(57)【要約】  本発明は、高分子材料および生体材料の分野に属し、ポリマー、セグメントとしてのポリマーを含むブロックコポリマー、その製造方法およびブロックコポリマーの製造方法、ブロックコポリマー、およびポリマー、ブロックコポリマー、ミセル粒子および/またはベシクル粒子を含む組成物を含む。本発明で提供されるポリマーは、医薬製剤、免疫製剤、および遺伝子送達試薬などの分野における新規の生物医学材料として使用することができる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（I）の繰返し単位を含むポリマー：
【化１】
2019504177.tif 000020
式中、Xは-SO-または- SO2-である;
mは1~100であり、例えば1~10,10~20,20~30,30~40,40~50,50~60,60~70,70~80,80~90または90~100である;
nは1~10であり、例えば、2~5,3~7,4~6,5~10,6~8または7~10である;
好ましくは、mは1~10であり、例えば、1,2,3,4,5,6,7,8,9または10である;、より好ましくは、mは3である;
好ましくは、nは2~5であり、例えば、2,3,4または5である;より好ましくは、nは3である;
好ましくはm = 3である;n = 3である；
好ましくは、前記ポリマーはホモポリマーである;
好ましくは、前記ポリマーは400~300000の数平均分子量を有する。
【請求項２】
式（II）の構造を有する、請求項1に記載のポリマー：
【化２】
2019504177.tif 000021
式中、X、m及びnは請求項1における記載と同じ意味を有する;
kは10~1000であり、例えば、10~50,10~100,50~100,100~200,200~300,300~400,400~500,500~600,600~700,700~800,800~900又は900~1000である;
好ましくは、kは10~100であり、例えば10~20,20~30,30~40,40~50, 50~60, 60~70,
70~80,80~90,90~100,10~50または50~100である;
Wは末端基である;好ましくは、Wは-ORである;より好ましくは、-ORは開始剤の残基である；
好ましくは、Rは
【化３】
2019504177.tif 000022
である;v = 1~6であり、例えば、1,2,3,4,5または6である；
好ましくは、Rは、一般式：
【化４】
2019504177.tif 000023
を有し、式中、i = 0,1,2,3または4である;、Zは、
【化５】
2019504177.tif 000024
から選択される；より好ましくはi = 0である;Zはベンジルである;
好ましくは、m = 3、n = 3、k = 10~100である；
好ましくは、m = 3、n = 3、k = 10~100、およびRはベンジルである。
【請求項３】
化合物1をモノマーとして用いて重合反応を行う工程を含む、請求項1または2に記載のポリマーの製造方法であって、
ここで、化合物1は、式（III）の構造を有する；
【化６】
2019504177.tif 000025
式中、Xおよびmは請求項1における記載と同じ意味を有する；
t = 1~10、例えば、1~4,2~5,3~7,4~6,5~10,6~8または7~10であり、例えば、1,2,3,4,5,6,7,8,9または10である；
好ましくは、前記重合反応は、開始剤の存在下で行われる；
好ましくは、前記開始剤は、一般式
【化７】
2019504177.tif 000026
を有し、ここで、v = 1~6であり、例えば、1,2,3,4,5または6である；
好ましくは、前記開始剤はアルコール化合物である; 好ましくは、アルコール化合物はROHである;、Rは一般式
【化８】
2019504177.tif 000027
を有し、ここで、i = 0,1,2,3または4である;Zは、
【化９】
2019504177.tif 000028
から選択される； 好ましくは、ROHはベンジルアルコールである;
好ましくは、前記重合反応は、触媒の存在下で行われる；
好ましくは、前記触媒は、1,5,7-トリアザビシクロ[4.4.0]デク-5-エン（TBD）、1,8-ジアザビシクロ[5.4.0]ウンデク-7-エン（DBU）、ジフェニルホスフェート、4-ジメチルアミノピリジン（DMAP）、有機アルミニウム化合物、スズ化合物、希土類化合物、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される；
好ましくは、前記触媒は、リン酸ジフェニルおよび4-ジメチルアミノピリジン（DMAP）からなる群から選択される、
製造方法。
【請求項４】
以下の工程：
（1）化合物1、前記開始剤および前記触媒を10~100：1：1~10のモル比で混合する;
好ましくは、前記開始剤はベンジルアルコールである;
好ましくは、前記触媒は、リン酸ジフェニルおよび4-ジメチルアミノピリジン（DMAP）からなる群から選択される、工程と；
（2）工程（1）で得られた混合物を実質的に水及び酸素を含まない条件下（例えば、不活性ガスの保護下）で、15℃~75℃、例えば、15°C-25°C、25°C-45°C、45°C-65°C、25°C-65°Cまたは65-75°Cの反応温度で、0.5-240時間、5~5時間、5~10時間、10~24時間、24~48時間、48~72時間、72~120時間、120~168時間または168~240時間の反応時間で重合反応させる工程と；
（3）場合によって、前記反応をクエンチするためのクエンチャー（例えば、トリエチルアミン）を加え、好ましくは、クエンチャーの量は、前記触媒の2~10当量、例えば、2~5,5~8または8~10の当量である工程と; 
（4）生成物を精製する;好ましくは、濃縮、透析および/または凍結乾燥によって前記生成物を精製する工程と；
を含む、請求項3に記載の方法。
【請求項５】
式（I）の繰り返し単位からなるセグメントを含むブロックポリマーであって、
好ましくは、前記ポリマーはジブロックコポリマーである；
好ましくは、前記ジブロックコポリマーは、式（IV）の構造を有する：
【化１０】
2019504177.tif 000029
式中、X、W、m、nおよびkは請求項1または2における記載の意味を有する；
hは2~10、例えば、2-5,3-7,4-6,5-10,6-8または7-10である;
jは10~1000、例えば、10~50,10~100,50~100,100~200,200~300,
300~400,400~500,500~600,600~700,700~800,800~900又は900~1000である；
好ましくは、hは2~5、例えば、2,3,4または5である;より好ましくは、hは4である；;
好ましくは、jは10~100、例えば、10~20,20~30,30~40,40~50,50~60,60~70,
70~80,80~90,90~100,10~50または50~100である;
好ましくは、m = 3、n = 3、k = 10~100、Rはベンジルである;、h = 4である;
好ましくは、m = 3、n = 3、k = 10~100、Rはベンジルである;、h = 4、およびj = 10~100である、
ブロックポリマー。
【請求項６】
式（II）の構造を有するポリマーを用いて第2モノマーの重合反応を開始させる工程を含む、請求項5に記載のブロックコポリマーの製造方法であって、
好ましくは、前記重合反応は、触媒の存在下で行われる；
好ましくは、第2モノマーは、4~13個の環原子を有するラクトンンから選択される、例えばε-カプロラクトである;
好ましくは、前記触媒は、1,5,7-トリアザビシクロ[4.4.0]デク-5-エン（TBD）、1,8-ジアザビシクロ[5.4.0]ウンデク-7-エン（DBU）、ジフェニルホスフェート、4-ジメチルアミノピリジン（DMAP）、有機アルミニウム化合物、スズ化合物、希土類化合物、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される；
好ましくは、前記触媒は、リン酸ジフェニルおよび4-ジメチルアミノピリジン（DMAP）からなる群から選択される；
好ましくは、前記方法は以下の工程：
（1）精製された又は精製されていない式（II）の構造を有するポリマーを合成する工程と；
（2）重合反応を実施するために第2モノマーを加え、好ましくは、実質的に水及び酸素を含まない条件下（例えば、不活性ガスの保護下で）で重合反応を実施する工程と；
（3）場合によって、クエンチャーを加えて反応をクエンチする工程と; 
（4）生成物を精製し、好ましくは、濃縮、透析および/または凍結乾燥によって生成物を精製する工程と；
を含む、ブロックコポリマーの製造方法。
【請求項７】
請求項5に記載のブロックコポリマー（block copolymer）を含有するミセル粒子であって、
好ましくは、前記ミセル粒子は、90~110nmの粒子サイズを有する；
好ましくは、前記ミセル粒子には、ポリペプチド、DNA、RNAおよび/または低分子化合物などの薬物が充填されている；
好ましくは、前記ミセル粒子は、以下の工程：
（1）ブロックコポリマーを有機溶媒に溶解して溶液を得る工程と；
（2）工程（1）で得られた溶液を水に滴下して混合物を得工程と；
（3）工程（2）で得られた混合物を透析バッグに入れ、透析を水中で行う工程と；
を含む方法によって調製される、ミセル粒子。
【請求項８】
ベシクル粒子（vesicle particle）であって、
好ましくは、前記ベシクル粒子は150~250nmの粒径を有する；
好ましくは、前記ベシクル粒子には、ポリペプチド、DNA、RNAおよび/または小分子化合物などの薬物が充填されている；
好ましくは、前記ベシクル粒子は、以下の工程：
（1）請求項3に記載のブロックコポリマーを有機溶媒に溶解して溶液を得る工程と；
（2）工程（1）で得られた溶液を水に注入し、有機溶媒が完全に揮発するまで攪拌する工程と；
（3）工程（2）で得られた生成物を遠心分離し、濾過する工程と；
を含む方法によって調製される、
請求項5に記載のブロックコポリマーを含むベシクル粒子。
【請求項９】
医薬組成物であって、
好ましくは、前記薬物は、ポリペプチド、DNA、RNAおよび低分子化合物からなる群から選択される;
好ましくは、前記医薬組成物は、製剤、例えば、医薬製剤または免疫製剤の形態で存在する、
請求項1または2に記載のポリマー、請求項5に記載のブロックコポリマー、請求項7に記載のミセル粒子および/または請求項8に記載のベシクル粒子、および薬剤を含む、医薬組成物。
【請求項１０】
組成物であって、
好ましくは、前記組成物は、薬学的に許容される補助物質である;
好ましくは、前記組成物は、遺伝子トランスフェクション試薬などの遺伝子送達試薬である;
好ましくは、前記組成物は免疫アジュバントである、
請求項1または2に記載のポリマー、請求項5に記載のブロックコポリマー、請求項7に記載のミセル粒子および/または請求項8に記載のベシクル粒子を含む、組成物。
【請求項１１】
式（III）の構造を有する化合物であって、
【化１１】
2019504177.tif 000030
式中、Xは-SO-または-SO2である;
mは1~100であり、例えば、1~10,10~20,20~30,30~40,40~50,50~60, 60~70,70~80, 80~90または90~100である;
t = 1~10であり、例えば、1~4,2~5,3~7,4~6,5~10,6~8または7~10であり、例えば、1,2,3,4,5,6,7,8,9または10である；
好ましくは、mは1~10であり、例えば、1,2,3,4,5,6,7,8,9または10である;、より好ましくは、mは3である;
好ましくは、tは2~5であり、例えば、2,3,4または5である;、より好ましくは、tは3である、
化合物。
【請求項１２】
式（III）の構造を有する化合物をモノマーとして用いて製造されたポリマーであって、
好ましくは、前記ポリマーは、ホモポリマー、ランダムコポリマー、ブロックコポリマー、グラフトコポリマーまたは交互コポリマー（alternating copolymer）である；
好ましくは、前記ポリマーは式（I）、式（II）または式（IV）の構造を有する、
ポリマー。
【請求項１３】
製造方法において、
式（V）の構造を有する化合物の酸化反応を行う工程を含み、
【化１２】
2019504177.tif 000031
式中、mおよびtは請求項11における記載と同じ意味を有する；
好ましくは、前記方法は、過酸化水素またはメタクロロ過安息香酸（mCPBA）を酸化剤として用いて酸化反応を行う工程を含む；
好ましくは、前記方法は、過酸化水素を酸化剤として用いて酸化反応を行う工程を含む；前記方法によって得られる化合物は、式（III）の構造を有し、式中、Xは-SO-である;
好ましくは、前記方法は、メタクロロ過安息香酸（mCPBA）を酸化剤として用いて酸化反応を行う工程を含む；前記方法によって得られる化合物は、式（III）の構造を有し、式中、Xは-SO2-である、
請求項11に記載の化合物の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、高分子および生物医学材料の分野に属し、ポリマー、セグメントとしてのポリマーを含むブロックコポリマー、前記ポリマーを調製し、ブロックコポリマーを調製する方法、ブロックから調製されたミセル粒子またはベシクル粒子（vesicle particle）、ブロックコポリマー（block copolymer）、ミセル粒子および/またはベシクル粒子を含む組成物を提供する。本発明で提供されるポリマーは、医薬製剤、免疫製剤、遺伝子送達試薬などの分野における新規な生物医学材料として使用することができる。
【背景技術】
【０００２】
脂肪族ポリエステル材料は、それらの良好な生体適合性および生分解性の理由で非常に貴重な生物医学材料のクラスである。しかしながら、脂肪族ポリエステルは、親水性が低く、生物医学材料の分野におけるそれらの広範な用途に影響を与え、制限する。
【０００３】
別の態様では、重要な医療補助材料としてのポリエチレングリコール（PEG）は、優れた親水性、高い生体適合性および生物学的不活性ならびに免疫原性がないため、生物医学の様々な分野で広く使用されている。特に、ポリエチレングリコールは、インビボ循環時間および薬物の安定性を効果的に改善し、薬物送達のための有効な材料として使用することができ、タンパク質、ポリペプチド、DNA、RNAおよび小分子の送達に広く使用される ドラッグデリバリーの分野で重要な役割を果たしている。
【０００４】
しかしながら、PEGベースのドラッグデリバリーシステムの幅広い応用により、PEGのいくつかの潜在的な欠点および短所も、徐々に一般の人々から注目を集めている。ポリエチレングリコールはポリエーテル構造を有するため、その最も重要な欠点の1つは、その固有の非生分解性である。重合度の低いPEGは腎臓経由で排泄され、重合度の高いPEGでは腎臓経由の排泄率が著しく低下し、体内に蓄積する。
【０００５】
したがって、PEGの生体適合性および親水性を有するだけでなく、ポリエステルの生分解性も有する生体医用材料が求められている。中国特許ZL201310169131.8には、親水基を導入してδ-バレロラクトン化合物を機能的に変性し、開環重合を制御してポリエステルを得るポリエステルの製造方法が開示されている。この方法で製造されたポリエステルは、ポリエチレングリコールに比べて生分解性を有するが、その親水性はそれほど良好ではなく、水への溶解度は10~20mg / mLに過ぎない。さらに、そこから調製された両親媒性ブロックコポリマーは、溶液中に安定なミセルまたはベジクル（vesicle）を形成することができない。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明において、他に特定しない限り、本明細書で使用される科学用語および技術用語は、当業者によって一般に理解される意味を有する。また、本明細書に含まれる実験室操作は、対応する分野で広く使用されているルーチン操作である。本発明をより良く理解するために、関連用語の定義および説明は以下のように提供される。
【０００７】
本明細書で使用される「ミセル粒子」という用語は、濃度がある臨界値を超えるときに疎媒性部分（例えば疎水性部分）または溶媒親和性部分（例えば親水性部分）の相互作用によって、溶媒（例えば水）中の両親媒性分子（例えば、両親媒性ブロックコポリマー）によって形成される固体コアーシェル構造を有するアセンブリを指し、ここで、前記コアは分子の疎媒性部分（例えば疎水性部分）によって形成され、前記シェルは分子の溶媒親和性部分（例えば親水性部分）によって形成される。前記濃度は、溶媒中の分子の臨界ミセル濃度（CMC）である。両親媒性ブロックコポリマーのミセル粒子は、例えば、溶液中での自己集合（self-assembly）によって形成することができる。
【０００８】
本明細書で使用される「ベジクル粒子」という用語は、疎媒性部分（例えば疎水性部分）または溶媒親和性部分（例えば親水性部分）の相互作用によって、溶媒中の両親媒性分子（例えば、両親媒性ブロックコポリマー）によって形成される二重膜構造を有する閉じた中空のアセンブリを指す。前記ベシクルの中空部には溶媒が含まれていてもよい。前記両親媒性ブロックコポリマーのベシクル粒子は、例えば、溶液中での自己集合によって形成することができる。
【０００９】
本明細書で使用される用語「粒子サイズ」は、「等価粒子サイズ（equivalent particle size）」を指し、これは、測定される粒子のある物理的性質または物理的挙動が一定の直径を有する均質な球体（または組合せ物）のものと最も類似する場合、球体（または組み合わせ）の直径は、測定される粒子の等価粒子サイズ（または粒子サイズ分布）とされる。
【００１０】
本明細書で使用される用語「ポリペプチド」は、タンパク質を含む。
【００１１】
本明細書で使用される用語「小分子化合物」は、500未満の分子量を有する化合物を指す。
【００１２】
本明細書中で使用される用語「薬学的に許容される補充物質」は、薬物の製造および調製に使用され、安全性について合理的に評価され、医薬製剤に含まれている有効成分以外の物質を指し、賦形剤として作用し、担体として作用し、安定性を増強し、可溶性を増強し、可溶化し、持続放出し、制御放出するなどの1つ以上の機能を有することができる。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
本発明者は、深い研究を行い、創造的な仕事をすることにより、側基（side group）を有するラクトンモノマーを得た。ここで、スルホン基またはスルホキシド基は、側基をラクトン構造に結合させるための架橋単位として使用される。本発明者は驚くべきことに、ラクトンモノマーは親水性が良好で親水性ポリエステルが得られ、前記ポリエステルも良好な生分解性を有する；ポリエステルから両親媒性ブロックコポリマーを合成することができ、モノマーの種類と比率を調整することにより、ブロックコポリマーの親水性及び疎水性を調節することができたことを見出した。したがって、以下の発明が提供される。
【００１４】
一態様では、本発明は、式（I）の繰返し単位を含むポリマーを提供する：
【化１】
2019504177.tif 000002
式中、Xは-SO-または- SO2-である;
mは1~100であり、例えば1~10,10~20,20~30,30~40,40~50,50~60,60~70,70~80,80~90または90~100である;
nは1~10であり、例えば、1-4, 2-5, 3-7, 4-6, 5-10, 6-8または7-10であり、例えば、1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 または10である;
好ましくは、mは1~10であり、例えば、1,2,3,4,5,6,7,8,9または10である;、より好ましくは、mは3である;
好ましくは、nは2~5であり、例えば、2,3,4または5である;、より好ましくは、nは3である;
好ましくはm = 3である;、n = 3である；
好ましくは、前記ポリマーはホモポリマーである;
好ましくは、前記ポリマーは400~300000、例えば、400-1000, 1000-5000, 5000-10000, 10000-50000, 50000-100000, 100000-200000 または 200000-300000の数平均分子量を有する。
【００１５】
好ましい実施形態では、ポリマーは式（II）の構造を有する。
【化２】
2019504177.tif 000003
式中、X、mおよびnは上記と同じ意味をゆする。
kは10~1000であり、例えば、10~50,10~100,50~100,100~200,200~300,300~400,400~500,
500~600,600~700,700~800,800~900又は900~1000である。
Wは末端基である;、好ましくは、Wが-ORである;、より好ましくは、-ORが開始剤の残基である。
好ましい実施形態では、kは10~100であり、例えば、10~20,20~30,30~40,40~50,50~60,60~70,70~80,80~90,90~100,10~50または50~100である。
好ましい実施形態では、Rは、
【化３】
2019504177.tif 000004
である;、v = 1~6であり、例えば、1,2,3,4,5または6である。
好ましい実施形態において、Rは、以下の一般式
【化４】
2019504177.tif 000005
を有する。ここで、i = 0,1,2,3または4である;、Zは、
【化５】
2019504177.tif 000006
から選択され、より好ましくはi = 0である;、Zはベンジルである。
好ましい実施形態では、m = 3、n = 3、およびk = 10~100である。
好ましい実施形態では、m = 3、n = 3、k = 10~100、およびRはベンジルである。
【００１６】
一態様では、本発明は、化合物1をモノマーとして用いて重合反応を行う工程を含む、ポリマーの調製方法を提供する。化合物1が式（III）の構造を有する。
【化６】
2019504177.tif 000007
（式中、Xおよびmは前記と同じ意味を有する。
t = 1~10、例えば、1~4,2~5,3~7,4~6,5~10,6~8または7~10であり、例えば、1,2,3,4,5,6,7,8,9または10である。
好ましい実施形態では、重合反応は開始剤の存在下で行われる。
【００１７】
好ましい実施形態において、前記開始剤は、一般式
【化７】
2019504177.tif 000008
を有し、
式中、v = 1~6、例えば、1,2,3,4,5または6である。
好ましくは、前記開始剤はアルコール化合物である;; 好ましくは、アルコール化合物はROHである;、Rは次の一般式
【化８】
2019504177.tif 000009
を有し、ここで、i = 0,1,2,3または4である;、Zは、
【化９】
2019504177.tif 000010
から選択され、好ましくは、ROHはベンジルアルコールである。
【００１８】
好ましい実施形態では、前記重合反応は、触媒の存在下で行われる；好ましくは、前記触媒は、1,5,7-トリアザビシクロ[4.4.0]デク-5-エン（TBD）、1,8-ジアザビシクロ[5.4.0]ウンデク-7-エン（DBU）、ジフェニルホスフェート、4-ジメチルアミノピリジン（DMAP）、有機アルミニウム化合物、スズ化合物、希土類化合物、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される；好ましくは、前記触媒は、リン酸ジフェニルおよび4-ジメチルアミノピリジン（DMAP）からなる群から選択される。
【００１９】
好ましい実施形態では、前記方法は以下の工程を含む：
（1）化合物1、前記開始剤および前記触媒をモル比10~100：1：1~10、例えば、10~50：1：1~10,50~100：1：1~10,10~100：1：1~5,10~100：1：5~10、例えば、10：1：1、10：1：10,100：1：1,100：1：10,50：1：1,50：1：5で混合する;
好ましくは、前記開始剤はベンジルアルコールである;
好ましくは、前記触媒は、リン酸ジフェニルおよび4-ジメチルアミノピリジン（DMAP）からなる群から選択される；
（2）工程（1）で得られた混合物を実質的に水及び酸素を含まない条件下（例えば、不活性ガスの保護下）で、15℃~75℃、例えば15°C-25°C、25°C-45°C、45°C-65°C、25°C-65°Cまたは65-75°Cの反応温度で、0.5~240時間、例えば、5~5時間、5~10時間、10~24時間、24~48時間、48~72時間、72~120時間、120~168時間または168~240時間の反応時間で重合反応させる工程;
（3）場合によって、反応をクエンチするためのクエンチャー（例えば、トリエチルアミン）を加え、好ましくは、クエンチャーの量は、2~10、例えば、前記触媒の2~5,5~8または8~10の当量;および
（4）生成物を精製すること;好ましくは、濃縮、透析および/または凍結乾燥によって生成物を精製する工程。
【００２０】
別の態様では、本発明は、式（I）の繰返し単位からなるセグメントを含むブロックポリマーを提供する。
【００２１】
好ましい実施形態では、前記ポリマーはジブロックコポリマーであり、例えば、ブロックコポリマーの1つのセグメントは式（I）の繰り返し単位からなり、他のセグメントは疎水性ポリマーセグメント、例えば、ポリ（L-ラクチド）、ポリグリコリドまたはポリカプロラクトンなどである。
【００２２】
好ましい実施形態において、前記ブロックコポリマーは、式（IV）の構造を有する：
【化１０】
2019504177.tif 000011
（式中、X、W、m、nおよびkは、上記の記載と同じ意味を有する；
hは2~10であり、例えば、2-5,3-7,4-6,5-10,6-8または7-10、例えば、2,3,4,5,6,7,8,9または10である；
jは10~1000であり、例えば、10~50,10~100,50~100,100~200,200~300,300~400,400~500,500~600,600~700,700~800,800~900または900~1000である；
好ましい実施形態では、hは2~5であり、例えば、2,3,4または5である;、より好ましくは、hは4である；
好ましい実施形態では、jは10~100であり、例えば、10~20,20~30,30~40,40~50,50~60,60~70,70~80,80~90,90~100,10~50または50~100である；
好ましい実施形態では、m = 3、n = 3、k = 10~100、Wは-OR、Rはベンジル、およびh = 4である；
好ましい実施形態では、m = 3、n = 3、k = 10~100、Wは-OR、Rはベンジル、h = 4、およびj = 10~100である。
【００２３】
別の態様では、本発明は、式（II）の構造を有するポリマーを使用して第2モノマーの重合反応を開始させる工程を含む、ブロックコポリマーを調製する方法を提供する。
【００２４】
好ましい実施形態では、第2モノマーは、ε-カプロラクトンなどの4~13個の環原子を有するラクトンから選択される。
【００２５】
好ましい実施形態では、前記重合反応は、触媒の存在下で行われる；好ましくは、前記触媒は、1,5,7-トリアザビシクロ[4.4.0]デク-5-エン（TBD）、1,8-ジアザビシクロ[5.4.0]ウンデク-7-エン（DBU）、ジフェニルホスフェート、4-ジメチルアミノピリジン（DMAP）、有機アルミニウム化合物、スズ化合物、希土類化合物、およびそれらの任意の組合せからなる群から選択される。好ましくは、前記触媒は、リン酸ジフェニルおよび4-ジメチルアミノピリジン（DMAP）からなる群から選択される。
【００２６】
好ましい実施形態では、本方法は以下の工程を含む：
（1）精製された又は精製されていない式（II）の構造を有するポリマーを合成する工程;
（2）重合反応を実施するために第2モノマーを加えること、好ましくは実質的に水及び酸素を含まない条件下（例えば、不活性ガスの保護下で）で重合反応を実施する工程。
（3）場合によって、クエンチャーを加えて反応をクエンチする工程; および
（4）生成物を精製すること、好ましくは、濃縮、透析および/または凍結乾燥によって生成物を精製する工程。
【００２７】
別の態様では、本発明は、上記記載のブロックコポリマーを含むミセル粒子を提供する。
【００２８】
好ましい実施形態では、ミセル粒子は90~110nm,例えば、95nm、96nm、97nm、98nm、99nm、100nm、101nm、102nm、103nm、104nm、105nm、106nm、107nm、108nm、109nmまたは110nmの粒径を有する。
【００２９】
好ましい実施形態では、ミセル粒子には、ポリペプチド、DNA、RNAおよび/または小分子化合物などの薬物が充填される。
【００３０】
好ましい実施形態では、ミセル粒子は、以下の工程を含む方法によって調製される。
（1）ブロックコポリマーを有機溶媒に溶解して溶液を得る工程；
（2）工程（1）で得られた溶液を水に滴下して混合物を得る；および
（3）工程（2）で得られた混合物を透析バッグに入れ、透析を水中で行う工程。
【００３１】
好ましい実施形態において、工程（1）において、有機溶媒は、ジメチルスルホキシド、テトラヒドロフラン、エタノール、アセトンおよびN、N-ジメチルホルムアミドからなる群から選択される。
【００３２】
好ましい実施形態において、工程（1）において、ブロックコポリマー：有機溶媒= 5~10mg：1~5mLの比でブロックコポリマーおよび有機溶媒を使用する。
【００３３】
好ましい実施形態において、工程（2）は、超音波条件下で氷浴中で実施される。
【００３４】
好ましい実施形態において、工程（3）において、透析バッグは、1000~10000の分子量カットオフを有する。
【００３５】
好ましい実施形態において、工程（3）において、透析は1~5日間行われる。
【００３６】
別の態様では、本発明は、上記のブロックコポリマーを含むベシクル粒子を提供する。
【００３７】
好ましい実施形態では、ベシクル粒子は150~250nm、例えば、150nm、160nm、170nm、180nm、190nm、200nm、210nm、220nm、230nm、240nmまたは250nmの粒径を有する。
【００３８】
好ましい実施形態では、ベジクル粒子には、ポリペプチド、DNA、RNAおよび/または小分子化合物などの薬物が充填される。
【００３９】
好ましい実施形態では、ベシクル粒子は、以下の工程を含む方法によって調製される：
（1）請求項3に記載のブロックコポリマーを有機溶媒に溶解して溶液を得る工程；
（2）工程（1）で得られた溶液を水に注入し、有機溶媒が完全に揮発するまで攪拌する工程；および
（3）工程（2）で得られた生成物を遠心分離し、濾過する工程。
【００４０】
好ましい態様において、工程（1）において、有機溶媒は、ジメチルスルホキシド、テトラヒドロフラン、エタノール、アセトンおよびN、N-ジメチルホルムアミドからなる群から選択されるものである。
【００４１】
好ましい実施形態において、工程（1）において、ブロックコポリマー：有機溶媒= 5~15mg：1~5mLの比で、ブロックコポリマーおよび有機溶媒が使用される。
【００４２】
好ましい実施形態では、工程（2）において、水の温度は25℃~60℃である。
【００４３】
好ましい実施形態では、工程（2）において、溶液を0.1mL /分~0.5mL /分の速度で水に注入する。
【００４４】
好ましい実施形態において、工程（3）において、遠心分離の速度は1000~7000rpmである。
【００４５】
好ましい実施形態では、工程（3）において、遠心分離時間は1~40分である。
【００４６】
好ましい実施形態では、工程（3）において、濾過が3回行われる。
【００４７】
好ましい実施形態では、工程（3）において、0.8μm、0.45μm及び0.22μmの精密濾過膜を順に用いて3回の濾過を行う。
【００４８】
別の態様では、本発明は、いずれかの態様によるポリマー、ブロックコポリマー、ミセル粒子および/またはベジクル粒子および薬物（例えば、薬学的に活性な成分）を含む医薬組成物を提供する。
【００４９】
好ましい実施形態では、薬物は、ポリペプチド、DNA、RNAおよび低分子化合物からなる群から選択される。
【００５０】
好ましい実施形態では、医薬組成物は、製剤、例えば、医薬製剤または免疫製剤の形態で存在する。
【００５１】
別の態様では、本発明は、いずれかの態様によるポリマー、ブロックコポリマー、ミセル粒子および/またはベシクル粒子を含む組成物を提供する。
【００５２】
好ましい実施形態では、組成物は薬学的に許容される補助物質である。
【００５３】
好ましい実施形態では、組成物は、遺伝子トランスフェクション試薬などの遺伝子送達試薬である。
【００５４】
ましい実施形態では、組成物は免疫アジュバントである。
【００５５】
別の態様では、本発明は、式（III）の構造を有する化合物を提供する。
【化１１】
2019504177.tif 000012
Xは-SO-または-SO2-である;
mは1~100、例えば、1~10,10~20,20~30,30~40,40~50,50~60,60~70,70~80,80~90または90~100である；
t = 1~10、例えば。 1~4,2~5,3~7,4~6,5~10,6~8または7~10、例えば、1,2,3,4,5,6,7,8,9または10である。
【００５６】
好ましい実施形態では、mは1~10、例えば、1,2,3,4,5,6,7,8,9または10である;、より好ましくは、mは3である。
【００５７】
好ましい実施形態では、tは2~5、例えば、1,2,3,4または5である;、より好ましくは、tは3である。
【００５８】
一態様では、本発明は、式（III）の構造を有する化合物をモノマーとして使用して調製されたポリマーを提供する。
【００５９】
好ましい実施形態において、ポリマーは、ホモポリマー、ランダムコポリマー、ブロックコポリマー、グラフトコポリマーまたは交互コポリマー（alternating copolymer）である。
【００６０】
好ましい実施形態において、ポリマーは、式（I）、式（II）または式（IV）の構造を有する。
【００６１】
ある態様において、本発明は、式（V）の化合物の酸化反応を実施する工程を含む、式（III）の構造を有する化合物の調製方法を提供する；
【化１２】
2019504177.tif 000013
式中、mおよびtは上記の記載と同じ意味を有する。
【００６２】
好ましい実施形態では、この方法は、酸化剤として過酸化水素またはメタクロロ過安息香酸（mCPBA）を使用して酸化反応を行う工程工程を含む。
【００６３】
好ましい実施形態では、この方法は、過酸化水素を酸化剤として使用して酸化反応を行う工程を含む； 前記方法によって得られる化合物は、式（III）の構造を有し、式中、Xは-SO-である。
【００６４】
好ましい実施形態では、前記方法は、酸化剤としてメタクロロ過安息香酸（mCPBA）を使用して酸化反応を行う工程を含む；前記方法によって得られる化合物は、式（III）の構造を有し、式中、Xは--SO2-である。
【発明の効果】
【００６５】
本発明は、以下の有利な効果を奏する。
（1）本発明は、官能性ラクトンをモノマーとして用いる制御された開環重合により製造された新規な分解性親水性ポリエステルであって、生物的適合性及び生分解性に優れ、従来の脂肪族ポリエステルと比較して親水性が向上している。本発明による親水性ポリエステルの親水性は、同様の分子量を有するPEGの親水性に匹敵する。
（2）本発明は、前記ポリエステルを親水性セグメントとして含む両親媒性ブロックコポリマー及びその製造方法を提供する。特に、前記ポリエステルを親水性セグメントとして使用し、疎水性セグメント（ポリ（L-ラクチド）、ポリグリコリドまたはポリカプロラクトンなど）を制御された開環重合によって効果的に導入して、分解性両親媒性ブロックコポリマーを調製する。
（3）本発明で提供される両親媒性ブロックコポリマーは、ポリペプチド、DNA、RNAおよび/または小分子薬剤を送達するためのミセル粒子またはベジクル粒子に自己集合することができる。
（4）本発明で提供されるポリマーは、生物医学の分野、医薬製剤、免疫製剤または遺伝子送達試薬の調製などに使用することができる。
【００６６】
本発明の実施形態を、以下の図面および実施例を参照して詳細に説明する。しかしながら、当業者には、本発明の保護範囲を限定するのではなく、以下の図面および実施例が本発明を例示するためだけに使用されることが理解される。以下の図面および好ましい実施形態の詳細な説明によれば、本発明の様々な目的および利点は、当業者にとって明らかである。
【図面の簡単な説明】
【００６７】
【図１】本発明の実施例3における官能性モノマー1bのホモポリマーの1H NMRスペクトルである。ホモポリマーの重合度は100である。図中、a~kは水素原子の位置を表し、nは重合度を表し、式（I）、（II）および（IV）中のnの意味とは異なる。
【図２】本発明の実施例4における官能性モノマー1aのホモポリマーの1H NMRスペクトルである。ホモポリマーの重合度は10である。図中、a~kは水素原子の位置を表し、nは重合度を表し、式（I）、（II）および（IV）中のnの意味とは異なる。
【図３】本発明の実施例5における両親媒性ジブロックコポリマー(P1b50-b-PCL50)の1H NMRスペクトルである。図中、a、bは水素原子の位置を示し、nは重合度を示し、式（I）、（II）および（IV）中のnの意味とは異なる。
【図４】本発明の実施例5における親水性セグメントP1b50（曲線1）およびその両親媒性ジブロックコポリマー(P1b50-b-PCL50)（曲線2）のGPC曲線を示す。図中、横軸は溶出時間を示し、縦軸は検出器のシグナル強度を示す。図に示すように、P1b50-b-PCL50はP1b50よりも溶出時間が短く、分子量が増加している。
【図５】非修飾金表面の水接触角（上図、水接触角64±1°）、mPEG-SH（Mnは6500である）-修飾金表面の水接触角の実験結果である、（中図、水接触角44±1°）および親水性ポリエステル修飾金表面（下図、水接触角53±1°）を示す。この結果は、本発明の親水性ポリエステルによって修飾された金表面の親水性が、同様の分子量を有するPEGによって修飾された金表面の親水性に匹敵することを示す。
【図６】本発明の実験例2におけるポリマーのインビトロの細胞傷害性の実験結果である。図中、横軸はポリマー濃度を示し、縦軸は細胞生存率を示す。この結果は、本発明のポリマーがPEGに匹敵する細胞生存能力を有すること、すなわち良好な生体適合性を有することを示している。
【図７】本発明の実験例3におけるポリマーによる細胞接着のインビトロ阻害の実験結果である。 図aは、本発明のポリマーによって修飾された金表面の蛍光顕微鏡写真である;、図bは、mPEG-SHによって修飾された金表面の蛍光顕微鏡写真である。図cは、本発明のポリエステルおよびmPEG-SHによってそれぞれ修飾された金表面上の細胞密度（cell density）を示し、2つの表面の両方の細胞密度は非常に低かった。この実験は、本発明による親水性側鎖を有するポリエステル材料が、細胞接着阻害の特性に関してPEGに匹敵することを示している。
【図８】本発明の実験例4における分解前のポリマー（曲線1）および分解後のポリマー（曲線2）のGPC曲線である。同図に示すように、ポリマー分解後、GPCの溶出時間が長くなり、ポリマーの分子量が低下する。この結果は、ポリマーがアルカリ性条件下で分解される可能であることを示している。
【図９】本発明の実験例6の動的レーザー散乱装置により測定された両親媒性ジブロックコポリマー（P1b50-b-PCL100）のミセル粒子の粒径分布を示し、ミセル粒子の粒径は90~110nm。
【図１０】本発明の実験例7の動的レーザー散乱装置によって測定された両親媒性ジブロックコポリマー（P1b50-b-PCL50）のベジクル粒子の粒径分布を示し、ベジクル粒度は150~250nm。
【発明を実施するための形態】
【００６８】
本発明の実施形態を、以下の実施例を参照して詳細に説明する。しかしながら、当業者には、本発明の保護範囲を限定するのではなく、本発明を説明する目的でのみ実施例を使用することが理解される。実施例において具体的な条件が記載されていない場合、実施例は、従来の条件または製造業者により推奨される条件に従って実施される。製造業者が指定していない試薬または器械は、市販されている通常の製品です。
【００６９】
実施例1：官能性ラクトンモノマー1aの調製
【化１３】
2019504177.tif 000014
化合物4は、CN特許ZL201310169131.8に記載の方法によって調製した。
【００７０】
25mLの丸底フラスコに、10mLの過酸化水素水溶液（濃度30％）を加え、次に化合物4（0.292g、1mmol）を加えた。10分間撹拌した後、水相をジクロロメタン20mLで3回抽出し、得られた有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。乾燥剤を濾過して除き、減圧下での蒸発により溶媒を除去して、無色油状の官能性ラクトンモノマー1aを得た（収率84％）。
【００７１】
1H NMR（CDCl3, 400 MHz）δ4.25-4.17（m、2H）、2.85-2.77.91（m、3H）、3.41-3.871（s、8H）、3.35-3.18（m、7H）、2.54-2.49（m、1H）、1.99-1.93（m、2H）、1.85-1.71（m、1H）。13C NMR (100 MHz, CDCl3)δ168,70.69,70.10,70.11,70.23,67.36,64.68,58.83,55.68,55.10,34.69,24.97,21.76。ESI MS計算値：308.4、測定値：[M+Na+] = 331.3。
【００７２】
実施例2：機能性ラクトンモノマー1bの調製
【化１４】
2019504177.tif 000015
化合物4をジクロロメタンに溶解し、氷-水浴中で撹拌し、次いでメタクロロ過安息香酸（mCPBA）をゆっくりと加えた。室温で2時間反応させた後、得られた混合物を濾過し、濾液を飽和炭酸ナトリウム溶液で3回以上洗浄した。有機相を合わせ、溶媒を減圧下で蒸発させて除去して、淡黄色油状物として機能性モノマー1bを得た（収率87％）。
【００７３】
1H NMR (CDCl3, 400 MHz)δ4.39-4.36（m、2H）、3.94-3.91（m、3H）、3.65-3.51（s、8H）、3.35-3.18（m、7H）、2.54-2.49 、1H）、1.99-1.93（m、2H）、1.85-1.71（m、1H）。  13C NMR (100 MHz, CDCl3)δ172,71.76,70.56,70.31,70.18,68.41,64.68,58.83,55.68,55.10,34.69,24.97,21.76。ESI MS計算値：324.1、測定値：[M+Na+]= 347.3。
【００７４】
実施例3：モノマー1bのホモポリマーの合成
【化１５】
2019504177.tif 000016
アルゴンの保護下で水および酸素を実質的に含まないグローブボックス中で、25mLの丸底フラスコにモノマー1b（0.324g、1.0mmol）およびベンジルアルコール（1.1mg、0.01mmol）を加え、均質に混合した後、2.5mgの触媒ジフェニルホスフェート（2.5mg、0.01mmol）を加えた。室温で24時間さらに撹拌した後、20mLのジクロロメタンおよびトリエチルアミン（0.3g）を加え、溶媒をロータリーエバポレーションで除去した。粗生成物を透析バッグ（分子量カットオフ1kDa）に移し、テトラヒドロフラン溶液（40％の水を含む）中で1~7日間透析し、その間に溶媒を2回更新した。最後に、透析液を凍結乾燥し、黄色油状液体としてポリエステルホモポリマー（0.24g）を得た。ゲルパーミエーションクロマトグラフィー（GPC）で測定したところ、Mn = 7325、Mw=7856, PDI=1.11、重合度k = 100であった。生成物の1H NMRスペクトルを図1に示した。
【００７５】
実施例4：モノマー1aのホモポリマーの合成
【化１６】
2019504177.tif 000017
アルゴンの保護下で水および酸素を実質的に含まないグローブボックス中で、25mLの丸底フラスコに、モノマー1a（0.68g、0.45mmol）、ベンジルアルコール（0.05mmol）、ジフェニルホスフェート（12.5mg 、0.05mmol）および4-ジメチルアミノピリジン（DMAP）（6mg、0.05mmol）を加え、65℃で72時間撹拌した。室温に冷却した後、10mLのジクロロメタンおよびトリエチルアミン（0.15g）を加え、溶媒をロータリーエバポレーションで除去した。粗生成物を透析バッグ（分子量カットオフ1kDa）に移し、テトラヒドロフラン溶液（20％の水を含む）中で1~7日間透析し、その間に溶媒を2回更新した。最後に、透析液を凍結乾燥して、淡黄色油状物としてポリエステル生成物（0.51g）を得た。ゲルパーミエーションクロマトグラフィー（GPC）で測定したところ、Mn = 1106, Mw = 1117, PDI = 1.01、重合度kは10であった。生成物の1H NMRスペクトルを図2に示した。
【００７６】
実施例5：モノマー1bとε-カプロラクトンのブロックコポリマーの合成
【化１７】
2019504177.tif 000018
アルゴンの保護下で水および酸素を実質的に含まないグローブボックス内で、25mLの丸底フラスコにモノマー1b（0.324g、1mmol）およびベンジルアルコール（2.08μL、0.02mmol）を加えた。室温で撹拌しながら、リン酸ジフェニル（5mg、0.02mmol）を反応フラスコに加えた。48時間さらに反応させた後（モノマー1bの転化率は95％以上であった）、親水性セグメントP1bが得られた。2mLのトルエンおよびε-カプロラクトン（CL、106.6μL、1mmol）を加えた。12時間撹拌した後（カプロラクトンの転化率は100％）、15mLのジクロロメタンおよびトリエチルアミン（0.3g）を加え、溶媒をロータリーエバポレーションで除去した。粗生成物を透析バッグ（分子量カットオフ1kDa）に移し、テトラヒドロフラン溶液（20％の水を含む）中で1~7日間透析し、その間に溶媒を3回更新した。最後に、透析溶液を凍結乾燥して、両親媒性ジブロックコポリマーP1b-b-PCLを得た。ここで、P1bは親水性セグメントである;、PCLは疎水性セグメントであった。P1b-b-PCLは、半透明の白色固体であった。ゲル浸透クロマトグラフィー（GPC）によって測定して、Mn = 7350, Mw = 7791, PDI = 1.06である。P1b50-b-PCL50の1HNMRスペクトルを図3に示した。p1bの重合度は50、PCLの重合度は50であると算出した。GPCによってモニターされた重合プロセスを図4に示した。図中、曲線1は親水性セグメントP1b50のGPC曲線である;、曲線2はP1b50-b-PCL50のGPC曲線である。図に示すように、P1b50-b-PCL50はP1b50よりも溶出時間が短く、分子量の増加を示している。
【００７７】
実験例1：ポリマーの親水性実験
実施例3に記載の方法に従い、モノマーとして1bを用い、チオール官能基(OH-CH2-CH2-CH2-CH2-SH)を開始剤として有するアルコール化合物を用いて、重合を行って、親水性側鎖を有するポリエステルを得た(Mn = 6880, PDI=1.11)。ここで、末端基はチオール基であった。ポリエステルを金表面に結合させ、水接触角アッセイを行った。結果は図5に示されている。ポリエステル修飾金表面の水接触角は、mPEG-SH(Mn = 6500)修飾金表面の水接触角に非常に近い。この実験は、親水性側鎖を有するポリエステル化合物が、親水性の点で同様の分子量を有するPEGに実質的に匹敵することを示した。
【００７８】
実験例2：ポリマーのインビトロ細胞傷害アッセイ
ポリマーの生体適合性を確認するために、ポリマーのインビトロ細胞傷害性をMTT法によって決定した。
【００７９】
対数増殖期でよく増殖するヒト包皮線維芽細胞（HFF）を使用し、培地をピペットで取り出して廃棄した。残留培地を1mLの1×PBSで洗い流し、PBSをピペットで除去して廃棄した。2mLの25％消化溶液（0.05％トリプシン+ 0.02％EDTA）を加え、インキュベーターで4分間消化した後、消化液が黄色に変色していることが確認されたとき、細胞は収縮して回転し、大部分の細胞を壁から剥離させ、培養皿を穏やかに振って、個々の剥がれていない細胞を吹き飛ばせずに、細胞を壁からほぼ完全に剥離させた。この細胞懸濁液に、完全培地（DMEM高グルコース培地+ 10％ウシ胎仔血清+ 1％ペニシリンーストレプトマイシン）2mLを加えて消化を停止し、培養皿を穏やかに振とうし、溶液を均一に混合した。細胞懸濁液を15mLの遠心管に移し、900rpmで5分間遠心分離した。上清溶液を捨てた。2mLの完全培地（DMEM高グルコース培地+ 10％ウシ胎仔血清+ 1％ペニシリンーストレプトマイシン）を加えて洗浄し、遠心分離を行い、上清溶液を捨てた。2mLの二重抗体を含まない培地（DMEM高グルコース培地+ 10％ウシ胎仔血清）を加え、細胞を穏やかに吹き、細胞カウントチャンバーで計数し、所望の密度に希釈し、96ウェルのプレートに播種した。前記96ウェルプレートを37℃、5％CO2インキュベーターで24時間インキュベートした。各ウェルの培地をピペットで取り出し、実施例3で調製したポリマーの100μL水溶液を各ウェルに加えた。各ウェルの試料溶液をピペットで除去し、100μLの完全培地（DMEM高グルコース培地+ 10％ウシ胎仔血清+ 1％ペニシリンーストレプトマイシン）を各ウェルに加え、続いて20μLのMTT溶液を加えた。前記96ウェルプレートを37℃、5％CO2インキュベーターで24時間インキュベートした。各ウェルの試料溶液をピペットで取り除き、150μLのジメチルスルホキシド（DMSO）を各ウェルに加えてホルマザン結晶を溶解させた。各ウェルの490nmでの光学密度値（OD値）をELISA装置で測定した。DMSOを加えた細胞を含まないプレートウェルをブランク対照とし、最終的に計算に用いたOD値は、実験群の直接OD値から測定DMSOブランク対照値を差し引いた値でなければならない。細胞生存率は、以下の式に従って計算した：
【数１】
2019504177.tif 000019
【００８０】
実験結果を図6に示す。図中、横軸はポリマー濃度を示し、縦軸は細胞生存率を示す。実験結果から、本発明の親水性側鎖を有するポリエステルは、細胞生存性に関してPEGと同等である;、PEGと同様に良好な生体適合性を有することが示された。
【００８１】
実験例3：細胞接着阻害アッセイ
未処理の264.7細胞（raw 264.7 cells）を培養瓶から取り出し、消化し、培地に浮遊させた。血球計算盤で細胞を計数し、細胞を5×105細胞/mLに希釈した。金被覆ガラススライドを、実験例1で調製した末端基としてのチオール基およびmPEG-SH (Mn = 6500)をそれぞれ有するポリエステルによって修飾した。修飾金被覆ガラスを3つの同一の部分に分け、滅菌培養皿に入れ、4mLの培地に浸した。1mLの希釈した細胞懸濁液を各培養皿に加えて、細胞の最終密度が1 × 105細胞/mLになるようにした。試料をインキュベーター（37°C, 5% CO2）中で24時間インキュベートし、サンプルを培地ですすぎ、未吸収細胞が確実に除去されるようにした。金スライド上に吸収された細胞をCalcein-AMで染色した。次いで、蛍光顕微鏡写真により細胞の生存率を測定し、顕微鏡下で細胞計数を行った。実験結果を図7に示し、図7aおよび図7bは、本発明のポリエステルによって修飾された金表面およびmPEG-SHによって修飾された金表面の蛍光顕微鏡写真である。図に示されるように、ポリエステルおよびmPEG-SH（Mn = 6500）によって修飾された金表面上には非常に少数の細胞が存在した。図cは、本発明のポリエステルおよびmPEG-SHによって修飾された金表面上の細胞密度を示し、2つの表面上の細胞密度は非常に低かった。アッセイは、本発明による親水性側鎖を有するポリエステル材料が、細胞接着阻害の特性に関してPEGに匹敵することを示した。
【００８２】
実験例4：ポリマー分解実験
実施例3に記載の方法に従い、モノマーとして1bを用い、ベンジルアルコールを開始剤として重合を行い、ポリエステル（Mw = 5423,10mg）を得た。前記ポリエステルをメタノール（5mL）に溶解し、ナトリウムメトキシドのメタノール溶液（50mg、30重量％）を溶液に加えた。室温で30分間撹拌しながらポリエステルを分解させ、適切な濃度のHCl（2M）を用いて溶液のpHを中性pHに調整した。ロータリーエバポレーションにより溶媒を除去した。残りをテトラヒドロフラン（2mL）に溶解し、得られた溶液をGPCで分析した。結果を分解前のGPC結果と比較した。GPC曲線を図8に示した。曲線1はポリエステル分解前のGPC曲線である;、曲線2はポリエステル分解後のGPC曲線であった。図に示すように、ポリマー分解後、GPCの溶出時間が増加し、ポリマーの分子量が減少した。この実験は、本発明による親水性側鎖を有するポリエステル材料がアルカリ性条件下で分解され得ることを示した。
【００８３】
実験例5
実施例5の工程に従って、モノマー1bとε-カプロラクトンのブロックコポリマー(P1b50-b-PCL100)を合成した。10mgのコポリマー(P1b50-b-PCL100)を1mLのN、N-ジメチルホルムアミドに溶解し、超音波条件下、氷浴中で精製水1mLに滴下した後、分子量カットオフ1000の透析袋に入れ、1日透析してコポリマーのミセル溶液を得た。ミセル粒子の粒径を測定し、粒度分布を図9に示した。粒度は90~110nmであった。
【００８４】
実験例6
実施例5の工程に従って、モノマー1bとε-カプロラクトンのブロックコポリマー(P1b50-b-PCL50)を合成した。15mgのコポリマー(P1b50-b-PCL50)を1mLのN、N-ジメチルホルムアミドに溶解した。前記溶液を30mLの精製水に25℃の温度で0.1mL/分の速度で注入し、エタノールが完全に揮発するまで撹拌した。乳白色の溶液が得られた。この溶液を1000rpmで1分間遠心分離し、0.8μm、0.45μm、0.22μmの精密濾過膜で順次ろ過し、コポリマーのベジクル溶液を得た。ベシクル粒子の粒径を測定し、粒度分布を図10に示した。粒径は150~250nmであった。
【００８５】
本発明の実施形態を詳細に説明したが、当業者であれば、開示された全ての教示によれば、詳細を修正や修飾することができ、これらの変更はすべて本発明の保護範囲に入ることを理解するであろう。本発明の範囲は、添付の特許請求の範囲およびその均等物によって規定される。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【国際調査報告】
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