(57)【要約】  １種以上の担体材料内に分散されたアトバコンのナノ粒子を含む固形組成物であって、アトバコンが少なくとも１０重量％の量で存在する、固形組成物。また、アトバコンのナノ粒子の筋肉内注射用又は皮下注射用製剤が記載される。【選択図】図８
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
１種以上の担体材料内に分散されたアトバコンのナノ粒子を含む固形組成物であって、前記アトバコンが少なくとも１０重量％の量で存在する、固形組成物。
【請求項２】
前記１種以上の担体材料が、親水性ポリマー活性及び界面活性を提供し、好ましくは、ポリビニルアルコール−ポリエチレングリコールグラフト共重合体；ポリビニルアルコール；ポリビニルピロリドンｋ３０；ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウレート；ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート；デオキシコール酸ナトリウム；Ｄ−α−トコフェロールポリエチレングリコール１０００サクシネート；及びポリエチレングリコール（１５）−ヒドロキシステアレートからなる群から選択される、請求項１に記載の固形組成物。
【請求項３】
前記１種以上の担体材料が、
ポリビニルアルコール−ポリエチレングリコールグラフト共重合体と、Ｄ−α−トコフェロールポリエチレングリコール１０００サクシネート、
ポリビニルアルコール−ポリエチレングリコールグラフト共重合体と、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウレート、
ポリビニルアルコール−ポリエチレングリコールグラフト共重合体と、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート、
ポリビニルアルコール−ポリエチレングリコールグラフト共重合体と、ポリエチレングリコール（１５）−ヒドロキシステアレート、
ポリビニルピロリドンｋ３０と、Ｄ−α−トコフェロールポリエチレングリコール１０００サクシネート、
ポリビニルピロリドンｋ３０と、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウレート、
ポリビニルピロリドンｋ３０と、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート、
ポリビニルピロリドンｋ３０と、ポリエチレングリコール（１５）−ヒドロキシステアレート、
ポリビニルアルコールと、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート、
ポリビニルアルコールと、デオキシコール酸ナトリウム、
ポリビニルアルコールと、ポリエチレングリコール（１５）−ヒドロキシステアレート、
のいずれか１以上の組み合わせで提供される、請求項２に記載の固形組成物。
【請求項４】
前記１種以上の担体材料が、
ポリビニルアルコール−ポリエチレングリコールグラフト共重合体；ポリビニルアルコール；ポリビニルピロリドンｋ３０；ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウレート；ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート；デオキシコール酸ナトリウム；及びＤ−α−トコフェロールポリエチレングリコール１０００サクシネートからなる群から選択される、請求項２に記載の固形組成物。
【請求項５】
前記１種以上の担体材料が、
ポリビニルアルコール−ポリエチレングリコールグラフト共重合体と、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート、
ポリビニルピロリドンｋ３０と、Ｄ−α−トコフェロールポリエチレングリコール１０００サクシネート、
ポリビニルピロリドンｋ３０と、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウレート、
ポリビニルピロリドンｋ３０と、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート、
ポリビニルアルコールと、デオキシコール酸ナトリウム、
のいずれか１以上の組み合わせで提供される、請求項４に記載の固形組成物。
【請求項６】
前記アトバコンのナノ粒子が１００ｎｍ〜８００ｎｍの平均粒子径を有する、請求項１〜５のいずれか一項に記載の固形組成物。
【請求項７】
前記アトバコンのナノ粒子の多分散度が０．８以下である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の固形組成物。
【請求項８】
請求項１〜７のいずれか一項に記載の固形組成物を作製する方法であって、
（ｉ）
アトバコンを含む油相と、
請求項２〜５のいずれか一項に定義される１以上の選択された担体材料を含む水相と、
を含む水中油型エマルジョンを作製することと、
（ｉｉ）前記水中油型エマルジョンから前記油及び水を取り除いて、前記固形組成物を形成することと、
を含む、方法。
【請求項９】
請求項１〜７のいずれか一項に記載の固形組成物を作製する方法であって、
（ｉ）１種以上の溶媒中にアトバコンと請求項２〜５のいずれか一項に定義される１種以上の選択された担体材料とを含む単相溶液を作製することと、
（ｉｉ）前記１種以上の溶媒を取り除いて前記固形組成物を形成することと、
を含む、方法。
【請求項１０】
工程（ｉｉ）が凍結乾燥工程を含む、請求項８又は９に記載の固形組成物を作製する方法。
【請求項１１】
請求項１〜７のいずれか一項に記載の固形組成物と、任意に１種以上の追加の（薬学的に許容可能な）賦形剤とを含む、注射用形態の医薬組成物又は獣医用組成物。
【請求項１２】
筋肉内注射用及び／又は皮下注射用の形態である、請求項１１に記載の医薬組成物又は獣医用組成物。
【請求項１３】
アトバコンのナノ粒子の筋肉内注射用製剤。
【請求項１４】
アトバコンのナノ粒子の皮下注射用製剤。
【請求項１５】
アトバコンのナノ粒子がそれぞれ、コアであり、その周りに１種以上の担体材料で構成される外層が備えられている、請求項１３に記載の筋肉内注射用製剤、又は請求項１４に記載の皮下注射用製剤。
【請求項１６】
デポ形態である、請求項１２に記載の医薬組成物若しくは獣医用組成物、請求項１３若しくは１５に記載の筋肉内注射用製剤、又は請求項１４若しくは１５に記載の皮下注射用製剤。
【請求項１７】
患者に投与された場合、投与日から少なくとも約２週間の期間に亘ってアトバコンを前記患者の血流へと放出する、請求項１６に記載の医薬組成物若しくは獣医用組成物、筋肉内注射用製剤、又は皮下注射用製剤。
【請求項１８】
水性媒質中に分散されたアトバコンの複数のナノ粒子を含む水性分散物であって、アトバコンの各ナノ粒子がコアであり、そのコアの少なくとも一部の周りに１種以上の担体材料で構成される外層が備えられており、前記アトバコンが少なくとも１０ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する、水性分散物。
【請求項１９】
油性媒質中に分散されたアトバコンの複数のナノ粒子と、１種以上の担体材料とを含み、
前記アトバコンが少なくとも１０ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する、油性分散物。
【請求項２０】
前記１種以上の担体材料が親水性ポリマー活性及び界面活性を提供し、
ポリビニルアルコール−ポリエチレングリコールグラフト共重合体；ポリビニルアルコール；ポリビニルピロリドンｋ３０；ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウレート；ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート；デオキシコール酸ナトリウム；Ｄ−α−トコフェロールポリエチレングリコール１０００サクシネート；及びポリエチレングリコール（１５）−ヒドロキシステアレートからなる群から選択される、請求項１６若しくは１７に記載の筋肉内注射用製剤若しくは皮下注射用製剤、請求項１８に記載の水性分散物、又は請求項１９に記載の油性分散物。
【請求項２１】
前記１種以上の担体材料が、
ポリビニルアルコール−ポリエチレングリコールグラフト共重合体と、Ｄ−α−トコフェロールポリエチレングリコール１０００サクシネート、
ポリビニルアルコール−ポリエチレングリコールグラフト共重合体と、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウレート、
ポリビニルアルコール−ポリエチレングリコールグラフト共重合体と、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート、
ポリビニルアルコール−ポリエチレングリコールグラフト共重合体と、ポリエチレングリコール（１５）−ヒドロキシステアレート、
ポリビニルピロリドンｋ３０と、Ｄ−α−トコフェロールポリエチレングリコール１０００サクシネート、
ポリビニルピロリドンｋ３０と、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウレート、
ポリビニルピロリドンｋ３０と、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート、
ポリビニルピロリドンｋ３０と、ポリエチレングリコール（１５）−ヒドロキシステアレート、
ポリビニルアルコールと、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート、
ポリビニルアルコールと、デオキシコール酸ナトリウム、
ポリビニルアルコールと、ポリエチレングリコール（１５）−ヒドロキシステアレート、
のいずれかの１以上の組み合わせで提供される、請求項２０に記載の筋肉内注射用製剤、皮下注射用製剤、水性分散物、又は油性分散物。
【請求項２２】
前記１種以上の担体材料が、
ポリビニルアルコール−ポリエチレングリコールグラフト共重合体；ポリビニルアルコール；ポリビニルピロリドンｋ３０；ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウレート；ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート；デオキシコール酸ナトリウム；及びＤ−α−トコフェロールポリエチレングリコール１０００サクシネートからなる群から選択される、請求項２０に記載の筋肉内注射用製剤、皮下注射用製剤、水性分散物、又は油性分散物。
【請求項２３】
前記１種以上の担体材料が、
ポリビニルアルコール−ポリエチレングリコールグラフト共重合体と、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート、
ポリビニルピロリドンｋ３０と、Ｄ−α−トコフェロールポリエチレングリコール１０００サクシネート、
ポリビニルピロリドンｋ３０と、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウレート、
ポリビニルピロリドンｋ３０と、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート、
ポリビニルアルコールと、デオキシコール酸ナトリウム、
のいずれか１以上の組み合わせで提供される、請求項２２に記載の筋肉内注射用製剤、皮下注射用製剤、水性分散物、又は油性分散物。
【請求項２４】
前記コアがそれぞれアトバコンから本質的になる、請求項１６〜２３のいずれか一項に記載の筋肉内注射用製剤若しくは皮下注射用製剤、請求項１８若しくは２０〜２３のいずれか一項に記載の水性分散物、又は請求項１９〜２３のいずれか一項に記載の油性分散物。
【請求項２５】
前記アトバコンのナノ粒子が１００ｎｍ〜８００ｎｍの平均粒子径である、請求項１６〜２４のいずれか一項に記載の筋肉内注射用製剤若しくは皮下注射用製剤、請求項１８若しくは２０〜２４のいずれか一項に記載の水性分散物、又は請求項１９〜２４のいずれか一項に記載の油性分散物。
【請求項２６】
水性媒質中に分散された場合の前記アトバコンのナノ粒子の平均ゼータ電位が−１００ｍＶ〜＋１００ｍＶである、請求項１６〜２５のいずれか一項に記載の筋肉内注射用製剤若しくは皮下注射用製剤、請求項１８若しくは２０〜２５のいずれか一項に記載の水性分散物、又は請求項１９〜２５のいずれか一項に記載の油性分散物。
【請求項２７】
少なくとも１０ｍｇ／ｍＬの濃度でアトバコンを含む、請求項１６〜２６のいずれか一項に記載の筋肉内注射用製剤若しくは皮下注射用製剤、請求項１８若しくは２０〜２６のいずれか一項に記載の水性分散物、又は請求項１９〜２６のいずれか一項に記載の油性分散物。
【請求項２８】
請求項１〜７のいずれか一項に記載の固形組成物を水性媒質中に分散させることを含む、請求項１８又は２０〜２７のいずれか一項に記載の水性分散物を作製する方法。
【請求項２９】
請求項１〜７のいずれか一項に記載の固形組成物を油性媒質中に分散させることを含む、請求項１９〜２７のいずれか一項に記載の油性分散物を作製する方法。
【請求項３０】
請求項１８又は２０〜２７のいずれか一項に記載の水性分散物、又は請求項１９〜２７のいずれか一項に記載の油性分散物と、任意に１種以上の追加の（薬学的に許容可能な）賦形剤とを含む、注射用形態の医薬組成物又は獣医用組成物。
【請求項３１】
筋肉内注射用又は皮下注射用の形態である、請求項３０に記載の医薬組成物又は獣医用組成物。
【請求項３２】
デポ形態である、請求項３１に記載の医薬組成物又は獣医用組成物。
【請求項３３】
医薬として用いられる、請求項１〜７のいずれか一項に記載の固形組成物、請求項１１、１２、１６、１７、３０、３１若しくは３２のいずれか一項に記載の薬学的若しくは獣医学的な注射用組成物、請求項１３、１５、１６、１７若しくは２０〜２７のいずれか一項に記載の筋肉内注射用製剤、請求項１４〜１７若しくは２０〜２７のいずれか一項に記載の皮下注射用製剤、請求項１８若しくは２０〜２７のいずれか一項に記載の水性分散物、又は請求項１９〜２７のいずれか一項に記載の油性分散物。
【請求項３４】
前記使用が、単剤療法、又はプログアニル、メフロキン、クロロキン、ヒドロキシクロロキン、キニーネ、キニジン、アーテメータ、ルメファントリン、プリマキン、ドキシサイクリン、テトラサイクリン、クリンダマイシン、ジヒドロアルテミシニン、ピペラキン、及びスルファドキシンを伴う若しくはスルファドキシンを伴わないピリメタミンのいずれかの１以上の他の薬物との組み合わせによる併用療法としての使用である、請求項３３に記載の医薬として用いられる固形組成物、薬学的又は獣医学的な注射用組成物、筋肉内注射用製剤、皮下注射用製剤、水性分散物、及び油性分散物。
【請求項３５】
寄生虫及び／又は真菌の感染症の治療及び／又は予防のために用いられる、請求項１〜７のいずれか一項に記載の固形組成物、請求項１１、１２、１６、１７、３０、３１若しくは３２のいずれか一項に記載の薬学的又は獣医学的な注射用組成物、請求項１３、１５、１６、１７若しくは２０〜２７のいずれか一項に記載の筋肉内注射用製剤、請求項１４〜１７若しくは２０〜２７のいずれか一項に記載の皮下注射用製剤、請求項１８若しくは２０〜２７のいずれか一項に記載の水性分散物、又は請求項１９〜２７のいずれか一項に記載の油性分散物。
【請求項３６】
前記使用が、単剤療法、又はプログアニル、メフロキン、クロロキン、ヒドロキシクロロキン、キニーネ、キニジン、アーテメータ、ルメファントリン、プリマキン、ドキシサイクリン、テトラサイクリン、クリンダマイシン、ジヒドロアルテミシニン、ピペラキン、及びスルファドキシンを伴う若しくはスルファドキシンを伴わないピリメタミンのいずれかの１以上の他の薬物との組み合わせによる併用療法としての使用である、請求項３５に記載の寄生虫及び／又は真菌の感染症の治療及び／又は予防のために用いられる、固形組成物、薬学的又は獣医学的な注射用組成物、筋肉内注射用製剤、皮下注射用製剤、水性分散物、及び油性分散物。
【請求項３７】
前記寄生虫感染症が、プラスモジウム属の寄生虫によって、若しくはトキソプラズマ属の寄生虫によって、若しくはバベシア属の寄生虫によって惹き起こされる、又は前記真菌感染症がニューモシスティス属の真菌によって惹き起こされる、請求項３５又は３６に記載の固形組成物、薬学的又は獣医学的な注射用組成物、筋肉内注射用製剤、皮下注射用製剤、水性分散物、又は油性分散物。
【請求項３８】
前記寄生虫感染症がマラリア、トキソプラズマ症若しくはバベシア症である、又は前記真菌感染症がニューモシスティス肺炎である、請求項３７に記載の固形組成物、薬学的又は獣医学的な注射用組成物、筋肉内注射用製剤、皮下注射用製剤、水性分散物、又は油性分散物。
【請求項３９】
寄生虫感染症又は真菌感染症を治療及び／又は予防する方法であって、該方法が、寄生虫感染症又は真菌感染症を患う又はそれを患うリスクがある患者に対して、治療的有効量の請求項１〜７のいずれか一項に記載の固形組成物、請求項１１、１２、１６、１７、３０、３１若しくは３２のいずれか一項に記載の薬学的若しくは獣医学的な注射用組成物、請求項１３、１５、１６、１７若しくは２０〜２７のいずれか一項に記載の筋肉内注射用製剤、請求項１４〜１７若しくは２０〜２７のいずれか一項に記載の皮下注射用製剤、請求項１８若しくは２０〜２７のいずれか一項に記載の水性分散物、又は請求項１９〜２７のいずれか一項に記載の油性分散物を投与することを含む、方法。
【請求項４０】
前記固形組成物、薬学的若しくは獣医学的な注射用組成物、筋肉内注射用製剤、皮下注射用製剤、水性分散剤、及び／又は油性分散剤を、単剤療法として、又はプログアニル、メフロキン、クロロキン、ヒドロキシクロロキン、キニーネ、キニジン、アーテメータ、ルメファントリン、プリマキン、ドキシサイクリン、テトラサイクリン、クリンダマイシン、ジヒドロアルテミシニン、ピペラキン、及びスルファドキシンを伴う若しくはスルファドキシンを伴わないピリメタミンのいずれかの１以上の他の薬物との組み合わせによる併用療法として投与する、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
前記寄生虫感染症が、プラスモジウム属の寄生虫によって、若しくはトキソプラズマ属の寄生虫によって、若しくはバベシア属の寄生虫によって惹き起こされる、又は前記真菌感染症がニューモシスティス属の真菌によって惹き起こされる、請求項３９又は４０に記載の方法。
【請求項４２】
前記寄生虫感染症が、マラリア、トキソプラズマ症若しくはバベシア症である、又は前記真菌感染症がニューモシスティス肺炎である、請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】
前記アトバコンが約２００ｍｇ／ｋｇの用量で筋肉内注射によって投与される、請求項４２に記載のマラリアを予防する方法。
【請求項４４】
前記予防効果が投与後、少なくとも２８日間持続する、請求項４２又は４３に記載のマラリアを予防する方法。
【請求項４５】
注射用のアトバコンのナノ粒子の滅菌液体製剤の作製に対するキットであって、
請求項１〜７のいずれか一項に記載の固形組成物、請求項１１、１２、１６、１７、３０、３１若しくは３２のいずれか一項に記載の薬学的若しくは獣医学的な注射用組成物、請求項１３、１５、１６、１７若しくは２０〜２７のいずれか一項に記載の筋肉内注射用製剤、又は請求項１４〜１７若しくは２０〜２７のいずれか一項に記載の皮下注射用製剤を含む第１のコンテナと、
前記アトバコンを少なくとも１０ｍｇ／ｍＬの濃度まで希釈するのに十分な量の滅菌水性又は油性希釈剤を含む第２のコンテナと、
を備える、キット。
【請求項４６】
前記製剤がデポ製剤である、請求項４５に記載のキット。
【請求項４７】
前記注射が筋肉内注射である、請求項４５又は４６に記載のキット。
【請求項４８】
前記注射が皮下注射である、請求項４５又は４６に記載のキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は化学組成物に関する。本発明は、より詳しくは、排他的ではないが、全身性の感染症の治療及び予防に対する化学組成物に関し、マラリア、トキソプラズマ症及びニューモシスティス肺炎等の全身性の寄生生物及び真菌の感染症の治療及び予防における特定の（しかし排他的ではない）適用が可能である。
【背景技術】
【０００２】
マラリアを治療の改善と予防の改善の両方の提供が望ましいであろう寄生虫の感染症の例にとってみると、疑いなくマラリアが熱帯及び亜熱帯で広まる節足動物媒介性感染症であることが認識される。毎年２億人を超える人々がマラリアに感染して、ほぼ５０００００人が死亡し、その大半がサハラ以南のアフリカの幼児である。さらに、文献は、１年に何千万人もの旅行者がマラリア予防を必要とすると指摘している（非特許文献１）。マラリアは、プラスモジウム属の原生動物によって惹き起こされる。疾患の最も重篤な形態は、Ｐ．ファルシパルム（P.falciparum）によって惹き起こされるが、他の関連する種であるＰ．ヴィヴァクス（P.vivax）、Ｐ．オヴァレ（P.ovale）、Ｐ．マラリエ（P.malariae）、及びＰ．ノウレシ（P.knowlesi）がヒトに感染する可能性がある。この群のヒト病原性プラスモジウム種は、通常マラリア原虫と称される。
【０００３】
現在、マラリアに対して有効なワクチンはないが、マラリアの治療及び予防に対する有効な経口調合剤が長年知られている。例えば、アトバコンと塩酸プログアニルとの合剤は、アトバコン２５０ｍｇ及び塩酸プログアニル１００ｍｇを含む標準（成人）錠剤で、Ｍａｌａｒｏｎｅ（商標）の商品名で入手可能である。成人（体重４０ｋｇ超）においてマラリアを予防するため、マラリア地域に入る２４時間〜４８時間前に１日１回、標準錠剤を１錠服用し、マラリア地域に滞在する間１日１錠を継続し、更にマラリア地域を離れた後７日間に亘って継続すべきであり、すなわち、マラリア地域における滞在が１日のみであれば２．２５ｇ〜２．５ｇのアトバコンである。成人においてマラリアを治療するため、４錠の標準錠剤を３日間に亘り毎日、すなわち、合計３ｇのアトバコンを服用すべきである。
【０００４】
アトバコンは、ヒドロキシ−１，４−ナフトキノンであり、抗原虫薬である。アトバコンは、水にほとんど溶けないが、高度に脂肪親和性の黄色の結晶性固体として存在する。アトバコンの構造を以下に示す。
【化１】
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【０００５】
重症マラリアの治療に関しては、患者に経口薬物治療が許容され得るまで、アーテスネート（アルテミシニンの誘導体）の非経口（又は直腸）調合剤が世界保健機構によって（２０１１年の時点で）推奨されている。アルテミシニンは天然起源のセスキテルペンラクトンであり、その構造を以下に示す。アルテミシニンに由来する調合剤は、マラリア原虫に対して最も迅速に作用すると現在考えられている物質の１つであり、したがって、重症マラリアの治療に好ましい。
【化２】
2019518057.tif 000004
【０００６】
しかしながら、例えば静脈内アーテスネートの使用が承認されていない米国等の国では、静脈内キニジンが使用される場合がある。キニジンの構造を以下に示す。
【化３】
2019518057.tif 000005
【０００７】
マラリアの（ａ）予防及び（ｂ）治療に対して現在入手可能な他の調合剤として、（ａ）ドキシサイクリン、メフロキン、クロロキン及びプリマキン、並びに（ｂ）コアルテム（アーテメータとルメファントリン）、キニーネ、及びクロロキンがそれぞれ挙げられる。
【０００８】
マラリアの有効な予防、制御及び治療は、特に、薬及び医療へのアクセスが制限されているサハラ以南のアフリカで難しい課題を提示する。医療従事者及び消費者の両方によるマラリア予防療法及び抗マラリア治療に対する不十分なアドヒアランスは、予防／治療の失敗、重症マラリア、及び死亡と関連している。不十分なアドヒアランスは体内の治療量以下の薬物濃度に結びつき、全てのマラリア原虫を根絶せず、耐性寄生虫を生育させる可能性がある。体内の薬物濃度は、投薬忘れ及び／又は服用したものの適時ではない投薬のいずれかにより、治療量以下のとなり得る。したがって、マラリア予防療法及び抗マラリア治療に対する患者の高レベルのアドヒアランスは、処方された調合剤の有効性を保証するのに重要である。
【０００９】
したがって、投薬の減少、投与の容易さ、患者のアドヒアランス／コンプライアンスの増加、及びフォローアップケアの単純化の任意の１以上の観点から、マラリアを治療及び／又は予防する方法の改善が望ましいであろう。
【００１０】
また、以下の他の寄生虫及び真菌の疾患、例えば、上で簡単に言及したように、トキソプラズマ症（寄生虫トキソプラズマ・ゴンディ（Toxoplasma gondii）によって惹き起こされる）、バベシア症（寄生虫バベシア・ミクロチ（Babesia microti）によって惹き起こされる）、及びニューモシスティス肺炎（真菌ニューモシスチス・イロベチイ（Pneumocystis jirovecii）によって惹き起こされる）等のいずれかの治療及び／又は予防の方法の改善は、マラリアの治療及び／又は予防を改善する要望に対して提供されるのと同じ多くの理由で望ましいであろう。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【００１１】
【非特許文献１】Leder K. et al., Clin. Infect Dis., 2004, 39, 1104-1112
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
したがって、本明細書で確認されるか否かにかかわらず、既存の抗寄生虫性及び抗真菌性の予防及び／又は治療の提供と関連する少なくとも１つの不利益を除く及び／又は緩和することが本発明の目的である。
【００１３】
さらに、寄生虫及び真菌の感染症、特にマラリア、トキソプラズマ症、バベシア症及びニューモシスティス肺炎の予防及び／又は治療に対する改善された化学組成物を提供することが本発明の目的である。
【課題を解決するための手段】
【００１４】
本発明の第１の態様によれば、１種以上の担体材料内に分散されたアトバコンのナノ粒子を含む固形組成物であって、アトバコンが少なくとも１０重量％の量で存在する、固形組成物が提供される。
【００１５】
あらゆる疑義を避けるため、本発明の第１の態様による固形組成物は、１種以上の固形担体材料内に分散されたアトバコンの固形ナノ粒子を含む。２以上の固形担体材料が存在する場合、該２以上の固形担体材料は混合物で存在し、そこにアトバコンの固形ナノ粒子が分散されている。１種以上の固形担体材料は、アトバコンの固形ナノ粒子が分散されているマトリクスを効果的に形成する。したがって、本発明の化学組成物は、物質の混合物であり、本明細書における「化学組成物」又は「固形組成物」の言及はいずれも適宜解釈されるべきである。
【００１６】
本発明の第２の態様によれば、水性媒質中に分散されたアトバコンの複数のナノ粒子を含み、アトバコンの各ナノ粒子がコアであり、そのコアの少なくとも一部の周りに１種以上の担体材料で構成される外層が備えられ得て、ここで、アトバコンは少なくとも１０ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する、水性分散物が提供される。
【００１７】
本明細書を通して、外層に関して「備えられ得る」は、アトバコンのナノ粒子の幾つかに上記外層が備えられるが、アトバコンの全てのナノ粒子に上記外層が備えられる必要はないものの、全てに備えられていてもよいことを意味する。
【００１８】
あらゆる疑義を避けるため、本発明の第２の態様による水性分散物は、水性媒質中に分散されたアトバコンの複数の固形ナノ粒子を含み、アトバコンの各固形ナノ粒子がコアであり、そのコアの周りに１種以上の担体材料で構成される外層（その厚み、組成及び／又は任意の他の特性に関して均一な層である必要はない）が備えられ得る。
【００１９】
本発明の第３の態様によれば、油性媒質中に分散されたアトバコンの複数のナノ粒子と、１種以上の担体材料とを含み、アトバコンが少なくとも１０ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する、油性分散物が提供される。
【００２０】
上記分散物は、物理組成において（ａ）油性媒質（好適な非水性希釈剤）中に完全に溶解又は分散されている１種以上の担体材料、及び油性媒質中に分散されているアトバコンの固形ナノ粒子から、（ｂ）アトバコンのナノ粒子がマトリクスに捕捉されたままになるように油性媒質中に分散されている（すなわち、マトリクスそれ自体は溶解しない）幾つかのアトバコンのナノ粒子を含む１種以上の担体材料のマトリクスのより小さい粒子まで及ぶ場合がある。
【００２１】
適宜変化し得る、油性媒質に対する固形材料、すなわちアトバコン及び１種以上の担体材料の比率に応じて、油性分散物は、油性媒質に対して高い比率の固形材料を有するペーストの形態であってもよい。
【００２２】
本明細書を通して、別段の指定がない限り、名詞としての「分散物（複数の場合もある）」の用語及び同様の用語の使用は、本発明の水性分散物と油性分散物の両方を意味する。
【００２３】
本発明の第４の態様によれば、アトバコンのナノ粒子の筋肉内注射用製剤が提供される。
【００２４】
本発明の第５の態様によれば、アトバコンのナノ粒子の皮下注射用製剤が提供される。
【００２５】
また言いかえれば、本発明は、アトバコンの安定な直接筋肉内注射可能な製剤と、アトバコンの安定な直接皮下注射可能な製剤の両方を提供し、それぞれ、固体形態（又は実質的に固体の形態、例えばペースト）であってもよく、又は液体形態であってもよく、ここでアトバコンはナノ粒子の形態で存在する。
【００２６】
本明細書を通して、別段の指定がない限り、「注射用製剤（複数の場合もある）」及び同様の用語の使用は、筋肉内注射用製剤と皮下注射用製剤の両方を意味する。
【００２７】
本発明の固形組成物、分散物、及び注射用製剤は、それぞれ、固形ナノ微粒子の形態のアトバコンを含む。本発明のナノ粒子は、アトバコンの改善された剤形を提供する。また、本発明の固形組成物、分散物、及び注射用製剤は、それぞれ、体内でのアトバコンの全身分布を達成する手段を提供し、循環血流におけるより高い薬物レベルを提供する。これらの利点により、全身感染症、特に全身性の寄生虫感染症及び真菌感染症のより有効な治療及び／又は予防に対する機会が与えられる。代替的には又は付加的には、これらの利点により、アトバコンの必要とされる投薬量を減少させることも可能となる。
【００２８】
また、固形組成物におけるナノ粒子の提供は、投与、例えば非経口的な投与に対してナノ粒子の水性分散物又は油性分散物をそれぞれ形成する必要がある場合、ナノ粒子は好適な水性又は油性の希釈剤（例えば、薬学的に又は獣医学的に許容可能な注射用油）中に分散可能であることから有利となり得る。固形組成物のかかる分散物は、本発明の注射用製剤を形成し得る。
【００２９】
好適な油性希釈剤における固形組成物の分散によって油性分散物が形成される場合、上記分散物は、物理組成において（ａ）アトバコンのナノ粒子が油性希釈剤中に放出され分散されるように、油性希釈剤中に完全に溶解又は分散している１種以上の担体材料から、（ｂ）油性希釈剤中に分散されている、バルク固形組成物に適用される、例えば粉砕若しくはグラインディング（grinding）又は他の好適な細かく砕く技術によって形成される、組成物のより小さい粒子まで及ぶ場合がある。後者の場合、油性希釈剤中に分散されている組成物のより小さい粒子は、アトバコンの幾つかのナノ粒子を含む１種以上の担体材料のマトリクスの効果的に分離された部分であり、マトリクスそれ自体は溶解せず、アトバコンのナノ粒子はマトリクスに捕捉されたままである。
【００３０】
同じように、固形形態又は液体形態のいずれであっても、すぐに使用できる注射用製剤の提供は、容易に投与される単純で簡便な形態の医薬を提供する。
【００３１】
本発明の固形組成物及び分散物はどちらも、理想的には、両方が実質的に均質（又は分散物の場合は均質とされ得る）であり、すなわちアトバコンの投与量の一部が必要に応じて正確に測定され得るため、個別化された医療体制（medicine regimes）に適している。さらに、本発明の固形組成物は、水性媒質又は油性媒質中に容易に分散し、安定な水性分散物又は油性分散物をそれぞれ提供することが可能である。かかる安定な分散物は、アトバコンの正確な液体用量を提供するため、それら自体を所定の方法で分けることができる。また、アトバコンの正確な投薬は、固体形態又は液体形態にかかわらず、本発明の注射用製剤によって達成され得る。
【００３２】
個別化された用量を提供するかかる方法は、子供達はより低用量を必要とすることから、小児の投与に対して特に適用可能である。さらに、アトバコンの用量は、患者の体重、年齢及び他の状況（寄生虫又は真菌の感染症のステージ又は重症度等）に合わせて適宜適合され得る。
【００３３】
本発明の第６の態様によれば、水性媒質中に第１の態様の固形組成物を分散させることによって取得可能な、それによって得られる、又はそれによって直接得られる水性分散物が提供される。
【００３４】
本発明の第７の態様によれば、油性媒質（非水性媒質）中に第１の態様の固形組成物を分散させることによって取得可能な、それによって得られる、又はそれによって直接得られる油性分散物が提供される。
【００３５】
本発明の第８の態様によれば、本明細書に定義される固形組成物の作製方法が提供される。
【００３６】
本発明の第９の態様によれば、第８の態様による方法のいずれかによって取得可能な、それによって得られる、又はそれによって直接得られる固形組成物が提供される。
【００３７】
本発明の第１０の態様によれば、本発明の第１若しくは第９の態様の固形組成物、又は本発明の第２若しくは第６の態様の水性分散物、又は本発明の第３若しくは第７の態様の油性分散物と、任意に更なる薬学的に許容可能な希釈剤、担体、又は賦形剤とを含む医薬組成物が提供される。また、上記組成物は、獣医用組成物であってもよい。
【００３８】
本発明の第１１の態様によれば、医薬として用いられる本明細書に定義される固形組成物、分散物、又は注射用製剤が提供される。
【００３９】
本発明の第１２の態様によれば、寄生虫及び真菌の感染症（例えばマラリア、トキソプラズマ症、バベシア症、ニューモシスティス肺炎）の治療及び／又は予防のために用いられる、本明細書に定義される固形組成物、分散物、又は注射用製剤が提供される。
【００４０】
本発明の第１３の態様によれば、寄生虫及び真菌の感染症（例えばマラリア、トキソプラズマ症、バベシア症、ニューモシスティス肺炎）の治療及び／又は予防のために用いられる医薬の製造における、本明細書に定義される固形組成物又は分散物の使用が提供される。
【００４１】
本発明の第１４の態様によれば、寄生虫又は真菌の感染症を患っている又はそれを患うリスクがある患者に対して、治療的有効量の本明細書で定義される固形組成物、薬学的若しくは獣医学的な注射用組成物、分散物、又は注射用製剤を投与することを含む、寄生虫感染症（例えばマラリア、トキソプラズマ症、バベシア症）又は真菌感染症（例えばニューモシスティス肺炎）を治療及び／又は予防する方法が提供される。
【００４２】
本発明の第１５の態様によれば、注射用のアトバコンの滅菌液体製剤の作製に対するキットであって、該キットは、本明細書に定義される固形組成物、薬学的若しくは獣医学的な注射用組成物、又は注射用製剤を含む第１のコンテナと、少なくとも１０ｍｇ／ｍＬの濃度までアトバコンを希釈するのに十分な量の滅菌水性又は油性（非水性）希釈剤を含む第２のコンテナとを備える、キットが提供される。
【００４３】
あらゆる疑義を避けるため、本発明の任意の態様の特徴（任意の好適な好ましい特徴を含む）は、別段の指定がない限り、本発明の他のあらゆる態様（複数の場合もある）の特徴（任意の好適な好ましい特徴を含む）でもあると見なされる。
【００４４】
本発明は、ここで、添付の図面を参照して、単なる非限定的な例としてより詳しく記載される。
【図面の簡単な説明】
【００４５】
【図１】実施例１に記載されるスクリーンの「ヒット」により達成されたアトバコンのナノ粒子のｚ−平均粒子径のプロットの図である。
【図２】実施例１に記載されるように、フルスケール（標準）製剤をハーフスケール製剤と比較したアトバコンのナノ粒子のｚ−平均粒子径のプロットの図である。
【図３】図３Ａ〜図３Ｋは、実施例２に記載されるように、製剤化されていないアトバコンと比較した、６時間に亘る本発明による様々な組成物から放出されるアトバコンのパーセンテージの個々のプロットの図である。
【図４】実施例２に記載されるように、製剤化されていないアトバコンと比較した、図３Ａ〜図３Ｋに個別にプロットされた組成物のそれぞれに対する２４時間までに放出されたアトバコンのパーセンテージのプロットの図である。
【図５】図５Ａ〜図５Ｃは、実施例４に記載されるように、製剤化されていないアトバコンと比較した、６時間に亘る本発明による様々な組成物から放出されるアトバコンのパーセンテージの個々のプロットの図である。
【図６】実施例４に記載されるように、製剤化されていないアトバコンと比較した、図５Ａ〜図５Ｃに個別にプロットされた組成物のそれぞれに対する２４時間までに放出されたアトバコンのパーセンテージのプロットの図である。
【図７】実施例５に記載されるように、製剤化されていないアトバコンと比較した、６時間に亘る本発明による様々な油性分散物から放出されるアトバコンのパーセンテージのプロットの図である。
【図８】図８ａ及び図８ｂは、実施例６に記載されるように、ＡＣＳ＿ＡＴＱ＿７及びＡＣＳ＿ＡＴＱ＿８のそれぞれに対する様々な投薬レジメン及び投薬チャレンジ間隔に関して、４２日間に亘るマウスにおける抗マラリア予防の提供についてアトバコンのナノ製剤の効能を判定する実験結果のプロットの図である。
【図９】図９ａ及び図９ｂは、実施例７に記載されるように、２００ｍｇ／ｋｇのナノ製剤を筋肉内注射によってマウスに投与した後の、ＡＣＳ＿ＡＴＱ＿７及びＡＣＳ＿ＡＴＱ＿８のそれぞれの経時的な血漿濃度の変動を示す薬物動態学的プロットの図である。
【図１０】アトバコンの血漿濃度と与えられた保護の効能との相関を示すプロットの図である。
【発明を実施するための形態】
【００４６】
定義
「ナノ粒子」又は「ナノ微粒子」の用語は、１ミクロン（μｍ）以下であるが１ナノメートル（ｎｍ）以上、すなわち１ｎｍ〜１０００ｎｍの範囲のサイズを有する粒子を意味するために本明細書で使用される。これらの用語は、明確であり、Petros and DeSimone, Nature Reviews Drug Discovery, 2010, 9, 615-627によって少なからず証明されるように、混乱なく当業者に十分理解される。
【００４７】
別段の指定がない限り、「粒子径」の用語は、数平均粒径を指すため本明細書で使用される。
【００４８】
別段の指定がない限り、「患者」の用語は、ヒト患者と動物患者の両方を含む。
【００４９】
「アトバコン」の用語は、アトバコンであるとして背景技術欄で説明された分子を指すため本明細書において使用され、またその薬学的に許容可能な塩、溶媒和物及び誘導体、そのプロドラッグと並んで、その任意の多型形態又は非晶質形態を含む。
【００５０】
「他の薬物」の用語は、予防的及び／又は治療的な併用療法において、本明細書に従って製剤化されるアトバコンと組み合わせて使用され得る、下記の他の薬物の（非網羅的な）一覧、すなわちプログアニル、メフロキン、クロロキン、ヒドロキシクロロキン、キニーネ、キニジン、アーテメータ、ルメファントリン、プリマキン、ドキシサイクリン、テトラサイクリン、クリンダマイシン、ジヒドロアルテミシニン、ピペラキン、及びスルファドキシンを伴う若しくはスルファドキシンを伴わないピリメタミンと並んで、その薬学的に許容可能な塩、溶媒和物及び誘導体、そのプロドラッグ、並びにその多型形態又は非晶質形態を指すため本明細書で使用される。
【００５１】
「予防すること」又は「予防」に対する言及は、予防的処置に関し、病状、障害又は状態に悩まされる可能性がある又はそれに罹りやすいが、まだ病状、障害又は状態の臨床上の又は不顕性の症状を経験又は呈していない患者において発生している病状、障害又は状態の臨床症状の出現を予防又は遅延することを含むことが認識される。特にマラリアに関しては、マラリア原虫が循環血流（赤血球中の）に限定される、又は感染の最初の数日間は肝臓に限定されることから、アトバコンの予防効果は、初期の肝臓期（原因的予防）と赤血球期（抑制的予防）の両方に及ぶ。
【００５２】
病状、障害又は状態の「治療」又はそれらを「治療すること」に対する言及は、（１）病状、障害若しくは状態を阻害すること、すなわち、疾患の発症若しくは（維持療法の場合の）その再発、若しくは少なくとも１つのその臨床上の若しくは不顕性の症状の停止、軽減若しくは遅延、又は（２）その疾患を和らげる若しくは減ずる、すなわち、病状、障害若しくは状態、若しくは少なくとも１つのその臨床上の若しくは不顕性の症状の緩解をもたらすことを含むことが更に認識される。
【００５３】
本発明に関して、「予防すること」又は「予防」の用語は、特定の病状、障害又は状態の治療において完全に有効である医薬を指すのみならず、部分的に有効な医薬も同様に包含すると見なされるものとする。
【００５４】
さらに、治療に対する患者集団の観点から考慮すると、「予防すること」及び「予防」の用語は、その標的集団における標的の障害又は状態（例えばマラリア、トキソプラズマ症、バベシア症、ニューモシスティス肺炎）の発病率を減少するのに有用である医薬と並んで、その標的集団から標的の病状、障害又は状態を完全に根絶するのに有用な医薬も包含すると見なされるものとする。
【００５５】
「治療的有効量」は、疾患を治療及び／又は予防するため患者に投与された場合に、疾患に対するかかる治療／予防を達成するのに十分な化合物の量を意味する。「治療的有効量」は、化合物、疾患及びその重症度、並びに治療される患者の年齢、体重等に応じて変化する。
【００５６】
「から本質的になる」の用語は、所与の生成物又は方法が、指定の材料又は工程と、任意に、特許請求の範囲に記載の発明の特性（複数の場合もある）に実質的に影響しない他の材料又は工程とのみからなることを意味するため本明細書において使用される。好適には、指定の材料（複数の場合もある）から本質的になる生成物は、８５％以上の指定の材料、より好適には９０％以上、より好適には９５％以上、最も好適には９８％以上の指定の材料（複数の場合もある）を含む。
【００５７】
別段の指定がない限り、本明細書で論じられる重量パーセンテージ（「重量％」）は、組成物の総重量の割合としての特定の構成成分の重量％に関する。
【００５８】
本明細書では、別の担体材料と「（実質的に）不混和性」である担体材料に対する言及は、２つの担体材料を含む混合物が単相を形成することができないことを意味する。
【００５９】
固形組成物
本発明は、１種以上の担体材料内に分散されたアトバコンのナノ粒子を含む固形組成物であって、アトバコンが少なくとも１０重量％の量で存在する、固形組成物を提供する。
【００６０】
アトバコンは、少なくとも１５重量％、更に好ましくは少なくとも２０重量％、より一層好ましくは少なくとも２５重量％、より一層好ましくは少なくとも３０重量％、より一層好ましくは少なくとも４０重量％、より一層好ましくは少なくとも５０重量％、より一層好ましくは少なくとも６０重量％、より一層好ましくは７０重量％、最も好ましくは少なくとも８０重量％の量で存在することが好ましい。
【００６１】
好ましくは、１種以上の担体材料は、親水性ポリマー活性及び界面活性を提供することができ、更に好ましくは、ポリビニルアルコール−ポリエチレングリコールグラフト共重合体；ポリビニルアルコール；ポリビニルピロリドンｋ３０；ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウレート；ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート；デオキシコール酸ナトリウム；Ｄ−α−トコフェロールポリエチレングリコール１０００サクシネート；及びポリエチレングリコール（１５）−ヒドロキシステアレートからなる群から選択され得る。
【００６２】
本明細書を通して、「１種以上の担体材料は親水性ポリマー活性及び界面活性を提供し得る」は、親水性ポリマー活性と界面活性の両方を提供する単一の担体材料が存在し得るか、又は複数の担体材料が存在し得て、その場合、複数のうちの１個（又はそれより多い）担体材料が親水性ポリマー活性を提供し得る一方で、複数のうちの別の担体材料（複数の場合もある）が界面活性を提供し得ることを意味する。後者の場合、簡略化するため、１種以上の担体材料は、親水性ポリマー活性及び界面活性を提供する担体材料について、それぞれ単に「（親水性）ポリマー」又は「界面活性剤」と称される場合がある。
【００６３】
したがって、１種以上の固形担体材料は、
ポリビニルアルコール−ポリエチレングリコールグラフト共重合体と、Ｄ−α−トコフェロールポリエチレングリコール１０００サクシネート、
ポリビニルアルコール−ポリエチレングリコールグラフト共重合体と、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウレート、
ポリビニルアルコール−ポリエチレングリコールグラフト共重合体と、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート、
ポリビニルアルコール−ポリエチレングリコールグラフト共重合体と、ポリエチレングリコール（１５）−ヒドロキシステアレート、
ポリビニルピロリドンｋ３０と、Ｄ−α−トコフェロールポリエチレングリコール１０００サクシネート、
ポリビニルピロリドンｋ３０と、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウレート、
ポリビニルピロリドンｋ３０と、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート、
ポリビニルピロリドンｋ３０と、ポリエチレングリコール（１５）−ヒドロキシステアレート、
ポリビニルアルコールと、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート、
ポリビニルアルコールと、デオキシコール酸ナトリウム、
ポリビニルアルコールと、ポリエチレングリコール（１５）−ヒドロキシステアレート、
のいずれか１以上の組み合わせで提供され得る。
【００６４】
より好ましくは、１種以上の担体材料は、
ポリビニルアルコール−ポリエチレングリコールグラフト共重合体；ポリビニルアルコール；ポリビニルピロリドンｋ３０；ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウレート；ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート；デオキシコール酸ナトリウム；及びＤ−α−トコフェロールポリエチレングリコール１０００サクシネートからなる群から選択され得る。
【００６５】
したがって、１種以上の固形担体材料は、
ポリビニルアルコール−ポリエチレングリコールグラフト共重合体と、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート、
ポリビニルピロリドンｋ３０と、Ｄ−α−トコフェロールポリエチレングリコール１０００サクシネート、
ポリビニルピロリドンｋ３０と、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウレート、
ポリビニルピロリドンｋ３０と、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート、
ポリビニルアルコールと、デオキシコール酸ナトリウム、
のいずれか１以上の組み合わせで提供され得る。
【００６６】
１種以上の固形担体材料は、好ましくは水溶性である。本発明に関して、担体材料（複数の場合もある）に適用される「水溶性」は、周囲温度及び周囲圧力での水中でのその溶解性が少なくとも１０ｇ／Ｌであることを意味する。
【００６７】
アトバコンの個々の固形ナノ粒子は、アトバコンから本質的になることが好ましい。
【００６８】
本発明の固形組成物は、患者にそのまま投与されてもよく、又は例えば、筋肉内デポ注射剤又は皮下デポ注射剤等の注射用製剤の形態の医薬組成物を提供するように更に製剤化されてもよい。
【００６９】
アトバコンのナノ粒子は、１ミクロン（μｍ）以下の平均粒子径を有する。アトバコンのナノ粒子は、１００ｎｍ〜１０００ｎｍの平均粒子径を有することが好ましい。アトバコンのナノ粒子は、２００ｎｍ〜８５０ｎｍの平均粒子径を有することが更に好ましい。
【００７０】
粒子径は、当該技術分野で知られている任意の好適な技術（例えば、レーザー回折、レーザー散乱、電子顕微鏡検査）によって評価され得る。本明細書では、水性媒質中に上記固形組成物を分散させ、Ｚｅｔａｓｉｚｅｒ（Malvern Instruments Ltd）を用いる動的光散乱によって粒子径を特定することにより粒子径を評価した。
【００７１】
アトバコンのナノ粒子の多分散度は、０．８以下、好ましくは０．６以下、より好ましくは０．４以下であってもよい。多分散度はアトバコンナノ粒子のサイズに関連し、当該技術分野で知られている好適な技術（例えばレーザー回析、レーザー散乱、電子顕微鏡検査）によって測定され得る。本明細書では、Ｍａｌｖｅｒｎ  Ｚｅｔａｓｉｚｅｒ（Malvern Instruments Ltd）を用いてアトバコンナノ粒子の粒子径の多分散度を評価した。
【００７２】
水性媒質中に分散された場合のアトバコンのナノ粒子の平均ゼータ電位は、−１００ｍＶ〜＋１００ｍＶであってもよい。一実施形態では、アトバコンのナノ粒子のゼータ電位は、−３０ｍＶ〜＋３０ｍＶであってもよい。別の実施形態では、アトバコンのナノ粒子のゼータ電位は、−２５ｍＶ〜＋２５ｍＶであってもよい。更に別の実施形態では、アトバコンのナノ粒子のゼータ電位は、−２５ｍＶ〜＋１０ｍＶであってもよい。一般に、比較的絶対値の小さいゼータ電位（正又は負のいずれか）は、ナノ粒子が細胞内により良好に取り込まれ、蓄積することを可能とすることがわかっている。本発明によれば、平均ゼータ電位は、Ｚｅｔａｓｉｚｅｒ（Malvern Instruments Ltd）の使用等の、当該技術分野で知られている技術によって測定され得る。
【００７３】
上記固形組成物は、より大きなサイズ、例えば５ミクロン〜３０ミクロン（μｍ）のサイズの固形の粒子又は顆粒を含んでもよく、各粒子又は顆粒は、１種以上の固形担体材料内に分散されたアトバコンの複数の固形ナノ粒子を含む。これらのより大きな粒子又は顆粒は、上記固形組成物を水性媒質と混合してアトバコンの個別の固形ナノ粒子を形成する際に分散する。
【００７４】
親水性ポリマー
以下の親水性ポリマーが本発明における使用に適している：
ポリビニルアルコール−ポリエチレングリコールグラフト共重合体（商品名Ｋｏｌｌｉｃｏａｔ（商標）で入手可能）、
ポリビニルアルコール（「ＰＶＡ」）、
平均Ｍｗ３００００を有するポリビニルピロリドンｋ３０（「ＰＶＰ  ｋ３０」）。
【００７５】
界面活性剤
以下の界面活性剤が本発明における使用に適している：
ポリソルベート２０（商品名Ｔｗｅｅｎ（商標）２０で入手可能）としても知られるポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウレート、
ポリソルベート８０（商品名Ｔｗｅｅｎ（商標）８０で入手可能）としても知られるポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート、
デオキシコール酸ナトリウム、
Ｄ−α−トコフェロールポリエチレングリコール１０００サクシネート、
ポリエチレングリコール（１５）−ヒドロキシステアレート（商品名Ｓｏｌｕｔｏｌ（商標）ＨＳで入手可能）。
【００７６】
特に、以下の界面活性剤が本発明における使用に好ましい：
ポリソルベート２０（商品名Ｔｗｅｅｎ（商標）２０で入手可能）としても知られるポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウレート、
ポリソルベート８０（商品名Ｔｗｅｅｎ（商標）８０で入手可能）としても知られるポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート、
デオキシコール酸ナトリウム、
Ｄ−α−トコフェロールポリエチレングリコール１０００サクシネート。
【００７７】
本発明では、界面活性を有する固形担体材料は、好適には、本明細書に定義される親水性ポリマー活性を有する担体材料と共に、アトバコンのナノ粒子を安定化することができ、薬学的使用に対して承認されている（例えば、それらの界面活性剤は米国食品医薬品局によって使用が承認されている）それらの界面活性剤から選択される。
【００７８】
親水性ポリマーと界面活性剤の特定の組み合わせ
当然のことながら、本発明における使用に対して、上述の親水性ポリマーのいずれか１種以上を、上述の界面活性剤のいずれか１種以上と組み合わせてもよい。しかしながら、親水性ポリマー（複数の場合もある）と界面活性剤（複数の場合もある）の以下の組み合わせが、本発明における使用に特に好ましい：
ポリビニルアルコール−ポリエチレングリコールグラフト共重合体と、Ｄ−α−トコフェロールポリエチレングリコール１０００サクシネート、
ポリビニルアルコール−ポリエチレングリコールグラフト共重合体と、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウレート、
ポリビニルアルコール−ポリエチレングリコールグラフト共重合体と、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート、
ポリビニルアルコール−ポリエチレングリコールグラフト共重合体と、ポリエチレングリコール（１５）−ヒドロキシステアレート、
ポリビニルピロリドンｋ３０と、Ｄ−α−トコフェロールポリエチレングリコール１０００サクシネート、
ポリビニルピロリドンｋ３０と、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウレート、
ポリビニルピロリドンｋ３０と、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート、
ポリビニルピロリドンｋ３０と、ポリエチレングリコール（１５）−ヒドロキシステアレート、
ポリビニルアルコールと、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート、
ポリビニルアルコールと、デオキシコール酸ナトリウム、
ポリビニルアルコールと、ポリエチレングリコール（１５）−ヒドロキシステアレート。
【００７９】
固形組成物の製剤化
特定の実施形態では、本明細書に定義される固形組成物は、１０重量％〜９９重量％のアトバコンを含み得る。好ましくは又は別の実施形態では、上記固形組成物は、１５重量％〜９５重量％のアトバコンを含み得る。更に好ましくは又は別の実施形態では、上記固形組成物は、少なくとも２０重量％、より好ましくは又は代替的には少なくとも４０重量％、より一層好ましくは又は代替的には少なくとも６０重量％、最も好ましくは又は代替的には少なくとも８０重量％のアトバコンを含み得る。
【００８０】
アトバコンは、１０重量％〜９９重量％、又は１０重量％〜９５重量％、又は１０重量％〜９０重量％の範囲等の少なくとも１０重量％の任意の量で存在する。
【００８１】
代替的には、アトバコンは、１５重量％〜９９重量％、又は１５重量％〜９５重量％、又は１５重量％〜９０重量％の範囲等の少なくとも１５重量％の量で存在し得る。
【００８２】
更に代替的には、アトバコンは、２０重量％〜９９重量％、又は２０重量％〜９５重量％、又は２０重量％〜９０重量％の範囲等の少なくとも２０重量％の量で存在し得る。
【００８３】
更に代替的には、アトバコンは、２５重量％〜９９重量％、又は２５重量％〜９５重量％、又は２５重量％〜９０重量％の範囲等の少なくとも２５重量％の量で存在し得る。
【００８４】
より一層代替的には、アトバコンは、３０重量％〜９９重量％、又は３０重量％〜９５重量％、又は３０重量％〜９０重量％の範囲等の少なくとも３０重量％の量で存在し得る。
【００８５】
より一層代替的には、アトバコンは、４０重量％〜９９重量％、又は４０重量％〜９５重量％、又は４０重量％〜９０重量％の範囲等の少なくとも４０重量％の量で存在し得る。
【００８６】
より一層代替的には、アトバコンは、５０重量％〜９９重量％、又は５０重量％〜９５重量％、又は５０重量％〜９０重量％の範囲等の少なくとも５０重量％の量で存在し得る。
【００８７】
より一層代替的には、アトバコンは、６０重量％〜９９重量％、又は６０重量％〜９５重量％、又は６０重量％〜９０重量％の範囲等の少なくとも６０重量％の量で存在し得る。
【００８８】
より一層代替的には、アトバコンは、７０重量％〜９９重量％、又は７０重量％〜９５重量％、又は７０重量％〜９０重量％の範囲等の少なくとも７０重量％の量で存在し得る。
【００８９】
より一層代替的には、アトバコンは、８０重量％〜９９重量％、又は８０重量％〜９５重量％、又は８０重量％〜９０重量％の範囲等の少なくとも８０重量％の量で存在し得る。
【００９０】
したがって、本発明の固形組成物は、高い薬物負荷を可能とし、毒性の可能性がある賦形剤（例えば界面活性剤）を最小に保持する。
【００９１】
上記固形組成物は、１重量％〜９０重量％の１種以上の選択された担体材料を含み得る。好ましくは又は一実施形態では、上記固形組成物は、５重量％〜８５重量％の１種以上の担体材料を含み得る。更に好ましくは又は別の実施形態では、上記固形組成物は、１０重量％〜８０重量％の１種以上の担体材料を含み得る。特定の実施形態では、上記固形組成物は、２０重量％〜６０重量％の１種以上の選択された担体材料を含み得る。疑義を避けるため、選択された担体材料のパーセント量は、その組成物中の上記の選択された担体材料全ての総重量を指す。
【００９２】
特定の実施形態では、上記固形組成物は、１重量％〜９０重量％の親水性ポリマーを含み得る。好ましくは又は別の実施形態では、上記固形組成物は、８重量％〜７０重量％の親水性ポリマーを含み得る。更に好ましくは又は別の実施形態では、上記固形組成物は、１０重量％〜６０重量％の親水性ポリマーを含み得る。より一層好ましくは又は特定の実施形態では、上記固形組成物は、１０重量％〜５０重量％の親水性ポリマーを含み得る。
【００９３】
特定の実施形態では、上記固形組成物は、１重量％〜７０重量％の界面活性剤を含み得る。好ましくは又は別の実施形態では、上記固形組成物は、２重量％〜５０重量％の界面活性剤を含み得る。更に好ましくは又は別の実施形態では、上記固形組成物は、３重量％〜３０重量％の界面活性剤を含み得る。
【００９４】
或る実施形態では、上記固形組成物は、親水性ポリマー活性を提供する担体材料と、界面活性を提供する担体材料とを３０：１〜１：１０の各比率で含み得る。好ましくは、又は特定の実施形態では、上記固形組成物は、親水性ポリマー活性を提供する担体材料と、界面活性を提供する担体材料とを１５：１〜１：２の各比率で含み得る。更に好ましくは、又は別の実施形態では、上記固形組成物は、親水性ポリマー活性を提供する担体材料と、界面活性を提供する担体材料とを１０：１〜２：１の各比率で含み得る。より一層好ましくは、又は特定の実施形態では、上記固形組成物は、親水性ポリマー活性を提供する担体材料と、界面活性を提供する担体材料とを６：１〜３：１の各比率で含み得る。
【００９５】
特に好ましい実施形態では、上記固形組成物は、
アトバコン４０重量％〜９０重量％と、
親水性ポリマー活性を提供する担体材料８重量％〜４０重量％と、
界面活性を提供する担体材料２重量％〜２０重量％と、
を含む。
【００９６】
上記固形組成物は、例えば、薬学的に許容可能な希釈剤中で又はｉｎ  ｖｉｖｏのいずれかでのナノ粒子の分散物の分散又は安定化を更に容易にする１種以上の追加の賦形剤を含み得る。
【００９７】
固形組成物を作製する方法
本発明の固形組成物は、当該技術分野でよく知られている数多くの方法によって作製され得る。かかる組成物を形成する好適な技術は、Horn and Rieger, Angew. Chem. Int. Ed., 2001, 40, 4330-4361に一般用語で記載される。
【００９８】
例えば、上記固形組成物は、固体形態のアトバコンを粉砕することによって作製され得る。粉砕は、１種以上の担体材料、例えば親水性ポリマー及び界面活性剤の存在下で行ってもよく、或いは、粉砕工程の後に粉砕された薬物とそれらの担体物質を混合してもよい。
【００９９】
しかしながら、一般的には、本発明の固形アトバコン組成物は、水中油型（ｏ／ｗ）エマルジョン技術によって作製されることが好ましく、上記技術によってアトバコンが油相に溶解され、例えば親水性ポリマー活性及び界面活性を提供する担体材料（複数の場合もある）が水相に存在する。その後、油及び水の溶媒を凍結乾燥、噴霧乾燥、又は噴霧造粒によって除去して、本発明による固形組成物を得る。
【０１００】
したがって、本発明の１つの態様によれば、本明細書に定義される固形組成物を作製する方法であって、
（ａ）
アトバコンを含む油相と、
本明細書に定義される１種以上の選択された担体材料を含む水性相と、
を含む水中油型エマルジョンを作製することと、
（ｂ）水中油型エマルジョンから油及び水を取り除いて、固形組成物を形成することと、
を含む、方法が提供される。
【０１０１】
本発明の方法の利点は、最初の工程で形成されたエマルジョンが、油及び水の除去に際して効果的で均一な乾燥を可能とするのに十分均質であり、安定であることである。さらに、形成されるナノ粒子は、それらの物理的形態（サイズ、形状等）が実質的に均一である。
【０１０２】
水中油型エマルジョンの形成工程は、当該技術分野でよく知られている方法によって行われ得る。したがって、水中油型エマルジョンを形成する任意の好適な方法が使用され得る。特に、水中油型エマルジョンを形成するための油相と水相の混合は、当該技術分野でよく知られている方法によって行われ得る。例えば、混合は、撹拌、超音波処理、ホモジナイゼーション、又はそれらの組み合わせを含み得る。特定の実施形態では、混合は、超音波処理及び／又はホモジナイゼーションによって促進される。
【０１０３】
水中油型エマルジョンの形成工程は、例えば、引用することにより当然に本明細書の一部をなす、国際公開第２００４／０１１５３７号（COOPER et al）に記載される方法を使用することによって行われ得る。
【０１０４】
特定の実施形態では、水中油型エマルジョンの形成は、
（ｉ）アトバコンを含む油相を提供することと、
（ｉｉ）１種以上の選択された担体材料を含む水相を提供することと、
（ｉｉｉ）油相と水相とを混合して水中油型エマルジョンを生成することと、
を含む。
【０１０５】
好適には、油相は、アトバコンを好適な有機溶媒に溶解することによって提供される。好適には、水相は、１種以上の選択された担体材料を水性媒質、好ましくは水に溶解することによって提供される。２以上の上記選択された担体材料を使用する実施形態では、水相は、選択された担体材料のそれぞれ別々に作製された対応する数の水溶液を混合することによって提供され得る。
【０１０６】
特定の実施形態では、更なる水性媒質（例えば水）又は有機溶媒を混合工程（ｉｉｉ）の前又はその間に添加する。
【０１０７】
水中油型エマルジョンにおけるアトバコンの濃度は、好適には、上記方法の有効なスケールアップを容易にするため可能な限り濃縮される。例えば、油相中の薬物（複数の場合もある）の濃度は、好適には１０ｍｇ／ｍＬ以上、より好適には１５ｍｇ／ｍＬ以上、より一層好適には２０ｍｇ／ｍＬ以上である。
【０１０８】
水性相／水相中の親水性ポリマー活性を提供する担体材料の濃度は、好適には０．５ｍｇ／ｍＬ〜５０ｍｇ／ｍＬである。
【０１０９】
水性相／水相エマルジョン中の界面活性を提供する担体材料の濃度は、好適には０．５ｍｇ／ｍＬ〜５０ｍｇ／ｍＬである。
【０１１０】
油相を形成する有機溶媒は、水と（実質的には）不混和性である。好適には、有機溶媒は非プロトン性である。好適には、有機溶媒は１２０℃未満、好適には１００℃未満、好適には９０℃未満の沸点を有する。
【０１１１】
特定の実施形態では、有機溶媒は、残留溶媒に関する医薬品規制ハーモナイゼーション国際会議（ＩＣＨ：International Conference on Harmonization）のガイドラインに列挙されるクラス２又はクラス３の溶媒から選択される。
【０１１２】
特定の実施形態では、有機溶媒は、クロロホルム、ジクロロメタン、ジクロロエタン、テトラクロロエタン、シクロヘキサン、ヘキサン（複数の場合もある）、イソオクタン、ドデカン、デカン、メチルブチルケトン（ＭＢＫ）、メチルシクロヘキサン、テトラヒドロフラン、トルエン、キシレン、酢酸ブチル、鉱油、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル、ヘプタン（複数の場合もある）、酢酸イソブチル、酢酸イソプロピル、酢酸メチル、メチルエチルケトン、酢酸エチル、エチルエーテル、ペンタン、及び酢酸プロピル、又はそのいずれかの好適な組み合わせから選択される。
【０１１３】
特定の実施形態では、有機溶媒は、クロロホルム、ジクロロメタン、メチルエチルケトン（ＭＥＫ）、メチルブチルケトン（ＭＢＫ）、及び酢酸エチルから選択される。
【０１１４】
混合工程（ｉｉｉ）における油相に対する水相の体積比は、好適には２０：１〜１：１、より好適には１０：１〜１：１、最も好適には６：１〜２：１である。
【０１１５】
混合工程（ｉｉｉ）は、好適には実質的に均一な水中油型エマルジョンを生成する。先に示されるように、混合は、当該技術分野でよく知られている方法によって行われ得る。好適には、混合工程（ｉｉｉ）は、撹拌、超音波処理、ホモジナイゼーション、又はそれらの組み合わせを含む。特定の実施形態では、混合工程（ｉｉｉ）は、超音波処理及び／又はホモジナイゼーションを含む。
【０１１６】
油及び水の除去は、当該技術分野でよく知られている方法を用いて行われ得る。好適には、油及び水の除去は、凍結乾燥、噴霧乾燥又は噴霧造粒を含む。
【０１１７】
油及び水の除去は、その内容全体が引用することにより本明細書の一部をなす国際公開第２００４／０１１５３７号（COOPER et al）に記載される方法を用いて行われ得る。
【０１１８】
特定の実施形態では、油及び水の除去は、水中油型エマルジョンを凍結乾燥することを含む。油及び水の除去は、好適には水中油型エマルジョンを凍結した後、真空下で溶媒を除去することを含んでもよい。
【０１１９】
水中油型エマルジョンの凍結は、外部から水中油型エマルジョンを冷却することによって行われ得ることが好ましい。例えば、水中油型エマルジョンを含む容器を、液体窒素等の冷却媒質に容器を浸漬することによって外部から冷却してもよい。凍結する目的での使用に対する代替となる媒質は、当業者によく知られている。
【０１２０】
代替的には、水中油型エマルジョンを含む容器に、冷却材を循環させて水中油型エマルジョンを凍結させる外部「ジャケット」を備えさせてもよい。代替的には、上記容器は、水中油型エマルジョンを凍結するため冷却材を循環させる内部エレメントを備えてもよい。
【０１２１】
更なる代替案では、水中油型エマルジョンを、該エマルジョンを凍結するのに有効な温度で冷却媒質と直接接触させることによって凍結する。「エマルジョンを凍結するのに有効な温度」は、凍結するためのエマルジョンの凍結温度に基づいて当業者に十分理解される。どのくらいの温度がエマルジョン及びその担体材料の凝固点に基づいて非常に有効となり得るかを、当業者は容易に判断し得ることが認識される。エマルジョンが冷却媒質との接触によって凍結される場合、冷却媒質（例えば液体窒素）を水中油型エマルジョンに添加してもよく、又は水中油型エマルジョンを冷却媒質に添加してもよい。
【０１２２】
特定の実施形態では、水中油型エマルジョンを、液体媒質（例えば液体窒素）に添加、好適には滴加し、好適にはそれによって水中油型エマルジョンの凍結した液滴が形成され得る。この添加の順番は、より高い純度の最終生成物を提供する。凍結された液滴は、好適には（例えば、液体媒質／液体窒素を除去するため真空下で）単離され得る。次いで、好適には真空下で凍結された液滴から溶媒を除去する。次いで、得られた固形組成物を単離する。
【０１２３】
代替的な態様では、本発明は、本明細書に定義される固形組成物を作製する方法であって、該方法は、
１種以上の溶媒中に、アトバコンと、１種以上の選択される担体材料とを含む単相溶液を作製することと、
１種以上の上記溶媒を除去して固形組成物を形成することと、
を含む、方法を提供する。
【０１２４】
本発明のこの態様では、アトバコンと１種以上の選択された担体材料とを含む単相溶液は、全て１つの溶媒中に、又は２以上の混和性の溶媒中に溶解される。かかる方法は国際公開第２００８／００６７１２号に詳しく記載され、その内容全体が引用することにより正当に本明細書の一部をなす。また、国際公開第２００８／００６７１２号は、単相溶液の形成に適した溶媒及びそれらの組み合わせを列挙する。或る実施形態では、単相溶液は、共にアトバコン及び１種以上の選択された担体材料を可溶化する２以上の溶媒（例えばエタノール及び水）を含む。別の実施形態では、単相は単一の溶媒、例えばエタノール又は水を含む。
【０１２５】
１種以上の溶媒の除去は、当該技術分野でよく知られている方法を用いて行われ得る。好適には、１種以上の溶媒の除去は、凍結乾燥、噴霧乾燥、又は噴霧造粒を含む。
【０１２６】
特定の実施形態では、１種以上の溶媒の除去は、単相溶液の凍結乾燥を含む。１種以上の溶媒の除去は、好適には、単相溶液を凍結した後、真空下で溶媒を除去することを含み得る。
【０１２７】
また、本発明は、本明細書に記載される方法のいずれかによって入手可能な、それによって得られる、又はそれによって直接得られる固形組成物を提供する。
【０１２８】
固形アトバコンナノ粒子の水性又は油性の分散物
本発明は、水性媒質中に分散されたアトバコンの複数のナノ粒子を含み、アトバコンの各ナノ粒子がコアであり、そのコアの少なくとも一部の周りに１種以上の担体材料で構成される外層が提供され得て、アトバコンが少なくとも１０ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する、水性分散物を提供する。
【０１２９】
また、本発明は、アトバコンの複数のナノ粒子と、油性媒質中に分散された１種以上の担体材料を含み、アトバコンが少なくとも１０ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する、油性分散物を提供する。
【０１３０】
好ましくは又は一実施形態では、アトバコンは、少なくとも１５ｍｇ／ｍＬの濃度で分散物中に存在する。更に好ましくは又は代替的な実施形態では、アトバコンは少なくとも１８ｍｇ／ｍＬの濃度で分散物中に存在する。より一層好ましくは又は代替的な実施形態では、アトバコンは、少なくとも２０ｍｇ／ｍＬ、更には少なくとも２５ｍｇ／ｍＬの濃度で分散物中に存在する。
【０１３１】
好ましくは、１種以上の担体材料は、親水性ポリマー活性及び界面活性を提供し得て、更に好ましくは、ポリビニルアルコール−ポリエチレングリコールグラフト共重合体；ポリビニルアルコール；ポリビニルピロリドンｋ３０；ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウレート；ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート；デオキシコール酸ナトリウム；Ｄ−α−トコフェロールポリエチレングリコール１０００サクシネート；及びポリエチレングリコール（１５）−ヒドロキシステアレートからなる群から選択され得る。
【０１３２】
したがって、１種以上の固形担体材料は、
ポリビニルアルコール−ポリエチレングリコールグラフト共重合体と、Ｄ−α−トコフェロールポリエチレングリコール１０００サクシネート、
ポリビニルアルコール−ポリエチレングリコールグラフト共重合体と、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウレート、
ポリビニルアルコール−ポリエチレングリコールグラフト共重合体と、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート、
ポリビニルアルコール−ポリエチレングリコールグラフト共重合体と、ポリエチレングリコール（１５）−ヒドロキシステアレート、
ポリビニルピロリドンｋ３０と、Ｄ−α−トコフェロールポリエチレングリコール１０００サクシネート、
ポリビニルピロリドンｋ３０と、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウレート、
ポリビニルピロリドンｋ３０と、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート、
ポリビニルピロリドンｋ３０と、ポリエチレングリコール（１５）−ヒドロキシステアレート、
ポリビニルアルコールと、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート、
ポリビニルアルコールと、デオキシコール酸ナトリウム、
ポリビニルアルコールと、ポリエチレングリコール（１５）−ヒドロキシステアレート、
のいずれか１以上の組み合わせで提供され得る。
【０１３３】
更に好ましくは、１種以上の担体材料は、
ポリビニルアルコール−ポリエチレングリコールグラフト共重合体；ポリビニルアルコール；ポリビニルピロリドンｋ３０；ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウレート；ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート；デオキシコール酸ナトリウム；及びＤ−α−トコフェロールポリエチレングリコール１０００サクシネートからなる群から選択され得る。
【０１３４】
したがって、１種以上の固形担体材料は、
ポリビニルアルコール−ポリエチレングリコールグラフト共重合体と、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート、
ポリビニルピロリドンｋ３０と、Ｄ−α−トコフェロールポリエチレングリコール１０００サクシネート、
ポリビニルピロリドンｋ３０と、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウレート、
ポリビニルピロリドンｋ３０と、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート、
ポリビニルアルコールと、デオキシコール酸ナトリウム、
のいずれか１以上の組み合わせで提供され得る。
【０１３５】
１種以上の担体材料は、水性媒質中に溶解及び／又は分散されるように、好ましくは水溶性であり、個々のアトバコンのコアの周りに、すなわち、本発明による水性分散物中のアトバコンの各ナノ粒子の周りに外層を形成することができる。水性媒質は、例えば、滅菌水であってもよい。
【０１３６】
また、本発明は、水性媒質中に本明細書で定義される固形組成物を分散させることによって入手可能な、それによって得られる、又はそれによって直接得られる水性分散物を提供する。好適には、水性分散物は使用の直前に作製される。
【０１３７】
また、本発明は、油性媒質中に本明細書で定義される固形組成物を分散させることによって入手可能な、それによって得られる、又はそれによって直接得られる油性分散物を提供する。好適には、油性分散物は使用の直前に作製される。
【０１３８】
上記固形組成物が水性媒質中に分散される場合、例えば親水性ポリマー活性及び界面活性を提供する１種以上の担体材料は、水性媒質内に溶解されて、分散形態でアトバコンの固形ナノ粒子を放出する。１種以上の選択された担体材料の固形混合物内に先に分散されたアトバコンのナノ粒子は、その後、外層が備えられた形態で水性媒質内に分散された状態となり、それによってアトバコンの少なくとも幾つかのコアが、それぞれ個別に１種以上の選択された担体材料で「被覆」される。かかる外層は、ナノ粒子に対して安定性を付与することによって早すぎる凝固及び凝集を防止すると考えられる。
【０１３９】
上記固形組成物が油性媒質中に分散される場合、例えば親水性ポリマー活性及び界面活性を提供する１種以上の担体材料は、油性媒質内に溶解されて、分散形態でアトバコンの固形ナノ粒子を放出し得る。１種以上の選択された担体材料の固形混合物内に先に分散されたアトバコンのナノ粒子は、その後、油性媒質内に分散された状態となる。かかる物理学的形態は、油性分散物の物理学的形態が含まれる連続体の１つの末端を形成し得て、その連続体の他の末端は、例えばグラインディングによって固形組成物を細かく砕き、アトバコンのナノ粒子がマトリクスに捕捉されたままになるように油性媒質中に分散されている（すなわち、マトリクスそれ自体は溶解しない）組成物の（そこに分散されたアトバコンのナノ粒子を有する１種以上の担体材料の）より小さい粒子を形成する。
【０１４０】
好適には、アトバコン、親水性ポリマー活性を提供する担体材料（複数の場合もある）、及び界面活性を提供する担体材料（複数の場合もある）の相対量（比率を含む）は、上記固形組成物に関して定義されるものと同じである。しかしながら、水性／油性媒質を考慮するため、全体としての分散物中のそれらの各重量％の値を調整しなければならない。特定の実施形態では、水性／油性媒質は、全分散物の２０重量％〜９９．５重量％を占める。好ましくは又は特定の実施形態では、水性／油性媒質は、全分散物の５０重量％〜９８重量％を占める場合がある。更に好ましくは又は特定の実施形態では、水性／油性媒質は、全分散物の７０重量％〜９５重量％を占める場合がある。好適には、分散物の残りの割合は、本質的にアトバコンと１種以上の選択される担体材料とからなり、全体としての該分散物におけるそれらの割合は、上記固形組成物に関して述べられる割合を参照して適宜計算（及び計量）される。
【０１４１】
特定の実施形態では、水性媒質は水であり、好ましくは滅菌水である。代替的な実施形態では、水性媒質は、水と１種以上の追加の薬学的に許容可能な希釈剤又は賦形剤とを含む。
【０１４２】
特定の実施形態では、油性媒質は、スクアレン；天然油、例えばトリグリセリド；鉱油；合成油；植物油、好ましくはアボカド油；米ぬか油；ホホバ油；ババス油；ベニバナ種子油；ダイズ油；ビタミンＥ；酢酸ビタミンＥ；非植物油、例えばシリコーン油及びパラフィン油；並びにカルバナ蝋、キャンデリラ蝋及びレシチンを含む蝋を含む群から選択される非水性媒質である。油の混合物を使用することができる。代替的な実施形態では、油性媒質は、１種以上の追加の薬学的に許容可能な希釈剤又は賦形剤と共に提供される。特に好ましい一実施形態では、油性媒質はダイズ油である。
【０１４３】
本発明の分散物は、有利には、化学的安定性と粒子それら自体の安定性の両方に関して（すなわち、凝集、凝固等に関して）長期間に亘って安定である。
【０１４４】
本発明の分散物は、本発明の医薬組成物とみなされる場合がある。したがって、本発明の分散物は、そのまま投与されてもよく、又は非経口投与に適した分散物（例えば、静脈内、皮下、筋肉内又は腹腔内の投薬に対する滅菌分散物）を提供するため１種以上の追加の賦形剤と共に更に製剤化されてもよい。
【０１４５】
個別化された医療体制において、本発明の分散物から、正確な投薬のため測定されたアリコートを得ることが可能となる。
【０１４６】
分散物中のアトバコンのナノ粒子の粒子径、多分散度及びゼータ電位は、固形組成物と関連して上に定義される通りである。固形組成物中に存在するアトバコンナノ粒子の粒子径、多分散度、及びゼータ電位は、水性媒質中に固形組成物を分散させることにより本発明の水性分散物を形成させて測定されることが当然に認識される。
【０１４７】
水性分散物又は油性分散物を作製する方法
上記分散物は、当該技術分野でよく知られている方法によって形成され得る。例えば、アトバコンは、１種以上の選択された担体材料の水性／油性混合物の存在下で粉砕され得る。
【０１４８】
しかしながら、本発明の特定の態様では、水性媒質中に本明細書で定義される固形アトバコン組成物を分散することを含む、水性分散物を作製する方法が提供される。
【０１４９】
特定の実施形態では、水性媒質は水である。代替的な実施形態では、水性媒質は、水と、１種以上の追加の賦形剤とを含む。
【０１５０】
しかしながら、本発明の特定の態様では、油性媒質中に本明細書で定義される固形アトバコン組成物を分散することを含む、油性分散物を作製する方法が提供される。
【０１５１】
特定の実施形態では、油性媒質はダイズ油である。代替的な実施形態では、油性媒質は、ダイズ油と、１種以上の追加の賦形剤とを含む。
【０１５２】
上記固形組成物を水性／油性媒質中に分散することは、固形組成物を水性／油性媒質に添加することと、好適には得られた混合物を（例えば、振盪、ホモジナイゼーション、超音波処理、撹拌等によって）かき混ぜることとを含み得る。
【０１５３】
アトバコンの注射用製剤
本発明はまた、アトバコンのナノ粒子の筋肉内注射用製剤を提供する。
【０１５４】
本発明はまた、アトバコンのナノ粒子の皮下注射用製剤を提供する。
【０１５５】
上記製剤は、固体形態（又は実質的に固体の形態、例えばペースト）又は液体形態であってもよく、ここで、アトバコンはナノ粒子の形態で存在する。アトバコンのナノ粒子は、１種以上の担体材料内に分散され得る。液体形態では、アトバコンの各ナノ粒子はコアとして提供され得て、その周りに１種以上の担体材料で構成される外層が備えられている。
【０１５６】
好ましくは、１種以上の担体材料は、親水性ポリマー活性及び界面活性を提供することができ、更に好ましくは、ポリビニルアルコール−ポリエチレングリコールグラフト共重合体；ポリビニルアルコール；ポリビニルピロリドンｋ３０；ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウレート；ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート；デオキシコール酸ナトリウム；Ｄ−α−トコフェロールポリエチレングリコール１０００サクシネート；及びポリエチレングリコール（１５）−ヒドロキシステアレートからなる群から選択され得る。
【０１５７】
したがって、１種以上の固形担体材料は、
ポリビニルアルコール−ポリエチレングリコールグラフト共重合体と、Ｄ−α−トコフェロールポリエチレングリコール１０００サクシネート、
ポリビニルアルコール−ポリエチレングリコールグラフト共重合体と、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウレート、
ポリビニルアルコール−ポリエチレングリコールグラフト共重合体と、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート、
ポリビニルアルコール−ポリエチレングリコールグラフト共重合体と、ポリエチレングリコール（１５）−ヒドロキシステアレート、
ポリビニルピロリドンｋ３０と、Ｄ−α−トコフェロールポリエチレングリコール１０００サクシネート、
ポリビニルピロリドンｋ３０と、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウレート、
ポリビニルピロリドンｋ３０と、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート、
ポリビニルピロリドンｋ３０と、ポリエチレングリコール（１５）−ヒドロキシステアレート、
ポリビニルアルコールと、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート、
ポリビニルアルコールと、デオキシコール酸ナトリウム、
ポリビニルアルコールと、ポリエチレングリコール（１５）−ヒドロキシステアレート、
のいずれか１以上の組み合わせで提供され得る。
【０１５８】
より一層好ましくは、１種以上の担体材料は、
ポリビニルアルコール−ポリエチレングリコールグラフト共重合体；ポリビニルアルコール；ポリビニルピロリドンｋ３０；ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウレート；ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート；デオキシコール酸ナトリウム；及びＤ−α−トコフェロールポリエチレングリコール１０００サクシネートからなる群から選択され得る。
【０１５９】
したがって、１種以上の固形担体材料は、
ポリビニルアルコール−ポリエチレングリコールグラフト共重合体と、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート、
ポリビニルピロリドンｋ３０と、Ｄ−α−トコフェロールポリエチレングリコール１０００サクシネート、
ポリビニルピロリドンｋ３０と、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウレート、
ポリビニルピロリドンｋ３０と、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート、
ポリビニルアルコールと、デオキシコール酸ナトリウム、
のいずれか１以上の組み合わせで提供され得る。
【０１６０】
アトバコンのナノ粒子の注射用製剤は、有利には、特にマラリアに関する予防及び／又は治療に対する不十分なアドヒアランス、並びに続いて起こる結果と関連する上述の課題を克服するように、デポ注射剤としての投与に対して設計される。さらに、デポ注射剤は、従来の調合剤よりも容易に投与され得て、より単純な経過観察／長期継続ケアを可能とすることから有益である。
【０１６１】
アトバコンのナノ粒子の注射用製剤は、患者に投与された場合（筋肉内又は皮下の注射によって）、投与日から少なくとも約２週間の期間に亘って患者の血流にアトバコンを放出するアトバコンの制御放出ボーラス製剤を提供することが好ましい。更に好ましくは、上記放出期間は、注射を行った日から少なくとも約３週間、より一層好ましくは少なくとも約１ヶ月、より好ましくは少なくとも約３ヶ月、最も好ましくは少なくとも約６ヶ月である。
【０１６２】
医薬組成物又は獣医用組成物
本発明は、本明細書に定義される固形組成物と、任意に１種以上の追加の（薬学的に許容可能な）賦形剤とを含む、注射用形態の医薬組成物又は獣医用組成物を提供する。
【０１６３】
上記医薬組成物又は獣医用組成物は、筋肉内注射用又は皮下注射用の形態で提供され得ることが好ましい。
【０１６４】
上記医薬組成物又は獣医用組成物は、デポ形態で提供され得ることが更に好ましい。かかる形態の利益は、本明細書において先に概説される。
【０１６５】
医薬組成物又は獣医用組成物は、デポ形態で患者に投与された場合、投与日から少なくとも約２週間の期間に亘って患者の血流にアトバコンを放出するアトバコンの制御放出ボーラス製剤を提供することが好ましい。更に好ましくは、上記放出期間は、製剤を投与した日から少なくとも約３週間、より一層好ましくは少なくとも約１ヶ月、より好ましくは少なくとも約３ヶ月、最も好ましくは少なくとも約６ヶ月である。
【０１６６】
特定の実施形態では、医薬組成物又は獣医用組成物は本明細書に記載される分散物である。かかる分散された製剤を、小児又は小動物に対する投与等に適したより少量の投薬量を正確に測定するため使用することができる。
【０１６７】
本発明の種々の医薬組成物又は獣医用組成物は、当該技術分野でよく知られている従来の（薬学的）賦形剤を使用して従来の手順によって取得され得ることが認識される。
【０１６８】
本発明の医薬組成物又は獣医用組成物は、治療的有効量のアトバコンを含む。当業者は、本発明の医薬組成物又は獣医用組成物に含むため、どのようにしてアトバコンの適切な治療的有効量を決定し、選択するかをわかっている。
【０１６９】
ナノ粒子製剤及び医薬組成物又は獣医用組成物の使用
本発明は、医薬として用いられる、本明細書に定義される固形組成物、分散物、注射用製剤、又は医薬組成物若しくは獣医用組成物を提供する。上記医薬は単剤療法として使用されてもよく、又はアトバコンと任意の１種以上の他の薬物との併用療法が提供されるように上記１種以上の他の薬物と組み合わされてもよい。かかる「他の薬物」として、限定されないが、プログアニル、メフロキン、クロロキン、ヒドロキシクロロキン、キニーネ、キニジン、アーテメータ、ルメファントリン、プリマキン、ドキシサイクリン、テトラサイクリン、クリンダマイシン、ジヒドロアルテミシニン、ピペラキン、及びスルファドキシンを伴う又はスルファドキシンを伴わないピリメタミンが挙げられる。
【０１７０】
原則として、本明細書に定義される固形組成物、分散物、注射用製剤、又は医薬組成物若しくは獣医用組成物を、寄生虫又は真菌の感染症の治療及び／又は予防に使用することができる。プラスモジウム属の寄生虫による感染症等の感染症の治療及び／又は予防が意図される。上記感染症は、特にマラリアであってもよい。また、トキソプラズマ属の寄生虫による感染症（例えばトキソプラズマ症）、バベシア属の寄生虫による感染症（例えばバベシア症）、及びニューモシスティス属の真菌による感染症（例えばニューモシスティス肺炎）等の他の感染症の治療及び／又は予防も意図される。
【０１７１】
上記治療及び／又は予防は、単剤療法を使用して達成されてもよく、又はアトバコンと任意の１種以上の他の薬剤との併用療法が提供されるように、アトバコン調合剤を上記１種以上の他の薬物と組み合わせるものであってもよい。かかる「他の薬剤」として、限定されないが、プログアニル、メフロキン、クロロキン、ヒドロキシクロロキン、キニーネ、キニジン、アーテメータ、ルメファントリン、プリマキン、ドキシサイクリン、テトラサイクリン、クリンダマイシン、ジヒドロアルテミシニン、ピペラキン、及びスルファドキシンを伴う又はスルファドキシンを伴わないピリメタミンが挙げられる。
【０１７２】
本発明は、マラリア、トキソプラズマ症、バベシア症、及びニューモシスティス肺炎の治療及び／又は予防のために用いられる本明細書に定義される固形組成物、分散物、注射用製剤、又は医薬組成物若しくは獣医用組成物を更に提供する。
【０１７３】
上記治療及び／又は予防は、単剤療法を使用して達成されてもよく、又はアトバコンと任意の１種以上の他の薬剤との併用療法が提供されるように、アトバコン調合剤を上記１種以上の他の薬物と組み合わせるものであってもよい。かかる「他の薬剤」として、限定されないが、プログアニル、メフロキン、クロロキン、ヒドロキシクロロキン、キニーネ、キニジン、アーテメータ、ルメファントリン、プリマキン、ドキシサイクリン、テトラサイクリン、クリンダマイシン、ジヒドロアルテミシニン、ピペラキン、及びスルファドキシンを伴う又はスルファドキシンを伴わないピリメタミンが挙げられる。
【０１７４】
本発明は、寄生虫及び真菌の感染症（例えば、プラスモジウム属の寄生虫による感染症、特にマラリア、トキソプラズマ属の寄生虫による感染症、特にトキソプラズマ症、バベシア科の属の寄生虫による感染症、特にバベシア症、又はニューモシスティス属の真菌による感染症、特にニューモシスティス肺炎）の治療及び／又は予防のために用いられる医薬の製造における本明細書に定義される固形組成物、分散物、注射用製剤、又は医薬組成物若しくは獣医用組成物の使用を更に提供する。
【０１７５】
上記使用は、単剤療法として行われてもよく、又はアトバコンと任意の１種以上の他の薬剤との併用療法が提供されるように、アトバコン調合剤を上記１種以上の他の薬物と組み合わせるものであってもよい。かかる「他の薬剤」として、限定されないが、プログアニル、メフロキン、クロロキン、ヒドロキシクロロキン、キニーネ、キニジン、アーテメータ、ルメファントリン、プリマキン、ドキシサイクリン、テトラサイクリン、クリンダマイシン、ジヒドロアルテミシニン、ピペラキン、及びスルファドキシンを伴う又はスルファドキシンを伴わないピリメタミンが挙げられる。
【０１７６】
本発明は、寄生虫又は真菌の感染症（例えば、プラスモジウム属の寄生虫による感染症、特にマラリア、トキソプラズマ属の寄生虫による感染症、特にトキソプラズマ症、バベシア属の寄生虫による感染症、特にバベシア症、又はニューモシスティス属の真菌による感染症、特にニューモシスティス肺炎）を治療及び／又は予防する方法であって、治療的有効量の本明細書に定義される固形組成物、分散物、注射用製剤、又は医薬組成物若しくは獣医用組成物を、上記感染症（例えば、プラスモジウム属の寄生虫による感染症、特にマラリア、トキソプラズマ属の寄生虫による感染症、特にトキソプラズマ症、バベシア属の寄生虫による感染症、特にバベシア症、又はニューモシスティス属の真菌による感染症、特にニューモシスティス肺炎）を患っている、又はそれを患うリスクにある患者に投与することを含む、方法を更に提供する。
【０１７７】
上記治療及び／又は予防は、単剤療法を使用して達成されてもよく、又はアトバコンと任意の１種以上の他の薬剤との併用療法が提供されるように、アトバコン調合剤を上記１種以上の他の薬物と組み合わせるものであってもよい。かかる「他の薬剤」として、限定されないが、プログアニル、メフロキン、クロロキン、ヒドロキシクロロキン、キニーネ、キニジン、アーテメータ、ルメファントリン、プリマキン、ドキシサイクリン、テトラサイクリン、クリンダマイシン、ジヒドロアルテミシニン、ピペラキン、及びスルファドキシンを伴う又はスルファドキシンを伴わないピリメタミンが挙げられる。
【０１７８】
特に、本発明は、約２００ｍｇ／ｋｇの用量の筋肉内注射によるアトバコンの投与によってマラリアを予防する方法を提供するため使用され得る。かかる方法は、投与後、少なくとも２８日間に亘って予防効果を提供することが好ましい。代替的には、上記用量は、約１００ｍｇ／ｋｇであってもよく、少なくとも２１日間に亘る予防を提供する。代替的には、上記用量は約５０ｍｇ／ｋｇであってもよく、少なくとも７日間の予防を提供し得る。更に代替的には、上記用量は約３５ｍｇ／ｋｇであってもよく、少なくとも７日間の予防を提供し得る。
【０１７９】
上述のあらゆる使用において、アトバコンのナノ粒子の投与形態は、患者に投与された場合、投与日から少なくとも約２週間の期間に亘って患者の血流にアトバコンを放出するアトバコンの制御放出ボーラス製剤を提供することが好ましい。更に好ましくは、上記放出期間は、注射を行った日から少なくとも約３週間、より一層好ましくは少なくとも約１ヶ月、より好ましくは少なくとも約３ヶ月、最も好ましくは少なくとも約６ヶ月である。
【０１８０】
投与経路
本発明の固形組成物、分散物、及び医薬組成物又は獣医用組成物は、（上で検討されたように）単独療法又は併用療法にかかわらず、任意の簡便な投与経路によって患者に投与され得る。特に併用療法に対して、定義される治療及び／又は予防療法との組み合わせで２以上の投与経路を使用してもよく、組み合わせの１成分が或る一つの経路を経て投与され得て、他方で組み合わせの別の成分が異なる経路を経て投与され得る。かかる組み合わせのいずれもが本明細書によって意図される。
【０１８１】
投与経路として、限定されないが、経口（例えば経口摂取によって）；バッカル；舌下；経皮的（例えばパッチ、パップ剤等によるものを含む）；経粘膜（例えばパッチ、パップ剤等によるものを含む）；鼻腔内（例えば鼻内スプレーによって）；眼（ocular）（例えば点眼剤によって）；肺（例えば、口又は鼻を通って、例えばエアロゾルの使用による吸入又は通気療法によって）；直腸（例えば坐剤又は浣腸によって）；膣（例えばペッサリーによって）；非経口的、例えば皮下、皮内、筋肉内、静脈内、動脈内、心臓内、髄腔内、脊髄内、嚢内、嚢下、眼窩内、腹腔内、気管内、表皮下、関節内、クモ膜下、及び胸骨内を含む注射によって；又はデポ若しくはリザーバー（reservoir）のインプラントによって、例えば皮下若しくは筋肉内が挙げられる。
【０１８２】
投与経路は、デポ製剤又はリザーバー製剤の非経口インプラントによることが最も好ましい。
【０１８３】
本発明の注射用製剤は、少なくとも数週間、好ましくは数ヶ月に亘って患者においてアトバコンの制御放出製剤を提供するように投与されるデポ製剤であることが好ましい。
【実施例】
【０１８４】
別段の指定がない限り、全ての材料をSigma-Aldrich又はFisher Scientificから購入し、更に精製せずに使用した。
【０１８５】
実施例１−アトバコンのナノ製剤に対するスクリーニング
クロロホルム中のアトバコン（Ａ）の８０ｍｇ／ｍＬ原液、どちらの原液も水中であるポリマー（Ｐ）の２２．５ｍｇ／ｍＬ原液及び界面活性剤（Ｓ）の２２．５ｍｇ／ｍＬ原液を使用して試料を作製した。原液を次の割合で添加した：１００μＬ（Ａ）；６３μＬ（Ｐ）及び３２μＬ（Ｓ）（したがって、固形質量比は次の通りである：油対水１：４（Ｏ／Ｗ）ミックス中、８０％（Ａ）；１３％（Ｐ）及び７％（Ｓ））。次いで、周波数掃引モードの１０サイクル／バースト及び５００サイクル／バーストの強度でのデューティーサイクル（duty cycle）２０回でＣｏｖａｒｉｓ  Ｓ２ｘを３０秒間使用して上記混合物を乳化した。乳化直後に、試料を極低温で凍結した。
【０１８６】
４２個の試料のマトリクスを作製した。一旦４２個全ての試料を作製し、乾燥した多孔質の生成物を残すため４２時間凍結乾燥（VirtisのベンチトップＫ）し、次いで、分析まで個別のバイアルで試料を密閉した。
【０１８７】
このスクリーンで採用したポリマー及び界面活性剤を、下記表１Ａ及び表１Ｂに詳述する：
【０１８８】
【表１】
2019518057.tif 000006
【０１８９】
１つのポリマーと１つの界面活性剤の全ての組み合わせを試験した（合計４２の組み合わせ）。
【０１９０】
スクリーン分析
分析の直前に、水１６ｍＬを添加することで試料を分散させた。次いで、活性な有機ナノ粒子分散物の粒子径を、MalvernのＺｅｔａｓｉｚｅｒ  Ｎａｎｏ  ＺＳを使用して、動的光散乱（ＤＬＳ：dynamic light scattering）によって測定した。自動測定最適化を使用する３回の測定に対して、MalvernのＺｅｔａｓｉｚｅｒソフトウェアｖｅｒｓｉｏｎ  ７．１１をデータ分析に使用した。以下の基準を満たす場合、その粒子をヒットとした。
【０１９１】
ナノ分散物の品質評価基準
粒子が以下の基準に従う場合、ヒットとした：
（ｉ）目に見える大きな粒子を含まない試料の完全な分散；
（ｉｉ）粒子Ｚ平均が１０００ｎｍ未満；
（ｉｉｉ）多分散性指数（ＰＤＩ：polydispersity index）０．４未満；
（ｉｖ）３回のスキャンの間の標準偏差が平均のＺ平均の５％未満；及び、
（ｖ）３回のＤＬＳスキャンのうち少なくとも２回が「サイズ品質レポート」に合格する。
【０１９２】
「サイズ品質レポート」は、記録されたデータの信頼度に対して１２回の試験を組み込み、Ｍａｌｖｅｒｎ  Ｚｅｔａｓｉｚｅｒソフトウェアによって各測定に対して自動的に適用される。これらの試験は、上記試料がＤＬＳに対して適切なサイズ範囲にあり、１未満のＰＤＩを有し、正しい濃度範囲にあって、キュムュラント（cumulant）及び分布フィットが良好（すなわち、データ上のエラーが０．００５未満である）であることを保証する。
【０１９３】
１回目のスクリーンで選択基準に合格した１１個のヒットがあり、それらはスクリーンを繰り返した際に２回目のスクリーンでも合格した。これらの１１個を更なる研究のため選択した。１１個のヒットを、再現性を示すために、ＤＬＳ及びゼータ電位分析によって特性評価するため作製された試料で複製して再度作製し（図１；エラーバーは±１  Ｓ．Ｄ．である）、一方で生物学的アッセイを実施するため追加の試料を作製した。
【０１９４】
薬理学的評価のため、トリチウム標識化アトバコンを組み込んで、１１個の製剤ヒットを作製した。しかしながら、好適な量の放射能を製剤に組み込むためには、製剤をハーフスケールで作製しなければならなかった。非標識化フルスケール製剤との非標識化ハーフスケール製剤の最初の比較は、図２（エラーバーは±１  Ｓ．Ｄ．である）に示されるように、ハーフスケール製剤が、フルスケール製剤と同様のサイズの粒子を生成したことを示した。
【０１９５】
後に、アトバコン原液に３Ｈアトバコンを含む以外はハーフスケールの作製と同じ手順に従って放射能標識化粒子を作製した。薬物に対して７．４ｋＢｑ／ｍｇ（０．２μＣｉ／ｍｇ）で試料を作製した。下記表２に示すように、作製した試料をＤＬＳによって特性評価し、ゼータ電位を測定した。
【０１９６】
【表２】
2019518057.tif 000007
【０１９７】
実施例２−固形組成物からのアトバコン放出の評価
本発明によるアトバコンのその固形組成物からの放出速度を、アトバコンの等価な製剤化されていない調製物と共に迅速平衡透析（ＲＥＤ：Rapid Equilibrium Dialysis）（ThermoFisher Scientific）を使用して評価した。
【０１９８】
１１個の「ヒット」製剤を疑似組織液（ＳＩＦ：Simulated Interstitial Fluid）中に分散させた後、アトバコン１ｍｇ／ｍＬまで希釈した。ＳＩＦは、ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）３５ｍｇ／ｍＬ及びウシ血液由来γ−グロブリン２ｍｇ／ｍＬからなり、蒸留水に溶解した。製剤化されていないアトバコンは、ＤＭＳＯの体積が総体積の１％未満となるように、ＳＩＦで希釈する前に最初にＤＭＳＯに溶解した。
【０１９９】
上の懸濁物の作製に続いて、それぞれ０．５ｍＬを８ｋＤａ  ＭＷＣＯ  ＲＥＤインサートのドナーコンパートメントに添加し、１ｍＬのＳＩＦをアクセプターコンパートメントに添加した。その後、ＲＥＤインサートを含むプレートを１００ｒｐｍで３７℃にて２４時間インキュベートし、次いで、０．５時間、１時間、２時間、３時間、４時間、５時間、６時間及び２４時間の時間点で０．５ｍＬのアクセプター内容物をサンプリングし、予め（３７℃に）温めておいた新たなＳＩＦで置き換えた。
【０２００】
インキュベーションに続いて、ｕｌｔｉｍａ  ｇｏｌｄ液体シンチレーションカクテル液４ｍＬ（英国のMeridian Biotechnologies）を各試料０．１ｍＬに添加し、Perkin Elmerの３１００ＴＳシンチレーションカウンターを使用して壊変毎分（ＤＰＭ：disintegrations per minute）として放射能を測定した。図３Ａ〜図３Ｋ（エラーバーは±１  Ｓ．Ｄ．である）及び図４（２４時間後の放出）（エラーバーは±１  Ｓ．Ｄ．である）に示されるように、製剤化されていないアトバコンと比較した１１個のヒット製剤のそれぞれについて３回繰り返し、開始ドナー量のパーセンテージとして、放出されメンブレンをこえて拡散したアトバコンの量としてデータを表す。
【０２０１】
最初の６時間の間のアトバコンの放出速度（図３Ａ〜図３Ｋに示される）を下記表３に提示する。
【０２０２】
【表３】
2019518057.tif 000008
【０２０３】
実施例３−マウスマラリアモデルにおけるアトバコンナノ製剤の試験
実施例２で同定されたアトバコンの様々な製剤を、プラスモディウム・ベルゲイ（Plasmodium berghei）のマウスモデルで研究した。
【０２０４】
プラスモディウム・ベルゲイ（ＡＮＫＡ  ２．３４）株に感染させたＣ５７ＢＬ６雄性マウス（６週齢、約２０ｇ）からなるマウスマラリアモデルを利用した。感染したステフェンスハマダラカ（Anopheles stephensi mosquitos）の唾液腺からスポロゾイト形態の寄生虫を得た。
【０２０５】
実験戦略は、０日目の静脈内スポロゾイトチャレンジの１日前（−１日目予防）又は７日前（−７日目予防）に筋肉内投薬されたアトバコンナノ製剤のマウスを保護する能力について試験することであった。尾部を切り取って得た（tail snip）血液試料中の寄生虫は、薬物が保護に失敗したことを表した。動物をチャレンジから４２日後までモニターした。
【０２０６】
ナノ製剤はいずれも、８０重量％のアトバコンを含んだ。賦形剤及び一次放出速度係数を下記表４に列挙する。Ｍｅｐｒｏｎ（商標）（GSKから入手可能であり、アトバコン１５０ｍｇ／ｍＬを含む）を製剤化されていないコンパレータとして経口投薬し、１０％ポロキサマー１８８（Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（商標）Ｆ−６８）を経口ビヒクル対照として使用した。
【０２０７】
【表４】
2019518057.tif 000009
【０２０８】
薬物の投与
動物２０ｇ当たり全体積４０μＬ中３６ｍｇ／ｋｇでナノ製剤を投薬した。上記用量を、各２０μＬの２回の注射で筋肉内に投与した。必要な濃度を与えるため、凍結乾燥されたナノ製剤を精製滅菌水に再懸濁することによって用量を調製した。経口アトバコン対照（Ｍｅｐｒｏｎ（商標）を１０％ポロキサマー１８８（Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（商標）Ｆ−６８）に希釈し、３６ｍｇ／ｋｇを２００μＬ容量で強制経口投与した。投薬のおよそ１６時間前に全ての動物を絶食させ、投薬後４時間〜６時間回復させた。
【０２０９】
スポロゾイトチャレンジ
６時間飢餓状態においた４日齢〜６日齢のステフェンスハマダラカに、プラスモディウム・ベルゲイ（ＡＮＫＡ  ２．３４株）で感染させたスイスウェブスターマウスを吸血させた。吸血させた蚊を１９℃及び８０％相対湿度で飼育した。感染から１８日後に、蚊の唾液腺をＲＰＭＩ培地に切り開き、２８  １／２Ｇの針を数回通過させることによってホモジナイズし、スポロゾイトを放出させた。スポロゾイトを血球計数器及び光学顕微鏡検査によって数え、２５０００／ｍＬのＲＰＭＩに希釈した。チャレンジにおいて、２００μＬのＲＰＭＩ中５０００個のスポロゾイトを静脈内投与した。マウスを３コホートに割り当てた。この方法は、感染後３日目まで検出可能な血液期寄生虫血症を一貫して生じ、感染動物は感染後７日以内にマラリアで死亡した。
【０２１０】
薬力学的エンドポイント
感染動物を、光学顕微鏡検査によって検査した尾部を切り取って得た血液試料のギムザ染色した薄層塗抹標本によって顕性血液期寄生虫血症についてモニターした。サンプリングをチャレンジ後７２時間で開始し、４８時間毎〜７２時間毎に繰り返した。チャレンジから４２日後での検出可能な血液期寄生虫血症のないマウスを保護されたと見なした。
【０２１１】
結果
−１日目予防について試験した３種のナノ製剤はいずれも、経口アトバコン対照と同様に保護的であった。しかしながら、経口アトバコン対照は、チャレンジの７日前に投薬した場合（−７日目予防）には有効ではなかった。試料ＡＣＳ＿ＡＴＱ＿４及び試料ＡＣＳ＿ＡＴＱ＿６もこのレジメンでは有効ではなかった。しかしながら、試料ＡＣＳ＿ＡＴＱ＿２は６匹中４匹を保護し、部分的な効能を実証し、試料ＡＣＳ＿ＡＴＱ＿７及び試料ＡＣＳ＿ＡＴＱ＿８は、−７日目予防により完全で一貫した保護をもたらした。これらの結果を下記表５に提供する。
【０２１２】
【表５】
2019518057.tif 000010
【０２１３】
実施例４−種々のアトバコン添加量（loadings）を有する固形組成物からのアトバコン放出の評価
種々のアトバコン添加量を有する本発明によるアトバコンのその固形組成物からの放出速度を、アトバコンの等価な製剤化されていない調製物と共に、迅速平衡透析（ＲＥＤ）（ThermoFisher Scientific）を使用して評価した。
【０２１４】
既にアトバコン８０重量％で製剤化された試料ＡＣＳ＿ＡＴＱ＿４、試料ＡＣＳ＿ＡＴＱ＿６及び試料ＡＣＳ＿ＡＴＱ＿８を、２０重量％、４０重量％及び６０重量％のアトバコン添加量でそれぞれ作製した。
【０２１５】
クロロホルム中のアトバコン（Ａ）の５ｍｇ／ｍＬ原液、どちらの原液も水中であるポリマー（Ｐ）の２２．５ｍｇ／ｍＬ原液及び界面活性剤（Ｓ）の２２．５ｍｇ／ｍＬ原液を使用して試料を作製した。原液を次の割合で添加した：１００μＬ（Ａ）；６３μＬ（Ｐ）及び３２μＬ（Ｓ）（したがって固形質量比は次の通りである：油対水１：４（Ｏ／Ｗ）ミックス中、２０％（Ａ）、５２％（Ｐ）及び２８％（Ｓ））。周波数掃引モードで１０サイクル／バースト及び５００サイクル／バーストの強度でのデューティーサイクル２０回でＣｏｖａｒｉｓ  Ｓ２ｘを３０秒間使用して上記混合物を乳化した。乳化直後に、試料を極低温で凍結し、次いで乾燥した多孔質の生成物を残すため４２時間凍結乾燥（VirtisのベンチトップＫ）した。次いで、試料をＤＬＳによって分析するまで個別のバイアルに密閉した。アトバコン添加量（４０重量％及び６０重量％の試料に対する）を、アトバコン原液の濃度を調整して変化させ、次いで、上に与えられる同じ手順に従う。
【０２１６】
作製されたサンプルをＤＬＳにより特性評価し、下記表６に提示する。
【０２１７】
【表６】
2019518057.tif 000011
【０２１８】
その後、アトバコン原液に３Ｈアトバコンを含む以外は、上と同じ手順に従って放射能標識化粒子を作製した。薬物に関して７．４ｋＢｑ／ｍｇ（０．２μＣｉ／ｍｇ）で試料を作製した。
【０２１９】
９種（３×３）の更なる放射能標識化製剤をＳＩＦ中に分散させた後、アトバコン１ｍｇ／ｍＬまで希釈した。ＳＩＦは、ＢＳＡ３５ｍｇ／ｍＬ及びウシ血液由来γ−グロブリン２ｍｇ／ｍＬからなり、蒸留水に溶解した。製剤化されていないアトバコンは、ＤＭＳＯの体積が総体積の１％未満となるように、ＳＩＦで希釈する前に最初にＤＭＳＯに溶解した。
【０２２０】
上の懸濁物の作製に続いて、それぞれ０．５ｍＬを８ｋＤａ  ＭＷＣＯ  ＲＥＤインサートのドナーコンパートメントに添加し、１ｍＬのＳＩＦをアクセプターコンパートメントに添加した。その後、ＲＥＤインサートを含むプレートを１００ｒｐｍで３７℃にて２４時間インキュベートし、次いで、０．５時間、１時間、２時間、３時間、４時間、５時間、６時間及び２４時間の時間点で０．５ｍＬのアクセプター内容物をサンプリングし、予め（３７℃に）温めておいた新たなＳＩＦで置き換えた。
【０２２１】
インキュベーションに続いて、ｕｌｔｉｍａ  ｇｏｌｄ液体シンチレーションカクテル液４ｍＬ（英国のMeridian Biotechnologies）を各試料０．１ｍＬに添加し、Perkin Elmerの３１００ＴＳシンチレーションカウンターを使用して壊変毎分（ＤＰＭ）として放射能を測定した。図５Ａ〜図５Ｃ及び図６（２４時間後の放出）（エラーバーは±１  Ｓ．Ｄ．である）に示されるように、製剤化されていないアトバコンと比較して、既存の３個の８０重量％製剤と共に９個の新たな製剤のそれぞれについて、３回繰り返して、開始ドナー量のパーセンテージとして、放出されメンブレンをこえて拡散したアトバコンの量としてデータを表す。
【０２２２】
最初の６時間の間のアトバコンの放出速度（図５Ａ〜図５Ｃに示される）を下記表７に提示する。
【０２２３】
【表７】
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【０２２４】
明らかに、調べた２４時間の間に放出されたアトバコンのパーセンテージの変動があって（図６に示される）、また同様に、試験した製剤のそれぞれからの放出速度にも変動があり（表７に示される）、適切なアトバコン添加量及び賦形剤の組み合わせの選択によって、特定の臨床要求に従って放出レジメンを設計することが可能である。
【０２２５】
実施例５−放出研究のためのアトバコン（油性分散物）のペースト状ナノ製剤の作製
アトバコン（Ａ）６０重量％、ポリマー（Ｐ）３０重量％、及び界面活性剤（Ｓ）１０重量％を使用する以外は上の実施例１に記載されるのと同じスクリーニング手順に従って、アトバコンのナノ粒子を含む固形組成物を作製した。実施例１に列挙される基準に従ってヒットを評価したところ、このスクリーンは更なる調査のためこの添加量で更に１１個のヒットを同定した。（上記１１個からの）３個の製剤を、長時間作用制御放出デポ注射用ペーストの可能性があるものとして研究するために選択した。
【０２２６】
凍結乾燥した製剤化モノリスをダイズ油と混和することによりペーストを作製した。本明細書で先に示されるように、固形原料に対するダイズ油の比は、油性分散物が液体であるか、又は油に対して固体の割合が大きいか、すなわちペーストであるかどうかを決定する。これらのペーストから水中へのアトバコンの放出は、ＲＥＤ及びＵＶ−Ｖｉｓ分光法を使用して行われた。また、対照として、ダイズ油を含むペーストに製剤化されていないアトバコンを混和した。放出研究は、上記製剤中の種々のポリマー及び界面活性剤の存在は、アトバコンの水中への放出速度プロファイルに影響することを示した（図７に示される）。
【０２２７】
実施例６−マウスマラリアモデルにおけるアトバコンナノ製剤の延長試験
ＡＣＳ＿ＡＴＱ＿７及びＡＣＳ＿ＡＴＱ＿８に対して、実施例２で行った試験の持続期間を延長し範囲を拡大した。
【０２２８】
実験戦略は、０日目の静脈内スポロゾイトチャレンジの１日前（−１日目予防）、７日前（−７日目予防）、１４日前（−１４日目予防）、２１日前（−２１日目予防）、又は２８日前（−２８日目予防）に筋肉内注射によって投薬されたアトバコンナノ製剤のマウスを保護する能力について試験することであった。尾部を切り取って得た血液試料中の寄生生物は、薬物が保護に失敗したことを表した。動物をチャレンジから４２日後までモニターした。
【０２２９】
ナノ製剤はいずれも、８０重量％のアトバコンを含んでいた。ＡＣＳ＿ＡＴＱ＿７及びＡＣＳ＿ＡＴＱ＿８に対する賦形剤及び一次放出速度係数は表４に見ることができる。
【０２３０】
薬物の投与
３６ｍｇ／ｋｇの先に試験した濃度に加えて、５０ｍｇ／ｋｇ、１００ｍｇ／ｋｇ及び２００ｍｇ／ｋｇの濃度を用いる以外は、実施例３と同じ方法でナノ製剤を投薬した。
【０２３１】
スポロゾイトチャレンジ
実施例３に記載の通り。
【０２３２】
薬力学的エンドポイント
実施例３と同様に、結果はバイナリ（binary）であり、全てのマウスがチャレンジから４２日後に寄生生物を有しないままであった場合には、そのマウスは保護されたと見なし、予防は成功であった。逆に、投薬コホートのいずれかのマウスで顕性寄生虫血症を検出した場合には、予防に失敗したとみなした。
【０２３３】
結果
−１日目予防は、ここでも３６ｍｇ／ｋｇのＡＣＳ＿ＡＴＱ＿７及びＡＣＳ＿ＡＴＱ＿８について成功であったことがわかった。より高い投薬レジメンは、有効であろうと予測されたため、この初期の時点では試験しなかった。ＡＣＳ＿ＡＴＱ＿７とＡＣＳ＿ＡＴＱ＿８の両方について試験した全ての投薬レジメンが有効な−７日目予防を提供することがわかった。−１４日目及び−２１日目の予防は、ＡＣＳ＿ＡＴＱ＿７とＡＣＳ＿ＡＴＱ＿８の両方について１００ｍｇ／ｋｇ又は２００ｍｇ／ｋｇの投薬レジメンによってのみ効果的に提供される。２００ｍｇ／ｋｇのＡＣＳ＿ＡＴＱ＿７又はＡＣＳ＿ＡＴＱ＿８の最も高い用量のみが有効な−２８日目の予防を提供することがわかった。これらの結果を、ＡＣＳ＿ＡＴＱ＿７及びＡＣＳ＿ＡＴＱ＿８について、表８、並びに図８ａ及び図８ｂにそれぞれ要約する。図８ａ及び図８ｂは、成功した投薬レジメン及び投薬チャレンジ間隔をプロットする（すなわち、各円は、対応する投薬チャレンジ間隔で予防に成功した投薬レジメンを示す）。
【０２３４】
【表８】
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【０２３５】
ＡＣＳ＿ＡＴＱ＿７及びＡＣＳ＿ＡＴＱ＿８に関する知見は、−７日目予防に失敗した２００ｍｇ／ｋｇで投与された経口アトバコン及びナノ製剤ビヒクル（すなわちポリマーと界面活性剤）の筋肉内注射に関する結果と対照的であった。また、結果は、予防の持続時間は、ＡＣＳ＿ＡＴＱ＿７及びＡＣＳ＿ＡＴＱ＿８の両方について用量依存的であり、より高い用量はより長い予防を提供したことを示す。
【０２３６】
実施例７−アトバコンナノ製剤の筋肉内注射のマウス薬物動態
アトバコンナノ製剤２００ｍｇ／ｋｇをマウスに筋肉内注射した。間をおいて（at intervals）血液を採取し（マイクロティナチューブ、BD Biosciences）、遠心分離し（１３００×ｇ、１０分間、４℃）、血漿を収集して、使用するまで−８０℃で保管した。試験したナノ製剤はＡＣＳ＿ＡＴＱ＿７及びＡＣＳ＿ＡＴＱ＿８であった。
【０２３７】
血漿中のアトバコン濃度をＵＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳによって化学分析した。簡潔には、アセトニトリル及び重水素化アトバコンの内部標準を解凍した血漿２５μＬに添加し、続いて濾過（Ｃａｐｔｉｖａ濾過プレート、Agilent Technologies）した。５μＬのアリコートを逆相カラム上で分離し、エレクトロスプレーイオン化による三連四重極ＡＰＩ４０００（米国マサチューセッツ州フレーミングハムのSCIEX）質量分析装置により、アトバコンをモニターした。上記アッセイを２５０ｎｇ／ｍＬ〜５００００ｎｇ／ｍＬについて、ＦＤＡガイドラインに対して検証した。２５０ｎｇ／ｍＬ〜７７ｎｇ／ｍＬ（検出限界）の値を控えめに判断した。
【０２３８】
結果
ＡＣＳ＿ＡＴＱ＿７の筋肉内注射から６時間後までのマウス血漿中のアトバコン濃度を簡易に検出したところ、半減期は７日間であることがわかり、マウスにおいて経口投薬されたアトバコンについて知られている９時間の半減期よりも実質的に長かった。ＡＣＳ＿ＡＴＱ＿８の筋肉内注射に対する半減期は１０．６日間であることがわかった。ＡＣＳ＿ＡＴＱ＿７及びＡＣＳ＿ＡＴＱ＿８に関するこれらの実験の結果を図９ａ及び図９ｂのグラフにそれぞれプロットする。
【０２３９】
実施例３、実施例６及び実施例７の知見、並びに血漿濃度と実施例が示す効能との比較より、２００ｎｇ／ｍＬ超の血漿濃度のアトバコンが予防の成功と相関することがわかる（図１０）。
【０２４０】
結論付けると、マウスマラリアモデルは、アトバコンのナノ製剤が該ナノ製剤の筋肉内注射から最長２８日後まで有効なマラリア予防を提供したことを実証した。ヒトにおけるアトバコンの体内動態（disposition）はマウスよりもおよそ８倍ゆっくりである（それぞれ、血漿半減期７０時間及び９時間）ことから、ヒトにおいて同様に投与されたアトバコンのナノ製剤によって与えられる有効な予防の持続時間は、マウスモデルにおいて観察された２８日間を超えて延長されると予想することができる。
【０２４１】
したがって、アトバコンの長時間作用型ナノ製剤は、他のＦＤＡによって承認された医薬において利用される賦形剤と共に安全で広範囲に研究された臨床的上使用される薬物を併用する。上に提示される知見は、単回の筋肉内用量のナノ製剤化されたアトバコンは、延長された期間に亘ってＰ．ファルシパルムのマラリアに対する原因的予防を提供することを示唆する。これは、旅行が典型的には４週間以下であるマラリア地域に旅行するマラリアに対して免疫を持たない人々にとって魅力的な選択肢であり、また注意深く展開されれば、マラリアを制御する試みにおいて大いに必要とされる新たな介入を提供する可能性がある。
【図１】
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【図２】
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【図３−１】
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【図３−２】
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【図４】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図５Ｃ】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【国際調査報告】
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