗体濃度などの特定の血漿における結合剤を達成するように調整される。用量および頻度は、対象における抗体などの抗ＣＸＣＲ５結合剤の半減期に応じて変動する。概して、ヒト抗体は、最長の半減期を示し、ヒト化抗体、キメラ抗体、および非ヒト抗体がこの後に続く。
【０１１５】
さらなる実施形態において、本発明は、対象における１つまたはそれ以上の疾患の対象への剤形の投与を通じた治療のための治療有効量の本発明の製剤を含む医薬剤形を提供する。いくつかの実施形態において、対象はヒトである。ヒトは成人または幼児であってよい。「医薬単位剤形」は治療される対象に対する単位用量として好適な物理的に分離した単位を指し、各々の単位が必要とされるクエン酸緩衝液およびｐＨと関連して、所望の治療／予防効果をもたらすよう計算された所定の量の活性化合物を含む。
【０１１６】
単位剤形は、製剤を含む容器であり得る。好適な容器は、密封アンプル、バイアル、ボトル、シリンジ、および試験管を含むが、これらに限定されない。容器は、ガラスまたはプラスチックなどの様々な材料から形成でき、滅菌アクセスポートを有してもよい（例えば、容器は皮下注射針によって突き刺すことができるストッパーを有するバイアルであってもよい）。いくつかの実施形態において、容器はバイアルである。概して、容器は、製剤の滅菌性および安定性を維持すべきである。
【０１１７】
特定の実施形態において、透明で無色のＩ型ガラスによって作製された４ｍＬのバイアル（２Ｒ  ＩＳＯバイアル）中に製剤が包装され、ストッパー（フルオロポリマー被覆ブロモブチル）によって閉じられ、フランジ付きフリップオフキャップ（ポリプロピレン）で密封される。バイアルは、いくつかの実施形態において、１．７ｍＬの製剤が充填され、バイアルは、バイアルあたり約０．２ｍＬの過充填量および１．５ｍＬの抽出可能量を有する。例えば、これは、抗体の用量強度（例えば、１７５ｍｇ／ｍＬ）が、１．５ｍＬの溶液中に含まれることを意味する。
【０１１８】
特定の一実施形態において、製剤は、バイアルを光から保護する段ボール箱などの容器に二次包装される。
【０１１９】
キット
本発明のある特定の実施形態は、本発明の製剤を含むキットを含む。キットは、薬学的に許容可能な賦形剤を含む１つまたはそれ以上の容器をさらに含むことができ、フィルター、針およびシリンジを含む、商業的および使用者の観点から望ましい他の物質を含む。キットには、例えば適応症、使用法、用量、製造、投与、禁忌、および／またはそのような治療用、予防用または診断用製品の使用に関する警告についての情報を含む、治療用、予防用または診断用製品の市販パッケージに通常含まれる説明書が付随し得る。キットにはまた、情報を含む任意の種類のデータ担体（例えば、リーフレット、ステッカー、チップ、印刷物またはバーコード）であり得るラベルが付随し得る。ある特定の実施形態において、上に列挙されるような説明書などは、ラベルの中またはラベル上に含めることができる。キットは、製剤を投与するための装置、特に製剤を含む装置、すなわちプレフィルド装置、例えばプレフィルドシリンジまたはプレフィルド自動注射器を含むがこれらに限定されないものをさらに含むことができる。キットは、製剤を含む容器、すなわちプレフィルド容器、例えばプレフィルドの、バイアル、カルトゥーシュ、サシェ、またはアンプルも含むことができる。
【０１２０】
種々の実施形態の組合せ
本発明に関連して、本明細書において記載される実施形態の任意のものは、そうでないと明示的に述べられていない限り、本明細書において記載される他の実施形態の１つまたはそれ以上と組み合わせることができる。特に、本明細書において記載される結合剤および抗体の任意のものと、本明細書において記載されるそれらの製剤は、キット、プレフィルド装置、またはプレフィルド容器の任意のものと組み合わせることができ、または、それぞれの抗体と関連した本明細書において記載されるような治療方法または医療用途において使用することができる（例えば、抗ＣＸＣＲ５抗体を含む安定な製剤は、本明細書において記載されるキット、容器、または装置の任意のものと組み合わせることができる）。抗原に特異的に結合する本明細書において記載される結合剤（例えば、ＣＸＣＲ５に特異的に結合する結合剤）の任意のものは、それぞれの抗体（すなわち、抗ＣＸＣＲ５）に関連した本明細書において記載される治療方法の任意のものにおいて使用することができ、逆もまた同様である。
【実施例】
【０１２１】
以下の実施例は、本発明の特定の実施形態を例示する。それらは例示的な目的としてのみ記述され、本発明を限定するものとして取られるべきではない。
【実施例１】
【０１２２】
スターダスト粒子形成の分析
Ａ）導入
ＳａｎｏｆｉによってＳＡＲ１１３２４４と命名される薬物製品（ＤＰ）は、ヒトＣＸＣＲ５に特異的に結合するヒト化ＩｇＧモノクローナル抗体（ｍＡｂ）であり、米国特許第８，６４７，６２２号に開示される。それは、１００ｍｇ／ｍＬの濃度の注射用溶液として非経口皮下投与用のために開発された。注射用のＤＰ溶液は、２ｍＬの透明で無色のバイアル（ガラス型Ｉ）に詰められ、ストッパー（フルオロポリマーでコーティングされたブロモブチルゴム）とフランジ（アルミニウム）付きフリップオフキャップ（ポリプロピレン）で閉じられた。
【０１２３】
ＳＡＲ１１３２４４  ｍＡｂについての製剤の開発は、１０ｍｇ／ｍＬのアルギニン、２ｍｇ／ｍＬのＮａＣｌ、０．０１％のポリソルベート２０および１０ｍＭのクエン酸緩衝液を含み、ｐＨ６を有する第Ｉ相臨床試験のための製剤で完了した（今後は「ＤＰ溶液」と呼ぶ）。この製剤は、化学安定性に関して、および非可視粒子に関して安定であった。しかしながら、製剤がガラスの一次包装物質、例えば、バイアルまたはプレフィルドシリンジで貯蔵されたとき、およそ１年後に可視粒子の形成が起きた。一次包装物質がプラスチック（バッグまたはフラスコ）であったとき、可視粒子の形成は起きなかった。
【０１２４】
可視粒子が２Ｒ  ＩＳＯガラスバイアル（Ｓｃｈｏｔｔ、Ｅｌｍｓｆｏｒｄ、ＮＹ）において貯蔵されたＤＰ溶液中に発見されたのは、第１相臨床試験のために計画された適合性試験中であった。粒子は非常に小さく、光沢があり、懸濁していたため、「スターダスト粒子」と呼ばれた。スターダスト粒子の発見により、研究が中止され、ＤＰ溶液のバッチを隔離した。緊急の行動計画が整備され、オンラインのフィルターオプションが調査され、臨床試験に適用された。これは、コメントなしで保健当局から承認された修正にまとめられ、研究は再開される可能性がある。しかしながら、さらなる臨床試験のために、スターダスト粒子を含まない製剤を開発することが望ましかった。本明細書において、スターダスト粒子を含まないＳＡＲ１１３２４４含有高濃度製剤を製造する方法について記載する。
【０１２５】
スターダスト粒子は、バッグまたはＮａｌｇｅｎｅ（登録商標）ボトルで貯蔵されたＤＰ溶液において存在しなかった。スターダスト粒子はまた、製造プロセス後に直接ガラスバイアルに貯蔵したＤＰ溶液においても存在しなかった。ガラスバイアルにおけるスターダスト粒子は、およそ１年間の貯蔵後に起きたと考えられている。同一のストッパーを使用し、同一の充填ラインを使用し、同一の装置を使用して同一の種類のバイアルに充填された他の製品（例えば、タンパク質治療薬）は、粒子について検査され、スターダスト粒子を全く生じなかった。
【０１２６】
ＤＰ溶液中でのＭｉｃｒｏｆｌｏｗ（登録商標）イメージングまたは光遮蔽を用いた非可視粒子の測定は、スターダスト粒子の存在にかかわらず常に許容範囲内であった。製造直後のサンプルと１年以上の長期保存期間を有するサンプルの非可視粒子の相違は、安定性試験中に検出されなかった。次に、スターダスト粒子を除去するために、第ＩＩ相臨床試験のための新たなスターダスト非含有製剤が開発された。最終的に、製剤は、加速条件下（４０℃）で６カ月間および２〜８℃で１２カ月間、ガラス容器中で安定性を実証した。
【０１２７】
Ｂ）方法
ＤＰ溶液の目視検査：ＤＰ溶液の目視検査は、ＤＰのバッチを完成させた直後に訓練を受けたスタッフによって実施された。バイアルを１回または２回反転させ、続いて５〜１５秒間バイアルを観察することによって（実験室１：液体検査ビューアＡｐｏｌｌｏ  ＩＩ；実験室２：ブラックボックス）、または反転のない回転バイアルを観察することによって（実験室３：拡大鏡付きＳｅｉｄｅｎａｄｅｒバイアル検査機）、バイアルを試験した光源は２０００〜３７５０ルクスであった。
【０１２８】
ＤＰ溶液容器中のガラス層間剥離：ガラス層間剥離を４つの異なるバッチ（３つの臨床バッチ、１つの技術バッチ）について分析した。この目的のために、バッチ当たり１０ｍＬのＤＰ溶液を試験して、溶液中に浸出したガラス元素、すなわちＳｉ、Ｂ、Ｃａ、およびＡｌの量を決定した。この試験のために４セットの容器を使用した：ＳＣＨＯＴＴＩ型プラス（ＳｉＯ２−被覆バイアル）、ＳＣＨＯＴＴ標準Ｆｉｏｌａｘ、ＳＣＨＯＴＴ  ＤＣ（制御された層間剥離）、およびＢＤプレフィルドとすることができるシリンジ。種々の溶液が６０℃で貯蔵され、３つの異なる時点（１、４、および１２週間後）で分析された。「フレーク様」および／または「非フレーク様」の粒子の存在に関して目視および拡大ビデオカメラによって目視検査を実施した。１０の容器が各々の時点で試験された。さらに、対照サンプルセット当たり５つの空の容器の光学検査を、拡大された焦点深度を有する立体顕微鏡を使用して実施し、容器の内部表面にガラス腐食または反応帯の存在の徴候があるかどうかを定性的に決定した。さらに、サンプルセット当たり１０個の空の容器および引上げ点を、拡大された焦点深度を有する立体顕微鏡により分析して、内部表面にガラス腐食または反応帯の存在の兆候があるかどうかを決定した。各々の引上げ点についてセット当たり２つの「最悪」の容器の内部表面上で、ＳＥＭ断面分析を実施した。各々のサンプルセットについて、各々の引き上げ点で容器からプールした全部で１０ｍＬのプラセボ溶液（１０ｍＭのクエン酸緩衝液、２ｇ／ＬのＮａＣｌ、１０ｇ／Ｌのアルギニン−ＨＣｌ、４５ｇ／Ｌのスクロース（４．５％）、および０．０１％のポリソルベート２０を含む）を、溶液中に浸出したガラス元素の量を定量的に決定するために分析した。
【０１２９】
機械的安定性試験：機械的応力が、ＤＰ溶液中でのスターダスト粒子の形成に寄与するかどうかを決定するために、機械的応力試験を実施した。製造中、ＤＰ溶液を、混合容器に添加し、賦形剤を添加した。１０ｍＬの容量の８つの異なる製剤（以下の表１を参照−各々の組成物はクエン酸緩衝液に基づく）を２００ｒｐｍで３０分または２時間のいずれかで攪拌した。賦形剤の混合後、可視粒子の発生について溶液を調べた。次いで、溶液をろ過し、２Ｒガラスバイアル中に充填した。目視検査を続け、溶液を４０℃で４週間貯蔵し、毎週検査した。
【０１３０】
【表１】
2019520390.tif 000002
【０１３１】
ＲａｐＩＤ試験（ろ過、ラマン、およびＦＴ−ＩＲ）：この試験中、５のＤＰ溶液サンプルが分析された。閉栓した容器中のＤＰ溶液の目視検査が最初に実施された。各々のサンプルの溶液を、直径４ｍｍの活性領域を有する別個の金被覆ポリカーボネートフィルター膜（孔径０．８μｍ）でろ過した。空になったバイアルを２×２ｍＬの無粒子水ですすぎ、そして栓を１×２ｍＬの無粒子水ですすいだ。全ての粒子が確実にフィルターに移されることを確保するために、ろ過装置内の漏斗を８ｍＬの無粒子水ですすいだ。観察された粒子の写真をビデオ顕微鏡で撮影した。最大の粒子（＞５０μｍ）のいくつかは、異なる分光法を適用してさらに分析された。ラマン分光法による調査は、ｒａｐ．ＩＤ  ｐａｒｔｉｃｌｅ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  ＧｍｂＨによって製造されたＳｉｎｇｌｅ  Ｐａｒｔｉｃｌｅ  Ｅｘｐｌｏｒｅｒ（ＳＰＥ）を用いて画像分析により手動で実施した。この装置は５３２ｎｍのレーザー波長で作動する。ＦＴ−ＩＲおよび／またはＡＴＲ分光法のために、Ｂｒｕｋｅｒによって製造されたＦＴ−ＩＲ分光計ＬＵＭＯＳ（シリアル番号１９０）を使用した。分析された粒子のうちの１つを、Ｂｒｕｋｅｒによって製造された走査電子顕微鏡ＳＥＭ−ＥＤＸ（商標）３０００によってさらに調査した。
【０１３２】
ろ過−顕微鏡検査：孔径０．４５μｍの硝酸セルロースフィルターを適用して各々のバッチの５つのバイアルから粒子を単離した。取得した粒子を、光学顕微鏡で分析した。粒子を、ＩＲ顕微鏡Ｈｙｐｅｒｉｏｎ２０００を使用して１５倍の倍率でＩＲ分光法によってさらに分析した。
【０１３３】
非可視分子の測定：
１．光学粒子カウンター：光学粒子カウンター（ＨＩＡＣ、Ｈａｃｈ）を使用して、タンパク質製剤中の非可視粒子の量を測定した。薬局方（ＵＳＰ、Ｐｈ．Ｅｕｒ．）によって要求されているように、１０μｍおよび２５μｍよりも大きい粒子を調査した。粒子の検出は、視体積内の粒子によって引き起こされる照明の光学的擾乱を検出する光検出器によって実施した。
２．フローイメージング顕微鏡：フローイメージング顕微鏡（フローイメージング顕微鏡（ＭＦＩ）、Ｐｒｏｔｅｉｎ  ｓｉｍｐｌｅ）を使用して、タンパク質製剤中の非可視粒子の量を測定した。薬局方（ＵＳＰ、Ｐｈ．Ｅｕｒ．）によって要求されているように、１０μｍおよび２５μｍよりも大きい粒子を調査した。粒子はデジタルカメラによって検出された。
３．ＳＥＣ：サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）を使用して、ナノメートルサイズ範囲内の可溶性凝集体の相対量を測定した。さらに、モノマーの純度または相対量を報告した。
４．ＤＬＳ：ナノメートルサイズ範囲の凝集体および粒子の存在は、動的光散乱（ＤＬＳ）（Ｚｅｔａｓｉｚｅｒ  Ｎａｎｏ−ＺＳ、Ｍａｌｖｅｒｎ）を用いて測定した。流体力学的直径および多分散性を測定した。
【０１３４】
Ｃ）  結果および議論：
ろ過実験：
スターダスト粒子現象を理解するために、ＳＡＲ１１３２４４薬物製品（ＤＰ溶液）から粒子を分離することを試みた。懸濁液中の粒子の単離は、ろ過によって、またはピペットもしくはヘラで粒子を取り出すことを試みることによって達成することができた。しかしながら、スターダスト粒子の分析は、それらを単離することができなかったので非常に困難であった。セルロースフィルターでろ過してもスターダスト粒子は単離されなかった（表２および図１〜３を参照）。３つのプラセボ溶液をろ過してもフィルター上にいかなる粒子も生じなかったが、ＮａｌｇｅｎｅボトルからのＤＰ溶液はかなりの量の輝く粒子を示した（図４および５）。フィルター上の粒子の絶対数は「スタダ―スト」の影響を受けたサンプルよりも少ないように見えたが、アスペクトとサイズは以前に単離された粒子と実質的に違いはなかった。したがって、ＮａｌｇｅｎｅボトルからのＤＰ溶液はスターダスト粒子を全く示さなかったので、「スターダスト」粒子を単離するための真空ろ過の方法の有効性は疑問視されなければならない。ＳＡＲ１１３２４４の製剤はまた、原薬がスターダスト粒子非含有であるにもかかわらず、フィルター上に粒子を示した（図６）：原薬は、クエン酸緩衝液（フェーズ１プロセスからの古い原薬）中でのみプラスチックバッグで貯蔵され、目視検査を実施したとき粒子を示さなかったが、ろ過後、粒子はフィルター上に見られた。
【０１３５】
異なるタンパク質の基づく治療薬（ＳＡＲ２５２０６７およびＳＡＲ３４１４０３）は、同様にフィルター上に粒子の存在を示した（図７〜１２）が、溶液は透明であった（スターダスト粒子非含有）。これらの知見は、高濃度抗体溶液の真空ろ過は、溶液成分がフィルター上に沈殿し、そして溶液中に存在する可能性のある可視または非可視の粒子の同定を不可能にするという危険性を有することを示す。
【０１３６】
【表２】
2019520390.tif 000003
【０１３７】
ＤＬＳによる測定：
動的光散乱によって測定されたタンパク質凝集体の測定は、スターダスト粒子を含まないプラスチックボトルで貯蔵されたＤＰ溶液（図１３）が、ガラスバイアルに保存されたスターダスト含有ＤＰ溶液（図１４）より低い多分散指数を有することを示した。これは、ＳＡＲ１１３２４４分子の立体構造変化がスターダスト粒子形成の根本的な原因である可能性があることを示している可能性がある。目視検査に加えて、この結果は、ガラス容器がスターダスト形成において役割を果たしていることを示している。
【０１３８】
層間剥離試験：
スターダスト粒子形成の１つのあり得る原因は、層間剥離がガラスバイアルから生じることであった。したがって、層間剥離試験を実施した。層間剥離試験は、１０ｍＭのクエン酸緩衝液、２ｇ／ＬのＮａＣｌ、１０ｇ／Ｌのアルギニン−ＨＣｌ、４５ｇ／Ｌ（４．５％）のスクロース、および０．０１％のポリソルベート２０を含むプラセボ溶液によって実施した。プラセボ溶液を、表３に概説される種々の種類のガラスバイアルで貯蔵した。
【０１３９】
【表３】
2019520390.tif 000004
【０１４０】
加速条件（６０℃）下において、１、４、または１２週間後に層間剥離は全く見られなかった（表４Ａおよび４Ｂを参照）。
【０１４１】
【表４】
2019520390.tif 000005
【０１４２】
【表５】
2019520390.tif 000006
【０１４３】
しかしながら、長期貯蔵（１２週間、６０℃）にわたって、溶液中にガラス成分（Ａｌ、Ｓｉ、Ｂ、Ｃａ）の濃度の増加が検出された（表５を参照）。
【０１４４】
【表６】
2019520390.tif 000007
【０１４５】
これらの観察に基づくと、ガラス成分（Ａｌ、Ｓｉ、Ｂ、Ｃａ）が粒子形成を開始する可能性が非常に高く、これは、バイアル中のｍＡｂ製剤をＮａｌｇｅｎｅ（登録商標）ボトル中の製剤と比較したときに観察された唯一の違いであった。プラセボ試験では、層間剥離は見られず、一部の成分の浸出が見られたが、これはタンパク質を含むＤＰ−溶液でも想定できる。さらに、この試験は、スターダスト粒子がタンパク質の非存在下では生じないことを確証した。
【０１４６】
ＲａｐＩＤ−試験：この試験の目的は、スターダスト粒子が何からなるのかを決定することであった。粒子をフィルター上で単離することが不可能であったため、以前のろ過試験は成功しなかった。ＲａｐＩＤは金フィルターを用いた解決策を提供する。ここでは、ＤＰ溶液を金フィルターでろ過し、次いでＦＴ−ＩＲ（図１５）およびラマン分光法（図１６）を用いて分析した。結果は、５つのバイアルのうち３つにおいて、タンパク質粒子が検出されたことを示した。他のバイアルにおいて、ポリエチレンが検出されている（図１７および１８）。ポリエチレンを含むサンプルはまた、ＦＴ−ＩＲにおいて３０００ｃｍ−１を超えるタンパク質の典型的な吸収ピークとしてタンパク質もおそらく含んでいた（図１７）。サンプルは非常に古かった（４年−貯蔵寿命＝３年）ことに言及しておかなければならない。そのため、スターダスト粒子が検出されたばかりの試験を使用して追加の研究を実施する必要がある。しかしながら、スターダスト粒子製剤が得られてしまうことの根底には、少なくとも部分的には、タンパク質凝集があると考えられている。したがって、タンパク質凝集を回避するように設計された新しい抗体製剤はスターダスト粒子製剤が得られることを回避することができると考えられている。
【０１４７】
さらに、スターダスト粒子は特定の抗ＣＸＣＲ５抗体に関して発見および記載されているが、他の抗体も同様の貯蔵の問題を示し、したがって本明細書に提示する提案された抗体製剤から潜在的に利益を得ることができると考えられる。
【実施例２】
【０１４８】
スターダスト粒子非含有製剤の開発
Ａ）  導入：
スターダスト粒子形成を回避するために、新しい配合物を開発しなければならなかった。この過程の間、化学的安定性および非可視粒子の非存在は同様に重要であった。
【０１４９】
Ｂ）  方法および結果：
長期間にわたって凝集しにくいロバストな製剤を得るために、様々な実験サンプルに対して機械的応力試験を実施した。サンプルにマグネチックスターラーを用いて応力をかけ、ろ過および加速条件下での貯蔵の後、サンプルをスターダスト粒子形成に関して試験した（目視検査）。機械的応力試験により、ポリソルベート２０またはポリソルベート８０の濃度が増加すると、抗体製剤中の粒子の量が減少することが示された。これらの結果に基づいて安定性試験が実施され、そこでは１７５ｍｇ／ｍＬまでの高濃度のＳＡＲ１１３２４４製剤がガラスバイアルおよびプレフィルドシリンジで試験された。ポリソルベート２０またはポリソルベート８０の濃度が０．１％であったとき、いずれのＳＡＲ１１３２４４の濃度においてもスターダスト粒子が観察されなかった。加速条件（６カ月、４０℃）においてさえ、可視粒子は存在しなかった。したがって、１００〜１７５ｍｇ／ｍＬを含む高濃度製剤は、安定性が増加し、スターダスト粒子が全く形成されなかった。製剤が約１００〜１７５ｍｇ／ｍＬのＳＡＲ１１３２４４、約２００ｍＭのアルギニン、約４．５〜９％のスクロース、約０．１％のポリソルベート２０または約０．１％のポリソルベート８０、および約１０ｍＭのクエン酸緩衝液を含んだときに化学的安定性が達成された。
【０１５０】
機械的応力試験：実験製剤は、最初に薬物製品（ＳＡＲ１１３２４４）を混合容器に添加して、続いて賦形剤（上記の表１を参照）を添加することによって製造された。賦形剤を混合した後、溶液をろ過してガラスバイアルに加えた。最後に、最終的な製剤を目視検査した。
【０１５１】
バイアルを上述のように機械的応力試験に供した。結果を図１９および図２０に示す。機械的応力試験により、貯蔵中のろ過後でさえも粒子が形成されることが示された。しかしながら、この可視粒子形成プロセスは、ポリソルベート濃度を増加させることによって低減することができ、さらには停止させることができる。これらの結果に基づいて、スターダスト粒子非含有製剤はポリソルベート濃度を増加させることによって達成され得ると仮定された。さらに、スターダスト粒子非含有製剤は、ポリソルベート２０またはポリソルベート８０のいずれかを用いて達成することができる。
【０１５２】
安定性試験：タンパク質含有医薬製剤中に界面活性剤を含めることは周知であり、そして一般的な界面活性剤はポリソルベート２０およびポリソルベート８０である。安定化剤としてアルギニンおよびメチオニンなどのアミノ酸を使用することも公知である。しかしながら、本願発明者らは、ＳＡＲ１１３２４４抗体については、一次包装物質がガラスからなるときにのみ、貯蔵後（１２カ月）に粒子形成が起こることを観察した。安定なＳＡＲ１１３２４４の製剤を同定するために、０．０１％より高い濃度のポリソルベートおよび５０ｍＭより高い濃度のアミノ酸を用いて抗体の医薬的に適切な製剤を製造した（下記の表６を参照）。これらの製剤をガラスバイアルまたはガラス注射器中に貯蔵し、加速条件下（４０℃）での安定性試験に供し、粒子形成を測定した（表７を参照）。
【０１５３】
安定性試験の結果は、たとえポリソルベート含有量が０．０１％であっても、大量のアルギニン（２００ｍＭ）が６カ月間安定なスターダスト粒子非含有製剤をもたらすことを示した。さらに高濃度のｍＡｂを達成し、長期間安定な製剤を達成することが望ましかった。以前の結果は、製剤中の高濃度のアルギニン（表５）および大量のポリソルベート（図１９および２０）が有益であることを示した。これらの観察を考慮して、大量のアルギニンとポリソルベートを使用して新しい安定性試験を実施した。
【０１５４】
【表７】
2019520390.tif 000008
【０１５５】
表６のサンプルを２Ｒ  ＩＳＯバイアル中で種々の温度（５℃、２５℃、４０℃、および−２０℃）で２週間（Ｔ０．５）、１カ月（Ｔ１）、３カ月（Ｔ３）、および６カ月（Ｔ６）貯蔵し、実施例１に記載される方法を使用してそれらの安定性を決定した。対照セットのサンプルもまたゼロ日（Ｔ０）に測定した。結果を表７に示す。
【０１５６】
【表８】
2019520390.tif 000009
【０１５７】
【表９】
2019520390.tif 000010
【０１５８】
その後の試験において、さらに高いｍＡｂ濃度を有する製剤１２４Ｄに基づく新しい製剤を製造し、そして上述のように安定性について試験した。さらに、表５に関連する結果のために、ポリソルベート濃度の増加も試験した。新しい製剤を以下の表８に記載し、ここでは、製剤ＡおよびＢを２Ｒ  ＩＳＯバイアルに貯蔵し、そして製剤ＣおよびＤをプレフィルドシリンジ（１ｍＬ  Ｈｙｐａｋ  ＢＤ）に貯蔵した。
【０１５９】
【表１０】
2019520390.tif 000011
【０１６０】
表８の製剤について安定性を試験し、結果を表９に示す。
【０１６１】
【表１１】
2019520390.tif 000012
【０１６２】
【表１２】
2019520390.tif 000013
【０１６３】
安定性試験の結果に基づくと、高抗体濃度のスターダスト粒子非含有製剤の製剤化が達成されたことが示される。実際、１７５ｍｇ／ｍＬまでの抗体濃度は、加速条件下（４０℃）で６カ月間安定であった（例えば、製剤Ｂを参照）。一次包装物質としてプレフィルドシリンジを使用したときに検出された粒子の量は、２Ｒ  ＩＳＯバイアルと比較してわずかに増加したが、それでも当局の許容基準を十分に下回っていた。そのような高濃度の凝集しやすいタンパク質を有する実験製剤を用いて試験した加速条件下（４０℃で６カ月間）で非可視粒子をほとんどもたらさないことは全く予想外であり、非常に安定な高濃度抗体製剤の確立における大きな進歩を表す。実際、そのような高抗体濃度製剤は、抗体製剤の投与のための自動注射器の使用を可能にし得る。さらに、そのような抗体製剤は、高濃度で長期間にわたってガラス容器に貯蔵されている抗体の貯蔵寿命をさらに延長する可能性がある。
【０１６４】
本発明を詳細にまたその特定の実施態様を参照して説明したが、添付の特許請求の範囲に定義された本発明の範囲から逸脱することなく変更および変形が可能であることは明らかであろう。より詳細には、本明細書において本発明のいくつかの態様が特に有利であると識別されているが、本発明は必ずしも本発明のこれらの特定の態様に限定される必要はないと考えられる。代替的な実施形態において、本明細書において開示されるパーセンテージは、それ以外に、本明細書において開示される値から±１０、２０、または３０％の量で変動し得る。
【０１６５】
【表１３】
2019520390.tif 000014
【０１６６】
【表１４】
2019520390.tif 000015
【０１６７】
【表１５】
2019520390.tif 000016
【０１６８】
【表１６】
2019520390.tif 000017
【０１６９】
【表１７】
2019520390.tif 000018
【０１７０】
【表１８】
2019520390.tif 000019
【０１７１】
【表１９】
2019520390.tif 000020
【０１７２】
【表２０】
2019520390.tif 000021
【０１７３】
【表２１】
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【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
2019520390.tif 000029
【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【配列表】
2019520390000001.app
【国際調査報告】
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2019520390.tif 000044
2019520390.tif 000045
2019520390.tif 000046
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