(57)【要約】  本発明は、周囲温度でのまたは周囲温度付近での医療機器の高水準消毒（「ＨＬＤ」）に好適な方法および液体組成物に関する。また、本方法および組成物は、生物学的汚染物質の消化に効果的であると同時に、驚くべきことに、洗浄および消毒に使用することができる。洗浄効力および消毒効力は両方とも、医療デバイスの洗浄および消毒の基準を満たす。本発明による組成物の使用は、従来技術の再処理法よりも迅速であり、エネルギー効力がより高く、より便利である機器の再処理を可能にする。また、本発明による組成物は、他の表面、例えば、病院および調理区域等、または病院洗濯室で処理されるもの等の布地等の同時洗浄および消毒にも有用である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
適用される表面の高水準消毒を達成するための液体組成物であって、酵素、殺生物性第四級アンモニウム殺生物剤、および陰イオン性ヒドロトロープを含む、液体組成物。
【請求項２】
前記表面に付着しているタンパク質を含む有機負荷物による汚染が存在する場合、それを除去するのに有効である、請求項１に記載の液体組成物。
【請求項３】
タンパク質を含む有機負荷物で汚染された医療機器の表面に付着している種菌を低減すると同時に、前記機器の表面の高水準消毒を達成するために浴中で使用するための液体組成物であって、酵素、殺生物性第四級アンモニウム殺生物剤、およびアニオン性ヒドロトロープを含む、液体組成物。
【請求項４】
タンパク質を含む有機負荷物で汚染された医療機器に付着している種菌を減少させると同時に、前記機器の高水準消毒を達成するために浴中で使用するための、１０：１から２００：１まで希釈されることが意図されている保管安定性液体濃縮物である、請求項３に記載の液体組成物。
【請求項５】
前記第四級アンモニウム殺生物剤が、使用のために希釈された際に、ＴＧ０５４で指定されている任意の負荷微生物に対する前記第四級アンモニウム殺生物剤の最小阻止濃度（「ＭＩＣ」）未満の濃度で存在する、請求項１〜４のいずれか一項に記載の液体組成物。
【請求項６】
前記陰イオン性ヒドロトロープが、アルカリ金属キシレンスルホン酸塩、アルカリ金属クメンスルホン酸塩、他のアルカリ金属アルキルアリールスルホン酸塩、およびそれらの組合せからなる群から選択される、請求項１〜５のいずれか一項に記載の液体組成物。
【請求項７】
前記第四級アンモニウム殺生物剤が、陽イオン性界面活性剤としても作用する、請求項１〜６のいずれか一項に記載の液体組成物。
【請求項８】
酵素活性保護剤をさらに含む、請求項１〜７のいずれか一項に記載の液体組成物。
【請求項９】
前記活性保護剤が、ホウ素化合物である、請求項８に記載の液体組成物。
【請求項１０】
２個から６個までのヒドロキシル基を有するポリオールをさらに含み、前記組成物が、２０ｍＬ／Ｌの濃度で４０℃にて９．５分以内に、種菌の少なくとも８対数の減少をもたらす、請求項１〜９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１１】
タンパク質を含む有機負荷物で汚染された表面を洗浄すると同時に、前記表面の高水準消毒を達成するための方法であって、前記表面を、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の組成物で処理するステップを含む方法。
【請求項１２】
前記表面が、医療機器の表面である、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
４０℃で１０分未満にＢＲＯＷＮＥ試験ストリップから汚れを除去することができる、請求項１１または１２に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、例えば医療機器および他の表面の、周囲温度付近における高水準消毒（「ＨＬＤ」、Ｈｉｇｈ  Ｌｅｖｅｌ  Ｄｉｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎ）１に好適な方法および組成物に関する。また、本発明による組成物は、生物学的汚染物質を消化するための有効な洗浄剤である。最も驚くべきことに、本発明による組成物は、洗浄および消毒を同時に行うことができ、洗浄および消毒を同時に行うために使用されることが最も多くなると考えられる。本組成物は、可撓性内視鏡の高水準消毒に好適であり、本明細書では、そのための使用を特に参照して記載されているが、本組成物は、熱不安定性な結腸内視鏡、腹腔鏡、超音波プローブ、他の手術、医学、生検、および歯科等の機器、そのような機器の部品、ならびの類似の装備等の多数の他の機器（以下、「機器」と総称される）の処理にも同様に好適である。機器の洗浄および消毒に使用する場合、機器は、現在使用されているプロセスで可能なものよりも、迅速で、より低温で、かなりの省エネルギーで「再処理」（つまり、洗浄、消毒し、再使用に好適なように準備することをいう）することができる。また、本発明は、例えば、整髪器具およびある特定の美容院装置等の、単に清潔にすればよいだけの機器にも応用可能である。本発明は、本明細書では、ＴＧＯ５４１のような高水準消毒での使用に関して記載されているが、「中水準消毒（Ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａｔｅ  Ｌｅｖｅｌ  Ｄｉｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎ）」、「病院グレード消毒（Ｈｏｓｐｉｔａｌ  Ｇｒａｄｅ  Ｄｉｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎ）」、「取扱安全（Ｓａｆｅ  ｔｏ  ｈａｎｄｌｅ）」、または使用目的および該当規格が許容する場合は清浄剤等のより低水準の消毒を提供するように改変することができることが理解されると予想される。また、本発明による組成物は、病院、医院および歯科医院、または老人ホーム等の、例えば、室内用便器、トレー、機器移動用ワゴン、および他の大型装置の他の表面の洗浄および／または消毒に、ならびに医薬品工場、調理場区域、調理器具、分配装置、および冷蔵室等、または病院洗濯室で処理されるもの等の布地等の洗浄および／または消毒にも好適である。
（１オーストラリア薬品・医薬品法１９８９年（Ａｕｓｔｒａｌｉａｎ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ｇｏｏｄｓ  Ａｃｔ  １９８９）の薬品・医薬品規則第５４条（Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ｇｏｏｄｓ  Ｏｒｄｅｒ  Ｎｏ  ５４）に規定された通り（ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ｃｏｍｌａｗ．ｇｏｖ．ａｕ／Ｄｅｔａｉｌｓ／Ｆ２００９Ｃ００３２７）。）
【背景技術】
【０００２】
従来技術
従来技術の例として、内視鏡は、医学診断および治療に使用されることが益々増加している。内視鏡は、指示通りに使用すると、身体の非無菌領域、粘膜、および血液中に存在する微生物で著しく汚れ、極度に汚染される場合がある。したがって、機器は、各使用後に徹底的に洗浄および消毒されなければならない。内視鏡は、物質の組合せで作られている精密機器である。内視鏡は、化学的攻撃に関与する物質に対する感受性を考慮すると洗浄が難しく、アクセス用の細い管腔を有するため、内部表面の洗浄が困難である。
【０００３】
中央滅菌供給部門にて典型的には２４時間の所要時間で再処理されるより安価でより小型の医療機器とは異なり、可撓性内視鏡は、典型的には、内視鏡検査部署にて３０〜６０分の所要時間で「再処理」される。そのような機器の資本費用は比較的高く、各患者に臨床使用する時間が平均して比較的短時間であるため、迅速な再処理が非常に望まれている。現在、再処理は、連続３ステップのプロセスである。第１のステップは「洗浄ステップ」であり、通常は二段階で実施される。第１の段階は「前洗浄」であり、臨床医が取り出した内視鏡を、ベッドサイドでまたはベッドサイド付近で前洗浄し、酵素溶液に浸漬した布地で機器から全体的な汚染を拭き取る。第２の段階では、典型的には界面活性剤または酵素／界面活性剤の組合せを含む洗浄溶液を用い、指定されているプロトコールに従ってブラシ洗浄／注射注入洗浄／擦り洗浄して、関連する外部および内部表面を全て確実に洗浄する。ＡＥＲで再処理する場合、洗浄は、界面活性剤および／または酵素の同じまたは異なる組合せを用いて繰り返される場合がある。最終的に、洗浄は、ＩＳＯ１５８８３に規定されている規格（再処理で取得されるべき規格として国際的に許容されているか、またはその国内規格に対応する）を適切に満たさなければならない。前洗浄およびその後の洗浄は、本明細書では、まとめて再処理の第１のステップとみなされる。
【０００４】
洗浄ステップ後の第２のステップは、「すすぎステップ」であり、このステップでは、機器を徹底的にすすいで、洗浄薬、酵素、および他の残留物を除去する。これらは、除去されないと、第３の（「消毒」）ステップに弊害をもたらし、消毒を無効にしてしまう可能性がある。例えば、徹底的なすすぎを３回行って、前洗浄した内視鏡に付着している残留物が、４００〜６００ｐｐｍの過酢酸を妨害しないことを確実にすることが求められる。過酢酸は、最もよく使用されている内視鏡消毒剤の１つである。
【０００５】
第３のステップである「消毒ステップ」では、機器を蒸気オートクレーブ（熱感受性でない場合）で滅菌するか、または高水準消毒を達成することができる消毒剤（例えば、過酢酸、グルタルアルデヒド）の浴に浸漬するかのいずれかを行う。洗浄、すすぎ、および消毒ステップは全て、自動内視鏡再処理器（「ＡＥＲ」）で連続実施し、その後、機器を乾燥し、ＡＥＲから取り出して再使用してもよい。あるいは、前洗浄した内視鏡を、同じまたは異なる洗浄溶液浴中で手作業にてさらに洗浄し、その後浴から取り出し、第２のステップにて手作業で徹底的に繰り返してすすぎを行ってもよく、最後に第３のステップにて、手動の高水準消毒用の消毒浴に移動させる。連続３ステップをＡＥＲで実施するかまたは手作業で実施するかに関わらず、内視鏡を再使用する前に、少なくとも３つの別個の連続処理ステップが必要とされている。
【０００６】
本発明に完全な理解には、こうした３つのステップの各々における課題に対する洞察が必要であり、それらを下記に詳述する。
【０００７】
洗浄ステップ
「ＳＣＮＡ  ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ  ｆｏｒ  ｕｓｅ  ｏｆ  Ｈｉｇｈ  Ｌｅｖｅｌ  Ｄｉｓｉｎｆｅｃｔａｎｔｓ＆Ｓｔｅｒｉｌａｎｔｓ  ｆｏｒ  Ｒｅｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ  Ｆｌｅｘｉｂｌｅ  Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  Ｅｎｄｏｓｃｏｐｅｓ」に記載されているように、「全ての機器の丹念な手作業での洗浄は、いずれの高水準消毒または殺菌に曝露される前に行わなければならない（Ｐｅｔｅｒｓｅｎら、２０１１年；ＳＧＮＡ、２０１２年）。機器の不適切な洗浄は、可撓性視鏡による感染症の伝染の原因となる１つの要因であることが報告されている（ＡＳＧＥ  Ｓｔａｎｄａｒｄｓ  ｏｆ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅら、２００８年；Ｒｕｔａｌａら、２００８年）。このプロセスは、高水準消毒剤または滅菌剤に対する有機物および微生物の負荷を著しく低減し、生物膜の防止に不可欠なステップである（ＡｌｆａおよびＨｏｗｉｅ、２００９年）。内視鏡の詳細な洗浄プロトコールは、ＳＧＮＡのＳｔａｎｄａｒｄｓ  ｏｆ  Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ  Ｃｏｎｔｒｏｌ  ａｎｄ  Ｒｅｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ  ｏｆ  Ｆｌｅｘｉｂｌｅ  Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  Ｅｎｄｏｓｃｏｐｅｓ（２０１２年）に見出される。」２。
（２ＳＣＮＡ  ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ  ｆｏｒ  ｕｓｅ  ｏｆ  Ｈｉｇｈ  Ｌｅｖｅｌ  Ｄｉｓｉｎｆｅｃｔａｎｔｓ  ＆  Ｓｔｅｒｉｌａｎｔｓ  ｆｏｒ  Ｒｅｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ  Ｆｌｅｘｉｂｌｅ  Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  Ｅｎｄｏｓｃｏｐｅｓの９頁。ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ｓｇｎａ．ｏｒｇ／Ｐｏｒｔａｌｓ／０／Ｉｓｓｕｅｓ／ＰＤＦ／Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ−Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ／６＿ＨＬＤＧｕｉｄｅｌｉｎｅ＿２０１３．ｐｄｆを参照。）
【０００８】
浴中にて手作業で洗浄する場合、ブラシかけおよび注射注入により、浴中の洗浄液および細菌がアエロゾル化され、内視鏡検査部署の空気および環境表面の全体的な汚染がもたらされる。そのような汚染空気は、再処理した機器の再感染の最も可能性の高い原因であると考えられ、「ＵＣＬＡ事故」３で報告されるものと同様の事故を引き起こす。
（３ｈｔｔｐ：／／ｊａｍａ．ｊａｍａｎｅｔｗｏｒｋ．ｃｏｍ／ａｒｔｉｃｌｅ．ａｓｐｘ？ａｒｔｉｃｌｅｉｄ＝１９１１３２６を参照。）
【０００９】
前浸漬は、受動的ではないことに留意されたい。職員は、全ての管腔に洗浄薬液を注射注入し、生検チャネルおよびバルブ等にブラシをかけるように指示されている。結腸内視鏡の洗浄には、例えば、最大１４回の手作業によるブラシかけ−注射注入−施栓−脱栓の操作が必要とされる。前洗浄および洗浄中での使用に推薦されるＰＰＥとしては、ガウン、手袋、保護眼鏡類、および／または顔面防護具が挙げられる４。
（４ＳＣＮＡ  ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ  ｆｏｒ  ｕｓｅ  ｏｆ  Ｈｉｇｈ  Ｌｅｖｅｌ  Ｄｉｓｉｎｆｅｃｔａｎｔｓ  ＆  Ｓｔｅｒｉｌａｎｔｓ  ｆｏｒ  Ｒｅｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ  Ｆｌｅｘｉｂｌｅ  Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  Ｅｎｄｏｓｃｏｐｅｓ。８頁。類似の規格が国際的に適用可能である。）
【００１０】
頑強で水不溶性のタンパク質性の汚れを除去するには、酵素含有洗浄薬が、界面活性剤単独よりも著しくより効果的であり、現在の業界標準である。３ＭのＲＭＥＣ（登録商標）、ＳｔｅｒｉｓのＰｒｏｌｙｓｔｉｃａ（登録商標）、Ｊ＆ＪのＣｉｄｅｚｙｍｅ（登録商標）等の製品は、酵素および界面活性剤の組合せを含み、表面の洗浄が良好であり、ＩＳＯ１５８８３の要件を満たす。しかしながら、これらは、清浄剤に第四級殺生物剤をさらに含む本発明者の先行特許出願ＰＣＴ／ＡＵ０１／００３８１が取り組んでいる課題を解決しない。この文献は、下記で考察されている。洗浄薬を含有し、酵素を含むまたは含まない幾つかの第四級殺生物剤（以下、「クワット（ｑｕａｔ）」と省略する）が、医療デバイスの洗浄および消毒用に販売されているが、こうしたクワット含有製品はいずれも、ＩＳＯ１５８８３が期待する水準の洗浄能力（ＩＳＯ１５８８３に準拠する模擬汚れインジケーター（ｓｉｍｕｌａｔｅｄ  ｓｏｉｌｓ  ｉｎｄｉｃａｔｏｒ）、例えばＢｒｏｗｎｅ  ＳＴＦ  Ｌｏａｄ  Ｃｈｅｃｋストリップの洗浄を含む）を有していない。前洗浄後の洗浄は、典型的には、ＡＥＲでは５〜７分間、手作業では１０〜１５分間かかる。ＩＳＯ１５８３３の洗浄効力の要件を満たす製品は、高水準消毒を供給または提供しない。
【００１１】
すすぎステップ
洗浄用洗浄薬の成分は、滅菌および消毒活性を妨害するため、洗浄ステップと滅菌ステップとの間に、徹底的なすすぎが必要である。第２のステップでは、機器を徹底的にすすいで、洗浄薬、酵素、および他の残留物を除去する。自動内視鏡再処理器（「ＡＥＲ」）で再処理する機器は、このステップでは、典型的には少なくとも３回のすすぎサイクルにかけられる。ＡＥＲで再処理しない機器は、典型的には、複数回のすすぎが行われる。すすぎには、典型的には、手作業処理では１０〜１５分間、ＡＥＲでは６〜１０分間かかる。
【００１２】
消毒ステップ
この１０年間で、血液および組織で伝播する可能性のあるもの、例えば、Ｂ型肝炎、ＨＩＶ、および他の感染症等の、非常に深刻で時には致死性である疾患の伝染を回避しようとする関心が特に高まっている。熱感受性機器の場合、高水準消毒は、そのような伝染の回避を確実するための最低限の要件である。例えば、Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｏｆ  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  Ｎｕｒｓｅｓ  ａｎｄ  Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ  Ｉｎｃによる「Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅ  ｆｏｒ  Ｕｓｅ  ｏｆ  Ｈｉｇｈ  Ｌｅｖｅｌ  Ｄｉｓｉｎｆｅｃｔａｎｔｓ＆Ｓｔｅｒｉｌａｎｔｓ  ｆｏｒ  Ｒｅｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ  Ｆｌｅｘｉｂｌｅ  Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  Ｅｎｄｏｓｃｏｐｅｓ」５に記載されているように、消毒ステップは、典型的には、高水準消毒剤を使用することを含み、最も一般的に使用されているものは、過酢酸（「ＰＡＡ」）、グルタルアルデヒド、オルトフタルアルデヒド（Ｏｒｔｈｏｐｈａｌａｌｄｅｈｙｄｅ）（「ＯＰＡ」）、または高濃度過酸化水素である。
（５ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ｓｇｎａ．ｏｒｇ／Ｐｏｒｔａｌｓ／０／Ｉｓｓｕｅｓ／ＰＤＦ／Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ−Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ／６＿ＨＬＤＧｕｉｄｅｌｉｎｅ＿２０１３．ｐｄｆ）
【００１３】
現在まで、「可撓性内視鏡を再処理するために使用される高水準消毒剤または滅菌剤は全て、内視鏡から完全にそそぎ落とされていないと、粘膜に傷害を与える場合がある（Ｒｕｔａｌａら、２００８年）。高水準消毒後、内視鏡を徹底的にすすぎ、無菌水、ろ過水、または水道水でチャネルをフラッシュ洗浄して、消毒剤／滅菌剤を除去しなければならない（Ｐｅｔｅｒｓｅｎら、２０１１年）。」。
【００１４】
高水準消毒に使用される化学薬品は、鼻をつく極めて刺激性の傾向があり、職員は、化学薬品による深刻な健康被害を予防するために、ラッテクス手袋および顔面マスクを含む全身保護具（ＰＰＥ）を着用する必要があり、化学薬品の中には、機器を腐食するものもあり、廃棄する前に追加の中和ステップを必要とするものもある６。ＰＡＡ等、あるものは、潜在的に爆発性である。いずれの場合でも、消毒ステップの一部として、機器をすすいて、消毒剤を除去する必要がある。
（６一般的に使用されているＨＬＤの利点および欠点は、参照文献１の１０〜１５頁を参照。）
【００１５】
酵素はタンパク質であり、あらゆる公知の消毒剤で変性するため、および消毒剤は酵素により影響を受けるため（酵素がタンパク質であるため）、別々の洗浄浴および滅菌浴を準備し、それらを使用する間に効率的なすすぎを行うことが必要とされる。
【００１６】
したがって、これまでは、適切な洗浄および滅菌処理を行うための「単一浴」を提供するのは不可能であるとされてきた。酵素処理を行い、その後同じ浴にフェノール系消毒剤を添加することを含む二成分系が提案されているものの、普及していない。
【００１７】
再処理サイクルは、消毒／滅菌ステップにより、典型的には最大２０分間さらに時間がかかることになる。
【００１８】
本出願の出願人によるＰＣＴ／ＡＵ０１／００３８１は、２００１ＡＤ前に使用される手順は、患者間の交差感染の予防には効果的であるが、実際のところ、医療職員および／または病院職員を、これまで認識されていなかった健康および安全リスクに曝していたという観察に基づいていた。前浸漬浴の酵素が、微生物を保持する生物学的分泌物を消化し、したがって微生物を浴内に放出させ、界面活性剤が微生物を効率的に分散させたため、前洗浄浴の流体内容物は、それ自体が容易に感染性物質により高水準に汚染されてしまう。一部の病院職員が考えていることとは逆に、酵素は、細菌を死滅させず、むしろ細菌を放出させていた。本発明者は、第１の浴に入れた機器に付着していた細菌数が、１平方ｃｍ当たり１０９形成単位（「ｃｆｕ」）を超えていることを測定し、したがって、職員は、以下：（ｉ）擦り洗いして汚染物質を放出させている間、または第１の浴を排水している間のいずれか間の、第１の浴からの水跳ね（または機器を誤って浴に落としてしまった際の水跳ね）；（ｉｉ）手袋の欠陥（ラテックス手袋の「ピンホール」欠陥率は約１２％である）；（ｉｉｉ）誤って手首よりも深く手袋を浸漬してしまうこと；（ｉｖ）手袋および場合によっては皮膚の貫通をもたらす浴中での指穿刺事故；（ｖ）ブラシおよび注射器により生成されるエアロゾルからの感染リスクに曝されているという結論を得た。加えて、第１の浴の壁表面は、浴を空にした後でも汚染されたままであり、それ自体が消毒されていない場合、保護されていない職員が取り扱ってしまう可能性がある。
【００１９】
ＰＣＴ／ＡＵ０１／００３８１では、前洗浄または洗浄浴として使用するための液体組成物を開示した。この組成物は、タンパク質を含む有機負荷物で汚染された医療機器に付着している微生物種菌（ｍｉｃｒｏｂｉａｌ  ｉｎｏｃｕｌｕｍ）を低減するためのものであり、簡潔に言えば、プロテアーゼ、殺生物性クワット殺生物剤、および活性保護剤を含んでいた。好ましい実施形態では、非イオン性界面活性剤が含まれていた。クワット殺生物剤は、タンパク質、および硬水に見出されるもの等のある特定のイオンにより瞬時に不活化されることが理解されると予想される。したがって、タンパク質で汚れた機器の環境においてクワット殺生物剤を使用することができることは驚くべきことだった。また、さらにより驚くべきことに、酵素はタンパク質であるため、クワットを変性させてしまい、それら自体もクワットにより不活化されてしまうことが予想されたはずである。これは、ホウ素活性保護剤と組み合わせることにより、本発明者の以前の発明で回避された。活性保護剤の存在下で、クワットの支援により、溶液は、８分以内に種菌（ｉｎｏｃｕｌｕｍ）の８または９対数の減少をもたらす「病院グレード消毒」のＴＧＡグレードＡ試験に合格することが可能だった。上述の明細書に記載されている組成物は、組成物を使用する作業者の健康にもはや有害ではなく、前浸漬または洗浄溶液の消毒に有効だった、つまり、酵素処理により溶液内に放出された細菌を死滅させ、浴壁面を消毒したが、達成された消毒水準（病院グレードＡ）は、機器を十分に洗浄して、さらなる別の消毒または滅菌プロセスを行わずに再使用することができるほど十分ではなかった。クワットは、これまで高水準消毒を提供していない。上述の発明による組成物で処理した後の機器は、再使用の前に、高水準消毒を行う必要があった。
【００２０】
さらに、出願ＰＣＴ／ＡＵ０１／００３８１に対する本発明者の特許による組成物は、医療機器用の洗浄剤がＩＳＯ１５８８３で規定されている洗浄効力規格に合格し、したがってその目的での規制／商業的認可を得るほど十分に効果的ではなかった。ＩＳＯ１５８３３を満たすためには、ＰＣＴ／ＡＵ０１／００３８１に従って前洗浄した機器は、上述の規格を満たすことができるＡＥＲまたは洗浄浴中で引き続き洗浄しならなければならなかった。許容される洗浄効力は、洗浄浴中で、ＩＳＯ１５８８３／５準拠のインジケーター（「ＢＲＯＷＮＥ」（商標登録）試験ストリップ（Ｓｔｅｒｉｓ  Ｃｏｒｐ製）またはその類似品等の模擬汚れを洗浄し、試験ストリップに印刷されているスクリーン印刷汚れパターンを、商業的洗浄サイクル中に基材から確実に除去することが求められる。ＰＣＴ／ＡＵ０１／００３８１による調合物は、ＩＳＯ１５５８３に準拠して、３〜１０ｍｌ／Ｌの濃度で５０℃にて商業的な条件である３〜５分内に、試験ストリップから汚れを除去することができなかった。
【００２１】
広範な研究開発努力にも関わらず、本発明者は、本発明者の以前の発明による酵素／ホウ素の組合せの洗浄効力を、本発明者の組成物中のクワット殺生物剤の洗浄効力を破壊する酵素、または酵素を変性させるクワットのいずれかを用いずに、商業的に許容されるのに十分な程度に向上させることができなかった。本発明に至るまで、本発明者の以前の発明の優先日から約１５年たっても、単一浴で医療機器を良好に洗浄すると同時に、機器の安全な再使用を可能にするのに十分であると考えられる高水準の消毒を達成することは、依然として成就されない目標であった。本発明者の米国特許第９，０２３，７７８号では、消毒剤でないが、界面活性剤が除外された洗浄剤を開示した（したがってクワットが除外されていた。クワットは全て界面活性剤である）。
【００２２】
本明細書における従来技術の考察はいずれも、当分野の一般常識の状態を示すものとして解釈されるべきではない。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００２３】
本発明の目的は、上記で考察した従来技術の欠点を回避もしくは改善するか、または少なくとも従来技術の商業的代替を提供することである。好ましい実施形態では、現在使用されているＨＬＤ消毒剤に伴う、職員に対する労働安全衛生上のリスク、機器および周囲の腐食リスク、または環境廃棄問題の１つもしくは複数を減少させる、高水準消毒のための向上された手段を提供することである。
【００２４】
本発明の好ましい実施形態の別の目的は、単一浴中で医療機器を良好に洗浄すると同時に、機器の安全な再使用を可能にし、従来技術の洗浄および消毒方法で可能なよりも短時間で使用に戻すのに十分な高水準の消毒を達成することである。
【００２５】
好ましい実施形態のさらなる目的は、機器の再処理中の洗浄と消毒との間のすすぎの必要性を排除し、それにより水、時間、および可能性としてはエネルギーを節約することである。
【００２６】
また、本発明の好ましい実施形態は、機器洗浄の各サイクル後に浴壁に残留する微生物が存在する場合、その増殖による機器の交差感染リスクに対処する。
【００２７】
本発明の一部の実施形態の目的は、表面を洗浄するための簡便な手段を提供することである。本発明の他の実施形態の目的は、消毒が求められている表面の消毒を達成するための簡便な手段を提供することである。本発明のさらに他の実施形態の目的は、表面を洗浄すると同時に、それら表面の高水準消毒を達成するための簡便な手段を提供することである。
【００２８】
一部の場合、機器は、滅菌が必要とされない場合がある。例えば、スパチュラ、および体組織を貫通しない保持具、ならびに整髪機器等は、適切な規格に従って機器を清潔にするかまたは消毒するだけで十分な場合がある。そのような場合、単一組成で要求規格を満たすことが可能な洗浄および消毒処理を提供することが望ましいと予想される。一部の実施形態では、望ましくは、処理は、表面、例えば手術室表面または調理場表面に噴霧または塗布により施して、これら表面を洗浄および消毒し、その後残留物がある場合は、それらを適切な手段で除去することであってもよい。
【課題を解決するための手段】
【００２９】
第１の態様によると、本発明は、適用される表面の高水準消毒を達成するための液体組成物であって、酵素、殺生物性第四級アンモニウム殺生物剤、および陰イオン性ヒドロトロープを含む、液体組成物を提供する。
【００３０】
当業者は、これまで、酵素はクワットとの適合性がなく、陰イオン性ヒドロトロープは酵素およびクワットの両方と適合性がないと考えていた。さらに、そのような組合せが高水準消毒をもたらすと考える理由はないはずである。なぜならば、酵素、クワット、およびヒドロトロープはいずれも単独では、高水準消毒をもたらすことができず、酵素および特に陰イオン性化合物がクワットによる消毒を妨害する可能性があることは、教科書的な教示であるからである。また、非常に好ましい実施形態では、本組成物は、本発明者の以前の出願ＰＣＴ／ＡＵ０１／００３８１に記載されているような酵素活性保護剤または保護系を含む。本発明者の以前の出願ＰＣＴ／ＡＵ０１／００３８１に記載されているものは、陰イオン性ヒドロトロープを含んでいなかった。
【００３１】
第１の態様による組成物は、この水準の消毒を達成するために現在推奨されているものと比較して、無害であり、労働安全衛生上のリスクおよび環境リスクが比較的少ない手段により、高水準消毒（「ＨＬＤ」）を達成する。
【００３２】
第２の態様によると、本発明は、上記表面に付着しているタンパク質を含む有機負荷物による汚染が存在する場合、それを除去するのに有効である、第１の態様による液体組成物である。
【００３３】
本発明の好ましい実施形態は、３〜１０ｍｌ／Ｌ希釈で、４０℃にて撹拌せずに１０分未満で試験ストリップから汚れを除去することができる。従来技術は、このような組合せが、ＩＳＯ１５５８３に準拠し、３〜１０ｍｌ／Ｌの濃度で５０℃にて３〜５分内という商業的な条件で試験ストリップから汚れを除去することができることを一切示唆していない。
【００３４】
第３の態様によると、本発明は、タンパク質を含む有機負荷物で汚染された医療機器の表面に付着している種菌を低減すると同時に、上記機器の表面の高水準消毒を達成するために浴中で使用するための液体組成物であって、酵素、殺生物性第四級アンモニウム殺生物剤、およびアニオン性ヒドロトロープを含む、液体組成物である。
【００３５】
これまで、洗浄および消毒には、３ステップの連続プロセスが必要だった。
【００３６】
第４の態様によると、本発明は、タンパク質を含む有機負荷物で汚染された医療機器に付着している種菌を減少させるために浴中で使用するための、１０：１から２００：１まで希釈されることが意図されている、第３の態様による保管安定性液体濃縮物である。
【００３７】
第５の態様によると、本発明は、クワットが、使用のために希釈された際に、ＴＧ０５４で指定されている任意の負荷微生物に対するクワットの最小阻止濃度（「ＭＩＣ；Ｍｉｎｉｍｕｍ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ  Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ」）未満の濃度で存在する、上記態様のいずれか１つに記載の組成物である。
【００３８】
第６の態様によると、本発明は、陰イオン性ヒドロトロープが、アルカリ金属キシレンスルホン酸塩、およびアルカリ金属クメンスルホン酸塩、他のアルカリ金属アルキルアリールスルホン酸塩、およびそれらの組合せから選択される、上記態様のいずれか１つに記載の組成物である。
【００３９】
第７の態様によると、本発明は、殺生物性クワットが、陽イオン性界面活性剤としても作用する、上記態様のいずれか１つに記載の組成物である。
【００４０】
機器に付着しているタンパク質を効果的に消化する状態に酵素を保つと同時に、高水準消毒を達成するような様式で、酵素およびクワットを、保管寿命安定性組成物内に組み合わせることができることは、当業者にとって驚くべきことと予想される。（例えば、米国特許第６２３５６９２号第６欄５７〜５８行「第四級アンモニウム塩は、酵素との適合性がないため、許容され得る抗微生物剤ではない。」を参照）さらにより驚くべきことには、教科書的な教示に反して、陽イオン性クワットは、濃縮物中でも希釈しても、陰イオン性ヒドロトロープにより中和および不活化されない。消毒剤としてクワットの任意の生物に対するその最小阻止濃度（「ＭＩＣ」）未満になるような濃度にクワットが希釈されている浴中で高水準消毒を達成することができることは、当業者にとってさらにより驚嘆すべきことと予想される。酵素自体は消毒剤ではなく、他の成分はいずれも、いかなる濃度であっても高水準消毒をもたらすことができないことを考慮すると、本発明により浴中でもたらされる高水準消毒は、クワット単独によりもたらされるものではなく、成分間の全く予想外の相乗的相互作用の結果ということになる。
【００４１】
さらにより驚くべきことに、本発明の好ましい実施形態では、クワット殺生物剤は、通常はクワット殺生物剤を迅速に不活化することが予想されるタンパク質でもある１つまたは複数の酵素と接触した状態で、これもクワットを迅速に不活化することが予想される陰イオン性化合物（ヒドロトロープ）と組み合わせて長期保管保存してもその殺生物活性を保持する液体濃縮物（使用前に水で１：２０から１：１０００まで希釈することができる）の形態の組成物中に存在する。また、驚くべきことに、酵素は、不可逆的に変性されない。液体濃縮物は、使用するための水で容易に希釈され、一般的に使用されている従来技術の高水準消毒剤と比較して無害な浴を提供する。
【００４２】
第８の態様によると、本発明は、酵素活性保護剤をさらに含む、上記態様のいずれか１つに記載の組成物である。好ましくは、活性保護剤は、ホウ素化合物であるか、またはホウ素化合物を含む。
【００４３】
第９の態様によると、本発明は、上記態様のいずれか１つに記載の組成物を使用することにより、有機負荷物で汚染された表面を洗浄にするための方法である。第９の態様による好ましい実施形態では、洗浄および消毒は、単一浴中で実施される。
【００４４】
第１０の態様によると、本発明は、タンパク質を含む有機負荷物で汚染された表面を洗浄すると同時に、上記表面の高水準消毒を達成するための方法であって、上記表面を、上記態様のいずれか１つに記載の組成物で処理するステップを含む方法である。表面は、医療機器の表面またはその部分であってもよい。
【００４５】
第１１の態様によると、本発明は、陰イオン性ヒドロトロープ対第四級化合物の比が、少なくとも２部の陰イオン性ヒドロトロープ対１部のクワットである組成物である。より好ましくは、陰イオン性ヒドロトロープ対第四級化合物の比は、５〜１０部の陰イオン性ヒドロトロープ対１部のクワットである。
【００４６】
また、驚くべきことであり、予期しないことであったが、１：２０から１：１００までの希釈では、第四級殺生物剤が添加されている好ましい調合物のタンパク質分解活性は、第四級殺生物剤を含まない調合物と比較して実質的により高い。アッセイ活性の増加は、５０％に達するほど高い。調合物中の酵素の保管寿命安定性は、２４か月間にわたって、事実上変化しない（＋／−５〜７％）。
【００４７】
文脈上明白にそうではないことが要求されない限り、本明細書および特許請求の範囲の全体にわたって、単語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」および「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」等は、排他的または網羅的な意味ではなく、包括的な意味に、つまり「〜を含むが、それらに限定されない」という意味に解釈されるべきである。
【００４８】
オーストラリアでは、環境表面消毒剤（医療機器／デバイスには使用されない）は、ＴＧＡにより指定されている試験に従って、グレードＢ「病院級の汚れ（Ｈｏｓｐｉｔａｌ  Ｄｉｒｔｙ）」、グレードＡ「病院級の清潔さ（Ｈｏｓｐｉｔａｌ  Ｃｌｅａｎ）」、グレードＣ「家庭／商業用（ｈｏｕｓｅｈｏｌｄ／ｃｏｍｍｅｒｃｉａｌ）」として類別され、この順で効力が減少する。ＴＧＡ試験は、ＴＧＯ５４に指定されている。他国では、類似の試験および分類が該当する。用語「病院グレード」消毒剤は、本明細書で使用される場合、グレードＡ試験に合格した消毒剤を指す。つまり「病院グレード」消毒剤は、少なくとも病院グレードＡでなければならない。ＴＧＡ規格では、「病院グレード消毒剤は、８分以内の種菌密度の少なくとも８または９対数の減少をもたらすことができる」ことが求められている。
【００４９】
「高水準消毒」は、オーストラリアＴＧＡにより、その製造業者の推奨に従って使用した場合、多数の細菌内生胞子を除き全ての微生物病原体を死滅させる消毒剤であると定義されており（ＴＧＡ規則第５４条）、換言すると、ミコバクテリア（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉａ）（非常に強靱である）および非エンベロープウイルスに対して少なくとも６対数の減少をもたらす消毒剤である。
【００５０】
機器の高水準消毒を達成することができず、その後に別の消毒または滅菌処理が必要だった、本発明者の以前の発明（ＰＣＴ／ＡＵ０１／００３８１）の組成物とは対照的に、本発明は、浴中で高水準消毒を達成し、タンパク質を含む有機負荷物で汚染された医療機器の洗浄に使用しても効果的である。現在認可されている機器の消毒方法とは異なり、本発明で使用される化学薬品は、比較的無害であり、グルタルアルデヒド、オルトフタルアルデヒド（「ＯＰＡ」）、過酢酸（「ＰＡＡ」）、または過酸化水素等の使用に関連する労働衛生リスクを伴わない。
【００５１】
さらに、５０℃にて６０分以内に試験ストリップから試験汚れを除去することができなかった本発明者の以前の発明の組成物とは対照的に、本発明による組成物は、４０℃では１０分未満で、室温では１５〜２０分で除去を達成することができ、さらなる２０分間の高水準消毒ステップを必要とせずに、機器を再処理することができる。
【発明を実施するための形態】
【００５２】
陰イオン性ヒドロトロープ
本発明の本質的な特徴は、陰イオン性ヒドロトロープが含まれていることにある。ヒドロトロープは、水溶液中の疎水性化合物を可溶化する化合物である。
【００５３】
望ましくは、ヒドロトロープは、以下の式：
【００５４】
【化１】
2019504077.tif 000002
、より好ましくは以下の式：
【００５５】
【化２】
2019504077.tif 000003
の水溶性陰イオン性ヒドロトロープからなる群から選択され、長さが６個の炭素を超えるアルキル側鎖を有していない。好ましいヒドロトロープでは、Ｒ１またはＲ２は、独立して、１個から６個までの炭素、好ましくは１個から４個までの炭素、より好ましくは１個から２個までの炭素を有するアルキル基であるが、Ｒ１およびＲ２は、任意選択で水素であってもよい。非常に高度に好ましいヒドロトロープは、水溶性キシレンスルホン酸塩（Ｒ１およびＲ２はメチルである）およびクメンスルホン酸塩（Ｒ１はイソプロピルであり、Ｒ２は水素である）である。
【００５６】
好適な陰イオン性疎水性化合物の例としては、キシレンスルホン酸ナトリウム（「ＳＸＳ」）およびクメンスルホン酸ナトリウム（「ＳＣＳ」）が挙げられる。しかしながら、他の好適な陰イオン性ヒドロトロープとしては、ナトリウム−２−エチルヘキシルヘキシルスルファート、オキシエチル化フェノールのリン酸エステル、アミンアルキルアリールスルホナート、直鎖アルキルナフタレンスルホナート、ジヘキシルスルホコハク酸ナトリウム、およびドデシルベンゼンスルホン酸ナトリウムが挙げられる。
【００５７】
望ましくは、陰イオン性ヒドロトロープは、第四級アンモニウム殺生物剤が、浴中に少なくとも１つの酵素および典型的なタンパク質性負荷物が存在する状態で、浴の「高水準」消毒（本明細書で規定されているような）を提供するための使用に効果的であるのに十分な濃度で存在する。陰イオン性ヒドロトロープ対クワットの比は、少なくとも２：１、より好ましくは５：１である。
【００５８】
活性保護剤
望ましくは、「活性保護剤」が存在しており、「活性保護剤」は、（１）酵素安定化化合物および系を含む、液体水溶液中で酵素の安定化に効果的であることが知られている組成物、（２）選択された「ミセル阻害剤」、ならびに（１）および（２）の混合物から選択される。本発明の好ましい実施形態では、「活性保護剤」は、酵素安定化剤であり、より具体的には、好適な濃度のホウ素陰イオンである。本出願では、他の可逆的な酵素阻害剤、例えば、フェニルボロン酸、および欧州特許第０７０７６４２号（Ａ１）に記載されている類似化合物が好適であり得る。望ましくは、これらは、ポリオールに溶媒和されており、酵素安定化相乗剤または助剤と組み合わされて、酵素安定化系を形成していてもよい。好ましい「ミセル阻害剤」としては、ミセル形成を修飾ならびに阻害することが知られている種が挙げられ、Ｃ１  Ｃ６アルカノール、Ｃ１  Ｃ６ジオール、Ｃ２  Ｃ２４アルキレングリコールエーテル、アルキレングリコールアルキルエーテル、およびそれらの混合物等の水混和性溶媒から選択してもよい。非常に好ましいミセル阻害剤は、ジ−（プロピレングリコール）メチルエーテル（「ＤＰＭ」）、およびミセル形成を修飾するその類似体である。本発明者により、クワット殺生物剤に付与されている殺生物活性保護を、酵素を不可逆的に変性させずに相乗的に増強することが見出されたＤＰＭと共にホウ酸イオンを使用することを組み合わせることが、特に好ましい。
【００５９】
クワット
クワット殺生物剤は、アリールクワット化合物、好ましくはハロゲン化ベンズアルコニウムであることが非常に好ましい。他の殺生物性第四級化合物も使用することができる。
【００６０】
酵素
酵素は、保存中、他の酵素の存在下で、ならびに／またはアニオン性界面活性剤、第四級アンモニウム化合物、および洗浄性「ビルダー」等の拮抗性アニオンの存在下で変性する場合があることが周知である。幾つかの酵素安定化系が開発されており、酵素調合物技術分野で周知である。「酵素安定化系」の一例は、過去に単独でまたは選択された他の助剤または相乗剤（例えば、多官能性アミノ化合物、酸化防止剤等）と共に、保存中のおよび種々の製品中のタンパク質分解性等の酵素を保護するために使用されているホウ素化合物（例えば、ホウ酸）である。ホウ素およびカルシウム等の酵素安定化系は、酵素分子をその活性空間配置に保持するように酵素分子を効果的に架橋または留置する分子内結合を形成する。これまで、酵素安定化剤は、クワット殺生物剤の殺生物活性を保護するためには使用されていない。本発明は、少なくとも一部の酵素安定化系が、タンパク質の存在下でのクワット殺生物剤の殺生物活性の保護に効果的であるという驚くべき発見に基づく。
【００６１】
また、本発明は、本発明者の特許明細書ＰＣＴ／ＡＵ０１／００３８１で考察されている種類の「活性保護剤」、例えば、クワット殺生物剤に対する比が、調合物中に酵素および所与の水準のタンパク質負荷物が存在する状態で、クワット殺生物剤の最小阻害濃度（「ＭＩＣ」）を実質的に最小限に抑えるように選択されているホウ素を含む。ＭＩＣは、指定の期間、例えば２４時間にわたって培養中の細菌増殖を防止することに成功する殺生物剤の最低濃度の尺度である。ＭＩＣ試験の詳細は、ＢａｉｌｅｙおよびＳｃｏｔｔ「Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ」、第８版、１９９０年、１１７頁に示されている。ＴＧＡ試験は、ＴＧＯ５４付属書で指定されている。本明細書で引用されているＭＩＣ試験は、２４時間にわたって実施される。
【００６２】
クワット殺生物剤に加えて酵素が存在し、酵素の酵素活性ならびにクワット殺生物剤の殺生物活性を保持することが望まれている本件では、「活性保護剤」の量は、単に酵素の保護に必要とされる量よりも多量である必要があり、酵素を安定させると共にクワット殺生物剤の殺生物活性を保護するのに十分な量である必要があると予想される。さらに、組成物は、外部のタンパク質性負荷物（手術器具浴中の汚染物質に由来する）と接触することが予想されるため、「活性保護剤」濃度は、さらにより多量である必要があると予想される。
【００６３】
本発明者は、驚くべきことに、ホウ素が、タンパク質の存在下で殺生物剤のＭＩＣが増加しないようにおよび増加しない程度にまで、タンパク質による不性化から第四級殺生物剤を保護することを発見した。本発明の好ましい実施形態では、ＭＩＣは、溶液の重量に基づいて最大２重量％のタンパク質が存在するにも関わらず、劇的に、例えば半分未満に低減される。これは、従来技術であれば著しく有効性を欠くかまたは全く有効性がない状況であっても消毒剤または抗菌剤としての有効性を保持する、広範な新しい有用な組成物の調合を可能にする。
【００６４】
また、本発明によると、より低い濃度のクワット殺生物剤を用いて、非常に低コストで、保存安定性で液体の殺生物に有効な組成物を調製することが可能になる。「保管安定性」とは、組成物が、１８〜２５℃にて密閉容器中で１２か月間保存した後でも、その殺生物効力の少なくとも５０％を保持することを意味する。本発明の好ましい実施形態では、殺生物効力が、こうした条件下で９８％よりも良好に保持される。
【００６５】
理論により束縛されることは望まないが、本発明者は、ポリマー性ホウ酸イオンが、陽イオン性クワット殺生物剤と結合し、それによりクワット殺生物剤がタンパク質との接触から保護されると推測している。調合物が希釈されると、ポリマー性イオンは不安定になり、消毒用のクワット殺生物剤を放出する。あるいは、クワット殺生物剤の殺生物活性は、細胞膜のタンパク質の変性に深く関連しており、ホウ素が、非活性タンパク質の電荷基と錯体を形成し、非活性タンパク質の変性にクワットを浪費しなくとも済むためであるとも考えられる。しかしながら、酵素はクワット殺生物剤とは構造が全く異なるため、またクワット殺生物剤が細菌を死滅させる機序が完全には分かっていないため、これまでは、任意の酵素安定化剤が、クワット殺生物剤（酵素拮抗剤）の殺生物活性を維持するのに有効であるとは予測できなかった。クワット殺生物剤の活性が維持される機序は、それにより酵素が安定化される機序とは異なる可能性がある。
【実施例】
【００６６】
様々な濃度のヒドロトロープ、種々の群の市販プロテアーゼ、および本発明による第四級アミン（殺生物活性）を有する幾つかの調合物を、本明細書に添付されている表１に示されているように調製した。調合物の一部は、非イオン性界面活性剤を含むかまたは含んでいない。
【００６７】
表１の調製物は、１２６−８〜１２６−２０という名称により識別され、全てが、手動の浴およびＡＥＲ医療機器再処理器で使用するための本発明による複数の酵素での洗浄および消毒のための製品の例である。好ましい使用濃度は、２５℃から６０℃までの温度（可撓性内視鏡を接触させることができる最高温度）で、５ｍＬ／Ｌ〜２０ｍＬ／Ｌである。
【００６８】
その後、組成物の洗浄効力および発泡特性を試験し、８４−０、８４−２、８４−４、および８４−１０と識別されている、ＰＣＴ／ＡＵ０１／００３８１に従って製作した調合物と比較し、本明細書に添付されている表２に示した。
【００６９】
本明細書に添付されている表３、４、および５は、表１の調合物の洗浄効力を示している。ＰＦ−１２６調合物を、ガラスビーカー中で、２５℃（表３）の蒸留水、５０℃（表４）または４０℃（表５）の温水で希釈した（２ｍＬ／Ｌ、５ｍＬ／Ｌ、および２０ｍＬ／Ｌの濃度に）。試験中の溶液温度は、水浴で維持した。試験汚れを、Ｂｒｏｗｎｅ  ｌｏａｄ  ｃｈｅｃｋストリップの形態で導入し、同時にストップウォッチを始動させた。試験ストリップを経時的にモニターして、試験汚れが、Ｂｒｏｗｎｅ  ｌｏａｄ  ｃｈｅｃｋストリップから完全に除去されるまでの時間を特定した。
【００７０】
表２の試料（ＰＣＴ／ＡＵ／００３８１による）は全て、５０℃および２０ｍＬ／Ｌの濃度であっても、６０分以内に試験汚れを除去することができなかった。
【００７１】
その一方で、表４および５に示されるように、本発明による調合物は、静止状態でさえ商業的に許容される時間内に試験汚れを除去した。
【００７２】
上記実験で使用した静的洗浄は最悪の場合のシナリオである。ＡＥＲＳおよびウォッシャー消毒器で遭遇する撹拌を模擬するように溶液を撹拌／混合すると、洗浄効力は著しく迅速化される。例えば、調合物１２６−８は、［２５℃、５ｍｌ／ｌ］の場合、静止状態では３１分で、ＡＥＲでは７分で、ウォッシャー消毒器の撹拌を模擬するオービタルシェーカーでは４分未満で、Ｂｒｏｗｎｅ  Ｌｏａｄ  Ｃｈｅｃｋを清浄化する。調合物８４−０は、従来技術の調合物の中では最良の性能を示したが、２０ｍｌ／ｌ、５０℃では、オービタルシェーカーであっても６０分間でＢｒｏｗｎｅストリップを清浄化することができなかった。
【００７３】
表７には、好ましい調合物のタンパク質分解活性が、第四級殺生物剤を含まない調合物と比較して示されている。非常に驚くべきことであり、予期しないことであるが、第四級殺生物剤を含む調合物のタンパク質分解活性が実質的により高いことを理解することができる。
【００７４】
表８には、Ｓ．ａｕｒｅｕｓ  ＡＴＣＣ６５３８およびＰ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ  ＡＴＣＣ１５４４２に対する、好ましい調合物の殺生物活性が示されている。殺生物活性は、１：１０００という高い希釈倍率でさえ保持されることを理解することができる。
【００７５】
表９には、一部の好ましい調合物の安定性データが示されている。各調合物のタンパク質分解活性は、まず製作時に、その後２５℃および４５℃での保存時に試験した。保存２２０日後に、調合物のタンパク質分解活性を再試験した。４５℃で２２０日間の保存は、２５℃で７００日間（約２年間）保存と等しい。保存時のタンパク質分解活性喪失は最大５０％が許容され得ることが、当技術分野で一般的に認識されている。
【００７６】
プロテアーゼおよびクワット、プロテアーゼおよびヒドロトロープ、ならびにクワットおよびヒドロトロープを組み合わせた一部の調合物の例が、表１０に示されている。調合物１２６−８は本発明によるものである。他の調合物は、安定性でないか（白濁）、または殺菌効力が許容しがたいほど不良であるか（表中の試験プロトコールでは時間が４０分間を超える）、または洗浄が許容しがたいほど不良であるか（表の試験プロトコールでは時間が３０分を超える）のいずれかである。
【００７７】
殺生物効力
組成物１２６−８，１２６−９，１２６−１３，１２６−１４の殺生物効力を、ＥＮ１２７６（殺生物性）およびＥＮ１４３４８（結核菌殺菌性（ｔｕｒｂｅｃｕｌｏｃｉｄａｌ））に従って評価した。添付の表６には、これら調合物がＨＬＤを達成するために必要とした処理エンベロープ（濃度、温度、時間）が要約されている。予想通り、ミコバクテリア（ＴＢ）は、最も大きな負荷を示した。クワットの濃度を増加させると、殺菌効力が向上した。同時に、水硬度の影響は、当業者が予想するほどクワット活性に有害ではなく、酵素がクワットと共生して、高水準の死滅を達成することができることを示した。
【００７８】
硬水で希釈した製品の試料を、妨害物質の溶液中のミコバクテリア試験懸濁液に添加する。混合物を、指定されている温度の１つおよび接触時間の１つで維持する。この接触時間の終了時に、少量を採取し、この部分の殺菌性および／または静菌作用を、有効な方法で直ちに中和または抑制する。
【００７９】
試験条件
試験生物  Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｅｒｒａｅ（ＡＴＣＣ１５７５５）
試験温度  ４０℃、４５℃、５０℃
接触時間  ５分〜３０分
製品希釈剤  ０ｐｐｍおよび３００ｐｐｍ硬水
妨害物質洗浄条件＝０．３ｇ／Ｌのウシ血清アルブミン
汚れ条件＝３ｇ／Ｌのウシ血清アルブミン＋３ｍＬ／Ｌの赤血球
【００８０】
対照および検証
対照および検証は全て、基本限度内だった（ＥＮ１４３４８）。
【００８１】
結果
添付の表６を参照されたい。
４０℃で使用した場合、Ｐ１２６−４は３０分以内に殺菌性を示す。
４５℃で使用した場合、Ｐ１２６−４は１５分以内に殺菌性を示す。
５０℃で使用した場合、Ｐ１２６−４は５分以内に殺菌性を示す。
【００８２】
希釈には、軟水（好ましくはＲＯ水または蒸留水）の使用が推奨される。なお、ほとんどの飲用水供給は、５０ｐｐｍ未満の水硬度を有する。
【００８３】
ミコバクテリアは、病原体の分類体系で最も負荷が高いものの１つであるとみなされているため（それに優るものはエンドバクテリア胞子のみである）、上記の結果は、調合物が、ＴＧＯ５４のような高水準消毒に準じて機器を消毒することが可能であることを示している。配合物ＰＦ−１２６−５、−６、−７、−８、−９および−１３、−１４で同様の結果が得られた。
【００８４】
当業者であれば、本発明による組成物は、使用目的および該当規格が許容する場合、「中水準消毒」、「病院グレード消毒」、「取扱安全」、「消毒」、または清浄剤等のより低水準の消毒を提供するように改変することができることは明白であろう。また、本発明による組成物は、病院、医院および歯科医院、または老人ホーム等の、例えば、室内用便器、トレー、機器移動用ワゴン、および他の大型装置の他の表面の洗浄および／または消毒に、ならびに調理区域、調理器具、分配装置、および冷蔵室等、または病院洗濯室で処理されるもの等の布地等の洗浄および／または消毒にも好適である。
【００８５】
【表１】
2019504077.tif 000004
【００８６】
【表２】
2019504077.tif 000005
【００８７】
【表３】
2019504077.tif 000006
【００８８】
【表４】
2019504077.tif 000007
【００８９】
【表５】
2019504077.tif 000008
【００９０】
【表６】
2019504077.tif 000009
【００９１】
【表７】
2019504077.tif 000010
【００９２】
【表８】
2019504077.tif 000011
【００９３】
【表９】
2019504077.tif 000012
【００９４】
【表１０】
2019504077.tif 000013
【手続補正書】
【提出日】平成29年11月21日(2017.11.21)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
適用される表面の高水準消毒を達成するための液体組成物であって、酵素、殺生物性第四級アンモニウム殺生物剤、および陰イオン性ヒドロトロープを含む、液体組成物。
【請求項２】
前記表面に付着しているタンパク質を含む有機負荷物による汚染が存在する場合、それを除去するのに有効である、請求項１に記載の液体組成物。
【請求項３】
タンパク質を含む有機負荷物で汚染された医療機器の表面に付着している種菌を低減すると同時に、前記機器の表面の高水準消毒を達成するために浴中で使用するための液体組成物であって、酵素、殺生物性第四級アンモニウム殺生物剤、およびアニオン性ヒドロトロープを含む、液体組成物。
【請求項４】
タンパク質を含む有機負荷物で汚染された医療機器に付着している種菌を減少させると同時に、前記機器の高水準消毒を達成するために浴中で使用するための、１０：１から２００：１まで希釈されることが意図されている保管安定性液体濃縮物である、請求項３に記載の液体組成物。
【請求項５】
前記第四級アンモニウム殺生物剤が、使用のために希釈された際に、ＴＧ０５４で指定されている任意の負荷微生物に対する前記第四級アンモニウム殺生物剤の最小阻止濃度（「ＭＩＣ」）未満の濃度で存在する、請求項１〜４のいずれか一項に記載の液体組成物。
【請求項６】
前記陰イオン性ヒドロトロープが、アルカリ金属キシレンスルホン酸塩、アルカリ金属クメンスルホン酸塩、他のアルカリ金属アルキルアリールスルホン酸塩、およびそれらの組合せからなる群から選択される、請求項１〜５のいずれか一項に記載の液体組成物。
【請求項７】
前記第四級アンモニウム殺生物剤が、陽イオン性界面活性剤としても作用する、請求項１〜６のいずれか一項に記載の液体組成物。
【請求項８】
酵素活性保護剤をさらに含む、請求項１〜７のいずれか一項に記載の液体組成物。
【請求項９】
前記活性保護剤が、ホウ素化合物である、請求項８に記載の液体組成物。
【請求項１０】
２個から６個までのヒドロキシル基を有するポリオールをさらに含み、前記組成物が、２０ｍＬ／Ｌの濃度で４０℃にて９．５分以内に、種菌の少なくとも８対数の減少をもたらす、請求項１〜９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１１】
タンパク質を含む有機負荷物で汚染された表面を洗浄すると同時に、前記表面の高水準消毒を達成するための方法であって、前記表面を、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の組成物で処理するステップを含む方法。
【請求項１２】
前記表面が、医療機器の表面である、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
４０℃で１０分未満にＢＲＯＷＮＥ試験ストリップから汚れを除去することができる、請求項１１または１２に記載の方法。
【国際調査報告】
2019504077.tif 000014
2019504077.tif 000015
2019504077.tif 000016
2019504077.tif 000017