(57)【要約】  有効な抗がん作用を有する新規な化合物を提供する。  本発明に係る新規な化合物には、式（Ｉ）2012011314.tif 000015［式中、Ｒ１は炭素数２ないし６個のアルコキシアルキル基である］で表される化合物、またはその医薬上許容される塩が含まれる。
2012011314.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
2012011314.tif 000011
［式中、Ｒ１は炭素数２ないし６個のアルコキシアルキル基である］
で表される化合物、またはその医薬上許容される塩。
【請求項２】
式（Ｉ）で表される化合物が、２−クロロ−Ｎ−［４−（７−メトキシ−４−メトキシメチルスルファモイル−ベンゾフラン−２−イル）−チアゾール−２−イル］−アセトアミド、２−クロロ−Ｎ−｛４−［７−メトキシ−４−（２−メトキシエチルスルファモイル）−ベンゾフラン−２−イル］−チアゾール−２−イル｝−アセトアミド、２−クロロ−Ｎ−｛４−［７−メトキシ−４−（３−メトキシプロピルスルファモイル）−ベンゾフラン−２−イル］−チアゾール−２−イル｝−アセトアミド、２−クロロ−Ｎ−｛４−［７−メトキシ−４−（４−メトキシブチルスルファモイル）−ベンゾフラン−２−イル］−チアゾール−２−イル｝−アセトアミド、２−クロロ−Ｎ−｛４−［７−メトキシ−４−（５−メトキシペンチルスルファモイル）−ベンゾフラン−２−イル］−チアゾール−２−イル｝−アセトアミド、２−クロロ−Ｎ−［４−（７−メトキシ−４−エトキシメチルスルファモイル−ベンゾフラン−２−イル）−チアゾール−２−イル］−アセトアミド、２−クロロ−Ｎ−｛４−［７−メトキシ−４−（２−エトキシエチルスルファモイル）−ベンゾフラン−２−イル］−チアゾール−２−イル｝−アセトアミド、２−クロロ−Ｎ−｛４−［７−メトキシ−４−（３−エトキシプロピルスルファモイル）−ベンゾフラン−２−イル］−チアゾール−２−イル｝−アセトアミド、２−クロロ−Ｎ−｛４−［７−メトキシ−４−（４−エトキシブチルスルファモイル）−ベンゾフラン−２−イル］−チアゾール−２−イル｝−アセトアミド、２−クロロ−Ｎ−［４−（７−メトキシ−４−プロポキシメチルスルファモイル−ベンゾフラン−２−イル）−チアゾール−２−イル］−アセトアミド、２−クロロ−Ｎ−｛４−［７−メトキシ−４−（２−プロポキシエチルスルファモイル）−ベンゾフラン−２−イル］−チアゾール−２−イル｝−アセトアミド、２−クロロ−Ｎ−｛４−［７−メトキシ−４−（３−プロポキシプロピルスルファモイル）−ベンゾフラン−２−イル］−チアゾール−２−イル｝−アセトアミド、２−クロロ−Ｎ−［４−（７−メトキシ−４−ブトキシメチルスルファモイル−ベンゾフラン−２−イル）−チアゾール−２−イル］−アセトアミド、２−クロロ−Ｎ−｛４−［７−メトキシ−４−（２−ブトキシエチルスルファモイル）−ベンゾフラン−２−イル］−チアゾール−２−イル｝−アセトアミド、および２−クロロ−Ｎ−［４−（７−メトキシ−４−ペントキシメチルスルファモイル−ベンゾフラン−２−イル）−チアゾール−２−イル］−アセトアミドよりなる群から選択される請求項１記載の化合物またはその医薬上許容される塩。
【請求項３】
式（Ｉ）で表される化合物が２−クロロ−Ｎ−｛４−［７−メトキシ−４−（２−メトキシエチルスルファモイル）−ベンゾフラン−２−イル］−チアゾール−２−イル｝−アセトアミドである請求項２記載の化合物またはその医薬上許容される塩。
【請求項４】
式（Ｉ）：
【化２】
2012011314.tif 000012
［式中、Ｒ１は炭素数２ないし６個のアルコキシアルキル基である］
で表される化合物またはその医薬上許容される塩の製法であって、
（１）２−アセチル−７−メトキシベンゾフランにクロロスルホン酸を反応させて２−アセチル−７−メトキシベンゾフラン−４−スルホニルクロリドを生成する工程；
（２）得られたスルホニルクロリド化合物に、塩基存在下で、アルコキシアルキルアミンを反応させて、式（ＩＩ）：
【化３】
2012011314.tif 000013
［式中、Ｒ１は上記定義に同じである］
で表されるスルホン酸アミド化合物を生成する工程；
（３）得られたスルホン酸アミド化合物にハロゲンを反応させてアセチル基をハロゲン化する工程；
（４）得られたスルホン酸アミドハロゲン化物に、塩基存在下で、チオ尿素を加熱条件下で反応させて式（ＩＩＩ）：
【化４】
2012011314.tif 000014
［式中、Ｒ１は上記定義に同じである］
で表される２−アミノチアゾリルベンゾフラン化合物を生成する工程；ついで
（５）得られた２−アミノチアゾリルベンゾフラン化合物に塩化クロロアセチルを反応させて式（Ｉ）で表される化合物を生成する工程
を含む製法。
【請求項５】
工程（２）で用いるアルコキシアルキルアミンが、メトキシメチルアミン、２−メトキシエチルアミン、３−メトキシプロピルアミン、４−メトキシブチルアミン、５−メトキシペンチルアミン、エトキシメチルアミン、２−エトキシエチルアミン、３−エトキシプロピルアミン、４−エトキシブチルアミン、プロポキシメチルアミン、２−プロポキシエチルアミン、３−プロポキシプロピルアミン、ブトキシメチルアミン、２−ブトキシエチルアミンおよびペントキシメチルアミンよりなる群から選択される請求項４記載の製法。
【請求項６】
式（Ｉ）で表される化合物またはその医薬上許容される塩を有効成分として含む、がんを治療するための医薬組成物。
【請求項７】
がんが膵臓がん、乳がん、脳腫瘍、神経膠腫、口腔がん、咽頭がん、喉頭がん、肺がん、食道がん、胃がん、腎臓がん、子宮体がん、子宮頸がん、卵巣がん、網膜芽細胞腫、前立腺がん、精巣腫瘍、肝臓がん、皮膚がん、結腸がんおよび直腸がんよりなる群から選択される請求項６記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規なベンゾフラノン化合物およびその化合物を有効成分として含む医薬組成物、ならびに新規なベンゾフラン化合物の製法に関する。
【背景技術】
【０００２】
様々な抗がん化合物が開発されている。
特許文献１にはロイコトリエン阻害作用、特にＢＬＴ２拮抗阻害作用を有するがん予防またはがん治療剤として有用なベンゾフラン化合物が開示されている。
特許文献２および３には過剰増殖性障害を処置するためのベンゾフランおよびベンゾチオフェン誘導体が開示されている。
一方、ベンゾフラン骨格を有する化合物には様々な薬理作用が見出されている。
特許文献４にはアレルギーや炎症性疾患を治療するのに有用なベンゾフラン誘導体が開示されている。
特許文献５には骨代謝疾患の予防および治療に有用なベンゾフラン誘導体が開示されている。
特許文献６には炎症性疾患、自己免疫性疾患の治療に有用なベンゾフラン誘導体が開示されている。
特許文献７には抗アレルギーや抗炎症作用を有するベンゾフラン誘導体が開示されている。
しかしながら、現在に至るまで、広いスペクトルの抗がん作用を示す有効なベンゾフラン化合物は見出されていなかった。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】国際公開第２００６／０５４７９３号
【特許文献２】特表２００６−５０７２１５号公報
【特許文献３】特表２００７−５０１７９６号公報
【特許文献４】国際公開第２００４／０７８７５１号公報
【特許文献５】特開２００６−２２５３０３号公報
【特許文献６】特表２０００−５０１４１１号公報
【特許文献７】特開２００５−８６３１号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明の目的は広いスペクトルの抗がん作用を有する新規な化合物を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明者らは上記課題を解決するために鋭意検討した結果、特定のベンゾフェノン化合物に広いスペクトルの抗がん作用があることを見出し、本発明を完成するに至った。
すなわち、本発明は、
［１］
式（Ｉ）：【０００６】
【化１】
2012011314.tif 000003
［式中、Ｒ１は炭素数２ないし６個のアルコキシアルキル基である］
で表される化合物、またはその医薬上許容される塩；
［２］
式（Ｉ）で表される化合物が、２−クロロ−Ｎ−［４−（７−メトキシ−４−メトキシメチルスルファモイル−ベンゾフラン−２−イル）−チアゾール−２−イル］−アセトアミド、２−クロロ−Ｎ−｛４−［７−メトキシ−４−（２−メトキシエチルスルファモイル）−ベンゾフラン−２−イル］−チアゾール−２−イル｝−アセトアミド、２−クロロ−Ｎ−｛４−［７−メトキシ−４−（３−メトキシプロピルスルファモイル）−ベンゾフラン−２−イル］−チアゾール−２−イル｝−アセトアミド、２−クロロ−Ｎ−｛４−［７−メトキシ−４−（４−メトキシブチルスルファモイル）−ベンゾフラン−２−イル］−チアゾール−２−イル｝−アセトアミド、２−クロロ−Ｎ−｛４−［７−メトキシ−４−（５−メトキシペンチルスルファモイル）−ベンゾフラン−２−イル］−チアゾール−２−イル｝−アセトアミド、２−クロロ−Ｎ−［４−（７−メトキシ−４−エトキシメチルスルファモイル−ベンゾフラン−２−イル）−チアゾール−２−イル］−アセトアミド、２−クロロ−Ｎ−｛４−［７−メトキシ−４−（２−エトキシエチルスルファモイル）−ベンゾフラン−２−イル］−チアゾール−２−イル｝−アセトアミド、２−クロロ−Ｎ−｛４−［７−メトキシ−４−（３−エトキシプロピルスルファモイル）−ベンゾフラン−２−イル］−チアゾール−２−イル｝−アセトアミド、２−クロロ−Ｎ−｛４−［７−メトキシ−４−（４−エトキシブチルスルファモイル）−ベンゾフラン−２−イル］−チアゾール−２−イル｝−アセトアミド、２−クロロ−Ｎ−［４−（７−メトキシ−４−プロポキシメチルスルファモイル−ベンゾフラン−２−イル）−チアゾール−２−イル］−アセトアミド、２−クロロ−Ｎ−｛４−［７−メトキシ−４−（２−プロポキシエチルスルファモイル）−ベンゾフラン−２−イル］−チアゾール−２−イル｝−アセトアミド、２−クロロ−Ｎ−｛４−［７−メトキシ−４−（３−プロポキシプロピルスルファモイル）−ベンゾフラン−２−イル］−チアゾール−２−イル｝−アセトアミド、２−クロロ−Ｎ−［４−（７−メトキシ−４−ブトキシメチルスルファモイル−ベンゾフラン−２−イル）−チアゾール−２−イル］−アセトアミド、２−クロロ−Ｎ−｛４−［７−メトキシ−４−（２−ブトキシエチルスルファモイル）−ベンゾフラン−２−イル］−チアゾール−２−イル｝−アセトアミド、および２−クロロ−Ｎ−［４−（７−メトキシ−４−ペントキシメチルスルファモイル−ベンゾフラン−２−イル）−チアゾール−２−イル］−アセトアミドよりなる群から選択される前記［１］記載の化合物またはその医薬上許容される塩；
［３］
式（Ｉ）で表される化合物が２−クロロ−Ｎ−｛４−［７−メトキシ−４−（２−メトキシエチルスルファモイル）−ベンゾフラン−２−イル］−チアゾール−２−イル｝−アセトアミドである前記［２］記載の化合物またはその医薬上許容される塩；
［４］
式（Ｉ）：【０００７】
【化２】
2012011314.tif 000004
［式中、Ｒ１は炭素数２ないし６個のアルコキシアルキル基である］
で表される化合物またはその医薬上許容される塩の製法であって、
（１）２−アセチル−７−メトキシベンゾフランにクロロスルホン酸を反応させて２−アセチル−７−メトキシベンゾフラン−４−スルホニルクロリドを生成する工程；
（２）得られたスルホニルクロリド化合物に、塩基存在下で、アルコキシアルキルアミンを反応させて、式（ＩＩ）：【０００８】
【化３】
2012011314.tif 000005
［式中、Ｒ１は上記定義に同じである］
で表されるスルホン酸アミド化合物を生成する工程；
（３）得られたスルホン酸アミド化合物にハロゲンを反応させてアセチル基をハロゲン化する工程；
（４）得られたスルホン酸アミドハロゲン化物に、塩基存在下で、チオ尿素を加熱条件下で反応させて式（ＩＩＩ）：【０００９】
【化４】
2012011314.tif 000006
［式中、Ｒ１は上記定義に同じである］
で表される２−アミノチアゾリルベンゾフラン化合物を生成する工程；ついで
（５）得られた２−アミノチアゾリルベンゾフラン化合物に塩化クロロアセチルを反応させて式（Ｉ）で表される化合物を生成する工程
を含む製法；
［５］
工程（２）で用いるアルコキシアルキルアミンが、メトキシメチルアミン、２−メトキシエチルアミン、３−メトキシプロピルアミン、４−メトキシブチルアミン、５−メトキシペンチルアミン、エトキシメチルアミン、２−エトキシエチルアミン、３−エトキシプロピルアミン、４−エトキシブチルアミン、プロポキシメチルアミン、２−プロポキシエチルアミン、３−プロポキシプロピルアミン、ブトキシメチルアミン、２−ブトキシエチルアミンおよびペントキシメチルアミンよりなる群から選択される前記［４］記載の製法；
［６］
式（Ｉ）で表される化合物またはその医薬上許容される塩を有効成分として含む、がんを治療するための医薬組成物；
［７］
がんが膵臓がん、乳がん、脳腫瘍、神経膠腫、口腔がん、咽頭がん、喉頭がん、肺がん、食道がん、胃がん、腎臓がん、子宮体がん、子宮頸がん、卵巣がん、網膜芽細胞腫、前立腺がん、精巣腫瘍、肝臓がん、皮膚がん、結腸がんおよび直腸がんよりなる群から選択される前記［６］記載の医薬組成物を提供する。
【発明の効果】
【００１０】
本発明によれば、広いスペクトルの抗がん作用を有する抗がん剤を提供することができる。また、本発明によれば、その抗がん剤を工業的に製造できる方法を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】本発明の化合物（−○−）および公知の抗がん剤ジェムザール（−□−）によるがん細胞（MIA PaCa−2）の増殖抑制を示すグラフである。
【図２】本発明の化合物（−○−）および公知の抗がん剤ジェムザール（−□−）によるがん細胞（MCF−7）の増殖抑制を示すグラフである。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１２】
本発明は、第１の態様において、式（Ｉ）：【００１３】
【化５】
2012011314.tif 000007
［式中、Ｒ１は所望により置換されていてもよい炭素数１ないし６のアルコキシアルキル基である］
で表されるベンゾフラン化合物およびその医薬上許容される塩を提供する。【００１４】
好ましい形態において、式（Ｉ）で表される化合物には、
２−クロロ−Ｎ−［４−（７−メトキシ−４−メトキシメチルスルファモイル−ベンゾフラン−２−イル）−チアゾール−２−イル］−アセトアミド、
２−クロロ−Ｎ−｛４−［７−メトキシ−４−（２−メトキシエチルスルファモイル）−ベンゾフラン−２−イル］−チアゾール−２−イル｝−アセトアミド、
２−クロロ−Ｎ−｛４−［７−メトキシ−４−（３−メトキシプロピルスルファモイル）−ベンゾフラン−２−イル］−チアゾール−２−イル｝−アセトアミド、
２−クロロ−Ｎ−｛４−［７−メトキシ−４−（４−メトキシブチルスルファモイル）−ベンゾフラン−２−イル］−チアゾール−２−イル｝−アセトアミド、
２−クロロ−Ｎ−｛４−［７−メトキシ−４−（５−メトキシペンチルスルファモイル）−ベンゾフラン−２−イル］−チアゾール−２−イル｝−アセトアミド、
２−クロロ−Ｎ−［４−（７−メトキシ−４−エトキシメチルスルファモイル−ベンゾフラン−２−イル）−チアゾール−２−イル］−アセトアミド、
２−クロロ−Ｎ−｛４−［７−メトキシ−４−（２−エトキシエチルスルファモイル）−ベンゾフラン−２−イル］−チアゾール−２−イル｝−アセトアミド、
２−クロロ−Ｎ−｛４−［７−メトキシ−４−（３−エトキシプロピルスルファモイル）−ベンゾフラン−２−イル］−チアゾール−２−イル｝−アセトアミド、
２−クロロ−Ｎ−｛４−［７−メトキシ−４−（４−エトキシブチルスルファモイル）−ベンゾフラン−２−イル］−チアゾール−２−イル｝−アセトアミド、
２−クロロ−Ｎ−［４−（７−メトキシ−４−プロポキシメチルスルファモイル−ベンゾフラン−２−イル）−チアゾール−２−イル］−アセトアミド、
２−クロロ−Ｎ−｛４−［７−メトキシ−４−（２−プロポキシエチルスルファモイル）−ベンゾフラン−２−イル］−チアゾール−２−イル｝−アセトアミド、
２−クロロ−Ｎ−｛４−［７−メトキシ−４−（３−プロポキシプロピルスルファモイル）−ベンゾフラン−２−イル］−チアゾール−２−イル｝−アセトアミド、
２−クロロ−Ｎ−［４−（７−メトキシ−４−ブトキシメチルスルファモイル−ベンゾフラン−２−イル）−チアゾール−２−イル］−アセトアミド、
２−クロロ−Ｎ−｛４−［７−メトキシ−４−（２−ブトキシエチルスルファモイル）−ベンゾフラン−２−イル］−チアゾール−２−イル｝−アセトアミド、および
２−クロロ−Ｎ−［４−（７−メトキシ−４−ペントキシメチルスルファモイル−ベンゾフラン−２−イル）−チアゾール−２−イル］−アセトアミド、
ならびにこれらの医薬上許容される塩が含まれる。【００１５】
また、本発明は、第２の態様において、式（Ｉ）で表される化合物の製法を提供する。
式（Ｉ）で表されるベンゾフラン化合物は、
（１）２−アセチル−７−メトキシベンゾフランにクロロスルホン酸を反応させて２−アセチル−７−メトキシベンゾフラン−４−スルホニルクロリドを生成し；
（２）得られたスルホニルクロリド化合物に、塩基存在下、0℃〜50℃、好ましくは10〜40℃、より好ましくは20〜30℃で、アルコキシアルキルアミンを反応させて、式（ＩＩ）：【００１６】
【化６】
2012011314.tif 000008
［式中、Ｒ１は上記定義に同じである］
で表されるスルホン酸アミド化合物を生成し；
（３）得られたスルホン酸アミド化合物に、5〜50℃、好ましくは15〜40℃、より好ましくは20〜30℃で、ハロゲン化試薬を反応させてアセチル基をモノハロゲン化し；
（４）得られたハロゲン化物に、塩基存在下、チオ尿素を加熱条件下で反応させて式（ＩＩＩ）：【００１７】
【化７】
2012011314.tif 000009
［式中、Ｒ１は上記定義に同じである］
で表される２−アミノチアゾリルベンゾフラン化合物を生成し、ついで
（５）得られた２−アミノチアゾリルベンゾフラン化合物に、0〜55℃、好ましくは5〜40℃、より好ましくは15〜30℃で、塩化クロロアセチルを反応させることによって製造することができる。【００１８】
上記の製法の工程（２）で用いるアルコキシアルキルアミンとしては、例えば、メトキシメチルアミン、２−メトキシエチルアミン、３−メトキシプロピルアミン、４−メトキシブチルアミン、５−メトキシペンチルアミン、エトキシメチルアミン、２−エトキシエチルアミン、３−エトキシプロピルアミン、４−エトキシブチルアミン、プロポキシメチルアミン、２−プロポキシエチルアミン、３−プロポキシプロピルアミン、ブトキシメチルアミン、２−ブトキシエチルアミンおよびペントキシメチルアミンなどを用いることができる。【００１９】
また、上記の製法の工程（３）で用いるハロゲン化試薬のハロゲンは塩素、臭素、ヨードなどが、使用できる。
また、上記の製法においては、例えば、アセトニトリル、エタノール、メタノール、クロロホルム、ヘキサン、酢酸エチルなどの溶媒を反応、液液分配、再結晶などに用いることができる。
また、塩基としては、例えば、ピリジン、ジエチルアミン、トリエチルアミンなどの有機塩基類、ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシドなどのアルカリ金属アルコキシド類、水酸化ナトリウム、水酸化カリウムなどの無機塩基類などを用いることができる。【００２０】
また、本発明は、第３の態様において、式（Ｉ）で表される化合物またはその医薬上許容される塩を有効成分として含む、がんを治療するための医薬組成物を提供する。本発明の医薬組成物は、例えば、がんの治療剤または予防剤として用いることができる。【００２１】
本発明の医薬組成物は、抗がん剤として経口的または非経口的に投与することができる。したがって、生体内において本発明の化合物またはこれと実質的に同一の化合物に代謝されるような、いわゆるプロドラッグも本発明の化合物に包含される。【００２２】
本発明の医薬組成物は、有効成分としての化合物（Ｉ）またはその医薬上許容される塩と製剤用の担体とを用いて調製され、製剤用担体としては、その製剤の形態に応じて選択されるが、例えば、デンプン、乳糖、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、ステアリン酸アルミニウムおよびステアリン酸マグネシウムなどが挙げられる。【００２３】
本発明の医薬組成物を経口的に投与する場合は、例えば、錠剤、カプセル剤、シロップ剤および懸濁液などの剤型で投与することができる。一方、本発明の医薬組成物を非経口的に投与する場合は、例えば、溶液、乳剤および懸濁液などを注射剤として、経皮剤として、あるいは噴霧剤として、あるいは錠剤などを坐剤として投与することができる。【００２４】
また、本発明の医薬組成物は、持続性製剤として調製することもできる。このような投与剤型は通常の担体、賦形剤、結合剤および安定剤などと有効成分とを公知の調剤方法により配合することにより調製することができる。注射剤型で用いる場合には、緩衝剤、溶解補助剤および等張剤などを添加することもできる。【００２５】
医薬組成物の治療対象となるがんには、哺乳動物の、好ましくはヒトの膵臓がん、乳がん、脳腫瘍、神経膠腫、口腔がん、咽頭がん、喉頭がん、肺がん、食道がん、胃がん、腎臓がん、子宮体がん、子宮頸がん、卵巣がん、網膜芽細胞腫、前立腺がん、精巣腫瘍、肝臓がん、皮膚がん、結腸がんおよび直腸がんなどが挙げられる。【００２６】
抗がん剤として本発明の医薬組成物を投与する場合の投与量、投与回数は対象とする疾患、患者の症状、年齢、体重、性別など、および投与形態、剤型など種々の要素によって異なるが、経口投与する場合、有効成分である化合物（Ｉ）の用量として、通常、成人に対して1日当たり約1〜3000mg、好ましくは約1〜1000mgまたは約500〜1500mgの範囲、より好ましくは約10〜500mgの範囲となるよう１回または数回に分けて投与することができる。注射剤として投与する場合には、化合物（Ｉ）の用量として、通常、成人に対して１日当たり約1〜3000mg、好ましくは約1〜1000mgまたは約500〜1500mgの範囲、より好ましくは約10〜500mgの範囲を１回または数回に分けて投与することができる。
また、本発明の医薬組成物は、上記の用量を、数週間ないし数ヶ月間連続して投与することができ、または、数週間ないし数ヶ月連続投与した後に一定の休薬期間を挟んで再度投与を再開するなど、様々な様式で投与することができる。【００２７】
以下に、実施例に基づいて本発明をより詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例によって限定されるものではない。
【実施例１】
【００２８】
製造例
0℃に氷冷した約2mLのクロロスルホン酸に、攪拌しつつ、0.15gの2−アセチル−7−メトキシベンゾフラン（0.79mmol）を徐々に加えた。40分後、反応を薄層クロマトグラフィー（E.Merck シリカゲル板（0.5mm, 60F-254）、展開液CHCl3:AcOEt= 3:2）で確認したところ原料の消失が確認されたため反応を終了した。得られた生成物を氷にあけてクロロホルムで抽出し、MgSO4上で乾燥後、濾過し、溶媒を留去させて2−アセチル−7−メトキシベンゾフラン−4−スルホニルクロリドを白色の固体として得た。【００２９】
元素分析  C11H9ClO5Sとして
計算値  C，45.86；H，3.14
実測値  C, 45.74 ; H, 3.21
質量分析
計算値：288.70
実測値：287.99.【００３０】
4mLの乾燥クロロホルム、0.42mLのトリエタノールアミン（TEA、0.31g、3.02mmol）および0.15mLの2−メトキシエチルアミン（0.13g、1.71mmol）を混合し、ここに乾燥ジクロロメタン10mLに溶解した2−アセチル−7−メトキシベンゾフラン−4−スルホニルクロリド滴下し、26℃にて反応させた。90分後、反応を薄層クロマトグラフィー（E.Merck シリカゲル板（0.5mm, 60F-254）、展開液CHCl3:AcOEt=5:2）で確認したところ原料の消失が確認されたため反応を終了した。得られた生成物を氷にあけてクロロホルムで抽出し、MgSO4上で乾燥後、濾過し、溶媒を留去させて黄色結晶0.25gを得た。この結晶をヘキサンおよび酢酸エチルから再結晶させて、0.12gの2−アセチル−7−メトキシベンゾフラン−4−スルホン酸（2−メトキシエチル）−アミドを黄色結晶として得た（収率  46.2％）。【００３１】
黄色結晶  0.12g（46.2%)
Rf=0.32 (CHCl3:AcOEt=5:2)
m.p.  153.6−155.1℃
元素分析C14H17NO6Sとして
計算値：C,51.37;H,5.23;N,4.28
実測値：C,51.28;H,5.28;N,4.23.
1H−NMR (500 MHz, CDCl3)δ:2.65 (3H, s, −COCH3), 3.11 (2H, q, J=5.5 Hz, −SO2NHCH2CH2OCH3), 3.23 (3H, s, −SO2NHCH2CH2OCH3), 3.37 (2H, t, J=5.1 Hz, −SO2NHCH2CH2OCH3), 4.09 (3H, s, −OCH3), 4.89 (1H, t, J=6.0 Hz, −SO2NHCH2CH2OCH3), 6.98 (1H, d, J=8.3 Hz, Bf−6H), 7.81 (1H, d, J=8.2 Hz, Bf−5H), 7.87 (1H, s, Bf−3H).
EIMS(70eV)m/z(rel.int.,%):327 (M+, 19.35), 282 (15.68),253 (79.83), 189 (34.55), 86 (100.00).【００３２】
室温（25℃）下、10mLの乾燥クロロホルムに1.5gの2−アセチル−7−メトキシベンゾフラン−4−スルホン酸（2−メトキシエチル）−アミド（4.59mmol）を加えて溶解させ、それに0.72gのBr2（4.59mmol）を入れた10mLの乾燥クロロホルムを滴下した。15分後、反応を薄層クロマトグラフィー（E.Merck シリカゲル板（0.5mm, 60F-254）、展開液CHCl3:AcOEt=5:2）で確認したところ原料の消失が確認されたため反応を終了した。得られた生成物を飽和NaHCO3水溶液にあけ、攪拌し、クロロホルムで抽出した。その抽出物を塩水で洗浄し、MgSO4上で乾燥後、溶媒を留去させて黄色固体1.88gを得た。この固体をヘキサンおよび酢酸エチルから再結晶させて、0.94gの2−（2−ブロモアセチル）−7−メトキシベンゾフラン−4−スルホン酸（2−メトキシエチル）−アミドを白黄色結晶として得た（収率  51％）。【００３３】
白黄色結晶  0.94g（51％）
Rf=0.45 (CHCl3:AcOEt=5:2)
m.p.  154.7−157.6℃
EIMS(70eV)m/z(rel.int.,%):407 (M+2, 29.27), 405 (M+, 27.86), 362 (35.24), 333 (100.00).【００３４】
ナトリウムエトキシドを加えた10mLの無水エタノールに0.3gの2−（2−ブロモアセチル）−7−メトキシベンゾフラン−4−スルホン酸（2−メトキシエチル）−アミド（0.74mmol）および0.07gのチオ尿素（0.89mmol）を加えて攪拌し、還流させた。5日後、薄層クロマトグラフィー（E.Merck シリカゲル板（0.5mm, 60F-254）、展開液CHCl3:MeOH=5:2）で確認したところ原料の消失が確認されたため反応を終了した。その反応物の溶媒を留去し、残渣をメタノールから再結晶させて、0.12gの2−（2−アミノチアゾール−4−イル）−7−メトキシベンゾフラン−4−スルホン酸（2−メトキシエチル）−アミドを白黄色結晶として得た（収率  39％）。【００３５】
黄色結晶  0.12g（39%)
Rf=0.89 (CHCl3:MeOH=5:2)
m.p.  205.7−207.3℃
元素分析C15H17N3O5S2として
計算値：C,46.98;H,4.47;N,10.96
実測値：C,47.00;H,4.39;N,10.77.
1H−NMR (400 MHz, DMSO−D6)δ:2.88 (2H, t, J=5.9 Hz, −SO2NHCH2CH2OCH3), 3.10 (3H, s, −SO2NHCH2CH2OCH3), 3.25 (2H, t, J=5.9 Hz, −SO2NHCH2CH2OCH3), 4.03 (3H, s, −OCH3), 7.08 (1H, d, J=8.4 Hz, Bf−6H), 7.15 (1H, s, Bf−3H or thiazol−H), 7.21 (2H, s, −NH2), 7.32 (1H, s, Bf−3H or thiazol−H), 7.63 (1H, d, J=8.4 Hz, Bf−5H), 7.70 (1H, br−s, −SO2NH−).
EIMS(70eV)m/z(rel.int.,%):383 (M+, 85.57), 309 (80.39), 245 (100.00).【００３６】
14mLの無水テトラヒドロフランに0.22gの2−（2−アミノチアゾール−4−イル）−7−メトキシベンゾフラン−4−スルホン酸（2−メトキシエチル）−アミド（0.57mmol）を加えて攪拌し、室温（23℃）下、これに0.05mLの塩化クロロアセチル（0.07g、0.68mmol）および0.08mLのTEA（0.06g、0.57mmol）を加えた。17時間後、薄層クロマトグラフィーで確認したところ少量の原料が残っていたため、さらに0.05mLの塩化クロロアセチルを加えて反応を続けた。1時間後、薄層クロマトグラフィー（E.Merck シリカゲル板（0.5mm, 60F-254）、展開液CHCl3:AcOEt=7:3）で確認したところ原料がほぼ消失したことが確認されたため反応を終了した。その反応物を水にあけて攪拌し、析出した固体を吸引濾過して0.23gの黄白色固体を得た。この固体をヘキサンおよび酢酸エチルから再結晶させて、0.17gの2−クロロ−N−｛4−［7−メトキシ−4−（2−メトキシエチルスルファモイル）−ベンゾフラン−2−イル］−チアゾール−2−イル｝−アセトアミドを白黄色結晶として得（収率  65％）、MU−1497と命名した。【００３７】
白黄色結晶  0.17g（65％）
Rf=0.83 (CHCl3:AcOEt=7:3)
m.p.  182.0−184.5℃
元素分析C17H18ClN3O6S2として
計算値：C,44.39;H,3.94;N,9.14
実測値：C,44.38;H,3.99;N,8.96.
1H−NMR (400 MHz, CDCl3)δ:3.11 (2H, q, J=5.5Hz, −SO2NHCH2CH2OCH3), 3.21 (3H, S, −SO2NHCH2CH2OCH3), 3.34 (2H, t, J=5.1Hz, −SO2NHCH2CH2OCH3), 4.09 (3H, s, −OCH3),4.31 (2H, s, −NHCOCH2Cl), 4.93 (1H, t, J=6.0Hz, −SO2NHCH2CH2OCH3), 6.76 (1H, d, J=8.4Hz, Bf−6H), 7.49 (1H, s, Bf−3H or thiazol−H), 7.55 (1H, s, Bf−3H or thiazol−H), 7.75 (1H, d, J=8.4Hz, Bf−5H), 9.77 (1H, s, −NHCOCH2Cl).
EIMS(70eV)m/z(rel.int.,%): 461 (M+2, 33.19), 459 (M+, 74.83), 321 (100.00).
【実施例２】
【００３８】
がん細胞増殖抑制試験
イン・ビトロ(in vitro)におけるヒト膵がん細胞（MIA PaCa−2）および乳がん細胞（MCF−7）に対する、新規に合成した化合物（MU−1497）の細胞増殖抑制作用を検討した。陽性対照薬として5−フルオロウラシル（5−FU、Sigma社）およびゲムシタビン塩酸塩（ジェムザール、GEM、日本イーライリリー（株））を供試した。実験は文部科学省の制がん剤スクリーニング委員会が行っている方法に準じて各実験区とも9回繰り返し実験を行い、その平均値を求めた。具体的には、各培養細胞を96ウェルマイクロプレートに1ウェル当たり1×104細胞（5.0×104細胞／mL、200μL）の密度で播種し、5％CO2下、37℃にて24時間培養した後、化合物を含む培地（180μL、化合物の最高用量は10μM、ジメチルスルフォキシド（DMSO、Sigma社）の終濃度は0.25％に調整）に交換し、さらに同条件下で72時間培養した。なお、MIA PaCa−2の培養にはダルベッコ改変イーグル培地（D−MEM、和光純薬工業（株））を、MCF−7の培養にはイーグル最小必須培地（E−MEM、和光純薬工業（株））を用いた。
培養後、培地にアラマブルー（20μL）（岩城硝子（株））を加えて攪拌した後に3時間培養し、蛍光プレートリーダー（Spectra Max M5（日本モレキュラーデバイス（株））により励起波長530nm、蛍光波長590nmにて蛍光値を測定した。
また、化合物を作用させる直前における蛍光値は、培地を交換した後、直ちに培地にアラマブルー（20μL）を加えて攪拌した後に3時間培養し、蛍光プレートリーダーにより蛍光値を測定した。【００３９】
得られた測定値に基づき、Tz（化合物を作用させる直前の培養細胞の状態）、GI50（対照と比較して培養細胞の増殖を50％に抑制する化合物濃度）、TGI（Tzと同じ細胞数に増殖を抑制する化合物濃度）、LC50（Tzの50％に培養細胞の数を減少せしめる化合物濃度）および増殖率（化合物を作用させてから蛍光値測定までの培養細胞の増殖率）を求めた。それらの結果を図１および表１に示す。
なお、各化合物の溶解度の問題から最高濃度を10μMとし、そのためLC50値が算出できない化合物については＞10μMとした。【００４０】
図１に示されるように、本発明の化合物MU−1497は、MIA PaCa−2において2.5μM以上の濃度で細胞傷害または増殖抑制作用を示し、10μM（最高用量）を適用した場合の増殖率は−95.39％であった。一方、公知の抗がん剤であるゲムシタビン塩酸塩は、MIA PaCa−2において0.0075μM以上の濃度で細胞傷害または増殖抑制作用を示し、10μMを適用した場合の増殖率は26.47％であった。
また、図２に示されるように、本発明の化合物MU−1497は、MCF−7において5.0μM以上の濃度で細胞傷害または増殖抑制作用を示し、10μM（最高用量）を適用した場合の増殖率は−99.71％であった。一方、ゲムシタビン塩酸塩は、MCF−7において0.005μM以上の濃度で細胞傷害または増殖抑制作用を示し、10μMを適用した場合の増殖率は59.52％であった。【００４１】
【表１】
2012011314.tif 000010
【００４２】
表１に示されるように、本発明の化合物MU−1497は、MIA PaCa−2およびMCF−7培養細胞の双方に対して細胞傷害または増殖抑制作用を示した（GI50値、各々、4.22μMおよび3.82μM）。一方、公知の抗がん剤である5−フルオロウラシルはMIA PaCa−2およびMCF−7に対していずれの作用も示さず、また、ゲムシタビン塩酸塩はMIA PaCa−2に対して細胞傷害または増殖抑制作用を示したが、MCF−7に対してはいずれの作用も示さなかった。【００４３】
これらの試験結果から、今回試験に供した化合物のうち、MU−1497にはMIA PaCa−2およびMCF−7の双方の細胞を傷害または増殖抑制する作用が認められた。一方、ゲムシタビン塩酸塩については、MIA PaCa−2において0.0075μM、MCF−7において0.005μMで細胞傷害または増殖抑制作用が認められたが、0.05μM以上の濃度で作用の増強は認められなかった。
したがって、本発明の化合物MU−1497の細胞傷害または増殖抑制作用は、公知の抗がん剤であるゲムシタビン塩酸塩と比較して高濃度域で認められたが、最大反応の大きさはいずれもゲムシタビン塩酸塩を上回ることが示された。よって、本発明により、公知の抗がん剤を上回る制がん作用を有する新規な抗がん剤を得ることができた。
【産業上の利用可能性】
【００４４】
本発明は医薬品分野に関する。詳細には、本発明は新規な抗がん剤の分野に関し、公知の抗がん剤と比較して強力な制がん作用および広いスペクトルの抗がん作用を有する抗がん剤に関する。
【図１】
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【図２】
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【国際調査報告】
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