(57)【要約】  本発明は、ラミブジン及びエムトリシタビンを生産するためのフロー及びバッチ合成法であって、少なくとも合成ステップが無溶媒環境で行われる、フロー及びバッチ合成法を含む合成法を提供する。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉの化合物
【化１】
2019521965.tif 000031
及びその薬学的に許容される塩を生産するためのフロー合成法であって、
前記フロー合成法が、以下のステップ：
ａ）グリオキシル酸Ｌ−メンチルを１，４−ジチアン−２，５−ジオールと脱水反応で反応させて、式Ｉａの化合物
【化２】
2019521965.tif 000032
を含む反応生成物を形成するステップ、
ｂ）ステップ（ａ）の反応生成物をアセチル化試薬と反応させて、式Ｉｂの化合物
【化３】
2019521965.tif 000033
を含む反応生成物を形成するステップ、
ｃ）ステップ（ｂ）の反応生成物を式Ｉｃの化合物
【化４】
2019521965.tif 000034
と、グリコシル化反応で反応させて、式Ｉｄの化合物
【化５】
2019521965.tif 000035
を含む反応生成物を形成するステップ、及び
ｄ）ステップ（ｃ）の反応生成物を還元剤と反応させて、式Ｉの化合物を形成するステップを含み、
式中、Ｒが、Ｈ又はＦから選択され、
ステップ（ａ）から（ｂ）及び（ｃ）から（ｄ）が、式Ｉｂの化合物が前記フロー合成法で単離される唯一の中間体となるような連続フロー合成ステップである、フロー合成法。
【請求項２】
ステップ（ａ）〜（ｄ）が、前記フロー合成法において単離する中間体が生じないような連続フロー合成ステップである、請求項１に記載のフロー合成法。
【請求項３】
ステップ（ａ）の前に、グリオキシル酸Ｌ−メンチルが、シクロヘキサン中、Ｌ（−）メントールとグリオキシル酸との反応から生産され、Ｌ（−）メントールが、ステップ（ｄ）で形成された反応混合物から副生物として回収される、請求項１又は２に記載のフロー合成法。
【請求項４】
ステップ（ｃ）で使用される式Ｉｃの化合物
【化６】
2019521965.tif 000036
が、式ＩＩの化合物
【化７】
2019521965.tif 000037
を、有機溶媒の存在下、ビス（トリメチルシリル）アセトアミドと反応させることにより生産される、請求項１〜３のいずれか一項に記載のフロー合成法。
【請求項５】
前記有機溶媒がアセトニトリルである、請求項４に記載のフロー合成法。
【請求項６】
ステップ（ｂ）で、アセチル化試薬が、無水酢酸とピリジンとの混合物、又は無水酢酸と炭酸ナトリウムとの混合物である、請求項１〜５のいずれか一項に記載のフロー合成法。
【請求項７】
ステップ（ａ）の反応が無溶媒反応である、請求項１〜６のいずれか一項に記載のフロー合成法。
【請求項８】
ステップ（ａ）で、グリオキシル酸Ｌ（−）メンチルと１，４−ジチアン２，５−ジオールとの反応が有機溶媒中で行われる、請求項１〜６のいずれか一項に記載のフロー合成法。
【請求項９】
ステップ（ｂ）で、アセチル化試薬と式Ｉａの化合物
【化８】
2019521965.tif 000038
との反応が、有機溶媒の存在下で行われる、請求項１〜６のいずれか一項に記載のフロー合成法。
【請求項１０】
前記有機溶媒が、アセトニトリル、アセトン、クロロホルム、ジクロロメタン、１，２−ジクロロエタン、テトラヒドロフラン及びそれらの混合物からなる群から選択される、請求項８又は９に記載のフロー合成法。
【請求項１１】
ステップ（ｃ）で、式Ｉｃの化合物
【化９】
2019521965.tif 000039
を、有機溶媒の存在下、式Ｉｂの化合物
【化１０】
2019521965.tif 000040
及びトリメチルシリルヨージド又はピリジントリフレートと反応させる、請求項１〜１０のいずれか一項に記載のフロー合成法。
【請求項１２】
前記有機溶媒が、アセトニトリル、アセトン、クロロホルム、ジクロロメタン、１，２−ジクロロエタン、テトラヒドロフラン及びそれらの混合物である、請求項１０に記載のフロー合成法。
【請求項１３】
式Ｉの化合物
【化１１】
2019521965.tif 000041
及びその薬学的に許容される塩を生産するためのバッチ法であって、
前記バッチ法が、以下のステップ：
ａ）グリオキシル酸Ｌ−メンチルを１，４−ジチアン−２，５−ジオールと反応させて、式Ｉａの化合物
【化１２】
2019521965.tif 000042
を含む反応生成物を形成するステップ、
ｂ）任意選択で有機溶媒の存在下、式Ｉａの化合物をアセチル化試薬と反応させて、式Ｉｂの化合物
【化１３】
2019521965.tif 000043
を含む反応生成物を形成するステップ、
ｃ）式Ｉｂの化合物を、有機溶媒の存在下、式Ｉｃの化合物
【化１４】
2019521965.tif 000044
及びヨードトリメチルシランと反応させて、式Ｉｄの化合物
【化１５】
2019521965.tif 000045
を含む反応生成物を形成するステップ、及び
ｄ）式Ｉｄの化合物を還元剤と反応させて、式Ｉの化合物を形成するステップ
を含み、式中、Ｒが、Ｈ又はＦから選択される、バッチ法。
【請求項１４】
前記アセチル化試薬が、無水酢酸及び炭酸ナトリウムである、請求項１３に記載のバッチ法。
【請求項１５】
ステップ（ａ）、ステップ（ｂ）、又はステップ（ａ）と（ｂ）の両方の反応が、無溶媒反応である、請求項１３又は１４に記載のバッチ法。
【請求項１６】
前記有機溶媒がアセトニトリルである、請求項１３〜１５のいずれか一項に記載のバッチ法。
【請求項１７】
ステップ（ａ）で、式Ｉａの化合物
【化１６】
2019521965.tif 000046
を、トリメチルアミンとヘプタンとの混合物により、反応生成物から結晶化させる、請求項１３〜１６のいずれか一項に記載のバッチ法。
【請求項１８】
ステップ（ｂ）で、式Ｉｂの化合物
【化１７】
2019521965.tif 000047
を、トリメチルアミンとヘキサンとの混合物により、反応生成物から結晶化させる、請求項１３〜１７のいずれか一項に記載のバッチ法。
【請求項１９】
ステップ（ｃ）で、反応生成物が、メタノール及びジクロロメタンの移動相を使用するカラムクロマトグラフィーによって精製され、その後に、式Ｉｄの化合物
【化１８】
2019521965.tif 000048
を、酢酸エチル、ヘキサン及びメタノールの混合物により再結晶させる、請求項１３〜１８のいずれか一項に記載のバッチ法。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【０００１】
［序論］
本発明は、ラミブジン及びエムトリシタビンの生産方法、特に、排他的ではないが、本方法の少なくとも１つのステップが無溶媒であり、該方法が、半連続フロー合成法又は完全連続フロー合成法である、ラミブジン及びエムトリシタビンの生産方法に関する。
【０００２】
［背景］
エムトリシタビン及びラミブジンは、抗ウイルス薬として使用される。エムトリシタビンは、５位にフッ素原子を含む点で、ラミブジンとは異なる。エムトリシタビン及びラミブジンの調製に関する従来技術において、多数の方法及び合成経路が記載されている。
【０００３】
しかし、これらの化合物を生産する既存の合成法は、標準的な撹拌式バッチリアクター型の方法に本質的に基づいており、この場合、多量の有機溶媒が使用される。さらに、これらの方法は、通常、この方法の各ステップにおいて、プロセス中間体を単離しており、それにより、溶媒の使用がさらに増加する。したがって、このように生産されるコストの比較的高いＡＰＩは、このような有機溶媒への依存性及び中間体の単離に起因するプロセスの内在的非効率性に大部分基づいている。
【０００４】
さらに最近、ブランド化された「フロー化学」である、マイクロリアクター法（Ｍｉｃｒｏ  ｒｅａｃｔｏｒ  ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ：ＭＲＴ）は、研究開発におけるそのような作業が、連続フローを利用する反応を迅速にスクリーニングすることを可能にする、新たに現れた技法であり、生産レベルにおいて使用するのに好適な反応条件の特定に導く。さらに、従来の反応方法を使用することに加えて、小さなリアクター容量を使用することに伴う本来もつ安全性により、使用者は、過酷な反応条件、又は「有害な」化合物の使用／生成などの、生産環境内での使用に有害過ぎるとこれまで考えられてきた反応条件を用いることが可能となる。その結果、この技術の使用により、化学者に利用可能な反応のタイプが増大する。
【０００５】
現在のところ、フロー化学、又は有機溶媒の必要性がこの方法のステップの一部において解消される方法に基づいた、エムトリシタビン又はラミブジンの生産方法は存在しない。
【０００６】
本発明は、新規なエムトリシタビン又はラミブジンの生産方法を提供することにより、従来技術の欠点のうちのいくつかに対処しようとするものである。
【発明の概要】
【０００７】
本発明への第１の態様によれば、式Ｉの化合物
【化１】
2019521965.tif 000002
及びその薬学的に許容される塩を生産するフロー合成法が提供され、
本方法は、以下のステップ：
ａ）グリオキシル酸Ｌ−メンチルを１，４−ジチアン−２，５−ジオールと脱水反応で反応させて、式Ｉａの化合物
【化２】
2019521965.tif 000003
を含む反応生成物を形成するステップ、
ｂ）ステップ（ａ）の反応生成物を適切なアセチル化試薬と反応させて、式Ｉｂの化合物
【化３】
2019521965.tif 000004
を含む反応生成物を形成するステップ、
ｃ）グリコシル化反応において、ステップ（ｂ）の反応生成物を式Ｉｃの化合物
【化４】
2019521965.tif 000005
と反応させて、式Ｉｄの化合物
【化５】
2019521965.tif 000006
を含む反応生成物を形成するステップ、及び
ｄ）ステップ（ｃ）の反応生成物を還元剤と反応させて、式Ｉの化合物を形成するステップを含み、
式中、Ｒは、Ｈ又はＦから選択され、
ステップ（ａ）から（ｂ）及び（ｃ）から（ｄ）は、式Ｉｂの化合物が本方法において単離される唯一の中間体となるような、連続フロー合成ステップである。
好ましい実施形態では、ステップ（ａ）〜（ｄ）は、本方法において単離する中間体が生成しない、連続フロー合成ステップである。
【０００８】
一実施形態では、ステップ（ａ）の前に、グリオキシル酸Ｌ−メンチルが、シクロヘキサン中、Ｌ（−）メントールとグリオキシル酸との反応から生産され、Ｌ（−）メントールが、ステップ（ｄ）において形成された反応混合物から副生物として回収される。
【０００９】
ステップ（ｃ）において使用される式Ｉｃの化合物
【化６】
2019521965.tif 000007
は、式ＩＩの化合物
【化７】
2019521965.tif 000008
を有機溶媒の存在下で、ビス（トリメチルシリル）アセトアミドと反応させることにより生産されることが好ましい。
【００１０】
好ましくは、有機溶媒はアセトニトリルである。
【００１１】
好ましい実施形態では、ステップ（ａ）、ステップ（ｂ）、又はステップ（ａ）と（ｂ）の両方における反応は、無溶媒反応である。
【００１２】
別の実施形態では、ステップ（ａ）において、グリオキシル酸Ｌ（−）メンチルと１，４−ジチアン−２，５−ジオールとの反応は、有機溶媒中で行われる。
【００１３】
一実施形態では、ステップ（ｂ）において、アセチル化試薬は、無水酢酸とピリジン、又は無水酢酸と炭酸ナトリウムの混合物である。
【００１４】
さらなる実施形態では、ステップ（ｂ）において、式Ｉａの化合物
【化８】
2019521965.tif 000009
のアセチル化反応は、有機溶媒の存在下で行われる。
【００１５】
好ましくは、ステップ（ａ）及び（ｂ）における有機溶媒は、アセトン、ジクロロメタン及びそれらの混合物からなる群から選択される。
【００１６】
一実施形態では、ステップ（ｃ）において、式Ｉｃの化合物
【化９】
2019521965.tif 000010
は、有機溶媒の存在下、式Ｉｂの化合物
【化１０】
2019521965.tif 000011
及びトリメチルシリルヨージド又はピリジントリフレートと反応させる。
【００１７】
好ましくは、ステップ（ｃ）の有機溶媒は、アセトニトリルである。
【００１８】
本発明の第２の態様によれば、式Ｉの化合物
【化１１】
2019521965.tif 000012
及びその薬学的に許容される塩を生産するバッチプロセスが提供され、
本方法は、以下のステップ：
ａ）グリオキシル酸Ｌ−メンチルを１，４−ジチアン２，５−ジオールと反応させて、式Ｉａの化合物
【化１２】
2019521965.tif 000013
を含む反応生成物を形成するステップ、
ｂ）任意選択で有機溶媒の存在下、式Ｉａの化合物をアセチル化試薬と反応させて、式Ｉｂの化合物
【化１３】
2019521965.tif 000014
を含む反応生成物を形成するステップ、
ｃ）式Ｉｂの化合物を、有機溶媒の存在下、式Ｉｃの化合物
【化１４】
2019521965.tif 000015
及びヨードトリメチルシランと反応させて、式Ｉｄの化合物
【化１５】
2019521965.tif 000016
を含む反応生成物を形成するステップ、及び
ｄ）式Ｉｄの化合物を還元剤と反応させて、式Ｉの化合物を形成するステップ
を含み、
式中、Ｒは、Ｈ又はＦから選択される。
【００１９】
好ましい実施形態では、アセチル化試薬は、無水酢酸と炭酸ナトリウムとの混合物である。
【００２０】
好ましい実施形態では、ステップ（ａ）、ステップ（ｂ）、又はステップ（ａ）と（ｂ）の両方における反応は、無溶媒反応である。
【００２１】
好ましい実施形態では、ステップ（ｂ）及び（ｃ）における有機溶媒は、アセトニトリルである。
【００２２】
一実施形態では、ステップ（ａ）において、式Ｉａの化合物
【化１６】
2019521965.tif 000017
は、トリメチルアミンとヘプタンとの混合物により、反応生成物から結晶化させる。
【００２３】
別の実施形態では、ステップ（ｂ）において、式Ｉｂの化合物
【化１７】
2019521965.tif 000018
は、トリメチルアミンとヘキサンとの混合物により、反応生成物から結晶化させる。
【００２４】
好ましくは、ステップ（ｃ）において、反応生成物は、メタノール及びジクロロメタンの移動相を使用するカラムクロマトグラフィーによって精製され、その後に、式Ｉｄの化合物
【化１８】
2019521965.tif 000019
を、酢酸エチル、ヘキサン及びメタノールの混合物により再結晶させる。
【００２５】
以下の非限定的な実施形態及び図面を参照して、本発明を一層詳細に記載する。
【図面の簡単な説明】
【００２６】
【図１】ラミブジン及びエムトリシタビンを生産するための、半連続フロー合成法に関する合成略図である。
【図２】ラミブジン及びエムトリシタビンを生産するための、バッチ合成法に関する合成略図である。
【００２７】
［好ましい実施形態の詳細な説明］
本明細書のこれ以降に記載されている発明は、本発明の範囲内に含まれることが意図されているわずかな修正及び他の実施形態を含め、開示されている特定の実施形態に限定されると解釈されるべきではない。
【００２８】
特定の用語が本明細書において用いられているが、これらの用語は一般的意味及び説明的な意味で使用されているに過ぎず、限定を目的とするものではない。
【００２９】
本明細書において使用する場合、本明細書全体及び以下に続く特許請求の範囲では、単数形「ａ」、「ａｎ」及び「ｔｈｅ」は、文脈が明白に他を示さない限り、複数形を含む。
【００３０】
本明細書において使用されている専門用語及び語法は、説明を目的としているものであり、限定として考えられるべきではない。本明細書において使用される、用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」、「含有する（ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ）」、「有する（ｈａｖｉｎｇ）」、「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」、及びそれらの変化形の使用は、これ以降に列挙されている項目及びその均等物、並びに追加の項目を包含することが意図されている。
【００３１】
本発明は、ラミブジン及びエムトリシタビン、並びにその薬学的に許容される塩の生産方法を提供し、ラミブジン及びエムトリシタビンは、以下の構造を有する式Ｉ
【化１９】
2019521965.tif 000020
（式中、Ｒは、Ｈ又はＦから選択される）によって表わされる。
【００３２】
本発明は、特に、ラミブジン及びエムトリシタビンの生産方法であって、該方法の反応のうちの少なくとも１つが溶媒の非存在下で行われる方法による生産方法を提供する。本方法は、バッチ法、半連続フロー合成法又は完全連続フロー合成法とすることができる。
【００３３】
本明細書において使用する場合、用語「半連続フロー合成法」は、いくつかのステップを含むフロー合成法を意味することを理解すべきであり、この場合、大部分のステップは、プロセス中間体の単離を行わない連続的なものである。
【００３４】
本明細書において使用する場合、用語「完全連続フロー合成法」は、いくつかのステップを含むフロー合成法を意味することを理解すべきであり、この場合、本方法の最終生成物は、いずれのプロセス中間体の単離も行うことなく得られる。
【００３５】
本方法のバッチ合成構成及びフロー合成構成のどちらにおいても、本方法の、第１の反応又は最初の２つの反応は、溶媒を含まない環境中で行うことができる。最初の２つの反応は、１）グリオキシル酸Ｌ（−）メンチルと１，４−ジチアン２，５−ジオールとの反応に由来する（２Ｒ，５Ｒ）−（（１Ｒ，２Ｓ，５Ｒ）−２−イソプロピル−５−メチルシクロヘキシル）５−ヒドロキシ−１，３−オキサチオラン−２−カルボキシレート（式Ｉａ）の形成、及び２）最初の反応の反応生成物と、無水酢酸又は無水酢酸及び炭酸水素ナトリウムとの反応に由来する（２Ｒ，５Ｒ）−（（１Ｒ，２Ｓ，５Ｒ）−２−イソプロピル−５−メチルシクロヘキシル）５−アセトキシ−１，３−オキサチオラン−２−カルボキシレート（式Ｉｂ）の形成である。無溶媒反応はバッチ構成において実証され得るが、この方法は、適切な機器を使用するフロー合成構成に移管することが可能であることが、当業者により理解されよう。
【００３６】
本方法のフロー合成構成において、本方法は、半連続フロー合成法又は完全連続フロー合成法のどちらか一方とすることができる。半連続フロー合成法では、反応の最初の２つのステップは、有機溶媒中で行われ、この後に、（２Ｒ，５Ｒ）−（（１Ｒ，２Ｓ，５Ｒ）−２−イソプロピル−５−メチルシクロヘキシル）５−アセトキシ−１，３−オキサチオラン−２−カルボキシレート（式Ｉｂ）が、本方法のさらなるステップにおいて使用するために、再構成されることになる中間体として単離される。例えば、本方法の第１の段階において使用される溶媒は、本方法の後の段階において使用される溶媒と混和しないので、この中間体は単離されてもよい。
【００３７】
しかし、本方法はまた、完全な連続方式で操作されてもよい。このフロー合成法では、中間体は単離されない。完全連続フロー合成法は、反応全体にわたり混和性の反応溶媒を選択することにより、又は代替として、無溶媒環境で本方法のステップの一部を行うことにより、実現することができる。半連続及び完全連続フロー合成法は、ラミブジン及びエムトリシタビンの従来の合成方法と比べると、一部が溶媒使用の低減の結果として、時間及び費用の削減をもたらす。
【００３８】
本方法のバッチ合成構成及びフロー合成構成の両方において、グリオキシル酸Ｌ（−）メンチル出発原料は、その開示が参照により本明細書に組み込まれている、Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  Ｃｏｍｍｕｎ．１９９０年、２０巻、２８３７〜２８４７頁に記載されている方法に従い、Ｌ（−）メントールとグリオキシル酸との反応により調製することができる。グリオキシル酸Ｌ（−）メンチルの生成において使用されるＬ（−）メントールは、（２Ｒ，５Ｒ）−（（１Ｒ，２Ｓ，５Ｒ）−２−イソプロピル−５−メチルシクロヘキシル）５−アセトキシ−１，３−オキサチオラン−２−カルボキシレート（式Ｉｄ）の還元によって、ラミブジン及びエムトリシタビンを調製するステップにおいて生産される有機層から回収することができる。
【００３９】
Ｌ（−）メントールは、還元反応の最終生成物の精製において使用される有機溶媒から回収することができる。ＮａＢＨ４を用いる最終反応の完了後、この反応混合物を希塩酸によりクエンチし、ｐＨを４〜４．５に調節し（ラミブジン及びエムトリシタビンは、水層中に塩の形態で存在する）、トルエン及びジエチルエーテルにより洗浄すると、メントールが回収され、このメントールをさらなる溶媒洗浄により精製した。
【００４０】
本方法のバッチ及びフロー合成構成の両方において、シリル化シトシン又はフルオロシトシンは、不活性雰囲気下、有機溶媒中、特定のシトシン出発化合物とビス（トリメチルシリル）アセトアミドとの反応により生成することができる。本方法のフロー合成構成では、シリル化シトシン又はシリル化フルオロシトシンは、ある所定の流速で、フロー合成法に導入し、（２Ｒ，５Ｒ）−（（１Ｒ，２Ｓ，５Ｒ）−２−イソプロピル−５−メチルシクロヘキシル）５−アセトキシ−１，３−オキサチオラン−２−カルボキシレート（式Ｉｂ）と反応させることができる。式Ｉｂの化合物は、再構成された単離中間体として（半連続）、又は前の反応の反応生成物の非単離構成成分として（完全連続）のどちらかで導入することができる。
【００４１】
これより、本発明を、本発明の非限定的実施形態の一部を参照して、これ以降、一層完全に記載する。
【００４２】
一般的実験手順
バッチ反応はすべて、オーブン乾燥したガラス器具で実施した。溶媒及び化学物質は、Ａｌｄｒｉｃｈ及びＡｌｆａ  Ａｅｓａｒ社から入手した。他のすべての試薬及び溶媒は、さらに精製することなく、入手したまま使用した。水分に敏感な反応はすべて、オーブン乾燥したガラス器具を使用して、窒素雰囲気下で実施した。
【００４３】
シリンジポンプ及びステンレスシリンジ（１ｍｌ、５ｍＬ及び１０ｍＬ）は、Ｓｕｐｅｌｃｏ社から購入した。ＰＦＡチューブは、パーフルオロアルコキシアルカンチューブを指す。ＰＦＡ及びＴｙｇｏｎ  ＭＨＬＬチューブは、ＩＤＥＸ  Ｈｅａｌｔｈ＆Ｓｃｉｅｎｃｅｓから購入した。
【００４４】
分析用薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）は、ＥＭＤシリカゲル  ６０  Ｆ２５４プレートを使用して実施した。生成物は、ＵＶ光（２５４ｎｍ）、ヨウ素蒸気及び／又はＫＭｎＯ４染色の使用により視覚化した。
【００４５】
１Ｈ及び１３Ｃ  ＮＭＲスペクトルは、ＤＭＳＯ−ｄ６及びＣＤＣｌ３中、Ｂｒｕｋｅｒ  ＡｖａｎｃｅＩＩＩ−４００スペクトロメーター（それぞれ、４００及び１００ＭＨｚ）で記録した。１Ｈ  ＮＭＲスペクトルにおける化学シフトは、ＣＤＣｌ３中の残留ＣＨＣｌ３（７．２６ｐｐｍ）、ＭｅＯＤ中のＭｅＯＨ（３．３１ｐｐｍ）又はＤＭＳＯ−ｄ６中のＤＭＳＯ（２．５０ｐｐｍ）である内部標準から、δスケールでの百万分率（ｐｐｍ）で報告する。データは、以下のとおり報告する：化学シフト、多重度（ｓ＝シングレット、ｄ＝ダブレット、ｔ＝トリプレット、ｑ＝カルテット、ｑｕｉｎｔ＝クインテット、ｍ＝マルチプレット及びｂｒ＝ブロード）で、ヘルツ（Ｈｚ）でのカップリング定数及び積分値。１３Ｃ  ＮＭＲスペクトルの化学シフトは、δスケールで、ＣＤＣｌ３（７７．１６ｐｐｍ）、ＭｅＯＤ（４９．１５ｐｐｍ）又はＤＭＳＯ−ｄ６（３９．５２ｐｐｍ）の中央ピークからｐｐｍで報告する。１個超の炭素に対する同一の化学シフトを有する１３Ｃシグナルを明記し、複数の炭素に対する重なりピークは、シフト範囲により表示する。赤外（ＩＲ）スペクトルは、Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒモデル２０００  ＦＴ−ＩＲで記録した。
【００４６】
実施例１：（２Ｒ，５Ｒ）−（（１Ｒ，２Ｓ，５Ｒ）−２−イソプロピル−５−メチルシクロヘキシル）５−ヒドロキシ−１，３−オキサチオラン−２−カルボキシレート（式Ｉａ）のフロー調製
【化２０】
2019521965.tif 000021
１，４−ジチアン２，５−ジオール（３９６ｍｇ、２．６０ｍｍｏｌ）及び触媒量の酢酸（０．５ｍＬ）に、アセトン（１０ｍＬ）中のグリオキシル酸Ｌ−メンチル一水和物（１．０ｇ、４．３４ｍｍｏｌ）を加えた。この溶液を流速０．０５ｍＬ／分（合わせた流速は０．１ｍＬ／分）でポンプ注入し、この反応溶液を１２５℃で、フローリアクターに通し、温度及び圧力を制御するための背圧調節器（１０ｂａｒ）を経てフローシステムから排出させた。セプタムを装備した収集バイアルに、この反応混合物を収集した。反応の完了後、薄層クロマトグラフィー（「ＴＬＣ」）及びガスクロマトグラフィー（「ＧＣ」）によってモニタリングしながら、溶媒を蒸発させた。この反応混合物を０℃〜−５℃に冷却し、ヘプタン又はヘキサン中の１％トリエチルアミン溶液を滴下して加えた。この混合物を、０℃で２〜３時間、撹拌し、沈殿の形成を観察した。単離した固体をろ過して、ｎ−ヘキサンにより洗浄すると、（２Ｒ，５Ｒ）−（（１Ｒ、２Ｓ，５Ｒ）−２−イソプロピル−５−メチルシクロヘキシル）５−ヒドロキシ−１，３−オキサチオラン−２−カルボキシレート（１．１ｇ、８８％）が白色固体として得られた。
【００４７】
スペクトル分析：
ＣＤＣｌ３中１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ）：∂  ５．９６（ｄ，１Ｈ）、５．５７（ｄ，１Ｈ）、４．７４（ｓ，１Ｈ）、３．３２〜３．２９（ｍ，１Ｈ）、３．１７〜３．０８（ｄｄ，１Ｈ）、２．０２（ｄ，２Ｈ）、１．７０（ｄ，１Ｈ）、１．５１〜１．４２（ｍ，２Ｈ）、１．０９〜１．００（ｍ，２Ｈ）、０．９１（ｄ，６Ｈ）、０．７８（ｄ，３Ｈ）。ＣＤＣｌ３中１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ）：∂  １６．２７、２０．６９、２３．３０、２６．１６、３１．４２、３４．１１、３８．４６、４０．３５、４６．８６、４６．０７、８０．２０、１０１．２２、１０３．２０、１７２．１８。ＦＴ−ＩＲ（Ｎｅａｔ）：３４５６、２９５６、２８６４、１７３１、１４５７、１３８７、１２８８、１１９６、１０４１、９８６。
化合物の性質：白色固体
流速：０．１ｍＬ／分
滞留時間：２０分
反応温度：５０℃〜１２５℃
再結晶：ヘプタン／ヘキサン中の１％ＴＥＡ
確認：ＧＣ、ＩＲ及び１Ｈ−ＮＭＲスペクトルによる
【００４８】
実施例１Ａ：（２Ｒ，５Ｒ）−（（１Ｒ，２Ｓ，５Ｒ）−２−イソプロピル−５−メチルシクロヘキシル）５−ヒドロキシ−１，３−オキサチオラン−２−カルボキシレート（式Ｉａ）の無溶媒バッチ調製
【化２１】
2019521965.tif 000022
グリオキシル酸Ｌ（−）メンチル（２５ｇ、１０８．６９ｍｍｏｌ）及び１，４−ジチアン２，５−ジオール（８．２ｇ、５４．３２ｍｍｏｌ）を２５０ｍＬの丸底フラスコ中、３０分間、一緒に混合した。丸底フラスコにＮ２を充填し、ディーンスタークコンデンサを据え付けて、水循環器に接続した。最初に、この反応混合物を８０℃〜８５℃で固体から融解させて、濃厚な褐色液体にする。次に、加熱を２〜３時間、１１０℃まで上昇させた。反応の完了後、ＧＣ及びＴＬＣによってモニタリングしながら、この反応混合物を０〜５℃に冷却した。１％トリエチルアミンのヘプタン（１５０ｍＬ）溶液をゆっくりと加え、撹拌して結晶化させた。この懸濁液を、０〜５℃で２時間、撹拌した。生成物をろ過により単離してヘプタンにより洗浄し、減圧下で乾燥すると、（２Ｒ，５Ｒ）−（（１Ｒ，２Ｓ，５Ｒ）−２−イソプロピル−５−メチルシクロヘキシル）５−ヒドロキシ−１，３−オキサチオラン−２−カルボキシレート（２６．５ｇ、８５．４％）が白色固体として得られた。
フロー構成では、グリオキシル酸Ｌ（−）メンチルを８０℃〜８５℃に加熱したフラスコに加え、この時点で、グリオキシル酸エステルが融解する。次に、この粘性の高い溶液を、ライン中での沈殿を防止するため、熱制御したチューブを使用して、リアクターにポンプ注入した。次に、これを、リアクターの他の注入口からの１，４−ジチアン２，５−ジオールと反応させた。反応の後処理は、上記と同じとした。
【００４９】
スペクトル分析：
ＣＤＣｌ３中１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ）：∂  ５．９６（ｄ，１Ｈ）、５．５７（ｄ，１Ｈ）、４．７４（ｓ，１Ｈ）、３．３２〜３．２９（ｍ，１Ｈ）、３．１７〜３．０８（ｄｄ，１Ｈ）、２．０２（ｄ，２Ｈ）、１．７０（ｄ，１Ｈ）、１．５１〜１．４２（ｍ，２Ｈ）、１．０９〜１．００（ｍ，２Ｈ）、０．９１（ｄ，６Ｈ）、０．７８（ｄ，３Ｈ）。ＣＤＣｌ３中１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ）：∂  １６．２７、２０．６９、２３．３０、２６．１６、３１．４２、３４．１１、３８．４６、４０．３５、４６．８６、４６．０７、８０．２０、１０１．２２、１０３．２０、１７２．１８。ＦＴ−ＩＲ（Ｎｅａｔ）：３４５６、２９５６、２８６４、１７３１、１４５７、１３８７、１２８８、１１９６、１０４１、９８６。
【００５０】
実施例２：（２Ｒ，５Ｒ）−（（１Ｒ，２Ｓ，５Ｒ）−２−イソプロピル−５−メチルシクロヘキシル）５−アセトキシ−１，３−オキサチオラン−２−カルボキシレート（式Ｉｂ）のフロー調製
【化２２】
2019521965.tif 000023
室温で、ジクロロメタン（「ＤＣＭ」）に溶解した（２Ｒ，５Ｒ）−（（１Ｒ，２Ｓ，５Ｒ）−２−イソプロピル−５−メチルシクロヘキシル）５−ヒドロキシ−１，３−オキサチオラン−２−カルボキシレート（１０．０ｇ、３４．７ｍｍｏｌ）の溶液を試料ループＡ（５０ｍＬ）に満たし、ＤＣＭ中の無水酢酸（１６．３ｍＬ、１７３．６ｍｍｏｌ）及びピリジン（８．３ｍＬ、１０４．１ｍｍｏｌ）の保存溶液を試料ループＢ（５０ｍＬ）に満たした。２つの試料ループ（Ａ及びＢ）は、同時に、ラインのスイッチを入れて、開始溶液を、それぞれ０．１ｍＬ／分の流速で、ユニクシス（Ｕｎｉｑｓｉｓ）（商標）システムによりポンプ注入した。開始溶液をＴ字型混合用ピース（Ｔ−ｍｉｘｉｎｇ  ｐｉｅｃｅ）中で混合し、この反応溶液（合わせた流速は、０．２ｍＬ／分）を、室温でＰＦＡコーティングしたステンレス鋼リアクターコイル（１０ｍＬ）に通した。排出流を、閉鎖したキャップバイアル（２５０ｍＬ）中に収集した。反応の完了を、ＴＬＣ及びＧＣによって確認した後、この混合物を氷水（１００ｍＬ）によりクエンチして静置し、分離した有機層を希ＨＣｌ（５０ｍＬ）により洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４により脱水し、減圧下で濃縮した。ジアステレオマー混合物を含む、７．８ｇのアセチル化合物が褐色固体として得られた。
７８０ｍｇの試料を、ＴＥＡ０．１ｍＬを含むヘキサン１０ｍＬ中に−１０℃で２４時間かけて、溶解し、これにより、所望の生成物である（２Ｒ，５Ｒ）−（（１Ｒ，２Ｓ，５Ｒ）−２−イソプロピル−５−メチルシクロヘキシル）５−アセトキシ−１，３−オキサチオラン−２−カルボキシレート（５５０ｍｇ、４８．２４％）が得られた。
【００５１】
スペクトル分析：
ＣＤＣｌ３中１Ｈ−ＮＭＲ：∂  ６．７９（ｄ，１Ｈ）、５．６３（ｓ，１Ｈ）、４．７４（ｄ，１Ｈ）、３．４５（ｄｄ，１Ｈ）、３．１６（ｄ，１Ｈ）、２．１１（ｓ，３Ｈ）、２．０３〜１．９５（ｍ，２Ｈ）、１．７０（ｄ，２Ｈ）、１．４１〜１．３３（ｍ，２Ｈ）、１．０８〜１．０２（ｍ，２Ｈ）、０．９９〜０．９１（ｍ，６Ｈ）、０．７６（ｄ，３Ｈ）。ＣＤＣｌ３中１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ）：∂  １６．１６、２０．７１、２１．５０、２３．２４、２６．１５、３１．３７、３４．１３、３７．３３、４０．４０、４７．０７、７６．１０、７９．９０、８０．３５、９９．６５、１６８．５８、１６９．６４。ＦＴ−ＩＲ（Ｎｅａｔ）：３４６３、２９５９、２９３２、２８６５、１７４５、１７３０、１４６３、１３８５、１２８７、１１６９、１０４０、９８６、８７６。
化合物の性質：白色固体
流速：０．２ｍＬ／分
滞留時間：５０分
反応温度：室温
確認：ＧＣ、ＩＲ及び１Ｈ−ＮＭＲスペクトルによる
【００５２】
実施例２Ａ：（２Ｒ，５Ｒ）−（（１Ｒ，２Ｓ，５Ｒ）−２−イソプロピル−５−メチルシクロヘキシル）５−アセトキシ−１，３−オキサチオラン−２−カルボキシレート（式Ｉｂ）のバッチ調製
【化２３】
2019521965.tif 000024
窒素を充填した５００ｍＬの２つ口丸底フラスコに、撹拌した（２Ｒ，５Ｒ）−（（１Ｒ，２Ｓ，５Ｒ）−２−イソプロピル−５−メチルシクロヘキシル）５−ヒドロキシ−１，３−オキサチオラン−２−カルボキシレート（２５ｇ、８６．８０ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（２００ｍＬ）溶液を室温で加えた。炭酸水素ナトリウム（１４．５ｇ、１７３．１１ｍｍｏｌ）及び無水酢酸（１６．３４ｍＬ、１７３．１１ｍｍｏｌ）をゆっくりと加え、この反応混合物を室温で６時間、撹拌した。この反応の進行を、ＴＬＣ（２０％ＥＡ＋ＰＥを使用、Ｒｆは約０．６５）及びＧＣによってモニタリングした。この反応混合物をろ過してアセトニトリルにより洗浄し、ロータリーエバポレーションにより蒸発させて、次に、水（１００ｍＬ）により希釈し、酢酸エチル（３ｘ１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４により脱水し、減圧下で濃縮すると、４つのジアステレオマーの混合物が得られた。５ｇの試料を１ｍＬのＴＥＡを含む８０ｍＬのヘキサンに溶解し、−２０℃で３６時間後、所望のｔｒａｎｓ−（２Ｒ、５Ｒ）立体異性体（２．４ｇ、４１．８％）が沈殿した。
【００５３】
スペクトル分析：
ＣＤＣｌ３中１Ｈ−ＮＭＲ：∂  ６．７９（ｄ，１Ｈ）、５．６３（ｓ，１Ｈ）、４．７４（ｄ，１Ｈ）、３．４５（ｄｄ，１Ｈ）、３．１６（ｄ，１Ｈ）、２．１１（ｓ，３Ｈ）、２．０３〜１．９５（ｍ，２Ｈ）、１．７０（ｄ，２Ｈ）、１．４１〜１．３３（ｍ，２Ｈ）、１．０８〜１．０２（ｍ，２Ｈ）、０．９９〜０．９１（ｍ，６Ｈ）、０．７６（ｄ，３Ｈ）。ＣＤＣｌ３中１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ）：∂  １６．１６、２０．７１、２１．５０、２３．２４、２６．１５、３１．３７、３４．１３、３７．３３、４０．４０、４７．０７、７６．１０、７９．９０、８０．３５、９９．６５、１６８．５８、１６９．６４。ＦＴ−ＩＲ（Ｎｅａｔ）：３４６３、２９５９、２９３２、２８６５、１７４５、１７３０、１４６３、１３８５、１２８７、１１６９、１０４０、９８６、８７６。
【００５４】
実施例３：（２Ｒ，５Ｒ）−（（１Ｒ，２Ｓ，５Ｒ）−２−イソプロピル−５−メチルシクロヘキシル）５−アセトキシ−１，３−オキサチオラン−２−カルボキシレート（式Ｉｂ）の調製における、最初の２つのステップ（ユニクシス（商標））の連続フロープロトコル
本方法の最初の２つのステップは、以下に詳述した方法に従い、ユニクシスフローシン（Ｕｎｉｑｓｉｓ  Ｆｌｏｗｓｙｎ）（商標）システム上で行った。
【化２４】
2019521965.tif 000025
【表１】
2019521965.tif 000026
グリオキシル酸Ｌ（−）メンチル一水和物（１ｇ、４．３４ｍｍｏｌ）、１，４−ジチアン２，５−ジオール（３９２ｍｇ、２．６０ｍｍｏｌ）及び酢酸（１ｍＬ）のアセトン（１０ｍＬ）保存溶液を、透明な溶液が形成されるまで、５０℃に加熱した。この透明な保存溶液を、１２５℃で２ｍＬのフローリアクターに、流速０．１ｍＬ／分でポンプ注入した。フローリアクターの出口を、バックプレッシャーレギュレータ（１０ｂａｒ）に接続し、排出流をＴ字型混合用ピース（Ｔ字型混合用ピースの前に冷却浴を準備して、第１のステップ溶液を冷却した）中で合わせた。別のフラスコ中で、ピリジン（１．０２ｍＬ、１３．０２ｍｍｏｌ）及び無水酢酸（２．２１ｍＬ、２１．７０ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１０ｍＬ）に溶解し、流速０．１ｍＬ／分でポンプ注入し、Ｔ字型混合用ピースにおいて混合した。ポンプＡ（０．１ｍＬ／分）及びポンプＢ（０．１ｍＬ／分）からの反応流速を合わせて、合計流速を０．２ｍＬ／分にした。この反応混合物を、室温で、ＰＦＡコーティングしたステンレス鋼リアクターコイル（１０ｍＬ）に流した。排出流を、閉鎖したキャップバイアル（２５ｍＬ）中に収集した。反応の完了を、ＴＬＣ及びＧＣによって確認した後、この混合物を氷水（１０ｍＬ）によりクエンチして静置し、分離した有機層を希ＨＣｌ（１０ｍＬ）により洗浄して、無水Ｎａ２ＳＯ４により脱水し、減圧下で濃縮した。ジアステレオマー混合物を含む、７００ｍｇのアセチル化合物が褐色固体として得られた。７００ｍｇの試料を、０．１ｍＬのＴＥＡを含むヘキサン１０ｍＬ中に、−１０℃で２４時間、溶解し、これにより、所望の生成物である（２Ｒ，５Ｒ）−（（１Ｒ，２Ｓ，５Ｒ）−２−イソプロピル−５−メチルシクロヘキシル）５−アセトキシ−１，３−オキサチオラン−２−カルボキシレート（４５０ｍｇ、２つのステップの総収率３１．４％）が得られた。
【００５５】
スペクトル分析：
ＣＤＣｌ３中１Ｈ−ＮＭＲ：∂  ６．７９（ｄ，１Ｈ）、５．６３（ｓ，１Ｈ）、４．７４（ｄ，１Ｈ）、３．４５（ｄｄ，１Ｈ）、３．１６（ｄ，１Ｈ）、２．１１（ｓ，３Ｈ）、２．０３〜１．９５（ｍ，２Ｈ）、１．７０（ｄ，２Ｈ）、１．４１〜１．３３（ｍ，２Ｈ）、１．０８〜１．０２（ｍ，２Ｈ）、０．９９〜０．９１（ｍ，６Ｈ）、０．７６（ｄ，３Ｈ）。ＣＤＣｌ３中１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ）：∂  １６．１６、２０．７１、２１．５０、２３．２４、２６．１５、３１．３７、３４．１３、３７．３３、４０．４０、４７．０７、７６．１０、７９．９０、８０．３５、９９．６５、１６８．５８、１６９．６４。ＦＴ−ＩＲ（Ｎｅａｔ）：３４６３、２９５９、２９３２、２８６５、１７４５、１７３０、１４６３、１３８５、１２８７、１１６９、１０４０、９８６、８７６。
化合物の性質：白色固体
流速：０．２ｍＬ／分
反応温度：室温
確認：ＧＣ、ＩＲ及び１Ｈ−ＮＭＲスペクトルによる
【００５６】
実施例４：式Ｉｄの化合物の調製における式Ｉｂの化合物のフロー法グリコシル化反応
式Ｉｄの化合物は、以下のフロー法に従い、式Ｉｂの化合物から調製することができる：
【化２５】
2019521965.tif 000027
２５ｍＬの丸底フラスコ中、窒素雰囲気下、室温で、シトシン又はフルオロシトシン（２．３ｇ、２０．７２ｍｍｏｌ）とビス（トリメチルシリル）アセトアミド（１１．６５ｍＬ、４７．６５ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（５ｍＬ）溶液とを混合し、８０℃に加熱した。透明な溶液が１時間後に得られ、シリル生成物の形成が示された。この生成物をオーブン乾燥したスクリューキャップメスフラスコ中で２５ｍＬに希釈した。
（２Ｒ，５Ｒ）−（（１Ｒ，２Ｓ，５Ｒ）−２−イソプロピル−５−メチルシクロヘキシル）５−アセトキシ−１，３−オキサチオラン−２−カルボキシレート（５．０ｇ、１９．６０ｍｍｏｌ）及びトリメチルシリルヨージド（２．７ｍＬ、１９．６０ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（２５ｍＬ）溶液を、別のオーブン乾燥したスクリューキャップメスフラスコ中で調製した。次に、この２つの溶液を、１０ｍＬステンレス鋼シリンジに移送した（核塩基（nucleobase）を加熱テープで周囲を包んだシリンジに入れて、反応中６０〜６５℃に維持し、シリンジ中で固体が沈殿するのを防止した）。試薬流を同一流速でＰＦＴチューブからポンプ注入（各ポンプは、０．１ｍＬ／分；合計流速：０．２ｍＬ／分）し、油浴を使用して１００℃に維持した。セプタムを装備したバイアルに、この反応混合物を収集した。収集した溶液を、回転式圧力下で蒸発させた。６０〜１２０シリカメッシュを使用するカラムクロマトグラフィーによって、残留物を精製した。溶離液は、ＤＣＭ中の４〜５％メタノールとした。純粋な生成物は、還流下、ヘキサン：酢酸エチル：メタノール（２：２：１）中で再結晶し、透明な白色固体を得た。
別のフロー実験では、トリメチルシリルヨージド（ＴＭＳＩ）をピリジウムトリフレートにより置き換えた類似反応を実施した。どちらの反応も、等しい収率で生成物が得られた。
【００５７】
スペクトル分析：
（１Ｒ，２Ｓ，５Ｒ）−２−イソプロピル−５−メチルシクロヘキシル（２Ｒ，５Ｓ）−５−（４−アミノ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１−ピリミジニル）−１，３−オキサチアラン−２−カルボキシレートの分析データ：
ＤＭＳＯ−ｄ６中１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ）：∂  ７．９５（ｄ，１Ｈ）、７．３０〜７．２５（ｄ，２Ｈ）、６．３５（ｔ，１Ｈ）、５．８０〜５．６８（ｍ，２Ｈ）、４．６９（ｑ，１Ｈ）、３．５３（ｄ，１Ｈ）、３．１４〜３．１０（ｍ，１Ｈ）、１．９２〜１．８６（ｍ，２Ｈ）、１．６５（ｄ，２Ｈ）、１．４７〜１．４１（ｍ，２Ｈ）、１．０８〜１．００（ｍ，２Ｈ）、０．９０〜０．８６（ｍ，６Ｈ）、０．７３（ｄ，３Ｈ）。ＣＤＣｌ３中１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ）：１６９．４５、１６６．１４、１４０．９２、９４．８１、８９．２８、７７．８１、７７．７７、４６．７５、４０．６３、３５．７６、３３．９７、３１．２７、２６．１５、２３．２８、２２．２５、２０．９５及び１６．５７。
（１Ｒ，２Ｓ，５Ｒ）−２−イソプロピル−５−メチルシクロヘキシル（２Ｒ，５Ｓ）−５−（４−アミノ−５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１−ピリミジニル）−１，３−オキサチアラン−２−カルボキシレートの分析データ：
ＣＤＣｌ３中１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ）：∂  ８．４３（ｄ，１Ｈ）、７．４２（ｂｓ，１Ｈ）、６．３５（ｄ，１Ｈ）、５．７１（ｂｓ，２Ｈ）、５．３９（ｓ，１Ｈ）、４．７３（ｔ，１Ｈ）、３．４８（ｄｄ，１Ｈ）、３．０７（ｄｄ，１Ｈ）、１．９７〜１．８５（ｍ，２Ｈ）、１．６４（ｄ，２Ｈ）、１．４４〜１．３５（ｍ，２Ｈ）、１．０５（ｔ，２Ｈ）、０．９７〜０．８３（ｍ，６Ｈ）、０．７８（ｄ，３Ｈ）。ＣＤＣｌ３中１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ）：１６９．７７、１５８．１１、１５３．３８、１３４．７１、１２５．５０  ８９．５９、７８．３１、７５．５８、４６．８６、４０．６３、３６．７４、３４．０２、３１．２５、２６．２１、２３．３８、２２．２５、２０．８８及び１６．５８。
化合物の性質：白色固体
流速：０．２ｍＬ／分
滞留時間：９．３分
反応温度：室温から１２０℃
確認：ＧＣ、ＩＲ及び１Ｈ−ＮＭＲスペクトルによる
【００５８】
実施例４Ａ：式Ｉｄの化合物の調製における式Ｉｂの化合物のバッチグリコシル化反応
式Ｉｄの化合物は、以下のバッチ法に従い、式Ｉｂの化合物から調製することができる：
【化２６】
2019521965.tif 000028
核酸塩基（１．０当量）のアセトニトリル（５ｍＬ）溶液に、窒素雰囲気下、室温でビス（トリメチルシリル）アセトアミド（２．５当量）をゆっくりと加えた。この反応混合物が透明な溶液を形成すると、この反応混合物を１時間かけて、８０℃まで加熱し、シリル生成物の形成が示された。この反応混合物を周囲温度まで冷却し、何らさらなる単離をすることなく、次のステップに使用した。
上記の混合物に、（２Ｒ，５Ｒ）−（（１Ｒ，２Ｓ，５Ｒ）−２−イソプロピル−５−メチルシクロヘキシル）５−アセトキシ−１，３−オキサチオラン−２−カルボキシレート（１．０当量）のアセトニトリル（１０ｍＬ）溶液を加え、１０分間、撹拌した。ヨードトリメチルシラン（１．０当量）を室温でカニューレによって滴下して導入した。反応の進行をＴＬＣ及びＧＣによってモニタリングしながら、この反応混合物を２時間かけて、８０℃まで加熱した。反応の完了後、この反応混合物をＮａ２Ｓ２Ｏ３（１５ｍＬ）水溶液を添加することによりクエンチした。溶媒をロータリーエバポレーションにより除去し、酢酸エチル（３ｘ５０ｍＬ）により抽出した。合わせた有機層を水（２５ｍＬ）、ブライン（２５ｍＬ）溶液、及びＮａＨＣＯ３（２５ｍＬ）の飽和溶液により洗浄した。有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４下で脱水し、回転式圧力を使用して濃縮すると、粗残留物が得られた。１００〜２００シリカメッシュ、及び希釈剤としてＭｅＯＨ：ＤＣＭ（６：９４）を使用するカラムクロマトグラフィーにより、粗化合物を精製した。この物質の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルにより、この物質はｃｉｓ−及びｔｒａｎｓ−ジアステレオマーの混合物であることが示された。この固体生成物を酢酸エチル、ヘキサン及びメタノールの混合物を使用して再結晶し、必要な異性体が生成した。
【００５９】
スペクトル分析：
（１Ｒ，２Ｓ，５Ｒ）−２−イソプロピル−５−メチルシクロヘキシル（２Ｒ，５Ｓ）−５−（４−アミノ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１−ピリミジニル）−１，３−オキサチアラン−２−カルボキシレートの分析データ：
ＤＭＳＯ−ｄ６中１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ）：∂  ７．９５（ｄ，１Ｈ）、７．３０〜７．２５（ｄ，２Ｈ）、６．３５（ｔ，１Ｈ）、５．８０〜５．６８（ｍ，２Ｈ）、４．６９（ｑ，１Ｈ）、３．５３（ｄ，１Ｈ）、３．１４〜３．１０（ｍ，１Ｈ）、１．９２〜１．８６（ｍ，２Ｈ）、１．６５（ｄ，２Ｈ）、１．４７〜１．４１（ｍ，２Ｈ）、１．０８〜１．００（ｍ，２Ｈ）、０．９０〜０．８６（ｍ，６Ｈ）、０．７３（ｄ，３Ｈ）。ＣＤＣｌ３中１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ）：１６９．４５、１６６．１４、１４０．９２、９４．８１、８９．２８、７７．８１、７７．７７、４６．７５、４０．６３、３５．７６、３３．９７、３１．２７、２６．１５、２３．２８、２２．２５、２０．９５及び１６．５７。
（１Ｒ，２Ｓ，５Ｒ）−２−イソプロピル−５−メチルシクロヘキシル（２Ｒ，５Ｓ）−５−（４−アミノ−５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−１−ピリミジニル）−１，３−オキサチアラン−２−カルボキシレートの分析データ：
ＣＤＣｌ３中１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ）：∂  ８．４３（ｄ，１Ｈ）、７．４２（ｂｓ，１Ｈ）、６．３５（ｄ，１Ｈ）、５．７１（ｂｓ，２Ｈ）、５．３９（ｓ，１Ｈ）、４．７３（ｔ，１Ｈ）、３．４８（ｄｄ，１Ｈ）、３．０７（ｄｄ，１Ｈ）、１．９７〜１．８５（ｍ，２Ｈ）、１．６４（ｄ，２Ｈ）、１．４４〜１．３５（ｍ，２Ｈ）、１．０５（ｔ，２Ｈ）、０．９７〜０．８３（ｍ，６Ｈ）、０．７８（ｄ，３Ｈ）。ＣＤＣｌ３中１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ）：１６９．７７、１５８．１１、１５３．３８、１３４．７１、１２５．５０  ８９．５９、７８．３１、７５．５８、４６．８６、４０．６３、３６．７４、３４．０２、３１．２５、２６．２１、２３．３８、２２．２５、２０．８８及び１６．５８。
【００６０】
実施例５：式Ｉｄの化合物のフロー法還元反応
【化２７】
2019521965.tif 000029
ＭｅＯＨ：Ｈ２Ｏ（２：３ｍＬ）中の式Ｉｄの化合物（１当量）の懸濁液を、オーブン乾燥した５ｍＬシリンジに入れた。水３ｍＬ中のリン酸水素カリウム（３当量）、及び水１．５ｍＬ中の水素化ホウ素ナトリウム（２当量）＋２５％ｗ／ｗ水酸化ナトリウム０．５ｍＬからなる調製溶液を、別のオーブン乾燥シリンジに入れた。両方のシリンジを個々のケムトリックス（Ｃｈｅｍｔｒｉｘ）（商標）フローポンプに取り付けた。これらのポンプをＴ−ジョイントに連結し、生成物流を導いてマイクロリアクター（個々の流速は０．１ｍＬ／分、合計流速は０．２ｍＬ／分）にポンプ注入した。
収集した溶液をＨＣｌ（ｐＨ４〜４．５）の希釈溶液によりクエンチして、ジエチルエーテルにより抽出し、メタノールを除去し、次に、飽和ＮａＨＣＯ３溶液を使用してｐＨを７に調節した。この溶液をセンタード漏斗（ｃｅｎｔｒｅｄ  ｆｕｎｎｅｌ）によりろ過し、ロータリーエバポレーションにより蒸発させた。ヘキサン：酢酸エチル：ＭｅＯＨ（１：１：１）からなる希釈混合物による、６０〜１２０シリカメッシュを使用するカラムクロマトグラフィーにより粗生成物を精製すると、純粋な生成物が得られた。
【００６１】
実施例５Ａ：式Ｉｄの化合物のバッチ法還元反応
【化２８】
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メタノール及び水（２：１）中のヌクレオシド（１当量）の懸濁液を、室温でＫ２ＨＰＯ４（３当量）の水溶液（２ｍＬ）に加えた。撹拌して１５分後、この反応混合物に、２５％（ｗ／ｗ）ＮａＯＨ溶液を含有するＮａＢＨ４（２当量）の水溶液（２ｍＬ）を加えた。反応の進行をＴＬＣによってモニタリングしながら、この反応混合物を室温で２時間、撹拌した。この反応物をＨＣｌによりクエンチし、４〜４．５にｐＨを調節し、ジエチルエーテルにより洗浄して、何らかの未反応出発原料及びメントールを除去した。２Ｍ  ＮａＯＨ溶液を使用して、水層のｐＨを７〜７．２に調節し、この混合物をセライトパッドによりろ過して、減圧したロータリーエバポレーション下で濃縮した。カラムクロマトグラフィーにより粗化合物を精製し、酢酸エチル：ＭｅＯＨを使用して再結晶すると、純粋な化合物が得られた。
【００６２】
スペクトル分析：
４−アミノ−１−（（２Ｒ，５Ｓ）−２−（ヒドロキシメチル）−１，３−オキサチオラン−５−イル）ピリミジン-２（１Ｈ）-オン（ラミブジン）の分析データ：
ＣＤ３ＯＤ−ｄ４中１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ）：∂  ８．０６（ｄ，Ｊ＝７．５２，１Ｈ）、６．３０（ｔ，Ｊ＝４．７２，１Ｈ）、５．９０（ｄ，Ｊ＝７．５２，１Ｈ）、５．２９（ｔ，Ｊ＝３．７２，１Ｈ）、３．９４（ｄｄ，Ｊ＝３．４８，２Ｈ）、３．８８（ｄｄ，Ｊ＝４．２８，１Ｈ）、３．５３（ｄｄ，Ｊ＝５．４，１２．０，１Ｈ）、３．１４（ｄｄ，Ｊ＝４．３６，１１．９６，１Ｈ）。ＣＤ３ＯＤ−ｄ４中１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ）：１６６．３５、１５６．５３、１４１．３３、９４．３０、８７．４５、８６．５６、６２．６７、３７．０５。元素分析：Ｃ８Ｈ１１Ｎ３Ｏ３Ｓの計算値：Ｃ  ４１．９１、Ｈ  ４．８４、Ｎ  １８．３３、Ｓ  １３．９９。実測値：Ｃ  ４１．８８、Ｈ  ４．７１、Ｎ  １８．１９  Ｓ  １３．９１。
４−アミノ−５−フルオロ−１−（（２Ｒ，５Ｓ）−２−（ヒドロキシメチル）−１，３−オキサチオラン−５−イル）ピリミジン-２（１Ｈ）−オン（エムトリシタビン）の分析データ：
ＣＤ３ＯＤ−ｄ４中１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ）：∂  ８．３６（ｄ、Ｊ＝６．９２，１Ｈ）、６．２５（ｄｄｄ，Ｊ＝１．６４，５．２，７．０３，１Ｈ）、５．３０（ｔ，Ｊ＝３．３６，１Ｈ）、４．０２（ｄｄ，Ｊ＝３．０３，１２．６，２Ｈ）、３．８８（ｄｄ，Ｊ＝３．５６，１２．６，１Ｈ）、３．５４（ｄｄ，Ｊ＝５．３６，１２．１６，１Ｈ）、３．１９（ｄｄ，Ｊ＝３．６３，１２．１２，１Ｈ）。ＣＤ３ＯＤ−ｄ４中１３Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ）：１５８．３１（ｄ，Ｊ＝１４）、１５４．８３、１３６．２４（ｄ，Ｊ＝２４０．２）、１２５．８（ｄ，Ｊ＝３３．３）、８７．４５、８７．３４、６２．０２、３７．５０。
【００６３】
本発明の例示的な実施形態の一部のこうした上記の説明は、どうすれば本発明をなす、及び実施することができるかを示すためのものである。当業者は、様々な詳細が修正され得、それにより、さらなる実施形態に到達するが、これらの実施形態の多数が、本発明の範囲内に依然としてあることを認識されよう。
【図１】
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【図２】
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【国際調査報告】
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