(57)【要約】  本発明は、治療上有効な量のトロンボキサンＡ２受容体拮抗薬を投与することにより、筋ジストロフィーを治療及び／もしくは改善し、及び／又は筋ジストロフィー患者における心筋症を治療する方法に関する。【選択図】  図１Ａ
2019515013.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
筋ジストロフィーの治療を必要とする患者において筋ジストロフィーを治療又は改善する方法であって、治療上有効な量のトロンボキサンＡ２受容体拮抗薬を前記患者に投与することを含む、方法。
【請求項２】
前記筋ジストロフィーがデュシェンヌ型ＭＤ（ＤＭＤ）、ベッカー型ＭＤ、及び肢帯型ＭＤから成る群から選択される線維症である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
慢性的な前記患者に前記トロンボキサンＡ２受容体拮抗薬を投与することを更に含む、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記患者の心機能が維持又は向上される、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５】
前記トロンボキサンＡ２受容体拮抗薬が［１Ｓ−（１α，２α，３α，４α）］−２−［［３−［４−［（ペンチルアミノ）カルボニル］−２−オキサゾリル］−７−オキサビシクロ［２．２．１］ヘプト−２−イル］メチル］−ベンゼンプロパン酸（イフェトロバン）及びその薬学的に許容可能な塩である、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
前記トロンボキサンＡ２受容体拮抗薬が［１Ｓ−（１α，２α，３α，４α）］−２−［［３−［４−［（ペンチルアミノ）カルボニル］−２−オキサゾリル］−７−オキサビシクロ［２．２．１］ヘプト−２−イル］メチル］−ベンゼンプロパン酸の１ナトリウム塩（イフェトロバンナトリウム）である、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
前記トロンボキサンＡ２受容体拮抗薬が経口投与、鼻腔内投与、直腸投与、膣投与、舌下投与、口腔内投与、非経口投与又は経皮投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記トロンボキサンＡ２受容体拮抗薬が非経口投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
前記トロンボキサンＡ２受容体拮抗薬が経口投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
前記トロンボキサンＡ２受容体拮抗薬が前記患者において心筋症を予防するために予防的に投与される、請求項２に記載の方法。
【請求項１１】
前記患者において胃腸障害を予防するために前記トロンボキサンＡ２受容体拮抗薬が予防的に投与される、請求項２に記載の方法。
【請求項１２】
前記治療上有効な量が１日当たり約５０ｍｇ〜約５００ｍｇ、好ましくは約１５０ｍｇ〜約３５０ｍｇであり、前記イフェトロバンが経口投与される、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
筋ジストロフィーを患うヒト患者において、心機能不全及び／又は胃腸障害を治療する方法であって、治療上有効な量のトロンボキサンＡ２受容体拮抗薬を前記ヒト患者に慢性投与することを含む、方法。
【請求項１４】
前記治療上有効な量が１日当たり約１００ｍｇ〜約５００ｍｇ、好ましくは約１５０ｍｇ〜約３５０ｍｇであり、イフェトロバンが経口投与される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１５】
前記トロンボキサンＡ２受容体拮抗薬が［１Ｓ−（１α，２α，３α，４α）］−２−［［３−［４−［（ペンチルアミノ）カルボニル］−２−オキサゾリル］−７−オキサビシクロ［２．２．１］ヘプト−２−イル］メチル］−ベンゼンプロパン酸（イフェトロバン）及びその薬学的に許容可能な塩である、請求項１３又は１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記トロンボキサンＡ２受容体拮抗薬が［１Ｓ−（１α，２α，３α，４α）］−２−［［３−［４−［（ペンチルアミノ）カルボニル］−２−オキサゾリル］−７−オキサビシクロ［２．２．１］ヘプト−２−イル］メチル］−ベンゼンプロパン酸１ナトリウム塩（イフェトロバンナトリウム）である、請求項１３又は１４に記載の方法。
【請求項１７】
前記筋ジストロフィーがＤＭＤである請求項１３又は１４に記載の方法。
【請求項１８】
前記胃腸障害が平滑筋機能不全である、請求項１３に記載の方法。
【請求項１９】
前記治療上有効な量のトロンボキサンＡ２受容体拮抗薬が前記患者の心臓の心室機能を向上させる、請求項１３に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、哺乳類、例えばヒトの筋ジストロフィーの治療におけるトロンボキサンＡ２受容体拮抗薬（例えばイフェトロバン）の使用、及び同一用途の医薬組成物であってトロンボキサンＡ２受容体拮抗薬（例えばイフェトロバン）を前記疾患を治療するのに有効な量含む、医薬組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
筋ジストロフィー（MD）は、健康な筋肉を形成するのに必要なタンパク質であるジストロフィンの変異により進行性の衰弱及び筋量の低下を引き起こす、３０以上の疾患群である。デュッシェンヌ型MD（DMD）はMDの半分を構成し、３，５００人に１人の男児に発症し、１／３は家族歴を有しない。発症は２〜３歳の間であり、急速に進行する。ベッカー型MD（BMD）はMDの２番目に一般的な形で、３０，０００人に１人の男児に発症する。BMDはDMDに比べて穏やかに、かつゆっくりと進行し、１０代、２０代半ば又はそれ以降まで症状が見られないこともある。肢帯型ＭＤ（LGMD）は、１４，５００人に１人もの数に発症し、近位の腕及び脚の筋肉の衰弱と消耗を引き起こす。
【０００３】
筋ジストロフィーの合併症には、歩行不能、呼吸障害、脊柱側弯症、心筋症、嚥下障害が含まれる。治療法はなく、現在までの治療は症状を管理し進行を遅らせることである。
【０００４】
デルタ‐サルコグリカン（ＤＳＧ）は、ジストロフィン関連糖タンパク質複合体（Dystrophin-associated glycoprotein complex、DGC）として形成する、膜貫通糖タンパク質である。ＤＧＣは、細胞外マトリックス（「ＥＣＭ」；コラーゲン、エラスチン、プロテオグリカン、グリコサミノグリカン、及び体液を含む物質であり、細胞によって産生され、その中に細胞が埋め込まれる）と細胞骨格（細胞の内部構造の要素又はバックボーン。細胞質中に広がる微小管及び多様なフィラメントから成り、構造的な支え及び細胞内輸送の手段の両方を与える。）をつなげることにより細胞膜の統合性を維持することにおいて中心的な役割を果たす。
【０００５】
骨格筋及び心筋の両方において、ＤＧＣはジストロフィン、シントロフィン、a-及びb-ジストログリカン（a, b-DG）、サルコグリカン（a-, b-, g-, d-SG）及びサルコスパン（ＳＳＰＮ）から成る。
【０００６】
ジストロフィン遺伝子内の変異は、ＤＭＤ及びＢＭＤにおいて心筋症の高い発生率をもたらす。ＤＧＣのうちサルコグリカンにおける変異は、肢帯型ＭＤの原因となり、心筋症と関連する。ジストロフィンの主な役割は、ＥＣＭを細胞骨格と架橋することにより筋細胞膜を強化することである。ユートロフィンとa7b1インテグリンも同一の役割を果たす。ジストロフィンは筋細胞膜を細胞質内のアクチン細胞骨格につなげるよう働く。機能異常により膜が不安定となり、[Ｃａ２＋]Ｉが上昇し、ＮＯシグナリングが攪乱される。γ‐及びδ‐ＳＧは、他のＳＧの膜への輸送／保持に必要なコアを形成する。
【０００７】
ＤＳＧ内の変異を有する患者（例えば、筋ジストロフィーを患う患者）は、心筋症を呈す。
【０００８】
デュッシェンヌ型の筋ジストロフィー（ＤＭＤ）において、ジストロフィンの欠如は筋細胞の進行性の崩壊を引き起こす。心臓では、ジストロフィンの欠損は、異常に増加した細胞内カルシウム、収縮タンパク質の分解、線維症及び心筋の死をもたらす。呼吸補助の発達に伴い、心筋症は現在ではＤＭＤ患者の間で主要な死因となっている。ＤＭＤ患者は、心不全をもたらす潜行性の心機能の低下を生じ、不整脈を発症する可能性もあり、たとえ身体的症状又は心エコー図検査による心機能の低下が最小限であっても、突然の心臓死の可能性を有する。このため、心臓磁気共鳴（ＣＭＲ）は、ＤＭＤ患者において初期の心臓の合併症を検出するのに有益である。ＣＭＲにおいて心筋線維症の増大及び細胞外体積の拡大は左心室（ＬＶ）の機能不全を予測し、不整脈及び心不全での入院又は心臓死のリスクの増加と関連する。
【０００９】
骨格筋及び心筋ほど深刻に影響されないものの、腸管平滑筋の機能も委縮症と線維症により変化することがある。ＤＭＤ患者では、特に車いす生活の場合は、これは弱い腸運動
、胃食道逆流及び慢性の便秘をもたらすことがあり、患者の生活の質にネガティブに影響する。より重要なことに、拡張症、宿便又は腸偽閉塞の起こりうる合併症は生命を脅かす可能性がある。
【００１０】
ＤＭＤの細胞損傷特性はまた、活性酸素種の形成又は酸化ストレスの増加と関連している(非特許文献１)。これらのフリーラジカルは膜リン脂質と反応し、ホスホリパーゼによる放出後自由に循環するイソプロスタンを形成する。比較的安定な１５−Ｆ２ｔ−イソプロスタン（Ｆ２−ＩｓｏＰ）はインビボの酸化ストレスの主要なバイオマーカーとなる（非特許文献２）。ＤＭＤ患者において血漿のＦ２−ＩＳｏＰレベルは増加しており（非特許文献１）、また、心不全の患者において尿のＦ２−ＩＳｏＰレベルは増加しており、それらは疾患の重症度と相関している（非特許文献３）。イソプロスタンは、細胞ストレスを告知することに加え、トロンボキサン／プロスタノイド受容体（ＴＰｒ）の活性化を介して損傷の原因になる可能性もあり、ＴＰｒを通したＦ２−ＩｓｏＰシグナリングは、血管新生を減少させ血管収縮（非特許文献４）及び線維症を引き起こす（非特許文献５、６）。
【００１１】
線維症とは、修復又は反応過程における器官又は組織における過剰な線維性結合組織の形成である。これは反応性、良性、又は病理学的状態であってもよく、結合組織を沈着させるよう生理学的に作用し、下にある器官又は組織の構造及び機能を消失させ得る。線維症は線維組織の過剰な沈着の病理学的状態及び治癒における結合組織の沈着過程を記述するために使用される。線維組織の形成は正常であり、線維組織は身体の器官や組織の正常な構成物であるが、線維症的状態によって生じる傷跡により下にある器官又は組織の構造は消失し得る。
【００１２】
現在まで、線維性疾患を治療又は予防するのに有効な、商業的に利用可能な治療法は存在しない。従来の治療ではよくプレドニゾンなどのコルチコステロイド及び／又は筋力を向上させ特定のタイプの筋ジストロフィーの進行を遅らせる他の薬剤が用いられる。また、筋ジストロフィーが心臓に損傷を与える場合、アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）の阻害剤又はベータ遮断薬等の心臓薬が筋ジストロフィー患者に投与されることもある。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【００１３】
【非特許文献１】Grosso等、Isoprostanes in dystrophinopathy: Evidence of increased oxidative stress. Brain Dev. 2008;30(6):391-5. doi:10.1016/j.braindev.2007.11.005. PubMed PMID: 18180123
【非特許文献２】Montuschi等、Isoprostanes: markers and mediators of oxidative stress. FASEB J. 2004;18(15):1791-800. doi: 10.1096/fj.04-2330rev
【非特許文献３】Cracowski等、Increased formation of F(2)-isoprostanes in patients with severe heart failure. Heart. 2000;84(4):439-40. PubMed PMID:10995421; PMCID: PMC172944614
【非特許文献４】Bauer等、Pathophysiology of isoprostanes in the cardiovascular system: implications of isoprostane-mediated thromboxane A2 receptor activation. Brit J Pharmacol. 2014;171:3115-3115
【非特許文献５】Acquaviva等、Signaling pathways involved in isoprostane-mediated fibrogenic effects in rat hepatic stellate cells. Free Radic Biol Med. 2013;65:201-7, doi:10.1016/j.freeradbiomed.2013.06.023. PubMed PMID: 23792773
【非特許文献６】Comporti等、Isoprostanes and hepatic fibrosis, Mol Aspects Med. 2008;29(1-2):43-9. doi: 10.1016/j.mam.2007.09.011. PubMed PMID: 18061254
【発明の概要】
【００１４】
本発明の目的は、哺乳類、例えばヒトにおいて筋ジストロフィーを治療する新たな方法を提供することである。
【００１５】
上述の目的のために、本発明は、治療有効量のトロンボキサンＡ２受容体拮抗薬を、それを必要とする患者に投与することにより筋ジストロフィーを治療する方法を提供する。
【００１６】
上述の目的のために、一部において本発明は、筋ジストロフィーの治療を必要とする患者において筋ジストロフィーを治療又は改善する方法であって、治療有効量のトロンボキサンＡ２受容体拮抗薬を患者に投与することを含む方法を対象とする。筋ジストロフィーはデュッシェンヌ型ＭＤ（ＤＭＤ）、ベッカー型ＭＤ及び肢帯型ＭＤから成るグループから選択される線維症である。トロンボキサンＡ２受容体拮抗薬は経口投与、鼻腔内投与、直腸投与、膣投与、舌下投与、口腔内投与、非経口投与又は経皮投与されてもよい。いくつかの好ましい実施形態においては、当該方法はさらにトロンボキサンＡ２受容体拮抗薬を患者に慢性投与することを含む。ある実施形態では、トロンボキサンＡ２受容体拮抗薬は治療有効量の［１Ｓ−（１α，２α，３α，４α）］−２−［［３−［４−［（ペンチルアミノ）カルボニル］−２−オキサゾリル］−７−オキサビシクロ［２．２．１］ヘプト−２−イル］メチル］−ベンゼンプロパン酸（イフェトロバン）及びその薬学的に許容可能な塩を含む。ある実施形態では、トロンボキサンＡ２受容体拮抗薬は治療有効量の［１Ｓ−（１α，２α，３α，４α）］−２−［［３−［４−［（ペンチルアミノ）カルボニル］−２−オキサゾリル］−７−オキサビシクロ［２．２．１］ヘプト−２−イル］メチル］−ベンゼンプロパン酸の１ナトリウム塩（イフェトロバンナトリウム）を含む。ある好ましい実施形態では、患者の心機能が維持、又は向上される。本発明のある実施形態は、患者において心筋症を予防するために、及び／又は患者において胃腸障害を予防するために、トロンボキサンＡ２受容体拮抗薬が予防的に投与される方法を対象とする。ある好ましい実施形態では、治療有効量は約５０ｍｇ〜約５００ｍｇである。ある好ましい実施形態では、トロンボキサンＡ２受容体拮抗薬はイフェトロバンであり、治療有効量は１日当たり約１５０ｍｇ〜約３５０ｍｇである。ある実施形態では、イフェトロバンは経口投与される。ある実施形態では、本発明は筋ジストロフィーの治療及び／又は改善をそれを必要とする患者において行う方法であって、治療有効量のトロンボキサンＡ２受容体拮抗薬を、それを必要とする患者に投与して、約０．１ｎｇ／ｍｌ〜約１０，０００ｎｇ／ｍｌの所望のトロンボキサンＡ２受容体拮抗薬の血漿濃度を与えることを含む方法を対象とする。
【００１７】
本発明はまた、本明細書に記載のようにトロンボキサンＡ２受容体拮抗薬を投与することにより、筋ジストロフィーを患うヒト患者に心臓保護効果を与える方法を対象とする。
【００１８】
本発明はさらに、本明細書に記載のようにトロンボキサンＡ２受容体拮抗薬を投与することにより、筋ジストロフィーを患うヒト患者においてストレス負荷に対する適正な心臓の適応を向上させる方法を対象とする。
【００１９】
本発明はさらに、筋ジストロフィーを患うヒト患者において心機能障害及び／又は胃腸障害を治療する方法であって、治療有効量のトロンボキサンＡ２受容体拮抗薬をヒト患者に慢性投与することを含む方法を対象とする。ある好ましい実施形態では、トロンボキサンＡ２受容体拮抗薬は［１Ｓ−（１α，２α，３α，４α）］−２−［［３−［４−［（ペンチルアミノ）カルボニル］−２−オキサゾリル］−７−オキサビシクロ［２．２．１］ヘプト−２−イル］メチル］−ベンゼンプロパン酸（イフェトロバン）及びその薬学的に許容可能な塩であり、最も好ましい実施形態では、トロンボキサンＡ２受容体拮抗薬は［１Ｓ−（１α，２α，３α，４α）］−２−［［３−［４−［（ペンチルアミノ）カルボニル］−２−オキサゾリル］−７−オキサビシクロ［２．２．１］ヘプト−２−イル］メチル］−ベンゼンプロパン酸の１ナトリウム塩（イフェトロバンナトリウム）である。治療有効量は例えば約１００ｍｇ〜約５００ｍｇであっても良い。トロンボキサンＡ２受容体拮抗薬は、例えば１日当たり約５０又は１００ｍｇから約５００ｍｇの量で投与されても良い。ある実施形態では、トロンボキサンＡ２受容体拮抗薬はイフェトロバン又はその薬学的に許容可能な塩であり、１日用量が１日当たり約１５０ｍｇ〜約３５０ｍｇである。ある実施形態では、イフェトロバンは経口投与される。ある実施形態では胃腸障害は平滑筋機能不全である。ある実施形態では、治療有効量のイフェトロバンが患者の心臓の心室機能を向上させる。
【００２０】
本発明はまた、筋ジストロフィーの治療を、それを必要とする哺乳類又はヒトにおいて行うための方法及び組成物に関し、当該方法は治療有効量のトロンボキサンＡ２受容体拮抗薬を、それを必要とする対象又は患者に投与することを含む。好ましくは、当該治療方法は組成物を投与することを含み、治療有効量のトロンボキサンＡ２受容体拮抗薬を、それを必要とする筋ジストロフィー患者に心機能を向上するのに有効な量投与することを含む。さらに、線維症又は硬化症の予防を、そのような治療を必要とする対象又は患者において行う方法であって、トロンボキサンＡ２受容体拮抗薬を含む組成物を、そのような治療がされない場合に起こりうる線維性又は硬化性組織の形成を減少させるのに有効な量で投与することを含む、方法が提供される。
【００２１】
ある実施形態では、線維症は心臓の線維症、腎線維症、肝線維症、肺線維症及び全身性硬化症から成るグループから選択される線維増殖性の疾患と関連する。
【００２２】
以下の図面は本発明の実施形態を説明するものであり、請求項に包含される発明の範囲を限定することを意図するものではない。
【図面の簡単な説明】
【００２３】
【図１Ａ】１０週目にビヒクル処理したＤＫＯ（ダブルノックアウト）マウスの写真である。
【図１Ｂ】１０週目にイフェトロバン処理したＤＫＯマウスの写真である。
【図２】（ビヒクル処理対イフェトロバン処理の）３カ月目のｄＳＧ  ＫＯ  オスにおける血漿ｃＴＮＩを示すグラフである。
【図３】マウスにおける３カ月目のエコーデータを示すグラフである（ＷＴ（野生型）、ｄＳＧ−ビヒクル、及びｄＳＧ−イフェトロバン処理）。
【図４】３カ月目のオスマウスについての心拍出量データを与えるグラフである（ＷＴ、ｄＳＧ  ＫＯ−ビヒクル、及びｄＳＧ  ＫＯ−イフェトロバン処理）。
【図５】６カ月齢オスについての自発的運動データを与えるグラフである（ＷＴ、ｄＳＧ−ビヒクル、及びｄＳＧ−イフェトロバン処理）；。
【図６】６カ月目のオスマウスにおける平均のワイヤーぶら下がり時間を示すグラフである（ＷＴ、ｄＳＧ−ビヒクル、及びｄＳＧ−イフェトロバン処理）。
【図７】６カ月でのワイヤーぶら下がり実験の結果（平均のぶら下がり時間）を示すグラフである（ＷＴ、ｄＳＧ；ビヒクル対イフェトロバン処理；２−ｗａｙ  ＡＮＯＶＡにより遺伝子型についてＰ＝０．００５６）。
【図８】試験されたオスマウスについての６カ月目でのワイヤーぶら下がり時間（最長時間）を示すグラフである（ＷＴ、ｄＳＧ−ビヒクル、ｄＳＧ−イフェトロバン処理）。
【図９】ｄＳＧ  ＫＯオスの心臓組織学を示す心臓組織の断面である（ビヒクル及びイフェトロバン処理）。
【図１０】ｄＳＧ  ＫＯオスの心臓組織学を示す、心臓組織の断面である（マッソントリクロームを使用、２ｘ；ビヒクル及びイフェトロバン処理）
【図１１】ｄＳＧ  ＫＯオスの心臓組織学を示す、心臓組織の断面である（マッソントリクロームを使用、１０ｘ；ビヒクル及びイフェトロバン処理）。
【図１２】ＷＴ及びｄＳＧ  ＫＯオスの骨格筋組織学を示す、心臓組織の断面図である（脛骨筋横断面、マッソントリクロームを使用；ビヒクル及びイフェトロバン処理）。
【図１３】腸組織の断面であり、イフェトロバン処理されたｄＳＧ  ＫＯマウスはビヒクル処理されたｄＳＧ  ＫＯマウスよりも軽い線維症を有することを示す（Ｈ＆Ｅ、１０ｘ）。
【図１４】イフェトロバン又はビヒクルで処理されたｄＳＧ  ＫＯオス及びメスの生存パーセントを示すグラフである。
【図１５】１０週目のＷＴ及びＤＫＯオスにおけるワイヤーぶら下がりを示すグラフである（イフェトロバン処理（「ｉｆｅ」）対ビヒクル）。
【図１６】９−１０週で測定されるＷＴ及びＤＫＯマウスにおける自発的な走行を示すグラフである（ＤＫＯ−ビヒクル及びＤＫＯ−イフェトロバン処理）。
【図１７】すべてのＤＫＯマウスについての生存を示すグラフである（ビヒクル及びイフェトロバン処理）。
【発明を実施するための形態】
【００２４】
上述の目的の通り、治療有効量のトロンボキサンＡ２受容体拮抗薬を、それを必要とする対象又は患者に投与することにより筋ジストロフィーに関連する心筋症を治療することができると考えられる。
【００２５】
「治療有効量」という語句は、任意の治療に適用可能な、妥当な利益／リスク比で所望の局所的又は全身的効果を生じる物質の量を指す。そのような物質の有効量は、治療される対象と病状、対象の体重と年齢、病状の重症度、及び投与方法等によって異なり、当業者によって容易に決定されうる。
【００２６】
ＴＰｒは、血小板、免疫細胞、平滑筋、及び心筋細胞に局在するＧタンパク質共役受容体であり、その活性化は心臓に有害な結果をもたらす。我々は最近、拮抗薬であるイフェトロバンによるＴＰｒの遮断は劇的に右心室の線維症を減少させ、肺動脈高血圧症の圧過負荷モデルにおいて心機能を向上させることを示した（米国特許出願公開第２０１５／０３２８１９０号）。ＴＰｒには、F2-IsoP、トロンボキサンA2、プロスタグランジンH2及び20-HETEを含む複数の内生のリガンドがあるが、オザグレルによるトロンボキサン合成酵素の遮断、又はアスピリンによるプロスタグランジン／トロンボキサン合成の遮断は、我々の圧過負荷モデルにおいて線維症又は心機能に効果がなかった。このため、Ｆ２−ＩｓｏＰはストレスのかかった心臓においてＴＰｒの活性化リガンドとして優れた候補である。右心室に加え、ＴＰｒの活性化はまた、全身性高血圧及びＧｈ−過剰発現のマウスモデルにおいて、左心室肥大及び心不全の一因となる。さらに、ＴＰｒの活性化は細胞内カルシウムの増加、不整脈、及び心室心筋細胞における細胞死を引き起こし、腸において蠕動を減少させる。ＭＤにおけるＴＰｒの役割はまだ知られていないが、これらの作用は当該受容体を、ＤＭＤにおけるいくつかの最も差し迫った問題に影響を与えるよう位置づける。
【００２７】
本出願人は、ＴＰｒの活性が筋ジストロフィーにおける病状の一因となる可能性を探索した。予備調査では、肢帯型筋ジストロフィー（ＬＧＭＤ）の、δ‐サルコグリカンノックアウト（ｄＳＧ  ＫＯ）マウスモデルにおいてＴＰｒ活性の遮断の効果。我々は、飲料水に入れて与えられた拮抗薬イフェトロバンによる治療は、上昇した血漿中の心臓トロポニンＩレベル（臨床的に使用される心外傷のバイオマーカー）を正常化しつつ、心線維症の形成を制限し、心機能の低下を予防することを発見した。左心室心外膜の線維症の抑制は、心線維症が典型的には左心室（ＬＶ）自由壁の心外膜下において始まり、残りのＬＶ自由壁及び中隔を含むよう進行するＤＭＤ患者に対し、特に適用可能であり得る。イフェトロバンによる治療はまたｄＳＧ  ＫＯマウスにおいて生存を著しく向上させ、重症のＤＭＤのモデルであるユートロフィン／ジストロフィンダブルノックアウト（ＤＫＯ）マウスにおいて、イフェトロバンによるＴＰｒ拮抗作用は１０週間の生存を５６％から１００％に向上させた。したがって、ＴＰｒ活性は筋ジストロフィーにおける病状の一因となると考えられる。
【００２８】
本発明によれば、ＴＰｒを通したイソプロスタンシグナリングの増加は、ＤＭＤにおいて心筋症及び平滑筋機能不全の一因となる。このため、（ＤＭＤの前臨床マウスモデルにおいて実証されるように）経口活性なＴＰｒ拮抗薬であるイフェトロバンによる治療は、哺乳類において心臓及び腸の機能を向上させ自然発生的な死亡率を低下させる。また、トロンボキサンＡ２受容体拮抗薬（イフェトロバン）による治療は、心臓の再生能力を増大させることにより心臓保護に寄与する可能性があり、それゆえ心臓の機能向上（例えば向上した心室機能）を提供し得ると考えられる。このように本発明は一部において、ＤＭＤにおける心機能障害及び／又は胃腸障害の治療としてのＴＰｒ拮抗薬の使用を対象とする。本発明はまた、一部において、筋ジストロフィー（ヒト）患者の心臓の再生能力を増大させること及び／又は心臓の機能向上を提供することにより、心臓保護を提供するためのＴＰＲ拮抗薬の使用を対象とする。
【００２９】
本明細書で用いられる「トロンボキサンＡ２受容体拮抗薬」という用語は、標準的なバイオアッセイ又はインビボにおいて又は治療上有効な投与量で使用された場合に、トロンボキサン受容体の発現又は活性を、少なくとも又は少なくとも約３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％阻害する化合物を指す。ある実施形態では、トロンボキサンＡ２受容体拮抗薬はトロンボキサンＡ２の受容体への結合を阻害する。トロンボキサンＡ２受容体拮抗薬は競合的拮抗薬（すなわち受容体に対してアゴニストと競合する拮抗薬）及び非競合的拮抗薬を含む。トロンボキサンＡ２受容体拮抗薬は受容体に対する抗体を含む。抗体はモノクローナルであっても良い。それらはヒト又はヒト化抗体であっても良い。トロンボキサンＡ２受容体拮抗薬はまた、トロンボキサン合成酵素阻害剤、並びにトロンボキサンＡ２受容体拮抗薬活性及びトロンボキサン合成酵素阻害剤活性の両方を有する化合物を含む。
【００３０】
トロンボキサンＡ２受容体拮抗薬
トロンボキサンＡ２受容体拮抗薬の発見及び開発は、約３０年間多くの製薬会社の目標であった（Dogne J-M等、Exp. Opin. Ther. Patents 11: 1663-1675 (2001)）。これらの会社によって同定された、トロンボキサンＡ２合成酵素阻害活性が付随している又は付随していない、個々の化合物には、イフェトロバン（ＢＭＳ）、リドグレル（Ｊａｎｓｓｅｎ）、テルボグレル（ＢＩ）、ＵＫ−１４７５３５（Ｐｆｉｚｅｒ）、ＧＲ３２１９１（Ｇｌａｘｏ）、及びＳ−１８８８６（Ｓｅｒｖｉｅｒ）が含まれる。前臨床薬理により、このクラスの化合物は、トロンボキサン経路の阻害により得られる有効な抗血栓作用を有することが立証された。これらの化合物はまた、血管床内でトロンボキサンＡ２受容体に作用するトロンボキサンＡ２及びその他のプロスタノイドにより誘導される血管収縮を抑制し、このため肝腎症候群及び／又は肝性脳症の予防及び／又は治療における使用に有益であり得る。
【００３１】
本発明における使用に適したトロンボキサンＡ２受容体拮抗薬は、例えば、限定されないが、イフェトロバン (BMS; [1S-(1α,2α,3α,4α)]-2-[[3-[4-[(ペンチルアミノ)カルボニル-l]-2-オキサゾリル]-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプト-2 イル]メチル]ベンゼンプロパン酸)のような小分子、並びに米国特許出願公開第2009/0012115号（その開示は全体的に本明細書に参照により組み込まれる）に記載の他の分子を含んでも良い。
【００３２】
本明細書における使用に適した更なるトロンボキサンＡ２受容体拮抗薬はまた、米国特許第4,839,384号(Ogletree); 5,066,480号(Ogletree等); 5,100,889号(Misra等); 5,312,818号(Rubin等); 5,399,725号(Poss等); 及び6,509,348号(Ogletree) に記載されており、それらの開示は全体的に本明細書に参照により組み込まれる。これらは、限定されないが、米国特許第5,100,889号に開示されている、インターフェニレン  ７−オキサビシクロ‐ヘプチル置換複素環アミドであるプロスタグランジン類似体を含んでもよく、以下を含む：
[1S-(1α, 2 α, 3 α, 4α)]-2-[[3-[4-[[(4-シクロ-ヘキシルブチル)アミノ]カルボニル]-2-オキサゾリル]-7-オキサビシクロ[2.2.1]-ヘプト-2-イル]メチル]ベンゼンプロパン酸 (SQ 33,961)、又はそのエステル若しくは塩; 
[1S-(1α, 2 α, 3 α, 4α)]-2-[[3-[4-[[[(4-クロロ- フェニル)-ブチル]アミノ]カルボニル]-2-オキサゾリル]-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプト-2-イル]メチル]ベンゼンプロパン酸、又はそのエステル若しくは塩; 
[1S-(1α, 2 α, 3 α, 4α)]-3-[[3-[4-[[(4-シクロヘキシルブチル)-アミノ]カルボニル]-2-オキサゾリル]-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプト-2-イル]ベンゼン酢酸、又はそのエステル若しくは塩; 
[1S-(1α, 2 α, 3 α, 4α)]-[2-[[3-[4-[[(4-シクロヘキシル-ブチル)アミノ]カルボニル]-2-オキサゾリル]-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプト-2-イル]メチル]フェノキシ]酢酸、又はそのエステル若しくは塩; 
[1S-(1α, 2α, 3α, 4α]-2-[[3-[4-[[(7,7-ジメ-チルオクチル)-アミノ]カルボニル]-2-オキサゾリル]-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプト-2-イル]-メチル]ベンゼンプロパン酸、又はそのエステル若しくは塩。
【００３３】
１９９２年３月３１日に発行された米国特許第5,100,889号に開示されている、7-オキサビシクロヘプチル置換複素環アミドであるプロスタグランジン類似体、例えば
[1S-[1α, 2α (Z), 3α, 4α)]-6-[3-[4-[[(4-シクロヘキシルブチル)アミノ]-カルボニル]-2-オキサゾリル]-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプト-2-イル]-4-ヘキセン酸、又はそのエステル若しくは塩; 
[1S-[1α, 2α (Z), 3α, 4α)]]-6-[3-[4-[[(4-シクロヘキシル-ブチル)アミノ]カルボニル]-2-チアゾリル]-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプト-2-イル]-4-ヘキセン酸、又はそのエステル若しくは塩; 
[1S-[1α, 2α (Z), 3α, 4α)]]-6-[3-[4-[[(4-シクロヘキシル-ブチル)メチルアミノ]カルボニル]-2-オキサゾリル]-7-オキサビシクロ-[2.2.1]ヘプト-2-イル]-4-ヘキセン酸、又はそのエステル若しくは塩; 
[1S-[1α, 2α (Z), 3α, 4α)]]-6-[3-[4-[(1-ピロリジニル)-カルボニル]-2-オキサゾリル]-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプト-2-イル]-4-ヘキセン酸、又はそのエステル若しくは塩; 
[1S-[1α, 2α (Z), 3α, 4α)]]-6-[3-[4-[(シクロヘキシルアミノ)-カルボニル]-2-オキサゾリル]-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプト-2-イル-4-ヘキセン酸、又はそのエステル若しくは塩; 
[1S-[1α, 2α (Z), 3α, 4α)]]-6-[3-[4-[[(2-シクロヘキシル-エチル)アミノ]カルボニル]-2-オキサゾリル]-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプト-2-イル]-4-ヘキセン酸、又はそのエステル若しくは塩; 
[1S-[1α, 2α (Z), 3α, 4α)]]-6-[3-[4-[[[2-(4-クロロ-フェニル)エチル]アミノ]カルボニル]-2-オキサゾリル]-7-オキサビシクロ-[2.2.1]ヘプト-2-イル]-4-ヘキセン酸、又はそのエステル若しくは塩; 
[1S-[1α, 2α (Z), 3α, 4α)]-6-[3-[4-[[(4-クロロフェニル)-アミノ]カルボニル]-2-オキサゾリル]-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプト-2-イル]-4-ヘキセン酸、又はそのエステル若しくは塩; 
[1S-[1α, 2α (Z), 3α, 4α)]]-6-[3-[4-[[[4-(4-クロロ-フェニル)ブチル]アミノ]カルボニル]-2-オキサゾリル]-7-オキサビシクロ-[2.2.1]ヘプト-2-イル]-4-ヘキセン酸、又はそのエステル若しくは塩; 
[1S-[11α, 2α (Z), 3α, 4α)]]-6-[3-[4.アルファ.-[[-(6-シクロヘキシル-ヘキシル)アミノ]カルボニル]-2-オキサゾリル]-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプト-2-イル]-4-ヘキセン酸、又はそのエステル若しくは塩; 
[1S-[1α, 2α (Z), 3α, 4α)]]-6-[3-[4-[[(6-シクロヘキシル-ヘキシル)アミノ]カルボニル]-2-オキサゾリル]-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプト-2-イル]-4-ヘキセン酸、又はそのエステル若しくは塩; 
[1S-[1α, 2α (Z), 3α, 4α]]-6-[3-[4-[(プロピルアミノ)-カルボニル]-2-オキサゾリル]-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプト-2-イル]-4-ヘキセン酸、又はそのエステル若しくは塩 
[1S-[1α, 2α (Z), 3α, 4α)]]-6-[3-[4-[[(4-ブチルフェニル)-アミノ]カルボニル]-2-オキサゾリル]-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプト-2-イル]-4-ヘキセン酸、又はそのエステル若しくは塩; 
[1S-[1α, 2α (Z), 3α, 4α)]]-6-[3-[4-[(2,3-ジヒドロ-1H-インドール-1-イル)カルボニル]-2-オキサゾリル]-7-オキサビシクロ( 2.2.1]ヘプト-2-イル]-4-ヘキセン酸、又はそのエステル若しくは塩; 
[1S-[1α, 2α (Z), 3α, 4α)]]-6-[3-[4-[[(4-シクロヘキシル-ブチル)アミノ]カルボニル]-2-オキサゾリル]-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプト-2-イル]-N-(フェニルスルホニル)-4-ヘキセンアミド; 
[1S-[11α, 2α (Z), 3α, 4α)]]-6-[3-[4-[[(4-シクロヘキシル-ブチル)アミノ]カルボニル]-2-オキサゾリル]-N-(メチルスルホニル)-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプト-2-イル]-4-ヘキセンアミド; 
[1S-[1α, 2α (Z), 3α, 4α)]]-7-[3-[4-[[(4-シクロヘキシル-ブチル)アミノ]カルボニル]-2-オキサゾリル]-7-オキサビシクロ (2.2.1]ヘプト-2-イル]-5-ヘプテン酸、又はそのエステル若しくは塩; 
[1S-[1α, 2α (Z), 3α, 4α)]]-6-[3-[4-[[(4-シクロヘキシル-ブチル)アミノ]カルボニル]-1H-イミダゾール-2-イル]-7-オキサビシクロ-[2.2.1]ヘプト-2-イル]-4-ヘキセン酸、又はそのエステル若しくは塩; 
[1S-[1α, 2α, 3α, 4α)]-6-[3-[4-[[(7, 7-ジメチルオクチル)-アミノ]カルボニル]-2-オキサゾリル]-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプト-2-イル]-4-ヘキセン酸、又はそのエステル若しくは塩; 
[1S-[1α, 2α(E), 3α, 4α)]]-6-[3-[4-[[(4-シクロヘキシル-ブチル)アミノ]カルボニル]-2-オキサゾリル]-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプト-2-イル]-4-ヘキセン酸; 
[1S-[1α, 2α, 3α, 4α)]-3-[4-[[(4-(シクロヘキシルブチル)-アミノ]カルボニル]-2-オキサゾリル]-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプタン-2-ヘキサン酸、又はそのエステル若しくは塩,
[1S-[1α, 2α(Z), 3α, 4α)]]-6-[3-[4-[[(4-シクロヘキシル- ブチル)アミノ]カルボニル]-2-オキサゾリル]-7-オキサビシクロ-[2.2.1]ヘプト-2-イル]-4-ヘキセン酸、又はそのエステル若しくは塩;
【００３４】
[1S-(1α, 2α(Z), 3α(1E, 3S*, 4R*), 4α)]]-7-[3-(3-ヒドロキシ-4-フェニル-1-ペンテニル)-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプト-2-イル]-5-ヘプテン酸(SQ 29,548)等の、Snitman等の米国特許第4,537,981号（その開示は全体的に本明細書に参照により組み込まれる）に開示されている7-オキサビシクロヘプタン及び7-オキサビシクロヘプテン化合物；[1S-[1α, 2α(Z), 3α, 4α)]]-7-[3-[[2-(フェニルアミノ)カルボニル]-ヒドラジノ]メチル]-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプト-2-イル]-5-ヘプテン酸等の、Nakane等の米国特許第4,416,896号（その開示は全体的に本明細書に参照により組み込まれる）に開示されている7-オキサビシクロヘプタン置換アミノプロスタグランジン類似体；[1S-[1α, 2α(Z), 3α, 4α)]]-7-[3-[[[[(1-オキソヘプチル)アミノ]-アセチル]アミノ]メチル]-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプト-2-イル]-5-ヘプテン酸及び対応するテトラゾール、並びに[1S-[1α, 2α(Z), 3α,4α)]]-7-[3-[[[[(4-シクロヘキシル-1-オキソブチル)-アミノ]アセチル]アミノ]メチル]-7-オキサビシクロ]2.2.1]ヘプト-2-イル]-5-ヘプテン酸等の、Nakane等の米国特許第4,663,336号（その開示は全体的に本明細書に参照により組み込まれる）に開示されている、7-オキサビシクロヘプタン置換ジアミドプロスタグランジン類似体；
【００３５】
米国特許第4,977,174号（その開示は全体的に本明細書に参照により組み込まれる）に開示されている、7-オキサビシクロヘプタンイミダゾールプロスタグランジン類似体：
[1S-[1α, 2α(Z), 3α, 4α)]]-6-[3-[[4-(4-シクロヘキシル-1-ヒドロキシブチル)-1H-イミダゾール-1-イル]メチル]-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプト-2-イル]-4-ヘキセン酸又はそのメチルエステル；
[1S-[1α, 2α(Z), 3α, 4α)]]-6-[3-[[4-(3-シクロヘキシル-プロピル)-1H-イミダゾール-1-イル]メチル]-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプト-2-イル]-4-ヘキセン酸又はそのメチルエステル; 
[1S-[1α., 2α(X(Z), 3α, 4α)]]-6-[3-[[4-(4-シクロヘキシル-1-オキソブチル)-1H-イミダゾール-1-イル]メチル]-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプト-2-イル]-4-ヘキセン酸又はそのメチルエステル; 
[1S-[1α, 2α(Z), 3α, 4α]]-6-[3-(1H-イミダゾール-1-イルメチル)-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプト-2-イル]-4-ヘキセン酸又はそのメチルエステル;又は
[1S-[1α, 2α(Z), 3α, 4α)]]-6-[3-[[4-[[(4-シクロヘキシル-ブチル)アミノ]カルボニル]-1H-イミダゾール-1-イル]メチル-7-オキサビシクロ-[2.2.1]- ヘプト-2-イル]-4-ヘキセン酸又はそのメチルエステル等；
【００３６】
4-[2-(ベンゼンスルファミド)エチル]フェノキシ-酢酸(BM 13,177-Boehringer Mannheim)を含む、Witte等の米国特許第4,258,058号（その開示は全体的に本明細書に参照により組み込まれる）に開示されているフェノキシアルキルカルボン酸、4-[2-(4-クロロベンゼンスルホンアミド)エチル]-フェニル酢酸(BM 13,505, Boehringer Mannheim)を含む、Witte等の米国特許第4,443,477号（その開示は全体的に本明細書に参照により組み込まれる）に開示されているスルホンアミドフェニルカルボン酸、4-(3-((4-クロロフェニル)スルホニル)プロピル)ベンゼン酢酸を含む、米国特許第4,752,616号（その開示は全体的に本明細書に参照により組み込まれる）に開示されているアリールチオアルキルフェニルカルボン酸。
【００３７】
本明細書における使用に適したトロンボキサンＡ２受容体拮抗薬の他の例は、限定されないが、バピプロスト（好ましい例である）、R68,070‐Janssen Research Laboratoriesとも呼ばれる(E)-5-[[[(ピリジニル)]3-(トリフルオロメチル)フェニル]メチレン]アミノ]-オキシ]ペンタン酸、3-[1-(4-クロロフェニルメチル)-5-フルオロ-3-メチルインドール-2-イル]-2,-2-ジメチルプロパン酸[(L-655240 Merck-Frosst) Eur. J. Pharmacol. 135(2):193, Mar. 17, 87]、5(Z)-7-([2,4,5-シス]-4-(2-ヒドロキシフェニル)-2-トリフルオロメチル-1,3-ジオキサン-5-イル)ヘプテン酸(ICI 185282, Brit. J. Pharmacol. 90 (Proc. Suppl):228 P-Abs, March 87)、5(Z)-7-[2,2-ジメチル-4-フェニル-1,3-ジオキサン-シス-5-イル]ヘプテン酸(ICI 159995, Brit. J. Pharmacol. 86 (Proc. Suppl):808 P-Abs., December 85)、N,N'-ビス[7-(3-クロロベンゼンアミノ-スルホニル)-1,2,3,4-テトラヒドロ-イソキノリル]ジスルホニルイミド(SKF 88046, Pharmacologist 25(3):116 Abs., 117 Abs, August 83)、(1.アルファ.(Z)-2.ベータ., 5.アルファ.]-(+)-7-[5-[[(1,1'-ビフェニル)-4-イル]-メトキシ]-2-(4-モルホリニル)-3-オキソシクロペンチル]-4-ヘプテン酸(AH 23848 -Glaxo, Circulation 72(6):1208, December 85、レバロルファンアリルブロミド(CM 32,191 Sanofi, Life Sci. 31 (20-21):2261, Nov. 15, 82)、(Z,2-エンド-3-オキソ)-7-(3-アセチル-2-ビシクロ [2.2.1]ヘプチル-5-ヘプタ-3Z-エン酸、4-フェニル-チオセミカルバゾン(EP092-Univ. Edinburgh, Brit. J. Pharmacol. 84(3):595, March 85); GR 32,191 (バピプロスト)-[1R-[1.アルファ.(Z), 2.ベータ., 3.ベータ., 5.アルファ.]]-(+)-7-[5-([1,1'-ビフェニル]-4-イルメトキシ)-3-ヒドロキシ-2-(1-ピペリジニル)シクロペンチル]-4-ヘプテン酸; ICI 192,605-4(Z)-6-[(2,4,5-シス)2-(2-クロロフェニル)-4-(2-ヒドロキシフェニル)-1,3-ジオキサン-5-イル]ヘキセン酸; BAY u 3405 (ラマトロバン)-3-[[(4-フルオロフェニル)-スルホニル]アミノ]-1,2,3,4-テトラヒドロ-9H-カルバゾール-9-プロパン酸;又はONO 3708-7-[2.アルファ., 4.アルファ.-(ジメチルメタノ)-6.ベータ.-(2-シクロペンチル-2.ベータ.-ヒドロキシアセトアミド)-1.アルファ.-シクロヘキシル]-5(Z)-ヘプテン酸; (.+-.)(5Z)-7-[3-エンド-((フェニルスルホニル)アミノ]-ビシクロ[2.2.1]ヘプト-2-エキソ-イル]-ヘプテン酸(S-1452, Shionogi domitroban, Anboxan(登録商標));(-)6,8-ジフルオロ-9-p-メチルスルホニルベンジル-1,2,3,4-テトラヒドロカルバゾール-1-イル-酢酸(L670596, Merck)及び(3-[l-(4-クロロベンジル)-5-フルオロ-3-メチル-インドール-2-イル]-2,2-ジメチルプロパン酸(L655240, Merck)を含む。
【００３８】
本発明の好ましいトロンボキサンＡ２受容体拮抗薬は、イフェトロバン又は任意のその薬学的に許容可能な塩である。
【００３９】
ある好ましい実施形態では、好ましいトロンボキサンＡ２受容体拮抗薬はイフェトロバンナトリウム（化学的に[1S-(1α,2α,3α,4α)]-2-[[3-[4-[(ペンチルアミノ)カルボニル]-2-オキサゾリル]-7-オキサビシクロ[2.2.1]ヘプト-2-イル]メチル]-ベンゼンプロパン酸の１ナトリウム塩として知られている）である。
【００４０】
治療方法
本発明のある実施形態では、治療有効量のトロンボキサンＡ２受容体拮抗薬を、それを必要とする患者に投与することにより、患者又は患者集団において心筋症を治療及び／又は改善する方法が提供される。
【００４１】
治療有効量のトロンボキサンＡ２受容体拮抗薬の投与は、経口投与、鼻腔内投与、直腸投与、膣投与、舌下投与、口腔内投与、非経口投与又は経皮投与を含むがこれらに限定されない、任意の治療上有用な投与経路により行われても良い。ある好ましい実施形態では、トロンボキサンＡ２受容体拮抗薬は非経口投与される。ある更なる実施形態では、トロンボキサンＡ２受容体拮抗薬は関節内注射により投与される。ある更なる実施形態では、トロンボキサンＡ２受容体拮抗薬は罹患した解剖学的部位に直接投与される。他の実施形態では、トロンボキサンＡ２受容体拮抗薬は肝動脈を通して投与される。
【００４２】
ある好ましい実施形態では、トロンボキサンＡ２受容体拮抗薬の血漿濃度は約0.1 ng/ml〜約10,000 ng/mlの範囲である。好ましくは、トロンボキサンＡ２受容体拮抗薬の血漿濃度は約1 ng/ml〜約1,000 ng/mlである。
【００４３】
トロンボキサンＡ２受容体拮抗薬がイフェトロバンである場合、ある実施形態において筋ジストロフィーにおける心筋症の治療のために望ましい血漿濃度は約10 ng/mL（イフェトロバン遊離酸）より高くなるべきである。トロンボキサンＡ２受容体拮抗薬、例えばイフェトロバン、のいくつかの治療効果は約1 ng/mLより高い濃度で見られうる。
【００４４】
投与量は患者の年齢、体重及び状態、並びに投与経路、剤形、投薬計画及び所望の結果に従って調整すべきである。
【００４５】
筋ジストロフィー患者における心筋症の治療のためにトロンボキサンＡ２受容体拮抗薬の望ましい血漿濃度を得るために、トロンボキサンＡ２受容体拮抗薬の１日用量は、好ましくは約0.1 mg〜約5000 mgの範囲である。より好ましい実施形態では、トロンボキサンＡ２受容体拮抗薬は慢性投与される。１日用量は、一日当たり約1 mg〜約1000 mg; 約10 mg〜約1000 mg; 約50 mg〜約500 mg; 約100 mg〜約500 mg; 約200 mg〜約500 mg; 約300 mg〜約500 mg; 又は約400 mg〜約500 mgの範囲であっても良い。前記哺乳類がヒト患者である、ある好ましい実施形態では、治療有効量は１日当たり約100mg〜約2000mg、又は１日当たり約10mg若しくは約100mg〜約1000mgであり、ある実施形態では、より好ましくは１日当たり約50〜約500mg、又は１日当たり約100mg〜約500ｍｇである。１日用量は、分割された用量で、１回のボーラス若しくは単位用量で、又は同時投与される複数の投薬量で、投与されても良い。これに関して、イフェトロバンは経口投与、鼻腔内投与、直腸投与、膣投与、舌下投与、口腔内投与、非経口投与又は経皮投与されても良い。ある好ましい実施形態では、上述の医薬組成物、治療有効量は１日当たり約10mg〜約1000mgのイフェトロバン（又はその薬学的に許容可能な塩）である。ある好ましい実施形態では治療有効量が１日当たり約100〜約500mgであり、ある実施形態では１日当たり約150mg〜約350mgにより、筋ジストロフィーの治療のために治療上有効な血漿レベルのイフェトロバン遊離酸が生じる。ある好ましい実施形態では、約10mg〜約250mg(イフェトロバン遊離酸の量)のイフェトロバンナトリウムの１日用量により、筋ジストロフィーの治療のために治療上有効な血漿レベルのイフェトロバン遊離酸が生じる。
【００４６】
好ましくは、筋ジストロフィーの治療のためにトロンボキサンＡ２受容体拮抗薬の治療上有効な血漿濃度は約1ng/ml〜約1,000ng/mlの範囲である。
【００４７】
トロンボキサンＡ２受容体拮抗薬がイフェトロバンである場合、Ａ２／プロスタグランジンエンドペルオキシド受容体（ＴＰｒ）活性化の阻害効果、ひいては脳微小血管の活性化の低下を提供するための望ましい血漿濃度は約10ng/mL（イフェトロバン遊離酸）より高いものとすべきである。トロンボキサンＡ２受容体拮抗薬、例えばイフェトロバン、のいくつかの阻害効果は約1ng/mLよりも高い濃度で見られ得る。
【００４８】
投与量は患者の年齢、体重及び状態、並びに投与経路、剤形、投薬計画及び所望の結果に従って慎重に調整しなければならない。
【００４９】
しかしながら、トロンボキサンＡ２受容体拮抗薬の望ましい血漿濃度を得るために、約0.1mg〜約5000mgの範囲の１日用量のトロンボキサンＡ２受容体拮抗薬が投与されなければならない。好ましくは、トロンボキサンＡ２受容体拮抗薬の１日用量は、１日当たり約1 mg〜約1000 mg; 約10 mg〜約1000 mg; 約50 mg〜約500 mg; 約100 mg〜約500 mg; 約200 mg〜約500 mg; 約300 mg〜約500 mg; 又は約400 mg〜約500 mgの範囲である。
【００５０】
ある好ましい実施形態では、約10mg〜約250mg（イフェトロバン遊離酸の量）のイフェトロバンナトリウムの１日用量により、有効な血漿レベルのイフェトロバン遊離酸が生じる。
【００５１】
医薬組成物
本発明のトロンボキサンＡ２受容体拮抗薬は任意の薬学的に有効な経路により投与することができる。例えば、トロンボキサンＡ２受容体拮抗薬は経口投与、鼻腔内投与、直腸投与、膣投与、舌下投与、口腔内投与、非経口投与又は経皮投与することができるような方法で製剤化することができ、したがって、適宜製剤化することができる。
【００５２】
ある実施形態では、トロンボキサンＡ２受容体拮抗薬は薬学的に許容可能な経口剤形で製剤化され得る。経口剤形は、限定されないが、経口固形剤形及び経口液状剤形を含み得る。
【００５３】
経口固形剤形は、限定されないが、錠剤、カプセル、カプレット、粉薬、ペレット、多粒子、ビーズ、球及びこれらの任意の組み合わせを含み得る。これらの経口固形剤形は即放性、制御放出、持続性（徐放性）、放出調節製剤として製剤化され得る。
【００５４】
本発明の経口固形剤形はまた、充填剤、希釈剤、潤沢剤、界面活性剤、滑剤、結合剤、分散剤、懸濁剤、分散剤、増粘剤、皮膜形成剤、造粒助剤、着香料、甘味料、コーティング剤、可溶化剤、及びこれらの組み合わせ等の薬学的に許容可能な賦形剤を含みうる。
【００５５】
所望の放出特性に応じて、本発明の経口固形剤形は適量の制御放出剤、徐放剤、放出調節剤を含みうる。
【００５６】
経口液状剤形は、限定されないが、液剤、乳剤、懸濁液、シロップ剤を含む。これらの経口液状剤形は、液状剤形の調合のために当業者に知られている任意の薬学的に許容可能な賦形剤を用いて製剤化されても良い。例えば水、グリセリン、単シロップ、アルコール、及びこれらの組み合わせである。
【００５７】
本発明のある実施形態では、トロンボキサンＡ２受容体拮抗薬は非経口的に使用するのに適した剤形に製剤化されても良い。例えば、剤形は凍結乾燥粉末、溶液、懸濁液（例えばデポー懸濁液）であっても良い。
【００５８】
他の実施形態では、トロンボキサンＡ２受容体拮抗薬は、局所用の剤形、例えば限定されないが、貼付剤、ゲル剤、ペースト剤、クリーム剤、乳剤、リニメント剤、バルム、ローション、軟膏等に製剤化され得る。
【実施例】
【００５９】
下記の実施例は限定することを目的とせず、本発明の特定の実施形態を表す。
［実施例１］
この実施例では、イフェトロバンナトリウム錠剤を、下記の表１に記載の成分で調合する。
【００６０】
【表１】
2019515013.tif 000003
【００６１】
イフェトロバンナトリウム塩、酸化マグネシウム、マンニトール、微結晶性セルロース、及びクロスポビドンを適切なミキサーを使用して約２〜約１０分間混合した。得られた混合物を＃１２〜＃４０の網目サイズのふるいに通した。その後、ステアリン酸マグネシウム及びコロイド状シリカを加え、約１〜約３分間混合し続けた。
【００６２】
その後、得られた均質の混合物を圧縮し、各々３５ｍｇのイフェトロバンナトリウム塩を含む錠剤とした。
【００６３】
［実施例２］
この実施例では、各々４００ｍｇのイフェトロバンナトリウムを含む１０００個の錠剤を、下記の表２に記載の成分から製造した。
【００６４】
【表２】
2019515013.tif 000004
【００６５】
［実施例３］
イフェトロバンナトリウムの注射可能な溶液を、下記の表３に記載の成分で、静脈内で用いるために調合した。
【表３】
2019515013.tif 000005
【００６６】
イフェトロバンのナトリウム塩、保存料、及び塩化ナトリウムを３リットルの注射用水に溶解し、その後体積を５リットルまでかさ上げする。当該溶液を滅菌フィルターを通して濾過し、事前に滅菌されたバイアルに無菌的に充填し、そしてバイアルを事前に滅菌されたゴム蓋で閉じる。各々のバイアルは、１５０ｍＬの溶液につき７５ｍｇの活性成分の濃度を含む。
【００６７】
［実施例４］
心臓の表現型で選ばれるｄＳＧ  ＫＯマウスはＬＧＭＤのモデルであるが、新生男児（１）約３５００人に１人の割合で起こるＤＭＤはＬＧＭＤよりもはるかに一般的な疾患である。ＤＭＤのｍｄｘマウスモデルは、ＤＭＤ患者に見られる短縮された平均余命、心線維症、及び心筋症を十分に再現しない。ユートロフィン／ジストロフィンＤＫＯモデルは、１０週までに顕著な死亡率を有するが、ＴＰｒ拮抗薬であるイフェトロバンで治療すると、この所定の時点まで１００％が生存する。ＴＰｒ拮抗作用はＤＭＤにおいて自然死を予防し得るが、重度の後湾症及び衰弱のため、ＤＭＤのＤＫＯモデルを用いて多くの有用な心臓データを得ることはできなかった。
【００６８】
実施例４はＷｅｓｔ／Ｃａｒｒｉｅｒ筋ジストロフィー動物モデル（デルタ‐サルコグリカンノックアウトマウス（ｓｇｃｄ−／−））を使用した。ＤＳＧを欠くマウスは心筋症及びＭＤを発症し、最初の３カ月以内に壊死、筋新生（ｍｕｓｃｕｌａｒ  ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ）、炎症、及び線維症などの進行性疾患の徴候を伴う。標的の変異についてホモ接合性であるマウスは生存可能であり、繁殖力があり、大きさが普通である。遺伝子産物（タンパク質）は骨格筋ミクロソーム試料においてまったく免疫検出されない。８週齢で突然死の発生があり、２８週目には５０％の生存率となる。クレアチンキナーゼの血清レベルの上昇は横紋筋変性を示している。骨格筋組織の組織病理により、筋線維の変性及び新生、炎症性浸潤、血管周囲線維症並びに石灰化が明らかとなる。１２週齢で、心筋組織はまた、変性、炎症性浸潤及び血管周囲線維症を示し始める。筋原線維膜は、エバンスブルー色素の筋原線維細胞質への取り込みにより評価される透過性の欠陥を有する。変異マウスの骨格筋は、機械的に誘導される筋線維鞘の損傷に対する感度が上昇する。ジストロフィン欠損マウスは２５％だけ平均余命が減少するという最小限の臨床症状を有し、７５％減少するＤＭＤのヒトとは異なる。これはおそらく、マウスでは代償機構が上方調節されるためである。ジストロフィンの主要な機能は、ＥＣＭを細胞骨格と架橋することにより筋線維鞘を強化することである。ユートロフィン及びａ７ｂ１インテグリンも同一の機能を果たし、ｍｄｘマウスにおいて上方調節されている。これらは筋線維鞘を細胞質のアクチン細胞骨格に結合させるよう機能する。機能異常により膜が不安定となり、［Ｃａ２＋］Ｉが上昇し、ＮＯシグナリングが攪乱される。γ‐及びδ‐ＳＧは、他のＳＧの膜への輸送／保持に必要なコアを形成する。
【００６９】
ＤＳＧ  ＫＯマウス（ｓｇｃｄ−／−）は機能的なデルタ‐サルコグリカンを欠くが、ＭＤの表現型はヒトの疾患よりも軽い。ジストロフィン関連タンパク質であるユートロフィンは、ジストロフィンの欠損を補うことができるため、ユートロフィン及びジストロフィンの欠損（ＤＫＯ）はより重度の表現型をもたらす。ＤＫＯは顕著に小さく、より重度の筋肉疾患（ＭＤのヒトの筋肉疾患と同様又はそれより悪い）を示す。マウスは作出し世話をするのが難しく、大抵早期に死亡する。イフェトロバン治療は離乳後３週目に始められた。
【００７０】
実施例４では、ビヒクル処理したマウスを慎重に世話し、１０週齢に到達させた（例えば、マウスは常にチェックされ、マウスがあまり動く必要のない状態で栄養を与えるために、ケージでマウスがうずくまっている場所のすぐ隣に砕いた餌と水を入れた低い皿を置いた）。
【００７１】
図１は、イフェトロバン処理されたＤＫＯマウスと比較されるビヒクル処理されたＤＫＯマウスの写真である。図１Ａは、ビヒクル処理されたＤＫＯマウスの１０週目の写真である。図１Ｂは、イフェトロバン処理されたＤＫＯマウスの１０週目の写真である。ワイヤーの周囲に尾を巻きつける能力は筋肉の機能に依存する。ＤＫＯマウスがワイヤーぶら下がり（ｗｉｒｅ  ｈａｎｇ）において評価するのが実際に困難な理由は、ＤＫＯマウスが重度の脊柱側弯症を有し、その後肢がその前肢に非常に近いため、苦痛にもかかわらず、後肢を上げて四肢でつかむことは困難でないためである。
【００７２】
図２は、３カ月目のｄＳＧ  ＫＯオスにおける、血漿ｃＴＮＩを示す。「ｃＴＮＩ」という用語は、血漿心臓トロポニンＩ（ｐｌａｓｍａ  ｃａｒｄｉａｃ  ｔｒｏｐｏｎｉｎ  Ｉ）を意味する。「ＫＯ」という用語はノックアウトを意味する。「ｄＳＧ」という用語はデルタサルコグリカンを意味する。「ＷＴ」という用語は野生型を意味する。血漿心臓トロポニンＩ（ｃＴＮＩ）は心筋組織に非常に特異的かつ高感度であり、迅速に測定することができる。これは心臓の損傷についての信頼できるバイオマーカーである。図２では、血漿ｃＴＮＩレベルはＷＴマウスよりもｄＳＧ  ＫＯマウスにおいてはるかに高いことを確認することができる。
【００７３】
図３は、３カ月目のエコーデータを与える。それに示される結果により、ｄＳＧ  ＫＯオスは３カ月目に心機能障害を示し、イフェトロバンが心機能障害を防ぐことが実証される。
【００７４】
図４は、３カ月目のオスｄＳＧ  ＫＯマウスについての心拍出量データを与える。図４は、イフェトロバンで処理されたｄＳＧ  ＫＯマウスは、ビヒクルに比べ、改善された心機能障害を有することを示す。心機能はＷＴレベルと同程度に改善した。
【００７５】
図５は、６カ月齢オスについての自発的運動データを与える。運動は、４．５Ｍの処理後１０日間の自発的なホイール走行（当該ホイールは自由に利用することができる）であった。オスは６Ｍで骨格機能の欠損を示し、これはイフェトロバン処理されたＤＳＧ  ＫＯマウスではあまり見られない。遺伝子型に関わらずオスよりも多く走っていたメスでは、相違はみられなかった。
【００７６】
図６は６カ月のｄＳＧマウスにおけるワイヤーぶら下がりを示す。イフェトロバンで処理されたｄＳＧマウスにおいて、ワイヤーぶら下がり時間が改善されていることは明らかである。ｏｎｅ−ｗａｙ  ＡＮＯＶＡ後、ダネットの多重比較事後検定によりＷＴと比べ＊ｐ＜０．０５。Ｖｅｈ及びｉｆｅ−処理されたグループは互いにＮＳ検定された。丸括弧内のＮ。「ｉｆｅ」はイフェトロバン。
【００７７】
図７は、６カ月でのワイヤーぶら下がり実験の結果を示しており、平均のぶら下がり時間がｄＳＧ及びＷＴマウスについてプロットされている。
【００７８】
図８は、試験されたマウスについてのワイヤーぶら下がり時間を示す。オスマウスはメスに比べ長時間ぶら下がらない。イフェトロバンにより生じる何らかの相違は、あったとしても、測定するのは困難であった。
【００７９】
図９は、ｄＳＧ  ＫＯオスの心臓組織を示す。イフェトロバン処理されたＲＶでは、線維症がより軽いことが分かる。示すのは、肉眼的組織学についての４ｘでのマッソントリクロームである。すべての裂け目／しわ／赤色のホットスポットは、病理ではなくスライスの作成によるものである。一部のＲＶはまた、スライスの影響を受けている可能性がある（矢印）。
【００８０】
図１０は、ｄＳＧ  ＫＯオスの心臓組織を示す（マッソントリクロームを使用、２ｘ）。イフェトロバン処理されたＲＶでは線維症がより軽いことを見ることができる。ＲＶ＝右心室。
【００８１】
図１１は、ｄＳＧ  ＫＯオスの心臓組織を示す（マッソントリクロームを使用、１０ｘ）。ＬＶ＝左心室、ＲＶ＝右心室。イフェトロバン処理されたＫＯマウスでは線維症がより軽いことが分かった。
【００８２】
図１２は、ＷＴ及びｄＳＧ  ＫＯオスの骨格筋組織を示す（脛骨筋横断面、マッソントリクロームを使用）。一部の線維症は筋肉の特定断面によるものである可能性がある。
【００８３】
図１３は、腸組織の横断面であり、イフェトロバンは大腸筋層における腸管平滑筋の損失を予防し得ることを示す。ＤＳＧ  ＫＯマウスは平滑筋を欠損していた（特に縦走平滑筋を欠損していた）が、イフェトロバン処理されたマウスはＷＴ平滑筋と同様の断面を有していた。「Ｈ＆Ｅ」＝ヘマトキシリン及びエオシン。図１３は、イフェトロバン処理されたｄＳＧ  ＫＯマウスはビヒクル処理されたｄＳＧ  ＫＯマウスよりも軽い線維症を有することを示す。
【００８４】
図１４は、イフェトロバン又はビヒクルで処理されたｄＳＧ  ＫＯオス及びメスの生存パーセントを示すグラフである。
【００８５】
図１５は、１０週目のＤＫＯオスにおけるワイヤーぶら下がりを示すグラフである（イフェトロバン（「ｉｆｅ」）処理対ビヒクル）。結果は、イフェトロバン処理されたマウスはビヒクルで処理されたマウスより平均ぶら下がり時間が著しく長かったことを示す。
【００８６】
図１６は、９−１０週で測定される、ＤＫＯマウスにおける自発的な走行を示す。
【００８７】
図１７は、すべてのＤＫＯマウスについての生存を示す。イフェトロバン処理されたマウスは７０日を超えて生存したが、ビヒクル処理されたマウス（オスとメスの両方）はそうではなかった。
【００８８】
前述の明細書において、本発明は、その特定の例示的な実施形態及び実施例に言及しながら説明された。しかしながら、請求項に記載される本発明の広範な意図及び範囲から離れずに、そこに様々な改変及び変更が行われ得ることは明らかであろう。従って明細書及び図面は、限定的な意味ではなく例示的な意味で捉えられるべきである。
【図１Ａ】
2019515013.tif 000006
【図１Ｂ】
2019515013.tif 000007
【図２】
2019515013.tif 000008
【図３】
2019515013.tif 000009
【図４】
2019515013.tif 000010
【図５】
2019515013.tif 000011
【図６】
2019515013.tif 000012
【図７】
2019515013.tif 000013
【図８】
2019515013.tif 000014
【図９】
2019515013.tif 000015
【図１０】
2019515013.tif 000016
【図１１】
2019515013.tif 000017
【図１２】
2019515013.tif 000018
【図１３】
2019515013.tif 000019
【図１４】
2019515013.tif 000020
【図１５】
2019515013.tif 000021
【図１６】
2019515013.tif 000022
【図１７】
2019515013.tif 000023
【国際調査報告】
2019515013.tif 000024