(57)【要約】  ジアミノフェノチアジニウム化合物の、迅速かつ効果的にその高い純度での調製を可能にする方法が開示される。【指定図】図１
2019518827.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
高い純度でのジアミノフェノチアジニウム化合物の調製方法であって、前記方法が、
１）  粗製の式Ａのジアミノフェノチアジニウム化合物を準備するステップと、
【化１】
2019518827.tif 000011
（式（Ａ）中、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４は、互いに独立に、
−  ハロゲン原子、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ基、Ｃ１−Ｃ４アルキルオキシカルボニル基もしくは−ＣＯＮＨ２から選択される一つ以上の官能基により任意に置換されてもよい、飽和もしくは不飽和の、直鎖状、分枝状もしくは環状のＣ１−Ｃ６アルキル基、
−  Ｃ１−Ｃ４アルキル基、ハロゲン原子、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ基、Ｃ１−Ｃ４アルキルオキシカルボニル基もしくは−ＣＯＮＨ２から選択される一つ以上の官能基により任意に置換されてもよいアリール基、または
−  水素原子であり、
Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０は、互いに独立に、
−  水素原子、
−  ハロゲン原子、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ基、Ｃ１−Ｃ４アルキルオキシカルボニル基もしくは−ＣＯＮＨ２から選択される一つ以上の官能基により任意に置換されてもよい、飽和もしくは不飽和の、直鎖状、分枝状もしくは環状のＣ１−Ｃ６アルキル基、
−  Ｃ１−Ｃ４アルキル基、ハロゲン原子、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ基、Ｃ１−Ｃ４アルキルオキシカルボニル基もしくは−ＣＯＮＨ２から選択される一つ以上の官能基により任意に置換されてもよいアリール基、または
−  ハロゲン原子であり、
Ｘ−は有機または無機アニオンである）
２）  粗製の式Ａのジアミノフェノチアジニウム化合物と、還元剤と、Ｒ１１基を含む保護剤との反応により、式Ｂの化合物を合成するステップと、
【化２】
2019518827.tif 000012
（式（Ｂ）中、
Ｒ１〜Ｒ１０は式（Ａ）と同様であり、
Ｒ１１は、
−  水素原子、
−    Ｃ１−Ｃ４アルキル基、ハロゲン原子、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ基もしくはニトロ基により任意に置換されてもよいフェニル基もしくはベンジル基、
直鎖状、分枝状もしくは環状のＣ１−Ｃ８アルキル基、
Ｃ１−Ｃ８アルキルアミノ基、
Ｃ１−Ｃ８アルコキシ基、または、
Ｃ１−Ｃ４アルキル基、ハロゲン原子、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ基もしくはニトロ基により任意に芳香環が置換されたフェニルオキシ基もしくはベンジルオキシ基、
により官能化された、カルボニル基もしくはチオカルボニル基である）
３）  安定なフリーラジカル剤による式Ｂの化合物の酸化により、式Ａのジアミノフェノチアジニウム化合物を得るステップであって、前記安定なフリーラジカル剤が、プロキシル（２，２，５，５−テトラメチル−１−ピロリジニルオキシ）、３−カルボキシル−プロキシル、３−カルバモイル−プロキシル、２，２−ジメチル−４，５−シクロヘキシル−プロキシル、３−オキソ−プロキシル、３−ヒドロキシルイミン−プロキシル、３−アミノメチル−プロキシル、３−メトキシ−プロキシル、３−ｔ−ブチル−プロキシル、３−マレイミド−プロキシル、３，４−ジ−ｔ−ブチル−プロキシル、３−カルボキシル−２，２，５，５テトラメチル−１−ピロリジニルオキシ、ＴＥＭＰＯ（すなわち２，２，６，６−テトラメチル−１−ピペリジニルオキシ）、ＮＨＡｃ−ＴＥＭＰＯ、４−Ｃ１−６−アルキルオキシ−ＴＥＭＰＯ、４−ベンゾキシルオキシ−ＴＥＭＰＯ、４−メトキシ−ＴＥＭＰＯ、４−カルボキシル−４−アミノ−ＴＥＭＰＯ、４−クロロ−ＴＥＭＰＯ、４−ヒドロキシルイミン−ＴＥＭＰＯ、４−ヒドロキシ−ＴＥＭＰＯ、４−オキソ−ＴＥＭＰＯ、４−オキソ−ＴＥＭＰＯ−エチレンケタール、４−アミノ−ＴＥＭＰＯ、２，２，６，６−テトラエチル−１−ピペリジニルオキシ、２，２，６−トリメチル−６−エチル１−ピペリジニルオキシ、ジ−ｔ−ブチルニトロオキシド、ジ−ｔ−ブチルニトロキシル、ジフェニルニトロオキシド、ジフェニルニトロキシル、ｔ−ブチル−ｔ−アミルニトロオキシド、ＤＯＸＹＬ（４，４−ジメチル−１−オキサゾリジニルオキシ）、２−ジ−ｔ−ブチル−ドキシル、５−デカン−ドキシル、２−シクロヘキサン−ドキシル、２，５−ジメチル−３，４−ジカルボキシル−ピロール、２，５−ジメチル−３，４−ジエチルエステル−ピロール、２，３，４，５−テトラフェニル−ピロール、３−シアノ−ピロリン−３−カルバモイル−ピロリン、３−カルボキシル−ピロリン、１，１，３，３−テトラメチルイソインドリン−２−イルオキシル、１，１，３，３−テトラエチルイソインドリン−２−イルオキシル、５−シクロヘキシルポルフィレキシドニトロキシル、２，２，４，５，５−ペンタメチル−［ＤＥＬＴＡ］３−イミダゾリン−３−オキシド−１−オキシル、ガルビノキシル、１，３，３−トリメチル−２−アザビシクロ［２，２，２］オクタン−５−オン−２−オキシド、１−アザビシクロ［３，３，１］ノナン−２−オキシド、２−アザアダマンタン  Ｎ−オキシル（ＡＺＡＤＯ）、９−アザビシクロ［３．３．１］ノナンＮ−オキシル（ＡＢＮＯ）、９−アザノルアダマンタン  Ｎ−オキシル（ノルＡＺＡＤＯ）、またはそれらの混合物であるステップと、
を含む前記方法。
【請求項２】
前記粗製の式Ａのジアミノフェノチアジニウム化合物が、粗メチレンブルー、メチレンブルー亜鉛複塩またはそれらの混合物から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
ステップ３）がワンポットでの合成ステップである、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記安定なフリーラジカル剤が、ＴＥＭＰＯ、ＮＨＡｃ−ＴＥＭＰＯ、４−Ｃ１−６−アルキルオキシ−ＴＥＭＰＯ、４−ベンゾキシルオキシ−ＴＥＭＰＯ、４−メトキシ−ＴＥＭＰＯ、４−カルボキシル−４−アミノ−ＴＥＭＰＯ、４−クロロ−ＴＥＭＰＯ、４−ヒドロキシルイミン−ＴＥＭＰＯ、４−ヒドロキシ−ＴＥＭＰＯ、４−オキソ−ＴＥＭＰＯ、４−オキソ−ＴＥＭＰＯ−エチレンケタール、４−アミノ−ＴＥＭＰＯ、２，２，６，６−テトラエチル−１−ピペリジニルオキシ、２，２，６−トリメチル−６−エチル１−ピペリジニルオキシ、１，３，３−トリメチル−２−アザビシクロ［２，２，２］オクタン−５−オン−２−オキシド、１−アザビシクロ［３，３，１］ノナン−２−オキシド、２−アザアダマンタン  Ｎ−オキシル（ＡＺＡＤＯ）、９−アザビシクロ［３．３．１］ノナンＮ−オキシル（ＡＢＮＯ）、９−アザノルアダマンタン  Ｎ−オキシル（ノルＡＺＡＤＯ）、またはそれらの混合物である、請求項１から３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５】
前記安定なフリーラジカル剤が、ＴＥＭＰＯ、ＮＨＡｃ−ＴＥＭＰＯ、４−メトキシ−ＴＥＭＰＯ、４−カルボキシル−４−アミノ−ＴＥＭＰＯ、４−クロロ−ＴＥＭＰＯ、４−ヒドロキシルイミン−ＴＥＭＰＯ、４−ヒドロキシ−ＴＥＭＰＯ、４−オキソ−ＴＥＭＰＯ、４−アミノ−ＴＥＭＰＯ、２−アザアダマンタン  Ｎ−オキシル（ＡＺＡＤＯ）、９−アザビシクロ［３．３．１］ノナン  Ｎ−オキシル（ＡＢＮＯ）、９−アザノルアダマンタン  Ｎ−オキシル（ノルＡＺＡＤＯ）またはそれらの混合物である、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記安定なフリーラジカル剤が、ＴＥＭＰＯ、４−ヒドロキシ−ＴＥＭＰＯ、２−アザアダマンタン  Ｎ−オキシル（ＡＺＡＤＯ）またはそれらの混合物である、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記安定なフリーラジカル剤が、４−ヒドロキシ−ＴＥＭＰＯである、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記安定なフリーラジカル剤が、ステップ３）において用いられる酸化剤のみである、請求項１から７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９】
ステップ３）の終了時、得られた生成物が沈殿および洗浄により反応混合液から回収される、請求項１から８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
ステップ３）において、前記安定なフリーラジカル剤が、最高６０重量％の安定なフリーラジカル剤を含む、好ましくは１０〜５０重量％の安定なフリーラジカル剤を含む水溶液として添加される、請求項１から９のいずれか１項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ジアミノフェノチアジニウム化合物の、迅速かつ効果的にその高い純度での調製を可能にする方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
ジアミノフェノチアジニウム構造を有する着色剤が既知である。その中で、最も周知のものは塩化メチルチオニニウム（塩化３，７−ビス（ジメチルアミノ）−５−フェノチアジンイウム）であり、一般にメチレンブルーとして公知であり、その伝統的な使用に加え、数多くの医療用途に使用されている。その採りうる共鳴構造の１つを、式Ｉに示す：
【０００３】
【化１】
2019518827.tif 000003
【０００４】
医学分野において、メチレンブルーは、シアン化物、メトヘモグロビン血症誘導剤（例えばフェナセチン、亜硝酸塩、アニリン、スルホンアミド）および一酸化炭素による中毒の解毒剤として用いられる。それはまた、クロモ診断またはクロモ内視鏡検査薬剤としても用いられる。それは近年では、神経変性疾患、ウイルス感染、双極性障害の治療への、またリンパ系のトレーサーとしての使用が提案されている。
【０００５】
メチレンブルーの合成プロセスは、最初に１８７７年に開発された（特許文献１、Ｂａｄｉｓｃｈｅ  Ａｎｉｌｉｎ−ｕｎｄ  Ｓｏｄａ  Ｆａｂｒｉｋ）。長年にわたり、該プロセスは改訂および改善されたが、それは未だ、鉄、クロミウム、亜鉛、アルミニウム、銅、マンガンおよび亜鉛を主成分とする多数の試薬および金属触媒の使用に基づくものである。したがって、金属種のメチレンブルーへの混入が一つの課題であり、また医学分野へのこの物質の使用に対する制約となっている。
【０００６】
工業的に生産されたメチレンブルーにはまた、フェノサイアジン構造の３および５位に存在するジメチルアミン基の脱メチルから生じるいくつかの有機不純物の存在という課題が残る。かかる不純物は、一般に「アズール」と呼ばれる、式ＩＩに記載のものである：
【０００７】
【化２】
2019518827.tif 000004
【０００８】
最新の薬局方（例えばヨーロッパ薬局方および米国薬局方）に記載のように、医学分野へのメチレンブルーの使用は、金属不純物および有機不純物の両方に対する規制が必要となる。
【０００９】
ジアミノフェノチアジニウム構造が埋没していること、および有機混入物質との化学的類似性の影響から、金属不純物からの、およびアズール誘導体からのメチレンブルーの精製のための簡便な解決手段が存在しない。
【００１０】
診断法の色素として用いられるアズール誘導体の精製も同様である。
【００１１】
改良ライト−ギムザ染色は通常、末梢血液塗抹標本の染色に用いられる。ライト・ギムザ迅速染色では、リン酸緩衝液の存在下では、アズールＢおよびエオシンを用いる。アズールＢ（青／紫色）は、正に荷電していることから、例えば核酸および核タンパク、好塩基性顆粒および酸性タンパク質、好中性顆粒（わずかに酸性）などの酸性の細胞構造に対して特異的である。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１２】
【特許文献１】独国特許発明第１８８６号明細書
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１３】
したがって、本発明の課題は、ジアミノフェノチアジニウム化合物の、迅速かつ効果的にその高い純度での調製を可能にする方法を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１４】
前記課題は、請求項１に記載のジアミノフェノチアジニウム化合物の調製方法により解決される。
【００１５】
本発明の特性および有利な効果は、以下の詳細な説明、説明の便宜上提供される実施例、および添付の図面から明らかとなる。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】本発明の調製スキームを示す。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
したがって、本発明は、高い純度でのジアミノフェノチアジニウム化合物の調製方法に関し、前記方法は以下のステップを含む：
１）  粗製の式Ａのジアミノフェノチアジニウム化合物を準備するステップと、
【００１８】
【化３】
2019518827.tif 000005
【００１９】
（式Ａ中、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４は、互いに独立に、
−  ハロゲン原子、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ基、Ｃ１−Ｃ４アルキルオキシカルボニル基もしくは−ＣＯＮＨ２から選択される一つ以上の官能基により任意に置換されてもよい、飽和もしくは不飽和の、直鎖状、分枝状もしくは環状のＣ１−Ｃ６アルキル基、
−  Ｃ１−Ｃ４アルキル基、ハロゲン原子、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ基、Ｃ１−Ｃ４アルキルオキシカルボニル基もしくは−ＣＯＮＨ２から選択される一つ以上の官能基により任意に置換されてもよいアリール基、または
−水素原子であり、
Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０は、互いに独立に、
−水素原子、
−  ハロゲン原子、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ基、Ｃ１−Ｃ４アルキルオキシカルボニル基もしくは−ＣＯＮＨ２から選択される一つ以上の官能基により任意に置換されてもよい、飽和もしくは不飽和の、直鎖状、分枝状もしくは環状のＣ１−Ｃ６アルキル基、
−  Ｃ１−Ｃ４アルキル基、ハロゲン原子、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ基、Ｃ１−Ｃ４アルキルオキシカルボニル基もしくは−ＣＯＮＨ２から選択される一つ以上の官能基により任意に置換されてもよいアリール基、または
−  ハロゲン原子であり、
Ｘ−は有機または無機アニオンである）
２）  粗製の式Ａのジアミノフェノチアジニウム化合物と、還元剤と、Ｒ１１基を含む保護剤との反応により、式Ｂの化合物を合成するステップと、
【００２０】
【化４】
2019518827.tif 000006
【００２１】
（式Ｂ中、
Ｒ１〜Ｒ１０は式Ａと同様であり、
Ｒ１１は、
−  水素原子、または、
−    Ｃ１−Ｃ４アルキル基、ハロゲン原子、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ基もしくはニトロ基により任意に置換されてもよいフェニル基もしくはベンジル基、
直鎖状、分枝状もしくは環状のＣ１−Ｃ８アルキル基、
Ｃ１−Ｃ８アルキルアミノ基、
Ｃ１−Ｃ８アルコキシ基、または、
Ｃ１−Ｃ４アルキル基、ハロゲン原子、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ基もしくはニトロ基により任意に芳香環が置換されたフェニルオキシ基もしくはベンジルオキシ基、
により官能化された、カルボニル基もしくはチオカルボニル基である）
３）  安定なフリーラジカル剤による式Ｂの化合物の酸化により、式Ａのジアミノフェノチアジニウム化合物を得るステップであって、前記安定なフリーラジカル剤は、プロキシル（２，２，５，５−テトラメチル−１−ピロリジニルオキシ）、３−カルボキシル−プロキシル、３−カルバモイル−プロキシル、２，２−ジメチル−４，５−シクロヘキシル−プロキシル、３−オキソ−プロキシル、３−ヒドロキシルイミン−プロキシル、３−アミノメチル−プロキシル、３−メトキシ−プロキシル、３−ｔ−ブチル−プロキシル、３−マレイミド−プロキシル、３，４−ジ−ｔ−ブチル−プロキシル、３−カルボキシル−２，２，５，５テトラメチル−１−ピロリジニルオキシ、ＴＥＭＰＯ（すなわち２，２，６，６−テトラメチル−１−ピペリジニルオキシ）、ＮＨＡｃ−ＴＥＭＰＯ、４−Ｃ１−６−アルキルオキシ−ＴＥＭＰＯ、４−ベンゾキシルオキシ−ＴＥＭＰＯ、４−メトキシ−ＴＥＭＰＯ、４−カルボキシル−４−アミノ−ＴＥＭＰＯ、４−クロロ−ＴＥＭＰＯ、４−ヒドロキシルイミン−ＴＥＭＰＯ、４−ヒドロキシ−ＴＥＭＰＯ、４−オキソ−ＴＥＭＰＯ、４−オキソ−ＴＥＭＰＯ−エチレンケタール、４−アミノ−ＴＥＭＰＯ、２，２，６，６−テトラエチル−１−ピペリジニルオキシ、２，２，６−トリメチル−６−エチル１−ピペリジニルオキシ、ジ−ｔ−ブチルニトロオキシド、ジ−ｔ−ブチルニトロキシル、ジフェニルニトロオキシド、ジフェニルニトロキシル、ｔ−ブチル−ｔ−アミルニトロオキシド、ＤＯＸＹＬ（４，４−ジメチル−１−オキサゾリジニルオキシ）、２−ジ−ｔ−ブチル−ドキシル、５−デカン−ドキシル、２−シクロヘキサン−ドキシル、２，５−ジメチル−３，４−ジカルボキシル−ピロール、２，５−ジメチル−３，４−ジエチルエステル−ピロール、２，３，４，５−テトラフェニル−ピロール、３−シアノ−ピロリン−３−カルバモイル−ピロリン、３−カルボキシル−ピロリン、１，１，３，３−テトラメチルイソインドリン−２−イルオキシル、１，１，３，３−テトラエチルイソインドリン−２−イルオキシル、５−シクロヘキシルポルフィレキシドニトロキシル、２，２，４，５，５−ペンタメチル−［ＤＥＬＴＡ］３−イミダゾリン−３−オキシド−１−オキシル、ガルビノキシル、１，３，３−トリメチル−２−アザビシクロ［２，２，２］オクタン−５−オン−２−オキシド、１−アザビシクロ［３，３，１］ノナン−２−オキシド、２−アザアダマンタン  Ｎ−オキシル（ＡＺＡＤＯ）、９−アザビシクロ［３．３．１］ノナンＮ−オキシル（ＡＢＮＯ）、９−アザノルアダマンタン  Ｎ−オキシル（ノルＡＺＡＤＯ）、またはそれらの混合物であるステップ。
【００２２】
好ましい実施形態では、前記粗製の式Ａのジアミノフェノチアジニウム化合物は、粗メチレンブルー、メチレンブルー亜鉛複塩およびそれらの混合物から選択される。
【００２３】
好ましくは、前記安定なフリーラジカル剤は、ＴＥＭＰＯ（すなわち２，２，６，６−テトラメチル−１−ピペリジニルオキシ）、ＮＨＡｃ−ＴＥＭＰＯ、４−Ｃ１−６−アルキルオキシ−ＴＥＭＰＯ、４−ベンゾキシルオキシ−ＴＥＭＰＯ、４−メトキシ−ＴＥＭＰＯ、４−カルボキシル−４−アミノ−ＴＥＭＰＯ、４−クロロ−ＴＥＭＰＯ、４−ヒドロキシルイミン−ＴＥＭＰＯ、４−ヒドロキシ−ＴＥＭＰＯ、４−オキソ−ＴＥＭＰＯ、４−オキソ−ＴＥＭＰＯ−エチレンケタール、４−アミノ−ＴＥＭＰＯ、２，２，６，６−テトラエチル−１−ピペリジニルオキシ、２，２，６−トリメチル−６−エチル１−ピペリジニルオキシ、１，３，３−トリメチル−２−アザビシクロ［２，２，２］オクタン−５−オン−２−オキシド、１−アザビシクロ［３，３，１］ノナン−２−オキシド、２−アザアダマンタン  Ｎ−オキシル（ＡＺＡＤＯ）、９−アザビシクロ［３．３．１］ノナンＮ−オキシル（ＡＢＮＯ）、９−アザノルアダマンタン  Ｎ−オキシル（ノルＡＺＡＤＯ）、またはそれらの混合物である。
【００２４】
好ましい実施形態では、前記安定なフリーラジカル剤は、ＴＥＭＰＯ（すなわち２，２，６，６−テトラメチル−１−ピペリジニルオキシ）、ＮＨＡｃ−ＴＥＭＰＯ、４−メトキシ−ＴＥＭＰＯ、４−カルボキシル−４−アミノ−ＴＥＭＰＯ、４−クロロ−ＴＥＭＰＯ、４−ヒドロキシルイミン−ＴＥＭＰＯ、４−ヒドロキシ−ＴＥＭＰＯ、４−オキソ−ＴＥＭＰＯ、４−アミノ−ＴＥＭＰＯ、２−アザアダマンタン  Ｎ−オキシル（ＡＺＡＤＯ）、９−アザビシクロ［３．３．１］ノナン  Ｎ−オキシル（ＡＢＮＯ）、９−アザノルアダマンタン  Ｎ−オキシル（ノルＡＺＡＤＯ）またはそれらの混合物である。
【００２５】
特に好ましい実施形態では、前記安定なフリーラジカル剤は、ＴＥＭＰＯ（すなわち２，２，６，６−テトラメチル−１−ピペリジニルオキシ）、４−ヒドロキシ−ＴＥＭＰＯ、２−アザアダマンタン  Ｎ−オキシル（ＡＺＡＤＯ）またはそれらの混合物である。
【００２６】
最も好ましい実施形態では、前記安定なフリーラジカル剤は、４−ヒドロキシ−ＴＥＭＰＯである。
【００２７】
好ましくは、ステップ２）は１０〜６０℃の温度で、より好ましくは室温で実施される。
【００２８】
好ましくは、ステップ２）はワンポットでの合成ステップである。これは、粗製の式Ａのジアミノフェノチアジニウムを、還元剤およびＲ１１基を有する保護剤と反応させて式Ｂの化合物を得るステップが、単一の反応環境において、または単一容器もしくは反応器において起こることを意味する。
【００２９】
このようにして、得られた中間体生成物の長い分離および精製プロセスを用いることを回避でき、それにより、時間のみならず資源（装置、化学品、溶媒など）の節約にもなる。さらに、その結果、中間物質のロスを減少させることで、化学収率を増加させることができる。
【００３０】
好ましくは、ステップ３）は、−１０〜２０℃、より好ましくは０〜５℃の温度で実施される。
【００３１】
好ましい実施形態では、ステップ３）の前に、式Ｂの化合物を、キレート化剤（例えばエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）またはその塩）の添加により精製し、次に再結晶化する。キレート化剤の添加により、反応環境中に存在するいかなる金属も、抽出により除去できる。
【００３２】
好ましくは、前記安定なフリーラジカル剤は、本発明の方法のステップ３において用いられる酸化剤のみである。
【００３３】
好ましくは、ステップ３）において、前記安定なフリーラジカル剤は、固体の状態で、または水溶液の状態で反応系中に添加される。
【００３４】
好ましい実施形態では、前記水溶液は、最大６０重量％の安定なフリーラジカル剤を含む。より好ましくは、前記水溶液は、１０〜５０重量％の安定なフリーラジカル剤を含む。
【００３５】
特に好ましい実施形態では、前記水溶液は、２０〜４０重量％の安定なフリーラジカル剤を含む。
【００３６】
より好ましくは、ＴＥＭＰＯ（すなわち２，２，６，６−テトラメチル−１−ピペリジニルオキシ）、４−ヒドロキシ−ＴＥＭＰＯ、２−アザアダマンタン  Ｎ−オキシル（ＡＺＡＤＯ）およびそれらの混合物から選択される安定なフリーラジカル剤を２０〜４０重量％含む水溶液である。
【００３７】
好ましくは、粗製の式Ａのジアミノフェノチアジニウム化合物において、Ｘ−は、塩化物イオン、臭化物イオン、ヨウ化物イオン、塩化亜鉛複塩、硫酸イオン、リン酸イオン、硝酸イオン、酢酸イオン、トリフルオロ酢酸イオン、シュウ酸イオン、酒石酸イオン、スクシナートイオン、リンゴ酸イオン、フマル酸イオン、グルコン酸イオン、クエン酸イオン、マレイン酸イオン、アスコルビン酸イオン、安息香酸イオン、ＯＨ−およびそれらの組合せから選択される有機または無機アニオンである。
【００３８】
上記の方法によって得られる粗製の式Ａのジアミノフェノチアジニウム化合物において、Ｘ−は出発物質の粗ジアミノフェノチアジニウム化合物と同じアニオンであるか、または異なってもよいが、それは上記したものから選択される。
【００３９】
好ましくは、前記還元剤は、亜ジチオン酸ナトリウム、水素化ホウ素ナトリウム、メチルヒドラジン、ヒドラジン、水和ヒドラジン、アスコルビン酸、蟻酸、水素、シュウ酸、ジチオスレイトール、亜リン酸塩、ホスフィン酸塩およびそれらの混合物から選択される。
【００４０】
好ましい実施形態では、前記還元剤は亜ジチオン酸ナトリウムである。
【００４１】
好ましくは、前記Ｒ１１基を含む保護剤は、ベンゾイルクロリド、安息香酸無水物、塩化メチルベンゾイル、臭化ベンゾイル、臭化メチルベンゾイル、塩化ジメチルベンゾイル、塩化クロロベンゾイル、塩化ジクロロベンゾイル、塩化メトキシベンゾイル、塩化ニトロベンゾイル、塩化アセチル、無水酢酸、プロピオン酸クロライド、無水プロピオン酸、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート、クロロギ酸ベンジル、クロロギ酸エチルおよびそれらの混合物から選択される。
【００４２】
ステップ３）の終了時、メチルイソブチルケトン、トルエン、アセトン、ジクロロメタン、ジイソプロピルエーテル、メチル−ｔｅｒｔ−ブチルエーテルまたはそれらの混合物などの適切な溶媒で洗浄することにより、Ｒ１１基を含む保護剤が除去される。
【００４３】
好ましい実施形態では、メチレンブルー亜鉛複塩（ＭＢ  ｚｄｓ）を用いてもよく、それを亜ジチオン酸ナトリウムを含む水溶液において還元し、次に相間移動触媒として臭化テトラブチルアンモニウムを用いた二相系のベンゾイル化により保護する。このようにして、Ｎ−ベンゾイル−ロイコメチレンブルー（略してＮ−Ｂｚ−ＬＭＢ）が得られる。
【００４４】
好ましくは、Ｎ−Ｂｚ−ＬＭＢをＥＤＴＡ処理して金属を除去し、次に２−プロパノールと熱処理することにより精製する。
【００４５】
Ｎ−Ｂｚ−ＬＭＢを次に加水分解し、ＨＣｌ水溶液中の４−ヒドロキシ−ＴＥＭＰＯを用いて低温で酸化させる。
【００４６】
得られる生成物を沈殿させて反応混合物から回収し、好ましくはメチルイソブチルケトンおよび酸性水により洗浄する。メチレンブルーは、好ましくは水から、より好ましくは酸性水から再結晶化させ、乾燥させる。
【００４７】
好ましくは、ステップ３）はワンポットでの合成ステップである。これは、式Ａのジアミノフェノチアジニウム化合物を得るための、加水分解、および安定なフリーラジカル剤による式Ｂの化合物の酸化が、単一の反応環境において、または単一容器もしくは反応器において生じることを意味する。
【００４８】
驚くべきことに、本発明のプロセスにより、数少ないステップで、反応中間体の分離をほとんど行うことなく、高い純度でのジアミノフェノチアジニウム化合物の取得が可能となり、工程全体のスピード、ならびに、環境およびヒトに対する安全性に関する顕著な効果を奏することが解った。
【００４９】
下記の実施例に示すように、達成される純度は、９５％超、好ましくは９７％超であった。
【００５０】
特に、酸性水溶液における安定なフリーラジカル剤は、有効な酸化剤として作用することにより不均化を起こす傾向があり、同時に水溶液中に残留し、それにより、沈殿する代わりに、自然とジアミノフェノチアジニウム生成物から分離される。
【００５１】
他の公知の酸化剤（例えば水溶液中で非常に有毒なＨＣＮを放出する傾向があるＤＤＱ）とは異なり、これは最終的な化合物の純度を増加させるだけでなく、プロセスの安全性にも役立つ。前記のように、医学分野ではメチレンブルーがシアン化物中毒の場合の解毒剤として用いられることを考えれば、ＤＤＱの使用はさらに不適切である。
【００５２】
ステップ１）の粗製の式Ａのジアミノフェノチアジニウム化合物は、市販の製品である。
【００５３】
あるいは、該化合物は以下の合成経路を用いて調製されてもよい。
【００５４】
出発原料としてＮ、Ｎ−ジメチルアニリンを用いるＭＢ  ｚｄｓおよび粗ＭＢによる合成反応により、ＭＢの三環構造が得られるが、最初に低温でＨＣｌ水溶液中のＮａＮＯ２による処理によりＮ，Ｎ−ジメチル−４−ニトロソアニリンに変化する。
【００５５】
Ｎ，Ｎ−ジメチル−４−ニトロソアニリンの窒素含有基は、低温で亜鉛粉による処理によりアミノ基に還元される。過剰な亜鉛を濾過して除去し、Ｎ，Ｎ−ジメチル−パラフェニレンジアミン塩酸塩を含む母液を次のステップで直接用いる。
【００５６】
塩化亜鉛、硫酸アルミニウム、チオ硫酸ナトリウムおよびクロム酸をそれぞれ含む４つの溶液を、前のステップの水溶液に順次添加する。
【００５７】
反応混合物は、中間体１を含む：
【００５８】
【化５】
2019518827.tif 000007
【００５９】
中間体１は、更なる処理をせずに次のステップで直接用いられる。
【００６０】
Ｎ、Ｎ−ジメチルアニリンおよびクロム酸をそれぞれ含む２つの溶液を、中間体１を含む混合液に順次添加する。
【００６１】
反応混合物は、中間体２を含む：
【００６２】
【化６】
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【００６３】
中間体２は、更なる処理をせずに次のステップで直接用いられる。
【００６４】
中間体２を含む混合液に二酸化マンガンを添加し、加熱し最終的に環化させる。沈殿物を濾過して回収し、熱水に溶解させる。塩化亜鉛および塩化ナトリウムを添加してＭＢ  ｚｄｓを溶液から沈殿させ、次にそれを水により結晶化させる。
【００６５】
上記の化合物および調製プロセスの全ての好適な態様の組合せは、本願明細書において記載されていると考えられる。
【００６６】
説明の便宜上、以下に本発明の実施例を示す。
【実施例】
【００６７】
［実施例１］メチレンブルーの調製
１）Ｎ−ベンゾイル−ロイコ−メチレンブルー（略してＮ−Ｂｚ−ＬＭＢ）の合成：
【００６８】
【化７】
2019518827.tif 000009
【００６９】
２．５Ｌの水および２５０ｇのメチレンブルー亜鉛複塩を、１０Ｌのフラスコに添加する。窒素雰囲気下で、１７６ｇの亜ジチオン酸ナトリウムを添加する。それを１時間室温で撹拌する。
【００７０】
同じフラスコに、２．５Ｌのジクロロメタンおよび２５ｇの臭化テトラブチルアンモニウムを添加する。２１５ｇの３２％  ＮａＯＨおよび１６５ｇのベンゾイルクロリドを滴下して添加する。それを２時間撹拌する。３２ｇの二ナトリウムＥＤＴＡを添加し、３２％のＮａＯＨによりｐＨ１０に調整する。それを１時間撹拌する。相分離が生じる。有機相を水で洗浄する。溶媒を真空下で揮発させ除去する。２−プロパノールを添加し、還流しながら加温する。それを冷却し、濾過し、真空下で乾燥させ、２４５ｇのＮ−Ｂｚ−ＬＭＢを得る。
【００７１】
２）メチレンブルー（略してＭＢ）の酸化：
【００７２】
【化８】
2019518827.tif 000010
【００７３】
９０ｍＬの水および３１０ｇの３７％のＨＣｌを３Ｌのフラスコに添加する。それを約−５°Ｃに冷却する。７０ｇのＮ−Ｂｚ−ＬＭＢを添加する。４０重量％の４−ヒドロキシＴＥＭＰＯの水溶液１７３ｇを、−５°の温度に維持しながら２時間にわたり滴下して添加する。それを１時間撹拌する。１．１２Ｌの水および４００ｍＬのメチルイソブチルケトンを添加し、それを２時間室温で撹拌する。固形物を濾過し、０．１Ｎ  ＨＣｌにより洗浄する。ウェットな生成物および１．６Ｌの水を適切なフラスコに添加する。それを６５°Ｃに加熱し、次に室温で再水和させる。３７％のＨＣｌによりｐＨを１に調整し、それを１６時間撹拌する。固形物を濾過し、０．１Ｎ  ＨＣｌにより洗浄する。それを真空乾燥させ、５０ｇのＭＢを得る。
【００７４】
このように得られたＭＢ生成物は、以下の性質を有する：純度：９７．８％、アズールＢ：２．２％、金属含量はヨーロッパ薬局方８．０に規定の限度の範囲内、乾燥減量：１４％。
【００７５】
得られたデータは、最新の薬局方により定義される規格に適合する。
【００７６】
［実施例２］メチレンブルーの調製
１）Ｎ−ベンゾイル−ロイコ−メチレンブルーの合成：
ＭＢ  ｚｄｓの代わりに出発原料として粗メチレンブルーを用い、実施例１の方法に従い行った。
【００７７】
２）メチレンブルーの酸化：
実施例１の方法に従い行った。
得られたＭＢ生成物は、９７．９％の純度を有する。
【００７８】
［実施例３］メチレンブルーの調製
１）Ｎ−ベンゾイル−ロイコ−メチレンブルーの合成：
ＭＢ  ｚｄｓの代わりに出発原料として粗メチレンブルーを用い、実施例１の方法に従い行った。
【００７９】
２）メチレンブルーの酸化：
４−ヒドロキシＴＥＭＰＯの代わりにＴＥＭＰＯを、２０重量％の水溶液において用い、実施例１の方法に従い行った。
得られたＭＢ生成物は、９７．７％の純度を有する。
【００８０】
［実施例４］メチレンブルーの調製
１）Ｎ−ベンゾイル−ロイコ−メチレンブルーの合成：
ＭＢ  ｚｄｓの代わりに出発原料として粗メチレンブルーを用い、実施例１の方法に従い行った。
【００８１】
２）メチレンブルーの酸化：
４−ヒドロキシＴＥＭＰＯの代わりにＡＺＡＤＯを、２５重量％の酸性水溶液において用い、実施例１の方法に従い行った。
得られたＭＢ生成物は、９７．６％の純度を有する。
【００８２】
［実施例５］メチレンブルーの調製
１）Ｎ−ベンゾイル−ロイコ−メチレンブルーの合成：
ＭＢ  ｚｄｓの代わりに出発原料として粗メチレンブルーを用い、実施例１の方法に従い行った。
【００８３】
２）メチレンブルーの酸化：
２０重量％の４−ヒドロキシＴＥＭＰＯの水溶液を用いて、実施例１の方法に従い行った。
得られたＭＢ生成物は、９７．５％の純度を有する。
【００８４】
［実施例６］メチレンブルーの調製
１）Ｎ−ベンゾイル−ロイコ−メチレンブルーの合成：
実施例１の方法に従い行った。
【００８５】
２）メチレンブルーの酸化：
３０重量％の４−ヒドロキシＴＥＭＰＯの水溶液を用いて、実施例１の方法に従い行った。
得られたＭＢ生成物は、９７．８％の純度を有する。
【００８６】
［実施例７］メチレンブルーの調製
１）Ｎ−ベンゾイル−ロイコ−メチレンブルーの合成：
実施例１の方法に従い行った。
【００８７】
２）メチレンブルーの酸化：
４−ヒドロキシＴＥＭＰＯの代わりにＮＨＡｃ−ＴＥＭＰＯを、２０重量％の水溶液において用い、実施例１の方法に従い行った。
得られたＭＢ生成物は、９７．８％の純度を有する。
【００８８】
［実施例８］メチレンブルーの調製
１）Ｎ−ベンゾイル−ロイコ−メチレンブルーの合成：
実施例１の方法に従い行った。
【００８９】
２）メチレンブルーの酸化：
４−ヒドロキシＴＥＭＰＯの代わりに３−カルバモイル−プロキシルを、２０重量％の水溶液において用い、実施例１の方法に従い行った。
得られたＭＢ生成物は、９７．１％の純度を有する。
【図１】
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【国際調査報告】
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