(57)【要約】  新規の修飾又は遺伝子操作を受けたｅｓＲＡＧＥ遺伝子を含む腫瘍溶解性ウイルス及び癌の治療のために当該腫瘍溶解性ウイルスを使用する方法が開示される。
2019518735.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
修飾された腫瘍溶解性ウイルスであって、前記腫瘍溶解性ウイルスが、内因性分泌型終末糖化産物受容体（ｅｓＲＡＧＥ）、又は配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、若しくは配列番号６に対して少なくとも９０％の配列同一性を含むそれらの機能性フラグメント若しくは機能性変異体をコードし、発現するよう修飾されている、修飾された腫瘍溶解性ウイルス。
【請求項２】
前記ウイルスのバックボーンが、修飾又は遺伝子操作を受けた、アデノウイルス、アデノ随伴ウイルス、単純ヘルペスウイルス１型、単純ヘルペスウイルス２型、水痘−帯状疱疹ウイルス、エプスタイン・バーウイルス、サイトメガロウイルス、ヒトヘルペスウイルス６型、痘瘡ウイルス、ワクシニアウイルス、伝染性軟属腫ウイルス、オルフウイルス、レオウイルス、ロタウイルス、エンテロウイルス、セネカウイルス、ポリオウイルス、コクサッキーウイルス、ライノウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、口蹄疫ウイルス、トガウイルス、アルファウイルス、セムリキ森林ウイルス、東部ウマ脳炎ウイルス、シンドビスウイルス、風疹ウイルス、コロナウイルス、フラビウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、日本脳炎ウイルス、セントルイス脳炎ウイルス、マレー渓谷熱ウイルス、黄熱病ウイルス、西ナイルウイルス、ジカウイルス、デング熱ウイルス、エボラウイルス、マールブルグウイルス、アレナウイルス、ラッサ熱ウイルス、リンパ球性脈絡髄膜炎ウイルス、ピチンデウイルス、フニンウイルス、マチュポウイルス、ハンターンウイルス、リフトバレー熱ウイルス、パラミクソウイルス、ヒトパラインフルエンザウイルス、ムンプスウイルス、シミアンウイルス５型、麻疹ウイルス、水疱性口炎ウイルス、狂犬病ウイルス、ＲＳウイルス、オルトミクソウイルス、Ａ型インフルエンザウイルス、Ｂ型インフルエンザウイルス、Ｃ型インフルエンザウイルス、Ｄ型肝炎ウイルス、サル免疫不全ウイルス、ヒト免疫不全ウイルス１型及びヒト免疫不全ウイルス２型、ラウス肉腫ウイルス、ヒトＴ細胞白血病ウイルス１型、サル泡沫状ウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｅ型肝炎ウイルス、ヒトパピローマウイルス、又はポリオーマウイルスに由来する、請求項１に記載の修飾された腫瘍溶解性ウイルス。
【請求項３】
前記腫瘍溶解性ウイルスが、単純ヘルペスウイルス１型であり、前記ウイルスが、ウイルスのＩＣＰ３４．５がネスチンプロモータによって発現され、Ｖｓｔａｔ１２０を発現するＨＳＶ−１腫瘍溶解性ウイルスＨＳＶ１７１６である、請求項２に記載の修飾された腫瘍溶解性ウイルス。
【請求項４】
前記腫瘍溶解性ウイルスが、修飾されたアデノウイルス腫瘍溶解性ウイルスであり、前記アデノウイルスがＨ１０１である、請求項２に記載の修飾された腫瘍溶解性ウイルス。
【請求項５】
前記腫瘍溶解性ウイルスが、修飾されたワクシニアウイルスであり、前記修飾されたワクシニアウイルスがＧＬ−ＯＮＣ１又はＪＸ−５９４である、請求項２に記載の修飾された腫瘍溶解性ウイルス。
【請求項６】
前記腫瘍溶解性ウイルスが、修飾されたレオウイルスであり、前記修飾されたレオウイルスがレオライシンである、請求項２に記載の修飾された腫瘍溶解性ウイルス。
【請求項７】
前記腫瘍溶解性ウイルスが、修飾されたエンテロウイルスであり、前記修飾されたエンテロウイルスがＲｉｇａウイルスである、請求項２に記載の修飾された腫瘍溶解性ウイルス。
【請求項８】
前記腫瘍溶解性ウイルスが、修飾されたセネカウイルスであり、前記修飾されたセネカウイルスがＳＶＶ−００１ウイルスである、請求項２に記載の修飾された腫瘍溶解性ウイルス。
【請求項９】
前記腫瘍溶解性ウイルスが、修飾されたポリオウイルスであり、前記修飾されたポリオウイルスがＰＶＳＲＩＰＯウイルスである、請求項２に記載の修飾された腫瘍溶解性ウイルス。
【請求項１０】
前記腫瘍溶解性ウイルスが、修飾されたコクサッキーウイルスであり、前記修飾されたコクサッキーウイルスがＡ２１ウイルスである、請求項２に記載の修飾された腫瘍溶解性ウイルス。
【請求項１１】
請求項１に記載の腫瘍溶解性ウイルスと医薬担体とを含む医薬組成物。
【請求項１２】
請求項１に記載の腫瘍溶解性ウイルスを投与することを含む癌を有する対象を治療する方法。
【請求項１３】
対象に修飾された腫瘍溶解性ウイルスを投与することを含む、癌を有する対象を治療する方法であって、前記腫瘍溶解性ウイルスが、内因性分泌型終末糖化産物受容体（ｅｓＲＡＧＥ）、又は配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、若しくは配列番号６に対して少なくとも９０％の配列同一性を含むそれらの機能性フラグメント若しくは機能性変異体をコードし、発現するよう修飾されている、方法。
【請求項１４】
前記癌が、Ｂ細胞リンパ腫、Ｔ細胞リンパ腫、菌状息肉腫、ホジキン病、骨髄性白血病、扁平上皮癌、腺癌、肉腫、神経膠腫、高悪性度神経膠腫、芽細胞腫、神経芽細胞腫、骨肉腫、形質細胞腫、組織球腫、黒色腫、腺腫、酸素欠乏腫瘍、骨髄腫、エイズ関連リンパ腫又はエイズ関連肉腫、膀胱癌、脳癌、中枢神経系の癌、頭頸部癌、頭頸部の扁平上皮癌、小細胞肺癌及び非小細胞肺癌のような肺癌、神経芽細胞腫／膠芽細胞腫、卵巣癌、膵癌、前立腺癌、皮膚癌、肝癌、黒色腫、口腔扁平上皮癌、咽頭、喉頭、及び肺、結腸癌、子宮頚癌、子宮頸癌、乳癌、及び上皮癌、腎癌、尿生殖器癌、肺癌、食道癌、大腸癌、造血器癌；精巣癌；大腸癌、並びに直腸癌からなる群から選択される、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
癌細胞を消去する腫瘍溶解性ウイルスの有効性と干渉する、終末糖化産物受容体（ＲＡＧＥ）を阻害するよう腫瘍溶解性ウイルスを修飾する方法であって、内因性分泌型ＲＡＧＥ（ｅｓＲＡＧＥ）遺伝子を発現するよう腫瘍溶解性ウイルスを遺伝子操作することを含む、方法。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
[背景技術]
細胞のウイルス溶解又は宿主の免疫応答の動員のいずれかを通じて癌細胞を特異的に標的化する腫瘍溶解性ウイルスの能力は、細胞溶解性ウイルスの投与による癌の治療を、最先端の癌治療の最前線にまで移動させた。しかしながら、腫瘍溶解性ウイルス療法の有効性は、ウイルス感染に対する初期自然免疫応答によって阻害され、ｏＨＳＶ複製、腫瘍破壊、及び有効性を低減する場合がある。更に、炎症性シグナルは、内皮細胞上の終末糖化産物受容体（receptor for advanced glycation endproducts、ＲＡＧＥ）の発現を上方制御することができる。ＲＡＧＥに対するいずれかのＲＡＧＥリガンドの結合は、内皮細胞の増殖、遊走、浸潤、血管形成を引き起こす。したがって、必要とされているものは、腫瘍溶解性ウイルス療法を受ける対象において、ＲＡＧＥシグナル伝達及び癌細胞の逃避及び増殖をもたらすＲＡＧＥを低減、阻害又は阻止する新しい療法及び治療方法である。
【発明の概要】
【０００２】
内因性分泌型終末糖化産物受容体（endogenous secretory receptor for advanced glycation endproducts、ｅｓＲＡＧＥ）を発現する腫瘍溶解性ウイルスに関連する方法及び組成物が開示される。
【０００３】
一態様において、修飾された腫瘍溶解性ウイルスが本明細書において開示され、ここで腫瘍溶解性ウイルスは、内因性分泌型終末糖化産物受容体（ｅｓＲＡＧＥ）、又は配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、及び／若しくは配列番号６に対して少なくとも９０％の配列同一性を含むそれらの機能性フラグメント若しくは機能性バリアントをコードし、発現するよう修飾されている。
【０００４】
一態様において、任意の先行する態様の修飾された腫瘍溶解性ウイルスは、修飾又は遺伝子操作を受けた、アデノウイルス、アデノ随伴ウイルス、単純ヘルペスウイルス１型、単純ヘルペスウイルス２型、水痘−帯状疱疹ウイルス、エプスタイン・バーウイルス、サイトメガロウイルス、ヒトヘルペスウイルス６型、痘瘡ウイルス、ワクシニアウイルス、伝染性軟属腫ウイルス、オルフウイルス、レオウイルス、ロタウイルス、エンテロウイルス、セネカウイルス、ポリオウイルス、コクサッキーウイルス、ライノウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、口蹄疫ウイルス、トガウイルス、アルファウイルス、セムリキ森林ウイルス、東部ウマ脳炎ウイルス、シンドビスウイルス、風疹ウイルス、コロナウイルス、フラビウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、日本脳炎ウイルス、セントルイス脳炎ウイルス、マレー渓谷熱ウイルス、黄熱病ウイルス、西ナイルウイルス、ジカウイルス、デング熱ウイルス、エボラウイルス、マールブルグウイルス、アレナウイルス、ラッサ熱ウイルス、リンパ球性脈絡髄膜炎ウイルス、ピチンデウイルス、フニンウイルス、マチュポウイルス、ハンターンウイルス、リフトバレー熱ウイルス、パラミクソウイルス、ヒトパラインフルエンザウイルス、ムンプスウイルス、シミアンウイルス５型、麻疹ウイルス、水疱性口炎ウイルス、狂犬病ウイルス、ＲＳウイルス、オルトミクソウイルス、Ａ型インフルエンザウイルス、Ｂ型インフルエンザウイルス、Ｃ型インフルエンザウイルス、Ｄ型肝炎ウイルス、サル免疫不全ウイルス、ヒト免疫不全ウイルス１型及びヒト免疫不全ウイルス２型、ラウス肉腫ウイルス、ヒトＴ細胞白血病ウイルス１型、サル泡沫状ウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｅ型肝炎ウイルス、ヒトパピローマウイルス、又はポリオーマウイルスに由来するウイルスのバックボーンを含み得る。
【０００５】
任意の先行する態様の腫瘍溶解性ウイルスと医薬担体とを含む医薬組成物もまた開示される。
対象に任意の先行する態様の腫瘍溶解性ウイルスを投与することを含む癌を有する対象を治療する方法もまた開示される。
【０００６】
一態様において、対象に修飾された腫瘍溶解性ウイルスを投与することを含む、癌を有する対象を治療する方法が本明細書に開示され、ここで腫瘍溶解性ウイルスは、内因性分泌型終末糖化産物受容体（ｅｓＲＡＧＥ）、又は配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、及び／若しくは配列番号６に対して少なくとも９０％の配列同一性を含むそれらの機能性フラグメントをコードし、発現するよう修飾されている。
【０００７】
任意の先行する態様の方法もまた、開示され、ここで癌は、Ｂ細胞リンパ腫、Ｔ細胞リンパ腫、菌状息肉腫、ホジキン病、骨髄性白血病、扁平上皮癌、腺癌、肉腫、神経膠腫、高悪性度神経膠腫、芽細胞腫、神経芽細胞腫、骨肉腫、形質細胞腫、組織球腫、黒色腫、腺腫、酸素欠乏腫瘍、骨髄腫、エイズ関連リンパ腫又はエイズ関連肉腫、膀胱癌、脳癌、中枢神経系の癌、頭頸部癌、頭頸部の扁平上皮癌、小細胞肺癌及び非小細胞肺癌のような肺癌、神経芽細胞腫／膠芽細胞腫、卵巣癌、膵癌、前立腺癌、皮膚癌、肝癌、黒色腫、口腔扁平上皮癌、咽頭、喉頭、及び肺、結腸癌、子宮頚癌、子宮頸癌、乳癌、及び上皮癌、腎癌、尿生殖器癌、肺癌、食道癌、大腸癌、造血器癌；精巣癌；結腸癌、並びに直腸癌からなる群から選択される。
【０００８】
一態様において、癌細胞を消去する腫瘍溶解性ウイルスの有効性と干渉する、終末糖化産物受容体（ＲＡＧＥ）を阻害するよう腫瘍溶解性ウイルスを修飾する方法が本明細書において開示され、内因性分泌型ＲＡＧＥ（ｅｓＲＡＧＥ）遺伝子を発現するよう腫瘍溶解性ウイルスを遺伝子操作することを含む。
【０００９】
本明細書に組み込まれ、また本明細書の一部を構成する添付の図面は、いくつかの実施形態を例証し、以下の説明と共に、開示された組成物及び方法を例証する。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】癌細胞の遊走／増殖、及び血管形成をもたらす、膜結合ＲＡＧＥ経路のＨＭＧＢ１活性化経路と、ＨＭＧＢ１のｅｓＲＡＧＥとの結合が、更なるシグナル伝達をもたらさず、継続的な腫瘍溶解性ウイルスの複製をもたらすことを示す。
【図２Ａ】ｅｓＲＡＧＥ／抗ＲＡＧＥ処理が、ｏＨＳＶ媒介性のＥＣの遊走及び漏出を低減することを示す。図２Ａは、内皮細胞の漏出が、コンフルエントな内皮細胞（ＥＣ）の単層を透過するＥＢＡの能力を測定することによって評価されたことを示す。示されるデータは平均ＥＢＡ±標準偏差である。
【図２Ｂ】ｅｓＲＡＧＥ／抗ＲＡＧＥ処理が、ｏＨＳＶ媒介性のＥＣの遊走及び漏出を低減することを示す。図２Ａは、内皮細胞の漏出が、コンフルエントな内皮細胞（ＥＣ）の単層を透過するＥＢＡの能力を測定することによって評価されたことを示す。示されるデータは平均ＥＢＡ±標準偏差である。
【図２Ｃ】ＥＣがＣＭ±ｏＨＳＶ±ｅｓＲＡＧＥ  ２００ｎｇ／ｍｌ又は抗ＲＡＧＥ  ２ｕｇ／ｍｌによって刺激された後のＥＣの遊走を示す。示されるデータは、トランスウェル膜を通って遊走したＥＣの平均数±標準偏差である。
【図３】ＯＶｅｓＲＡＧＥが、ｅｓＲＡＧＥを効率的に発現及び分泌することを示す。
【図４】ＯＶｅｓＲＡＧＥが、ｏＨＳＶ誘発性ＥＣ活性化を大幅に阻害し、ｏＨＳＶの複製を増加させることを示す。
【図５】ＯＶｅｓＲＡＧＥが、ＨＵＶＥＣとの共培養において、神経膠腫細胞殺傷を増加させることを示す。
【図６】ＯＶｅｓＲＡＧＥが、マクロファージ細胞内でＮＦｋＢシグナル伝達を活性化することを示す。
【図７】ＯＶｅｓＲＡＧＥが、マクロファージ／小膠細胞の遊走を大幅に増加させることを示す。
【図８】腫瘍溶解性ウイルス又はｅｓＲＡＧＥを発現する修飾された腫瘍溶解性ウイルスの曝露に続く、Ｕ２５１Ｔ３及びＢＶ２の細胞における、サイトカイン発現の誘導及び低減を示す。
【図９】ＯＶｅｓＲＡＧＥが、小膠細胞／マクロファージ−媒介性神経膠腫細胞殺傷を大幅に増加させることを示す。
【図１０】可溶性ＲＡＧＥ（ｅｓＲＡＧＥ）の発現が、感染された対象において上昇した生存をもたらすことを示す。ＦｖｂｎマウスにおけるＤＢ７頭蓋内手術：２×１０＾５ｐｆｕ。ＶｅｓＲＡＧＥウイルスのＩＵ単位は、コントロールのｒＨＳＶＱウイルスよりも２０倍高く、我々はｐｆｕを有するウイルスを注射することを決めた
【発明を実施するための形態】
【００１１】
本発明の化合物、組成物、物品、デバイス及び／又は方法を開示及び説明する前に、特に指定されない限り、これらが特定の合成法又は特定の組換えバイオテクノロジー方法に限定されないこと、又は、特に指定されない限り、特定の試薬に限定されず、当然ながらそれ自体が変化してもよいことを理解されたい。本明細書で使用される専門用語は、特定の実施形態を説明するための目的のものにすぎず、限定することを意図しないことも理解するべきである。
【００１２】
Ａ．定義
本明細書及び添付の特許請求の範囲において使用されるとき、単数形「ａ」、「ａｎ」、及び「ｔｈｅ」は、その内容について別段の明確な指示がない限り、複数の指示対象を包含する。したがって、例えば、「医薬担体」への言及は、２つ以上のこのような担体の混合物などを含む。
【００１３】
範囲は、「約」１つの特定の値から、かつ／又は「約」別の特定の値までとして表され得る。このような範囲が表されるとき、別の実施形態は、１つの特定の値から、かつ／又は他の特定の値までを含む。同様に、値が、先行詞「約」の使用によって近似として表されるとき、特定の値は別の実施形態を形成することが理解されるであろう。範囲の各々の端点は、他の端点に関しても、他の端点とは独立しても、この両方において、有意であると更に理解されるであろう。本明細書でいくつかの値数が開示され、各値がその値自体に加えて「約」その特定の値として本明細書でもまた開示されることもまた理解されたい。例えば、値「１０」が開示されている場合、「約１０」もまた開示されている。当業者によって適切に理解されるように、ある値が開示される場合、その値「以下」、「その値以上」及び値間の可能な範囲もまた開示されていることもまた理解されたい。例えば、値「１０」が開示されている場合、「１０以下」と同様に「１０以上」もまた開示されている。本願全体にわたってデータが多数の異なるフォーマットで提供され、このデータが、端点及び開始点並びにデータ点の任意の組み合わせに対する範囲を表すこともまた理解されたい。例えば、特定のデータポイント「１０」及び特定のデータポイント１５が開示されている場合、１０と１５との間と同様に、１０及び１５よりも大きい、１０及び１５以上、１０及び１５未満、１０及び１５以下、並びに１０及び１５に等しいデータポイントが開示されていると見なされることを理解されたい。特定の２つの単位間のそれぞれの単位もまた開示されていることもまた理解されたい。例えば、１０及び１５が開示されている場合、１１、１２、１３及び１４もまた開示されている。
【００１４】
本明細書及び以下の「特許請求の範囲」において、多数の用語に言及し、それらは以下の意味を有すると定義されるものとする。
「任意選択的な」又は「任意選択的に」は、引き続いて記載された事象又は状況が起こってもよくあるいは起こらなくてもよいこと、及び説明が、当該事象又は状況が起こる場合の例及びそれが起こらない場合の例を含むことを意味する。
【００１５】
本明細書全体において、様々な出版物が参照される。これらの出版物の開示全体が、開示内容が関連する技術分野の状態をより十分に説明するためにここに参照により本出願に組み込まれる。開示される参照文献も、その参照文献が依拠される文において考察されるそれらに含まれる資料について、参照により本明細書に個々に、かつ具体的に組み込まれる。
【００１６】
Ｂ．組成物
開示された組成物を調製するために使用される組成物と同様に、本明細書で開示される方法の範囲内で使用される組成物それ自体が開示される。これら及び他の物質が本明細書で開示されており、これらの物質の組み合わせ、サブセット、相互作用、群などが開示されている場合、これらの化合物のそれぞれの様々な個々及び集合的な組み合わせ及び順列の具体的な言及は、明示的に開示されていない場合があるが、それぞれが具体的に企図され、本明細書に記載されることを理解されたい。例えば、特定の内因性分泌型終末糖化産物受容体（ｅｓＲＡＧＥ）が開示かつ論じられ、また終末糖化産物受容体（ｅｓＲＡＧＥ）を含む多数の分子に対して行うことができる多数の修飾が論じられている場合、それとは反対の具体的な指示がない限り、終末糖化産物受容体体（ｅｓＲＡＧＥ）と考えられ得る修飾とのあらゆる組み合わせ及び順列が具体的に企図される。したがって、分子Ａ、Ｂ及びＣの種類が開示されており、同様に分子Ｄ、Ｅ及びＦの種類及び分子Ａ〜Ｄの組み合わせの例が開示されている場合、それぞれが個々に列挙されていない場合であっても、それぞれが個々にかつ集合的に企図され、組み合わせＡ−Ｅ、Ａ−Ｆ、Ｂ−Ｄ、Ｂ−Ｅ、Ｂ−Ｆ、Ｃ−Ｄ、Ｃ−Ｅ及びＣ−Ｆが開示されると見なされる。同様に、これらの任意のサブセット又は組み合わせもまた開示される。したがって、例えば、Ａ−Ｅ、Ｂ−Ｆ及びＣ−Ｅのサブグループが開示されていると見なされるであろう。この概念は、本出願のすべての態様に適用され、開示された組成物の作製及び使用方法における工程を含むが、これに限定されない。このように、実施することができる多様な更なる工程が存在する場合、これらの更なる工程のそれぞれは、任意の特定の実施形態又は開示された方法の実施形態の組み合わせにより実施することができることを理解されたい。
【００１７】
最先端の癌療法の最前線へと向かう腫瘍溶解性ウイルスの投与。しかしながら、腫瘍溶解性ウイルス療法の有効性は、ウイルス感染に対する初期自然免疫応答によって阻害され、ｏＨＳＶ複製、腫瘍破壊、及び有効性を低減する場合がある。更に、炎症性シグナルは、内皮細胞上の終末糖化産物受容体（ＲＡＧＥ）の発現を上方制御することができる。ＲＡＧＥはＩｇＧ分子の一員である。ＲＡＧＥに対するリガンドとしては、ＡＧＥ、ＨＭＧＢ１、Ｓ１００ファミリー、アミロイドβが挙げられる。ＲＡＧＥとそのリガンドとの間の相互作用は、炎症誘発性遺伝子の活性化をもたらすと考えられている。ＲＡＧＥに対するいずれかのＲＡＧＥリガンドの結合は、内皮細胞の増殖、遊走、浸潤、血管形成を引き起こす。腫瘍溶解性ウイルス感染に続いて、ＲＡＧＥリガンドの発現が増加し、これは、癌細胞に対して逃避に関するメカニズムを提供して腫瘍溶解性ウイルスの有効性に対する重大な問題となる。
【００１８】
興味深いことに、膜貫通及びシグナルドメインを欠くＲＡＧＥタンパク質のいくつかのアイソフォーム（一般的に可溶性ＲＡＧＥ又は内因性可溶型（ｅｓＲＡＧＥ）と呼ばれるが存在する。これらのｅｓＲＡＧＥペプチド、ポリペプチド、及びタンパク質はまた、ＲＡＧＥリガンドに結合することもできる。膜結合ＲＡＧＥの阻害効果と闘うｅｓＲＡＧＥタンパク質によって利点をもたらすことができることが理解され、本明細書において企図される。具体的には、ｅｓＲＡＧＥは、利用可能なリガンドについて膜結合ＲＡＧＥと競合することができ、これはＲＡＧＥを通じてシグナル伝達の可能なリガンドの量を低下させる。更に、ｅｓＲＡＧｅは可溶性であり、したがって、細胞外マトリックス中に分泌されるので、膜結合ＲＡＧＥよりも生物学的に利用可能であり、またいずれの細胞シグナル伝達カスケード（図１）をも開始することができない。この系を試験するために、ＬＮ２２９を細胞溶解性ウイルスで感染させ、単独のままにするか、又はｅｓＲＡＧＥ若しくは抗ＲＡＧＥリガンド（ＨＧＭＢ１）抗体によって処理するかのいずれかにし、内皮細胞（ＥＣ）の遊走及び漏出を測定した。ｅｓＲＡＧＥ又は抗ＨＧＭＢ１抗体のいずれかを受け取った細胞は、低下した漏出及びＥＣの遊走を示した（図２）。
【００１９】
一態様において、修飾された腫瘍溶解性ウイルスが本明細書において開示され、ここで腫瘍溶解性ウイルスは、内因性分泌型終末糖化産物受容体（ｅｓＲＡＧＥ）、又は配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、及び／若しくは配列番号６に対して少なくとも９０％の配列同一性を含むそれらの機能性フラグメント若しくは機能性変異体をコードし、発現するよう修飾されている。
【００２０】
一態様において、任意の先行する態様の修飾された腫瘍溶解性ウイルスは、修飾又は遺伝子操作を受けた、アデノウイルス、アデノ随伴ウイルス、単純ヘルペスウイルス１型、単純ヘルペスウイルス２型、水痘−帯状疱疹ウイルス、エプスタイン・バーウイルス、サイトメガロウイルス、ヒトヘルペスウイルス６型、痘瘡ウイルス、ワクシニアウイルス、伝染性軟属腫ウイルス、オルフウイルス、レオウイルス、ロタウイルス、エンテロウイルス、セネカウイルス、ポリオウイルス、コクサッキーウイルス、ライノウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、口蹄疫ウイルス、トガウイルス、アルファウイルス、セムリキ森林ウイルス、東部ウマ脳炎ウイルス、シンドビスウイルス、風疹ウイルス、コロナウイルス、フラビウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、日本脳炎ウイルス、セントルイス脳炎ウイルス、マレー渓谷熱ウイルス、黄熱病ウイルス、西ナイルウイルス、ジカウイルス、デング熱ウイルス、エボラウイルス、マールブルグウイルス、アレナウイルス、ラッサ熱ウイルス、リンパ球性脈絡髄膜炎ウイルス、ピチンデウイルス、フニンウイルス、マチュポウイルス、ハンターンウイルス、リフトバレー熱ウイルス、パラミクソウイルス、ヒトパラインフルエンザウイルス、ムンプスウイルス、シミアンウイルス５型、麻疹ウイルス、水疱性口炎ウイルス、狂犬病ウイルス、ＲＳウイルス、オルトミクソウイルス、Ａ型インフルエンザウイルス、Ｂ型インフルエンザウイルス、Ｃ型インフルエンザウイルス、Ｄ型肝炎ウイルス、サル免疫不全ウイルス、ヒト免疫不全ウイルス１型及びヒト免疫不全ウイルス２型、ラウス肉腫ウイルス、ヒトＴ細胞白血病ウイルス１型、サル泡沫状ウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｅ型肝炎ウイルス、ヒトパピローマウイルス、又はポリオーマウイルスに由来するウイルスのバックボーンを含み得る。例えば、腫瘍溶解性ウイルスは、単純ヘルペスウイルス１型であり得、ここでウイルスは、ウイルスのＩＣＰ３４．５がネスチンプロモータによって発現され、Ｖｓｔａｔ１２０を発現するＨＳＶ−１腫瘍溶解性ウイルスＨＳＶ１７１６であり；修飾されたアデノウイルス腫瘍溶解性ウイルスであり得、ここでアデノウイルスがＨ１０１であり；修飾されたワクシニアウイルスであり得、ここで修飾されたワクシニアウイルスがＧＬ−ＯＮＣ１又はＪＸ−５９４であり；修飾されたレオウイルスであり得、ここで修飾されたレオウイルスがレオライシン（reolysin）であり；修飾されたエンテロウイルスであり得、ここで修飾されたエンテロウイルスがＲｉｇａウイルスであり；修飾されたセネカウイルスであり得、ここで修飾されたセネカウイルスがＳＶＶ−００１ウイルスであり；修飾されたポリオウイルスであり得、ここで修飾されたポリオウイルスがＰＶＳＲＩＰＯであり；及び／又は修飾されたコクサッキーウイルスであり得、ここで修飾されたコクサッキーウイルスがＡ２１ウイルスである。
【００２１】
ｅｓＲＡＧＥを含む腫瘍溶解性ウイルスは、ｅｓＲＡＧＥについて試験された（図３）。次にｅｓＲＡＧＥを含み、それを発現する腫瘍溶解性ウイルスは、腫瘍溶解性ウイルスに誘発されるＥＣ活性化を阻害する能力、及び、腫瘍溶解性ウイルス複製に対するいずれかの有害反応について試験された。ｅｓＲＡＧｅを発現する腫瘍溶解性ウイルスは、コントロールと比べて、ウイルス複製に対する影響を全く有さなかったが、腫瘍溶解性ウイルスに誘発されるＥＣ活性化を低減した（図４）。次いで、ｅｓＲＡＧＥを含む腫瘍溶解性ウイルスは、神経膠腫細胞殺傷に対する効果について試験された。ＯＶｅｓＲＡＧＥは、ヒト臍帯静脈内皮細胞（Human Umbilical Vein Endothelial Cell、ＨＵＶＥＣ）との共培養において神経膠腫の細胞殺傷を増加した（図５）。ＯＶｅｓＲＡＧＥはまた、マクロファージ細胞におけるＮＦκＢシグナル伝達も活性化し（図６）、マクロファージ／小膠細胞の遊走を有意に増加させた（図７）。次いでウイルスは、それらのサイトカイン発現に対する効果を見るために測定された。図８は、腫瘍溶解性ウイルス又はｅｓＲＡＧＥを発現する修飾された腫瘍溶解性ウイルスの曝露に続く、Ｕ２５１Ｔ３及びＢＶ２の細胞における、サイトカイン発現の誘導及び低減を示す。ＲＡＮＴＥＳ．ＧＭ−ＣＳＦ、ＩＬ−１β、ＩＬ−７、ＩＬ−６、ＩＬ−１２−ｐ４０／ｐ７０、ＴＮＦα、ＴＣＡ−３、ＴＩＭＰ−１がすべて誘導されたが、一方で、ＩＬ−４、ＩＬ−１α、エオタキシン−２の発現は低下した。
【００２２】
開示されたｅｓＲＡＧＥ腫瘍溶解性ウイルスが、ＲＡＧＥ経路のシグナル伝達を成功裏に阻止することができるので、腫瘍溶解性ウイルスの有効性と干渉するＲＡＧＥを低減する方法が有益であることが理解され、本明細書において企図される。一態様において、癌細胞を消去する腫瘍溶解性ウイルスの有効性と干渉する、終末糖化産物受容体（ＲＡＧＥ）を阻害するよう腫瘍溶解性ウイルスを修飾する方法が本明細書において開示され、内因性分泌型ＲＡＧＥ（ｅｓＲＡＧＥ）遺伝子を発現するよう腫瘍溶解性ウイルスを遺伝子操作することを含む。開示されるＲＡＧＥを阻害する方法は、ｅｓＲＡＧＥを発現するようウイルスを修飾することによって、任意の腫瘍溶解性ウイルスにおいて実施することができることが理解され、本明細書において企図される。
【００２３】
１．相同性／同一性
本明細書で開示された遺伝子及びタンパク質のうちの任意の既知の変異体及び誘導体又は起こり得るものを決定するための１つの方法は、特定の既知の配列に対する相同性に関して変異体及び誘導体を定義することによるものであることを理解されたい。例えば、配列番号１、２、３、４、５、及び６は、ｅｓＲＡＧＥの特定の配列を示す。具体的には、記載された配列に対して少なくとも７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９パーセントの相同性を有する、本明細書で開示されるこれら及び他の遺伝子及びタンパク質の変異体が開示される。当業者は、２つのタンパク質又は遺伝子などの２つの核酸の相同性を決定する方法を容易に理解する。例えば、相同性は、相同性が最も高いレベルになるように２つの配列をアライメントした後に算出することができる。
【００２４】
相同性を算出する他の方法は、公開されたアルゴリズムによって行うことができる。比較のための配列の最適なアライメントは、Ｓｍｉｔｈ  ａｎｄ  Ｗａｔｅｒｍａｎ  Ａｄｖ．Ａｐｐｌ．Ｍａｔｈ．２：４８２（１９８１）の局所相同性アルゴリズムによって、Ｎｅｅｄｌｅｍａｎ  ａｎｄ  Ｗｕｎｓｃｈ，Ｊ．ＭｏＬ  Ｂｉｏｌ．４８：４４３（１９７０）の相同性アライメントアルゴリズムによって、Ｐｅａｒｓｏｎ  ａｎｄ  Ｌｉｐｍａｎ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．８５：２４４４（１９８８）の類似性に関する検索法によって、これらのアルゴリズム（Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  Ｐａｃｋａｇｅ，Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  Ｃｏｍｐｕｔｅｒ  Ｇｒｏｕｐ，５７５  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｄｒ．，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩのＧＡＰ、ＢＥＳＴＦＩＴ、ＦＡＳＴＡ及びＴＦＡＳＴＡ）のコンピュータ化された実施によって、又はインスペクションによって行われてもよい。
【００２５】
同じ種類の相同性は、例えば、Ｚｕｋｅｒ，Ｍ．Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４４：４８〜５２，１９８９，Ｊａｅｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８６：７７０６〜７７１０，１９８９，Ｊａｅｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍｏｌ．１８３：２８１〜３０６、１９８９に開示されるアルゴリズムによって核酸について取得することができ、これらは、少なくとも核酸アラインメントに関連する内容に関する参照により本明細書に援用される。
【００２６】
２．核酸
例えば、ｅｓＲＡＧＥをコードする核酸、又はｅｓＲＡＧＥを発現する腫瘍溶解性ウイルスを作製するための本明細書において開示される核酸の任意のもの、若しくはそれらのフラグメント、並びに様々な機能性核酸を含む、核酸に基づく本明細書において開示される様々な分子が存在する。開示される核酸は、例えば、ヌクレオチド、ヌクレオチド類似体、又はヌクレオチド置換体からなる。これら及び他の分子の非限定的な例は、本明細書において議論されている。例えば、細胞内でベクターが発現されるとき、発現されたｍＲＮＡは典型的には、Ａ、Ｃ、Ｇ、及びＵからなることは理解される。同様に、例えば、アンチセンス分子が例えば外因性の送達を通じて細胞又は細胞環境に導入される場合、アンチセンスヌクレオチドが、細胞環境におけるアンチセンス分子の分解を低減する核酸類似体からなることは有益である。
【００２７】
ａ）ヌクレオチド及び関連分子
ヌクレオチドは塩基部分、糖部分、及びリン酸部分を含む分子である。ヌクレオチドは、ヌクレオシド間結合を生成するそれらのリン酸部分及び糖部分を通じて結合され得る。ヌクレオチドの塩基部分はアデニン−９−イル（Ａ）、シトシン−１−イル（Ｃ）、グアニン−９−イル（Ｇ）、ウラシル−１−イル（Ｕ）、及びチミン−１−イル（Ｔ）であり得る。ヌクレオチドの糖部分はリボース又はデオキシリボースである。ヌクレオチドのリン酸部分は、五価のリン酸である。ヌクレオチドの非限定例は、３’−ＡＭＰ（３’−アデノシンモノリン酸）又は５’−ＧＭＰ（５’−グアノシンモノリン酸）である。当該技術分野において利用可能な多数の様々のこれらの種類の分子が存在し、本明細書において利用可能である。
【００２８】
ヌクレオチド類似体は、塩基、糖、又はリン酸部分のいずれかにある種の修飾を含むヌクレオチドである。ヌクレオチドに対する修飾は、従来技術において周知であり、例えば、５−メチルシトシン（５−ｍｅ−Ｃ）、５−ヒドロキシメチルシトシン、キサンチン、ヒポキサンチン、及び２−アミノアデニン、並びに糖又はリン酸部分における修飾が挙げられる。当該技術分野において利用可能な多数の様々のこれらの種類の分子が存在し、本明細書において利用可能である。
【００２９】
ヌクレオチド置換体は、ヌクレオチドに対して同様の機能性を有するが、ペプチド核酸（ＰＮＡ）などのリン酸部分を含まない分子である。ヌクレオチド置換体は、ワトソン−クリック又はフーグスティーンの様式で核酸を認識するが、リン酸部分以外の部分を通じて共に結合する分子である。ヌクレオチド置換体は、適切な標的核酸と相互作用する際に二重らせん型構造に適合することができる。当該技術分野において利用可能な多数の様々のこれらの種類の分子が存在し、本明細書において利用可能である。
【００３０】
他の種類の分子（コンジュゲート）をヌクレオチド又はヌクレオチド類似体に結合させて例えば、細胞取り込みを増強することも可能である。コンジュゲートは、ヌクレオチド又はヌクレオチド類似体に化学結合することができる。このようなコンジュゲートとしては、コレステロール部分のような脂質部分が挙げられるが、これらに限定されない。（Ｌｅｔｓｉｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１９８９，８６，６５５３〜６５５６）。当該技術分野において利用可能な多数の様々のこれらの種類の分子が存在し、本明細書において利用可能である。
【００３１】
ワトソン−クリック相互作用は、ヌクレオチド、ヌクレオチド類似体、又はヌクレオチド置換体のワトソン−クリック面との少なくとも１つの相互作用である。ヌクレオチド、ヌクレオチド類似体、又はヌクレオチド置換体のワトソン−クリック面は、プリン塩基ヌクレオチド、ヌクレオチド類似体、又はヌクレオチド置換体のＣ２、Ｎ１、及びＣ６の位置、及びピリミジン塩基ヌクレオチド、ヌクレオチド類似体、又はヌクレオチド置換体のＣ２、Ｎ３、Ｃ４の位置を含む。
【００３２】
フーグスティーン相互作用は、二本鎖ＤＮＡの主溝において露出したヌクレオチド又はヌクレオチド類似体のフーグスティーン面で起こる相互作用である。フーグスティーン面は、プリンヌクレオチドのＮ７位置及びＣ６位置における反応性基（ＮＨ２又はＯ）を含む。
【００３３】
ｂ）配列
例えばｅｓＲＡＧＥ、又はｅｓＲＡＧＥを作製するために本明細書において開示される核酸の任意のもののような、本明細書において開示されるシグナル伝達経路に関与するタンパク質分子に関連する様々な配列が存在する。これらの遺伝子のヒト類似体及び他の類似体、及びこれらの遺伝子の対立遺伝子、及びスプライス変異体、及び他の種類の変異体についての配列は、Ｇｅｎｂａｎｋを含む、様々なタンパク質及び遺伝子のデータベースにおいて利用可能である。配列の矛盾及び相違をいかに解決するか、特定の配列に関する組成物及び方法を、他の関連する配列のためにいかに適応させるかについて、当業者は理解するであろう。
【００３４】
３．発現系
細胞に送達される核酸は、典型的には、発現制御系を含む。例えば、ウイルス又はレトロウイルスの系に挿入された遺伝子は通常、所望の遺伝子産物の発現の制御を助けるためのプロモーター及び／又はエンハンサーを含む。プロモーターは、一般的に、転写開始部位に関して比較的固定された位置にあるときに機能するＤＮＡの配列又は複数の配列である。プロモーターは、ＲＮＡポリメラーゼ及び転写因子の基本的な相互作用に必要なコアエレメントを含み、上流エレメント及び応答エレメントを含むことができる。
【００３５】
ａ）ウイルスプロモーター及びエンハンサー
哺乳動物宿主細胞におけるベクターからの転写を制御する好ましいプロモーターは、例えば、ポリオーマ、シミアンウイルス４０（ＳＶ４０）、アデノウイルス、レトロウイルス、Ｂ型肝炎ウイルスなど、最も好ましくは、サイトメガロウイルスなどのウイルスのゲノム、又は異種の哺乳動物プロモーター、例えばβアクチンプロモーターなどの様々な源より得ることができる。ＳＶ４０ウイルスの初期及び後期プロモーターは、ＳＶ４０の制限フラグメントとして簡便に得られ、それはまた、ＳＶ４０ウイルスの複製起点をも含む（Ｆｉｅｒｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，２７３：１１３（１９７８））。ヒトサイトメガロウイルス又は単純ヘルペスウイルス−１の最初期プロモーターが簡便に得られる。当然ながら、宿主細胞又は関連する種からのプロモーターもまた、本明細書において有用である。
【００３６】
エンハンサーは、一般的に、転写開始部位から不定の距離で機能し、転写ユニットの５’（Ｌａｉｍｉｎｓ，Ｌ．ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．７８：９９３（１９８１））又は３’（Ｌｕｓｋｙ，Ｍ．Ｌ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏ．３：１１０８（１９８３））のいずれかに存在し得るＤＮＡの配列を指す。更に、エンハンサーは、イントロン内（Ｂａｎｅｒｊｉ，Ｊ．Ｌ．ｅｔ  ａｌ．，Ｃｅｌｌ  ３３：７２９（１９８３））、及びコーディング配列それ自体内（Ｏｓｂｏｒｎｅ，Ｔ．Ｆ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏ．４：１２９３（１９８４））に存在し得る。それらは通常、１０〜３００ｂｐの長さであり、シスで機能する。エンハンサーは、近傍のプロモーターからの転写を増大させるよう機能する。エンハンサーはまた、転写の調節を媒介する応答性のエレメントをしばしば含む。プロモーターもまた、転写の調節を媒介する応答性のエレメントを含み得る。エンハンサーは、遺伝子の発現の調節をしばしば決定する。現在、哺乳動物の遺伝子（グロビン、エラステーゼ、アルブミン、−フェトプロテイン）由来の多くのエンハンサー配列が知られているが、典型的には、真核生物細胞ウイルス由来のエンハンサーが一般的な発現のために使用されるであろう。好ましい例は、複製起点（ｂｐ１００〜２７０）の後位置のＳＶ４０エンハンサー、サイトメガロウイルス初期プロモーターエンハンサー、複製起点の後位置のポリオーマエンハンサー、及びアデノウイルスエンハンサーである。
【００３７】
プロモーター及び／又はエンハンサーは、それらの機能を引き起こす光又は特定の化学事象のいずれかによって特異的に活性化され得る。系は、テトラサイクリン及びデキサメタゾンなどの試薬によって制御できる。ガンマ線照射などの照射又はアルキル化化学療法薬への曝露によってウイルスベクター遺伝子発現を増強する方法もまた存在する。
【００３８】
ある実施形態において、プロモーター及び／又はエンハンサー領域は、転写されるべき転写ユニットの領域の発現を最大化するために、構成的プロモーター及び／又はエンハンサーとして作用することができる。あるコンストラクトにおいて、プロモーター及び／又はエンハンサーは、たとえそれが特定の時期に特定の型の細胞においてのみ発現する場合であっても、真核生物細胞のすべての種類で活性である。このタイプの好ましいプロモーターは、ＣＭＶプロモーター（６５０塩基）である。他の好ましいプロモーターは、ＳＶ４０プロモーター、サイトメガロウイルス（全長プロモーター）、及びレトロウイルスベクターＬＴＲである。
【００３９】
すべての特定の制御エレメントを、コンストラクト発現ベクターにクローニングして、使用することができ、それは、黒色腫などの特定の細胞型において選択的に発現する。グリア線維酢酸性タンパク質（glial fibrillary acetic protein、ＧＦＡＰ）のプロモーターは、膠細胞起源の細胞において選択的に遺伝子を発現するのに使用されている。
【００４０】
真核生物宿主細胞に用いられる発現ベクター（酵母、真菌、昆虫、植物、動物、ヒト又は有核細胞）はまた、転写の終止に必要な配列を含んでいてもよく、これはｍＲＮＡの発現に影響を及ぼす。これらの領域は、組織因子タンパク質をコードするｍＲＮＡの未翻訳部分においてポリアデニル化セグメントとして転写される。３’非翻訳領域はまた、転写終結部位を含む。転写単位がポリアデニル化領域を更に含むことが好ましい。この領域の１つの利点は、それが転写単位をｍＲＮＡのように加工及び輸送する可能性を高めることである。発現コンストラクトにおけるポリアデニル化シグナルの同定及び使用は、よく確立化されている。同種のポリアデニル化シグナルが導入遺伝子コンストラクトにおいて使用されることが好ましい。ある転写単位において、ポリアデニル化領域は、ＳＶ４０初期ポリアデニル化シグナルに由来し、約４００塩基からなる。転写単位が標準的な配列単独で、又は上述の配列と組み合わせて含み、コンストラクトからの発現、又はその安定性を向上させることもまた好ましい。
【００４１】
ｂ）マーカー
ウイルスベクターは、マーカー産物をコードする核酸配列を含み得る。このマーカー産物は、遺伝子が細胞に送達され、送達された後に発現されるかどうかを確認するために使用される。好ましいマーカー遺伝子は、β−ガラクトシダーゼをコードする大腸菌ｌａｃＺ遺伝子、及び緑色蛍光タンパク質である。
【００４２】
いくつかの実施形態において、マーカーは選択可能マーカーであってもよい。哺乳動物細胞に対する好適な選択可能マーカーの例としては、ジヒドロ葉酸レダクターゼ（dihydrofolate reductase、ＤＨＦＲ）、チミジンキナーゼ、ネオマイシン、ネオマイシン類似体、Ｇ４１８、ハイドロマイシン（hydromycin）、及びピューロマイシンが挙げられる。このような選択可能マーカーが哺乳動物宿主細胞に成功裏に導入されると、形質転換された哺乳動物宿主細胞は、選択圧に置かれた場合に生存することができる。広く使用されている２つの異なるカテゴリの選択体制が存在する。第１のカテゴリは、細胞の代謝と、補充された培地と独立して増殖する能力を欠落する変異細胞株の使用とに基づく。２つの例は：ＣＨＯ  ＤＨＦＲ−細胞、及びマウスＬＴＫ−細胞である。これらの細胞は、チミジン又はヒポキサンチンのような栄養素の添加なしで増殖する能力を欠落する。これらの細胞は、完全なヌクレオチド合成経路に必要な特定の遺伝子を欠損しているので、失われたヌクレオチドが補充された培地中に供給されなければ生存できない。培地を補充することの代替としては、無傷のＤＨＦＲ又はＴＫ遺伝子を、対応する遺伝子を欠損している細胞へと導入し、それによってそれらの増殖要求を改変することである。ＤＨＦＲ又はＴＫ遺伝子によって形質転換されなかった個々の細胞は、非補充培地において生存することができない。
【００４３】
第２のカテゴリは、任意の細胞型で使用される選択スキームを指し、変異細胞株の使用を必要としない、優性選択である。これらのスキームは、典型的には、宿主細胞の増殖を停止するための薬剤を使用する。新規遺伝子を有するそれらの細胞は、薬物耐性をもたらすタンパク質を発現し、選択を生き延びることができる。そのような優性選択の例は使用する薬物ネオマイシン（Ｓｏｕｔｈｅｒｎ  Ｐ．ａｎｄ  Ｂｅｒｇ，Ｐ．，Ｊ．Ｍｏｌｅｃ．Ａｐｐｌ．Ｇｅｎｅｔ．１：３２７（１９８２））、ミコフェノール酸（Ｍｕｌｌｉｇａｎ，Ｒ．Ｃ．ａｎｄ  Ｂｅｒｇ，Ｐ．Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２０９：１４２２（１９８０））、又はハイグロマイシン、（Ｓｕｇｄｅｎ，Ｂ．ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．５：４１０〜４１３（１９８５））を使用する。それらの例は、真核生物の制御下で細菌３の遺伝子を使用し、適切な薬物Ｇ４１８若しくはネオマイシン（ジェネテシン）、ｘｇｐｔ（ミコフェノール酸）又はハイグロマイシンのそれぞれに対する耐性をもたらす。他はネオマイシン類似体Ｇ４１８及びピューロマイシンを含む。
【００４４】
４．医薬担体／医薬品の送達
上述のように、組成物はまた、薬学的に許容される担体中で、インビボで投与され得る。このように、一態様において、修飾された細胞溶解性ウイルスと医薬担体とを含む医薬組成物が本明細書において開示され、ここで腫瘍溶解性ウイルスは、内因性分泌型終末糖化産物受容体（ｅｓＲＡＧＥ）、又は配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、若しくは配列番号６に対して少なくとも９０％の配列同一性を含むそれらの機能性フラグメント若しくは機能性変異体をコードし、発現するよう修飾されている。「医薬的に許容される」とは、生物学的に又はその他の点で望ましくなくない物質を意味し、即ち、物質は、望ましくない生物学的効果をいずれも引き起こすことなく、又は物質が含まれる医薬組成物の他の成分のいずれかと有害な様式で相互作用することなく、核酸又はベクターと共に被験体に投与され得る。担体は、当業者に周知であるように、活性成分の分解を最小限にするため、及び被験体における任意の有害な副作用を最小限にするため、当然選択される。
【００４５】
組成物は、局所鼻腔内投与又は吸入による投与を含んで、経口的に、非経口的に（例えば、静脈内に）、筋肉内注射によって、腹腔内注射によって、経皮的に、体外に、局所的になどで投与されてもよい。本明細書で使用するとき、「局所鼻腔内投与」は、鼻孔の一方又は両方を通る鼻及び鼻腔への組成物の送達を意味し、噴霧機構若しくは液滴機構による送達又は核酸若しくはベクターのエアロゾル化を介した送達を含むことができる。吸入による組成物の投与は、噴霧機構又は液滴機構による送達を介して鼻又は口を通して行うことができる。送達はまた、挿管を介して呼吸器系（例えば、肺）の任意の領域に対して直接行うことができる。必要とされる組成物の正確な量は、被験体の人種、年齢、体重及び全身状態、治療されるアレルギー性疾患の重症度、使用される特定の核酸又はベクター、組成物の投与様式などに依存して、被験体によって異なるであろう。したがって、すべての組成物の正確な量を指定することは不可能である。しかしながら、適量は、本明細書の教示に鑑みて、通常の実験のみを使用して、当業者によって決定され得る。
【００４６】
組成物の非経口投与は、使用される場合、一般に注射を特徴とする。注射剤は、溶液若しくは懸濁液、注射前に液体で懸濁する溶液に好適な固形、又は乳剤のいずれかとして、従来の形態で調製されてよい。非経口投与についてごく最近改良された方法は、一定用量が維持されるように徐放系又は持続放出系の使用を伴う。例えば、参照により本明細書に組み込まれる米国特許第３，６１０，７９５号を参照されたい。
【００４７】
材料は、溶液、（例えば、微小粒子、リポソーム又は細胞に組み込まれた）懸濁液であってもよい。これらは、抗体、受容体又は受容体リガンドを介して特定の細胞型を標的としてもよい。以下の参照文献は、特定のタンパク質を腫瘍組織へ標的化するためにこの技術を使用する例である（Ｓｅｎｔｅｒ，ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．，２：４４７〜４５１，（１９９１）；Ｂａｇｓｈａｗｅ，Ｋ．Ｄ．，Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ，６０：２７５〜２８１，（１９８９）；Ｂａｇｓｈａｗｅ，ｅｔ  ａｌ．，Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ，５８：７００〜７０３，（１９８８）；Ｓｅｎｔｅｒ，ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．，４：３〜９，（１９９３）；Ｂａｔｔｅｌｌｉ，ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．，３５：４２１〜４２５，（１９９２）；Ｐｉｅｔｅｒｓｚ  ａｎｄ  ＭｃＫｅｎｚｉｅ，Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇ．Ｒｅｖｉｅｗｓ，１２９：５７〜８０，（１９９２）；及びＲｏｆｆｌｅｒ，ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ，４２：２０６２〜２０６５，（１９９１））。「ステルス」などのビヒクル及び（結腸癌を標的とする脂質介在性薬物を含む）他の抗体共役リポソーム、細胞特異的リガンドを介するＤＮＡの受容体介在性標的化、リンパ球指向性腫瘍標的化、並びにインビボでのマウスグリオーマ細胞の高特異的治療的レトロウイルス標的化。以下の参照文献は、特定のタンパク質を腫瘍組織へ標的化するためにこの技術を使用する例である（Ｈｕｇｈｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，４９：６２１４〜６２２０，（１９８９）；及びＬｉｔｚｉｎｇｅｒ  ａｎｄ  Ｈｕａｎｇ，Ｂｉｏｃｈｉｍｉｃａ  ｅｔ  Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａ  Ａｃｔａ，１１０４：１７９〜１８７，（１９９２））。全般的に、受容体は、構成的誘発性又はリガンド誘発性のいずれかで、エンドサイトーシスの経路に関与する。クラスリン被覆ピット中のこれらの受容体クラスターは、クラスリン被覆小胞を介して細胞に入り、受容体が分別される酸性化エンドソームを通過し、次いで、細胞表面へ再循環するか、細胞内に保存されるか又はリポソーム内で分解されるかのいずれかである。内在化経路は、栄養取り込み、活性化タンパク質の除去、巨大分子のクリアランス、ウイルス及び毒素の日和見侵入、リガンドの解離及び分解、並びに受容体レベル調節などの多様な機能を果たす。多数の受容体は、細胞型、受容体濃度、リガンドの種類、リガンドの価数及びリガンド濃度に応じて、２つ以上の細胞内経路に従う。受容体介在性エンドサイトーシスの分子機構及び細胞機構がレビューされている（Ｂｒｏｗｎ  ａｎｄ  Ｇｒｅｅｎｅ，ＤＮＡ  ａｎｄ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  １０：６，３９９〜４０９（１９９１））。
【００４８】
ａ）薬学的に許容される担体
抗体を含む組成物は、薬学的に許容される担体と組み合わせて治療する上で使用することができる。
【００４９】
好適な担体及びこれらの製剤は、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ（１９ｔｈ  ｅｄ．）ｅｄ．Ａ．Ｒ．Ｇｅｎｎａｒｏ，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ  １９９５に記載されている。一般的には、適量の薬学的に許容される塩を製剤に使用して、製剤等張性（formulation isotonic）を与える。薬学的に許容される担体の例には、生理食塩水、リンゲル溶液及びデキストロース溶液が挙げられ、これらに限定されない。溶液のｐＨは、好ましくは、約５〜約８、より好ましくは、約７〜約７．５である。更に、担体は、抗体を含む固体疎水性ポリマーの半透性マトリックスなどの徐放性製剤を含み、マトリックスは、成形品の形態、例えば、フィルム、リポソーム又は微粒子である。例えば、投与経路及び投与される組成物の濃度に応じて、特定の担体が更に好ましい場合があることは、当業者には明白であろう。
【００５０】
医薬担体は、当業者に既知である。これらは、最も典型的には、滅菌水、生理食塩水及び生理的ｐＨの緩衝液などの溶液を含む、ヒトへの薬剤投与のための標準的な担体であると考えられる。組成物は、筋肉内又は皮下に投与することができる。他の化合物は、当業者によって使用される標準的な手順に従って投与されることとなる。
【００５１】
医薬組成物は、選択した分子に加えて、担体、増粘剤、希釈剤、緩衝剤、防腐剤、界面活性剤などを含んでもよい。医薬組成物はまた、抗菌剤、抗炎症剤、麻酔薬などの、１種以上の有効成分を含んでもよい。
【００５２】
医薬組成物は、局所治療又は全身治療が望まれているかどうか、及び治療すべき領域に応じて、多数の方法で投与されてもよい。投与は、（眼科的、経腟的、経直腸的、鼻腔内を含んで）局所的に、経口的に、吸入により又は、例えば、静脈内点滴、皮下注射、腹腔内注射若しくは筋肉内注射による非経口的にでもよい。開示された抗体は、静脈内、腹腔内、筋肉内、皮下、腔内又は経皮的に投与することができる。
【００５３】
非経口的投与の製剤には、滅菌した水溶液又は非水溶液、懸濁液及びエマルションが挙げられる。非水溶液の例は、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、オリーブオイルなどの植物油及びオレイン酸エチルなどの注射用有機エステルである。水性担体には、生理食塩水及び緩衝媒体を含む、水、アルコール性／水性溶液、エマルション又は懸濁液が挙げられる。非経口ビヒクルには、塩化ナトリウム溶液、リンゲルデキストロース、デキストロース及び塩化ナトリウム、乳酸加リンゲル又は不揮発性油が挙げられる。静脈内ビヒクルには、流体及び栄養補充剤、電解質補充剤（例えば、リンゲルデキストロースに基づく電解質補充剤）などが挙げられる。防腐剤及び他の添加剤はまた、例えば、抗菌剤、抗酸化剤、キレート剤及び不活性ガスなどとして存在してもよい。
【００５４】
局所投与のための製剤は、軟膏、ローション、クリーム、ゲル、液滴、坐剤、スプレー、液体及び粉末を含んでもよい。従来の医薬担体、水性基剤、粉末基剤又は油性基剤、増粘剤などが、必要となるか又は望ましい場合がある。
【００５５】
経口投与のための組成物には、粉末若しくは顆粒、水又は非水性媒体中の懸濁液若しくは溶液、カプセル、小袋又はタブレットが挙げられる。増粘剤、香味料、希釈剤、乳化剤、分散助剤、又は結合剤が望ましい場合がある。
【００５６】
組成物のうちのいくつかは、塩酸、臭化水素酸、過塩素酸、硝酸、チオシアン酸、硫酸及びリン酸などの無機酸並びにギ酸、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、乳酸、ピルビン酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、マレイン酸及びフマル酸などの有機酸との反応によって、又は、水酸化ナトリウム、水酸化アンモニウム、水酸化カリウムなどの無機塩基並びにモノ、ジ、トリアルキルアミン及びアリールアミン及び置換エタノールアミンなどの有機塩基類との反応によって形成される、薬学的に許容される酸付加塩又は塩基付加塩として、投与される可能性がある場合がある。
【００５７】
ｂ）治療の使用
組成物を投与するための有効量及びスケジュールは、経験的に決定されてもよく、そのような決定を行うことは、当業者の技能の範囲内である。組成物の投与の用量範囲は、疾患の症状に影響する所望の効果を生じるほど大きい用量である。用量は、望ましくない交差反応、アナフィラキシー反応などの有害な副作用を引き起こすほど大きくあるべきではない。一般に、用量は、年齢、状態、性別及び患者の疾患の程度、投与経路又は他の薬物がレジメンに含まれているかどうかにより変動することとなり、当業者によって決定することができる。用量は、いずれかの禁忌がある場合には、個々の医師によって調整することができる。用量は、変更することができ、毎日、１日又は数日間、１つ以上の用量の投与において投与することができる。指針は、所与のクラスの医薬製品に対する適切な用量に関する文献において見出すことができる。例えば、抗体について適切な用量を選択する際の指針は、抗体の治療用途に関する文献、例えば、Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，Ｆｅｒｒｏｎｅ  ｅｔ  ａｌ．，ｅｄｓ．，Ｎｏｇｅｓ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎｓ，Ｐａｒｋ  Ｒｉｄｇｅ，Ｎ．Ｊ．，（１９８５）ｃｈ．２２  ａｎｄ  ｐｐ．３０３〜３５７；Ｓｍｉｔｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ｉｎ  Ｈｕｍａｎ  Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ  ａｎｄ  Ｔｈｅｒａｐｙ，Ｈａｂｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，ｅｄｓ．，Ｒａｖｅｎ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９７７）ｐｐ．３６５〜３８９に見出すことができる。単独使用の抗体の一般的な１日用量は、上記の因子に基づいて、１日につき体重１ｋｇ当たり約１μｇ〜最大１００ｍｇ又はそれ以上の範囲である場合がある。
【００５８】
Ｃ．癌を治療する方法
一態様において、開示された腫瘍溶解性ウイルスは、癌のような制御不能な細胞増殖が生じる任意の疾患を治療するために使用され得ることが分かる。本明細書において指摘するように、従来技術は、膜結合ＲＡＧＥと結合し、それを通じてシグナル伝達する活性化炎症性分子が、癌細胞の増殖、遊走、及び血管形成をもたらすことを示す。開示された腫瘍溶解性ウイルスは、細胞外マトリックスにおいてＲＡＧＥに対するリガンドに結合することができ、したがって、膜結合ＲＡＧＥへの結合及び後に続くそれを通じたシグナル伝達を制限することができる可溶性（すなわち内因性分泌型）ＲＡＧＥ（ｅｓＲＡＧＥ）を発現することによって、この課題を解決する。ｅｓＲＡＧＥの発現はＮＫ細胞媒介性腫瘍殺傷を変質させない。実際、図９に示されるように、ＯＶｅｓＲＡＧＥが、小膠細胞／マクロファージ−媒介性神経膠腫細胞殺傷を大幅に増加させることを示す。この増加した可溶性ＲＡＧＥ（ｅｓＲＡＧＥ）発現を介する腫瘍標的化殺傷は、感染した患者の上昇した生存をもたらす（図１０）。したがって、一態様において、対象に本明細書において開示されたｅｓＲＡＧＥを含む腫瘍溶解性ウイルスのいずれかを投与することを含む、癌を有する対象を治療する方法が本明細書に開示される。例えば、対象に修飾された腫瘍溶解性ウイルスを投与することを含む、癌を有する対象を治療する方法が本明細書に開示され、ここで腫瘍溶解性ウイルスは、内因性分泌型終末糖化産物受容体（ｅｓＲＡＧＥ）、又は配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、若しくは配列番号６に対して少なくとも９０％の配列同一性を含むそれらの機能性フラグメントをコードし、発現するよう修飾されている。
【００５９】
開示されたｅｓＲＡＧＥを含む腫瘍溶解性ウイルスを用いて治療できることのできる種々の型の癌の非限定的なリストは以下のようなものである：リンパ腫（ホジキン及び非ホジキン）、白血病、癌、固形組織の癌、扁平上皮癌、腺癌、肉腫、神経膠腫、高悪性度神経膠腫、芽細胞腫、神経芽細胞腫、骨肉腫、形質細胞腫、組織球腫、黒色腫、腺腫、酸素欠乏腫瘍、骨髄腫、エイズ関連リンパ腫若しくは肉腫、転移性癌、又は一般的な癌。
【００６０】
開示された組成物を使用して治療することのできる癌の代表的であるが非限定的なリストは、以下のようなものである：リンパ腫、Ｂ細胞リンパ腫、Ｔ細胞リンパ腫、菌状息肉腫、ホジキン病、骨髄性白血病、扁平上皮癌、腺癌、肉腫、神経膠腫、高悪性度神経膠腫、芽細胞腫、神経芽細胞腫、骨肉腫、形質細胞腫、組織球腫、黒色腫、腺腫、酸素欠乏腫瘍、骨髄腫、エイズ関連リンパ腫又はエイズ関連肉腫、膀胱癌、脳癌、中枢神経系の癌、頭頸部の扁平上皮癌、小細胞肺癌及び非小細胞肺癌のような肺癌、神経芽細胞腫／膠芽細胞腫、卵巣癌、膵癌、前立腺癌、皮膚癌、肝癌、黒色腫、口腔扁平上皮癌、咽頭、喉頭、及び肺、結腸癌、子宮頚癌、子宮頸癌、乳癌、及び上皮癌、腎癌、尿生殖器癌、肺癌、食道癌、大腸癌、造血器癌；精巣癌；結腸癌、並びに直腸癌。
【００６１】
開示された癌を治療する方法は、任意の腫瘍溶解性ウイルスのバックボーンを含む本明細書に開示された腫瘍溶解性ウイルスのいずれかを用いて適用され得ることが理解され、本明細書において企図される。したがって、一態様において、対象に修飾された腫瘍溶解性ウイルスを投与することを含む、対象における癌を治療する方法が本明細書に開示され、ここで腫瘍溶解性ウイルスは、内因性分泌型終末糖化産物受容体（ｅｓＲＡＧＥ）、又は配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、若しくは配列番号６に対して少なくとも９０％の配列同一性を含むそれらの機能性フラグメントをコードし、発現するよう修飾され；ここで、腫瘍溶解性ウイルスのウイルスのバックボーンは、修飾又は遺伝子操作を受けた、アデノウイルス、アデノ随伴ウイルス、単純ヘルペスウイルス１型、単純ヘルペスウイルス２型、水痘−帯状疱疹ウイルス、エプスタイン・バーウイルス、サイトメガロウイルス、ヒトヘルペスウイルス６型、痘瘡ウイルス、ワクシニアウイルス、伝染性軟属腫ウイルス、オルフウイルス、レオウイルス、ロタウイルス、エンテロウイルス、セネカウイルス、ポリオウイルス、コクサッキーウイルス、ライノウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、口蹄疫ウイルス、トガウイルス、アルファウイルス、セムリキ森林ウイルス、東部ウマ脳炎ウイルス、シンドビスウイルス、風疹ウイルス、コロナウイルス、フラビウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、日本脳炎ウイルス、セントルイス脳炎ウイルス、マレー渓谷熱ウイルス、黄熱病ウイルス、西ナイルウイルス、ジカウイルス、デング熱ウイルス、エボラウイルス、マールブルグウイルス、アレナウイルス、ラッサ熱ウイルス、リンパ球性脈絡髄膜炎ウイルス、ピチンデウイルス、フニンウイルス、マチュポウイルス、ハンターンウイルス、リフトバレー熱ウイルス、パラミクソウイルス、ヒトパラインフルエンザウイルス、ムンプスウイルス、シミアンウイルス５型、麻疹ウイルス、水疱性口炎ウイルス、狂犬病ウイルス、ＲＳウイルス、オルトミクソウイルス、Ａ型インフルエンザウイルス、Ｂ型インフルエンザウイルス、Ｃ型インフルエンザウイルス、Ｄ型肝炎ウイルス、サル免疫不全ウイルス、ヒト免疫不全ウイルス１型及びヒト免疫不全ウイルス２型、ラウス肉腫ウイルス、ヒトＴ細胞白血病ウイルス１型、サル泡沫状ウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｅ型肝炎ウイルス、ヒトパピローマウイルス、又はポリオーマウイルスに由来する。
【００６２】
Ｄ．配列
配列番号１：内因性分泌型ＲＡＧＥ変異体１
１  ｇｃｃａｇｇａｃｃｃ  ｔｇｇａａｇｇａａｇ  ｃａｇｇａｔｇｇｃａ  ｇｃｃｇｇａａｃａｇ  ｃａｇｔｔｇｇａｇｃ  ｃｔｇｇｇｔｇｃｔｇ
６１  ｇｔｃｃｔｃａｇｔｃ  ｔｇｔｇｇｇｇｇｇｃ  ａｇｔａｇｔａｇｇｔ  ｇｃｔｃａａａａｃａ  ｔｃａｃａｇｃｃｃｇ  ｇａｔｔｇｇｃｇａｇ
１２１  ｃｃａｃｔｇｇｔｇｃ  ｔｇａａｇｔｇｔａａ  ｇｇｇｇｇｃｃｃｃｃ  ａａｇａａａｃｃａｃ  ｃｃｃａｇｃｇｇｃｔ  ｇｇａａｔｇｇａａａ
１８１  ｃｔｇａａｃａｃａｇ  ｇｃｃｇｇａｃａｇａ  ａｇｃｔｔｇｇａａｇ  ｇｔｃｃｔｇｔｃｔｃ  ｃｃｃａｇｇｇａｇｇ  ａｇｇｃｃｃｃｔｇｇ
２４１  ｇａｃａｇｔｇｔｇｇ  ｃｔｃｇｔｇｔｃｃｔ  ｔｃｃｃａａｃｇｇｃ  ｔｃｃｃｔｃｔｔｃｃ  ｔｔｃｃｇｇｃｔｇｔ  ｃｇｇｇａｔｃｃａｇ
３０１  ｇａｔｇａｇｇｇｇａ  ｔｔｔｔｃｃｇｇｔｇ  ｃｃａｇｇｃａａｔｇ  ａａｃａｇｇａａｔｇ  ｇａａａｇｇａｇａｃ  ｃａａｇｔｃｃａａｃ
３６１  ｔａｃｃｇａｇｔｃｃ  ｇｔｇｔｃｔａｃｃａ  ｇａｔｔｃｃｔｇｇｇ  ａａｇｃｃａｇａａａ  ｔｔｇｔａｇａｔｔｃ  ｔｇｃｃｔｃｔｇａａ
４２１  ｃｔｃａｃｇｇｃｔｇ  ｇｔｇｔｔｃｃｃａａ  ｔａａｇｇｔｇｇｇｇ  ａｃａｔｇｔｇｔｇｔ  ｃａｇａｇｇｇａａｇ  ｃｔａｃｃｃｔｇｃａ
４８１  ｇｇｇａｃｔｃｔｔａ  ｇｃｔｇｇｃａｃｔｔ  ｇｇａｔｇｇｇａａｇ  ｃｃｃｃｔｇｇｔｇｃ  ｃｔａａｔｇａｇａａ  ｇｇｇａｇｔａｔｃｔ
５４１  ｇｔｇａａｇｇａａｃ  ａｇａｃｃａｇｇａｇ  ａｃａｃｃｃｔｇａｇ  ａｃａｇｇｇｃｔｃｔ  ｔｃａｃａｃｔｇｃａ  ｇｔｃｇｇａｇｃｔａ
６０１  ａｔｇｇｔｇａｃｃｃ  ｃａｇｃｃｃｇｇｇｇ  ａｇｇａｇａｔｃｃｃ  ｃｇｔｃｃｃａｃｃｔ  ｔｃｔｃｃｔｇｔａｇ  ｃｔｔｃａｇｃｃｃａ
６６１  ｇｇｃｃｔｔｃｃｃｃ  ｇａｃａｃｃｇｇｇｃ  ｃｔｔｇｃｇｃａｃａ  ｇｃｃｃｃｃａｔｃｃ  ａｇｃｃｃｃｇｔｇｔ  ｃｔｇｇｇａｇｃｃｔ
７２１  ｇｔｇｃｃｔｃｔｇｇ  ａｇｇａｇｇｔｃｃａ  ａｔｔｇｇｔｇｇｔｇ  ｇａｇｃｃａｇａａｇ  ｇｔｇｇａｇｃａｇｔ  ａｇｃｔｃｃｔｇｇｔ
７８１  ｇｇａａｃｃｇｔａａ  ｃｃｃｔｇａｃｃｔｇ  ｔｇａａｇｔｃｃｃｔ  ｇｃｃｃａｇｃｃｃｔ  ｃｔｃｃｔｃａａａｔ  ｃｃａｃｔｇｇａｔｇ
８４１  ａａｇｇａｔｇｇｔｇ  ｔｇｃｃｃｔｔｇｃｃ  ｃｃｔｔｃｃｃｃｃｃ  ａｇｃｃｃｔｇｔｇｃ  ｔｇａｔｃｃｔｃｃｃ  ｔｇａｇａｔａｇｇｇ
９０１  ｃｃｔｃａｇｇａｃｃ  ａｇｇｇａａｃｃｔａ  ｃａｇｃｔｇｔｇｔｇ  ｇｃｃａｃｃｃａｔｔ  ｃｃａｇｃｃａｃｇｇ  ｇｃｃｃｃａｇｇａａ
９６１  ａｇｃｃｇｔｇｃｔｇ  ｔｃａｇｃａｔｃａｇ  ｃａｔｃａｔｃｇａａ  ｃｃａｇｇｃｇａｇｇ  ａｇｇｇｇｃｃａａｃ  ｔｇｃａｇｇｔｇａｇ
１０２１  ｇｇｇｔｔｔｇａｔａ  ａａｇｔｃａｇｇｇａ  ａｇｃａｇａａｇａｔ  ａｇｃｃｃｃｃａａｃ  ａｃａｔｇｔｇａｃｔ  ｇｇｇｇｇｇａｔｇｇ
１０８１  ｔｃａａｃａａｇａａ  ａｇｇａａｔｇｇａａ  ｇｇｃｃｃｃａｇａａ  ａａｃｃａｇｇａｇｇ  ａａｇａｇｇａｇｇａ  ｇｃｇｔｇｃａｇａａ
１１４１  ｃｔｇａａｔｃａｇｔ  ｃｇｇａｇｇａａｃｃ  ｔｇａｇｇｃａｇｇｃ  ｇａｇａｇｔａｇｔａ  ｃｔｇｇａｇｇｇｃｃ  ｔｔｇａｇｇｇｇｃｃ
１２０１  ｃａｃａｇａｃａｇａ  ｔｃｃｃａｔｃｃａｔ  ｃａｇ
配列番号２：内因性分泌型ＲＡＧＥ変異体２
１  ａｇｇａａｇｃａｇｇ  ａｔｇｇｃａｇｃｃｇ  ｇａａｃａｇｃａｇｔ  ｔｇｇａｇｃｃｔｇｇ  ｇｔｇｃｔｇｇｔｃｃ  ｔｃａｇｔｃｔｇｔｇ
６１  ｇｇｇｇｇｃａｇｔａ  ｇｔａｇｇｔｇｃｔｃ  ａａａａｃａｔｃａｃ  ａｇｃｃｃｇｇａｔｔ  ｇｇｃｇａｇｃｃａｃ  ｔｇｇｔｇｃｔｇａａ
１２１  ｇｔｇｔａａｇｇｇｇ  ｇｃｃｃｃｃａａｇａ  ａａｃｃａｃｃｃｃａ  ｇｃｇｇｃｔｇｇａａ  ｔｇｇａａａｃｔｇａ  ａｃａｃａｇｇｃｃｇ
１８１  ｇａｃａｇａａｇｃｔ  ｔｇｇａａｇｇｔｃｃ  ｔｇｔｃｔｃｃｃｃａ  ｇｇｇａｇｇａｇｇｃ  ｃｃｃｔｇｇｇａｃａ  ｇｔｇｔｇｇｃｔｃｇ
２４１  ｔｇｔｃｃｔｔｃｃｃ  ａａｃｇｇｃｔｃｃｃ  ｔｃｔｔｃｃｔｔｃｃ  ｇｇｃｔｇｔｃｇｇｇ  ａｔｃｃａｇｇａｔｇ  ａｇｇｇｇａｔｔｔｔ
３０１  ｃｃｇｇｔｇｃｃａｇ  ｇｃａａｔｇａａｃａ  ｇｇａａｔｇｇａａａ  ｇｇａｇａｃｃａａｇ  ｔｃｃａａｃｔａｃｃ  ｇａｇｔｃｃｇｔｇｔ
３６１  ｃｔａｃｃａｇａｔｔ  ｃｃｔｇｇｇａａｇｃ  ｃａｇａａａｔｔｇｔ  ａｇａｔｔｃｔｇｃｃ  ｔｃｔｇａａｃｔｃａ  ｃｇｇｃｔｇｇｔｇｔ
４２１  ｔｃｃｃａａｔａａｇ  ｇｔｇｇｇｇａｃａｔ  ｇｔｇｔｇｔｃａｇａ  ｇｇｇａａｇｃｔａｃ  ｃｃｔｇｃａｇｇｇａ  ｃｔｃｔｔａｇｃｔｇ
４８１  ｇｃａｃｔｔｇｇａｔ  ｇｇｇａａｇｃｃｃｃ  ｔｇｇｔｇｃｃｔａａ  ｔｇａｇａａｇｇｇａ  ｇｔａｔｃｔｇｔｇａ  ａｇｇａａｃａｇａｃ
５４１  ｃａｇｇａｇａｃａｃ  ｃｃｔｇａｇａｃａｇ  ｇｇｃｔｃｔｔｃａｃ  ａｃｔｇｃａｇｔｃｇ  ｇａｇｃｔａａｔｇｇ  ｔｇａｃｃｃｃａｇｃ
６０１  ｃｃｇｇｇｇａｇｇａ  ｇａｔｃｃｃｃｇｔｃ  ｃｃａｃｃｔｔｃｔｃ  ｃｔｇｔａｇｃｔｔｃ  ａｇｃｃｃａｇｇｃｃ  ｔｔｃｃｃｃｇａｃａ
６６１  ｃｃｇｇｇｃｃｔｔｇ  ｃｇｃａｃａｇｃｃｃ  ｃｃａｔｃｃａｇｃｃ  ｃｃｇｔｇｔｃｔｇｇ  ｇａｇｃｃｔｇｔｇｃ  ｃｔｃｔｇｇａｇｇａ
７２１  ｇｇｔｃｃａａｔｔｇ  ｇｔｇｇｔｇｇａｇｃ  ｃａｇａａｇｇｔｇｇ  ａｇｃａｇｔａｇｃｔ  ｃｃｔｇｇｔｇｇａａ  ｃｃｇｔａａｃｃｃｔ
７８１  ｇａｃｃｔｇｔｇａａ  ｇｔｃｃｃｔｇｃｃｃ  ａｇｃｃｃｔｃｔｃｃ  ｔｃａａａｔｃｃａｃ  ｔｇｇａｔｇａａｇｇ  ａｔｇｇｃｃｔｃａｇ
８４１  ｇａｃｃａｇｇｇａａ  ｃｃｔａｃａｇｃｔｇ  ｔｇｔｇｇｃｃａｃｃ  ｃａｔｔｃｃａｇｃｃ  ａｃｇｇｇｃｃｃｃａ  ｇｇａａａｇｃｃｇｔ
９０１  ｇｃｔｇｔｃａｇｃａ  ｔｃａｇｃａｔｃａｔ  ｃｇａａｃｃａｇｇｃ  ｇａｇｇａｇｇｇｇｃ  ｃａａｃｔｇｃａｇｇ  ｃｔｃｔｇｔｇｇｇａ
９６１  ｇｇａｔｃａｇｇｇｃ  ｔｇｇｇａａｃｔｃｔ  ａｇｃｃｃｔｇｇｃｃ  ｃｔｇｇｇｇａｔｃｃ  ｔｇｇｇａｇｇｃｃｔ  ｇｇｇｇａｃａｇｃｃ
１０２１  ｇｃｃｃｔｇｃｔｃａ  ｔｔｇｇｇｇｔｃａｔ  ｃｔｔｇｔｇｇｃａａ  ａｇｇｃｇｇｃａａｃ  ｇｃｃｇａｇｇａｇａ  ｇｇａｇａｇｇａａｇ
１０８１  ｇｃｃｃｃａｇａａａ  ａｃｃａｇｇａｇｇａ  ａｇａｇｇａｇｇａｇ  ｃｇｔｇｃａｇａａｃ  ｔｇａａｔｃａｇｔｃ  ｇｇａｇｇａａｃｃｔ
１１４１  ｇａｇｇｃａｇｇｃｇ  ａｇａｇｔａｇｔａｃ  ｔｇｇａｇｇｇｃｃｔ  ｔｇａｇｇｇｇｃｃｃ  ａｃａｇａｃａｇａｔ  ｃｃｃａ
配列番号３：内因性分泌型ＲＡＧＥ変異体３
１  ａｇｇａａｇｃａｇｇ  ａｔｇｇｃａｇｃｃｇ  ｇａａｃａｇｃａｇｔ  ｔｇｇａｇｃｃｔｇｇ  ｇｔｇｃｔｇｇｔｃｃ  ｔｃａｇｔｃｔｇｔｇ
６１  ｇｇｇｇｇｃａｇｔａ  ｇｔａｇｇｔｇｃｔｃ  ａａａａｃａｔｃａｃ  ａｇｃｃｃｇｇａｔｔ  ｇｇｃｇａｇｃｃａｃ  ｔｇｇｔｇｃｔｇａａ
１２１  ｇｔｇｔａａｇｇｇｇ  ｇｃｃｃｃｃａａｇａ  ａａｃｃａｃｃｃｃａ  ｇｃｇｇｃｔｇｇａａ  ｔｇｇａａａｃｔｇａ  ａｃａｃａｇｇｃｃｇ
１８１  ｇａｃａｇａａｇｃｔ  ｔｇｇａａｇｇｔｃｃ  ｔｇｔｃｔｃｃｃｃａ  ｇｇｇａｇｇａｇｇｃ  ｃｃｃｔｇｇｇａｃａ  ｇｔｇｔｇｇｃｔｃｇ
２４１  ｔｇｔｃｃｔｔｃｃｃ  ａａｃｇｇｃｔｃｃｃ  ｔｃｔｔｃｃｔｔｃｃ  ｇｇｃｔｇｔｃｇｇｇ  ａｔｃｃａｇｇａｔｇ  ａｇｇｇｇａｔｔｔｔ
３０１  ｃｃｇｇｔｇｃｃａｇ  ｇｃａａｔｇａａｃａ  ｇｇａａｔｇｇａａａ  ｇｇａｇａｃｃａａｇ  ｔｃｃａａｃｔａｃｃ  ｇａｇｔｃｃｇｔｇｔ
３６１  ｃｔａｃｃａｇａｔｔ  ｃｃｔｇｇｇａａｇｃ  ｃａｇａａａｔｔｇｔ  ａｇａｔｔｃｔｇｃｃ  ｔｃｔｇａａｃｔｃａ  ｃｇｇｃｔｇｇｔｇｔ
４２１  ｔｃｃｃａａｔａａｇ  ｇｔｇｇｇｇａｃａｔ  ｇｔｇｔｇｔｃａｇａ  ｇｇｇａａｇｃｔａｃ  ｃｃｔｇｃａｇｇｇａ  ｃｔｃｔｔａｇｃｔｇ
４８１  ｇｃａｃｔｔｇｇａｔ  ｇｇｇａａｇｃｃｃｃ  ｔｇｇｔｇｃｃｔａａ  ｔｇａｇａａｇｇｇａ  ｇｔａｔｃｔｇｔｇａ  ａｇｇａａｃａｇａｃ
５４１  ｃａｇｇａｇａｃａｃ  ｃｃｔｇａｇａｃａｇ  ｇｇｃｔｃｔｔｃａｃ  ａｃｔｇｃａｇｔｃｇ  ｇａｇｃｔａａｔｇｇ  ｔｇａｃｃｃｃａｇｃ
６０１  ｃｃｇｇｇｇａｇｇａ  ｇａｔｃｃｃｃｇｔｃ  ｃｃａｃｃｔｔｃｔｃ  ｃｔｇｔａｇｃｔｔｃ  ａｇｃｃｃａｇｇｃｃ  ｔｔｃｃｃｃｇａｃａ
６６１  ｃｃｇｇｇｃｃｔｔｇ  ｃｇｃａｃａｇｃｃｃ  ｃｃａｔｃｃａｇｃｃ  ｃｃｇｔｇｔｃｔｇｇ  ｇａｇｃｃｔｇｔｇｃ  ｃｔｃｔｇｇａｇｇａ
７２１  ｇｇｔｃｃａａｔｔｇ  ｇｔｇｇｔｇｇａｇｃ  ｃａｇａａｇｇｔｇｇ  ａｇｃａｇｔａｇｃｔ  ｃｃｔｇｇｔｇｇａａ  ｃｃｇｔａａｃｃｃｔ
７８１  ｇａｃｃｔｇｔｇａａ  ｇｔｃｃｃｔｇｃｃｃ  ａｇｃｃｃｔｃｔｃｃ  ｔｃａａａｔｃｃａｃ  ｔｇｇａｔｇａａｇｇ  ａｔｇｇｔｇｔｇｃｃ
８４１  ｃｔｔｇｃｃｃｃｔｔ  ｃｃｃｃｃｃａｇｃｃ  ｃｔｇｔｇｃｔｇａｔ  ｃｃｔｃｃｃｔｇａｇ  ａｔａｇｇｇｃｃｔｃ  ａｇｇａｃｃａｇｇｇ
９０１  ａａｃｃｔａｃａｇｃ  ｔｇｔｇｔｇｇｃｃａ  ｃｃｃａｔｔｃｃａｇ  ｃｃａｃｇｇｇｃｃｃ  ｃａｇｇａａａｇｃｃ  ｇｔｇｃｔｇｔｃａｇ
９６１  ｃａｔｃａｇｃａｔｃ  ａｔｃｇａａｃｃａｇ  ｇｃｇａｇｇａｇｇｇ  ｇｃｃａａｃｔｇｃａ  ｇｇｔｇａｇｇｇｇｔ  ｔｔｇａｔａａａｇｔ
１０２１  ｃａｇｇｇａａｇｃａ  ｇａａｇａｔａｇｃｃ  ｃｃｃａａｃａｃａｔ  ｇｔｇａｃｔｇｇｇｇ  ｇｇａｔｇｇｔｃａａ  ｃａａｇａａａｇｇａ
１０８１  ａｔｇｇａａｇｇｃｃ  ｃｃａｇａａａａｃｃ  ａｇｇａｇｇａａｇａ  ｇｇａｇｇａｇｃｇｔ  ｇｃａｇａａｃｔｇａ  ａｔｃａｇｔｃｇｇａ
１１４１  ｇｇａａｃｃｔｇａｇ  ｇｃａｇｇｃｇａｇａ  ｇｔａｇｔａｃｔｇｇ  ａｇｇｇｃｃｔｔｇａ  ｇｇｇｇｃｃｃａｃａ  ｇａｃａｇａｔｃｃｃ
１２０１  ａ
配列番号４：内因性分泌型ＲＡＧＥ変異体４
１  ａｇｇａａｇｃａｇｇ  ａｔｇｇｃａｇｃｃｇ  ｇａａｃａｇｃａｇｔ  ｔｇｇａｇｃｃｔｇｇ  ｇｔｇｃｔｇｇｔｃｃ  ｔｃａｇｔｃｔｇｔｇ
６１  ｇｇｇｇｇｃａｇｔａ  ｇｔａｇｇｔｇｃｔｃ  ａａａａｃａｔｃａｃ  ａｇｃｃｃｇｇａｔｔ  ｇｇｃｇａｇｃｃａｃ  ｔｇｇｔｇｃｔｇａａ
１２１  ｇｔｇｔａａｇｇｇｇ  ｇｃｃｃｃｃａａｇａ  ａａｃｃａｃｃｃｃａ  ｇｃｇｇｃｔｇｇａａ  ｔｇｇａａａｃｔｇａ  ａｃａｃａｇｇｃｃｇ
１８１  ｇａｃａｇａａｇｃｔ  ｔｇｇａａｇｇｔｃｃ  ｔｇｔｃｔｃｃｃｃａ  ｇｇｇａｇｇａｇｇｃ  ｃｃｃｔｇｇｇａｃａ  ｇｔｇｔｇｇｃｔｃｇ
２４１  ｔｇｔｃｃｔｔｃｃｃ  ａａｃｇｇｃｔｃｃｃ  ｔｃｔｔｃｃｔｔｃｃ  ｇｇｃｔｇｔｃｇｇｇ  ａｔｃｃａｇｇａｔｇ  ａｇｇｇｇａｔｔｔｔ
３０１  ｃｃｇｇｔｇｃｃａｇ  ｇｃａａｔｇａａｃａ  ｇｇａａｔｇｇａａａ  ｇｇａｇａｃｃａａｇ  ｔｃｃａａｃｔａｃｃ  ｇａｇｔｃｃｇｔｇｔ
３６１  ｃｔａｃｃａｇａｔｔ  ｃｃｔｇｇｇａａｇｃ  ｃａｇａａａｔｔｇｔ  ａｇａｔｔｃｔｇｃｃ  ｔｃｔｇａａｃｔｃａ  ｃｇｇｃｔｇｇｔｇｔ
４２１  ｔｃｃｃａａｔａａｇ  ｇｔｇｇｇｇａｃａｔ  ｇｔｇｔｇｔｃａｇａ  ｇｇｇａａｇｃｔａｃ  ｃｃｔｇｃａｇｇｇａ  ｃｔｃｔｔａｇｃｔｇ
４８１  ｇｃａｃｔｔｇｇａｔ  ｇｇｇａａｇｃｃｃｃ  ｔｇｇｔｇｃｃｔａａ  ｔｇａｇａａｇｇｇａ  ｇｔａｔｃｔｇｔｇａ  ａｇｇａａｃａｇａｃ
５４１  ｃａｇｇａｇａｃａｃ  ｃｃｔｇａｇａｃａｇ  ｇｇｃｔｃｔｔｃａｃ  ａｃｔｇｃａｇｔｃｇ  ｇａｇｃｔａａｔｇｇ  ｔｇａｃｃｃｃａｇｃ
６０１  ｃｃｇｇｇｇａｇｇａ  ｇａｔｃｃｃｃｇｔｃ  ｃｃａｃｃｔｔｃｔｃ  ｃｔｇｔａｇｃｔｔｃ  ａｇｃｃｃａｇｇｃｃ  ｔｔｃｃｃｃｇａｃａ
６６１  ｃｃｇｇｇｃｃｔｔｇ  ｃｇｃａｃａｇｃｃｃ  ｃｃａｔｃｃａｇｃｃ  ｃｃｇｔｇｔｃｔｇｇ  ｇａｇｃｃｔｇｔｇｃ  ｃｔｃｔｇｇａｇｇａ
７２１  ｇｇｔｃｃａａｔｔｇ  ｇｔｇｇｔｇｇａｇｃ  ｃａｇａａｇｇｔｇｇ  ａｇｃａｇｔａｇｃｔ  ｃｃｔｇｇｔｇｇａａ  ｃｃｇｔａａｃｃｃｔ
７８１  ｇａｃｃｔｇｔｇａａ  ｇｔｃｃｃｔｇｃｃｃ  ａｇｃｃｃｔｃｔｃｃ  ｔｃａａａｔｃｃａｃ  ｔｇｇａｔｇａａｇｇ  ａｔｇｇｃｃｔｃａｇ
８４１  ｇａｃｃａｇｇｇａａ  ｃｃｔａｃａｇｃｔｇ  ｔｇｔｇｇｃｃａｃｃ  ｃａｔｔｃｃａｇｃｃ  ａｃｇｇｇｃｃｃｃａ  ｇｇａａａｇｃｃｇｔ
９０１  ｇｃｔｇｔｃａｇｃａ  ｔｃａｇｃａｔｃａｔ  ｃｇａａｃｃａｇｇｃ  ｇａｇｇａｇｇｇｇｃ  ｃａａｃｔｇｃａｇｇ  ｔｇａｇｇｇｇｔｔｔ
９６１  ｇａｔａａａｇｔｃａ  ｇｇｇａａｇｃａｇａ  ａｇａｔａｇｃｃｃｃ  ｃａａｃａｃａｔｇｔ  ｇａｃｔｇｇｇｇｇｇ  ａｔｇｇｔｃａａｃａ
１０２１  ａｇａａａｇｇａａｔ  ｇｇａａｇｇｃｃｃｃ  ａｇａａａａｃｃａｇ  ｇａｇｇａａｇａｇｇ  ａｇｇａｇｃｇｔｇｃ  ａｇａａｃｔｇａａｔ
１０８１  ｃａｇｔｃｇｇａｇｇ  ａａｃｃｔｇａｇｇｃ  ａｇｇｃｇａｇａｇｔ  ａｇｔａｃｔｇｇａｇ  ｇｇｃｃｔｔｇａｇｇ  ｇｇｃｃｃａｃａｇａ
１１４１  ｃａｇａｔｃｃｃａ
配列番号５：内因性分泌型ＲＡＧＥ変異体５
１  ａｇｇａａｇｃａｇｇ  ａｔｇｇｃａｇｃｃｇ  ｇａａｃａｇｃａｇｔ  ｔｇｇａｇｃｃｔｇｇ  ｇｔｇｃｔｇｇｔｃｃ  ｔｃａｇｔｃｔｇｔｇ
６１  ｇｇｇｇｇｃａｇｔａ  ｇｔａｇｇｔｇｃｔｃ  ａａａａｃａｔｃａｃ  ａｇｃｃｃｇｇａｔｔ  ｇｇｃｇａｇｃｃａｃ  ｔｇｇｔｇｃｔｇａａ
１２１  ｇｔｇｔａａｇｇｇｇ  ｇｃｃｃｃｃａａｇａ  ａａｃｃａｃｃｃｃａ  ｇｃｇｇｃｔｇｇａａ  ｔｇｇａａａｃｔｇａ  ａｃａｃａｇｇｃｃｇ
１８１  ｇａｃａｇａａｇｃｔ  ｔｇｇａａｇｇｔｃｃ  ｔｇｔｃｔｃｃｃｃａ  ｇｇｇａｇｇａｇｇｃ  ｃｃｃｔｇｇｇａｃａ  ｇｔｇｔｇｇｃｔｃｇ
２４１  ｔｇｔｃｃｔｔｃｃｃ  ａａｃｇｇｃｔｃｃｃ  ｔｃｔｔｃｃｔｔｃｃ  ｇｇｃｔｇｔｃｇｇｇ  ａｔｃｃａｇｇａｔｇ  ａｇｇｇｇａｔｔｔｔ
３０１  ｃｃｇｇｔｇｃｃａｇ  ｇｃａａｔｇａａｃａ  ｇｇａａｔｇｇａａａ  ｇｇａｇａｃｃａａｇ  ｔｃｃａａｃｔａｃｃ  ｇａｇｔｃｃｇｔｇｔ
３６１  ｃｔａｃｃａｇａｔｔ  ｃｃｔｇｇｇａａｇｃ  ｃａｇａａａｔｔｇｔ  ａｇａｔｔｃｔｇｃｃ  ｔｃｔｇａａｃｔｃａ  ｃｇｇｃｔｇｇｔｇｔ
４２１  ｔｃｃｃａａｔａａｇ  ｇｔａｇｔｇｇａａｇ  ａａａｇｃａｇｇａｇ  ａａｇｔａｇａａａａ  ｃｇｇｃｃｃｔｇｔｇ  ａａｃａｇｇａｇｇｔ
４８１  ｇｇｇｇａｃａｔｇｔ  ｇｔｇｔｃａｇａｇｇ  ｇａａｇｃｔａｃｃｃ  ｔｇｃａｇｇｇａｃｔ  ｃｔｔａｇｃｔｇｇｃ  ａｃｔｔｇｇａｔｇｇ
５４１  ｇａａｇｃｃｃｃｔｇ  ｇｔｇｃｃｔａａｔｇ  ａｇａａｇｇｇａｇｔ  ａｔｃｔｇｔｇａａｇ  ｇａａｃａｇａｃｃａ  ｇｇａｇａｃａｃｃｃ
６０１  ｔｇａｇａｃａｇｇｇ  ｃｔｃｔｔｃａｃａｃ  ｔｇｃａｇｔｃｇｇａ  ｇｃｔａａｔｇｇｔｇ  ａｃｃｃｃａｇｃｃｃ  ｇｇｇｇａｇｇａｇａ
６６１  ｔｃｃｃｃｇｔｃｃｃ  ａｃｃｔｔｃｔｃｃｔ  ｇｔａｇｃｔｔｃａｇ  ｃｃｃａｇｇｃｃｔｔ  ｃｃｃｃｇａｃａｃｃ  ｇｇｇｃｃｔｔｇｃｇ
７２１  ｃａｃａｇｃｃｃｃｃ  ａｔｃｃａｇｃｃｃｃ  ｇｔｇｔｃｔｇｇｇａ  ｇｃｃｔｇｔｇｃｃｔ  ｃｔｇｇａｇｇａｇｇ  ｔｃｃａａｔｔｇｇｔ
７８１  ｇｇｔｇｇａｇｃｃａ  ｇａａｇｇｔｇｇａｇ  ｃａｇｔａｇｃｔｃｃ  ｔｇｇｔｇｇａａｃｃ  ｇｔａａｃｃｃｔｇａ  ｃｃｔｇｔｇａａｇｔ
８４１  ｃｃｃｔｇｃｃｃａｇ  ｃｃｃｔｃｔｃｃｔｃ  ａａａｔｃｃａｃｔｇ  ｇａｔｇａａｇｇａｔ  ｇｇｔｇｔｇｃｃｃｔ  ｔｇｃｃｃｃｔｔｃｃ
９０１  ｃｃｃｃａｇｃｃｃｔ  ｇｔｇｃｔｇａｔｃｃ  ｔｃｃｃｔｇａｇａｔ  ａｇｇｇｃｃｔｃａｇ  ｇａｃｃａｇｇｇａａ  ｃｃｔａｃａｇｃｔｇ
９６１  ｔｇｔｇｇｃｃａｃｃ  ｃａｔｔｃｃａｇｃｃ  ａｃｇｇｇｃｃｃｃａ  ｇｇａａａｇｃｃｇｔ  ｇｃｔｇｔｃａｇｃａ  ｔｃａｇｃａｔｃａｔ
１０２１  ｃｇａａｃｃａｇｇｃ  ｇａｇｇａｇｇｇｇｃ  ｃａａｃｔｇｃａｇｇ  ｔｇａｇｇｇｇｔｔｔ  ｇａｔａａａｇｔｃａ  ｇｇｇａａｇｃａｇａ
１０８１  ａｇａｔａｇｃｃｃｃ  ｃａａｃａｃａｔｇｔ  ｇａｃｔｇｇｇｇｇｇ  ａｔｇｇｔｃａａｃａ  ａｇａａａｇｇａａｔ  ｇｇａａｇｇｃｃｃｃ
１１４１  ａｇａａａａｃｃａｇ  ｇａｇｇａａｇａｇｇ  ａｇｇａｇｃｇｔｇｃ  ａｇａａｃｔｇａａｔ  ｃａｇｔｃｇｇａｇｇ  ａａｃｃｔｇａｇｇｃ
１２０１  ａｇｇｃｇａｇａｇｔ  ａｇｔａｃｔｇｇａｇ  ｇｇｃｃｔｔｇａｇｇ  ｇｇｃｃｃａｃａｇａ  ｃａｇａｔｃｃｃａ
配列番号６：内因性分泌型ＲＡＧＥ変異体６
１  ａｔｇｇｃａｇｃｃｇ  ｇａａｃａｇｃａｇｔ  ｔｇｇａｇｃｃｔｇｇ  ｇｔｇｃｔｇｇｔｃｃ  ｔｃａｇｔｃｔｇｔｇ  ｇｇｇｇｇｃａｇｔａ
６１  ｇｔａｇｇｔｇｃｔｃ  ａａａａｃａｔｃａｃ  ａｇｃｃｃｇｇａｔｔ  ｇｇｃｇａｇｃｃａｃ  ｔｇｇｔｇｃｔｇａａ  ｇｔｇｔａａｇｇｇｇ
１２１  ｇｃｃｃｃｃａａｇａ  ａａｃｃａｃｃｃｃａ  ｇｃｇｇｃｔｇｇａａ  ｔｇｇａａａｃｔｇａ  ａｃａｃａｇｇｃｃｇ  ｇａｃａｇａａｇｃｔ
１８１  ｔｇｇａａｇｇｔｃｃ  ｔｇｔｃｔｃｃｃｃａ  ｇｇｇａｇｇａｇｇｃ  ｃｃｃｔｇｇｇａｃａ  ｇｔｇｔｇｇｃｔｃｇ  ｔｇｔｃｃｔｔｃｃｃ
２４１  ａａｃｇｇｃｔｃｃｃ  ｔｃｔｔｃｃｔｔｃｃ  ｇｇｃｔｇｔｃｇｇｇ  ａｔｃｃａｇｇａｔｇ  ａｇｇｇｇａｔｔｔｔ  ｃｃｇｇｔｇｃｃａｇ
３０１  ｇｃａａｔｇａａｃａ  ｇｇａａｔｇｇａａａ  ｇｇａｇａｃｃａａｇ  ｔｃｃａａｃｔａｃｃ  ｇａｇｔｃｃｇｔｇｔ  ｃｔａｃｃａｇａｔｔ
３６１  ｃｃｔｇｇｇａａｇｃ  ｃａｇａａａｔｔｇｔ  ａｇａｔｔｃｔｇｃｃ  ｔｃｔｇａａｃｔｃａ  ｃｇｇｃｔｇｇｔｇｔ  ｔｃｃｃａａｔａａｇ
４２１  ｇｔｇｇｇｇａｃａｔ  ｇｔｇｔｇｔｃｇｇａ  ｇｇｇａａｇｃｔａｃ  ｃｃｔｇｃａｇｇｇａ  ｃｔｃｔｔａｇｃｔｇ  ｇｃａｃｔｔｇｇａｔ
４８１  ｇｇｇａａｇｃｃｃｃ  ｔｇｇｔｇｃｃｔａａ  ｔｇａｇａａｇｇｇａ  ｇｔａｔｃｔｇｔｇａ  ａｇｇａａｃａｇａｃ  ｃａｇｇａｇａｃａｃ
５４１  ｃｃｔｇａｇａｃａｇ  ｇｇｃｔｃｔｔｃａｃ  ａｃｔｇｃａｇｔｃｇ  ｇａｇｃｔａａｔｇｇ  ｔｇａｃｃｃｃａｇｃ  ｃｃｇｇｇｇａｇｇａ
６０１  ｇａｔｃｃｃｃｇｔｃ  ｃｃａｃｃｔｔｃｔｃ  ｃｔｇｔａｇｃｔｔｃ  ａｇｃｃｃａｇｇｃｃ  ｔｔｃｃｃｃｇａｃａ  ｃｃｇｇｇｃｃｔｔｇ
６６１  ｃｇｃａｃａｇｃｃｃ  ｃｃａｔｃｃａｇｃｃ  ｃｃｇｔｇｔｃｔｇｇ  ｇａｇｃｃｔｇｔｇｃ  ｃｔｃｔｇｇａｇｇａ  ｇｇｔｃｃａａｔｔｇ
７２１  ｇｔｇｇｔｇｇａｇｃ  ｃａｇａａｇｇｔｇｇ  ａｇｃａｇｔａｇｃｔ  ｃｃｔｇｇｔｇｇａａ  ｃｃｇｔａａｃｃｃｔ  ｇａｃｃｔｇｔｇａａ
７８１  ｇｔｃｃｃｔｇｃｃｃ  ａｇｃｃｃｔｃｔｃｃ  ｔｃａａａｔｃｃａｃ  ｔｇｇａｔｇａａｇｇ  ａｔｇｇｇｇｔｇｃｃ  ｃｔｔｇｃｃｃｃｔｔ
８４１  ｃｃｃｃｃｃａｇｃｃ  ｃｔｇｔｇｃｔｇａｔ  ｃｃｔｃｃｃｔｇａｇ  ａｔａｇｇｇｃｃｔｃ  ａｇｇａｃｃａｇｇｇ  ａａｃｃｔａｃａｇｃ
９０１  ｔｇｔｇｔｇｇｃｃａ  ｃｃｃａｔｔｃｃａｇ  ｃｃａｃｇｇｇｃｃｃ  ｃａｇｇａａａｇｃｃ  ｇｔｇｃｔｇｔｃａｇ  ｃａｔｃａｇｃａｔｃ
９６１  ａｔｃｇｇｔｇａｇａ  ｃｃｔｃｔｃｃｃｃａ  ａｇｃｃｃｔａｃａｇ  ａｃｃｃｔｇｇｇａｃ  ｔａｇｇｇｔｇｃａｇ  ｇａｃａｇｃａｃａｇ
１０２１  ｇｃｔｃｔａａｔｔｔ  ｃｃｔｇｃｃｃｃａｔ  ｔｃｔｇｇｃｃｔｔａ  ｔｃｃｃｔａａｃａｇ  ｃｃａｃｃｃｃａｃｃ  ｔｃｔｃｃｃｔｃｃａ
１０８１  ｔｇｃａｃｃｃａｃａ  ｃｃｃａａｇｃｃｔｃ  ｃｃｃｔｇｃｃｃｃａ  ｃｃｃａａａｔｔｃｔ  ｇｃｃａａｇａｇａｇ  ｃａｇｃｃａａｇｃｃ
１１４１  ｔｃｔｃｃｃｔｔｃｔ  ｔｃｃｃｔｃｔｇａｇ  ｃｔａａ
【図１】
2019518735.tif 000003
【図２Ａ】
2019518735.tif 000004
【図２Ｂ】
2019518735.tif 000005
【図２Ｃ】
2019518735.tif 000006
【図３】
2019518735.tif 000007
【図４】
2019518735.tif 000008
【図５】
2019518735.tif 000009
【図６】
2019518735.tif 000010
【図７】
2019518735.tif 000011
【図８】
2019518735.tif 000012
【図９】
2019518735.tif 000013
【図１０】
2019518735.tif 000014
【配列表】
2019518735000001.app
【国際調査報告】
2019518735.tif 000015
2019518735.tif 000016