(57)【要約】  本発明は、がんのための治療及び診断方法ならびに組成物を提供する。本発明は、とりわけ、がんを治療する方法、及びＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体）による治療に対する、がんを有する患者の応答をモニタリングする方法を提供する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
がんを有する患者のＶＥＧＦアンタゴニストによる治療に対する応答をモニタリングする方法であって、
（ａ）前記ＶＥＧＦアンタゴニストの投与後の時点で前記患者から得られた生体試料において以下の遺伝子のうちの１つ以上の発現レベルを決定すること：
ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、もしくはＰＲＦ１；
ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、もしくはＣＸＣＬ１３；または
ＧＺＭＢ、ＫＬＲＫ１、もしくはＳＬＡＭＦ７；及び
（ｂ）前記生体試料中の前記１つ以上の遺伝子の前記発現レベルを参照レベルと比較し、それにより前記ＶＥＧＦアンタゴニストによる治療に対する前記患者における前記応答をモニタリングすること、を含む、前記方法。
【請求項２】
前記ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、またはＰＲＦ１のうちの１つ以上の発現レベルが、腫瘍微小環境中のＣＤ８＋Ｔエフェクター（Ｔｅｆｆ）細胞の存在と相関する、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、またはＣＸＣＬ１３のうちの１つ以上の発現レベルが、前記腫瘍微小環境中のＴｈ１ケモカインの存在と相関する、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記ＧＺＭＢ、ＫＬＲＫ１、またはＳＬＡＭＦ７の存在が、前記腫瘍微小環境中のナチュラルキラー（ＮＫ）細胞の存在と相関する、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、またはＰＲＦ１のうちの１つ以上の発現レベルが決定される、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
前記ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、またはＰＲＦ１のうちの少なくとも２個、少なくとも３個、少なくとも４個、少なくとも５個、または少なくとも６個の発現レベルが決定される、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、及びＰＲＦ１の発現レベルが決定される、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、またはＣＸＣＬ１３のうちの１つ以上の発現レベルが決定される、請求項１〜７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９】
前記ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、またはＣＸＣＬ１３のうちの少なくとも２個または少なくとも３個の発現レベルが決定される、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
前記ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、及びＣＸＣＬ１３の発現レベルが決定される、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記ＧＺＭＢ、ＫＬＲＫ１、またはＳＬＡＭＦ７のうちの１つ以上の発現レベルが決定される、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
前記ＧＺＭＢ、ＫＬＲＫ１、またはＳＬＡＭＦ７のうちの少なくとも２個の発現レベルが決定される、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記ＧＺＭＢ、ＫＬＲＫ１、及びＳＬＡＭＦ７の発現レベルが決定される、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記参照レベルが、（ｉ）前記ＶＥＧＦアンタゴニストの投与前に得られた前記患者由来の生体試料における前記１つ以上の遺伝子の前記発現レベル；（ｉｉ）参照集団における前記１つ以上の遺伝子の前記発現レベル；（ｉｉｉ）前記１つ以上の遺伝子についての事前に割り当てられた発現レベル；（ｉｖ）前の時点で前記患者から得られた生体試料における前記１つ以上の遺伝子の前記発現レベルであって、前記前の時点が前記ＶＥＧＦアンタゴニストの投与の後である、前記発現レベル；または（ｖ）次なる時点で前記患者から得られた生体試料における前記１つ以上の遺伝子の前記発現レベル、からなる群から選択される、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】
前記１つ以上の遺伝子の前記発現レベルが、前記参照レベルと比べて前記患者から得られた前記生体試料において増加する、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１６】
前記ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、またはＰＲＦ１のうちの１つ以上の発現レベルが、前記参照レベルと比べて少なくとも約２倍増加する、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、またはＰＲＦ１のうちの１つ以上の発現レベルが、前記参照レベルと比べて少なくとも約４倍増加する、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、またはＰＲＦ１のうちの１つ以上の発現レベルが、前記参照レベルと比べて少なくとも約７倍増加する、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、またはＣＸＣＬ１３のうちの１つ以上の発現レベルが、前記参照レベルと比べて少なくとも約２倍増加する、請求項１５〜１８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２０】
前記ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、またはＣＸＣＬ１３のうちの１つ以上の発現レベルが、前記参照レベルと比べて少なくとも約４倍増加する、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、またはＣＸＣＬ１３のうちの１つ以上の発現レベルが、前記参照レベルと比べて少なくとも約６倍増加する、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記ＧＺＭＢ、ＫＬＲＫ１、またはＳＬＡＭＦ７のうちの１つ以上の発現レベルが、前記参照レベルと比べて少なくとも約２倍増加する、請求項１５〜２１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２３】
前記ＧＺＭＢ、ＫＬＲＫ１、またはＳＬＡＭＦ７のうちの１つ以上の発現レベルが、前記参照レベルと比べて少なくとも約４倍増加する、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記ＧＺＭＢ、ＫＬＲＫ１、またはＳＬＡＭＦ７のうちの１つ以上の発現レベルが、前記参照レベルと比べて少なくとも約８倍増加する、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
前記１つ以上の遺伝子の前記増加した発現レベルにより、前記患者が前記ＶＥＧＦアンタゴニストに応答していることが示される、請求項１５〜２４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２６】
がんを有する患者のＶＥＧＦアンタゴニストによる治療に対する応答をモニタリングする方法であって、
（ａ）前記ＶＥＧＦアンタゴニストの投与後の時点で前記患者から得られた生体試料における前記ＭＨＣ−Ｉの発現レベルを決定すること；及び
（ｂ）前記生体試料中の前記ＭＨＣ−Ｉの発現レベルを参照レベルと比較し、それにより前記ＶＥＧＦアンタゴニストによる治療に対する前記患者における前記応答をモニタリングすること、を含む、前記方法。
【請求項２７】
前記参照レベルが、（ｉ）前記ＶＥＧＦアンタゴニストの投与前に得られた前記患者由来の生体試料における前記ＭＨＣ−Ｉの発現レベル；（ｉｉ）参照集団における前記ＭＨＣ−Ｉの発現レベル；（ｉｉｉ）ＭＨＣ−Ｉについての事前に割り当てられた発現レベル；（ｉｖ）前の時点で前記患者から得られた生体試料における前記ＭＨＣ−Ｉの発現レベルであって、前記前の時点が前記ＶＥＧＦアンタゴニストの投与の後である、前記発現レベル；または（ｖ）次なる時点で前記患者から得られた生体試料における前記ＭＨＣ−Ｉの発現レベル、からなる群から選択される、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
前記ＭＨＣ−Ｉの発現レベルが、前記参照レベルと比べて前記患者から得られた前記生体試料において増加する、請求項２６または２７に記載の方法。
【請求項２９】
前記ＭＨＣ−Ｉの発現レベルが、前記参照レベルと比べて少なくとも約２倍増加する、請求項２６〜２８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３０】
前記ＭＨＣ−１の増加した発現により、前記患者が前記ＶＥＧＦアンタゴニストに応答していることが示される、請求項２８または２９に記載の方法。
【請求項３１】
がんを有する患者のＶＥＧＦアンタゴニストによる治療に対する応答をモニタリングする方法であって、
（ａ）前記ＶＥＧＦアンタゴニストの投与後の時点で前記患者から得られた生体試料において以下の遺伝子のうちの１つ以上の発現レベルを決定すること：
ＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＣＣＲ５、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＣＲ７、またはＣＸＣＬ１０；及び
（ｂ）前記生体試料中の前記１つ以上の遺伝子の前記発現レベルを参照レベルと比較し、それにより前記ＶＥＧＦアンタゴニストによる治療に対する前記患者における前記応答をモニタリングすること、を含む、前記方法。
【請求項３２】
前記ＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＣＣＲ５、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＣＲ７、またはＣＸＣＬ１０のうちの少なくとも２個、少なくとも３個、少なくとも４個、または少なくとも５個の発現レベルが決定される、請求項２０に記載の方法。
【請求項３３】
前記ＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＣＣＲ５、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＣＲ７、及びＣＸＣＬ１０の発現レベルが決定される、請求項２１に記載の方法。
【請求項３４】
前記参照レベルが、（ｉ）前記ＶＥＧＦアンタゴニストの投与前に得られた前記患者由来の生体試料における前記１つ以上の遺伝子の前記発現レベル；（ｉｉ）参照集団における前記１つ以上の遺伝子の前記発現レベル；（ｉｉｉ）前記１つ以上の遺伝子についての事前に割り当てられた発現レベル；（ｉｖ）前の時点で前記患者から得られた生体試料における前記１つ以上の遺伝子の前記発現レベルであって、前記前の時点が前記ＶＥＧＦアンタゴニストの投与の後である、前記発現レベル；または（ｖ）次なる時点で前記患者から得られた生体試料における前記１つ以上の遺伝子の前記発現レベル、からなる群から選択される、請求項３１〜３３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３５】
前記１つ以上の遺伝子の前記発現レベルが、前記参照レベルと比べて増加する、請求項３１〜３４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３６】
前記１つ以上の遺伝子の前記増加した発現レベルにより、前記患者が前記ＶＥＧＦアンタゴニストに応答していることが示される、請求項３１〜３５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３７】
前記患者由来の前記生体試料が、前記ＶＥＧＦアンタゴニストの投与から約１５〜約１８日後に得られる、請求項１〜３６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３８】
１つ以上の追加用量のＶＥＧＦアンタゴニストを、ＭＨＣ−Ｉまたは前記１つ以上の遺伝子の発現レベルが前記参照レベルと比べて増加する患者に投与するステップを更に含む、請求項１〜３７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３９】
がんを有する患者をＶＥＧＦアンタゴニストによって治療する方法であって、
（ａ）前記ＶＥＧＦアンタゴニストの投与後の時点で前記患者から得られた生体試料において以下の遺伝子のうちの１つ以上の発現レベルを決定すること：
ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、もしくはＰＲＦ１；
ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、もしくはＣＸＣＬ１３；または
ＧＺＭＢ、ＫＬＲＫ１、もしくはＳＬＡＭＦ７；
（ｂ）前記生体試料における前記１つ以上の遺伝子の前記発現レベルを参照レベルと比較すること；及び
（ｃ）前記患者の１つ以上の遺伝子の前記発現レベルが前記参照レベルと比べて増加する場合に、前記ＶＥＧＦアンタゴニストの前記患者への投与を継続すること、を含む、前記方法。
【請求項４０】
前記ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、またはＰＲＦ１のうちの１つ以上の発現レベルが、腫瘍微小環境中のＣＤ８＋Ｔエフェクター（Ｔｅｆｆ）細胞の存在と相関する、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
前記ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、またはＣＸＣＬ１３のうちの１つ以上の発現レベルが、前記腫瘍微小環境中のＴｈ１ケモカインの存在と相関する、請求項３９に記載の方法。
【請求項４２】
前記ＧＺＭＢ、ＫＬＲＫ１、またはＳＭＡＬＦ７の存在が、前記腫瘍微小環境中のナチュラルキラー（ＮＫ）細胞の存在と相関する、請求項３９に記載の方法。
【請求項４３】
前記ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、またはＰＲＦ１のうちの１つ以上の発現レベルが決定される、請求項３９〜４２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４４】
前記ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、またはＰＲＦ１のうちの少なくとも２個、少なくとも３個、少なくとも４個、少なくとも５個、または少なくとも６個の発現レベルが決定される、請求項４３に記載の方法。
【請求項４５】
前記ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、及びＰＲＦ１の発現レベルが決定される、請求項４４に記載の方法。
【請求項４６】
前記ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、またはＣＸＣＬ１３のうちの１つ以上の発現レベルが決定される、請求項３９〜４５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４７】
前記ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、またはＣＸＣＬ１３のうちの少なくとも２個または少なくとも３個の発現レベルが決定される、請求項４６に記載の方法。
【請求項４８】
前記ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、及びＣＸＣＬ１３の発現レベルが決定される、請求項４７に記載の方法。
【請求項４９】
前記ＧＺＭＢ、ＫＬＲＫ１、またはＳＬＡＭＦ７のうちの１つ以上の発現レベルが決定される、請求項３９〜４８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５０】
前記ＧＺＭＢ、ＫＬＲＫ１、またはＳＬＡＭＦ７のうちの少なくとも２個の発現レベルが決定される、請求項４９に記載の方法。
【請求項５１】
前記ＧＺＭＢ、ＫＬＲＫ１、及びＳＬＡＭＦ７の発現レベルが決定される、請求項５０に記載の方法。
【請求項５２】
前記参照レベルが、（ｉ）前記ＶＥＧＦアンタゴニストの投与前に得られた前記患者由来の生体試料における前記１つ以上の遺伝子の前記発現レベル；（ｉｉ）参照集団における前記１つ以上の遺伝子の前記発現レベル；（ｉｉｉ）前記１つ以上の遺伝子についての事前に割り当てられた発現レベル；（ｉｖ）前の時点で前記患者から得られた生体試料における前記１つ以上の遺伝子の前記発現レベルであって、前記前の時点が前記ＶＥＧＦアンタゴニストの投与の後である、前記発現レベル；または（ｖ）次なる時点で前記患者から得られた生体試料における前記１つ以上の遺伝子の前記発現レベル、からなる群から選択される、請求項３９〜５１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５３】
前記ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、またはＰＲＦ１のうちの１つ以上の発現レベルが、前記参照レベルと比べて少なくとも約２倍増加する、請求項３９〜５１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５４】
前記ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、またはＰＲＦ１のうちの１つ以上の発現レベルが、前記参照レベルと比べて少なくとも約４倍増加する、請求項５３に記載の方法。
【請求項５５】
前記ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、またはＰＲＦ１のうちの１つ以上の発現レベルが、前記参照レベルと比べて少なくとも約７倍増加する、請求項５４に記載の方法。
【請求項５６】
前記ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、またはＣＸＣＬ１３のうちの１つ以上の発現レベルが、前記参照レベルと比べて少なくとも約２倍増加する、請求項３９〜５５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５７】
前記ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、またはＣＸＣＬ１３のうちの１つ以上の発現レベルが、前記参照レベルと比べて少なくとも約４倍増加する、請求項５６に記載の方法。
【請求項５８】
前記ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、またはＣＸＣＬ１３のうちの１つ以上の発現レベルが、前記参照レベルと比べて少なくとも約６倍増加する、請求項５７に記載の方法。
【請求項５９】
前記ＧＺＭＢ、ＫＬＲＫ１、またはＳＬＡＭＦ７のうちの１つ以上の発現レベルが、前記参照レベルと比べて少なくとも約２倍増加する、請求項３９〜５８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６０】
前記ＧＺＭＢ、ＫＬＲＫ１、またはＳＬＡＭＦ７のうちの１つ以上の発現レベルが、前記参照レベルと比べて少なくとも約４倍増加する、請求項５９に記載の方法。
【請求項６１】
前記ＧＺＭＢ、ＫＬＲＫ１、またはＳＬＡＭＦ７のうちの１つ以上の発現レベルが、前記参照レベルと比べて少なくとも約８倍増加する、請求項６０に記載の方法。
【請求項６２】
がんを有する患者をＶＥＧＦアンタゴニストによって治療する方法であって、
（ａ）前記ＶＥＧＦアンタゴニストの投与後の時点で前記患者から得られた生体試料における前記ＭＨＣ−Ｉの発現レベルを決定すること；及び
（ｂ）前記生体試料における前記ＭＨＣ−Ｉの発現レベルを参照レベルと比較すること；及び
（ｃ）前記患者の１つ以上の遺伝子の前記発現レベルが前記参照レベルと比べて増加する場合に、前記ＶＥＧＦアンタゴニストの前記患者への投与を継続すること、を含む、前記方法。
【請求項６３】
前記参照レベルが、（ｉ）前記ＶＥＧＦアンタゴニストの投与前に得られた前記患者由来の生体試料における前記ＭＨＣ−Ｉの発現レベル；（ｉｉ）参照集団における前記ＭＨＣ−Ｉの発現レベル；（ｉｉｉ）ＭＨＣ−Ｉについての事前に割り当てられた発現レベル；（ｉｖ）前の時点で前記患者から得られた生体試料における前記ＭＨＣ−Ｉの発現レベルであって、前記前の時点が前記ＶＥＧＦアンタゴニストの投与の後である、前記発現レベル；または（ｖ）次なる時点で前記患者から得られた生体試料における前記ＭＨＣ−Ｉの発現レベル、からなる群から選択される、請求項６２に記載の方法。
【請求項６４】
前記ＭＨＣ−Ｉの発現レベルが、前記参照レベルと比べて少なくとも約２倍増加する、請求項６２または６３に記載の方法。
【請求項６５】
がんを有する患者をＶＥＧＦアンタゴニストによって治療する方法であって、
（ａ）前記ＶＥＧＦアンタゴニストの投与後の時点で前記患者から得られた生体試料において以下の遺伝子のうちの１つ以上の発現レベルを決定すること：
ＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＣＣＲ５、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＣＲ７、またはＣＸＣＬ１０；
（ｂ）前記生体試料中の前記１つ以上の遺伝子の前記発現レベルを参照レベルと比較し、それにより前記ＶＥＧＦアンタゴニストによる治療に対する前記患者における前記応答をモニタリングすること；及び
（ｃ）前記患者の１つ以上の遺伝子の前記発現レベルが前記参照レベルと比べて増加する場合に、前記ＶＥＧＦアンタゴニストの前記患者への投与を継続すること、を含む、前記方法。
【請求項６６】
前記ＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＣＣＲ５、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＣＲ７、またはＣＸＣＬ１０のうちの少なくとも２個、少なくとも３個、少なくとも４個、または少なくとも５個の発現レベルが決定される、請求項４４に記載の方法。
【請求項６７】
前記ＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＣＣＲ５、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＣＲ７、及びＣＸＣＬ１０の発現レベルが決定される、請求項４５に記載の方法。
【請求項６８】
前記参照レベルが、（ｉ）前記ＶＥＧＦアンタゴニストの投与前に得られた前記患者由来の生体試料における前記１つ以上の遺伝子の前記発現レベル；（ｉｉ）参照集団における前記１つ以上の遺伝子の前記発現レベル；（ｉｉｉ）前記１つ以上の遺伝子についての事前に割り当てられた発現レベル；（ｉｖ）前の時点で前記患者から得られた生体試料における前記１つ以上の遺伝子の前記発現レベルであって、前記前の時点が前記ＶＥＧＦアンタゴニストの投与の後である、前記発現レベル；または（ｖ）次なる時点で前記患者から得られた生体試料における前記１つ以上の遺伝子の前記発現レベル、からなる群から選択される、請求項６５〜６７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６９】
前記患者由来の前記生体試料が、前記ＶＥＧＦアンタゴニストの投与から約１５〜約１８日後に得られる、請求項１〜６８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７０】
前記ＶＥＧＦアンタゴニストが抗ＶＥＧＦ抗体である、請求項１〜６９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７１】
前記抗ＶＥＧＦ抗体がベバシズマブである、請求項７０に記載の方法。
【請求項７２】
第２の治療薬を前記患者に投与することを更に含む、請求項１〜７１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７３】
前記第２の治療薬が、免疫療法剤、細胞毒性剤、増殖阻害剤、放射線療法剤、抗血管新生剤、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項７２に記載の方法。
【請求項７４】
前記免疫療法剤がＰＤ−Ｌ１軸結合アンタゴニストである、請求項７３に記載の方法。
【請求項７５】
前記ＰＤ−Ｌ１軸結合アンタゴニストが、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニスト、ＰＤ−１結合アンタゴニスト、及びＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストからなる群から選択される、請求項７４に記載の方法。
【請求項７６】
前記ＰＤ−Ｌ１軸結合アンタゴニストがＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストである、請求項７５に記載の方法。
【請求項７７】
前記ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストが抗体である、請求項７４〜７６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７８】
前記抗体が、ＭＰＤＬ３２８０Ａ（アテゾリズマブ）、ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０、ＭＤＸ−１１０５、ＭＥＤＩ４７３６（デュルバルマブ）、及びＭＳＢ００１０７１８Ｃ（アベルマブ）からなる群から選択される、請求項７７に記載の方法。
【請求項７９】
前記がんが、乳癌、黒色腫、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、膀胱癌、腎細胞癌腫、大腸癌、卵巣癌、胃癌、または肝臓癌である、請求項１〜７８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８０】
前記がんが腎細胞癌腫である、請求項７９に記載の方法。
【請求項８１】
前記腎細胞癌腫が転移性腎細胞癌腫である、請求項８０に記載の方法。
【請求項８２】
前記発現レベルがｍＲＮＡ発現レベルである、請求項１〜８１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８３】
前記ｍＲＮＡ発現レベルが、ポリメラーゼ連鎖反応（ｑＰＣＲ）、逆転写ｑＰＣＲ（ＲＴ−ｑＰＣＲ）、ＲＮＡシークエンシング、マイクロアレイ分析、インサイツハイブリダイゼーション、及び遺伝子発現の逐次分析（ＳＡＧＥ）からなる群から選択される方法を使用して決定される、請求項８２に記載の方法。
【請求項８４】
前記発現レベルがタンパク質発現レベルである、請求項１〜８１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８５】
前記タンパク質発現レベルが、免疫組織化学（ＩＨＣ）、免疫蛍光、質量分析、フローサイトメトリー、及びウェスタンブロットからなる群から選択される方法を使用して決定される、請求項８４に記載の方法。
【請求項８６】
前記患者から得られる前記生体試料が、腫瘍試料または細胞試料である、請求項１〜６４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８７】
前記腫瘍試料が、ホルマリン固定及びパラフィン包埋されるか、新鮮であるか、保管されるか、または凍結される、請求項８６に記載の方法。
【請求項８８】
前記細胞試料が末梢ＣＤ８＋Ｔ細胞を含む、請求項８６に記載の方法。
【請求項８９】
前記患者がヒト患者である、請求項１〜８８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９０】
がんに罹患している患者の治療方法に使用するためのＶＥＧＦアンタゴニストであって、前記患者から得られる生体試料が、参照レベルと比べて、以下の遺伝子：
ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、もしくはＰＲＦ１；
ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、もしくはＣＸＣＬ１３；または
ＧＺＭＢ、ＫＬＲＫ１、もしくはＳＬＡＭＦ７のうちの１つ以上の増加した発現レベルを有することが決定されている、前記ＶＥＧＦアンタゴニスト。
【請求項９１】
がんに罹患している患者の治療に使用するための医薬品の製造における有効量のＶＥＧＦアンタゴニストの使用であって、前記患者から得られた生体試料が、参照レベルと比べて、以下の遺伝子：
ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、もしくはＰＲＦ１；
ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、もしくはＣＸＣＬ１３；または
ＧＺＭＢ、ＫＬＲＫ１、もしくはＳＬＡＭＦ７のうちの１つ以上の増加した発現レベルを有することが決定されている、前記使用。
【請求項９２】
がんに罹患している患者の治療方法に使用するための有効量のＶＥＧＦアンタゴニストを含む組成物であって、前記患者から得られた生体試料が、参照レベルと比べて増加した免疫遺伝子特性の発現レベルを有することが決定されており、前記免疫遺伝子特性が、以下の遺伝子：
ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、もしくはＰＲＦ１；
ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、もしくはＣＸＣＬ１３；または
ＧＺＭＢ、ＫＬＲＫ１、もしくはＳＬＡＭＦ７のうちの１つ以上を含む、前記組成物。
【請求項９３】
がんに罹患している患者の治療方法に使用するためのＶＥＧＦアンタゴニストであって、前記患者から得られた生体試料が、参照レベルと比べて増加したＭＨＣ−Ｉの発現レベルを有することが決定されている、前記ＶＥＧＦアンタゴニスト。
【請求項９４】
がんに罹患している患者の治療に使用するための医薬品の製造における有効量のＶＥＧＦアンタゴニストの使用であって、前記患者から得られた生体試料が、参照レベルと比べて増加したＭＨＣ−Ｉの発現レベルを有することが決定されている、前記使用。
【請求項９５】
がんに罹患している患者の治療方法に使用するための有効量のＶＥＧＦアンタゴニストを含む組成物であって、前記患者から得られた生体試料が、参照レベルと比べて増加したＭＨＣ−Ｉの発現レベルを有することが決定されている、前記組成物。
【請求項９６】
がんに罹患している患者の治療方法に使用するためのＶＥＧＦアンタゴニストであって、前記患者から得られた生体試料が、参照レベルと比べて、ＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＣＣＲ５、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＣＲ７、またはＣＸＣＬ１０から選択される１つ以上の遺伝子の増加した発現レベルを有することが決定されている、前記ＶＥＧＦアンタゴニスト。
【請求項９７】
がんに罹患している患者の治療に使用するための医薬品の製造における有効量のＶＥＧＦアンタゴニストの使用であって、前記患者から得られた生体試料が、参照レベルと比べて、ＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＣＣＲ５、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＣＲ７、またはＣＸＣＬ１０から選択される１つ以上の遺伝子の増加した発現レベルを有することが決定されている、前記使用。
【請求項９８】
がんに罹患している患者の治療方法に使用するための有効量のＶＥＧＦアンタゴニストを含む組成物であって、前記患者から得られた生体試料が、参照レベルと比べて、ＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＣＣＲ５、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＣＲ７、またはＣＸＣＬ１０から選択される１つ以上の遺伝子の増加した発現レベルを有することが決定されている、前記組成物。
【請求項９９】
前記ＶＥＧＦアンタゴニストが抗ＶＥＧＦ抗体である、請求項９０〜９８のいずれか１項に記載のＶＥＧＦアンタゴニスト、使用、または組成物。
【請求項１００】
前記抗ＶＥＧＦ抗体がベバシズマブである、請求項９９に記載のＶＥＧＦアンタゴニスト、使用、または組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
配列表
本出願は、ＡＳＣＩＩ形式で電子的に提出された配列表を含み、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。２０１７年４月１３日に作成された該ＡＳＣＩＩコピーは、名称が５０４７４−１２８ＷＯ２＿Ｓｅｑｕｅｎｃｅ＿Ｌｉｓｔｉｎｇ＿４＿１３＿１７＿ＳＴ２５であり、サイズが８６，７１６バイトである。
【０００２】
本発明は、概して、がんの診断、モニタリング、及び治療のための方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
がんは、ヒトの健康に対して最も致命的な脅威の１つであり続けている。米国だけで、がんは、毎年１３０万人近くの新たな患者に影響しており、心血管疾患に続いて死亡原因の第２位であり、死者約４人に１人を占めている。固形腫瘍が、これらの死亡の大部分の原因である。ある特定のがんの医療処置における進歩は顕著であるが、全てのがんに関する５年間の全生存率は、過去２０年間で約１０％しか改善していない。特に腎臓癌は、１９９０年以降発生率が上昇しており、現在では男女共に最も頻度の高い１０のがんのうちの１つである。
【０００４】
したがって、がんのための改善された療法及び診断方法に対する満たされていないニーズが本分野に存在する。
【発明の概要】
【０００５】
本発明は、がん、例えば、腎臓癌（例えば、転移性腎細胞癌腫（ｍＲＣＣ））をモニタリング、診断、及び治療するための組成物及び方法を提供する。
【０００６】
一態様では、本発明は、ＶＥＧＦアンタゴニストによる治療に対する、がんを有する患者の応答をモニタリングする方法を特徴とし、本方法は、（ａ）ＶＥＧＦアンタゴニストの投与後の時点で患者から得られた生体試料において、次の遺伝子：ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、もしくはＰＲＦ１；ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、もしくはＣＸＣＬ１３；またはＧＺＭＢ、ＫＬＲＫ１、もしくはＳＬＡＭＦ７のうちの１つ以上の発現レベルを決定すること；及び（ｂ）生体試料における１つ以上の遺伝子の発現レベルを参照レベルと比較し、それにより、ＶＥＧＦアンタゴニストによる治療に対する患者における応答をモニタリングすることを含む。
【０００７】
いくつかの実施形態では、ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、またはＰＲＦ１のうちの１つ以上の発現レベルは、腫瘍微小環境中のＣＤ８＋Ｔエフェクター（Ｔｅｆｆ）細胞の存在と相関する。いくつかの実施形態では、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、またはＣＸＣＬ１３のうちの１つ以上の発現レベルは、腫瘍微小環境中のＴｈ１ケモカインの存在と相関する。いくつかの実施形態では、ＧＺＭＢ、ＫＬＲＫ１、またはＳＬＡＭＦ７の存在は、腫瘍微小環境中のナチュラルキラー（ＮＫ）細胞の存在と相関する。
【０００８】
いくつかの実施形態では、ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、またはＰＲＦ１のうちの１つ以上の発現レベルが決定される。いくつかの実施形態では、ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、またはＰＲＦ１のうちの少なくとも２個、少なくとも３個、少なくとも４個、少なくとも５個、または少なくとも６個の発現レベルが決定される。いくつかの実施形態では、ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、及びＰＲＦ１の発現レベルが決定される。
【０００９】
いくつかの実施形態では、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、またはＣＸＣＬ１３のうちの１つ以上の発現レベルが決定される。いくつかの実施形態では、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、またはＣＸＣＬ１３のうちの少なくとも２個または少なくとも３個の発現レベルが決定される。いくつかの実施形態では、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、及びＣＸＣＬ１３の発現レベルが決定される。
【００１０】
いくつかの実施形態では、ＧＺＭＢ、ＫＬＲＫ１、またはＳＬＡＭＦ７のうちの１つ以上の発現レベルが決定される。いくつかの実施形態では、ＧＺＭＢ、ＫＬＲＫ１、またはＳＬＡＭＦ７のうちの少なくとも２個の発現レベルが決定される。いくつかの実施形態では、ＧＺＭＢ、ＫＬＲＫ１、及びＳＬＡＭＦ７の発現レベルが決定される。
【００１１】
いくつかの実施形態では、参照レベルは、（ｉ）ＶＥＧＦアンタゴニストの投与前に得られた患者由来の生体試料における１つ以上の遺伝子の発現レベル；（ｉｉ）参照集団における１つ以上の遺伝子の発現レベル；（ｉｉｉ）１つ以上の遺伝子についての事前に割り当てられた発現レベル；（ｉｖ）前の時点で患者から得られた生体試料における１つ以上の遺伝子の発現レベルであって、前の時点がＶＥＧＦアンタゴニストの投与の後である、発現レベル；または（ｖ）次なる時点で患者から得られた生体試料における１つ以上の遺伝子の発現レベル、からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、１つ以上の遺伝子の発現レベルは、参照レベルと比べて患者から得られた生体試料において増加する。
【００１２】
いくつかの実施形態では、ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、またはＰＲＦ１のうちの１つ以上の発現レベルは、参照レベルと比べて少なくとも約２倍増加する。いくつかの実施形態では、ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、またはＰＲＦ１のうちの１つ以上の発現レベルは、参照レベルと比べて少なくとも約４倍増加する。いくつかの実施形態では、ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、またはＰＲＦ１のうちの１つ以上の発現レベルは、参照レベルと比べて少なくとも約７倍増加する。
【００１３】
いくつかの実施形態では、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、またはＣＸＣＬ１３のうちの１つ以上の発現レベルは、参照レベルと比べて少なくとも約２倍増加する。いくつかの実施形態では、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、またはＣＸＣＬ１３のうちの１つ以上の発現レベルは、参照レベルと比べて少なくとも約４倍増加する。いくつかの実施形態では、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、またはＣＸＣＬ１３のうちの１つ以上の発現レベルは、参照レベルと比べて少なくとも約６倍増加する。
【００１４】
いくつかの実施形態では、ＧＺＭＢ、ＫＬＲＫ１、またはＳＬＡＭＦ７のうちの１つ以上の発現レベルは、参照レベルと比べて少なくとも約２倍増加する。いくつかの実施形態では、ＧＺＭＢ、ＫＬＲＫ１、またはＳＬＡＭＦ７のうちの１つ以上の発現レベルは、参照レベルと比べて少なくとも約４倍増加する。いくつかの実施形態では、ＧＺＭＢ、ＫＬＲＫ１、またはＳＬＡＭＦ７のうちの１つ以上の発現レベルは、参照レベルと比べて少なくとも約８倍増加する。
【００１５】
いくつかの実施形態では、１つ以上の遺伝子の増加した発現レベルにより、患者がＶＥＧＦアンタゴニストに応答していることが示される。
【００１６】
別の態様では、本発明は、ＶＥＧＦアンタゴニストによる治療に対するがんを有する患者の応答をモニタリングする方法を特徴とし、本方法は、（ａ）ＶＥＧＦアンタゴニストの投与後の時点で患者から得られた生体試料におけるＭＨＣ−Ｉの発現レベルを決定すること；及び（ｂ）生体試料におけるＭＨＣ−Ｉの発現レベルを参照レベルと比較し、それにより、ＶＥＧＦアンタゴニストによる治療に対する患者における応答をモニタリングすることを含む。いくつかの実施形態では、参照レベルは、（ｉ）ＶＥＧＦアンタゴニストの投与前に得られた患者由来の生体試料におけるＭＨＣ−Ｉの発現レベル；（ｉｉ）参照集団におけるＭＨＣ−Ｉの発現レベル；（ｉｉｉ）ＭＨＣ−Ｉについての事前に割り当てられた発現レベル；（ｉｖ）前の時点で患者から得られた生体試料におけるＭＨＣ−Ｉの発現レベルであって、前の時点がＶＥＧＦアンタゴニストの投与の後である、発現レベル；または（ｖ）次なる時点で患者から得られた生体試料におけるＭＨＣ−Ｉの発現レベル、からなる群から選択される。
【００１７】
いくつかの実施形態では、ＭＨＣ−Ｉの発現レベルは、参照レベルと比べて患者から得られた生体試料において増加する。いくつかの実施形態では、ＭＨＣ−Ｉの発現レベルは、参照レベルと比べて少なくとも約２倍増加する。いくつかの実施形態では、ＭＨＣ−１の増加した発現により、患者がＶＥＧＦアンタゴニストに応答していることが示される。
【００１８】
別の態様では、本発明は、本発明は、ＶＥＧＦアンタゴニストによる治療に対する、がんを有する患者の応答をモニタリングする方法を特徴とし、本方法は、（ａ）ＶＥＧＦアンタゴニストの投与後の時点で患者から得られた生体試料において、次の遺伝子：ＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＣＣＲ５、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＣＲ７、またはＣＸＣＬ１０のうちの１つ以上の発現レベルを決定すること；及び（ｂ）生体試料における１つ以上の遺伝子の発現レベルを参照レベルと比較し、それにより、ＶＥＧＦアンタゴニストによる治療に対する患者における応答をモニタリングすることを含む。
【００１９】
いくつかの実施形態では、ＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＣＣＲ５、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＣＲ７、またはＣＸＣＬ１０のうちの少なくとも２個、少なくとも３個、少なくとも４個、または少なくとも５個の発現レベルが決定される。いくつかの実施形態では、ＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＣＣＲ５、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＣＲ７、及びＣＸＣＬ１０の発現レベルが決定される。
【００２０】
いくつかの実施形態では、参照レベルは、（ｉ）ＶＥＧＦアンタゴニストの投与前に得られた患者由来の生体試料における１つ以上の遺伝子の発現レベル；（ｉｉ）参照集団における１つ以上の遺伝子の発現レベル；（ｉｉｉ）１つ以上の遺伝子についての事前に割り当てられた発現レベル；（ｉｖ）前の時点で患者から得られた生体試料における１つ以上の遺伝子の発現レベルであって、前の時点がＶＥＧＦアンタゴニストの投与の後である、発現レベル；または（ｖ）次なる時点で患者から得られた生体試料における１つ以上の遺伝子の発現レベル、からなる群から選択される。
【００２１】
いくつかの実施形態では、１つ以上の遺伝子の発現レベルは、参照レベルと比べて増加する。いくつかの実施形態では、１つ以上の遺伝子の増加した発現レベルにより、患者がＶＥＧＦアンタゴニストに応答していることが示される。
【００２２】
先行する態様のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、患者由来の生体試料は、ＶＥＧＦアンタゴニストの投与から約１５〜約１８日後に得られる。いくつかの実施形態では、本方法は、１つ以上の追加用量のＶＥＧＦアンタゴニストを、ＭＨＣ−Ｉまたは１つ以上の遺伝子の発現レベルが参照レベルと比べて増加する患者に投与するステップを更に含む。
【００２３】
別の態様では、本発明は、ＶＥＧＦアンタゴニストによってがんを有する患者を治療する方法を特徴とし、本方法は、（ａ）ＶＥＧＦアンタゴニストの投与後の時点で患者から得られた生体試料において、次の遺伝子：ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、もしくはＰＲＦ１；ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、もしくはＣＸＣＬ１３；またはＧＺＭＢ、ＫＬＲＫ１、もしくはＳＬＡＭＦ７のうちの１つ以上の発現レベルを決定すること；（ｂ）生体試料における１つ以上の遺伝子の発現レベルを参照レベルと比較すること；及び（ｃ）患者の１つ以上の遺伝子の発現レベルが参照レベルと比べて増加する場合に、ＶＥＧＦアンタゴニストの患者への投与を継続すること、を含む。
【００２４】
いくつかの実施形態では、ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、またはＰＲＦ１のうちの１つ以上の発現レベルは、腫瘍微小環境中のＣＤ８＋Ｔエフェクター（Ｔｅｆｆ）細胞の存在と相関する。いくつかの実施形態では、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、またはＣＸＣＬ１３のうちの１つ以上の発現レベルは、腫瘍微小環境中のＴｈ１ケモカインの存在と相関する。いくつかの実施形態では、ＧＺＭＢ、ＫＬＲＫ１、またはＳＭＡＬＦ７の存在は、腫瘍微小環境中のナチュラルキラー（ＮＫ）細胞の存在と相関する。
【００２５】
いくつかの実施形態では、ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、またはＰＲＦ１のうちの１つ以上の発現レベルが決定される。いくつかの実施形態では、ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、またはＰＲＦ１のうちの少なくとも２個、少なくとも３個、少なくとも４個、少なくとも５個、または少なくとも６個の発現レベルが決定される。いくつかの実施形態では、ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、及びＰＲＦ１の発現レベルが決定される。
【００２６】
いくつかの実施形態では、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、またはＣＸＣＬ１３のうちの１つ以上の発現レベルが決定される。いくつかの実施形態では、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、またはＣＸＣＬ１３のうちの少なくとも２個または少なくとも３個の発現レベルが決定される。いくつかの実施形態では、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、及びＣＸＣＬ１３の発現レベルが決定される。
【００２７】
いくつかの実施形態では、ＧＺＭＢ、ＫＬＲＫ１、またはＳＬＡＭＦ７のうちの１つ以上の発現レベルが決定される。いくつかの実施形態では、ＧＺＭＢ、ＫＬＲＫ１、またはＳＬＡＭＦ７のうちの少なくとも２個の発現レベルが決定される。いくつかの実施形態では、ＧＺＭＢ、ＫＬＲＫ１、及びＳＬＡＭＦ７の発現レベルが決定される。
【００２８】
いくつかの実施形態では、参照レベルは、（ｉ）ＶＥＧＦアンタゴニストの投与前に得られた患者由来の生体試料における１つ以上の遺伝子の発現レベル；（ｉｉ）参照集団における１つ以上の遺伝子の発現レベル；（ｉｉｉ）１つ以上の遺伝子についての事前に割り当てられた発現レベル；（ｉｖ）前の時点で患者から得られた生体試料における１つ以上の遺伝子の発現レベルであって、前の時点がＶＥＧＦアンタゴニストの投与の後である、発現レベル；または（ｖ）次なる時点で患者から得られた生体試料における１つ以上の遺伝子の発現レベル、からなる群から選択される。
【００２９】
いくつかの実施形態では、ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、またはＰＲＦ１のうちの１つ以上の発現レベルは、参照レベルと比べて少なくとも約２倍増加する。いくつかの実施形態では、ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、またはＰＲＦ１のうちの１つ以上の発現レベルは、参照レベルと比べて少なくとも約４倍増加する。いくつかの実施形態では、ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、またはＰＲＦ１のうちの１つ以上の発現レベルは、参照レベルと比べて少なくとも約７倍増加する。
【００３０】
いくつかの実施形態では、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、またはＣＸＣＬ１３のうちの１つ以上の発現レベルは、参照レベルと比べて少なくとも約２倍増加する。いくつかの実施形態では、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、またはＣＸＣＬ１３のうちの１つ以上の発現レベルは、参照レベルと比べて少なくとも約４倍増加する。いくつかの実施形態では、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、またはＣＸＣＬ１３のうちの１つ以上の発現レベルは、参照レベルと比べて少なくとも約６倍増加する。
【００３１】
いくつかの実施形態では、ＧＺＭＢ、ＫＬＲＫ１、またはＳＬＡＭＦ７のうちの１つ以上の発現レベルは、参照レベルと比べて少なくとも約２倍増加する。いくつかの実施形態では、ＧＺＭＢ、ＫＬＲＫ１、またはＳＬＡＭＦ７のうちの１つ以上の発現レベルは、参照レベルと比べて少なくとも約４倍増加する。いくつかの実施形態では、ＧＺＭＢ、ＫＬＲＫ１、またはＳＬＡＭＦ７のうちの１つ以上の発現レベルは、参照レベルと比べて少なくとも約８倍増加する。
【００３２】
別の態様では、本発明は、ＶＥＧＦアンタゴニストによってがんを有する患者を治療する方法を特徴とし、本方法は、（ａ）ＶＥＧＦアンタゴニストの投与後の時点で患者から得られた生体試料におけるＭＨＣ−Ｉの発現レベルを決定すること；（ｂ）生体試料におけるＭＨＣ−Ｉの発現レベルを参照レベルと比較すること；及び（ｃ）患者の１つ以上の遺伝子の発現レベルが参照レベルと比べて増加する場合に、ＶＥＧＦアンタゴニストの患者への投与を継続すること、を含む。いくつかの実施形態では、参照レベルは、（ｉ）ＶＥＧＦアンタゴニストの投与前に得られた患者由来の生体試料におけるＭＨＣ−Ｉの発現レベル；（ｉｉ）参照集団におけるＭＨＣ−Ｉの発現レベル；（ｉｉｉ）ＭＨＣ−Ｉについての事前に割り当てられた発現レベル；（ｉｖ）前の時点で患者から得られた生体試料におけるＭＨＣ−Ｉの発現レベルであって、前の時点がＶＥＧＦアンタゴニストの投与の後である、発現レベル；または（ｖ）次なる時点で患者から得られた生体試料におけるＭＨＣ−Ｉの発現レベル、からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、ＭＨＣ−Ｉの発現レベルは、参照レベルと比べて少なくとも約２倍増加する。
【００３３】
別の態様では、本発明は、ＶＥＧＦアンタゴニストによってがんを有する患者を治療する方法を特徴とし、本方法は、（ａ）ＶＥＧＦアンタゴニストの投与後の時点で患者から得られた生体試料において、次の遺伝子：ＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＣＣＲ５、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＣＲ７、またはＣＸＣＬ１０のうちの１つ以上の発現レベルを決定すること；（ｂ）生体試料における１つ以上の遺伝子の発現レベルを参照レベルと比較し、それにより、ＶＥＧＦアンタゴニストによる治療に対する患者における応答をモニタリングすること；及び（ｃ）患者の１つ以上の遺伝子の発現レベルが参照レベルと比べて増加する場合に、ＶＥＧＦアンタゴニストの患者への投与を継続すること、を含む。いくつかの実施形態では、ＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＣＣＲ５、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＣＲ７、またはＣＸＣＬ１０のうちの少なくとも２個、少なくとも３個、少なくとも４個、または少なくとも５個の発現レベルが決定される。いくつかの実施形態では、ＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＣＣＲ５、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＣＲ７、及びＣＸＣＬ１０の発現レベルが決定される。いくつかの実施形態では、参照レベルは、（ｉ）ＶＥＧＦアンタゴニストの投与前に得られた患者由来の生体試料における１つ以上の遺伝子の発現レベル；（ｉｉ）参照集団における１つ以上の遺伝子の発現レベル；（ｉｉｉ）１つ以上の遺伝子についての事前に割り当てられた発現レベル；（ｉｖ）前の時点で患者から得られた生体試料における１つ以上の遺伝子の発現レベルであって、前の時点がＶＥＧＦアンタゴニストの投与の後である、発現レベル；または（ｖ）次なる時点で患者から得られた生体試料における１つ以上の遺伝子の発現レベル、からなる群から選択される。
【００３４】
先行する態様のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、患者由来の生体試料は、ＶＥＧＦアンタゴニストの投与から約１５〜約１８日後に得られる。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニストは、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブである。
【００３５】
先行する態様のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、本方法は、第２の治療薬を患者に投与することを更に含む。いくつかの実施形態では、第２の治療薬は、免疫療法剤、細胞毒性剤、増殖阻害剤、放射線療法剤、抗血管新生剤、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される。
【００３６】
いくつかの実施形態では、免疫療法剤はＰＤ−Ｌ１軸結合アンタゴニストである。いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ１軸結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニスト、ＰＤ−１結合アンタゴニスト、及びＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ１軸結合アンタゴニストはＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストである。いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、抗体、例えば、ＭＰＤＬ３２８０Ａ（アテゾリズマブ）、ＹＷ２４３．５５Ｓ７０、ＭＤＸ−１１０５、ＭＥＤＩ４７３６（デュルバルマブ）、またはＭＳＢ００１０７１８Ｃ（アベルマブ）である。
【００３７】
先行する態様のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、がんは、乳癌、黒色腫、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、膀胱癌、腎細胞癌腫、大腸癌、卵巣癌、胃癌、または肝臓癌である。いくつかの実施形態では、がんは、腎細胞癌腫、例えば、転移性腎細胞癌腫である。
【００３８】
先行する態様のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、発現レベルはｍＲＮＡ発現レベルである。いくつかの実施形態では、ｍＲＮＡ発現レベルは、ポリメラーゼ連鎖反応（ｑＰＣＲ）、逆転写ｑＰＣＲ（ＲＴ−ｑＰＣＲ）、ＲＮＡシークエンシング、マイクロアレイ分析、インサイツハイブリダイゼーション、及び遺伝子発現の逐次分析（ＳＡＧＥ）からなる群から選択される方法を使用して決定される。
【００３９】
先行する態様のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、発現レベルはタンパク質発現レベルである。いくつかの実施形態では、タンパク質発現レベルは、免疫組織化学（ＩＨＣ）、免疫蛍光、質量分析、フローサイトメトリー、及びウェスタンブロットからなる群から選択される方法を使用して決定される。
【００４０】
先行する態様のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、患者から得られる生体試料は、腫瘍試料または細胞試料である。いくつかの実施形態では、腫瘍試料は、ホルマリン固定及びパラフィン包埋されるか、新鮮であるか、保管されるか、または凍結される。いくつかの実施形態では、細胞試料は末梢ＣＤ８＋Ｔ細胞を含む。
【００４１】
先行する態様のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、患者はヒト患者である。
【００４２】
別の態様では、本発明は、がんに罹患している患者の治療方法において使用するためのＶＥＧＦアンタゴニストを特徴とし、患者から得られる生体試料は、参照レベルと比べて、以下の遺伝子：ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、もしくはＰＲＦ１；ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、もしくはＣＸＣＬ１３；またはＧＺＭＢ、ＫＬＲＫ１、もしくはＳＬＡＭＦ７のうちの１つ以上の増加した発現レベルを有することが決定されている。
【００４３】
別の態様では、別の態様では、本発明は、がんに罹患している患者の治療に使用するための医薬品の製造における有効量のＶＥＧＦアンタゴニストの使用を特徴とし、患者から得られる生体試料は、参照レベルと比べて、以下の遺伝子：ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、もしくはＰＲＦ１；ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、もしくはＣＸＣＬ１３；またはＧＺＭＢ、ＫＬＲＫ１、もしくはＳＬＡＭＦ７のうちの１つ以上の増加した発現レベルを有することが決定されている。
【００４４】
別の態様では、本発明は、がんに罹患している患者の治療方法に使用するための有効量のＶＥＧＦアンタゴニストを含む組成物を特徴とし、患者から得られた生体試料は、参照レベルと比べて増加した免疫遺伝子特性の発現レベルを有することが決定されており、この免疫遺伝子特性は、以下の遺伝子：ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、もしくはＰＲＦ１；ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、もしくはＣＸＣＬ１３；またはＧＺＭＢ、ＫＬＲＫ１、もしくはＳＬＡＭＦ７のうちの１つ以上を含む。
【００４５】
別の態様では、本発明は、がんに罹患している患者の治療方法に使用するためのＶＥＧＦアンタゴニストを特徴とし、患者から得られた生体試料は、参照レベルと比べて増加したＭＨＣ−Ｉの発現レベルを有することが決定されている。
【００４６】
別の態様では、本発明は、がんに罹患している患者の治療に使用するための医薬品の製造における有効量のＶＥＧＦアンタゴニストの使用を特徴とし、患者から得られた生体試料は、参照レベルと比べて増加したＭＨＣ−Ｉの発現レベルを有することが決定されている。
【００４７】
別の態様では、本発明は、がんに罹患している患者の治療方法に使用するための有効量のＶＥＧＦアンタゴニストを含む組成物を特徴とし、患者から得られた生体試料は、参照レベルと比べて増加したＭＨＣ−Ｉの発現レベルを有することが決定されている。
【００４８】
別の態様では、本発明は、がんに罹患している患者の治療方法に使用するためのＶＥＧＦアンタゴニストを特徴とし、患者から得られた生体試料は、参照レベルと比べて、ＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＣＣＲ５、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＣＲ７、またはＣＸＣＬ１０から選択される１つ以上の遺伝子の増加した発現レベルを有することが決定されている。
【００４９】
別の態様では、本発明は、がんに罹患している患者の治療に使用するための医薬品の製造における有効量のＶＥＧＦアンタゴニストの使用を特徴とし、患者から得られた生体試料は、参照レベルと比べて、ＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＣＣＲ５、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＣＲ７、またはＣＸＣＬ１０から選択される１つ以上の遺伝子の増加した発現レベルを有することが決定されている。
【００５０】
別の態様では、本発明は、がんに罹患している患者の治療方法に使用するための有効量のＶＥＧＦアンタゴニストを含む組成物を特徴とし、患者から得られた生体試料は、参照レベルと比べて、ＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＣＣＲ５、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＣＲ７、またはＣＸＣＬ１０から選択される１つ以上の遺伝子の増加した発現レベルを有することが決定されている。
【００５１】
先行する態様のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニストは、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブである。
【図面の簡単な説明】
【００５２】
【図１】アテゾリズマブ及びベバシズマブの併用治療を受けている腎細胞癌腫（ＲＣＣ）患者の間の経時的な全身腫瘍組織量を示すグラフである。グラフ上の点は、標的病変についての長径和（ＳＬＤ）のベースラインからの最大低減を示す。ＰＲ、部分奏効；ＰＤ、進行性疾患；ＳＤ、安定疾患。
【図２】各ＲＣＣ患者についての試験治療の期間を示すグラフである。最初のＰＲまたはＣＲの時は丸印で示され、最初のＰＤの時は三角印で示され、治療中止は黒色の棒印で示され、分析時に依然として治療中の患者は矢印で示される。
【図３】ベバシズマブ（「Ｂｅｖ」）治療後の腫瘍バイオマーカーの遺伝子発現レベルを示すグラフである。治療中の腫瘍試料の発現レベルは、ベースライン発現レベル（治療前）と比べて示される。血管特性遺伝子（ＡＮＧＰＴ２、ＣＤ３４、ＤＬＬ４、ＥＧＦＬ７、及びＥＳＭ１）は黒色で示され、ＣＤ８  Ｔ細胞エフェクター遺伝子（ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＩＦＮＧ、及びＰＲＦ１）は柄付きの灰色で示され、Ｔｈ１ケモカイン（ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、ＣＸＣＬ１３、及びＣＸＣＬ９）は白色で示され、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞遺伝子（ＧＺＭＢ、ＫＬＲＫ１、及びＳＬＡＭＦ７）は塗りつぶした灰色で示される。
【図４】アテゾリズマブ及びベバシズマブの併用（「Ｂｅｖ＋Ａｔｅｚｏ」）治療後の腫瘍バイオマーカーの遺伝子発現レベルを示すグラフである。治療中の腫瘍試料の発現レベルは、ベースライン発現レベル（治療前）と比べて示される。血管特性遺伝子（ＡＮＧＰＴ２、ＣＤ３４、ＤＬＬ４、ＥＧＦＬ７、及びＥＳＭ１）は黒色で示され、ＣＤ８  Ｔ細胞エフェクター遺伝子（ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＩＦＮＧ、及びＰＲＦ１）は柄付きの灰色で示され、Ｔｈ１ケモカイン（ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、ＣＸＣＬ１３、及びＣＸＣＬ９）は白色で示され、ＮＫ細胞遺伝子（ＧＺＭＢ、ＫＬＲＫ１、及びＳＬＡＭＦ７）は塗りつぶした灰色で示される。
【図５】免疫組織化学（ＩＨＣ）によって評定した、患者３由来の腫瘍試料における免疫及び脈管構造マーカーのタンパク質発現を示す一連の代表的な画像である。ＣＤ３１は暗灰色に塗られ（第１の行）、ＣＤ８は暗灰色に塗られ（第２の行）、ＭＨＣ−Ｉは暗灰色に塗られ（第３の行）、ＰＤ−Ｌ１は暗灰色に塗られる（第４の行）。治療前の試料は左手の列に示され、ベバシズマブ後の試料は中央の列に示され、ベバシズマブ＋アテゾリズマブ後の試料は右手の列に示される。
【図６】ＩＨＣによって評定した、示される時点での免疫及び脈管構造マーカーの定量化を示す一連のグラフである。ＣＤ３１発現は上部のパネルに示され、ＣＤ８発現は中央のパネルに示され、ＭＨＣ−Ｉ発現は下部のパネルに示される。Ｐ値は、対応のあるｔ−検定によって決定された。「ＶＰＯＳＶＥ」は血管密度の測定である。
【図７】ＩＨＣによって評定した、患者３由来の腫瘍試料の連続切片からの免疫及び脈管構造マーカーのタンパク質発現を示す一連の代表的な画像である。第１の行は、ＣＤ３４、アルファ平滑筋アクチン（αＳＭＡ）、及びポドプラニンの発現を示す。第２の行は、ＣＤ８及びＫｉ６７の発現を示す。第３の行は、ＣＤ６８及びＣＤ１６３を示す。治療前の試料は左手の列に示され、ベバシズマブ後の試料は中央の列に示され、ベバシズマブ＋アテゾリズマブ後の試料は右手の列に示される。
【図８】ＩＨＣによって評定した、腫瘍試料におけるＣＤ３４及びαＳＭＡのタンパク質発現を示す一連の代表的な画像である。治療前の試料は左手の列に示され、ベバシズマブ後の試料は中央の列に示され、ベバシズマブ＋アテゾリズマブ後の試料は右手の列に示される。個々の患者１〜６の切片が各行に配列される。各患者の応答も示される。
【図９】ＩＨＣによって評定した、腫瘍の連続切片からの免疫及び脈管構造マーカーのタンパク質発現を示す一連の代表的な画像である。第１の行は、ＣＤ３４、αＳＭＡ、及びポドプラニンの発現を示す。第２の行は、ＣＤ８及びＫｉ６７の発現を示す。第３の行は、ＣＤ６８及びＣＤ１６３を示す。ベバシズマブ後の試料は左手の列に示され、ベバシズマブ＋アテゾリズマブ後の試料は右手の列に示される。
【図１０】ＩＨＣによって評定した、ベバシズマブ＋アテゾリズマブ後の腫瘍の連続切片からの免疫及び脈管構造マーカーのタンパク質発現を示す一連の代表的な画像である。上部の画像は、ＣＤ３４、αＳＭＡ、及びポドプラニンの発現を示す。中央の画像はＣＤ８及びＫｉ６７の発現を示す。下部の画像はＣＤ６８及びＣＤ１６３の発現を示す。
【図１１】ベバシズマブ及びベバシズマブ＋アテゾリズマブ治療に応答したＶＥＧＦ転写産物発現の上方調節を示すグラフである。発現は、ハウスキーピング（ＨＫ）遺伝子発現に対して正規化される。各線は個々の患者を表す。
【図１２】ＩＨＣによって評定した、腫瘍切片からのＣＤ８（塗られた暗灰色）のタンパク質発現を示す一連の代表的な画像である。治療前の試料は左手の列に示され、ベバシズマブ後の試料は中央の列に示され、ベバシズマブ＋アテゾリズマブ後の試料は右手の列に示される。個々の患者１〜６の切片が各行に配列される。各患者の応答も示される。
【図１３】ＩＨＣによって評定した、腫瘍切片におけるＣＤ８及びＫｉ６７のタンパク質発現を示す一連の代表的な画像である。治療前の試料は左手の列に示され、ベバシズマブ後の試料は中央の列に示され、ベバシズマブ＋アテゾリズマブ後の試料は右手の列に示される。個々の患者１〜６の切片が各行に配列される。
【図１４Ａ】治療前の時点の各患者に関する腫瘍面積１平方ミリメートル（ｍｍ２）あたりのＣＤ８またはＫｉ６７とＣＤ８との両方を発現している細胞の数を示す一連のグラフである。図１４Ａは患者１及び２に関するデータを示す。各患者の応答も示される。
【図１４Ｂ】治療前の時点の各患者に関する腫瘍面積１平方ミリメートル（ｍｍ２）あたりのＣＤ８またはＫｉ６７とＣＤ８との両方を発現している細胞の数を示す一連のグラフである。図１４Ｂは患者３及び４に関するデータを示す。各患者の応答も示される。
【図１４Ｃ】治療前の時点の各患者に関する腫瘍面積１平方ミリメートル（ｍｍ２）あたりのＣＤ８またはＫｉ６７とＣＤ８との両方を発現している細胞の数を示す一連のグラフである。図１４Ｃは患者５に関するデータを示す。各患者の応答も示される。
【図１５Ａ】ベバシズマブ後の時点の各患者に関する腫瘍面積１ｍｍ２あたりのＣＤ８またはＫｉ６７とＣＤ８との両方を発現している細胞の数を示す一連のグラフである。図１５Ａは患者１及び２に関するデータを示す。各患者の応答も示される。
【図１５Ｂ】ベバシズマブ後の時点の各患者に関する腫瘍面積１ｍｍ２あたりのＣＤ８またはＫｉ６７とＣＤ８との両方を発現している細胞の数を示す一連のグラフである。図１５Ｂは患者３及び５に関するデータを示す。各患者の応答も示される。
【図１５Ｃ】ベバシズマブ後の時点の各患者に関する腫瘍面積１ｍｍ２あたりのＣＤ８またはＫｉ６７とＣＤ８との両方を発現している細胞の数を示す一連のグラフである。図１５Ｃは患者６に関するデータを示す。各患者の応答も示される。
【図１６Ａ】ベバシズマブ＋アテゾリズマブ後の時点の各患者に関する腫瘍面積１ｍｍ２あたりのＣＤ８またはＫｉ６７とＣＤ８との両方を発現している細胞の数を示す一連のグラフである。図１６Ａは患者１及び２に関するデータを示す。各患者の応答も示される。
【図１６Ｂ】ベバシズマブ＋アテゾリズマブ後の時点の各患者に関する腫瘍面積１ｍｍ２あたりのＣＤ８またはＫｉ６７とＣＤ８との両方を発現している細胞の数を示す一連のグラフである。図１６Ｂは患者３及び４に関するデータを示す。各患者の応答も示される。
【図１６Ｃ】ベバシズマブ＋アテゾリズマブ後の時点の各患者に関する腫瘍面積１ｍｍ２あたりのＣＤ８またはＫｉ６７とＣＤ８との両方を発現している細胞の数を示す一連のグラフである。図１６Ｃは患者５及び６に関するデータを示す。各患者の応答も示される。
【図１７Ａ】ＣＸ３ＣＲ１を発現している腫瘍試料中の末梢ＣＤ８＋細胞のパーセンテージを示す一連のフローサイトメトリーのプロットである。治療前の試料は左手の列に示され、ベバシズマブ後の試料は中央の列に示され、ベバシズマブ＋アテゾリズマブ後の試料は右手の列に示される。各行は個々の患者からの結果を示す。図１７Ａは患者２及び３に関するデータを示す。
【図１７Ｂ】ＣＸ３ＣＲ１を発現している腫瘍試料中の末梢ＣＤ８＋細胞のパーセンテージを示す一連のフローサイトメトリーのプロットである。治療前の試料は左手の列に示され、ベバシズマブ後の試料は中央の列に示され、ベバシズマブ＋アテゾリズマブ後の試料は右手の列に示される。各行は個々の患者からの結果を示す。図１７Ｂは患者５及び６に関するデータを示す。
【図１８】フローサイトメトリー分析に基づき、ＣＸ３ＣＲ１の発現を、全ＣＤ８＋細胞のパーセンテージ（左）、及び腫瘍抗原特異的（Ｄｅｘ−ＡＰＣ＋）Ｔ細胞のパーセンテージ（右）として示すグラフである。
【図１９】血中の抗原特異的Ｔ細胞の代表的な頻度を示す一連のフローサイトメトリーのプロットである。腫瘍生検の時点と一致する採血による２名のＨＬＡ−Ａ２陽性患者からの代表的なデータが示される。
【図２０】示される治療の時点での腫瘍中のケモカイン発現（ＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＣＣＲ５、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＣＲ７、及びＣＸＣＬ１０）における変化を示す一連のグラフである。発現は、ハウスキーピング（ＨＫ）遺伝子発現に対して正規化された。
【図２１Ａ】図２１Ａ、図２１Ｂ及び図２１Ｃは、患者６由来の腫瘍試料における治療前後の浸潤性リンパ球（ＴＩＬ）のＴＣＲβシークエンシングの結果を示す一連のグラフである。各群の上位のクローン（最大２５個）が示される。トレンドのＴＣＲβクローン集団の患者数は、図２１Ａ（下部のパネル）、２２Ｂ、及び２２Ｃにおいて、より暗い線で示される。
【図２１Ｂ】図２１Ａ、図２１Ｂ及び図２１Ｃは、患者６由来の腫瘍試料における治療前後の浸潤性リンパ球（ＴＩＬ）のＴＣＲβシークエンシングの結果を示す一連のグラフである。各群の上位のクローン（最大２５個）が示される。トレンドのＴＣＲβクローン集団の患者数は、図２１Ａ（下部のパネル）、２２Ｂ、及び２２Ｃにおいて、より暗い線で示される。
【図２１Ｃ】図２１Ａ、図２１Ｂ及び図２１Ｃは、患者６由来の腫瘍試料における治療前後の浸潤性リンパ球（ＴＩＬ）のＴＣＲβシークエンシングの結果を示す一連のグラフである。各群の上位のクローン（最大２５個）が示される。トレンドのＴＣＲβクローン集団の患者数は、図２１Ａ（下部のパネル）、２２Ｂ、及び２２Ｃにおいて、より暗い線で示される。
【図２２】ベバシズマブ＋アテゾリズマブ治療前後の患者３のＴＩＬからのＴＣＲβシークエンシングの結果を示すグラフである。
【図２３Ａ】患者２、３、及び６由来の治療前のＰＢＭＣ、ベバシズマブ＋アテゾリズマブ後の末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）、及びベバシズマブ＋アテゾリズマブ後のＴＩＬのＴＣＲβシークエンシングの結果を示す一連のグラフである。図２３Ａは患者２及び３に関するデータを示す。各群の上位のクローン（最大２５個）が示される。
【図２３Ｂ】患者２、３、及び６由来の治療前のＰＢＭＣ、ベバシズマブ＋アテゾリズマブ後の末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）、及びベバシズマブ＋アテゾリズマブ後のＴＩＬのＴＣＲβシークエンシングの結果を示す一連のグラフである。図２３Ｂは患者６に関するデータを示す。各群の上位のクローン（最大２５個）が示される。
【図２４】患者３及び６に関する各治療の時点でのＰＢＭＣプールとＴＩＬプールとの比較におけるウイルス抗原特異的クローンの数を示すヒートマップである。
【発明を実施するための形態】
【００５３】
Ｉ．導入
本発明は、がん（例えば、腎臓癌）の診断、モニタリング、及び治療のための方法を提供する。本発明は、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）を含む抗がん療法による治療により、バイオマーカー（例えば、免疫学的バイオマーカー、例えば、ＣＤ８＋Ｔｅｆｆ細胞に関連する遺伝子（例えば、ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、及びＰＲＦ１）、Ｔｈ１ケモカイン（例えば、ＣＸＣＬ９、ＣＸＬＣ１０、ＣＸＣＬ１１、及びＣＸＣＬ１３）、ＮＫ細胞（例えば、ＧＺＭＢ、ＫＬＲＫ１、及びＳＬＡＭＦ７）、抗原提示（例えば、ＭＨＣ−Ｉ）、及び免疫輸送分子（例えば、ＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＣＣＲ５、ＣＸＣＬ１、ＣＣＲ７、及びＣＸＣＬ１０））の発現レベルの変化が生じるという発見に少なくとも一部基づく。本発明は、本発明のバイオマーカーの発現レベルを検出及び比較することによって、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体）による治療に対するがん（例えば、腎臓癌）を有する患者の応答をモニタリングするための方法を提供する。本発明はまた、本発明のバイオマーカーの発現レベルに基づいてＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）を患者に投与することによって、がん（例えば、腎臓癌）を有する患者を治療するための方法を提供する。
【００５４】
ＩＩ．定義
本明細書に記載の本発明の態様及び実施形態が、態様及び実施形態「を含む」、「からなる」、及び「から本質的になる」を含むことが理解される。本明細書で使用される場合、単数形「ａ」、「ａｎ」、及び「ｔｈｅ」は、別途指示されない限り、複数の対象を含む。
【００５５】
本明細書で使用される「約」という用語は、当業者に容易に知られているそれぞれの値の通常の誤差範囲を指す。本明細書における「約」値またはパラメータへの言及は、その値またはパラメータ自体を対象とする実施形態を含む（かつ説明する）。
【００５６】
本明細書で使用される場合、「個体」、「患者」または「対象」という用語は、交換可能に使用され、治療が所望される任意の単一の動物、より好ましくは哺乳動物（例えば、イヌ、ネコ、ウマ、ウサギ、動物園の動物、雌ウシ、ブタ、ヒツジ、及び非ヒト霊長類などの非ヒト動物を含む）を指す。特定の実施形態では、本明細書の患者はヒトである。患者は、「がん患者」、即ち、がんに罹患しているか、またはがんに罹患する危険があるか、またはがんの１つ以上の症状に苦しむ患者であり得る。
【００５７】
「がん」及び「がん性」という用語は、制御されていない細胞成長を典型的に特徴とする哺乳動物における生理学的状態を指すか、または説明する。この定義には、良性がん及び悪性がん、ならびに休眠腫瘍または微小転移が含まれる。がんの例としては、がん腫、リンパ腫、芽細胞腫（髄芽細胞腫及び網膜芽細胞腫を含む）、肉腫（脂肪肉腫及び滑膜細胞肉腫を含む）、神経内分泌腫瘍（カルチノイド腫瘍、ガストリン産生腫瘍、及び島細胞癌を含む）、中皮腫、シュワン細胞腫（聴神経腫瘍を含む）、髄膜腫、腺癌、黒色腫、ならびに白血病またはリンパ系腫瘍が挙げられるが、これらに限定されない。かかるがんのより具体的な例には、腎臓癌（例えば、腎細胞癌腫（ＲＣＣ）、例えば、転移性ＲＣＣ）、扁平上皮細胞癌（例えば、上皮系扁平上皮細胞癌）、肺癌（小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、肺の腺癌、及び肺の扁平上皮癌を含む）、腹膜の癌、肝細胞癌、消化管癌を含む胃（ｇａｓｔｒｉｃ）癌または胃（ｓｔｏｍａｃｈ）癌、膵臓癌、膠芽腫、子宮頸癌、卵巣癌、肝臓癌、肝臓癌、乳癌（転移性乳癌を含む）、膀胱癌、結腸癌、直腸癌、大腸癌、子宮内膜癌または子宮癌、唾液腺癌、前立腺癌、外陰部癌、甲状腺癌、肝癌、肛門癌、陰茎癌、メルケル細胞癌、菌状息肉腫、精巣癌、食道癌、胆管の腫瘍、頭頸部癌、及びＢ細胞リンパ腫（低悪性度／濾胞性非ホジキンリンパ種（ＮＨＬ）；小リンパ球性（ＳＬ）ＮＨＬ；中悪性度／濾胞性ＮＨＬ；中悪性度びまん性ＮＨＬ；高悪性度免疫芽球性ＮＨＬ；高悪性度リンパ芽球性ＮＨＬ；高悪性度小型非開裂細胞性ＮＨＬ；巨大病変性ＮＨＬ；マントル細胞リンパ腫；ＡＩＤＳ関連リンパ腫；及びワルデンストレームマクログロブリン血症を含む）；慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）；急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）；有毛細胞性白血病；慢性骨髄芽球性白血病；及び移植後リンパ増殖性障害（ＰＴＬＤ）、ならびに母斑症、浮腫（脳腫瘍と関連付けられるものなど）、及びメイグス症候群と関連付けられる異常な血管増殖が挙げられる。いくつかの実施形態では、がんは腎臓癌である。特定の実施形態では、腎臓癌はＲＣＣ（例えば、ｍＲＣＣ）である。
【００５８】
「早期がん」または「早期腫瘍」とは、侵襲性もしくは転移性でないか、または０期、Ｉ期、もしくはＩＩ期がんとして分類されるがんを意味する。
【００５９】
「進行」がんは、元の部位または器官の外に、局所浸潤または転移のいずれかによって広がったがんである。
【００６０】
「不応性」がんは、化学療法剤などの抗腫瘍剤ががん患者に投与されているにもかかわらず進行するがんである。不応性がんの例は、白金不応性であるがんである。
【００６１】
「再発性」がんは、初期療法に応答した後に、初期の部位または遠位部位で再増殖したがんである。
【００６２】
「細胞増殖性障害」及び「増殖性障害」という用語は、ある程度の異常な細胞増殖と関連付けられる障害を指す。一実施形態では、細胞増殖性障害はがんである。
【００６３】
本明細書で使用される「腫瘍」という用語は、悪性または良性にかかわらず、全ての腫瘍性細胞の成長及び増殖、ならびに全ての前がん性及びがん性の細胞及び組織を指す。
【００６４】
「がん」、「がん性」、「細胞増殖性障害」、「増殖性障害」、及び「腫瘍」という用語は、本明細書で言及されるように相互排他的ではない。
【００６５】
「障害」とは、哺乳動物を問題の障害に罹患しやすくする病理学的状態を含む慢性及び急性障害または疾患を含むがこれらに限定されない、治療から利益を受けることになる任意の状態である。
【００６６】
「検出」という用語は、直接的及び間接的検出を含む、任意の検出方法を含む。
【００６７】
本明細書で使用される「試料」という用語は、例えば、物理的、生化学的、化学的、及び／または生理学的特性に基づいて、特徴付けかつ／または識別される細胞及び／または他の分子実体を含有する、目的の患者及び／または個体から得られるか、またはそれに由来する組成物を指す。例えば、「疾患試料」という語句及びその変化形は、特徴付けられる細胞及び／または分子実体を含有することが予期されるか、または含有することが既知である、目的の患者から得られた任意の試料を指す。試料には、組織試料、初代または培養細胞または細胞株、細胞上清、細胞溶解物、血小板、血清、血漿、硝子体液、リンパ液、滑液、卵胞液、精液、羊水、乳、全血、血液由来の細胞、尿、脳脊髄液、唾液、痰、涙、汗、粘液、腫瘍溶解物、及び組織培養培地、組織抽出物、例えば、均質化組織、腫瘍組織、細胞抽出物、ならびにそれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。
【００６８】
本明細書で使用される場合、「細胞」、「細胞株」、及び「細胞培養物」という表現は、同義に使用され、全てのかかる名称は、子孫を含む。このため、「形質転換体」及び「形質転換細胞」という語は、移行の数にかかわらず初代対象細胞及びそれ由来の培養物を含む。また、全ての子孫は、意図的なまたは想定外の突然変異に起因してＤＮＡ内容において厳密に同一でない場合があることが理解される。最初に形質転換された細胞についてスクリーニングされたものと同じ機能または生物活性を有する変異子孫が含まれる。別個の指定が意図される場合には、それは文脈から明確となるであろう。
【００６９】
「バイオマーカー」及び「マーカー」という用語は、ＤＮＡ、ＲＮＡ、タンパク質、炭水化物、糖脂質、または細胞系分子マーカーを指すために本明細書では同義に使用され、患者の試料におけるその発現または存在は、標準的な方法（または本明細書に開示の方法）によって検出され得る。かかるバイオマーカーには、表２に示される遺伝子及びタンパク質が挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、マーカーは、細胞（例えば、ＣＤ８＋Ｔ細胞、例えば、Ｔエフェクター（Ｔｅｆｆ）細胞）であってもよい。かかるバイオマーカーの発現は、ＶＥＧＦアンタゴニストに感受性または応答性である患者から得られた試料において、参照レベル（例えば、患者、例えば、がんを有し、ＶＥＧＦアンタゴニストへの応答性について試験されている患者の群／集団由来の試料におけるバイオマーカーの平均発現レベル；患者、例えば、がんを有し、ＶＥＧＦアンタゴニストに応答しないとして特定された患者の群／集団由来の試料におけるバイオマーカーの平均発現レベル；前の時点で個体から以前に得られた試料におけるレベル；または原発腫瘍の状況でＶＥＧＦアンタゴニストによる事前治療を受け、現在転移を経験している場合がある患者由来の試料におけるレベルを含む）よりも高いまたは低いことが決定され得る。
【００７０】
本明細書で使用される「ＣＤ８Ａ」という用語は、別途示されない限り、霊長類（例えば、ヒト）及び齧歯動物（例えば、マウス及びラット）などの哺乳動物を含む、任意の脊椎動物源に由来する任意の天然ＣＤ８Ａを指す。本用語は、「全長」の処理されていないＣＤ８Ａ、及び細胞における処理から生じるＣＤ８Ａの任意の形態を包含する。本用語はまた、ＣＤ８Ａの天然に存在する変異型、例えば、スプライス変異型または対立遺伝子変異型を包含する。例示的なヒトＣＤ８Ａの核酸配列は、配列番号１に示される。ヒトＣＤ８Ａによってコードされる例示的なタンパク質のアミノ酸配列は、配列番号２に示される。
【００７１】
本明細書で使用される「ＣＤ８Ｂ」という用語は、別途示されない限り、霊長類（例えば、ヒト）及び齧歯動物（例えば、マウス及びラット）などの哺乳動物を含む、任意の脊椎動物源に由来する任意の天然ＣＤ８Ｂを指す。本用語は、「全長」の処理されていないＣＤ８Ｂ、及び細胞における処理から生じるＣＤ８Ｂの任意の形態を包含する。本用語はまた、ＣＤ８Ｂの天然に存在する変異型、例えば、スプライス変異型または対立遺伝子変異型を包含する。例示的なヒトＣＤ８Ｂの核酸配列は、配列番号３に示される。ヒトＣＤ８Ｂによってコードされる例示的なタンパク質のアミノ酸配列は、配列番号４に示される。
【００７２】
本明細書で使用される「ＥＯＭＥＳ」という用語は、別途示されない限り、霊長類（例えば、ヒト）及び齧歯動物（例えば、マウス及びラット）などの哺乳動物を含む、任意の脊椎動物源に由来する任意の天然ＥＯＭＥＳ（エオメソデルミン（Ｅｏｍｅｓｏｄｅｒｍｉｎ））を指す。本用語は、「全長」の処理されていないＥＯＭＥＳ、及び細胞における処理から生じるＥＯＭＥＳの任意の形態を包含する。本用語はまた、ＥＯＭＥＳの天然に存在する変異型、例えば、スプライス変異型または対立遺伝子変異型を包含する。例示的なヒトＥＯＭＥＳの核酸配列は、配列番号５に示される。ヒトＥＯＭＥＳによってコードされる例示的なタンパク質のアミノ酸配列は、配列番号６に示される。
【００７３】
本明細書で使用される「ＧＺＭＡ」という用語は、別途示されない限り、霊長類（例えば、ヒト）及び齧歯動物（例えば、マウス及びラット）などの哺乳動物を含む、任意の脊椎動物源に由来する任意の天然ＧＺＭＡ（グランザイムＡ）を指す。本用語は、「全長」の処理されていないＧＺＭＡ、及び細胞における処理から生じるＧＺＭＡの任意の形態を包含する。本用語はまた、ＧＺＭＡの天然に存在する変異型、例えば、スプライス変異型または対立遺伝子変異型を包含する。例示的なヒトＧＺＭＡの核酸配列は、配列番号７に示される。ヒトＧＺＭＡによってコードされる例示的なタンパク質のアミノ酸配列は、配列番号８に示される。
【００７４】
本明細書で使用される「ＧＺＭＢ」という用語は、別途示されない限り、霊長類（例えば、ヒト）及び齧歯動物（例えば、マウス及びラット）などの哺乳動物を含む、任意の脊椎動物源に由来する任意の天然ＧＺＭＢ（グランザイムＢ）を指す。本用語は、「全長」の処理されていないＧＺＭＢ、及び細胞における処理から生じるＧＺＭＢの任意の形態を包含する。本用語はまた、ＧＺＭＢの天然に存在する変異型、例えば、スプライス変異型または対立遺伝子変異型を包含する。例示的なヒトＧＺＭＢの核酸配列は、配列番号９に示される。ヒトＧＺＭＢによってコードされる例示的なタンパク質のアミノ酸配列は、配列番号１０に示される。
【００７５】
本明細書で使用される「ＩＦＮＧ」という用語は、別途示されない限り、霊長類（例えば、ヒト）及び齧歯動物（例えば、マウス及びラット）などの哺乳動物を含む、任意の脊椎動物源に由来する任意の天然ＩＦＮＧ（インターフェロン、ガンマ）を指す。本用語は、「全長」の処理されていないＩＦＮＧ、及び細胞における処理から生じるＩＦＮＧの任意の形態を包含する。本用語はまた、ＩＦＮＧの天然に存在する変異型、例えば、スプライス変異型または対立遺伝子変異型を包含する。例示的なヒトＩＦＮＧの核酸配列は、配列番号１１に示される。ヒトＩＦＮＧによってコードされる例示的なタンパク質のアミノ酸配列は、配列番号１２に示される。
【００７６】
本明細書で使用される「ＰＲＦ１」という用語は、別途示されない限り、霊長類（例えば、ヒト）及び齧歯動物（例えば、マウス及びラット）などの哺乳動物を含む、任意の脊椎動物源に由来する任意の天然ＰＲＦ１（パーフォリン１；孔形成タンパク質としても知られる）を指す。本用語は、「全長」の処理されていないＰＲＦ１、及び細胞における処理から生じるＰＲＦ１の任意の形態を包含する。本用語はまた、ＰＲＦ１の天然に存在する変異型、例えば、スプライス変異型または対立遺伝子変異型を包含する。例示的なヒトＰＲＦ１の核酸配列は、配列番号１３に示される。ヒトＰＲＦ１によってコードされる例示的なタンパク質のアミノ酸配列は、配列番号１４に示される。
【００７７】
本明細書で使用される「ＣＸＣＬ９」という用語は、別途示されない限り、霊長類（例えば、ヒト）及び齧歯動物（例えば、マウス及びラット）などの哺乳動物を含む、任意の脊椎動物源に由来する任意の天然ＣＸＣＬ９（ケモカイン（Ｃ−Ｘ−Ｃモチーフ）リガンド９）を指す。本用語は、「全長」の処理されていないＣＸＣＬ９、及び細胞における処理から生じるＣＸＣＬ９の任意の形態を包含する。本用語はまた、ＣＸＣＬ９の天然に存在する変異型、例えば、スプライス変異型または対立遺伝子変異型を包含する。例示的なヒトＣＸＣＬ９の核酸配列は、配列番号１５に示される。ヒトＣＸＣＬ９によってコードされる例示的なタンパク質のアミノ酸配列は、配列番号１６に示される。
【００７８】
本明細書で使用される「ＣＸＣＬ１０」という用語は、別途示されない限り、霊長類（例えば、ヒト）及び齧歯動物（例えば、マウス及びラット）などの哺乳動物を含む、任意の脊椎動物源に由来する任意の天然ＣＸＣＬ１０（ケモカイン（Ｃ−Ｘ−Ｃモチーフ）リガンド１０）を指す。本用語は、「全長」の処理されていないＣＸＣＬ１０、及び細胞における処理から生じるＣＸＣＬ１０の任意の形態を包含する。本用語はまた、ＣＸＣＬ１０の天然に存在する変異型、例えば、スプライス変異型または対立遺伝子変異型を包含する。例示的なヒトＣＸＣＬ１０の核酸配列は、配列番号１７に示される。ヒトＣＸＣＬ１０によってコードされる例示的なタンパク質のアミノ酸配列は、配列番号１８に示される。
【００７９】
本明細書で使用される「ＣＸＣＬ１１」という用語は、別途示されない限り、霊長類（例えば、ヒト）及び齧歯動物（例えば、マウス及びラット）などの哺乳動物を含む、任意の脊椎動物源に由来する任意の天然ＣＸＣＬ１１（ケモカイン（Ｃ−Ｘ−Ｃモチーフ）リガンド１１）を指す。本用語は、「全長」の処理されていないＣＸＣＬ１１、及び細胞における処理から生じるＣＸＣＬ１１の任意の形態を包含する。本用語はまた、ＣＸＣＬ１１の天然に存在する変異型、例えば、スプライス変異型または対立遺伝子変異型を包含する。例示的なヒトＣＸＣＬ１１の核酸配列は、配列番号１９に示される。ヒトＣＸＣＬ１１によってコードされる例示的なタンパク質のアミノ酸配列は、配列番号２０に示される。
【００８０】
本明細書で使用される「ＣＸＣＬ１３」という用語は、別途示されない限り、霊長類（例えば、ヒト）及び齧歯動物（例えば、マウス及びラット）などの哺乳動物を含む、任意の脊椎動物源に由来する任意の天然ＣＸＣＬ１３（ケモカイン（Ｃ−Ｘ−Ｃモチーフ）リガンド１１）を指す。本用語は、「全長」の処理されていないＣＸＣＬ１３、及び細胞における処理から生じるＣＸＣＬ１３の任意の形態を包含する。本用語はまた、ＣＸＣＬ１３の天然に存在する変異型、例えば、スプライス変異型または対立遺伝子変異型を包含する。例示的なヒトＣＸＣＬ１３の核酸配列は、配列番号２１に示される。ヒトＣＸＣＬ１３によってコードされる例示的なタンパク質のアミノ酸配列は、配列番号２２に示される。
【００８１】
本明細書で使用される「ＫＬＲＫ１」という用語は、別途示されない限り、霊長類（例えば、ヒト）及び齧歯動物（例えば、マウス及びラット）などの哺乳動物を含む、任意の脊椎動物源に由来する任意の天然ＫＬＲＫ１（キラー細胞レクチン様受容体サブファミリーＫ（カッパ）、メンバー１）を指す。本用語は、「全長」の処理されていないＫＬＲＫ１、及び細胞における処理から生じるＫＬＲＫ１の任意の形態を包含する。本用語はまた、ＫＬＲＫ１の天然に存在する変異型、例えば、スプライス変異型または対立遺伝子変異型を包含する。例示的なヒトＫＬＲＫ１の核酸配列は、配列番号２３に示される。ヒトＫＬＲＫ１によってコードされる例示的なタンパク質のアミノ酸配列は、配列番号２４に示される。
【００８２】
本明細書で使用される「ＳＬＡＭＦ７」という用語は、別途示されない限り、霊長類（例えば、ヒト）及び齧歯動物（例えば、マウス及びラット）などの哺乳動物を含む、任意の脊椎動物源に由来する任意の天然ＳＬＡＭＦ７（ＳＬＡＭファミリーメンバー７）を指す。本用語は、「全長」の処理されていないＳＬＡＭＦ７、及び細胞における処理から生じるＳＬＡＭＦ７の任意の形態を包含する。本用語はまた、ＳＬＡＭＦ７の天然に存在する変異型、例えば、スプライス変異型または対立遺伝子変異型を包含する。例示的なヒトＳＬＡＭＦ７の核酸配列は、配列番号２５に示される。ヒトＳＬＡＭＦ７によってコードされる例示的なタンパク質のアミノ酸配列は、配列番号２６に示される。
【００８３】
本明細書で使用される「ＣＸ３ＣＲ１」という用語は、別途示されない限り、霊長類（例えば、ヒト）及び齧歯動物（例えば、マウス及びラット）などの哺乳動物を含む、任意の脊椎動物源に由来する任意の天然ＣＸ３ＣＲ１（ＣＸＣ３ケモカイン受容体１、当該技術分野ではフラクタルカイン受容体またはＧタンパク質結合受容体１３（ＧＰＲ１３）としても知られる）を指す。本用語は、「全長」の処理されていないＣＸ３ＣＲ１、及び細胞における処理から生じるＣＸ３ＣＲ１の任意の形態を包含する。本用語はまた、ＣＸ３ＣＲ１の天然に存在する変異型、例えば、スプライス変異型または対立遺伝子変異型を包含する。例示的なヒトＣＸ３ＣＲ１の核酸配列は、配列番号２７に示される。ヒトＣＸ３ＣＲ１によってコードされる例示的なタンパク質のアミノ酸配列は、配列番号２８に示される。
【００８４】
本明細書で使用される「ＣＣＬ２」という用語は、別途示されない限り、霊長類（例えば、ヒト）及び齧歯動物（例えば、マウス及びラット）などの哺乳動物を含む、任意の脊椎動物源に由来する任意の天然ＣＣＬ２（ケモカイン（Ｃ−Ｃモチーフ）リガンド２）を指す。本用語は、「全長」の処理されていないＣＣＬ２、及び細胞における処理から生じるＣＣＬ２の任意の形態を包含する。本用語はまた、ＣＣＬ２の天然に存在する変異型、例えば、スプライス変異型または対立遺伝子変異型を包含する。例示的なヒトＣＣＬ２の核酸配列は、配列番号２９に示される。ヒトＣＣＬ２によってコードされる例示的なタンパク質のアミノ酸配列は、配列番号３０に示される。
【００８５】
本明細書で使用される「ＣＣＬ５」という用語は、別途示されない限り、霊長類（例えば、ヒト）及び齧歯動物（例えば、マウス及びラット）などの哺乳動物を含む、任意の脊椎動物源に由来する任意の天然ＣＣＬ５（ケモカイン（Ｃ−Ｃモチーフ）リガンド５）を指す。本用語は、「全長」の処理されていないＣＣＬ５、及び細胞における処理から生じるＣＣＬ５の任意の形態を包含する。本用語はまた、ＣＣＬ５の天然に存在する変異型、例えば、スプライス変異型または対立遺伝子変異型を包含する。例示的なヒトＣＣＬ５の核酸配列は、配列番号３１に示される。ヒトＣＣＬ５によってコードされる例示的なタンパク質のアミノ酸配列は、配列番号３２に示される。
【００８６】
本明細書で使用される「ＣＣＲ５」という用語は、別途示されない限り、霊長類（例えば、ヒト）及び齧歯動物（例えば、マウス及びラット）などの哺乳動物を含む、任意の脊椎動物源に由来する任意の天然ＣＣＲ５（ケモカイン（Ｃ−Ｃモチーフ）受容体５）を指す。本用語は、「全長」の処理されていないＣＣＲ５、及び細胞における処理から生じるＣＣＲ５の任意の形態を包含する。本用語はまた、ＣＣＲ５の天然に存在する変異型、例えば、スプライス変異型または対立遺伝子変異型を包含する。例示的なヒトＣＣＲ５の核酸配列は、配列番号３３に示される。ヒトＣＣＲ５によってコードされる例示的なタンパク質のアミノ酸配列は、配列番号３４に示される。
【００８７】
本明細書で使用される「ＣＸ３ＣＬ１」という用語は、別途示されない限り、霊長類（例えば、ヒト）及び齧歯動物（例えば、マウス及びラット）などの哺乳動物を含む、任意の脊椎動物源に由来する任意の天然ＣＸ３ＣＬ１（ケモカイン（Ｃ−Ｘ３−Ｃモチーフ）リガンド１；当該技術分野ではフラクタルカインとしても知られる）を指す。本用語は、「全長」の処理されていないＣＸ３ＣＬ１、及び細胞における処理から生じるＣＸ３ＣＬ１の任意の形態を包含する。本用語はまた、ＣＸ３ＣＬ１の天然に存在する変異型、例えば、スプライス変異型または対立遺伝子変異型を包含する。例示的なヒトＣＸ３ＣＬ１の核酸配列は、配列番号３５に示される。ヒトＣＸ３ＣＬ１によってコードされる例示的なタンパク質のアミノ酸配列は、配列番号３６に示される。
【００８８】
本明細書で使用される「ＣＣＲ７」という用語は、別途示されない限り、霊長類（例えば、ヒト）及び齧歯動物（例えば、マウス及びラット）などの哺乳動物を含む、任意の脊椎動物源に由来する任意の天然ＣＣＲ７（ケモカイン（Ｃ−Ｃモチーフ）受容体７）を指す。本用語は、「全長」の処理されていないＣＣＲ７、及び細胞における処理から生じるＣＣＲ７の任意の形態を包含する。本用語はまた、ＣＣＲ７の天然に存在する変異型、例えば、スプライス変異型または対立遺伝子変異型を包含する。例示的なヒトＣＣＲ７の核酸配列は、配列番号３７に示される。ヒトＣＣＲ７によってコードされる例示的なタンパク質のアミノ酸配列は、配列番号３８に示される。
【００８９】
本明細書で使用される「ＭＨＣ−Ｉ」という用語は、別途示されない限り、霊長類（例えば、ヒト）及び齧歯動物（例えば、マウス及びラット）などの哺乳動物を含む、任意の脊椎動物源に由来する任意の天然ＭＨＣ−Ｉ（主要組織適合複合体Ｉ）を指す。ヒトＭＨＣ−Ｉは、ヒト白血球抗原Ｉ（ＨＬＡ−Ｉ）とも称される。ＭＨＣ−ＩまたはＨＬＡ−Ｉの発現レベルは、任意のＨＬＡ−Ｉ遺伝子もしくは偽遺伝子（例えば、ＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−Ｂ、ＨＬＡ−Ｃ、ＨＬＡ−Ｅ、ＨＬＡ−Ｆ、ＨＬＡ−Ｇ、ＨＬＡ−Ｋ、またはＨＬＡ−Ｌ）そのハプロタイプの発現レベルを決定することによって評定されてもよい。発現レベルは、遺伝子または偽遺伝子の全てまたは一部（例えば、ＭＨＣ−Ｉアルファ鎖またはＨＬＡ−Ｉ組織適合抗原アルファ鎖）の検出によって評定することができる。
【００９０】
「発現のレベル」または「発現レベル」という用語は、一般に、同義に使用され、一般に、生体試料中のバイオマーカーの量を指す。「発現」とは、一般に、情報（例えば、遺伝子コード情報及び／またはエピジェネティック情報）が、細胞中に存在しかつそこで機能する構造に変換されるプロセスを指す。したがって、本明細書で使用される場合、「発現」とは、ポリヌクレオチドへの転写、ポリペプチドへの翻訳、または更にはポリヌクレオチド及び／もしくはポリペプチド修飾（例えば、ポリペプチドの翻訳後修飾）を指してもよい。転写されたポリヌクレオチド、翻訳されたポリペプチド、またはポリヌクレオチド及び／もしくはポリペプチド修飾（例えば、ポリペプチドの翻訳後修飾）の断片も、それらが選択的スプライシングによって生成された転写物もしくは分解された転写物に由来するか、または例えばタンパク質分解によるポリペプチドの翻訳後プロセシングに由来するかどうかにかかわらず、発現されたものと見なされるべきである。「発現遺伝子」は、ｍＲＮＡとしてポリヌクレオチドに転写され、その後、ポリペプチドに翻訳される遺伝子を含み、ＲＮＡに転写されるが、ポリペプチドに翻訳されない遺伝子（例えば、トランスファーＲＮＡ及びリボソームＲＮＡ）も含む。
【００９１】
「増加した発現」、「増加した発現レベル」、「増加したレベル」、「上昇した発現」、「上昇した発現レベル」、または「上昇したレベル」は、疾患もしくは障害（例えば、がん）に罹患していない個体（複数可）、内部対照（例えば、ハウスキーピングバイオマーカー）、または療法（例えば、ＶＥＧＦアンタゴニストを含む抗がん療法）の実施前に得られた試料におけるバイオマーカーのレベルなどの対照と比べた、個体におけるバイオマーカーの発現の増加またはそのレベルの増加を指す。
【００９２】
「減少した発現」、「減少した発現レベル」、「減少したレベル」、「低下した発現」、「低下した発現レベル」、または「低下したレベル」は、疾患もしくは障害（例えば、がん）に罹患していない個体（複数可）、内部対照（例えば、ハウスキーピングバイオマーカー）、または療法（例えば、ＶＥＧＦアンタゴニストを含む抗がん療法）の実施前に得られた試料におけるバイオマーカーのレベルなどの対照と比べた、個体におけるバイオマーカーの発現の減少またはそのレベルの減少を指す。いくつかの実施形態では、低下した発現は、発現がほとんどまたは全くない。
【００９３】
目的のタンパク質を「発現する」試料または細胞は、断片を含む、タンパク質をコードするｍＲＮＡまたはタンパク質が、試料または細胞中に存在することが決定されるものである。
【００９４】
個体への臨床的利益の増加に関連するバイオマーカーの「量」または「レベル」は、生体試料中で検出可能なレベルである。これらは、当業者に既知であり、また本明細書にも開示される方法によって測定され得る。評価されるバイオマーカーの発現レベルまたは量を使用して、治療への応答を判定することができる。
【００９５】
「に基づく」という語句は、本明細書で使用されるとき、１つ以上のバイオマーカーについての情報が、例えば治療決定、添付文書上で提供される情報、またはマーケティング／宣伝指針などを伝えるために使用されることを意味する。
【００９６】
「ハウスキーピングバイオマーカー」という用語は、典型的には全ての細胞型に同様に存在するバイオマーカーまたはバイオマーカーの群（例えば、ポリヌクレオチド及び／またはポリペプチド）を指す。いくつかの実施形態では、ハウスキーピングバイオマーカーは「ハウスキーピング遺伝子」である。「ハウスキーピング遺伝子」は、本明細書において、その活性が細胞機能の維持に必須であるタンパク質をコードし、典型的には全ての細胞型に同様に存在する遺伝子または遺伝子の群を指す。
【００９７】
本明細書で使用される「増幅」は、一般に、所望の配列の複数のコピーを生成するプロセスを指す。「複数のコピー」とは、少なくとも２つのコピーを意味する。「コピー」は、鋳型配列に対する完全な配列相補性または同一性を必ずしも意味しない。例えば、コピーは、デオキシイノシンなどのヌクレオチド類似体、意図的な配列改変（鋳型にハイブリダイズ可能であるが相補的ではない配列を含むプライマーによって導入される配列改変など）、及び／または増幅中に生じる配列エラーを含み得る。
【００９８】
「多重ＰＣＲ」という用語は、単一の反応で２つ以上のＤＮＡ配列を増幅させる目的で、１つ超のプライマーセットを使用して単一の源（例えば、個体）から得られた核酸上で行われる単一のＰＣＲ反応を指す。
【００９９】
本明細書で使用される「ポリメラーゼ連鎖反応」または「ＰＣＲ」技法とは、一般に、核酸、ＲＮＡ、及び／またはＤＮＡの微量の特定の片が、例えば、米国特許第４，６８３，１９５号に記載されているように増幅される手順を指す。概して、オリゴヌクレオチドプライマーを設計できるように、目的の領域またはそれを越える領域の末端から得られる配列情報を入手する必要があり、これらのプライマーは、増幅するテンプレートの逆鎖の配列と同一または同様となる。これらの２つのプライマーの５’末端ヌクレオチドは、増幅される材料の末端と一致し得る。ＰＣＲを用いて、特定のＲＮＡ配列、全ゲノムＤＮＡ由来の特定のＤＮＡ配列及び全細胞ＲＮＡから転写したｃＤＮＡ、バクテリオファージ配列またはプラスミド配列などを増幅できる。概要については、Ｍｕｌｌｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｓｙｍｐ．Ｑｕａｎｔ．Ｂｉｏｌ．５１：２６３（１９８７）、及びＥｒｌｉｃｈ，ｅｄ．，ＰＣＲ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，（Ｓｔｏｃｋｔｏｎ  Ｐｒｅｓｓ，ＮＹ，１９８９）を参照されたい。本明細書で使用される場合、ＰＣＲは、既知の核酸（ＤＮＡまたはＲＮＡ）をプライマーとして使用することを含む、核酸試験試料を増幅する核酸ポリメラーゼ反応法の一例であると見なされるが、唯一の例ではなく、核酸の特定の片を増幅もしくは生成するために、または特定の核酸に相補的な核酸の特定の片を増幅もしくは生成するために、核酸ポリメラーゼを利用する。
【０１００】
「定量リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応」または「ｑＲＴ−ＰＣＲ」は、ＰＣＲ産物の量がＰＣＲ反応の各ステップで測定される、ＰＣＲの形態を指す。この技法は、例えば、Ｃｒｏｎｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ．Ｊ．Ｐａｔｈｏｌ．１６４（１）：３５−４２（２００４）及びＭａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｌｌ  ５：６０７−６１６（２００４）を含む、様々な刊行物に記載されている。
【０１０１】
「マイクロアレイ」という用語は、基質上のハイブリダイズ可能なアレイ要素、好ましくはポリヌクレオチドプローブの規則配置を指す。
【０１０２】
「診断」という用語は、分子的または病理学的状態、疾患、または病態（例えば、がん）の特定または分類を指すために本明細書で使用される。例えば、「診断」は、特定のタイプのがんの特定を指してもよい。「診断」は、例えば病理組織的基準によるか、または分子特徴によるがんの特定のサブタイプの分類も指し得る（例えば、バイオマーカーのうちの１つまたはその組み合わせの発現を特徴とするサブタイプ（例えば、特定の遺伝子、または該遺伝子によりコードされるタンパク質））。
【０１０３】
「腫瘍浸潤性免疫細胞」は、本明細書で使用される場合、腫瘍またはその試料中に存在する任意の免疫細胞を指す。腫瘍浸潤性免疫細胞には、腫瘍内免疫細胞、腫瘍周辺免疫細胞、他の腫瘍間質細胞（例えば、線維芽細胞）、またはこれらの任意の組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。かかる腫瘍浸潤性免疫細胞は、Ｔリンパ球（ＣＤ８＋Ｔリンパ球及び／またはＣＤ４＋Ｔリンパ球など）、Ｂリンパ球、または顆粒球（例えば、好中球、好酸球、及び好塩基球）、単球、マクロファージ（例えば、ＣＤ６８＋／ＣＤ１６３＋マクロファージ）、樹状細胞（例えば、指状嵌入樹状細胞）、組織球、及びナチュラルキラー（ＮＫ）細胞を含む、他の骨髄系細胞であり得る。
【０１０４】
「腫瘍細胞」は、本明細書で使用される場合、腫瘍またはその試料中に存在する任意の腫瘍細胞を指す。腫瘍細胞は、当該技術分野で既知であり、かつ／または本明細書に記載される方法を使用して、腫瘍試料中に存在し得る他の細胞、例えば間質細胞及び腫瘍浸潤性免疫細胞と区別され得る。
【０１０５】
本明細書で使用される「参照試料」、「参照細胞」、「参照組織」、「対照試料」、「対照細胞」、または「対照組織」は、比較目的のために使用される試料、細胞、組織、標準物、またはレベルを指す。一実施形態では、参照試料、参照細胞、参照組織、対照試料、対照細胞、または対照組織は、同じ患者または個体の身体の健康な及び／または罹患していない部分（例えば、組織または細胞）から得られる。例えば、参照試料、参照細胞、参照組織、対照試料、対照細胞、または対照組織は、疾患細胞または組織に隣接する健康及び／または非疾患細胞または組織（例えば、腫瘍に隣接する細胞または組織）であり得る。別の実施形態では、参照試料は、同じ患者または個体の身体の治療されていない組織及び／または細胞から得られる。更に別の実施形態では、参照試料、参照細胞、参照組織、対照試料、対照細胞、または対照組織は、患者または個体ではない個体の身体の健康な及び／または罹患していない部分（例えば、組織または細胞）から得られる。なお別の実施形態では、参照試料、参照細胞、参照組織、対照試料、対照細胞、または対照組織は、患者または個体ではない個体の身体の治療されていない組織及び／または細胞から得られる。別の実施形態では、参照試料、参照細胞、参照組織、対照試料、対照細胞、または対照組織は、療法（例えば、ＶＥＧＦアンタゴニストを含む抗がん療法）の実施前に患者から得られる。
【０１０６】
「相関する」または「相関すること」は、任意の方法によって、第１の分析またはプロトコルの性能及び／または結果を第２の分析またはプロトコルの性能及び／または結果と比較することを意味する。例えば、第２のプロトコルを行う際に第１の分析もしくはプロトコルの結果を使用することができ、かつ／または第１の分析もしくはプロトコルの結果を使用して、第２の分析もしくはプロトコルが行われるべきかを判定してもよい。ポリペプチド分析またはプロトコルの実施形態に関して、ポリペプチド発現分析またはプロトコルの結果を使用して、特定の治療レジメンが行われるべきかを判定してもよい。ポリヌクレオチド分析またはプロトコルの実施形態に関して、ポリヌクレオチド発現分析またはプロトコルの結果を使用して、特定の治療レジメンが行われるべきかを判定してもよい。
【０１０７】
本明細書で使用される場合、「治療」（及び「治療する」または「治療すること」などのその文法上の変形）とは、治療されている個体の自然経過を変更することを目的とした臨床介入を指し、予防のために、または臨床病理過程中に行われ得る。治療の望ましい効果には、疾患の発生または再発の予防、症状の緩和、疾患の任意の直接的または間接的病理学的帰結の縮小、転移の予防、疾患進行速度の減少、病状の向上または寛解、及び回復または予後の改善が含まれるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、抗体（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体）は、疾患の発達を遅らせるか、または疾患もしくは障害の進行を減速させるために使用される。
【０１０８】
本明細書で使用される場合、「投与すること」は、化合物（例えば、ＶＥＧＦアンタゴニスト、例えば、抗ＶＥＧＦ抗体）または組成物（例えば、薬学的組成物、例えば、ＶＥＧＦアンタゴニストを含む薬学的組成物）の投薬量を患者に付与する方法を意味する。本明細書に記載の方法で利用される組成物は、例えば、筋肉内に、静脈内に、皮内に、経皮的に、動脈内に、腹腔内に、病変内に、頭蓋内に、関節内に、前立腺内に、胸膜内に、気管内に、髄腔内に、鼻腔内に、腟内に、直腸内に、局所的に、腫瘍内に、腹膜に、皮下に、結膜下に、小胞内に、粘膜に、心膜内に、臍帯内に、眼内に、眼窩内に、硝子体内に（例えば、硝子体内注射により）、点眼により、経口的に、局所的に、経皮的に、吸入により、注射により、移植により、注入により、持続注入により、標的細胞を直接的に浸す局所灌流により、カテーテルにより、洗浄により、クリームに入れて、または脂質組成物に入れて、投与され得る。本明細書に記載の方法で利用される組成物はまた、全身または局所投与され得る。投与方法は、様々な要因（例えば、投与される化合物または組成物、及び治療される状態、疾患、または障害の重症度）に応じて様々であり得る。
【０１０９】
「治療有効量」は、哺乳動物において疾患または障害を治療または予防するための治療剤の量を指す。がんの場合、治療有効量の治療剤は、がん細胞の数を低減、原発腫瘍サイズを低減、末梢器官へのがん細胞浸潤を阻害（即ち、ある程度の減速及び好ましくは停止）、腫瘍転移を阻害（即ち、ある程度の減速及び好ましくは停止）、腫瘍成長のある程度の阻害、及び／または障害に関連する症状のうちの１つ以上をある程度軽減し得る。薬物が既存のがん細胞の成長の予防及び／またはそれらの殺滅を行うことができる限り、この薬物は細胞増殖抑制性かつ／または細胞毒性であり得る。がん治療に関して、インビボでの有効性は、例えば生存期間、疾患進行までの期間（ＴＴＰ）、奏効率（例えば、完全奏効（ＣＲ）及び部分奏効（ＰＲ））、奏効期間、及び／または生活の質を評定することによって測定され得る。
【０１１０】
「同時に」という用語は、投与の時間が少なくとも部分的に重複している、２つ以上の治療剤の投与を指すために本明細書で使用される。したがって、同時投与は、１つ以上の薬剤（複数可）の投与が、１つ以上の他の薬剤（複数可）の投与の中止後に続くときの投薬レジメンを含む。
【０１１１】
「低減する」または「阻害する」とは、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、またはそれ以上の全体的な減少を引き起こす能力を意味する。低減または阻害は、治療されている障害の症状、転移の存在もしくはサイズ、または原発腫瘍のサイズに対して言及し得る。
【０１１２】
本明細書における治療剤の「固定」または「一定」用量は、ヒト患者に患者の体重（ＷＴ）または体表面積（ＢＳＡ）に関係なく投与される用量を指す。固定または一定用量は、したがって、ｍｇ／ｋｇ用量またはｍｇ／ｍ２用量としてではなく、治療剤の絶対量として提供される。
【０１１３】
本明細書における「負荷」用量は、一般に、患者に投与される治療剤の初期用量を含み、１つ以上のその維持用量（複数可）が続く。一般に、単一負荷用量が投与されるが、複数の負荷用量が本明細書で企図される。通常、投与される負荷用量（複数可）の量は、投与される維持用量（複数可）の量を超過し、かつ／または負荷用量（複数可）は、治療剤の所望の定常状態における濃度を、維持用量（複数可）を用いて達成することができるものよりも早く達成するように、維持用量（複数可）よりも頻繁に投与される。
【０１１４】
本明細書における「維持」用量または「延長」用量は、治療期間にわたって患者に投与される治療剤の１つ以上の用量を指す。通常、維持用量は、ほぼ毎週、約２週毎、約３週毎、または約４週毎など、間をおいた治療間隔で投与される。
【０１１５】
本発明との関連における「に応答性」という語句は、がん（例えば、腎臓癌、例えば、ＲＣＣ、例えば、転移性ＲＣＣ）に罹患している、それが疑われる、またはその傾向がある患者が、療法、例えば、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）への応答を示すことを示す。当業者であれば、容易に、本発明の方法に従ってＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）によって治療される人が応答を示すかどうかを決定する立場になれるであろう。例えば、応答は、腫瘍成長の減退及び／もしくは停止、腫瘍のサイズの低減、ならびに／または１つ以上のがんの症状の緩和など、がん由来の苦痛の減少を反映し得る。好ましくは、応答は、がんの転移性変換のインデックスまたはがんのインデックスの減少または減退、例えば、転移の形成の防止または転移の数もしくはサイズの低減を反映し得る。
【０１１６】
「抗がん療法」という用語は、がんの治療において有用な療法を指す。抗がん療法剤の例には、細胞毒性剤、化学療法剤、成長阻害剤、放射線療法で使用される薬剤、抗血管新生剤、アポトーシス剤、抗チューブリン剤、及びがんを治療するための他の薬剤、例えば次の標的：ＰＤＧＦＲ−β、ＢｌγＳ、ＡＰＲＩＬ、ＢＣＭＡ受容体（複数可）、ＴＲＡＩＬ／Ａｐｏ２、他の生理活性及び有機化学薬剤などのうちの１つ以上に結合する抗ＣＤ２０抗体、血小板由来成長因子阻害剤（例えば、ＧＬＥＥＶＥＣ（商標）（イマチニブメシル酸塩））、ＣＯＸ−２阻害剤（例えば、セレコキシブ）、インターフェロン、サイトカイン、アンタゴニスト（例えば、中和抗体）が含まれるが、これらに限定される。これらの組み合わせも本発明に含まれる。
【０１１７】
「抗血管新生剤」または「血管新生阻害剤」は、血管新生、脈管形成、または望ましくない血管透過性を直接的または間接的に阻害する、低分子量物質、ポリヌクレオチド、ポリペプチド、単離されたタンパク質、組換えタンパク質、抗体、またはその抱合体もしくは融合タンパク質を指す。抗血管新生剤には、血管新生因子またはその受容体の血管新生活性を妨害する薬剤が含まれることを理解されたい。例えば、抗血管新生剤は、上で定義した血管新生剤に対する抗体または他のアンタゴニスト、例えば、ＶＥＧＦ−ＡまたはＶＥＧＦ−Ａ受容体（例えば、ＫＤＲ受容体またはＦｌｔ−１受容体）に対する抗体、ＧＬＥＥＶＥＣ（商標）（メシル酸イマチニブ）などの抗ＰＤＧＦＲ阻害剤である。抗血管新生剤には、天然の血管新生阻害剤、例えば、アンギオスタチン、エンドスタチンなども含まれる。例えば、Ｋｌａｇｓｂｒｕｎ  ａｎｄ  Ｄ’Ａｍｏｒｅ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．，５３：２１７−３９（１９９１）；Ｓｔｒｅｉｔ  ａｎｄ  Ｄｅｔｍａｒ，Ｏｎｃｏｇｅｎｅ，２２：３１７２−３１７９（２００３）（例えば、悪性黒色腫における抗血管新生療法を列挙している表３）；Ｆｅｒｒａｒａ＆Ａｌｉｔａｌｏ，Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  ５（１２）：１３５９−１３６４（１９９９）；Ｔｏｎｉｎｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｏｎｃｏｇｅｎｅ，２２：６５４９−６５５６（２００３）、及びＳａｔｏ  Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．，８：２００−２０６（２００３）を参照されたい。
【０１１８】
本明細書で使用される「細胞毒性剤」という用語は、細胞の機能を阻害もしくは防止する物質、及び／または細胞の破壊を引き起こす物質を指す。本用語は、放射性同位体（例えば、Ａｔ２１１、Ｉ１３１、Ｉ１２５、Ｙ９０、Ｒｅ１８６、Ｒｅ１８８、Ｓｍ１５３、Ｂｉ２１２、Ｐ３２、及びＬｕの放射性同位体）、化学療法剤、例えば、メトトレキサート、アドリアミシン、ビンカアルカロイド（ビンクリスチン、ビンブラスチン、エトポシド）、ドキソルビシン、メルファラン、ミトマイシンＣ、クロラムブシル、ダウノルビシン、または他の挿入剤、酵素及びその断片、例えば、核酸分解酵素、抗生物質、及び細菌、真菌、植物、または動物起源の小分子毒素または酵素的に活性な毒素などの毒素（その断片及び／または変異型を含む）、ならびに下に開示される様々な抗腫瘍剤または抗がん剤を含むことを意図する。殺腫瘍剤は、腫瘍細胞の破壊を引き起こす。
【０１１９】
「化学療法剤」は、がんの治療に有用な化学化合物を含む。化学療法剤の例には、エルロチニブ（ＴＡＲＣＥＶＡ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／ＯＳＩ  Ｐｈａｒｍ．）、ボルテゾミブ（ＶＥＬＣＡＤＥ（登録商標）、Ｍｉｌｌｅｎｎｉｕｍ  Ｐｈａｒｍ．）、ジスルフィラム、没食子酸エピガロカテキン、サリノスポラミドＡ、カルフィルゾミブ、１７−ＡＡＧ（ゲルダナマイシン）、ラディシコール、乳酸脱水素酵素Ａ（ＬＤＨ−Ａ）、フルベストラント（ＦＡＳＬＯＤＥＸ（登録商標）、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、スニチブ（ｓｕｎｉｔｉｂ）（ＳＵＴＥＮＴ（登録商標）、Ｐｆｉｚｅｒ／Ｓｕｇｅｎ）、レトロゾール（ＦＥＭＡＲＡ（登録商標）、Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、メシル酸イマチニブ（ＧＬＥＥＶＥＣ（登録商標）、Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、フィナスネート（ｆｉｎａｓｕｎａｔｅ）（ＶＡＴＡＬＡＮＩＢ（登録商標）、Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、オキサリプラチン（ＥＬＯＸＡＴＩＮ（登録商標）、Ｓａｎｏｆｉ）、５−ＦＵ（５−フルオロウラシル）、ロイコボリン、ラパマイシン（シロリムス、ＲＡＰＡＭＵＮＥ（登録商標）、Ｐｆｉｚｅｒ）、ラパチニブ（ＴＹＫＥＲＢ（登録商標）、ＧＳＫ５７２０１６、Ｇｌａｘｏ  Ｓｍｉｔｈ  Ｋｌｉｎｅ）、ロナファニブ（ＳＣＨ６６３３６）、ソラフェニブ（ＮＥＸＡＶＡＲ（登録商標）、Ｂａｙｅｒ  Ｌａｂｓ）、ゲフィチニブ（ＩＲＥＳＳＡ（登録商標）、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、ＡＧ１４７８、チオテパ及びＣＹＴＯＸＡＮ（登録商標）シクロスホスファミドなどのアルキル化剤；ブスルファン、インプロスルファン、及びピポスルファンなどのアルキルスルホネート；ベンゾドパ（ｂｅｎｚｏｄｏｐａ）、カルボクオン、メツレドパ（ｍｅｔｕｒｅｄｏｐａ）、及びウレドパ（ｕｒｅｄｏｐａ）などのアジリジン；アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホルアミド、トリエチレンチオホスホルアミド、及びトリメチロメラミンを含む、エチレンイミン及びメチラメラミン（ｍｅｔｈｙｌａｍｅｌａｍｉｎｅ）；アセトゲニン（特にブラタシン及びブラタシノン）；カンプトテシン（トポテカン及びイリノテカンを含む）；ブリオスタチン；カリスタチン；ＣＣ−１０６５（そのアドゼレシン、カルゼレシン、及びビゼレシン合成類似体を含む）、クリプトフィシン（特に、クリプトフィシン１及びクリプトフィシン８）；副腎皮質ステロイド（プレドニゾン及びプレドニゾロンを含む）；酢酸シプロテロン；フィナステリド及びデュタステリドを含む５α−還元酵素；ボリノスタット、ロミデプシン、パノビノスタット、バルプロ酸、モセチノスタットドラスタチン；アルデスロイキン、タルクデュオカルマイシン（合成類似体のＫＷ−２１８９及びＣＢ１−ＴＭ１を含む）；エリュテロビン；パンクラチスタチン；サルコジクチン（ｓａｒｃｏｄｉｃｔｙｉｎ）；スポンジスタチン；クロラムブシル、クロマファジン（ｃｈｌｏｍａｐｈａｚｉｎｅ）クロロホスファミド、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、メクロレタミンオキシド塩酸塩、メルファラン、ノベムビチン（ｎｏｖｅｍｂｉｃｈｉｎ）、フェネステリン、プレドニムスチン、トロホスファミド、ウラシルマスタードなどの窒素マスタード；カルムスチン、クロロゾトシン、ホテムスチン、ロムスチン、ニムスチン、及びラニムヌスチン（ｒａｎｉｍｎｕｓｔｉｎｅ）などのニトロソウレア；エンジイン抗生物質（例えば、カリケアマイシン、特に、カリケアマイシンγ１Ｉ及びカリケアマイシンω１Ｉ（ＡｎｇｅｗＣｈｅｍ．Ｉｎｔｌ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ．３３：１８３−１８６，１９９４）；ダイネミシンＡを含むダイネミシン；クロドロネートなどのビスホスホネート；エスペラミシン；ならびにネオカルジノスタチンクロモフォア及び関連色素タンパク質エネジイン抗生物質発色団）などの抗生物質、アクラシノマイシン、アクチノマイシン、オースラマイシン（ａｕｔｈｒａｍｙｃｉｎ）、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カラビシン、カミノマイシン（ｃａｍｉｎｏｍｙｃｉｎ）、カルジノフィリン、クロモマイシニス、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン、６−ジアゾ−５−オキソ−Ｌ−ノルロイシン、ＡＤＲＩＡＭＹＣＩＮ（登録商標）（ドキソルビシン）、モルホリノ−ドキソルビシン、シアノモルホリノ−ドキソルビシン、２−ピロリノ−ドキソルビシン、及びデオキシドキソルビシン）、エピルビシン、エソルビシン、イダルビシン、マルセロマイシン、マイトマイシンＣなどのマイトマイシン、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン、ペプロマイシン、ポトフィロマイシン、ピューロマイシン、ケラマイシン、ロドルビシン、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメックス、ジノスタチン、ゾルビシン、メトトレキサート及び５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）などの抗代謝物；デノプテリン、メトトレキサート、プテロプテリン、トリメトレキサートなどの葉酸類似体；フルダラビン、６−メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニンなどのプリン類似体；アンシタビン、アザシチジン、６−アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロキシウリジンなどのピリミジン類似体；カルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトンなどのアンドロゲン；アミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタンなどの抗副腎剤；フロリン酸などの葉酸補液；アセグラトン；アルドホスファミドグリコシド；アミノレブリン酸；エニルウラシル；アムサクリン；ベストラブシル；ビサントレン；エダトレキサート；デフォファミン（ｄｅｆｏｆａｍｉｎｅ）；デメコルシン；ジアジクオン；エルホミチン（ｅｌｆｏｍｉｔｈｉｎｅ）；酢酸エリプチニウム；エポチロン；エトグルシド；硝酸ガリウム；ヒドロキシウレア；レンチナン；ロニダイニン、マイタンシン及びアンサミトシンなどのマイタンシノイド；ミトグアゾン、ミトキサントロン、モピダンノール（ｍｏｐｉｄａｍｎｏｌ）、ニトラエリン、ペントスタチン；フェナメト；ピラルビシン；ロソキサントロン；ポドフィリン酸；２−エチルヒドラジド；プロカルバジン；ＰＳＫ（登録商標）多糖複合体（ＪＨＳ  Ｎａｔｕｒａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ，Ｅｕｇｅｎｅ，Ｏｒｅｇ．）、ラゾキサン；リゾキシン；シゾフィラン；スピロゲルマニウム；テヌアゾン酸；トリアジコン；２，２’，２’’−トリクロロトリエ���ルアミン；トリコテセン（特にＴ−２毒素、ベラキュリンＡ、ロリジンＡ、及びアングイジン）；ウレタン；ビンデシン；ダカルバジン；マンノムスチン；ミトブロニトール；ミトラクトール；ピポブロマン；ガシトシン（ｇａｃｙｔｏｓｉｎｅ）；アラビノシド（「Ａｒａ−Ｃ」）；シクロホスファミド；チオテパ；タキソイド、例えば、ＴＡＸＯＬ（パクリタキセル；Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ，Ｎ．Ｊ．）、ＡＢＲＡＸＡＮＥ（登録商標）（発色団不含）、パクリタキセルのアルブミン操作ナノ粒子製剤（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐａｒｔｎｅｒｓ，Ｓｃｈａｕｍｂｅｒｇ，Ｉｌｌ．）、及びＴＡＸＯＴＥＲＥ（登録商標）（ドセタキセル、ドキセタキセル（ｄｏｘｅｔａｘｅｌ）；Ｓａｎｏｆｉ−Ａｖｅｎｔｉｓ）；クロランブシル（ｃｈｌｏｒａｎｍｂｕｃｉｌ）；ＧＥＭＺＡＲ（登録商標）（ゲムシタビン）；６−チオグアニン；メルカプトプリン；メトトレキサート；シスプラチン及びカルボプラチンなどの白金類似体；ビンブラスチン；エトポシド（ＶＰ−１６）；イホスファミド；ミトキサントロン；ビンクリスチン；ＮＡＶＥＬＢＩＮＥ（登録商標）（ビノレルビン）；ノバントロン；テニポシド；エダトレキサート；ダウノマイシン；アミノプテリン；カペシタビン（ＸＥＬＯＤＡ（登録商標））；イバンドロネート；ＣＰＴ−１１；トポイソメラーゼ阻害剤ＲＦＳ２０００；ジフルオロメチルオルニチン（ＤＭＦＯ）；レチノイン酸などのレチノイド；ならびに上記のうちのいずれかの薬学的に許容される塩、酸、及び誘導体が挙げられる。
【０１２０】
化学療法剤には、例えば、タモキシフェン（ＮＯＬＶＡＤＥＸ（登録商標）；タモキシフェンクエン酸塩を含む）、ラロキシフェン、ドロロキシフェン（ｄｒｏｌｏｘｉｆｅｎｅ）、ヨードキシフェン（ｉｏｄｏｘｙｆｅｎｅ）、４−ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン（ｔｒｉｏｘｉｆｅｎｅ）、ケオキシフェン（ｋｅｏｘｉｆｅｎｅ）、ＬＹ１１７０１８、オナプリストン（ｏｎａｐｒｉｓｔｏｎｅ）、及びＦＡＲＥＳＴＯＮ（登録商標）（トレミフェンクエン酸塩）を含む、抗エストロゲン及び選択的エストロゲン受容体調節因子（ＳＥＲＭ）などの腫瘍へのホルモン作用を調節または阻害するように作用する抗ホルモン剤；副腎におけるエストロゲン産生を調節する酵素アロマターゼを阻害するアロマターゼ阻害剤、例えば、４（５）−イミダゾール、アミノグルテチミド、ＭＥＧＡＳＥ（登録商標）（酢酸メゲストロール）、ＡＲＯＭＡＳＩＮ（登録商標）（エキセメスタン；Ｐｆｉｚｅｒ）、ホルメスタニ（ｆｏｒｍｅｓｔａｎｉｅ）、ファドロゾール、ＲＩＶＩＳＯＲ（登録商標）（ボロゾール）、ＦＥＭＡＲＡ（登録商標）（レトロゾール；Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、及びＡＲＩＭＩＤＥＸ（登録商標）（アナストロゾール；ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）；抗アンドロゲン薬、例えば、フルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、ロイプロリド、及びゴセレリン；ブセレリン、トリプテレリン（ｔｒｉｐｔｅｒｅｌｉｎ）、酢酸メドロキシプロゲステロン、ジエチルスチルベストロール、プレマリン、フルオキシメステロン、ａｌｌ−ｔｒａｎｓレチノイン酸、フェンレチニド、及びトロキサシタビン（１，３−ジオキソランヌクレオシドシトシン類似体）；タンパク質キナーゼ阻害剤；脂質キナーゼ阻害剤；アンチセンスオリゴヌクレオチド、特に、例えば、ＰＫＣ−アルファ、Ｒａｌｆ、及びＨ−Ｒａｓなどの、異常な細胞増殖に関与するシグナル伝達経路における遺伝子の発現を阻害するもの；ＶＥＧＦ発現阻害剤（例えば、ＡＮＧＩＯＺＹＭＥ（登録商標））及びＨＥＲ２発現阻害剤などのリボザイム；遺伝子療法ワクチン、例えば、ＡＬＬＯＶＥＣＴＩＮ（登録商標）、ＬＥＵＶＥＣＴＩＮ（登録商標）、及びＶＡＸＩＤ（登録商標）などのワクチン；ＰＲＯＬＥＵＫＩＮ（登録商標）、ｒＩＬ−２；ＬＵＲＴＯＴＥＣＡＮ（登録商標）などのトポイソメラーゼ１阻害剤；ＡＢＡＲＥＬＩＸ（登録商標）ｒｍＲＨ；ならびに上記のうちのいずれかの薬学的に許容される塩、酸、及び誘導体も含まれる。
【０１２１】
化学療法剤には、抗体、例えば、アレムツズマブ（Ｃａｍｐａｔｈ）、ベバシズマブ（ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）、セツキシマブ（ＥＲＢＩＴＵＸ（登録商標）、Ｉｍｃｌｏｎｅ）、パニツムマブ（ＶＥＣＴＩＢＩＸ（登録商標）、Ａｍｇｅｎ）、リツキシマブ（ＲＩＴＵＸＡＮ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／Ｂｉｏｇｅｎ  Ｉｄｅｃ）、ペルツズマブ（ＯＭＮＩＴＡＲＧ（登録商標）、２Ｃ４、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）、トラスツズマブ（ＨＥＲＣＥＰＴＩＮ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）、トシツモマブ（Ｂｅｘｘａｒ、Ｃｏｒｉｘｉａ）、及び抗体−薬物コンジュゲート、ゲムツズマブオゾガマイシン（ＭＹＬＯＴＡＲＧ（登録商標）、Ｗｙｅｔｈ）も含まれる。本発明の化合物と組み合わせて薬剤としての治療可能性を有する追加のヒト化モノクローナル抗体には、アポリズマブ、アセリズマブ（ａｓｅｌｉｚｕｍａｂ）、アトリズマブ、バピネオズマブ、ビバツズマブメルタンシン（ｂｉｖａｔｕｚｕｍａｂ  ｍｅｒｔａｎｓｉｎｅ）、カンツズマブメルタンシン、セデリズマブ（ｃｅｄｅｌｉｚｕｍａｂ）、セルトリズマブペゴール、シドフシツズマブ（ｃｉｄｆｕｓｉｔｕｚｕｍａｂ）、シドツズマブ（ｃｉｄｔｕｚｕｍａｂ）、ダクリズマブ、エクリズマブ、エファリズマブ、エプラツズマブ、エルリズマブ（ｅｒｌｉｚｕｍａｂ）、フェルビズマブ（ｆｅｌｖｉｚｕｍａｂ）、フォントリズマブ、ゲムツズマブオゾガマイシン、イノツズマブオゾガマイシン、イピリムマブ、ラベツズマブ、リンツズマブ、マツズマブ、メポリズマブ、モタビズマブ、モトビズマブ（ｍｏｔｏｖｉｚｕｍａｂ）、ナタリズマブ、ニモツズマブ（ｎｉｍｏｔｕｚｕｍａｂ）、ノロビズマブ（ｎｏｌｏｖｉｚｕｍａｂ）、ヌマビズマブ（ｎｕｍａｖｉｚｕｍａｂ）、オクレリズマブ、オマリズマブ、パリビズマブ、パスコリズマブ（ｐａｓｃｏｌｉｚｕｍａｂ）、ペクフシツズマブ（ｐｅｃｆｕｓｉｔｕｚｕｍａｂ）、ペクツズマブ（ｐｅｃｔｕｚｕｍａｂ）、パキセリズマブ、ラリビズマブ（ｒａｌｉｖｉｚｕｍａｂ）、ラニビズマブ、レスリビズマブ（ｒｅｓｌｉｖｉｚｕｍａｂ）、レスリズマブ、レシビズマブ（ｒｅｓｙｖｉｚｕｍａｂ）、ロベリズマブ（ｒｏｖｅｌｉｚｕｍａｂ）、ルプリズマブ（ｒｕｐｌｉｚｕｍａｂ）、シブロツズマブ（ｓｉｂｒｏｔｕｚｕｍａｂ）、シプリズマブ、ソンツズマブ（ｓｏｎｔｕｚｕｍａｂ）、タカツズマブテトラキセタン（ｔａｃａｔｕｚｕｍａｂ  ｔｅｔｒａｘｅｔａｎ）、タドシズマブ（ｔａｄｏｃｉｚｕｍａｂ）、タリズマブ、テフィバズマブ（ｔｅｆｉｂａｚｕｍａｂ）、トシリズマブ、トラリズマブ（ｔｏｒａｌｉｚｕｍａｂ）、ツコツズマブセルモロイキン（ｔｕｃｏｔｕｚｕｍａｂ  ｃｅｌｍｏｌｅｕｋｉｎ）、ツクシツズマブ（ｔｕｃｕｓｉｔｕｚｕｍａｂ）、ウマビズマブ（ｕｍａｖｉｚｕｍａｂ）、ウルトキサズマブ、ウステキヌマブ、ビジリズマブ、及びインターロイキン−１２ｐ４０タンパク質を認識するように遺伝子修飾された排他的にヒト配列の組換え完全長ＩｇＧ１λ抗体である、抗インターロイキン−１２（ＡＢＴ−８７４／Ｊ６９５、Ｗｙｅｔｈ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ａｎｄ  Ａｂｂｏｔｔ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）が含まれる。
【０１２２】
化学療法剤には、ＥＧＦＲに結合するか、または他の様式でそれと直接相互作用し、そのシグナル伝達活性を阻止または低減する化合物を指す「ＥＧＦＲ阻害剤」も含まれ、これは代替的に「ＥＧＦＲアンタゴニスト」とも称される。かかる薬剤の例には、ＥＧＦＲに結合する抗体及び小分子が挙げられる。ＥＧＦＲに結合する抗体の例には、ＭＡｂ５７９（ＡＴＣＣ  ＣＲＬ  ＨＢ８５０６）、ＭＡｂ４５５（ＡＴＣＣ  ＣＲＬ  ＨＢ８５０７）、ＭＡｂ２２５（ＡＴＣＣ  ＣＲＬ８５０８）、ＭＡｂ５２８（ＡＴＣＣ  ＣＲＬ８５０９）（米国特許第４，９４３，５３３号（Ｍｅｎｄｅｌｓｏｈｎ  ｅｔ  ａｌ．）を参照されたい）、ならびにそれらの変異型、例えば、キメラ化２２５（Ｃ２２５またはセツキシマブ、ＥＲＢＵＴＩＸ（登録商標））及び再成形ヒト２２５（Ｈ２２５）（ＷＯ９６／４０２１０（Ｉｍｃｌｏｎｅ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  Ｉｎｃ．）を参照されたい）；ＩＭＣ−１１Ｆ８、完全ヒトＥＧＦＲ標的抗体（Ｉｍｃｌｏｎｅ）；ＩＩ型変異体ＥＧＦＲに結合する抗体（米国特許第５，２１２，２９０号）；米国特許第５，８９１，９９６号に記載されるＥＧＦＲに結合するヒト化抗体及びキメラ抗体；ならびにＥＧＦＲに結合するヒト抗体、例えば、ＡＢＸ−ＥＧＦまたはパニツムマブ（ＷＯ９８／５０４３３（Ａｂｇｅｎｉｘ／Ａｍｇｅｎ）を参照されたい）；ＥＭＤ５５９００（Ｓｔｒａｇｌｉｏｔｔｏ  ｅｔ  ａｌ．Ｅｕｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ  ３２Ａ：６３６−６４０（１９９６））；ＥＧＦＲ結合についてＥＧＦ及びＴＧＦ−アルファの両方と競合するＥＧＦＲに向けられたヒト化ＥＧＦＲ抗体ＥＭＤ７２００（マツズマブ）（ＥＭＤ／Ｍｅｒｃｋ）；ヒトＥＧＦＲ抗体ＨｕＭａｘ−ＥＧＦＲ（ＧｅｎＭａｂ）；Ｅ１．１、Ｅ２．４、Ｅ２．５、Ｅ６．２、Ｅ６．４、Ｅ２．１１、Ｅ６．３、及びＥ７．６．３として知られ、ＵＳ６，２３５，８８３に記載される完全ヒト抗体；ＭＤＸ−４４７（Ｍｅｄａｒｅｘ  Ｉｎｃ）；ならびにｍＡｂ８０６またはヒト化ｍＡｂ８０６（Ｊｏｈｎｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７９（２９）：３０３７５−３０３８４（２００４））が挙げられる。抗ＥＧＦＲ抗体は、細胞毒性剤に抱合され、それにより免疫抱合体を生成し得る（例えば、ＥＰ６５９，４３９Ａ２，Ｍｅｒｃｋ  Ｐａｔｅｎｔ  ＧｍｂＨを参照されたい）。ＥＧＦＲアンタゴニストには、米国特許第５，６１６，５８２号、同第５，４５７，１０５号、同第５，４７５，００１号、同第５，６５４，３０７号、同第５，６７９，６８３号、同第６，０８４，０９５号、同第６，２６５，４１０号、同第６，４５５，５３４号、同第６，５２１，６２０号、同第６，５９６，７２６号、同第６，７１３，４８４号、同第５，７７０，５９９号、同第６，１４０，３３２号、同第５，８６６，５７２号、同第６，３９９，６０２号、同第６，３４４，４５９号、同第６，６０２，８６３号、同第６，３９１，８７４号、同第６，３４４，４５５号、同第５，７６０，０４１号、同第６，００２，００８号、及び同第５，７４７，４９８号、ならびに以下のＰＣＴ公開第ＷＯ９８／１４４５１号、ＷＯ９８／５００３８、ＷＯ９９／０９０１６、及びＷＯ９９／２４０３７に記載されている化合物などの小分子が挙げられる。特定の小分子ＥＧＦＲアンタゴニストには、ＯＳＩ−７７４（ＣＰ−３５８７７４、エルロチニブ、ＴＡＲＣＥＶＡ（登録商標）Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／ＯＳＩ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）；ＰＤ１８３８０５（ＣＩ１０３３、２−プロペンアミド、Ｎ−［４−［（３−クロロ−４−フルオロフェニル）アミノ］−７−［３−（４−モルホリニル）プロポキシ］−６−キナゾリニル］−、ジヒドロクロリド、Ｐｆｉｚｅｒ  Ｉｎｃ．）；ＺＤ１８３９、ゲフィチニブ（ＩＲＥＳＳＡ（登録商標））４−（３’−クロロ−４’−フルオロアニリノ）−７−メトキシ−６−（３−モルホリノプロポキシ）キナゾリン、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）；ＺＭ１０５１８０（（６−アミノ−４−（３−メチルフェニル−アミノ）−キナゾリン、Ｚｅｎｅｃａ）；ＢＩＢＸ−１３８２（Ｎ８−（３−クロロ−４−フルオロ−フェニル）−Ｎ２−（１−メチル−ピペリジン−４−イル）−ピリミド［５，４−ｄ］ピリミジン−２，８−ジアミン、Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ）；ＰＫＩ−１６６（（Ｒ）−４−［４−［（１−フェニルエチル）アミノ］−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−６−イル］−フェノール）；（Ｒ）−６−（４−ヒドロキシフェニル）−４−［（１−フェニルエチル）アミノ］−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン）；ＣＬ−３８７７８５（Ｎ−［４−［（３−ブロモフェニル）アミノ］−６−キナゾリニル］−２−ブチンアミド）；ＥＫＢ−５６９（Ｎ−［４−［（３−クロロ−４−フルオロフェニル）アミノ］−３−シアノ−７−エトキシ−６−キナゾリニル］−４−（ジメチルアミノ）−２−ブチンアミド）（Ｗｙｅｔｈ）；ＡＧ１４７８（Ｐｆｉｚｅｒ）；ＡＧ１５７１（ＳＵ５２７１、Ｐｆｉｚｅｒ）；二重ＥＧＦＲ／ＨＥＲ２チロシンキナーゼ阻害剤、例えば、ラパチニブ（ＴＹＫＥＲＢ（登録商標）、ＧＳＫ５７２０１６またはＮ−［３−クロロ−４−［（３−フルオロフェニル）メトキシ］フェニル］−６［５［［［２メチルスルホニル）エチル］アミノ］メチル］−２−フラニル］−４−キナゾリンアミン）が挙げられる。
【０１２３】
化学療法剤には、「チロシンキナーゼ阻害剤」、例えば、前段落に記載のＥＧＦＲ標的薬物；小分子ＨＥＲ２チロシンキナーゼ阻害剤、例えば、Ｔａｋｅｄａから入手可能なＴＡＫ１６５；ＥｒｂＢ２受容体チロシンキナーゼの経口選択的阻害剤であるＣＰ−７２４，７１４（Ｐｆｉｚｅｒ及びＯＳＩ）；二重ＨＥＲ阻害剤、例えば、ＥＧＦＲに優先的に結合するが、ＨＥＲ２及びＥＧＦＲ過剰発現細胞の両方を阻害するＥＫＢ−５６９（Ｗｙｅｔｈから入手可能）；ラパチニブ（ＧＳＫ５７２０１６、Ｇｌａｘｏ−ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅから入手可能）；経口ＨＥＲ２及びＥＧＦＲチロシンキナーゼ阻害剤；ＰＫＩ−１６６（Ｎｏｖａｒｔｉｓから入手可能）；ｐａｎ−ＨＥＲ阻害剤、例えば、カネルチニブ（ＣＩ−１０３３、Ｐｈａｒｍａｃｉａ）；Ｒａｆ−１阻害剤、例えば、Ｒａｆ−１シグナル伝達を阻害するＩＳＩＳ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓから入手可能なアンチセンス薬剤ＩＳＩＳ−５１３２；非ＨＥＲ標的ＴＫ阻害剤、例えば、メシル酸イマチニブ（ＧＬＥＥＶＥＣ（登録商標）、Ｇｌａｘｏ  ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅから入手可能）；多標的チロシンキナーゼ阻害剤、例えば、スニチニブ（ＳＵＴＥＮＴ（登録商標）、Ｐｆｉｚｅｒから入手可能）；ＶＥＧＦ受容体チロシンキナーゼ阻害剤、例えば、バタラニブ（ＰＴＫ７８７／ＺＫ２２２５８４、Ｎｏｖａｒｔｉｓ／Ｓｃｈｅｒｉｎｇ  ＡＧから入手可能）；ＭＡＰＫ細胞外制御キナーゼＩ阻害剤ＣＩ−１０４０（Ｐｈａｒｍａｃｉａから入手可能）；キナゾリン、例えば、ＰＤ１５３０３５，４−（３−クロロアニリノ）キナゾリン；ピリドピリミジン；ピリミドピリミジン；ピロロピリミジン、例えば、ＣＧＰ５９３２６、ＣＧＰ６０２６１、及びＣＧＰ６２７０６；ピラゾロピリミジン、４−（フェニルアミノ）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン；クルクミン（ジフェルロイルメタン、４，５−ビス（４−フルオロアニリノ）フタルイミド）；ニトロチオフェン部分を含有するチルホスチン；ＰＤ−０１８３８０５（Ｗａｒｎｅｒ−Ｌａｍｂｅｒ）；アンチセンス分子（例えば、ＨＥＲコード核酸に結合するもの）、キノキサリン（米国特許第５，８０４，３９６号）；トリホスチン（ｔｒｙｐｈｏｓｔｉｎ）（米国特許第５，８０４，３９６号）；ＺＤ６４７４（Ａｓｔｒａ  Ｚｅｎｅｃａ）；ＰＴＫ−７８７（Ｎｏｖａｒｔｉｓ／Ｓｃｈｅｒｉｎｇ  ＡＧ）；ｐａｎ−ＨＥＲ阻害剤、例えば、ＣＩ−１０３３（Ｐｆｉｚｅｒ）；Ａｆｆｉｎｉｔａｃ（ＩＳＩＳ３５２１、Ｉｓｉｓ／Ｌｉｌｌｙ）；メシル酸イマチニブ（ＧＬＥＥＶＥＣ（登録商標））；ＰＫＩ１６６（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）；ＧＷ２０１６（Ｇｌａｘｏ  ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）；ＣＩ−１０３３（Ｐｆｉｚｅｒ）；ＥＫＢ−５６９（Ｗｙｅｔｈ）；セマキシニブ（Ｐｆｉｚｅｒ）；ＺＤ６４７４（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）；ＰＴＫ−７８７（Ｎｏｖａｒｔｉｓ／Ｓｃｈｅｒｉｎｇ  ＡＧ）；ＩＮＣ−１Ｃ１１（Ｉｍｃｌｏｎｅ）、ラパマイシン（シロリムス、ＲＡＰＡＭＵＮＥ（登録商標）；または以下の特許公開：米国特許第５，８０４，３９６号；ＷＯ１９９９／０９０１６；ＷＯ１９９８／４３９６０；ＷＯ１９９７／３８９８３；ＷＯ１９９９／０６３７８；Ｗ���１９９９／０６３９６；ＷＯ１９９６／３０３４７；ＷＯ１９９６／３３９７８；ＷＯ１９９６／３３９７、及びＷＯ１９９６／３３９８０のいずれかに記載されているものが挙げられる。
【０１２４】
化学療法剤には、デキサメタゾン、インターフェロン、コルヒチン、メトプリン、シクロスポリン、アンホテリシン、メトロニダゾール、アレムツズマブ、アリトレチノイン、アロプリノール、アミホスチン、三酸化ヒ素、アスパラギナーゼ、ＢＣＧ生、ベバクジマブ（ｂｅｖａｃｕｚｉｍａｂ）、ベキサロテン、クラドリビン、クロファラビン、ダルベポエチンアルファ、デニロイキン、デクスラゾキサン、エポエチンアルファ、エロチニブ（ｅｌｏｔｉｎｉｂ）、フィルグラスチム、酢酸ヒストレリン、イブリツモマブ、インターフェロンアルファ−２ａ、インターフェロンアルファ−２ｂ、レナリドミド、レバミゾール、メスナ、メトキサレン、ナンドロロン、ネララビン、ノフェツモマブ、オプレルベキン、パリフェルミン、パミドロネート、ペガデマーゼ、ペグアスパラガーゼ、ペグフィルグラスチム、ペメトレキセド二ナトリウム、プリカマイシン、ポルフィマーナトリウム、キナクリン、ラスブリカーゼ、サルグラモスチム、テモゾロミド、ＶＭ−２６、６−ＴＧ、トレミフェン、トレチノイン、全トランス型レチノイン酸（ＡＴＲＡ）、バルルビシン、ゾレドロネート、及びゾレドロン酸、ならびにこれらの薬学的に許容される塩も挙げられる。
【０１２５】
本明細書で使用される「プロドラッグ」という用語は、親薬物と比較して腫瘍細胞に対する細胞毒性が低く、酵素によってより活性な親形態へと活性化または変換され得る、薬学的に活性な物質の前駆体または誘導体形態を指す。例えば、Ｗｉｌｍａｎ，“Ｐｒｏｄｒｕｇｓ  ｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ”Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  Ｔｒａｎｓａｃｔｉｏｎｓ，１４，ｐｐ．３７５−３８２，６１５ｔｈ  Ｍｅｅｔｉｎｇ  Ｂｅｌｆａｓｔ（１９８６）ａｎｄ  Ｓｔｅｌｌａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｐｒｏｄｒｕｇｓ：Ａ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈ  ｔｏ  Ｔａｒｇｅｔｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ，”Ｄｉｒｅｃｔｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ，Ｂｏｒｃｈａｒｄｔ  ｅｔ  ａｌ．，（ｅｄ．），ｐｐ．２４７−２６７，Ｈｕｍａｎａ  Ｐｒｅｓｓ（１９８５）を参照されたい。本発明のプロドラッグには、ホスフェート含有プロドラッグ、チオホスフェート含有プロドラッグ、スルフェート含有プロドラッグ、ペプチド含有プロドラッグ、Ｄアミノ酸修飾プロドラッグ、グリコシル化プロドラッグ、β−ラクタム含有プロドラッグ、任意選択で置換されたフェノキシアセトアミド含有プロドラッグまたは任意選択で置換されたフェニルアセトアミド含有プロドラッグ、５−フルオロシトシン及び他の５−フルオロウリジンプロドラッグが挙げられるがこれらに限定されず、これらは、より活性な細胞毒性遊離薬物へと変換され得る。本発明に使用するためのプロドラッグ形態に誘導体化することができる細胞毒性薬の例としては、上記の化学療法剤が挙げられるがこれらに限定されない。
【０１２６】
「成長阻害剤」は、本明細書で使用されるとき、インビトロまたはインビボのいずれかで細胞の成長及び／または増殖を阻害する化合物または組成物を指す。したがって、成長阻害剤は、Ｓ相における細胞の割合を著しく低減するものであってよい。成長阻害剤の例には、細胞周期進行（Ｓ期以外の場所で）を遮断する薬剤、例えば、Ｇ１停止及びＭ期停止を誘導する薬剤が挙げられる。従来のＭ相遮断剤には、ビンカ（ビンクリスチン及びビンブラスチン）、タキサン、及びトポイソメラーゼＩＩ阻害剤、例えばアントラサイクリン抗生物質ドキソルビシン（（８Ｓ−シス）−１０−［（３−アミノ−２，３，６−トリデオキシ−α−Ｌ−リキソ−ヘキサピラノシル）オキシ］−７，８，９，１０−テトラヒドロ−６，８，１１−トリヒドロキシ−８−（ヒドロキシアセチル）−１−メトキシ−５，１２−ナフタセンジオン）、エピルビシン、ダウノルビシン、エトポシド、及びブレオマイシンが含まれる。Ｇ１で停止させるこれらの薬剤はまた、Ｓ期での停止、例えば、タモキシフェン、プレドニゾン、ダカルバジン、メクロレタミン、シスプラチン、メトトレキサート、５−フルオロウラシル、及びａｒａ−ＣなどのＤＮＡアルキル化剤にも及ぶ。さらなる情報は、Ｍｕｒａｋａｍｉ  ｅｔ  ａｌ．による“Ｃｅｌｌ  ｃｙｃｌｅ  ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ，ｏｎｃｏｇｅｎｅｓ，ａｎｄ  ａｎｔｉｎｅｏｐｌａｓｔｉｃ  ｄｒｕｇｓ”と題される“Ｔｈｅ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｃａｎｃｅｒ，”Ｍｅｎｄｅｌｓｏｈｎ  ａｎｄ  Ｉｓｒａｅｌ，ｅｄｓ．，Ｃｈａｐｔｅｒ１（ＷＢ  Ｓａｕｎｄｅｒｓ：Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，１９９５）、特に、１３ページで見い出すことができる。タキサン（パクリタキセル及びドセタキセル）は、いずれもイチイ由来の抗がん薬である。ヨーロッパイチイ由来のドセタキセル（ＴＡＸＯＴＥＲＥ（登録商標）、Ｒｈｏｎｅ−Ｐｏｕｌｅｎｃ  Ｒｏｒｅｒ）は、パクリタキセル（ＴＡＸＯＬ（登録商標）、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）の半合成類似体である。パクリタキセル及びドセタキセルは、チューブリン二量体由来の微小管の構築を促進し、脱重合を阻止することによって微小管を安定させ、細胞内の有糸分裂の阻害をもたらす。
【０１２７】
「放射線療法」は、正常に機能するか、または細胞を完全に破壊するその能力を制限するように細胞に十分な損傷を誘導するための指向性ガンマ線またはベータ線の使用を意味する。線量及び治療期間を決定するための当該技術分野で既知の方法が多く存在することが理解される。典型的な治療は、１回投与として与えられ、典型的な線量は、１日当たり１０〜２００単位（グレイ）の範囲である。
【０１２８】
「薬学的製剤」という用語は、調製物の中に含有される活性成分の生物活性が有効になるような形態であり、かつ製剤が投与される患者にとって許容できないほど有毒である追加の構成成分を何ら含有しない調製物を指す。
【０１２９】
「薬学的に許容される担体」は、患者にとって無毒である、活性成分以外の薬学的製剤中の成分を指す。薬学的に許容される担体には、緩衝液、賦形剤、安定剤、または保存剤が含まれるが、これらに限定されない。
【０１３０】
「添付文書」という用語は、かかる治療薬の適応症、使用法、投薬量、投与、併用療法、禁忌症、及び／またはその使用に関する警告についての情報を含有する、治療剤製品のパッケージに通例含まれる指示書を指すように使用される。
【０１３１】
「滅菌」製剤は、無菌であるか、または全ての生存微生物及びそれらの胞子を含まない。
【０１３２】
「製品」は、少なくとも１つの試薬、例えば、疾患もしくは障害（例えば、がん）の治療のための医薬品、または本明細書に記載のバイオマーカーを特異的に検出するためのプローブを含む、任意の製造物（例えば、パッケージもしくは容器）またはキットである。ある特定の実施形態では、製造物またはキットは、本明細書に記載の方法を実行するためのユニットとして、推奨、流通、または販売される。
【０１３３】
「小分子」という用語は、約２０００ダルトン以下、好ましくは約５００ダルトン以下の分子量を有する任意の分子を指す。
【０１３４】
「標識」という単語は、本明細書で使用される場合、ポリヌクレオチドプローブなどの試薬または抗体に直接的または間接的に抱合または融合され、それが抱合または融合される試薬の検出を容易にする化合物または組成物を指す。標識は、それ自体が検出可能（例えば、放射性同位標識または蛍光標識）であり得るか、または酵素標識の場合、検出可能である基質化合物もしくは組成物の化学改変を触媒し得る。この用語は、検出可能な物質をプローブまたは抗体に結合すること（即ち、物理的に連結すること）によるプローブまたは抗体の直接的標識化、ならびに直接的に標識化される別の試薬との反応性によるプローブまたは抗体の間接的標識化を包含することを意図する。間接的標識化の例には、蛍光標識化された二次抗体を使用した一次抗体の検出、及び蛍光標識化されたストレプトアビジンを用いて検出され得るようなビオチンを有するＤＮＡプローブの末端標識化が含まれる。
【０１３５】
「抗体」という用語は、本明細書で最も広義に使用され、それらが所望の生物活性を呈する限り、モノクローナル抗体（全長モノクローナル抗体を含む）、ポリクローナル抗体、多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）、及び抗体断片を具体的に網羅する。
【０１３６】
「天然抗体」は、通常、２つの同一の軽（Ｌ）鎖及び２つの同一の重（Ｈ）鎖からなる約１５０，０００ダルトンのヘテロ四量体糖タンパク質である。各軽鎖は、１つの共有ジスルフィド結合により重鎖に結合しているが、ジスルフィド結合の数は、異なる免疫グロブリンアイソタイプの重鎖間で異なる。各重鎖及び軽鎖はまた、規則的に離間した鎖内ジスルフィド架橋も有する。各重鎖は、一方の端に可変ドメイン（ＶＨ）を有し、いくつかの定常ドメインが続く。各軽鎖は、一方の端に可変ドメイン（ＶＬ）を有し、その他方の端に定常ドメインを有し、軽鎖の定常ドメインは、重鎖の第１の定常ドメインと整列し、軽鎖の可変ドメインは、重鎖の可変ドメインと整列する。特定のアミノ酸残基が軽鎖可変ドメインと重鎖可変ドメインとの間に界面を形成すると考えられている。
【０１３７】
「単離された」抗体とは、その自然環境の成分から特定及び分離され、かつ／または回収された抗体である。その自然環境の汚染成分は、抗体の研究的、診断的、及び／または治療的使用を妨害するであろう物質であり、それらには、酵素、ホルモン、及び他のタンパク質性または非タンパク質性溶質が挙げられる。いくつかの実施形態では、抗体は、（１）例えば、ローリー法によって決定される、抗体の９５重量％超、及びいくつかの実施形態では、９９重量％超になるまで、（２）例えば、スピニングカップシークエネーターを使用して、Ｎ末端または内部アミノ酸配列の少なくとも１５個の残基を得るのに十分な程度まで、または（３）例えば、クマシーブルーまたはシルバー染色を使用して、還元または非還元条件下でＳＤＳ−ＰＡＧＥによって均質性が得られるまで、精製される。単離抗体には、組換え細胞内でインサイツの抗体が含まれるが、これは、抗体の天然環境の少なくとも１つの構成要素が存在していないためである。しかしながら、通常、単離された抗体は、少なくとも１つの精製ステップによって調製される。
【０１３８】
「遮断」抗体または抗体「アンタゴニスト」は、それが結合する抗原の生物活性を阻害または低減する抗体である。例えば、ＶＥＧＦ特異的アンタゴニスト抗体は、ＶＥＧＦに結合し、ＶＥＧＦが血管内皮細胞増殖を誘発する能力を阻害する。好ましい遮断抗体またはアンタゴニスト抗体は、抗原の生物活性を完全に阻害する。
【０１３９】
別途指示されない限り、「多価抗体」という表現は、３つ以上の抗原結合部位を含む抗体を表すために本明細書全体で使用される。多価抗体は、好ましくは、３つ以上の抗原結合部位を有するように操作され、一般には天然配列のＩｇＭまたはＩｇＡ抗体ではない。
【０１４０】
任意の哺乳動物種由来の抗体（免疫グロブリン）の「軽鎖」は、それらの定常ドメインのアミノ酸配列に基づいてカッパ（「κ」）及びラムダ（「λ」）と呼ばれる２つの明らかに異なるタイプのうちの１つに割り当てられ得る。
【０１４１】
「定常ドメイン」という用語は、抗原結合部位を含む可変ドメインである免疫グロブリンの他方の部分と比較してより保存されたアミノ酸配列を有する免疫グロブリン分子の部分を指す。定常ドメインは、重鎖のＣＨ１、ＣＨ２、及びＣＨ３ドメイン（集合的に、ＣＨ）、ならびに軽鎖のＣＨＬ（またはＣＬ）ドメインを含有する。
【０１４２】
抗体の「可変領域」または「可変ドメイン」は、抗体の重鎖または軽鎖のアミノ末端ドメインを指す。重鎖可変ドメインは「ＶＨ」と称され得る。軽鎖可変ドメインは「ＶＬ」と称され得る。これらのドメインは、一般に、抗体の最も可変の部分であり、抗原結合部位を含む。
【０１４３】
「可変」という用語は、可変ドメインのある特定のセグメントが抗体の間で配列において大きく異なることを指す。可変または「Ｖ」ドメインは、抗原結合を媒介し、特定の抗体のその特定の抗原に対する特異性を定義する。しかしながら、可変性は、可変ドメインの広がりにわたって均等には分布していない。代わりに、Ｖ領域は、各々９〜１２アミノ酸長である「超可変領域」と呼ばれる極度の可変性のより短い領域によって分離される１５〜３０アミノ酸のフレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれる比較的不変である範囲からなる。「超可変領域」または「ＨＶＲ」という用語は、本明細書で使用されるとき、抗原結合に関与する抗体のアミノ酸残基を指す。超可変領域は、一般に、例えば、概ねＶＬにおける残基２４〜３４（Ｌ１）、５０〜５６（Ｌ２）、及び８９〜９７（Ｌ３）あたり、ならびに概ねＶＨにおける残基２６〜３５（Ｈ１）、４９〜６５（Ｈ２）、及び９５〜１０２（Ｈ３）あたり（一実施形態では、Ｈ１は概ね残基３１〜３５あたり）からのアミノ酸残基（Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ  Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ．（１９９１））、ならびに／または「超可変ループ」からの残基（例えば、ＶＬにおける残基２６〜３２（Ｌ１）、５０〜５２（Ｌ２）、及び９１−９６（Ｌ３）、ならびにＶＨにおいて２６〜３２（Ｈ１）、５３〜５５（Ｈ２）、及び９６〜１０１（Ｈ３）（Ｃｈｏｔｈｉａ  ａｎｄ  Ｌｅｓｋ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１−９１７（１９８７））を含む。天然重鎖及び軽鎖可変ドメインは各々、ベータシート構造を接続し、かつある場合には、その一部を形成するループを形成する、３つの超可変領域によって接続されたベータシート立体配置を主に採用する４つのＦＲを含む。各鎖内の超可変領域は、ＦＲによって近接近し一緒に保持されており、他方の鎖の超可変領域と共に、抗体の抗原結合部位の形成に寄与する（Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ  Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ．（１９９１）を参照されたい）。したがって、ＨＶＲ及びＦＲ配列は、一般に、ＶＨ（またはＶＬ）において次の配列中に出現する：ＦＲ１−Ｈ１（Ｌ１）−ＦＲ２−Ｈ２（Ｌ２）−ＦＲ３−Ｈ３（Ｌ３）−ＦＲ４。定常ドメインは、抗体の抗原への結合に直接関与しないが、抗体の抗体依存性細胞毒性（ＡＤＣＣ）への参加などの様々なエフェクター機能を呈する。
【０１４４】
本明細書の目的での「アクセプターヒトフレームワーク」は、以下に定義されるように、ヒト免疫グロブリンフレームワークまたはヒトコンセンサスフレームワークに由来する、軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）フレームワークまたは重鎖可変ドメイン（ＶＨ）フレームワークのアミノ酸配列を含むフレームワークである。ヒト免疫グロブリンフレームワークまたはヒトコンセンサスフレームワーク「に由来する」アクセプターヒトフレームワークは、その同じアミノ酸配列を含んでもよく、あるいはアミノ酸配列変化を含有してもよい。いくつかの実施形態では、アミノ酸変化の数は、１０以下、９以下、８以下、７以下、６以下、５以下、４以下、３以下、または２以下である。いくつかの実施形態では、ＶＬアクセプターヒトフレームワークは、ＶＬヒト免疫グロブリンフレームワーク配列またはヒトコンセンサスフレームワーク配列と配列において同一である。
【０１４５】
本明細書で使用される場合、「超可変領域」、「ＨＶＲ」、または「ＨＶ」という用語は、配列が超可変性であり、かつ／または構造的に定義されたループを形成する抗体可変ドメインの領域を指す。概して、抗体は、６つのＨＶＲを含み、３つがＶＨにあり（Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３）、３つがＶＬにある（Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３）。天然抗体において、Ｈ３及びＬ３は、これらの６つのＨＶＲのうちで最も高い多様性を呈し、特にＨ３が、抗体に優れた特異性を与える上で特有の役割を果たすと考えられている。例えば、Ｘｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｉｔｙ１３：３７−４５（２０００）；Ｊｏｈｎｓｏｎ  ａｎｄ  Ｗｕ，ｉｎ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ２４８：１−２５（Ｌｏ，ｅｄ．，Ｈｕｍａｎ  Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，Ｎ．Ｊ．，２００３）を参照されたい。実際には、重鎖のみからなる天然に存在するラクダ科抗体は、軽鎖の不在下で機能的であり、安定している。例えば、Ｈａｍｅｒｓ−Ｃａｓｔｅｒｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ３６３：４４６−４４８（１９９３）；Ｓｈｅｒｉｆｆ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．３：７３３−７３６（１９９６）を参照されたい。
【０１４６】
ある数のＨＶＲ描写が本明細書で使用されており、本明細書に包含される。Ｋａｂａｔ相補性決定領域（ＣＤＲ）は、配列可変性に基づくものであり、最も一般的に使用されている（Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ  Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．（１９９１）を参照されたい）。代わりに、Ｃｈｏｔｈｉａは、構造的ループの位置に言及する（Ｃｈｏｔｈｉａ  ａｎｄ  Ｌｅｓｋ  Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１−９１７（１９８７））。ＡｂＭ  ＨＶＲは、Ｋａｂａｔ  ＨＶＲとＣｈｏｔｈｉａ構造的ループとの間の折衷物を表し、Ｏｘｆｏｒｄ  ＭｏｌｅｃｕｌａｒのＡｂＭ抗体モデリングソフトウェアによって使用されている。「接触」ＨＶＲは、利用可能な複合体結晶構造の分析に基づく。これらのＨＶＲのうちの各々に由来する残基が以下に記載される。
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【０１４７】
ＨＶＲは、以下の「伸長ＨＶＲ」を含み得る：ＶＬにおいて、２４−３６または２４−３４（Ｌ１）、４６−５６または５０−５６（Ｌ２）、及び８９−９７または８９−９６（Ｌ３）、ならびにＶＨにおいて、２６−３５（Ｈ１）、５０−６５または４９−６５（Ｈ２）、及び９３−１０２、９４−１０２、または９５−１０２（Ｈ３）。可変ドメイン残基は、これらの定義の各々について、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．（上記参照）に従って番号付けされる。
【０１４８】
「フレームワーク」または「ＦＲ」残基は、本明細書で定義されるＨＶＲ残基以外の可変ドメイン残基である。
【０１４９】
「ヒトコンセンサスフレームワーク」は、ヒト免疫グロブリンＶＬまたはＶＨフレームワーク配列のセレクションにおいて最も一般的に生じるアミノ酸残基を表すフレームワークである。一般に、ヒト免疫グロブリンＶＬまたはＶＨ配列のセレクションは、可変ドメイン配列の下位群に由来する。一般に、この配列の下位群は、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，Ｆｉｆｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，ＮＩＨ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ９１−３２４２，Ｂｅｔｈｅｓｄａ  ＭＤ（１９９１），ｖｏｌｓ．１−３にある下位群である。一実施形態では、ＶＬについては、下位群は、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，（上記参照）における下位群カッパＩである。一実施形態では、ＶＨについては、下位群は、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，（上記参照）における下位群ＩＩＩである。
【０１５０】
「Ｋａｂａｔにあるような可変ドメイン残基番号付け」または「Ｋａｂａｔにあるようなアミノ酸位置番号付け」という用語、及びそれらの変形は、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．（上記参照）における抗体の編集物の重鎖可変ドメインまたは軽鎖可変ドメインに使用される番号付けシステムを指す。この番号付けシステムを使用すると、実際の直鎖状アミノ酸配列は、可変ドメインのＦＲもしくはＨＶＲの短縮、またはそれへの挿入に対応するより少ないアミノ酸または追加のアミノ酸を含み得る。例えば、重鎖可変ドメインは、Ｈ２の残基５２の後に単一のアミノ酸挿入断片（Ｋａｂａｔによる残基５２ａ）、及び重鎖ＦＲ残基８２の後に挿入された残基（例えば、Ｋａｂａｔによる残基８２ａ、８２ｂ、及び８２ｃなど）を含み得る。残基のＫａｂａｔ番号付けは、「標準の」Ｋａｂａｔにより番号付けられた配列との抗体の配列の相同性領域でのアライメントによって所与の抗体について決定され得る。
【０１５１】
Ｋａｂａｔ番号付けシステムは、一般に、可変ドメイン内の残基（およそ軽鎖残基１〜１０７及び重鎖残基１〜１１３）に言及する際に使用される（例えば、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ．５ｔｈ  Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．（１９９１））。「ＥＵ番号付けシステム」または「ＥＵ指標」は、一般に、免疫グロブリン重鎖定常領域内の残基に言及する際に使用される（例えば、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，（上記参照）で報告されているＥＵ指標）。「ＫａｂａｔにあるようなＥＵ指標」とは、ヒトＩｇＧ１  ＥＵ抗体の残基番号付けを指す。本明細書で別途指示されない限り、抗体の可変ドメイン中の残基番号への言及は、Ｋａｂａｔ番号付けシステムによる残基番号付けを意味する。本明細書で別途指示されない限り、抗体の定常ドメイン中の残基番号への言及は、ＥＵ番号付けシステム（例えば、米国仮出願第６０／６４０，３２３号、ＥＵ番号付けに関する図面を参照されたい）による残基番号付けを意味する。
【０１５２】
本明細書で別途示されない限り、可変ドメイン中のＨＶＲ残基及び他の残基（例えば、ＦＲ残基）は、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，（上記参照）に従って癌番号付けされる。
【０１５３】
「全長抗体」、「無傷抗体」、及び「全抗体」という用語は、以下に定義される抗体断片ではなく、その実質的に無傷な形態にある抗体を指すように、本明細書において同義に使用される。これらの用語は、具体的には、Ｆｃ領域を含む重鎖を有する抗体を指す。
【０１５４】
「抗体断片」は、無傷抗体の一部分を含み、好ましくはその抗原結合領域を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される抗体断片は、抗原結合断片である。抗体断片の例としては、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、及びＦｖ断片、ダイアボディ、直鎖状抗体、一本鎖抗体分子、ならびに抗体断片から形成される多重特異性抗体が挙げられる。
【０１５５】
抗体のパパイン消化は、各々、単一の抗原結合部位を持つ、「Ｆａｂ」断片と呼ばれる２つの同一の抗原結合断片、及び容易に結晶化する能力を反映する名称を持つ、残った「Ｆｃ」断片を産生する。ペプシン処理は、Ｆ（ａｂ’）２断片を生成し、これは、２つの抗原結合部位を有し、依然として抗原を架橋することができる。
【０１５６】
本明細書の「Ｆｃ領域」という用語は、定常領域の少なくとも一部を含有する免疫グロブリン重鎖のＣ末端領域を定義するために使用される。本用語は、天然配列Ｆｃ領域及び変異型Ｆｃ領域を含む。一実施形態では、ヒトＩｇＧ重鎖Ｆｃ領域は、Ｃｙｓ２２６から、またはＰｒｏ２３０から、重鎖のカルボキシル末端までに及ぶ。しかしながら、Ｆｃ領域のＣ末端リジン（Ｌｙｓ４４７）は、存在することもあれば、しないこともある。本明細書で別途指定されない限り、Ｆｃ領域または定常領域内のアミノ酸残基の番号付けは、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ  Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ（１９９１）に記載されている、ＥＵインデックスとも呼ばれるＥＵ番号付けシステムに従う。
【０１５７】
「エフェクター機能」は、抗体アイソタイプにより異なる抗体のＦｃ領域に帰せられる生物活性を指す。抗体エフェクター機能の例には、Ｃ１ｑ結合及び補体依存性細胞毒性（ＣＤＣ）；Ｆｃ受容体結合；抗体依存性細胞媒介性細胞毒性（ＡＤＣＣ）；食作用；細胞表面受容体（例えば、Ｂ細胞受容体）の下方調節；ならびにＢ細胞活性化が挙げられる。
【０１５８】
「Ｆｖ」は、完全な抗原結合部位を含む最小抗体断片である。一実施形態では、二本鎖Ｆｖ種は、密接に非共有会合している１つの重鎖可変ドメイン及び１つの軽鎖可変ドメインの二量体からなる。一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）種では、１つの重鎖可変ドメイン及び１つの軽鎖可変ドメインは、軽鎖及び重鎖が二本鎖Ｆｖ種における構造に類似している「二量体」構造で会合し得るように、柔軟性ペプチドリンカーによって共有結合し得る。各可変ドメインの３つのＨＶＲが相互作用してＶＨ−ＶＬ二量体の表面上の抗原結合部位を定義するのは、この立体配置においてである。集合的に、６つのＨＶＲが抗体に抗原結合特異性を与える。しかしながら、全結合部位よりも低い親和性ではあるが、単一の可変ドメイン（または抗原に特異的な３つのＨＶＲのみを含むＦｖの半分）でさえも、抗原を認識してそれに結合する能力を有する。
【０１５９】
Ｆａｂ断片は、重鎖及び軽鎖可変ドメインを含み、軽鎖の定常ドメイン及び重鎖の第１の定常ドメイン（ＣＨ１）も含む。Ｆａｂ’断片は、抗体ヒンジ領域からの１つ以上のシステインを含む重鎖ＣＨ１ドメインのカルボキシ末端への数個の残基の付加によって、Ｆａｂ断片とは異なる。Ｆａｂ’−ＳＨは、定常ドメインのシステイン残基（複数可）が遊離チオール基を持つＦａｂ’の本明細書における表記である。Ｆ（ａｂ’）２抗体断片は、元来、間にヒンジシステインを有するＦａｂ’断片の対として産生されたものであった。抗体断片の他の化学的結合もまた知られている。
【０１６０】
「一本鎖Ｆｖ」または「ｓｃＦｖ」抗体断片は、抗体のＶＨ及びＶＬドメインを含み、これらのドメインは、単一のポリペプチド鎖内に存在する。一般に、ｓｃＦｖポリペプチドは、ＶＨドメインとＶＬドメインとの間にポリペプチドリンカーを更に含み、それにより、ｓｃＦｖが抗原結合に望ましい構造を形成することが可能になる。ｓｃＦｖに関する概説については、例えば、ＰｌｕｃｋｔｈuｎのＴｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ｏｆ  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，ｖｏｌ．１１３，Ｒｏｓｅｎｂｕｒｇ  ａｎｄ  Ｍｏｏｒｅ  ｅｄｓ．，（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９９４），ｐｐ．２６９−３１５を参照されたい。
【０１６１】
「多重特異性抗体」という用語は、最も広義に使用され、ＶＨ−ＶＬユニットがポリエピトープ特異性を有する（即ち、１つの生体分子上で２つの異なるエピトープに、または異なる生体分子上で各エピトープに結合することができる）、重鎖可変ドメイン（ＶＨ）及び軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）を含む抗体を具体的に網羅する。かかる多重特異性抗体には、全長抗体、２つ以上のＶＬ及びＶＨドメインを有する抗体、抗体断片、例えば、Ｆａｂ、Ｆｖ、ｄｓＦｖ、ｓｃＦｖ、ダイアボディ、二重特異性ダイアボディ、及びトリアボディ、共有結合または非共有結合した抗体断片が挙げられるが、これらに限定されない。「ポリエピトープ特異性」は、同じまたは異なる標的（複数可）上の２つ以上の異なるエピトープに特異的に結合することができる能力を指す。「二特異性（ｄｕａｌ  ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ）」または「二重特異性（ｂｉｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ）」は、同じまたは異なる標的（複数可）上の２つの異なるエピトープに特異的に結合することができる能力を指す。しかしながら、二重特異性抗体とは対照的に、二特異性抗体は、アミノ酸配列が同一である２つの抗原結合アームを有し、各Ｆａｂアームにより２つの抗原を認識することができる。二特異性により、抗体は、高い親和性で単一のＦａｂまたはＩｇＧ分子として２つの異なる抗原と相互作用することができるようになる。一実施形態に従うと、ＩｇＧ１中の多重特異性抗体は、５μＭ〜０．００１ｐＭ、３μＭ〜０．００１ｐＭ、１μＭ〜０．００１ｐＭ、０．５μＭ〜０．００１ｐＭ、または０．１μＭ〜０．００１ｐＭの親和性で各エピトープと結合を形成する。「単一特異性」は、１つのエピトープのみに結合することができる能力を指す。
【０１６２】
「ダイアボディ」という用語は、２つの抗原結合部位を有する抗体断片を指し、これらの断片は、同じポリペプチド鎖内の軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）に接続された重鎖可変ドメイン（ＶＨ）（ＶＨ−ＶＬ）を含む。同じ鎖上の２つのドメイン間での対合を可能にするには短すぎるリンカーを使用することによって、ドメインを別の鎖の相補的ドメインと対合させ、２つの抗原結合部位を生成することができる。ダイアボディは、二価または二重特異性であり得る。ダイアボディについては、例えば、ＥＰ４０４，０９７、ＷＯ１９９３／０１１６１、Ｈｕｄｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ．Ｍｅｄ．９：１２９−１３４（２００３）、及びＨｏｌｌｉｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ９０：６４４４−６４４８（１９９３）においてより十分に記載されている。トリアボディ及びテトラボディも、Ｈｕｄｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ．Ｍｅｄ．９：１２９−１３４（２００３）に記載されている。
【０１６３】
抗体の「クラス」は、その重鎖によって保有される定常ドメインまたは定常領域の型を指す。ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、及びＩｇＭという５つの主要な抗体クラスが存在し、これらのうちのいくつかは、「サブクラス」（アイソタイプ）、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１、及びＩｇＡ２に更に分けられ得る。抗体の異なるクラスに対応する重鎖定常ドメインは、それぞれ、α、δ、ε、γ、及びμと呼ばれる。
【０１６４】
本明細書で使用される「モノクローナル抗体」という用語は、実質的に同種の抗体集団から得られた抗体を指し、例えば、その集団を構成する個々の抗体は、少量で存在し得る可能な変異、例えば、自然発生変異を除いて同一である。したがって、「モノクローナル」という修飾語は、別個の抗体の混合物ではないという抗体の特徴を示す。ある特定の実施形態では、かかるモノクローナル抗体は、典型的には、標的に結合するポリペプチド配列を含む抗体を含み、標的結合ポリペプチド配列は、複数のポリペプチド配列から単一の標的結合ポリペプチド配列の選択を含むプロセスによって得られたものである。例えば、選択過程は、ハイブリドーマクローン、ファージクローン、または組換えＤＮＡクローンのプールなどの複数のクローンからの特有のクローンの選択であり得る。選択された標的結合配列が、例えば、標的への親和性を改善し、標的結合配列をヒト化し、細胞培養におけるその産生を改善し、インビボでのその免疫原性を低減し、多重特異性抗体を作製するように更に改変されてもよく、かつ改変された標的結合配列を含む抗体が本発明のモノクローナル抗体でもあることを理解されたい。異なる決定基（エピトープ）に向けた異なる抗体を典型的に含むポリクローナル抗体調製物とは対照的に、モノクローナル抗体調製物の各モノクローナル抗体は、抗原上の単一の決定基に向けられる。それらの特異性に加えて、モノクローナル抗体調製物は、それらには他の免疫グロブリンが典型的に夾雑していないという点で有利である。
【０１６５】
「モノクローナル」という修飾語句は、実質的に同種の抗体集団から得られるという抗体の特徴を示し、任意の特定の方法による抗体の産生を必要とするものと解釈されるべきではない。例えば、本発明に従って使用されるモノクローナル抗体は、例えば、ハイブリドーマ法（例えば、Ｋｏｈｌｅｒ  ａｎｄ  Ｍｉｌｓｔｅｉｎ，Ｎａｔｕｒｅ，２５６：４９５−９７（１９７５）、Ｈｏｎｇｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ，１４（３）：２５３−２６０（１９９５）、Ｈａｒｌｏｗ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，（Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，２ｎｄ  ｅｄ．１９８８）；Ｈａｍｍｅｒｌｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，ｉｎ：Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ａｎｄ  Ｔ  ｃｅｌｌ  Ｈｙｂｒｉｄｏｍａｓ５６３−６８１（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，Ｎ．Ｙ．，１９８１））、組換えＤＮＡ法（例えば、米国特許第４，８１６，５６７号）、ファージディスプレイ技術（例えば、Ｃｌａｃｋｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３５２：６２４−６２８，１９９１；Ｍａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２２：５８１−５９７，１９９２；Ｓｉｄｈｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３３８（２）：２９９−３１０，２００４；Ｌｅｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３４０（５）：１０７３−１０９３，２００４；Ｆｅｌｌｏｕｓｅ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  １０１（３４）：１２４６７−１２４７２，２００４；及びＬｅｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２８４（１−２）：１１９−１３２，２００４を参照されたい）；及びヒト免疫グロブリン配列をコードするヒト免疫グロブリン遺伝子座または遺伝子の一部または全てを有するヒトまたはヒト様抗体を動物で産生するための技術（例えば、ＷＯ１９９８／２４８９３；ＷＯ１９９６／３４０９６；ＷＯ１９９６／３３７３５；ＷＯ１９９１／１０７４１；Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９０：２５５１，１９９３；Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３６２：２５５−２５８，１９９３；Ｂｒｕｇｇｅｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｙｅａｒ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．７：３３，１９９３；米国特許第５，５４５，８０７号；同第５，５４５，８０６号；同第５，５６９，８２５号；同第５，６２５，１２６号；同第５，６３３，４２５号；及び同第５，６６１，０１６号；Ｍａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １０：７７９−７８３（１９９２）；Ｌｏｎｂｅｒｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３６８：８５６−８５９，１９９４；Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，Ｎａｔｕｒｅ  ３６８：８１２−８１３，１９９４；Ｆｉｓｈｗｉｌｄ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１４：８４５−８５１，１９９６；Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒ，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１４：８２６，１９９６；ならびにＬｏｎｂｅｒｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｔｅｒｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３：６５−９３，１９９５）を含む様々な技法によって作製され得る。
【０１６６】
本明細書におけるモノクローナル抗体は、具体的には、所望の生物活性を呈する限り、重鎖及び／または軽鎖の一部分が、特定の種に由来する抗体、または特定の抗体クラスもしくはサブクラスに属する抗体における対応する配列と同一または同種である一方で、鎖（複数可）の残りが、別の種に由来する抗体、または別の抗体クラスもしくはサブクラスに属する抗体における対応する配列と同一または同種である「キメラ」抗体、ならびにかかる抗体の断片を含む（例えば、米国特許第４，８１６，５６７号、及びＭｏｒｒｉｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８１：６８５１−６８５５（１９８４）を参照されたい）。キメラ抗体には、ＰＲＩＭＡＴＩＺＥＤ（登録商標）抗体が挙げられ、この抗体の抗原結合領域は、例えば、マカクザルを目的の抗原で免疫化することによって産生された抗体由来である。
【０１６７】
「ヒト抗体」は、ヒトもしくはヒト細胞により産生された抗体、またはヒト抗体レパートリーもしくは他のヒト抗体コード配列を利用する非ヒト源に由来する抗体のアミノ酸配列に対応するアミノ酸配列を保有するものである。ヒト抗体のこの定義は、非ヒト抗原結合残基を含むヒト化抗体を明確に除外する。
【０１６８】
非ヒト（例えば、齧歯動物）抗体の「ヒト化」抗体は、非ヒト抗体に由来する配列を最小限含有するキメラ抗体である。大部分は、ヒト化抗体は、レシピエントの超可変領域からの残基が、所望の抗体特異性、親和性、及び能力を有するマウス、ラット、ウサギ、または非ヒト霊長類などの非ヒト種（ドナー抗体）の超可変領域からの残基によって代置される、ヒト免疫グロブリン（レシピエント抗体）である。いくつかの事例では、ヒト免疫グロブリンのＦＲ残基は、対応する非ヒト残基によって代置される。更に、ヒト化抗体は、レシピエント抗体またはドナー抗体には見られない残基を含み得る。これらの修飾は、抗体の性能を更に改良するために行われる。一般に、ヒト化抗体は、超可変ループの全てまたは実質的に全てが非ヒト免疫グロブリンの超可変ループに対応し、ＦＲの全てまたは実質的に全てがヒト免疫グロブリン配列のＦＲである、少なくとも１つ、典型的には２つの超可変ドメインの実質的に全てを含むことになる。ヒト化抗体は、任意選択で、免疫グロブリン定常領域（Ｆｃ）、典型的にはヒト免疫グロブリンの定常領域の少なくとも一部も含むことになる。更なる詳細については、Ｊｏｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３２１：５２２−５２５，１９８６；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３３２：３２３−３２９，１９８８；及びＰｒｅｓｔａ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．２：５９３−５９６，１９９２を参照されたい。
【０１６９】
開始または参照ポリペプチド（例えば、参照抗体またはその可変ドメイン（複数可）／ＨＶＲ（複数可））の「変異型」または「変異体」は、（１）開始または参照ポリペプチドのアミノ酸配列とは異なるアミノ酸配列を有し、（２）天然または人工（人為的）突然変異誘発のいずれかを介して開始または参照ポリペプチドから誘導されたポリペプチドである。かかる変異型には、例えば、本明細書では「アミノ酸残基改変」と称される、目的のポリペプチドのアミノ酸配列内の残基からの欠失、及び／またはそれへの挿入、及び／またはその置換が挙げられる。このため、変異型ＨＶＲは、開始または参照ポリペプチド配列（ソース抗体または抗原結合断片のものなど）に関する変異型配列を含むＨＶＲを指す。アミノ酸残基改変は、本文脈では、開始または参照ポリペプチド配列（参照抗体またはその抗原結合断片のものなど）における対応する位置にあるアミノ酸とは異なるアミノ酸を指す。最終変異型または突然変異構築物に到達するように、欠失、挿入、及び置換を任意に組み合わせることができるが、但し、その最終構築物が、所望の機能的特徴を保有することを条件とする。アミノ酸変化、例えば、グリコシル化部位の数または位置の変化も、ポリペプチドの翻訳後プロセスを改変し得る。
【０１７０】
「野生型（ＷＴ）」もしくは「参照」配列または「野生型」もしくは「参照」タンパク質／ポリペプチドの配列、例えば、参照抗体のＨＶＲまたは可変ドメインは、参照配列であってもよく、この参照配列から、突然変異の導入を介して変異型ポリペプチドが誘導される。一般に、所与の「野生型」配列は、自然において最も一般的な配列である。同様に、「野生型」遺伝子配列は、自然において最も一般的に見られる遺伝子についての配列である。突然変異は、天然のプロセスを介してまたは人為的手段を介して、「野生型」遺伝子（故に、それがコードするタンパク質）中に導入され得る。かかるプロセスの産物は、元の「野生型」タンパク質または遺伝子の「変異型」または「突然変異」形態である。
【０１７１】
「参照抗体」は、本明細書で使用される場合、抗原結合配列が鋳型配列として働き、その際に本明細書に記載の基準に従う多様化が行われる、抗体またはその断片を指す。抗原結合配列は、概して、好ましくはフレームワーク領域を含む、抗体可変領域、好ましくは少なくとも１つのＨＶＲを含む。
【０１７２】
本明細書で使用される場合、「ライブラリ」は、複数の抗体もしくは抗体断片配列（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体）、またはこれらの配列をコードする核酸を指し、これらの配列は、本発明の方法に従ってこれらの配列に導入される変異型アミノ酸の組み合わせにおいて異なる。
【０１７３】
「親和性」とは、分子（例えば、抗体）とその結合パートナー（例えば、抗原）との単一結合部位の間の非共有結合相互作用の合計の強度を指す。別途指示されない限り、本明細書で使用される場合、「結合親和性」とは、結合対のメンバー（例えば、抗体及び抗原）間の１：１の相互作用を反映する固有の結合親和性を指す。分子ＸのそのパートナーＹに対する親和性は、一般に、解離定数（Ｋｄ）で表され得る。親和性は、本明細書に記載される方法を含む当該技術分野で既知の一般的な方法によって測定することができる。結合親和性を測定するための具体的な例証的かつ例示的な実施形態は本明細書に記載される。
【０１７４】
抗体の標的分子への結合に関して、特定のポリペプチドまたは特定のポリペプチド標的上のエピトープへの「特異的結合」またはそれ「に特異的に結合する」またはそれ「に特異的」という用語は、非特異的相互作用とは測定可能に異なる結合を意味する。特異的結合は、例えば、分子の結合を対照分子の結合と比較して決定することによって測定することができる。例えば、特異的結合は、標的に類似した対照分子、例えば、過剰な標識されていない標的との競合によって決定することができる。この場合、標識された標的のプローブへの結合が過剰な標識されていない標的によって阻害されると、特異的結合が示される。特定のポリペプチドまたは特定のポリペプチド標的上のエピトープへの「特異的結合」またはそれ「に特異的に結合する」またはそれ「に特異的」であるという用語は、本明細書で使用される場合、例えば、標的へのＫｄが、１０−４Ｍ以下、または１０−５Ｍ以下、または１０−６Ｍ以下、または１０−７Ｍ以下、または１０−８Ｍ以下、または１０−９Ｍ以下、または１０−１０Ｍ以下、または１０−１１Ｍ以下、または１０−１２Ｍ以下、あるいはＫｄが、１０−４Ｍ〜１０−６Ｍ、または１０−６Ｍ〜１０−１０Ｍ、または１０−７Ｍ〜１０−９Ｍの範囲である分子によって呈され得る。当業者によって理解されるであろう通り、親和性とＫｄ値とは反比例する。抗原に対する高い親和性は、低いＫｄ値によって測定される。一実施形態では、「特異的結合」という用語は、分子が、いずれの他のポリペプチドまたはポリペプチドエピトープにも実質的に結合することなく、特定のポリペプチドまたは特定のポリペプチド上のエピトープに結合する、結合を指す。
【０１７５】
「親和性成熟」抗体とは、改変を有しない親抗体と比較して、１つ以上の超可変領域（ＨＶＲ）に１つ以上の改変を有し、かかる改変により抗体の抗原に対する親和性が改善される抗体を指す。
【０１７６】
参照抗体と「同じエピトープに結合する抗体」は、競合アッセイにおいて、参照抗体のその抗原への結合を５０％以上遮断する抗体、及び逆に、競合アッセイにおいて、抗体のその抗原への結合を５０％以上遮断する参照抗体を指す。
【０１７７】
「免疫抱合体」は、細胞毒性剤を含むがこれに限定されない１つ以上の異種分子（複数可）に抱合される抗体である。
【０１７８】
本明細書で使用される場合、「イムノアドヘシン」という用語は、異種タンパク質（「アドヘシン」）の結合特異性と、免疫グロブリン定常ドメインのエフェクター機能とを組み合わせた、抗体様分子を指す。構造的には、イムノアドヘシンは、抗体の抗原認識及び結合部位以外である所望の結合特異性を有する（即ち、「異種の」）アミノ酸配列と、免疫グロブリン定常ドメイン配列との融合物を含む。イムノアドヘシン分子のアドヘシン部分は、典型的に、少なくとも受容体またはリガンドの結合部位を含む連続したアミノ酸配列である。イムノアドヘシン中の免疫グロブリン定常ドメイン配列は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２（ＩｇＧ２Ａ及びＩｇＧ２Ｂを含む）、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４サブタイプ、ＩｇＡ（ＩｇＡ１及びＩｇＡ２を含む）、ＩｇＥ、ＩｇＤ、またはＩｇＭなどの任意の免疫グロブリンから得られてもよい。Ｉｇ融合物は、好ましくは、Ｉｇ分子内の少なくとも１つの可変領域の場所に、本明細書に記載されるポリペプチドまたは抗体のドメインの置換を含む。特に好ましい実施形態では、免疫グロブリン融合物は、ＩｇＧ１分子のヒンジ、ＣＨ２、及びＣＨ３、またはヒンジ、ＣＨ１、ＣＨ２及びＣＨ３領域を含む。免疫グロブリン融合物の作製に関しては、米国特許第５，４２８，１３０号も参照されたい。
【０１７９】
「融合タンパク質」及び「融合ポリペプチド」は、一緒に共有結合した２つの部分を有するポリペプチドを指し、ここで、これらの部分のそれぞれは、異なる特性を有するポリペプチドである。この特性は、インビトロまたはインビボでの活性などの生物学的特性であり得る。この特性はまた、標的分子への結合、反応の触媒作用などの単純な化学的または物理的特性であり得る。これらの２つの部分は、単一のペプチド結合によって直接的に、またはペプチドリンカーを介して連結され得るが、互いのリーディングフレーム内にある。
【０１８０】
本明細書で特定されるポリペプチド配列に関する「アミノ酸配列同一性パーセント（％）」は、最大の配列同一性パーセントが得られるように、配列をアライメントし、必要に応じてギャップを導入した後に、いずれの保存的置換も配列同一性の一部とは見なさずに、候補配列内のアミノ酸残基が、比較されるポリペプチド内のアミノ酸残基と同一である割合として定義される。アミノ酸配列同一性パーセントを決定するための整列は、当業者が備えている技能の範囲内の様々な方法で、例えば、ＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ−２、ＡＬＩＧＮ、またはＭｅｇａｌｉｇｎ（ＤＮＡＳＴＡＲ）ソフトウェアなどの公的に入手可能なコンピュータソフトウェアを使用して達成され得る。当業者であれば、比較されている配列の全長にわたって最大のアライメントを達成するために必要な任意のアルゴリズムを含め、アライメントを測定するための適切なパラメータを判定することができる。しかしながら、本明細書における目的のために、アミノ酸配列同一性％値は、配列比較コンピュータプログラムＡＬＩＧＮ−２を使用して生成される。ＡＬＩＧＮ−２配列比較コンピュータプログラムは、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．が作成したものであり、ソースコードは、使用者用書類と共に、米国著作権局、Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ  Ｄ．Ｃ．、２０５５９に提出され、ここで、米国著作権登録番号ＴＸＵ５１００８７として登録されている。ＡＬＩＧＮ−２プログラムは、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．，Ｓｏｕｔｈ  Ｓａｎ  Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａから公的に利用可能である。ＡＬＩＧＮ−２プログラムは、ＵＮＩＸオペレーティングシステム、好ましくはデジタルＵＮＩＸ  Ｖ４．０Ｄで使用する場合はコンパイルすべきである。全ての配列比較パラメータは、ＡＬＩＧＮ−２プログラムにより設定されており、変動しない。
【０１８１】
ＡＬＩＧＮ−２がアミノ酸配列比較に用いられる状況下で、所与のアミノ酸配列Ｂへの、それとの、またはそれに対する所与のアミノ酸配列Ａのアミノ酸配列同一性％（代替的に、所与のアミノ酸配列Ｂへの、それとの、またはそれに対するある特定のアミノ酸配列同一性％を有するか、または含む所与のアミノ酸配列Ａと表現され得る）は、以下のように計算される：
１００×分数Ｘ／Ｙ
式中、Ｘは、配列整列プログラムＡＬＩＧＮ−２によってそのプログラムのＡとＢとの整列において完全な一致としてスコア化されたアミノ酸残基の数であり、Ｙは、Ｂにおけるアミノ酸残基の総数である。アミノ酸配列Ａの長さがアミノ酸配列Ｂの長さと等しくない場合、ＡのＢに対するアミノ酸配列同一性％は、ＢのＡに対するアミノ酸配列同一性％とは等しくないことが理解される。別途具体的に示されない限り、本明細書で使用される全てのアミノ酸配列同一性％値は、直前の段落に記載されるようにＡＬＩＧＮ−２コンピュータプログラムを使用して得られる。
【０１８２】
本明細書で同義に使用される「ポリヌクレオチド」または「核酸」は、任意の長さのヌクレオチドのポリマーを指し、ＤＮＡ及びＲＮＡを含む。ヌクレオチドは、デオキシリボヌクレオチド、リボヌクレオチド、修飾ヌクレオチドもしくは塩基、及び／またはそれらの類似体、あるいはＤＮＡまたはＲＮＡポリメラーゼにより、または合成反応によりポリマーに組み込むことができる任意の基質であり得る。したがって、例えば、本明細書で定義されるポリヌクレオチドには、一本鎖及び二本鎖ＤＮＡ、一本鎖及び二本鎖領域を含むＤＮＡ、一本鎖及び二本鎖ＲＮＡ、ならびに一本鎖及び二本鎖領域を含むＲＮＡ、一本鎖もしくはより典型的には二本鎖であり得るか、または一本鎖及び二本鎖領域を含み得るＤＮＡ及びＲＮＡを含むハイブリッド分子が挙げられるが、これらに限定されない。加えて、本明細書で使用される「ポリヌクレオチド」という用語は、ＲＮＡもしくはＤＮＡ、またはＲＮＡ及びＤＮＡの両方を含む三本鎖領域を指す。かかる領域内の鎖は、同じ分子由来であり得るか、または異なる分子由来であり得る。これらの領域は、これらの分子のうちの１つ以上の全てを含み得るが、より典型的には、これらの分子のうちのいくつかの領域のみを含む。三重らせん領域の分子のうちの１つは、多くの場合、オリゴヌクレオチドである。「ポリヌクレオチド」という用語は、具体的には、ｃＤＮＡを含む。
【０１８３】
ポリヌクレオチドは、メチル化ヌクレオチド及びそれらの類似体などの修飾ヌクレオチドを含み得る。存在する場合、ヌクレオチド構造への修飾は、ポリマーの組み立て前または後に付与され得る。ヌクレオチドの配列は、非ヌクレオチド成分により中断され得る。ポリヌクレオチドは、例えば標識との抱合により、合成後に更に修飾され得る。他のタイプの修飾には、例えば、天然に存在するヌクレオチドのうちの１つ以上を類似体と置換する「キャップ」、ヌクレオチド間修飾、例えば、非電荷性結合（例えば、メチルホスホン酸塩、ホスホトリエステル、ホスホアミデート、カルバメートなど）によるもの、及び電荷性結合（例えば、ホスホロチオエート、ホスホロジチオエートなど）によるもの、懸垂部分、例えばタンパク質（例えば、ヌクレアーゼ、毒素、抗体、シグナルペプチド、ポリ−Ｌ−リシンなど）などを含むもの、挿入剤（例えば、アクリジン、ソラーレンなど）によるもの、キレート剤（例えば、金属、放射活性金属、ホウ素、酸化金属など）を含むもの、アルキル化剤を含むもの、修飾結合（例えば、αアノマー核酸など）によるもの、ならびにポリヌクレオチド（複数可）の未修飾形態が挙げられる。更に、糖内に通常存在するヒドロキシル基のうちのいずれかは、例えば、ホスホン酸基、リン酸基により置換されるか、標準保護基により保護されるか、もしくは活性化されて追加のヌクレオチドへの追加の結合を調製してもよく、または固体もしくは半固体支持体に抱合されてもよい。５′及び３′末端ＯＨをリン酸化するか、またはアミンもしくは１〜２０個の炭素原子の有機キャッピング基部分と置換することができる。他のヒドロキシルもまた、標準保護基に誘導体化されてもよい。ポリヌクレオチドは、例えば、２’−Ｏ−メチル−、２’−Ｏ−アリル、２’−フルオロ−または２’−アジド−リボース、炭素環糖の類似体、α−アノマー糖、アラビノース、キシロースまたはリキソースなどのエピマー糖、ピラノース糖、フラノース糖、セドヘプツロース、アクリル酸類似体、及びメチルリボシドなどの脱塩基ヌクレオシド類似体を含む、当該技術分野において一般的に既知であるリボース糖またはデオキシリボース糖の類似形態も含むことができる。１つ以上のホスホジエステル結合は、代替連結基に置き換えられてもよい。これらの代替連結基には、リン酸塩がＰ（Ｏ）Ｓ（「チオエート」）、Ｐ（Ｓ）Ｓ（「ジチオエート」）、“（Ｏ）ＮＲ２（「アミデート」）、Ｐ（Ｏ）Ｒ、Ｐ（Ｏ）ＯＲ’、ＣＯまたはＣＨ２（「ホルムアセタール」）に置き換えられる実施形態が含まれるが、これらに限定されず、式中、各ＲまたはＲ’は、独立してＨであるか、または置換もしくは非置換アルキル（１〜２０Ｃ）（任意にエーテル（−Ｏ−）結合を含む）、アリール、アルケニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、もしくはアラルジルである。ポリヌクレオチド内の全ての結合が同一である必要はない。前述の説明は、ＲＮＡ及びＤＮＡを含む、本明細書で言及される全てのポリヌクレオチドに適用する。
【０１８４】
本明細書で使用される場合、「オリゴヌクレオチド」は、一般に、約２５０ヌクレオチド長未満であるが、必ずしもそうではない短い一本鎖ポリヌクレオチドを指す。オリゴヌクレオチドは合成であってもよい。「オリゴヌクレオチド」及び「ポリヌクレオチド」という用語は、相互排他的ではない。ポリヌクレオチドに関する上記の説明は、等しく完全にオリゴヌクレオチドに適用可能である。
【０１８５】
「プライマー」という用語は、核酸にハイブリダイズすることができ、一般に遊離３’−ＯＨ基を提供することにより相補的核酸の重合を可能にする、一本鎖ポリヌクレオチドを指す。
【０１８６】
「宿主細胞」、「宿主細胞株」、及び「宿主細胞培養物」という用語は、同義に使用され、外因性核酸が中に導入されている細胞を指し、かかる細胞の子孫を含む。宿主細胞には、「形質転換体」及び「形質転換細胞」が含まれ、これらには、初代形質転換細胞及び継代の数に関わらずそれに由来する子孫が含まれる。子孫は、核酸含有量が親細胞と完全に同一ではない場合があるが、突然変異を含み得る。最初に形質転換された細胞についてスクリーニングまたは選択されたものと同じ機能または生物活性を有する変異子孫が、本明細書に含まれる。
【０１８７】
本明細書で使用される「ベクター」という用語は、それが結合している別の核酸を運搬することができる核酸分子を指す。この用語は、自己複製核酸構造としてのベクター、及びそれが導入される宿主細胞のゲノム内に組み込まれたベクターを含む。ある特定のベクターは、それらが作動可能に結合している核酸の発現を誘導することができる。かかるベクターは、本明細書で「発現ベクター」と称される。
【０１８８】
「単離された」核酸分子は、少なくとも１つの混入核酸分子から識別及び分離される核酸分子であり、この核酸分子は、通常、核酸の天然源と関連する。単離核酸分子は、それが天然にみられる形態または状況にあるもの以外のものである。単離された核酸分子は、したがって、天然細胞中に存在する核酸分子とは区別される。しかしながら、単離された核酸分子は、例えば、核酸分子が天然細胞のものとは異なる染色体位置にある場合、通常は抗体を発現する細胞中に含有される核酸分子を含む。
【０１８９】
「突然変異」は、野生型配列などの参照ヌクレオチド配列に対する、ヌクレオチド（複数可）の欠失、挿入、または置換である。
【０１９０】
本明細書「コドンセット」は、所望の変異型アミノ酸をコードするために使用される異なるヌクレオチド三重項配列のセットを指す。オリゴヌクレオチドのセットは、例えば、コドンセットによって提供されるヌクレオチド三重項の全ての可能な組み合わせを表し、かつアミノ酸の所望の群をコードすることになる配列を含む、固相合成によって合成することができる。コドン表記の標準形態は、当業者に既知であり、本明細書に記載される、ＩＵＢコードのものである。コドンセットは、典型的には、斜体の３つの大文字、例えば、ＮＮＫ、ＮＮＳ、ＸＹＺ、ＤＶＫなどによって表される。ある特定の位置で選択されたヌクレオチドの「縮退」を有するオリゴヌクレオチドの合成、例えば、ＴＲＩＭアプローチは、当該技術分野で周知である（Ｋｎａｐｐｅｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２９６：５７−８６，１９９９）；Ｇａｒｒａｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，Ｇｅｎｅ１２８：１０３，１９９３）。ある特定のコドンセットを有するオリゴヌクレオチドのかかるセットは、市販の核酸合成機（例えば、Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ，Ｆｏｓｔｅｒ  Ｃｉｔｙ，ＣＡから入手可能）を使用して合成するか、または商業的に得ることができる（例えば、Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ，ＭＤから）。したがって、特定のコドンセットを有する合成されたオリゴヌクレオチドのセットは、典型的には、配列が異なる複数のオリゴヌクレオチドを含むことになり、この差は、全体の配列内でコドンセットによって確立される。オリゴヌクレオチドは、本明細書に従って使用される場合、可変ドメイン核酸鋳型へのハイブリダイゼーションを可能にし、かつ例えばクローニングプロセスに有用な制限酵素部位を含み得るがその必要はない配列を有する。
【０１９１】
「対照配列」という表現は、特定の宿主生物における作動可能に連結したコード配列の発現に必要なＤＮＡ配列を指す。例えば、原核生物に好適な対照配列には、プロモーター、任意選択でオペレーター配列、及びリボソーム結合部位が挙げられる。真核細胞は、プロモーター、ポリアデニル化シグナル、及びエンハンサーを利用することが知られている。
【０１９２】
核酸は、別の核酸配列と機能的関係に置かれるときに「作動可能に連結」される。例えば、プレ配列または分泌リーダーのためのＤＮＡは、ポリペプチドの分泌に関与するプレタンパク質として発現される場合に、ポリペプチドのためのＤＮＡに作動可能に連結され、プロモーターまたはエンハンサーは、配列の転写に影響する場合に、コード配列に作動可能に連結され、あるいはリボソーム結合部位は、翻訳を促進するように位置付けられる場合に、コード配列に作動可能に連結される。一般に、「作動可能に連結される」は、連結されるＤＮＡ配列が連続的であり、分泌リーダーの場合には、連続的であり、かつ読み相（ｒｅａｄｉｎｇ  ｐｈａｓｅ）にあることを意味する。しかしながら、エンハンサーは連続的である必要はない。連結は、簡便な制限部位でのライゲーションによって達成される。かかる部位が存在しない場合には、合成オリゴヌクレオチドアダプターまたはリンカーが従来の慣例に従って使用される。
【０１９３】
「血管内皮成長因子」または「ＶＥＧＦ」という用語は、Ｓｗｉｓｓ  Ｐｒｏｔ受託番号Ｐ１５６９２、Ｇｅｎｅ  ＩＤ（ＮＣＢＩ）：７４２２によって例示されるような、血管内皮成長因子タンパク質Ａを指す。「ＶＥＧＦ」という用語は、Ｓｗｉｓｓ  Ｐｒｏｔ受託番号Ｐ１５６９２、Ｇｅｎｅ  ＩＤ（ＮＣＢＩ）：７４２２のアミノ酸配列を有するタンパク質、ならびにその相同体及びアイソフォームを包含する。「ＶＥＧＦ」という用語はまた、既知のアイソフォーム、例えば、ＶＥＧＦのスプライスアイソフォーム、例えば、ＶＥＧＦ１１１、ＶＥＧＦ１２１、ＶＥＧＦ１４５、ＶＥＧＦ１６５、ＶＥＧＦ１８９、及びＶＥＧＦ２０６を、ＶＥＧＦ１６５のプラスミン切断によって生成される１１０アミノ酸ヒト血管内皮細胞成長因子を含む、その天然のアレル形態及び処理形態と併せて包含し、これについては、Ｆｅｒｒａｒａ  Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．Ｃｅｌｌ．２１：６８７，２０１０；Ｌｅｕｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２４６：１３０６．１９８９；及びＨｏｕｃｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎ．，５：１８０６，１９９１で説明されている。「ＶＥＧＦ」という用語は、マウス、ラット、または霊長類などの非ヒト種由来のＶＥＧＦも指す。場合により、特定の種由来のＶＥＧＦは、ヒトＶＥＧＦについてのｈＶＥＧＦ、マウスＶＥＧＦについてのｍＶＥＧＦなどといった用語で示される。「ＶＥＧＦ」という用語はまた、１６５アミノ酸ヒト血管内皮細胞成長因子のアミノ酸８〜１０９または１〜１０９を含むポリペプチドの切断型を指すために使用される。ＶＥＧＦのいずれのかかる形態への言及も、例えば、「ＶＥＧＦ１０９」、「ＶＥＧＦ（８−１０９）」、「ＶＥＧＦ（１−１０９）」、または「ＶＥＧＦ１６５」によって、本出願中で特定され得る。「切断された」天然ＶＥＧＦについてのアミノ酸位置は、天然ＶＥＧＦ配列において示される通りに番号付けされる。例えば、切断された天然ＶＥＧＦにおけるアミノ酸位置１７（メチオニン）は、天然ＶＥＧＦにおける位置１７（メチオニン）でもある。切断された天然ＶＥＧＦは、ＫＤＲ及びＦｌｔ−１受容体への結合親和性が天然ＶＥＧＦに相当する。「ＶＥＧＦ変異型」という用語は、本明細書で使用される場合、天然ＶＥＧＦ配列における１つ以上のアミノ酸突然変異を含むＶＥＧＦポリペプチドを指す。任意選択で、この１つ以上のアミノ酸突然変異には、アミノ酸置換（複数可）が含まれる。本明細書に記載のＶＥＧＦ変異型の短縮表記のために、数は、アミノ酸残基位置、及び推定の天然ＶＥＧＦのアミノ酸配列を指すことが記される（Ｌｅｕｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，（上記参照）及びＨｏｕｃｋ  ｅｔ  ａｌ．，（上記参照）に提供される）。別途指定されない限り、「ＶＥＧＦ」という用語は、本明細書で使用される場合、ＶＥＧＦ−Ａを示す。
【０１９４】
「ＶＥＧＦアンタゴニスト」または「ＶＥＧＦ特異的アンタゴニスト」は、ＶＥＧＦに結合する、ＶＥＧＦ発現レベルを低減する、または１つ以上のＶＥＧＦ受容体へのＶＥＧＦ結合、ＶＥＧＦシグナル伝達、ならびにＶＥＧＦ媒介性血管新生及び内皮細胞生存もしくは増殖を含むがこれらに限定されないＶＥＧＦ生物活性を、中和する、遮断する、阻害する、無効化する、低減する、もしくはそれに干渉することができる分子を指す。例えば、ＶＥＧＦ生物活性を、中和する、遮断する、阻害する、無効化する、低減する、もしくはそれに干渉することができる分子は、１つ以上のＶＥＧＦ受容体（ＶＥＧＦＲ）（例えば、ＶＥＧＦＲ１、ＶＥＧＦＲ２、ＶＥＧＦＲ３、膜結合ＶＥＧＦ受容体（ｍｂＶＥＧＦＲ）、または可溶性ＶＥＧＦ受容体（ｓＶＥＧＦＲ））に結合することによってその効果を発揮し得る。ＶＥＧＦ、抗ＶＥＧＦ抗体、及びその抗原結合断片に特異的に結合するポリペプチド、ＶＥＧＦに特異的に結合することで１つ以上の受容体へのその結合を封鎖する受容体分子及び誘導体、融合タンパク質（例えば、ＶＥＧＦ−Ｔｒａｐ（Ｒｅｇｅｎｅｒｏｎ））、ならびにＶＥＧＦ１２１−ゲロニン（Ｐｅｒｅｇｒｉｎｅ）が、本発明の方法に有用なＶＥＧＦ特異的アンタゴニストとして含まれる。ＶＥＧＦ特異的アンタゴニストはまた、ＶＥＧＦポリペプチドのアンタゴニスト変異型、ＶＥＧＦポリペプチドをコードする核酸分子の少なくとも断片に相補的なアンチセンス核酸塩基オリゴマー；ＶＥＧＦポリペプチドをコードする核酸分子の少なくとも断片に相補的な小ＲＮＡ；ＶＥＧＦを標的化するリボザイム；ＶＥＧＦに対するペプチボディ；及びＶＥＧＦアプタマーを含む。ＶＥＧＦアンタゴニストはまた、ＶＥＧＦＲ、抗ＶＥＧＦＲ抗体、及びその抗原結合断片に結合するポリペプチド、ならびにＶＥＧＦＲに結合することでＶＥＧＦ生物活性（例えば、ＶＥＧＦシグナル伝達）を、遮断する、阻害する、無効化する、低減する、もしくはそれに干渉する誘導体、または融合タンパク質を含む。ＶＥＧＦ特異的アンタゴニストはまた、ＶＥＧＦまたはＶＥＧＦＲに結合し、ＶＥＧＦ生物活性を、遮断する、阻害する、無効化する、低減する、もしくはそれに干渉することができる非ペプチド小分子を含む。したがって、「ＶＥＧＦ活性」という用語は、ＶＥＧＦのＶＥＧＦ媒介性生物活性を具体的に含む。ある特定の実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニストは、ＶＥＧＦの発現レベルまたは生物活性を、少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％以上、低減または阻害する。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦ特異的アンタゴニストによって阻害されるＶＥＧＦは、ＶＥＧＦ（８−１０９）、ＶＥＧＦ（１−１０９）、またはＶＥＧＦ１６５である。
【０１９５】
本明細書で使用される場合、ＶＥＧＦアンタゴニストには、抗ＶＥＧＦＲ２抗体及び関連する分子（例えば、ラムシルマブ、タニビルマブ、アフリベルセプト）、抗ＶＥＧＦＲ１抗体及び関連する分子（例えば、イクルクマブ、アフリベルセプト（ＶＥＧＦ  Ｔｒａｐ−Ｅｙｅ；ＥＹＬＥＡ（登録商標））、及びジブ−アフリベルセプト（ＶＥＧＦ  Ｔｒａｐ；ＺＡＬＴＲＡＰ（登録商標））、二重特異性ＶＥＧＦ抗体（例えば、ＭＰ−０２５０、バヌシズマブ（ＶＥＧＦ−ＡＮＧ２）、及びＵＳ２００１／０２３６３８８に開示されている二重特異性抗体）、抗ＶＥＧＦアーム、抗ＶＥＧＦＲ１アーム、及び抗ＶＥＧＦＲ２のうちの２つの組み合わせを含む二重特異性抗体；抗ＶＥＧＦＡ抗体（例えば、ベバシズマブ、セバシズマブ）、抗ＶＥＧＦＢ抗体；抗ＶＥＧＦＣ抗体（例えば、ＶＧＸ−１００）、抗ＶＥＧＦＤ抗体；ならびに非ペプチド小分子ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、パゾパニブ、アキシチニブ、バンデタニブ、スチバーガ、カボザンチニブ、レンバチニブ、ニンテダニブ、オランチニブ、テラチニブ、ドビチニグ（ｄｏｖｉｔｉｎｉｇ）、セジラニブ、モテサニブ、スルファチニブ、アパチニブ、フォレチニブ、ファミチニブ、及びチボザニブ）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１９６】
「抗ＶＥＧＦ抗体」は、十分な親和性及び特異性でＶＥＧＦに結合する抗体である。ある特定の実施形態では、抗体は、ＶＥＧＦに対して十分に高い結合親和性を有することになり、例えば、抗体は、１００ｎＭ〜１ｐＭのＫｄ値でｈＶＥＧＦに結合し得る。抗体親和性は、例えば、表面プラズモン共鳴系アッセイ（ＰＣＴ出願公開第ＷＯ２００５／０１２３５９号に記載されているようなＢＩＡｃｏｒｅ（登録商標）アッセイなど）；酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）；及び競合アッセイ（例えば、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ））によって決定されてもよい。
【０１９７】
ある特定の実施形態では、抗ＶＥＧＦ抗体は、ＶＥＧＦ活性が関与する疾患または状態の標的化及び干渉における治療剤として使用することができる。また、本抗体は、例えば、治療薬としてその有効性を評価するために、他の生物活性アッセイに供してもよい。かかるアッセイは、当該技術分野で既知であり、抗体に対する標的抗原及び意図される使用に依存する。例としては、ＨＵＶＥＣ阻害アッセイ；腫瘍細胞成長阻害アッセイ（例えば、ＷＯ８９／０６６９２に記載される）；抗体依存性細胞毒性（ＡＤＣＣ）及び補体媒介性細胞毒性（ＣＤＣ）アッセイ（米国特許第５，５００，３６２号）；ならびにアゴニスト活性または造血アッセイ（ＷＯ９５／２７０６２を参照されたい）が挙げられる。抗ＶＥＧＦ抗体は、通常、ＶＥＧＦ−ＢまたはＶＥＧＦ−Ｃなどの他のＶＥＧＦ相同体、またはＰｌＧＦ、ＰＤＧＦ、またはｂＦＧＦなどの他の成長因子に結合しない。一実施形態では、抗ＶＥＧＦ抗体は、ハイブリドーマＡＴＣＣ  ＨＢ  １０７０９によって産生されるモノクローナル抗ＶＥＧＦ抗体Ａ４．６．１と同じエピトープに結合するモノクローナル抗体である。別の実施形態では、抗ＶＥＧＦ抗体は、Ｐｒｅｓｔａら（Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．５７：４５９３−４５９９，１９９７）に従って生成される組換えヒト化抗ＶＥＧＦモノクローナル抗体であり、これには、ベバシズマブ（ＢＶ；ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標））として知られる抗体が挙げられるが、これに限定されない。
【０１９８】
「ｒｈｕＭＡｂ  ＶＥＧＦ」または「ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標）」としても知られる抗ＶＥＧＦ抗体「ベバシズマブ（ＢＶ）」は、Ｐｒｅｓｔａ  ｅｔ  ａｌ．（Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．５７：４５９３−４５９９，１９９７）に従って生成される組換えヒト化抗ＶＥＧＦモノクローナル抗体である。これは、変異型ヒトＩｇＧ１フレームワーク領域と、ヒトＶＥＧＦのその受容体への結合を妨害するマウス抗ｈＶＥＧＦモノクローナル抗体Ａ．４．６．１由来の抗原結合相補性決定領域とを含む。フレームワーク領域の大部分を含む、ベバシズマブのアミノ酸配列の約９３％が、ヒトＩｇＧ１から誘導され、配列の約７％が、マウス抗体Ａ４．６．１から誘導される。ベバシズマブは、分子量が約１４９，０００ダルトンであり、グリコシル化される。ベバシズマブ及び他のヒト化抗ＶＥＧＦ抗体は、２００５年２月２６日発行の米国特許第６，８８４，８７９号に更に記載されており、その開示全体が参照により明示的に本明細書に組み込まれる。追加の好ましい抗体には、ＰＣＴ出願公開第ＷＯ２００５／０１２３５９号に記載されているＧ６またはＢ２０シリーズ抗体（例えば、Ｇ６−３１、Ｂ２０−４．１）が含まれる。追加の好ましい抗体については、米国特許第７，０６０，２６９号、同第６，５８２，９５９号、同第６，７０３，０２０号；同第６，０５４，２９７号；ＷＯ９８／４５３３２；ＷＯ９６／３００４６；ＷＯ９４／１０２０２；ＥＰ０６６６８６８Ｂ１；米国特許出願公開第２００６００９３６０号、同第２００５０１８６２０８号、同第２００３０２０６８９９号、同第２００３０１９０３１７号、同第２００３０２０３４０９号、及び同第２００５０１１２１２６；ならびにＰｏｐｋｏｖ  ｅｔ  ａｌ．（Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２８８：１４９−１６４，２００４）を参照されたい。他の好ましい抗体には、残基Ｆ１７、Ｍ１８、Ｄ１９、Ｙ２１、Ｙ２５、Ｑ８９、１９１、Ｋ１０１、Ｅ１０３、及びＣ１０４を含むか、または代替的に残基Ｆ１７、Ｙ２１、Ｑ２２、Ｙ２５、Ｄ６３、１８３、及びＱ８９を含む、ヒトＶＥＧＦ上の機能エピトープに結合するものが含まれる。
【０１９９】
ＶＥＧＦアンタゴニストが「単独抗腫瘍剤」として投与される場合、これは、がんを治療するために投与される抗腫瘍剤でしかなく、即ち、化学療法などの別の抗腫瘍剤と組み合わせて投与されない。
【０２００】
「抗ＶＥＧＦ抗体をコードする核酸」は、抗体の重鎖及び軽鎖（またはその断片）をコードする１つ以上の核酸分子を指し、これには、単一のベクターまたは別々のベクター中のかかる核酸分子（複数可）、及び宿主細胞中の１つ以上の場所に存在するかかる核酸分子（複数可）が含まれる。
【０２０１】
免疫機能障害との関連での「機能障害」という用語は、抗原刺激への免疫応答性が低減した状態を指す。この用語には、抗原認識が生じ得るが、その後の免疫応答が感染または腫瘍成長の制御に無効である、「消耗」及び／または「アネルギー」の両方の共通要素が含まれる。
【０２０２】
本明細書で使用される「機能障害性」という用語には、抗原認識に対する不応性または無応答性、具体的には、抗原認識を、増殖、サイトカイン産生（例えば、ＩＬ−２）、及び／または標的細胞殺滅などの下流Ｔ細胞エフェクター機能に翻訳する能力の障害も含まれる。
【０２０３】
「アネルギー」という用語は、Ｔ細胞受容体を介して送達される不完全または不十分なシグナル（例えば、Ｒａｓ活性化の不在下での細胞内Ｃａ２＋の増加）に起因する抗原刺激に対する無応答の状態を指す。Ｔ細胞アネルギーは、共刺激の不在下における抗原での刺激に際しても生じ得、結果的に細胞は、共刺激との関連においても、抗原によるその後の活性化に不応性になる。無応答状態はしばしば、インターロイキン２の存在により覆され得る。アネルギーＴ細胞は、クローン増殖を経ず、かつ／またはエフェクター機能を獲得しない。
【０２０４】
「消耗」という用語は、多くの慢性感染及びがん発症中に生じる持続的ＴＣＲシグナル伝達に起因するＴ細胞機能障害の状態としてのＴ細胞消耗を指す。これは、不完全なまたは不十分なシグナル伝達を介してではなく、持続的シグナル伝達に起因するという点で、アネルギーとは区別される。これは、エフェクター機能不良、阻害性受容体の持続的発現、及び機能的エフェクターまたはメモリーＴ細胞とは異なる転写状態によって定義される。消耗は、感染及び腫瘍の最適な制御を妨げる。消耗は、外因性の負の制御性経路（例えば、免疫制御性サイトカイン）及び細胞内因性の負の制御性（共刺激）経路（ＰＤ−１、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４など）の両方に起因し得る。
【０２０５】
「Ｔ細胞機能を増強する」とは、持続したもしくは増幅された生物学的機能を有するようにＴ細胞を誘導するか、引き起こすか、もしくは刺激すること、または消耗されたもしくは不活性のＴ細胞を再生もしくは再活性化することを意味する。Ｔ細胞機能の増強の例としては、介入前のレベルと比較した、ＣＤ８＋Ｔ細胞からのγインターフェロンの分泌の増加、増殖の増加、抗原応答性（例えば、ウイルス、病原体、または腫瘍のクリアランス）の上昇が挙げられる。一実施形態では、増強のレベルは、少なくとも５０％、あるいは６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、１２０％、１５０％、または２００％の増強である。この増強を測定する様式は、当業者に既知である。
【０２０６】
「腫瘍免疫」とは、腫瘍が免疫認識及びクリアランスを回避するプロセスを指す。したがって、治療的概念として、腫瘍免疫は、かかる回避が減弱し、腫瘍が免疫系によって認識及び攻撃されるときに「治療される」。腫瘍認識の例としては、腫瘍結合、腫瘍収縮、及び腫瘍クリアランスが挙げられる。
【０２０７】
「免疫原性」とは、免疫応答を誘発する特定の物質の能力を指す。腫瘍は、免疫原性であり、腫瘍免疫原性の増強により、免疫応答による腫瘍細胞のクリアランスが支援される。
【０２０８】
「プログラム死リガンド１」及び「ＰＤ−Ｌ１」という用語は、本明細書において、天然配列ＰＤ−Ｌ１ポリペプチド、ポリペプチド変異型、ならびに天然配列ポリペプチド及びポリペプチド変異型の断片（これらは、本明細書で更に定義される）を指す。本明細書に記載されるＰＤ−Ｌ１ポリペプチドは、ヒト組織型から、もしくは別の源からなど、多様な源から単離されるか、または組換え法または合成法によって調製されたものであり得る。
【０２０９】
「天然配列ＰＤ−Ｌ１ポリペプチド」は、対応する、自然界に由来するＰＤ−Ｌ１ポリペプチドと同じアミノ酸配列を有するポリペプチドを含む。
【０２１０】
「ＰＤ−Ｌ１ポリペプチド変異型」またはその変化形は、本明細書に定義されるＰＤ−Ｌ１ポリペプチド、一般的には活性ＰＤ−Ｌ１ポリペプチドが、本明細書に開示される天然配列ＰＤ−Ｌ１ポリペプチド配列のいずれかに対して少なくとも約８０％のアミノ酸配列同一性を有することを意味する。かかるＰＤ−Ｌ１ポリペプチド変異型には、例えば、天然アミノ酸配列のＮ末端またはＣ末端に１つ以上のアミノ酸残基が付加または欠失されたＰＤ−Ｌ１ポリペプチドが含まれる。通常、ＰＤ−Ｌ１ポリペプチド変異型は、本明細書に開示される天然配列ＰＤ−Ｌ１ポリペプチド配列に対して少なくとも約８０％のアミノ酸配列同一性、あるいは少なくとも約８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％のアミノ酸配列同一性を有する。通常、ＰＤ−Ｌ１変異型ポリペプチドは、少なくとも約１０アミノ酸長であり、あるいは少なくとも約２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、２００、２１０、２２０、２３０、２４０、２５０、２６０、２７０、２８０、２８１、２８２、２８３、２８４、２８５、２８６、２８７、２８８、もしくは２８９アミノ酸長、またはそれ以上である。任意選択で、ＰＤ−Ｌ１変異型ポリペプチドは、天然ＰＤ−Ｌ１ポリペプチド配列と比較して１つ以下の保存的アミノ酸置換、あるいは天然ＰＤ−Ｌ１ポリペプチド配列と比較して２、３、４、５、６、７、８、９、または１０個以下の保存的アミノ酸置換を有する。
【０２１１】
「ＰＤ−Ｌ１軸結合アンタゴニスト」という用語は、ＰＤ−１シグナル伝達軸上のシグナル伝達に起因するＴ細胞機能障害を除去するように、ＰＤ−Ｌ１軸結合パートナーとその結合パートナーのうちの１つ以上との相互作用を阻害し、結果として、Ｔ細胞機能が復元または増強される分子を指す。本明細書で使用される場合、ＰＤ−Ｌ１軸結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニスト及びＰＤ−１結合アンタゴニスト、ならびにＰＤ−Ｌ１とＰＤ−１との間の相互作用を妨害する分子（例えば、ＰＤ−Ｌ２−Ｆｃ融合）を含む。いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ１軸結合アンタゴニスト、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニスト、またはＰＤ−１結合アンタゴニストは、全体が参照により本明細書に組み込まれる国際特許出願公開第ＷＯ２０１３／０１９９０６号に記載されている任意のＰＤ−Ｌ１軸結合アンタゴニスト、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニスト、またはＰＤ−１結合アンタゴニストであり得る。
【０２１２】
「抗ＰＤ−Ｌ１抗体」及び「ＰＤ−Ｌ１に結合する抗体」という用語は、抗体がＰＤ−Ｌ１を標的とする上で診断剤及び／または治療剤として有用になるように、十分な親和性でＰＤ−Ｌ１に結合することができる抗体を指す。一実施形態では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体の、無関係の非ＰＤ−Ｌ１タンパク質への結合の程度は、例えばＲＩＡにより測定されたときに、抗体の、ＰＤ−Ｌ１への結合の約１０％未満である。ある特定の実施形態では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、異なる種由来のＰＤ−Ｌ１の間で保存されているＰＤ−Ｌ１のエピトープに結合する。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、全体が参照により本明細書に組み込まれる米国特許第８，２１７，１４９号に記載のされている任意の抗ＰＤ−Ｌ１抗体であり得る。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体はアテゾリズマブである。
【０２１３】
「抗ＰＤ−１抗体」及び「ＰＤ−１に結合する抗体」という用語は、抗体がＰＤ−１を標的とする上で診断剤及び／または治療剤として有用になるように、十分な親和性でＰＤ−１に結合することができる抗体を指す。一実施形態では、抗ＰＤ−１抗体の、無関係の非ＰＤ−１タンパク質への結合の程度は、例えばＲＩＡにより測定されたときに、抗体の、ＰＤ−１への結合の約１０％未満である。ある特定の実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、異なる種由来のＰＤ−１の間で保存されているＰＤ−１のエピトープに結合する。
【０２１４】
本明細書で使用される場合、「ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニスト」は、ＰＤ−Ｌ１と、ＰＤ−１及び／またはＢ７−１などのその結合パートナーのうちの１つ以上との相互作用から生じるシグナル形質導入を低下、遮断、阻害、無効化、または妨害する分子である。いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ１の、その結合パートナーへの結合を阻害する分子である。特定の態様では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ１の、ＰＤ−１及び／またはＢ７−１への結合を阻害する。いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、抗ＰＤ−Ｌ１抗体及びその抗原結合断片、イムノアドヘシン、融合タンパク質、オリゴペプチド、小分子アンタゴニスト、ポリヌクレオチドアンタゴニスト、ならびにＰＤ−Ｌ１と、ＰＤ−１及び／またはＢ７−１などのその結合パートナーのうちの１つ以上との相互作用に起因するシグナル形質導入を低下、遮断、阻害、無効化、または妨害する他の分子を含む。一実施形態では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１を介して、媒介性シグナル伝達、Ｔリンパ球及び他の細胞上で発現される細胞表面タンパク質によりまたはそれを介して媒介される負のシグナルを低減し、その結果、機能不全のＴ細胞の機能不全状態を軽減する。いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは抗ＰＤ−Ｌ１抗体である。特定の態様では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体はＹＷ２４３．５５．Ｓ７０である。別の特定の態様では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体はＭＤＸ−１１０５である。なお別の特定の態様では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体はＭＥＤＩ４７３６（ドルバルマブ（ｄｒｕｖａｌｕｍａｂ））である。なお別の特定の態様では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体はＭＳＢ００１０７１８Ｃ（アベルマブ）である。なお別の特定の態様では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は本明細書に記載のアテゾリズマブ（ＭＰＤＬ３２８０Ａ）である。
【０２１５】
本明細書で使用される場合、「ＰＤ−１結合アンタゴニスト」は、ＰＤ−１と、ＰＤ−Ｌ１及び／またはＰＤ−Ｌ２などのその結合パートナーのうちの１つ以上との相互作用から生じるシグナル形質導入を低下、遮断、阻害、無効化、または妨害する分子である。いくつかの実施形態では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、ＰＤ−１のその結合パートナーへの結合を阻害する分子である。特定の態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、ＰＤ−１のＰＤ−Ｌ１及び／またはＰＤ−Ｌ２への結合を阻害する。例えば、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、抗ＰＤ−１抗体及びこれらの抗原結合断片、イムノアドヘシン、融合タンパク質、オリゴペプチド、小分子アンタゴニスト、ポリヌクレオチドアンタゴニスト、ならびにＰＤ−１と、ＰＤ−Ｌ１及び／またはＰＤ−Ｌ２との相互作用から生じるシグナル形質導入を低下、遮断、阻害、無効化、または妨害する他の分子を含む。一実施形態では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、ＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１を介して、媒介性シグナル伝達、Ｔリンパ球及び他の細胞上で発現される細胞表面タンパク質によりまたはそれを介して媒介される負のシグナルを低減し、その結果、機能不全のＴ細胞の機能不全状態を軽減する。いくつかの実施形態では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは抗ＰＤ−１抗体である。特定の態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストはＭＤＸ−１１０６（ニボルマブ）である。別の特定の態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストはＭＫ−３４７５（ペンブロリズマブ）である。別の特定の態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストはＣＴ−０１１（ピディリズマブ）である。別の特定の態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストはＭＥＤＩ−０６８０（ＡＭＰ−５１４）である。別の特定の態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストはＰＤＲ００１である。別の特定の態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストはＲＥＧＮ２８１０である。別の特定の態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストはＢＧＢ−１０８である。別の特定の態様では、ＰＤ−１結合アンタゴニストはＡＭＰ−２２４である。
【０２１６】
「個体応答」または「応答」は、減速及び完全阻止を含む、疾患進行（例えば、がん進行）のある程度の阻害；腫瘍サイズの減少；隣接する末梢器官及び／もしくは組織へのがん細胞浸潤の阻害（即ち、低減、減速、または完全停止）；転移の阻害（即ち、低減、減速、または完全停止）；疾患もしくは障害（例えば、がん）と関連付けられる１つ以上の症状のある程度の軽減；全生存及び無進行生存を含む生存の長さの増加もしくは延長、ならびに／または治療後の所定の時点における低下した死亡率を非限定的に含む、個体への利益を示す任意のエンドポイントを使用して評価され得る。
【０２１７】
医薬品による治療に対する患者の「有効な応答」または患者の「応答性」及び類似の単語は、がんなどの疾患もしくは障害の危険があるか、またはそれに罹患している患者に付与される臨床的または治療的利益を指す。一実施形態では、かかる利益には、生存期間（全生存期間及び／または無進行生存期間を含む）を延長すること、客観的奏効（完全奏効または部分奏効を含む）をもたらすこと、またはがんの徴候もしくは症状を改善することのうちのいずれか１つ以上が含まれる。一実施形態では、バイオマーカー（例えば、表２に列挙されるバイオマーカー）を使用して、バイオマーカーを発現しない患者と比べて医薬品による治療（例えば、ＶＥＧＦアンタゴニスト、例えば、抗ＶＥＧＦ抗体を含む治療）に応答性である可能性が増加していると予測される患者を特定する。一実施形態では、バイオマーカー（例えば、例えばＩＨＣを使用して決定される腫瘍浸潤性免疫細胞におけるＣＤ８Ａ発現）を使用して、バイオマーカーを同レベルで発現しない患者と比べて医薬品（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体）による治療に応答性である可能性が増加していると予測される患者を特定する。一実施形態では、バイオマーカーの存在を使用して、バイオマーカーの存在を有しない患者と比べて医薬品による治療に応答する可能性がより高い患者を特定する。別の実施形態では、バイオマーカーの存在を使用して、患者が、バイオマーカーの存在を有しない患者と比べて医薬品による治療から利益を受ける可能性が増加するであろうことを決定する。
【０２１８】
「奏効」は、完全奏効（ＣＲ）または部分奏効（ＰＲ）を含む測定可能な応答を指す。いくつかの実施形態では、「奏効率（ＯＲＲ）」は、完全奏効（ＣＲ）率及び部分奏効（ＰＲ）率の合計を指す。
【０２１９】
「完全奏効」または「ＣＲ」により、治療に応答したがんの全ての徴候の消滅（例えば、全ての標的病巣の消滅）が意図される。これは、必ずしもがんが治癒されたことを意味しない。
【０２２０】
本明細書で使用される場合、「部分奏効」または「ＰＲ」は、治療に応答した、１つ以上の腫瘍もしくは病巣のサイズ、または身体内のがんの範囲の低下を指す。例えば、いくつかの実施形態において、ＰＲは、ベースラインＳＬＤを参照として、標的病変の長径和（ＳＬＤ）における少なくとも３０％の低減を指す。
【０２２１】
「持続的応答」とは、治療の休止後の腫瘍成長の低下に対する持続的効果を指す。例えば、腫瘍サイズは、投与期の開始時のサイズと比較して同じサイズのままであるか、またはより小さくなり得る。いくつかの実施形態では、持続的応答は、治療期間と少なくとも同じか、治療期間の長さの少なくとも１．５倍、２．０倍、２．５倍、もしくは３．０倍か、またはそれ以上の期間を有する。
【０２２２】
本明細書で使用される場合、「安定疾患」または「ＳＤ」は、治療開始以来の最小ＳＬＤを参照として、ＰＲと言えるほどの十分な標的病変の収縮も、ＰＤと言えるほどの十分な増加もないことを指す。
【０２２３】
本明細書で使用される場合、「進行性疾患」または「ＰＤ」は、治療開始以来記録された最小ＳＬＤ、または１つ以上の新たな病変の存在を参照として、標的病変のＳＬＤの少なくとも２０％の増加を指す。
【０２２４】
「生存」という用語は、患者が生存していることを指し、全生存及び無進行生存を含む。
【０２２５】
本発明との関連における「無進行生存」という用語は、治療にあたっている医師または研究者の評定により、患者の疾患が悪化しない、即ち、進行しない、治療中及び治療後の期間を指す。当業者であれば、患者の無進行生存は、似た状況の患者の対照群の平均または中間無進行生存期間と比較して、患者の疾患が進行しない期間がより長い場合に、改善または増強されることを理解するであろう。
【０２２６】
本明細書で使用される場合、「全生存」（ＯＳ）は、特定の期間後に生きている可能性が高い、群における個体のパーセンテージを指す。
【０２２７】
「生存延長」による意味は、治療されていない患者と比べて（即ち、医薬品によって治療されていない患者と比べて）、または指定されたレベルでバイオマーカーを発現しない患者と比べて、かつ／または認可されている抗腫瘍剤（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体）によって治療された患者と比べて、治療された患者における全生存または無進行生存が増加することである。
【０２２８】
「利益」という用語は、最も広義に使用され、任意の望ましい効果を指し、本明細書に定義される臨床的利益を特に含む。臨床的利益は、様々なエンドポイントを評定することによって測定され得、これらのエンドポイントは、例えば、減速及び完全阻止を含む、疾患進行のある程度の阻害；疾患の発作及び／もしくは症状の数の低減；病巣サイズの低減；隣接する末梢器官及び／もしくは組織への疾患細胞浸潤の阻害（即ち、低減、減速、または完全停止）；疾患蔓延の阻害（即ち、低減、減速、または完全停止）；疾患病変の退縮または除去につながり得るが必ずしもそうではない自己免疫応答の減少；障害と関連付けられる１つ以上の症状のある程度の軽減；治療後の無疾患提示、例えば、無進行生存の長さの増加；増加した全生存；より高い応答率；ならびに／または治療後の所定の時点における低下した死亡率である。
【０２２９】
ＩＩＩ．方法
一態様では、本発明は、１つ以上の免疫学的バイオマーカー（例えば、ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、ＰＲＦ１、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、ＣＸＣＬ１３、ＫＬＲＫ１、ＳＬＡＭＦ７、ＭＨＣ−Ｉ、ＣＸ３ＣＲ１、ＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＣＣＲ５、ＣＣＲ７、ＣＸ３ＣＬ１）の発現レベルの変化及び／または免疫細胞（例えば、ＣＤ８＋Ｔｅｆｆ細胞）の腫瘍浸潤が、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）を含む抗がん療法に対する患者応答と関連付けられるという予期せぬ発見に一部基づく。ある特定の実施形態では、かかるバイオマーカーの発現に従って患者の治療に対する応答をモニタリングする方法が提供される。他の実施形態では、かかるバイオマーカーの発現レベルまたは数に従う治療の方法が提供される。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニストを含む抗がん療法の利益を得る可能性が高いがん患者を特定する方法が提供される。いくつかの実施形態では、がん患者のためにＶＥＧＦアンタゴニストを含む抗がん療法を選択する方法が提供される。本発明は、がんを有する患者を治療するための方法も提供する。いくつかの事例では、本発明の方法は、本発明のバイオマーカーの発現レベルに基づいて、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）を含む抗がん療法を患者に施すことを含む。いくつかの実施形態では、本方法は、ＶＥＧＦアンタゴニストと組み合わせた第２の治療薬、例えば、ＰＤ−Ｌ１軸結合アンタゴニスト（例えば、ＰＤ−Ｌ１アンタゴニスト、例えば、アテゾリズマブ）を投与することを更に含む。
【０２３０】
Ａ．治療に対する応答のモニタリング、診断、予後、及び患者選択の方法
本発明は、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、ベバシズマブなどの抗ＶＥＧＦ抗体）に対する応答と相関するがん（例えば、腎臓癌）のバイオマーカー（例えば、免疫学的バイオマーカー）の特定、選択、及び使用に関する。この点において、本発明は、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、ベバシズマブなどの抗ＶＥＧＦ抗体）を含む抗がん療法に対して感受性または応答性である患者を特定するために、本発明のバイオマーカーのうちの１つ以上の、その１つ以上のバイオマーカーについての参照レベル（複数可）と比べた発現プロファイル（複数可）を使用することに関する。いくつかの事例では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、ベバシズマブなどの抗ＶＥＧＦ抗体）の投与は、参照レベル（複数可）に対する１つ以上のバイオマーカーの発現レベル（複数可）の決定及び／または比較に基づく。
【０２３１】
本発明は、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、ベバシズマブなどの抗ＶＥＧＦ抗体）による治療に対するがん（例えば、腎臓癌）を有する患者の応答をモニタリングする方法を提供し、本方法は、患者から得られた生体試料における１つ以上の免疫学的バイオマーカーの発現レベルを決定すること、及び試料における１つ以上のバイオマーカーの発現レベルを参照レベルと比較し、それにより、ＶＥＧＦアンタゴニストによる治療に対する患者の応答をモニタリングすることを伴う。いくつかの実施形態では、発現レベルは、参照レベルと比べて増加する。例示的な免疫学的バイオマーカーのリストが以下で表２に示される。いくつかの実施形態では、本方法は、以下で表２に示されるバイオマーカーの発現レベルに基づいて、患者のためにＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、ベバシズマブなどの抗ＶＥＧＦ抗体）を選択することを伴う。
表２．例示的な免疫学的バイオマーカー
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【０２３２】
他の実施形態では、本発明は、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、ベバシズマブなどの抗ＶＥＧＦ抗体）による治療から利益を得る可能性が高いがん（例えば、腎臓癌）を有する患者を特定する方法を提供し、本方法は、患者から得られた生体試料における１つ以上の免疫学的バイオマーカーの発現レベルを決定すること、及び試料における１つ以上のバイオマーカーの発現レベルを参照レベルと比較し、それにより、患者を、ＶＥＧＦアンタゴニストによる治療から利益を得る可能性が高いとして特定することを含む。いくつかの実施形態では、参照レベルと比べた生体試料における１つ以上の免疫学的バイオマーカーの発現レベルの変化（例えば、増加または減少）により、患者は、ＶＥＧＦアンタゴニストによる治療から利益を得る可能性が高い患者として特定される。いくつかの実施形態では、免疫学的バイオマーカーは表２に示される。他の実施形態では、免疫学的バイオマーカーはＭＨＣ−Ｉである。
【０２３３】
別の実施形態では、本発明は、がん（例えば、腎臓癌）の診断または予後診断を行う方法を提供し、本方法は、患者から得られた生体試料における１つ以上の免疫学的バイオマーカーの発現レベルを決定すること、及び試料における１つ以上のバイオマーカーの発現レベルを参照レベルと比較し、それにより、がんの診断または予後診断を行うことを伴う。いくつかの実施形態では、参照レベルと比べた生体試料における１つ以上の免疫学的バイオマーカーの発現レベルの変化（例えば、増加または減少）により、患者が診断または予後診断される。いくつかの実施形態では、免疫学的バイオマーカーは表２に示される。他の実施形態では、免疫学的バイオマーカーはＭＨＣ−Ｉである。
【０２３４】
更に別の実施形態では、本発明は、がん（例えば、腎臓癌）を有する患者が、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、ベバシズマブなどの抗ＶＥＧＦ抗体）を含む抗がん療法による治療に応答する可能性が高いかどうかを決定する方法を提供し、本方法は、患者から得られた生体試料における１つ以上の免疫学的バイオマーカーの発現レベルを決定すること、及び試料における１つ以上のバイオマーカーの発現レベルを参照レベルと比較し、それにより、患者を、抗がん療法に応答する可能性が高い患者として特定することを含む。いくつかの実施形態では、参照レベルと比べた生体試料における１つ以上の免疫学的バイオマーカーの発現レベルの変化（例えば、増加または減少）により、患者は、抗がん療法による治療に応答する可能性が高いとして特定される。いくつかの実施形態では、免疫学的バイオマーカーは表２に示される。他の実施形態では、免疫学的バイオマーカーはＭＨＣ−Ｉである。
【０２３５】
他の実施形態では、本発明は、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、ベバシズマブなどの抗ＶＥＧＦ抗体）を含む抗がん療法の治療有効性を最適化する方法を提供し、本方法は、患者から得られた生体試料における１つ以上の免疫学的バイオマーカーの発現レベルを決定すること、及び試料における１つ以上のバイオマーカーの発現レベルを参照レベルと比較することを伴い、ここでは、参照レベルと比べた生体試料における１つ以上の免疫学的バイオマーカーの発現レベルの変化（例えば、増加または減少）により、抗がん療法に応答する可能性が高い患者が特定される。いくつかの実施形態では、免疫学的バイオマーカーは表２に示される。他の実施形態では、免疫学的バイオマーカーはＭＨＣ−Ｉである。
【０２３６】
なお更なる実施形態では、本発明は、がん（例えば、腎臓癌）を有する患者のためにＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、ベバシズマブなどの抗ＶＥＧＦ抗体）を含む抗がん療法を選択する方法を提供し、本方法は、患者から得られた生体試料における１つ以上の免疫学的バイオマーカーの発現レベルを決定すること、生体試料における１つ以上のバイオマーカーの発現レベルを参照レベルと比較すること、及び１つ以上の免疫学的バイオマーカーの発現レベルに基づいて、患者のためにＶＥＧＦアンタゴニストを含む抗がん療法を選択することを伴う。いくつかの実施形態では、参照レベルと比べた生体試料における１つ以上の免疫学的バイオマーカーの発現レベルの変化（例えば、増加または減少）を使用して、抗がん療法が選択される。いくつかの実施形態では、免疫学的バイオマーカーは表２に示される。他の実施形態では、免疫学的バイオマーカーはＭＨＣ−Ｉである。
【０２３７】
いくつかの実施形態では、本発明は、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、ベバシズマブなどの抗ＶＥＧＦ抗体）による治療に対するがんを有する患者の応答をモニタリングする方法を提供し、本方法は、抗がん療法の実施後の時点で患者から得られた生体試料において、ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、ＰＲＦ１、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、ＣＸＣＬ１３、ＫＬＲＫ１、及び／またはＳＬＡＭＦ７のうちの１個以上（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、または１３個）の発現レベルを決定すること、ならびにＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、ＰＲＦ１、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、ＣＸＣＬ１３、ＫＬＲＫ１、及び／またはＳＬＡＭＦ７のうちの１個以上（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、または１３個）の発現レベルを参照レベルと比較し、それにより、ＶＥＧＦアンタゴニストによる治療に対する患者における応答をモニタリングすることを伴う。
【０２３８】
他の実施形態では、本発明は、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、ベバシズマブなどの抗ＶＥＧＦ抗体）による治療から利益を得る可能性が高いがん（例えば、腎臓癌）を有する患者を特定する方法を提供し、本方法は、患者から得られた生体試料における、ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、ＰＲＦ１、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、ＣＸＣＬ１３、ＫＬＲＫ１、及び／またはＳＬＡＭＦ７のうちの１個以上（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、または１３個）の発現レベルを決定すること、ならびに生体試料における、ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、ＰＲＦ１、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、ＣＸＣＬ１３、ＫＬＲＫ１、及び／またはＳＬＡＭＦ７のうちの１個以上の発現レベルを参照レベルと比較し、それにより、患者を、ＶＥＧＦアンタゴニストによる治療から利益を得る可能性が高いとして特定することを伴う。いくつかの実施形態では、参照レベルと比べた生体試料における、ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、ＰＲＦ１、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、ＣＸＣＬ１３、ＫＬＲＫ１、及び／またはＳＬＡＭＦ７のうちの１つ以上の発現レベルの変化（例えば、増加または減少）により、患者は、ＶＥＧＦアンタゴニストによる治療から利益を得る可能性が高いとして特定される。いくつかの実施形態では、変化は増加である。他の実施形態では、変化は減少である。
【０２３９】
別の実施形態では、本発明は、がん（例えば、腎臓癌）の診断または予後診断を行う方法を提供し、本方法は、患者から得られた生体試料におけるＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、ＰＲＦ１、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、ＣＸＣＬ１３、ＫＬＲＫ１、及び／またはＳＬＡＭＦ７のうちの１個以上（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、または１３個）の発現レベルを決定すること、及び生体試料におけるＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、ＰＲＦ１、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、ＣＸＣＬ１３、ＫＬＲＫ１、及び／またはＳＬＡＭＦ７のうちの１つ以上の発現レベルを参照レベルと比較し、それにより、がんの診断または予後診断を行うことを伴う。いくつかの実施形態では、参照レベルと比べた生体試料における、ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、ＰＲＦ１、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、ＣＸＣＬ１３、ＫＬＲＫ１、及び／またはＳＬＡＭＦ７のうちの１つ以上の発現レベルの変化（例えば、増加または減少）により、患者が診断または予後診断される。いくつかの実施形態では、変化は増加である。他の実施形態では、変化は減少である。
【０２４０】
更に別の実施形態では、本発明は、がん（例えば、腎臓癌）を有する患者が、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、ベバシズマブなどの抗ＶＥＧＦ抗体）を含む抗がん療法による治療に応答する可能性が高いかどうかを決定する方法を提供し、本方法は、患者から得られた生体試料における、ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、ＰＲＦ１、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、ＣＸＣＬ１３、ＫＬＲＫ１、及び／またはＳＬＡＭＦ７のうちの１個以上（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、または１３個）の発現レベルを決定すること、及び生体試料におけるＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、ＰＲＦ１、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、ＣＸＣＬ１３、ＫＬＲＫ１、及び／またはＳＬＡＭＦ７のうちの１個以上の発現レベルを参照レベルと比較し、それにより、患者を、抗がん療法に応答する可能性が高い患者として特定することを含む。いくつかの実施形態では、参照レベルと比べた生体試料における、ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、ＰＲＦ１、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、ＣＸＣＬ１３、ＫＬＲＫ１、及び／またはＳＬＡＭＦ７のうちの１個以上の発現レベルの変化（例えば、増加または減少）により、患者は、抗がん療法による治療に応答する可能性が高いとして特定される。いくつかの実施形態では、変化は増加である。他の実施形態では、変化は減少である。
【０２４１】
他の実施形態では、本発明は、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、ベバシズマブなどの抗ＶＥＧＦ抗体）を含む抗がん療法の治療有効性を最適化する方法を提供し、本方法は、患者から得られた生体試料における、ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、ＰＲＦ１、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、ＣＸＣＬ１３、ＫＬＲＫ１、及び／またはＳＬＡＭＦ７のうちの１個以上（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、または１３個）の発現レベルを決定すること、及び試料における生体試料における、ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、ＰＲＦ１、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、ＣＸＣＬ１３、ＫＬＲＫ１、及び／またはＳＬＡＭＦ７のうちの１個以上の発現レベルを参照レベルと比較することを伴い、ここでは、参照レベルと比べた生体試料における生体試料における、ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、ＰＲＦ１、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、ＣＸＣＬ１３、ＫＬＲＫ１、及び／またはＳＬＡＭＦ７のうちの１個以上の発現レベルの変化（例えば、増加または減少）により、抗がん療法に応答する可能性が高い患者が特定される。いくつかの実施形態では、変化は増加である。他の実施形態では、変化は減少である。
【０２４２】
なお更なる実施形態では、本発明は、がん（例えば、腎臓癌）を有する患者のためにＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、ベバシズマブなどの抗ＶＥＧＦ抗体）を含む抗がん療法を選択する方法を提供し、本方法は、患者から得られた生体試料における、ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、ＰＲＦ１、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、ＣＸＣＬ１３、ＫＬＲＫ１、及び／またはＳＬＡＭＦ７のうちの１個以上（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、または１３個）の発現レベルを決定すること、生体試料における、ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、ＰＲＦ１、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、ＣＸＣＬ１３、ＫＬＲＫ１、及び／またはＳＬＡＭＦ７のうちの１個以上の発現レベルを参照レベルと比較すること、ならびに参照レベルと比べた生体試料における、ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、ＰＲＦ１、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、ＣＸＣＬ１３、ＫＬＲＫ１、及び／またはＳＬＡＭＦ７のうちの１個以上の発現レベルに基づいて、患者のためにＶＥＧＦアンタゴニストを含む抗がん療法を選択することを伴う。いくつかの実施形態では、参照レベルと比べた生体試料における、ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、ＰＲＦ１、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、ＣＸＣＬ１３、ＫＬＲＫ１、及び／またはＳＬＡＭＦ７のうちの１個以上の発現レベルの変化（例えば、増加または減少）を使用して、抗がん療法が選択される。いくつかの実施形態では、変化は増加である。他の実施形態では、変化は減少である。
【０２４３】
先行する方法のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、またはＰＲＦ１のうちの１個以上（例えば、１、２、３、４、５、６、または７個）の発現レベルは、腫瘍微小環境中のＣＤ８＋Ｔエフェクター（Ｔｅｆｆ）細胞の存在と相関する。いくつかの実施形態では、ＧＺＭＢ、ＫＬＲＫ１、またはＳＬＡＭＦ７のうちの１個以上（例えば、１、２、または３個）の発現レベルは、腫瘍微小環境中のナチュラルキラー（ＮＫ）細胞の存在と相関する。ＣＤ８＋Ｔｅｆｆ細胞及び／またはＮＫ細胞の存在を検出する方法は、本明細書に記載され、例えば、腫瘍試料細胞に対するフローサイトメトリー分析（例えば、腫瘍生検における腫瘍浸潤性免疫細胞の分析）を含む。ある特定の実施形態では、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、またはＣＸＣＬ１３のうちの１個以上（例えば、１、２、３、または４個）の発現レベルは、腫瘍微小環境中のＴｈ１ケモカインの存在と相関する。腫瘍微小環境中のＴｈ１ケモカインの存在を検出する方法は、本明細書に記載され、例えば、腫瘍試料（例えば、腫瘍生検溶解物）に対する酵素結合免疫吸着アッセイ（「ＥＬＩＳＡ」）分析を含む。
【０２４４】
先行する方法のうちのいずれかのある特定の実施形態では、ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、またはＰＲＦ１のうちの１個以上（例えば、１、２、３、４、５、６、または７個）の発現レベルが決定される。いくつかの実施形態では、ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、またはＰＲＦ１のうちの少なくとも２個、少なくとも３個、少なくとも４個、少なくとも５個、または少なくとも６個の発現レベルが決定される。いくつかの実施形態では、ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、及びＰＲＦ１の発現レベルが決定される。いくつかの実施形態では、ＣＤ８Ａのレベルは、参照レベルと比較して、約１倍〜約１０倍（例えば、約１倍、約２倍、約３倍、約４倍、約５倍、約６倍、約７倍、約８倍、約９倍、約１０倍、約２倍〜約７倍、約３倍〜約６倍、または約４倍〜約５倍）増加する。いくつかの実施形態では、ＣＤ８Ａのレベルは、参照レベルと比較して、約７倍以上（例えば、約７倍、８倍、９倍、１０倍、１５倍、２０倍、５０倍、１００倍、１０００倍以上）増加する。いくつかの実施形態では、ＣＤ８Ｂのレベルは、参照レベルと比較して、約１倍〜約１０倍（例えば、約１倍、約２倍、約３倍、約４倍、約５倍、約６倍、約７倍、約８倍、約９倍、約１０倍、約２倍〜約７倍、約３倍〜約６倍、または約４倍〜約５倍）増加する。いくつかの実施形態では、ＣＤ８Ｂのレベルは、参照レベルと比較して、約７倍以上（例えば、約７倍、８倍、９倍、１０倍、１５倍、２０倍、５０倍、１００倍、１０００倍以上）増加する。いくつかの実施形態では、ＥＯＭＥＳのレベルは、参照レベルと比較して、約１倍〜約１０倍（例えば、約１倍、約２倍、約３倍、約４倍、約５倍、約６倍、約７倍、約８倍、約９倍、約１０倍、約２倍〜約７倍、約３倍〜約６倍、または約４倍〜約５倍）増加する。いくつかの実施形態では、ＥＯＭＥＳのレベルは、参照レベルと比較して、約７倍以上（例えば、約７倍、８倍、９倍、１０倍、１５倍、２０倍、５０倍、１００倍、１０００倍以上）増加する。いくつかの実施形態では、ＧＺＭＡのレベルは、参照レベルと比較して、約１倍〜約１０倍（例えば、約１倍、約２倍、約３倍、約４倍、約５倍、約６倍、約７倍、約８倍、約９倍、約１０倍、約２倍〜約７倍、約３倍〜約６倍、または約４倍〜約５倍）増加する。いくつかの実施形態では、ＧＺＭＡのレベルは、参照レベルと比較して、約７倍以上（例えば、約７倍、８倍、９倍、１０倍、１５倍、２０倍、５０倍、１００倍、１０００倍以上）増加する。いくつかの実施形態では、ＧＺＭＢのレベルは、参照レベルと比較して、約１倍〜約１０倍（例えば、約１倍、約２倍、約３倍、約４倍、約５倍、約６倍、約７倍、約８倍、約９倍、約１０倍、約２倍〜約７倍、約３倍〜約６倍、または約４倍〜約５倍）増加する。いくつかの実施形態では、ＧＺＭＢのレベルは、参照レベルと比較して、約７倍以上（例えば、約７倍、８倍、９倍、１０倍、１５倍、２０倍、５０倍、１００倍、１０００倍以上）増加する。いくつかの実施形態では、ＩＦＮＧのレベルは、参照レベルと比較して、約１倍〜約１０倍（例えば、約１倍、約２倍、約３倍、約４倍、約５倍、約６倍、約７倍、約８倍、約９倍、約１０倍、約２倍〜約７倍、約３倍〜約６倍、または約４倍〜約５倍）増加する。いくつかの実施形態では、ＩＦＮＧのレベルは、参照レベルと比較して、約７倍以上（例えば、約７倍、８倍、９倍、１０倍、１５倍、２０倍、５０倍、１００倍、１０００倍以上）増加する。いくつかの実施形態では、ＰＲＦ１のレベルは、参照レベルと比較して、約１倍〜約１０倍（例えば、約１倍、約２倍、約３倍、約４倍、約５倍、約６倍、約７倍、約８倍、約９倍、約１０倍、約２倍〜約７倍、約３倍〜約６倍、または約４倍〜約５倍）増加する。いくつかの実施形態では、ＰＲＦ１のレベルは、参照レベルと比較して、約７倍以上（例えば、約７倍、８倍、９倍、１０倍、１５倍、２０倍、５０倍、１００倍、１０００倍以上）増加する。
【０２４５】
先行する方法のうちのいずれかのある特定の実施形態では、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、またはＣＸＣＬ１３のうちの１個以上（例えば、１、２、３、または４個）の発現レベルが決定される。いくつかの実施形態では、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、またはＣＸＣＬ１３のうちの少なくとも２個または少なくとも３個の発現レベルが決定される。いくつかの実施形態では、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、及びＣＸＣＬ１３の発現レベルが決定される。いくつかの実施形態では、ＣＸＣＬ９のレベルは、参照レベルと比較して、約１倍〜約１０倍（例えば、約１倍、約２倍、約３倍、約４倍、約５倍、約６倍、約７倍、約８倍、約９倍、約１０倍、約２倍〜約７倍、約３倍〜約６倍、または約４倍〜約５倍）増加する。いくつかの実施形態では、ＣＸＣＬ９のレベルは、参照レベルと比較して、約７倍以上（例えば、約７倍、８倍、９倍、１０倍、１５倍、２０倍、５０倍、１００倍、１０００倍以上）増加する。いくつかの実施形態では、ＣＸＣＬ１０のレベルは、参照レベルと比較して、約１倍〜約１０倍（例えば、約１倍、約２倍、約３倍、約４倍、約５倍、約６倍、約７倍、約８倍、約９倍、約１０倍、約２倍〜約７倍、約３倍〜約６倍、または約４倍〜約５倍）増加する。いくつかの実施形態では、ＣＸＣＬ１０のレベルは、参照レベルと比較して、約７倍以上（例えば、約７倍、８倍、９倍、１０倍、１５倍、２０倍、５０倍、１００倍、１０００倍以上）増加する。いくつかの実施形態では、ＣＸＣＬ１１のレベルは、参照レベルと比較して、約１倍〜約１０倍（例えば、約１倍、約２倍、約３倍、約４倍、約５倍、約６倍、約７倍、約８倍、約９倍、約１０倍、約２倍〜約７倍、約３倍〜約６倍、または約４倍〜約５倍）増加する。いくつかの実施形態では、ＣＸＣＬ１１のレベルは、参照レベルと比較して、約７倍以上（例えば、７倍、８倍、９倍、１０倍、１５倍、２０倍、５０倍、１００倍、１０００倍以上）増加する。いくつかの実施形態では、ＣＸＣＬ１３のレベルは、参照レベルと比較して、約１倍〜約１０倍（例えば、約１倍、約２倍、約３倍、約４倍、約５倍、約６倍、約７倍、約８倍、約９倍、約１０倍、約２倍〜約７倍、約３倍〜約６倍、または約４倍〜約５倍）増加する。いくつかの実施形態では、ＣＸＣＬ１３のレベルは、参照レベルと比較して、約７倍以上（例えば、約７倍、８倍、９倍、１０倍、１５倍、２０倍、５０倍、１００倍、１０００倍以上）増加する。
【０２４６】
先行する方法のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、ＧＺＭＢ、ＫＬＲＫ１、またはＳＬＡＭＦ７のうちの１個以上（例えば、１、２、または３個）の発現レベルが決定される。いくつかの実施形態では、ＧＺＭＢ、ＫＬＲＫ１、またはＳＬＡＭＦ７のうちの少なくとも２個（例えば、２個または３個）の発現レベルが決定される。いくつかの実施形態では、ＧＺＭＢ、ＫＬＲＫ１、及びＳＬＡＭＦ７の発現レベルが決定される。いくつかの実施形態では、ＧＺＭＢのレベルは、参照レベルと比較して、約１倍〜約１０倍（例えば、約１倍、約２倍、約３倍、約４倍、約５倍、約６倍、約７倍、約８倍、約９倍、約１０倍、約２倍〜約９倍、約３倍〜約８倍、約４倍〜約７倍、約５倍〜約６倍）増加する。いくつかの実施形態では、ＧＺＭＢのレベルは、参照レベルと比較して、約９倍以上（例えば、約９倍、１０倍、１５倍、２０倍、５０倍、１００倍、１０００倍以上）増加する。いくつかの実施形態では、ＫＬＲＫ１のレベルは、参照レベルと比較して、約１倍〜約１０倍（例えば、約１倍、約２倍、約３倍、約４倍、約５倍、約６倍、約７倍、約８倍、約９倍、約１０倍、約２倍〜約９倍、約３倍〜約８倍、約４倍〜約７倍、約５倍〜約６倍）増加する。いくつかの実施形態では、ＫＬＲＫ１のレベルは、参照レベルと比較して、約９倍以上（例えば、約９倍、１０倍、１５倍、２０倍、５０倍、１００倍、１０００倍以上）増加する。いくつかの実施形態では、ＳＬＡＭＦ７のレベルは、参照レベルと比較して、約１倍〜約１０倍（例えば、約１倍、約２倍、約３倍、約４倍、約５倍、約６倍、約７倍、約８倍、約９倍、約１０倍、約２倍〜約９倍、約３倍〜約８倍、約４倍〜約７倍、約５倍〜約６倍）増加する。いくつかの実施形態では、ＳＬＡＭＦ７のレベルは、参照レベルと比較して、約９倍以上（例えば、約９倍、１０倍、１５倍、２０倍、５０倍、１００倍、１０００倍以上）増加する。
【０２４７】
先行する方法のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、患者から得られた生体試料における、ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、ＰＲＦ１、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、ＣＸＣＬ１３、ＫＬＲＫ１、及び／またはＳＬＡＭＦ７のうちの１個以上（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、または１３個）の発現レベルは、参照レベルと比べて増加する（例えば、約１．１倍、約１．２倍、約１．３倍、約１．４倍、約１．５倍、約１．６倍、約１．７倍、約１．８倍、約１．９倍、約２倍、約２．１倍、約２．２倍、約２．３倍、約２．４倍、約２．５倍、約３倍、約３．５倍、約４倍、約４．５倍、約５倍、約５．５倍、約６倍、約６．５倍、約７倍、約７．５倍、約８倍、約８．５倍、約９倍、約９．５倍、約１０倍、約１１倍、約１２倍、約１３倍、約１４倍、約１５倍、約１６倍、約１７倍、約１８倍、約１９倍、約２０倍、約３０倍、約４０倍、約５０倍、約１００倍、約５００倍、約１，０００倍以上）。
【０２４８】
先行する方法のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、参照レベルは、抗がん療法の実施前（例えば、数分、数時間、数日、数週（例えば、１、２、３、４、５、６、または７週）、数カ月、または数年前）に得られた患者由来の生体試料における１個以上の遺伝子（例えば、ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、ＰＲＦ１、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、ＣＸＣＬ１３、ＫＬＲＫ１、及び／またはＳＬＡＭＦ７）の発現レベルである。ある特定の実施形態では、参照レベルは、参照集団における１つ以上の遺伝子の発現レベルである。ある特定の実施形態では、参照レベルは、１つ以上の遺伝子について事前に割り当てられた発現レベルである。いくつかの実施形態では、参照レベルは、前の時点で患者から得られた生体試料における１つ以上の遺伝子の発現レベルであり、前の時点とは、抗がん療法の投与の後である。他の実施形態では、参照レベルは、次なる時点（例えば、ＶＥＧＦアンタゴニストの投与後数分、数時間、数日、数週、数カ月、または数年）で患者から得られた生体試料における１つ以上の遺伝子の発現レベルである。
【０２４９】
別の態様では、本発明は、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、ベバシズマブなどの抗ＶＥＧＦ抗体）による治療に対するがんを有する患者の応答をモニタリングする方法を提供し、本方法は、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、ベバシズマブなどの抗ＶＥＧＦ抗体）を含む抗がん療法の実施後の時点で患者から得られた生体試料におけるＭＨＣ−Ｉの発現レベルを決定すること、及び生体試料におけるＭＨＣ−Ｉの発現レベルを参照レベルと比較し、それによりＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、ベバシズマブなどの抗ＶＥＧＦ抗体）を含む抗がん療法による治療に対する患者の応答をモニタリングすることを伴う。いくつかの実施形態では、患者から得られた生体試料における発現レベルは、参照レベルと比べて増加する。
【０２５０】
他の実施形態では、本発明は、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、ベバシズマブなどの抗ＶＥＧＦ抗体）による治療から利益を得る可能性が高いがん（例えば、腎臓癌）を有する患者を特定する方法を提供し、本方法は、患者から得られた生体試料におけるＭＨＣ−Ｉの発現レベルを決定すること、及び生体試料におけるＭＨＣ−Ｉの発現レベルを参照レベルと比較し、それにより、患者を、ＶＥＧＦアンタゴニストによる治療から利益を得る可能性が高いとして特定することを伴う。いくつかの実施形態では、参照レベルと比べた生体試料におけるＭＨＣ−Ｉの発現レベルの変化（例えば、増加または減少）により、患者は、ＶＥＧＦアンタゴニストによる治療から利益を得る可能性が高いとして特定される。いくつかの実施形態では、変化は増加である。他の実施形態では、変化は減少である。
【０２５１】
別の実施形態では、本発明は、がん（例えば、腎臓癌）の診断または予後診断を行う方法を提供し、本方法は、患者から得られた生体試料におけるＭＨＣ−Ｉの発現レベルを決定すること、及び患者試料におけるＭＨＣ−Ｉの発現レベルを参照レベルと比較し、がんの診断または予後診断を行うことを伴う。いくつかの実施形態では、参照レベルと比べた生体試料におけるＭＨＣ−Ｉの発現レベルの変化（例えば、増加または減少）により、患者が診断または予後診断される。いくつかの実施形態では、変化は増加である。他の実施形態では、変化は減少である。
【０２５２】
更に別の実施形態では、本発明は、がん（例えば、腎臓癌）を有する患者が、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、ベバシズマブなどの抗ＶＥＧＦ抗体）を含む抗がん療法による治療に応答する可能性が高いかどうかを決定する方法を提供し、本方法は、患者から得られた生体試料におけるＭＨＣ−Ｉの発現レベルを決定すること、及び患者試料におけるＭＨＣ−Ｉの発現レベルを参照レベルと比較し、それにより、患者を、抗がん療法に応答する可能性が高い患者として特定することを含む。いくつかの実施形態では、参照レベルと比べた生体試料におけるＭＨＣ−Ｉの発現レベルの変化（例えば、増加または減少）により、患者は、抗がん療法による治療に応答する可能性が高いとして特定される。いくつかの実施形態では、変化は増加である。他の実施形態では、変化は減少である。
【０２５３】
他の実施形態では、本発明は、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、ベバシズマブなどの抗ＶＥＧＦ抗体）を含む抗がん療法の治療有効性を最適化する方法を提供し、本方法は、患者から得られた生体試料におけるＭＨＣ−Ｉの発現レベルを決定すること、及び患者試料におけるＭＨＣ−Ｉの発現レベルを参照レベルと比較することを伴い、ここでは、参照レベルと比べた生体試料におけるＭＨＣ−Ｉの発現レベルの変化（例えば、増加または減少）により、抗がん療法に応答する可能性が高い患者が特定される。いくつかの実施形態では、変化は増加である。他の実施形態では、変化は減少である。
【０２５４】
なお更なる実施形態では、本発明は、がん（例えば、腎臓癌）を有する患者のためにＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、ベバシズマブなどの抗ＶＥＧＦ抗体）を含む抗がん療法を選択する方法を提供し、本方法は、患者から得られた生体試料におけるＭＨＣ−Ｉの発現レベルを決定すること、生体試料におけるＭＨＣ−Ｉの発現レベルを参照レベルと比較すること、及び患者試料におけるＭＨＣ−Ｉの発現レベルに基づいて、患者のためにＶＥＧＦアンタゴニストを含む抗がん療法を選択することを伴う。いくつかの実施形態では、参照レベルと比べた生体試料におけるＭＨＣ−Ｉの発現レベルの変化（例えば、増加または減少）を使用して、抗がん療法が選択される。いくつかの実施形態では、変化は増加である。他の実施形態では、変化は減少である。
【０２５５】
先行する方法のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、ＭＨＣ−Ｉの発現レベルは、任意のヒト白血球抗原クラスＩ（ＨＬＡ−Ｉ）遺伝子もしくは偽遺伝子（例えば、ＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−Ｂ、ＨＬＡ−Ｃ、ＨＬＡ−Ｅ、ＨＬＡ−Ｆ、ＨＬＡ−Ｇ、ＨＬＡ−Ｋ、またはＨＬＡ−Ｌ）またはそのハプロタイプの発現レベルを、本明細書に記載の検出方法のうちのいずれかによって決定することで評定される。いくつかの実施形態では、ＭＨＣ−Ｉの発現レベルは、ＭＨＣ−Ｉアルファ鎖またはＨＬＡ−Ｉ組織適合抗原アルファ鎖のタンパク質発現によって評定される。いくつかの実施形態では、ＭＨＣ−Ｉの発現レベルは免疫組織化学によって決定される。
【０２５６】
先行する方法のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、参照レベルは、抗がん療法の実施前（例えば、数分、数時間、数日、数週（例えば、１、２、３、４、５、６、または７週）、数カ月、または数年前）に得られた患者由来の生体試料におけるＭＨＣ−Ｉの発現レベルである。他の実施形態では、参照レベルは、参照集団におけるＭＨＣ−Ｉの発現レベルである。他の実施形態では、参照レベルは、ＭＨＣ−Ｉについて事前に割り当てられた発現レベルである。他の実施形態では、参照レベルは、前の時点で患者から得られた生体試料におけるＭＨＣ−Ｉの発現レベルであり、前の時点とは、抗がん療法の実施の後である。他の実施形態では、参照レベルは、次なる時点（例えば、ＶＥＧＦアンタゴニストの投与後数分、数時間、数日、数週、数カ月、または数年）で患者から得られた生体試料におけるＭＨＣ−Ｉの発現レベルである。
【０２５７】
先行する方法のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、患者から得られた生体試料におけるＭＨＣ−Ｉの発現レベルは、参照レベルと比べて増加する（例えば、約１．１倍、約１．２倍、約１．３倍、約１．４倍、約１．５倍、約１．６倍、約１．７倍、約１．８倍、約１．９倍、約２倍、約２．１倍、約２．２倍、約２．３倍、約２．４倍、約２．５倍、約３倍、約３．５倍、約４倍、約４．５倍、約５倍、約５．５倍、約６倍、約６．５倍、約７倍、約７．５倍、約８倍、約８．５倍、約９倍、約９．５倍、約１０倍、約１１倍、約１２倍、約１３倍、約１４倍、約１５倍、約１６倍、約１７倍、約１８倍、約１９倍、約２０倍、約３０倍、約４０倍、約５０倍、約１００倍、約５００倍、約１，０００倍以上）。いくつかの実施形態では、患者から得られた生体試料におけるＭＨＣ−Ｉの発現レベルは、少なくとも約２倍増加する。
【０２５８】
更なる態様では、本発明は、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、ベバシズマブなどの抗ＶＥＧＦ抗体）による治療に対するがんを有する患者の応答をモニタリングする方法を提供し、本方法は、抗がん療法の実施後の時点で患者から得られた生体試料における、次の遺伝子：ＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＣＣＲ５、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＣＲ７、またはＣＸＣＬ１０のうちの１個以上（例えば、１、２、３、４、５、または６個）の発現レベルを決定すること、及び生体試料における、ＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＣＣＲ５、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＣＲ７、またはＣＸＣＬ１０のうちの１個以上の発現レベルを参照レベルと比較し、それにより、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、ベバシズマブなどの抗ＶＥＧＦ抗体）を含む抗がん療法による治療に対する患者における応答をモニタリングすることを伴う。いくつかの実施形態では、患者から得られた生体試料における発現レベルは、参照レベルと比べて増加する。
【０２５９】
他の実施形態では、本発明は、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、ベバシズマブなどの抗ＶＥＧＦ抗体）による治療から利益を得る可能性が高いがん（例えば、腎臓癌）を有する患者を特定する方法を提供し、本方法は、患者から得られた生体試料における、次の遺伝子：ＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＣＣＲ５、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＣＲ７、またはＣＸＣＬ１０のうちの１個以上（多例えば、１、２、３、４、５、または６個）の発現レベルを決定すること、及び生体試料における、ＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＣＣＲ５、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＣＲ７、またはＣＸＣＬ１０のうちの１個以上の発現レベルを参照レベルと比較し、それにより、患者を、ＶＥＧＦアンタゴニストによる治療から利益を得る可能性が高いとして特定することを伴う。いくつかの実施形態では、参照レベルと比べた生体試料における、ＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＣＣＲ５、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＣＲ７、またはＣＸＣＬ１０のうちの１個以上の発現レベルの変化（例えば、増加または減少）により、患者は、ＶＥＧＦアンタゴニストによる治療から利益を得る可能性が高いとして特定される。いくつかの実施形態では、変化は増加である。他の実施形態では、変化は減少である。
【０２６０】
別の実施形態では、本発明は、がん（例えば、腎臓癌）の診断または予後診断を行う方法を提供し、本方法は、患者から得られた生体試料における次の遺伝子：ＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＣＣＲ５、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＣＲ７、またはＣＸＣＬ１０のうちの１個以上（例えば、１、２、３、４、５、または６個）の発現レベルを決定すること、及び生体試料におけるＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＣＣＲ５、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＣＲ７、またはＣＸＣＬ１０のうちの１個以上の発現レベルを参照レベルと比較し、それによりがんの診断または予後診断を行うことを伴う。いくつかの実施形態では、参照レベルと比べた生体試料におけるＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＣＣＲ５、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＣＲ７、またはＣＸＣＬ１０のうちの１個以上の発現レベルの変化（例えば、増加または減少）により、患者が診断または予後診断される。いくつかの実施形態では、変化は増加である。他の実施形態では、変化は減少である。
【０２６１】
更に別の実施形態では、本発明は、がん（例えば、腎臓癌）を有する患者が、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、ベバシズマブなどの抗ＶＥＧＦ抗体）を含む抗がん療法による治療に応答する可能性が高いかどうかを決定する方法を提供し、本方法は、患者から得られた生体試料における次の遺伝子：ＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＣＣＲ５、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＣＲ７、またはＣＸＣＬ１０のうちの１個以上（例えば、１、２、３、４、５、または６個）の発現レベルを決定すること、及び生体試料におけるＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＣＣＲ５、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＣＲ７、またはＣＸＣＬ１０のうちの１個以上の発現レベルを参照レベルと比較し、それにより、患者を、抗がん療法に応答する可能性が高い患者として特定することを含む。いくつかの実施形態では、参照レベルと比べた生体試料におけるＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＣＣＲ５、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＣＲ７、またはＣＸＣＬ１０のうちの１個以上の発現レベルの変化（例えば、増加または減少）により、患者は、抗がん療法による治療に応答する可能性が高いとして特定される。いくつかの実施形態では、変化は増加である。他の実施形態では、変化は減少である。
【０２６２】
他の実施形態では、本発明は、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、ベバシズマブなどの抗ＶＥＧＦ抗体）を含む抗がん療法の治療有効性を最適化する方法を提供し、本方法は、患者から得られた生体試料における次の遺伝子：ＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＣＣＲ５、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＣＲ７、またはＣＸＣＬ１０のうちの１個以上（例えば、１、２、３、４、５、または６個）の発現レベルを決定すること、及び生体試料におけるＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＣＣＲ５、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＣＲ７、またはＣＸＣＬ１０のうちの１個以上の発現レベルを参照レベルと比較することを伴い、ここでは、参照レベルと比べた生体試料におけるＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＣＣＲ５、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＣＲ７、またはＣＸＣＬ１０のうちの１個以上の発現レベルの変化（例えば、増加または減少）により、抗がん療法に応答する可能性が高い患者が特定される。いくつかの実施形態では、変化は増加である。他の実施形態では、変化は減少である。
【０２６３】
なお更なる実施形態では、本発明は、がん（例えば、腎臓癌）を有する患者のためにＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、ベバシズマブなどの抗ＶＥＧＦ抗体）を含む抗がん療法を選択する方法を提供し、本方法は、患者から得られた生体試料における次の遺伝子：ＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＣＣＲ５、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＣＲ７、またはＣＸＣＬ１０のうちの１個以上（例えば、１、２、３、４、５、または６個）の発現レベルを決定すること、生体試料におけるＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＣＣＲ５、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＣＲ７、またはＣＸＣＬ１０のうちの１個以上の発現レベルを参照レベルと比較すること、及び参照レベルと比べた生体試料におけるＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＣＣＲ５、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＣＲ７、またはＣＸＣＬ１０のうちの１個以上の発現レベルに基づいて、患者のためにＶＥＧＦアンタゴニストを含む抗がん療法を選択することを伴う。いくつかの実施形態では、参照レベルと比べた生体試料におけるＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＣＣＲ５、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＣＲ７、またはＣＸＣＬ１０のうちの１個以上の発現レベルの変化（例えば、増加または減少）を使用して、抗がん療法が選択される。いくつかの実施形態では、変化は増加である。他の実施形態では、変化は減少である。
【０２６４】
先行する方法のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、ＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＣＣＲ５、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＣＲ７、またはＣＸＣＬ１０のうちの少なくとも２個、少なくとも３個、少なくとも４個、または少なくとも５個の発現レベルが決定される。いくつかの実施形態では、ＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＣＣＲ５、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＣＲ７、及びＣＸＣＬ１０の発現レベルが決定される。
【０２６５】
先行する方法のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、参照レベルは、抗がん療法の実施前（例えば、数分、数時間、数日、数週、数カ月、または数年前）に得られた患者由来の生体試料における１個以上の遺伝子（例えば、ＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＣＣＲ５、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＣＲ７、及び／またはＣＸＣＬ１０）の発現レベルである。他の実施形態では、参照レベルは、参照集団における１つ以上の遺伝子の発現レベルである。他の実施形態では、参照レベルは、１つ以上の遺伝子について事前に割り当てられた発現レベルである。他の実施形態では、参照レベルは、前の時点で患者から得られた生体試料における１つ以上の遺伝子の発現レベルであり、前の時点とは、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、ベバシズマブなどの抗ＶＥＧＦ抗体）を含む抗がん療法の実施の後である。他の実施形態では、参照レベルは、次なる時点で患者から得られた生体試料における１つ以上の遺伝子の発現レベルである。
【０２６６】
先行する方法のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、患者から得られた生体試料におけるＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＣＣＲ５、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＣＲ７、及び／またはＣＸＣＬ１０のうちの１個以上（例えば、１、２、３、４、５、または６個）の発現レベルは、参照レベルと比べて増加する（例えば、約１．１倍、約１．２倍、約１．３倍、約１．４倍、約１．５倍、約１．６倍、約１．７倍、約１．８倍、約１．９倍、約２倍、約２．１倍、約２．２倍、約２．３倍、約２．４倍、約２．５倍、約３倍、約３．５倍、約４倍、約４．５倍、約５倍、約５．５倍、約６倍、約６．５倍、約７倍、約７．５倍、約８倍、約８．５倍、約９倍、約９．５倍、約１０倍、約１１倍、約１２倍、約１３倍、約１４倍、約１５倍、約１６倍、約１７倍、約１８倍、約１９倍、約２０倍、約３０倍、約４０倍、約５０倍、約１００倍、約５００倍、約１，０００倍以上）。
【０２６７】
上記の方法のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、患者由来の生体試料は、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、ベバシズマブなどの抗ＶＥＧＦ抗体）を含む抗がん療法の実施から約１〜約３０日（例えば、約１５〜約１８日、例えば、１５、１６、１７、または１８日）後に得られる。いくつかの実施形態では、患者由来の生体試料は、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、ベバシズマブなどの抗ＶＥＧＦ抗体）を含む抗がん療法の実施から１８日超（例えば、１９日、２０日、２１日、２２日、２３日、２４日、２５日、２６日、２７日、２８日、５週、６週、７週、８週以上）の後に得られる。
【０２６８】
先行する方法のうちのいずれかのある特定の実施形態では、本発明の方法は、１個以上（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０個以上）の追加用量のＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、ベバシズマブなどの抗ＶＥＧＦ抗体）を、ＭＨＣ−Ｉまたは１個以上の遺伝子（例えば、ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、ＰＲＦ１、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、ＣＸＣＬ１３、ＫＬＲＫ１、ＳＬＡＭＦ７、ＣＸ３ＣＲ１、ＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＣＣＲ５、ＣＸ３ＣＬ１、及び／またはＣＣＲ７）の発現レベルが参照レベルと比べて増加する患者に投与するステップを更に含む。
【０２６９】
上記のバイオマーカーのうちのいずれかの存在及び／または発現レベルは、ＤＮＡ、ｍＲＮＡ、ｃＤＮＡ、タンパク質、タンパク質断片、及び／または遺伝子コピー数を含むがこれらに限定されない、当該技術分野で既知の任意の好適な基準に基づいて、定性的及び／または定量的に評定され得る。当該技術分野で既知であり当業者によって理解されているかかるバイオマーカーを測定するための方法には、ＩＨＣ、ウェスタンブロット分析、免疫沈降、分子結合アッセイ、ＥＬＩＳＡ、ＥＬＩＦＡ、蛍光活性化細胞選別（「ＦＡＣＳ」）、ＭａｓｓＡＲＲＡＹ、プロテオミクス、定量的血液系アッセイ（例えば、血清ＥＬＩＳＡ）、生化学酵素活性アッセイ、インサイツハイブリダイゼーション、蛍光インサイツハイブリダイゼーション（ＦＩＳＨ）、サザン分析、ノーザン分析、全ゲノム解読、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）（定量リアルタイムＰＣＲ（ｑＲＴ−ＰＣＲ）、ならびに例えば、分岐ＤＮＡ、ＳＩＳＢＡ、ＴＭＡ、及び同様のものなどの他の増幅型検出方法を含む）、ＲＮＡ−Ｓｅｑ、マイクロアレイ分析、遺伝子発現プロファイリング、全ゲノム解読（ＷＧＳ）、ならびに／または遺伝子発現の逐次分析（「ＳＡＧＥ」）、ならびにタンパク質、遺伝子、及び／または組織アレイ分析によって行われ得る多種多様なアッセイのうちのいずれかが挙げられるが、これらに限定されない。遺伝子及び遺伝子産物の状態を評価するための典型的なプロトコルは、例えば、Ａｕｓｕｂｅｌ  ｅｔ  ａｌ．ｅｄｓ．（Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  Ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，１９９５）、Ｕｎｉｔｓ２（ノーザンブロット）、４（サザンブロット）、１５（免疫ブロット）、及び１８（ＰＣＲ分析）に見出される。また、多重免疫アッセイ、例えば、Ｒｕｌｅｓ  Ｂａｓｅｄ  ＭｅｄｉｃｉｎｅまたはＭｅｓｏ  Ｓｃａｌｅ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ（「ＭＳＤ」）から利用可能なものを使用してもよい。
【０２７０】
先行する方法のうちのいずれかでは、バイオマーカーの発現レベルはタンパク質発現レベルであってもよい。ある特定の実施形態では、本方法は、生体試料を、バイオマーカーの結合を許容する条件下で、本明細書に記載のバイオマーカーに特異的に結合する抗体と接触させること、及び抱合体が抗体とバイオマーカーとの間で形成されるかどうかを検出することを含む。かかる方法は、インビトロまたはインビボ法であり得る。いくつかの事例では、ＶＥＧＦアンタゴニストによる療法に適格である患者を選択するために、抗体、例えば、個体の選択のためのバイオマーカーが使用される。当該技術分野で既知であるかまたは本明細書で提供されるタンパク質発現レベルを測定する任意の方法が使用され得る。例えば、いくつかの実施形態では、バイオマーカーのタンパク質発現レベルは、フローサイトメトリー（例えば、蛍光活性化細胞分類（ＦＡＣＳ（商標）））、ウェスタンブロット、ＥＬＩＳＡ、免疫沈降、ＩＨＣ、免疫蛍光、ラジオイムノアッセイ、ドットブロット、免疫検出法、ＨＰＬＣ、表面プラズモン共鳴、光学分光法、質量分析、及びＨＰＬＣからなる群から選択される方法を使用して決定される。いくつかの実施形態では、バイオマーカーのタンパク質発現レベルは、腫瘍浸潤性免疫細胞中で決定される。いくつかの実施形態では、バイオマーカーのタンパク質発現レベルは、腫瘍細胞中で決定される。いくつかの実施形態では、バイオマーカーのタンパク質発現レベルは、腫瘍浸潤性免疫細胞中及び／または腫瘍細胞中で決定される。いくつかの実施形態では、バイオマーカーのタンパク質発現レベルは、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）中で決定される。
【０２７１】
ある特定の実施形態では、試料中のバイオマーカータンパク質の存在ならびに／または発現レベル及び／もしくは量は、ＩＨＣ及び染色プロトコルを使用して検査される。組織切片のＩＨＣ染色は、試料中のタンパク質の存在を決定または検出する信頼性のある方法であることが示されている。本方法、アッセイ、及び／またはキットのうちのいずれかのいくつかの実施形態では、バイオマーカーは、次の遺伝子：ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、ＰＲＦ１、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、ＣＸＣＬ１３、ＫＬＲＫ１、ＳＬＡＭＦ７、ＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＣＣＲ５、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＣＲ７、及びＭＨＣ−Ｉのタンパク質発現産物のうちの１個以上である。一実施形態では、バイオマーカーの発現レベルは、（ａ）抗体を用いた試料（患者から得られた腫瘍試料など）のＩＨＣ分析の実施、及び（ｂ）試料中のバイオマーカーの発現レベルの決定を含む方法を使用して決定される。いくつかの実施形態では、ＩＨＣ染色強度は、参照レベルと比べて決定される。いくつかの実施形態では、参照は参照値である。いくつかの実施形態では、参照は、参照試料（例えば、対照細胞株染色試料、非がん患者由来の組織試料、または目的のバイオマーカーについて陰性であることが決定される腫瘍試料）である。
【０２７２】
本方法のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、バイオマーカーは、診断用抗体（即ち、一次抗体）を使用するＩＨＣによって検出される。いくつかの実施形態では、診断用抗体は、ヒト抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、診断用抗体は、非ヒト抗体である。いくつかの実施形態では、診断用抗体は、ラット、マウス、またはウサギ抗体である。いくつかの実施形態では、診断用抗体は、ウサギ抗体である。いくつかの実施形態では、診断用抗体は、モノクローナル抗体である。いくつかの実施形態では、診断用抗体は、直接標識される。他の実施形態では、診断用抗体は、間接標識される。
【０２７３】
ＩＨＣは、形態染色及び／またはインサイツハイブリダイゼーション（例えば、ＦＩＳＨ）などの追加の技法と組み合わせて行われてもよい。直接アッセイ及び間接アッセイという２つの一般的なＩＨＣ方法が利用可能である。第１のアッセイに従うと、抗体の標的抗原への結合は直接的に決定される。この直接アッセイには、更なる抗体相互作用なく可視化することができる、蛍光タグまたは酵素標識された抗体などの標識された試薬が使用される。典型的な間接アッセイでは、抱合されていない一次抗体が抗原に結合した後、標識された二次抗体が一次抗体に結合する。二次抗体が酵素標識に抱合される場合、発色基質または蛍光基質を添加して、抗原の可視化をもたらす。いくつかの二次抗体は一次抗体上で異なるエピトープと反応し得るため、シグナル増幅が生じる。
【０２７４】
ＩＨＣに使用される一次及び／または二次抗体は、典型的には、検出可能な部分で標識されることになる。多数の標識が利用可能であり、これらは、概して次のカテゴリーにグループ分けすることができる：（ａ）放射性同位体、例えば、３５Ｓ、１４Ｃ、１２５１、３Ｈ、及び１３１Ｉ；（ｂ）コロイド金粒子；（ｃ）希土類キレート（ユーロピウムキレート）、Ｔｅｘａｓ  Ｒｅｄ、ローダミン、フルオレセイン、ダンシル、リサミン、ウンベリフェロン、フィコクリテリン（ｐｈｙｃｏｃｒｙｔｈｅｒｉｎ）、フィコシアニン、もしくはＳＰＥＣＴＲＵＭ  ＯＲＡＮＧＥ７及びＳＰＥＣＴＲＵＭ  ＧＲＥＥＮ７などの市販のフルオロフォア、ならびに／または上記のうちいずれか１個以上の誘導体が挙げられるがこれらに限定されない、蛍光標識；（ｄ）様々な酵素基質標識が利用可能であり、米国特許第４，２７５，１４９号がこれらのうちのいくつかの概説を提供している。酵素標識の例には、ルシフェラーゼ（例えば、ホタルルシフェラーゼ及び細菌ルシフェラーゼ；例えば、米国特許第４，７３７，４５６号を参照）、ルシフェリン、２，３−ジヒドロフタラジンジオン、リンゴ酸脱水素酵素、ウレアーゼ、ペルオキシダーゼ、例えば、西洋ワサビペルオキシダーゼ（ＨＲＰＯ）、アルカリホスファターゼ、β−ガラクトシダーゼ、グルコアミラーゼ、リゾチーム、糖オキシダーゼ（例えば、グルコースオキシダーゼ、ガラクトースオキシダーゼ、及びグルコース−６−リン酸脱水素酵素）、複素環式オキシダーゼ（ウリカーゼ及びキサンチンオキシダーゼなど）、ラクトペルオキシダーゼ、マイクロペルオキシダーゼなどが挙げられる。
【０２７５】
酵素−基質の組合せの例には、例えば、西洋ワサビペルオキシダーゼ（ＨＲＰＯ）と基質としての水素ペルオキシダーゼ；アルカリホスファターゼ（ＡＰ）と発色基質としてのパラ−ニトフェニルホスフェート；及びβ−Ｄ−ガラクトシダーゼ（β−Ｄ−Ｇａｌ）と発色基質（例えば、ｐ−ニトロフェニル−β−Ｄ−ガラクトシダーゼ）または蛍光基質（例えば、４−メチルウンベリフェリル−β−Ｄ−ガラクトシダーゼ）が挙げられる。これらの総説については、例えば、米国特許第４，２７５，１４９号及び同第４，３１８，９８０号を参照されたい。
【０２７６】
標本は、手で、または自動染色機器（例えば、Ｖｅｎｔａｎａ  ＢｅｎｃｈＭａｒｋ  ＸＴまたはＢｅｎｃｈｍａｒｋ  ＵＬＴＲＡ  ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ）を使用して、調製され得る。このように調製された標本は、スライドガラスに載せされ、カバースリップをかぶせられ得る。その後、例えば、顕微鏡を使用して、スライド評価が決定され、当該技術分野で日常的に使用される染色強度基準が用いられ得る。一実施形態では、ＩＨＣを使用して腫瘍由来の細胞及び／または組織を検査するときには、染色は、腫瘍細胞（複数可）及び／または組織中で（試料中に存在し得る間質または周囲組織とは対照的である）決定または評定されることを理解されたい。いくつかの実施形態では、ＩＨＣを使用して腫瘍由来の細胞及び／または組織を検査するときには、染色は、腫瘍内または腫瘍周辺免疫細胞を含む腫瘍浸潤性免疫細胞中での決定または評定を含むことを理解されたい。いくつかの実施形態では、バイオマーカーの存在は、試料の０％超、試料の少なくとも１％、試料の少なくとも５％、試料の少なくとも１０％、試料の少なくとも１５％、試料の少なくとも１５％、試料の少なくとも２０％、試料の少なくとも２５％、試料の少なくとも３０％、試料の少なくとも３５％、試料の少なくとも４０％、試料の少なくとも４５％、試料の少なくとも５０％、試料の少なくとも５５％、試料の少なくとも６０％、試料の少なくとも６５％、試料の少なくとも７０％、試料の少なくとも７５％、試料の少なくとも８０％、試料の少なくとも８５％、試料の少なくとも９０％、試料の少なくとも９５％、またはそれ以上においてＩＨＣによって検出される。試料は、当該技術分野で既知の任意の方法を使用して、例えば、病理学者によって、または自動画像分析によって採点され得る。
【０２７７】
本方法のうちのいずれかの他の実施形態では、バイオマーカーの発現レベルは、核酸発現レベル（例えば、ＤＮＡ発現レベルまたはＲＮＡ発現レベル（例えば、ｍＲＮＡ発現レベル）であり得る。核酸発現レベルを決定する任意の好適な方法が使用され得る。いくつかの実施形態では、核酸発現レベルは、ｑＰＣＲ、ｒｔＰＣＲ、ＲＮＡ−ｓｅｑ、多重ｑＰＣＲもしくはＲＴ−ｑＰＣＲ、マイクロアレイ分析、遺伝子発現の逐次分析（ＳＡＧＥ）、ＭａｓｓＡＲＲＡＹ技法、インサイツハイブリダイゼーション（例えば、ＦＩＳＨ）、またはこれらに組み合わせを使用して決定される。
【０２７８】
細胞におけるｍＲＮＡの評価のための方法は周知であり、これらには、例えば、遺伝子発現の逐次分析（ＳＡＧＥ）、全ゲノム解読（ＷＧＳ）、相補的ＤＮＡプローブを使用するハイブリダイゼーションアッセイ（１つ以上の遺伝子に特異的な標識されたリボプローブを使用するインサイツハイブリダイゼーション、ノーザンブロット、及び関連する技法など）、及び様々な核酸増幅アッセイ（遺伝子のうちの１つ以上に特異的な相補的プライマーを使用するＲＴ−ＰＣＲ（例えば、ｑＲＴ−ＰＣＲ）、及び例えば、分岐ＤＮＡ、ＳＩＳＢＡ、ＴＭＡなどといった他の増幅型検出方法など）が挙げられる。加えて、かかる方法は、生体試料中の標的ｍＲＮＡのレベルを決定すること（例えば、アクチンファミリーメンバーなどの「ハウスキーピング」遺伝子の比較対照ｍＲＮＡ配列のレベルを同時に検査することによって）を可能にする１つ以上のステップを含み得る。任意選択で、増幅された標的ｃＤＮＡの配列が決定され得る。任意選択の方法は、マイクロアレイ技法によって組織または細胞試料中の標的ｍＲＮＡなどのｍＲＮＡを検査または検出するプロトコルを含む。核酸マイクロアレイを使用して、試験組織試料由来の試験ｍＲＮＡ試料及び対照組織試料由来の対照ｍＲＮＡ試料は、逆転写され、標識されて、ｃＤＮＡプローブを生成する。その後、プローブは、固体支持体に固定された核酸のアレイにハイブリダイズされる。アレイは、アレイの各メンバーの配列及び位置が分かるように構成される。例えば、発現がＶＥＧＦアンタゴニストを含む治療の臨床的利益の増加または低減と相関する遺伝子のセレクションが、固体支持体上でアレイ化されてもよい。特定のアレイメンバーとの標識されたプローブのハイブリダイゼーションにより、プローブが誘導された試料がその遺伝子を発現することが示される。
【０２７９】
ある特定の実施形態では、第１の試料中のバイオマーカーの存在及び／または発現レベル／量は、第２の試料中の存在／不在及び／または発現レベル／量と比較して増加または上昇する。ある特定の実施形態では、第１の試料中のバイオマーカーの存在／不在及び／または発現レベル／量は、第２の試料中の存在及び／または発現レベル／量と比較して減少または低下する。ある特定の実施形態では、第２の試料は、参照試料、参照細胞、参照組織、対照試料、対照細胞、または対照組織である。
【０２８０】
本方法のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、患者から得られた試料は、抗がん療法、例えば、がんの治療、またはその症状の管理もしくは軽減のための療法の開始後に採集される。したがって、いくつかの実施形態では、試料は、化学療法剤の投与または化学療法レジメンの開始後に採集される。
【０２８１】
ある特定の実施形態では、参照試料、参照細胞、参照組織、対照試料、対照細胞、または対照組織は、単一の試料であるか、または試験試料が得られるときとは異なる１つ以上の時点で得られる同じ患者もしくは個体に由来する組み合わせた複数の試料である。例えば、いくつかの実施形態では、参照試料、参照細胞、参照組織、対照試料、対照細胞、または対照組織は、試験試料が得られるときよりも早い時点で同じ患者または個体から得られる。かかる参照試料、参照細胞、参照組織、対照試料、対照細胞、または対照組織は、参照試料ががんの初期診断中に得られ、試験試料が後でがんが転移性となるときに得られる場合に有用であり得る。
【０２８２】
ある特定の実施形態では、参照試料、参照細胞、参照組織、対照試料、対照細胞、または対照組織は、患者ではない１体以上の健康な個体に由来する組み合わせた複数の試料である。ある特定の実施形態では、参照試料、参照細胞、参照組織、対照試料、対照細胞、または対照組織は、その患者または個体ではない、疾患または障害（例えば、がん、例えば、腎臓癌）を有する１体以上の個体に由来する組み合わせた複数の試料である。ある特定の実施形態では、参照試料、参照細胞、参照組織、対照試料、対照細胞、または対照組織は、正常な組織に由来するプールされたＲＮＡ試料、または患者ではない１体以上の個体に由来するプールされた血漿もしくは血清試料である。ある特定の実施形態では、参照試料、参照細胞、参照組織、対照試料、対照細胞、または対照組織は、腫瘍組織に由来するプールされたＲＮＡ試料、または患者ではない疾患もしくは障害（例えば、がん）を有する１体以上の個体に由来するプールされた血漿もしくは血清試料である。
【０２８３】
先行する方法のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、上昇または増加した発現または数は、参照試料、参照細胞、参照組織、対照試料、対照細胞、または対照組織と比較した、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の方法などの方法によって検出された、バイオマーカー（例えば、タンパク質、核酸（例えば、遺伝子またはｍＲＮＡ）、または細胞）のレベルまたは数における、約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％以上のうちのいずれかの全体的増加を指す。ある特定の実施形態では、上昇した発現または数は、増加が、参照試料、参照細胞、参照組織、対照試料、対照細胞、または対照組織における対応するバイオマーカーの発現レベル／量の少なくとも約１．１倍、１．２倍、１．３倍、１．４倍、１．５倍、１．６倍、１．７倍、１．８倍、１．９倍、２倍、２．１倍、２．２倍、２．３倍、２．４倍、２．５倍、２．６倍、２．７倍、２．８倍、２．９倍、３倍、３．５倍、４倍、４．５倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、１０倍、１５倍、２０倍、３０倍、４０倍、５０倍、１００倍、５００倍、または１０００倍のうちのいずれかである、試料中のバイオマーカーの発現レベル／量における増加を指す。いくつかの実施形態では、上昇した発現または数は、参照試料、参照細胞、参照組織、対照試料、対照細胞、対照組織、または内部対照（例えば、ハウスキーピング遺伝子）と比較して、約１．１倍、約１．２倍、約１．３倍、約１．４倍、約１．５倍、約１．６倍、約１．７倍、約１．８倍、約１．９倍、約２倍、約２．１倍、約２．２倍、約２．３倍、約２．４倍、約２．５倍、約２．６倍、約２．７倍、約２．８倍、約２．９倍、約３倍、約３．５倍、約４倍、約４．５倍、約５倍、約６倍、約７倍、約８倍、約９倍、約１０倍、約１５倍、約２０倍、約３０倍、約４０倍、約５０倍、約１００倍、約５００倍、約１，０００倍以上を上回る全体的な増加を指す。
【０２８４】
先行する方法のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、低減した発現または数は、参照試料、参照細胞、参照組織、対照試料、対照細胞、または対照組織と比較した、本明細書に記載の方法などの標準的な当該技術分野で既知の方法によって検出された、バイオマーカー（例えば、核酸（例えば、遺伝子またはｍＲＮＡ）、または細胞）のレベルにおける、約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％以上のうちのいずれかの全体的な低減を指す。ある特定の実施形態では、低減した発現または数は、減少が、参照試料、参照細胞、参照組織、対照試料、対照細胞、または対照組織における対応するバイオマーカーの発現レベル／量の少なくとも約０．９倍、０．８倍、０．７倍、０．６倍、０．５倍、０．４倍、０．３倍、０．２倍、０．１倍、０．０５倍、または０．０１倍のうちのいずれかである、試料中のバイオマーカーの発現レベル／量における減少を指す。
【０２８５】
先行する方法のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、バイオマーカーの発現レベルまたは数は、組織試料、初代もしくは培養細胞もしくは細胞株、細胞上清、細胞溶解物、血小板、血清、血漿、硝子体液、リンパ液、滑液、卵胞液、精液、羊水、乳、全血、血液由来細胞、尿、脳脊髄液、唾液、痰、涙液、汗、粘液、腫瘍溶解物、及び組織培地、組織抽出物、例えば、均質化組織、腫瘍組織、細胞抽出物、またはこれらの任意の組み合わせにおいて検出される。
【０２８６】
例えば、先行する方法のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、バイオマーカーの発現レベルは、既知の技法（例えば、フローサイトメトリーまたはＩＨＣ）を使用して、腫瘍浸潤性免疫細胞、腫瘍細胞、ＰＢＭＣ、またはこれらの組み合わせにおいて検出される。腫瘍浸潤性免疫細胞には、腫瘍内免疫細胞、腫瘍周辺免疫細胞、またはこれらの任意の組み合わせ、及び他の腫瘍間質細胞（例えば、線維芽細胞）が挙げられるが、これらに限定されない。かかる腫瘍浸潤性免疫細胞は、Ｔリンパ球（ＣＤ８＋Ｔリンパ球（例えば、ＣＤ８＋Ｔエフェクター（Ｔｅｆｆ）細胞）及び／またはＣＤ４＋Ｔリンパ球（例えば、ＣＤ４＋Ｔｅｆｆ細胞）など）、Ｂリンパ球、または顆粒球（好中球、好酸球、好塩基球）、単球、マクロファージ、樹状細胞（例えば、指状嵌入樹状細胞）、組織球、及びナチュラルキラー（ＮＫ）細胞を含む、他の骨髄系細胞であり得る。いくつかの実施形態では、バイオマーカーについての染色は、膜染色、細胞質染色、またはこれらの組み合わせとして検出される。他の実施形態では、バイオマーカーの不在は、参照試料と比べた、試料における不在または無染色として検出される。
【０２８７】
いくつかの実施形態では、患者から得られた試料は、抗がん療法、例えば、がんの治療、またはその症状の管理もしくは軽減のための療法の開始後に採集される。したがって、いくつかの実施形態では、試料は、化学療法剤の投与または化学療法レジメンの開始後に採集される。
【０２８８】
先行する方法のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、患者は、癌腫、リンパ腫、芽細胞腫（髄芽細胞腫及び網膜芽細胞腫を含む）、肉腫（脂肪肉腫及び滑膜細胞肉腫を含む）、神経内分泌腫瘍（カルチノイド腫瘍、ガストリノーマ、及び膵島細胞癌を含む）、中皮腫、神経鞘腫（聴神経腫を含む）、髄膜腫、腺癌、黒色腫、及び白血病またはリンパ性悪性疾患を有する。いくつかの実施形態では、がんには、腎臓癌（例えば、腎細胞癌腫（ＲＣＣ）、例えば、転移性ＲＣＣ）、扁平上皮細胞癌（例えば、上皮系扁平上皮細胞癌）、肺癌（小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、肺の腺癌、及び肺の扁平上皮癌を含む）、腹膜の癌、肝細胞癌、消化管癌を含む胃（ｇａｓｔｒｉｃ）癌または胃（ｓｔｏｍａｃｈ）癌、膵臓癌、膠芽腫、子宮頸癌、卵巣癌、肝臓癌、肝臓癌、乳癌（転移性乳癌を含む）、膀胱癌、結腸癌、直腸癌、大腸癌、子宮内膜癌または子宮癌、唾液腺癌、前立腺癌、外陰部癌、甲状腺癌、肝癌、肛門癌、陰茎癌、メルケル細胞癌、菌状息肉腫、精巣癌、食道癌、胆管の腫瘍、頭頸部癌、Ｂ細胞リンパ腫（低悪性度／濾胞性非ホジキンリンパ種（ＮＨＬ）；小リンパ球性（ＳＬ）ＮＨＬ；中悪性度／濾胞性ＮＨＬ；中悪性度びまん性ＮＨＬ；高悪性度免疫芽球性ＮＨＬ；高悪性度リンパ芽球性ＮＨＬ；高悪性度小型非開裂細胞性ＮＨＬ；巨大病変性ＮＨＬ；マントル細胞リンパ腫；ＡＩＤＳ関連リンパ腫；及びワルデンストレームマクログロブリン血症を含む）；慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）；急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）；有毛細胞性白血病；慢性骨髄芽球性白血病；移植後リンパ増殖性障害（ＰＴＬＤ）；母斑症、浮腫（脳腫瘍と関連付けられるものなど）、またはメイグス症候群と関連付けられる異常な血管増殖が挙げられる。好ましい実施形態では、患者は、腎臓癌（例えば、ＲＣＣ、例えば、ｍＲＣＣ）を有する。患者は、任意選択で、進行性、不応性、再発性、化学療法抵抗性、及び／または白金抵抗性型のがんを有してもよい。
【０２８９】
先行する方法のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、患者から得られた試料は、組織、全血、血漿、血清、及びこれらの組み合わせからなる群から選択され得る。いくつかの実施形態では、試料は組織試料である。いくつかの実施形態では、組織試料は腫瘍試料である。いくつかの実施形態では、腫瘍試料は、腫瘍浸潤性免疫細胞、腫瘍細胞、間質細胞、またはこれらに任意の組み合わせを含む。先行する実施形態のうちのいずれかでは、腫瘍試料は、ホルマリン固定及びパラフィン包埋（ＦＦＰＥ）腫瘍試料、保管腫瘍試料、新鮮腫瘍試料、または凍結腫瘍試料であり得る。
【０２９０】
特定の実施形態では、バイオマーカーの発現レベルは、がん細胞を含有するかまたはそれが疑われる生体試料において評定される。試料は、例えば、がん（例えば、腎臓癌、特に、腎細胞癌腫）に罹患している、それが疑われる、またはそれと診断された患者から得られた組織生検または転移性病変であってもよい。いくつかの実施形態では、試料は、腎臓組織、腎臓腫瘍の生検、分かっているもしくは疑われている転移性腎臓癌病変もしくは部位、または循環がん細胞、例えば、腎臓癌細胞を含むことが分かっているまたは疑われる血液試料、例えば、末梢血試料である。試料は、両方のがん細胞、即ち、腫瘍細胞及び非がん性細胞（例えば、リンパ球、例えば、浸潤性Ｔ細胞またはＮＫ細胞などの末梢リンパ球）を含んでもよく、かつある特定の実施形態では、がん性細胞及び非がん性細胞の両方を含む。いくつかの実施形態では、細胞試料は、末梢ＣＤ８＋Ｔ細胞の試料である。がん／腫瘍細胞を含む、組織切除片、生検、及び体液、例えば、血液試料を含む生体試料を得る方法は、当該技術分野で周知である。
【０２９１】
Ｂ．治療方法
本発明は、がんを有する患者を治療するための方法も提供する。いくつかの事例では、本発明の方法は、本発明のバイオマーカーの発現レベルに基づいて、患者にＶＥＧＦアンタゴニストを投与することを含む。本ＶＥＧＦアンタゴニスト、または本明細書に記載の他の抗がん剤（例えば、ＰＤ−Ｌ１軸結合アンタゴニストなどの「組成物」または「実施例」に記載されているもの）もしくは当該技術分野で既知のもののうちのいずれも、本方法において使用され得る。
【０２９２】
いくつかの事例では、本方法は、抗がん療法の投与後の時点で患者から得られた生体試料におけるバイオマーカー（例えば、表２に列挙されるバイオマーカーなどの免疫学的バイオマーカー）の存在及び／または発現レベルを決定すること、生体試料における遺伝子のうちの１個以上の発現レベルを参照レベルと比較すること、ならびに発現レベルが発現レベルと比べて増加する場合に、ＶＥＧＦアンタゴニストの患者への投与を継続することを伴う。遺伝子発現レベルは、本明細書に記載のまたは当該技術分野で既知の方法のうちのいずれかを使用して決定または比較され得る。本発明は、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、ベバシズマブなどの抗ＶＥＧＦ抗体）の投与による、がんに罹患している患者の無進行生存（ＰＦＳ）及び／または全生存（ＯＳ）を改善するための方法に更に関する。本明細書に記載のバイオマーカーのうちのいずれの発現レベルまたは数も、当該技術分野で既知のならびに／または本明細書、例えば、上記のＡ節及び／もしくは実施例に記載のいずれの方法を使用して決定されてもよい。
【０２９３】
いくつかの実施形態では、本発明は、ＶＥＧＦアンタゴニス（例えば、ベバシズマブなどの抗ＶＥＧＦ抗体）によってがんを有する患者を治療する方法を提供し、本方法は、患者から得られた生体試料において、ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、ＰＲＦ１、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、ＣＸＣＬ１３、ＫＬＲＫ１、ＳＬＡＭＦ７のうちの１個以上（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、または１３個）の発現レベルを決定すること、ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、ＰＲＦ１、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、ＣＸＣＬ１３、ＫＬＲＫ１、ＳＬＡＭＦ７のうちの１個以上（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、または１３個）の発現レベルを参照レベルと比較すること、及び患者の１つ以上の遺伝子の発現レベルが参照レベルと比べて変化（例えば、増加または減少）する場合に、ＶＥＧＦアンタゴニストを患者に投与することを含む。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニストは、患者の１つ以上の遺伝子の発現レベルが参照レベルと比べて増加する場合に患者に投与される。
【０２９４】
他の実施形態では、本発明は、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、ベバシズマブなどの抗ＶＥＧＦ抗体）によってがんを有する患者を治療する方法を提供し、本方法は、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、ベバシズマブなどの抗ＶＥＧＦ抗体）の投与後の時点で患者から得られた生体試料において、ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、ＰＲＦ１、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、ＣＸＣＬ１３、ＫＬＲＫ１、ＳＬＡＭＦ７のうちの１個以上（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、または１３個）の発現レベルを決定すること、及びＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、ＰＲＦ１、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、ＣＸＣＬ１３、ＫＬＲＫ１、ＳＬＡＭＦ７のうちの１個以上（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、または１３個）の発現レベルを参照レベルと比較すること、及び患者の１つ以上の遺伝子の発現レベルが参照レベルと比べて増加する場合に、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、ベバシズマブなどの抗ＶＥＧＦ抗体）の患者への投与を継続することを含む。
【０２９５】
ある特定の実施形態では、ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、またはＰＲＦ１のうちの１個以上（例えば、１、２、３、４、５、６、または７個）の発現レベルが決定される。いくつかの実施形態では、ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、またはＰＲＦ１のうちの１個以上（例えば、１、２、３、４、５、６、または７個）の発現レベルは、腫瘍微小環境中のＣＤ８＋Ｔｅｆｆ細胞の存在と相関する。ある特定の実施形態では、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、またはＣＸＣＬ１３のうちの１個以上（１、２、３、または４個）の発現レベルが決定される。いくつかの実施形態では、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、またはＣＸＣＬ１３のうちの１個以上（１、２、３、または４個）の発現レベルは、腫瘍微小環境中のＴｈ１ケモカインの存在と相関する。いくつかの実施形態では、ＧＺＭＢ、ＫＬＲＫ１、またはＳＬＡＭＦ７のうちの１個以上（例えば、１、２、または３個）の存在が決定される。いくつかの実施形態では、ＧＺＭＢ、ＫＬＲＫ１、またはＳＬＡＭＦ７のうちの１個以上（例えば、１、２、または３個）の存在は、腫瘍微小環境中のナチュラルキラー（ＮＫ）細胞の存在と相関する。
【０２９６】
いくつかの実施形態では、参照レベルは、抗がん療法の実施前（例えば、数分、数時間、数日、数週（例えば、１、２、３、４、５、６、または７週）、数カ月、または数年前）に得られた患者由来の生体試料における１個以上の遺伝子（例えば、ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、ＰＲＦ１、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、ＣＸＣＬ１３、ＫＬＲＫ１、及び／またはＳＬＡＭＦ７）の発現レベルである。ある特定の実施形態では、参照レベルは、参照集団における１つ以上の遺伝子の発現レベルである。ある特定の実施形態では、参照レベルは、１つ以上の遺伝子について事前に割り当てられた発現レベルである。いくつかの実施形態では、参照レベルは、前の時点で患者から得られた生体試料における１つ以上の遺伝子の発現レベルであり、前の時点とは、抗がん療法の投与の後である。他の実施形態では、参照レベルは、次なる時点（例えば、ＶＥＧＦアンタゴニストの投与後数分、数時間、数日、数週、数カ月、または数年）で患者から得られた生体試料における１つ以上の遺伝子の発現レベルである。
【０２９７】
ある特定の実施形態では、ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、またはＰＲＦ１のうちの１個以上（例えば、１、２、３、４、５、６、または７個）の発現レベルが決定される。いくつかの実施形態では、ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、またはＰＲＦ１のうちの少なくとも２個、少なくとも３個、少なくとも４個、少なくとも５個、または少なくとも６個の発現レベルが決定される。いくつかの実施形態では、ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、及びＰＲＦ１の発現レベルが決定される。いくつかの実施形態では、ＣＤ８Ａのレベルは、参照レベルと比較して、約１倍〜約１０倍（例えば、約１倍、約２倍、約３倍、約４倍、約５倍、約６倍、約７倍、約８倍、約９倍、約１０倍、約２倍〜約７倍、約３倍〜約６倍、または約４倍〜約５倍）増加する。いくつかの実施形態では、ＣＤ８Ａのレベルは、参照レベルと比較して、約７倍以上（例えば、約７倍、８倍、９倍、１０倍、１５倍、２０倍、５０倍、１００倍、１０００倍以上）増加する。いくつかの実施形態では、ＣＤ８Ｂのレベルは、参照レベルと比較して、約１倍〜約１０倍（例えば、約１倍、約２倍、約３倍、約４倍、約５倍、約６倍、約７倍、約８倍、約９倍、約１０倍、約２倍〜約７倍、約３倍〜約６倍、または約４倍〜約５倍）増加する。いくつかの実施形態では、ＣＤ８Ｂのレベルは、参照レベルと比較して、約７倍以上（例えば、約７倍、８倍、９倍、１０倍、１５倍、２０倍、５０倍、１００倍、１０００倍以上）増加する。いくつかの実施形態では、ＥＯＭＥＳのレベルは、参照レベルと比較して、約１倍〜約１０倍（例えば、約１倍、約２倍、約３倍、約４倍、約５倍、約６倍、約７倍、約８倍、約９倍、約１０倍、約２倍〜約７倍、約３倍〜約６倍、または約４倍〜約５倍）増加する。いくつかの実施形態では、ＥＯＭＥＳのレベルは、参照レベルと比較して、約７倍以上（例えば、約７倍、８倍、９倍、１０倍、１５倍、２０倍、５０倍、１００倍、１０００倍以上）増加する。いくつかの実施形態では、ＧＺＭＡのレベルは、参照レベルと比較して、約１倍〜約１０倍（例えば、約２倍〜約７倍、約３倍〜約６倍、または約４倍〜約５倍）増加する。いくつかの実施形態では、ＧＺＭＡのレベルは、参照レベルと比較して、約７倍以上（例えば、約７倍、８倍、９倍、１０倍、１５倍、２０倍、５０倍、１００倍、１０００倍以上）増加する。いくつかの実施形態では、ＧＺＭＢのレベルは、参照レベルと比較して、約１倍〜約１０倍（例えば、約１倍、約２倍、約３倍、約４倍、約５倍、約６倍、約７倍、約８倍、約９倍、約１０倍、約２倍〜約７倍、約３倍〜約６倍、または約４倍〜約５倍）増加する。いくつかの実施形態では、ＧＺＭＢのレベルは、参照レベルと比較して、約７倍以上（例えば、約７倍、８倍、９倍、１０倍、１５倍、２０倍、５０倍、１００倍、１０００倍以上）増加する。いくつかの実施形態では、ＩＦＮＧのレベルは、参照レベルと比較して、約１倍〜約１０倍（例えば、約１倍、約２倍、約３倍、約４倍、約５倍、約６倍、約７倍、約８倍、約９倍、約１０倍、約２倍〜約７倍、約３倍〜約６倍、または約４倍〜約５倍）増加する。いくつかの実施形態では、ＩＦＮＧのレベルは、参照レベルと比較して、約７倍以上（例えば、７倍、８倍、９倍、１０倍、１５倍、２０倍、５０倍、１００倍、１０００倍以上）増加する。いくつかの実施形態では、ＰＲＦ１のレベルは、参照レベルと比較して、約１倍〜約１０倍（例えば、約１倍、約２倍、約３倍、約４倍、約５倍、約６倍、約７倍、約８倍、約９倍、約１０倍、約２倍〜約７倍、約３倍〜約６倍、または約４倍〜約５倍）増加する。いくつかの実施形態では、ＰＲＦ１のレベルは、参照レベルと比較して、約７倍以上（例えば、約７倍、８倍、９倍、１０倍、１５倍、２０倍、５０倍、１００倍、１０００倍以上）増加する。
【０２９８】
ある特定の実施形態では、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、またはＣＸＣＬ１３のうちの１個以上（例えば、１、２、３、または４個）の発現レベルが決定される。いくつかの実施形態では、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、またはＣＸＣＬ１３のうちの少なくとも２個または少なくとも３個の発現レベルが決定される。いくつかの実施形態では、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、及びＣＸＣＬ１３の発現レベルが決定される。いくつかの実施形態では、ＣＸＣＬ９のレベルは、参照レベルと比較して、約１倍〜約１０倍（例えば、約１倍、約２倍、約３倍、約４倍、約５倍、約６倍、約７倍、約８倍、約９倍、約１０倍、約２倍〜約７倍、約３倍〜約６倍、または約４倍〜約５倍）増加する。いくつかの実施形態では、ＣＸＣＬ９のレベルは、参照レベルと比較して、約７倍以上（例えば、約７倍、８倍、９倍、１０倍、１５倍、２０倍、５０倍、１００倍、１０００倍以上）増加する。いくつかの実施形態では、ＣＸＣＬ１０のレベルは、参照レベルと比較して、約１倍〜約１０倍（例えば、約１倍、約２倍、約３倍、約４倍、約５倍、約６倍、約７倍、約８倍、約９倍、約１０倍、約２倍〜約７倍、約３倍〜約６倍、または約４倍〜約５倍）増加する。いくつかの実施形態では、ＣＸＣＬ１０のレベルは、参照レベルと比較して、約７倍以上（例えば、約７倍、８倍、９倍、１０倍、１５倍、２０倍、５０倍、１００倍、１０００倍以上）増加する。いくつかの実施形態では、ＣＸＣＬ１１のレベルは、参照レベルと比較して、約１倍〜約１０倍（例えば、約１倍、約２倍、約３倍、約４倍、約５倍、約６倍、約７倍、約８倍、約９倍、約１０倍、約２倍〜約７倍、約３倍〜約６倍、または約４倍〜約５倍）増加する。いくつかの実施形態では、ＣＸＣＬ１１のレベルは、参照レベルと比較して、約７倍以上（例えば、７倍、８倍、９倍、１０倍、１５倍、２０倍、５０倍、１００倍、１０００倍以上）増加する。いくつかの実施形態では、ＣＸＣＬ１３のレベルは、参照レベルと比較して、約１倍〜約１０倍（例えば、約１倍、約２倍、約３倍、約４倍、約５倍、約６倍、約７倍、約８倍、約９倍、約１０倍、約２倍〜約７倍、約３倍〜約６倍、または約４倍〜約５倍）増加する。いくつかの実施形態では、ＣＸＣＬ１３のレベルは、参照レベルと比較して、約７倍以上（例えば、約７倍、８倍、９倍、１０倍、１５倍、２０倍、５０倍、１００倍、１０００倍以上）増加する。
【０２９９】
いくつかの実施形態では、ＧＺＭＢ、ＫＬＲＫ１、またはＳＬＡＭＦ７のうちの１個以上（例えば、１、２、または３個）の発現レベルが決定される。いくつかの実施形態では、ＧＺＭＢ、ＫＬＲＫ１、またはＳＬＡＭＦ７のうちの少なくとも２個（例えば、２個または３個）の発現レベルが決定される。いくつかの実施形態では、ＧＺＭＢ、ＫＬＲＫ１、及びＳＬＡＭＦ７の発現レベルが決定される。いくつかの実施形態では、ＧＺＭＢのレベルは、参照レベルと比較して、約１倍〜約１０倍（例えば、約１倍、約２倍、約３倍、約４倍、約５倍、約６倍、約７倍、約８倍、約９倍、約１０倍、約２倍〜約９倍、約３倍〜約８倍、約４倍〜約７倍、約５倍〜約６倍）増加する。いくつかの実施形態では、ＧＺＭＢのレベルは、参照レベルと比較して、約９倍以上（例えば、約９倍、１０倍、１５倍、２０倍、５０倍、１００倍、１０００倍以上）増加する。いくつかの実施形態では、ＫＬＲＫ１のレベルは、参照レベルと比較して、約１倍〜約１０倍（例えば、約１倍、約２倍、約３倍、約４倍、約５倍、約６倍、約７倍、約８倍、約９倍、約１０倍、約２倍〜約９倍、約３倍〜約８倍、約４倍〜約７倍、約５倍〜約６倍）増加する。いくつかの実施形態では、ＫＬＲＫ１のレベルは、参照レベルと比較して、約９倍以上（例えば、９倍、１０倍、１５倍、２０倍、５０倍、１００倍、１０００倍以上）増加する。いくつかの実施形態では、ＳＬＡＭＦ７のレベルは、参照レベルと比較して、約１倍〜約１０倍（例えば、約１倍、約２倍、約３倍、約４倍、約５倍、約６倍、約７倍、約８倍、約９倍、約１０倍、約２倍〜約９倍、約３倍〜約８倍、約４倍〜約７倍、約５倍〜約６倍）増加する。いくつかの実施形態では、ＳＬＡＭＦ７のレベルは、参照レベルと比較して、約９倍以上（例えば、９倍、１０倍、１５倍、２０倍、５０倍、１００倍、１０００倍以上）増加する。
【０３００】
いくつかの実施形態では、患者から得られた生体試料における、ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、ＰＲＦ１、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、ＣＸＣＬ１３、ＫＬＲＫ１、及び／またはＳＬＡＭＦ７のうちの１個以上（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、または１３個）の発現レベルは、参照レベルと比べて増加する（例えば、約１．１倍、約１．２倍、約１．３倍、約１．４倍、約１．５倍、約１．６倍、約１．７倍、約１．８倍、約１．９倍、約２倍、約２．１倍、約２．２倍、約２．３倍、約２．４倍、約２．５倍、約３倍、約３．５倍、約４倍、約４．５倍、約５倍、約５．５倍、約６倍、約６．５倍、約７倍、約７．５倍、約８倍、約８．５倍、約９倍、約９．５倍、約１０倍、約１１倍、約１２倍、約１３倍、約１４倍、約１５倍、約１６倍、約１７倍、約１８倍、約１９倍、約２０倍、約３０倍、約４０倍、約５０倍、約１００倍、約５００倍、約１，０００倍以上）。
【０３０１】
別の態様では、本発明は、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、ベバシズマブなどの抗ＶＥＧＦ抗体）によってがん（例えば、腎臓癌）を有する患者を治療する方法を提供し、本方法は、患者から得られた生体試料においてＭＨＣ−Ｉの発現レベルを決定すること、生体試料におけるＭＨＣ−Ｉの発現レベルを参照試料におけるＭＨＣ−Ｉの発現レベルと比較すること、及び参照試料におけるＭＨＣ−Ｉの発現レベルと比べて患者の試料において患者のＭＨＣ−Ｉの発現レベルが変化（例えば、増加または減少）する場合に、ＶＥＧＦアンタゴニストを患者に投与することを伴う。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニストは、患者の試料におけるＭＨＣ−Ｉの発現レベルが参照レベルと比べて増加する場合に、患者に投与される。
【０３０２】
別の態様では、本発明は、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、ベバシズマブなどの抗ＶＥＧＦ抗体）によってがんを有する患者を治療する方法を提供し、本方法は、ＶＥＧＦアンタゴニストの投与後の時点で患者から得られた生体試料におけるＭＨＣ−Ｉの発現レベルを決定すること、生体試料におけるＭＨＣ−Ｉの発現レベルを参照試料におけるＭＨＣ−Ｉの発現レベルと比較すること、及び患者のＭＨＣ−Ｉの発現レベルが参照試料におけるＭＨＣ−Ｉの発現レベルと比べて増加する場合に、ＶＥＧＦアンタゴニストの患者への投与を継続すること、を伴う。
【０３０３】
先行する方法のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、参照レベルは、抗がん療法の実施前（例えば、数分、数時間、数日、数週（例えば、１、２、３、４、５、６、または７週）、数カ月、または数年前）に得られた患者由来の生体試料におけるＭＨＣ−Ｉの発現レベルである。他の実施形態では、参照レベルは、参照集団におけるＭＨＣ−Ｉの発現レベルである。他の実施形態では、参照レベルは、ＭＨＣ−Ｉについて事前に割り当てられた発現レベルである。他の実施形態では、参照レベルは、前の時点で患者から得られた生体試料におけるＭＨＣ−Ｉの発現レベルであり、前の時点とは、抗がん療法の実施の後である。他の実施形態では、参照レベルは、次なる時点（例えば、ＶＥＧＦアンタゴニストの投与後数分、数時間、数日、数週、数カ月、または数年）で患者から得られた生体試料におけるＭＨＣ−Ｉの発現レベルである。
【０３０４】
先行する方法のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、ＭＨＣ−Ｉの発現レベルは、参照レベルと比べて増加する（例えば、約１．１倍、約１．２倍、約１．３倍、約１．４倍、約１．５倍、約１．６倍、約１．７倍、約１．８倍、約１．９倍、約２倍、約２．１倍、約２．２倍、約２．３倍、約２．４倍、約２．５倍、約２．６倍、約２．７倍、約２．８倍、約２．９倍、約３倍、約３．１倍、約３．２倍、約３．３倍、約３．４倍、約３．５倍、約３．６倍、約３．７倍、約３．８倍、約３．９倍、約４倍、約４．１倍、約４．２倍、約４．３倍、約４．４倍、約４．５倍、約４．６倍、約４．７倍、約４．８倍、約４．９倍、約５倍、約５．５倍、約６倍、約６．５倍、約７倍、約７．５倍、約８倍、約８．５倍、約９倍、約９．５倍、約１０倍、約１１倍、約１２倍、約１３倍、約１４倍、約１５倍、約１６倍、約１７倍、約１８倍、約１９倍、約２０倍、約３０倍、約４０倍、約５０倍、約１００倍、約５００倍、約１，０００倍以上）。いくつかの実施形態では、ＭＨＣ−Ｉの発現レベルは、参照レベルと比べて少なくとも約２倍増加する。
【０３０５】
他の実施形態では、本発明は、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体）によってがん（例えば、腎臓癌）を有する患者を治療する方法を提供し、本方法は、患者から得られた生体試料においてＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＣＣＲ７、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＣＲ７、またはＣＸＣＬ１０のうちの１個以上（例えば、１、２、３、４、５、または６個）の発現レベルを決定すること、発現レベルを参照レベルと比較すること、及び発現レベルが参照レベルと比べて変化（例えば、増加または減少）する場合に、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、ベバシズマブなどの抗ＶＥＧＦ抗体）を患者に投与することを含む。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニストは、ＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＣＣＲ７、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＣＲ７、またはＣＸＣＬ１０のうちの１個以上の発現レベルが参照レベルと比べて患者の試料において増加する場合に、患者に投与される。いくつかの実施形態では、ＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＣＣＲ５、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＣＲ７、またはＣＸＣＬ１０のうちの少なくとも２個、少なくとも３個、少なくとも４個、または少なくとも５個の発現レベルが決定される。いくつかの実施形態では、ＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＣＣＲ５、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＣＲ７、及びＣＸＣＬ１０の発現レベルが決定される。
【０３０６】
なお他の実施形態では、本発明は、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体）によってがん（例えば、腎臓癌）を有する患者を治療する方法を提供し、本方法は、ＶＥＧＦアンタゴニストの投与後の時点で患者から得られた生体試料においてＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＣＣＲ７、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＣＲ７、またはＣＸＣＬ１０のうちの１個以上（例えば、１、２、３、４、５、または６個）の発現レベルを決定すること、発現レベルを参照レベルと比較すること、及び発現レベルが参照レベルと比べて増加する場合に、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、ベバシズマブなどの抗ＶＥＧＦ抗体）の患者への投与を継続することを含む。いくつかの実施形態では、ＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＣＣＲ５、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＣＲ７、またはＣＸＣＬ１０のうちの少なくとも２個、少なくとも３個、少なくとも４個、または少なくとも５個の発現レベルが決定される。いくつかの実施形態では、ＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＣＣＲ５、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＣＲ７、及びＣＸＣＬ１０の発現レベルが決定される。
【０３０７】
いくつかの実施形態では、参照レベルは、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、ベバシズマブなどの抗ＶＥＧＦ抗体）の投与前（例えば、数分、数時間、数日、数週、数カ月、または数年前）に得られた患者由来の生体試料における１個以上の遺伝子（例えば、ＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＣＣＲ５、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＣＲ７、及び／またはＣＸＣＬ１０）の発現レベルである。他の実施形態では、参照レベルは、参照集団における１つ以上の遺伝子の発現レベルである。他の実施形態では、参照レベルは、１つ以上の遺伝子について事前に割り当てられた発現レベルである。他の実施形態では、参照レベルは、前の時点で患者から得られた生体試料における１つ以上の遺伝子の発現レベルであり、前の時点とは、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、ベバシズマブなどの抗ＶＥＧＦ抗体）の投与の後である。他の実施形態では、参照レベルは、次なる時点で患者から得られた生体試料における１つ以上の遺伝子の発現レベルである。
【０３０８】
いくつかの実施形態では、患者から得られた生体試料におけるＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＣＣＲ５、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＣＲ７、及び／またはＣＸＣＬ１０のうちの１個以上（例えば、１、２、３、４、５、または６個）の発現レベルは、参照レベルと比べて増加する（例えば、約１．１倍、約１．２倍、約１．３倍、約１．４倍、約１．５倍、約１．６倍、約１．７倍、約１．８倍、約１．９倍、約２倍、約２．１倍、約２．２倍、約２．３倍、約２．４倍、約２．５倍、約３倍、約３．５倍、約４倍、約４．５倍、約５倍、約５．５倍、約６倍、約６．５倍、約７倍、約７．５倍、約８倍、約８．５倍、約９倍、約９．５倍、約１０倍、約１１倍、約１２倍、約１３倍、約１４倍、約１５倍、約１６倍、約１７倍、約１８倍、約１９倍、約２０倍、約３０倍、約４０倍、約５０倍、約１００倍、約５００倍、約１，０００倍以上）。
【０３０９】
別の態様では、本発明は、がんを有する患者を治療する方法を提供し、本方法は、抗がん剤の投与後の時点で患者から得られた腫瘍試料におけるＴ細胞の数（例えば、ＣＤ８＋Ｔ細胞、例えば、末梢ＣＤ８＋Ｔｅｆｆ細胞）を決定すること、腫瘍試料におけるＴ細胞の数（例えば、ＣＤ８＋Ｔ細胞、例えば、ＣＤ８＋Ｔｅｆｆ細胞）を参照試料におけるＴ細胞の数（例えば、ＣＤ８＋Ｔ細胞、例えば、ＣＤ８＋Ｔｅｆｆ細胞）と比較すること、及び患者の試料におけるＴ細胞（例えば、ＣＤ８＋Ｔ細胞、例えば、ＣＤ８＋Ｔｅｆｆ細胞）の数が参照試料と比べて増加する場合に、抗がん療法の実施を継続することによる。
【０３１０】
いくつかの実施形態では、患者から得られた腫瘍試料は、参照試料と比べて増加した数（例えば、少なくとも約１．１倍、約１．２倍、約１．３倍、約１．４倍、約１．５倍、約１．６倍、約１．７倍、約１．８倍、約１．９倍、約２倍、約２．１倍、約２．２倍、約２．３倍、約２．４倍、約２．５倍、約２．６倍、約２．７倍、約２．８倍、約２．９倍、約３倍、約３．１倍、約３．２倍、約３．３倍、約３．４倍、約３．５倍、約３．６倍、約３．７倍、約３．８倍、約３．９倍、約４倍、約４．１倍、約４．２倍、約４．３倍、約４．４倍、約４．５倍、約４．６倍、約４．７倍、約４．８倍、約４．９倍、約５倍、約５．５倍、約６倍、約６．５倍、約７倍、約７．５倍、約８倍、約８．５倍、約９倍、約９．５倍、約１０倍、約１１倍、約１２倍、約１３倍、約１４倍、約１５倍、約１６倍、約１７倍、約１８倍、約１９倍、約２０倍、約３０倍、約４０倍、約５０倍、約１００倍、約５００倍、約１，０００倍以上）のＣＤ８＋Ｔ細胞（例えば、末梢ＣＤ８＋Ｔ細胞を有する。
【０３１１】
先行する方法のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニストは抗ＶＥＧＦ抗体である。いくつかの実施形態では、抗ＶＥＧＦ抗体はベバシズマブである。
【０３１２】
いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、ベバシズマブなどの抗ＶＥＧＦ抗体）またはＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、ベバシズマブなどの抗ＶＥＧＦ抗体）による療法は、好ましくは、無進行生存（ＰＦＳ）及び／または全生存（ＯＳ）を含む生存を延長及び／または改善する。一実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、ベバシズマブなどの抗ＶＥＧＦ抗体）による療法は、治療されるがんのための認可されている抗腫瘍剤または標準治療の投与によって達成される生存と比べて、少なくとも約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、２００％以上、生存を延長する。
【０３１３】
先行する方法のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、患者は、癌腫、リンパ腫、芽細胞腫（髄芽細胞腫及び網膜芽細胞腫を含む）、肉腫（脂肪肉腫及び滑膜細胞肉腫を含む）、神経内分泌腫瘍（カルチノイド腫瘍、ガストリノーマ、及び膵島細胞癌を含む）、中皮腫、神経鞘腫（聴神経腫を含む）、髄膜腫、腺癌、黒色腫、及び白血病またはリンパ性悪性疾患を有する。いくつかの実施形態では、がんには、腎臓癌（例えば、腎細胞癌腫（ＲＣＣ）、例えば、転移性ＲＣＣ）、扁平上皮細胞癌（例えば、上皮系扁平上皮細胞癌）、肺癌（小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、肺の腺癌、及び肺の扁平上皮癌を含む）、腹膜の癌、肝細胞癌、消化管癌を含む胃（ｇａｓｔｒｉｃ）癌または胃（ｓｔｏｍａｃｈ）癌、膵臓癌、膠芽腫、子宮頸癌、卵巣癌、肝臓癌、肝臓癌、乳癌（転移性乳癌を含む）、膀胱癌、結腸癌、直腸癌、大腸癌、子宮内膜癌または子宮癌、唾液腺癌、前立腺癌、外陰部癌、甲状腺癌、肝癌、肛門癌、陰茎癌、メルケル細胞癌、菌状息肉腫、精巣癌、食道癌、胆管の腫瘍、頭頸部癌、Ｂ細胞リンパ腫（低悪性度／濾胞性非ホジキンリンパ種（ＮＨＬ）；小リンパ球性（ＳＬ）ＮＨＬ；中悪性度／濾胞性ＮＨＬ；中悪性度びまん性ＮＨＬ；高悪性度免疫芽球性ＮＨＬ；高悪性度リンパ芽球性ＮＨＬ；高悪性度小型非開裂細胞性ＮＨＬ；巨大病変性ＮＨＬ；マントル細胞リンパ腫；ＡＩＤＳ関連リンパ腫；及びワルデンストレームマクログロブリン血症を含む）；慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）；急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）；有毛細胞性白血病；慢性骨髄芽球性白血病；移植後リンパ増殖性障害（ＰＴＬＤ）；母斑症、浮腫（脳腫瘍と関連付けられるものなど）、またはメイグス症候群と関連付けられる異常な血管増殖が挙げられる。好ましい実施形態では、患者は、腎臓癌（例えば、ＲＣＣ、例えば、ｍＲＣＣ）を有する。患者は、任意選択で、進行性、不応性、再発性、化学療法抵抗性、及び／または白金抵抗性型のがんを有してもよい。
【０３１４】
先行する方法のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、本方法は、第２の治療薬を患者に投与することを更に含む。いくつかの実施形態では、第２の治療薬は、免疫療法剤、細胞毒性剤、増殖阻害剤、放射線療法剤、抗血管新生剤、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、免疫療法剤はＰＤ−Ｌ１軸結合アンタゴニストである。いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ１軸結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニスト、ＰＤ−１結合アンタゴニスト、及びＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ１軸結合アンタゴニストはＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストである。いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは抗体である。いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、ＭＰＤＬ３２８０Ａ（アテゾリズマブ）、ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０、ＭＤＸ−１１０５、ＭＥＤＩ４７３６（デュルバルマブ）、及びＭＳＢ００１０７１８Ｃ（アベルマブ）からなる群から選択される。
【０３１５】
いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、活性化副刺激分子に向けたアゴニストと同時投与されてもよい。いくつかの実施形態では、活性化副刺激分子は、ＣＤ４０、ＣＤ２２６、ＣＤ２８、ＯＸ４０、ＧＩＴＲ、ＣＤ１３７、ＣＤ２７、ＨＶＥＭ、またはＣＤ１２７を含んでもよい。いくつかの実施形態では、活性化副刺激分子に向けたアゴニストは、ＣＤ４０、ＣＤ２２６、ＣＤ２８、ＯＸ４０、ＧＩＴＲ、ＣＤ１３７、ＣＤ２７、ＨＶＥＭ、またはＣＤ１２７に結合するアゴニスト抗体である。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、阻害性副刺激分子に向けたアンタゴニストと共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、阻害性副刺激分子は、ＣＴＬＡ−４（ＣＤ１５２としても知られる）、ＴＩＭ−３、ＢＴＬＡ、ＶＩＳＴＡ、ＬＡＧ−３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＩＤＯ、ＴＩＧＩＴ、ＭＩＣＡ／Ｂ、またはアルギナーゼを含んでもよい。いくつかの実施形態では、阻害性副刺激分子に向けたアンタゴニストは、ＣＴＬＡ−４、ＴＩＭ−３、ＢＴＬＡ、ＶＩＳＴＡ、ＬＡＧ−３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＩＤＯ、ＴＩＧＩＴ、ＭＩＣＡ／Ｂ、またはアルギナーゼに結合するアンタゴニスト抗体である。先行する実施形態のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニストは、更に、ＰＤ−Ｌ１軸結合アンタゴニスト（例えば、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、例えば、アテゾリズマブ）と共に投与されてもよい。
【０３１６】
いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、ＣＴＬＡ−４（ＣＤ１５２としても知られる）に向けたアンタゴニスト、例えば、遮断抗体と共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、イピリムマブ（ＭＤＸ−０１０、ＭＤＸ−１０１、またはＹＥＲＶＯＹ（登録商標）としても知られる）と共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、トレメリムマブ（チシリムマブまたはＣＰ−６７５，２０６としても知られる）と共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、Ｂ７−Ｈ３に向けたアンタゴニスト（ＣＤ２７６としても知られる）、例えば、遮断抗体と共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、ＭＧＡ２７１と共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、ＴＧＦ−ベータに向けたアンタゴニスト、例えば、メテリムマブ（ｍｅｔｅｌｉｍｕｍａｂ）（ＣＡＴ−１９２としても知られる）、フレソリムマブ（ｆｒｅｓｏｌｉｍｕｍａｂ）（ＧＣ１００８としても知られる）、またはＬＹ２１５７２９９と共に投与されてもよい。先行する実施形態のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニストは、更に、ＰＤ−Ｌ１軸結合アンタゴニスト（例えば、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、例えば、アテゾリズマブ）と共に投与されてもよい。
【０３１７】
いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、ＣＤ１３７に向けたアゴニスト（ＴＮＦＲＳＦ９、４−１ＢＢ、またはＩＬＡとしても知られる）、例えば、活性化抗体と共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、ウレルマブ（ＢＭＳ−６６３５１３としても知られる）と共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、ＣＤ４０に向けたアゴニスト、例えば、活性化抗体と共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、ＣＰ−８７０８９３と共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、ＯＸ４０に向けたアゴニスト（ＣＤ１３４としても知られる）、例えば、活性化抗体と共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、抗ＯＸ４０抗体（例えば、ＡｇｏｎＯＸ）と共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、ＣＤ２７に向けたアゴニスト、例えば、活性化抗体と共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、ＣＤＸ−１１２７と共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、ＴＩＧＩＴに向けたアンタゴニスト、例えば、抗ＴＩＧＩＴ抗体と共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、インドールアミン−２，３−ジオキシゲナーゼ（ＩＤＯ）に向けたアンタゴニストと共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＩＤＯアンタゴニストは、１−メチル−Ｄ−トリプトファン（１−Ｄ−ＭＴとしても知られる）である。先行する実施形態のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニストは、更に、ＰＤ−Ｌ１軸結合アンタゴニスト（例えば、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、例えば、アテゾリズマブ）と共に投与されてもよい。
【０３１８】
いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、がんワクチンと共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、がんワクチンは、ペプチドがんワクチンであり、これは、いくつかの実施形態では、個人化されたペプチドワクチンである。いくつかの実施形態では、ペプチドがんワクチンは、多価長鎖ペプチド、マルチペプチド、ペプチドカクテル、ハイブリッドペプチド、またはペプチドパルス樹状細胞ワクチンである（例えば、Ｙａｍａｄａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｓｃｉ．１０４：１４−２１，２０１３を参照されたい）。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、アジュバントと共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、ＴＬＲアゴニスト、例えば、Ｐｏｌｙ−ＩＣＬＣ（ＨＩＬＴＯＮＯＬ（登録商標）としても知られる）、ＬＰＳ、ＭＰＬ、またはＣｐＧ  ＯＤＮを含む治療と共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）アルファと共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、ＩＬ−１と共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、ＨＭＧＢ１と共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、ＩＬ−１０アンタゴニストと共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、ＩＬ−４アンタゴニストと共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、ＩＬ−１３アンタゴニストと共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、ＨＶＥＭアンタゴニストと共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、ＩＣＯＳアゴニストと共に、例えば、ＩＣＯＳ−Ｌ、またはＩＣＯＳに向けたアゴニスト抗体の投与によって、投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、ＣＸ３ＣＬ１を標的化する治療と共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、ＣＸＣＬ９を標的化する治療と共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、ＣＸＣＬ１０を標的化する治療と共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、ＣＣＬ５を標的化する治療と共に投与されて���よい。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、ＬＦＡ−１またはＩＣＡＭ１アゴニストと共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、セレクチンアゴニストと共に投与されてもよい。先行する実施形態のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニストは、更に、ＰＤ−Ｌ１軸結合アンタゴニスト（例えば、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、例えば、アテゾリズマブ）と共に投与されてもよい。
【０３１９】
がんの予防または治療のためには、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、ベバシズマブなどの抗ＶＥＧＦ抗体）の用量は、上で定義される治療されるがんの種類、がんの重症度及び経過、抗体が予防目的で投与されるのか治療目的で投与されるのか、事前療法、患者の病歴及び薬物に対する応答、ならびに主治医の裁量に応じることになる。
【０３２０】
いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、ベバシズマブなどの抗ＶＥＧＦ抗体、及び任意の第２の治療薬、例えば、ＰＤ−Ｌ１軸結合アンタゴニスト（例えば、アテゾリズマブなどのＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニスト））は、一度にまたは一連の治療にわたって患者に好適に投与され得る。１つの典型的な日用量は、上で言及した因子に応じて、約１μｇ／ｋｇ〜１００ｍｇ／ｋｇ以上であり得る。病状に応じて数日以上にわたる反復投与については、治療は、一般的に、疾患症状の所望の抑制が生じるまで持続される。かかる用量は、間欠的に、例えば、週に１回または３週に１回（例えば、患者が、例えば、約２〜約２０回、または例えば、約６回のＶＥＧＦアンタゴニストの用量を受けるように）投与され得る。最初により高い負荷の用量、続いて１回以上のより低い用量が投与され得る。しかしながら、他の投薬レジメンが有用であってもよい。この療法の進行は、従来の技法及びアッセイによって容易にモニタリングされる。
【０３２１】
例えば、一般的な提案としては、ヒトに投与される治療有効量のＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、ベバシズマブなどの抗ＶＥＧＦ抗体、及び任意の第２の治療薬、例えば、ＰＤ−Ｌ１軸結合アンタゴニスト（例えば、アテゾリズマブなどのＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニスト））は、１回またはそれ以上の投与で、患者の体重１ｋｇあたり約０．０１〜約５０ｍｇの範囲となる。いくつかの実施形態では、使用される抗体は、例えば、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約４５ｍｇ／ｋｇ、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約４０ｍｇ／ｋｇ、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約３５ｍｇ／ｋｇ、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約３０ｍｇ／ｋｇ、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約２５ｍｇ／ｋｇ、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約２０ｍｇ／ｋｇ、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約１５ｍｇ／ｋｇ、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇ、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約５ｍｇ／ｋｇ、または０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約１ｍｇ／ｋｇであり、毎日、毎週、２週毎、３週毎、または毎月投与される。いくつかの実施形態では、抗体は１５ｍｇ／ｋｇで投与される。しかしながら、他の投薬レジメンが有用であってもよい。一実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、ベバシズマブなどの抗ＶＥＧＦ抗体）及び／またはＰＤ−Ｌ１軸結合アンタゴニスト（例えば、アテゾリズマブなどのＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニスト）は、２１日周期の１日目（３週毎、ｑ３ｗ）に、約１００ｍｇ、約２００ｍｇ、約３００ｍｇ、約４００ｍｇ、約４２０ｍｇ、約５００ｍｇ、約５２５ｍｇ、約６００ｍｇ、約７００ｍｇ、約８００ｍｇ、約８４０ｍｇ、約９００ｍｇ、約１０００ｍｇ、約１０５０ｍｇ、約１１００ｍｇ、約１２００ｍｇ、約１３００ｍｇ、約１４００ｍｇ、約１５００ｍｇ、約１６００ｍｇ、約１７００ｍｇ、または約１８００ｍｇの用量でヒトに投与される。
【０３２２】
いくつかの実施形態では、アテゾリズマブは、３週毎（ｑ３ｗ）に１２００ｍｇで静脈内投与される。いくつかの実施形態では、ベバシズマブは、一度にまたは一連の治療にわたって固定用量で投与される。固定用量が投与される場合、好ましくは、用量は約５ｍｇ〜約２０００ｍｇの範囲である。例えば、固定用量は、約４２０ｍｇ、約５２５ｍｇ、約８４０ｍｇ、または約１０５０ｍｇであってもよい。いくつかの実施形態では、ベバシズマブは、２週毎に１０ｍｇ／ｋｇで静脈内投与される。いくつかの実施形態では、ベバシズマブは、３週毎に１５ｍｇ／ｋｇで静脈内投与される。ＶＥＧＦアンタゴニスト及び／またはＰＤ−Ｌ１軸結合アンタゴニストの用量は、単回用量または複数回用量（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０以上の用量）として投与され得る。一連の用量が投与される場合、これらは、例えば、ほぼ毎週、ほぼ２週毎、ほぼ３週毎、またはほぼ４週毎に投与されてもよい。併用治療において投与される抗体の用量は、単独治療と比較して低減されてもよい。この療法の進行は、従来の技法によって容易にモニタリングされる。
【０３２３】
ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）または任意の追加の治療薬（例えば、ＰＤ−Ｌ１軸結合アンタゴニスト）は、良好な医療行為と一致する様式で、製剤化、投薬、及び投与され得る。この背景で検討する因子には、治療される特定の障害、治療される特定の哺乳動物、個々の患者の臨床状態、障害の原因、薬剤の送達部位、投与方法、投与スケジュール、及び医療従事者に既知である他の因子が含まれる。ＶＥＧＦアンタゴニストは、必須ではないが任意選択で、問題の障害を予防または治療するために現在使用されている１つ以上の薬剤と共に製剤化及び／または同時投与される。かかる他の薬剤の有効量は、製剤中に存在するＶＥＧＦアンタゴニストの量、障害または治療の種類、及び上で考察された他の因子に応じる。これらは、一般に、本明細書に記載のものと同じ投薬量で、本明細書記載の投与経路によって、または本明細書に記載の投薬量の約１〜９９％、または適切であると経験的／臨床的に決定される任意の投薬量及び任意の経路で使用される。
【０３２４】
いくつかの実施形態では、先行する方法のうちのいずれも、追加の治療薬を投与することを更に含み得る。いくつかの実施形態では、追加の治療薬は、免疫療法剤、細胞毒性剤、増殖阻害剤、放射線療法剤、抗血管新生剤、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される。
【０３２５】
先行する方法のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、ＰＤ−Ｌ１軸結合アンタゴニスト（例えば、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、例えば、アテゾリズマブ）と同時投与される。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）及びＰＤ−Ｌ１軸結合アンタゴニスト（例えば、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、例えば、アテゾリズマブ）は、同じ製剤の一部として投与される。他の実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、ＰＤ−Ｌ１軸結合アンタゴニスト（例えば、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、例えば、アテゾリズマブ）とは別に投与される。
【０３２６】
いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、活性化副刺激分子に向けたアゴニストと同時投与される。いくつかの実施形態では、活性化副刺激分子は、ＣＤ４０、ＣＤ２２６、ＣＤ２８、ＯＸ４０、ＧＩＴＲ、ＣＤ１３７、ＣＤ２７、ＨＶＥＭ、またはＣＤ１２７を含んでもよい。いくつかの実施形態では、活性化副刺激分子に向けたアゴニストは、ＣＤ４０、ＣＤ２２６、ＣＤ２８、ＯＸ４０、ＧＩＴＲ、ＣＤ１３７、ＣＤ２７、ＨＶＥＭ、またはＣＤ１２７に結合するアゴニスト抗体である。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、阻害性副刺激分子に向けたアンタゴニストと共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、阻害性副刺激分子は、ＣＴＬＡ−４（ＣＤ１５２としても知られる）、ＴＩＭ−３、ＢＴＬＡ、ＶＩＳＴＡ、ＬＡＧ−３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＩＤＯ、ＴＩＧＩＴ、ＭＩＣＡ／Ｂ、またはアルギナーゼを含んでもよい。いくつかの実施形態では、阻害性副刺激分子に向けたアンタゴニストは、ＣＴＬＡ−４、ＴＩＭ−３、ＢＴＬＡ、ＶＩＳＴＡ、ＬＡＧ−３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＩＤＯ、ＴＩＧＩＴ、ＭＩＣＡ／Ｂ、またはアルギナーゼに結合するアンタゴニスト抗体である。
【０３２７】
いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、ＣＴＬＡ−４（ＣＤ１５２としても知られる）に向けたアンタゴニスト、例えば、遮断抗体と共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、イピリムマブ（ＭＤＸ−０１０、ＭＤＸ−１０１、またはＹＥＲＶＯＹ（登録商標）としても知られる）と共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、トレメリムマブ（チシリムマブまたはＣＰ−６７５，２０６としても知られる）と共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、Ｂ７−Ｈ３に向けたアンタゴニスト（ＣＤ２７６としても知られる）、例えば、遮断抗体と共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、ＭＧＡ２７１と共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、ＴＧＦ−ベータに向けたアンタゴニスト、例えば、メテリムマブ（ｍｅｔｅｌｉｍｕｍａｂ）（ＣＡＴ−１９２としても知られる）、フレソリムマブ（ｆｒｅｓｏｌｉｍｕｍａｂ）（ＧＣ１００８としても知られる）、またはＬＹ２１５７２９９と共に投与されてもよい。
【０３２８】
いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、ＣＤ１３７に向けたアゴニスト（ＴＮＦＲＳＦ９、４−１ＢＢ、またはＩＬＡとしても知られる）、例えば、活性化抗体と共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、ウレルマブ（ＢＭＳ−６６３５１３としても知られる）と共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、ＣＤ４０に向けたアゴニスト、例えば、活性化抗体と共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、ＣＰ−８７０８９３と共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、ＯＸ４０に向けたアゴニスト（ＣＤ１３４としても知られる）、例えば、活性化抗体と共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、抗ＯＸ４０抗体（例えば、ＡｇｏｎＯＸ）と共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、ＣＤ２７に向けたアゴニスト、例えば、活性化抗体と共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、ＣＤＸ−１１２７と共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、インドールアミン−２，３−ジオキシゲナーゼ（ＩＤＯ）に向けたアンタゴニストと共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＩＤＯアンタゴニストは、１−メチル−Ｄ−トリプトファン（１−Ｄ−ＭＴとしても知られる）である。
【０３２９】
いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、がんワクチンと共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、がんワクチンは、ペプチドがんワクチンであり、これは、いくつかの実施形態では、個人化されたペプチドワクチンである。いくつかの実施形態では、ペプチドがんワクチンは、多価長鎖ペプチド、マルチペプチド、ペプチドカクテル、ハイブリッドペプチド、またはペプチドパルス樹状細胞ワクチンである（例えば、Ｙａｍａｄａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｓｃｉ．１０４：１４−２１，２０１３を参照されたい）。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、アジュバントと共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、ＴＬＲアゴニスト、例えば、Ｐｏｌｙ−ＩＣＬＣ（ＨＩＬＴＯＮＯＬ（登録商標）としても知られる）、ＬＰＳ、ＭＰＬ、またはＣｐＧ  ＯＤＮを含む治療と共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）アルファと共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、ＩＬ−１と共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、ＨＭＧＢ１と共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、ＩＬ−１０アンタゴニストと共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、ＩＬ−４アンタゴニストと共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、ＩＬ−１３アンタゴニストと共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、ＨＶＥＭアンタゴニストと共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、ＩＣＯＳアゴニストと共に、例えば、ＩＣＯＳ−Ｌ、またはＩＣＯＳに向けたアゴニスト抗体の投与によって、投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、ＣＸ３ＣＬ１を標的化する治療と共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、ＣＸＣＬ９を標的化する治療と共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、ＣＸＣＬ１０を標的化する治療と共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、ＣＣＬ５を標的化する治療と共に投与されて���よい。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、ＬＦＡ−１またはＩＣＡＭ１アゴニストと共に投与されてもよい。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）は、セレクチンアゴニストと共に投与されてもよい。
【０３３０】
先行する実施形態のうちのいずれも、ＰＤ−Ｌ１軸結合アンタゴニスト（例えば、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、例えば、アテゾリズマブ）の投与を更に伴ってもよい。例えば、ＶＥＧＦアンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ１軸結合アンタゴニスト（例えば、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、例えば、アテゾリズマブ）及び別の免疫療法剤と共に投与されてもよい。
【０３３１】
化学療法剤は、投与される場合、通常、その結果分かった投薬量、または任意選択で、薬物の複合作用もしくは化学療法剤の投与に帰す副作用に起因して低下した投薬量で投与される。かかる化学療法剤の調製及び投薬スケジュールは、製造業者の指示に従ってまたは当業者によって経験的に決定されるように使用され得る。化学療法剤がパクリタキセルである場合、好ましくは、化学療法剤は、約１３０ｍｇ／ｍ２〜２００ｍｇ／ｍ２（例えば、約１７５ｍｇ／ｍ２）の用量で、例えば、３時間かけて、３週に１回、投与される。化学療法剤がカルボプラチンである場合、好ましくは、化学療法剤は、患者の先在腎機能または腎機能及び所望の血小板最下点に基づくカルバート式を使用して、カルボプラチンの用量を計算することによって投与される。腎排泄がカルボプラチンの主要な排除経路である。体表面積に基づく経験的な用量計算と比較して、この投薬処方を使用することにより、さもなければ過少投薬（平均以上の腎機能を有する患者において）または過剰投薬（腎機能障害を有する患者において）のいずれかを引き起こし得る前治療腎機能における患者の差を補償することが可能となる。単剤カルボプラチンを使用する４〜６ｍｇ／ｍＬ／分の標的ＡＵＣが、以前に試験された患者において最適な用量範囲を提供するようである。
【０３３２】
上記の療法レジメンに加えて、患者は、腫瘍及び／またはがん細胞の外科的除去に供されてもよい。
【０３３３】
上述のかかる併用療法は、併用投与（２つ以上の治療薬が同じまたは別々の製剤に含まれる）、ならびにＶＥＧＦアンタゴニストの投与が追加の治療薬または薬剤（例えば、ＰＤ−Ｌ１軸結合アンタゴニスト）の投与の前、それと同時、及び／またはその後に生じ得る、個別投与を包含する。一実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニストの投与と追加の治療薬（例えば、ＰＤ−Ｌ１軸結合アンタゴニスト）の投与とは、互いの約１カ月以内、または約１、２、もしくは３週以内、または１、２、３、４、５、もしくは６日以内に生じる。
【０３３４】
いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト及び第２の治療薬（例えば、ＰＤ−Ｌ１軸結合アンタゴニスト）の投与は、追加の治療薬または薬剤の投与の前、それと同時、及び／またはその後に生じ得る。一実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニスト及び第２の治療薬（例えば、ＰＤ−Ｌ１軸結合アンタゴニスト）の投与と追加の治療薬の投与とは、互いの約１カ月以内、または約１、２、もしくは３週以内、または１、２、３、４、５、もしくは６日以内に生じる。
【０３３５】
ＶＥＧＦアンタゴニストまたは第２の治療薬（例えば、ＰＤ−Ｌ１軸結合アンタゴニスト）のいずれかが抗体（例えば、ベバシズマブまたはアテゾリズマブ）である実施形態では、投与される抗体は裸抗体であってもよい。投与されるＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、ベバシズマブなどの抗ＶＥＧＦ抗体）及び第２の治療薬（例えば、ＰＤ−Ｌ１軸結合アンタゴニスト（例えば、アテゾリズマブなどのＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニスト））は、細胞毒性剤と抱合され得る。好ましくは、抱合及び／またはそれが結合する抗原は、細胞によって取り込まれ、抱合体が結合するがん細胞の殺滅におけるその治療有効性の増大をもたらす。好ましい実施形態では、細胞毒性剤は、がん細胞中の核酸を標的化するか、またはそれに干渉する。かかる細胞毒性剤の例には、マイタンシノイド、カリケアマイシン、リボヌクレアーゼ、及びＤＮＡエンドヌクレアーゼが挙げられる。
【０３３６】
本明細書に記載の方法で利用される組成物は、任意の好適な方法によって投与され得、これらの方法には、例えば、静脈内に、筋肉内に、皮下に、皮内に、経皮的に、動脈内に、腹腔内に、病変内に、頭蓋内に、関節内に、前立腺内に、胸膜内に、気管内に、髄腔内に、鼻腔内に、腟内に、直腸内に、局所的に、腫瘍内に、腹膜に、結膜下に、小胞内に、粘膜に、心膜内に、臍帯内に、眼内に、眼窩内に、経口的に、局所的に、経皮的に、硝子体内に（例えば、硝子体内注射により）、点眼により、吸入により、注射により、移植により、注入により、持続注入により、標的細胞を直接的に浸す局所灌流により、カテーテルにより、洗浄により、クリームに入れて、または脂質組成物に入れて、が挙げられる。本明細書に記載の方法で利用される組成物はまた、全身または局所投与され得る。投与方法は、様々な要因（例えば、投与される化合物または組成物、及び治療される状態、疾患、または障害の重症度）に応じて様々であり得る。いくつかの実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニストは、静脈内に、筋肉内に、皮下に、局所的に、経口的に、経皮的に、腹腔内に、眼窩内に、移植により、吸入により、髄腔内に、脳室内に、または鼻腔内に投与される。投薬は、投与が短期または長期であるかに部分的に応じて、任意の好適な経路、例えば、静脈内または皮下注入などの注入によるものであり得る。単回投与または様々な時点にわたる複数回投与、ボーラス投与、及びパルス注入を含むが、これらに限定されない様々な投薬スケジュールが本明細書で企図される。
【０３３７】
別の態様では、がんに罹患している患者の治療に使用するための医薬品の製造における有効量のＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）の使用が本明細書で提供され、ここでは、患者から得られた生体試料は、参照レベルと比べて増加した、ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、ＰＲＦ１、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、もしくはＣＸＣＬ１３、ＫＬＲＫ１、またはＳＬＡＭＦ７のうちの１個以上（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、または１３個）の発現レベルを有することが決定されている。
【０３３８】
更なる態様では、がんに罹患している患者の治療に使用するための医薬品の製造における有効量のＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）の使用が本明細書で提供され、ここでは、患者から得られた生体試料は、参照レベルと比べて増加したＭＨＣ−Ｉの発現レベルを有することが決定されている。
【０３３９】
なお更なる態様では、がんに罹患している患者の治療に使用するための医薬品の製造における有効量のＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）の使用が本明細書で提供され、ここでは、患者から得られた生体試料は、参照レベルと比べて増加した、ＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＣＣＲ５、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＣＲ７、またはＣＸＣＬ１０のうちの１個以上（例えば、１、２、３、４、５、または６個）の発現レベルを有することが決定されている。
【０３４０】
先行する方法のうちのいずれかのいくつかの実施形態では、患者はヒト患者である。
【０３４１】
ＩＶ．組成物
一態様では、本発明は、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、ベバシズマブなどの抗ＶＥＧＦ抗体）を含む抗がん剤が、がんにおける抗腫瘍作用を有するという発見に一部基づく。ある特定の実施形態では、ＶＥＧＦアンタゴニストが提供される。これらの薬剤及びそれらの組み合わせは、例えば、本明細書に記載の方法のうちのいずれかの一部として、がんの治療に有用である。
【０３４２】
いくつかの態様では、がんに罹患している患者の治療方法に使用するためのＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）が提供され、ここでは、患者から得られた生体試料は、参照レベルと比べて増加した、ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、ＰＲＦ１、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、もしくはＣＸＣＬ１３、ＫＬＲＫ１、またはＳＬＡＭＦ７のうちの１個以上（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、または１３個）の発現レベルを有することが決定されている。また、がんに罹患している患者の治療方法に使用するための有効量のＶＥＧＦアンタゴニストを含む組成物が提供され、ここでは、患者から得られた生体試料は、参照レベルと比べて増加した免疫遺伝子特性の発現レベルを有することが決定されており、この免疫遺伝子特性は、ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、ＰＲＦ１、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、もしくはＣＸＣＬ１３、ＫＬＲＫ１、またはＳＬＡＭＦ７のうちの１個以上（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、または１３個）を含む。
【０３４３】
他の態様では、がんに罹患している患者の治療方法に使用するためのＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）が提供され、ここでは、患者から得られた生体試料は、参照レベルと比べて増加したＭＨＣ−Ｉの発現レベルを有することが決定されている。また、がんに罹患している患者の治療方法に使用するための有効量のＶＥＧＦアンタゴニストを含む組成物が提供され、ここでは、患者から得られた生体試料は、参照レベルと比べて増加したＭＨＣ−Ｉの発現レベルを有することが決定されている。
【０３４４】
更なる態様では、がんに罹患している患者の治療方法に使用するためのＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、例えば、ベバシズマブ）が提供され、ここでは、患者から得られた生体試料は、参照レベルと比べて増加した、ＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＣＣＲ５、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＣＲ７、またはＣＸＣＬ１０のうちの１個以上（例えば、１、２、３、４、５、または６個）の発現レベルを有することが決定されている。また、がんに罹患している患者の治療方法に使用するための有効量のＶＥＧＦアンタゴニストを含む組成物が提供され、ここでは、患者から得られた生体試料は、参照レベルと比べて増加した、ＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＣＣＲ５、ＣＸ３ＣＬ１、ＣＣＲ７、またはＣＸＣＬ１０から選択される１つ以上の遺伝子の発現レベルを有することが決定されている。
【０３４５】
Ａ．例示的なＶＥＧＦアンタゴニスト
本発明のＶＥＧＦアンタゴニストには、ＶＥＧＦと結合する、ＶＥＧＦ発現レベルを低減する、またはＶＥＧＦの生物活性を中和する、遮断する、阻害する、無効化する、低減する、もしくはそれに干渉することができる任意の分子が含まれる。例示的なヒトＶＥＧＦは、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ受託番号Ｐ１５６９２、Ｇｅｎｅ  ＩＤ（ＮＣＢＩ）：７４２２として示される。
【０３４６】
いくつかの事例では、ＶＥＧＦアンタゴニストは抗ＶＥＧＦ抗体である。いくつかの実施形態では、抗ＶＥＧＦ抗体は、「ｒｈｕＭａｂ  ＶＥＧＦ」または「ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標）」としても知られるベバシズマブである。ベバシズマブは、Ｐｒｅｓｔａら（Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．５７：４５９３−４５９９，１９９７）に従って生成される組換えヒト化抗ＶＥＧＦモノクローナル抗体である。これは、変異型ヒトＩｇＧ１フレームワーク領域と、ヒトＶＥＧＦのその受容体への結合を妨害するマウス抗ｈＶＥＧＦモノクローナル抗体Ａ．４．６．１由来の抗原結合相補性決定領域とを含む。フレームワーク領域の大部分を含む、ベバシズマブのアミノ酸配列の約９３％が、ヒトＩｇＧ１から誘導され、配列の約７％が、マウス抗体Ａ４．６．１から誘導される。ベバシズマブは、分子量が約１４９，０００ダルトンであり、グリコシル化される。ベバシズマブ及び他のヒト化抗ＶＥＧＦ抗体は、２００５年２月２６日発行の米国特許第６，８８４，８７９号に更に記載されており、その開示全体が参照により明示的に本明細書に組み込まれる。追加の好ましい抗体には、ＰＣＴ出願公開第ＷＯ２００５／０１２３５９号に記載されているＧ６またはＢ２０シリーズ抗体（例えば、Ｇ６−３１、Ｂ２０−４．１）が含まれる。追加の好ましい抗体については、米国特許第７，０６０，２６９号、同第６，５８２，９５９号、同第６，７０３，０２０号；同第６，０５４，２９７号；ＷＯ９８／４５３３２；ＷＯ９６／３００４６；ＷＯ９４／１０２０２；ＥＰ０６６６８６８Ｂ１；米国特許出願公開第２００６００９３６０号、同第２００５０１８６２０８号、同第２００３０２０６８９９号、同第２００３０１９０３１７号、同第２００３０２０３４０９号、及び同第２００５０１１２１２６；ならびにＰｏｐｋｏｖ  ｅｔ  ａｌ．（Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２８８：１４９−１６４，２００４）を参照されたい。他の好ましい抗体には、残基Ｆ１７、Ｍ１８、Ｄ１９、Ｙ２１、Ｙ２５、Ｑ８９、１９１、Ｋ１０１、Ｅ１０３、及びＣ１０４を含むか、または代替的に残基Ｆ１７、Ｙ２１、Ｑ２２、Ｙ２５、Ｄ６３、１８３、及びＱ８９を含む、ヒトＶＥＧＦ上の機能エピトープに結合するものが含まれる。
【０３４７】
他の事例では、ＶＥＧＦアンタゴニストは、抗ＶＥＧＦＲ２抗体または関連する分子（例えば、ラムシルマブ、タニビルマブ、アフリベルセプト）；抗ＶＥＧＦＲ１抗体または関連する分子（例えば、イクルクマブ、アフリベルセプト（ＶＥＧＦ  Ｔｒａｐ−Ｅｙｅ；ＥＹＬＥＡ（登録商標））、またはジブ−アフリベルセプト（ｚｉｖ−ａｆｌｉｂｅｒｃｅｐｔ）（ＶＥＧＦ  Ｔｒａｐ；ＺＡＬＴＲＡＰ（登録商標）））；二重特異性ＶＥＧＦ抗体（例えば、ＭＰ−０２５０、バヌシズマブ（ＶＥＧＦ−ＡＮＧ２）、またはＵＳ２００１／０２３６３８８に開示されている二重特異性抗体）；抗ＶＥＧＦアーム、抗ＶＥＧＦＲ１アーム、及び抗ＶＥＧＦＲ２のうちの２つの組み合わせを含む二重特異性抗体；抗ＶＥＧＦＡ抗体（例えば、ベバシズマブ、セバシズマブ）；抗ＶＥＧＦＢ抗体；抗ＶＥＧＦＣ抗体（例えば、ＶＧＸ−１００）、抗ＶＥＧＦＤ抗体；または非ペプチド小分子ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、パゾパニブ、アキシチニブ、バンデタニブ、スチバーガ、カボザンチニブ、レンバチニブ、ニンテダニブ、オランチニブ、テラチニブ、ドビチニグ（ｄｏｖｉｔｉｎｉｇ）、セジラニブ、モテサニブ、スルファチニブ、アパチニブ、フォレチニブ、ファミチニブ、及びチボザニブ）である。
【０３４８】
上に列挙された実施形態のうちのいずれかにおいて使用するためのかかるＶＥＧＦアンタゴニスト抗体、または本明細書に記載の他の抗体（例えば、ＶＥＧＦ発現レベルの検出のための抗ＶＥＧＦ抗体）は、以下のＣ節のｉ節〜ｖｉｉ節に記載の特徴の任意のものを、単独または組み合わせで有し得ることが、明示的に企図される。
【０３４９】
Ｂ．例示的なＰＤ−Ｌ１軸結合アンタゴニスト
本発明の方法に使用され得るＰＤ−Ｌ１軸結合アンタゴニストは、ＰＤ−１結合アンタゴニスト、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニスト、及びＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストを含む。ＰＤ−１（プログラム死１）は、当該技術分野において「プログラム細胞死１」、「ＰＤＣＤ１」、「ＣＤ２７９」、及び「ＳＬＥＢ２」とも称される。例示的なヒトＰＤ−１は、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ受託番号Ｑ１５１１６に示される。ＰＤ−Ｌ１（プログラム死リガンド１）は、当該技術分野において「プログラム細胞死１リガンド１」「ＰＤＣＤ１ＬＧ１」、「ＣＤ２７４」、「Ｂ７−Ｈ」、及び「ＰＤＬ１」とも称される。例示的なヒトＰＤ−Ｌ１は、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ受託番号第Ｑ９ＮＺＱ７．１号に示される。ＰＤ−Ｌ２（プログラム死リガンド２）は、当該技術分野において「プログラム細胞死１リガンド２」、「ＰＤＣＤ１ＬＧ２」、「ＣＤ２７３」、「Ｂ７−ＤＣ」、「Ｂｔｄｃ」、及び「ＰＤＬ２」とも称される。例示的なヒトＰＤ−Ｌ２は、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ受託番号第Ｑ９ＢＱ５１に示される。いくつかの実施形態では、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、及びＰＤ−Ｌ２は、ヒトＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、及びＰＤ−Ｌ２である。
【０３５０】
いくつかの事例では、ＰＤ−Ｌ１軸結合アンタゴニストはＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストである。いくつかの事例では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ１の、そのリガンド結合パートナーのうちの１つ以上への結合を阻害する。他の事例では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ１のＰＤ−１への結合を阻害する。また他の事例では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ１のＢ７−１への結合を阻害する。いくつかの事例では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ１のＰＤ−１及びＢ７−１両方への結合を阻害する。いくつかの事例では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは抗体である。いくつかの実施形態では、抗体は、ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０、ＭＰＤＬ３２８０Ａ（アテゾリズマブ）、ＭＤＸ−１１０５、ＭＥＤＩ４７３６（デュルバルマブ）、及びＭＳＢ００１０７１８Ｃ（アベルマブ）からなる群から選択される。
【０３５１】
いくつかの事例では、ＰＤ−Ｌ１軸結合アンタゴニストはＰＤ−１結合アンタゴニストである。例えば、いくつかの事例では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、ＰＤ−１の、そのリガンド結合パートナーのうちの１つ以上への結合を阻害する。いくつかの事例では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、ＰＤ−１のＰＤ−Ｌ１への結合を阻害する。他の事例では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、ＰＤ−１のＰＤ−Ｌ２への結合を阻害する。また他の事例では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、ＰＤ−１のＰＤ−Ｌ１及びＰＤ−Ｌ２両方への結合を阻害する。いくつかの事例では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは抗体である。いくつかの事例では、抗体は、ＭＤＸ  １１０６（ニボルマブ）、ＭＫ−３４７５（ペンブロリズマブ）、ＣＴ−０１１（ピディリズマブ）、ＭＥＤＩ−０６８０（ＡＭＰ−５１４）、ＰＤＲ００１、ＲＥＧＮ２８１０、及びＢＧＢ−１０８からなる群から選択される。いくつかの事例では、ＰＤ−１結合アンタゴニストはＦｃ融合タンパク質である。例えば、いくつかの事例では、Ｆｃ融合タンパク質はＡＭＰ−２２４である。
更なる態様では、本発明は、医薬品の製造または調製におけるＰＤ−Ｌ１軸結合アンタゴニストの使用を提供する。一実施形態では、医薬品は、がんの治療用である。更なる実施形態では、医薬品は、腎臓癌（例えば、腎細胞癌腫（ＲＣＣ）、例えば、転移性ＲＣＣ（ｍＲＣＣ））に罹患している患者に有効量の医薬品を投与することを含む、がんを治療する方法において使用するためのものである。１つのかかる実施形態では、本方法は、例えば、以下に記載のような、有効量の少なくとも１つの追加の治療薬を個体に投与することを更に含む。
【０３５２】
いくつかの実施形態では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、ＰＤ−１のそのリガンド結合パートナーへの結合を阻害する分子である。特定の態様では、ＰＤ−１リガンド結合パートナーはＰＤ−Ｌ１及び／またはＰＤ−Ｌ２である。別の実施形態では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ１のその結合リガンドへの結合を阻害する分子である。特定の態様では、ＰＤ−Ｌ１結合パートナーはＰＤ−１及び／またはＢ７−１である。別の実施形態では、ＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ２のそのリガンド結合パートナーへの結合を阻害する分子である。特定の態様では、ＰＤ−Ｌ２結合リガンドパートナーはＰＤ−１である。アンタゴニストは、抗体、その抗原結合断片、イムノアドヘシン、融合タンパク質、またはオリゴペプチドである。
【０３５３】
いくつかの実施形態では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、例えば、以下に記載のような、抗ＰＤ−１抗体（例えば、ヒト抗体、ヒト化抗体、またはキメラ抗体）である。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、ＭＤＸ−１１０６（ニボルマブ）、ＭＫ−３４７５（ペンブロリズマブ）、ＣＴ−０１１（ピディリズマブ）、ＭＥＤＩ−０６８０（ＡＭＰ−５１４）、ＰＤＲ００１、ＲＥＧＮ２８１０、及びＢＧＢ−１０８からなる群から選択される。ＭＤＸ−１１０６−０４、ＯＮＯ−４５３８、ＢＭＳ−９３６５５８、またはニボルマブとしても知られるＭＤＸ−１１０６は、ＷＯ２００６／１２１１６８に記載されている抗ＰＤ−１抗体である。ペンブロリズマブまたはランブロリズマブとしても知られるＭＫ−３４７５は、ＷＯ２００９／１１４３３５に記載されている抗ＰＤ−１抗体である。ｈＢＡＴ、ｈＢＡＴ−１、またはピディリズマブとしても知られるＣＴ−０１１は、ＷＯ２００９／１０１６１１に記載されている抗ＰＤ−１抗体である。いくつかの実施形態では、ＰＤ−１結合アンタゴニストは、イムノアドヘシン（例えば、定常領域（例えば、免疫グロブリン配列のＦｃ領域）に融合したＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２の細胞外またはＰＤ−１結合部分を含むイムノアドヘシン）である。いくつかの実施形態では、ＰＤ−１結合アンタゴニストはＡＭＰ−２２４である。Ｂ７−ＤＣＩｇとしても知られるＡＭＰ−２２４は、ＷＯ２０１０／０２７８２７及びＷＯ２０１１／０６６３４２に記載されているＰＤ−Ｌ２−Ｆｃ融合可溶性受容体である。
【０３５４】
いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−１抗体はＭＤＸ−１１０６である。「ＭＤＸ−１１０６」の代替名には、ＭＤＸ−１１０６−０４、ＯＮＯ−４５３８、ＢＭＳ−９３６５５８、及びニボルマブが挙げられる。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−１抗体はニボルマブ（ＣＡＳ登録番号：９４６４１４−９４−４）である。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−１抗体は、国際特許出願公開第ＷＯ２０１３／０１９９０６号に記載されている任意の抗ＰＤ−１抗体である。
【０３５５】
いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ１軸結合アンタゴニストはＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストである。いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストは抗ＰＤ−Ｌ２抗体（例えば、ヒト抗体、ヒト化抗体、またはキメラ抗体）である。いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストはイムノアドヘシンである。いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストは、国際特許出願公開第ＷＯ２０１３／０１９９０６号に記載されている任意のＰＤ−Ｌ２結合アンタゴニストである。
【０３５６】
いくつかの実施形態では、ＰＤ−Ｌ１結合アンタゴニストは、例えば、以下に記載のような、抗ＰＤ−Ｌ１抗体である。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、ＰＤ−Ｌ１とＰＤ−１との間、及び／またはＰＤ−Ｌ１とＢ７−１との間の結合を阻害することができる。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体はモノクローナル抗体である。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’−ＳＨ、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、及び（Ｆａｂ’）２断片からなる群から選択される抗体断片である。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体はヒト化抗体である。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体はヒト抗体である。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０、ＭＰＤＬ３２８０Ａ（アテゾリズマブ）、ＭＤＸ−１１０５、及びＭＥＤＩ４７３６（デュルバルマブ）、及びＭＳＢ００１０７１８Ｃ（アベルマブ）からなる群から選択される。抗体ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０は、ＷＯ２０１０／０７７６３４に記載されている抗ＰＤ−Ｌ１である。ＢＭＳ−９３６５５９としても知られるＭＤＸ−１１０５は、ＷＯ２００７／００５８７４に記載されている抗ＰＤ−Ｌ１抗体である。ＭＥＤＩ４７３６（デュルバルマブ）は、ＷＯ２０１１／０６６３８９及びＵＳ２０１３／０３４５５９に記載されている抗ＰＤ−Ｌ１モノクローナル抗体である。本発明の方法に有用な抗ＰＤ−Ｌ１抗体、及びそれを作製するための方法の例は、参照により本明細書に組み込まれる、ＰＣＴ特許出願第ＷＯ２０１０／０７７６３４号、ＷＯ２００７／００５８７４、ＷＯ２０１１／０６６３８９、米国特許第８，２１７，１４９号、及びＵＳ２０１３／０３４５５９に記載されている。
【０３５７】
ＷＯ２０１０／０７７６３４Ａ１及びＵＳ８，２１７，１４９に記載されている抗ＰＤ−Ｌ１抗体が、本明細書に記載の方法において使用され得る。
【０３５８】
本明細書の実施形態のうちのいずれにおいても、単離された抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、ヒトＰＤ−Ｌ１、例えば、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ受託番号Ｑ９ＮＺＱ７．１に示されるヒトＰＤ−Ｌ１、またはその変異型に結合し得る。
【０３５９】
上に列挙された実施形態のうちのいずれかにおいて使用するためのかかるＰＤ−Ｌ１軸結合アンタゴニスト抗体（例えば、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＰＤ−１抗体、及び抗ＰＤ−Ｌ２抗体）、または本明細書に記載の他の抗体（例えば、ＰＤ−Ｌ１発現レベルの検出のための抗ＰＤ−Ｌ１抗体）は、以下のＣ節のｉ節〜ｖｉｉ節に記載の特徴の任意のものを、単独または組み合わせで有し得ることが、明示的に企図される。
【０３６０】
Ｃ．抗体
ｉ．抗体親和性
ある特定の実施形態では、本明細書で提供される抗体（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、または抗ＰＤ−１抗体）は、≦１μＭ、≦１００ｎＭ、≦１０ｎＭ、≦１ｎＭ、≦０．１ｎＭ、≦０．０１ｎＭ、または≦０．００１ｎＭ（例えば、１０−８Ｍ以下、例えば、１０−８Ｍ〜１０−１３Ｍ、例えば、１０−９Ｍ〜１０−１３Ｍ）の解離定数（Ｋｄ）を有する。
【０３６１】
一実施形態では、Ｋｄは、放射性標識抗原結合アッセイ（ＲＩＡ）によって測定される。一実施形態では、ＲＩＡは、目的の抗体及びその抗原のＦａｂバージョンを用いて行われる。例えば、抗原についてのＦａｂの溶液結合親和性は、Ｆａｂを、標識されていない抗原の滴定シリーズの存在下で最小濃度の（１２５Ｉ）で標識された抗原によって平衡化した後、抗Ｆａｂ抗体でコーティングされたプレートを用いて結合した抗原を捕捉することによって測定される（例えば、Ｃｈｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２９３：８６５−８８１，１９９９を参照されたい）。アッセイのための条件を確立するために、ＭＩＣＲＯＴＩＴＥＲ（登録商標）マルチウェルプレート（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を、５０ｍＭの炭酸塩（ｐＨ９．６）中５μｇ／ｍｌの捕捉用抗Ｆａｂ抗体（Ｃａｐｐｅｌ  Ｌａｂｓ）で一晩コーティングし、続いて、室温（約２３℃）で２〜５時間、ＰＢＳ中２％（ｗ／ｖ）のウシ血清アルブミンによってブロッキングする。非吸収性プレート（Ｎｕｎｃ＃２６９６２０）において、１００ｐＭまたは２６ｐＭの［１２５Ｉ］抗原を目的のＦａｂの連続希釈物と混合する（例えば、Ｐｒｅｓｔａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．５７：４５９３−４５９９，１９９７における抗ＶＥＧＦ抗体、Ｆａｂ−１２の評定と一致して）。次に、目的のＦａｂを一晩インキュベートするが、このインキュベーションは、平衡が達成されることを確実にするために、より長い期間（例えば、約６５時間）継続し得る。その後、混合物を、室温でのインキュベーション（例えば、１時間）のため、捕捉プレートに移す。次に、溶液を除去し、プレートを、ＰＢＳ中０．１％のポリソルベート２０（ＴＷＥＥＮ−２０（登録商標））で８回洗浄する。プレートが乾燥したら、１５０μｌ／ウェルのシンチラント（ＭＩＣＲＯＳＣＩＮＴ−２０（商標）；Ｐａｃｋａｒｄ）を添加し、プレートを１０分間ＴＯＰＣＯＵＮＴ（商標）ガンマカウンター（Ｐａｃｋａｒｄ）で計数する。２０％以下の最大結合を付与する各Ｆａｂの濃度を競合結合アッセイにおける使用のために選択する。
【０３６２】
別の実施形態に従うと、Ｋｄは、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）表面プラズモン共鳴アッセイを使用して測定される。例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）−２０００またはＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）−３０００（ＢＩＡｃｏｒｅ，Ｉｎｃ．，Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ，ＮＪ）を使用するアッセイは、固定化抗原ＣＭ５チップを約１０応答単位（ＲＵ）で用いて２５℃で行われる。一実施形態では、カルボキシメチル化デキストランバイオセンサチップ（ＣＭ５，ＢＩＡＣＯＲＥ，Ｉｎｃ．）を、供給業者の指示に従ってＮ−エチル−Ｎ’−（３−ジメチルアミノプロピル）−カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ）及びＮ−ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ）を用いて活性化数。抗原をｐＨ４．８の１０ｍＭの酢酸ナトリウムによって５μｇ／ｍｌ（約０．２μＭ）に希釈した後、５μｌ／分の流量で注射し、カップリングされたタンパク質の約１０応答単位（ＲＵ）を達成する。抗原の注射に続いて、１Ｍのエタノールアミンを注射して、未反応群をブロッキングする。動態測定のため、Ｆａｂの２倍連続希釈物（０．７８ｎＭから５００ｎＭ）を、約２５μｌ／分の流量で２５℃で０．０５％のポリソルベート２０（ＴＷＥＥＮ−２０（商標））界面活性剤（ＰＢＳＴ）を有するＰＢＳ中に注射する。会合速度（ｋｏｎ）及び解離速度（ｋｏｆｆ）を、単純な１対１のラングミュア結合モデル（ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ、バージョン３．２）を使用して、会合センサグラム及び解離センサグラムを同時に適合させることによって、計算する。平衡解離定数（Ｋｄ）をｋｏｆｆ／ｋｏｎの比として計算する。例えば、Ｃｈｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，（Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２９３：８６５−８８１，１９９９を参照されたい。上記の表面プラズモン共鳴アッセイによって会合速度が１０６Ｍ−１ｓ−１を超過する場合には、会合速度は、ストップフローを装備した分光光度計（Ａｖｉｖ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）または撹拌キュベットを有する８０００−ｓｅｒｉｅｓ  ＳＬＭ−ＡＭＩＮＣＯ（商標）分光光度計（ＴｈｅｒｍｏＳｐｅｃｔｒｏｎｉｃ）などの分光計で測定した、漸増濃度の抗原の存在下におけるｐＨ７．２のＰＢＳ中２０ｎＭの抗抗原抗体（Ｆａｂ形態）の２５℃での蛍光発光強度（励起＝２９５ｎｍ；発光＝３４０ｎｍ、１６ｎｍ帯域）の増減を測定する、蛍光消光技法の使用によって決定することができる。
【０３６３】
ｉｉ．抗体断片
ある特定の実施形態では、本明細書に提供される抗体（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体）は抗体断片である。抗体断片には、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆａｂ’−ＳＨ、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、及びｓｃＦｖ断片、ならびに以下に記載される他の断片が含まれるが、これらに限定されない。ある特定の抗体断片の概説については、Ｈｕｄｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．（Ｎａｔ．Ｍｅｄ．９：１２９−１３４，２００３）を参照されたい。ｓｃＦｖ断片に関する概説については、例えば、ＰｌｕｃｋｔｈuｎのＴｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ｏｆ  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，ｖｏｌ．１１３，Ｒｏｓｅｎｂｕｒｇ  ａｎｄ  Ｍｏｏｒｅ  ｅｄｓ．，（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ），ｐｐ．２６９−３１５（１９９４）を参照されたい。ＷＯ９３／１６１８５、ならびに米国特許第５，５７１，８９４号及び同第５，５８７，４５８号も参照されたい。サルベージ受容体結合エピトープ残基を含み、インビボ半減期が増加したＦａｂ及びＦ（ａｂ’）２断片の考察については、米国特許第５，８６９，０４６号を参照されたい。
【０３６４】
ダイアボディは、二価または二重特異性であり得る２つの抗原結合部位を有する抗体断片である。例えば、ＥＰ４０４，０９７、ＷＯ１９９３／０１１６１、Ｈｕｄｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．Ｎａｔ．Ｍｅｄ．９：１２９−１３４，２００３及びＨｏｌｌｉｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９０：６４４４−６４４８，１９９３を参照されたい。トリアボディ及びテトラボディも、Ｈｕｄｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．（Ｎａｔ．Ｍｅｄ．９：１２９−１３４，２００３）に記載されている。
【０３６５】
単一ドメイン抗体は、抗体の重鎖可変ドメインの全てもしくは一部、または軽鎖可変ドメインの全てもしくは一部を含む、抗体断片である。ある特定の実施形態では、単一ドメイン抗体は、ヒト単一ドメイン抗体である（Ｄｏｍａｎｔｉｓ，Ｉｎｃ．，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ；例えば、米国特許第６，２４８，５１６Ｂ１号を参照されたい）。
【０３６６】
抗体断片は、既知の方法に従う、インタクトな抗体のタンパク分解、ならびに組換え宿主細胞（例えば、Ｅ．ｃｏｌｉまたはファージ）の産生を含むが、これらに限定されない、様々な技法によって作製され得る。
【０３６７】
ｉｉｉ．キメラ抗体及びヒト化抗体
ある特定の実施形態では、本明細書に提供される抗体（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体）はキメラ抗体である。ある特定のキメラ抗体は、例えば、米国特許第４，８１６，５６７号、及びＭｏｒｒｉｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８１：６８５１−６８５５，１９８４）に記載されている。一例では、キメラ抗体は、非ヒト可変領域（例えば、マウス、ラット、ハムスター、ウサギ、または非ヒト霊長類、例えばサルに由来する可変領域）及びヒト定常領域を含む。更なる例では、キメラ抗体は、クラスまたはサブクラスが親抗体のクラスまたはサブクラスから変化した「クラススイッチ」抗体である。キメラ抗体には、その抗原結合断片が含まれる。
【０３６８】
ある特定の実施形態では、キメラ抗体はヒト化抗体である。典型的には、非ヒト抗体は、非ヒト親抗体の特異性及び親和性を保持しながら、ヒトに対する免疫原性を低減させるために、ヒト化される。一般に、ヒト化抗体は、ＨＶＲ、例えば、ＣＤＲ（またはその一部）が非ヒト抗体に由来し、及びＦＲ（またはその一部）がヒト抗体配列に由来する１つ以上の可変ドメインを含む。ヒト化抗体は、任意選択で、ヒト定常領域の少なくとも一部も含むことになる。いくつかの実施形態では、ヒト化抗体中のいくつかのＦＲ残基は、例えば、抗体特異性または親和性を復元または改善するために、非ヒト抗体（例えば、ＨＶＲ残基が由来する抗体）由来の対応する残基で置換される。
【０３６９】
ヒト化抗体及びそれらを作製する方法は、例えば、Ａｌｍａｇｒｏ  ａｎｄ  Ｆｒａｎｓｓｏｎ，（Ｆｒｏｎｔ．Ｂｉｏｓｃｉ．１３：１６１９−１６３３，２００８）において概説されており、例えば、Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．（Ｎａｔｕｒｅ  ３３２：３２３−３２９，１９８８）；Ｑｕｅｅｎ  ｅｔ  ａｌ．（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８６：１００２９−１００３３，１９８９）；米国特許第５，８２１，３３７号、同第７，５２７，７９１号、同第６，９８２，３２１号、及び同第７，０８７，４０９号；Ｋａｓｈｍｉｒｉ  ｅｔ  ａｌ．（Ｍｅｔｈｏｄｓ  ３６：２５−３４，２００５）（特異性決定領域（ＳＤＲ）移植について記載）；Ｐａｄｌａｎ，（Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２８：４８９−４９８，１９９１）（「リサーフェシング」について記載）；Ｄａｌｌ’Ａｃｑｕａ  ｅｔ  ａｌ．（Ｍｅｔｈｏｄｓ  ３６：４３−６０，２００５）（「ＦＲシャフリング」について記載）；Ｏｓｂｏｕｒｎ  ｅｔ  ａｌ．（Ｍｅｔｈｏｄｓ  ３６：６１−６８，２００５）、及びＫｌｉｍｋａ  ｅｔ  ａｌ．（Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ，８３：２５２−２６０，２０００）（ＦＲシャフリングへの「誘導選択」アプローチについて記載）に更に記載されている。
【０３７０】
ヒト化に使用され得るヒトフレームワーク領域には、「最良適合」法を使用して選択されるフレームワーク領域（例えば、Ｓｉｍｓ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５１：２２９６，１９９３）；軽鎖または重鎖可変領域の特定の下位集団のヒト抗体のコンセンサス配列に由来するフレームワーク領域（例えば、Ｃａｒｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８９：４２８５，１９９２；及びＰｒｅｓｔａ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１５１：２６２３，１９９３を参照されたい）；ヒト成熟（体細胞変異した）フレームワーク領域またはヒト生殖細胞系列フレームワーク領域（例えば、Ａｌｍａｇｒｏ  ａｎｄ  Ｆｒａｎｓｓｏｎ，Ｆｒｏｎｔ．Ｂｉｏｓｃｉ．１３：１６１９−１６３３，２００８を参照されたい）；ならびにＦＲライブラリのスクリーニングに由来するフレームワーク領域（例えば、Ｂａｃａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２：１０６７８−１０６８４，１９９７；及びＲｏｓｏｋ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７１：２２６１１−２２６１８，１９９６を参照されたい）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０３７１】
ｉｖ．ヒト抗体
ある特定の実施形態では、本明細書で提供される抗体（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体）はヒト抗体である。ヒト抗体は、当該技術分野で既知の種々の技法を使用して産生することができる。ヒト抗体は、ｖａｎ  Ｄｉｊｋ  ａｎｄ  ｖａｎ  ｄｅ  Ｗｉｎｋｅｌ，（Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．５：３６８−７４（２００１）及びＬｏｎｂｅｒｇ（Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２０：４５０−４５９，２００８）に概して記載されている。
【０３７２】
ヒト抗体は、抗原投与に応答して、インタクトなヒト抗体またはヒト可変領域を有するインタクトな抗体を産生するように修正されたトランスジェニック動物に免疫原を投与することにより調製され得る。かかる動物は、典型的には、内因性免疫グロブリン遺伝子座を置き換えるか、または染色体外に存在するかもしくは動物の染色体内にランダムに組み込まれているヒト免疫グロブリン遺伝子座の全てまたは一部を含有する。かかるトランスジェニックマウスにおいて、内因性免疫グロブリン遺伝子座は一般に、不活性化されている。トランスジェニック動物からヒト抗体を得るための方法の概説については、Ｌｏｎｂｅｒｇ，（Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．２３：１１１７−１１２５，２００５）を参照されたい。例えば、ＸＥＮＯＭＯＵＳＥ（商標）技術を説明している米国特許第６，０７５，１８１号及び同第６，１５０，５８４号、ＨＵＭＡＢ（登録商標）技術を説明している米国特許第５，７７０，４２９号、Ｋ−Ｍ  ＭＯＵＳＥ（登録商標）技術を説明している米国特許第７，０４１，８７０号、ならびにＶＥＬＯＣＩＭＯＵＳＥ（登録商標）技術を説明している米国特許出願公開第２００７／００６１９００号）も参照されたい。かかる動物により生成されたインタクトな抗体由来のヒト可変領域は、例えば、異なるヒト定常領域と組み合わせることにより更に修飾され得る。
【０３７３】
ヒト抗体は、ハイブリドーマに基づく方法によっても作製され得る。ヒトモノクローナル抗体の産生のためのヒト骨髄腫及びマウス−ヒトヘテロ骨髄腫細胞株が説明されている。例えば、Ｋｏｚｂｏｒ，（Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３３：３００１，１９８４）；Ｂｒｏｄｅｕｒ  ｅｔ  ａｌ．（Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，ｐｐ．５１−６３，Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９８７）；及びＢｏｅｒｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１４７：８６，１９９１）を参照されたい。ヒトＢ細胞ハイブリドーマ技術を介して生成されるヒト抗体も、Ｌｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１０３：３５５７−３５６２，２００６に記載されている。更なる方法には、例えば、米国特許第７，１８９，８２６号（ハイブリドーマ細胞株からのモノクローナルヒトＩｇＭ抗体の産生を説明する）及びＮｉ，（Ｘｉａｎｄａｉ  Ｍｉａｎｙｉｘｕｅ，２６（４）：２６５−２６８，２００６）（ヒト−ヒトハイブリドーマを説明する）で説明されているものが挙げられる。ヒトハイブリドーマ技術（トリオーマ技術）はまた、Ｖｏｌｌｍｅｒｓ  ａｎｄ  Ｂｒａｎｄｌｅｉｎ，（Ｈｉｓｔｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｈｉｓｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ，２０（３）：９２７−９３７，２００５）及びＶｏｌｌｍｅｒｓ  ａｎｄ  Ｂｒａｎｄｌｅｉｎ，（Ｍｅｔｈｏｄｓ  ａｎｄ  Ｆｉｎｄｉｎｇｓ  ｉｎ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ａｎｄ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，２７（３）：１８５−９１，２００５）でも説明されている。
【０３７４】
ヒト抗体は、ヒト由来ファージディスプレイライブラリから選択されるＦｖクローン可変ドメイン配列を単離することによっても生成され得る。次いで、かかる可変ドメイン配列は、所望のヒト定常ドメインと組み合わせられ得る。抗体ライブラリからヒト抗体を選択するための技法は、以下に記載される。
【０３７５】
ｖ．ライブラリ由来抗体
本発明の抗体（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体）は、所望の活性（複数可）を有する抗体についてコンビナトリアルライブラリをスクリーニングすることによって単離され得る。例えば、ファージディスプレイライブラリを生成し、所望の結合特性を保有する抗体に関してかかるライブラリをスクリーニングするための様々な方法が当該技術分野で既知である。かかる方法は、例えば、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ  ｅｔ  ａｌ．（Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  １７８：１−３７，Ｏ’Ｂｒｉｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，ｅｄ．，Ｈｕｍａｎ  Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ，２００１）で概説されており、例えば、ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙ  ｅｔ  ａｌ．（Ｎａｔｕｒｅ  ３４８：５５２−５５４，１９９０）；Ｃｌａｃｋｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．（Ｎａｔｕｒｅ  ３５２：６２４−６２８，１９９１）；Ｍａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ．（Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２２：５８１−５９７，１９９２）；Ｍａｒｋｓ  ａｎｄ  Ｂｒａｄｂｕｒｙ，（Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ２４８：１６１−１７５，Ｌｏ，ｅｄ．，Ｈｕｍａｎ  Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ，２００３）；Ｓｉｄｈｕ  ｅｔ  ａｌ．（Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３３８（２）：２９９−３１０，２００４）；Ｌｅｅ  ｅｔ  ａｌ．（Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３４０（５）：１０７３−１０９３，２００４）；Ｆｅｌｌｏｕｓｅ，（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  １０１（３４）：１２４６７−１２４７２，２００４）；及びＬｅｅ  ｅｔ  ａｌ．（Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２８４（１−２）：１１９−１３２，２００４）で更に説明されている。
【０３７６】
ある特定のファージディスプレイ方法において、ＶＨ及びＶＬ遺伝子のレパートリーが、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）により別個にクローニングされ、ファージライブラリで無作為に組み換えられ、これが、次いで、Ｗｉｎｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１２：４３３−４５５，１９９４）に記載されているように抗原結合ファージについてスクリーニングされ得る。ファージは典型的には、一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）断片またはＦａｂ断片のいずれかとして抗体断片をディスプレイする。免疫化源由来のライブラリは、ハイブリドーマの構築を必要とすることなく、高親和性抗体を免疫原に提供する。あるいは、Ｇｒｉｆｆｉｔｈｓ  ｅｔ  ａｌ．（ＥＭＢＯ  Ｊ，１２：７２５−７３４，１９９３）によって説明されるように、ナイーブレパートリーは、クローン化され（例えば、ヒトから）、いかなる免疫化も伴わずに、幅広い非自己抗原及び自己抗原に対する抗体の単一の源を提供することができる。最後に、ナイーブライブラリは、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ  ａｎｄ  Ｗｉｎｔｅｒ，（Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２７：３８１−３８８，１９９２）によって説明されているように、幹細胞由来の再配列されていないＶ遺伝子セグメントをクローニングし、ランダム配列を含むＰＣＲプライマーを使用することによっても合成的に作製されて、高度可変ＣＤＲ３領域をコードし、インビトロでの再配列を達成することができる。ヒト抗体ファージライブラリを説明している特許公開には、例えば、米国特許第５，７５０，３７３号、ならびに米国特許出願公開第２００５／００７９５７４号、同第２００５／０１１９４５５号、同第２００５／０２６６０００号、同第２００７／０１１７１２６号、同第２００７／０１６０５９８号、同第２００７／０２３７７６４号、同第２００７／０２９２９３６号、及び同第２００９／０００２３６０号が挙げられる。
【０３７７】
ヒト抗体ライブラリから単離された抗体または抗体断片は、本明細書でヒト抗体またはヒト抗体断片と見なされる。
【０３７８】
ｖｉ．多重特異性抗体
上記の態様のいずれか１つでは、本明細書に提供される抗体（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体）は、多重特異性抗体、例えば、二重特異性抗体であり得る。多重特異性抗体は、少なくとも２つの異なる部位に対する結合特異性を有するモノクローナル抗体である。ある特定の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、多重特異性抗体、例えば、二重特異性抗体である。ある特定の実施形態では、結合特異性の一方は、ＶＥＧＦに対するものであり、他方は、任意の他の抗原、例えばＰＤ−Ｌ１に対するものである。ある特定の実施形態では、二重特異性抗体は、ＶＥＧＦの２つの異なるエピトープに結合し得る。二重特異性抗体を使用して、ＶＥＧＦを発現する細胞に細胞毒性剤を局所化することもできる。二重特異性抗体は、完全長抗体または抗体断片として調製され得る。
【０３７９】
多重特異性抗体を作製するための技法には、異なる特異性を有する２つの免疫グロブリン重鎖−軽鎖対の組換え共発現（Ｍｉｌｓｔｅｉｎ  ａｎｄ  Ｃｕｅｌｌｏ，Ｎａｔｕｒｅ  ３０５：５３７，１９８３）、ＷＯ９３／０８８２９、及びＴｒａｕｎｅｃｋｅｒ  ｅｔ  ａｌ．ＥＭＢＯ  Ｊ．１０：３６５５，１９９１を参照されたい）、及び「ノブインホール」操作（例えば、米国特許第５，７３１，１６８号を参照されたい）が挙げられるが、これらに限定されない。多重特異性抗体はまた、抗体Ｆｃヘテロ二量体分子を作製するために静電式ステアリング効果を遺伝子操作すること（例えば、ＷＯ２００９／０８９００４Ａ１を参照されたい）、２つ以上の抗体または断片を架橋すること（例えば、米国特許第４，６７６，９８０号及びＢｒｅｎｎａｎ  ｅｔ  ａｌ．Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２２９：８１，１９８５を参照されたい）、二重特異性抗体を作製するためのロイシンジッパーを使用すること（例えば、Ｋｏｓｔｅｌｎｙ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４８（５）：１５４７−１５５３，１９９２を参照されたい）、二重特異性抗体断片を作製するための「ダイアボディ」技術を使用すること（例えば、Ｈｏｌｌｉｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９０：６４４４−６４４８，１９９３を参照されたい）、一本鎖Ｆｖ（ｓＦｖ）二量体を使用すること（例えば、Ｇｒｕｂｅｒ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５２：５３６８，１９９４）、ならびに例えば、Ｔｕｔｔ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４７：６０，１９９１）で説明されている三重特異性抗体を調製することによって作製されてもよい。
【０３８０】
「オクトパス抗体」を含む３つ以上の機能的抗原結合部位を有する操作された抗体も、本明細書に含まれる（例えば、ＵＳ２００６／００２５５７６Ａ１を参照されたい）。
【０３８１】
本明細書の抗体または断片には、ＰＤ−Ｌ１及び別の異なる抗原に結合する抗原結合部位を含む「二重作用Ｆａｂ」または「ＤＡＦ」も含まれる。本明細書の抗体または断片には、ＶＥＧＦ及び別の異なる抗原に結合する抗原結合部位を含むＤＡＦも含まれる。
【０３８２】
ｖｉｉ．抗体変異型
ある特定の実施形態では、本発明の抗体（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体）のアミノ酸配列変異型が企図される。例えば、抗体の結合親和性及び／または他の生物学的特性を改善することが望ましい場合がある。抗体のアミノ酸配列変異型は、抗体をコードするヌクレオチド配列中に適切な修飾を導入することによるか、またはペプチド合成により調製され得る。かかる修飾には、例えば、抗体のアミノ酸配列内における、残基からの欠失、及び／またはそこへの挿入、及び／またはその置換が含まれる。最終構築物に到達するように、欠失、挿入、及び置換を任意に組み合わせることができるが、但し、その最終構築物が、所望の特徴、例えば、抗原結合性を有することを条件とする。
【０３８３】
ａ．置換、挿入、及び欠失変異型
ある特定の実施形態では、１つ以上のアミノ酸置換を有する抗体変異型が提供される。置換型突然変異誘発の目的とする部位は、ＨＶＲ及びＦＲを含む。保存的置換は、表１において、「好ましい置換」の見出しの下に示される。より実質的な変化は、表１において、「例示的な置換」の見出しの下に提供され、またアミノ酸側鎖クラスを参照して以下に更に記載される通りである。アミノ酸置換は、目的の抗体中に導入され得、その産物は、所望の活性、例えば、保持／改善された抗原結合、減少した免疫原性、または改善されたＡＤＣＣもしくはＣＤＣについてスクリーニングされ得る。
表１．例示的な好ましいアミノ酸置換
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アミノ酸は、一般的な側鎖特性に従って群分けされ得る：
（１）疎水性：ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ；
（２）中性親水性：Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ；
（３）酸性：Ａｓｐ、Ｇｌｕ；
（４）塩基性：Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ；
（５）鎖配向に影響を及ぼす残基：Ｇｌｙ、Ｐｒｏ；
（６）芳香族：Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ。
【０３８４】
非保存的置換は、これらのクラスのうちの１つのメンバーを別のクラスと交換することを伴う。
【０３８５】
置換型変異型の１つのタイプは、親抗体（例えば、ヒト化抗体またはヒト抗体）の１つ以上の超可変領域残基の置換を伴う。一般に、更なる研究のために選択される得られた変異型（複数可）は、親抗体と比べて、特定の生物学的特性（例えば、親和性の増加及び／または免疫原性の低減）における変更（例えば、改善）を有し、かつ／または実質的に保持された親抗体の特定の生物学的特性を有することになる。例示的な置換型変異型は、例えば、本明細書に記載の技法などのファージディスプレイに基づく親和性成熟技法を使用して簡便に生成され得る親和性成熟抗体である。簡潔には、１つ以上のＨＶＲ残基が変異し、変異型抗体がファージにディスプレイされ、特定の生物活性（例えば、結合親和性）についてスクリーニングされる。
【０３８６】
改変（例えば、置換）は、ＨＶＲにおいて、例えば抗体親和性を改善するために行われ得る。かかる改変は、ＨＶＲ「ホットスポット」、即ち、体細胞成熟プロセス中に高頻度で変異を経るコドンによってコードされる残基（例えば、Ｃｈｏｗｄｈｕｒｙ，Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２０７：１７９−１９６，２００８を参照されたい）、及び／または抗原と接触する残基で行われ得、結果として得られた変異型ＶＨまたはＶＬが結合親和性について試験される。二次ライブラリを構築し、そこから再選択することによる親和性成熟は、例えば、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ  ｅｔ  ａｌ．（Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  １７８：１−３７，Ｏ’Ｂｒｉｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，ｅｄ．，Ｈｕｍａｎ  Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ，２００１）で説明されている。親和性成熟のいくつかの実施形態では、多様な方法（例えば、エラープローンＰＣＲ、鎖シャフリング、またはオリゴヌクレオチド指向性変異誘発）のいずれかによって、成熟のために選択される可変遺伝子に多様性が導入される。次いで、二次ライブラリが創出される。次いで、ライブラリがスクリーニングされ、所望の親和性を有する任意の抗体変異型を特定する。多様性を導入する別の方法は、いくつかのＨＶＲ残基（例えば、一度に４〜６つの残基）が無作為化されるＨＶＲ指向手法を伴う。抗原結合に関与するＨＶＲ残基は、例えば、アラニンスキャニング突然変異誘発またはモデリングを使用して、具体的に特定され得る。特に、ＣＤＲ−Ｈ３及びＣＤＲ−Ｌ３が標的化されることが多い。
【０３８７】
ある特定の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、かかる改変が抗体の抗原に結合する能力を実質的に低減させない限り、１つ以上のＨＶＲ内で生じ得る。例えば、結合親和性を実質的に低減しない保存的改変（例えば、本明細書に提供されるような保存的置換）がＨＶＲ内で行われ得る。かかる改変は、例えば、ＨＶＲ内の抗原接触残基の外側であってもよい。上で提供される変異型ＶＨ及びＶＬ配列の特定の実施形態では、各ＨＶＲは、改変されていないか、または１つ、２つ、または３つ以下のアミノ酸置換を有するかのいずれかである。
【０３８８】
突然変異誘発のために標的化され得る抗体の残基または領域の特定に有用な方法は、Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍ  ａｎｄ  Ｗｅｌｌｓ（Ｓｃｉｅｎｃｅ，２４４：１０８１−１０８５，１９８９）によって説明されている「アラニンスキャニング突然変異誘発」と呼ばれる。この方法では、標的残基の残基または基（例えば、Ａｒｇ、Ａｓｐ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、及びＧｌｕなどの荷電残基）が特定され、中性または負に荷電されたアミノ酸（例えば、アラニンまたはポリアラニン）で置き換えられ、抗体の抗原との相互作用が影響を受けたかどうかを決定する。更なる置換が最初の置換に対する機能感受性を示すアミノ酸位置に導入され得る。あるいは、または加えて、抗体と抗原との間の接触点を特定するための抗原−抗体複合体の結晶構造。かかる接触残基及び隣接する残基が置換の候補として標的とされてもよく、または排除されてもよい。変異型がスクリーニングされて、それらが所望の特性を有するかどうかが決定され得る。
【０３８９】
アミノ酸配列挿入には、長さが１残基から１００以上の残基を含有するポリペプチドの範囲であるアミノ末端及び／またはカルボキシル末端の融合、ならびに単一または複数のアミノ酸残基の配列内挿入が含まれる。末端挿入の例には、Ｎ末端メチオニル残基を有する抗体が含まれる。抗体分子の他の挿入変異型には、酵素（例えば、ＡＤＥＰＴのための）またはポリペプチドへの抗体のＮ末端もしくはＣ末端の融合が挙げられ、これは抗体の血清半減期を増加させる。
【０３９０】
ｂ．グリコシル化変異型
ある特定の実施形態では、本発明の抗体を改変して、抗体がグリコシル化する程度を増加または減少させることができる。本発明の抗体へのグリコシル化部位の付加または欠失は、１つ以上のグリコシル化部位を創出するかまたは除去するように、アミノ酸配列を改変することによって簡便に達成することができる。
【０３９１】
抗体がＦｃ領域を含む場合、それに結合した炭水化物が改変され得る。哺乳動物細胞によって産生された天然抗体は、典型的には、Ｎ結合によってＦｃ領域のＣＨ２ドメインのＡｓｎ２９７に一般に結合される分岐状の二分岐オリゴ糖を含む。例えば、Ｗｒｉｇｈｔ  ｅｔ  ａｌ．ＴＩＢＴＥＣＨ  １５：２６−３２，１９９７を参照されたい。オリゴ糖には、様々な炭水化物、例えば、マンノース、Ｎ−アセチルグルコサミン（ＧｌｃＮＡｃ）、ガラクトース、及びシアル酸、ならびに二分岐オリゴ糖構造の「幹」のＧｌｃＮＡｃに結合したフコースが含まれ得る。いくつかの実施形態では、特定の特性が改善された抗体変異型を作製するために、本発明の抗体中におけるオリゴ糖の修飾が行われ得る。
【０３９２】
一実施形態では、Ｆｃ領域に結合した（直接的にまたは間接的に）フコースを欠く炭水化物構造を有する抗体変異型が提供される。例えば、かかる抗体中のフコースの量は、１％〜８０％、１％〜６５％、５％〜６５％、または２０％〜４０％であり得る。フコースの量は、例えば、ＷＯ２００８／０７７５４６で説明されているＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ質量分析によって測定される、Ａｓｎ２９７に結合した全ての糖構造（例えば、複合体、ハイブリッド、及び高マンノース構造）の合計に対する、Ａｓｎ２９７での糖鎖内のフコースの平均量を計算することによって決定される。Ａｓｎ２９７は、Ｆｃ領域内の約２９７位（Ｆｃ領域残基のＥＵ番号付け）に位置するアスパラギン残基を指すが、Ａｓｎ２９７はまた、抗体における小規模な配列変異に起因して、２９７位から約±３アミノ酸、上流または下流、即ち、２９４〜３００位の間に位置してもよい。かかるフコシル化変異型は、改善されたＡＤＣＣ機能を有し得る。例えば、米国特許出願公開第２００３／０１５７１０８号、同第２００４／００９３６２１号を参照されたい。「脱フコシル化」または「フコース欠乏」抗体変異型に関する公表文献の例には、ＵＳ２００３／０１５７１０８；ＷＯ２０００／６１７３９；ＷＯ２００１／２９２４６；ＵＳ２００３／０１１５６１４；ＵＳ２００２／０１６４３２８；ＵＳ２００４／００９３６２１；ＵＳ２００４／０１３２１４０；ＵＳ２００４／０１１０７０４；ＵＳ２００４／０１１０２８２；ＵＳ２００４／０１０９８６５；ＷＯ２００３／０８５１１９；ＷＯ２００３／０８４５７０；ＷＯ２００５／０３５５８６；ＷＯ２００５／０３５７７８；ＷＯ２００５／０５３７４２；ＷＯ２００２／０３１１４０；Ｏｋａｚａｋｉ  ｅｔ  ａｌ．（Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３３６：１２３９−１２４９，２００４）；及びＹａｍａｎｅ−Ｏｈｎｕｋｉ  ｅｔ  ａｌ．（Ｂｉｏｔｅｃｈ．Ｂｉｏｅｎｇ．８７：６１４，２００４）が挙げられる。脱フコシル化抗体を産生することが可能な細胞株の例には、タンパク質フコシル化が欠損したＬｅｃ１３  ＣＨＯ細胞（Ｒｉｐｋａ  ｅｔ  ａｌ．Ａｒｃｈ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．２４９：５３３−５４５，１９８６）；米国特許出願第２００３／０１５７１０８Ａ１号；及びＷＯ２００４／０５６３１２Ａ１、特に実施例１１）、及びアルファ−１，６−フコシルトランスフェラーゼ遺伝子、ＦＵＴ８、ノックアウトＣＨＯ細胞などのノックアウト細胞株（例えば、Ｙａｍａｎｅ−Ｏｈｎｕｋｉ  ｅｔ  ａｌ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．Ｂｉｏｅｎｇ．８７：６１４，２００４；Ｋａｎｄａ，Ｙ．ｅｔ  ａｌ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｂｉｏｅｎｇ．９４（４）：６８０−６８８，２００６；及びＷＯ２００３／０８５１０７）が挙げられる。
【０３９３】
例えば、抗体のＦｃ領域に結合した二分岐オリゴ糖がＧｌｃＮＡｃによって二分されている、二分されたオリゴ糖を有する抗体変異型が更に提供される。かかる抗体変異型は、低減されたフコシル化及び／または改善されたＡＤＣＣ機能を有し得る。かかる抗体変異体の例は、例えば、ＷＯ２００３／０１１８７８、米国特許第６，６０２，６８４号、及びＵＳ２００５／０１２３５４６に記載されている。Ｆｃ領域に結合したオリゴ糖内に少なくとも１つのガラクトース残基を有する抗体変異型も提供される。かかる抗体変異型は、改善されたＣＤＣ機能を有し得る。かかる抗体変異型は、例えば、ＷＯ１９９７／３００８７、ＷＯ１９９８／５８９６４、及びＷＯ１９９９／２２７６４に記載されている。
【０３９４】
ｃ．Ｆｃ領域変異型
ある特定の実施形態では、１つ以上のアミノ酸修飾が、本発明の抗体のＦｃ領域内に導入され、それによりＦｃ領域変異型が生成され得る。Ｆｃ領域変異型は、１つ以上のアミノ酸位置にアミノ酸修飾（例えば、置換）を含むヒトＦｃ領域配列（例えば、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４  Ｆｃ領域）を含み得る。
【０３９５】
ある特定の実施形態では、本発明は、全てではないが、いくつかのエフェクター機能を有することにより、インビボでの抗体の半減期が重要ではあるが、ある特定のエフェクター機能（補体及びＡＤＣＣなど）が不要または有害である用途に望ましい候補となる抗体変異体を企図する。インビトロ及び／またはインビボ細胞傷害性アッセイを行って、ＣＤＣ及び／またはＡＤＣＣ活性の低減／欠乏を確認することができる。例えば、Ｆｃ受容体（ＦｃＲ）結合アッセイを実行して、抗体がＦｃγＲ結合を欠く（故にＡＤＣＣ活性を欠く可能性が高い）が、ＦｃＲｎ結合能力を保持していることを確実にすることができる。ＡＤＣＣを媒介するための初代細胞であるＮＫ細胞がＦｃγＲＩＩＩのみを発現する一方で、単球は、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩ、及びＦｃγＲＩＩＩを発現する。造血細胞でのＦｃＲ発現は、Ｒａｖｅｔｃｈ  ａｎｄ  Ｋｉｎｅｔ，（Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．９：４５７−４９２，１９９１）の４６４ページの表３に要約されている。目的の分子のＡＤＣＣ活性を評定するためのインビトロアッセイの非限定的な例は、米国特許第５，５００，３６２号（例えば、Ｈｅｌｌｓｔｒｏｍ，Ｉ．ｅｔ  ａｌ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８３：７０５９−７０６３，１９８６、及びＨｅｌｌｓｔｒｏｍ，Ｉ  ｅｔ  ａｌ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８２：１４９９−１５０２，１９８５；米国特許第５，８２１，３３７号；Ｂｒｕｇｇｅｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１６６：１３５１−１３６１，１９８７を参照されたい）に記載されている。あるいは、非放射性アッセイ法が用いられ得る（例えば、フローサイトメトリーのためのＡＣＴＩ（商標）非放射性細胞傷害性アッセイ（ＣｅｌｌＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｉｎｃ．Ｍｏｕｎｔａｉｎ  Ｖｉｅｗ，ＣＡ；及びＣＹＴＯＴＯＸ  ９６（登録商標）非放射性細胞毒性アッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ）を参照されたい））。かかるアッセイに有用なエフェクター細胞には、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）及びナチュラルキラー（ＮＫ）細胞が含まれる。あるいは、または加えて、目的の分子のＡＤＣＣ活性は、体内で、例えば、Ｃｌｙｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９５：６５２−６５６，１９９８）に開示されているものなどの動物モデルにおいて、評定されてもよい。Ｃ１ｑ結合アッセイを実行して、抗体がＣ１ｑに結合することができないためにＣＤＣ活性を欠くことを確認することもできる。例えば、ＷＯ２００６／０２９８７９及びＷＯ２００５／１００４０２におけるＣ１ｑ及びＣ３ｃ結合ＥＬＩＳＡを参照されたい。補体活性化を評定するために、ＣＤＣアッセイが行われ得る（例えば、Ｇａｚｚａｎｏ−Ｓａｎｔｏｒｏ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２０２：１６３，１９９６；Ｃｒａｇｇ  ｅｔ  ａｌ．Ｂｌｏｏｄ．１０１：１０４５−１０５２，２００３；及びＣｒａｇｇ  ｅｔ  ａｌ．Ｂｌｏｏｄ．１０３：２７３８−２７４３，２００４を参照されたい）。ＦｃＲｎ結合及びインビボクリアランス／半減期決定も、当該技術分野で既知の方法を使用して行われ得る（例えば、Ｐｅｔｋｏｖａ  ｅｔ  ａｌ．Ｉｎｔ’ｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１８（１２）：１７５９−１７６９，２００６を参照されたい）。
【０３９６】
低減したエフェクター機能を有する抗体には、Ｆｃ領域残基２３８、２６５、２６９、２７０、２９７、３２７、及び３２９のうちの１つ以上の置換を有する抗体が挙げられる（米国特許第６，７３７，０５６号及び同第８，２１９，１４９号）。かかるＦｃ突然変異体は、アラニンへの残基２６５及び２９７の置換を有するいわゆる「ＤＡＮＡ」Ｆｃ突然変異体を含む、アミノ酸２６５位、２６９位、２７０位、２９７位、及び３２７位のうちの２つ以上において置換を有するＦｃ突然変異体を含む（米国特許第７，３３２，５８１号及び同第８，２１９，１４９号）。
【０３９７】
ＦｃＲへの結合が改善または低減されたある特定の抗体変異型が説明されている（例えば、米国特許第６，７３７，０５６号、ＷＯ２００４／０５６３１２、及びＳｈｉｅｌｄｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．９（２）：６５９１−６６０４，２００１を参照されたい）。
【０３９８】
ある特定の実施形態では、抗体変異型は、ＡＤＣＣを改善する１つ以上のアミノ酸置換、例えば、Ｆｃ領域の２９８、３３３、及び／または３３４位（残基のＥＵ番号付け）での置換を有するＦｃ領域を含む。
【０３９９】
いくつかの実施形態では、例えば、米国特許第６，１９４，５５１号、ＷＯ９９／５１６４２、及びＩｄｕｓｏｇｉｅ  ｅｔ  ａｌ．（Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６４：４１７８−４１８４，２０００）で説明されている、改変された（即ち、改善したまたは低減した）Ｃ１ｑ結合及び／または補体依存性細胞傷害性（ＣＤＣ）をもたらす変化が、Ｆｃ領域になされる。
【０４００】
母体ＩｇＧの胎児への移入に関与する、増加した半減期及び新生児型Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）への改善された結合を有する抗体（Ｇｕｙｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１１７：５８７，１９７６；及びＫｉｍ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２４：２４９，１９９４）が、米国特許出願公開第２００５／００１４９３４Ａ１号で説明されている。それらの抗体は、ＦｃＲｎへのＦｃ領域の結合を改善する、１つ以上の置換を内部に有するＦｃ領域を含む。かかるＦｃ変異体には、Ｆｃ領域残基：２３８、２５６、２６５、２７２、２８６、３０３、３０５、３０７、３１１、３１２、３１７、３４０、３５６、３６０、３６２、３７６、３７８、３８０、３８２、４１３、４２４、または４３４のうちの１つ以上での置換、例えば、Ｆｃ領域残基４３４の置換を有するものを含む（米国特許第７，３７１，８２６号）。
【０４０１】
Ｆｃ変異型の他の例に関して、Ｄｕｎｃａｎ  ａｎｄ  Ｗｉｎｔｅｒ，（Ｎａｔｕｒｅ  ３２２：７３８−４０，１９８８）；米国特許第５，６４８，２６０号；米国特許第５，６２４，８２１号；及びＷＯ９４／２９３５１も参照されたい。
【０４０２】
ｄ．システイン操作された抗体変異型
ある特定の実施形態では、抗体の１つ以上の残基がシステイン残基で置換されているシステイン操作された抗体、例えば、「ｔｈｉｏＭＡｂ」を作製することが望ましい場合がある。特定の実施形態では、置換された残基は、抗体の利用しやすい部位で生じる。それらの残基をシステインで置換することにより、反応性チオール基が抗体の到達可能な部位に位置付けられ、それを使用して、抗体を他の部分、例えば、薬物部分またはリンカー−薬物部分に抱合させて、本明細書に更に記載されるように、免疫抱合体を作製することができる。ある特定の実施形態では、以下の残基のうちの任意の１つ以上を、システインで置換することができる：軽鎖のＶ２０５（Ｋａｂａｔ番号付け）、重鎖のＡ１１８（ＥＵ番号付け）、及び重鎖Ｆｃ領域のＳ４００（ＥＵ番号付け）。システイン操作された抗体は、例えば、米国特許第７，５２１，５４１号で説明されているように生成し得る。
【０４０３】
ｅ．抗体誘導体
ある特定の実施形態では、本明細書で提供される抗体は、当該技術分野で既知であり、容易に入手可能な追加の非タンパク質性部分を含有するように更に修飾され得る。抗体の誘導体化に好適な部分には、水溶性ポリマーが含まれるが、これに限定されない。水溶性ポリマーの非限定的な例には、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、エチレングリコール／プロピレングリコールのコポリマー、カルボキシメチルセルロース、デキストラン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポリ−１，３−ジオキソラン、ポリ−１，３，６−トリオキサン、エチレン／無水マレイン酸コポリマー、ポリアミノ酸（ホモポリマーまたはランダムコポリマーのいずれか）、及びデキストランまたはポリ（ｎ−ビニルピロリドン）ポリエチレングリコール、プロプロピレン（ｐｒｏｐｒｏｐｙｌｅｎｅ）グリコールホモポリマー、プロリプロピレン（ｐｒｏｌｙｐｒｏｐｙｌｅｎｅ）オキシド／エチレンオキシドコポリマー、ポリオキシエチル化ポリオール（例えば、グリセロール）、ポリビニルアルコール、ならびにそれらの混合物が挙げられるが、これらに限定されない。ポリエチレングリコールプロピオンアルデヒドは、水中でのその安定性のため、製造時に有利であり得る。ポリマーは、いずれの分子量のものであってもよく、分岐状であっても非分岐状であってもよい。抗体に結合したポリマーの数は異なり得、１つ超のポリマーが結合している場合、それらは同じ分子であることも異なる分子であることもできる。一般に、誘導体化に使用されるポリマーの数及び／または種類は、改善される抗体の特定の特性または機能、抗体誘導体が定義された条件下である療法に使用されるかなどを含むが、これらに限定されない、考慮すべき事項に基づいて決定され得る。
【０４０４】
別の実施形態では、放射線への曝露によって選択的に加熱され得る抗体及び非タンパク質性部分の抱合体が提供される。一実施形態では、非タンパク質性部分はカーボンナノチューブである（Ｋａｍ  ｅｔ  ａｌ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  １０２：１１６００−１１６０５，２００５）。放射線は、いずれの波長のものであってもよく、通常の細胞を傷つけないが、抗体−非タンパク質性部分に隣接する細胞が殺滅される温度まで非タンパク質性部分を加熱する波長を含むが、これらに限定されない。
【０４０５】
ｆ．免疫抱合体
本発明は、化学療法剤もしくは薬物、成長阻害剤、毒素（例えば、タンパク質毒素、細菌、真菌、植物、もしくは動物起源の酵素活性毒素、またはそれらの断片）、または放射性同位体などの１つ以上の細胞毒性剤に抱合された、本明細書の抗体（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体）を含む免疫抱合体も提供する。
【０４０６】
一実施形態では、免疫抱合体は、マイタンシノイド（米国特許第５，２０８，０２０号及び同第５，４１６，０６４号、ならびに欧州特許第ＥＰ０４２５２３５Ｂ１号を参照されたい）；モノメチルオーリスタチン薬物部分ＤＥ及びＤＦ（ＭＭＡＥ及びＭＭＡＦ）などのオーリスタチン（米国特許第５，６３５，４８３号、同第５，７８０，５８８号、及び同第７，４９８，２９８号を参照されたい）；ドラスタチン；カリケアマイシンまたはその誘導体（米国特許第５，７１２，３７４号、同第５，７１４，５８６号、同第５，７３９，１１６号、同第５，７６７，２８５号、同第５，７７０，７０１号、同第５，７７０，７１０号、同第５，７７３，００１号、及び同第５，８７７，２９６号；Ｈｉｎｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．５３：３３３６−３３４２，１９９３；及びＬｏｄｅ  ｅｔ  ａｌ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．５８：２９２５−２９２８，１９９８を参照されたい）；ダウノマイシンまたはドキソルビシンなどのアントラサイクリン（Ｋｒａｔｚ  ｅｔ  ａｌ．Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１３：４７７−５２３，２００６；Ｊｅｆｆｒｅｙ  ｅｔ  ａｌ．Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ＆Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔｅｒｓ  １６：３５８−３６２，２００６；Ｔｏｒｇｏｖ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｏｎｊ．Ｃｈｅｍ．１６：７１７−７２１（２００５）；Ｎａｇｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９７：８２９−８３４（２０００）；Ｄｕｂｏｗｃｈｉｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｏｒｇ．＆Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔｅｒｓ  １２：１５２９−１５３２，２００２；Ｋｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．４５：４３３６−４３４３，２００２；及び米国特許第６，６３０，５７９号を参照されたい）；メトトレキサート；ビンデシン；ドセタキセル、パクリタキセル、ラロタキセル（ｌａｒｏｔａｘｅｌ）、テセタキセル（ｔｅｓｅｔａｘｅｌ）、及びオルタタキセル（ｏｒｔａｔａｘｅｌ）などのタキサン；トリコテセン；ならびにＣＣ１０６５を含むがこれらに限定されない１つ以上の薬物に抱合されている抗体−薬物抱合体（ＡＤＣ）である。
【０４０７】
別の実施形態では、免疫抱合体は、ジフテリアＡ鎖、ジフテリア毒素の非結合活性断片、外毒素Ａ鎖（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ由来）、リシンＡ鎖、アブリンＡ鎖、モデシンＡ鎖、アルファ−サルシン、Ａｌｅｕｒｉｔｅｓ  ｆｏｒｄｉｉタンパク質、ジアンシンタンパク質、Ｐｈｙｔｏｌａｃａ  ａｍｅｒｉｃａｎａタンパク質（ＰＡＰＩ、ＰＡＰＩＩ、及びＰＡＰ−Ｓ）、ｍｏｍｏｒｄｉｃａ  ｃｈａｒａｎｔｉａ阻害剤、クルシン、クロチン、ｓａｐａｏｎａｒｉａ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ阻害剤、ゲロニン、ミトゲリン、レストリクトシン、フェノマイシン、エノマイシン、及びトリコテセンを含むがこれらに限定されない酵素活性毒素またはその断片に抱合された、本明細書に記載される抗体を含む。
【０４０８】
別の実施形態では、免疫抱合体は、放射性原子に抱合され、放射性抱合体を形成する、本明細書に記載される抗体を含む。放射性抱合体の産生には、様々な放射性同位体が利用可能である。例としては、Ａｔ２１１、Ｉ１３１、Ｉ１２５、Ｙ９０、Ｒｅ１８６、Ｒｅ１８８、Ｓｍ１５３、Ｂｉ２１２、Ｐ３２、Ｐｂ２１２、及びＬｕの放射性同位体が挙げられる。放射性抱合体を検出のために使用する場合、それは、シンチグラフィー研究のための放射性原子、例えば、ｔｃ９９ｍもしくはＩ１２３、または核磁気共鳴（ＮＭＲ）画像法（別名、磁気共鳴画像法、ＭＲＩ）のためのスピン標識、例えば、再びヨウ素−１２３、ヨウ素−１３１、インジウム−１１１、フッ素−１９、炭素−１３、窒素−１５、酸素−１７、ガドリニウム、マンガン、もしくは鉄を含み得る。
抗体及び細胞傷害性剤の抱合体は、Ｎ−スクシンイミジル−３−（２−ピリジルジチオ）プロピオネート（ＳＰＤＰ）、スクシンイミジル−４−（Ｎ−マレイミドメチル）シクロヘキサン−１−カルボキシレート（ＳＭＣＣ）、イミノチオラン（ＩＴ）、イミドエステルの二官能性誘導体（例えば、アジプイミド酸ジメチルＨＣｌ）、活性エステル（例えば、スベリン酸ジスクシンイミジル）、アルデヒド（例えば、グルタルアルデヒド）、ビス−アジド化合物（例えば、ビス（ｐ−アジドベンゾイル）ヘキサンジアミン）、ビス−ジアゾニウム誘導体（例えば、ビス−（ｐ−ジアゾニウムベンゾイル）−エチレンジアミン）、ジイソシアネート（例えば、トルエン２，６−ジイソシアネート）、及びビス−活性フッ素化合物（例えば、１，５−ジフルオロ−２，４−ジニトロベンゼン）などの多様な二官能性タンパク質結合剤を使用して作製され得る。例えば、リシン免疫毒素は、Ｖｉｔｅｔｔａ  ｅｔ  ａｌ．（Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２３８：１０９８，１９８７）で説明されているように調製することができる。炭素−１４で標識された１−イソチオシアナトベンジル−３−メチルジエチレントリアミンペンタ酢酸（ＭＸ−ＤＴＰＡ）は、放射性ヌクレオチドの抗体への抱合のための例示的なキレート剤である。ＷＯ９４／１１０２６を参照されたい。リンカーは、細胞内において細胞毒性薬物の放出を容易にする「切断可能リンカー」であってもよい。例えば、酸不安定性リンカー、ペプチダーゼ感受性リンカー、感光性リンカー、ジメチルリンカー、またはジスルフィド含有リンカー（Ｃｈａｒｉ  ｅｔ  ａｌ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．５２：１２７−１３１，１９９２；及び米国特許第５，２０８，０２０号）が使用され得る。
【０４０９】
本明細書の免疫抱合体またはＡＤＣは、市販されている（例えば、Ｐｉｅｒｃｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｉｎｃ．，Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，ＩＬ．，Ｕ．Ｓ．Ａから）、ＢＭＰＳ、ＥＭＣＳ、ＧＭＢＳ、ＨＢＶＳ、ＬＣ−ＳＭＣＣ、ＭＢＳ、ＭＰＢＨ、ＳＢＡＰ、ＳＩＡ、ＳＩＡＢ、ＳＭＣＣ、ＳＭＰＢ、ＳＭＰＨ、スルホ−ＥＭＣＳ、スルホ−ＧＭＢＳ、スルホ−ＫＭＵＳ、スルホ−ＭＢＳ、スルホ−ＳＩＡＢ、スルホ−ＳＭＣＣ、及びスルホ−ＳＭＰＢ、ならびにＳＶＳＢ（サクシニミジル−（４−ビニルスルホン）安息香酸塩）を含むが、これらに限定されない架橋剤試薬で調製されるかかる抱合体を明示的に企図するが、これらに限定されない。
【０４１０】
Ｄ．薬学的製剤
本発明に従って使用されるＶＥＧＦアンタゴニストの治療製剤（例えば、ベバシズマブなどの抗ＶＥＧＦ抗体）は、所望の純度を有するアンタゴニストを、凍結乾燥された製剤または水溶液の形態にある任意選択の薬学的に許容される担体、賦形剤、または安定剤と混合することにより、保管のために調製される。製剤に関する一般情報に関しては、例えば、Ｇｉｌｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．（ｅｄｓ．）Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｅｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，８ｔｈ  Ｅｄ．，Ｐｅｒｇａｍｏｎ  Ｐｒｅｓｓ，１９９０；Ａ．Ｇｅｎｎａｒｏ（ｅｄ．），Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１８ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，Ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａ，１９９０；Ａｖｉｓ  ｅｔ  ａｌ．（ｅｄｓ．）Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ：Ｐａｒｅｎｔｅｒａｌ  Ｍｅｄｉｃａｔｉｏｎｓ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９９３；Ｌｉｅｂｅｒｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．（ｅｄｓ．）Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ：Ｔａｂｌｅｔｓ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９９０；Ｌｉｅｂｅｒｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．（ｅｄｓ．），Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ：Ｄｉｓｐｅｒｓｅ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９９０；及びＷａｌｔｅｒｓ（ｅｄ．）Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｔｒａｎｓｄｅｒｍａｌ  Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎｓ（Ｄｒｕｇｓ  ａｎｄ  ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ），Ｖｏｌ  １１９，Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，２００２を参照されたい。
【０４１１】
許容される担体、賦形剤、または安定剤は、受容者に対し、利用される用量及び濃度で非毒性であり、リン酸塩、クエン酸塩、及び他の有機酸などの緩衝剤；アスコルビン酸及びメチオニンを含む抗酸化剤；防腐剤（オクタデシルジメチルベンジル塩化アンモニウム；塩化ヘキサメトニウム；塩化ベンザルコニウム；塩化ベンゼトニウム；フェノール、ブチル、またはベンジルアルコール；メチルまたはプロピルパラベンなどのアルキルパラベン；カテコール；レゾルシノール；シクロヘキサノール；３−ペンタノール；及びｍ−クレゾールなど）；低分子量（約１０残基未満）ポリペプチド；血清アルブミン、ゼラチン、もしくは免疫グロブリンなどのタンパク質；ポリビニルピロリドンなどの親水性ポリマー；グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニン、もしくはリジンなどのアミノ酸；単糖類、二糖類、及びグルコース、マンノース、もしくはデキストリンを含む他の炭水化物；ＥＤＴＡなどのキレート剤；ショ糖、マンニトール、トレハロース、もしくはソルビトールなどの糖；ナトリウムなどの塩形成対イオン；金属錯体（例えば、Ｚｎ−タンパク質錯体）；ならびに／またはＴＷＥＥＮ（商標）、ＰＬＵＲＯＮＩＣＳ（商標）、もしくはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）などの非イオン性界面活性剤を含む。
【０４１２】
本明細書の製剤は、１つ超の活性化合物、好ましくは、互いに悪影響を及ぼさない相補的活性を有するものも含有し得る。かかる医薬品の種類及び有効量は、例えば、製剤中に存在するアンタゴニストの量及び種類、ならびに患者の臨床的パラメータに依存する。
【０４１３】
活性成分はまた、例えば、コアセルベーション技法によって、または界面重合によって調製されたマイクロカプセル、例えば、それぞれ、ヒドロキシメチルセルロースまたはゼラチンマイクロカプセル及びポリ−（メチルメタシレート）マイクロカプセル内に、コロイド薬物送達系（例えば、リポソーム、アルブミンマイクロスフェア、マイクロ乳濁液、ナノ粒子、及び名のカプセル）中、またはマクロ乳濁液中に取り込まれ得る。かかる技法は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  １６ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｏｓｏｌ，Ａ．Ｅｄ．，１９８０に開示されている。
【０４１４】
徐放性調製物が調製され得る。徐放性調製物の好適な例には、アンタゴニストを含有する固体の疎水性ポリマーの半透性マトリクスが挙げられ、このマトリクスは、成型品、例えば、フィルムまたはマイクロカプセルの形態にある。持続放出性マトリックスの例には、ポリエステル、ヒドロゲル（例えば、ポリ（２−ヒドロキシエチル−メタクリレート）、またはポリ（ビニルアルコール））、ポリラクチド（米国特許第３，７７３，９１９号）、Ｌ−グルタミン酸とγ−Ｌ−グルタミン酸エチルとのコポリマー、非分解性エチレン酢酸ビニル、ＬＵＰＲＯＮ  ＤＥＰＯＴ（商標）などの分解性の乳酸−グリコール酸コポリマー（乳酸−グリコール酸コポリマー及び酢酸ロイプロリドから構成される注射用ミクロスフェア）、ならびにポリ−Ｄ−（−）−３−ヒドロキシ酪酸が挙げられる。
【０４１５】
インビボ投与に使用される製剤は、滅菌されていなければならない。これは、滅菌濾過膜を通す濾過によって容易に達成される。
【０４１６】
上記の製品のうちのいずれも、ＰＤ−Ｌ１軸結合アンタゴニストの代わりに、またはそれに加えて本明細書に記載される免疫抱合体を含み得ることを理解されたい。
【０４１７】
Ｅ．診断用キット及び製品
疾患または障害（例えば、腎臓癌を含むがん）を有する個体または患者由来の試料中における本発明のバイオマーカー（例えば、本明細書、例えば、上文または実施例に記載の任意のバイオマーカー、例えば、表２に列挙されるバイオマーカー）の存在を決定するための１つ以上の試薬を含む診断用キットが本発明に提供される。いくつかの事例では、試料中のバイオマーカーの存在により、個体がＶＥＧＦアンタゴニストで治療される際の有効性のより高い可能性が示される。いくつかの事例では、試料中のバイオマーカーの不在により、疾患を有する個体がＶＥＧＦ軸結合アンタゴニストで治療される際に有効である可能性が低いことが示される。いくつかの実施形態では、キットは、本明細書に記載されるがん患者をモニタリングまたは治療する方法のうちのいずれかを行うために使用され得る。任意選択で、キットには、個体が試料中にバイオマーカーを発現する場合に、キットを使用して、疾患または障害を治療するための医薬品（例えば、ＶＥＧＦアンタゴニスト、例えば、ベバシズマブなどの抗ＶＥＧＦ抗体）を選択するための指示書が更に含まれてもよい。別の事例では、指示書は、個体が試料中にバイオマーカーを発現しない場合に、キットを使用して、ＶＥＧＦアンタゴニスト以外の医薬品を選択するためのものである。
【０４１８】
薬学的に許容される担体中のＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体）と、ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体）が、バイオマーカー（例えば、本明細書、例えば、上文または実施例に記載の任意のバイオマーカー、例えば、表２に列挙されるバイオマーカー）の発現に基づいて疾患または障害（例えば、がん）を有する患者を治療するためのものであることを示す添付文書とを同封して含む製品もまた本明細書に提供される。治療方法には、本明細書に開示される治療方法のいずれかが含まれる。ＶＥＧＦアンタゴニスト（例えば、抗ＶＥＧＦ抗体）を含む薬学的組成物と、この薬学的組成物が、バイオマーカー（例えば、本明細書、例えば、上文または実施例に記載の任意のバイオマーカー、例えば、表２に列挙されるバイオマーカー）の発現に基づいて疾患または障害（例えば、がん）を有する患者を治療するためのものであることを示す添付文書とをパッケージ中に組み合わせて含む製品を製造するための方法に関する発明も更に提供される。
【０４１９】
製品は、例えば、容器、及び容器上のまたは容器に関連するラベルまたは添付文書を含んでもよい。好適な容器には、例えば、ボトル、バイアル、シリンジなどが含まれる。容器は、ガラスまたはプラスチックなどの様々な材料から形成され得る。容器は、がんの医薬品を活性薬剤として含む組成物を保持または収容し、滅菌アクセスポートを有し得る（例えば、容器は、皮下注射針によって穿刺可能なストッパーを有する静脈用溶液袋またはバイアルであり得る）。
【０４２０】
製品は、注射用静菌水（ＢＷＦＩ）、リン酸干渉食塩水、リンガー溶液、及び／またはデキストロース溶液などの薬学的に許容される希釈緩衝液を含む第２の容器を更に含んでもよい。製品は、他の緩衝液、希釈剤、フィルター、針、及びシリンジを含む、商業的観点及び使用者の観点から望ましい他の材料を更に含んでもよい。
【０４２１】
本発明の製品はまた、例えば添付文書の形態で、組成物が本明細書のバイオマーカー（複数可）の発現レベルに基づいてがんを治療するために使用されることを示す情報も含む。添付文書またはラベルは、紙面、または電子媒体上、例えば、磁気記録媒体（例えば、フロッピーディスク）、ＣＤ−ＲＯＭ、汎用シリアルバス（ＵＳＢ）フラッシュドライブ、及び同様のものなどの任意の形態をとってもよい。ラベルまたは添付文書はまた、キットまたは製品中の薬学的組成物及び投与剤形に関する他の情報も含み得る。
【実施例】
【０４２２】
実施例１：材料及び実験方法
Ａ．試験設計
実施例１〜４に記載するＩｂ相試験の目標は、以前に治療されていない進行性転移性腎細胞癌腫（ｍＲＣＣ）を有する患者に３週（ｑ３ｗ）毎に静脈内注入によって同時投与するときのヒトのモノクローナルの操作された抗ＶＥＧＦ抗体であるベバシズマブと組み合わせた抗ＰＤ−Ｌ１抗体アテゾリズマブの安全性及び忍容性を評価することであった。治療は、患者が研究者の意見による臨床的利益を経験する限り（即ち、許容できない毒性または疾患進行に起因する症状の悪化がない限り）、継続した。偽性進行が疑われた場合または応答がまちまちである証拠があった場合には、研究者の判断で患者に試験治療を受け続けることを許可した。試験目的には、腫瘍、ならびにベバシズマブ及びアテゾリズマブの投与と関連付けられる血中薬物動態マーカーの評価と、治療の組み合わせの抗腫瘍活性の予備評定が含まれた。
【０４２３】
安全性評価（臨床面及び研究面）をスクリーニング時及び試験全体で行った。最終評価は最終投薬から３０日後に行った。有害事象（ＡＥ）の発生率、性質、及び重症度を、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  Ｃｏｍｍｏｎ  Ｔｅｒｍｉｎｏｌｏｇｙ  Ｃｒｉｔｅｒｉａ  ｆｏｒ  Ａｄｖｅｒｓｅ  Ｅｖｅｎｔｓ（ＣＴＣＡＥ）、バージョン４．０に従って格付けした。
【０４２４】
あらゆる評価可能または測定可能な疾患をスクリーニング時に記録し、各腫瘍評価時に再評価した。腫瘍評価を、２、４、６、８、１２、及び１６周期目の終了時、または臨床的に必要なときに行った。評定を、薬物投与周期の最終週の間、次の周期の治療開始前に行った。疾患進行以外の理由で試験治療を中止した患者は、患者が疾患進行を経験するか、更なる全身がん療法を開始するか、または死亡するまで、１２週毎に腫瘍評定を受け続けた。
【０４２５】
プロトコルで定義された用量制限毒性（ＤＬＴ）基準には、標準等級≧３または４の血液学的毒性及び非血液学的毒性が含まれた。標識したｑ３ｗ用量のベバシズマブと組み合わせて投与した推奨される２相用量のアテゾリズマブによって投与薬を開始したところ、ＤＬＴは報告されなかった。
【０４２６】
Ｂ．患者
患先行する全身療法を受けていない進行性または転移性ＲＣＣを有した患者が、Ｉｂ相試験の本コホートへの参加対象であった。患者は、最低１８歳であり、血液及び末端器官機能が十分であり、Ｅａｓｔｅｒｎ  Ｃｏｏｐｅｒａｔｉｖｅ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ  Ｇｒｏｕｐの一般状態が０または１であることが求められた。疾患は、Ｒｅｓｐｏｎｓｅ  Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  Ｃｒｉｔｅｒｉａ  ｉｎ  Ｓｏｌｉｄ  Ｔｕｍｏｒｓ（ＲＥＣＩＳＴ）に従って測定可能である必要があった。既知の初発中枢神経系（ＣＮＳ）悪性腫瘍または症候性ＣＮＳ転移、自己免疫疾患の病歴もしくは危険、またはヒト免疫不全ウイルス、Ｂ型肝炎、またはＣ型肝炎の感染を有する患者は除外した。抗ＣＴＬＡ−４、抗ＰＤ−１、もしくは抗ＰＤ−Ｌ１治療抗体または経路標的化剤による事前治療を受けた患者、及び試験開始前の特定の期間内に全身性免疫刺激剤または全身性免疫抑制性医薬品によって治療された患者も除外した。
【０４２７】
試験中の１０名の患者のうち６名から、治療後の両時点で十分な生存腫瘍細胞を有する生検が得られた。６対（即ち、治療中の両時点で同じ患者から得られた生検）のうち、７つが腎臓病変、４つが腹／胸壁、１つが肺病変、１つがリンパ節、５つが非公開の病変に由来した。
【０４２８】
Ｃ．ＰＤ−Ｌ１、ＣＤ８、及びＭＨＣ−Ｉについての免疫組織化学分析
厚さ４μｍのホルマリン固定、パラフィン包埋（ＦＦＰＥ）組織切片を、ジアミノベンジジンによってシグナルを可視化し、４．３ｍｇ／ｍｌの濃度を使用した自動染色プラットフォーム（ＢｅｎｃｈＭａｒｋ；Ｖｅｎｔａｎａ）上で、抗ヒトＰＤ−Ｌ１ウサギモノクローナル抗体（クローンＳＰ１４２；Ｖｅｎｔａｎａ，Ｔｕｃｓｏｎ，ＡＺ）を用いてＰＤ−Ｌ１について染色し、切片はヘマトキシリンで対比染色した。ＰＤ−Ｌ１発現を腫瘍細胞及び腫瘍浸潤性免疫細胞上で評価した。腫瘍細胞については、ＰＤ−Ｌ１陽性腫瘍細胞の集団を腫瘍細胞の総数のパーセンテージとして推定し、腫瘍細胞は、典型的には、細胞質の染色の可変的に強い成分をもって膜性染色を示した。所与の腫瘍試料中のＰＤ−Ｌ１陽性腫瘍細胞の分布は、典型的には、極めて限局性であり、固形凝集として成長している腫瘍においては、ＰＤ−Ｌ１陽性腫瘍細胞は、悪性細胞は、悪性細胞と腫瘍浸潤性免疫細胞を含む間質との間の界面で最も一般的に観察された。腫瘍浸潤性免疫細胞については、腫瘍を占有しているＰＤ−Ｌ１陽性腫瘍浸潤性免疫細胞のパーセンテージを決定した。マクロファージ及び樹状細胞などの明確に認識できる細胞質を有する腫瘍浸潤性免疫細胞は、ＰＤ−Ｌ１について膜性染色パターンを示した。これは、細胞質が少量しかない小型のリンパ形態の細胞について決定するためにはより困難であった。ＰＤ−Ｌ１陽性腫瘍浸潤性免疫細胞は、典型的には、腫瘤の周辺に向けて、腫瘤を切断している間質帯において、間質中で分散した単細胞として、または腫瘍浸潤性免疫細胞凝集中で、腫瘤の周辺に向けてサイズが様々な凝集として見られた。標本を、エリアあたりの細胞の１％未満、１％以上５％未満、５％以上１０％未満、または１０％がＰＤ−Ｌ１陽性である場合に、それぞれ、ＩＨＣ０、１、２、または３と採点した。複数の標本を有する患者におけるＰＤ−Ｌ１  ＩＨＣスコアは、最高スコアに基づいた。ＣＤ８（クローンＳＰ１６（Ｅｐｉｔｏｍｉｃｓ））ＩＨＣを、ＣＣ１抗原回復及びＯＭＮＩＭＡＰ（商標）（Ｖｅｎｔａｎａ）検出技術を使用してＤｉｓｃｏｖｅｒｙ  ＸＴ  ａｕｔｏｓｔａｉｎｅｒ（Ｖｅｎｔａｎａ）上で行った。
【０４２９】
全てのＭＨＣ−Ｉ  ＩＨＣステップをＶｅｎｔａｎａ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ＸＴ自動プラットフォーム（Ｖｅｎｔａｎａ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｓｙｓｔｅｍｓ；Ｔｕｃｓｏｎ，ＡＺ）上で実行した。切片を、Ｃｅｌｌ  Ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｅｒ  １で標準時間処理した後、１：５０００希釈の一次抗体ＭＨＣ  Ｃｌａｓｓ  Ｉ（ＥＰ１３９５Ｙ，Ｎｏｖｕｓ，カタログ番号ＮＢ１１０−５７２０１）中で６０分間３７℃でインキュベートした。結合した抗体を、ＯＭＮＩＭＡＰ（商標）抗ウサギＨＲＰ検出キット、続いてＤＡＢ（Ｖｅｎｔａｎａ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｓｙｓｔｅｍｓ；Ｔｕｃｓｏｎ，ＡＺ）によって検出した。切片をヘマトキシリンＩＩ（Ｖｅｎｔａｎａ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｓｙｓｔｅｍｓ；Ｔｕｃｓｏｎ，ＡＺ）で４分間、青味溶液で４分間対比染色した後、脱水しカバースリップをかぶせた。ＭＨＣ−Ｉを低度、中等度、高度に内因性発現しているヒト細胞ペレットを、陽性対照として並行して使用した。ウサギモノクローナル（Ｃｌｏｎｅ  ＤＡ１Ｅ，Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，カタログ番号３９００Ｓ）アイソタイプ抗体を使用して、陰性対照を処理した。腫瘍細胞中のＭＨＣ−Ｉ染色を、Ｈ採点システムを使用して採点した。簡潔には、腫瘍細胞膜の染色強度に、それぞれ、低、中、または高３，３’−ジアミノベンジジン（ＤＡＢ）シグナル強度に対応する、０、１、２、または３の数値を割り当てた。全腫瘍面積に対して、異なる染色強度の細胞のパーセンテージを視覚評価によって決定した。最終スコアは、以下の通り、膜強度スコアに所与の腫瘍試料中に存在する各集団についての面積パーセンテージを乗じることによって計算した：１×（１の％＋細胞）＋２×（２の％＋細胞）＋３×（３の％＋細胞）＝Ｈスコア。２名の別の病理医が症例を採点した。採点ブラケットは、１００以下、１０１〜２００、及び２０１〜３００のスコアとして定義し、一致は、同じブラケット内に入る個別のスコアとして定義した。いずれの不一致も症例の共通レビュー時に解決した。
【０４３０】
Ｄ．二色及び三色免疫組織化学及び全スライドデジタル分析
ＦＦＰＥ腫瘍組織の連続した厚さ４μｍの切片を、Ｖｅｎｔａｎａ  Ｂｅｎｃｈｍａｒｋ  ＸＴまたはＢｅｎｃｈｍａｒｋ  Ｕｌｔｒａ自動プラットフォーム（Ｖｅｎｔａｎａ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｓｙｓｔｅｍｓ；Ｔｕｃｓｏｎ，ＡＺ）を使用する以下の研究室で開発したＩＨＣアッセイによって染色した：Ｋｉ６７／ＣＤ８、ＰＤＰＮ／ＣＤ３４／ＡＳＭＡ、及びＣＤ１６３／ＣＤ６８。
【０４３１】
Ｋｉ６７／ＣＤ８アッセイについて、切片をＣｅｌｌ  Ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｅｒ  １で６４分間処理した。その後、切片を一次抗体Ｋｉ６７（３０−９、ＲＴＵ、Ｖｅｎｔａｎａ）中で４分間３７℃でインキュベートした。結合した一次抗体をＯｐｔｉＶｉｅｗ  ＤＡＢ  ＩＨＣ検出キット（Ｖｅｎｔａｎａ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｓｙｓｔｅｍｓ；Ｔｕｃｓｏｎ，ＡＺ）によって検出した。続いて、スライドを１：１００希釈の一次抗体抗ＣＤ８（ＳＰ２３９、Ｓｐｒｉｎｇ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）中で６０分間３７℃でインキュベートした。結合した一次抗体をＵｌｔｒａＶｉｅｗ  Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ  ＡＰ  Ｒｅｄ検出キット（Ｖｅｎｔａｎａ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｓｙｓｔｅｍｓ；Ｔｕｃｓｏｎ，ＡＺ）によって検出した。切片をヘマトキシリンＩＩ（Ｖｅｎｔａｎａ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｓｙｓｔｅｍｓ；Ｔｕｃｓｏｎ，ＡＺ）で４分間、青味溶液で４分間対比染色した後、脱水しカバースリップをかぶせた。
【０４３２】
ＰＤＰＮ／ＣＤ３４／ＡＳＭＡアッセイについて、切片をＣｅｌｌ  Ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｅｒ  １で３２分間処理した。その後、切片を一次抗体抗ポドプラニン（Ｄ２−４０、ＲＴＵ、Ｖｅｎｔａｎａ）中で１６分間３７℃でインキュベートした。結合した一次抗体をＯｐｔｉＶｉｅｗ  ＤＡＢ  ＩＨＣ検出キット（Ｖｅｎｔａｎａ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｓｙｓｔｅｍｓ；Ｔｕｃｓｏｎ，ＡＺ）によって検出した。続いて、スライドを一次抗体抗ＣＤ３４（ＱＢＥｎｄ／１０；ＲＴＵ、Ｖｅｎｔａｎａ）中で１６分間３７℃でインキュベートした。結合した抗体をｉＶｉｅｗ  Ｂｌｕｅ  Ｐｌｕｓ検出キット（Ｖｅｎｔａｎａ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｓｙｓｔｅｍｓ；Ｔｕｃｓｏｎ，ＡＺ）によって検出した。最後に、スライドを一次抗体抗平滑筋アクチン（「ＳＭＡｃｔｉｎ」）（１Ａ４；ＲＴＵ、Ｖｅｎｔａｎａ）中で１６分間３７℃でインキュベートした。結合した抗体をＵｌｔｒａＶｉｅｗ  Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ  ＡＰ  Ｒｅｄ検出キット（Ｖｅｎｔａｎａ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｓｙｓｔｅｍｓ；Ｔｕｃｓｏｎ，ＡＺ）によって検出した。切片をヘマトキシリンＩＩ（Ｖｅｎｔａｎａ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｓｙｓｔｅｍｓ；Ｔｕｃｓｏｎ，ＡＺ）で４分間、青味溶液で４分間対比染色した後、脱水しカバースリップをかぶせた。
【０４３３】
ＣＤ１６３／ＣＤ６８アッセイについて、切片をＣｅｌｌ  Ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｅｒ  １で３２分間処理し、一次抗体抗ＣＤ１６３（ＭＲＱ−２６、ＲＴＵ、Ｖｅｎｔａｎａ）中で８分間３７℃でインキュベートした。結合した一次抗体をＯｐｔｉＶｉｅｗ  ＤＡＢ  ＩＨＣ検出キット（Ｖｅｎｔａｎａ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｓｙｓｔｅｍｓ；Ｔｕｃｓｏｎ，ＡＺ）によって検出した。続いて、スライドを一次抗体抗ＣＤ６８（ＫＰ−１、ＲＴＵ、Ｖｅｎｔａｎａ）中で８分間３７℃でインキュベートした。結合した一次抗体をＵｌｔｒａＶｉｅｗ  Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ  ＡＰ  Ｒｅｄ検出キット（Ｖｅｎｔａｎａ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｓｙｓｔｅｍｓ；Ｔｕｃｓｏｎ，ＡＺ）によって検出した。切片をヘマトキシリンＩＩ（Ｖｅｎｔａｎａ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｓｙｓｔｅｍｓ；Ｔｕｃｓｏｎ，ＡＺ）で４分間、青味溶液で４分間対比染色した後、脱水しカバースリップをかぶせた。適切な陰性対照及び陽性対照を既知の方法に従って処理した。
【０４３４】
全スライドベースのＩＨＣ染色した対象物の検出及び分類のためのアルゴリズムはＭａｔｌａｂで作製された。明視野染色のアンミキシングの後、ＩＨＣ染色した対象物を細胞候補として検出した。全ての細胞候補について、量的特徴を抽出した。その後、教師あり機械学習を使用して、候補を様々な細胞クラス（例えば、ＣＤ８＋／Ｋｉ６７−細胞）に分類した。真偽染色した対象物のグラウンドトゥルースギャラリー（病理医により提供）を使用して、分類方法を訓練した。最後に、分類した細胞及び腫瘍面積（デジタルスライドアノテーションを介して病理医により提供）を報告し、品質管理（ＱＣ）画像を病理審査のために生成した。自動デジタルスライド分析の結果を以下のように腫瘍面積について報告した：Ｋｉ６７−／ＣＤ８＋及びＫｉ６７＋／ＣＤ８＋細胞密度（１ｍｍ２あたりの細胞計数の数）、ＣＤ６８＋／ＣＤ１６３＋及びＣＤ６８＋／ＣＤ１６３−被覆面積のパーセント（全腫瘍面積との関連の被覆面積）、ＣＤ３４＋／αＳＭＡ−及びＣＤ３４＋／αＳＭＡ＋血管密度（１ｍｍ２あたりの血管計数）。
【０４３５】
Ｅ．ＦＦＰＥ腫瘍組織からのＲＮＡ単離
ＲＮＡ単離を、Ｓｃｈｌｅｉｆｍａｎら（ＰＬｏＳ  Ｏｎｅ  ８：ｅ７４２３１，２０１４）によって説明されているように行った。簡潔には、腫瘍ＦＦＰＥ切片をマクロ解剖して、腫瘍性組織を富化し、腫瘍溶解緩衝液及びプロテイナーゼＫを使用して組織を溶解させて、核酸を完全消化及び放出させた。Ｈｉｇｈ  Ｐｕｒｅ  ＦＦＰＥ  ＲＮＡ  Ｍｉｃｒｏ  Ｋｉｔ（Ｒｏｃｈｅ  Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ，ＩＮ）を製造業者のプロトコルに従って使用して、ＲＮＡを単離した。ＱＩＡＡＭＰ（登録商標）ＤＮＡ  ＦＦＰＥ  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｋｉｔ（Ｑｉａｇｅｎ，Ｈｉｌｄｅｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を製造業者のプロトコルに従って使用して、ＤＮＡを単離した。ＲＮＡ及びＤＮＡは、分析を行うまで２８０ｕＣで保管した。
【０４３６】
Ｆ．Ｆｌｕｉｄｉｇｍ及びＮａｎｏｓｔｒｉｎｇ発現分析
遺伝子発現分析を、ＢｉｏＭａｒｋ  ＨＤ（商標）ｒｅａｌ−ｔｉｍｅ  ＰＣＲ  Ｐｌａｔｆｏｒｍ（Ｆｌｕｉｄｉｇｍ）を使用して、Ｓｃｈｌｅｉｆｍａｎら（ＰＬｏＳ  Ｏｎｅ  ８：ｅ７４２３１，２０１４）によって説明されているように行った。発現パネルにおける全てのＴＡＱＭＡＮ（登録商標）アッセイは、ＦＡＭ（商標）色素染色したＴＡＱＭＡＮ（登録商標）小溝結合剤（ＭＧＢ）プローブを使用し、４つの参照細胞ＳＰ２、ＧＵＳＢ、ＴＭＥＭ５５Ｂ、及びＶＰＳ３３Ｂを含め、受注生産または特注設計のいずれかでＬｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓから注文した。４つの参照遺伝子（ＳＰ２、ＧＵＳＢ、ＴＭＥＭ５５Ｂ、及びＶＰＳ３３Ｂ）についてのＣｔ値の幾何中央値を各試料について計算し、以下のようにデルタＣｔ（ΔＣｔ）法を使用して発現レベルを決定した：Ｃｔ（標的遺伝子）２ＧｅｏＭｅｄｉａｎ  Ｃｔ（参照遺伝子）。試験中の患者全体の中央ｍＲＮＡ発現レベル（免疫チップ（ｉｍｍｕｎｏｃｈｉｐ）（ｉＣｈｉｐ）によって測定）をカットオフとして使用して、高発現対低発現のカテゴリー化を導いた。Ｐ値をｔ検定によって決定した。
【０４３７】
ＮａｎｏＳｔｒｉｎｇ遺伝子発現データを、Ｒ／Ｂｉｏｃｏｎｄｕｃｔｏｒパッケージ「ＮａｎｏＳｔｒｉｎｇＱＣＰｒｏ」を使用して処理した。原数値を陽性対照計数によって調整した後、プローブ及びレーン特異的バックグラウンドを陰性対照及びブランク測定の両方に基づいて計算した。バックグラウンドを補正した後、計数を、ｌｏｇ２変換し、ハウスキーピング遺伝子発現（ＴＭＥＭ５５Ｂ、ＶＰＳ３３Ｂ、ＴＢＰ、及びＴＵＢＢ）によって正規化した。
【０４３８】
Ｇ．ＴＣＲスクリーニング
ＴＣＲβレパートリーの増幅及びシークエンシングを、Ａｄａｐｔｉｖｅ  ＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓにてＫｌｉｎｇｅｒら（ＰＬｏＳ  Ｏｎｅ  ８：ｅ７４２３１，２０１３）によって説明されているように行った。
【０４３９】
Ｈ．フローサイトメトリー
ＣＤ３、ＣＤ８、ＨＬＡ−ＤＲ、及びＫｉ−６７発現についての全血フローサイトメトリーを、確立されているプロトコルに従ってＬａｂＣｏｒｐ中央研究所で行った。末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）をＰｒｅｃｉｓｉｏｎ  Ｂｉｏｓｅｒｖｉｃｅｓで単離し、凍結保存した試料をフラクタルカイン受容体発現の分析及び腫瘍特異的Ｔ細胞の検出のためにＧｅｎｅｎｔｅｃｈに輸送した。ＰＢＭＣを解凍し、一晩置き、細胞の少量のアリコートを抗ＨＬＡ−Ａ２−ＦＩＴＣ（ＢＢ７．２、ＢＤ）及び抗ＣＤ４５−ＡＰＣ−Ｈ７（２Ｄ１、ＢＤ）で染色して、ＨＬＡ−Ａ２の状態を決定した。残りの細胞を、ＨＬＡ−Ａ＊０２０１／ペプチドデキストラマー及びペンタマー（Ｉｍｍｕｄｅｘ及びＰｒｏｉｍｍｕｎｅ、表１参照）の混合物によって１０分間室温で染色し、続いて抗ＣＤ３−ＢＶ５１０（ＵＣＨＴＩ、Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ）、抗ＣＤ８−Ａ７００（ＲＰＡ−Ｔ８、ＢＤ）、抗ＣＤ４−ＰＥ−Ｃｙ７（ＲＰＡ−Ｔ４、ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）、抗ＣＤ４５ＲＡ−ｅＶｏｌｖｅ６０５（ＨＩ１００、ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）、抗ＣＣＲ７−ＢＶ４２１（Ｇ０４３Ｈ７、Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ）、抗ＣＸ３ＣＲ１−ＰｅｒＣＰ−ｅＦｌｕｏｒ７１０（２Ａ９−１、ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）、及びＦｉｘａｂｌｅ  Ｖｉａｂｉｌｉｔｙ  Ｄｙｅ  ｅＦｌｕｏｒ７８０（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）によって３０分間氷上で染色した。試料を２回洗浄した後、データを取得し、ＦＡＣＳＤＩＶＡ（商標）ｖ８ソフトウェアを実行するＢＤ  ＦＡＣＳＡＲＩＡ（商標）上で選別した。５０，０００個のＣＤ８＋Ｔ細胞中最低１０個のデキストラマー陽性事象が腫瘍特異的応答であるとみなされた。表３は、フローサイトメトリーに使用したデキストラマーのリストを示す。
表３．フローサイトメトリーのためのデキストラマー
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【０４４０】
Ｉ．統計分析
アテゾリズマブ及びベバシズマブを１つ超の用量で２１日毎に静脈内投与によって受けたＲＣＣ患者１０名全員からのデータを使用して、ベースライン特性及び有害事象率を決定した。有効性をＲＥＣＩＳＴ  ｖ１．１に従って評定した。最も良く確認された全客観的奏効率は、研究者によって報告された評定から導出された。客観的奏効率（ＯＲＲ）は、完全または部分奏効の最良の全客観的奏効を有する患者の数を、ベースライン腫瘍評定を有する患者の総数で除したものとして定義した。
【０４４１】
カットオフ日に生存し、疾患進行を経験しなかった患者を、最終腫瘍評定時に打ち切りとした。奏効期間をカプラン・マイヤー法によって得た。全ＡＥ、治療に関連するＡＥ、及びグレード３〜４のＡＥの要約が、１０名全ての患者から提供された。
【０４４２】
実施例２：遺伝子発現分析により、ベバシズマブ単剤療法及びベバシズマブとアテゾリズマブとの併用療法と関連付けられるバイオマーカーを特定する
第１ｂ相臨床試験を行い、本試験においては、事前に治療されていないｍＲＣＣを有する１０名の患者に、Ｃ１Ｄ１にベバシズマブの単回用量を与え、続いて３週毎のアテゾリズマブとベバシズマブとの併用投与をＣ２Ｄ１に開始した。患者コホートのベースライン人口統計を表４に示す。ＲＥＣＩＳＴ  ｖ１．１を使用して、患者１０名中４名で部分奏効（ＰＲ）が観察され、同時に、更に５名の患者は、安定疾患（ＳＤ）が延長した（図１及び２）。この小さいコホートで観察された臨床活性は、それまでにいずれの単剤療法によって得られた活性よりも高かった。奏効期間は達成されず、奏効期間の中央値は４．２カ月であった。
表４．ベースライン人口統計
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【０４４３】
安全性、忍容性、及び臨床活性に加えて、上記の第Ｉｂ相試験の１つの重要な目的は、組み合わせた活性の機序を評価することであった。試験設計には、ベバシズマブが局所腫瘍微小環境に与える影響を具体的に調査するためのベバシズマブによる導入期間、続くアテゾリズマブを使用する免疫チェックポイント阻止による併用療法を含めた。腫瘍生検及び血液を、治療前、ベバシズマブ後１５〜１８日、及びアテゾリズマブ及びベバシズマブの併用治療を開始した後４〜６週で採取した。
【０４４４】
ベバシズマブ単剤療法または併用療法と関連付けられる腫瘍マーカーを特定するために、９０遺伝子ＰＣＲ系Ｆｌｕｉｄｉｇｍパネル及び８００遺伝子カスタムＮａｎｏＳｔｒｉｎｇパネルの両方を使用して、遺伝子発現分析を行った（図３及び４）。ＶＥＧＦ下流シグナル伝達活性を反映する新脈管構造と関連付けられる遺伝子が全患者において両治療時点で顕著に減少し（図３）、ベバシズマブの抗血管新生活性が確認された。驚くべきことに、治療前の時点とベバシズマブ治療のみの時点との比較により、増加したＴｈ１ケモカイン（ＣＸＣＬ９、ＣＸＬＣ１０、ＣＸＣＬ１１、及びＣＸＣＬ１３）（治療前のレベルと比べて約０．７倍〜６．９倍の範囲）、ＣＤ８Ｔエフェクターマーカー（ＣＤ８Ａ、ＣＤ８Ｂ、ＥＯＭＥＳ、ＧＺＭＡ、ＧＺＭＢ、ＩＦＮＧ、及びＰＲＦ１）（治療前のレベルと比べて約０．４倍〜６．２倍の範囲）、及びＮＫ細胞マーカー（ＧＺＭＢ、ＫＬＲＫ１、及びＳＬＡＭＦ７）（治療前のレベルと比べて約０．７倍〜８．２倍の範囲）の遺伝子発現が明らかとなった（図３）。ベバシズマブ治療により、患者６名中４名がＴｈ１シグナル伝達に関する遺伝子特性の顕著な増加を示した。重要なことに、個々の患者レベルでは、これらの特性はＶＥＧＦ依存性特性の減少度とは関連しなかった。ＩＨＣによるＦａｓＬ発現は、ＲＣＣを含むいくつかのがんにおいて免疫細胞に対する可能性のある障壁として説明されている（Ｍｏｔｚ  ｅｔ  ａｌ．Ｎａｔ．Ｍｅｄ．２０：６０７−６１５，２０１４）。本試験では、ベバシズマブまたは併用治療によるＦａｓＬ遺伝子発現の一貫した変化は観察されなかった。全体として、これらの差異は、ベバシズマブ治療のみにより、腫瘍微小環境中の最も顕著な治療誘導性改変を反映するＴｈ１関連特性による腫瘍免疫微小環境の調節が生じることを示す。
【０４４５】
実施例３：両治療時点におけるベバシズマブ単剤療法または併用療法後の血管及び免疫応答のバイオマーカーの特性評価
腫瘍中で観察された免疫及び血管遺伝子発現変化を確認するために、治療前及び治療中の組織における免疫及び血管タンパク質発現変化を免疫組織化学によって評価した。血管内壁の内皮細胞のマーカーであるＣＤ３１の減少が観察された（図５及び６）。アルファ平滑筋アクチン（αＳＭＡ）を用いた内皮細胞の別のマーカーであるＣＤ３４の二色染色により、未熟または不安定な血管（ＣＤ３４＋／αＳＭＡ−）が主にベバシズマブ治療の影響を受けたことが示され（図７及び８）、これは、他の公開されている報告と一致した（例えば、Ｇａｓｐａｒｉｎｉ  ｅｔ  ａｌ．Ｎａｔ．Ｃｌｉｎ．Ｐｒａｃｔ．Ｏｎｃｏｌ．２：５６２−５７７，２００５を参照されたい）。内皮細胞中の形態的変化も併用治療について明らかであり、イピルミマブ（ｉｐｉｌｕｍｉｍａｂ）及びベバシズマブ治療後の転移性黒色腫における発見と一致した（例えば、Ｈｏｄｉ  ｅｔ  ａｌ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｓ．２：６３２−６４２，２０１４を参照されたい）。加えて、ＣＤ６８＋／ＣＤ１６３−マクロファージではなくＣＤ６８＋／ＣＤ１６３＋マクロファージの状況的局在が、ベバシズマブ療法によって大きな影響を受けなかった成熟した血管ではなく未熟な血管に隣接して、治療中の４名の患者において観察された（図７、９、及び１０）。理論に束縛されるものではないが、１つの可能性のある説明は、不安定な血管に局在したマクロファージがベバシズマブによって引き起こされる炎症及び血管誘導性変化に応答している可能性があるということである。マクロファージは、ＶＥＧＦの分泌により脈管化を促進することが示されており（Ｌａｍａｇｎａ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｌｅｕｋｏｃ．Ｂｉｏｌ．８０：７０５−７１３，２００６）、ＶＥＧＦ転写産物発現が治療中に腫瘍において上方調節された（図１１）。
【０４４６】
腫瘍内ＣＤ８＋Ｔ細胞の増加が、１名を除いて全ての患者において併用治療後に顕著であった（図５、６、及び１２）。しかしながら、ＩＦＮ−γ応答遺伝子であるＰＤ−Ｌ１の上方調節は、ＰＲを示した患者１名において免疫組織化学によって検出されたたけであった（図５）。逆に、また予想外に、ＭＨＣ−Ｉ染色の同時増加がベバシズマブ及び併用治療の両方の後に観察された（図５及び６）。抗ＶＥＧＦ抗体療法によるＭＨＣ−Ｉの調節は、これまでに説明されておらず、ＣＤ８＋Ｔ細胞の増加と一貫しては関連しなかった。これまでの研究で、低酸素症がＨＩＦ−１αを介したＭＨＣ−Ｉ発現の増加に関係することが発見されている（Ｇｈｏｓｈ  ｅｔ  ａｌ．Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．３３：２７１８−２７３１，２０１３）。
【０４４７】
併用療法の際のＣＤ８＋Ｔ細胞密度の増加が増強された腫瘍内増殖または増加した輸送に起因したのかどうかに取り組むために、増殖マーカーであるＫｉ６７によるＣＤ８の二色免疫組織化学染色を用いた。Ｋｉ６７＋／ＣＤ８＋細胞とＫｉ６７−／ＣＤ８＋細胞との割合は治療中変化しないままであり（図７、１３、１４Ａ〜１４Ｃ、１５Ａ〜１５Ｃ、及び１６Ａ〜１６Ｃ）、ＣＤ８＋Ｔ細胞の増加が、増強された主要な増殖に起因するのではなく、増殖性ＣＤ８＋Ｔ細胞の増加した輸送及び浸潤に起因したことが示唆された。
【０４４８】
実施例４：併用療法後の抗原特異的Ｔ細胞応答の特性評価
腫瘍内ＣＤ８＋Ｔ細胞の上昇が増加した輸送に起因したかどうかを確認するために、末端部の細胞集団をフローサイトメトリーによって表現型分析した。既に説明されているＲＣＣ腫瘍抗原ペプチドを含有するＨＬＡ−Ａ２デキストラマー（表１）を使用して、抗原特異的Ｔ細胞が患者の血中に存在するかどうか、及びこれらの細胞集団が治療によって変化したかどうかを決定した。１０名の患者のうち、２名のＨＬＡ−Ａ２陽性患者しか治療前の時点でＤｅｘ−ＡＰＣチャネル中の細胞について陽性ではなかった（図１９）。これら２名の患者のうち、患者６のみが腫瘍内ＣＤ８＋Ｔ細胞の増加を示した。興味深いことに、Ｄｅｘ−ＡＰＣ陽性染色は、併用治療後の時点までに、患者６については少なくとも３倍減少したが、腫瘍内ＣＤ８＋Ｔ細胞の増加を示さなかった患者２については認められなかった。これらの変化により、ＲＣＣ抗原特異的Ｔ細胞が末端部から腫瘍中に輸送されることが示され得る。
【０４４９】
遺伝子発現データによっても、いくつかの他のケモカイン及びケモカイン受容体が治療中に患者の腫瘍中で増加したことが示された（図２０）。最も顕著な変化は、炎症または低酸素環境において活性化された内皮細胞の膜上で発現されることが知られているフラクタルカイン（ＣＸ３ＣＬ１）で生じた（Ｓｚｕｋｉｅｗｉｃｚ  ｅｔ  ａｌ．Ｍｅｄｉａｔｏｒｓ  Ｉｎｆｌａｍｍ．２０１３：４３７５７６，２０１３；Ｕｍｅｈａｒａ  ｅｔ  ａｌ．Ａｒｔｅｒｉｏｓｃｌｅｒ．Ｔｈｒｏｍｂ．Ｖａｓｃ．Ｂｉｏｌ．２４：３４−４０，２００４）。
【０４５０】
フラクタルカインの受容体ＣＸ３ＣＲ１は、アームのあるＣＤ８＋Ｔ細胞（パーフォリン＋／グランザイムＢ＋）上で発現されることが示されている（Ｎｉｓｈｉｍｕｒａ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６８：６１７３−６１８０，２００２）。本試験では、ＣＸ３ＣＲ１は、併用治療後に末梢ＣＤ８＋Ｔ細胞上で上方調節された（図１３）。更に、デキストラマー陽性細胞の大部分（図１９）もＣＸ３ＣＲ１を発現した（患者２及び６について、それぞれ８４％及び１００％；図１６Ａ及び１６Ｃ）。腫瘍中のフラクタルカイン及び他のケモカインとＣＤ８＋Ｔ細胞上のＣＸ３ＣＲ１との治療中の一致した上方調節により、ＣＤ８＋Ｔ細胞の増加した腫瘍浸潤についての機序が示唆される。
【０４５１】
Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）シークエンシングを腫瘍に行い、一致したＰＢＭＣからＣＤ８＋Ｔ細胞を選別して、治療誘導性のＴ細胞レパートリーの変化及びＴ細胞の腫瘍への輸送を調査した。患者３及び６についてのＴＩＬからの上位のクローンを治療前と治療中とで比較すると、一部のクローンが治療中に保持されたことが示された（図２１Ａ〜２１Ｃ、及び２２）。ベバシズマブ単独に続いて現れたクローンがあったが、他のクローンは併用療法の後でしか出現しなかった。治療前の腫瘍中では検出されたが治療中の腫瘍では検出されなかったクローンもあった。要するに、腫瘍内Ｔ細胞組成におけるこれらの動的な変化により、抗腫瘍Ｔ細胞応答が治療中に発展していることが示唆される。
【０４５２】
選別した末梢ＣＤ８＋Ｔ細胞からのＴＣＲ配列の評価により、上位のクローンの多くが治療前の試料と治療中の試料との間で維持されたが、ＰＢＭＣに見出されるクローンと治療中のＴＩＬとの間でいくらかの重複もあった（図２３Ａ及び２３Ｂ）。具体的には、腫瘍内ＣＤ８＋Ｔ細胞が治療中に増加しなかった患者である患者２のＰＢＭＣとＴＩＬとの間でクローンは共有されなかった。患者３及び６については、ＰＢＭＣとＴＩＬとの間で類似した頻度で存在するクローンがいくつかあった。Ａｄａｐｔｉｖｅ  Ｐｕｂｌｉｃ  Ｃｌｏｎｅ  Ｄａｔａｂａｓｅのブラストにより、上位のＰＢＭＣクローンのいくつかはウイルス抗原を認識する可能性が高いことが明らかとなったが、これらのクローンのいくつかしかＴＩＬ中で検出されず、これにより、腫瘍抗原特異的Ｔ細胞が腫瘍中に移行している可能性があることが更に示唆された（図２４）。治療中のＴＩＬにおける上位のクローンの大部分は、血中でははるかに低いレベルで存在し、一方で血中で最も優勢なクローンは、腫瘍中では検出されない。ＴＩＬと比較してＰＢＭＣでは上位のクローンの相対的割合が維持されないため、このことにより、併用治療によって誘導された腫瘍中のＣＤ８＋Ｔ細胞の増加が、選択的輸送機序を介して生じることが示唆され得る。浸潤に偏りがなく、腫瘍中の抗原特異的Ｔ細胞の保持がある可能性もある。
【０４５３】
他の実施形態
上述の発明は、明確な理解を目的として、図解及び例により、ある程度詳細に記載されたが、これらの説明及び例は、本発明の範囲を限定するものとして解釈されるべきではない。本明細書で引用される全ての特許及び科学文献の開示は、参照によりそれらの全体が明示的に組み込まれる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４Ａ】
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【図１４Ｂ】
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【図１４Ｃ】
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【図１５Ａ】
2019515670.tif 000023
【図１５Ｂ】
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【図１５Ｃ】
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【図１６Ａ】
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【図１６Ｂ】
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【図１６Ｃ】
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【図１７Ａ】
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【図１７Ｂ】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１Ａ】
2019515670.tif 000034
【図２１Ｂ】
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【図２１Ｃ】
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【図２２】
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【図２３Ａ】
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【図２３Ｂ】
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【図２４】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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