(57)【要約】  本開示は、ＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体、ＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体をコードする核酸またはベクター、ＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体または核酸を含む組成物、ならびにＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体、核酸またはベクター、および組成物の使用に関する。【図１】2019511998.tif 000061
2019511998.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｆ１ポリペプチドおよびＦ２ポリペプチドを含み、野生型ＲＳＶ  Ｆタンパク質のアミノ酸配列に対する少なくとも１つのアミノ酸突然変異を含む、野生型ＲＳＶ  Ｆタンパク質の突然変異体であって、アミノ酸突然変異が、
（１）操作されたジスルフィド結合突然変異、
（２）間隙充填突然変異、
（３）静電気的突然変異、
（４）少なくとも１つの操作されたジスルフィド突然変異および少なくとも１つの間隙充填突然変異の組合せ、
（５）少なくとも１つの操作されたジスルフィド突然変異および少なくとも１つの静電気的突然変異の組合せ、
（６）少なくとも１つの間隙充填突然変異および少なくとも１つの静電気的突然変異の組合せ、ならびに
（７）少なくとも１つの操作されたジスルフィド突然変異、少なくとも１つの間隙充填突然変異、および少なくとも１つの静電気的突然変異の組合せ
からなる群から選択される、突然変異体。
【請求項２】
アミノ酸突然変異が、少なくとも１つの操作されたジスルフィド突然変異、少なくとも１つの間隙充填突然変異、および少なくとも１つの静電気的突然変異の組合せを含む、請求項１に記載の突然変異体。
【請求項３】
三量体の形態である、請求項１に記載の突然変異体。
【請求項４】
対応する野生型ＲＳＶ  Ｆタンパク質と比較して安定性が増大しており、安定性が、突然変異体と抗体ＡＭ１４との結合によって測定される、請求項１に記載の突然変異体。
【請求項５】
野生型ＲＳＶが、サブタイプＡ、サブタイプＢ、株Ａ２、株Ｏｎｔａｒｉｏ、または株Ｂｕｅｎｏｓ  Ａｉｒｅｓである、請求項１から４のいずれか一項に記載の突然変異体。
【請求項６】
操作されたジスルフィド突然変異が、Ｓ５５ＣおよびＬ１８８Ｃ、Ｓ１５５ＣおよびＳ２９０Ｃ、Ｔ１０３ＣおよびＩ１４８Ｃ、ならびにＬ１４２ＣおよびＮ３７１Ｃからなる群から選択される、請求項１から５のいずれか一項に記載の突然変異体。
【請求項７】
間隙充填突然変異が、
（１）５５位、６２位、１５５位、１９０位、または２９０位のＳの、Ｉ、Ｙ、Ｌ、Ｈ、またはＭでの置換、
（２）５４位、５８位、１８９位、２１９位、または３９７位のＴの、Ｉ、Ｙ、Ｌ、Ｈ、またはＭでの置換、
（３）１５１位のＧの、ＡまたはＨでの置換、
（４）１４７位または２９８位のＡの、Ｉ、Ｌ、Ｈ、またはＭでの置換、
（５）１６４位、１８７位、１９２位、２０７位、２２０位、２９６位、３００位、または４９５位のＶの、Ｉ、Ｙ、Ｈでの置換、および
（６）１０６位のＲの、Ｗでの置換
からなる群から選択される、請求項１から５のいずれか一項に記載の突然変異体。
【請求項８】
静電気的突然変異が、
（１）８２位、９２位、または４８７位のＥの、Ｄ、Ｆ、Ｑ、Ｔ、Ｓ、Ｌ、またはＨによる置換、
（２）３１５位、３９４位、または３９９位のＫの、Ｆ、Ｍ、Ｒ、Ｓ、Ｌ、Ｉ、Ｑ、またはＴによる置換、
（３）３９２位、４８６位、または４８９位のＤの、Ｈ、Ｓ、Ｎ、Ｔ、またはＰによる置換、および
（４）１０６位または３３９位のＲの、Ｆ、Ｑ、Ｎ、またはＷによる置換
からなる群から選択される、請求項１から５のいずれか一項に記載の突然変異体。
【請求項９】
アミノ酸突然変異が、少なくとも１つの操作されたジスルフィド突然変異、少なくとも１つの間隙充填突然変異、および少なくとも１つの静電気的突然変異の組合せであり、
（ｉ）操作されたジスルフィド突然変異が、５５Ｃおよび１８８Ｃ、１５５Ｃおよび２９０Ｃ、１０３Ｃおよび１４８Ｃ、ならびに１４２Ｃおよび３７１Ｃからなる群から選択され、
（ｉｉ）間隙充填突然変異が、
（１）５５位、６２位、１５５位、１９０位、または２９０位のＳの、Ｉ、Ｙ、Ｌ、Ｈ、またはＭでの置換、
（２）５４位、５８位、１８９位、２１９位、または３９７位のＴの、Ｉ、Ｙ、Ｌ、Ｈ、またはＭでの置換、
（３）１５１位のＧの、ＡまたはＨでの置換、
（４）１４７位または２９８位のＡの、Ｉ、Ｌ、Ｈ、またはＭでの置換、
（５）１６４位、１８７位、１９２位、２０７位、２２０位、２９６位、３００位、または４９５位のＶの、Ｉ、Ｙ、Ｈでの置換、および
（６）１０６位のＲの、Ｗでの置換
からなる群から選択され、かつ、
（ｉｉｉ）静電気的突然変異が、
（１）８２位、９２位、または４８７位のＥの、Ｄ、Ｆ、Ｑ、Ｔ、Ｓ、Ｌ、またはＨによる置換、
（２）３１５位、３９４位、または３９９位のＫの、Ｆ、Ｍ、Ｒ、Ｓ、Ｌ、Ｉ、Ｑ、またはＴによる置換、
（３）３９２位、４８６位、または４８９位のＤの、Ｈ、Ｓ、Ｎ、Ｔ、またはＰによる置換、および
（４）１０６位または３３９位のＲの、Ｆ、Ｑ、Ｎ、またはＷによる置換
からなる群から選択される、請求項１から５のいずれか一項に記載の突然変異体。
【請求項１０】
アミノ酸突然変異が、
（１）Ｔ１０３Ｃ、Ｉ１４８Ｃ、Ｓ１９０Ｉ、およびＤ４８６Ｓの組合せ、
（２）Ｔ５４Ｈ、Ｓ５５Ｃ、Ｌ１８８Ｃ、Ｄ４８６Ｓの組合せ、
（３）Ｔ５４Ｈ、Ｔ１０３Ｃ、Ｉ１４８Ｃ、Ｓ１９０Ｉ、Ｖ２９６Ｉ、およびＤ４８６Ｓの組合せ、
（４）Ｔ５４Ｈ、Ｓ５５Ｃ、Ｌ１４２Ｃ、Ｌ１８８Ｃ、Ｖ２９６Ｉ、およびＮ３７１Ｃの組合せ、
（５）Ｓ５５Ｃ、Ｌ１８８Ｃ、およびＤ４８６Ｓの組合せ、
（６）Ｔ５４Ｈ、Ｓ５５Ｃ、Ｌ１８８Ｃ、およびＳ１９０Ｉの組合せ、
（７）Ｓ５５Ｃ、Ｌ１８８Ｃ、Ｓ１９０Ｉ、およびＤ４８６Ｓの組合せ、
（８）Ｔ５４Ｈ、Ｓ５５Ｃ、Ｌ１８８Ｃ、Ｓ１９０Ｉ、およびＤ４８６Ｓの組合せ、
（９）Ｓ１５５Ｃ、Ｓ１９０Ｉ、Ｓ２９０Ｃ、およびＤ４８６Ｓの組合せ、
（１０）Ｔ５４Ｈ、Ｓ５５Ｃ、Ｌ１４２Ｃ、Ｌ１８８Ｃ、Ｖ２９６Ｉ、Ｎ３７１Ｃ、Ｄ４８６Ｓ、Ｅ４８７Ｑ、およびＤ４８９Ｓの組合せ、ならびに
（１１）Ｔ５４Ｈ、Ｓ１５５Ｃ、Ｓ１９０Ｉ、Ｓ２９０Ｃ、およびＶ２９６Ｉの組合せ
からなる群から選択される突然変異の組合せである、請求項９に記載の突然変異体。
【請求項１１】
１０３位（１０３Ｃ）および１４８位（１４８Ｃ）のシステイン（Ｃ）、１９０位のイソロイシン（Ｉ）（１９０Ｉ）、ならびに４８６位のセリン（Ｓ）（４８６Ｓ）を含み、かつ、
（１）配列番号４１のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号４２のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（２）配列番号４１のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号４２のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（３）配列番号４３のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号４４のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（４）配列番号４３のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号４４のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（５）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号４６のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（６）配列番号４５のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号４６のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（７）配列番号４７のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号４８のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（８）配列番号４７のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号４８のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（９）配列番号４９のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号５０のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１０）配列番号４９のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号５０のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１１）配列番号２７９のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２８０のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１２）配列番号２７９のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２８０のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１３）配列番号２８１のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２８２のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１４）配列番号２８１のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２８２のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１５）配列番号２８３のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２８４のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１６）配列番号２８３のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２８４のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１７）配列番号２８５のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２８６のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１８）配列番号２８５のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２８６のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１９）配列番号２８７のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２８８のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（２０）配列番号２８７のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２８８のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（２１）配列番号２８９のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２９０のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、ならびに
（２２）配列番号２８９のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２９０のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド
からなる群から選択されるＦ１ポリペプチドおよびＦ２ポリペプチドを含む、請求項１に記載の突然変異体。
【請求項１２】
５４位のヒスチジン（Ｈ）、１０３位および１４８位のシステイン（Ｃ）、１９０位、および２９６位のイソロイシン（Ｉ）、ならびに４８６位のセリン（Ｓ）を含み、かつ、
（１）配列番号５１のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号５２のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（２）配列番号５１のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号５２のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（３）配列番号５３のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号５４のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（４）配列番号５３のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号５４のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（５）配列番号５５のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号５６のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（６）配列番号５５のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号５６のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（７）配列番号５７のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号５８のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（８）配列番号５７のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号５８のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（９）配列番号５９のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号６０のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１０）配列番号５９のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号６０のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１１）配列番号２９１のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２９２のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１２）配列番号２９１のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２９２のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１３）配列番号２９３のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２９４のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１４）配列番号２９３のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２９４のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１５）配列番号２９５のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２９６のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１６）配列番号２９５のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２９６のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１７）配列番号２９７のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２９８のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１８）配列番号２９７のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２９８のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１９）配列番号２９９のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３００のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（２０）配列番号２９９のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３００のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（２１）配列番号３０１のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３０２のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、ならびに
（２２）配列番号３０１のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３０２のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド
からなる群から選択されるＦ１ポリペプチドおよびＦ２ポリペプチドを含む、請求項１に記載の突然変異体。
【請求項１３】
５４位のヒスチジン（Ｈ）、５５位および１８８位のシステイン（Ｃ）、ならびに４８６位のセリン（Ｓ）を含み、かつ、
（１）配列番号６１のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号６２のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（２）配列番号６１のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号６２のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（３）配列番号６３のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号６４のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（４）配列番号６３のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号６４のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（５）配列番号６５のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号６６のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（６）配列番号６５のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号６６のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（７）配列番号６７のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号６８のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（８）配列番号６７のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号６８のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（９）配列番号６９のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号７０のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１０）配列番号６９のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号７０のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１１）配列番号３０３のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３０４のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１２）配列番号３０３のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３０４のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１３）配列番号３０５のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３０６のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１４）配列番号３０５のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３０６のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１５）配列番号３０７のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３０８のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１６）配列番号３０７のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３０８のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１７）配列番号３０９のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３１０のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１８）配列番号３０９のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３１０のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１９）配列番号３１１のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３１２のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（２０）配列番号３１１のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３１２のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（２１）配列番号３１３のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３１４のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、ならびに
（２２）配列番号３１３のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３１４のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド
からなる群から選択されるＦ１ポリペプチドおよびＦ２ポリペプチドを含む、請求項１に記載の突然変異体。
【請求項１４】
５４位のヒスチジン（Ｈ）、５５位および１８８位のシステイン（Ｃ）、１９０位のイソロイシン（Ｉ）（１９０Ｉ）、ならびに４８６位のセリン（Ｓ）を含み、かつ、
（１）配列番号７１のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号７２のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（２）配列番号７１のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号７２のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（３）配列番号７３のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号７４のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（４）配列番号７３のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号７４のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（５）配列番号７５のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号７６のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（６）配列番号７５のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号７６のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（７）配列番号７７のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号７８のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（８）配列番号７７のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号７８のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（９）配列番号７９のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号８０のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１０）配列番号７９のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号８０のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１１）配列番号３１５のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３１６のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１２）配列番号３１５のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３１６のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１３）配列番号３１７のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３１８のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１４）配列番号３１７のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３１８のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１５）配列番号３１９のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３２０のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１６）配列番号３１９のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３２０のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１７）配列番号３２１のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３２２のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１８）配列番号３２１のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３２２のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１９）配列番号３２３のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３２４のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（２０）配列番号３２３のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３２４のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（２１）配列番号３２５のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３２６のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、ならびに
（２２）配列番号３２５のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３２６のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド
からなる群から選択されるＦ１ポリペプチドおよびＦ２ポリペプチドを含む、請求項１に記載の突然変異体。
【請求項１５】
（１）配列番号１９のアミノ酸配列、
（２）配列番号２０のアミノ酸配列、および
（３）配列番号２１のアミノ酸配列
からなる群から選択されるアミノ酸配列のアミノ酸２６〜１０９および１３７〜５１３を含む、請求項１０に記載の突然変異体。
【請求項１６】
ＨＲＢ領域内の少なくとも１対のシステイン突然変異をさらに含む、請求項９に記載の突然変異体。
【請求項１７】
少なくとも１対のシステイン突然変異が、
（１）５０８Ｃおよび５０９Ｃ、
（２）５１５Ｃおよび５１６Ｃ、ならびに
（３）５２２Ｃおよび５２３Ｃ
からなる群から選択される、請求項１６に記載の突然変異体。
【請求項１８】
（ｉ）請求項１から１７のいずれか一項に記載のＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体、および（ｉｉ）薬学的に許容できる担体を含む医薬組成物。
【請求項１９】
Ｆ１ポリペプチドおよびＦ２ポリペプチドがＲＳＶサブタイプＢのＦタンパク質由来である、請求項１８に記載の医薬組成物。
【請求項２０】
Ｆ１ポリペプチドおよびＦ２ポリペプチドがＲＳＶサブタイプＡのＦタンパク質由来である、請求項１８に記載の医薬組成物。
【請求項２１】
請求項１から１７のいずれか一項に記載の第２の突然変異体をさらに含み、第２の突然変異体のＦ１ポリペプチドおよびＦ２ポリペプチドがＲＳＶサブタイプＢのＦタンパク質由来である、請求項２０に記載の医薬組成物。
【請求項２２】
ワクチンである、請求項１８に記載の医薬組成物。
【請求項２３】
有効量の請求項２２に記載のワクチンを対象に投与することを含む、ヒトにおけるＲＳＶ感染を低減させる方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願
本願は、２０１５年１２月２３日に出願された米国仮特許出願第６２／３８７，２７０号および２０１６年１１月１１日に出願された米国仮特許出願第６２／４２１、１８４号に対する優先権を主張する。前述の各出願の内容全体は、参照によって本明細書に組み込まれる。
【０００２】
本発明は、全体としてワクチンに、具体的には呼吸器合胞体ウイルスに対するワクチンに関する。
【背景技術】
【０００３】
呼吸器合胞体ウイルス、またはＲＳＶは、肺および気道に感染する呼吸器ウイルスである。ＲＳＶは、世界中の乳児における重篤なウイルス性下気道疾患の主な原因であり、高齢者における呼吸器疾患の重要な原因である。しかし、ＲＳＶ感染を予防するためのワクチンは承認されていない。
【０００４】
ＲＳＶは、パラミクソウイルス科（Ｐａｒａｍｙｘｏｖｉｒｉｄａｅ）のメンバーである。そのゲノムは、９つの構造タンパク質（３つの糖タンパク質および６つの内部タンパク質）および２つの非構造タンパク質を含む１１個のタンパク質をコードする、一本鎖のネガティブセンスＲＮＡ分子からなる。構造タンパク質は、３つの膜貫通表面糖タンパク質：付着タンパク質Ｇ、融合タンパク質Ｆ、および低分子疎水性ＳＨタンパク質を含む。ＲＳＶには２つのサブタイプ、ＡおよびＢがある。これらはＧ糖タンパク質が主に異なるが、Ｆ糖タンパク質の配列は、２つのサブタイプ間で、より保存されている。
【０００５】
成熟Ｆ糖タンパク質は、３つの一般ドメイン：細胞外ドメイン（ＥＤ）、膜貫通ドメイン（ＴＭ）、および細胞質尾部（ＣＴ）を有する。ＣＴは、単一のパルミトイル化されたシステイン残基を含有する。
【０００６】
ヒトＲＳＶのＦ糖タンパク質は、Ｎ末端にシグナルペプチド配列（アミノ酸１〜２５）を含有する、５７４アミノ酸からなる単一のポリペプチド前駆体（「Ｆ０」または「Ｆ０前駆体」と呼ぶ）として、ｍＲＮＡから最初に翻訳される。翻訳の際、シグナルペプチドは、小胞体内でシグナルペプチダーゼによって除去される。Ｆ０前駆体の残りの部分（すなわち、残基２６〜５７４）は、２つの多塩基部位（アミノ酸１０９／１１０および１３６／１３７）で細胞プロテアーゼ（特に、フーリン）によってさらに切断され得、ｐｅｐ２７と呼ばれる２７アミノ酸からなる介在配列（アミノ酸１１０〜１３６）を除去し、Ｆ１（Ｃ末端部分、アミノ酸１３７〜５７４）およびＦ２（Ｎ末端部分、アミノ酸２６〜１０９）と呼ばれる２つの連結した断片を生じさせる。Ｆ１は、そのＮ末端に疎水性融合ペプチドを含有し、また２つの７残基反復領域（ＨＲＡおよびＨＲＢ）を含有する。ＨＲＡは融合ペプチドのそばにあり、ＨＲＢはＴＭドメインのそばにある。Ｆ１およびＦ２断片は、２つのジスルフィド結合を介して互いに連結している。シグナルペプチド配列を有さない未切断のＦ０タンパク質またはＦ１−Ｆ２ヘテロ二量体のいずれかは、ＲＳＶ  Ｆプロトマーを形成し得る。３つのこのようなプロトマーは組み合わさって最終的なＲＳＶ  Ｆタンパク質複合体を形成し、これは３つのプロトマーのホモ三量体である。
【０００７】
サブタイプＡおよびＢのＦタンパク質は、アミノ酸配列が約９０パーセント同一である。ＡサブタイプのＦ０前駆体ポリペプチドの配列の例を配列番号１で示し（Ａ２株、ＧｅｎＢａｎｋ  ＧＩ：１３８２５１、Ｓｗｉｓｓ  Ｐｒｏｔ  Ｐ０３４２０）、ＢサブタイプのＦ０前駆体ポリペプチドの配列の例を配列番号２で示す（１８５３７株、ＧｅｎＢａｎｋ  ＧＩ：１３８２５０、Ｓｗｉｓｓ  Ｐｒｏｔ  Ｐ１３８４３）。配列番号１および配列番号２は共に、５７４アミノ酸の配列である。配列番号１および配列番号２のシグナルペプチド配列もまた、アミノ酸１〜２５として報告されている（ＧｅｎＢａｎｋおよびＵｎｉＰｒｏｔ）。両配列において、ＴＭドメインは、およそアミノ酸５３０から５５０であるが、５２５〜５４８という報告もある。細胞質尾部は、アミノ酸５４８または５５０で開始し、アミノ酸５７４で終わり、パルミトイル化されたシステイン残基は、アミノ酸５５０に位置する。
【０００８】
ＲＳＶサブユニットワクチンのために調査された主要な抗原の１つはＦタンパク質である。ＲＳＶ  Ｆタンパク質三量体は、ビリオン膜と宿主細胞膜との間の融合を媒介し、また、シンシチウムの形成を促進する。宿主細胞の膜と融合する前のビリオンにおいて、Ｆ分子の最大の集団は、ＴＭドメインがウイルスエンベロープ内に固定された、ロリポップ形状の構造を形成する［Ｄｏｒｍｉｔｚｅｒ，Ｐ．Ｒ．、Ｇｒａｎｄｉ，Ｇ．、Ｒａｐｐｕｏｌｉ，Ｒ．、Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ、１０、８０７、２０１２］。この立体構造は、融合前立体構造と呼ばれる。融合前ＲＳＶ  Ｆは、オリゴマーの状態の間を区別することなく、モノクローナル抗体（ｍＡｂ）Ｄ２５、ＡＭ２２、およびＭＰＥ８によって認識される。融合前Ｆ三量体は、ｍＡｂ  ＡＭ１４によって特異的に認識される［Ｇｉｌｍａｎ  ＭＳ、Ｍｏｉｎ  ＳＭ、Ｍａｓ  Ｖら、Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  ｐｒｅｆｕｓｉｏｎ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｔｈａｔ  ｒｅｃｏｇｎｉｚｅｓ  ａ  ｑｕａｔｅｒｎａｒｙ，ｃｌｅａｖａｇｅ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  ｅｐｉｔｏｐｅ  ｏｎ  ｔｈｅ  ＲＳＶ  ｆｕｓｉｏｎ  ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ．ＰＬｏＳ  Ｐａｔｈｏｇｅｎｓ、１１（７）、２０１５］。ＲＳＶが細胞内に侵入する間、Ｆタンパク質は、融合前状態（本明細書において「融合前Ｆ」と呼ばれ得る）から、中間体の広がった構造を介して、融合後状態（「融合後Ｆ」）に再編成される。この再編成の間、融合前分子のＣ末端コイルドコイルは、その３つの構成要素鎖に解離し、これは次いで、球状頭部の周りを包み、３つのさらなるへリックスと合わさって、融合後の６ヘリックスバンドルを形成する。融合前ＲＳＶ  Ｆ三量体は、温度の上昇などの苛酷さが次第に増す化学的または物理的条件に置かれると、構造的変化を起こす。まず、三量体構造が失われ（分子内で少なくとも局所的に）、次いで、融合後形態に再編成され、次いで、ドメインが変性する。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
ウイルスの侵入を防ぐために、Ｆ特異的な中和抗体は、ウイルスエンベロープが細胞膜と融合する前に、おそらく、ビリオン上のＦの融合前立体構造、または場合によっては広がった中間体上に結合しなくてはならない。したがって、融合前形態のＦタンパク質は、所望のワクチン抗原として好ましい立体構造であると見なされる［Ｎｇｗｕｔａ，Ｊ．Ｏ．、Ｃｈｅｎ，Ｍ．、Ｍｏｄｊａｒｒａｄ，Ｋ．、Ｊｏｙｃｅ，Ｍ．Ｇ．、Ｋａｎｅｋｉｙｏ，Ｍ．、Ｋｕｍａｒ，Ａ．、Ｙａｓｓｉｎｅ，Ｈ．Ｍ．、Ｍｏｉｎ，Ｓ．Ｍ．、Ｋｉｌｌｉｋｅｌｌｙ，Ａ．Ｍ．、Ｃｈｕａｎｇ，Ｇ．Ｙ．、Ｄｒｕｚ，Ａ．、Ｇｅｏｒｇｉｅｖ，Ｉ．Ｓ．、Ｒｕｎｄｌｅｔ，Ｅ．Ｊ．、Ｓａｓｔｒｙ，Ｍ．、Ｓｔｅｗａｒｔ−Ｊｏｎｅｓ，Ｇ．Ｂ．、Ｙａｎｇ．Ｙ．、Ｚｈａｎｇ，Ｂ．、Ｎａｓｏｎ，Ｍ．Ｃ．、Ｃａｐｅｌｌａ，Ｃ．、Ｐｅｅｐｌｅｓ，Ｍ．、Ｌｅｄｇｅｒｗｏｏｄ，Ｊ．Ｅ．、Ｍｃｌｅｌｌａｎ，Ｊ．Ｓ．、Ｋｗｏｎｇ，Ｐ．Ｄ．、Ｇｒａｈａｍ，Ｂ．Ｓ．、Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｔｒａｎｓｌａｔ．Ｍｅｄ．、１４、７、３０９（２０１５）］。トリトンＸ−１００、トリトンＸ−１１４、ＮＰ−４０、Ｂｒｉｊ−３５、Ｂｒｉｊ−５８、Ｔｗｅｅｎ  ２０、Ｔｗｅｅｎ  ８０、オクチルグルコシド、オクチルチオグルコシド、ＳＤＳ、ＣＨＡＰＳ、ＣＨＡＰＳＯなどの界面活性剤での膜からの抽出、または細胞外ドメインとしての発現、物理的もしくは化学的ストレス、または保存の際に、Ｆ糖タンパク質は融合後形態に容易に変換される［ＭｃＬｅｌｌａｎ  ＪＳ、Ｃｈｅｎ  Ｍ、Ｌｅｕｎｇ  ＳらＳｔｒｕｃｔｕｒｅ  ｏｆ  ＲＳＶ  ｆｕｓｉｏｎ  ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ  ｔｒｉｍｅｒ  ｂｏｕｎｄ  ｔｏ  ａ  ｐｒｅ−ｆｕｓｉｏｎ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｎｅｕｔｒａｌｉｚｉｎｇ  ａｎｔｉｂｏｄｙ．Ｓｃｉｅｎｃｅ  ３４０、１１１３〜１１１７（２０１３）；Ｃｈａｉｗａｔｐｏｎｇｓａｋｏｒｎ，Ｓ．、Ｅｐａｎｄ，Ｒ．Ｆ．、Ｃｏｌｌｉｎｓ，Ｐ．Ｌ．、Ｅｐａｎｄ  Ｒ．Ｍ．、Ｐｅｅｐｌｅｓ，Ｍ．Ｅ．、Ｊ  Ｖｉｒｏｌ．８５（８）：３９６８〜７７（２０１１）；Ｙｕｎｕｓ，Ａ．Ｓ．、Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｔ．Ｐ．、Ｃｒｉｓａｆｉ，Ｋ．、Ｂｕｒｉｍｓｋｉ，Ｉ．、Ｋｉｌｇｏｒｅ，Ｎ．Ｒ．、Ｚｏｕｍｐｌｉｓ，Ｄ．、Ａｌｌａｗａｙ，Ｇ．Ｐ．、Ｗｉｌｄ，Ｃ．Ｔ．、Ｓａｌｚｗｅｄｅｌ，Ｋ．Ｖｉｒｏｌｏｇｙ．２０１０年１月２０日、３９６（２）：２２６〜３７］。したがって、ワクチン抗原としての融合前Ｆの調製は、依然として困難である。中和抗体および防御抗体は、ウイルスの侵入に干渉することによって機能するため、融合後特異的抗体のみを誘起するＦ抗原は、融合前特異的抗体を誘起するＦ抗原としては効果的でないと予想されるという仮説が立てられる。したがって、融合前形態（または場合によっては広がった中間体形態）のＦタンパク質免疫原を含有するＦワクチンを利用することがさらに望ましいと考えられる。これまでの試みでは、ＲＳＶワクチンの承認をサポートするために十分なレベルの保護を誘起することを臨床で実証したＲＳＶワクチンは得られていない。したがって、対応する未変性ＲＳＶ  Ｆタンパク質と比較して増強した免疫原性または向上した融合前形態の安���性などの、向上した特性を有するＲＳＶ  Ｆタンパク質に由来する免疫源、および、このような免疫原を含む組成物、例えばワクチンが必要である。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
一部の態様では、本発明は、対応する野生型ＲＳＶ  Ｆタンパク質のアミノ酸配列に対する、アミノ酸配列において導入された突然変異を呈し、かつ野生型ＲＳＶ  Ｆタンパク質に対してまたは野生型Ｆタンパク質を含むウイルスに対して免疫原性である、野生型ＲＳＶ  Ｆタンパク質の突然変異体を提供する。突然変異体におけるアミノ酸突然変異には、野生型ＲＳＶ  Ｆタンパク質に対する、アミノ酸の置換、欠失、または付加が含まれる。
【００１１】
一部の実施形態では、本開示は、導入されたアミノ酸突然変異が、野生型ＲＳＶ  Ｆタンパク質内の一対のアミノ酸残基の、一対のシステインへの突然変異（「操作されたジスルフィド突然変異」）である、野生型ＲＳＶ  Ｆタンパク質の突然変異体を提供する。導入されたシステイン残基対によって、融合前立体構造などのタンパク質の立体構造またはオリゴマー状態を安定化させるシステイン残基間のジスルフィド結合の形成が可能になる。このような突然変異の具体的な対の例には、５５Ｃおよび１８８Ｃ、１５５Ｃおよび２９０Ｃ、１０３Ｃおよび１４８Ｃ、ならびに１４２Ｃおよび３７１Ｃ、例えば、Ｓ５５ＣおよびＬ１８８Ｃ、Ｓ１５５ＣおよびＳ２９０Ｃ、Ｔ１０３ＣおよびＩ１４８Ｃ、ならびにＬ１４２ＣおよびＮ３７１Ｃが含まれる。
【００１２】
さらに他の実施形態では、ＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体は、１つまたは複数の間隙充填突然変異であるアミノ酸突然変異を含む。間隙充填を目的として置き換えられ得るアミノ酸の例には、低分子脂肪族アミノ酸（例えば、Ｇｌｙ、Ａｌａ、およびＶａｌ）または低分子極性アミノ酸（例えば、ＳｅｒおよびＴｈｒ）、および融合前立体構造では埋没しているが融合後立体構造では溶媒に曝露されるアミノ酸が含まれる。置き換えアミノ酸の例には、高分子脂肪族アミノ酸（Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、およびＭｅｔ）または高分子芳香族アミノ酸（Ｈｉｓ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、およびＴｒｐ）が含まれる。一部の具体的な実施形態では、ＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体は、
（１）５５位、６２位、１５５位、１９０位、または２９０位のＳの、Ｉ、Ｙ、Ｌ、Ｈ、またはＭでの置換、
（２）５４位、５８位、１８９位、２１９位、または３９７位のＴの、Ｉ、Ｙ、Ｌ、Ｈ、またはＭでの置換、
（３）１５１位のＧの、ＡまたはＨでの置換、
（４）１４７位または２９８位のＡの、Ｉ、Ｌ、Ｈ、またはＭでの置換、
（５）１６４位、１８７位、１９２位、２０７位、２２０位、２９６位、３００位、または４９５位のＶの、Ｉ、Ｙ、Ｈでの置換、および
（６）１０６位のＲの、Ｗでの置換
からなる群から選択される間隙充填突然変異を含む。
【００１３】
一部の特定の実施形態では、ＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体は、Ｔ５４Ｈ、Ｓ１９０Ｉ、およびＶ２９６Ｉからなる群から選択される少なくとも１つの間隙充填突然変異を含む。
【００１４】
さらに他の実施形態では、本開示は、フォールディングした構造で互いに近接しているタンパク質内残基の間のイオン反発を減少させるかまたはイオン引力を増大させる静電気的突然変異を含むＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体を提供する。いくつかの実施形態では、ＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体は、ＲＳＶ  Ｆ三量体の別のプロトマーの酸性残基Ｇｌｕ４８７およびＡｓｐ４８９を用いて反発性のイオン相互作用を低減させるかまたは引力性のイオン相互作用を増大させる、静電気的置換を含む。一部の具体的な実施形態では、ＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体は、
（１）８２位、９２位、または４８７位のＥの、Ｄ、Ｆ、Ｑ、Ｔ、Ｓ、Ｌ、またはＨによる置換、
（２）３１５位、３９４位、または３９９位のＫの、Ｆ、Ｍ、Ｒ、Ｓ、Ｌ、Ｉ、Ｑ、またはＴによる置換、
（３）３９２位、４８６位、または４８９位のＤの、Ｈ、Ｓ、Ｎ、Ｔ、またはＰによる置換、および
（４）１０６位または３３９位のＲの、Ｆ、Ｑ、Ｎ、またはＷによる置換
からなる群から選択される静電気的突然変異を含む。
【００１５】
さらに他の実施形態では、本開示は、操作されたジスルフィド突然変異、間隙充填突然変異、および静電気的突然変異から選択される２つ以上の異なるタイプの突然変異の組合せを含む、ＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体を提供する。一部の特定の実施形態では、本発明は、対応する野生型ＲＳＶ  Ｆタンパク質に対する突然変異の組合せを含む、野生型ＲＳＶ  Ｆタンパク質の突然変異体であって、突然変異の組合せが、
（１）Ｔ１０３Ｃ、Ｉ１４８Ｃ、Ｓ１９０Ｉ、およびＤ４８６Ｓの組合せ、
（２）Ｔ５４Ｈ、Ｓ５５Ｃ、Ｌ１８８Ｃ、Ｄ４８６Ｓの組合せ、
（３）Ｔ５４Ｈ、Ｔ１０３Ｃ、Ｉ１４８Ｃ、Ｓ１９０Ｉ、Ｖ２９６Ｉ、およびＤ４８６Ｓの組合せ、
（４）Ｔ５４Ｈ、Ｓ５５Ｃ、Ｌ１４２Ｃ、Ｌ１８８Ｃ、Ｖ２９６Ｉ、およびＮ３７１Ｃの組合せ、
（５）Ｓ５５Ｃ、Ｌ１８８Ｃ、およびＤ４８６Ｓの組合せ、
（６）Ｔ５４Ｈ、Ｓ５５Ｃ、Ｌ１８８Ｃ、およびＳ１９０Ｉの組合せ、
（７）Ｓ５５Ｃ、Ｌ１８８Ｃ、Ｓ１９０Ｉ、およびＤ４８６Ｓの組合せ、
（８）Ｔ５４Ｈ、Ｓ５５Ｃ、Ｌ１８８Ｃ、Ｓ１９０Ｉ、およびＤ４８６Ｓの組合せ、
（９）Ｓ１５５Ｃ、Ｓ１９０Ｉ、Ｓ２９０Ｃ、およびＤ４８６Ｓの組合せ、
（１０）Ｔ５４Ｈ、Ｓ５５Ｃ、Ｌ１４２Ｃ、Ｌ１８８Ｃ、Ｖ２９６Ｉ、Ｎ３７１Ｃ、Ｄ４８６Ｓ、Ｅ４８７Ｑ、およびＤ４８９Ｓの組合せ、ならびに
（１１）Ｔ５４Ｈ、Ｓ１５５Ｃ、Ｓ１９０Ｉ、Ｓ２９０Ｃ、およびＶ２９６Ｉの組合せ
からなる群から選択される、突然変異体を提供する。
【００１６】
別の態様では、本発明は、本明細書において記載されるＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体をコードする核酸分子を提供する。一部の他の具体的な実施形態では、本開示は、
（１）配列番号８のヌクレオチド配列、
（２）配列番号９のヌクレオチド配列、
（３）配列番号１０のヌクレオチド配列、
（４）配列番号１１のヌクレオチド配列、
（５）配列番号１２のヌクレオチド配列、
（６）配列番号１３のヌクレオチド配列、
（７）配列番号１４のヌクレオチド配列、
（８）配列番号１５のヌクレオチド配列、
（９）配列番号１６のヌクレオチド配列、
（１０）配列番号１７のヌクレオチド配列、および
（１１）配列番号１８のヌクレオチド配列
からなる群から選択されるヌクレオチド配列を含む、ＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体をコードする核酸分子を提供する。
【００１７】
別の態様では、本発明は、（１）本開示において記載されるＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体、または（２）このようなＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体をコードする核酸分子またはベクターを含む組成物を提供する。一部の特定の実施形態では、組成物は、本開示によって提供されるＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体および薬学的に許容できる担体を含む医薬組成物である。さらに他の特定の実施形態では、医薬組成物はワクチンである。
【００１８】
本開示はまた、ＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体、このようなＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体をコードする核酸、またはこのようなＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体を発現させるためのベクター、またはＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体もしくは核酸を含む組成物の使用に関する。一部の特定の実施形態では、本開示は、ＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体、ＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体をコードする核酸、またはＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体を発現するベクターを含む、ワクチンなどの、有効量の医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＲＳＶ感染を予防する方法を提供する。
【図面の簡単な説明】
【００１９】
【図１】実施例で記載するＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体の一部の構築のために使用される前駆体ポリペプチド鋳型のアミノ酸配列（配列番号３）を示す図である。前駆体ポリペプチドは、シグナル配列（残基１〜２５）、Ｆ２ポリペプチド（残基２６〜１０９）、ｐｅｐ２７配列（残基１１０〜１３６）、Ｆ１ポリペプチド（残基１３７〜５１３）、Ｔ４フィブリチン由来三量化ドメイン（フォールドン（ｆｏｌｄｏｎ）、残基５１８〜５４４）、トロンビン認識配列（残基５４７〜５５２）、ヒスチジンタグ（残基５５３〜５５８）、Ｓｔｒｅｐｔａｇ  ＩＩ（５６１〜５６８）、およびリンカー配列（残基５１４〜５１７、５４５〜５４６、および５５９〜５６０）を含む。これはまた、配列番号１で示す未変性ＲＳＶ  Ｆ配列に対する３つの天然の置換（Ｐ１０２Ａ、Ｉ３７９Ｖ、およびＭ４４７Ｖ）を含む。フーリンの切断部位は、ＲＡＲＲおよびＫＫＲＫＲＲで示される。
【図２Ａ】非還元条件下での、選択された融合前Ｆ突然変異体（ｐＸＣＳ８４７、ｐＸＣＳ８５１、およびｐＸＣＳ８５２）のドデシル硫酸ナトリウムポリアクリルアミドゲル電気泳動（ＳＤＳ−ＰＡＧＥ）およびウェスタンブロット分析を示す図である。
【図２Ｂ】分析用超遠心機を使用する沈降速度実験から計算された、選択された突然変異体（ｐＸＣＳ８４７、ｐＸＣＳ８５１、およびｐＸＣＳ８５２）の沈降係数分布を示すグラフである。
【図３Ａ】特異的部位突然変異を有する例示的な修飾されたＲＳＶ  Ｆタンパク質の円二色性分光法（ＣＤ）スペクトルを示すグラフである。設計された突然変異体の遠紫外（ＵＶ）ＣＤスペクトルによって二次構造の完全性が確認され、近ＵＶ  ＣＤスペクトルによって三次構造の完全性が確認される。
【図３Ｂ】特異的部位の突然変異を有する例示的な修飾されたＲＳＶ  Ｆタンパク質の円二色性分光法（ＣＤ）スペクトルを示すグラフである。設計された突然変異体の遠紫外（ＵＶ）ＣＤスペクトルによって二次構造の完全性が確認され、近ＵＶ  ＣＤスペクトルによって三次構造の完全性が確認される。
【図４】２つの異なるモノクローナル抗体（ｍＡｂ）Ｄ２５およびＡＭ１４を２つの温度（５０℃および６０℃）で使用する、精製ＤＳ−Ｃａｖ１の時間依存的ストレス試験を示すグラフである。
【図５】精製ＤＳ−Ｃａｖ１を用いる示差走査熱量測定（ＤＳＣ）実験（実施例８）を示すグラフである。実験は、設計された融合前Ｆ突然変異体について記載したように行った。実線−試料の最初のＤＳＣスキャン、破線−最初のスキャンで使用した同一試料の反復スキャン。ＤＳＣピークは反復スキャンの間に大きく回復し、このことは、ＤＳＣによって検出される立体構造の遷移が可逆的であることを示す。
【図６Ａ】６０℃でストレスを受けたＤＳ−Ｃａｖ１の遠ＵＶ  ＣＤスペクトル（実施例８）を示すグラフである。ＣＤスペクトルは、設計された融合前ＲＳＶ  Ｆ突然変異体について上記に記載したように（実施例６）記録した。ＤＳ−Ｃａｖ１は、６０℃で最大２時間のインキュベーション後に、既定の遠ＵＶ  ＣＤスペクトルを保持し、これは、全体的なタンパク質アンフォールディングがその間に起こっていないことを示す。
【図６Ｂ】６０℃でストレスを受けたＤＳ−Ｃａｖ１の近ＵＶ  ＣＤスペクトル（実施例８）を示すグラフである。ＣＤスペクトルは、設計された融合前ＲＳＶ  Ｆ突然変異体について上記に記載したように（実施例６）記録した。
【図７Ａ】融合前Ｆ三量体特異的ＡＭ１４エピトープの保存によって判定される、熱ストレス耐性のタンパク質濃度依存性を示すグラフである（実施例８）。
【図７Ｂ】融合前Ｆ特異的Ｄ２５エピトープの保存によって判定される、熱ストレス耐性のタンパク質濃度依存性を示すグラフである（実施例８）。タンパク質試料を連続希釈し、５０℃のストレスに１時間曝した。対照（無ストレス）試料と比較した、ストレス後に残っているＤ２５の反応性を、ＥＬＩＳＡアッセイで評価した。
【図８】アジュバントとしてのリン酸アルミニウムを伴ってまたは伴わずに、ＤＳ−Ｃａｖ１、野生型Ｆ、または突然変異体ｐＸＣＳ８５２、ｐＸＣＳ８５５、ｐＸＣＳ８３０、ｐＸＣＳ８５３、ｐＸＣＳ７８０、ｐＸＣＳ８９８、ｐＸＣＳ８５１、ｐＸＣＳ８７４、ｐＸＣＳ８８１、ｐＸＣＳ７３８、もしくはｐＸＣＳ８４７で免疫化したマウスの中和抗体応答を示すグラフである。結果は、１群あたり１０匹のマウスから得た５０％幾何平均力価（ＧＭＴ）として報告される。各散布図は、１群当たり全部で１０匹での、個々のマウスの応答を反映する。各群内の線は、幾何平均５０％中和抗体力価を示す。「野生型Ｆ」は、野生型Ｆ細胞外ドメイン組換え構築物を指す。
【図９Ａ】操作された融合前Ｆタンパク質突然変異体によって誘起される中和抗体力価と操作された融合前Ｆタンパク質突然変異体の安定性との間の相関を説明するグラフである。Ｙ軸−０．２５μｇの抗原およびアジュバントなし、または０．０２５μｇの抗原および０．１ｍｇ／ｍｌのＡｌＰＯ４アジュバントでのマウスの免疫化によって誘起された中和抗体力価（データは表１２に示す）。Ｘ軸−熱ストレス後の残りのＡＭ１４反応性によって規定される、操作された突然変異体の安定性（データは表８Ｂに示す）。
【図９Ｂ】操作された融合前Ｆタンパク質突然変異体によって誘起される中和抗体力価と操作された融合前Ｆタンパク質突然変異体の安定性との間の相関を説明するグラフである。Ｙ軸−０．２５μｇの抗原およびアジュバントなし、または０．０２５μｇの抗原および０．１ｍｇ／ｍｌのＡｌＰＯ４アジュバントでのマウスの免疫化によって誘起された中和抗体力価（データは表１２に示す）。Ｘ軸−熱ストレス後の残りのＡＭ１４反応性によって規定される、操作された突然変異体の安定性（データは表８Ｂに示す）。
【発明を実施するための形態】
【００２０】
本開示は、ＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体、ＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体を含む免疫原性組成物、ＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体を生産するための方法、ＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体を含む組成物、およびＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体をコードする核酸に関する。
【００２１】
Ａ．定義
用語「１０１Ｆ」は、配列番号３０のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号３１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを有する、ＵＳ２００６／０１５９６９５Ａ１において記載されている抗体を指す。
【００２２】
本明細書において用いる場合、単数形「１つの（ａ）」、「１つの（ａｎ）」、および「その（ｔｈｅ）」は、文脈から別段のことが明らかに示されない限り、単数形および複数形の両方を指す。例えば、用語「抗原」は単数または複数の抗原を含み、「少なくとも１つの抗原」という表現に等しいと見なすことができる。
【００２３】
用語「アジュバント」は、（それがワクチン自体の標的抗原ではないが）ワクチン内の抗原に対する身体の免疫応答を増強、加速、または延長させ得る物質を指す。アジュバントは、ワクチン組成物内に含まれ得るか、またはワクチンと別々に投与され得る。
【００２４】
用語「投与」は、選択された経路による対象内への物質または組成物の導入を指す。投与は、局所的または全身的であり得る。例えば、選択された経路が筋肉内である場合、組成物（開示された免疫原を含む組成物など）は、対象の筋肉内への組成物の導入によって投与される。
【００２５】
用語「ＡＭ１４」は、配列番号２４のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号２５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを有する、ＷＯ２００８／１４７１９６Ａ２において記載されている抗体を指す。
【００２６】
用語「ＡＭ２２」は、配列番号２６のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号２７のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを有する、ＷＯ２０１１／０４３６４３Ａ１において記載されている抗体を指す。
【００２７】
用語「抗原」は、抗体によって認識され得る分子を指す。抗原の例には、免疫細胞によって認識されるものなどの、抗原決定基を含有するポリペプチド、ペプチド、脂質、多糖、および核酸が含まれる。
【００２８】
用語「保存的な置換」は、化学的に類似のアミノ酸でのアミノ酸の置換を指す。機能的に類似のアミノ酸をもたらす保存的なアミノ酸置換は、当技術分野において周知である。以下の６つの群は、それぞれ、互いにとって保存的な置換であるアミノ酸を含有する。
１）アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、スレオニン（Ｔ）、
２）アスパラギン酸（Ｄ）、グルタミン酸（Ｅ）、
３）アスパラギン（Ｎ）、グルタミン（Ｑ）、
４）アルギニン（Ｒ）、リジン（Ｋ）、
５）イソロイシン（Ｉ）、ロイシン（Ｌ）、メチオニン（Ｍ）、バリン（Ｖ）、および
６）フェニルアラニン（Ｆ）、チロシン（Ｙ）、トリプトファン（Ｗ）。
【００２９】
用語「Ｄ２５」は、配列番号２２のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号２３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを有する、ＷＯ２００８／１４７１９６Ａ２において記載されている抗体を指す。
【００３０】
参照ポリヌクレオチドの「縮重変異体」という用語は、参照ポリヌクレオチドとヌクレオチド配列は異なるが参照ポリヌクレオチドによってコードされるものと同一のポリペプチド配列をコードする、ポリヌクレオチドを指す。２０の天然アミノ酸があり、そのほとんどは、２つ以上のコドンによって特定される。例えば、コドンＣＧＵ、ＣＧＣ、ＣＧＡ、ＣＧＧ、ＡＧＡ、およびＡＧＧは全て、アミノ酸アルギニンをコードする。したがって、タンパク質コード配列内でアルギニンが特定される全ての位置で、コドンは、コードされるタンパク質を改変することなく、記載された対応するコドンのいずれかに改変され得る。遺伝子コードの縮重に起因して、多くの機能的に同一な核酸が、あらゆる所与のポリペプチドをコードする。
【００３１】
用語「ＤＳ−Ｃａｖ１」は、ＭｃＬｅｌｌａｎら、Ｓｃｉｅｎｃｅ、３４２（６１５８）、５９２〜５９８、２０１３において記載されているアミノ酸配列を有するある種のＲＳＶ  Ｆタンパク質を指す。
【００３２】
用語「有効量」は、所望の応答を生じさせるために十分な作用物質の量を指す。例えば、これは、ウイルス複製を阻害するため、またはウイルス感染の表立った症候をある程度改変するために必要な量であり得る。
【００３３】
用語「エピトープ」（または「抗原決定基」または「抗原性部位」）は、抗体、Ｂ細胞受容体、またはＴ細胞受容体が結合または応答する抗原の領域を指す。エピトープは、二次、三次、もしくは四次のタンパク質フォールディングが並置する連続するアミノ酸または不連続なアミノ酸から形成され得る。連続するアミノ酸から形成されたエピトープは、典型的には、変性溶媒への曝露で保持されるが、一方、高次のフォールディングによって形成されたエピトープは、典型的には、変性溶媒での処理で失われる。
【００３４】
用語「Ｆ０ポリペプチド」（Ｆ０）は、シグナルポリペプチド配列、Ｆ１ポリペプチド配列、ｐｅｐ２７ポリペプチド配列、およびＦ２ポリペプチド配列から構成される、ＲＳＶ  Ｆタンパク質の前駆体ポリペプチドを指す。稀な例外を除いて、既知のＲＳＶ株のＦ０ポリペプチドは、５７４アミノ酸からなる。
【００３５】
用語「Ｆ１ポリペプチド」（Ｆ１）は、成熟ＲＳＶ  Ｆタンパク質のポリペプチド鎖を指す。未変性Ｆ１は、ＲＳＶ  Ｆ０前駆体のおよそ残基１３７〜５７４を含み、（Ｎ末端からＣ末端まで）細胞外領域（およそ残基１３７〜５２４）、膜貫通ドメイン（およそ残基５２５〜５５０）、および細胞質ドメイン（およそ残基５５１〜５７４）から構成される。本明細書において用いる場合、この用語は、未変性Ｆ１ポリペプチド、および、未変性配列からの修飾（例えば、アミノ酸の置換、挿入、または欠失）、例えば、Ｆ突然変異体を安定化させるようにまたはＦ突然変異体の免疫原性を増強させるように設計された修飾を含むＦ１ポリペプチドの両方を包含する。
【００３６】
用語「Ｆ２ポリペプチド」（Ｆ２）は、成熟ＲＳＶ  Ｆタンパク質のポリペプチド鎖を指す。未変性Ｆ２は、ＲＳＶ  Ｆ０前駆体のおよそ残基２６〜１０９を含む。本明細書において用いる場合、この用語は、未変性Ｆ２ポリペプチド、および、未変性配列からの修飾（例えば、アミノ酸の置換、挿入、または欠失）、例えば、Ｆ突然変異体を安定化させるようにまたはＦ突然変異体の免疫原性を増強させるように設計された修飾を含むＦ２ポリペプチドの両方を包含する。未変性ＲＳＶ  Ｆタンパク質では、Ｆ２ポリペプチドは、２つのジスルフィド結合によってＦ１ポリペプチドに連結して、Ｆ２−Ｆ１ヘテロ二量体を形成する。用語「フォールドン」または「フォールドンドメイン」は、三量体を形成し得るアミノ酸配列を指す。このようなフォールドンドメインの一例は、配列ＧＹＩＰＥＡＰＲＤＧＱＡＹＶＲＫＤＧＥＷＶＬＬＳＴＦＬ（配列番号４０）を有する、バクテリオファージＴ４フィブリチンに由来するペプチド配列である。用語「哺乳動物」は、哺乳綱（Ｍａｍｍａｌｉａ）クラスのあらゆる動物種を指す。哺乳動物の例には、ヒト、サルなどの非ヒト霊長類、ラット、マウス、モルモットなどの実験動物、ネコ、イヌ、ウサギ、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ウマ、およびブタなどの家畜、ならびに、ライオン、トラ、ゾウなどの捕らえられた野生動物などが含まれる。
【００３７】
用語「糖タンパク質」は、ポリペプチド側鎖に共有結合的に付加されたオリゴ糖鎖（グリカン）を含有するタンパク質を指す。糖質は、翻訳時修飾または翻訳後修飾においてタンパク質に付加され、これはグリコシル化として知られている。用語「グリコシル化部位」は、グリカンの付加を受ける、タンパク質などのポリペプチドの表面上のアミノ酸配列を指す。Ｎ連結型グリコシル化部位は、ＮＸ（Ｓ／Ｔ）のトリプレット配列であり、ここで、Ｎはアスパラギン、Ｘはプロリンを除くあらゆる残基、（Ｓ／Ｔ）はセリンまたはスレオニン残基である。グリカンは、多糖またはオリゴ糖である。グリカンはまた、糖タンパク質、糖脂質、またはプロテオグリカンなどの複合糖質の糖質部分を指すためにも使用され得る。
【００３８】
用語「宿主細胞」は、その中でベクターが増殖し得、そのＤＮＡまたはＲＮＡが発現される細胞を指す。細胞は原核細胞または真核細胞であり得る。
【００３９】
用語「同一」またはパーセント「同一性」は、２つ以上の核酸配列またはポリペプチド配列の文脈において、最大の対応となるように比較およびアラインされた場合に、同一であるか、または特定のパーセンテージの同一のアミノ酸残基もしくはヌクレオチドを有する、２つ以上の配列または部分配列を指す。比較のために配列をアラインメントする方法は、当技術分野において周知である。アラインメントされると、同一のヌクレオチドまたはアミノ酸残基が両配列に存在する位置の数を数えることによって、マッチ数が決定される。配列同一性パーセントは、マッチ数を、同定された配列で示される配列の長さによって、または分節的な長さ（同定された配列で示される配列からの１００の連続ヌクレオチドまたはアミノ酸残基など）によって除し、その後、得られた値に１００を乗じることによって決定される。例えば、１１６６のマッチを有するペプチド配列は、１５５４アミノ酸を有する試験配列とアラインされた場合、試験配列に７５．０パーセント同一である（１１６６÷１５５４×１００＝７５．０）。
【００４０】
比較のための配列の最適なアラインメントは、例えば、ＳｍｉｔｈおよびＷａｔｅｒｍａｎ、Ａｄｖ．Ａｐｐｌ．Ｍａｔｈ．２：４８２、１９８１のローカル相同性アルゴリズムによって、ＮｅｅｄｌｅｍａｎおよびＷｕｎｓｃｈ、Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．４８：４４３、１９７０の相同性アラインメントアルゴリズムによって、ＰｅａｒｓｏｎおよびＬｉｐｍａｎ、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８５：２４４４、１９８８の類似性探索方法によって、これらのアルゴリズムのコンピュータ化された実行（Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  Ｐａｃｋａｇｅ、Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  Ｃｏｍｐｕｔｅｒ  Ｇｒｏｕｐ、５７５  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｄｒ．、Ｍａｄｉｓｏｎ、ＷＩのＧＡＰ、ＢＥＳＴＦＩＴ、ＦＡＳＴＡ、およびＴＦＡＳＴＡ）によって、または、手動のアラインメントおよび目視検査（例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋら（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ、第４版、Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、２０１２）およびＡｕｓｕｂｅｌら（Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  Ａｎｄ  Ｓｏｎｓ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、補遺（ｔｈｒｏｕｇｈ  ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ）１０４、２０１３）を参照されたい）によって行うことができる。
【００４１】
用語「免疫原性の」は、物質の、アジュバントの存在下または不存在下で動物において特定の抗原に対する免疫応答を生じさせる、誘起する、刺激する、または誘発する能力を指す。
【００４２】
用語「免疫応答」は、限定はしないが、自然免疫応答（例えば、Ｔｏｌｌ受容体シグナル伝達カスケードの活性化）、細胞介在性免疫応答（例えば、抗原特異的Ｔ細胞などのＴ細胞、および免疫系の非特異的細胞によって媒介される応答）、ならびに液性免疫応答（例えば、血漿、リンパ、および／または組織液内への抗体の生成および分泌などの、Ｂ細胞によって媒介される応答）を含む、宿主哺乳動物の免疫系の１つまたは複数の細胞の、刺激（免疫原など）に対するあらゆる検出可能な応答を指す。免疫応答の例には、Ｔｏｌｌ様受容体活性化、リンホカイン（例えばサイトカイン（例えば、Ｔｈ１、Ｔｈ２、もしくはＴｈ１７型サイトカイン）またはケモカイン）の発現または分泌、マクロファージ活性化、樹状細胞活性化、Ｔ細胞（例えば、ＣＤ４＋またはＣＤ８＋Ｔ細胞）活性化、ＮＫ細胞活性化、Ｂ細胞活性化（例えば、抗体の生成および／または分泌）、ＭＨＣ分子への免疫原（例えば、抗原（例えば、免疫原性ポリペプチド））の結合、細胞傷害性Ｔリンパ球（「ＣＴＬ」）応答の誘発、Ｂ細胞応答（例えば、抗体産生）の誘発、および免疫系細胞（例えば、Ｔ細胞およびＢ細胞）の増加（例えば、細胞集団の増殖）、ならびにプロセシングおよび抗原提示細胞による抗原の提示の増大における変化（増加）が含まれる。用語「免疫応答」はまた、脊椎動物の免疫系の１つまたは複数の構成成分によるインビトロでの特定の物質（抗原または免疫原など）に対するあらゆる検出可能な応答を包含する。用語「免疫原」は、本明細書において以下に規定するような免疫原性の化合物、組成物、または物質を指す。
【００４３】
用語「免疫原性組成物」は、免疫原を含む組成物を指す。
【００４４】
用語「ＭＰＥ８」は、配列番号２８のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号２９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを有する、Ｃｏｒｔｉら［Ｃｏｒｔｉ，Ｄ．、Ｂｉａｎｃｈｉ，Ｓ．、Ｖａｎｚｅｔｔａ，Ｆ．、Ｍｉｎｏｌａ，Ａ．、Ｐｅｒｅｚ，Ｌ．、Ａｇａｔｉｃ，Ｇ．、Ｌａｎｚａｖｅｃｃｈｉａ，Ａ．Ｃｒｏｓｓ−ｎｅｕｔｒａｌｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｆｏｕｒ  ｐａｒａｍｙｘｏｖｉｒｕｓｅｓ  ｂｙ  ａ  ｈｕｍａｎ  ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  ａｎｔｉｂｏｄｙ．Ｎａｔｕｒｅ、５０１（７４６７）、４３９〜４４３（２０１３）］において記載されている抗体を指す。野生型ＲＳＶ  Ｆタンパク質の「突然変異体」、ＲＳＶ  Ｆタンパク質の「突然変異体」、「ＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体」、または「修飾されたＲＳＶ  Ｆタンパク質」という用語は、野生型Ｆタンパク質に対する導入された突然変異を呈し、野生型Ｆタンパク質に対して免疫原性である、ポリペプチドを指す。
【００４５】
用語「突然変異」は、参照タンパク質またはポリペプチドのアミノ酸配列と比較した、タンパク質またはポリペプチドのアミノ酸配列におけるアミノ酸残基の欠失、付加、または置換を指す。本明細書および特許請求の範囲の全体を通して、タンパク質配列内の１つの特定の位置でのアミノ酸の置換は、「（野生型タンパク質内のアミノ酸残基）（アミノ酸位置）（操作されたタンパク質内のアミノ酸残基）」という表記を使用して言及される。例えば、Ｙ７５Ａという表記は、参照タンパク質のアミノ酸配列の第７５位のチロシン（Ｙ）残基の、アラニン（Ａ）残基による置換（参照タンパク質の突然変異体における）を指す。異なる野生型配列の間で、同一の位置のアミノ酸残基にばらつきがある場合では、位置番号の前にあるアミノ酸コードは、「７５Ａ」などのように、表記が省略され得る。
【００４６】
用語「未変性の」または「野生型の」タンパク質、配列、またはポリペプチドは、選択的突然変異によって人工的に修飾されていない、天然に存在するタンパク質、配列、またはポリペプチドを指す。
【００４７】
用語「ｐｅｐ２７ポリペプチド」または「ｐｅｐ２７」は、ＲＳＶ  Ｆタンパク質の成熟の間にＦ０前駆体から切除される２７アミノ酸のポリペプチドを指す。ｐｅｐ２７の配列には、Ｆタンパク質の成熟の間に細胞プロテアーゼによって切断されてＦ１ポリペプチドおよびＦ２ポリペプチドを生じる、２つのフーリン切断部位が隣接している。
【００４８】
用語「薬学的に許容できる担体」は、活性成分と組み合わされると活性成分と適合し、対象、特に哺乳動物に投与されると毒性反応またはそうでなければ望ましくない反応を生じさせない、材料または組成物を指す。薬学的に許容できる担体の例には、溶媒、界面活性剤、懸濁剤、緩衝剤、滑沢剤、乳化剤、吸収剤、分散媒体、被覆剤、および安定剤が含まれる。
【００４９】
用語「融合前特異的抗体」は、融合前立体構造のＲＳＶ  Ｆ糖タンパク質に特異的に結合するが、融合後立体構造のＲＳＶ  Ｆタンパク質には結合しない抗体を指す。例示的な融合前特異的抗体には、Ｄ２５、ＡＭ２２、５Ｃ４、ＭＰＥ８、およびＡＭ１４抗体が含まれる。
【００５０】
用語「融合前三量体特異的抗体」は、融合前三量体立体構造のＲＳＶ  Ｆ糖タンパク質に特異的に結合するが、融合後立体構造、または三量体でもない融合前立体構造のＲＳＶ  Ｆタンパク質には結合しない抗体を指す。例示的な融合前三量体特異的抗体は、ＡＭ１４抗体である。「融合前三量体特異的抗体」は、「融合前特異的抗体」のサブセットである。
【００５１】
用語「初回−追加ワクチン接種」は、免疫応答を誘発するための、対象への第１の免疫原性組成物（初回ワクチン）の投与、その後の第２の免疫原性組成物（追加ワクチン）の投与を含む、免疫療法レジメンを指す。初回ワクチンおよび追加ワクチンは、典型的には同一の免疫原を含有し、同一または類似の形式とする。しかし、これらはまた、異なる形式、例えば、一方ではベクターの形態で、他方では裸ＤＮＡプラスミドの形態とし得る。当業者には、初回ワクチンの投与と追加ワクチンの投与との間の適切な時間間隔が理解されよう。さらに、初回ワクチン、追加ワクチン、または初回ワクチンおよび追加ワクチンの両方は、さらに、アジュバントを含む。
【００５２】
用語「融合前立体構造」は、（ｉ）ＲＳＶ  Ｆタンパク質もしくは突然変異体が単量体もしくは三量体の形態である場合には抗体Ｄ２５によって、または（ｉｉ）ＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体が三量体の形態である場合には抗体ＡＭ１４が特異的に結合し得る、ＲＳＶ  Ｆタンパク質または突然変異体がとる立体構造を指す。融合前三量体の立体構造は、融合前立体構造のサブセットである。
【００５３】
用語「融合後立体構造」は、Ｄ２５、ＡＭ２２、またはＡＭ１４が特異的に結合しない、ＲＳＶ  Ｆタンパク質がとる立体構造を指す。未変性Ｆタンパク質は、ウイルスエンベロープと宿主細胞膜とが融合した後に融合後立体構造をとる。ＲＳＶ  Ｆタンパク質はまた、融合事象の背景以外に、例えば、膜から抽出された場合、細胞外ドメインとして発現された場合、または保存の際などに、熱および低い重量モル浸透圧濃度などのストレス条件下で、融合後立体構造をとり得る。
【００５４】
用語「可溶性タンパク質」は、水溶液中に溶解し得、溶解したままでいられる、タンパク質を指す。タンパク質の溶解度は、水ベースの液体内のタンパク質の濃度、液体の緩衝条件、液体内の他の溶質の濃度、例えば塩およびタンパク質の濃度、ならびに液体の温度に応じて変化し得る。
【００５５】
用語「特異的に結合する」は、所与の標的分子への抗体の結合の文脈において、他の試験対象の物質とのその結合よりも高い親和性で、抗体が標的分子に結合することを指す。例えば、融合前立体構造のＲＳＶ  Ｆタンパク質に特異的に結合する抗体は、融合後立体構造のＲＳＶ  Ｆタンパク質への結合よりも高い親和性で融合前立体構造のＲＳＶ  Ｆタンパク質に結合する抗体である。
【００５６】
用語「治療有効量」は、症候および／または障害の潜在的原因を予防する、治療する（防止を含む）、低減および／または改善するのに十分な作用物質の量を指す。
【００５７】
用語「ワクチン」は、対象において予防的または治療的免疫応答を誘起し得る免疫源を含む医薬組成物を指す。典型的には、ワクチンは、病原体、例えばウイルス病原体の抗原に対する抗原特異的な免疫応答を誘起する。
【００５８】
用語「ベクター」は、外来核酸分子を輸送または移送し得る核酸分子を指す。この用語は、発現ベクターおよび転写ベクターの両方を包含する。用語「発現ベクター」は、標的細胞においてインサートを発現し得るベクターを指し、インサートの発現を駆動するエンハンサー配列、プロモーター配列、およびターミネーター配列などの制御配列を一般に含有する。用語「転写ベクター」は、転写され得るが翻訳され得ないベクターを指す。転写ベクターは、それらのインサートを増幅するために使用される。外来核酸分子は、「インサート」または「導入遺伝子」と呼ばれる。ベクターは一般に、インサート、および、ベクターの骨格としての役割を果たす、より大きな配列からなる。ベクターの構造または由来源に基づいて、主なタイプのベクターには、プラスミドベクター、コスミドベクター、ファージベクター、例えばラムダファージ、ウイルスベクター、例えばアデノウイルス（Ａｄ）ベクター、および人工染色体が含まれる。
【００５９】
Ｂ．ＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体
一部の態様では、本発明は、対応する野生型ＲＳＶ  Ｆタンパク質のアミノ酸配列に対する、アミノ酸配列において導入された突然変異を呈し、かつ野生型ＲＳＶ  Ｆタンパク質に対してまたは野生型Ｆタンパク質を含むウイルスに対して免疫原性である、野生型ＲＳＶ  Ｆタンパク質の突然変異体を提供する。ある特定の実施形態では、ＲＳＶ  Ｆ突然変異体は、ある特定の有利な特徴、例えば、対応する野生型Ｆタンパク質と比較して増大した免疫原性特性、または、突然変異体の融合前立体構造もしくは突然変異体の融合前三量体立体構造における向上した安定性を有する。さらに他の実施形態では、本開示は、本明細書において記載される１つまたは複数の導入された突然変異を呈し、抗体Ｄ２５または抗体ＡＭ１４から選択される融合前特異的抗体に結合する、ＲＳＶ  Ｆ突然変異体を提供する。
【００６０】
ＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体における導入されたアミノ酸突然変異には、アミノ酸の置換、欠失、または付加が含まれる。一部の実施形態では、突然変異体のアミノ酸配列における唯一の突然変異は、野生型ＲＳＶ  Ｆタンパク質に対するアミノ酸置換である。
【００６１】
異なるＲＳＶサブタイプ由来の多くの未変性ＲＳＶ  Ｆタンパク質のアミノ酸配列、ならびにこのようなタンパク質をコードする核酸配列は、当技術分野において公知である。例えば、いくつかのサブタイプＡ、Ｂ、およびウシＲＳＶ  Ｆ０前駆体タンパク質の配列は、配列番号１、２、４、６、および８１〜２７０で示される。
【００６２】
未変性ＲＳＶ  Ｆタンパク質は、ＲＳＶサブタイプにわたる顕著な配列保存を示す。例えば、ＲＳＶサブタイプＡおよびＢは９０％の配列同一性を共有し、ＲＳＶサブタイプＡおよびＢはそれぞれ、Ｆ０前駆体分子にわたって、ウシＲＳＶ  Ｆタンパク質と８１％の配列同一性を有する。ＲＳＶサブタイプ内では、Ｆ０配列の同一性はさらに高く、例えば、ＲＳＶ  Ａ、Ｂ、およびウシサブタイプのそれぞれの内では、ＲＳＶ  Ｆ０前駆体タンパク質は、約９８％の配列同一性を有する。ほぼ全ての同定されたＲＳＶ  Ｆ０前駆体配列は、Ｃ末端細胞質尾部の長さに典型的には起因して長さがわずかに異なるが、５７４アミノ酸長からなる。様々な未変性ＲＳＶ  Ｆタンパク質にわたる配列同一性は、当技術分野において公知である（例えば、ＷＯ２０１４／１６０４６３を参照されたい）。Ｆタンパク質の配列保存のレベルをさらに説明するために、代表的なＲＳＶ  Ａ株およびＲＳＶ  Ｂ株のＦ０前駆体ポリペプチド配列の間の非コンセンサスアミノ酸残基を、それぞれ表１７および１８に示す（表中、非コンセンサスアミノ酸は、ＣｌｕｓｔａｌＸ（バージョン２）でＲＳＶ  Ａ株の選択されたＦタンパク質配列のアラインメントを行って同定された）。
【００６３】
ＲＳＶ  Ｆ配列がかなり保存されていることを考慮して、当業者であれば、異なる未変性ＲＳＶ  Ｆ配列間のアミノ酸位置を容易に比較して、異なるＲＳＶ株とサブタイプとの間の対応するＲＳＶ  Ｆアミノ酸位置を同定することができる。例えば、ほぼ全ての同定された未変性ＲＳＶ  Ｆ０前駆体タンパク質にわたって、フーリン切断部位は、同一のアミノ酸位置にある。したがって、株およびサブタイプにわたる未変性ＲＳＶ  Ｆタンパク質配列の保存によって、ＲＳＶ  Ｆタンパク質内の特定の位置でのアミノ酸の比較のための、参照ＲＳＶ  Ｆ配列の使用が可能になる。本開示の目的では（文脈から別段のことが示されない限り）、ＲＳＶ  Ｆタンパク質のアミノ酸位置は、配列番号１で示すＦ０前駆体ポリペプチドの配列（ＧｅｎＩｎｆｏ識別子ＧＩ  １３８２５１およびＳｗｉｓｓ  Ｐｒｏｔ識別子Ｐ０３４２０に対応する、ＲＳＶ  Ａ２株の完全長未変性Ｆ前駆体ポリペプチドのアミノ酸配列）を参照して示される。しかし、例えば、配列番号１と比較してさらなるアミノ酸残基が付加または除去されている場合には、異なるＲＳＶ  Ｆ０配列が異なる番号付け系を有し得ることに留意されたく、またこのことは当業者に理解されよう。したがって、特異的なアミノ酸残基がそれらの番号によって参照される場合、記載は、所与のアミノ酸配列の最初から数えてその番号付けされた位置に正確に位置しているアミノ酸のみに限定されず、ありとあらゆるＲＳＶ  Ｆ配列内の同等の／対応するアミノ酸残基も、これらの残基が同一の正確な番号付けされた位置になくても、例えば、ＲＳＶ配列が配列番号１よりも短いもしくは長くても、または配列番号１と比較して挿入もしくは欠失を有していても、意図されることを理解されたい。
【００６４】
Ｂ−１．ＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体の構造
本開示によって提供されるＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体は、Ｆ１ポリペプチドおよびＦ２ポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、突然変異体は、三量化ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、Ｆ１ポリペプチドまたはＦ２ポリペプチドのいずれかは、本明細書において以下に詳述する少なくとも１つの導入された修飾（例えば、アミノ酸置換）を含む。一部の他の実施形態では、Ｆ１ポリペプチドおよびＦ２ポリペプチドのそれぞれは、本明細書において以下に詳述する少なくとも１つの導入された修飾（例えば、アミノ酸置換）を含む。
【００６５】
Ｂ−１（ａ）．ＲＳＶ  Ｆ突然変異体のＦ１ポリペプチドおよびＦ２ポリペプチド
一部の実施形態では、突然変異体は、２つの個別のポリペプチド鎖、すなわち、Ｆ１ポリペプチドおよびＦ２ポリペプチドを含む、ＲＳＶ  Ｆタンパク質の成熟形態である。一部の他の実施形態では、Ｆ２ポリペプチドは、１つまたは２つのジスルフィド結合によってＦ１ポリペプチドに連結して、Ｆ２−Ｆ１ポリペプチドヘテロ二量体を形成する。さらに他の実施形態では、ＲＳＶ  Ｆ突然変異体は、Ｆ２ポリペプチドがペプチド結合またはペプチドリンカーによってＦ１ポリペプチドに連結している、一本鎖タンパク質の形態である。２つポリペプチド鎖を共に繋ぐためのあらゆる適切なペプチドリンカーを使用することができる。このようなリンカーの例には、Ｇ、ＧＧ、ＧＧＧ、ＧＳ、およびＳＡＩＧリンカー配列が含まれる。リンカーは、完全長ｐｅｐ２７配列またはその断片でもあり得る。
【００６６】
突然変異体のＦ１ポリペプチド鎖は、対応する野生型ＲＳＶ  Ｆタンパク質の完全長Ｆ１ポリペプチドと同一の長さであり得る。しかしこれは、欠失、例えば、完全長Ｆ１ポリペプチドのＣ末端からの１から６０までのアミノ酸残基の欠失も有し得る。ＲＳＶ  Ｆ突然変異体の完全長Ｆ１ポリペプチドは、未変性ＲＳＶ  Ｆ０前駆体アのミノ酸位置１３７〜５７４に対応し、（Ｎ末端からＣ末端で）細胞外領域（残基１３７〜５２４）、膜貫通ドメイン（残基５２５〜５５０）、および細胞質ドメイン（残基５５１〜５７４）を含む。未変性Ｆ１ポリペプチド配列におけるアミノ酸残基５１４以降（ａｍｉｎｏ  ａｃｉｄ  ｒｅｓｉｄｕｅｓ  ５１４  ｏｎｗａｒｄｓ）は、本明細書において提供されるＲＳＶ  Ｆ突然変異体のＦ１ポリペプチドにおいて任意の配列であり、したがって、突然変異体のＦ１ポリペプチドには存在しないこともあることに留意されたい。
【００６７】
一部の実施形態では、ＲＳＶ  Ｆ突然変異体のＦ１ポリペプチドは、細胞質ドメイン全体を欠く。他の実施形態では、Ｆ１ポリペプチドは、細胞質ドメインおよび膜貫通ドメイン全体の一部または全体を欠く。一部の具体的な実施形態では、突然変異体は、５１０位、５１１位、５１２位、５１３位、５１４位、５１５位、５２０位、５２５位、または５３０位から５７４位のアミノ酸残基が存在しないＦ１ポリペプチドを含む。典型的には、フォールドンなどの三量化ドメインに連結した突然変異体では、アミノ酸５１４から７５４が存在しないこともある。したがって、一部の具体的な実施形態では、アミノ酸残基５１４から５７４が突然変異体のＦ１ポリペプチドには存在しない。さらに他の具体的な実施形態では、ＲＳＶ  Ｆ突然変異体のＦ１ポリペプチドは、未変性Ｆ０ポリペプチド配列のアミノ酸残基１３７〜５１３、例えば、配列番号１、２、４、６、および８１〜２７０で示されるＦ０前駆体配列のいずれかを含むかまたはそれからなる。
【００６８】
他方、ＲＳＶ  Ｆ突然変異体のＦ１ポリペプチドは、フォールドンなどの三量化ドメインへのＣ末端連結を含み得る。本明細書において開示されるＲＳＶ  Ｆ突然変異体の配列の多くは、免疫応答の誘発などのＲＳＶ  Ｆタンパク質の機能に必須ではない、トロンビン切断部位（ＬＶＰＲＧＳ）などのプロテアーゼ切断部位の配列、６×Ｈｉｓタグ（ＨＨＨＨＨＨ）およびＳｔｒｅｐｔａｇ  ＩＩ（ＷＳＨＰＧＦＥＫ）などのタンパク質タグ、またはリンカー配列（例えばＧＧおよびＧＳ）（図１を参照されたい）を含む。当業者にはこのような配列が認識され、また、適切である場合には、これらの配列が、開示されたＲＳＶ  Ｆ突然変異体に含まれないことが理解されよう。
【００６９】
本開示によって提供されるＲＳＶ  Ｆ突然変異体では、Ｆ２ポリペプチド鎖は、対応する野生型ＲＳＶ  Ｆタンパク質の完全長Ｆ２ポリペプチドと同一の長さのものであり得る。これはまた、欠失、例えば、Ｆ２ポリペプチドのＮ末端またはＣ末端から１、２、３、４、５、６、７、または８アミノ酸残基の欠失を有し得る。
【００７０】
Ｆ０形態の突然変異体（すなわち、部分的または完全長ｐｅｐ２７を有するまたは有さないＦ１ポリペプチドに繋がれたＦ２ポリペプチドを含む一本鎖ポリペプチド）またはＦ１−Ｆ２ヘテロ二量体形態は、プロトマーを形成し得る。突然変異体はまた、同一のプロトマーの３つを含む、三量体の形態であり得る。さらに、突然変異体は、グリコシル化されたタンパク質（すなわち、糖タンパク質）またはグリコシル化されていないタンパク質であり得る。Ｆ０形態の突然変異体は、シグナルペプチド配列を含んでいてもよいし、欠いていてもよい。
【００７１】
１つまたは複数の突然変異が導入されたＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体のＦ１ポリペプチドおよびＦ２ポリペプチドは、限定はしないが、Ａ２  ＯｎｔａｒｉｏおよびＢｕｅｎｏｓ  Ａｉｒｅｓを含むＲＳＶサブタイプＡ株およびサブタイプＢ株、またはあらゆる他のサブタイプのＦタンパク質アミノ酸配列を含む、当技術分野において公知であるかまたは将来発見されるあらゆる野生型ＲＳＶ  Ｆタンパク質の形態であり得る。一部の実施形態では、ＲＳＶ  Ｆ突然変異体は、ＲＳＶ  ＡウイルスのＦ１および／またはＦ２ポリペプチド、例えば、１つまたは複数の突然変異が導入された配列番号１、２、４、６、および８１〜２７０のいずれか１つで示されるＲＳＶ  Ｆ０前駆体タンパク質のＦ１および／またはＦ２ポリペプチドを含む。一部の他の実施形態では、ＲＳＶ  Ｆ突然変異体は、ＲＳＶ  ＢウイルスのＦ１および／またはＦ２ポリペプチド、例えば、１つまたは複数の突然変異が導入された配列番号２および２１１〜２６３のいずれか１つで示されるＲＳＶ  Ｆ０前駆体タンパク質のＦ１および／またはＦ２ポリペプチドを含む。さらに他の実施形態では、ＲＳＶ  Ｆ突然変異体は、ＲＳＶウシウイルスのＦ１および／またはＦ２ポリペプチド、例えば、１つまたは複数の突然変異が導入された配列番号２６４〜２７０のいずれか１つで示されるＲＳＶ  Ｆ０前駆体タンパク質のＦ１および／またはＦ２ポリペプチドを含む。
【００７２】
一部の実施形態では、ＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体は、Ｆ１ポリペプチド、Ｆ２ポリペプチド、および本明細書において以下に記載する１つまたは複数の導入されたアミノ酸突然変異を含み、ここで、Ｆ１ポリペプチドは、３５０個の連続するアミノ酸を含み、配列番号１、４、および８１〜２１０の配列のいずれかのアミノ酸１３７〜５１３に少なくとも９０、９５、９８、または９９パーセント同一であり、Ｆ２ポリペプチドは、７０個の連続するアミノ酸を含み、配列番号１、４、および８１〜２１０の配列のいずれかのアミノ酸２６〜１０９に少なくとも９０、９５、９８、または９９パーセント同一であり、ＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体は、単量体または三量体としての融合前立体構造で安定化している。一部の実施形態では、Ｆ１ポリペプチドは、３５０個の連続するアミノ酸を含み、配列番号２、６、および２１１〜２６３の配列のいずれかのアミノ酸１３７〜５１３に少なくとも９０、９５、９８、または９９パーセント同一であり、Ｆ２ポリペプチドは、７０個の連続するアミノ酸を含み、配列番号２、６、および２１１〜２６３の配列のいずれかのアミノ酸２６〜１０９に少なくとも９０、９５、９８、または９９パーセント同一であり、一部の他の実施形態では、ＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体は、融合前三量体立体構造で安定化している。
【００７３】
Ｂ−１（ｂ）三量化ドメイン
いくつかの実施形態では、本開示によって提供されるＲＳＶ  Ｆ突然変異体は、三量化ドメインに連結している。一部の実施形態では、三量化ドメインは、３つのＦ１／Ｆ２ヘテロ二量体の三量体の形成を促進する。
【００７４】
可溶性タンパク質の安定な三量体の形成を促進するいくつかの外因性多量体化ドメインは、当技術分野において公知である。本開示によって提供される突然変異体に連結し得る、このような多量体化ドメインの例には、（１）ＧＣＮ４ロイシンジッパー（Ｈａｒｂｕｒｙら  １９９３  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２６２：１４０１〜１４０７）、（２）肺サーファクタントタンパク質の三量化モチーフ（Ｈｏｐｐｅら  １９９４、ＦＥＢ  Ｓ  Ｌｅｔｔ  ３４４：１９１〜１９５）、（３）コラーゲン（ＭｃＡｌｉｎｄｅｎら  ２００３、Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２７８：４２２００〜４２２０７）、および（４）ファージＴ４フィブリチンフォールドン（Ｍｉｒｏｓｈｎｉｋｏｖら  １９９８、Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇ  １１：３２９〜４１４）が含まれる。一部の実施形態では、フォールドンドメインは、Ｆ１ポリペプチドのＣ末端でＦ突然変異体に連結している。具体的な実施形態では、フォールドンドメインは、アミノ酸配列ＧＹＩＰＥＡＰＲＤＧＱＡＹＶＲＫＤＧＥＷＶＬＬＳＴＦＬ（配列番号４０）などのＴ４フィブリチンフォールドンドメインである。
【００７５】
典型的には、多量体化ドメインは、Ｆ１ポリペプチドに対してＣ末端に位置している。これは、Ｆ１ポリペプチド鎖に直接繋がれ得る。多量体化ドメインは、アミノ酸リンカーなどのリンカー、例えば、配列ＧＧ、ＧＳ、またはＳＡＩＧを介して、Ｆ１ポリペプチドに接続されていてもよい。リンカーはまた、より長いリンカーでもあり得る（例えば、反復配列ＧＧを含む）。本開示によって提供される突然変異体において使用され得る、多くの立体構造上中性のリンカーが、当技術分野において公知である。一部の実施形態では、フォールドンドメインを含むＦ突然変異体は、Ｆ１ポリペプチドからフォールドンドメインを除去するためのプロテアーゼ切断部位、例えば、Ｆ１ポリペプチドとフォールドンドメインとの間のトロンビン部位を含む。
【００７６】
Ｂ−２．ＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体における導入された突然変異
本開示によって提供されるＲＳＶ  Ｆ突然変異体は、Ｆ１ポリペプチドおよびＦ２ポリペプチドを含み、ここで、（１）Ｆ１ポリペプチドもしくは（２）Ｆ２ポリペプチドのいずれか、または（３）Ｆ１ポリペプチドおよびＦ２ポリペプチドの両方は、対応する未変性Ｆタンパク質のアミノ酸配列に対する１つまたは複数の導入されたアミノ酸突然変異を含む。ＲＳＶ  Ｆ突然変異体へのこのようなアミノ酸突然変異の導入によって、増強した免疫原性、向上した安定性、または、突然変異体のある特定の所望の物理的形態もしくは立体構造の形成もしくは向上した安定性などの有利な特性が、突然変異体に付与される。このような導入されたアミノ酸突然変異は、「操作されたジスルフィド結合突然変異」、「間隙充填突然変異」、または「静電気的突然変異」と呼ばれ、本明細書において以下に詳述される。あらゆるさらなる突然変異を含むＲＳＶ  Ｆ突然変異体もまた、突然変異体の免疫原性特性がさらなる突然変異によって不都合な影響を実質的に受けない限り、本発明に包含される。
【００７７】
Ｂ−２（ａ）操作されたジスルフィド結合突然変異
一部の実施形態では、本開示によって提供されるＲＳＶ  Ｆ突然変異体は、１つまたは複数の操作されたジスルフィド結合突然変異を含む。用語「操作されたジスルフィド結合突然変異」は、野生型ＲＳＶ  Ｆタンパク質内の一対のアミノ酸残基の、一対のシステイン残基への突然変異を指す。導入されたシステイン残基対によって、導入されたシステイン残基間のジスルフィド結合の形成が可能になり、このジスルフィド結合は、融合前立体構造などのタンパク質の立体構造またはオリゴマー状態を安定化させるために役立つ。突然変異体の融合前立体構造を安定化させるために、システインへの突然変異のための残基対は、融合前立体構造では近接しているが融合後立体構造内では遠位にあるべきである。このような残基は、当技術分野において公知の適切な方法によって、例えば、融合前立体構造におけるＲＳＶ  Ｆの結晶構造の目視検査、または、コンピュータ計算によるタンパク質設計ソフトウェア（ＢｉｏＬｕｍｉｎａｔｅ（商標）［ＢｉｏＬｕｍｉｎａｔｅ、Ｓｃｈｒｏｄｉｎｇｅｒ  ＬＬＣ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、２０１５］、Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｓｔｕｄｉｏ（商標）［Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｓｔｕｄｉｏ  Ｍｏｄｅｌｉｎｇ  Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ、Ａｃｃｅｌｒｙｓ、Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ、２０１５］、ＭＯＥ（商標）［Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｏｐｅｒａｔｉｎｇ  Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ、Ｃｈｅｍｉａｌ  Ｃｏｍｐｕｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐ  Ｉｎｃ．、Ｍｏｎｔｒｅａｌ、２０１５］、およびＲｏｓｅｔｔａ（商標）［Ｒｏｓｅｔｔａ、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ、Ｓｅａｔｔｌｅ、２０１５］など）を使用する、より定量的な選択によって、同定することができる。好ましくは、残基対（例えば、ベータ炭素）間の距離は、融合前立体構造では８Å未満であるが、融合後立体構造では２０Åより大きい。
【００７８】
一部の実施形態では、ＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体は、ただ１つの操作されたジスルフィド突然変異（「単一の操作されたジスルフィド突然変異」）を含む。一部の他の実施形態では、ＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体は、ＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体が融合前立体構造である場合には操作されたジスルフィド突然変異のシステイン残基の各対が適切に位置している、少なくとも２つの操作されたジスルフィド突然変異を含む（「二重の操作されたジスルフィド突然変異」）。
【００７９】
一部の具体的な実施形態では、本開示は、表１および４〜６で示される例示的な突然変異体のいずれかにある同一の導入された突然変異を含む、少なくとも１つの操作されたジスルフィド結合突然変異を含むＲＳＶ  Ｆ突然変異体を提供する。表１および４〜６で示される例示的なＲＳＶ  Ｆ突然変異体は、１０２位、３７９位、および４４７位に３つの天然の置換を有するＲＳＶ  Ａ２株の同一の未変性Ｆ０配列（配列番号３）に基づく。突然変異体のそれぞれにおける同一の導入された突然変異を、あらゆる他のＲＳＶサブタイプまたは株の未変性Ｆ０ポリペプチド配列に行って、配列番号１、２、４、６、および８１〜２７０のいずれかで示される未変性Ｆ０ポリペプチド配列などの異なるＲＳＶ  Ｆ突然変異体を得ることができる。あらゆる他のＲＳＶサブタイプまたは株の未変性Ｆ０ポリペプチド配列に基づき、かつ、操作されたジスルフィド突然変異のいずれかを含む、ＲＳＶ  Ｆ突然変異体もまた、本発明の範囲内である。一部の特定の実施形態では、ＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体は、５５Ｃおよび１８８Ｃ、１５５Ｃおよび２９０Ｃ、１０３Ｃおよび１４８Ｃ、ならびに１４２Ｃおよび３７１Ｃ、例えばＳ５５ＣおよびＬ１８８Ｃ、Ｓ１５５ＣおよびＳ２９０Ｃ、Ｔ１０３ＣおよびＩ１４８Ｃ、またはＬ１４２ＣおよびＮ３７１Ｃからなる群から選択される少なくとも１つの操作されたジスルフィド突然変異を含む。
【００８０】
一部の実施形態では、本開示は、アミノ酸突然変異が、ＲＳＶ  Ｆタンパク質のＨＲＢ領域（およそアミノ酸４７６〜５２４）内の一対のアミノ酸残基の、一対のシステインへの突然変異である、ＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体を提供する。導入されたシステイン残基対によって、三量体の２つの隣接したＦ２−Ｆ１突然変異体プロトマーのシステイン残基間のジスルフィド結合の形成が可能になる。三量体内の２つのプロトマーを連結するジスルフィドは、三量体状態の突然変異体を安定化させるために役立つ。このような突然変異の具体的な対の例には、５０８Ｃおよび５０９Ｃ、５１５Ｃおよび５１６Ｃ、５２２Ｃおよび５２３Ｃ、例えば、Ｋ５０８ＣおよびＳ５０９Ｃ、Ｎ５１５ＣおよびＶ５１６Ｃ、またはＴ５２２ＣおよびＴ５２３Ｃが含まれる。一部の実施形態では、ＲＳＶ  Ｆ突然変異体は、（１）ＨＲＢ領域内の少なくとも一対のシステイン突然変異、および（２）本明細書において上記に記載した操作されたジスルフィド結合突然変異、本明細書において以下に記載する間隙充填突然変異、本明細書において以下に記載する静電気的突然変異、またはこれらの突然変異のいずれかの組合せから選択される、ＨＲＢ領域の外側の少なくとも１つの導入された突然変異を含む。
【００８１】
Ｂ−２（ｂ）間隙充填突然変異。
他の実施形態では、本開示は、１つまたは複数の間隙充填突然変異を含むＲＳＶ  Ｆ突然変異体を提供する。用語「間隙充填突然変異」は、成熟ＲＳＶ  Ｆタンパク質の内部間隙を充填することが期待されるアミノ酸による、野生型ＲＳＶ  Ｆタンパク質のアミノ酸残基の置換を指す。１つの適用では、このような間隙充填突然変異は、ＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体の融合前立体構造の安定化に寄与する。ＲＳＶ  Ｆタンパク質の融合前立体構造内の間隙は、当技術分野において公知の方法によって、例えば、融合前立体構造のＲＳＶ  Ｆの結晶構造の目視検査によって、または、コンピュータ計算によるタンパク質設計ソフトウェア（ＢｉｏＬｕｍｉｎａｔｅ（商標）［ＢｉｏＬｕｍｉｎａｔｅ、Ｓｃｈｒｏｄｉｎｇｅｒ  ＬＬＣ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、２０１５］、Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｓｔｕｄｉｏ（商標）［Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｓｔｕｄｉｏ  Ｍｏｄｅｌｉｎｇ  Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ、Ａｃｃｅｌｒｙｓ、Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ、２０１５］、ＭＯＥ（商標）［Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｏｐｅｒａｔｉｎｇ  Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ、Ｃｈｅｍｉａｌ  Ｃｏｍｐｕｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐ  Ｉｎｃ．、Ｍｏｎｔｒｅａｌ、２０１５］、およびＲｏｓｅｔｔａ（商標）［Ｒｏｓｅｔｔａ、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ、Ｓｅａｔｔｌｅ、２０１５］など）を使用することによって、同定することができる。間隙充填突然変異のために置き換えられるアミノ酸には、典型的には、低分子脂肪族アミノ酸（例えば、Ｇｌｙ、Ａｌａ、およびＶａｌ）または低分子極性アミノ酸（例えば、ＳｅｒおよびＴｈｒ）が含まれる。これらにはまた、融合前立体構造では埋没しているが融合後立体構造では溶媒に曝露されるアミノ酸が含まれ得る。置き換えアミノ酸は、高分子脂肪族アミノ酸（Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、およびＭｅｔ）または高分子芳香族アミノ酸（Ｈｉｓ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、およびＴｒｐ）であり得る。例えば、いくつかの実施形態では、ＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体は、Ｔ５４Ｈ突然変異を含む。
【００８２】
一部の具体的な実施形態では、ＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体は、
（１）５５位、６２位、１５５位、１９０位、または２９０位のＳの、Ｉ、Ｙ、Ｌ、Ｈ、またはＭでの置換、
（２）５４位、５８位、１８９位、２１９位、または３９７位のＴの、Ｉ、Ｙ、Ｌ、Ｈ、またはＭでの置換、
（３）１５１位のＧの、ＡまたはＨでの置換、
（４）１４７位または２９８位のＡの、Ｉ、Ｌ、Ｈ、またはＭでの置換、
（５）１６４位、１８７位、１９２位、２０７位、２２０位、２９６位、３００位、または４９５位のＶの、Ｉ、Ｙ、Ｈでの置換、および
（６）１０６位のＲの、Ｗでの置換
からなる群から選択される１つまたは複数の間隙充填突然変異を含む。
【００８３】
一部の具体的な実施形態では、本開示は、表２、４、および６で示される突然変異のいずれかにおける間隙充填突然変異を含む、１つまたは複数の間隙充填突然変異を含むＲＳＶ  Ｆ突然変異体を提供する。表２、４、および６で示されるＲＳＶ  Ｆ突然変異体は、１０２位、３７９位、および４４７位に３つの天然の置換を有するＲＳＶ  Ａ２株の同一の未変性Ｆ０配列（配列番号３）に基づく。突然変異体のそれぞれにおける同一の導入された突然変異を、あらゆる他のＲＳＶサブタイプまたは株の未変性Ｆ０ポリペプチド配列にも行って、配列番号１、２、４、６、および８１〜２７０のいずれかで示される未変性Ｆ０ポリペプチド配列などの異なるＲＳＶ  Ｆ突然変異体を得ることができる。あらゆる他のＲＳＶサブタイプまたは株の未変性Ｆ０ポリペプチド配列に基づき、かつ、１つまたは複数の間隙充填突然変異のいずれかを含む、ＲＳＶ  Ｆ突然変異体もまた、本発明の範囲内である。一部の特定の実施形態では、本開示によって提供されるＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体は、Ｔ５４Ｈ、Ｓ１９０Ｉ、およびＶ２９６Ｉからなる群から選択される少なくとも１つの間隙充填突然変異を含む。
【００８４】
Ｂ−２（ｃ）静電気的突然変異。
さらに他の実施形態では、本開示は、１つまたは複数の静電気的突然変異を含むＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体を提供する。用語「静電気的突然変異」は、フォールディングした構造で互いに近接するタンパク質内の残基間のイオン反発を減少させるかまたはイオン引力を増大させる、野生型ＲＳＶ  Ｆタンパク質に導入されたアミノ酸突然変異を指す。水素結合はイオン引力の特殊なケースであるため、静電気的突然変異は、このような近接した残基間の水素結合を増大させ得る。一実施例では、静電気的突然変異は、三量体の安定性を向上させるために導入することができる。一部の実施形態では、静電気的突然変異は、その融合前立体構造ではＲＳＶ  Ｆ糖タンパク質に近接しているがその融合後立体構造では近接していない残基間の反発性のイオン相互作用を減少させるため、または引力性のイオン相互作用（水素結合を潜在的に含む）を増大させるために導入される。例えば、融合前立体構造では、ＲＳＶ  Ｆ糖タンパク質三量体の１つのプロトマーの酸性側鎖Ａｓｐ４８６は三量体の界面に位置し、別のプロトマーの２つの他の酸性側鎖Ｇｌｕ４８７とＡｓｐ４８９との間で構造的に挟まれる。他方、融合後立体構造では、酸性側鎖Ａｓｐ４８６は三量体の表面に位置し、溶媒に曝露される。いくつかの実施形態では、ＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体は、ＲＳＶ  Ｆ三量体の別のプロトマーの酸性残基Ｇｌｕ４８７およびＡｓｐ４８９との反発性のイオン相互作用を低減させるかまたは引力性のイオン相互作用を増大させる、静電気的なＤ４８６Ｓ置換を含む。典型的には、静電気的突然変異の導入によって、ＲＳＶ  Ｆタンパク質の融合前立体構造または融合前三量体立体構造の融解温度（Ｔｍ）が上昇する。
【００８５】
融合前立体構造または融合前三量体立体構造における好ましくない静電気的相互作用は、当技術分野において公知の方法によって、例えば、融合前立体構造もしくは融合前三量体立体構造のＲＳＶ  Ｆの結晶構造の目視検査によって、またはコンピュータ計算によるタンパク質設計ソフトウェア（ＢｉｏＬｕｍｉｎａｔｅ（商標）［ＢｉｏＬｕｍｉｎａｔｅ、Ｓｃｈｒｏｄｉｎｇｅｒ  ＬＬＣ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、２０１５］、Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｓｔｕｄｉｏ（商標）［Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｓｔｕｄｉｏ  Ｍｏｄｅｌｉｎｇ  Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ、Ａｃｃｅｌｒｙｓ、Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ、２０１５］、ＭＯＥ（商標）［Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｏｐｅｒａｔｉｎｇ  Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ、Ｃｈｅｍｉａｌ  Ｃｏｍｐｕｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐ  Ｉｎｃ．、Ｍｏｎｔｒｅａｌ、２０１５．］、およびＲｏｓｅｔｔａ（商標）［Ｒｏｓｅｔｔａ、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ、Ｓｅａｔｔｌｅ、２０１５］など）を使用することによって、同定することができる。
【００８６】
一部の具体的な実施形態では、ＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体は、
（１）８２位、９２位、または４８７位のＥの、Ｄ、Ｆ、Ｑ、Ｔ、Ｓ、Ｌ、またはＨによる置換、
（２）３１５位、３９４位、または３９９位のＫの、Ｆ、Ｍ、Ｒ、Ｓ、Ｌ、Ｉ、Ｑ、またはＴによる置換、
（３）３９２位、４８６位、または４８９位のＤの、Ｈ、Ｓ、Ｎ、Ｔ、またはＰによる置換、および
（４）１０６位または３３９位のＲの、Ｆ、Ｑ、Ｎ、またはＷによる置換
からなる群から選択される少なくとも１つの静電気的突然変異を含む。
【００８７】
一部の具体的な実施形態では、本開示は、表３、５、および６で示される突然変異体のいずれかにおける静電気的突然変異を含む、１つまたは複数の静電気的突然変異を含むＲＳＶ  Ｆ突然変異体を提供する。表３、５、および６で示されるＲＳＶ  Ｆ突然変異体は、１０２位、３７９位、および４４７位に３つの天然の置換を有するＲＳＶ  Ａ２株の同一の未変性Ｆ０配列（配列番号３）に基づく。突然変異体のそれぞれにおける同一の導入された突然変異を、あらゆる他のＲＳＶサブタイプまたは株の未変性Ｆ０ポリペプチド配列にも行って、配列番号１、２、４、６、および８１〜２７０のいずれかで示される未変性Ｆ０ポリペプチド配列などの異なるＲＳＶ  Ｆ突然変異体を得ることができる。あらゆる他のＲＳＶサブタイプまたは株の未変性Ｆ０ポリペプチド配列に基づき、かつ、１つまたは複数の静電気的突然変異のいずれかを含む、ＲＳＶ  Ｆ突然変異体もまた、本発明の範囲内である。一部の特定の実施形態では、ＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体は、突然変異Ｄ４８６Ｓを含む。
【００８８】
Ｂ−２（ｄ）操作されたジスルフィド結合突然変異、間隙充填突然変異、および静電気的突然変異の組合せ。
別の態様では、本開示は、それぞれ本明細書において上記に記載した、操作されたジスルフィド結合突然変異、間隙充填突然変異、および静電気的突然変異から選択される２つ以上の異なるタイプの突然変異の組合せを含む、ＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体を提供する。
【００８９】
一部の実施形態では、突然変異体は、少なくとも１つの操作されたジスルフィド結合突然変異および少なくとも１つの間隙充填突然変異を含む。一部の具体的な実施形態では、ＲＳＶ  Ｆ突然変異体は、表４で示される突然変異の組合せを含む。
【００９０】
一部のさらなる実施形態では、ＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体は、少なくとも１つの操作されたジスルフィド突然変異および少なくとも１つの静電気的突然変異を含む。一部の具体的な実施形態では、ＲＳＶ  Ｆ突然変異体は、表５で示される突然変異の組合せを含む。
【００９１】
さらに他の実施形態では、ＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体は、少なくとも１つの操作されたジスルフィド突然変異、少なくとも１つの間隙充填突然変異、および少なくとも１つの静電気的突然変異を含む。一部の具体的な実施形態では、ＲＳＶ  Ｆ突然変異体は、表６で示される突然変異の組合せを含む。
【００９２】
一部の特定の実施形態では、本発明は、
（１）Ｔ１０３Ｃ、Ｉ１４８Ｃ、Ｓ１９０Ｉ、およびＤ４８６Ｓの組合せ、
（２）Ｔ５４Ｈ、Ｓ５５Ｃ、Ｌ１８８Ｃ、Ｄ４８６Ｓの組合せ、
（３）Ｔ５４Ｈ、Ｔ１０３Ｃ、Ｉ１４８Ｃ、Ｓ１９０Ｉ、Ｖ２９６Ｉ、およびＤ４８６Ｓの組合せ、
（４）Ｔ５４Ｈ、Ｓ５５Ｃ、Ｌ１４２Ｃ、Ｌ１８８Ｃ、Ｖ２９６Ｉ、およびＮ３７１Ｃの組合せ、
（５）Ｓ５５Ｃ、Ｌ１８８Ｃ、およびＤ４８６Ｓの組合せ、
（６）Ｔ５４Ｈ、Ｓ５５Ｃ、Ｌ１８８Ｃ、およびＳ１９０Ｉの組合せ、
（７）Ｓ５５Ｃ、Ｌ１８８Ｃ、Ｓ１９０Ｉ、およびＤ４８６Ｓの組合せ、
（８）Ｔ５４Ｈ、Ｓ５５Ｃ、Ｌ１８８Ｃ、Ｓ１９０Ｉ、およびＤ４８６Ｓの組合せ、
（９）Ｓ１５５Ｃ、Ｓ１９０Ｉ、Ｓ２９０Ｃ、およびＤ４８６Ｓの組合せ、
（１０）Ｔ５４Ｈ、Ｓ５５Ｃ、Ｌ１４２Ｃ、Ｌ１８８Ｃ、Ｖ２９６Ｉ、Ｎ３７１Ｃ、Ｄ４８６Ｓ、Ｅ４８７Ｑ、およびＤ４８９Ｓの組合せ、ならびに
（１１）Ｔ５４Ｈ、Ｓ１５５Ｃ、Ｓ１９０Ｉ、Ｓ２９０Ｃ、およびＶ２９６Ｉの組合せ
からなる群から選択される突然変異の組合せを含むＲＳＶ  Ｆ突然変異体を提供する。
【００９３】
一部の具体的な実施形態では、本開示は、表４、５、および６で示される突然変異体のいずれかにおける突然変異の組合せを含む、導入された突然変異の組合せを含むＲＳＶ  Ｆ突然変異体を提供する。表４、５、および６で示されるＲＳＶ  Ｆ突然変異体は、１０２位、３７９位、および４４７位に３つの天然の置換を有するＲＳＶ  Ａ２株の同一の未変性Ｆ０配列（配列番号３）に基づく。突然変異体のそれぞれにおける同一の導入された突然変異を、あらゆる他のＲＳＶサブタイプまたは株の未変性Ｆ０ポリペプチド配列にも行って、配列番号１、２、４、６、および８１〜２７０のいずれかで示される未変性Ｆ０ポリペプチド配列などの異なるＲＳＶ  Ｆ突然変異体を得ることができる。あらゆる他のＲＳＶサブタイプまたは株の未変性Ｆ０ポリペプチド配列に基づき、かつ、突然変異の組合せのいずれかを含む、ＲＳＶ  Ｆ突然変異体もまた、本発明の範囲内である。
【００９４】
一部の他の特定の実施形態では、本発明は、１０３位（１０３Ｃ）および１４８位（１４８Ｃ）のシステイン（Ｃ）、１９０位のイソロイシン（Ｉ）（１９０Ｉ）、ならびに４８６位のセリン（Ｓ）（４８６Ｓ）を含み、かつ、
（１）配列番号４１のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号４２のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（２）配列番号４１のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号４２のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（３）配列番号４３のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号４４のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（４）配列番号４３のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号４４のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（５）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号４６のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（６）配列番号４５のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号４６のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（７）配列番号４７のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号４８のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（８）配列番号４７のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号４８のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（９）配列番号４９のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号５０のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１０）配列番号４９のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号５０のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１１）配列番号２７９のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２８０のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１２）配列番号２７９のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２８０のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１３）配列番号２８１のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２８２のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１４）配列番号２８１のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２８２のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１５）配列番号２８３のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２８４のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１６）配列番号２８３のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２８４のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１７）配列番号２８５のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２８６のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１８）配列番号２８５のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２８６のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１９）配列番号２８７のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２８８のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（２０）配列番号２８７のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２８８のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（２１）配列番号２８９のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２９０のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、ならびに
（２２）配列番号２８９のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２９０のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド
からなる群から選択されるＦ１ポリペプチドおよびＦ２ポリペプチドを含む、ＲＳＶ  Ｆ突然変異体を提供する。
【００９５】
一部の他の特定の実施形態では、本発明は、５４位のヒスチジン（Ｈ）、１０３位および１４８位のシステイン（Ｃ）、１９０位および２９６位のイソロイシン（Ｉ）、ならびに４８６位のセリン（Ｓ）を含み、かつ、
（１）配列番号５１のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号５２のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（２）配列番号５１のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号５２のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（３）配列番号５３のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号５４のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（４）配列番号５３のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号５４のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（５）配列番号５５のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号５６のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（６）配列番号５５のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号５６のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（７）配列番号５７のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号５８のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（８）配列番号５７のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号５８のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（９）配列番号５９のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号６０のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１０）配列番号５９のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号６０のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１１）配列番号２９１のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２９２のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１２）配列番号２９１のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２９２のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１３）配列番号２９３のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２９４のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１４）配列番号２９３のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２９４のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１５）配列番号２９５のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２９６のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１６）配列番号２９５のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２９６のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１７）配列番号２９７のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２９８のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１８）配列番号２９７のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２９８のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１９）配列番号２９９のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３００のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（２０）配列番号２９９のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３００のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（２１）配列番号３０１のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３０２のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、ならびに
（２２）配列番号３０１のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３０２のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド
からなる群から選択されるＦ１ポリペプチドおよびＦ２ポリペプチドを含む、ＲＳＶ  Ｆ突然変異体を提供する。
【００９６】
一部の他の特定の実施形態では、本発明は、５４位のヒスチジン（Ｈ）、５５位および１８８位のシステイン（Ｃ）、ならびに４８６位のセリン（Ｓ）を含み、かつ、
（１）配列番号６１のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号６２のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（２）配列番号６１のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号６２のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（３）配列番号６３のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号６４のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（４）配列番号６３のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号６４のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（５）配列番号６５のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号６６のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（６）配列番号６５のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号６６のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（７）配列番号６７のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号６８のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（８）配列番号６７のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号６８のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（９）配列番号６９のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号７０のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１０）配列番号６９のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号７０のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１１）配列番号３０３のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３０４のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１２）配列番号３０３のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３０４のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１３）配列番号３０５のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３０６のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１４）配列番号３０５のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３０６のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１５）配列番号３０７のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３０８のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１６）配列番号３０７のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３０８のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１７）配列番号３０９のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３１０のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１８）配列番号３０９のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３１０のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１９）配列番号３１１のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３１２のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（２０）配列番号３１１のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３１２のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（２１）配列番号３１３のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３１４のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、ならびに
（２２）配列番号３１３のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３１４のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド
からなる群から選択されるＦ１ポリペプチドおよびＦ２ポリペプチドを含む、ＲＳＶ  Ｆ突然変異体を提供する。
【００９７】
一部の他の特定の実施形態では、本発明は、５４位のヒスチジン（Ｈ）、５５位および１８８位のシステイン（Ｃ）、１９０位のイソロイシン（Ｉ）（１９０Ｉ）、ならびに４８６位のセリン（Ｓ）を含み、かつ、
（１）配列番号７１のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号７２のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（２）配列番号７１のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号７２のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（３）配列番号７３のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号７４のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（４）配列番号７３のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号７４のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（５）配列番号７５のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号７６のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（６）配列番号７５のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号７６のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（７）配列番号７７のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号７８のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（８）配列番号７７のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号７８のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（９）配列番号７９のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号８０のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１０）配列番号７９のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号８０のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１１）配列番号３１５のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３１６のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１２）配列番号３１５のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３１６のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１３）配列番号３１７のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３１８のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１４）配列番号３１７のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３１８のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１５）配列番号３１９のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３２０のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１６）配列番号３１９のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３２０のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１７）配列番号３２１のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３２２のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１８）配列番号３２１のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３２２のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１９）配列番号３２３のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３２４のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（２０）配列番号３２３のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３２４のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（２１）配列番号３２５のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３２６のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、ならびに
（２２）配列番号３２５のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３２６のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド
からなる群から選択されるＦ１ポリペプチドおよびＦ２ポリペプチドを含む、ＲＳＶ  Ｆ突然変異体を提供する。
【００９８】
本開示によって提供される例示的なＲＳＶ  Ｆ突然変異体のＦ２ポリペプチドおよびＦ１ポリペプチドのアミノ酸配列を、表１９〜２２に示す。
【００９９】
いくつかの実施形態では、フォールドンドメインは、本明細書において上記に記載したＲＳＶ  Ｆ突然変異体に連結しており、ここで、フォールドンドメインはＦ１ポリペプチドのＣ末端に連結し、配列番号４０のアミノ酸配列を含む。
【０１００】
本開示によって提供されるＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体は、当技術分野において公知である通常の方法によって、例えば、適切なベクターを使用する組換え宿主系における発現によって、調製することができる。適切な組換え宿主細胞には、例えば、昆虫細胞、哺乳動物細胞、鳥類細胞、細菌、および酵母細胞が含まれる。適切な昆虫細胞の例には、例えば、Ｓｆ９細胞、Ｓｆ２１細胞、Ｔｎ５細胞、Ｓｃｈｎｅｉｄｅｒ  Ｓ２細胞、およびＨｉｇｈ  Ｆｉｖｅ細胞（親イラクサギンウワバ（Ｔｒｉｃｈｏｐｌｕｓｉａ  ｎｉ）ＢＴＩ−ＴＮ−５Ｂ１−４細胞株（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）から派生したクローン単離体）が含まれる。適切な哺乳動物細胞の例には、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、ヒト胚腎臓細胞（せん断されたアデノウイルス５型のＤＮＡによって典型的には形質転換された、ＨＥＫ２９３細胞またはＥｘｐｉ２９３細胞）、ＮＩＨ−３Ｔ３細胞、２９３−Ｔ細胞、Ｖｅｒｏ細胞、およびＨｅＬａ細胞が含まれる。適切な鳥類細胞には、例えば、ニワトリ胚性幹細胞（例えば、ＥＢｘ．ＲＴＭ．細胞）、ニワトリ胚線維芽細胞、ニワトリ胚生殖細胞、ウズラ線維芽細胞（例えば、ＥＬＬ−Ｏ）、およびアヒル細胞が含まれる。バキュロウイルス−ベクター化型の系などの適切な昆虫細胞発現系は、当業者に公知であり、例えば、ＳｕｍｍｅｒｓおよびＳｍｉｔｈ、Ｔｅｘａｓ  Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ  Ｓｔａｔｉｏｎ  Ｂｕｌｌｅｔｉｎ  Ｎｏ．１５５５（１９８７）において記載されている。バキュロウイルス／昆虫細胞発現系のための材料および方法は、とりわけＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ  Ｃａｌｉｆから、キットの形態で市販されている。鳥類細胞発現系もまた当業者に公知であり、例えば、米国特許第５，３４０，７４０号、米国特許第５，６５６，４７９号、米国特許第５，８３０，５１０号、米国特許第６，１１４，１６８号、および米国特許第６，５００，６６８号において記載されている。同様に、細菌および哺乳動物細胞発現系もまた当技術分野において公知であり、例えば、Ｙｅａｓｔ  Ｇｅｎｅｔｉｃ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ（Ｂａｒｒら編、１９８９）Ｂｕｔｔｅｒｗｏｒｔｈｓ、Ｌｏｎｄｏｎにおいて記載されている。
【０１０１】
昆虫細胞または哺乳動物細胞における組換えタンパク質の発現のための多くの適切なベクターは当技術分野において周知であり、従来的なものである。適切なベクターは、限定はしないが以下の１つまたは複数を含む、多くの構成成分を含有し得る：複製起点、選択マーカー遺伝子、１つもしくは複数の発現制御エレメント、例えば転写制御エレメント（例えば、プロモーター、エンハンサー、ターミネーター）、および／または１つもしくは複数の翻訳シグナル、ならびに、選択された宿主細胞（例えば、哺乳動物由来の、または異種の哺乳動物もしくは非哺乳動物種由来の）における分泌経路を標的化するためシグナル配列またはリーダー配列。例えば、昆虫細胞における発現では、ｐＦａｓｔＢａｃ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）などの適切なバキュロウイルス発現ベクターを使用して、組換えバキュロウイルス粒子が生産される。バキュロウイルス粒子は増幅され、昆虫細胞に感染して組換えタンパク質を発現させるために使用される。哺乳動物細胞における発現では、所望の哺乳動物宿主細胞（例えば、チャイニーズハムスター卵巣細胞）における構築物の発現を駆動するベクターが使用される。
【０１０２】
ＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体ポリペプチドは、あらゆる適切な方法を使用して精製することができる。例えば、免疫親和性クロマトグラフィーによってＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体ポリペプチドを精製するための方法は、当技術分野において公知である。Ｒｕｉｚ−Ａｒｇｕｅｌｌｏら、Ｊ．Ｇｅｎ．Ｖｉｒｏｌ．、８５：３６７７〜３６８７（２００４）。沈殿、ならびに疎水性相互作用クロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、親和性クロマトグラフィー、キレート化クロマトグラフィー、およびサイズ排除クロマトグラフィーなどの様々なタイプのクロマトグラフィーを含む、所望のタンパク質を精製するための適切な方法は、当技術分野において周知である。適切な精製スキームは、これらのまたは他の適切な方法の２つ以上を使用して作ることができる。必要に応じて、ＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体ポリペプチドは、エピトープタグまたはヒスチジン（ＨＩＳ）タグなどの、精製を容易にする「タグ」を含み得る。このようなタグ付けされたポリペプチドは、例えば馴化培地から、キレート化クロマトグラフィーまたは親和性クロマトグラフィーによって都合良く精製することができる。
【０１０３】
Ｃ．ＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体をコードする核酸
別の態様では、本発明は、本明細書において上記に記載したＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体をコードする核酸分子を提供する。これらの核酸分子には、ＤＮＡ配列、ｃＤＮＡ配列、およびＲＮＡ配列が含まれる。ＲＳＶ  Ｆ突然変異体のＦ２ポリペプチドのみまたはＦ１ポリペプチドのみをコードする核酸分子もまた、本発明に包含される。核酸分子は、発現ベクターなどのベクター内に組み込むことができる。
【０１０４】
一部の実施形態では、核酸分子は、適切な細胞内で発現すると開示されたＲＳＶ  Ｆ突然変異体にプロセシングされる前駆体Ｆ０ポリペプチドをコードする。一部の実施形態では、核酸分子は、適切な細胞内で発現すると開示されたＲＳＶ  Ｆ突然変異体にプロセシングされる前駆体Ｆ０ポリペプチドをコードし、ここで、前駆体Ｆ０ポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端で、シグナルペプチド、Ｆ２ポリペプチド、Ｐｅｐ２７ポリペプチド、およびＦ１ポリペプチドを含む。一部の実施形態では、Ｐｅｐ２７ポリペプチドは、配列番号１、２、４、６、および８１〜２７０のいずれか１つの１１０位〜１３６位で示されるアミノ酸配列を含み、ここで、アミノ酸位置は、配列番号１のアミノ酸配列に対応する。一部の実施形態では、シグナルペプチドは、配列番号１、２、４、６、および８１〜２７０のいずれか１つの１位〜２５位で示されるアミノ酸配列を含み、ここで、アミノ酸位置は、配列番号１の参照のアミノ酸配列に対応する。
【０１０５】
一部の実施形態では、核酸分子は、
（１）少なくとも１つの操作されたジスルフィド突然変異を含む突然変異体、
（２）少なくとも１つの間隙充填突然変異を含む突然変異体、
（３）少なくとも１つの静電気的突然変異を含む突然変異体、
（４）少なくとも１つの操作されたジスルフィド突然変異および少なくとも１つの間隙充填突然変異を含む突然変異体、
（５）少なくとも１つの操作されたジスルフィド突然変異および少なくとも１つの静電気的突然変異を含む突然変異体、
（６）少なくとも１つの間隙充填突然変異および少なくとも１つの静電気的突然変異を含む突然変異体、ならびに
（７）少なくとも１つの操作されたジスルフィド突然変異、ならびに少なくとも１つの静電気的突然変異、少なくとも１つの間隙充填突然変異、および少なくとも１つの静電気的突然変異を含む突然変異体
からなる群から選択される突然変異体をコードする。
【０１０６】
一部の具体的な実施形態では、本開示は、
（１）置換１０３Ｃ、１４８Ｃ、１９０Ｉ、および４８６Ｓの組合せを含む突然変異体、
（２）置換５４Ｈ、５５Ｃ、１８８Ｃ、および４８６Ｓの組合せを含む突然変異体、
（３）置換５４Ｈ、１０３Ｃ、１４８Ｃ、１９０Ｉ、２９６Ｉ、および４８６Ｓの組合せを含む突然変異体、
（４）置換５４Ｈ、５５Ｃ、１４２Ｃ、１８８Ｃ、２９６Ｉ、および３７１Ｃの組合せを含む突然変異体、
（５）アミノ酸置換５５Ｃ、１８８Ｃ、および４８６Ｓの組合せを含む突然変異体、
（６）アミノ酸置換５４Ｈ、５５Ｃ、１８８Ｃ、および１９０Ｉの組合せを含む突然変異体、
（７）アミノ酸置換５５Ｃ、１８８Ｃ、１９０Ｉ、および４８６Ｓの組合せを含む突然変異体、
（８）アミノ酸置換５４Ｈ、５５Ｃ、１８８Ｃ、１９０Ｉ、および４８６Ｓの組合せを含む突然変異体、
（９）アミノ酸置換１５５Ｃ、１９０Ｉ、２９０Ｃ、および４８６Ｓの組合せを含む突然変異体、
（１０）アミノ酸置換５４Ｈ、５５Ｃ、１４２Ｃ、１８８Ｃ、２９６Ｉ、３７１Ｃ、４８６Ｓ、４８７Ｑ、および４８９Ｓの組合せを含む突然変異体、ならびに
（１１）アミノ酸置換５４Ｈ、１５５Ｃ、１９０Ｉ、２９０Ｃ、および２９６Ｉの組合せを含む突然変異体
からなる群から選択される突然変異体をコードする核酸分子を提供する。
【０１０７】
一部の特定の実施形態では、核酸分子は、１０３位（１０３Ｃ）および１４８位（１４８Ｃ）のシステイン（Ｃ）、１９０位のイソロイシン（Ｉ）（１９０Ｉ）、ならびに４８６位のセリン（Ｓ）（４８６Ｓ）を含み、かつ、
（１）配列番号４１のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号４２のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（２）配列番号４１のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号４２のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（３）配列番号４３のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号４４のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（４）配列番号４３のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号４４のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（５）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号４６のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（６）配列番号４５のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号４６のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（７）配列番号４７のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号４８のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（８）配列番号４７のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号４８のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（９）配列番号４９のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号５０のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１０）配列番号４９のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号５０のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１１）配列番号２７９のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２８０のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１２）配列番号２７９のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２８０のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１３）配列番号２８１のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２８２のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１４）配列番号２８１のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２８２のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１５）配列番号２８３のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２８４のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１６）配列番号２８３のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２８４のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１７）配列番号２８５のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２８６のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１８）配列番号２８５のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２８６のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１９）配列番号２８７のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２８８のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（２０）配列番号２８７のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２８８のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（２１）配列番号２８９のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２９０のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、ならびに
（２２）配列番号２８９のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２９０のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド
からなる群から選択されるＦ１ポリペプチドおよびＦ２ポリペプチドを含む、ＲＳＶ  Ｆ突然変異体をコードする。
【０１０８】
一部の他の特定の実施形態では、核酸分子は、５４位のヒスチジン（Ｈ）、１０３位および１４８位のシステイン（Ｃ）、１９０位および２９６位のイソロイシン（Ｉ）、ならびに４８６位のセリン（Ｓ）を含み、かつ、
（１）配列番号５１のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号５２のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（２）配列番号５１のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号５２のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（３）配列番号５３のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号５４のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（４）配列番号５３のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号５４のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（５）配列番号５５のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号５６のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（６）配列番号５５のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号５６のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（７）配列番号５７のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号５８のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（８）配列番号５７のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号５８のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（９）配列番号５９のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号６０のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１０）配列番号５９のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号６０のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１１）配列番号２９１のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２９２のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１２）配列番号２９１のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２９２のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１３）配列番号２９３のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２９４のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１４）配列番号２９３のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２９４のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１５）配列番号２９５のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２９６のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１６）配列番号２９５のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２９６のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１７）配列番号２９７のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２９８のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１８）配列番号２９７のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２９８のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１９）配列番号２９９のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３００のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（２０）配列番号２９９のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３００のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（２１）配列番号３０１のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３０２のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、ならびに
（２２）配列番号３０１のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３０２のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド
からなる群から選択されるＦ１ポリペプチドおよびＦ２ポリペプチドを含む、ＲＳＶ  Ｆ突然変異体をコードする。
【０１０９】
一部の他の特定の実施形態では、核酸分子は、５４位のヒスチジン（Ｈ）、５５位および１８８位のシステイン（Ｃ）、ならびに４８６位のセリン（Ｓ）を含み、かつ、
（１）配列番号６１のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号６２のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（２）配列番号６１のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号６２のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（３）配列番号６３のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号６４のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（４）配列番号６３のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号６４のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（５）配列番号６５のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号６６のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（６）配列番号６５のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号６６のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（７）配列番号６７のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号６８のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（８）配列番号６７のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号６８のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（９）配列番号６９のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号７０のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１０）配列番号６９のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号７０のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１１）配列番号３０３のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３０４のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１２）配列番号３０３のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３０４のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１３）配列番号３０５のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３０６のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１４）配列番号３０５のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３０６のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１５）配列番号３０７のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３０８のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１６）配列番号３０７のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３０８のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１７）配列番号３０９のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３１０のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１８）配列番号３０９のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３１０のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１９）配列番号３１１のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３１２のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（２０）配列番号３１１のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３１２のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（２１）配列番号３１３のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３１４のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、ならびに
（２２）配列番号３１３のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３１４のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド
からなる群から選択されるＦ１ポリペプチドおよびＦ２ポリペプチドを含む、ＲＳＶ  Ｆ突然変異体をコードする。
【０１１０】
一部の他の特定の実施形態では、核酸分子は、５４位のヒスチジン（Ｈ）、５５位および１８８位のシステイン（Ｃ）、１９０位のイソロイシン（Ｉ）（１９０Ｉ）、ならびに４８６位のセリン（Ｓ）を含み、かつ、
（１）配列番号７１のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号７２のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（２）配列番号７１のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号７２のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（３）配列番号７３のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号７４のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（４）配列番号７３のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号７４のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（５）配列番号７５のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号７６のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（６）配列番号７５のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号７６のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（７）配列番号７７のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号７８のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（８）配列番号７７のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号７８のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（９）配列番号７９のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号８０のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１０）配列番号７９のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号８０のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１１）配列番号３１５のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３１６のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１２）配列番号３１５のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３１６のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１３）配列番号３１７のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３１８のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１４）配列番号３１７のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３１８のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１５）配列番号３１９のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３２０のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１６）配列番号３１９のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３２０のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１７）配列番号３２１のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３２２のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１８）配列番号３２１のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３２２のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１９）配列番号３２３のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３２４のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（２０）配列番号３２３のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３２４のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（２１）配列番号３２５のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３２６のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、ならびに
（２２）配列番号３２５のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３２６のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド
からなる群から選択されるＦ１ポリペプチドおよびＦ２ポリペプチドを含む、ＲＳＶ  Ｆ突然変異体をコードする。
【０１１１】
一部の具体的な実施形態では、本開示は、
（１）配列番号１９のアミノ酸２６〜５１３を含む突然変異体、
（２）配列番号２０のアミノ酸２６〜５１３を含む突然変異体、および
（３）配列番号２１のアミノ酸２６〜５１３を含む突然変異体
からなる群から選択される突然変異体をコードする核酸分子を提供する。
【０１１２】
一部の他の具体的な実施形態では、本開示は、
（１）配列番号８のヌクレオチド７６〜１５３９を含むヌクレオチド配列、
（２）配列番号９のヌクレオチド７６〜１５３９を含むヌクレオチド配列、
（３）配列番号１０のヌクレオチド７６〜１５３９を含むヌクレオチド配列、
（４）配列番号１１のヌクレオチド７６〜１５３９を含むヌクレオチド配列、
（５）配列番号１２のヌクレオチド７６〜１５３９を含むヌクレオチド配列、
（６）配列番号１３のヌクレオチド７６〜１５３９を含むヌクレオチド配列、
（７）配列番号１４のヌクレオチド７６〜１５３９を含むヌクレオチド配列、
（８）配列番号１５のヌクレオチド７６〜１５３９を含むヌクレオチド配列、
（９）配列番号１６のヌクレオチド７６〜１５３９を含むヌクレオチド配列、
（１０）配列番号１７のヌクレオチド７６〜１５３９を含むヌクレオチド配列、および
（１１）配列番号１８のヌクレオチド７６〜１５３９を含むヌクレオチド配列
からなる群から選択されるヌクレオチド配列を含む、ＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体をコードする核酸分子、またはその縮重変異体を提供する。
【０１１３】
Ｄ．ＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体を含む組成物、ＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体をコードする核酸を含む組成物
別の態様では、本発明は、（１）本開示において記載されるＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体、または（２）このようなＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体をコードする核酸分子もしくはベクター、を含む組成物を提供する。
【０１１４】
一部の実施形態では、組成物は、対象におけるＲＳＶのＦタンパク質に対する免疫応答を誘起し得る免疫原性組成物である。一部の特定の実施形態では、免疫原性組成物は、本開示によって提供されるＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体および薬学的に許容できる担体を含む医薬組成物である。
【０１１５】
さらに他の実施形態では、医薬組成物はワクチンである。ワクチン内の免疫原性構成成分は、（１）本開示において記載されるＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体、（２）このようなＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体をコードする核酸、または（３）このようなＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体を発現させるためのベクターであり得る。
【０１１６】
一部の特定の実施形態では、ワクチンは、１０３位（１０３Ｃ）および１４８位（１４８Ｃ）のシステイン（Ｃ）、１９０位のイソロイシン（Ｉ）（１９０Ｉ）、ならびに４８６位のセリン（Ｓ）（４８６Ｓ）を含み、かつ、
（１）配列番号４１のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号４２のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（２）配列番号４１のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号４２のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（３）配列番号４３のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号４４のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（４）配列番号４３のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号４４のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（５）配列番号４５のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号４６のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（６）配列番号４５のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号４６のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（７）配列番号４７のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号４８のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（８）配列番号４７のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号４８のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（９）配列番号４９のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号５０のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１０）配列番号４９のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号５０のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１１）配列番号２７９のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２８０のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１２）配列番号２７９のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２８０のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１３）配列番号２８１のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２８２のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１４）配列番号２８１のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２８２のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１５）配列番号２８３のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２８４のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１６）配列番号２８３のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２８４のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１７）配列番号２８５のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２８６のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１８）配列番号２８５のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２８６のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１９）配列番号２８７のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２８８のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（２０）配列番号２８７のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２８８のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（２１）配列番号２８９のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２９０のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、ならびに
（２２）配列番号２８９のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２９０のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド
からなる群から選択されるＦ１ポリペプチドおよびＦ２ポリペプチドを含む、ＲＳＶ  Ｆ突然変異体を含む。
【０１１７】
一部の他の特定の実施形態では、ワクチンは、５４位のヒスチジン（Ｈ）、１０３位および１４８位のシステイン（Ｃ）、１９０位および２９６位のイソロイシン（Ｉ）、ならびに４８６位のセリン（Ｓ）を含み、かつ、
（１）配列番号５１のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号５２のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（２）配列番号５１のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号５２のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（３）配列番号５３のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号５４のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（４）配列番号５３のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号５４のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（５）配列番号５５のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号５６のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（６）配列番号５５のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号５６のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（７）配列番号５７のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号５８のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（８）配列番号５７のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号５８のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（９）配列番号５９のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号６０のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１０）配列番号５９のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号６０のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１１）配列番号２９１のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２９２のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１２）配列番号２９１のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２９２のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１３）配列番号２９３のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２９４のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１４）配列番号２９３のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２９４のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１５）配列番号２９５のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２９６のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１６）配列番号２９５のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２９６のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１７）配列番号２９７のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２９８のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１８）配列番号２９７のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号２９８のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１９）配列番号２９９のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３００のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（２０）配列番号２９９のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３００のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（２１）配列番号３０１のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３０２のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、ならびに
（２２）配列番号３０１のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３０２のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド
からなる群から選択されるＦ１ポリペプチドおよびＦ２ポリペプチドを含む、ＲＳＶ  Ｆ突然変異体を含む。
【０１１８】
一部の他の特定の実施形態では、ワクチンは、５４位のヒスチジン（Ｈ）、５５位および１８８位のシステイン（Ｃ）、ならびに４８６位のセリン（Ｓ）を含み、かつ、
（１）配列番号６１のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号６２のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（２）配列番号６１のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号６２のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（３）配列番号６３のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号６４のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（４）配列番号６３のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号６４のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（５）配列番号６５のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号６６のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（６）配列番号６５のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号６６のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（７）配列番号６７のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号６８のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（８）配列番号６７のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号６８のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（９）配列番号６９のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号７０のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１０）配列番号６９のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号７０のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１１）配列番号３０３のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３０４のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１２）配列番号３０３のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３０４のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１３）配列番号３０５のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３０６のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１４）配列番号３０５のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３０６のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１５）配列番号３０７のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３０８のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１６）配列番号３０７のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３０８のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１７）配列番号３０９のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３１０のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１８）配列番号３０９のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３１０のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１９）配列番号３１１のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３１２のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（２０）配列番号３１１のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３１２のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（２１）配列番号３１３のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３１４のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、ならびに
（２２）配列番号３１３のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３１４のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド
からなる群から選択されるＦ１ポリペプチドおよびＦ２ポリペプチドを含む、ＲＳＶ  Ｆ突然変異体を含む。
【０１１９】
一部の他の特定の実施形態では、ワクチンは、５４位のヒスチジン（Ｈ）、５５位および１８８位のシステイン（Ｃ）、１９０位のイソロイシン（Ｉ）（１９０Ｉ）、ならびに４８６位のセリン（Ｓ）を含み、かつ、
（１）配列番号７１のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号７２のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（２）配列番号７１のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号７２のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（３）配列番号７３のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号７４のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（４）配列番号７３のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号７４のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（５）配列番号７５のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号７６のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（６）配列番号７５のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号７６のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（７）配列番号７７のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号７８のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（８）配列番号７７のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号７８のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（９）配列番号７９のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号８０のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１０）配列番号７９のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号８０のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１１）配列番号３１５のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３１６のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１２）配列番号３１５のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３１６のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１３）配列番号３１７のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３１８のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１４）配列番号３１７のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３１８のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１５）配列番号３１９のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３２０のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１６）配列番号３１９のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３２０のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１７）配列番号３２１のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３２２のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１８）配列番号３２１のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３２２のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（１９）配列番号３２３のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３２４のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（２０）配列番号３２３のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３２４のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、
（２１）配列番号３２５のアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３２６のアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド、ならびに
（２２）配列番号３２５のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ２ポリペプチド、および配列番号３２６のアミノ酸配列に少なくとも９７％、９８％、または９９％同一なアミノ酸配列を含むＦ１ポリペプチド
からなる群から選択されるＦ１ポリペプチドおよびＦ２ポリペプチドを含む、ＲＳＶ  Ｆ突然変異体を含む。
【０１２０】
一部の実施形態では、医薬組成物などの組成物またはワクチンは、２つ以上の異なるＲＳＶ  Ｆ突然変異体を含む。２つ以上の異なるＲＳＶ  Ｆ突然変異体は、同一の導入されたアミノ酸突然変異を含み得るが、異なるＲＳＶ株またはサブタイプのＦ１ポリペプチドおよびＦ２ポリペプチドを含む。２つ以上の異なるＲＳＶ  Ｆ突然変異体は、異なる導入されたアミノ酸突然変異を含み得る。
【０１２１】
一部の実施形態では、組成物は、突然変異体の一方がＲＳＶサブタイプＡのＦ１ポリペプチドおよびＦ２ポリペプチドを含み、他方の突然変異体がＲＳＶサブタイプＢのＦ１ポリペプチドおよびＦ２ポリペプチドを含む、同一の導入されたアミノ酸突然変異を含む２つの異なる突然変異体を含む。一部の具体的な実施形態では、２つの異なる突然変異体は、
（１）アミノ酸置換１０３Ｃ、１４８Ｃ、１９０Ｉ、および４８６Ｓの組合せ、
（２）アミノ酸置換５４Ｈ、５５Ｃ、１８８Ｃ、および４８６Ｓの組合せ、
（３）アミノ酸置換５４Ｈ、１０３Ｃ、１４８Ｃ、１９０Ｉ、２９６Ｉ、および４８６Ｓの組合せ、
（４）アミノ酸置換５４Ｈ、５５Ｃ、１４２Ｃ、１８８Ｃ、２９６Ｉ、および３７１Ｃの組合せ、
（５）アミノ酸置換５５Ｃ、１８８Ｃ、および４８６Ｓの組合せ、
（６）アミノ酸置換５４Ｈ、５５Ｃ、１８８Ｃ、および１９０Ｉの組合せ、
（７）アミノ酸置換５５Ｃ、１８８Ｃ、１９０Ｉ、および４８６Ｓの組合せ、
（８）アミノ酸置換５４Ｈ、５５Ｃ、１８８Ｃ、１９０Ｉ、および４８６Ｓの組合せ、
（９）アミノ酸置換１５５Ｃ、１９０Ｉ、２９０Ｃ、および４８６Ｓの組合せ、
（１０）アミノ酸置換５４Ｈ、５５Ｃ、１４２Ｃ、１８８Ｃ、２９６Ｉ、３７１Ｃ、４８６Ｓ、４８７Ｑ、および４８９Ｓの組合せ、ならびに
（１１）アミノ酸置換５４Ｈ、１５５Ｃ、１９０Ｉ、２９０Ｃ、および２９６Ｉの組合せ
からなる群から選択されるアミノ酸置換の同一の組合せを含む。
【０１２２】
免疫原性構成成分に加えて、ワクチンは、アジュバントなどの免疫調節剤をさらに含み得る。適切なアジュバントの例には、水酸化アルミニウムおよび／またはリン酸アルミニウムなどのアルミニウム塩、ＭＦ５９などのスクアレン−水エマルジョンを含む油エマルジョン組成物（または水中油型組成物）（例えば、ＷＯ９０／１４８３７を参照されたい）、例えばＱＳ２１などのサポニン製剤、および免疫刺激複合体（ＩＳＣＯＭＳ）（例えば、米国特許第５，０５７，５４０号、ＷＯ９０／０３１８４、ＷＯ９６／１１７１１、ＷＯ２００４／００４７６２、ＷＯ２００５／００２６２０を参照されたい）、細菌または微生物誘導体、その例を挙げると、モノホスホリルリピドＡ（ＭＰＬ）、３−Ｏ−脱アシル化型ＭＰＬ（３ｄＭＰＬ）、ＣｐＧ−モチーフ含有オリゴヌクレオチド、ＡＤＰ−リボシル化細菌毒素、またはそれらの突然変異体、例えば大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）易熱性エンテロトキシンＬＴ、コレラ毒素ＣＴなどが含まれる。例えば、目的の抗原へのＣ４結合タンパク質（Ｃ４ｂｐ）のオリゴマー化ドメインの融合体をコードする異種核酸を使用することによって、ベクターによってコードされたアジュバントを使用することも可能である（例えば、Ｓｏｌａｂｏｍｉら、２００８、Ｉｎｆｅｃｔ  Ｉｍｍｕｎ  ７６：３８１７〜２３）。ある特定の実施形態では、この組成物は、アジュバントとして、０．０５〜５ｍｇの濃度、例えば用量当たり０．０７５〜１．０ｍｇのアルミニウム含有量で、例えば水酸化アルミニウム、リン酸アルミニウム、リン酸アルミニウムカリウム、またはその組合せの形態のアルミニウムを含む。
【０１２３】
Ｅ．ＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体、核酸分子、および組成物の使用
本開示はまた、ＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体、ＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体をコードする核酸、またはＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体を発現させるためのベクター、またはＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体もしくは核酸を含む組成物の使用に関する。
【０１２４】
いくつかの実施形態では、本開示は、有効量のＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体、ＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体をコードする核酸分子、またはＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体もしくは核酸分子を含む組成物を対象に投与することを含む、対象においてＲＳＶに対する免疫応答を誘起させる方法を提供する。
【０１２５】
一部の特定の実施形態では、本開示は、ＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体、ＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体をコードする核酸、またはＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体を発現させるためのベクターを含む、ワクチンなどの有効量の医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＲＳＶ感染を予防する方法を提供する。一部の実施形態では、対象はヒトである。一部の特定の実施形態では、ヒトは乳児などの小児である。一部の他の特定の実施形態では、ヒトは女性であり、特に妊婦である。
【０１２６】
組成物は、アジュバントの投与を伴ってまたは伴わずに対象に投与することができる。対象に投与される有効量は、対象においてＲＳＶ  Ｆタンパク質などのＲＳＶ抗原に対する免疫応答を誘起するために十分な量である。治療に選択され得る対象には、ＲＳＶへの曝露または曝露の可能性を理由として、ＲＳＶ感染を発症するリスクがある対象が含まれる。ほぼ全てのヒトが２歳までにＲＳＶに感染するため、出生コホート全体が、免疫化のための関連する集団として含まれる。これは、例えば、出生から６カ月齢まで、６カ月齢から５歳まで、抗体の受動移入によってその乳児を保護するために妊婦（または妊娠可能年齢の女性）において、新生児またはまだ子宮内にいる胎児の家族において、および５０歳を超える対象において、のいずれかの時点で免疫化レジメンを開始することによって行うことができる。重篤な症候（例えば、入院を要する）を伴うＲＳＶ感染のリスクが最も高い対象には、未熟児、気管支肺異形成を有する小児、および先天的心疾患を有する小児が含まれる。
【０１２７】
医薬組成物などの、本開示によって提供される組成物の投与は、標準的な投与経路を使用して行うことができる。非限定的な実施形態には、非経口投与、例えば、皮内、筋肉内、皮下、経皮、粘膜、または経口投与が含まれる。
【０１２８】
１回の投与の間に対象に与えられる組成物の総用量は、熟練医師では分かるであろうが、変化し得る。
【０１２９】
ワクチン組成物の１つまたは複数の、１回または複数回の追加投与を提供することも可能である。追加ワクチン接種が実施される場合、典型的には、このような追加ワクチン接種は、対象に組成物を初めて投与した（これは、このような場合では「初回ワクチン接種」と呼ぶ）後、１週間から１０年の間の、好ましくは２週間から６カ月の間をあけて同一の対象に投与される。代替的な追加投与レジメンでは、異なるベクター、例えば１つもしくは複数のアデノウイルス、または他のベクター、例えばＡｎｋａｒａの修飾型ワクシニアウイルス（ＭＶＡ）、またはＤＮＡ、またはタンパク質を、初回ワクチン接種後に、対象に投与することも可能である。例えば、本明細書の組換えウイルスベクターを初回投与として、そしてＲＳＶ  Ｆタンパク質を含む組成物を追加投与として投与することが可能である。
【０１３０】
ある特定の実施形態では、投与は、１回の初回投与および少なくとも１回の追加投与を含む。ある特定の他の実施形態では、投与は毎年行われる。さらに他の実施形態では、投与は、インフルエンザワクチンと一緒に毎年行われる。
【０１３１】
本開示によって提供されるワクチンは、１つまたは複数の他のワクチンと一緒に使用することができる。例えば、成人では、ワクチンは、インフルエンザワクチン、プレベナー、破傷風ワクチン、ジフテリアワクチン、および百日咳ワクチンと一緒に使用することができる。小児での使用では、本開示によって提供されるワクチンは、小児患者に指示されているあらゆる他のワクチンと共に使用することができる。
【０１３２】
【表１−１】
2019511998.tif 000003
【０１３３】
【表１−２】
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【０１３４】
【表２】
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【０１３５】
【表３−１】
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【０１３６】
【表３−２】
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【０１３７】
【表３−３】
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【０１３８】
【表３−４】
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【０１３９】
【表４−１】
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【０１４０】
【表４−２】
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【０１４１】
【表４−３】
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【０１４２】
【表４−４】
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【０１４３】
【表５−１】
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【０１４４】
【表５−２】
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【０１４５】
【表５−３】
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【０１４６】
【表５−４】
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【０１４７】
【表５−５】
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【０１４８】
【表５−６】
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【０１４９】
【表６−１】
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【０１５０】
【表６−２】
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【０１５１】
【表６−３】
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【０１５２】
【表６−４】
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【０１５３】
【表７】
2019511998.tif 000024
【実施例】
【０１５４】
Ｆ．実施例
本発明を、以下の例示的な実施例によってさらに説明する。実施例は本発明を決して限定するものではない。実施例は本発明を明らかにするためだけのものである。
【０１５５】
（実施例１）
ＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体の設計および調製
１Ａ：フォールドンドメインを有するＲＳＶ  Ｆ突然変異体
この実施例は、フィブリチンフォールドン三量化ドメインおよび導入されたアミノ酸突然変異、例えば、操作されたジスルフィド結合突然変異、間隙充填突然変異、静電気的突然変異、またはそれらの組合せを含む、様々なＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体の設計および調製を説明する。ｐＸＣＳ５０１、ｐＸＣＳ６０１などの固有の識別子によってそれぞれが同定されている例示的なＲＳＶ  Ｆ突然変異体を、表１〜６に示す。これらの突然変異体のそれぞれは、配列番号３で示されるアミノ酸配列に基づいて設計および調製され、これもまた図１で説明する。配列番号３の配列のアミノ酸残基１〜５１３は、配列番号３の配列におけるＰ１０２Ａ、Ｉ３７９Ｖ、およびＭ４４７Ｖという３つの天然の置換を除いて、配列番号１で示される未変性ＲＳＶ  Ａ２のＦ０前駆体ポリペプチドのアミノ酸残基１〜５１３に同一である。したがって、これらの例示的なＦ突然変異体のアミノ酸配列は、表１〜６で列挙される各突然変異体について記載される導入されたアミノ酸突然変異を除いて同一である。これらのＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体のそれぞれは、２つの個別のポリペプチド鎖を含む。一方のポリペプチド鎖であるＦ２ポリペプチドは、記載される導入された突然変異を除いて、配列番号３のアミノ酸２６〜１０９を含む。他方のポリペプチド鎖は、ＳＡＩＧリンカー（残基５１４〜５１７）を介してフォールドン三量化ドメイン（残基５１８〜５４４）に連結したＦ１ポリペプチド（残基１３７〜５１３）を含む。配列番号３のシグナルペプチド（残基１〜２５）およびｐｅｐ２７（残基１１０〜１３６）を、発現プロセスの間にＦ０前駆体から切断した。これらの例示的なＲＳＶ  Ｆ突然変異体の発現および精製のためのプロセスを、実施例２および３で記載する。
【０１５６】
１Ｂ：フォールドンドメインを有さないＲＳＶ  Ｆ突然変異体
フォールドンドメインを欠くＲＳＶ  Ｆ突然変異体、ｐＸＣＳ８９９を、配列番号３のＦ０前駆体配列のアミノ酸５１４〜５４４が欠失していることを除いて、上記の実施例１Ａで記載したものと同一の方法で調製した。ｐＸＣＳ８９９の前駆体ポリペプチドのアミノ酸配列を、配列番号２７１で示す。
【０１５７】
【表８−１】
2019511998.tif 000025
【０１５８】
【表８−２】
2019511998.tif 000026
【０１５９】
【表８−３】
2019511998.tif 000027
【０１６０】
【表８−４】
2019511998.tif 000028
【０１６１】
【表９−１】
2019511998.tif 000029
【０１６２】
【表９−２】
2019511998.tif 000030
【０１６３】
【表１０−１】
2019511998.tif 000031
【０１６４】
【表１０−２】
2019511998.tif 000032
【０１６５】
【表１１−１】
2019511998.tif 000033
【０１６６】
【表１１−２】
2019511998.tif 000034
【０１６７】
【表１１−３】
2019511998.tif 000035
【０１６８】
【表１１−４】
2019511998.tif 000036
【０１６９】
【表１２】
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【０１７０】
【表１３−１】
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【０１７１】
【表１３−２】
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【０１７２】
【表１３−３】
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【０１７３】
（実施例２）
ＲＳＶ  Ｆ突然変異体発現ベクターの構築
天然の置換Ｐ１０２Ａ、Ｉ３７９Ｖ、およびＭ４４７Ｖを有する、配列番号１で示される未変性ＲＳＶ  Ａ２  Ｆ０ポリペプチドをコードする核酸分子を、標準的な分子生物学技術を使用して突然変異させて、所望の導入されたアミノ酸突然変異を有するＲＳＶ  Ｆ突然変異体の前駆体ポリペプチドをコードした。前駆体ポリペプチドの構造および構成成分を図１および配列番号３に示す。前駆体ポリペプチドは、シグナルペプチド（残基１〜２５）、Ｆ２ポリペプチド（残基２６〜１０９）、ｐｅｐ２７ポリペプチド（残基１１０〜１３６）、Ｆ１ポリペプチド（残基１３７〜５１３）、Ｔ４フィブリチンフォールドン（残基５１８〜５４４）、トロンビン認識配列（５４７〜５５２）、精製タグ（ＨＩＳタグ（残基５５３〜５５８））、ＳｔｒｅｐタグＩＩ（残基５６１〜５６８）、およびリンカー配列（残基５１４〜５１７、５４５、５４６、５５９、および５６０）を含む。
【０１７４】
配列番号３のタンパク質配列を、ＤＮＡ２．０（Ｍｅｎｌｏ  Ｐａｒｋ、ＣＡ）による哺乳動物コドンの最適化および合成にかけた。合成された遺伝子産物を、アンピシリン耐性の代わりにカナマイシン耐性をコードするように、またＣＭＶプロモーターの代わりにＣＡＧプロモーター［Ｎｉｗａ，Ｈ．、Ｙａｍａｍｕｒａ，Ｋ．、およびＭｉｙａｚａｋｉ，Ｊ．、Ｅｆｆｉｃｉｅｎｔ  ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ｆｏｒ  ｈｉｇｈ−ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｔｒａｎｓｆｅｃｔａｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ａ  ｎｏｖｅｌ  ｅｕｋａｒｙｏｔｉｃ  ｖｅｃｔｏｒ．Ｇｅｎｅ、１０８（２）、１９３〜１９９、１９９１］をコードするように修飾されている、市販されている発現ベクターｐｃＤＮＡ３．１／Ｚｅｏ（＋）（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、Ｗａｌｔｈａｍ、ＭＡ）に導入した。突然変異誘発性のオリゴヌクレオチドを、ＱｕｉｋＣｈａｎｇｅ  Ｐｒｉｍｅｒ  Ｄｅｓｉｇｎアルゴリズム（Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｓａｎｔａ  Ｃｌａｒａ、ＣＡ）で設計し、全てのオリゴヌクレオチドは、Ｉｎｔｅｇｒａｔｅｄ  ＤＮＡ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（Ｃｏｒａｌｖｉｌｌｅ、ＩＡ）から購入した。ヌクレオチドの置換、挿入、および欠失を、ＱｕｉｋＣｈａｎｇｅ  Ｌｉｇｈｔｎｉｎｇ  Ｍｕｌｔｉ  Ｓｉｔｅ−Ｄｉｒｅｃｔｅｄ  Ｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓ  Ｋｉｔ（Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）で組み込んだ。元のプラスミド鋳型をＤｐｎＩで消化した後、突然変異生成したＦ対立遺伝子を、ハイフィデリティＱ５  ＤＮＡポリメラーゼ（Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｂｉｏｌａｂｓ、Ｉｐｓｗｉｃｈ、ＭＡ）またはＰｒｉｍｅＳＴＡＲ  ＨＳ（Ｐｒｅｍｉｘ）ＤＮＡポリメラーゼ（Ｔａｋａｒａ／Ｃｌｏｎｔｅｃｈ、Ｍｏｕｎｔａｉｎ  Ｖｉｅｗ、ＣＡ）を使用してポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）によって再増幅し、得られた生成物を、ＮＥＢｕｉｌｄｅｒ  ＨｉＦｉ  ＤＮＡ  Ａｓｓｅｍｂｌｙ  Ｋｉｔ（Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｂｉｏｌａｂｓ）またはＧｉｂｓｏｎ  Ａｓｓｅｍｂｌｙ  Ｍａｓｔｅｒ  Ｍｉｘ（Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｂｉｏｌａｂｓ）を用いて、哺乳動物発現ベクター内に挿入した。目的の配列の存在をＤＮＡ配列決定によって確認した。Ｅｘｐｉ２９３細胞へのトランスフェクションのためのプラスミドＤＮＡを、ＱＩＡｐｒｅｐ  Ｓｐｉｎ  ＭｉｎｉＰｒｅｐ  Ｋｉｔ（Ｑｉａｇｅｎ、Ｖａｌｅｎｃｉａ、ＣＡ）、またはＥｎｄｏＦｒｅｅ  Ｐｌａｓｍｉｄ  Ｍｅｇａ  Ｋｉｔ（Ｑｉａｇｅｎ）で精製した。全ての市販のキットまたは試薬について、手順は、製造業者のプロトコールに従って実施した。
【０１７５】
（実施例３）
ＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体の発現および精製
ＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体の評価のためのタンパク質を、実施例２で記載したように組み立ておよび調製されたＤＮＡ構築物の、Ｅｘｐｉ２９３Ｆ細胞（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ、Ｗａｌｔｈａｍ、ＭＡ）への一過性トランスフェクションによって生産した。一過性トランスフェクションは、製造業者のプロトコールに従って行った。
【０１７６】
澄明化した細胞培養物を、タンジェンシャルフロー濾過を使用して５〜１０倍に濃縮し、その後、緩衝液を、Ｎｉ−ＩＭＡＣカラムでの捕捉に適した緩衝液に交換した。可溶性Ｆタンパク質を含有する馴化細胞培養培地を、Ｎｉ−ＩＭＡＣカラムにロードした。生成物を、増大濃度のイミダゾールを使用して溶出した。生成物を含有する画分をプールし、次いで、Ｓｔｒｅｐ−Ｔａｃｔｉｎカラム（ＩＢＡ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｇｏｅｔｔｉｎｇｅｎ、Ｇｅｒｍａｎｙ）にロードした。生成物を、増大濃度のデスチオビオチンを使用してＳｔｒｅｐ−Ｔａｃｔｉｎカラムから溶出した。生成物を含有する画分をプールし、最終保存緩衝液内に透析した。粗培養上清および精製タンパク質を、本明細書において記載するインビトロおよびインビボアッセイに使用した。
【０１７７】
（実施例４）
ＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体の安定性
設計されたＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体の安定性を、ストレス試験および保存安定性実験によって評価した。熱ストレス試験の間、設計された突然変異体の粗培養上清を１時間、５０℃または６０℃でインキュベートし、ＥＬＩＳＡアッセイにおいて、融合前特異的なモノクローナル抗体Ｄ２５および融合前三量体特異的抗体ＡＭ１４で調べた。ストレスを受けた試料および無ストレス試料の抗体反応性の比率を、ストレス耐性パラメータとして規定する。突然変異体の安定性が高いほど、ストレス耐性が高いと予想される。保存安定性アッセイの間、４℃での保存の１週間後の粗培養上清における融合前抗体の反応性を、新鮮な培養上清の反応性と比較した。活性比率を、突然変異体の保存安定性として規定する。
【０１７８】
結果を表７Ａ〜７Ｃおよび８Ａ〜８Ｃに提示する。ストレス耐性を、ストレス後に残っている、融合前特異的ｍＡｂの部分的（ｆｒａｃｔｉｏｎａｌ）反応性として計算した（「ＮＲ」−反応性は検出されず、「ＮＤ」−未判定）。個々の操作されたジスルフィド突然変異体、間隙充填突然変異体、および静電気的突然変異体のスクリーニングから同定された、最も大きな安定化をもたらすアミノ酸置換（熱ストレス後に残っているＤ２５の反応性によって規定される融合前安定性）を、組合せ突然変異体に組み合わせた。これらの組合せ突然変異体も熱ストレスに曝し、２つのモノクローナル抗体、Ｄ２５（融合前特異的）およびＡＭ１４（融合前三量体特異的）で調べた。ＡＭ１４抗体によって認識される融合前三量体特異的な第４級エピトープ（ｑｕａｔｅｒｎａｒｙ  ｅｐｉｔｏｐｅ）は、Ｄ２５エピトープよりも熱ストレスに対して有意により感受性である（表８Ｂ）。ＡＭ１４の有意な反応性は、組合せ突然変異体のいずれによっても、６０℃のストレス後に保持されず、しかし、突然変異体のほとんどが、６０℃の熱ストレス後にＤ２５の反応性を保持した。この所見は、ＡＭ１４抗体が融合前構造の喪失、特に融合前三量体状態の喪失のはるかに正確な指標であることの重要な証拠を提供する。
【０１７９】
【表１４−１】
2019511998.tif 000041
【０１８０】
【表１４−２】
2019511998.tif 000042
【０１８１】
【表１５】
2019511998.tif 000043
【０１８２】
【表１６】
2019511998.tif 000044
【０１８３】
【表１７】
2019511998.tif 000045
【０１８４】
【表１８−１】
2019511998.tif 000046
【０１８５】
【表１８−２】
2019511998.tif 000047
【０１８６】
【表１９】
2019511998.tif 000048
【０１８７】
（実施例５）
モノクローナル抗体のパネルで評価された、ＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体の立体構造完全性。
この研究の目的は、融合前三量体立体構造を含むＲＳＶ−Ｆ融合前立体構造および会合の構造的完全性を維持するＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体を同定することであった。各突然変異体を、２つの部位Φ特異的および融合前特異的ｍＡｂ（ＡＭ２２およびＤ２５）、同様に融合前特異的である、部位ＩＩに近いエピトープに結合する１つのｍＡｂ（ＭＰＥ８）、融合前Ｆおよび融合後Ｆの両方に結合する１つの部位ＩＩ特異的ｍＡｂ（パリビズマブ、Ｓｙｎａｇｉｓ（登録商標））、１つの融合前三量体特異的ｍＡｂ（ＡＭ１４）、ならびに融合前Ｆおよび融合後Ｆの両方に結合する部位ＩＶ特異的抗体（１０１Ｆ）を含む参照ｍＡｂのパネルに対して試験した。融合前立体構造で維持されたＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体は、試験した参照抗体の全てに結合すると予想された。
【０１８８】
リアルタイムな生体分子相互作用の動態を測定するＯＣＴＥＴ  ＨＴＸ（ＦｏｒｔｅＢｉｏ、Ｐａｌｌ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、Ｐｏｒｔ  Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ、ＮＹ）機器を使用して、各突然変異体についての抗体反応性を評価した。実験は、ウェル当たり最終容積２００μＬを有する９６ウェル黒色プレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ  Ｂｉｏ−Ｏｎｅ、Ｍｏｎｒｏｅ、ＮＣ）中で、３０℃の温度で、１０００ｒｐｍで撹拌しながら行った。抗ＨＩＳバイオセンサーチップを、リン酸緩衝溶液（ＰＢＳ）、２％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）、０．０５％Ｔｗｅｅｎ  ２０（ＰＢＴ）中で１０分平衡させ、その後、結合の測定を開始した。ＨＩＳタグ付けされた突然変異タンパク質を、抗ＨＩＳバイオセンサーによって５分捕捉した。ベースラインをＰＢＴ中で３分確立し、その後、ＰＢＴ中の２０ｎＭの抗体との会合ステップを１０分行った。全抗体の解離を、ベースラインの確立に使用したものと同一のウェル内で２０分行った。ＯＣＴＥＴデータ分析ソフトウェア（バージョン８．２、Ｐａｌｌ  Ｃｏｒｐ．）を、会合ステップおよび解離ステップの曲線にあてはめ、ならびに１：１の可逆的結合相互作用の仮定に基づいて、動態分析に使用した。突然変異体のそれぞれと様々な参照モノクローナル抗体との結合応答（ｎｍシフト）を表９Ａおよび９Ｂに提示する。応答値＜０．１０は陰性であると見なされ、このアッセイの検出限界（ＬＯＤ）である。≧０．１０の値は陽性と見なされ、個々の突然変異体への抗体結合を示した。変動する結合の程度が、突然変異体にわたり、また各抗体で観察された。しかし、組合せ突然変異体の大部分には１０１ＦおよびＳｙｎａｇｉｓが結合し、一方、例えばｐＸＣＳ７３５およびｐＸＣＳ７７６などの突然変異体は、少なくとも１つの融合前特異的ｍＡｂへの結合の喪失を示した。結合の喪失は、無傷の融合前立体構造の喪失を示した。
【０１８９】
【表２０−１】
2019511998.tif 000049
【０１９０】
【表２０−２】
2019511998.tif 000050
【０１９１】
【表２１−１】
2019511998.tif 000051
【０１９２】
【表２１−２】
2019511998.tif 000052
【０１９３】
（実施例６）
選択された融合前ＲＳＶ  Ｆ突然変異体の分子量およびサイズ分布の分析。
安定化した融合前Ｆ突然変異体をＳＤＳ−ＰＡＧＥによって分析し、その後、ＲＳＶ  Ｆ特異的なモノクローナル抗体Ｌ４を用いるウェスタンブロットによって分析した［Ｗａｌｓｈ  ＥＥ、Ｃｏｔｅ  ＰＴ、Ｆｅｒｎｉｅ  ＢＦら  Ａｎａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ  Ｓｙｎｃｙｔｉａｌ  Ｖｉｒｕｓ  Ｆｕｓｉｏｎ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｕｓｉｎｇ  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  ａｎｄ  Ｐｏｌｙｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ．Ｊ．Ｇｅｎ．Ｖｉｒｏｌ．７６：５０５〜５１３、１９８６．］。図２Ａは、代表的な突然変異体ｐＸＣＳ８４７、ｐＸＣＳ８５１、およびｐＸＣＳ８５２、ならびにＤＳ−Ｃａｖ１のＳＤＳ−ＰＡＧＥ移動性プロファイルを示す。全ての場合で、単量体ＲＳＶ  Ｆ突然変異体について予想される５５から６０ｋＤａの間の見かけの分子量を有する主要なバンドが、非還元条件下で存在した。ＤＳ−Ｃａｖ１と突然変異体ｐＸＣＳ８４７、ｐＸＣＳ８５１、ｐＸＣＳ８５２との間で観察された移動性におけるわずかな変化は、個々のジスルフィド結合の性質、ならびに、その結果としての、非フォールディング状態のタンパク質の全体的なコンパクトさ、およびＳＤＳへのアクセス可能性に対する影響に起因し得る。
【０１９４】
図２Ｂは、未変性条件下の溶液における突然変異体ｐＸＣＳ８４７、ｐＸＣＳ８５１、ｐＸＣＳ８５２、およびＤＳ−Ｃａｖ１の分子量およびサイズ分布を説明する。分子量およびサイズ分布を、分析用超遠心機を使用する沈降速度分析から推定した。精製タンパク質を３５，０００ｒｐｍ、２０℃で遠心分離し、試料セルにわたるＵＶ吸光度を２８０ｎｍでモニタリングした。セル内の沈査種の全てで摩擦比が同一であると仮定して、データを連続ｃ（ｓ）分布にフィッティングした。全てのタンパク質は、約７．６Ｓの沈降係数および約１８０ｋＤaの見かけの分子量で沈降し、このことは、精製タンパク質が溶液中で三量体であることを示す。そのアミノ酸組成から計算されたＲＳＶ  Ｆ三量体の予想分子量は、１７１ｋＤaである。
【０１９５】
（実施例７）
設計されたＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体の二次構造および三次構造の完全性を特徴付けするための円二色性分光法。
遠および近ＵＶ  ＣＤスペクトルの両方を、ペルチェ式６ポジション温度制御型セルホルダーを備えたＪａｓｃｏ  Ｊ−８１０自動記録分光偏光計で記録した。遠ＵＶ  ＣＤスペクトルを、１ｍｍの長方形石英セル内で、１×ＰＢＳ中、ｐＨ７．４で０．１０〜０．１２ｍｇ／ｍｌのタンパク質濃度で、２００から２６０ｎｍの間で０．１ｎｍごとに１００ｎｍ／分で、３ｎｍのバンド幅で記録した。各試料について５つのスペクトルを回収し、平均した。近ＵＶ  ＣＤスペクトルを、１ｃｍの長方形石英セル内で、１×ＰＢＳ中、ｐＨ７．４で０．４〜０．５ｍｇ／ｍｌのタンパク質濃度で、２５０から３２０ｎｍの間で０．１ｎｍごとに１００ｎｍ／分で、３ｎｍのバンド幅で記録した。各試料についても５つのスペクトルを回収し、平均した。データを、緩衝液ベースラインの寄与について補正し、確立された関係性を使用して、平均残基楕円率（遠ＵＶ  ＣＤ）またはモル楕円率（近ＵＶ  ＣＤ）のいずれかに対して正規化した。
【０１９６】
結果を図３Ａおよび３Ｂに示す。遠および近ＵＶ  ＣＤの両方のデータは、全てのタンパク質が、良く規定された二次構造および三次構造を保持していることを示す。さらに、遠および近ＵＶ  ＣＤスペクトルの明らかな類似性は、突然変異体の全体的な二次構造および三次構造が類似しており、タンパク質の構造的完全性が保存されていることを示す。
【０１９７】
（実施例８）
設計されたＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体の構造的安定性
精製ＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体の構造的安定性を、示差走査熱量測定（ＤＳＣ）を使用して特徴付けした。ＤＳＣ実験を、ＶＰ−ＤＳＣマイクロカロリメータ（ＭｉｃｒｏＣａｌ、Ｎｏｒｔｈａｍｐｔｏｎ、ＭＡ）で行った。タンパク質濃度を分光測光法によって決定し、光散乱の寄与について補正した。１×ＰＢＳ中、ｐＨ７．４の０．２〜０．５ｍｇ／ｍＬのタンパク質試料（１．０〜２．４マイクロモル濃度の三量体濃度）を、１０℃から８０℃で９０℃／時間、８秒の応答時間および５分のプレスキャン平衡で、スキャンした。サーモグラムで見られた遷移数に応じて、熱容量プロファイルを、ＤＳＣの製造業者によって提供されているＯｒｉｇｉｎ  ７．０ソフトウェアを使用して、２または３状態アンフォールディングモデルにフィッティングさせた。第１の観察可能な遷移の融解温度を、各突然変異体の融解温度とする。
【０１９８】
ＤＳＣデータは、設計された突然変異体のほとんど全てがＤＳ−Ｃａｖ１よりも安定であることを示す（表１０）。全ての突然変異体（ｐＸＣＳ７３８を除く）の融解温度（各実験における第１の観察可能なＤＳＣピークのＤＳＣ最大値として規定される、表１０）はＤＳ−Ｃａｖ１よりも高く、最大で１８℃高い。ＤＳＣデータは、実施例１で記載したコンピュータ計算によるタンパク質設計によって、有意により安定であり融合前立体構造も保持するＲＳＶ  Ｆ突然変異体が成功裏に生産されたことを示す（Ｏｃｔｅｔデータ、実施例５）。
【０１９９】
【表２２】
2019511998.tif 000053
【０２００】
（実施例９）
融合前三量体立体構造の喪失のメカニズム。
融合前立体構造の喪失をもたらす特異的な構造的経路を特徴付けするために、本発明者らは、精製ＤＳ−Ｃａｖ１を熱ストレス試験にかけた。精製糖タンパク質（１×ＰＢＳ中、ｐＨ７．４で０．５ｍｇ／ｍｌ）を５０℃および６０℃で３０、６０、および１２０分インキュベートした。融合前特異的ｍＡｂであるＤ２５および融合前三量体特異的ｍＡｂであるＡＭ１４の、ストレスを受けたタンパク質への結合を、実施例４に記載したＥＬＩＳＡ実験を介して評価した。タンパク質の構造的完全性を、実施例７および８でそれぞれ記載したＣＤおよびＤＳＣを介して特徴付けした。結果を図４〜６に示す。
【０２０１】
ストレスを受けた試料の相対的なＡＭ１４の反応性およびＤ２５の反応性を図４に示す。ＤＳ−Ｃａｖ１のＤ２５の反応性およびＡＭ１４の反応性の両方は、５０℃で最大２時間のインキュベーションの後にほぼ不変のままである。逆に、両方の融合前特異的抗体への反応性は、６０℃での処理の間に徐々に喪失する。さらに、ＡＭ１４の反応性はＤ２５の反応性よりも速く喪失し、このことは、第４級融合前ＡＭ１４エピトープがＤ２５エピトープよりも早く崩壊することを示す。結果は、融合前三量体立体構造の喪失を検出するためのプローブとしてのＡＭ１４抗体の利点を際立たせている。
【０２０２】
無ストレスＤＳ−Ｃａｖ１のＤＳＣ評価（図５）は、タンパク質が５０℃から６０℃の間で可逆の立体構造遷移を受けることを示す。この遷移は、不可逆的な、融合前立体構造の喪失に対応しない。さらに、この遷移は、ＤＳ−Ｃａｖ１が規定された遠および近ＵＶ  ＣＤスペクトルを保持するため（図６Ａおよび６Ｂ）、タンパク質の全体的なアンフォールディングに起因するものではなく、このことは、タンパク質がこれらの条件下でフォールディングされたままであることを示す。観察されたＤＳＣ遷移の説明として最も可能性の高いものは、タンパク質の四次構造の可逆の喪失、すなわち、融合前三量体の少なくとも局所的な解離である。この解離は、融合前立体構造の喪失に向かう最初のステップに必要であり、それは、ＡＭ１４の反応性もＤ２５の反応性も、その遷移が起こる前にほとんど喪失していないためである（図４、ＥＬＩＳＡデータ）。これらのデータによって、融合前立体構造の安定性のためには三量体の完全性が重要であることが強調される。三量体の完全性は、第４級エピトープ特異的抗体ＡＭ１４に対する反応性によってのみ確認することができ、部位Φ特異的抗体Ｄ２５に対する反応性では確認できない。
【０２０３】
これらのデータは、融合前立体構造の喪失が以下の経路を介して生じることを示唆する。
【０２０４】
【数１】
2019511998.tif 000054
【０２０５】
ゆっくりとかつ不可逆的に融合前立体構造を喪失し（３Ｕ）、最終的には凝集し、高分子量種（Ｕn）を形成する未変性単量体（３Ｎ）に、可逆的に解離する未変性三量体（Ｎ３）。次に、三量体の解離は、ＤＳ−Ｃａｖ１が熱ストレスに対するタンパク質濃度依存性の耐性を示すであろうことを意味する。つまり、総タンパク質濃度の低下は三量体の解離を促進し、これが次いで、融合前立体構造の喪失を加速させる。逆に、安定化した融合前Ｆ突然変異体（例えば、８５１）は、十分に安定となっていれば、それらのストレス耐性の濃度依存性をほとんどないし全く示さない。図７Ａおよび７Ｂは、この仮説を裏付けるさらなる実験的証拠を示す。タンパク質試料を連続希釈し、５０℃のストレスに１時間曝した。対照（無ストレス）試料に関して、ストレス後に残っているＡＭ１４およびＤ２５の反応性を、ＥＬＩＳＡアッセイで評価した。ＤＳ−Ｃａｖ１のストレス耐性は、ＡＭ１４抗体の反応性（図７Ａ）またはＤ２５抗体の反応性（図７Ｂ）のいずれかによって判定したところ、タンパク質濃度に対する明白な依存性を示す。逆に、安定化した突然変異体ｐＸＣＳ８５１およびｐＸＣＳ８９８のストレス耐性は、同一のタンパク質濃度範囲にわたって、広く不変のままである。
【０２０６】
（実施例１０）
融合前立体構造で安定化したＲＳＶ  Ｆタンパク質突然変異体は、マウスにおいて中和抗体応答を誘起する。
メスＢａｌｂ／ｃマウスを、アジュバントとして用量当たり０．１ｍｇのリン酸アルミニウムを伴ってまたは伴わずに、０．０２５μｇまたは０．２５μｇのＤＳ−Ｃａｖ１、野生型Ｆ、Ｆ突然変異体ｐＸＣＳ８５２、ｐＸＣＳ８５５、ｐＸＣＳ８３０、ｐＸＣＳ８５３、ｐＸＣＳ７８０、ｐＸＣＳ８９８、ｐＸＣＳ８５１、ｐＸＣＳ８７４、ｐＸＣＳ８８１、ｐＸＣＳ７３８、またはｐＸＣＳ８４７のいずれかで免疫化した。免疫化は、筋肉内に、０週目および３週目に行った（表１１）。投与前（０週目）および投与後２（ＰＤ２、５週目）の血清を、［Ｅｙｌｅｓ  ＪＥ、Ｊｏｈｎｓｏｎ  ＪＥ、Ｍｅｇａｔｉ  Ｓら  Ｎｏｎｒｅｐｌｉｃａｔｉｎｇ  ｖａｃｃｉｎｅｓ  ｃａｎ  ｐｒｏｔｅｃｔ  ａｆｒｉｃａｎ  ｇｒｅｅｎ  ｍｏｎｋｅｙｓ  ｆｒｏｍ  ｔｈｅ  Ｍｅｍｐｈｉｓ  ３７  ｓｔｒａｉｎ  ｏｆ  ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ  ｓｙｎｃｙｔｉａｌ  ｖｉｒｕｓ．Ｊ  Ｉｎｆ  Ｄｉｓ．２０８（２）：３１９〜２９、２０１３．］の記載をわずかに修正して、ＲＳＶサブファミリーＡ中和アッセイで評価した。簡潔に述べると、中和抗体力価を、感染単位を５０％低減させる血清希釈係数として決定した。結果を、１群あたり１０頭のマウスから得た幾何平均力価として報告する。ウイルス中和が検出不可能である血清を、力価２０に割り当てた。５０％幾何平均力価の倍増を、各群内の、免疫化前の力価に対する投与後２（ＰＤ２）の力価の比率として報告する。
【０２０７】
【表２３】
2019511998.tif 000055
【０２０８】
試験した全ての突然変異体は、マウスにおいて２回の免疫化の後に中和抗体応答を誘起した（表１２）。全体的に、抗体力価は、突然変異体８５２、８３０、８５１、および８４７で、両抗原用量で一貫してより高く、このことは、これらの突然変異体が、安定化したＲＳＶ融合前Ｆ糖タンパク質の、より免疫原性の形態であったことを実証する（表１２および１３、図８）。
【０２０９】
【表２４】
2019511998.tif 000056
【０２１０】
【表２５】
2019511998.tif 000057
【０２１１】
ＰＤ２  ５０％中和抗体力価と、それらの対応する突然変異体のインビトロでの特徴付けデータとの比較は、ＰＤ２中和抗体力価とＡＭ１４熱ストレス耐性との間の相関を示す（図９）。この結果は、融合前三量体状態に特異的なＡＭ１４結合が、突然変異体の免疫原性と相関することを示唆する。
【０２１２】
（実施例１１）
ＨＲＢ領域における導入されたシステイン突然変異を含むＲＳＶ  Ｆ突然変異体
１１Ａ．ＨＲＢ領域における導入された突然変異を含むＲＳＶ  Ｆ突然変異体の調製
ＨＲＢ領域（Ｆ０ポリペプチドのおよそアミノ酸４７６〜５２４）における導入されたシステイン突然変異を含む代表的なＲＳＶ  Ｆ突然変異体を表１４に示し、この表中で、各突然変異体内のこの領域における具体的な突然変異が示されている。ＨＲＢ領域内の突然変異に加えて、これらの突然変異体の各々はまた、導入された突然変異Ｓ５５Ｃ、Ｌ１８８Ｃ、Ｔ５４Ｈ、およびＤ４８６Ｓも含む。これらの突然変異体は、実施例１〜３に記載した方法に類似の方法によって調製した。簡潔に述べると、５４５アミノ酸からなる前駆体ポリペプチドを、（１）残基１０４から１４４の間の４１アミノ酸が欠失していることを除いて配列番号１の配列のアミノ酸１〜５２９、（２）ＨＲＢ領域の外側の導入された突然変異（Ｓ５５Ｃ、Ｌ１８８Ｃ、Ｔ５４Ｈ、およびＤ４８６Ｓ）、（３）トロンビンプロテアーゼ認識配列、（４）フォールドンドメイン、（５）ＨＩＳタグ、（６）Ｓｔｒｅｐｔａｇ  ＩＩ、（７）リンカー配列、ならびに（８）記載した導入されたシステイン突然変異、を含む各突然変異体について調製した。アミノ酸１〜２５を含むシグナルペプチドを、発現プロセスの間に前駆体から切断した。フォールドンドメインもまた突然変異体から切断し、これは、発現プロセスの後に、５００ｕｇ／ｍｌのウシアルファ−トロンビン（ＨＴＩ）で一晩、室温で消化することによって達成した。
【０２１３】
【表２６】
2019511998.tif 000058
【０２１４】
１１Ｂ．ＨＲＢ領域における導入されたシステイン突然変異を含むＲＳＶ  Ｆ突然変異体の安定性
表１４で示したＲＳＶ  Ｆ突然変異体の安定性を、実施例８および実施例４で記載した方法に従って評価した。結果をそれぞれ表１５および１６に提示する。
【０２１５】
【表２７】
2019511998.tif 000059
【０２１６】
【表２８】
2019511998.tif 000060
【０２１７】
生配列（ｒａｗ  ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ）表
配列番号１．未変性ＲＳＶ  Ａ２の完全長Ｆ０のアミノ酸配列（ＧｅｎＢａｎｋ  ＧＩ：１３８２５１、Ｓｗｉｓｓ  Ｐｒｏｔ  Ｐ０３４２０）
ＭＥＬＬＩＬＫＡＮＡＩＴＴＩＬＴＡＶＴＦＣＦＡＳＧＱＮＩＴＥＥＦＹＱＳＴＣＳＡＶＳＫＧＹＬＳＡＬＲＴＧＷＹＴＳＶＩＴＩＥＬＳＮＩＫＥＮＫＣＮＧＴＤＡＫＶＫＬＩＫＱＥＬＤＫＹＫＮＡＶＴＥＬＱＬＬＭＱＳＴＰＰＴＮＮＲＡＲＲＥＬＰＲＦＭＮＹＴＬＮＮＡＫＫＴＮＶＴＬＳＫＫＲＫＲＲＦＬＧＦＬＬＧＶＧＳＡＩＡＳＧＶＡＶＳＫＶＬＨＬＥＧＥＶＮＫＩＫＳＡＬＬＳＴＮＫＡＶＶＳＬＳＮＧＶＳＶＬＴＳＫＶＬＤＬＫＮＹＩＤＫＱＬＬＰＩＶＮＫＱＳＣＳＩＳＮＩＥＴＶＩＥＦＱＱＫＮＮＲＬＬＥＩＴＲＥＦＳＶＮＡＧＶＴＴＰＶＳＴＹＭＬＴＮＳＥＬＬＳＬＩＮＤＭＰＩＴＮＤＱＫＫＬＭＳＮＮＶＱＩＶＲＱＱＳＹＳＩＭＳＩＩＫＥＥＶＬＡＹＶＶＱＬＰＬＹＧＶＩＤＴＰＣＷＫＬＨＴＳＰＬＣＴＴＮＴＫＥＧＳＮＩＣＬＴＲＴＤＲＧＷＹＣＤＮＡＧＳＶＳＦＦＰＱＡＥＴＣＫＶＱＳＮＲＶＦＣＤＴＭＮＳＬＴＬＰＳＥＩＮＬＣＮＶＤＩＦＮＰＫＹＤＣＫＩＭＴＳＫＴＤＶＳＳＳＶＩＴＳＬＧＡＩＶＳＣＹＧＫＴＫＣＴＡＳＮＫＮＲＧＩＩＫＴＦＳＮＧＣＤＹＶＳＮＫＧＭＤＴＶＳＶＧＮＴＬＹＹＶＮＫＱＥＧＫＳＬＹＶＫＧＥＰＩＩＮＦＹＤＰＬＶＦＰＳＤＥＦＤＡＳＩＳＱＶＮＥＫＩＮＱＳＬＡＦＩＲＫＳＤＥＬＬＨＮＶＮＡＧＫＳＴＴＮＩＭＩＴＴＩＩＩＶＩＩＶＩＬＬＳＬＩＡＶＧＬＬＬＹＣＫＡＲＳＴＰＶＴＬＳＫＤＱＬＳＧＩＮＮＩＡＦＳＮ
【０２１８】
配列番号２．未変性ＲＳＶ  Ｂの完全長Ｆ０のアミノ酸配列（１８５３７株、ＧｅｎＢａｎｋ  ＧＩ：１３８２５０、Ｓｗｉｓｓ  Ｐｒｏｔ  Ｐ１３８４３）
ＭＥＬＬＩＨＲＳＳＡＩＦＬＴＬＡＶＮＡＬＹＬＴＳＳＱＮＩＴＥＥＦＹＱＳＴＣＳＡＶＳＲＧＹＦＳＡＬＲＴＧＷＹＴＳＶＩＴＩＥＬＳＮＩＫＥＴＫＣＮＧＴＤＴＫＶＫＬＩＫＱＥＬＤＫＹＫＮＡＶＴＥＬＱＬＬＭＱＮＴＰＡＡＮＮＲＡＲＲＥＡＰＱＹＭＮＹＴＩＮＴＴＫＮＬＮＶＳＩＳＫＫＲＫＲＲＦＬＧＦＬＬＧＶＧＳＡＩＡＳＧＩＡＶＳＫＶＬＨＬＥＧＥＶＮＫＩＫＮＡＬＬＳＴＮＫＡＶＶＳＬＳＮＧＶＳＶＬＴＳＫＶＬＤＬＫＮＹＩＮＮＲＬＬＰＩＶＮＱＱＳＣＲＩＳＮＩＥＴＶＩＥＦＱＱＭＮＳＲＬＬＥＩＴＲＥＦＳＶＮＡＧＶＴＴＰＬＳＴＹＭＬＴＮＳＥＬＬＳＬＩＮＤＭＰＩＴＮＤＱＫＫＬＭＳＳＮＶＱＩＶＲＱＱＳＹＳＩＭＳＩＩＫＥＥＶＬＡＹＶＶＱＬＰＩＹＧＶＩＤＴＰＣＷＫＬＨＴＳＰＬＣＴＴＮＩＫＥＧＳＮＩＣＬＴＲＴＤＲＧＷＹＣＤＮＡＧＳＶＳＦＦＰＱＡＤＴＣＫＶＱＳＮＲＶＦＣＤＴＭＮＳＬＴＬＰＳＥＶＳＬＣＮＴＤＩＦＮＳＫＹＤＣＫＩＭＴＳＫＴＤＩＳＳＳＶＩＴＳＬＧＡＩＶＳＣＹＧＫＴＫＣＴＡＳＮＫＮＲＧＩＩＫＴＦＳＮＧＣＤＹＶＳＮＫＧＶＤＴＶＳＶＧＮＴＬＹＹＶＮＫＬＥＧＫＮＬＹＶＫＧＥＰＩＩＮＹＹＤＰＬＶＦＰＳＤＥＦＤＡＳＩＳＱＶＮＥＫＩＮＱＳＬＡＦＩＲＲＳＤＥＬＬＨＮＶＮＴＧＫＳＴＴＮＩＭＩＴＴＩＩＩＶＩＩＶＶＬＬＳＬＩＡＩＧＬＬＬＹＣＫＡＫＮＴＰＶＴＬＳＫＤＱＬＳＧＩＮＮＩＡＦＳＫ
【０２１９】
配列番号３．フォールドンを有するＲＳＶ  Ａ２  Ｆ細胞外ドメイン
ＭＥＬＬＩＬＫＡＮＡＩＴＴＩＬＴＡＶＴＦＣＦＡＳＧＱＮＩＴＥＥＦＹＱＳＴＣＳＡＶＳＫＧＹＬＳＡＬＲＴＧＷＹＴＳＶＩＴＩＥＬＳＮＩＫＥＮＫＣＮＧＴＤＡＫＶＫＬＩＫＱＥＬＤＫＹＫＮＡＶＴＥＬＱＬＬＭＱＳＴＰＡＴＮＮＲＡＲＲＥＬＰＲＦＭＮＹＴＬＮＮＡＫＫＴＮＶＴＬＳＫＫＲＫＲＲＦＬＧＦＬＬＧＶＧＳＡＩＡＳＧＶＡＶＳＫＶＬＨＬＥＧＥＶＮＫＩＫＳＡＬＬＳＴＮＫＡＶＶＳＬＳＮＧＶＳＶＬＴＳＫＶＬＤＬＫＮＹＩＤＫＱＬＬＰＩＶＮＫＱＳＣＳＩＳＮＩＥＴＶＩＥＦＱＱＫＮＮＲＬＬＥＩＴＲＥＦＳＶＮＡＧＶＴＴＰＶＳＴＹＭＬＴＮＳＥＬＬＳＬＩＮＤＭＰＩＴＮＤＱＫＫＬＭＳＮＮＶＱＩＶＲＱＱＳＹＳＩＭＳＩＩＫＥＥＶＬＡＹＶＶＱＬＰＬＹＧＶＩＤＴＰＣＷＫＬＨＴＳＰＬＣＴＴＮＴＫＥＧＳＮＩＣＬＴＲＴＤＲＧＷＹＣＤＮＡＧＳＶＳＦＦＰＱＡＥＴＣＫＶＱＳＮＲＶＦＣＤＴＭＮＳＬＴＬＰＳＥＶＮＬＣＮＶＤＩＦＮＰＫＹＤＣＫＩＭＴＳＫＴＤＶＳＳＳＶＩＴＳＬＧＡＩＶＳＣＹＧＫＴＫＣＴＡＳＮＫＮＲＧＩＩＫＴＦＳＮＧＣＤＹＶＳＮＫＧＶＤＴＶＳＶＧＮＴＬＹＹＶＮＫＱＥＧＫＳＬＹＶＫＧＥＰＩＩＮＦＹＤＰＬＶＦＰＳＤＥＦＤＡＳＩＳＱＶＮＥＫＩＮＱＳＬＡＦＩＲＫＳＤＥＬＬＳＡＩＧＧＹＩＰＥＡＰＲＤＧＱＡＹＶＲＫＤＧＥＷＶＬＬＳＴＦＬＧＧＬＶＰＲＧＳＨＨＨＨＨＨＧＳＷＳＨＰＱＦＥＫ
【０２２０】
配列番号４：ＲＳＶ  ＲＳＶＡ／Ｈｏｍｏ  ｓａｐｉｅｎｓ／ＵＳＡ／ＬＡ２＿２１／２０１３  Ｆ（Ｏｎｔａｒｉｏ）未変性アミノ酸配列（ＧｅｎＢａｎｋ  ＧＩ：ＡＨＸ５７１８５）：
ＭＥＬＰＩＬＫＴＮＡＩＴＴＩＬＡＡＶＴＬＣＦＡＳＳＱＮＩＴＥＥＦＹＱＳＴＣＳＡＶＳＫＧＹＬＳＡＬＲＴＧＷＹＴＳＶＩＴＩＥＬＳＮＩＫＥＮＫＣＮＧＴＤＡＫＶＫＬＩＫＱＥＬＤＫＹＫＮＡＶＴＥＬＱＬＬＭＱＳＴＰＡＡＮＳＲＡＲＲＥＬＰＲＦＭＮＹＴＬＮＮＴＫＮＴＮＶＴＬＳＫＫＲＫＲＲＦＬＧＦＬＬＧＶＧＳＡＩＡＳＧＩＡＶＳＫＶＬＨＬＥＧＥＶＮＫＩＫＳＡＬＬＳＴＮＫＡＶＶＳＬＳＮＧＶＳＶＬＴＳＫＶＬＤＬＫＮＹＩＤＫＱＬＬＰＩＶＮＫＱＳＣＳＩＳＮＩＥＴＶＩＥＦＱＱＫＮＮＲＬＬＥＩＴＲＥＦＳＶＮＡＧＶＴＴＰＶＳＴＹＭＬＴＮＳＥＬＬＳＬＩＮＤＭＰＩＴＮＤＱＫＫＬＭＳＳＮＶＱＩＶＲＱＱＳＹＳＩＭＳＩＩＫＥＥＶＬＡＹＶＶＱＬＰＬＹＧＶＩＤＴＰＣＷＫＬＨＴＳＰＬＣＴＴＮＴＫＥＧＳＮＩＣＬＴＲＴＤＲＧＷＹＣＤＮＡＧＳＶＳＦＦＰＱＡＥＴＣＫＶＱＳＮＲＶＦＣＤＴＭＮＳＬＴＬＰＳＥＶＮＬＣＮＩＤＩＦＮＰＫＹＤＣＫＩＭＴＳＫＴＤＶＳＳＳＶＩＴＳＬＧＡＩＶＳＣＹＧＫＴＫＣＴＡＳＮＫＮＲＧＩＩＫＴＦＳＮＧＣＤＹＶＳＮＫＧＶＤＴＶＳＶＧＮＴＬＹＹＶＮＫＱＥＧＫＳＬＹＶＫＧＥＰＩＩＮＦＹＤＰＬＶＦＰＳＤＥＦＤＡＳＩＳＱＶＮＥＫＩＮＱＳＬＡＦＩＲＫＳＤＥＬＬＨＮＶＮＡＧＫＳＴＴＮＩＭＩＴＴＩＩＩＶＩＩＶＩＬＬＡＬＩＡＶＧＬＬＬＹＣＫＡＲＳＴＰＶＴＬＳＫＤＱＬＳＧＩＮＮＩＡＦＳＮ
【０２２１】
配列番号５：フォールドンを有するＲＳＶ  ＲＳＶＡ／Ｈｏｍｏ  ｓａｐｉｅｎｓ／ＵＳＡ／ＬＡ２＿２１／２０１３  Ｆ細胞外ドメイン：
ＭＥＬＰＩＬＫＴＮＡＩＴＴＩＬＡＡＶＴＬＣＦＡＳＳＱＮＩＴＥＥＦＹＱＳＴＣＳＡＶＳＫＧＹＬＳＡＬＲＴＧＷＹＴＳＶＩＴＩＥＬＳＮＩＫＥＮＫＣＮＧＴＤＡＫＶＫＬＩＫＱＥＬＤＫＹＫＮＡＶＴＥＬＱＬＬＭＱＳＴＰＡＡＮＳＲＡＲＲＥＬＰＲＦＭＮＹＴＬＮＮＴＫＮＴＮＶＴＬＳＫＫＲＫＲＲＦＬＧＦＬＬＧＶＧＳＡＩＡＳＧＩＡＶＳＫＶＬＨＬＥＧＥＶＮＫＩＫＳＡＬＬＳＴＮＫＡＶＶＳＬＳＮＧＶＳＶＬＴＳＫＶＬＤＬＫＮＹＩＤＫＱＬＬＰＩＶＮＫＱＳＣＳＩＳＮＩＥＴＶＩＥＦＱＱＫＮＮＲＬＬＥＩＴＲＥＦＳＶＮＡＧＶＴＴＰＶＳＴＹＭＬＴＮＳＥＬＬＳＬＩＮＤＭＰＩＴＮＤＱＫＫＬＭＳＳＮＶＱＩＶＲＱＱＳＹＳＩＭＳＩＩＫＥＥＶＬＡＹＶＶＱＬＰＬＹＧＶＩＤＴＰＣＷＫＬＨＴＳＰＬＣＴＴＮＴＫＥＧＳＮＩＣＬＴＲＴＤＲＧＷＹＣＤＮＡＧＳＶＳＦＦＰＱＡＥＴＣＫＶＱＳＮＲＶＦＣＤＴＭＮＳＬＴＬＰＳＥＶＮＬＣＮＩＤＩＦＮＰＫＹＤＣＫＩＭＴＳＫＴＤＶＳＳＳＶＩＴＳＬＧＡＩＶＳＣＹＧＫＴＫＣＴＡＳＮＫＮＲＧＩＩＫＴＦＳＮＧＣＤＹＶＳＮＫＧＶＤＴＶＳＶＧＮＴＬＹＹＶＮＫＱＥＧＫＳＬＹＶＫＧＥＰＩＩＮＦＹＤＰＬＶＦＰＳＤＥＦＤＡＳＩＳＱＶＮＥＫＩＮＱＳＬＡＦＩＲＫＳＤＥＬＬＳＡＩＧＧＹＩＰＥＡＰＲＤＧＱＡＹＶＲＫＤＧＥＷＶＬＬＳＴＦＬＧＧＬＶＰＲＧＳＨＨＨＨＨＨＧＳＷＳＨＰＱＦＥＫ
【０２２２】
配列番号６：ＲＳＶ  ＲＳＶＢ／Ｈｏｍｏ  ｓａｐｉｅｎｓ／ＰＥＲ／ＦＰＰ００５９２／２０１１Ｆ（Ｂｕｅｎｏｓ  Ａｉｒｅｓ）未変性アミノ酸配列（ＧｅｎＢａｎｋ  ＧＩ：ＡＨＶ８０７５８）：
ＭＥＬＬＩＨＲＳＳＡＩＦＬＴＬＡＩＮＡＬＹＬＴＳＳＱＮＩＴＥＥＦＹＱＳＴＣＳＡＶＳＲＧＹＦＳＡＬＲＴＧＷＹＴＳＶＩＴＩＥＬＳＮＩＫＥＴＫＣＮＧＴＤＴＫＶＫＬＩＫＱＥＬＤＫＹＫＮＡＶＴＥＬＱＬＬＭＱＮＴＰＡＡＮＮＲＡＲＲＥＡＰＱＹＭＮＹＴＩＮＴＴＫＮＬＮＶＳＩＳＫＫＲＫＲＲＦＬＧＦＬＬＧＶＧＳＡＩＡＳＧＩＡＶＳＫＶＬＨＬＥＧＥＶＮＫＩＫＮＡＬＬＳＴＮＫＡＶＶＳＬＳＮＧＶＳＶＬＴＳＫＶＬＤＬＫＮＹＩＮＮＱＬＬＰＩＶＮＱＱＳＣＲＩＳＮＩＥＴＶＩＥＦＱＱＫＮＳＲＬＬＥＩＴＲＥＦＳＶＮＡＧＶＴＴＰＬＳＴＹＭＬＴＮＳＥＬＬＳＬＩＮＤＭＰＩＴＮＤＱＫＫＬＭＳＳＮＶＱＩＶＲＱＱＳＹＳＩＭＳＩＩＫＥＥＶＬＡＹＶＶＱＬＰＩＹＧＶＩＤＴＰＣＷＫＬＨＴＳＰＬＣＴＴＮＩＫＥＧＳＮＩＣＬＴＲＴＤＲＧＷＹＣＤＮＡＧＳＶＳＦＦＰＱＡＤＴＣＫＶＱＳＮＲＶＦＣＤＴＭＮＳＬＴＬＰＳＥＶＳＬＣＮＴＤＩＦＮＳＫＹＤＣＫＩＭＴＳＫＴＤＩＳＳＳＶＩＴＳＬＧＡＩＶＳＣＹＧＫＴＫＣＴＡＳＮＫＮＲＧＩＩＫＴＦＳＮＧＣＤＹＶＳＮＫＧＶＤＴＶＳＶＧＮＴＬＹＹＶＮＫＬＥＧＫＮＬＹＶＫＧＥＰＩＩＮＹＹＤＰＬＶＦＰＳＤＥＦＤＡＳＩＳＱＶＮＥＫＩＮＱＳＬＡＦＩＲＲＳＤＥＬＬＨＮＶＮＴＧＫＳＴＴＮＩＭＩＴＡＩＩＩＶＩＩＶＶＬＬＳＬＩＡＩＧＬＬＬＹＣＫＡＫＮＴＰＶＴＬＳＫＤＱＬＳＧＩＮＮＩＡＦＳＫ
【０２２３】
配列番号７：フォールドンを有するＲＳＶ  ＲＳＶＢ／Ｈｏｍｏ  ｓａｐｉｅｎｓ／ＰＥＲ／ＦＰＰ００５９２／２０１１Ｆ細胞外ドメイン：
ＭＥＬＬＩＨＲＳＳＡＩＦＬＴＬＡＩＮＡＬＹＬＴＳＳＱＮＩＴＥＥＦＹＱＳＴＣＳＡＶＳＲＧＹＦＳＡＬＲＴＧＷＹＴＳＶＩＴＩＥＬＳＮＩＫＥＴＫＣＮＧＴＤＴＫＶＫＬＩＫＱＥＬＤＫＹＫＮＡＶＴＥＬＱＬＬＭＱＮＴＰＡＡＮＮＲＡＲＲＥＡＰＱＹＭＮＹＴＩＮＴＴＫＮＬＮＶＳＩＳＫＫＲＫＲＲＦＬＧＦＬＬＧＶＧＳＡＩＡＳＧＩＡＶＳＫＶＬＨＬＥＧＥＶＮＫＩＫＮＡＬＬＳＴＮＫＡＶＶＳＬＳＮＧＶＳＶＬＴＳＫＶＬＤＬＫＮＹＩＮＮＱＬＬＰＩＶＮＱＱＳＣＲＩＳＮＩＥＴＶＩＥＦＱＱＫＮＳＲＬＬＥＩＴＲＥＦＳＶＮＡＧＶＴＴＰＬＳＴＹＭＬＴＮＳＥＬＬＳＬＩＮＤＭＰＩＴＮＤＱＫＫＬＭＳＳＮＶＱＩＶＲＱＱＳＹＳＩＭＳＩＩＫＥＥＶＬＡＹＶＶＱＬＰＩＹＧＶＩＤＴＰＣＷＫＬＨＴＳＰＬＣＴＴＮＩＫＥＧＳＮＩＣＬＴＲＴＤＲＧＷＹＣＤＮＡＧＳＶＳＦＦＰＱＡＤＴＣＫＶＱＳＮＲＶＦＣＤＴＭＮＳＬＴＬＰＳＥＶＳＬＣＮＴＤＩＦＮＳＫＹＤＣＫＩＭＴＳＫＴＤＩＳＳＳＶＩＴＳＬＧＡＩＶＳＣＹＧＫＴＫＣＴＡＳＮＫＮＲＧＩＩＫＴＦＳＮＧＣＤＹＶＳＮＫＧＶＤＴＶＳＶＧＮＴＬＹＹＶＮＫＬＥＧＫＮＬＹＶＫＧＥＰＩＩＮＹＹＤＰＬＶＦＰＳＤＥＦＤＡＳＩＳＱＶＮＥＫＩＮＱＳＬＡＦＩＲＲＳＤＥＬＬＳＡＩＧＧＹＩＰＥＡＰＲＤＧＱＡＹＶＲＫＤＧＥＷＶＬＬＳＴＦＬＧＧＬＶＰＲＧＳＨＨＨＨＨＨＧＳＷＳＨＰＱＦＥＫ
【０２２４】
配列番号８：ｐＸＣＳ７３８の前駆体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列：
ａｔｇｇａａｃｔｔｃｔｇａｔｃｃｔｇａａａｇｃｃａａｃｇｃｇａｔｔａｃｃａｃｔａｔｃｃｔｇａｃｔｇｃｃｇｔｃａｃｃｔｔｃｔｇｃｔｔｃｇｃａｔｃｇｇｇａｃａｇａａｃａｔｔａｃｃｇａｇｇａｇｔｔｃｔａｃｃａｇｔｃｃａｃｃｔｇｔｔｃｇｇｃｇｇｔｇｔｃｃａａｇｇｇｔｔａｃｃｔｃｔｃｇｇｃｃｃｔｇａｇａａｃｔｇｇｃｔｇｇｔａｃｃａｃｔｇｔｇｔｇａｔｔａｃｔａｔｃｇａｇｃｔｇａｇｃａａｃａｔｃａａｇｇａｇａａｃａａｇｔｇｃａａｔｇｇａａｃｇｇａｃｇｃｇａａｇｇｔｃａａｇｃｔｇａｔｔａａｇｃａｇｇａａｃｔｃｇａｔａａｇｔａｃａａｇａａｃｇｃｃｇｔｇａｃｃｇａｇｃｔｃｃａｇｃｔｇｃｔｇａｔｇｃａａｔｃｇａｃｃｃｃｔｇｃｃａｃｔａａｃａａｃａｇａｇｃｔｃｇｃｃｇｇｇａａｃｔｇｃｃｇｃｇｃｔｔｃａｔｇａａｔｔａｃａｃｃｃｔｃａａｃａａｃｇｃｇａａｇａａａａｃｃａａｃｇｔｇａｃｃｃｔｇｔｃｃａａｇａａｇｃｇｃａａｇｃｇｇａｇｇｔｔｃｃｔｇｇｇａｔｔｃｃｔｇｔｇｔｇｇｃｇｔｇｇｇｃｔｃｃｇｃａａｔｃｇｃａｔｃｃｇｇａｇｔｇｇｃｃｇｔｇｔｃｃａａａｇｔｇｃｔｇｃａｔｃｔｇｇａｇｇｇｇｇａａｇｔｇａａｃａａｇａｔｃａａｇｔｃｃｇｃｃｃｔｃｃｔｇｔｃａａｃｔａａｔａａｇｇｃｇｇｔｇｇｔｇｔｃｃｃｔｇａｇｃａａｃｇｇａｇｔｃａｇｃｇｔｇｔｇｔａｃａｔｃｃａａｇｇｔｃｃｔｇｇａｃｃｔｃａａｇａａｃｔａｃａｔｃｇａｃａａｇｃａｇｃｔｇｔｔｇｃｃｃａｔｃｇｔｃａａｃａａｇｃａｇｔｃａｔｇｃｔｃｇａｔｔａｇｃａａｔａｔｃｇａａａｃｃｇｔｇａｔｔｇａｇｔｔｃｃａｇｃａｇａａｇａａｃａａｃａｇａｃｔｇｃｔｃｇａａａｔｔａｃｃｃｇｇｇａｇｔｔｔｔｃｃｇｔｇａａｃｇｃｃｇｇａｇｔｇａｃｃａｃｔｃｃｔｇｔｇｔｃｃａｃｃｔａｃａｔｇｃｔｔａｃｇａａｃｔｃｃｇａａｃｔｇｃｔｃａｇｃｃｔｃａｔｃａａｃｇａｔａｔｇｃｃｇａｔｃａｃｔａａｃｇａｃｃａｇａａｇａａｇｔｔｇａｔｇａｇｃａａｃａａｔｇｔｇｃａｇａｔｃｇｔｇｃｇｃｃａａｃａｇｔｃｃｔａｃｔｃａａｔｃａｔｇｔｃａａｔｔａｔｃａａｇｇａｇｇａａａｔｃｃｔｃｇｃｃｔａｔｇｔｇｇｔｇｃａａｔｔｇｃｃｔｃｔｇｔａｃｇｇａｇｔｃａｔｃｇａｃａｃａｃｃｃｔｇｃｔｇｇａａｇｃｔｇｃａｃａｃｔａｇｃｃｃａｃｔｃｔｇｔａｃｇａｃｃａａｃａｃｃａａｇｇａａｇｇｔｔｃｃａａｃａｔｃｔｇｃｃｔｇａｃｔａｇｇａｃｃｇａｔｃｇｇｇｇｃｔｇｇｔａｔｔｇｃｇａｔａａｔｇｃｔｇｇｇｔｃｃｇｔｇａｇｃｔｔｃｔｔｃｃｃｇｃａａｇｃｃｇａｇａｃｔｔｇｃａａａｇｔｇｃａｇｔｃａａａｃｃｇｃｇｔｇｔｔｃｔｇｔｇａｃａｃｃａｔｇｔｇｔａｇｃｃｔｇａｃｃｃｔｇｃｃａｔｃｃｇａａｇｔｃａａｃｃｔｃｔｇｃａａｃｇｔｇｇａｃａｔｃｔｔｔａａｃｃｃｇａａａｔａｃｇａｃｔｇｃａａｇａｔｔａｔｇａｃｃｔｃｃａａｇａｃｃｇａｃｇｔｃａｇｃａｇｃｔｃｔｇｔｃａｔｃａｃｔａｇｃｃｔｇｇｇａｇｃｔａｔｔｇｔｇｔｃｃｔｇｃｔａｃｇｇａａａｇａｃｃａａａｔｇｃａｃｔｇｃｃｔｃｇａａｃａａｇａａｃａｇａｇｇｃａｔｃａｔｃａａｇａｃｃｔｔｃａｇｃａａｃｇｇｃｔｇｔｇａｃｔａｃｇｔｇｔｃｃａａｃａａｇｇｇａｇｔｇｇａｃａｃｃｇｔｇｔｃｃｇｔｃｇｇｇａａｃａｃｃｃｔｇｔａｃｔａｃｇｔｇａａｃａａｇｃａｇｇａｇｇｇｇａａｇｔｃｇｃｔｃｔａｃｇｔｃａａｇｇｇｇｇａａｃｃｇａｔｔａｔｃａａｔｔｔｃｔａｃｇａｃｃｃｃｃｔｇｇｔｇｔｔｃｃｃｔｔｃｃｇａｃｇａｇｔｔｃｇａｔｇｃｃｔｃｃａｔａｔｃｃｃａａｇｔｃａａｃｇａｇａａｇａｔｃａａｃｃａｇｔｃｔｃｔｔｇｃｃｔｔｃａｔｃｃｇｇａａｇｔｃｇｇａｃｇａａｃｔｇｃｔｇｔｃｃｇｃｃａｔｃｇｇｔｇｇｃｔａｔａｔｔｃｃｇｇａａｇｃｃｃｃｃａｇｇｇａｔｇｇａｃａｇｇｃｃｔａｃｇｔｇｃｇｇａａｇｇａｔｇｇａｇａａｔｇｇｇｔｇｃｔｔｔｔｇｔｃｃａｃｃｔｔｃｃｔｇｇｇｃｇｇｔｃｔｇｇｔｇｃｃｃｃｇｃｇｇｃｔｃａｃａｃｃａｔｃａｔｃａｃｃａｃｃａｃｇｇｔｔｃｇｔｇｇｔｃｃｃａｃｃｃｔｃａａｔｔｔｇａｇａａｇｔｇａ
［関連する構成成分（ｂｐ座標）：シグナル配列：１〜７５、ｐｅｐ２７：３２８〜４０８、Ｆ１：４０９〜１５３９、Ｆ２：７６〜３２７、フォールドン：１５５２〜１６３２、トロンビン認識配列：１６３９〜１６５６、Ｈｉｓタグ：１６５７〜１６７４、Ｓｔｒｅｐｔａｇ  ＩＩ：１６８１〜１７０４、リンカー配列：１５４０〜１５５１、１６３３〜１６３８、１６７５〜１６８０、Ｐ１０２Ａ（天然の置換）：３０４〜３０６、Ｉ３７９Ｖ（天然の置換）：１１３５〜１１３７、Ｍ４４７Ｖ（天然の置換）：１３３９〜１３４１、Ｔ５４Ｈ：１６０〜１６２、Ｓ５５Ｃ：１６３〜１６５、Ｌ１４２Ｃ：４２４〜４２６、Ｌ１８８Ｃ：５６２〜５６４、Ｖ２９６Ｉ：８８６〜８８８、Ｎ３７１Ｃ：１１１１〜１１１３］
【０２２５】
配列番号９：ｐＸＣＳ７８０の前駆体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列：
ａｔｇｇａａｃｔｔｃｔｇａｔｃｃｔｇａａａｇｃｃａａｃｇｃｇａｔｔａｃｃａｃｔａｔｃｃｔｇａｃｔｇｃｃｇｔｃａｃｃｔｔｃｔｇｃｔｔｃｇｃａｔｃｇｇｇａｃａｇａａｃａｔｔａｃｃｇａｇｇａｇｔｔｃｔａｃｃａｇｔｃｃａｃｃｔｇｔｔｃｇｇｃｇｇｔｇｔｃｃａａｇｇｇｔｔａｃｃｔｃｔｃｇｇｃｃｃｔｇａｇａａｃｔｇｇｃｔｇｇｔａｃａｃｃｔｇｔｇｔｇａｔｔａｃｔａｔｃｇａｇｃｔｇａｇｃａａｃａｔｃａａｇｇａｇａａｃａａｇｔｇｃａａｔｇｇａａｃｇｇａｃｇｃｇａａｇｇｔｃａａｇｃｔｇａｔｔａａｇｃａｇｇａａｃｔｃｇａｔａａｇｔａｃａａｇａａｃｇｃｃｇｔｇａｃｃｇａｇｃｔｃｃａｇｃｔｇｃｔｇａｔｇｃａａｔｃｇａｃｃｃｃｔｇｃｃａｃｔａａｃａａｃａｇａｇｃｔｃｇｃｃｇｇｇａａｃｔｇｃｃｇｃｇｃｔｔｃａｔｇａａｔｔａｃａｃｃｃｔｃａａｃａａｃｇｃｇａａｇａａａａｃｃａａｃｇｔｇａｃｃｃｔｇｔｃｃａａｇａａｇｃｇｃａａｇｃｇｇａｇｇｔｔｃｃｔｇｇｇａｔｔｃｃｔｇｔｔｇｇｇｃｇｔｇｇｇｃｔｃｃｇｃａａｔｃｇｃａｔｃｃｇｇａｇｔｇｇｃｃｇｔｇｔｃｃａａａｇｔｇｃｔｇｃａｔｃｔｇｇａｇｇｇｇｇａａｇｔｇａａｃａａｇａｔｃａａｇｔｃｃｇｃｃｃｔｃｃｔｇｔｃａａｃｔａａｔａａｇｇｃｇｇｔｇｇｔｇｔｃｃｃｔｇａｇｃａａｃｇｇａｇｔｃａｇｃｇｔｇｔｇｔａｃａｔｃｃａａｇｇｔｃｃｔｇｇａｃｃｔｃａａｇａａｃｔａｃａｔｃｇａｃａａｇｃａｇｃｔｇｔｔｇｃｃｃａｔｃｇｔｃａａｃａａｇｃａｇｔｃａｔｇｃｔｃｇａｔｔａｇｃａａｔａｔｃｇａａａｃｃｇｔｇａｔｔｇａｇｔｔｃｃａｇｃａｇａａｇａａｃａａｃａｇａｃｔｇｃｔｃｇａａａｔｔａｃｃｃｇｇｇａｇｔｔｔｔｃｃｇｔｇａａｃｇｃｃｇｇａｇｔｇａｃｃａｃｔｃｃｔｇｔｇｔｃｃａｃｃｔａｃａｔｇｃｔｔａｃｇａａｃｔｃｃｇａａｃｔｇｃｔｃａｇｃｃｔｃａｔｃａａｃｇａｔａｔｇｃｃｇａｔｃａｃｔａａｃｇａｃｃａｇａａｇａａｇｔｔｇａｔｇａｇｃａａｃａａｔｇｔｇｃａｇａｔｃｇｔｇｃｇｃｃａａｃａｇｔｃｃｔａｃｔｃａａｔｃａｔｇｔｃａａｔｔａｔｃａａｇｇａｇｇａａｇｔｇｃｔｃｇｃｃｔａｔｇｔｇｇｔｇｃａａｔｔｇｃｃｔｃｔｇｔａｃｇｇａｇｔｃａｔｃｇａｃａｃａｃｃｃｔｇｃｔｇｇａａｇｃｔｇｃａｃａｃｔａｇｃｃｃａｃｔｃｔｇｔａｃｇａｃｃａａｃａｃｃａａｇｇａａｇｇｔｔｃｃａａｃａｔｃｔｇｃｃｔｇａｃｔａｇｇａｃｃｇａｔｃｇｇｇｇｃｔｇｇｔａｔｔｇｃｇａｔａａｔｇｃｔｇｇｇｔｃｃｇｔｇａｇｃｔｔｃｔｔｃｃｃｇｃａａｇｃｃｇａｇａｃｔｔｇｃａａａｇｔｇｃａｇｔｃａａａｃｃｇｃｇｔｇｔｔｃｔｇｔｇａｃａｃｃａｔｇａａｃａｇｃｃｔｇａｃｃｃｔｇｃｃａｔｃｃｇａａｇｔｃａａｃｃｔｃｔｇｃａａｃｇｔｇｇａｃａｔｃｔｔｔａａｃｃｃｇａａａｔａｃｇａｃｔｇｃａａｇａｔｔａｔｇａｃｃｔｃｃａａｇａｃｃｇａｃｇｔｃａｇｃａｇｃｔｃｔｇｔｃａｔｃａｃｔａｇｃｃｔｇｇｇａｇｃｔａｔｔｇｔｇｔｃｃｔｇｃｔａｃｇｇａａａｇａｃｃａａａｔｇｃａｃｔｇｃｃｔｃｇａａｃａａｇａａｃａｇａｇｇｃａｔｃａｔｃａａｇａｃｃｔｔｃａｇｃａａｃｇｇｃｔｇｔｇａｃｔａｃｇｔｇｔｃｃａａｃａａｇｇｇａｇｔｇｇａｃａｃｃｇｔｇｔｃｃｇｔｃｇｇｇａａｃａｃｃｃｔｇｔａｃｔａｃｇｔｇａａｃａａｇｃａｇｇａｇｇｇｇａａｇｔｃｇｃｔｃｔａｃｇｔｃａａｇｇｇｇｇａａｃｃｇａｔｔａｔｃａａｔｔｔｃｔａｃｇａｃｃｃｃｃｔｇｇｔｇｔｔｃｃｃｔｔｃｃｔｃｃｇａｇｔｔｃｇａｔｇｃｃｔｃｃａｔａｔｃｃｃａａｇｔｃａａｃｇａｇａａｇａｔｃａａｃｃａｇｔｃｔｃｔｔｇｃｃｔｔｃａｔｃｃｇｇａａｇｔｃｇｇａｃｇａａｃｔｇｃｔｇｔｃｃｇｃｃａｔｃｇｇｔｇｇｃｔａｔａｔｔｃｃｇｇａａｇｃｃｃｃｃａｇｇｇａｔｇｇａｃａｇｇｃｃｔａｃｇｔｇｃｇｇａａｇｇａｔｇｇａｇａａｔｇｇｇｔｇｃｔｔｔｔｇｔｃｃａｃｃｔｔｃｃｔｇｇｇｃｇｇｔｃｔｇｇｔｇｃｃｃｃｇｃｇｇｃｔｃａｃａｃｃａｔｃａｔｃａｃｃａｃｃａｃｇｇｔｔｃｇｔｇｇｔｃｃｃａｃｃｃｔｃａａｔｔｔｇａｇａａｇｔｇａ
［関連する構成成分（ｂｐ座標）：シグナル配列：１〜７５、ｐｅｐ２７：３２８〜４０８、Ｆ１：４０９〜１５３９、Ｆ２：７６〜３２７、フォールドン：１５５２〜１６３２、トロンビン認識配列：１６３９〜１６５６、Ｈｉｓタグ：１６５７〜１６７４、Ｓｔｒｅｐｔａｇ  ＩＩ：１６８１〜１７０４、リンカー配列：１５４０〜１５５１、１６３３〜１６３８、１６７５〜１６８０、Ｐ１０２Ａ（天然の置換）：３０４〜３０６、Ｉ３７９Ｖ（天然の置換）：１１３５〜１１３７、Ｍ４４７Ｖ（天然の置換）：１３３９〜１３４１、Ｓ５５Ｃ：１６３〜１６５、Ｌ１８８Ｃ：５６２〜５６４、Ｄ４８６Ｓ：１４５６〜１４５８］
【０２２６】
配列番号１０：ｐＸＣＳ８３０の前駆体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列：
ａｔｇｇａａｃｔｔｃｔｇａｔｃｃｔｇａａａｇｃｃａａｃｇｃｇａｔｔａｃｃａｃｔａｔｃｃｔｇａｃｔｇｃｃｇｔｃａｃｃｔｔｃｔｇｃｔｔｃｇｃａｔｃｇｇｇａｃａｇａａｃａｔｔａｃｃｇａｇｇａｇｔｔｃｔａｃｃａｇｔｃｃａｃｃｔｇｔｔｃｇｇｃｇｇｔｇｔｃｃａａｇｇｇｔｔａｃｃｔｃｔｃｇｇｃｃｃｔｇａｇａａｃｔｇｇｃｔｇｇｔａｃｃａｃｔｇｔｇｔｇａｔｔａｃｔａｔｃｇａｇｃｔｇａｇｃａａｃａｔｃａａｇｇａｇａａｃａａｇｔｇｃａａｔｇｇａａｃｇｇａｃｇｃｇａａｇｇｔｃａａｇｃｔｇａｔｔａａｇｃａｇｇａａｃｔｃｇａｔａａｇｔａｃａａｇａａｃｇｃｃｇｔｇａｃｃｇａｇｃｔｃｃａｇｃｔｇｃｔｇａｔｇｃａａｔｃｇａｃｃｃｃｔｇｃｃａｃｔａａｃａａｃａｇａｇｃｔｃｇｃｃｇｇｇａａｃｔｇｃｃｇｃｇｃｔｔｃａｔｇａａｔｔａｃａｃｃｃｔｃａａｃａａｃｇｃｇａａｇａａａａｃｃａａｃｇｔｇａｃｃｃｔｇｔｃｃａａｇａａｇｃｇｃａａｇｃｇｇａｇｇｔｔｃｃｔｇｇｇａｔｔｃｃｔｇｔｔｇｇｇｃｇｔｇｇｇｃｔｃｃｇｃａａｔｃｇｃａｔｃｃｇｇａｇｔｇｇｃｃｇｔｇｔｃｃａａａｇｔｇｃｔｇｃａｔｃｔｇｇａｇｇｇｇｇａａｇｔｇａａｃａａｇａｔｃａａｇｔｃｃｇｃｃｃｔｃｃｔｇｔｃａａｃｔａａｔａａｇｇｃｇｇｔｇｇｔｇｔｃｃｃｔｇａｇｃａａｃｇｇａｇｔｃａｇｃｇｔｇｔｇｔａｃａａｔｃａａｇｇｔｃｃｔｇｇａｃｃｔｃａａｇａａｃｔａｃａｔｃｇａｃａａｇｃａｇｃｔｇｔｔｇｃｃｃａｔｃｇｔｃａａｃａａｇｃａｇｔｃａｔｇｃｔｃｇａｔｔａｇｃａａｔａｔｃｇａａａｃｃｇｔｇａｔｔｇａｇｔｔｃｃａｇｃａｇａａｇａａｃａａｃａｇａｃｔｇｃｔｃｇａａａｔｔａｃｃｃｇｇｇａｇｔｔｔｔｃｃｇｔｇａａｃｇｃｃｇｇａｇｔｇａｃｃａｃｔｃｃｔｇｔｇｔｃｃａｃｃｔａｃａｔｇｃｔｔａｃｇａａｃｔｃｃｇａａｃｔｇｃｔｃａｇｃｃｔｃａｔｃａａｃｇａｔａｔｇｃｃｇａｔｃａｃｔａａｃｇａｃｃａｇａａｇａａｇｔｔｇａｔｇａｇｃａａｃａａｔｇｔｇｃａｇａｔｃｇｔｇｃｇｃｃａａｃａｇｔｃｃｔａｃｔｃａａｔｃａｔｇｔｃａａｔｔａｔｃａａｇｇａｇｇａａｇｔｇｃｔｃｇｃｃｔａｔｇｔｇｇｔｇｃａａｔｔｇｃｃｔｃｔｇｔａｃｇｇａｇｔｃａｔｃｇａｃａｃａｃｃｃｔｇｃｔｇｇａａｇｃｔｇｃａｃａｃｔａｇｃｃｃａｃｔｃｔｇｔａｃｇａｃｃａａｃａｃｃａａｇｇａａｇｇｔｔｃｃａａｃａｔｃｔｇｃｃｔｇａｃｔａｇｇａｃｃｇａｔｃｇｇｇｇｃｔｇｇｔａｔｔｇｃｇａｔａａｔｇｃｔｇｇｇｔｃｃｇｔｇａｇｃｔｔｃｔｔｃｃｃｇｃａａｇｃｃｇａｇａｃｔｔｇｃａａａｇｔｇｃａｇｔｃａａａｃｃｇｃｇｔｇｔｔｃｔｇｔｇａｃａｃｃａｔｇａａｃａｇｃｃｔｇａｃｃｃｔｇｃｃａｔｃｃｇａａｇｔｃａａｃｃｔｃｔｇｃａａｃｇｔｇｇａｃａｔｃｔｔｔａａｃｃｃｇａａａｔａｃｇａｃｔｇｃａａｇａｔｔａｔｇａｃｃｔｃｃａａｇａｃｃｇａｃｇｔｃａｇｃａｇｃｔｃｔｇｔｃａｔｃａｃｔａｇｃｃｔｇｇｇａｇｃｔａｔｔｇｔｇｔｃｃｔｇｃｔａｃｇｇａａａｇａｃｃａａａｔｇｃａｃｔｇｃｃｔｃｇａａｃａａｇａａｃａｇａｇｇｃａｔｃａｔｃａａｇａｃｃｔｔｃａｇｃａａｃｇｇｃｔｇｔｇａｃｔａｃｇｔｇｔｃｃａａｃａａｇｇｇａｇｔｇｇａｃａｃｃｇｔｇｔｃｃｇｔｃｇｇｇａａｃａｃｃｃｔｇｔａｃｔａｃｇｔｇａａｃａａｇｃａｇｇａｇｇｇｇａａｇｔｃｇｃｔｃｔａｃｇｔｃａａｇｇｇｇｇａａｃｃｇａｔｔａｔｃａａｔｔｔｃｔａｃｇａｃｃｃｃｃｔｇｇｔｇｔｔｃｃｃｔｔｃｃｇａｃｇａｇｔｔｃｇａｔｇｃｃｔｃｃａｔａｔｃｃｃａａｇｔｃａａｃｇａｇａａｇａｔｃａａｃｃａｇｔｃｔｃｔｔｇｃｃｔｔｃａｔｃｃｇｇａａｇｔｃｇｇａｃｇａａｃｔｇｃｔｇｔｃｃｇｃｃａｔｃｇｇｔｇｇｃｔａｔａｔｔｃｃｇｇａａｇｃｃｃｃｃａｇｇｇａｔｇｇａｃａｇｇｃｃｔａｃｇｔｇｃｇｇａａｇｇａｔｇｇａｇａａｔｇｇｇｔｇｃｔｔｔｔｇｔｃｃａｃｃｔｔｃｃｔｇｇｇｃｇｇｔｃｔｇｇｔｇｃｃｃｃｇｃｇｇｃｔｃａｃａｃｃａｔｃａｔｃａｃｃａｃｃａｃｇｇｔｔｃｇｔｇｇｔｃｃｃａｃｃｃｔｃａａｔｔｔｇａｇａａｇｔｇａ
［関連する構成成分（ｂｐ座標）：シグナル配列：１〜７５、ｐｅｐ２７：３２８〜４０８、Ｆ１：４０９〜１５３９、Ｆ２：７６〜３２７、フォールドン：１５５２〜１６３２、トロンビン認識配列：１６３９〜１６５６、Ｈｉｓタグ：１６５７〜１６７４、Ｓｔｒｅｐｔａｇ  ＩＩ：１６８１〜１７０４、リンカー配列：１５４０〜１５５１、１６３３〜１６３８、１６７５〜１６８０、Ｐ１０２Ａ（天然の置換）：３０４〜３０６、Ｉ３７９Ｖ（天然の置換）：１１３５〜１１３７、Ｍ４４７Ｖ（天然の置換）：１３３９〜１３４１、Ｔ５４Ｈ：１６０〜１６２、Ｓ５５Ｃ：１６３〜１６５、Ｌ１８８Ｃ：５６２〜５６４、Ｓ１９０Ｉ：５６８〜５７０］
【０２２７】
配列番号１１：ｐＸＣＳ８４７の前駆体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列：
ａｔｇｇａａｃｔｔｃｔｇａｔｃｃｔｇａａａｇｃｃａａｃｇｃｇａｔｔａｃｃａｃｔａｔｃｃｔｇａｃｔｇｃｃｇｔｃａｃｃｔｔｃｔｇｃｔｔｃｇｃａｔｃｇｇｇａｃａｇａａｃａｔｔａｃｃｇａｇｇａｇｔｔｃｔａｃｃａｇｔｃｃａｃｃｔｇｔｔｃｇｇｃｇｇｔｇｔｃｃａａｇｇｇｔｔａｃｃｔｃｔｃｇｇｃｃｃｔｇａｇａａｃｔｇｇｃｔｇｇｔａｃａｃｃａｇｃｇｔｇａｔｔａｃｔａｔｃｇａｇｃｔｇａｇｃａａｃａｔｃａａｇｇａｇａａｃａａｇｔｇｃａａｔｇｇａａｃｇｇａｃｇｃｇａａｇｇｔｃａａｇｃｔｇａｔｔａａｇｃａｇｇａａｃｔｃｇａｔａａｇｔａｃａａｇａａｃｇｃｃｇｔｇａｃｃｇａｇｃｔｃｃａｇｃｔｇｃｔｇａｔｇｃａａｔｃｇａｃｃｃｃｔｇｃｃｔｇｔａａｃａａｃａｇａｇｃｔｃｇｃｃｇｇｇａａｃｔｇｃｃｇｃｇｃｔｔｃａｔｇａａｔｔａｃａｃｃｃｔｃａａｃａａｃｇｃｇａａｇａａａａｃｃａａｃｇｔｇａｃｃｃｔｇｔｃｃａａｇａａｇｃｇｃａａｇｃｇｇａｇｇｔｔｃｃｔｇｇｇａｔｔｃｃｔｇｔｔｇｇｇｃｇｔｇｇｇｃｔｃｃｇｃａｔｇｔｇｃａｔｃｃｇｇａｇｔｇｇｃｃｇｔｇｔｃｃａａａｇｔｇｃｔｇｃａｔｃｔｇｇａｇｇｇｇｇａａｇｔｇａａｃａａｇａｔｃａａｇｔｃｃｇｃｃｃｔｃｃｔｇｔｃａａｃｔａａｔａａｇｇｃｇｇｔｇｇｔｇｔｃｃｃｔｇａｇｃａａｃｇｇａｇｔｃａｇｃｇｔｇｃｔｇａｃａａｔｃａａｇｇｔｃｃｔｇｇａｃｃｔｃａａｇａａｃｔａｃａｔｃｇａｃａａｇｃａｇｃｔｇｔｔｇｃｃｃａｔｃｇｔｃａａｃａａｇｃａｇｔｃａｔｇｃｔｃｇａｔｔａｇｃａａｔａｔｃｇａａａｃｃｇｔｇａｔｔｇａｇｔｔｃｃａｇｃａｇａａｇａａｃａａｃａｇａｃｔｇｃｔｃｇａａａｔｔａｃｃｃｇｇｇａｇｔｔｔｔｃｃｇｔｇａａｃｇｃｃｇｇａｇｔｇａｃｃａｃｔｃｃｔｇｔｇｔｃｃａｃｃｔａｃａｔｇｃｔｔａｃｇａａｃｔｃｃｇａａｃｔｇｃｔｃａｇｃｃｔｃａｔｃａａｃｇａｔａｔｇｃｃｇａｔｃａｃｔａａｃｇａｃｃａｇａａｇａａｇｔｔｇａｔｇａｇｃａａｃａａｔｇｔｇｃａｇａｔｃｇｔｇｃｇｃｃａａｃａｇｔｃｃｔａｃｔｃａａｔｃａｔｇｔｃａａｔｔａｔｃａａｇｇａｇｇａａｇｔｇｃｔｃｇｃｃｔａｔｇｔｇｇｔｇｃａａｔｔｇｃｃｔｃｔｇｔａｃｇｇａｇｔｃａｔｃｇａｃａｃａｃｃｃｔｇｃｔｇｇａａｇｃｔｇｃａｃａｃｔａｇｃｃｃａｃｔｃｔｇｔａｃｇａｃｃａａｃａｃｃａａｇｇａａｇｇｔｔｃｃａａｃａｔｃｔｇｃｃｔｇａｃｔａｇｇａｃｃｇａｔｃｇｇｇｇｃｔｇｇｔａｔｔｇｃｇａｔａａｔｇｃｔｇｇｇｔｃｃｇｔｇａｇｃｔｔｃｔｔｃｃｃｇｃａａｇｃｃｇａｇａｃｔｔｇｃａａａｇｔｇｃａｇｔｃａａａｃｃｇｃｇｔｇｔｔｃｔｇｔｇａｃａｃｃａｔｇａａｃａｇｃｃｔｇａｃｃｃｔｇｃｃａｔｃｃｇａａｇｔｃａａｃｃｔｃｔｇｃａａｃｇｔｇｇａｃａｔｃｔｔｔａａｃｃｃｇａａａｔａｃｇａｃｔｇｃａａｇａｔｔａｔｇａｃｃｔｃｃａａｇａｃｃｇａｃｇｔｃａｇｃａｇｃｔｃｔｇｔｃａｔｃａｃｔａｇｃｃｔｇｇｇａｇｃｔａｔｔｇｔｇｔｃｃｔｇｃｔａｃｇｇａａａｇａｃｃａａａｔｇｃａｃｔｇｃｃｔｃｇａａｃａａｇａａｃａｇａｇｇｃａｔｃａｔｃａａｇａｃｃｔｔｃａｇｃａａｃｇｇｃｔｇｔｇａｃｔａｃｇｔｇｔｃｃａａｃａａｇｇｇａｇｔｇｇａｃａｃｃｇｔｇｔｃｃｇｔｃｇｇｇａａｃａｃｃｃｔｇｔａｃｔａｃｇｔｇａａｃａａｇｃａｇｇａｇｇｇｇａａｇｔｃｇｃｔｃｔａｃｇｔｃａａｇｇｇｇｇａａｃｃｇａｔｔａｔｃａａｔｔｔｃｔａｃｇａｃｃｃｃｃｔｇｇｔｇｔｔｃｃｃｔｔｃｃｔｃｃｇａｇｔｔｃｇａｔｇｃｃｔｃｃａｔａｔｃｃｃａａｇｔｃａａｃｇａｇａａｇａｔｃａａｃｃａｇｔｃｔｃｔｔｇｃｃｔｔｃａｔｃｃｇｇａａｇｔｃｇｇａｃｇａａｃｔｇｃｔｇｔｃｃｇｃｃａｔｃｇｇｔｇｇｃｔａｔａｔｔｃｃｇｇａａｇｃｃｃｃｃａｇｇｇａｔｇｇａｃａｇｇｃｃｔａｃｇｔｇｃｇｇａａｇｇａｔｇｇａｇａａｔｇｇｇｔｇｃｔｔｔｔｇｔｃｃａｃｃｔｔｃｃｔｇｇｇｃｇｇｔｃｔｇｇｔｇｃｃｃｃｇｃｇｇｃｔｃａｃａｃｃａｔｃａｔｃａｃｃａｃｃａｃｇｇｔｔｃｇｔｇｇｔｃｃｃａｃｃｃｔｃａａｔｔｔｇａｇａａｇｔｇａ
［関連する構成成分（ｂｐ座標）：シグナル配列：１〜７５、ｐｅｐ２７：３２８〜４０８、Ｆ１：４０９〜１５３９、Ｆ２：７６〜３２７、フォールドン：１５５２〜１６３２、トロンビン認識配列：１６３９〜１６５６、Ｈｉｓタグ：１６５７〜１６７４、Ｓｔｒｅｐｔａｇ  ＩＩ：１６８１〜１７０４、リンカー配列：１５４０〜１５５１、１６３３〜１６３８、１６７５〜１６８０、Ｐ１０２Ａ（天然の置換）：３０４〜３０６、Ｉ３７９Ｖ（天然の置換）：１１３５〜１１３７、Ｍ４４７Ｖ（天然の置換）：１３３９〜１３４１、Ｔ１０３Ｃ：３０７〜３０９、Ｉ１４８Ｃ：４４２〜４４４、Ｓ１９０Ｉ：５６８〜５７０、Ｄ４８６Ｓ：１４５６〜１４５８］
【０２２８】
配列番号１２：ｐＸＣＳ８５１の前駆体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列：
ａｔｇｇａａｃｔｔｃｔｇａｔｃｃｔｇａａａｇｃｃａａｃｇｃｇａｔｔａｃｃａｃｔａｔｃｃｔｇａｃｔｇｃｃｇｔｃａｃｃｔｔｃｔｇｃｔｔｃｇｃａｔｃｇｇｇａｃａｇａａｃａｔｔａｃｃｇａｇｇａｇｔｔｃｔａｃｃａｇｔｃｃａｃｃｔｇｔｔｃｇｇｃｇｇｔｇｔｃｃａａｇｇｇｔｔａｃｃｔｃｔｃｇｇｃｃｃｔｇａｇａａｃｔｇｇｃｔｇｇｔａｃｃａｃａｇｃｇｔｇａｔｔａｃｔａｔｃｇａｇｃｔｇａｇｃａａｃａｔｃａａｇｇａｇａａｃａａｇｔｇｃａａｔｇｇａａｃｇｇａｃｇｃｇａａｇｇｔｃａａｇｃｔｇａｔｔａａｇｃａｇｇａａｃｔｃｇａｔａａｇｔａｃａａｇａａｃｇｃｃｇｔｇａｃｃｇａｇｃｔｃｃａｇｃｔｇｃｔｇａｔｇｃａａｔｃｇａｃｃｃｃｔｇｃｃｔｇｔａａｃａａｃａｇａｇｃｔｃｇｃｃｇｇｇａａｃｔｇｃｃｇｃｇｃｔｔｃａｔｇａａｔｔａｃａｃｃｃｔｃａａｃａａｃｇｃｇａａｇａａａａｃｃａａｃｇｔｇａｃｃｃｔｇｔｃｃａａｇａａｇｃｇｃａａｇｃｇｇａｇｇｔｔｃｃｔｇｇｇａｔｔｃｃｔｇｔｔｇｇｇｃｇｔｇｇｇｃｔｃｃｇｃａｔｇｔｇｃａｔｃｃｇｇａｇｔｇｇｃｃｇｔｇｔｃｃａａａｇｔｇｃｔｇｃａｔｃｔｇｇａｇｇｇｇｇａａｇｔｇａａｃａａｇａｔｃａａｇｔｃｃｇｃｃｃｔｃｃｔｇｔｃａａｃｔａａｔａａｇｇｃｇｇｔｇｇｔｇｔｃｃｃｔｇａｇｃａａｃｇｇａｇｔｃａｇｃｇｔｇｃｔｇａｃａａｔｃａａｇｇｔｃｃｔｇｇａｃｃｔｃａａｇａａｃｔａｃａｔｃｇａｃａａｇｃａｇｃｔｇｔｔｇｃｃｃａｔｃｇｔｃａａｃａａｇｃａｇｔｃａｔｇｃｔｃｇａｔｔａｇｃａａｔａｔｃｇａａａｃｃｇｔｇａｔｔｇａｇｔｔｃｃａｇｃａｇａａｇａａｃａａｃａｇａｃｔｇｃｔｃｇａａａｔｔａｃｃｃｇｇｇａｇｔｔｔｔｃｃｇｔｇａａｃｇｃｃｇｇａｇｔｇａｃｃａｃｔｃｃｔｇｔｇｔｃｃａｃｃｔａｃａｔｇｃｔｔａｃｇａａｃｔｃｃｇａａｃｔｇｃｔｃａｇｃｃｔｃａｔｃａａｃｇａｔａｔｇｃｃｇａｔｃａｃｔａａｃｇａｃｃａｇａａｇａａｇｔｔｇａｔｇａｇｃａａｃａａｔｇｔｇｃａｇａｔｃｇｔｇｃｇｃｃａａｃａｇｔｃｃｔａｃｔｃａａｔｃａｔｇｔｃａａｔｔａｔｃａａｇｇａｇｇａａａｔｃｃｔｃｇｃｃｔａｔｇｔｇｇｔｇｃａａｔｔｇｃｃｔｃｔｇｔａｃｇｇａｇｔｃａｔｃｇａｃａｃａｃｃｃｔｇｃｔｇｇａａｇｃｔｇｃａｃａｃｔａｇｃｃｃａｃｔｃｔｇｔａｃｇａｃｃａａｃａｃｃａａｇｇａａｇｇｔｔｃｃａａｃａｔｃｔｇｃｃｔｇａｃｔａｇｇａｃｃｇａｔｃｇｇｇｇｃｔｇｇｔａｔｔｇｃｇａｔａａｔｇｃｔｇｇｇｔｃｃｇｔｇａｇｃｔｔｃｔｔｃｃｃｇｃａａｇｃｃｇａｇａｃｔｔｇｃａａａｇｔｇｃａｇｔｃａａａｃｃｇｃｇｔｇｔｔｃｔｇｔｇａｃａｃｃａｔｇａａｃａｇｃｃｔｇａｃｃｃｔｇｃｃａｔｃｃｇａａｇｔｃａａｃｃｔｃｔｇｃａａｃｇｔｇｇａｃａｔｃｔｔｔａａｃｃｃｇａａａｔａｃｇａｃｔｇｃａａｇａｔｔａｔｇａｃｃｔｃｃａａｇａｃｃｇａｃｇｔｃａｇｃａｇｃｔｃｔｇｔｃａｔｃａｃｔａｇｃｃｔｇｇｇａｇｃｔａｔｔｇｔｇｔｃｃｔｇｃｔａｃｇｇａａａｇａｃｃａａａｔｇｃａｃｔｇｃｃｔｃｇａａｃａａｇａａｃａｇａｇｇｃａｔｃａｔｃａａｇａｃｃｔｔｃａｇｃａａｃｇｇｃｔｇｔｇａｃｔａｃｇｔｇｔｃｃａａｃａａｇｇｇａｇｔｇｇａｃａｃｃｇｔｇｔｃｃｇｔｃｇｇｇａａｃａｃｃｃｔｇｔａｃｔａｃｇｔｇａａｃａａｇｃａｇｇａｇｇｇｇａａｇｔｃｇｃｔｃｔａｃｇｔｃａａｇｇｇｇｇａａｃｃｇａｔｔａｔｃａａｔｔｔｃｔａｃｇａｃｃｃｃｃｔｇｇｔｇｔｔｃｃｃｔｔｃｃｔｃｃｇａｇｔｔｃｇａｔｇｃｃｔｃｃａｔａｔｃｃｃａａｇｔｃａａｃｇａｇａａｇａｔｃａａｃｃａｇｔｃｔｃｔｔｇｃｃｔｔｃａｔｃｃｇｇａａｇｔｃｇｇａｃｇａａｃｔｇｃｔｇｔｃｃｇｃｃａｔｃｇｇｔｇｇｃｔａｔａｔｔｃｃｇｇａａｇｃｃｃｃｃａｇｇｇａｔｇｇａｃａｇｇｃｃｔａｃｇｔｇｃｇｇａａｇｇａｔｇｇａｇａａｔｇｇｇｔｇｃｔｔｔｔｇｔｃｃａｃｃｔｔｃｃｔｇｇｇｃｇｇｔｃｔｇｇｔｇｃｃｃｃｇｃｇｇｃｔｃａｃａｃｃａｔｃａｔｃａｃｃａｃｃａｃｇｇｔｔｃｇｔｇｇｔｃｃｃａｃｃｃｔｃａａｔｔｔｇａｇａａｇｔｇａ
［関連する構成成分（ｂｐ座標）：シグナル配列：１〜７５、ｐｅｐ２７：３２８〜４０８、Ｆ１：４０９〜１５３９、Ｆ２：７６〜３２７、フォールドン：１５５２〜１６３２、トロンビン認識配列：１６３９〜１６５６、Ｈｉｓタグ：１６５７〜１６７４、Ｓｔｒｅｐｔａｇ  ＩＩ：１６８１〜１７０４、リンカー配列：１５４０〜１５５１、１６３３〜１６３８、１６７５〜１６８０、Ｐ１０２Ａ（天然の置換）：３０４〜３０６、Ｉ３７９Ｖ（天然の置換）：１１３５〜１１３７、Ｍ４４７Ｖ（天然の置換）：１３３９〜１３４１、Ｔ５４Ｈ：１６０〜１６２、Ｔ１０３Ｃ：３０７〜３０９、Ｉ１４８Ｃ：４４２〜４４４、Ｓ１９０Ｉ：５６８〜５７０、Ｖ２９６Ｉ：８８６〜８８８、Ｄ４８６Ｓ：１４５６〜１４５８］
【０２２９】
配列番号１３：ｐＸＣＳ８５２の前駆体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列：
ａｔｇｇａａｃｔｔｃｔｇａｔｃｃｔｇａａａｇｃｃａａｃｇｃｇａｔｔａｃｃａｃｔａｔｃｃｔｇａｃｔｇｃｃｇｔｃａｃｃｔｔｃｔｇｃｔｔｃｇｃａｔｃｇｇｇａｃａｇａａｃａｔｔａｃｃｇａｇｇａｇｔｔｃｔａｃｃａｇｔｃｃａｃｃｔｇｔｔｃｇｇｃｇｇｔｇｔｃｃａａｇｇｇｔｔａｃｃｔｃｔｃｇｇｃｃｃｔｇａｇａａｃｔｇｇｃｔｇｇｔａｃｃａｃｔｇｔｇｔｇａｔｔａｃｔａｔｃｇａｇｃｔｇａｇｃａａｃａｔｃａａｇｇａｇａａｃａａｇｔｇｃａａｔｇｇａａｃｇｇａｃｇｃｇａａｇｇｔｃａａｇｃｔｇａｔｔａａｇｃａｇｇａａｃｔｃｇａｔａａｇｔａｃａａｇａａｃｇｃｃｇｔｇａｃｃｇａｇｃｔｃｃａｇｃｔｇｃｔｇａｔｇｃａａｔｃｇａｃｃｃｃｔｇｃｃａｃｔａａｃａａｃａｇａｇｃｔｃｇｃｃｇｇｇａａｃｔｇｃｃｇｃｇｃｔｔｃａｔｇａａｔｔａｃａｃｃｃｔｃａａｃａａｃｇｃｇａａｇａａａａｃｃａａｃｇｔｇａｃｃｃｔｇｔｃｃａａｇａａｇｃｇｃａａｇｃｇｇａｇｇｔｔｃｃｔｇｇｇａｔｔｃｃｔｇｔｔｇｇｇｃｇｔｇｇｇｃｔｃｃｇｃａａｔｃｇｃａｔｃｃｇｇａｇｔｇｇｃｃｇｔｇｔｃｃａａａｇｔｇｃｔｇｃａｔｃｔｇｇａｇｇｇｇｇａａｇｔｇａａｃａａｇａｔｃａａｇｔｃｃｇｃｃｃｔｃｃｔｇｔｃａａｃｔａａｔａａｇｇｃｇｇｔｇｇｔｇｔｃｃｃｔｇａｇｃａａｃｇｇａｇｔｃａｇｃｇｔｇｔｇｔａｃａｔｃｃａａｇｇｔｃｃｔｇｇａｃｃｔｃａａｇａａｃｔａｃａｔｃｇａｃａａｇｃａｇｃｔｇｔｔｇｃｃｃａｔｃｇｔｃａａｃａａｇｃａｇｔｃａｔｇｃｔｃｇａｔｔａｇｃａａｔａｔｃｇａａａｃｃｇｔｇａｔｔｇａｇｔｔｃｃａｇｃａｇａａｇａａｃａａｃａｇａｃｔｇｃｔｃｇａａａｔｔａｃｃｃｇｇｇａｇｔｔｔｔｃｃｇｔｇａａｃｇｃｃｇｇａｇｔｇａｃｃａｃｔｃｃｔｇｔｇｔｃｃａｃｃｔａｃａｔｇｃｔｔａｃｇａａｃｔｃｃｇａａｃｔｇｃｔｃａｇｃｃｔｃａｔｃａａｃｇａｔａｔｇｃｃｇａｔｃａｃｔａａｃｇａｃｃａｇａａｇａａｇｔｔｇａｔｇａｇｃａａｃａａｔｇｔｇｃａｇａｔｃｇｔｇｃｇｃｃａａｃａｇｔｃｃｔａｃｔｃａａｔｃａｔｇｔｃａａｔｔａｔｃａａｇｇａｇｇａａｇｔｇｃｔｃｇｃｃｔａｔｇｔｇｇｔｇｃａａｔｔｇｃｃｔｃｔｇｔａｃｇｇａｇｔｃａｔｃｇａｃａｃａｃｃｃｔｇｃｔｇｇａａｇｃｔｇｃａｃａｃｔａｇｃｃｃａｃｔｃｔｇｔａｃｇａｃｃａａｃａｃｃａａｇｇａａｇｇｔｔｃｃａａｃａｔｃｔｇｃｃｔｇａｃｔａｇｇａｃｃｇａｔｃｇｇｇｇｃｔｇｇｔａｔｔｇｃｇａｔａａｔｇｃｔｇｇｇｔｃｃｇｔｇａｇｃｔｔｃｔｔｃｃｃｇｃａａｇｃｃｇａｇａｃｔｔｇｃａａａｇｔｇｃａｇｔｃａａａｃｃｇｃｇｔｇｔｔｃｔｇｔｇａｃａｃｃａｔｇａａｃａｇｃｃｔｇａｃｃｃｔｇｃｃａｔｃｃｇａａｇｔｃａａｃｃｔｃｔｇｃａａｃｇｔｇｇａｃａｔｃｔｔｔａａｃｃｃｇａａａｔａｃｇａｃｔｇｃａａｇａｔｔａｔｇａｃｃｔｃｃａａｇａｃｃｇａｃｇｔｃａｇｃａｇｃｔｃｔｇｔｃａｔｃａｃｔａｇｃｃｔｇｇｇａｇｃｔａｔｔｇｔｇｔｃｃｔｇｃｔａｃｇｇａａａｇａｃｃａａａｔｇｃａｃｔｇｃｃｔｃｇａａｃａａｇａａｃａｇａｇｇｃａｔｃａｔｃａａｇａｃｃｔｔｃａｇｃａａｃｇｇｃｔｇｔｇａｃｔａｃｇｔｇｔｃｃａａｃａａｇｇｇａｇｔｇｇａｃａｃｃｇｔｇｔｃｃｇｔｃｇｇｇａａｃａｃｃｃｔｇｔａｃｔａｃｇｔｇａａｃａａｇｃａｇｇａｇｇｇｇａａｇｔｃｇｃｔｃｔａｃｇｔｃａａｇｇｇｇｇａａｃｃｇａｔｔａｔｃａａｔｔｔｃｔａｃｇａｃｃｃｃｃｔｇｇｔｇｔｔｃｃｃｔｔｃｃｔｃｃｇａｇｔｔｃｇａｔｇｃｃｔｃｃａｔａｔｃｃｃａａｇｔｃａａｃｇａｇａａｇａｔｃａａｃｃａｇｔｃｔｃｔｔｇｃｃｔｔｃａｔｃｃｇｇａａｇｔｃｇｇａｃｇａａｃｔｇｃｔｇｔｃｃｇｃｃａｔｃｇｇｔｇｇｃｔａｔａｔｔｃｃｇｇａａｇｃｃｃｃｃａｇｇｇａｔｇｇａｃａｇｇｃｃｔａｃｇｔｇｃｇｇａａｇｇａｔｇｇａｇａａｔｇｇｇｔｇｃｔｔｔｔｇｔｃｃａｃｃｔｔｃｃｔｇｇｇｃｇｇｔｃｔｇｇｔｇｃｃｃｃｇｃｇｇｃｔｃａｃａｃｃａｔｃａｔｃａｃｃａｃｃａｃｇｇｔｔｃｇｔｇｇｔｃｃｃａｃｃｃｔｃａａｔｔｔｇａｇａａｇｔｇａ
［関連する構成成分（ｂｐ座標）：シグナル配列：１〜７５、ｐｅｐ２７：３２８〜４０８、Ｆ１：４０９〜１５３９（未変性ＲＳＶ  Ｆ配列を含むのみ）、Ｆ２：７６〜３２７、フォールドン：１５５２〜１６３２、トロンビン認識配列：１６３９〜１６５６、Ｈｉｓタグ：１６５７〜１６７４、Ｓｔｒｅｐｔａｇ  ＩＩ：１６８１〜１７０４、リンカー配列：１５４０〜１５５１、１６３３〜１６３８、１６７５〜１６８０、Ｐ１０２Ａ（天然の置換）：３０４〜３０６、Ｉ３７９Ｖ（天然の置換）：１１３５〜１１３７、Ｍ４４７Ｖ（天然の置換）：１３３９〜１３４１、Ｔ５４Ｈ：１６０〜１６２、Ｓ５５Ｃ：１６３〜１６５、Ｌ１８８Ｃ：５６２〜５６４、Ｄ４８６Ｓ：１４５６〜１４５８］
【０２３０】
配列番号１４：ｐＸＣＳ８５３の前駆体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列：
ａｔｇｇａａｃｔｔｃｔｇａｔｃｃｔｇａａａｇｃｃａａｃｇｃｇａｔｔａｃｃａｃｔａｔｃｃｔｇａｃｔｇｃｃｇｔｃａｃｃｔｔｃｔｇｃｔｔｃｇｃａｔｃｇｇｇａｃａｇａａｃａｔｔａｃｃｇａｇｇａｇｔｔｃｔａｃｃａｇｔｃｃａｃｃｔｇｔｔｃｇｇｃｇｇｔｇｔｃｃａａｇｇｇｔｔａｃｃｔｃｔｃｇｇｃｃｃｔｇａｇａａｃｔｇｇｃｔｇｇｔａｃａｃｃｔｇｔｇｔｇａｔｔａｃｔａｔｃｇａｇｃｔｇａｇｃａａｃａｔｃａａｇｇａｇａａｃａａｇｔｇｃａａｔｇｇａａｃｇｇａｃｇｃｇａａｇｇｔｃａａｇｃｔｇａｔｔａａｇｃａｇｇａａｃｔｃｇａｔａａｇｔａｃａａｇａａｃｇｃｃｇｔｇａｃｃｇａｇｃｔｃｃａｇｃｔｇｃｔｇａｔｇｃａａｔｃｇａｃｃｃｃｔｇｃｃａｃｔａａｃａａｃａｇａｇｃｔｃｇｃｃｇｇｇａａｃｔｇｃｃｇｃｇｃｔｔｃａｔｇａａｔｔａｃａｃｃｃｔｃａａｃａａｃｇｃｇａａｇａａａａｃｃａａｃｇｔｇａｃｃｃｔｇｔｃｃａａｇａａｇｃｇｃａａｇｃｇｇａｇｇｔｔｃｃｔｇｇｇａｔｔｃｃｔｇｔｔｇｇｇｃｇｔｇｇｇｃｔｃｃｇｃａａｔｃｇｃａｔｃｃｇｇａｇｔｇｇｃｃｇｔｇｔｃｃａａａｇｔｇｃｔｇｃａｔｃｔｇｇａｇｇｇｇｇａａｇｔｇａａｃａａｇａｔｃａａｇｔｃｃｇｃｃｃｔｃｃｔｇｔｃａａｃｔａａｔａａｇｇｃｇｇｔｇｇｔｇｔｃｃｃｔｇａｇｃａａｃｇｇａｇｔｃａｇｃｇｔｇｔｇｔａｃａａｔｃａａｇｇｔｃｃｔｇｇａｃｃｔｃａａｇａａｃｔａｃａｔｃｇａｃａａｇｃａｇｃｔｇｔｔｇｃｃｃａｔｃｇｔｃａａｃａａｇｃａｇｔｃａｔｇｃｔｃｇａｔｔａｇｃａａｔａｔｃｇａａａｃｃｇｔｇａｔｔｇａｇｔｔｃｃａｇｃａｇａａｇａａｃａａｃａｇａｃｔｇｃｔｃｇａａａｔｔａｃｃｃｇｇｇａｇｔｔｔｔｃｃｇｔｇａａｃｇｃｃｇｇａｇｔｇａｃｃａｃｔｃｃｔｇｔｇｔｃｃａｃｃｔａｃａｔｇｃｔｔａｃｇａａｃｔｃｃｇａａｃｔｇｃｔｃａｇｃｃｔｃａｔｃａａｃｇａｔａｔｇｃｃｇａｔｃａｃｔａａｃｇａｃｃａｇａａｇａａｇｔｔｇａｔｇａｇｃａａｃａａｔｇｔｇｃａｇａｔｃｇｔｇｃｇｃｃａａｃａｇｔｃｃｔａｃｔｃａａｔｃａｔｇｔｃａａｔｔａｔｃａａｇｇａｇｇａａｇｔｇｃｔｃｇｃｃｔａｔｇｔｇｇｔｇｃａａｔｔｇｃｃｔｃｔｇｔａｃｇｇａｇｔｃａｔｃｇａｃａｃａｃｃｃｔｇｃｔｇｇａａｇｃｔｇｃａｃａｃｔａｇｃｃｃａｃｔｃｔｇｔａｃｇａｃｃａａｃａｃｃａａｇｇａａｇｇｔｔｃｃａａｃａｔｃｔｇｃｃｔｇａｃｔａｇｇａｃｃｇａｔｃｇｇｇｇｃｔｇｇｔａｔｔｇｃｇａｔａａｔｇｃｔｇｇｇｔｃｃｇｔｇａｇｃｔｔｃｔｔｃｃｃｇｃａａｇｃｃｇａｇａｃｔｔｇｃａａａｇｔｇｃａｇｔｃａａａｃｃｇｃｇｔｇｔｔｃｔｇｔｇａｃａｃｃａｔｇａａｃａｇｃｃｔｇａｃｃｃｔｇｃｃａｔｃｃｇａａｇｔｃａａｃｃｔｃｔｇｃａａｃｇｔｇｇａｃａｔｃｔｔｔａａｃｃｃｇａａａｔａｃｇａｃｔｇｃａａｇａｔｔａｔｇａｃｃｔｃｃａａｇａｃｃｇａｃｇｔｃａｇｃａｇｃｔｃｔｇｔｃａｔｃａｃｔａｇｃｃｔｇｇｇａｇｃｔａｔｔｇｔｇｔｃｃｔｇｃｔａｃｇｇａａａｇａｃｃａａａｔｇｃａｃｔｇｃｃｔｃｇａａｃａａｇａａｃａｇａｇｇｃａｔｃａｔｃａａｇａｃｃｔｔｃａｇｃａａｃｇｇｃｔｇｔｇａｃｔａｃｇｔｇｔｃｃａａｃａａｇｇｇａｇｔｇｇａｃａｃｃｇｔｇｔｃｃｇｔｃｇｇｇａａｃａｃｃｃｔｇｔａｃｔａｃｇｔｇａａｃａａｇｃａｇｇａｇｇｇｇａａｇｔｃｇｃｔｃｔａｃｇｔｃａａｇｇｇｇｇａａｃｃｇａｔｔａｔｃａａｔｔｔｃｔａｃｇａｃｃｃｃｃｔｇｇｔｇｔｔｃｃｃｔｔｃｃｔｃｃｇａｇｔｔｃｇａｔｇｃｃｔｃｃａｔａｔｃｃｃａａｇｔｃａａｃｇａｇａａｇａｔｃａａｃｃａｇｔｃｔｃｔｔｇｃｃｔｔｃａｔｃｃｇｇａａｇｔｃｇｇａｃｇａａｃｔｇｃｔｇｔｃｃｇｃｃａｔｃｇｇｔｇｇｃｔａｔａｔｔｃｃｇｇａａｇｃｃｃｃｃａｇｇｇａｔｇｇａｃａｇｇｃｃｔａｃｇｔｇｃｇｇａａｇｇａｔｇｇａｇａａｔｇｇｇｔｇｃｔｔｔｔｇｔｃｃａｃｃｔｔｃｃｔｇｇｇｃｇｇｔｃｔｇｇｔｇｃｃｃｃｇｃｇｇｃｔｃａｃａｃｃａｔｃａｔｃａｃｃａｃｃａｃｇｇｔｔｃｇｔｇｇｔｃｃｃａｃｃｃｔｃａａｔｔｔｇａｇａａｇｔｇａ
［関連する構成成分（ｂｐ座標）：シグナル配列：１〜７５、ｐｅｐ２７：３２８〜４０８、Ｆ１：４０９〜１５３９、Ｆ２：７６〜３２７、フォールドン：１５５２〜１６３２、トロンビン認識配列：１６３９〜１６５６、Ｈｉｓタグ：１６５７〜１６７４、Ｓｔｒｅｐｔａｇ  ＩＩ：１６８１〜１７０４、リンカー配列：１５４０〜１５５１、１６３３〜１６３８、１６７５〜１６８０、Ｐ１０２Ａ（天然の置換）：３０４〜３０６、Ｉ３７９Ｖ（天然の置換）：１１３５〜１１３７、Ｍ４４７Ｖ（天然の置換）：１３３９〜１３４１、Ｓ５５Ｃ：１６３〜１６５、Ｌ１８８Ｃ：５６２〜５６４、Ｓ１９０Ｉ：５６８〜５７０、Ｄ４８６Ｓ：１４５６〜１４５８］
【０２３１】
配列番号１５：ｐＸＣＳ８５５の前駆体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列：
ａｔｇｇａａｃｔｔｃｔｇａｔｃｃｔｇａａａｇｃｃａａｃｇｃｇａｔｔａｃｃａｃｔａｔｃｃｔｇａｃｔｇｃｃｇｔｃａｃｃｔｔｃｔｇｃｔｔｃｇｃａｔｃｇｇｇａｃａｇａａｃａｔｔａｃｃｇａｇｇａｇｔｔｃｔａｃｃａｇｔｃｃａｃｃｔｇｔｔｃｇｇｃｇｇｔｇｔｃｃａａｇｇｇｔｔａｃｃｔｃｔｃｇｇｃｃｃｔｇａｇａａｃｔｇｇｃｔｇｇｔａｃｃａｃｔｇｔｇｔｇａｔｔａｃｔａｔｃｇａｇｃｔｇａｇｃａａｃａｔｃａａｇｇａｇａａｃａａｇｔｇｃａａｔｇｇａａｃｇｇａｃｇｃｇａａｇｇｔｃａａｇｃｔｇａｔｔａａｇｃａｇｇａａｃｔｃｇａｔａａｇｔａｃａａｇａａｃｇｃｃｇｔｇａｃｃｇａｇｃｔｃｃａｇｃｔｇｃｔｇａｔｇｃａａｔｃｇａｃｃｃｃｔｇｃｃａｃｔａａｃａａｃａｇａｇｃｔｃｇｃｃｇｇｇａａｃｔｇｃｃｇｃｇｃｔｔｃａｔｇａａｔｔａｃａｃｃｃｔｃａａｃａａｃｇｃｇａａｇａａａａｃｃａａｃｇｔｇａｃｃｃｔｇｔｃｃａａｇａａｇｃｇｃａａｇｃｇｇａｇｇｔｔｃｃｔｇｇｇａｔｔｃｃｔｇｔｔｇｇｇｃｇｔｇｇｇｃｔｃｃｇｃａａｔｃｇｃａｔｃｃｇｇａｇｔｇｇｃｃｇｔｇｔｃｃａａａｇｔｇｃｔｇｃａｔｃｔｇｇａｇｇｇｇｇａａｇｔｇａａｃａａｇａｔｃａａｇｔｃｃｇｃｃｃｔｃｃｔｇｔｃａａｃｔａａｔａａｇｇｃｇｇｔｇｇｔｇｔｃｃｃｔｇａｇｃａａｃｇｇａｇｔｃａｇｃｇｔｇｔｇｔａｃａａｔｃａａｇｇｔｃｃｔｇｇａｃｃｔｃａａｇａａｃｔａｃａｔｃｇａｃａａｇｃａｇｃｔｇｔｔｇｃｃｃａｔｃｇｔｃａａｃａａｇｃａｇｔｃａｔｇｃｔｃｇａｔｔａｇｃａａｔａｔｃｇａａａｃｃｇｔｇａｔｔｇａｇｔｔｃｃａｇｃａｇａａｇａａｃａａｃａｇａｃｔｇｃｔｃｇａａａｔｔａｃｃｃｇｇｇａｇｔｔｔｔｃｃｇｔｇａａｃｇｃｃｇｇａｇｔｇａｃｃａｃｔｃｃｔｇｔｇｔｃｃａｃｃｔａｃａｔｇｃｔｔａｃｇａａｃｔｃｃｇａａｃｔｇｃｔｃａｇｃｃｔｃａｔｃａａｃｇａｔａｔｇｃｃｇａｔｃａｃｔａａｃｇａｃｃａｇａａｇａａｇｔｔｇａｔｇａｇｃａａｃａａｔｇｔｇｃａｇａｔｃｇｔｇｃｇｃｃａａｃａｇｔｃｃｔａｃｔｃａａｔｃａｔｇｔｃａａｔｔａｔｃａａｇｇａｇｇａａｇｔｇｃｔｃｇｃｃｔａｔｇｔｇｇｔｇｃａａｔｔｇｃｃｔｃｔｇｔａｃｇｇａｇｔｃａｔｃｇａｃａｃａｃｃｃｔｇｃｔｇｇａａｇｃｔｇｃａｃａｃｔａｇｃｃｃａｃｔｃｔｇｔａｃｇａｃｃａａｃａｃｃａａｇｇａａｇｇｔｔｃｃａａｃａｔｃｔｇｃｃｔｇａｃｔａｇｇａｃｃｇａｔｃｇｇｇｇｃｔｇｇｔａｔｔｇｃｇａｔａａｔｇｃｔｇｇｇｔｃｃｇｔｇａｇｃｔｔｃｔｔｃｃｃｇｃａａｇｃｃｇａｇａｃｔｔｇｃａａａｇｔｇｃａｇｔｃａａａｃｃｇｃｇｔｇｔｔｃｔｇｔｇａｃａｃｃａｔｇａａｃａｇｃｃｔｇａｃｃｃｔｇｃｃａｔｃｃｇａａｇｔｃａａｃｃｔｃｔｇｃａａｃｇｔｇｇａｃａｔｃｔｔｔａａｃｃｃｇａａａｔａｃｇａｃｔｇｃａａｇａｔｔａｔｇａｃｃｔｃｃａａｇａｃｃｇａｃｇｔｃａｇｃａｇｃｔｃｔｇｔｃａｔｃａｃｔａｇｃｃｔｇｇｇａｇｃｔａｔｔｇｔｇｔｃｃｔｇｃｔａｃｇｇａａａｇａｃｃａａａｔｇｃａｃｔｇｃｃｔｃｇａａｃａａｇａａｃａｇａｇｇｃａｔｃａｔｃａａｇａｃｃｔｔｃａｇｃａａｃｇｇｃｔｇｔｇａｃｔａｃｇｔｇｔｃｃａａｃａａｇｇｇａｇｔｇｇａｃａｃｃｇｔｇｔｃｃｇｔｃｇｇｇａａｃａｃｃｃｔｇｔａｃｔａｃｇｔｇａａｃａａｇｃａｇｇａｇｇｇｇａａｇｔｃｇｃｔｃｔａｃｇｔｃａａｇｇｇｇｇａａｃｃｇａｔｔａｔｃａａｔｔｔｃｔａｃｇａｃｃｃｃｃｔｇｇｔｇｔｔｃｃｃｔｔｃｃｔｃｃｇａｇｔｔｃｇａｔｇｃｃｔｃｃａｔａｔｃｃｃａａｇｔｃａａｃｇａｇａａｇａｔｃａａｃｃａｇｔｃｔｃｔｔｇｃｃｔｔｃａｔｃｃｇｇａａｇｔｃｇｇａｃｇａａｃｔｇｃｔｇｔｃｃｇｃｃａｔｃｇｇｔｇｇｃｔａｔａｔｔｃｃｇｇａａｇｃｃｃｃｃａｇｇｇａｔｇｇａｃａｇｇｃｃｔａｃｇｔｇｃｇｇａａｇｇａｔｇｇａｇａａｔｇｇｇｔｇｃｔｔｔｔｇｔｃｃａｃｃｔｔｃｃｔｇｇｇｃｇｇｔｃｔｇｇｔｇｃｃｃｃｇｃｇｇｃｔｃａｃａｃｃａｔｃａｔｃａｃｃａｃｃａｃｇｇｔｔｃｇｔｇｇｔｃｃｃａｃｃｃｔｃａａｔｔｔｇａｇａａｇｔｇａ
［関連する特徴（ｂｐ座標）：シグナル配列：１〜７５、ｐｅｐ２７：３２８〜４０８、Ｆ１：４０９〜１５３９、Ｆ２：７６〜３２７、フォールドン：１５５２〜１６３２、トロンビン認識配列：１６３９〜１６５６、Ｈｉｓタグ：１６５７〜１６７４、Ｓｔｒｅｐｔａｇ  ＩＩ：１６８１〜１７０４、リンカー配列：１５４０〜１５５１、１６３３〜１６３８、１６７５〜１６８０、Ｐ１０２Ａ（天然の置換）：３０４〜３０６、Ｉ３７９Ｖ（天然の置換）：１１３５〜１１３７、Ｍ４４７Ｖ（天然の置換）：１３３９〜１３４１、Ｔ５４Ｈ：１６０〜１６２、Ｓ５５Ｃ：１６３〜１６５、Ｌ１８８Ｃ：５６２〜５６４、Ｓ１９０Ｉ：５６８〜５７０、Ｄ４８６Ｓ：１４５６〜１４５８］
【０２３２】
配列番号１６：ｐＸＣＳ８７４の前駆体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列：
ａｔｇｇａａｃｔｔｃｔｇａｔｃｃｔｇａａａｇｃｃａａｃｇｃｇａｔｔａｃｃａｃｔａｔｃｃｔｇａｃｔｇｃｃｇｔｃａｃｃｔｔｃｔｇｃｔｔｃｇｃａｔｃｇｇｇａｃａｇａａｃａｔｔａｃｃｇａｇｇａｇｔｔｃｔａｃｃａｇｔｃｃａｃｃｔｇｔｔｃｇｇｃｇｇｔｇｔｃｃａａｇｇｇｔｔａｃｃｔｃｔｃｇｇｃｃｃｔｇａｇａａｃｔｇｇｃｔｇｇｔａｃａｃｃａｇｃｇｔｇａｔｔａｃｔａｔｃｇａｇｃｔｇａｇｃａａｃａｔｃａａｇｇａｇａａｃａａｇｔｇｃａａｔｇｇａａｃｇｇａｃｇｃｇａａｇｇｔｃａａｇｃｔｇａｔｔａａｇｃａｇｇａａｃｔｃｇａｔａａｇｔａｃａａｇａａｃｇｃｃｇｔｇａｃｃｇａｇｃｔｃｃａｇｃｔｇｃｔｇａｔｇｃａａｔｃｇａｃｃｃｃｔｇｃｃａｃｔａａｃａａｃａｇａｇｃｔｃｇｃｃｇｇｇａａｃｔｇｃｃｇｃｇｃｔｔｃａｔｇａａｔｔａｃａｃｃｃｔｃａａｃａａｃｇｃｇａａｇａａａａｃｃａａｃｇｔｇａｃｃｃｔｇｔｃｃａａｇａａｇｃｇｃａａｇｃｇｇａｇｇｔｔｃｃｔｇｇｇａｔｔｃｃｔｇｔｔｇｇｇｃｇｔｇｇｇｃｔｃｃｇｃａａｔｃｇｃａｔｃｃｇｇａｇｔｇｇｃｃｇｔｇｔａａａｇｔｇｃｔｇｃａｔｃｔｇｇａｇｇｇｇｇａａｇｔｇａａｃａａｇａｔｃａａｇｔｃｃｇｃｃｃｔｃｃｔｇｔｃａａｃｔａａｔａａｇｇｃｇｇｔｇｇｔｇｔｃｃｃｔｇａｇｃａａｃｇｇａｇｔｃａｇｃｇｔｇｃｔｇａｃａａｔｃａａｇｇｔｃｃｔｇｇａｃｃｔｃａａｇａａｃｔａｃａｔｃｇａｃａａｇｃａｇｃｔｇｔｔｇｃｃｃａｔｃｇｔｃａａｃａａｇｃａｇｔｃａｔｇｃｔｃｇａｔｔａｇｃａａｔａｔｃｇａａａｃｃｇｔｇａｔｔｇａｇｔｔｃｃａｇｃａｇａａｇａａｃａａｃａｇａｃｔｇｃｔｃｇａａａｔｔａｃｃｃｇｇｇａｇｔｔｔｔｃｃｇｔｇａａｃｇｃｃｇｇａｇｔｇａｃｃａｃｔｃｃｔｇｔｇｔｃｃａｃｃｔａｃａｔｇｃｔｔａｃｇａａｃｔｃｃｇａａｃｔｇｃｔｃａｇｃｃｔｃａｔｃａａｃｇａｔａｔｇｃｃｇａｔｃａｃｔａａｃｇａｃｃａｇａａｇａａｇｔｔｇａｔｇａｇｃａａｃａａｔｇｔｇｃａｇａｔｃｇｔｇｃｇｃｃａａｃａｇｔｃｃｔａｃｔｃａａｔｃａｔｇｔｇｃａｔｔａｔｃａａｇｇａｇｇａａｇｔｇｃｔｃｇｃｃｔａｔｇｔｇｇｔｇｃａａｔｔｇｃｃｔｃｔｇｔａｃｇｇａｇｔｃａｔｃｇａｃａｃａｃｃｃｔｇｃｔｇｇａａｇｃｔｇｃａｃａｃｔａｇｃｃｃａｃｔｃｔｇｔａｃｇａｃｃａａｃａｃｃａａｇｇａａｇｇｔｔｃｃａａｃａｔｃｔｇｃｃｔｇａｃｔａｇｇａｃｃｇａｔｃｇｇｇｇｃｔｇｇｔａｔｔｇｃｇａｔａａｔｇｃｔｇｇｇｔｃｃｇｔｇａｇｃｔｔｃｔｔｃｃｃｇｃａａｇｃｃｇａｇａｃｔｔｇｃａａａｇｔｇｃａｇｔｃａａａｃｃｇｃｇｔｇｔｔｃｔｇｔｇａｃａｃｃａｔｇａａｃａｇｃｃｔｇａｃｃｃｔｇｃｃａｔｃｃｇａａｇｔｃａａｃｃｔｃｔｇｃａａｃｇｔｇｇａｃａｔｃｔｔｔａａｃｃｃｇａａａｔａｃｇａｃｔｇｃａａｇａｔｔａｔｇａｃｃｔｃｃａａｇａｃｃｇａｃｇｔｃａｇｃａｇｃｔｃｔｇｔｃａｔｃａｃｔａｇｃｃｔｇｇｇａｇｃｔａｔｔｇｔｇｔｃｃｔｇｃｔａｃｇｇａａａｇａｃｃａａａｔｇｃａｃｔｇｃｃｔｃｇａａｃａａｇａａｃａｇａｇｇｃａｔｃａｔｃａａｇａｃｃｔｔｃａｇｃａａｃｇｇｃｔｇｔｇａｃｔａｃｇｔｇｔｃｃａａｃａａｇｇｇａｇｔｇｇａｃａｃｃｇｔｇｔｃｃｇｔｃｇｇｇａａｃａｃｃｃｔｇｔａｃｔａｃｇｔｇａａｃａａｇｃａｇｇａｇｇｇｇａａｇｔｃｇｃｔｃｔａｃｇｔｃａａｇｇｇｇｇａａｃｃｇａｔｔａｔｃａａｔｔｔｃｔａｃｇａｃｃｃｃｃｔｇｇｔｇｔｔｃｃｃｔｔｃｃｔｃｃｇａｇｔｔｃｇａｔｇｃｃｔｃｃａｔａｔｃｃｃａａｇｔｃａａｃｇａｇａａｇａｔｃａａｃｃａｇｔｃｔｃｔｔｇｃｃｔｔｃａｔｃｃｇｇａａｇｔｃｇｇａｃｇａａｃｔｇｃｔｇｔｃｃｇｃｃａｔｃｇｇｔｇｇｃｔａｔａｔｔｃｃｇｇａａｇｃｃｃｃｃａｇｇｇａｔｇｇａｃａｇｇｃｃｔａｃｇｔｇｃｇｇａａｇｇａｔｇｇａｇａａｔｇｇｇｔｇｃｔｔｔｔｇｔｃｃａｃｃｔｔｃｃｔｇｇｇｃｇｇｔｃｔｇｇｔｇｃｃｃｃｇｃｇｇｃｔｃａｃａｃｃａｔｃａｔｃａｃｃａｃｃａｃｇｇｔｔｃｇｔｇｇｔｃｃｃａｃｃｃｔｃａａｔｔｔｇａｇａａｇｔｇａ
［関連する特徴（ｂｐ座標）：シグナル配列：１〜７５、ｐｅｐ２７：３２８〜４０８、Ｆ１：４０９〜１５３９、Ｆ２：７６〜３２７、フォールドン：１５５２〜１６３２、トロンビン認識配列：１６３９〜１６５６、Ｈｉｓタグ：１６５７〜１６７４、Ｓｔｒｅｐｔａｇ  ＩＩ：１６８１〜１７０４、リンカー配列：１５４０〜１５５１、１６３３〜１６３８、１６７５〜１６８０、Ｐ１０２Ａ（天然の置換）：３０４〜３０６、Ｉ３７９Ｖ（天然の置換）：１１３５〜１１３７、Ｍ４４７Ｖ（天然の置換）：１３３９〜１３４１、Ｓ１５５Ｃ：４６３〜４６５、Ｓ１９０Ｉ：５６８〜５７０、Ｓ２９０Ｃ：８６８〜８７０、Ｄ４８６Ｓ：１４５６〜１４５８］
【０２３３】
配列番号１７：ｐＸＣＳ８８１の前駆体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列：
ａｔｇｇａａｃｔｔｃｔｇａｔｃｃｔｇａａａｇｃｃａａｃｇｃｇａｔｔａｃｃａｃｔａｔｃｃｔｇａｃｔｇｃｃｇｔｃａｃｃｔｔｃｔｇｃｔｔｃｇｃａｔｃｇｇｇａｃａｇａａｃａｔｔａｃｃｇａｇｇａｇｔｔｃｔａｃｃａｇｔｃｃａｃｃｔｇｔｔｃｇｇｃｇｇｔｇｔｃｃａａｇｇｇｔｔａｃｃｔｃｔｃｇｇｃｃｃｔｇａｇａａｃｔｇｇｃｔｇｇｔａｃｃａｃｔｇｔｇｔｇａｔｔａｃｔａｔｃｇａｇｃｔｇａｇｃａａｃａｔｃａａｇｇａｇａａｃａａｇｔｇｃａａｔｇｇａａｃｇｇａｃｇｃｇａａｇｇｔｃａａｇｃｔｇａｔｔａａｇｃａｇｇａａｃｔｃｇａｔａａｇｔａｃａａｇａａｃｇｃｃｇｔｇａｃｃｇａｇｃｔｃｃａｇｃｔｇｃｔｇａｔｇｃａａｔｃｇａｃｃｃｃｔｇｃｃａｃｔａａｃａａｃａｇａｇｃｔｃｇｃｃｇｇｇａａｃｔｇｃｃｇｃｇｃｔｔｃａｔｇａａｔｔａｃａｃｃｃｔｃａａｃａａｃｇｃｇａａｇａａａａｃｃａａｃｇｔｇａｃｃｃｔｇｔｃｃａａｇａａｇｃｇｃａａｇｃｇｇａｇｇｔｔｃｃｔｇｇｇａｔｔｃｃｔｇｔｇｔｇｇｃｇｔｇｇｇｃｔｃｃｇｃａａｔｃｇｃａｔｃｃｇｇａｇｔｇｇｃｃｇｔｇｔｃｃａａａｇｔｇｃｔｇｃａｔｃｔｇｇａｇｇｇｇｇａａｇｔｇａａｃａａｇａｔｃａａｇｔｃｃｇｃｃｃｔｃｃｔｇｔｃａａｃｔａａｔａａｇｇｃｇｇｔｇｇｔｇｔｃｃｃｔｇａｇｃａａｃｇｇａｇｔｃａｇｃｇｔｇｔｇｔａｃａｔｃｃａａｇｇｔｃｃｔｇｇａｃｃｔｃａａｇａａｃｔａｃａｔｃｇａｃａａｇｃａｇｃｔｇｔｔｇｃｃｃａｔｃｇｔｃａａｃａａｇｃａｇｔｃａｔｇｃｔｃｇａｔｔａｇｃａａｔａｔｃｇａａａｃｃｇｔｇａｔｔｇａｇｔｔｃｃａｇｃａｇａａｇａａｃａａｃａｇａｃｔｇｃｔｃｇａａａｔｔａｃｃｃｇｇｇａｇｔｔｔｔｃｃｇｔｇａａｃｇｃｃｇｇａｇｔｇａｃｃａｃｔｃｃｔｇｔｇｔｃｃａｃｃｔａｃａｔｇｃｔｔａｃｇａａｃｔｃｃｇａａｃｔｇｃｔｃａｇｃｃｔｃａｔｃａａｃｇａｔａｔｇｃｃｇａｔｃａｃｔａａｃｇａｃｃａｇａａｇａａｇｔｔｇａｔｇａｇｃａａｃａａｔｇｔｇｃａｇａｔｃｇｔｇｃｇｃｃａａｃａｇｔｃｃｔａｃｔｃａａｔｃａｔｇｔｃａａｔｔａｔｃａａｇｇａｇｇａａａｔｃｃｔｃｇｃｃｔａｔｇｔｇｇｔｇｃａａｔｔｇｃｃｔｃｔｇｔａｃｇｇａｇｔｃａｔｃｇａｃａｃａｃｃｃｔｇｃｔｇｇａａｇｃｔｇｃａｃａｃｔａｇｃｃｃａｃｔｃｔｇｔａｃｇａｃｃａａｃａｃｃａａｇｇａａｇｇｔｔｃｃａａｃａｔｃｔｇｃｃｔｇａｃｔａｇｇａｃｃｇａｔｃｇｇｇｇｃｔｇｇｔａｔｔｇｃｇａｔａａｔｇｃｔｇｇｇｔｃｃｇｔｇａｇｃｔｔｃｔｔｃｃｃｇｃａａｇｃｃｇａｇａｃｔｔｇｃａａａｇｔｇｃａｇｔｃａａａｃｃｇｃｇｔｇｔｔｃｔｇｔｇａｃａｃｃａｔｇｔｇｔａｇｃｃｔｇａｃｃｃｔｇｃｃａｔｃｃｇａａｇｔｃａａｃｃｔｃｔｇｃａａｃｇｔｇｇａｃａｔｃｔｔｔａａｃｃｃｇａａａｔａｃｇａｃｔｇｃａａｇａｔｔａｔｇａｃｃｔｃｃａａｇａｃｃｇａｃｇｔｃａｇｃａｇｃｔｃｔｇｔｃａｔｃａｃｔａｇｃｃｔｇｇｇａｇｃｔａｔｔｇｔｇｔｃｃｔｇｃｔａｃｇｇａａａｇａｃｃａａａｔｇｃａｃｔｇｃｃｔｃｇａａｃａａｇａａｃａｇａｇｇｃａｔｃａｔｃａａｇａｃｃｔｔｃａｇｃａａｃｇｇｃｔｇｔｇａｃｔａｃｇｔｇｔｃｃａａｃａａｇｇｇａｇｔｇｇａｃａｃｃｇｔｇｔｃｃｇｔｃｇｇｇａａｃａｃｃｃｔｇｔａｃｔａｃｇｔｇａａｃａａｇｃａｇｇａｇｇｇｇａａｇｔｃｇｃｔｃｔａｃｇｔｃａａｇｇｇｇｇａａｃｃｇａｔｔａｔｃａａｔｔｔｃｔａｃｇａｃｃｃｃｃｔｇｇｔｇｔｔｃｃｃｔｔｃｃａｇｃｃａｇｔｔｃａｇｔｇｃｃｔｃｃａｔａｔｃｃｃａａｇｔｃａａｃｇａｇａａｇａｔｃａａｃｃａｇｔｃｔｃｔｔｇｃｃｔｔｃａｔｃｃｇｇａａｇｔｃｇｇａｃｇａａｃｔｇｃｔｇｔｃｃｇｃｃａｔｃｇｇｔｇｇｃｔａｔａｔｔｃｃｇｇａａｇｃｃｃｃｃａｇｇｇａｔｇｇａｃａｇｇｃｃｔａｃｇｔｇｃｇｇａａｇｇａｔｇｇａｇａａｔｇｇｇｔｇｃｔｔｔｔｇｔｃｃａｃｃｔｔｃｃｔｇｇｇｃｇｇｔｃｔｇｇｔｇｃｃｃｃｇｃｇｇｃｔｃａｃａｃｃａｔｃａｔｃａｃｃａｃｃａｃｇｇｔｔｃｇｔｇｇｔｃｃｃａｃｃｃｔｃａａｔｔｔｇａｇａａｇｔｇａ
［関連する特徴（ｂｐ座標）：シグナル配列：１〜７５、ｐｅｐ２７：３２８〜４０８、Ｆ１：４０９〜１５３９、Ｆ２：７６〜３２７、フォールドン：１５５２〜１６３２、トロンビン認識配列：１６３９〜１６５６、Ｈｉｓタグ：１６５７〜１６７４、Ｓｔｒｅｐｔａｇ  ＩＩ：１６８１〜１７０４、リンカー配列：１５４０〜１５５１、１６３３〜１６３８、１６７５〜１６８０、Ｐ１０２Ａ（天然の置換）：３０４〜３０６、Ｉ３７９Ｖ（天然の置換）：１１３５〜１１３７、Ｍ４４７Ｖ（天然の置換）：１３３９〜１３４１、Ｔ５４Ｈ：１６０〜１６２、Ｓ５５Ｃ：１６３〜１６５、Ｌ１４２Ｃ：４２４〜４２６、Ｌ１８８Ｃ：５６２〜５６４、Ｖ２９６Ｉ：８８６〜８８８、Ｎ３７１Ｃ：１１１１〜１１１３、Ｄ４８６Ｓ：１４５６〜１４５８、Ｅ４８７Ｑ：１４５９〜１４６１、Ｄ４８９Ｓ：１４６５〜１４６７］
【０２３４】
配列番号１８：ｐＸＣＳ８９８の前駆体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列：
ａｔｇｇａａｃｔｔｃｔｇａｔｃｃｔｇａａａｇｃｃａａｃｇｃｇａｔｔａｃｃａｃｔａｔｃｃｔｇａｃｔｇｃｃｇｔｃａｃｃｔｔｃｔｇｃｔｔｃｇｃａｔｃｇｇｇａｃａｇａａｃａｔｔａｃｃｇａｇｇａｇｔｔｃｔａｃｃａｇｔｃｃａｃｃｔｇｔｔｃｇｇｃｇｇｔｇｔｃｃａａｇｇｇｔｔａｃｃｔｃｔｃｇｇｃｃｃｔｇａｇａａｃｔｇｇｃｔｇｇｔａｃｃａｃａｇｃｇｔｇａｔｔａｃｔａｔｃｇａｇｃｔｇａｇｃａａｃａｔｃａａｇｇａｇａａｃａａｇｔｇｃａａｔｇｇａａｃｇｇａｃｇｃｇａａｇｇｔｃａａｇｃｔｇａｔｔａａｇｃａｇｇａａｃｔｃｇａｔａａｇｔａｃａａｇａａｃｇｃｃｇｔｇａｃｃｇａｇｃｔｃｃａｇｃｔｇｃｔｇａｔｇｃａａｔｃｇａｃｃｃｃｔｇｃｃａｃｔａａｃａａｃａｇａｇｃｔｃｇｃｃｇｇｇａａｃｔｇｃｃｇｃｇｃｔｔｃａｔｇａａｔｔａｃａｃｃｃｔｃａａｃａａｃｇｃｇａａｇａａａａｃｃａａｃｇｔｇａｃｃｃｔｇｔｃｃａａｇａａｇｃｇｃａａｇｃｇｇａｇｇｔｔｃｃｔｇｇｇａｔｔｃｃｔｇｔｔｇｇｇｃｇｔｇｇｇｃｔｃｃｇｃａａｔｃｇｃａｔｃｃｇｇａｇｔｇｇｃｃｇｔｇｔｇｔａａａｇｔｇｃｔｇｃａｔｃｔｇｇａｇｇｇｇｇａａｇｔｇａａｃａａｇａｔｃａａｇｔｃｃｇｃｃｃｔｃｃｔｇｔｃａａｃｔａａｔａａｇｇｃｇｇｔｇｇｔｇｔｃｃｃｔｇａｇｃａａｃｇｇａｇｔｃａｇｃｇｔｇｃｔｇａｃａａｔｃａａｇｇｔｃｃｔｇｇａｃｃｔｃａａｇａａｃｔａｃａｔｃｇａｃａａｇｃａｇｃｔｇｔｔｇｃｃｃａｔｃｇｔｃａａｃａａｇｃａｇｔｃａｔｇｃｔｃｇａｔｔａｇｃａａｔａｔｃｇａａａｃｃｇｔｇａｔｔｇａｇｔｔｃｃａｇｃａｇａａｇａａｃａａｃａｇａｃｔｇｃｔｃｇａａａｔｔａｃｃｃｇｇｇａｇｔｔｔｔｃｃｇｔｇａａｃｇｃｃｇｇａｇｔｇａｃｃａｃｔｃｃｔｇｔｇｔｃｃａｃｃｔａｃａｔｇｃｔｔａｃｇａａｃｔｃｃｇａａｃｔｇｃｔｃａｇｃｃｔｃａｔｃａａｃｇａｔａｔｇｃｃｇａｔｃａｃｔａａｃｇａｃｃａｇａａｇａａｇｔｔｇａｔｇａｇｃａａｃａａｔｇｔｇｃａｇａｔｃｇｔｇｃｇｃｃａａｃａｇｔｃｃｔａｃｔｃａａｔｃａｔｇｔｇｃａｔｔａｔｃａａｇｇａｇｇａａａｔｃｃｔｃｇｃｃｔａｔｇｔｇｇｔｇｃａａｔｔｇｃｃｔｃｔｇｔａｃｇｇａｇｔｃａｔｃｇａｃａｃａｃｃｃｔｇｃｔｇｇａａｇｃｔｇｃａｃａｃｔａｇｃｃｃａｃｔｃｔｇｔａｃｇａｃｃａａｃａｃｃａａｇｇａａｇｇｔｔｃｃａａｃａｔｃｔｇｃｃｔｇａｃｔａｇｇａｃｃｇａｔｃｇｇｇｇｃｔｇｇｔａｔｔｇｃｇａｔａａｔｇｃｔｇｇｇｔｃｃｇｔｇａｇｃｔｔｃｔｔｃｃｃｇｃａａｇｃｃｇａｇａｃｔｔｇｃａａａｇｔｇｃａｇｔｃａａａｃｃｇｃｇｔｇｔｔｃｔｇｔｇａｃａｃｃａｔｇａａｃａｇｃｃｔｇａｃｃｃｔｇｃｃａｔｃｃｇａａｇｔｃａａｃｃｔｃｔｇｃａａｃｇｔｇｇａｃａｔｃｔｔｔａａｃｃｃｇａａａｔａｃｇａｃｔｇｃａａｇａｔｔａｔｇａｃｃｔｃｃａａｇａｃｃｇａｃｇｔｃａｇｃａｇｃｔｃｔｇｔｃａｔｃａｃｔａｇｃｃｔｇｇｇａｇｃｔａｔｔｇｔｇｔｃｃｔｇｃｔａｃｇｇａａａｇａｃｃａａａｔｇｃａｃｔｇｃｃｔｃｇａａｃａａｇａａｃａｇａｇｇｃａｔｃａｔｃａａｇａｃｃｔｔｃａｇｃａａｃｇｇｃｔｇｔｇａｃｔａｃｇｔｇｔｃｃａａｃａａｇｇｇａｇｔｇｇａｃａｃｃｇｔｇｔｃｃｇｔｃｇｇｇａａｃａｃｃｃｔｇｔａｃｔａｃｇｔｇａａｃａａｇｃａｇｇａｇｇｇｇａａｇｔｃｇｃｔｃｔａｃｇｔｃａａｇｇｇｇｇａａｃｃｇａｔｔａｔｃａａｔｔｔｃｔａｃｇａｃｃｃｃｃｔｇｇｔｇｔｔｃｃｃｔｔｃｃｇａｃｇａｇｔｔｃｇａｔｇｃｃｔｃｃａｔａｔｃｃｃａａｇｔｃａａｃｇａｇａａｇａｔｃａａｃｃａｇｔｃｔｃｔｔｇｃｃｔｔｃａｔｃｃｇｇａａｇｔｃｇｇａｃｇａａｃｔｇｃｔｇｔｃｃｇｃｃａｔｃｇｇｔｇｇｃｔａｔａｔｔｃｃｇｇａａｇｃｃｃｃｃａｇｇｇａｔｇｇａｃａｇｇｃｃｔａｃｇｔｇｃｇｇａａｇｇａｔｇｇａｇａａｔｇｇｇｔｇｃｔｔｔｔｇｔｃｃａｃｃｔｔｃｃｔｇｇｇｃｇｇｔｃｔｇｇｔｇｃｃｃｃｇｃｇｇｃｔｃａｃａｃｃａｔｃａｔｃａｃｃａｃｃａｃｇｇｔｔｃｇｔｇｇｔｃｃｃａｃｃｃｔｃａａｔｔｔｇａｇａａｇｔｇａ
［関連する特徴（ｂｐ座標）：シグナル配列：１〜７５、ｐｅｐ２７：３２８〜４０８、Ｆ１：４０９〜１５３９、Ｆ２：７６〜３２７、フォールドン：１５５２〜１６３２、トロンビン認識配列：１６３９〜１６５６、Ｈｉｓタグ：１６５７〜１６７４、Ｓｔｒｅｐｔａｇ  ＩＩ：１６８１〜１７０４、リンカー配列：１５４０〜１５５１、１６３３〜１６３８、１６７５〜１６８０、Ｐ１０２Ａ（天然の置換）：３０４〜３０６、Ｉ３７９Ｖ（天然の置換）：１１３５〜１１３７、Ｍ４４７Ｖ（天然の置換）：１３３９〜１３４１、Ｔ５４Ｈ：１６０〜１６２、Ｓ１５５Ｃ：４６３〜４６５、Ｓ１９０Ｉ：５６８〜５７０、Ｓ２９０Ｃ：８６８〜８７０、Ｖ２９６Ｉ：８８６〜８８８］
【０２３５】
配列番号１９：ｐＸＣＳ８４７の前駆体ポリペプチドのアミノ酸配列：
ＭＥＬＬＩＬＫＡＮＡＩＴＴＩＬＴＡＶＴＦＣＦＡＳＧＱＮＩＴＥＥＦＹＱＳＴＣＳＡＶＳＫＧＹＬＳＡＬＲＴＧＷＹＴＳＶＩＴＩＥＬＳＮＩＫＥＮＫＣＮＧＴＤＡＫＶＫＬＩＫＱＥＬＤＫＹＫＮＡＶＴＥＬＱＬＬＭＱＳＴＰＡＣＮＮＲＡＲＲＥＬＰＲＦＭＮＹＴＬＮＮＡＫＫＴＮＶＴＬＳＫＫＲＫＲＲＦＬＧＦＬＬＧＶＧＳＡＣＡＳＧＶＡＶＳＫＶＬＨＬＥＧＥＶＮＫＩＫＳＡＬＬＳＴＮＫＡＶＶＳＬＳＮＧＶＳＶＬＴＩＫＶＬＤＬＫＮＹＩＤＫＱＬＬＰＩＶＮＫＱＳＣＳＩＳＮＩＥＴＶＩＥＦＱＱＫＮＮＲＬＬＥＩＴＲＥＦＳＶＮＡＧＶＴＴＰＶＳＴＹＭＬＴＮＳＥＬＬＳＬＩＮＤＭＰＩＴＮＤＱＫＫＬＭＳＮＮＶＱＩＶＲＱＱＳＹＳＩＭＳＩＩＫＥＥＶＬＡＹＶＶＱＬＰＬＹＧＶＩＤＴＰＣＷＫＬＨＴＳＰＬＣＴＴＮＴＫＥＧＳＮＩＣＬＴＲＴＤＲＧＷＹＣＤＮＡＧＳＶＳＦＦＰＱＡＥＴＣＫＶＱＳＮＲＶＦＣＤＴＭＮＳＬＴＬＰＳＥＶＮＬＣＮＶＤＩＦＮＰＫＹＤＣＫＩＭＴＳＫＴＤＶＳＳＳＶＩＴＳＬＧＡＩＶＳＣＹＧＫＴＫＣＴＡＳＮＫＮＲＧＩＩＫＴＦＳＮＧＣＤＹＶＳＮＫＧＶＤＴＶＳＶＧＮＴＬＹＹＶＮＫＱＥＧＫＳＬＹＶＫＧＥＰＩＩＮＦＹＤＰＬＶＦＰＳＳＥＦＤＡＳＩＳＱＶＮＥＫＩＮＱＳＬＡＦＩＲＫＳＤＥＬＬＳＡＩＧＧＹＩＰＥＡＰＲＤＧＱＡＹＶＲＫＤＧＥＷＶＬＬＳＴＦＬＧＧＬＶＰＲＧＳＨＨＨＨＨＨＧＳＷＳＨＰＱＦＥＫ
［関連する特徴（アミノ酸残基座標）：シグナル配列（最終産物には存在しない）：１〜２５、ｐｅｐ２７（最終産物には存在しない）：１１０〜１３６、Ｆ１：１３７〜５１３、Ｆ２：２６〜１０９、フォールドン：５１８〜５４４、トロンビン認識配列：５４７〜５５２、Ｈｉｓタグ：５５３〜５５８、Ｓｔｒｅｐｔａｇ  ＩＩ：５６１〜５６８、Ｐ１０２Ａ（天然の置換）、Ｉ３７９Ｖ（天然の置換）、Ｍ４４７Ｖ（天然の置換）、Ｔ１０３Ｃ、Ｉ１４８Ｃ、Ｓ１９０Ｉ、Ｄ４８６Ｓ］
【０２３６】
配列番号２０：ｐＸＣＳ８５１の前駆体ポリペプチドのアミノ酸配列：
ＭＥＬＬＩＬＫＡＮＡＩＴＴＩＬＴＡＶＴＦＣＦＡＳＧＱＮＩＴＥＥＦＹＱＳＴＣＳＡＶＳＫＧＹＬＳＡＬＲＴＧＷＹＨＳＶＩＴＩＥＬＳＮＩＫＥＮＫＣＮＧＴＤＡＫＶＫＬＩＫＱＥＬＤＫＹＫＮＡＶＴＥＬＱＬＬＭＱＳＴＰＡＣＮＮＲＡＲＲＥＬＰＲＦＭＮＹＴＬＮＮＡＫＫＴＮＶＴＬＳＫＫＲＫＲＲＦＬＧＦＬＬＧＶＧＳＡＣＡＳＧＶＡＶＳＫＶＬＨＬＥＧＥＶＮＫＩＫＳＡＬＬＳＴＮＫＡＶＶＳＬＳＮＧＶＳＶＬＴＩＫＶＬＤＬＫＮＹＩＤＫＱＬＬＰＩＶＮＫＱＳＣＳＩＳＮＩＥＴＶＩＥＦＱＱＫＮＮＲＬＬＥＩＴＲＥＦＳＶＮＡＧＶＴＴＰＶＳＴＹＭＬＴＮＳＥＬＬＳＬＩＮＤＭＰＩＴＮＤＱＫＫＬＭＳＮＮＶＱＩＶＲＱＱＳＹＳＩＭＳＩＩＫＥＥＩＬＡＹＶＶＱＬＰＬＹＧＶＩＤＴＰＣＷＫＬＨＴＳＰＬＣＴＴＮＴＫＥＧＳＮＩＣＬＴＲＴＤＲＧＷＹＣＤＮＡＧＳＶＳＦＦＰＱＡＥＴＣＫＶＱＳＮＲＶＦＣＤＴＭＮＳＬＴＬＰＳＥＶＮＬＣＮＶＤＩＦＮＰＫＹＤＣＫＩＭＴＳＫＴＤＶＳＳＳＶＩＴＳＬＧＡＩＶＳＣＹＧＫＴＫＣＴＡＳＮＫＮＲＧＩＩＫＴＦＳＮＧＣＤＹＶＳＮＫＧＶＤＴＶＳＶＧＮＴＬＹＹＶＮＫＱＥＧＫＳＬＹＶＫＧＥＰＩＩＮＦＹＤＰＬＶＦＰＳＳＥＦＤＡＳＩＳＱＶＮＥＫＩＮＱＳＬＡＦＩＲＫＳＤＥＬＬＳＡＩＧＧＹＩＰＥＡＰＲＤＧＱＡＹＶＲＫＤＧＥＷＶＬＬＳＴＦＬＧＧＬＶＰＲＧＳＨＨＨＨＨＨＧＳＷＳＨＰＱＦＥＫ
［関連する特徴（アミノ酸残基座標）：シグナル配列（最終産物には存在しない）：１〜２５、ｐｅｐ２７（最終産物には存在しない）：１１０〜１３６、Ｆ１：１３７〜５１３、Ｆ２：２６〜１０９、フォールドン：５１８〜５４４、トロンビン認識配列：５４７〜５５２、Ｈｉｓタグ：５５３〜５５８、Ｓｔｒｅｐｔａｇ  ＩＩ：５６１〜５６８、Ｐ１０２Ａ（天然の置換）、Ｉ３７９Ｖ（天然の置換）、Ｍ４４７Ｖ（天然の置換）、Ｔ５４Ｈ、Ｔ１０３Ｃ、Ｉ１４８Ｃ、Ｓ１９０Ｉ、Ｖ２９６Ｉ、Ｄ４８６Ｓ］
【０２３７】
配列番号２１：ｐＸＣＳ８５２の前駆体ポリペプチドのアミノ酸配列：
ＭＥＬＬＩＬＫＡＮＡＩＴＴＩＬＴＡＶＴＦＣＦＡＳＧＱＮＩＴＥＥＦＹＱＳＴＣＳＡＶＳＫＧＹＬＳＡＬＲＴＧＷＹＨＣＶＩＴＩＥＬＳＮＩＫＥＮＫＣＮＧＴＤＡＫＶＫＬＩＫＱＥＬＤＫＹＫＮＡＶＴＥＬＱＬＬＭＱＳＴＰＡＴＮＮＲＡＲＲＥＬＰＲＦＭＮＹＴＬＮＮＡＫＫＴＮＶＴＬＳＫＫＲＫＲＲＦＬＧＦＬＬＧＶＧＳＡＩＡＳＧＶＡＶＳＫＶＬＨＬＥＧＥＶＮＫＩＫＳＡＬＬＳＴＮＫＡＶＶＳＬＳＮＧＶＳＶＣＴＳＫＶＬＤＬＫＮＹＩＤＫＱＬＬＰＩＶＮＫＱＳＣＳＩＳＮＩＥＴＶＩＥＦＱＱＫＮＮＲＬＬＥＩＴＲＥＦＳＶＮＡＧＶＴＴＰＶＳＴＹＭＬＴＮＳＥＬＬＳＬＩＮＤＭＰＩＴＮＤＱＫＫＬＭＳＮＮＶＱＩＶＲＱＱＳＹＳＩＭＳＩＩＫＥＥＶＬＡＹＶＶＱＬＰＬＹＧＶＩＤＴＰＣＷＫＬＨＴＳＰＬＣＴＴＮＴＫＥＧＳＮＩＣＬＴＲＴＤＲＧＷＹＣＤＮＡＧＳＶＳＦＦＰＱＡＥＴＣＫＶＱＳＮＲＶＦＣＤＴＭＮＳＬＴＬＰＳＥＶＮＬＣＮＶＤＩＦＮＰＫＹＤＣＫＩＭＴＳＫＴＤＶＳＳＳＶＩＴＳＬＧＡＩＶＳＣＹＧＫＴＫＣＴＡＳＮＫＮＲＧＩＩＫＴＦＳＮＧＣＤＹＶＳＮＫＧＶＤＴＶＳＶＧＮＴＬＹＹＶＮＫＱＥＧＫＳＬＹＶＫＧＥＰＩＩＮＦＹＤＰＬＶＦＰＳＳＥＦＤＡＳＩＳＱＶＮＥＫＩＮＱＳＬＡＦＩＲＫＳＤＥＬＬＳＡＩＧＧＹＩＰＥＡＰＲＤＧＱＡＹＶＲＫＤＧＥＷＶＬＬＳＴＦＬＧＧＬＶＰＲＧＳＨＨＨＨＨＨＧＳＷＳＨＰＱＦＥＫ
［関連する特徴（アミノ酸残基座標）：シグナル配列（最終産物には存在しない）：１〜２５、ｐｅｐ２７（最終産物には存在しない）：１１０〜１３６、Ｆ１：１３７〜５１３（未変性ＲＳＶ  Ｆ配列を含むのみ）、Ｆ２：２６〜１０９、フォールドン：５１８〜５４４、トロンビン認識配列：５４７〜５５２、Ｈｉｓタグ：５５３〜５５８、Ｓｔｒｅｐｔａｇ  ＩＩ：５６１〜５６８、Ｐ１０２Ａ（天然の置換）、Ｉ３７９Ｖ（天然の置換）、Ｍ４４７Ｖ（天然の置換）、Ｔ５４Ｈ（導入された突然変異）、Ｓ５５Ｃ（導入された突然変異）、Ｌ１８８Ｃ（導入された突然変異）、Ｄ４８６Ｓ（導入された突然変異）］
【０２３８】
配列番号２２：抗体Ｄ２５の重鎖可変ドメインのアミノ酸配列：
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＭＶＳＣＱＡＳＧＧＰＬＲＮＹＩＩＮＷＬＲＱＡＰＧＱＧＰＥＷＭＧＧＩＩＰＶＬＧＴＶＨＹＡＰＫＦＱＧＲＶＴＩＴＡＤＥＳＴＤＴＡＹＩＨＬＩＳＬＲＳＥＤＴＡＭＹＹＣＡＴＥＴＡＬＶＶＳＴＴＹＬＰＨＹＦＤＮＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
【０２３９】
配列番号２３：抗体Ｄ２５の軽鎖可変ドメインのアミノ酸配列：
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＡＶＧＤＲＶＴＩＴＣＱＡＳＱＤＩＶＮＹＬＮＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＶＡＳＮＬＥＴＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＳＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＶＡＴＹＹＣＱＱＹＤＮＬＰＬＴＦＧＧＧＴＫＶＥＩＫＲ
【０２４０】
配列番号２４：抗体ＡＭ１４の重鎖可変ドメインのアミノ酸配列：
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＶＶＱＰＧＲＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＳＦＳＨＹＡＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＶＩＳＹＤＧＥＮＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＳＩＳＲＤＮＳＫＮＴＶＳＬＱＭＮＳＬＲＰＥＤＴＡＬＹＹＣＡＲＤＲＩＶＤＤＹＹＹＹＧＭＤＶＷＧＱＧＡＴＶＴＶＳＳ
【０２４１】
配列番号２５：抗体ＡＭ１４の軽鎖可変ドメインのアミノ酸配列：
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＱＡＳＱＤＩＫＫＹＬＮＷＹＨＱＫＰＧＫＶＰＥＬＬＭＨＤＡＳＮＬＥＴＧＶＰＳＲＦＳＧＲＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＩＧＴＹＹＣＱＱＹＤＮＬＰＰＬＴＦＧＧＧＴＫＶＥＩＫＲＴＶ
【０２４２】
配列番号２６：抗体ＡＭ２２の重鎖可変ドメインのアミノ酸配列
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＴＶＫＶＳＣＫＩＳＧＨＴＬＩＫＬＳＩＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＭＧＧＹＥＧＥＶＤＥＩＦＹＡＱＫＦＱＨＲＬＴＶＩＡＤＴＡＴＤＴＶＹＭＥＬＧＲＬＴＳＤＤＴＡＶＹＦＣＧＴＬＧＶＴＶＴＥＡＧＬＧＩＤＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
【０２４３】
配列番号２７：抗体ＡＭ２２の軽鎖可変ドメインのアミノ酸配列
ＥＩＶＬＴＱＳＰＧＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＱＩＶＳＲＮＨＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＦＧＡＳＳＲＡＴＧＩＰＶＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＮＧＬＡＰＥＤＦＡＶＹＹＣＬＳＳＤＳＳＩＦＴＦＧＰＧＴＫＶＤＦＫ
【０２４４】
配列番号２８：抗体ＭＰＥ８の重鎖可変ドメインのアミノ酸配列：
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＫＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＳＭＮＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＳＩＳＡＳＳＳＹＳＤＹＡＤＳＡＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＴＳＬＦＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＩＹＦＣＡＲＡＲＡＴＧＹＳＳＩＴＰＹＦＤＩＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
【０２４５】
配列番号２９：抗体ＭＰＥ８の軽鎖可変ドメインのアミノ酸配列：
ＱＳＶＶＴＱＴＰＳＶＳＧＡＰＧＱＲＶＴＩＳＣＴＧＳＳＳＮＩＧＡＧＹＤＶＨＷＹＱＱＬＰＧＴＡＰＫＬＬＩＹＤＮＮＮＲＰＳＧＶＰＤＲＦＳＡＳＫＳＧＴＳＡＳＬＡＩＴＧＬＱＡＥＤＥＡＤＹＹＣＱＳＹＤＲＮＬＳＧＶＦＧＴＧＴＫＶＴＶＬ
【０２４６】
配列番号３０：抗体１０１Ｆの重鎖可変ドメインのアミノ酸配列：
ＱＶＴＬＫＥＳＧＰＧＩＬＱＰＳＱＴＬＳＬＴＣＳＦＳＧＦＳＬＳＴＳＧＭＧＶＳＷＩＲＱＰＳＧＫＧＬＥＷＬＡＨＩＹＷＤＤＤＫＲＹＮＰＳＬＫＳＲＬＴＩＳＫＤＴＳＲＮＱＶＦＬＫＩＴＳＶＤＴＡＤＴＡＴＹＹＣＡＲＬＹＧＦＴＹＧＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＡ
【０２４７】
配列番号３１：抗体１０１Ｆの軽鎖可変ドメインのアミノ酸配列：
ＤＩＶＬＴＱＳＰＡＳＬＡＶＳＬＧＱＲＡＴＩＦＣＲＡＳＱＳＶＤＹＮＧＩＳＹＭＨＷＦＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＡＡＳＮＰＥＳＧＩＰＡＲＦＴＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＮＩＨＰＶＥＥＥＤＡＡＴＹＹＣＱＱＩＩＥＤＰＷＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫ
【０２４８】
配列番号３２：ｐＸＣＳ７３８の前駆体ポリペプチドのアミノ酸配列：
ＭＥＬＬＩＬＫＡＮＡＩＴＴＩＬＴＡＶＴＦＣＦＡＳＧＱＮＩＴＥＥＦＹＱＳＴＣＳＡＶＳＫＧＹＬＳＡＬＲＴＧＷＹＨＣＶＩＴＩＥＬＳＮＩＫＥＮＫＣＮＧＴＤＡＫＶＫＬＩＫＱＥＬＤＫＹＫＮＡＶＴＥＬＱＬＬＭＱＳＴＰＡＴＮＮＲＡＲＲＥＬＰＲＦＭＮＹＴＬＮＮＡＫＫＴＮＶＴＬＳＫＫＲＫＲＲＦＬＧＦＬＣＧＶＧＳＡＩＡＳＧＶＡＶＳＫＶＬＨＬＥＧＥＶＮＫＩＫＳＡＬＬＳＴＮＫＡＶＶＳＬＳＮＧＶＳＶＣＴＳＫＶＬＤＬＫＮＹＩＤＫＱＬＬＰＩＶＮＫＱＳＣＳＩＳＮＩＥＴＶＩＥＦＱＱＫＮＮＲＬＬＥＩＴＲＥＦＳＶＮＡＧＶＴＴＰＶＳＴＹＭＬＴＮＳＥＬＬＳＬＩＮＤＭＰＩＴＮＤＱＫＫＬＭＳＮＮＶＱＩＶＲＱＱＳＹＳＩＭＳＩＩＫＥＥＩＬＡＹＶＶＱＬＰＬＹＧＶＩＤＴＰＣＷＫＬＨＴＳＰＬＣＴＴＮＴＫＥＧＳＮＩＣＬＴＲＴＤＲＧＷＹＣＤＮＡＧＳＶＳＦＦＰＱＡＥＴＣＫＶＱＳＮＲＶＦＣＤＴＭＣＳＬＴＬＰＳＥＶＮＬＣＮＶＤＩＦＮＰＫＹＤＣＫＩＭＴＳＫＴＤＶＳＳＳＶＩＴＳＬＧＡＩＶＳＣＹＧＫＴＫＣＴＡＳＮＫＮＲＧＩＩＫＴＦＳＮＧＣＤＹＶＳＮＫＧＶＤＴＶＳＶＧＮＴＬＹＹＶＮＫＱＥＧＫＳＬＹＶＫＧＥＰＩＩＮＦＹＤＰＬＶＦＰＳＤＥＦＤＡＳＩＳＱＶＮＥＫＩＮＱＳＬＡＦＩＲＫＳＤＥＬＬＳＡＩＧＧＹＩＰＥＡＰＲＤＧＱＡＹＶＲＫＤＧＥＷＶＬＬＳＴＦＬＧＧＬＶＰＲＧＳＨＨＨＨＨＨＧＳＷＳＨＰＱＦＥＫ
［関連する特徴（アミノ酸残基座標）：シグナル配列（最終産物には存在しない）：１〜２５、ｐｅｐ２７（最終産物には存在しない）：１１０〜１３６、Ｆ１：１３７、Ｆ２：２６〜１０９、フォールドン：５１８〜５４４、トロンビン認識配列：５４７〜５５２、Ｈｉｓタグ：５５３〜５５８、Ｓｔｒｅｐｔａｇ  ＩＩ：５６１〜５６８、リンカー配列：５１４〜５１７、５４５〜５４６、５５９〜５６０、Ｐ１０２Ａ（天然の置換）、Ｉ３７９Ｖ（天然の置換）、Ｍ４４７Ｖ（天然の置換）、Ｔ５４Ｈ（導入された突然変異）、Ｓ５５Ｃ（導入された突然変異）、Ｌ１４２Ｃ（導入された突然変異）、Ｌ１８８Ｃ（導入された突然変異）、Ｖ２９６Ｉ（導入された突然変異）、Ｎ３７１Ｃ（導入された突然変異）］
【０２４９】
配列番号３３：ｐＸＣＳ７８０の前駆体ポリペプチドのアミノ酸配列：
ＭＥＬＬＩＬＫＡＮＡＩＴＴＩＬＴＡＶＴＦＣＦＡＳＧＱＮＩＴＥＥＦＹＱＳＴＣＳＡＶＳＫＧＹＬＳＡＬＲＴＧＷＹＴＣＶＩＴＩＥＬＳＮＩＫＥＮＫＣＮＧＴＤＡＫＶＫＬＩＫＱＥＬＤＫＹＫＮＡＶＴＥＬＱＬＬＭＱＳＴＰＡＴＮＮＲＡＲＲＥＬＰＲＦＭＮＹＴＬＮＮＡＫＫＴＮＶＴＬＳＫＫＲＫＲＲＦＬＧＦＬＬＧＶＧＳＡＩＡＳＧＶＡＶＳＫＶＬＨＬＥＧＥＶＮＫＩＫＳＡＬＬＳＴＮＫＡＶＶＳＬＳＮＧＶＳＶＣＴＳＫＶＬＤＬＫＮＹＩＤＫＱＬＬＰＩＶＮＫＱＳＣＳＩＳＮＩＥＴＶＩＥＦＱＱＫＮＮＲＬＬＥＩＴＲＥＦＳＶＮＡＧＶＴＴＰＶＳＴＹＭＬＴＮＳＥＬＬＳＬＩＮＤＭＰＩＴＮＤＱＫＫＬＭＳＮＮＶＱＩＶＲＱＱＳＹＳＩＭＳＩＩＫＥＥＶＬＡＹＶＶＱＬＰＬＹＧＶＩＤＴＰＣＷＫＬＨＴＳＰＬＣＴＴＮＴＫＥＧＳＮＩＣＬＴＲＴＤＲＧＷＹＣＤＮＡＧＳＶＳＦＦＰＱＡＥＴＣＫＶＱＳＮＲＶＦＣＤＴＭＮＳＬＴＬＰＳＥＶＮＬＣＮＶＤＩＦＮＰＫＹＤＣＫＩＭＴＳＫＴＤＶＳＳＳＶＩＴＳＬＧＡＩＶＳＣＹＧＫＴＫＣＴＡＳＮＫＮＲＧＩＩＫＴＦＳＮＧＣＤＹＶＳＮＫＧＶＤＴＶＳＶＧＮＴＬＹＹＶＮＫＱＥＧＫＳＬＹＶＫＧＥＰＩＩＮＦＹＤＰＬＶＦＰＳＳＥＦＤＡＳＩＳＱＶＮＥＫＩＮＱＳＬＡＦＩＲＫＳＤＥＬＬＳＡＩＧＧＹＩＰＥＡＰＲＤＧＱＡＹＶＲＫＤＧＥＷＶＬＬＳＴＦＬＧＧＬＶＰＲＧＳＨＨＨＨＨＨＧＳＷＳＨＰＱＦＥＫ
［関連する特徴（アミノ酸残基座標）：シグナル配列（最終産物には存在しない）：１〜２５、ｐｅｐ２７（最終産物には存在しない）：１１０〜１３６、Ｆ１：１３７〜５１３、Ｆ２：２６〜１０９、フォールドン：５１８〜５４４、トロンビン認識配列：５４７〜５５２、Ｈｉｓタグ：５５３〜５５８、Ｓｔｒｅｐｔａｇ  ＩＩ：５６１〜５６８、リンカー配列：５１４〜５１７、５４５〜５４６、５５９〜５６０、Ｐ１０２Ａ（天然の置換）、Ｉ３７９Ｖ（天然の置換）、Ｍ４４７Ｖ（天然の置換）、Ｓ５５Ｃ（導入された突然変異）、Ｌ１８８Ｃ（導入された突然変異）、Ｄ４８６Ｓ（導入された突然変異）］
【０２５０】
配列番号３４：ｐＸＣＳ８３０の前駆体ポリペプチドのアミノ酸配列：
ＭＥＬＬＩＬＫＡＮＡＩＴＴＩＬＴＡＶＴＦＣＦＡＳＧＱＮＩＴＥＥＦＹＱＳＴＣＳＡＶＳＫＧＹＬＳＡＬＲＴＧＷＹＨＣＶＩＴＩＥＬＳＮＩＫＥＮＫＣＮＧＴＤＡＫＶＫＬＩＫＱＥＬＤＫＹＫＮＡＶＴＥＬＱＬＬＭＱＳＴＰＡＴＮＮＲＡＲＲＥＬＰＲＦＭＮＹＴＬＮＮＡＫＫＴＮＶＴＬＳＫＫＲＫＲＲＦＬＧＦＬＬＧＶＧＳＡＩＡＳＧＶＡＶＳＫＶＬＨＬＥＧＥＶＮＫＩＫＳＡＬＬＳＴＮＫＡＶＶＳＬＳＮＧＶＳＶＣＴＩＫＶＬＤＬＫＮＹＩＤＫＱＬＬＰＩＶＮＫＱＳＣＳＩＳＮＩＥＴＶＩＥＦＱＱＫＮＮＲＬＬＥＩＴＲＥＦＳＶＮＡＧＶＴＴＰＶＳＴＹＭＬＴＮＳＥＬＬＳＬＩＮＤＭＰＩＴＮＤＱＫＫＬＭＳＮＮＶＱＩＶＲＱＱＳＹＳＩＭＳＩＩＫＥＥＶＬＡＹＶＶＱＬＰＬＹＧＶＩＤＴＰＣＷＫＬＨＴＳＰＬＣＴＴＮＴＫＥＧＳＮＩＣＬＴＲＴＤＲＧＷＹＣＤＮＡＧＳＶＳＦＦＰＱＡＥＴＣＫＶＱＳＮＲＶＦＣＤＴＭＮＳＬＴＬＰＳＥＶＮＬＣＮＶＤＩＦＮＰＫＹＤＣＫＩＭＴＳＫＴＤＶＳＳＳＶＩＴＳＬＧＡＩＶＳＣＹＧＫＴＫＣＴＡＳＮＫＮＲＧＩＩＫＴＦＳＮＧＣＤＹＶＳＮＫＧＶＤＴＶＳＶＧＮＴＬＹＹＶＮＫＱＥＧＫＳＬＹＶＫＧＥＰＩＩＮＦＹＤＰＬＶＦＰＳＤＥＦＤＡＳＩＳＱＶＮＥＫＩＮＱＳＬＡＦＩＲＫＳＤＥＬＬＳＡＩＧＧＹＩＰＥＡＰＲＤＧＱＡＹＶＲＫＤＧＥＷＶＬＬＳＴＦＬＧＧＬＶＰＲＧＳＨＨＨＨＨＨＧＳＷＳＨＰＱＦＥＫ
［関連する特徴（アミノ酸残基座標）：シグナル配列（最終産物には存在しない）：１〜２５、ｐｅｐ２７（最終産物には存在しない）：１１０〜１３６、Ｆ１：１３７〜５１３、Ｆ２：２６〜１０９、フォールドン：５１８〜５４４、トロンビン認識配列：５４７〜５５２、Ｈｉｓタグ：５５３〜５５８、Ｓｔｒｅｐｔａｇ  ＩＩ：５６１〜５６８、リンカー配列：５１４〜５１７、５４５〜５４６、５５９〜５６０、Ｐ１０２Ａ（天然の置換）、Ｉ３７９Ｖ（天然の置換）、Ｍ４４７Ｖ（天然の置換）、Ｔ５４Ｈ（導入された突然変異）、Ｓ５５Ｃ（導入された突然変異）、Ｌ１８８Ｃ（導入された突然変異）、Ｓ１９０Ｉ（導入された突然変異）］
【０２５１】
配列番号３５：ｐＸＣＳ８５３の前駆体ポリペプチドのアミノ酸配列：
ＭＥＬＬＩＬＫＡＮＡＩＴＴＩＬＴＡＶＴＦＣＦＡＳＧＱＮＩＴＥＥＦＹＱＳＴＣＳＡＶＳＫＧＹＬＳＡＬＲＴＧＷＹＴＣＶＩＴＩＥＬＳＮＩＫＥＮＫＣＮＧＴＤＡＫＶＫＬＩＫＱＥＬＤＫＹＫＮＡＶＴＥＬＱＬＬＭＱＳＴＰＡＴＮＮＲＡＲＲＥＬＰＲＦＭＮＹＴＬＮＮＡＫＫＴＮＶＴＬＳＫＫＲＫＲＲＦＬＧＦＬＬＧＶＧＳＡＩＡＳＧＶＡＶＳＫＶＬＨＬＥＧＥＶＮＫＩＫＳＡＬＬＳＴＮＫＡＶＶＳＬＳＮＧＶＳＶＣＴＩＫＶＬＤＬＫＮＹＩＤＫＱＬＬＰＩＶＮＫＱＳＣＳＩＳＮＩＥＴＶＩＥＦＱＱＫＮＮＲＬＬＥＩＴＲＥＦＳＶＮＡＧＶＴＴＰＶＳＴＹＭＬＴＮＳＥＬＬＳＬＩＮＤＭＰＩＴＮＤＱＫＫＬＭＳＮＮＶＱＩＶＲＱＱＳＹＳＩＭＳＩＩＫＥＥＶＬＡＹＶＶＱＬＰＬＹＧＶＩＤＴＰＣＷＫＬＨＴＳＰＬＣＴＴＮＴＫＥＧＳＮＩＣＬＴＲＴＤＲＧＷＹＣＤＮＡＧＳＶＳＦＦＰＱＡＥＴＣＫＶＱＳＮＲＶＦＣＤＴＭＮＳＬＴＬＰＳＥＶＮＬＣＮＶＤＩＦＮＰＫＹＤＣＫＩＭＴＳＫＴＤＶＳＳＳＶＩＴＳＬＧＡＩＶＳＣＹＧＫＴＫＣＴＡＳＮＫＮＲＧＩＩＫＴＦＳＮＧＣＤＹＶＳＮＫＧＶＤＴＶＳＶＧＮＴＬＹＹＶＮＫＱＥＧＫＳＬＹＶＫＧＥＰＩＩＮＦＹＤＰＬＶＦＰＳＳＥＦＤＡＳＩＳＱＶＮＥＫＩＮＱＳＬＡＦＩＲＫＳＤＥＬＬＳＡＩＧＧＹＩＰＥＡＰＲＤＧＱＡＹＶＲＫＤＧＥＷＶＬＬＳＴＦＬＧＧＬＶＰＲＧＳＨＨＨＨＨＨＧＳＷＳＨＰＱＦＥＫ
［関連する特徴（アミノ酸残基座標）：シグナル配列（最終産物には存在しない）：１〜２５、ｐｅｐ２７（最終産物には存在しない）：１１０〜１３６、Ｆ１：１３７〜５１３、Ｆ２：２６〜１０９、フォールドン：５１８〜５４４、トロンビン認識配列：５４７〜５５２、Ｈｉｓタグ：５５３〜５５８、Ｓｔｒｅｐｔａｇ  ＩＩ：５６１〜５６８、リンカー配列：５１４〜５１７、５４５〜５４６、５５９〜５６０、Ｐ１０２Ａ（天然の置換）、Ｉ３７９Ｖ（天然の置換）、Ｍ４４７Ｖ（天然の置換）、Ｓ５５Ｃ（導入された突然変異）、Ｌ１８８Ｃ（導入された突然変異）、Ｓ１９０Ｉ（導入された突然変異）、Ｄ４８６Ｓ（導入された突然変異）］
【０２５２】
配列番号３６：ｐＸＣＳ８５５前駆体ポリペプチドのアミノ酸配列：
ＭＥＬＬＩＬＫＡＮＡＩＴＴＩＬＴＡＶＴＦＣＦＡＳＧＱＮＩＴＥＥＦＹＱＳＴＣＳＡＶＳＫＧＹＬＳＡＬＲＴＧＷＹＨＣＶＩＴＩＥＬＳＮＩＫＥＮＫＣＮＧＴＤＡＫＶＫＬＩＫＱＥＬＤＫＹＫＮＡＶＴＥＬＱＬＬＭＱＳＴＰＡＴＮＮＲＡＲＲＥＬＰＲＦＭＮＹＴＬＮＮＡＫＫＴＮＶＴＬＳＫＫＲＫＲＲＦＬＧＦＬＬＧＶＧＳＡＩＡＳＧＶＡＶＳＫＶＬＨＬＥＧＥＶＮＫＩＫＳＡＬＬＳＴＮＫＡＶＶＳＬＳＮＧＶＳＶＣＴＩＫＶＬＤＬＫＮＹＩＤＫＱＬＬＰＩＶＮＫＱＳＣＳＩＳＮＩＥＴＶＩＥＦＱＱＫＮＮＲＬＬＥＩＴＲＥＦＳＶＮＡＧＶＴＴＰＶＳＴＹＭＬＴＮＳＥＬＬＳＬＩＮＤＭＰＩＴＮＤＱＫＫＬＭＳＮＮＶＱＩＶＲＱＱＳＹＳＩＭＳＩＩＫＥＥＶＬＡＹＶＶＱＬＰＬＹＧＶＩＤＴＰＣＷＫＬＨＴＳＰＬＣＴＴＮＴＫＥＧＳＮＩＣＬＴＲＴＤＲＧＷＹＣＤＮＡＧＳＶＳＦＦＰＱＡＥＴＣＫＶＱＳＮＲＶＦＣＤＴＭＮＳＬＴＬＰＳＥＶＮＬＣＮＶＤＩＦＮＰＫＹＤＣＫＩＭＴＳＫＴＤＶＳＳＳＶＩＴＳＬＧＡＩＶＳＣＹＧＫＴＫＣＴＡＳＮＫＮＲＧＩＩＫＴＦＳＮＧＣＤＹＶＳＮＫＧＶＤＴＶＳＶＧＮＴＬＹＹＶＮＫＱＥＧＫＳＬＹＶＫＧＥＰＩＩＮＦＹＤＰＬＶＦＰＳＳＥＦＤＡＳＩＳＱＶＮＥＫＩＮＱＳＬＡＦＩＲＫＳＤＥＬＬＳＡＩＧＧＹＩＰＥＡＰＲＤＧＱＡＹＶＲＫＤＧＥＷＶＬＬＳＴＦＬＧＧＬＶＰＲＧＳＨＨＨＨＨＨＧＳＷＳＨＰＱＦＥＫ
［関連する特徴（アミノ酸残基座標）：シグナル配列（最終産物には存在しない）：１〜２５、ｐｅｐ２７（最終産物には存在しない）：１１０〜１３６、Ｆ１：１３７〜５１３、Ｆ２：２６〜１０９、フォールドン：５１８〜５４４、トロンビン認識配列：５４７〜５５２、Ｈｉｓタグ：５５３〜５５８、Ｓｔｒｅｐｔａｇ  ＩＩ：５６１〜５６８、リンカー配列：５１４〜５１７、５４５〜５４６、５５９〜５６０、Ｐ１０２Ａ（天然の置換）、Ｉ３７９Ｖ（天然の置換）、Ｍ４４７Ｖ（天然の置換）、Ｔ５４Ｈ（導入された突然変異）、Ｓ５５Ｃ（導入された突然変異）、Ｌ１８８Ｃ（導入された突然変異）、Ｓ１９０Ｉ（導入された突然変異）、Ｄ４８６Ｓ（導入された突然変異）］
【０２５３】
配列番号３７：ｐＸＣＳ８７４の前駆体ポリペプチドのアミノ酸配列：
ＭＥＬＬＩＬＫＡＮＡＩＴＴＩＬＴＡＶＴＦＣＦＡＳＧＱＮＩＴＥＥＦＹＱＳＴＣＳＡＶＳＫＧＹＬＳＡＬＲＴＧＷＹＴＳＶＩＴＩＥＬＳＮＩＫＥＮＫＣＮＧＴＤＡＫＶＫＬＩＫＱＥＬＤＫＹＫＮＡＶＴＥＬＱＬＬＭＱＳＴＰＡＴＮＮＲＡＲＲＥＬＰＲＦＭＮＹＴＬＮＮＡＫＫＴＮＶＴＬＳＫＫＲＫＲＲＦＬＧＦＬＬＧＶＧＳＡＩＡＳＧＶＡＶＣＫＶＬＨＬＥＧＥＶＮＫＩＫＳＡＬＬＳＴＮＫＡＶＶＳＬＳＮＧＶＳＶＬＴＩＫＶＬＤＬＫＮＹＩＤＫＱＬＬＰＩＶＮＫＱＳＣＳＩＳＮＩＥＴＶＩＥＦＱＱＫＮＮＲＬＬＥＩＴＲＥＦＳＶＮＡＧＶＴＴＰＶＳＴＹＭＬＴＮＳＥＬＬＳＬＩＮＤＭＰＩＴＮＤＱＫＫＬＭＳＮＮＶＱＩＶＲＱＱＳＹＳＩＭＣＩＩＫＥＥＶＬＡＹＶＶＱＬＰＬＹＧＶＩＤＴＰＣＷＫＬＨＴＳＰＬＣＴＴＮＴＫＥＧＳＮＩＣＬＴＲＴＤＲＧＷＹＣＤＮＡＧＳＶＳＦＦＰＱＡＥＴＣＫＶＱＳＮＲＶＦＣＤＴＭＮＳＬＴＬＰＳＥＶＮＬＣＮＶＤＩＦＮＰＫＹＤＣＫＩＭＴＳＫＴＤＶＳＳＳＶＩＴＳＬＧＡＩＶＳＣＹＧＫＴＫＣＴＡＳＮＫＮＲＧＩＩＫＴＦＳＮＧＣＤＹＶＳＮＫＧＶＤＴＶＳＶＧＮＴＬＹＹＶＮＫＱＥＧＫＳＬＹＶＫＧＥＰＩＩＮＦＹＤＰＬＶＦＰＳＳＥＦＤＡＳＩＳＱＶＮＥＫＩＮＱＳＬＡＦＩＲＫＳＤＥＬＬＳＡＩＧＧＹＩＰＥＡＰＲＤＧＱＡＹＶＲＫＤＧＥＷＶＬＬＳＴＦＬＧＧＬＶＰＲＧＳＨＨＨＨＨＨＧＳＷＳＨＰＱＦＥＫ
［関連する特徴（アミノ酸残基座標）：シグナル配列（最終産物には存在しない）：１〜２５、ｐｅｐ２７（最終産物には存在しない）：１１０〜１３６、Ｆ１：１３７〜５１３、Ｆ２：２６〜１０９、フォールドン：５１８〜５４４、トロンビン認識配列：５４７〜５５２、Ｈｉｓタグ：５５３〜５５８、Ｓｔｒｅｐｔａｇ  ＩＩ：５６１〜５６８、リンカー配列：５１４〜５１７、５４５〜５４６、５５９〜５６０、Ｐ１０２Ａ（天然の置換）、Ｉ３７９Ｖ（天然の置換）、Ｍ４４７Ｖ（天然の置換）、Ｓ１５５Ｃ（導入された突然変異）、Ｓ１９０Ｉ（導入された突然変異）、Ｓ２９０Ｃ（導入された突然変異）、Ｄ４８６Ｓ（導入された突然変異）］
【０２５４】
配列番号３８：ｐＸＣＳ８８１の前駆体ポリペプチドのアミノ酸配列：
ＭＥＬＬＩＬＫＡＮＡＩＴＴＩＬＴＡＶＴＦＣＦＡＳＧＱＮＩＴＥＥＦＹＱＳＴＣＳＡＶＳＫＧＹＬＳＡＬＲＴＧＷＹＨＣＶＩＴＩＥＬＳＮＩＫＥＮＫＣＮＧＴＤＡＫＶＫＬＩＫＱＥＬＤＫＹＫＮＡＶＴＥＬＱＬＬＭＱＳＴＰＡＴＮＮＲＡＲＲＥＬＰＲＦＭＮＹＴＬＮＮＡＫＫＴＮＶＴＬＳＫＫＲＫＲＲＦＬＧＦＬＣＧＶＧＳＡＩＡＳＧＶＡＶＳＫＶＬＨＬＥＧＥＶＮＫＩＫＳＡＬＬＳＴＮＫＡＶＶＳＬＳＮＧＶＳＶＣＴＳＫＶＬＤＬＫＮＹＩＤＫＱＬＬＰＩＶＮＫＱＳＣＳＩＳＮＩＥＴＶＩＥＦＱＱＫＮＮＲＬＬＥＩＴＲＥＦＳＶＮＡＧＶＴＴＰＶＳＴＹＭＬＴＮＳＥＬＬＳＬＩＮＤＭＰＩＴＮＤＱＫＫＬＭＳＮＮＶＱＩＶＲＱＱＳＹＳＩＭＳＩＩＫＥＥＩＬＡＹＶＶＱＬＰＬＹＧＶＩＤＴＰＣＷＫＬＨＴＳＰＬＣＴＴＮＴＫＥＧＳＮＩＣＬＴＲＴＤＲＧＷＹＣＤＮＡＧＳＶＳＦＦＰＱＡＥＴＣＫＶＱＳＮＲＶＦＣＤＴＭＣＳＬＴＬＰＳＥＶＮＬＣＮＶＤＩＦＮＰＫＹＤＣＫＩＭＴＳＫＴＤＶＳＳＳＶＩＴＳＬＧＡＩＶＳＣＹＧＫＴＫＣＴＡＳＮＫＮＲＧＩＩＫＴＦＳＮＧＣＤＹＶＳＮＫＧＶＤＴＶＳＶＧＮＴＬＹＹＶＮＫＱＥＧＫＳＬＹＶＫＧＥＰＩＩＮＦＹＤＰＬＶＦＰＳＳＱＦＳＡＳＩＳＱＶＮＥＫＩＮＱＳＬＡＦＩＲＫＳＤＥＬＬＳＡＩＧＧＹＩＰＥＡＰＲＤＧＱＡＹＶＲＫＤＧＥＷＶＬＬＳＴＦＬＧＧＬＶＰＲＧＳＨＨＨＨＨＨＧＳＷＳＨＰＱＦＥＫ
［関連する特徴（アミノ酸残基座標）：シグナル配列（最終産物には存在しない）：１〜２５、ｐｅｐ２７（最終産物には存在しない）：１１０〜１３６、Ｆ１：１３７〜５１３、Ｆ２：２６〜１０９、フォールドン：５１８〜５４４、トロンビン認識配列：５４７〜５５２、Ｈｉｓタグ：５５３〜５５８、Ｓｔｒｅｐｔａｇ  ＩＩ：５６１〜５６８、リンカー配列：５１４〜５１７、５４５〜５４６、５５９〜５６０、Ｐ１０２Ａ（天然の置換）、Ｉ３７９Ｖ（天然の置換）、Ｍ４４７Ｖ（天然の置換）、Ｔ５４Ｈ（導入された突然変異）、Ｓ５５Ｃ（導入された突然変異）、Ｌ１４２Ｃ（導入された突然変異）、Ｌ１８８Ｃ（導入された突然変異）、Ｖ２９６Ｉ（導入された突然変異）、Ｎ３７１Ｃ（導入された突然変異）、Ｄ４８６Ｓ（導入された突然変異）、Ｅ４８７Ｑ（導入された突然変異）、Ｄ４８９Ｓ（導入された突然変異）］
【０２５５】
配列番号３９：ｐＸＣＳ８９８の前駆体ポリペプチドのアミノ酸配列：
ＭＥＬＬＩＬＫＡＮＡＩＴＴＩＬＴＡＶＴＦＣＦＡＳＧＱＮＩＴＥＥＦＹＱＳＴＣＳＡＶＳＫＧＹＬＳＡＬＲＴＧＷＹＨＳＶＩＴＩＥＬＳＮＩＫＥＮＫＣＮＧＴＤＡＫＶＫＬＩＫＱＥＬＤＫＹＫＮＡＶＴＥＬＱＬＬＭＱＳＴＰＡＴＮＮＲＡＲＲＥＬＰＲＦＭＮＹＴＬＮＮＡＫＫＴＮＶＴＬＳＫＫＲＫＲＲＦＬＧＦＬＬＧＶＧＳＡＩＡＳＧＶＡＶＣＫＶＬＨＬＥＧＥＶＮＫＩＫＳＡＬＬＳＴＮＫＡＶＶＳＬＳＮＧＶＳＶＬＴＩＫＶＬＤＬＫＮＹＩＤＫＱＬＬＰＩＶＮＫＱＳＣＳＩＳＮＩＥＴＶＩＥＦＱＱＫＮＮＲＬＬＥＩＴＲＥＦＳＶＮＡＧＶＴＴＰＶＳＴＹＭＬＴＮＳＥＬＬＳＬＩＮＤＭＰＩＴＮＤＱＫＫＬＭＳＮＮＶＱＩＶＲＱＱＳＹＳＩＭＣＩＩＫＥＥＩＬＡＹＶＶＱＬＰＬＹＧＶＩＤＴＰＣＷＫＬＨＴＳＰＬＣＴＴＮＴＫＥＧＳＮＩＣＬＴＲＴＤＲＧＷＹＣＤＮＡＧＳＶＳＦＦＰＱＡＥＴＣＫＶＱＳＮＲＶＦＣＤＴＭＮＳＬＴＬＰＳＥＶＮＬＣＮＶＤＩＦＮＰＫＹＤＣＫＩＭＴＳＫＴＤＶＳＳＳＶＩＴＳＬＧＡＩＶＳＣＹＧＫＴＫＣＴＡＳＮＫＮＲＧＩＩＫＴＦＳＮＧＣＤＹＶＳＮＫＧＶＤＴＶＳＶＧＮＴＬＹＹＶＮＫＱＥＧＫＳＬＹＶＫＧＥＰＩＩＮＦＹＤＰＬＶＦＰＳＤＥＦＤＡＳＩＳＱＶＮＥＫＩＮＱＳＬＡＦＩＲＫＳＤＥＬＬＳＡＩＧＧＹＩＰＥＡＰＲＤＧＱＡＹＶＲＫＤＧＥＷＶＬＬＳＴＦＬＧＧＬＶＰＲＧＳＨＨＨＨＨＨＧＳＷＳＨＰＱＦＥＫ
［関連する特徴（アミノ酸残基座標）：シグナル配列（最終産物には存在しない）：１〜２５、ｐｅｐ２７（最終産物には存在しない）：１１０〜１３６、Ｆ１：１３７〜５１３、Ｆ２：２６〜１０９、フォールドン：５１８〜５４４、トロンビン認識配列：５４７〜５５２、Ｈｉｓタグ：５５３〜５５８、Ｓｔｒｅｐｔａｇ  ＩＩ：５６１〜５６８、リンカー配列：５１４〜５１７、５４５〜５４６、５５９〜５６０、Ｐ１０２Ａ（天然の置換）、Ｉ３７９Ｖ（天然の置換）、Ｍ４４７Ｖ（天然の置換）、Ｔ５４Ｈ（導入された突然変異）、Ｓ１５５Ｃ（導入された突然変異）、Ｓ１９０Ｉ（導入された突然変異）、Ｓ２９０Ｃ（導入された突然変異）、Ｖ２９６Ｉ（導入された突然変異）］
【０２５６】
配列番号４０：Ｔ４フィブリチンフォールドンのアミノ酸配列：
ＧＹＩＰＥＡＰＲＤＧＱＡＹＶＲＫＤＧＥＷＶＬＬＳＴＦＬ
【０２５７】
配列番号２７１．ｐＸＣＳ８９９の前駆体ポリペプチドのアミノ酸配列
ＭＥＬＬＩＬＫＡＮＡＩＴＴＩＬＴＡＶＴＦＣＦＡＳＧＱＮＩＴＥＥＦＹＱＳＴＣＳＡＶＳＫＧＹＬＳＡＬＲＴＧＷＹＨＣＶＩＴＩＥＬＳＮＩＫＥＮＫＣＮＧＴＤＡＫＶＫＬＩＫＱＥＬＤＫＹＫＮＡＶＴＥＬＱＬＬＭＱＳＴＰＡＴＮＮＲＡＲＲＥＬＰＲＦＭＮＹＴＬＮＮＡＫＫＴＮＶＴＬＳＫＫＲＫＲＲＦＬＧＦＬＬＧＶＧＳＡＩＡＳＧＶＡＶＳＫＶＬＨＬＥＧＥＶＮＫＩＫＳＡＬＬＳＴＮＫＡＶＶＳＬＳＮＧＶＳＶＣＴＳＫＶＬＤＬＫＮＹＩＤＫＱＬＬＰＩＶＮＫＱＳＣＳＩＳＮＩＥＴＶＩＥＦＱＱＫＮＮＲＬＬＥＩＴＲＥＦＳＶＮＡＧＶＴＴＰＶＳＴＹＭＬＴＮＳＥＬＬＳＬＩＮＤＭＰＩＴＮＤＱＫＫＬＭＳＮＮＶＱＩＶＲＱＱＳＹＳＩＭＳＩＩＫＥＥＶＬＡＹＶＶＱＬＰＬＹＧＶＩＤＴＰＣＷＫＬＨＴＳＰＬＣＴＴＮＴＫＥＧＳＮＩＣＬＴＲＴＤＲＧＷＹＣＤＮＡＧＳＶＳＦＦＰＱＡＥＴＣＫＶＱＳＮＲＶＦＣＤＴＭＮＳＬＴＬＰＳＥＶＮＬＣＮＶＤＩＦＮＰＫＹＤＣＫＩＭＴＳＫＴＤＶＳＳＳＶＩＴＳＬＧＡＩＶＳＣＹＧＫＴＫＣＴＡＳＮＫＮＲＧＩＩＫＴＦＳＮＧＣＤＹＶＳＮＫＧＶＤＴＶＳＶＧＮＴＬＹＹＶＮＫＱＥＧＫＳＬＹＶＫＧＥＰＩＩＮＦＹＤＰＬＶＦＰＳＳＥＦＤＡＳＩＳＱＶＮＥＫＩＮＱＳＬＡＦＩＲＫＳＤＥＬＬＧＧＬＶＰＲＧＳＨＨＨＨＨＨＧＳＷＳＨＰＱＦＥＫ
【０２５８】
配列番号２７２．ｐＸＣＳ１１０６の前駆体ポリペプチドのアミノ酸配列
ＭＥＬＬＩＬＫＡＮＡＩＴＴＩＬＴＡＶＴＦＣＦＡＳＧＱＮＩＴＥＥＦＹＱＳＴＣＳＡＶＳＫＧＹＬＳＡＬＲＴＧＷＹＨＣＶＩＴＩＥＬＳＮＩＫＥＮＫＣＮＧＴＤＡＫＶＫＬＩＫＱＥＬＤＫＹＫＮＡＶＴＥＬＱＬＬＭＱＳＴＰＡＴＧＳＡＩＡＳＧＶＡＶＳＫＶＬＨＬＥＧＥＶＮＫＩＫＳＡＬＬＳＴＮＫＡＶＶＳＬＳＮＧＶＳＶＣＴＳＫＶＬＤＬＫＮＹＩＤＫＱＬＬＰＩＶＮＫＱＳＣＳＩＳＮＩＥＴＶＩＥＦＱＱＫＮＮＲＬＬＥＩＴＲＥＦＳＶＮＡＧＶＴＴＰＶＳＴＹＭＬＴＮＳＥＬＬＳＬＩＮＤＭＰＩＴＮＤＱＫＫＬＭＳＮＮＶＱＩＶＲＱＱＳＹＳＩＭＳＩＩＫＥＥＶＬＡＹＶＶＱＬＰＬＹＧＶＩＤＴＰＣＷＫＬＨＴＳＰＬＣＴＴＮＴＫＥＧＳＮＩＣＬＴＲＴＤＲＧＷＹＣＤＮＡＧＳＶＳＦＦＰＱＡＥＴＣＫＶＱＳＮＲＶＦＣＤＴＭＮＳＬＴＬＰＳＥＶＮＬＣＮＶＤＩＦＮＰＫＹＤＣＫＩＭＴＳＫＴＤＶＳＳＳＶＩＴＳＬＧＡＩＶＳＣＹＧＫＴＫＣＴＡＳＮＫＮＲＧＩＩＫＴＦＳＮＧＣＤＹＶＳＮＫＧＶＤＴＶＳＶＧＮＴＬＹＹＶＮＫＱＥＧＫＳＬＹＶＫＧＥＰＩＩＮＦＹＤＰＬＶＦＰＳＳＥＦＤＡＳＩＳＱＶＮＥＫＩＮＱＳＬＡＦＩＲＣＣＤＥＬＬＨＮＶＮＡＧＫＳＴＴＮＩＭＩＴＴＬＶＰＲＧＳＧＧＳＡＩＧＧＹＩＰＥＡＰＲＤＧＱＡＹＶＲＫＤＧＥＷＶＬＬＳＴＦＬＧＧＨＨＨＨＨＨＧＳＷＳＨＰＱＦＥＫ
【０２５９】
配列番号２７３．ｐＸＣＳ１１０７の前駆体ポリペプチドのアミノ酸配列
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【０２６０】
配列番号２７４．ｐＸＣＳ１１０８の前駆体ポリペプチドのアミノ酸配列
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【０２６１】
配列番号２７５．ｐＸＣＳ１１０９の前駆体ポリペプチドのアミノ酸配列
ＭＥＬＬＩＬＫＡＮＡＩＴＴＩＬＴＡＶＴＦＣＦＡＳＧＱＮＩＴＥＥＦＹＱＳＴＣＳＡＶＳＫＧＹＬＳＡＬＲＴＧＷＹＨＣＶＩＴＩＥＬＳＮＩＫＥＮＫＣＮＧＴＤＡＫＶＫＬＩＫＱＥＬＤＫＹＫＮＡＶＴＥＬＱＬＬＭＱＳＴＰＡＴＧＳＡＩＡＳＧＶＡＶＳＫＶＬＨＬＥＧＥＶＮＫＩＫＳＡＬＬＳＴＮＫＡＶＶＳＬＳＮＧＶＳＶＣＴＳＫＶＬＤＬＫＮＹＩＤＫＱＬＬＰＩＶＮＫＱＳＣＳＩＳＮＩＥＴＶＩＥＦＱＱＫＮＮＲＬＬＥＩＴＲＥＦＳＶＮＡＧＶＴＴＰＶＳＴＹＭＬＴＮＳＥＬＬＳＬＩＮＤＭＰＩＴＮＤＱＫＫＬＭＳＮＮＶＱＩＶＲＱＱＳＹＳＩＭＳＩＩＫＥＥＶＬＡＹＶＶＱＬＰＬＹＧＶＩＤＴＰＣＷＫＬＨＴＳＰＬＣＴＴＮＴＫＥＧＳＮＩＣＬＴＲＴＤＲＧＷＹＣＤＮＡＧＳＶＳＦＦＰＱＡＥＴＣＫＶＱＳＮＲＶＦＣＤＴＭＮＳＬＴＬＰＳＥＶＮＬＣＮＶＤＩＦＮＰＫＹＤＣＫＩＭＴＳＫＴＤＶＳＳＳＶＩＴＳＬＧＡＩＶＳＣＹＧＫＴＫＣＴＡＳＮＫＮＲＧＩＩＫＴＦＳＮＧＣＤＹＶＳＮＫＧＶＤＴＶＳＶＧＮＴＬＹＹＶＮＫＱＥＧＫＳＬＹＶＫＧＥＰＩＩＮＦＹＤＰＬＶＦＰＳＳＥＦＤＡＳＩＳＱＶＮＥＫＩＮＱＳＬＡＦＩＲＣＣＤＥＬＬＨＣＣＮＡＧＫＳＴＴＮＩＭＩＴＴＬＶＰＲＧＳＧＧＳＡＩＧＧＹＩＰＥＡＰＲＤＧＱＡＹＶＲＫＤＧＥＷＶＬＬＳＴＦＬＧＧＨＨＨＨＨＨＧＳＷＳＨＰＱＦＥＫ
【０２６２】
配列番号２７６．ｐＸＣＳ１１１０の前駆体ポリペプチドのアミノ酸配列
ＭＥＬＬＩＬＫＡＮＡＩＴＴＩＬＴＡＶＴＦＣＦＡＳＧＱＮＩＴＥＥＦＹＱＳＴＣＳＡＶＳＫＧＹＬＳＡＬＲＴＧＷＹＨＣＶＩＴＩＥＬＳＮＩＫＥＮＫＣＮＧＴＤＡＫＶＫＬＩＫＱＥＬＤＫＹＫＮＡＶＴＥＬＱＬＬＭＱＳＴＰＡＴＧＳＡＩＡＳＧＶＡＶＳＫＶＬＨＬＥＧＥＶＮＫＩＫＳＡＬＬＳＴＮＫＡＶＶＳＬＳＮＧＶＳＶＣＴＳＫＶＬＤＬＫＮＹＩＤＫＱＬＬＰＩＶＮＫＱＳＣＳＩＳＮＩＥＴＶＩＥＦＱＱＫＮＮＲＬＬＥＩＴＲＥＦＳＶＮＡＧＶＴＴＰＶＳＴＹＭＬＴＮＳＥＬＬＳＬＩＮＤＭＰＩＴＮＤＱＫＫＬＭＳＮＮＶＱＩＶＲＱＱＳＹＳＩＭＳＩＩＫＥＥＶＬＡＹＶＶＱＬＰＬＹＧＶＩＤＴＰＣＷＫＬＨＴＳＰＬＣＴＴＮＴＫＥＧＳＮＩＣＬＴＲＴＤＲＧＷＹＣＤＮＡＧＳＶＳＦＦＰＱＡＥＴＣＫＶＱＳＮＲＶＦＣＤＴＭＮＳＬＴＬＰＳＥＶＮＬＣＮＶＤＩＦＮＰＫＹＤＣＫＩＭＴＳＫＴＤＶＳＳＳＶＩＴＳＬＧＡＩＶＳＣＹＧＫＴＫＣＴＡＳＮＫＮＲＧＩＩＫＴＦＳＮＧＣＤＹＶＳＮＫＧＶＤＴＶＳＶＧＮＴＬＹＹＶＮＫＱＥＧＫＳＬＹＶＫＧＥＰＩＩＮＦＹＤＰＬＶＦＰＳＳＥＦＤＡＳＩＳＱＶＮＥＫＩＮＱＳＬＡＦＩＲＣＣＤＥＬＬＨＮＶＮＡＧＫＳＣＣＮＩＭＩＴＴＬＶＰＲＧＳＧＧＳＡＩＧＧＹＩＰＥＡＰＲＤＧＱＡＹＶＲＫＤＧＥＷＶＬＬＳＴＦＬＧＧＨＨＨＨＨＨＧＳＷＳＨＰＱＦＥＫ
【０２６３】
配列番号２７７．ｐＸＣＳ１１１１の前駆体ポリペプチドのアミノ酸配列
ＭＥＬＬＩＬＫＡＮＡＩＴＴＩＬＴＡＶＴＦＣＦＡＳＧＱＮＩＴＥＥＦＹＱＳＴＣＳＡＶＳＫＧＹＬＳＡＬＲＴＧＷＹＨＣＶＩＴＩＥＬＳＮＩＫＥＮＫＣＮＧＴＤＡＫＶＫＬＩＫＱＥＬＤＫＹＫＮＡＶＴＥＬＱＬＬＭＱＳＴＰＡＴＧＳＡＩＡＳＧＶＡＶＳＫＶＬＨＬＥＧＥＶＮＫＩＫＳＡＬＬＳＴＮＫＡＶＶＳＬＳＮＧＶＳＶＣＴＳＫＶＬＤＬＫＮＹＩＤＫＱＬＬＰＩＶＮＫＱＳＣＳＩＳＮＩＥＴＶＩＥＦＱＱＫＮＮＲＬＬＥＩＴＲＥＦＳＶＮＡＧＶＴＴＰＶＳＴＹＭＬＴＮＳＥＬＬＳＬＩＮＤＭＰＩＴＮＤＱＫＫＬＭＳＮＮＶＱＩＶＲＱＱＳＹＳＩＭＳＩＩＫＥＥＶＬＡＹＶＶＱＬＰＬＹＧＶＩＤＴＰＣＷＫＬＨＴＳＰＬＣＴＴＮＴＫＥＧＳＮＩＣＬＴＲＴＤＲＧＷＹＣＤＮＡＧＳＶＳＦＦＰＱＡＥＴＣＫＶＱＳＮＲＶＦＣＤＴＭＮＳＬＴＬＰＳＥＶＮＬＣＮＶＤＩＦＮＰＫＹＤＣＫＩＭＴＳＫＴＤＶＳＳＳＶＩＴＳＬＧＡＩＶＳＣＹＧＫＴＫＣＴＡＳＮＫＮＲＧＩＩＫＴＦＳＮＧＣＤＹＶＳＮＫＧＶＤＴＶＳＶＧＮＴＬＹＹＶＮＫＱＥＧＫＳＬＹＶＫＧＥＰＩＩＮＦＹＤＰＬＶＦＰＳＳＥＦＤＡＳＩＳＱＶＮＥＫＩＮＱＳＬＡＦＩＲＫＳＤＥＬＬＨＣＣＮＡＧＫＳＣＣＮＩＭＩＴＴＬＶＰＲＧＳＧＧＳＡＩＧＧＹＩＰＥＡＰＲＤＧＱＡＹＶＲＫＤＧＥＷＶＬＬＳＴＦＬＧＧＨＨＨＨＨＨＧＳＷＳＨＰＱＦＥＫ
【０２６４】
配列番号２７８．ｐＸＣＳ１１１２の前駆体ポリペプチドのアミノ酸配列
ＭＥＬＬＩＬＫＡＮＡＩＴＴＩＬＴＡＶＴＦＣＦＡＳＧＱＮＩＴＥＥＦＹＱＳＴＣＳＡＶＳＫＧＹＬＳＡＬＲＴＧＷＹＨＣＶＩＴＩＥＬＳＮＩＫＥＮＫＣＮＧＴＤＡＫＶＫＬＩＫＱＥＬＤＫＹＫＮＡＶＴＥＬＱＬＬＭＱＳＴＰＡＴＧＳＡＩＡＳＧＶＡＶＳＫＶＬＨＬＥＧＥＶＮＫＩＫＳＡＬＬＳＴＮＫＡＶＶＳＬＳＮＧＶＳＶＣＴＳＫＶＬＤＬＫＮＹＩＤＫＱＬＬＰＩＶＮＫＱＳＣＳＩＳＮＩＥＴＶＩＥＦＱＱＫＮＮＲＬＬＥＩＴＲＥＦＳＶＮＡＧＶＴＴＰＶＳＴＹＭＬＴＮＳＥＬＬＳＬＩＮＤＭＰＩＴＮＤＱＫＫＬＭＳＮＮＶＱＩＶＲＱＱＳＹＳＩＭＳＩＩＫＥＥＶＬＡＹＶＶＱＬＰＬＹＧＶＩＤＴＰＣＷＫＬＨＴＳＰＬＣＴＴＮＴＫＥＧＳＮＩＣＬＴＲＴＤＲＧＷＹＣＤＮＡＧＳＶＳＦＦＰＱＡＥＴＣＫＶＱＳＮＲＶＦＣＤＴＭＮＳＬＴＬＰＳＥＶＮＬＣＮＶＤＩＦＮＰＫＹＤＣＫＩＭＴＳＫＴＤＶＳＳＳＶＩＴＳＬＧＡＩＶＳＣＹＧＫＴＫＣＴＡＳＮＫＮＲＧＩＩＫＴＦＳＮＧＣＤＹＶＳＮＫＧＶＤＴＶＳＶＧＮＴＬＹＹＶＮＫＱＥＧＫＳＬＹＶＫＧＥＰＩＩＮＦＹＤＰＬＶＦＰＳＳＥＦＤＡＳＩＳＱＶＮＥＫＩＮＱＳＬＡＦＩＲＣＣＤＥＬＬＨＣＣＮＡＧＫＳＣＣＮＩＭＩＴＴＬＶＰＲＧＳＧＧＳＡＩＧＧＹＩＰＥＡＰＲＤＧＱＡＹＶＲＫＤＧＥＷＶＬＬＳＴＦＬＧＧＨＨＨＨＨＨＧＳＷＳＨＰＱＦＥＫ
【図１】
2019511998.tif 000062
【図２−１】
2019511998.tif 000063
【図２−２】
2019511998.tif 000064
【図３−１】
2019511998.tif 000065
【図３−２】
2019511998.tif 000066
【図４】
2019511998.tif 000067
【図５】
2019511998.tif 000068
【図６−１】
2019511998.tif 000069
【図６−２】
2019511998.tif 000070
【図７−１】
2019511998.tif 000071
【図７−２】
2019511998.tif 000072
【図８】
2019511998.tif 000073
【図９−１】
2019511998.tif 000074
【図９−２】
2019511998.tif 000075
【配列表】
2019511998000001.app
【国際調査報告】
2019511998.tif 000076
2019511998.tif 000077
2019511998.tif 000078
2019511998.tif 000079
2019511998.tif 000080