(57)【要約】  本発明は、式（Ｉ）［式中、Ｒ１〜Ｒ５は、上記に記載の通りである］の化合物、又はその医薬的に許容される塩、エナンチオマー、又はジアステレオマーに関する。該化合物は、Ｂ型肝炎ウイルス感染の治療又は予防に有用であり得る。
2019521142.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
2019521142.tif 000042
［式中：
Ｒ１は、Ｃ３−７シクロアルキル；
ジオキソチアジアゾリジニル、該ジオキソチアジアゾリジニルは、未置換であるか又はベンジルによって置換される；
ジオキソチアゾリジニル；
オキソモルホリニル；
オキソオキサゾリジニル、該オキソオキサゾリジニルは、Ｃ１−６アルキルによって１回又は２回置換される；
オキソピロリジニル、該オキソピロリジニルは、未置換であるか、又はシアノ又はＣ１−６アルキルオキサジアゾリルによって置換される；
フェニル、該フェニルは、ハロゲンによって１回又は２回置換される；又は
ピリジニル、該ピリジニルは、ハロゲンによって１回又は２回置換される
であり；
Ｒ２は、Ｈ又はＣ１−６アルキルであり；
Ｒ３は、フェニル、該フェニルは、シアノ、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル、及びハロＣ１−６アルキルより独立して選択される置換基によって１回、２回、又は３回置換される；
ピリジニル、該ピリジニルは、ハロゲンによって１回又は２回置換される；又は
チエニルであり；
Ｒ４は、Ｈ又はＣ１−６アルキルであり；
Ｒ５は、Ｈ又はＣ１−６アルキルである］
の化合物、又はその医薬的に許容される塩、エナンチオマー、又はジアステレオマー。
【請求項２】
Ｒ１が、Ｃ３−７シクロアルキル；
ジオキソチアジアゾリジニル、該ジオキソチアジアゾリジニルは、未置換であるか又はベンジルによって置換される；
ジオキソチアゾリジニル；
オキソモルホリニル；
オキソオキサゾリジニル、該オキソオキサゾリジニルは、Ｃ１−６アルキルによって２回置換される；
オキソピロリジニル、該オキソオキサゾリジニルは、未置換であるか又はシアノ又はＣ１−６アルキルオキサジアゾリルによって置換される；
フェニル、該フェニルは、ハロゲンによって２回置換される；又は
ハロゲンによって置換されるピリジニルであり；
Ｒ２は、Ｈであり；
Ｒ３は、フェニル、該フェニルは、シアノ、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル、及びハロＣ１−６アルキルより独立して選択される置換基によって１回、２回、又は３回置換される；
ピリジニル、該ピリジニルは、ハロゲンによって１回又は２回置換される；又は
チエニルであり；
Ｒ４は、Ｈであり；
Ｒ５は、Ｈである、
請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物、又はその医薬的に許容される塩、エナンチオマー、又はジアステレオマー。
【請求項３】
Ｒ１が、シクロペンチル、ジオキソチアジアゾリジニル、ベンジルジオキソチアジアゾリジニル、ジオキソチアジアゾリジニル、オキソモルホリニル、ジメチルオキソオキサゾリジニル、オキソピロリジニル、シアノオキソピロリジニル、メチルオキサジアゾリルオキソピロリジニル、ジフルオロフェニル、又はフルオロピリジニルであり；
Ｒ２は、Ｈであり；
Ｒ３は、シアノフルオロフェニル、メチルフルオロフェニル、トリフルオロフェニル、トリフルオロメチルフルオロフェニル、フルオロピリジニル、ジフルオロピリジニル、又はチエニルであり；
Ｒ４は、Ｈであり；
Ｒ５は、Ｈである、
請求項２に記載の式（Ｉ）の化合物、又はその医薬的に許容される塩、エナンチオマー、又はジアステレオマー。
【請求項４】
３−（２−オキソピロリジン−１−イル）−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド；
３−（５，５−ジメチル−２−オキソ−オキサゾリジン−３−イル）−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド；
３−（２，４−ジフルオロフェニル）−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド；
３−シクロペンチル−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド；
３−（１，１−ジオキソ−１，２−チアゾリジン−２−イル）−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド；
３−（５−ベンジル−１，１−ジオキソ−１，２，５−チアジアゾリジン−２−イル）−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド；
３−（１，１−ジオキソ−１，２，５−チアジアゾリジン−２−イル）−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド；
３−（４−シアノ−２−オキソ−ピロリジン−１−イル）−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド；
３−（３−オキソモルホリン−４−イル）−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド；
３−［４−（３−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−５−イル）−２−オキソ−ピロリジン−１−イル］−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド；
３−（２，４−ジフルオロフェニル）−Ｎ−（３−チエニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド；
３−（２，４−ジフルオロフェニル）−Ｎ−［４−フルオロ−３−（トリフルオロメチル）フェニル］−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド；
Ｎ−（３−シアノ−４−フルオロ−フェニル）−３−（２，４−ジフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド；
３−（２，４−ジフルオロフェニル）−Ｎ−（４−フルオロ−３−メチル−フェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド；
３−（２，４−ジフルオロフェニル）−Ｎ−（２，６−ジフルオロ−４−ピリジル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド；
３−（２，４−ジフルオロフェニル）−Ｎ−（２−フルオロ−４−ピリジル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド；
３−（６−フルオロ−３−ピリジル）−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド；及び
３−［４−（５−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−２−オキソ−ピロリジン−１−イル］−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド
より選択される化合物。
【請求項５】
以下の工程：
（ｃ）ヨウ化物（ＩＶ）：
【化２】
2019521142.tif 000043
の、銅触媒の存在下でのＲ６Ｒ７ＮＨとの反応：
（ｄ）ヨウ化物（ＩＶ）：
【化３】
2019521142.tif 000044
の、パラジウム触媒の存在下でのボロン酸：Ｒ１−Ｂ（ＯＨ）２との反応；
（ｃ）式（ＶＩ）：
【化４】
2019521142.tif 000045
の化合物の塩基との反応に続く、カップリング試薬の存在下でのＲ３ＮＨ２とのカップリング；
式中、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５は、請求項１〜請求項４のいずれか１項に定義される通りであり；Ｒ８は、アリール、ヘテロアリール、又はＣ３−７シクロアルキルである
のいずれか１つを含んでなる、請求項１〜請求項４のいずれか１項に記載の化合物の製造のための方法。
【請求項６】
治療活性物質としての使用のための、請求項１〜請求項４のいずれか１項に記載の化合物又はその医薬的に許容される塩、エナンチオマー、又はジアステレオマー。
【請求項７】
請求項１〜請求項４のいずれか１項に記載の化合物と治療上不活性な担体を含んでなる医薬組成物。
【請求項８】
請求項１〜請求項４のいずれか１項に記載の化合物の、Ｂ型肝炎ウイルス感染の治療又は予防のための使用。
【請求項９】
請求項１〜請求項４のいずれか１項に記載の化合物の、Ｂ型肝炎ウイルス感染の治療又は予防用医薬品の製造への使用。
【請求項１０】
Ｂ型肝炎ウイルス感染の治療又は予防のための、請求項１〜請求項４のいずれか１項に記載の化合物又はその医薬的に許容される塩、エナンチオマー、又はジアステレオマー。
【請求項１１】
請求項５の方法に従って製造される場合の、請求項１〜請求項４のいずれか１項に記載の化合物又はその医薬的に許容される塩、エナンチオマー、又はジアステレオマー。
【請求項１２】
Ｂ型肝炎ウイルス感染の治療又は予防のための方法であって、請求項１〜請求項４のいずれか１項に記載の化合物の治療有効量を投与することを含む、前記方法。
【請求項１３】
本明細書に記載されるような、本発明。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、哺乳動物における治療及び／又は予防に、そして特にＢ型肝炎ウイルス感染を治療するのに有用な有機化合物と、それらの医薬活性、製造、それらを含有する医薬組成物、及び医薬品としてのそれらの潜在的な使用に関する。
【発明の概要】
【０００２】
本発明は、式（Ｉ）：
【０００３】
【化１】
2019521142.tif 000003
【０００４】
［式中、Ｒ１〜Ｒ５とＱは、下記に記載される通りである］の化合物、又はその医薬的に許容される塩、エナンチオマー、又はジアステレオマーに関する。本発明の化合物は、Ｂ型肝炎ウイルス感染の治療又は予防に有用である。
【０００５】
Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）感染は、世界全体の重大な公衆衛生問題であって、世界人口のほぼ３０％が現在又は過去の感染の血清学的証拠を示す。このウイルスに対する安全で有効な予防用ワクチンが１９８０年代の初めに導入されたにも拘らず、世界全体で依然として２億４千万人を超える慢性ＨＢＶキャリアがいて、その高い比率が最終的には肝硬変又は肝細胞癌（ＨＣＣ）を発症すると推定されている（ＷＨＯ  Ｂ型肝炎概況報告書：Ｎ°２０４）。２０１０年度の全世界疾病負荷（Global Burden of Disease）研究（R Lozano, et al. Lancet, 380 (2012), 2095-2128）において、ＨＢＶ感染は、世界における健康の上位優先課題にランク付けられて、第１０位の死因であった（年間死亡件数：７８０，０００）。最近の研究では、慢性ＨＢＶ感染患者における肝硬変及びＨＣＣへの進行が循環血液中のＨＢＶ  ＤＮＡレベルと有意に関連していることが示されてきた。従って、ＨＢＶに対する抗ウイルス療法は、肝硬変への進行やＨＣＣの発症を予防するのにきわめて重要なのである。
【０００６】
ＨＢＶは、ヘパドナウイルス科に属する、エンベロープのある小型ウイルスである。それは、ほぼ３２００塩基対で一部二本鎖のＤＮＡゲノムを含有する。ＨＢＶには、ヒト肝細胞に感染する強い選好性がある。その生活環は、ＨＢＶがそのエンベロープタンパク質を介して宿主細胞膜へ付着するときに始まる。ウイルス侵入の正確な機序については、完全には解明されていない。ヌクレオキャプシドを含有するウイルスの弛緩型環状ＤＮＡ（ｒｃＤＮＡ）が細胞質へ放出されて、核へ輸送される。核内において、ｒｃＤＮＡは、ウイルスの酵素と細胞の酵素の両方によって修復されて、共有結合閉環状ＤＮＡ（ｃｃｃＤＮＡ）を形成する。それぞれの被感染細胞が１〜５０個のｃｃｃＤＮＡ分子を独自のエピソーム微小染色体として含有するという証拠がある。サブゲノムＲＮＡ（ｓｇＲＮＡ）とプレゲノムＲＮＡ（ｐｇＲＮＡ）は、いずれも細胞の転写機構を使用して、このｃｃｃＤＮＡより転写される。核内輸送の後で、ｐｇＲＮＡは、コアタンパク質とウイルスポリメラーゼへ翻訳される。ｓｇＲＮＡは、調節Ｘタンパク質と３種のエンベロープタンパク質へ翻訳される。ＲＮＡ含有ウイルスヌクレオキャプシドの自己組織化は、コアタンパク質とポリメラーゼとのｐｇＲＮＡの複合体形成を介して生じる。ヌクレオキャプシドの内側において、ｐｇＲＮＡは、マイナス鎖ＤＮＡへ逆転写される。次いで、このマイナス鎖ＤＮＡからのプラス鎖合成によって、ｒｃＤＮＡが産生される。ヌクレオキャプシドは、ｃｃｃＤＮＡ増殖のために核へ再移送されるか、又はエンベロープ化されて小胞体（ＥＲ）を介して放出される。逆転写酵素には、プルーフリーディング活性が不足している；被感染個体においてウイルスゲノムの突然変異が頻発して遺伝学的に別個のウイルス種（類似種）の共存が生じるのは、そのためである。
【０００７】
現在、２種のインターフェロン（ＩＦＮ）製剤（慣用のＩＦＮとＰＥＧ−ＩＦＮ）と５種のヌクレオシ（チ）ド類似体（ＮＵＣ：ラミブジン、アデフォビルジピボキシル、エンテカビル、テルビブジン、及びテノフォビルジソプロキシル）を含めて、７種の治療薬が慢性Ｂ型肝炎（ＣＨＢ）に対して承認されている。免疫調節剤とＮＵＣの間の主たる違いは、ＰＥＧ−ＩＦＮには一定の使用期間という利点があるのに対し、ＮＵＣの使用には限りが無いことである。ＰＥＧ−ＩＦＮの重大な欠点は、その有害事象の高頻度である。インターフェロン療法に対して良好な反応を示さないウイルス遺伝子型もある。一方、ＮＵＣの長期使用には、薬剤耐性のリスクを引き起こす。ＣＨＢへの抗ウイルス療法の最終目標は、ＨＢＶの根絶又は永続的なウイルス抑制を介して、肝硬変又はＨＣＣへの進行を防ぐことである。現在治療されている患者の大多数で、この目標は達成されていない。上記に示したように、ヌクレオキャプシド組織化は、ＨＢＶゲノム複製にとって最も重要な工程である。ウイルスＤＮＡの合成は、ヌクレオキャプシドの内部でのみ生じるので、ヌクレオキャプシドの組織化と瓦解は、ウイルスゲノムの正確なパッケージングと放出を確実にするために、正確に調節されなければならない。ヌクレオキャプシド組織化は、ＨＢＶの多様性を制限する、進化上の束縛プロセスであって、些細な分子障害に対してさえきわめて敏感である。ヌクレオキャプシドの組織化と瓦解のプロセスは、様々なＨＢＶ遺伝子型と薬剤耐性単離株に対する新たな抗ウイルス療法の開発にとって魅力的な治療標的となる。カプシドに関連した抗ＨＢＶ化合物について、これまでにいくつか報告されてきた。例えば、Ｂａｙ４１−４１０９、Ｂａｙ３８−７６９０、及びＢａｙ３９−５４９３と呼称される化合物が含まれるヘテロアリールジヒドロピリミジン類（ＨＡＰ）（Deres K. et al. Science 2003, 893）と、ＡＴ−６１とＡＴ−１３０のようなフェニルプロぺンアミド誘導体（Feld J. et al. Antiviral Research 2007, 168-177）である。カプシドは、臨床開発段階にある数種の化合物にとって有望な薬物標的となってきた。Ｂ型肝炎ウイルス感染の予防と治療のために新たな治療薬を開発することへのニーズが依然として存在する。
【０００８】
発明の要旨
本発明は、式（Ｉ）：
【０００９】
【化２】
2019521142.tif 000004
【００１０】
［式中：
Ｒ１は、Ｃ３−７シクロアルキル；
ジオキソチアジアゾリジニル、該ジオキソチアジアゾリジニルは、未置換であるか又はベンジルによって置換される；
ジオキソチアゾリジニル；
オキソモルホリニル；
オキソオキサゾリジニル、該オキソオキサゾリジニルは、Ｃ１−６アルキルによって１回又は２回置換される；
オキソピロリジニル、該オキソピロリジニルは、未置換であるか、又はシアノ又はＣ１−６アルキルオキサジアゾリルによって置換される；
フェニル、該フェニルは、ハロゲンによって１回又は２回置換される；又は
ピリジニル、該ピリジニルは、ハロゲンによって１回又は２回置換されるであり；  Ｒ２は、Ｈ又はＣ１−６アルキルであり；
Ｒ３は、フェニル、該フェニルは、シアノ、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル、及びハロＣ１−６アルキルより独立して選択される置換基によって１回、２回、又は３回置換される；
ピリジニル、該ピリジニルは、ハロゲンによって１回又は２回置換される；又は
チエニルであり；
Ｒ４は、Ｈ又はＣ１−６アルキルであり；
Ｒ５は、Ｈ又はＣ１−６アルキルである］の新規化合物、又はその医薬的に許容される塩、エナンチオマー、又はジアステレオマーに関する。
【００１１】
本発明の目的は、式（Ｉ）の新規化合物、それらの製造、本発明による化合物に基づいた医薬品とそれらの製法、並びに式（Ｉ）の化合物の、ＨＢＶ阻害剤としての使用とＨＢＶ感染の治療又は予防への使用である。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
定義
「Ｃ１−６アルキル」という用語は、１〜６個の炭素原子の一価で直鎖又は分岐鎖の飽和した炭化水素基を意味する。特別な態様において、Ｃ１−６アルキルは、１〜６個の炭素原子を有して、より特別な態様では、１〜４個の炭素原子を有する。Ｃ１−６アルキルの例には、限定されないが、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、及びｔｅｒｔ−ブチルが含まれる。
【００１３】
「Ｃ３−７シクロアルキル」という用語は、単独で、又は組合せにおいて、３〜７個の炭素原子、特に３〜６個の炭素原子を含有する飽和した炭素環、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、等を意味する。特別な「Ｃ３−７シクロアルキル」基は、シクロペンチルである。
【００１４】
「ハロ」又は「ハロゲン」という用語は、本明細書において交換可能的に使用されて、フルオロ、クロロ、ブロモ、又はヨードを意味する。
「ハロＣ１−６アルキル」という用語は、該Ｃ１−６アルキル基の水素原子の少なくとも１個が同じ又は異なるハロゲン原子、特にフルオロ原子に置き換わったＣ１−６アルキル基を意味する。ハロＣ１−６アルキルの例には、モノフルオロ、ジフルオロ、又はトリフルオロ−メチル、−エチル、又は−プロピル、例えば、３，３，３−トリフルオロプロピル、２−フルオロエチル、トリフルオロエチル、フルオロメチル、ジフルオロメチル、ジフルオロエチル、又はトリフルオロメチルが含まれる。
【００１５】
「オキソ」という用語は、２価の酸素原子、＝Ｏを意味する。
「アリール」という用語は、６〜１０個の炭素環原子を含んでなる一価芳香族の炭素環式環系を意味する。アリールの例には、限定されないが、フェニル、シアノフルオロフェニル、メチルフルオロフェニル、トリフルオロフェニル、トリフルオロメチルフルオロフェニルが含まれる。
【００１６】
「ヘテロアリール」という用語は、Ｎ、Ｏ、及びＳより選択される１、２、３、又は４個のヘテロ原子を含んでなり、残る環原子は炭素である、５〜１２個の環原子の一価芳香族複素環式単環系又は二環系を意味する。ヘテロアリール部分の例には、限定されないが、ピロリル、フラニル、チエニル、イミダゾリル、オキサゾリル、チアゾリル、トリアゾリル、オキサジアゾリル、チアジアゾリル、テトラゾリル、ピリジニル、ピラジニル、ピラゾリル、ピリダジニル、ピリミジニル、トリアジニル、イソオキサゾリル、ベンゾフラニル、イソチアゾリル、ベンゾチエニル、インドリル、イソインドリル、イソベンゾフラニル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾイソオキサゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾイソチアゾリル、ベンゾオキサジアゾリル、ベンゾチアジアゾリル、ベンゾトリアゾリル、プリニル、キノリニル、イソキノリニル、キナゾリニル、又はキノキサリニルが含まれる。ヘテロアリールは、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル、ハロＣ１−６アルキル、シアノ、Ｃ３−７シクロアルキル、（Ｃ１−６アルキル）２アミノ、Ｃ１−６アルコキシによってさらに置換される可能性がある。ヘテロアリールの例には、限定されないが、クロロピリジニル、クロロチアゾリル、シアノピラゾリル、シアノピリジニル、フルオロクロロピリジニル、フルオロピラゾリル、フルオロピリジニル、ジフルオロピリジニル、フルオロピリミジニル、ヒドロキシメチルピラゾリル、メトキシメチルピラゾリル、メチルフルオロピリジニル、メチルフルオロピリミジニル、メチルピラゾリル、トリフルオロメチルピリジニル、及びトリフルオロメチルチアゾリルが含まれる。
【００１７】
「ヘテロシクリル」という用語は、Ｎ、Ｏ、及びＳより選択される１〜５個のヘテロ原子を含んでなり、残る環原子は炭素である、３〜１０個の環原子の一価で飽和又は一部不飽和の単環式又は二環式の環系を意味する。特別な態様において、ヘテロシクリルは、Ｎ、Ｏ、及びＳより選択される１、２、又は３個のヘテロ原子を含んでなり、残る環原子は炭素である、４〜７個の環原子の一価で飽和の単環式環系である。単環式飽和ヘテロシクリルの例は、アジリジニル、オキシラニル、アゼチジニル、オキセタニル、ピロリジニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロチエニル、ピラゾリジニル、イミダゾリジニル、オキサゾリジニル、イソオキサゾリジニル、チアゾリジニル、ピペリジニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロチオピラニル、ピペラジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、１，１−ジオキソ−チオモルホリン−４−イル、アゼパニル、ジアゼパニル、ホモピペラジニル、オキサゼパニル、及びラクタムであり、限定されないが、ジオキソチアジアゾリジニル、ジオキソチアゾリジニル、オキソピロリジニル、オキソモルホリニル、オキソオキサゾリジニル、及びオキソオキサジラニルが含まれ；単環式飽和ヘテロシクリルは、ベンジル、シアノ、Ｃ１−６アルキル、ハロゲン、ハロＣ１−６アルキル、又はＣ１−６アルキルオキサジアゾリルによってさらに置換される可能性がある。置換された単環式飽和ヘテロシクリルの例には、限定されないが、ジオキソチアジアゾリジニル、ベンジルジオキソチアジアゾリジニル、ジオキソチアジアゾリジニル、オキソモルホリニル、ジメチルオキソオキサゾリジニル、オキソピロリジニル、シアノオキソピロリジニル、及びメチルオキサジアゾリルオキソピロリジニルが含まれる。
【００１８】
「ジアステレオマー」という用語は、２個以上のキラル中心があって、その分子が互いの鏡像ではない、立体異性体を意味する。ジアステレオマーは、異なる物理特性（例、融点、沸点、分光特性、活性、及び反応性）を有する。
【００１９】
「エナンチオマー」という用語は、互いに重ね合わせることができない鏡像である、化合物の２つの立体異性体を意味する。
「医薬的に許容される塩」という用語は、生物学的にも他の点でも望ましくなくはない塩を意味する。医薬的に許容される塩には、酸付加塩と塩基付加塩がともに含まれる。
【００２０】
「医薬的に許容される酸付加塩」という用語は、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、炭酸、リン酸のような無機酸とともに、そしてギ酸、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、グルコン酸、乳酸、ピルビン酸、シュウ酸、リンゴ酸、マレイン酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、アスパラギン酸、アスコルビン酸、グルタミン酸、アントラニル酸、安息香酸、桂皮酸、マンデル酸、エンボン酸、フェニル酢酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、及びサリチル酸のような、脂肪族、脂環式、芳香族、芳香脂肪族、複素環式、カルボン酸、及びスルホン酸の有機酸群より選択される有機酸とともに生成される医薬的に許容される塩を意味する。
【００２１】
「医薬的に許容される塩基付加塩」という用語は、有機若しくは無機塩基とともに生成される医薬的に許容される塩を意味する。許容される無機塩基の例には、ナトリウム、カリウム、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、鉄、亜鉛、銅、マンガン、及びアルミニウムの塩類が含まれる。医薬的に許容される無害な有機塩基より誘導される塩には、イソプロピルアミン、トリメチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、トリプロピルアミン、エタノールアミン、２−ジエチルアミノエタノール、トリメタミン、ジシクロヘキシルアミン、リジン、アルギニン、ヒスチジン、カフェイン、プロカイン、ヒドラバミン、コリン、ベタイン、エチレンジアミン、グルコサミン、メチルグルカミン、テオブロミン、プリン類、ピペリジン（piperizine）、ピペリジン（piperidine）、Ｎ−エチルピペリジン、及びポリアミン樹脂のような、一級、二級、及び三級アミン、天然に存在する置換アミンが含まれる置換アミン、環式アミン、及び塩基性イオン交換樹脂の塩類が含まれる。
【００２２】
１個又は数個のキラル中心を含有する一般式（Ｉ）の化合物は、ラセミ化合物、ジアステレオマー混合物、又は光学的に活性な単一の異性体のいずれでも存在し得る。ラセミ化合物は、既知の方法に従って、エナンチオマーへ分離させることができる。特に、結晶化によって分離され得るジアステレオマー塩は、ラセミ混合物より、Ｄ若しくはＬ−酒石酸、マンデル酸、リンゴ酸、乳酸、又はカンファースルホン酸のような光学活性酸との反応によって生成される。
【００２３】
ＨＢＶの阻害剤
本発明は、（ｉ）一般式（Ｉ）：
【００２４】
【化３】
2019521142.tif 000005
【００２５】
［式中：
Ｒ１は、Ｃ３−７シクロアルキル；
ジオキソチアジアゾリジニル、該ジオキソチアジアゾリジニルは、未置換であるか又はベンジルによって置換される；
ジオキソチアゾリジニル；
オキソモルホリニル；
オキソオキサゾリジニル、該オキソオキサゾリジニルは、Ｃ１−６アルキルによって１回又は２回置換される；
オキソピロリジニル、該オキソピロリジニルは、未置換であるか、又はシアノ又はＣ１−６アルキルオキサジアゾリルによって置換される；
フェニル、該フェニルは、ハロゲンによって１回又は２回置換される；又は
ピリジニル、該ピリジニルは、ハロゲンによって１回又は２回置換される
であり；
Ｒ２は、Ｈ又はＣ１−６アルキルであり；
Ｒ３は、フェニル、該フェニルは、シアノ、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル、及びハロＣ１−６アルキルより独立して選択される置換基によって１回、２回、又は３回置換される；
ピリジニル、該ピリジニルは、ハロゲンによって１回又は２回置換される；又は
チエニルであり；
Ｒ４は、Ｈ又はＣ１−６アルキルであり；
Ｒ５は、Ｈ又はＣ１−６アルキルである］を有する新規化合物、又はその医薬的に許容される塩、エナンチオマー、又はジアステレオマーを提供する。
【００２６】
本発明の別の態様は、（ｉｉ）
Ｒ１が、Ｃ３−７シクロアルキル；
ジオキソチアジアゾリジニル、該ジオキソチアジアゾリジニルは、未置換であるか又はベンジルによって置換される；
ジオキソチアゾリジニル；
オキソモルホリニル；
オキソオキサゾリジニル、該オキソオキサゾリジニルは、Ｃ１−６アルキルによって２回置換される；
オキソピロリジニル、該オキソオキサゾリジニルは、未置換であるか又は、シアノ又はＣ１−６アルキルオキサジアゾリルによって置換される；
フェニル、該フェニルは、ハロゲンによって２回置換される；又は
ハロゲンによって置換されるピリジニルであり；
Ｒ２は、Ｈであり；
Ｒ３は、フェニル、該フェニルは、シアノ、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル、及びハロＣ１−６アルキルより独立して選択される置換基によって１回、２回、又は３回置換される；
ピリジニル、該ピリジニルは、ハロゲンによって１回又は２回置換される；又は
チエニルであり；
Ｒ４は、Ｈであり；
Ｒ５は、Ｈである、
式（Ｉ）の化合物、又はその医薬的に許容される塩、エナンチオマー、又はジアステレオマーに関する。
【００２７】
本発明のさらなる態様は、（ｉｉｉ）
Ｒ１が、シクロペンチル、ジオキソチアジアゾリジニル、ベンジルジオキソチアジアゾリジニル、ジオキソチアジアゾリジニル、オキソモルホリニル、ジメチルオキソオキサゾリジニル、オキソピロリジニル、シアノオキソピロリジニル、メチルオキサジアゾリルオキソピロリジニル、ジフルオロフェニル、又はフルオロピリジニルであり；
Ｒ２は、Ｈであり；
Ｒ３は、シアノフルオロフェニル、メチルフルオロフェニル、トリフルオロフェニル、トリフルオロメチルフルオロフェニル、フルオロピリジニル、ジフルオロピリジニル、又はチエニルであり；
Ｒ４は、Ｈであり；
Ｒ５は、Ｈである、
式（Ｉ）の化合物、又はその医薬的に許容される塩、エナンチオマー，又はジアステレオマーである。
【００２８】
本発明のさらなる態様は、（ｖｉｉ）本発明の特別な化合物が以下：
３−（２−オキソピロリジン−１−イル）−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド；
３−（５，５−ジメチル−２−オキソ−オキサゾリジン−３−イル）−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド；
３−（２，４−ジフルオロフェニル）−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド；
３−シクロペンチル−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド；
３−（１，１−ジオキソ−１，２−チアゾリジン−２−イル）−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド；
３−（５−ベンジル−１，１−ジオキソ−１，２，５−チアジアゾリジン−２−イル）−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド；
３−（１，１−ジオキソ−１，２，５−チアジアゾリジン−２−イル）−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド；
３−（４−シアノ−２−オキソ−ピロリジン−１−イル）−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド；
３−（３−オキソモルホリン−４−イル）−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド；
３−［４−（３−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−５−イル）−２−オキソ−ピロリジン−１−イル］−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド；
３−（２，４−ジフルオロフェニル）−Ｎ−（３−チエニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド；
３−（２，４−ジフルオロフェニル）−Ｎ−［４−フルオロ−３−（トリフルオロメチル）フェニル］−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド；
Ｎ−（３−シアノ−４−フルオロ−フェニル）−３−（２，４−ジフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド；
３−（２，４−ジフルオロフェニル）−Ｎ−（４−フルオロ−３−メチル−フェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド；
３−（２，４−ジフルオロフェニル）−Ｎ−（２，６−ジフルオロ−４−ピリジル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド；
３−（２，４−ジフルオロフェニル）−Ｎ−（２−フルオロ−４−ピリジル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド；
３−（６−フルオロ−３−ピリジル）−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド；及び
３−［４−（５−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−２−オキソ−ピロリジン−１−イル］−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミドであるということである。
【００２９】
合成
本発明の化合物は、どの慣用の手段によっても製造することができる。以下のスキームと実施例では、これらの化合物、並びにその出発材料を合成するのに適した方法を提供する。すべての置換基、特に、Ｒ１〜Ｒ５は、他に示さなければ、上記に定義される通りである。さらに、そして他に明確に述べなければ、すべての反応、反応条件、略語、及び記号は、有機化学分野の当業者によく知られた意味を有する。
【００３０】
スキーム１：式（Ｉａ）の化合物と式（Ｉｂ）の化合物についての一般的な合成経路
【００３１】
【化４】
2019521142.tif 000006
【００３２】
Ｒ１は、Ｒ６Ｒ７Ｎ−又はＲ８である。Ｒ６とＲ７は、それらが付く窒素原子と一緒に、限定されないが、ジオキソチアジアゾリジニル、ジオキソチアゾリジニル、オキソモルホリニル、オキソオキサゾリジニル、オキソピロリジニルのような、３〜７員のヘテロシクリルを形成する。Ｒ８は、アリール、ヘテロアリール、又はＣ３−７シクロアルキルである。
【００３３】
式（Ｉａ）の化合物又は式（Ｉｂ）の化合物は、スキーム１に従って製造することができる。酸（ＩＩ）をＨＡＴＵのようなカップリング試薬とＤＩＰＥＡのような塩基の存在下にアミン：Ｒ３ＮＨ２と反応させてアミド（ＩＩＩ）を得て、これをＮ−ヨードスクシンイミドのようなヨウ素化試薬で処理してヨウ化物（ＩＶ）を得る。ヨウ化物（ＩＶ）は、ＣｕＩのような銅触媒の存在下にＲ６Ｒ７ＮＨとの銅触媒化カップリング反応を受けて式（Ｉａ）の最終化合物となるか、又はＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）のようなパラジウム触媒の存在下にボロン酸：Ｒ８−Ｂ（ＯＨ）２とのパラジウム触媒化カップリング反応を受けて、式（Ｉｂ）の最終化合物となる。式（Ｉｂ）の化合物を合成するために使用される別の経路は、酸（ＩＩ）のエステル化に始まってヨウ素化が続いてエステル（Ｖ）を得て、これをＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）のようなパラジウム触媒の存在下にＲ８−Ｂ（ＯＨ）２と反応させて、式（ＶＩ）の化合物を得る。式（ＶＩ）の化合物の、ＮａＯＨのような塩基での加水分解により酸を得て、これをＨＡＴＵのようなカップリング試薬とＤＩＰＥＡのような塩基の存在下にアミン：Ｒ３ＮＨ２とカップリングさせて、式（Ｉｂ）の化合物を得る。又は、式（ＶＩ）の化合物の加水分解からの酸を対応するアシル塩化物へ変換して、これをアミン：Ｒ３ＮＨ２と反応させて、式（Ｉｂ）の化合物を得る。
【００３４】
本発明はまた、以下の工程：
（ａ）ヨウ化物（ＩＶ）：
【００３５】
【化５】
2019521142.tif 000007
【００３６】
の、銅触媒の存在下でのＲ６Ｒ７ＮＨとの反応：
（ｂ）ヨウ化物（ＩＶ）：
【００３７】
【化６】
2019521142.tif 000008
【００３８】
の、パラジウム触媒の存在下でのボロン酸：Ｒ１−Ｂ（ＯＨ）２との反応；及び
（ｃ）式（ＶＩ）：
【００３９】
【化７】
2019521142.tif 000009
【００４０】
の化合物の塩基との反応に続く、カップリング試薬の存在下でのＲ３ＮＨ２とのカップリング［式中、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、及びＲ８は、上記に定義される通りである］のいずれか１つを含んでなる、式（Ｉ）、式（Ｉａ）、又は式（Ｉｂ）の化合物の製造のための方法に関する。
【００４１】
工程（ａ）において、銅触媒は、例えば、ＣｕＩであり得る。
工程（ｂ）において、パラジウム触媒は、例えば、ＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）であり得る。
【００４２】
工程（ｃ）において、カップリング試薬は、例えば、ＨＡＴＵであり得る。
式（Ｉ）、（Ｉａ）、又は（Ｉｂ）の化合物は、上記の方法に従って製造される場合、本発明の目的でもある。
【００４３】
医薬組成物と投与
別の態様は、本発明の化合物と治療上不活性な担体、希釈剤、又は賦形剤を含有する医薬組成物又は医薬品、並びに、本発明の化合物を使用してそのような組成物及び医薬品を製造する方法を提供する。１つの例では、式（Ｉ）の化合物を、周囲温度で、適正なｐＨで、そして所望される度合いの純度で、生理学的に許容される担体（即ち、製剤投与形態へ利用される投与量及び濃度でレシピエントに対して無害である担体）と混合することによって製剤化することができる。製剤のｐＨは、化合物の特別な使用とその濃度に主に依存するが、好ましくは、約３〜約８のあらゆる範囲に及ぶ。１つの例では、式（Ｉ）の化合物を酢酸塩緩衝液においてｐＨ５で製剤化する。別の態様において、式（Ｉ）の化合物は、無菌である。該化合物は、例えば、固体又は非晶性の組成物として、凍結乾燥製剤として、又は水溶液剤として保存し得る。
【００４４】
組成物は、良好な医療行為に一致したやり方で製剤化、用量決定、及び投与される。この文脈において考慮すべき要因には、治療される特別な障害、治療される特別な哺乳動物、個々の患者の臨床状態、障害の原因、薬剤の送達部位、投与の方法、投与の計画、及び医療従事者に知られた他の要因が含まれる。投与される化合物の「有効量」は、そのような考慮事項によって支配されるものであって、血清ＨＢＶ  ＤＮＡレベルの抑制、又はＨＢｅＡｇのＨＢｅＡｂへの血清変換、又はＨＢｓＡｇの消失、又はアラニンアミノトランスフェラーゼレベルの正常化と肝組織学の改善に必要な最少量である。例えば、そのような量は、正常細胞、又はその哺乳動物全体にとって有害である量未満であり得る。
【００４５】
１つの例において、非経口的に投与される本発明の化合物の投薬当たりの医薬有効量は、患者の体重１ｋｇにつき、１日当たり約０．０１〜１００ｍｇ、あるいは約０．１〜２０ｍｇの範囲にあって、使用される化合物の典型的な初回範囲は、０．３〜１５ｍｇ／ｋｇ／日であろう。別の態様では、錠剤及びカプセル剤のような経口の単位剤形は、本発明の化合物の約０．１〜約１０００ｍｇを含有する。
【００４６】
本発明の化合物は、経口、局所（頬内及び舌下が含まれる）、直腸、膣、経皮、非経口、皮下、腹腔内、肺内、皮内、髄腔内、及び硬膜外、及び鼻腔内と（局部治療が所望されるならば）病巣内の投与が含まれる、どの好適な手段によっても投与してよい。非経口注入には、筋肉内、静脈内、動脈内、腹腔内、又は皮下の投与が含まれる。
【００４７】
本発明の化合物は、例えば、錠剤、散剤、カプセル剤、溶液剤、分散液剤、懸濁液剤、シロップ剤、スプレー剤、坐剤、ゲル剤、乳液剤、パッチ剤、等といったどの簡便な投与形態でも投与してよい。そのような組成物は、医薬調製品に慣用の成分、例えば、希釈剤、担体、ｐＨ調整剤、甘味剤、増嵩剤、及びさらなる有効成分を含有してよい。
【００４８】
典型的な製剤は、本発明の化合物と担体又は賦形剤を混合することによって調製される。好適な担体及び賦形剤は、当業者によく知られていて、例えば、Ansel, Howard C., et al.「アンセルの医薬剤形と薬物送達系（Ansel's Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems）」フィラデルフィア：リッピンコット、ウィリアムズ・アンド・ウィルキンス（2004）；Gennaro, Alfonso R., et al.「レミントン：調剤の科学及び実践（Remington: The Science and Practice of Pharmacy）」フィラデルフィア：リッピンコット、ウィリアムズ・アンド・ウィルキンス（2000）；及び、Rowe, Raymond C.「医薬賦形剤ハンドブック（Handbook of Pharmaceutical Excipients）」シカゴ、ファーマシューティカル・プレス（2005）に詳しく記載されている。この製剤には、薬物（即ち、本発明の化合物又はその医薬組成物）の洗練された提示を提供するか又はその製剤製品（即ち、医薬品）の製造に役立てるために、１以上の緩衝剤、安定化剤、界面活性剤、湿潤剤、滑沢剤、乳化剤、懸濁剤、保存剤、抗酸化剤、不透明化剤、流動促進剤、加工助剤、着色剤、甘味剤、芳香剤、香味剤、希釈剤、及び他の既知の添加剤が含まれる場合もある。
【００４９】
好適な経口剤形の例は、約０．１〜１０００ｍｇの本発明の化合物を約３０ｍｇ〜９０ｍｇの無水乳糖、約５ｍｇ〜４０ｍｇのクロスカルメロースナトリウム、約５ｍｇ〜３０ｍｇのポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）Ｋ３０、及び約１ｍｇ〜１０ｍｇのステアリン酸マグネシウムと複合して含有する錠剤である。最初に、粉末化した成分を一緒に混合して、次にＰＶＰの溶液剤と混合する。生じる組成物は、慣用の機器を使用して、乾燥させ、造粒して、ステアリン酸マグネシウムと混合して、錠剤形態へ圧縮することができる。本発明の化合物（例えば、５ｍｇ〜４００ｍｇ）を好適な緩衝剤溶液（例、リン酸塩緩衝液）に溶かし、所望されるならば等張化剤（例、塩化ナトリウムのような塩）を加えることによって、エアゾール製剤の例を調製することができる。この溶液剤は、例えば、０．２ミクロンのフィルターを使用して濾過して、不純物や混在物を除去してよい。
【００５０】
故に、ある態様には、式（Ｉ）の化合物又はその立体異性体又は医薬的に許容される塩を含んでなる医薬組成物が含まれる。さらなる態様には、式（Ｉ）の化合物又はその立体異性体又は医薬的に許容される塩を医薬的に許容される担体又は賦形剤と一緒に含んでなる医薬組成物が含まれる。
【００５１】
適応症と治療の方法
本発明の化合物は、ＨＢＶのＤＮＡ合成を阻害して、ＨＢＶ  ＤＮＡレベルを低下させることができる。従って、本発明の化合物は、ＨＢＶ感染の治療又は予防に有用である。
【００５２】
本発明は、式（Ｉ）の化合物の、ＨＢＶ感染の治療又は予防への使用に関する。
式（Ｉ）の化合物の、ＨＢＶ感染に関連した疾患の治療又は予防に有用な医薬品の製造への使用は、本発明の１つの目的である。
【００５３】
本発明は、式（Ｉ）の化合物の、ＨＢＶ感染の治療又は予防用医薬品の製造への使用に特に関する。
別の態様には、ＨＢＶ感染の治療又は予防のための方法が含まれ、該方法は、式（Ｉ）の化合物、その立体異性体、互変異性体、プロドラッグ、又は医薬的に許容される塩の有効量を投与することを含む。
【実施例】
【００５４】
本発明は、以下の実施例を参照することによって、より完全に理解されよう。しかしながら、それらは、本発明の範囲を制限するものと解釈してはならない。
本明細書に使用される略語は、以下の通りである：
Ａｃ２Ｏ：            無水酢酸
ＤＩＰＥＡ：        Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン
ＥｔＯＡｃ：        酢酸エチル
ＥＣ５０：            半数効果濃度
ＨＡＴＵ：          Ｏ−（７−アザ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム・ヘキサフルオロリン酸塩
ＨＰＬＣ：          高速液体クロマトグラフィー
ＭＳ（ＥＳＩ）：      質量分析法（電子スプレーイオン化）
ＮＩＳ：            Ｎ−ヨードスクシンイミド
ＮＭＰ：            １−メチルピロリジン−２−オン
ｏｂｓｄ．：        実測値
Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２：  ［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ）
Ｐｄ／Ｃ：            パラジウム担持活性炭
ｐｒｅｐ−ＨＰＬＣ：  分取用高速液体クロマトグラフィー
ｐｒｅｐ−ＴＬＣ：    分取用薄層クロマトグラフィー
ＴＥＡ：            トリメチルアミン
全般的な実験条件
中間体と最終化合物は、以下の機器の１つを使用して、フラッシュクロマトグラフィーによって精製した：ｉ）Biotage SP1 システム及び Quad 12/25 Cartridge モジュール、ｉｉ）ISCO combi-フラッシュクロマトグラフィー機器。シリカゲルのブランド及び孔径：ｉ）KP-SIL 60A（オングストローム）粒径：４０〜６０μｍ；ｉｉ）ＣＡＳ登録番号：Silica Gel：63231-67-4，粒径：４７〜６０ミクロンシリカゲル；ｉｉｉ）ＺＣＸ（Qingdao Haiyang Chemical 株式会社製）、空孔：２００〜３００又は３００〜４００。
【００５５】
中間体と最終化合物は、ＸＢｒｉｄｇｅＴＭＰｒｅｐ  Ｃ１８（５μｍ，ＯＢＤＴＭ  ３０ｘ１００ｍｍ）カラム又はＳｕｎＦｉｒｅＴＭＰｒｅｐ  Ｃ１８（５μｍ，ＯＢＤＴＭ  ３０ｘ１００ｍｍ）カラムを使用する逆相カラムでの分取用ＨＰＬＣによって精製した。Waters 自動精製システム（Auto Purification System）（カラム：ＸＢｒｉｄｇｅＴＭＰｒｅｐ−Ｃ１８，３０ｘ１００ｍｍ，Sample Manager 2767，Pump 2525，検出器：Micromass ZQ と UV 2487，溶媒系：アセトニトリルと水中０．１％水酸化アンモニウム）。
【００５６】
化合物のＬＣ／ＭＳスペクトルは、ＬＣ／ＭＳ（ＷａｔｅｒｓＴＭＡｌｌｉａｎｃｅ  ２７９５−Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ  ＺＱ）を使用して入手した。ＬＣ／ＭＳ条件は、以下の通りであった（操作時間：６分）：
酸性条件：Ａ：Ｈ２Ｏ中０．１％ギ酸；Ｂ：アセトニトリル中０．１％ギ酸；
塩基性条件：Ａ：Ｈ２Ｏ中０．１％  ＮＨ３・Ｈ２Ｏ；Ｂ：アセトニトリル；
中性条件：Ａ：Ｈ２Ｏ；Ｂ：アセトニトリル。
【００５７】
質量スペクトル（ＭＳ）：全般的には、親質量を示すイオンだけを報告して、他に述べなければ、引用される質量イオンは、陽性の質量イオン（Ｍ＋Ｈ）＋である。
マイクロ波支援反応は、Biotage Initiator Sixty 又は CEM Discover において行った。
【００５８】
ＮＭＲスペクトルは、Bruker Avance 400MHz を使用して入手した。
空気感受性の試薬が関わるすべての反応は、アルゴン雰囲気下で実施した。他に述べなければ、試薬は、市販の供給業者より受け取ったままで、さらに精製せずに使用した。
【００５９】
以下の実施例は、本発明の意味を例解することを企図するが、本発明の意味の範囲内での制限を表すものでは決してない。
製造の実施例
本発明は、以下の実施例を参照にしてより完全に理解されよう。しかしながら、それらは、本発明の範囲を限定するものと解釈してはならない。
【００６０】
実施例１
３−（２−オキソピロリジン−１−イル）−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド
【００６１】
【化８】
2019521142.tif 000010
【００６２】
この表題化合物は、以下のスキームに従って製造した：
【００６３】
【化９】
2019521142.tif 000011
【００６４】
工程１：ピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−３，５−ジカルボン酸ジメチル（化合物１ｄ）の製造
ピリジン−４−カルボン酸メチル（化合物１ａ，５．０ｇ，３６．５ミリモル）とＯ−（２，４−ジニトロフェニル）ヒドロキシルアミン（化合物１ｂ，７．３ｇ，２．６ミリモル）のＭｅＣＮ（２５０ｍＬ）溶液を４０℃で１８時間撹拌した。この反応混合物を濃縮してＤＭＦ（５０ｍＬ）に溶かし、プロピオン酸メチル（化合物１ｃ，３．１ｇ，３６．５ミリモル）とＫ２ＣＯ３（１０．１ｇ，７２．９ミリモル）の添加を続けた。次いで、この反応混合物を２５℃で４時間撹拌して、ＥｔＯＡｃ（３００ｍＬ）で希釈した。生じる混合物を塩水（１００ｍＬ）で４回洗浄した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させて、減圧下に濃縮した。その残渣をカラムクロマトグラフィーによって精製して、ピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−３，５−ジカルボン酸ジメチル（化合物１ｄ，５．１ｇ）を茶褐色の固形物として得た。MS obsd. (ESI+) [(M+H)+]: 235.
工程２：ピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボン酸（化合物１ｅ）の製造
ピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−３，５−ジカルボン酸ジメチル（化合物１ｄ，２．０ｇ，８．５４ミリモル）の硫酸（Ｈ２Ｏ中４０％，５０ｍＬ）溶液を１００℃で４時間撹拌した。室温へ冷やした後で、この反応混合物を２Ｎ  ＮａＯＨ水溶液でｐＨ＝４へ調整してから、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で３回抽出した。合わせた有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させて減圧下に濃縮して、ピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボン酸（化合物１ｅ，１．０ｇ，粗製）を茶褐色の固形物として得た。MS obsd. (ESI+) [(M+H)+]: 163.
工程３：４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボン酸（化合物１ｆ）の製造
ピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボン酸（化合物１ｅ，１．０ｇ，６．２ミリモル）のＭｅＯＨ（２０ｍＬ）溶液へＰｄ／Ｃ（２００ｍｇ）を加えた。この反応混合物をＨ２（５０ｐｓｉ）下に６０℃で１２時間撹拌してから減圧下に濃縮して、４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボン酸（化合物１ｆ，１．１ｇ，粗製）を茶褐色のオイルとして得た。MS obsd. (ESI+) [(M+H)+]: 167.
工程４：Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド（化合物１ｇ）の製造
４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボン酸（化合物１ｆ，１．０ｇ，６．２ミリモル）、３，４，５−トリフルオロアニリン（１．４ｇ，９．３ミリモル）、及びＤＩＰＥＡ（１．６ｇ，１２．３ミリモル）のＤＭＦ（１０ｍＬ）溶液へＨＡＴＵ（３．５ｇ，９．３ミリモル）を加えた。この反応混合物を２５℃で１２時間撹拌してから分取用ＨＰＬＣによって精製して、Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド（化合物１ｇ，１．１ｇ）を黄色のオイルとして得た。MS obsd. (ESI+) [(M+H)+]: 296.
工程５：３−ヨード−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド（化合物１ｈ）の製造
Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド（化合物１ｇ，５００ｍｇ，１．７ミリモル）のＤＣＭ（１０ｍＬ）溶液へＮＩＳ（５７１ｍｇ，２．５ミリモル）を加えた。この反応混合物を２５℃で１２時間撹拌してから、ＤＣＭ（２００ｍＬ）と水（１００ｍＬ）の間で分配した。有機層を塩水で２回洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させて、減圧下に濃縮した。その残渣を分取用ＨＰＬＣによって精製して、３−ヨード−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド（化合物１ｈ，６１０ｍｇ）を黄色の固形物として得た。MS obsd. (ESI+) [(M+H)+]: 422.
工程６：３−（２−オキソピロリジン−１−イル）−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド（実施例１）の製造
３−ヨード−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド（化合物１ｈ，１００ｍｇ，０．２４ミリモル）、ピロリジン−２−オン（３０ｍｇ，０．３６ミリモル）、ｔｒａｎｓ−Ｎ，Ｎ’−ジメチルシクロヘキサン−１，２−ジアミン（３ｍｇ，０．０２４ミリモル）、及びＣｕＩ（４５ｍｇ，０．２４ミリモル）のＤＭＳＯ（３ｍＬ）中の混合物へＫ２ＣＯ３（１３１ｍｇ，０．９５ミリモル）を加えた。この混合物を１１０℃で１２時間撹拌してから、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）と水（５０ｍＬ）の間で分配した。有機層を塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させて減圧下に濃縮した。その残渣を分取用ＨＰＬＣによって精製して、３−（２−オキソピロリジン−１−イル）−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド（実施例１，３６ｍｇ）を白色の固形物として得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.31 (br. s., 1H), 7.29-7.44 (m, 3H), 4.06-4.23 (m, 1H), 3.79-4.02 (m, 2H), 3.65 (m, 1H), 3.34 (d, 1H), 2.94-3.05 (m, 1H), 2.77 (dd, 4.77 Hz, 1H), 2.61-2.72 (m, 1H), 2.50-2.61 (m, 2H), 2.08-2.28 (m, 3H). MS obsd. (ESI+) [(M+H)+]: 379.
実施例２
３−（５，５−ジメチル−２−オキソ−オキサゾリジン−３−イル）−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド
【００６５】
【化１０】
2019521142.tif 000012
【００６６】
この表題化合物は、以下のスキームに従って製造した：
【００６７】
【化１１】
2019521142.tif 000013
【００６８】
３−（５，５−ジメチル−２−オキソ−オキサゾリジン−３−イル）−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミドの製造
３−ヨード−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド（化合物１ｈ，１００ｍｇ，０．２４ミリモル）、５，５−ジメチルオキサゾリジン−２−オン（４１ｍｇ，０．３６ミリモル）、ｔｒａｎｓ−Ｎ，Ｎ’−ジメチルシクロヘキサン−１，２−ジアミン（３ｍｇ，０．０２４ミリモル）、及びＣｕＩ（４５ｍｇ，０．２４ミリモル）のＤＭＳＯ（３ｍＬ）中の混合物へＫ２ＣＯ３（１３１ｍｇ，０．９５ミリモル）を加えた。この反応混合物を８０℃で１２時間撹拌してから、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）と水（５０ｍＬ）の間で分配した。有機層を塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させて減圧下に濃縮した。その残渣を分取用ＨＰＬＣによって精製して、３−（５，５−ジメチル−２−オキソ−オキサゾリジン−３−イル）−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド（実施例２，６２ｍｇ）を白色の固形物として得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.94 (br. s., 1H), 7.37-7.48 (m, 3H), 4.04-4.20 (m, 2H), 3.79 (d, 1H), 3.64 (d, 1H), 3.34 (dd, 1H), 2.89-3.04 (m, 2H), 2.58-2.70 (m, 1H), 2.20-2.33 (m, 1H), 1.61 (s, 6 H). MS obsd. (ESI+) [(M+H)+]: 409.
実施例３
３−（２，４−ジフルオロフェニル）−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド
【００６９】
【化１２】
2019521142.tif 000014
【００７０】
この表題化合物は、以下のスキームに従って製造した：
【００７１】
【化１３】
2019521142.tif 000015
【００７２】
３−（２，４−ジフルオロフェニル）−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミドの製造
３−ヨード−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド（化合物１ｈ，１００ｍｇ，０．２４ミリモル）と（２，４−ジフルオロフェニル）ボロン酸（３８ｍｇ，０．２４ミリモル）のジオキサン／Ｈ２Ｏ（３ｍＬ／０．５ｍＬ）中の混合物へＮ２雰囲気下にＫ２ＣＯ３（９８ｍｇ，０．７１ミリモル）とＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）（１８ｍｇ，０．０２４ミリモル）を加えた。この反応混合物を８０℃で１２時間撹拌してから、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）と水（５０ｍＬ）の間で分配した。有機層を塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させて減圧下に濃縮した。その残渣を分取用ＨＰＬＣによって精製して、３−（２，４−ジフルオロフェニル）−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド（実施例３，４１ｍｇ）を白色の固形物として得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.66 (s., 1H), 7.38 (br. s., 1H), 7.29-7.34 (m, 2H), 6.88-6.99 (m, 2H), 4.49 (dt, 1H), 4.13-4.28 (m, 1H), 3.02-3.24 (m, 2H), 2.75 (m, 1H), 2.35-2.50 (m, 2H). MS obsd. (ESI+) [(M+H)+]: 408.
実施例４
３−シクロペンチル−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド
【００７３】
【化１４】
2019521142.tif 000016
【００７４】
この表題化合物は、以下のスキームに従って製造した：
【００７５】
【化１５】
2019521142.tif 000017
【００７６】
工程１：３−（シクロペンテン−１−イル）−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミドの製造
３−ヨード−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド（化合物１ｈ，９０ｍｇ，０．２１ミリモル）と１−シクロペンテニルボロン酸ピナコールエステル（５０ｍｇ，０．２６ミリモル）のジオキサン／Ｈ２Ｏ（２ｍＬ／０．４ｍＬ）中の混合物へＮ２雰囲気下にＫ２ＣＯ３（８９ｍｇ，０．６４ミリモル）とＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）（１５ｍｇ，０．０２１ミリモル）を加えた。この反応混合物を９０℃で１２時間撹拌してから、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で希釈した。生じる混合物を水と塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させて減圧下に濃縮した。その残渣を分取用ＴＬＣによって精製して、化合物４ａ（６０ｍｇ）を無色のオイルとして得た。MS obsd. (ESI+) [(M+H)+]: 362.
工程２：３−シクロペンチル−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミドの製造
３−（シクロペンテン−１−イル）−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド（化合物４ａ，６０ｍｇ，０．１７ミリモル）とＰｄ／Ｃ（１０ｍｇ）のエタノール（３ｍＬ）中の混合物をＨ２（１５ｐｓｉ）下に２５℃で１２時間撹拌した。この混合物を濾過して、濾液を減圧下に濃縮した。その残渣を分取用ＨＰＬＣによって精製して、３−シクロペンチル−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド（実施例４，１７ｍｇ）を白色の固形物として得た。1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 7.40-7.51 (m, 2H), 7.31 (s., 1H), 4.23-4.33 (m, 1H), 4.02-4.11 (m, 1H), 3.03-3.15 (m, 1H), 2.81-2.95 (m, 3H), 2.30-2.38 (m, 1H), 2.11-2.25 (m, 1H), 1.96-2.08 (m, 2H), 1.42-1.86 (m, 6H). MS obsd. (ESI+) [(M+H)+]: 364.
実施例５
３−（１，１−ジオキソ−１，２−チアゾリジン−２−イル）−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド
【００７７】
【化１６】
2019521142.tif 000018
【００７８】
この表題化合物は、以下のスキームに従って製造した：
【００７９】
【化１７】
2019521142.tif 000019
【００８０】
３−ヨード−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド（化合物１ｈ，２０ｍｇ，０．０４８ミリモル）のＤＭＳＯ（１．０ｍＬ）溶液へＣｕＩ（２ｍｇ，０．００９５ミリモル）、Ｋ２ＣＯ３（７ｍｇ，０．０９５ミリモル）、Ｎ，Ｎ’−ジメチル−１，２−シクロヘキサンジアミン（２ｍｇ，０．００９５ミリモル）、及び１，２−チアゾリジン１，１−ジオキシド（化合物５ａ，５ｍｇ，０．０５７ミリモル）を加えた。この反応混合物を１１０℃で１８時間撹拌してから、フラッシュクロマトグラフィーと分取用ＨＰＬＣによって精製して、３−（１，１−ジオキソ−１，２−チアゾリジン−２−イル）−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド（実施例５，１１．５ｍｇ）を白色の固形物として得た。1H NMR (400MHz, CDCl3) δ8.21 (s., 1H), 7.56 (s., 1H), 7.41-7.26 (m, 2H), 4.27-4.14 (m, 1H), 4.07 (m, 1H), 3.73-3.54 (m, 2H), 3.36 (t, 2H), 3.25-3.08 (m, 2H), 2.84-2.72 (m, 1H), 2.60-2.39 (m, 3H), 2.34-2.21 (m, 1H). MS obsd. (ESI+) [(M+H)+]: 415
実施例６
３−（５−ベンジル−１，１−ジオキソ−１，２，５−チアジアゾリジン−２−イル）−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド
【００８１】
【化１８】
2019521142.tif 000020
【００８２】
この表題化合物は、１，２−チアゾリジン１，１−ジオキシド（化合物５ａ）の代わりに２−ベンジル−１，２，５−チアジアゾリジン１，１−ジオキシドを使用することによって、実施例５の製造と同様に製造した。実施例６（１０ｍｇ）を白色の固形物として入手した。1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.52 (s., 1H), 7.61 (s., 1H), 7.41-7.29 (m, 7H), 4.38-4.28 (m, 1H), 4.27-4.15 (m, 2H), 4.04-3.90 (m, 1H), 3.73-3.60 (m, 2H), 3.43-3.28 (m, 2H), 3.25-3.01 (m, 2H), 2.61 (m, 1H), 2.37-2.19 (m, 2H). MS obsd. (ESI+) [(M+H)+]: 506.
実施例７
３−（１，１−ジオキソ−１，２，５−チアジアゾリジン−２−イル）−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド
【００８３】
【化１９】
2019521142.tif 000021
【００８４】
この表題化合物は、以下のスキームに従って製造した：
【００８５】
【化２０】
2019521142.tif 000022
【００８６】
３−（５−ベンジル−１，１−ジオキソ−１，２，５−チアジアゾリジン−２−イル）−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド（実施例６，１０ｍｇ，０．０２０ミリモル）のメタノール（１５ｍＬ）溶液へＰｄ／Ｃ（２１ｍｇ）を加えた。この反応混合物をＨ２雰囲気（５０ｐｓｉ）下に６０℃で１８時間撹拌してから濾過し、濾液を減圧下に濃縮した。その残渣を分取用ＨＰＬＣによって精製して、３−（１，１−ジオキソ−１，２，５−チアジアゾリジン−２−イル）−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド（実施例７，３．０ｍｇ）を白色の固形物として得た。1H NMR (400MHz, MeOD) δ8.52 (br s., 1H), 7.58 (s., 1H), 7.49-7.27 (m, 2H), 4.39-4.22 (m, 1H), 4.10 (m, 1H), 3.84-3.70 (m, 2H), 3.60-3.47 (m, 2H), 3.25-3.13 (m, 1H), 3.06-2.95 (m, 1H), 2.89 (m, 1H), 2.39-2.17 (m, 2H). MS obsd. (ESI+) [(M+H)+]: 416.
実施例８
３−（４−シアノ−２−オキソ−ピロリジン−１−イル）−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド
【００８７】
【化２１】
2019521142.tif 000023
【００８８】
この表題化合物は、以下のスキームに従って製造した：
【００８９】
【化２２】
2019521142.tif 000024
【００９０】
３−ヨード−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド（化合物１ｈ，１００ｍｇ，０．２４ミリモル）のＮＭＰ（１ｍＬ）溶液へ５−オキソピロリジン−３−カルボニトリル（３１ｍｇ，０．２８ミリモル）、Ｎ，Ｎ’−ジメチル−１，２−シクロヘキサンジアミン（６．７ｍｇ，０．０５ミリモル）、リン酸カリウム（１５１ｍｇ，０．７１ミリモル）、及びＣｕＩ（４．５ｍｇ，０．０２ミリモル）を加えた。生じる混合物をマイクロ波下に１１０℃で２時間加熱した。この混合物をカラムクロマトグラフィーと分取用ＨＰＬＣによって精製して、３−（４−シアノ−２−オキソ−ピロリジン−１−イル）−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド（実施例８，１３ｍｇ）を白色の固形物として得た。1H NMR (400MHz, MeOD) δ7.55 (s., 1H), 7.50-7.38 (m, 2H), 4.30 (m, 1H), 4.16-3.92 (m, 3H), 3.79-3.66 (m, 1H), 3.08-2.76 (m, 5H), 2.40-2.31 (m, 1H), 2.25 (m, 1H). MS obsd. (ESI+) [(M+H)+]: 404.
実施例９
３−（３−オキソモルホリン−４−イル）−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド
【００９１】
【化２３】
2019521142.tif 000025
【００９２】
この表題化合物は、１，２−チアゾリジン１，１−ジオキシド（化合物５ａ）の代わりにモルホリン−３−オンを使用することによって、実施例５の製造と同様に製造した。実施例９（１１ｍｇ）を白色の固形物として入手した。1H NMR (400MHz, CDCl3) δ9.14 (s., 1H), 7.49-7.37 (m, 3H), 4.37 (s, 2H), 4.30-4.19 (m, 1H), 4.14-3.96 (m, 3H), 3.95-3.83 (m, 1H), 3.73-3.64 (m, 1H), 3.29-3.23 (m, 1H), 3.11 (m, 1H), 2.87-2.73 (m, 2H), 2.33-2.20 (m, 1H). MS obsd. (ESI+) [(M+H)+]: 395.
実施例１０
３−［４−（３−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−５−イル）−２−オキソ−ピロリジン−１−イル］−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド
【００９３】
【化２４】
2019521142.tif 000026
【００９４】
この表題化合物は、以下のスキームに従って製造した：
【００９５】
【化２５】
2019521142.tif 000027
【００９６】
工程１：５−オキソ−１−［５−［（３，４，５−トリフルオロフェニル）カルバモイル］−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−３−イル］ピロリジン−３−カルボン酸（化合物１０ｂ）の製造
３−ヨード−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド（化合物１ｈ，５００ｍｇ，１．２ミリモル）のＤＭＳＯ（５ｍＬ）溶液へ５−オキソピロリジン−３−カルボン酸メチル（２０４ｍｇ，１．４ミリモル）、Ｎ，Ｎ’−ジメチル−１，２−シクロヘキサンジアミン（３４ｍｇ，０．２４ミリモル）、炭酸カリウム（４９２ｍｇ，３．６ミリモル）、及びＣｕＩ（０．０１ｍＬ，０．２４ミリモル）を加えた。生じる混合物をＮ２雰囲気下に１１０℃で１８時間撹拌してから分取用ＨＰＬＣによって精製して、化合物１０ｂ（１００ｍｇ）を灰白色の固形物として得た。MS obsd. (ESI+) [(M+H)+]: 423.
工程２：３−［４−（３−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−５−イル）−２−オキソ−ピロリジン−１−イル］−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミドの製造
５−オキソ−１−［５−［（３，４，５−トリフルオロフェニル）カルバモイル］−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−３−イル］ピロリジン−３−カルボン酸（化合物１０ｂ，１５ｍｇ，０．０４ミリモル）のＤＭＦ（０．５ｍＬ）溶液へＣＤＩ（６．９ｍｇ，０．０４ミリモル）を加えた。この混合物を１００℃で１時間撹拌し、Ｎ−ヒドロキシアセトアミジン（４ｍｇ，０．０５ミリモル）の添加を続けた。生じる混合物を１００℃で１７時間撹拌してから分取用ＨＰＬＣによって精製して、３−［４−（３−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−５−イル）−２−オキソ−ピロリジン−１−イル］−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド（実施例１０，７ｍｇ）を白色の固形物として得た。1H NMR (400MHz, MeOD) δ7.55 (s., 1H), 7.48-7.38 (m, 2H), 4.33-4.18 (m, 2H), 4.16-3.96 (m, 3H), 3.12-2.83 (m, 6H), 2.38-2.34 (m, 3H), 2.29-2.19 (m, 1H). MS obsd. (ESI+) [(M+H)+]: 461.
実施例１１
３−（２，４−ジフルオロフェニル）−Ｎ−（３−チエニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド
【００９７】
【化２６】
2019521142.tif 000028
【００９８】
この表題化合物は、以下のスキームに従って製造した：
【００９９】
【化２７】
2019521142.tif 000029
【０１００】
工程１：４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボン酸メチル（化合物１１ａ）の製造
４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボン酸（化合物１ｆ，１００ｍｇ，０．６０ミリモル）とＳＯＣｌ２（１４３ｍｇ，１．２０ミリモル）のＭｅＯＨ（３ｍＬ）中の混合物を７０℃で１６時間撹拌した。この反応混合物を減圧下に濃縮した後で、その残渣をＤＣＭ（５０ｍＬ）で希釈して、ＮａＨＣＯ３水溶液（２０ｍＬ）と塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下に濃縮して、粗製の４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボン酸メチル（化合物１１ａ，１００ｍｇ）を黄色のオイルとして得て、これをさらに精製せずに次の工程に直接使用した。MS obsd. (ESI+) [(M+H)+]: 181.
工程２：３−ヨード−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボン酸メチル（化合物１１ｂ）の製造
４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボン酸メチル（化合物１１ａ，粗製１００ｍｇ，０．５６ミリモル）のＣＣｌ４（３ｍＬ）中の混合物へＮＩＳ（２１３ｍｇ，０．９５ミリモル）を加えた。この反応混合物を１５℃で１６時間撹拌してから、ＤＣＭ（５０ｍＬ）と水（２０ｍＬ）の間で分配した。有機層を塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させて減圧下に濃縮した。その残渣を分取用ＴＬＣによって精製して、３−ヨード−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボン酸メチル（化合物１１ｂ，１３０ｍｇ）を黄色のオイルとして得た。MS obsd. (ESI+) [(M+H)+]: 307.
工程３：３−（２，４−ジフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボン酸メチル（化合物１１ｃ）の製造
３−ヨード−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボン酸メチル（化合物１１ｂ，１２０ｍｇ，０．３９ミリモル）と２，４−ジフルオロフェニルボロン酸（６８ｍｇ，０．４３ミリモル）、Ｋ２ＣＯ３（１６２ｍｇ，１．１８ミリモル）、及びＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）（１０ｍｇ）のジオキサン／Ｈ２Ｏ（４ｍＬ／０．８ｍＬ）中の混合物を８０℃で１６時間撹拌した。この反応混合物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）と水（３０ｍＬ）の間で分配した。有機層を塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させて減圧下に濃縮した。その残渣を分取用ＴＬＣによって精製して、３−（２，４−ジフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボン酸メチル（化合物１１ｃ，１００ｍｇ）を無色のオイルとして得た。MS obsd. (ESI+) [(M+H)+]: 293.
工程４：３−（２，４−ジフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボン酸（化合物１１ｄ）の製造
３−（２，４−ジフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボン酸メチル（化合物１１ｃ，１００ｍｇ，０．３４ミリモル）のＭｅＯＨ（２ｍＬ）中の混合物へ２Ｎ  ＮａＯＨ水溶液（０．３４ｍＬ）を加えた。この混合物を１５℃で１６時間撹拌してから、２Ｎ  ＨＣｌ水溶液でｐＨ＝４へ酸性化した。生じる混合物を濃縮して、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）と塩水（２０ｍＬ）の間で分配した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させて減圧下に濃縮して、３−（２，４−ジフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボン酸（化合物１１ｄ，５０ｍｇ）を白色の固形物として得た。MS obsd. (ESI+) [(M+H)+]: 279.
工程５：３−（２，４−ジフルオロフェニル）−Ｎ−（３−チエニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド（実施例１１）の製造
３−（２，４−ジフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボン酸（化合物１１ｄ，２５ｍｇ，０．０９０ミリモル）、チオフェン−３−アミン（化合物１１ｅ，１１ｍｇ，０．１１ミリモル）、及びＤＩＰＥＡ（３５ｍｇ，０．２７ミリモル）のＤＭＦ（０．５ｍＬ）中の混合物へＨＡＴＵ（５１ｍｇ，０．１４ミリモル）を加えた。この反応混合物を１５℃で１６時間撹拌してから、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）と水（２０ｍＬ）の間で分配した。有機層を塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させて減圧下に濃縮した。その残渣を分取用ＨＰＬＣによって精製して、３−（２，４−ジフルオロフェニル）−Ｎ−（３−チエニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド（実施例１１，５．０ｍｇ）を白色の固形物として得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7.86 (br s., 1H) 7.57-7.71 (m, 2H) 7.22-7.29 (m, 2H) 7.01 (d, 1H) 6.85-6.97 (m, 2H) 4.41-4.53 (m, 1H) 4.10-4.23 (m, 1H) 3.02-3.25 (m, 2H) 2.74 (m, 1H) 2.35-2.47 (m, 2H). MS obsd. (ESI+) [(M+H)+]: 360.
実施例１２
３−（２，４−ジフルオロフェニル）−Ｎ−［４−フルオロ−３−（トリフルオロメチル）フェニル］−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド
【０１０１】
【化２８】
2019521142.tif 000030
【０１０２】
この表題化合物は、チオフェン−３−アミン（化合物１１ｅ）の代わりに４−フルオロ−３−（トリフルオロメチル）アニリンを使用することによって、実施例１１の製造と同様に製造した。実施例１２（１４ｍｇ）を白色の固形物として入手した。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7.83 (br d, 1H), 7.73 (br d, 1H), 7.66 (s., 1H), 7.42 (br s., 1H), 7.26-7.33 (m, 1H), 7.19 (t, 1 H), 6.86-6.96 (m, 2H), 4.49 (dt, 1H), 4.16-4.26 (m, 1H), 3.04-3.25 (m, 2H), 2.79 (br d, 1H), 2.36-2.49 (m, 2H). MS obsd (ESI) [(M+H) +]: 440
実施例１３
Ｎ−（３−シアノ−４−フルオロ−フェニル）−３−（２，４−ジフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド
【０１０３】
【化２９】
2019521142.tif 000031
【０１０４】
この表題化合物は、チオフェン−３−アミン（化合物１１ｅ）の代わりに５−アミノ−２−フルオロ−ベンゾニトリルを使用することによって、実施例１１の製造と同様に製造した。実施例１３（２３ｍｇ）を白色の固形物として入手した。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7.93 (dd, 1H), 7.71-7.77 (m, 1H), 7.65 (s., 1H), 7.61 (s., 1H), 7.20-7.32 (m, 2H), 6.85-6.97 (m, 2H), 4.48 (dt, 1H), 4.15-4.26 (m, 1H), 3.03-3.22 (m, 2H), 2.74-2.84 (m, 1H), 2.38-2.47 (m, 2H). MS obsd (ESI) [(M+H) +]: 397
実施例１４
３−（２，４−ジフルオロフェニル）−Ｎ−（４−フルオロ−３−メチル−フェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド
【０１０５】
【化３０】
2019521142.tif 000032
【０１０６】
この表題化合物は、チオフェン−３−アミン（化合物１１ｅ）の代わりに４−フルオロ−３−メチル−アニリンを使用することによって、実施例１１の製造と同様に製造した。実施例１４（８ｍｇ）を白色の固形物として入手した。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7.66 (s., 1H), 7.41 (br d, 1H), 7.18-7.33 (m, 3H), 6.88-7.00 (m, 3H), 4.45-4.53 (m, 1H), 4.16-4.25 (m, 1H), 3.14-3.25 (m, 1H), 3.03-3.12 (m, 1H), 2.69-2.79 (m, 1H), 2.38-2.46 (m, 2H), 2.27 (d, 3H). MS obsd (ESI) [(M+H) +]: 386
実施例１５
３−（２，４−ジフルオロフェニル）−Ｎ−（２，６−ジフルオロ−４−ピリジル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド
【０１０７】
【化３１】
2019521142.tif 000033
【０１０８】
この表題化合物は、以下のスキームに従って製造した：
【０１０９】
【化３２】
2019521142.tif 000034
【０１１０】
３−（２，４−ジフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボン酸メチル（化合物１１ｃ，５０ｍｇ，０．１７ミリモル）と２，６−ジフルオロピリジン−４−アミン（２６．７ｍｇ，０．２１ミリモル）のＴＨＦ（１ｍＬ）中の混合物へリチウムビス（トリメチルシリル）アミド（０．２６ｍＬ，０．２６ミリモル）を０℃で加えた。この反応混合物を２０℃で１２時間撹拌してから、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液の添加によってクエンチした。生じる混合物をＥｔＯＡｃ（５ｍＬ）で３回抽出した。合わせた有機層を塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させて減圧下に濃縮した。その残渣を分取用ＨＰＬＣによって精製して、３−（２，４−ジフルオロフェニル）−Ｎ−（２，６−ジフルオロ−４−ピリジル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド（実施例１５，３ｍｇ）を白色の固形物として得た。1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 7.63 (d, 1H), 7.38-7.47 (m, 1H), 7.19 (s, 2H), 6.97-7.08 (m, 2H), 4.35-4.45 (m, 1H), 4.18 (td, 1H), 3.03-3.16 (m, 2H), 2.91-3.00 (m, 1H), 2.39-2.48 (m, 1H), 2.24-2.37 (m, 1H). MS obsd. (ESI+) [(M+H)+] : 391
実施例１６
３−（２，４−ジフルオロフェニル）−Ｎ−（２−フルオロ−４−ピリジル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド
【０１１１】
【化３３】
2019521142.tif 000035
【０１１２】
この表題化合物は、以下のスキームに従って製造した：
【０１１３】
【化３４】
2019521142.tif 000036
【０１１４】
工程１：３−（２，４−ジフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボニルクロリド（化合物１６ａ）の製造
３−（２，４−ジフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボン酸（化合物１１ｄ，１００．０ｍｇ，０．３６０ミリモル）のＴＨＦ（２ｍＬ）中の撹拌溶液へ塩化チオニル（２１３．７８ｍｇ，１．８ミリモル）を２０℃でゆっくり加えた。この混合物を６０℃で４時間撹拌してから減圧下に濃縮して、３−（２，４−ジフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボニルクロリド（化合物１６ａ，１００ｍｇ，粗製）を得て、これを次の工程に直接使用した。
【０１１５】
工程２：３−（２，４−ジフルオロフェニル）−Ｎ−（２−フルオロ−４−ピリジル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド（実施例１６）の製造
４−アミノ−２−フルオロピリジン（１９．８ｍｇ，０．１８ミリモル）とトリエチルアミン（０．０５ｍＬ，０．３５ミリモル）のＤＣＭ（１ｍＬ）溶液へ３−（２，４−ジフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボニルクロリド（化合物１６ａ，３５．０ｍｇ，０．１２ミリモル）のＤＣＭ（１ｍＬ）溶液を加えた。この反応混合物を２０℃で１２時間撹拌してから、減圧下に濃縮した。その残渣を分取用ＨＰＬＣ（ギ酸を溶出液中の添加剤とする）によって精製して、３−（２，４−ジフルオロフェニル）−Ｎ−（２−フルオロ−４−ピリジル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド（実施例１６，１０．６ｍｇ）をそのギ酸塩として得た。1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 8.52 (br, 1 H), 8.05 (d, 1H), 7.64 (d, 1H), 7.49 (d, 1H), 7.39-7.47 (m, 1H), 7.33-7.39 (m, 1H), 6.98-7.08 (m, 2H), 4.36-4.44 (m, 1H), 4.12-4.24 (m, 1H), 3.06-3.14 (m, 2H), 2.92-3.02 (m, 1H), 2.39-2.48 (m, 1H), 2.28-2.37 (m, 1H). MS obsd. (ESI+) [(M+H)+] : 373.
実施例１７
３−（６−フルオロ−３−ピリジル）−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド
【０１１６】
【化３５】
2019521142.tif 000037
【０１１７】
この表題化合物は、以下のスキームに従って製造した：
【０１１８】
【化３６】
2019521142.tif 000038
【０１１９】
３−ヨード−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド（化合物１ｈ，２０ｍｇ，０．０５ミリモル）のジオキサン（０．５ｍＬ）溶液へ２−フルオロピリジン−５−ボロン酸（１３ｍｇ，０．０９ミリモル）、Ｋ３ＰＯ４（３０ｍｇ，０．１４ミリモル）、及びＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）・ＤＣＭ（４ｍｇ）を加えた。生じる混合物をＮ２下に８０℃で１５時間撹拌した。室温へ冷やした後で、この混合物を濾過して、濾液を減圧下に濃縮した。その残渣を分取用ＴＬＣと分取用ＨＰＬＣによって精製して、実施例１７（５．４ｍｇ）を白色の固形物として得た。1H NMR (400MHz, MeOD) δ 8.29 (s., 1H), 8.03 (dt, J=2.5, 8.0 Hz, 1H), 7.78 (s., 1H), 7.43 (dd, J=6.4, 9.9 Hz, 2H), 7.11 (dd, J=2.4, 8.6 Hz, 1H), 4.43-4.31 (m, 1H), 4.18 (dt, J=5.1, 11.8 Hz, 1H), 3.24-3.18 (m, 2H), 3.01-2.88 (m, 1H), 2.47-2.23 (m, 2H). MS obsd (ESI) [(M+H) +]: 391.
実施例１８
３−［４−（５−メチル−１，２，４−オキサジアゾール−３−イル）−２−オキソ−ピロリジン−１−イル］−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド
【０１２０】
【化３７】
2019521142.tif 000039
【０１２１】
この表題化合物は、以下のスキームに従って製造した：
【０１２２】
【化３８】
2019521142.tif 000040
【０１２３】
工程１：３−［４−（Ｎ−ヒドロキシカルバムイミドイル）−２−オキソ−ピロリジン−１−イル］−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド（化合物１８ａ）の製造
３−（４−シアノ−２−オキソ−ピロリジン−１−イル）−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド（実施例８，１０ｍｇ，０．０２ミリモル）のＥｔＯＨ（０．１ｍＬ）溶液へ塩酸ヒドロキシルアミン（１．６ｍｇ，０．０５ミリモル）とＴＥＡ（０．０１ｍＬ，０．０７ミリモル）を加えた。生じる混合物を８０℃で１５時間撹拌してから冷却して減圧下に濃縮して、粗製の化合物１８ａ（１２ｍｇ）を黄色のオイルとして得た。MS obsd (ESI) [(M+H) +]: 437.
工程２：実施例１８の製造
３−［４−（Ｎ−ヒドロキシカルバムイミドイル）−２−オキソ−ピロリジン−１−イル］−Ｎ−（３，４，５−トリフルオロフェニル）−４，５，６，７−テトラヒドロピラゾロ［１，５−ａ］ピリジン−５−カルボキサミド（化合物１８ａ，１２ｍｇ，粗製）のＡｃＯＨ（０．２ｍＬ）中の混合物へＡｃ２Ｏ（２８ｍｇ，０．２７ミリモル）を加えた。生じる混合物を８０℃で１５時間撹拌してから室温へ冷却して、濾過した。濾液を減圧下に濃縮した。その残渣を分取用ＨＰＬＣによって精製して、実施例１８（２．８ｍｇ）を白色の固形物として得た。1H NMR (400MHz, MeOD) δ 8.52 (s., 1H), 7.57-7.52 (m, 1H), 7.48-7.40 (m, 2H), 4.34-4.26 (m, 1H), 4.24-4.04 (m, 2H), 4.02-3.87 (m, 2H), 3.10-2.87 (m, 4H), 2.86-2.73 (m, 1H), 2.58 (d, 3H), 2.42-2.31 (m, 1H), 2.30-2.20 (m, 1H). MS obsd (ESI) [(M+H) +]: 461.
実施例１９：ＨＢＶ阻害アッセイ
細胞系と培養条件：
ＨｅｐＧ２．２．１５は、ＨＢＶゲノムを含有する、安定的にトランスフェクトされた細胞系である。それは、肝芽腫細胞系のＨｅｐ  Ｇ２（American Type Culture Collection，ＡＴＣＣ（登録商標）ＨＢ−８０６５ＴＭ）より参考文献：MA Selles et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1987, 84, 1005-1009 に記載される公知の手順によって誘導される。１０％胎仔ウシ血清（Gibco，カタログ番号：１００９９−１４１）、１００Ｕ／ｍＬのペニシリン、１００μｇ／ｍＬのストレプトマイシン（Gibco，カタログ番号：１５１４０−１２２）、及び０．３ｍｇ／ｍＬのＧ４１８硫酸塩（Gibco，カタログ番号：１０１３１−０２７）を補充したダルベッコ改良イーグル培地と混合栄養素Ｆ−１２（ＤＭＥＭ／Ｆ−１２，Gibco，カタログ番号：１１３２０−０３３）においてこの細胞系を維持した。
【０１２４】
試験管内（in vitro）抗ＨＢＶ活性：
ＨｅｐＧ２．２．１５細胞を２．５％胎仔ウシ血清、１００Ｕ／ｍＬのペニシリン、１００μｇ／ｍＬのストレプトマイシンを補充した１００μＬ  ＤＭＥＭ／Ｆ−１２の培養基においてウェルあたり３ｘ１０４個の細胞の密度で９６ウェルプレート中へ播いて、３７℃で一晩培養した。試験化合物は、ＤＭＳＯにおいて連続的に半対数希釈してから、培養基で１００倍希釈した。各ウェルにおいてＤＭＳＯの最終濃度が０．５％に達するように、希釈された化合物を含有する１００μＬの培養基を先のプレート中へ加えた。化合物処理から５日後、さらなる分析のために培養上清を採取した。
【０１２５】
細胞外ＨＢＶ  ＤＮＡの定量的ＰＣＲ検出のために、５０℃で１時間の５００μｇ／ｍＬのプロテイナーゼＫ（シグマ、カタログ番号：Ｐ２３０８）消化によって培養上清を処理した。この酵素の９５℃で１５分間の加熱不活性化の後で、その試料をｑＰＣＲによるＨＢＶ  ＤＮＡ定量へ処した。ＨＢＶ複製が５０％阻害されるのに有効な化合物濃度（ＥＣ５０）を決定した。
【０１２６】
本発明の実施例について、本明細書に記載したような上記アッセイにおいて検定して、下記の表１に示すように、ＨｅｐＧ２．２．１５アッセイにおいてＥＣ５０が１μＭ未満であることを見出した。
【０１２７】
表１．ＨｅｐＧ２．２．１５アッセイにおける本発明の化合物の活性
【０１２８】
【表１】
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【国際調査報告】
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