(57)【要約】アゴニスト、スーパーアゴニスト、アンタゴニスト、または、スーパーアンタゴニスト活性を有するＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体リガンドの類似体が提供される。これらの類似体は、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体の１つ以上に対して選択的であり得るか、または、汎特異的であり得る。
2019504119.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）の構造を含むＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体のアゴニストであって、
Ｂａ−Ｃａ−Ｄａ（Ｉ）
式中、
Ｂａは、２０〜２８個のアミノ酸残基を含むアドレノメデュリンペプチドファミリーメンバーの修飾Ｎ末端断片であり、断片の２つのアミノ酸残基がシステイン（Ｃｙｓ）であり、断片のＣ末端残基がスレオニン（Ｔｈｒ）であり、
Ｃａは、３〜１２個のアミノ酸からなる中心コアであり、
Ｄａは、Ｃ末端アミドを有する３〜６個のアミノ酸残基を含むインターメジン（ＩＭＤ）の改変Ｃ末端断片であり、Ｃ末端断片の少なくとも１つのアミノ酸が、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、プロリン（Ｐ）、セリン（Ｓｅｒ）、チロシン（Ｔｙｒ）である、アゴニスト。
【請求項２】
Ｃａが、３〜１２個の残基のコアである、請求項１に記載のアゴニスト。
【請求項３】
Ｎ末端断片Ｂａが、Ｂ０−Ｂ１−Ｂ２−Ｃ−Ｂ４−Ｂ５−Ｇ−Ｂ７−Ｃ−Ｂ９−Ｂ１０−Ｂ１１−Ｂ１２−Ｂ１３−Ｂ１４−Ｂ１５−Ｂ１６−Ｂ１７−Ｂ１８−Ｂ１９−Ｂ２０−Ｂ２１（配列番号１）を含み、
式中、
Ｂ０は、存在せず、または、存在しており、または、ＫＴＫＫＴＬＲＴのアミノストリングであり、
Ｂ１は、空の残基、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、アシル化ヒスチジン（ａｃｙ−Ｈｉｓ）、二重アシル化ヒスチジン（ａｃｙ−Ｈｉｓ（ａｃｙ））、ａｃｅ−ヒスチジン（ａｃｙ）（ａｃｅ−Ｈｉｓ（ａｃｙ））、ｍｉｎｉ−ＰＥＧ−アシル化−ヒスチジン（ｍｉｎｉ−ＰＥＧ−Ｈｉｓ（ａｃｙ））、アルギニン（Ａｒｇ）、アシル化アルギニン（ａｃｙ−Ａｒｇ）、二重アシル化アルギニン（ａｃｙ−Ａｒｇ（ａｃｙ））、ａｃｅ−アルギニン（ａｃｙ）（ａｃｅ−Ａｒｇ（ａｃｙ））、ｍｉｎｉ−ＰＥＧ−アシル化アルギニン（ｍｉｎｉ−ＰＥＧ−Ａｒｇ（ａｃｙ））、リジン（Ｌｙｓ）、アシル化リジン（ａｃｙ−Ｌｙｓ）、二重アシル化リジン（ａｃｙ−Ｌｙｓ（ａｃｙ））、ａｃｅ−リジン（ａｃｙ）（ａｃｅ−Ｌｙｓ（ａｃｙ））、及び、ｍｉｎｉ−ＰＥＧ−アシル化リジン（ｍｉｎｉ−ＰＥＧ−Ｌｙｓ（ａｃｙ））からなる群から選択され、
Ｂ２は、グリシン（Ｇｌｙ）及び空の残基からなる群から選択され、
Ｂ４は、アルギニン（Ａｒｇ）、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、及び、リジン（Ｌｙｓ）からなる群から選択され、
Ｂ５は、フェニルアラニン（Ｐｈｅ）、及び、ロイシン（Ｌｅｕ）からなる群から選択され、
Ｂ７は、セリン（Ｓｅｒ）、スレオニン（Ｔｈｒ）、及び、チロシン（Ｔｙｒ）からなる群から選択され、
Ｂ９は、セリン（Ｓｅｒ）、スレオニン（Ｔｈｒ）、チロシン（Ｔｙｒ）、グルタミン（Ｇｌｎ）、及び、アスパラギン（Ａｓｎ）からなる群から選択され、
Ｂ１０は、バリン（Ｖａｌ）、アラニン（Ａｌａ）、グリシン（Ｇｌｙ）、イソロイシン（Ｉｌｅ）、及び、ロイシン（Ｌｅｕ）からなる群から選択され、
Ｂ１１は、グルタミン（Ｇｌｎ）、及び、アスパラギン（Ａｓｎ）からなる群から選択され、
Ｂ１２は、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、アルギニン（Ａｒｇ）、リジン（Ｌｙｓ）、グルタミン（Ｇｌｎ）、及び、アスパラギン（Ａｓｎ）からなる群から選択され、
Ｂ１３は、バリン（Ｖａｌ）、アラニン（Ａｌａ）、グリシン（Ｇｌｙ）、イソロイシン（Ｉｌｅ）及びロイシン（Ｌｅｕ）からなる群から選択され、
Ｂ１４は、バリン（Ｖａｌ）、アラニン（Ａｌａ）、グリシン（Ｇｌｙ）、イソロイシン（Ｉｌｅ）、ロイシン（Ｌｅｕ）、セリン（Ｓｅｒ）、スレオニン（Ｔｈｒ）、及び、チロシン（Ｔｙｒ）からなる群から選択され、
Ｂ１５は、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、アルギニン（Ａｒｇ）、及び、リジン（Ｌｙｓ）からなる群から選択され
Ｂ１６は、空の残基、グルタミン（Ｇｌｎ）、及び、アスパラギン（Ａｓｎ）からなる群から選択され、
Ｂ１７は、バリン（Ｖａｌ）、アラニン（Ａｌａ）、グリシン（Ｇｌｙ）、イソロイシン（Ｉｌｅ）、及び、ロイシン（Ｌｅｕ）からなる群から選択され、
Ｂ１８は、トリプトファン（Ｔｒｐ）、フェニルアラニン（Ｐｈｅ）、セリン（Ｓｅｒ）、スレオニン（Ｔｈｒ）、及び、チロシン（Ｔｙｒ）からなる群から選択され、
Ｂ１９は、グルタミン（Ｇｌｎ）、グルタミン酸（Ｇｌｕ）、アスパラギン酸（Ａｓｐ）、及び、アスパラギン（Ａｓｎ）からなる群から選択され、
Ｂ２０は、トリプトファン（Ｔｒｐ）、フェニルアラニン（Ｐｈｅ）、バリン（Ｖａｌ）、アラニン（Ａｌａ）、グリシン（Ｇｌｙ）、イソロイシン（Ｉｌｅ）、及び、ロイシン（Ｌｅｕ）からなる群から選択され、
Ｂ２１は、セリン（Ｓｅｒ）、スレオニン（Ｔｈｒ）、チロシン（Ｔｙｒ）、メチオニン（Ｍｅｔ）、トリプトファン（Ｔｒｐ）、及び、フェニルアラニン（Ｐｈｅ）からなる群から選択される、請求項１または２に記載のアゴニスト。
【請求項４】
前記Ｂａ配列が、配列番号２〜１６からなる群より選択される、請求項１〜３のいずれか１項に記載のアゴニスト。
【請求項５】
中心コアＣａが、ヒトアドレノメデュリンまたはインターメジンの断片を含む、請求項１〜４のいずれか１項に記載のアゴニスト。
【請求項６】
前記Ｃａの断片が、３〜１２個のアミノ酸を含む、請求項５に記載のアゴニスト。
【請求項７】
前記Ｃａが、Ｃ１−Ｃ２−Ｃ３−Ｃ４−Ｃ５−Ｃ６−Ｃ７−Ｃ８−Ｃ９−Ｃ１０−Ｃ１１−Ｃ１２（配列番号１７）を含み、
式中、
Ｃ１は、空の残基、アスパラギン酸（Ａｓｐ）、グルタミン酸（Ｇｌｕ）、グルタミン（Ｇｌｎ）、アスパラギン（Ａｓｎ）、及び、プロリン（Ｐｒｏ）からなる群から選択され、
Ｃ２は、空の残基、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、アルギニン（Ａｒｇ）、リジン（Ｌｙｓ）、バリン（Ｖａｌ）、アラニン（Ａｌａ）、グリシン（Ｇｌｙ）、イソロイシン（Ｉｌｅ）、及び、ロイシン（Ｌｅｕ）からなる群から選択され、
Ｃ３は、空の残基、アスパラギン酸（Ａｓｐ）、グルタミン酸（Ｇｌｕ）、グルタミン（Ｇｌｎ）、アスパラギン（Ａｓｎ）、バリン（Ｖａｌ）、アラニン（Ａｌａ）、グリシン（Ｇｌｙ）、イソロイシン（Ｉｌｅ）、及び、ロイシン（Ｌｅｕ）からなる群から選択され、
Ｃ４は、空の残基、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、アルギニン（Ａｒｇ）、及び、リジン（Ｌｙｓ）からなる群から選択され、
Ｃ５は、空の残基、アスパラギン酸（Ａｓｐ）、グルタミン酸（Ｇｌｕ）、グルタミン（Ｇｌｎ）、及び、アスパラギン（Ａｓｎ）からなる群から選択され、
Ｃ６は、空の残基、アスパラギン酸（Ａｓｐ）、グルタミン酸（Ｇｌｕ）、グルタミン（Ｇｌｎ）、及び、アスパラギン（Ａｓｎ）からなる群から選択され、
Ｃ７は、空の残基、バリン（Ｖａｌ）、アラニン（Ａｌａ）、グリシン（Ｇｌｙ）、イソロイシン（Ｉｌｅ）、ロイシン（Ｌｅｕ）、セリン（Ｓｅｒ）、スレオニン（Ｔｈｒ）、及び、チロシン（Ｔｙｒ）からなる群から選択され、
Ｃ８は、空の残基、バリン（Ｖａｌ）、アラニン（Ａｌａ）、グリシン（Ｇｌｙ）、イソロイシン（Ｉｌｅ）、及び、ロイシン（Ｌｅｕ）からなる群から選択され、
Ｃ９は、空の残基、プロリン（Ｐｒｏ）、バリン（Ｖｌ）、アラニン（Ａｌａ）、グリシン（Ｇｌｙ）、イソロイシン（Ｉｌｅ）、及び、ロイシン（Ｌｅｕ）からなる群から選択され、
Ｃ１０は、空の残基、バリン（Ｖａｌ）、アラニン（Ａｌａ）、グリシン（Ｇｌｙ）、イソロイシン（Ｉｌｅ）、ロイシン（Ｌｅｕ）、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、アルギニン（Ａｒｇ）、及び、リジン（Ｌｙｓ）からなる群から選択され、
Ｃ１１は、空の残基、アスパラギン酸（Ａｓｐ）、グルタミン酸（Ｇｌｕ）、グルタミン（Ｇｌｎ）、アスパラギン（Ａｓｎ）、セリン（Ｓｅｒ）、スレオニン（Ｔｈｒ）、及び、チロシン（Ｔｙｒ）からなる群から選択され、
Ｃ１２は、空の残基、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、アルギニン（Ａｒｇ）、リジン（Ｌｙｓ）及び、プロリン（Ｐｒｏ）からなる群から選択される、請求項１〜６のいずれか１項に記載のアゴニスト。
【請求項８】
前記Ｃａの配列が、配列番号１８〜２６から選択される、請求項７に記載のアゴニスト。
【請求項９】
前記Ｃａの配列が、配列番号１８〜２６から選択される配列に対して少なくとも６０％の配列同一性を有する、請求項７に記載のアゴニスト。
【請求項１０】
前記Ｄａが、Ｄ１−Ｄ２−Ｄ３−Ｄ４−Ｄ５−Ｄ６−ＮＨ２（配列番号２７）を含み、
式中、
Ｄ１は、空の残基、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、及び、Ｔｙｒからなる群から選択され、
Ｄ２は、空の残基、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、及び、Ｔｙｒからなる群から選択され、
Ｄ３は、空の残基、Ｐｒｏ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｉｌｅ、及び、Ｌｅｕからなる群から選択され、
Ｄ４は、空の残基、Ｈｉｓ、Ａｒｇ、及び、Ｌｙｓからなる群から選択され、
Ｄ５は、空の残基、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、及び、Ｔｙｒからなる群から選択され、及び
Ｄ６は、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、及び、Ｔｙｒからなる群から選択される、請求項１〜９のいずれか１項に記載のアゴニスト。
【請求項１１】
前記Ｄａが、Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｈｉｓ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−ＮＨ２と６０％の配列同一性を有する、請求項９に記載のアゴニスト。
【請求項１２】
２９〜４６個のアミノ酸残基を含む、請求項１に記載のアゴニスト。
【請求項１３】
アドレノメデュリンから２１個以下のアミノ酸残基を有する第１のペプチド断片、アドレノメデュリンまたはインターメジンから３〜１２個のアミノ酸を有する第２のペプチド断片、及び、インターメジンから６個以下のアミノ酸残基を有する第３のペプチド断片を含む、請求項１に記載のアゴニスト。
【請求項１４】
配列番号２９〜５１及び９２から選択される配列、または、医薬として許容されるその塩を含む、請求項１に記載のアゴニスト。
【請求項１５】
配列番号６９、７０、９４、１０１、１０３、及び、１１０から選択される配列を含む、修飾されたＣＬＲ／ＲＡＭＰ２受容体特異的スーパーアゴニスト。
【請求項１６】
配列番号２８〜５１、６９〜７０、９２、９４、１０１、１０３、及び、１１０のアミノ酸配列と６０％よりも大きな配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体スーパーアゴニスト。
【請求項１７】
配列番号２８〜５１、６９〜７０、９２、９４、１０１、１０３、及び、１１０から選択されるアミノ酸配列の立体異性体、誘導体、または、ペプチド模倣体を含む、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体スーパーアゴニスト。
【請求項１８】
式（ＩＩ）の構造を含むＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体のスーパーアンタゴニストであって、
Ｂｂ−Ｃｂ−Ｄｂ（ＩＩ）
式中、
Ｂｂは、４〜１３個のアミノ酸残基を含むアドレノメデュリンペプチドファミリーメンバーのＮ末端断片であり、
Ｃｂは、３〜１２個のアミノ酸からなる中心コアであり、
Ｄｂは、Ｃ末端アミドを有する３〜６個のアミノ酸残基を含むインターメジン（ＩＭＤ）の改変Ｃ末端断片であり、Ｃ末端断片の少なくとも１つのアミノ酸が、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、プロリン（Ｐ）、セリン（Ｓｅｒ）、チロシン（Ｔｙｒ）である、スーパーアンタゴニスト。
【請求項１９】
Ｎ末端断片Ｂｂが、Ｂ０−Ｂ１−Ｂ２−Ｂ３−Ｂ４−Ｂ５−Ｂ６−Ｂ７−Ｂ８−Ｂ９−Ｂ１０−Ｂ１１−Ｂ１２を含み、
式中、
Ｂ０は、空の残基、アシル化ヒスチジン（ａｃｙ−Ｈｉｓ）、アシル化アルギニン（ａｃｙ−Ａｒｇ）、アシル化リジン（ａｃｙ−Ｌｙｓ）、アシル化セリン（ａｃｙ−Ｓｅｒ）、アシル化スレオニン（ａｃｙ−Ｔｈｒ）、アシル化チロシン（ａｃｙ−Ｔｙｒ）、アシル化アスパラギン酸（ａｃｙ−Ａｓｐ）、アシル化グルタミン酸（ａｃｙ−Ｇｌｕ）、アシル化グルタミン（ａｃｙ−Ｇｌｎ）、アシル化アスパラギン（ａｃｙ−Ａｓｎ）、アシル化バリン（ａｃｙ−Ｖａｌ）、アシル化アラニン（ａｃｙ−Ａｌａ）、アシル化グリシン（ａｃｙ−Ｇｌｙ）、アシル化イソロイシン（ａｃｙ−Ｉｌｅ）、アシル化ロイシン（ａｃｙ−Ｌｅｕ）、アシル化フェニルアラニン（ａｃｙ−Ｐｈｅ）、アシル化トリプトファン（ａｃｙ−Ｔｒｐ）、アシル化プロリン（ａｃｙ−Ｐｒｏ）、アシル化メチオニン（ａｃｙ−Ｍｅｔ）、アシル化システイン（ａｃｙ−Ｃｙｓ）、二重アシル化ヒスチジン（ａｃｙ−Ｈｉｓ（ａｃｙ））、ａｃｅ−ヒスチジン（ａｃｙ）（ａｃｅ−Ｈｉｓ（ａｃｙ））、ｍｉｎｉ−ＰＥＧ−アシル化ヒスチジン（ｍｉｎｉ−ＰＥＧ−Ｈｉｓ（ａｃｙ））、二重アシル化アルギニン（ａｃｙ−Ａｒｇ（ａｃｙ））、ａｃｅ−アルギニン（ａｃｙ）（ａｃｅ−Ａｒｇ（ａｃｙ））、ｍｉｎｉ−ＰＥＧ−アシル化−アルギニン（ｍｉｎｉ−ＰＥＧ−Ａｒｇ（ａｃｙ））、リジン（Ｌｙｓ）、二重アシル化リシン（ａｃｙ−Ｌｙｓ（ａｃｙ））、ａｃｅ−リジン（ａｃｙ）（ａｃｅ−Ｌｙｓ（ａｃｙ））、及び、ｍｉｎｉ−ＰＥＧ−アシル化リジン（ｍｉｎｉ―ＰＥＧ−Ｌｙｓ（ａｃｙ））からなる群から選択され、
Ｂ１は、空の残基、バリン（Ｖａｌ）、アラニン（Ａｌａ）、グリシン（Ｇｌｙ）、イソロイシン（Ｉｌｅ）、及び、ロイシン（Ｌｅｕ）からなる群から選択され、
Ｂ２は、空の残基、グルタミン（Ｇｌｎ）、グルタミン酸（Ｇｌｕ）、アスパラギン酸（Ａｓｐ）、及び、アスパラギン（Ａｓｎ）からなる群から選択され、
Ｂ３は、空の残基、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、アルギニン（Ａｒｇ）、リジン（Ｌｙｓ）、グルタミン（Ｇｌｎ）、及び、アスパラギン（Ａｓｐ）からなる群から選択され、
Ｂ４は、空の残基、バリン（Ｖａｌ）、アラニン（Ａｌａ）、グリシン（Ｇｌｙ）、イソロイシン（Ｉｌｅ）、及び、ロイシン（Ｌｅｕ）からなる群から選択され、
Ｂ５は、空の残基、バリン（Ｖａｌ）、アラニン（Ａｌａ）、グリシン（Ｇｌｙ）、イソロイシン（Ｉｌｅ）、ロイシン（Ｌｅｕ）、セリン（Ｓｅｒ）、スレオニン（Ｔｈｒ）、及び、チロシン（Ｔｙｒ）からなる群から選択され、
Ｂ６は、空の残基、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、アルギニン（Ａｒｇ）、及び、リジン（Ｌｙｓ）からなる群から選択され、
Ｂ７は、空の残基、グルタミン（Ｇｌｎ）、及び、アスパラギン（Ａｓｎ）からなる群から選択され、
Ｂ８は、空の残基、バリン（Ｖａｌ）、アラニン（Ａｌａ）、グリシン（Ｇｌｙ）、イソロイシン（Ｉｌｅ）、及び、ロイシン（Ｌｅｕ）からなる群から選択され、
Ｂ９は、空の残基、トリプトファン（Ｔｒｐ）、フェニルアラニン（Ｐｈｅ）、セリン（Ｓｅｒ）、スレオニン（Ｔｈｒ）、及び、チロシン（Ｔｙｒ）からなる群から選択され、
Ｂ１０は、空の残基、グルタミン（Ｇｌｎ）、グルタミン酸（Ｇｌｕ）、アスパラギン酸（Ａｓｐ）、及び、アスパラギン（Ａｓｎ）からなる群から選択され、
Ｂ１１は、空の残基、トリプトファン（Ｔｒｐ）、フェニルアラニン（Ｐｈｅ）、バリン（Ｖａｌ）、アラニン（Ａｌａ）、グリシン（Ｇｌｙ）、イソロイシン（Ｉｌｅ）、及び、ロイシン（Ｌｅｕ）からなる群から選択され、
Ｂ１２は、空の残基、セリン（Ｓｅｒ）、スレオニン（Ｔｈｒ）、チロシン（Ｔｙｒ）、メチオニン（Ｍｅｔ）、トリプトファン（Ｔｒｐ）、及び、フェニルアラニン（Ｐｈｅ）からなる群から選択される、請求項１８に記載のアンタゴニスト。
【請求項２０】
前記Ｃｂの断片が、３〜１２個のアミノ酸を含む、請求項１８または１９に記載のアンタゴニスト。
【請求項２１】
前記Ｃｂが、Ｃ１−Ｃ２−Ｃ３−Ｃ４−Ｃ５−Ｃ６−Ｃ７−Ｃ８−Ｃ９−Ｃ１０−Ｃ１１−Ｃ１２（配列番号１７）を含み、
式中、
Ｃ１は、空の残基、グルタミン（Ｇｌｎ）、グルタミン酸（Ｇｌｕ）、アスパラギン酸（Ａｓｐ）、アスパラギン（Ａｓｎ）、及び、プロリン（Ｐｒｏ）からなる群から選択され、
Ｃ２は、空の残基、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、アルギニン（Ａｒｇ）、リジン（Ｌｙｓ）、バリン（Ｖａｌ）、アラニン（Ａｌａ）、グリシン（Ｇｌｙ）、イソロイシン（Ｉｌｅ）、及び、ロイシン（Ｌｅｕ）からなる群から選択され、
Ｃ３は、空の残基、グルタミン（Ｇｌｎ）、グルタミン酸（Ｇｌｕ）、アスパラギン酸（Ａｓｐ）、アスパラギン（Ａｓｎ）、バリン（Ｖａｌ）、アラニン（Ａｌａ）、グリシン（Ｇｌｙ）、イソロイシン（Ｉｌｅ）、及び、ロイシン（Ｌｅｕ）からなる群から選択され、
Ｃ４は、空の残基、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、アルギニン（Ａｒｇ）、及び、リジン（Ｌｙｓ）からなる群から選択され、
Ｃ５は、空の残基、アスパラギン酸（Ａｓｐ）、グルタミン酸（Ｇｌｕ）、グルタミン（Ｇｌｎ）、及び、アスパラギン（Ａｓｎ）からなる群から選択され、
Ｃ６は、空の残基、アスパラギン酸（Ａｓｐ）、グルタミン酸（Ｇｌｕ）、グルタミン（Ｇｌｎ）、及び、アスパラギン（Ａｓｎ）からなる群から選択され、
Ｃ７は、空の残基、バリン（Ｖａｌ）、アラニン（Ａｌａ）、グリシン（Ｇｌｙ）、イソロイシン（Ｉｌｅ）、ロイシン（Ｌｅｕ）、セリン（Ｓｅｒ）、スレオニン（Ｔｈｒ）、及び、チロシン（Ｔｙｒ）からなる群から選択され、
Ｃ８は、空の残基、バリン（Ｖａｌ）、アラニン（Ａｌａ）、グリシン（Ｇｌｙ）、イソロイシン（Ｉｌｅ）、及び、ロイシン（Ｌｅｕ）からなる群から選択され、
Ｃ９は、空の残基、プロリン（Ｐｒｏ）、バリン（Ｖａｌ）、アラニン（Ａｌａ）、グリシン（Ｇｌｙ）、イソロイシン（Ｉｌｅ）、及び、ロイシン（Ｌｅｕ）からなる群から選択され、
Ｃ１０は、空の残基、バリン（Ｖａｌ）、アラニン（Ａｌａ）、グリシン（Ｇｌｙ）、イソロイシン（Ｉｌｅ）、ロイシン（Ｌｅｕ）、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、アルギニン（Ａｒｇ）、及び、リジン（Ｌｙｓ）からなる群から選択され、
Ｃ１１は、空の残基、アスパラギン酸（Ａｓｐ）、グルタミン酸（Ｇｌｕ）、グルタミン（Ｇｌｎ）、アスパラギン（Ａｓｎ）、セリン（Ｓｅｒ）、スレオニン（Ｔｈｒ）、及び、チロシン（Ｔｙｒ）からなる群から選択され、
Ｃ１２は、空の残基、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、アルギニン（Ａｒｇ）、リジン（Ｌｙｓ）及び、プロリン（Ｐｒｏ）からなる群から選択される、請求項１８〜２０のいずれか１項に記載のアンタゴニスト。
【請求項２２】
前記Ｃｂが、ＤＫＤＫＤＮＳＡＰＶＤＰ（配列番号１９）を含む、請求項１８〜２０のいずれか１項に記載のアンタゴニスト。
【請求項２３】
前記Ｃｂが、ＤＫＤＫＤＮＳＡＰＶＤＰ（配列番号１９）に対して少なくとも６０％の配列同一性を有する配列を含む、請求項１８〜２０のいずれか１項に記載のアンタゴニスト。
【請求項２４】
前記Ｄｂが、Ｄ１−Ｄ２−Ｄ３−Ｄ４−Ｄ５−Ｄ６−ＮＨ２（配列番号２７）を含み、
式中、
Ｄ１は、空の残基、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、及び、Ｔｙｒからなる群から選択され、
Ｄ２は、空の残基、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、及び、Ｔｙｒからなる群から選択され、
Ｄ３は、空の残基、Ｐｒｏ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｉｌｅ、及び、Ｌｅｕからなる群から選択され、
Ｄ４は、空の残基、Ｈｉｓ、Ａｒｇ、及び、Ｌｙｓからなる群から選択され、
Ｄ５は、空の残基、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、及び、Ｔｙｒからなる群から選択され、
Ｄ６は、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、及び、Ｔｙｒからなる群から選択される、請求項１８〜２３のいずれか１項に記載のアンタゴニスト。
【請求項２５】
前記Ｄｂが、Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｈｉｓ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−ＮＨ２を含む、請求項２４に記載のアンタゴニスト。
【請求項２６】
前記Ｄｂが、Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｈｉｓ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−ＮＨ２に対して６０％を超える配列同一性を有する配列を含む、請求項２４に記載のアンタゴニスト。
【請求項２７】
式（ＩＩＩ）の構造を含むＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体のスーパーアンタゴニストであって、
Ｂ０−Ｂ１−Ｂ２−Ｂ３−Ｂ４−Ｂ５−Ｂ６−Ｂ７−Ｂ８−Ｂ９−Ｂ１０−Ｂ１１−Ｂ１２−Ｂ１３−Ｂ１４−Ｂ１５−Ｂ１６−Ｂ１７−Ｂ１８−Ｂ１９−Ｂ２０−Ｂ２１−Ｂ２２−Ｂ２３−Ｂ２４−Ｂ２５−Ｂ２６−Ｂ２７−Ｂ２８（ＩＩＩ）
式中、
Ｂ０は、空の残基、アシル化ヒスチジン（ａｃｙ−Ｈｉｓ）、アシル化アルギニン（ａｃｙ−Ａｒｇ）、アシル化リジン（ａｃｙ−Ｌｙｓ）、アシル化セリン（ａｃｙ−Ｓｅｒ）、アシル化スレオニン（ａｃｙ−Ｔｈｒ）、アシル化チロシン（ａｃｙ−Ｔｙｒ）、アシル化アスパラギン酸（ａｃｙ−Ａｓｐ）、アシル化グルタミン酸（ａｃｙ−Ｇｌｕ）、アシル化グルタミン（ａｃｙ−Ｇｌｎ）、アシル化アスパラギン（ａｃｙ−Ａｓｎ）アシル化バリン（ａｃｙ−Ｖａｌ）、アシル化アラニン（ａｃｙ−Ａｌａ）、アシル化グリシン（ａｃｙ−Ｇｌｙ）、アシル化イソロイシン（ａｃｙ−Ｉｌｅ）、アシル化ロイシン（ａｃｙ−Ｌｅｕ）、アシル化フェニルアラニン（ａｃｙ−Ｐｈｅ）、アシル化トリプトファン（ａｃｙ−Ｔｒｐ）、アシル化プロリン（ａｃｙ−Ｐｒｏ）、アシル化メチオニン（ａｃｙ−Ｍｅｔ）、アシル化システイン（ａｃｙ−Ｃｙｓ）、二重アシル化ヒスチジン（ａｃｙ−Ｈｉｓ（ａｃｙ））、ａｃｅ−ヒスチジン（ａｃｙ）（ａｃｅ−Ｈｉｓ（ａｃｙ））、ｍｉｎｉ−ＰＥＧ−アシル化ヒスチジン（ｍｉｎｉ−ＰＥＧ−Ｈｉｓ（ａｃｙ））、二重アシル化アルギニン（ａｃｙ−Ａｒｇ（ａｃｙ））、ａｃｅ−アルギニン（ａｃｙ）（ａｃｅ−Ａｒｇ（ａｃｙ））、ｍｉｎｉ−ＰＥＧ−アシル化−アルギニン（ｍｉｎｉ−ＰＥＧ−Ａｒｇ（ａｃｙ））、リジン（Ｌｙｓ）、二重アシル化リシン（ａｃｙ−Ｌｙｓ（ａｃｙ））、ａｃｅ−リジン（ａｃｙ）（ａｃｅ−Ｌｙｓ（ａｃｙ））、及び、ｍｉｎｉ−ＰＥＧ−アシル化リジン（ｍｉｎｉ―ＰＥＧ−Ｌｙｓ（ａｃｙ））からなる群から選択され、
Ｂ１は、空の残基、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、及び、Ｌｅｕからなる群から選択され、
Ｂ２は、空の残基、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、及び、Ａｓｎからなる群から選択され、
Ｂ３は、空の残基、Ｈｉｓ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｇｌｎ、及び、Ａｓｐからなる群から選択され、
Ｂ４は、空の残基、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｉｌｅ、及び、Ｌｅｕからなる群から選択され、
Ｂ５は、空の残基、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｓｅｒ、Ｔｈ、及び、Ｔｙｒからなる群から選択され、
Ｂ６は、空の残基、Ｈｉｓ、Ａｒｇ、及び、Ｌｙｓからなる群から選択され、
Ｂ７は、空の残基、Ｇｌｎ、Ａｓｎ、Ｈｉｓ、Ａｒｇ、及び、Ｌｙｓからなる群から選択され、
Ｂ８は、空の残基、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｉｌｅ、及び、Ｌｅｕからなる群から選択され、
Ｂ９は、空の残基、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、及び、Ｔｙｒからなる群から選択され、
Ｂ１０は、空の残基、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、及び、Ａｓｎからなる群から選択され、
Ｂ１１は、空の残基、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｉｌｅ、及び、Ｌｅｕからなる群から選択され、
Ｂ１２は、空の残基、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｙｒ、Ｍｅｔ、Ｔｒｐ、及び、Ｐｈｅからなる群から選択され、
Ｂ１３は、空の残基、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ａｓｎ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｉｌｅ、及び、Ｌｅｕからなる群から選択され、
Ｂ１４は、空の残基、Ｈｉｓ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、及び、Ｐｒｏからなる群から選択され、
Ｂ１５は、空の残基、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ａｓｎ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｉｌｅ、及び、Ｌｅｕからなる群より選択され、
Ｂ１６は、空の残基、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｉｌｅ、及び、Ｌｅｕからなる群から選択され、
Ｂ１７は、空の残基、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、及び、Ｔｙｒからなる群から選択され、
Ｂ１８は、空の残基、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｉｌｅ、及び、Ｌｅｕからなる群から選択され、
Ｂ１９は、空の残基、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、及び、Ｐｒｏからなる群から選択され、
Ｂ２０は、空の残基、Ｈｉｓ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｉｌｅ、及び、Ｌｅｕからなる群から選択され、
Ｂ２１は、空の残基、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｙｒ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、及び、Ａｓｎからなる群から選択され、
Ｂ２２は、空の残基、Ｈｉｓ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、及び、Ｐｒｏからなる群から選択され、
Ｂ２３は、空の残基、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｙｒ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｉｌｅ、及び、Ｌｅｕからなる群から選択され、
Ｂ２４は、空の残基、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、及び、Ｔｙｒからなる群から選択され、
Ｂ２５は、空の残基、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、及び、Ｐｒｏからなる群から選択され、
Ｂ２６は、空の残基、Ｈｉｓ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、及び、Ａｓｎからなる群から選択され、
Ｂ２７は、空の残基、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、及び、Ｔｙｒからなる群から選択され、
Ｂ２８は、空の残基、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、及び、Ｔｙｒからなる群から選択される、スーパーアンタゴニスト。
【請求項２８】
配列番号７７、７８、１１２、１２１、及び、１２５から選択される配列を含む汎特異的ＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体スーパーアンタゴニスト。
【請求項２９】
配列番号１１４、１２０、１２２、１２３、１２４、及び、１３９から選択される配列を含むＣＬＲ／ＲＡＭＰ１特異的受容体スーパーアンタゴニスト。
【請求項３０】
Ｐａｌ−ＫＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＶＡＰＲＳＫＩＳＰＱＧＹ−ＮＨ２（配列番号１１９）の配列を含むＣＬＲ／ＲＡＭＰ２特異的受容体スーパーアンタゴニスト。
【請求項３１】
配列番号７７〜７８、１１２、１１４、１１９、１２０〜１２５、及び、１３９から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも６０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体スーパーアンタゴニスト。
【請求項３２】
配列番号７７〜７８、１１２、１１４、１１９、１２０〜１２５、及び、１３９から選択されるアミノ酸配列の立体異性体、誘導体、または、ペプチド模倣体を含むＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体スーパーアゴニスト。
【請求項３３】
医薬として許容される賦形剤、及び、請求項１〜３２のいずれか１項に記載のＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体のスーパーアゴニストまたはスーパーアンタゴニストを含む医薬組成物。
【請求項３４】
高血圧症、内皮機能不全、心臓血管組織の損傷、心不全、冠動脈性心疾患、虚血性及び／または出血性脳卒中、末梢動脈閉塞性疾患、子癇前症、血液または胎児−胎盤循環、浮腫性疾患、肺機能不全、急性肺傷害／急性呼吸窮迫症候群（ＡＬＩ／ＡＲＤＳ）、外傷及び／または火傷、及び／または、人工呼吸器誘発肺傷害（ＶＩＬＩ）、肺線維症、高山病、慢性腎疾患、急性腎障害、リンパ浮腫、リンパ管再生、炎症性腸疾患、炎症性疾患、または、障害を受けた血管機能、局所傷、片頭痛、腫瘍、転移、血管新生、及び、癌が関連する眼疾患を、個体または動物において、治療及び／または予防する方法であって、請求項１〜３２のいずれか１項に記載のＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体のスーパーアゴニストまたはスーパーアンタゴニストの有効量を前記個体に対して投与することを含む、方法。
【請求項３５】
請求項１〜３２のいずれか１項に記載のＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体スーパーアゴニストまたはスーパーアンタゴニストを個体または動物に対して投与することを含む、異常なレベルのアドレノメデュリン、カルシトニン遺伝子関連ペプチド（ＣＧＲＰ）、または、インターメジンに関連する病態を治療及び／または予防する方法であって、前記個体または動物に対して、有効量のＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体のスーパーアゴニストまたはスーパーアンタゴニストを投与することを含む、方法。
【請求項３６】
請求項１〜３２のいずれか１項に記載のＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体のスーパーアゴニストまたはスーパーアンタゴニストに対して特異的に結合する抗体。
【請求項３７】
個体における内皮機能不全に関連する病態の治療及び／または予防のために、請求項１〜２４のいずれか１項に記載のＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体のスーパーアゴニストまたはスーパーアンタゴニストを用いて内皮細胞及び／またはリンパ上皮細胞を生成する方法であって、前記個体に対して有効量の内皮細胞及び／またはリンパ管内皮細胞を投与することを含む、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本実施形態は、ペプチドホルモンのアドレノメデュリン（ＡＤＭ）／カルシトニン遺伝子関連ペプチド（ＣＧＲＰ）／インターメジン（アドレノメデュリン２、ＩＭＤ）ファミリーのスーパーアゴニスト及びスーパーアンタゴニスト、ならびに、それらの治療的使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
Ｇタンパク質共役型受容体（ＧＰＣＲ）は、細胞表面受容体であり、かつ、ヒトゲノムにおいて最大のタンパク質ファミリーの１つである。系統学的基準に基づいて、ヒトＧＰＣＲの大きなスーパーファミリーは、グルタミン酸塩、ロドプシン、接着因子、フリズルド／苦味、及び、セクレチン（「ＧＲＡＦＳ」命名法）の５つの主なサブファミリーに細分することができ、それらの中で、セクレチンファミリー（コワコフスキ／ＮＣ−ＩＵＰＨＡＲ拡張命名法システムでのクラスＢ  ＧＰＣＲファミリーと類似である）は、最も研究が進んだサブクラスの１つである。現在までに、すべての薬剤の３分の１以上が、ＧＰＣＲを標的としている。
【０００３】
ＧＰＣＲシグナル伝達の標準的な考え方は、細胞内ヘテロ三量体グアニンヌクレオチド結合タンパク質（Ｇタンパク質）の活性化に重点を置いている（Ｌａｇｅｒｓｔｒｏｍ  ｅｔ  ａｌ（２００８）Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ；７：３３９−３５７）。受容体媒介性細胞応答を誘発するリガンドの能力は、用語「有効性」によって表現されている（Ｋｅｎａｋｉｎ（２０１３）Ｂｒ  Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  １６８：５５４−５７５；Ｒａｊａｇｏｐａｌ（２０１３）Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ  １２：４８３）。歴史的に、リガンドの有効性は、濃度−効果曲線から導かれており、また、有効濃度（ＥＣ５０）、及び、内因性リガンドなどの標準化合物でのＥＭＡＸに対する最大効果（ＥＭＡＸ）として定量される（Ｌａｎｇｍｅａｄ  ａｎｄ  Ｃｈｒｉｓｔｏｐｏｕｌｏｓ（２０１３）Ｂｒ  Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  １６９：３５３−３５６）。
【０００４】
にもかかわらず、アゴニスト結合に必要とされる受容体の割合は、受容体活性化のための個々の有効性に依存させることができるので、システムにおいて最大応答を誘導する薬物は、異なる有効性を示し得る。したがって、通常、応答には、アッセイ依存限界がある。通常、ＧＰＣＲリガンドは、その有効性、すなわち、受容体媒介薬理学的応答を誘発する能力にしたがって分類される（Ｓｍｉｔｈ  ｅｔ  ａｌ（２０１１）Ｍｏｌ  Ｃｅｌｌ  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ  ３３１：２４１−２４７）。
【０００５】
活性状態に基づくＧＰＣＲを用いた結晶学的研究は、アゴニスト結合及びＧタンパク質の結合が、完全に活性な状態でタンパク質を捕捉する上で重要であることを示している（Ｒａｓｍｕｓｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ（２０１１）Ｎａｔｕｒｅ  ４７７：５４９−５５５）。さらに、最近の研究は、ＧＰＣＲアゴニストが、可能な配座状態にあるサブセットだけを安定化することを示している（Ｋｏｂｉｌｋａ  ａｎｄ  Ｄｅｕｐｉ（２００７）Ｔｒｅｎｄｓ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｓｃｉ  ２８：３９７−４０６；Ｋｅｎａｋｉｎ（２０１３）Ｂｒ  Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  １６８：５５４−５７５）。したがって、所与の受容体タンパク質の多様なアゴニストは、特異的シグナル伝達経路の活性化のための異なる有効性を有する異なるサブセットの立体配座を安定化し得る（Ｋｅｎａｋｉｎ（２０１３）Ｂｒ  Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  １６８：５５４−５７５）。したがって、「強力な」アゴニストは、非常に有効なアゴニストによって生成された、均一性に富み、かつ、完全に活性な配座と同様の一連の配座を寄せ集めることができる。
【０００６】
結果として、内在性アゴニストよりもより均一な配座を安定化する化合物の超生理学的有効性のことを、スーパーアゴニストと表している（Ｓｃｈｒａｇｅ  ｅｔ  ａｌ（２０１５）  Ｂｒ  Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  ｄｏｉ：１０．１１１１／ＢＰＨ．１３２７８）。ＧＰＣＲ（ロドプシン様クラスまたはクラスＡ）の最大で、かつ、最も「ドラッガブルな」クラスでは、幾つかの合成化合物が、内在性リガンドよりも大きな内因的有効性を示すことが記載されている。これらの化合物として、ソマトスタチンｓｓｔ４受容体、グレリン受容体、α２Ａ−アドレナリン受容体、甲状腺刺激ホルモン放出ホルモンＴＲＨ１受容体、及び、ムスカリンＭ２コリン受容体に対するものなどがある（Ｓｃｈｒａｇｅ  ｅｔ  ａｌ（２０１５）Ｂｒ  Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  ｄｏｉ：１０．１１１１／ｂｐｈ．１３２７８）。リガンド依存性イオンチャネルでの超生理学的アゴニストの有効性に関する例もあり（Ｃａｒｌｉｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（２００２）Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  Ｌｅｔｔ  １２：１９８５−１９８８；Ｉｈａｒａ  ｅｔ  ａｌ．（２００４）Ｂｉｏｓｃｉ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍ  ６８：７６１−７６３）、また、その事例は、ＧＡＢＡ受容体を含んでいる。
【０００７】
ＡＤＭ／ＣＧＲＰ／ＩＭＤペプチドファミリーは、カルシトニン遺伝子関連ペプチド（ＣＧＲＰα及びＣＧＲＰβ）、アドレノメデュリン（ＡＤＭ）、インターメジン（ＩＭ）、カルシトニン（ＣＴ）、及び、アミリンを含む。これらの中で、ＣＧＲＰ、ＡＤＭ、及び、ＩＭＤは、構造的に類似しており、また、２つの膜貫通構成要素、すなわち、カルシトニン受容体様受容体（ＣＬＲ）と、３つの受容体活性修飾タンパク質（ＲＡＭＰ１，２及び３）の内の１つとからなる受容体複合体を介してシグナル伝達する。ＣＧＲＰ、ＡＤＭ、及び、ＩＭＤのための機能的受容体を生成するためには、カルシトニン受容体様受容体（ＣＬＲ）と受容体活性修飾タンパク質（ＲＡＭＰ）との共発現が必要である。ＣＧＲＰは、主にＣＬＲ／ＲＡＭＰ１受容体を介して作用するが、ＡＤＭは、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ２及び３受容体に対して高い親和性を示す。一方で、ＩＭＤは、３つのＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体に対して明確な選択性を示さない。
【０００８】
５２個のアミノ酸のＡＤＭは、副腎、肺、腎臓、心筋、及び、他の器官で産生されるのに対して、ＣＧＲＰペプチドは、神経伝達物質である。ＡＤＭ、ＣＧＲＰ、及び、ＩＭＤの血漿レベルは、ピコモルの範囲内にある。ＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体の活性化は、受容体担持細胞におけるアデノシン３’、５’−環状一リン酸（ｃＡＭＰ）の細胞内上昇をもたらす。ＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体は、内皮細胞を含むほぼすべての器官の異なる細胞型に存在する。これらのペプチドは、中性エンドペプチダーゼによって代謝されると考えられており、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体が高度に発現されている腎臓または肺で主に浄化されている［Ｇｉｂｂｏｎｓ  Ｃ，Ｄａｃｋｏｒ  Ｒ，Ｄｕｎｗｏｒｔｈ  Ｗ，Ｆｒｉｔｚ−Ｓｉｘ  Ｋ，Ｃａｒｏｎ  ＫＭ，Ｍｏｌ  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ  ２１（４），７８３−７９６（２００７）］。
【０００９】
ＡＤＭ及びＩＭＤは、当初は、強力な血管調節剤として特徴付けがされていたが、その後の研究により、これらのペプチドの機能は、降圧効果をはるかに凌ぐものであり、また、様々な器官において多面発現効果を示すことが明らかになった。トランスジェニックマウスを用いた研究は、ＡＤＭ、ＣＬＲ、及び、ＲＡＭＰ２が、胚発生期及び成人期において、血液及びリンパ管の正常な形成に必須であることを示している。ＡＤＭまたはＩＭＤの注入は、血管収縮、末梢血管抵抗、及び、浮腫を減少させ、動物における心拍出量及び腎糸球体濾過を増加させることが認められている。また、これらのペプチドは、ヒト、ヒツジ、及び、齧歯類における心不全及び心筋梗塞、そして、ヒト、ブタ、及び、ラットにおける肺動脈高血圧症に関して有益な効果を有することが認められている。さらに、ＡＤＭ及びＩＭＤは、傷害及び低酸素症に対して代償応答し、病的状態において増加する逆調節ホルモンであることが一般に知られている。加えて、ＡＤＭは、種々の動物モデルにおいて、リポ多糖類（ＬＰＳ）、エラスターゼ、モノクロタリン、ブレオマイシン、虚血−再灌流、及び、カラゲナンによって誘発される急性または慢性の肺損傷を改善することが認められている。
【００１０】
加えて、外因性ＡＤＭ及びＩＭＤは、インビトロで内皮細胞及びリンパ球上皮細胞の増殖及び移動を刺激するとともに、様々な動物モデルにおいて損傷を受けたリンパ管及び血管を再形成することも認められている。さらに、心不全、心筋梗塞、脳卒中、耐性高血圧症、肺動脈性高血圧症、子癇前症、二次性リンパ浮腫、及び、糖尿病性潰瘍を有する動物において、内皮細胞の生存、血管形成、及び、血管壁統合性、心臓出力、及び、腎糸球体濾過を改善することによって、これらのホルモンは、神経保護、腎保護、利尿、及び／または、ナトリウム利尿効果を示す。さらに、ＡＤＭは、種々の幹細胞／前駆細胞の生存、分化、及び、脈管形成能を動員及び増強することができる。
【００１１】
ＣＧＲＰは、Ｅｖａｎｓ  ｅｔ  ａｌ．の米国特許第４，５３０，８３８号に記載されているような強力な血管拡張性、強心性、及び、疼痛伝達作用を有する感覚神経ペプチドである。ＣＧＲＰは、中枢神経系及び末梢神経系の両方に存在し、また、自律神経系の入力に関連する後角からの限られた量の感覚入力を受ける身体の領域に集中している。脳において、このペプチドは、感覚及び運動性脳神経の核内、そして、視床下部、視索前野、腹側視床、海馬などの細胞体に存在する（Ｐｏｙｎｅｒ，Ｄ．１９９２，Ｐｈａｒｍａｃ．Ｔｈｅｒ．５６：２３−５１）。
【００１２】
加えて、ＡＤＭ／ＣＧＲＰ／ＩＭＤファミリーペプチドは、血管、脈管形成、及び、脈管リモデリングのための出発材料として利用できる内皮細胞の増殖に対して強力な刺激効果を示すことが知られている。ＡＤＭ、ＣＧＲＰ、及び、ＩＭＤは、ヒトにおいて最も有効な血管拡張薬であるため、正常な生理期間中、及び、妊娠期間中に、高流量／低抵抗性循環、及び、胎児−胎盤組織発生を維持するために機能的に重要であり得る。
【００１３】
ＣＧＲＰ、ＡＤＭ、または、ＩＭＤに対する受容体レベルのアゴニストは、内皮機能不全、不十分な血管発達、及び、異常な血管拡張調節が認められる生理学的病態において有用であるとの仮説がある。ＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体スーパーアゴニストは、血管ＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体を刺激するので、心不全、心筋梗塞、抵抗性高血圧症、悪性高血圧症、血管痙攣、脳卒中、血管攣縮、気管支肺異形成、肺動脈高血圧症、リンパ浮腫、創傷治癒、急性肺損傷、褥瘡、加齢黄斑変性症、多発性硬化症、アルツハイマー病、パーキンソン病、癲癇、網膜症、臓器保存、子癇、及び、子癇前症などの病理学的病態における組織再生を刺激するためのツールとして用いることができる。
【００１４】
ＣＴ／ＣＧＲＰファミリーにおけるホルモンペプチドの生理学的機能は、受容体結合特異性、ならびに、個々のリガンド、及び、それら各々についての受容体の組織発現プロファイルによって決定されており、そして、心臓血管形態形成、感覚神経伝達、炎症反応、侵害行動、及び、グルコース恒常性に関与していることが認められている（例えば、Ｈａｙ，ｅｔ  ａｌ．２００１，Ｔｒｅｎｄｓ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｓｃｉ．２２：５７−５９；Ｓｈｉｎｄｏ，ｅｔ  ａｌ．  ２００１，Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ  １０４：１９６４−１９７１；Ｚｈａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．２００１，Ｐａｉｎ  ８９：２６５−２７３；Ｓａｌｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．（１９９９）Ｎｅｕｒｏｒｅｐｏｒｔ  １０：８４９−８５４；Ｓａｌｍｏｎ，ｅｔ  ａｌ．２００１，Ｎａｔ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．４：３５７−３５８；及び、Ｍｕｌｄｅｒ、ｅｔ  ａｌ．２０００，Ａｍ．／．Ｐｈｙｓｉｏｌ．２７８：Ｅ６８４−Ｅ６９１を参照されたい）。
【００１５】
ＣＧＲＰ及びＡＤＭに対する受容体レベルの阻害剤は、過剰のＣＧＲＰ及び／またはＡＤＭ受容体活性化が起こった病態生理学的病態において有用であると考えられる。これらには、神経性血管拡張、神経原性炎症、偏頭痛、クラスター頭痛及び他の頭痛、熱傷、循環器ショック、更年期フラッシング、及び、喘息が含まれる。ＣＧＲＰ受容体活性化は、特に、片頭痛の病因に関与している（Ｅｄｖｉｎｓｓｏｎ  Ｌ．  ２００１，ＣＮＳ  Ｄｒｕｇｓ  １５（１０）：７４５−５３；Ｗｉｌｌｉａｍｓｏｎ，Ｄ．Ｊ．２００１  Ｍｉｃｒｏｓｃ．  ＲＥＳ．  Ｔｅｃｈ．  ５３：１６７−１７８．；Ｇｒａｎｔ，Ａ．Ｄ．２００２，Ｂｒｉｔ．Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１３５：３５６−３６２）。片頭痛に関連する頭痛は、片頭痛事象に関連する深刻な脳血管拡張の結果であると考えられている（Ｍｏｓｋｏｗｉｔｚ  １９９２，Ｔｒｅｎｄｓ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．  Ｓｃｉ．１３：３０７−３１１）。片頭痛患者は、対照と比較して上昇した基礎ＣＧＲＰレベルを示し（Ａｓｈｉｎａ，ｅｔ  ａｌ．，２０００、Ｐａｉｎ  ８６（１−２）１３３−８）、また、片頭痛の間にＣＧＲＰの血清レベルが上昇する（Ｇｏａｄｓｂｙ，ｅｔ  ａｌ．，１９９０，Ａｎｎ．Ｎｅｕｒｏｌ．２８：１８３−７）。抗片頭痛治療候補での治療は、頭痛の緩和と同時にＣＧＲＰレベルを正常に戻し（Ｇａｌｌａｉ，ｅｔ  ａｌ．１９９５，Ｃｅｐｈａｌａｌｇｉａ  １５：３８４−９０）、その一方で、静脈内ＣＧＲＰ投与は、偏頭痛患者に頭痛を生じさせる（Ｌａｓｓｅｎ，ｅｔ  ａｌ．２００２，Ｃｅｐｈａｌａｌｇｉａ  ２２（１）：５４−６１）。したがって、ＣＧＲＰアンタゴニストは、脳血管ＣＧＲＰ受容体を遮断し、そして、片頭痛を遮断する上で有用であり得る。
【００１６】
静脈内鎮痛剤（ＢＩＢＮ４０９６  ＢＳ，Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ）、及び、経口テルカゲパント（ＭＫ−０９７４，Ｍｅｒｃｋ  ＆  Ｃｏ．，  Ｉｎｃ．）などのＣＧＲＰ受容体の小分子及びペプチドアンタゴニストの両方が、治療のための臨床試験において有効であることが示されている（Ｔｅｐｐｅｒ  ａｎｄ  Ｓｔｉｌｌｍａｎ，２００８，Ｈｅａｄａｃｈｅ  ４８（８）：１２５９−１２６８；及び、Ｄｕｒｈａｍ  ａｎｄ  Ｖａｕｓｅ  ２０１０，ＣＮＳ  Ｄｒｕｇｓ  ２４（７）：５３９−５４８を参照されたい）。しかしながら、ＭＫ−３２０７などの選択された小分子ＣＧＲＰアンタゴニストは、一部の患者において無症候性肝臓試験での異常と関連している。
【００１７】
ＣＧＲＰ受容体のペプチドアンタゴニストは、ＣＧＲＰの配列を含むが、３７個のアミノ酸のＣＧＲＰの配列の少なくとも最初の７個のアミノ酸を欠いている（例えば、ＣＧＲＰ（８〜３７）、ＣＧＲＰ（２８〜３７）、［Ｔｙｒｏ］ＣＧＲＰ（２８〜３７）、ＣＧＲＰ（１２〜３７）、ｈ−ａ−ＣＧＲＰ（９〜３７）、ｈ−ａ−ＣＧＲＰ（１０〜３７）、ｈ−ａ−ＣＧＲＰ（１１〜３７）、［Ａｌａ  ９］−ｈ−ａ−ＣＧＲＰ（８〜３７）、［Ａｌａ  １０］−ｈ−ａ−ＣＧＲＰ（８〜３７）、［Ａｌａ  ｎ］−ｈ−ａ−ＣＧＲＰ（８〜３７）、［Ａｌａ  １２］−ｈ−ａ−ＣＧＲＰ（８〜３７）、ｈ−ａ−ＣＧＲＰ（１９〜３７）、ｈ−ａ−ＣＧＲＰ（２３〜３７）、及び、アセチル−ｈ−ａ−ＣＧＲＰ（１９〜３７）；Ｍｉｍｅａｕｌｔ，Ｍ．ｅｔ  ａｌ．，１９９２，Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．３５：２１６３−２１６８；Ｒｏｖｅｒｏ，Ｐ．ｅｔ  ａｌ．，１９９２，Ｐｅｐｔｉｄｅｓ  １３：１０２５−１０２７）。多数のＣＧＲＰ受容体ペプチドアンタゴニストが、インビトロでＣＧＲＰと効果的に競合することが示されているが、これらのアンタゴニストは、低い生物活性に起因する片頭痛様病変のインビボモデルでは、同様に機能しなかった。
【００１８】
ＡＤＭに対する受容体レベルの阻害剤として、ＡＤＭ２２−５２がある。三次構造分析は、ＡＤＭファミリーペプチドの結合ドメインが、非構造化ストリングによって特徴付けられることを示した。（１）ＡＤＭは、肺、乳房、結腸、脳、膵臓、子宮内膜、卵巣、腎臓、または、前立腺起源の腫瘍の腫瘍細胞及び周囲血管の分裂促進因子として働き、（２）腫瘍におけるＡＤＭ発現は、腫瘍の凝集、遠隔転移、及び、患者の不良な予後に関連しており、また、（３）ＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体シグナル伝達の遮断は、腫瘍異種移植片の増殖、微小血管密度、腫瘍関連マクロファージ誘発性血管形成、及び、転移を減少させるので、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ２、及び／または、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ３受容体アンタゴニストは、癌治療のための抗血管形成薬の候補である。
【００１９】
全体として、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体シグナル伝達を遮断するために、４つの方法が使われている。これらの方法は、（１）合成ペプチドアンタゴニスト（例えば、ＣＧＲＰ８−３７及びＡＤＭ２２−５２、それぞれ、ＣＧＲＰ媒介ＣＬＲ／ＲＡＭＰ１及びＡＤＭ媒介ＣＬＲ／ＲＡＭＰ２シグナル伝達に特異的である）、（２）小分子ＣＧＲＰ受容体アンタゴニスト（例えば、テルカゲパント）、（３）抗リガンド抗体（例えば、抗ＣＧＲＰまたは抗ＡＤＭ抗体）、及び、（４）抗受容体抗体（例えば、抗ＣＬＲまたは抗ＲＡＭＰ抗体）の使用を含む。しかしながら、既存の治療候補は、有効性または安全性の懸念と関連している。第１に、ＣＧＲＰ８−３７及びＡＤＭ２２−５２などのペプチドアンタゴニストは、半減期が極めて短く、かつ、有効性も乏しく、また、受容体特異的である。第２に、小分子ＣＬＲ／ＲＡＭＰ１受容体アンタゴニストは、ヒトに対して肝臓毒性を呈する。第３に、抗リガンド抗体及び抗受容体抗体は、リガンドまたは受容体成分の１つに対して特異的であるので、それらは標的のごく一部のサブグループにしか作用しない。第４に、これらの抗体は、中枢神経系におけるＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体への交通が制限されている。したがって、小分子ＣＬＲ／ＲＡＭＰ１アンタゴニスト及び抗ＣＧＲＰ抗体と比較して、ＣＧＲＰ８−３７などのペプチドアンタゴニストは、血液脳関門（ＢＢＢ）を効率的に通過することが示されているので、汎特異的またはＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体１−、２−、または、３−特異的スーパーアンタゴニストは、優れた抗ＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体治療薬の候補である。加えて、新たに開発されたスーパーアンタゴニストは、かなり親油性であるので、野生型類似体と比較して、脳室に向けた交通が良好である。
【００２０】
最も研究が進んでいるＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体アゴニストであるＡＤＭは、心不全及び肺高血圧症の急性治療のための早期臨床試験において、安全で、効果的で、かつ、耐容性が高いことが知られている。しかしながら、アゴニストの有効性が限定的なため、薬理学的効果は不十分である。
【００２１】
以下に示した各文献は、特に、本明細書の一部を構成するものとして、その内容を援用する。
Ｈｏｎｇ  ｅｔ  ａｌ．（２０１２）Ｂｒ  Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  １６６：１１０−１２０
Ｗａｔｋｉｎｓ  ｅｔ  ａｌ．（２０１３）Ｂｒ  Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  １７０：１３０８−１３２２
Ｂｏｏｅ  ｅｔ  ａｌ．（２０１５）Ｍｏｌ  Ｃｅｌｌ  ５８：１０４０−１０５２
Ｈｉｎｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．（２０００）Ｅｎｄｏｃｒ  Ｒｅｖ  ２１：１３８−１６７（２０００）
Ｔａｋｅｉ  ｅｔ  ａｌ．（２００４）ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ  ５５６：５３−５８．
ＭｃＬａｔｃｈｉｅ  ｅｔ  ａｌ．（１９９８）．Ｎａｔｕｒｅ  ３９３：３３３−３３９
Ｂｅｌｌ，Ｄ．＆  ＭｃＤｅｒｍｏｔｔ，Ｂ．Ｊ．（２００８）Ｂｒ  Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  １５３  Ｓｕｐｐｌ  １，Ｓ２４７−２６２
Ｍｕｆｆ，Ｒ．  ｅｔ  ａｌ．（１９９８）．  ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ  ４４１，３６６−３６８
Ｈａｙ  ｅｔ  ａｌ．（２００５）Ｍｏｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  ６７：１６５５−１６６５
Ｒｏｂｉｎｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．（２００９）Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｅｘｐ  Ｔｈｅｒ  ３３１：５１３−５２１
Ｙｉｎ  ｅｔ  ａｌ．（２００９）Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ  ２８４：１２３２８−１２３３８
ｖａｎ  Ｄｅｒ  Ｌｅｅ  ｅｔ  ａｌ．（２００８）Ｊ  Ｂｉｏｍｏｌ  Ｓｃｒｅｅｎ  １３：９８６−９９８
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００２２】
ＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体（すなわち、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ１、２及び３）に対してスーパーアゴニスト活性またはスーパーアンタゴニスト活性を示すアドレノメデュリン及びインターメジン類似体に関する組成物及び方法を提供する。ＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体シグナル伝達及びヒトリンパ管内皮細胞系に基づいて、ｍｉｎｉ−ＰＥＧ部分を任意に含む、キメラ配列及びＮ末端アシル化を含んだアドレノメデュリン及びインターメディンの類似体は、アドレノメデュリン、ＣＧＲＰ、または、インターメジンと比較した場合に、ＥＣ５０または最大内因活性の点で、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ１、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ２、及び／または、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ３受容体に対して優れたスーパーアゴニスト受容体活性化活性を示す、ことが本明細書において示されている。そのようなキメラペプチドは、本明細書において、汎特異的スーパーアゴニストと称し得る。
【００２３】
本発明の幾つかの実施形態において、Ｎ末端ｍｉｎｉ−ＰＥＧ及びアシル化部分を含むアドレノメデュリン類似体が提供され、当該類似体は、野生型リガンドと比較した場合に、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ２、及び／または、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ３受容体に対してスーパーアゴニスト活性を示す。そのような類似体は、本明細書において、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ２受容体特異的スーパーアゴニストと称し得る。
【００２４】
他の実施形態において、アドレノメデュリン及びインターメジンのキメラ配列を含み、Ｎ末端アシル化を受けたアンタゴニスト類似体が提供され、同類似体は、公知のＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体アンタゴニストと比較した場合に、ＩＣ５０に関して、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ１、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ２、及び／または、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ３受容体に対して優れた拮抗活性を示す。そのようなキメラペプチドは、本明細書において、汎特異的、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ１特異的、または、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ２特異的スーパーアンタゴニストと称し得る。
【００２５】
特定の作用機序に縛られることを望むものではないが、これらの類似体が示したスーパーアゴニスト及びスーパーアンタゴニズムは、一部が、野生型リガンドと比較した場合に、安定なリガンド−受容体複合体の形成に起因するものであると考えられる。
【発明の効果】
【００２６】
驚くべきことに、本明細書で開示及び記載したように、ＡＤＭのＮ末端部分及びインターメジンのＣ末端部分における特定の選択されたアミノ酸は、ペプチドアゴニスト活性の特異性及び有効性に寄与していることが明らかになった。本明細書において、ＡＤＭのＮ末端部分の特定のアミノ酸の置換及び修飾をすることで、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体の正常アゴニストからスーパーアゴニストへと活性を調整できることを示している。さらなる置換または修飾は、本発明のペプチドにさらなる所望の特性を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００２７】
添付した図面を参照しつつ、以下の詳細な説明を読み込むことで、本発明の理解を深めることができる。一般的に、図面の主要箇所は同じ縮尺ではない。逆に、主要箇所での寸法を、明確にする目的で、任意に、拡大または縮小する。図面は、以下の図を含む。
【００２８】
【図１】２％ＦＢＳを含む培地でのスーパーアゴニストによるヒトリンパ管内皮細胞増殖の刺激を示す。ＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体（配列番号２８、３０、３３、３８、３９、４０及び６９）のスーパーアゴニストで、初代ヒトリンパ内皮細胞（ＨＬＥＣ）を処理すると、ナノモル範囲で、ＨＬＥＣ増殖を有意に促進する。インビトロ細胞増殖アッセイについては、２％ウシ胎児血清（ＦＢＳ）、及び、異なる濃度のアゴニスト（３０、１００及び３００ｎＭ）を補充した内皮細胞基礎培地でＨＬＥＣをインキュベートした。細胞を７２時間培養し、そして、細胞生存率をＭＴＳアッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ）でアッセイした。対照的に、正常なアゴニスト（配列番号５２、５３、５４及び５９）は、同一の培養条件下で、ＨＬＥＣ増殖について無視できる効果しか示さなかった。細胞の増殖率における有意差は、棒グラフの上のアスタリスクによって表している。
【図２】０．１％ＦＢＳを含む培地でのスーパーアゴニストによるヒトリンパ内皮細胞生存の刺激を示す。ＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体（配列番号２８、３０、３３、３８、３９、４０及び６９）のスーパーアゴニストで、初代ヒトリンパ内皮細胞（ＨＬＥＣ）を処理すると、ナノモル範囲で、ＨＬＥＣ生存を有意に促進する。インビトロ細胞生存アッセイについては、０．１％ウシ胎児血清（ＦＢＳ）、及び、異なる濃度のアゴニスト（３０、１００及び３００ｎＭ）を補充した内皮細胞基礎培地でＨＬＥＣをインキュベートした。細胞を７２時間培養し、そして、細胞生存率をＭＴＳアッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ）でアッセイした。対照的に、正常なアゴニスト（配列番号５２、５３、５４及び５９）は、同一の培養条件下で、ＨＬＥＣ増殖について無視できる効果しか示さなかった。細胞の生存率の有意差は、棒グラフの上のアスタリスクによって表している。
【発明を実施するための形態】
【００２９】
定義
以下の定義は、実施形態を説明するために使用される様々な用語の意味及び範囲を、例示及び定義するために記載している。
【００３０】
本明細書で使用される「アゴニスト」とは、生物学的に活性なリガンドであって、相補的生物学的に活性なその受容体に結合し、そして、当該受容体における生物学的応答を惹起するか、あるいは、当該受容体の既存の生物学的活性を増強するために、後者を活性化する当該リガンドのことを指す。アンタゴニストとは、生物学的に活性な受容体に結合し、かつ、応答を減少させる生物学的に活性なリガンドのことを指す。本明細書で使用される「アンタゴニスト」とは、受容体の生理学的応答を阻害する生物学的に活性なリガンドのことを指す。
【００３１】
本明細書で使用されるスーパーアゴニストとは、天然リガンドよりも大きな生物活性を有するアゴニストであって、野生型ヒトインターメジン、アドレノメデュリン、または、カルシトニン遺伝子関連ペプチド（ＣＧＲＰ）を含むが、これらに限定されない。特定のリガンド／受容体の対、例えば、カルシトニン受容体様受容体（ＣＬＲ）、及び、３つの受容体活性修飾タンパク質（ＲＡＭＰ１、２及び３）の内の１つの活性を参照することができる。カルシトニン受容体様受容体（ＣＬＲ）、及び、受容体活性修飾タンパク質（ＲＡＭＰ）の共発現は、ＣＧＲＰ、ＡＤＭ、及び、ＩＭＤについての機能的受容体を生成するために必要である。ＣＧＲＰは、主にＣＬＲ／ＲＡＭＰ１受容体を介して作用するが、ＡＤＭは、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ２及び３受容体に対して高い親和性を有する。ＩＭＤは、３つのＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体に対する明確な選択を示さない。ペプチドは、受容体の天然のリガンドと比較して、特異的な受容体のスーパーアゴニストであり得るか、または、複数の受容体に対するスーパーアゴニスト、及び、１つの受容体に対する任意の天然のリガンドであり得る。
【００３２】
幾つかの実施形態において、スーパーアゴニストは、受容体または受容体群についての天然リガンドに対して、約１０５％、１１０％、１２５％、１５０％、１７５％、２倍、３倍、５倍以上の活性を有する。
【００３３】
特異的スーパーアゴニスト。特異的スーパーアゴニストは、選択された受容体に対して高い活性を有し、当該スーパーアゴニストは、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体ファミリーの１つのメンバーに対して約５倍より大きく、約１０倍より大きく、約２０倍より大きい活性を有し得る。幾つかの実施形態において、スーパーアゴニストは、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ２よりもＣＬＲ／ＲＡＭＰ１に対して特異的である。他の実施形態では、スーパーアゴニストは、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ１よりもＣＬＲ／ＲＡＭＰ２に対して特異的である。
【００３４】
本明細書に記載のスーパーアンタゴニストまたはアンタゴニストは、１つ以上の受容体、特に、ＡＤＭ、ＩＭＤ及びＣＧＲＰによって活性化される受容体の生物学的活性を阻害する。スーパーアンタゴニストは、天然のリガンドの阻害よりも強力に活性を阻害し得る。アンタゴニストまたはスーパーアンタゴニストは、例えば、天然リガンドの存在下で、受容体活性を、１０５％、１１０％、１２５％、１５０％、１７５％、２倍、３倍、５倍、または、それ以上に阻害し得る。スーパーアンタゴニストまたはアンタゴニストは、汎特異的であり得る。
【００３５】
汎特異的スーパーアゴニスト、アゴニスト、または、アンタゴニストは、２つ以上の受容体に対して活性を有する。幾つかの実施形態において、受容体は、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ１、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ２、及び、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ３の２つ以上を含む。幾つかの実施形態において、受容体は、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ１、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ２、及び／または、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ３である。
【００３６】
Ｍｉｎｉ−ｐｅｇ。ｍｉｎｉ−ＰＥＧ部分は、ＣＡＳ番号：１６６１０８−７１−０、Ｆｍｏｃ−ＮＨ−（ＰＥＧ）−ＣＯＯＨ、または、Ｆｍｏｃ−８−アミノ−３，６−ジオキサオクタン酸、分子量：３８５．４２ｇ／モルで、以下のの構造を有するものとして定義し得る。
【００３７】
【化１】
2019504119.tif 000003
【００３８】
カップリング反応において、ｍｉｎｉ−ＰＥＧは、アミノ酸と同様に挙動し、ｍｉｎｉ−ＰＥＧの遊離酸末端は、最後のＮ末端アミノ酸（この場合は、Ｌ−リジン残基）の遊離アミノ基と反応してペプチド結合を形成する。以下の脱保護手順では、保護基Ｆｍｏｃを開裂して、ｍｉｎｉ−ＰＥＧの遊離アミノ基を露出させた。
【００３９】
天然アドレノメデュリン、インターメジン、または、カルシトニン遺伝子関連ペプチド（ＣＧＲＰ）。本明細書で使用される当該用語は、当該技術分野で周知のこれらのペプチドの共通の野生型対応物を指す。野生型ヒトペプチドも含まれるが、例えば、ヒト以外の霊長類、サル類、イヌ類、ウマ類、ネズミ類、ネコ類、ウサギ類、ウシ類、ヒツジ類、ブタ類などの他の哺乳動物の対応物も使用され得る。
【００４０】
本明細書で使用される「医薬として許容される塩」とは、ナトリウム塩、カリウム塩、リチウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、バリウム塩、アンモニウム塩、及び、プロタミン亜鉛塩を含む製薬業界で一般的に使用される非毒性アルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩、及び、アンモニウム塩のことを指す。また、この用語は、一般的には、本明細書で開示したＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体スーパーアゴニストと適切な有機酸または無機酸とを反応させることによって調製される非毒性酸付加塩も含む。代表的な塩として、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、重硫酸塩、酢酸塩、シュウ酸塩、吉草酸塩、オレイン酸塩、ラウリン酸塩、ホウ酸塩、安息香酸塩、乳酸塩、リン酸塩、トシル酸塩、クエン酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、ナプシル酸塩などがある。したがって、この用語は、遊離塩基の生物学的有効性及び性質を保持し、かつ、生物学的に、または、その他の点で望ましくない塩、すなわち、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などの無機酸と、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、シュウ酸、リンゴ酸、マロン酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、桂皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、サリチル酸などの有機酸とから形成された塩のことを指す。プロドラッグとして医薬として許容される塩の記載については、Ｂｕｎｄｇａａｒｄ、Ｈ．  ｅｄ．、１９８５  Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ、Ｅｌｓｅｖｉｅｒ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ、Ａｍｓｔｅｒｄａｍを参照されたい。
【００４１】
本明細書で使用される「医薬として許容されるエステル」とは、エステル結合の加水分解時に、カルボン酸またはアルコールの生物学的有効性及び特性を保持し、かつ、生物学的またはその他の点で望ましくないものではないエステルのことを指す。プロドラッグとして医薬として許容されるエステルの記載については、Ｂｕｎｄｇａａｒｄ、Ｈ．  ｅｄ．、１９８５  Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ、Ｅｌｓｅｖｉｅｒ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ、Ａｍｓｔｅｒｄａｍを参照されたい。エステルのアルコール成分は、一般に、（Ｉ）１つ以上の二重結合を含むことが可能であるか、または、含むことができない、分枝炭素を含むことが可能であるか、または、含むことができないＣ２−Ｃ１２脂肪族アルコール、または、（ＩＩ）Ｃ７−Ｃ１２芳香族またはヘテロ芳香族アルコールを含む。
【００４２】
本明細書で使用される「Ｃ末端アミド」とは、ポリペプチドが、カルボキサミド（すなわち、Ｃ末端カルボキシ（すなわち、Ｃ（＝Ｏ）−ＯＨ）よりはむしろＣ（＝Ｏ）−ＮＨ２）部分で終わるように、ポリペプチドのカルボキシ末端に通常存在するＣ末端ヒドロキシル部分を置換する、アミド部分のことを指す。これらのアミドは、一般的には、対応するカルボン酸及びアミンから形成される。一般に、アミド形成は、従来の合成技術によって達成することができる。例えば、ＭＡＲＫ、ｅｔ  ａｌ．１９８０  Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ  ｏｆ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋを参照されたい。
【００４３】
本明細書で使用される「医薬として許容される担体」とは、活性成分の生物学的活性の有効性を妨害せず、かつ、宿主または患者にとって毒性を呈さない担体媒体のことを指す。
【００４４】
本明細書で使用される「立体異性体」とは、他のものと同じ分子量、化学組成、及び、結合順序を有するが、その原子が、空間において、１つ以上のキラル中心について異なったグループ分けされている実体のことを指す。すなわち、同じ化学式の立体異性体は、少なくとも１つのキラル中心について異なる空間方位に位置する同一の化学的部分を含むことになる。純粋な立体異性体は、平面偏光を回転させることができる。本明細書で開示したペプチドは、１つ以上の不斉炭素原子を有することができ、したがって、様々な立体異性体を含む。すべての立体異性体は、本実施形態の範囲内にある。
【００４５】
本明細書で使用されている本明細書で開示した組成物に対して使用される「治療的に」または「医薬として有効な量」とは、所望の生物学的結果を導くために十分な組成物の量をいう。その結果は、疾患の徴候、症状、または、原因の軽減、あるいは、生物学的システムという、あらゆる他の所望の改変をもたらすことができる。
【００４６】
本明細書で使用する「ペプチド残基」及び「ペプチド構造」の用語は、天然のＬ−アミノ酸、及び、対応するＤ−アミノ酸、ならびに、天然のＬ−アミノ酸構造のペプチド誘導体、ペプチド類似体、及び、ペプチド模倣体を含む。ペプチド類似体、誘導体、及び、模倣体をデザインする手法は、当該技術分野で周知である。例えば、Ｖｅｂｅｒ  ａｎｄ  Ｆｒｅｉｄｉｎｇｅｒ  １９８５  ＴＩＮＳ  ｐ．３９２；Ｅｖａｎｓ，ｅｔ  ａｌ．  １９８７  Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．３０：２２９を参照されたい。治療的に有用なペプチドと構造的に類似しているペプチド模倣体は、当該技術分野において周知であり、かつ、以下の文献にさらに記載されている方法によって、同等または改善された治療効果または予防効果を獲得するために使用され得る。Ｓｐａｔｏｌａ，Ａ．Ｆ．１９８３  ｉｎ：Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ａｍｉｎｏ  Ａｃｉｄｓ，  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ，  ａｎｄ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ，Ｂ．  Ｗｅｉｎｓｔｅｉｎ，ｅｄｓ．，  Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ｐ．２６７；Ｈｏｌｌａｄａｙ，ｅｔ  ａｌ．１９８３  Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．２４：４４０１−４４０４．
【００４７】
コンセンサス配列のアミノ酸の１つ以上を、同じタイプのＤ−アミノ酸（例えば、Ｌ−リジンの代わりにＤ−リジン）で系統的に置換することは、より安定なペプチドを生成するために使用され得る。加えて、コンセンサス配列または実質的に同一のコンセンサス配列変異を含む拘束性ペプチドは、当該分野で公知の方法によって生成され得る（Ｒｉｚｏ，ｅｔ  ａｌ．１９９２  Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．６１：３８７、本明細書の一部を構成するものとして、この全内容を援用する）ものであり、例えば、ペプチドを環状化する分子内ジスルフィド架橋を形成することができる内部システイン残基を付加し、環状ラクタム架橋を付加し、あるいは、可撓性の６−アミノヘキサン酸（Ａｈｘ）、硬質アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）、または、Ｄ−アミノ酸残基を使用して、ヘリックスの安定性を変える。
【００４８】
本明細書で使用される化合物、例えば、ペプチドまたはアミノ酸の「誘導体」とは、化合物内の反応性基の１つ以上が置換基で誘導体化された化合物の形態のことを指す。ペプチド誘導体の例として、アミノ酸側鎖、ペプチド骨格、または、アミノまたはカルボキシ末端が誘導体化されたペプチド（例えば、メチル化アミド結合またはヒドロキシル化アミノ酸またはアミノ酸残基を有するペプチド性化合物）を含む。
【００４９】
本明細書で使用される化合物の「類似体」とは、当該化合物の機能的活性に必要な参照化合物の化学構造を保持するが、参照化合物とは異なる特定の化学構造も含む化合物のことを指す。本明細書で使用される化合物の「模倣体」とは、当該化合物の機能活性に必要な参照化合物の化学構造が、参照化合物の立体配座を模倣する他の化学構造で置換された化合物のことを指す。ペプチド模倣体の例として、ペプチド骨格が１つ以上のベンゾジアゼピン分子で置換されたペプチド化合物、すべてのＬ−アミノ酸が対応するＤ−アミノ酸及び「レトロインベルソ」ペプチドで置換されたペプチドがある（Ｓｉｓｔｏの米国特許第４，５２２，７５２号、Ｊａｍｅｓ，Ｇ．Ｌ．ｅｔ  ａｌ．，１９９３  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２６０：１９３７−１９４２，及び、Ｇｏｏｄｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８１  Ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅｓ  ｉｎ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２８３−２９４を参照されたい）。他の誘導体として、Ｃ−末端ヒドロキシメチル誘導体、Ｏ−修飾誘導体（例えば、Ｃ−末端ヒドロキシメチルベンジルエーテル）、及び、アルキルアミド及びヒドラジドなどの置換アミドを含むＮ−末端修飾誘導体がある。
【００５０】
本明細書で使用される用語「アミノ酸構造」は、化合物の機能的活性を維持するアミノ酸の類似体、誘導体、及び、模倣体を含むことを意図している。例えば、用語「フェニルアラニン構造」は、フェニルアラニン、ならびに、ピリジルアラニン及びホモフェニルアラニンを含むことを意図している。用語「ロイシン構造」は、ロイシン、ならびに、バリン、イソロイシン、あるいは、ノルロイシンなどの脂肪族側鎖を有する他の天然または非天然のアミノ酸を用いた置換を含むことを意図している。
【００５１】
本明細書で開示したペプチド化合物のアミノ末端及び／またはカルボキシ末端は、ほとんどのタンパク質に認められるような、標準的なアミノ末端及びカルボキシ末端であり得る。あるいは、ペプチド化合物のアミノ末端及び／またはカルボキシ末端は、誘導体基の付加または置換によって化学的に変化させることができる。ペプチド化合物のＮ末端に存在し得るアミノ誘導体基として、アセチル、アリール、アラルキル、アシル、エポキシスクシニル、及び、コレステリル基がある。ペプチド化合物のＣ末端に存在し得るカルボキシ誘導体基として、アルコール、アルデヒド、エポキシコハク酸塩、酸ハロゲン化物、カルボニル、ハロメタン、ジアゾメタン基、及び、カルボキサミドがある。カルボキサミドが好ましい。
【００５２】
本明細書で使用される「造影剤」とは、化合物に共有結合した場合に、化合物の検出を可能にする物質のことを指し、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体スーパーアゴニストが投与された患者でのインビボでの検出などがあるが、これに限定されない。適切な造影剤は、当該技術分野において周知であり、例えば、放射性同位元素、蛍光標識（例えば、フルオレセイン）などがある。このような因子に対する標識の選択は、当業者に周知の範囲内である。ペプチドまたはペプチド模倣体への検出可能な標識の共有結合は、当該分野で周知の従来の方法によって実現できる。例えば、１２５Ｉの放射性同位元素が造影剤として使用される場合、ペプチドまたはペプチド模倣体への１２５Ｉの共有結合は、ペプチドまたはペプチド模倣体にアミノ酸チロシンを組み込み、次いで、ペプチドをヨウ素化することで達成し得る（例えば、Ｗｅａｎｅｒ，ｅｔ  ａｌ．，１９９４  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ｉｓｏｔｏｐｉｃａｌｌｙ  Ｌａｂｅｌｌｅｄ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ；ｐｐ．１３７−１４０を参照されたい）。
【００５３】
本明細書で使用される用語「治療剤」とは、特定の疾患適応症に対して所望の治療効果を示すことができる薬剤のことを意味しており、心不全治療剤または血圧低下剤を含むが、これらに限定されない。
【００５４】
本明細書で使用される「修飾した」とは、関連するポリペプチドの全体的な構造を保持するが、関連ポリペプチドとは少なくとも１つの残基が異なるポリペプチドのことを指す。本明細書において、「修飾したＣ末端」とは、標準ペプチドカルボキシ基以外の化学構造を有するポリペプチドのＣ末端のことであり、このような修飾Ｃ末端の例として、Ｃ末端カルボキサミドがある。
【００５５】
本明細書で使用される「医薬として許容される担体」とは、活性成分の生物学的活性の有効性を妨げず、かつ、宿主または患者に対して毒性を呈さない担体媒体のことを指す。
【００５６】
本明細書で使用する用語「ペプチド残基」及び「ペプチド構造」は、天然のＬ−アミノ酸、及び、対応するＤ−アミノ酸、ならびに、天然Ｌ−アミノ酸構造のペプチド誘導体、ペプチド類似体、及び、ペプチド模倣体などを意図している。ペプチド類似体、誘導体、及び、模倣体をデザインする方法は、当該技術分野で周知である（Ｆａｒｍｅｒ，Ｐ．Ｓ．ｉｎ：Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ  Ｅ．Ｊ．Ａｒｉｅｎｓ，ｅｄ．Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９８０，Ｖｏｌ．１０，ｐｐ．１１９−１４３；Ｂａｌｌ  Ｊ．Ｂ．＆  Ａｌｅｗｏｏｄ，Ｐ．Ｆ．１９９０／．  Ｍｏｌ．  Ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ  ３：５５；Ｌｕｔｈｍａｎ，ｅｔ  ａｌ．１９９６，Ａ  Ｔｅｘｔｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ  ａｎｄ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，１４：３８６−４０６，２ｎｄ  Ｅｄ．，Ｈａｒｗｏｏｄ  Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ；Ｊｏａｃｈｉｍ  Ｇｒａｎｔｅ，Ａｎｇｅｗ.１９９４  Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ．３３：１６９９−１７２０を参照されたい）。治療的に有効なペプチドと構造的に類似しているペプチド模倣体は、当該技術分野で公知の方法によって使用して、等価または改善された治療または予防効果をもたらし得る（Ｓｐａｔｏｌａ，Ａ．Ｆ．１９８３  ｉｎ：Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ａｍｉｎｏ  Ａｃｉｄｓ，Ｐｅｐｔｉｄｅｓ，ａｎｄ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ，Ｂ．Ｗｅｉｎｓｔｅｉｎ，  ｅｄｓ．，Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、ｐ．２６７；Ｓｐａｔｏｌａ，Ａ．Ｆ．１９８３，Ｖｅｇａ  Ｄａｔａ，Ｖｏｌ．１，  Ｉｓｓｕｅ  ３，Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｂａｃｋｂｏｎｅ  Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｓ（ｇｅｎｅｒａｌ  ｒｅｖｉｅｗ）；Ｊｅｎｎｉｎｇｓ−Ｗｈｉｔｅ，ｅｔ  ａｌ．１９８２  Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．２３：２５３３；Ｈｏｌｌａｄａｙ，ｅｔ  ａｌ．１９８３  Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．２４：４４０１−４４０４；及び、Ｈｒｕｂｙ，１９８２  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉ．３１：１８９−１９９を参照されたい）。
【００５７】
加えて、コンセンサス配列または実質的に同一のコンセンサス配列変異を含む拘束性ペプチドは、当該技術分野で周知の方法によって生成され得る（Ｒｉｚｏ，ｅｔ  ａｌ．，１９９２  Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．６１：３８７）ものであり、例えば、ペプチドを環状化する分子内架橋を形成することができる内部システイン残基または有機リンカーを付加して、環状ラクタム架橋を付加することによって、あるいは、可撓性の６−アミノヘキサン酸（Ａｈｘ）、硬質アミノイソ酪酸（Ａｉｂ）、または、Ｄ−アミノ酸残基を使用して、ヘリックスの安定性を変える。
【００５８】
合成または非天然のアミノ酸とは、インビボにおいて天然には存在しないにもかかわらず、本明細書に記載のペプチド構造に組み込むことができるアミノ酸のことを指す。
【００５９】
本明細書に記載の改変されたペプチドは、例えば、標準的な固相技術を用いて調製することができる（Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ，１９６３．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．８５：２１４９；Ｊ．Ｍ．Ｓｔｅｗａｒｔ  ａｎｄ  Ｊ．Ｄ．Ｙｏｕｎｇ，１９８４  Ｓｏｌｉｄ  Ｐｈａｓｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｅｓ  ２ｎｄ  Ｅｄ．，Ｐｉｅｒｃｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏｍｐａｎｙを参照されたい）。また、これらの手順は、２０種の遺伝的にコードされた天然アミノ酸以外のアミノ酸が、本明細書に開示されて改変されたペプチドのいずれかの１つ、２つ、または、それ以上の位置で置換されるペプチドを合成するために使用され得る。例えば、ナフチルアラニンをトリプトファンの代わりに用いて、合成を促すことができる。本実施形態のペプチドに置換することができる他の合成アミノ酸として、Ｌ−ヒドロキシプロピル、Ｌ−３，４−ジヒドロキシ−フェニルアラニル、ｄ−アミノ酸、例えば、Ｌ−ｄ−ヒドロキシルシル、及び、Ｄ−ｄ−メチルアラニル、Ｌ−ａ−メチルアラニル、β−アミノ酸、及び、イソキノリルなどがある。また、Ｄアミノ酸及び非天然の合成アミノ酸も、本実施形態のペプチドに組み込むことができる（Ｒｏｂｅｒｔｓ，ｅｔ  ａｌ．，１９８３  Ｕｎｕｓｕａｌ  Ａｍｉｎｏ／Ａｃｉｄｓ  ｉｎ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ５：３４１−４４９を参照のこと）。幾つかの実施形態において、本明細書で開示した遺伝的にコードされた２０種のアミノ酸の天然の側鎖、または、あらゆる他の側鎖は、ペプチドにおいて一般的に認められるようなα−炭素の代わりに、アミノ酸の窒素に転位することができる。
【００６０】
幾つかの実施形態は、本明細書で開示した完全長ポリペプチド配列（例えば、配列番号２８〜５１、６９〜７０、９２、９４、１０１、１０３、及び、１１０）、または、本明細書で開示した全長ポリペプチド配列のあらゆる他の特に規定された断片に対して、６０％〜９９％のアミノ酸同一性を有する修飾されたペプチドアゴニストを提供する。
【００６１】
本明細書において同定されたポリペプチド配列に関する「パーセント（％）アミノ酸配列同一性」とは、配列を整列させ、そして、ギャップを導入した後の、特定のポリペプチド配列でのアミノ酸残基と同一である候補配列でのアミノ酸残基のパーセンテージとして定義され、かつ、必要に応じて、最大の配列同一性パーセントを実現するために、保存的置換は、配列同一性の一部として考慮しない。パーセントアミノ酸配列同一性を決定するためのアライメントは、当業者に周知の様々な方法、例えば、ＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ−２、ＡＬＩＧＮ、または、Ｍｅｇａｌｉｇｎ（ＤＮＡＳＴＡＲ）ソフトウェアなどの公的に入手可能なコンピュータソフトウェアを用いて作成することができる。当業者であれば、比較される配列の全長にわたって最大限のアライメントを作成するために必要なあらゆるアルゴリズムを含めて、アライメントを測定するための適切なパラメータを決定することができる。
【００６２】
本明細書に記載のアゴニストまたはアンタゴニストペプチドの配列における変異は、例えば、米国特許第５，３６４，９３４号（Ｄｒａｙｎａ  ｅｔ  ａｌ．，１９９４年１１月１５日発行）に記載の保存的及び非保存的突然変異のいずれかの技術及び指針を用いて行うことができる。変異は、アゴニストまたはアンタゴニストペプチドの置換、欠失、または、挿入とし得るものであって、それらは、参照アゴニストまたはアンタゴニストペプチド配列と比較して、アゴニストまたはアンタゴニストペプチドのアミノ酸配列に変化をもたらす。
【００６３】
安定化したスーパーアゴニスト及びスーパーアゴニストのペプチド誘導体が提供され、ペプチド誘導体の配列、及び／または、側鎖が変更される。ＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体に対する誘導体の生物活性は、ｗｔ  ＡＤＭ、ＣＧＲＰ、または、ＩＭＤと比較して優れている。また、安定化したスーパーアゴニストペプチドは、インビトロでの内皮細胞増殖、及び／または、生存能力に関する特異的作用に基づいて、ｗｔペプチドと比較して優れた薬理学的作用を示す。
【００６４】
任意に、これらの修飾されたペプチド誘導体は、異種部分に共有結合されるか、あるいは、Ｎ−メチル化を受け、当該異種部分は、ポリマー、Ｆｃ、ＦｃＲｎ結合リガンド、免疫グロブリン、アルブミン、コラーゲン結合モチーフ、ＲＧＤモチーフ、及び、アルブミン結合リガンドを含み得る。共有結合されたポリマーは、任意に置換された、飽和、または、モノまたはジ不飽和の直鎖状または分枝状Ｃ３−Ｃ１００カルボン酸、好ましくは、Ｃ４−Ｃ３０カルボン酸（脂質化）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）部分、ポリプロピレングリコール（ＰＰＧ）部分、アラニン及びセリン残基を主に含む、または、アラニン、セリン、及び、プロリン残基を主に含むアミノ酸配列であるＰＡＳ部分、生理学的条件下でランダムコイル配座を形成するアミノ酸配列［米国公開特許公報第２０１０／０２９２１３０号、及び、ＷＯ２００８／１５５１３４］、及び、ヒドロキシエチルスターチ（ＨＥＳ）部分［ＷＯ０２／０８０９７９］、Ｆｃ、ＦｃＲｎ結合リガンド、アルブミン、及び、アルブミン結合リガンド、ならびに、ＸＴＥＮ部分（Ｓｃｈｅｌｌｅｎｂｅｒｇｅｒ，ｅｔ  ａｌ．，２００９、Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ２７（１２）：１１８６−１１２２を参照されたい）からなる群から選択し得る。
【００６５】
共有結合がＰＥＧに対するものである場合、ＰＥＧ分子量は、取り扱い易さ、及び、製造を容易にするために、約１ｋＤａ〜約１００ｋＤａの間であり得る。例えば、ＰＥＧは、約２００、５００、１０００、２０００、４０００、８０００、１６，０００、３２，０００、６４，０００、または、１００，０００ｋＤａの平均分子量を有し得る。幾つかの実施形態において、ＰＥＧは、分岐構造を有し得る（米国特許第５，６４３，５７５号；Ｍｏｒｐｕｒｇｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｐｐｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．５６：５９−７２（１９９６）；Ｖｏｒｏｂｊｅｖ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅｓ  Ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ  １８：２７４５−２７５０（１９９９）；及び、Ｃａｌｉｃｅｔｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ．Ｃｈｅｍ．１０：６３８−６４６（１９９９））。
【００６６】
任意に、修飾されたペプチド誘導体は、ペプチドの代謝安定性を高めるために、ラクタム架橋を有するジスルフィド結合の置換を１つ以上含む。シスタチオンは、チオール還元に対して耐性である。したがって、チオエーテル、または、セレノスルフィド、ジセレニド、及び、ジテルリド架橋によるジスルフィドの置換は、還元に対する保護をもたらすことができる［Ｋｎｅｒｒ  ｅｔ  ａｌ．，ＡＣＳ  Ｃｈｅｍ  Ｂｉｏｌ，６（７），７５３−７６０，２０１１；Ｍｕｔｔｅｎｔｈａｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．  Ｊ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ．，５３（２４）、８５８５−８５９６、２０１０］。ジアミノジアシドに基づいたペプチドジスルフィド結合模倣体も、類似体の安定性を改善するために使用することができる（Ｃｕｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｇｅｗ  Ｃｈｅｍ，１２５，９７３７−９７４１，２０１３）。また、ジスルフィド架橋は、異なる性質のリンカーまたは架橋のいずれかの挿入によって修飾することができる。
【００６７】
薬物分子を非共有結合状態で含有するポリマーマトリックスは、溶液、ヒドロゲル、微粒子、または、ミセルとして注射可能である［Ｄ．Ｈ．Ｌｅｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃｏｎｔｒ．Ｒｅｌ．，９２，２９１−２９９，２００３］。ペプチドまたはタンパク質を永久ＰＥＧ化して、腎クリアランスを減少させることによって、それらの溶解性を増強し、免疫原性を低下させ、そして、半減期を増加させることは、当該技術分野で周知である［Ｃａｌｉｃｅｔｉ  Ｐ．，Ｖｅｒｏｎｅｓｅ  Ｆ．Ｍ．，Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ．Ｒｅｖ．，５５，１２６１−１２７７，２００３；Ｔ．Ｐｅｌｅｇ−Ｓｈｕｌｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，４７，４８９７−４９０４，２００４］。
【００６８】
任意に、修飾されたペプチド誘導体は、アルカン、コレステロール、または、ＰＥＧ−コレステロール部分の１つ以上の付加によって修飾されて、ペプチドの代謝安定性を増加させる。合成したブレース（ステープル）の導入を介してステープル留めしたペプチドは、環状閉鎖メタセシスを用いてペプチドを特定の配座で固定し、配座エントロピーを減少させることができる。
【００６９】
また、本発明は、式（Ｉ）、（ＩＩ）及び（ＩＩＩ）の化合物のプロドラッグ、すなわち、化合物それ自体が生物学的に活性または不活性であるが、体内で（例えば、代謝的にまたは加水分解的に）式（Ｉ）、（ＩＩ）、及び（ＩＩＩ）の化合物へと変換されるものを含む。プロドラッグは、アミン官能基をマスキングすること、または、チロシンのフェノール基をマスキングすること（フェノール基でのカルバメートの内部求核基補助開裂）などに基づいて生じ得る。
【００７０】
本明細書に記載のスーパーアゴニストまたはスーパーアンタゴニストペプチドを含むポリマーベースのプロドラッグが提供される。プロドラッグは、その薬理学的効果を示す以前に生体内変換を受ける任意の化合物である。担体結合プロドラッグ（担体プロドラッグ）は、改善された物理化学的または薬物動態学的特性を生じ、かつ、生化学的切断によってインビボで除去できる、一時的な担体基を有する所与の活性物質の一時的な結合を含む。ＰＥＧベースの担体プロドラッグは、主として、酵素加水分解によって開始される活性薬物と担体との間のリンカーの酵素活性化を必要とする。一般的に使用されるカスケードリンカーは、ペプチドまたはタンパク質に対してアミン官能基を結合させる。カスケードリンカーでは、カスケードの律速段階として、マスキンググループが削除される。こうすることで、リンカーを活性化して第２の位置で分解し、ペプチドまたはタンパク質を放出する。一般的に、マスキング基は、酵素機構によって除去することができる［Ｒ．Ｂ．Ｇｒｅｅｎｗａｌｄ  ｅｔ  ａｌ．，ＷＯ２００２／０８９７８９，Ｇｒｅｅｎｗａｌｄ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９９，４２，３６５７−３６６７、Ｆ．Ｍ．Ｈ．ＤｅＧｒｏｏｔ  ｅｔ  ａｌ．ＷＯ２００２／０８３１８０，及びＷＯ２００４／０４３４９３，及び、Ｄ．Ｓｈａｂａｔ  ＷＯ２００４／０１９９９３］。酵素活性化に頼らない代替法（ＷＯ２００５／０９９７６８を参照されたい）は、内部求核試薬の攻撃によって、フェノールにおいて純粋にｐＨ依存的に除去されるマスキング基を利用する。このことは、さらなる分解のためにリンカーを活性化する（米国特許第８，６８０，３１５号を参照されたい）。ｐＨトリガー分解により、薬物が放出される。フェノール、例えば、チロシンに最も適した他の手法は、ＷＯ２０１３／０６４４５５に記載されているように、フェノールの放出下で求核性アミンによってｐＨ依存的に攻撃を受けるカルバメートと、巨大分子に結合した環状尿素の生成とに基づいている。
【００７１】
ペプチドの薬物動態学的特性は、脂質化によって調整することができる。脂質化は、Ｎ末端、または、ペプチド配列内のアミノ酸の側鎖官能基に起こり得る。脂質化のことは、文献及び特許に記載されている（Ｚｈａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｕｒｒ  Ｍｅｄ  １９：１６０２−１８、２０１２；Ｇｅｒａｕｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｗｉｌｅｙ  Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ  ｏｆ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌｕｍｅ２，５２０−５３０，２００９（Ｈｒｓｇ．Ｂｅｇｌｅｙ，Ｔ．Ｐ．）．Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｈｏｂｏｋｅｎ，ＮＪ.）。ＡＤＭ配列の脂質化は、ＷＯ２０１２／１３８８６７に記載されている。造影剤及び治療剤として使用するために標識されたＡＤＭ誘導体は公知である［Ｊ．Ｄｅｐｕｉｓ  ｅｔ  ａｌ．ＣＡ２５６７４７８、及び、ＷＯ２００８／１３８１４１］。これらのＡＤＭ誘導体において、放射性同位体を結合することができる分子構造のような複合体形成ケージは、ＡＤＭのＮ末端に直接的に、または、短いＰＥＧスペーサーをも潜在的に含むスペーサー単位を介して付着された。これらの薬物の診断上または治療上の価値は、放射性分子の標的送達から生じる。
【００７２】
また、本発明は、本発明の式（Ｉ）、（ＩＩ）及び（ＩＩＩ）の化合物のすべての適切な同位体変異体を含む。化合物の同位体変異体は、本発明の化合物内の少なくとも１つの原子が、同じ原子番号の別の原子と交換された化合物を意味すると理解されるが、通常は、または、大部分は主に自然界で認められる原子質量とは異なる原子質量を有している。化合物に取り込むことができる同位体の例として、ハロゲン、炭素、窒素、酸素、リン、硫黄、フッ素、塩素、臭素、及び、ヨウ素、例えば、２Ｈ（重水素）、３Ｈ（トリチウム）、１３Ｃ、１４Ｃ、１５Ｎ、１７Ｏ、１８Ｏ、３２Ｐ、３３Ｐ、３３Ｓ、３４Ｓ、３５Ｓ、３６Ｓ、１８Ｆ、３６Ｃｌ、８２Ｂｒ、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２９Ｉ、及び、１３１Ｉなどがある。化合物の特定の同位体変異体は、例えば、作用機序の検査、または、体内の活性化合物分布の検査のために有益であり得る。加えて、同位体、例えば、重水素の取り込みは、化合物のより大きな代謝安定性の結果として、例えば、身体における半減期の延長、または、必要とされる活性用量の減少の結果として、特定の治療上の利益をもたらし得る。
【００７３】
ペプチド組成物及び製剤
式（Ｉ）、（ＩＩ）及び（ＩＩＩ）の化合物、及び、それらの塩、それらの溶媒和物、及び、それらの塩の溶媒和物が本明細書に記載されている。化合物は、実施例として具体的に説明し得る。
【００７４】
本明細書に記載のペプチドは、インビボでの分子の透過及び拡散、ならびに、中枢神経系への交通を容易にし、それによって、疾患の治療における有用性を改善する、任意の微小な分子量で提供される。微小受容体アゴニストまたはアンタゴニストの生成は、細胞外液でのペプチドの拡散を容易にするだけでなく、より大きな類似体の進入を可能にするには小さすぎる限られた空間への分子の進入を可能にする。従来のＡＤＭまたはＩＭＤ類似体の長さは、それぞれ、３９及び４０個のアミノ酸であり、そして、ＣＧＲＰ類似体の長さは３７個のアミノ酸であった。本明細書で提供されるペプチドは、長さが３５〜３６個のアミノ酸の超微小スーパーファミリー、それに、長さが１７〜２８個のアミノ酸の超微小アンタゴニストの例を含む。また、この微小類似体は、野生型ペプチドの連続配列の途中にトランケーションを含むＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体リガンドが、以前に記載されていない点で独特である。
【００７５】
アゴニスト及びスーパーアゴニスト
幾つかの実施形態において、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体スーパーアゴニストが提供され、当該アンタゴニストは、式（Ｉ）の構造を有しており、
Ｂａ−Ｃａ−Ｄａ（Ｉ）
式中、
Ｂａは、２０〜２８個のアミノ酸残基を含むアドレノメデュリンペプチドファミリーメンバーの修飾Ｎ末端断片であり、当該Ｎ末端断片の２つのアミノ酸残基が、システイン（Ｃｙｓ）であり、及び、当該断片のＣ末端残基がスレオニン（Ｔｈｒ）であり、Ｂｂが、構造（Ｂ０−Ｂ１−Ｂ２−Ｃ−Ｂ４−Ｂ５−Ｇ−Ｂ７−Ｃ−Ｂ９−Ｂ１０−Ｂ１１−Ｂ１２−Ｂ１３−Ｂ１４−Ｂ１５−Ｂ１６−Ｂ１７−Ｂ１８−Ｂ１９−Ｂ２０−Ｂ２１）として表現し得るものであり、
Ｃａは、３〜１２個のアミノ酸からなる中心コアであり、及び
Ｄａは、Ｃ末端アミドを有する３〜６個のアミノ酸残基を含むインターメジン（ＩＭＤ）の改変Ｃ末端断片であって、Ｄａの少なくとも１つのアミノ酸が、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、プロリン（Ｐ）、セリン（Ｓｅｒ）、及び、チロシン（Ｔｙｒ）である。
【００７６】
幾つかの実施形態において、Ｂａは、ジスルフィド結合を形成する配列に存在する２つのシステインによって特徴付けられる。ジスルフィド結合に関与する２つのＣｙｓ残基間の残基は、配列内では順不同である。上記のジスルフィド結合は、α−ヘリックスの形成と、標的受容体の膜貫通成分へのＢａ−Ｃａ−Ｄａの結合との双方を促すＢａ−Ｃａ−Ｄａの構造を安定化する。
【００７７】
ｍｉｎｉ−ＰＥＧを、Ｎ末端にアシル化修飾と共に導入するか、あるいは、式（Ｉ）のペプチドのＮ末端にｍｉｎｉ−ＰＥＧが存在しないアシル化修飾を導入すると、野生型ＡＤＭ（配列番号５３〜５４）、ＩＭＤ（配列番号５２）、または、不適切な配列（配列番号５５〜６８）を有するキメラペプチドと比較した場合に、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ１またはＣＬＲ／ＲＡＭＰ２受容体と連動して相互作用する分子のスーパーアゴニスト活性をもたらす。そのような修飾は、受容体を占有し、そして、そのようなアシル化、及び／または、ＰＥＧ化の非存在下での野生型ＡＤＭ、ＩＭＤ、または、キメラリガンドと比較して、シグナル伝達経路の受容体活性化の有効性を約５倍超にも増大するまで活性化する分子を生じさせる。幾つかの実施形態において、スーパーアゴニストは、ｍｉｎｉ−ＰＥＧの非存在下でのアシル化修飾を含む。
【００７８】
Ｂａ−Ｃａ−Ｄａの第１のシステインに対するＮ末端の残基の付加は、ポリペプチドのスーパーアゴニスト特性に影響し得ない。幾つかの実施形態において、ペプチドは、式（Ｉ）のペプチドの第１のシステインのＮ末端残基で、アミノ酸残基またはポリペプチドに結合する。式（Ｉ）のペプチドは、ポリペプチド、例えば、アルブミンなどの血清ポリペプチド、免疫グロブリン定常領域を含む免疫グロブリンなどに結合し得る。
【００７９】
幾つかの実施形態において、式（Ｉ）のＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体スーパーアゴニストは、
・ｍｉｎｉ−ＰＥＧ−Ｋ（ＰＡＬ）ＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２（配列番号２８）
・ｍｉｎｉ−ＰＥＧ−Ｋ（ＰＡＬ）ＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＰＡＧＲＱＤＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２（配列番号２９）
・Ｐａｌ−ＫＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２（配列番号３０）
・Ｐａｌ−ＫＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＰＡＧＲＱＤＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２（配列番号３１）
・Ａｃｅ−Ｋ（ＰＡＬ）ＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２（配列番号３２）
・Ａｃｅ−Ｋ（ＰＡＬ）ＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＰＡＧＲＱＤＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２（配列番号３３）
・Ｐａｌ−ＫＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２（配列番号３４）
・Ｐａｌ−ＫＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＱＤＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２（配列番号３５）
・Ｐａｌ−ＫＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＧＲＱＤＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２（配列番号３６）
・Ｐａｌ−Ｋ（Ｐａｌ）ＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２（配列番号３７）
・Ｐａｌ−ＫＴＫＫＴＬＲＴＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２（配列番号３８）
・Ａｃｅ−ＴＫ（Ｐａｌ）ＫＴＬＲＴＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２（配列番号３９）
・Ｐａｌ−ＫＴＫＫＴＬＲＴＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２（配列番号４０）
・Ａｃｅ−ＴＫ（Ｐａｌ）ＫＴＬＲＴＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２（配列番号４１）
・ｍｉｎｉＰＥＧ−ＴＫ（Ｐａｌ）ＫＴＬＲＴＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２（配列番号４２）
・ｍｉｎｉＰＥＧ−Ｋ（ＰＡＬ）ＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２（配列番号４３）
・Ｐａｌ−ＫＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２（配列番号４４）
・Ｐａｌ−ＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２（配列番号４５）
・ｍｉｎｉＰＥＧ−Ｋ（ＰＡＬ）ＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２（配列番号４６）
・ｍｉｎｉＰＥＧ−Ｋ（ＰＡＬ）ＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２（配列番号４７）
・ｍｉｎｉＰＥＧ−Ｋ（ＰＡＬ）ＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＬＡＱＩＹＱＦＴＤＫＤＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２（配列番号４８）
・ｍｉｎｉＰＥＧ−Ｋ（ＰＡＬ）ＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＰＡＧＲＱＤＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２（配列番号４９）
・ｍｉｎｉＰＥＧ−Ｋ（ＰＡＬ）ＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２（配列番号５０）
・ｍｉｎｉＰＥＧ−Ｋ（ＰＡＬ）ＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＱＤＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２（配列番号５１）
・ｍｉｎｉ−ＰＥＧ−Ｋ（ＰＡＬ）ＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡＰＲＳＫＩＳＰＱＧＹ−ＮＨ２（配列番号６９）
・ｍｉｎｉＰＥＧ−Ｋ（ＰＡＬ）ＴＫＫＴＬＲＴＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡＰＲＳＫＩＳＰＱＧＹ−ＮＨ２（配列番号７０）
・Ｐａｌ−ＫＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２（配列番号９２）
・ｍｉｎｉＰＥＧ−Ｋ（ＰＡＬ）ＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２（配列番号９４）
・ｍｉｎｉＰＥＧ−Ｋ（ＰＡＬ）ＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＬＡＱＩＹＱＦＴＤＫＤＶＡＰＲＳＫＩＳＰＱＧＹ−ＮＨ２（配列番号１０１）
・Ｐａｌ−ＫＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＶＡＰＲＳＫＩＳＰＱＧＹ−ＮＨ２（配列番号１０３）
・Ｐａｌ−ＫＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤｋＤａＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２（配列番号１１０）
（式中、「ｐａｌ」はパルミチン酸部分を表し、「ａｃｅ」はアセチル化された末端を表す）からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、当該アミノ酸配列からなる、または、当該アミノ酸配列から本質的になる。
これらの配列のアライメントから明らかなように、これらのペプチドは、ＡＤＭ及び／またはＩＭＤに由来する断片を含み得る。
【００８０】
幾つかの実施形態において、１つ以上のアミノ酸残基が、Ｂ１に対してＮ末端で融合され、それにより、Ｂ１に関して残基がＮ末端で伸長しているポリペプチドを生成する。幾つかの実施形態において、この伸長は、スーパーアゴニストの生物活性に影響を与えない。
【００８１】
幾つかの実施形態において、本明細書に開示した式（Ｉ）のスーパーアゴニストは、３〜１２個のアミノ酸残基を含む中心コアＣａを含む。中心コアの長さは、残基の数ではなく、Ｂａ及びＤａが細胞膜表面の標的受容体と相互作用し得るように配置されることを必要とする立体的考察の制約を受ける。式（Ｉ）の構造を有するＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体スーパーアゴニストの幾つかの実施形態において、中心コアは、哺乳動物種を含むが、これに限定されることがない任意の範囲の種に由来するアドレノメデュリンまたはインターメジンの断片を含む。幾つかの実施形態において、Ｃａは、配列ＤＫＤＫＤＮＶＡＰＲＳＫ（配列番号１８）、ＤＫＤＫＤＮＳＡＰＶＤＰ（配列番号１９）、ＰＡＧＲＱＤＳＡＰＶＤＰ（配列番号２０）、ＤＫＤＫＤＮＶＡＰＶＤＰ（配列番号２１）、ＤＫＤＫＱＮＳＡＰＶＤＰ（配列番号２２）、ＤＫＧＲＱＤＳＡＰＶＤＰ（配列番号２３）、ＤＫＤＫＳＡＰＶＤＰ（配列番号２４）、ＤＫＤＫＳＡＰＶＤＰ（配列番号２５）、または、ＤＫＤＳＡＰＶＤＰ（配列番号２６）に対して、少なくとも６０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９９％、または、１００％の配列同一性を有する。幾つかの実施形態において、Ｃａは、配列番号１８〜２６のいずれかと６０％以上の配列同一性を有する。
【００８２】
Ｄａは、インターメジンのＣ末端由来の３個、４個、５個、６個、または、それ以上のアミノ酸残基を含むＩＭＤペプチドのＣ末端断片である。Ｄａは、Ｃ末端アミドを有する。Ｄａの少なくとも１つのアミノ酸は、プロリン（Ｐｒｏ）、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、チロシン（Ｔｙｒ）、及び、セリン（Ｓｅｒ）から選択される。上述したＣａと同様に、Ｄａは、その配列による制約を受けず、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ１及びＣＬＲ／ＲＡＭＰ２受容体の双方と相互作用する能力による制約を受ける。Ｄａの場合、アゴニストが結合すると受容体が活性化されるように、細胞外ドメインの部位で標的受容体と相互作用することが必要である。
【００８３】
幾つかの実施形態において、Ｄａは、少なくとも１つのチロシン残基を含む。幾つかの実施形態において、ＤａのＣ末端は、アミド化カルボキシ（−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ２）部分を含むように修飾される。
【００８４】
幾つかの実施形態において、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ２受容体特異的スーパーアゴニストは、配列番号６９、７０、９４、２０２、１０３または１１０のペプチドを含み、あるいは、それから本質的になる。
【００８５】
本明細書の幾つかの実施形態において、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体スーパーアゴニストは、細胞膜でＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体に結合するが、アゴニスト配列に由来する少なくとも１つのアミノ酸残基が異なるアゴニストの配列を保持する。好ましい実施形態において、ＡＤＭ及びＩＭＤに由来するキメラスーパーアゴニストは、スーパーアゴニストまたはスーパーアンタゴニストの有効性を高めるために使用される構造の一部である。
【００８６】
幾つかの実施形態において、Ｂａは、配列番号１〜１６のペプチドからなる群から選択される。幾つかの実施形態において、式（Ｉ）のＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体スーパーアゴニストは、ヒトＡＤＭなど、これに限定されないＡＤＭ配列に由来する約１９個のアミノ酸残基またはそれ以上のアミノ酸残基を有する第１のペプチド断片、ヒトＡＤＭ及びＩＭＤなど、これらに限定されないＡＤＭ及びＩＭＤに由来する約３個のアミノ酸残基またはそれ以上のアミノ酸残基を有する第２のペプチド断片、ならびに、ヒトＩＭＤなどのＩＭＤ由来の第３のペプチド断片を含む。幾つかの実施形態において、式（Ｉ）のＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体スーパーアゴニストは、隣接する第２及び第３のペプチド断片を含む。
【００８７】
アンタゴニスト及びスーパーアンタゴニスト
ＡＤＭ／ＣＧＲＰ／ＩＭＤファミリーペプチドのＮ末端部分での特定の選択アミノ酸は、ペプチドアゴニスト活性を担う。これらのペプチドのＮ末端部分における特定のアミノ酸の切断または置換は、アゴニストからアンタゴニストへの活性を調整することができる。さらなる置換または修飾が、アンタゴニストにさらなる望ましい特徴を付与し得ることが発見された。例えば、ＣＧＲＰシグナル伝達の遮断は、片頭痛の発症または進行の予防に有効であり得るのに対して、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ２シグナル伝達の遮断は、腫瘍の成長及び癌進行を抑制する抗血管形成アプローチを示す。しかしながら、既存のＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体アンタゴニストは、有効性の懸念が払拭できていない。ＣＧＲＰ８−３７及びＡＤＭ２２−５２などのペプチドアンタゴニストは、半減期が非常に短く、また、有効性にも乏しく、そして、受容体特異的である。
【００８８】
幾つかの実施形態において、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体スーパーアンタゴニストが提供され、当該アンタゴニストは、式（ＩＩ）の構造を有しており、
Ｂｂ−Ｃｂ−Ｄｂ（ＩI）
式中、
Ｂｂは、１２〜１３個のアミノ酸残基を含むアドレノメデュリンペプチドファミリーメンバーのＮ末端断片であり、Ｂｂが、構造（Ｂ０−Ｂ１−Ｂ２−Ｂ３−Ｂ４−Ｂ５−Ｂ６−Ｂ７−Ｂ８−Ｂ９−Ｂ１０−Ｂ１１−Ｂ１２）として表現し得るものであり、
Ｃｂは、約３個、約４個、約５個、約６個、約７個、約８個、約９個、約１０個、約１１個、約１２個のアミノ酸からなる中心コアであり、及び、
Ｄｂは、Ｃ末端アミドを有する約３個、約４個、約５個、約６個のアミノ酸残基を含むインターメジン（ＩＭＤ）の改変Ｃ末端断片であり、当該Ｃ末端断片の少なくとも１つのアミノ酸が、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、プロリン（Ｐ）、セリン（Ｓｅｒ）、チロシン（Ｔｙｒ）から選択される。
【００８９】
幾つかの実施形態において、汎特異的ＣＬＲ／ＲＡＭＰ１特異的、及び、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ２特異的受容体スーパーアンタゴニストは、
・Ｐａｌ−ＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２（配列番号７７）
・ｍｉｎｉＰＥＧ−Ｋ（Ｐａｌ）ＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２（配列番号７８）
・ｍｉｎｉＰＥＧ−Ｋ（Ｐａｌ）ＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２（配列番号１１２）
・ｍｉｎｉＰＥＧ−Ｋ（Ｐａｌ）ＶＱＫＬＡＨＱＩＹＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２（配列番号１１４）
・Ｐａｌ−ＫＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＶＡＰＲＳＫＩＳＰＱＧＹ−ＮＨ２（配列番号１１９）
・Ｐａｌ−ＫＶＱＮＬＳＨＲＬＷＱＬＭＧＰＡＧＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２（配列番号１２０）
・Ｐａｌ−ＫＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２（配列番号１２１）
・Ｐａｌ−ＫＶＱＫＬＡＨＱＩＹＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２（配列番号１２２）
・Ｐａｌ−ＫＶＱＫＬＡＨＱＩＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２（配列番号１２３）
・Ｐａｌ−ＫＶＱＫＬＡＨＱＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２（配列番号１２４）
・Ｐａｌ−ＫＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２（配列番号１２５）
・Ｐａｌ−ＫＶＱＫＬＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２（配列番号１３９）
を含み、からなり、または、から本質的になる。
【００９０】
幾つかの実施形態において、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体スーパーアンタゴニストは、配列番号７７〜７８、１１２、１１４、１１９、１２０〜１２５、または、１３９のアミノ酸配列に対して、６０％超、７０％超、８０％超、９０％超、９５％超の配列同一性を有する一方で、当該ペプチドは、アンタゴニスト活性を維持している。ＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体スーパーアンタゴニストは、配列番号７７〜７８、１１２、１１４、１１９、１２０〜１２５または１３９のアミノ酸配列に対する立体異性体、誘導体、または、ペプチド模倣体を含み得る。
【００９１】
式（ＩＩ）の構造を有するＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体スーパーアンタゴニストの幾つかの実施形態において、アンタゴニストは、６個以下のアミノ酸残基の第３のペプチド断片（Ｄｂ）を含み、当該第３のペプチド断片は、ＡＤＭまたはＩＭＤ由来の配列を有している。式（ＩＩ）の構造を有するＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体スーパーアンタゴニストの幾つかの実施形態において、当該第２のペプチド断片と当該第３のペプチド断片とは隣接している。
【００９２】
式（ＩＩ）または（ＩＩＩ）の構造を有する修飾スーパーアンタゴニストの幾つかの実施形態において、当該配列は、あらゆる範囲の種のいずれかに由来するＡＤＭまたはＩＭＤの断片を含む。幾つかの実施形態において、当該類似体は、配列番号７７〜７８、１１２、１１４、１１９、１２０〜１２５、または、１３９に対して、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％または９５％の配列同一性を有する。
【００９３】
式（ＩＩ）の構造を有するＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体スーパーアンタゴニストの幾つかの実施形態において、Ｂｂは、４〜１３個のアミノ酸残基を含むＡＤＭ及びＩＭＤペプチドファミリーメンバーの修飾Ｎ末端断片であり、Ｃｂは、３〜６個のアミノ酸残基を含む中心コアであり、Ｄｂは、Ｃ末端アミドを有する３〜６個のアミノ酸残基を含むＩＭＤのＣ末端断片であり、Ｃ末端断片の少なくとも１つのアミノ酸が、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、プロリン（Ｐ）、セリン（Ｓｅｒ）またはチロシン（Ｔｙｒ）、または、医薬として許容されるそれらの塩である。Ｂｂ、Ｃｂ及びＤｂの長さは、残基自体の数ではなく、類似体が、細胞膜表面、及び、細胞外ドメイン（すなわち、機能的要件）の各々で、野生型ＡＤＭ／ＣＧＲＰ／ＩＭＤファミリーペプチドと競合して、標的受容体と相互作用することを可能ならしめる立体的考察による制約を受ける。
【００９４】
幾つかの実施形態において、当該ＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体スーパーアンタゴニストは、野生型分子と比較して、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体または受容体のカルシトニン／ＣＧＲＰファミリーのメンバーとの相互作用における分子の活性化活性を喪失するが、受容体への結合には影響を及ぼし得ない。結果として、当該ＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体スーパーアンタゴニストは、受容体を占有することはできるが、シグナル伝達アゴニストによる結合のために、または、リガンドの親水性を反発することによって、受容体を利用できなくなるので、シグナル伝達経路を活性化するのではなく、むしろ、拮抗してしまう。
【００９５】
幾つかの実施形態において、スーパーアンタゴニストは、式（ＩＩ）の構造を有し、Ｂｂ断片は、（Ｂ０−Ｂ１−Ｂ２−Ｂ３−Ｂ４−Ｂ５−Ｂ６−Ｂ７−Ｂ８−Ｂ９−Ｂ１０−Ｂ１１−Ｂ１２（配列番号１６）を含み、式中、Ｂ０は、天然アミノ酸、または、無し、からなる群から選択することができ、Ｂ１、Ｂ２、Ｂ３、Ｂ４、Ｂ５、Ｂ６、Ｂ７、Ｂ８、Ｂ９、Ｂ１０、Ｂ１１、及び、Ｂ１２は、バリン（Ｖａｌ）、ロイシン（Ｌｅｕ）、アラニン（Ａｌａ）、イソロイシン（Ｉｌｅ）、システイン（Ｃｙｓ）、セリン（Ｓｅｒ）、ならびに、チロシン（Ｔｙｒ）、アルギニン（Ａｒｇ）、アスパラギン（Ａｓｎ）、アスパラギン酸（Ａｓｐ）、グルタミン酸（Ｇｌｕ）、グルタミン（Ｇｌｎ）、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、リジン（Ｌｙｓ）、ならびに、チロシン（Ｔｙｒ）、フェニルアラニン（Ｆ）、または、無し、からなる群から選択することができる。
【００９６】
幾つかの実施形態において、スーパーアンタゴニストは、式（ＩＩＩ）の構造を有する。
Ｂ０−Ｂ１−Ｂ２−Ｂ３−Ｂ４−Ｂ５−Ｂ６−Ｂ７−Ｂ８−Ｂ９−Ｂ１０−Ｂ１１−Ｂ１２−Ｂ１３−Ｂ１４−Ｂ１５−Ｂ１６−Ｂ１７−Ｂ１８−Ｂ１９−Ｂ２０−Ｂ２１−Ｂ２２−Ｂ２３−Ｂ２４−Ｂ２５−Ｂ２６−Ｂ２７−Ｂ２８−ＮＨ２（ＩＩＩ）
式中、
Ｂ０は、空の残基、アシル化ヒスチジン（ａｃｙ−Ｈｉｓ）、アシル化アルギニン（ａｃｙ−Ａｒｇ）、アシル化リジン（ａｃｙ−Ｌｙｓ）、アシル化セリン（ａｃｙ−Ｓｅｒ）、アシル化スレオニン（ａｃｙ−Ｔｈｒ）、アシル化チロシン（ａｃｙ−Ｔｙｒ）、アシル化アスパラギン酸（ａｃｙ−Ａｓｐ）、アシル化グルタミン酸（ａｃｙ−Ｇｌｕ）、アシル化グルタミン（ａｃｙ−Ｇｌｎ）、アシル化アスパラギン（ａｃｙ−Ａｓｎ）、アシル化バリン（ａｃｙ−Ｖａｌ）、アシル化アラニン（ａｃｙ−Ａｌａ）、アシル化グリシン（ａｃｙ−Ｇｌｙ）、アシル化イソロイシン（ａｃｙ−Ｉｌｅ）、アシル化ロイシン（ａｃｙ−Ｌｅｕ）、アシル化フェニルアラニン（ａｃｙ−Ｐｈｅ）、アシル化トリプトファン（ａｃｙ−Ｔｒｐ）、アシル化プロリン（ａｃｙ−Ｐｒｏ）、アシル化メチオニン（ａｃｙ−Ｍｅｔ）、アシル化システイン（ａｃｙ−Ｃｙｓ）、二重アシル化ヒスチジン（ａｃｙ−Ｈｉｓ（ａｃｙ））、ａｃｅ−ヒスチジン（ａｃｙ）（ａｃｅ−Ｈｉｓ（ａｃｙ））、ｍｉｎｉ−ＰＥＧ−アシル化−ヒスチジン（ｍｉｎｉ−ＰＥＧ−Ｈｉｓ（ａｃｙ））、二重アシル化アルギニン（ａｃｙ−Ａｒｇ（ａｃｙ））、ａｃｅ−アルギニン（ａｃｙ）（ａｃｅ−Ａｒｇ（ａｃｙ））、ｍｉｎｉ−ＰＥＧ−アシル化−アルギニン（ｍｉｎｉ−ＰＥＧ−Ａｒｇ（ａｃｙ））、リジン（Ｌｙｓ）、二重アシル化リシン（ａｃｙ−Ｌｙｓ（ａｃｙ））、ａｃｅ−リジン（ａｃｙ）（ａｃｅ−Ｌｙｓ（ａｃｙ））、及び、ｍｉｎｉ−ＰＥＧ−アシル化リジン（ｍｉｎｉ―ＰＥＧ−Ｌｙｓ（ａｃｙ））からなる群から選択され、
Ｂ１は、空の残基、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、及び、Ｌｅｕからなる群から選択され、
Ｂ２は、空の残基、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、及び、Ａｓｎからなる群から選択され、
Ｂ３は、空の残基、Ｈｉｓ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｇｌｎ、及び、Ａｓｐからなる群から選択され、
Ｂ４は、空の残基、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｉｌｅ、及び、Ｌｅｕからなる群から選択され、
Ｂ５は、空の残基、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｓｅｒ、Ｔｈ、及び、Ｔｙｒからなる群から選択され、
Ｂ６は、空の残基、Ｈｉｓ、Ａｒｇ、及び、Ｌｙｓからなる群から選択され、
Ｂ７は、空の残基、Ｇｌｎ、Ａｓｎ、Ｈｉｓ、Ａｒｇ、及び、Ｌｙｓからなる群から選択され、
Ｂ８は、空の残基、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｉｌｅ、及び、Ｌｅｕからなる群から選択され、
Ｂ９は、空の残基、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、及び、Ｔｙｒからなる群から選択され、
Ｂ１０は、空の残基、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、及び、Ａｓｎからなる群から選択され、
Ｂ１１は、空の残基、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｉｌｅ、及び、Ｌｅｕからなる群から選択され、
Ｂ１２は、空の残基、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｙｒ、Ｍｅｔ、Ｔｒｐ、及び、Ｐｈｅからなる群から選択され、
Ｂ１３は、空の残基、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ａｓｎ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｉｌｅ、及び、Ｌｅｕからなる群から選択され、
Ｂ１４は、空の残基、Ｈｉｓ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、及び、Ｐｒｏからなる群から選択され、
Ｂ１５は、空の残基、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ａｓｎ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｉｌｅ、及び、Ｌｅｕからなる群より選択され、
Ｂ１６は、空の残基、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｉｌｅ、及び、Ｌｅｕからなる群から選択され、
Ｂ１７は、空の残基、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、及び、Ｔｙｒからなる群から選択され、
Ｂ１８は、空の残基、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｉｌｅ、及び、Ｌｅｕからなる群から選択され、
Ｂ１９は、空の残基、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、及び、Ｐｒｏからなる群から選択され、
Ｂ２０は、空の残基、Ｈｉｓ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｉｌｅ、及び、Ｌｅｕからなる群から選択され、
Ｂ２１は、空の残基、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｙｒ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、及び、Ａｓｎからなる群から選択され、
Ｂ２２は、空の残基、Ｈｉｓ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、及び、Ｐｒｏからなる群から選択され、
Ｂ２３は、空の残基、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｙｒ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｉｌｅ、及び、Ｌｅｕからなる群から選択され、
Ｂ２４は、空の残基、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、及び、Ｔｙｒからなる群から選択され、
Ｂ２５は、空の残基、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、及び、Ｐｒｏからなる群から選択され、
Ｂ２６は、空の残基、Ｈｉｓ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、及び、Ａｓｎからなる群から選択され、
Ｂ２７は、空の残基、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、及び、Ｔｙｒからなる群から選択され、
Ｂ２８は、空の残基、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、及び、Ｔｙｒからなる群から選択される。
【００９７】
スーパーアンタゴニストは、スーパーアンタゴニストペプチドの１つを含む医薬組成物として提供され得る。この医薬組成物は、個体における頭痛、偏頭痛、関節痛、腫瘍関連痛、神経因性疼痛、子宮内膜症、モルヒネ耐性、黄斑変性、腫瘍血管形成、腫瘍転移、または、血管浮腫を治療するための方法において使用することができ、及び、当該方法は、有効量のＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体スーパーアンタゴニストを個体に投与することを含む。幾つかの実施形態は、医薬として許容される賦形剤、及び、本明細書に開示及び記載したスーパーアンタゴニストを含む医薬組成物を提供する。
【００９８】
幾つかの実施形態は、個体の頭痛または腫瘍を治療する方法を提供し、当該方法は、本明細書に開示及び記載した有効量のスーパーアンタゴニストを個体に投与することを含む。幾つかの実施形態において、当該方法は、頭痛または腫瘍に罹患している対象を同定することをさらに含み得る。幾つかの実施形態において、頭痛は、片頭痛である。
【００９９】
幾つかの実施形態は、個体に対して、本明細書に開示及び記載したスーパーアンタゴニストを投与することを含む、異常なレベルのＣＧＲＰに関連する病態を治療する方法を提供し、及び、当該方法は、個体に対して、本明細書に開示及び記載したスーパーアンタゴニストの有効量を投与することを含む。幾つかの実施形態において、その病態は、片頭痛である。
【０１００】
一般的なペプチド修飾
幾つかの実施形態において、１つ以上の残基が、式（Ｉ）のアゴニスト、及び、式（ＩＩ）及び（ＩＩＩ）のアンタゴニストのＢｂにＮ末端へと融合され、それにより、類似体に関する残基のＮ末端が伸長したポリペプチドを生成する。幾つかの実施形態において、この伸長は、投与後のアゴニストまたはアンタゴニストの安定性に影響を及ぼす。
【０１０１】
幾つかの実施形態において、アゴニストまたはアンタゴニストのＢｂへのＮ末端またはＣ末端の残基、例えば、Ａｌａ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、及び、Ｔｈｒを含むＸＴＥＮＳ配列の付加は、類似体（Ｓｃｈｅｌｌｅｎｂｅｒｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２００９，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ２７（１２）：１１８６−１１９２）の安定性を拡大し得る。幾つかの実施形態において、Ｎ末端またはＣ末端への残基の付加は、投与された薬物の半減期を増加し得る。これらの変更は、本明細書において企図しており、当業者であれば、このための実施方法を理解している。
【０１０２】
幾つかの実施形態は、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体に結合したスーパーアンタゴニストを提供し、試験化合物または試験化合物のライブラリーを提供し、及び、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体からスーパーアンタゴニストを解離することができる化合物を同定することによって、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体結合リガンドを同定する方法を提供する。この方法によって同定された化合物は、他のＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体結合剤をさらにスクリーニングして、選択的ＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体結合リガンドを同定し得る。
【０１０３】
本発明の幾つかの実施形態において、ペプチドは、配列番号２８〜５１、６９〜７０、７７〜７８、９２、９４、１０１、１０３、１１０、１１２、１１４、１１９、１２０〜１２５、及び、１３９のアミノ酸配列に対して、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、当該アミノ酸配列からなり、あるいは、当該アミノ酸配列を本質的に含み、当該ペプチドは、アゴニスト活性またはアンタゴニスト活性を保持している。
【０１０４】
また、治療剤、例えば、本発明のＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体スーパーアゴニストまたはスーパーアンタゴニストに結合された薬物、治療用ポリペプチドなどが提供され、当該ＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体スーパーアゴニストまたはスーパーアンタゴニストは、治療剤の標的部分として作用する。また、本発明のＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体スーパーアゴニストまたはスーパーアンタゴニストに結合された治療剤を送達する方法も提供され、当該方法は、有効量の結合した治療剤を、それを必要とする個体に投与することを含む。幾つかの実施形態において、治療薬は、造影剤である。標識されたＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体リガンドである（例えば、造影剤及び治療剤としての使用のためのアドレノメデュリン誘導体は、Ｊ．Ｄｅｐｕｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，カナダ特許第２５６７４７８号、及び、ＷＯ２００８／１３８１４１に記載されている）。これらのＡＤＭ誘導体において、放射性同位体を結合することができる分子構造のような複合体形成ケージは、ＡＤＭのＮ末端に直接的に、または、短いＰＥＧスペーサーも潜在的に含むスペーサー単位を介して付着された。これらの薬物の診断上または治療上の価値は、放射性分子の標的送達に応じて高まる。
【０１０５】
幾つかの実施形態は、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体に結合したＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体スーパーアゴニストまたはスーパーアンタゴニストを提供し、試験化合物または試験化合物のライブラリーを提供することで、インビボでＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体をイメージングするためのＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体を同定する方法を提供する。
【０１０６】
幾つかの実施形態において、異種部分は、スーパーアゴニストまたはスーパーアンタゴニストに結合される。幾つかの実施形態において、異種部分は、ＰＡＳ配列である。本明細書で使用するＰＡＳ配列とは、アラニン及びセリン残基を主に含むアミノ酸配列、または、主に、アラニン、セリン、及び、プロリン残基を含むアミノ酸配列のことを指し、当該アミノ酸配列は、生理学的条件下でランダムコイル配座を形成する。当業者であれば、アラニン、セリン、及び、プロリン以外の残基が、ＰＡＳ配列中の微量成分として添加される場合に、アミノ酸ポリマーが、ランダムコイル配座を形成し得ることも認識している。アラニン、セリン、及び、プロリン以外のアミノ酸は、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｈｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、及び、Ｖａｌからなる群から選択され得る。生理学的条件下において、ＰＡＳ配列ストレッチは、ランダムコイル配座を形成し、それにより、インビボ、及び／または、インビトロでの改善した安定性を媒介することができる。他の実施形態において、ランダムコイルドメインを形成するＰＡＳ配列は、特に、血漿におけるタンパク質分解、免疫原性、等電点／静電気挙動、細胞表面受容体への結合、または、内在性に関しては生物学的に不活性であるが、依然として生分解性を有しており、このことは、ＰＥＧなどの合成ポリマーにおいて明確な利点を提供する。
【０１０７】
ランダムコイル配座を形成するＰＡＳ配列として、ＡＳＰＡＡＰＡＰＡＳＰＡＡＰＡＰＳＡＰＡ、ＡＡＰＡＳＰＡＰＡＡＰＳＡＰＡＰＡＰＡＰ、及び、ＡＳ  ＡＡＡＰ  ＡＡＡＳ  ＡＡＡＳ  ＡＰＳ  ＡＡＡ、または、それらのあらゆる組合せからなる群から選択されるアミノ酸配列を含む（米国公開特許公報第２０１０／０２９２１３０  Ａ１号、及び、ＰＣＴ出願公開公報第ＷＯ２００８／１５５１３４  Ａ１号を参照されたい）が、これらに限定されない。
【０１０８】
特定の実施形態において、スーパーアゴニストまたはスーパーアンタゴニストに結合される異種部分は、ヒドロキシエチルデンプン（ＨＥＳ）、または、その誘導体である。ＨＥＳは、天然のアミロペクチンの誘導体であり、体内のアルファアミラーゼによって分解され、そして、有利な生物学的特性を示す。それらは、血液量補充剤として、及び、診療所での血液希釈療法において使用される（Ｓｏｍｍｅｒｍｅｙｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｋｒａｎｋｅｎｈａｕｓｐｈａｒｍａｚｉｅ，８（８）、２７１−２７８（１９８７）；及び、Ｗｅｉｄｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｒｚｎｅｉｍ．−Ｆｏｒｓｃｈｕｎｇ／Ｄｒｕｇ  Ｒｅｓ．４１，４９４〜４９８（１９９１））。
【０１０９】
特定の実施形態において、スーパーアゴニストまたはスーパーアンタゴニストに結合された異種部分は、異なる平均分子量、及び／または、異なる置換度、及び／または、異なるＣ２：Ｃ６置換比を有するヒドロキシエチルデンプンの混合物である。
【０１１０】
特定の実施形態において、スーパーアゴニストまたはスーパーアンタゴニストに結合される異種部分は、ポリシアル酸（ＰＳＡ）またはその誘導体である。ポリシアル酸（ＰＳＡ）は、特定の細菌株、及び、ある種の細胞の哺乳動物によって産生される天然のシアル酸の非分枝ポリマーである（Ｒｏｔｈ  Ｊ．ｅｔ  ａｌ．，Ｐｏｌｙｓｉａｌｉｃ  Ａｃｉｄ：Ｆｒｏｍ  Ｍｉｃｒｏｂｅｓ  ｔｏ  Ｍａｎ，  ｅｄｓ  Ｒｏｔｈ  Ｊ., Ｒｕｔｉｓｈａｕｓｅｒ  Ｕ., Ｔｒｏｙ  Ｆ．Ａ.（Ｂｉｒｋｈａｕｓｅｒ  Ｖｅｒｌａｇ，Ｂａｓｅｌ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ），ｐｐ  ３３５−３４８）。また、シアル酸は、シアル酸以外のモノマーとの交互コポリマーにおいて見出し得る。ポリシアル酸は、病原性細菌による免疫系及び補体系の回避、及び、胎児発育中の未成熟ニューロンのグリア接着能の調節を含む重要な生物学的機能を有する（このポリマーは、抗接着機能を有する；Ｃｈｏ  ａｎｄ  Ｔｒｏｙ，Ｐ．Ｎ．Ａ．Ｓ．，ＵＳＡ，９１（１９９４），１１４２７−１１４３１）。ポリシアル酸をペプチドまたはポリペプチドに対して付着または結合させるための様々な方法が記載されている（米国特許第５，８４６，９５１号；ＷＯ−Ａ−０１８７９２２、及び、米国公開特許公報第２００７／０１９１５９７号を参照されたい）。
【０１１１】
特定の実施形態において、スーパーアゴニストまたはスーパーアンタゴニストに結合される異種部分は、グリシンに富むホモアミノ酸ポリマー（ＨＡＰ）である。ＨＡＰ配列は、少なくとも５０個のアミノ酸、少なくとも１００個のアミノ酸、２００個のアミノ酸、または５００個のアミノ酸の長さを有するグリシンの反復配列を含むことができる。ある実施形態において、ＨＡＰ配列は、ＨＡＰ配列に融合または結合された部分の半減期を延ばすことができる。限定されないＨＡＰ配列の例として、（Ｇｌｙ）ｎ、（Ｇｌｙ４Ｓｅｒ）ｎ、または、Ｓ（Ｇｌｙ４Ｓｅｒ）ｎなどで、式中、ｎは、１〜２００であるが、これらに限定されない。
【０１１２】
特定の態様において、本発明の化合物は、ＸＴＥＮポリペプチド、または、その断片、変異体、または、誘導体であるか、または、それらを含む少なくとも１つの異種部分に共有結合される。本明細書で使用する「ＸＴＥＮポリペプチド」とは、非天然の実質的に非反復の配列を有する延長されたポリペプチドであって、小さな親水性アミノ酸から主として構成され、生理的条件下で、低次構造を有し、あるいは、２次または３次構造を有さない配列を持つポリペプチドのことを指す。異種部分として、ＸＴＥＮは、半減期延長部分として作用することができる。加えて、ＸＴＥＮは、望ましい特性を提供することができ、当該特性として、改善した薬物動態パラメータ、及び、溶解特性があるが、これらに限定されない。
【０１１３】
特定の態様において、ＸＴＥＮ部分は、インビボ半減期を延ばしたり、または、曲線下面積（ＡＵＣ）を大きくしたりするなどの薬物動態学的特性を改善することができるので、本発明の化合物またはコンジュゲートは、インビボに留まり、そして、化合物、または、ＸＴＥＮ異種部分を含まない同化合物とのコンジュゲートと比較して、長期間にわたって凝固促進活性を奏する（国際特許公報番号第ＷＯ  ２０１００９１１２２  Ａ１号、第ＷＯ  ２０１０１４４５０２  Ａ２号、第ＷＯ  ２０１０１４４５０８  Ａ１号、第ＷＯ  ２０１１０２８２２８  Ａ１号、第ＷＯ  ２０１１０２８２２９  Ａ１号、または、第ＷＯ  ２０１１０２８３４４  Ａ２号を参照されたい）。
【０１１４】
本発明の意味において、用語「Ｆｃ」は、例えば、Ｆｃ領域またはＦｃＲｎ結合パートナーなど、免疫グロブリン定常領域、または、その一部として理解されるべきである。そうではあるが、特定の実施形態において、化合物またはコンジュゲートは、Ｆｃ受容体（ＦｃＲ）結合特性をＦｃ領域に付与するために十分である１つ以上の切断されたＦｃ領域に結合される。例えば、ＦｃＲｎに結合するＦｃ領域の部分（すなわち、ＦｃＲｎ結合部分）は、ＩｇＧ１のおおよそアミノ酸２８２〜４３８、ＥＵ付番法では（ＣＨ２ドメインでのアミノ酸２４８、２５０〜２５７、２７２、２８５、２８８、２９０〜２９１、３０８〜３１１、及び、３１４、ならびに、ＣＨ３ドメインでのアミノ酸残基３８５〜３８７、４２８、及び、４３３〜４３６にある一次接触部位となる。したがって、本発明の生物学的に活性なペプチド誘導体中のＦｃ領域は、ＦｃＲｎ結合部分を含み得るか、または、それからなり得る。ＦｃＲｎ結合部分は、IｇＧ１、IｇＧ２、IｇＧ３、及び、ＩｇＧ４を含むあらゆるアイソタイプの重鎖に由来し得る。ある実施形態において、ヒトアイソタイプＩｇＧ１の抗体由来のＦｃＲｎ結合部分が使用される。別の実施形態において、ヒトアイソタイプＩｇＧ４の抗体由来のＦｃＲｎ結合部分が使用される。
【０１１５】
特定の実施形態において、Ｆｃ領域は、ヒンジ（例えば、上部、中間、及び／または、下部のヒンジ領域）ドメイン（ＥＵ付番法による抗体Ｆｃ領域のおおよそアミノ酸２１６〜２３０）、ＣＨ２ドメイン（ＥＵ付番法による抗体Ｆｃ領域のおおよそアミノ酸２３１〜３４０）、ＣＨ３ドメイン（ＥＵ付番法による抗体Ｆｃ領域のおおよそアミノ酸３４１〜４３８）、ＣＨ４ドメイン、または、それらの変異体、それらの一部、あるいは、それらの断片の少なくとも１つを含む。他の実施形態において、Ｆｃ領域は、完全なＦｃドメイン（すなわち、ヒンジドメイン、ＣＨ２ドメイン、及び、ＣＨ３ドメイン）を含む。幾つかの実施形態において、Ｆｃ領域は、ＣＨ３ドメイン（または、その一部）に融合したヒンジドメイン（または、その一部）、ＣＨ２ドメイン（または、その一部）に融合したヒンジドメイン（または、その一部）、ＣＨ３ドメイン（または、その一部）に融合されたＣＨ２ドメイン（または、その一部）、双方のヒンジドメイン（または、その一部）に融合されたＣＨ２ドメイン（または、その一部）、及び、ＣＨ３ドメイン（または、その一部）を含む。さらに他の実施形態では、Ｆｃ領域は、ＣＨ２ドメインの少なくとも一部（例えば、ＣＨ２ドメインの全部または一部）を欠いている。特定の実施形態において、Ｆｃ領域は、ＥＵ付番法で２２１〜４４７に対応するアミノ酸を含むか、または、当該アミノ酸からなる。
【０１１６】
本発明の生物学的に活性なペプチド誘導体でのＦｃは、例えば、ＰＣＴ公報第ＷＯ８８／０７０８９Ａ１号、第ＷＯ９６／１４３３９Ａ１号、第ＷＯ９８／０５７８７Ａ１号、第ＷＯ９８／２３２８９Ａ１号、第ＷＯ９９／５１６４２Ａ１号、第ＷＯ９９／５８５７２Ａ１号、第ＷＯ００／０９５６０Ａ２号、第ＷＯ００／３２７６７Ａ１号、第ＷＯ００／４２０７２Ａ２号、第ＷＯ０２／４４２１５Ａ２号、第ＷＯ０２／０６０９１９Ａ２号、第ＷＯ０４／０９９２４９Ａ２号、第ＷＯ０５／０４０２１７Ａ２号、第ＷＯ０４／０４４８５９号、第ＷＯ０５／０７０９６３Ａ１号、第ＷＯ０５／０７７９８１Ａ２号、第ＷＯ０５／０９２９２５Ａ２号、第ＷＯ０５／１２３７８０Ａ２号、第ＷＯ０６／０１９４４７Ａ１号、第ＷＯ０６／０４７３５０Ａ２号、及び、第ＷＯ０６／０８５９６７Ａ２号、米国公開特許第ＵＳ２００７／０２３７７６６号、第ＵＳ２００７／０２３７７６７号、第ＵＳ２００７／０２４３１８８号、第ＵＳ２００７／０２４８６０３号、第ＵＳ２００７／０２８６８５９、第ＵＳ２００８／００５７０５６号に開示された１つ以上の位置での変化（例えば、置換）を含むことができる。ある実施形態において、特定の変化（例えば、当該技術分野で開示された１つ以上のアミノ酸の特異的置換）は、開示されたアミノ酸位置の１つ以上で行われ得る。別の実施形態において、開示されたアミノ酸位置の１つ以上での異なる変化（例えば、当該技術分野で開示された１つ以上のアミノ酸位置での異なる置換）が行われ得る。
【０１１７】
また、本発明で使用されるＦｃ領域は、そのグリコシル化を変化させるものとして当該技術分野で認識されたアミノ酸置換を含み得る。例えば、Ｆｃは、グリコシル化の低下（例えば、Ｎ−またはＯ−結合グリコシル化）をもたらす突然変異を有するか、あるいは、野生型Ｆｃ部分の改変グリコフォーム（例えば、低フコースまたはフコースフリーグリカン）を含み得る。特定の実施形態において、本発明の化合物、または、コンジュゲートは、アルブミン、または、その機能的断片を含む異種部分に結合される。完全長形態の６０９個のアミノ酸のタンパク質であるヒト血清アルブミン（ＨＳＡまたはＨＡ）は、血清の浸透圧のかなりの部分を占め、また、内因性及び外因性のリガンドの担体として機能する。本明細書で使用する用語「アルブミン」は、完全長アルブミン、または、その機能的断片、その変異体、その誘導体、または、その類似体を含む。アルブミン、または、その断片、もしくは、その変異体の例は、米国公開特許公報第２００８／０１９４４８１  Ａ１号、第２００８／０２６１８７７  Ａ１号、または、第２００８／０１５３７５１  Ａ１号、または、ＰＣＴ出願公開公報第２００８／０３３４１３  Ａ２号、第２００９／０５８３２２  Ａ１号、または、第２００７／０２１４９４  Ａ２号に開示されている。
【０１１８】
ある実施形態において、異種部分は、アルブミン、その断片、または、その変異体であり、免疫グロブリン定常領域、または、その一部（例えば、Ｆｃ領域）、ＰＡＳ配列、ＨＥＳ、及び、ＰＥＧからなる群から選択される異種部分にさらに結合される。
【０１１９】
特定の実施形態において、異種部分は、アルブミン結合部分であり、これは、アルブミン結合ペプチド、細菌性アルブミン結合ドメイン、アルブミン結合抗体断片、または、それらのあらゆる組み合わせを含む。
【０１２０】
例えば、アルブミン結合タンパク質を、細菌アルブミン結合タンパク質、抗体、または、抗体断片、例えば、ドメイン抗体とすることができる（米国特許第６，６９６，２４５号を参照されたい）。アルブミン結合タンパク質を、例えば、連鎖球菌タンパク質Ｇの１つとすることができる（Ｋｏｎｉｇ，Ｔ．  ａｎｄ  Ｓｋｅｒｒａ，Ａ．（１９９８）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２１８，７３−８３）。抱合パートナーとして使用することができるアルブミン結合ペプチドの他の例として、例えば、米国特許出願第２００３／００６９３９５号、または、Ｄｅｎｎｉｓ  ｅｔ  ａｌ．（Ｄｅｎｎｉｓ  ｅｔ  ａｌ．（２００２）Ｊ．  Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７７，３５０３５−３５０４３）に記載されたものがある。アルブミン結合ペプチドの例としては、コア配列ＤＩＣＬＰＲＷＧＣＬＷを有する一連のペプチドがあり（Ｄｅｎｎｉｓ  ｅｔ  ａｌ．、２００２．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ  ２７７：３５０３５−３５０４３を参照されたい）、アルブミン結合抗体断片として、Ｍｕｌｌｅｒ  ａｎｄ  Ｋｏｎｔｅｒｍａｎｎ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．  Ｍｏｌ．  Ｔｈｅｒ．  ９：３１９−３２６（２００７）、及び、Ｈｏｌｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｔ．  Ｅｎｇ．  Ｄｅｓｉｇｎ  Ｓｃｉ．，２１：２８３−２８８（２００８）に記載のものがある。
【０１２１】
記載されたスーパーアゴニスト及びスーパーアンタゴニストは、さらなるシステインでのチオール基の間に分子内ジスルフィド結合を有する環化形態で存在し得る。他の実施形態は、これらのジスルフィド誘導体の類似体を含み、そこでは、硫黄の１つが、硫黄を、Ｃ３／４基、または、他の同配体で置換されている。これらの類似体は、当該技術分野で周知の方法を用いて、分子内または分子間変位を介して製造することができる。
【０１２２】
あるいは、ペプチドのアミノ末端を、α−置換酢酸でキャップすることができ、α−置換基は、脱離基、例えば、α−ハロ酢酸、例えば、α−クロロ酢酸、α−ブロモ酢酸、または、ｏｃ−ヨード酢酸である。本実施形態のペプチドは、システインまたはホモシステイン残基の硫黄による脱離基の置換を介して環化または二量化することができる。例えば、Ａｎｄｒｅｕ，ｅｔ  ａｌ．１９９４，Ｍｅｔｈ．  Ｍｏｌ．  Ｂｉｏ．  ３５（７）：９１−１６９；Ｂａｒｋｅｒ，ｅｔ  ａｌ．  １９９２，  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  ３５：２０４０−２０４８；及び、Ｏｒ，ｅｔ  ａｌ．１９９１，Ｏｒｇ．  Ｃｈｅｍ．  ５６：３１４６−３１４９）を参照されたい。
【０１２３】
本発明の一実施形態によれば、式（Ｉ）、（ＩＩ）または（ＩＩＩ）の化合物は、少なくとも１つのアミド結合のＮ−メチル化によってさらに修飾することができる。ペプチドの代謝安定性に関するＮ−メチル化の影響は、様々なペプチドについて記載されている。例えば、シクロスポリンは、優れた薬物動態プロファイルを示す、自然界に存在する環状で複数回のＮ−メチル化を受けたペプチドである。一般に、Ｎ−メチル化は、Ｎ−メチル化ペプチド結合を切断することができないプロテアーゼによる酵素分解を遮断する。複数回のＮ−メチル化は、ペプチドの代謝安定性及び腸透過性を改善することが示されている［Ｃｈａｔｔｅｒｊｅｅ  Ｊ，Ｇｉｌｏｎ  Ｃ，Ｈｏｆｆｍａｎ  Ａ，Ｋｅｓｓｌｅｒ  Ｈ，Ｎ−ｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｐｅｐｔｉｄｅｓ：ａ  ｎｅｗ  ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅ  ｉｎ  ｍｅｄｉｃａｌ  ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ａｃｃ  Ｃｈｅｍ  Ｒｅｓ．，４１（１０）、１３３１−１３４２、２００８］。代謝安定性、膜透過性、及び、経口バイオアベイラビリティなどのペプチドの物理化学的特性を調節するために、Ａｆ−メチル化と組み合わせた環化を用いた［Ｃｈａｔｔｅｒｊｅｅ  Ｊ，Ｌａｕｆｅｒ  Ｂ，Ｋｅｓｓｌｅｒ  Ｈ，Ａｆ−ｍｅｔｈｙｌａｔｅｄ  ｃｙｃｌｉｃ  ｐｅｐｔｉｄｅｓ，Ｎａｔ  Ｐｒｏｔｏｃ、７（３）  ４３２−４４４、２０１２］。Ｄｏｎｇ  ＱＧ，  Ｚｈａｎｇ  Ｙ，  Ｗａｎｇ  ＭＳ，Ｆｅｎｇ  Ｊ，Ｚｈａｎｇ  ＨＨ，Ｗｕ  ＹＧ，  Ｇｕ  ＴＪ，  Ｙｕ  ＸＨ，  Ｊｉａｎｇ  ＣＬ，  Ｃｈｅｎ  Ｙ，  Ｌｉ  Ｗ，Ｋｏｎｇ  Ｗ，  Ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔ  ｏｆ  ｅｎｚｙｍａｔｉｃ  ｓｔａｂｉｌｉｔｙ  ａｎｄ  ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙ  ｏｆ  ｄｅｕｔｅｒｏｈｅｍｉｎ−ｐｅｐｔｉｄｅ  ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ  ｂｙ  ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｍｕｌｔｉ−ｓｉｔｅ  Ａｆ−ｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ，Ａｍｉｎｏ  Ａｃｉｄｓ．，４３（６）、２４３１−２４４１、２０１２は、選択した部位でのＡｆ−メチル化が、タンパク質分解に対して高い耐性を示したことを記載している。希釈した血清、及び、腸内調製物において、５０〜１４０倍も長い半減期の値が観察された。しかしながら、Ｌｉｎｄｅ  Ｙ，Ｏｖａｄｉａ  Ｏ，Ｓａｆｒａｉ  Ｅ，Ｘｉａｎｇ  Ｚ，Ｐｏｒｔｉｌｌｏ  ＦＰ，Ｓｈａｌｅｖ  ＤＥ，Ｈａｓｋｅｌｌ−Ｌｕｅｖａｎｏ  Ｃ，Ｈｏｆｆｍａｎ  Ａ，Ｇｉｌｏｎ  Ｃ，Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ−ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ  ａｎｄ  ｍｅｔａｂｏｌｉｃ  ｓｔａｂｉｌｉｔｙ  ｓｔｕｄｕｉｅｓ  ｏｆ  ｂａｃｋｂｏｎｅ  ｃｙｃｌｉｚａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ａｆ−ｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｍｅｌａｎｏｃｏｒｔｉｎ  ｐｅｐｔｉｄｅｓ，Ｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒｓ．，９０（５），６７１−６８２，２００８は、ａ−メラニン細胞刺激ホルモンの環状Ａｆ−メチル化類似体が安定性に優れてはいるが、親ペプチドよりも生物学的活性が劣っている、ことを記載している。１つのペプチド模倣体構造において、２つ以上のかような修飾が結合され得ることが理解される。
【０１２４】
幾つかの実施形態において、本明細書に開示及び記載された改変ペプチドアゴニストまたはアンタゴニストは、プロドラッグにもなり得るものであり、プロドラッグとは、その薬理学的効果を示す以前に生体内で変換を受けるあらゆる化合物のことである。プロドラッグは、担体結合プロドラッグ、カスケードプロドラッグも含むことができる。
【０１２５】
使用方法
本発明は、活性量の本発明の化合物を用いて、障害、特に、上述した障害を治療及び／または予防する方法も提供するものであり、障害として、内皮、心臓血管、肺、リンパ、浮腫、及び／または、炎症性障害を含むが、これらに限定されない。幾つかの実施形態は、個体に対して、本明細書に開示及び記載したＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体スーパーアゴニストの投与を含む、異常なレベルのＣＧＲＰ、ＡＤＭ、または、ＩＭＤに関連する病態を治療する方法を提供するものであって、この方法は、本明細書に開示及び記載したＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体スーパーアゴニストの有効量を個体に対して投与することを含む。
【０１２６】
本発明について、用語「治療」または「治療する」は、疾患、障害、病態、または、状態、その進展及び／または進行、及び／または、その兆候を、阻害、遅延、緩和、軽減、阻止、低減、または、退行をもたらす、ことを含む。用語「予防する」または「予防する」は、疾患、障害、病態、または、状態、その進展及び／または進行、及び／または、その兆候を、有する、罹患する、または、経験するリスクを低減することを含む。予防という用語には、予防法を含む。疾患、障害、病態、または、状態の治療または予防は、部分的または全面的であり得る。
【０１２７】
ＣＬＲ／ＲＡＭＰアゴニスト及びアンタゴニストの薬理学的活性に照らして、明らかに数多くの臨床的適応症があり、それらには、高血圧症、例えば、妊娠高血圧症、子癇前症、子癇、悪性高血圧症、肺動脈性肺高血圧症、糖尿病に関連する高血圧症など、心不全、脳卒中、心筋梗塞、心肥大、変形性関節症、気管支肺異形成（ＢＰＤ）、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、肺気腫、肺線維症、潰瘍性大腸炎、創傷治癒、糖尿病性潰瘍、リンパ浮腫、リウマチ性関節炎などがあるが、これらに限定されない。例えば、本発明のスーパーアゴニストを使用することができる臨床適応症は、特に、悪性高血圧症を含み得る。本発明のペプチドは、血圧の低下、例えば、心拍数に影響を及ぼさずに、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％以上の低下をもたらす。
【０１２８】
使用方法において、有効量の本発明のペプチドは、それ単独で、または、ペプチドのカクテルとして投与されるか、または、上述した病態の処置のためのさらなる活性剤と組み合わせて投与される。有効量は、約１ｎｇ／体重ｋｇ、１０ｎｇ／体重ｋｇ、１００ｎｇ／体重ｋｇ、１μｇ／体重ｋｇ、１０μｇ／体重ｋｇ、２５μｇ／体重ｋｇ、５０μｇ／体重ｋｇ、１００μｇ／体重ｋｇ、２５０μｇ／体重ｋｇ、５００μｇ／体重ｋｇ、７５０μｇ／体重ｋｇ、１ｍｇ／体重ｋｇ、５ｍｇ／体重ｋｇ、１０ｍｇ／体重ｋｇ、２５ｍｇ／体重ｋｇ、５０ｍｇ／体重ｋｇ、７５ｍｇ／体重ｋｇ、１００ｍｇ／体重ｋｇ、２５０ｍｇ／体重ｋｇ、５００ｍｇ／体重ｋｇ、７５０ｍｇ／体重ｋｇから、などである。投与量は、必要に応じて、例えば、３０分毎、毎時間、２時間毎、４時間毎、６時間毎、８時間毎、１２時間毎、１８時間毎、毎日、２日毎、３日毎、毎週などで、複数回投与し得る。また、投薬量は、例えば、急性治療法において連続注入で投与し得る。
【０１２９】
本発明のペプチドは、子癇前症及び子癇に関連する高血圧症を低下させることが知見されており、また、対象を安定化させて、そして、妊娠の安全な送達を可能にするために十分な期間にわたって投与され得る。
【０１３０】
子癇前症は、妊娠２０週後に新たに発症する高血圧症及び尿タンパクである。子癇は、子癇前症の患者における原因不明の全身性痙攣である。診断は、臨床的であり、尿タンパク質測定によって行われる。従来の治療では、通常、硫酸マグネシウムの静脈注射で、治療期間内に送達する。子癇前症は、妊婦の３〜７％に影響する。子癇前症及び子癇は、妊娠２０週後に発症し、症例の２５％までが産後にまで影響し、大半は最初の４日以内に発症するが、産後６週間まで至ることもある。子癇前症を治療しないでいると、通常は、様々な期間にわたってくすぶった状態となり、次いで、子癇前症の１／２００の患者で、突然に子癇へと進行する。子癇を治療しないでいると、通常は、致命的となる。
【０１３１】
子癇前症は、無症候性であるか、あるいは、浮腫または過剰な体重増加を引き起こし得る。顔または手の腫れ（患者の指に患者の指輪が入らなくなる場合もある）などの非依存性浮腫は、依存性浮腫よりも特異的である。反射反応が多くなり、神経筋過敏性を示し、発作（子癇）に進行することがある。点状出血は、凝固亢進の他の徴候と同様にして発症し得る。
【０１３２】
診断は、新生児高血圧症（ＢＰ＞１４０／９０ｍｍＨｇ）に加えて、２０週後の３００ｍｇ／２４時間を超える新たな未知のタンパク質尿症である。診断は、収縮期ＢＰ＞１４０ｍｍＨｇ、拡張期ＢＰ＞９０ｍｍＨｇ、または、その両方として定義される高血圧の症状または存在によって示唆される。緊急事態を除いて、高血圧は、少なくとも４時間以上空けて、２回以上の測定で、記録する必要がある。尿タンパク質の排出は、２４時間の収集で測定される。蛋白尿は、＞３００ｍｇ／２４時間と定義される。あるいは、タンパク尿は、タンパク質：クレアチン比が、≧０．３であること、または、ディップスティック読取値が、１＋である（他の定量的方法が利用できない場合にのみ使用される）ことに基づいて診断される。正確性に欠ける検査（例えば、尿ディップスティック検査、ルーチンの尿検査）での尿タンパクが認められなくとも、子癇前症は除外しない。
【０１３３】
タンパク尿が認められなくとも、妊娠中の女性に、新生児高血圧症の他に、血小板減少（血小板＜１００，０００／μｌ）、腎不全（血清クレアチニン＞１．１ｍｇ／ｄｌ、または、腎疾患が認められない女性での血清クレアチニンの倍増）、肝機能障害（アミノトランスフェラーゼ＞正常値の２倍）、肺水腫、脳、または、視覚症状のいずれかで新たな発症がある場合にも、子癇前症と診断される。
【０１３４】
高血圧症は、治療をしなければ、アテローム性動脈硬化性心臓血管疾患を非常に招きやすくする疾患である。成人のアメリカ人４人に１人が、高血圧症を抱えていると推定されている。高血圧症は、糖尿病を有さない場合と比べて、糖尿病を有している場合、約２倍の頻度で発症をする。高血圧症の有病率は、年齢とともに増加する。
【０１３５】
高血圧症は、単一の測定値に基づいて診断されるべきではない。少なくとも１週間以上にわたって、２回以上の連続した訪問で、高血圧症の診断に必要とされる平均拡張期血圧９０ｍｍＨｇ以上、または、収縮期血圧１４０ｍｍＨｇ以上を、最初に上昇した読取値で確認すべきである。糖尿病患者の高血圧症の診断にあっては、血圧の変動が大きく、また、類をみない収縮期高血圧症の可能性がより高いため、特別な注意が必要である。これらの患者には、１３０／８５ｍｍＨｇ未満の目標血圧が推奨される。
【０１３６】
食事の変化に加えて、高血圧をコントロールするために薬理学的処置が必要とされ得る。対象としたペプチドは、動脈血圧を低下させるために投与し得る。加えて、高い血圧を下げる副次的効果は、浮腫及び炎症性滲出液量の減少である。
【０１３７】
本発明のペプチドを含有する医薬組成物は、心臓保護剤として有用であり、例えば、心筋虚血に起因する虚血性損傷または心筋梗塞サイズを改善する。急性心筋虚血後の心筋傷害の程度、すなわち、心筋梗塞の程度を制限することができる新規の治療剤の開発は、現代の心臓病学の主要な関心事項である。また、後ろ向き疫学研究は、梗塞後の最初の数年間の死亡率が、当初の梗塞の大きさと関連しているようであることを示しているので、血栓溶解療法と併用して、あるいは、それ単独で投与できる追加の心筋保護を提供することができる治療法の開発にも関心が集まっている。
【０１３８】
心筋虚血は、心筋酸素の供給と需要との不均衡の結果であり、労作性及び血管攣縮性の心筋機能不全を含む。労作性虚血は、一般に、大きな心臓動脈が関係する重篤なアテローム性動脈硬化症狭窄の存在に起因し、その結果、心内膜下血流が減少する。血管攣縮性虚血は、病巣集団の痙攣と関連しており、その発症は、労作またはストレスとは関連していない。痙攣は、血管緊張の急激な高まりとして、より良く定義されている。
【０１３９】
本発明の化合物は、心臓保護療法を必要とする患者の治療において、通常、経口的または非経口的に投与することができる。投与計画は、改善が認められるまで最大治療応答を保証し、そして、その後に、軽減をもたらす最小有効レベルを保証するものである。したがって、一般的に、投与量は、心臓保護効果、すなわち、心筋虚血に起因する虚血性損傷または心筋梗塞サイズの改善をもたらす治療的に有効な量である。また、ペプチドは、心筋虚血などを患っている患者に緊急時に投与され得る注射可能な投薬形態として有用であると考えられる。
【０１４０】
本発明のペプチドについては、例えば、リンパ浮腫、リウマチ性関節炎、脳腫瘍または癌に向けた照射に続発する浮腫、脳卒中、頭部外傷、または、脊髄損傷に起因する浮腫、手術後浮腫、喘息、及び、他の呼吸器疾患、及び、嚢胞性黄斑浮腫などの浮腫を軽減するための使用も知見している。
【０１４１】
それらの薬理学的特性に基づいて、本発明の化合物は、心臓血管疾患、特に、心不全、特に、慢性及び急性心不全、悪化する心不全、拡張期及び収縮期（鬱血性）心不全、急性非代償性心不全、心臓麻痺、冠動脈性心疾患、狭心症、心筋梗塞、虚血再灌流傷害、虚血性及び出血性脳卒中、動脈硬化症、アテローム性動脈硬化症、高血圧症、特に、本態性高血圧症、悪性本態性高血圧症、二次性高血圧症、血管新生高血圧症、及び、腎臓障害及び内分泌障害に続発する高血圧症、高血圧性心疾患、高血圧性腎疾患、肺高血圧症、特に、二次性肺高血圧症、急性肺線維症の有無に関わらず肺塞栓後の肺高血圧症、原発性肺高血圧症、及び、末梢動脈疾患閉塞性疾患の治療及び／または予防のために用いることができる。
【０１４２】
さらに、本発明の化合物は、肺障害、例えば、慢性閉塞性肺疾患、喘息、急性及び慢性肺水腫、吸入した有機塵、及び、真菌、放線菌、または、これら以外に由来する粒子によるアレルギー性の肺胞炎及び肺炎、急性化学的気管支炎、急性及び慢性化学的肺気腫、神経性肺気腫、放射線に起因する急性及び慢性肺症状、急性及び慢性間質性肺障害、成人、または、新生児を含む小児における急性肺傷害／急性呼吸窮迫症候群（ＡＬＩ／ＡＲＤＳ）、または、ＡＬＩ／ＡＲＤＳに続発する肺炎及び敗血症、誤嚥に続発する誤嚥性肺炎及びＡＬＩ／ＡＲＤＳ、煙ガス吸入に続発するＡＬＩ／ＡＲＤＳ、輸血関連急性肺傷害（ＴＲＡＬＩ）、術後、外傷、または、火傷の後のＡＬＩ／ＡＲＤＳまたは急性肺機能不全、人工呼吸器誘発肺傷害（ＶＩＬＩ）、肺線維症、及び、高山病などの治療及び／または予防に適している。
【０１４３】
さらに、本発明の化合物は、妊娠（妊娠誘発性）浮腫、及び、高血圧症を伴う、及び、伴わない尿タンパク（子癇前症及び子癇）の治療及び／または予防に適している。
【０１４４】
さらに、本発明の化合物は、慢性腎疾患、腎不全、糖尿病性腎症、高血圧性慢性腎疾患、糸球体腎炎、急速進行性慢性腎症候群、非特異的腎炎症候群、ネフローゼ症候群、遺伝性腎症、急性及び慢性尿細管間質腎炎、急性腎障害、急性腎不全、外傷及び術後腎障害、心筋梗塞症候群、ならびに、腎臓移植の保護及び機能改善の治療及び／または予防に適している。
【０１４５】
さらに、当該化合物は、真性糖尿病、及び、その続発性症状、例えば、糖尿病性大血管障害、及び、糖尿病性微小血管障害、糖尿病性腎症、及び、神経障害の治療及び／または予防に適している。
【０１４６】
本発明の化合物は、偏頭痛、群発性頭痛、癲癇、脳卒中、血管痙攣、ウイルス性及び細菌性髄膜炎及び脳炎（例えば、帯状疱疹脳炎）、外傷性及び中毒性脳損傷、脳及び脊髄の原発性及び続発性悪性新生物、神経根炎、多発性神経根炎、ギラン・バレー症候群[急性または感染後の多発性神経炎、ミラーフィッシャー症候群]、パーキンソン病、急性及び慢性多発性神経障害、疼痛、脳浮腫、アルツハイマー病、神経系の変性疾患、及び、多発性硬化症をはじめとする中枢神経系の脱髄疾患などの中枢神経系及び末梢神経系の障害の治療及び／または予防に用いることができる。
【０１４７】
さらに、本発明の化合物は、食道静脈瘤及び腹水などの門脈圧亢進及び肝線維症[肝硬変]及びその後遺症の治療及び／または予防のため、悪性腫瘍または炎症に続発する胸水の治療及び／または予防のため、及び、原発性及び続発性リンパ浮腫、及び、静脈瘤に続発する浮腫の治療及び／または予防に適している。
【０１４８】
さらに、本発明の化合物は、炎症性腸疾患、クローン病、潰瘍性大腸炎、及び、腸の中道障害及び血管障害などの胃腸管の炎症性障害の治療及び／または予防に適している。さらに、本発明の化合物は、敗血症、出血性ショック、または、多臓器不全（ＭＯＦ）、外傷性ショック、及び、血管神経性浮腫［巨大蕁麻疹、クインケ浮腫］の治療及び／または予防に適している。
【０１４９】
さらに、本発明の化合物は、浮腫性眼疾患、または、障害を受けた血管機能に関連する眼疾患の治療及び／または予防に適しており、それらの疾患として、加齢性黄斑変性症（ＡＭＤ）、糖尿病性網膜症、特に、糖尿病性黄斑浮腫（ＤＭＥ）、網膜下浮腫、及び、網膜内浮腫などがあるが、これらに限定されない。本発明の背景において、加齢性黄斑変性（ＡＭＤ）の用語は、ＡＭＤの湿潤（または、滲出性、新生血管）及び乾性（または、非滲出性、非新生血管）症状の両方を含む。さらに、本発明の化合物は、高眼圧症（緑内障）の治療に適している。
【０１５０】
さらに、本発明の化合物は、手術に関連した虚血の状態、及び、外科的処置後に生ずる症状、特に、心肺装置を用いた心臓の処置、頸動脈、動脈の処置、または、器具で設けた頭蓋骨の開口部または貫通部の治療及び／または予防に使用することができる。さらに、当該化合物は、創傷の治癒を促し、かつ、再回復期間を短縮する目的で、外科的処置の際の一般的な治療及び／または予防に適している。さらに、当該化合物は、創傷の治癒を促すことに適している。
【０１５１】
さらに、本発明の化合物は、骨密度、及び、骨構造の障害の治療及び／または予防に適しており、それらの障害として、骨粗鬆症、骨軟化症、及び、副甲状腺機能亢進関連骨疾患などがあるが、これらに限定されない。
【０１５２】
さらに、本発明は、障害、特に、上述した障害の治療及び／または予防のための医薬を調製するための、本発明の化合物の使用を提供する。
【０１５３】
さらに、本発明は、本発明の化合物と１つ以上のさらなる有効成分とを含む医薬、特に、上述した障害の治療及び／または予防のための医薬を提供する。例示的かつ好ましい活性成分の組み合わせは、ＡＣＥ阻害剤、アンギオテンシン受容体アンタゴニスト、β−２受容体アゴニスト、ホスホジエステラーゼ阻害剤、グルココルチコイド受容体アゴニスト、利尿薬、または、アンジオテンシン変換酵素−２、または、アセチルサリチル酸（アスピリン）である。
【０１５４】
本発明の好ましい実施形態において、本発明の化合物は、例として、かつ、好ましくは、エナラプリル、キナプリル、カプトプリル、リシノプリル、ラミプリル、デラプリル、フォシノプリル、ペリンドプリル、シラザプリル、イミダプリル、ベナゼプリル、モエキシプリル、スピラプリリル、または、トランドプリルなどのＡＣＥ阻害剤と組み合わせて投与される。本発明の好ましい実施形態において、本発明の化合物は、例として、かつ、好ましくは、ロサルタン、カンデサルタン、バルサルタン、テルミサルタン、または、エンブサルタンなどのアンジオテンシン受容体アンタゴニストと組み合わせて投与される。
【０１５５】
本発明の実施形態において、本発明の化合物は、例として、かつ、好ましくは、サルブタモール、ピルブテロール、サルメテロール、テルブタリン、フェノテロール、ツロブテロール、クレンブテロール、レプロテロール、または、フォルモテロールなどのβ−２受容体アゴニストと組み合わせて投与される。
【０１５６】
本発明の実施形態において、本発明の化合物は、例として、かつ、好ましくは、ミルリノン、アムリノン、ピモベンダン、シロスタゾール、シルデナフィル、バルデナフィル、または、タダラフィルなどのホスホジエステラーゼ（ＰＤＥ）阻害剤と組み合わせて投与される。
【０１５７】
本発明の実施形態において、本発明の化合物は、例として、かつ、好ましくは、コルチゾール、コルチゾン、ヒドロコルチゾン、プレドニゾン、メチル−プレドニゾロン、プレドニリデン、デフラザコート、フルコルトロン、トリアムシノロン、デキサメタゾン、または、ベタメタゾンなどのグルココルチコイド受容体アゴニストと組み合わせて投与される。
【０１５８】
本発明の実施形態において、本発明の化合物は、例として、かつ、好ましくは、フロセミド、トラセミド、及び、ヒドロクロロチアジドなどの利尿剤と組み合わせて投与される。
【０１５９】
本発明の実施形態において、本発明の化合物は、ネシリチド（ヒトＢ型ナトリウム利尿ペプチド（ｈＢＮＰ））、及び、カルペリチド（α−ヒト心房性ナトリウム利尿ポリペプチド（ｈＡＮＰ））などのナトリウム利尿ペプチドと組み合わせて投与される。
【０１６０】
本発明の実施形態において、本発明の化合物は、急性心不全のために開発中であるＡＮＰの誘導体であるウロジラチンと組み合わせて投与される。
【０１６１】
本発明の実施形態において、本発明の化合物は、ネプリライシン（エンケファリナーゼ、中性エンドペプチダーゼ、ＡＤＭの代謝にも関与するＮＥＰ）阻害剤であるＬＣＺ６９６（Ｅｎｔｒｅｓｔｏ）と組み合わせて投与される。
【０１６２】
本発明の実施形態において、本発明の化合物は、インビトロまたはインビボで、ヒトまたは動物に由来する内皮細胞またはリンパ管内皮細胞の増殖を刺激するために使用される。内皮機能不全は、アテローム性動脈硬化症、心筋症、脳卒中、耐性高血圧症、子癇前症、肺動脈性高血圧症、及び、糖尿病性潰瘍などの生命を脅かす様々な疾患における微小血管及び大血管合併症の主要な原因である。内皮機能不全は、これらの疾患の自然経過に沿って、初期に事象を表す。血管内皮の機能は、血管緊張を調節する物質の合成、血小板凝集の阻害、及び、血管細胞の増殖の制御を含む。内皮細胞の損傷は、内皮由来の収縮因子の増加、一酸化窒素産生の低下、及び、内皮バリアの破壊をもたらし、高血圧症、アテローム性動脈硬化症、血栓症、炎症、血管抵抗性、血管漏出、浮腫、及び、多くの器官において機能障害をもたらす。このため、内皮機能不全を改善する方法の発見に、多大な関心が寄せられている。過去数十年間に、アンギオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤、アンジオテンシン受容体アンタゴニスト（ＡＲＢ）、ミネラロコルチコイド受容体アンタゴニスト、β−遮断薬、利尿薬、及び、カルシウムチャネルアンタゴニストなどの降圧剤や血管保護剤の幾つかのクラスの開発は、酸化的ストレス、エンドセリン活性、プラスミノーゲンアクチベーター活性、または、血小板活性化を低下させることによって、内皮機能不全関連疾患の一部の患者の転帰を劇的に改善した。加えて、スタチン、及び、抗糖尿病薬のメトホルミン、及び、アロプリノールなどのキサンチンオキシダーゼの阻害剤は、患者の内皮機能を改善することが示されている。しかしながら、多くの内皮機能不全関連疾患の進行は、主として、シグナル伝達プロセスを遮断して、内皮機能を積極的に刺激しないように開発された既存の薬物では防止することはできない。本発明は、種々の疾患における内皮機能障害を予防または治療して、内皮細胞の効率的な増殖を促すことができ、それ自体で、内皮細胞機能障害の治療に適用することができる。
【０１６３】
製剤
少なくとも１つの本発明の化合物を、通常は、不活性で毒性がない医薬として適切な賦形剤の１つ以上と共に含む製剤及び医薬品、ならびに、上述した目的のためのその使用に関する。この目的のために、それらは、例えば、非経口、肺、鼻、舌下、舌、頬、経皮、経皮、結膜、視神経の経路、または、インプラントやステントなどの適切な方法で投与することができる。活性薬剤は、本明細書に開示した単一のペプチドとすることができ、あるいは、１つ以上のペプチド、例えば、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、または、それ以上の個数が異なるペプチド、例えば、表１のペプチド配列の構造を含むか、それらからなるか、または、それらから本質的になるペプチド、あるいは、配列番号２８〜５１、６９〜７０、９２、９４、１０１、１０３、及び、１１０のアミノ酸配列に対して、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または、それ以上の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか、それらからなるか、または、それらから本質的になるペプチドのカクテルとして処方し得るものであり、当該ペプチドは、アゴニストまたはスーパーアゴニスト活性を保持している。当該ペプチドは、医薬として許容される塩として提供され得る。
【０１６４】
幾つかの実施形態は、活性成分として、本明細書に開示した本発明の修飾ペプチド（Ｄ−アミノ酸、または、ペプチド模倣体）の少なくとも１つを、医薬担体または希釈剤と共に含む医薬組成物を有する。これらの医薬組成物は、当業者に周知のあらゆる方法で投与することができ、そして、経口、肺、非経口（筋内、腹腔内、静脈内、または、皮下注射）、吸入（微粉末製剤またはエアロゾルを介したもの）、経皮、鼻腔内、または、舌下投与の経路で投与することができるが、これらに限定されず、また、各投与経路に適切な剤形に製剤することができる。そして、当該化合物は、所定の速度で、延長及び／または時限パルス投与のために、持続放出投与または制御放出投与の形態で投与することができ、蓄積注射、浸透圧ポンプ、経皮（電気輸送を含む）パッチなどの形態があるが、これらに限定されない。
【０１６５】
本実施形態の医薬組成物は、例えば、従来の混合、溶解、造粒、糖衣錠製造、粉末化、乳化、カプセル化、封入、または、錠剤化プロセスなど、それ自体公知の方法で製造し得る。したがって、本実施形態に従って使用するための医薬組成物は、薬学的に使用することができる調製物に対して活性化合物の取り込みを促す賦形剤及び補助剤を含む生理学的に許容される担体の１つ以上を用いて、従来の方法で製剤し得る。あらゆる周知の技術、担体、及び、賦形剤のいずれも適切であり、また、当該技術分野で理解されているように使用し得る。
【０１６６】
注射剤は、液体溶液または懸濁液のいずれか、注射前の液体での溶液または懸濁液に適した固体形態、または、乳濁液として、従来の形態で調製することができる。適切な賦形剤は、例えば、水、生理食塩水、デキストロース、マンニトール、ラクトース、レシチン、アルブミン、グルタミン酸ナトリウム、システイン塩酸塩などである。加えて、所望であれば、注射用医薬組成物は、湿潤剤、ｐＨ緩衝剤などの少量の無毒性補助物質を含み得る。生理学的に適合する緩衝液として、ハンクス溶液、リンガー溶液、または、生理食塩水緩衝液があるが、これらに限定されない。所望であれば、吸収増強製剤（例えば、リポソーム）を利用し得る。
【０１６７】
経粘膜投与のために、浸透すべきバリアに対する適切な浸透剤を、製剤に使用し得る。
【０１６８】
非経口投与、例えば、ボーラス注射または連続注入のための医薬製剤は、水溶性形態の活性化合物の水溶液を含む。加えて、活性化合物の懸濁液は、適切な油性注射懸濁液として調製し得る。適切な親油性溶媒または賦形剤は、ゴマ油などの脂肪油、または、大豆油、グレープフルーツ油、または、アーモンド油などの他の有機油、または、オレイン酸エチル、または、トリグリセリドなどの合成脂肪酸エステル、または、リポソームを含む。水性注射懸濁液は、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ソルビトール、または、デキストランなどの懸濁液の粘度を増加させる物質を含み得る。また、任意に、懸濁液は、化合物の溶解度を高めて、高濃度の溶液の調製を可能にする適切な安定剤または薬剤を含み得る。注射用製剤は、単位剤形、例えば、アンプルまたは複数用量容器に、防腐剤を添えて提供し得る。当該組成物は、油性または水性の賦形剤を用いた懸濁液、溶液、または、エマルジョンなどの形態をとり得るものであり、懸濁剤、安定化剤、及び／または、分散剤などの処方剤を含み得る。あるいは、当該有効成分は、使用前に適切な賦形剤、例えば、発熱物質を含まない滅菌水で構成する粉末形態とし得る。
【０１６９】
吸入による投与について、本実施形態の使用のための本発明の化合物は、適切な噴射剤、例えば、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素、または、他の適切なガスなどの使用により、加圧パックまたはネブライザーからのエアロゾルスプレーの供給の形態で、都合よく送達される。加圧エアロゾルの場合、用量単位は、所定量を送達するバルブを用いることで決定され得る。例えば、吸入具または吸入器で用いるためのゼラチン製のカプセル及びカートリッジは、ラクトースまたはデンプンなどの適切な粉末基剤と当該化合物との粉末混合物を含むように製剤化することができる。一例として、吸入による投与のための調製物は、Ｑｕａｙ  ｅｔ  ａｌ．，の米国特許第７，８１２，１２０  Ｂ２号での教示に従って調製し得る。
【０１７０】
さらに、眼内、鼻腔内、及び、耳介内への送達などの使用のための製薬業界において周知の種々の医薬組成物を、本明細書に開示する。これらの使用のための適切な浸透剤は、当該技術分野で一般的に公知である。眼内送達のための医薬組成物として、点眼剤のような水溶性形態の活性化合物の水性点眼剤、ジェランガム、眼科用軟膏、微小粒子などの眼科用懸濁液、液体担体媒体に懸濁された薬物含有小ポリマー粒子、脂溶性製剤、及び、眼用インサートなどがある。上記の参照文献全ては、それらの全体が本明細書に参考として組み込まれる。このような適切な医薬製剤は、最も頻繁に、かつ、好ましくは、安定性及び快適性のために、滅菌、等張化、及び、緩衝化して処方される。また、鼻腔内送達のための医薬組成物は、多くが、正常な毛様体作用の維持を確実にするために鼻分泌物に注意を払っており、しばしば、その点を勘案して調製された滴剤及びスプレーを含み得るものであって、そのような組成物として、例えば、Ａｚｒｉａ  ｅｔ  ａｌ．，の米国特許第５，７３３，５６９号に開示されたものがあるが、これらに限定されない。耳介内送達のための医薬製剤として、耳の局所適用のための懸濁液及び軟膏がある。このような耳用製剤のための一般的な溶媒として、グリセリン及び水がある。
【０１７１】
先述した製剤に加えて、本発明の化合物は、デポー製剤としても製剤化し得る。そのような長時間持続性製剤は、移植（例えば、皮下または筋肉内）または筋肉内注射によって投与し得る。したがって、例えば、当該化合物は、適切なポリマーまたは疎水性材料（例えば、許容される油でのエマルジョンとして）、または、イオン交換樹脂、または、難溶性誘導体として、例えば、難溶性塩として処方され得る。
【０１７２】
投与方法の例としては、とりわけ、（ａ）眼内、鼻腔内、または、耳内などの非経口経路による投与が挙げられ、これらの投与として、水性懸濁液、油性調製物などとしての投与、あるいは、滴下、噴霧、膏薬、軟膏などとしての投与があり、（ｂ）注入ポンプ送達を含む、注射を用いた投与、皮下、腹腔内、静脈内、筋肉内、皮内、眼窩内などへの投与、（ｃ）局所的投与、例えば、デポー移植による頭蓋内への直接注射、ならびに、（ｄ）本実施形態のペプチドを生体組織に接触させるために、当業者が適切と判断する局所的投与があるが、これらに限定されない。
【０１７３】
本実施形態の医薬組成物の的確な製剤、投与経路、及び、投与量は、個々の医師が、患者の状態を考慮して選択することができる。一般的には、患者に投与される組成物の用量範囲は、患者の体重あたり、約０．０００００１〜１００ｍｇ／ｋｇとすることができる。この投与量は、患者の要望に応じて、１日以上の治療単位において、１回限り、または、一連の２回以上の量とし得る。化合物のヒト投薬量が、少なくとも幾つかの病態で確立されている場合には、本実施形態は、確立されたヒト用量と同じ投薬量、または、確立されたヒト用量の約０．１％〜５００％、より好ましくは、約２５％〜２５０％投薬量を使用する。新規に発見された医薬化合物など、ヒト用量が確立されていない場合、適切なヒト用量は、動物を用いた毒性試験及び有効性試験で認められたＥＤ５０またはＩＤ５０値、あるいは、インビトロまたはインビボ研究から得た他の適切な数値から推定することができる。
【０１７４】
正確な投与量は、薬物ごとに決定されるが、ほとんどの場合、投与量について幾つかの一般化が可能である。成人のヒト患者の１日投与計画は、例えば、０．００１ｍｇ〜１００ｍｇの例示的範囲、または、０．００５ｍｇ〜５ｍｇの例示的範囲で、各活性成分の静脈内、皮下、または、筋肉内の用量とし得る。医薬として許容される塩の投与の場合、投与量は、遊離塩基として計算することができる。幾つかの実施形態において、当該組成物は、１日当たり０．１〜４回、または、例えば、１回の急性用量として、例えば、高血圧症を改善するために投与される。あるいは、本明細書に記載の組成物は、好ましくは、各有効成分について、１０００ｍｇ／日までの用量で、連続静脈内注入によって投与し得る。当業者であれば理解するように、特定の状況下、とりわけ、侵攻性疾患や侵攻性感染症を効果的かつ積極的に治療するためには、本明細書に開示したペプチドを、上述した例示的な投与量範囲を超えるか、または、それを遙かに超える量で、投与することが必要な場合もあり得る。幾つかの実施形態において、ペプチドは、例えば、１週間以上、または、数ヶ月または数年間にわたる連続治療期間にわたって投与される。
【０１７５】
局所投与または選択的摂取の場合、薬物の有効局所濃度は、血漿濃度に関連し得ない。投与した本発明の組成物の量は、治療を受ける対象、対象の体重、苦痛の重篤度、及び、投与方法に依存し得る。
【０１７６】
本明細書に開示した化合物は、公知の方法を用いて、有効性及び毒性について評価することができる。そのような研究の結果は、哺乳動物、より具体的には、ヒトなどの動物における有効性を予測する。あるいは、マウス、ラット、ウサギ、または、サルなどの動物モデルでの特定の化合物の有効性は、公知の方法を用いて決定することができる。
【０１７７】
当該化合物を含む組成物は、予防的、及び／または、治療的処置のために投与することができる。治療用途において、上述した公知の疾患に罹患している患者に対して、当該疾患の症状、及び、その合併症を、治癒あるいは少なくとも部分的に進行を阻むために十分な量で、組成物は投与される。このことを実現するために十分な量が、「治療有効量」と定義される。
【０１７８】
また、本明細書に記載の組成物は、例えば、Ｔｉｃｅ及びＢｉｂｉの方法（Ｔｒｅａｔｉｓｅ  ｏｎ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ，ｅｄ．Ａ．Ｋｙｄｏｎｉｅｕｓ，Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｎ．Ｙ．１９９２，ｐｐ．３１５−３３９に記載）によってマイクロカプセル化することができる。
【０１７９】
本明細書に記載のアゴニストペプチド及びペプチド模倣体を、例えば、約０．０１μｇ〜約５０ｍｇ／体重ｋｇ／日の例示的用量範囲で投与する場合、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体媒介性病態の治療に有効である。使用される特定の用量は、治療される特定の病態、投与経路、ならびに、症状の重症度、患者の年齢及び全身状態などの要因に応じて主治医の判断によって調節される。そのような用量は、当業者が容易に決定し得る。
【０１８０】
液体溶液、懸濁液、注射前に液体で溶液または懸濁液とするために適した固体形態、乳液、または、医薬として許容される非経口賦形剤を有する凍結乾燥粉末などのいずれかの従来の形態で、注射剤を調製することができる。かような賦形剤の例として、水、生理食塩水、リンガー液、デキストロース溶液、及び、５％ヒト血清アルブミンがある。リポソーム、及び、固定油などの非水性賦形剤も使用し得る。賦形剤または凍結乾燥粉末は、等張性を維持する添加物（例えば、塩化ナトリウム、マンニトール）、及び、化学的安定性を維持する添加物（例えば、緩衝剤、及び、防腐剤）を含有し得る。製剤は、一般的に用いられている技術によって滅菌される。例えば、注射による投与に適した非経口組成物は、１．５重量％の活性成分を、０．９％塩化ナトリウム溶液に溶解して調製される。
【０１８１】
当該化合物は、徐放性製剤、例えば、徐放性ポリマーを含む組成物に投与することができる。放出制御製剤などの急速放出から化合物を保護する担体である、インプラントやマイクロカプセル化送達システムなどを用いて、活性化合物を調製することができる。生分解性の生体適合性ポリマーである、エチレン酢酸ビニル、ポリ無水物、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオルトエステル、ポリ乳酸（ＰＬＡ）、ポリ乳酸、ポリグリコール酸コポリマー（ＰＬＧ）、または、ポリ（乳酸−コ−グリコール酸）（ＰＬＧＡ）などを使用することができる。一般的に、かような製剤の調製のための多くの方法は、当業者に公知である。
【０１８２】
適切な賦形剤として、例えば、水、生理食塩水、デキストロース、マンニトール、ラクトース、レシチン、アルブミン、グルタミン酸ナトリウム、システイン塩酸塩などがある。加えて、所望であれば、注射用医薬組成物は、湿潤剤、ｐＨ緩衝剤などの少量の無毒性補助物質を含有し得る。所望であれば、吸収増強剤（例えば、リポソーム）を利用し得る。当該組成物は、油性または水性賦形剤での懸濁液、溶液、または、エマルジョンなどの形態をとり、かつ、懸濁剤、安定化剤、及び／または、分散剤のような処方剤を含み得る。水性注射懸濁液は、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ソルビトール、または、デキストランなどの懸濁液の粘度を増加させる物質を含み得る。
【０１８３】
経粘膜投与については、浸透を受けるバリアに対して適切な浸透剤を、製剤に使用し得る。適切な親油性溶媒または賦形剤は、ゴマ油などの脂肪油、または、大豆油、グレープフルーツ油、または、アーモンド油などの他の有機油、または、オレイン酸エチル、または、トリグリセリドなどの合成脂肪酸エステル、または、リポソームを含む。
【０１８４】
吸入による投与については、本実施形態の使用のための本発明の化合物は、適切な噴射剤、例えば、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素、または、他の適切なガスなどの使用により、加圧パックまたはネブライザーからのエアロゾルスプレーの供給の形態で、都合よく送達される。加圧エアロゾルの場合、用量単位は、所定量を送達するバルブを用いることで決定され得る。一例として、吸入による投与のための調製物は、２０１０年１０月１２日に発行されたＱｕａｙ  ｅｔ  ａｌ．，の米国特許第７，８１２，１２０  Ｂ２号での教示に従って調製し得る。
【０１８５】
また、本明細書に記載の組成物は、例えば、Ｔｉｃｅ及びＢｉｂｉの方法（Ｔｒｅａｔｉｓｅ  ｏｎ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ，ｅｄ．Ａ．Ｋｙｄｏｎｉｅｕｓ，Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｎ．Ｙ．１９９２，ｐｐ．３１５−３３９に記載）によってマイクロカプセル化することができる。
【０１８６】
さらに、眼内、鼻腔内、及び、耳介内への送達などの使用のための製薬業界において周知の種々の医薬組成物を、本明細書に開示する。眼内送達のための医薬組成物として、点眼剤のような水溶性形態の活性化合物の水性点眼剤、ジェランガム（Ｓｈｅｄｄｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００１、Ｃｌｉｎ．  Ｔｈｅｒ．，２３（３）：４４０−５０）、または、ヒドロゲル（Ｍａｙｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９９６，Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｉｃａ，２１０（２）：１０１−３）、眼科用軟膏、微小粒子などの眼科用懸濁液、液体担体媒体に懸濁された薬物含有小ポリマー粒子（Ｊｏｓｈｉ，Ａ．，１９９４．Ｏｃｕｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ，１０（１）：２９−４５）、脂溶性製剤（Ａｉｍ  ｅｔ  ａｌ．，１９８９  Ｐｒｏｇ．  Ｃｌｉｎ．  Ｂｉｏｌ．  Ｒｅｓ．，３１２：４４７−５８）、及び、マイクロスフェア（Ｍｏｒｄｅｎｔｉ，１９９９，Ｔｏｘｉｃｏｌ．  Ｓｃｉ．，５２（１）：１０１−６）、及び、眼用インサートなどがある。
【０１８７】
また、鼻腔内送達のための医薬組成物は、多くが、正常な毛様体作用の維持を確実にするために鼻分泌物に注意を払っており、しばしば、その点を勘案して調製された滴剤及びスプレーを含み得るものであって、そのような組成物として、例えば、１９９８年３月３１日に発行されたＡｚｒｉａ  ｅｔ  ａｌ．，の米国特許第５，７３３，５６９号に開示されたものがあるが、これらに限定されない。Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１８ｔｈ  Ｅｄ．，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，  Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ（１９９０）に開示されているように、そして、多くの場合は、また、好ましくは、抗菌防腐剤、及び、適切な薬物安定剤を含む。耳介内送達のための医薬製剤として、耳の局所適用のための懸濁液及び軟膏がある。このような耳用製剤のための一般的な溶媒として、グリセリン及び水がある。
【０１８８】
先述した製剤に加えて、本発明の化合物は、デポー製剤としても製剤化し得る。そのような長時間持続性製剤は、移植（例えば、皮下または筋肉内）または筋肉内注射によって投与し得る。したがって、例えば、当該化合物は、適切なポリマーまたは疎水性材料（例えば、許容される油でのエマルジョンとして）、または、イオン交換樹脂、または、難溶性誘導体として、例えば、難溶性塩として処方され得る。
【０１８９】
投与方法の例としては、とりわけ、（ａ）注入ポンプ送達を含む、注射を用いた投与、皮下、腹腔内、静脈内、筋肉内、皮内、眼窩内などへの投与、（ｂ）局所的投与、例えば、デポー移植による頭蓋内への直接注射、ならびに、（ｃ）本実施形態のペプチドを生体組織に接触させるために、当業者が適切と判断する局所的投与があるが、これらに限定されない。
【０１９０】
一般的には、患者に投与される組成物の用量範囲は、患者の体重あたり、約０．０００００１〜１００ｍｇ／ｋｇであり得る。この投与量は、患者の要望に応じて、１日以上の治療単位において、１回限り、または、一連の２回以上の量とし得る。投薬量及び間隔は、調節効果、または、最小有効濃度（ＭＥＣ）を維持するために十分な活性部分の血漿レベルを提供するように個別に調整し得る。また、投与間隔は、ＭＥＣ値を用いて決定することができる。組成物は、時間の１０〜９０％がＭＥＣを超える血漿レベルを維持する投与計画を用いて投与されるべきである。
【０１９１】
本明細書を通じて、特定の化合物のあらゆる記載は、当該化合物、及び、あらゆる（他の）医薬として許容されるその塩を含むものと理解されるべきである。
【０１９２】
幾つかの実施形態は、表１に列挙した以下のペプチド配列から選択される構造を有するＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体スーパーアゴニストまたはスーパーアンタゴニストを提供する。
【０１９３】
表１．合成ＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体アゴニスト及びアンタゴニスト配列のリスト
Ｂ０−Ｂ１−Ｂ２−Ｃ−Ｂ４−Ｂ５−Ｇ−Ｂ７−Ｃ−Ｂ９−Ｂ１０−Ｂ１１−Ｂ１２−Ｂ１３−
Ｂ１４−Ｂ１５−Ｂ１６−Ｂ１７−Ｂ１８−Ｂ１９−Ｂ２０−Ｂ２１        （配列番号１）
ｍｉｎｉＰＥＧ−Ｋ（ＰＡＬ）ＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴ−
（配列番号２）
ｍｉｎｉＰＥＧ−Ｋ（ＰＡＬ）ＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＬＷＱＬＭ−
（配列番号３）
Ｐａｌ−ＫＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴ−           （配列番号４）
Ｐａｌ−ＫＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＬＷＱＬＭ−                    （配列番号５）
Ａｃｅ−Ｋ（ＰＡＬ）ＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴ− （配列番号６）
Ａｃｅ−Ｋ（ＰＡＬ）ＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＬＷＱＬＭ−   （配列番号７）
Ｐａｌ−Ｋ（Ｐａｌ）ＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴ− （配列番号８）
Ｐａｌ−ＫＴＫＫＴＬＲＴＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴ−
（配列番号９）
Ａｃｅ−ＴＫ（Ｐａｌ）ＫＴＬＲＴＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴ−
（配列番号１０）
Ａｃｅ−ＴＫ（Ｐａｌ）ＫＴＬＲＴＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴ−
（配列番号１１）
ｍｉｎｉＰＥＧ−ＴＫ（Ｐａｌ）ＫＴＬＲＴＧＣＲＰＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴ−                                                         （配列番号１２）
ｍｉｎｉＰＥＧ−Ｋ（ＰＡＬ）ＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴ−
（配列番号１３）
Ｐａｌ−ＫＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴ−                   （配列番号１４）
Ｐａｌ−ＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴ−                   （配列番号１５）
Ｐａｌ−ＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴ−              （配列番号１６）
Ｃ１−Ｃ２−Ｃ３−Ｃ４−Ｃ５−Ｃ６−Ｃ７−Ｃ８−Ｃ９−Ｃ１０−Ｃ１１−Ｃ１２
（配列番号１７）
ＤＫＤＫＤＮＶＡＰＲＳＫ−                                    （配列番号１８）
ＤＫＤＫＤＮＳＡＰＶＤＰ−                                    （配列番号１９）
ＰＡＧＲＱＤＳＡＰＶＤＰ−                                    （配列番号２０）
ＤＫＤＫＤＮＶＡＰＶＤＰ−                                    （配列番号２１）
ＤＫＤＫＱＤＳＡＰＶＤＰ−                                    （配列番号２２）
ＤＫＧＲＱＤＳＡＰＶＤＰ−                                    （配列番号２３）
ＤＫＤＫＤＳＡＰＶＤＰ−                                      （配列番号２４）
ＤＫＤＫＳＡＰＶＤＰ−                                        （配列番号２５）
ＤＫＤＳＡＰＶＤＰ−                                          （配列番号２６）
Ｄ１−Ｄ２−Ｄ３−Ｄ４−Ｄ５−Ｄ６−ＮＨ２                             （配列番号２７）
汎特異的スーパーアゴニストペプチド配列
ｍｉｎｉＰＥＧ−Ｋ（ＰＡＬ）ＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２                                  （配列番号２８）
ｍｉｎｉＰＥＧ−Ｋ（ＰＡＬ）ＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＰＡＧＲＱＤＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２                                  （配列番号２９）
Ｐａｌ−ＫＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２                                                    （配列番号３０）
Ｐａｌ−ＫＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＰＡＧＲＱＤＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２                                                    （配列番号３１）
Ａｃｅ−Ｋ（ＰＡＬ）ＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２                                   （配列番号３２）
Ａｃｅ−Ｋ（ＰＡＬ）ＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＰＡＧＲＱＤＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２                                   （配列番号３３）
Ｐａｌ−ＫＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２                                                      （配列番号３４）
Ｐａｌ−ＫＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＱＤＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２                                                      （配列番号３５）
Ｐａｌ−ＫＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＧＲＱＤＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２                                                    （配列番号３６）
Ｐａｌ−Ｋ（Ｐａｌ）ＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２                                   （配列番号３７）
Ｐａｌ−ＫＴＫＫＴＬＲＴＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２                                      （配列番号３８）
Ａｃｅ−ＴＫ（Ｐａｌ）ＫＴＬＲＴＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２                                （配列番号３９）
Ｐａｌ−ＫＴＫＫＴＬＲＴＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２                                        （配列番号４０）
Ａｃｅ−ＴＫ（Ｐａｌ）ＫＴＬＲＴＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２                                （配列番号４１）
ｍｉｎｉＰＥＧ−ＴＫ（Ｐａｌ）ＫＴＬＲＴＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２                        （配列番号４２）
ｍｉｎｉＰＥＧ−Ｋ（Ｐａｌ）ＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２                               （配列番号４３）
Ｐａｌ−ＫＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２                                                      （配列番号４４）
Ｐａｌ−ＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２                                                      （配列番号４５）
ｍｉｎｉＰＥＧ−Ｋ（ＰＡＬ）ＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２                             （配列番号４６）
ｍｉｎｉＰＥＧ−Ｋ（ＰＡＬ）ＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２                                      （配列番号４７）
ｍｉｎｉＰＥＧ−Ｋ（ＰＡＬ）ＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２                                        （配列番号４８）
ｍｉｎｉＰＥＧ−Ｋ（ＰＡＬ）ＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＰＡＧＲＱＤＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２                                  （配列番号４９）
ｍｉｎｉＰＥＧ−Ｋ（ＰＡＬ）ＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２                                  （配列番号５０）
ｍｉｎｉＰＥＧ−Ｋ（ＰＡＬ）ＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＱＤＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２                                  （配列番号５１）
Ｐａｌ−ＫＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２                                                     （配列番号９２）
野生型ＩＭＤ、ＡＤＭ、及び、ＣＧＲＰ
Ａｃｅ−ＶＧＣＶＬＧＴＣＱＶＱＮＬＳＨＲＬＷＱＬＭＧＰＡＧＲＱＤＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２                                             （配列番号５２）
Ａｃｅ−ＦＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡＰＲＳＫＩＳＰＱＧＹ−ＮＨ２                                                      （配列番号５３）
Ａｃｅ−ＹＲＱＳＭＮＮＦＱＧＬＲＳＦＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡＰＲＳＫＩＳＰＱＧＹ−ＮＨ２                            （配列番号５４）
ＡＣＮＴＡＴＣＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＭＶＫＳＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ−ＮＨ２                                                       （配列番号１４３）
不活性または低有効性アゴニストキメラペプチド配列
Ａｃｅ−ＶＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡＰＲＳＫＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２                                                      （配列番号５５）
Ａａｃｅ−ＶＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２                                           （配列番号５６）
Ａｃｅ−ＶＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＰＡＧＲＱＤＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２                                                    （配列番号５７）
Ａｃｅ−ＶＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＬＷＱＬＭＧＰＡＧＲＱＤＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２                                                      （配列番号５８）
Ａｃｅ−ＫＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２                                                      （配列番号５９）
Ａｃｅ−ＫＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２                                                      （配列番号６０）
ｍｉｎｉＰＥＧ−Ｋ（ＰＡＬ）ＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡＰＲＳＫＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２                             （配列番号６１）
ｍｉｎｉＰＥＧ−Ｋ（ＰＡＬ）ＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＬＷＱＬＭＧＰＡＧＲＱＤＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２                                  （配列番号６２）
Ｐａｌ−ＫＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡＰＲＳＫＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２                                                    （配列番号６３）
Ｐａｌ−ＫＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＬＷＱＬＭＧＰＡＧＲＱＤＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２                                                      （配列番号６４）
Ａｃｅ−Ｋ（ＰＡＬ）ＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡＰＲＳＫＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２                                   （配列番号６５）
Ａｃｅ−Ｋ（ＰＡＬ）ＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＬＷＱＬＭＧＰＡＧＲＱＤＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２                                   （配列番号６６）
Ｐａｌ−ＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２                                                   （配列番号６７）
ｍｉｎｉＰＥＧ−Ｋ（ＰＡＬ）ＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＧＲＱＤＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２                                    （配列番号６８）
Ａｃｅ−ＫＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２                                                     （配列番号９３）
Ｐａｌ−ＡＣＤＴＡＴＣＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡＰＲＳＫＩＳＰＱＧＹ−ＮＨ２                                                      （配列番号１０４）
Ｐａｌ−ＦＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＲＬＷＱＬＭＧＰＤＫＤＮＶＡＰＲＳＫＩＳＰＱＧＹ−ＮＨ２                                                    （配列番号１０５）
Ｐａｌ−ＡＣＤＴＡＴＣＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ−ＮＨ２                                                              （配列番号１０８）
ＣＬＲ／ＲＡＭＰ２特異的スーパーアゴニストペプチド配列
ｍｉｎｉＰＥＧ−Ｋ（ＰＡＬ）ＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡＰＲＳＫＩＳＰＱＧＹ−ＮＨ２                                  （配列番号６９）
ｍｉｎｉＰＥＧ−Ｋ（ＰＡＬ）ＴＫＫＴＬＲＴＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡＰＲＳＫＩＳＰＱＧＹ−ＮＨ２                    （配列番号７０）
ｍｉｎｉＰＥＧ−Ｋ（ＰＡＬ）ＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２                                        （配列番号９４）
ｍｉｎｉＰＥＧ−Ｋ（ＰＡＬ）ＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＶＡＰＲＳＫＩＳＰＱＧＹ−ＮＨ２                                      （配列番号１０１）
Ｐａｌ−ＫＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＶＡＰＲＳＫＩＳＰＱＧＹ−ＮＨ２                                                   （配列番号１０３）
Ｐａｌ−ＫＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２                                                            （配列番号１１０）
低有効性ＣＬＲ／ＲＡＭＰ１−またはＣＬＲ／ＲＡＭＰ２特異的ペプチド配列
Ｐａｌ−ＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡＰＲＳＫＩＳＰＱＧＹ−ＮＨ２                                                      （配列番号７１）
Ｐａｌ−ＹＱＲＳＭＮＮＦＱＧＬＲＳＦＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡＰＲＳＫＩＳＰＱＧＹ−ＮＨ２                          （配列番号７２）
Ｐａｌ−Ｋ（Ｐａｌ）ＧＣＲＦＧＴＣＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡＰＲＳＫＩＳＰＱＧＹ−ＮＨ２                                     （配列番号７３）
Ａｃｅ−Ｋ（Ｐａｌ）ＧＣＤＴＡＴＣＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ−ＮＨ２                                              （配列番号７４）
汎特異的スーパーアンタゴニストペプチド配列
Ｐａｌ−ＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２
（配列番号７７）
ｍｉｎｉＰＥＧ−Ｋ（Ｐａｌ）ＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２                                             （配列番号７８）
ＭｉｎｉＰＥＧ−Ｋ（Ｐａｌ）ＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２                                               （配列番号１１２）
Ｐａｌ−ＫＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２
（配列番号１２１）
Ｐａｌ−ＫＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２
（配列番号１２５）
野生型アンタゴニストペプチド配列
Ａｃｅ−ＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡＰＲＳＫＩＳＰＱＧＹ−ＮＨ２
（配列番号７５）
Ａｃｅ−ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＳＧＧＶＶＫＮＮＦＶＰＴＮＶＧＳＫＡＦ−ＮＨ２
（配列番号１３７）
低有効性アンタゴニストペプチド配列
Ａｃｅ−ＴＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＫＤＮＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２
（配列番号７６）
Ａｃｅ−ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡＰＲＳＫＩＳＰＱＧＹ−ＮＨ２
（配列番号１１５）
Ａｃｅ−ＴＶＱＫＬＡＨＲＬＷＱＬＭＧＰＤＫＤＮＶＡＰＲＳＫＩＳＰＱＧＹ−ＮＨ２
（配列番号１１６）
Ｐａｌ−ＶＴＨＲＬＡＧＬＬＳＲＦＴＤＫＤＫＤＮＶＡＰＲＳＫＩＳＰＱＧＹ−ＮＨ２
（配列番号１１７）
Ｐａｌ−ＴＶＱＫＬＡＨＲＬＷＱＬＭＧＰＤＫＤＮＶＡＰＲＳＫＩＳＰＱＧＹ−ＮＨ２
（配列番号１１８）
ＣＬＲ／ＲＡＭＰ１特異的スーパーアンタゴニストペプチド配列
ＭｉｎｉＰＥＧ−Ｋ（Ｐａｌ）ＶＱＫＬＡＨＱＩＹＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２
（配列番号１１４）
Ｐａｌ−ＫＶＱＮＬＳＨＲＬＷＱＬＭＧＰＡＧＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２
（配列番号１２０）
Ｐａｌ−ＫＶＱＫＬＡＨＱＩＹＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２    （配列番号１２２）
Ｐａｌ−ＫＶＱＫＬＡＨＱＩＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２    （配列番号１２３）
Ｐａｌ−ＫＶＱＫＬＡＨＱＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２      （配列番号１２４）
Ｐａｌ−ＫＶＱＫＬＳＡＰＶＤＰＳＳＰＨＳＹ−ＮＨ２                  （配列番号１３９）
ＣＬＲ／ＲＡＭＰ２特異的スーパーアンタゴニストペプチド配列
Ｐａｌ−ＫＶＱＫＬＡＨＱＩＹＱＦＴＤＫＤＶＡＰＲＳＫＩＳＰＱＧＹ−ＮＨ２
（配列番号１１９）
【０１９４】
ペプチド及びペプチド模倣体の調製
固相合成。本明細書に記載のＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体スーパーアゴニスト、アゴニスト、スーパーアンタゴニスト、及び、アンタゴニストは、例えば、標準的な固相技術を用いて、当該分野で周知の典型的な方法によって調製することができる。例えば、Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ，１９６３  Ｊ．Ａｍ．  Ｃｈｅｍ．  Ｓｏｃ．  ８５：２１４９．を参照されたい。これらの固相ペプチド合成手順は、当該技術分野において周知であり、Ｊ．  Ｍ．  Ｓｔｅｗａｒｔ  ａｎｄ  Ｊ．  Ｄ．  Ｙｏｕｎｇ，１９８４  Ｓｏｌｉｄ  Ｐｈａｓｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｅｓ  ２ｎｄ  Ｅｄ．，Ｐｉｅｒｃｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏｍｐａｎｙにおいて、さらに記載されている。
【０１９５】
合成アミノ酸。また、これらの手順は、２０種類の天然の遺伝的にコードされたアミノ酸以外のアミノ酸が、本明細書に開示した本発明のペプチドのいずれかの１つ、２つ、またはそれ以上の位置で置換されているペプチドを合成するために使用され得る。例えば、ナフチルアラニンをトリプトファンの代わりに用いて、合成を進めることができる。本実施形態のペプチドに置換することができる他の合成アミノ酸として、Ｌ−ヒドロキシプロピル、Ｌ−３，４−ジヒドロキシ−フェニルアラニル、ｄ−アミノ酸、例えば、Ｌ−ｄ−ヒドロキシリシル、及び、Ｄ−ｄ−メチルアラニル、Ｌ−α−メチルアラニル、β−アミノ酸、及び、イソキノリルがある。Ｄアミノ酸及び非天然の合成アミノ酸も、本実施形態のペプチドに組み込むことができる（例えば、Ｒｏｂｅｒｔｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９８３  Ｕｎｕｓｕａｌ  Ａｍｉｎｏ／Ａｃｉｄｓ  ｉｎ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ５：３４１−４４９を参照されたい）。
【０１９６】
幾つかの実施形態において、本明細書に開示した２０個の遺伝的にコードされたアミノ酸の天然の側鎖、または、あらゆる他の側鎖は、ペプチドに一般的に認められるα−炭素の代わりに、アミノ酸の窒素に転位することができる。
【０１９７】
幾つかの実施形態において、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体スーパーアゴニストのアミノ酸配列に対して修飾をすることができ、配列番号２８〜５１、６９〜７０、９２、９４、１０１、１０３、及び、１１０の配列については、酵素的タンパク質分解に対する感受性を低下させる。幾つかの実施形態において、この修飾は、ヒト血清アルブミンまたは免疫グロブリンタンパク質の全部または一部を含む配列のＮ末端付加を含む。幾つかの実施形態において、本発明のペプチドは、１つ以上のＤ−アミノ酸残基を含む。幾つかの実施形態において、本発明のペプチドのアミノ酸配列は修飾を受けており、配列番号２８〜５１、６９〜７０、９２、９４、１０１、１０３、及び、１１０の配列については、この修飾は、１つ以上のＬ−アミノ酸残基を、対応するＤ−アミノ酸残基で置換することを含む。
【０１９８】
幾つかの実施形態において、本発明のペプチドのアミノ酸配列は、配列番号２８〜５１、６９〜７０、９２、９４、１０１、１０３、及び、１１０の配列については、当該修飾は、置換保存的アミノ酸を有する１つ以上のアミノ酸の置換である。
【０１９９】
天然の残基は、共通する側鎖特性に基づいて、クラスに分類し得る。
疎水性：ノルロイシン（Ｎｏｒ）、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｄｅ
中性親水性：Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ
酸性：Ａｓｐ、Ｇｌｕ
塩基性：Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ
主鎖の配向に影響を及ぼす残基：Ｇｌｙ、Ｐｒｏ
芳香族：Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ
【０２００】
保存的アミノ酸置換は、あるクラスのメンバーと、同じクラスの別のメンバーとの置換に関与し得る。保存的アミノ酸置換は、生物学的系における合成よりも、一般的に化学的ペプチド合成によって組み込まれる非天然アミノ酸残基を含み得る。これらには、ペプチド模倣体、及び、他の反対形態または反転形態のアミノ酸を含む。
【０２０１】
幾つかの実施形態において、保存的置換は、イソロイシン、バリン、ロイシンノルロイシン、アラニン、または、メチオニンなどの非極性（疎水性）アミノ酸残基の１つから他のアミノ酸残基への置換、別の極性（親水性）アミノ酸残基の１つから、例えば、アルギニンとリジンとの間、グルタミンとアスパラギンとの間、スレオニンとセリンとの間の他のアミノ酸への置換、リジン、アルギニン、または、ヒスチジンなどのアミノ酸残基の１つから他のアミノ酸残基への置換、あるいは、アスパラギン酸またはグルタミン酸などの酸性残基の１つから他のアミノ酸残基への置換を含むことができる（表３）。また、語句「保存的アミノ酸置換」は、そのようなポリペプチドが必要とするアゴニスト活性を示すことであれば、非誘導残基の代わりに、化学的に誘導された残基の使用も含む。
【０２０２】
本実施形態に従って有用であり得るアミノ酸残基置換の例として、以下のものがある。
【０２０３】
【表１】
2019504119.tif 000004
【０２０４】
幾つかの実施形態において、Ａｒｇのグアニジンなど、本明細書に開示したアミノ酸の塩基性部分は、塩基性生物同位体で置き換えることができる。
【０２０５】
また、Ｈｒｕｂｙ，ｅｔ  ａｌ．１９９０  Ｂｉｏｃｈｅｍ．  Ｊ．  ２６８：２４９−２６２に記載された方法のような、本実施形態の化合物のペプチド誘導体を作製するための他の方法で、本実施形態のペプチドを容易に修飾することができる。したがって、本明細書に開示したペプチドは、同様の生物学的活性を有するペプチド模倣体を調製するための基礎としても役立つ。
【０２０６】
末端修飾
対応するＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体スーパーアゴニストと同一または同様の所望の生物学的活性を有しつつも、溶解性、安定性、ならびに、加水分解及びタンパク質分解に対する感受性に関しては参照ペプチドよりも好ましい活性を有するペプチド模倣体を構築するために様々な技術が利用可能であることを、当業者であれば認識している。例えば、Ｍｏｒｇａｎ，ｅｔ  ａｌ．１９８９  Ａｎｎ．  Ｒｅｐ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  ２４：２４３−２５２．を参照されたい。Ｎ末端アミノ基、Ｃ末端カルボキシル基で修飾されたペプチド模倣体を調製する方法、及び／または、ペプチドの１つ以上のアミド結合を非アミド結合に変化させる方法を、以下に記載する。１つのペプチド模倣構造において、２つ以上のかような修飾がカップリング（例えば、Ｃ末端カルボキシル基の修飾と、ペプチドでの２つのアミノ酸の間への−ＣＨ２−カルバメート結合の組み込み）がされ得ることが理解される。
【０２０７】
Ｎ末端修飾
ペプチドは、一般的には遊離酸として合成されるが、上述したように、アミドまたはエステルとして容易に調製することができる。ペプチド化合物のアミノ末端、及び／または、カルボキシ末端を修飾して、他の有用な化合物を生成することもできる。アミノ末端修飾として、メチル化（すなわち、−ＮＨＣＨ３または−ＮＨ（ＣＨ３）２）、アセチル化、ベンジルオキシカルボニル基の付加、または、ＲＣＯＯ−、式中、Ｒは、ナフチル、アクリジニル、ステロイジル、及び、類似の基からなる群から選択される、で定義されるカルボキシレート官能基を含むあらゆるブロッキング基を用いたアミノ末端のブロックがある。
【０２０８】
アミノ末端の修飾は、上述した通りであり、また、アルキル化、アセチル化、カルボベンゾイル基の付加、スクシンイミド基の形成などがある。例えば、Ｍｕｒｒａｙ，ｅｔ  ａｌ．  １９９５  Ｂｕｒｇｅｒ‘ｓ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ５ｔｈ  ｅｄ．，Ｖｏｌ．１，  Ｍａｎｆｒｅｄ  Ｅ．Ｗｏｌｆ  ｅｄ．，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．を参照されたい。
【０２０９】
また、Ｎ末端は、少なくとも１つの残基Ｎ末端を、Ｂａ断片に付加して修飾し得る。ペプチドに対するＮ末端延長の影響を評価するための技術は、例えば、Ｓｃｈｅｌｌｅｎｂｅｒｇｅｒ，ｅｔ  ａｌ．  ２００９，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ２７（１２）：１１８６−１１３２にあるように、当該技術分野において公知である。
【０２１０】
Ｃ端末修飾
カルボキシ末端修飾として、遊離酸をカルボキサミド基で置換すること、あるいは、カルボキシ末端に環状ラクタムを形成して構造的制約を導入することがある。Ｃ末端カルボキシル基を、アミド−Ｃ（Ｏ）ＮＲ３Ｒ４で置換してペプチド模倣体を調製する際に、ベンズヒドリルアミン樹脂が、ペプチド合成のための固体支持体として使用される。合成が完了すると、ペプチドを支持体から遊離させるフッ化水素処理によって、遊離ペプチドアミド（すなわち、Ｃ末端は、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２である）が直接に得られる。あるいは、ペプチド合成中でのクロロメチル化樹脂の使用は、側鎖保護ペプチドを支持体から切断するアンモニアとの反応による、遊離ペプチドアミドの生成と、アルキルアミンまたはジアルキルアミンとの反応による、側鎖保護アルキルアミドまたはジアルキルアミドの生成へと結びつく。次いで、フッ化水素で処理して遊離アミド、アルキルアミド、または、ジアルキルアミドを得るという通常の方法で側鎖保護を除去する。
【０２１１】
前述したＮ末端修飾に加えて、ペプチド模倣体を含む本明細書に記載の修飾ペプチドアゴニストは、様々な親水性ポリマーの１つ以上で修飾するか、あるいは、共有結合させることができる。ペプチド化合物が、親水性ポリマーで誘導体化されると、それらの溶解性及び循環半減期が増加し、そして、それらの免疫原性がマスクされることが認められた。幾つかの実施形態において、本明細書に開示及び記載したＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体スーパーアゴニストは、Ｚａｌｌｉｐｓｋｙ，Ｓ．１９９５  Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ  ６：１５０−１６５；Ｍｏｎｆａｒｄｉｎｉ，Ｃ，ｅｔ  ａｌ．  １９９５  Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ  ６：６２−６９．に記載されたあらゆる方法を用いて、かようなポリマーで誘導体化または結合する。
【０２１２】
主鎖修飾
当該化合物のペプチド誘導体を製造するための他の方法は、Ｈｒｕｂｙ，ｅｔ  ａｌ．  １９９０  Ｂｉｏｃｈｅｍ．  Ｊ．２６８（２）：２４９−２６２に開示されている。したがって、当該ペプチド化合物は、同様の生物学的活性を有する非ペプチド性化合物の構造モデルとしても役立つ。当業者であれば、リードペプチド化合物と同一または同様の所望の生物学的活性を有するが、溶解性、安定性、及び、加水分解及びタンパク質分解に対する感受性に関して当該リード化合物よりも好ましい活性を有する化合物を構築するために、様々な技術が利用可能であることを認識する。本明細書の一部を構成するものとしてその全内容を援用する、Ｍｏｒｇａｎ，ｅｔ  ａｌ．  １９８９  Ａｎｎ．  Ｒｅｐ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  ２４：２４３−２５２を参照されたい。
【０２１３】
ジスルフィド結合形成
当該化合物は、システインのチオール基の間に１つ以上の分子内ジスルフィド結合を有する環化された形態で存在し得る。
【０２１４】
他の実施形態は、硫黄の１つが、硫黄についてのＣＨ２基または他の同配体で置換されている、これらのジスルフィド誘導体の類似体を含む。これらの類似体は、当該技術分野で周知の方法を用いて、分子内または分子間変位を介して作製することができる。
【０２１５】
あるいは、当該ペプチドのアミノ末端は、α置換酢酸でキャップすることができ、当該α置換基は、α−ハロ酢酸、例えば、α−クロロ酢酸、α−ブロモ酢酸、または、α−ヨード酢酸などの脱離基である。本実施形態のペプチドは、システインまたはホモシステイン残基の硫黄によって、脱離基の置換を介して、環化または二量化することができる。例えば、Ａｎｄｒｅｕ，ｅｔ  ａｌ．１９９４、Ｍｅｔｈ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏ．３５（７）：９１−１６９．を参照されたい。
【０２１６】
幾つかの実施形態において、本明細書に開示及び記載した本発明のペプチド、ならびに、それらの融合タンパク質も、当該技術分野で周知の組換ＤＮＡ技術によって調製され得る。当該融合タンパク質として、ヒト血清アルブミン、免疫グロブリン、Ｆｃ、Ｆｃ誘導体、ミクログロブリン、または、他の血清タンパク質を有するものがあるが、これらに限定されない。
【０２１７】
他の実用性
本明細書に記載の化合物は、生体細胞、固定細胞、体液、組織ホモジネート、人体などにおいてＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体を選択的に検出するための試薬として使用することができる。本明細書に記載のペプチドの１つ以上に特異的に結合する抗体は、当業者に公知の方法によって作製することができ、当該抗体は、例えば、本明細書に記載のペプチドの検出及び分析に使用し得る。
【０２１８】
実験
以下の実施例は、本発明の再現方法と使用方法との完全な開示及び説明を当業者に提供するために提示され、本発明者が発明と見なす範囲を制限することを意図するものでもなく、また、以下の実験が、全てまたは唯一の実験であることを示す意図もない。使用される数値（例えば、量、温度など）に関して正確さを保つための努力がなされているが、いくばくかの実験誤差及び偏差が考慮されるべきである。特に断りがない限り、部は、重量部、分子量は、重量平均分子量、温度は、摂氏温度、そして、圧力は、大気圧または、それに近似する圧力である。
【実施例】
【０２１９】
実施例１
ＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体が、数多くの中枢神経系（ＣＮＳ）及び末梢血管活動を調節するという証拠に基づいて、アドレノメデュリン、ＣＧＲＰ、及び、インターメジンの多くの類似体が合成されており、そして、研究がされている。これまでのところ、これらのペプチドホルモンの公知の合成類似体は、野生型リガンドに匹敵するか、あるいは、劣る受容体活性化活性を示している。同様に、これらのペプチドホルモンの合成アンタゴニスト類似体（例えば、ＣＧＲＰ８−３７及びＡＤＭ２２−５２；Ｒｏｖｅｒｏ，Ｐ．ｅｔ  ａｌ．，１９９２、Ｐｅｐｔｉｄｅｓ  １３：１０２５−１０２７）は、軽度の生物活性を示し、また、主として、３つのＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体（すなわち、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ１，２及び３受容体）の１つに対して特異的である。汎特異的スーパーアゴニスト、または、アンタゴニスト、ならびに、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ２特異的スーパーアゴニストは存在していない。
【０２２０】
ヒト及び齧歯類を含む他の哺乳類では、アドレノメデュリン、ＣＧＲＰ、及び、インターメジンに対する３つのＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体が存在する。これらは、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ１，２及び３受容体であり、血管系を通じて発現される。ＣＧＲＰは、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ１に対する選択的アゴニストであり、アドレノメデュリンは、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ２に対して高い親和性で相互作用することが報告されている。一方で、インターメジンは、有効性が低いリガンドであり、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ１，２及び３受容体の間で特異的な選択性を示さない。これらのペプチドホルモンの興味深い生理学的及び薬理学的特性を考慮して、本発明者は、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ１及び２受容体の両方に対して優れたアゴニストまたはアンタゴニスト活性を示すリガンド、ならびに、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ２受容体に対して優れたアゴニスト活性を示すリガンドを同定しようとした。本発明者は、アドレノメデュリン及びインターメジンの系統的に修飾された誘導体のデザイン及び合成を行い、そして、親化合物と比較して、それらのシグナル伝達を特徴付けた。そこでの知見は、ｍｉｎｉ−ＰＥＧ修飾の有無にかかわらず、Ｎ末端アシル化を有するキメラ類似体の活性が、生理学的伝達物質、ＣＧＲＰ、ＡＤＭ、または、ＩＭＤより有意に優れていることを示している。加えて、Ｎ末端アシル化及びｍｉｎｉ−ＰＥＧ修飾の両方を受けたアドレノメデュリン類似体は、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ２受容体に対するスーパーアゴニスト活性を特異的に示す。
【０２２１】
加えて、ＡＤＭ及びＩＭＤの配列を含む分子は、一般的なＣＬＲ／ＲＡＭＰ１受容体アンタゴニストＣＧＲＰ８−３８、及び／または、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ２受容体アンタゴニストＡＤＭ２２−５２と比較して、高い有効性を示すＣＬＲ／ＲＡＭＰ１、２及び／または３受容体と、ＣＧＲＰ及びＡＤＭ相互作用について、競合することが示された。また、選択されたスーパーアンタゴニスト類似体は、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ１−またはＣＬＲ／ＲＡＭＰ２−特異的アンタゴニスト活性を示している。したがって、当該類似体は、その相補的な生物学的に活性な受容体に結合し、かつ、生理学的リガンドよりも強力な受容体の生理学的応答を阻害する、汎特異的または選択的なスーパーアンタゴニストとなる。
【０２２２】
実施例１
受容体活性化アッセイを用いて、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ１受容体、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ２、または、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ３受容体複合体に関する本発明のペプチドアゴニストの用量依存的刺激応答を決定した。組換えＣＬＲ／ＲＡＭＰ１、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ２、または、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ３受容体を保有する細胞株を、このアッセイに用いた。ペプチドアゴニスト活性を、１．０μＭで開始し、ＤＭＳＯにて連続的に３倍に希釈した１０種類の異なる濃度で、繰り返して試験をした。公知のＣＬＲ／ＲＡＭＰ１受容体アゴニストであるヒトβ−ＣＧＲＰを、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ１アッセイにおいて陽性対照として用い、そして、公知のＣＬＲ／ＲＡＭＰ２受容体アゴニストであるＡＤＭを、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ２アッセイにおいて陽性対照として用いた。ＣＬＲ／ＲＡＭＰ１  ｃＡＭＰ、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ２アレスチンアッセイ、及び、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ３  ｃＡＭＰ（Ｄｉｓｃｏｖｅｒｘ，Ｆｒｅｍｏｎｔ，Ｃａｌｉｆ．）を使用した。これらのアッセイを、単一の濃度で繰り返し実施し、ＥＣ５０及びＩＣ５０の決定を、１０点の用量反応曲線を用いて、開始濃度で３倍希釈をして、繰り返し行った。
【０２２３】
結果
ＣＬＲ／ＲＡＭＰ１（１３２１Ｎ１細胞）、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ２（ＣＨＯ−Ｋ１細胞）、または、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ３（ＣＨＯ−Ｋ１細胞）受容体を安定に発現する細胞において、合成類似体のスーパーアゴニスト活性の薬効薬理を研究した。野生型リガンド、及び、修飾類似体の０．０３〜１０００ｎＭ用量を用いる受容体活性化アッセイにおいて、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ２受容体におけるアドレノメデュリンの５０％有効濃度（ＥＣ５０）は約１３〜２６ｎＭであり、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ１受容体におけるＣＬＲ／ＲＡＭＰ１特異的β−ＣＧＲＰのＥＣ５０は、約１〜１．５ｎＭである（表２）。
【０２２４】
野生型ＡＤＭペプチド（配列番号５３及び５４）、及び、ＩＭＤペプチド（配列番号５２）のさらなる制御は、これらのペプチドが、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ１受容体に対して低有効性のリガンドであることを示した。野生型ＡＤＭペプチドのＥＣ５０が、９〜１２ｎＭであったのに対して、野生型ＩＭＤのＥＣ５０は、７０ｎＭであった。合成類似体の生物活性の比較は、ＡＤＭ及びＩＭＤの６つの主要なキメラペプチド（配列番号５５〜６０）が、低有効性であるか、あるいは、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ１及び／またはＣＬＲ／ＲＡＭＰ２受容体の刺激において不活性であることを示した。
【０２２５】
驚くべきことに、選択したペプチド（配列番号２８〜２９）のＮ末端でのｍｉｎｉ−ＰＥＧ及びパルミトイル化修飾は、これらのペプチドの有効性を、１０〜１０００倍増加させた。さらなる試験は、これらのペプチド、及び、さらなるキメラペプチドにおけるパルミトイル化を用いた選択的修飾（配列番号３０〜５１及び９２）も、有効性を有意に増大させたことを示した。これらの合成ペプチドの大半を用いてＣＬＲ／ＲＡＭＰ１及び２受容体を刺激するＥＣ５０は、高いピコモルの範囲（すなわち、＜１ｎＭ）にある。
【０２２６】
重要なことに、これらの合成ペプチド（配列番号２８、３０、３１、３４、及び、３６）の幾つかは、アドレノメデュリンと比較して、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ２受容体において、＞１１０％の最大活性を示した。加えて、これらの強力なアゴニストペプチドの幾つかは、小規模のアゴニストを表す。例えば、配列番号４８及び９２は、３６個のアミノ酸だけを含み、このものは、３９個のアミノ酸または４０個のアミノ酸の野生型ペプチドよりもはるかに小さい。さらに、これらのアゴニストペプチドの幾つかも、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ３に対してスーパーアゴニスト活性を示す。ＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体についてのＡＤＭのＥＣ５０は、約０．４ｎＭであったが（表２）、配列番号２８及び４８のＥＣ５０は、０．０６〜０．０７ｎＭであった。したがって、これらのデータは、これらの合成アゴニストが、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ１、２及び／または３受容体についての汎特異的スーパーアゴニストであることを示唆した。
【０２２７】
これらの合成リガンドについての有効性の増大は、これらのリガンドに特異的かつ独特である。Ｎ−末端にｍｉｎｉ−ＰＥＧ、及び／または、パルミトイル化修飾を有する他のキメラペプチド（配列番号６１〜６８）、非アシル化切断キメラペプチド（配列番号９３）、アシル化キメラＣＧＲＰ−ＡＤＭペプチド（配列番号１０４）、アシル化キメラＡＤＭ−ＩＭＤ−ＡＤＭペプチド（配列番号１０５）、及び、アシル化切断ＣＧＲＰ（配列番号１０８）は、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ１及び２受容体について、有効性の増大を示さなかった。
【０２２８】
これらの観察を利用して、本発明者はＣＬＲ／ＲＡＭＰ２受容体に対して選択的であるスーパーアゴニストを同定し、そして、さらなる合成類似体（配列番号７１〜７４）を試験した。結果は、ＣＧＲＰ（配列番号７４）のパルミトイル化修飾が、ＣＧＲＰ活性の特性に影響を及ぼさないことを示した。同様に、異なる長さのＡＤＭペプチド（配列番号７１〜７３）のＮ末端でのパルミトイル化は、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ１及び２受容体に関して、これらのペプチドの有効性を適度に増大させただけであった。対照的に、ＡＤＭペプチドのｍｉｎｉ−ＰＥＧモチーフ及びパルミトイル化（配列番号６９−７０）の双方を用いた特異的な修飾は、ＥＣ５０を、低ナノモル濃度またはサブナノモル濃度にまで低下させ、そして、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ２受容体についての選択性を維持した。本発明者は、ＡＤＭ（配列番号６９）のｍｉｎｉ−ＰＥＧ修飾及びパルミトイル化修飾が、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ２受容体の最大活性を１４７％にまで増大させることも示した。加えて、本発明者は、配列の途中で切断箇所を有する選択されたＡＤＭ及びキメラ類似体が、小規模のＣＬＲ／ＲＡＭＰ２特異的類似体（配列番号９４、１０１、１０３、及び、１１０）を生成することを発見した。これらのデータは、これらのリガンドが、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ２特異的スーパーアゴニストであることを示している。
【０２２９】
陽性対照値を用いて、これらの実験の結果を表２に示す。これらの結果は、選択されたペプチドの驚くほど高い有効性を示しており、例えば、野生型ペプチドにおける高いナノモルＥＣ５０濃度と比較して、多くのペプチドが、高いピコモル濃度範囲でＥＣ５０濃度を有している。
【０２３０】
これらの知見は、これらのスーパーアゴニストが、細胞機能を刺激する上で、野生型リガンドよりもより有効なアゴニストであることを示唆している。実際、培養されたヒトリンパ内皮細胞（ＨＬＥＣ）を用いた機能性試験は、ＨＬＥＣ細胞の生存及び増殖を刺激する上で、これらのスーパーアゴニストでは、野生型ＡＤＭ及びＩＭＤよりも高い内因性有効性が認められたことを示した。ＭＴＳアッセイを用いた細胞生存及び増殖の定量は、合成類似体（配列番号２８、３０、３３、３８、３９、４０、及び、６９）が、３０〜１００ｎＭの範囲で、ＨＬＥＣ細胞増殖及び生存を用量依存的に刺激したことを示した（図１及び２）。対照的に、野生型ＡＤＭ（配列番号５３及び５４）、野生型ＩＭＤ（配列番号５２）、及び、主要なキメラペプチド（配列番号５９）は、この用量範囲で、ＨＬＥＣ細胞の増殖及び生存に関して、最小限の効果を有する（図１及び２）。したがって、これらのデータは、これらの新規類似体の相対的内因性有効性が、受容体シグナル伝達を刺激する上で、かつ、受容体媒介細胞生存及び増殖において、公知のＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体リガンドよりも優れていることを実証した。
【０２３１】
表２．合成ＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体アゴニストのアゴニスト活性のリスト
ＣＬＲ／ＲＡＭＰ１    ＣＬＲ／ＲＡＭＰ２    ＣＬＲ／ＲＡＭＰ３
識別表示            最大活性              最大活性              最大活性
ＥＣ５０  陽性対照      ＥＣ５０  陽性対照      ＥＣ５０  陽性対照
（ｎＭ）  の％        （ｎＭ）  の％        （ｎＭ）  の％
野生型ＡＤ                        １３〜  １００          ０．４  １０４
Ｍポジティ                        ２６
ブ
野生型      １〜    １００
ＣＧＲＰ−  １．５
ポジティブ
汎特異的スーパーアゴニスト
（配列番号    ０．３    ５４      ０．５    １４３      ０．０６    １１７
２８）
（配列番号    ３        ５４      ３        ９４
２９）
（配列番号    ０．４    ５１      ０．６    １２６
３０）
（配列番号    ０．８    ４７      ０．９    １１０
３１）
（配列番号    ０．５    ４８      １        １１９
３２）
（配列番号    ０．３    ６２      ０．４    １０１
３３）
（配列番号    ０．２    ５０      ０．７    １２０
３４）
（配列番号    ０．８    ４２      １        １１６
３５）
（配列番号    ０．６    ５８      ０．９    １３０
３６）
（配列番号    １．３    ５５      ４        ７２
３７）
（配列番号    ０．５    ８９      ０．７    ９７
３８）
（配列番号    ０．２    ８２      ０．５    ８６
３９）
（配列番号    ２        ９９      １        ８６
４０）
（配列番号    ０．４    ７５      ０．９    １０５
４１）
（配列番号    １．３    ５６      ０．２    ７６
４２）
（配列番号    ０．５    ３９      ０．２    ３０
４３）
（配列番号    ０．１    ５８      ０．２    ６９
４４）
（配列番号    ０．１    ５０      ０．３    ７９
４５）
（配列番号    ０．７    ６０      ０．５    １０４
４６）
（配列番号    １．５    ８５      ０．４    ６４
４７）
（配列番号    ０．３    ７８      ０．２    ７７      ０．０７    １４１
４８）
（配列番号    ０．５    ６６      ０．４    ８３
４９）
（配列番号    １．２    ６５      １．２    ８７
５０）
（配列番号    ０．２    ６５      ０．３    １０７
５１）
（配列番号    ０．４    ６１      ０．３    ６７      ０．２      １５６
９２）
野生型ＩＭＤ、ＡＤＭ、及び、ＣＧＲＰ
（配列番号    １１６    ７２      ７０      ６７
５２）
（配列番号    ５４０    ６９      ９        １０２
５３）
（配列番号    ５６４    ６３      １２      ９１      ２．２      １３０
５４）
（配列番号    １．８〜  １０３    >1000
１４３）      ２．９
不活性または効果が小さなキメラペプチド
（配列番号    >1000     １        >1000     ８
５５）
（配列番号    ２２４    ５８      １７      １１１
５６）
（配列番号    ９０９    ５３      １４９    ９４
５７）
（配列番号    >1000     ０        >1000     １
５８）
（配列番号    ３１      ９５      １８      １１５
５９）
（配列番号    １６      １００    ３        １１４
６０）
（配列番号    １７５    ７０      ６        ９２
６１）
（配列番号    >1000     ２        >1000     ８
６２）
（配列番号    １８０    ６１      ７        ９４
６３）
（配列番号    >1000     １        >1000     ８
６４）
（配列番号    ２３４    ７３      １９      ９９
６５）
（配列番号    >1000     ４        >1000     ４
６６）
（配列番号    １        ７８      >1000     ７７
６７）
（配列番号    １１      ４８      ７        ７０
６８）
（配列番号    ７７１    ５３      １７      ８５
９３）
（配列番号    >1000     ２        >1000     ４
１０４）
（配列番号    >1000     ３３      １９      ４０
１０５）
（配列番号    >1000     ６        >1000     ６
１０８）
ＣＬＲ／ＲＡＭＰ２特異的スーパーアゴニスト
（配列番号    １３      ７０      ０．６    １４７    ０．６      １２７
６９）
（配列番号    ６１９    ６９      １．１    ６８
７０）
（配列番号    １１      ６７      １．３    ８２
９４）
（配列番号    ７．７    ５６      ０．３    ７４      ０．５      １２９
１０１）
（配列番号    ４．５    ９６      ０．７    ７７      ０．３      １４０
１０３）
（配列番号    ４３      ７１      ６．４    ７４
１１０）
効果が小さなＣＬＲ／ＲＡＭＰ１−またはＣＬＲ／ＲＡＭＰ２−特異的ペプチド
（配列番号    ２４      ５３      ３        ７８
７１）
（配列番号    ２８      ４５      ３        ９０
７２）
（配列番号    ３４      ７９      ４９      ４６
７３）
（配列番号    ２        ９５      >1000     １２
７４）
【０２３２】
アンタゴニスト活性の分析のために、当該合成類似体を、参照リガンドをＥＣ８０で添加する前に、細胞と共にプレインキュベートした。このアッセイは、野生型ＡＤＭ２２−５２（配列番号７５）が、ＣＧＲＰ−刺激ＣＬＲ／ＲＡＭＰ１、及び、ＡＤＭ−刺激ＣＬＲ／ＲＡＭＰ２受容体活性化が、それぞれ、＞２００００及び６３１ｎＭのＩＣ５０で阻害したことを示した（表３）。他方で、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ１−特異的ＣＧＲＰ８−３７（配列番号１３７）は、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ１及びＣＬＲ／ＲＡＭＰ３のそれぞれについて、１３３、及び、＞１００００ｎＭのＩＣ５０を有する。
【０２３３】
これらのデータは、ＣＧＲＰ８−３７及びＡＤＭ２２−５２が、それぞれ、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ１及びＣＬＲ／ＲＡＭＰ２に特異的な低有効性のアンタゴニストであるという文献と矛盾していない。ＡＤＭ及びＩＭＤ配列（配列番号７６）からなるキメラペプチドは、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ１及び２受容体に対して軽度に改善されたアンタゴニスト活性を有するようである。ＣＧＲＰで刺激されたＣＬＲ／ＲＡＭＰ１、及び、ＡＤＭ刺激ＣＬＲ／ＲＡＭＰ２受容体シグナル伝達のＩＣ５０は、それぞれ、１１２３ｎＭ及び２８９ｎＭであった。対照的に、Ｎ末端パルミトイル化、または、パルミトイル化、及び、ｍｉｎｉ−ＰＥＧ修飾を受けたキメラペプチド（配列番号７７〜７８、１１２、１１４、１１９、１２０〜１２５、または、１３９）は、ＣＧＲＰ刺激ＣＬＲ／ＲＡＭＰ１、及び／または、ＡＤＭ刺激ＣＬＲ／ＲＡＭＰ２受容体シグナル伝達に対して非常に強力なアンタゴニスト活性を示した。
【０２３４】
これらのアンタゴニストの中でも、配列番号７７〜７８、１１２、１２１、及び、１２５は汎特異的であり、配列番号１１４、１２０、１２２〜１２４、及び、１３９は、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ１特異的であるが、配列番号１１９は、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ２特異的である。これらの類似体についてのＣＧＲＰ刺激ＣＬＲ／ＲＡＭＰ１、及び、ＡＤＭ刺激ＣＬＲ／ＲＡＭＰ２受容体シグナル伝達のＩＣ５０は、それぞれ、１．８〜９．９ｎＭ、及び、０．６〜４７ｎＭであった。一方で、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体に対して強力なアンタゴニスト活性を示すことが報告されている２つの合成ペプチド（配列番号１１５及び１１６；表３）は、同じアッセイにおいて、スーパーアゴニスト活性を示さなかった。さらに、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ３受容体活性化活性の研究は、選択されたペプチドが、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ３のスーパーアゴニストであることも示した。ＣＬＲＰ／ＲＡＭＰ３について、ＩＣ５０が、それぞれ、５７４ｎＭ及び３３０ｎＭであるＣＧＲＰ８−３７及びＡＤＭ２２−５２とは異なり、配列番号７８、１１２、１１４、１１９、１２０〜１２２、及び、１２３のＩＣ５０は、０．８〜９．２ｎＭであった。これらのスーパーアンタゴニストの内の幾つかが、１７〜２８個のアミノ酸しか含まない小規模のアンタゴニストであることに留意することも重要である。ＣＧＲＰ８−３７及びＡＤＭ２２−５２は、それぞれ、３０個のアミノ酸及び３１個のアミノ酸を含む。
【０２３５】
これらのデータは、Ｎ末端が改変されたキメラペプチド（配列番号：７７〜７８、１１２、１１４、１１９、１２０〜１２５、または、１３９）が、親ペプチド（配列番号７６）、または、ＣＧＲＰ−由来、及び、ＡＤＭ−由来のアンタゴニストよりも、１〜２桁も大きなアンタゴニスト活性を有する、ことを示した。したがって、これらの改変されたキメラ、または、切断されたペプチドは、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ１，２及び３受容体に対する強力な汎特異的、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ１特異的、または、ＣＬＲ／ＲＡＭＰ２特異的スーパーアンタゴニストであること示している。
【０２３６】
表３．合成ＣＬＲ／ＲＡＭＰ受容体アンタゴニストのアンタゴニスト活性のリスト
ＣＬＲ／ＲＡＭＰ１    ＣＬＲ／ＲＡＭＰ２    ＣＬＲ／ＲＡＭＰ３
識別表示            最大活性              最大活性              最大活性
ＩＣ５０  陽性対照      ＩＣ５０  陽性対照      ＩＣ５０  陽性対照
（ｎＭ）  の％        （ｎＭ）  の％        （ｎＭ）  の％
ＣＬＲ／ＲＡＭＰ１アンタゴニスト
ＢＩＢＮ    ０．０５    １０５    >100      ０
４０９６
汎特異的スーパーアンタゴニスト
（配列番号    ９．９    １０１    ４７      １００
７７）
（配列番号    ４．８    １０４    ３４      １０７      ０．８      １０１
７８）
（配列番号    １．８    ９９      ５．３    ９７        ２．３      ９９
１１２）
（配列番号    ３．２    ９４      ４．９    １０４      １．８      １００
１２１）
（配列番号    ７        ９３      ７．１    １００
１２５）
ＡＤＮ２２−５２及びＣＧＲＰ８−３７
（配列番号    >20000    ２２      ６３１    １００      ３３０      ９９
７５）
（配列番号    １３３    ９５      >10000    １５        ５７４      ９６
１３７）
（配列番号    １１２３  １０６    ２８９    １０１
７６）
（配列番号    １８７８  ９９      １１７    １００      １１５      ９８
１１５）
（配列番号    １５２    １０１    ７．３    １０１      ５３        ９８
１１６）
ＣＬＲ／ＲＡＭＰ１特異的スーパーアンタゴニスト
（配列番号    ４．８    １０１    １４６      ８７      ８．４      １０２
１１４）
（配列番号    ５．８      ９４      ８５      ９８      ９．２      １００
１２０）
（配列番号    ７．３      ９５      ６１      １００    ４．１      １００
１２２）
（配列番号    ４．７      ９４      ５０      １０１
１２３）
（配列番号    ６．７      ９５      ６４      １０３    ５．９      １０２
１２４）
（配列番号    ３．８      ９８      ４６２    １０１
１３９）
ＣＬＲ／ＲＡＭＰ２特異的スーパーアンタゴニスト
（配列番号    ２１        ９５      ０．６    １０１    １．５      １０２
１１９）
【０２３７】
本実施形態は、明確さを付与し、かつ、理解を深めてもらう目的で、ある程度の詳しさで記載をしているが、当業者であれば、実施形態の実際の範囲から逸脱することなく、形式及び実体に対して様々な変更を加えることができることを理解するであろう。上述したすべての図面、表、及び、添付物、ならびに、特許、特許出願、及び特許公報は、それらの全体が参考として組み込まれる。
【０２３８】
対照試薬。ヒトβ−ＣＧＲＰ及びヒトＡＤＭを、それぞれ陽性対照として用いた。加えて、配列（ヒトＩＭＤ、配列番号５２）、（ヒトＡＤＭ、配列番号５３）、及び（ヒトＡＤＭ、配列番号５４）を有するペプチドを、追加の対照として用いた。
【０２３９】
本明細書において引用したすべての文献及び特許出願を、各文献または特許出願が、参考として組み込まれることを具体的かつ個別に明示されているものと同然に、本明細書に参考として組み込まれる。
【０２４０】
本発明は、本発明者によって知見または提案された特定の実施形態に関して、本発明の実施のための好ましい態様を含むものとして記載されている。本開示に照らして、本発明の意図した範囲から逸脱することなく、例示された特定の実施形態において無数の修正及び変更を行うことができることを、当業者であれば理解するであろう。さらに、生物学的機能の均等性の考慮故に、種類または量において生物学的作用に影響を与えることなく、タンパク質構造を変化させることができる。そのような改変は、すべて、添付した特許請求の範囲に含まれるものとして意図している。
【０２４１】
関連出願の相互参照
本願は、２０１６年１月４日に出願された米国仮特許出願第６２／２７４，６３８号の利益を主張し、それらの出願はそれらの全体が本明細書に参考として組み込まれる。
【図１】
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【図２】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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