(57)【要約】  本発明は、高度に安定な薬剤投与形態に関する。本発明はまた、４−ヒドロキシフェニルピルビン酸ジオキシゲナーゼ５の阻害が、結果として患者の健康を改善する、疾病の治療のための、高度に安定な薬剤投与形態も意図する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
医薬有効成分として２−（２−ニトロ−４−トリフルオロメチルベンゾイル）−１，３−シクロヘキサンジオン、並びにα化でんぷん及びステアリン酸を含有する、安定な固形医薬製剤。
【請求項２】
ステアリン酸の量が、成分の全体量の０．５〜５％ｗ／ｗである、請求項１に記載の安定な固形医薬製剤。
【請求項３】
ステアリン酸の量が、前記成分の全体量の１％ｗ／ｗ±１０％である、請求項２に記載の安定な固形医薬製剤。
【請求項４】
２−（２−ニトロ−４−トリフルオロメチルベンゾイル）−１，３−シクロヘキサンジオンの化学的完全性が、２５℃で３か月貯蔵したのち、少なくとも９５％であり、好ましくは２５℃で３か月貯蔵したのち、少なくとも９７％であり、さらに好ましくは２５℃で３か月貯蔵したのち、少なくとも９８％であり、さらに好ましくは２５℃で３か月貯蔵したのち、少なくとも９９％である、請求項１〜３のいずれか１項に記載の安定な固形医薬製剤。
【請求項５】
主な不純物の量が、４０℃／７５％ＲＨで３か月貯蔵したのち、０．２０％を超えない、請求項１〜４のいずれか１項に記載の安定な固形医薬製剤。
【請求項６】
２−（２−ニトロ−４−トリフルオロメチルベンゾイル）−１，３−シクロヘキサンジオンの量が、典型的に２ｍｇ、５ｍｇ、１０ｍｇ、または２０ｍｇであって、ゼラチンカプセルの形態である、請求項１〜４のいずれか１項に記載の安定な固形医薬製剤。
【請求項７】
前記ゼラチンカプセルが、ハードゼラチンカプセルである、請求項６に記載の安定な固形医薬製剤。
【請求項８】
４−ヒドロキシフェニルピルビン酸ジオキシゲナーゼの阻害が、結果として前記患者の健康を改善する、疾病の治療において使用するための、請求項１〜７のいずれか１項に記載の安定な固形医薬製剤。
【請求項９】
治療するべき前記疾病は、眼皮膚／眼球白子、微生物感染、下肢静止不能症候群、アルカプトン尿症、及び遺伝性チロシン血症タイプ１からなる群から選択される、請求項８に記載の安定な固形医薬製剤。
【請求項１０】
治療するべき前記疾病は、遺伝性チロシン血症タイプ１である、請求項９に記載の安定な固形医薬製剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、分解しやすく、特に温度誘導された化合物、及び少なくとも１つの医薬的に許容可能な賦形剤を含む、高度に安定な薬剤投与形態に関する。
【０００２】
より具体的には、本発明は、ニチシノンまたはＮＴＢＣとしても知られる、４−ヒドロキシフェニルピルビン酸ジオキシゲナーゼ（ＨＰＰＤ）阻害剤２−（２−ニトロ−４−トリフルオロメチルベンゾイル）−１，３−シクロヘキサンジオンを考える。
【発明の概要】
【０００３】
ＮＴＢＣは、Ｏｒｆａｄｉｎ（登録商標）というブランド名で、Ｓｗｅｄｉｓｈ  Ｏｒｐｈａｎ  Ｂｉｏｖｉｔｒｕｍ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ＡＢより市販されている薬剤で、成人及び小児患者における遺伝性チロシン血症タイプ１（ＨＴ−１）の影響を緩和するために使用される。これはＦＤＡ及びＥＭＡにより、２００２年１月及び２００５年２月にそれぞれ認可されたものである。
【０００４】
ＨＴ−１病は、チロシン異化経路フマリルアセト酢酸ヒドラーゼの最終酵素の欠損による。ＮＴＢＣは、４−ヒドロキシフェニルピルビン酸ジオキシゲナーゼ（ＨＰＰＤ）の競合的阻害剤で、フマリルアセト酢酸ヒドラーゼに先行する酵素である。ＨＴ−１を有する患者において、チロシンの通常異化を阻害することによって、ＮＴＢＣは、毒性のある中間体、マレイルアセト酢酸及びフマリルアセト酢酸の蓄積を防ぐ。これら中間体は、ＨＴ−１を有する患者において、５−アミノレブリン酸の蓄積につながるポルフィリン合成経路を阻害している前者、毒性のある代謝物質、スクシニルアセトン及びスクシニルアセト酢酸に転換される。
【０００５】
さらなる疾病の治療におけるＮＴＢＣの有用性も、記述されている。包括的でないリストを、本明細書の以降に報告する。
【０００６】
ＷＯ２０１１１０６６５５は、眼皮膚／眼球白子を患う対象において、チロシン血漿濃度増加のための方法を報告する。この方法は、１日約０．１ｍｇ／ｋｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇの範囲内のＮＴＢＣを含む、医薬的に許容可能な組成物を対象に投与することを含む。
【０００７】
ＵＳ８３５４４５１Ｂ２は、治療的に有効量のＮＴＢＣを対象に投与する手段によって、真菌または細菌による微生物感染と闘う新しい方法を報告する。
【０００８】
ＷＯ２０１００５４２７３は、下肢静止不能症候群（ＲＬＳ）の治療及び／または予防のためのＮＴＢＣ含有組成物及び方法を開示する。
【０００９】
ＥＰ１８５３２４１Ｂ１は、神経変性疾患、とりわけパーキンソン病の治療におけるＮＴＢＣの使用を主張する。
【００１０】
Ｉｎｔｒｏｎｅ  Ｗ．Ｊ．らは、アルカプトン尿症の治療におけるニチシノンの有用性を開示した（Ｉｎｔｒｏｎｅ  Ｗ．Ｊ．ら、Ｍｏｌｅｃ．Ｇｅｎｅｔ．Ｍｅｔａｂ．、２０１１、１０３、４、３０７）。実際の製剤（すなわち、Ｏｒｆａｄｉｎ（登録商標）カプセル）の問題のひとつは、その化学的安定性であることはよく知られている。実際に、たとえＯｒｆａｄｉｎ（登録商標）が２℃〜８℃の範囲の温度で、冷蔵庫に貯蔵されなければならないとしても、その有効期間は１８か月だけである。開封後の使用安定性は、２５℃を超えない温度で２か月間しかなく、その後は廃棄しなければならない。このような貯蔵条件は、費用の点からも、また患者のための物流の点からも、薬の流通系統に影響があることは明らかであろう。したがって、物流供給系統の見地と、患者コンプライアンスの見地の両方から、より安定な製剤が至急必要である。
【００１１】
ＨＰＰＤ作用の製品が関係する（例えば、ＨＴ−１）疾病の治療におけるＯｒｆａｄｉｎ（登録商標）の有用性は、ＥＰ０５９１２７５Ｂ１に明白に記載されている。ＮＴＢＣの合成も、本特許に記載されている。本明細書に記載された適切な医薬製剤の中で、出願者は、錠剤、甘味入り錠剤、ハードまたはソフトカプセル、水性または油性懸濁剤、乳剤、分散性散剤または顆粒剤、シロップ剤またはエリキシル剤などの、様々な従来の組成物を挙げた。非経口製剤（例えば、静脈内、皮下、筋肉内、または血管内投薬のための無菌の水性または油性溶液）、または坐薬のような直腸製剤も開示される。ＥＰ０５９１２７５Ｂ１は、製剤の具体例を３つ報告し、そのうち２つは錠剤で、１つはカプセル形態であった。後者の投薬形態は、２％の有効成分、０．３％の潤滑剤（すなわち、ステアリン酸マグネシウム）、残りは希釈剤として存在するラクトース欧州薬局方を含有した。これらのカプセルは、次いでインビボ研究に使用された。
【００１２】
Ｃｙｃｌｅ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ  ＬＴＤの名前で出願されたＷＯ２０１５１０１７９４は、ＮＴＢＣの錠剤製剤を報告し、この製剤はＯｒｆａｄｉｎ（登録商標）のカプセル製剤に関して、より大きな安定性を与えると主張している。出願者はまた、熱安定性問題において存在する、現在入手可能な市販品の主な欠点のひとつにも言及しており、特に、６−トリフルオロメチル−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−キサンテン−１，９−ジオンまたはオキソテトラヒドロキサントンという名の望まない環化生成物が形成されることによる。出願者はさらに、潤滑剤ステアリン酸マグネシウム（Ｏｒｆａｄｉｎ（登録商標）のカプセル製剤には存在しない）を、ＮＴＢＣの不安定性を加速させる要因として特定した。出願はさらに、製剤中にはいかなる金属イオンまたはいかなるでんぷんも使用しないよう示唆した。特に、出願者は、でんぷんが望まない環化不純物オキソテトラヒドロキサントンの形成を促進すると開示した。本特許出願はまた、錠剤製剤が好ましい製剤であるとも示唆した。潤滑剤としては、２０〜２２個の炭素原子を含有する脂肪酸が好ましく、より好ましくは、その組成物の脂肪が、グリセロールジベヘネート（例えば、Ｃｏｍｐｒｉｔｏｌ（登録商標）８８８）から成るということである。ラクトースに関するこの成分は、望まない環化生成物の形成を防ぎつつ、製剤の安定性を高めることもできると示唆した。
【００１３】
Ｓｗｅｄｉｓｈ  Ｏｒｐｈａｎ  Ｂｉｏｖｉｔｒｕｍ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ＡＢの名前で出願されたＷＯ２０１２１７７２１４は、安定剤としてクエン酸緩衝剤を含有するニチシノンの経口液体懸濁液を開示する。
【００１４】
Ｂｉｏｔｉｅ  Ｔｈｅｒａｐｉｅｓ  Ｉｎｃ．の名前で出願され、今は放棄されたＷＯ２０１３１８１２９２は、長期の貯蔵にも安定すると主張されたニチシノンの医薬製剤を開示した。仮定の安定剤の長いリストの中で、出願者は、クエン酸、ピルビン酸、コハク酸、フマル酸、リンゴ酸、オキサロ酢酸、シス−アコニット酸、イソクエン酸、及びα−ケトグルタル酸からなる群から選択される特に好ましい有機酸として、ジカルボキシル酸及びトリカルボキシル酸を示唆する。様々な成分の均一分布を可能にするために、湿式造粒から得られる錠剤製剤の安定研究は、加速された条件の下、実施されてきた。出願者は、クエン酸の存在が、製剤の安定化を可能にすると示唆した。
【００１５】
しかし今日まで、数々の努力にもかかわらず、ＮＴＢＣ製剤は、患者にとって必要な安定性及び／またはコンプライアンス基準を完全には満たしていない。したがって、長期に安定な製剤の医薬的必要性は満たされていない。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
本発明は、有効成分として２−（２−ニトロ−４−トリフルオロメチルベンゾイル）−１，３−シクロヘキサンジオン、並びに１つの安定剤及び少なくとも１つの賦形剤を含む、高安定で、耐久的にも安定な医薬組成物に関する。
【００１７】
理論的に如何様にも結びつけられる意図はないが、製剤の改善された安定性は、ステアリン酸の存在によるものと思われる。ステアリン酸を安定剤としてニチシノンを製剤化することが、室温で長期間でも医薬組成物に驚くべき高安定性を与えることが、今わかった。
【００１８】
好ましい実施形態では、そのような製剤は、賦形剤としてα化でんぷんもしくはラクトース、またはその混合物を含む。
【００１９】
より好ましい実施形態では、そのような製剤は、ハードゼラチンカプセルの形態である。
【００２０】
製剤において、潤滑剤としてのステアリン酸の有用性は長く知られてはいたが、ニチシノンの安定剤としてのその使用は、これまで言及も示唆もされてこなかった。さらに、先行技術で示唆されたものとは反対に、医薬組成物内にステアリン酸も存在していたならば、希釈剤としてのでんぷんは、ニチシノンの完全性に適合しない。
【００２１】
本発明の１つの好ましい実施形態では、α化でんぷんを希釈剤に使用し、ステアリン酸を安定剤として使用する。
【００２２】
本発明の別の好ましい実施形態では、ラクトースを希釈剤として使用し、ステアリン酸を安定剤として使用する。
【００２３】
本発明のさらに好ましい実施形態では、ラクトースとα化でんぷんとの混合物を希釈剤として使用し、ステアリン酸を安定剤として使用する。このような製剤において、α化でんぷん／ラクトースの比率は、好ましくは５／９５〜９５／５の範囲にわたる。
【００２４】
本発明のさらなる好ましい実施形態では、それぞれの成分の重量比の割合は次のように、２〜５％、９３〜９７％、及び０．５〜５％であり、このような割合はそれぞれ、ニチシノン、希釈剤（すなわちα化でんぷんまたはラクトース）、及びステアリン酸に関する。
【００２５】
本発明のより好ましい実施形態では、ステアリン酸は、１％ｗ／ｗ±１０％まで濃縮して存在する。
【００２６】
本発明のさらなるより好ましい実施形態では、それぞれの成分の重量比の割合は次のように、３．５７％、９５．３４％、及び１．０９％であり、このような割合はそれぞれ、ニチシノン、希釈剤（すなわちα化でんぷんまたはラクトース）、及びステアリン酸に関する。
【００２７】
本発明のさらに好ましい実施形態では、本発明の医薬製剤対象が、有効成分ニチシノンの量に関して、４つの異なる強度になり得、その強度は、２ｍｇ、５ｍｇ、１０ｍｇ、及び２０ｍｇである。
【００２８】
本発明の医薬製剤は、疾患の治療のために、その４−ヒドロキシフェニルピルビン酸ジオキシゲナーゼ阻害特性に起因する薬剤として有用であり、そのような阻害が、結果として患者の健康を改善することになる。特に、ＨＴ−１、または眼皮膚／眼球白子、または真菌または細菌による微生物感染、または下肢静止不能症候群、または神経変性疾患、とりわけパーキンソン病を患う患者を、治療することができる。
【００２９】
本発明の好ましい実施形態では、医薬製剤は、ＨＴ−１を患う患者を治療するためである。
【００３０】
一般に、本発明の医薬製剤は、「治療有効量」で投与される。実際に投与される医薬製剤の量は、治療するべき状態、患者が現在摂取しているその他の潜在的薬剤、年齢、性別、体重、及びそれぞれの患者の反応、患者の症状の重症度などを含む、関連する状況を鑑みて、一般に医師によって決定される。
【００３１】
一般に、有効用量は、１日当たり０．５  ｍｇ／ｋｇ〜２  ｍｇ／ｋｇであり、好ましくは、１日当たり１  ｍｇ／ｋｇ  〜  １．５  ｍｇ／ｋｇである。このような１日の用量は、２つの等しい用量で分けてもよく、毎日ほぼ同じ時間に１日２回摂取してもよい。
【００３２】
好ましい実施形態では、１日の用量は２つの等しい用量に分けられる。
【００３３】
用量調整は、尿スクシニルアセトン及びα−フェトプロテインを監視したレベル、ならびに肝機能検査値に従ってなされる。
【００３４】
ＨＴ−１患者は、チロシン及びフェニルアラニンを制限された食餌療法中である一方で、本発明の医薬製剤で治療中であることが理解されよう。
【００３５】
表現「％ｗ／ｗ」は、医薬製剤内に重量比ベース（すなわち、１ｇ／１００ｇが１％ｗ／ｗに相当）で存在する物質の割合を指す。
【００３６】
表現「ほぼ同じ時間」は、通常の投与時間の前後±３０分を意味する。
【００３７】
表現「高安定」及び／または「耐久的にも安定」は、２５℃及び６０％ＲＨで薬剤剤形を１か月貯蔵したのちの有効成分の化学的完全性が、少なくとも９５％であることを意味する。
【００３８】
１つの実施形態では、２５℃及び６０％ＲＨで薬剤剤形を１か月貯蔵したのちの該化学的完全性は、少なくとも９６％である。
【００３９】
別の実施形態では、２５℃及び６０％ＲＨで薬剤剤形を１か月貯蔵したのちの該化学的完全性は、少なくとも９７％である。
【００４０】
好ましい実施形態では、２５℃及び６０％ＲＨで薬剤剤形を１か月貯蔵したのちの該化学的完全性は、少なくとも９８％である。
【００４１】
さらなる好ましい実施形態では、２５℃及び６０％ＲＨで薬剤剤形を１か月貯蔵したのちの該化学的完全性は、少なくとも９９％である。
【００４２】
本発明の別の実施形態は、２５℃及び６０％ＲＨで３か月貯蔵したのちの薬剤剤形の化学的完全性を熟考する。
【００４３】
該実施形態では、２５℃及び６０％ＲＨで薬剤剤形を３か月貯蔵したのちの薬剤剤形の化学的完全性は、少なくとも９５％である。
【００４４】
好ましい実施形態では、２５℃及び６０％ＲＨで薬剤剤形を３か月貯蔵したのちの薬剤剤形の化学的完全性は、少なくとも９６％である。
【００４５】
別の好ましい実施形態では、２５℃及び６０％ＲＨで薬剤剤形を３か月貯蔵したのちの薬剤剤形の化学的完全性は、少なくとも９７％である。
【００４６】
さらなる好ましい実施形態では、２５℃及び６０％ＲＨで薬剤剤形を３か月貯蔵したのちの薬剤剤形の化学的完全性は、少なくとも９８％である。
【００４７】
さらなるより好ましい実施形態では、２５℃及び６０％ＲＨで薬剤剤形を３か月貯蔵したのちの薬剤剤形の化学的完全性は、少なくとも９９％である。
【００４８】
本発明の別の実施形態は、４０℃及び７５％ＲＨで１か月貯蔵したのちの薬剤剤形の化学的完全性を熟考する。
【００４９】
該実施形態では、４０℃及び７５％ＲＨで薬剤剤形を１か月貯蔵したのちの薬剤剤形の化学的完全性は、少なくとも９５％である。好ましい実施形態では、４０℃及び７５％ＲＨで薬剤剤形を１か月貯蔵したのちの薬剤剤形の化学的完全性は、少なくとも９６％である。
【００５０】
別の好ましい実施形態では、４０℃及び７５％ＲＨで薬剤剤形を１か月貯蔵したのちの薬剤剤形の化学的完全性は、少なくとも９７％である。
【００５１】
さらなる好ましい実施形態では、４０℃及び７５％ＲＨで薬剤剤形を１か月貯蔵したのちの薬剤剤形の化学的完全性は、少なくとも９８％である。
【００５２】
さらなるより好ましい実施形態では、４０℃及び７５％ＲＨで薬剤剤形を１か月貯蔵したのちの薬剤剤形の化学的完全性は、少なくとも９９％である。
【００５３】
本発明の別の実施形態は、４０℃及び７５％ＲＨで３か月貯蔵したのちの薬剤剤形の化学的完全性を熟考する。
【００５４】
該実施形態では、４０℃及び７５％ＲＨで薬剤剤形を３か月貯蔵したのちの薬剤剤形の化学的完全性は、少なくとも９５％である。好ましい実施形態では、４０℃及び７５％ＲＨで薬剤剤形を３か月貯蔵したのちの薬剤剤形の化学的完全性は、少なくとも９６％である。
【００５５】
別の好ましい実施形態では、４０℃及び７５％ＲＨで薬剤剤形を３か月貯蔵したのちの薬剤剤形の化学的完全性は、少なくとも９７％である。
【００５６】
さらなる好ましい実施形態では、４０℃及び７５％ＲＨで薬剤剤形を３か月貯蔵したのちの薬剤剤形の化学的完全性は、少なくとも９８％である。
【００５７】
さらなるより好ましい実施形態では、４０℃及び７５％ＲＨで薬剤剤形を３か月貯蔵したのちの薬剤剤形の化学的完全性は、少なくとも９９％である。
【００５８】
ストレスのかかった貯蔵条件下で、３つの不純物が検出され、４−（トリフルオロメチル）サリチル酸、６−トリフルオロメチル−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−キサンテン−１，９−ジオン、及び１，３−シクロヘキサンジオンであると化学的にみなされた。これらはさらに、Ｉｍｐ−１、Ｉｍｐ−２、及びＩｍｐ−３として、言及される。このような不純物は、ＷＯ２０１５１０１７９４内に以前に報告されている。
【００５９】
４０℃及び７５％ＲＨで６か月などの短期間試験することは、２５℃（すなわち室温）で、より長い期間（１５〜１８か月）安定性を示すと考えられる、と提示される。
【図面の簡単な説明】
【００６０】
【図１Ａ】図１Ａは、加速された安定性条件の中で、３か月間にわたる実施可能例１〜３からのＩｍｐ−２の量である。
【図１Ｂ】図１Ｂは、加速された安定性条件の中で、３か月間にわたる実施可能例４〜９からのＩｍｐ−２の量である。
【図２Ａ】図２Ａは、加速された安定性条件の中で、３か月間にわたる実施可能例１〜３からの総不純物の量である。
【図２Ｂ】図２Ｂは、加速された安定性条件の中で、３か月間にわたる実施可能例４〜９からの総不純物の量である。
【図３Ａ】図３Ａは、長期の安定性条件の中で、３か月間にわたる実施可能例１〜３からのＩｍｐ−２の量である。
【図３Ｂ】図３Ｂは、長期の安定性条件の中で、３か月間にわたる実施可能例４〜９からのＩｍｐ−２の量である。
【図４Ａ】図４Ａは、長期の安定性条件の中で、３か月間にわたる実施可能例１〜３からの総不純物の量である。
【図４Ｂ】図４Ｂは、長期の安定性条件の中で、３か月間にわたる実施可能例４〜９からの総不純物の量である。
【実施例】
【００６１】
表１に開示されるとおり、９つの医薬製剤は、実施可能例１〜９で報告されるとおりに試験された。
【００６２】
【表１】
2019504846.tif 000002
使用された材料
【００６３】
活性医薬成分
ＥＰ０８０５７９１Ｂ１に記載される手順に従って、ニチシノンが得られた。その化学的純度（すなわち、９９．９５％）を、２３５ｎｍの波長検出で、ＨＰＬＣの手段により、評価した。
【００６４】
希釈剤
α化でんぷん：（Ｓｔａｒｃｈ  １５００（登録商標）；Ｃｏｌｏｒｃｏｎ、  Ｅｉｇｈｅｎｍａｎｎ  ＆  Ｖｅｒｏｎｅｌｌｉ）ラクトース一水和物＾（Ｌａｃｔｏｐｒｅｓｓ（登録商標）噴霧乾燥；ＤＦＥ  Ｐｈａｒｍａ）無水リン酸水素カルシウム（ＤＬＣＡＦＯＳ（登録商標）、Ｂｕｄｅｎｈｅｉｍ）
【００６５】
潤滑剤
ステアリン酸（ステアリン酸５０、Ｃａｒｌｏ  Ｅｒｂａ）ステアリン酸マグネシウム（ｖｅｇｅｔａｌ  ｇｒａｄｅ、  Ｌｉｇａｍｅｄ  ＭＦ−３−Ｖ、  Ｐｅｔｅｒ  Ｇｒｅｖｅｎ  Ｎｅｄｅｒｌａｎｄ）
【００６６】
実施可能例
医薬製剤
例証した実現可能性医薬製剤を得るための一般的な手順を、本明細書の以下に記載する。
【００６７】
ニチシノン（２．５ｍｇ）及び希釈剤（２６９．７５ｍｇ）を、Ｔｕｒｂｕｌａ（登録商標）内で、２３ｒｐｍで３分間混合した。潤滑剤（２．７５ｍｇ）を次いで加え、同じ混合速度（すなわち、２３ｒｐｍ）で、もう１分混合を続けた。潤滑剤を加えない場合は、希釈剤の量は２７２．５ｍｇに調整し、混合ステップの長さは４分に調整した。
【００６８】
次いで、ハードゼラチンカプセルサイズ２を、半自動Ｚｕｍａ  ＯＳＺ／１５０充填機の手段によって、２．５ｍｇのニチシノン、１％ｗ／ｗの潤滑剤（もし存在すれば）、残りは希釈剤材料を含有する、２７５ｍｇの混合物で充填した。
【００６９】
貯蔵条件
カプセルは、以下に報告するとおり、３つの異なる環境条件（すなわち、温度及び相対湿度（ＲＨ））で貯蔵した。
・条件１（冷蔵した安定性試験）
５℃／
・条件２（長期安定性試験）
２５℃／６０％ＲＨ
・条件３（加速された安定性試験）
４０℃／７５％ＲＨ
【００７０】
以下に報告するとおり、様々な時点での医薬製剤の不純物特性を十分に評価するための適切な分析方法が開発された。
【００７１】
実施可能例の医薬製剤は、適切な成分を選択して、本明細書の上記に報告した一般的な手順を用いて得られた。実現可能性試験の間、不純物の総量が検討され、結果を図１Ａ、１Ｂ、２Ａ、２Ｂ、３Ａ、３Ｂ、４Ａ及び４Ｂに表す。
【００７２】
分析方法
溶解相（ＤＰ）：ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ：１／１
カラム：Ｓｕｎｆｉｒｅ  Ｃ１８  ５μｍ、２５０ｘ４．６ｍｍ
流量：１ｍｌ／分
注入量：１０μｌ
波長検出：２３５ｎｍ
カラム温度：３５℃
不純物１及び２（すなわちＩｍｐ−１及びＩｍｐ−２）の溶出条件
溶出剤Ａ：ＣＨ３ＣＮ
溶出剤Ｂ：ＣＨ３ＣＯ２ＮＨ４  ０．０２Ｍ
勾配−１：
【００７３】
【表２】
2019504846.tif 000003
実施時間：３５ｍｎ、実施後：１１分
不純物３（すなわち、Ｉｍｐ−３）の溶出条件
溶出剤Ｃ：ＣＨ３ＣＮ
溶出剤Ｄ：Ｈ３ＰＯ４  ０．１％
勾配−２：
【００７４】
【表３】
2019504846.tif 000004
実施時間：２５分、実施後：１分
【００７５】
溶解方法
試験溶液
分析する５０ｍｇの製剤化されたニチシノンを、５０ｍｌのメスフラスコ内の２ｍｌのＣＨ３ＣＮに溶解する。該溶液を、次いで必要とされる量のＤＰを追加することにより、５０ｍｌに調整する。
【００７６】
基準溶液Ａ
１０ｍｇのニチシノン（標準試料）及びそれぞれ１５ｍｇのＩｍｐ−１及びＩｍｐ−２を、１００ｍｌのメスフラスコ内の２ｍｌのＣＨ３ＣＮ内に溶解する。該溶液を、次いで必要とされる量のＤＰを追加することにより、１００ｍｌに調整する。こうして得られた１ｍｌの溶液を、次いで９９ｍｌのＤＰで１００ｍｌまで希釈する。
【００７７】
基準溶液は、０．１０％のニチシノン及び、０．１５％のそれぞれの不純物を含有する。
【００７８】
基準溶液Ｂ
１５ｍｇのＩｍｐ−３を、１００ｍｌのメスフラスコ内で１００ｍｌまでＤＰで溶解する。こうして得られた１ｍｌの溶液を、次いで９９ｍｌのＤＰで１００ｍｌまで希釈する。
【００７９】
基準溶液は、０．１５％のＩｍｐ−３を含有する。
【００８０】
二塩基性リン酸カルシウムを希釈剤（すなわち、実施可能例１〜３）として含有する製剤は、４０℃／７５％ＲＨで、または２５℃／６０％ＲＨでも、たとえより低い範囲内でも、１か月後でさえ、環化した不純物の形成を急速に許容するため、結果として不安定であった。これを、図１Ａ及び３Ａそれぞれに、強調している。二塩基性リン酸カルシウム含有製剤は、潤滑剤が存在しない場合、環化分解生成物を形成しにくく、オキソテトラヒドロキサントン（すなわち、図１Ａ）の形成に関して、ステアリン酸はむしろマイナス効果を示していることに注目するのは興味深い。貯蔵条件中に、形成される任意の不純物を探すとき、実施可能例１〜３のいずれの製剤も適切でないことは明らかである。というのも、４０℃／７５％ＲＨ（すなわち、図２Ａ）で、３か月後には、約４０〜５０％の不純物が形成される一方で、２５℃／６０％ＲＨ（図４Ａ）で、３か月後には、１０％を超えるニチシノンが分解される。
【００８１】
ラクトース（すなわち、実施可能例４〜６）を含有する製剤は、ステアリン酸も含むとき、結果としてきわめて安定する。ステアリン酸マグネシウムは、加速された及び長期の安定性試験（すなわち、それぞれ図１Ｂ及び３Ｂ）の両方において、オキソテトラヒドロキサントンの形成を考えるとき、悪影響を有した。この傾向は、どのような条件が用いられても（すなわち、図２Ｂ及び４Ｂ）、貯蔵中に形成されるすべての不純物を考えるときにも、観察することができる。驚くべきことに、ステアリン酸の存在は、ニチシノン／ラクトース製剤（表１Ｂ、２Ｂ、３Ｂ、及び４Ｂにおける実施可能例６対実施可能例４及び５）の安定性を大幅に改善した。
【００８２】
α化する前のでんぷん（すなわち、実施可能例７〜９）を含有する製剤は、ステアリン酸も含むとき、結果としてきわめて安定し、オキソテトラヒドロキサントンの形成は非常に限定される。実際、驚くべきことに、オキソテトラヒドロキサントンの量は、加速された安定性実験において（図１Ｂの実施可能例６対実施可能例５）、１１倍以上も低減した。その他の不純物のレベルも、加速された安定性条件（すなわち、４０℃／７５％ＲＨで３か月後に０．３４％）においてさえも、きわめて低いレベルにとどまった。
【００８３】
実施可能例６及び９の有望な製剤から始めて、さらなる改善された安定性特性を伴う製剤を特定するための追加実験が行われた。実施可能例９から得られた、実施例１〜３に例示する化学組成物は、きわめて高い安定性特性を示した。
実施例１〜３
【００８４】
【表４】
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【００８５】
混合
大型バッチのために、ニチシノンを、希釈剤の総量の２５％とともに低密度ポリエチレン（ＬＤＰＥ）バッグに入れ、１分間、１０ｒｐｍで混合して、「プレミックス１」を得る。その後、希釈剤の総量の別の２５％を「プレミックス１」に加え、以前と同じ条件で再び混合して、「プレミックス２」を得る。後者を次いで、希釈剤の総量の残り５０％とともに双円錐ミキサー内に移し、次いでステアリン酸を加える。混合物全体を、次いで１０分±２分、混合する。
【００８６】
カプセル充填
カプセルサイズ２（１０ｍｇ強度のカプセルに対して。２及び５ｍｇ強度のカプセルに対してはサイズ３）が、自動ＩＮ−ＣＡＰ充填機（Ｂｏｎａｐａｃｅ）を用いて、充填された。
【００８７】
溶解試験
このような試験が、脱イオン水内にＫＨ２ＰＯ４及びＮａＯＨを溶かして作成された、ｐＨ６．８の緩衝溶液９００ｍｌを含有する容器内で実施された。
【００８８】
安定性
１０ｍｇ強度のカプセル（すなわち、実施例１）の安定性が、様々な時点での医薬製剤の不純物特性を十分に評価するために分析された。使用された分析方法は、以下に報告する。
【００８９】
分析方法
溶解相（ＤＰ）：ＣＨ３ＣＮ／ＭｅＯＨ：６５／３５
カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｓｙｎｅｒｇｉ  ４μｍ（商標）Ｈｙｄｒｏ−ＲＰ  ８０Ａ  １００ｘ４．６ｍｍ
流量：１．５ｍｌ／分
注入量：１０μｌ
波長検出：２５５ｎｍ及び３１０ｎｍ
カラム温度：３０℃
溶出剤Ａ：ＣＨ３ＣＮ
溶出剤Ｂ：ｐＨ３のアセテート緩衝溶液
勾配：
【００９０】
【表５】
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【００９１】
【表６】
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【００９２】
【表７】
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【００９３】
【表８】
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【００９４】
表２〜４に報告された結果から、当業者には理解されるとおり、このような製剤は、貯蔵条件と関係なく、長期間非常に安定している。さらに、通常の不純物、６−トリフルオロメチル−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−キサンテン−１，９−ジオン（すなわち、Ｉｍｐ−２）は、０．０５％未満である。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
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【国際調査報告】
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