(57)【要約】本開示は、抗ＡＬＫ７抗体などのＡＬＫ７結合性タンパク質、及び組成物ならびにＡＬＫ７結合性タンパク質を作製するための方法を提供する。特定の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７活性を阻害する、または減弱させる。加えて、本開示は、過体重、肥満、糖尿病、過体重、肥満、２型糖尿病、及びそれらの関連状態；ＡＬＫ７を標的とすることにより処置する、予防する、または寛解させることができる代謝障害、及び他の疾患または状態を診断及び処置するための組成物及び方法を提供する。【選択図】図１
2019515676.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＣＤＲのセット：ＶＨ−ＣＤＲ１、ＶＨ−ＣＤＲ２、ＶＨ−ＣＤＲ３、ＶＬ−ＣＤＲ１、ＶＬ−ＣＤＲ２及びＶＬ−ＣＤＲ３を含む単離アクチビン受容体様キナーゼ７（ＡＬＫ７）結合性タンパク質であって、前記ＣＤＲが、
（ａ）
（ｉ）配列番号１０５のＶＨ配列、及び
（ｉｉ）配列番号１１０のＶＬ配列；
（ｂ）
（ｉ）配列番号１１７のＶＨ配列、及び
（ｉｉ）配列番号１２４のＶＬ配列；
（ｃ）
（ｉ）配列番号１２８のＶＨ配列、及び
（ｉｉ）配列番号１３５のＶＬ配列；
（ｄ）
（ｉ）配列番号１４０のＶＨ配列、及び
（ｉｉ）配列番号１４８のＶＬ配列；
（ｅ）
（ｉ）配列番号９１のＶＨ配列、及び
（ｉｉ）配列番号９８のＶＬ配列；
（ｆ）
（ｉ）配列番号４のＶＨ配列、及び
（ｉｉ）配列番号１３のＶＬ配列；
（ｇ）
（ｉ）配列番号１５２のＶＨ配列、及び
（ｉｉ）配列番号９８のＶＬ配列；
（ｈ）
（ｉ）配列番号１５９のＶＨ配列、及び
（ｉｉ）配列番号１１０のＶＬ配列；
（ｉ）
（ｉ）配列番号１６５のＶＨ配列、及び
（ｉｉ）配列番号１７１のＶＬ配列；
（ｊ）
（ｉ）配列番号２２のＶＨ配列、及び
（ｉｉ）配列番号３１のＶＬ配列；
（ｋ）
（ｉ）配列番号４０のＶＨ配列、及び
（ｉｉ）配列番号４９のＶＬ配列；
（ｌ）
（ｉ）配列番号５８のＶＨ配列、及び
（ｉｉ）配列番号６７のＶＬ配列
からなる群から選択される重鎖可変領域（ＶＨ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）対からなり；
かつＡＬＫ７に結合する、前記単離アクチビン受容体様キナーゼ７（ＡＬＫ７）結合性タンパク質。
【請求項２】
ＣＤＲのセット：ＶＨ−ＣＤＲ１、ＶＨ−ＣＤＲ２、ＶＨ−ＣＤＲ３、ＶＬ−ＣＤＲ１、ＶＬ−ＣＤＲ２及びＶＬ−ＣＤＲ３を含む単離ＡＬＫ７結合性タンパク質であって、前記ＣＤＲのセットが、
（ａ）
（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号１０２のアミノ酸配列を含み；
（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号１０３のアミノ酸配列を含み；
（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号１０４のアミノ酸配列を含み；
（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号１０７のアミノ酸配列を含み；
（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号１０８のアミノ酸配列を含み；及び
（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号１０９のアミノ酸配列を含む；
（ｂ）
（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号１１４のアミノ酸配列を含み；
（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号１１５のアミノ酸配列を含み；
（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号１１６のアミノ酸配列を含み；
（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号１２１のアミノ酸配列を含み；
（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号１２２のアミノ酸配列を含み；及び
（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号１２３のアミノ酸配列を含む；
（ｃ）
（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号１２５のアミノ酸配列を含み；
（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号１２６のアミノ酸配列を含み；
（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号１２７のアミノ酸配列を含み；
（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号１３２のアミノ酸配列を含み；
（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号１３３のアミノ酸配列を含み；及び
（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号１３４のアミノ酸配列を含む；または
（ｄ）
（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号１３７のアミノ酸配列を含み；
（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号１３８のアミノ酸配列を含み；
（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号１３９のアミノ酸配列を含み；
（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号１４５のアミノ酸配列を含み；
（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号１４６のアミノ酸配列を含み；及び
（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号１４７のアミノ酸配列を含む；
（ｅ）
（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号８８のアミノ酸配列を含み；
（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号８９のアミノ酸配列を含み；
（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号９０のアミノ酸配列を含み；
（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号９５のアミノ酸配列を含み；
（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号９６のアミノ酸配列を含み；及び
（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号９７のアミノ酸配列を含む；
（ｆ）
（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号３７のアミノ酸配列を含み；
（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号５６のアミノ酸配列を含み；
（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号９０のアミノ酸配列を含み；
（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号４２のアミノ酸配列を含み；
（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号４３のアミノ酸配列を含み；及び
（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号９３のアミノ酸配列を含む；
（ｇ）
（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号１５６のアミノ酸配列を含み；
（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号１５７のアミノ酸配列を含み；
（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号１０４のアミノ酸配列を含み；
（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号１０７のアミノ酸配列を含み；
（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号１０８のアミノ酸配列を含み；及び
（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号１０９のアミノ酸配列を含む；
（ｈ）
（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号１のアミノ酸配列を含み；
（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号１６３のアミノ酸配列を含み；
（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号１６４のアミノ酸配列を含み；
（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号１０７のアミノ酸配列を含み；
（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号１６８のアミノ酸配列を含み；及び
（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号１６９のアミノ酸配列を含む；
（ｉ）
（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号１のアミノ酸配列を含み；
（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号２のアミノ酸配列を含み；
（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号３のアミノ酸配列を含み；
（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号１０のアミノ酸配列を含み；
（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号１１のアミノ酸配列を含み；及び
（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号１２のアミノ酸配列を含む；
（ｊ）
（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号１９のアミノ酸配列を含み；
（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号２０のアミノ酸配列を含み；
（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号２１のアミノ酸配列を含み；
（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号２８のアミノ酸配列を含み；
（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号２９のアミノ酸配列を含み；及び
（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号３０のアミノ酸配列を含む；
（ｋ）
（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号３７のアミノ酸配列を含み；
（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号３８のアミノ酸配列を含み；
（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号３９のアミノ酸配列を含み；
（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号４６のアミノ酸配列を含み；
（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号４７のアミノ酸配列を含み；及び
（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号４８のアミノ酸配列を含む；ならびに
（ｌ）
（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号５５のアミノ酸配列を含み；
（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号５６のアミノ酸配列を含み；
（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号５７のアミノ酸配列を含み；
（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号６４のアミノ酸配列を含み；
（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号６５のアミノ酸配列を含み；及び
（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号６６のアミノ酸配列を含む
ＣＤＲの基準セットから合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１０未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有し、かつＡＬＫ７に結合する、前記単離ＡＬＫ７結合性タンパク質。
【請求項３】
ＣＤＲのセット：
（ａ）
（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号１０２のアミノ酸配列を含み；
（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号１０３のアミノ酸配列を含み；
（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号１０４のアミノ酸配列を含み；
（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号１０７のアミノ酸配列を含み；
（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号１０８のアミノ酸配列を含み；及び
（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号１０９のアミノ酸配列を含む；
（ｂ）
（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号１１４のアミノ酸配列を含み；
（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号１１５のアミノ酸配列を含み；
（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号１１６のアミノ酸配列を含み；
（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号１２１のアミノ酸配列を含み；
（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号１２２のアミノ酸配列を含み；及び
（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号１２３のアミノ酸配列を含む；
（ｃ）
（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号１２５のアミノ酸配列を含み；
（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号１２６のアミノ酸配列を含み；
（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号１２７のアミノ酸配列を含み；
（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号１３２のアミノ酸配列を含み；
（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号１３３のアミノ酸配列を含み；及び
（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号１３４のアミノ酸配列を含む；
（ｄ）
（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号１３７のアミノ酸配列を含み；
（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号１３８のアミノ酸配列を含み；
（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号１３９のアミノ酸配列を含み；
（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号１４５のアミノ酸配列を含み；
（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号１４６のアミノ酸配列を含み；及び
（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号１４７のアミノ酸配列を含む；
（ｅ）
（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号８８のアミノ酸配列を含み；
（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号８９のアミノ酸配列を含み；
（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号９０のアミノ酸配列を含み；
（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号９５のアミノ酸配列を含み；
（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号９６のアミノ酸配列を含み；及び
（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号９７のアミノ酸配列を含む；
（ｇ）
（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号３７のアミノ酸配列を含み；
（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号５６のアミノ酸配列を含み；
（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号９０のアミノ酸配列を含み；
（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号９５のアミノ酸配列を含み；
（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号９６のアミノ酸配列を含み；及び
（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号９７のアミノ酸配列を含む；
（ｈ）
（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号１５６のアミノ酸配列を含み；
（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号１５７のアミノ酸配列を含み；
（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号１０４のアミノ酸配列を含み；
（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号１０７のアミノ酸配列を含み；
（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号１０８のアミノ酸配列を含み；及び
（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号１０９のアミノ酸配列を含む；
（ｈ）
（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号１のアミノ酸配列を含み；
（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号１６３のアミノ酸配列を含み；
（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号１６４のアミノ酸配列を含み；
（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号１６７のアミノ酸配列を含み；
（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号１６８のアミノ酸配列を含み；及び
（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号１６９のアミノ酸配列を含む；
（ｉ）
（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号１のアミノ酸配列を含み；
（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号２のアミノ酸配列を含み；
（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号３のアミノ酸配列を含み；
（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号１０のアミノ酸配列を含み；
（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号１１のアミノ酸配列を含み；及び
（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号１２のアミノ酸配列を含む；
（ｊ）
（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号１９のアミノ酸配列を含み；
（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号２０のアミノ酸配列を含み；
（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号２１のアミノ酸配列を含み；
（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号２８のアミノ酸配列を含み；
（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号２９のアミノ酸配列を含み；及び
（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号３０のアミノ酸配列を含む；
（ｋ）
（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号３７のアミノ酸配列を含み；
（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号３８のアミノ酸配列を含み；
（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号３９のアミノ酸配列を含み；
（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号４６のアミノ酸配列を含み；
（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号４７のアミノ酸配列を含み；及び
（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号４８のアミノ酸配列を含む；または
（ｌ）
（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号５５のアミノ酸配列を含み；
（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号５６のアミノ酸配列を含み；
（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号５７のアミノ酸配列を含み；
（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号６４のアミノ酸配列を含み；
（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号６５のアミノ酸配列を含み；及び
（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号６６のアミノ酸配列を含む；
を含み；かつＡＬＫ７に結合する、請求項２に記載の単離ＡＬＫ７結合性タンパク質。
【請求項４】
ＡＬＫ７結合性タンパク質であって、
（ａ）
（ｉ）配列番号１０５に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＨ、及び
（ｉｉ）配列番号１１０に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＬ；
（ｂ）
（ｉ）配列番号１１７に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＨ、及び
（ｉｉ）配列番号１２４に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＬ；
（ｃ）
（ｉ）配列番号１２８に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＨ、及び
（ｉｉ）配列番号１３５に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＬ；
（ｄ）
（ｉ）配列番号１４０に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＨ、及び
（ｉｉ）配列番号１４８に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＬ；
（ｅ）
（ｉ）配列番号９１に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＨ、及び
（ｉｉ）配列番号９８に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＬ；
（ｆ）
（ｉ）配列番号１５２に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＨ、及び
（ｉｉ）配列番号９８に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＬ；
（ｇ）
（ｉ）配列番号１５９に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＨ、及び
（ｉｉ）配列番号１１０に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＬ；
（ｈ）
（ｉ）配列番号１６５に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＨ、及び
（ｉｉ）配列番号１７１に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＬ；
（ｉ）
（ｉ）配列番号４に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＨ、及び
（ｉｉ）配列番号１３に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＬ；
（ｊ）
（ｉ）配列番号２２に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＨ、及び
（ｉｉ）配列番号３１に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＬ；
（ｋ）
（ｉ）配列番号４０に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＨ、及び
（ｉｉ）配列番号４９に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＬ；ならびに
（ｌ）
（ｉ）配列番号５８に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＨ、及び
（ｉｉ）配列番号６７に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＬ
からなる群から選択されるＶＨ及びＶＬ対を含み；かつＡＬＫ７に結合する、前記ＡＬＫ７結合性タンパク質。
【請求項５】
前記ＶＨ及びＶＬ対が、
（ａ）配列番号１０５のＶＨ配列及び配列番号１１０のＶＬ配列；
（ｂ）配列番号１１７のＶＨ配列及び配列番号１２４のＶＬ配列；
（ｃ）配列番号１２８のＶＨ配列及び配列番号１３５のＶＬ配列；及び
（ｄ）配列番号１４０のＶＨ配列及び配列番号１４８のＶＬ配列；及び
（ｅ）配列番号９１のＶＨ配列及び配列番号９８のＶＬ配列；
（ｆ）配列番号１５２のＶＨ配列及び配列番号９８のＶＬ配列；
（ｇ）配列番号１５９のＶＨ配列及び配列番号１１０のＶＬ配列；
（ｈ）配列番号１６５のＶＨ配列、及び配列番号１７１のＶＬ配列；
（ｉ）配列番号４のＶＨ配列及び配列番号１３のＶＬ配列；
（ｊ）配列番号２２のＶＨ配列及び配列番号３１のＶＬ配列；
（ｋ）配列番号４０のＶＨ配列、及び配列番号４９のＶＬ配列；ならびに
（ｌ）配列番号５８のＶＨ配列及び配列番号６７のＶＬ配列
からなる群から選択され；ＡＬＫ７に結合する、請求項４に記載のＡＬＫ７結合性タンパク質。
【請求項６】
ＡＬＫ７結合性タンパク質であって、
（ａ）
（ｉ）配列番号１０５の基準ＶＨ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＨ配列、及び
（ｉｉ）配列番号１１０の基準ＶＬ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＬ配列；
（ｂ）
（ｉ）配列番号１１７の基準ＶＨ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＨ配列、及び
（ｉｉ）配列番号１２４の基準ＶＬ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＬ配列；
（ｃ）
（ｉ）配列番号１２８からなる群から選択される基準ＶＨ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＨ配列、及び
（ｉｉ）配列番号１３５の基準ＶＬ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＬ配列；
（ｄ）
（ｉ）配列番号１４０からなる群から選択される基準ＶＨ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＨ配列、及び
（ｉｉ）配列番号１４８の基準ＶＬ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＬ配列；
（ｅ）
（ｉ）配列番号９１の基準ＶＨ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＨ配列、及び
（ｉｉ）配列番号９８の基準ＶＬ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＬ配列；
（ｆ）
（ｉ）配列番号１５２の基準ＶＨ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＨ配列、及び
（ｉｉ）配列番号９８の基準ＶＬ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＬ配列；
（ｇ）
（ｉ）配列番号１５９の基準ＶＨ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＨ配列、及び
（ｉｉ）配列番号１１０の基準ＶＬ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＬ配列；
（ｈ）
（ｉ）配列番号１６５の基準ＶＨ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＨ配列、及び
（ｉｉ）配列番号１７１の基準ＶＬ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＬ配列；
（ｉ）
（ｉ）配列番号４の基準ＶＨ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＨ配列、及び
（ｉｉ）配列番号１３の基準ＶＬ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＬ配列；
（ｊ）
（ｉ）配列番号２２の基準ＶＨ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＨ配列、及び
（ｉｉ）配列番号３１の基準ＶＬ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＬ配列；
（ｋ）
（ｉ）配列番号４０の基準ＶＨ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＨ配列、及び
（ｉｉ）配列番号４９の基準ＶＬ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＬ配列；及び
（ｌ）
（ｉ）配列番号５８からなる群から選択される基準ＶＨ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＨ配列、及び
（ｉｉ）配列番号６７の基準ＶＬ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＬ配列
からなる群から選択されるＶＨ及びＶＬ対を含み；ＡＬＫ７に結合する、前記ＡＬＫ７結合性タンパク質。
【請求項７】
請求項１〜６のいずれか１項に記載のＡＬＫ７結合性タンパク質と同じエピトープに結合する、ＡＬＫ７結合性タンパク質。
【請求項８】
請求項１〜７のいずれか１項に記載のＡＬＫ７結合性タンパク質を交差遮断するか、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する、ＡＬＫ７結合性タンパク質。
【請求項９】
ＡＬＫ７活性を減弱させる、請求項１〜８のいずれか１項に記載のＡＬＫ７結合性タンパク質。
【請求項１０】
脂肪細胞における脂肪分解を増加させる、ＡＬＫ７結合性タンパク質。
【請求項１１】
白色または褐色脂肪細胞における脂肪分解を増加させる、請求項１０に記載のＡＬＫ７結合性タンパク質。
【請求項１２】
脂肪細胞における脂肪分解のＡＬＫ−７媒介性阻害を減弱させる、請求項１０に記載のＡＬＫ７結合性タンパク質。
【請求項１３】
白色または褐色脂肪細胞における脂肪分解のＡＬＫ−７媒介性阻害を減弱させる、請求項１２に記載のＡＬＫ７結合性タンパク質。
【請求項１４】
脂肪細胞における脂肪分解を少なくとも５％〜１００％、１０％〜９５％、１０〜９０％、１０〜８５％、１０〜８０％、１０〜７５％、１０〜７０％、１０〜７５％、１０〜７０％、１０〜６０％、１０〜５５％、１０〜５０％、または１０〜４５％増加させる、請求項１０に記載のＡＬＫ７結合性タンパク質。
【請求項１５】
脂肪分解が、１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行われる脂肪分解アッセイで決定される、請求項１０〜１４に記載のＡＬＫ７結合性タンパク質。
【請求項１６】
前記脂肪分解アッセイが、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行われる、請求項１５に記載のＡＬＫ７結合性タンパク質。
【請求項１７】
下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴：
（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；
（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；
（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；
（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；
（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；
（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、及び
（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる
を有する請求項１〜１６のいずれか１項に記載のＡＬＫ７結合性タンパク質。
【請求項１８】
脂肪細胞におけるグリセロール産生を増加させる、請求項１〜１７のいずれか１項に記載のＡＬＫ７結合性タンパク質。
【請求項１９】
ＡＬＫ７に特異的に結合する抗体である、請求項１〜１８のいずれか１項に記載のＡＬＫ７結合性タンパク質。
【請求項２０】
前記抗体が、モノクローナル抗体、組換え抗体、ヒト抗体、ヒト化抗体、キメラ抗体、二重特異性抗体、多重特異性抗体、またはＡＬＫ７結合性抗体断片である、請求項１９に記載のＡＬＫ７結合性タンパク質。
【請求項２１】
前記ＡＬＫ７結合性抗体断片が、Ｆａｂ断片、Ｆａｂ’断片、Ｆ（ａｂ’）２断片、Ｆｖ断片、ダイアボディ、または一本鎖抗体分子からなる群から選択される、請求項２０に記載のＡＬＫ７結合性タンパク質。
【請求項２２】
前記抗体がさらに、
（ａ）ヒトＩｇＡ定常ドメイン；
（ｂ）ヒトＩｇＤ定常ドメイン；
（ｃ）ヒトＩｇＥ定常ドメイン；
（ｄ）ヒトＩｇＧ１定常ドメイン；
（ｅ）ヒトＩｇＧ２定常ドメイン；
（ｆ）ヒトＩｇＧ３定常ドメイン；
（ｇ）ヒトＩｇＧ４定常ドメイン；及び
（ｈ）ヒトＩｇＭ定常ドメイン
からなる群から選択される重鎖免疫グロブリン定常ドメインを含む、請求項１９〜２０、または２１のいずれか１項に記載のＡＬＫ７結合性タンパク質。
【請求項２３】
前記抗体がさらに、
（ａ）ヒトＩｇカッパ定常ドメイン；及び
（ｂ）ヒトＩｇラムダ定常ドメイン
からなる群から選択される軽鎖免疫グロブリン定常ドメインを含む、請求項１９〜２１、または２２のいずれか１項に記載のＡＬＫ７結合性タンパク質。
【請求項２４】
前記抗体がさらに、ヒトＩｇＧ１重鎖定常ドメイン及びヒトラムダ軽鎖定常ドメインを含む、請求項１９〜２２、または２３のいずれか１項に記載のＡＬＫ７結合性タンパク質。
【請求項２５】
請求項１〜２３、または２４のいずれか１項に記載のＡＬＫ７結合性タンパク質をコードする、単離核酸分子または核酸分子のセット。
【請求項２６】
ｃＤＮＡである、請求項２５に記載の単離核酸分子または核酸分子のセット。
【請求項２７】
請求項２５または２６に記載の核酸分子もしくは核酸分子のセットの断片、またはその補体であるハイブリダイゼーションプローブ、ＰＣＲプライマーまたは配列決定プライマーとして使用するために十分な単離ポリヌクレオチドまたはｃＤＮＡ分子。
【請求項２８】
前記核酸分子が、制御配列に作動可能に連結している、請求項２５、２６、または２７に記載の核酸分子またはｃＤＮＡ分子。
【請求項２９】
請求項２５〜２７、または２８に記載の核酸分子を含むベクター。
【請求項３０】
請求項２５〜２７、もしくは２８に記載の核酸分子、または請求項２９に記載のベクターを含む、宿主細胞。
【請求項３１】
哺乳類宿主細胞である、請求項３０に記載の宿主細胞。
【請求項３２】
ＮＳ０マウス骨髄腫細胞、ＰＥＲ．Ｃ６（登録商標）ヒト細胞、またはチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞である、請求項３１に記載の哺乳類宿主細胞。
【請求項３３】
請求項１〜２３、または２４のいずれか１項に記載のＡＬＫ７結合性タンパク質を作製する方法であって、前記ＡＬＫ７結合性タンパク質を生成するために適した条件下で、請求項３０、３１、または３２に記載の宿主細胞を培養することを含む、前記方法。
【請求項３４】
前記宿主細胞から分泌されるＡＬＫ７結合性タンパク質を単離することをさらに含む、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
請求項３３または３４に記載の方法を使用して生成されたＡＬＫ７結合性タンパク質。
【請求項３６】
請求項１〜２３、または２４のいずれか１項に記載のＡＬＫ７結合性タンパク質及び薬学的に許容される担体を含む、医薬組成物。
【請求項３７】
医薬品として使用するための、請求項３６に記載の医薬組成物。
【請求項３８】
ＡＬＫ７発現またはＡＬＫ７シグナル伝達と関連する疾患または状態を処置する、及び／または寛解させるための、請求項３７に記載の医薬組成物の使用。
【請求項３９】
前記疾患または状態が、肥満（例えば、腹部または内臓肥満）；過体重；インスリン抵抗性；代謝症候群及び他の代謝性疾患または状態；脂質障害、例えば、低ＨＤＬ値、高ＬＤＬ値、高脂血症、高トリグリセリド血症または脂質異常症；リポタンパク質異常；トリグリセリドの減少；炎症（例えば、肝臓炎症及び／または脂肪組織の炎症）、脂肪肝疾患；非アルコール性脂肪肝疾患；高血糖症；耐糖能障害（ＩＧＴ）；インスリン過剰血症；高コレステロール（例えば、高ＬＤＬ値及び／または高コレステロール血症）；心臓血管疾患、例えば、冠動脈性心疾患を含む心疾患、鬱血性心不全、卒中、末梢血管疾患、アテローム硬化症；動脈硬化症、及び高血圧；Ｘ症候群；血管再狭窄；神経障害；網膜障害；神経変性疾患；内皮機能障害、呼吸機能障害、腎疾患（例えば、腎障害）；膵臓炎；多嚢胞性卵巣症候群；尿酸値の上昇；ヘモクロマトーシス（鉄過剰）；黒色表皮腫（皮膚上の暗色斑）；及びがん（例えば、骨髄腫（例えば、多発性骨髄腫、プラスマ細胞腫、限局性骨髄腫、または髄外骨髄腫）、または卵巣、乳房、結腸、子宮内膜、肝臓、腎臓、膵臓、胃、子宮もしくは結腸の癌）；及び／または上記疾患もしくは状態のうちの１種もしくは複数と、または多すぎる体脂肪と関連する他の障害／状態からなる群から選択されるメンバーである、請求項３８に記載の使用。
【請求項４０】
前記ＡＬＫ７結合性タンパク質がさらに、標識基またはエフェクター基を含む、請求項３６または３７に記載の医薬組成物。
【請求項４１】
前記エフェクター基が放射性同位体、放射性核種、毒素、治療薬及び化学療法薬からなる群から選択される、請求項４０に記載の医薬組成物。
【請求項４２】
対象においてＡＬＫ７発現またはＡＬＫ７媒介性シグナル伝達の増加と関連する疾患または状態を処置する、及び／または寛解させるための方法であって、それを必要とする対象に、請求項１〜２３、もしくは２４のいずれか１項に記載のＡＬＫ７結合性タンパク質を含む組成物、または請求項３６、３７、もしくは４０に記載の医薬組成物の有効量を投与することを含む前記方法。
【請求項４３】
前記疾患または状態が、肥満（例えば、腹部肥満）；過体重；インスリン抵抗性；代謝症候群及び他の代謝性疾患または状態；脂質障害、例えば、低ＨＤＬ値、高ＬＤＬ値、高脂血症、高トリグリセリド血症または脂質異常症；リポタンパク質異常；トリグリセリドの減少；炎症（例えば、肝臓炎症及び／または脂肪組織の炎症）、脂肪肝疾患；非アルコール性脂肪肝疾患；高血糖症；耐糖能障害（ＩＧＴ）；インスリン過剰血症；高コレステロール（例えば、高ＬＤＬ値及び／または高コレステロール血症）；心臓血管疾患、例えば、冠動脈性心疾患を含む心疾患、鬱血性心不全、卒中、末梢血管疾患、アテローム硬化症；動脈硬化症、及び高血圧；Ｘ症候群；血管再狭窄；神経障害；網膜障害；神経変性疾患；内皮機能障害、呼吸機能障害、腎疾患（例えば、腎障害）；膵臓炎；多嚢胞性卵巣症候群；尿酸値の上昇；ヘモクロマトーシス（鉄過剰）；黒色表皮腫（皮膚上の暗色斑）；及びがん（例えば、骨髄腫（例えば、多発性骨髄腫、プラスマ細胞腫、限局性骨髄腫、または髄外骨髄腫）、または卵巣、乳房、結腸、子宮内膜、肝臓、腎臓、膵臓、胃、子宮もしくは結腸の癌）；及び／または上記疾患もしくは状態のうちの１種もしくは複数と、または多すぎる体脂肪と関連する他の障害／状態からなる群から選択されるメンバーである、請求項４２に記載の方法。
【請求項４４】
前記ＡＬＫ７結合性タンパク質または医薬組成物を単独で、または併用療法として投与する、請求項４３に記載の方法。
【請求項４５】
対象においてＡＬＫ７活性を低下させる方法であって、請求項１〜２４、もしくは３５のいずれか１項に記載のＡＬＫ７結合性タンパク質、または請求項３６、３７、４０、もしくは４１に記載の医薬組成物の有効量を投与することを含む前記方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
電子送信された配列表への言及
本出願と共に提出したＡＳＣＩＩテキストファイル３１７４．００４ＰＣ０１＿ＳｅｑＬｉｓｔ．ＳＴ２５ｔｘｔ（サイズ：７２，８９８バイト；及び作成日：２０１７年４月２１日）で電子送信された配列表の内容は、その全体で参照により本明細書に組み込まれる。
【背景技術】
【０００２】
過体重及び肥満は、米国及び世界中の多くの国において蔓延しており、すべての年代、人種及び民族で、また男性及び女性の両方で増加している。過体重及び肥満は、生活活動及び生活様式を撹乱する他の疾患または状態とも関連している。肥満は、他の疾患及び状態、例えば、２型糖尿病、炎症、ならびに心臓血管、肺、脂肪肝の疾患、神経、及び肝臓、及び腎臓の疾患に関する重大な危険因子として認識されている。
【０００３】
２型糖尿病は、同様に蔓延している慢性の進行性疾患である。ＩＩ型糖尿病には、樹立された療法はないが、この疾患で不可避の結果を遅延させる、または緩和することを試みる多くの認められている処置が存在する。２型糖尿病は初めは、食事及び運動の調節により、ならびに、とりわけ肥満対象では体重減少により処置される。臨床像を改善する体重減少の量は時には、それほど多くなく（例えば、４．４〜１１ポンド）；これは、脂肪組織の活性、例えば、化学的シグナル伝達（特に、腹部臓器内及びその周囲の内臓脂肪組織における）の態様の不十分な理解による可能性がある。
【０００４】
上述を考慮すると、過体重、肥満及び２型糖尿病の流行を制御及び処置するための新たな処置が必要とされている。本開示の目的は、ＡＬＫ７結合性タンパク質、ならびに過体重、肥満、２型糖尿病、及びそれらの関連状態；ＡＬＫ７を標的とすることにより処置する、予防する、または改善することができる代謝障害、及び他の疾患または状態の診断及び処置、予防及び／または寛解におけるその使用を提供することである。
【発明の概要】
【０００５】
本開示は、ＡＬＫ７結合性タンパク質及びＡＬＫ７結合性タンパク質を使用する方法を提供する。特定の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、１種または複数の同族のＡＬＫ７リガンド及び／または１種または複数の同族のＡｃｔＲＩ受容体へのＡＬＫ７の結合を阻害または遮断することができる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７、及びＡｃｔＲＩＩ受容体（ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）及びＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、またはＮｏｄａｌの多量体化を阻害または遮断することができる。本開示はまた、ＡＬＫ７発現及び／またはＡＬＫ７媒介性シグナル伝達の増加と関連する疾患または状態を診断する、もしくは処置する、予防する、及び／または寛解させるためにＡＬＫ７結合性タンパク質を使用する方法を提供する。そのような疾患または状態には、これらだけに限定されないが、過体重、肥満（例えば、腹部肥満）；インスリン抵抗性；代謝症候群及び他の代謝性疾患または状態；脂質障害、例えば、低ＨＤＬ値、高ＬＤＬ値、高脂血症、高トリグリセリド血症または脂質異常症；リポタンパク質異常；トリグリセリドの減少；炎症（例えば、肝臓炎症及び／または脂肪組織の炎症）、脂肪肝疾患；非アルコール性脂肪肝疾患；高血糖症；耐糖能障害（ＩＧＴ）；インスリン過剰血症；高コレステロール（例えば、高ＬＤＬ値及び高コレステロール血症）；心臓血管疾患、例えば、冠動脈性心疾患を含む心疾患、鬱血性心不全、卒中、末梢血管疾患、線維素溶解の障害、アテローム硬化症；動脈硬化症、及び高血圧；Ｘ症候群；血管再狭窄；神経障害；網膜障害；神経変性疾患；内皮機能障害、呼吸機能障害、腎疾患（例えば、腎障害）；膵臓炎；多嚢胞性卵巣症候群；尿酸値の上昇；ヘモクロマトーシス（鉄過剰）；黒色表皮腫（皮膚上の暗色斑）；及びがん（例えば、骨髄腫（例えば、多発性骨髄腫、プラスマ細胞腫、限局性骨髄腫、または髄外骨髄腫）、または卵巣、乳房、結腸、子宮内膜、肝臓、腎臓、膵臓、胃、子宮もしくは結腸の癌）；ならびに上記疾患もしくは状態のうちの１種もしくは複数と、または過剰体重（例えば、肥満指数（ＢＭＩ）≧２５ｋｇ／ｍ２）と、または多すぎる体脂肪と関連する他の障害／状態が含まれる。本開示はまた、抗体などのアンタゴニストＡＬＫ７結合性タンパク質を使用して、限定ではないが、体重を減少させる（例えば、体重減少を促進する）方法、及び体重増加を減少させる（例えば、体重増加を予防する）方法を提供する。
【０００６】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合する。さらなる実施形態では、提供するＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ−７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、本明細書において開示するＡＬＫ７結合性ＶＨ及びＶＬ対を有する抗体を交差遮断（ｃｒｏｓｓ−ｂｌｏｃｋ）する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、抗ＡＬＫ７抗体またはＡＬＫ７結合性抗体断片である。
【０００７】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、相補性決定領域（ＣＤＲ）のセット：重鎖可変領域（ＶＨ）−ＣＤＲ１、ＶＨ−ＣＤＲ２、ＶＨ−ＣＤＲ３、軽鎖可変領域（ＶＬ）−ＣＤＲ１、ＶＬ−ＣＤＲ２及びＶＬ−ＣＤＲ３を含み、その際、そのＣＤＲは、表１Ａに開示されている重鎖可変領域（ＶＨ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）対で存在する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択されるＶＨ及びＶＬ対で存在するＣＤＲのセットを含む：（ａ）配列番号４のＶＨ配列、及び配列番号１３のＶＬ配列；（ｂ）配列番号２２のＶＨ配列、及び配列番号３１のＶＬ配列；（ｃ）配列番号４０のＶＨ配列、及び配列番号４９のＶＬ配列；ならびに（ｄ）配列番号５８のＶＨ配列及び配列番号６７のＶＬ配列。
【０００８】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、相補性決定領域（ＣＤＲ）のセット：重鎖可変領域（ＶＨ）−ＣＤＲ１、ＶＨ−ＣＤＲ２、ＶＨ−ＣＤＲ３、軽鎖可変領域（ＶＬ）−ＣＤＲ１、ＶＬ−ＣＤＲ２及びＶＬ−ＣＤＲ３を含み、その際、ＣＤＲは、表１Ｂまたは表３に開示されている重鎖可変領域（ＶＨ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）対で存在する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択されるＶＨ及びＶＬ対で存在するＣＤＲのセットを含む：（ａ）配列番号１５２のＶＨ配列、及び配列番号９８のＶＬ配列；（ｂ）配列番号１５９のＶＨ配列、及び配列番号１１０のＶＬ配列；ならびに（ｃ）配列番号１６５のＶＨ配列、及び配列番号１７１のＶＬ配列。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択されるＶＨ及びＶＬ対で存在するＣＤＲのセットを含む：（ａ）配列番号９１のＶＨ配列、及び配列番号９８のＶＬ配列；（ｂ）配列番号１０５のＶＨ配列、及び配列番号１１０のＶＬ配列；（ｃ）配列番号１１７のＶＨ配列、及び配列番号１２４のＶＬ配列；（ｄ）配列番号１２８のＶＨ配列及び配列番号１３５のＶＬ配列；ならびに（ｅ）配列番号１４０のＶＨ配列及び配列番号１４８のＶＬ配列。
【０００９】
追加の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、ＣＤＲのセット：ＶＨ−ＣＤＲ１、ＶＨ−ＣＤＲ２、ＶＨ−ＣＤＲ３、ＶＬ−ＣＤＲ１、ＶＬ−ＣＤＲ２、及びＶＬ−ＣＤＲ３を含み、その際、そのＣＤＲのセットは、（ａ）（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号１のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号２のアミノ酸配列を含み；（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号３のアミノ酸配列を含み；（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号１０のアミノ酸配列を含み；（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号１１のアミノ酸配列を含み；及び（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号１２のアミノ酸配列を含む；（ｂ）（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号１９のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号２０のアミノ酸配列を含み；（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号２１のアミノ酸配列を含み；（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号２８のアミノ酸配列を含み；（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号２９のアミノ酸配列を含み；及び（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号３０のアミノ酸配列を含む；（ｃ）（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号３７のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号３８のアミノ酸配列を含み；（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号３９のアミノ酸配列を含み；（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号４６のアミノ酸配列を含み；（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号４７のアミノ酸配列を含み；及び（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号４８のアミノ酸配列を含む；または（ｄ）（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号５５のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号５６のアミノ酸配列を含み；（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号５７のアミノ酸配列を含み；（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号６４のアミノ酸配列を含み；（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号６５のアミノ酸配列を含み；及び（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号６６のアミノ酸配列を含むＣＤＲの基準セットと同一であるか、またはそこから合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、または１０未満のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有し；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。
【００１０】
追加の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、ＣＤＲのセット：ＶＨ−ＣＤＲ１、ＶＨ−ＣＤＲ２、ＶＨ−ＣＤＲ３、ＶＬ−ＣＤＲ１、ＶＬ−ＣＤＲ２、及びＶＬ−ＣＤＲ３を含み、その際、そのＣＤＲのセットは、（ａ）（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号８８のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号８９のアミノ酸配列を含み；（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号９０のアミノ酸配列を含み；（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号９５のアミノ酸配列を含み；（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号９６のアミノ酸配列を含み；及び（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号９７のアミノ酸配列を含む；（ｂ）（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号１０２のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号１０３のアミノ酸配列を含み；（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号１０４のアミノ酸配列を含み；（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号１０７のアミノ酸配列を含み；（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号１０８のアミノ酸配列を含み；及び（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号１０９のアミノ酸配列を含む；（ｃ）（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号１１４のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号１１５のアミノ酸配列を含み；（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号１１６のアミノ酸配列を含み；（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号１２１のアミノ酸配列を含み；（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号１２２のアミノ酸配列を含み；及び（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号１２３のアミノ酸配列を含む；（ｄ）（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号１２５のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号１２６のアミノ酸配列を含み；（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号１２７のアミノ酸配列を含み；（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号１３２のアミノ酸配列を含み；（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号１３３のアミノ酸配列を含み；及び（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号１３４のアミノ酸配列を含む；または（ｅ）（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号１３７のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号１３８のアミノ酸配列を含み；（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号１３９のアミノ酸配列を含み；（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号１４５のアミノ酸配列を含み；（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号１４６のアミノ酸配列を含み；及び（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号１４７のアミノ酸配列を含むＣＤＲの基準セットと同一であるか、またはそこから合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、または１０未満のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有し；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。
【００１１】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、（ａ）（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号１のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号２のアミノ酸配列を含み；（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号３のアミノ酸配列を含み；（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号１０のアミノ酸配列を含み；（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号１１のアミノ酸配列を含み；及び（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号１２のアミノ酸配列を含む；（ｂ）（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号１９のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号２０のアミノ酸配列を含み；（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号２１のアミノ酸配列を含み；（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号２８のアミノ酸配列を含み；（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号２９のアミノ酸配列を含み；及び（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号３０のアミノ酸配列を含む；（ｃ）（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号３７のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号３８のアミノ酸配列を含み；（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号３９のアミノ酸配列を含み；（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号４６のアミノ酸配列を含み；（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号４７のアミノ酸配列を含み；及び（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号４８のアミノ酸配列を含む；または（ｄ）（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号５５のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号５６のアミノ酸配列を含み；（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号５７のアミノ酸配列を含み；（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号６４のアミノ酸配列を含み；（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号６５のアミノ酸配列を含み；及び（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号６６のアミノ酸配列を含むＣＤＲのセットを含み；そのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。
【００１２】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、（ａ）（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号８８のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号８９のアミノ酸配列を含み；（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号９０のアミノ酸配列を含み；（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号９５のアミノ酸配列を含み；（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号９６のアミノ酸配列を含み；及び（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号９７のアミノ酸配列を含む；（ｂ）（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号１０２のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号１０３のアミノ酸配列を含み；（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号１０４のアミノ酸配列を含み；（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号１０７のアミノ酸配列を含み；（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号１０８のアミノ酸配列を含み；及び（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号１０９のアミノ酸配列を含む；（ｃ）（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号１１４のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号１１５のアミノ酸配列を含み；（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号１１６のアミノ酸配列を含み；（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号１２１のアミノ酸配列を含み；（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号１２２のアミノ酸配列を含み；及び（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号１２３のアミノ酸配列を含む；（ｄ）（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号１２５のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号１２６のアミノ酸配列を含み；（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号１２７のアミノ酸配列を含み；（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号１３２のアミノ酸配列を含み；（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号１３３のアミノ酸配列を含み；及び（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号１３４のアミノ酸配列を含む；または（ｅ）（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号１３７のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号１３８のアミノ酸配列を含み；（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号１３９のアミノ酸配列を含み；（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号１４５のアミノ酸配列を含み；（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号１４６のアミノ酸配列を含み；及び（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号１４７のアミノ酸配列を含むＣＤＲのセットを含み；そのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。
【００１３】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、（ａ）（ｉ）配列番号４に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＨ、及び（ｉｉ）配列番号１３に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＬ；（ｂ）（ｉ）配列番号２２または１３２に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＨ、及び（ｉｉ）配列番号３１に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＬ；（ｃ）（ｉ）配列番号４０に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＨ、及び（ｉｉ）配列番号４９に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＬ；ならびに（ｄ）（ｉ）配列番号５８に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＨ、及び（ｉｉ）配列番号６７に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＬからなる群から選択されるＶＨ及びＶＬ対を含み；そのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。
【００１４】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、（ａ）（ｉ）配列番号９１に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＨ、及び（ｉｉ）配列番号９８に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＬ；（ｂ）（ｉ）配列番号１０５、または１３２に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＨ、及び（ｉｉ）配列番号１１０に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＬ；（ｃ）（ｉ）配列番号１１７に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＨ、及び（ｉｉ）配列番号１２４に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＬ；（ｄ）（ｉ）配列番号１２８に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＨ、及び（ｉｉ）配列番号１３５に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＬ；ならびに（ｅ）（ｉ）配列番号１４０に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＨ、及び（ｉｉ）配列番号１４８に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＬからなる群から選択されるＶＨ及びＶＬ対を含み；そのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。
【００１５】
一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号４０または５８のＶＨ配列、及び配列番号４９または６７のＶＬ配列を含有するＶＨ及びＶＬを含み；そのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号４０のＶＨ配列及び配列番号４９のＶＬ配列を含み、そのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号５８のＶＨ配列及び配列番号６７のＶＬ配列を含み、そのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。
【００１６】
一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号４のＶＨ配列及び配列番号１３のＶＬ配列を含むＶＨ及びＶＬ対を含み、そのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。
【００１７】
一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号２２のＶＨ配列及び配列番号３１のＶＬ配列を含むＶＨ及びＶＬ対を含み、そのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。
【００１８】
一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号４０のＶＨ配列及び配列番号４９のＶＬ配列を含むＶＨ及びＶＬ対を含み、そのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。
【００１９】
一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号５８のＶＨ配列及び配列番号６７のＶＬ配列を含むＶＨ及びＶＬ対を含み、そのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。
【００２０】
一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号９１のＶＨ配列及び配列番号９８のＶＬ配列を含むＶＨ及びＶＬ対を含み、そのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。
【００２１】
一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号１０５のＶＨ配列及び配列番号１１０のＶＬ配列を含むＶＨ及びＶＬ対を含み、そのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。
【００２２】
一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号１１７のＶＨ配列及び配列番号１２４のＶＬ配列を含むＶＨ及びＶＬ対を含み、そのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。
【００２３】
一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号１２８のＶＨ配列及び配列番号１３５のＶＬ配列を含むＶＨ及びＶＬ対を含み、そのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。
【００２４】
一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号１４０のＶＨ配列及び配列番号１４８のＶＬ配列を含むＶＨ及びＶＬ対を含み、そのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。
【００２５】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、（ａ）（ｉ）配列番号４からなる群から選択される基準ＶＨ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＨ配列、及び（ｉｉ）配列番号１３の基準ＶＬ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＬ配列；（ｂ）（ｉ）配列番号２２の基準ＶＨ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＨ配列、及び（ｉｉ）配列番号３１の基準ＶＬ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＬ配列；（ｃ）（ｉ）配列番号４０の基準ＶＨ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＨ配列、及び（ｉｉ）配列番号４９の基準ＶＬ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＬ配列；ならびに（ｄ）（ｉ）配列番号５８の基準ＶＨ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＨ配列、及び（ｉｉ）配列番号６７の基準ＶＬ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＬ配列からなる群から選択されるＶＨ及びＶＬ対を含み；そのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。
【００２６】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、（ａ）（ｉ）配列番号９１からなる群から選択される基準ＶＨ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＨ配列、及び（ｉｉ）配列番号９８の基準ＶＬ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＬ配列；（ｂ）（ｉ）配列番号１０５の基準ＶＨ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＨ配列、及び（ｉｉ）配列番号１１０の基準ＶＬ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＬ配列；（ｃ）（ｉ）配列番号１１７の基準ＶＨ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＨ配列、及び（ｉｉ）配列番号１２４の基準ＶＬ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＬ配列；（ｄ）（ｉ）配列番号１２８の基準ＶＨ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＨ配列、及び（ｉｉ）配列番号１３５の基準ＶＬ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＬ配列；ならびに（ｅ）（ｉ）配列番号１４０の基準ＶＨ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＨ配列、及び（ｉｉ）配列番号１４８の基準ＶＬ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＬ配列からなる群から選択されるＶＨ及びＶＬ対を含み；そのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。
【００２７】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合する抗体である。追加の実施形態では、抗体は、モノクローナル抗体、組換え抗体、ヒト抗体、ヒト化抗体、キメラ抗体、二重特異性抗体、または多重特異性抗体である。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７結合性抗体断片である。一部の実施形態では、抗体は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、ダイアボディ、ＤＡＲＴ、及び一本鎖抗体分子（例えば、ＢｉＴＥ）からなる群から選択される抗体断片である。
【００２８】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号８５のアミノ酸２０〜１１３の間でＡＬＫ７に特異的に結合する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号８５のアミノ酸２０〜１１３の間でＡＬＫ７に特異的に結合し、１種または複数のＡＬＫリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及び／またはＮｏｄａｌ）がＡＬＫ７に結合することを阻害する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号８５のアミノ酸２０〜１１３の間でＡＬＫ７に特異的に結合し、（ａ）配列番号８５の２１位のＧｌｕ；（ｂ）配列番号８５の２２位のＬｅｕ；（ｃ）配列番号８５の２３位のＳｅｒ；（ｄ）配列番号８５の２４位のＰｒｏ；（ｅ）配列番号８５の２５位のＧｌｙ；（ｆ）配列番号８５の２６位のＬｅｕ；（ｇ）配列番号８５の２７位のＬｙｓ；（ｈ）配列番号８５の２８位のＣｙｓ；（ｉ）配列番号８５の２９位のＶａｌ；（ｊ）配列番号８５の３０位のＣｙｓ；（ｋ）配列番号８５の３１位のＬｅｕ；（ｌ）配列番号８５の３２位のＬｅｕ；（ｍ）配列番号８５の３３位のＣｙｓ；（ｎ）配列番号８５の３４位のＡｓｐ；（ｏ）配列番号８５の３５位のＳｅｒ；（ｐ）配列番号８５の３６位のＳｅｒ；（ｑ）配列番号８５の３７位のＡｓｎ；（ｒ）配列番号８５の３８位のＰｈｅ；（ｓ）配列番号８５の３９位のＴｈｒ；（ｔ）配列番号８５の４０位のＣｙｓ；（ｕ）配列番号８５の４１位のＧｌｎ；（ｖ）配列番号８５の４２位のＴｈｒ；（ｗ）配列番号８５の４３位のＧｌｕ；（ｘ）配列番号８５の４４位のＧｌｙ；（ｙ）配列番号８５の４５位のＡｌａ；（ｚ）配列番号８５の４６位のＣｙｓ；（ａａ）配列番号８５の４７位のＴｒｐ；（ａｂ）配列番号８５の４８位のＡｌａ；（ａｃ）配列番号８５の４９位のＳｅｒ；（ａｄ）配列番号８５の５０位のＶａｌ；（ａｅ）配列番号８５の５１位のＭｅｔ；（ａｆ）配列番号８５の５２位のＬｅｕ；（ａｇ）配列番号８５の５３位のＴｈｒ；（ａｈ）配列番号８５の５４位のＡｓｎ；（ａｉ）配列番号８５の５５位のＧｌｙ；（ａｊ）配列番号８５の５６位のＬｙｓ；（ａｋ）配列番号８５の５７位のＧｌｕ；（ａｌ）配列番号８５の５８位のＧｌｎ；（ａｍ）配列番号８５の５９位のＶａｌ；（ａｎ）配列番号８５の６０位のＩｌｅ；（ａｏ）配列番号８５の６１位のＬｙｓ；（ａｐ）配列番号８５の６２位のＳｅｒ；（ａｑ）配列番号８５の６３位のＣｙｓ；（ａｒ）配列番号８５の６４位のＶａｌ；（ａｓ）配列番号８５の６５位のＳｅｒ；（ａｔ）配列番号８５の６６位のＬｅｕ；（ａｕ）配列番号８５の６７位のＰｒｏ；（ａｖ）配列番号８５の６８位のＧｌｕ；（ａｗ）配列番号８５の６９位のＬｅｕ；（ａｘ）配列番号８５の７０位のＡｓｎ；（ａｙ）配列番号８５の７１位のＡｌａ；（ａｚ）配列番号８５の７２位のＧｌｎ；（ｂａ）配列番号８５の７３位のＶａｌ；（ｂｂ）配列番号８５の７４位のＰｈｅ；（ｂｃ）配列番号８５の７５位のＣｙｓ；（ｂｄ）配列番号８５の７６位のＨｉｓ；（ｂｅ）配列番号８５の７７位のＳｅｒ；（ｂｆ）配列番号８５の７８位のＳｅｒ；（ｂｇ）配列番号８５の７９位のＡｓｎ；（ｂｈ）配列番号８５の８０位のＡｓｎ；（ｂｉ）配列番号８５の８１位のＶａｌ；（ｂｊ）配列番号８５の８２位のＴｈｒ；（ｂｋ）配列番号８５の８３位のＬｙｓ；（ｂｌ）配列番号８５の８４位のＴｈｒ；（ｂｍ）配列番号８５の８５位のＧｌｕ；（ｂｎ）配列番号８５の８６位のＣｙｓ；（ｂｏ）配列番号８５の８７位のＣｙｓ；（ｂｐ）配列番号８５の８８位のＰｈｅ；（ｂｑ）配列番号８５の８９位のＴｈｒ；（ｂｒ）配列番号８５の９０位のＡｓｐ；（ｂｓ）配列番号８５の９１位のＰｈｅ；（ｂｔ）配列番号８５の９２位のＣｙｓ；（ｂｕ）配列番号８５の９３位のＡｓｎ；（ｂｖ）配列番号８５の９４位のＡｓｎ；（ｂｗ）配列番号８５の９５位のＩｌｅ；（ｂｘ）配列番号８５の９６位のＴｈｒ；（ｂｙ）配列番号８５の９７位のＬｅｕ；（ｂｚ）配列番号８５の９８位のＨｉｓ；（ｃａ）配列番号８５の９９位のＬｅｕ；（ｃｂ）配列番号８５の１００位のＰｒｏ；（ｃｃ）配列番号８５の１０１位のＴｈｒ；（ｃｄ）配列番号８５の１０２位のＡｌａ；（ｃｅ）配列番号８５の１０３位のＳｅｒ；（ｃｆ）配列番号８５の１０４位のＰｒｏ；（ｃｇ）配列番号８５の１０５位のＡｓｎ；（ｃｈ）配列番号８５の１０６位のＡｌａ；（ｃｉ）配列番号８５の１０７位のＰｒｏ；（ｃｊ）配列番号８５の１０８位のＬｙｓ；（ｃｋ）配列番号８５の１０９位のＬｅｕ；（ｃｌ）配列番号８５の１１０位のＧｌｙ；（ｃｍ）配列番号８５の１１１位のＰｒｏ；（ｃｎ）配列番号８５の１１２位のＭｅｔ；及び（ｃｏ）配列番号８５の１１３位のＧｌｕからなる群から選択される１つまたは複数のアミノ酸に接触する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号８５のアミノ酸２０〜１１３の間でＡＬＫ７に特異的に結合し、（ａ）配列番号８５の２１位のＧｌｕ；（ｂ）配列番号８５の２２位のＬｅｕ；（ｃ）配列番号８５の２３位のＳｅｒ；（ｄ）配列番号８５の２４位のＰｒｏ；（ｅ）配列番号８５の２５位のＧｌｙ；（ｆ）配列番号８５の２６位のＬｅｕ；（ｇ）配列番号８５の２７位のＬｙｓ；（ｈ）配列番号８５の２８位のＣｙｓ；（ｉ）配列番号８５の２９位のＶａｌ；（ｊ）配列番号８５の３０位のＣｙｓ；（ｋ）配列番号８５の３１位のＬｅｕ；（ｌ）配列番号８５の３２位のＬｅｕ；（ｍ）配列番号８５の３３位のＣｙｓ；（ｎ）配列番号８５の３４位のＡｓｐ；（ｏ）配列番号８５の３５位のＳｅｒ；（ｐ）配列番号８５の３６位のＳｅｒ；（ｑ）配列番号８５の３７位のＡｓｎ；（ｒ）配列番号８５の３８位のＰｈｅ；（ｓ）配列番号８５の３９位のＴｈｒ；（ｔ）配列番号８５の４０位のＣｙｓ；（ｕ）配列番号８５の４１位のＧｌｎ；（ｖ）配列番号８５の４２位のＴｈｒ；（ｗ）配列番号８５の４３位のＧｌｕ；（ｘ）配列番号８５の４４位のＧｌｙ；（ｙ）配列番号８５の４５位のＡｌａ；（ｚ）配列番号８５の４６位のＣｙｓ；（ａａ）配列番号８５の４７位のＴｒｐ；（ａｂ）配列番号８５の４８位のＡｌａ；（ａｃ）配列番号８５の４９位のＳｅｒ；（ａｄ）配列番号８５の５０位のＶａｌ；（ａｅ）配列番号８５の５１位のＭｅｔ；（ａｆ）配列番号８５の５２位のＬｅｕ；（ａｇ）配列番号８５の５３位のＴｈｒ；（ａｈ）配列番号８５の５４位のＡｓｎ；（ａｉ）配列番号８５の５５位のＧｌｙ；（ａｊ）配列番号８５の５６位のＬｙｓ；（ａｋ）配列番号８５の５７位のＧｌｕ；（ａｌ）配列番号８５の５８位のＧｌｎ；（ａｍ）配列番号８５の５９位のＶａｌ；（ａｎ）配列番号８５の６０位のＩｌｅ；（ａｏ）配列番号８５の６１位のＬｙｓ；（ａｐ）配列番号８５の６２位のＳｅｒ；（ａｑ）配列番号８５の６３位のＣｙｓ；（ａｒ）配列番号８５の６４位のＶａｌ；（ａｓ）配列番号８５の６５位のＳｅｒ；（ａｔ）配列番号８５の６６位のＬｅｕ；（ａｕ）配列番号８５の６７位のＰｒｏ；（ａｖ）配列番号８５の６８位のＧｌｕ；（ａｗ）配列番号８５の６９位のＬｅｕ；（ａｘ）配列番号８５の７０位のＡｓｎ；（ａｙ）配列番号８５の７１位のＡｌａ；（ａｚ）配列番号８５の７２位のＧｌｎ；（ｂａ）配列番号８５の７３位のＶａｌ；（ｂｂ）配列番号８５の７４位のＰｈｅ；（ｂｃ）配列番号８５の７５位のＣｙｓ；（ｂｄ）配列番号８５の７６位のＨｉｓ；（ｂｅ）配列番号８５の７７位のＳｅｒ；（ｂｆ）配列番号８５の７８位のＳｅｒ；（ｂｇ）配列番号８５の７９位のＡｓｎ；（ｂｈ）配列番号８５の８０位のＡｓｎ；（ｂｉ）配列番号８５の８１位のＶａｌ；（ｂｊ）配列番号８５の８２位のＴｈｒ；（ｂｋ）配列番号８５の８３位のＬｙｓ；（ｂｌ）配列番号８５の８４位のＴｈｒ；（ｂｍ）配列番号８５の８５位のＧｌｕ；（ｂｎ）配列番号８５の８６位のＣｙｓ；（ｂｏ）配列番号８５の８７位のＣｙｓ；（ｂｐ）配列番号８５の８８位のＰｈｅ；（ｂｑ）配列番号８５の８９位のＴｈｒ；（ｂｒ）配列番号８５の９０位のＡｓｐ；（ｂｓ）配列番号８５の９１位のＰｈｅ；（ｂｔ）配列番号８５の９２位のＣｙｓ；（ｂｕ）配列番号８５の９３位のＡｓｎ；（ｂｖ）配列番号８５の９４位のＡｓｎ；（ｂｗ）配列番号８５の９５位のＩｌｅ；（ｂｘ）配列番号８５の９６位のＴｈｒ；（ｂｙ）配列番号８５の９７位のＬｅｕ；（ｂｚ）配列番号８５の９８位のＨｉｓ；（ｃａ）配列番号８５の９９位のＬｅｕ；（ｃｂ）配列番号８５の１００位のＰｒｏ；（ｃｃ）配列番号８５の１０１位のＴｈｒ；（ｃｄ）配列番号８５の１０２位のＡｌａ；（ｃｅ）配列番号８５の１０３位のＳｅｒ；（ｃｆ）配列番号８５の１０４位のＰｒｏ；（ｃｇ）配列番号８５の１０５位のＡｓｎ；（ｃｈ）配列番号８５の１０６位のＡｌａ；（ｃｉ）配列番号８５の１０７位のＰｒｏ；（ｃｊ）配列番号８５の１０８位のＬｙｓ；（ｃｋ）配列番号８５の１０９位のＬｅｕ；（ｃｌ）配列番号８５の１１０位のＧｌｙ；（ｃｍ）配列番号８５の１１１位のＰｒｏ；（ｃｎ）配列番号８５の１１２位のＭｅｔ；及び（ｃｏ）配列番号８５の１１３位のＧｌｕからなる群から選択される１つまたは複数のアミノ酸に接触し；１種または複数のＡＬＫ７リガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及び／またはＮｏｄａｌ）がＡＬＫ７に結合することを阻害する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号８５のアミノ酸２０〜１１３の間でＡＬＫ７に特異的に結合し、脂肪分解（例えば、白色脂肪細胞及び／または褐色脂肪細胞の脂肪分解）を増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号８５のアミノ酸２０〜１１３の間でＡＬＫ７に特異的に結合し、（ａ）配列番号８５の２１位のＧｌｕ；（ｂ）配列番号８５の２２位のＬｅｕ；（ｃ）配列番号８５の２３位のＳｅｒ；（ｄ）配列番号８５の２４位のＰｒｏ；（ｅ）配列番号８５の２５位のＧｌｙ；（ｆ）配列番号８５の２６位のＬｅｕ；（ｇ）配列番号８５の２７位のＬｙｓ；（ｈ）配列番号８５の２８位のＣｙｓ；（ｉ）配列番号８５の２９位のＶａｌ；（ｊ）配列番号８５の３０位のＣｙｓ；（ｋ）配列番号８５の３１位のＬｅｕ；（ｌ）配列番号８５の３２位のＬｅｕ；（ｍ）配列番号８５の３３位のＣｙｓ；（ｎ）配列番号８５の３４位のＡｓｐ；（ｏ）配列番号８５の３５位のＳｅｒ；（ｐ）配列番号８５の３６位のＳｅｒ；（ｑ）配列番号８５の３７位のＡｓｎ；（ｒ）配列番号８５の３８位のＰｈｅ；（ｓ）配列番号８５の３９位のＴｈｒ；（ｔ）配列番号８５の４０位のＣｙｓ；（ｕ）配列番号８５の４１位のＧｌｎ；（ｖ）配列番号８５の４２位のＴｈｒ；（ｗ）配列番号８５の４３位のＧｌｕ；（ｘ）配列番号８５の４４位のＧｌｙ；（ｙ）配列番号８５の４５位のＡｌａ；（ｚ）配列番号８５の４６位のＣｙｓ；（ａａ）配列番号８５の４７位のＴｒｐ；（ａｂ）配列番号８５の４８位のＡｌａ；（ａｃ）配列番号８５の４９位のＳｅｒ；（ａｄ）配列番号８５の５０位のＶａｌ；（ａｅ）配列番号８５の５１位のＭｅｔ；（ａｆ）配列番号８５の５２位のＬｅｕ；（ａｇ）配列番号８５の５３位のＴｈｒ；（ａｈ）配列番号８５の５４位のＡｓｎ；（ａｉ）配列番号８５の５５位のＧｌｙ；（ａｊ）配列番号８５の５６位のＬｙｓ；（ａｋ）配列番号８５の５７位のＧｌｕ；（ａｌ）配列番号８５の５８位のＧｌｎ；（ａｍ）配列番号８５の５９位のＶａｌ；（ａｎ）配列番号８５の６０位のＩｌｅ；（ａｏ）配列番号８５の６１位のＬｙｓ；（ａｐ）配列番号８５の６２位のＳｅｒ；（ａｑ）配列番号８５の６３位のＣｙｓ；（ａｒ）配列番号８５の６４位のＶａｌ；（ａｓ）配列番号８５の６５位のＳｅｒ；（ａｔ）配列番号８５の６６位のＬｅｕ；（ａｕ）配列番号８５の６７位のＰｒｏ；（ａｖ）配列番号８５の６８位のＧｌｕ；（ａｗ）配列番号８５の６９位のＬｅｕ；（ａｘ）配列番号８５の７０位のＡｓｎ；（ａｙ）配列番号８５の７１位のＡｌａ；（ａｚ）配列番号８５の７２位のＧｌｎ；
（ｂａ）配列番号８５の７３位のＶａｌ；（ｂｂ）配列番号８５の７４位のＰｈｅ；（ｂｃ）配列番号８５の７５位のＣｙｓ；（ｂｄ）配列番号８５の７６位のＨｉｓ；（ｂｅ）配列番号８５の７７位のＳｅｒ；（ｂｆ）配列番号８５の７８位のＳｅｒ；（ｂｇ）配列番号８５の７９位のＡｓｎ；（ｂｈ）配列番号８５の８０位のＡｓｎ；（ｂｉ）配列番号８５の８１位のＶａｌ；（ｂｊ）配列番号８５の８２位のＴｈｒ；（ｂｋ）配列番号８５の８３位のＬｙｓ；（ｂｌ）配列番号８５の８４位のＴｈｒ；（ｂｍ）配列番号８５の８５位のＧｌｕ；（ｂｎ）配列番号８５の８６位のＣｙｓ；（ｂｏ）配列番号８５の８７位のＣｙｓ；（ｂｐ）配列番号８５の８８位のＰｈｅ；（ｂｑ）配列番号８５の８９位のＴｈｒ；（ｂｒ）配列番号８５の９０位のＡｓｐ；（ｂｓ）配列番号８５の９１位のＰｈｅ；（ｂｔ）配列番号８５の９２位のＣｙｓ；（ｂｕ）配列番号８５の９３位のＡｓｎ；（ｂｖ）配列番号８５の９４位のＡｓｎ；（ｂｗ）配列番号８５の９５位のＩｌｅ；（ｂｘ）配列番号８５の９６位のＴｈｒ；（ｂｙ）配列番号８５の９７位のＬｅｕ；（ｂｚ）配列番号８５の９８位のＨｉｓ；（ｃａ）配列番号８５の９９位のＬｅｕ；（ｃｂ）配列番号８５の１００位のＰｒｏ；（ｃｃ）配列番号８５の１０１位のＴｈｒ；（ｃｄ）配列番号８５の１０２位のＡｌａ；（ｃｅ）配列番号８５の１０３位のＳｅｒ；（ｃｆ）配列番号８５の１０４位のＰｒｏ；（ｃｇ）配列番号８５の１０５位のＡｓｎ；（ｃｈ）配列番号８５の１０６位のＡｌａ；（ｃｉ）配列番号８５の１０７位のＰｒｏ；（ｃｊ）配列番号８５の１０８位のＬｙｓ；（ｃｋ）配列番号８５の１０９位のＬｅｕ；（ｃｌ）配列番号８５の１１０位のＧｌｙ；（ｃｍ）配列番号８５の１１１位のＰｒｏ；（ｃｎ）配列番号８５の１１２位のＭｅｔ；及び（ｃｏ）配列番号８５の１１３位のＧｌｕからなる群から選択される１つまたは複数のアミノ酸に接触し；脂肪分解（例えば、白色脂肪細胞及び／または褐色脂肪細胞の脂肪分解）を増加させる。
【００２９】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号８５のアミノ酸２８〜９２の間でＡＬＫ７に特異的に結合する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号８５のアミノ酸２８〜９２の間でＡＬＫ７に特異的に結合し、１種または複数のＡＬＫ７リガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及び／またはＮｏｄａｌ）がＡＬＫ７に結合することを阻害する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号８５のアミノ酸２８〜９２の間でＡＬＫ７に特異的に結合し、（ａ）配列番号８５の２８位のＣｙｓ；（ｂ）配列番号８５の２９位のＶａｌ；（ｃ）配列番号８５の３０位のＣｙｓ；（ｄ）配列番号８５の３１位のＬｅｕ；（ｅ）配列番号８５の３２位のＬｅｕ；（ｆ）配列番号８５の３３位のＣｙｓ；（ｇ）配列番号８５の３４位のＡｓｐ；（ｈ）配列番号８５の３５位のＳｅｒ；（ｉ）配列番号８５の３６位のＳｅｒ；（ｊ）配列番号８５の３７位のＡｓｎ；（ｋ）配列番号８５の３８位のＰｈｅ；（ｌ）配列番号８５の３９位のＴｈｒ；（ｍ）配列番号８５の４０位のＣｙｓ；（ｎ）配列番号８５の４１位のＧｌｎ；（ｏ）配列番号８５の４２位のＴｈｒ；（ｐ）配列番号８５の４３位のＧｌｕ；（ｑ）配列番号８５の４４位のＧｌｙ；（ｒ）配列番号８５の４５位のＡｌａ；（ｓ）配列番号８５の４６位のＣｙｓ；（ｔ）配列番号８５の４７位のＴｒｐ；（ｕ）配列番号８５の４８位のＡｌａ；（ｖ）配列番号８５の４９位のＳｅｒ；（ｗ）配列番号８５の５０位のＶａｌ；（ｘ）配列番号８５の５１位のＭｅｔ；（ｙ）配列番号８５の５２位のＬｅｕ；（ｚ）配列番号８５の５３位のＴｈｒ；（ａａ）配列番号８５の５４位のＡｓｎ；（ａｂ）配列番号８５の５５位のＧｌｙ；（ａｃ）配列番号８５の５６位のＬｙｓ；（ａｄ）配列番号８５の５７位のＧｌｕ；（ａｅ）配列番号８５の５８位のＧｌｎ；（ａｆ）配列番号８５の５９位のＶａｌ；（ａｇ）配列番号８５の６０位のＩｌｅ；（ａｈ）配列番号８５の６１位のＬｙｓ；（ａｉ）配列番号８５の６２位のＳｅｒ；（ａｊ）配列番号８５の６３位のＣｙｓ；（ａｋ）配列番号８５の６４位のＶａｌ；（ａｌ）配列番号８５の６５位のＳｅｒ；（ａｍ）配列番号８５の６６位のＬｅｕ；（ａｎ）配列番号８５の６７位のＰｒｏ；（ａｏ）配列番号８５の６８位のＧｌｕ；（ａｐ）配列番号８５の６９位のＬｅｕ；（ａｑ）配列番号８５の７０位のＡｓｎ；（ａｒ）配列番号８５の７１位のＡｌａ；（ａｓ）配列番号８５の７２位のＧｌｎ；（ａｔ）配列番号８５の７３位のＶａｌ；（ａｕ）配列番号８５の７４位のＰｈｅ；（ａｖ）配列番号８５の７５位のＣｙｓ；（ａｗ）配列番号８５の７６位のＨｉｓ；（ａｘ）配列番号８５の７７位のＳｅｒ；（ａｙ）配列番号８５の７８位のＳｅｒ；（ａｚ）配列番号８５の７９位のＡｓｎ；（ｂａ）配列番号８５の８０位のＡｓｎ；（ｂｂ）配列番号８５の８１位のＶａｌ；（ｂｃ）配列番号８５の８２位のＴｈｒ；（ｂｄ）配列番号８５の８３位のＬｙｓ；（ｂｅ）配列番号８５の８４位のＴｈｒ；（ｂｆ）配列番号８５の８５位のＧｌｕ；（ｂｇ）配列番号８５の８６位のＣｙｓ；（ｂｈ）配列番号８５の８７位のＣｙｓ；（ｂｉ）配列番号８５の８８位のＰｈｅ；（ｂｊ）配列番号８５の８９位のＴｈｒ；（ｂｋ）配列番号８５の９０位のＡｓｐ；（ｂｌ）配列番号８５の９１位のＰｈｅ；及び（ｂｍ）配列番号８５の９２位のＣｙｓからなる群から選択される１つまたは複数のアミノ酸に接触する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号８５のアミノ酸２８〜９２の間でＡＬＫ７に特異的に結合し、（ａ）配列番号８５の２８位のＣｙｓ；（ｂ）配列番号８５の２９位のＶａｌ；（ｃ）配列番号８５の３０位のＣｙｓ；（ｄ）配列番号８５の３１位のＬｅｕ；（ｅ）配列番号８５の３２位のＬｅｕ；（ｆ）配列番号８５の３３位のＣｙｓ；（ｇ）配列番号８５の３４位のＡｓｐ；（ｈ）配列番号８５の３５位のＳｅｒ；（ｉ）配列番号８５の３６位のＳｅｒ；（ｊ）配列番号８５の３７位のＡｓｎ；（ｋ）配列番号８５の３８位のＰｈｅ；（ｌ）配列番号８５の３９位のＴｈｒ；（ｍ）配列番号８５の４０位のＣｙｓ；（ｎ）配列番号８５の４１位のＧｌｎ；（ｏ）配列番号８５の４２位のＴｈｒ；（ｐ）配列番号８５の４３位のＧｌｕ；（ｑ）配列番号８５の４４位のＧｌｙ；（ｒ）配列番号８５の４５位のＡｌａ；（ｓ）配列番号８５の４６位のＣｙｓ；（ｔ）配列番号８５の４７位のＴｒｐ；（ｕ）配列番号８５の４８位のＡｌａ；（ｖ）配列番号８５の４９位のＳｅｒ；（ｗ）配列番号８５の５０位のＶａｌ；（ｘ）配列番号８５の５１位のＭｅｔ；（ｙ）配列番号８５の５２位のＬｅｕ；（ｚ）配列番号８５の５３位のＴｈｒ；（ａａ）配列番号８５の５４位のＡｓｎ；（ａｂ）配列番号８５の５５位のＧｌｙ；（ａｃ）配列番号８５の５６位のＬｙｓ；（ａｄ）配列番号８５の５７位のＧｌｕ；（ａｅ）配列番号８５の５８位のＧｌｎ；（ａｆ）配列番号８５の５９位のＶａｌ；（ａｇ）配列番号８５の６０位のＩｌｅ；（ａｈ）配列番号８５の６１位のＬｙｓ；（ａｉ）配列番号８５の６２位のＳｅｒ；（ａｊ）配列番号８５の６３位のＣｙｓ；（ａｋ）配列番号８５の６４位のＶａｌ；（ａｌ）配列番号８５の６５位のＳｅｒ；（ａｍ）配列番号８５の６６位のＬｅｕ；（ａｎ）配列番号８５の６７位のＰｒｏ；（ａｏ）配列番号８５の６８位のＧｌｕ；（ａｐ）配列番号８５の６９位のＬｅｕ；（ａｑ）配列番号８５の７０位のＡｓｎ；（ａｒ）配列番号８５の７１位のＡｌａ；（ａｓ）配列番号８５の７２位のＧｌｎ；（ａｔ）配列番号８５の７３位のＶａｌ；（ａｕ）配列番号８５の７４位のＰｈｅ；（ａｖ）配列番号８５の７５位のＣｙｓ；（ａｗ）配列番号８５の７６位のＨｉｓ；（ａｘ）配列番号８５の７７位のＳｅｒ；（ａｙ）配列番号８５の７８位のＳｅｒ；（ａｚ）配列番号８５の７９位のＡｓｎ；（ｂａ）配列番号８５の８０位のＡｓｎ；（ｂｂ）配列番号８５の８１位のＶａｌ；（ｂｃ）配列番号８５の８２位のＴｈｒ；（ｂｄ）配列番号８５の８３位のＬｙｓ；（ｂｅ）配列番号８５の８４位のＴｈｒ；（ｂｆ）配列番号８５の８５位のＧｌｕ；（ｂｇ）配列番号８５の８６位のＣｙｓ；（ｂｈ）配列番号８５の８７位のＣｙｓ；（ｂｉ）配列番号８５の８８位のＰｈｅ；（ｂｊ）配列番号８５の８９位のＴｈｒ；（ｂｋ）配列番号８５の９０位のＡｓｐ；（ｂｌ）配列番号８５の９１位のＰｈｅ；及び（ｂｍ）配列番号８５の９２位のＣｙｓからなる群から選択される１つまたは複数のアミノ酸に接触し、１種または複数のＡＬＫ７リガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及び／またはＮｏｄａｌ）がＡＬＫ７に結合することを阻害する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号８５のアミノ酸２８〜９２の間でＡＬＫ７に特異的に結合し、脂肪分解（例えば、白色脂肪細胞及び／または褐色脂肪細胞の脂肪分解）を増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号８５のアミノ酸２８〜９２の間でＡＬＫ７に特異的に結合し、（ａ）配列番号８５の２８位のＣｙｓ；（ｂ）配列番号８５の２９位のＶａｌ；（ｃ）配列番号８５の３０位のＣｙｓ；（ｄ）配列番号８５の３１位のＬｅｕ；（ｅ）配列番号８５の３２位のＬｅｕ；（ｆ）配列番号８５の３３位のＣｙｓ；（ｇ）配列番号８５の３４位のＡｓｐ；（ｈ）配列番号８５の３５位のＳｅｒ；（ｉ）配列番号８５の３６位のＳｅｒ；（ｊ）配列番号８５の３７位のＡｓｎ；（ｋ）配列番号８５の３８位のＰｈｅ；（ｌ）配列番号８５の３９位のＴｈｒ；（ｍ）配列番号８５の４０位のＣｙｓ；（ｎ）配列番号８５の４１位のＧｌｎ；（ｏ）配列番号８５の４２位のＴｈｒ；（ｐ）配列番号８５の４３位のＧｌｕ；（ｑ）配列番号８５の４４位のＧｌｙ；（ｒ）配列番号８５の４５位のＡｌａ；（ｓ）配列番号８５の４６位のＣｙｓ；（ｔ）配列番号８５の４７位のＴｒｐ；（ｕ）配列番号８５の４８位のＡｌａ；（ｖ）配列番号８５の４９位のＳｅｒ；（ｗ）配列番号８５の５０位のＶａｌ；（ｘ）配列番号８５の５１位のＭｅｔ；（ｙ）配列番号８５の５２位のＬｅｕ；（ｚ）配列番号８５の５３位のＴｈｒ；（ａａ）配列番号８５の５４位のＡｓｎ；（ａｂ）配列番号８５の５５位のＧｌｙ；（ａｃ）配列番号８５の５６位のＬｙｓ；（ａｄ）配列番号８５の５７位のＧｌｕ；（ａｅ）配列番号８５の５８位のＧｌｎ；（ａｆ）配列番号８５の５９位のＶａｌ；（ａｇ）配列番号８５の６０位のＩｌｅ；（ａｈ）配列番号８５の６１位のＬｙｓ；（ａｉ）配列番号８５の６２位のＳｅｒ；（ａｊ）配列番号８５の６３位のＣｙｓ；（ａｋ）配列番号８５の６４位のＶａｌ；（ａｌ）配列番号８５の６５位のＳｅｒ；（ａｍ）配列番号８５の６６位のＬｅｕ；（ａｎ）配列番号８５の６７位のＰｒｏ；（ａｏ）配列番号８５の６８位のＧｌｕ；（ａｐ）配列番号８５の６９位のＬｅｕ；（ａｑ）配列番号８５の７０位のＡｓｎ；（ａｒ）配列番号８５の７１位のＡｌａ；（ａｓ）配列番号８５の７２位のＧｌｎ；（ａｔ）配列番号８５の７３位のＶａｌ；（ａｕ）配列番号８５の７４位のＰｈｅ；（ａｖ）配列番号８５の７５位のＣｙｓ；（ａｗ）配列番号８５の７６位のＨｉｓ；（ａｘ）配列番号８５の７７位のＳｅｒ；（ａｙ）配列番号８５の７８位のＳｅｒ；（ａｚ）配列番号８５の７９位のＡｓｎ；（ｂａ）配列番号８５の８０位のＡｓｎ；（ｂｂ）配列番号８５の８１位のＶａｌ；（ｂｃ）配列番号８５の８２位のＴｈｒ；（ｂｄ）配列番号８５の８３位のＬｙｓ；（ｂｅ）配列番号８５の８４位のＴｈｒ；（ｂｆ）配列番号８５の８５位のＧｌｕ；（ｂｇ）配列番号８５の８６位のＣｙｓ；（ｂｈ）配列番号８５の８７位のＣｙｓ；（ｂｉ）配列番号８５の８８位のＰｈｅ；（ｂｊ）配列番号８５の８９位のＴｈｒ；（ｂｋ）配列番号８５の９０位のＡｓｐ；（ｂｌ）配列番号８５の９１位のＰｈｅ；及び（ｂｍ）配列番号８５の９２位のＣｙｓからなる群から選択される１つまたは複数のアミノ酸に接触し、脂肪分解（例えば、白色脂肪細胞及び／または褐色脂肪細胞の脂肪分解）を増加させる。
【００３０】
ＡＬＫ７結合性タンパク質をコードする核酸及び核酸のセットも提供する。核酸及び核酸のセットを含有するベクター及びベクターのセット、ならびにそれらの核酸及びベクターで形質転換された宿主細胞をさらに提供する。一部の実施形態では、宿主細胞は、ハイブリドーマまたは哺乳類宿主細胞、例えば、ＮＳ０マウス骨髄腫細胞、ＰＥＲ．Ｃ６（登録商標）ヒト細胞、またはチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞である。ＡＬＫ７結合性タンパク質を産生する、哺乳類宿主細胞及びハイブリドーマを含む宿主細胞も提供する。
【００３１】
ＡＬＫ７結合性タンパク質を作製する方法も提供する。一部の実施形態では、方法は、タンパク質を発現するために適切な条件下でＡＬＫ７結合性タンパク質を発現することができる宿主細胞を培養すること、及び任意選択で、発現されたＡＬＫ７結合性タンパク質を単離することを含む。本明細書において開示するか、または別段に当技術分野で公知の方法を使用して調製及び／または単離されたＡＬＫ７結合性タンパク質も提供する。
【００３２】
ＡＬＫ７結合性タンパク質及び薬学的に許容される担体を含む医薬組成物をさらに提供する。一部の実施形態では、本開示は、ＡＬＫ７発現またはＡＬＫ７媒介性シグナル伝達の増加と関連するか、またはＡＬＫ７シグナル伝達の減少により処置し得る、及び／または寛解させ得る、対象における状態を処置する、及び／または寛解させるための方法を提供する。一部の実施形態では、方法は、対象においてＡＬＫ７媒介性シグナル伝達を減少させる。
【００３３】
提供する方法を使用して対象において処置及び／または寛解され得る状態には、これらだけに限定されないが：肥満（例えば、腹部肥満）；過体重；インスリン抵抗性；代謝症候群及び他の代謝性疾患または状態；脂質障害、例えば、低ＨＤＬ値、高ＬＤＬ値、高脂血症、高トリグリセリド血症または脂質異常症；リポタンパク質異常；トリグリセリドの減少；炎症（例えば、肝臓炎症及び／または脂肪組織の炎症）、脂肪肝疾患；非アルコール性脂肪肝疾患；高血糖症；耐糖能障害（ＩＧＴ）；インスリン過剰血症；高コレステロール（例えば、高ＬＤＬ値及び高コレステロール血症）；心臓血管疾患、例えば、冠動脈性心疾患を含む心疾患、鬱血性心不全、卒中、末梢血管疾患、線維素溶解の障害、アテローム硬化症；動脈硬化症、及び高血圧；Ｘ症候群；血管再狭窄；神経障害；網膜障害；神経変性疾患；内皮機能障害、呼吸機能障害、腎疾患（例えば、腎障害）；膵臓炎；多嚢胞性卵巣症候群；尿酸値の上昇；ヘモクロマトーシス（鉄過剰）；黒色表皮腫（皮膚上の暗色斑）；及びがん（例えば、骨髄腫（多発性骨髄腫、プラスマ細胞腫、限局性骨髄腫、または髄外骨髄腫）、または卵巣、乳房、結腸、子宮内膜、肝臓、腎臓、膵臓、胃、子宮及び／または結腸の癌）；ならびに上記疾患もしくは状態の１種もしくは複数と、または過体重（例えば、ＢＭＩ≧２５ｋｇ／ｍ２）と、または多すぎる体脂肪と関連する他の障害／状態が含まれる。
【００３４】
一部の実施形態では、本開示の方法は、ＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、アンタゴニストＡＬＫ７結合性タンパク質、例えば、アンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体）の有効量を、それを必要とする対象に投与することを含む、医薬組成物の投与を含む。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質を単独で投与する。他の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質を併用療法として投与する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質を、標準治療処置／療法に対する併用療法として投与する。
【００３５】
ＡＬＫ７活性（例えば、リガンド結合及び／またはシグナル伝達）を遮断する、または低下させる方法も提供する。一部の実施形態では、方法は、ＡＬＫ７結合性タンパク質、及びＡＬＫ７を発現する細胞（例えば、分化白色または褐色脂肪細胞）を接触させることを含む。一部の事例では、方法は、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及び／またはＮｏｄａｌの存在下で、ＡＬＫ７結合性タンパク質、及びＡＬＫ７を発現する細胞を接触させることを含む。一部の実施形態では、方法をｉｎ  ｖｉｖｏで行う。他の実施形態では、方法をｉｎ  ｖｉｔｒｏで行う。一部の実施形態では、遮断される、または低下するＡＬＫ７活性は、ＡＬＫ７のリン酸化である。追加の実施形態では、遮断される、または低下するＡＬＫ７活性は、Ｓｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化である。一部の実施形態では、本開示は、対象においてＡＬＫ７活性を遮断する、または低下させる方法であって、ＡＬＫ７結合性タンパク質の有効量を、それを必要とする対象に投与することを含む方法を提供する。
【００３６】
ＡＬＫ７発現及び／またはＡＬＫ７シグナル伝達と関連する病的状態において、またはＡＬＫ７−リガンドの活性の低下または阻害により処置及び／または寛解され得る病的状態において、ＡＬＫ７活性を遮断する、または低下させる方法も提供する。一部の事例では、方法は、ＡＬＫ７結合性タンパク質を、ＡＬＫ７またはＡＬＫ７−リガンドの発現が増加している対象に投与することを含む。一部の実施形態では、病的状態は、肥満、糖尿病、代謝性疾患、脂質異常症；心臓血管疾患、２型糖尿病、炎症、または肺、脂肪肝疾患、神経、及び肝臓、または腎臓の疾患である。
【００３７】
一実施形態では、本開示は、過体重または過体重と関連する状態を処置する、または寛解させる方法であって、過体重対象に、ＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、アンタゴニストＡＬＫ７結合性タンパク質、例えば、アンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体）の有効量を投与することを含む方法を提供する。一実施形態では、処置または寛解される状態は、肥満である。別の実施形態では、処置または寛解される状態は、脂質異常症、高脂血症、高コレステロール血症、低ＨＤＬ血清レベル、高ＬＤＬ血清レベル（例えば、ＬＤＬ−Ｃ≧１００ｍｇ／ｄＬ、≧１３０ｍｇ／ｄＬ、≧１６０ｍｇ／ｄＬ）、及び高トリグリセリド血症（例えば、ＴＧ≧１５０ｍｇ／ｄＬ、≧１６０ｍｇ／ｄＬ、≧１７０ｍｇ／ｄＬ）からなる群から選択されるメンバーである。別の実施形態では、処置または寛解される状態は、高血圧である。別の実施形態では、処置または寛解される状態は、糖尿病である。一実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニストである。一実施形態では、投与されるアンタゴニストＡＬＫ７結合性タンパク質は、抗ＡＬＫ７抗体またはＡＬＫ７結合性抗体断片である。別の実施形態では、投与されるアンタゴニストＡＬＫ７結合性タンパク質は、本明細書において開示する抗ＡＬＫ７抗体またはＡＬＫ７結合性抗体断片である。一実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質は、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ対を含む。別の実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質は、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ配列対を含む抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。一実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質は、表１Ｂまたは表３に開示されているＶＨ及びＶＬ対を含む。別の実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質は、表１Ｂまたは表３に開示されているＶＨ及びＶＬ配列対を含む抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。一実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質は、表１Ａ、表１Ｂ、または表３に開示されているＶＨ及びＶＬ対を含む。別の実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質は、表１Ａ、表１Ｂ、または表３に開示されているＶＨ及びＶＬ配列対を含む抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。
【００３８】
一実施形態では、本開示は、肥満または肥満と関連する状態を処置する、または寛解させる方法であって、肥満対象に、ＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、アンタゴニストＡＬＫ７結合性タンパク質、例えば、アンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体）の有効量を投与することを含む方法を提供する。一実施形態では、処置または寛解される状態は、高血圧、脂質異常症（例えば、高い総コレステロールまたは高レベルのトリグリセリド）、２型糖尿病、冠動脈性心疾患、卒中、胆嚢疾患、変形性関節症、睡眠障害、呼吸器問題、がん（例えば、骨髄腫（多発性骨髄腫、プラスマ細胞腫、限局性骨髄腫、または髄外骨髄腫）、または卵巣、乳房、結腸、子宮内膜、肝臓、腎臓、膵臓、胃、子宮及び／または結腸の癌）、肥満関連胆嚢疾患、肥満関連炎症、肥満誘発性睡眠無呼吸、脂肪症（脂肪肝）、グルカゴノーマ、動脈硬化症または心不全である。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質が投与される対象は、高血圧、脂質異常症（例えば、高い総コレステロールまたは高レベルのトリグリセリド）、２型糖尿病、冠動脈性心疾患、卒中、胆嚢疾患、変形性関節症、睡眠障害、呼吸器問題、がん（例えば、骨髄腫（多発性骨髄腫、プラスマ細胞腫、限局性骨髄腫、または髄外骨髄腫）、または卵巣、乳房、結腸、子宮内膜、肝臓、腎臓、膵臓、胃、子宮もしくは結腸の癌）、肥満関連胆嚢疾患、肥満関連炎症、肥満誘発性睡眠無呼吸、脂肪症、グルカゴノーマ、動脈硬化症または心不全を発症するリスクを有する。一実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニストである。一実施形態では、投与されるアンタゴニストＡＬＫ７結合性タンパク質は、抗ＡＬＫ７抗体またはＡＬＫ７結合性抗体断片である。別の実施形態では、投与されるアンタゴニストＡＬＫ７結合性タンパク質は、本明細書において開示する抗ＡＬＫ７抗体またはＡＬＫ７結合性抗体断片である。一実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質は、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ対を含む。別の実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質は、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ配列対を含む抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。一実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質は、表３に開示されているＶＨ及びＶＬ対を含む。別の実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質は、表３に開示されているＶＨ及びＶＬ配列対を含む抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。一実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質は、表１Ａ、表１Ｂ、または表３に開示されているＶＨ及びＶＬ対を含む。別の実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質は、表１Ａ、表１Ｂ、または表３に開示されているＶＨ及びＶＬ配列対を含む抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。
【００３９】
一実施形態では、本開示は、ＩＩ型糖尿病またはＩＩ型糖尿病と関連する状態を処置する、または寛解させる方法であって、糖尿病対象に、ＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、アンタゴニストＡＬＫ７結合性タンパク質、例えば、アンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体）の有効量を投与することを含む方法を提供する。一実施形態では、本開示は、ＩＩ型糖尿病と関連する状態を処置する、または寛解させる方法を提供する。さらなる一実施形態では、状態は、眼状態（例えば、緑内障、白内障、及び網膜障害）、心臓血管疾患（例えば、高血圧、アテローム硬化症、心筋梗塞、及び卒中）、高血糖症、末梢神経障害、及び腎臓疾患（例えば、腎障害）から選択されるメンバーである。追加の一実施形態では、対象は、ＩＩ型糖尿病またはＩＩ型糖尿病と関連する状態を発症するリスクを有する。別の実施形態では、対象は、眼状態（例えば、緑内障、白内障、及び網膜障害）、心臓血管疾患（例えば、高血圧、アテローム硬化症、心筋梗塞、線維素溶解の障害、及び卒中）、高血糖症、末梢神経障害、または腎臓疾患（例えば、腎障害）を発症するリスクを有する。一実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニストである。一実施形態では、投与されるアンタゴニストＡＬＫ７結合性タンパク質は、抗ＡＬＫ７抗体またはＡＬＫ７結合性抗体断片である。別の実施形態では、投与されるアンタゴニストＡＬＫ７結合性タンパク質は、本明細書において開示する抗ＡＬＫ７抗体またはＡＬＫ７結合性抗体断片である。一実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質は、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ対を含む。一実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質は、表３に開示されているＶＨ及びＶＬ対を含む。別の実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質は、表１Ｂまたは表３に開示されているＶＨ及びＶＬ配列対を含む抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。
【００４０】
一実施形態では、本開示は、代謝性疾患もしくは障害または代謝性疾患もしくは障害と関連する状態を処置する、または寛解させる方法であって、ＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、アンタゴニストＡＬＫ７結合性タンパク質、例えば、アンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体）の有効量を、それを必要とする対象に投与することを含む方法を提供する。一実施形態では、処置または寛解される状態は、脂質、リポタンパク質またはアポリポタンパク質代謝の変化である。別の実施形態では、代謝状態は、高血漿中トリグリセリドレベル、高血圧、脂質異常症、高空腹時血糖、低ＨＤＬコレステロールレベルである。別の実施形態では、処置または寛解される状態は、アテローム硬化症、動脈硬化症、または内皮機能障害である。一実施形態では、処置または寛解される状態は、慢性炎症である。別の実施形態では、処置または寛解される状態は、非アルコール性脂肪肝疾患（例えば、脂肪肝及び／またはＮＡＳＨ）である。一実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニストである。一実施形態では、投与されるアンタゴニストＡＬＫ７結合性タンパク質は、抗ＡＬＫ７抗体またはＡＬＫ７結合性抗体断片である。別の実施形態では、投与されるアンタゴニストＡＬＫ７結合性タンパク質は、本明細書において開示する抗ＡＬＫ７抗体またはＡＬＫ７結合性抗体断片である。一実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質は、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ対を含む。別の実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質は、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ配列対を含む抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。一実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質は、表１Ｂまたは表３に開示されているＶＨ及びＶＬ対を含む。別の実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質は、表１Ｂまたは表３に開示されているＶＨ及びＶＬ配列対を含む抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。
【００４１】
一実施形態では、本開示は、インスリン抵抗性またはインスリン抵抗性と関連する状態を処置する、または寛解させる方法であって、ＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、アンタゴニストＡＬＫ７結合性タンパク質、例えば、アンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体）の有効量を、それを必要とする対象に投与することを含む方法を提供する。さらなる一実施形態では、処置または寛解される状態は、耐糖能障害または高血糖症と関連する。別の実施形態では、処置または寛解される状態は、高血圧またはアテローム硬化症と関連する。別の実施形態では、処置または寛解される状態は、脂質異常症、高脂血症、高コレステロール血症、低ＨＤＬ血清レベル、高ＬＤＬ血清レベル（例えば、ＬＤＬ−Ｃ≧１００ｍｇ／ｄＬ、≧１３０ｍｇ／ｄＬ、≧１６０ｍｇ／ｄＬ）、及び高トリグリセリド血症（例えば、ＴＧ≧１５０ｍｇ／ｄＬ、≧１６０ｍｇ／ｄＬ、≧１７０ｍｇ／ｄＬ）からなる群から選択されるメンバーである。一実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニストである。一実施形態では、投与されるアンタゴニストＡＬＫ７結合性タンパク質は、抗ＡＬＫ７抗体またはＡＬＫ７結合性抗体断片である。別の実施形態では、投与されるアンタゴニストＡＬＫ７結合性タンパク質は、本明細書において開示する抗ＡＬＫ７抗体またはＡＬＫ７結合性抗体断片である。一実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質は、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ対を含む。別の実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質は、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ配列対を含む抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。一実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質は、表１Ｂまたは表３に開示されているＶＨ及びＶＬ対を含む。別の実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質は、表１Ｂまたは表３に開示されているＶＨ及びＶＬ配列対を含む抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。
【００４２】
一実施形態では、本開示は、眼、神経系、腎臓、肺、及び／または肝臓の疾患もしくは障害、または関連状態を処置する、または寛解させる方法であって、ＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、アンタゴニストＡＬＫ７結合性タンパク質、例えば、アンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体）の有効量を、それを必要とする対象に投与することを含む方法を提供する。一実施形態では、処置または寛解される状態は、炎症である。一実施形態では、処置または寛解される状態は、腎障害（例えば、糖尿病性腎障害）、腎臓動脈の動脈硬化症）、または腎不全である。さらなる一実施形態では、処置または寛解される状態は、慢性炎症である。さらなる一実施形態では、処置または寛解される状態は、脂肪組織の炎症である。別の実施形態では、処置または寛解される状態は、肝臓の炎症である。別の実施形態では、処置または寛解される状態は、ＮＡＦＬＤ（例えば、脂肪肝及び／またはＮＡＳＨ）である。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質が投与される対象は、腎臓、肺、または肝臓の疾患または障害を発症するリスクを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質が投与される対象は、腎障害を発症するリスクを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質が投与される対象は、腎障害を発症するリスクを有する。一実施形態では、対象は、慢性炎症を発症するリスクを有する。一実施形態では、対象は、脂肪組織の炎症を発症するリスクを有する。追加の一実施形態では、対象は、肝臓の炎症を発症するリスクを有する。一実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニストである。一実施形態では、投与されるアンタゴニストＡＬＫ７結合性タンパク質は、抗ＡＬＫ７抗体またはＡＬＫ７結合性抗体断片である。別の実施形態では、投与されるアンタゴニストＡＬＫ７結合性タンパク質は、本明細書において開示する抗ＡＬＫ７抗体またはＡＬＫ７結合性抗体断片である。一実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質は、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ対を含む。別の実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質は、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ配列対を含む抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。一実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質は、表１Ｂまたは表３に開示されているＶＨ及びＶＬ対を含む。別の実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質は、表１Ｂまたは表３に開示されているＶＨ及びＶＬ配列対を含む抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。
【００４３】
一実施形態では、本開示は、心臓血管疾患もしくは障害または心臓血管疾患もしくは障害と関連する状態を処置する、または寛解させる方法であって、ＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、アンタゴニストＡＬＫ７結合性タンパク質、例えば、アンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体）の有効量を、それを必要とする対象に投与することを含む方法を提供する。一実施形態では、処置または寛解される状態は、冠動脈性心疾患、鬱血性心不全、血管再狭窄、卒中、末梢血管疾患、微小血管性疾患、線維素溶解の障害、または動脈硬化症である。一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質が投与される対象は、冠動脈性心疾患、鬱血性心不全、血管再狭窄、卒中、末梢血管疾患、微小血管性疾患、または動脈硬化症を発症するリスクを有する。一実施形態では、処置または寛解される状態は、高血圧（例えば、安静状態で血圧＞１３０／８０ｍｍＨｇ）である。一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質が投与される対象は、高血圧を発症するリスクを有する。一実施形態では、処置または寛解される状態は、アテローム硬化症である。一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質が投与される対象は、アテローム硬化症を発症するリスクを有する。一実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニストである。一実施形態では、投与されるアンタゴニストＡＬＫ７結合性タンパク質は、抗ＡＬＫ７抗体またはＡＬＫ７結合性抗体断片である。別の実施形態では、投与されるアンタゴニストＡＬＫ７結合性タンパク質は、本明細書において開示する抗ＡＬＫ７抗体またはＡＬＫ７結合性抗体断片である。一実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質は、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ対を含む。別の実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質は、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ配列対を含む抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。一実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質は、表１Ｂに開示されているＶＨ及びＶＬ対を含む。別の実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質は、表１Ｂに開示されているＶＨ及びＶＬ配列対を含む抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。一実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質は、表３に開示されているＶＨ及びＶＬ対を含む。別の実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質は、表３に開示されているＶＨ及びＶＬ配列対を含む抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。
【図面の簡単な説明】
【００４４】
【図１】ＴＢＳ及びＡＬＫ７ｍＡｂ処置された高脂肪食（ＨＦＤ）マウスにおける脂肪変化量を示している。脂肪量の変化は、ＡＬＫ７ＡｂまたはＴＢＳ処置の前の基線に対する。ＡＬＫ７ｍＡｂ（すなわち、Ｊ０２、Ｋ０２、Ｇ０５、Ｃ０３、及びＬ０２）での処置は、ＨＦＤマウスの体脂肪を有意に減少させる。＊は、ＨＦＤ＋ＴＢＳに対するｐ＞０．００１を示す。
【図２】ＴＢＳ及びＡＬＫ７ｍＡｂ処置された高脂肪食（ＨＦＤ）マウスにおける除脂肪体重変化量を示している。徐脂肪量の変化は、ＡＬＫ７ＡｂまたはＴＢＳ処置前の基線に対する。ＡＬＫ７ｍＡｂ（すなわち、Ｊ０２、Ｋ０２、Ｇ０５、Ｃ０３、及びＬ０２）での処置は、ＨＦＤマウスにおいて、除脂肪体重を変化させなかった。
【発明を実施するための形態】
【００４５】
本開示は、単離及び／または組換えＡＬＫ７結合性タンパク質を提供する。特定の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、抗ＡＬＫ７抗体である。ＡＬＫ７結合性タンパク質をコードする核酸、その核酸を含有するベクター及び宿主細胞、ならびにＡＬＫ７結合性タンパク質を作製及び使用する方法も提供する。提供するＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７発現及び／またはシグナル伝達の増加と関連する疾患及び状態を診断する、処置する、及び／または寛解させる際に使用される。そのような使用には、これらだけに限定されないが、肥満（例えば、腹部肥満）；過体重；インスリン抵抗性；代謝症候群及び他の代謝性疾患または状態；脂質障害、例えば、低ＨＤＬ値、高ＬＤＬ値、高脂血症、高トリグリセリド血症または脂質異常症；リポタンパク質異常；トリグリセリドの減少；炎症（例えば、肝臓炎症及び／または脂肪組織の炎症）、脂肪肝疾患；非アルコール性脂肪肝疾患；高血糖症；耐糖能障害（ＩＧＴ）；インスリン過剰血症；高コレステロール（例えば、高ＬＤＬ値及び高コレステロール血症）；心臓血管疾患、例えば、冠動脈性心疾患を含む心疾患、鬱血性心不全、卒中、末梢血管疾患、アテローム硬化症；動脈硬化症、及び高血圧；Ｘ症候群；血管再狭窄；神経障害；網膜障害；神経変性疾患；内皮機能障害、呼吸機能障害、腎疾患（例えば、腎障害）；膵臓炎；多嚢胞性卵巣症候群；尿酸値の上昇；ヘモクロマトーシス（鉄過剰）；黒色表皮腫（皮膚上の暗色斑）；ならびにがん（例えば、骨髄腫（多発性骨髄腫、プラスマ細胞腫、限局性骨髄腫、または髄外骨髄腫）、または卵巣、乳房、結腸、子宮内膜、肝臓、腎臓、膵臓、胃、子宮及び／または結腸の癌）；ならびに上記疾患もしくは状態の１種もしくは複数と、または過体重（例えば、２５ｋｇ／ｍ２のＢＭＩ）と、または多すぎる体脂肪と関連する他の障害／状態を予防する、及び／または寛解させることが含まれる。
【００４６】
定義
別段に定義されていない限り、本明細書において使用するすべての専門用語及び科学用語は、本開示が関連する分野において通常の技能を有するものが共通して理解する意味と同じ意味を有する。例えば、ｔｈｅ  Ｃｏｎｃｉｓｅ  Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ  ｏｆ  Ｂｉｏｍｅｄｉｃｉｎｅ  ａｎｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｊｕｏ，Ｐｅｉ−Ｓｈｏｗ，２ｎｄ  ｅｄ．，２００２，ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ；Ｔｈｅ  Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ  ｏｆ  Ｃｅｌｌ  ａｎｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，３ｒｄ  ｅｄ．，１９９９，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ；及びｔｈｅ  Ｏｘｆｏｒｄ  Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ  Ｏｆ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ａｎｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｒｅｖｉｓｅｄ，２０００，Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓは、当業者にとって、本開示で使用する用語の多くの一般的な辞書となっている。本明細書において示す見出しは、本明細書を全体として参照することにより得ることができる様々な実施形態の限定ではない。さらに、すぐ下で定義する用語は、本明細書をその全体で参照することにより、より完全に定義される。
【００４７】
その用語が使用されている文脈が明確に別段に示していない限り、用語「ａ」、「ａｎ」及び「ｔｈｅ」は、複数の言及を含む。用語「ａ」（または「ａｎ」）、さらには、用語「１種（１個、１つ）または複数」、及び「少なくとも１種（１個、１つ）」は、本明細書において互換的に使用され得る。さらに、本明細書において使用する場合の「及び／または」は、他を伴う、または伴わない、２つ以上の指定の特徴または構成成分のそれぞれの具体的な開示として解釈されるべきである。したがって、本明細書において「Ａ及び／またはＢ」などの語句で使用される場合の用語「及び／または」は、「Ａ及びＢ」、「ＡまたはＢ」、「Ａ」（単独で）、及び「Ｂ」（単独で）を含むことが意図されている。同様に、「Ａ、Ｂ、及び／またはＣ」などの語句で使用される場合の用語「及び／または」は、次の実施形態：Ａ、Ｂ、及びＣ；Ａ、Ｂ、またはＣ；ＡまたはＣ；ＡまたはＢ；ＢまたはＣ；Ａ及びＣ；Ａ及びＢ；Ｂ及びＣ；Ａ（単独で）；Ｂ（単独で）；及びＣ（単独で）のそれぞれを含むことが意図されている。
【００４８】
用語「含む」は一般に、包含する、という意味で、すなわち、１つまたは複数の特徴または構成成分の存在を許容することを述べるために使用される。実施形態が、「含む」という言葉と共に本明細書において記載されている場合にはいつでも、「からなる」、及び／または「から本質的になる」に関して記載される、他の点では同様の実施形態も提供する。
【００４９】
本明細書及び特許請求の範囲を通じて数値と関連して使用される場合の用語「約」及び「ほぼ」は、当業者に熟知されいて、かつ許容される確度の間隔を示している。一般に、確度のそのような間隔は、±１０％である。別法では、かつ特に生物系では、用語「約」及び「ほぼ」は、所与の値の一桁、好ましくは≦５倍、より好ましくは≦２倍以内である値を意味し得る。
【００５０】
数値範囲は、その範囲を定義する数値を包含する。
【００５１】
ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合する、好ましくは、ＡＬＫ７の細胞外ドメインに結合するタンパク質を指す。
【００５２】
用語「ＡＬＫ７」及び「ＡＬＫ７受容体」は、互換的に使用され、ＡＬＫ７を指す（文献ではＡＣＶＲＬＫ７、アクチビンＡ受容体、Ｔｙｐｅ  ＩＣ、ＡＣＶＲ−１Ｃ、アクチビン受容体様キナーゼ７、及びＥＣ２．７．１１とも称される）。ヒトＡＬＫ７での基準配列は、ＮＣＢＩ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ＮＰ＿００１１０４５０１．１に示されている。提供するＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号８６のアミノ酸配列に対応する、ヒトＡＬＫ７の細胞外ドメインに結合する。ラットＡＬＫ７の基準配列は、ＮＣＢＩ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  Ｐ７０５３９に示されている。一部の実施形態では、提供するＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号８７のアミノ酸配列に対応する、ラットＡＬＫ７の細胞外ドメインに結合する。
【００５３】
ＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、中和抗体）の文脈で使用される場合の用語「競合する」は、試験中の抗原結合性タンパク質（例えば、抗ＡＬＫ７抗体またはそのＡＬＫ７結合性断片）が、共通の抗原（例えば、ＡＬＫ７細胞外ドメインまたはその断片）への基準抗原結合性タンパク質（例えば、リガンド、または基準抗体）の特異的結合を防止または阻害するアッセイにより決定した場合の、抗原結合性タンパク質間の競合を意味する。数多くの種類の競合結合アッセイ、例えば：固相直接または間接ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）（例えば、Ｍｏｌｄｅｎｈａｕｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃａｎｄ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３２：７７−８２（１９９０）及びＭｏｒｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌｅｃ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２５：７−１５（１９８８）を参照されたい）、固相直接または間接酵素イムノアッセイ（ＥＩＡ）、固相直接ビオチン−アビジンＥＩＡ（例えば、Ｃｈｅｕｎｇ，ｅｔ  ａｌ．，Ｖｉｒｏｌｏｇｙ  １７６：５４６−５５２（１９９０）及びＫｉｒｋｌａｎｄ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３７：３６１４−３６１９（１９８６）を参照されたい）及びサンドイッチ競合アッセイ（例えば、Ｓｔａｈｌｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ  ９２：２４２−２５３（１９８３）を参照されたい）を使用することができる。典型的には、そのようなアッセイは、固体表面に結合した精製抗原またはこれらのいずれかを担持する細胞、非標識試験抗原結合性タンパク質及び標識基準抗原結合性タンパク質の使用を伴う。
【００５４】
競合阻害は、試験抗原結合性タンパク質の存在下で固体表面または細胞に結合した標識の量を決定することにより測定することができる。通常、試験抗原結合性タンパク質は、過剰に存在する。競合アッセイにより同定される抗原結合性タンパク質（競合性抗原結合性タンパク質）には、基準ＡＬＫ７結合性タンパク質と同じエピトープに結合するＡＬＫ７結合性タンパク質、さらには、基準ＡＬＫ７結合性タンパク質が結合するエピトープに対して、立体障害が起こるような十分に近位にある隣接エピトープに結合するＡＬＫ７結合性タンパク質が含まれる。通常、競合性ＡＬＫ７結合性タンパク質が過剰に存在する場合、これは、ＡＬＫ７への基準ＡＬＫ７結合性タンパク質の特異的結合を少なくとも４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％または７５％阻害するであろう。一部の事例では、競合性抗原結合性タンパク質は、基準ＡＬＫ７結合性タンパク質の特異的結合を少なくとも８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％阻害する。
【００５５】
ＡＬＫ７タンパク質の文脈で使用する場合の用語「エピトープ」は、本開示のＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、抗体）に結合することができるＡＬＫ７（例えば、ヒトＡＬＫ７またはマウスＡＬＫ７）タンパク質決定基を指す。エピトープは通常、アミノ酸または糖側鎖などの分子の化学的に活性な表面原子団からなり、通常、特異的三次元構造特徴、さらには特異的電荷特性を有する。配座異性及び非配座異性エピトープは、前者への結合は変性溶媒の存在下で失われるが、後者への結合は失われないことにおいて識別される。ＡＬＫ７結合性タンパク質が結合するＡＬＫ７エピトープは、当技術分野で公知の技術を使用して容易に決定することができる。
【００５６】
本明細書において開示する抗原結合性タンパク質、例えば、抗ＡＬＫ７結合性抗体及びそのＡＬＫ７結合性断片、バリアント、または誘導体は、それらが認識または特異的に結合する抗原、例えば、標的ポリペプチドのエピトープ（複数可）または部分（複数可）に関して記載または規定され得る。例えば、本明細書において開示するＡＬＫ７結合性タンパク質の抗原結合性ドメインと特異的に相互作用するＡＬＫ７の部分が、「エピトープ」である。エピトープは、連続アミノ酸、またはタンパク質の三次折り畳みにより並列する非連続アミノ酸の両方から形成され得る。連続アミノ酸から形成されるエピトープは典型的には、変性溶媒に曝露されても保持されるのに対して、三次折り畳みにより形成されたエピトープは典型的には、変性溶媒での処置で失われる。エピトープ決定基は、アミノ酸、糖側鎖、ホスホリルまたはスルホニル基などの分子の化学的に活性な表面原子団を含むことができ、特異的な三次元構造特徴、及び／または特異的な電荷特性を有し得る。エピトープは典型的には、独特の空間立体配座に少なくとも３、４、５、６、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２５、３０、３５個のアミノ酸を含む。エピトープは、当技術分野で公知の方法を使用してルーチン的に決定され得る。
【００５７】
用語「阻害する」、「遮断する」、「減少させる」、「低下させる」、「抑制する」、「減弱させる（ａｎｔａｇｏｎｉｚｅ）」、及び「中和する」は互換的に使用され、活性の完全な遮断を含む、活性（例えば、ＡＬＫ７リガンド結合及び／またはＡＬＫ７シグナル伝達）の任意の統計的に有意な低下を指す。例えば、「阻害」、「抑制」、または「減弱」は、対照と比較して、活性の約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または１００％の低下を指し得る。
【００５８】
一部の実施形態では、用語「減少させる」、「阻害する」、または「減弱させる」は、ＡＬＫ７及びＡｃｔｒＩＩＡ／Ｂを発現する細胞と、ＡＬＫ７リガンド、例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及び／またはＮｏｄａｌとを接触させることにより誘導される１種または複数のＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を、ＡＬＫ７結合性タンパク質と接触させない場合の細胞におけるＳｍａｄリン酸化の規模に対して統計的に有意に（例えば、０．０５以下のｐ値で）減少させる、ＡＬＫ７結合性タンパク質、例えば、抗体またはそのＡＬＫ７結合性断片の能力を指し得る。ＡＬＫ７を発現する細胞は、天然に存在する細胞または細胞系であってよいか、またはＡＬＫ７をコードする核酸を宿主細胞に導入することにより組換えで生成することもできる。一実施形態では、本明細書に記載されているか、または当技術分野で別段に公知の技術を使用して、例えば、ウエスタンブロット法、続いて、抗ホスホチロシン抗体でプローブすることにより、またはＥＬＩＳＡ（例えば、Ｐ−Ｓｍａｄ  ＥＬＩＳＡ）またはＳｍａｄ依存的レポーター遺伝子アッセイにより決定した場合に、ＡＬＫ７結合性タンパク質、例えば、ＡＬＫ７抗体またはそのＡＬＫ７結合性断片は、１種または複数のＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のＡＬＫ７リガンド媒介性リン酸化を少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または９５％、または約１００％減弱させる（減少させる）。一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解のＡＬＫ７媒介性阻害を減弱させる（減少させる）。一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニストであり、脂肪分解アッセイで決定した場合に、白色脂肪細胞における脂肪分解のＡＬＫ７媒介性阻害を５％〜１００％、１０％〜９５％、１０〜９０％、１０〜８５％、１０〜８０％、１０〜７５％、１０〜７０％、１０〜７５％、１０〜７０％、１０〜６０％、１０〜５５％、１０〜５０％、または１０〜４５％減弱させる。別の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解アッセイで決定した場合に、白色脂肪細胞における脂肪分解のＡＬＫ７媒介性阻害を少なくとも５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または９５％、または約１００％減少させる、または低下させる。一部の実施形態では、脂肪分解アッセイを、１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌ）からなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。
【００５９】
一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニストであり、脂肪分解アッセイで決定した場合に、白色及び／または褐色脂肪細胞における脂肪分解のＡＬＫ７媒介性阻害を５％〜１００％、１０％〜９５％、１０〜９０％、１０〜８５％、１０〜８０％、１０〜７５％、１０〜７０％、１０〜７５％、１０〜７０％、１０〜６０％、１０〜５５％、１０〜５０％、または１０〜４５％減弱させる。別の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解アッセイで決定した場合に、白色及び／または褐色脂肪細胞における脂肪分解のＡＬＫ７媒介性阻害を少なくとも５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または９５％、または約１００％減少させる、または低下させる。一部の実施形態では、脂肪分解アッセイを、１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌ）からなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。
【００６０】
用語「増加させる」、「促進する」、及び「増進する（ａｇｏｎｉｓｔ）」は、互換的に使用され、活性（例えば、ＡＬＫ７リガンド結合及び／またはＡＬＫ７シグナル伝達）の任意の統計的に有意な増加を指す。例えば、「増加させる」または「促進する」は、対照と比較して、活性の約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または１００％の増加を指し得る。
【００６１】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、細胞における脂肪分解を増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解アッセイにおいて決定した場合に、細胞における脂肪分解を少なくとも５％〜１００％、１０％〜９５％、１０〜９０％、１０〜８５％、１０〜８０％、１０〜７５％、１０〜７０％、１０〜７５％、１０〜７０％、１０〜６０％、１０〜５５％、１０〜５０％、または１０〜４５％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解アッセイにおいて決定した場合に、脂肪細胞における脂肪分解を少なくとも５％〜１００％、１０％〜９５％、１０〜９０％、１０〜８５％、１０〜８０％、１０〜７５％、１０〜７０％、１０〜７５％、１０〜７０％、１０〜６０％、１０〜５５％、１０〜５０％、または１０〜４５％増加させる。一部の実施形態では、脂肪分解アッセイを、１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイをＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、白色脂肪細胞または褐色脂肪細胞における脂肪分解を増加させる。
【００６２】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、白色脂肪細胞における脂肪分解を増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解アッセイにおいて決定した場合に、白色脂肪細胞における脂肪分解を少なくとも５％〜１００％、１０％〜９５％、１０〜９０％、１０〜８５％、１０〜８０％、１０〜７５％、１０〜７０％、１０〜７５％、１０〜７０％、１０〜６０％、１０〜５５％、１０〜５０％、または１０〜４５％増加させる。一部の実施形態では、脂肪分解アッセイを１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。
【００６３】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、褐色脂肪細胞における脂肪分解を増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解アッセイにおいて決定した場合に、褐色脂肪細胞における脂肪分解を少なくとも５％〜１００％、１０％〜９５％、１０〜９０％、１０〜８５％、１０〜８０％、１０〜７５％、１０〜７０％、１０〜７５％、１０〜７０％、１０〜６０％、１０〜５５％、１０〜５０％、または１０〜４５％増加させる。一部の実施形態では、脂肪分解アッセイを、１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。
【００６４】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、白色及び褐色脂肪細胞における脂肪分解を増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解アッセイにおいて決定した場合に、白色及び褐色脂肪細胞における脂肪分解を少なくとも５％〜１００％、１０％〜９５％、１０〜９０％、１０〜８５％、１０〜８０％、１０〜７５％、１０〜７０％、１０〜７５％、１０〜７０％、１０〜６０％、１０〜５５％、１０〜５０％、または１０〜４５％増加させる。一部の実施形態では、脂肪分解アッセイを、１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。
【００６５】
追加の一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、アクチビンＢ（５０ｎｇ／ｍｌ）の存在下で（例えば、本明細書において記載するとおりに）行われる脂肪分解アッセイにおいて標準的な技術及び条件を使用して決定した場合に、白色脂肪細胞における脂肪分解を少なくとも５％〜１００％、１０％〜９５％、１０〜９０％、１０〜８５％、１０〜８０％、１０〜７５％、１０〜７０％、１０〜７５％、１０〜７０％、１０〜６０％、１０〜５５％、１０〜５０％、または１０〜４５％増加させる。別の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解阻害アッセイにおいて標準的な技術及び条件を使用して決定した場合に、白色脂肪細胞における脂肪分解のＡＬＫ７媒介性阻害を少なくとも５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または９５％、または約１００％減少または低下させる。脂肪分解アッセイを、アクチビンＢ（５０ｎｇ／ｍｌ）の存在下で（例えば、本明細書において記載するとおりに）行う。
【００６６】
追加の一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、アクチビンＢ（５０ｎｇ／ｍｌ）の存在下で（例えば、本明細書において記載するとおりに）行われる脂肪分解アッセイにおいて標準的な技術及び条件を使用して決定した場合に、白色及び／または褐色脂肪細胞における脂肪分解を少なくとも５％〜１００％、１０％〜９５％、１０〜９０％、１０〜８５％、１０〜８０％、１０〜７５％、１０〜７０％、１０〜７５％、１０〜７０％、１０〜６０％、１０〜５５％、１０〜５０％、または１０〜４５％増加させる。別の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解阻害アッセイにおいて標準的な技術及び条件を使用して決定した場合に、白色脂肪細胞における脂肪分解のＡＬＫ７媒介性阻害を少なくとも５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または９５％、または約１００％減少または低下させる。脂肪分解アッセイを、アクチビンＢ（５０ｎｇ／ｍｌ）の存在下で（例えば、本明細書において記載するとおりに）行う。
【００６７】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞におけるグリセロール産生を増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解アッセイにおいて決定した場合に、脂肪細胞におけるグリセロール産生を少なくとも５％〜１００％、１０％〜９５％、１０〜９０％、１０〜８５％、１０〜８０％、１０〜７５％、１０〜７０％、１０〜７５％、１０〜７０％、１０〜６０％、１０〜５５％、１０〜５０％、または１０〜４５％増加させる。一部の実施形態では、脂肪分解アッセイを１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、白色脂肪細胞または褐色脂肪細胞におけるグリセロール産生を増加させる。
【００６８】
用語「抗体」及び「免疫グロブリン」は、本明細書において互換的に使用され、全体（全長）抗体及びその抗原結合性断片または一本鎖を含む。典型的な抗体は、ジスルフィド結合により相互接続している少なくとも２本の重（Ｈ）鎖及び２本の軽（Ｌ）鎖を含む。各重鎖は、重鎖可変領域（本明細書ではＶＨと略される）及び重鎖定常領域からなる。重鎖定常領域は、３つのドメイン、ＣＨＩ、ＣＨ２、及びＣＨ３からなる。各軽鎖は、軽鎖可変領域（本明細書ではＶＬと略される）及び軽鎖定常領域からなる。軽鎖定常領域は、１つのドメイン、ＣＬからなる。ＶＨ及びＶＬ領域は、フレームワーク領域（ＦＷ）と名付けられたより保存された領域が散在している、相補性決定領域（ＣＤＲ）と名付けられた超可変性の領域にさらに細分化され得る。各ＶＨ及びＶＬは、アミノ末端からカルボキシ末端へと次の順序：ＦＷ１、ＣＤＲ１、ＦＷ２、ＣＤＲ２、ＦＷ３、ＣＤＲ３、ＦＷ４で配置された３つのＣＤＲ及び４つのＦＷからなる。重鎖及び軽鎖の可変領域は、抗原と相互作用する結合性ドメインを含有する。抗体の定常領域は、免疫系の様々な細胞（例えば、エフェクター細胞）及び古典的補体系の第１の成分（Ｃｌｑ）を含む、宿主組織または因子への免疫グロブリンの結合を媒介し得る。例示的な抗体には、定型抗体、ｓｃＦｖ、及びそれらの組合せが含まれ、その場合、例えば、ｓｃＦｖは、（例えば、ペプチド結合により、または化学的リンカーにより）定型抗体の重鎖及び／または軽鎖のいずれかのＮまたはＣ末端に共有結合で連結しているか、または定型抗体の重鎖及び／または軽鎖に挿入されている。
【００６９】
用語「抗体」及び「免疫グロブリン」は、インタクトなポリクローナル抗体、インタクトなモノクローナル抗体、抗体断片（Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、及びＦｖ断片など）、一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）誘導体及び突然変異体、多重特異性抗体、例えば、二重特異性抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体、抗体の抗原決定部分を含む融合タンパク質、ならびにその抗体が所望の結合活性を示す限り、抗原認識部位を含む任意の他の修飾免疫グロブリン分子を含む。抗体は、それぞれアルファ、デルタ、イプシロン、ガンマ、及びミューと称されるそれらの重鎖定常ドメインのアイデンティティに基づき、免疫グロブリンの５つの主なクラス：ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、及びＩｇＭ、またはそのサブクラス（アイソタイプ）（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡｌ及びＩｇＡ２）のいずれかであり得る。異なるクラスの免疫グロブリンは、異なる周知のサブユニット構造及び三次元立体配置を有する。抗体は、そのままであってよいか、または毒素、放射性同位体などの他の分子にコンジュゲートしていてよい。用語「ＩｇＧ」は、認識されている免疫グロブリンガンマ遺伝子により実質的にコードされる抗体のクラスに属するポリペプチドを指す。ヒトでは、このクラスは、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、及びＩｇＧ４を含む。マウスでは、このクラスは、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２ａ、ＩｇＧ２ｂ、及びＩｇＧ３を含む。
【００７０】
用語「ＡＬＫ７抗体」、「ＡＬＫ７に結合する抗体」、または「抗ＡＬＫ７抗体」は、その抗体が、それぞれＡＬＫ７を標的とする際に治療薬または診断試薬として有用であるような充分な親和性でＡＬＫ７に結合することができる抗体を指す。
【００７１】
ＡＬＫ７タンパク質の文脈で使用する場合の「特異的に結合する」では、これは一般に、結合性タンパク質が無関係対照タンパク質に結合するよりも高い親和性で、ＡＬＫ７（例えば、ヒトＡＬＫ７、好ましくはＡＬＫ７の細胞外ドメイン）に結合する抗体などの結合性タンパク質の能力を意味する。一部の実施形態では、対照タンパク質は、ニワトリ卵白リゾチームである。好ましくは、結合性タンパク質は、対照タンパク質での親和性よりも少なくとも、１００、５００、または１０００倍高い親和性で、ＡＬＫ７に結合する。好ましくは、結合性タンパク質は、当技術分野で公知の結合アッセイを使用して測定した場合に、ヒトＡＬＫ７で≦１×１０−７Ｍまたは≦１×１０−８の結合親和性を有する。一部の実施形態では、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）またはＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）を使用して（例えば、分析物としてＡＬＫ７及びリガンドとしてＡＬＫ７結合性タンパク質を、またはその逆でそれらを使用して）、結合親和性を測定する。
【００７２】
一部の実施形態では、無関係非ＡＬＫ７タンパク質へのＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、抗ＡＬＫ７抗体）の結合規模は、例えば、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）（例えば、分析物として組換えＡＬＫ７及びリガンドとしてＡＬＫ７結合性タンパク質を、またはその逆でそれらを使用して）、結合平衡除外アッセイ（ｋｉｎｅｔｉｃ  ｅｘｃｌｕｓｉｏｎ  ａｓｓａｙ）（ＫＩＮＥＸＡ（登録商標））、または当技術分野で公知の他の結合アッセイにより測定した場合に、ＡＬＫ７へのＡＬＫ７結合性タンパク質の結合の約１０％未満である。特定の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、≦１μＭ、≦１００ｎＭ、≦１０ｎＭ、≦１ｎＭ、≦０．１ｎＭ、≦１０ｐＭ、≦１ｐＭ、または≦０．１ｐＭの解離定数（ＫＤ）を有する全長抗体またはＡＬＫ７結合性抗体断片である。
【００７３】
用語「抗原結合性抗体断片」（例えば、「ＡＬＫ７結合性抗体断片」）は、インタクトな抗体の抗原結合性可変領域（例えば、ＣＤＲ３）の全部または一部を含有する断片を指す。抗体の抗原結合機能は、全長抗体の断片により行われ得ることが公知である。抗体断片の例には、これらだけに限定されないが、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、及びＦｖ断片、線状抗体、一本鎖抗体、及び１つまたは複数の抗体断片から形成される多重特異性抗体が含まれる。一部の実施形態では、本開示は、Ｆａｂ断片、Ｆａｂ’断片、Ｆ（ａｂ’）２断片、Ｆｖ断片、ダイアボディ、または一本鎖抗体分子であるＡＬＫ７結合性抗体断片を提供する。
【００７４】
Ｆｃ領域は、第１の定常領域免疫グロブリンドメインを除く抗体の定常領域を含むポリペプチドを含む。したがって、Ｆｃは、ＩｇＡ、ＩｇＤ、及びＩｇＧの最後の２つの定常領域免疫グロブリンドメイン、ならびにＩｇＥ及びＩｇＭの最後の３つの定常領域免疫グロブリンドメイン、ならびにこれらのドメインの柔軟なヒンジＮ末端を指す。ＩｇＡ及びＩｇＭでは、Ｆｃは、Ｊ鎖を含み得る。ＩｇＧでは、Ｆｃは、免疫グロブリンドメインＣγ２及びＣγ３ならびにＣγ１及びＣγ２の間のヒンジを含む。Ｆｃ領域の境界は様々であり得るが、ヒトＩｇＧ重鎖Ｆｃ領域は通常、残基Ｃ２２６またはＰ２３０からそのカルボキシル末端までを含むと定義され、その際、ナンバリングは、Ｋａｂａｔ（Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ  Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ，ＮＩＨ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．（１９９１））に記載されているとおりのＥＵインデックスによる。Ｆｃは、単離されたこの領域、または全抗体、抗体断片、もしくはＦｃ融合タンパク質の文脈におけるこの領域を指し得る。これらだけに限定されないが、ＥＵインデックスによりナンバリングした場合に、２７０、２７２、３１２、３１５、３５６、及び３５８位を含むいくつかの異なるＦｃ位置で、多型性が観察されており、したがって、従来技術で示されている１つまたは複数の配列の間で、僅かな差異が存在し得る。
【００７５】
「モノクローナル抗体」は、単一の抗原決定基またはエピトープの高度に特異的な認識及び結合に関与する均一な抗体集団を指す。これは、典型的に種々の抗原決定基を指向する種々の抗体を含むポリクローナル抗体と対照的である。用語「モノクローナル抗体」は、インタクトで全長でもあるモノクローナル抗体、さらには抗体断片（Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、及びＦｖなど）、一本鎖（ｓｃＦｖ）突然変異体、及び抗体部分を含む融合タンパク質）、及び抗原認識部位を含む任意の他の修飾免疫グロブリン分子を含む。モノクローナル抗体は、これらだけに限定されないが、ハイブリドーマ、ファージ選択、組換え発現、及びトランスジェニック動物による方法を含む任意の多くの方法で作製することができる。
【００７６】
用語「キメラ抗体」は、免疫グロブリン分子のアミノ酸配列が２種以上の種に由来する抗体を指す。典型的には、軽鎖及び重鎖の両方の可変領域は、所望の抗原結合特異性、親和性、及び／または能力を有する哺乳類（例えば、マウス、ラット、ウサギなど）の１種に由来する抗体の可変領域に対応する一方で、定常領域は、別の種（通常はヒト）に由来する抗体中の配列に相同して、その種での免疫応答の誘発を回避する。
【００７７】
用語「ヒト化抗体」は、より少ない、好ましくは、最小限の非ヒト（例えば、マウス）配列を含有するように操作されている非ヒト（例えば、マウス）免疫グロブリンに由来する抗体を指す。典型的には、ヒト化抗体は、ＣＤＲからの残基が、所望の抗原結合特異性、親和性、及び／または能力を有する非ヒト種（例えば、マウス、ラット、ウサギ、またはハムスター）のＣＤＲからの残基に置き換えられているヒト免疫グロブリンである（Ｊｏｎｅｓ，Ｎａｔｕｒｅ  ３２１：５２２−５２５（１９８６）；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ，Ｎａｔｕｒｅ  ３３２：３２３−３２７（１９８８）；Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎ，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２３９：１５３４−１５３６（１９８８））。一部の事例では、ヒト免疫グロブリンのＦｖフレームワーク領域（ＦＷ）残基が、所望の抗原結合特異性、親和性、及び／または能力を有する非ヒト種からの抗体中の対応する残基で置き換えられている。ヒト化抗体は、抗体特異性、親和性、及び／または能力を精密化する、及び最適化するために、Ｆｖフレームワーク領域においてか、及び／または置き換えられた非ヒト残基内かのいずれかでの追加の残基の置換によりさらに修飾されてよい。一般に、ヒト化抗体は、非ヒト免疫グロブリンに対応するＣＤＲ領域のすべて、または実質的にすべてを含有する少なくとも１つ、及び典型的には２つまたは３つの可変ドメインを実質的にすべて含む一方で、ＦＲ領域のすべて、または実質的にすべては、ヒト免疫グロブリンコンセンサス配列のものである。ヒト化抗体はまた、免疫グロブリン定常領域またはドメイン（Ｆｃ）の少なくとも一部、典型的には、ヒト免疫グロブリンのものを含んでよい。ヒト化抗体を生成するために使用される方法の例は、米国特許第５，２２５，５３９号及び同第５，６３９，６４１号に記載されている。
【００７８】
用語「ヒト抗体」は、ヒトにより産生される抗体、または当技術分野で公知の任意の技術を使用して作製される、ヒトにより産生される抗体に対応するアミノ酸配列を有する抗体を指す。用語「ヒト抗体」は、インタクトな（全長）抗体、その断片、及び／またはマウス軽鎖及びヒト重鎖ポリペプチドを含む抗体などの、少なくとも１つのヒト重鎖及び／または軽鎖ポリペプチドを含む抗体を含む。
【００７９】
「アンタゴニスト」、「遮断」、または「中和」結合性タンパク質は、ＡＬＫ７などの、それが結合する抗原の活性を阻害する、または低下させるものである。一部の実施形態では、アンタゴニストＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７、ならびにＡｃｔＲＩＩ受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）ならびにＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及び／またはＮｏｄａｌの多量体化を減少させる、または阻害する。特定の実施形態では、アンタゴニストＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７の活性を実質的に、または完全に阻害する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７活性を１０％、２０％、３０％、５０％、７０％、８０％、９０％、９５％、または１００％低下させる。特定の実施形態では、アンタゴニストＡＬＫ７結合性タンパク質は、抗ＡＬＫ７抗体、例えば、全長抗体またはＡＬＫ７結合性抗体断片である。さらなる実施形態では、アンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、ＡＬＫ７の活性を少なくとも１０％、２０％、３０％、５０％、７０％、８０％、９０％、９５％、またはなお１００％阻害する、または低下させる。
【００８０】
「結合親和性」は一般に、分子（例えば、抗体）の単一の結合部位と、その結合パートナー（例えば、抗原）との間の非共有結合性相互作用の合計の強度を指す。別段に示さない限り、「結合親和性」は、結合対のメンバー（例えば、抗体及び抗原）の間の１：１相互作用を反映する固有の結合親和性を指す。そのパートナーＹについての分子Ｘの親和性は一般に、解離定数（ＫＤ）により表され得る。親和性は、本明細書に記載の方法を含む、当技術分野で公知の一般の方法により測定することができ、本開示の目的のために使用することができる。
【００８１】
「効力」は、所与の強度の効果を生成するために必要な化合物の量で表現される、化合物の薬理活性の尺度である。これは、規定の生物学的作用を達成するために必要な化合物の量を指し；必要な用量が少ないほど、薬物の効力は高い。効力は通常、別段に述べない限り、ＩＣ５０値としてｎＭで表される。ＩＣ５０は、ＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、抗ＡＬＫ７抗体）の半抑制濃度である。機能性アッセイでは、ＩＣ５０は、生物学的応答をその最大の５０％減少させる濃度である。リガンド受容体結合試験では、ＩＣ５０は、リガンド−受容体結合を、最大特異的結合レベルの５０％減少させる濃度である。ＩＣ５０は、当技術分野で公知の任意の数の手段により計算することができる。基準抗ＡＬＫ７抗体または他のＡＬＫ７結合性タンパク質と比較した場合の、本明細書において提供する抗体または他の結合性タンパク質での効力の改善の倍数は、少なくとも２倍、４倍、６倍、８倍、１０倍、２０倍、３０倍、４０倍、５０倍、６０倍、７０倍、８０倍、９０倍、１００倍、１１０倍、１２０倍、１３０倍、１４０倍、１５０倍、１６０倍、１７０倍、または少なくとも１８０倍であり得る。
【００８２】
「抗体依存性細胞媒介細胞傷害性」または「ＡＤＣＣ」は、特定の細胞傷害性細胞（例えば、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、好中球、及びマクロファージ）の上に存在するＦｃ受容体（ＦｃＲ）に結合した分泌Ｉｇが、これらの細胞傷害性エフェクター細胞が抗原担持標的細胞に特異的に結合し、続いて、細胞毒素でその標的細胞を死滅させることを可能にする細胞傷害性の形態を指す。標的細胞の表面を指向する特異的な高親和性ＩｇＧ抗体は、細胞傷害性細胞を「武装させ（ａｒｍ）」、そのような死滅のためには絶対に必要である。標的細胞の溶解は、細胞外であり、直接的な細胞−対−細胞接触を必要とし、補体を必要としない。抗体に加えて、ＡＬＫ７担持標的細胞に特異的に結合する能力を有するＦｃ領域を含む他のタンパク質、具体的にはＦｃ融合タンパク質が、細胞媒介性細胞傷害性を行うことができると考えられる。簡略化のために、Ｆｃ融合タンパク質の活性から生じる細胞媒介性細胞傷害性は、本発明では、ＡＤＣＣ活性とも称される。
【００８３】
「単離」されているＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、そのＡＬＫ７結合性断片、バリアント、及び誘導体を含むＡＬＫ７抗体）、ポリヌクレオチド、ベクター、細胞、または組成物は、天然には見い出されない形態であるタンパク質（例えば、抗体）、ポリヌクレオチド、ベクター、細胞、または組成物である。単離タンパク質、ポリヌクレオチド、ベクター、細胞または組成物には、天然にはもはや見い出され得ない形態である程に、精製されているものが含まれる。一部の実施形態では、単離されているタンパク質、ポリヌクレオチド、ベクター、細胞、または組成物は、実質的に純粋である。単離タンパク質及び単離核酸は、それらが天然では随伴する物質、例えば、それらの天然環境、またはそのような調製がｉｎ  ｖｉｔｒｏまたはｉｎ  ｖｉｖｏで実行される組換えＤＮＡ技術による場合には、それらが調製された環境（例えば、細胞培養物）で見い出されるような他のポリペプチドまたは核酸を含有しないか、または実質的に含有しない。タンパク質及び核酸は、希釈剤またはアジュバントと共に製剤化することができ、さらに実用的な目的では、単離することができ、例えば、タンパク質を通常は、イムノアッセイで使用するためにマイクロタイタープレートをコーティングするために使用する場合にはゼラチンまたは他の担体と混合するか、または診断または治療で使用するときには薬学的に許容される担体または希釈剤と混合する。
【００８４】
用語「対象」、「個体」、「動物」、「患者」、及び「哺乳類」は、診断、予後、または治療が望ましい任意の対象、特に、哺乳類対象を指す。哺乳類対象には、これらだけに限定されないが、特定の処置の受容者となるであろうヒト、非ヒト霊長類、家畜、牧場動物、げっ歯類などが含まれる。
【００８５】
用語「医薬組成物」は、活性成分の生物学的活性が有効であることを可能にするような形態であり、組成物が投与されるであろう対象に対して許容できないほど毒性である濃度で追加の成分を含有しない調製物を指す。そのような組成物は、無菌であり得る。
【００８６】
ポリペプチド、例えば、本明細書に開示のとおりの、抗体を含む抗原結合性タンパク質の「有効量」は、具体的に述べられている目的を実行するために十分な量である。「有効量」は、経験的に、かつルーチン的な手法で、述べられている目的に関係して決定することができる。用語「治療有効量」は、対象（例えば、ヒトなどの哺乳類）における疾患または状態を「処置する」ために有効なポリペプチド、例えば、抗体を含む抗原結合性タンパク質、または他の薬物の量を指し、疾患または状態を有する対象に多少の改善または利益をもたらす。したがって、「治療上有効な」量は、ＡＬＫ７媒介性疾患または状態の少なくとも１つの臨床症状の多少の緩和、軽減、及び／または減少をもたらす量である。本開示の方法により治療することができる疾患または状態と関連する臨床症状は周知である。さらに、多少の利益が対象にもたらされる限り、治療効果は、完全または治癒的である必要はない。一部の実施形態では、用語「治療上有効」は、それを必要とする対象においてＡＬＫ７活性を低下させることができる治療薬の量を指す。投与される実際の量ならびに投与速度及び時間経過は、処置されるものの性質及び重症度に依存するであろう。処置の処方、例えば、投薬量の決定などは、総合診療医及び他の医師の責任の範囲内である。抗体及びその抗原結合性断片の適切な用量は一般に公知である；Ｌｅｄｅｒｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ  ４７：６５９−６６４（１９９１）；Ｂａｇｓｈａｗｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｔ．Ｉｍｍｕｎ．ａｎｄ  Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍ．４：９１５−９２２（１９９１）を参照されたい。
【００８７】
ＡＬＫ７媒介性疾患または状態を有する対象において特定の結果を達成するために「十分な量」または「そのために十分な量」は、任意選択で治療効果である所望の効果を生成するために（すなわち、治療有効量の投与により）有効である治療薬（例えば、本明細書に開示のとおりの、抗体を含む抗原結合性タンパク質）の量を指す。一部の実施形態では、そのような特定の結果は、それを必要とする対象におけるＡＬＫ７活性の低下である。
【００８８】
用語「標識」は、「標識」部分を生成するように抗ＡＬＫ７抗体などの部分に直接的または間接的にコンジュゲートされる検出可能な化合物または組成物を指す。標識は、単独で検出可能であり得るか（例えば、放射性同位体標識または蛍光標識）、または酵素標識の場合には、検出可能である基質化合物または組成物の化学変成を触媒し得る。
【００８９】
「処置すること」、または「処置」、「処置する」または「寛解させること」及び「寛解させる」などの用語は、（ａ）診断された病的状態または障害を治癒させる、減速させる、その症状を軽減する、及び／またはその進行を停止させる治療手段、ならびに（ｂ）標的疾患または状態を予防する、及び／またはその発生を遅延させる予防または防止手段の両方を指す。したがって、処置を必要とする対象には、疾患または状態をすでに有するもの；疾患または状態を発症するリスクを有するもの；及び疾患または状態を予防すべきものが含まれる。特定の実施形態では、対象が、例えば、疾患または状態と関連する徴候の完全な、部分的な、または一過性の寛解または消失を示すならば、対象は、本明細書において提供する方法により成功裏に「処置される」。一部の実施形態では、本開示は、肥満（例えば、腹部肥満）；インスリン抵抗性；代謝症候群及び他の代謝性疾患または状態；脂質障害、例えば、低ＨＤＬ値、高ＬＤＬ値、高脂血症、高トリグリセリド血症または脂質異常症；リポタンパク質異常；トリグリセリドの減少；炎症（例えば、肝臓炎症及び／または脂肪組織の炎症）、脂肪肝疾患；非アルコール性脂肪肝疾患；高血糖症；耐糖能障害（ＩＧＴ）；インスリン過剰血症；高コレステロール（例えば、高ＬＤＬ値及び高コレステロール血症）；心臓血管疾患、例えば、冠動脈性心疾患を含む心疾患、鬱血性心不全、卒中、末梢血管疾患、アテローム硬化症；動脈硬化症、及び高血圧；Ｘ症候群；血管再狭窄；神経障害；網膜障害；神経変性疾患；内皮機能障害、呼吸機能障害、腎疾患（例えば、腎障害）；膵臓炎；多嚢胞性卵巣症候群；尿酸値の上昇；ヘモクロマトーシス（鉄過剰）；黒色表皮腫（皮膚上の暗色斑）；及びがん（例えば、骨髄腫（多発性骨髄腫、プラスマ細胞腫、限局性骨髄腫、または髄外骨髄腫）、または卵巣（例えば、上皮性卵巣）、乳房、結腸、子宮内膜、肝臓、腎臓、膵臓、胃、子宮、または結腸癌）；ならびに上記疾患もしくは状態のうちの１種もしくは複数と、または過剰体重（例えば、ＢＭＩ≧２５ｋｇ／ｍ２）と、または多すぎる体脂肪と関連する他の障害／状態から選択される疾患、障害または状態を処置するための方法を提供する。
【００９０】
本明細書で使用する場合、「と組み合わせて」または「併用療法」は、追加の治療薬（例えば、第２、第３、第４など）が身体でなお有効であるような投与の任意の形態を指す（例えば、複数の化合物が、対象において同期で有効であり、それには、それらの化合物の相乗効果が含まれ得る）。有効性は、血液、血清、または血漿中の薬剤の測定可能な濃度と相関しないこともある。例えば、異なる治療用化合物を、同じ製剤中で、または別々の製剤中で、付随して、または連続して、及び異なるスケジュールで投与することができる。したがって、そのような処置を与えられる対象は、異なる治療の組合せ効果から利益を得ることができる。本明細書において提供する１種または複数のＡＬＫ７結合性タンパク質は、１種または複数の他の追加の薬剤及び／または支持療法と同時に、その前に、またはその後に投与することができる。一般に、各治療薬は、特定の薬剤のために決定された用量で、及び／または時間スケジュールで投与される。レジメンで使用するための特定の組合せは、本開示のアンタゴニストと療法との適合性及び／または所望の結果を考慮する。
【００９１】
本開示の方法及び技術を一般に、公知の従来の方法により、かつ別段に示さない限り本開示を通じて引用及び検討される様々な一般的及びより具体的な参照文献に記載されているとおりに行う。例えば、すべて参照により本明細書に組み込まれるＳａｍｂｒｏｏｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，３ｒｄ  ｅｄ．，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．（２００１）及びＡｕｓｕｂｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｇｒｅｅｎｅ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ（１９９２）、及びＨａｒｌｏｗ  ａｎｄ  Ｌａｎｅ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ  Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．（１９９０）を参照されたい。
【００９２】
用語「がん」、「腫瘍」、「癌性」、及び「悪性」は、典型的には未制御の細胞増殖により特徴づけられる、哺乳類における生理学的状態を指すか、またはそれを説明する。がんの例には、これらだけに限定されないが、腺癌、リンパ腫、芽細胞腫、黒色腫、肉腫、及び白血病を含む癌腫が含まれる。そのようながんのより特定の例には、扁平上皮細胞癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、胃腸癌、ホジキン及び非ホジキンリンパ腫、膵臓癌、神経膠芽細胞腫、膠腫、子宮頸癌、卵巣癌、肝臓癌、例えば、肝癌及び肝細胞癌、膀胱癌、乳癌（ホルモン媒介性乳癌を含む、例えば、Ｉｎｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ  ９４：１０５７−１０６５（２００６）を参照されたい）、結腸癌、結腸直腸癌、子宮内膜癌、骨髄腫（多発性骨髄腫など）、唾液腺癌、腎臓癌、例えば、腎細胞癌及びウィルムス腫瘍、基底細胞癌、黒色腫、前立腺癌、外陰癌、甲状腺癌、睾丸癌、食道癌、様々な種類の頭頚部癌及び粘液由来の癌、例えば、粘液性卵巣癌、胆管癌（肝臓）及び腎臓乳頭状癌が含まれる。特定の一実施形態では、がんは、乳房、子宮内膜、または子宮癌である。別の実施形態では、がんは、骨髄腫（例えば、多発性骨髄腫、プラスマ細胞腫、限局性骨髄腫、及び髄外骨髄腫）、または子宮内膜、胃、肝臓、結腸、腎臓もしくは膵臓の癌である。
【００９３】
用語「ポリヌクレオチド」及び「核酸」は、互換的に使用され、単数の核酸、さらには、複数の核酸を含むことが意図されており、単離核酸分子またはコンストラクト、例えば、メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）、相補的ＤＮＡ（ｃＤＮＡ）、またはプラスミドＤＮＡ（ｐＤＮＡ）を指す。特定の実施形態では、ポリヌクレオチドは、通常のホスホジエステル結合または通常ではない結合（例えば、ペプチド核酸（ＰＮＡ）において見出されるようなアミド結合）を含む。用語「核酸」は、ポリヌクレオチド中に存在する任意の１つまたは複数の核酸セグメント、例えば、ＤＮＡ、ｃＤＮＡ、またはＲＮＡ断片を指す。核酸またはポリヌクレオチドに適用される場合、用語「単離（された）」は、その天然環境から除去されている核酸分子、ＤＮＡまたはＲＮＡを指し、例えば、ベクター中に含有される抗原結合性タンパク質をコードする組換えポリヌクレオチドが、本開示の目的のために単離されると考えられる。単離ポリヌクレオチドのさらなる例には、異種の宿主細胞中で維持されるか、または溶液中の他のポリヌクレオチドから（部分的にまたは実質的に）精製される組換えポリヌクレオチドが含まれる。単離ＲＮＡ分子には、本開示のポリヌクレオチドのｉｎ  ｖｉｖｏまたはｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ＲＮＡ転写物が含まれる。本開示による単離ポリヌクレオチドまたは核酸にはさらに、合成で生成されたそのような分子が含まれる。加えて、ポリヌクレオチドまたは核酸は、プロモーター、エンハンサー、リボソーム結合部位、または転写終結シグナルなどの調節エレメントを含むことができる。
【００９４】
用語「ベクター」は、宿主細胞において１つまたは複数の目的の遺伝子（複数可）または配列（複数可）を送達する、及び一部の実施形態では発現することができるコンストラクトを意味する。ベクターの例には、これらだけに限定されないが、ウイルスベクター、裸のＤＮＡまたはＲＮＡ発現ベクター、プラスミド、コスミドまたはファージベクター、カチオン縮合剤と会合したＤＮＡまたはＲＮＡ発現ベクター、リポソーム中に封入されたＤＮＡまたはＲＮＡ発現ベクター、及びある種の真核細胞、例えば、プロデューサー細胞が含まれる。
【００９５】
用語「宿主細胞」は、組換え核酸を含むか、または含むことができる細胞または細胞の集団を指す。宿主細胞は、原核（例えば、Ｅ．ｃｏｌｉ）、または真核であってよい。宿主細胞は、酵母、例えば、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ、Ｐｉｃｈｉａ  ｐａｓｔｏｒｉｓ、またはＳｃｈｉｚｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｐｏｍｂｅを含む真菌細胞であってよい。宿主細胞はまた、様々な動物細胞のいずれか、例えば、昆虫細胞（例えば、Ｓｆ−９）または哺乳類細胞（例えば、ＨＥＫ２９３Ｆ、ＣＨＯ、ＣＯＳ−７、ＮＩＨ−３Ｔ３、ＮＳ０、ＰＥＲ．Ｃ６（登録商標）、及びハイブリドーマ）であってよい。さらなる実施形態では、宿主細胞は、ＣＨＯ−Ｋ、ＣＨＯ−０  ＣＨＯ−Ｌｅｃ１０、ＣＨＯ−Ｌｅｃ１３、ＣＨＯ−Ｌｅｃ１、ＣＨＯ  Ｐｒｏ−５、及びＣＨＯ  ｄｈｆｒ−からなる群から選択されるＣＨＯ細胞である。特定の実施形態では、宿主細胞は、ハイブリドーマである。
【００９６】
用語「ポリペプチド」、「ペプチド」、及び「タンパク質」は、任意の長さのアミノ酸のポリマーを指すために、本明細書において互換的に使用される。ポリマーは、直鎖または分枝であってよく、修飾されたアミノ酸を含んでよく、非アミノ酸により中断されていてもよい。この用語はまた、天然に、または介入；例えば、ジスルフィド結合の形成、グリコシル化、脂質付加、アセチル化、リン酸化、または任意の他の操作もしくは修飾、例えば、標識成分とのコンジュゲーションにより修飾されているアミノ酸ポリマーを含む。例えば、アミノ酸の１つまたは複数の類似体（例えば、非天然アミノ酸などを含む）、さらに当技術分野で公知の他の修飾を含有するポリペプチドもこの定義内に含まれる。一部の実施形態では、提供するＡＬＫ７結合性タンパク質は抗体に基づくので、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、一本鎖または会合した鎖として生じ得ることは理解される。
【００９７】
「組換え」ポリペプチド、タンパク質または抗体は、組換えＤＮＡ技術により生成されるポリペプチド、タンパク質または抗体を指す。任意の適切な技術により分離されている、分画されている、または部分的に、もしくは実質的に精製されている天然または組換えポリペプチドと同様に、宿主細胞で発現される、組換えで生成されたポリペプチド、タンパク質及び抗体は、本開示の目的のために単離されると考えられる。
【００９８】
ポリペプチドの断片、バリアント、または誘導体、及びそれらの任意の組合せも本開示に含まれる。ポリペプチド及びタンパク質について言及する場合の用語「断片」には、基準ポリペプチドまたはタンパク質の特性の少なくとも一部を維持している任意のポリペプチドまたはタンパク質が含まれる。ポリペプチドの断片には、タンパク質分解断片、さらには欠失断片が含まれる。
【００９９】
用語「バリアント」は、少なくとも１つのアミノ酸修飾により、親抗体またはポリペプチド配列の配列とは異なる抗体またはポリペプチド配列を指す。抗体またはポリペプチドのバリアントには、断片、及びアミノ酸置換、欠失、または挿入によるアミノ酸配列の変更を含む抗体またはポリペプチドも含まれる。バリアントは、天然に、または非天然に存在し得る。非天然に存在するバリアントは、当技術分野で公知の変異誘発技術を使用して生成することができる。バリアントポリペプチドは、保存的または非保存的アミノ酸置換、欠失または付加を含み得る。
【０１００】
抗体またはポリペプチドに適用される場合の用語「誘導体」は、天然の抗体またはポリペプチドでは見い出されない追加の特徴を示すように変更されている抗体またはポリペプチドを指す。「誘導体」抗体の例は、第２のポリペプチドまたは別の分子（例えば、ＰＥＧなどのポリマー、クロモフォア、またはフルオロフォア）または原子（例えば、放射性同位体）との融合体またはコンジュゲートである。
【０１０１】
用語「アミノ酸置換」は、親配列に存在するアミノ酸残基を別のアミノ酸残基に置き換えることを指す。アミノ酸は、例えば、化学的ペプチド合成により、または既知の組換え法を介して、親配列において置換され得る。したがって、「Ｘ位での置換」または「Ｘ位での置換」という言及は、代替のアミノ酸残基での、Ｘ位に存在するアミノ酸残基の置換を指す。一部の実施形態では、置換パターンは、スキーマＡＸＹにより説明され得、ここで、Ａは、Ｘ位に天然に存在するアミノ酸残基に対応する１文字コードであり、Ｙは、置換するアミノ酸残基である。他の実施形態では、置換パターンは、スキーマＸＹにより説明され得、ここで、Ｙは、Ｘ位に天然に存在するアミノ酸残基を置換するアミノ酸残基に対応する１文字コードである。
【０１０２】
「保存的アミノ酸置換」は、アミノ酸残基が、同様の側鎖を有するアミノ酸残基で置き換えられているものである。同様の側鎖を有するアミノ酸残基のファミリーは、塩基性側鎖（例えば、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ）、酸性側鎖（例えば、Ａｓｐ、Ｇｌｕ）、非荷電極性側鎖（例えば、Ｇｌｙ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｙｒ、Ｃｙｓ）、非極性側鎖（例えば、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、Ｔｒｐ）、ベータ−分枝側鎖（例えば、Ｔｈｒ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ）及び芳香族側鎖（例えば、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｈｉｓ）を含むと、以前に定義されている。したがって、ポリペプチド中のアミノ酸残基が同じ側鎖ファミリーからの別のアミノ酸残基で置き換えられている場合、置換は、保存的であると考えられる。別の実施形態では、アミノ酸残基の列は、側鎖ファミリーメンバーの順序及び／または組成が異なる構造的に同様の列で保存的に置き換えられ得る。
【０１０３】
非保存的置換には、（ａ）電気陽性側鎖（例えば、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、またはＬｙｓ）を有する残基が、電気陰性残基（例えば、ＧｌｕまたはＡｓｐ）で、またはそれにより置換されている、（ｂ）親水性残基（例えば、ＳｅｒまたはＴｈｒ）が、疎水性残基（例えば、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ、またはＶａｌ）で、またはそれにより置換されている、（ｃ）ＣｙｓまたはＰｒｏが、任意の他の残基で、またはそれにより置換されている、または（ｄ）嵩高な疎水性または芳香族側鎖（例えば、Ｖａｌ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、またはＴｒｐ）を有する残基が、より小さな側鎖を有するもの（例えば、ＡｌａまたはＳｅｒ）または側鎖を有さないもの（例えば、Ｇｌｙ）で、またはそれにより置換されている非保存的置換が含まれる。
【０１０４】
他の置換を、容易に同定することができる。例えば、アミノ酸アラニンでは、置換は、Ｄ−Ａｌａ、Ｇｌｙ、ベータ−Ａｌａ、Ｌ−Ｃｙｓ及びＤ−Ｃｙｓのいずれか１つから採用することができる。リシンでは、置き換えは、Ｄ−Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｄ−Ａｒｇ、ｈｏｍｏ−Ａｒｇ、Ｍｅｔ、Ｄ−Ｍｅｔ、オルニチン、またはＤ−オルニチンのいずれか１つであってよい。一般に、単離ポリペプチドの特性の変化を誘導すると予測され得る機能的に重要な領域での置換は、（ａ）極性残基（例えば、ＳｅｒまたはＴｈｒ）が、疎水性残基（例えば、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ、またはＡｌａ）で（またはそれにより）置換されている；（ｂ）Ｃｙｓ残基が、任意の他の残基で（またはそれにより）置換されている；（ｃ）電気陽性側鎖を有する残基（例えば、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、またはＨｉｓ）が、電気陰性側鎖を有する残基（例えば、ＧｌｕまたはＡｓｐ）で（またはそれにより）置換されている；または（ｄ）嵩高な側鎖を有する残基（例えば、Ｐｈｅ）がそのような側鎖を有さないもの（例えば、Ｇｌｙ）で（またはそれにより）置換されている置換である。上述の非保存的置換のうちの１つがタンパク質の機能特性を変更し得る可能性は、タンパク質の機能的に重要な領域に関する置換の位置にも相関している：したがって、一部の非保存的置換は、生物学的特性に対してほとんど作用を有し得ないか、または作用を有し得ない。
【０１０５】
用語「アミノ酸挿入」は、親配列に存在する２個のアミノ酸残基の間に新たなアミノ酸残基を導入することを指す。アミノ酸残基は、例えば、化学的ペプチド合成により、または当技術分野で公知の組換え法を介して、親配列に挿入することができる。したがって、語句「Ｘ位とＹ位との間への挿入」または「Ｋａｂａｔ位でＸ位とＹ位との間への挿入」（ここで、Ｘ及びＹは、アミノ酸残基位に対応する（例えば、２３９位と２４０位との間へのシステインアミノ酸残基挿入）は、Ｘ位とＹ位との間へのアミノ酸残基の挿入、及び同じく、Ｘ位及びＹ位のアミノ酸残基をコードするコドンの間への、アミノ酸残基をコードするコドンの核酸配列での挿入を指す。
【０１０６】
２つのポリヌクレオチドまたはポリペプチド配列の間での用語「配列同一性パーセント」または「同一性パーセント」は、２つの配列の最適なアラインメントのために導入されなければならない付加または欠失（すなわち、ギャップ）を考慮しつつ、比較ウィンドウにわたってそれらの配列が共有する、同一でマッチする位置の数を指す。マッチする位置は、同一のヌクレオチドまたはアミノ酸が標的及び基準配列の両方に存在する任意の位置である。標的配列で示されるギャップはカウントされない。それというのも、ギャップはヌクレオチドまたはアミノ酸ではないためである。同様に、基準配列で示されるギャップもカウントされない。それというのも、標的配列ヌクレオチドまたはアミノ酸はカウントされ、基準配列からのヌクレオチドまたはアミノ酸はカウントされないためである。配列同一性のパーセンテージは、同一のアミノ酸残基または核酸塩基が両方の配列で生じている位置の数を決定して、マッチする位置の数を得、マッチした位置の数を比較ウィンドウ内の位置の合計数で割り、結果に１００を掛けて配列同一性のパーセンテージを得ることにより計算される。２つの配列の間での配列の比較及び配列同一性パーセントの決定は、容易に入手可能なソフトウェアプログラムを使用して達成することができる。適切なソフトウェアプログラムは、様々な供給源から、かつタンパク質及びヌクレオチド配列の両方のアラインメントについて入手可能である。配列同一性パーセントを決定するために適したプログラムの１つは、米国政府の国立バイオテクノロジー情報センター（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｅｎｔｅｒ  ｆｏｒ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ）ＢＬＡＳＴウェブサイト（ｂｌａｓｔ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ）から入手可能なプログラムのＢＬＡＳＴスーツの一部であるｂｌ２ｓｅｑである。Ｂｌ２ｓｅｑは、ＢＬＡＳＴＮまたはＢＬＡＳＴＰアルゴリズムのいずれかを使用して２つの配列間の比較を実行する。ＢＬＡＳＴＮは、核酸配列を比較するために使用される一方、ＢＬＡＳＴＰは、アミノ酸配列を比較するために使用される。他の適切なプログラムは、例えば、バイオインフォマティクスプログラムのＥＭＢＯＳＳスーツの一部であるＮｅｅｄｌｅ、Ｓｔｒｅｔｃｈｅｒ、Ｗａｔｅｒ、またはＭａｔｃｈｅｒであり、さらに欧州バイオインフォマティクス研究所（Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ）（ＥＢＩ）、ｗｗｗ．ｅｂｉ．ａｃ．ｕｋ／Ｔｏｏｌｓ／ｐｓａから入手可能である。
【０１０７】
ＣＤＲまたはＣＤＲのセットを持つ構造は一般に、抗体重鎖もしくは軽鎖配列またはその大部分からなり、その際、ＣＤＲまたはＣＤＲのセットは、再編成免疫グロブリン遺伝子によりコードされる天然に存在するＶＨ及びＶＬ抗体可変ドメインのＣＤＲまたはＣＤＲのセットに対応する位置に位置している。免疫グロブリン可変ドメイン及びそれらのＣＤＲの構造及び位置は、プログラムを使用して当業者により容易に決定され得、公知の可変ドメイン残基ナンバリングシステム、例えば、Ｃｈｏｔｈｉａ、Ｃｈｏｔｈｉａ＋、及びＫａｂａｔは、その全体で参照により本明細書に組み込まれるＫａｂａｔ（Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ．４ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ．Ｕ．Ｓ．ＤＨＨＳ．１９８７、ならびにインターネットで入手可能なツール（例えば、ｂｉｏｉｎｆ．ｏｒｇ．ｕｋ／  ａｂｙｓｉｓ／ｓｅｑｕｅｎｃｅ＿  ｉｎｐｕｔ／ｋｅｙ＿  ａｎｎｏｔａｔｉｏｎ／ｋｅｙ  ＿ａｎｎｏｔａｔｉｏｎ．ｈｔｍｌ；及びｉｍｍｕｎｏ．ｂｍｅ．ｎｗｕ．ｅｄｕで））を参照することによりルーチン的に決定され得る。
【０１０８】
ＣＤＲは、他のスキャフォールド、例えば、フィブロネクチン、シトクロムＢ、アルブミン（例えば、ＡＬＢＵｄＡｂ（Ｄｏｍａｎｔｉｓ／ＧＳＫ）及びＡＬＢ−Ｋｕｎｉｔｚ（Ｄｙａｘ））、３または６つのアミノ酸からなる非構造化反復配列（ｕｎｓｔｒｕｃｔｕｒｅｄ  ｒｅｐｅａｔ  ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ）（例えば、ＰＡＳｙｌａｔｉｏｎ（登録商標）技術及びＸＴＥＮ（登録商標）技術）、及びエラスチン様反復ドメインを含有する配列（例えば、その全体で参照により本明細書に組み込まれる米国仮特許出願第６１／４４２，１０６号を参照されたい）により担持されてもよい。
【０１０９】
実質的に本明細書において提示するとおりのＣＤＲアミノ酸配列は、ヒト可変ドメインまたはその大部分においてＣＤＲとして担持されていてよい。実質的に本明細書において提示するとおりのＨＣＤＲ３配列は、本開示の実施形態を表し、これらはそれぞれ、ヒト重鎖可変ドメインまたはその大部分においてＨＣＤＲ３として担持されていてよい。
【０１１０】
本開示で使用される可変ドメインは、任意の生殖細胞系または再編成ヒト可変ドメインから得ることができるか、または既知のヒト可変ドメインのコンセンサス配列に基づく合成可変ドメインであってよい。ＣＤＲ配列（例えば、ＣＤＲ３）は、組換えＤＮＡ技術を使用して、ＣＤＲ（例えば、ＣＤＲ３）を欠いている可変ドメインのレパートリーに導入することができる。
【０１１１】
例えば、Ｍａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ．（その全体で参照により本明細書に組み込まれるＢｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １０：７７９−７８３（１９９２））は、抗体可変ドメインのレパートリーを生成する方法を提供しており、この際、可変ドメイン領域の５’末端を指向するか、またはそれに隣接するコンセンサスプライマーを、ヒトＶＨ遺伝子の第３のフレームワーク領域へのコンセンサスプライマーと併せて使用して、ＣＤＲ３を欠いたＶＨ可変ドメインのレパートリーを得る。Ｍａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ．はさらに、このレパートリーを特定の抗体のＣＤＲ３と組み合わせることができる方法を記載している。類似の技術を使用して、本開示のＣＤＲ３由来配列を、ＣＤＲ３を欠いたＶＨまたはＶＬドメインのレパートリーとシャッフルし、シャッフルされた完全なＶＨまたはＶＬドメインを、同族のＶＬまたはＶＨドメインと組み合わせて、抗原結合性タンパク質を得ることができる。次いで、そのレパートリーを適切な宿主系、例えば、国際出願公開ＷＯ９２／０１０４７またはＫａｙ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９６）Ｐｈａｇｅ  Ｄｉｓｐｌａｙ  ｏｆ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ：Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓを含むその後の大量の文献のいずれかのファージディスプレイシステムでディスプレイすることができるので、適切な抗原結合性タンパク質を選択することができる。レパートリーは、１０４の個々のメンバー以上、例えば、１０６〜１０８、または１０１０メンバーの任意のものからなってよい。他の適切な宿主系には、酵母ディスプレイ、細菌ディスプレイ、Ｔ７ディスプレイ、及びリボソームディスプレイが含まれる。リボソームディスプレイの概説については、それぞれその全体で参照により本明細書に組み込まれるＬｏｗｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｕｒｒ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．５１７−５２７（２００４）及び国際出願公開ＷＯ９２／０１０４７を参照されたい。類似のシャッフリングまたはコンビナトリアル技術は、Ｓｔｅｍｍｅｒ（その全体で参照により本明細書に組み込まれるＮａｔｕｒｅ  ３７０：３８９−３９１（１９９４））によっても開示されており、これは、β−ラクタマーゼ遺伝子と関連する技術を記載しているが、そのアプローチは、抗体の生成のために使用することができることを観察している。
【０１１２】
ＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、抗ＡＬＫ７抗体）は、それがＡＬＫ７に結合する場合に、ＡＬＫ７への基準分子の結合をある程度遮断する限りにおいて、ＡＬＫ７への結合について基準分子と「競合する」と記載される。ＡＬＫ７への結合について競合し、したがって、ＡＬＫ７への互いの結合に干渉する、それを遮断する、または「交差遮断する」タンパク質の能力は、例えば、競合ＥＬＩＳＡアッセイ、表面プラスモン共鳴（ＳＰＲ；ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）、Ｂｉｏｓｅｎｓｏｒ、Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ、Ｎ．Ｊ．）を含む当技術分野で公知の任意の標準的な競合結合アッセイにより、またはＳｃａｔｃｈａｒｄ  ｅｔ  ａｌ．（Ａｎｎ．Ｎ．Ｙ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．５１：６６０−６７２（１９４９））により記載された方法により決定することができる。ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７への基準分子の結合を例えば、少なくとも９０％、少なくとも８０％、少なくとも７０％、少なくとも６０％、または少なくとも５０％競合的に阻害すると記載され得る。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７への基準分子の結合を少なくとも９０％、少なくとも８０％、少なくとも７０％、少なくとも６０％、または少なくとも５０％競合的に阻害する。他の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７への基準分子の結合を少なくとも９０％、少なくとも８０％、少なくとも７０％、少なくとも６０％、または少なくとも５０％競合的に阻害する。
【０１１３】
ＡＬＫ７結合性タンパク質
ＡＬＫ７に特異的に結合するタンパク質を提供する。一部の実施形態では、アンタゴニストＡＬＫ−７結合性タンパク質を提供する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は抗体である。さらなる実施形態では、抗体は、アンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体である。
【０１１４】
本明細書で使用する場合、用語「ＡＬＫ７」は、任意の種からのアクチビン受容体様キナーゼ−７タンパク質のファミリー及び変異誘発または他の修飾によるそのようなＡＬＫ７タンパク質に由来するバリアントを指す。本明細書におけるＡＬＫ７との言及は、現在同定されている形態のいずれか１種に対する言及であると理解される。ＡＬＫ７ファミリーのメンバーは一般に、システインリッチ領域を含むリガンド結合性細胞外ドメイン、膜貫通ドメイン、及び予測セリン／トレオニンキナーゼ活性を有する細胞質ドメインからなる膜貫通タンパク質である。ヒトＡＬＫ７には、様々な天然に存在するアイソフォームが存在する。正準ヒトＡＬＫ７アイソフォーム１前駆体タンパク質の配列（ＮＣＢＩ  Ｒｅｆ  Ｓｅｑ  ＮＰ＿６６０３０２．２）は、次のとおりである：
【化１】
2019515676.tif 000003
シグナルペプチドが一本線の下線で示されており、細胞外ドメインが太字で示されている。
【０１１５】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＴＧＦ−ベータ受容体ファミリーメンバーではない対照タンパク質についてのＡＬＫ７結合性タンパク質の親和性よりも少なくとも、１００、５００、または１０００倍高い親和性でＡＬＫ７に結合する。特定の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に結合し、＜１μΜ、＜１００ｎＭ、＜１０ｎＭ、＜１ｎＭ、＜０．１ｎＭ、＜１０ｐＭ、＜１ｐＭ、または＜０．１ｐＭの解離定数（ＫＤ）を有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ヒトＡＬＫ７について、≦１μＭ及び≧０．１ｐＭ、≦１００μＭ及び≧０．１ｐＭ、または≦１００μＭ及び≧１ｐＭの範囲内のＫＤを有する。
【０１１６】
一部の実施形態では、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析を使用して、ＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、抗ＡＬＫ７抗体）が基準ＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、抗ＡＬＫ７抗体）によるＡＬＫ７タンパク質への結合と競合する／それを遮断する能力を決定する。ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）機器（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）３０００）を製造者の推奨に従って操作するさらなる一実施形態では、ＡＬＫ７−Ｆｃ融合タンパク質は、前もって付着させた抗ｎｉＦｃ  ＩｇＧにより、ＣＭ５  ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）チップの上に捕捉されて、ＡＬＫ７コーティングされた表面を生成する。典型的には、ＡＬＫ７−Ｆｃ（二量体）の２００〜８００の共鳴単位（ｒｅｓｏｎａｎｃｅ  ｕｎｉｔ）が、チップにカップリングされるであろう（容易に測定可能なレベルの結合を示すが、使用される試験試薬の濃度により容易に飽和可能な量）。
【０１１７】
相互に競合する／相互に遮断するそれらの能力について評価される２種のＡＬＫ７結合性タンパク質（Ａ＊及びＢ＊と名付ける）を、適切な緩衝液中で、結合部位について１対１のモル比で混合して、試験混合物を作製する。結合部位に基づき濃度を計算する場合、ＡＬＫ７結合性タンパク質の分子量は、そのＡＬＫ７結合性タンパク質の上のＡＬＫ７結合部位の数で割ったＡＬＫ７結合性タンパク質の合計分子量であると仮定する。試験混合物中での各ＡＬＫ７結合性タンパク質（すなわち、Ａ＊及びＢ＊）の濃度は、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）チップの上に捕捉されているＡＬＫ７−Ｆｃ分子の上にある、そのＡＬＫ７結合性タンパク質のための結合部位を容易に飽和させるように十分に高くあるべきである。混合物中のＡ＊及びＢ＊ＡＬＫ７結合性タンパク質は、（結合ベースで）同じモル濃度であり、その濃度は典型的には、（結合部位ベースで）１．００〜１．５マイクロモルであろう。ＡＬＫ７結合性プロテインＡ＊のみ及びＡＬＫ７結合性プロテインＢ＊のみを含有する別の溶液も調製する。これらの溶液中のＡＬＫ７結合性プロテインＡ＊及びＡＬＫ７結合性プロテインＢ＊は、試験混合物においてと同じ緩衝液中、かつ同じ濃度であるべきである。試験混合物を、ＡＬＫ７−ＦｃコーティングされたＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）チップ上に通過させ、結合の合計量を記録する。次いで、チップを、チップに結合したＡＬＫ７−Ｆｃを損傷させずに、結合したＡＬＫ７結合性タンパク質を除去するように処理する。典型的には、これを、３０ｍＭ  ＨＣ１で６０秒間にわたってチップを処理することにより行う。次いで、ＡＬＫ７結合性プロテインＡ＊のみの溶液をＡＬＫ７−Ｆｃコーティングされた表面に通過させ、結合量を記録する。チップを再び、チップに結合したＡＬＫ７−Ｆｃを損傷させずに、結合した抗体を除去するように処理する。次いで、ＡＬＫ７結合性プロテインＢ＊のみの溶液をＡＬＫ７−Ｆｃコーティングされた表面に通過させ、結合量を記録する。次に、ＡＬＫ７結合性プロテインＡ＊及びＡＬＫ７結合性プロテインＢ＊の混合物の最大理論結合を計算するが、これは、ＡＬＫ７表面に単独で通過させた場合の各ＡＬＫ７結合性タンパク質の結合の合計である。混合物の実際に記録された結合が、この理論最大よりも小さければ、その２種のＡＬＫ７結合性タンパク質は、相互に競合している／相互に遮断している。したがって、一般に、遮断性ＡＬＫ７結合性タンパク質は、アッセイ中に、及び第２のＡＬＫ７結合性タンパク質の存在下で、記録される結合が、組合せでの２種のＡＬＫ７結合性タンパク質の最大理論結合（上記で定義したとおり）の８０％〜０．１％（例えば、８０％＞〜４％）、具体的には最大理論結合の７５％〜０．１％（例えば、７５％〜４％）、より具体的には最大理論結合の７０％〜０．１％（例えば、７０％〜４％）であるように、上記のＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）遮断アッセイにおいてＡＬＫ７に結合するものである。
【０１１８】
上記のＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）アッセイは、抗ＡＬＫ７抗体などの２種のＡＬＫ７結合性タンパク質がＡＬＫ７への結合について相互に競合する／相互に遮断するかどうかを決定するために使用される例示的なアッセイである。稀なケースでは、特定のＡＬＫ７結合性タンパク質が、ＣＭ５  ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）チップに抗Ｆｃ  ＩｇＧを介してカップリングしているＡＬＫ７−Ｆｃに結合しないことがある（ＡＬＫ７上の関係結合部位がＦｃへのＡＬＫ７連結により隠ぺいまたは破壊されているときに、これは起こり得る）。そのようなケースでは、ＡＬＫ７の標識バージョン、例えば、Ｃ末端Ｈｉｓ標識ＡＬＫ７を使用して、遮断を決定することができる。この特定の形式では、抗Ｈｉｓ抗体を、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）チップにカップリングさせ、次いで、Ｈｉｓ標識ＡＬＫ７をチップの表面に通過させ、抗Ｈｉｓ抗体により捕捉するであろう。各チップの再生サイクルの後に、新たなＨｉｓ標識ＡＬＫ７が、抗Ｈｉｓ抗体でコーティングされた表面上に戻し負荷されるであろうことを除いて、交差遮断分析は、基本的に上記のとおり実施されるであろう。さらに、様々な他の公知の標識及び標識結合性タンパク質の組合せを、そのような遮断分析のために使用することができる（例えば、ＨＡ標識と抗ＨＡ抗体；ＦＬＡＧ標識と抗ＦＬＡＧ抗体；ビオチン標識とストレプトアビジン）。次では概して、ＡＬＫ７結合性タンパク質がＡＬＫ７への基準ＡＬＫ７結合性タンパク質の結合を遮断するか、遮断することができるかどうかを決定するためのＥＬＩＳＡアッセイを説明する。
【０１１９】
一部の実施形態では、ＥＬＩＳＡを使用して、ＡＬＫ７への結合について、基準ＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、抗ＡＬＫ７抗体またはＡＬＫ７リガンド）と競合するＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、抗ＡＬＫ７抗体）の能力を決定する。そのようなアッセイの一般的な原則は、基準ＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、抗ＡＬＫ７抗体）をＥＬＩＳＡプレートのウェル上にコーティングすることである。過剰量の第２の、遮断性である可能性のある試験ＡＬＫ７結合性タンパク質を溶液に添加する（すなわち、ＥＬＩＳＡプレートには結合していない）。次いで、ＡＬＫ７の限定量（または別法では、ＡＬＫ７−Ｆｃ）をウェルに添加する。コーティングされた基準ＡＬＫ７結合性タンパク質及び溶液中の試験ＡＬＫ７結合性タンパク質は、限定数のＡＬＫ７（またはＡＬＫ７−Ｆｃ）分子の結合について競合する。プレートを洗浄して、コーティングされた基準ＡＬＫ７結合性タンパク質に結合していないＡＬＫ７を除去し、かつ液相の試験ＡＬＫ７結合性タンパク質、さらには、液相の試験ＡＬＫ７結合性タンパク質とＡＬＫ７との間で形成される任意の複合体も除去する。次いで、結合したＡＬＫ７の量を、適切なＡＬＫ７検出試薬を使用して測定する。ＡＬＫ７への、コーティングされた基準ＡＬＫ７結合性タンパク質の結合を遮断することができる溶液中の試験ＡＬＫ７結合性タンパク質は、コーティングされた基準ＡＬＫ７結合性タンパク質が第２の液相の試験ＡＬＫ７結合性タンパク質の非存在下で結合することができるＡＬＫ７分子の数に対して、コーティングされた基準ＡＬＫ７結合性タンパク質が結合することができるＡＬＫ７分子の数の減少をもたらし得るであろう。このアッセイでのバックグラウンドシグナルは、コーティングされた基準ＡＬＫ７結合性タンパク質、液相の試験ＡＬＫ７結合性タンパク質、ＡＬＫ７緩衝液のみ（すなわち、ＡＬＫ７なし）及びＡＬＫ７検出試薬を含むウェルで得られるシグナルと定義される。このアッセイでの陽性対照シグナルは、コーティングされた基準ＡＬＫ７結合性タンパク質、液相の試験ＡＬＫ７結合性タンパク質緩衝液のみ（すなわち、液相の試験ＡＬＫ７結合性タンパク質なし）、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）検出試薬を含むウェルで得られるシグナルと定義される。ＥＬＩＳＡアッセイを、バックグラウンドシグナルの少なくとも３倍の陽性対照シグナルが得られるような手法で実行することとする。方法のアーチファクトのための対照として、交差遮断アッセイを、記載したとおりの形式で、及び試験ＡＬＫ７結合性タンパク質をコーティングされた抗体として、及び基準ＡＬＫ７結合性タンパク質を液相抗体として用いる逆の形式で実行してもよい。
【０１２０】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＴＧＦ−ベータ受容体ファミリーメンバーではない対照タンパク質についてのＡＬＫ７結合性タンパク質の親和性よりも少なくとも１００、５００、または１０００倍高い親和性でＡＬＫ７に結合する。追加の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＴＧＦ−ベータ受容体ファミリーメンバーではない対照タンパク質についてのＡＬＫ７結合性タンパク質の親和性よりも少なくとも１００、５００、または１０００倍高い親和性でＡＬＫ７に結合する。特定の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質はＡＬＫ７に結合し、＜１μΜ、＜１００ｎＭ、＜１０ｎＭ、＜１ｎＭ、＜０．１ｎＭ、＜１０ｐＭ、＜１ｐＭ、または＜０．１ｐＭの解離定数（ＫＤ）を有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ヒトＡＬＫ７について≦１μＭ及び≧０．１ｐＭ、≦１００μＭ及び≧０．１ｐＭ、または≦１００μＭ及び≧１ｐＭの範囲内のＫＤを有する。
【０１２１】
一部の実施形態では、細胞ベースの脂肪分解阻害アッセイを使用して、哺乳類白色脂肪細胞における脂肪分解のＡＬＫ７媒介性阻害を減少させる（阻害する）ＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、アンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体）の能力を決定する。一部の実施形態では、成熟白色脂肪細胞（例えば、ヒト、マウス、またはラット）を使用して、脂肪分解阻害アッセイを行って、ＡＬＫ７活性を低下させるＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、抗ＡＬＫ７抗体）の能力を決定する。脂肪分解アッセイを行うためのキット、試薬及び方法は、市販されていて、当技術分野で公知である。特定の実施形態では、脂肪分解阻害アッセイを、本明細書において実施例で示すとおりに行う。他の実施形態では、このアッセイを、市販の脂肪分解アッセイキット（例えば、ＢｉｏＡｓｓａｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，ＥｎｚｙＣｈｒｏｍ（商標）Ａｄｉｐｏｌｙｓｉｓ  Ａｓｓａｙ  Ｋｉｔ，Ｃａｔ．Ｎｏ．ＥＡＰＬ−２００；Ａｂｃａｍ  Ｃａｔ．Ｎｏ．ａｂ１８５４３３；Ｚｅｎ−Ｂｉｏ，Ｃａｔ．Ｎｏ．ＬＩＰ−１−ＮＣＬ１；ＢｉｏＶｉｓｉｏｎ，Ｃａｔ．Ｎｏ．Ｋ５７７−１００；Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ，Ｃａｔ．Ｎｏ．ＭＡＫ２１１；及びＡｄｉｐｏＬｙｚｅ（商標）Ｌｉｐｏｌｙｓｉｓ  Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ  Ａｓｓａｙ，Ｌｏｎｚａ，Ｃａｔ．Ｎｏ．１９３３３９）において示されているとおりに、指示及び試薬に従って行う。
【０１２２】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニストであり、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、アクチビンＢ（５０ｎｇ／ｍｌ）の存在下で（例えば、本明細書において記載するとおりに）行われる脂肪分解阻害アッセイにおいて標準的な技術及び条件を使用して決定した場合に、成熟白色脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％９５％、１０〜９０％、１０〜８５％、１０〜８０％、１０〜７５％、１０〜７０％、１０〜６５％、１０〜６０％、１０〜５５％、１０〜５０％、または１０〜４５％増加させる。別の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、アクチビンＢ（５０ｎｇ／ｍｌ）の存在下で（例えば、本明細書において記載するとおりに）行われる脂肪分解阻害アッセイにおいて標準的な技術及び条件を使用して決定した場合に、成熟白色脂肪細胞における脂肪分解を少なくとも５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または９５％、または約１００％増加させる。
【０１２３】
ＡＬＫ７を中和して、治療効果をもたらすことができる結合性タンパク質を同定するために、ＡＬＫ７シグナル伝達に依存する薬力学的パラメーターを、ＡＬＫ７結合性タンパク質のｉｎ  ｖｉｖｏ試験のための終点として測定することができる。ＡＬＫ７中和結合薬は、そのような薬力学的パラメーターにおいて、ビヒクル処置された動物と比較した場合に、統計的に有意な変化をもたらし得るものと定義される。そのようなｉｎ  ｖｉｖｏ試験は、任意の適切な哺乳類（例えば、マウス、ラット、またはサルにおいて行うことができる。
【０１２４】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合する抗体である。追加の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、全長抗ＡＬＫ７抗体である。追加の実施形態では、抗体は、モノクローナル抗体、組換え抗体、ヒト抗体、ヒト化抗体、キメラ抗体、二重特異性抗体、多重特異性抗体、またはそのＡＬＫ７結合性抗体断片である。
【０１２５】
一部の実施形態では、抗ＡＬＫ７抗体は、ＡＬＫ７結合性抗体断片である。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性抗体断片は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ断片、ダイアボディ、または一本鎖抗体分子である。追加の実施形態では、ＡＬＫ７抗体は、Ｆｄ、一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、ジスルフィド結合したＦｖ、Ｖ−ＮＡＲドメイン、ＩｇＮａｒ、細胞内抗体、ＩｇＧΔＣＨ２、ミニボディ、Ｆ（ａｂ’）３、テトラボディ、トリボディ（ｔｒｉａｂｏｄｙ）、ダイアボディ、シングルドメイン抗体、ＤＶＤ−Ｉｇ、Ｆｃａｂ、ｍＡｂ２、（ｓｃＦｖ）２、ｓｃＦｖ−ＦｃまたはビスｓｃＦｖである。
【０１２６】
追加の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＶＨ及びＶＬを含む抗体である。一部の実施形態では、抗ＡＬＫ７抗体はさらに、重鎖定常領域またはその断片を含む。一部の実施形態では、抗体は、（ａ）ヒトＩｇＡ定常領域、またはその断片；（ｂ）ヒトＩｇＤ定常領域、またはその断片；（ｃ）ヒトＩｇＥ定常ドメイン、またはその断片；（ｄ）ヒトＩｇＧ１定常領域、またはその断片；（ｅ）ヒトＩｇＧ２定常領域、またはその断片；（ｆ）ヒトＩｇＧ３定常領域、またはその断片；（ｇ）ヒトＩｇＧ４定常領域、またはその断片；及び（ｈ）ヒトＩｇＭ定常領域、またはその断片からなる群から選択される重鎖免疫グロブリン定常領域を含む。特定の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、重鎖定常領域またはその断片、例えば、ヒトＩｇＧ定常領域またはその断片を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、変更されたエフェクター機能及び／または半減期を有するか、有するように変異している重鎖免疫グロブリン定常ドメインを含む。
【０１２７】
特定の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、エフェクター機能を低下させる変異を含有するＩｇＧ１重鎖定常領域を含む抗体である（例えば、それぞれその全体で参照により本明細書に組み込まれるＩｄｕｓｏｇｉｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６６：２５７１−２５７５（２００１）；Ｓａｚｉｎｓｋｙ  ｅｔ  ａｌ．，ＰＮＡＳ  ＵＳＡ  １０５：２０１６７−２０１７２（２００８）；Ｄａｖｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｒｈｅｕｍａｔｏｌ．３４：２２０４−２２１０（２００７）；Ｂｏｌｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２３：４０３−４１１（１９９３）；Ａｌｅｇｒｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ  ５７：１５３７−１５４３（１９９４）；Ｘｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｅｌｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．２００：１６−２６（２０００）；Ｃｏｌｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ  ６８：５６３−５７１（１９９９）；Ｈｕｔｃｈｉｎｓ  ｅｔ  ａｌ．，ＰＮＡＳ  ＵＳＡ  ９２：１１９８０−１１９８４（１９９５）；Ｒｅｄｄｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６４：１９２５−１９３３（２０００）；ＷＯ９７／１１９７１、及びＷＯ０７／１０６５８５；米国特許出願公開第２００７／０１４８１６７Ａ１；ＭｃＥａｒｃｈｅｒｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ  １０９：１１８５−１１９２（２００７）；Ｓｔｒｏｈｌ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２０：６８５−６９１（２００９）；ならびにＫｕｍａｇａｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．４７：１４８９−１４９７（２００７）を参照されたい）。
【０１２８】
一部の実施形態では、重鎖定常領域またはその断片は、野生型ＩｇＧ定常ドメインに対して、１つまたは複数のアミノ酸置換を含み、修飾されたＩｇＧは、野生型ＩｇＧ定常ドメインを有するＩｇＧの半減期と比較してＡＤＣＣの減少を有する。ＡＤＣＣを減少させる、提供する抗体に含まれるＦｃ配列を操作する修飾の例には、ＩｇＧ１−Ｋ３２６Ｗ、Ｅ３３３Ｓ；ＩｇＧ２−Ｅ３３３Ｓ；ＩｇＧ１−Ｎ２９７Ａ；ＩｇＧ１−Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ；ＩｇＧ２−Ｖ２３４Ａ、Ｇ２３７Ａ；ＩｇＧ４−Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａ、Ｅ３１８Ａ；ＩｇＧ４−Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３６Ｅ；ＩｇＧ２−ＥＵ配列１１８〜２６０；ＩｇＧ４−ＥＵ配列２６１〜４４７；ＩｇＧ２−Ｈ２６８Ｑ、Ｖ３０９Ｌ、Ａ３３０Ｓ、Ａ３３１Ｓ；ＩｇＧ１−Ｃ２２０Ｓ、Ｃ２２６Ｓ、Ｃ２２９Ｓ、Ｐ２３８Ｓ；ＩｇＧ１−Ｃ２２６Ｓ、Ｃ２２９Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ；及びＩｇＧ１−Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ、Ｐ３３１Ｓに対応する１つまたは複数の修飾が含まれ、その際、位置のナンバリングは、ＫａｂａｔにおいてのとおりのＥＵインデックスによる。
【０１２９】
特定の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＣＤＣ活性の低下を有するか、またはそれを有するように変異している重鎖免疫グロブリン定常ドメインを含む。特定の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＣＤＣ活性を低下させる変異を含有するＩｇＧ１重鎖定常領域を含む抗体である（例えば、それぞれその全体で参照により本明細書に組み込まれるＷＯ９７／１１９７１及びＷＯ０７／１０６５８５；米国特許出願公開第２００７／０１４８１６７Ａ１号；ＭｃＥａｒｃｈｅｒｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ  １０９：１１８５−１１９２（２００７）；Ｈａｙｄｅｎ−Ｌｅｄｂｅｔｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ  １５：２７３９−２７４６（２００９）；Ｌａｚａｒ  ｅｔ  ａｌ．，ＰＮＡＳ  ＵＳＡ  １０３：４００５−４０１０（２００６）；Ｂｒｕｃｋｈｅｉｍｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎｅｏｐｌａｓｉａ  １１：５０９−５１７（２００９）；Ｓｔｒｏｈｌ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２０：６８５−６９１（２００９）；及びＳａｚｉｎｓｋｙ  ｅｔ  ａｌ．，ＰＮＡＳ  ＵＳＡ  １０５：２０１６７−２０１７２（２００８）を参照されたい）。ＣＤＣを減少させる、抗ＡＬＫ７抗体に含まれるＦｃ配列を操作する修飾の例には、ＩｇＧ１−Ｓ２３９Ｄ、Ａ３３０Ｌ、Ｉ３３２Ｅ；ＩｇＧ２  ＥＵ配列１１８〜２６０；ＩｇＧ４−ＥＵ配列２６１〜４４７；ＩｇＧ２−Ｈ２６８Ｑ、Ｖ３０９Ｌ、Ａ３３０Ｓ、Ａ３３１Ｓ；ＩｇＧ１−Ｃ２２６Ｓ、Ｃ２２９Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３５Ａ；ＩｇＧ１−Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ、Ｐ３３１Ｓ；及びＩｇＧ１−Ｃ２２６Ｓ、Ｐ２３０Ｓに対応する１つまたは複数の修飾が含まれる。
【０１３０】
さらなる実施形態では、重鎖定常領域またはその断片は、野生型ＩｇＧ定常ドメインに対して１つまたは複数のアミノ酸置換を含み、修飾されたＩｇＧは、野生型ＩｇＧ定常ドメインを有するＩｇＧの半減期と比較して半減期の増加を有する。例えば、ＩｇＧ定常ドメインは、２５１〜２５７、２８５〜２９０、３０８〜３１４、３８５〜３８９、及び４２８〜４３６位にアミノ酸残基の１つまたは複数のアミノ酸置換を含有してよく、この際、アミノ酸位置のナンバリングは、Ｋａｂａｔに記載されているとおりのＥＵインデックスによる。特定の実施形態では、ＩｇＧ定常ドメインは、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、もしくはＴｈｒでのＫａｂａｔ２５２位のアミノ酸の置換；ＴｈｒでのＫａｂａｔ２５４位のアミノ酸の置換；Ｓｅｒ、Ａｒｇ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、もしくはＴｈｒでのＫａｂａｔ２５６位のアミノ酸の置換；ＬｅｕでのＫａｂａｔ２５７位のアミノ酸の置換；ＰｒｏでのＫａｂａｔ３０９位のアミノ酸の置換；ＳｅｒでのＫａｂａｔ３１１位のアミノ酸の置換；Ｔｈｒ、Ｌｅｕ、Ｐｈｅ、もしくはＳｅｒでのＫａｂａｔ４２８位のアミノ酸の置換；Ａｒｇ、Ｓｅｒ、Ｉｓｏ、Ｐｒｏ、もしくはＧｌｎでのＫａｂａｔ４３３位のアミノ酸の置換；またはＴｒｐ、Ｍｅｔ、Ｓｅｒ、Ｈｉｓ、Ｐｈｅ、もしくはＴｙｒでのＫａｂａｔ４３４位のアミノ酸の置換のうちの１つもしくは複数を含有してよい。より具体的には、ＩｇＧ定常ドメインは、ＴｙｒでのＫａｂａｔ２５２位のアミノ酸の置換、ＴｈｒでのＫａｂａｔ２５４位のアミノ酸の置換、及びＧｌｕでのＫａｂａｔ２５６位のアミノ酸の置換を含む、野生型ヒトＩｇＧ定常ドメインに対するアミノ酸置換を含有してよい。
【０１３１】
追加の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、軽鎖免疫グロブリン定常領域を含む抗体である。さらなる一実施形態では、抗体は、ヒトＩｇカッパ定常領域またはヒトＩｇラムダ定常領域を含む。
【０１３２】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＣＤＲのセット：ＶＨ−ＣＤＲ１、ＶＨ−ＣＤＲ２、ＶＨ−ＣＤＲ３、ＶＬ−ＣＤＲ１、ＶＬ−ＣＤＲ２及びＶＬ−ＣＤＲ３を含み、その際、そのＣＤＲは、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ対で存在する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、（ａ）配列番号４のＶＨ配列、及び配列番号１３のＶＬ配列；（ｂ）配列番号２２のＶＨ配列、及び配列番号３１のＶＬ配列；（ｃ）配列番号４０のＶＨ配列、及び配列番号４９のＶＬ配列；ならびに（ｄ）配列番号５８のＶＨ配列及び配列番号６７のＶＬ配列からなる群から選択されるＶＨ及びＶＬ対で存在するＣＤＲのセットを含み、タンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。
【０１３３】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＣＤＲのセット：ＶＨ−ＣＤＲ１、ＶＨ−ＣＤＲ２、ＶＨ−ＣＤＲ３、ＶＬ−ＣＤＲ１、ＶＬ−ＣＤＲ２及びＶＬ−ＣＤＲ３を含み、その際、そのＣＤＲは、表１Ｂに開示されているＶＨ及びＶＬ対で存在する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、（ａ）配列番号１５２のＶＨ配列、及び配列番号９８のＶＬ配列；（ｂ）配列番号１５９のＶＨ配列、及び配列番号１１０のＶＬ配列；ならびに（ｃ）配列番号１６５のＶＨ配列、及び配列番号１７１のＶＬ配列からなる群から選択されるＶＨ及びＶＬ対で存在するＣＤＲのセットを含み、タンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。
【０１３４】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＣＤＲのセット：ＶＨ−ＣＤＲ１、ＶＨ−ＣＤＲ２、ＶＨ−ＣＤＲ３、ＶＬ−ＣＤＲ１、ＶＬ−ＣＤＲ２及びＶＬ−ＣＤＲ３を含み、その際、そのＣＤＲは、表３に開示されているＶＨ及びＶＬ対で存在する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、（ａ）配列番号９１のＶＨ配列、及び配列番号９８のＶＬ配列；（ｂ）配列番号１０５のＶＨ配列、及び配列番号１１０のＶＬ配列；（ｃ）配列番号１１７のＶＨ配列、及び配列番号１２４のＶＬ配列；（ｄ）配列番号１２８のＶＨ配列及び配列番号１３５のＶＬ配列；ならびに（ｄ）配列番号１４０のＶＨ配列及び配列番号１４８のＶＬ配列からなる群から選択されるＶＨ及びＶＬ対で存在するＣＤＲのセットを含み、タンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。
【０１３５】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＣＤＲのセット：（ａ）ＶＨ−ＣＤＲ１、ＶＨ−ＣＤＲ２、及びＶＨ−ＣＤＲ３、または（ｂ）ＶＬ−ＣＤＲ１、ＶＬ−ＣＤＲ２、及びＶＬ−ＣＤＲ３を含み、その際、そのＣＤＲのセットは、本明細書において開示するＣＤＲの基準セットと同一であるか、またはそこから合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、または１０未満のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、表１Ａに開示されているＶＨまたはＶＬ配列中のＣＤＲの基準セットと同一であるか、またはそこから合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、または１０未満のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＣＤＲのセットを含む。
【０１３６】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、本明細書において開示するＣＤＲの基準セットと同一であるか、またはそこから合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、または１０未満のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＣＤＲのセット：（ａ）ＶＨ−ＣＤＲ１、ＶＨ−ＣＤＲ２、及びＶＨ−ＣＤＲ３、または（ｂ）ＶＬ−ＣＤＲ１、ＶＬ−ＣＤＲ２、及びＶＬ−ＣＤＲ３を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、表１Ｂに開示されているＶＨまたはＶＬ配列中のＣＤＲの基準セットと同一であるか、またはそこから合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、または１０未満のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＣＤＲのセットを含む。
【０１３７】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、本明細書において開示するＣＤＲの基準セットと同一であるか、またはそこから合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、または１０未満のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＣＤＲのセット：ＶＨ−ＣＤＲ１、ＶＨ−ＣＤＲ２、ＶＨ−ＣＤＲ３、ＶＬ−ＣＤＲ１、ＶＬ−ＣＤＲ２、及びＶＬ−ＣＤＲ３を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、表３に開示されているＶＨまたはＶＬ配列対におけるＣＤＲの基準セットと同一であるか、またはそこから合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、または１０未満のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＣＤＲのセットを含む。
【０１３８】
追加の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、ＣＤＲのセット：ＶＨ−ＣＤＲ１、ＶＨ−ＣＤＲ２、ＶＨ−ＣＤＲ３、ＶＬ−ＣＤＲ１、ＶＬ−ＣＤＲ２、及びＶＬ−ＣＤＲ３を含み、その際、そのＣＤＲのセットは、（ａ）（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号１のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号２のアミノ酸配列を含み；（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号３のアミノ酸配列を含み；（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号１０のアミノ酸配列を含み；（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号１１のアミノ酸配列を含み；及び（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号１２のアミノ酸配列を含む；（ｂ）（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号１９のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号２０のアミノ酸配列を含み；（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号２１のアミノ酸配列を含み；（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号２８のアミノ酸配列を含み；（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号２９のアミノ酸配列を含み；及び（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号３０のアミノ酸配列を含む；（ｃ）（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号３７のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号３８のアミノ酸配列を含み；（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号３９のアミノ酸配列を含み；（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号４６のアミノ酸配列を含み；（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号４７のアミノ酸配列を含み；及び（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号４８のアミノ酸配列を含む；または（ｄ）（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号５５のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号５６のアミノ酸配列を含み；（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号５７のアミノ酸配列を含み；（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号６４のアミノ酸配列を含み；（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号６５のアミノ酸配列を含み；及び（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号６６のアミノ酸配列を含むＣＤＲの基準セットと同一であるか、またはそこから合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、または１０未満のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有し；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０１３９】
追加の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、ＣＤＲのセット：ＶＨ−ＣＤＲ１、ＶＨ−ＣＤＲ２、ＶＨ−ＣＤＲ３、ＶＬ−ＣＤＲ１、ＶＬ−ＣＤＲ２、及びＶＬ−ＣＤＲ３を含み、その際、そのＣＤＲのセットは、（ａ）（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号３７のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号５６のアミノ酸配列を含み；（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号９０のアミノ酸配列を含み；（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号９５のアミノ酸配列を含み；（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号９６のアミノ酸配列を含み；及び（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号９７のアミノ酸配列を含む；（ｂ）（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号１５６のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号１５７のアミノ酸配列を含み；（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号１８４のアミノ酸配列を含み；（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号１０７のアミノ酸配列を含み；（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号１０８のアミノ酸配列を含み；及び（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号１０９のアミノ酸配列を含む；ならびに（ｃ）（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号１のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号１６３のアミノ酸配列を含み；（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号１６４のアミノ酸配列を含み；（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号１６７のアミノ酸配列を含み；（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号１６８のアミノ酸配列を含み；及び（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号１６９のアミノ酸配列を含むＣＤＲの基準セットと同一であるか、またはそこから合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、または１０未満のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有し；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０１４０】
追加の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、ＣＤＲのセット：ＶＨ−ＣＤＲ１、ＶＨ−ＣＤＲ２、ＶＨ−ＣＤＲ３、ＶＬ−ＣＤＲ１、ＶＬ−ＣＤＲ２、及びＶＬ−ＣＤＲ３を含み、その際、そのＣＤＲのセットは、（ａ）（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号８８のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号８９のアミノ酸配列を含み；（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号９０のアミノ酸配列を含み；（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号９５のアミノ酸配列を含み；（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号９６のアミノ酸配列を含み；及び（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号９７のアミノ酸配列を含む；（ｂ）（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号１０２のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号１０３のアミノ酸配列を含み；（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号１０４のアミノ酸配列を含み；（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号１０７のアミノ酸配列を含み；（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号１０８のアミノ酸配列を含み；及び（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号１０９のアミノ酸配列を含む；（ｃ）（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号１１４のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号１１５のアミノ酸配列を含み；（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号１１６のアミノ酸配列を含み；（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号１２１のアミノ酸配列を含み；（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号１２２のアミノ酸配列を含み；及び（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号１２３のアミノ酸配列を含む；（ｄ）（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号１２５のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号１２６のアミノ酸配列を含み；（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号１２７のアミノ酸配列を含み；（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号１３２のアミノ酸配列を含み；（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号１３３のアミノ酸配列を含み；及び（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号１３４のアミノ酸配列を含む；または（ｅ）（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号１３７のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号１３８のアミノ酸配列を含み；（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号１３９のアミノ酸配列を含み；（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号１４５のアミノ酸配列を含み；（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号１４６のアミノ酸配列を含み；及び（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号１４７のアミノ酸配列を含むＣＤＲの基準セットと同一であるか、またはそこから合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、または１０未満のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有し；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０１４１】
追加の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、ＣＤＲのセット：ＶＨ−ＣＤＲ１、ＶＨ−ＣＤＲ２、ＶＨ−ＣＤＲ３、ＶＬ−ＣＤＲ１、ＶＬ−ＣＤＲ２、及びＶＬ−ＣＤＲ３を含み、その際、（ａ）（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号１のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号２のアミノ酸配列を含み；（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号３のアミノ酸配列を含み；（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号１０のアミノ酸配列を含み；（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号１１のアミノ酸配列を含み；及び（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号１２のアミノ酸配列を含む；（ｂ）（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号１９のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号２０のアミノ酸配列を含み；（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号２１のアミノ酸配列を含み；（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号２８のアミノ酸配列を含み；（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号２９のアミノ酸配列を含み；及び（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号３０のアミノ酸配列を含む；（ｃ）（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号３７のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号３８のアミノ酸配列を含み；（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号３９のアミノ酸配列を含み；（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号４６のアミノ酸配列を含み；（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号４７のアミノ酸配列を含み；及び（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号４８のアミノ酸配列を含む；または（ｄ）（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号５５のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号５６のアミノ酸配列を含み；（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号５７のアミノ酸配列を含み；（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号６４のアミノ酸配列を含み；（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号６５のアミノ酸配列を含み；及び（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号６６のアミノ酸配列を含み；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。
【０１４２】
追加の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、ＣＤＲのセット：ＶＨ−ＣＤＲ１、ＶＨ−ＣＤＲ２、ＶＨ−ＣＤＲ３、ＶＬ−ＣＤＲ１、ＶＬ−ＣＤＲ２、及びＶＬ−ＣＤＲ３を含み、その際、（ａ）（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号３７のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号５６のアミノ酸配列を含み；（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号９０のアミノ酸配列を含み；（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号９５のアミノ酸配列を含み；（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号９６のアミノ酸配列を含み；及び（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号９７のアミノ酸配列を含む；（ｂ）（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号１５６のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号１５７のアミノ酸配列を含み；（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号１０４のアミノ酸配列を含み；（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号１０７のアミノ酸配列を含み；（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号１０８のアミノ酸配列を含み；及び（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号１０９のアミノ酸配列を含む；ならびに（ｃ）（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号１のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号１６３のアミノ酸配列を含み；（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号１１６４のアミノ酸配列を含み；（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号１０７のアミノ酸配列を含み；（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号１６８のアミノ酸配列を含み；及び（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号１６９のアミノ酸配列を含み；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。
【０１４３】
追加の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、ＣＤＲのセット：ＶＨ−ＣＤＲ１、ＶＨ−ＣＤＲ２、ＶＨ−ＣＤＲ３、ＶＬ−ＣＤＲ１、ＶＬ−ＣＤＲ２、及びＶＬ−ＣＤＲ３を含み、その際、（ａ）（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号８８のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号８９のアミノ酸配列を含み；（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号９０のアミノ酸配列を含み；（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号９５のアミノ酸配列を含み；（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号９６のアミノ酸配列を含み；及び（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号９７のアミノ酸配列を含む；（ｂ）（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号１０２のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号１０３のアミノ酸配列を含み；（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号１０４のアミノ酸配列を含み；（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号１０７のアミノ酸配列を含み；（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号１０８のアミノ酸配列を含み；及び（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号１０９のアミノ酸配列を含む；（ｃ）（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号１１４のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号１１５のアミノ酸配列を含み；（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号１１６のアミノ酸配列を含み；（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号１２１のアミノ酸配列を含み；（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号１２２のアミノ酸配列を含み；及び（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号１２３のアミノ酸配列を含む；（ｄ）（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号１２５のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号１２６のアミノ酸配列を含み；（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号１２７のアミノ酸配列を含み；（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号１３２のアミノ酸配列を含み；（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号１３３のアミノ酸配列を含み；及び（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号１３４のアミノ酸配列を含む；または（ｅ）（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号１３７のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号１３８のアミノ酸配列を含み；（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号１３９のアミノ酸配列を含み；（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号１４５のアミノ酸配列を含み；（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号１４６のアミノ酸配列を含み；及び（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号１４７のアミノ酸配列を含み；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。
【０１４４】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、（ａ）（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号１のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号２のアミノ酸配列を含み；（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号３のアミノ酸配列を含み；（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号１０のアミノ酸配列を含み；（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号１１のアミノ酸配列を含み；及び（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号１２のアミノ酸配列を含むＣＤＲの基準セットから合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１０未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＣＤＲのセットを含み；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及びアクチビンＢを含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０１４５】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号１９のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号２０のアミノ酸配列を含み；（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号２１のアミノ酸配列を含み；（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号２８のアミノ酸配列を含み；（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号２９のアミノ酸配列を含み；及び（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号３０のアミノ酸配列を含むＣＤＲの基準セットから合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１０未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＣＤＲのセットを含み；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及びアクチビンＢを含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０１４６】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号３７のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号３８のアミノ酸配列を含み；（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号３９のアミノ酸配列を含み；（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号４６のアミノ酸配列を含み；（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号４７のアミノ酸配列を含み；及び（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号４８のアミノ酸配列を含むＣＤＲの基準セットから合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１０未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＣＤＲのセットを含み；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０１４７】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号５５のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号５６のアミノ酸配列を含み；（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号５７のアミノ酸配列を含み；（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号６４のアミノ酸配列を含み；（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号６５のアミノ酸配列を含み；及び（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号６６のアミノ酸配列を含むＣＤＲの基準セットから合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１０未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＣＤＲのセットを含み；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０１４８】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、（ａ）（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号８８のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号８９のアミノ酸配列を含み；（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号９０のアミノ酸配列を含み；（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号９５のアミノ酸配列を含み；（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号９６のアミノ酸配列を含み；及び（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号９７のアミノ酸配列を含むＣＤＲの基準セットから合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１０未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＣＤＲのセットを含み；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及びアクチビンＢを含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０１４９】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号１０２のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号１０３のアミノ酸配列を含み；（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号１０４のアミノ酸配列を含み；（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号１０７のアミノ酸配列を含み；（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号１０８のアミノ酸配列を含み；及び（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号１０９のアミノ酸配列を含むＣＤＲの基準セットから合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１０未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＣＤＲのセットを含み；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及びアクチビンＢを含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０１５０】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号１１４のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号１１５のアミノ酸配列を含み；（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号１１６のアミノ酸配列を含み；（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号１２１のアミノ酸配列を含み；（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号１２２のアミノ酸配列を含み；及び（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号１２３のアミノ酸配列を含むＣＤＲの基準セットから合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１０未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＣＤＲのセットを含み；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０１５１】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号１２５のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号１２６のアミノ酸配列を含み；（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号１２７のアミノ酸配列を含み；（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号１３２のアミノ酸配列を含み；（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号１３３のアミノ酸配列を含み；及び（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号１３４のアミノ酸配列を含むＣＤＲの基準セットから合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１０未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＣＤＲのセットを含み；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０１５２】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号１３７のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号１３８のアミノ酸配列を含み；（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号１３９のアミノ酸配列を含み；（ｉｖ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号１４５のアミノ酸配列を含み；（ｖ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号１４６のアミノ酸配列を含み；及び（ｖｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号１４７のアミノ酸配列を含むＣＤＲの基準セットから合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１０未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＣＤＲのセットを含み；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０１５３】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、ＣＤＲのセット：ＶＨ−ＣＤＲ１、ＶＨ−ＣＤＲ２、及びＶＨ−ＣＤＲ３を含み、その際、そのＣＤＲのセットは、（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号３７のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号３８のアミノ酸配列を含み；及び（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号３９または５７のアミノ酸配列を含むＣＤＲの基準セットと同一であるか、またはそこから合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、または１０未満のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有し；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、ＣＤＲのセット：ＶＨ−ＣＤＲ１、ＶＨ−ＣＤＲ２、及びＶＨ−ＣＤＲ３を含み、その際、（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１は配列番号３７のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２は配列番号３８のアミノ酸配列を含み；及び（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３は配列番号３９のアミノ酸配列を含み；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、ＣＤＲのセット：ＶＨ−ＣＤＲ１、ＶＨ−ＣＤＲ２、及びＶＨ−ＣＤＲ３を含み、その際、そのＣＤＲのセットは、（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号３７のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号３８のアミノ酸配列を含み；及び（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号３９のアミノ酸配列を含むＣＤＲの基準セットと同一であるか、またはそこから合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、または１０未満のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有し；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、ＣＤＲのセット：ＶＨ−ＣＤＲ１、ＶＨ−ＣＤＲ２、及びＶＨ−ＣＤＲ３を含み、その際、そのＣＤＲのセットは、（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号３７のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号３８のアミノ酸配列を含み；及び（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号５７のアミノ酸配列を含むＣＤＲの基準セットと同一であるか、またはそこから合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、または１０未満のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有し；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、ＣＤＲのセット：ＶＨ−ＣＤＲ１、ＶＨ−ＣＤＲ２、及びＶＨ−ＣＤＲ３を含み、その際、（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１は配列番号３７のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２は配列番号３８のアミノ酸配列を含み；及び（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３は配列番号５７のアミノ酸配列を含み；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０１５４】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、ＣＤＲのセット：ＶＨ−ＣＤＲ１、ＶＨ−ＣＤＲ２、及びＶＨ−ＣＤＲ３を含み、その際、そのＣＤＲのセットは、（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号１のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号２のアミノ酸配列を含み；及び（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号３のアミノ酸配列を含むＣＤＲの基準セットと同一であるか、またはそこから合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、または１０未満のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有し；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、ＣＤＲのセット：ＶＨ−ＣＤＲ１、ＶＨ−ＣＤＲ２、及びＶＨ−ＣＤＲ３を含み、その際、（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１は配列番号１のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２は配列番号２のアミノ酸配列を含み；及び（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３は配列番号３のアミノ酸配列を含み；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０１５５】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、ＣＤＲのセット：ＶＨ−ＣＤＲ１、ＶＨ−ＣＤＲ２、及びＶＨ−ＣＤＲ３を含み、その際、そのＣＤＲのセットは、（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号１９のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号２０のアミノ酸配列を含み；及び（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号２１のアミノ酸配列を含むＣＤＲの基準セットと同一であるか、またはそこから合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、または１０未満のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有し；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、ＣＤＲのセット：ＶＨ−ＣＤＲ１、ＶＨ−ＣＤＲ２、及びＶＨ−ＣＤＲ３を含み、その際、（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１は配列番号１９のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２は配列番号２０のアミノ酸配列を含み；及び（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３は配列番号２１のアミノ酸配列を含み；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０１５６】
さらなる一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、ＣＤＲのセット：ＶＨ−ＣＤＲ１、ＶＨ−ＣＤＲ２、及びＶＨ−ＣＤＲ３を含み、その際、そのＣＤＲのセットは、（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号３７のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号３８のアミノ酸配列を含み；及び（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号３９のアミノ酸配列を含むＣＤＲの基準セットと同一であるか、またはそこから合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、または１０未満のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有し；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、ＣＤＲのセット：ＶＨ−ＣＤＲ１、ＶＨ−ＣＤＲ２、及びＶＨ−ＣＤＲ３を含み、その際、（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１は配列番号３７のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２は配列番号３８のアミノ酸配列を含み；及び（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３は配列番号３９のアミノ酸配列を含み；そのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０１５７】
さらなる一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、ＣＤＲのセット：ＶＨ−ＣＤＲ１、ＶＨ−ＣＤＲ２、及びＶＨ−ＣＤＲ３を含み、その際、そのＣＤＲのセットは、（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号５５のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号５６のアミノ酸配列を含み；及び（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号５７のアミノ酸配列を含むＣＤＲの基準セットと同一であるか、またはそこから合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、または１０未満のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有し；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、ＣＤＲのセット：ＶＨ−ＣＤＲ１、ＶＨ−ＣＤＲ２、及びＶＨ−ＣＤＲ３を含み、その際、（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１は配列番号５５のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２は配列番号５６のアミノ酸配列を含み；及び（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３は配列番号５７のアミノ酸配列を含み；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０１５８】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、ＣＤＲのセット：ＶＨ−ＣＤＲ１、ＶＨ−ＣＤＲ２、及びＶＨ−ＣＤＲ３を含み、その際、そのＣＤＲのセットは、（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号８８のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号８９のアミノ酸配列を含み；及び（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号９０のアミノ酸配列を含むＣＤＲの基準セットと同一であるか、またはそこから合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、または１０未満のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有し；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、ＣＤＲのセット：ＶＨ−ＣＤＲ１、ＶＨ−ＣＤＲ２、及びＶＨ−ＣＤＲ３を含み、その際、（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１は配列番号８８のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２は配列番号８９のアミノ酸配列を含み；及び（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３は配列番号９０のアミノ酸配列を含み；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０１５９】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、ＣＤＲのセット：ＶＨ−ＣＤＲ１、ＶＨ−ＣＤＲ２、及びＶＨ−ＣＤＲ３を含み、その際、そのＣＤＲのセットは、（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号１０２のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号１０３のアミノ酸配列を含み；及び（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号１０４のアミノ酸配列を含むＣＤＲの基準セットと同一であるか、またはそこから合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、または１０未満のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有し；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、ＣＤＲのセット：ＶＨ−ＣＤＲ１、ＶＨ−ＣＤＲ２、及びＶＨ−ＣＤＲ３を含み、その際、（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１は配列番号１０２のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２は配列番号１０３のアミノ酸配列を含み；及び（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３は配列番号１０４のアミノ酸配列を含み；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０１６０】
さらなる一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、ＣＤＲのセット：ＶＨ−ＣＤＲ１、ＶＨ−ＣＤＲ２、及びＶＨ−ＣＤＲ３を含み、その際、そのＣＤＲのセットは、（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号１１４のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号１１５のアミノ酸配列を含み；及び（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号１１６のアミノ酸配列を含むＣＤＲの基準セットと同一であるか、またはそこから合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、または１０未満のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有し；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、ＣＤＲのセット：ＶＨ−ＣＤＲ１、ＶＨ−ＣＤＲ２、及びＶＨ−ＣＤＲ３を含み、その際、（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１は配列番号１１４のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２は配列番号１１５のアミノ酸配列を含み；及び（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３は配列番号１１６のアミノ酸配列を含み；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０１６１】
さらなる一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、ＣＤＲのセット：ＶＨ−ＣＤＲ１、ＶＨ−ＣＤＲ２、及びＶＨ−ＣＤＲ３を含み、その際、そのＣＤＲのセットは、（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号１２５のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号１２６のアミノ酸配列を含み；及び（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号１２７のアミノ酸配列を含むＣＤＲの基準セットと同一であるか、またはそこから合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、または１０未満のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有し；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、ＣＤＲのセット：ＶＨ−ＣＤＲ１、ＶＨ−ＣＤＲ２、及びＶＨ−ＣＤＲ３を含み、その際、（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１は配列番号１２５のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２は配列番号１２６のアミノ酸配列を含み；及び（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３は配列番号１２７のアミノ酸配列を含み；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０１６２】
さらなる一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、ＣＤＲのセット：ＶＨ−ＣＤＲ１、ＶＨ−ＣＤＲ２、及びＶＨ−ＣＤＲ３を含み、その際、そのＣＤＲのセットは、（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１が配列番号１３７のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２が配列番号１３８のアミノ酸配列を含み；及び（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３が配列番号１３９のアミノ酸配列を含むＣＤＲの基準セットと同一であるか、またはそこから合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、または１０未満のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有し；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、ＣＤＲのセット：ＶＨ−ＣＤＲ１、ＶＨ−ＣＤＲ２、及びＶＨ−ＣＤＲ３を含み、その際、（ｉ）ＶＨ−ＣＤＲ１は配列番号１３７のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ２は配列番号１３８のアミノ酸配列を含み；及び（ｉｉｉ）ＶＨ−ＣＤＲ３は配列番号１３９のアミノ酸配列を含み；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０１６３】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、ＣＤＲのセット：ＶＬ−ＣＤＲ１、ＶＬ−ＣＤＲ２、及びＶＬ−ＣＤＲ３を含み、その際、そのＣＤＲのセットは、（ｉ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号１０のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号１１のアミノ酸配列を含み；及び（ｉｉｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号１２のアミノ酸配列を含むＣＤＲの基準セットと同一であるか、またはそこから合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、または１０未満のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有し；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、ＣＤＲのセット：ＶＬ−ＣＤＲ１、ＶＬ−ＣＤＲ２、及びＶＬ−ＣＤＲ３を含み、その際、（ｉ）ＶＬ−ＣＤＲ１は配列番号１０のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＬ−ＣＤＲ２は配列番号１１のアミノ酸配列を含み；及び（ｉｉｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３は配列番号１２のアミノ酸配列を含み；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０１６４】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、ＣＤＲのセット：ＶＬ−ＣＤＲ１、ＶＬ−ＣＤＲ２、及びＶＬ−ＣＤＲ３を含み、その際、そのＣＤＲのセットは、（ｉ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号２８のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号２９のアミノ酸配列を含み；及び（ｉｉｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号３０のアミノ酸配列を含むＣＤＲの基準セットと同一であるか、またはそこから合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、または１０未満のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有し；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、ＣＤＲのセット：ＶＬ−ＣＤＲ１、ＶＬ−ＣＤＲ２、及びＶＬ−ＣＤＲ３を含み、その際、（ｉ）ＶＬ−ＣＤＲ１は配列番号２８のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＬ−ＣＤＲ２は配列番号２９のアミノ酸配列を含み；及び（ｉｉｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３は配列番号３０のアミノ酸配列を含み；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０１６５】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、ＣＤＲのセット：ＶＬ−ＣＤＲ１、ＶＬ−ＣＤＲ２、及びＶＬ−ＣＤＲ３を含み、その際、そのＣＤＲのセットは、（ｉ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号４６のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号４７のアミノ酸配列を含み；及び（ｉｉｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号４８のアミノ酸配列を含むＣＤＲの基準セットと同一であるか、またはそこから合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、または１０未満のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有し；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、ＣＤＲのセット：ＶＬ−ＣＤＲ１、ＶＬ−ＣＤＲ２、及びＶＬ−ＣＤＲ３を含み、その際、（ｉ）ＶＬ−ＣＤＲ１は配列番号４６のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＬ−ＣＤＲ２は配列番号４７のアミノ酸配列を含み；及び（ｉｉｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３は配列番号４８のアミノ酸配列を含み；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０１６６】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、ＣＤＲのセット：ＶＬ−ＣＤＲ１、ＶＬ−ＣＤＲ２、及びＶＬ−ＣＤＲ３を含み、その際、そのＣＤＲのセットは、（ｉ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号６４のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号６５のアミノ酸配列を含み；及び（ｉｉｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号６６のアミノ酸配列を含むＣＤＲの基準セットと同一であるか、またはそこから合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、または１０未満のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有し；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、ＣＤＲのセット：ＶＬ−ＣＤＲ１、ＶＬ−ＣＤＲ２、及びＶＬ−ＣＤＲ３を含み、その際、（ｉ）ＶＬ−ＣＤＲ１は配列番号６４のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＬ−ＣＤＲ２は配列番号６５のアミノ酸配列を含み；及び（ｉｉｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３は配列番号６６のアミノ酸配列を含み；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０１６７】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、ＣＤＲのセット：ＶＬ−ＣＤＲ１、ＶＬ−ＣＤＲ２、及びＶＬ−ＣＤＲ３を含み、その際、そのＣＤＲのセットは、（ｉ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号９５のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号９６のアミノ酸配列を含み；及び（ｉｉｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号９７のアミノ酸配列を含むＣＤＲの基準セットと同一であるか、またはそこから合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、または１０未満のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有し；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、ＣＤＲのセット：ＶＬ−ＣＤＲ１、ＶＬ−ＣＤＲ２、及びＶＬ−ＣＤＲ３を含み、その際、（ｉ）ＶＬ−ＣＤＲ１は配列番号９５のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＬ−ＣＤＲ２は配列番号９６のアミノ酸配列を含み；及び（ｉｉｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３は配列番号９７のアミノ酸配列を含み；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０１６８】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、ＣＤＲのセット：ＶＬ−ＣＤＲ１、ＶＬ−ＣＤＲ２、及びＶＬ−ＣＤＲ３を含み、その際、そのＣＤＲのセットは、（ｉ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号１０７のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号１０８のアミノ酸配列を含み；及び（ｉｉｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号１０９のアミノ酸配列を含むＣＤＲの基準セットと同一であるか、またはそこから合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、または１０未満のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有し；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、ＣＤＲのセット：ＶＬ−ＣＤＲ１、ＶＬ−ＣＤＲ２、及びＶＬ−ＣＤＲ３を含み、その際、（ｉ）ＶＬ−ＣＤＲ１は配列番号１０７のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＬ−ＣＤＲ２は配列番号１０８のアミノ酸配列を含み；及び（ｉｉｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３は配列番号１０９のアミノ酸配列を含み；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０１６９】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、ＣＤＲのセット：ＶＬ−ＣＤＲ１、ＶＬ−ＣＤＲ２、及びＶＬ−ＣＤＲ３を含み、その際、そのＣＤＲのセットは、（ｉ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号１２１のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号１２２のアミノ酸配列を含み；及び（ｉｉｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号１２３のアミノ酸配列を含むＣＤＲの基準セットと同一であるか、またはそこから合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、または１０未満のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有し；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、ＣＤＲのセット：ＶＬ−ＣＤＲ１、ＶＬ−ＣＤＲ２、及びＶＬ−ＣＤＲ３を含み、その際、（ｉ）ＶＬ−ＣＤＲ１は配列番号１２１のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＬ−ＣＤＲ２は配列番号１２２のアミノ酸配列を含み；及び（ｉｉｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３は配列番号１２３のアミノ酸配列を含み；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０１７０】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、ＣＤＲのセット：ＶＬ−ＣＤＲ１、ＶＬ−ＣＤＲ２、及びＶＬ−ＣＤＲ３を含み、その際、そのＣＤＲのセットは、（ｉ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号１３２のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号１３３のアミノ酸配列を含み；及び（ｉｉｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号１３４のアミノ酸配列を含むＣＤＲの基準セットと同一であるか、またはそこから合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、または１０未満のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有し；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、ＣＤＲのセット：ＶＬ−ＣＤＲ１、ＶＬ−ＣＤＲ２、及びＶＬ−ＣＤＲ３を含み、その際、（ｉ）ＶＬ−ＣＤＲ１は配列番号１３２のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＬ−ＣＤＲ２は配列番号１３３のアミノ酸配列を含み；及び（ｉｉｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３は配列番号１３４のアミノ酸配列を含み；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０１７１】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、ＣＤＲのセット：ＶＬ−ＣＤＲ１、ＶＬ−ＣＤＲ２、及びＶＬ−ＣＤＲ３を含み、その際、そのＣＤＲのセットは、（ｉ）ＶＬ−ＣＤＲ１が配列番号１４５のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＬ−ＣＤＲ２が配列番号１４６のアミノ酸配列を含み；及び（ｉｉｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３が配列番号１４７のアミノ酸配列を含むＣＤＲの基準セットと同一であるか、またはそこから合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、または１０未満のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有し；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、ＣＤＲのセット：ＶＬ−ＣＤＲ１、ＶＬ−ＣＤＲ２、及びＶＬ−ＣＤＲ３を含み、その際、（ｉ）ＶＬ−ＣＤＲ１は配列番号１４５のアミノ酸配列を含み；（ｉｉ）ＶＬ−ＣＤＲ２は配列番号１４６のアミノ酸配列を含み；及び（ｉｉｉ）ＶＬ−ＣＤＲ３は配列番号１４７のアミノ酸配列を含み；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０１７２】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、本明細書において開示するＶＨ−ＣＤＲ３またはＶＬ−ＣＤＲ３配列を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、表１Ａに開示されているＶＨ−ＣＤＲ３またはＶＬ−ＣＤＲ３配列を含む。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、本明細書において開示するＶＨ−ＣＤＲ３及びＶＬ−ＣＤＲ３配列を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、表１Ａに開示されているＶＨ−ＣＤＲ３及びＶＬ−ＣＤＲ３配列を含む。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、表１Ｂに開示されているＶＨ−ＣＤＲ３またはＶＬ−ＣＤＲ３配列を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、表１Ｂに開示されているＶＨ−ＣＤＲ３及びＶＬ−ＣＤＲ３配列を含む。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、表３に開示されているＶＨ−ＣＤＲ３またはＶＬ−ＣＤＲ３配列を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、表３に開示されているＶＨ−ＣＤＲ３及びＶＬ−ＣＤＲ３配列を含む。
【０１７３】
一部の実施形態では、本開示は、配列番号３のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ３を含むＡＬＫ７結合性タンパク質を提供する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号３のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ３及び配列番号２のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ２を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号３のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ３、配列番号２のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ２、及び配列番号１のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ１を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０１７４】
一部の実施形態では、本開示は、配列番号２１のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ３を含むＡＬＫ７結合性タンパク質を提供する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号２１のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ３及び配列番号２０のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ２を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号２１のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ３、配列番号２０のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ２、及び配列番号１９のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ１を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０１７５】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号３９のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ３を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号３９のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ３及び配列番号３８のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ２を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号３９のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ３、配列番号３８のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ２、及び配列番号３７のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ１を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０１７６】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号５７のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ３を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号５７のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ３及び配列番号５６のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ２を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号５７のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ３、配列番号５６のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ２、及び配列番号５５のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ１を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０１７７】
さらなる実施形態では、本開示は、配列番号１のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ１を含むＡＬＫ７結合性タンパク質を提供する。さらなる実施形態では、本開示は、配列番号１のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ１及び配列番号２のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ２を含むＡＬＫ７結合性タンパク質を提供する。さらなる実施形態では、本開示は、配列番号１のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ１、配列番号２のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ２、及び配列番号３または２１のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ３を含むＡＬＫ７結合性タンパク質を提供する。
【０１７８】
さらなる実施形態では、本開示は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ２を含むＡＬＫ７結合性タンパク質を提供する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ２及び配列番号１のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ１を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ２、配列番号１のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ１、及び配列番号３または２１のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ３を含む。
【０１７９】
さらなる実施形態では、本開示は、配列番号３８のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ１を含むＡＬＫ７結合性タンパク質を提供する。さらなる実施形態では、本開示は、配列番号３７のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ１及び配列番号３８のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ２を含むＡＬＫ７結合性タンパク質を提供する。さらなる実施形態では、本開示は、配列番号３７のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ１、配列番号３８のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ２、及び配列番号３９または５７のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ３を含むＡＬＫ７結合性タンパク質を提供する。
【０１８０】
さらなる実施形態では、本開示は、配列番号３８のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ２を含むＡＬＫ７結合性タンパク質を提供する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号３８のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ２及び配列番号３７のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ１を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号３８のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ２、配列番号３７のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ１、及び配列番号３９または５７のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ３を含む。
【０１８１】
一部の実施形態では、本開示は、配列番号９０のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ３を含むＡＬＫ７結合性タンパク質を提供する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号９０のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ３及び配列番号８９のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ２を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号９０のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ３、配列番号８９のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ２、及び配列番号８８のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ１を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０１８２】
一部の実施形態では、本開示は、配列番号１０４のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ３を含むＡＬＫ７結合性タンパク質を提供する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号１０４のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ３及び配列番号１０３のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ２を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号１０４のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ３、配列番号１０３のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ２、及び配列番号１０２のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ１を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０１８３】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号１１６のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ３を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号１１６のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ３及び配列番号１１５のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ２を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号１１６のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ３、配列番号１１５のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ２、及び配列番号１１４のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ１を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０１８４】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号１２７のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ３を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号１２７のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ３及び配列番号１２６のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ２を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号１２７のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ３、配列番号１２６のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ２、及び配列番号１２５のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ１を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０１８５】
一部の実施形態では、本開示は、配列番号１６４のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ３を含むＡＬＫ７結合性タンパク質を提供する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号１６４のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ３及び配列番号１３８または１６３のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ２を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号１６４のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ３、配列番号１０３のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ２、及び配列番号１または１３７のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ１を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０１８６】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号１３９のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ３を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号１３９のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ３及び配列番号１３８のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ２を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号１３９のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ３、配列番号１３８のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ２、及び配列番号１３７のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ１を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０１８７】
さらなる実施形態では、本開示は、配列番号８８のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ１を含むＡＬＫ７結合性タンパク質を提供する。さらなる実施形態では、本開示は、配列番号８８のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ１及び配列番号８９のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ２を含むＡＬＫ７結合性タンパク質を提供する。さらなる実施形態では、本開示は、配列番号８８のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ１、配列番号８９のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ２、及び配列番号９０のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ３を含むＡＬＫ７結合性タンパク質を提供する。
【０１８８】
さらなる実施形態では、本開示は、配列番号８９のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ２を含むＡＬＫ７結合性タンパク質を提供する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号８９のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ２及び配列番号８８のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ１を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号８９のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ２、配列番号８８のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ１、及び配列番号９０のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ３を含む。
【０１８９】
さらなる実施形態では、本開示は、配列番号１０２のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ１を含むＡＬＫ７結合性タンパク質を提供する。さらなる実施形態では、本開示は、配列番号１０２のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ１及び配列番号１０３のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ２を含むＡＬＫ７結合性タンパク質を提供する。さらなる実施形態では、本開示は、配列番号１０２のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ１、配列番号１０３のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ２、及び配列番号１０４のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ３を含むＡＬＫ７結合性タンパク質を提供する。
【０１９０】
さらなる実施形態では、本開示は、配列番号１０３のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ２を含むＡＬＫ７結合性タンパク質を提供する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号１０３のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ２及び配列番号１０２のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ１を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号１０３のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ２、配列番号１０２のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ１、及び配列番号１０４のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ３を含む。
【０１９１】
さらなる実施形態では、本開示は、配列番号１１４のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ１を含むＡＬＫ７結合性タンパク質を提供する。さらなる実施形態では、本開示は、配列番号１１４のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ１及び配列番号１１５のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ２を含むＡＬＫ７結合性タンパク質を提供する。さらなる実施形態では、本開示は、配列番号１１４のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ１、配列番号１１５のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ２、及び配列番号１１６のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ３を含むＡＬＫ７結合性タンパク質を提供する。
【０１９２】
さらなる実施形態では、本開示は、配列番号１１５のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ２を含むＡＬＫ７結合性タンパク質を提供する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号１１５のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ２及び配列番号１１４のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ１を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号１１５のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ２、配列番号１１４のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ１、及び配列番号１１６のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ３を含む。
【０１９３】
さらなる実施形態では、本開示は、配列番号１２５のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ１を含むＡＬＫ７結合性タンパク質を提供する。さらなる実施形態では、本開示は、配列番号１２５のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ１及び配列番号１２６のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ２を含むＡＬＫ７結合性タンパク質を提供する。さらなる実施形態では、本開示は、配列番号１２５のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ１、配列番号１２６のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ２、及び配列番号１２７のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ３を含むＡＬＫ７結合性タンパク質を提供する。
【０１９４】
さらなる実施形態では、本開示は、配列番号１２６のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ２を含むＡＬＫ７結合性タンパク質を提供する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号１２６のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ２及び配列番号１２５のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ１を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号１２６のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ２、配列番号１２５のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ１、及び配列番号１２７のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ３を含む。
【０１９５】
さらなる実施形態では、本開示は、配列番号１３７のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ１を含むＡＬＫ７結合性タンパク質を提供する。さらなる実施形態では、本開示は、配列番号１３７のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ１及び配列番号１３８のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ２を含むＡＬＫ７結合性タンパク質を提供する。さらなる実施形態では、本開示は、配列番号１３７のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ１、配列番号１３８のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ２、及び配列番号１３９のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ３を含むＡＬＫ７結合性タンパク質を提供する。
【０１９６】
さらなる実施形態では、本開示は、配列番号１３８のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ２を含むＡＬＫ７結合性タンパク質を提供する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号１３８のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ２及び配列番号１３７のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ１を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号１３８のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ２、配列番号１３７のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ１、及び配列番号１３９のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＣＤＲ３を含む。
【０１９７】
さらなる実施形態では、本開示は、配列番号１２のアミノ酸配列を有するＶＬ−ＣＤＲ３を含むＡＬＫ７結合性タンパク質を提供する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号１２のアミノ酸配列を有するＶＬ−ＣＤＲ３及び配列番号１１のアミノ酸配列を有するＶＬ−ＣＤＲ２を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号１２のアミノ酸配列を有するＶＬ−ＣＤＲ３、配列番号１１のアミノ酸配列を有するＶＬ−ＣＤＲ２、及び配列番号１０のアミノ酸配列を有するＶＬ−ＣＤＲ１を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０１９８】
さらなる実施形態では、本開示は、配列番号３０のアミノ酸配列を有するＶＬ−ＣＤＲ３を含むＡＬＫ７結合性タンパク質を提供する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号３０のアミノ酸配列を有するＶＬ−ＣＤＲ３及び配列番号２９のアミノ酸配列を有するＶＬ−ＣＤＲ２を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号３０のアミノ酸配列を有するＶＬ−ＣＤＲ３、配列番号２９のアミノ酸配列を有するＶＬ−ＣＤＲ２、及び配列番号２８のアミノ酸配列を有するＶＬ−ＣＤＲ１を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０１９９】
さらなる実施形態では、本開示は、配列番号４８のアミノ酸配列を有するＶＬ−ＣＤＲ３を含むＡＬＫ７結合性タンパク質を提供する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号４８のアミノ酸配列を有するＶＬ−ＣＤＲ３及び配列番号４７のアミノ酸配列を有するＶＬ−ＣＤＲ２を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号４８のアミノ酸配列を有するＶＬ−ＣＤＲ３、配列番号４７のアミノ酸配列を有するＶＬ−ＣＤＲ２、及び配列番号４６のアミノ酸配列を有するＶＬ−ＣＤＲ１を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０２００】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号６６のアミノ酸配列を有するＶＬ−ＣＤＲ３を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号６６のアミノ酸配列を有するＶＬ−ＣＤＲ３及び配列番号６５のアミノ酸配列を有するＶＬ−ＣＤＲ２を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号６６のアミノ酸配列を有するＶＬ−ＣＤＲ３、配列番号６５のアミノ酸配列を有するＶＬ−ＣＤＲ２、及び配列番号６４のアミノ酸配列を有するＶＬ−ＣＤＲ１を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０２０１】
さらなる実施形態では、本開示は、配列番号９７のアミノ酸配列を有するＶＬ−ＣＤＲ３を含むＡＬＫ７結合性タンパク質を提供する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号９７のアミノ酸配列を有するＶＬ−ＣＤＲ３及び配列番号９６のアミノ酸配列を有するＶＬ−ＣＤＲ２を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号９７のアミノ酸配列を有するＶＬ−ＣＤＲ３、配列番号９６のアミノ酸配列を有するＶＬ−ＣＤＲ２、及び配列番号９５のアミノ酸配列を有するＶＬ−ＣＤＲ１を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０２０２】
さらなる実施形態では、本開示は、配列番号１０９のアミノ酸配列を有するＶＬ−ＣＤＲ３を含むＡＬＫ７結合性タンパク質を提供する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号１０９のアミノ酸配列を有するＶＬ−ＣＤＲ３及び配列番号１０８のアミノ酸配列を有するＶＬ−ＣＤＲ２を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号１０９のアミノ酸配列を有するＶＬ−ＣＤＲ３、配列番号１０８のアミノ酸配列を有するＶＬ−ＣＤＲ２、及び配列番号１０７のアミノ酸配列を有するＶＬ−ＣＤＲ１を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０２０３】
さらなる実施形態では、本開示は、配列番号１２３のアミノ酸配列を有するＶＬ−ＣＤＲ３を含むＡＬＫ７結合性タンパク質を提供する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号１２３のアミノ酸配列を有するＶＬ−ＣＤＲ３及び配列番号１２２のアミノ酸配列を有するＶＬ−ＣＤＲ２を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号１２３のアミノ酸配列を有するＶＬ−ＣＤＲ３、配列番号１２２のアミノ酸配列を有するＶＬ−ＣＤＲ２、及び配列番号１２１のアミノ酸配列を有するＶＬ−ＣＤＲ１を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０２０４】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号１３４のアミノ酸配列を有するＶＬ−ＣＤＲ３を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号１３４のアミノ酸配列を有するＶＬ−ＣＤＲ３及び配列番号１３３のアミノ酸配列を有するＶＬ−ＣＤＲ２を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号１３４のアミノ酸配列を有するＶＬ−ＣＤＲ３、配列番号１３３のアミノ酸配列を有するＶＬ−ＣＤＲ２、及び配列番号１３２のアミノ酸配列を有するＶＬ−ＣＤＲ１を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０２０５】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号１４７のアミノ酸配列を有するＶＬ−ＣＤＲ３を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号１４７のアミノ酸配列を有するＶＬ−ＣＤＲ３及び配列番号１４６のアミノ酸配列を有するＶＬ−ＣＤＲ２を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号１４７のアミノ酸配列を有するＶＬ−ＣＤＲ３、配列番号１４６のアミノ酸配列を有するＶＬ−ＣＤＲ２、及び配列番号１４５のアミノ酸配列を有するＶＬ−ＣＤＲ１を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０２０６】
さらなる実施形態では、本開示は、配列番号７５、７８、８１、または８４のアミノ酸配列を有するＶＨ抗原結合性ドメイン３（ＡＢＤ３）を含むＡＬＫ７結合性タンパク質を提供する。一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号７５のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＡＢＤ３を含む。一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号７５のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＡＢＤ３及び配列番号７４のアミノ酸配列を有するＶＨ抗原結合性ドメイン２（ＶＨ−ＡＢＤ２）を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号７５のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＡＢＤ３、配列番号７４のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＡＢＤ２、及び配列番号７３のアミノ酸配列を有するＶＨ抗原結合性ドメイン１（ＶＨ−ＡＢＤ１）を含む。一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号７５のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＡＢＤ３を含む。一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号７５のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＡＢＤ３及び配列番号７４のアミノ酸配列を有するＶＨ抗原結合性ドメイン２（ＶＨ−ＡＢＤ２）を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号７５のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＡＢＤ３、配列番号７４のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＡＢＤ２、及び配列番号７３のアミノ酸配列を有するＶＨ抗原結合性ドメイン１（ＶＨ−ＡＢＤ１）を含む。一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号７８のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＡＢＤ３を含む。一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号７８のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＡＢＤ３及び配列番号７７のアミノ酸配列を有するＶＨ抗原結合性ドメイン２（ＶＨ−ＡＢＤ２）を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号７８のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＡＢＤ３、配列番号７７のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＡＢＤ２、及び配列番号７６のアミノ酸配列を有するＶＨ抗原結合性ドメイン１（ＶＨ−ＡＢＤ１）を含む。一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号８１のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＡＢＤ３を含む。一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号８１のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＡＢＤ３及び配列番号８０のアミノ酸配列を有するＶＨ抗原結合性ドメイン２（ＶＨ−ＡＢＤ２）を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号８１のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＡＢＤ３、配列番号８０のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＡＢＤ２、及び配列番号７９のアミノ酸配列を有するＶＨ抗原結合性ドメイン１（ＶＨ−ＡＢＤ１）を含む。一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号８４のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＡＢＤ３を含む。一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号８４のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＡＢＤ３及び配列番号８３のアミノ酸配列を有するＶＨ抗原結合性ドメイン２（ＶＨ−ＡＢＤ２）を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号８４のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＡＢＤ３、配列番号８３のアミノ酸配列を有するＶＨ−ＡＢＤ２、及び配列番号８２のアミノ酸配列を有するＶＨ抗原結合性ドメイン１（ＶＨ−ＡＢＤ１）を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０２０７】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、本明細書において開示する基準ＶＨまたはＶＬと比較して、合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＨまたはＶＬを含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、表１Ｂに開示されている基準ＶＨまたはＶＬと比較して、合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＨまたはＶＬを含む。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、本明細書において開示する基準ＶＨ及びＶＬ対と比較して、合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＨ及びＶＬ対を含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、表１Ｂに開示されている基準ＶＨ及びＶＬ対と比較して、合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＨ及びＶＬ対を含む。
【０２０８】
さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、表３に開示されている基準ＶＨまたはＶＬと比較して、合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＨまたはＶＬを含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、表１Ｂまたは表３に開示されている基準ＶＨ及びＶＬ対と比較して、合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＨ及びＶＬ対を含む。
【０２０９】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、（ａ）（ｉ）配列番号４からなる群から選択される基準ＶＨ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＨ配列、及び（ｉｉ）配列番号１３の基準ＶＬ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＬ配列；（ｂ）（ｉ）配列番号２２の基準ＶＨ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＨ配列、及び（ｉｉ）配列番号３１の基準ＶＬ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＬ配列；（ｃ）（ｉ）配列番号４０、１７０、または１７１の基準ＶＨ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＨ配列、及び（ｉｉ）配列番号４９の基準ＶＬ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＬ配列；ならびに（ｄ）（ｉ）配列番号５８の基準ＶＨ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＨ配列、及び（ｉｉ）配列番号６７の基準ＶＬ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＬ配列からなる群から選択されるＶＨ及びＶＬ対を含み；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０２１０】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、（ａ）（ｉ）配列番号９１からなる群から選択される基準ＶＨ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＨ配列、及び（ｉｉ）配列番号９８の基準ＶＬ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＬ配列；（ｂ）（ｉ）配列番号１０５の基準ＶＨ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＨ配列、及び（ｉｉ）配列番号１１０の基準ＶＬ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＬ配列；（ｃ）（ｉ）配列番号１１７の基準ＶＨ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＨ配列、及び（ｉｉ）配列番号１２４の基準ＶＬ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＬ配列；（ｄ）（ｉ）配列番号１２８の基準ＶＨ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＨ配列、及び（ｉｉ）配列番号１３５の基準ＶＬ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＬ配列；ならびに（ｅ）（ｉ）配列番号１４０の基準ＶＨ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＨ配列、及び（ｉｉ）配列番号１４８の基準ＶＬ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＬ配列からなる群から選択されるＶＨ及びＶＬ対を含み；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０２１１】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、（ａ）（ｉ）配列番号１５２からなる群から選択される基準ＶＨ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＨ配列、及び（ｉｉ）配列番号９８の基準ＶＬ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＬ配列；（ｂ）（ｉ）配列番号１５９の基準ＶＨ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＨ配列、及び（ｉｉ）配列番号１１０の基準ＶＬ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＬ配列；ならびに（ｃ）（ｉ）配列番号１６５の基準ＶＨ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＨ配列、及び（ｉｉ）配列番号１７１の基準ＶＬ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＬ配列からなる群から選択されるＶＨ及びＶＬ対を含み；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０２１２】
さらなる一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＶＨ配列が、配列番号４の基準ＶＨ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有し；かつＶＬ配列が、配列番号１３の基準ＶＬ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＨ及びＶＬ対を含み；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０２１３】
さらなる一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＶＨ配列が配列番号２２の基準ＶＨ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有し；かつＶＬ配列が配列番号３１の基準ＶＬ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＨ及びＶＬ対を含み；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０２１４】
さらなる一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＶＨ配列が配列番号４０の基準ＶＨ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有し；かつＶＬ配列が配列番号４９の基準ＶＬ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＨ及びＶＬ対を含み；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０２１５】
さらなる一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＶＨ配列が配列番号５８の基準ＶＨ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有し、かつＶＬ配列が配列番号６７の基準ＶＬ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＨ及びＶＬ対を含み；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０２１６】
さらなる一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＶＨ配列が配列番号９１の基準ＶＨ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有し；かつＶＬ配列が配列番号９８の基準ＶＬ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＨ及びＶＬ対を含み；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０２１７】
さらなる一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＶＨ配列が配列番号１０５の基準ＶＨ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有し；かつＶＬ配列が配列番号１１０の基準ＶＬ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＨ及びＶＬ対を含み；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０２１８】
さらなる一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＶＨ配列が配列番号１１７の基準ＶＨ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有し；かつＶＬ配列が配列番号１２４の基準ＶＬ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＨ及びＶＬ対を含み；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０２１９】
さらなる一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＶＨ配列が配列番号１２８の基準ＶＨ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有し、かつＶＬ配列が配列番号１３５の基準ＶＬ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＨ及びＶＬ対を含み；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０２２０】
さらなる一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＶＨ配列が配列番号１４０の基準ＶＨ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有し、かつＶＬ配列が配列番号１４８の基準ＶＬ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＨ及びＶＬ対を含み；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０２２１】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、（ａ）配列番号４、（ｂ）配列番号２２、（ｃ）配列番号４０、及び（ｄ）配列番号５８からなる群から選択される基準ＶＨ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＨ配列を含み；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０２２２】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、（ａ）配列番号９１、（ｂ）配列番号１０５、（ｃ）配列番号１１７、（ｄ）配列番号１２８、及び（ｅ）配列番号１４０からなる群から選択される基準ＶＨ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＨ配列を含み；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０２２３】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、（ａ）配列番号１３；（ｂ）配列番号３１；（ｃ）配列番号４９；及び（ｄ）配列番号６７の基準ＶＬ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＬ配列を含み；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０２２４】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、（ａ）配列番号９８；（ｂ）配列番号１１０；（ｃ）配列番号１２４；（ｄ）配列番号１３５、及び（ｅ）配列番号１４８の基準ＶＬ配列から合計１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０、１５未満、または０のアミノ酸置換、欠失、及び／または挿入を有するＶＬ配列を含み；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０２２５】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、本明細書において開示する基準ＶＨまたはＶＬに対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＨまたはＶＬを含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、表１Ａに開示されている基準ＶＨまたはＶＬに対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＨまたはＶＬを含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、表１Ｂに開示されている基準ＶＨまたはＶＬに対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＨまたはＶＬを含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、表３に開示されている基準ＶＨまたはＶＬに対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＨまたはＶＬを含む。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、本明細書において開示する基準ＶＨ及びＶＬに対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＨ及びＶＬを含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、表１Ａに開示されている基準ＶＨまたはＶＬに対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＨ及びＶＬを含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、表１Ｂに開示されている基準ＶＨ及びＶＬに対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＨ及びＶＬを含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、表３に開示されている基準ＶＨ及びＶＬに対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＨ及びＶＬを含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０２２６】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、（ａ）配列番号４に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性；（ｂ）配列番号２２に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性；（ｃ）配列番号４０に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＨ；及び（ｄ）配列番号５８に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＨを含む；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０２２７】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、（ａ）配列番号９１に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性；（ｂ）配列番号１０５に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性；（ｃ）配列番号１１７に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＨ；（ｄ）配列番号１２８に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＨ；及び（ｅ）配列番号１４０に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＨを含み；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０２２８】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、（ａ）配列番号１３に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性；（ｂ）配列番号３１に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性；（ｃ）配列番号４９に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性；及び（ｄ）配列番号６７に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＬを含み；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０２２９】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、（ａ）配列番号９８に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性；（ｂ）配列番号１１０に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性；（ｃ）配列番号１２４に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性；（ｄ）配列番号１３５に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性；及び（ｅ）配列番号１４８に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＬを含み；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０２３０】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、（ａ）（ｉ）配列番号４に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＨ、及び（ｉｉ）配列番号１３に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＬ；（ｂ）（ｉ）配列番号２２に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＨ、及び（ｉｉ）配列番号３１に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＬ；（ｃ）（ｉ）配列番号４０に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＨ、及び（ｉｉ）配列番号４９に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＬ；ならびに（ｄ）（ｉ）配列番号５８に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＨ、及び（ｉｉ）配列番号６７に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＬからなる群から選択されるＶＨ及びＶＬ対を含み；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０２３１】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、（ａ）（ｉ）配列番号１５２に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＨ、及び（ｉｉ）配列番号９８に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＬ；（ｂ）（ｉ）配列番号１５９に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＨ、及び（ｉｉ）配列番号１１０に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＬ；ならびに（ｃ）（ｉ）配列番号１６５に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＨ、及び（ｉｉ）配列番号１７１に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＬからなる群から選択されるＶＨ及びＶＬ対を含み；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０２３２】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、（ａ）（ｉ）配列番号９１に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＨ、及び（ｉｉ）配列番号９８に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＬ；（ｂ）（ｉ）配列番号１０５に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＨ、及び（ｉｉ）配列番号１１０に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＬ；（ｃ）（ｉ）配列番号１１７に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＨ、及び（ｉｉ）配列番号１２４に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＬ；（ｄ）（ｉ）配列番号１２８に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＨ、及び（ｉｉ）配列番号１３５に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＬ；ならびに（ｅ）（ｉ）配列番号１４０に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＨ、及び（ｉｉ）配列番号１４８に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＬからなる群から選択されるＶＨ及びＶＬ対を含み；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０２３３】
一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、配列番号４に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＨ、及び配列番号１３に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＬを含む。一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、配列番号４のＶＨ及び配列番号１３のＶＬを含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０２３４】
一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、配列番号２２に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＨ、及び配列番号３１に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＬを含む。一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、配列番号２２のＶＨ及び配列番号３１のＶＬを含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０２３５】
一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、配列番号４０に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＨ、及び配列番号４９に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＬを含む。一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、配列番号４０のＶＨ及び配列番号４９のＶＬを含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０２３６】
一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、配列番号５８に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＨ、及び配列番号６７に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＬを含む。一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、配列番号５８のＶＨ及び配列番号６７のＶＬを含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０２３７】
一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、配列番号９１に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＨ、及び配列番号９８に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＬを含む。一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、配列番号９１のＶＨ及び配列番号９８のＶＬを含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０２３８】
一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、配列番号１０５に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＨ、及び配列番号１１０に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＬを含む。一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、配列番号１０５のＶＨ及び配列番号１１０のＶＬを含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０２３９】
一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、配列番号１１７に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＨ、及び配列番号１２４に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＬを含む。一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、配列番号１１７のＶＨ及び配列番号１２４のＶＬを含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０２４０】
一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、配列番号１２８に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＨ、及び配列番号１３５に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＬを含む。一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、配列番号１２８のＶＨ及び配列番号１３５のＶＬを含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０２４１】
一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、配列番号１４０に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＨ、及び配列番号１４８に対して少なくとも９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有するＶＬを含む。一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、配列番号１４０のＶＨ及び配列番号１４８のＶＬを含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０２４２】
さらなる一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、（ａ）配列番号４のＶＨ配列及び配列番号１３のＶＬ配列；（ｂ）配列番号２２のＶＨ配列、及び配列番号３１のＶＬ配列；（ｃ）配列番号４０のＶＨ配列、及び配列番号４９のＶＬ配列；ならびに（ｄ）配列番号５８のＶＨ配列及び配列番号６７のＶＬ配列からなる群から選択されるＶＨ及びＶＬ対を含み；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩＡ／Ｂを発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０２４３】
さらなる一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、（ａ）配列番号９１のＶＨ配列及び配列番号９８のＶＬ配列；（ｂ）配列番号１０５のＶＨ配列、及び配列番号１１０のＶＬ配列；（ｃ）配列番号１１７のＶＨ配列、及び配列番号１２４のＶＬ配列；（ｄ）配列番号１２８のＶＨ配列及び配列番号１３５のＶＬ配列；ならびに（ｅ）配列番号１４０のＶＨ配列及び配列番号１４８のＶＬ配列からなる群から選択されるＶＨ及びＶＬ対を含み；かつそのタンパク質は、ＡＬＫ７に結合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩＡ／Ｂを発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０２４４】
追加の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、本明細書において開示するＶＨ及びＶＬ配列対を含む抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。追加の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ配列対を含む抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、配列番号４、２２、４０、または５８のＶＨを含む。追加の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、配列番号１３、３１、４９、または６７のＶＬを含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、配列番号４、２２、４０、または５８のＶＨ；及び配列番号１３、３１、４９、または６７のＶＬを含む。特定の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、本明細書において開示するＡＬＫ７結合性タンパク質と同じエピトープに結合する。追加の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、表１Ａに開示されているＡＬＫ７結合性タンパク質と同じエピトープに結合する。結合について基準ＡＬＫ７結合性タンパク質と競合する、及び／またはそれと同じＡＬＫ７のエピトープに結合するＡＬＫ７結合性タンパク質の能力は、本明細書において開示する、または別段に当技術分野で公知の技術を使用して容易に決定することができる。
【０２４５】
追加の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、表１Ｂに開示されているＶＨ及びＶＬ配列対を含む抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、配列番号１５２、１５９、または１６６のＶＨを含む。追加の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、配列番号９８、１１０、または１７１のＶＬを含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、配列番号１５２、１５９、または１６６のＶＨ；及び配列番号９８、１１０、または１７１のＶＬを含む。特定の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、本明細書において開示するＡＬＫ７結合性タンパク質と同じエピトープに結合する。追加の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、表１Ａに開示されているＡＬＫ７結合性タンパク質と同じエピトープに結合する。結合について基準ＡＬＫ７結合性タンパク質と競合する、及び／またはそれと同じＡＬＫ７のエピトープに結合するＡＬＫ７結合性タンパク質の能力は、本明細書において開示する、または別段に当技術分野で公知の技術を使用して容易に決定することができる。
【０２４６】
追加の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、表１Ｂまたは表３に開示されているＶＨ及びＶＬ配列対を含む抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、配列番号９１、１０５、１１７、１２８、または１４０のＶＨを含む。追加の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、配列番号９８、１１０、１２４、１３５、または１４８のＶＬを含む。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、配列番号９１、１０５、１１７、１２８、または１４０のＶＨ；及び配列番号９８、１１０、１２４、１３５、または１４８のＶＬを含む。特定の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、本明細書において開示するＡＬＫ７結合性タンパク質と同じエピトープに結合する。追加の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、表１Ａに開示されているＡＬＫ７結合性タンパク質と同じエピトープに結合する。追加の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、表１Ｂまたは表３に開示されているＡＬＫ７結合性タンパク質と同じエピトープに結合する。結合について基準ＡＬＫ７結合性タンパク質と競合する、及び／またはそれと同じＡＬＫ７のエピトープに結合するＡＬＫ７結合性タンパク質の能力は、本明細書において開示する、または別段に当技術分野で公知の技術を使用して容易に決定することができる。
【０２４７】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号４０のＶＨ配列及び配列番号４９のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号４０のＶＨ配列及び配列番号４９のＶＬ配列を含む抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号４０のＶＨ配列及び配列番号４９のＶＬ配列を含む抗体と同じＡＬＫ７のエピトープに結合する。
【０２４８】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号５８のＶＨ配列及び配列番号６７のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号５８のＶＨ配列及び配列番号６７のＶＬ配列を含む抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号５８のＶＨ配列及び配列番号６７のＶＬ配列を含む抗体と同じＡＬＫ７のエピトープに結合する。
【０２４９】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、抗体Ｊ０１のＶＨ及びＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号１５２のＶＨ配列及び配列番号９８のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号１５２のＶＨ配列及び配列番号９８のＶＬ配列を含む抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号１５２のＶＨ配列及び配列番号９８のＶＬ配列を含む抗体と同じＡＬＫ７のエピトープに結合する。
【０２５０】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、抗体Ｊ０２のＶＨ及びＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号９１のＶＨ配列及び配列番号９８のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号９１のＶＨ配列及び配列番号９８のＶＬ配列を含む抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号９１のＶＨ配列及び配列番号９８のＶＬ配列を含む抗体と同じＡＬＫ７のエピトープに結合する。
【０２５１】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、抗体Ｋ０１のＶＨ及びＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号１５９のＶＨ配列及び配列番号１１０のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号１５９のＶＨ配列及び配列番号１１０のＶＬ配列を含む抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号１５９のＶＨ配列及び配列番号１１０のＶＬ配列を含む抗体と同じＡＬＫ７のエピトープに結合する。
【０２５２】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、抗体Ｋ０２のＶＨ及びＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号１０５のＶＨ配列及び配列番号１１０のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号１０５のＶＨ配列及び配列番号１１０のＶＬ配列を含む抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号１０５のＶＨ配列及び配列番号１１０のＶＬ配列を含む抗体と同じＡＬＫ７のエピトープに結合する。
【０２５３】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、抗体Ｇ０４のＶＨ及びＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号４のＶＨ配列及び配列番号１３のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号４のＶＨ配列及び配列番号１３のＶＬ配列を含む抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号４のＶＨ配列及び配列番号１３のＶＬ配列を含む抗体と同じＡＬＫ７のエピトープに結合する。
【０２５４】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、抗体Ｇ０５のＶＨ及びＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号１１７のＶＨ配列及び配列番号１２４のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号１１７のＶＨ配列及び配列番号１２４のＶＬ配列を含む抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号１１７のＶＨ配列及び配列番号１２４のＶＬ配列を含む抗体と同じＡＬＫ７のエピトープに結合する。
【０２５５】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、抗体Ｃ０２のＶＨ及びＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号２２のＶＨ配列及び配列番号３１のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号２２のＶＨ配列及び配列番号３１のＶＬ配列を含む抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号２２のＶＨ配列及び配列番号３１のＶＬ配列を含む抗体と同じＡＬＫ７のエピトープに結合する。
【０２５６】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、抗体Ｃ０３のＶＨ及びＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号１２８のＶＨ配列及び配列番号１３５のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号１２８のＶＨ配列及び配列番号１３５のＶＬ配列を含む抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号１２８のＶＨ配列及び配列番号１３５のＶＬ配列を含む抗体と同じＡＬＫ７のエピトープに結合する。
【０２５７】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、抗体Ｌ０１のＶＨ及びＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号１６５のＶＨ配列及び配列番号１７１のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号１６５のＶＨ配列及び配列番号１７１のＶＬ配列を含む抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号１６５のＶＨ配列及び配列番号１７１のＶＬ配列を含む抗体と同じＡＬＫ７のエピトープに結合する。
【０２５８】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、抗体Ｌ０２のＶＨ及びＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号１４０のＶＨ配列及び配列番号１４８のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号１４０のＶＨ配列及び配列番号１４８のＶＬ配列を含む抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、配列番号１４０のＶＨ配列及び配列番号１４８のＶＬ配列を含む抗体と同じＡＬＫ７のエピトープに結合する。
【０２５９】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合する抗体である。一部の実施形態では、抗ＡＬＫ７抗体は、マウス抗体、ヒト化抗体、キメラ抗体、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、組換え抗体、多重特異性抗体、またはそれらの任意の組合せである。一部の実施形態では、抗ＡＬＫ７抗体は、Ｆｖ断片、Ｆａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）２断片、Ｆａｂ’断片、ｄｓＦｖ断片、ｓｃＦｖ断片、またはｓｃ（Ｆｖ）２断片である。
【０２６０】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、ＡＬＫ７−リガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、またはＮｏｄａｌ）の活性を遮断する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ）の活性を遮断する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、ＡＬＫ７リガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、またはＮｏｄａｌ）の活性と関連する脂肪形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、過剰体重、肥満または代謝障害と関連する１つまたは複数の疾患または状態を処置する、または寛解させる。一部の実施形態では、疾患または状態は、ＩＩ型糖尿病である。一部の実施形態では、疾患または状態は、高血圧である。一部の実施形態では、代謝障害は、脂質異常症、インスリン抵抗性、インスリン過剰血症または高血糖症である。
【０２６１】
特定の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、抗ＡＬＫ７抗体）は、ＡＬＫ７媒介性Ｓｍａｄシグナル伝達を減少させる。別の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解アッセイにおいて決定した場合に、白色及び／または褐色脂肪細胞における脂肪分解のＡＬＫ７媒介性阻害を５％〜１００％、１０％〜９５％、１０〜９０％、１０〜８５％、１０〜８０％、１０〜７５％、１０〜７０％、１０〜７５％、１０〜７０％、１０〜６０％、１０〜５５％、１０〜５０％、または１０〜４５％減弱させる。別の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解アッセイにおいて決定した場合に、白色及び／または褐色脂肪細胞における脂肪分解のＡＬＫ７媒介性阻害を少なくとも５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または９５％、または約１００％減少または低下させる。一部の実施形態では、脂肪分解アッセイを１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイをＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌ）からなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に結合し、過体重、肥満、インスリン抵抗性、糖尿病、アテローム硬化症、高血圧、炎症、及び／またはＮＡＦＬＤ（例えば、脂肪肝及び／またはＮＡＳＨ）と関連する１種または複数の状態を阻害する、または減少させる。
【０２６２】
特定の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、抗ＡＬＫ７抗体）は、ＡＬＫ７媒介性Ｓｍａｄシグナル伝達を減少させる。別の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、アクチビンＢ（５０ｎｇ／ｍｌ）の存在下で（例えば、本明細書において実施例で記載するとおりに）行われる脂肪分解阻害アッセイにおいて標準的な技術及び条件を使用して決定した場合に、白色脂肪細胞における脂肪分解のＡＬＫ７媒介性阻害を５％〜１００％、１０％〜９５％、１０〜９０％、１０〜８５％、１０〜８０％、１０〜７５％、１０〜７０％、１０〜７５％、１０〜７０％、１０〜６０％、１０〜５５％、１０〜５０％、または１０〜４５％阻害する。別の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、アクチビンＢ（５０ｎｇ／ｍｌ）の存在下で（例えば、本明細書において実施例で記載するとおりに）行われる脂肪分解阻害アッセイにおいて標準的な技術及び条件を使用して決定した場合に、白色脂肪細胞における脂肪分解のＡＬＫ７媒介性阻害を少なくとも５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または９５％、または約１００％減少または低下させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７に結合し、過体重、肥満、インスリン抵抗性、糖尿病、アテローム硬化症、高血圧、炎症、及び／またはＮＡＦＬＤ（例えば、脂肪肝及び／またはＮＡＳＨ）と関連する１種または複数の状態を阻害する、または減少させる。
【０２６３】
特定の実施形態では、本明細書に記載のＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、抗ＡＬＫ７抗体）によるＡＬＫ７活性の遮断は、過剰体重、インスリン抵抗性、肥満または糖尿病、例えば、高血圧、がん、ならびに神経障害、網膜障害、ならびに心臓血管、肺及び腎臓疾患と関連する１種または複数の状態を阻害する、または減少させる。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７の遮断は、代謝性疾患と関連する１種または複数の状態を阻害する、または減少させる。特定の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、抗ＡＬＫ７抗体）は、アクチビンＢ、ＧＤＦ８、またはＮｏｄａｌによるＡＬＫ７への結合を阻害する、または減少させる。別の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、Ｓｍａｄ依存経路による脂肪分解の阻害を阻害する、または減少させる。
【０２６４】
上述のとおり、一部の実施形態では、ＡＬＫ７に結合するＶＨ及び／またはＶＬアミノ酸配列を含有する抗ＡＬＫ７抗体（例えば、全長ＡＬＫ７抗体及びＡＬＫ７結合性抗体断片、ならびにそのバリアント及び誘導体）は、本明細書において記載する配列に対して少なくとも８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％配列同一性を有し得る。一部の実施形態では、ＡＬＫ７に結合するＶＨ及び／またはＶＬアミノ酸配列（複数可）は、本明細書において記載する配列に対して８つ、７つ、６つ、５つ、４つ、３つ、２つ、１つのアミノ酸付加、置換（例えば、保存的置換）または欠失を含む。追加の実施形態では、ＡＬＫ７に結合するＶＨ及び／またはＶＬアミノ酸配列は、本明細書において記載する配列に対して１つ、２つ、３つ、４つ、５つまたはそれ以上のアミノ酸付加、置換（例えば、保存的置換）または欠失を含む。ＶＨ領域またはＶＬ領域に対して一定のパーセントの類似性を有するか、または１つまたは複数の置換、欠失及び／または挿入（例えば、保存的置換）を有するＶＨ及びＶＬ領域を含有する抗ＡＬＫ７抗体は、本明細書に記載のＶＨ及び／またはＶＬ領域をコードする核酸分子を変異誘発（例えば、部位特異的またはＰＣＲ媒介性突然変異誘発）させ、続いて、ＡＬＫ７への結合について、コードされた変更抗体を試験し、かつ任意選択で、本明細書に記載の機能性アッセイまたは残留機能を試験するためにルーチン的に変更することができる当技術分野で公知のアッセイを使用して、残留機能について試験することにより得ることができる。
【０２６５】
ｈＡＬＫ７、またはｍｕｒＡＬＫ７についてのＡＬＫ７結合性タンパク質、例えば、抗ＡＬＫ７抗体（例えば、全長ＡＬＫ７抗体及びＡＬＫ７結合性抗体断片、ならびにそのバリアント及び誘導体）の親和性または結合活性を、当技術分野で公知の任意の適切な方法、例えば、フローサイトメトリー、酵素結合免疫吸着検定法（ＥＬＩＳＡ）、またはラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）、または反応速度（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）またはＫＩＮＥＸＡ（登録商標）分析）を使用して実験で決定することができる。直接的な結合アッセイ及び競合結合アッセイ様式を容易に使用することができる（例えば、Ｂｅｒｚｏｆｓｋｙ  ｅｔ  ａｌ．，“Ａｎｔｉｂｏｄｙ−Ａｎｔｉｇｅｎ  Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ，”  Ｉｎ  Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，Ｐａｕｌ，Ｗ．Ｅ．，Ｅｄ．，Ｒａｖｅｎ  Ｐｒｅｓｓ：Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．（１９８４）；Ｋｕｂｙ，Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ  ａｎｄ  Ｃｏｍｐａｎｙ：Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．（１９９２）；及び本明細書に記載の方法を参照されたい）。特定の抗体−抗原相互作用の測定される親和性は、異なる条件（例えば、塩濃度、ｐＨ、温度）下で測定すると変動し得る。したがって、親和性及び他のＡＬＫ７結合パラメーター（例えば、ＫＤまたはＫｄ、Ｋｏｎ、Ｋｏｆｆ）の測定を、ＡＬＫ７結合性タンパク質及びＡＬＫ７の標準溶液で行い、測定を、本明細書に記載の、または別段に当技術分野で公知の標準条件及び方法を使用して行う。
【０２６６】
本開示はさらに、異種作用物質（ｈｅｔｅｒｏｌｏｇｏｕｓ  ａｇｅｎｔ）にコンジュゲートしているＡＬＫ７結合性タンパク質、例えば、本明細書に記載のとおりの抗ＡＬＫ７抗体を提供する。特定の実施形態では、異種作用物質は、抗微生物薬、治療薬、プロドラッグ、ペプチド、タンパク質、酵素、脂質、生物学的応答調節薬、医薬品、リンホカイン、異種抗体もしくは抗体断片、検出可能な標識、またはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）である。ヘテロコンジュゲートＡＬＫ７結合性タンパク質については、本明細書の他のところでより詳細に論述する。
【０２６７】
特定の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、抗ＡＬＫ７抗体ではない。タンパク質標的に高い親和性で結合する非抗体ポリペプチドを同定及び生成するための様々な方法が当技術分野で公知である。例えば、それぞれその全体で参照により本明細書に組み込まれるＳｋｅｒｒａ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．１８：２９５−３０４（２００７）；Ｈｏｓｓｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  １５：１４−２７（２００６）；Ｇｉｌｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１７：６５３−６５８（２００６）；Ｎｙｇｒｅｎ，ＦＥＢＳ  Ｊ．２７５：２６６８−２６７６（２００８）；及びＳｋｅｒｒａ，ＦＥＢＳ  Ｊ．２７５：２６７７−２６８３（２００８）を参照されたい。一部の実施形態では、ファージディスプレイ技術を使用して、ＡＬＫ７結合性タンパク質を同定／生成することができる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＶＡＳＰポリペプチド、トリ膵臓ポリペプチド（ａＰＰ）、テトラネクチン（ＣＴＬＤ３をベースとする）、アフィリン（γＢ−クリスタリン／ユビキチンをベースとする）、ノッチン、ＳＨ３ドメイン、ＰＤＺドメイン、テンダミスタット、トランスフェリン、アンキリンコンセンサスリピートドメイン（例えば、ＤＡＲＰｉｎｓ）、リポカリンタンパク質フォールド（例えば、アンチカリン及びデュオカリン）、タンパク質エピトープミメティック（ＰＥＭ）、マキシボディ／アビマー、ドメイン抗体フィブロネクチンドメイン（例えば、１０Ｆｎ３、例えば、それぞれその全体で参照により本明細書に組み込まれる米国特許出願公開第２００３／０１７０７５３及び同第２００９０１５５２７５号を参照されたい）、プロテインＡのドメイン（例えば、アフィボディ）、及びチオレドキンからなる群から選択される種類をベースとするタンパク質スキャフォールドを含む。
【０２６８】
一部の実施形態では、本開示は、本明細書において提供する抗ＡＬＫ７抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合するＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、抗ＡＬＫ７抗体、例えば、全長抗ＡＬＫ７抗体及びＡＬＫ７結合性抗体断片）を提供する。一部の実施形態では、本開示は、本明細書において提供するＡＬＫ７結合性タンパク質と同じＡＬＫ７のエピトープに結合するＡＬＫ７結合性タンパク質を提供する。ＡＬＫ７への、例えば、基準結合性タンパク質、例えば、配列番号４のＶＨ配列及び配列番号１３のＶＬ配列、配列番号２２のＶＨ配列及び配列番号３１のＶＬ配列、配列番号４０のＶＨ配列及び配列番号４９のＶＬ配列、または配列番号５８のＶＨ配列及び配列番号６７のＶＬ配列を含む抗体の結合を阻害する試験ＡＬＫ７結合性タンパク質の能力は、その試験ＡＬＫ７結合性タンパク質が、ＡＬＫ７への結合について基準抗体と競合し得ることを実証する。そのようなＡＬＫ７結合性タンパク質は、非限定的理論により、それが競合するＡＬＫ７基準抗体と同じ、または関連する（例えば、構造的に同様、または立体的に近位の）ＡＬＫ７の上のエピトープに結合することができる。一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、それぞれ配列番号４のＶＨ配列及び配列番号１３のＶＬ配列、配列番号２２のＶＨ配列及び配列番号３１のＶＬ配列、配列番号４０のＶＨ配列及び配列番号４９のＶＬ配列、または配列番号５８のＶＨ配列及び配列番号６７のＶＬ配列を含む抗体と同じＡＬＫ７の上のエピトープに結合する。
【０２６９】
同様に、ＡＬＫ７への、例えば、基準結合性タンパク質、例えば、配列番号９１のＶＨ配列及び配列番号９８のＶＬ配列、配列番号１０５のＶＨ配列及び配列番号１１０のＶＬ配列、配列番号１１７のＶＨ配列及び配列番号１２４のＶＬ配列、配列番号１２８のＶＨ配列及び配列番号１３５のＶＬ配列、または配列番号１４０のＶＨ配列及び配列番号１４８のＶＬ配列を含む抗体の結合を阻害する試験ＡＬＫ７結合性タンパク質の能力は、その試験ＡＬＫ７結合性タンパク質が、ＡＬＫ７への結合について基準抗体と競合し得ることを実証する。そのようなＡＬＫ７結合性タンパク質は、非限定的理論により、それが競合するＡＬＫ７基準抗体と同じ、または関連する（例えば、構造的に同様、または立体的に近位の）ＡＬＫ７の上のエピトープに結合することができる。一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、それぞれ配列番号９１のＶＨ配列及び配列番号９８のＶＬ配列、配列番号１０５のＶＨ配列及び配列番号１１０のＶＬ配列、配列番号１１７のＶＨ配列及び配列番号１２４のＶＬ配列、配列番号１２８のＶＨ配列及び配列番号１３５のＶＬ配列、または配列番号１４０のＶＨ配列及び配列番号１４８のＶＬ配列を含む抗体と同じＡＬＫ７の上のエピトープに結合する。
【０２７０】
一般に、１型ＴＧＦ−ベータ受容体ファミリーメンバー、例えば、ＡＬＫ７は、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及びＡｃｔＲＩＩＢ）によりリン酸化されて、Ｓｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を介してシグナル伝達することが公知である。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、抗ＡＬＫ７抗体）は、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体発現性細胞（例えば、脂肪細胞）における１つまたは複数のＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）によるＡＬＫ７のリン酸化を減少させることができる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、抗ＡＬＫ７抗体）は、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体発現性細胞（例えば、脂肪細胞）におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のＡＬＫ７媒介性リン酸化を減少させることができる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７受容体発現性細胞は、マウスである。一部の実施形態では、ＡＬＫ７受容体発現性細胞は、ヒトである。一部の実施形態では、ＡＬＫ７受容体発現性細胞は、脂肪細胞である。
【０２７１】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ−７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、本明細書において開示するＡＬＫ７結合性ＶＨ及びＶＬ対を有する抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、抗ＡＬＫ７抗体またはＡＬＫ７結合性抗体断片である。
【０２７２】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ−７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、本明細書において開示するＡＬＫ７結合性ＶＨ及びＶＬ対を有する抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、抗ＡＬＫ７抗体またはＡＬＫ７結合性抗体断片である。
【０２７３】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合は、ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ−７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、本明細書において開示するＡＬＫ７結合性ＶＨ及びＶＬ対を有する抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、抗ＡＬＫ７抗体またはＡＬＫ７結合性抗体断片である。
【０２７４】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、抗ＡＬＫ７抗体）は、１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、細胞ベースのアッセイを使用して測定した場合に、Ｓｍａｄのリン酸化を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、細胞ベースのアッセイを使用して測定した場合に、ＡＬＫ７媒介性リン酸化を５００ｐＭ未満、３５０ｐＭ未満、２５０ｐＭ未満、１５０ｐＭ未満、１００ｐＭ未満、７５ｐＭ未満、６０ｐＭ未満、５０ｐＭ未満、４０ｐＭ未満、３０ｐＭ未満、２０ｐＭ未満、１５ｐＭ未満、１０ｐＭ未満、または５ｐＭ未満のＩＣ５０で減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、本明細書において開示するＡＬＫ７結合性ＶＨ及びＶＬ対を有する抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、抗ＡＬＫ７抗体またはＡＬＫ７結合性抗体断片である。
【０２７５】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ−７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、本明細書において開示するＡＬＫ７結合性ＶＨ及びＶＬ対を有する抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、抗ＡＬＫ７抗体またはＡＬＫ７結合性抗体断片である。
【０２７６】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ−７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、本明細書において開示するＡＬＫ７結合性ＶＨ及びＶＬ対を有する抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、抗ＡＬＫ７抗体またはＡＬＫ７結合性抗体断片である。
【０２７７】
ＡＬＫ７結合性タンパク質の調製
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７の細胞外ドメインに結合する。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、抗ＡＬＫ７抗体、例えば、全長抗ＡＬＫ７抗体またはＡＬＫ７結合性抗体断片、ならびにそのバリアント、及び誘導体である。
【０２７８】
ＡＬＫ７結合性タンパク質は、公知の技術を使用して容易に調製することができる。モノクローナル抗ＡＬＫ７抗体は、ハイブリドーマ法、例えば、Ｋｏｈｌｅｒ  ａｎｄ  Ｍｉｌｓｔｅｉｎ，Ｎａｔｕｒｅ  ２５６：４９５−４９７（１９７５）に記載の方法を含む当技術分野で公知の技術を使用して調製することができる。ハイブリドーマ法を使用する場合、マウス、ハムスター、または他の適切な宿主動物を上記のとおりに免疫化して、免疫抗原に特異的に結合するであろう抗体のリンパ球による産生を誘導する。リンパ球はｉｎ  ｖｉｔｒｏでも免疫化され得る。免疫化の後に、リンパ球を単離し、適切な骨髄腫細胞系と融合してハイブリドーマ細胞を形成し、次いで、これを非融合リンパ球及び骨髄腫細胞から離して選択することができる。次いで、免疫沈降、免疫ブロット法により、またはｉｎ  ｖｉｔｒｏ結合アッセイ（例えば、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）；酵素結合免疫吸着検定法（ＥＬＩＳＡ））により決定した場合にＡＬＫ７、例えば、ｈＡＬＫ７を特異的に指向するモノクローナル抗体を産生するハイブリドーマをｉｎ  ｖｉｔｒｏ培養物中で標準的な方法を使用して（例えば、Ｇｏｄｉｎｇ，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，１９８６を参照されたい）、またはｉｎ  ｖｉｖｏで動物において腹水腫瘍として増殖させることができる。次いで、モノクローナル抗体を、上記ポリクローナル抗体について記載したとおりに、培養培地または腹水液から精製することができる。
【０２７９】
提供するモノクローナル抗体をまた、モノクローナル抗体をコードするポリヌクレオチドを成熟Ｂ細胞またはハイブリドーマ細胞から単離する米国特許第４，８１６，５６７号に記載されているとおりの組換えＤＮＡ法を使用して、例えば、その抗体の重鎖及び軽鎖をコードする遺伝子を特異的に増幅するオリゴヌクレオチドプライマーを使用するＲＴ−ＰＣＲにより作製することができ、それらの配列を、既知の手順を使用して決定する。次いで、重鎖及び軽鎖をコードする単離されたポリヌクレオチドを、適切な発現ベクターにクローニングし、これを、免疫グロブリンタンパク質を他には産生しない宿主細胞、例えば、Ｅ．ｃｏｌｉ細胞、サルＣＯＳ細胞、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、Ｐｅｒ．Ｃ６細胞、または骨髄腫細胞（例えば、ＮＳ０細胞）に遺伝子導入すると、モノクローナル抗体が宿主細胞により産生される。組換え抗ＡＬＫ７モノクローナル抗体はまた、公知の技術を使用して、所望の種のＣＤＲを発現するファージディスプレイライブラリから容易に単離することができる（例えば、ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３４８：５５２−５５４（１９９０）；Ｃｌａｃｋｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３５２：６２４−６２８（１９９１）；及びＭａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２２：５８１−５９７（１９９１）を参照されたい）。
【０２８０】
抗ＡＬＫ７抗体を任意選択で、ＡＬＫ７抗原について高い親和性及び他の好ましい生物学的特性を示すようにヒト化し、再表面形成し、かつ操作することができる。例えば、ヒト化（またはヒト）抗ＡＬＫ７抗体を、一般的に利用可能な三次元免疫グロブリンモデリングならびにフレームワーク（ＦＷ）残基、コンセンサス配列、及び生殖細胞系配列を選択するための公知の手順を使用して容易に設計及び調製して、所望の抗体の特徴、例えば、ＡＬＫ７についての親和性の増加を得ることができる。
【０２８１】
親和性成熟ストラテジー及び鎖シャッフリングストラテジーは、当技術分野で公知であり、高親和性抗ＡＬＫ７抗体、さらに、本明細書において開示するＡＬＫ７結合性タンパク質の誘導体及びバリアントを生成するために使用することができる。例えば、その全体で参照により本明細書に組み込まれるＭａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １０：７７９−７８３（１９９２）を参照されたい。高親和性抗ＡＬＫ７抗体、さらに、本明細書において開示するＡＬＫ７結合性タンパク質の誘導体及びバリアントを生成するための追加のストラテジーは、全可変ドメイン内で変異を生じさせるために１つまたは複数の選択されたＶＨ及び／またはＶＬ遺伝子のランダム変異誘発を使用して、本開示のＣＤＲ由来配列を担持する新規のＶＨまたはＶＬ領域を生成することである。エラープローンＰＣＲを使用するそのような技術は、Ｇｒａｍ  ｅｔ  ａｌ．（ＰＮＡＳ  ＵＳＡ  ８９：３５７６−３５８０（１９９２））に記載されている。一部の実施形態では、１つまたは２つのアミノ酸置換を、ＶＨ  ＣＤＲ及び／またはＶＬ  ＣＤＲのセット内で行う。さらなる戦略は、本明細書において開示する抗ＡＬＫ７抗体をコードするＶＨまたはＶＬ遺伝子のＣＤＲ領域に対する直接的な変異誘発を使用した。そのような技術の例は、Ｂａｒｂａｓ  ｅｔ  ａｌ．（ＰＮＡＳ  ＵＳＡ  ９１：３８０９−３８１３（１９９４））及びＳｃｈｉｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２６３：５５１−５６７（１９９６））により開示されている。
【０２８２】
本開示の抗ＡＬＫ７抗体のヒト化、再表面形成または操作は、これらだけに限定されないが、それぞれその全体で参照により本明細書に組み込まれるＪｏｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３２１：５２２（１９８６）；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  ３３２：３２３（１９８８）；Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２３９：１５３４（１９８８）），Ｓｉｍｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５１：２２９６（１９９３）；Ｃｈｏｔｈｉａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１（１９８７），Ｃａｒｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，ＰＮＡＳ  ＵＳＡ  ８９：４２８５（１９９２）；Ｐｒｅｓｔａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５１：２６２３（１９９３）、米国特許第５，６３９，６４１号、同第５，７２３，３２３号；同第５，９７６，８６２号；同第５，８２４，５１４号；同第５，８１７，４８３号；同第５，８１４，４７６号；同第５，７６３，１９２号；同第５，７２３，３２３号；同第５，７６６，８８６号；同第５，７１４，３５２号；同第６，２０４，０２３号；同第６，１８０，３７０号；同第５，６９３，７６２号；同第５，５３０，１０１号；同第５，５８５，０８９号；同第５，２２５，５３９号；同第４，８１６，５６７号、同第７，５５７，１８９号；同第７，５３８，１９５号；及び第７，３４２，１１０号；国際公開番号ＰＣＴ／ＵＳ９８／１６２８０；ＰＣＴ／ＵＳ９６／１８９７８；ＰＣＴ／ＵＳ９１／０９６３０；ＰＣＴ／ＵＳ９１／０５９３９；ＰＣＴ／ＵＳ９４／０１２３４；ＰＣＴ／ＧＢ８９／０１３３４；ＰＣＴ／ＧＢ９１／０１１３４；ＰＣＴ／ＧＢ９２／０１７５５；国際公開番号ＷＯ９０／１４４４３；ＷＯ９０／１４４２４；ＷＯ９０／１４４３０；ならびに欧州特許第２２９２４６号に記載されている方法を含む、任意の公知の方法を使用して行うことができる。同様に、公知のアッセイを、望ましい特徴を示す抗ＡＬＫ７抗体を容易に選択するために利用することができる（例えば、ＡＬＫ７への結合親和性を決定するためのアッセイ；交差遮断アッセイ、例えば、本明細書に記載のＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）ベースのヒトＡＬＫ７結合性タンパク質競合結合アッセイ）。
【０２８３】
非ヒトまたはヒト抗体を操作する、ヒト化する、または再表面形成するための方法も使用することができ、当技術分野で公知である。ヒト化、再表面形成または同様に操作された抗体は、非ヒト、例えば、これらだけに限定されないが、マウス、ラット、ウサギ、非ヒト霊長類または他の哺乳類である源からの１つまたは複数のアミノ酸残基を有することができる。これらの非ヒトアミノ酸残基は、多くの場合に「重要な」残基と称される残基により置き換えられており、これは、典型的には公知のヒト配列の「重要な」可変、定常または他のドメインから典型的には取られている。そのような重要な配列を、当技術分野で公知であるとおり、免疫原性を減少させる、または結合、親和性、オンレート、オフレート、結合活性、特異性、半減期、もしくは任意の他の適切な特徴を減少させる、増強する、もしくは調節するために使用することができる。好ましくは、非ヒトまたはヒトＣＤＲ配列の一部または全部が維持されるが、可変及び定常領域の非ヒト配列を、ヒトまたは他のアミノ酸で置き換えることができる。
【０２８４】
ＡＬＫ７結合性タンパク質、例えば、全長抗ＡＬＫ７抗体をコードする核酸（複数可）を、組換えＤＮＡ技術を使用するいくつかの異なる手法でさらに修飾して、代替の抗体を生成することができる。一部の実施形態では、例えば、マウスモノクローナル抗体の軽鎖及び重鎖の定常ドメインをコードする核酸（複数可）を、（ａ）例えば、ヒト抗体のコード領域で置換して、キメラ抗体を生成することができるか、または（ｂ）非免疫グロブリンをコードする核酸（複数可）で置換して、融合抗体を生成することができる。一部の実施形態では、定常領域を短縮化するか、または除去して、モノクローナル抗体の所望の抗体断片を生成する。可変領域コード配列の部位特異的または高密度変異誘発を使用して、モノクローナル抗体の特異性、親和性などを最適化することができる。
【０２８５】
抗ＡＬＫ７ヒト抗体は、当技術分野で公知の多数の技術のいずれかを使用して直接的に調製することができる。（例えば、Ｃｏｌｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ａｎｄ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ，Ａｌａｎ  Ｒ．Ｌｉｓｓ，ｐ．７７（１９８５）；Ｂｏｅｍｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４７（１）：８６−９５（１９９１）；及び米国特許第５，７５０，３７３号を参照されたい）。同様に、ヒト抗ＡＬＫ７抗体は容易に、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで免疫化された不死化ヒトＢリンパ球から得ることができるか、またはＡＬＫ７を指向する抗体を産生する免疫化個体から単離することができる。
【０２８６】
例えば、Ｖａｕｇｈａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．１４：３０９−３１４（１９９６），Ｓｈｅｅｔｓ  ｅｔ  ａｌ．，ＰＮＡＳ  ９５：６１５７−６１６２（１９９８），Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ  ａｎｄ  Ｗｉｎｔｅｒ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２７：３８１（１９９１）、及びＭａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２２：５８１（１９９１）に記載されているとおり、ヒト抗ＡＬＫ７抗体はまた、ヒト抗体を発現するファージライブラリから選択することができる。抗体ファージライブラリを生成及びスクリーニングするための技術はまた、米国特許第５，９６９，１０８号；同第６，１７２，１９７号；同第５，８８５，７９３号；同第６，５２１，４０４号；同第６，５４４，７３１号；同第６，５５５，３１３号；同第６，５８２，９１５号；同第６，５９３，０８１号；同第６，３００，０６４号；同第６，６５３，０６８号；同第６，７０６，４８４号；及び同第７，２６４，９６３号；ならびにＲｏｔｈｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３７６（４）：１１８２−１２００（２００８）（これらはそれぞれ、その全体で参照により本明細書に組み込まれる）に記載されている。
【０２８７】
ヒト抗ＡＬＫ７抗体をまた、免疫化で、内因性免疫グロブリン産生の非存在下でヒト抗体を産生することができるヒト免疫グロブリン遺伝子座を含有する遺伝子導入マウスにおいて作製することができる。このアプローチは、例えば、米国特許第５，５４５，８０７号；同第５，５４５，８０６号；同第５，５６９，８２５号；同第５，６２５，１２６号；同第５，６３３，４２５号；及び同第５，６６１，０１６号に記載されている。
【０２８８】
ヒト抗ＡＬＫ７抗体はまた、例えば、それぞれの内容がその全体で参照により本明細書に組み込まれるＷＯ０１２／００９５６８；ＷＯ０９／０３６３７９；ＷＯ１０／１０５２５６；ＷＯ０３／０７４６７９及び米国特許出願公開第２００２／０１７７１７０号に開示のとおりの酵母ベースの抗体プレゼンテーションライブラリから選択／単離することができる。そのようなライブラリは、ヒト免疫前レパートリーにより得られる多様性を反映して、ｉｎ  ｓｉｌｉｃｏと名付けられている。
【０２８９】
別法では、抗ＡＬＫ７抗体は、酵母ディスプレイ抗体ライブラリから選択してもよい。例えば：Ｂｌａｉｓｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｇｅｎｅ  ３４２（２）：２１１−２１８（２００４）；Ｂｏｄｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１５（６）：５５３−５５７（１９９７）；Ｋｕｒｏｄａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｌｅｔｔ．３３（１）：１−９（２０１１）を参照されたい。概説；Ｌａｕｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．１０１（１）：１０２−１５（２０１２）；Ｏｒｃｕｔｔ  Ｋ．Ｄ．ａｎｄ  Ｗｉｔｔｒｕｐ  Ｋ．Ｄ．Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，ｙｅａｓｔ  ｄｉｓｐｌａｙ  ａｎｄ  ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ（２０１０），２０７−２３３；Ｒａｋｅｓｔｒａｗ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇ．Ｄｅｓ．Ｓｅｌ．２４（６）：５２５−３０（２０１１）；ならびに米国特許第６，４２３，５３８号；同第６，６９６，２５１号；及び同第６，６９９，６５８号。
【０２９０】
様々な技術が、抗原結合性抗体断片を生成するために公知である。従来、これらの断片は、インタクトな抗体のタンパク質分解消化により得られる（例えば、Ｍｏｒｉｍｏｔｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｍｅｔｈ．２４：１０７−１１７（１９９３）；及びＢｒｅｎｎａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２２９：８１（１９８５）を参照されたい）。特定の実施形態では、ＡＬＫ７結合性抗体断片を組換えで生成する。Ｆａｂ、Ｆｖ、及びｓｃＦｖ抗体断片はすべて、Ｅ．ｃｏｌｉまたは他の宿主細胞で発現し、かつそこから分泌され得るので、これらの断片を大量に生成することが可能である。加えて、そのようなＡＬＫ７結合性抗体断片を、上記で論述した抗体ファージライブラリから単離することができる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性抗体断片は、米国特許第５，６４１，８７０号に記載されているとおりの線状抗体である。抗原結合性抗体断片を生成するための他の技術は、当技術分野で公知である。
【０２９１】
公知の技術を、ＡＬＫ７に結合する一本鎖抗体を生成するために容易に適合させることができる（例えば、米国特許第４，９４６，７７８号を参照されたい）。加えて、公知の方法を、Ｆａｂ発現ライブラリのコンストラクションのためにルーチン的に適合させて（例えば、Ｈｕｓｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４６：１２７５−１２８１（１９８９）を参照されたい）、ＡＬＫ７について所望の特異性を有するモノクローナルＦａｂ断片の迅速で有効な同定を可能にすることができる。これらだけに限定されないが：（ａ）抗体のペプシン消化により生成されたＦ（ａｂ’）２断片；（ｂ）Ｆ（ａｂ’）２断片のジスルフィド架橋を還元することにより生成されたＦａｂ断片、（ｃ）パパイン及び還元剤で抗ＡＬＫ７抗体を処置することにより生成されたＦａｂ断片、ならびに（ｄ）Ｆｖ断片を含むＡＬＫ７結合性抗体断片を、当技術分野で公知の技術により生成することができる。
【０２９２】
特定の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、抗ＡＬＫ７抗体）を、その血清半減期が増加するように修飾することができる。これは、例えば、ＡＬＫ７結合性タンパク質内の適切な領域の変異によりサルベージ受容体結合性エピトープをＡＬＫ７結合性タンパク質に導入することにより、またはサルベージ受容体エピトープをペプチドタグに導入し、次いで、これをＡＬＫ７結合性タンパク質に、いずれかの末端で、または中央で融合させることにより（例えば、ＤＮＡまたはペプチド合成により）、達成することができる。ＡＬＫ７結合性タンパク質の血清半減期を増加させる他の方法、例えば、ＰＥＧなどの異種分子へのコンジュゲーションは、当技術分野で公知である。
【０２９３】
ヘテロコンジュゲートＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、抗ＡＬＫ７抗体、例えば、全長抗ＡＬＫ７抗体及びＡＬＫ７結合性抗体断片、ならびにそのバリアント及び誘導体）も、本開示の範囲内である。ヘテロコンジュゲートＡＬＫ７結合性タンパク質は、２つの共有結合したタンパク質からなる。ヘテロコンジュゲートＡＬＫ７結合性タンパク質を、架橋剤を要するものを含む合成タンパク質ケミストリーで公知の方法を使用してｉｎ  ｖｉｔｒｏで調製することができることが企図される。例えば、免疫毒素を、ジスルフィド交換反応を使用して、またはチオエーテル結合を形成することによりコンストラクトすることができる。この目的のために適した試薬の例には、イミノチオラート及びメチル−４−メルカプトブチルイミダートが含まれる。
【０２９４】
ＡＬＫ７結合性タンパク質は、抗体とＡＬＫ７との会合をもたらす任意の種類の可変領域を含むことができる。そのような可変領域は、体液性応答を開始し、ＡＬＫ７抗原に対する免疫グロブリンを生成するように誘導することができる任意の哺乳類を含むか、またはそれから得ることができる。抗ＡＬＫ７抗体の可変領域は、例えば、ヒト、マウス、非ヒト霊長類（例えば、カニクイザル、マカクなど）またはオオカミ由来であってよい。一部の実施形態では、修飾抗ＡＬＫ７抗体の可変及び定常領域の両方がヒトである。他の実施形態では、分子の結合特性を改善するか、または免疫原性を減少させるために、適合性の抗体の可変領域（通常、非ヒト供給源に由来）を操作するか、または特異的に適合させることができる。これに関して、親和性成熟、変異誘発手順、鎖シャッフリングストラテジー及び／または本明細書に記載されているか、もしくは別段に当技術分野で公知である他の方法を使用して、移入アミノ酸配列を含ませることにより、本開示による有用な可変領域をヒト化する、または別段に変更することができる。
【０２９５】
特定の実施形態では、抗ＡＬＫ７抗体の重鎖及び軽鎖の両方の可変ドメインを、１つまたは複数のＣＤＲの少なくとも部分的な置き換えにより、及び／または部分的なフレームワーク領域置き換え及び配列変化により変更する。ＣＤＲは、フレームワーク領域が由来する抗体と同じクラスまたはさらにはサブクラスの抗体に由来してよいが、ＣＤＲが異なるクラスの抗体に、かつ特定の実施形態では、異なる種からの抗体に由来することが想像される。ある可変ドメインの抗原結合能を別のものに移すために、すべてのＣＤＲをドナー可変領域からの完全ＣＤＲで置き換えることは必要ない。むしろ、抗原結合性部位の活性を維持するために、必要な残基を移すことだけが必要である。免疫原性が低い機能性抗体をルーチン的に得ることは十分に、当技術分野で通常の技能を有するもの能力の範囲内である。例えば、米国特許第５，５８５，０８９号、同第５，６９３，７６１号及び同第５，６９３，７６２号を参照されたい。
【０２９６】
可変領域の変更にも関わらず、当技術分野で通常の技能を有するものは、本開示の修飾抗ＡＬＫ７抗体が、天然または非変更定常領域を含むほぼ同じ免疫原性の抗体と比較した場合に、所望の生化学的特徴、例えば、ＡＤＣＣの減少または血清半減期の増加が得られるように、定常領域ドメインのうちの１つまたは複数の少なくとも一部が欠失している、または別段に変更されている抗体を含むであろうことは分かるであろう。一部の実施形態では、修飾された抗ＡＬＫ７抗体の定常領域は、ヒト定常領域を含む。定常領域に対する修飾は、１つまたは複数のドメイン内の１つまたは複数のアミノ酸の付加、欠失または置換を含む。本明細書において開示する修飾された抗ＡＬＫ７抗体は、３つの重鎖定常ドメイン（ＣＨ１、ＣＨ２またはＣＨ３）のうちの１つもしくは複数に対する、及び／または軽鎖定常ドメイン（ＣＬ）に対する改変または修飾を含むことができる。一部の実施形態では、修飾された抗ＡＬＫ７抗体は定常領域を含み、１つまたは複数のドメインが部分的に、または完全に欠失していることが企図される。一部の実施形態では、修飾された抗ＡＬＫ７抗体は、全ＣＨ２ドメインが除去されているドメイン欠失コンストラクトまたはバリアントを含む（ΔＣＨ２コンストラクト）。一部の実施形態では、削除される定常領域ドメインを、典型的には定常領域が存在しないことにより付与される多少の分子柔軟性を与える短いアミノ酸スペーサー（例えば、１０残基）により置き換えることができる。
【０２９７】
定常領域がいくつかのエフェクター機能を媒介することは、一般に理解される。例えば、抗体への補体のＣ１成分の結合は補体系を活性化させる。補体の活性化は、細胞病原体のオプソニン作用及び溶解において重要である。補体の活性化はまた、炎症応答を刺激し、自己免疫過敏症にも関係し得る。さらに、抗体は、Ｆｃ領域を介して細胞に結合し、その際、抗体Ｆｃ領域の上のＦｃ受容体部位が、細胞の上のＦｃ受容体（ＦｃＲ）に結合する。ＩｇＧ（ガンマ受容体）、ＩｇＥ（イータ受容体）、ＩｇＡ（アルファ受容体）及びＩｇＭ（ミュー受容体）を含む種々のクラスの抗体に特異的であるいくつかのＦｃ受容体が存在する。細胞表面の上のＦｃ受容体への抗体の結合は、抗体被覆粒子の抱き込み及び破壊、イムノコンジュゲートのクリアランス、キラー細胞による抗体被覆標的細胞の溶解（抗体依存性細胞媒介細胞傷害性、またはＡＤＣＣと呼ばれる）、炎症性メディエーターの放出、胎盤通過ならびに免疫グロブリン産生の制御を含む、いくつかの重要で多様な生物学的応答を開始させる。
【０２９８】
特定の実施形態では、抗ＡＬＫ７抗体は、変更されたエフェクター機能を有し、今度はその変更されたエフェクター機能が、投与される抗ＡＬＫ７抗体の生物学的プロファイルに影響を及ぼす。例えば、定常領域ドメインの欠失または不活性化（点突然変異または他の手段による）は、循環中の修飾抗体のＦｃ受容体結合を減少させ得る。他の場合には、定常領域の修飾は、補体結合を抑制し、したがって、コンジュゲートした細胞毒素の血清半減期及び非特異的会合を減少させ得る。定常領域のまた他の修飾を使用して、ジスルフィド結合またはオリゴ糖部分を除去することができ、これは、抗原特異性または抗体柔軟性の上昇により、限局性の増強を可能にする。同様に、本開示による定常領域への修飾は、当技術分野で通常の技能を有するものには公知の生化学または分子操作技術を使用して容易に行うことができる。
【０２９９】
一部の実施形態では、本明細書で提供するＡＬＫ７結合性タンパク質は、１つまたは複数のエフェクター機能を有さないＡＬＫ７抗体である。例えば、一部の実施形態では、抗ＡＬＫ７抗体は、抗体依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）活性を有さない、及び／または補体依存性細胞傷害性（ＣＤＣ）活性を有さない。特定の実施形態では、抗ＡＬＫ７抗体は、Ｆｃ受容体及び／または補体因子に結合しない。特定の実施形態では、抗ＡＬＫ７抗体は、エフェクター機能を有さない。ＡＤＣＣ及び／またはＣＤＣ活性ならびにＦｃ受容体及び／または補体因子結合を減少させる、または除去するＦｃ配列の操作修飾の例は、本明細書に記載されているか、または当技術分野で別段に公知であり、試験のためのアッセイ及び手順も同様である。
【０３００】
一部の実施形態では、抗ＡＬＫ７抗体を操作して、ＣＨ３ドメインを、それぞれの修飾抗体のヒンジ領域に直接的に融合させる。他のコンストラクトでは、ペプチドスペーサーをヒンジ領域と修飾されたＣＨ２及び／またはＣＨ３ドメインとの間に挿入する。例えば、ＣＨ２ドメインが欠失していて、残りのＣＨ３ドメイン（修飾、または非修飾）が５〜２０アミノ酸スペーサーでヒンジ領域に結合している適合可能なコンストラクトを発現させることができる。そのようなスペーサーを、例えば、定常ドメインの調節エレメントがフリーで、アクセス可能なままであること、またはヒンジ領域が柔軟なままであることを保証するために付加することができる。アミノ酸スペーサーは場合によっては、免疫原性であり、コンストラクトに対する望ましくない免疫応答を誘発すると判明し得る。したがって、特定の実施形態では、修飾された抗ＡＬＫ７抗体の所望の生化学品質を維持するために、コンストラクトに付加される任意のスペーサーは、比較的に非免疫原性であり得るか、またはさらにはそれを完全に省略してもよい。
【０３０１】
追加の実施形態では、抗ＡＬＫ７抗体を、定常領域内のいくつか、または１個だけのアミノ酸の部分的な欠失または置換により修飾する。例えば、ＣＨ２ドメインの選択された領域内の１個のアミノ酸の変異が、Ｆｃ結合をかなり減少させ、それで十分であり得る。同様に、エフェクター機能（例えば、補体Ｃ１Ｑ結合）を制御する１つまたは複数の定常領域ドメインを完全に、または部分的に欠失させることができる。定常領域のそのような部分的欠失により、対応する定常領域ドメインと関連する他の望ましい機能はインタクトにしたままで、抗ＡＬＫ７抗体の選択された特徴（例えば、血清半減期）を改善することができる。一部の実施形態では、抗ＡＬＫ７抗体の定常領域を、得られたコンストラクトのプロファイルを増強する１つまたは複数のアミノ酸の変異または置換を介して修飾する。これに関連して、修飾された抗ＡＬＫ７抗体の配置及び免疫原性プロファイルを実質的に維持しながら、保存された結合部位（例えば、Ｆｃ結合）により与えられる活性を破壊することが可能である。本開示はまた、エフェクター機能を低下もしくは上昇させながら、または１つもしくは複数の細胞毒素、標識もしくは炭水化物部分のための結合部位を提供しながら、そのような望ましい特徴を増強するために、定常領域への１つまたは複数のアミノ酸の付加を含有する抗ＡＬＫ７抗体を提供する。そのような実施形態では、選択された定常領域ドメインに由来する特異的配列を挿入または複製することが望まれ得る。
【０３０２】
本開示はまた、本明細書において提供するＡＬＫ７結合性タンパク質に対するバリアントであるＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、マウス、キメラ、ヒト化及びヒトＡＬＫ７結合性タンパク質）を提供する。特定の実施形態では、バリアントＡＬＫ７結合性タンパク質は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有する：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０３０３】
提供するＡＬＫ７結合性タンパク質、例えば、抗ＡＬＫ７抗体を、例えば、溶解度、生物学的半減期、生物学的利用能を改善するために当技術分野で公知の追加の化学的部分を含有するように、及び別段に、ＡＬＫ７結合性タンパク質の安定性、処方及び／または治療上の特性を改善するように、誘導体化することができる。そのような部分の非網羅的概説は、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，２０ｔｈ  ｅｄ．，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ（２０００）において見い出すことができる。
【０３０４】
ＡＬＫ７結合性タンパク質をコードする核酸及びそれらの発現
ＡＬＫ７結合性タンパク質をコードする核酸分子及び核酸分子の組合せも提供する。一部の実施形態では、核酸分子は、抗ＡＬＫ７抗体、例えば、全長抗ＡＬＫ７抗体及びＡＬＫ７結合性抗体断片をコードする。さらなる実施形態では、本開示は、本明細書において提供する全長抗ＡＬＫ７抗体またはＡＬＫ７結合性抗体断片のバリアントまたは誘導体をコードする核酸分子を提供する。
【０３０５】
本明細書において開示する核酸分子は、ＲＮＡの形態またはＤＮＡの形態であってよい。ＤＮＡには、ｃＤＮＡ、ゲノムＤＮＡ、及び合成ＤＮＡが含まれ；かつこれは、二本鎖または一本鎖であってよく、一本鎖であれば、コーディングストランド／または非コーディング（アンチセンス）ストランドであってよい。特定の実施形態では、核酸分子を単離する。追加の実施形態では、核酸分子は、実質的に純粋である。一部の実施形態では、核酸は、ｃＤＮＡであるか、またはｃＤＮＡに由来する。一部の実施形態では、核酸は、組換えで生成する。
【０３０６】
一部の実施形態では、核酸分子は、宿主細胞またはｉｎ  ｖｉｔｒｏにおいてコード配列の発現を制御する制御配列に作動可能に連結された、ＡＬＫ７結合性タンパク質をコードする配列を含む。特定の実施形態では、コード配列は、ｃＤＮＡである。本開示はまた、宿主細胞またはｉｎ  ｖｉｔｒｏにおいてコード配列の発現を制御する制御配列に作動可能に連結された、ＡＬＫ７結合性タンパク質をコードする配列を含む核酸分子を含有するベクターに関する。
【０３０７】
一部の実施形態では、核酸分子は、同じリーディングフレームで異種ポリヌクレオチド配列に融合している成熟ＡＬＫ７結合性タンパク質のためのコード配列を含む。一部の実施形態では、異種ポリヌクレオチド配列は、ＡＬＫ７結合性タンパク質をコードする核酸分子（複数可）で形質転換された宿主細胞から発現されるタンパク質の分泌を促進するリーダーペプチド配列をコードする。リーダー配列を含有するタンパク質は、プレタンパク質と称され、ＡＬＫ７結合性タンパク質の成熟形態を形成するために、宿主細胞により切断されるリーダー配列を有し得る。宿主細胞における組換えタンパク質の分泌を促進するそのようなリーダーペプチド配列及びそれらの使用は一般に、当技術分野で公知である。追加の実施形態では、異種ポリヌクレオチド配列は、例えば、組換え発現されたＡＬＫ７結合性タンパク質の精製を容易にする、タンパク質安定性及び／または治療もしくは診断特性を加える、または改善するように機能し得る追加の５’アミノ酸残基をコードする。
【０３０８】
一部の実施形態では、本開示は、ハイブリダイゼーションプローブ、ＰＣＲプライマーまたは配列決定プライマーとして使用するために十分である単離核酸、例えば、ＡＬＫ７結合性タンパク質をコードするｃＤＮＡ断片を提供する。
【０３０９】
一部の実施形態では、核酸分子は、下記からなる群から選択される少なくとも１つの特徴を有するＡＬＫ７結合性タンパク質をコードする：（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、コードされるＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、コードされるＡＬＫ−７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７を発現する脂肪細胞における脂肪分解を増加させる。一部の実施形態では、コードされるＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、コードされるＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。一部の実施形態では、コードされるＡＬＫ７結合性タンパク質は、本明細書において開示するＡＬＫ７結合性ＶＨ及びＶＬ対を有する抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。追加の実施形態では、コードされるＡＬＫ７結合性タンパク質は、本明細書において開示する抗体と同じＡＬＫ７のエピトープに結合する。一部の実施形態では、コードされるＡＬＫ７結合性タンパク質は、本明細書において開示するＶＨ及びＶＬ対を有するＡＬＫ７結合性抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。追加の実施形態では、コードされるＡＬＫ７結合性タンパク質は、本明細書において開示する抗体と同じＡＬＫ７のエピトープに結合する。さらなる実施形態では、核酸分子は、ＡＬＫ７に特異的に結合し、ＶＨ及びＶＬを含むＡＬＫ７結合性タンパク質をコードする。
【０３１０】
一部の実施形態では、本開示は、本明細書において提供するＡＬＫ７結合性タンパク質をコードする核酸及び核酸のセットを含有するベクター及びベクターのセットを提供する。これらの核酸、核酸のセット、ベクター、及びベクターのセットで形質転換された宿主細胞も提供し、ＡＬＫ７結合性タンパク質を作製する、及び使用する方法も提供する。
【０３１１】
一部の実施形態では、本開示は、上記で提供したとおりの核酸分子もしくは核酸分子の組合せまたはベクターを含む宿主細胞であって、一部の事例では、ＡＬＫ７に特異的に結合するＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、抗ＡＬＫ７抗体、例えば、全長ＡＬＫ７抗体及びＡＬＫ７結合性抗体断片）を発現する宿主細胞を提供する。さらなる実施形態では、本開示は、上記で提供したとおりの核酸分子もしくは核酸分子の組合せまたはベクターで形質転換された宿主細胞であって、一部の事例では、ＡＬＫ７に特異的に結合するＡＬＫ７結合性タンパク質を発現し得る宿主細胞を提供する。そのような宿主細胞は、本明細書で提供するとおりのＡＬＫ７結合性タンパク質を作製する方法であって、（ａ）宿主細胞を培養すること、及び（ｂ）宿主細胞から発現されたＡＬＫ７結合性タンパク質を単離することを含む方法で利用することができる。
【０３１２】
本開示はまた、ＡＬＫ７結合性タンパク質を作製するための方法であって、適切な条件下でＡＬＫ７結合性タンパク質を発現することができる宿主細胞（例えば、ハイブリドーマまたは形質転換された哺乳類宿主細胞）を培養することを含む方法を提供し、かつ任意選択で、宿主細胞から分泌されるＡＬＫ７結合性タンパク質を単離するための方法を提供する。また、本開示は追加的に、本開示の方法を使用して単離されたＡＬＫ７結合性タンパク質を提供する。
【０３１３】
特定の実施形態では、ポリヌクレオチドは、同じリーディングフレームにおいて、例えば、コードされたポリペプチドの精製を可能にするマーカー配列に融合している成熟ＡＬＫ７結合性タンパク質（複数可）（例えば、ＡＬＫ７抗体、例えば、全長抗体及びＡＬＫ７結合性抗体断片）のためのコード配列（複数可）を含む。例えば、マーカー配列は、細菌宿主の場合には、マーカーに融合している成熟ポリペプチドの精製をもたらすｐＱＥ−９ベクターにより供給されるヘキサ−ヒスチジンタグであってよいか、または哺乳類宿主（例えば、ＣＯＳ−７細胞）が使用されているときには、マーカー配列は、インフルエンザ血球凝集素タンパク質に由来する血球凝集素（ＨＡ）タグであってよい。
【０３１４】
ＡＬＫ７結合性タンパク質、例えば、抗ＡＬＫ７抗体及びＡＬＫ７結合性抗体断片をコードする核酸バリアントも提供する。核酸バリアントは、コード領域、非コード領域、またはその両方に変更を含有してよい。一部の実施形態では、核酸バリアントは、サイレント置換、付加、または欠失を生成する変更を含有するが、コードされるポリペプチドの特性または活性は変更しない。一部の実施形態では、核酸バリアントを、遺伝コードの縮重によるサイレント置換により生成する。核酸バリアントを、様々な理由で、例えば、特定の宿主でのコドン発現を最適化するために生成することができる（ヒトｍＲＮＡのコドンを、Ｅ．ｃｏｌｉなどの細菌宿主に好ましいものに変化させる）。本明細書に記載の核酸を含むベクター及び細胞も提供する。
【０３１５】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、抗ＡＬＫ７抗体、例えば、全長抗体及びＡＬＫ７結合性抗体断片）をコードする核酸配列を、オリゴヌクレオチドシンセサイザーを使用する化学合成によりコンストラクトする。そのようなオリゴヌクレオチドは、所望のポリペプチドのアミノ酸配列及び宿主細胞の嗜好に基づくコドン最適化に基づき、設計することができる。標準的な方法をルーチン的に、ＡＬＫ７結合性タンパク質をコードする単離ポリヌクレオチド配列を合成するために適合させることができる。
【０３１６】
組み立てたら（合成、特定部位の突然変異誘発または別の方法により）、ＡＬＫ７結合性タンパク質をコードする核酸配列をルーチン的に、所望の宿主におけるＡＬＫ７結合性タンパク質の発現に適した制御配列に作動可能に連結させることができる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質をコードする核酸配列（複数可）を１つまたは複数の発現ベクターに挿入し、所望の宿主におけるタンパク質の発現に適した制御配列（複数可）に作動可能に連結させる。宿主において、遺伝子導入されたコード配列の高い発現レベルを得るために、コード配列を、選択された発現宿主において作動可能である転写及び翻訳発現制御配列と作動可能に連結するか、または会合させることができる。
【０３１７】
特定の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質、例えば、抗ＡＬＫ７抗体またはＡＬＫ７結合性抗体断片をコードするＤＮＡを増幅及び発現するために、組換え発現ベクターを使用する。組換え発現ベクターは、哺乳類、微生物、ウイルスまたは昆虫遺伝子に由来する適切な転写または翻訳調節エレメントに作動可能に連結しているＡＬＫ７結合性タンパク質のポリペプチド鎖をコードする合成またはｃＤＮＡ由来ＤＮＡ断片を有する複製可能なＤＮＡコンストラクトである。転写ユニットは一般に、（１）遺伝子発現において調節の役割を有する１つまたは複数の遺伝子要素、例えば、転写プロモーターまたはエンハンサー、（２）ｍＲＮＡに転写され、タンパク質に翻訳される構造またはコード配列、及び（３）下記で詳述するとおりの適切な転写及び翻訳開始及び終止配列のアセンブリを含む。そのような調節エレメントは、転写を制御するオペレーター配列を含んでよい。追加的に、複製開始点により通常は付与される宿主において複製する能力、及び形質転換体の認識を促進する選択遺伝子を組み込むことができる。相互に機能的に関連するときには、ＤＮＡ領域を作動可能に連結する。例えば、ポリペプチドの分泌に関係する前駆体として発現されるならば、シグナルペプチド（分泌リーダー）のためのＤＮＡを、ポリペプチドのためのＤＮＡに作動可能に連結させ；配列の転写を制御するならば、プロモーターを、コード配列に作動可能に連結させ；または翻訳を可能にするように位置しているならば、リボソーム結合性部位を、コード配列に作動可能に連結させる。酵母発現系における使用が意図されている構造要素には、宿主細胞による翻訳タンパク質の細胞外分泌を可能にするリーダー配列が含まれる。別法では、組換えタンパク質がリーダーまたは移行配列を含まずに発現される場合、そのタンパク質は、Ｎ末端メチオニン残基を含んでよい。続いて、この残基を任意選択で、発現された組換えタンパク質から切断すると、最終タンパク質を得ることができる。特定の実施形態では、本開示は、上で、または本明細書の他の所で記載したとおりの核酸またはベクターを含み、任意選択で、１種または複数の担体、希釈剤、賦形剤、または他の添加剤をさらに含む組成物、例えば、医薬組成物を提供する。
【０３１８】
本明細書において開示する核酸分子もしくはｃＤＮＡ分子及び／またはベクターで形質転換された宿主細胞も提供する。本開示はまた、制御配列に作動可能に連結され、かつ任意選択で、ベクターに挿入された開示の１つまたは複数の核酸分子で形質転換された宿主細胞を提供する。一部の実施形態では、宿主細胞は、哺乳類宿主細胞である。さらなる実施形態では、哺乳類宿主細胞は、ＮＳ０マウス骨髄腫細胞、ＰＥＲ．Ｃ６（登録商標）ヒト細胞、またはチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞である。他の実施形態では、宿主細胞は、ハイブリドーマである。
【０３１９】
追加の実施形態では、本開示は、本明細書において提供するＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、抗ＡＬＫ７抗体、例えば、全長ＡＬＫ７抗体及びＡＬＫ７結合性抗体断片、ならびにそのバリアント及び誘導体）を作製する方法であって、ＡＬＫ７結合性タンパク質を生成するために適した条件下で本明細書において開示する形質転換された宿主細胞またはハイブリドーマを培養することを含む方法を提供する。本開示は任意選択で、宿主細胞から分泌されるＡＬＫ７結合性タンパク質を単離することを提供する。本開示はまた任意選択で、この方法を使用して生成されたＡＬＫ７結合性タンパク質、及びＡＬＫ７結合性タンパク質及び薬学的に許容される担体を含む医薬組成物を提供する。
【０３２０】
発現制御配列及び発現ベクターの選択は、宿主の選択に依存する。広範囲の様々な発現宿主／ベクターの組合せを使用することができる。真核宿主に有用な発現ベクターには、例えば、ＳＶ４０、ウシ乳頭腫ウイルス、アデノウイルス及びサイトメガロウイルスからの発現制御配列を含むベクターが含まれる。細菌宿主に有用な発現ベクターには、公知の細菌プラスミド、例えば、ｐＣＲ１、ｐＢＲ３２２、ｐＭＢ９及びそれらの誘導体を含むＥ．ｃｏｌｉからのプラスミド、ならびにより広い宿主範囲のプラスミド、例えば、Ｍ１３及び糸状一本鎖ＤＮＡファージも含まれる。
【０３２１】
ＡＬＫ７結合性タンパク質の発現に適した宿主細胞には、適切なプロモーターの制御下での原核生物、酵母、昆虫または高等真核細胞が含まれる。原核生物には、グラム陰性またはグラム陽性生体、例えば、Ｅ．ｃｏｌｉまたはｂａｃｉｌｌｉが含まれる。高等真核細胞には、下記のとおりの哺乳類由来の確立された細胞系が含まれる。無細胞翻訳系も使用することができるであろう。抗体生成を含む、タンパク質生成の方法に関する追加の情報を、例えば、それぞれその全体で参照により本明細書に組み込まれる米国特許出願公開第２００８／０１８７９５４号、米国特許第６，４１３，７４６号及び同第６，６６０，５０１号、ならびに国際出願公開ＷＯ０４／００９８２３において見い出すことができる。
【０３２２】
様々な哺乳類または昆虫細胞培養系もまた、組換えＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、抗ＡＬＫ７抗体、例えば、全長ＡＬＫ７抗体及びＡＬＫ７結合性抗体断片、ならびにそれらのバリアント及び誘導体）を発現するために有利に使用することができる。哺乳類細胞において組換えＡＬＫ７結合性タンパク質の発現を行うことができるが、それというのも、そのようなタンパク質が一般に、正確に折り畳まれ、適切に修飾され、完全に機能するためである。適切な哺乳類宿主細胞系の例には、ＨＥＫ−２９３及びＨＥＫ−２９３Ｔ、Ｇｌｕｚｍａｎ（Ｃｅｌｌ  ２３：１７５（１９８１））により記載されたサル腎臓細胞のＣＯＳ−７系、ならびに例えば、Ｌ細胞、Ｃ１２７、３Ｔ３、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）、ＨｅＬａ及びＢＨＫ細胞系を含む他の細胞系が含まれる。哺乳類発現ベクターは、非転写要素、例えば、発現する遺伝子に連結された複製開始点、適切なプロモーター及びエンハンサー、ならびに他の５’または３’フランキング非転写配列、ならびに５’または３’非翻訳配列、例えば、必要なリボソーム結合性部位、ポリアデニル化部位、スプライスドナー及びアクセプターサイト、ならびに転写終止配列を含んでよい。昆虫細胞において異種タンパク質を生成するためのバキュロウイルス系は、Ｌｕｃｋｏｗ  ａｎｄ  Ｓｕｍｍｅｒｓ，ＢｉｏＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ６：４７（１９８８）に概説されている。
【０３２３】
形質転換宿主細胞またはハイブリドーマにより産生されたＡＬＫ７結合性タンパク質を任意の適切な方法により精製することができる。そのような標準的な方法には、クロマトグラフィー（例えば、イオン交換、親和性及びサイジングカラムクロマトグラフィー）、遠心分離、溶解度差が含まれるか、またはそれは、タンパク質精製のための任意の他の標準的な技術による。親和性タグ、例えば、ヘキサヒスチジン、マルトース結合性ドメイン、インフルエンザコート配列及びグルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼをタンパク質に付加して、適切なアフィニティーカラム上に通過させることによる容易な精製を可能にすることができる。ＡＬＫ７結合性タンパク質を、タンパク質分解、核磁気共鳴及びＸ線結晶学などの技術を使用して物理的に特徴付けることもできる。
【０３２４】
例えば、組換えＡＬＫ７結合性タンパク質を培養培地に分泌する系からの上清を初めに、市販のタンパク質濃縮フィルター、例えば、ＡｍｉｃｏｎまたはＭｉｌｌｉｐｏｒｅ  Ｐｅｌｌｉｃｏｎ限外濾過ユニットを使用して濃縮することができる。濃縮ステップの後に、濃縮物を、適切な精製マトリックスに適用することができる。別法では、アニオン交換樹脂、例えば、懸垂ジエチルアミノエチル（ＤＥＡＥ）基を有するマトリックスまたは基質を使用することができる。マトリックスは、アクリルアミド、アガロース、デキストラン、セルロースまたはタンパク質精製で一般に使用される他の種類であってよい。別法では、カチオン交換ステップを使用することができる。適切なカチオン交換体には、スルホプロピルまたはカルボキシメチル基を含む様々な不溶性マトリックスが含まれる。最後に、疎水性ＲＰ−ＨＰＬＣ媒体、例えば、懸垂メチルまたは他の脂肪族基を有するシリカゲルを使用する１つまたは複数の逆相高速液体クロマトグラフィー（ＲＰ−ＨＰＬＣ）ステップを使用して、ＡＬＫ７結合性タンパク質をさらに精製することができる。上述の精製ステップの一部またはすべてを、様々な組み合わせでルーチン的に使用しても、均一な組換えＡＬＫ７結合性タンパク質を得ることができる。
【０３２５】
細菌培養で生成した組換えＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、抗ＡＬＫ７抗体、例えば、全長ＡＬＫ７抗体及びＡＬＫ７結合性抗体断片ならびにそのバリアント及び誘導体）を、例えば、細胞ペレットからの最初の抽出、続く、１回または複数の濃縮、塩析、水性イオン交換またはサイズ排除クロマトグラフィーステップにより単離することができる。高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）は、最終精製ステップのために使用することができる。組換えタンパク質の発現で使用される微生物細胞を、凍結解凍サイクル、音波処理、機械的破壊、または細胞溶解剤の使用を含む任意の簡便な方法により破壊することができる。
【０３２６】
標的の結合性タンパク質、例えば、全長抗体及び抗原結合性抗体断片を精製するための当技術分野で公知の方法には、例えば、それぞれその全体で参照により本明細書に組み込まれる米国特許出願公開第２００８／０３１２４２５号、同第２００８／０１７７０４８号、及び同第２００９／０１８７００５号に記載されているものも含まれる。
【０３２７】
特定の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、抗体ではない。様々な方法が、タンパク質標的に対して高い親和性で結合する非抗体ポリペプチドを同定及び生成するために公知である。例えば、それぞれその全体で参照により本明細書に組み込まれるＳｋｅｒｒａ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１８：２９５−３０４（２００７），Ｈｏｓｓｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  １５：１４−２７（２００６），Ｇｉｌｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１７：６５３−６５８（２００６），Ｎｙｇｒｅｎ，ＦＥＢＳ  Ｊ．２７５：２６６８−２６７６（２００８）、及びＳｋｅｒｒａ，ＦＥＢＳ  Ｊ．２７５：２６７７−２６８３（２００８）を参照されたい。特定の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質を同定／生成するために、ファージディスプレイ技術を使用する。特定の実施形態では、ポリペプチドは、プロテインＡ、リポカリン、フィブロネクチンドメイン（例えば、フィブロネクチンＩＩＩ型（Ｆｎ３））、アンキリンコンセンサスリピートドメイン、及びチオレドキシンからなる群から選択される種類のタンパク質スキャフォールドを含む。
【０３２８】
使用方法及び医薬組成物
提供するＡＬＫ７結合性タンパク質（抗体、イムノコンジュゲート、及びポリペプチドを含む）は、これらだけに限定されないが、診断方法ならびにＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、抗ＡＬＫ７抗体）で様々な疾患及び状態を処置する、及び／または寛解させる方法を含む様々な用途で有用である。ＡＬＫ７シグナル伝達、ＡＬＫ７発現の変化と関連し、及び／またはＡＬＫ７シグナル伝達の減少により寛解し得る疾患または状態を有する対象を処置するために、ＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、抗ＡＬＫ７抗体、例えば、ＡＬＫ７に特異的に結合する全長抗体及びＡＬＫ７結合性抗体断片、ならびにそれらのバリアント及び誘導体）を使用する方法を提供する。追加の実施形態では、本開示は、本明細書において提供するＡＬＫ７結合性タンパク質及び薬学的に許容される担体を含有する医薬組成物を提供する。一部の実施形態では、本開示は、医薬品として使用するための、本明細書において提供するＡＬＫ７結合性タンパク質及び薬学的に許容される担体を含有する医薬組成物を提供する。本開示はまた、ＡＬＫ７シグナル伝達、ＡＬＫ７発現の変化と関連し、及び／またはＡＬＫ７シグナル伝達の減少により寛解し得る疾患または状態を処置する、及び／または寛解させるための、本明細書において開示する医薬組成物の使用を提供する。一部の実施形態では、本明細書において提供する医薬組成物を使用して処置される疾患または状態は、肥満（例えば、腹部肥満）；過体重；インスリン抵抗性；代謝症候群及び他の代謝性疾患または状態；脂質障害、例えば、低ＨＤＬ値、高ＬＤＬ値、高脂血症、高トリグリセリド血症または脂質異常症；リポタンパク質異常；トリグリセリドの減少；炎症（例えば、肝臓炎症及び／または脂肪組織の炎症）、脂肪肝疾患；非アルコール性脂肪肝疾患；高血糖症；耐糖能障害（ＩＧＴ）；インスリン過剰血症；高コレステロール（例えば、高ＬＤＬ値及び高コレステロール血症）；心臓血管疾患、例えば、冠動脈性心疾患を含む心疾患、鬱血性心不全、卒中、末梢血管疾患、アテローム硬化症；動脈硬化症、及び高血圧；Ｘ症候群；血管再狭窄；神経障害；網膜障害；神経変性疾患；内皮機能障害、呼吸機能障害、腎疾患（例えば、腎障害）；膵臓炎；多嚢胞性卵巣症候群；尿酸値の上昇；ヘモクロマトーシス（鉄過剰）；黒色表皮腫（皮膚上の暗色斑）；またはがん、例えば、骨髄腫（例えば、多発性骨髄腫、プラスマ細胞腫、限局性骨髄腫、及び髄外骨髄腫）、卵巣、乳房、子宮内膜、及び結腸の癌）；または上記疾患もしくは状態の１種もしくは複数と関連する別の障害／状態である。一部の実施形態では、本明細書において提供する医薬組成物を使用して処置される疾患または状態は、過体重（例えば、≧２５ｋｇ／ｍ２のＢＭＩ）と、または多すぎる体脂肪と関連する。
【０３２９】
一部の実施形態では、医薬組成物は、ＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、抗ＡＬＫアンタゴニスト抗体）及び薬学的に許容される担体を含み、ＡＬＫ７結合性タンパク質はさらに、標識基またはエフェクター基を含む。「標識」は、スクリーニングにおいて検出を可能にするために付加されている１種または複数の元素、同位体、または化学化合物を指す。標識は一般に、３つの群：（ａ）放射性または重同位体であり得る同位体標識、（ｂ）蛍光及び測色色素（ｃｏｌｏｒｉｍｅｔｒｉｃ  ｄｙｅ）、または分子、例えば、他の標識方法を可能にするビオチンを含み得る小分子標識、ならびに（ｃ）抗体により認識される融合パートナーとして組み込まれたエピトープであってよい免疫標識に該当し、「標識基」は、任意の検出可能な標識を指す。一部の実施形態では、潜在的な立体障害を減少させるために、標識基を、スペーサー（例えば、ペプチドスペーサー）を介してＡＬＫ７結合性タンパク質にカップリングさせる。標識を、任意の位置で化合物に組み込んでよく、タンパク質発現中にｉｎ  ｖｉｔｒｏまたはｉｎ  ｖｉｖｏで組み込んでよい。タンパク質を標識するための様々な方法は、当技術分野で公知であり、提供する方法を行う際に使用してよい。追加の実施形態では、標識基は、二次レポーターにより認識される同位体標識、磁気標識、レドックス活性部分、光学色素、ビオチン化基及びポリペプチドエピトープからなる群から選択される。一部の実施形態では、標識基は、蛍光タンパク質、例えば、緑色蛍光タンパク質またはその誘導体（例えば、強化ＧＦＰ、青色蛍光タンパク質またはその誘導体（例えば、ＥＢＦＰ（強化青色蛍光タンパク質）、ＥＢＦＰ２、Ａｚｕｒｉｔｅ、ｍＫａｌａｍａ１、シアン蛍光タンパク質またはその誘導体（例えば、ＥＣＦＰ（強化シアン蛍光タンパク質）、Ｃｅｒｕｌｅａｎ、ＣｙＰｅｔ）、黄色蛍光タンパク質またはその誘導体（例えば、ＹＦＰ、Ｃｉｔｒｉｎｅ、Ｖｅｎｕｓ、ＹＰｅｔ）である。一部の実施形態では、ポリペプチドエピトープは、ビオチンシグナル伝達ペプチド、ヒスチジンペプチド（ｈｉｓ）、血球凝集素（ＨＡ）、Ｆｌａｇ、金結合性ペプチドから選択されるメンバーである。追加の実施形態では、エフェクター基は、放射性同位体、放射性ヌクレオチド、毒素、治療薬及び化学療法薬からなる群から選択される。
【０３３０】
本開示のＡＬＫ７結合性タンパク質は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ及びｉｎ  ｖｉｖｏでの診断上及び治療上の利用において用途を有する。例えば、ＡＬＫ７結合性タンパク質を、培養物中の細胞に、例えば、ｉｎ  ｖｉｔｒｏまたはｉｎ  ｖｉｖｏで、または対象に投与して、様々な疾患または状態を処置、予防または診断することができる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ヒト抗体、マウス抗体、またはヒト化抗体である。
【０３３１】
ＡＬＫ７活性を遮断する方法も提供する。一部の実施形態では、方法は、ＡＬＫ７をアンタゴニストＡＬＫ７結合性タンパク質と接触させることを含む。さらなる実施形態では、アンタゴニストＡＬＫ７結合性タンパク質は、抗ＡＬＫ７抗体である。一部の事例では、方法をｉｎ  ｖｉｖｏで行う。他の事例では、方法をｉｎ  ｖｉｔｒｏで行う。一部の実施形態では、遮断されるＡＬＫ７活性は、下記から選択される（ａ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンドの存在下で、ＡＬＫ７及びＡｃｔＲＩＩ受容体を発現する細胞の表面の上で、ＡＬＫ７、ＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）を含有する複合体の形成を減少させる；（ｂ）ＡＬＫ７への結合について、１つまたは複数のＩＩ型受容体と競合する；（ｃ）ＡＬＫ７への結合について、１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３及び／またはＧＤＦ８）と競合する；（ｄ）１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＡＬＫ７のリン酸化を減少させる；（ｅ）１種または複数のＴＧＦ−ベータリガンド（例えば、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡＢ、及び／またはＮｏｄａｌ）の存在下で、ＡＬＫ７及びＩＩ型受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢ）を発現する細胞におけるＳｍａｄ（例えば、Ｓｍａｄ２及び／またはＳｍａｄ３）のリン酸化を減少させる；（ｆ）≦１ｎＭ及び≧１ｐＭのＫＤで、ＡＬＫ７に結合する（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）分析により決定した場合）、ならびに（ｇ）ＡＬＫ７、補助受容体（例えば、ｃｒｉｐｔｏ及び／またはｃｒｙｐｔｉｃ）、及び１種または複数のＴＧＦ−ベータスーパーファミリーリガンド（例えば、Ｎｏｄａｌ）を含有する複合体の形成を減少させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト（例えば、中和抗ＡＬＫ７抗体）である。さらなる実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞（例えば、白色脂肪細胞）を使用する脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態で��、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの２つ、３つ、または４つを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、上記の特徴のうちの少なくとも２つ、少なくとも３つ、または少なくとも４つを有する。
【０３３２】
一実施形態では、本開示は、疾患または状態の処置、予防及び／または寛解を提供し、これは、ＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、抗ＡＬＫアンタゴニスト抗体）を、ＡＬＫ７シグナル伝達、ＡＬＫ７発現の変化と関連し、及び／またはＡＬＫ７シグナル伝達の減少により寛解し得る疾患もしくは状態を有するか、または疾患もしくは状態を発症するリスクを有する対象に投与することを含む。別の実施形態では、処置は、ＡＬＫ７結合性タンパク質を、対象からの単離組織または細胞に投与することを含み、その際、その対象は、ＡＬＫ７発現またはＡＬＫ７シグナル伝達と関連する疾患もしくは状態を有するか、または疾患もしくは状態を発症するリスクを有する。
【０３３３】
本開示は、ＡＬＫ７結合性タンパク質及び薬学的に許容される担体を含む医薬組成物を提供する。対象において、ＡＬＫ７媒介性活性と関連する状態を処置する、及び／または寛解させる方法であって、それを必要とする対象に、本明細書において提供するＡＬＫ７結合性タンパク質を含む医薬組成物の有効量を投与することを含む方法も提供する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質を単独で投与する。他の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質を併用療法として投与する。対象においてＡＬＫ７活性を低下させる方法であって、それを必要とする対象に、ＡＬＫ７結合性タンパク質の有効量を投与することを含む方法も提供する。
【０３３４】
本明細書において提供するとおり、ＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、ＡＬＫ７に特異的に結合するアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体またはアンタゴニストＡＬＫ７結合性抗体断片）の有効量を、体重を減少させるために（例えば、体重減少を促進するために）、体重増加を減少させるために（例えば、体重増加を予防するために）、及び／または肥満を処置するために投与することができる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、本明細書において開示する抗体である。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト抗体である。一部の実施形態では、投与される抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。一部の実施形態では、投与される抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体と同じＡＬＫ７のエピトープに結合する。一部の実施形態では、投与される抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ｂまたは表３に開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。一部の実施形態では、投与される抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ｂまたは表３に開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体と同じＡＬＫ７のエピトープに結合する。特定の事例では、対象は、２型糖尿病を有する。
【０３３５】
一実施形態では、本開示は、体重を減少させる方法であって、体重を減少させることを望んでいる、またはそれを必要とする対象に、ＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、ＡＬＫ７に特異的に結合するアンタゴニスト抗体またはアンタゴニストＡＬＫ７結合性抗体断片）の有効量を投与することを含む方法を提供する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、本明細書において開示する抗体である。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト抗体である。一部の実施形態では、投与されるアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。一部の実施形態では、投与されるアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体と同じＡＬＫ７のエピトープに結合する。一部の実施形態では、投与されるアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ｂまたは表３に開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。一部の実施形態では、投与されるアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ｂまたは表３に開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体と同じＡＬＫ７のエピトープに結合する。一部の実施形態では、対象は過体重（例えば、前肥満）である。一部の実施形態では、対象は、２５ｋｇ／ｍ２以上の肥満指数（ＢＭＩ）を有する。さらなる実施形態では、対象は、２５ｋｇ／ｍ２〜２９．９ｋｇ／ｍ２、３０ｋｇ／ｍ２〜３９．９ｍｋｇ／ｍ２、２５ｋｇ／ｍ２〜３９．９ｋｇ／ｍ２、または２５ｋｇ／ｍ２〜５０ｋｇ／ｍ２のＢＭＩを有する。一部の実施形態では、対象は肥満している。一部の実施形態では、対象は、３０ｋｇ／ｍ２以上（例えば、３０〜３９．９ｋｇ／ｍ２または３０ｋｇ／ｍ２〜５０ｋｇ／ｍ２）のＢＭＩを有する。一部の実施形態では、対象は、病的に肥満している。一部の実施形態では、対象は、４０ｋｇ／ｍ２以上のＢＭＩを有する。さらなる実施形態では、対象は、４０ｋｇ／ｍ２〜４５ｋｇ／ｍ２、または４０ｋｇ／ｍ２〜５０ｋｇ／ｍ２のＢＭＩを有する。一部の実施形態では、対象は、中心性肥満（例えば、腹部脂肪及び／または内臓脂肪を含む、腹部領域における過剰な脂肪蓄積）を有する。一部の実施形態では、対象は、０．８５以上のウエスト／ヒップ周囲径比（ＷＨＲ）を有する。一部の実施形態では、対象は、末梢性肥満（例えば、ヒップ上の過剰な脂肪蓄積）を有する。一部の実施形態では、対象は、２型糖尿病を有する。ＡＬＫ７結合性タンパク質を単独で、または併用療法として投与する。一部の実施形態では、投与は、ダイエット及び／または運動に対する補助である。
【０３３６】
一実施形態では、本開示は、体重増加を減少させる方法であって、体重増加を減少させることを望んでいるか、またはそれを必要とする対象に、ＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、ＡＬＫ７に特異的に結合するアンタゴニスト抗体またはアンタゴニストＡＬＫ７結合性抗体断片）の有効量を投与することを含む方法を提供する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、本明細書において開示する抗体である。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト抗体である。一部の実施形態では、投与されるアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。一部の実施形態では、投与されるアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体と同じＡＬＫ７のエピトープに結合する。一部の実施形態では、投与されるアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ｂまたは表３に開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。一部の実施形態では、投与されるアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ｂまたは表３に開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体と同じＡＬＫ７のエピトープに結合する。一部の実施形態では、対象は過体重（例えば、前肥満）である。一部の実施形態では、対象は、２５ｋｇ／ｍ２以上の肥満指数（ＢＭＩ）を有する。さらなる実施形態では、対象は、２５ｋｇ／ｍ２〜２９．９ｋｇ／ｍ２、３０ｋｇ／ｍ２〜３９．９ｍｋｇ／ｍ２、２５ｋｇ／ｍ２〜３９．９ｋｇ／ｍ２、または２５ｋｇ／ｍ２〜５０ｋｇ／ｍ２のＢＭＩを有する。一部の実施形態では、対象は肥満している。一部の実施形態では、対象は、３０ｋｇ／ｍ２以上（例えば、３０〜３９．９ｋｇ／ｍ２または３０ｋｇ／ｍ２〜５０ｋｇ／ｍ２）のＢＭＩを有する。一部の実施形態では、対象は、病的に肥満している。一部の実施形態では、対象は、４０ｋｇ／ｍ２以上のＢＭＩを有する。さらなる実施形態では、対象は、４０ｋｇ／ｍ２〜４５ｋｇ／ｍ２、または４０ｋｇ／ｍ２〜５０ｋｇ／ｍ２のＢＭＩを有する。一部の実施形態では、対象は、２型糖尿病を有する。
【０３３７】
過剰体重と関連する疾患または状態を処置または予防する方法であって、処置または予防を必要とする対象に、ＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、ＡＬＫ７に特異的に結合するアンタゴニスト抗体またはアンタゴニストＡＬＫ７結合性抗体断片）の有効量を投与することを含む方法も提供する。一部の実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、アンタゴニスト抗体）は、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体と同じＡＬＫ７のエピトープに結合する。一部の実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質は、表１Ｂまたは表３に開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体と同じＡＬＫ７のエピトープに結合する。一実施形態では、処置または予防される疾患または状態は、肥満である。一実施形態では、処置または予防される疾患または状態は、インスリン抵抗性である。一実施形態では、処置または予防される疾患または状態は、下記からなる群から選択されるメンバーである：脂質異常症、高脂血症（総コレステロール値＞２４０ｍｇ／ｄＬ）、高コレステロール血症（例えば、＞２００ｍｇ／ｄＬ、＞２２０ｍｇ／ｄＬ、＞２４０ｍｇ／ｄＬ、＞２５０ｍｇ／ｄＬ、または＞２７５ｍｇ／ｄＬの総コレステロール値）、低ＨＤＬ血清レベル（例えば、＜４０ｍｇ／ｄＬ、＜４５ｍｇ／ｄＬ、または＜５０ｍｇ／ｄＬ）、高ＬＤＬ血清レベル（例えば、≧１００ｍｇ／ｄＬ、≧１３０ｍｇ／ｄＬ、≧１６０ｍｇ／ｄＬ、または≧１９０ｍｇ／ｄＬ）、及び高トリグリセリド血症（例えば、≧１５０ｍｇ／ｄＬ、≧１７５ｍｇ／ｄＬ、≧２００ｍｇ／ｄＬ、≧３００ｍｇ／ｄＬ、≧４００ｍｇ／ｄＬ、または≧４９９ｍｇ／ｄＬの空腹時ＴＧ値）。特定の事例では、投与は、ダイエット及び／または運動に対する補助である。
【０３３８】
別の実施形態では、本開示は、過体重である対象において体重を減少させる方法を提供する。この方法は、過体重対象に、ＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、ＡＬＫ７に特異的に結合するアンタゴニスト抗体またはアンタゴニストＡＬＫ７結合性抗体断片）の有効量を投与することを含む。一部の実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、アンタゴニスト抗体）は、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。一部の実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、アンタゴニスト抗体）は、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。一部の実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、アンタゴニスト抗体）は、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体と同じＡＬＫ７のエピトープに結合する。一部の実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、アンタゴニスト抗体）は、表１Ｂまたは表３に開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。一部の実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、アンタゴニスト抗体）は、表１Ｂまたは表３に開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。一部の実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、アンタゴニスト抗体）は、表１Ｂまたは表３に開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体と同じＡＬＫ７のエピトープに結合する。一部の実施形態では、対象は、２５ｋｇ／ｍ２以上の肥満指数（ＢＭＩ）を有する。さらなる実施形態では、対象は、２５ｋｇ／ｍ２〜２９．９ｋｇ／ｍ２、３０ｋｇ／ｍ２〜３９．９ｍｋｇ／ｍ２、２５ｋｇ／ｍ２〜３９．９ｋｇ／ｍ２、または２５ｋｇ／ｍ２〜５０ｋｇ／ｍ２、または２７〜４０ｋｇ／ｍ２のＢＭＩを有する。一部の実施形態では、対象は肥満している。一部の実施形態では、対象は、３０ｋｇ／ｍ２以上（例えば、３０〜３９．９ｋｇ／ｍ２または３０ｋｇ／ｍ２〜５０ｋｇ／ｍ２）のＢＭＩを有する。ＡＬＫ７結合性タンパク質を単独または併用療法として投与する。一部の実施形態では、投与は、ダイエット及び／または運動に対する補助である。
【０３３９】
一実施形態では、本開示は、肥満対象において体重を減少させる方法を提供する。この方法は、対象に、ＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、ＡＬＫ７に特異的に結合するアンタゴニスト抗体またはアンタゴニストＡＬＫ７結合性抗体断片）の有効量を投与することを含む。一部の実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、アンタゴニスト抗体）は、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。一部の実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、アンタゴニスト抗体）は、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体と同じＡＬＫ７のエピトープに結合する。一部の実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、アンタゴニスト抗体）は、表１Ｂまたは表３に開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。一部の実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、アンタゴニスト抗体）は、表１Ｂまたは表３に開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体と同じＡＬＫ７のエピトープに結合する。一部の実施形態では、対象は、３０ｋｇ／ｍ２以上（例えば、３０〜３９．９ｋｇ／ｍ２または３０ｋｇ／ｍ２〜５０ｋｇ／ｍ２のＢＭＩを有する。一部の実施形態では、対象は、４０ｋｇ／ｍ２以上のＢＭＩを有する。一部の実施形態では、対象は、中心性肥満（例えば、腹部脂肪及び／または内臓脂肪を含む、腹部領域における過剰な脂肪蓄積）を有する。一部の実施形態では、対象は、０．８５以上のウエスト／ヒップ周囲径比（ＷＨＲ）を有する。一部の実施形態では、対象は、末梢性肥満（例えば、ヒップ上の過剰な脂肪蓄積）を有する。ＡＬＫ７結合性タンパク質を単独で、または併用療法として投与する。一部の実施形態では、投与は、ダイエット及び／または運動に対する補助である。
【０３４０】
別の実施形態では、本開示は、肥満または肥満と関連する疾患もしくは状態を処置する、及び／または寛解させる方法であって、肥満対象に、ＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、ＡＬＫ７に特異的に結合するアンタゴニスト抗体またはアンタゴニストＡＬＫ７結合性抗体断片）の有効量を投与することを含む方法を提供する。一部の実施形態では、アンタゴニストＡＬＫ７結合性タンパク質は、本明細書において開示する抗体である。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、本明細書において開示する抗体である。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト抗体である。一部の実施形態では、投与されるアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。一部の実施形態では、投与されるアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体と同じＡＬＫ７のエピトープに結合する。一部の実施形態では、投与されるアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ｂまたは表３に開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。一部の実施形態では、投与されるアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ｂまたは表３に開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体と同じＡＬＫ７のエピトープに結合する。一部の実施形態では、対象は、３０ｋｇ／ｍ２以上のＢＭＩを有する。さらなる実施形態では、対象は、３０〜３９．９ｋｇ／ｍ２または３０ｋｇ／ｍ２〜５０ｋｇ／ｍ２のＢＭＩを有する。一部の実施形態では、対象は、病的に肥満している。一部の実施形態では、対象は、４０ｋｇ／ｍ２以上の体ＢＭＩを有する。さらなる実施形態では、対象は、４０ｋｇ／ｍ２〜４５ｋｇ／ｍ２、または４０ｋｇ／ｍ２〜５０ｋｇ／ｍ２のＢＭＩを有する。一部の実施形態では、対象は、２型糖尿病を有する。一部の実施形態では、対象は、３０ｋｇ／ｍ２以上（例えば、３０〜３９．９ｋｇ／ｍ２）のＢＭＩを有する。一部の実施形態では、対象は、少なくとも４０ｋｇ／ｍ２のＢＭＩを有する。一部の実施形態では、対象は、中心性肥満（例えば、腹部脂肪及び／または内臓脂肪を含む、腹部領域における過剰な脂肪蓄積）を有する。一部の実施形態では、対象は、０．８５以上のウエスト／ヒップ周囲径比（ＷＨＲ）を有する。一部の実施形態では、対象は、末梢性肥満（例えば、ヒップ上の過剰な脂肪蓄積）を有する。ＡＬＫ７結合性タンパク質を単独で、または併用療法として投与する。一部の実施形態では、投与は、ダイエット及び／または運動に対する補助である。
【０３４１】
肥満と関連する疾患または状態を処置または予防する方法であって、処置または予防を必要とする対象に、ＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、ＡＬＫ７に特異的に結合するアンタゴニスト抗体またはアンタゴニストＡＬＫ７結合性抗体断片）の有効量を投与することを含む方法も提供する。一部の実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、アンタゴニスト抗体）は、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。一部の実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、アンタゴニスト抗体）は、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体と同じＡＬＫ７のエピトープに結合する。一部の実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、アンタゴニスト抗体）は、表１Ｂまたは表３に開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。一部の実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、アンタゴニスト抗体）は、表１Ｂまたは表３に開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体と同じＡＬＫ７のエピトープに結合する。一実施形態では、処置または予防される疾患または状態は、脂質異常症、高脂血症（総コレステロール値＞２４０ｍｇ／ｄＬ）、高コレステロール血症（例えば、＞２００ｍｇ／ｄＬ、＞２２０ｍｇ／ｄＬ、＞２４０ｍｇ／ｄＬ、＞２５０ｍｇ／ｄＬ、または＞２７５ｍｇ／ｄＬの総コレステロール値）、低ＨＤＬ血清レベル（例えば、＜４０ｍｇ／ｄＬ、＜４５ｍｇ／ｄＬ、または＜５０ｍｇ／ｄＬ）、高ＬＤＬ血清レベル（例えば、≧１００ｍｇ／ｄＬ、≧１３０ｍｇ／ｄＬ、≧１６０ｍｇ／ｄＬ、または≧１９０ｍｇ／ｄＬ）、及び高トリグリセリド血症（例えば、≧１５０ｍｇ／ｄＬ、≧１７５ｍｇ／ｄＬ、≧２００ｍｇ／ｄＬ、≧３００ｍｇ／ｄＬ、≧４００ｍｇ／ｄＬ、または≧４９９ｍｇ／ｄＬの空腹時ＴＧ値）からなる群から選択されるメンバーである。一実施形態では、処置または予防される疾患または状態は、心臓血管疾患である。追加の一実施形態では、処置または予防される疾患または状態は、高血圧（高い血圧）、心筋梗塞、卒中、末梢動脈疾患、血圧調節機能障害、動脈硬化性鬱血性心不全、アテローム硬化症、冠動脈性心疾患、または微小血管性疾患である。一実施形態では、処置または予防される疾患または状態は、炎症である。別の実施形態では、処置または予防される疾患または状態は、網膜障害、腸疾患、潰瘍性大腸炎、及び喘息、炎症（例えば、肝臓の炎症及び／または脂肪組織の炎症）の群から選択されるメンバーである。一実施形態では、処置または予防される疾患または状態は、肝臓疾患である。一実施形態では、処置または予防される肝臓疾患または状態は、ＮＡＦＬＤである。一実施形態では、肝臓疾患は脂肪肝である。一実施形態では、肝臓疾患はＮＡＳＨである。別の実施形態では、処置または予防される疾患または状態は、脂肪性肝炎、脂肪症、線維症、及び／または硬変の群から選択されるメンバーである。一実施形態では、処置または予防される疾患または状態は、白内障、黄斑変性、閉塞性睡眠無呼吸、静脈炎、痛風、変形性関節症、胆嚢疾患、腎疾患、肺疾患（例えば、喘息、低換気症候群、または呼吸機能障害）、及び／またはがん（例えば、卵巣、乳房、子宮内膜、肝臓、腎臓、及び／または結腸の癌、及び／またはがん転移（例えば、リンパ性転移、血流転移、及び／または腫瘍成長及び侵襲）からなる群から選択されるメンバーである。一実施形態では、処置または予防される疾患または状態は感染である。一実施形態では、処置または予防される疾患または状態は、回復が遅いか、または回復しない創傷である。特定の事例では、投与は、ダイエット及び／または運動に対する補助である。
【０３４２】
一実施形態では、本開示は、肝臓脂肪を減少させる方法であって、それを必要とする対象に、ＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、ＡＬＫ７に特異的に結合するアンタゴニスト抗体またはアンタゴニストＡＬＫ７結合性抗体断片）の有効量を投与することを含む方法を提供する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、本明細書において開示する抗体である。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト抗体である。一部の実施形態では、投与されるアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。一部の実施形態では、投与されるアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体と同じＡＬＫ７のエピトープに結合する。一部の実施形態では、投与されるアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ｂまたは表３に開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。一部の実施形態では、投与されるアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ｂまたは表３に開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体と同じＡＬＫ７のエピトープに結合する。一部の実施形態では、対象は過体重（例えば、前肥満）である。一部の実施形態では、対象は、２５ｋｇ／ｍ２以上の肥満指数（ＢＭＩ）を有する。さらなる実施形態では、対象は、２５ｋｇ／ｍ２〜２９．９ｋｇ／ｍ２、３０ｋｇ／ｍ２〜３９．９ｍｋｇ／ｍ２、２５ｋｇ／ｍ２〜３９．９ｋｇ／ｍ２、または２５ｋｇ／ｍ２〜５０ｋｇ／ｍ２のＢＭＩを有する。一部の実施形態では、対象は肥満している。一部の実施形態では、対象は、３０ｋｇ／ｍ２以上（例えば、３０〜３９．９ｋｇ／ｍ２または３０ｋｇ／ｍ２〜５０ｋｇ／ｍ２）のＢＭＩを有する。一部の実施形態では、対象は、病的に肥満している。一部の実施形態では、対象は、４０ｋｇ／ｍ２以上のＢＭＩを有する。さらなる実施形態では、対象は、４０ｋｇ／ｍ２〜４５ｋｇ／ｍ２、または４０ｋｇ／ｍ２〜５０ｋｇ／ｍ２のＢＭＩを有する。一部の実施形態では、対象は、中心性肥満（例えば、腹部脂肪及び／または内臓脂肪を含む、腹部領域における過剰な脂肪蓄積）を有する。一部の実施形態では、対象は、０．８５以上のウエスト／ヒップ周囲径比（ＷＨＲ）を有する。一部の実施形態では、対象は、末梢性肥満（例えば、ヒップ上の過剰な脂肪蓄積）を有する。一部の実施形態では、対象は、２型糖尿病を有する。ＡＬＫ７結合性タンパク質を単独で、または併用療法として投与する。一部の実施形態では、投与は、ダイエット及び／または運動に対する補助である。
【０３４３】
別の実施形態では、本開示は、２型糖尿病または糖尿病と関連する疾患もしくは状態を処置、寛解、及び／または予防する方法であって、２型糖尿病を有する、または２型糖尿病を発症するリスクを有する対象に、ＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、ＡＬＫ７に特異的に結合するアンタゴニスト抗体またはアンタゴニストＡＬＫ７結合性抗体断片）の有効量を投与することを含む方法を提供する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、本明細書において開示する抗体である。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト抗体である。一部の実施形態では、投与されるアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。一部の実施形態では、投与されるアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体と同じＡＬＫ７のエピトープに結合する。一部の実施形態では、投与されるアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ｂまたは表３に開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。一部の実施形態では、投与されるアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ｂまたは表３に開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体と同じＡＬＫ７のエピトープに結合する。一部の実施形態では、対象は、３０ｋｇ／ｍ２以上（例えば、３０〜３９．９ｋｇ／ｍ２）の肥満指数ＢＭＩを有する。一部の実施形態では、対象は、少なくとも４０ｋｇ／ｍ２のＢＭＩを有する。一部の実施形態では、対象は、中心性肥満（例えば、腹部脂肪及び／または内臓脂肪を含む、腹部領域における過剰な脂肪蓄積）を有する。一部の実施形態では、対象は、０．８５以上のウエスト／ヒップ周囲径比（ＷＨＲ）を有する。一部の実施形態では、対象は、末梢性肥満（例えば、ヒップ上の過剰な脂肪蓄積）を有する。ＡＬＫ７結合性タンパク質を単独で、または併用療法として投与する。一部の実施形態では、投与は、ダイエット及び／または運動に対する補助である。
【０３４４】
糖尿病と関連する疾患または状態を処置、寛解または予防する方法であって、糖尿病を有する対象に、ＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、ＡＬＫ７に特異的に結合するアンタゴニスト抗体またはアンタゴニストＡＬＫ７結合性抗体断片）の有効量を投与することを含む方法も提供する。一部の実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、アンタゴニスト抗体）は、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。一部の実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、アンタゴニスト抗体）は、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体と同じＡＬＫ７のエピトープに結合する。一部の実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、アンタゴニスト抗体）は、表１Ｂまたは表３に開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。一部の実施形態では、投与されるＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、アンタゴニスト抗体）は、表１Ｂまたは表３に開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体と同じＡＬＫ７のエピトープに結合する。一実施形態では、処置または予防される疾患または状態は、脂質異常症、高脂血症（総コレステロール値＞２４０ｍｇ／ｄＬ）、高コレステロール血症（例えば、＞２００ｍｇ／ｄＬ、＞２２０ｍｇ／ｄＬ、＞２４０ｍｇ／ｄＬ、＞２５０ｍｇ／ｄＬ、または＞２７５ｍｇ／ｄＬの総コレステロール値）、低ＨＤＬ血清レベル（例えば、＜４０ｍｇ／ｄＬ、＜４５ｍｇ／ｄＬ、または＜５０ｍｇ／ｄＬ）、高ＬＤＬ血清レベル（例えば、≧１００ｍｇ／ｄＬ、≧１３０ｍｇ／ｄＬ、≧１６０ｍｇ／ｄＬ、または≧１９０ｍｇ／ｄＬ）、及び高トリグリセリド血症（例えば、≧１５０ｍｇ／ｄＬ、≧１７５ｍｇ／ｄＬ、≧２００ｍｇ／ｄＬ、≧３００ｍｇ／ｄＬ、≧４００ｍｇ／ｄＬ、または≧４９９ｍｇ／ｄＬの空腹時ＴＧ値）からなる群から選択されるメンバーである。一実施形態では、処置または予防される疾患または状態は心臓血管疾患である。追加の一実施形態では、処置または予防される疾患または状態は、高血圧（高い血圧）、心筋梗塞、卒中、末梢動脈疾患、血圧調節機能障害、動脈硬化症である。一実施形態では、処置または予防される疾患または状態は、炎症（例えば、全身炎症、肝臓の炎症、及び脂肪組織の炎症）である。別の実施形態では、処置または予防される疾患または状態は、アテローム硬化症、網膜障害、腸疾患、潰瘍性大腸炎、喘息、肝臓の炎症、及び／または脂肪組織の炎症）の群から選択されるメンバーである。一実施形態では、処置または予防される疾患または状態は、肝臓疾患である。別の実施形態では、処置または予防される疾患または状態は、脂肪肝疾患、脂肪性肝炎、脂肪症、及び／または硬変の群から選択されるメンバーである。一実施形態では、処置または予防される疾患または状態は、白内障、黄斑変性、閉塞性睡眠無呼吸、静脈炎、痛風、変形性関節症、胆嚢疾患、高コレステロール、肺疾患（例えば、喘息、及び／または低換気症候群）、神経障害、網膜障害、脈管障害、細小血管症、腎障害、腎不全、及び／またはがん（例えば、卵巣、乳房、子宮内膜、肝臓、腎臓、膵臓、及び／または結腸癌）、及びがん転移（例えば、リンパ性転移、血流転移、及び／または腫瘍成長及び侵襲）からなる群から選択されるメンバーである。一実施形態では、処置または予防される疾患または状態は、感染または回復しない創傷である。特定の事例では、投与は、ダイエット及び／または運動に対する補助である。
【０３４５】
本開示はまた、対象において血液−脂質プロファイルを改善するための方法であって、そのような処置を必要とする対象に、ＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、ＡＬＫ７に特異的に結合するアンタゴニスト（中和）抗体またはアンタゴニストＡＬＫ７結合性抗体断片）の有効量を投与することを含む方法を提供する。一部の実施形態では、アンタゴニストＡＬＫ７結合性タンパク質は、本明細書において開示する抗体である。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、本明細書において開示する抗体である。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト抗体である。一部の実施形態では、投与されるアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。一部の実施形態では、投与されるアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体と同じＡＬＫ７のエピトープに結合する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、ＡＬＫ７アンタゴニスト抗体である。一部の実施形態では、投与されるアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ｂまたは表３に開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。一部の実施形態では、投与されるアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ｂまたは表３に開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体と同じＡＬＫ７のエピトープに結合する。一部の実施形態では、本開示は、ＬＤＬコレステロールの値を低下させる、またはＨＤＬ−コレステロールの値を上昇させるための方法を提供する。一実施形態では、対象は、脂質異常症を有する。別の実施形態では、対象は、高い血清中脂質（例えば、コレステロール（高コレステロール血症）及び／またはトリグリセリド（例えば、高トリグリセリド血症）を有する。一実施形態では、対象は、ＬＤＬ−Ｃ≧１００ｍｇ／ｄＬ、≧１３０ｍｇ／ｄＬ、または≧１６０ｍｇ／ｄＬ）を有する。一実施形態では、対象は、ＴＧ≧１５０ｍｇ／ｄＬ、≧１６０ｍｇ／ｄＬ、≧１７０ｍｇ／ｄＬ）を有する。一実施形態では、対象は、高い血漿中インスリン値（インスリン過剰血症；例えば、＞２０ｕｇ／ｍｌの空腹時インスリン値が１００を超え得る）を有する。一部の実施形態では、対象はＩＩ型糖尿病を有する。
【０３４６】
一実施形態では、本開示は、代謝性疾患もしくは障害または代謝性疾患もしくは障害と関連する状態を処置または予防する方法であって、それを必要とする対象に、ＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、ＡＬＫ７に特異的に結合するアンタゴニスト抗体またはアンタゴニストＡＬＫ７結合性抗体断片）の有効量を投与することを含む方法を提供する。一実施形態では、処置される代謝性疾患、障害、または状態は、高血糖症（例えば、空腹状態で、または経口ブドウ糖負荷試験中のグルコース投与後に＞１３０ｍｇ／ｄＬ）である。一実施形態では、処置される代謝性疾患、障害、または状態は、脂質代謝疾患、障害、または状態である。一実施形態では、処置される代謝性疾患、障害、または状態は、脂質異常症である。さらなる一実施形態では、脂質代謝疾患、障害、または状態は、低ＨＤＬ値、高ＬＤＬ値、高トリグリセリド値、高脂血症、及びリポタンパク質異常から選択されるメンバーである。一実施形態では、ＡＬＫ−７結合性タンパク質が投与される対象は、＞２００ｍｇ／ｄＬ、＞２２０ｍｇ／ｄＬ、＞２４０ｍｇ／ｄＬ、＞２５０ｍｇ／ｄＬ、または＞２７５ｍｇ／ｄＬの総コレステロール値を有する。一実施形態では、ＡＬＫ−７結合性タンパク質が投与される対象は、＜４０ｍｇ／ｄＬ、＜４５ｍｇ／ｄＬ、または＜５０ｍｇ／ｄＬ）のＨＤＬ血清レベルを有する。一実施形態では、ＡＬＫ−７結合性タンパク質が投与される対象は、ＬＤＬ血清レベル≧１００ｍｇ／ｄＬ、≧１３０ｍｇ／ｄＬ、≧１６０ｍｇ／ｄＬ、または≧１９０ｍｇ／ｄＬを有する。一実施形態では、ＡＬＫ−７結合性タンパク質を投与される対象は、≧１５０ｍｇ／ｄＬ、≧１７５ｍｇ／ｄＬ、≧２００ｍｇ／ｄＬ、≧３００ｍｇ／ｄＬ、≧４００ｍｇ／ｄＬ、または≧４９９ｍｇ／ｄＬの空腹時ＴＧ値を有する。一実施形態では、処置される代謝性疾患、障害、または状態は、グルコース代謝疾患、障害、または状態である。さらなる一実施形態では、グルコース代謝疾患、障害、または状態は、グルコース不耐性、インスリン抵抗性、耐糖能障害（ＩＧＴ）、空腹時血糖異常（ＩＦＧ）から選択されるメンバーである。一実施形態では、処置される代謝性疾患、障害、または状態は、高尿酸値、ＮＡＦＬＤ、脂肪肝、ＮＡＳＨ、及び多嚢胞性卵巣症候群からなる群から選択されるメンバーである。一実施形態では、処置される対象は、インスリン過剰血症を有する。一実施形態では、処置される対象は肥満している（例えば、対象は、内臓または腹部肥満を有する）。別の実施形態では、処置される対象は、ＩＩ型糖尿病を有する。
【０３４７】
代謝症候群は、心疾患のリスクを増強する一連の障害を伴う状態である。代謝症候群の主な構成成分は、過体重、心臓血管パラメーター（高血圧、脂質異常症、血中での高トリグリセリド値及び／または低ＨＤＬ値）、アテローム硬化症、糖尿病、及び／またはインスリン抵抗性である。各構成成分も危険因子であるが、これらの構成成分のいくつか、すなわち、代謝症候群を有する対象は、心疾患に高度に罹患しやすい。本開示はまた、代謝症候群の上記の構成成分のうちの１つ、２つ、３つ、またはそれ以上を処置または予防するための方法であって、処置を必要とする対象に、ＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、ＡＬＫ７に特異的に結合するアンタゴニスト抗体またはアンタゴニストＡＬＫ７結合性抗体断片）の有効量を投与することを含む方法を提供する。
【０３４８】
加えて、心臓血管疾患または状態を処置する、予防する、または寛解させる方法であって、それを必要とする対象に、ＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、ＡＬＫ７に特異的に結合するアンタゴニスト抗体またはアンタゴニストＡＬＫ７結合性抗体断片）の有効量を投与することを含む方法を提供する。一実施形態では、処置、予防、または寛解される心臓血管疾患または状態は、アテローム硬化症である。一実施形態では、処置、予防、または寛解される心臓血管疾患または状態は、高血圧（例えば、安静状態で血圧＞１３０／８０ｍｍＨｇまたは＞１４０／９０ｍｍＨｇ）である。一実施形態では、心臓血管疾患または状態は、末梢血管疾患、微小血管性もしくは微小血管性合併症、卒中、及び／または網膜障害である。一実施形態では、心臓血管疾患は、アテローム硬化症（冠動脈性心疾患）である。
【０３４９】
一実施形態では、本開示は、炎症性疾患または状態を処置する、及び／または寛解させるための方法であって、それを必要とする対象に、ＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、ＡＬＫ７に特異的に結合するアンタゴニスト抗体またはアンタゴニストＡＬＫ７結合性抗体断片）の有効量を投与することを含む方法を提供する。一実施形態では、炎症性疾患または状態は、慢性炎症である。別の実施形態では、炎症性疾患または状態は、脂肪組織の炎症である。別の実施形態では、疾患または状態は、肝臓の炎症である。一実施形態では、疾患または状態は、ＮＡＦＬＤである。さらなる一実施形態では、疾患または状態は、脂肪肝である。さらなる一実施形態では、疾患または状態は、脂肪症（例えば、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）である。
【０３５０】
本開示は、血糖コントロールを改善する方法であって、処置を必要とする対象に、ＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、ＡＬＫ７に特異的に結合するアンタゴニスト抗体またはアンタゴニストＡＬＫ７結合性抗体断片）の有効量を投与することを含む方法も提供する。一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質が投与される対象は、＞１３０、＞１３５、＞１４０、＞１４５、または＞１５０ｍｇ／ｄＬの空腹時血糖値を有する。一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質が投与される対象は、食事から２時間後に＞１８０、＞１８５、＞１９０、＞１９５、または＞２００ｍｇ／ｄＬの食後血糖値を有する。特定の事例では、投与は、ダイエット及び／または運動に対する補助である。投与はまた、体重を減少させる、または肥満を処置することができる。特定の事例では、対象は、２型糖尿病を有する。特定の事例では、対象は、２７〜４０ｋｇ／ｍ２のＢＭＩを有する。特定の事例では、対象は、３０〜３９．９ｋｇ／ｍ２のＢＭＩを有する。特定の事例では、対象は、少なくとも４０のＢＭＩを有する。特定の事例では、対象は過体重である。特定の事例では、対象は肥満している。血糖コントロールの改善は、混合食試験などの当技術分野で公知の技術を使用して評価することができる。
【０３５１】
本開示は、対象において高血糖症または高血糖症と関連する状態を処置する、予防する、または寛解させるための組成物及び方法であって、そのような処置を必要とする対象に、ＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、ＡＬＫ７に特異的に結合するアンタゴニスト抗体またはアンタゴニストＡＬＫ７結合性抗体断片）の有効量を投与することを含む組成物及び方法も提供する。一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質が投与される対象は、＞１３０、＞１３５、＞１４０、＞１４５、または＞１５０ｍｇ／ｄＬの空腹時血糖値を有する。一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質が投与される対象は、食事から２時間後に＞１８０、＞１８５、＞１９０、＞１９５、または＞２００ｍｇ／ｄＬの食後血糖値を有する。一実施形態では、処置、予防または寛解の結果は、処置前の対象における血清レベルと比較した場合に、グルコースの血清レベルの低下、トリグリセリドの血清レベルの低下、インスリンの血清レベルの低下、及び／または非エステル化脂肪酸の血清レベルの低下からなる群から選択されるメンバーである。一実施形態では、処置、予防または寛解の結果は、処置前の対象の体温と比較した場合に、体温の約０．４℃〜１℃の上昇である。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、アンタゴニスト抗ＡＬＫ７タンパク質である。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、アンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体またはそのＡＬＫ７結合性断片である。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、本明細書において開示するアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体またはそのＡＬＫ７結合性断片である。一部の実施形態では、投与されるアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。一部の実施形態では、投与されるアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体と同じＡＬＫ７のエピトープに結合する。一部の実施形態では、投与されるアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ｂまたは表３に開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。一部の実施形態では、投与されるアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ｂまたは表３に開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体と同じＡＬＫ７のエピトープに結合する。一部の実施形態では、投与はまた、対象の体重を減少させる。
【０３５２】
別の実施形態では、本開示は、対象において血漿中インスリン値を低下させる方法であって、そのような処置を必要とする対象に、ＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、ＡＬＫ７に特異的に結合するアンタゴニスト抗体またはアンタゴニストＡＬＫ７結合性抗体断片）の有効量を投与することを含む方法を提供する。一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質が投与される対象は、＞１３０、＞１３５、＞１４０、＞１４５、または＞１５０ｍｇ／ｄＬの空腹時血糖値を有する。一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質が投与される対象は、食事から２時間後に＞１８０、＞１８５、＞１９０、＞１９５、または＞２００ｍｇ／ｄＬの食後血糖値を有する。一実施形態では、対象は過体重である。一実施形態では、対象は肥満している。別の実施形態では、対象は２型糖尿病を有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、アンタゴニスト抗ＡＬＫ７タンパク質である。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、アンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体またはそのＡＬＫ７結合性断片である。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、本明細書において開示するアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体またはそのＡＬＫ７結合性断片である。一部の実施形態では、投与されるアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。一部の実施形態では、投与されるアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体と同じＡＬＫ７のエピトープに結合する。一部の実施形態では、投与されるアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ｂまたは表３に開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。一部の実施形態では、投与されるアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ｂまたは表３に開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体と同じＡＬＫ７のエピトープに結合する。
【０３５３】
本開示は、対象において高血糖症または高血糖症と関連する状態を処置する、予防する、または寛解させるための組成物及び方法であって、そのような処置を必要とする対象に、ＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、ＡＬＫ７に特異的に結合するアンタゴニスト抗体またはアンタゴニストＡＬＫ７結合性抗体断片）の有効量を投与することを含む組成物及び方法も提供する。一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質が投与される対象は、＞１３０、＞１３５、＞１４０、＞１４５、または＞１５０ｍｇ／ｄＬの空腹時血糖値を有する。一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質が投与される対象は、食事から２時間後に＞１８０、＞１８５、＞１９０、＞１９５、または＞２００ｍｇ／ｄＬの食後血糖値を有する。一実施形態では、処置、予防または寛解の結果は、処置前の対象における血清レベルと比較した場合に、グルコースの血清レベルの低下、トリグリセリドの血清レベルの低下、インスリンの血清レベルの低下、及び／または非エステル化脂肪酸の血清レベルの低下からなる群から選択されるメンバーである。一実施形態では、処置、予防または寛解の結果は、処置前の対象の体温と比較した場合に、体温の約０．４℃〜１℃の上昇である。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、アンタゴニスト抗ＡＬＫ７タンパク質である。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、アンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体またはそのＡＬＫ７結合性断片である。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、本明細書において開示するアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体またはＡＬＫ７結合性断片である。一部の実施形態では、投与されるアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。一部の実施形態では、投与されたアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体投与されたアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体と同じＡＬＫ７のエピトープに結合する。一部の実施形態では、投与されるアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ｂまたは表３に開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。一部の実施形態では、投与されるアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ｂまたは表３に開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体と同じＡＬＫ７のエピトープに結合する。一部の実施形態では、投与はまた、対象の体重を減少させる。
【０３５４】
別の実施形態では、本開示は、対象において血漿中インスリン値を低下させる方法であって、そのような処置を必要とする対象に、ＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、ＡＬＫ７に特異的に結合するアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体またはアンタゴニストＡＬＫ７結合性抗体断片）の有効量を投与することを含む方法を提供する。一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質が投与される対象は、＞１３０、＞１３５、＞１４０、＞１４５、または＞１５０ｍｇ／ｄＬの空腹時血糖値を有する。一実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質が投与される対象は、食事から２時間後に＞１８０、＞１８５、＞１９０、＞１９５、または＞２００ｍｇ／ｄＬの食後血糖値を有する。一実施形態では、対象は過体重である。一実施形態では、対象は肥満している。別の実施形態では、対象は２型糖尿病を有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質はアンタゴニスト抗ＡＬＫ７タンパク質である。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質はアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体またはそのＡＬＫ７結合性断片である。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、本明細書において開示するアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体またはそのＡＬＫ７結合性断片である。一部の実施形態では、投与されるアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。一部の実施形態では、投与されるアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体と同じＡＬＫ７のエピトープに結合する。一部の実施形態では、投与されるアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ｂまたは表３に開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。一部の実施形態では、投与されるアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ｂまたは表３に開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体と同じＡＬＫ７のエピトープに結合する。
【０３５５】
別の実施形態では、本開示は、対象において肝臓疾患を処置する、予防する、または寛解させる方法であって、肝臓疾患を有する対象に、ＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、ＡＬＫ７に特異的に結合するアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体またはアンタゴニストＡＬＫ７結合性抗体断片）の有効量を投与することを含む方法を提供する。一実施形態では、対象は、肝臓の炎症を有する。一実施形態では、対象はＮＡＦＬＤを有する。一実施形態では、対象は脂肪肝を有する。別の実施形態では、対象はＮＡＳＨを有する。一実施形態では、処置、予防または寛解される肝臓疾患は、線維症、瘢痕化、硬変、または肝不全である。別の実施形態では、処置、予防または寛解される肝臓疾患は肝臓癌である。一実施形態では、対象は過体重である。別の実施形態では、対象は肥満している。別の実施形態では、対象は２型糖尿病を有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、アンタゴニスト抗ＡＬＫ７タンパク質である。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、アンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体またはそのＡＬＫ７結合性断片である。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、本明細書において開示するアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体またはそのＡＬＫ７結合性断片である。一部の実施形態では、投与されるアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。一部の実施形態では、投与されるアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体と同じＡＬＫ７のエピトープに結合する。一部の実施形態では、投与されるアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ｂまたは表３に開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。一部の実施形態では、投与されるアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ｂまたは表３に開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体と同じＡＬＫ７のエピトープに結合する。
【０３５６】
追加の実施形態では、本開示は、がんまたはがんと関連する状態を処置する／寛解させる方法であって、それを必要とする対象に、ＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、抗ＡＬＫ７抗体またはそのＡＬＫ７結合性抗体断片）の有効量を投与することを含む方法を提供する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、抗ＡＬＫ７抗体またはそのＡＬＫ７結合性断片である。一部の実施形態では、対象は、骨髄腫（例えば、多発性骨髄腫、プラスマ細胞腫、限局性骨髄腫、または髄外骨髄腫）、または卵巣、乳房、結腸、子宮内膜、肝臓、腎臓、膵臓、胃、子宮もしくは結腸の癌からなる群から選択されるがんを有する。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質を、リンパ性転移、血流転移、腫瘍成長、または腫瘍侵襲を処置または予防するために投与する。
【０３５７】
一実施形態では、本開示は、がんを処置する方法であって、ＡＬＫ７を発現するがん細胞、腫瘍関連ストローマ細胞、または内皮細胞をＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、ＡＬＫ７に特異的に結合するアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体またはアンタゴニストＡＬＫ７結合性抗体断片）と接触させることを含む方法を提供する。追加の実施形態では、がん細胞は、骨髄腫（例えば、多発性骨髄腫、プラスマ細胞腫、限局性骨髄腫、または髄外骨髄腫）、卵巣、乳房、結腸、子宮内膜、肝臓、腎臓、膵臓、胃、子宮及び／または結腸の癌細胞である。一部の実施形態では、接触させる細胞は、がん系からの細胞である。一部の実施形態では、がん細胞をｉｎ  ｖｉｖｏで接触させる。
【０３５８】
一実施形態では、本開示は、脂肪分解を増加させるための方法であって、白色脂肪細胞または脂肪組織を、アンタゴニストＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、ＡＬＫ７に特異的に結合するアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体またはアンタゴニストＡＬＫ７結合性抗体断片）と接触させることを含む方法を提供する。一部の実施形態では、ＡＬＫ−７結合性タンパク質は、脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪細胞における脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質は、脂肪分解アッセイにおける脂肪分解を５％〜１００％、１０％〜８０％、または１０％〜６０％増加させる。さらなる実施形態では、脂肪分解アッセイを、ＧＤＦ１、ＧＤＦ３、ＧＤＦ８、アクチビンＢ、アクチビンＡ／Ｂ、及びＮｏｄａｌからなる群から選択される１種または複数のＡＬＫ７リガンドの存在下で行う。一部の実施形態では、アンタゴニストＡＬＫ７結合性タンパク質は、抗体である。一部の実施形態では、アンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、本明細書において開示する抗体である。一部の実施形態では、アンタゴニスト抗体は、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。一部の実施形態では、アンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体と同じＡＬＫ７のエピトープに結合する。一部の実施形態では、投与されるアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ｂまたは表３に開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。一部の実施形態では、投与されるアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ｂまたは表３に開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体と同じＡＬＫ７のエピトープに結合する。一部の実施形態では、白色脂肪細胞または脂肪組織をｉｎ  ｖｉｔｒｏで接触させる。一部の実施形態では、分化白色脂肪細胞または脂肪組織をｉｎ  ｖｉｖｏで接触させる。一実施形態では、方法をｉｎ  ｖｉｖｏで、例えば、哺乳類対象（例えば、動物モデル）で実施する。さらなる一実施形態では、対象はヒトである。一部の実施形態では、方法は、グリセロール産生の増加をもたらす。さらなる実施形態では、方法は、脂肪細胞培養物においてグリセロール及び／または遊離脂肪酸の増加をもたらす。一部の実施形態では、方法は、脂肪細胞または組織においてトリグリセリド（ＴＧ）含分の低下をもたらす。一部の実施形態では、方法は、対象において血漿中ＴＧ値の低下をもたらす。
【０３５９】
別の実施形態では、本開示は、脂肪細胞または組織においてアドレナリン受容体−β（ＡＤＲＢ）シグナル伝達を増加させる方法を提供する。この方法は、分化白色脂肪細胞または脂肪組織を、ＡＤＲＢシグナル伝達を増加させるために十分な量のアンタゴニストＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、ＡＬＫ７に特異的に結合するアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体またはアンタゴニストＡＬＫ７結合性抗体断片）と接触させることを含む。一部の実施形態では、アンタゴニストＡＬＫ７結合性タンパク質は抗体である。一部の実施形態では、アンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は本明細書において提供する抗体を含む。一部の実施形態では、アンタゴニスト抗体は、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。一部の実施形態では、アンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体と同じＡＬＫ７のエピトープに結合する。一部の実施形態では、投与されるアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ｂまたは表３に開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。一部の実施形態では、投与されるアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ｂまたは表３に開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体と同じＡＬＫ７のエピトープに結合する。一部の実施形態では、分化白色脂肪細胞または脂肪組織をｉｎ  ｖｉｔｒｏで接触させる。一部の実施形態では、分化白色脂肪細胞または脂肪組織をｉｎ  ｖｉｖｏで接触させる。一実施形態では、方法をｉｎ  ｖｉｖｏで、例えば、哺乳類対象（例えば、動物モデル）で実施する。さらなる一実施形態では、対象はヒトである。一部の実施形態では、方法は、グリセロール産生の増加をもたらす。さらなる実施形態では、方法は、脂肪細胞培養物においてグリセロール及び／または遊離脂肪酸の増加をもたらす。一部の実施形態では、方法は、脂肪細胞または組織においてＴＧ含分の低下をもたらす。一部の実施形態では、方法は、対象において血漿中ＴＧ値の低下をもたらす。一部の実施形態では、方法は、栄養素過剰負荷の間の脂肪細胞または脂肪組織においてＡＤＲＢシグナル伝達の増加をもたらす。
【０３６０】
別の実施形態では、本開示は、脂肪細胞または脂肪組織（例えば、分化白色脂肪細胞）においてペルオキシソーム増殖因子活性化受容体−ガンマ（ＰＰＡＲガンマ）シグナル伝達を減少させる方法を提供する。この方法は、分化白色脂肪細胞または脂肪組織を、ＰＰＡＲガンマ活性を低下させるために有効な量のアンタゴニストＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、ＡＬＫ７に特異的に結合するアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体またはアンタゴニストＡＬＫ７結合性抗体断片）と接触させることを含む。一部の実施形態では、アンタゴニストＡＬＫ７結合性タンパク質は抗体である。一部の実施形態では、アンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は本明細書において提供する抗体を含む。一部の実施形態では、アンタゴニスト抗体は、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。一部の実施形態では、アンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体と同じＡＬＫ７のエピトープに結合する。一部の実施形態では、投与されるアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ｂまたは表３に開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。一部の実施形態では、投与されるアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ｂまたは表３に開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体と同じＡＬＫ７のエピトープに結合する。一部の実施形態では、分化白色脂肪細胞または脂肪組織をｉｎ  ｖｉｔｒｏで接触させる。一部の実施形態では、分化白色脂肪細胞または脂肪組織をｉｎ  ｖｉｖｏで接触させる。一実施形態では、方法をｉｎ  ｖｉｖｏで、例えば、哺乳類対象（例えば、動物モデル）で実施する。さらなる一実施形態では、対象はヒトである。一部の実施形態では、方法は、グリセロール産生の増加をもたらす。さらなる実施形態では、方法は、脂肪細胞培養物においてグリセロール及び／または遊離脂肪酸の増加をもたらす。一部の実施形態では、方法は、脂肪細胞または組織においてＴＧ含分の低下をもたらす。一部の実施形態では、方法は、対象において血漿中ＴＧ値の低下をもたらす。
【０３６１】
別の実施形態では、本開示は、脂肪細胞または脂肪組織（例えば、分化白色脂肪細胞）においてインスリン抵抗性を低下させる方法を提供する。この方法は、脂肪細胞または脂肪組織を、インスリン抵抗性を低下させるために有効な量のアンタゴニストＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、ＡＬＫ７に特異的に結合するアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体またはアンタゴニストＡＬＫ７結合性抗体断片）と接触させることを含む。一部の実施形態では、アンタゴニストＡＬＫ７結合性タンパク質は抗体である。一部の実施形態では、アンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、本明細書において提供する抗体を含む。一部の実施形態では、アンタゴニスト抗体は、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。一部の実施形態では、アンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体と同じＡＬＫ７のエピトープに結合する。一部の実施形態では、投与されるアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ｂまたは表３に開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。一部の実施形態では、投与されるアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ｂまたは表３に開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体と同じＡＬＫ７のエピトープに結合する。一部の実施形態では、分化白色脂肪細胞または脂肪組織をｉｎ  ｖｉｔｒｏで接触させる。一部の実施形態では、分化白色脂肪細胞または脂肪組織をｉｎ  ｖｉｖｏで接触させる。一実施形態では、方法をｉｎ  ｖｉｖｏで、例えば、哺乳類対象（例えば、動物モデル）で実施する。さらなる一実施形態では、対象はヒトである。
【０３６２】
別の実施形態では、本開示は、脂肪細胞または組織の代謝率を増加させる方法を提供する。この方法は、脂肪細胞または脂肪組織を、脂肪細胞または組織の代謝を増加させるために有効な量のアンタゴニストＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、ＡＬＫ７に特異的に結合するアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体またはアンタゴニストＡＬＫ７結合性抗体断片）と接触させることを含む。一部の実施形態では、アンタゴニストＡＬＫ７結合性タンパク質は抗体である。一部の実施形態では、アンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、本明細書において提供する抗体を含む。一部の実施形態では、アンタゴニスト抗体は、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。一部の実施形態では、アンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ａに開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体と同じＡＬＫ７のエピトープに結合する。一部の実施形態では、投与されるアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ｂまたは表３に開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体を交差遮断する、またはＡＬＫ７への結合についてそれと競合する。一部の実施形態では、投与されるアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体は、表１Ｂまたは表３に開示されているＶＨ及びＶＬ対を有する抗体と同じＡＬＫ７のエピトープに結合する。一部の実施形態では、分化白色脂肪細胞または脂肪組織をｉｎ  ｖｉｔｒｏで接触させる。一部の実施形態では、分化白色脂肪細胞または脂肪組織をｉｎ  ｖｉｖｏで接触させる。一実施形態では、方法をｉｎ  ｖｉｖｏで、例えば、哺乳類対象（例えば、動物モデル）で実施する。さらなる一実施形態では、対象はヒトである。
【０３６３】
本開示は、ＡＬＫ７媒介性疾患及び／または状態、例えば、肥満（例えば、腹部または内臓肥満）；過体重；インスリン抵抗性；代謝症候群及び他の代謝性疾患または状態；脂質障害、例えば、低ＨＤＬ値、高ＬＤＬ値、高脂血症、高トリグリセリド血症または脂質異常症；リポタンパク質異常；トリグリセリドの減少；炎症（例えば、肝臓炎症及び／または脂肪組織の炎症）、脂肪肝疾患；非アルコール性脂肪肝疾患；高血糖症；耐糖能障害（ＩＧＴ）；インスリン過剰血症；高コレステロール（例えば、高ＬＤＬ値及び／または高コレステロール血症）；心臓血管疾患、例えば、冠動脈性心疾患を含む心疾患、鬱血性心不全、卒中、末梢血管疾患、アテローム硬化症；動脈硬化症、及び／または高血圧；Ｘ症候群；血管再狭窄；神経障害；網膜障害；神経変性疾患；内皮機能障害、呼吸機能障害、腎疾患（例えば、腎障害）；膵臓炎；多嚢胞性卵巣症候群；尿酸値の上昇；ヘモクロマトーシス（鉄過剰）；黒色表皮腫（皮膚上の暗色斑）；及び／またはがん（例えば、骨髄腫（例えば、多発性骨髄腫、プラスマ細胞腫、限局性骨髄腫、または髄外骨髄腫）、卵巣、乳房、結腸、子宮内膜、肝臓、腎臓、膵臓、胃、子宮または結腸の癌）；及び／または上記疾患または状態のうちの１種もしくは複数と、及び／または過剰体重（例えば、≧２５ｋｇ／ｍ２のＢＭＩ）と、または多すぎる体脂肪と関連する他の障害／状態を有するか、またはそれらを発症するリスクを有する対象に、ＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、ＡＬＫ７に特異的に結合するアンタゴニスト抗ＡＬＫ７抗体またはアンタゴニストＡＬＫ７結合性抗体断片）の治療有効量を単独で、または１種または複数の追加の治療（例えば、１種または複数の追加の治療薬）と組み合わせて投与することを含む方法を提供する。
【０３６４】
治験手順の一部として、例えば、所与の処置レジメンの有効性を決定するために、血液または組織における、タンパク質レベル（例えば、ＡＬＫ７レベル）を診断的にモニタリングするための、本明細書において提供するＡＬＫ７結合性タンパク質の使用も提供する。例えば、検出を、ＡＬＫ７結合性タンパク質を検出可能な物質にカップリングさせることにより促進することができる。検出可能な物質の例には、様々な酵素、補欠分子族、蛍光物質、発光物質、生物発光物質、及び／または放射性物質が含まれる。適切な酵素の例には、ホースラディッシュペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼ、β−ガラクトシダーゼ、またはアセチルコリンエステラーゼが含まれ；適切な補欠分子族複合体の例には、ストレプトアビジン／ビオチン及びアビジン／ビオチンが含まれ；適切な蛍光物質の例には、ウンベリフェロン、フルオレセイン、フルオレセインイソチオシアナート、ローダミン、ジクロロトリアジニルアミンフルオレセイン、塩化ダンシルまたはフィコエリトリンが含まれ；発光物質の例には、ルミノールが含まれ；生物発光物質の例には、ルシフェラーゼ、ルシフェリン、及びエクオリンが含まれ；適切な放射性物質の例には、１２５Ｉ、１３１Ｉ、３５Ｓ、または３Ｈが含まれる。
【０３６５】
医薬組成物及び投与方法
ＡＬＫ７結合性タンパク質を調製し、それを必要とする対象に投与する方法は、当技術分野で通常の技能を有するものには公知であり、容易に決定される。ＡＬＫ７結合性タンパク質の投与経路は、例えば、経口、非経口、吸入または局所によってよい。非経口という用語には、例えば、静脈内、動脈内、腹腔内、筋肉内、眼内、皮下、直腸、または膣投与が含まれる。投与のこれらの形態はすべて、本開示の範囲内であると明らかに企図されるが、投与形態の別の例は、注射用、殊に、静脈内もしくは動脈内注射または点滴用の液剤であろう。通常、適切な医薬組成物は、緩衝剤（例えば、酢酸、リン酸またはクエン酸緩衝剤）、界面活性剤（例えば、ポリソルベート）、任意選択で、安定剤（例えば、ヒトアルブミン）などを含んでよい。本明細書に記載の教示と適合する他の方法では、本明細書において提供するとおりのＡＬＫ７結合性タンパク質は、線維症または腫瘍の臓器及び／または部位に直接的に送達し、それにより、治療薬への罹患組織の曝露を増加させることができる。一実施形態では、投与は、例えば、吸入または鼻腔内投与により、直接的に気道に対してである。
【０３６６】
本明細書において論述したとおり、ＡＬＫ７結合性タンパク質を、ＡＬＫ７媒介性疾患及び状態、例えば、肥満、糖尿病、代謝性疾患、脂質異常症；心臓血管疾患、２型糖尿病、炎症、または心臓血管、肺、脂肪肝の疾患、神経、及び肝臓、または腎臓の疾患、ならびに／がんなどをｉｎ  ｖｉｖｏで処置するために薬学的有効量で投与することができる。この点について、開示のＡＬＫ７結合性タンパク質を、投与を容易にし、かつ活性薬剤の安定性を促進するように製剤化することができることは分かるであろう。本開示による医薬組成物は、薬学的に許容される非毒性無菌担体、例えば、生理食塩水、非毒性緩衝液、防腐剤などを含んでよい。本出願の目的のために、コンジュゲートまたは非コンジュゲートＡＬＫ７結合性タンパク質の薬学的有効量は、ＡＬＫ７への有効な結合を達成し、かつ利益を達成する、例えば、疾患または状態の症状を寛解させる、または物質もしくは細胞を検出するために十分な量を意味する。本明細書において開示する治療方法で使用するために適した製剤は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．）１６ｔｈ  ｅｄ．（１９８０）に記載されている。
【０３６７】
本明細書において提供する特定の医薬組成物は、例えば、カプセル剤、錠剤、水性懸濁剤または液剤を含む許容される剤形で経口投与することができる。特定の医薬組成物は、経鼻エアロゾルまたは吸入により投与することもできる。そのような組成物は、ベンジルアルコールもしくは他の適切な防腐剤、生物学的利用能を増強するための吸収促進剤、及び／または他の従来の可溶化剤もしくは分散剤を使用して、生理食塩水中の溶液として調製することができる。
【０３６８】
単一剤形を生成するために担体物質と組み合わせることができるＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、ＡＬＫ７に特異的に結合する抗体）の量は、処置される対象及び特定の投与様式に応じて様々である。組成物を、単回投与、複数回投与として、または立証された期間にわたって注入で投与することができる。投与計画を、最適な所望の応答（例えば、治療または予防上の応答）が得られるように調節することもできる。
【０３６９】
本明細書において提供するＡＬＫ７結合性タンパク質を、治療効果が生じるために十分な量で、処置の上述の方法により、ヒトまたは他の対象に投与することができる。本明細書において提供するＡＬＫ７結合性タンパク質を、公知の技術によりＡＬＫ７結合性タンパク質を従来の薬学的に許容される担体または希釈剤と組み合わせることにより調製された従来の剤形で、そのようなヒトまたは他の動物に投与することができる。薬学的に許容される担体または希釈剤の形態及び特徴を、組み合わせることとなっている活性成分の量、投与経路及び他の周知の変項により指定することができる。１種または複数の異なるＡＬＫ７結合性タンパク質を含むカクテルも使用することができる。
【０３７０】
ＡＬＫ７媒介性疾患または状態、例えば、肥満、糖尿病、代謝性疾患、脂質異常症；心臓血管疾患、２型糖尿病、炎症、または心臓血管、肺、脂肪肝の疾患、神経、及び肝臓、もしくは腎臓の疾患及び／またはがんを処置するためのＡＬＫ７結合性組成物の治療上有効な用量は、投与手段、標的部位、対象の生理学的状態、対象がヒトであるかまたは動物であるか、投与される他の薬物、及び処置が予防的であるかまたは治療的であるかを含む、多くの異なる因子に応じて変動する。通常、対象はヒトであるが、トランスジェニック哺乳類を含む非ヒト哺乳類を処置することもできる。処置投薬量を、安全性及び有効性を最適化するために、当技術分野で通常の技能を有するものが公知のルーチン的な方法を使用して用量設定することができる。
【０３７１】
ＡＬＫ７結合性タンパク質の投与により特定の疾患または状態の症状を寛解させることは、永続的または一時的、持続的または一過性であるかに関わらず、ＡＬＫ７結合性の投与に帰せられ得る、またはそれに関連し得る何らかの軽減を指す。
【０３７２】
本開示は、例えば、肥満、糖尿病、代謝性疾患、脂質異常症；心臓血管疾患、２型糖尿病、炎症、または心臓血管、肺、脂肪肝の疾患、神経、及び肝臓、もしくは腎臓の疾患及び／またはがんを処置する、予防する、または寛解させるための医薬品の製造における、ＡＬＫ７結合性タンパク質、例えば、抗ＡＬＫ７抗体の使用も提供する。
【０３７３】
併用治療
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、抗ＡＬＫ７抗体、例えば、全長ＡＬＫ７抗体及びＡＬＫ７結合性抗体断片、またはそれらのバリアントもしくは誘導体）を、１種または複数の他の治療と組み合わせて投与する。そのような治療には、追加の治療薬、さらには、他の医学的介入が含まれる。本明細書において提供するＡＬＫ７結合性タンパク質と組み合わせて投与することができる例示的な治療薬には、これらだけに限定されないが、抗ＳＤＩ−線維化薬（ｆｉｂｒｏｔｉｃｓ）、コルチコステロイド、抗炎症薬、アンジオテンシン変換酵素阻害薬、アンジオテンシン受容体遮断薬、利尿薬、抗糖尿病薬（ａｎｔｉｄｉａｂｅｔｉｃｓ）、免疫抑制薬、化学療法薬、代謝拮抗薬、及び／または免疫調節薬が含まれる。様々な実施形態で、ＡＬＫ７結合性タンパク質を、外科的切除／除去手順の前、その間、及び／またはその後に対象に投与する。
【０３７４】
一部の実施形態では、ＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、抗ＡＬＫ７抗体、例えば、全長ＡＬＫ７抗体及びＡＬＫ７結合性抗体断片、またはそのバリアントもしくは誘導体）を、１種または複数の（ａ）ビグアニド（例えば、ブホルミン、メトホルミン、フェンホルミン）、（ｂ）インスリン、（ｃ）ソマトスタチン、（ｄ）アルファ−グルコシダーゼ阻害薬（例えば、ボグリボース、ミグリトール、アカルボース）、（ｅ）ＤＰＰ−ＩＶ阻害薬、例えば、シタグリプチン、ビルダグリプチン、アログリプチン、サクサグリプチン（例えば、米国特許第６，６９９，８７１Ｂ１号に開示のとおり）（ｆ）ＬＸＲ調節薬、（ｇ）インスリン分泌促進物質（例えば、アセトヘキサミド、カルブタミド、クロルプロパミド、グリボルヌリド、グリクラジド、グリメルピリド、グリピジド、グリキジン、グリソキセピド、グリブリド、グリヘキサミド、グリピナミド、フェンブタミド、トラザミド、トルブタミド、トルシクラミド、ナテグリニド及び／またはレパグリニド）、（ｋ）ＣＢ１阻害薬、例えば、リモナバン、タラナバント、及び国際出願公開ＷＯ０３／０７７８４７Ａ２及びＷＯ０５／０００８０９Ａ１に開示されている化合物、または（ｉ）シブトラミン、トピラマート、オルリスタット、クネクサ、メバスタチン、シンバスタチン、エゼチミベ、アトルバスタチン、ナルトレキソン、ブプリオピオン、フェンテルミン、ヒドロクロロチアジド、またはロサルタンと組み合わせて投与する。
【０３７５】
診断法
本開示は、ＡＬＫ７媒介性疾患及び状態（例えば、肥満（例えば、腹部または内臓肥満）；過体重；インスリン抵抗性；代謝症候群及び／または他の代謝性疾患または状態；脂質障害、例えば、低ＨＤＬ値、高ＬＤＬ値、高脂血症、高トリグリセリド血症または脂質異常症；リポタンパク質異常；トリグリセリドの減少；炎症（例えば、肝臓炎症及び／または脂肪組織の炎症）、脂肪肝疾患；非アルコール性脂肪肝疾患；高血糖症；耐糖能障害（ＩＧＴ）；インスリン過剰血症；高コレステロール（例えば、高ＬＤＬ値及び／または高コレステロール血症）；心臓血管疾患、例えば、冠動脈性心疾患を含む心疾患、鬱血性心不全、卒中、末梢血管疾患、アテローム硬化症；動脈硬化症、及び／または高血圧；Ｘ症候群；血管再狭窄；神経障害；網膜障害；神経変性疾患；内皮機能障害、呼吸機能障害、腎疾患（例えば、腎障害）；膵臓炎；多嚢胞性卵巣症候群；尿酸値の上昇；ヘモクロマトーシス（鉄過剰）；黒色表皮腫（皮膚上の暗色斑）；及び／またはがん（例えば、骨髄腫（例えば、多発性骨髄腫、プラスマ細胞腫、限局性骨髄腫、または髄外骨髄腫）、または卵巣、乳房、結腸、子宮内膜、肝臓、腎臓、膵臓、胃、子宮もしくは結腸の癌）；及び／または上記疾患もしくは状態の１種もしくは複数と、または多すぎる体脂肪と関連する他の障害／状態）の診断中に有用な診断法であって、個体からのＡＬＫ７タンパク質組織または体液の発現レベルを測定すること、及びその測定された発現レベルを正常な組織または体液における標準的なＡＬＫ７発現レベルと比較することを含み、それにより、標準と比較してのＡＬＫ７発現レベルの上昇が、本明細書において提供するＡＬＫ７結合性タンパク質、例えば、本明細書において提供するとおりの全長抗ＡＬＫ７抗体及びＡＬＫ７結合性抗体断片により処置可能な障害を示す診断法も提供する。
【０３７６】
本明細書において提供するＡＬＫ７結合性タンパク質、例えば、抗ＡＬＫ７抗体（例えば、全長ＡＬＫ７抗体及びＡＬＫ７結合性抗体断片、ならびにそのバリアント及び誘導体）を、当業者に知られている従来の免疫組織学的方法を使用して、生体試料におけるＡＬＫ７レベルをアッセイするために使用することができる（例えば、Ｊａｌｋａｎｅｎ，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．１０１：９７６−９８５（１９８５）；Ｊａｌｋａｎｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．１０５：３０８７−３０９６（１９８７）を参照されたい）。ＡＬＫ７タンパク質発現を検出するために有用な他の抗体ベースの方法には、イムノアッセイ、例えば、酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）、免疫沈降、またはウエスタンブロット法が含まれる。
【０３７７】
「ＡＬＫ７タンパク質の発現レベルをアッセイする」とは、第１の生体試料におけるＡＬＫ７タンパク質のレベルを直接的に（例えば、絶対タンパク質レベルを決定または推定することにより）、または相対的に（例えば、第２の生体試料における疾患関連ポリペプチドレベルと比較することにより）定性的または定量的に測定または推定することを意図している。第１の生体試料におけるＡＬＫ７タンパク質発現レベルを測定または推定し、標準ＡＬＫ７タンパク質レベルと比較することができ、その際、標準は、障害を有さない個体から得られた第２の生体試料から採取されるか、または障害を有さない個体集団からのレベルを平均することにより決定される。当技術分野で認められるであろうとおり、「標準」ＡＬＫ７タンパク質レベルが分かったら、これを、比較のための標準として繰り返し使用することができる。
【０３７８】
「生体試料」では、ＡＬＫ７を発現する可能性がある個体、細胞系、組織培養物、または細胞の他の源から得られる任意の生体試料が意図されている。哺乳類から組織生検材料及び体液を得る方法は、当技術分野で公知である。
【０３７９】
ＡＬＫ７結合性タンパク質を含むキット
本開示はさらに、適切なパッケージング内のＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、ＡＬＫ７に特異的に結合する抗体、例えば、全長ＡＬＫ７抗体及びＡＬＫ７結合性抗体断片、ならびにそのバリアント及び誘導体）、及び資料を含み、本明細書に記載の方法を行うために使用することができるキットを提供する。資料は、次の情報のうちのいずれかを含んでよい：取扱説明書、臨床研究の論述、副作用の列挙、科学的文献参照、添付文書、治験結果、及び／またはこれらの要約など。資料は、組成物の活性及び／または利点を示す、または立証してよく、及び／または投与量、投与、副作用、薬物相互作用、または医療供給者に有用な他の情報を説明してよい。そのような情報は、様々な試験、例えば、ｉｎ  ｖｉｖｏモデルを伴う実験動物を使用する試験及び／またはヒト治験に基づく試験の結果に基づき得る。キットはさらに、別の治療（例えば、別の薬剤）及び／または他の治療（例えば、他の薬剤）に関する情報を提供するために役立つ、上記のものなどの資料を含んでもよい。
【０３８０】
特定の実施形態では、キットは、少なくとも１種の精製ＡＬＫ７結合性タンパク質を１個または複数の容器内に含む。一部の実施形態では、キットは、すべての対照、アッセイを行うための指示書、及び／または結果を分析及び提示するための任意の必要なソフトウェアを含めて、検出アッセイを行うために必要で、及び／または十分な構成成分のすべてを含む。
【０３８１】
イムノアッセイ
ＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、ＡＬＫ７に特異的に結合する抗体及びＡＬＫ７に特異的に結合する抗体のＡＣＴＲＩＩＡ／Ｂ結合性断片、及びそのバリアント、または誘導体）を、当技術分野で公知の任意の方法により、免疫特異的結合についてアッセイすることができる。使用することができるイムノアッセイには、これらだけに限定されないが、ウェスタンブロットなどの技術を使用する競合的及び非競合的アッセイシステム、ラジオイムノアッセイ（ＲＥＡ）、ＥＬＩＳＡ（酵素結合免疫吸着アッセイ）、「サンドイッチ」イムノアッセイ、免疫沈降アッセイ、沈降反応、ゲル拡散沈降反応、免疫拡散アッセイ、凝集アッセイ、補体結合アッセイ、免疫放射定量測定アッセイ、蛍光イムノアッセイ、またはプロテインＡイムノアッセイが含まれる。そのようなアッセイは、ルーチン的であり、当技術分野で公知である（例えば、その全体で参照により本明細書に組み込まれるＡｕｓｕｂｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，ｅｄｓ，（１９９４）Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ（Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，ＮＹ）Ｖｏｌ．１を参照されたい）．
【０３８２】
本明細書において提供するＡＬＫ７結合性タンパク質（例えば、ＡＬＫ７に特異的に結合する抗体及びＡＬＫ７に特異的に結合する抗体のＡｃｔＲＩＩ受容体（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡまたはＡｃｔＲＩＩＢ）結合性断片、及びそのバリアント、または誘導体）を、免疫蛍光、免疫電子顕微鏡法または非免疫アッセイにおいてのように、ＡＬＫ７またはその保存バリアントもしくはペプチド断片のｉｎ  ｓｉｔｕ検出のために組織学的に使用することができる。ｉｎ  ｓｉｔｕ検出は、当技術分野で公知の方法により達成することができる。当技術分野で通常の技能を有するものは、ルーチン的な実験を使用することにより、各決定のために最も重要で最適なアッセイ条件を決定することができるであろう。ＡＬＫ７結合性タンパク質の結合特徴を決定するために適した方法は、本明細書に記載されているか、または別段に当技術分野で公知である。そのような反応速度分析のために設計された機器及びソフトウェアは、市販されている（例えば、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）、ＢＩＡｅｖａｌｕａｔｉｏｎ（登録商標）ソフトウェア、ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ；ＫＩＮＥＸＡ（登録商標）Ｓｏｆｔｗａｒｅ、Ｓａｐｉｄｙｎｅ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）。
【０３８３】
別段に示さない限り、本開示の実行では、当技術分野の技能の範囲内である細胞生物学、細胞培養、分子生物学、トランスジェニック生物学、微生物学、組換えＤＮＡ、及び免疫学の従来の技術を使用する。
【０３８４】
次の実施例は、実例として提示されており、限定するものではない。
【実施例】
【０３８５】
具体的な実施形態の上述の記載は、本開示の全般的な性質を十分に明らかにするものであるので、他者は、本開示の全般的な概念から逸脱することなく、過度の実験なしに、当技術分野の技能の範囲内の知識を適用することにより、そのような具体的な実施形態を容易に変更する、及び／または様々な用途に適合させることができる。したがって、そのような適合及び変更は、本明細書に示されている教示及び指針に基づき、開示の実施形態の同等物の意味及び範囲内であることが意図されている。本明細書に記載の表現または専門用語は、限定ではなく説明を目的としたものであり、本明細書の専門用語または表現は、教示及び指針に照らして、当業者により解釈されるはずであることは理解されるべきである。
【０３８６】
本開示の広がり及び範囲は、上記の例示的な実施形態のいずれによっても限定されるべきではないが、下記の特許請求の範囲及びそれらの同等物にのみ従って定義されるべきである。
【０３８７】
本出願において引用した刊行物、特許、特許出願、及び／または他の文献はすべて、それぞれ個々の刊行物、特許、特許出願、及び／または他の文献が個別に、あらゆる目的のために参照により本明細書に組み込まれると示されている場合と同程度に、あらゆる目的のためにそれらの全体で参照により本明細書に組み込まれる。
【０３８８】
実施例１。ＡＬＫ７結合性抗体の選択、特徴づけ及び生成
マルチラウンド（ｍｕｌｔｉ−ｒｏｕｎｄ）の選択手順を使用して、下記に詳述する高い親和性でＡＬＫ７に結合するヒトＩｇＧ抗体を選択した。
【０３８９】
物質及び方法
Ｐｉｅｒｃｅ製のＥＺ−Ｌｉｎｋ  Ｓｕｌｆｏ−ＮＨＳ−Ｂｉｏｔｉｎｙｌａｔｉｏｎ  Ｋｉｔを使用して、ヒトＡＬＫ７−Ｆｃを含むタンパク質をビオチン化した。ヤギ抗ヒトＦ（ａｂ’）２カッパ−ＦＩＴＣ（ＬＣ−ＦＩＴＣ）、Ｅｘｔｒａｖｉｄｉｎ−ＰＥ（ＥＡ−ＰＥ）及びストレプトアビジン−６３３（ＳＡ−６３３）をＳｏｕｔｈｅｒｎ  Ｂｉｏｔｅｃｈ、Ｓｉｇｍａ及びＭｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓからそれぞれ得た。Ｓｔｒｅｐｔａｖｉｄｉｎ  ＭｉｃｒｏＢｅａｄｓ及びＭＡＣＳ  ＬＣ分離カラムはＭｉｌｔｅｎｙｉ  Ｂｉｏｔｅｃから購入した。
【０３９０】
Ｔ１００／Ｔ２００バイオセンサー（Ｂｉａｃｏｒｅ／ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を２５℃及び３７℃で使用して、実験を行った。ＡＬＫ７抗体を特注のＦＡＢチップ上に捕捉した。一連の濃度のＡＬＫ７−Ｆｃ含有タンパク質を、５０μｌ／ｍｌの流速でフローセル上に注入した。反応速度定数を得るために、ＢｉａＥｖａｌｕａｔｉｏｎソフトウェア（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を使用して、修正されたデータを１：１相互作用モデルにフィットさせた。平衡結合定数ＫＤを結合速度定数ｋｄ／ｋａの比により決定した。
【０３９１】
それぞれ約１０９の多様性の８つのナイーブなヒト合成酵母ライブラリを、以前に記載されたとおりに増殖させた（例えば、ＷＯ０９／０３６３７９；ＷＯ１０／１０５２５６；ＷＯ１２／００９５６８を参照されたい）。記載されているとおりに、選択の最初の２ラウンドでは、Ｍｉｌｔｅｎｙｉ  ＭＡＣシステムを利用する磁気ビーズ選別技術を行った（例えば、Ｓｉｅｇｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈ．２８６（１−２）：１４１−１５３（２００４）を参照されたい）。簡単に述べると、酵母細胞（約１０１０細胞／ライブラリ）を１０ｎＭビオチン化ＡＬＫ７−Ｆｃ含有タンパク質３ｍｌと共に１５分間にわたって室温で、ＦＡＣＳ洗浄緩衝液（リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）／０．１％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ））中でインキュベートした。氷冷洗浄緩衝液５０ｍｌで１回洗浄した後に、細胞ペレットを洗浄緩衝液４０ｍＬに再懸濁し、Ｓｔｒｅｐｔａｖｉｄｉｎ  ＭｉｃｒｏＢｅａｄｓ（５００μｌ）を酵母に添加し、１５分間にわたって４℃でインキュベートした。次に、酵母をペレット化し、洗浄緩衝液５ｍＬに再懸濁し、Ｍｉｌｔｅｎｙｉ  ＬＳカラム上に装填した。５ｍＬを装填した後に、カラムをＦＡＣＳ洗浄緩衝液３ｍｌで３回洗浄した。次いで、カラムを磁場から取り外し、酵母を増殖培地５ｍＬで溶離し、次いで、終夜増殖させた。フローサイトメトリーを使用して、次のラウンドの選別を行った。約１×１０８の酵母をペレット化し、洗浄緩衝液で３回洗浄し、漸減濃度のビオチン化ＡＬＫ７−Ｆｃ含有タンパク質（１００〜１ｎＭ）と共に平衡条件下で室温でインキュベートした。次いで、酵母を２回洗浄し、ＬＣ−ＦＩＴＣ（１：１００希釈）及びＳＡ−６３３（１：５００希釈）またはＥＡ−ＰＥ（１：５０希釈）二次試薬のいずれかで１５分間にわたって４℃で染色した。氷冷洗浄緩衝液で２回洗浄した後に、細胞ペレットを洗浄緩衝液０．４ｍＬに再懸濁させ、ストレーナーキャップ付きの（ｓｔｒａｉｎｅｒ−ｃａｐｐｅｄ）選別管に移した。ＦＡＣＳ  ＡＲＩＡソーター（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を使用して選別を行い、バックグラウンド対照に対して特異的な結合物を選択するために、ソーティングゲートを指定した。ＣＨＯ細胞からの可溶性膜タンパク質を利用して非特異的試薬結合物の数を減少させ（例えば、ＷＯ１４／１７９３６３及びＸｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇ．Ｄｅｓ．Ｓｅｌ．２６（１０）：６６３−６７０（２０１３）を参照されたい）、かつＡＬＫ７−Ｆｃ含有タンパク質を使用して、ＡＬＫ７への親和性が改善された結合物を同定するために、その後の選択ラウンドを使用した。選別の最終ラウンドの後に、酵母をプレーティングし、特徴づけのために、及び親和性成熟についてクローンを指定するために、個々のコロニーを採集した。
【０３９２】
抗体生成及び精製
さらなる特徴づけのために選択された抗体を十分な量で生成するために、酵母クローンを飽和まで増殖させ、次いで、振盪させながら３０℃で４８時間にわたって誘導した。誘導の後に、酵母細胞をペレット化し、上清を精製のために採取した。ＩｇＧを、プロテインＡカラムを使用して精製し、酢酸、ｐＨ２．０で溶離した。Ｆａｂ断片をパパイン消化により生成し、ＫａｐｐａＳｅｌｅｃｔ（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  ＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅｓ）上で精製した。
【０３９３】
ＦｏｒｔｅＢｉｏ  ＫＤの測定
概して以前に記載されたとおりに（例えば、Ｅｓｔｅｐ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍａｂｓ，５（２）：２７０−２７８（２０１３）を参照されたい）、選択された抗体のＦｏｒｔｅＢｉｏ親和性の測定を行った。簡単に述べると、ＦｏｒｔｅＢｉｏ親和性の測定を、ＡＨＱセンサー上にオンラインでＩｇＧを負荷することにより行った。センサーを３０分間にわたってアッセイ緩衝液中でオフラインで平衡化させ、次いで、基線の確立のために６０秒間にわたってオンラインでモニターした。ＩｇＧを負荷されたセンサーを、１００ｎＭ抗原に５分間にわたって曝露し、その後、それらを、オフレート測定のために５分間にわたってアッセイ緩衝液に移した。１：１結合モデルを使用して、反応速度を分析した。
【０３９４】
Ｏｃｔｅｔ  Ｒｅｄ３８４エピトープビニング／リガンド遮断
標準的なサンドイッチ形式の交差遮断アッセイを使用して、選択された抗体のエピトープビニング／リガンド遮断を行った。対照の抗標的ＩｇＧをＡＨＱセンサー上に負荷し、センサー上の非占有Ｆｃ結合性部位を無関係ヒトＩｇＧ１抗体で遮断した。次いで、センサーを１００ｎＭ標的抗原に、続いて、第２の抗標的抗体またはリガンドに曝露した。データを、ＦｏｒｔｅＢｉｏのデータ分析ソフトウェア７．０を使用して処理した。抗原会合後の第２の抗体またはリガンドによる追加の結合は、非占有エピトープ（非競合物質）を示す一方で、無結合は、エピトープ遮断を示している（競合物質またはリガンド遮断）。
【０３９５】
サイズ排除クロマトグラフィー
ＴＳＫｇｅｌ  ＳｕｐｅｒＳＷ  ｍＡｂ  ＨＴＰカラム（２２８５５）を、酵母産生ｍＡｂの高速ＳＥＣ分析のために、０．４ｍＬ／分で、６分／ランのサイクル時間で使用した。２００ｍＭリン酸ナトリウム及び２５０ｍＭ塩化ナトリウムを移動相として使用した。
【０３９６】
動的走査蛍光定量
２０ｘ  Ｓｙｐｒｏ  Ｏｒａｎｇｅ１０ｕＬを０．２〜１ｍｇ／ｍＬのｍＡｂまたはＦａｂ溶液２０ｕＬに添加した。ＲＴ−ＰＣＲ機器（ＢｉｏＲａｄ  ＣＦＸ９６  ＲＴ  ＰＣＲ）を使用して、サンプルプレート温度を４０℃〜９５℃へと０．５℃刻みで傾斜させ、各温度で２分平衡化させた。生データでの一次導関数のマイナスを使用して、Ｔｍを抽出した。
【０３９７】
実施例２。ＡＬＫ７結合性抗体の特徴づけ
前の実施例により生成した例示的なＡＬＫ７結合性タンパク質を、配列、ＳＰＲ、及び細胞ベースの脂肪分解阻害アッセイ分析によりさらに特徴づけた。
【０３９８】
実施例１に記載した方法により生成した例示的なＡＬＫ７結合性抗体の配列を表１Ａに示す（例示的なＣＤＲ配列に下線が引かれている）。
【表１Ａ】
2019515676.tif 000004
2019515676.tif 000005
2019515676.tif 000006
2019515676.tif 000007
【表１Ｂ】
2019515676.tif 000008
2019515676.tif 000009
2019515676.tif 000010
【０３９９】
ＳＰＲ（ＢＩＡＣＯＲＥ（商標）ベースの分析）及び細胞ベースの脂肪分解阻害アッセイを使用して、表１Ａ、表１Ｂ、または表３に記載のＡＬＫ７結合性タンパク質の例示的セットをさらに十分に特徴づけた。
【０４００】
表面プラスモン共鳴分析
Ｔ１００／Ｔ２００バイオセンサー（Ｂｉａｃｏｒｅ／ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を２５及び３７℃で使用して、実験を行った。ＡＬＫ７抗体を特注のＦＡＢチップ上で捕捉した。一連の濃度のＡＬＫ７−Ｆｃ含有タンパク質をフローセル上に５０μｌ／ｍｌの流速で注入した。反応速度定数を得るために、ＢｉａＥｖａｌｕａｔｉｏｎソフトウェア（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を使用して、修正されたデータを１：１相互作用モデルにフィットさせた。平衡結合定数ＫＤを結合速度定数ｋｄ／ｋａの比により決定した。
【０４０１】
脂肪分解阻害アッセイ
脂肪分解は、グリセロール及び遊離脂肪酸への、細胞内のトリグリセリドの加水分解である。次いで、グリセロール及び遊離脂肪酸は血流または培養培地に放出される。脂肪分解は本質的にすべての細胞で起こるが、これは、白色及び褐色脂肪細胞において最も多量である。集密を達成するまで、３Ｔ３−Ｌ１細胞（ＡＴＣＣが供給；ＡＴＣＣ（登録商標）ＣＬ−１７３（商標））を１０％ウシ血清（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ；１６１７０−０６０）を含有するダルベッコ変法イーグル培地（ＡＴＣＣ；ＡＴＣＣ（登録商標）３０−２００２（商標））中で増殖させた。分化を誘導するために、集密後２日目に、培地を、１０％ウシ胎児血清（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ；１００８２１４７）、デキサメタゾン（Ｓｉｇｍａ、Ｄ８８９３）、ＩＢＭＸ（Ｓｉｇｍａ、Ｉ７０１８）及びインスリン（Ｓｉｇｍａ、Ｉ０５１６）を含有する新鮮なダルベッコ変法イーグル培地（ＡＴＣＣ；ＡＴＣＣ（登録商標）３０−２００２(登録商標））に２週間にわたって置き換えた。顕微鏡により決定されるとおり、細胞上の脂肪滴の蓄積を使用して、成熟脂肪細胞への完全な分化を確認した。脂肪細胞を終夜、ビヒクル（ＰＢＳ）、アクチビンＢ（５０ｎｇ／ｍｌ）で処置するか、またはアクチビンＢ（５０ｎｇ／ｍｌ）及びＡＬＫ７抗体（５μｇ／ｍｌ）で同時処置した。細胞をＰＢＳで２回洗浄し、脂肪分解アッセイ緩衝液（Ａｂｃａｍが供給；ａｂ１８５４３３）と共にインキュベートした。脂肪分解アッセイ緩衝液を３時間後に収集し、グリセロールレベルを、製造者指示（Ａｂｃａｍ；ａｂ１８５４３３）により測定した。
【０４０２】
ＳＰＲの結果を表２Ａ及び２Ｂに示し、例示的なＡＬＫ−７結合性タンパク質での細胞ベースの脂肪分解阻害アッセイを表２Ａに示す。
【０４０３】
例示的なＡＬＫ−７結合性タンパク質でのＳＰＲ及び細胞ベースの脂肪分解阻害アッセイの結果を表３に示す。
【表２Ａ】
2019515676.tif 000011
【表２Ｂ】
2019515676.tif 000012
【０４０４】
ＡＬＫ７シグナル伝達は、脂肪分解を抑制し、その結果、脂肪細胞及び脂肪組織において脂肪蓄積をもたらすと考えられる。脂肪分解のＡＬＫ７媒介性阻害に干渉する抗体Ｈ０３、Ｄ０４、Ｃ０２、及びＧ０４の能力を細胞ベースの脂肪分解阻害アッセイで評価した。抗体Ｈ０３、Ｄ０４、Ｃ０２、及びＧ０４はそれぞれ、脂肪分解活性を９１．８％、１０９．２％、５５．８％、及び４５．８％増加させた。したがって、これらのデータは、ＡＬＫ７抗体を使用すると、脂肪分解のＡＬＫ７媒介性抑制を減弱させ、それにより、脂肪細胞における脂肪酸分解を増加させることができることを示している。総合すると、これらのデータは、ＡＬＫ７抗体を使用すると、例えば、肥満、糖尿病、インスリン抵抗性；代謝症候群脂肪肝疾患及び他の代謝性疾患または状態を含む、細胞、詳細には脂肪細胞（ａｄｉｐｏｃｙｔｅ）（脂肪細胞（ａｄｉｐｏｓｅ  ｃｅｌｌ））における低い脂肪分解活性及び／または過剰な脂肪酸蓄積と関連する様々な障害または状態を処置することができることを示している。
【０４０５】
ヒトＡＬＫ７（配列番号８５）及びラットＡＬＫ７（配列番号８６）の細胞外ドメインは、９７％配列同一性を共有する。ヒトＡＬＫ７及びラットＡＬＫ７への抗体Ｈ０３、Ｇ０４．Ｃ０２及びＤ０４の結合を、ＳＰＲを使用して決定した。抗体Ｈ０３、Ｄ０４、Ｋ０１、及びＬ０１は、ヒトＡＬＫ７及びラットＡＬＫ７の両方に結合する。Ｆ０３及びＣ０２は、ヒトＡＬＫ７にのみ結合した。Ｊ０１はラットＡＬＫ７にのみ結合した。
【０４０６】
実施例３。ＡＬＫ７抗体の結合最適化
ナイーブなクローンの結合最適化を、３つの成熟ストラテジ：軽鎖多様化；ＣＤＲＨ及び／ＣＤＲＨ２の多様化；ならびに連続ＶＨ及びＶＬ変異誘発の実行を利用して実施した。
【０４０７】
軽鎖多様化：重鎖プラスミドは、抽出されたナイーブなアウトプット（上記）であり、１×１０６の多様性を有する軽鎖ライブラリに変換した。選択を上記のとおり、１０ｎＭまたは１ｎＭビオチン化ＡＬＫ７−Ｆｃ抗原（個々のラウンドで）を使用して、１ラウンドのＭＡＣＳ選別及び２ラウンドのＦＡＣＳ選別で行った。
【０４０８】
ＣＤＲＨ１及びＣＤＲＨ２の選択：軽鎖多様化手順から選択されたクローンからのＣＤＲＨ３を、１×１０８の多様性のＣＤＲＨ１及びＣＤＲＨ２バリアントを有する予め作製したライブラリに再び組み合わせ、選択を、ＡＬＫ７を使用して上記のとおり行った。最適な親和性抗体を選び出すために種々の時間量にわたって、ビオチン化抗原−抗体酵母複合体を非ビオチン化抗原と共にインキュベートすることにより、親和性圧力（ａｆｆｉｎｉｔｙ  ｐｒｅｓｓｕｒｅ）を適用した。
【０４０９】
ＶＨｍｕｔ／ＶＫｍｕｔの選択：ＣＤＲＨ１及びＣＤＲＨ２選択手順から得られたクローンが、重鎖及び／または軽鎖の、誤りがちなＰＣＲベースの変異誘発による親和性成熟の追加のラウンドの対象であった。上記実施例２に全般的に記載したとおりに、しかし、すべての選択ラウンドについてＦＡＣＳ選別を追加的に使用して、選択を、ＡＬＫ７を抗原として使用して行った。抗原濃度を低下させ、冷間抗原競合時間（ｃｏｌｄ  ａｎｔｉｇｅｎ  ｃｏｍｐｅｔｉｔｉｏｎ  ｔｉｍｅｓ）を、最適な親和性のためにさらに圧力を掛けるように増加させた。
【０４１０】
例示的な最適化ＡＬＫ７抗体の配列を表３に示す。
【表３】
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2019515676.tif 000015
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【０４１１】
ＳＰＲ（ＢＩＡＣＯＲＥ（商標）ベースの分析）を使用して、表３に記載の親和性成熟ＡＬＫ７抗体をより十分に特徴づけた。
【０４１２】
表面プラスモン共鳴分析
Ｔ１００／Ｔ２００バイオセンサー（Ｂｉａｃｏｒｅ／ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を２５及び３７℃で使用して、実験を行った。ＡＬＫ７抗体を特注のＦＡＢチップ上に捕捉した。一連の濃度のＡＬＫ７−Ｆｃ含有タンパク質を、５０μｌ／ｍｌの流速でフローセル上に注入した。反応速度定数を得るために、ＢｉａＥｖａｌｕａｔｉｏｎソフトウェア（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を使用して、修正されたデータを１：１相互作用モデルにフィットさせた。平衡結合定数ＫＤを結合速度定数ｋｄ／ｋａの比により決定した。
【０４１３】
上記のとおり行ったＳＰＲの結果を表４に示す。
【表４】
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【０４１４】
実施例４。肥満マウスにおける脂肪蓄積及び除脂肪体重に対するＡＬＫ７  Ａｂの効果
本出願人は、食事性肥満のマウスモデルにおける脂肪及び徐脂肪組織量に対する、いくつかのヒトモノクローナルＡＬＫ７抗体（ＡＬＫ７ｍＡｂ）の効果を調査した。
【０４１５】
雄のマウス（１群当たりｎ＝８）を基線で、ＮＭＲを使用して脂肪及び徐脂肪筋肉量について評価した。次いで、マウスを種々の処置群に分類した：１）標準固形飼料（ＳＤ）を供給され、週２回、ＴＢＳビヒクルで皮下処置されるマウス；２）高脂肪食（ＨＦＤ）を供給され、週２回、ＴＢＳビヒクルで皮下処置されるマウス；３）週２回、１０ｍｇ／ｋｇのＡＬＫ７ｍＡｂ  Ｊ０２で皮下処置されるＨＤＦマウス；４）週２回、１０ｍｇ／ｋｇのＡＬＫ７ｍＡｂ  Ｋ０２で皮下処置されるＨＤＦマウス；５）週２回、１０ｍｇ／ｋｇのＡＬＫ７ｍＡｂ  Ｇ０５で皮下処置されるＨＤＦマウス；６）週２回、１０ｍｇ／ｋｇのＡＬＫ７ｍＡｂ  Ｃ０３で皮下処置されるＨＤＦマウス；及び７）週２回、１０ｍｇ／ｋｇのＡＬＫ７ｍＡｂ  Ｌ０２で皮下処置されるＨＤＦマウス。３週後に、マウスを再び、全身ＮＭＲ走査に掛けて、脂肪及び徐脂肪筋肉量について評価し、これらの測定値を脂肪及び徐脂肪筋肉の基線量と比較した。
【０４１６】
ＴＢＳ処置されたＨＦＤマウスは、ＴＢＳ処置されたＳＤマウスと比較して、有意に多い量の脂肪組織を示した（図１）。平均して、各ＡＬＫ７ｍＡｂでの処置は、ＴＢＳ処置されたＨＦＤマウスと比較して、ＨＦＤマウス（約−３０％少ない）において、有意に少ない脂肪組織蓄積をもたらした（図１）。対照的に、すべてのマウスが、基線から筋肉量の増加を示したが、処置群のなかでは、有意な差はなかった（図２）。
【０４１７】
総合すると、これらのデータは、ＡＬＫ７ｍＡｂを使用すると、ｉｎ  ｖｉｖｏで脂肪レベルを低下させることができることを実証している。したがって、データは、ＡＬＫ７抗体が望ましくない高脂肪レベルと関連する様々な障害及び合併症の処置において、特に、肥満患者において有用であり得ることを示している。さらに、これは、脂肪減少が除脂肪体重が同時に増加することなく達成され得ることを示しており、これは、ＡＬＫ７  Ａｂが同じく筋肉量を増加させることなく体脂肪含分を減少させることが望ましい患者の処置において特に有用であり得ることを示している。
【図１】
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【図２】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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