【手続補正書】
【提出日】令和3年11月19日(2021.11.19)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒト第ＸＩ因子（ＦＸＩ）および／または活性化型第ＸＩ因子（ＦＸＩａ）の触媒ドメイン内に結合する標的抗体に特異的に結合する結合剤であって、
前記標的抗体の抗凝固活性を阻害し、かつ、
（ａ）配列番号３４７のアミノ酸配列を含む重鎖、および配列番号５７のアミノ酸配列を含む軽鎖、または（ｂ）配列番号３４９のアミノ酸配列を含む重鎖、および配列番号８９のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、抗体またはその抗原結合性断片である、
前記結合剤。
【請求項２】
抗イディオタイプ抗体である、請求項１に記載の結合剤。
【請求項３】
前記標的抗体が、（ｉ）配列番号１２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、および配列番号２３のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；または（ｉｉ）配列番号１４のアミノ酸配列を含む重鎖、および配列番号２５のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、請求項１に記載の結合剤。
【請求項４】
ヒトＦＸＩおよび／またはＦＸＩａの触媒ドメイン内に結合する標的抗体に特異的に結合する結合剤であって、前記標的抗体の抗凝固活性を反転させ、重鎖と軽鎖とを含む、抗イディオタイプ抗体であり、
（ｉ）前記重鎖が、配列番号３４７と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖が、配列番号５７と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含むか；
（ｉｉ）前記重鎖が、配列番号３４９と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖が、配列番号８９と少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含むか；
（ｉｉｉ）前記重鎖が、配列番号３４７と少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖が、配列番号５７と少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含むか；
（ｉｖ）前記重鎖が、配列番号３４９と少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖が、配列番号８９と少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含むか；
（ｖ）前記重鎖が、配列番号３４７と少なくとも９８％同一であるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖が、配列番号５７と少なくとも９８％同一であるアミノ酸配列を含むか；
（ｖｉ）前記重鎖が、配列番号３４９と少なくとも９８％同一であるアミノ酸配列を含み、前記軽鎖が、配列番号８９と少なくとも９８％同一であるアミノ酸配列を含むか；
（ｖｉｉ）前記重鎖が、活性に実質的に影響を及ぼさない１、２、３、もしくは４カ所のアミノ酸突然変異を有する、配列番号３４７のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖が、活性に実質的に影響を及ぼさない、１、２、３、もしくは４カ所のアミノ酸突然変異を有する、配列番号５７のアミノ酸配列を含むか；
（ｖｉｉｉ）前記重鎖が、活性に実質的に影響を及ぼさない１、２、３、もしくは４カ所のアミノ酸突然変異を有する、配列番号３４９のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖が、活性に実質的に影響を及ぼさない１、２、３、もしくは４カ所のアミノ酸突然変異を有する、配列番号８９のアミノ酸配列を含むか；または
（ｉｘ）前記重鎖が、活性に実質的に影響を及ぼさない、配列番号３４９のＳからＱへの突然変異など、３０位における保存的突然変異などの突然変異を有する、配列番号３４９のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖が、配列番号８９のアミノ酸配列を含む、
前記結合剤。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれか一項に記載の結合剤をコードするヌクレオチド配列を含む、ポリヌクレオチド。
【請求項６】
請求項５に記載のポリヌクレオチドを含む、ベクター。
【請求項７】
請求項５に記載のポリヌクレオチドを含む、宿主細胞。
【請求項８】
請求項６に記載のベクターを含む、宿主細胞。
【請求項９】
結合剤を作製する方法であって、請求項７または８に記載の宿主細胞を、前記結合剤またはその抗原結合性部位の発現に適する条件下で培養するステップを含み、任意選択で、前記結合剤を精製するステップを含む、前記方法。
【請求項１０】
請求項１〜４のいずれか一項に記載の結合剤と薬学的に許容される担体とを含む、医薬組成物。
【請求項１１】
医薬としての使用のための医薬組成物であって、有効量の、請求項１〜４のいずれか一項に記載の結合剤を含む、前記医薬組成物。
【請求項１２】
抗ＦＸＩ／ＦＸＩａ抗体の、前記抗ＦＸＩ／ＦＸＩａ抗体により処置されている患者における抗凝固効果を反転させるための使用のための医薬組成物であって、有効量の、請求項１〜４のいずれか一項に記載の結合剤を含む、前記医薬組成物。
【請求項１３】
前記抗ＦＸＩ／ＦＸＩａ抗体またはその抗原結合性断片が、
（ｉ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＶＨ、および配列番号２３のアミノ酸配列を含むＶＬ；
（ｉｉ）配列番号１４のアミノ酸配列を含む重鎖、および配列番号２５のアミノ酸配列を含む軽鎖；または
（ｉｉｉ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＶＨの相補性決定領域である、ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、およびＨＣＤＲ３を含むＶＨ、ならびに、配列番号２３のアミノ酸配列を含むＶＬの相補性決定領域である、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、およびＬＣＤＲ３を含むＶＬ
を含む、請求項１２に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
前記患者が、血栓症を有するか、またはこれを発症する危険性がある、請求項１２または１３に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
前記患者が、
ａ．心房細動；
ｂ．発作性、遷延性、または永続性の心房細動または心房粗動など、疑われるか、または確認された心不整脈；
ｃ．慢性血栓塞栓性肺高血圧症（ＣＴＥＰＨ）；
ｄ．心房細動を伴うか、または伴わない弁膜性心疾患；
ｅ．肺高血圧症；
ｆ．第Ｖ因子ライデン変異、プロトロンビンの突然変異、抗トロンビンＩＩＩ、プロテインＣおよびプロテインＳの欠損、第ＸＩＩＩ因子突然変異、家族性異常フィブリノゲン血症、先天性プラスミノゲン欠損、第ＸＩ因子レベルの上昇、鎌状赤血球病、抗リン脂質症候群、自己免疫疾患、慢性腸疾患、ネフローゼ症候群、溶血性尿毒症、骨髄増殖性疾患、播種性血管内凝固、発作性夜間ヘモグロビン尿症、およびヘパリン誘導性血小板減少症を含むがこれらに限定されない、先天性または後天性の血栓性素因；
ｇ．慢性腎疾患；
ｈ．静脈血栓塞栓症；
ｉ．心房細動における脳卒中；
ｊ．深部静脈血栓症；
ｋ．がん；
ｌ．一過性虚血性発作；
ｍ．全身性塞栓症；
ｎ．心筋梗塞；または
ｏ．人工膝関節置換術、人工股関節置換術、整形外科術、胸部手術および腹部手術
からなる群から選択される外科手術後の状態
を有する、請求項１２〜１４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
前記患者が、
ａ．非弁膜症性心房細動；
ｂ．裏付けられた、出血の高危険性；または
ｃ．慢性腎疾患
を有する、請求項１２〜１５のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
前記患者が、末期腎疾患（ＥＳＲＤ）を有する、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
前記患者が、
ａ．ＥＳＲＤを有し、透析を受けている；または
ｂ．非弁膜症性心房細動を有する、
請求項１７に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
脳卒中および／または全身性塞栓症の危険性を低減するように、前記患者が、前記抗ＦＸＩ／ＦＸＩａ抗体またはその抗原結合性断片を投与されている、請求項１２〜１８のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２０】
前記抗ＦＸＩ／ＦＸＩａ抗体またはその抗原結合性断片の前記抗凝固効果の反転が、救急手術／緊急手順のために必要とされ、致死性であるか、またはコントロール不能の出血において必要とされる、請求項１２〜１９のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２２】
【図１】実施例で記載される、１２の抗ＮＯＶ１４０１抗体（ＦａｂおよびＩｇＧ）の各々についてのＳＥＴ実験による、代表的な結合曲線を示す図である。実施例で記載される、ＦａｂおよびＩｇＧについて、ＫＤ値は、実験データを、１：１結合モデルへと当てはめることから決定した。２つ〜６つの個別の実験による平均ＫＤ値を示す。
【図２】ＮＯＶ１４０１、および３つのＮＯＶ１４０１／抗ＮＯＶ１４０１混合物の、固定化させたＦＸＩａへの結合についての、代表的なＳＰＲ応答曲線を示す図である。抗ＮＯＶ１４０１の濃度を増大させると、ＮＯＶ１４０１の、ＦＸＩａへの結合を低減し、１０倍モル過剰量は、結合を完全に遮断する。これらのデータは、抗ＮＯＶ１４０１が、ＮＯＶ１４０１に結合し、ＮＯＶ１４０１の、ＦＸＩａとの相互作用を遮断することが可能であることを指し示す。単独の抗ＮＯＶ１４０１は、固定化させたＦＸＩａへの結合を示さなかった（図示しない）。
【図３】ＦＸＩを含有するヒト血漿を添加し、凝固カスケードの内因系経路を誘発する前に、ＮＯＶ１４０１を、抗ＮＯＶ１４０１と共に、１０分間にわたりプレインキュベートした場合の、２つの代表的な抗ＮＯＶ１４０１  ＦａｂについてのａＰＴＴアッセイ結果を示す図である。いずれの抗ＮＯＶ１４０１  Ｆａｂも、ＮＯＶ１４０１のａＰＴＴ延長効果を、濃度依存的に遮断する、すなわち、ＮＯＶ１４０１の効果を阻害する。１００％の阻害（点線）は、３倍モルアクセスの抗ＮＯＶ１４０１で達成された。
【図４】抗ＮＯＶ１４０１  Ｆａｂまたは抗ＮＯＶ１４０１  ＩｇＧを添加し、凝固カスケードの内因系経路を誘発する前に、ＮＯＶ１４０１を、ＦＸＩを含有するヒト血漿と共に、５分間にわたりプレインキュベートした場合の、１０の抗ＮＯＶ１４０１  Ｆａｂ、および２つの抗ＮＯＶ１４０１  ＩｇＧについてのａＰＴＴアッセイ結果を示す図である。１２の抗ＮＯＶ１４０１の全ては、ＮＯＶ１４０１のａＰＴＴに対する効果の、濃度依存的な部分的反転を示す。
【図５】抗ＮＯＶ１４０１  Ｆａｂまたは抗ＮＯＶ１４０１  ＩｇＧを添加し、トロンビンフィードバックループを誘発する前に、ＮＯＶ１４０１を、ＦＸＩを含有するヒト血漿と共に、５分間にわたりプレインキュベートした場合の、１０の抗ＮＯＶ１４０１  Ｆａｂ、および２つの抗ＮＯＶ１４０１  ＩｇＧについてのＴＧＡ結果を示す図である。ＴＧＡは、ＮＯＶ１４０１について、濃度を、別個の実験で決定したＩＣ５０値に対応する、０．０５μＭで一定にして行った。１２の抗ＮＯＶ１４０１の全ては、ＮＯＶ１４０１のトロンビン生成に対する効果の、濃度依存的な部分的反転を示す。