(57)【要約】テトラ又はペンタペプチドを含む、網膜色素変性症の治療のための医薬製剤又はその使用が開示される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
種々の形態の網膜色素変性症及びその合併症の治療に使用するための、一般式Ｌ１−Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４のペプチド又はその塩であって、式中：
Ｌ１は、Ｈ、又はアシル、又は任意にＮ−アシル化及び／若しくはＮ−アルキル化及び／若しくはＣα−アルキル化された、Ｇｌｕ、Ｇｉｎ、Ｐｒｏ、ヒドロキシ−Ｐｒｏ、Ａｚｔ、Ｐｉｐ、ｐＧｌｕ、Ａｉｂ、Ａｃ３ｃ、Ａｃ４ｃ、Ａｃ５ｃ又はＡｃ６ｃから選択されるアミノ酸であり；
Ｘ１及びＸ３は、同じでも異なっていてもよく、任意にＮ−アルキル化及び／又はＣα−アルキル化された、Ａｒｇ、Ｏｒｎ及び任意にグアニジル化Ｌｙｓから選択される塩基性アミノ酸、並びにメタ又はパラ位でアミノ基又はグアニジノ基で置換されたフェニルアラニンであり；
Ｘ２は、任意にＮ−アルキル化された、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、α−メチルロイシン、α−メチルバリン、α−メチルグルタミン酸、Ａｉｂ、Ａｃ３ｃ、Ａｃ４ｃ、Ａｃ５ｃ及びＡｃ６ｃから選択されるアミノ酸であり；
Ｘ４は、疎水性アミノ酸であって、Ｃ末端でアミド化又は非アミド化され、任意にＣα−アルキル化されており、Ｐｈｅ、ｈ−Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、１−Ｎａｌ、２−Ｎａｌ、ｈ−１−Ｎａｌ、ｈ−２−Ｎａｌ、Ｃｈａ、Ｃｈｇ及びＰｈｇから選択される、
ペプチド又はその塩。
【請求項２】
Ａｃｅ−Ａｒｇ−Ｇｌｕ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−ＮＨ２；ｐＧｌｕ−Ａｒｇ−Ｇｌｕ−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＯＨ；Ｇｌｕ−Ａｒｇ−Ｇｌｕ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−ＮＨ２；Ａｃｅ−Ａｒｇ−Ｇｌｕ−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２；Ａｃｅ−Ａｒｇ−Ｇｌｕ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−ＮＨ２；Ａｃｅ−Ａｒｇ−Ｇｌｕ−Ｎ（Ｍｅ）Ａｒｇ−Ｐｈｅ−ＮＨ２；Ａｃｅ−Ａｒｇ−Ｇｌｕ−Ｎ（Ｍｅ）Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２；Ａｃｅ−Ａｒｇ−Ｇｌｕ−Ｎ（Ｍｅ）Ａｒｇ−Ｔｒｐ−ＮＨ２；ｐＧｌｕ−Ａｒｇ−Ｇｌｕ−Ｎ（Ｍｅ）Ａｒｇ−Ｐｈｅ−ＮＨ２；ｐＧｌｕ−Ａｒｇ−Ｇｌｕ−Ｎ（Ｍｅ）Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２；ｐＧｌｕ−Ａｒｇ−Ｇｌｕ−Ｎ（Ｍｅ）Ａｒｇ−Ｔｒｐ−ＮＨ２；ｐＧｌｕ−Ａｒｇ−Ｇｌｕ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−ＮＨ２；ｐＧｌｕ−Ａｒｇ−Ｇｌｕ−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２；ｐＧｌｕ−Ａｒｇ−Ｇｌｕ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−ＮＨ２；Ａｃｅ−Ａｒｇ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−ＮＨ２；Ａｃｅ−Ａｒｇ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２；Ａｃｅ−Ａｒｇ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−ＮＨ２；Ａｃｅ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−ＮＨ２；Ａｃｅ−Ａｒｇ−Ａｉｂ−Ｎ（Ｍｅ）Ａｒｇ−Ｐｈｅ−ＮＨ２；Ａｃｅ−Ａｒｇ−Ａｉｂ−Ｎ（Ｍｅ）Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２；Ａｃｅ−Ａｒｇ−Ａｉｂ−Ｎ（Ｍｅ）Ａｒｇ−Ｔｒｙ−ＮＨ２；ｐＧｌｕ−Ａｒｇ−Ａｉｂ−Ｎ（Ｍｅ）Ａｒｇ−Ｐｈｅ−ＮＨ２；Ｇｌｕ−Ａｒｇ−Ａｉｂ−Ｎ（Ｍｅ）Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２；ｐＧｌｕ−Ａｒｇ−Ａｉｂ−Ｎ（Ｍｅ）Ａｒｇ−Ｔｒｐ−ＮＨ２；ｐＧｌｕ−Ａｒｇ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−ＮＨ２；ｐＧｌｕ−Ａｒｇ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２；ｐＧｌｕ−Ａｒｇ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−ＮＨ２；Ａｃｅ−Ａｒｇ−Ａｃ５ｃ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−ＮＨ２；Ａｃｅ−Ａｒｇ−Ａｃ５ｃ−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２；Ａｃｅ−Ａｒｇ−Ａｃ５ｃ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−ＮＨ２；Ａｃｅ−Ａｒｇ−Ａｃ５ｃ−Ｎ（Ｍｅ）Ａｒｇ−Ｐｈｅ−ＮＨ２；Ａｃｅ−Ａｒｇ−Ａｃ５ｃ−Ｎ（Ｍｅ）Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２；Ａｃｅ−Ａｒｇ−Ａｃ５ｃ−Ｎ（Ｍｅ）Ａｒｇ−Ｔｒｐ−ＮＨ２；ｐＧｌｕ−Ａｒｇ−Ａｃ５ｃ−Ｎ（Ｍｅ）Ａｒｇ−Ｐｈｅ−ＮＨ２；ｐＧｌｕ−Ａｒｇ−Ａｃ５ｃ−Ｎ（Ｍｅ）Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２；ｐＧｌｕ−Ａｒｇ−Ａｃ５ｃ−Ｎ（Ｍｅ）Ａｒｇ−Ｔｒｐ−ＮＨ２；ｐＧｌｕ−Ａｒｇ−Ａｃ５ｃ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−ＮＨ２；ｐＧｌｕ−Ａｒｇ−Ａｃ５ｃ−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＮＨ２；ｐＧｌｕ−Ａｒｇ−Ａｃ５ｃ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−ＮＨ２；Ａｃｅ−Ａｒｇ−Ｇｌｕ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−ＯＨ；Ａｃｅ−Ａｒｇ−Ｇｌｕ−Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＯＨ；Ａｃｅ−Ａｒｇ−Ｇｌｕ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−ＯＨ；Ａｃｅ−Ａｒｇ−Ｇｌｕ−Ｎ（Ｍｅ）Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＯＨ；ｐＧｌｕ−Ａｒｇ−Ｇｌｕ−Ｎ（Ｍｅ）Ａｒｇ−Ｐｈｅ−ＯＨ；ｐＧｌｕ−Ａｒｇ−Ｇｌｕ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−ＯＨ；Ａｃｅ−Ａｒｇ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−ＯＨ；Ａｃｅ−Ａｒｇ−Ａｉｂ−Ｎ（Ｍｅ）Ａｒｇ−Ｐｈｅ−ＯＨ；ｐＧｌｕ−Ａｒｇ−Ａｉｂ−Ｎ（Ｍｅ）Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＯＨ；ｐＧｌｕ−Ａｒｇ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−ＯＨ；Ａｃｅ−Ａｒｇ−Ａｃ５ｃ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−ＯＨ；Ａｃｅ−Ａｒｇ−Ａｃ５ｃ−Ｎ（Ｍｅ）Ａｒｇ−Ｔｙｒ−ＯＨ；ｐＧｌｕ−Ａｒｇ−Ａｃ５ｃ−Ｎ（Ｍｅ）Ａｒｇ−Ｔｒｐ−ＯＨ；ｐＧｌｕ−Ａｒｇ−Ａｃ５ｃ−Ａｒｇ−Ｔｒｐ−ＯＨ；Ａｃｅ−Ｎ（Ｍｅ）Ａｒｇ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−ＮＨ２；Ａｃｅ−Ｎ（Ｍｅ）Ａｒｇ−Ａｉｂ−Ｎ（Ｍｅ）Ａｒｇ−Ｐｈｅ−ＮＨ２；Ａｃｅ−Ａｒｇ−Ａｉｂ−Ｎ（Ｍｅ）Ａｒｇ−Ｐｈｅ−ＮＨ２；Ａｃｅ−Ａｒｇ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−α（Ｍｅ）Ｐｈｅ−ＮＨ２；Ａｃｅ−Ｎ（Ｍｅ）Ａｒｇ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−α（Ｍｅ）Ｐｈｅ−ＮＨ２；Ａｃｅ−Ｎ（Ｍｅ）Ａｒｇ−Ａｉｂ−Ｎ（Ｍｅ）Ａｒｇ−α（Ｍｅ）Ｐｈｅ−ＮＨ２；Ａｃｅ−Ａｒｇ−Ａｉｂ−Ｎ（Ｍｅ）Ａｒｇ−α（Ｍｅ）Ｐｈｅ−ＮＨ２；Ａｃｅ−Ａｉｂ−Ｎ（Ｍｅ）Ａｒｇ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−ＮＨ２；Ａｃｅ−Ａｉｂ−Ｎ（Ｍｅ）Ａｒｇ−Ａｉｂ−Ｎ（Ｍｅ）Ａｒｇ−Ｐｈｅ−ＮＨ２；Ａｃｅ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ａｉｂ−Ｎ（Ｍｅ）Ａｒｇ−Ｐｈｅ−ＮＨ２；Ａｃｅ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−α（Ｍｅ）Ｐｈｅ−ＮＨ２；Ａｃｅ−Ａｉｂ−Ｎ（Ｍｅ）Ａｒｇ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−α（Ｍｅ）Ｐｈｅ−ＮＨ２；Ａｃｅ−Ａｉｂ−Ｎ（Ｍｅ）Ａｒｇ−Ａｉｂ−Ｎ（Ｍｅ）Ａｒｇ−α（Ｍｅ）Ｐｈｅ−ＮＨ２；Ａｃｅ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ａｉｂ−Ｎ（Ｍｅ）Ａｒｇ−α（Ｍｅ）Ｐｈｅ−ＮＨ２から選択される請求項１に記載の使用のためのペプチド又はその塩。
【請求項３】
Ａｃ−Ａｒｇ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−α（Ｍｅ）Ｐｈｅ−ＮＨ２又はＡｃ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−α（Ｍｅ）Ｐｈｅ−ＮＨ２から選択される、請求項１に記載の使用のためのペプチド又はその塩。
【請求項４】
種々の形態の網膜色素変性症及びその合併症の治療に使用するための、請求項１〜３のうちいずれか一項に記載のペプチドのうちの１つ以上を含む医薬組成物。
【請求項５】
皮下、筋肉内、静脈内、眼内内、経口、経鼻、舌下、局所、エアゾール又は経皮経路のための、点眼剤又は眼軟膏として、任意に更なる活性成分、担体及び賦形剤を含む、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項６】
皮下投与のための、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項７】
眼内投与のための、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項８】
前記ペプチドの用量が１０μｇ〜５００ｍｇの範囲である、請求項４〜７のうちいずれか一項に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、網膜色素変性症の治療に使用するためのテトラ又はペンタペプチドに関する。
【背景技術】
【０００２】
網膜色素変性症（ＲＰ）は、進行性の視細胞の変性と数十年で失明につながる（その間に視力はゆっくりではあるが、否応なく低下する）網膜色素上皮（ＲＰＥ）の異常を特徴とする遺伝性ジストロフィーの一群に属する。
【０００３】
夜盲症は、この疾患の最初の発現で、一般的に青年前期に生じ、杆体の変質と、それに続く進行性の杆体細胞死滅と相関性がある。
【０００４】
その後、ＲＰを罹患している患者は、杆体細胞が大部分を占める網膜の周辺部分での更なる杆体消失の結果生じる視野の狭窄（トンネル視）を示す。この疾患は、視野の中央における進行性の視力低下、及び進行性の錐体消失による、色認識の変調を更に発現する。上記細胞は、全網膜光受容体の５％未満であるが、視覚におけるその役割はきわめて重要であり、その変性は、ＲＰ罹患患者の失明を招く。ＲＰの更なる合併症は、後嚢下白内障及び類嚢胞黄斑浮腫である。その他の形態のＲＰとして：アッシャー症候群（ＲＰに難聴を伴う）；バルデー・ビードル症候群（ＲＰに多指症、肥満、性器発育不全及び学習障害を伴う）；及び出生時の失明を特徴とするレーバー先天黒内障（ＬＣＡ）も存在する。
【０００５】
ＲＰの特徴的な徴候は、多数の遺伝的異質性で、５４の異なる遺伝子及び６１の座における３０００を超える突然変異（非特許文献１）が、この疾患の非症候群型を引き起こすことが現在知られている。
【０００６】
ＲＰの原因となる突然変異と、錐体及び杆体で観察される損傷とを結びつける生物学的メカニズムは、まだ十分に理解されていない。アポトーシスは、光受容体の死滅の主原因であると一般的に考えられている（非特許文献２、非特許文献３）。錐体死の原因として考えられるものに、酸化ストレスがある。
【０００７】
ＲＰの治療に関しては、多数の処置が提案されてきたが、これまでのところ、その全てが、非常に限られた有効性を示している。
【０００８】
可能性のある治療のうち最も広範囲に研究されているのは、遺伝子治療である。遺伝子治療の治療ウインドウは、視細胞が失われるにつれて徐々に狭くなる。更に、光受容体の消失は、遺伝子治療後でも減少の徴候を示さず（非特許文献４；非特許文献５）、これが、現在まで人体に使用されるウイルスベクターが安全上の理由から低用量であることによるのか、又は未知の生物学的要因によるものかは不明である。
【０００９】
上記の制限に加えて、遺伝子治療は、疾患の多数の遺伝的異質性を考慮する必要がある個々に合わせた治療であり、特に、同じ突然変異を有する患者の小グループを作るコストが非常に高いことから、あまり実用的ではないことは明白である。
【００１０】
別の治療的アプローチは、種々の電子人工器官の移植であり、こうした人工器官は、網膜の最内層に接触するか、神経節細胞の近く（人工網膜）か、又は光受容体の位置に（網膜下移植）配置される（非特許文献６；非特許文献７；非特許文献８）。ただし、これらの生物工学的移植はまだ不完全であり、現在まで、光源の場所を見つけるという最低限の能力しか生み出しておらず、したがって可動性試験において性能を改善するにすぎない。
【００１１】
ＲＰ治療に可能性のある薬理学的戦略は、以下に基づく：
-神経保護（特許文献１、特許文献２、特許文献３、特許文献４、特許文献５）；
-酸化ストレスの低減（特許文献６、特許文献７、特許文献８、特許文献９、特許文献１０）；
-光受容体アポトーシスの阻害（特許文献１１）；
-網膜炎症の減弱（特許文献１２）；
−血管新生抑制剤の使用（特許文献１３、特許文献１４、特許文献１５、特許文献１６）。
【００１２】
網膜疾患に対するいかなる薬理学的アプローチも、実際に、薬剤が網膜内の標的細胞に到達するのを妨げ得る物理的及び機能的障壁（眼組織及び血液網膜関門）を、薬剤が通過できるようにしなければならないことは明白である。
【００１３】
現在までに提案されている薬理学的戦略は、神経栄養因子；神経成長因子（ＮＧＦ）；バルプロ酸（ＶＰＡ）；ビタミンＡ又はドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）；抗炎症薬（デキサメタゾン、フルオシノロンアセトニド）；酸化防止剤（ウノプロストン）；９−ｃｉｓ−レチナール（ＱＬＴ０９１００１）；抗アポトーシス；スフィンゴ脂質；及び化学的フォトスイッチに基づく。
【００１４】
提案された治療アプローチの数が多いことは、多数の形態のＲＰの全てに真に有効な治療がないことを実証している。
【００１５】
これらの戦略の利点、及び上記の全ての制限は、最近記載された（非特許文献９）。
【００１６】
上記の情報は、異なる病因のＲＰ（その全てが否応なく失明につながる）に対する有効な非外傷性治療を可能にする新規治療戦略の開発が必要であることを実証する。
【００１７】
下記の種々の形態のＲＰを予防及び治療するための医薬製剤は、限られたコスト及び低外傷性の投与経路を特徴とし、反復投与と、活性成分が長期間にわたって有効な一定レベルにあることを可能する。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１８】
【特許文献１】カナダ国特許出願公開第２２３６１５７号明細書
【特許文献２】仏国特許出願公開6第２７８４８９８号明細書
【特許文献３】国際公開第２００９／０８９３９９号
【特許文献４】国際公開第２００９／１１１１６９号
【特許文献５】国際公開第２００７／０１１８８０号
【特許文献６】米国特許出願公開第２０１５／３２８３３７号明細書
【特許文献７】米国特許出願公開第２０１４／０４４６９３号明細書
【特許文献８】米国特許出願公開第２０１２／１０８６５４号明細書
【特許文献９】米国特許出願公開第２００８／３１７８８５号明細書
【特許文献１０】国際公開第２００８／１１１４９７号
【特許文献１１】特開２００３−８９６４３号公報（特許第４９５３０４０号公報）
【特許文献１２】国際公開第２０１５／１１０５５６号
【特許文献１３】米国特許出願公開第２０１２／２６３７９４号明細書
【特許文献１４】特開２０１２−０６２２５８号公報
【特許文献１５】米国特許出願公開第２００４／１７６２９０号明細書
【特許文献１６】米国特許第６４５１７９９号明細書
【特許文献１７】国際公開第２００８／０１７３７２号
【非特許文献】
【００１９】
【非特許文献１】Clin. Genet. 2013, 84, 132-141
【非特許文献２】Curr. Mol. Med. 2009, 9, 375-383
【非特許文献３】Prog. Retin. Eye Res. 2014,43,17-75
【非特許文献４】N. Engl. J. Med. 2015, 372, 1887-1897
【非特許文献５】Proc. Natl. Acad.1887 Sci. U. S. A. 2013, 1 10, E517-E525
【非特許文献６】Vis. Res. 2002, 42, 393e399
【非特許文献７】Ophthalmic Res. 2013, 50, 215-220
【非特許文献８】J. Biomater. Sci. Polym. Ed. 2007，18，1031-1055
【非特許文献９】Progress in Retinal and Eye Research 2015, 48, 62-81
【非特許文献１０】FEBS Letters, 582, (2008) 1141-1146.
【非特許文献１１】Mol Cancer Ther, 8, (2009) 2708-2717
【非特許文献１２】Mol Cancer  Ther, 12, (2013) 1981-1993,
【非特許文献１３】Mol Cancer  Ther, 13, (2014) 1092-1104
【非特許文献１４】IOVS, (2015), 56(4) 2392-2407
【非特許文献１５】IOVS, (2015), 56(4) 2392-2407
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００２０】
特許文献１７に細胞運動性阻害剤及び抗腫瘍剤として記載されているテトラ又はペンタペプチドは、硝子体内投与によってのみでなく、全身、特に皮下投与の形態によっても、網膜色素変性症及びその合併症の治療に有効であることが、現在確認されている。
【００２１】
したがって、本発明の目的は、上記ペプチドを網膜色素変性症の治療に使用することである。上記ペプチドは、好ましくは全身投与により、有意な毒性副作用なく疾患の予防及び治療ができる。
【発明を実施するための形態】
【００２２】
本発明に従って使用するペプチドは、そのまま又は塩化形態で使用でき、一般式Ｌ１−Ｘ１−Ｘ２−Ｘ３−Ｘ４を有し、式中：
Ｌ１は、Ｈ、又はアシル、又は任意にＮ−アシル化及び／若しくはＮ−アルキル化及び／若しくはＣα−アルキル化された、Ｇｌｕ、Ｇｌｎ、Ｐｒｏ、ヒドロキシ−Ｐｒｏ、Ａｚｔ、Ｐｉｐ、ｐＧｌｕ、Ａｉｂ、Ａｃ４ｃ、Ａｃ５ｃ及びＡｃ６ｃから選択されるアミノ酸であり；
Ｘ１及びＸ３は、同じでも異なっていてもよく、任意にＮ−アルキル化及び／又はＣα−アルキル化された、Ａｒｇ、Ｏｒｎ及び任意にグアニジル化Ｌｙｓから選択される塩基性アミノ酸、並びにメタ又はパラ位でアミノ基又はグアニジノ基で置換されたフェニルアラニンであり；
Ｘ２は、任意にＮ−アルキル化された、Ｇｌｕ、Ｌｙｓ、α−メチルロイシン、α−メチルバリン、α−メチルグルタミン酸、Ａｉｂ、Ａｃ４ｃ、Ａｃ５ｃ及びＡｃ６ｃから選択されるアミノ酸であり；
Ｘ４は、Ｃ末端でアミド化又は非アミド化され、任意にＣα−アルキル化された、Ｐｈｅ、ｈ−Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、１−Ｎａｌ、２−Ｎａｌ、ｈ−１−Ｎａｌ、ｈ−２−Ｎａｌ、Ｃｈａ、Ｃｈｇ及びＰｈｇから選択される、疎水性アミノ酸である。
【００２３】
以下のものは、本発明によるペプチドの式に含まれ得る非天然アミノ酸のいくつかに使用される通常の略称である：
Ａｚｔ＝アゼチジン酸、Ｐｉｐ＝ピペコリン酸、Ａｉｂ＝α−アミノ−イソ酪酸、Ａｃ４ｃ＝１−アミノシクロブタン−１−カルボン酸、Ａｃ５ｃ＝１−アミノシクロペンタン−１−カルボン酸、Ａｃ６ｃ＝１−アミノシクロヘキサン−１−カルボン酸、ｈ−Ｐｈｅ＝ホモフェニルアラニン、１−Ｎａｌ＝β−１−ナフチル−アラニン、２−Ｎａｌ＝β−２−ナフチル−アラニン、ｈ−１−Ｎａｌ＝ホモ−β−１−ナフチル−アラニン、ｈ−２−Ｎａｌ＝ホモ−β−２−ナフチル−アラニン、Ｃｈａ＝シクロヘキシルアラニン、Ｃｈｇ＝シクロヘキシルグリシン、Ｐｈｇ＝フェニルグリシン、ｐＧｌｕ＝ピログルタミン酸。
【００２４】
本発明による使用に好ましいペプチドは、添付の配列表及び下表に記載の配列を有する。
【００２５】
【表１】
2019504006.tif 000002
2019504006.tif 000003
2019504006.tif 000004
【００２６】
ペプチドＡｃ−Ａｒｇ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−α（Ｍｅ）Ｐｈｅ−ＮＨ２及びＡｃ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−α（Ｍｅ）Ｐｈｅ−ＮＨ２が特に好ましい。
【００２７】
これらのペプチドのその他の種類の適用、特に抗腫瘍剤としての適用も、文献から既知である（非特許文献１０、非特許文献１１、非特許文献１２、非特許文献１３）。Ａｃ−Ａｒｇ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−α（Ｍｅ）Ｐｈｅ−ＮＨ２（ＳＥＱ  ＩＤ  ６４）（ＵＰＡＲＡＮＴとも呼ばれる）は、硝子体内注射により投与したときに、酸素誘発性網膜症（ＯＩＲ）マウスにおける網膜新血管形成の減少、血液網膜関門の機能不全の修復、及び抗炎症マーカーの低減の活性も知られている（非特許文献１４）。
【００２８】
本発明によるペプチドは全て、ホルミル−ペプチド受容体（Ｎ−ホルミル−Ｍｅｔ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ；ＦＰＲ）に対する高い親和性を特徴とし、それに結合することで、その生物活性を示す。更に、ペプチドＡｃ−Ａｒｇ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−α（Ｍｅ）Ｐｈｅ−ＮＨ２（ＳＥＱ  ＩＤ  ６４）（非特許文献１５）は網膜の構造を変えないことが報告されているが、更に驚くべきことに、このペプチドは、ＲＰの研究で最も信頼される動物モデルの１つであるＲＣＳ／ＫＹＯラットにおいて激しく劣化した網膜構造をほぼ全て修復することができることが見出された。最後に、本発明による化合物は、そのペプチドの性質にもかかわらず、卓越した薬理学的特性を示し、全身投与、特に皮下投与したときに、血液眼関門を通過する。特に重篤なＲＰの症例では、硝子体内投与が好ましく、全身投与を含む維持療法で実質的に置き換えることができる。
【００２９】
本発明によるペプチドの親水性の性質は、ＲＰ治療のための注射可能な製剤に特に好適な、単純で低コストの医薬製剤の使用を可能にする。
【００３０】
ＲＰ及びその様々な形態、例えば、アッシャー症候群、バルデー・ビードル症候群及びレーバー先天黒内障、並びにその合併症、例えば、後嚢下白内障及び類嚢胞黄斑浮腫の治療における治療的使用では、本発明によるペプチドを、そのまま又は塩の形態で、液体若しくは固体医薬組成物に処方することができ、それを皮下、筋肉内、静脈内、眼内、経口、経鼻、舌下、局所、経皮、又は吸入により投与することができ、又は点眼剤及び軟膏として適用することもできる。皮下投与が好ましい。
【００３１】
ヒトにおけるペプチドの用量は広い範囲、典型的には１投与当たり１０μｇ〜５００ｍｇ、好ましくは１ｍｇ〜２００ｍｇで変動し得る。しかし、上記用量は、疾患の段階に応じ、患者の体重、性別及び年齢、並びに当然ながら投与方法を考慮することによって、専門家は容易に決定できるであろう。
【００３２】
本発明によるペプチドの医薬組成物の例としては：ａ）液体製剤、例えば、経口、経鼻、経肛門、膣内若しくは胃内投与、又は粘膜投与（例えば、舌下、肺胞又は歯肉、及び嗅粘膜若しくは呼吸粘膜）のための懸濁液、シロップ又はエリキシル剤；ｂ）非経口、眼内、皮下、皮内、筋肉内又は静脈内投与のための滅菌溶液、懸濁液又は乳濁液が挙げられる。本発明によるペプチドの１つ以上に加え、上記の組成物は、製薬技術において一般的に使用されるその他の活性成分及びレオロジー化合物も含有することができる。
【実施例１】
【００３３】
以下の実施例は、本発明をより詳細に例証する。
【００３４】
実施例１−Ａｃ−Ａｒｇ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−α（Ｍｅ）Ｐｈｅ−ＮＨ２（ＳＥＱ  １９）又はＡｃ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−α（Ｍｅ）Ｐｈｅ−ＮＨ２（ＳＥＱ  ＩＤ  ６４）を含有する製剤
【００３５】
Ａ）酢酸塩又はコハク酸塩の形態のペプチドＡｃ−Ａｒｇ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−α（Ｍｅ）Ｐｈｅ−ＮＨ２又はＡｃ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−α（Ｍｅ）Ｐｈｅ−ＮＨ２を、活性成分濃度１．２、７．６又は１６．６ｍｇ／ｍＬで、０．９％ＮａＣｌ水溶液に溶解した。ｐＨを、ＮａＯＨの０．１Ｍ溶液で７．２に調節した。濾過により滅菌した後、製剤は使用可能な状態となる。
【００３６】
Ｂ）酢酸塩又はコハク酸塩の形態のペプチドＡｃ−Ａｒｇ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−α（Ｍｅ）Ｐｈｅ−ＮＨ２又はＡｃ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−α（Ｍｅ）Ｐｈｅ−ＮＨ２を、活性成分濃度１．２、７．６又は１６．６ｍｇ／ｍＬで、ＫＣ１＝０．２ｇ／Ｌ；ＫＨ２ＰＯ４＝０．２４ｇ／Ｌ；ＮａＣｌ＝８．０ｇ／Ｌ；Ｎａ２ＨＰＯ４（無水）＝１．４４ｇ／Ｌを含有する緩衝溶液に溶解した。濾過により滅菌した後、製剤は使用可能な状態となる。
【００３７】
Ｃ）酢酸塩又はコハク酸塩の形態のペプチドＡｃ−Ａｒｇ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−α（Ｍｅ）Ｐｈｅ−ＮＨ２又はＡｃ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−α（Ｍｅ）Ｐｈｅ−ＮＨ２を、活性成分濃度１．２、７．６又は１６．６ｍｇ／ｍＬで、ＣａＣｌ２  ２Ｈ２Ｏ＝０．１３３ｇ／Ｌ；ＭｇＣｌ２  ６Ｈ２Ｏ＝０．１ｇ／Ｌ；ＫＣｌ＝０．２ｇ／Ｌ；ＫＨ２ＰＯ４＝０．２ｇ／Ｌ；ＮａＣｌ＝８．０ｇ／Ｌ；Ｎａ２ＨＰＯ４（無水）＝１．１５ｇ／Ｌを含有する緩衝溶液に溶解した。濾過により滅菌した後、製剤は使用可能な状態となる。
【００３８】
Ｄ）２４８．８ｍＭ酢酸アンモニウム中に０．５％のヒアルロン酸ナトリウム（平均分子量１２００ｋＤａ）溶液（合計５０ｍＬ）を、分画分子量８ｋＤａの膜を用いて２４．８８ｍＭ酢酸アンモニウムで透析洗浄した。４回の洗浄を実施した：１×１Ｌ、７時間；１×５００ｍＬ、７時間；水で２×５００ｍＬ、７時間。５０５．５ｍｇのＡｃ−Ａｒｇ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−α（Ｍｅ）Ｐｈｅ−ＮＨ２を、酢酸塩として、透析膜内に存在するヒアルロン酸アンモニウム溶液に添加した（６８．５ｍＬ）。２時間撹拌した後、溶液を凍結乾燥した。ペプチド／ヒアルロン酸（モノマー）／アセテートを１／１／１のモル比で含む塩が得られた。上記塩を、ヒアルロン酸濃度１４．８ｍｇ／ｍＬ、ペプチド＝２４．０ｍｇ／ｍＬが得られるまで水に溶解し、ｐＨを０．１Ｍ  ＮａＯＨで７．２に調節した。濾過により滅菌した後、製剤は使用可能な状態となる。
【実施例２】
【００３９】
硝子体内又は皮下投与によるＲＣＳ／ＫＹＯラットの治療における有効性
【００４０】
ＲＣＳ／Ｋｙｏラット（Ｒｏｙａｌ  Ｃｏｌｌｅｇｅ  ｏｆ  Ｓｕｒｇｅｏｎｓラット）は、この眼疾患において最も一般的に使用されるモデルを表す。ＲＣＳラットは、この疾患の研究に理想的なモデルとなる網膜変性を呈する。具体的には、チロシンキナーゼ受容体をコードするＭｅｒｔｋ遺伝子の欠失により、ラットは、３週齢から網膜変性を示した。これらの動物では、網膜の上皮細胞は上皮光受容細胞を摂取することができず、そのためこれらの光受容体は死滅する。
【００４１】
雄及び雌のＲＣＳ／Ｋｙｏラット、１４／２１日齢を４５匹用いて、テトラペプチドＡｃ−Ａｒｇ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−α（Ｍｅ）Ｐｈｅ−ＮＨ２を、硝子体内注射は１．２ｍｇ／ｍＬ、皮下注射は７．６ｍｇ／ｍＬの濃度で実施例１Ａに記載のように処方した。
【００４２】
使用した治療レジメンは下記のとおりである：
【００４３】
【表２】
2019504006.tif 000005
【００４４】
ラットを４９日齢で安楽死させた後、各グループの網膜の厚さを顕微鏡下で測定た：
【００４５】
【表３】
2019504006.tif 000006
【００４６】
処置したグループの全てにおいて、予防的処置と、より少ない程度ではあるが、反復皮下処置で、網膜の厚さにかなりの増大が認められた。
【００４７】
顆粒の外層（外顆粒層（ＯＮＬ）、錐体及び杆体の細胞体）の厚さも測定した。
【００４８】
【表４】
2019504006.tif 000007
【００４９】
この場合、ＯＮＬの厚さの増大は、予防的処置と治療的処置のいずれでも認められた。片目につき４μｇの単回投与で、光受容体層は３４％増大し、反復皮下投与により、層の厚さが事実上２倍になった。
【実施例３】
【００５０】
Ａｃ−Ａｒｇ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−α（Ｍｅ）Ｐｈｅ−ＮＨ２の皮下及び硝子体内投与のラットにおける薬物動態学及び組織分布
【００５１】
１０匹の雄ＳＤラット（Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット）を使用した。用量１６．６ｍｇ／ｋｇ、１ｍＬ／ｋｇの量での単回皮下投与によって血漿薬物動態及び組織分布を測定するため、ラットを５匹のグループ２つに分けた。血液試料を０．２５、０．５、１、２、４、６、８及び２４時間後に採取し；その後、第２グループのラットについて、Ｔｍａｘにおいて組織試料を採取した。動態方程式、Ｃｍａｘ、Ｔｍａｘ、血漿半減期及びＡＵＣを求めた。濃度をＬＣ−ＭＳによって測定した。
【００５２】
薬物動態学パラメータを下表のように設定する：
【００５３】
【表５】
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【００５４】
約２時間のＴｍａｘ及び５．９１±１．１８μｇ／ｍＬのＣｍａｘから実証されるように、皮下注射後、中程度の吸収プロセスが観察された。上記プロセスの後で方法の感度限界よりも低い濃度値であったが、血漿から化合物が２４時間までに消失した。動態方程式は、ｔを時間単位、Ｃをｍｇ／Ｌとして表した場合、Ｃ（ｔ）＝Ｃ０（ｅ−０．３２１ｔ−ｅ−０．６７４ｔと書くことができる。
【００５５】
この研究は、皮下投与経路により、化合物が利用可能となることを実証する。更に、化合物は、注射部位から体循環に達するだけでなく、下表にまとめるように、調査した様々な組織内にも存在する：
【００５６】
【表６】
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【００５７】
表は、投与後Ｔｍａｘにおける組織濃度をｍｇ／ｋｇとして表す。見てわかるように、腎臓は、他の組織と比較して最も値の高い器官である。ただし、標的組織を表す眼では、ペプチドは、約５という組織血漿比率で存在する。
【配列表】
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【国際調査報告】
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