(57)【要約】  本出願は、心血管病態を治療する方法を提供する。該方法は、硬膜外腔に一過性受容体電位バニロイド１（ＴＲＰＶ１）受容体アゴニストを投与することを含むことができる。該方法は、高血圧、高血圧前症、軽症高血圧、重症高血圧、難治性高血圧、うっ血性心不全および心筋瘢痕など種々の病態を治療するために使用することができる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
対象における心血管病態を治療する方法であって、
前記対象の第１〜第４胸椎レベルの１つ以上に位置する硬膜外腔に一過性受容体電位バニロイド１（ＴＲＰＶ１）受容体アゴニストを投与することを含む、方法。
【請求項２】
前記対象がヒトである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記心血管病態がうっ血性心不全である、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記心血管病態が前記対象の心筋の瘢痕化である、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記心血管病態が高血圧、高血圧前症、または軽症高血圧からなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記心血管病態が重症高血圧および難治性高血圧のうちの少なくとも１つからなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記一過性受容体電位バニロイド１（ＴＲＰＶ１）受容体アゴニストが、第１胸椎に近接した前記硬膜外腔に投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記一過性受容体電位バニロイド１（ＴＲＰＶ１）受容体アゴニストが、第２胸椎に近接した前記硬膜外腔に投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
前記一過性受容体電位バニロイド１（ＴＲＰＶ１）受容体アゴニストが、第３胸椎に近接した前記硬膜外腔に投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
前記一過性受容体電位バニロイド１（ＴＲＰＶ１）受容体アゴニストが、第４胸椎に近接した前記硬膜外腔に投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
高血圧の対象において血圧を降下させる方法であって、
前記対象の第１〜第４胸椎レベルの１つ以上に位置する硬膜外腔に一過性受容体電位バニロイド１（ＴＲＰＶ１）受容体アゴニストを投与することを含む、方法。
【請求項１２】
収縮期高血圧の対象において収縮期血圧を降下させる方法であって、
前記対象の第１〜第４胸椎レベルの１つ以上に位置する硬膜外腔に一過性受容体電位バニロイド１（ＴＲＰＶ１）受容体アゴニストを投与することを含む、方法。
【請求項１３】
拡張期高血圧の対象において拡張期血圧を降下させる方法であって、
前記対象の第１〜第４胸椎レベルの１つ以上に位置する硬膜外腔に一過性受容体電位バニロイド１（ＴＲＰＶ１）受容体アゴニストを投与することを含む、方法。
【請求項１４】
対象における心血管病態を治療する方法であって、
前記対象の第１〜第４胸椎レベルの１つ以上で硬膜外腔にレシニフェラトキシンを投与することを含む、方法。
【請求項１５】
前記対象がヒトである、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記心血管病態がうっ血性心不全である、請求項１４に記載の方法。
【請求項１７】
前記心血管病態が前記対象の心筋の瘢痕化である、請求項１４に記載の方法。
【請求項１８】
前記心血管病態が高血圧、高血圧前症、または軽症高血圧からなる群から選択される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１９】
前記心血管病態が重症高血圧および難治性高血圧のうちの少なくとも１つからなる群から選択される、請求項１４に記載の方法。
【請求項２０】
前記レシニフェラトキシンが、第１胸椎に近接した前記硬膜外腔に投与される、請求項１４に記載の方法。
【請求項２１】
前記レシニフェラトキシンが、第２胸椎に近接した前記硬膜外腔に投与される、請求項１４に記載の方法。
【請求項２２】
前記レシニフェラトキシンが、第３胸椎に近接した前記硬膜外腔に投与される、請求項１４に記載の方法。
【請求項２３】
前記レシニフェラトキシンが、第４胸椎に近接した前記硬膜外腔に投与される、請求項１４に記載の方法。
【請求項２４】
対象を予防的に治療する方法であって、前記対象が高血圧前症または軽症高血圧を有し、前記方法が、前記対象の胸椎に近接した硬膜外腔に一過性受容体電位バニロイド１（ＴＲＰＶ１）受容体アゴニストを投与することを含む、方法。
【請求項２５】
対象を予防的に治療する方法であって、前記対象が高血圧前症または軽症高血圧を有し、前記方法が、前記対象の胸椎に近接した硬膜外腔にレシニフェラトキシンを投与することを含む、方法。
【請求項２６】
対象における心血管病態を治療する方法であって、
前記対象の第１〜第４胸椎レベルの１つ以上の硬膜外腔にある量のレシニフェラトキシンを投与することを含み、前記量が、約０．０６マイクログラム超かつ約３０マイクログラム未満である、方法。
【請求項２７】
対象における心血管病態を治療する方法であって、
前記対象の第１〜第４胸椎レベルの１つ以上の硬膜外腔に溶液を投与することを含み、前記溶液が溶液１ミリリットルにつき０．６〜１０マイクログラムのレシニフェラトキシンを含む、方法。
【請求項２８】
前記溶液が、前記１つ以上の椎骨レベルのそれぞれに約１００マイクロリットル超かつ約３ミリリットル未満の容量で投与される、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
対象における心血管病態を治療する方法であって、
オピオイド受容体アゴニストを前記対象に投与することと、
前記対象の第１〜第４胸椎レベルの１つ以上に位置する硬膜外腔に一過性受容体電位バニロイド１（ＴＲＰＶ１）受容体アゴニストを投与することと、を含む、方法。
【請求項３０】
前記対象がヒトである、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
前記オピオイド受容体がμ−オピオイド受容体である、請求項２９に記載の方法。
【請求項３２】
前記オピオイド受容体アゴニストがオピオイドである、請求項２９に記載の方法。
【請求項３３】
前記オピオイドがフェンタニールである、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
前記フェンタニールを、対象重量１ｋｇにつき５０〜１００μｇのフェンタニールに相当する量で１２時間おきに投与する、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
前記オピオイド受容体アゴニストの投与が静脈内投与または腹腔内投与である、請求項２９に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１６年４月１３日に出願された「Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ｔｒｅａｔｉｎｇ  Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ  Ｄｉｓｅａｓｅｓ  ｗｉｔｈ  Ｒｅｓｉｎｉｆｅｒａｔｏｘｉｎ」と題する米国仮特許出願第６２／３２２，０７９号に対する優先権を主張し、この開示はその全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【０００２】
政府援助
本発明は、米国国立衛生研究所より与られた１Ｒ０１ＨＬ１２６７９６−０１Ａ１（Ｚｕｃｋｅｒ／Ｗａｎｇ）の下、政府援助によりなされた。米国政府は、本発明に一定の権利を有し得る。
【０００３】
本開示は、心血管病態の寛解治療または予防的治療に関するものであり、一過性受容体電位バニロイド１（ＴＲＰＶ１）製剤、例えば、レシニフェラトキシン（ＲＴＸ）を硬膜外投与するための方法を提供し、１つ以上の心血管病態を有する患者を治療または予防的に治療するための心臓交感神経求心性神経のアブレーションまたは除神経を提供する。本開示は、患者の１つ以上の胸椎レベルにおいて製剤を投与する方法を提供する。
【背景技術】
【０００４】
心血管病態は、相当数の対象を苦しめている。さらに、慢性心不全、高血圧、および高血圧前症などの一部の心血管病態は、それら自体がさらなる心血管損傷および対象の心血管系の健康を低下させる一因となることがある。うっ血性心不全（ＣＨＦ）とは、心臓が代謝に必要な十分な血流量を心血管系全体に維持することができなくなる病態をいう。薬物療法（例えば、利尿薬、ＡＣＥ阻害薬、ベータ遮断薬）、医療機器（例えば、除細動器）および生活習慣の改善など、ＣＨＦの治療として様々なものが知られている。心筋虚血とは、例えば、冠動脈の閉塞などによる、心臓への血液供給が不十分な病態をいう。
【０００５】
ＣＨＦは、交感神経系の過剰活動を引き起こすことが知られており、（Ｗａｎｇ  ａｎｄ  Ｚｕｃｋｅｒ（１９９６）Ａｍ  Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．２７１：Ｒ７５１−Ｒ７５６）、心筋虚血も交感神経系の活動亢進（Ｚａｈｎｅｒ（２００３）Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．５５１．２：５１５−５２３）および求心性（知覚）神経の活性化（Ｗａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．（２０１４）Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ  ６４（４）：７４５−７５）の一因となる場合がある。活発かつ過剰な交感神経の励起および末梢抵抗は、動脈圧および心拍数を上昇し得る。時間の経過とともに、動脈圧および心拍数の上昇は、慢性心不全のさらなる進行の一因となり、心血管系に損傷を与えかねない。（Ｓｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ．（２０００）Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ．Ｒｅｓ．４５：７１３−７１９、Ｆｏｗｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（１９８６）Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ  ７４：１２９０−１３０２）
【０００６】
高血圧とは、対象が慢性的に異常に高い動脈圧を呈する病態をいう。高血圧は、動脈壁の肥厚および左心室の肥大など心血管系に損傷を与えることがあり、ＣＨＦの一因となり得る。生活習慣の改善、利尿薬、ベータ遮断薬、およびＡＣＥ阻害薬などを含む、多数の高血圧の治療が知られている。一部の患者は難治性高血圧（治療抵抗性高血圧または薬剤抵抗性高血圧と呼ばれることもある）を示し、利尿薬または他の薬物による治療にうまく反応しない。
【０００７】
心臓交感神経求心性神経反射（ＣＳＡＲ）の活動亢進は、ＣＨＦの対象に見られる過剰な交感神経の励起に関連すると考えられている（Ｗａｎｇ（２０００）Ｈｅａｒｔ  Ｆａｉｌ．Ｒｅｖ．５：５７−７１）。出願人は以前、心外膜または後根神経節（ＤＲＧ）を処置することにより、ＣＳＡＲ関連求心路末端またはＤＲＧを化学的に切除または脱感作することによりＣＳＡＲ活性を減少させる方法を開示している。（米国特許出願第１４／４８４，２３５号）
【０００８】
特定の一過性受容体電位バニロイド１（ＴＲＰＶ１）アゴニスト、例えば、レシニフェラトキシン（ＲＴＸ）は、ＤＲＧニューロンを脱感作する能力を示す。特に、ＲＴＸは、強力かつ持続的ニューロンアブレーションを呈し、疼痛対策として研究されている（Ｋａｒａｉ  ｅｔ  ａｌ．（２００４）Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．１１３：１３４４−１３５２１、Ｓｚａｂｏ  ｅｔ  ａｌ．（１９９９）Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ．８４０：９２−９８）。ＲＴＸは、カルシウム依存性毒作用を含むことによりＴＲＰＶ１含有ニューロンを破壊できる。ニューロン内の受容体は、適切なアゴニストの投与により脱感作でき、そこではアゴニストが痛覚に関連する急性反応を誘発し、続いて長期の脱感作がおこる。
【０００９】
ＲＴＸは、バニリル置換基を有するホルボール関連ジテルペンである。ＲＴＸの構造を図１に示す。バニリル基は、ＲＴＸがバニロイド受容体アゴニストとして機能することを可能にするが、ホルボール部分は、かなりの程度および期間の脱感作効果に寄与すると考えられている（Ｓｚａｌｌａｓｉ  ｅｔ  ａｌ．（１９９９）Ｂｒｉｔ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１２８：４２８−４３４）。多数の類似化合物が報告されており、それぞれが様々な程度の脱感作をもたらす（Ｓｚａｌｌａｓｉ  ｅｔ  ａｌ．（１９９９）Ｂｒｉｔ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１２８：４２８−４３４）。ＲＴＸは、Ｅｕｐｈｏｒｂｉａ  ｒｅｓｉｎｉｆｅｒａから単離することができ、合成もされてきた（Ｗｅｎｄｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（１９９７）Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１１９：１２９７６−１２９７７）。
【００１０】
心血管治療のための医薬品製剤の投与は、様々な方法で達成されることができる。心外膜投与および髄腔内投与は、一部の対象には有用だが、ある課題が存在する。例えば、体内の複数箇所に相当な深さで注入することは、医師にとっては複雑で時間がかかるものであり、対象に対しては不快症状および損傷リスクの増加を引き起こす可能性がある。髄腔内注入は、非活性成分、例えば保存剤または夾雑物などを脊柱管へ導入することによる危害のリスクのために疎まれることがある。このリスクを低減するために必要な予防措置は、髄腔内投与のための製剤の調製を複雑にする可能性がある。心外膜および髄腔内投与のこのような全般的な短所に加えて、本文脈、即ち脊柱内の神経アブレーションまたは除神経において、髄腔内投与に代わるものは、脊柱管の脳脊髄液に製剤を投与することを避けることが特に望ましい。脳脊髄液は高泳動性を可能にし、脊柱管を介して著しいＲＴＸ移動をもたらし得る。このＲＴＸ移動は、脊柱内の至る所で不必要な除神経をもたらす可能性があり、ＣＳＡＲとは無関係な神経に潜在的に影響を及ぼす。さらに、心外膜投与は比較的長く神経求心線維のアブレーションを呈するが、効果期間を延長することは、頻繁な反復投与の必要がなく慢性心血管病態の治療にとって望ましい。
【００１１】
したがって、心血管病態を治療または予防するために患者に対するリスクを低減したＴＲＰＶ１アゴニスト（例えばＲＴＸ）の標的投与の改善が当該技術分野において必要とされている。
【発明の概要】
【００１２】
本開示は、ＴＲＰＶ１アゴニスト（例えばＲＴＸ）硬膜外投与の方法を提供し、心臓交感神経求心路末端の除神経を提供する。投与は、第１から第４の胸椎のうちの少なくとも１つに対して行われる。本開示は、心不全、高血圧、交感神経励起の亢進、心肥大、左室拡張末期圧（ＬＶＥＤＰ）の上昇、肺水腫およびこれらの組み合わせからなる群から選択される関連徴候を含む、１つ以上の心血管病態を治療する方法を提供する。
【００１３】
硬膜外腔への投与は、より非侵襲的な治療、より容易な投与、ならびに脊柱管への髄腔内注入または心臓への投与（例えば心外膜投与）に付随する潜在的な有害作用を低減することなど、いくつかの利点がある。
【００１４】
ＲＴＸの硬膜外投与はまた、心外膜投与と比較すると、より標的化した神経求心線維のアブレーションおよびより長期持続するＣＳＡＲ活性の減少を得ると考えられてきた。例えば、ラットモデルにおいて、心外膜投与の約３〜４ヶ月後にＣＳＡＲ活性が増加したのとは対照的に、硬膜外投与の６ヵ月後でもＣＳＡＲ活性は減少したままだった。
【００１５】
さらに、硬膜外腔への投与は、不必要または望ましくない神経をアブレーションまたは除神経することを減らす可能性がある。硬膜外腔への注入は、脊柱管への投与と比較して、製剤が脊柱内で移動する程度を減らす。製剤は、硬膜外腔内では脊柱管内よりもより低い泳動性を経験するだろう。硬膜外腔内の組織は、脊柱管の脳脊髄液中でのより高い泳動性と比較して、製剤の泳動性を遅延させる傾向があるだろう。
【００１６】
さらに、各結節腫への投与とは対照的に、本出願のある種の実施形態では、特に単一の硬膜外レベルに投与する場合においては、不必要な神経のアブレーションまたは除神経の量を減らすのと同様に、注入数はさらに減らされる。
【００１７】
患者の心血管病態を治療する方法がさらに本明細書において提供され、この方法は、患者にオピオイド受容体アゴニストを投与することと、患者の第１〜第４胸椎レベルの１つ以上に位置する硬膜外腔に一過性受容体電位バニロイド１（ＴＲＰＶ１）受容体アゴニストを投与することと、を提供する。実施形態において、オピオイド受容体アゴニストはオピオイドであり、オピオイドはフェンタニールである。オピオイド受容体アゴニストの投与は、例えば、静脈内投与または腹腔内投与により行うことができる。オピオイド受容体アゴニストの投与は、ＴＲＰＶ１アゴニストの投与前に行うことができる。例えば、ＴＲＰＶ１アゴニストは、オピオイド受容体アゴニストの投与の直後、またはオピオイド受容体アゴニスト投与後の若干の時間、例えば、１、２、３、４、５、１０、１５、３０、４５、６０または９０分後に投与され得る。
【００１８】
オピオイド受容体アゴニストは、オピオイド受容体と結合し、オピオイド受容体を誘発する任意の化合物を含んでもよい。オピオイド受容体アゴニストは、オピオイドを含む。オピオイドは、例えば、モルヒネ、コデイン、ヒドロコドン、オキシコドン、フェンタニールおよびそれらの類似体などの天然型化合物および合成化合物の両方を含む。オピオイド受容体のある特定のクラスは、μ−オピオイド受容体である。具体的に、μ−オピオイド受容体アゴニストとしては、セブラノパドール、エルクサドリン、ヒドロコドン、ヒドロモルホン、レボルファノール、ロペラミド、メタドン、ナルブフィン、メペリジン、タペンタドール、コデイン、ＤＡＤＬＥ、ＤＡＭＧＯ、ジヒドロモルフィン、エンドモルフィン−１、エトニタゼン、フェンタニール、レボメサドン、モルヒネ、スフェンタニル、ブプレノルフィン、ブトルファノール、（−）−ペンタゾシン、無水アルビモパン、ジプレノルフィン、レバロルファン、メチルナルトレキソン、ナルメフェン、ナロルフィン、ナロキソン、ナルトレキソン、ナルトリベン、ナルトリンドールおよびクァダゾシンなどが挙げられる。本明細書において、フェンタニールは、その類似体である、スフェンタニル、アルフェンタニル、レミフェンタニルおよびロフェンタニルなどを含んでもよい。
【図面の簡単な説明】
【００１９】
本発明は、添付図面とあわせて以下の詳細な説明から、より十分に理解されるだろう。
【００２０】
【図１】レシニフェラトキシン（ＲＴＸ）の構造を示す。
【図２】異なる椎骨レベルの活性を示す添付画像により、図示した椎骨レベル、すなわち最初の４つの胸椎レベルでのＲＴＸ注入についてのＴＲＰＶ１受容体反応の強度を表す、ラットモデルの実験データを示す。
【図３】図３Ａは、ＲＴＸ無注入およびＲＴＸ注入ラット群についてのイソレクチンＢ４（ＩＢ４）およびＴＲＰＶ１反応を表す、ラットモデルの実験データを示す。    図３Ｂは、２６週間にわたって測定された、ＲＴＸ無処置（ビヒクル）群および硬膜外ＲＴＸ処置群についての平均動脈圧（ＭＡＰ）および腎交感神経活動（ＲＳＮＡ）を表す、ラットモデルの実験データを示す。    図３Ｃは、２６週間にわたって測定された、ＲＴＸ無処置（ビヒクル）群および心外膜ＲＴＸ処置群についてのＭＡＰおよびＲＳＮＡを表す、ラットモデルの実験データを示す。
【図４】ＴＲＰＶ１およびサブスタンスＰ（ＳＰ）の両方を染色したＴ２脊髄後角の画像を示し、ＲＴＸ注入を受けた対象を対照群と比較する。
【図５】スプラーグドーリーラット各４群：ビヒクルのみを投与したシャムラット（カラムＡ）、ＲＴＸを硬膜外投与したシャムラット（カラムＢ）、ビヒクルのみを投与した誘発慢性心不全（ＣＨＦ）のラット（カラムＣ）、およびＲＴＸを硬膜外投与した誘発慢性心不全（ＣＨＦ）のラット（カラムＤ）、（各群ｎ＝９〜１６）の心機能の実験データを示し、その実験データは、体重、心臓重量、心臓重量と体重（ＨＷ／ＢＷ）の比、湿肺重量と体重（ＷＬＷ／ＢＷ）の比、左室収縮末期圧（ＬＶＥＳＰ）、左室拡張末期圧（ＬＶＥＤＰ）、左室圧の最大一次導関数（ｄｐ／ｄｔｍａｘ）、左室圧の最小一次導関数（ｄｐ／ｄｔｍｉｎ）および梗塞サイズを含む。ビヒクル群のシャムと比べて統計的な有意値をアスタリスク（＊）で示し、ビヒクルのみの群のＣＨＦと比べて統計的な有意値をダガー（†）で示す。有意基準は両方とも、Ｐ＜０．０５レベルであった。
【図６】スプラーグドーリーラット各４群：ビヒクルのみを投与したシャムラット（カラムＥ）、ＲＴＸを心外膜投与したシャムラット（カラムＦ）、ビヒクルのみを投与した誘発慢性心不全（ＣＨＦ）のラット（カラムＧ）、およびＲＴＸを心外膜投与した誘発慢性心不全（ＣＨＦ）のラット（カラムＨ）、（各群ｎ＝２０〜２５）の心機能の実験データを示し、その実験データは、体重、心臓重量、心臓重量と体重（ＨＷ／ＢＷ）の比、湿肺重量と体重（ＷＬＷ／ＢＷ）の比、平均動脈圧（ＭＡＰ）、左室拡張末期圧（ＬＶＥＤＰ）、心拍数、左室圧の最大一次導関数（ｄｐ／ｄｔｍａｘ）、左室圧の最小一次導関数（ｄｐ／ｄｔｍｉｎ）および梗塞サイズを含む。ビヒクル群のシャムと比べて統計的な有意値をアスタリスク（＊）で示し、ビヒクルのみの群のＣＨＦと比べて統計的な有意値をダガー（†）で示す。有意基準は両方とも、Ｐ＜０．０５レベルであった。
【図７Ａ】２８週間にわたって、ＲＴＸ無処置（ｎ＝２０）および心外膜ＲＴＸ処置（ｎ＝１９）した誘発ＣＨＦラットの長期生存率を表す、ラットモデルの実験データを示す。
【図７Ｂ】２８週間にわたって、ＲＴＸ無処置（ｎ＝１０）および第１から第４胸椎レベルへの硬膜外ＲＴＸ処置（ｎ＝９）した誘発ＣＨＦラットの長期生存率を表す、ラットモデルの実験データを示す。
【図８】無処置のシャムラット、無処置の誘発ＣＨＦラット、心外膜ＲＴＸ処置した誘発ＣＨＦラット、硬膜外ＲＴＸ処置した誘発ＣＨＦラットについての動脈圧（ＡＢＰ）および心臓交感神経活動（ＣＳＮＡ）を表す、ラットモデルの実験データを示す。
【図９】シャムおよびビヒクルのみ、シャムおよびＲＴＸ、ＣＨＦおよびビヒクルのみ、ならびにＲＴＸ群のＣＨＦについての、心臓交感神経活動（ＣＳＮＡ）および腎交感神経活動（ＲＳＮＡ）に対する基礎的な心臓交感神経緊張を表す、ラットモデルの実験データを示す。いずれの場合においても、ビヒクルの投与またはＲＴＸとビヒクルの投与は硬膜外であった。ビヒクル群のシャムと比べて統計的な有意値をアスタリスク（＊）で示し、ビヒクルのみの群のＣＨＦと比べて統計的な有意値を番号記号（＃）で示す。有意基準は両方とも、Ｐ＜０．０５レベルであった。
【図１０】シャムおよびビヒクルのみ、シャムおよびＲＴＸ、ＣＨＦおよびビヒクルのみ、ならびにＲＴＸ投与群のＣＨＦについての収縮終期圧・容量関係（ＥＳＰＶＲ）を表す、ラットモデルの実験データを示す。いずれの場合においても、ビヒクルの投与またはＲＴＸとビヒクルの投与は硬膜外であった。ビヒクル群のシャムと比べて統計的な有意値（Ｐ＜０．０５レベル）を、アスタリスク（＊）によって示す。
【図１１】シャムおよびビヒクルのみ、シャムおよびＲＴＸ、ＣＨＦおよびビヒクルのみ、ならびにＲＴＸ投与群のＣＨＦについての拡張終期圧・容量関係（ＥＤＰＶＲ）を表す、ラットモデルの実験データを示す。いずれの場合においても、ビヒクルの投与またはＲＴＸとビヒクルの投与は硬膜外であった。ビヒクル群のシャムと比べて統計的な有意値をアスタリスク（＊）で示し、ビヒクルのみの群のＣＨＦと比べて統計的な有意値を番号記号（＃）で示す。有意基準は両方とも、Ｐ＜０．０５レベルであった。
【図１２】シャムおよびビヒクルのみ、シャムおよびＲＴＸ、ＣＨＦおよびビヒクルのみ、ならびにＲＴＸ投与群のＣＨＦ（ｎ＝５〜８）についての２４時間の平均動脈圧（ＭＡＰ）を表す、ラットモデルの実験データを示す。研究は、心筋梗塞の１０〜１２週後に実行した。
【図１３】図１３Ａは、ＲＴＸ処置した初期高血圧性の（すなわち、高血圧前症または軽症高血圧の）対象を特徴とするラットモデル、およびビヒクル処置のみの対照群の実験データから平均動脈圧（ＭＡＰ）示す。白抜き丸は対照群を示し、黒丸はＲＴＸ処置群を示す。グラフ上の矢印で示すように、０日目に注入することによりＲＴＸの硬膜外投与が行われる。アスタリスク（＊）および横線は、２つの集団間において有意差のあるデータを示す。    図１３Ｂは、ＲＴＸ処置した初期高血圧性の（すなわち、高血圧前症または軽症高血圧の）対象を特徴とするラットモデル、およびビヒクル処置のみの対照群の実験データからの収縮期動脈圧を示す。白抜き丸は対照群を示し、黒丸はＲＴＸ処置群を示す。グラフ上の矢印で示すように、０日目に注入することによりＲＴＸの硬膜外投与が行われる。アスタリスク（＊）および横線は、２つの集団間において有意差のあるデータを示す。    図１３Ｃは、ＲＴＸ処置した初期高血圧性の（すなわち、高血圧前症または軽症高血圧の）対象を特徴とするラットモデル、およびビヒクル処置のみの対照群の実験データからの拡張期動脈圧を示す。白抜き丸は対照群を示し、黒丸はＲＴＸ処置群を示す。グラフ上の矢印で示すように、０日目に注入することによりＲＴＸの硬膜外投与が行われる。アスタリスク（＊）および横線は、２つの集団間において有意差のあるデータを示す。
【図１４】図１４Ａは、ＲＴＸ処置群およびビヒクル処置のみの対照群を含む、確定高血圧を伴う自然発生高血圧ラット（ＳＨＲ）モデルの実験データからの平均動脈圧（ＭＡＰ）を示す。白抜き丸は対照群を示し、黒丸はＲＴＸ処置群を示す。グラフ上の矢印で示すように、０日目に注入することによりＲＴＸの硬膜外投与が行われる。いずれの場合においても、アスタリスク（＊）および横線は、２つの群間において有意差のあるデータを示す。    図１４Ｂは、ＲＴＸ処置群およびビヒクル処置のみの対照群を含む、確定高血圧を伴う自然発生高血圧ラット（ＳＨＲ）モデルの実験データからの収縮期動脈圧を示す。白抜き丸は対照群を示し、黒丸はＲＴＸ処置群を示す。グラフ上の矢印で示すように、０日目に注入することによりＲＴＸの硬膜外投与が行われる。いずれの場合においても、アスタリスク（＊）および横線は、２つの群間において有意差のあるデータを示す。    図１４Ｃは、ＲＴＸ処置群およびビヒクル処置のみの対照群を含む、確定高血圧を伴う自然発生高血圧ラット（ＳＨＲ）モデルの実験データからの拡張期動脈圧を示す。白抜き丸は対照群を示し、黒丸はＲＴＸ処置群を示す。グラフ上の矢印で示すように、０日目に注入することによりＲＴＸの硬膜外投与が行われる。いずれの場合においても、アスタリスク（＊）および横線は、２つの群間において有意差のあるデータを示す。
【図１５Ａ】Ｌ２〜Ｌ５領域の腰椎投与によってＲＴＸ処置した確定高血圧ラットモデルの実験データからの平均動脈圧（ＭＡＰ）をｍｍＨｇで示し、０日目のＲＴＸ投与とともに投与前の７日間および投与後の６０日間を示している。血圧測定は、１日あたり平均８時間である。
【図１５Ｂ】Ｌ２〜Ｌ５領域の腰椎投与によってＲＴＸ処置した確定高血圧ラットモデルの実験データからの心拍数（１分あたりの拍数）を示し、０日目のＲＴＸ投与とともに、投与前の７日間および投与後の６０日間を示している。血圧測定は、１日あたり平均８時間である。
【図１６】高血圧ラットの自由行動下血圧（ＡＢＰ）、ＭＡＰおよび心拍数を示し、ＲＴＸの投与前、投与中、投与後と経時的に示す。Ｔ１〜Ｔ４の各椎骨レベルにＲＴＸを投与する時間を、アスタリスクで示す。
【図１７】高血圧ラットの自由行動下血圧（ＡＢＰ）、ＭＡＰおよび心拍数を示し、７μｇ／ｋｇのフェンタニールを静脈内投与する前処置を受けた対象について、ＲＴＸの投与前、投与中、投与後と経時的に示す。Ｔ１〜Ｔ４の各椎骨レベルにＲＴＸを投与する時間を、アスタリスクで示す。
【図１８】高血圧ラット３群の比較データを示し、第１群（ｎ＝９）は前処置を受けず（ＲＴＸのみ）、第２群（ｎ＝７）は２０μｇ／ｋｇのフェンタニールを腹腔内投与する前処置を受け（ＲＴＸ＋ＩＰ  Ｆｅｎ（２０μｇ／ｋｇ））、第３群（ｎ＝５）は、３．５μｇ／ｋｇのフェンタニールを静脈内投与する前処置を受けた（ＩＶ  Ｆｅｎ（３．５μｇ／ｋｇ））。データは、ベースライン測定値を超えるＭＡＰおよび心拍数の変化を示す。
【図１９】高血圧ラット３群の比較データを示し、第１群（ｎ＝９）は前処置を受けず（ＲＴＸのみ）、第２群（ｎ＝７）は２０μｇ／ｋｇのフェンタニールを腹腔内投与する前処置を受け（ＲＴＸ＋ＩＰ  Ｆｅｎ（２０μｇ／ｋｇ））、第３群（ｎ＝５）は、３．５μｇ／ｋｇのフェンタニールを静脈内投与する前処置を受けた（ＩＶ  Ｆｅｎ（３．５μｇ／ｋｇ））。データは、各群の、処置前（ベースライン）、前処置を受けた群（「Ｆｅｎ」と指定）の前処置後、およびＲＴＸ処置後についてのＭＡＰを示す。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
本開示は、対象における心血管病態（複数可）を治療する方法に関し、該方法は、一過性受容体電位バニロイド１（ＴＲＰＶ１）アゴニストを患者の第１〜第４胸椎レベルの少なくとも１つ以上の硬膜外腔に投与することを含む。ある種の実施形態において、心血管病態はうっ血性心不全であってもよい。あるいは、心血管病態は、患者の心筋の瘢痕化でもあってもよい。あるいは、心血管病態は、高血圧、高血圧前症、または軽症高血圧からなる群から選択されてもよい。心血管病態は、重症高血圧もしくは薬剤耐性高血圧または難治性高血圧を含んでもよい。
【００２２】
さらに、本開示によるＴＲＰＶ１アゴニストの投与は、単一の椎骨レベルに行われてもよい。ある種の実施形態において、ＴＲＰＶ１アゴニストは、第１胸椎に近接した硬膜外腔に投与されてもよく、ＴＲＰＶ１アゴニストは、第２胸椎に近接した硬膜外腔に投与されてもよく、ＴＲＰＶ１アゴニストは、第３胸椎に近接した硬膜外腔に投与されてもよく、またはＴＲＰＶ１アゴニストは、第４胸椎に近接した硬膜外腔に投与されてもよい。
【００２３】
本開示は、さらに、対象において心血管病態を治療する方法に関し、該方法は、レシニフェラトキシン（ＲＴＸ）を患者の第１〜第４胸椎レベルの少なくとも１つの硬膜外腔に投与することを含む。ある種の実施形態において、心血管病態はうっ血性心不全であってもよい。あるいは、心血管病態は、患者の心筋の瘢痕化であってもよい。あるいは、心血管病態は、高血圧、高血圧前症、または軽症高血圧からなる群から選択されてもよい。あるいは、心血管病態は、重症高血圧または難治性高血圧からなる群から選択されてもよい。ある種の実施形態において、ＲＴＸは、第１胸椎に近接した硬膜外腔に投与されてもよく、ＲＴＸは、第２胸椎に近接した硬膜外腔に投与されてもよく、ＲＴＸは、第３胸椎に近接した硬膜外腔に投与されてもよく、またはＲＴＸは、第４胸椎に近接した硬膜外腔に投与されてもよい。
【００２４】
本開示は、対象を予防的に治療する方法であって、該対象が高血圧前症または軽症高血圧を有し、該方法が、該対象の胸椎に近接した硬膜外腔にＴＲＰＶ１アゴニストを投与することを含む、方法に関する。
【００２５】
本開示は、一部の実施形態において、対象を予防的に治療する方法であって、該対象が高血圧前症または軽症高血圧を有し、該方法が該対象の胸椎に近接した硬膜外腔にＲＴＸを投与することを含む、方法に関する。
【００２６】
本開示は、さらに、一部の実施形態において、患者の心血管病態を治療する方法であって、該方法が該患者の第１〜第４胸椎レベルの１つ以上の硬膜外腔に、約０．０６μｇ超かつ約３０μｇ未満の量のＲＴＸを投与することを含む、方法に関する。
【００２７】
本開示は、さらに、一部の実施形態において、患者の心血管病態を治療する方法であって、該方法が該患者の第１〜第４胸椎レベルの１つ以上の硬膜外腔に溶液を投与することを含み、該溶液が溶液１ミリリットル（ｍＬ）につき０．６〜１０μｇのＲＴＸを含む、方法に関する。ある種の実施形態において、該溶液は、約１００μＬ超かつ約３ｍＬ未満の量で、該１つ以上の椎骨レベルそれぞれに投与されてもよい。
【００２８】
ヒト対象について、「高血圧」という用語は、患者が（ｉ）１４０ｍｍＨｇ以上の収縮期血圧、および（ｉｉ）９０ｍｍＨｇ以上の拡張期血圧のいずれかまたはその両方を呈する病態を意味する。「高血圧前症」または「軽症高血圧」という用語は、患者が（ｉ）１２０ｍｍＨｇ以上１４０ｍｍＨｇ未満の収縮期血圧、および（ｉｉ）８０ｍｍＨｇ以上９０ｍｍＨｇ未満の拡張期血圧のいずれかまたはその両方を呈する病態を意味する。「重症高血圧」という用語は、患者が（ｉ）１８０ｍｍＨｇ以上の収縮期血圧、または（ｉｉ）１１０ｍｍＨｇ以上の拡張期血圧のいずれかまたはその両方を呈する病態を意味する。非ヒト対象について、「高血圧」「高血圧前症」「軽症高血圧」および「重症高血圧」という用語は、ヒト対象における前述のものに相当する非ヒト対象における持続血圧を意味する。「治療抵抗性高血圧」という用語は、患者の血圧が目標血圧を上回ったままであるため患者は少なくとも３つの異なる種類の降圧剤で併用療法中であり、降圧剤はそれぞれ最適用量で処方され、好ましくは３剤のうち少なくとも１つが利尿薬である、病態を意味する。
【００２９】
「硬膜外腔」という用語は、脊柱の椎骨と硬膜の間の空間の一部を意味する。用語「椎骨レベル」は、椎骨およびその椎骨に近接した脊柱の部分を意味する。椎骨レベルは、硬膜外腔、硬膜、および脊髄を含む椎骨の空間内部を含む。
【００３０】
椎骨レベルは数値的に示され、第１胸椎レベルは頸椎に近接した椎骨レベルであり、頭蓋骨に最も近い胸椎である。その呼称に従って、椎骨レベルの番号付けは、腰椎の方へ向かって脊椎を下に進む。胸椎は、Ｔ１〜Ｔ１２に指定されている。
【００３１】
心臓交感神経活動の上昇に対応する交感神経励起に関連した神経は、最初の４つの胸椎レベルで主に見られる（Ｅｖａｎｓ  ｅｔ  ａｌ．（１９５３）Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．２４９：７９１−７９６）。したがって、最初の４つの胸椎レベルのうち１つ以上に投与することは、心臓交感神経求心性神経活動に関連した神経が主に最初の４つの胸椎レベルに見られるため、有利な場合がある。これらの胸椎レベルを治療することによって、これらの交感神経求心性神経の除神経は実質的に達成され、それは他の椎骨レベルで神経を最小限または部分的に除神経またはアブレーションをするだけで達成される。図２は、図示した椎骨レベル（Ｔ１〜Ｔ４）にＲＴＸ注入した後のＴＲＰＶ１受容体の反応を示す。図２は、最初の４つの胸椎レベル内に投与する場合、バニロイド受容体強度の減少が、処置した４つの椎骨レベル、ならびに処置した椎骨レベルに近接した１つまたは２つの椎骨レベルに通常局在することを実証する。さらに、図に挿入された小画像は、Ｃ８からＴ５の椎骨レベルと比較して、Ｃ６、Ｃ７、Ｔ６、Ｔ７、およびＬ４の椎骨レベルで見られる活性強度がより大きいことを示す。
【００３２】
１つ、２つまたはそれ以上の各椎骨レベルへの注入によって、硬膜外腔への投与がなされる。２つの注入が行われる場合は、２つの注入は、椎骨の各側面に１つずつ注入することからなる場合がある（すなわち、両側性注入）。ヒト対象での実施形態において、投与は段階的に発生してもよく、すなわち、第一段階において、患者は、１つまたは２つの椎骨レベルで片側注入を受け、その後短い回復期間をとってもよい。その後、充分な効果が見られない場合、処置した椎骨レベルとは反対側、他の椎骨レベル、またはその両方に注入することにより、投与の後続段階が行われてもよい。投与は、医療注入／デバイスによって代替的に行われてもよい。ラットモデルにおいて、投与は、Ｔ１３〜Ｌ１胸椎領域でクモ膜下腔へのカテーテル挿入により、Ｔ１レベルへ進んだ後、引き戻し、所望の椎骨レベルで連続注入することによって行われた。
【００３３】
一実施形態において、ガイダンスのための蛍光透視法を使用して、硬膜外腔への注入のために硬膜外腔の方向へ針を皮膚に挿入することにより、ヒト対象は、ＲＴＸ（各椎骨レベルのそれぞれ側面に０．６〜１０μｇ／ｍＬ、１００μＬ〜１．５ｍＬ）硬膜外注入を受けることができる。一実施形態において、まず１つ以上の椎骨レベルの片側への注入により患者を処置してもよい。続いて、大きな効果が必要とされる場合には、（前回の椎骨）レベルまたは別のレベルで反対側面に注入することにより患者を処置してもよい。片側の椎骨レベルの治療は、単一結節腫を主に治療してもよい。限られた数の神経節による初期治療、次いで、必要であれば、治療を増加させることで神経アブレーションに伴う副作用を制御することができる。
【００３４】
さらに、他の薬の投与後、またはその直前に、ＲＴＸを並行して送達できる。例えば、ＲＴＸ送達の直前に、特定のオピオイドまたは他の薬剤を投与することは、血圧および／または心拍数の短期的な有害変化を減少または鈍化させ得る。したがって、オピオイド（例えばフェンタニールまたは他の薬剤）は、既知のルート、例えば、静注、経口、頬、腹膜、直腸または他のルートを介して与えられてもよい。
【００３５】
本開示は、以下の実施例に対する参照によってさらに理解され得る。これらの実施例は、本開示の様々な実施形態を示すが、単に例示目的として示されるものと理解すべきである。
【実施例】
【００３６】
慢性心不全対象の処置
以下の実施例１から９は、誘発ＣＨＦラットのデータについて述べる。本実施例は、ＣＨＦ対象におけるＲＴＸ処置と関連した多くの指標の改善を示す。本ラットモデルは、ＲＴＸ心外膜投与および各種対照群と比べた、ＲＴＸ硬膜外投与の比較を提供する。心外膜データのために、誘発心筋梗塞（冠状動脈結紮）を開腹手術する際に同時に、ＲＴＸをスワブで直接心外膜に投与した。
【００３７】
ＲＴＸの硬膜外投与のために、小さい正中切開が、Ｔ１３−Ｌ１胸椎領域でなされた。表層性筋の切開の後に、２つの小開口（約２ｍｍ×２ｍｍ）をＴ１３椎骨の左側面および右側面に作った。ポリエチレンカテーテル（ＰＥ−１０）を左穴よりクモ膜下腔に挿入し、徐々に、左Ｔ１レベルへ約５．５〜６ｃｍ進めた所で、最初の注入（６μｇ／ｍＬ、１０μＬ）をＲＴＸの拡散を最小化するために非常に遅い速度で行った。次いで、カテーテルを、左Ｔ２、Ｔ３およびＴ４の方へそれぞれ約０．５ｃｍ引き戻し、各分節に連続注入（各１０μＬ）を実施した。次いで、カテーテルを引き抜き、同じ注入を、右側で繰り返した。シリコーンジェルを使用し、Ｔ１３椎骨の穴を封止した。筋肉を覆う皮膚を３−０ポリプロピレン縫合糸で閉じた。単純結節縫合を使用し、皮膚を閉じた。
【００３８】
実施例１
図３Ａ〜４Ｂは、本出願の実施形態に従いラット研究の実験結果を示す。図３Ａは、硬膜外ＲＴＸ無注入ラット群および硬膜外ＲＴＸ注入ラット群でのイソレクチンＢ４（ＩＢ４）およびＴＲＰＶ１反応を表す、ラットモデルの実験データを示す。図３Ｂは、２６週間にわたって測定された、ＲＴＸ無処置（ビヒクル）群および硬膜外ＲＴＸ処置群での平均動脈圧（ＭＡＰ）および腎交感神経活動（ＲＳＮＡ）を表す、ラットモデルの実験データを示す。図３Ｃは、２６週間にわたって測定された、ＲＴＸ無処置（ビヒクル）群および心外膜ＲＴＸ処置群についてのＭＡＰおよびＲＳＮＡを表す、ラットモデルの実験データを示す。
【００３９】
図３Ａは、視覚的に明白な発現増加を示すビヒクルのみの処置と比較して、ＲＴＸ処置後の様々なサイズのＤＲＧ神経細胞におけるイソレクチンＢ４（ＩＢ４）およびＴＲＰＶ１の発現減退を示す。図３Ｂは、ＲＴＸ無処置群およびＲＴＸ処置群のＣＳＡＲ活性化に対する反応を示す。図３Ｂは、平均動脈圧（ＭＡＰ）および腎交感神経活動（ＲＳＮＡ）でのＲＴＸの作用が長期に及ぶことを示している。硬膜外ＲＴＸ投与の後、ＲＴＸ無処置（ビヒクル）の対照ラットと比較して、ＭＡＰおよびＲＮＳＡの両方は大幅減少を示す。その大幅減少は、１週、５〜６週、９〜１１週および２４〜２６週に観察される。
【００４０】
図３Ｃは、ＲＴＸの心外膜投与を使用したラット研究の実験データを示す。図３Ｃは、心外膜ＲＴＸ投与後の心臓交感神経求心性神経アブレーションはわずか約３〜４ヵ月間だったことを示す。図３Ｂは、硬膜外ＲＴＸ投与後の心臓交感神経求心性神経アブレーションは少なくとも６ヵ月間だったことを示す。
【００４１】
実施例２
図４は、本出願の実施形態に従いラット研究の実験結果を示す。図４は、ＴＲＰＶ１およびサブスタンスＰ（ＳＰ）の両方を染色したＴ２脊髄後角の画像を示し、ＲＴＸ注入を受けた対象を対照群と比較する。Ｔ１〜Ｔ４のＤＲＧレベルでのＲＴＸの硬膜外塗布は、胸髄後角に突き出ている、ほとんどすべてのＳＰ−含有Ｃ線維求心性神経（ペプチド作動性）およびイソレクチンＢ４（ＩＢ４）陽性Ｃ線維求心性神経（非ペプチド作動性）の大部分を、切断した。図４は、ＴＲＰＶ１タンパク質の発現減少および細胞体を含むＩＢ４の破壊を示し、これは小径神経細胞が切断されたことを示唆する。ＳＰを発現する脊髄後角の神経細胞をＲＴＸにより切断した。ＩＢ４は小径求心性神経の指標であり、ＳＰは神経炎症の指標である。いずれの場合においても、対照群と比較して、ＲＴＸ処置対象群の画像におけるシグナルの減少から、発現の減少は目にみえて明らかである
【００４２】
実施例３
図５は、本出願の実施形態に従いラット研究の実験結果を示す。図５は、スプラーグドーリーラットの各４群：ビヒクルのみを投与したシャムラット（カラムＡ）、ＲＴＸを硬膜外投与したシャムラット（カラムＢ）、ビヒクルのみを投与した誘発慢性心不全（ＣＨＦ）のラット（カラムＣ）、およびＲＴＸを硬膜外投与した誘発慢性心不全（ＣＨＦ）のラット（カラムＤ）（各群ｎ＝９〜１６）の心機能の実験データを示す。その実験データは、体重、心臓重量、心臓重量と体重（ＨＷ／ＢＷ）の比、湿肺重量と体重（ＷＬＷ／ＢＷ）の比、左室収縮末期圧（ＬＶＥＳＰ）、左室拡張末期圧（ＬＶＥＤＰ）、左室圧の最大一次導関数（ｄｐ／ｄｔｍａｘ）、左室圧の最小一次導関数（ｄｐ／ｄｔｍｉｎ）および梗塞サイズを含む。ビヒクル群のシャムと比べて統計的な有意値をアスタリスク（＊）で示し、ビヒクルのみの群のＣＨＦと比べて統計的な有意値をダガー（†）で示す。有意基準は両方とも、Ｐ＜０．０５レベルであった。「ＣＨＦ＋ビヒクル」と表したカラムは、誘発慢性心不全対照ラットの様々な指標を示す。「ＣＨＦ＋ＲＴＸ」と表したカラムは、硬膜外ＲＴＸ注入を受けた誘発慢性心不全ラットの様々な指標を示す。「シャム＋ビヒクル」および「シャム＋ＲＴＸ」と表したカラムは、硬膜外ＲＴＸ処置した誘発慢性心不全を伴わないシャムラットと、硬膜外ＲＴＸ処置しない誘発慢性心不全を伴わないシャムラットを、それぞれ比較する。
【００４３】
カラムＣおよびＡの比較は、試験されたラット群について、以下の慢性心不全に関する統計的に有意な効果を示す。：心臓重量、体重（心肥大に合わせた）に対する割合としての心臓重量、体重（肺うっ血に合わせた）に対する割合としての湿肺重量、および左室拡張末期圧における大幅増加、心筋収縮力の減少を示す、左室圧の最大一次導関数（ｄｐ／ｄｔｍａｘ）および左室圧の最小一次導関数（ｄｐ／ｄｔｍｉｘ）の大幅減少（絶対項において）。これらの結果はそれぞれ、慢性心不全において予想される心臓の弱体化と一致している。カラムＤは、ＲＴＸ硬膜外投与を受けた群が、心臓重量、体重に対する割合としての心臓重量、体重に対する割合としての湿肺重量、左室拡張末期圧、および左室圧最小一次導関数（ｄｐ／ｄｔｍｉｎ）に関して、統計学的に有意な心臓血管機能の改善を示すことを示す。特に、シャムと比較して慢性心不全群では３８０％の上昇を示す、左室拡張末期圧が、ＲＴＸ処置後に６０％だけ上昇を示した。カラムＣおよびＤにおいて見られる梗塞サイズの類似性（統計的に有意でない差）は、結果の改善が対象の梗塞のサイズによって説明できないことを示唆する。
【００４４】
図６は、比較のために心外膜投与によるＲＴＸでの処置を示す。図６は、スプラーグドーリーラット各４群：ビヒクルのみを投与したシャムラット（カラムＥ）、ＲＴＸを心外膜投与したシャムラット（カラムＦ）、ビヒクルのみを投与した誘発慢性心不全（ＣＨＦ）のラット（カラムＧ）、およびＲＴＸを心外膜投与した誘発慢性心不全（ＣＨＦ）のラット（カラムＨ）（各群ｎ＝２０〜２５）の心機能の実験データを示す。実験データは、体重、心臓重量、心臓重量と体重（ＨＷ／ＢＷ）の比、湿肺重量と体重（ＷＬＷ／ＢＷ）の比、平均動脈圧（ＭＡＰ）、左室拡張末期圧（ＬＶＥＤＰ）、心拍数、左室圧の最大一次導関数（ｄｐ／ｄｔｍａｘ）、左室圧の最小一次導関数（ｄｐ／ｄｔｍｉｎ）および梗塞サイズを含む。ビヒクル群のシャムと比べて統計的な有意値をアスタリスク（＊）で示し、ビヒクルのみの群のＣＨＦと比べて統計的な有意値をダガー（†）で示す。有意基準は両方とも、Ｐ＜０．０５レベルであった。
【００４５】
図６カラムＨと図５カラムＤとの比較により、硬膜外投与によって得られる結果は、心外膜投与によって得られる結果と同等、または場合によっては（例えば左室拡張末期圧）より良好であることが認められた。上述のように、硬膜外処置には、投与の容易さおよび処置による潜在的な副作用について心外膜処置に勝る多くの利点があり、心外膜処置に伴う一過性の効果に比べると持続的な生理学的効果をももたらす。したがって、一部の患者にとっては、心外膜処置に少なくとも同等の有効性を有する硬膜外処置が好ましい。
【００４６】
実施例４
図７は、本出願の実施形態に従いラット研究の実験結果を示す。図７Ａは、２８週間にわたって、ＲＴＸ無処置（ｎ＝２０）および心外膜ＲＴＸ処置（ｎ＝１９）した誘発ＣＨＦラットの長期生存率を表す、ラットモデルの実験データを示す。図７Ｂは、２８週間にわたって、ＲＴＸ無処置（ｎ＝１０）および第１から第４胸椎レベルへの硬膜外ＲＴＸ処置（ｎ＝９）した誘発ＣＨＦラットの長期生存率を表す、ラットモデルの実験データを示す。図７は、ＲＴＸ処置した誘発慢性心不全ラットおよびＲＴＸ無処置の誘発慢性心不全ラットの生存率を示す。図７Ａにおいて、処置は、心外膜だった。図７Ｂにおいて、処置は、硬膜外だった。図７Ｂに示すとおり、硬膜外ＲＴＸで処置されたラットの長期生存率は、ＲＴＸで処置されなかったラットの生存率より有意に高かった。特に、ＲＴＸ無処置では、１０匹のラットのうち７匹が、２８週間の間に死んだ。しかし、ＲＴＸ処置した９匹のラットのうち２匹だけ、同期間に死んだ。さらに、硬膜外処置は、心外膜処置で報告されたものとおよそ同等の改善を示した。
【００４７】
実施例５
図８は、本出願の実施形態に従いラット研究の実験結果を示す。図８は、無処置のシャムラット、無処置の誘発ＣＨＦラット、心外膜ＲＴＸ処置した誘発ＣＨＦラット、硬膜外ＲＴＸ処置した誘発ＣＨＦラットについての動脈圧（ＡＢＰ）および心臓交感神経活動（ＣＳＮＡ）を表す、ラットモデルの実験データを示す。図８は、ＣＨＦ群でのＣＳＮＡの増加を示し、心外膜および硬膜外両方のＲＴＸ処置は、未治療のＣＨＦ群と比較して大幅なＣＳＮＡの減少を示したが、硬膜外ＲＴＸ処置は、心外膜ＲＴＸ処置より大幅に低いＣＳＮＡを示した。
【００４８】
実施例６
図９は、本出願の実施形態に従いラット研究の実験結果を示す。図９は、シャムおよびビヒクルのみ、シャムおよびＲＴＸ、ＣＨＦおよびビヒクルのみ、ならびにＲＴＸ群のＣＨＦについての、心臓交感神経活動（ＣＳＮＡ）および腎交感神経活動（ＲＳＮＡ）に対する基礎的な心臓交感神経の緊張を表す、ラットモデルの実験データを示す。いずれの場合においても、ビヒクルの投与またはＲＴＸとビヒクルの投与は硬膜外であった。ビヒクル群のシャムと比べて統計的な有意値をアスタリスク（＊）で示し、ビヒクルのみの群のＣＨＦと比べて統計的な有意値を番号記号（＃）で示す。有意基準は両方とも、Ｐ＜０．０５レベルであった。図９は、心臓交感神経活動（ＣＳＮＡ）および腎交感神経活動（ＲＳＮＡ）に対する基礎的な心臓交感神経の緊張を表す。誘発ＣＨＦは、心臓交感神経緊張の大幅増加を引き起こし、それは、ＲＴＸで処置されたラット群によって示されなかった。未治療のＣＨＦ群集と比較した、ＲＴＸ処置したＣＨＦ群の値の差異は、統計的に有意だったが、ＲＴＸ処置したＣＨＦ群と非ＣＨＦ群との間の差異は、統計的に有意でなかった。
【００４９】
実施例７
図１０は、本出願の実施形態に従いラット研究の実験結果を示す。図１０は、シャムおよびビヒクルのみ、シャムおよびＲＴＸ、ＣＨＦおよびビヒクルのみ、ならびにＲＴＸ投与群のＣＨＦについての収縮終期圧・容量関係（ＥＳＰＶＲ）を表す、ラットモデルの実験データを示す。いずれの場合においても、ビヒクルの投与またはＲＴＸとビヒクルの投与は硬膜外であった。ビヒクル群のシャムと比べて統計的な有意値（Ｐ＜０．０５レベル）を、アスタリスク（＊）によって示す。図１０は、収縮終末期圧・容量関係（ＥＳＰＶＲ）を示し、心臓の収縮機能に相関している。ＣＨＦは、ＥＳＰＶＲの減退に対応し、硬膜外ＲＴＸにより無影響と現れた。類似の結果は、心外膜ＲＴＸ処置に対して見られた。（Ｗａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．（２０１４）Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ  ６４（４）：７４５−７５）
【００５０】
実施例８
図１１は、本出願の実施形態に従いラット研究の実験結果を示す。図１１は、シャムおよびビヒクルのみ、シャムおよびＲＴＸ、ＣＨＦおよびビヒクルのみ、ならびにＲＴＸ投与群のＣＨＦついての拡張末期圧・容量関係（ＥＤＰＶＲ）を表す、ラットモデルの実験データを示す。いずれの場合においても、ビヒクルの投与またはＲＴＸとビヒクルの投与は硬膜外であった。ビヒクル群のシャムと比べて統計的な有意値をアスタリスク（＊）で示し、ビヒクルのみの群のＣＨＦと比べて統計的な有意値を番号記号（＃）で示す。有意基準は両方とも、Ｐ＜０．０５レベルであった。
【００５１】
図１１は、拡張末期圧・容量関係（ＥＤＰＶＲ）を示し、心臓の拡張機能に相関している。ＣＨＦは、ＥＤＰＶＲの上昇に対応する。図１１は、ＲＴＸ処置したＣＨＦ群のＥＤＰＶＲは、未治療のＣＨＦ群と比べて統計的に有意に小さかったが、ＲＴＸ処置したＣＨＦ群とＣＨＦのない群との間のＥＤＰＶＲ差は、統計的に有意ではなかったことを示す。
【００５２】
実施例９
図１２は、本出願の実施形態に従いラット研究の実験結果を示す。図１２は、シャムおよびビヒクルのみ、ＣＨＦおよびビヒクルのみ、ならびにＲＴＸを硬膜外投与したＣＨＦ群の２４時間の平均動脈圧（ＭＡＰ）を表す、ラットモデルの実験データを示す。各群、ｎ＝６−８である。研究は、心筋梗塞後の１０〜１２週間に実行した。図１２は、２４時間の平均動脈圧（ＭＡＰ）を示す。硬膜外ＲＴＸによる処置は、ＣＨＦラット群の低ＭＡＰに対応する。
【００５３】
高血圧および高血圧前症の対象の治療
実験データはまた、ラットモデルを使用して高血圧および高血圧前症の対象（すなわち、軽症高血圧または初期高血圧）のための良好な治療を示した。高血圧性モデルは、遺伝的な自然発生高血圧ラット（ＳＨＲ）である。初期高血圧ラットは、生後８週で処置され、血圧が実験の始めに最小限上昇した群を反映する。実施例１０および１１は、高血圧および高血圧前症の対象（すなわち、軽度の高血圧または初期高血圧）および誘発ＣＨＦのない対象の治療について示す。これらの対象にとって、ＲＴＸの硬膜外投与は血圧の完全な減少と関連し得る。さらに、ＲＴＸで処置された対象は、対照群と比較して、時間とともに血圧上昇は小さいことがある。または、処置が血圧を完全に低下させ、時間とともに上昇も弱まっていることの両方に関連することがある。
【００５４】
実施例１０
図１３は、初期高血圧のラットを使用した研究の実験結果を示す。図１３Ａは、ＲＴＸ処置した初期高血圧性の（すなわち、高血圧前症または軽症高血圧の）対象を特徴とするラットモデル、およびビヒクル処置のみの対照群の実験データから平均動脈圧（ＭＡＰ）示す。白抜き丸は対照群を示し、黒丸はＲＴＸ処置群を示す。各グラフ上の矢印で示すように、０日目に注入することによりＲＴＸの硬膜外投与が行われる。アスタリスク（＊）および横線は、２つの集団間において有意差のあるデータを示す。図１３Ｂは、ＲＴＸ処置した初期高血圧性の（すなわち、高血圧前症または軽症高血圧の）対象を特徴とするラットモデル、およびビヒクル処置のみの対照群の実験データからの収縮期動脈圧を示す。白抜き丸は対照群を示し、黒丸はＲＴＸ処置群を示す。各グラフ上の矢印で示すように、０日目に注入することによりＲＴＸの硬膜外投与が行われる。アスタリスク（＊）および横線は、２つの集団間において有意差のあるデータを示す。図１３Ｃは、ＲＴＸ処置した初期高血圧性の（すなわち、高血圧前症または軽症高血圧の）対象を特徴とするラットモデル、およびビヒクル処置のみの対照群の実験データからの拡張期動脈圧を示す。白抜き丸は対照群を示し、黒丸はＲＴＸ処置群を示す。各グラフ上の矢印で示すように、０日目に注入することによりＲＴＸの硬膜外投与が行われる。アスタリスク（＊）および横線は、２つの集団間において有意差のあるデータを示す。
【００５５】
図１３Ａは、上述の実験中に測定される平均動脈圧（ＭＡＰ）を示し、ＲＴＸ注入の後はわずかに減少する。しかし、それ以上に有意なのは、ＲＴＸ注入を受けたラット群が研究期間中ほぼ安定したＭＡＰを示したが、ビヒクルのみの群で報告されるＭＡＰは同期間中増加し続けた。その結果、図１３Ａのアスタリスクおよび線によって示されるように、ＲＴＸ処置群についてのＭＡＰは２０日目およびそれ以降、有意に減少した。
【００５６】
図１３Ｂは、上述の研究中の収縮期動脈圧を示す。図１３Ｂは、収縮期動脈圧が、ほぼ同じ血圧に回復する前に、ＲＴＸ注入後数日以内にわずかに低下し、研究期間の間、その血圧を維持したことを示す。それに対し、ビヒクルのみの群の収縮期動脈圧は、研究期間を通して上昇し続けた。約２３日目までおよびそれ以降、ＲＴＸ処置群は、対照群より有意に低い血圧を示した。
【００５７】
図１３Ｃは、上述の研究中の拡張期動脈圧を示す。図１３Ｃは、ＲＴＸ処置群において、拡張期動脈圧が研究期間にわたってほぼ安定したままだったことを示す。それに対し、ビヒクルのみの群の拡張期動脈圧は、研究期間にわたって上昇し続けた。約２２日目までまたはそれ以降、ＲＴＸ処置群は、対照群に比べて有意に低い血圧を示した。
【００５８】
実施例１１
図１４Ａ〜１４Ｃは、さらに、（ＳＨＲ）モデルを使用した研究の実験結果を示す。図１４Ａは、ＲＴＸ処置群およびビヒクル投与のみの対照群を含む、確定高血圧を伴う自然発生高血圧ラット（ＳＨＲ）モデルの実験データからの平均動脈圧（ＭＡＰ）を示す。確定高血圧ラットは、生後１６週で処置され、血圧がＲＴＸ投与の最初で上昇した群を反映する。白抜き丸は対照群を示し、黒丸はＲＴＸ処置群を示す。各グラフ上の矢印で示すように、０日目に注入することによりＲＴＸの硬膜外投与が行われる。いずれの場合においても、アスタリスク（＊）および横線は、２つの群間において有意差のあるデータを示す。図１４Ｂは、ＲＴＸ処置群およびビヒクル処置のみの対照群を含む、自然発生高血圧ラット（ＳＨＲ）モデルの実験データからの収縮期動脈圧を示す。白抜き丸は対照群を示し、黒丸はＲＴＸ処置群を示す。各グラフ上の矢印で示すように、０日目に注入することによりＲＴＸの硬膜外投与が行われる。いずれの場合においても、アスタリスク（＊）および横線は、２つの群間において有意差のあるデータを示す。図１４Ｃは、ＲＴＸ処置群およびビヒクル処置のみの対照群を含む、自然発生高血圧ラット（ＳＨＲ）モデルの実験データからの拡張期動脈圧を示す。白抜き丸は対照群を示し、黒丸はＲＴＸ処置群を示す。各グラフ上の矢印で示すように、０日目に注入することによりＲＴＸの硬膜外投与が行われる。いずれの場合においても、アスタリスク（＊）および横線は、２つの群間において有意差のあるデータを示す。これらの対象は、心筋梗塞を誘発するために処置しなかった。データは、ビヒクルのみ注入したＳＨＲラット（ｎ＝７）とビヒクルおよびＲＴＸを注入したＳＨＲラット（ｎ＝７）の比較を可能にした。
【００５９】
図１４Ａは、注入前の試験最初の数日間に示されたベースラインレベルと比較して、注入後数日以内で平均動脈圧（ＭＡＰ）がＲＴＸ処置ラットにおいて若干の減少を示したことを表す。このＭＡＰの減少は、５５日の研究期間を通じて観察された。約８日目まで、図１４Ａのアスタリスクおよび線によって示されるように、減少は、ビヒクルのみの群と比較して有意だった。残りの研究の間中、この有意差は見られた。さらに、ビヒクルのみの群は、ＭＡＰで上昇傾向を経験し、それはＲＴＸ処置群において見られなかった。図１４Ｂは、同群の収縮期動脈圧を示す。ここでもまた、注入前の試験最初の７日間により示されたベースラインレベルと比較すると、ＲＴＸ処置群は注入後の減少を報告した。残りの研究の間中、この血圧の低下は維持された。ＲＴＸ処置群は、約７日目まで、およびそれ以降、ビヒクルのみの群に比べて有意な差を示した。さらに、ビヒクルのみの群は、研究の過程で血圧がより顕著な上昇を示した。図１４Ｃは、同群の拡張期動脈圧を示す。ここでもまた、注入前の試験最初の７日間により示されたベースラインレベルと比較すると、ＲＴＸ処置群は注入後の減少を報告した。残りの研究の間中ずっと、この血圧の低下は維持された。ＲＴＸ処置群は、約８日目まで、およびそれ以降、ビヒクルのみの群に比べて有意な差を示した。さらに、ビヒクルのみの群は、研究の過程で血圧がより顕著な上昇を示した。
【００６０】
実施例１１は、ＲＴＸ処置に反応した確定高血圧ラットを示す。処置前、確定高血圧ラットの平均ＭＡＰは、初期高血圧ラットの平均ＭＡＰより約１０〜１５ｍｍＨｇ高かった。図１４Ａと図１３Ａの比較。処置後、確定高血圧ラットと初期高血圧ラットは両方、約１２５〜１３０ｍｍＨｇの類似のＭＡＰを示した。これらの結果は、初期高血圧ラットと確定高血圧ラット両方に対する利点を実証する。
【００６１】
実施例１２
実施例１２は、ＲＴＸ投与をラット群の腰部（Ｌ２〜Ｌ５）に実施した実験について説明する。実施例１２は、腰部への投与は、第１〜第４胸椎レベルへの投与で得られる持続的な高血圧治療を達成しない。
【００６２】
図１５Ａは、Ｌ２〜Ｌ５領域の腰椎投与によってＲＴＸ処置した確定高血圧ラットモデルの実験データからの平均動脈圧（ＭＡＰ）をｍｍＨｇで示し、０日目に行ったＲＴＸ投与とともに投与前の７日間および投与後の６０日間を示している。図１５Ａは、ＭＡＰは、腰椎注入の後すぐに減少したが、その後増加し始め、処置後、約１５〜２０で、最初（注入前）のベースラインに戻ったことを示す。血圧は、研究期間の終了まで、注入前ベースラインレベルを上回って上昇し続けた。
【００６３】
図１５Ｂは、Ｌ２〜Ｌ５領域の腰椎投与を介してＲＴＸ処置した確定高血圧ラットモデルの実験データからの心拍数（１分あたりの拍数）を示し、０日目のＲＴＸ投与とともに、投与前の７日間および投与後の６０日間を示している。図１５Ｂは、ＲＴＸ注入後の心拍数の上昇を示し、注入後約２〜１０日で鎮静する。
【００６４】
さらに、ＴＲＰＶ１求心性神経のための免疫蛍光研究は、投与の後、Ｌ２〜Ｌ５レベルで行われた。処置後、Ｌ２〜Ｌ５レベル内で、ＤＲＧニューロンは、ほとんどのＴＲＰＶ１求心性神経の消失を示した。Ｌ１は強力な蛍光を示し、多数のＴＲＰＶ１求心性神経が残っていることを示している。Ｔ１〜Ｔ５レベル内で、Ｌ２〜Ｌ５注入の後、ＴＲＰＶ１求心性神経の減少は見られなかった。心臓内で、ＴＲＰＶ１蛍光は、心筋の表面および心臓組織内に残った。免疫蛍光研究は、腰椎投与の効果が局所的であり、心臓組織または無処置の椎骨レベル内で有意な除神経もたらさなかったことを示した。
【００６５】
実施例１２は、Ｌ２〜Ｌ５椎骨レベルへの投与後に、Ｔ１〜Ｔ４椎骨レベルへの処置に伴う持続的な高血圧の低下が見られなかったことを実証する。さらに、免疫蛍光研究により、ＴＲＰＶ１除神経は、Ｌ２〜Ｌ５の処置後、局在したことが確認された。
【００６６】
一過性の血圧上昇および心拍数上昇への対処
本開示に従って実施される実験により、本明細書に記載のＴＲＰＶ１アゴニスト（例えばＲＴＸ）の投与が、血圧、心拍数、またはその両方の一過性の上昇を引き起こし得ることが実証された。この一過性の上昇は、ＲＴＸ注入後に発生することがあり、数分間、例えば約５分または１０分間、持続することがある。この上昇は、特に高血圧など隠れた心臓病態の患者に有害作用がある場合があり、そのような患者には現在治療を受け得る多くの患者が含まれると思われる。
【００６７】
本開示に従って実施された実験により、一過性の血圧上昇と心拍数が、オピオイド受容体アゴニスト、より具体的にはμ−オピオイド受容体アゴニストでの前処置により軽減または除去され得ることもまた実証された。後述のように、実施例１４において、μ−オピオイド受容体アゴニストフェンタニールを使用して試験を実施した。この投与により、一過性の血圧および心拍数上昇が軽減または除去されることが判った。
【００６８】
いかなる特定の理論にも拘束されることを望むものではないが、μ−オピオイド受容体アゴニストの投与により、脊柱後角のオピオイド受容体の活性化がもたらされることがあり、それよって一過性の交感神経の励起を抑制する。さらに、アゴニストは、ＲＴＸ投与に伴う痛覚入力を阻害し得る。
【００６９】
実施例１３
実施例１３は、オピオイド受容体アゴニストによる対象の前処置が、ＲＴＸ注入後に見られる平均血圧、ＭＡＰおよび心拍数の短期上昇を制御するために使用するできることを実証する。本文脈において、Ｔ１〜Ｔ４椎骨レベルへの硬膜外ＲＴＸ投与は、血圧および心拍数の短期上昇を起こすことがある。図１６は、図上のアスタリスクで示した各注入時間ともに、Ｔ１〜Ｔ４椎骨レベルへの投与後の実験結果を示す。結果は、ＡＢＰ、ＭＡＰおよび心拍数が短期間に大幅に上昇し、注入後も数分間にわたって継続したことを実証した。この短期上昇は、患者にとって不快症状を伴うことがあり、極端な場合、患者、特にすでに極度の高血圧または他の心臓病態を呈する患者に害を及ぼすことがある。
【００７０】
実施例１３は、この短期の血圧および心拍数の上昇が、フェンタニールを使用して患者を前処置することによって軽減または除去できることを示している。本研究では、静脈注入および腹腔内注入を使用して前処置を実施した。投与の適切な形態は、処置される対象に基づいて選択されてもよい。例えば、ヒト患者においては、一般的に静脈内投与が好ましい場合がある。図１７は、７μｇ／ｋｇのフェンタニール静脈内投与（ＩＶ）による前処置を示す。前と同じように、アスタリスクは、ＲＴＸ注入がなされた時間を示す。結果は、特にフェンタニールを投与されなかった対象において見られた上昇と比較すると、前処置を受けた対象では、ＲＴＸ投与後にＡＢＰ、ＭＡＰおよび心拍数はほとんどまたは全く短期上昇を示さないことが実証された（図１６）。
【００７１】
実施例１４
実施例１４はさらに、短期血圧および心拍数の上昇を制御する手段として、ＲＴＸ投与前のオピオイド前処置を示す。研究は、高血圧ラットモデルを使用した。研究において、第１群は前処置を受けなかった。第２群は、２０μｇ／ｋｇのフェンタニールを腹腔内注入で前処置した。第３群は、３．５μｇ／ｋｇのフェンタニールを静脈内投与で前処置した。図１８は、３群のそれぞれのＭＡＰおよび心拍数測定値の転換ベースラインを示す。結果は、前処置のない群では平均約３０ｍｍＨｇおよび７０ｂｐｍ短期上昇したことを示した。２０μｇ／ｋｇのフェンタニールで腹腔内注入の前処置を受けた群は、前処置のない群と比較して、ＭＡＰのごくわずかな上昇および心拍数の有意に少ない上昇を実証した。３．５μｇ／ｋｇのフェンタニールで静脈内投与の前処置を受けた群は、ＭＡＰおよび心拍数の減少を示した。
【００７２】
図１９は、処置された各群のＭＡＰに対する絶対数を示す。図１９は、処置前（ベースライン）、前処置後（前処置をうけている群の場合は「Ｆｅｎ」）、およびＲＴＸ投与後の心拍数を示す。図１９は、オピオイド受容体アゴニストの単独投与が血圧のわずかな減少をもたらしたことを示す。しかし、ＲＴＸ処置前のＭＡＰの減少は、緩和されたＲＴＸ後の反応を得るのに必要ではなかった。すなわち、オピオイド受容体アゴニストの投与は、患者の血圧が比較的安定するように設定することができる。血圧変動の減少は、完全な減少に伴う利点に加えて、さらなる恩恵を患者に提供してもよい。
【００７３】
実施例１４は、フェンタニールによる前処置により、ＲＴＸ注入に伴う短期の血圧および心拍数の上昇を劇的に低下させ、または、血圧および心拍数の短期減少を達成したといってもよい程度にまで戻すことができることを実証する。結果は、静脈内および腹腔内処置は両方とも有効であってもよく、必要とされる用量は２つの投与形態では大きく異なることを実証する。結果は、腹腔内投与より、静脈内投与の方が少量のフェンタニールですむことを示す。
【００７４】
参照による援用
本出願全体を通じて引用され得るすべての引用文献（文献参照、特許、特許出願およびウェブサイトを含む）の内容は、その箇所で引用される文献と同様にその全体が参照により本明細書に明白に組み込まれる。本発明の実施は、特に指示がない限り、当技術分野において周知の手術、心臓学、放射線学、および画像下治療の従来技術を使用する。
【００７５】
等価物
本発明は、その精神または本質的な特徴を逸脱しない範囲で他の特定の形態で具現化することができる。前述の実施形態は、したがって、本願記載の本発明を限定するよりむしろ、あらゆる点で例証と考慮されるべきである。本発明の範囲は、したがって、前述の説明によるよりむしろ添付の特許請求の範囲により示され、特許請求の範囲と同等の意味や範囲内でのすべての変更は、したがって、本明細書に包含されることが意図されている。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【国際調査報告】
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