(57)【要約】本発明は全体として、神経学的障害を治療および予防する化合物を含む組成物および使用方法に関し、該神経学的障害には、アルツハイマー病、神経炎症、ならびにタンパク質ミスフォールディングおよび/またはタンパク質凝集に関連する疾患および病態が含まれる。2019504876.tif 000009
2019504876.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
クルクミンおよび/またはクルクミンの機能的誘導体、ならびに測定精密質量が120.094amuでありかつ相対存在量が少なくとも2.17％であるバイオマーカー1
を含む、組成物であって、
該バイオマーカー1がウコン(Curcuma longa)中に見出され;かつ
該相対存在量が、エタノール中に溶解させた0.5mg/mlの該組成物中にスパイクされた25mg/mlサリチル酸を基準としている、組成物。
【請求項２】
以下の追加のバイオマーカー:
測定精密質量が134.110amuでありかつ相対存在量が少なくとも0.31％である、バイオマーカー2;
測定精密質量が200.157amuでありかつ相対存在量が少なくとも0.47％である、バイオマーカー6;および
測定精密質量が232.146amuでありかつ相対存在量が少なくとも2.38％である、バイオマーカー12
の任意の1つまたは任意の組合せまたはすべてをさらに含み、
該バイオマーカーがウコン中に見出され、かつ
該相対存在量が、エタノール中に溶解させた0.5mg/mlの前記組成物中にスパイクされた25mg/mlサリチル酸を基準としている、請求項1に記載の組成物。
【請求項３】
バイオマーカー1、2、6、および12の少なくとも2つ、3つ、または4つを有している、請求項2に記載の組成物。
【請求項４】
測定精密質量が150.104amuでありかつ濃度が少なくとも0.04重量％である、バイオマーカー3;
測定精密質量が176.120amuでありかつ相対存在量が少なくとも0.96％である、バイオマーカー4;
測定精密質量が192.091amuでありかつ相対存在量が少なくとも1.74％である、バイオマーカー5;
測定精密質量が202.172amuでありかつ相対存在量が少なくとも0.87％である、バイオマーカー7;
測定精密質量が204.188amuでありかつ相対存在量が少なくとも0.30％である、バイオマーカー8;
測定精密質量が216.151amuでありかつ相対存在量が少なくとも10.75％である、バイオマーカー9;
測定精密質量が218.203amuでありかつ相対存在量が少なくとも4.00％である、バイオマーカー10;
測定精密質量が220.183amuでありかつ相対存在量が少なくとも0.72％である、バイオマーカー11;
測定精密質量が234.162amuでありかつ相対存在量が少なくとも3.52％である、バイオマーカー13;
測定精密質量が256.240amuでありかつ相対存在量が少なくとも0.25％である、バイオマーカー14;
測定精密質量が308.105amuでありかつ濃度が少なくとも1.50重量％である、バイオマーカー15;
測定精密質量が338.115amuでありかつ濃度が少なくとも1.67重量％である、バイオマーカー16;
測定精密質量が372.157amuでありかつ濃度が少なくとも0.88重量％である、バイオマーカー18;および
測定精密質量が450.261amuでありかつ相対存在量が少なくとも0.61％である、バイオマーカー19
の1つまたは複数をさらに含み、
各バイオマーカーがウコン中に見出され、かつ
該相対存在量が、エタノール中に溶解させた0.5mg/mlの前記組成物中にスパイクされた25mg/mlサリチル酸を基準としている、請求項1〜3のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５】
少なくとも1種類のアセチルコリンエステラーゼ阻害物質、少なくとも1種類のN-メチル-D-アスパラギン酸(NMDA)受容体アンタゴニスト、および/または少なくとも1種類の抗炎症薬をさらに含む、請求項1〜4のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６】
前記少なくとも1種類のアセチルコリンエステラーゼ阻害物質が、ドネペジル、タクリン、ガランタミン、リバスチグミン、それらの塩、もしくはそれらの任意の組合せであり、前記少なくとも1種類のN-メチル-D-アスパラギン酸(NMDA)受容体アンタゴニストがメマンチンであり、かつ/または前記少なくとも1種類の抗炎症薬が非ステロイド性抗炎症薬である、請求項5に記載の組成物。
【請求項７】
鼻腔内投与用、局所適用用、注射による投与用、および/または経口投与用に製剤化されている、請求項1〜6のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項８】
少なくとも1つのツルメロンをさらに含み、かつツルメロンに対するクルクミンおよび/またはそのアナログの重量比が0.5〜0.9の間である、請求項1〜7のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項９】
前記組成物を投与されたヒトの血清中に少なくとも10mgのクルクミンおよび/もしくはその機能的誘導体を供給するように、かつ/または該組成物を投与されたヒトの脳脊髄液中に少なくとも1mgのクルクミンおよび/もしくはその機能的誘導体を供給するように製剤化されている、請求項1〜8のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１０】
前記組成物中にありかつ/またはバイオマーカー1〜16、18、もしくは19の少なくとも1つに共有結合している造影剤をさらに含む、請求項1〜9のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１１】
神経学的な疾患、障害、および/もしくは病態のリスクを有している対象ならびに/または神経学的な疾患、障害、および/もしくは病態を有している対象を治療する方法であって、前記方法が、請求項1〜10のいずれか一項に記載の組成物のいずれか1つを該対象に投与する段階を含み、かつ、該神経学的な疾患、障害、および/もしくは病態が該対象において改善されかつ/または発症が、患者が治療されなかった場合に予想される該神経学的な疾患、障害、および/もしくは病態の発症と比べて遅延する、方法。
【請求項１２】
前記神経学的な疾患、障害、および/もしくは病態が、変性性/タンパク質ミスフォールディングの疾患、障害、および/もしくは病態;脳血管の疾患、障害、および/もしくは病態;炎症性の疾患、障害、および/もしくは病態;外傷/閉鎖性頭部損傷;てんかん;ならびに/または新生物である、請求項11に記載の方法。
【請求項１３】
前記神経学的な疾患、障害、および/もしくは病態が、アルツハイマー病、パーキンソン病、レビー小体病、前頭側頭変性症、進行性核上性麻痺、筋萎縮性側索硬化症、多系統萎縮症、脳アミロイドーシス、脊髄小脳萎縮症、虚血性脳卒中、再灌流障害、脳血管れん縮、多発性硬化症、CNSループス、振盪、挫傷、慢性外傷性脳障害、全般発作性疾患、部分的発作性疾患、転移性腫瘍、および/もしくはCNS原発腫瘍である、請求項11に記載の方法。
【請求項１４】
前記神経学的な疾患、障害、および/もしくは病態がアルツハイマー病である、請求項11に記載の方法。
【請求項１５】
アミロイド凝集が減少し、アミロイド分泌が減少し、タウレベルが低下し、リン酸化タウレベルが低下し、タウのリン酸化が減少し、タンパク質ミスフォールディングが減少し、タンパク質凝集が減少し、活性酸素種レベルが低下し、フリーラジカルレベルが低下し、神経炎症が減少し、IL-2に対するIL-4の比が増加し、認知が増大し、かつ/または対象へのクルクミンおよび/もしくはその機能的誘導体の取込みが、バイオマーカー1〜16、18、および/もしくは19のいずれも伴わない場合の該クルクミンおよび/もしくはその機能的誘導体の取込みと比べて増大する、請求項11〜14のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】
少なくとも1種類のアセチルコリンエステラーゼ阻害物質、NMDA受容体アンタゴニスト、および/またはクルクミンを摂取している対象に関連する副作用および/または有害事象を治療および/または予防する方法であって、該方法が、請求項1〜10のいずれか一項に記載の組成物のいずれか1つを該対象に投与する段階を含み、少なくとも1種類のアセチルコリンエステラーゼ阻害物質、NMDA受容体アンタゴニスト、および/もしくはクルクミンを摂取している対象に関連する少なくとも1つの副作用および/もしくは有害事象が、減少し、かつ/または請求項1〜10のいずれか一項に記載の組成物のいずれか1つを該対象が摂取しなかった場合に予想される該少なくとも1つの副作用および/もしくは有害事象の量および/もしくは強さと比較して減少する、方法。
【請求項１７】
対象の血清中および/または脳脊髄液中へのクルクミンおよび/またはその機能的誘導体の取込みを増大させる方法であって、該方法が、請求項1〜10のいずれか一項に記載の組成物のいずれか1つを該対象に投与する段階を含み、クルクミンおよび/またはその機能的誘導体の取込みが、バイオマーカー1〜16、18、または19のいずれも伴わない場合のクルクミンおよび/またはその機能的誘導体の投与と比べて増大する、方法。
【請求項１８】
前記組成物中に存在する前記クルクミンおよび/もしくはその機能的誘導体の少なくとも30％が、前記対象の血清中に入り、少なくとも10mgのクルクミンおよび/もしくはその機能的誘導体が該対象の血清中に入り、かつ/または少なくとも1mgのクルクミンおよび/もしくはその機能的誘導体が該対象の脳脊髄液中に入る、請求項17に記載の方法。
【請求項１９】
アミロイドおよび/またはタウを請求項1〜10のいずれか一項に記載の組成物と接触させる段階を含む、アミロイドおよび/またはタウタンパク質を標識する方法。
【請求項２０】
前記バイオマーカーの相対存在量のバッチ間の化学的一致が少なくとも90％、好ましくは少なくとも95％、または少なくとも98％である組成物を作製する、請求項1〜10のいずれか一項に記載の組成物を作製する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、2015年12月16日に出願された米国特許仮出願第62/268,371号および2016年6月3日に出願された米国特許仮出願第62/345,375号の恩典を主張する。これらの参照される出願の内容は、参照により本出願に組み入れられる。
【０００２】
A  発明の分野
本発明は、神経学的疾患、タンパク質ミスフォールディング、タンパク質凝集、神経炎症、およびアルツハイマー病を予防および治療することができる化合物の混合物を含む製剤に関する。
【背景技術】
【０００３】
B  関連技術の説明
多くのヒト神経変性障害は、病的ミスフォールディングを起こしやすいタンパク質の凝集に関係があるとされている(Ellisdon et al., 2004)。タンパク質は、安定性、機能性、および他の分子との相互作用に対する特異性を与える先天的構造を有している。タンパク質の遺伝的変化、翻訳後修飾、および特定の環境条件への曝露によって、タンパク質の3次元構造が変化して、ミスフォールドされた立体配置を呈するようになり得る。場合によっては、ミスフォールディングは、タンパク質が自己集合して凝集体になるのを促進する、エネルギー的に不都合な立体配置を作り出す。凝集したミスフォールドタンパク質は、神経細胞を含む多くの細胞にとって特に有毒であり得る。凝集したミスフォールドタンパク質の細胞膜中への侵入は、細胞死を招き得る。タンパク質ミスフォールディングは、アルツハイマー病(β-アミロイドおよびリン酸化タウタンパク質)、パーキンソン病(α-シヌクレインタンパク質)、レビー小体型認知症(β-アミロイド、リン酸化タウ、およびα-シヌクレインタンパク質)、前頭側頭型認知症(タウタンパク質)、海綿状脳症(プリオンタンパク質)などのヒト神経変性障害に、ならびに他の多くの中枢神経アミロイドーシスおよび全身性アミロイドーシスに関係付けられている(Ellisdon et al., 2004を参照されたい)。タンパク質ミスフォールディングの傾向を小さくする、脱凝集する、もしくはそうでなければ凝集経路を変化させる、かつ/またはミスフォールドタンパク質およびそれらの凝集体の毒性を弱める介入治療は、アルツハイマー病およびタンパク質ミスフォールディングを伴う他のいくつかのヒト障害を予防および治療する潜在的手段になる。
【０００４】
アルツハイマー病(AD)は、タンパク質ミスフォールディングが関係付けられている1つの疾患である。ADは、高齢者の認知症の原因の第1位である(Mayo Clinic, Alzheimer’s, 2014)。ADは、500万人超のアメリカ人を苦しめていると推定されており、人々が年を取るにつれ、有病率が急速に上昇している。症状を治療することはできるものの、ADは、依然として不治の致死的な障害である。ADの原因は完全には分かっていないが、遺伝因子および環境因子が、その病因に関係付けられている。潜在的な病理学的プロセスは、数十年間の時期を通して発達する。一番早くに実証された病理学的変化の1つは、異常なβアミロイド産生、凝集、代謝、および/またはクリアランスに関係のある、脳および脳血管系における可溶性アミロイドおよび不溶性アミロイドの凝集体の蓄積である。慢性の神経炎症は、ADで発生し、異常なミクログリア活性化ならびにサイトカインおよびケモカインの変化に関連付けられている。活性酸素種および終末糖化産物による神経細胞に対する酸化的障害の増大が、ADにおいて起こる。ADはまた、神経原線維変化の発生につながる、タウの過剰リン酸化およびタウ凝集にも関連付けられている。ADの病理が進行するにつれ、顕著なシナプスおよび神経細胞の消失、ならびにグリオーシスが起こり、結果として脳萎縮をもたらす。アセチルコリンおよびグルタミンなどの神経伝達物質の不足ならびに脳グルコース代謝の乱れもまた、起こる。ADは、認知、日常機能、および挙動の進行的衰えを伴う認知症として発症し、典型的には、最初に短期の想起に影響を及ぼし、進行して認知領域全体に影響を及ぼす。(Mayo Clinic, Alzheimer's, 2014)。
【０００５】
炎症は、ADならびに他のいくつかの神経変性疾患の別の潜在的因子であり得る。シクロオキシゲナーゼ酵素COX1およびCOX2ならびに5-リポキシゲナーゼ酵素5LOXなどの炎症性経路に関与している複数のタンパク質がある。これらの酵素またはロイコトリエンのような下流の炎症媒介物を阻害することにより、炎症を抑制することができる。IFNγ、TNF-α、IL-1、およびIL-6などの炎症誘発性サイトカインは、AD脳において炎症を促進し得るTヘルパー1型(Th1)応答において産生される。炎症誘発性サイトカインの減少または抗炎症性サイトカインの増加は、ADにおいて治療効果を有している可能性がある。いくつかの炎症阻害物質には、NSAIDならびにIL-2のような抗炎症性サイトカインおよびIL-4のようなTヘルパー2(Th2)応答サイトカインが含まれる。ADに対する潜在的な治療薬または予防薬としてCOX-1阻害物質および他のNSAIDを試験する過去の臨床試験は、ほとんど失敗に終わっている。特にLOX阻害物質と組み合わせた他のCOX阻害物質(例えば、COX/LOX二重阻害物質)が、アルツハイマー病のような加齢に関係する脳障害の治療へのより良い治療アプローチを提供し、許容される胃腸忍容性を有し得るという仮説が立てられている(Hoozemans et al., 2008)。これに関して、COX2阻害物質は、マウスにおいて加齢によって誘発される記憶力障害を顕著に回復させることから、神経細胞炎症の潜在的治療法であることが示されている(Bishnoi et al., 2005)。
【０００６】
酸化的障害の低減によっても、ADおよび他の神経変性疾患に関与している神経炎症が軽減し得る。例として、COX1、COX2、および5LOXの活性を低下させると、一つには酸化脂肪酸の減少によって、炎症が軽減する。具体的には、COX1およびCOX2は、2種類の脂肪酸、すなわちアラキドン酸(AA)およびドコサヘキサエン酸(DHA)の酸化生成物の減少を通して、神経毒性および神経変性を軽減する(Hoozemans et al.)。薬剤疫学的データ、ヒト組織および体液の分析データ、ならびに主にマウスモデルから得られた力学的データはいずれも、AAおよびDHAの酸化生成物が神経変性の病因に関係していることを示した(Hoozemans et al., 2008)。5-LOX酵素は、アラキドン酸を炎症メディエーターに変換するのに主に関与している。シクロオキシゲナーゼ(COX1およびCOX2)酵素はプロスタグランジンを生成するのに対し、5-LOXはロイコトリエンを生成する(Silverman et al., 1999)。COX1およびCOX2を阻害すると、アラキドン酸が5-LOX経路に回され、それによって、ロイコトリエン、すなわち炎症応答およびアレルギー応答に関与している分子が産生される(Steinhilber et al., 2013)。
【０００７】
ADの現在の治療薬には、細胞間情報交換のレベルを押し上げるのを助けるもの、例えば、アセチルコリンエステラーゼ阻害物質およびメマンチンが含まれる。(Mayo Clinic, Alzheimer's, 2014)。しかし、徹底的な研究にもかかわらず、新しい種類の薬物がAD用に認可されてから10年以上過ぎている。十分に管理された大規模な前向き臨床試験において、ヒトAD患者にとって有益であることが判明した食事サプリメントは、いままでない。
【０００８】
クルクミン(ジフェルロメタン)は、抗酸化特性、抗炎症特性、抗アミロイド特性、および他の特性を有している、ターメリック根中に見出されたポリフェノール植物化学物質である。クルクミンは、カレー粉の主要成分である。カレーを摂取すると認知症発病率が低下する可能性があるとする証拠がある(Ng, 2006)。クルクミンの多くの起こり得る利点が、過去20年にわたって前臨床研究で実証されており、これらの研究は、アミロイド前駆タンパク質代謝、β-アミロイド凝集体、タウを含む神経原線維変化、神経炎症、およびAD病理の他のいくつかの要素に対するクルクミンの有望な効果を示している(Lim, 2001; Yang, 2005; Ma, 2013)。
【０００９】
さらに、インビトロ、インビボ、および/または臨床的な研究も、クルクミンが他の多くの疾患、病態、障害、それらの原因、および/またはそれらの症状を治療する潜在能力を有することを示している。例えば、クルクミンは、とりわけ、抗微生物作用および抗ウイルス作用を有し、強力な抗炎症性の免疫調節剤であり、心血管系を保護し、癌の化学予防的な化学療法剤であり、神経保護的かつ神経治療的であり、糖尿病および肥満薬理学のための潜在的薬物であり、腎臓損傷から保護し、心肺バイパス後の肺を保護し、胃腸障害の治療剤であり、創傷治癒の調節物質であり、生殖器系の調節物質であり、抗血管新生物質であり、抗毒性物質である(Beevers 2011)。
【００１０】
しかし、クルクミンに関連する薬物動態が、多くのヒト疾患の治療のためにクルクミンを広く臨床使用することにとって大きな難題となる。というのは、クルクミンは、極端に乏しい胃腸管吸収および経口バイオアベイラビリティを示すのである(Beevers 2011)。さらに、ヒトへの精製クルクミンの経口投与に対する大きな妨げは、摂取された物質のほぼ100％が、血液脳関門を通過しない不活性なグルクロン酸抱合型に変換されることである。この変換が、クルクミンを用いた有望なインビトロ研究および動物研究がヒト対象での有効性と相関関係を示していない理由であり得る(Ringman, 2005)。1つの試験(Ringman, 2012)において、試験実施者らは、インドにおける1人の平均食事摂取量の32倍にほぼ相当する最大4g/日の精製クルクミン調製物をAD患者に与えた。このような高用量を投与したにもかかわらず、ほんの少し(約7.76ng/ml)のクルクミンしか、患者血液中には存在せず、未修飾のクルクミンは脳脊髄液(CSF)中で検出されなかった。前掲書。さらに、クルクミン摂取後に、ADに関連したCSFバイオマーカーの変化は観察されなかった。前掲書。
【００１１】
バイオアベイラビリティがもっと高いクルクミン調製物を開発するための最近の取組みでは、リポソーム封入技術を使用するか、またはクルクミン調製物にピペリンを添加している。(Ringman, 2005)。しかし、たとえあったとしてもわずかな試みしか、血液中に有意なレベルのクルクミンを供給するのに成功していない(Ringman 2012; Ringman, 2005)。例えば、2000mg未満の純粋なクルクミンを経口投与する場合、クルクミンの血液レベルおよび尿レベルは、存在しないか、またはかろうじて測定可能であるかのいずれかである(Ringman, 2005)。さらに、これまで、脳脊髄液中で検出可能なレベルのクルクミンをもたらすことを示された経口投与製剤はない。
【００１２】
ヒトへの精製クルクミンの経口投与に対するさらなる妨げは、胃腸管副作用である。副作用には、下痢、黒色便、胃刺激、および悪心が含まれ得る(Ringman 2005; Ringman 2012)。これらの副作用は、一部の患者にとって重度であり、それらの患者を臨床試験から除外する原因となるほどであった(Ringman 2012)。
【００１３】
クルクミンを含む1つの専売組成物であるHSRx-888を、アルツハイマー病のインビトロモデルおよび動物(マウス)モデルで試験した。これは、アミロイド斑の量を減らし、ADに関係のある脳病理に対して他の良い効果を有することが判明した(Shytle et al., 2009, Shytle et al., 2012)。しかし、インビトロおよびげっ歯動物での活性は、ヒトでの活性またはヒトでのクルクミンの取込みと常に相関があるとは限らず、これは、一つにはこれらのモデルとヒトの薬物動態プロファイルが異なることによる可能性が高い。
【発明の概要】
【００１４】
本発明は、アルツハイマー病、炎症、神経炎症、神経炎症に起因する疾患および病態、タンパク質ミスフォールディング、タンパク質凝集、ならびにタンパク質ミスフォールディングおよびタンパク質凝集に起因する疾患および病態の治療および予防の前に立ちはだかる現在の問題の解決法を提供する。
【００１５】
驚くべきことに、本発明者らは、ターメリック中に見出されたいくつかの化合物の組合せが、アルツハイマー病、炎症、タンパク質ミスフォールディング、タンパク質凝集を予防および治療することができ、ヒト対象でのクルクミンの取込みを増大させることができることを明らかにした。本発明者らはまた、これらの化合物の特定の相対濃度が、組み合わされた化合物のこれらの能力を高めることも明らかにした。さらに、本発明者らは、アルツハイマー病、炎症、ならびにタンパク質ミスフォールディング/凝集に関係のある疾患および病態などの疾患および病態を治療または予防するための追加の作用物質と共に本発明の化合物を使用することにより、組み合わされた化合物がそのような疾患および病態を予防および治療する能力が高まることも明らかにした。さらに、本明細書において開示される組合せは、他の神経学的な障害、疾患、および病態、例えば、他の変性性障害/タンパク質ミスフォールディング障害、脳血管疾患、炎症性疾患、外傷/閉鎖性頭部損傷、てんかん、および/または新生物の治療および/または予防において利益を与える。
【００１６】
1つの局面において、本明細書において開示されるバイオマーカー1〜16、18、19の任意の1つ、任意の組合せ、またはすべてとクルクミンとを含む組成物が、開示される。いくつかの場合において、この組成物は、クルクミンおよび/またはクルクミンの機能的誘導体、ならびに測定精密質量が120.094amuでありかつ相対存在量が少なくとも2.17％であるバイオマーカー1を含み、このバイオマーカー1はウコン(Curcuma longa)中に見出され、かつ相対存在量は、エタノール中に溶解させた0.5mg/mlの組成物中にスパイクされた25mg/mlサリチル酸を基準としている。
【００１７】
いくつかの態様において、組成物は、以下の追加のバイオマーカー:測定精密質量が134.110amuでありかつ相対存在量が少なくとも0.31％である、バイオマーカー2;測定精密質量が200.157amuでありかつ相対存在量が少なくとも0.47％である、バイオマーカー6;および測定精密質量が232.146amuでありかつ相対存在量が少なくとも2.38％である、バイオマーカー12の任意の1つまたは任意の組合せまたはすべてをさらに含み、これらのバイオマーカーはウコン中に見出され、かつ相対存在量は、エタノール中に溶解させた0.5mg/mlの組成物中にスパイクされた25mg/mlサリチル酸を基準としている。いくつかの態様において、組成物は、バイオマーカー1、2、6、および12の少なくとも2つ、3つ、または4つを有している。
【００１８】
いくつかの態様において、本明細書において開示される組成物は、測定精密質量が150.104amuでありかつ濃度が少なくとも0.04重量％である、バイオマーカー3;測定精密質量が176.120amuでありかつ相対存在量が少なくとも0.96％である、バイオマーカー4;測定精密質量が192.091amuでありかつ相対存在量が少なくとも1.74％である、バイオマーカー5;測定精密質量が202.172amuでありかつ相対存在量が少なくとも0.87％である、バイオマーカー7;測定精密質量が204.188amuでありかつ相対存在量が少なくとも0.30％である、バイオマーカー8;測定精密質量が216.151amuでありかつ相対存在量が少なくとも10.75％である、バイオマーカー9;測定精密質量が218.203amuでありかつ相対存在量が少なくとも4.00％である、バイオマーカー10;測定精密質量が220.183amuでありかつ相対存在量が少なくとも0.72％である、バイオマーカー11;測定精密質量が234.162amuでありかつ相対存在量が少なくとも3.52％である、バイオマーカー13;測定精密質量が256.240amuでありかつ相対存在量が少なくとも0.25％である、バイオマーカー14;測定精密質量が308.105amuでありかつ濃度が少なくとも1.50重量％である、バイオマーカー15;測定精密質量が338.115amuでありかつ濃度が少なくとも1.67重量％である、バイオマーカー16;測定精密質量が372.157amuでありかつ濃度が少なくとも0.88重量％である、バイオマーカー18;および測定精密質量が450.261amuでありかつ相対存在量が少なくとも0.61％である、バイオマーカー19の1つまたは複数をさらに含み、各バイオマーカーはウコン中に見出され、かつ相対存在量は、エタノール中に溶解させた0.5mg/mlの組成物中にスパイクされた25mg/mlサリチル酸を基準としている。
【００１９】
いくつかの態様において、各バイオマーカーの質量は、リアルタイム直接分析-TOF(DART-TOF)質量分析計を用いて測定された質量である。
【００２０】
いくつかの態様において、バイオマーカーの少なくとも1つは、合成によって得られる。いくつかの態様において、バイオマーカーの少なくとも1つは、植物から単離される。1つの場合において、バイオマーカーの少なくとも1つは、ウコンから単離される。いくつかの態様において、組成物のバイオマーカーの相対存在量のバッチ間の化学的一致は、少なくとも90％、好ましくは少なくとも95％、または少なくとも98％である。
【００２１】
いくつかの態様において、組成物は、少なくとも1種類の薬物をさらに含む。いくつかの態様において、組成物は、少なくとも1種類のアセチルコリンエステラーゼ阻害物質をさらに含む。1つの場合において、少なくとも1種類のアセチルコリンエステラーゼ阻害物質は、ドネペジル、タクリン、ガランタミン、リバスチグミン、それらの塩、またはそれらの任意の組合せである。いくつかの態様において、組成物は、N-メチル-D-アスパラギン酸(NMDA)受容体アンタゴニストをさらに含む。いくつかの態様において、NMDA受容体アンタゴニストはメマンチンである。いくつかの態様において、組成物は、少なくとも1種類の抗炎症薬をさらに含む。1つの場合において、少なくとも1種類の抗炎症薬は、非ステロイド性抗炎症薬である。1つの場合において、非ステロイド性抗炎症薬は、アセチルサリチル酸、イブプロフェン、ケトプロフェン、もしくはナプロキセン、それらの塩、またはそれらの任意の組合せである。
【００２２】
いくつかの態様において、組成物は、鼻腔内投与用に製剤化される。1つの場合において、組成物は、乾燥粉末として、かつ/またはネブライザーによって投与される。いくつかの態様において、組成物は、局所適用用、注射による投与用、および/または経口投与用に製剤化される。1つの場合において、組成物は、経口投与用に製剤化される。別の場合において、組成物は、ロゼンジ、散剤、錠剤、ジェルキャップ、ゼラチン剤、溶液剤、食品、食品中、および/または溶解性フィルムである。
【００２３】
いくつかの態様において、バイオマーカーの少なくとも1つは、アミロイドに結合することができる。いくつかの態様において、バイオマーカーの少なくとも1つは、アミロイドが凝集するのを防止することができる。いくつかの態様において、組成物は、アミロイド分泌を減少させるように製剤化される。いくつかの態様において、組成物は、可溶性アミロイドレベルおよび不溶性アミロイドレベルの両方を低下させるように製剤化される。
【００２４】
いくつかの態様において、組成物は、タウを減少させるように製剤化される。いくつかの態様において、組成物は、リン酸化タウおよび/またはタウのリン酸化を減少させるように製剤化される。
【００２５】
いくつかの態様において、組成物は、タンパク質ミスフォールディングを減少させるように製剤化される。いくつかの態様において、組成物は、タンパク質凝集を減少させるように製剤化される。
【００２６】
いくつかの態様において、組成物は、神経炎症を減少させるように製剤化される。いくつかの態様において、組成物は、IL-2に対するIL-4の比を増加させるように製剤化される。
【００２７】
いくつかの態様において、組成物は、認知を増大させるように製剤化される。
【００２８】
いくつかの態様において、組成物は、COX1および/もしくはCOX2またはその経路を阻害するように製剤化される。いくつかの態様において、組成物は、5LOXまたはその経路を阻害するように製剤化される。いくつかの態様において、組成物は、抗酸化活性を有するように製剤化される。いくつかの態様において、組成物は、フリーラジカルを捕捉するように製剤化される。いくつかの態様において、組成物は、Th2応答を高めるように製剤化される。
【００２９】
いくつかの態様において、組成物は、神経学的な疾患、障害、および/または病態を抑制または治療するように製剤化される。いくつかの態様において、組成物は、変性性障害/タンパク質ミスフォールディング障害、脳血管疾患、炎症性疾患、外傷/閉鎖性頭部損傷、てんかん、および/または新生物を抑制または治療するように製剤化される。いくつかの態様において、組成物は、アルツハイマー病、パーキンソン病、レビー小体病、前頭側頭変性症、進行性核上性麻痺、筋萎縮性側索硬化症、多系統萎縮症、脳アミロイドーシス、脊髄小脳萎縮症、虚血性脳卒中、再灌流障害、脳血管れん縮、多発性硬化症、CNSループス、振盪、挫傷、慢性外傷性脳障害、全般発作性疾患、部分的発作性疾患、転移性腫瘍、および/またはCNS原発腫瘍を抑制または治療するように製剤化される。いくつかの態様において、組成物は、アルツハイマー病を抑制または治療するように製剤化される。
【００３０】
いくつかの態様において、組成物は、神経学的な疾患、障害、および/または病態を予防するように製剤化される。いくつかの態様において、組成物は、変性性障害/タンパク質ミスフォールディング障害、脳血管疾患、炎症性疾患、外傷/閉鎖性頭部損傷、てんかん、および/または新生物を予防するように製剤化される。いくつかの態様において、組成物は、アルツハイマー病、パーキンソン病、レビー小体病、前頭側頭変性症、進行性核上性麻痺、筋萎縮性側索硬化症、多系統萎縮症、脳アミロイドーシス、脊髄小脳萎縮症、虚血性脳卒中、再灌流障害、脳血管れん縮、多発性硬化症、CNSループス、振盪、挫傷、慢性外傷性脳障害、全般発作性疾患、部分的発作性疾患、転移性腫瘍、および/またはCNS原発腫瘍を予防するように製剤化される。いくつかの態様において、組成物は、アルツハイマー病を予防するように製剤化される。
【００３１】
いくつかの態様において、組成物は、制嘔吐剤として製剤化される。いくつかの態様において、組成物は、少なくとも1種類のアセチルコリンエステラーゼ阻害物質、NMDA受容体アンタゴニスト、および/またはクルクミンを摂取している対象に関連する副作用および/または有害事象を処置するように製剤化される。いくつかの態様において、組成物は、少なくとも1種類のアセチルコリンエステラーゼ阻害物質、NMDA受容体アンタゴニスト、および/またはクルクミンを摂取している対象に関連する副作用および/または有害事象を予防するように製剤化される。
【００３２】
いくつかの態様において、組成物は、バイオマーカー1〜16、18、および/または19のいずれも伴わない場合のクルクミンおよび/またはそのアナログの取込みと比べて対象へのクルクミンおよび/またはそのアナログの取込みを増大させるように製剤化される。
【００３３】
いくつかの態様において、組成物は、少なくとも1つのツルメロンをさらに含み、かつツルメロンに対するクルクミンおよび/またはそのアナログの重量比は0.5〜0.9の間である。
【００３４】
いくつかの態様において、組成物は、組成物中に存在するクルクミンおよび/またはその機能的誘導体の少なくとも30％を、組成物を投与されたヒトの血清中に供給するように製剤化される。いくつかの態様において、組成物は、少なくとも10mgのクルクミンおよび/またはその機能的誘導体を、組成物を投与されたヒトの血清中に供給するように製剤化される。いくつかの態様において、組成物は、ヒト対象への投与後の対象の血清におけるクルクミンおよび/またはその機能的誘導体のTmaxが20〜120分になるように製剤化される。いくつかの態様において、組成物は、ヒト対象への投与後の対象の血清におけるクルクミンおよび/またはその機能的誘導体のCmaxが少なくとも5マイクロモル濃度になるように製剤化される。
【００３５】
いくつかの態様において、組成物は、ヒト対象への投与後の対象の血清におけるバイオマーカー1のTmaxが5〜120分になるように製剤化される。いくつかの態様において、組成物は、ヒト対象への投与後の対象の血清におけるバイオマーカー2のTmaxが2〜60分になるように製剤化される。いくつかの態様において、組成物は、ヒト対象への投与後の対象の血清におけるバイオマーカー6のTmaxが10〜180分になるように製剤化される。いくつかの態様において、組成物は、ヒト対象への投与後の対象の血清におけるバイオマーカー12のTmaxが5〜20分になるように製剤化される。
【００３６】
いくつかの態様において、組成物は、組成物中に存在するクルクミンおよび/またはその機能的誘導体を、組成物を投与されたヒトの脳脊髄液中に供給するように製剤化される。いくつかの態様において、組成物は、少なくとも1mgのクルクミンおよび/またはその機能的誘導体を、組成物を投与されたヒトの脳脊髄液中に供給するように製剤化される。いくつかの態様において、組成物は、バイオマーカー1〜16、18、または19の少なくとも1つを、組成物を投与されたヒトの脳脊髄液中に供給するように製剤化される。
【００３７】
いくつかの態様において、組成物は、造影剤をさらに含む。1つの場合において、造影剤は、バイオマーカー1〜16、18、または19の少なくとも1つに共有結合している。別の場合において、造影剤は、バイオマーカー1〜16、18、および19のいずれにも共有結合していない。
【００３８】
対象を治療する方法が、本明細書において開示される。いくつかの態様において、この方法は、本明細書において開示される組成物のいずれか1つを対象に投与する段階によって、神経学的な疾患、病態、および/または障害のリスクを有している対象、および/または神経学的な疾患、病態、および/または障害を有している対象を治療する方法であり、かつ、神経学的な疾患、病態、および/もしくは障害が対象において改善されかつ/または発症が、患者が治療されなかった場合に予想される神経学的な疾患、病態、および/もしくは障害の発症と比べて遅延する、方法である。いくつかの態様において、神経学的な疾患、病態、および/または障害は、変性性障害/タンパク質ミスフォールディング障害、脳血管疾患、炎症性疾患、外傷/閉鎖性頭部損傷、てんかん、および/または新生物である。いくつかの態様において、神経学的な疾患、病態、および/または障害は、アルツハイマー病、パーキンソン病、レビー小体病、前頭側頭変性症、進行性核上性麻痺、筋萎縮性側索硬化症、多系統萎縮症、脳アミロイドーシス、脊髄小脳萎縮症、虚血性脳卒中、再灌流障害、脳血管れん縮、多発性硬化症、CNSループス、振盪、挫傷、慢性外傷性脳障害、全般発作性疾患、部分的発作性疾患、転移性腫瘍、および/またはCNS原発腫瘍である。いくつかの態様において、神経学的な疾患、病態、および/または障害は、アルツハイマー病である。
【００３９】
いくつかの態様において、方法は、アルツハイマー病のリスクを有しているか、またはアルツハイマー病を有している対象を治療するための方法である。いくつかの態様において、方法は、本明細書において開示される組成物のいずれか1つを対象に投与する段階を含み、対象においてアルツハイマー病の少なくとも1つの症状が改善されるか、または患者が治療されなかった場合に予想されるアルツハイマー病の発症と比べてアルツハイマー病の発症が遅延する。いくつかの態様において、方法は、対象がアミロイド分泌、アミロイド凝集、タウ高リン酸化、神経炎症、もしくは認知低下、またはそれらの任意の組合せを有していると確認されている場合を含む。
【００４０】
いくつかの態様において、本明細書において開示される方法は、24時間の期間中に1〜10,000mgの間、10〜5,000mgの間、50〜2,500mgの間、または100〜1,000mgの間の総量の組成物が対象に投与される場合を含む。
【００４１】
いくつかの態様において、本明細書において開示される方法は、バイオマーカー1〜16、18、または19の少なくとも1つが合成によって得られる場合を含む。いくつかの態様において、方法は、バイオマーカー1〜16、18、または19の少なくとも1つが植物から単離される場合を含む。1つの場合において、方法は、バイオマーカーの少なくとも1つがウコンから単離される場合を含む。いくつかの態様において、方法は、組成物のバイオマーカーの相対存在量のバッチ間の化学的一致が、少なくとも95％である場合を含む。
【００４２】
いくつかの態様において、本明細書において開示される方法は、組成物がアセチルコリンエステラーゼ阻害物質をさらに含む場合を含む。1つの場合において、方法は、アセチルコリンエステラーゼ阻害物質が、ドネペジル、タクリン、ガランタミン、リバスチグミン、それらの塩、またはそれらの任意の組合せである場合を含む。1つの場合において、方法は、アセチルコリンエステラーゼ阻害物質が、ドネペジル、その塩、またはそれらの任意の組合せである場合を含む。いくつかの態様において、本明細書において開示される方法は、組成物がN-メチル-D-アスパラギン酸(NMDA)受容体アンタゴニストをさらに含む場合を含む。いくつかの態様において、NMDA受容体アンタゴニストはメマンチンである。
【００４３】
いくつかの態様において、本明細書において開示される方法は、組成物が鼻腔内に投与される場合を含む。いくつかの態様において、方法は、組成物が乾燥粉末として、かつ/またはネブライザーによって投与される場合を含む。いくつかの態様において、方法は、組成物が局所的に、注射によって、かつ/または経口的に投与される場合を含む。1つの場合において、方法は、組成物が経口的に投与される場合を含む。別の場合において、方法は、組成物が、ロゼンジ、散剤、錠剤、ジェルキャップ、ゼラチン剤、溶液剤、食品、食品中、および/または溶解性フィルムとして投与される場合を含む。
【００４４】
いくつかの態様において、本明細書において開示される方法は、バイオマーカーの少なくとも1つがアミロイドに結合する場合を含む。いくつかの態様において、方法は、アミロイド凝集が減少する場合を含む。1つの場合において、方法は、投与される組成物中のバイオマーカーが、投与される組成物中の個々のバイオマーカーそれぞれに対して予想されるアミロイド凝集の減少の相加量と比較してアミロイド凝集を減少させる際に相乗的に作用する場合を含む。いくつかの態様において、方法は、アミロイド分泌が減少する場合を含む。1つの場合において、方法は、投与される組成物中のバイオマーカーが、投与される組成物中の個々のバイオマーカーそれぞれに対して予想されるアミロイド分泌の減少の相加量と比較してアミロイド分泌を減少させる際に相乗的に作用する場合を含む。いくつかの態様において、方法は、可溶性アミロイドレベルおよび不溶性アミロイドレベルの両方が低下する場合を含む。
【００４５】
いくつかの態様において、本明細書において開示される方法は、タウレベルが低下する場合を含む。いくつかの態様において、方法は、リン酸化タウレベルおよび/またはタウのリン酸化が減少する場合を含む。
【００４６】
いくつかの態様において、本明細書において開示される方法は、タンパク質ミスフォールディングレベルが低下する場合を含む。いくつかの態様において、本明細書において開示される方法は、タンパク質凝集レベルが低下する場合を含む。
【００４７】
いくつかの態様において、本明細書において開示される方法は、活性酸素種レベルおよび/またはフリーラジカルレベルが低下する場合を含む。
【００４８】
いくつかの態様において、本明細書において開示される方法は、神経炎症が減少する場合を含む。いくつかの態様において、方法は、IL-2に対するIL-4の比が増加する場合を含む。
【００４９】
いくつかの態様において、本明細書において開示される方法は、認知が増大する場合を含む。
【００５０】
いくつかの態様において、本明細書において開示される方法は、バイオマーカー1〜16、18、および/または19のいずれも伴わない場合のクルクミンおよび/またはその機能的誘導体の取込みと比べて対象へのクルクミンおよび/またはその機能的誘導体の取込みが増大する場合を含む。
【００５１】
いくつかの態様において、本明細書において開示される方法は、組成物が、少なくとも1つのツルメロンをさらに含み、かつツルメロンに対するクルクミンおよび/またはその機能的誘導体の重量比が0.5〜0.9の間である場合を含む。
【００５２】
いくつかの態様において、本明細書において開示される方法は、組成物中に存在するクルクミンおよび/またはその機能的誘導体の少なくとも30％が、対象の血清中に入る場合を含む。いくつかの態様において、方法は、少なくとも10mgのクルクミンおよび/またはその機能的誘導体が対象の血清中に入る場合を含む。いくつかの態様において、方法は、対象への投与後の対象の血清におけるクルクミンおよび/またはその機能的誘導体のTmaxが20〜120分、20〜110分、30〜150分、25〜100分、または30〜90分である場合を含む。いくつかの態様において、方法は、対象への投与後の対象の血清におけるクルクミンおよび/またはその機能的誘導体のCmaxが少なくとも5マイクロモル濃度、少なくとも6マイクロモル濃度、少なくとも10マイクロモル濃度、または少なくとも11マイクロモル濃度である場合を含む。いくつかの態様において、方法は、対象への投与後の対象の血清中でのバイオマーカー1のTmaxが5〜120分、2〜100分、7〜150分、または10〜100分である場合を含む。いくつかの態様において、方法は、対象への投与後の対象の血清におけるバイオマーカー2のTmaxが2〜60分、1〜45分、5〜120分、または5〜50分である場合を含む。いくつかの態様において、方法は、対象への投与後の対象の血清におけるバイオマーカー6のTmaxが10〜180分、5〜150分、15〜210分、または15〜150分である場合を含む。いくつかの態様において、方法は、対象への投与後の対象の血清におけるバイオマーカー12のTmaxが5〜20分、2〜15分、7〜30分、または7〜15分である場合を含む。
【００５３】
少なくとも1種類のアセチルコリンエステラーゼ阻害物質、NMDA受容体アンタゴニスト、および/またはクルクミンを摂取している対象に関連する副作用および/または有害事象を処置する方法が、本明細書において開示される。いくつかの態様において、この方法は、本明細書において開示される組成物のいずれか1つを対象に投与する段階を含み、少なくとも1種類のアセチルコリンエステラーゼ阻害物質、NMDA受容体アンタゴニスト、および/またはクルクミンを摂取している対象に関連する少なくとも1つの副作用および/または有害事象が減少する。
【００５４】
少なくとも1種類のアセチルコリンエステラーゼ阻害物質、NMDA受容体アンタゴニスト、および/またはクルクミンを摂取している対象に関連する副作用および/または有害事象を予防する方法が、本明細書において開示される。いくつかの態様において、この方法は、本明細書において開示される組成物のいずれか1つを対象に投与する段階を含み、少なくとも1種類のアセチルコリンエステラーゼ阻害物質、NMDA受容体アンタゴニスト、および/またはクルクミンを摂取している対象に関連する少なくとも1つの副作用および/または有害事象が、本明細書において開示される組成物のいずれか1つを対象が摂取しなかった場合に予想される少なくとも1つの副作用および/または有害事象の量および/または強さと比較して減少する。
【００５５】
対象の血清中へのクルクミンおよび/またはその機能的誘導体の取込みを増大させる方法が、本明細書において開示される。いくつかの態様において、この方法は、本明細書において開示される組成物のいずれか1つを対象に投与する段階を含み、クルクミンおよび/またはその機能的誘導体の取込みが、バイオマーカー1〜16、18、または19のいずれも伴わない場合のクルクミンおよび/またはその機能的誘導体の投与と比べて、クルクミンおよび/またはその機能的誘導体の取込みを増大する。いくつかの態様において、インビトロ、インビボ、および/または臨床的な研究においてクルクミンによって治療または予防されることが実証された疾患、障害、病態、それらの原因、および/またはそれらの症状が、対象において治療または予防される。
【００５６】
対象の脳脊髄液中へのクルクミンおよび/またはその機能的誘導体の取込みを増大させる方法が、本明細書において開示される。いくつかの態様において、この方法は、本明細書において開示される組成物のいずれか1つを対象に投与する段階を含み、クルクミンおよび/またはその機能的誘導体の取込みが、バイオマーカー1〜16、18、または19のいずれも伴わない場合のクルクミンおよび/またはその機能的誘導体の投与と比べて、クルクミンおよび/またはその機能的誘導体の取込みを増大する。1つの場合において、方法は、対象への本明細書において開示される組成物のいずれか1つの投与により、対象の脳脊髄液中に少なくとも1mgのクルクミンおよび/またはその機能的誘導体が供給される場合を含む。いくつかの態様において、インビトロ、インビボ、および/または臨床的な研究においてクルクミンによって治療または予防されることが実証された疾患、障害、病態、それらの原因、および/またはそれらの症状が、対象において治療または予防される。
【００５７】
バイオマーカー1〜16、18、または19の少なくとも1つを対象の脳脊髄液中に供給する方法が、本明細書において開示される。いくつかの態様において、この方法は、本明細書において開示される組成物のいずれか1つを対象に投与する段階を含み、バイオマーカー1〜16、18、または19の少なくとも1つが対象の脳脊髄液中に侵入する。
【００５８】
アミロイドを標識する方法が、本明細書において開示される。いくつかの態様において、この方法は、アミロイドを本明細書において開示される組成物のいずれか1つと接触させる段階を含む。いくつかの態様において、方法は、標識されるアミロイドがβアミロイドである場合を含む。
【００５９】
タウタンパク質を標識する方法が、本明細書において開示される。いくつかの態様において、この方法は、タウを本明細書において開示される組成物のいずれか1つと接触させる段階を含む。
【００６０】
本明細書において開示される組成物を作製する方法が、本明細書において開示される。いくつかの態様において、この方法は、作製する方法が、バイオマーカーの相対存在量のバッチ間の化学的一致が少なくとも90％、好ましくは少なくとも95％、または少なくとも98％である組成物を作製する場合を含む。
【００６１】
本発明のいくつかの局面において、組成物は、1つまたは複数の栄養補助的(nutraceutical)および/または薬学的に許容される担体または希釈剤もさらに含んでよい。これらの担体/希釈剤は、補助剤、賦形剤、またはビヒクル、例えば、保存剤、増量剤、崩壊剤、湿潤剤、エマルジファイヤー、懸濁化剤、甘味剤、矯味剤、芳香剤、抗菌剤、抗真菌剤、滑沢剤、ビタミン、ポリマー、シロキサン含有化合物、精油、構造化剤、および分散剤であってよい。各担体は、製剤の他の成分と共存でき、対象に害を及ぼさないという意味で許容される。本発明のいくつかの局面において、担体は、ゴム、セルロースエーテル、アクリル樹脂、炭水化物担体、タルク、ラクトース、マンニトール、グルコース、水、ゼラチン、タンパク質由来の化合物、ポリビニルピロリドン、ステアリン酸マグネシウム、およびそれらの任意の組合せからなる群より選択される少なくとも1つの親水性ポリマー化合物を含み得る。希釈剤/担体の非限定的な例は、本明細書の全体を通して特定され、参照により本セクションに組み入れられる。このような成分の量は、本明細書の他のセクションで開示されるように、組成物の重量もしくは体積を基準として0.0001％〜99.9％の範囲であるか、または中間の任意の整数もしくは範囲であってよく、これらは参照によりこのパラグラフに組み入れられる。
【００６２】
前記組成物は、室温で1ヶ月、6ヶ月、12ヶ月、18ヶ月、または24ヶ月、保管することができる。本発明のいくつかの局面において、組成物は、散剤、錠剤、ジェルキャップ、ビーズ剤、可食錠剤、食品、食品中、溶解性フィルム、空気を介して分散され得る液剤、ゼラチン剤、ローション剤、経皮吸収型貼付剤、または経口投与向けの溶液剤として製剤化される。本発明のいくつかの局面において、製剤化された組成物は、中実ナノ粒子、脂質含有ナノ粒子、脂質を主成分とする担体、密閉された導管、ストロー、密閉バッグ、またはそれらの任意の組合せの中に含まれてよい。本発明の他の局面において、組成物は、注射投与用に製剤化され得る。
【００６３】
本発明の組成物を含むキットもまた、企図される。特定の態様において、組成物は、容器中に含まれる。容器は、瓶、ディスペンサー、パッケージ、またはストローであってよい。容器は、所定の量の組成物を分配することができる。特定の局面において、組成物は、丸剤、錠剤、カプセル剤、経皮吸収型貼付剤、食べられるかむ食べ物、クリーム剤、ローション剤、ゲル、スプレー、ミスト、半流動体の塊、散剤、または液剤として分配される。容器は、印字された指示を表面に含んでよい。印字された指示は、単語、略語、絵、または記号であってよい。
【００６４】
本明細書において考察される任意の態様は、本発明の任意の方法または組成物について実施できること、および逆もまた同様であることが企図される。さらに、本発明の組成物を用いて、本発明の方法を実現することができる。
【００６５】
本発明の組成物を含む製品もまた、企図される。非限定的な局面において、製品は、栄養補助食品製品であってよい。栄養補助食品製品は、本明細書の他のセクションで説明されるもの、または当業者に公知のものであってよい。他の非限定的な局面において、製品は、薬学的製品であってよい。薬学的製品および/または栄養補助食品製品は、本明細書の他のセクションで説明されるもの、または当業者に公知のものであってよい。製品の非限定的な例には、丸剤、錠剤、食べられるかむ食べ物、カプセル剤、クリーム剤、ローション剤、ゲル、スプレー、ミスト、溶解フィルム、経皮吸収型貼付剤、または液剤などが含まれる。
【００６６】
本発明の以下の態様1〜107も開示される。態様1は、クルクミンおよび/またはクルクミンの機能的誘導体、ならびに測定精密質量が120.094amuでありかつ相対存在量が少なくとも2.17％であるバイオマーカー1を含む、組成物であり;このバイオマーカー1はウコン中に見出され;かつ相対存在量は、エタノール中に溶解させた0.5mg/mlの組成物中にスパイクされた25mg/mlサリチル酸を基準としている。態様2は、以下の追加のバイオマーカー:測定精密質量が134.110amuでありかつ相対存在量が少なくとも0.31％である、バイオマーカー2;測定精密質量が200.157amuでありかつ相対存在量が少なくとも0.47％である、バイオマーカー6;および測定精密質量が232.146amuでありかつ相対存在量が少なくとも2.38％である、バイオマーカー12の任意の1つまたは任意の組合せまたはすべてをさらに含む、態様1に記載の組成物であり、これらのバイオマーカーはウコン中に見出され、かつ相対存在量は、エタノール中に溶解させた0.5mg/mlの組成物中にスパイクされた25mg/mlサリチル酸を基準としている。態様3は、バイオマーカー1、2、6、および12の少なくとも2つ、3つ、または4つを有している、態様2に記載の組成物である。態様4は、態様1〜3のいずれか1つに記載の組成物であり、該組成物は、測定精密質量が150.104amuでありかつ濃度が少なくとも0.04重量％である、バイオマーカー3;測定精密質量が176.120amuでありかつ相対存在量が少なくとも0.96％である、バイオマーカー4;測定精密質量が192.091amuでありかつ相対存在量が少なくとも1.74％である、バイオマーカー5;測定精密質量が202.172amuでありかつ相対存在量が少なくとも0.87％である、バイオマーカー7;測定精密質量が204.188amuでありかつ相対存在量が少なくとも0.30％である、バイオマーカー8;測定精密質量が216.151amuでありかつ相対存在量が少なくとも10.75％である、バイオマーカー9;測定精密質量が218.203amuでありかつ相対存在量が少なくとも4.00％である、バイオマーカー10;測定精密質量が220.183amuでありかつ相対存在量が少なくとも0.72％である、バイオマーカー11;測定精密質量が234.162amuでありかつ相対存在量が少なくとも3.52％である、バイオマーカー13;測定精密質量が256.240amuでありかつ相対存在量が少なくとも0.25％である、バイオマーカー14;測定精密質量が308.105amuでありかつ濃度が少なくとも1.50重量％である、バイオマーカー15;測定精密質量が338.115amuでありかつ濃度が少なくとも1.67重量％である、バイオマーカー16;測定精密質量が372.157amuでありかつ濃度が少なくとも0.88重量％である、バイオマーカー18;および測定精密質量が450.261amuでありかつ相対存在量が少なくとも0.61％である、バイオマーカー19の1つまたは複数をさらに含み、各バイオマーカーはウコン中に見出され、かつ相対存在量は、エタノール中に溶解させた0.5mg/mlの組成物中にスパイクされた25mg/mlサリチル酸を基準としている。態様5は、各バイオマーカーの質量が、リアルタイム直接分析-TOF(DART-TOF)質量分析計を用いて測定された質量である、態様1〜4のいずれかに記載の組成物である。態様6は、バイオマーカーの少なくとも1つが合成によって得られる、態様1〜5のいずれか1つに記載の組成物である。態様7は、バイオマーカーの少なくとも1つが植物から単離される、態様1〜6のいずれか1つに記載の組成物である。態様8は、バイオマーカーの少なくとも1つがウコ��から単離される、態様7に記載の組成物である。態様9は、バイオマーカーの相対存在量のバッチ間の化学的一致が少なくとも90％、好ましくは少なくとも95％、または少なくとも98％である、態様1〜8のいずれか1つに記載の組成物である。態様10は、少なくとも1種類の薬物をさらに含む、態様1〜9のいずれか1つに記載の組成物である。態様11は、少なくとも1種類のアセチルコリンエステラーゼ阻害物質および/またはN-メチル-D-アスパラギン酸(NMDA)受容体アンタゴニストをさらに含む、態様1〜10のいずれか1つに記載の組成物である。態様12は、少なくとも1種類のアセチルコリンエステラーゼ阻害物質が、ドネペジル、タクリン、ガランタミン、リバスチグミン、それらの塩、もしくはそれらの任意の組合せであり、かつ/または少なくとも1種類のNMDA受容体アンタゴニストがメマンチンである、態様11に記載の組成物である。態様13は、少なくとも1種類の抗炎症薬をさらに含む、態様1〜12のいずれかに記載の組成物である。態様14は、少なくとも1種類の抗炎症薬が、非ステロイド性抗炎症薬である、態様13に記載の組成物である。態様15は、非ステロイド性抗炎症薬が、アセチルサリチル酸、イブプロフェン、ケトプロフェン、もしくはナプロキセン、それらの塩、またはそれらの任意の組合せである、態様14に記載の組成物である。態様16は、鼻腔内投与用に製剤化されている、態様1〜15のいずれか1つに記載の組成物である。態様17は、乾燥粉末として、かつ/またはネブライザーによって投与される、態様16に記載の組成物である。態様18は、局所適用用、注射による投与用、および/または経口投与用に製剤化されている、態様1〜15のいずれか1つに記載の組成物である。態様19は、経口投与用に製剤化されている、態様18に記載の組成物である。態様20は、ロゼンジ、散剤、錠剤、ジェルキャップ、ゼラチン剤、溶液剤、食品、食品中、および/または溶解性フィルムである、態様19に記載の組成物である。態様21は、バイオマーカーの少なくとも1つがアミロイドに結合することができる、態様1〜20のいずれかに記載の組成物である。態様22は、バイオマーカーの少なくとも1つが、アミロイドが凝集するのを防止することができる、態様1〜21のいずれかに記載の組成物である。態様23は、アミロイド分泌を減少させるように製剤化されている、態様1〜22のいずれかに記載の組成物である。態様24は、可溶性アミロイドレベルおよび不溶性アミロイドレベルの両方を低下させるように製剤化されている、態様1〜23のいずれかに記載の組成物である。態様25は、タウを減少させるように製剤化されている、態様1〜24のいずれかに記載の組成物である。態様26は、リン酸化タウおよび/またはタウのリン酸化を減少させるように製剤化されている、態様1〜25のいずれかに記載の組成物である。態様27は、神経炎症、タンパク質ミスフォールディング、および/またはタンパク質分解を減少させるように製剤化されている、態様1〜26のいずれかに記載の組成物である。態様28は、IL-2に対するIL-4の比を増加させるように製剤化されている、態様1〜27のいずれかに記載の組成物である。態様29は、認知を増大させるように製剤化されている、態様1〜28のいずれかに記載の組成物である。態様30は、COX1および/もしくはCOX2またはその経路を阻害するように製剤化されて���る、態様1〜29のいずれかに記載の組成物である。態様31は、5LOXまたはその経路を阻害するように製剤化されている、態様1〜30のいずれかに記載の組成物である。態様32は、抗酸化活性を有するように製剤化されている、態様1〜31のいずれかに記載の組成物である。態様33は、フリーラジカルを捕捉するように製剤化されている、態様1〜32のいずれかに記載の組成物である。態様34は、Th2応答を高めるように製剤化されている、態様1〜33のいずれかに記載の組成物である。態様35は、神経学的な疾患、障害、および/または病態を治療および/または予防するように製剤化されている、態様1〜34のいずれかに記載の組成物である。態様36は、変性性/タンパク質ミスフォールディングの疾患、障害、および/もしくは病態、脳血管の疾患、障害、および/もしくは病態、炎症性の疾患、障害、および/もしくは病態、外傷/閉鎖性頭部損傷、てんかん、ならびに/または新生物を治療および/または予防するように製剤化されている、態様35に記載の組成物である。態様37は、アルツハイマー病、パーキンソン病、レビー小体病、前頭側頭変性症、進行性核上性麻痺、筋萎縮性側索硬化症、多系統萎縮症、脳アミロイドーシス、脊髄小脳萎縮症、虚血性脳卒中、再灌流障害、脳血管れん縮、多発性硬化症、CNSループス、振盪、挫傷、慢性外傷性脳障害、全般発作性疾患、部分的発作性疾患、転移性腫瘍、および/またはCNS原発腫瘍を治療および/または予防するように製剤化されている、態様35に記載の組成物である。態様38は、アルツハイマー病を治療および/または予防するように製剤化されている、態様35に記載の組成物である。態様39は、制嘔吐剤として製剤化されている、態様1〜38のいずれかに記載の組成物である。態様40は、少なくとも1種類のアセチルコリンエステラーゼ阻害物質、NMDA受容体アンタゴニスト、および/またはクルクミンを摂取している対象に関連する副作用および/または有害事象を処置するように製剤化されている、態様1〜39のいずれかに記載の組成物である。態様41は、少なくとも1種類のアセチルコリンエステラーゼ阻害物質、NMDA受容体アンタゴニスト、および/またはクルクミンを摂取している対象に関連する副作用および/または有害事象を予防するように製剤化されている、態様1〜39のいずれかに記載の組成物である。態様42は、バイオマーカー1〜16、18、および/または19のいずれも伴わない場合のクルクミンおよび/またはそのアナログの取込みと比べて対象へのクルクミンおよび/またはそのアナログの取込みを増大させるように製剤化されている、態様1〜41のいずれかに記載の組成物である。態様43は、少なくとも1つのツルメロンをさらに含み、かつツルメロンに対するクルクミンおよび/またはそのアナログの重量比が0.5〜0.9の間である、態様1〜42のいずれかに記載の組成物である。態様44は、組成物を投与されたヒトの血清中に組成物中に存在するクルクミンおよび/またはその機能的誘導体の少なくとも30％を供給するように製剤化されている、態様1〜43のいずれかに記載の組成物である。態様45は、組成物を投与されたヒトの血清中に少なくとも10mgのクルクミンおよび/またはその機能的誘導体を供給するように製剤化されている、態様1〜44のいずれかに記載の組成物である。態様46は、ヒト対象への投与後の対象の血清におけるクルクミンおよび/またはその機能的誘導体のT maxが20〜120分になるように製剤化されている、態様1〜45のいずれかに記載の組成物である。態様47は、ヒト対象への投与後の対象の血清におけるクルクミンおよび/またはその機能的誘導体のCmaxが少なくとも5マイクロモル濃度になるように製剤化されている、態様1〜46のいずれかに記載の組成物である。態様48は、ヒト対象への投与後の対象の血清におけるバイオマーカー1のTmaxが5〜120分になるように製剤化されている、態様1〜47のいずれかに記載の組成物である。態様49は、ヒト対象への投与後の対象の血清におけるバイオマーカー2のTmaxが2〜60分になるように製剤化されている、態様2〜48のいずれかに記載の組成物である。態様50は、ヒト対象への投与後の対象の血清におけるバイオマーカー6のTmaxが10〜180分になるように製剤化されている、態様2〜49のいずれかに記載の組成物である。態様51は、ヒト対象への投与後の対象の血清におけるバイオマーカー12のTmaxが5〜20分になるように製剤化されている、態様2〜50のいずれかに記載の組成物である。態様52は、組成物を投与されたヒトの脳脊髄液中に供給するように組成物中に存在するクルクミンおよび/またはその機能的誘導体を製剤化されている、態様1〜51のいずれかに記載の組成物である。態様53は、組成物を投与されたヒトの脳脊髄液中に少なくとも1mgのクルクミンおよび/またはその機能的誘導体を供給するように製剤化されている、態様1〜52のいずれかに記載の組成物である。態様54は、組成物を投与されたヒトの脳脊髄液中にバイオマーカー1〜16、18、または19の少なくとも1つを供給するように製剤化されている、態様1〜53のいずれかに記載の組成物である。態様55は、造影剤をさらに含む、態様1〜54のいずれかに記載の組成物である。態様56は、造影剤がバイオマーカー1〜16、18、または19の少なくとも1つに共有結合している、態様55に記載の組成物である。態様57は、造影剤がバイオマーカー1〜16、18、および19のいずれにも共有結合していない、態様55に記載の組成
物である。態様58は、神経学的な疾患、障害、および/もしくは病態のリスクを有している対象ならびに/または神経学的な疾患、障害、および/もしくは病態を有している対象を治療する方法であって、前記方法が、態様1〜57に記載の組成物のいずれか1つを対象に投与する段階を含み、かつ、神経学的な疾患、障害、および/もしくは病態が対象において改善されかつ/または発症が、患者が治療されなかった場合に予想される神経学的な疾患、障害、および/もしくは病態の発症と比べて遅延する、方法である。態様59は、神経学的な疾患、障害、および/もしくは病態が、変性性/タンパク質ミスフォールディングの疾患、障害、および/もしくは病態、脳血管の疾患、障害、および/もしくは病態、炎症性の疾患、障害、および/もしくは病態、外傷/閉鎖性頭部損傷、てんかん、ならびに/または新生物である、態様58に記載の方法である。態様60は、神経学的な疾患、障害、および/もしくは病態が、アルツハイマー病、パーキンソン病、レビー小体病、前頭側頭変性症、進行性核上性麻痺、筋萎縮性側索硬化症、多系統萎縮症、脳アミロイドーシス、脊髄小脳萎縮症、虚血性脳卒中、再灌流障害、脳血管れん縮、多発性硬化症、CNSループス、振盪、挫傷、慢性外傷性脳障害、全般発作性疾患、部分的発作性疾患、転移性腫瘍、および/もしくはCNS原発腫瘍である、態様58に記載の方法である。態様61は、神経学的な疾患、障害、および/もしくは病態がアルツハイマー病である、態様58に記載の方法である。態様62は、対象がアミロイド分泌、アミロイド凝集、タウ高リン酸化、神経炎症、もしくは認知低下、またはそれらの任意の組合せを有していると確認されている、態様61に記載の方法である。態様63は、24時間の期間中に1〜10,000mgの間、10〜5,000mgの間、50〜2,500mgの間、または100〜1,000mgの間の総量の組成物が対象に投与される、態様58〜62のいずれか1つに記載の方法である。態様64は、バイオマーカー1〜16、18、または19の少なくとも1つが合成によって得られる、態様58〜63のいずれか1つに記載の方法である。態様65は、バイオマーカー1〜16、18、または19の少なくとも1つが植物から単離される、態様58〜64のいずれか1つに記載の方法である。態様66は、バイオマーカーの少なくとも1つがウコンから単離される、態様65に記載の方法である。態様67は、組成物のバイオマーカーの相対存在量のバッチ間の化学的一致が少なくとも95％である、態様58〜66のいずれか1つに記載の方法である。態様68は、組成物がアセチルコリンエステラーゼ阻害物質および/またはN-メチル-D-アスパラギン酸(NMDA)受容体アンタゴニストをさらに含む、態様58〜67のいずれか1つに記載の方法である。態様69は、アセチルコリンエステラーゼ阻害物質が、ドネペジル、タクリン、ガランタミン、リバスチグミン、それらの塩、もしくはそれらの任意の組合せであり、かつ/または少なくとも1種類のNMDA受容体アンタゴニストがメマンチンである、態様68に記載の方法である。態様70は、アセチルコリンエステラーゼ阻害物質が、ドネペジル、その塩、またはそれらの任意の組合せである、態様69に記載の方法である。態様71は、組成物が鼻腔内に投与される、態様58〜70のいずれか1つに記載の方法である。態様72は、組成物が乾燥粉末として、かつ/またはネブライザーによって投与される、態様58〜71のいずれか1つに記載の方法である。態様73は、組成物が局所的に、注射によって、かつ/または経口的に投与される、態様58〜70のいずれか1つに記載の方法である。態様74は、組成物が経口的に投与される、態様73に記載の方法である。態様75は、組成物が、ロゼンジ、散剤、錠剤、ジェルキャップ、ゼラチン剤、溶液剤、食品、食品中、および/または溶解性フィルムとして投与される、態様74に記載の方法である。態様76は、バイオマーカーの少なくとも1つがアミロイドに結合する、態様61〜75のいずれか1つに記載の方法である。態様77は、アミロイド凝集が減少する、態様61〜76のいずれか1つに記載の方法である。態様78は、投与される組成物中のバイオマーカーが、投与される組成物中の個々のバイオマーカーそれぞれに対して予想されるアミロイド凝集の減少の相加量と比較してアミロイド凝集を減少させる際に相乗的に作用する、態様77に記載の方法である。態様79は、アミロイド分泌が減少する、態様61〜78のいずれかに記載の方法である。態様80は、投与される組成物中のバイオマーカーが、投与される組成物中の個々のバイオマーカーそれぞれに対して予想されるアミロイド分泌の減少の相加量と比較してアミロイド分泌を減少させる際に相乗的に作用する、態様79に記載の方法である。態様81は、可溶性アミロイドレベルおよび不溶性アミロイドレベルの両方が低下する、態様61〜79のいずれかに記載の方法である。態様82は、タウレベルが低下する、態様61〜81のいずれかに記載の方法である。態様83は、リン酸化タウレベルおよび/またはタウのリン酸化が減少する、態様61〜82のいずれかに記載の方法である。態様84は、活性酸素種レベルおよび/もしくはフリーラジカルレベルが低下し、タンパク質凝集が減少し、かつ/またはタンパク質ミスフォールディングが減少する、態様58〜83のいずれかに記載の方法である。態様85は、神経炎症が減少する、態様58〜83のいずれかに記載の方法である。態様86は、IL-2に対するIL-4の比が増加する、態様58〜85のいずれかに記載の方法である。態様87は、認知が増大する、態様58〜86のいずれかに記載の方法である。態様88は、対象へのクルクミンおよび/またはその機能的誘導体の取込みが、バイオマーカー1〜16、18、および/または19のいずれも伴わない場合のクルクミンおよび/またはその機能的誘導体の取込みと比べて、対象へのクルクミンおよび/またはその機能的誘導体の取込みを増大する、態様58〜87のいずれかに記載の方法である。態様89は、組成物が、少なくとも1つのツルメロンをさらに含み、かつツルメロンに対するクルクミンおよび/またはその機能的誘導体の重量比が0.5〜0.9の間である、態様58〜88のいずれかに記載の方法である。態様90は、組成物中に存在するクルクミンおよび/またはその機能的誘導体の少なくとも30％が、対象の血清中に入る、態様58〜89のいずれかに記載の方法である。態様91は、少なくとも10mgのクルクミンおよび/またはその機能的誘導体が対象の血清中に入る、態様58〜90のいずれかに記載の方法である。態様92は、対象への投与後の対象の血清におけるクルクミンおよび/またはその機能的誘導体のTmaxが20〜120分、20〜110分、30〜150分、25〜100分、または30〜90分である、態様58〜91のいずれかに記載の方法である。態様93は、対象への投与後の対象の血清におけるクルクミンおよび/またはその機能的誘導体のCmaxが少なくとも5マイクロモル濃度、少なくとも6マイクロモル濃度、少なくとも10マイクロモル濃度、または少なくとも11マイクロモル濃度である、態様58〜92のいずれかに記載の方法である。態様94は、対象への投与後の対象の血清におけるバイオマーカー1のTmaxが5〜120分、2〜100分、7〜150分、または10〜100分である、態様58〜93のいずれかに記載の方法である。態様95は、対象への投与後の対象の血清におけるバイオマーカー2のTmaxが2〜60分、1〜45分、5〜120分、または5〜50分である、態様58〜94のいずれかに記載の方法である。態様96は、対象への投与後の対象の血清におけるバイオマーカー6のTmaxが10〜180分、5〜150分、15〜210分、または15〜150分である、態様58〜95のいずれかに記載の方法である。態様97は、対象への投与後の対象の血清におけるバイオマーカー12のTmaxが5〜20分、2〜15分、7〜30分、または7〜15分である、態様58〜96のいずれかに記載の方法である。態様98は、少なくとも1種類のアセチルコリンエステラーゼ阻害物質、NMDA受容体アンタゴニスト、および/またはクルクミンを摂取している対象に関連する副作用および/または有害事象を処置する方法であって、該方法が、態様1〜57に記載の組成物のいずれか1つを対象に投与する段階を含み、少なくとも1種類のアセチルコリンエステラーゼ阻害物質、NMDA受容体アンタゴニスト、および/またはクルクミンを摂取している対象に関連する少なくとも1つの副作用および/または有害事象が減少する、方法である。態様99は、少なくとも1種類のアセチルコリンエステラーゼ阻害物質、NMDA受容体アンタゴニスト、および/またはクルクミンを摂取している対象に関連する副作用および/または有害事象を予防する方法であって、該方法が、態様1〜57に記載の組成物のいずれか1つを対象に投与する段階を含み、少なくとも1種類のアセチルコリンエステラーゼ阻害物質、NMDA受容体アンタゴニスト、および/またはクルクミンを摂取している対象に関連する少なくとも1つの副作用および/または有害事象が、態様1〜57に記載の組成物のいずれか1つを対象が摂取しなかった場合に予想される少なくとも1つの副作用および/または有害事象の量および/または強さと比較して減少する、方法である。態様100は、対象の血清中へのクルクミンおよび/またはその機能的誘導体の取込みを増大させる方法であって、該方法が、態様1〜57に記載の組成物のいずれか1つを対象に投与する段階を含み、クルクミンおよび/またはその機能的誘導体の取込みが、バイオマーカー1〜16、18、または19のいずれも伴わない場合のクルクミンおよび/またはその機能的誘導体の投与と比べて、クルクミンおよび/またはその機能的誘導体の取込みを増大する、方法である。態様101は、対象の脳脊髄液中へのクルクミンおよび/またはその機能的誘導体の取込みを増大させる方法であって、該方法が、態様1〜57に記載の組成物のいずれか1つを対象に投与する段階を含み、クルクミンおよび/またはその機能的誘導体の取込みが、バイオマーカー1〜16、18、または19のいずれも伴わない場合のクルクミンおよび/またはその機能的誘導体の投与と比べて、クルクミンおよび/またはその機能的誘導体の取込みを増大する、方法である。態様102は、対象への態様1〜57に記載の組成物の���ずれか1つの投与により、対象の脳脊髄液中に少なくとも1mgのクルクミンおよび/またはその機能的誘導体が供給される、態様101に記載の方法である。態様103は、バイオマーカー1〜16、18、または19の少なくとも1つを対象の脳脊髄液中に供給する方法であって、該方法が、態様1〜57に記載の組成物のいずれか1つを対象に投与する段階を含み、バイオマーカー1〜16、18、または19の少なくとも1つが対象の脳脊髄液中に侵入する、方法である。態様104は、アミロイドを態様1〜57のいずれかに記載の組成物と接触させる段階を含む、アミロイドを標識する方法である。態様105は、標識されるアミロイドがβアミロイドである、態様104に記載の方法である。態様106は、タウを態様1〜57のいずれかに記載の組成物と接触させる段階を含む、タウタンパク質を標識する方法である。態様107は、バイオマーカーの相対存在量のバッチ間の化学的一致が少なくとも90％、好ましくは少なくとも95％、または少なくとも98％である組成物を作製する、態様1〜57のいずれかに記載の組成物を作製する方法である。
【００６７】
「治療物質」は、本明細書において具体的に請求される化合物を包含する。これはまた、栄養補助的および/または薬学的に許容されるそれらの塩と共に、このような化合物を包含する。有用な塩は当業者に公知であり、無機酸、有機酸、無機塩基、または有機塩基との塩が含まれる。本発明で有用な治療物質は、単独であるかまたは他の栄養補助的および/もしくは薬学的な賦形剤もしくは不活性成分と組み合わせてかを問わず、ヒトまたは動物に投与された際に、所望の有益でしばしば薬理学的な作用を及ぼすような化合物である。
【００６８】
「バイオマーカー」という用語は、バイオマーカーと定義される化合物、その類似体、その誘導体、その塩形態、またはその任意の類似体もしくは誘導体の塩形態を意味する。
【００６９】
「測定精密質量」という用語は、電荷が公知であるイオンについて実験的に測定された分子の測定質量を意味する。測定精密質量の単位には、原子質量単位(amu)およびミリ統一原子質量単位(mmu)が含まれる。「分子量」という用語は、化合物中に存在する異なる同位体組成のすべてを用いるが、それらの天然存在量に対して重み付けされた、分子の平均重量を意味する。
【００７０】
「相対存在量」という用語は、参照化合物の存在量を基準とした、関心対象の化合物の存在量を意味する。特定の局面において、相対存在量は、関心対象の化合物の質量分析ピークの処理が施されていない強度を、参照化合物の質量分析ピークの処理が施されていない強度で割った値である。1つの非限定的な例において、質量分析ピークは、DART-TOF質量分析を用いて得ることができる。別の特定の局面において、参照化合物は、関心対象の化合物を含む試料中にスパイクまたは添加された化合物である。さらに別の特定の局面において、参照化合物は、相対存在量を測定するために試料に添加される前は試料中に存在しない、化合物である。別の特定の局面において、参照化合物は、サリチル酸であってよい。
【００７１】
「実質的に」という用語およびその変形は、おおむね、当業者によって理解されるように特定されることであるが、必ずしも完全にそうではないことと定義され、1つの非限定的な態様において、実質的にとは、10％以内、5％以内、1％以内、または0.5％以内の範囲を意味する。
【００７２】
「患者」、「対象」、または「個体」とは、哺乳動物(例えば、ヒト、霊長類、イヌ、ネコ、ウシ、ヒツジ、ブタ、ウマ、マウス、ラット、ハムスター、ウサギ、またはモルモット)を意味する。特定の局面において、患者、対象、または個体は、ヒトである。
【００７３】
「阻害する/抑制する(inhibiting)」もしくは「減少させる/低下させる(reducing)」またはこれらの用語の任意の変形は、所望の結果を実現するための任意の測定可能な減少または全面的な阻害を含む。
【００７４】
「有効な」もしくは「治療する/処置する(treating)」もしくは「予防する/防止する(preventing)」またはこれらの用語の任意の変形は、所望の、予想される、または意図される結果を達成するために適切であることを意味する。
【００７５】
ある化合物に言及する場合、「類似体」および「アナログ」とは、1つもしくは複数の原子が他の原子によって置換されているか、または1つもしくは複数の原子が化合物から欠失しているか、または1つもしくは複数の原子が化合物に付加されている、修飾化合物、またはそのような修飾の任意の組合せを意味する。このような原子の付加、欠失、または置換は、化合物を構成する一次構造沿いの任意の箇所、または複数の箇所で起こってよい。
【００７６】
親化合物に関しての「誘導体」とは、少なくとも1つの置換基が親化合物またはその類似体には存在していない、化学修飾された親化合物またはその類似体を意味する。1つのこのような非限定的な例は、共有結合的に修飾された親化合物である。典型的な修飾は、アミド、炭水化物、アルキル基、アシル基、エステル、およびペグ化などである。
【００７７】
「治療的に等価な」化合物とは、疾患または病態の治療において、1つまたは複数の他の化合物と本質的に同じ効果を有しているものである。治療的に等価である化合物は、化学的に等価、生物学的に等価、または包括的に等価であってもなくてもよい。
【００７８】
「非経口注射」とは、ヒトのような動物の1つもしくは複数の皮膚層もしくは粘膜の下への、またはそれらを通る注射による、低分子薬物の投与を意味する。
【００７９】
「バイオアベイラビリティ」とは、治療物質が製剤から吸収される程度を意味する。
【００８０】
「薬学的に許容される担体」とは、本発明の組成物または薬物化合物を動物またはヒトなどの哺乳動物に送達するための、薬学的に許容される溶剤、懸濁化剤、またはビヒクルを意味する。
【００８１】
「栄養補助的に許容される担体」とは、本発明の化合物を哺乳動物またはヒトなどの動物に送達するための、栄養補助的に許容される溶剤、懸濁化剤、またはビヒクルを意味する。
【００８２】
「薬学的に許容される」成分、賦形剤、または構成成分とは、過度の有害な副作用(毒性、刺激、およびアレルギー反応など)を伴わず、妥当な便益/リスク比に相応し、ヒトおよび/または動物に使用するのに適しているものである。
【００８３】
「栄養補助的に許容される」成分、賦形剤、または構成成分とは、過度の有害な副作用(毒性、刺激、およびアレルギー反応など)を伴わず、妥当な便益/リスク比に相応し、ヒトおよび/または動物に使用するのに適しているものである。
【００８４】
「約」または「およそ」または「実質的に不変の」という用語は、当業者によって理解されるものに近いものと定義され、1つの非限定的な態様において、これらの用語は、10％以内、好ましくは5％以内、より好ましくは1％以内、および最も好ましくは0.5％以内であると定義される。さらに、「実質的に非水性の」とは、重量または体積に基づいて5％、4％、3％、2％、1％未満、またはそれ未満の水を意味する。
【００８５】
「1つの(a)」または「1つの(an)」という単語の使用は、特許請求の範囲および/または明細書中で「含む」という用語と一緒に使用される場合、「1つ」を意味し得るが、「1つまたは複数の」、「少なくとも1つの」、および「1つまたは1つより多い」という意味とも矛盾しない。
【００８６】
本明細書および特許請求の範囲中で使用される場合、「含む(comprising)」という単語(および任意の形態の含む、例えば「含む(comprise)」および「含む(comprises)」)、「有する(having)」(および任意の形態の有する、例えば「有する(have)」および「有する(has)」)、「含む(including)」(および任意の形態の含む、例えば「含む(includes)」および「含む(include)」)、または「含む(containing)」(および任意の形態の含む、例えば「含む(contains)」および「含む(contain)」)は、包括的または非限定的であり、追加の挙げられていない要素も方法段階も除外しない。
【００８７】
前記組成物およびそれらの使用のための方法は、本明細書の全体を通して開示される成分または段階のいずれか「を含む」、「から本質的になる」、または「からなる」ことができる。移行句「から本質的になる」に関して、1つの非限定的な局面において、本明細書で開示される組成物および方法の基本的かつ新規な特徴は、アルツハイマー病ならびに/または関係する原因および/もしくは症状、例えば、非限定的に、炎症、タンパク質ミスフォールディング、および/もしくはタンパク質凝集を低減または予防する組成物の能力を含む。
【００８８】
本発明の他の目的、特徴、および利点は、以下の詳細な説明から明らかになると考えられる。しかし、詳細な説明および例は、本発明の特定の態様を示すものの、単に例証として与えられることが理解されるべきである。さらに、本発明の精神および範囲内の変化および修正は、この詳細な説明から当業者に明らかになるであろうことが予期される。
【図面の簡単な説明】
【００８９】
以下の図面は、本明細書の一部を形成し、本発明の特定の局面をさらに説明するために含まれる。本明細書において提示される具体的な態様の詳細な説明と組み合わせてこれらの図面の1つまたは複数を参照することにより、本発明をより良く理解することができる。
【図１】HSRx-888の経口投与に由来するヒト血清中のクルクミンおよびバイオマーカー1、2、6、および12の検出。
【図２】50mgのHSRx-888(35mgのクルクミンを含む)の経口投与に由来するヒト血清中のクルクミンの検出(対象5名の平均)。
【図３】HSRx-888の経口投与に由来するヒト血清中のバイオマーカー1の検出(ヒト対象5名の平均)。
【図４】HSRx-888の経口投与に由来するヒト血清中のバイオマーカー2の検出(ヒト対象5名の平均)。
【図５】HSRx-888の経口投与に由来するヒト血清中のバイオマーカー6の検出(ヒト対象5名の平均)。
【図６】HSRx-888の経口投与に由来するヒト血清中のバイオマーカー12の検出(ヒト対象5名の平均)。
【図７】HSRx-888(HSG0888)は、β-アミロイド凝集の用量依存的な抑制を示す。HSRx-888は、マイクロモル濃度(μM)でAβ1-42を有効に阻害する。0〜30μg/mLの様々な濃度のHSRx-888、HSG0838、HSG0848、または単一分子標準物質(クルクミン(Cur)、デメトキシクルクミン(DMC)、ビスデメトキシクルクミン(BDMC)、およびテトラヒドロクルクミン(THC))と共にインキュベートされた合成Aβ1-42ペプチドを用いて、Aβ凝集アッセイ法を実施した。1回の処理事象後5日目に、チオフラビンT法によって凝集を測定した。
【図８】HSRx-888(HSG0888)は、濃度依存的な様式でβ-アミロイド生成を有意に減少させる。HSRx-888は、濃度依存的な様式でSweAPP N2a細胞においてAβ1-40ペプチドおよびAβ1-42ペプチド両方のAβ生成を有意に減少させた。SweAPP N2a細胞を濃度範囲3〜30μg/mLの各化合物で12時間処理し、SweAPP N2a細胞の馴化培地中のAβ1-40、42ペプチドをELISAによって解析した。
【図９】HSRx-888(HSS-888)は、Tg2576マウスの脳アミロイドーシスを軽減する。8ヶ月齢のTg2576マウスにHSRx-888を経口投与した。HSRx-888処置により、対照およびTHC処置の両方と比べて、これらのマウスにおけるAβ沈着は有意に減少した。A - 帯状皮質および嗅内皮質のAβ沈着の染色。B - 嗅内皮質(EC)、海馬(H)、および帯状皮質(CC)中のプラーク負荷量の平均%を標準誤差と共に示す。
【図１０】HSRx-888(HSS-888)は、Tg2576マウス脳ホモジネート中の可溶性β-アミロイドレベルおよび不溶性β-アミロイドレベルの両方を低下させる。マウス脳ホモジネートのAβレベルをELISAによって解析した。経口投与されたHSRx-888により、可溶性対照および不溶性対照と比べて、可溶型および不溶型のAβ1-40、42は有意に減少した(それぞれAおよびB)。
【図１１】HSRx-888(HSS-888)は、Tg2576マウス中のリン酸化タウタンパク質を減少させる。HSRx-888で処置されたマウスは、対照マウスと比べてpTauの80％の減少を示した。処置されたマウスに由来する脳前方部四分の一のホモジネートをウェスタンブロット解析によって解析した。**=p<0.01。
【図１２】HSRx-888(HSS-888)は、Th2細胞性免疫応答を増強する。HSRx-888処置によってサイトカインIL-2およびIL-4が増加したことから、HSRx-888が特定のサイトカインの抗炎症活性を介してミクログリア保護をもたらすことが示された。屠殺した後にマウスからミクログリアの初代培養物を樹立し、抗CD3抗体で24時間刺激した。細胞内タンパク質の総量(mg)当たりの各サイトカインのpgとしてデータを表した。**=p<0.01。
【図１３】提案される、β-アミロイド凝集を減少させる際の非結合作用機序。βA(1-42)単量体とバイオマーカー15(BDMC)の相互作用のモデル。Tyr10とバイオマーカー1の間で強い分子間相互作用が起こることによって、バイオマーカー15がHis13およびHis14を取り囲むことが可能になって、Phe19およびPhe20が結合しオリゴマーを形成するのを効果的に防ぐ(A)。バイオマーカー15はまた、Gly33、Met35、およびGly37に結合して、βA(1-42)オリゴマーの安定化分子間相互作用を妨害することもできる(B)。
【図１４】HSRx-888による、2-ジフェニル-1-ピクリルヒドラジルラジカルアッセイ法(DPPH)の用量依存的阻害。HSRx-888のIC50値は、19.2μg/mLである(R2=0.731、N=10)。
【図１５Ａ】HSRx888によるCOX1の用量依存的阻害。HSRx-888のIC50値は、100.6μg/mL(R2=0.907、N=36)である。
【図１５Ｂ】HSRx888によるCOX2の用量依存的阻害。HSRx-888のIC50値は、23.0μg/mL(R2=0.874、N=24)である。
【図１５Ｃ】HSRx888による5LOXの用量依存的阻害。HSRx-888のIC50値は、256.3μg/mL(R2=0.999、N=8)である。
【発明を実施するための形態】
【００９０】
詳細な説明
驚くべきことに、本発明者らは、ターメリック中に見出され得るいくつかの化合物の組合せが、アルツハイマー病、炎症、タンパク質ミスフォールディング、およびタンパク質凝集を予防および治療できることを発見した。本発明者らはまた、これらの化合物の特定の相対濃度が、組み合わされた化合物がアルツハイマー病、炎症、タンパク質ミスフォールディング、およびタンパク質凝集を予防および治療する能力を増強する役割を果たすことも発見した。さらに、本発明者らは、追加の薬物と共に本発明の化合物を使用すると、組み合わされた化合物がアルツハイマー病、炎症、タンパク質ミスフォールディング、およびタンパク質凝集を予防および治療する能力が増強されることも発見した。理論に拘束されることを望むものではないが、本明細書において開示される化合物および組成物は、ヒト対象の血漿および脳脊髄液を含む、対象中へのクルクミン取込みを増大させる能力、組成物の抗炎症能力、組成物がアミロイドに結合する能力、組成物がアミロイド凝集を減少させる能力、および組成物がアミロイドーシスを軽減する能力によって有効であり得ると考えられている。
【００９１】
本明細書において開示される化合物および組成物は、アルツハイマー病および炎症に関連する症状、ならびにアルツハイマー病および炎症を治療するための薬物の摂取に関連する副作用、例えば悪心を治療、改善、および予防することができる。アルツハイマー病の症状および/または原因の非限定的な例には、アミロイド凝集、アミロイド分泌の増加、アミロイド産生の増加、老人斑、アミロイドの正常な生理学的機能の喪失、タウの高リン酸化、神経原線維変化の増加、タウの毒性種の増加、タウレベルの増大、神経炎症などが含まれる。アルツハイマー病の症状のその他の非限定的な例には、認知の低下、記憶障害、錯乱、視力障害、空間認識の障害、語彙の減少、うつ、気分の変化などが含まれる。
【００９２】
本明細書において開示される化合物および組成物は、タンパク質凝集およびタンパク質ミスフォールディングを減少させることができて、アルツハイマー病(β-アミロイドおよびリン酸化タウタンパク質)、パーキンソン病(α-シヌクレインタンパク質)、レビー小体型認知症(β-アミロイド、リン酸化タウ、およびα-シヌクレインタンパク質)、前頭側頭型認知症(タウタンパク質)、海綿状脳症(プリオンタンパク質)などの神経変性障害の治療および/または予防において、ならびに他の多くの中枢神経アミロイドーシスおよび全身性アミロイドーシスにおいて、利益を与える。
【００９３】
さらに、本明細書において開示される組合せは、他の神経学的な疾患、障害、および/または病態、例えば、非限定的に、変性性障害/タンパク質ミスフォールディング障害、脳血管疾患、炎症性疾患、外傷/閉鎖性頭部損傷、てんかん、および/または新生物の治療および/または予防においても利益を与える。変性性/タンパク質ミスフォールディングの疾患、障害、および/または病態の非限定的な例には、アルツハイマー病、パーキンソン病、レビー小体、前頭側頭変性症、進行性核上性麻痺、筋萎縮性側索硬化症、多系統萎縮症、脳アミロイドーシス、脊髄小脳萎縮症が含まれる。脳血管の疾患、障害、および/または病態の非限定的な例には、虚血性脳卒中、再灌流障害、および脳血管れん縮が含まれる。炎症性の疾患、障害、および/または病態の非限定的な例には、多発性硬化症およびCNSループスが含まれる。外傷/閉鎖性頭部損傷の非限定的な例には、振盪、挫傷、および慢性外傷性脳障害が含まれる。てんかんの非限定的な例には、全般発作性疾患および部分的発作性疾患が含まれる。新生物の非限定的な例には、転移性腫瘍およびCNS原発腫瘍が含まれる。
【００９４】
A  組成物中の化合物
本発明の組成物は、クルクミン(368.126amu)、ならびにウコン(ターメリック)中に見出され測定精密質量により定義されるバイオマーカー、すなわち120.094amu(バイオマーカー1)、134.110amu(バイオマーカー2)、150.104amu(バイオマーカー3)、176.120amu(バイオマーカー4)、192.091amu(バイオマーカー5)、200.157amu(バイオマーカー6)、202.172amu(バイオマーカー7)、204.188amu(バイオマーカー8)、216.151amu(バイオマーカー9)、218.203amu(バイオマーカー10)、220.183amu(バイオマーカー11)、232.146amu(バイオマーカー12)、234.162amu(バイオマーカー13)、256.240amu(バイオマーカー14)、308.105amu(バイオマーカー15)、338.115amu(バイオマーカー16)、372.157amu(バイオマーカー18)、および450.261amu(バイオマーカー19)のバイオマーカーの1つまたは複数、ならびにそれらの組合せを含み得る。理論に拘束されることを望むものではないが、これらのバイオマーカーは、対象の血清中および/または対象の脳脊髄液中へのクルクミンの取込みを増大させ、アミロイドに結合し、タンパク質凝集を減少させ、タンパク質ミスファイリングを減少させ、炎症を軽減すると考えられている。
【００９５】
特定の態様において、バイオマーカーまたはバイオマーカーの組合せは、バイオマーカーの相対存在量のバッチ間の化学的一致が90％である。別の特定の態様において、化合物または化合物の組合せは、バイオマーカーの相対存在量のバッチ間の化学的一致が95％および/または98％である。
【００９６】
本発明のいくつかの局面において、組成物中の化合物ならびに誘導体および類似体は、公知の合成方法によって作製されてよい。本発明のいくつかの局面において、組成物中の化合物および/または組成物は、化学合成の当業者に公知の方法に従って化合物および/または組成物を製造することによって、合成的に得ることができる。いくつかの局面において、化合物および/または組成物は、有機化学の方法によって合成される。
【００９７】
本発明のいくつかの局面において、組成物中の化合物および/または組成物は、果物、植物、動物、真菌、細菌、および/または古細菌などの生物の抽出物から単離することができる。植物の非限定的な例には、ウコンが含まれる。組成物中の化合物または組成物は、公知の抽出方法を用いて、例えば、40〜80℃および80〜900バールで抽出物をCO2と接触させるか、または抽出物をH2OもしくはEtOH:H2Oの任意の組合せと接触させ、かつポリマー分離を利用する任意の方法を用いて抽出物を分離することによって、生物から抽出することができる。ポリマー分離のために使用されるポリマーの非限定的な例には、ADS5ポリマー(Nankai University, China)が含まれる。抽出物は、クルクミン、ならびにウコン中に見出され測定精密質量により定義される化合物、すなわち120.094amu(バイオマーカー1)、134.110amu(バイオマーカー2)、150.104amu(バイオマーカー3)、176.120amu(バイオマーカー4)、192.091amu(バイオマーカー5)、200.157amu(バイオマーカー6)、202.172amu(バイオマーカー7)、204.188amu(バイオマーカー8)、216.151amu(バイオマーカー9)、218.203amu(バイオマーカー10)、220.183amu(バイオマーカー11)、232.146amu(バイオマーカー12)、234.162amu(バイオマーカー13)、256.240amu(バイオマーカー14)、308.105amu(バイオマーカー15)、338.115amu(バイオマーカー16)、372.157amu(バイオマーカー18)、および450.261amu(バイオマーカー19)の化合物のいずれか1つまたは組合せを含み得る。
【００９８】
本発明のいくつかの局面において、組成物中の化合物ならびにそれらの誘導体および類似体の1つまたは複数は、当業者に公知である公知の合成方法によって作製することができ、組成物中の化合物ならびにそれらの誘導体および類似体の1つまたは複数は、限定されるわけではないが果物および植物の抽出物のような他の供給源から単離されてもよい。
【００９９】
B  DART TOF/MSによって明らかにされる活性
本明細書において説明する測定精密質量および相対存在量は、特定の測定機器および特定の設定を用いる実験に基づいており、測定機器によって変化し得る。各測定にはばらつきがある。したがって、測定精密質量および相対存在量は、当業者によって理解されるものに近いものと定義される。1つの非限定的な態様において、これらの用語は、30％以内、好ましくは20％以内、好ましくは10％、好ましくは5％以内、より好ましくは1％以内、最も好ましくは0.5％以内であると定義される。1つの非限定的な態様において、測定精密質量は、±20mmu以内、好ましくは10mmu、より好ましくは5mmu以内、および最も好ましくは1mmu以内の誤差を有する。1つの非限定的な態様において、相対存在量は、±20％、好ましくは10％、好ましくは5％以内、およびより好ましくは1％以内、および最も好ましくは0.5％以内の誤差を有する。
【０１００】
非限定的な例において、本発明の化合物は、リアルタイム直接分析(DART)飛行時間型/質量分析法(TOF/MS)を用いて同定することができる。具体的には、Peabody, MAのJeol USA製のJEOL DART(商標)AccuTOF質量分析計(JMS-T100LC)を使用することができる。測定精密質量は、試料から生じたイオンの測定質量からプロトンの質量(1.007825amu)を引くことによって、測定することができる。化合物の質量は、Dip-IT試料採取器およびDip-IT試料採取器ホルダー(ionSense(商標))を用いてイオン流に試料を直接導入することによって、試料中で測定することができる。DARTを用いる単純な解析には試料調製は必要とされないものの、公知の量と比べる定量のために、化学物質を添加/スパイクされた溶液を使用することができる。非限定的な例として、参照化合物は、基準として働くように添加されるまでは試料中に存在せず、したがって、生物活性分子の定量的化学プロファイルを作成するのに使用することができる。DARTイオン源の設定は以下であってよい。
気体:He
流量:50PSIで2.52LPM
温度:250℃
ニードル電圧:3000V
グリッド電極電圧:250V
放電極電圧:400V
JEOL AccuTOF MSの設定は以下であってよい。
ピーク電圧:1000V
オリフィス1温度:120℃
検出器電圧:2600V
リフレクトロン電圧:990.0V
【０１０１】
試料は、6つ組でDART-TOF MSによって解析することができる。これら6つのレプリケートを解析して、試料の単一の、平均され、選別され、統計学的に有意なDARTフィンガープリントを作り出すことができる。次いで、処理されたこのフィンガープリントを用いて、質量を比較することにより生物活性マーカーの存在を判定することができる。これらの生物活性マーカーを最初に発見および同定するので、単純な質量比較が、化学物質の任意の抽出物または混合物中におけるそれらの存在を判定するのに十分である。
【０１０２】
質量許容誤差、すなわち、予測される[M+H]値または[M-H]値の周辺の許容される報告質量の範囲がどのMSにもある。AccuTOFの場合、その質量許容誤差は、20ミリ質量単位(mmu)未満(予測される質量±10mmu)である。同じ試料およびイオン源を前提とする場合、他のTOF-MSの質量許容誤差が高い場合も低い場合もある。
【０１０３】
別の非限定的な例において、本発明の化合物は、DARTイオン源について以下の設定を用いて、陽イオンモード([M+H]+)で実行される Peabody, MAのJeol USA製のJEOL DART(商標)AccuTOF質量分析計(JMS-T100LC)を用いることにより、DART TOF/MSによって測定することができる。
気体:He
流量:3.98L/分
ニードル電圧:3500V
温度:300℃
電極1電圧:150V
電極2電圧:250V
JEOL AccuTOF MSの設定は以下であってよい。
ピーク電圧:1000V
オリフィス1電圧:20V
リングレンズ電圧:5V
オリフィス2電圧:5V
検出器電圧: 2550V
【０１０４】
較正は、必要とされる質量範囲100〜1000amuの全体にわたる質量マーカーを提供するUltra Chemical(North Kingston, RI)製のPEG600の10％(重量/体積)溶液を用いて、各試料を用いて内部で実施することができる。較正許容誤差は5mmuに維持することができる。試料は、トータルイオンクロマトグラム(TIC)においてシグナルが得られるまで、ホウケイ酸ガラス融点毛細管チューブの閉じた端を用いて、DART He血漿中に導入することができる。その後、TICがベースラインレベルに戻ったときに、次の試料を導入することができる。
【０１０５】
C  アルツハイマー病またはその症状を治療または予防するための作用物質
本発明の組成物は、アルツハイマー病またはその症状を治療または予防するための作用物質を含み得ることが企図される。このような作用物質は、アルツハイマー病の症状または原因を減らすのに使用される化合物または組成物である。アルツハイマー病の症状または原因の非限定的な例には、アミロイド凝集、アミロイド分泌の増加、アミロイド産生の増加、老人斑、アミロイドの正常な生理学的機能の喪失、タウの高リン酸化、神経原線維変化の増加、タウの毒性種の増加、タウレベルの増大、神経炎症などが含まれる。アルツハイマー病の症状のその他の非限定的な例には、認知の低下、記憶障害、錯乱、視力障害、空間認識の障害、語彙の減少、うつ、気分の変化などが含まれる。
【０１０６】
アルツハイマー病またはその症状を治療または予防するための作用物質の非限定的な例には、アセチルコリンエステラーゼ阻害物質、NMDA受容体アンタゴニスト、および/またはクルクミンが含まれる。アセチルコリンエステラーゼ阻害物質は、アセチルコリンエステラーゼ酵素を阻害するのに使用される。アセチルコリンエステラーゼ酵素は、神経伝達物質アセチルコリンを分解する。アセチルコリンエステラーゼ阻害物質の非限定的な例には、ドネペジル、タクリン、ガランタミン、およびリバスチグミンが含まれる。NMDA受容体アンタゴニストの非限定的な例には、メマンチンが含まれる。いくつかのアセチルコリンエステラーゼ阻害物質は、悪心のような副作用を有する。多量のクルクミンの投与もまた、悪心を含む胃腸の問題の原因となり得る。1つの態様において、本明細書において開示される組成物は、限定されるわけではないが、ドネペジル、タクリン、ガランタミン、およびリバスチグミンであり得る、少なくとも1種類のアセチルコリンエステラーゼ阻害物質をさらに含む。いくつかの態様において、組成物は、限定されるわけではないが、悪心であり得る、アセチルコリンエステラーゼ阻害物質および/またはクルクミンの副作用を少なくするように製剤化される。1つの態様において、本明細書において開示される組成物は、限定されるわけではないが、メマンチンであり得る、少なくとも1種類のNMDA受容体アンタゴニストをさらに含む。
【０１０７】
D  抗炎症剤
本発明の組成物は、抗炎症剤を含み得ることが企図される。抗炎症剤は、対象における炎症応答を減少させるか、または炎症応答の影響を小さくするのに使用される化合物または組成物である。抗炎症剤の非限定的な例には、コルチコステロイドおよび非ステロイド性抗炎症薬が含まれる。非ステロイド性抗炎症薬の非限定的な例には、アセチルサリチル酸、イブプロフェン、ケトプロフェン、およびナプロキセンが含まれる。いくつかの抗炎症薬は、COX1もしくはCOX2、またはそれらの経路を阻害する。いくつかの抗炎症薬は、5LOXまたは5LOX経路を阻害する。いくつかの抗炎症剤は、IL-2およびIL-4などの抗炎症性サイトカインを増加させる。いくつかの抗炎症剤は、Th1応答を減少させ、かつ/またはTh2応答を増大させる。いくつかの態様において、本明細書において開示される組成物は、限定されるわけではないが、アセチルサリチル酸、イブプロフェン、ケトプロフェン、およびナプロキセンであり得る、少なくとも1種類の追加の抗炎症剤をさらに含む。
【０１０８】
E  成分の量
本発明の組成物は、任意の量の本明細書で考察される成分を含み得ることが企図される。組成物はまた、本明細書の全体を通して説明される追加の成分(例えば、安定化剤、増量剤、薬学的および/もしくは栄養補助的に許容される塩、ならびに/または追加の薬学的および/もしくは栄養補助的な成分)の任意の数の組合せも含み得る。組成物内の任意の成分の濃度は、様々であってよい。非限定的な態様において、例えば、組成物は、その最終形態において、例えば、少なくとも約
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またはこの中から派生する任意の範囲の、本明細書および特許請求の範囲の全体を通して挙げられる成分のうちの少なくとも1つを含むか、本質的にそれからなるか、またはそれからなってよい。非限定的な局面において、パーセンテージは、組成物全体の重量もしくは体積、または相対存在量に基づいて算出することができる。当業者は、所与の組成物における成分の追加、置換、および/または除去に応じて濃度が変動し得ることを理解するであろう。
【０１０９】
F  追加の構成成分
本発明の化合物は、ヒト患者または非ヒト罹患動物に投与するための任意の適切な組成物形態に製剤化され得る。
【０１１０】
この組成物は、投与様式および剤形の性質に応じて、特許請求の範囲の化合物のみからなってもよいか、または化合物ならびに任意の適切な追加の構成成分、例えば、1種類もしくは複数種類の薬学的および/もしくは栄養補助的に許容される担体、希釈剤、アジュバント、賦形剤、もしくはビヒクル、例えば、保存剤、増量剤、崩壊剤、湿潤剤、乳化剤、懸濁化剤、甘味剤、矯味剤、着香剤、抗菌剤、抗真菌剤、滑沢剤、および分散剤を含んでもよい。各担体は、製剤の他の成分と共存でき、患者に害を及ぼさないという意味で許容されなければならない。
【０１１１】
1  賦形剤
本発明の組成物中で使用される賦形剤は、固体、半固体、液体、またはそれらの組合せであってよい。好ましくは、賦形剤は固体である。賦形剤を含む本発明の組成物は、例えば、賦形剤と特許請求の範囲の化合物を混合する段階を含む任意の公知の技術によって調製することができる。本発明の薬学的組成物は、用量単位ごとに所望の量の特許請求の範囲の化合物を含み、経口投与向けの場合は、例えば、錠剤、カプレット、丸剤、硬もしくは軟カプセル剤、ロゼンジ、カシェ剤、分配可能な散剤、顆粒剤、懸濁剤、エリキシル剤、分散剤の形態、またはそのような投与にほどよく適している他の任意の形態で存在してよい。経鼻投与向けの場合には、例えば、乾燥粉末、ネブライザー、またはそのような投与にほどよく適している他の任意の形態で存在してよい。非経口投与向けの場合には、例えば、懸濁剤または経皮吸収型貼付剤の形態で存在してよい。直腸投与向けの場合には、例えば坐剤の形態で存在してよい。現在、具体的であるのは、所定の量の特許請求の範囲の化合物をそれぞれが含む別個の用量単位、例えば錠剤またはカプセル剤である経口剤形である。
【０１１２】
2  担体/希釈剤
例示的に、適切な担体または希釈剤には、個別にまたは組み合わせて、無水ラクトースおよびラクトース一水和物を含むラクトース;直接的に圧縮可能なデンプンおよび加水分解デンプン(例えばCelutab(商標)およびEmdex(商標))を含むデンプン;マンニトール、ソルビトール、キシリトール、デキストロース(例えば、Cerelose(商標)2000)およびデキストロース一水和物、二塩基性リン酸カルシウム二水和物、スクロースベースの希釈剤、菓子製造業者の糖、一塩基性硫酸カルシウム一水和物、硫酸カルシウム二水和物、顆粒状乳酸カルシウム三水和物、デキストラート、イノシトール、加水分解された穀物固形物、アミロース、結晶セルロースを含むセルロース、α-セルロースおよびアモルファスセルロースの食品グレードの供給源(例えばRexcelJ)、粉末セルロース、ヒドロキシプロピルセルロース(HPC)およびヒドロキシプロピルメチルセルロース(HPMC)、炭酸カルシウム、グリシン、粘土、ベントナイト、ブロック共重合体、およびポリビニルピロリドンなど含まれるが、それらに限定されるわけではない。このような担体または希釈剤は、存在する場合、合わせて、組成物の総重量の約5％〜約99.999％、約10％〜約85％、および20％〜約80％を占める。好ましくは、選択される1つの担体、複数の担体、1つの希釈剤、または複数の希釈剤は、適切な流動特性を示し、錠剤が望ましい場合には、圧縮性を示す。
【０１１３】
3  崩壊剤
本発明の組成物は、任意で、特に錠剤製剤の場合、賦形剤として1種類または複数種類の薬学的および/または栄養補助的に許容される崩壊剤を含んでよい。適切な崩壊剤には、個別にまたは組み合わせて、グリコール酸デンプンナトリウムおよびアルファ化トウモロコシデンプンを含むデンプン、粘土、セルロース、例えば、精製セルロース、結晶セルロース、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、およびカルボキシメチルセルロースナトリウムなど、クロスカルメロースナトリウム、アルギン酸、クロスポビドン、ならびにゴム、例えば、カンテン、グアー、イナゴマメ、カラヤ、ペクチン、およびトラガカントゴムなどが含まれるが、それらに限定されるわけではない。崩壊剤は、組成物を調製する間の任意の適切な段階で、特に、顆粒化の前、または圧縮前の潤滑化段階の間に、添加されてよい。このような崩壊剤は、存在する場合、合わせて、組成物の総重量の好ましくは約0.2％〜約30％、好ましくは約0.2％〜約10％、およびより好ましくは約0.2％〜約5％を占める。
【０１１４】
4  結合剤
本発明の組成物は、特に錠剤製剤の場合、結合剤または接着剤を含んでよい。このような結合剤および接着剤は、好ましくは、錠剤化される粉末に十分な粘着力を与えて、分粒、潤滑化、圧縮、および包装などの通常の加工処理作業を可能にするが、それでもなお、錠剤が崩壊し、摂取時に組成物が吸収されるようにする。このような結合剤は、塩が溶液中に溶解されると、本発明の共結晶の結晶化または再結晶を防止または阻害することもできる。適切な結合剤および接着剤には、個別にまたは組み合わせて、アカシア;トラガカントゴム、スクロース、ゼラチン、グルコース、デンプン、例えば、非限定的にアルファ化デンプン、セルロース、例えば、非限定的に、メチルセルロースおよびカルメロースナトリウム、アルギン酸およびアルギン酸の塩;ケイ酸アルミニウムマグネシウム、PEG、グァーゴム、ポリサッカライド酸、ベントナイト、ポビドン、ポリメタクリラート、HPMC、ヒドロキシプロピルセルロース、およびエチルセルロースが含まれるが、それらに限定されるわけではない。このような結合剤および/または接着剤は、存在する場合、合わせて、薬学的組成物の総重量の好ましくは約0.5％〜約25％、好ましくは約0.75％〜約15％、およびより好ましくは約1％〜約10％を占める。結合剤の多くは、アミド基、エステル基、エーテル基、アルコール基、またはケトン基を含むポリマーであり、したがって、本発明の薬学的組成物中に含まれてよい。ポリビニルピロリドンは、徐放錠剤のために使用される結合剤の非限定的な例である。ポリマー結合剤の分子量、架橋の程度、およびポリマーのグレードは、様々であってよい。ポリマー結合剤はまた、コポリマー、例えば酸化エチレン単位および酸化プロピレン単位の混合物を含むブロックコポリマーであってもよい。所与のポリマー中のこれらの単位の比の変化は、特性および性能に影響を及ぼし得る。
【０１１５】
5  湿潤剤
湿潤剤が、本発明の組成物中で使用されてよい。湿潤剤は、組成物のバイオアベイラビリティを向上させることができる条件である、水と密接に関連した状態で結晶を維持するように選択され得る。このような湿潤剤はまた、結晶を可溶化するのに、または結晶の溶解性を高めるのに有用であり得る。界面活性剤は、湿潤剤として使用され得る。本発明の組成物中で湿潤剤として使用され得る界面活性剤の非限定的な例には、四級アンモニウム化合物、例えば塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、および塩化セチルピリジニウム、ジオクチルナトリウムスルホサクシナート、ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテル、ポロキサマー(ポリオキシエチレンおよびポリオキシプロピレンブロックコポリマー)、ポリオキシエチレン脂肪酸グリセリドおよび油、例えばポリオキシエチレン(8)カプリル酸/カプリン酸モノグリセリドおよびジグリセリド、ポリオキシエチレン(35)ヒマシ油およびポリオキシエチレン(40)硬化ヒマシ油、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、例えばポリオキシエチレン(20)セトステアリルエーテル、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、例えばポリオキシエチレン(40)ステアラート、ポリオキシエチレンソルビタンエステル、例えばポリソルベート20およびポリソルベート80、プロピレングリコール脂肪酸エステル、例えばラウリン酸プロピレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウム、脂肪酸およびそれらの塩、例えばオレイン酸、オレイン酸ナトリウム、およびオレイン酸トリエタノールアミン、グリセリル脂肪酸エステル、例えばモノステアリン酸グリセリル、ソルビタンエステル、例えばソルビタンモノラウラート、ソルビタンモノオレアート、モノパルミチン酸ソルビタンおよびモノステアリン酸ソルビタン、チロキサポール、ならびにそれらの混合物が含まれる。このような湿潤剤は、存在する場合、合わせて、薬学的組成物の総重量の約0.25％〜約15％、好ましくは約0.4％〜約10％、およびより好ましくは約0.5％〜約5％を占める。
【０１１６】
6  滑沢剤
滑沢剤が、本発明の組成物中に含まれてよい。適切な滑沢剤には、個別にまたは組み合わせて、ベヘン酸グリセリル、ステアリン酸、ならびにステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、およびステアリン酸ナトリウムを含む、その塩;硬化植物油、コロイドシリカ、タルク、ワックス、ホウ酸、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、フマル酸ナトリウム、塩化ナトリウム、DL-ロイシン、PEG(例えば、Dow Chemical Company製のカーボワックス(商標)4000およびカーボワックス(商標)6000)、オレイン酸ナトリウム、ラウリル硫酸ナトリウム、ならびにラウリル硫酸マグネシウムが含まれるが、それらに限定されるわけではない。このような滑沢剤は、存在する場合、合わせて、組成物の総重量の好ましくは約0.1％〜約10％、好ましくは約0.2％〜約8％、およびより好ましくは約0.25％〜約5％を占める。
【０１１７】
7  他の作用物質
界面活性剤、エマルジファイヤー、または起泡剤が、組成物中で使用されてよい。乳化剤は、軟ゼラチンカプセル剤内の成分を可溶化するのを助けるのに使用され得る。界面活性剤、エマルジファイヤー、または起泡剤の非限定的な例には、D-ソルビトール、エタノール、カラゲナン、カルボキシビニルポリマー、カルメロースナトリウム、グァーゴム、グリセロール、グリセロール脂肪酸エステル、コレステロール、白色蜜ろう、ジオクチルナトリウムスルホサクシナート、スクロース脂肪酸エステル、ステアリルアルコール、ステアリン酸、ステアリン酸ポリオキシル40、セスキオレイン酸ソルビタン、セタノール、ゼラチン、ソルビタン脂肪酸エステル、タルク、トリオレイン酸ソルビタン、パラフィン、ジャガイモデンプン、ヒドロキシプロピルセルロース、プロピレングリコール、プロピレングリコール脂肪酸エステル、ペクチン、ポリオキシエチレン(105)ポリオキシプロピレン(5)グリコール、ポリオキシエチレン(160)ポリオキシプロピレン(30)グリコール、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油40、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油60、ポリオキシル35ヒマシ油、ポリソルベート20、ポリソルベート60、ポリソルベート80、マクロゴール400、ミリスチン酸オクチルドデシル、メチルセルロース、ソルビタンモノオレアート、モノステアリン酸グリセロール、ソルビタンモノパルミタート、ソルビタンモノラウラート、ラウリルジメチルアミンオキシド溶液、ラウリル硫酸ナトリウム、ラウロマクロゴール、乾燥炭酸ナトリウム、酒石酸、水酸化ナトリウム、精製ダイズレシチン、ダイズレシチン、炭酸カリウム、炭酸水素ナトリウム、中鎖トリグリセリド、クエン酸無水物、綿実油-ダイズ油混合物、および液体パラフィンが含まれる。
【０１１８】
G  ビヒクル
例えば、リポソーム、微粒子、マイクロカプセル中への封入、および受容体を介したエンドサイトーシスなどの様々な送達システムが当技術分野において公知であり、本発明の治療物質または組成物を投与するために使用することができる。投与方法には、非経口経路、動脈内経路、筋肉内経路、静脈内経路、鼻腔内経路、および経口経路が含まれるが、それらに限定されるわけではない。組成物は、錠剤、ロゼンジ、顆粒剤、カプセル剤、丸剤、アンプル剤、坐剤、またはエアロゾル型の形態で提供されてよい。組成物はまた、水性もしくは非水性の希釈剤に溶かした活性成分の懸濁剤、液剤、および乳剤、シロップ剤、粒剤、または散剤の形態で提供されてもよい。
【０１１９】
H  製剤および投与
前記組成物は、例えば、薬学的組成物(医薬)、および医師の処方箋なしで買える組成物(OTC)、栄養補助食品などであってよい。本発明による組成物には、鼻経路、経口経路、または非経口経路に適した製剤が含まれる。具体的な経路の非限定的な例には、皮内、皮下、筋肉内、静脈内、局所注射、直腸、鼻腔内吸入、吹き入れ、局所(経皮、口腔内、および舌下を含む)、膣、非経口(皮下、筋肉内、静脈内、および皮内を含む)、ならびに肺投与が含まれる。製剤は、便宜的に、単位剤形で与えられてよく、かつ当技術分野において周知の任意の方法によって調製されてよい。このような方法は、1種類の活性成分(または複数種類の活性成分)を、1種類または複数種類の補助成分をなす担体と結合させる段階を含む。一般に、製剤は、液状担体もしくは微粉砕した固形担体または両方などの適切な単体と活性成分を均一かつ密接に結合させ、次いで、必要な場合には、製品を成形することによって調製される。経口投与に適した本発明の製剤は、所定の量の活性成分をそれぞれ含む、カプセル剤、カシェ剤、もしくは錠剤など個別の単位として、または水中油型液体エマルジョン、油中水型液体エマルジョンとして、または水溶液中、例えばお茶中のサプリメントとして、与えられてよい。活性成分はまた、大型丸剤、舐剤、またはパスタ剤として与えられてもよい。有用な注射調製物には、水性ビヒクルまたは油性ビヒクル中の複合組成物の滅菌済み懸濁剤、液剤、または乳剤が含まれる。組成物はまた、懸濁化剤、安定化剤、および/または分散剤などの製剤用物質も含んでよい。注射用の製剤は、単位剤形で、例えば、アンプルまたは多回投与用容器に入れて与えられてよく、添加された保存剤を含んでよい。あるいは、注射剤は、使用前に、滅菌済みパイロジェンフリー水、緩衝液、デキストロース溶液などを非限定的に含む適切なビヒクルを用いて再構成するための粉末形態で提供されてもよい。このために、凍結乾燥のような当技術分野で公知の任意の技術によって複合組成物を乾燥させ、使用前に再構成することができる。
【０１２０】
口の中に局所投与するのに適した製剤には、風味付きの基剤、通常はスクロースおよびアラビアゴムまたはトラガカントゴム中に活性成分を含むロゼンジ、ゼラチンおよびグリセリンまたはスクロースおよびアラビアゴムなどの不活性基剤中に活性成分を含むトローチ剤、適切な液体単体中に活性成分を含む口内洗剤、ならびに活性成分を含むチョコレートが含まれる。
【０１２１】
局所投与に適した本発明による製剤は、軟膏剤、クリーム剤、懸濁剤、ローション剤、散剤、液剤、パスタ剤、ゲル剤、スプレー剤、エアロゾル剤、またはオイル剤として製剤化されてよい。あるいは、製剤は、活性成分、および任意で1種類または複数種類の賦形剤または希釈剤を染み込ませた包帯または絆創膏などの貼付剤または包帯剤も含み得る。好ましくは、局所製剤は、皮膚を通って血流中に活性成分が吸収されるのを促進する化合物を含む。
【０１２２】
鼻腔内投与に適した製剤は、担体が固体である場合、粒径が例えば約20〜約500ミクロンの範囲である粗末を含み、これは、嗅剤が摂取される様式で、すなわち鼻の近くに保持された粉末容器から鼻腔を通しての急速な吸入によって投与される。非限定的な例としてネブライザーによるような鼻腔内投与のための、担体が液体である適切な製剤には、作用物質の水性液剤または油性液剤が含まれる。好ましくは、製剤は、皮膚を通って血流中に活性成分が吸収されるのを促進する化合物を含んでよい。
【０１２３】
非経口投与に適した製剤には、抗酸化剤、緩衝剤、静菌剤、および対象とする受け手の血液とその製剤を等張性にする溶質を含み得る水性および非水性の等張性無菌注射液剤;ならびに懸濁化剤および増粘剤を含み得る水性および非水性の滅菌懸濁剤;ならびに化合物を血液構成成分または1つもしくは複数の器官に導くように設計されているリポソームまたは他の微粒子システムが含まれる。これらの製剤は、単位投与用容器または多回投与用容器もしくは多回投与用密閉容器、例えばアンプルおよびバイアルに入れて与えられてよく、かつ使用する直前に、無菌の液状担体、例えば注射用水の添加のみを必要とする、フリーズドライさせた(凍結乾燥させた)状態で保存されてよい。用時溶解注射用の液剤および懸濁剤は、既に説明した種類の無菌の散剤、顆粒剤、および錠剤から調製することができる。
【０１２４】
経口投与用の液体調製物は、例えば、エリキシル剤、液剤、シロップ剤、もしくは懸濁剤の形態をとってよいか、またはそれらは、使用前に水もしくは他の適切なビヒクルを用いて構成するための乾燥製品として与えられてもよい。このような液体調製物は、薬学的および/または栄養補助的に許容される添加剤、例えば、懸濁化剤(例えば、ソルビトールシロップ、セルロース誘導体、または食用硬化脂);乳化剤(例えば、レシチンまたはアラビアゴム);非水系ビヒクル(例えば、アーモンド油、油状エステル、エチルアルコール、または分別された植物油);および保存剤(例えばメチル-p-ヒドロキシベンゾアートもしくはプロピル-p-ヒドロキシベンゾアートまたはソルビン酸)を用いて従来手段によって調製することができる。この調製物はまた、適宜、緩衝塩、保存剤、矯味剤、着色剤、および甘味剤も含んでよい。
【０１２５】
口腔内投与の場合、組成物は、従来の様式で製剤化された、非限定的な例として錠剤またはロゼンジの形態をとってよい。
【０１２６】
直腸経路および膣経路の投与のために、複合組成物を、ココアバターまたは他のグリセリドなど従来の坐剤基剤を含む、(停留浣腸用の)液剤、坐剤、または軟膏剤として製剤化することができる。
【０１２７】
経鼻投与または吸入もしくは吹入による投与のために、複合組成物を、適切な噴射剤、例えば、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、フルオロカーボン、二酸化炭素、または他の適切な気体を用いて、加圧パックまたはネブライザーからのエアロゾルスプレーの形態で便宜的に送達することができる。加圧したエアロゾルの場合、単位用量は、計量された量を送達するバルブを提供することによって決定することができる。化合物の粉末混合物および適切な粉末基剤、例えば、ラクトースまたはデンプンを含む、吸入器または吹入器において使用するためのカプセル剤およびカートリッジ(例えば、ゼラチンから構成されるカプセル剤およびカートリッジ)を調剤することができる。
【０１２８】
持続性送達のために、複合組成物を、埋め込みまたは筋肉内注射による投与向けのデポ調製物として製剤化することができる。複合組成物は、適切なポリマー材料もしくは疎水性材料(例えば、許容される油中の乳剤として)またはイオン交換樹脂と共に、または難溶性誘導体、例えば難溶性塩として、製剤化することができる。あるいは、経皮吸収されるように複合組成物をゆっくりと放出する、接着性のディスクまたは貼付剤として製造される経皮送達システムを使用することもできる。このために、透過促進剤を用いて、複合組成物の経皮浸透を促進することができる。適切な経皮吸収型貼付剤は、例えば、米国特許第5,407,713号;米国特許第5,352,456号;米国特許第5,332,213号;米国特許第5,336,168号;米国特許第5,290,561号;米国特許第5,254,346号;米国特許第5,164,189号;米国特許第5,163,899号;米国特許第5,088,977号;米国特許第5,087,240号;米国特許第5,008,110号;および米国特許第4,921,475号において説明されている。
【０１２９】
あるいは、他の送達システムも使用することができる。リポソームおよびエマルジョンは、複合組成物を送達するのに使用され得る送達ビヒクルの周知の例である。ジメチルスルホキシド(DMSO)のようなある種の有機溶媒もまた使用され得るが、通常、毒性が大きいという代償を払う。
【０１３０】
特に上記に挙げた成分の他に、本発明において有用な製剤は、当該製剤のタイプに関して当技術分野において慣例的な他の作用物質を含み得ることを理解すべきである。例えば、経口投与に適した製剤は、甘味剤、増粘剤、および矯味剤などのさらなる作用物質を含んでよい。本発明の作用物質、組成物、および方法は、他の適切な組成物および治療法と組み合わせられることもまた、意図される。
【０１３１】
1つの態様において、本発明の薬学的および/または栄養補助的な組成物は、治療を必要とする部分に局部的に投与され得る:このような局所投与は、例えば、局所注入によって、注射によって、またはカテーテルを用いて実現することができる。別の態様において、本発明の化合物または組成物は、疾患部位で活性化合物のピーク濃度を達成するような様式で投与される。疾患部位でのピーク濃度は、例えば、任意で生理食塩水中に溶かした作用物質を静脈内注射することによって、または例えば、活性成分を含む錠剤、カプセル剤、もしくはシロップ剤を経口投与することによって、達成することができる。
【０１３２】
I  他の薬学的および/または栄養補助的な作用物質
本発明の薬学的製剤、OTC製剤、および/または栄養補助的製剤は、他の薬物または生物学的に活性な作用物質と同時にまたは逐次的に投与することができる。例には、抗酸化剤、フリーラジカル捕捉剤、鎮痛薬、麻酔薬、肛門直腸用物質、抗ヒスタミン薬、非ステロイド系抗炎症薬を含む抗炎症剤、抗生物質、抗真菌薬、抗ウイルス薬、抗微生物薬、抗癌活性物質、抗新生物薬、生物学的に活性なタンパク質およびペプチド、酵素、止血薬、ホルモンおよびコルチコステロイドを含むステロイドなどが含まれるが、それらに限定されるわけではない。
【０１３３】
J  治療方法および投与量
具体的な単位用量製剤は、作用物質の日用量もしくは1日単位量、分割日用量、またはその適切な小部分を含むものである。治療的量は、経験に基づいて決定することができ、治療される病理、治療される対象、ならびに作用物質の有効性および毒性によって変わる。同様に、適切な投薬製剤および作用物質を投与する方法も、当業者によって容易に決定され得る。
【０１３４】
いくつかの態様において、本発明の治療方法は、疾患、病態、または障害を治療するのに有効な量の本明細書において説明する安定な製剤を、そのような疾患または病態を有している対象に投与することによって、疾患、病態、または障害を治療する段階を含み得る。いくつかの態様において、対象に、本明細書において請求される化合物を含む安定な製剤が投与される。疾患、病態、または障害は、アルツハイマー病、炎症、タンパク質ミスフォールディングおよびタンパク質凝集疾患もしくは病態、ならびに/または同様の症状を有する疾患、ならびに関係する疾患、病態、および障害であってよい。予防的投与の場合、組成物は、先に説明した病態の1つを発症するリスクがある患者に投与されてよい。
【０１３５】
投与される組成物の量は、例えば、治療される個々の徴候、投与様式、所望の利益が予防的であるか治療的であるか、治療される徴候の重症度、ならびに患者の年齢および体重などを含む様々な因子に応じて変わる。有効投与量の決定は、当業者の能力の範囲に十分収まる。本発明のいくつかの局面において、複合組成物の合計投与量は、典型的には、約0.0001または0.001または0.01mg/kg患者体重/日〜約100mg/kg患者体重/日の範囲であるが、様々な因子の中でも特に、組成物の活性、そのバイオアベイラビリティ、投与様式、および上記の様々な因子に応じて、それより多くても少なくてもよい。投与の量および間隔を個別に調整して、治療効果または予防効果を維持するのに十分な化合物の血漿レベルを与えることができる。例えば、化合物は、特に、投与様式、治療される具体的な徴候、および処方する医師の判断に応じて、1週間に1回、1週間に数回(例えば、1日おき)、1日に1回、または1日に複数回、投与されてよい。当業者は、過度に実験をすることなく、有効な局所投与量を最適化できるであろう。
【０１３６】
K  キット
本発明の別の局面において、疾患、病態、または障害を治療するためのキットが、本明細書において説明される。例えば、本発明の組成物は、キット中に含まれてよい。キットは容器を含んでよい。容器には、瓶、金属チューブ、ラミネートチューブ、プラスチックチューブ、ディスペンサー、ストロー、加圧容器、バリア容器、パッケージ、仕切られた容器、または他のタイプの容器、例えば、分散体もしくは組成物または所望の瓶、ディスペンサー、もしくはパッケージがその中に保持される射出成形もしくは吹込成形されたプラスチック容器が含まれ得る。キットおよび/または容器は、印字された指示を表面に含んでよい。印字された指示は、例えば、単語、句、略語、絵、または記号であってよい。
【０１３７】
前記容器は、所定の量の組成物を分配することができる。他の態様において、容器を押しつぶして(例えば、金属、ラミネート、またはプラスチック製のチューブ)、所望の量の組成物を分配することができる。組成物は、スプレー剤、エアロゾル剤、液剤、流体剤、半固形剤、または固形剤として分配されてよい。特定の態様において、組成物は、錠剤またはロゼンジとして分配される。容器は、スプレー、ポンプ、または圧搾のメカニズムを有してよい。キットはまた、キット構成要素を使用するため、さらに容器中に含まれる他の任意の組成物の使用のための取扱い説明書も含んでよい。取扱い説明書は、組成物を適用、使用、および維持する方法の説明を含んでよい。組成物は、所望の場合は、複合組成物を含む1つまたは複数の単位剤形を含むことができる容器またはディスペンサー器具に入れて与えられてよい。この容器は、例えば、ブリスターパックのような金属ホイルまたはプラスチックホイルを含んでよい。パックまたはディスペンサー器具には、投与用の取扱い説明書が添えられてよい。
【実施例】
【０１３８】
具体的な例を用いて、本発明をより詳細に説明する。以下の実施例は例示のために提供され、本発明を限定することを決して意図しない。当業者は、本質的に同じ結果をもたらすように、変更または修正することができる重大ではない様々なパラメーターを容易に認識するであろう。
【０１３９】
実施例1
測定精密質量、相対存在量、および重量パーセントによる、化合物の特徴決定
驚くべきことに、本発明者らは、いくつかの化合物の組合せが、アルツハイマー病、タンパク質凝集、タンパク質ミスフォールディング、および炎症を予防および治療できることを発見した。本発明者らはまた、これらの化合物の特定の相対濃度が、組み合わされた化合物がこれらの疾患を予防および治療する能力を増強する役割を果たすことも発見した。本発明の化合物は、クルクミン、ならびにウコン中に見出される化合物によって定められるバイオマーカー化合物、すなわち、測定精密質量が120.094amu(バイオマーカー1)、134.110amu(バイオマーカー2)、150.104amu(バイオマーカー3)、176.120amu(バイオマーカー4)、192.091amu(バイオマーカー5)、200.157amu(バイオマーカー6)、202.172amu(バイオマーカー7)、204.188amu(バイオマーカー8)、216.151amu(バイオマーカー9)、218.203amu(バイオマーカー10)、220.183amu(バイオマーカー11)、232.146amu(バイオマーカー12)、234.162amu(バイオマーカー13)、256.240amu(バイオマーカー14)、308.105amu(バイオマーカー15)、338.115amu(バイオマーカー16)、372.157amu(バイオマーカー18)、および450.261amu(バイオマーカー19)であるバイオマーカー化合物、を含む。これらの化合物は、合成によって製造されてもよいか、または非限定的にウコンのような生物から単離されてもよい。これらの化合物は、当業者に公知の方法によって特徴決定されることができる。
【０１４０】
本明細書において説明する測定精密質量および相対存在量は、特定の測定機器および特定の設定を用いる実験に基づいており、測定機器によって変化し得る。各測定にはばらつきがある。したがって、測定精密質量および相対存在量は、当業者によって理解されるものに「近いもの」と定義される。
【０１４１】
測定精密質量のための方法:飛行時間型/質量分析法(TOF-MS)と組み合わされたリアルタイム直接分析(DART)イオン源を用いて、化合物を特徴決定し、相対存在量を測定した。具体的には、DART TOF-MSは、 Peabody, MAのJeol USA製のJEOL DART(商標)AccuTOF質量分析計(JMS-T100LC)であった。化合物の質量は、Dip-IT試料採取器およびDip-IT試料採取器ホルダー(ionSense(商標))を用いてイオン流に試料を直接導入することによって、ウコン抽出試料中で測定した。
【０１４２】
DARTイオン源の設定は以下であった。
気体:He
流量:50PSIで2.52LPM
温度:250℃
ニードル電圧:3000V
グリッド電極電圧:250V
放電極電圧:400V
【０１４３】
JEOL AccuTOF MSの設定は以下であった。
ピーク電圧:1000V
オリフィス1温度:120℃
検出器電圧:2600V
リフレクトロン電圧:990.0V
【０１４４】
抽出試料は、6つ組でDART-TOF MSによって解析した。これら6つのレプリケートを解析して、抽出物の単一の、平均され、選別され、統計学的に有意なDARTフィンガープリントを作り出した。次いで、処理されたこのフィンガープリントを用いて、質量を比較することにより生物活性マーカーの存在を判定した。これらの生物活性マーカーを最初に発見および同定するので、単純な質量比較が、化学物質の任意の抽出物または混合物中におけるそれらの存在を判定するのに十分であった。AccuTOFの場合、その質量許容誤差は、20ミリ質量単位(mmu)未満(予測される質量±10mmu)である。同じ抽出物およびイオン源を前提とする場合、他のTOF質量分析計の質量許容誤差が高い場合も低い場合もある。
【０１４５】
相対存在量のための方法:DARTを用いる単純な解析には試料調製は必要とされないものの、公知の量と比べる定量によって試験化合物の相対存在量を決定するために、サリチル酸を添加/スパイクされた溶液を使用した。クルクミンのような、周知でありターメリック中に天然に存在する標準物質は、生育条件、収穫時期、植物の健康状態などの任意の数の影響因子を前提として、変動すると思われる。バイオマーカーを定量する目的に対して、クルクミン(または他の天然に存在する標準物質)にはこれらの自然変動があるため、これらをバイオマーカーの絶対的定量のための基準として使用することは許容できない。この不整合性を取り除くために、ターメリックに固有ではない化合物(この場合、サリチル酸)を、生物活性分子の定量的化学プロファイルのための基準として使用した。
【０１４６】
本明細書において開示されるバイオマーカーの濃度が不明である試料の相対存在量を測定するために、開示される組成物をエタノールに溶かした0.5mg/ml試料に、25mg/mlサリチル酸を添加/スパイクした。次いで、上記に使用したDART-TOF方法によって試料を解析した。
【０１４７】
重量パーセントを測定するための方法:相対存在量に関して使用したDART-TOF方法を用いて、パーセント重量を測定したが;しかし、サリチル酸を、バイオマーカーの利用可能な標準物質で置き換えた。
【０１４８】
表1は、バイオマーカー1〜16、18、19、およびクルクミン(バイオマーカー17)を含む組成物の非限定的な特定の態様において存在する、本明細書において開示されるバイオマーカーのパーセント重量および相対存在量を明らかにする。
【０１４９】
（表１）標準物質を用いて測定したパーセント重量、および25mg/mlサリチル酸をスパイクされた0.5mg/mlの組成物を用いて測定した、特定の活性組成物中のバイオマーカーの相対存在量
2019504876.tif 000004
【０１５０】
実施例2
実施例3〜8のための製剤
開示される組成物の特定の態様である、HSRx-888は、55重量％のクルクミンを含む用量が確かなターメリック抽出物とバイオマーカー1〜16、18、および19とを含み、その際、0.06重量％のバイオマーカー3、2.15重量％のバイオマーカー15、2.39重量％のバイオマーカー16、および1.26重量％のバイオマーカー18であり、相対存在量が、3.11％のバイオマーカー1、0.44％のバイオマーカー2、1.37％のバイオマーカー4、2.49％のバイオマーカー5、0.68％のバイオマーカー6、1.24％のバイオマーカー7、0.43％のバイオマーカー8、15.35％のバイオマーカー9、5.72％のバイオマーカー10、1.02％のバイオマーカー11、3.39％のバイオマーカー12、5.03％のバイオマーカー13、0.35％のバイオマーカー14、および0.87％のバイオマーカー19であり、アルツハイマー病の原因および症状、タンパク質ミスフォールディング、タンパク質凝集、ならびに炎症に対してインビトロおよびインビボの活性を有している。このHSRx-888は、Shytle et al. 2009およびShytle et al. 2012で説明されている方法におおむね従って、HSRx-888を作製した。
【０１５１】
通常、ターメリック(ウコン)は、粉砕し、40〜80℃および80〜900バールでCO2を用いて抽出し、ADS 5 ポリマー(Nankai University, China)を用いてポリマー分離した。採取した画分を50℃で一晩乾燥させて、結晶性の粉末を得ることができる。この手順を複数回繰り返して、抽出物の再現性を確実にした。
【０１５２】
実施例3
ヒト対象における血清PKおよび忍容性の研究
本実施例は、正常なヒトボランティア対象において実施例2の製剤の血清薬物動態(PK)を調べた研究から得られたデータに関する。50mgの製剤をボランティアヒト対象に経口投与した。50mgの用量は、35mgのクルクミンを含んでいた。ヒトボランティア5名への経口投与後、t=0分、5分、10分、20分、30分、40分、60分、120分、180分、240分、および480分の時点に血液を抜き取って試験した。血漿中のクルクミンならびに/またはクルクミンおよびバイオマーカー1、2、6、および12のピーク強度をDART ToF-MSによって測定した。
【０１５３】
各時点でのピークをプロットして、クルクミンの最大濃度(Cmax)ならびにクルクミンおよび各バイオマーカー1、2、6、および12の最大濃度時間(Tmax)を明らかにした(図1〜6)。CmaxおよびTmaxは、各時点の平均ピーク強度を用いて、実験によって決定した。
【０１５４】
50mgのHSRx-888を1回経口投与すると、マイクロモル濃度レベルの遊離型の未改変クルクミンが血液中に生じることが明らかになった(図2、Cmaxは11.3マイクロモル濃度)。クルクミンのTmaxは、約40分〜120分の間であることが示された。バイオマーカー1、2、6、および12のTmaxは、バイオマーカー1については約5〜120であり、バイオマーカー2については5および60であり、バイオマーカー6については5および240であり、バイオマーカー12については1および30であった。
【０１５５】
さらに、HSRx-888の投与は、忍容性が高いことが判明した。
【０１５６】
実施例4
インビトロでのアミロイド凝集の阻害
Shytle et al., 2009に示されているように、HSRx-888(HSG0888)は、インビトロにてマイクロモル濃度で、β-アミロイド(Aβ)凝集の用量依存的な阻害を示す(図7)。0〜30μg/mLの様々な濃度のHSRx-888、他の専売ターメリック抽出物(HSG0838、HSG0848)または単一分子標準物質(クルクミン(Cur)、15％デメトキシクルクミン(DMC)、5％ビスデメトキシクルクミン(BDMC)、およびテトラヒドロクルクミン(THC))と共にインキュベートされた合成Aβ1-42ペプチドを用いて、Aβ凝集アッセイ法を実施した。1回の処置事象後5日目に、Shytle et al., 2009に説明されているようにチオフラビンT法によって凝集を測定した。チオフラビンT法は、成熟したβ-プリーツシートアミロイド繊維を主に検出する。
【０１５７】
方法論:「以前に説明されているように(Moore et al., 2004; LeVine, 1993)、チオフラビンT蛍光に基づいて、Aβ1-42繊維の存在を溶液中でモニターした。簡単に説明すると、50mM Tris-HCl緩衝液(pH7.4)に溶かしたAβ1-42(25μM、95μg/mL)の3つ組の15μL試料を、0〜30μg/mLの濃度の最適化ターメリック抽出物([HSG0888、HSG0838、HSG0848])またはクルクミノイド標準物質(Cur、DMC、BDCM、およびTHC)の存在下または不在下でこのペプチド溶液を37℃で最高120時間インキュベーションした後、取り出した。これらのペプチド溶液を、ブラックウォール(black-walled)の96ウェルプレート中の50mMグリシン/NaOH緩衝液(pH9.0)に溶かした100μLの10μMチオフラビンTにそれぞれ添加し、25℃で30分インキュベーションした後に、アミロイド繊維へのチオフラビンTの結合に続いて起こる蛍光の特徴的な変化をMolecular Devices製のSPECTRAmax GEMINIプレートリーダを用いてモニターした(Ex450nmおよびEm482nm)。ペプチド溶液を添加する前および直後に、3つ組の試料を3回スキャンした。結果は、3つ組の試料の平均値±これらの平均値間の差を示している。」Shytle et al., 2009。
【０１５８】
結果:HSRx-888は、HSG0838およびHSG0848などの他のターメリック抽出物と比べて、インビトロでのAβ1-42凝集の有効な阻害物質である(図7)。さらに、これらの結果は、個々のバイオマーカーがHSRx-888組成物全体と同じ投与量で使用される場合(例えば、15マイクログラムのクルクミンと比べて15マイクログラム/mlのHSRx-888)、HSRx-888が、HSRx-888中に見出される個々のバイオマーカー(クルクミン、DMC、BCMC、およびTHC)を上回る程度まで、または同様の程度まで、凝集を阻害することも示している。しかし、これら個々のバイオマーカーは、ずっと低い濃度でHSRx-888中に見出されることから(表1を参照されたい)、HSRx-888中のバイオマーカーが相乗的に作用していることが強く示唆される。さらに、このデータおよび本明細書において開示される追加データから、本明細書において開示される組成物が、アルツハイマー病(β-アミロイドおよびリン酸化タウタンパク質)、パーキンソン病(α-シヌクレインタンパク質)、レビー小体型認知症(β-アミロイド、リン酸化タウ、およびα-シヌクレインタンパク質)、前頭側頭型認知症(タウタンパク質)、海綿状脳症(プリオンタンパク質)などの神経変性障害、ならびに他の多くの中枢神経アミロイドーシスおよび全身性アミロイドーシスを治療および/または予防する際に有益であると思われる、抗タンパク質凝集特性および抗タンパク質ミスフォールディング特性を有することも予想される。
【０１５９】
実施例5
インビボでのアミロイド生成の阻害
Shytle et al., 2009に示されているように、HSRx-888(HSG0888)は、濃度依存的な様式でSweAPP N2a細胞においてAβ1-40ペプチドおよびAβ1-42ペプチド両方のAβ生成を有意に減少させた(図8)。Shytle et al., 2009に説明されているように、SweAPP N2a細胞を濃度範囲3〜30μg/mLの各化合物で12時間処理し、SweAPP N2a細胞の馴化培地中のAβ1-40、42ペプチドをELISAによって解析した。
【０１６０】
方法論:「馴化培地を採取し、以前に説明されている(Tan et al., 2002)方法を用いて希釈率1:1で解析し、対照(未処置のN2a SweAPP細胞の馴化培地)を基準とした分泌Aβ1-42のパーセンテージとして値を報告した。公開されている方法(Marambaud et al., 2005; Obregon et al. 2006)に従って、全Aβ種の定量を実施した。簡単に説明すると、リン酸緩衝生理食塩水(PBS;pH7.4)中2μg/mLの濃度の6E10(捕捉抗体)で、96ウェルイムノアッセイプレートを4℃で一晩コーティングした。プレートを、PBS中0.05％(v/v)Tween-20で5回洗浄し、ブロッキング緩衝液(1％BSA、5％[v/v]ウマ血清を含むPBS)を用いて室温で2時間ブロッキングした。
【０１６１】
馴化培地またはAβ標準物質をプレートに添加し、4℃で一晩インキュベーションした。3回洗浄した後、ビオチン標識抗体、4G8(1％[w/v]BSAを含むPBS中0.5μg/mL)をプレートに添加し、室温で2時間インキュベーションした。5回洗浄した後、室温で30分間、ストレプトアビジン-西洋ワサビペルオキシダーゼ(1％BSAを含むPBS中での1:200希釈物)を96ウェルに添加した。
【０１６２】
テトラメチルベンジジン(TMB)基質をプレートに添加し、室温で15分間インキュベーションした。停止液(2N N2SO4)を50μLずつ、プレートの各ウェルに添加して、反応を停止させた。マイクロプレートリーダーを用いてO.D.450nmで、各ウェルの光学濃度を直ちに測定した。対照(未処置のN2a SweAPP細胞の馴化培地)に対するパーセンテージとしてAβ レベルを表した。」Shytle et al., 2009。
【０１６３】
結果:未処置のSweAPP N2a細胞は、合計128pgのAβ1-40ペプチドおよびAβ1-42ペプチドを排出した。HSRx-888は、濃度依存的な様式で、分泌されるAβ1-40ペプチドおよびAβ1-42ペプチドの量を有意に減少させた(図8)。他のターメリック抽出物は、阻害をまったく示さないか、ほとんど示さなかった。クルクミンもまた、有意な阻害を示した(図8)。さらに、これらの結果は、個々のバイオマーカーがHSRx-888組成物全体と同じ投与量で使用される場合(例えば、15マイクログラムのクルクミンと比べて15マイクログラム/mlのHSRx-888)、HSRx-888が、HSRx-888中に見出される個々のバイオマーカー(クルクミン、DMC、BCMC、およびTHC)を上回る程度まで、または同様の程度まで、分泌を阻害することも示している。しかし、これら個々のバイオマーカーは、ずっと低い濃度でHSRx-888中に見出されることから(表1を参照されたい)、HSRx-888中のバイオマーカーが相乗的に作用していることが強く示唆される。
【０１６４】
実施例6
TG2576マウスにおける脳アミロイドーシスの軽減
Shytle et al., 2012に示されているように、HSRx-888 (HSS-888)はTg2576マウスの脳アミロイドーシスを軽減する。(図9AおよびB)。Shytle et al.に説明されているように、8ヶ月齢のTg2576マウスにHSRx-888を経口投与し、これらのマウスでのAβ沈着を、ウサギポリクローナル抗ヒトAβ抗体を用いて脳冠状凍結切片を染色することによって解析し(図9A)、定量的画像解析を用いて定量した(図9B)。
【０１６５】
方法論:「インビボ処置 - 8ヶ月齢から始めて、Tg2576処置マウスに最適化ターメリック抽出物[HSRx-888](0.1％w/w)またはNIH31固形飼料に入れたTHC(0.1％w/w)またはNIH3I固形飼料のみ(対照)を6ヶ月間投与した[n=20(雌10匹/雄10匹)]。以前に説明されている方法(Garcia-Alloza et al., 2006)に従って、脳中のAPレベルおよびAP量を解析するために、14ヶ月齢の時点ですべてのマウスを屠殺した。
【０１６６】
免疫組織化学 - イソフルオランでマウスに麻酔をかけ、ヘパリン(10U/mL)を含む氷冷生理食塩水を経心的に灌流させた。脳を迅速に単離し、マウス脳スライサー(Muromachi Kikai Co., Tokyo, Japan)を用いて4つに分けた。1つ目および2つ目の前方の各四分の一を、後述するELISAおよびウェスタンブロット解析のためにホモジナイズし、3つ目および4つ目の後方の各四分の一を、ミクロトームまたはクリオスタットによる切片作成に使用した。次いで、PBS中4％(w/v)パラホルムアルデヒド中、4℃で一晩、脳を固定し、病理部(USF College of Medicine)の中心施設で常法通りパラフィン中で処理した。各脳切片が約150μmの間隔をおいている5つの連続的な冠状切片(5μm)を、免疫組織化学染色および画像解析のために選択した。常法通り、切片を脱パラフィンし、無血清タンパク質ブロック(Dakocytomation, Glostrup, Denmark)を用いて周囲温度で30分間プレブロッキングする前に、段階的な濃度系列のUSPエタノール中で水和させた。ジアミノベンジジン基質を併用するVectaStain Elite(商標)ABCキットと一緒に抗ヒトP抗体(クローン4G8、1:100)を用いて、AP免疫組織化学染色を実施した。Olympus BX-51顕微鏡を用いて、4GB陽性AP沈着物を明視野下で検査した。4G8免疫組織化学的検査のために、定量的画像解析(従来の「Aβ量」解析)を常法通り実施した。データは、捕捉された全領域(全画素)によって割られた、捕捉された免疫標識領域(陽性画素)のパーセンテージとして報告される。
【０１６７】
画像解析 - 定量的画像解析(従来の「Aβ量」解析)を、THC、HSRx-888、またはNIH31対照固形飼料を経口投与されたTg2576マウスに由来する脳の4G8免疫組織化学的検査およびコンゴーレッド組織化学的検査のために、立体解析学的方法を用いて実施した。Olympus BX-51顕微鏡を用いて画像を取得し、付属のMAGNAFIRE(商標)画像化システム(Olympus, Tokyo, Japan)を用いてデジタル化した。簡単に説明すると、関心対象の各解剖学的部分(海馬領または皮質領)を通る約150μmの間隔をおいている5つの連続的な切片(5μm)の画像を取り込み、バックグラウンドからの染色を判別する閾値光学濃度を得た。各視野の手動編集を用いて、アーチファクトをなくした。データは、捕捉された全領域(全画素)によって割られた、捕捉された免疫標識領域(陽性画素)のパーセンテージとして報告される。定量的画像解析は、試料の実体を知らされていない1人の試験者が実施した。」Shytle et al., 2012。
【０１６８】
結果:HSRx-888は、図9Aの帯状皮質および嗅内皮質のAβ沈着の染色におよび図9Bの嗅内皮質(EC)、海馬(H)、および帯状皮質(CC)中のプラーク負荷量の平均比率%および標準誤差に示すように、Tg2576マウスの脳アミロイドーシスを軽減した。このデータおよび本明細書において提供される他のデータから、本明細書において開示される組成物が、アルツハイマー病(β-アミロイドおよびリン酸化タウタンパク質)、パーキンソン病(α-シヌクレインタンパク質)、レビー小体型認知症(β-アミロイド、リン酸化タウ、およびα-シヌクレインタンパク質)、前頭側頭型認知症(タウタンパク質)、海綿状脳症(プリオンタンパク質)などの神経変性障害、ならびに他の多くの中枢神経アミロイドーシスおよび全身性アミロイドーシスを治療および/または予防する際に有益であると思われる、抗タンパク質凝集特性および抗タンパク質ミスフォールディング特性を有することが予想される。
【０１６９】
実施例7
Tg2576マウスの可溶性アミロイドレベルおよび不溶性アミロイドレベルの低下
Shytle et al., 2012に示されるように、HSRx-888(HSS-888)は、Tg2576マウス脳ホモジネート中の可溶性β-アミロイドレベルおよび不溶性β-アミロイドレベルの両方を低下させる。(図10AおよびB)。マウス脳ホモジネートのAβレベルをELISAによって解析した。経口投与されたHSRx-888により、可溶性対照および不溶性対照と比べて、可溶型および不溶型のAβ1-40、42は有意に減少した(それぞれAおよびB)。
【０１７０】
方法論:「以前に説明されているようにして(Johnson-Wood et al. 1997)、氷上の無菌条件下でマウス脳を単離し、氷冷した溶解緩衝液(20mM Tris、pH7.5、150mM NaCl、1mM EDTA、1 mM EGTA、1％[v/v]トリトンX-100、2.5mMピロリン酸ナトリウム、1mM β-グリセロールリン酸、1mM Na3VO4、1μg/mLロイペプチン、1mM PMSF)中に入れた。次いで、氷上で約3分間、脳を超音波処理し、4℃で15分間放置し、15,000rpmで15分間遠心分離した。5Mグアニジン緩衝液に溶かした脳ホモジネートを酸抽出し(Rezai-Zadeh et al. 2008)、続いて、溶解緩衝液中で1:10希釈することによって、不溶性Aβ1-40,42種を検出した。可溶性Aβ1-40,42は、1:10希釈によって前述の溶解緩衝液を用いて調製した脳ホモジネート中で直接的に検出した。ホモジネート試料のタンパク質レベルは、希釈前にBCAタンパク質アッセイ法によってすべて標準化した。標準物質が場合によっては0.5Mグアニジン緩衝液を含むことを除いては、Immuno-Biological Laboratories製の非識別Aβ ELISAキットを製造業者の取扱い説明書に従って用いて、Aβ1-40,42を定量した。」Shytle et al., 2012。
【０１７１】
結果:経口投与されたHSRx-888により、可溶性対照および不溶性対照と比べて、可溶型および不溶型のAβ1-40、42は有意に減少した(それぞれ図10AおよびB)。
【０１７２】
実施例8
Tg2576マウス中のリン酸化タウタンパク質の減少
Shytle et al., 2012に示されているように、HSRx-888(HSS-888)は、Tg2576マウス中のリン酸化タウタンパク質を減少させる。(図11AおよびB)。処置されたマウスに由来する脳前方部の四分の一のホモジネートをウェスタンブロット解析によって解析した。
【０１７３】
方法論:「以前に説明されているようにして、脳ホモジネートを得た。タウを解析するために、10％トリスゲルを用いて、100μgの全タンパク質に対応する分取物を電気泳動によって分離させた。次いで、電気泳動にかけたタンパク質をニトロセルロース膜(Bio-Rad, Richmond, CA)に移し、ddH2O中で洗浄し、5％(w/v)脱脂粉乳を含むトリス緩衝生理食塩水(TBS)中、周囲温度で1時間、ブロッキングした。ブロッキング後、周囲温度で1時間、膜を様々な一次抗体と混ぜて結合させた。次いで、ddH2O中で5分ずつ、膜を3回洗浄し、適切なHRP結合型二次抗体(1:1,000、Pierce Biotechnology, Woburn, MA)と共に、周囲温度で1時間インキュベーションした。抗体はすべて、5％(w/v)の脱脂粉乳を含むTBS中で希釈した。ルミノール試薬(Pierce Biotechnology, Woburn, MA)を用いて、ブロットを発色させた。QUANTITY ONE(商標)ソフトウェアと共にFluorS Multiimager(BioRad, Hercules, CA)を用いて、以前に説明されているようにして濃度測定解析を実施した(Rezai-Zadeh et al., 2005)。」Shytle et al., 2012。
【０１７４】
結果:HSRx-888で処置されたマウスは、対照マウスと比べてp-タウの80％の減少を示した。(図11AおよびB)。
【０１７５】
実施例9
Tg2576マウスに由来する培養ミクログリア細胞におけるTh2応答の低下
Shytle et al., 2012に示されているように、HSRx-888(HSS-888)は、Th2細胞性免疫応答を増大させ、これは、クルクミンを用いた場合に示される、免疫応答がTh1免疫からTh2免疫に移行する状況に類似している(Kang et al. 1999)。(図12AおよびB)。具体的には、HSRx-888処置によってIL-2に対するIL-4の比が増加したことから、Th1(炎症性)反応からTh2(非炎症性)反応への切り換わりが示された。さらに、HSRx-888処置によってサイトカインIL-2およびIL-4が増加したことから、HSRx-888が特定のサイトカインの抗炎症活性を介してミクログリア保護をもたらすことが示された。(図12AおよびB)。屠殺した後にマウスからミクログリアの初代培養物を樹立し、抗CD3抗体で24時間刺激した。
【０１７６】
方法論:「処置群および対象群の両方を屠殺した後、これらのマウスからミクログリアの初代培養物を樹立し、抗CD3抗体で24時間刺激した。」Shytle et al., 2012。「以前の研究で説明されているようにして(Tan et al. Journal of Immunology, 1999; Tan et al. Science, 1999)、市販のサイトカインELISAキットによってサイトカインを測定するために、細胞培養されたミクログリアを採取した。並行して、全細胞タンパク質を測定するために、細胞溶解物を調製した。データは、産生された各サイトカインについて、ng/mg全細胞タンパク質として表している。IL-2およびIL-4の検出を可能にする市販されているELISA(BioSource International, Inc., Camarillo, CA)を用いてサイトカインを定量した。」Shytle et al., 2012。
【０１７７】
結果:HSRx-888で処置したマウスは、対照と比べて、それぞれ3倍および2倍の、サイトカインIL-4およびIL-2の両方の増加を示した(それぞれ143ng/mlおよび129ng/ml)。図12A。さらに、HSRx-888で処置したマウスに由来する細胞では、IL-2に対するIL-4の比が、対照と比べて、0.73から1.11に増加した。図12B。具体的には、HSRx-888処置によってIL-2に対するIL-4の比が増加したことから、Th1(炎症性)応答からTh2(非炎症性)応答への移行が示された。Th1応答と比較してTh2応答の比が増加することにより、免疫応答に関係する炎症が減少すると予想される。したがって、このデータから、本明細書において開示される組成物が抗炎症特性を有することが予想される。
【０１７８】
実施例10
アミロイドへの直接的結合
本明細書において開示される組成物によるβ-アミロイド凝集の減少について提唱されている任意の非結合的作用機序は、本明細書において開示されるバイオマーカーの少なくとも1つがアミロイドに結合し、それによって、β-アミロイド凝集を減少させる可能性を除外しない。バイオマーカー15(BDMC)はβA(1-42)に結合すると予測されることが示された。
【０１７９】
簡単に説明すると、Chem 3D Ultra(Cambridgesoft, Cambridge, MA)分子モデリングパッケージを用いる三次元自由エネルギー最小化を、分子力学の2つの理論レベルを用いるバイオマーカー15の自由エネルギー最小化のために使用した。
【０１８０】
結果:最小自由エネルギーモデリング解析により、Tyr10とバイオマーカー15の間で強い分子間相互作用が起こることによって、バイオマーカー15がHis13およびHis14を取り囲むことが可能になって、Phe19およびPhe20が結合しオリゴマーを形成するのを効果的に防ぐことが明らかになった。(図13A)。バイオマーカー15はまた、Gly33、Met35、およびGly37に結合して、βA(1-42)オリゴマーの安定化分子間相互作用を妨害することもできる。(図13B)。
【０１８１】
実施例11
脳脊髄液溶解性
本明細書において開示される組成物の投与は、任意の投与手段によって対象に投与された場合、そのような組成物に由来するバイオマーカーを脳脊髄液に供給すると予想される。投与には、経口、静脈内(IV)、または体腔内(IC)投与が含まれてよいが、それらに限定されるわけではない。裏付けとして、実施例3では、HSRx-888由来のバイオマーカーを、ヒトへの経口投与後に血清中で発見することができる。さらに、実施例6、7、および8は、HSRx-888を経口投与されたマウスでは、脳中のアルツハイマー病のマーカーが減少していたことを示すことから、HSRx-888由来のバイオマーカーがそれを脳脊髄液中に移動させたことが強く示唆される。また、血清中に見出されるいくつかの化合物が、それを脳脊髄液中に移動させる可能性があることも示唆されている(Nau et al., 2010)。
【０１８２】
最後に、HSRx-888が脳脊髄液に溶解でき、検出可能であることを示すために、HSRx-888がエクスビボ脳脊髄液に溶解できることが示された(図示せず)。さらに、DART-TOFを用いて、HSRx-888およびエクスビボ脳脊髄液の混合物中でHSRx-888バイオマーカーを検出できることも示された。
【０１８３】
本明細書において開示される組成物をヒト対象に経口投与すると、そのような組成物に由来するバイオマーカーが対象の脳脊髄液に供給されることをさらに実証するために、臨床試験が現在計画されている。実施例12を参照されたい。
【０１８４】
実施例12
ヒト対象における臨床試験
本実施例は、軽度〜中程度のアルツハイマー病(AD)の脳脊髄バイオマーカーに対するHSRx-888の安全性および忍容性ならびにその効果を明らかにするための、HSRx-888を用いる計画された臨床試験に関する。具体的には、この試験は、(1)軽度〜中程度のAD患者において、プラセボと比較した、2種類の用量のターメリック由来栄養サプリメントHSRx-888の安全性および忍容性を検査するように;(2)HSRX-888の複数回投与後に、AD罹患者の脳脊髄液中でクルクミンが検出可能であるかどうかを判定するように;かつ(3)アミロイド-42、タウ、およびリン酸化タウを含むADのバイオマーカーに対するHSRx-888およびプラセボの効果を調べるように、設計されている。表2は、試験で従うべき手順を概説している。
【０１８５】
方法論:認可されているアセチルコリンエステラーゼ阻害物質を持続的に投与されている、軽度〜中程度のADに罹患し(ミニメンタルステート検査(MMSE)14〜28点)、年齢が50〜90歳の間である対象45名を、約56週間の試験に登録する。試験は、ランダム化二重盲検プラセボ対照の設計である。
【０１８６】
対象は、被験薬が入ったカプセル型の2つの容器を受け取る。各カプセル剤は、175mgのHSRx-888または等しい重量の識別不能な不活性プラセボ粉末を含む。対象は、食事の前に毎日3回、2錠の丸剤を服用するように指示される。服用し損なった場合、後の時点に2倍を服用することによって補うべきではない。プラセボ群は、毎日3回、2錠のプラセボカプセル剤を服用する。HSRx-888低用量群は、1日に3回、1錠のプラセボカプセル剤および1錠のHSRx-888カプセル剤を服用する。HSRx-888高用量群は、1日に3回、2錠のHSRx-888カプセル剤を服用する。
【０１８７】
試験の合計期間は1年であり、以下の構成要素を含む。
(1)対象は、175mg HSRX-888、350mg HSRX-888、または一致させたプラセボのいずれかを毎日3回服用するように1:1:1の比で無作為に割り当てられる。第1の対象9名(各群から3名を含む)は、ベースライン時および1ヶ月の試験サプリメント服用後に、腰椎穿刺(LP)を受ける。対象9名が2回のLPを完了した後、暫定的な解析を実施して、血液および脳脊髄液(CSF)中のクルクミンおよびグルクロン酸抱合クルクミンレベルを測定する。
(2)HSRx-888を服用した第1の対象6名の脳脊髄液中にクルクミンが存在することが確認される場合、残りの対象36名を、2種類の用量のHSRx-888またはプラセボのうちの1つを1年間服用するように無作為化する。クルクミンがCSF中に見出されないかもしくは飽和量がより低用量で見出される場合、または最適以下の量のクルクミンがCSF中に見出される場合、治験依頼者およびIRBに通知され、適切とみなされる場合、調整した用量のHSRx-888を用いて追加の対象9名を試験するよう要望が出される。
(3)追加の対象36名が試験に登録され、ベースライン時および無作為化後6ヶ月目に、腰椎穿刺を受ける。彼らのCSFを、遊離クルクミンおよびクルクミン代謝産物、ならびに確認されているアルツハイマー病バイオマーカー(アミロイド-42、タウ、およびリン酸化タウ181)について解析する。対象18名が6ヶ月の試験製品を完了した際に、ADバイオマーカーの暫定的解析を実施する。
(4)対象45名全員が、無作為に割り当てられた被験サプリメントまたはプラセボを1年間服用する。その年の間ずっと、対象は、定期的な肉体的、神経的、および臨床的な評価、ならびに通例の検査室検査を受けて、被験サプリメントに対する忍容性を評価し、アルツハイマー病罹患者におけるこのサプリメントの安全性に関するさらなる情報を得る。
【０１８８】
測定されるアウトカム:この臨床試験では、以下のアウトカムが測定される。
【０１８９】
安全性:(1年、全対象)測定される安全性アウトカムには、有害事象/重篤有害事象;臨床検査室検査(CBC、生化学的プロファイル);バイタルサイン;体重/BMI;身体的および神経的検査;老年期うつ病評価尺度(GDS);改変ミニメンタルステート検査(3MS);ADCS-ADLスケール;神経精神症状評価(NPI)が含まれる。3MS、ADCS-ADL、GDS、およびNPIを含めるのは、認知、日常の機能、気分、または挙動に対して被験製品に関連する任意の有害作用があるかどうかを調べるためである。試験のこの構成要素はまた、有効性についての今後の研究を推進するのに有用なデータも提供し得る。
【０１９０】
6ヶ月バイオマーカーエンドポイント(対象36名での6ヶ月のHSRx-888またはプラセボおよび2回のLP):6ヶ月目の受診時に、測定される主要アウトカムには、6ヶ月の試験サプリメントの後のCSF aβ-42の変化が含まれる。測定される副次アウトカムには、6ヶ月の試験サプリメントの投与後のCSFタウ、リン酸化タウ、およびクルクミンの変化が含まれる。
【０１９１】
追加の探索的エンドポイント:(対象全員のCSFおよび血清)測定される追加のエンドポイントには、試験サプリメント後の血清中の生物活性クルクミンレベルの変化;試験サプリメント後の血液およびCSF中の他のターメリック由来物質レベルの変化;ならびに試験サプリメント後の血液およびCSF中のグルクロン酸抱合クルクミンレベルの変化が含まれる。
【０１９２】
第1の暫定的解析(第1の対象9名での1ヶ月のHSRx-888またはプラセボおよび2回のLPの後):第1の暫定的解析で測定されるアウトカムには、1ヶ月後の脳脊髄液中のクルクミンレベルの変化および1ヶ月後の血液中のクルクミンレベルの変化が含まれる。
【０１９３】
第2の暫定的解析(対象18名での6ヶ月のHSRx-888またはプラセボおよび2回のLPの後):第2の暫定的解析で測定されるアウトカムには、毎日3回投与を6ヶ月実施した後の脳脊髄液中の生物活性クルクミンレベルのベースラインからの変化;毎日3回投与を6ヶ月実施した後の血液中のクルクミン濃度のベースラインからの変化;ならびにCSF aβ-42/タウおよびリン酸化タウのベースラインからの変化が含まれる。
【０１９４】
統計学的解析:記述統計学を用いて、試験集団を全体として特徴決定し、試験群間の不平衡を調べる。クラスカル・ワリス検定または同様のノンパラメトリック検定を用いて、第1の対象9名の暫定的解析のために脳脊髄クルクミンレベルのベースラインから3ヶ月目までの差異の有意性を評価する。6ヶ月のHSRx-888またはプラセボ後のバイオマーカー解析については、欠けているデータを補完するために前回観測値代入法を用いて、ANOVAを実施する。試験群間で年齢、ベースラインMMSE、または他の人口統計学的指標に有意な差がある場合には、ANCOVAを用いて不均衡を調整する。安全性アウトカムは、全体として試験について表にし、試験群によって分類する。AEの頻度および重症度の点から、HSRx-888を服用している対象とプラセボを服用している対象とを比較する。
【０１９５】
（表２）手順に関する表
2019504876.tif 000005
*安全性検査室検査:全血球数および血小板数、全面的な代謝プロファイル、TSH、B12、尿検査、HgA1C。
**凝固プロファイル:プロタイム(Protime)(PT)、プロトロンビン時間(PTT)、およびINR。
***ADに合致しかつLPに対する禁忌なしの、過去6ヶ月以内のMRIスキャンまたはCTスキャン。そうでない場合は新しいスキャンが必要とされる。
【０１９６】
実施例13
抗酸化能力
本実施例は、2,2-ジフェニル-1-ピクリルヒドラジル(DPPH)方法を用いてHSRx-888の抗酸化能力に関して得られたデータに関する。
【０１９７】
方法論:簡単に説明すると、HSRx-888の保存溶液を純エタノール(USP)および/またはTris-HCL緩衝液(pH7.4)中に溶解させた。段階希釈物を調製し、各希釈物の100μLを、96ウェルプレート中の2つ組のウェルに添加した。陽性対照ウェルおよび適切な試料ウェルは、100μLのTris-HCl緩衝液および純エタノールに溶かした100μLの500μM DPPHを含んだ。Tris-HCl緩衝液をブランク試料ウェルに添加して、各ブランクウェルの合計体積を200μLにした。室温、暗所で20分間、プレートを振盪し、BioTek Synergyマイクロプレートリーダー(Biotek, Winooski, VT)を用いて517nmでの吸光度を測定した。DPPHのラジカル捕捉活性は、DPPH陽性対照と比べたブランクウェルとDPPH含有試料ウェルの吸光度の差と定義される。
【０１９８】
結果:HSRx-888が用量依存的に2-ジフェニル-1-ピクリルヒドラジルラジカル(DPPH)を阻害することが明らかにされた。HSRx-888のIC50値は、19.2μg/mL(R2=0.731、N=10)である。(図14)
【０１９９】
実施例14
抗炎症性特性
本実施例は、COX1、COX2、および5LOXの阻害に関して得られたデータに関する。このデータは、HSRx-888が抗炎症性物質であることを示す。
【０２００】
COX1およびCOX2のアッセイ法
方法論:簡単に説明すると、COX-1およびCOX-2の阻害アッセイ法のために、Cayman Chemicals(Ann Arbor, MI)によって確立されたプロトコールに従って、すべての試薬および溶液を調製した。2つの手順を利用して、COX1/2特異的活性およびCOX1/2非特異的活性を評価した。
【０２０１】
プロスタグランジン産生阻害:ターメリック抽出物を純ジメチルスルホキシド(DMSO)に溶解し、次いで反応緩衝液中で希釈して、最終DMSO濃度を1％(v/v)にした。ヘムの存在下でCOX-1(ヒツジ)酵素またはCOX-2(ヒト組換え)酵素を用いて、反応を行った。ターメリック抽出物を含む100％酵素活性のウェル、バックグラウンドウェル(熱失活させた酵素)、および適切なブランクを調製した。反応を行う前に15分間、37℃インキュベーター中に溶液を置いた。アラキドン酸を添加し、反応を2分間進行させた。1M HClを添加することによって反応を停止させた。EIAを用いてプロスタグランジンF2生成物を定量した。
【０２０２】
EIAを用いるプロスタグランジンの定量:アッセイ用プレート(EIA)は、Cayman Chemicalsスクリーニングキット中で提供された。プロスタグランジン生成に由来する反応生成物(PGF2)の分取物(50μL)を各ウェルに添加した。全活性ウェルおよびブランクウェルには150μLのEIA緩衝液を加え、非特異的結合ウェルには100μLのEIA緩衝液を加え、最大結合ウェルには50μLのEIA緩衝液を加えた。COX 100％活性ウェル、非特異的結合ウェル、バックグラウンドウェル、最大結合ウェル、標準物質ウェル、およびターメリック抽出物ウェルには、50μLのトレーサーを加えた。COX 100％活性ウェル、バックグラウンドウェル、最大結合ウェル、標準物質ウェル、およびターメリック抽出物ウェルには、50μLの抗血清も加えた。EIAプレート反応を室温で18時間行った。洗浄緩衝液でプレートを洗浄し、エルマン試薬200μLをすべてのウェルに添加し、続いて、トレーサー5μLを全活性ウェルに添加した。BioTek Synergyマイクロプレートリーダーを用いて409nmでの吸光度に基づいて、発色を定量した。
【０２０３】
結果:HSRx-888が用量依存的にCOX1およびCOX2を阻害することが明らかにされた。HSRx-888のIC50値は、COX1に対して100.6μg/mL(R2=0.907、N=36)(図15A)、COX2に対して23.0μg/mL(R2=0.874、N=24)(図15B)である。
【０２０４】
5-LOXアッセイ法
方法論:簡単に説明すると、リポキシゲナーゼ阻害物質スクリーニングアッセイキット(Cayman Chemical, Ann Arbor, MI)のための製造業者のプロトコールに従って、精製ジャガイモ5-LOXをモニターすることによって、5-リポキシゲナーゼ(5-LOX)活性を測定した。ターメリック抽出物を純DMSOに溶解し、反応緩衝液中で段階希釈して、全ウェルの最終DMSO濃度を1％(v/v)にした。反応は製造業者の仕様書に従って行い、対照実験を行って、1％(v/v)DMSOが反応を邪魔しないことを確かめた。クロマゲン画像化試薬の添加後にBiotek Synergyプレートリーダー(Winooski, VT)を用いて495nmでの吸光度を測定することによって、5-リポキシゲナーゼ活性阻害を定量した。
【０２０５】
結果:HSRx-888が用量依存的に5LOXを阻害することが明らかにされた。HSRx-888のIC50値は、5LOXに対して256.3μg/mL(R2=0.999、N=8)である(図15C)。
【０２０６】
実施例15
相乗作用
前述したように、本明細書の実験結果から、本明細書において開示されるバイオマーカー間の相乗作用が示唆される。さらに、本明細書において開示されるバイオマーカーの予測される作用方法が理由で、これらのバイオマーカーが、異なる機序によって作用してアルツハイマー病、タンパク質ミスフォールディング/凝集の疾患および病態、ならびに/または炎症を治療または予防する他の化合物と相乗的に作用すると考えられている。このような相乗作用をさらに裏付け、他の化合物/組成物との相乗作用を明らかにするために、本明細書において開示されるバイオマーカーの1つまたは複数を、本明細書において開示される他のバイオマーカーの1つもしくは複数および/または1つもしくは複数の薬物および処置と組み合わせて試験してよい。組合せ試験により、細胞培養、動物試験、ヒト試験などにおいて、疾患および/もしくは病態ならびに/またはそれらの症状を治療および/または予防するための競合的、相加的、または相乗的な相互作用を示すことができる。試験の非限定的な例には、前述および本明細書において説明したもの、ならびに当業者に公知のものが含まれてよい。非限定的な例として、HSRx-888およびNSAID、NMDA受容体アンタゴニスト、および/またはアセチルコリンエステラーゼ阻害物質の組合せが試験されてよい。
【０２０７】
組合せの競合的、相加的、または相乗的な相互作用を明らかにするために実施できる組合せアッセイ法の非限定的な例は、薬物の相互作用および相乗作用を調べるのによく使用される相互作用マトリックスを利用することができる。1つの場合において、相互作用マトリックスは、細胞培養でアルツハイマー病、タンパク質ミスフォールディング、タンパク質凝集、または炎症の予防または治療を研究する際に使用される。簡単に説明すると、実験は25個の試料を有してよい:第1の試験化合物/組成物(例えばHSRx-888)のみを用いる4個、第2の試験化合物/組成物のみを用いる4個、化学物質を用いない1個、そして残りの16個は、第1の試験化合物/組成物と第2の試験化合物/組成物の組合せであってよい。出発濃度(例えばHSRx-888の場合1mg/ml)からの第1の試験化合物/組成物の1:4希釈物および出発濃度からの第2の試験化合物/組成物の1:4希釈物を試験することができる。炎症マーカーを減少させる、アミロイド分泌を減少させる、アミロイド凝集を減少させる、タウのリン酸化を減少させるなどの能力は、阻害性化合物が常時存在する場合に起こり得る。このように、実験は、予防的な処置を受けている患者をシミュレートし、第1の試験化合物/組成物のみ、第2の試験化合物/組成物のみ、およびある範囲の濃度での2つの組合せによる疾患発症の予防を検証する。Berenbaumの方法論を用いてデータを解析して、競合的、相加的、または相乗的な相互作用を明らかにすることができる。(Berenbaum 1977)。
【０２０８】
実施例15
多様な神経障害の予想される治療および/または予防
本明細書において開示される組合せは、本明細書において開示される利益、ならびに非ヒトモデルおよびインビトロで実証されるものを含む、クルクミンを用いる治療の利益に基づく、多様な疾患、障害、および病態の治療および/または予防における利益を与える。本明細書において実証されるように、本明細書において開示されるバイオマーカーの組合せは、ヒト対象におけるクルクミンの取込みを増大させることができ、脳脊髄液に可溶性であり、抗炎症特性を有しており、抗酸化能力を有しており、かつタンパク質変性および/またはミスフォールディングを減少させる能力を有している。これらの特性に基づいて、特に、本明細書において開示される組合せが、生体利用可能なクルクミンの増量、抗炎症性利益の増大、抗酸化利益の増大、タンパク質変性減少の利益、およびタンパク質ミスフォールディング減少の利益をヒト対象にもたらし得ることが予想される。
【０２０９】
本明細書において説明され実証される少なくともこれらの理由から、本明細書において開示される組合せは、変性性障害/タンパク質ミスフォールディング障害、脳血管疾患、炎症性疾患、外傷/閉鎖性頭部損傷、てんかん、および/または新生物を非限定的に含む神経学的な障害、疾患、および病態の治療および/または予防において利益を与える。変性性障害/タンパク質ミスフォールディングの障害の非限定的な例には、アルツハイマー病、パーキンソン病、レビー小体、前頭側頭変性症、進行性核上性麻痺、筋萎縮性側索硬化症、多系統萎縮症、脳アミロイドーシス、脊髄小脳萎縮症が含まれる。脳血管の疾患の非限定的な例には、虚血性脳卒中、再灌流障害、および脳血管れん縮が含まれる。炎症性の疾患の非限定的な例には、多発性硬化症およびCNSループスが含まれる。外傷/閉鎖性頭部損傷の非限定的な例には、振盪、挫傷、および慢性外傷性脳障害が含まれる。てんかんの非限定的な例には、全般発作性疾患および部分的発作性疾患が含まれる。新生物の非限定的な例には、転移性腫瘍およびCNS原発腫瘍が含まれる。
【０２１０】
さらに、本明細書において開示および実証されるように、本明細書において開示されるバイオマーカーの組合せは、ヒト対象におけるクルクミンの取込みを増大させることができる。少なくともこの理由および前述の理由から、本明細書において開示されるバイオマーカーおよびクルクミンの組合せは、インビトロ、インビボ、および/または臨床試験で実証されるクルクミンに関連する利益をヒト対象にもたらす。
【０２１１】
本明細書において開示および特許請求する組成物および/またはは方法はすべて、本発明の開示に照らして、過度に実験をすることなく作製および実行できる。本発明の組成物および方法を、特定の態様の立場から説明してきたが、本発明の概念、精神、および範囲から逸脱することなく、本明細書において説明する組成物および/または方法、ならびに方法の段階または段階の順序に変更を加えてよいことが、当業者には明らかであろう。より具体的には、本明細書において説明する作用物質の代わりに、化学的にも生理学的にも関係している特定の作用物質を用いてよく、さらに、同じまたは同様の結果が達成されるであろうことも明らかである。当業者に明らかなこのような同様の代用および改良はすべて、添付の特許請求の範囲によって定義される本発明の精神、範囲、および概念の範囲内にあるとみなされる。
【０２１２】
参照文献
2019504876.tif 000006
2019504876.tif 000007
2019504876.tif 000008
【図１】
2019504876.tif 000010
【図２】
2019504876.tif 000011
【図３】
2019504876.tif 000012
【図４】
2019504876.tif 000013
【図５】
2019504876.tif 000014
【図６】
2019504876.tif 000015
【図７】
2019504876.tif 000016
【図８】
2019504876.tif 000017
【図９】
2019504876.tif 000018
【図１０】
2019504876.tif 000019
【図１１】
2019504876.tif 000020
【図１２】
2019504876.tif 000021
【図１３】
2019504876.tif 000022
【図１４】
2019504876.tif 000023
【図１５Ａ】
2019504876.tif 000024
【図１５Ｂ】
2019504876.tif 000025
【図１５Ｃ】
2019504876.tif 000026
【手続補正書】
【提出日】平成30年9月13日(2018.9.13)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
測定精密質量が１２０．０９４ａｍｕでありかつ相対存在量が少なくとも２．１７％であるバイオマーカー１；
測定精密質量が１３４．１１０ａｍｕでありかつ相対存在量が少なくとも０．３１％である、バイオマーカー２；
測定精密質量が２００．１５７ａｍｕでありかつ相対存在量が少なくとも０．４７％である、バイオマーカー６；および
測定精密質量が２３２．１４６ａｍｕでありかつ相対存在量が少なくとも２．３８％である、バイオマーカー１２；
測定精密質量が１５０．１０４ａｍｕでありかつ濃度が少なくとも０．０４重量％である、バイオマーカー３；
測定精密質量が１７６．１２０ａｍｕでありかつ相対存在量が少なくとも０．９６％である、バイオマーカー４；
測定精密質量が１９２．０９１ａｍｕでありかつ相対存在量が少なくとも１．７４％である、バイオマーカー５；
測定精密質量が２０２．１７２ａｍｕでありかつ相対存在量が少なくとも０．８７％である、バイオマーカー７；
測定精密質量が２０４．１８８ａｍｕでありかつ相対存在量が少なくとも０．３０％である、バイオマーカー８；
測定精密質量が２１６．１５１ａｍｕでありかつ相対存在量が少なくとも１０．７５％である、バイオマーカー９；
測定精密質量が２１８．２０３ａｍｕでありかつ相対存在量が少なくとも４．００％である、バイオマーカー１０；
測定精密質量が２２０．１８３ａｍｕでありかつ相対存在量が少なくとも０．７２％である、バイオマーカー１１；
測定精密質量が２３４．１６２ａｍｕでありかつ相対存在量が少なくとも３．５２％である、バイオマーカー１３；
測定精密質量が２５６．２４０ａｍｕでありかつ相対存在量が少なくとも０．２５％である、バイオマーカー１４；
測定精密質量が３０８．１０５ａｍｕでありかつ濃度が少なくとも１．５０重量％である、バイオマーカー１５；
測定精密質量が３３８．１１５ａｍｕでありかつ濃度が少なくとも１．６７重量％である、バイオマーカー１６；
測定精密質量が３７２．１５７ａｍｕでありかつ濃度が少なくとも０．８８重量％である、バイオマーカー１８；
測定精密質量が４５０．２６１ａｍｕでありかつ相対存在量が少なくとも０．６１％である、バイオマーカー１９；ならびに
クルクミンおよび／またはクルクミンの機能的誘導体の組み合わせを含む、組成物であって、
各バイオマーカーがウコン（Curcuma longa）中に見出され；かつ
該相対存在量が、エタノール中に溶解させた０．５ｍｇ／ｍｌの該組成物中にスパイクされた２５ｍｇ／ｍｌサリチル酸を基準としている、組成物。
【請求項２】
少なくとも１種類のアセチルコリンエステラーゼ阻害物質、少なくとも１種類のＮ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸（ＮＭＤＡ）受容体アンタゴニスト、および／または少なくとも１種類の抗炎症薬をさらに含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記少なくとも１種類のアセチルコリンエステラーゼ阻害物質が、ドネペジル、タクリン、ガランタミン、リバスチグミン、それらの塩、もしくはそれらの任意の組合せであり、前記少なくとも１種類のＮ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸（ＮＭＤＡ）受容体アンタゴニストがメマンチンであり、かつ／または前記少なくとも１種類の抗炎症薬が非ステロイド性抗炎症薬である、請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
鼻腔内投与用、局所適用用、注射による投与用、および／または経口投与用に製剤化されている、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５】
少なくとも１つのツルメロンをさらに含み、かつツルメロンに対するクルクミンおよび／またはそのアナログの重量比が０．５〜０．９の間である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６】
前記組成物を投与されたヒトの血清中に少なくとも１０ｍｇのクルクミンおよび／もしくはその機能的誘導体を供給するように、かつ／または該組成物を投与されたヒトの脳脊髄液中に少なくとも１ｍｇのクルクミンおよび／もしくはその機能的誘導体を供給するように製剤化されている、請求項１〜５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７】
前記組成物中にありかつ／またはバイオマーカー１〜１６、１８、もしくは１９の少なくとも１つに共有結合している造影剤をさらに含む、請求項１〜６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項８】
クルクミンおよび／またはクルクミンの機能的誘導体、ならびに
測定精密質量が１２０．０９４ａｍｕでありかつ相対存在量が少なくとも２．１７％であるバイオマーカー１；
測定精密質量が１３４．１１０ａｍｕでありかつ相対存在量が少なくとも０．３１％である、バイオマーカー２；
測定精密質量が２００．１５７ａｍｕでありかつ相対存在量が少なくとも０．４７％である、バイオマーカー６；および
測定精密質量が２３２．１４６ａｍｕでありかつ相対存在量が少なくとも２．３８％である、バイオマーカー１２；
測定精密質量が１５０．１０４ａｍｕでありかつ濃度が少なくとも０．０４重量％である、バイオマーカー３；
測定精密質量が１７６．１２０ａｍｕでありかつ相対存在量が少なくとも０．９６％である、バイオマーカー４；
測定精密質量が１９２．０９１ａｍｕでありかつ相対存在量が少なくとも１．７４％である、バイオマーカー５；
測定精密質量が２０２．１７２ａｍｕでありかつ相対存在量が少なくとも０．８７％である、バイオマーカー７；
測定精密質量が２０４．１８８ａｍｕでありかつ相対存在量が少なくとも０．３０％である、バイオマーカー８；
測定精密質量が２１６．１５１ａｍｕでありかつ相対存在量が少なくとも１０．７５％である、バイオマーカー９；
測定精密質量が２１８．２０３ａｍｕでありかつ相対存在量が少なくとも４．００％である、バイオマーカー１０；
測定精密質量が２２０．１８３ａｍｕでありかつ相対存在量が少なくとも０．７２％である、バイオマーカー１１；
測定精密質量が２３４．１６２ａｍｕでありかつ相対存在量が少なくとも３．５２％である、バイオマーカー１３；
測定精密質量が２５６．２４０ａｍｕでありかつ相対存在量が少なくとも０．２５％である、バイオマーカー１４；
測定精密質量が３０８．１０５ａｍｕでありかつ濃度が少なくとも１．５０重量％である、バイオマーカー１５；
測定精密質量が３３８．１１５ａｍｕでありかつ濃度が少なくとも１．６７重量％である、バイオマーカー１６；
測定精密質量が３７２．１５７ａｍｕでありかつ濃度が少なくとも０．８８重量％である、バイオマーカー１８；
測定精密質量が４５０．２６１ａｍｕでありかつ相対存在量が少なくとも０．６１％である、バイオマーカー１９；
の１つまたは複数を含む、組成物であって、
各バイオマーカー１がウコン中に見出され；かつ
該相対存在量が、エタノール中に溶解させた０．５ｍｇ／ｍｌの該組成物中にスパイクされた２５ｍｇ／ｍｌサリチル酸を基準としている、組成物。
【請求項９】
少なくとも１種類のアセチルコリンエステラーゼ阻害物質、少なくとも１種類のＮ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸（ＮＭＤＡ）受容体アンタゴニスト、および／または少なくとも１種類の抗炎症薬をさらに含む、請求項８に記載の組成物。
【請求項１０】
前記少なくとも１種類のアセチルコリンエステラーゼ阻害物質が、ドネペジル、タクリン、ガランタミン、リバスチグミン、それらの塩、もしくはそれらの任意の組合せであり、前記少なくとも１種類のＮ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸（ＮＭＤＡ）受容体アンタゴニストがメマンチンであり、かつ／または前記少なくとも１種類の抗炎症薬が非ステロイド性抗炎症薬である、請求項９に記載の組成物。
【請求項１１】
鼻腔内投与用、局所適用用、注射による投与用、および／または経口投与用に製剤化されている、請求項８〜１０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１２】
少なくとも１つのツルメロンをさらに含み、かつツルメロンに対するクルクミンおよび／またはそのアナログの重量比が０．５〜０．９の間である、請求項８〜１１のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１３】
前記組成物を投与されたヒトの血清中に少なくとも１０ｍｇのクルクミンおよび／もしくはその機能的誘導体を供給するように、かつ／または該組成物を投与されたヒトの脳脊髄液中に少なくとも１ｍｇのクルクミンおよび／もしくはその機能的誘導体を供給するように製剤化されている、請求項８〜１２のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１４】
前記組成物中にありかつ／またはバイオマーカー１〜１６、１８、もしくは１９の少なくとも１つに共有結合している造影剤をさらに含む、請求項８〜１３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１５】
神経学的な疾患、障害、および／もしくは病態のリスクを有している対象ならびに／または神経学的な疾患、障害、および／もしくは病態を有している対象の治療に用いるための、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の組成物であって、該神経学的な疾患、障害、および／もしくは病態が該対象において改善されかつ／または発症が、患者が治療されなかった場合に予想される該神経学的な疾患、障害、および／もしくは病態の発症と比べて遅延する、組成物。
【請求項１６】
前記神経学的な疾患、障害、および／もしくは病態が、変性性／タンパク質ミスフォールディングの疾患、障害、および／もしくは病態；脳血管の疾患、障害、および／もしくは病態；炎症性の疾患、障害、および／もしくは病態；外傷／閉鎖性頭部損傷；てんかん；ならびに／または新生物である、請求項１５に記載の組成物。
【請求項１７】
前記神経学的な疾患、障害、および／もしくは病態が、アルツハイマー病、パーキンソン病、レビー小体病、前頭側頭変性症、進行性核上性麻痺、筋萎縮性側索硬化症、多系統萎縮症、脳アミロイドーシス、脊髄小脳萎縮症、虚血性脳卒中、再灌流障害、脳血管れん縮、多発性硬化症、ＣＮＳループス、振盪、挫傷、慢性外傷性脳障害、全般発作性疾患、部分的発作性疾患、転移性腫瘍、および／もしくはＣＮＳ原発腫瘍である、請求項１５に記載の組成物。
【請求項１８】
前記神経学的な疾患、障害、および／もしくは病態がアルツハイマー病である、請求項１５に記載の組成物。
【請求項１９】
アミロイド凝集が減少し、アミロイド分泌が減少し、タウレベルが低下し、リン酸化タウレベルが低下し、タウのリン酸化が減少し、タンパク質ミスフォールディングが減少し、タンパク質凝集が減少し、活性酸素種レベルが低下し、フリーラジカルレベルが低下し、神経炎症が減少し、ＩＬ−２に対するＩＬ−４の比が増加し、認知が増大し、かつ／または対象へのクルクミンおよび／もしくはその機能的誘導体の取込みが、バイオマーカー１〜１６、１８、および／もしくは１９のいずれも伴わない場合の該クルクミンおよび／もしくはその機能的誘導体の取込みと比べて増大する、請求項１５〜１８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２０】
対象の血清中および／または脳脊髄液中へのクルクミンおよび／またはその機能的誘導体の取込みの増大に用いるための、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の組成物であって、クルクミンおよび／またはその機能的誘導体の取込みが、バイオマーカー１〜１６、１８、または１９のいずれも伴わない場合のクルクミンおよび／またはその機能的誘導体の投与と比べて増大する、組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８８】
[本発明1001]
クルクミンおよび/またはクルクミンの機能的誘導体、ならびに測定精密質量が120.094amuでありかつ相対存在量が少なくとも2.17％であるバイオマーカー1
を含む、組成物であって、
該バイオマーカー1がウコン(Curcuma longa)中に見出され;かつ
該相対存在量が、エタノール中に溶解させた0.5mg/mlの該組成物中にスパイクされた25mg/mlサリチル酸を基準としている、組成物。
[本発明1002]
以下の追加のバイオマーカー:
測定精密質量が134.110amuでありかつ相対存在量が少なくとも0.31％である、バイオマーカー2;
測定精密質量が200.157amuでありかつ相対存在量が少なくとも0.47％である、バイオマーカー6;および
測定精密質量が232.146amuでありかつ相対存在量が少なくとも2.38％である、バイオマーカー12
の任意の1つまたは任意の組合せまたはすべてをさらに含み、
該バイオマーカーがウコン中に見出され、かつ
該相対存在量が、エタノール中に溶解させた0.5mg/mlの前記組成物中にスパイクされた25mg/mlサリチル酸を基準としている、本発明1001の組成物。
[本発明1003]
バイオマーカー1、2、6、および12の少なくとも2つ、3つ、または4つを有している、本発明1002の組成物。
[本発明1004]
測定精密質量が150.104amuでありかつ濃度が少なくとも0.04重量％である、バイオマーカー3;
測定精密質量が176.120amuでありかつ相対存在量が少なくとも0.96％である、バイオマーカー4;
測定精密質量が192.091amuでありかつ相対存在量が少なくとも1.74％である、バイオマーカー5;
測定精密質量が202.172amuでありかつ相対存在量が少なくとも0.87％である、バイオマーカー7;
測定精密質量が204.188amuでありかつ相対存在量が少なくとも0.30％である、バイオマーカー8;
測定精密質量が216.151amuでありかつ相対存在量が少なくとも10.75％である、バイオマーカー9;
測定精密質量が218.203amuでありかつ相対存在量が少なくとも4.00％である、バイオマーカー10;
測定精密質量が220.183amuでありかつ相対存在量が少なくとも0.72％である、バイオマーカー11;
測定精密質量が234.162amuでありかつ相対存在量が少なくとも3.52％である、バイオマーカー13;
測定精密質量が256.240amuでありかつ相対存在量が少なくとも0.25％である、バイオマーカー14;
測定精密質量が308.105amuでありかつ濃度が少なくとも1.50重量％である、バイオマーカー15;
測定精密質量が338.115amuでありかつ濃度が少なくとも1.67重量％である、バイオマーカー16;
測定精密質量が372.157amuでありかつ濃度が少なくとも0.88重量％である、バイオマーカー18;および
測定精密質量が450.261amuでありかつ相対存在量が少なくとも0.61％である、バイオマーカー19
の1つまたは複数をさらに含み、
各バイオマーカーがウコン中に見出され、かつ
該相対存在量が、エタノール中に溶解させた0.5mg/mlの前記組成物中にスパイクされた25mg/mlサリチル酸を基準としている、本発明1001〜1003のいずれかの組成物。
[本発明1005]
少なくとも1種類のアセチルコリンエステラーゼ阻害物質、少なくとも1種類のN-メチル-D-アスパラギン酸(NMDA)受容体アンタゴニスト、および/または少なくとも1種類の抗炎症薬をさらに含む、本発明1001〜1004のいずれかの組成物。
[本発明1006]
前記少なくとも1種類のアセチルコリンエステラーゼ阻害物質が、ドネペジル、タクリン、ガランタミン、リバスチグミン、それらの塩、もしくはそれらの任意の組合せであり、前記少なくとも1種類のN-メチル-D-アスパラギン酸(NMDA)受容体アンタゴニストがメマンチンであり、かつ/または前記少なくとも1種類の抗炎症薬が非ステロイド性抗炎症薬である、本発明1005の組成物。
[本発明1007]
鼻腔内投与用、局所適用用、注射による投与用、および/または経口投与用に製剤化されている、本発明1001〜1006のいずれかの組成物。
[本発明1008]
少なくとも1つのツルメロンをさらに含み、かつツルメロンに対するクルクミンおよび/またはそのアナログの重量比が0.5〜0.9の間である、本発明1001〜1007のいずれかの組成物。
[本発明1009]
前記組成物を投与されたヒトの血清中に少なくとも10mgのクルクミンおよび/もしくはその機能的誘導体を供給するように、かつ/または該組成物を投与されたヒトの脳脊髄液中に少なくとも1mgのクルクミンおよび/もしくはその機能的誘導体を供給するように製剤化されている、本発明1001〜1008のいずれかの組成物。
[本発明1010]
前記組成物中にありかつ/またはバイオマーカー1〜16、18、もしくは19の少なくとも1つに共有結合している造影剤をさらに含む、本発明1001〜1009のいずれかの組成物。
[本発明1011]
神経学的な疾患、障害、および/もしくは病態のリスクを有している対象ならびに/または神経学的な疾患、障害、および/もしくは病態を有している対象を治療する方法であって、前記方法が、本発明1001〜1010のいずれかの組成物のいずれか1つを該対象に投与する段階を含み、かつ、該神経学的な疾患、障害、および/もしくは病態が該対象において改善されかつ/または発症が、患者が治療されなかった場合に予想される該神経学的な疾患、障害、および/もしくは病態の発症と比べて遅延する、方法。
[本発明1012]
前記神経学的な疾患、障害、および/もしくは病態が、変性性/タンパク質ミスフォールディングの疾患、障害、および/もしくは病態;脳血管の疾患、障害、および/もしくは病態;炎症性の疾患、障害、および/もしくは病態;外傷/閉鎖性頭部損傷;てんかん;ならびに/または新生物である、本発明1011の方法。
[本発明1013]
前記神経学的な疾患、障害、および/もしくは病態が、アルツハイマー病、パーキンソン病、レビー小体病、前頭側頭変性症、進行性核上性麻痺、筋萎縮性側索硬化症、多系統萎縮症、脳アミロイドーシス、脊髄小脳萎縮症、虚血性脳卒中、再灌流障害、脳血管れん縮、多発性硬化症、CNSループス、振盪、挫傷、慢性外傷性脳障害、全般発作性疾患、部分的発作性疾患、転移性腫瘍、および/もしくはCNS原発腫瘍である、本発明1011の方法。
[本発明1014]
前記神経学的な疾患、障害、および/もしくは病態がアルツハイマー病である、本発明1011の方法。
[本発明1015]
アミロイド凝集が減少し、アミロイド分泌が減少し、タウレベルが低下し、リン酸化タウレベルが低下し、タウのリン酸化が減少し、タンパク質ミスフォールディングが減少し、タンパク質凝集が減少し、活性酸素種レベルが低下し、フリーラジカルレベルが低下し、神経炎症が減少し、IL-2に対するIL-4の比が増加し、認知が増大し、かつ/または対象へのクルクミンおよび/もしくはその機能的誘導体の取込みが、バイオマーカー1〜16、18、および/もしくは19のいずれも伴わない場合の該クルクミンおよび/もしくはその機能的誘導体の取込みと比べて増大する、本発明1011〜1014のいずれかの方法。
[本発明1016]
少なくとも1種類のアセチルコリンエステラーゼ阻害物質、NMDA受容体アンタゴニスト、および/またはクルクミンを摂取している対象に関連する副作用および/または有害事象を治療および/または予防する方法であって、該方法が、本発明1001〜1010のいずれかの組成物のいずれか1つを該対象に投与する段階を含み、少なくとも1種類のアセチルコリンエステラーゼ阻害物質、NMDA受容体アンタゴニスト、および/もしくはクルクミンを摂取している対象に関連する少なくとも1つの副作用および/もしくは有害事象が、減少し、かつ/または本発明1001〜1010のいずれかの組成物のいずれか1つを該対象が摂取しなかった場合に予想される該少なくとも1つの副作用および/もしくは有害事象の量および/もしくは強さと比較して減少する、方法。
[本発明1017]
対象の血清中および/または脳脊髄液中へのクルクミンおよび/またはその機能的誘導体の取込みを増大させる方法であって、該方法が、本発明1001〜1010のいずれかの組成物のいずれか1つを該対象に投与する段階を含み、クルクミンおよび/またはその機能的誘導体の取込みが、バイオマーカー1〜16、18、または19のいずれも伴わない場合のクルクミンおよび/またはその機能的誘導体の投与と比べて増大する、方法。
[本発明1018]
前記組成物中に存在する前記クルクミンおよび/もしくはその機能的誘導体の少なくとも30％が、前記対象の血清中に入り、少なくとも10mgのクルクミンおよび/もしくはその機能的誘導体が該対象の血清中に入り、かつ/または少なくとも1mgのクルクミンおよび/もしくはその機能的誘導体が該対象の脳脊髄液中に入る、本発明1017の方法。
[本発明1019]
アミロイドおよび/またはタウを本発明1001〜1010のいずれかの組成物と接触させる段階を含む、アミロイドおよび/またはタウタンパク質を標識する方法。
[本発明1020]
前記バイオマーカーの相対存在量のバッチ間の化学的一致が少なくとも90％、好ましくは少なくとも95％、または少なくとも98％である組成物を作製する、本発明1001〜1010のいずれかの組成物を作製する方法。
本発明の他の目的、特徴、および利点は、以下の詳細な説明から明らかになると考えられる。しかし、詳細な説明および例は、本発明の特定の態様を示すものの、単に例証として与えられることが理解されるべきである。さらに、本発明の精神および範囲内の変化および修正は、この詳細な説明から当業者に明らかになるであろうことが予期される。
【国際調査報告】
2019504876.tif 000027
2019504876.tif 000028
2019504876.tif 000029