(57)【要約】本発明は、式：Ｘ１ＩＶＸ２ＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＸ３ＥＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＫ＊ＴＮＡＸ４ＩＬＡＱＶ−ＮＨ２（式中、Ｘ１は、Ｉ残基が、Ｎ末端でアセチル化またはメチル化のいずれかにより修飾されていることを示し；Ｘ２は、ＬまたはＴであり；Ｘ３は、ＬまたはＩであり；Ｘ４は、ＱまたはＥであり；２９位の修飾されたＫ残基（「Ｋ＊」）は、式−Ｘ５−Ｘ６（式中、Ｘ５は、１〜４つのアミノ酸；１〜４つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）部分；および１〜４つのアミノ酸と１〜４つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）部分の組み合わせからなる群から選択され；Ｘ６は、Ｃ１４−Ｃ２４脂肪酸である）の基でのＫ側鎖のイプシロン−アミノ基へのコンジュゲートを介して修飾されている）の化合物または医薬的に許容される塩を提供する。いくつかの実施形態において、式−Ｘ５−Ｘ６の基は、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−（γＥ）２−ＣＯ−（ＣＨ２）ｘ−ＣＯ２Ｈ（式中、ｘは、１６または１８である）である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式：
Ｘ１ＩＶＸ２ＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＸ３ＥＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＫ＊ＴＮＡＸ４ＩＬＡＱＶ−ＮＨ２
（式中、Ｘ１は、Ｉ残基が、Ｎ末端でのアセチル化またはメチル化のいずれかにより修飾されていることを示し；
Ｘ２は、ＬまたはＴであり；
Ｘ３は、ＬまたはＩであり；
Ｘ４は、ＱまたはＥであり；
２９位の修飾されたＫ残基（「Ｋ＊」）は、式−Ｘ５−Ｘ６（式中、
Ｘ５は、
１〜４つ多いアミノ酸；
１〜４つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）部分；および
１〜４つのアミノ酸と１〜４つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）部分の組み合わせ
からなる群から選択され；
Ｘ６は、Ｃ１４−Ｃ２４脂肪酸である）
の基でのＫ側鎖のイプシロン−アミノ基へのコンジュゲートを介して修飾される）（配列番号１６）の化合物、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項２】
Ｘ５が、
１〜４つのＥもしくはγＥアミノ酸；
１〜４つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）部分；および
１〜４つのＥもしくはγＥアミノ酸と１〜４つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）部分の組み合わせ
からなる群から選択される、請求項１に記載の化合物または塩。
【請求項３】
Ｘ５が、１〜４つのＥもしくはγＥアミノ酸と１〜４つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）部分の組み合わせである、請求項２に記載の化合物または塩。
【請求項４】
Ｘ５が、２〜４つのγＥアミノ酸と１〜４つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）部分の組み合わせである、請求項３に記載の化合物または塩。
【請求項５】
Ｘ５が、２つのγＥアミノ酸と２つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）部分の組み合わせである、請求項３に記載の化合物または塩。
【請求項６】
Ｘ６が、式ＣＯ−（ＣＨ２）ｘ−ＣＯ２Ｈ（式中、ｘは、１６、１８、もしくは２０である）の直鎖脂肪酸である、請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物または塩。
【請求項７】
式−Ｘ５−Ｘ６の基が、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−（γＥ）２−ＣＯ−（ＣＨ２）ｘ−ＣＯ２Ｈ（式中、ｘは、１６または１８である）である、請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物または塩。
【請求項８】
Ｃ末端のアミノ酸が、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される、請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物または塩。
【請求項９】
Ｘ１が、前記Ｉ残基が、Ｎ末端でのアセチル化により修飾されていることを示し；
Ｘ２がＬであり；
Ｘ３がＬであり；
Ｘ４がＱであり；
前記式−Ｘ５−Ｘ６の前記基が、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−（γＥ）２−ＣＯ−（ＣＨ２）ｘ−ＣＯ２Ｈ（式中、ｘは、１６または１８である）
である、請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物または塩。
【請求項１０】
ｘが１８である、請求項９に記載の化合物または塩。
【請求項１１】
ｘが１６である、請求項９に記載の化合物または塩。
【請求項１２】
Ｘ１が、前記Ｉ残基が、Ｎ末端でメチル化により修飾されていることを示し；
Ｘ２がＬであり；
Ｘ３がＬであり；
Ｘ４がＱであり；
前記式−Ｘ５−Ｘ６の前記基が、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−（γＥ）２−ＣＯ−（ＣＨ２）１８−ＣＯ２Ｈである、
請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物または塩。
【請求項１３】
Ｘ１が、前記Ｉ残基が、Ｎ末端でメチル化により修飾されていることを示し；
Ｘ２がＬであり；
Ｘ３がＬであり；
Ｘ４がＱであり；
前記式−Ｘ５−Ｘ６の前記基が、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−（γＥ）２−ＣＯ−（ＣＨ２）１６−ＣＯ２Ｈである、
請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物または塩。
【請求項１４】
Ｘ１が、前記Ｉ残基が、Ｎ末端でメチル化により修飾されていることを示し；
Ｘ２がＴであり；
Ｘ３がＬであり；
Ｘ４がＥであり；
前記式−Ｘ５−Ｘ６の前記基が、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−（γＥ）２−ＣＯ−（ＣＨ２）１８−ＣＯ２Ｈである、
請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物または塩。
【請求項１５】
Ｘ１が、前記Ｉ残基が、Ｎ末端でメチル化により修飾されていることを示し；
Ｘ２がＬであり；
Ｘ３がＬであり；
Ｘ４がＥであり；
前記式−Ｘ５−Ｘ６の前記基が、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−（γＥ）２−ＣＯ−（ＣＨ２）１８−ＣＯ２Ｈである、
請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物または塩。
【請求項１６】
Ｘ１が、前記Ｉ残基が、Ｎ末端でメチル化により修飾されていることを示し；
Ｘ２がＴであり；
Ｘ３がＩであり；
Ｘ４がＥであり；
前記式−Ｘ５−Ｘ６の前記基が、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−（γＥ）２−ＣＯ−（ＣＨ２）１８−ＣＯ２Ｈである、
請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物または塩。
【請求項１７】
アミノ酸配列
ＩＶＸ２ＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＸ３ＥＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＴＸ７ＮＡＸ４ＩＬＡＸ８Ｖ−ＮＨ２（配列番号６７）
Ｘ２は、ＬまたはＴであり；
Ｘ３は、ＬまたはＩであり；
Ｘ４は、Ｑ、Ｒ、またはＥであり；
Ｘ７は、ＴまたはＥであり；
Ｘ８は、Ｑ、ＨまたはＲであり、
（式中、修飾されたＫ残基（「Ｋ＊」）は、１０位のアミノ酸残基、もしくは１４位〜３０位を含む任意のアミノ酸残基について置換されており、Ｋ＊は、式−Ｘ５−Ｘ６（式中、
Ｘ５は、
１〜４つのアミノ酸残基；
１〜４つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル部分；および
１〜４つのアミノ酸残基と１〜４つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル部分の組み合わせ
からなる群から選択され；
Ｘ６は、Ｃ１４−Ｃ２４脂肪酸である）
の基に結合されたＫ側鎖のイプシロンアミノ基を有することにより修飾されている）
を含む化合物、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項１８】
Ｘ８が、ＨまたはＱ残基のいずれかである、請求項１７に記載の化合物または塩。
【請求項１９】
Ｘ５が、１もしくは２つのアミノ酸残基および１もしくは２つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル部分を含む、請求項１７に記載の化合物または塩。
【請求項２０】
Ｘ５が、２つのアミノ酸残基および２つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル部分を含み、前記２つのアミノ酸残基が、ＥまたはγＥ残基のいずれかである、請求項１９に記載の化合物または塩。
【請求項２１】
Ｘ１が、Ｎ末端でアセチル化またはメチル化のいずれかにより修飾されている、請求項１７に記載の化合物または塩。
【請求項２２】
Ｘ２がＬ残基である、請求項１７に記載の化合物または塩。
【請求項２３】
Ｘ３がＬ残基である、請求項１７に記載の化合物または塩。
【請求項２４】
Ｘ４がＱ残基である、請求項１７に記載の化合物または塩。
【請求項２５】
Ｘ７がＴ残基である、請求項１７に記載の化合物または塩。
【請求項２６】
Ｘ５が、前記合成分子中に（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル部分が存在しないように、１〜４つのアミノ酸残基を含む、請求項１７に記載の化合物または塩。
【請求項２７】
１位の前記Ｉ残基が、前記Ｎ末端でアセチル化もしくはメチル化の１つにより修飾されている、請求項１７に記載の化合物または塩。
【請求項２８】
請求項１〜２７のいずれか１項に記載の化合物または塩、ならびに１つまたは複数の医薬的に許容される担体、希釈剤、および賦形剤を含む、医薬組成物。
【請求項２９】
患者におけるＩＩ型糖尿病を治療する方法であって、かかる治療を必要とする患者に有効量の請求項１〜２８のいずれか１項に記載の化合物または塩を投与することを含む、方法。
【請求項３０】
患者における慢性腎疾患を治療する方法であって、かかる治療を必要とする患者に有効量の請求項１〜２８のいずれか１項に記載の化合物または塩を投与することを含む、方法。
【請求項３１】
前記慢性腎疾患が、糖尿病性腎症により引き起こされる、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
前記慢性腎疾患が、高血圧性腎症により引き起こされる、請求項３０に記載の方法。
【請求項３３】
前記かかる治療を必要とする患者への前記化合物または塩の前記投与が皮下投与である、請求項３０〜３２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３４】
治療において使用するための、請求項１〜２８のいずれか１項に記載の化合物または塩。
【請求項３５】
ＩＩ型糖尿病の治療において使用するための請求項１〜２８のいずれか１項に記載の化合物または塩。
【請求項３６】
慢性腎疾患の治療において使用するための請求項１〜２８のいずれか１項に記載の化合物または塩。
【請求項３７】
式：
Ｘ１ＩＶＸ２ＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＸ３ＥＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＫＴＮＡＸ４ＩＬＡＱＶ−ＮＨ２
（式中、Ｘ１は、Ｉ残基が、Ｎ末端でのアセチル化またはメチル化のいずれかにより修飾されていることを示し；
Ｘ２は、ＬまたはＴであり；
Ｘ３は、ＬまたはＩであり；
Ｘ４は、ＱまたはＥである）（配列番号１８）
の化合物。
【請求項３８】
ネコにおいてＩＩ型糖尿病を治療する方法であって、かかる治療を必要とするネコに、有効量の配列番号１、２、３、５、６、および７のいずれか一つに従う化合物または塩を投与することを含む、方法。
【請求項３９】
ネコにおいて慢性腎疾患を治療する方法であって、かかる治療を必要とするネコに、有効量の配列番号１、２、３、５、６、および７のいずれか一つに従う化合物または塩を投与することを含む、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規ウロコルチン−２化合物、化合物を含む医薬組成物、化合物を使用してコルチコトロピン放出ホルモン受容体−２と関連する障害を治療する方法、ならびに化合物の合成において有用な中間体およびプロセスに関する。
【背景技術】
【０００２】
ウロコルチン−２（ＵＣＮ２）は、３８個のアミノ酸の内在ペプチド（配列番号１５）である。これは、哺乳類において見い出される３つの公知の内在ウロコルチン（ＵＣＮ１およびＵＣＮ３）の１つであり、コルチコトロピン放出ホルモン（ＣＲＨ；コルチコトロピン放出因子としても言及される）ファミリーの一部である。ＣＲＨファミリーは、多くの生理学的機能を示す。ＵＣＮペプチドは、短時間作用性である。これらは、ＣＲＨＲ１および／またはＣＲＨＲ２として知られたＣＲＨ受容体（ＣＲＨＲ）を介して作用する。具体的には、ＵＣＮ２は、公知のアイソフォームＣＲＨＲ２−アルファ（α）、ＣＲＨＲ２−ベータ（β））およびＣＲＨＲ２−ガンマ（γ）を含むＣＲＨＲ２を選択的に活性化する。ＵＣＮ２はまた、血圧の低減と関連する。Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ４６９：１１１−１１５（２００３）。
【０００３】
ＩＩ型糖尿病（Ｔ２Ｄ）は、全糖尿病の約９０％を占める、糖尿病の最も一般的な形態である。世界中で３億を超える人々が、Ｔ２Ｄと診断されている。これは、インスリン抵抗性により引き起こされる高い血液グルコースレベルにより特徴付けられる。Ｔ２Ｄの現在の標準治療は、根底にある補助的療法として食餌および運動を、利用可能な経口および注射可能なグルコース低下薬と共に含む。それにもかかわらず、Ｔ２Ｄを有する患者は、依然として十分にコントロールされないままである。Ｔ２Ｄの代替治療が必要とされる。
【０００４】
慢性腎疾患（ＣＫＤ）は、腎機能の進行的な喪失により特徴付けられる。ＣＫＤを有する個人は、経時的にアルブミン尿、タンパク尿、血清クレアチニン、および腎臓の組織病理学的損傷の増大を経験する。これは、最終的に末期腎疾患（ＥＳＲＤ）を発症し、その多くの患者が透析または腎移植のいずれかを必要とする。ＣＫＤは、それぞれ、糖尿病性腎症および高血圧性腎症として知られて糖尿病ならびに高血圧を含むいくつかの根底にある状態により引き起こされ得る。糖尿病性腎症の有病率は、米国における腎不全の約５０％を占める。高血圧性腎症の有病率は、米国における腎不全のほぼ２５％を占める。腎疾患の現在の標準治療は、アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤およびアンジオテンシンＩＩ受容体遮断薬（ＡＲＢ）を含む。ＣＫＤの代替治療が必要なままである。
【０００５】
Ｃｈｅｎ  ｅｔ  ａｌ．（Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ａｃａｄｅｍｙ  ｏｆ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（ＰＮＡＳ），Ｏｃｔｏｂｅｒ  ３１，２００６，ｖｏｌ．１０３，ＮＯ：４４，ｐｐ．１６５８０−１６５８５）は、「Ｕｒｏｃｏｒｔｉｎ  ２  ｍｏｄｕｌａｔｅｓ  ｇｌｕｃｏｓｅ  ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｉｎｓｕｌｉｎ  ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ  ｉｎ  ｓｋｅｌｅｔａｌ  ｍｕｓｃｌｅ」を表題とする論文である。さらに、Ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ２７：１８０６−１８１３（２００６）において、著者らは、筋萎縮症のようなＣＲＨＲ２により調節される障害の治療のためのＵＣＮ２類似体を含むＣＲＨＲ２アゴニストを開示する。しかしながら、依然として、ＣＲＨＲ２のアゴニストである新規治療用ヒトＵＣＮ２類似体がさらに必要である。
【発明の概要】
【０００６】
本発明は、ＣＲＨＲ２アゴニストである新規化合物を提供する。本発明はまた、週１回の投与または隔月もしくは毎月のような他の種類の投与に適し得る形態のヒトＵＣＮ２類似体の新規治療用ＣＲＨＲ２アゴニストを提供する。本発明はまた、治療における使用、特に、Ｔ２ＤもしくはＣＫＤ、またはその組み合わせを治療するための使用のためのＣＲＨＲ２アゴニストである新規化合物を提供する。
【発明を実施するための形態】
【０００７】
したがって、本発明は、式ＩＩＩ：
Ｘ１ＩＶＸ２ＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＸ３ＥＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＴＸ７ＮＡＸ４ＩＬＡＸ８Ｖ−ＮＨ２（式ＩＩＩ）
（式中、
Ｘ１は、修飾されていないか、またはＩ残基がアセチル化もしくはメチル化のいずれかによりＮ末端で修飾されていることを示し、
Ｘ２は、ＬまたはＴであり、
Ｘ３は、ＬまたはＩであり、
Ｘ４は、Ｑ、Ｒ、またはＥであり、
Ｘ７は、ＴまたはＥであり、
Ｘ８は、Ｑ、ＨまたはＲである）（配列番号６７）
のアミノ酸配列を有するウロコルチン分子である化合物を提供し、
式ＩＩＩはさらに、１０位においてまたは１４位〜３０位（これらを含む）の任意の１つの位置において置換されている修飾されたＫ残基（「Ｋ＊」）を含み、
Ｋ＊は、式−Ｘ５−Ｘ６（式中、Ｘ５は、１〜４つのアミノ酸残基、１〜４つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル部分、および１〜４つのアミノ酸残基と１〜４つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル部分の組み合わせからなる群から選択され、Ｘ６は、Ｃ１４−Ｃ２４脂肪酸である）の基に結合したＫ側鎖のイプシロンアミノ基を有することにより修飾されている。
【０００８】
本発明は、修飾されたＫ残基を有する式ＩＩＩの化合物、またはその医薬的に許容される塩（例えば、トリフルオロ酢酸塩、酢酸塩、もしくは塩酸塩）を含む医薬組成物を提供する。いくつかの実施形態において、末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される。さらなる実施形態において、医薬組成物は、医薬的に許容される担体、希釈剤、および賦形剤をさらに含んでもよい。
【０００９】
上述の通り、式ＩＩＩの合成分子は、１０位においてまたは１４位〜３０位（これらを含む）の任意の１つの位置において、修飾されたＫ残基が置換されているように、構築される。例えば、これらの合成分子が、次の式：
Ｘ１ＩＶＸ２ＳＬＤＶＰＩＫ＊ＬＬＱＩＬＸ３ＥＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＴＸ７ＮＡＸ４ＩＬＡＸ８Ｖ−ＮＨ２
（式中、Ｋ＊は、修飾されたＫ残基であり、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、Ｘ７およびＸ８は、本明細書において記載される値および特徴を有する）
を有するように、１０位において、修飾されたＫ残基が置換されているなら、そのとき、通常１０位を占めるＧ残基が、修飾されたＫ残基で置き換えられている。
【００１０】
これらの合成分子が、次の式：
Ｘ１ＩＶＸ２ＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＫ＊ＬＸ３ＥＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＴＸ７ＮＡＸ４ＩＬＡＸ８Ｖ−ＮＨ２
（式中、Ｋ＊は、修飾されたＫ残基であり、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、Ｘ７およびＸ８は、本明細書において記載される値および特徴を有する）
を有するように、１４位において、修飾されたＫ残基が置換されているなら、そのとき、通常１４位を占めるＩ残基が、修飾されたＫ残基で置き換えられている。
【００１１】
これらの合成分子が、次の式：
Ｘ１ＩＶＸ２ＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＫ＊Ｘ３ＥＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＴＸ７ＮＡＸ４ＩＬＡＸ８Ｖ−ＮＨ２
（式中、Ｋ＊は、修飾されたＫ残基であり、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、Ｘ７およびＸ８は、本明細書において記載される値および特徴を有する）
を有するように、１５位において修飾されたＫ残基が置換されているなら、そのとき、通常１５位を占めるＬ残基が、修飾されたＫ残基で置きかけられている。
【００１２】
これらの合成分子が、次の式：
Ｘ１ＩＶＸ２ＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＫ＊ＥＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＴＸ７ＮＡＸ４ＩＬＡＸ８Ｖ−ＮＨ２
（式中、Ｋ＊は、修飾されたＫ残基であり、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、Ｘ７およびＸ８は、本明細書において記載される値および特徴を有する）
を有するように、１６位において修飾されたＫ残基が置換されているなら、そのとき、通常１６位を占めるＸ３残基が、修飾されたＫ残基で置き換えられている。
【００１３】
これらの合成分子が、次の式：
Ｘ１ＩＶＸ２ＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＸ３Ｋ＊ＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＴＸ７ＮＡＸ４ＩＬＡＸ８Ｖ−ＮＨ２
（式中、Ｋ＊は、修飾されたＫ残基であり、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、Ｘ７およびＸ８は、本明細書において記載される値および特徴を有する）
を有するように、１７位において修飾されたＫ残基が置換されているなら、そのとき、通常１７位を占めるＥ残基が、修飾されたＫ残基で置き換えられている。
【００１４】
これらの合成分子が、次の式：
Ｘ１ＩＶＸ２ＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＸ３ＥＫ＊ＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＴＸ７ＮＡＸ４ＩＬＡＸ８Ｖ−ＮＨ２
（式中、Ｋ＊は、修飾されたＫ残基であり、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、Ｘ７およびＸ８は、本明細書において記載される値および特徴を有する）
を有するように、１８位において修飾されたＫ残基が置換されているなら、そのとき、通常１８位を占めるＱ残基が、修飾されたＫ残基で置き換えられている。
【００１５】
これらの合成分子が、次の式：
Ｘ１ＩＶＸ２ＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＸ３ＥＱＫ＊ＫＱＥＫＥＫＱＱＡＴＸ７ＮＡＸ４ＩＬＡＸ８Ｖ−ＮＨ２
（式中、Ｋ＊は、修飾されたＫ残基であり、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、Ｘ７およびＸ８は、本明細書において記載される値および特徴を有する）
を有するように、１９位において修飾されたＫ残基が置換されているなら、そのとき、通常１９位を占めるＥ残基が、修飾されたＫ残基で置き換えられている。
【００１６】
これらの合成分子が、次の式：
Ｘ１ＩＶＸ２ＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＸ３ＥＱＥＫ＊ＱＥＫＥＫＱＱＡＴＸ７ＮＡＸ４ＩＬＡＸ８Ｖ−ＮＨ２
（式中、Ｋ＊は、修飾されたＫ残基であり、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、Ｘ７およびＸ８は、本明細書において記載される値および特徴を有する）
を有するように、２０位において修飾されたＫ残基が置換されているなら、そのとき、通常２０位を占めるＫ残基が、修飾されたＫ残基で置き換えられている。
【００１７】
これらの合成分子が、次の式：
Ｘ１ＩＶＸ２ＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＸ３ＥＱＥＫＫ＊ＥＫＥＫＱＱＡＴＸ７ＮＡＸ４ＩＬＡＸ８Ｖ−ＮＨ２
（式中、Ｋ＊は、修飾されたＫ残基であり、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、Ｘ７およびＸ８は、本明細書において記載される値および特徴を有する）
を有するように、２１位において修飾されたＫ残基が置換されているなら、そのとき、通常２１位を占めるＱ残基が、修飾されたＫ残基で置き換えられている。
【００１８】
これらの合成分子が、次の式：
Ｘ１ＩＶＸ２ＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＸ３ＥＱＥＫＱＫ＊ＫＥＫＱＱＡＴＸ７ＮＡＸ４ＩＬＡＸ８Ｖ−ＮＨ２
（式中、Ｋ＊は、修飾されたＫ残基であり、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、Ｘ７およびＸ８は、本明細書において記載される値および特徴を有する）
を有するように、２２位において修飾されたＫ残基が置換されているなら、そのとき、通常２２位を占めるＥ残基が、修飾されたＫ残基で置き換えられている。
【００１９】
これらの合成分子が、次の式：
Ｘ１ＩＶＸ２ＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＸ３ＥＱＥＫＱＥＫ＊ＥＫＱＱＡＴＸ７ＮＡＸ４ＩＬＡＸ８Ｖ−ＮＨ２
（式中、Ｋ＊は、修飾されたＫ残基であり、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、Ｘ７およびＸ８は、本明細書において記載される値および特徴を有する）
を有するように、２３位において修飾されたＫ残基が置換されているなら、そのとき、通常２３位を占めるＫ残基が、修飾されたＫ残基で置き換えられている。
【００２０】
これらの合成分子が、次の式：
Ｘ１ＩＶＸ２ＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＸ３ＥＱＥＫＱＥＫＫ＊ＫＱＱＡＴＸ７ＮＡＸ４ＩＬＡＸ８Ｖ−ＮＨ２
（式中、Ｋ＊は、修飾されたＫ残基であり、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、Ｘ７およびＸ８は、本明細書において記載される値および特徴を有する）
を有するように、２４位において修飾されたＫ残基が置換されているなら、そのとき、通常２４位を占めるＥ残基が、修飾されたＫ残基で置き換えられている。
【００２１】
これらの合成分子が、次の式：
Ｘ１ＩＶＸ２ＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＸ３ＥＱＥＫＱＥＫＥＫ＊ＱＱＡＴＸ７ＮＡＸ４ＩＬＡＸ８Ｖ−ＮＨ２
（式中、Ｋ＊は、修飾されたＫ残基であり、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、Ｘ７およびＸ８は、本明細書において記載される値および特徴を有する）
を有するように、２５位において修飾されたＫ残基が置換されているなら、そのとき、通常２５位を占めるＫ残基が、修飾されたＫ残基で置き換えられている。
【００２２】
これらの合成分子が、次の式：
Ｘ１ＩＶＸ２ＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＸ３ＥＱＥＫＱＥＫＥＫＫ＊ＱＡＴＸ７ＮＡＸ４ＩＬＡＸ８Ｖ−ＮＨ２
（式中、Ｋ＊は、修飾されたＫ残基であり、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、Ｘ７およびＸ８は、本明細書において記載される値および特徴を有する）
を有するように、２６位において修飾されたＫ残基が置換されているなら、そのとき、通常２６位を占めるＱ残基が、修飾されたＫ残基で置き換えられている。
【００２３】
これらの合成分子が、次の式：
Ｘ１ＩＶＸ２ＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＸ３ＥＱＥＫＱＥＫＥＫＱＫ＊ＡＴＸ７ＮＡＸ４ＩＬＡＸ８Ｖ−ＮＨ２
（式中、Ｋ＊は、修飾されたＫ残基であり、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、Ｘ７およびＸ８は、本明細書において記載される値および特徴を有する）
を有するように、２７位において修飾されたＫ残基が置換されているなら、そのとき、通常２７位を占めるＱ残基が、修飾されたＫ残基で置き換えられている。
【００２４】
これらの合成分子が、次の式：
Ｘ１ＩＶＸ２ＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＸ３ＥＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＫ＊ＴＸ７ＮＡＸ４ＩＬＡＸ８Ｖ−ＮＨ２
（式中、Ｋ＊は、修飾されたＫ残基であり、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、Ｘ７およびＸ８は、本明細書において記載される値および特徴を有する）
を有するように、２８位において修飾されたＫ残基が置換されているなら、そのとき、通常２８位を占めるＡ残基が、修飾されたＫ残基で置き換えられている。
【００２５】
これらの合成分子が、次の式：
Ｘ１ＩＶＸ２ＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＸ３ＥＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＫ＊Ｘ７ＮＡＸ４ＩＬＡＸ８Ｖ−ＮＨ２
（式中、Ｋ＊は、修飾されたＫ残基であり、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、Ｘ７およびＸ８は、本明細書において記載される値および特徴を有する）
を有するように、２９位において修飾されたＫ残基が置換されているなら、そのとき、通常２９位を占めるＴ残基が、修飾されたＫ残基で置き換えられている。
【００２６】
これらの合成分子が、次の式：
Ｘ１ＩＶＸ２ＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＸ３ＥＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＴＫ＊ＮＡＸ４ＩＬＡＸ８Ｖ−ＮＨ２
（式中、Ｋ＊は、修飾されたＫ残基であり、Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３、Ｘ４、およびＸ８は、本明細書において記載される値および特徴を有する）
を有するように、３０位において修飾されたＫ残基が置換されているなら、そのとき、通常３０位を占めるＸ７残基が、修飾されたＫ残基で置き換えられている。
【００２７】
上述の通り、式ＩＩＩのＸ８は、Ｑ、Ｈ、またはＲであってもよい。しかしながら、現在好ましい実施形態のいくつかにおいて、Ｘ８基は、ＨまたはＱのいずれかである。さらに好ましい実施形態は、Ｌ残基である式ＩＩＩのＸ２および／またはＸ３を有してもよい。その上さらに好ましい実施形態において、式ＩＩＩのＸ４は、Ｑ残基であってもよく、および／または式ＩＩＩのＸ７はＴ残基である。
【００２８】
他の現在好ましい実施形態において、式ＩＩＩのＸ５は、０〜２つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル部分を含み、より好ましくは、１または２つのアミノ酸残基を含んでもよい。他の現在好ましい実施形態において、式ＩＩＩのＸ５は、２つのアミノ酸残基および２つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル部分を含んでもよく、２つのアミノ酸残基は、ＥまたはγＥ残基のいずれかである。いくつかの実施形態において、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル部分が存在しないように、Ｘ５は、アミノ酸残基のみを含む。その上さらに現在好ましい実施形態において、式ＩＩＩのＸ１は、１位において、アセチル化またはメチル化のいずれかにより（Ｎ末端で）修飾されたＩ残基を有する。
【００２９】
上述の通り、配列中１０位においてまたは１４位〜３０位（これらを含む）の任意の１つの位置において修飾されたＫ残基が置換されているように、式ＩＩＩのアミノ酸配列は修飾される。式ＩＩＩの最も好ましい実施形態のいくつかは、２９位に置換されている修飾されたＫ残基（「Ｋ＊」）を有し、ＱであるＸ８およびＴであるＸ７を有する。式ＩＩＩのサブセットであるこれらの分子は、以下で、式Ｉ：Ｘ１ＩＶＸ２ＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＸ３ＥＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＫ＊ＴＮＡＸ４ＩＬＡＱＶ−ＮＨ２（式Ｉ）
（式ＩＩＩの実施形態と同様に、Ｘ２はＬまたはＴであることができ、Ｘ３はＬまたはＩであることができ、Ｘ４はＱ、Ｒ、またはＥ（より好ましくは、ＱまたはＥ）であることができ、Ｘ１は、１位のＩ残基が、そのＮ末端で、修飾されていないか、またはアセチル化もしくはメチル化のいずれかにより修飾されていることを意味することができるように、式Ｉの実施形態は設計される）として表される）。式Ｉの好ましい実施形態のいくつかにおいて、Ｘ１は、１位において、アセチル化またはメチル化のいずれかによりＮ末端で修飾されたＩ残基を有する。式Ｉの実施形態において、２９位における修飾されたＫ残基は、Ｋ側鎖のイプシロン−アミノ基にコンジュゲートされている脂肪酸側鎖で修飾され、脂肪酸側鎖は、式：（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−（γＥ）２−ＣＯ−（ＣＨ２）ｘ−ＣＯ２Ｈ（式中、ｘは、１６または１８である）を有する。（別の言い方をすれば、式Ｉの現在好ましい実施形態のいくつかにおいて、式ＩＩＩのＸ５およびＸ６基は、次の式：（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−（γＥ）２−ＣＯ−（ＣＨ２）ｘ−ＣＯ２Ｈ（式中、ｘは、１６または１８である）を有する）（配列番号８）。当然、上述の通り、式Ｉの化合物および分子は、その医薬的に許容される塩にされてもよい。
【００３０】
本発明はまた、式Ｉの化合物またはその医薬的に許容される塩（例えば、トリフルオロ酢酸塩、酢酸塩、もしくは塩酸塩）を含む医薬組成物を提供する。いくつかの実施形態において、末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される。さらなる実施形態において、医薬組成物は、医薬的に許容される担体、希釈剤、および賦形剤をさらに含んでもよい。
【００３１】
１つの実施形態において、式Ｉの化合物または医薬的に許容される塩は、Ｘ１が、アセチル化により修飾されたＩ残基のＮ末端を有し；Ｘ２がＬであり；Ｘ３がＬであり；Ｘ４がＱであり；２９位のＫ＊が、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−（γＥ）２−ＣＯ−（ＣＨ２）１６−ＣＯ２ＨでのＫ側鎖のイプシロン−アミノ基へのコンジュゲートを介して化学的に修飾され；Ｃ末端のアミノ酸が、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化されるように、設計される（配列番号１）。
【００３２】
別の実施形態において、式Ｉの化合物または医薬的に許容される塩は、Ｘ１が、アセチル化により修飾されたＩ残基のＮ末端を有し；Ｘ２がＬであり；Ｘ３がＬであり；Ｘ４がＱであり；２９位のＫ＊が、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−（γＥ）２−ＣＯ−（ＣＨ２）１８−ＣＯ２ＨでのＫ側鎖のイプシロン−アミノ基へのコンジュゲートを介して化学的に修飾され；Ｃ末端のアミノ酸が、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化されるように、設計される（配列番号２）。
【００３３】
別の実施形態において、式Ｉの化合物または医薬的に許容される塩は、Ｘ１が、メチル化により修飾されたＩ残基のＮ末端を有し；Ｘ２がＬであり；Ｘ３がＬであり；Ｘ４がＱであり；２９位のＫ＊が、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−（γＥ）２−ＣＯ−（ＣＨ２）１６−ＣＯ２ＨでのＫ側鎖のイプシロン−アミノ基へのコンジュゲートを介して化学的に修飾され；Ｃ末端のアミノ酸が、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化されるように、設計される（配列番号３）。
【００３４】
別の実施形態において、式Ｉの化合物または医薬的に許容される塩は、Ｘ１が、メチル化により修飾されたＩ残基のＮ末端を有し；Ｘ２がＬであり；Ｘ３がＬであり；Ｘ４がＱであり；２９位のＫ＊が、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−（γＥ）２−ＣＯ−（ＣＨ２）１８−ＣＯ２ＨでのＫ側鎖のイプシロン−アミノ基へのコンジュゲートを介して化学的に修飾され；Ｃ末端のアミノ酸が、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化されるように、設計される（配列番号４）。
【００３５】
別の実施形態において、式Ｉの化合物または医薬的に許容される塩は、Ｘ１が、メチル化により修飾されたＩ残基のＮ末端を有し；Ｘ２がＴであり；Ｘ３がＬであり；Ｘ４がＥであり；２９位のＫ＊が、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−（γＥ）２−ＣＯ−（ＣＨ２）１８−ＣＯ２ＨでのＫ側鎖のイプシロン−アミノ基へのコンジュゲートを介して化学的に修飾され；Ｃ末端のアミノ酸が、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化されるように、設計される（配列番号５）。
【００３６】
別の実施形態において、式Ｉの化合物または医薬的に許容される塩は、Ｘ１が、メチル化により修飾されたＩ残基のＮ末端を有し；Ｘ２がＬであり；Ｘ３がＬであり；Ｘ４がＥであり；２９位のＫ＊が、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−（γＥ）２−ＣＯ−（ＣＨ２）１８−ＣＯ２ＨでのＫ側鎖のイプシロン−アミノ基へのコンジュゲートを介して化学的に修飾され；Ｃ末端のアミノ酸が、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化されるように、設計される（配列番号６）。
【００３７】
別の実施形態において、式Ｉの化合物または医薬的に許容される塩は、Ｘ１が、メチル化により修飾されたＩ残基のＮ末端を有し；Ｘ２がＴであり；Ｘ３がＩであり；Ｘ４がＥであり；２９位のＫ＊が、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−（γＥ）２−ＣＯ−（ＣＨ２）１８−ＣＯ２ＨでのＫ側鎖のイプシロン−アミノ基へのコンジュゲートを介して化学的に修飾され；Ｃ末端のアミノ酸が、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化されるように、設計される（配列番号７）。
【００３８】
２９位において、修飾されたＫ残基（「Ｋ＊」）は置換されており、Ｘ８はＱであり、Ｘ７はＴである、本発明のさらなる好ましい実施形態（同様に、式ＩＩＩの範囲内にある）が設計されてもよい。かかる好ましい分子および化合物（式ＩＩＩのサブセットである）は、式ＩＩ：
Ｘ１ＩＶＸ２ＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＸ３ＥＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＫ＊ＴＮＡＸ４ＩＬＡＱＶ−ＮＨ２（式ＩＩ）
（式ＩＩＩの実施形態と同様に、式ＩＩの実施形態は、Ｘ２がＬまたはＴであることができ、Ｘ３がＬまたはＩであることができ、Ｘ４がＱ、Ｒ、またはＥであることができ、Ｘ１が、１位のＩ残基が、そのＮ末端で、修飾されていないか、またはアセチル化もしくはメチル化のいずれかにより修飾されていることを意味することができるように設計される）として表され得る。しかしながら、Ｘ１が、（１位の）Ｉ残基が、Ｎ末端でアセチル化またはメチル化のいずれかにより修飾されるように制約され、Ｘ４が、ＱまたはＥのいずれかであるように制約される、式ＩＩのさらなる好ましい実施形態が設計されてもよい。
【００３９】
式ＩＩの実施形態において、２９位の修飾されたＫ残基（「Ｋ＊」）は、式−Ｘ５−Ｘ６（式中、
Ｘ５は、
１〜４つのアミノ酸；
１〜４つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）部分；および
１〜４つのアミノ酸と１〜４つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）部分の組み合わせ
からなる群から選択され；
Ｘ６は、Ｃ１４−Ｃ２４脂肪酸である）
の基でＫ側鎖のイプシロン−アミノ基へのコンジュゲートを介して修飾される（配列番号１６）、またはその医薬的に許容される塩。
【００４０】
本明細書において記載される式１の実施形態において、式Ｉにおいて使用される修飾されたＫ残基は、次の基：（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−（γＥ）２−ＣＯ−（ＣＨ２）ｘ−ＣＯ２Ｈ（式中、ｘは、１６または１８である）にコンジュゲートされたＫ側鎖のイプシロン−アミノ基を有する。（別の言い方をすれば、式Ｉの現在好ましい実施形態のいくつかにおいて、式ＩＩＩのＸ５およびＸ６基は、次の式：（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−（γＥ）２−ＣＯ−（ＣＨ２）ｘ−ＣＯ２Ｈ（式中、ｘは、１６または１８である）を有する。）
【００４１】
さらに、上述の通り、式ＩＩおよび式ＩＩＩの化合物は、Ｘ５およびＸ６について異なる基を使用してもよい。例えば、式ＩＩおよび式ＩＩＩのいくつかの実施形態において、Ｘ５は、１もしくは４つのＥまたはγＥアミノ酸残基であってもよい。さらなる実施形態式ＩＩおよび式ＩＩＩは、２〜４つのＥまたはγＥであるＸ５を有してもよい。Ｘ５が、２つのγＥアミノ酸を含む、なおさらなる好ましい実施形態式ＩＩおよび式ＩＩＩが構築される。式ＩＩおよび式ＩＩＩのいくつかの実施形態において、Ｘ５基は、アミノ酸残基のみを含んでもよく；しかしながら、他の実施形態において、Ｘ５基は、１〜４つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）部分と組み合わせて使用される１〜４つのアミノ酸残基（例えば、ＥまたはγＥアミノ酸のような）を含んでもよい。具体的には、他の実施形態において、Ｘ５は、１〜４つのＥまたはγＥアミノ酸と１〜４つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）部分の組み合わせを構成する。Ｘ５が、２〜４つのγＥアミノ酸と１〜４つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）部分（例えば、２つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）部分のような）の組み合わせである、さらなる実施形態が設計される。他の実施形態は、２つのγＥアミノ酸と２つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）部分の組み合わせであるＸ５を有する。
【００４２】
式ＩＩＩおよびＩＩＩの１つの好ましい実施形態において、式−Ｘ５−Ｘ６の基は、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−（γＥ）２−ＣＯ−（ＣＨ２）ｘ−ＣＯ２Ｈ（式中、ｘは、１６または１８である）である。式ＩＩＩおよびＩＩＩの他の実施形態において、Ｘ５基は、任意のアミノ酸残基を有する、または有しない、少なくとも１つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル部分を含んでもよい。Ｘ５基が、１または２つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル部分を含む、式ＩＩＩおよびＩＩＩのさらなる好ましい実施形態が構築される。いくつかの実施形態において、Ｘ６基は、式ＣＯ−（ＣＨ２）ｘ−ＣＯ２Ｈ（式中、ｘは、１６、１８、または２０である）の直鎖脂肪酸側鎖である。最も好ましい実施形態は、１６または１８のいずれかであるｘを有する。
【００４３】
上述の通り、式ＩＩおよびＩＩＩの化合物（またはその医薬的に許容される塩）は、Ｃ１４〜Ｃ２４脂肪酸であるＸ６基を有する。このＣ１４−Ｃ２４脂肪酸は、飽和モノ酸または飽和二酸であってもよい。好ましくは、脂肪酸は、ミリスチン酸（テトラデカン酸）（Ｃ１４モノ酸）、テトラデカン二酸（Ｃ１４二酸）、パルミチン酸（ヘキサデカン酸）（Ｃ１６モノ酸）、ヘキサデカン二酸（Ｃ１６二酸）、マルガリン酸（ヘプタデカン酸）（Ｃ１７モノ酸）、ヘプタデカン二酸（Ｃ１７二酸）、ステアリン酸（オクタデカン酸）（Ｃ１８モノ酸）、オクタデカン二酸（Ｃ１８二酸）、ノナデシル酸（ノナデカン酸）（Ｃ１９モノ酸）、ノナデカン二酸（Ｃ１９二酸）、アラカド酸（ａｒａｃｈａｄｉｃ  ａｃｉｄ）（エイコサン酸）（Ｃ２０モノ酸）、エイコサン二酸（Ｃ２０二酸）、ヘンイコシル酸（ヘンイコサノン酸）（Ｃ２１モノ酸）、ヘンイコシル二酸（Ｃ２１二酸）、ベヘン酸（ドコサン酸）（Ｃ２２モノ酸）、ドコサン二酸（Ｃ２２二酸）、リグノセリン酸（テトラコサン酸）（Ｃ２４モノ酸）およびテトラコサン二酸（Ｃ２４二酸）からなる群から選択される飽和モノ酸または飽和二酸である。最も好ましい酸は、以下の：ミリスチン酸、テトラデカン二酸、パルミチン酸、ヘキサデカン二酸、ステアリン酸、オクタデカン二酸、ノナデカン二酸、アラカド酸（ａｒａｃｈａｄｉｃ  ａｃｉｄ）、エイコサン二酸またはドコサン二酸である。
【００４４】
式Ｉまたは式ＩＩまたは式ＩＩＩの本発明は、式Ｉもしくは式ＩＩもしくは式ＩＩＩの化合物、またはその医薬的に許容される塩（例えば、特に、トリフルオロ酢酸塩、酢酸塩、もしくは塩酸塩）を含む医薬組成物を提供する。他の実施形態において、ヒト使用に適した任意の塩または遊離塩基は、式Ｉまたは式ＩＩまたは式ＩＩＩの化合物を使用して作られてもよい。いくつかの好ましい実施形態において、式Ｉまたは式ＩＩまたは式ＩＩＩの化合物のペプチド酢酸塩が使用される。いくつかの実施形態において、Ｃ末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される。さらなる実施形態において、医薬組成物は、医薬的に許容される担体、希釈剤、および賦形剤をさらに含んでもよい。
【００４５】
本発明は、式Ｉもしくは式ＩＩもしくは式ＩＩＩの化合物、またはその医薬的に許容される塩、および１つもしくは複数の医薬的に許容される担体、希釈剤、または賦形剤を含む医薬組成物を提供する。本発明はまた、さらなる有効成分と組み合わせて、式Ｉもしくは式ＩＩもしくは式ＩＩＩの化合物、またはその医薬的に許容される塩を含む医薬組成物を提供する。
【００４６】
本発明は、患者におけるＩＩ型糖尿病の治療方法であって、かかる治療を必要とする患者に、有効量の式Ｉもしくは式ＩＩもしくは式ＩＩＩの化合物、またはその医薬的に許容される塩を投与することを含む方法を提供する。本発明はまた、患者におけるＩＩ型糖尿病の治療方法であって、かかる治療を必要とする患者に、有効量の式Ｉもしくは式ＩＩもしくは式ＩＩＩの化合物、またはその医薬的に許容される塩を投与することを含む方法であって、投与は皮下投与である方法を提供する。本発明はまた、患者におけるＩＩ型糖尿病の治療方法であって、かかる治療を必要とする患者に、有効量の式Ｉもしくは式ＩＩもしくは式ＩＩＩの化合物、またはその医薬的に許容される塩、および同時もしくは連続して、有効量の１つまたは複数の他の有効成分を投与することを含む方法を提供する。１つの実施形態において、他の有効成分は、投与前、米国糖尿病協会のような業界ガイドラインにより決められた標準治療とみなされる薬物の種類から選択される現在入手可能な経口グルコース低下薬である。現在の標準治療の例は、メトホルミン、チアゾリジンジオン（ＴＺＤ）、スルホニル尿素系薬剤（ＳＵ）、ジペプチジルペプチダーゼ４（ＤＰＰ−ＩＶ）阻害剤、およびナトリウム／グルコース共輸送体（ＳＧＬＴ）を含む。本発明のさらなる実施形態において、上で定義された患者におけるＩＩ型糖尿病の治療方法は、食餌および運動と組み合わされる。
【００４７】
さらに、本発明は、患者における慢性腎疾患の治療方法であって、かかる治療を必要とする患者に、有効量の式Ｉもしくは式ＩＩもしくは式ＩＩＩの化合物、またはその医薬的に許容される塩を投与することを含む方法を提供する。本発明はまた、患者における慢性腎疾患の治療方法であって、かかる治療を必要とする患者に、有効量の式Ｉもしくは式ＩＩもしくは式ＩＩＩの化合物、またはその医薬的に許容される塩を投与することを含む方法であって、慢性腎疾患が、糖尿病性腎症により引き起こされる方法を提供する。本発明はまた、患者における慢性腎疾患の治療方法であって、かかる治療を必要とする患者に、有効量の式Ｉもしくは式ＩＩもしくは式ＩＩＩの化合物、またはその医薬的に許容される塩を投与することを含む方法であって、慢性腎疾患が、高血圧性腎症により引き起こされる方法を提供する。本発明はまた、患者における慢性腎疾患の治療方法であって、かかる治療を必要とする患者に、有効量の式Ｉもしくは式ＩＩもしくは式ＩＩＩの化合物、またはその医薬的に許容される塩を投与することを含む方法であって、投与が皮下投与である方法を提供する。本発明はまた、患者における慢性腎疾患の治療方法であって、かかる治療を必要とする患者に、有効量の式Ｉの化合物、またはその医薬的に許容される塩、および同時もしくは連続して、有効量の１つまたはそれ以上の他の有効成分を投与することを含む方法を提供する。１つの実施形態において、他の有効成分は、投与前に、業界ガイドラインにより決められた標準治療とみなされる現在入手可能な経口ＡＣＥ阻害剤またはＡＲＢから選択される。現在の標準治療の例は、ＡＣＥ阻害剤であるリシノプリルおよびカプトプリルならびにＡＲＢロサルタンおよびイルベサルタンである。
【００４８】
さらに、本発明は、治療における使用のための、式Ｉもしくは式ＩＩもしくは式ＩＩＩの化合物、またはその医薬的に許容される塩を提供する。本発明はまた、ＩＩ型糖尿病の治療における使用のための、式Ｉもしくは式ＩＩもしくは式ＩＩＩの化合物、またはその医薬的に許容される塩を提供する。さらに、本発明は、慢性腎疾患の治療における使用のための、式Ｉもしくは式ＩＩもしくは式ＩＩＩの化合物、またはその医薬的に許容される塩を提供する。本発明は、糖尿病性腎症または高血圧性腎症により引き起こされる慢性腎疾患の治療における使用のための、式Ｉもしくは式ＩＩもしくは式ＩＩＩの化合物、またはその医薬的に許容される塩を提供する。本発明は、ＩＩ型糖尿病および／または慢性腎疾患の治療用医薬の製造のための、式Ｉもしくは式ＩＩもしくは式ＩＩＩの化合物、またはその医薬的に許容される塩の使用を提供する。
【００４９】
本発明はまた、式Ｉまたは式ＩＩまたは式ＩＩＩの化合物の合成のための新規中間体およびプロセスを包含する。
【００５０】
式Ｉもしくは式ＩＩもしくは式ＩＩＩの化合物、またはその医薬的な塩は、本発明の治療方法において特に有用である。
【００５１】
本発明の化合物のペプチド鎖は、標準的な手動または自動固相合成方法を使用して合成することができる。自動ペプチドシンセサイザーは、例えば、アプライドバイオシステムズ（フォスターシティ、カリフォルニア州）およびＰｒｏｔｅｉｎ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  Ｉｎｃ．（トゥーソン、アリゾナ州）から市販されている。固相合成用試薬は、商業供給源から容易に入手可能である。固相シンセサイザーは、干渉する基のブロッキング、反応中のアミノ酸の保護、カップリング、脱保護、および未反応のアミノ酸のキャッピングについての製造元の指示に従い、使用することができる。
【００５２】
典型的には、樹脂に結合した伸長するペプチド鎖上のＮ−α−カルバモイル保護アミノ酸およびＮ末端のアミノ酸は、室温で、ジメチルホルムアミド、Ｎ−メチルピロリドンまたは塩化メチレンのような不活性な溶媒中、ジイソプロピル−カルボジイミドおよび１−ヒドロキシベンゾトリアゾールのようなカップリング剤の存在下でカップリングされる。Ｎα−カルバモイル保護基は、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）またはピペリジンのような試薬を使用して、得られたペプチドから取り除かれ、カップリング反応が、次に所望される、ペプチド鎖に加えられるべきＮα−保護アミノ酸で繰り返される。適当なアミン保護基は、当該技術分野において周知であり、例えば、Ｇｒｅｅｎ  ａｎｄ  Ｗｕｔｓ，“Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，”Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，１９９１において記載される。最も一般的に使用される例は、ｔＢｏｃおよびフルオレニルメトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）を含む。合成完了後、ペプチドは、酸性条件下で標準的な処理方法を使用した同時側鎖脱保護で固相支持体から切断される。
【００５３】
当業者は、Ｃ末端のカルボキサミドを有する、本発明の化合物のペプチド鎖が合成されることを理解するだろう。Ｃ末端のアミドペプチドの合成のため、Ｆｍｏｃ合成と共に、Ｒｉｎｋ  ａｍｉｄｅ  ＭＢＨＡまたはＲｉｎｋ  ａｍｉｄｅ  Ａｍリンカーを取り込んだ樹脂が典型的には使用され、一方、ｔＢｏｃ合成と共に、ＭＢＨＡ樹脂が一般に使用される。
【００５４】
粗ペプチドは、典型的には、０．０５〜０．１％ＴＦＡ中の水−アセトニトリル勾配を使用したＣ８またはＣ１８カラム上のＲＰ−ＨＰＬＣを使用して精製される。純度は、分析的ＲＰ−ＨＰＬＣにより検証することができる。ペプチドの同一性は、質量分析により検証することができる。ペプチドは、広いｐＨ範囲に渡り水性バッファーに溶解可能である。
【００５５】
本明細書において使用される用語「ＡＵＣ」は、曲線下面積を意味する。
【００５６】
本明細書において使用される用語「平均分子量」は、非常に狭い分布を伴う、異なるオリゴマーサイズの成分の分子量の平均を示し、質量分析技術により決定される。
【００５７】
本明細書において使用される用語「ＥＣ５０」は、アッセイエンドポイントの５０％活性化をもたらす化合物、例えば、ｃＡＭＰの濃度を指す。
【００５８】
本明細書において使用される用語「ＥＤ５０」は、インビボアッセイのエンドポイントにおいて５０％応答をもたらす化合物、例えば、血漿または血液グルコースの濃度を指す。
【００５９】
本明細書において使用される用語「有効量」は、患者への１回もしくは複数回用量の投与の際、毎日の投与について診断もしくは治療下にある患者において所望される効果をもたらす本発明の化合物、またはその医薬的に許容される塩の量あるいは用量を指す。有効量は、公知の技術の使用により、および同様の状況下で得られる結果を観察することにより、当業者である主治医により容易に決定することができる。患者についての有効量を決定する際に、哺乳類の種；その大きさ、年齢、および一般的な健康状態；関与する具体的な疾患または障害；疾患もしくは障害のあるいは関与または重症度の程度；個々の患者の応答；投与される特定の化合物；投与経路；投与される調製物のバイオアベイラビリティ特徴；選択される用法；併用薬の使用；ならびに他の関連する状況を含むが、これらに限定されない、多数の要因が、診断医により考慮される。
【００６０】
本明細書において使用される用語「患者」は、マウス、モルモット、ラット、イヌ、ネコ、またはヒトのような哺乳類を指す。好ましい患者はヒトであることは理解される。
【００６１】
本明細書において使用される用語「治療」または「治療すること」は、現在の症状もしくは障害の進行または重症化を妨げること、抑制すること、遅延させること、止めること、あるいは逆転させることを含む。
【００６２】
本明細書において使用されるとき、用語「と組み合わせて」は、１つもしくは複数のさらなる治療剤と、同時に、連続して、または１つもしくは複数のさらなる治療剤を含む単一の組み合わせ製剤においてのいずれかで本発明の合成分子の投与を意味する。
【００６３】
ある種の略語が以下の通り定義される：「ＡＣＲ」は尿アルブミン／尿クレアチニン比を指し；「ａｍｕ」は原子質量単位を指し；「Ｂｏｃ」はｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルを指し；「ｃＡＭＰ」は環状アデノシン一リン酸を指し；「ＤＭＳＯ」はジメチルスルホキシドを指し；「ＥＩＡ／ＲＩＡ」は酵素イムノアッセイ／ラジオイムノアッセイを指し；「ｈｒ」は時間を指し；「ＨＴＲＦ」は均一時間分解蛍光を指し；「ｉ．ｖ．」は静脈内を指し；「ｋＤａ」はキロダルトンを指し；「ＬＣ−ＭＳ」は液体クロマトグラフィー−質量分析を指し；「ＭＳ」は質量分析を指し；「ＯｔＢｕ」はＯ−ｔｅｒｔ−ブチルを指し；「Ｐｂｆ」はＮＧ−２，２，４，６，７−ペンタメチルジヒドロベンゾフラン−５−スルホニルを指し；「ＲＰ−ＨＰＬＣ」は逆相高速液体クロマトグラフィーを指し；「ｓ．ｃ．」は皮下を指し；「ＳＥＭ」は平均の標準誤差を指し；「ＴＦＡ」はトリフルオロ酢酸を指し；「Ｔｒｔ」はトリチルを指す。標準的な１文字コードを使用して、式Ｉの化合物中のアミノ酸を表す。式Ｉにおいて使用される全てのアミノ酸は、Ｌ−アミノ酸である。標準的な３文字コードを使用して、アミノ酸を表してもよい。
【００６４】
本発明の化合物は、直接結合によって、またはリンカーによってのいずれかでリジン側鎖のイプシロン−アミノ基に化学的にコンジュゲートされたＣ１４−Ｃ２４脂肪酸を利用する。本明細書において使用される用語「Ｃ１４−Ｃ２４脂肪酸」は、１４〜２４個の炭素原子を有するカルボン酸を意味する。本明細書における使用に適したＣ１４−Ｃ２４脂肪酸は、飽和モノ酸または飽和二酸であり得る。「飽和」により、脂肪酸が、炭素と炭素の間の２重結合または３重結合を含有しないことを意味する。
【００６５】
本明細書において開示される化合物およびその使用に適当である具体的な飽和Ｃ１４−Ｃ２４脂肪酸の例は、ミリスチン酸（テトラデカン酸）（Ｃ１４モノ酸）、テトラデカン二酸（Ｃ１４二酸）、パルミチン酸（ヘキサデカン酸）（Ｃ１６モノ酸）、ヘキサデカン二酸（Ｃ１６二酸）、マルガリン酸（ヘプタデカン酸）（Ｃ１７モノ酸）、ヘプタデカン二酸（Ｃ１７二酸）、ステアリン酸（オクタデカン酸）（Ｃ１８モノ酸）、オクタデカン二酸（Ｃ１８二酸）、ノナデシル酸（ノナデカン酸）（Ｃ１９モノ酸）、ノナデカン二酸（Ｃ１９二酸）、アラカド酸（ａｒａｃｈａｄｉｃ  ａｃｉｄ）（エイコサン酸）（Ｃ２０モノ酸）、エイコサン二酸（Ｃ２０二酸）、ヘンイコシル酸（ヘンイコサノン酸）（Ｃ２１モノ酸）、ヘンイコシル二酸（Ｃ２１二酸）、ベヘン酸（ドコサン酸）（Ｃ２２モノ酸）、ドコサン二酸（Ｃ２２二酸）、リグノセリン酸（テトラコサン酸）（Ｃ２４モノ酸）、テトラコサン二酸（Ｃ２４二酸）（それらの分岐および置換された誘導体を含む）を含むが、これらに限定されない。
【００６６】
本発明の化合物の好ましい態様において、Ｃ１４−Ｃ２４脂肪酸は、飽和Ｃ１４モノ酸、飽和Ｃ１４二酸、飽和Ｃ１６モノ酸、飽和Ｃ１６二酸、飽和Ｃ１８モノ酸、飽和Ｃ１８二酸、飽和Ｃ１９二酸、飽和Ｃ２０モノ酸、飽和Ｃ２０二酸、飽和Ｃ２２二酸、ならびにそれらの分岐および置換された誘導体からなる群から選択される。本発明の化合物のより好ましい態様において、Ｃ１４−Ｃ２４脂肪酸は、ミリスチン酸、テトラデカン二酸、パルミチン酸、ヘキサデカン二酸、ステアリン酸、オクタデカン二酸、ノナデカン二酸、アラカド酸（ａｒａｃｈａｄｉｃ  ａｃｉｄ）、エイコサン二酸およびドコサン二酸からなる群から選択される。好ましくは、Ｃ１４−Ｃ２４脂肪酸は、オクタデカン二酸またはエイコサン二酸である。
【００６７】
脂肪酸の長さおよび組成は、化合物の半減期、インビボ動物モデルにおける化合物の効力に影響を及ぼし、化合物の溶解性および安定性にも影響を及ぼす。Ｃ１４−Ｃ２４飽和脂肪モノ酸または二酸への本明細書において定義されるペプチドの結合は、望ましい半減期、インビボ動物モデルにおける望ましい効力を示し、所望される溶解性および安定性特徴も有する化合物をもたらす。
【００６８】
本発明の化合物は、非経口経路（例えば、皮下、静脈内、腹腔内、筋肉内、または経皮）により投与される医薬組成物として好ましくは製剤される。かかる医薬組成物、およびそれを製造するプロセスは、当該技術分野において周知である。（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｌ．Ｖ．Ａｌｌｅｎ，Ｅｄｉｔｏｒ，２２ｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓ，２０１２を参照。）好ましい投与経路は、皮下投与である。
【００６９】
本発明の化合物は、多数の無機酸および有機酸のいずれかと反応して、医薬的に許容される酸付加塩を形成してもよい。医薬的に許容される塩、およびそれを製造する一般的な方法論は、当該技術分野において周知である。例えば、Ｐ．Ｓｔａｈｌ，ｅｔ  ａｌ．Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ：Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｕｓｅ，２ｎｄ  Ｒｅｖｉｓｅｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ（Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ，２０１１）；Ｓ．Ｍ．Ｂｅｒｇｅ，ｅｔ  ａｌ．，“Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ，”Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｖｏｌ．６６，ＮＯ：１，Ｊａｎｕａｒｙ  １９７７を参照。本発明の好ましい医薬的に許容される塩は、特に、トリフルオロ酢酸塩、酢酸塩、および塩酸塩である。
【００７０】
本発明の化合物は、医師により投与されるか、または注射を用いて自己投与されてもよい。ゲージサイズおよび注射体積量は、スキルを持つ医師により決定されることが理解される。１つの実施形態において、注射体積量は、２ｍｌ以下であり、好ましくは、１ｍｌ以下である。また、さらなる実施形態は、２７以上、好ましくは、２９以上のニードルゲージの使用である。
【００７１】
式Ｉまたは式ＩＩまたは式ＩＩＩの化合物は、一般に、広い投薬量範囲に渡り有効である。例えば、１日当たりの投薬量は、通常、体重１ｋｇ当たり約０．０１〜約５０ｍｇの範囲にある。ある場合では、前述の範囲の下限未満の投薬量レベルが十分過ぎであってもよく、一方、他の場合では、さらに大きな用量が、許容される副作用を伴って利用されてもよく、それ故、上記の投薬量範囲は、いかなる方法でも本発明の範囲を制限しないことを意図する。
【００７２】
本発明はまた、式Ｉもしくは式ＩＩもしくは式ＩＩＩの化合物、またはその医薬的に許容される塩の合成に有用な新規中間体およびプロセスを包含する。本発明の中間体および化合物は、化学合成と組み換え技術の両方を介したものを含む、当該技術分野において公知の様々な方法により製造されてもよい。特に、化学合成を使用するプロセスは、以下の調製および実施例物において説明される。記載される経路のそれぞれの具体的な合成ステップを異なる方法と組み合わせて、式Ｉの化合物、またはその塩を製造してもよい。試薬および出発材料は、当業者にとって容易に入手可能である。これらの調製物および実施例は、いかなる方法でも本発明の範囲への限定ではないことが意図されることは、理解される。
【実施例】
【００７３】
実施例１
Ｘ１ＩＶＸ２ＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＸ３ＥＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＫ＊ＴＮＡＸ４ＩＬＡＱＶ−ＮＨ２
（式中、１位のＸ１は、Ｎ末端で、アセチル化により修飾されているＩであり；Ｘ２はＬであり；Ｘ３はＬであり；Ｘ４はＱであり；２９位のＫ＊は、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−（γＥ）２−ＣＯ−（ＣＨ２）１６−ＣＯ２ＨでのＫ側鎖のイプシロン−アミノ基へのコンジュゲートを介して化学的に修飾され；Ｃ末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される）（配列番号１）。この配列の構造を以下に示す。
【００７４】
【化１】
2019525919.tif 000002
【００７５】
この配列の構造は、１位の残基Ｉ、およびこれらのアミノ酸残基の構造を拡大した２９位のＫを除き、標準的な１文字アミノ酸コードを包含する。
【００７６】
本発明の配列番号１に記載のペプチドを、ＲＡＰＰ  ＡＭ−Ｒｉｎｋ  Ａｍｉｄｅ樹脂（Ｈ４００２３ポリスチレンＡＭ  ＲＡＭ、Ｒａｐｐ  ｐｏｌｙｍｅｒｅ  ＧｍｂＨ）から出発してＳｙｍｐｈｏｎｙ自動ペプチドシンセサイザー（ＰＴＩ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  Ｉｎｃ．）上で実行するＦｍｏｃ／ｔ−Ｂｕストラテジーを使用した固相ペプチド合成により、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）中のジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）およびＯｘｙｍａ  ｐｕｒｅ（モル比１：１：１）で３時間２５℃で活性化したアミノ酸６当量を用いたカップリングで作製する。
【００７７】
Ｔｈｒ３０の拡大したカップリング（１０時間）は、粗ペプチドの品質を改善するのに必要である。Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−ＯＨ基本単位を、２９位のＫのカップリングのため使用し（直交の保護基）、合成プロセスにおいて後に、脂肪酸部分の部位特異的な結合を可能にする。Ｎ末端の残基（１位のＩ）を、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）中のジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）およびＯｘｙｍａ  ｐｕｒｅ（モル比１：１：１）を含む酢酸１０当量を１時間２５℃で使用してアセチル化する。
【００７８】
上記のペプチド−樹脂の伸長を終えた後、２９位のＫに存在するＡｌｌｏｃ保護基を、スカベンジャーとしてＰｈＳｉＨ３の存在下で触媒量のＰｄ（ＰＰｈ３）４を使用して取り除く。２９位のＫの側鎖を拡大するＦｍｏｃ／ｔ−Ｂｕストラテジーを使用したさらなるカップリング／脱保護サイクルは、Ｆｍｏｃ−ＮＨ−ＰＥＧ２−ＣＨ２ＣＯＯＨ（ＣｈｅｍＰｅｐカタログ番号２８０１０２）、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯＨ）−ＯｔＢｕ（ＣｈｅｍＰｅｐカタログ番号１００７０３）およびＨＯＯＣ−（ＣＨ２）１６−ＣＯＯｔＢｕを含むものであった。全てのカップリングにおいて、基本単位３当量を、ＤＭＦ中のＰｙＢＯＰ（３当量）およびＤＩＥＡ（６当量）と共に４時間２５℃で使用する。
【００７９】
同時の、樹脂からの切断と側鎖保護基の除去を、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）：トリイソプロピルシラン：１，２−エタンジチオール：メタノール：チオアニソール８０：５：５：５：５（ｖ／ｖ）を含有する溶液中２時間２５℃で行い、続いて、冷エーテルで沈殿させる。粗ペプチドを、適当な分画をプールし、凍結乾燥する、フェニルヘキシルカラム（ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ、５ミクロン、１００Ａ）上の水／アセトニトリル（１％ｖ／ｖＴＦＡを含有する）勾配での逆相ＨＰＬＣクロマトグラフィーにより、純度＞９９％（精製収率１５〜２０％）まで精製する。
【００８０】
上記の通り本質的に行った合成において、実施例１の純度を、分析的逆相ＨＰＬＣにより調べ、ＬＣ／ＭＳを使用して、同一性を確認した（観察：Ｍ＋３Ｈ＋／３＝１７１８．８；計算Ｍ＋３Ｈ＋／３＝１７２０．０；観察：Ｍ＋４Ｈ＋／４＝１２８９．２；計算Ｍ＋４Ｈ＋／４＝１２９０．３；観察：Ｍ＋５Ｈ＋／５＝１０３１．５；計算Ｍ＋５Ｈ＋／５＝１０３２．４）。
【００８１】
実施例２
Ｘ１ＩＶＸ２ＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＸ３ＥＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＫ＊ＴＮＡＸ４ＩＬＡＱＶ−ＮＨ２
（式中、Ｘ１は、Ｎ末端がアセチル化を介して修飾されているＩであり；Ｘ２はＬであり；Ｘ３はＬであり；Ｘ４はＱであり；２９位のＫ＊は、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−（γＥ）２−ＣＯ−（ＣＨ２）１８−ＣＯ２ＨでのＫ側鎖のイプシロン−アミノ基へのコンジュゲートを介して化学的に修飾され；Ｃ末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される）（配列番号２）。この配列の構造を以下に示す。
【００８２】
【化２】
2019525919.tif 000003
【００８３】
この配列の構造は、１位の残基Ｉ、およびこれらのアミノ酸残基の構造を拡大した２９位のＫを除き、標準的な１文字アミノ酸コードを包含する。
【００８４】
本発明の配列番号２に記載のペプチドを、実施例１において上で記載したのと同様に合成する。ＤＭＦ中のＰｙＢＯＰ（３当量）およびＤＩＥＡ（６当量）を含む基本単位３当量を４時間２５℃で使用して、ＨＯＯＣ−（ＣＨ２）１８−ＣＯＯｔＢｕを取り込む。
【００８５】
上記の通り本質的に行った合成において、実施例２の純度を、分析的逆相ＨＰＬＣにより調べ、ＬＣ／ＭＳを使用して、同一性を確認した（観察：Ｍ＋３Ｈ＋／３＝１７２８．２；計算Ｍ＋３Ｈ＋／３＝１７２９．４；観察：Ｍ＋４Ｈ＋／４＝１２９６．３；計算Ｍ＋４Ｈ＋／４＝１２９７．３；観察：Ｍ＋５Ｈ＋／５＝１０３７．４；計算Ｍ＋５Ｈ＋／５＝１０３８．０）。
【００８６】
実施例３
Ｘ１ＩＶＸ２ＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＸ３ＥＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＫ＊ＴＮＡＸ４ＩＬＡＱＶ−ＮＨ２
（式中、Ｘ１は、Ｎ末端がメチル化を介して修飾されているＩであり；Ｘ２はＬであり；Ｘ３はＬであり；Ｘ４はＱであり；２９位のＫ＊は、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−（γＥ）２−ＣＯ−（ＣＨ２）１６−ＣＯ２ＨでのＫ側鎖のイプシロン−アミノ基へのコンジュゲートを介して化学的に修飾され；Ｃ末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される）（配列番号３）。この配列の構造を以下に示す。
【００８７】
【化３】
2019525919.tif 000004
【００８８】
この配列の構造は、１位の残基Ｎ−メチルイソロイシン、およびこれらのアミノ酸残基の構造を拡大した２９位のＫを除き、標準的な１文字アミノ酸コードを包含する。
【００８９】
本発明の配列番号３に記載の化合物を、実施例１について上で記載したのと同様に合成する。ＤＭＦ−ＤＣＭ中のＰｙＢＯＰ（６当量）およびＤＩＥＡ（１２当量）（１：１、ｖ／ｖ）を含む基本単位６当量を１５時間２５℃で使用し、Ｎ末端の残基（１位のＮ−メチルイソロイシン）をＢｏｃ−ＮＭｅＩｌｅ−ＯＨとして取り込む。
【００９０】
上記の通り本質的に行った合成において、実施例３の純度を、分析的逆相ＨＰＬＣにより調べ、ＬＣ／ＭＳを使用して、同一性を確認した（観察：Ｍ＋３Ｈ＋／３＝１７０９．６；計算Ｍ＋３Ｈ＋／３＝１７１０．７；観察：Ｍ＋４Ｈ＋／４＝１２８２．２；計算Ｍ＋４Ｈ＋／４＝１２８３．３；観察：Ｍ＋５Ｈ＋／５＝１０２５．８；計算Ｍ＋５Ｈ＋／５＝１０２６．８）。
【００９１】
実施例４
Ｘ１ＩＶＸ２ＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＸ３ＥＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＫ＊ＴＮＡＸ４ＩＬＡＱＶ−ＮＨ２
（式中、Ｘ１は、Ｎ末端がメチル化を介して修飾されているＩであり；Ｘ２はＬであり；Ｘ４はＬであり；Ｘ４はＱであり；２９位のＫ＊は、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−（γＥ）２−ＣＯ−（ＣＨ２）１８−ＣＯ２ＨでのＫ側鎖のイプシロン−アミノ基へのコンジュゲートを介して化学的に修飾され；Ｃ末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される）（配列番号４）。この配列の構造を以下に示す。
【００９２】
【化４】
2019525919.tif 000005
【００９３】
この配列の構造は、１位の残基Ｎ−メチルイソロイシン、およびこれらのアミノ酸残基の構造を拡大した２９位のＫを除き、標準的な１文字アミノ酸コードを包含する。
【００９４】
本発明の配列番号４に記載の化合物を、実施例１について上で記載したのと同様に合成する。ＤＭＦ−ＤＣＭ中のＰｙＢＯＰ（６当量）およびＤＩＥＡ（１２当量）（１：１、ｖ／ｖ）を含む基本単位６当量を１５時間２５℃で使用し、Ｎ末端の残基（１位のＮ−メチルイソロイシン）をＢｏｃ−ＮＭｅＩｌｅ−ＯＨとして取り込む。ＤＭＦ中のＰｙＢＯＰ（３当量）およびＤＩＥＡ（６当量）を含む基本単位３当量を４時間２５℃で使用して、ＨＯＯＣ−（ＣＨ２）１８−ＣＯＯｔＢｕを取り込む。
【００９５】
上記の通り本質的に行った合成において、実施例４の純度を、分析的逆相ＨＰＬＣにより調べ、ＬＣ／ＭＳを使用して、同一性を確認した（観察：Ｍ＋３Ｈ＋／３＝１７１９．４；計算Ｍ＋３Ｈ＋／３＝１７２０．１；観察：Ｍ＋４Ｈ＋／４＝１２８９．８；計算Ｍ＋４Ｈ＋／４＝１２９０．３；観察：Ｍ＋５Ｈ＋／５＝１０３１．８；計算Ｍ＋５Ｈ＋／５＝１０３２．４）。
【００９６】
実施例５
Ｘ１ＩＶＸ２ＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＸ３ＥＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＫ＊ＴＮＡＸ４ＩＬＡＱＶ−ＮＨ２
（式中、Ｘ１は、Ｎ末端がメチル化を介して修飾されているＩであり；Ｘ２はＴであり；Ｘ３はＬであり；Ｘ４はＥであり；２９位のＫ＊は、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−（γＥ）２−ＣＯ−（ＣＨ２）１８−ＣＯ２ＨでのＫ側鎖のイプシロン−アミノ基へのコンジュゲートを介して化学的に修飾され；Ｃ末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される）（配列番号５）。この配列の構造を以下に示す。
【００９７】
【化５】
2019525919.tif 000006
【００９８】
この配列の構造は、１位の残基Ｎ−メチルイソロイシン、およびこれらのアミノ酸残基の構造を拡大した２９位のＫを除き、標準的な１文字アミノ酸コードを包含する。
【００９９】
本発明の配列番号５に記載の化合物を、実施例４について上で記載したのと同様に合成する。
【０１００】
上記の通り本質的に行った合成において、実施例５の純度を、分析的逆相ＨＰＬＣにより調べ、ＬＣ／ＭＳを使用して、同一性を確認した（観察：Ｍ＋３Ｈ＋／３＝１７１５．７；計算Ｍ＋３Ｈ＋／３＝１７１６．４；観察：Ｍ＋４Ｈ＋／４＝１２８７．０；計算Ｍ＋４Ｈ＋／４＝１２８７．５；観察：Ｍ＋５Ｈ＋／５＝１０２９．７；計算Ｍ＋５Ｈ＋／５＝１０３０．２）。
【０１０１】
実施例６
Ｘ１ＩＶＸ２ＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＸ３ＥＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＫ＊ＴＮＡＸ４ＩＬＡＱＶ−ＮＨ２
（式中、Ｘ１は、Ｎ末端がメチル化を介して修飾されているＩであり；Ｘ２はＬであり；Ｘ３はＬであり；Ｘ４はＥであり；２９位のＫ＊は、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−（γＥ）２−ＣＯ−（ＣＨ２）１８−ＣＯ２ＨでのＫ側鎖のイプシロン−アミノ基へのコンジュゲートを介して化学的に修飾され；Ｃ末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される）（配列番号６）。この配列の構造を以下に示す。
【０１０２】
【化６】
2019525919.tif 000007
【０１０３】
この配列の構造は１位の残基Ｎ−メチルイソロイシン、およびこれらのアミノ酸残基の構造を拡大した２９位のＫを除き、標準的な１文字アミノ酸コードを包含する。
【０１０４】
本発明の配列番号６に記載の化合物を、実施例４について上で記載したのと同様に合成する。
【０１０５】
上記の通り本質的に行った合成において、実施例６の純度を、分析的逆相ＨＰＬＣにより調べ、ＬＣ／ＭＳを使用して、同一性を確認した（観察：Ｍ＋３Ｈ＋／３＝１７１９．７；計算Ｍ＋３Ｈ＋／３＝１７２０．４；観察：Ｍ＋４Ｈ＋／４＝１２８９．８；計算Ｍ＋４Ｈ＋／４＝１２９０．５；観察：Ｍ＋５Ｈ＋／５＝１０３２．２；計算Ｍ＋５Ｈ＋／５＝１０３２．６）。
【０１０６】
実施例７
Ｘ１ＩＶＸ２ＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＸ３ＥＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＫ＊ＴＮＡＸ４ＩＬＡＱＶ−ＮＨ２
（式中、Ｘ１は、Ｎ末端がメチル化を介して修飾されているＩであり；Ｘ２はＴであり；Ｘ３はＩであり；Ｘ４はＥであり；２９位のＫ＊は、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−（γＥ）２−ＣＯ−（ＣＨ２）１８−ＣＯ２ＨでのＫ側鎖のイプシロン−アミノ基へのコンジュゲートを介して化学的に修飾され；Ｃ末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される）（配列番号７）。この配列の構造を以下に示す。
【０１０７】
【化７】
2019525919.tif 000008
【０１０８】
この配列の構造は、１位の残基Ｎ−メチルイソロイシン、およびこれらのアミノ酸残基の構造を拡大した２９位のＫを除き、標準的な１文字アミノ酸コードを包含する。
【０１０９】
本発明の配列番号７に記載の化合物を、実施例４について上で記載したのと同様に合成する。
【０１１０】
上記の通り本質的に行った合成において、実施例７の純度を、分析的逆相ＨＰＬＣにより調べ、ＬＣ／ＭＳを使用して、同一性を確認した（観察：Ｍ＋３Ｈ＋／３＝１７１５．６；計算Ｍ＋３Ｈ＋／３＝１７１６．４；観察：Ｍ＋４Ｈ＋／４＝１２８６．８；計算Ｍ＋４Ｈ＋／４＝１２８７．５；観察：Ｍ＋５Ｈ＋／５＝１０２９．８；計算Ｍ＋５Ｈ＋／５＝１０３０．２）。
【０１１１】
実施例８
本発明の次の化合物を、実施例４について上で記載したのと同様に合成する。以下に示す構造は、１位の残基Ｎ−メチル化Ｉ、およびこれらのアミノ酸残基の構造を拡大した２９位のＫを除き、標準的な１文字アミノ酸コードを包含する。
【０１１２】
Ｘ１ＩＶＬＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＬＥＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＫ＊ＴＮＡＱＩＬＡＱＶ−ＮＨ２
（式中、Ｘ１は、メチル化により修飾されたＩ残基のＮ末端を有し；
２９位のＫ＊は、次の脂肪酸側鎖：
−γＥ−（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−（γＥ）２−ＣＯ−（ＣＨ２）１８−ＣＯＯＨ
で化学的に修飾され；Ｃ末端のアミノ酸が、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される）（配列番号９）。
【０１１３】
Ｘ１ＩＶＬＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＬＥＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＫ＊ＴＮＡＱＩＬＡＱＶ−ＮＨ２
（式中、Ｘ１は、メチル化により修飾されたＩ残基のＮ末端を有し；
２９位のＫ＊は、次の脂肪酸側鎖：
−γＥ−（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−（γＥ）２−ＣＯ−（ＣＨ２）１６−ＣＯＯＨ
で化学的に修飾され；
Ｃ末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される）（配列番号１０）。
【０１１４】
Ｘ１ＩＶＬＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＬＥＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＫ＊ＴＮＡＱＩＬＡＱＶ−ＮＨ２
（式中、Ｘ１は、メチル化により修飾されたＩ残基のＮ末端を有し；
２９位のＫ＊は、次の脂肪酸側鎖：
−γＥ−γＥ−γＥ−γＥ−ＣＯ−（ＣＨ２）１８−ＣＯＯＨ
で化学的に修飾されており；
Ｃ末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される）（配列番号１１）。
【０１１５】
Ｘ１ＩＶＬＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＬＥＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＫ＊ＴＮＡＱＩＬＡＱＶ−ＮＨ２
（式中、Ｘ１は、メチル化により修飾されたＩ残基のＮ末端を有し；
２９位のＫ＊は、次の脂肪酸側鎖：
−γＥ−γＥ−（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）−γＥ−γＥ−ＣＯ−（ＣＨ２）１８−ＣＯＯＨ
で化学的に修飾され；
Ｃ末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される）（配列番号１２）。
【０１１６】
Ｘ１ＩＶＬＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＬＥＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＫ＊ＴＮＡＱＩＬＡＱＶ−ＮＨ２
（式中、Ｘ１は、メチル化により修飾されたＩ残基のＮ末端を有し；
２９位のＫ＊は、次の脂肪酸側鎖：
−γＥ−γＥ−（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−γＥ−γＥ−ＣＯ−（ＣＨ２）１８−ＣＯＯＨ
で化学的に修飾され；
Ｃ末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される）（配列番号１３）。
【０１１７】
Ｘ１ＩＶＬＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＬＥＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＫ＊ＴＮＡＱＩＬＡＱＶ−ＮＨ２
（式中、Ｘ１は、メチル化により修飾されたＩ残基のＮ末端を有し；
２９位のＫ＊は、次の脂肪酸側鎖：
−γＥ−（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）−γＥ−γＥ−ＣＯ−（ＣＨ２）１８−ＣＯＯＨ
で化学的に修飾され；
Ｃ末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される）（配列番号１４）。
【０１１８】
実施例９
本発明の次の化合物を、実施例４について上で記載したのと同様に合成する。以下に示す構造は、標準的な１文字アミノ酸コードを含有する。次の化合物または合成分子の全てが、式ＩＩＩの範囲にある。これらの化合物の純度を、分析的逆相ＨＰＬＣにより試験し、本明細書で概説した方法で、ＬＣ／ＭＳを使用して、同一性を確認した。
【０１１９】
ＩＶＬＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＫ＊ＬＬＥＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＴＴＮＡＲＩＬＡＲＶ−ＮＨ２
（式中、１４位のＫ＊は、Ｋ側鎖のイプシロン−アミノ基が、−γＥ−ＣＯ−（ＣＨ２）１４−ＣＨ３基と結合するように化学的に修飾され；
Ｃ末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される）（配列番号２１）。
【０１２０】
この配列は、式ＩＩＩ（式中、この特定の実施形態において、Ｘ１は、修飾されていない残基であり、Ｘ２はＬであり、Ｘ３はＬであり、Ｘ４はＲであり、Ｘ７はＴであり、Ｘ８はＲであり、Ｘ５は、１つのγＥ残基であり、Ｘ６は、Ｃ１６モノ脂肪酸であり、Ｋ＊残基は、１４位の本来のアミノ酸を置換している）の範囲にある。
【０１２１】
ＩＶＬＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＫ＊ＬＥＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＴＴＮＡＲＩＬＡＲＶ−ＮＨ２
（式中、１５位のＫ＊は、Ｋ側鎖のイプシロン−アミノ基が、−γＥ−ＣＯ−（ＣＨ２）１４−ＣＨ３基と結合するように化学的に修飾され；
Ｃ末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される）（配列番号２２）。
【０１２２】
この配列は、式ＩＩＩ（式中、この特定の実施形態において、Ｘ１は、修飾されていない残基であり、Ｘ２はＬであり、Ｘ３はＬであり、Ｘ４はＲであり、Ｘ７はＴであり、Ｘ８はＲであり、Ｘ５は、１つのγＥ残基であり、Ｘ６は、Ｃ１６モノ脂肪酸であり、Ｋ＊残基は、１５位の本来のアミノ酸を置換している）の範囲にある。
【０１２３】
ＩＶＬＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＬＫ＊ＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＴＴＮＡＲＩＬＡＲＶ−ＮＨ２
（式中、１７位のＫ＊は、Ｋ側鎖のイプシロン−アミノ基が、−γＥ−ＣＯ−（ＣＨ２）１４−ＣＨ３基と結合するように化学的に修飾され；
Ｃ末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される）（配列番号２３）。
【０１２４】
この配列は、式ＩＩＩ（式中、この特定の実施形態において、Ｘ１は、修飾されていない残基であり、Ｘ２はＬであり、Ｘ３はＬであり、Ｘ４はＲであり、Ｘ７はＴであり、Ｘ８はＲであり、Ｘ５は、１つのγＥ残基であり、Ｘ６は、Ｃ１６モノ脂肪酸であり、Ｋ＊残基は、１７位の本来のアミノ酸を置換している）の範囲にある。
【０１２５】
ＩＶＬＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＬＥＱＫ＊ＫＱＥＫＥＫＱＱＡＴＴＮＡＲＩＬＡＲＶ−ＮＨ２
（式中、１９位のＫ＊は、Ｋ側鎖のイプシロン−アミノ基が、−γＥ−ＣＯ−（ＣＨ２）１４−ＣＨ３基と結合するように化学的に修飾され；
Ｃ末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される）（配列番号２４）。
【０１２６】
この配列は、式ＩＩＩ（式中、この特定の実施形態において、Ｘ１は、修飾されていない残基であり、Ｘ２はＬであり、Ｘ３はＬであり、Ｘ４はＲであり、Ｘ７はＴであり、Ｘ８はＲであり、Ｘ５は、１つのγＥ残基であり、Ｘ６は、Ｃ１６モノ脂肪酸であり、Ｋ＊残基は、１９位の本来のアミノ酸を置換している）の範囲にある。
【０１２７】
ＩＶＬＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＬＥＱＥＫ＊ＱＥＫＥＫＱＱＡＴＴＮＡＲＩＬＡＲＶ−ＮＨ２
（式中、２０位のＫ＊は、Ｋ側鎖のイプシロン−アミノ基が、−γＥ−ＣＯ−（ＣＨ２）１４−ＣＨ３基と結合するように化学的にされ；
Ｃ末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される）（配列番号２５）。
【０１２８】
この配列は、式ＩＩＩ（式中、この特定の実施形態において、Ｘ１は、修飾されていない残基であり、Ｘ２はＬであり、Ｘ３はＬであり、Ｘ４はＲであり、Ｘ７はＴであり、Ｘ８はＲであり、Ｘ５は、１つのγＥ残基であり、Ｘ６は、Ｃ１６モノ脂肪酸であり、Ｋ＊残基は、２０位の本来のアミノ酸を置換している）の範囲にある。
【０１２９】
ＩＶＬＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＬＥＱＥＫＫ＊ＥＫＥＫＱＱＡＴＴＮＡＲＩＬＡＲＶ−ＮＨ２
（式中、２１位のＫ＊は、Ｋ側鎖のイプシロン−アミノ基が、−γＥ−ＣＯ−（ＣＨ２）１４−ＣＨ３基と結合するように化学的に修飾され；
Ｃ末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される）（配列番号２６）。
【０１３０】
この配列は、式ＩＩＩ（式中、この特定の実施形態において、Ｘ１は、修飾されていない残基であり、Ｘ２はＬであり、Ｘ３はＬであり、Ｘ４はＲであり、Ｘ７はＴであり、Ｘ８はＲであり、Ｘ５は、１つのγＥ残基であり、Ｘ６は、Ｃ１６モノ脂肪酸であり、Ｋ＊残基は、２１位の本来のアミノ酸を置換している）の範囲にある。
【０１３１】
ＩＶＬＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＬＥＱＥＫＱＫ＊ＫＥＫＱＱＡＴＴＮＡＲＩＬＡＲＶ−ＮＨ２
（式中、２２位のＫ＊は、Ｋ側鎖のイプシロン−アミノ基が、−γＥ−ＣＯ−（ＣＨ２）１４−ＣＨ３基と結合するように化学的に修飾され；
Ｃ末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される）（配列番号２７）。
【０１３２】
この配列は、式ＩＩＩ（式中、この特定の実施形態において、Ｘ１は、修飾されていない残基であり、Ｘ２はＬであり、Ｘ３はＬであり、Ｘ４はＲであり、Ｘ７はＴであり、Ｘ８はＲであり、Ｘ５は、１つのγＥ残基であり、Ｘ６は、Ｃ１６モノ脂肪酸であり、Ｋ＊残基は、２２位の本来のアミノ酸を置換している）の範囲にある。
【０１３３】
ＩＶＬＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＬＥＱＥＫＱＥＫ＊ＥＫＱＱＡＴＴＮＡＲＩＬＡＲＶ−ＮＨ２
（式中、２３位のＫ＊は、Ｋ側鎖のイプシロン−アミノ基が、−γＥ−ＣＯ−（ＣＨ２）１４−ＣＨ３基と結合するように化学的に修飾され；
Ｃ末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される）（配列番号２８）。
【０１３４】
この配列は、式ＩＩＩ（式中、この特定の実施形態において、Ｘ１は、修飾されていない残基であり、Ｘ２はＬであり、Ｘ３はＬであり、Ｘ４はＲであり、Ｘ７はＴであり、Ｘ８はＲであり、Ｘ５は、１つのγＥ残基であり、Ｘ６は、Ｃ１６モノ脂肪酸であり、Ｋ＊残基は、２３位の本来のアミノ酸を置換している）の範囲にある。
【０１３５】
ＩＶＬＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＬＥＱＥＫＱＥＫＫ＊ＫＱＱＡＴＴＮＡＲＩＬＡＲＶ−ＮＨ２
（式中、２４位のＫ＊は、Ｋ側鎖のイプシロン−アミノ基が、−γＥ−ＣＯ−（ＣＨ２）１４−ＣＨ３基と結合するように化学的に修飾され；
Ｃ末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される）（配列番号２９）。
【０１３６】
この配列は、式ＩＩＩ（式中、この特定の実施形態において、Ｘ１は、修飾されていない残基であり、Ｘ２はＬであり、Ｘ３はＬであり、Ｘ４はＲであり、Ｘ７はＴであり、Ｘ８はＲであり、Ｘ５は、１つのγＥ残基であり、Ｘ６は、Ｃ１６モノ脂肪酸であり、Ｋ＊残基は、２４位の本来のアミノ酸を置換している）の範囲にある。
【０１３７】
ＩＶＬＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＬＥＱＥＫＱＥＫＥＫ＊ＱＱＡＴＴＮＡＲＩＬＡＲＶ−ＮＨ２
（式中、２５位のＫ＊は、Ｋ側鎖のイプシロン−アミノ基が、−γＥ−ＣＯ−（ＣＨ２）１４−ＣＨ３基と結合するように化学的に修飾され；
Ｃ末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される）（配列番号３０）。
【０１３８】
この配列は、式ＩＩＩ（式中、この特定の実施形態において、Ｘ１は、修飾されていない残基であり、Ｘ２はＬであり、Ｘ３はＬであり、Ｘ４はＲであり、Ｘ７はＴであり、Ｘ８はＲであり、Ｘ５は、１つのγＥ残基であり、Ｘ６は、Ｃ１６モノ脂肪酸であり、Ｋ＊残基は、２５位の本来のアミノ酸を置換している）の範囲にある。
【０１３９】
ＩＶＬＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＬＥＱＥＫＱＥＫＥＫ＊ＱＱＡＴＴＮＡＲＩＬＡＲＶ−ＮＨ２
（式中、２５位のＫ＊は、Ｋ側鎖のイプシロン−アミノ基が、−γＥ−γＥ−ＣＯ−（ＣＨ２）１４−ＣＨ３基と結合するように化学的に修飾され；
Ｃ末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される）（配列番号３１）。
【０１４０】
この配列は、式ＩＩＩ（式中、この特定の実施形態において、Ｘ１は、修飾されていない残基であり、Ｘ２はＬであり、Ｘ３はＬであり、Ｘ４はＲであり、Ｘ７はＴであり、Ｘ８はＲであり、Ｘ５は、２つのγＥ残基であり、Ｘ６は、Ｃ１６モノ脂肪酸であり、Ｋ＊残基は、２５位の本来のアミノ酸を置換している）の範囲にある。
【０１４１】
ＩＶＬＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＬＥＱＥＫＱＥＫＥＫ＊ＱＱＡＴＴＮＡＲＩＬＡＲＶ−ＮＨ２
（式中、２５位のＫ＊は、Ｋ側鎖のイプシロン−アミノ基が、−（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）−γＥ−ＣＯ−（ＣＨ２）１４−ＣＨ３基と結合するように化学的に修飾され；
Ｃ末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される）（配列番号３２）。
【０１４２】
この配列は、式ＩＩＩ（式中、この特定の実施形態において、Ｘ１は、修飾されていない残基であり、Ｘ２はＬであり、Ｘ３はＬであり、Ｘ４はＲであり、Ｘ７はＴであり、Ｘ８はＲであり、Ｘ５は、１つのγＥ残基と１つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）基の組み合わせであり、Ｘ６は、Ｃ１６モノ脂肪酸であり、Ｋ＊残基は、２５位の本来のアミノ酸を置換している）の範囲にある。
【０１４３】
ＩＶＬＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＬＥＱＥＫＱＥＫＥＫＫ＊ＱＡＴＴＮＡＲＩＬＡＲＶ−ＮＨ２
（式中、２６位のＫ＊は、Ｋ側鎖のイプシロン−アミノ基が、−γＥ−ＣＯ−（ＣＨ２）１４−ＣＨ３基と結合するように化学的に修飾され；
Ｃ末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される）（配列番号３３）。
【０１４４】
この配列は、式ＩＩＩ（式中、この特定の実施形態において、Ｘ１は、修飾されていない残基であり、Ｘ２はＬであり、Ｘ３はＬであり、Ｘ４はＲであり、Ｘ７はＴであり、Ｘ８はＲであり、Ｘ５は、１つのγＥ残基であり、Ｘ６は、Ｃ１６モノ脂肪酸であり、Ｋ＊残基は、２６位の本来のアミノ酸を置換している）の範囲にある。
【０１４５】
ＩＶＬＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＬＥＱＥＫＱＥＫＥＫＫ＊ＱＡＴＴＮＡＲＩＬＡＲＶ−ＮＨ２
（式中、２６位のＫ＊は、Ｋ側鎖のイプシロン−アミノ基が、−γＥ−γＥ−ＣＯ−（ＣＨ２）１４−ＣＨ３基と結合するように化学的に修飾され；
Ｃ末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される）（配列番号３４）。
【０１４６】
この配列は、式ＩＩＩ（式中、この特定の実施形態において、Ｘ１は、修飾されていない残基であり、Ｘ２はＬであり、Ｘ３はＬであり、Ｘ４はＲであり、Ｘ７はＴであり、Ｘ８はＲであり、Ｘ５は、２つのγＥ残基であり、Ｘ６は、Ｃ１６モノ脂肪酸であり、Ｋ＊残基は、２６位の本来のアミノ酸を置換している）の範囲にある。
【０１４７】
ＩＶＬＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＬＥＱＥＫＱＥＫＥＫＱＫ＊ＡＴＴＮＡＲＩＬＡＲＶ−ＮＨ２
（式中、２７位のＫ＊は、Ｋ側鎖のイプシロン−アミノ基が、−γＥ−ＣＯ−（ＣＨ２）１４−ＣＨ３基と結合するように化学的に修飾され；
Ｃ末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される）（配列番号３５）。
【０１４８】
この配列は、式ＩＩＩ（式中、この特定の実施形態において、Ｘ１は、修飾されていない残基であり、Ｘ２はＬであり、Ｘ３はＬであり、Ｘ４はＲであり、Ｘ７はＴであり、Ｘ８はＲであり、Ｘ５は、１つのγＥ残基であり、Ｘ６は、Ｃ１６モノ脂肪酸であり、Ｋ＊残基は、２７位の本来のアミノ酸を置換している）の範囲にある。
【０１４９】
ＩＶＬＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＬＥＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＫ＊ＴＴＮＡＲＩＬＡＲＶ−ＮＨ２
（式中、２８位のＫ＊は、Ｋ側鎖のイプシロン−アミノ基が、−γＥ−ＣＯ−（ＣＨ２）１４−ＣＨ３基と結合するように化学的に修飾され；
Ｃ末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される）（配列番号３６）。
【０１５０】
この配列は、式ＩＩＩ（式中、この特定の実施形態において、Ｘ１は、修飾されていない残基であり、Ｘ２はＬであり、Ｘ３はＬであり、Ｘ４はＲであり、Ｘ７はＴであり、Ｘ８はＲであり、Ｘ５は、１つのγＥ残基であり、Ｘ６は、Ｃ１６モノ脂肪酸であり、Ｋ＊残基は、２８位の本来のアミノ酸を置換している）の範囲にある。
【０１５１】
ＩＶＬＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＬＥＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＫ＊ＴＮＡＲＩＬＡＲＶ−ＮＨ２
（式中、２９位のＫ＊は、Ｋ側鎖のイプシロン−アミノ基が、−γＥ−ＣＯ−（ＣＨ２）１４−ＣＨ３基と結合するように化学的に修飾され；
Ｃ末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される）（配列番号３７）。
【０１５２】
この配列は、式ＩＩＩ（式中、この特定の実施形態において、Ｘ１は、修飾されていない残基であり、Ｘ２はＬであり、Ｘ３はＬであり、Ｘ４はＲであり、Ｘ７はＴであり、Ｘ８はＲであり、Ｘ５は、１つのγＥ残基であり、Ｘ６は、Ｃ１６モノ脂肪酸であり、Ｋ＊残基は、２９位の本来のアミノ酸を置換している）の範囲にある。
【０１５３】
ＩＶＬＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＬＥＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＫ＊ＴＮＡＲＩＬＡＲＶ−ＮＨ２
（式中、２９位のＫ＊は、Ｋ側鎖のイプシロン−アミノ基が、−γＥ−γＥ−ＣＯ−（ＣＨ２）１４−ＣＨ３基と結合するように化学的に修飾され；
Ｃ末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される）（配列番号３８）。
【０１５４】
この配列は、式ＩＩＩ（式中、この特定の実施形態において、Ｘ１は、修飾されていない残基であり、Ｘ２はＬであり、Ｘ３はＬであり、Ｘ４はＲであり、Ｘ７はＴであり、Ｘ８はＲであり、Ｘ５は、２つのγＥ残基であり、Ｘ６は、Ｃ１６モノ脂肪酸であり、Ｋ＊残基は、２９位の本来のアミノ酸を置換している）の範囲にある。
【０１５５】
ＩＶＬＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＬＥＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＴＫ＊ＮＡＲＩＬＡＲＶ−ＮＨ２
（式中、３０位のＫ＊は、Ｋ側鎖のイプシロン−アミノ基が、−γＥ−ＣＯ−（ＣＨ２）１４−ＣＨ３基と結合するように化学的に修飾され；
Ｃ末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される）（配列番号３９）。
【０１５６】
この配列は、式ＩＩＩ（式中、この特定の実施形態において、Ｘ１は、修飾されていない残基であり、Ｘ２はＬであり、Ｘ３はＬであり、Ｘ４はＲであり、Ｘ８はＲであり、Ｘ５は、１つのγＥ残基であり、Ｘ６は、Ｃ１６モノ脂肪酸であり、Ｋ＊残基は、３０位の本来のアミノ酸（例えば、Ｘ７）を置換している）の範囲にある。
【０１５７】
ＩＶＬＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＫ＊ＬＬＥＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＴＴＮＡＱＩＬＡＨＶ−ＮＨ２
（式中、１４位のＫ＊は、Ｋ側鎖のイプシロン−アミノ基が、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−γＥ−γＥ−ＣＯ−（ＣＨ２）１６−ＣＯＯＨ基と結合するように化学的に修飾され；
Ｃ末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される）（配列番号４０）。
【０１５８】
この配列は、式ＩＩＩ（式中、この特定の実施形態において、Ｘ１は、修飾されていない残基であり、Ｘ２はＬであり、Ｘ３はＬであり、Ｘ４はＱであり、Ｘ７はＴであり、Ｘ８はＨであり、Ｘ５は、２つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）基と２つのγＥ残基の組み合わせであり、Ｘ６は、Ｃ１８ジ脂肪酸であり、Ｋ＊残基は、１４位の本来のアミノ酸を置換している）の範囲にある。
【０１５９】
ＩＶＬＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＫ＊ＬＥＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＴＴＮＡＱＩＬＡＨＶ−ＮＨ２
（式中、１５位のＫ＊は、Ｋ側鎖のイプシロン−アミノ基が、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−γＥ−γＥ−ＣＯ−（ＣＨ２）１６−ＣＯＯＨ基と結合するように化学的に修飾され；
Ｃ末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される）（配列番号４１）。
【０１６０】
この配列は、式ＩＩＩ（式中、この特定の実施形態において、Ｘ１は、修飾されていない残基であり、Ｘ２はＬであり、Ｘ３はＬであり、Ｘ４はＱであり、Ｘ７はＴであり、Ｘ８はＨであり、Ｘ５は、２つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）基と２つのγＥ残基の組み合わせであり、Ｘ６は、Ｃ１８ジ脂肪酸であり、Ｋ＊残基は、１５位の本来のアミノ酸を置換している）の範囲にある。
【０１６１】
ＩＶＬＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＫ＊ＥＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＴＴＮＡＱＩＬＡＨＶ−ＮＨ２
（式中、１６位のＫ＊は、Ｋ側鎖のイプシロン−アミノ基が、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−γＥ−γＥ−ＣＯ−（ＣＨ２）１６−ＣＯＯＨ基と結合するように化学的に修飾され；
Ｃ末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される）（配列番号４２）。
【０１６２】
この配列は、式ＩＩＩ（式中、この特定の実施形態において、Ｘ１は、修飾されていない残基であり、Ｘ２はＬであり、Ｘ４はＱであり、Ｘ７はＴであり、Ｘ８はＨであり、Ｘ５は、２つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）基と２つのγＥ残基の組み合わせであり、Ｘ６は、Ｃ１８ジ脂肪酸であり、Ｋ＊残基は、１６位の本来のアミノ酸（例えば、Ｘ３）を置換している）の範囲にある。
【０１６３】
ＩＶＬＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＬＫ＊ＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＴＴＮＡＱＩＬＡＨＶ−ＮＨ２
（式中、１７位のＫ＊は、Ｋ側鎖のイプシロン−アミノ基が、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−γＥ−γＥ−ＣＯ−（ＣＨ２）１６−ＣＯＯＨ基と結合するように化学的に修飾され；
Ｃ末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される）（配列番号４３）。
【０１６４】
この配列は、式ＩＩＩ（式中、この特定の実施形態において、Ｘ１は、修飾されていない残基であり、Ｘ２はＬであり、Ｘ３はＬであり、Ｘ４はＱであり、Ｘ７はＴであり、Ｘ８はＨであり、Ｘ５は、２つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）基と２つのγＥ残基の組み合わせであり、Ｘ６は、Ｃ１８ジ脂肪酸であり、Ｋ＊残基は、１７位の本来のアミノ酸を置換している）の範囲にある。
【０１６５】
ＩＶＬＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＬＥＫ＊ＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＴＴＮＡＱＩＬＡＨＶ−ＮＨ２
（式中、１８位のＫ＊は、Ｋ側鎖のイプシロン−アミノ基が、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−γＥ−γＥ−ＣＯ−（ＣＨ２）１６−ＣＯＯＨ基と結合するように化学的に修飾され；
Ｃ末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される）（配列番号４４）。
【０１６６】
この配列は、式ＩＩＩ（式中、この特定の実施形態において、Ｘ１は、修飾されていない残基であり、Ｘ２はＬであり、Ｘ３はＬであり、Ｘ４はＱであり、Ｘ７はＴであり、Ｘ８はＨであり、Ｘ５は、２つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）基と２つのγＥ残基の組み合わせであり、Ｘ６は、Ｃ１８ジ脂肪酸であり、Ｋ＊残基は、１８位の本来のアミノ酸を置換している）の範囲にある。
【０１６７】
ＩＶＬＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＬＥＱＥＫＫ＊ＥＫＥＫＱＱＡＴＴＮＡＱＩＬＡＨＶ−ＮＨ２
（式中、２１位のＫ＊は、Ｋ側鎖のイプシロン−アミノ基が、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−γＥ−γＥ−ＣＯ−（ＣＨ２）１６−ＣＯＯＨ基と結合するように化学的に修飾され；
Ｃ末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される）（配列番号４５）。
【０１６８】
この配列は、式ＩＩＩ（式中、この特定の実施形態において、Ｘ１は、修飾されていない残基であり、Ｘ２はＬであり、Ｘ３はＬであり、Ｘ４はＱであり、Ｘ７はＴであり、Ｘ８はＨであり、Ｘ５は、２つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）基と２つのγＥ残基の組み合わせであり、Ｘ６は、Ｃ１８ジ脂肪酸であり、Ｋ＊残基は、２１位の本来のアミノ酸を置換している）の範囲にある。
【０１６９】
ＩＶＬＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＬＥＱＥＫＱＥＫＥＫ＊ＱＱＡＴＴＮＡＱＩＬＡＨＶ−ＮＨ２
（式中、２５位のＫ＊は、Ｋ側鎖のイプシロン−アミノ基が、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−γＥ−γＥ−ＣＯ−（ＣＨ２）１６−ＣＯＯＨ基と結合するように化学的に修飾され；
Ｃ末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される）（配列番号４６）。
【０１７０】
この配列は、式ＩＩＩ（式中、この特定の実施形態において、Ｘ１は、修飾されていない残基であり、Ｘ２はＬであり、Ｘ３はＬであり、Ｘ４はＱであり、Ｘ７はＴであり、Ｘ８はＨであり、Ｘ５は、２つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）基と２つのγＥ残基の組み合わせであり、Ｘ６は、Ｃ１８ジ脂肪酸であり、Ｋ＊残基は、２５位の本来のアミノ酸を置換している）の範囲にある。
【０１７１】
ＩＶＬＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＬＥＱＥＫＱＥＫＥＫＫ＊ＱＡＴＴＮＡＱＩＬＡＨＶ−ＮＨ２
（式中、２６位のＫ＊は、Ｋ側鎖のイプシロン−アミノ基が、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−γＥ−γＥ−ＣＯ−（ＣＨ２）１６−ＣＯＯＨ基と結合するように化学的に修飾され；
Ｃ末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される）（配列番号４７）。
【０１７２】
この配列は、式ＩＩＩ（式中、この特定の実施形態において、Ｘ１は、修飾されていない残基であり、Ｘ２はＬであり、Ｘ３はＬであり、Ｘ４はＱであり、Ｘ７はＴであり、Ｘ８はＨであり、Ｘ５は、２つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）基と２つのγＥ残基の組み合わせであり、Ｘ６は、Ｃ１８ジ脂肪酸であり、Ｋ＊残基は、２６位の本来のアミノ酸を置換している）の範囲にある。
【０１７３】
ＩＶＬＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＬＥＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＫ＊ＴＮＡＱＩＬＡＨＶ−ＮＨ２
（式中、２９位のＫ＊は、Ｋ側鎖のイプシロン−アミノ基が、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−γＥ−γＥ−ＣＯ−（ＣＨ２）１６−ＣＯＯＨ基と結合するように化学的に修飾され；
Ｃ末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される）（配列番号４８）。
【０１７４】
この配列は、式ＩＩＩ（式中、この特定の実施形態において、Ｘ１は、修飾されていない残基であり、Ｘ２はＬであり、Ｘ３はＬであり、Ｘ４はＱであり、Ｘ７はＴであり、Ｘ８はＨであり、Ｘ５は、２つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）基と２つのγＥ残基の組み合わせであり、Ｘ６は、Ｃ１８ジ脂肪酸であり、Ｋ＊残基は、２９位の本来のアミノ酸を置換している）の範囲にある。
【０１７５】
ＩＶＬＳＬＤＶＰＩＫ＊ＬＬＱＩＬＬＥＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＴＴＮＡＱＩＬＡＱＶ−アミド
（式中、１０位のＫ＊は、Ｋ側鎖のイプシロン−アミノ基が、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−γＥ−γＥ−ＣＯ−（ＣＨ２）１６−ＣＯＯＨ基と結合するように化学的に修飾され；
Ｃ末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される）（配列番号４９）。
【０１７６】
この配列は、式ＩＩＩ（式中、この特定の実施形態において、Ｘ１は、修飾されていない残基であり、Ｘ２はＬであり、Ｘ３はＬであり、Ｘ４はＱであり、Ｘ７はＴであり、Ｘ８はＱであり、Ｘ５は、２つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）基と２つのγＥ残基の組み合わせであり、Ｘ６は、Ｃ１８ジ脂肪酸であり、Ｋ＊残基は、１０位の本来のアミノ酸を置換している）の範囲にある。
【０１７７】
ＩＶＬＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＬＫ＊ＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＴＴＮＡＱＩＬＡＱＶ−ＮＨ２
（式中、１７位のＫ＊は、Ｋ側鎖のイプシロン−アミノ基が、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−γＥ−γＥ−ＣＯ−（ＣＨ２）１６−ＣＯＯＨ基と結合するように化学的に修飾され；
Ｃ末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される）（配列番号５０）。
【０１７８】
この配列は、式ＩＩＩ（式中、この特定の実施形態において、Ｘ１は、修飾されていない残基であり、Ｘ２はＬであり、Ｘ３はＬであり、Ｘ４はＱであり、Ｘ７はＴであり、Ｘ８はＱであり、Ｘ５は、２つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）基と２つのγＥ残基の組み合わせであり、Ｘ６は、Ｃ１８ジ脂肪酸であり、Ｋ＊残基は、１７位の本来のアミノ酸を置換している）の範囲にある。
【０１７９】
ＩＶＬＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＬＥＱＥＫＱＥＫＥＫＫ＊ＱＡＴＴＮＡＱＩＬＡＱＶ−ＮＨ２
（式中、２６位のＫ＊は、Ｋ側鎖のイプシロン−アミノ基が、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−γＥ−γＥ−ＣＯ−（ＣＨ２）１６−ＣＯＯＨ基と結合するように化学的に修飾され；
Ｃ末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される）（配列番号５１）。
【０１８０】
この配列は、式ＩＩＩ（式中、この特定の実施形態において、Ｘ１は、修飾されていない残基であり、Ｘ２はＬであり、Ｘ３はＬであり、Ｘ４はＱであり、Ｘ７はＴであり、Ｘ８はＱであり、Ｘ５は、２つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）基と２つのγＥ残基の組み合わせであり、Ｘ６は、Ｃ１８ジ脂肪酸であり、Ｋ＊残基は、２６位の本来のアミノ酸を置換している）の範囲にある。
【０１８１】
ＩＶＬＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＬＥＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＫ＊ＴＮＡＱＩＬＡＱＶ−ＮＨ２
（式中、２９位のＫ＊は、Ｋ側鎖のイプシロン−アミノ基が、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−γＥ−γＥ−ＣＯ−（ＣＨ２）１６−ＣＯＯＨ基と結合するように化学的に修飾され；
Ｃ末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される）（配列番号５２）。
【０１８２】
この配列は、式ＩＩＩ（式中、この特定の実施形態において、Ｘ１は、修飾されていない残基であり、Ｘ２はＬであり、Ｘ３はＬであり、Ｘ４はＱであり、Ｘ７はＴであり、Ｘ８はＱであり、Ｘ５は、２つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）基と２つのγＥ残基の組み合わせであり、Ｘ６は、Ｃ１８ジ脂肪酸であり、Ｋ＊残基は、２９位の本来のアミノ酸を置換している）の範囲にある。
【０１８３】
ＩＶＬＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＬＫ＊ＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＴＥＮＡＱＩＬＡＱＶ−ＮＨ２
（式中、１７位のＫ＊は、Ｋ側鎖のイプシロン−アミノ基が、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−γＥ−γＥ−ＣＯ−（ＣＨ２）１６−ＣＯＯＨ基と結合するように化学的に修飾され；
Ｃ末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される）（配列番号５３）。
【０１８４】
この配列は、式ＩＩＩ（式中、この特定の実施形態において、Ｘ１は、修飾されていない残基であり、Ｘ２はＬであり、Ｘ３はＬであり、Ｘ４はＱであり、Ｘ７はＥであり、Ｘ８はＱであり、Ｘ５は、２つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）基と２つのγＥ残基の組み合わせであり、Ｘ６は、Ｃ１８ジ脂肪酸であり、Ｋ＊残基は、１７位の本来のアミノ酸を置換している）の範囲にある。
【０１８５】
ＩＶＬＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＬＥＱＥＫＱＥＫＥＫＫ＊ＱＡＴＥＮＡＱＩＬＡＱＶ−ＮＨ２
（式中、２６位のＫ＊は、Ｋ側鎖のイプシロン−アミノ基が、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−γＥ−γＥ−ＣＯ−（ＣＨ２）１６−ＣＯＯＨ基と結合するように化学的に修飾され；
Ｃ末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される）（配列番号５４）。
【０１８６】
この配列は、式ＩＩＩ（式中、この特定の実施形態において、Ｘ１は、修飾されていない残基であり、Ｘ２はＬであり、Ｘ３はＬであり、Ｘ４はＱであり、Ｘ７はＥであり、Ｘ８はＱであり、Ｘ５は、２つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）基と２つのγＥ残基の組み合わせであり、Ｘ６は、Ｃ１８ジ脂肪酸であり、Ｋ＊残基は、２６位の本来のアミノ酸を置換している）の範囲にある。
【０１８７】
ＩＶＬＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＬＥＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＫ＊ＥＮＡＱＩＬＡＱＶ−ＮＨ２
（式中、２９位のＫ＊は、Ｋ側鎖のイプシロン−アミノ基が、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−γＥ−γＥ−ＣＯ−（ＣＨ２）１６−ＣＯＯＨ基と結合するように化学的に修飾され；
Ｃ末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される）（配列番号５５）。
【０１８８】
この配列は、式ＩＩＩ（式中、この特定の実施形態において、Ｘ１は、修飾されていない残基であり、Ｘ２はＬであり、Ｘ３はＬであり、Ｘ４はＱであり、Ｘ７はＥであり、Ｘ８はＱであり、Ｘ５は、２つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）基と２つのγＥ残基の組み合わせであり、Ｘ６は、Ｃ１８ジ脂肪酸であり、Ｋ＊残基は、２９位の本来のアミノ酸を置換している）の範囲にある。
【０１８９】
ＩＶＬＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＬＥＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＫ＊ＥＮＡＱＩＬＡＱＶ−ＮＨ２
（式中、２９位のＫ＊は、Ｋ側鎖のイプシロン−アミノ基が、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−γＥ−ＣＯ−（ＣＨ２）１６−ＣＯＯＨ基と結合するように化学的に修飾され；
Ｃ末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される）（配列番号５６）。
【０１９０】
この配列は、式ＩＩＩ（式中、この特定の実施形態において、Ｘ１は、修飾されていない残基であり、Ｘ２はＬであり、Ｘ３はＬであり、Ｘ４はＱであり、Ｘ７はＥであり、Ｘ８はＱであり、Ｘ５は、２つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）基と１つのγＥ残基の組み合わせであり、Ｘ６は、Ｃ１８ジ脂肪酸であり、Ｋ＊残基は、２９位の本来のアミノ酸を置換している）の範囲にある。
【０１９１】
Ｘ１ＩＶＬＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＬＥＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＫ＊ＥＮＡＥＩＬＡＱＶ−ＮＨ２
（式中、Ｘ１は、メチル化により修飾されたＩ残基のＮ末端を有し；
（式中、２９位のＫ＊は、Ｋ側鎖のイプシロン−アミノ基が、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）−γＥ−γＥ−ＣＯ−（ＣＨ２）１８−ＣＯＯＨ基と結合するように化学的に修飾され；
Ｃ末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される）（配列番号５７）。
【０１９２】
この配列は、式ＩＩＩ（式中、この特定の実施形態において、Ｘ１は、Ｉ残基がＮ末端でメチル化されていることを表し、Ｘ２はＬであり、Ｘ３はＬであり、Ｘ４はＥであり、Ｘ７はＥであり、Ｘ８はＱであり、Ｘ５は、１つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）基と２つのγＥ残基の組み合わせであり、Ｘ６は、Ｃ２０ジ脂肪酸であり、Ｋ＊残基は、２９位の本来のアミノ酸を置換している）の範囲にある。
【０１９３】
Ｘ１ＩＶＬＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＬＥＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＫ＊ＥＮＡＥＩＬＡＱＶ−ＮＨ２
（式中、Ｘ１は、メチル化により修飾されたＩ残基のＮ末端を有し；
（式中、２９位のＫ＊は、Ｋ側鎖のイプシロン−アミノ基が、γＥ−γＥ−ＣＯ−（ＣＨ２）１８−ＣＯＯＨ基と結合するように化学的に修飾され；
Ｃ末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される）（配列番号５８）。
【０１９４】
この配列は、式ＩＩＩ（式中、この特定の実施形態において、Ｘ１は、Ｉ残基がＮ末端でメチル化されていることを表し、Ｘ２はＬであり、Ｘ３はＬであり、Ｘ４はＥであり、Ｘ７はＥであり、Ｘ８はＱであり、Ｘ５は、２つのγＥ残基であり、Ｘ６は、Ｃ２０ジ脂肪酸であり、Ｋ＊残基は、２９位の本来のアミノ酸を置換している）の範囲にある。
【０１９５】
Ｘ１ＩＶＬＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＬＥＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＫ＊ＥＮＡＥＩＬＡＱＶ−ＮＨ２
（式中、Ｘ１は、メチル化により修飾されたＩ残基のＮ末端を有し；
（式中、２９位のＫ＊は、Ｋ側鎖のイプシロン−アミノ基が、γＥ−（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）−γＥ−γＥ−ＣＯ−（ＣＨ２）１８−ＣＯＯＨ基と結合するように化学的に修飾され；
Ｃ末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される）（配列番号５９）。
【０１９６】
この配列は、式ＩＩＩ（式中、この特定の実施形態において、Ｘ１は、Ｉ残基がＮ末端でメチル化されていることを表し、Ｘ２はＬであり、Ｘ３はＬであり、Ｘ４はＥであり、Ｘ７はＥであり、Ｘ８はＱであり、Ｘ５は、γＥ残基、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）基および次に２つのさらなるγＥ残基の組み合わせであり、Ｘ６は、Ｃ２０ジ脂肪酸であり、Ｋ＊残基は、２９位の本来のアミノ酸を置換している）の範囲にある。
【０１９７】
Ｘ１ＩＶＬＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＬＥＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＫ＊ＴＮＡＱＩＬＡＱＶ−ＮＨ２
（式中、Ｘ１は、メチル化により修飾されたＩ残基のＮ末端を有し；
（式中、２９位のＫ＊は、Ｋ側鎖のイプシロン−アミノ基が、γＥ−（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−γＥ−γＥ−ＣＯ−（ＣＨ２）１８−ＣＯＯＨ基と結合するように化学的に修飾され；
Ｃ末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される）（配列番号６０）。
【０１９８】
この配列は、式ＩＩＩ（式中、この特定の実施形態において、Ｘ１は、Ｉ残基がＮ末端でメチル化されていることを表し、Ｘ２はＬであり、Ｘ３はＬであり、Ｘ４はＱであり、Ｘ７はＴであり、Ｘ８はＱであり、Ｘ５は、γＥ残基、２つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）基および次に２つのさらなるγＥ残基の組み合わせであり、Ｘ６は、Ｃ２０ジ脂肪酸であり、Ｋ＊残基は、２９位の本来のアミノ酸を置換している）の範囲にある。
【０１９９】
Ｘ１ＩＶＬＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＬＥＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＫ＊ＴＮＡＱＩＬＡＱＶ−ＮＨ２
（式中、Ｘ１は、メチル化により修飾されたＩ残基のＮ末端を有し；
（式中、２９位のＫ＊は、Ｋ側鎖のイプシロン−アミノ基が、γＥ−（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）−γＥ−γＥ−ＣＯ−（ＣＨ２）１８−ＣＯＯＨ基と結合するように化学的に修飾され；
Ｃ末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される）（配列番号６１）。
【０２００】
この配列は、式ＩＩＩ（式中、この特定の実施形態において、Ｘ１は、Ｉ残基がＮ末端でメチル化されていることを表し、Ｘ２はＬであり、Ｘ３はＬであり、Ｘ４はＱであり、Ｘ７はＴであり、Ｘ８はＱであり、Ｘ５は、γＥ残基、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）基および次に２つのさらなるγＥ残基の組み合わせであり、Ｘ６は、Ｃ２０ジ脂肪酸であり、Ｋ＊残基は、２９位の本来のアミノ酸を置換している）の範囲にある。
【０２０１】
Ｘ１ＩＶＬＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＬＥＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＫ＊ＴＮＡＱＩＬＡＱＶ−ＮＨ２
（式中、Ｘ１は、メチル化により修飾されたＩ残基のＮ末端を有し；
２９位のＫ＊は、Ｋ側鎖のイプシロン−アミノ基が、γＥ−γＥ−（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−γＥ−γＥ−ＣＯ−（ＣＨ２）１８−ＣＯＯＨ基と結合するように化学的に修飾され；
Ｃ末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される）（配列番号６２）。
【０２０２】
この配列は、式ＩＩＩ（式中、この特定の実施形態において、Ｘ１は、Ｉ残基がＮ末端でメチル化されていることを表し、Ｘ２はＬであり、Ｘ３はＬであり、Ｘ４はＱであり、Ｘ７はＴであり、Ｘ８はＱであり、Ｘ５は、２つのγＥ残基、２つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）基および次に２つのさらなるγＥ残基の組み合わせであり、Ｘ６は、Ｃ２０ジ脂肪酸であり、Ｋ＊残基は、２９位の本来のアミノ酸を置換している）の範囲にある。
【０２０３】
Ｘ１ＩＶＬＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＬＥＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＫ＊ＴＮＡＱＩＬＡＱＶ−ＮＨ２
（式中、Ｘ１は、メチル化により修飾されたＩ残基のＮ末端を有し；
２９位のＫ＊は、Ｋ側鎖のイプシロン−アミノ基が、γＥ−γＥ−（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）−γＥ−γＥ−ＣＯ−（ＣＨ２）１８−ＣＯＯＨ基と結合するように化学的に修飾され；
Ｃ末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される）（配列番号６３）。
【０２０４】
この配列は、式ＩＩＩ（式中、この特定の実施形態において、Ｘ１は、Ｉ残基がＮ末端でメチル化されていることを表し、Ｘ２はＬであり、Ｘ３はＬであり、Ｘ４はＱであり、Ｘ７はＴであり、Ｘ８はＱであり、Ｘ５は、２つのγＥ残基、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）基および次に２つのさらなるγＥ残基の組み合わせであり、Ｘ６は、Ｃ２０ジ脂肪酸であり、Ｋ＊残基は、２９位の本来のアミノ酸を置換している）の範囲にある。
【０２０５】
Ｘ１ＩＶＬＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＬＥＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＫ＊ＴＮＡＱＩＬＡＱＶ−ＮＨ２
（式中、Ｘ１は、メチル化により修飾されたＩ残基のＮ末端を有し；
２９位のＫ＊は、Ｋ側鎖のイプシロン−アミノ基が、γＥ−γＥ−γＥ−γＥ−ＣＯ−（ＣＨ２）１８−ＣＯＯＨ基と結合するように化学的に修飾され；
Ｃ末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される）（配列番号６４）。
【０２０６】
この配列は、式ＩＩＩ（式中、この特定の実施形態において、Ｘ１は、Ｉ残基がＮ末端でメチル化されていることを表し、Ｘ２はＬであり、Ｘ３はＬであり、Ｘ４はＱであり、Ｘ７はＴであり、Ｘ８はＱであり、Ｘ５は、４つのγＥ残基の組み合わせであり、Ｘ６は、Ｃ２０二酸二酸の脂肪酸であり、Ｋ＊残基は、２９位の本来のアミノ酸を置換している）の範囲にある。
【０２０７】
Ｘ１ＩＶＴＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＬＥＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＫ＊ＴＮＡＥＩＬＡＱＶ−ＮＨ２
（式中、Ｘ１は、メチル化により修飾されたＩ残基のＮ末端を有し；
（式中、２９位のＫ＊は、Ｋ側鎖のイプシロン−アミノ基が、γＥ−（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−γＥ−γＥ−ＣＯ−（ＣＨ２）１８−ＣＯＯＨ基と結合するように化学的に修飾され；
Ｃ末端のアミノ酸は、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される）（配列番号６６）。
【０２０８】
この配列は、式ＩＩＩ（式中、この特定の実施形態において、Ｘ１は、Ｉ残基がＮ末端でメチル化されていることを表し、Ｘ２はＴであり、Ｘ３はＬであり、Ｘ４はＥであり、Ｘ７はＴであり、Ｘ８はＱであり、Ｘ５は、γＥ残基、２つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）基および次に２つのさらなるγＥ残基の組み合わせであり、Ｘ６は、Ｃ２０ジ脂肪酸であり、Ｋ＊残基は、２９位の本来のアミノ酸を置換している）の範囲にある。
【０２０９】
上記の化合物を製造する方法に加えて、収束的合成も使用してよいことは、注意されるべきである。例えば、この収束的合成において、アシル化リジン側鎖が構築され、および／または得られる。このアシル化リジン側鎖フラグメントは、ｔ−ブチルエステルとして直交に保護された酸性フラグメント、またはペプチド合成において一般的に知られた他の保護基を有する。かかる合成方法は、下流のクロマトグラフィー要件を減らし得る、高純度≧９８％でアシル化側鎖を生成し得、もしかしたら改善された純度および増大したプロセス効率を導くと思われる。例えば、全ての線形構造において、アシル化リジン構成成分（すなわち、アミノ−エトキシ部分などを有する脂肪酸側鎖）は、典型的には、合成の最後に導入され、これにより、取り除くのに問題があり得る、より多数または少数のアミノ−エトキシ部分を有する不純物に限定されないが、その不純物のような、高レベルのプロセス不純物を生じ得る。収束的（本明細書において概説される）ストラテジーを使用することで、１つのミスが全体的なロスをもたらし得る、全ての線形合成構造ストラテジーのリスクを減らし得る。加えて、収束的合成アプローチを使用し、標準的な全ての線形構造に、比較可能な資源提供要件との供給鎖適応性を改善し得る。加えて、収束的合成ストラテジーはまた、ＣＯＰＳ（製品販売価格）を下げ、さらに頑強性を改善する手段でもあり得る。別の利点は、Ｎ末端のＮ−メチルイソロイシン残基が、大きなペプチドにとって頻繁に困難なカップリングであることであり得る。より小さなフラグメントへのＮ−メチルイソロイシンの取り込みは、場合により、このカップリング問題のリスクを減らす良好な手段であり得る。
【０２１０】
実施例４の化合物を例として使用すると、アシル化リジン側鎖はＣ末端に隣接し、収束的合成プロセスの戦略的な逆合成分岐点は、２８位のアラニン（Ａ）と２９位のリジン（Ｋ）の間であり得る。したがって、この「フラグメント」は、最後の９残基（最終Ｃ末端に至る）と共に２９位のリジン（およびその付随する側鎖）を含む。いくつかの実施形態において、この「フラグメント」は、Ｒｉｎｋ  ＡｍｉｄｅまたはＳｉｅｂｅｒ  Ａｍｉｄｅ樹脂上で生成された基本の親フラグメントであってもよい。別の逆合成の断絶は、１０位のグリシン（Ｇ）と１１位のロイシン（Ｌ）の間であってもよい。これらの配列のフラグメントの作製により、かかる配列が、ラセミ化の傾向を有しない（またはより低い傾向を有する）ことが確かになり得る。１８のアミノ酸（例えば、１１位の残基〜２８位のアラニン）の第３のフラグメントも生成され得る。この１８残基のフラグメントは、最初の１０のアミノ酸のフラグメント（例えば、Ｎ末端〜１０位のＧ）と共に、両方が例えば、２−ＣＴＣ樹脂により生成され得る。ペプチド保護基をそのまま離す間に、樹脂は直交で切断され得るので、２−ＣＴＣ樹脂が、しばしば、大抵のフラグメントの合成に好ましくあり得る。
【０２１１】
したがって、要約すると、次の実施例４の化合物の合成方法が、以下で提供される：
１）リジン（例えば、最終的に２９位のＫであるＫ）に結合している脂肪酸側鎖を構築する；
２）脂肪酸側鎖を有するリジン（例えば、最終的に２９位のＫであるＫ）で始まる１０のアミノ酸のフラグメントを構築し、最後のＶ残基の後のＣ末端の終わりに他のアミノ酸を加える；
３）１１位のＬで始まり、２８位のＡで終わる、１８のアミノ酸残基のフラグメントを構築する；
４）１位の修飾されたＩで始まり、１０位のＧで終わる、１０のアミノ酸のフラグメントを構築する；
５）ステップ３の１８の残基のフラグメントが、ステップ４の１０の残基（ｒｅｓｉｄｅ）のフラグメントに結合され得、次に、この２８の構築物が、ステップ２のフラグメント（側鎖を有する）に結合され得るか；あるいは、ステップ３の１８の残基のフラグメントが、テップ２の１０のアミノ酸のフラグメントに加えて結合され得、次に、この残基の構築物が、ステップ４のフラグメントに結合され得る。
【０２１２】
さらに、構築技術に基づきこの「フラグメント」を用いる利点の１つは、各フラグメントが、連続して、または同時に生成され得ることである。さらに、ペプチドのより小さいフラグメントは、精製するのが容易であり得、ときに、高純度を与える結晶形で単離することができる。同様に、フラグメントの１つにエラーが生じると、そのフラグメントのみが捨てられ、再生成されなければならない（むしろ、化合物全体を再生成しなければならない）。他の戦略的なフラグメント分岐点は、１８のアミノ酸の残基を生じるための非限定的にはフラグメント縮合のような、純度および効率をさらに改善することが可能である。
【０２１３】
いくつかの実施形態において、凍結乾燥が、化合物の可能性のある物理的特性の問題のリスクを潜在的に減らす手段と同等のストラテジーとして取り込まれてもよい。具体的には、化合物は、クロマトグラフィーを介して精製されることにより、構築されてもよい。精製されると、溶液は濃縮され、次に、凍結乾燥を介して固形物（例えば、乾燥粉末）として単離されてもよい。代替の実施形態において、固形物は、沈殿／濾過／乾燥／加湿方法を使用して、得られ、単離されてもよい。
【０２１４】
凍結乾燥は、保存または再構成用の固形ペプチド薬物製品の製造の最も一般に実施される（≧８０％）産業上の手段である。いくつかの実施形態において、沈殿の一番目の欠点は、頑強なプロセスを確実にするのに必要な、大規模な材料および設計空間の開発である。沈殿した化合物はまた、凝集する傾向にある高密度の粒子を含有してもよく、頻繁には、これらの沈殿した生成物は、標準的な溶解アッセイおよび／または薬物製品の処方設計でゆっくり溶解してもよい。他方、凍結乾燥により生成された広い表面積の生成物は、溶解アッセイおよび／または薬物製品の処方設計において最大の溶解率を確実にし得る。しかしながら、この方法は、大きい体積の製品にとってあまり高価でない傾向にあるので、沈殿生成物がまた使用されてもよい。
【０２１５】
他の実施形態において、本発明はまた、次のアミノ酸配列：
Ｘ１ＩＶＸ２ＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＸ３ＥＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＫＴＮＡＸ４ＩＬＡＱＶ−ＮＨ２
（式中、Ｘ１は、Ｎ末端でのアセチル化またはメチル化のいずれかにより修飾されているＩ残基を示し；
Ｘ２は、ＬまたはＴであり；
Ｘ３は、ＬまたはＩであり；
Ｘ４は、ＱまたはＥである）（配列番号１８）
を含む化合物に関する。
【０２１６】
この配列は、中間体として使用した。具体的には、この配列を中間体として使用して、本明細書において記載される化合物が構築されてもよい。この特定の方法において、この中間体での合成は、３８位のＶから始まり、Ｉ（Ｎ末端にアシルまたはＮ−メチル基のいずれかを有する）で終わる、（上で概説された方法での）固相上のものである。この配列が構築されると、直交する保護基が取り除かれるように、２９位のＫが脱保護される。次に、式−Ｘ５−Ｘ６の特定の基が、次に、２９位のＫ側鎖のイプシロン−アミノ基に加えられ得る。本明細書において概説される式−Ｘ５−Ｘ６の基の特定の側鎖のいずれかが使用さてもよい。式−Ｘ５−Ｘ６の基のかかる付加は、ペプチドが依然として固相に結合している間に、加えられてもよい。式−Ｘ５−Ｘ６の基の付加後、ペプチドは、樹脂から放出され、精製されてもよい。
【０２１７】
アッセイ
いくつかのアッセイにおける上で列挙した実施例のいくつかについての条件およびデータ：インビトロ機能および選択性、薬物動態、ＩＩ型糖尿病、筋萎縮症、慢性腎疾患（糖尿病性腎症、高血圧性腎症）、ならびに血圧を、以下で提供する。
【０２１８】
インビトロ機能および選択性
ＣＲＨＲアゴニスト活性を、細胞ベースのｃＡＭＰアッセイにおいて測定する。試験ペプチドの連続希釈液を、２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳおよび０．０５％ラクトアルブミン酵素的加水分解物（ＬＡＨ）を添加したハンクス平衡塩類溶液（ＨＢＳＳ、フェノールレッドを含まない）を含有するアッセイバッファー（「アッセイバッファー」）中で作製する。使用する最高濃度は、ヒトＣＲＨＲ２ｂにおいて１μＭから始まり、一方、１００μＭの開始濃度を、ヒトＣＲＨＲ１アッセイにおいて使用する。試験ペプチドの１〜３つの希釈液を、両方のアッセイにおいて使用する。
【０２１９】
受容体を過剰発現するチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞株を、ヒトＣＲＨＲ２ｂアッセイのため使用する。ＣＨＯ細胞を、１０％ウシ胎児血清を添加したＤＭＥＭにおいて３７℃において懸濁条件下で成長させ、ヒトＣＲＨＲ２ｂ（Ｇｅｎｂａｎｋ受託番号：ＡＦ０１１４０６．１）のｃＤＮＡ構築物で一過性に遺伝子導入する。遺伝子導入の４８時間後、細胞を遠心分離して、培地を取り除き、５％ＤＭＳＯを含有するウシ胎児血清において再懸濁する。それらを、低温凍結し、液体窒素中のバイアル（２０×１０６細胞／ｍｌ／バイアル）において保存する。アッセイの日に、細胞を融解し、２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳを添加した冷培地３０ｍｌにおいて再懸濁する。次に、細胞を遠心分離して、培地を取り除き、２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳを添加したＨＢＳＳで１回洗浄する。最終的に、最終の遠心分離の後、細胞をアッセイバッファーにおいて再懸濁する。各治療について、ヒトＣＲＨＲ２ｂアッセイにおいて、３００００つの細胞を使用する。
【０２２０】
内在性ヒトＣＲＨＲ１を発現する、ヒト網膜芽細胞腫細胞株Ｙ７９（ＡＴＣＣ番号ＨＴＢ−１８）を、ヒトＣＲＨＲ１アッセイにおいて使用する。細胞を、懸濁培養で、２０％ウシ胎児血清および１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳを含有するＲＰＭＩ  １６４０（Ｈｙｃｌｏｎｅ、番号ＳＨ３０２５５）において成長させる。細胞を遠心分離して、培地を取り除き、２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳを添加したＨＢＳＳで１回洗浄する。細胞を、アッセイバッファーにおいて再懸濁し、ヒトＣＲＨＲ１アッセイにおいて１治療当たり２０，０００細胞を使用する。
【０２２１】
細胞を、Ｃｏｓｔａｒ  ９６ウェル黒ポリスチレンハーフエリアＥＩＡ／ＲＩＡプレート（コーニング、コーニング、ニューヨーク州）に分注し、続いて、希釈したペプチドを、それぞれ体積２０μＬで加える。アゴニストにより誘導したｃＡＭＰレベルを、ＨＴＲＦ  ｃＡＭＰ  Ｄｙｎａｍｉｃ  ２キット（シスバイオ、ベッドフォード、マサチューセッツ州）を使用して検出する。３７℃で３０分間のインキュベーション後、製造元により記載される通り、アッセイを、ｄ２標識ｃＡＭＰ２０μＬ、続いて、クリプテート標識抗ｃＡＭＰ抗体２０μＬの添加を介した細胞溶解により停止させる。細胞内ｃＡＭＰ（アゴニスト刺激の結果として）は、抗体への結合についてｄ２標識ｃＡＭＰと競合する。ＨＴＲＦ検出を、３２０ｎｍで励起後の６２０および６６５での比率計算発光を測定することにより、Ｅｎｖｉｓｉｏｎプレートリーダー（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ  Ｌｉｆｅ  ａｎｄ  Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、ウォルサム、マサチューセッツ州）上で行う。
【０２２２】
変動する濃度の未標識ｃＡＭＰで行った同じアッセイから得た標準曲線を使用して、データを、ピコモルのｃＡＭＰに変換する。細胞の最大活性化のパーセントを、ヒトＣＲＨＲ２ｂについて１μＭヒトＵＣＮ２、またはヒトＣＲＨＲ１アッセイについて１μＭヒトＵＣＮ１により産生されるｃＡＭＰの量を比較することにより、変換したピコモルｃＡＭＰデータを使用して計算する。データを、Ｆｉｔｔｉｎｇ  Ｔｏｏｌを使用して解析し、ＥＤ５０を計算する。表１において以下で示す数値は、平均値±ＳＥＭの後に複数実行の平均（丸括弧内に示す実行数）を表す。
【０２２３】
【表１】
2019525919.tif 000009
【０２２４】
これらのデータは、実施例１〜７の化合物が、ｃＡＭＰアッセイにおいてＣＲＨＲ２アゴニスト活性を有することを示す。これらのデータは、実施例１〜７の化合物が、ＣＲＨＲ１よりＣＲＨＲ２について選択的であることをさらに示す。
【０２２５】
薬物動態
化合物の血漿濃度を、ＬＣ／ＭＳ方法により決定した。それぞれの方法により、未変化の化合物；ペプチドおよび結合時間の延長を測定した。それぞれのアッセイについて、内部標準（ＩＳ）として使用する、化合物および類似体を、アセトニトリルを使用して、１００％マウス、ラットまたはサル血漿（２５μｌ）から抽出する。２つの異なる相を、化合物との遠心分離の際に形成させ、ＩＳは上清相に位置した。上清のアリコート（８０μｌ）を、水（１５０μｌ）およびギ酸（２５μｌ）を含むＴｈｅｒｍｏ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｏｎ  Ｐｌａｔｅに移し、続いて、混合した。１０％ギ酸試料（１０μｌ）中の最終３１％アセトニトリルを、Ｓｕｐｅｌｃｏ  Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ＢＩＯ  Ｗｉｄｅ  Ｐｏｒｅ  Ｃ５−３カラム（５ｃｍ×１ｍｍ、３μｍ）に充填した。検出および定量のため、カラム溶出液をＴｈｅｒｍｏ  Ｑ−Ｅｘａｃｔｉｖｅ質量分析計に注ぐ。
【０２２６】
オスのカニクイザルに、２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌバッファー（ｐＨ７）中の本明細書において記載する化合物の１回の皮下用量または静脈内用量（９６．４ｎｍｏｌ／ｋｇ）を、量１ｍＬ／ｋｇで投与した。薬物動態特徴決定のための投与の２、６、２４、４８、７２、９６、１６８、２４０、３３６、４０８および５０４時間後に、それぞれの動物から血液を採取した。
【０２２７】
オスのカニクイザルにまた、２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌバッファー（ｐＨ８）中の本明細書において記載する化合物の１回の皮下用量（５０ｎｍｏｌ／ｋｇ）を、量０．２６ｍＬ／ｋｇで投与した。薬物動態特徴決定のための投与の３、６、１２、２４、４８、７２、９６、１２０、１６８、１９２、２４０、３３６、４０８、および５０４時間後に、それぞれの動物から血液を採取した。
【０２２８】
オスのスプラーグドーリーラットに、２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ  Ｔｒｉｓバッファー（ｐＨ８）中の本明細書において記載する化合物の１回の皮下用量（５０もしくは１５０ｎｍｏｌ／ｋｇ）を、量０．２６または０．７７ｍＬ／ｋｇで投与する。薬物動態特徴決定のための投与の６、１２、２４、４８、７２、９６、１２０、１４４、１６８、１９２、２４０、２８８、および３３６時間後に、それぞれの動物から血液を採取した。
【０２２９】
オスのＣＤ−１マウスに、２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ  Ｔｒｉｓバッファー（ｐＨ７もしくは８）中の本明細書において記載する化合物の１回の皮下用量（３５０、３８６もしくは３８８ｎｍｏｌ／ｋｇ）を、量０．０５または０．０６ｍＬ／動物で投与した。薬物動態特徴決定（１０１）のための投与の６、１２、２４、４８、７２、９６、１２０および１６８時間後に、血液を採取した。
【０２３０】
【表２】
2019525919.tif 000010
【０２３１】
【表３】
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【０２３２】
【表４】
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【０２３３】
【表５】
2019525919.tif 000013
【０２３４】
これらのデータは、上記の化合物が、毎週１回の投与または隔月もしくは毎月のような他の種類の投与に適した薬物動態特性を有することを示す。
【０２３５】
ＩＩ型糖尿病
インビボで食餌により誘導した肥満（ＤＩＯ）モデル−慢性用量の投与
ＤＩＯモデルは、インスリンに感受性がある前糖尿病状態を表す。これらの動物は、糖尿ではないが、高脂肪（脂肪から６０％のＫｃａｌ）食餌に１２週間置いた後、インスリン抵抗性、異常脂質血症、および脂肪肝、メタボリックシンドロームの全ての特徴を示す（Ｓｕｒｗｉｔ  ＲＳ  ｅｔ  ａｌ．，Ｄｉｅｔ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｔｙｐｅ  ＩＩ  ｄｉａｂｅｔｅｓ  ｉｎ  Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ  ｍｉｃｅ．  Ｄｉａｂｅｔｅｓ  ３７（９）：１１６３−７（１９８８））。この研究の目的は、空腹時血糖、空腹時インスリン、体重減少、および身体組成に対する実施例４、５、６、ならびに７の分子の効果を評価することである。
【０２３６】
オスの２２週齢のＣ５７ＢＬ６マウス（６週齢以来高脂肪食餌を受ける、ジャクソン研究所３８０００５０；バーハーバー、メイン州）を、１ケージ当たり１匹で飼育し、実験開始前、動物施設において２週間、Ｄ１２４９２食物（６０％ラード高脂肪食餌：Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ｄｉｅｔｓ  Ｎｅｗ  Ｂｒｕｎｓｗｉｃｋ  ＮＪ）、および通常の光サイクルにて維持する。ブロックランダム化を使用して、体重により治療群に動物をランダム化する。実験の１日目に、動物および食物の重量を計り、記録する。動物を、２つの同等の群に分け、別々の日に開始して（データを組み合わせる）、研究のロジスティックを単純化する。動物に、１（開始）、４、７、１０、および１３日目に、２０ｍＭクエン酸塩、ｐＨ７中の示した治療の１回の皮下注射（ｓ．ｃ．）を、量１０ｍｌ／ｋｇで与える。ビークル対照動物に、同様の体積のこの溶液を注射する。溶液を、無菌の蓋をしたバイアルにおいて維持し、研究継続中４℃で保存する。それぞれの治療部門は、１群当たり５匹のマウスであるｎを有する。
【０２３７】
研究１日目〜研究１５日目まで、用量の投与に先立ち、動物およびそれらの食物の重量を毎日計る。これらのデータを使用して、体重増加および食物消費を計算する。動物または食物を含むワイヤーラックを、秤量皿に置き、天秤を安定させる。重量を記録する。
【０２３８】
研究１５日目に、動物を、清潔なワイヤーラックを有し、食物を有しないが、水へのアクセスを可能にした清潔なケージに置くことにより、一晩（約１６〜１８時間）絶食させ、１６日目に、腹腔内耐糖能試験（ｉｐＧＴＴ）の対象にする。これを以下の通り行う；動物の尾を切除し、ベースラインの血液および血清試料（時間０）を集め、動物に、無菌食塩水中の２ｇ／ｋｇグルコースのボーラスを、量５ｍｌ／ｋｇで腹腔内（ｉｐ）注射する。その後、血液グルコースおよびインスリン用の血清試料を、注射の２０、６０、および１２０分後に集める。Ａｃｃｕ−Ｃｈｅｋ  Ａｖｉｖａグルコースメーター（ロッシュ；インディアナポリス、インディアナ州）を使用して、血液グルコースを測定する。血清試料を、マイクロヘマトクリット遠心機において９０００相対遠心力（ｒｃｆ）で５分間遠心分離する。血清を集め、ラット／マウスインスリンキット（Ｍｅｓｏｓｃａｌｅ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ）を使用して、インスリンについて解析する。ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｚｍソフトウエア（ラホヤ、カリフォルニア州）を使用して、統計的有意性（＊＝ｐ＞０．０５対０用量；一元配置分散分析、ダネットの事後）を計算する。ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍソフトウエア（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  Ｉｎｃ．、ラホヤ、カリフォルニア州）を使用して、グルコースおよびインスリンＡＵＣを計算する。データセット中の第１のＸ値から始まり、最大のＸ値で終わる（０から、台形公式）０と曲線の間の面積を計算する。
【０２３９】
研究の１日目および研究の１５日目（ＩＰＧＴＴ測定のための絶食に先立ち）に、定量的核磁気共鳴ＥｃｈｏＭＲＩアナライザー（ＥＭＲ−１６６−ｓ、ＥｃｈｏＭＲＩ；Ｈｏｕｓｔｏｎ  Ｔｘ）を使用して、身体組成を解析する。公知の量のキャノーラ油でアナライザーを校正した後、脂肪および非脂肪（赤身）質量（グラム）を測定するアナライザーに動物を置く。１日目の値から１５日目の値を引くことにより、質量の変化を計算する。
【０２４０】
以下の表６、７、８および９は、上記の測定のそれぞれに対応するデータを示す。データをＳＥＭと共に算術平均として表す。
【０２４１】
表６〜９におけるデータは、連続する１５日間３日毎に１回の実施例４〜７の皮下投与が、次の有意差：（１）ビークルＤＩＯマウスと比較したとき、総体重の減少および改善した身体組成（赤身質量にける有意な変化を伴わず、脂肪質量の低減ｎとして表す）をもたらすことを示す。さらに、実施例４〜７は、連続する１５日間３日毎にｓ．ｃ．注射したとき、次の有意差：（１）空腹時血清グルコースおよび血清インスリンの低下、ならびに（２）耐糖能における改善（ＩＰＧＴＴ中のグルコースおよびインスリンＡＵＣにより表す）を示した。空腹時血清インスリン低下についてＥＤ５０を計算するとき、実施例４、５、および６は、それぞれ、ＥＤ５０６．４７、６．２３および１６．９７ｎｍｏｌ／ｋｇを生じた。
【０２４２】
【表６】
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【０２４３】
【表７】
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【０２４４】
【表８】
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【０２４５】
【表９】
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【０２４６】
２２週齢のＣ５７ＢＬ６マウス（６週齢以来高脂肪食餌を受ける、ジャクソン研究所３８０００５０；バーハーバー、メイン州）を飼育し、上記の通り治療した。ブロックランダム化を使用して、体重により治療群に動物をランダム化する。実験の１日目に、動物および食物の重量を計り、記録する。動物を、３つの同等の群に分け、別々の日に開始して（データを組み合わせる）、研究のロジスティックを単純化する。動物に、１（開始）、４、７、１０、および１３日目に、２０ｍＭクエン酸塩、ｐＨ７中の示した治療の１回のｓ．ｃ．注射を、量１０ｍｌ／ｋｇで与える。ビークル対照動物に、同様の体積のこの溶液を注射する。溶液を、無菌の蓋をしたバイアルにおいて維持し、研究継続中４℃で保存する。
【０２４７】
研究の１４日目（インビボでのグルコース摂取実験の朝）、ＤＩＯマウスを清潔なケージに入れ、食物を４時間取り除いた。次に、動物を、２％イソフルレンで麻酔し、示したインスリン用量および食塩水と一緒に［３Ｈ］−２−デオキシグルコース１０μＣｉ（無菌の食塩水１００μｌ中で一緒に）を、後眼窩に０．３ｍｌのシリンジで注射する。尾の先端を切除し、アイソトープ注射の２、５、１０、１５、２０および３０分後に、１滴の血液を、Ａｃｃｕ−Ｃｈｅｋ  Ａｖｉｖａ  グルコースメーター（ロッシュ；インディアナポリス、インディアナ州）を介した血液グルコースの測定のためトリプリケートで採取する。これらの値は、Ｃｐを表す。上で示したのと同じ時間点で、さらに血液１０μｌを採取し、ヘパリンチューブに入れ、混合し、氷上に置いた。次に、へパリ処理した血液５μｌを、清潔な微量遠心チューブに移し、１Ｍ  Ｂａ（ＯＨ）２１２５μｌおよび１Ｍ  ＺｎＳＯ４１２５μｌを、連続して加える。次に、チューブを混合し、氷上に置く。チューブを、８０００ｒｃｆで５分間遠心分離する。上清２００μｌを、シンチレーション液５ｍｌと合わせ、カウントして、血漿壊変毎分（ＤＰＭ）を決定する。これらの値は、Ｃ＊ｐを表す。
【０２４８】
最後の血液試料を３０分で集めた後、次に、動物を頸椎脱臼により安楽死させ、組織試料（赤色の四頭筋（ＲＱ）、白色の四頭筋（ＷＱ）、ヒラメ筋、長指伸筋（ＥＤＬ））を取り出し、鉗子の間で凍結し、液体窒素中で冷却する。処理するまで、組織を−８０℃で保存する。次に、２ｍｌのＬｙｓｉｎｇ  Ｍａｔｒｉｘ  Ｄチューブ中乾燥組織重量５０〜１００ｍｇをドライアイス上に置くことにより、カウントのため組織を処理する。０．５％過塩素酸１ｍｌをチューブに加え、Ｆａｓｔｐｒｅｐ−２４（エムピーバイオ、サンタアナ、カリフォルニア州）を使用して、設定６．０で３０秒間、組織をホモジナイズする。５Ｎ  ＫＯＨ２０μｌの添加により、試料を中和し、混合し、２０００ｒｃｆで１５分間４℃で遠心分離する。中和した上清３００μｌを、２つの別々の清潔な１．５ｍｌの微量遠心チューブに入れる。蒸留水３００μｌを第１のチューブに加え、一方、水酸化バリウム（Ｂａ（ＯＨ）２）１５０μｌおよび硫酸亜鉛（ＺｎＳＯ４）５０μｌを第２のチューブに連続して加える。次に、試料を混合し、１時間氷上でインキュベーションする。次に、両方のセットのチューブを、３０００ｒｃｆで１５分間４℃において遠心分離する。それぞれのチューブから２００μｌを、７ｍｌのシンチレーションバイアルに加え、次に、５ｍｌのシンチレーション液（Ｓｃｉｎｔｉ−Ｓａｆｅ）を加える。次に、Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｓｃｉｎｔｉｌｌａｔｉｏｎカウンター（ベックマン・コールター、ブレア、カリフォルニア州）において、ＤＰＭについてバイアルをカウントする。これらの試料間でのＤＰＭの差は、Ｃ＊ｍを表す。
【０２４９】
それぞれの組織による２−デオキシグルコースの摂取を、次の式：
Ｒｇ＝（Ｃ＊ｍ）／∫Ｃｐ＊／Ｃｐ  ｄｔ
Ｒｇ＝グルコース代謝速度（μｍｏｌ／１００ｇ／分）
Ｃ＊ｍ＝ｔ＝３０分での蓄積した２ＤＧ６Ｐ（ｄｐｍ／湿重量１００ｇ）
Ｃ＊ｐ＝血漿２ＤＧ活性（ｄｐｍ／ｍｌ）
により計算し、
Ｃｐは、血漿グルコース（ｍＭ）である。
【０２５０】
以下の表１０および１１は、上記の測定のそれぞれに対応するデータを示す。データをＳＥＭと共に算術平均として表す。
【０２５１】
表１０におけるデータは、連続して１４日間の実施例７の３日毎に１回の皮下投与が、ＲＱ、ＷＱおよびＥＤＬにおいて最大下インスリン濃度（０．５Ｕ／ｋｇ）により刺激されるとき、筋肉グルコース摂取における有意な増大をもたらし、一方、ヒラメ筋筋肉における摂取は、ビークルＤＩＯマウスについての対応する値と比較したとき、変化しない。加えて、表１１におけるデータは、両方のＥＤＬ筋肉の合わせた重量が、連続して１４日間の実施例７の３日毎に１回の皮下投与により有意に増大する。
【０２５２】
【表１０】
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【０２５３】
【表１１】
2019525919.tif 000019
【０２５４】
インビボレプチン受容体欠損（Ｃ５７Ｂｌ／６ｄｂ−／ｄｂ−）マウス−慢性用量の投与
糖尿病の有効性パラメーターを調べるインビボの薬理研究を、Ｔ２Ｄの一般に使用される前臨床モデルであるｄｂ／ｄｂマウスにおいて、実施例１、２、３、および４の分子について行う。このマウス系統は、レプチン受容体中に遺伝子変異を有し、これが、食物摂取の維持に重要なアディポカインである、レプチンシグナル伝達の欠如をもたらす（Ｃｏｌｅｍａｎ  ＤＬ．Ｏｂｅｓｅ  ａｎｄ  ｄｉａｂｅｔｅｓ：ｔｗｏ  ｍｕｔａｎｔ  ｇｅｎｅｓ  ｃａｕｓｉｎｇ  ｄｉａｂｅｔｅｓ−ｏｂｅｓｉｔｙ  ｓｙｎｄｒｏｍｅｓ  ｉｎ  ｍｉｃｅ．Ｄｉａｂｅｔｏｌｏｇｉａ；１４（３）：１４１−８，（１９７８））。これらのマウスは、通常のげっ歯類固形飼料食餌を与えて３〜４週間辺りで肥満になる。それらは、血漿インスリンおよび血液グルコースの上昇を示し、多数の感作剤に応答した血液グルコースの低下を示す。それ故、この研究の目的は、インスリン感受性を改善し、続いて血漿グルコースを低下させる能力を評価することである。
【０２５５】
オスの５〜６週齢のｄｂ／ｄｂ（ＢＫＳ．Ｃｇ−＋Ｌｅｐｒｄｂ／＋Ｌｅｐｒｄｂ／ＯｌａＨｓｄ）（Ｈａｒｌａｎ  Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ）マウスを、１ケージ当たり３〜４匹で飼育し、実験開始に先立ち、動物施設において水ボトルおよび５００８固形飼料（ＬａｂＤｉｅｔ；セントルイス）を与え、通常の光サイクルで２週間維持する。体重、食物消費および他の血清パラメーターの評価を、食物消費を除き、それらは、それぞれのケージの動物（１ケージ辺り３〜４匹の動物；１治療当たり２ケージ）に渡り平均化する、インビボＤＩＯモデル−慢性の用量の投与において、上で説明した通り決定する。パーセント体重変化は、１日目の体重から研究の終わりのパーセント変化である。
【０２５６】
研究１日目に、マウスを、軽く拘束し、清潔なメスを使用して、尾を切除する。血液１滴を、グルコース試験紙に置き、血液グルコースメーター（ロッシュ、インディアナポリス）を使用して解析する。次に、血液グルコースに基づき、ブロックランダム化により治療群に動物をランダム化する。動物に、２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ  ＨＣｌ  ｐＨ８中または２０ｍＭ  クエン酸塩、ｐＨ７中のいずれかの量１０ｍｌ／ｋｇで、示した治療（４日間の研究）の１回の皮下注射を与えるか、または実験の３日毎に１回（１日目に開始し；１４および１６日間の研究）投与する。ビークル対照動物に、同様の体積のこの溶液を注射する。溶液を、無菌の蓋をしたバイアルにおいて維持し、研究継続中４℃で保存する。投与の直前の研究（１６日間）のそれぞれの日またはそれぞれの投与日（１４日間の研究）に、以下に記載の通り、血液グルコースの決定のため、動物を失血させる。（研究の長さに基づき）４、１４または１６日目のいずれかでのグルコース測定の後、ＣＯ２窒息により動物を屠殺する。
【０２５７】
ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｚｍソフトウエア（ラホヤ、カリフォルニア州）を使用して、グルコースＡＵＣ（０から、台形公式）および統計的有意性（＊＝ｐ＞０．０５対０用量；一元配置分散分析、ダネットの事後）を計算する。
【０２５８】
以下の表１２、１３、および１４は、上記の測定のそれぞれに対応するデータを示す。データをＳＥＭと共に算術平均として表す。
【０２５９】
表１２におけるデータは、実施例１〜３が、１回の注射の後、４日間に渡り測定した血液グルコースＡＵＣを有意に低下させることを示す。表１２および１３におけるデータは、実施例１〜３が、４（１回の注射）または１３（研究日数の１、４、７、１０および１３日目に注射した）についてのｓ．ｃ．投与により投与した後、体重の有意な低減を誘導したことを示す。以下の表１４は、実施例４は、ｄｂ／ｄｂマウスにおいて、１６日間の研究で（研究の１、４、７、１０、および１３日目に投与）体重とグルコースＡＵＣの両方を有意に低減することを示す。実施例４の有意なグルコースおよび体重低下効果は、それぞれ、計算ＥＤ５０１３．０４ｎｍｏｌ／ｋｇおよび３０．１６ｎｍｏｌ／ｋｇを生じる。
【０２６０】
【表１２】
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【０２６１】
【表１３】
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【０２６２】
【表１４】
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【０２６３】
これらのデータは、本明細書において概説した化合物が、ＩＩ型糖尿病を治療する能力があることを示す。
【０２６４】
慢性腎疾患−高血圧性腎症
腎臓の全質量の３／４の外科的縮小を含むマウス残遺腎臓モデル（「残遺」）を、高血圧腎臓疾患の前臨床モデルとして使用する（Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔ．６４（１）：３５０−５，（２００３））。このモデルは、経時的に高血圧および中程度のアルブミン尿をもたらし、また糸球体濾過率（ＧＦＲ）の低減と一致した血清クレアチニンの上昇も示し、これにより、より進んだステージのヒト慢性腎疾患（およそステージ３）を表す。
【０２６５】
８〜９週齢のオスの１２９Ｓ６マウス（Ｔａｃｏｎｉｃ，Ｉｎｃ．より得る）において、腎臓の質量の外科的縮小（Ｎ＝４０マウス）または偽手術を行う。手術の１５週間後に、クレアチニンに対する尿アルブミン比（ＡＣＲ）および体重により、８匹の残遺腎臓マウスを５つの均等な群にランダム化する。２０ｍＭクエン酸塩を含む０．９％生理食塩水（「食塩水対照」）または異なる用量レベルの実施例２の化合物（７．２、２４、７２および１４４ｎｍｏｌ／ｋｇ）のいずれかを、１６週齢から開始して２週間、毎週３回皮下投与する。
【０２６６】
研究継続時間は、９週である。投与の２週間後、さらに７週間ＡＣＲについてモニターするのを継続して、尿ＡＣＲに対する実施例２の化合物の効果の耐久性を決定する実施例２の１４４ｎｍｏｌ／ｋｇ群を除き、全ての群において、剖検を行う。
【０２６７】
実施例２の１４４ｎｍｏｌ／ｋｇを除き全ての群について、研究のエンドポイントは、体重、腎臓重量、心臓重量、血清クレアチニンおよび尿ＡＣＲである。実施例２の１４４ｎｍｏｌ／ｋｇ群について、エンドポイントは、体重および尿ＡＣＲである。研究中に脂肪したものはいない。
【０２６８】
体重を、ベースラインとして、およびＭｅｔｌｅｒ  Ｔｏｌｅｄｏ  Ｂａｌａｎｃｅでの終結時に決定する。心臓および腎臓を、剖検時に取り出し、Ｍｅｔｌｅｒ  Ｔｏｌｅｄｏ  Ｂａｌａｎｃｅにて計量する。イソフルレン麻酔下での終了時に、後眼窩洞から血液（５００μｌ）を集める。凝血した血液を遠心分離して、血清を得る。ロッシュの試薬を用いてロッシュＨｉｔａｃｈｉ  Ｍｏｄｕｌａｒ  Ａｎａｌｙｔｉｃｓ  Ｐアナライザーにおいて、ＢＵＮおよびクレアチニンについて、血清を解析する。
【０２６９】
以下の表１５は、上記の測定に対応するデータを示す。示したデータは、列挙したパラメーターについての算術平均±ＳＥＭを表す。全てのデータは、１群当たり８匹の動物のＮ値を表す。
【０２７０】
【表１５】
2019525919.tif 000023
【０２７１】
表１５においてデータは、疾患対照が、外科的に低減した腎臓質量と関連する慢性腎疾患に起因する偽対照と比較して、心臓重量、腎臓重量、血清ＢＵＮおよび血清クレアチニンの有意な増大を示すことを示す。表１５においてデータは、実施例２の化合物が、食塩水対照に比較して、７．２ｎｍｏｌ／ｋｇを除く全ての用量レベルで体重を有意に低減することを示す。実施例２の化合物はまた、食塩水対照群と比較して、腎臓重量に対する効果を有しない２４および７２ｎｍｏｌ／ｋｇ用量レベルで、心臓重量を有意に低減する。実施例２の化合物はまた、食塩水対照と比較して、２４および７２ｎｍｏｌ／ｋｇ用量レベルで血清ＢＵＮ、ならびに２４ｎｍｏｌ／ｋｇ用量レベルで血清クレアチニンを有意に低減する。
【０２７２】
食塩水および実施例２の化合物の全ての用量レベルについて、ベースライン（−１）、１および２週目に、尿ＡＣＲを測定するためのスポット尿を収集する。４、６および９週で、実施例２の１４４ｎｍｏｌ／ｋｇ用量レベルのため、スポット尿収集も集める。マウスを９６ウェルポリプロピレンマイクロプレート上に置いて、２時間の期間に渡りそれらの尿を集めることにより、スポット尿を集める。集めた尿を氷上に置き、遠心分離し、アルブミンおよびクレアチニン解析の対象にする。
【０２７３】
ロッシュＨｉｔａｃｈｉ  Ｍｏｄｕｌａｒ  Ａｎａｌｙｔｉｃｓ  Ｐアナライザーにおいて、尿アルブミンおよびクレアチニンを決定する。ロッシュによるクレアチニンプラス試薬で、尿クレアチニンを決定する。尿アルブミンについて、ロッシュＭｉｃｒｏアルブミンアッセイを改変して、マウスにおいて尿アルブミンを測定するための較正曲線に適応させる。尿中のアルブミンについての検出のアッセイ限界は、１ｍｌ当たり４．９ｍｃｇである。偽マウスは、尿中に検出可能なアルブミンを有しない。
【０２７４】
表１６は、尿ＡＣＲの測定に対応するデータを示す。示したデータは、それぞれの時間ポイントでの算術平均±ＳＥＭである。１群当たり８匹のマウスが存在する。
【０２７５】
【表１６】
2019525919.tif 000024
【０２７６】
表１６におけるデータは、実施例２の化合物が、投与の１週間と同等の早さで２４ｎｍｏｌ／ｋｇ用量レベルで、ならびに残遺腎臓モデルにおいて投与の２週間後、食塩水対照と比較して全ての用量レベルで尿ＡＣＲを有意に低減することを示す。表１６におけるデータはさらに、１４４ｎｍｏｌ／ｋｇの実施例２の化合物での尿ＡＣＲ低下効果において耐久性が存在すること、および効果が、実施例２の化合物の投与を止めた後７週を超えて持続するので、ＡＣＲの低減が、単に本来血行動態であり得ないことを示す。
【０２７７】
概して、これらのデータは、実施例２の化合物が、無治療の対照と比較して、血清ＢＵＮ、血清クレアチニンおよび尿ＡＣＲの低減を有する慢性腎疾患と関連する高血圧条件下で腎機能を改善することを示す。
【０２７８】
全てのデータを、ＪＭＰｖ．８．０ソフトウエア（ＳＡＳ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ）で解析する。アルブミン尿（ＡＣＲ）の統計的分析を、次のものにより行った：１）異なる治療群に渡り分散を安定化するためのログスケールで、データを解析した、２）それぞれの時間ポイントで分散分析およびダネットのｔ検定を使用してＪＭＰ  ｖ．８．０において、データ解析を行った。データが非対称であるなら、ログ変換したデータで分散分析、およびスチューデント非対ｔ検定により、全ての他のデータを評価した。解析に先立ち、統計的異常値を除去した。Ｐ値＜０．０５を、統計学的に有意であるとみなした。
【０２７９】
このデータは、本明細書において概説した化合物が、高血圧性腎症により引き起こされる慢性腎疾患を治療する能力があることを示す。
【０２８０】
慢性腎疾患−高血圧性腎症
腎臓の全質量の３／４の外科的縮小を含むマウス残遺腎臓モデル（「残遺」）を、高血圧腎臓疾患の前臨床モデルとして使用する（Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔ．６４（１）：３５０−５，（２００３））。このモデルは、経時的に高血圧および中程度のアルブミン尿をもたらし、また糸球体濾過率（ＧＦＲ）の低減と一致した血清クレアチニンの上昇も示し、これにより、より進んだステージのヒト慢性腎疾患（およそステージ３）を表す。
【０２８１】
９〜１０週齢のオスの１２９Ｓ６マウスにおいて、腎臓の質量の外科的縮小（Ｎ＝３２匹のマウス）をＴａｃｏｎｉｃ，Ｉｎｃ．により行う。手術の１７週間後に、クレアチニンに対する尿アルブミン比（ＡＣＲ）および体重により、８匹の残遺腎臓マウスを４つの均等な群にランダム化する。注射用の０．９％生理食塩水（「食塩水対照」）または異なる用量レベルの実施例４（２．６、７．２および２４ｎｍｏｌ／ｋｇ、ロット番号ＢＣＡ−ＢＥ０３９３５−０１９）を、手術の１８週後に開始して毎週３回皮下に投与する。
【０２８２】
研究継続時間は、８週である。断続的な投与ストラテジーを実施例４として使用し、最初の２週間のみ投与し、次に、研究の４週目に再度投与し、これにより、実施例４への動物の曝露が存在しない研究中の期間が存在する。これを行い、アルブミン尿に対する実施例４の化合物が、単に血行動態で運ばれるか、または腎機能に対するより長い永続効果が存在するかを決定する。
【０２８３】
全ての群について、研究のエンドポイントは、体重、腎臓重量、心臓重量、アルブミン尿、血清クレアチニン、ならびに骨盤拡大、尿細管変性、尿細管タンパク質、尿細管再生、糸球体変性、間質性炎症、間質性線維症についての腎臓の病理スコア、マッソンのスコアおよびＰＡＳスコアである。研究中に、実施例４の２．６ｎｍｏｌ／ｋｇ投与群の１匹が死亡した。
【０２８４】
体重を、ベースラインとして、およびＭｅｔｌｅｒ  Ｔｏｌｅｄｏ  Ｂａｌａｎｃｅでの終結時に決定する。心臓および腎臓を、剖検時に取り出し、Ｍｅｔｌｅｒ  Ｔｏｌｅｄｏ  Ｂａｌａｎｃｅにて計量する。イソフルレン麻酔下での終了時に、後眼窩洞から血液（５００μｌ）を集める。凝血した血液を遠心分離して、血清を得る。ロッシュの試薬を用いてロッシュＨｉｔａｃｈｉ  Ｍｏｄｕｌａｒ  Ａｎａｌｙｔｉｃｓ  Ｐアナライザーにおいて、クレアチニンについて血清を解析する。
【０２８５】
以下の表１７は、上記の測定に対応するデータを示す。示したデータは、列挙したパラメーターについての算術平均±ＳＥＭを表す。全てのデータは、１群当たり７〜８匹の動物のＮ値を表す。
【０２８６】
【表１７】
2019525919.tif 000025
【０２８７】
表１７におけるデータは、実施例４の化合物で心臓重量を下げる傾向が存在するが、実施例４の化合物が、体重、心臓重量または腎臓重量に対する有意な効果を示さないことを示す。２４ｎｍｏｌ／ｋｇ用量レベルの実施例４の化合物は、食塩水の群と比較して血清クレアチニンを有意に低減する。
【０２８８】
アルブミン尿の測定
クレアチニンに対する尿アルブミン比（ＡＣＲ）を測定するためのスポット尿収集を、食塩水および実施例４投与群の全てのベースライン、１、２、４、６ならびに８週で行う。
【０２８９】
マウスを９６ウェルポリプロピレンマイクロプレート上に置いて、２時間の期間に渡りそれらの尿を集めることにより、スポット尿を集める。集めた尿を氷上に置き、遠心分離し、アルブミンおよびクレアチニン解析の対象にする。
【０２９０】
ロッシュＨｉｔａｃｈｉ  Ｍｏｄｕｌａｒ  Ａｎａｌｙｔｉｃｓ  Ｐアナライザーにおいて、尿アルブミンおよびクレアチニンを決定する。ロッシュによるクレアチニンプラス試薬で、尿クレアチニンを決定する。尿アルブミンについて、ロッシュＭｉｃｒｏアルブミンアッセイを改変して、マウスにおいて尿アルブミンを測定するための較正曲線に適応させる。
【０２９１】
表１８は、アルブミン尿の測定に対応するデータを示す。示したデータは、それぞれの時間ポイントでの算術平均±ＳＥＭである。１群当たり９〜１０匹のマウスが存在する。
【０２９２】
【表１８】
2019525919.tif 000026
【０２９３】
表１８におけるデータは、実施例４の化合物が、残遺腎臓モデルにおいて、食塩水対照と比較し、全ての用量レベルでアルブミン尿を有意に低減することを示す。表１８におけるデータはさらに、実施例４の化合物の最大容量レベルでの投与のたった２週間後に、アルブミン尿の正常値近くまでの回復をもたらす実施例４の化合物との投与の１週間と同じくらいの早さで、食塩水対照群と比較してアルブミン尿に対する用量依存性の効果が存在することを示す。データはさらに、実施例の化合物が、実施例４の化合物の薬物動態特性に基づきもはや存在しないとき、効果は、６および８週目の時間ポイントで持続するので、アルブミン尿に対する化合物の効果が、単に本来血行動態であり得ないことを示す。
【０２９４】
概して、これらのデータは、実施例４の化合物が、血清クレアチニン、および慢性腎疾患と関連するアルブミン尿の低減を伴い、高血圧条件下で腎機能を改善することを示す。
【０２９５】
腎臓の病理
研究終了時に、残遺腎臓を取り出し、ホルマリンにおいて固定し、標準的な方法に従い、パラフィン切片のため処理する。正式な病理学者により、腎臓病変について腎臓の切片を評価する。尿細管タンパク質、尿細管再生、糸球体硬化症、傍糸球体線維症／炎症、間質性炎症および間質性線維症を、次のスケール：なし（０）、極小（１）、極めて小さい（２）、中程度（３）、顕著（４）および重篤（５）を使用して半定量的に記録する。Ｈ＆Ｅ、マッソンのトリクロームおよびＰＡＳ染色した切片で、病理スコアを得る。
【０２９６】
表１９は、腎臓の病理の測定に対応するデータを示す。示したデータは、それぞれのパラメーターについての算術平均±ＳＥＭである。１群当たり７〜８匹のマウスが存在する。
【０２９７】
【表１９】
2019525919.tif 000027
【０２９８】
表１９におけるデータは、実施例４の化合物が、残遺腎臓モデルにおいて、尿細管タンパク質および間質性線維症についての食塩水対照と比較して全ての用量レベルで、腎臓の病理を有意に低減することを示す。表１９におけるデータは、実施例４の化合物が、食塩水対照群と比較して、最大用量レベルで尿細管再生、糸球体硬化症、および間質性炎症の有意な低減を示すことをさらに示す。これらのデータは、このモデルにおける実施例４の化合物での腎機能の改善は、高血圧の腎疾患に起因する腎臓の病理の低減と共に腎構造の有意な改善を伴うことを示す。
【０２９９】
統計的方法
順序ロジットモデルを分類別のスコアに近似させること、次に、異なる治療群間の差を比較することにより、Ｒソフトウエアで、病理データを統計的に評価する。アルブミン尿（ＡＣＲ）の統計的分析を、次のものによりＲソフトウエアで行う：１）データを、ログスケールで解析し、異なる治療群に渡る分散を安定させる、２）モデル期間、およびベースラインＡＣＲを共変数として含むので、治療群、時間およびそれらの相互作用と組み合わせたモデルを使用して、データ解析を行う、３）異なる時間でのそれぞれの動物からの知見を、ＣＳ共分散構造を使用して繰り返し測定値として処理する、ならびに４）複数の検定について検定ｐ値を調整しない。ログ変換したデータでの分散分析、およびＪＭＰ  ｖ．８．０ソフトウエア（ＳＡＳ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ）でのスチューデント非対ｔ検定により、全ての他のデータを評価する。解析に先立ち、統計的異常値を除去した。Ｐ値＜０．０５を、統計学的に有意であるとみなした。
【０３００】
このデータは、本明細書において概説した化合物が、高血圧性腎症により引き起こされる慢性腎疾患を治療する能力があることを示す。
【０３０１】
ＳＨＲモデルにおける血圧制御に対する長期作用ウロコルチン２の効果
オスの自然発生高血圧ラット（ＳＨＲ／ＮＣｒｌ、チャールズリバーラボラトリーズ株式会社）に、血圧および心拍データの収集のためＤａｔａ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｒ（ＴＡ１１ＰＡ−Ｃ４０）を埋め込む。実験の開始に先立ち少なくとも２週間、外科的埋め込み方法から全てのＳＨＲを回復させた。モニタリング期（−１日目〜２１日目）中、それらの個々のホームケージにおいて、意識があり、自由に移動し、かつ平穏なＳＨＲ中の無線送信機を介して、心血管パラメーター（平均動脈圧、収縮期圧および拡張期圧、ならびに心拍）を継続的にモニターした。次に、ＤＳＩ遠隔測定埋め込みからの遠隔測定データを、市販のデータ取得および解析システム（ＰＯＮＥＭＡＨ）にインプットする校正したアナログシグナルに変換した。全てのラットを、制御した温度および湿度で個々に飼育し、１２時間の明／暗サイクルで維持する。
【０３０２】
投与開始に先立ち７日目に集めた平均動脈圧（ＭＡＰ）にしがたい、ＳＨＲを群にランダム化した。ラットに、ビークル（２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌバッファー、ｐＨ８．０）、または実施例４の化合物の用量レベル（２．４、７．２、２４、７２ｎｍｏｌ／ｋｇ）の１つを、２週間毎週２回皮下注射（１、４、８および１１日目に注射）で投与した。さらに１週間、血圧データを集めて、実施例４治療の中止後の血圧応答を評価した。
【０３０３】
実施例４の化合物は、血圧に依存して低減した（表２１、２２）。最大ＭＡＰ低減を、投与の２４時間後に達成した。１日目の１回目の注射後のＭＡＰと１１日目の４回目の注射後のＭＡＰを比較する表において示す通り、実施例４の化合物の血圧低下効果は、繰り返し投与で減少した。実施例４の化合物の中止後、全ての治療群における血圧レベルを記録し、それは、ビークル群と異なっていなかった。
【０３０４】
以下の表２０は、期間（１〜６８時間）および（２４１〜３３２時間）のＰ値と共にＡＵＣ結果を示す。
【０３０５】
【表２０】
2019525919.tif 000028
【０３０６】
【表２１】
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【０３０７】
【表２２】
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【０３０８】
表２０〜２２におけるデータおよび表２０における統計的結果は、実施例４の化合物が、第１の注射後血圧を用量に依存して低減することを示す。最大ＭＡＰ低減は、投与の２４時間後に達成される。実施例４の化合物の中止後、全ての治療群におけるＭＡＰは回復し、３３６時間でビークル群と差はない。
【０３０９】
第１の投与（１日目）後６８時間に渡る、および最終投与（１１日目）後９２時間に渡るＡＵＣについての一元共分散分析により、ＳＡＳソフトウエアでＭＡＰデータを統計的に評価する。
【０３１０】
慢性腎疾患−糖尿病性腎症
一側性腎摘出したｄｂ／ｄｂアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）レニンモデルは、ＡＡＶレニン導入遺伝子によりもたらされた高血圧を有する糖尿病性腎疾患の進行性モデルを表す（Ａｍ  Ｊ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  Ｒｅｇｕｌ  Ｉｎｔｅｇｒ  Ｃｏｍｐ  Ｐｈｙｓｉｏｌ．３０９（５）：Ｒ４６７−７４，（２０１５））。このモデルは、経時的に進行的に増大する明白なアルブミン尿を示し、糸球体濾過率（ＧＦＲ）の低減も示し、これにより、より進んだステージのヒト糖尿病性腎症（およそステージ３〜４）を表す。
【０３１１】
Ｃ５７ＢＬＫＳ／Ｊバックグラウンド（Ｈａｒｌａｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓから得た）のメスのｄｂ／ｄｂマウスでの一側性腎摘出（ＵｎｉＮｘ）手術を、糖尿病性腎疾患を促進するための右腎除去と共に、４週齢でＨａｒｌａｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓにより行う。動物を５週齢で受け取り、マイクロアイソレーターケージにおいて１ケージ当たり３マウスで飼育し、１２時間の明／暗サイクルに置く。全てのｄｂ／ｄｂマウスに、Ｐｕｒｉｎａ特別食餌５００８を自由に与え、オートクレーブした水に自由なアクセスさせる。
【０３１２】
持続性高血圧を誘導するための後眼窩洞へのＡＡＶレニン（５×１０９ＧＣ）静脈内投与に先立ち７週間、マウスを順応させる。１２匹の食塩水対照マウスおよび３３匹のマウスの２群への、クレアチニンに対する尿アルブミン比（ＡＣＲ）、血液グルコースおよび体重によるランダム化を、１５週齢（腎疾患および病理が、このモデルにおいて知見に基づき確立されるポイント）で行い、リシノプリル治療を受ける。
【０３１３】
リシノプリル（３０ｍｇ／Ｌ）での投与は、１６週齢で始まる。リシノプリル治療の２週間後、３３匹のマウスを、尿ＡＣＲ、血液グルコースおよび体重により４つの群（９匹のマウス１つの群および８匹のマウスの３つの群）にランダム化する。
【０３１４】
リシノプリル治療を受けたＵｎｉＮｘ  ｄｂ／ｄｂ  ＡＡＶレニンマウスの４つの群において、注射用の０．９％生理食塩水（「食塩水対照」Ｎ＝９）または異なる用量レベルの実施例４（７．２、２４もしくは７２ｎｍｏｌ／ｋｇ、１つの用量レベル当たりＮ＝８）のいずれかを、１８週齢で始まり、１２週間毎週３回継続する１回の注射当たり０．２ｍＬのｓ．ｃ．で投与する。アルブミンおよびクレアチニンの検出用ロッシュ試薬でロッシュＨｉｔａｃｈｉ  Ｍｏｄｕｌａｒ  Ａｎａｌｙｔｉｃｓ  Ｐアナライザーで尿において、アルブミンおよびクレアチニンを測定する。
【０３１５】
研究の間に、食塩水疾患対照群において６匹、リシノプリル＋食塩水群において２匹、リシノプリル＋７．２ｎｍｏｌ／ｋｇ実施例４の群において１匹、リシノプリル＋２４ｎｍｏｌ／ｋｇ実施例４の群において３匹、およびリシノプリル＋７２ｎｍｏｌ／ｋｇ実施例４の群において匹が死亡した。
【０３１６】
全ての群について、測定したパラメーターは、体重、腎臓重量、心臓重量、クレアチニンに対する尿アルブミン比、血清クレアチニン、ならびにメサンギウム基質拡大、糸球体線維症、尿細管再生、間質性炎症および間質性線維症についての腎臓の病理スコアである。
【０３１７】
１５および２７週齢で、全てのＵｎｉＮｘ  ｄｂ／ｄｂ  ＡＡＶレニンマウス由来の血液（３０〜５０μＬ）を、尾静脈から得て、ＭｅｄｉＳｅｎｓｅ  Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ  ＰＣｘ血糖値測定器（アボット・ラボラトリーズ）での血液グルコース決定のため、Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ  ＰＣｘ血液グルコースセンサー電極ストリップ（アボット・ラボラトリーズ）に滴下する。血液グルコースデータを使用して、ＵｎｉＮｘ  ｄｂ／ｄｂマウスを等しい群に封じる。体重を、ベースラインとして、およびＭｅｔｌｅｒ  Ｔｏｌｅｄｏ  Ｂａｌａｎｃｅでの終結時に決定する。心臓および腎臓を、剖検時に取り出し、Ｍｅｔｌｅｒ  Ｔｏｌｅｄｏ  Ｂａｌａｎｃｅにて計量する。イソフルレン麻酔下での終了時に、後眼窩洞から血液（５００μｌ）を集める。凝血した血液を遠心分離して、血清を得る。ロッシュの試薬を用いてロッシュＨｉｔａｃｈｉ  Ｍｏｄｕｌａｒ  Ａｎａｌｙｔｉｃｓ  Ｐアナライザーにおいて、クレアチニンについて血清を解析する。
【０３１８】
以下の表２３は、体重、血液グルコース、腎臓重量、心臓重量および血清クレアチニンの測定値に対応するデータを示す。示したデータは、列挙したパラメーターについての算術平均±ＳＥＭを表す。全てのデータは、食塩水対照群（Ｎ＝６〜１２）を除き、１群当たり５〜８匹の動物のＮ値を表す。
【０３１９】
【表２３】
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【０３２０】
表２３におけるデータは、食塩水対照群が、レニン導入遺伝子の効果に起因して研究期間中に体重を減少し、一方、リシノプリルの添加が、体重に対するこの効果を防ぐことを示す。リシノプリルに加えた７．２ｎｍｏｌ／ｋｇ用量レベルの実施例４は、化合物は、食塩水対照群と比較して体重を有意に増大する。食塩水対照群における体重の減少はまた、研究の終わりに血液グルコースの低減を導き、一方、リシノプリルは、血液グルコースに対するこの効果を有意に妨げる。リシノプリルへの７．２および７２ｎｍｏｌ／ｋｇ用量レベルでの実施例４の添加は、リシノプリル単独群と比較して血液グルコースの有意な低減をもたらす。リシノプリル単独は、食塩水対照群と比較して腎臓重量に対する効果を有さず、一方、リシノプリルへの７２ｎｍｏｌ／ｋｇの用量レベルでの実施例４の化合物の添加は、食塩水対照群およびリシノプリル単独群と比較して腎臓重量の有意な低減をもたらす。リシノプリル治療単独、ならびにリシノプリルへの実施例４の化合物（２４および７２ｎｍｏｌ／ｋｇ）の添加は、食塩水対照群と比較して心臓重量の有意な低減をもたらす。リシノプリルへの２４ｎｍｏｌ／ｋｇ用量レベルでの実施例４の化合物の添加、ならびにリシノプリル単独は、食塩水対照群と比較して血清クレアチニンの有意な低減をもたらす。リシノプリルへの７２ｎｍｏｌ／ｋｇ用量レベルでの実施例４の化合物の添加は、リシノプリル単独群と比較して血清クレアチニンの有意な増大をもたらす。
【０３２１】
２〜４時間の期間に渡るスポット回収方法により、尿を集める。個々のマウスを、９６ウェルポリプロピレンマイクロプレートの上部に置き、次に、呼吸のための穴を有するが、食物または水にアクセスできないＰｌｅｘｉｇｌａｓチャンバーで覆う。期間の終わりに、尿をプレートからマイクロピペットで取り出し、氷上に置き、遠心分離し、アルブミンおよびクレアチニン解析の対象にする。ロッシュＨｉｔａｃｈｉ  Ｍｏｄｕｌａｒ  Ａｎａｌｙｔｉｃｓ  Ｐアナライザーにおいて、尿アルブミン、クレアチニンおよびグルコースを決定する。ロッシュによるクレアチニン＋試薬で、尿クレアチニンを決定する。尿アルブミンについて、ロッシュＭｉｃｒｏアルブミンアッセイを改変して、マウスにおいて尿アルブミンを測定するための較正曲線に適応させる。アルブミン尿を、クレアチニンに対するアルブミン比（ＡＣＲ）として定義した。
【０３２２】
以下の表２４は、アルブミン尿の測定値に対応するデータを示す。示したデータは、実施例４の化合物での治療の週齢として付与したそれぞれの時間ポイントでの算術平均±ＳＥＭである。食塩水群（Ｎ＝５〜１２）を除き、時間ポイントに渡り１群当たり６〜８匹のマウスが存在した。
【０３２３】
【表２４】
2019525919.tif 000032
【０３２４】
表２４におけるデータは、実施例４の化合物が開始される（０週目）時点で全てのＵｎｉＮｘ  ｄｂ／ｄｂ  ＡＡＶレニン群において有意なアルブミン尿が存在することを示す。表２４におけるデータは、実施例４の化合物の投与に先立ち２週間のリシノプリル治療が、０週目での食塩水対照群と比較してより低いアルブミン尿の傾向を示す。全てのＡＣＲ値の全体的な統計比較は、リシノプリル群の全てが、食塩水の群と比較してＡＣＲについて有意に改善されることを示す。リシノプリルに添加した実施例４の化合物は、概して、２４および７２ｎｍｏｌ／ｋｇ用量レベルでのリシノプリル単独と比較してさらに有意なＡＣＲ低下効果を示す。２４および７２ｎｍｏｌ／ｋｇの用量レベルの実施例４の化合物はまた、０週目でのそれぞれのベースライン値と比較して、１２週でＡＣＲの有意な低減を示し、一方、食塩水の群は、この時間に渡り有意な増大を示し、リシノプリル単独は、有意な硬化を有しない。
【０３２５】
腎臓の病理の測定
研究終了時に、腎臓を取り出し、ホルマリンにおいて固定し、標準的な方法に従い、パラフィン切片のため処理する。正式な病理学者により、腎臓病変について腎臓の切片を評価する。この糖尿病モデルにおける主な腎臓の病理は、糸球体および間質性線維症における増大、ならびに間質性炎症における増大である。腎臓の病理を、次のスケール：なし（０）、極小（１）、極めて小さい（２）、中程度（３）、顕著（４）および重篤（５）を使用して半定量的にスコア化する。Ｈ＆Ｅ、マッソンのトリクロームおよびＰＡＳ染色した切片を使用して、病理スコアを得る。
【０３２６】
以下の表２５は、腎臓の病理の測定値に対応するデータを示す。示したデータは、列挙したパラメーターについての算術平均±ＳＥＭを表す。全てのデータは、１群当たり４〜７匹の動物のＮ値を表す。
【０３２７】
【表２５】
2019525919.tif 000033
【０３２８】
表２５におけるデータは、リシノプリル＋食塩水治療が、間質性線維症を除き、食塩水対照群と比較して腎臓の病理パラメーターの全てを有意に低減することを示す。表２５におけるデータはまた、リシノプリル＋実施例４の化合物が、食塩水対照群と比較して全てのパラメーターについて腎臓の病理を有意に低減することを示す。表２５におけるデータはさらに、リシノプリル＋実施例４の化合物が、リシノプリル＋食塩水の群と比較して実施例４の少なくとも１回用量レベルという最小値で、メサンギウム基質拡大、尿細管再生、間質性炎症および間質性線維症についての腎臓の病理を有意に低減することを示す。
【０３２９】
概して、これらのデータは、この糖尿病性腎症モデルにおいてリシノプリル＋実施例４の化合物治療で得られる腎機能における改善が、糖尿病性高血圧腎疾患に起因する主な腎臓の病理における低減と共に、腎構造における有意な改善を伴うことを示す。これらのデータは、実施例４の化合物が、糖尿病および高血圧により引き起こされる慢性腎疾患を治療する能力があることを示す。
【０３３０】
順序ロジットモデルを分類別のスコアに近似させること、次に、異なる治療群間の差を比較することにより、Ｒソフトウエアで、病理データを統計的に評価する。アルブミン尿（ＡＣＲ）の統計的分析を、次のものによりＲソフトウエアで行う：１）データを、ログスケールで解析し、異なる治療群に渡る分散を安定させる、２）モデル期間、およびベースラインＡＣＲを共変数として含むので、治療群、時間およびそれらの相互作用と組み合わせたモデルを使用して、データ解析を行う、３）異なる時間でのそれぞれの動物からの知見を、ＣＳ共分散構造を使用して繰り返し測定値として処理する、ならびに４）複数の検定について検定ｐ値を調整しない。ログ変換したデータでの分散分析、およびＪＭＰ  ｖ．８．０ソフトウエア（ＳＡＳ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ）でのスチューデント非対ｔ検定により、全ての他のデータを評価する。解析に先立ち、統計的異常値を除去した。Ｐ値＜０．０５を、統計学的に有意であるとみなした。
【０３３１】
このデータは、本明細書において概説した化合物が、高血圧性腎症により引き起こされる慢性腎疾患を治療する能力があることを示す。
【０３３２】
上述の通り、表１は、実施例１〜７の化合物についてのｈＣＲＨＲ２ｂへのインビトロ活性（ならびにｈＵＣＮ１およびｈＵＣＮ２についてのこのデータ）を提供する。以下の表２６は、実施例９の化合物についてのｃＡＭＰアッセイにおけるｈＣＲＨＲ２ｂを提供する。このデータはさらに、かかる化合物が、ｃＡＭＰアッセイにおいてＣＲＨＲ２アゴニスト活性を有することを示す。
【０３３３】
【表２６】
2019525919.tif 000034
2019525919.tif 000035
【０３３４】
番号を付けた実施形態：
１．式：
Ｘ１ＩＶＸ２ＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＸ３ＥＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＫ＊ＴＮＡＸ４ＩＬＡＱＶ−ＮＨ２
（式中、Ｘ１は、Ｉ残基が、Ｎ末端でアセチル化またはメチル化のいずれかにより修飾されていることを示す、Ｘ２は、ＬまたはＴであり、Ｘ３は、ＬまたはＩであり、Ｘ４は、ＱまたはＥであり、２９位のＫ＊は、式−Ｘ５−Ｘ６（式中、
Ｘ５は、
１〜４つのアミノ酸、１〜４つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）部分、および１〜４つのアミノ酸と１〜４つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）部分の組み合わせからなる群から選択され、
Ｘ６は、Ｃ１４−Ｃ２４脂肪酸である）
の基でのＫ側鎖のイプシロン−アミノ基へのコンジュゲートを介して修飾される）（配列番号１６）、またはその医薬的に許容される塩。
２．Ｘ５が、１〜４つのＥまたはγＥアミノ酸、１〜４つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）部分、および１〜４つのＥまたはγＥアミノ酸と１〜４つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）部分の組み合わせからなる群から選択される、番号を付けた実施形態１の化合物または塩。
３．Ｘ５が、１〜４つのＥまたはγＥアミノ酸と１〜４つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）部分の組み合わせである、番号を付けた実施形態２の化合物または塩。
４．Ｘ５が、２〜４つのγＥアミノ酸と１〜４つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）部分の組み合わせである、番号を付けた実施形態３の化合物または塩。
５．Ｘ５が、２つのγＥアミノ酸と２つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）部分の組み合わせである、番号を付けた実施形態１〜４の化合物または塩。
６．Ｘ６が、式ＣＯ−（ＣＨ２）ｘ−ＣＯ２Ｈ（式中、ｘは、１６、１８、または２０である）の直鎖脂肪酸である、番号を付けた実施形態１〜５のいずれかの化合物または塩。
７．式−Ｘ５−Ｘ６の基が、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−（γＥ）２−ＣＯ−（ＣＨ２）ｘ−ＣＯ２Ｈ（式中、ｘは、１６または１８である）である、番号を付けた実施形態１〜６のいずれか１つの化合物または塩。
８．末端のアミノ酸が、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される、番号を付けた実施形態１〜７のいずれか１つの化合物または塩。
９．Ｘ１が、Ｉ残基が、Ｎ末端でアセチル化により修飾されていることを示し、Ｘ２はＬであり、Ｘ３はＬであり、Ｘ４はＱであり、式−Ｘ５−Ｘ６の基が、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−（γＥ）２−ＣＯ−（ＣＨ２）ｘ−ＣＯ２Ｈ（式中、ｘは、１６または１８である）である（配列番号１７）、番号を付けた実施形態１〜８のいずれか１つの化合物または塩。
１０．ｘが１８である（配列番号２）、番号を付けた実施形態９のいずれか１つの化合物または塩。
１１．ｘが１６である（配列番号１）、番号を付けた実施形態９のいずれか１つの化合物または塩。
１２．Ｘ１は、Ｉ残基が、Ｎ末端でメチル化により修飾されていることを示し、Ｘ２はＬであり、Ｘ３はＬであり、Ｘ４はＱであり、式−Ｘ５−Ｘ６の基が、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−（γＥ）２−ＣＯ−（ＣＨ２）１８−ＣＯ２Ｈである（配列番号４）、番号を付けた実施形態１〜８のいずれか１つの化合物または塩。
１３．Ｘ１は、Ｉ残基が、Ｎ末端でメチル化により修飾されていることを示し、Ｘ２はＬであり、Ｘ３はＬであり、Ｘ３はＱであり、式−Ｘ５−Ｘ６の基が、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−（γＥ）２−ＣＯ−（ＣＨ２）１６−ＣＯ２Ｈである（配列番号４）、番号を付けた実施形態１〜８のいずれか１つの化合物または塩。
１４．Ｘ１は、Ｉ残基が、Ｎ末端でメチル化により修飾されていることを示し、Ｘ２はＴであり、Ｘ３はＬであり、Ｘ４はＥであり、式−Ｘ５−Ｘ６の基が、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−（γＥ）２−ＣＯ−（ＣＨ２）１８−ＣＯ２Ｈである（配列番号４）、番号を付けた実施形態１〜８のいずれか１つの化合物または塩。
１５．Ｘ１は、Ｉ残基が、Ｎ末端でメチル化により修飾されていることを示し、Ｘ２はＬであり、Ｘ３はＬであり、Ｘ４はＥであり、式−Ｘ６−Ｘ６の基が、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−（γＥ）２−ＣＯ−（ＣＨ２）１８−ＣＯ２Ｈである（配列番号４）、番号を付けた実施形態１〜８のいずれか１つの化合物または塩。
１６．Ｘ１は、Ｉ残基が、Ｎ末端でメチル化により修飾されていることを示し、Ｘ２はＴであり、Ｘ３はＩであり、Ｘ４はＥであり、式−Ｘ７−Ｘ６の基が、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−（γＥ）２−ＣＯ−（ＣＨ２）１８−ＣＯ２Ｈである（配列番号４）、番号を付けた実施形態１〜８のいずれか１つの化合物または塩。
１７．番号を付けた実施形態１〜１６のいずれか１つの化合物、ならびに１つまたは複数の医薬的に許容される担体、希釈剤、および賦形剤を含む医薬組成物。
１８．患者におけるＩＩ型糖尿病を治療する方法であって、かかる治療を必要とする患者に有効量の番号を付けた実施形態１〜１６のいずれか１つの化合物または塩を投与することを含む、方法。
１９．かかる治療を必要とする患者に有効量の化合物または塩を投与することが、食餌および運動と合わされる、番号を付けた実施形態１８の方法。
２０．患者における慢性腎疾患を治療する方法であって、かかる治療を必要とする患者に有効量の番号を付けた実施形態１〜１６のいずれか１つの化合物または塩を投与することを含む、方法。
２１．慢性腎疾患が、糖尿病性腎症により引き起こされる、番号を付けた実施形態２０の方法。
２２．慢性腎疾患が、高血圧性腎症により引き起こされる、番号を付けた実施形態２０の方法。
２３．化合物または塩のかかる治療を必要とする患者への投与が、皮下投与である、番号を付けた実施形態１９〜２２のいずれか１つの方法。
２４．治療において使用するための、番号を付けた実施形態１〜１６のいずれか１つの化合物または塩。
２５．ＩＩ型糖尿病の治療において使用するための、番号を付けた実施形態１〜１６のいずれか１つの化合物または塩。
２６．慢性腎疾患の治療において使用するための、番号を付けた実施形態１〜１６のいずれか１つの化合物または塩。
２７．化合物または塩の投与が皮下投与である、番号を付けた実施形態２４〜２６のいずれか１つの化合物または塩。
２８．式：
Ｘ１ＩＶＸ２ＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＸ３ＥＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＫＴＮＡＸ４ＩＬＡＱＶ−ＮＨ２
（式中、Ｘ１は、Ｉ残基が、Ｎ末端でアセチル化またはメチル化のいずれかにより修飾されていることを示し、Ｘ２は、ＬまたはＴであり、Ｘ３は、ＬまたはＩであり、Ｘ４は、ＱまたはＥである）の化合物（配列番号１８）。
２９．式：
【０３３５】
【化８】
2019525919.tif 000036
（式中、
１位のＩｌｅは、場合により、Ｎ末端のアミンにてメチルまたはアセチル基で誘導体化されていてもよく；
３位のＸａａは、ＬｅｕまたはＴｈｒであり；
１０位のＸａａは、ＧｌｙまたはＬｙｓであり；
１４位のＸａａは、ＩｌｅまたはＬｙｓであり；
１５位のＸａａは、ＬｅｕまたはＬｙｓであり；
１６位のＸａａは、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、またはＬｙｓであり；
１７位のＸａａは、ＧｌｕまたはＬｙｓであり；
１８位のＸａａは、ＧｌｎまたはＬｙｓであり；
１９位のＸａａは、ＧｌｕまたはＬｙｓであり；
２１位のＸａａは、ＧｌｎまたはＬｙｓであり；
２２位のＸａａは、ＧｌｕまたはＬｙｓであり；
２４位のＸａａは、ＧｌｕまたはＬｙｓであり；
２６位のＸａａは、ＧｌｎまたはＬｙｓであり；
２７位のＸａａは、ＧｌｎまたはＬｙｓであり；
２８位のＸａａは、ＡｌａまたはＬｙｓであり；
２９位のＸａａは、ＴｈｒまたはＬｙｓであり；
３０位のＸａａは、Ｔｈｒ、ＧｌｕまたはＬｙｓであり；
３３位のＸａａは、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、またはＧｌｕであり；
３７位のＸａａは、Ｇｌｎ、Ｈｉｓ、またはＡｒｇであり；
３８位のＶａｌは、場合により、Ｃ末端のカルボキシルでアミド化される；
但し、１０および１４〜３０位のいずれか正確に１つのＬｙｓのイプシロン−アミンは、−Ｘ５−Ｘ６（式中、Ｘ５は、１〜４つのアミノ酸、および／または１〜４つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）部分であり、Ｘ６は、Ｃ１４−Ｃ２４脂肪酸である）で修飾されており；
１０、１４〜１９、２１、２２、２４、および２６〜３０位のいずれかがＬｙｓであるなら、次に、その位置は、Ｌｙｓである１０、１４−１９、２１、２２、２４、および２６〜３０の１つのみであり；
１０、１４〜１９、２１、２２、２４、および２６〜３０位の１つがＬｙｓであるとき、そのＬｙｓが、Ｘ５−Ｘ６で修飾されている）
の化合物。
【０３３６】
【表２７】
2019525919.tif 000037
2019525919.tif 000038
2019525919.tif 000039
2019525919.tif 000040
2019525919.tif 000041
2019525919.tif 000042
2019525919.tif 000043
【０３３７】
上述の通り、患者がネコのような動物である、ある種の実施形態を設計してもよい。以下は、ヒトおよびいくつかの動物種において見出される様々なウロコルチン２配列の配列表である。
ヒト  ＩＶＬＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＬＥＱＡＲＡＲＡＡＲＥＱＡＴＴＮＡＲＩＬＡＲＶＧＨＣ：４１
マウス  ＶＩＬＳＬＤＶＰＩＧＬＬＲＩＬＬＥＱＡＲＹＫＡＡＲＮＱＡＡＴＮＡＱＩＬＡＨＶ−−−：３８
ラット  ＶＩＬＳＬＤＶＰＩＧＬＬＲＩＬＬＥＱＡＲＮＫＡＡＲＮＱＡＡＴＮＡＱＩＬＡＲＶ−−−：３８
オランウータン  ＩＶＬＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＬＥＱＡＲＡＲＡＡＲＥＱＡＴＴＮＡＲＩＬＡＨＶＧ−−：３９
イヌ  ＩＩＬＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＬＥＱＡＲＡＲＡＳＲＥＱＡＴＴＮＡＲＩＬＡＱＶＧ−−：３９
ウシ  ＩＴＬＳＬＤＶＰＬＧＬＬＱＩＬＬＥＱＡＲＡＲＡＶＲＥＱＡＡＡＮＡＲＩＬＡＨＶＧＨ−：４０
ウマ  ＩＴＬＳＬＤＶＰＶＧＬＬＱＩＬＬＥＱＶＲＡＲＡＡＲＥＱＡＡＡＮＡＲＩＬＡＨＶＧ−−：３９
ブタ  ＩＴＬＳＬＤＶＰＬＧＬＬＱＩＬＬＥＱＡＲＡＲＡＶＲＥＱＡＡＡＮＡＲＩＬＡＨＶＧ−−：３９
ゾウ  ＩＴＬＳＬＤＶＰＬＧＬＬＱＩＬＬＥＱＡＲＩＲＡＡＲＥＱＡＡＡＮＡＲＩＬＡＨＶＧ−−：３９
魚類  ＩＳＬＤＶＰＴＳＩＬＳＶＬＩＤＩＡＫＮＱＤＭＲＴＫＡＡＡＮＡＥＬＭＡＲＩＧ−−−−：３７
【０３３８】
加えて、ネコのウロコルチン２についての情報が、ＧＥＮＢＡＮＫデータベースにおいて見ることができ、以下で再現される。
【０３３９】
ＧＥＮＢＡＮＫ受託番号ＸＲ＿００２１５０７８２（バージョンＸＲ＿００２１５０７８２．１）
【化９】
2019525919.tif 000044
【０３４０】
ＧＥＮＢＡＮＫ受託番号ＸＭ＿００６９２８７２５（バージョンＸＭ＿００６９２８７２５．２）
【化１０】
2019525919.tif 000045
【０３４１】
配列番号１、２、３、５、６および７の分子を使用して、ネコもしくは他の動物において慢性腎疾患および／または糖尿病を治療する、具体的な実施形態を設計してもよい。
【配列表】
2019525919000001.app
【手続補正書】
【提出日】平成31年1月11日(2019.1.11)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式：
Ｘ１ＩＶＸ２ＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＸ３ＥＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＫ＊ＴＮＡＸ４ＩＬＡＱＶ−ＮＨ２
（式中、Ｘ１は、Ｉ残基が、Ｎ末端でのアセチル化またはメチル化のいずれかにより修飾されていることを示し；
Ｘ２は、ＬまたはＴであり；
Ｘ３は、ＬまたはＩであり；
Ｘ４は、ＱまたはＥであり；
２９位の修飾されたＫ残基（「Ｋ＊」）は、式−Ｘ５−Ｘ６（式中、
Ｘ５は、
１〜４つ多いアミノ酸；
１〜４つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）部分；および
１〜４つのアミノ酸と１〜４つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）部分の組み合わせ
からなる群から選択され；
Ｘ６は、Ｃ１４−Ｃ２４脂肪酸である）
の基でのＫ側鎖のイプシロン−アミノ基へのコンジュゲートを介して修飾される）（配列番号１６）の化合物、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項２】
Ｘ５が、
１〜４つのＥもしくはγＥアミノ酸；
１〜４つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）部分；および
１〜４つのＥもしくはγＥアミノ酸と１〜４つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）部分の組み合わせ
からなる群から選択される、請求項１に記載の化合物または塩。
【請求項３】
Ｘ５が、１〜４つのＥもしくはγＥアミノ酸と１〜４つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）部分の組み合わせである、請求項２に記載の化合物または塩。
【請求項４】
Ｘ５が、２〜４つのγＥアミノ酸と１〜４つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）部分の組み合わせである、請求項３に記載の化合物または塩。
【請求項５】
Ｘ５が、２つのγＥアミノ酸と２つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）部分の組み合わせである、請求項３に記載の化合物または塩。
【請求項６】
Ｘ６が、式ＣＯ−（ＣＨ２）ｘ−ＣＯ２Ｈ（式中、ｘは、１６、１８、もしくは２０である）の直鎖脂肪酸である、請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物または塩。
【請求項７】
式−Ｘ５−Ｘ６の基が、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−（γＥ）２−ＣＯ−（ＣＨ２）ｘ−ＣＯ２Ｈ（式中、ｘは、１６または１８である）である、請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物または塩。
【請求項８】
Ｃ末端のアミノ酸が、Ｃ末端の一級アミドとしてアミド化される、請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物または塩。
【請求項９】
Ｘ１が、前記Ｉ残基が、Ｎ末端でのアセチル化により修飾されていることを示し；
Ｘ２がＬであり；
Ｘ３がＬであり；
Ｘ４がＱであり；
前記式−Ｘ５−Ｘ６の前記基が、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−（γＥ）２−ＣＯ−（ＣＨ２）ｘ−ＣＯ２Ｈ（式中、ｘは、１６または１８である）
である、請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物または塩。
【請求項１０】
ｘが１８である、請求項９に記載の化合物または塩。
【請求項１１】
ｘが１６である、請求項９に記載の化合物または塩。
【請求項１２】
Ｘ１が、前記Ｉ残基が、Ｎ末端でメチル化により修飾されていることを示し；
Ｘ２がＬであり；
Ｘ３がＬであり；
Ｘ４がＱであり；
前記式−Ｘ５−Ｘ６の前記基が、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−（γＥ）２−ＣＯ−（ＣＨ２）１８−ＣＯ２Ｈである、
請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物または塩。
【請求項１３】
Ｘ１が、前記Ｉ残基が、Ｎ末端でメチル化により修飾されていることを示し；
Ｘ２がＬであり；
Ｘ３がＬであり；
Ｘ４がＱであり；
前記式−Ｘ５−Ｘ６の前記基が、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−（γＥ）２−ＣＯ−（ＣＨ２）１６−ＣＯ２Ｈである、
請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物または塩。
【請求項１４】
Ｘ１が、前記Ｉ残基が、Ｎ末端でメチル化により修飾されていることを示し；
Ｘ２がＴであり；
Ｘ３がＬであり；
Ｘ４がＥであり；
前記式−Ｘ５−Ｘ６の前記基が、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−（γＥ）２−ＣＯ−（ＣＨ２）１８−ＣＯ２Ｈである、
請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物または塩。
【請求項１５】
Ｘ１が、前記Ｉ残基が、Ｎ末端でメチル化により修飾されていることを示し；
Ｘ２がＬであり；
Ｘ３がＬであり；
Ｘ４がＥであり；
前記式−Ｘ５−Ｘ６の前記基が、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−（γＥ）２−ＣＯ−（ＣＨ２）１８−ＣＯ２Ｈである、
請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物または塩。
【請求項１６】
Ｘ１が、前記Ｉ残基が、Ｎ末端でメチル化により修飾されていることを示し；
Ｘ２がＴであり；
Ｘ３がＩであり；
Ｘ４がＥであり；
前記式−Ｘ５−Ｘ６の前記基が、（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル）２−（γＥ）２−ＣＯ−（ＣＨ２）１８−ＣＯ２Ｈである、
請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物または塩。
【請求項１７】
アミノ酸配列
ＩＶＸ２ＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＸ３ＥＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＴＸ７ＮＡＸ４ＩＬＡＸ８Ｖ−ＮＨ２（配列番号６７）
Ｘ２は、ＬまたはＴであり；
Ｘ３は、ＬまたはＩであり；
Ｘ４は、Ｑ、Ｒ、またはＥであり；
Ｘ７は、ＴまたはＥであり；
Ｘ８は、Ｑ、ＨまたはＲであり、
（式中、修飾されたＫ残基（「Ｋ＊」）は、１０位のアミノ酸残基、もしくは１４位〜３０位を含む任意のアミノ酸残基について置換されており、Ｋ＊は、式−Ｘ５−Ｘ６（式中、
Ｘ５は、
１〜４つのアミノ酸残基；
１〜４つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル部分；および
１〜４つのアミノ酸残基と１〜４つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル部分の組み合わせ
からなる群から選択され；
Ｘ６は、Ｃ１４−Ｃ２４脂肪酸である）
の基に結合されたＫ側鎖のイプシロンアミノ基を有することにより修飾されている）
を含む化合物、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項１８】
Ｘ８が、ＨまたはＱ残基のいずれかである、請求項１７に記載の化合物または塩。
【請求項１９】
Ｘ５が、１もしくは２つのアミノ酸残基および１もしくは２つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル部分を含む、請求項１７に記載の化合物または塩。
【請求項２０】
Ｘ５が、２つのアミノ酸残基および２つの（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル部分を含み、前記２つのアミノ酸残基が、ＥまたはγＥ残基のいずれかである、請求項１９に記載の化合物または塩。
【請求項２１】
Ｘ１が、Ｎ末端でアセチル化またはメチル化のいずれかにより修飾されている、請求項１７に記載の化合物または塩。
【請求項２２】
Ｘ２がＬ残基である、請求項１７に記載の化合物または塩。
【請求項２３】
Ｘ３がＬ残基である、請求項１７に記載の化合物または塩。
【請求項２４】
Ｘ４がＱ残基である、請求項１７に記載の化合物または塩。
【請求項２５】
Ｘ７がＴ残基である、請求項１７に記載の化合物または塩。
【請求項２６】
Ｘ５が、前記合成分子中に（［２−（２−アミノ−エトキシ）−エトキシ］−アセチル部分が存在しないように、１〜４つのアミノ酸残基を含む、請求項１７に記載の化合物または塩。
【請求項２７】
１位の前記Ｉ残基が、前記Ｎ末端でアセチル化もしくはメチル化の１つにより修飾されている、請求項１７に記載の化合物または塩。
【請求項２８】
請求項１〜２７のいずれか１項に記載の化合物または塩、ならびに１つまたは複数の医薬的に許容される担体、希釈剤、および賦形剤を含む、医薬組成物。
【請求項２９】
ＩＩ型糖尿病を治療するための、請求項２８に記載の医薬組成物。
【請求項３０】
慢性腎疾患を治療するための、請求項２８に記載の医薬組成物。
【請求項３１】
前記慢性腎疾患が、糖尿病性腎症により引き起こされる、請求項３０に記載の医薬組成物。
【請求項３２】
前記慢性腎疾患が、高血圧性腎症により引き起こされる、請求項３０に記載の医薬組成物。
【請求項３３】
皮下投与に使用するための、請求項２８〜３２のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項３４】
治療において使用するための医薬の製造における、請求項１〜２７のいずれか１項に記載の化合物または塩の使用。
【請求項３５】
ＩＩ型糖尿病の治療において使用するための医薬の製造における、請求項１〜２７のいずれか１項に記載の化合物または塩の使用。
【請求項３６】
慢性腎疾患の治療において使用するための医薬の製造における、請求項１〜２７のいずれか１項に記載の化合物または塩の使用。
【請求項３７】
式：
Ｘ１ＩＶＸ２ＳＬＤＶＰＩＧＬＬＱＩＬＸ３ＥＱＥＫＱＥＫＥＫＱＱＡＫＴＮＡＸ４ＩＬＡＱＶ−ＮＨ２
（式中、Ｘ１は、Ｉ残基が、Ｎ末端でのアセチル化またはメチル化のいずれかにより修飾されていることを示し；
Ｘ２は、ＬまたはＴであり；
Ｘ３は、ＬまたはＩであり；
Ｘ４は、ＱまたはＥである）（配列番号１８）
の化合物。
【請求項３８】
ネコにおいてＩＩ型糖尿病を治療する方法であって、かかる治療を必要とするネコに、有効量の配列番号１、２、３、５、６、および７のいずれか一つに従う化合物または塩を投与することを含む、方法。
【請求項３９】
ネコにおいて慢性腎疾患を治療する方法であって、かかる治療を必要とするネコに、有効量の配列番号１、２、３、５、６、および７のいずれか一つに従う化合物または塩を投与することを含む、方法。
【国際調査報告】
2019525919.tif 000046
2019525919.tif 000047
2019525919.tif 000048