(57)【要約】  本発明は、腫瘍、特に腎細胞癌（ＲＣＣ）を有する対象の癌治療に対する感受性を予測または監視する方法、癌の適当な治療を選択する方法、癌の治療を改善するのに適した化合物をスクリーニングまたは同定する方法、および対応するキットに関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
腎臓癌を有する対象の、腎臓癌の治療のためのチロシンキナーゼ受容体の阻害剤、またはニボルマブ、アテゾリズマブおよびアベルマブから選択される抗体に対する感受性を評価するためのインビトロの方法であって、前記対象に由来する生物学的試料においてＣＸＣＬ５またはＣＸＣＬ７の発現レベルを決定するステップａ）、およびＣＸＣＬ５またはＣＸＣＬ７の発現レベルが決定されたら、前記ＣＸＣＬ５またはＣＸＣＬ７の発現レベルを（ＣＸＣＬ５またはＣＸＣＬ７の）基準の発現レベルと比較することにより、ｃｃＲＣＣを有する対象が前記チロシンキナーゼ受容体の阻害剤または前記抗体に対して感受性であるかまたは耐性であるかを評価するステップｂ）を含む、方法。
【請求項２】
方法が前記対象に由来する生物学的試料においてＣＸＣＬ５の発現レベルを決定するステップａ）を含む場合、方法が、前記対象に由来する生物学的試料においてＣＸＣＬ７の発現レベルを決定するステップａ’）、およびＣＸＣＬ７の発現レベルが決定されたら、前記ＣＸＣＬ７の発現レベルをＣＸＣＬ７の基準の発現レベルと比較するステップｂ’）をさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
方法が前記対象に由来する生物学的試料においてＣＸＣＬ７の発現レベルを決定するステップａ）を含む場合、方法が、前記対象に由来する生物学的試料においてＣＸＣＬ５の発現レベルを決定するステップａ’）、およびＣＸＣＬ５の発現レベルが決定されたら、前記ＣＸＣＬ５の発現レベルをＣＸＣＬ５の基準の発現レベルと比較するステップｂ’）をさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
対象の腎臓癌を治療するための前記チロシンキナーゼ受容体の阻害剤または前記抗体を対象に投与する前に、ＣＸＣＬ５および／またはＣＸＣＬ７の発現レベルを決定する、請求項１から３までのいずれか１項に記載の方法。
【請求項５】
生物学的試料が血漿試料またはその派生物である、請求項１から４までのいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
チロシンキナーゼ受容体の阻害剤がスニチニブ、アキシチニブ、パゾパニブおよびソラフェニブから選択される、請求項１から５までのいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
チロシンキナーゼ受容体の阻害剤がスニチニブである場合、ＣＸＣＬ５の基準の発現レベルが約１００ｐｇ／ｍｌであり、ＣＸＣＬ７の基準の発現レベルが約２５０ｎｇ／ｍｌである、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
それぞれの基準の発現レベルと同じかまたはそれより低いＣＸＣＬ５および／またはＣＸＣＬ７の発現レベルが前記チロシンキナーゼ受容体の阻害剤または前記抗体に対する対象の耐性を示し、前記基準の発現レベルより高いＣＸＣＬ５および／またはＣＸＣＬ７の発現レベルが前記チロシンキナーゼ受容体の阻害剤または前記抗体に対する対象の感受性を示す、請求項１から７までのいずれか１項に記載の方法。
【請求項９】
方法が、前記対象に由来する生物学的試料においてＣＸＣＬ５およびＣＸＣＬ７のそれぞれの発現レベルを決定するステップ、およびＣＸＣＬ５およびＣＸＣＬ７の発現レベルが決定されたら、前記ＣＸＣＬ５およびＣＸＣＬ７の発現レベルをそれぞれＣＸＣＬ５およびＣＸＣＬ７の基準の発現レベルと比較することにより、対象が前記チロシンキナーゼ受容体の阻害剤または前記抗体に対して感受性であるかまたは耐性であるかを評価するステップを含む、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
チロシンキナーゼ受容体の阻害剤がスニチニブである場合、１００ｐｇ／ｍｌと同じかまたはそれより低いＣＸＣＬ５の発現レベルと共に２５０ｎｇ／ｍｌと同じかまたはそれより低いＣＸＣＬ７の発現レベルがスニチニブに対する対象の耐性を示し、１００ｐｇ／ｍｌより高いＣＸＣＬ５の発現レベルと共に２５０ｎｇ／ｍｌより高いＣＸＣＬ７のレベルがスニチニブに対する対象の感受性を示す、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
腎臓癌を有する対象のために、対象において腎臓癌に対して効率的な、チロシンキナーゼ受容体の阻害剤、またはニボルマブ、アテゾリズマブおよびアベルマブから選択される抗体を含む治療を選択する方法であって、
チロシンキナーゼ受容体の阻害剤、またはニボルマブ、アテゾリズマブおよびアベルマブから選択される抗体を腎臓癌を有する対象に投与する前に、対象の生物学的試料においてＣＸＣＬ５および／またはＣＸＣＬ７の発現レベルを決定するステップａ）、
前記ＣＸＣＬ５および／またはＣＸＣＬ７の発現レベルを（ＣＸＣＬ５および／またはＣＸＣＬ７の）基準の発現レベルと比較するステップｂ）、ここで（ＣＸＣＬ５および／またはＣＸＣＬ７の）基準の発現レベルと同じであるかまたは（ＣＸＣＬ５および／またはＣＸＣＬ７の）基準の発現レベルより低いＣＸＣＬ５および／またはＣＸＣＬ７の発現レベルは、チロシンキナーゼ受容体の阻害剤、またはニボルマブ、アテゾリズマブおよびアベルマブから選択される抗体が、対象において、効率的でないか、または単独で効率的でないことを示す、および、
例えば前記チロシンキナーゼ受容体の阻害剤または前記抗体をＣＸＣＬ５またはＣＸＣＬ７の抗体のような追加の化合物と組み合わせるなど、対象において適当な腎臓癌の治療を選択するステップｃ）を含み、
一方、（ＣＸＣＬ５および／またはＣＸＣＬ７の）基準の発現レベルより高いＣＸＣＬ５および／またはＣＸＣＬ７の発現レベルは、チロシンキナーゼ受容体の阻害剤または抗体が対象において腎臓癌に対して単独で効率的であることを示す、方法。
【請求項１２】
対象が癌性腫瘍の少なくとも部分的な切除を受けた対象である、請求項１から１１までのいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
腎臓癌が転移性明細胞腎臓癌（ｃｃＲＣＣ）である、請求項１から１２までのいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
ｉ）スニチニブ、アキシチニブ、パゾパニブ、およびソラフェニブから選択されるチロシンキナーゼ受容体の阻害剤、またはニボルマブ、アテゾリズマブおよびアベルマブから選択される抗体に対する、腎臓癌を有する対象の感受性または耐性を評価または監視するための、および／またはｉｉ）腎臓癌を有する対象における前記チロシンキナーゼ受容体の阻害剤または抗体の潜在的な毒性を決定するためのキットの使用であって、キットが、少なくともＣＸＣＬ５ポリペプチド結合剤および／またはＣＸＣＬ７ポリペプチド結合剤からなる群から選択される検出手段と、前記結合剤の検出を可能にする分子とを含み、ＣＸＣＬ５および／またはＣＸＣＬ７のそれぞれの基準の発現レベルを提供する説明書を含んでいてもよい、使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、腫瘍を有する対象の癌治療（本明細書では「化学療法」ともいう）に対する感受性を予測または監視する方法、特に腎細胞癌（ＲＣＣ）を有する対象の、チロシンキナーゼ受容体の阻害剤、またはニボルマブ、アテゾリズマブおよびアベルマブから選択される抗体に対する感受性を予測または監視する方法、癌の適当（適切）な治療を選択する方法、癌の治療を改善するのに適した化合物をスクリーニングまたは同定する方法、ならびに対応するキットに関する。腎細胞癌（ＲＣＣ）を有する対象の、チロシンキナーゼ受容体の阻害剤、またはニボルマブ、アテゾリズマブおよびアベルマブから選択される抗体に対する感受性を予測または監視する方法は、典型的には、ステップａ）前記対象に由来する生物学的試料内で少なくともＣＸＣＬ５またはＣＸＣＬ７、好ましくはＣＸＣＬ５およびＣＸＣＬ７の発現レベルを決定し、発現レベルが決定されたら、ステップｂ）前記発現レベルを基準の発現レベルと比較することにより、ｃｃＲＣＣを有する対象がチロシンキナーゼ受容体の阻害剤または抗体に反応するかまたは耐性であるかを評価または監視することを含む。
【背景技術】
【０００２】
腎細胞癌（ＲＣＣ、副腎腫ともいわれる）は、血液をろ過し、老廃物を取り除く腎臓の非常に細い管である近位尿細管の内壁に由来する腎臓癌である。転移性明細胞腎細胞癌（ｃｃＲＣＣ）は成人における腎臓癌のおよそ８０％の症例の原因である最も一般的なものである（Mulders PF et al., 2008, Ned Tijdschr Geneeskd, 152: 376）。また、あらゆる泌尿生殖器腫瘍のうちで最も致死性であることも知られている。初期治療は根治的腎摘出術または腎部分切除術が最も一般的であり、治療処置の頼みの綱であるままである（Rini BI et al., 2008）。腫瘍が腎実質に限定されている場合５年生存率は６０〜７０％であるが、転移が拡がると大幅に低下する。放射線療法および化学療法に対して耐性があるが、いくつかの症例は免疫療法に反応する。スニチニブ、テムシロリムス、ベバシズマブ、インターフェロン−アルファ、およびソラフェニブのような標的癌療法はＲＣＣに関する見通し（無憎悪生存率）を改善したが、改善された生存率はまだ立証されていない。
【０００３】
抗血管新生療法が明細胞腎臓癌（ｃｃＲＣＣ、最も一般的な腎臓癌）で使用されており、緩和された結果が得られている（Escudier et al., 2010）。これらの治療は患者の無増悪生存率を上昇させたが、いくつかの極めてまれな症例を除いて全生存率には影響を及ぼさない。この半分不成功を説明する可能性がある１つの仮説は、腫瘍細胞または腫瘍微小環境の細胞による、ＶＥＧＦまたはその受容体（現在の治療の主たる治療標的）にとって余分な血管新生因子の産生である。本発明者は、ＥＬＲ＋ＣＸＣＬサイトカインが明細胞転移性腎細胞癌（ｃｃＲＣＣ）における生存の予後マーカーとしてＶＥＧＦより関連性があることを示した（Grepin et al., 2014; Grepin et al., 2012）。これらのサイトカインの重要性のため、ＲＣＣ：ＣＸＣＬ１、ＣＸＣＬ５、ＣＸＣＬ７およびＣＸＣＬ８との関連で３つの最も関連がある「予後」サイトカインを同時に標的とするモノクローナル抗体が開発されている（国際公開第２０１４／１８４３８４号）。抗−ＶＥＧＦ抗体とは逆に、これらの抗体は実験動物モデルにおいて腫瘍増殖をかなり低減する。これらの抗体はマウスにおける実験腫瘍増殖を遮断するのにスニチニブ と同様に効果的である。
【０００４】
現在の標準的治療であるスニチニブに対する反応の不均質性（Motzer et al., N Engl J Med, 2007）は真の問題である。治療に反応しそうな患者を認定することは効果のない毒性の製品の投与を制限するための治療上の難問となる。このように、治療に対する反応の予測マーカーの発見は診断時の時間の浪費を回避し、治療上の利益を期待させるであろう。したがって、臨床医は利用可能なものの中から（通常第２または第３の選択治療で投与される）代わりの治療を選ぶであろう（Motzer et al., Lancet Oncol 2013; Motzer et al., N Engl J Med, 2013; Motzer et al., Lancet 2008）。特定の化学療法に反応することができる患者の正確な選択は、患者ができるだけ早く、典型的には診断されたらすぐに最も適当な治療を受けるための解決策である。
【発明の概要】
【０００５】
本発明は、ＣＸＣＬ５が癌、特に腎臓癌、より具体的には腎細胞癌（ＲＣＣ）、特に明細胞腎細胞癌（ｃｃＲＣＣ）または転移性ｃｃＲＣＣの化学療法処置に対する反応の予測マーカーであるという発明者による発見に基づく。発明者はさらに、ＣＸＣＬ５の代わりに、またはＣＸＣＬ５に加えてＣＸＣＬ７を評価する価値を発見した。そこで、本発明は、腫瘍または癌、特に本明細書中で同定される腎臓癌を有する対象の、特定の化学療法処置（「化学療法」）、特にチロシンキナーゼ受容体の阻害剤（本明細書中では「チロシンキナーゼ阻害剤」ともいわれる）、典型的にはチロシンキナーゼ受容体の阻害剤、またニボルマブ、アテゾリズマブおよびアベルマブから選択される抗体にも対する反応を、これらのバイオマーカーのいずれか１つまたはこれらの組合せを用いて予測または評価するための方法およびキットを含む。
本発明との関連で、表現「癌の化学療法処置」および「化学療法」は一般に「癌治療」を示し、例えばチロシンキナーゼ受容体の阻害剤または（モノクローナル）抗体が関与するもののようなあらゆる標的化癌治療を含む。
【０００６】
本明細書に記載されている第１の方法は、癌を有する対象の化学療法に対する感受性、典型的には腎臓癌、より具体的には腎細胞癌（ＲＣＣ）、特に明細胞腎細胞癌（ｃｃＲＣＣ）または転移性ｃｃＲＣＣを有する対象の化学療法に対する感受性を評価（または予測）または監視するためのインビトロまたはエクスビボの方法であり、この方法は、前記対象に由来する生物学的試料においてＣＸＣＬ５またはＣＸＣＬ７の発現レベルを決定するステップａ）、およびＣＸＣＬ５またはＣＸＣＬ７の発現レベルが決定されたら、前記ＣＸＣＬ５またはＣＸＣＬ７の発現レベルをＣＸＣＬ５またはＣＸＣＬ７の基準の発現レベルと比較することにより、腫瘍、典型的には腎臓癌を有する対象が化学療法に対して反応するかまたは耐性であるかを評価または監視するステップｂ）を含む。
【０００７】
本明細書に記載されている特定の方法は、癌、典型的には腎臓癌、より具体的には腎細胞癌（ＲＣＣ）、特に明細胞腎細胞癌（ｃｃＲＣＣ）または転移性ｃｃＲＣＣを有する対象に対して適当な癌の化学療法処置を選択する方法、典型的にはインビトロまたはエクスビボの方法であり、この方法は、前記対象の生物学的試料においてＣＸＣＬ５および／またはＣＸＣＬ７の発現レベルを決定するステップａ）、および前記レベルを対応する（ＣＸＣＬ５および／またはＣＸＣＬ７）の基準の発現レベルと比較するステップｂ）、および対象における癌の適当な化学療法処置を選択するステップｃ）を含み、（ＣＸＣＬ５および／またはＣＸＣＬ７）の基準の発現レベルと同じかまたはそれ以下のＣＸＣＬ５および／またはＣＸＣＬ７の発現レベルは、チロシンキナーゼ受容体の阻害剤、またはニボルマブ、アテゾリズマブおよびアベルマブから選択される抗体が対象において癌に対して単独で効率的ではないことを示し、一方、（ＣＸＣＬ５および／またはＣＸＣＬ７）の基準の発現レベルを超えるＣＸＣＬ５および／またはＣＸＣＬ７発現レベルは、チロシンキナーゼ受容体の阻害剤、またはニボルマブ、アテゾリズマブおよびアベルマブから選択される抗体が対象において癌に対して単独で効率的である（前記チロシンキナーゼ受容体の阻害剤または抗体が対象における癌の適当な化学療法処置である）ことを示す。
また本明細書には、本明細書中で同定される癌を有する対象においてかかる癌の治療を改善するのに適した化合物をスクリーニングまたは同定する方法であって、ＣＸＣＬ５および／またはＣＸＣＬ７の発現を改変するか、またはその異常な発現を補償する試験化合物の能力を決定することを含む、方法も記載される。
【０００８】
さらなる実施形態は、ｉ）癌、特に腎臓癌を有する対象の化学療法に対する感受性または耐性を評価または監視し、および／またはｉｉ）癌、特に腎臓癌を有する対象における前記化学療法の潜在的な毒性を決定するためのキットの使用に関し、キットは、ＣＸＣＬ５またはＣＸＣＬ７に特異的な少なくとも１種の抗体、好ましくはＣＸＣＬ５に特異的な抗体ならびにＣＸＣＬ７に特異的な抗体またはＣＸＣＬ５およびＣＸＣＬ７の両方を特異的に認識する抗体からなる群から選択される検出手段；抗体検出を可能にする分子を含み；また、典型的には対照集団における基準の発現レベルに対応するＣＸＣＬ５および／またはＣＸＣＬ７それぞれの基準の発現レベルを提供する説明書を含んでいてもよい。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
【図１】カプラン−マイヤー法を使用して無増悪生存率曲線を作成し、ログランク検定を使用して生存率曲線間の統計的差異を決定した。スプライン曲線解析を用いてＰＦＳ生存率に対するＣＸＣＬ５カットオフポイント（１００ｐｇ／ｍｌ）を決定した。
【図２】カプラン−マイヤー法を使用して無増悪生存率曲線を作成し、ログランク検定を使用して生存率曲線間の統計的差異を決定した。スプライン曲線解析を用いてＰＦＳ生存率に対するＣＸＣＬ７カットオフポイント（２５０ｎｇ／ｍｌ）を決定した。
【図３】カプラン−マイヤー法を使用して無増悪生存率曲線を作成し、ログランク検定を使用して生存率曲線間の統計的差異を決定した。患者を、上で決定した基準値より高いかまたは低いそのＣＸＣＬ５およびＣＸＣＬ７レベルに従って階層化した。患者０（２つのサイトカインが基準より低い）；患者１（サイトカインの１つが基準より低い）；患者２（２つのサイトカインが基準値より高い）。
【図４】スニチニブで処置したｃｃＲＣＣ患者の無増悪生存率（Ａ）および全生存率（Ｂ）の解析にカプラン−マイヤー法を使用した。ＳＵＶＥＧＩＬトライアル（予測分析）に対して、無増悪生存率を、診断時のＣＸＣＬ７の血漿レベルが２５０ｎｇ／ｍｌのカットオフ値より小さいかまたは大きい患者のサブグループから計算した。統計的有意差（ｐ値）および無病の時間の中央値が示されている。
【図５】スニチニブで処置したｃｃＲＣＣ患者の無増悪生存率の解析にカプラン−マイヤー法を使用した。ＴＯＲＡＶＡトライアル（遡及的解析）（Ａ）では無増悪生存率を診断時のＣＸＣＬ７の血漿レベルが２５０ｎｇ／ｍｌのカットオフ値より小さいかまたは大きい患者のサブグループから計算し、ＳＵＶＥＧＩＬおよびＴＯＲＡＶＡトライアルの組合せでは無増悪生存率（Ｂ）および全生存率（Ｃ）を診断時のＣＸＣＬ７の血漿レベルが２５０ｎｇ／ｍｌのカットオフ値より小さいかまたは大きい患者のサブグループから計算した。統計的有意差（ｐ値）および無病の時間の中央値が示されている。
【図６】ベバシズマブおよびテムシロリムス（Ａ）またはベバシズマブおよびインターフェロン（Ｂ）でｃｃＲＣＣ処置した患者の無増悪生存率の解析にカプラン−マイヤー法を使用した。ＴＯＲＡＶＡトライアルで診断時のＣＸＣＬ５の血漿レベルが０．１ｎｇ／ｍｌのカットオフ値より小さいかまたは大きい患者のサブグループから無増悪生存率を計算した。統計的有意差（ｐ値）および無病の時間の中央値が示されている。
【図７】ベバシズマブおよびテムシロリムス（Ａ）またはベバシズマブおよびインターフェロン（Ｂ）で処置したｃｃＲＣＣ患者の無増悪生存率の解析にカプラン−マイヤー法を使用した。ＴＯＲＡＶＡトライアルでは診断時のＣＸＣＬ７の血漿レベルが２５０ｎｇ／ｍｌのカットオフ値より小さいかまたは大きい患者のサブグループから無増悪生存率を計算した。統計的有意差（ｐ値）および無病の時間の中央値が示されている。
【図８】ｃｃＲＣＣ患者と比較した健常なドナーのＣＸＣＬ５血漿レベル。
【図９】ｃｃＲＣＣ患者（Ａ）と比較した健常なドナーの、ならびにスニチニブに反応する患者およびスニチニブ処置で再発する患者（Ｂ）と比較した健常なドナーのＣＸＣＬ７血漿レベル。
【図１０】ＣＸＣＬ７レベルで階層化された非転移性患者の生存率。ＣＸＣＬ７の予測的な役割を４６人の未処置の患者で評価した。６０ｎｇ／ｍｌより低いＣＸＣＬ７血漿レベルの患者は６０ｎｇ／ｍｌより高い血漿レベルの患者と（中央値３２．９月、ｐ＝０．００１３）と比較してより長いＰＦＳを有していた（＞８０月）。
【図１１】臨床パラメーターの独立性；ＦｕｈｒｍａｎグレードＡ）異なるＦｕｈｒｍａｎグレードの腫瘍を有する患者の血漿でＣＸＣＬ７レベルを試験した。統計的差異は観察されなかった（ｎｓ）。Ｂ）Ｆｕｈｒｍａｎグレード２／３の患者のＰＦＳをその血漿のＣＸＣＬ７に従って試験した。６０ｎｇ／ｍｌより低いＣＸＣＬ７血漿レベルの患者（「低い」）は６０ｎｇ／ｍｌより高い血漿レベルの患者（「高い」）と比較してより長いＰＦＳ（＞８０月）を有していた（中央値４３．０７月、ｐ＝０．０１６９）。Ｃ）Ｆｕｈｒｍａｎグレード４の患者のＰＦＳをその血漿のＣＸＣＬ７に従って試験した。６０ｎｇ／ｍｌより低いＣＸＣＬ７血漿レベルの患者（「低い」）は６０ｎｇ／ｍｌより高い血漿レベルの患者（「高い」）と比較してより長いＰＦＳ（＞８０月）を有していた（中央値１８．０４月、ｐ＝０．０６２１）。これらの結果はより長いＰＦＳの傾向を示した。
【図１２】臨床パラメーターに対する独立性；サイズ（Ｔ１＜７ｃｍ）小さい／中間のサイズ（＜７ｃｍ）の腫瘍を有する患者の血漿でＣＸＣＬ７レベルを試験した。患者のＰＦＳをその血漿のＣＸＣＬ７に従って試験した。６０ｎｇ／ｍｌより低いＣＸＣＬ７血漿レベルの患者（「低い」）は６０ｎｇ／ｍｌより高い血漿レベルの患者（「高い」）と比較してより長いＰＦＳ（＞８０月）を有していた。（中央値４３．０７月、ｐ＝０．０１３１）。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
ＣＸＣＬ５は、上皮由来好中球活性化ペプチド７８（ＥＮＡ−７８）ともいわれるＣＸＣケモカインファミリーに属する小さいサイトカインである。典型的なＣＸＣＬ５のアミノ酸配列は配列番号１の配列を有する。それは、炎症性サイトカインインターロイキン−１または腫瘍壊死因子−アルファによる細胞の刺激により産生される。ＣＸＣＬ５の発現は好酸球でも観察されており、ＩＩ型インターフェロンＩＦＮ−γにより阻害され得る。このケモカインは血管新生特性を保有する好中球の走化性を刺激し、細胞表面ケモカイン受容体ＣＸＣＲ２と相互作用することによってこれらの効果を引き起こす。ＣＸＣＬ５の遺伝子は４つのエクソン上にコードされており、ヒトの染色体４上で幾つかの他のＣＸＣケモカイン遺伝子の間に位置している。ＣＸＣＬ５に対する抗体は既に記載されており、当技術分野で入手可能である。例えば、当業者は、Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓにより作成されたＣＸＣＬ５に特異的な抗体を使用することができる（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ参照番号：ＤＹ２５４）。
【００１１】
ＣＸＣＬ７は、ＣＸＣケモカインファミリーに属する小さいサイトカインであり、ベータ−トロンボグロブリンまたは前血小板塩基性タンパク質（ＰＰＢＰ）のアイソフォームである。ＣＸＣＬ７をコードする典型的な核酸配列は配列番号２である。それは、血小板の活性化後それから大量に放出されるタンパク質であり、有糸分裂誘発、細胞外マトリックスの合成、グルコース代謝およびプラスミノーゲン活性化因子の合成を含めて様々なプロセスを刺激する。ＣＸＣＬ７に対する抗体は既に記載されており、当技術分野で入手可能である。例えば、当業者は、Ｐｅｐｒｏｔｅｃｈにより作成されたＣＸＣＬ７に特異的な抗体の１つを使用することができる（例えばＰｅｐｒｏｔｅｃｈ参照番号９００−Ｋ４０参照）。
【００１２】
ＣＸＣＬ１、ＣＸＣＬ５、ＣＸＣＬ７およびＣＸＣＬ８を同時に標的とする好ましいＣＸＣＬ５およびＣＸＣＬ７抗体は国際公開第２０１４／１８４３８４号に記載されている抗体１２Ａ１０−１３および３５Ｂ１１−８である（それぞれＣＮＣＭ寄託番号：Ｉ−４６１７およびＩ−４６１８に対応するハイブリドーマにより産生される）。抗体１２Ａ１０−１３および／または３５Ｂ１１−８のＣＤＲ配列（配列番号３〜１４およびその任意の組合せから選択される）を含むいずれかの抗体ならびにそのヒト化バージョンは本発明との関連で有利に使用することができる。
【００１３】
本発明において、癌は、慣習的に次の癌療法：免疫療法、特異的キナーゼ阻害剤に基づく治療、血管新生阻害剤に基づく治療、抗体に基づく治療および手術の１つで処置される癌である。本発明との関連で、抗癌薬または抗癌剤（本明細書では一般に「化学療法薬もしくは剤」または「化学療法」ともいわれる）は、中でも、癌の治療に使用されるキナーゼ阻害剤、抗血管新生薬（例えばソラフェニブ）、サイトカイン、ならびにモノクローナル抗体（典型的にはニボルマブ、アテゾリズマブおよびアベルマブから選択される抗体）、およびこれらの任意の組合せを含む。
特異的キナーゼ阻害剤に基づく治療に感受性の癌は慣習的に例えばチロシンキナーゼ阻害剤、セリンキナーゼ阻害剤およびスレオニンキナーゼ阻害剤から選択される化合物を用いて処置される。
癌または腫瘍はいかなる種類の癌または新生物であってもよい。癌は典型的には癌腫、肉腫、リンパ腫、黒色腫、小児科腫瘍および白血病腫瘍から選択される。
癌は好ましくは癌腫、黒色腫および小児科腫瘍から選択される。
【００１４】
癌はさらにいっそう好ましくは癌腫である。特定の癌腫は腎臓癌、例えば明細胞腎臓癌（ｃｃＲＣＣ）、典型的には転移性腎臓癌のような腎臓癌であり、これらは慣習的にサイトカイン［典型的にはインターフェロンアルファまたはインターロイキン２］；例えばチロシンキナーゼ阻害剤、セリンキナーゼ阻害剤［特にｍＴＯＲ阻害剤、典型的にはエベロリムスまたはテムシロリムス］およびスレオニンキナーゼ阻害剤［典型的にはスニチニブ、アキシチニブ、パゾパニブ、ソラフェニブのようなチロシンキナーゼ阻害剤；またはベバシズマブ（アフリベルセプトともいわれるＶＥＧＦ  ｔｒａｐ）］から選択される抗血管新生薬；またはこれらの組合せ、典型的にはサイトカインと抗血管新生薬の組合せ、好ましくはインターフェロンアルファとベバシズマブの組合せで処置される。
【００１５】
本発明との関連で、患者または対象は哺乳動物である。特定の実施形態において、哺乳動物はその年齢または性別は問わずヒトである。患者は典型的には腫瘍を有する。本開示において他に断らない限り、腫瘍は癌性または悪性の腫瘍である。好ましい実施形態において、対象は、前もって癌の治療を経験していない対象、または化学療法薬の最初の投与を受けた対象である。別の好ましい実施形態において、対象は、癌性腫瘍の少なくとも部分的な切除を受けた対象である。対象のもう１つ別の特定の部分集団は転移を有する対象で構成される。
腎臓癌との関連で、対象の特定の部分集団はＭｏｔｚｅｒ分類に従って高度または中程度の再発のリスクの対象で構成される（Motzer RJ et. al., 1999, J Clin Oncol, 17:2530）。これらの対象は、前記分類に従って低度の再発のリスクの対象として分類される対象とは異なる。
本発明の方法の実施は対象から（生物学的な）試料を入手することを含む。試料は好ましくは流体試料であり、血清、血液、血漿、リンパ液、髄液、胸水、腹水、またはこれらの組合せを含み得る。試料は典型的には血液試料、血清試料、血漿試料またはこれらの派生物から選択される。好ましい試料は血漿試料または血小板を含まない（または欠く）血漿試料のようなその派生物である。別の好ましい試料は細胞を含まない流体試料である。
【００１６】
本発明に従う方法は、本明細書に記載されているような癌、特に腎臓癌を有する対象の、化学療法、特にチロシンキナーゼ受容体の阻害剤（本明細書中では「チロシンキナーゼ阻害剤」ともいわれる）、またはニボルマブ、アテゾリズマブおよびアベルマブから選択される抗体に対する感受性を評価（または予測）または監視するためのインビトロまたはエクスビボの方法であり、この方法は、前記対象に由来する生物学的試料において、ＣＸＣＬ５またはＣＸＣＬ７の存在、不在または発現レベルを決定するステップａ）、およびＣＸＣＬ５またはＣＸＣＬ７の発現レベルが決定されたら、前記ＣＸＣＬ５またはＣＸＣＬ７の発現レベルを（ＣＸＣＬ５またはＣＸＣＬ７）の基準の発現レベルと比較することにより、癌を有する対象が化学療法に対して反応するかまたは耐性であるかを評価または監視するステップｂ）を含む。
【００１７】
好ましい実施形態において、方法が前記対象に由来する生物学的試料においてＣＸＣＬ５の存在、不在または発現レベルを決定するステップａ）を含む場合、前記方法は、前記対象に由来する生物学的試料においてＣＸＣＬ７の発現レベルを決定するステップａ’）、およびＣＸＣＬ７の発現レベルが決定されたら、前記ＣＸＣＬ７の発現レベルをＣＸＣＬ７の基準の発現レベルと比較するステップｂ’）をさらに含む。
【００１８】
別の好ましい実施形態において、方法が前記対象に由来する生物学的試料においてＣＸＣＬ７の存在、不在または発現レベルを決定するステップａ）を含む場合、前記方法は、前記対象に由来する生物学的試料においてＣＸＣＬ５の発現レベルを決定するステップａ’）、およびＣＸＣＬ５の発現レベルが決定されたら、前記ＣＸＣＬ５の発現レベルをＣＸＣＬ５の基準の発現レベルと比較するステップｂ’）をさらに含む。
「感受性」または「反応性」とは、本明細書で、患者が化学療法処置に対して反応する見込みが意図されている。
「耐性」とは、本明細書で、患者が化学療法処置に対して反応しない可能性が意図されている。
本発明の予測方法は、個々の患者に対する最も適当な治療手順をできるだけ早く選ぶことにより治療上の決断をするために臨床的に使用することができる。
本発明に従う方法を用いて対象が特定の癌治療に対して耐性であると同定されたら、方法は、最初に前もって選択された化学療法薬の代わりに、もしくはそれと組み合わせて、または異なる化学療法薬と共に使用するべき、典型的には「補償分子」を含む異なる化学療法処置を対象の癌の適当な治療処置として選択するステップをさらに含むのが有利である。
【００１９】
好ましくは、対象の生物学的試料で少なくともＣＸＣＬ５および／またはＣＸＣＬ７の存在、不在または発現レベルを決定するステップは、化学療法処置ステップの前、すなわち対象の癌を処置するための化学療法の対象への投与の前に行われる。それ程好ましくはないが、このステップは化学療法薬の対象への最初の投与後に行うことも可能である。このステップは腫瘍の外科的手術の前に行うことができる。また、癌性腫瘍の少なくとも部分的な切除を受けた対象に行うことも可能である。
【００２０】
特定の実施形態において、本発明に従う方法は腎臓癌、好ましくは明細胞腎細胞癌（ｃｃＲＣＣ）、好ましくは転移性ｃｃＲＣＣを有する対象の感受性を評価、予測または監視するインビトロまたはエクスビボの方法であり、化学療法は、例えばチロシンキナーゼ阻害剤、セリンキナーゼ阻害剤（例えばエベロリムスおよびテムシロリムスから選択されるｍＴＯＲ阻害剤）およびスレオニンキナーゼ阻害剤、好ましくはチロシンキナーゼ阻害剤から選択されるキナーゼ阻害剤に基づく治療であり、より特定的には好ましくはスニチニブ、アキシチニブ、パゾパニブ、およびソラフェニブから選択されるチロシンキナーゼ受容体の阻害剤に基づく治療である。好ましい実施形態において、チロシンキナーゼ受容体の阻害剤はスニチニブである。
もう１つ別の特定の実施形態において、本発明に従う方法は腎臓癌、好ましくは明細胞腎細胞癌（ｃｃＲＣＣ）、好ましくは転移性ｃｃＲＣＣを有する対象の感受性を評価、予測または監視するインビトロまたはエクスビボの方法であり、化学療法はニボルマブ、アテゾリズマブおよびアベルマブから選択される抗体である。
【００２１】
本明細書には典型的に、癌が本明細書に記載されている腎臓癌、特に転移性腎臓癌であり、化学療法がキナーゼ阻害剤に基づく治療、特に本明細書中で同定されるチロシンキナーゼ受容体の阻害剤、または（モノクローナル）抗体に基づく治療であるインビトロまたはエクスビボの方法であって、対象の生物学的試料でＣＸＣＬ５の発現レベルを決定するステップａ）であって、ＣＸＣＬ７の発現レベルを決定することもできる、ステップ、および前記ＣＸＣＬ５の発現レベルをＣＸＣＬ５の基準の発現レベルまたは基準値と比較するステップｂ）であって、ＣＸＣＬ７の発現レベルをＣＸＣＬ７の基準の発現レベルまたは基準値と比較することもできる、ステップを含み、（生物学的試料で測定した）ＣＸＣＬ７であってもよいＣＸＣＬ５の発現レベルがそれぞれの基準の発現レベルと同じかそれより低ければその対象の化学療法に対する耐性を示し、一方（生物学的試料で測定した）ＣＸＣＬ７であってもよいＣＸＣＬ５の発現レベルがそれぞれの基準の発現レベルを超えていればその対象の化学療法に対する感受性を示し、または言い換えるとその化学療法が前記対象で効率的であることを示す、方法が記載される。
【００２２】
本発明の特定の方法は、対象に由来する生物学的試料においてＣＸＣＬ５およびＣＸＣＬ７のそれぞれの発現レベルを決定するステップ、およびＣＸＣＬ５およびＣＸＣＬ７の発現レベルが決定されたら、前記ＣＸＣＬ５およびＣＸＣＬ７の発現レベルをそれぞれＣＸＣＬ５およびＣＸＣＬ７の基準の発現レベルと比較することにより、対象が化学療法、特にチロシンキナーゼ阻害剤または（典型的にはニボルマブ、アテゾリズマブおよびアベルマブから選択される）抗体に対して感受性であるかまたは耐性であるかを評価するステップを含む。
典型的には、「基準値」または「基準の発現レベル」は、癌、特に腎臓癌を有する１以上の対象（基準集団）に由来する対照試料におけるＣＸＣＬ５またはＣＸＣＬ７のレベルであり、典型的には基準集団から得られる場合の中央値である。
一例として、患者が転移性ｃｃＲＣＣ癌である場合、候補の化学療法薬（本明細書では化学療法と同一視される）は本明細書に記載されているようなチロシンキナーゼ受容体の阻害剤、特にスニチニブであり、ＣＸＣＲ５の基準の発現レベルは約１００ｐｇ／ｍｌであり、ＣＸＣＲ７の基準の発現レベルは約２５０ｎｇ／ｍｌである。
特定の実施形態において、チロシンキナーゼ受容体の阻害剤がスニチニブである場合、ＣＸＣＬ５の発現レベルが１００ｐｇ／ｍｌ以下であって、ＣＸＣＬ７の発現レベルが２５０ｎｇ／ｍｌ以下であれば、対象がスニチニブに対して耐性であることを示し、ＣＸＣＬ５の発現レベルが１００ｐｇ／ｍｌ超であって、ＣＸＣＬ７レベルが２５０ｎｇ／ｍｌ超であれば、対象がスニチニブに対して感受性であることを示す。
【００２３】
本発明のいくつかの実施形態において、ＣＸＣＬ５および／またはＣＸＣＬ７の同定は少なくとも１種のＣＸＣＬ５および／またはＣＸＣＬ７ポリペプチド結合剤の使用を含む。ポリペプチドは、特定の実施形態において、抗体である。ＣＸＣＬ５またはＣＸＣＬ７に関連するさらなる実施形態において、抗体はモノクローナル抗体である。好ましくは、ＣＸＣＬ５またはＣＸＣＬ７抗体は、当技術分野の特異的ＣＸＣＬ５またはＣＸＣＬ７抗体から選択される。抗体は二重特異的で、異なるエピトープを認識することができる。抗体は、いくつかの実施形態において、同一のＣＸＣＬ５またはＣＸＣＬ７ポリペプチドの１より多くのエピトープに免疫学的に結合する。
ポリペプチドであるＣＸＣＬ５ポリペプチド結合剤はまた、ＣＸＣＬ５ポリペプチドの受容体であるＣＸＣＲ２の全部または一部を含んでいてもよい。
本発明のいくつかの実施形態において、可溶性のＣＸＣＬ５またはＣＸＣＬ７ポリペプチド結合剤はアプタマーである。
本発明のいくつかの実施形態において、ＣＸＣＬ５またはＣＸＣＬ７結合剤は標識される。さらなる実施形態において、標識は放射活性、蛍光性、化学発光性、酵素、またはリガンドである。また、結合剤が未標識であることも具体的に考えられるが、標識された検出剤と共に使用してもよい。検出剤は、自身の検出または単離を可能にして、結合する別の化合物の直接または間接の検出を可能にする化合物である。間接結合とは、互いに直接結合しないが、同一の化合物または互いに結合する化合物に結合することにより互いに会合するかまたは複合体の状態になっている化合物間の結合をいう。
【００２４】
本発明の他の実施形態は第１のＣＸＣＬ５またはＣＸＣＬ７ポリペプチド結合剤に加えて第２のＣＸＣＬ５またはＣＸＣＬ７ポリペプチド結合剤を含む。第２の結合剤は第１の結合剤に関して上記した実在のもののいずれか、例えば抗体でよい。第２の抗体は第１の抗体と同一または異なるエピトープに結合し得ると考えられる。また、第２の抗体は第１の抗体または第１の抗体により認識されるものとは別のエピトープに結合し得るとも考えられる。
既に論じたように、結合剤は標識されてもされなくてもよい。本発明の方法に使用されるＣＸＣＬ５またはＣＸＣＬ７ポリペプチド結合剤は少なくとも１つの検出剤を用いて認識され得る。検出剤は抗体のようなＣＸＣＬ５またはＣＸＣＬ７ポリペプチド結合剤に結合する抗体であり得る。検出剤抗体は、いくつかの実施形態において、結合剤抗体のＦｃ−領域に結合する。さらなる実施形態において、検出剤はビオチニル化され、追加の実施形態においてストレプトアビジンおよび標識を含む第２の検出剤と共にインキュベートされる。標識は放射活性、蛍光性、化学発光性、酵素、またはリガンドであり得ると考えられる。いくつかの場合において、標識は西洋ワサビペルオキシダーゼのような酵素である。
【００２５】
本発明はまた、ＣＸＣＬ５またはＣＸＣＬ７ポリペプチドを同定するためにＥＬＩＳＡアッセイを使用することに関する方法も含む。いくつかの実施形態において、ＥＬＩＳＡアッセイはサンドイッチアッセイである。サンドイッチアッセイにおいては、１より多くの抗体が使用される。典型的には、マイクロタイタープレートのウェルに問題のタンパク質を認識する一組の抗体を塗布するＥＬＩＳＡ法を使用することができる。次いで、問題のタンパク質を含有するかまたは含有すると疑われる試料を、塗布されたウェルに加える。抗体−抗原複合体の形成を可能にするのに充分なインキュベーション期間の後、プレートを洗浄して未結合の部分を取り除き、検出可能なように標識された第２の結合分子を加えることができる。第２の結合分子を捕獲された試料マーカータンパク質と反応させ、プレートを洗浄し、第２の結合分子の存在を当技術分野で周知の方法を用いて検出する。
【００２６】
また、本明細書には、癌、典型的には腎臓癌、より具体的には腎細胞癌（ＲＣＣ）、特に明細胞腎細胞癌（ｃｃＲＣＣ）または転移性ｃｃＲＣＣを有する対象のために適当な癌の化学療法処置を選択する方法、典型的にはインビトロまたはエクスビボの方法であって、前記対象の生物学的試料において、ＣＸＣＬ５および／またはＣＸＣＬ７の発現レベルを決定するステップａ）、および前記ＣＸＣＬ５および／またはＣＸＣＬ７のレベルを（ＣＸＣＬ５および／またはＣＸＣＬ７）の基準の発現レベルと比較するステップｂ）であって、ｉ）（ＣＸＣＬ５および／またはＣＸＣＬ７）基準の発現レベルと同じかまたはそれより低いＣＸＣＬ５および／またはＣＸＣＬ７の発現レベルは化学療法処置、特にチロシンキナーゼ受容体の阻害剤、またはニボルマブ、アテゾリズマブおよびアベルマブから選択される抗体が対象において癌に対して効率的ではない、特に単独で効率的ではないことを示す、ステップ、および対象において癌の適当な、好ましくは最適な化学療法処置を選択するステップｃ）を含み、一方、ｉｉ）（ＣＸＣＬ５および／またはＣＸＣＬ７）基準の発現レベルを超えるＣＸＣＬ５および／またはＣＸＣＬ７の発現レベルは化学療法処置、特にチロシンキナーゼ受容体の阻害剤、またはニボルマブ、アテゾリズマブおよびアベルマブから選択される抗体が対象において効率的であることを示し、前記化学療法処置は癌の適当な化学療法処置である、方法も記載される。
【００２７】
癌、特に本明細書で定義されている腎臓癌を有する対象のために、対象において癌に対して効率的な癌治療または化学療法、特にチロシンキナーゼ受容体の阻害剤、またはニボルマブ、アテゾリズマブおよびアベルマブから選択される抗体を含む治療を選択する特定の方法は、対象への癌治療の投与前に、癌を有する対象の生物学的試料においてＣＸＣＬ５および／またはＣＸＣＬ７の発現レベルを決定するステップａ）、前記ＣＸＣＬ５および／またはＣＸＣＬ７の発現レベルを（ＣＸＣＬ５および／またはＣＸＣＬ７）基準の発現レベルと比較するステップｂ）であって、（ＣＸＣＬ５および／またはＣＸＣＬ７）基準の発現レベルと同じであるかまたは（ＣＸＣＬ５および／またはＣＸＣＬ７）基準の発現レベルより低いＣＸＣＬ５および／またはＣＸＣＬ７の発現レベルは、癌治療、特にチロシンキナーゼ受容体の阻害剤、またはニボルマブ、アテゾリズマブおよびアベルマブから選択される抗体が対象において効率的ではないか、または単独で効率的ではないことを示す、ステップ、および対象において癌の適当な、好ましくは最適な処置を選択する、例えば前記癌治療、特にチロシンキナーゼ受容体の阻害剤または抗体を典型的にはＣＸＣＬ５抗体のような追加の化合物と組み合わせるステップｃ）を含み、一方、（ＣＸＣＬ５および／またはＣＸＣＬ７）基準の発現レベルを超えるＣＸＣＬ５および／またはＣＸＣＬ７の発現レベルは癌治療、特にチロシンキナーゼ受容体の阻害剤または抗体が対象において癌に対して単独で効率的であることを示す。
【００２８】
癌、特に本明細書で定義されている腎臓癌を有する対象のために対象において癌に対して効率的な癌治療または化学療法、特にチロシンキナーゼ受容体の阻害剤、またはニボルマブ、アテゾリズマブおよびアベルマブから選択される抗体を含む治療を選択する別の特定の方法は、前記対象の生物学的試料においてＣＸＣＬ５の発現レベルおよび加えてＣＸＣＬ７の発現レベルを決定するステップａ）、前記レベルをＣＸＣＬ５およびＣＸＣＬ７の基準の発現レベルと比較するステップｂ）であって、ＣＸＣＬ５の基準の発現レベルと同じかまたはＣＸＣＬ５の基準の発現レベルより低いＣＸＣＬ５の発現レベルならびにＣＸＣＬ７の基準の発現レベルと同じかまたはＣＸＣＬ７の基準の発現レベルより低いＣＸＣＬ７の発現レベルは癌治療、特にチロシンキナーゼ受容体の阻害剤、またはニボルマブ、アテゾリズマブおよびアベルマブから選択される抗体を含む治療が対象において効率的ではないかまたは単独で効率的ではないことを示す、ステップ、および対象において癌の適当な治療を選択し、前記癌治療、特にチロシンキナーゼ受容体の阻害剤、またはニボルマブ、アテゾリズマブおよびアベルマブから選択される抗体を典型的にはＣＸＣＬ５および／またはＣＸＣＬ７抗体のような追加の化合物と組み合わせるステップｃ）を含み、一方、ＣＸＣＬ５の基準の発現レベルを超えるＣＸＣＬ５の発現レベルならびにＣＸＣＬ７の基準の発現レベルを超えるＣＸＣＬ７の発現レベルは癌治療、特にチロシンキナーゼ受容体の阻害剤、またはニボルマブ、アテゾリズマブおよびアベルマブから選択される抗体が対象において癌に対して単独で効率的であることを示す。
【００２９】
もう１つ別の実施形態において、既に記載された方法との関連で決定された適当な癌の治療は、ＣＸＣＬ５および／またはＣＸＣＬ７抗体、またはＣＸＣＬ５およびＣＸＣＬ７の両方に対する抗体、例えば（国際公開第２０１４／１８４３８４号に記載されている）抗体１２Ａ１０−１３または抗体３５Ｂ１１−８のようなＣＸＣＬ１、ＣＸＣＬ５、ＣＸＣＬ７およびＣＸＣＬ８に対する抗体の投与をさらに含む。この（これらの）抗体ならびに抗体１２Ａ１０−１３および／または３５Ｂ１１−８（配列番号３−１４およびこれらの任意の組合せから選択される）またはこれらのヒト化バージョンのＣＤＲ配列を含む抗体は抗−癌治療を対象において効果的にすることができる補償分子として使用することができる。
【００３０】
既に記載された方法との関連で決定された癌の適当な治療は、異なる実施形態に従って、ＳＢ２２５００２（Grepin et al. 2014）、ダニリキシン（ＧＳＫ１３２５７５６−Miller et al.）またはＣＸＣＲ２  ＳＭ（Steele et al.）のようなＣＸＣＬ５および／またはＣＸＣＬ７受容体（ＣＸＣＲ１およびＣＸＣＲ２）の阻害剤の投与を含み得る。
さらに異なる実施形態において、癌の適当な治療は本明細書中で上記した本発明の方法のために対象において単独で効率的ではないと同定された癌治療、特にチロシンキナーゼ 受容体の阻害剤または抗体を含まない。この実施形態において、癌の適当な治療は好ましくは異なる癌治療（「代わりの治療」）であり、典型的には異なるサイトカインまたは抗血管新生薬から選択され、好ましくは本明細書に記載されている異なるチロシンキナーゼ受容体の阻害剤またはｍＴＯＲ阻害剤、または抗体である。
【００３１】
好ましい実施形態において、本発明によってスニチニブが対象において単独で効率的ではないと同定されたとき、代わりの治療として使用される癌の適当な治療は本明細書に記載されているチロシンキナーゼ受容体の阻害剤（典型的にはアキシチニブ、パゾパニブ、ソラフェニブおよびこれらの組合せから選択される）、好ましくはアキシチニブである。代わりの治療に使用されるこの最初に選択されたチロシンキナーゼ受容体の阻害剤はさらに本明細書に記載されているｍＴＯＲ阻害剤（典型的にはエベロリムス、テムシロリムスおよびこれらの組合せから選択される）、好ましくはエベロリムス、および／またはさらに異なるチロシンキナーゼ受容体の阻害剤、好ましくはソラフェニブと組み合わせることができる。特定の実施形態において、ｍＴＯＲ阻害剤および／またはさらに異なるチロシンキナーゼ受容体の阻害剤、および最初に選択されたチロシンキナーゼ受容体の阻害剤は引き続いて使用され、最初に選択されたチロシンキナーゼ受容体の阻害剤が最初に使用され、ｍＴＯＲ阻害剤および／またはさらに異なるチロシンキナーゼ受容体の阻害剤が前記最初に選択されたチロシンキナーゼ受容体の阻害剤の後に使用される。
【００３２】
別の好ましい実施形態において、本発明によってスニチニブが対象において単独で効率的ではないと同定されたとき、代わりの治療として使用される癌の適当な治療は本明細書に記載されているｍＴＯＲ阻害剤（典型的にはエベロリムス、テムシロリムスおよびこれらの組合せから選択される）、好ましくはエベロリムスである。代わりの治療に使用されるこの最初に選択されたｍＴＯＲ阻害剤はさらに本明細書に記載されている少なくとも１種のチロシンキナーゼ受容体の阻害剤（典型的にはアキシチニブ、パゾパニブ、ソラフェニブおよびこれらの組合せから選択される）、好ましくはアキシチニブ単独、または同時に使用してもまたは引き続いて使用してもよいアキシチニブとソラフェニブ、ソラフェニブとスニチニブ、またはアキシチニブ、ソラフェニブおよびスニチニブの組合せと組み合わせることができる。組合せで使用されるとき、アキシチニブは好ましくは最初に使用され、ソラフェニブおよび使用してもよいスニチニブは後に（この順に）使用される。
【００３３】
さらなる好ましい実施形態において、本発明によってスニチニブが対象において単独で効率的ではないと同定されたとき、代わりおよび／または組み合わせた治療として使用される癌の適当な治療はニボルマブ、アテゾリズマブおよびアベルマブから選択されるモノクローナル抗体である。
腫瘍を有する対象の化学療法に対する感受性を評価するための本明細書に記載されている方法ならびに適当な化学療法処置を選択するための本明細書に記載されている方法において、典型的にはＥＬＩＳＡおよびラジオイムノアッセイのような、問題の化合物の存在を決定するかまたは発現レベルを測定するための当業者に公知の古典的な方法を使用することができる。
【００３４】
いくつかの実施形態において、本発明は、癌、典型的には腎臓癌を患う対象の治療を監視する方法に関し、この方法は、ｉ）治療前または治療中対象から得た試料のＣＸＣＬ５および／またはＣＸＣＬ７のレベルを決定し、ｉｉ）治療後または治療中後に対象から得た試料のＣＸＣＬ５および／またはＣＸＣＬ７のレベルを決定し、ｉｉｉ）ステップｉ）で決定されたレベルをステップｉｉ）で決定されたレベルと比較し、ｉｖ）ステップｉｉ）で決定されたレベルがステップｉ）で決定されたレベルを超えているとき治療が有効であると結論付けるか、またはステップｉｉ）で決定されたレベルがステップｉ）で決定されたレベルと同じであるかまたはステップｉ）で決定されたレベルより低いとき治療が有効ではないか、または十分効率的ではないと結論付けるステップを含む。
治療が有効でないかまたは十分効率的ではないと同定されたとき、適当な、好ましくは最適な代わりの癌の治療処置を選択する本明細書中上記のステップを含む方法を実行するのが有利である。
【００３５】
癌を予防または治療するための候補の治療剤をスクリーニングする方法も本発明の一部として含まれる。この方法は典型的にはインビトロまたはエクスビボで行われる方法である。インビトロまたはエクスビボで行われるとき、例えば試験化合物を投与した対象からの試料に対して行うことができる。
本明細書に記載されている方法は典型的には腫瘍を有する対象において癌の治療を改善するのに適した化合物をスクリーニングまたは同定する方法であり、前記方法はＣＸＣＬ５および／またはＣＸＣＬ７の発現を改変するか、またはその異常な（典型的にはないかまたは不充分な）発現を補償する試験化合物の能力を決定することを含む。
【００３６】
特定の実施形態において、本発明は、本明細書に記載されている癌に対する候補の治療剤をスクリーニングする方法に関し、この方法は、ｉ）複数の候補化合物を準備し、ｉｉ）候補化合物を、ＣＸＣＬ５および／またはＣＸＣＬ７を発現する癌細胞株、または治療される対象に由来する癌細胞（Grepin R., Plos one 2014）と、ＣＸＣＬ５および／またはＣＸＣＬ７の発現を調節する作用物質の存在下で接触させ、ｉｉｉ）癌細胞株または治療される対象に由来する癌細胞により発現されるＣＸＣＬ５および／またはＣＸＣＬ７のレベルを決定し、ｉｖ）ステップｉｉｉ）で決定されたレベルを候補化合物の不在下で決定されたレベルと比較し、ｖ）ステップｉｉｉ）で決定されたレベルが候補化合物の不在下で決定されたレベルと比較して低下しているとき候補化合物を積極的に選択するステップを含む。
【００３７】
候補化合物は天然または合成の化合物であり得る。
典型的には、候補化合物はサイトカインおよび抗血管新生薬から選択される。抗血管新生薬は例えばチロシンキナーゼ阻害剤、セリンキナーゼ阻害剤（特にｍＴＯＲ阻害剤）、またはスレオニンキナーゼ阻害剤であり得る。
候補化合物は腎臓癌のような癌腫、特にｃｃＲＣＣの治療における効率が試験される任意の化合物であることができる。ボラセルチブおよびフォレチニブは臨床アッセイとの関連でｃｃＲＣＣの治療におけるその効率の試験を受けている化合物の例である。
本発明に従う候補化合物は既に合成された化合物のライブラリー、またはデータベースで構造が決定される化合物のライブラリー、または改めて合成された化合物のライブラリーから選択され得る。
【００３８】
特定の実施形態において、本発明に従う候補化合物は抗体であり得る。本発明の抗体は、例えば、問題の抗原配列に対して免疫化された動物、特にマウスまたはラットの脾臓細胞から古典的な方法に従って形成され得るハイブリドーマにより産生することができる。本発明のこの実施形態に従う抗体は、ＨおよびＬ鎖をコードするマウスおよび／またはヒトのゲノムＤＮＡ配列またはＨおよびＬ鎖をコードするｃＤＮＡクローンから出発して組換えＤＮＡ技術によって作成されたマウス抗体のヒト化バージョンであってもよい。あるいは、抗体はヒトの抗体であり得る。かかるヒト抗体は、例えば、重症複合免疫不全（ＳＣＩＤ）マウスのヒト末梢血リンパ球（ＰＢＬ）再増殖によって、またはヒト抗体を産生することができるトランスジェニック非ヒト動物を用いることによって製造される。また、これらの抗体に由来するＦａｂ、Ｆ（ａｂ）’２およびｓ（「単鎖可変断片」）のような断片も、元々の結合特性を保持していることを条件として、本発明の一部を形成する。かかる断片は一般に、例えば、パパイン、ペプシン、または他のプロテアーゼを用いる抗体の酵素消化によって作成される。当業者には周知のように、モノクローナル抗体またはその断片は各種用途向けに改変することができる。酵素、蛍光性、または放射活性型の適当な標識で本発明に含まれる抗体を標識することができる。典型的な抗体はＣＸＣＬ５および／またはＣＸＣＬ７抗体として新たに同定された抗体である。
【００３９】
いくつかの場合において、候補の治療剤が同定され、さらなる試験が必要とされ得る。いくつかの実施形態において、さらなる試験は候補治療剤（または治療的であることが確認された作用物質）の品質管理および／または安全性の懸念を評価することである。いくつかの実施形態において、本発明の方法は、治療剤（または候補治療剤）の癌、典型的には腎臓癌に対する有効性を関連動物モデルでアッセイする方法を含む。
【００４０】
また、本明細書には、腎臓癌を有する対象に癌転移を起こすリスクがあるかどうかを評価する方法も記載されており、この方法は、本明細書に記載されている対象の生物学的試料、典型的には血漿試料でＣＸＣＬ７発現レベルを決定するステップ、および前記ＣＸＣＬ７発現レベルをＣＸＣＬ７の基準の発現レベルと比較するステップを含み、基準の発現レベルを超えるＣＸＣＬ７発現レベルは対象に癌転移を起こすリスクがあるかまたは既に癌転移が生じていることを示し、基準の発現レベル以下のＣＸＣＬ７発現レベルは対象に癌転移を起こすリスクがないことを示す。
先の方法の結果癌転移を起こすリスクがあると同定された対象は、典型的には、本明細書に記載されている化学療法、典型的にはチロシンキナーゼ阻害剤、好ましくはスニチニブ、またはニボルマブ、アテゾリズマブおよびアベルマブから選択される抗体で治療するべき対象である。
先の方法の結果癌転移を起こすリスクがないと同定された対象は、典型的には、本明細書に記載されている化学療法で治療するべきではない対象である。
【００４１】
本発明はまた、癌、例えば腎臓癌を有する対象の化学療法に対する感受性または耐性を評価または監視するためのキットも含む。特定の実施形態において、キットは、場合により適切な容器手段に入った、少なくとも１種のＣＸＣＬ５ポリペプチド結合剤（典型的にはＣＸＣＬ５に特異的な抗体、例えばＲ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ参照番号ＤＹ２５４により作成されたＣＸＣＬ５特異的抗体）および／または少なくとも１種のＣＸＣＬ７ポリペプチド結合剤（典型的にはＣＸＣＬ７に特異的な抗体、例えばＰｅｐｒｏｔｅｃｈにより作成されたＣＸＣＬ７特異的抗体の１つ、例えばＰｅｐｒｏｔｅｃｈ参照番号９００−Ｋ４０）からなる群から選択される検出手段を含み；結合剤（典型的には抗体）検出を可能にする分子を含んでもよく；また、対照または基準集団に由来する生物学的試料におけるＣＸＣＬ５および／またはＣＸＣＬ７の基準の発現レベルを提供する説明書を含んでいてもよい。
【００４２】
さらなる実施形態において、結合剤は標識されているか、または検出剤がキット内に含まれている。キットは組織培養皿または多数のウェルがあるプレートのような非反応性の固体支持体に結合したＣＸＣＬ５および／またはＣＸＣＬ７ポリペプチド結合剤を含んでいてもよいと考えられる。さらに、かかるキットは本発明のいくつかの実施形態において少なくとも１つ、典型的には２つ（ＣＸＣＬ５およびＣＸＣＬ７ポリペプチド結合剤の各々に対して１つずつ）の検出可能な作用物質を含むと考えられる。いくつかの実施形態において、本発明は、適切な容器手段内に、（ａ）ＣＸＣＬ５またはＣＸＣＬ７ポリペプチドの全てまたは一部を特異的に認識する作用物質、好ましくはＣＸＣＬ５ポリペプチドの全てまたは一部を特異的に認識する作用物質およびＣＸＣＬ７ポリペプチドの全てまたは一部を特異的に認識する作用物質；および（ｂ）作用物質がＣＸＣＬ５またはＣＸＣＬ７ポリペプチドの全てまたは一部を特異的に認識することができるかどうか決定するのに使用することができる陽性対照を含む、本発明の方法を実施するためのキットに関する。キットはまた、ＣＸＣＬ５および／またはＣＸＣＬ７ポリペプチドの可視化その他の検出を可能にする、比色分析または酵素アッセイのための試薬のような他の試薬も含み得る。
【００４３】
本発明はさらに、ｉ）癌、特に腎臓癌を有する対象の、化学療法、特にスニチニブ、アキシチニブ、パゾパニブおよびソラフェニブから選択されるチロシンキナーゼ受容体の阻害剤、またはニボルマブ、アテゾリズマブおよびアベルマブから選択される抗体に対する感受性または耐性を評価または監視するための、および／またはｉｉ）癌、特に腎臓癌を有する対象における前記化学療法の潜在的な毒性を決定するための、本明細書に記載されているキットの使用に関する。
【００４４】
本出願を通じて各種の文献が、本発明が属する分野の技術水準を記載している。これらの文献の開示は参照により本開示に組み入れられる。
本発明の他の特性および利点は（図１〜９を参照して）以下の実験欄に記載されるが、これらは例示であって本出願の範囲を限定するものではない。
【００４５】
実験部分
（例１）
明細胞腎細胞癌（ｃｃＲＣＣ）におけるスニチニブ反応の予測バイオマーカーの発見
患者／方法論
患者は、プロモーターとしてｔｈｅ  Ｃｅｎｔｒｅ  Ａｎｔｏｉｎｅ  Ｌａｃａｓｓａｇｎｅを、リクルーターセンターとしてｔｈｅ  Ｃｌｉｎｉｑｕｅ  ｄｅ  Ｍｏｕｇｉｎｓ、ｔｈｅ  Ｃｌｉｎｉｑｕｅ  Ｓａｉｎｔ  Ｊｅａｎ  ｄｕ  Ｌａｎｇｕｅｄｏｃ  （Ｔｏｕｌｏｕｓｅ）、ｔｈｅ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔ  Ｄａｎｉｅｌ  Ｈｏｌｌａｒｄ  （Ｇｒｅｎｏｂｌｅ）、およびＡｓｓｉｓｔａｎｃｅ  Ｐｕｂｌｉｑｕｅ  Ｈｏｐｉｔａｕｘ  ｄｅ  Ｍａｒｓｅｉｌｌｅ（Ｃｅｎｔｒｅ  ｈｏｓｐｉｔａｌｉｅｒ  ｄｅ  ｌａ  Ｔｉｍｏｎｅ）を有する多施設臨床トライアルである臨床トライアルＳＵＶＥＧＩＬ８に含まれるコホート由来である。
【００４６】
【表１】
2019518970.tif 000002
2019518970.tif 000003
方法論
統計学
各々のサイトカインの基準レベルを、無増悪生存率に対するハザード比のスプライン曲線で得られたカットオフから決定した。
結果
統計的研究の結果は、診断時のＣＸＣＬ５およびＣＸＣＬ７のレベルがスニチニブによる処置に対する反応を予測させることを示している。
【００４７】
ＣＸＣＬ５
研究により、健常なドナーで検出されるレベル（中央値５６５範囲：５１〜２３６７ｐｇ／ｍｌ）（Tacke et al., 2011）より低い血漿レベルである１００ｐｇ／ｍｌ血漿のＣＸＣＬ５の基準の発現レベル（閾値）が明らかにされた。観察された値の中央値（範囲０〜１００ｐｇ／ｍｌ）に対応する１００ｐｇ／ｍｌより低い血漿レベルの患者は１００ｐｇ／ｍｌより高い（範囲：１００〜８２１．８ｐｇ／ｍｌ）血漿レベルを有する患者と比較して悪い結果であった。
【００４８】
ＣＸＣＬ７
研究により、健常なドナーで検出されるレベル（平均１８３±３２１ｎｇ／ｍｌ）（Glenister et al., 2008; Ayache et al., 2006）と等価な血漿レベルである２５０ｎｇ／ｍｌ血漿のＣＸＣＬ７の基準の発現レベル（閾値）が明らかになった。観察された値（範囲１３９．２〜２５０ｎｇ／ｍｌ）の中央値に対応する２５０ｎｇ／ｍｌより低い血漿レベルの患者は２５０ｎｇ／ｍｌより高い血漿レベル（範囲：２５０〜４８５．２ｎｇ／ｍｌ）を有する患者と比較して悪い結果であった。
【００４９】
２つのパラメーター（ＣＸＣＬ５およびＣＸＣＬ７）の組合せ
統計的研究では、スニチニブに対する反応を予測する能力に対する２つのパラメーターの累積効果に焦点を合わせた。すなわち、患者の２つの集団を、０および１つのパラメーターが前もって決定された閾値より高いかまたは低い患者、および両方のパラメーターが閾値より高いかまたは低い患者に階層化した。１００ｐｇ／ｍｌより高いＣＸＣＬ５の血漿レベルおよび２５０ｎｇ／ｍｌより高いＣＸＣＬ７の血漿レベルを有する患者はより長い時間スニチニブに対して感受性である。
結論
手術後および治療を開始する直前のサイトカインＣＣＬ５およびＣＸＣＬ７の正常値に近いレベルはスニチニブに対する反応を予測させる。
【００５０】
（例２）
明細胞腎細胞癌（ｃｃＲＣＣ）におけるスニチニブ反応の予測バイオマーカー
患者および方法
患者
適格の患者は年齢１８歳以上で、組織学的に確認された転移性ｃｃＲＣＣを有しており、固形癌の治療効果判定のためのガイドライン（Ｒｅｓｐｏｎｓｅ  Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  Ｃｒｉｔｅｒｉａ  ｉｎ  Ｓｏｌｉｄ  Ｔｕｍｏｒｓ）（ＲＥＣＩＳＴ）ｖ１．１による測定可能な病気が存在していた。全ての患者が書面によるインフォームドコンセントを提出した。ＳＵＶＥＧＩＬトライアル（ＮＣＴ００９４３８３９）は多施設共同単一群試験であった。ＴＯＲＡＶＡトライアル（ＮＣＴ００６１９２６８）を検証コホートとして用いた。患者の特性および結果は以前に記載されている（Negrier et al., 2011）。
有効性および安全性
研究の主要エンドポイントはＣＸＣＬ５およびＣＸＣＬ７の血漿レベルと全奏効率（ＯＲＲ）との相互関係を評価することであった。反応は研究者の判断によって評価した。
副次的エンドポイントは、生存している人々または進行していない患者に対して最後の追跡調査で検閲されたＣＸＣＬ５および／またはＣＸＣＬ７の血漿レベルと全生存率（ＯＳ）および無増悪生存率（ＰＦＳ）との相互関係を評価することであった。
安全性は、各サイクルの終了時に（スニチニブの４週後）有害事象および物理的検査の証拠資料によって評価した。有害事象はＮａｔｉｏｎａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅの有害事象共通用語規準、バージョン３．０を使用して格付けした。
【００５１】
生化学的解析
血液試料を遠心分離し、血漿を集め、−８０℃で保存した。ＣＸＣＬ５およびＣＸＣＬ７の血漿レベルはそれぞれＲ＆Ｄ（参照番号ＤＹ２５４）およびＰｅｐｒｏｔｅｃｈキット（参照番号９００−Ｋ４０）を用いてＥＬＩＳＡにより決定した。ＣＸＣＬ５  検出には純粋な血漿または１／５希釈を用い、１／１００希釈を用いてＣＸＣＬ７を検出した。
【００５２】
統計的解析
６１人の患者について、この研究は両側０．０５固定アルファリスクで反応とケモカイン血漿レベルとの０．４の相関係数を示す９０％の検出力を提供することが計算された。副次的エンドポイントはＰＦＳおよびＯＳであった。スピアマンの相関関係は最良の反応速度とケモカインの定量レベルとの間で実行された。ＰＦＳおよびＯＳに対するＣＸＣＬ５およびＣＸＣＬ７カットオフポイント（それぞれ０．１および２５０ｎｇ／ｍｌ）は平滑化スプライン曲線解析（Ｒソフトウェア、バージョン３．２．２）を用いて決定した。カプランマイヤー法を用いて生存率曲線を作成し、検閲したデータの解析をＣｏｘモデルを用いて行った。ＳＵＶＥＧＩＬコホートで決定した予測カットオフポイントをＴＯＲＡＶＡコホートのために用いた。
健常ドナー血漿
血漿は独立した科学審査委員会の勧告に従ってヘルシンキ宣言を受けたインフォームドコンセントのある健常なドナーから得た。
【００５３】
結果
患者および病理学パラメーター
２００９年３月から２０１３年１０月までに、３７人の患者がフランスの５つのセンターでＳＵＶＥＧＩＬトライアルに登録された。初期診断時、年齢の中央値は６３．６歳であった。全ての患者が腎摘出術を受ける。１３人の患者（３５％）が局所または遠位の節の浸潤を有し、６人の患者（１６％）が遠位のリンパ節転移を有していた。１１人（３０％）の患者がＦｕｈｒｍａｎグレード１−２、そして２６人（７０％）の患者がＦｕｈｒｍａｎグレード３−４の腫瘍を有していた。診断から転移の出現までの時間は１７人の患者（４５．９％）では１年より短く、２０人の患者（５４．１％）では１年より長かった。１６人（４３％）の患者が良好なＭＳＫＣＣスコアを有し、１４人（３８％）の患者が中間または悪いＭＳＫＣＣスコアを有していた。集団特性および病理学パラメーターをまとめて表２に示す。検証コホートに含まれたＴＯＲＡＶＡトライアルからの患者の特性も表２に記載する。
【００５４】
【表２】
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【００５５】
前向きコホートにおける生存率（ＰＦＳおよびＯＳ）およびＣＸＣＬ５／７血漿レベルに対する相関
ＰＦＳの中央値は２０．１月であり、ＯＳの中央値は２４．６月であった。ＣＸＣＬ５およびＣＸＣＬ７の血漿レベルを、診断時およびスニチニブ処置の異なるサイクルを通じて測定した。病気の進行とサイトカイン血漿レベルの時間に沿った変動との間には相関は観察されなかった。診断時の血漿レベルのみがＰＦＳと相関した。
【００５６】
２５０ｎｇ／ｍｌより低い（範囲１３９．２〜２５０ｎｇ／ｍｌ）ＣＸＣＬ７血漿レベルの患者は２５０ｎｇ／ｍｌより高い（範囲２５０〜４８５．２ｎｇ／ｍｌ−２７．５、ｐ＝０．０１３）血漿レベルの患者と比較してより短いＰＦＳ（１５．１月）を有する（図４Ａ）。
０．１ｎｇ／ｍｌより低い（範囲０〜０．１ｎｇ／ｍｌ）ＣＸＣＬ５血漿レベルの患者も、血漿レベルが０．１ｎｇ／ｍｌより高い（範囲：０．１〜０．８２ｎｇ／ｍｌ）患者に対する２７月と比較して、ＰＦＳの中央値が１４．９月と悪い結果を有していた。ｐ＝０．０４（図１Ａ）
ＣＸＣＬ７（カットオフ：２５０ｎｇ／ｍｌ）のレベルもＯＳと相関していた。実際、２５０ｎｇ／ｍｌより低い血漿レベルの患者は２５０ｎｇ／ｍｌより高い血漿レベルの患者（３４．４月、ｐ＝０．００１）（図４Ｂ）と比較してより低いＯＳの中央値（２０．５月）を有していた。
【００５７】
検証遡及的コホート（スニチニブグループ）における生存率（ＰＦＳおよびＯＳ）およびＣＸＣＬ５および／またはＣＸＣＬ７血漿レベルとの相互関係
ＣＸＣＬ５およびＣＸＣＬ７の予測的な役割を独立の遡及的コホート（ＴＯＲＡＶＡトライアル）においてスニチニブで処置した１６人の患者で評価した。
２５０ｎｇ／ｍｌより低いＣＸＣＬ７血漿レベルの患者は２５０ｎｇ／ｍｌより高い血漿レベルの患者（達しなかった、ｐ＝０．０４７）と比較してより短いＰＦＳを有していた（８．６月）（図５Ａ）。
両方のコホートを組み合わせることによって、統計的有意差が改善された。実際、２５０ｎｇ／ｍｌより低いＣＸＣＬ７血漿レベルの患者は２５０ｎｇ／ｍｌより高い血漿レベルの患者（２７．７月、ｐ＝０．００２）と比較してより短いＰＦＳの中央値（８．３月）を有していた（図５Ｂ）。
２５０ｎｇ／ｍｌより低いＣＸＣＬ７血漿レベルの患者は２５０ｎｇ／ｍｌより高い血漿レベルの患者（３４．４月、ｐ＝０．０００２５）と比較してより短いＯＳ（２０．７月）を有していた（図５Ｃ）。
【００５８】
ベバシズマブ／テムシロリムスまたはベバシズマブ／インターフェロングループに対する遡及的コホートにおけるＰＦＳおよびＯＳとＣＸＣＬ５および／またはＣＸＣＬ７血漿レベルとの相互関係
スニチニブの有効性に対するＣＸＣＬ５／７の予測的な役割を決定するために、発明者は、ベバシズマブ／テムシロリムスまたはベバシズマブ／インターフェロンアルファで処置したＴＯＲＡＶＡ臨床トライアルの患者の部分集合でＣＸＣＬ５／７の血漿レベルを試験した。両方のサブグループで、ＣＸＣＬ５（ＣＸＣＬ５＜０．１ｎｇ／ｍｌ、ＰＦＳの中央値：１０．５または２４．６月、ＣＸＣＬ５＞０．１ｎｇ／ｍｌ、ＰＦＳの中央値：８または１３．９月、ｐ＝０．９７１または０．６０８、図６ＡおよびＢ）およびＣＸＣＬ７（ＣＸＣＬ７＜２５０ｎｇ／ｍｌ、ＰＦＳの中央値：７．８または２１月、ＣＸＣＬ５＞２５０ｎｇ／ｍｌ、ＰＦＳの中央値：９．６または２２．２月、ｐ＝ＮＳ、図７Ａ〜Ｃ）の血漿レベルは長いまたは短いＰＦＳまたはＯＳの患者を区別しなかった。
追加の予備解析
発明者は、２４人の健常ドナーおよび３７人のｃｃＲＣＣ患者（原発腫瘍の外科的切除後）の血漿中のＣＸＣＬ５およびＣＸＣＬ７のレベルを比較した。ＣＸＣＬ７およびＣＸＣＬ５のレベルはｃｃＲＣＣ患者（それぞれ１．４倍および６倍）（図９Ａおよび図８Ａ）の方が低い。また、スニチニブで再発する患者は、ＣＸＣＬ７血漿の濃度が健常ドナーとあまり変わらない反応性の患者と比較して低下した血漿のＣＸＣＬ７レベルを有する（図９Ｂ）。
【００５９】
考察
ｃｃＲＣＣに対する幾つかの治療法の開発およびＰＦＳの増大にも関わらず、治癒的処置は現在のところ存在しない。初発腫瘍およびその後の転移（Gerlinger et al., 2014）の不均質性のため、スニチニブに対する反応は極めて変化しやすい。２つの主要な制約がある。第１のものは患者の生存率の改善に関する。第２は経済的なものであり、標的とする治療法の高いコストに関連する。治療および経済的な必須事項を調整するためには、治療の有効性のたくましい予測マーカーが確認されなければならない。臨床実施で管理できるためには、プロトコルは病院の技術基盤に移すのが容易でなければならず、非侵襲性で少量の血液または尿試料に応用可能でなければならない。
【００６０】
発明者は、前向き多施設臨床トライアル（ＳＵＶＥＧＩＬ）の枠内で、かかるマーカー血管新生および炎症誘発性のサイトカインＣＸＣＬ７を確認した。これは、発明者の結果の妥当性を強調する別の患者コホートで裏付けられた。また、ＣＸＣＬ７は、他の薬剤の組合せで処置した患者にはＰＦＳまたはＯＳを示さなかった。これらの結果はスニチニブの有効性に対するＣＸＣＬ７の予測的な価値を示している。標的が等価であれば、このような結果はアキシチニブ、パゾパニブおよびソラフェニブに外挿することができると考えられる。これらの結果はさらにニボルマブ、アテゾリズマブおよびアベルマブに外挿することができよう。実際、Ｌｉｕらは腫瘍細胞に対するＰＤＬ−１のスニチニブ依存性の誘導を示した。
結論
発明者は、ＣＸＣＬ５、ＣＸＣＬ７およびこれらの組合せをスニチニブの有効性の予測マーカーとして強調した。発明者は独立の前向きコホートおよび遡及的コホートにおける患者に対して再発および死の低いまたは高いリスクの閾値を確立した。
【００６１】
（例３）
非転移性患者（Ｍ０）におけるＣＸＣＬ７血漿レベルと生存率との相互関係
４６人の非転移性患者（Ｍ０）を研究に含めた。これらの患者の無増悪生存率の中央値は４６．３月（ＰＦＳ）であった。４６人の患者のうち１９人は様々な時間の後転移性になった。これらの患者の血漿を例２に記載したように分析した。
ＣＸＣＬ７発現の中央値は６０ｎｇ／ｍｌであった。この閾値をＰＦＳ分析のカットオフ値として選んだ。
ＣＸＣＬ７血漿レベルはＦｕｈｒｍａｎグレードおよび腫瘍サイズと比較して生存率の独立したマーカーである。
【００６２】
参考文献
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2019518970.tif 000008
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
2019518970.tif 000018
【図１１Ａ−Ｂ】
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【図１１Ｃ】
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【図１２】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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