(57)【要約】本発明は、１種以上のプロバイオティック菌株と１種以上の脂質改変活性成分とを含む組成物に関する。該組成物は、コレステロール及び／又は高血圧の管理に使用することができる。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
１種以上のプロバイオティック菌株及び１種以上の脂質改変活性成分を含む、組成物。
【請求項２】
前記１種以上の菌株が乳酸菌株である、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記乳酸菌株が、ラクトバチルス  プランタルム（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｌａｎｔａｒｕｍ）、ラクトバチルス  ラムノサス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｒｈａｍｎｏｓｕｓ）、ラクトバチルス  ロイテリ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｒｅｕｔｅｒｉ）、ラクトバチルス  アシドフィルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ）、ラクトバチルス  パラカゼイ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐａｒａｃａｓｅｉ）、ラクトバチルス  クリスパタス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｒｉｓｐａｔｕｓ）、ラクトバチルス  サリバリウス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓａｌｉｖａｒｉｕｓ）及び／又はラクトバチルス  カゼイ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃａｓｅｉ）の１種以上から選択される株を含む、請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
前記１種以上の菌株がラクトバチルス  プランタルムを含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５】
前記ラクトバチルス  プランタルムがラクトバチルス  プランタルムＥＣＧＣ１３１１０４０２又はその変異株（単数又は複数）を含む、請求項４に記載の組成物。
【請求項６】
前記１種以上の活性成分が、スタチン；スタノール及びステロール；モナコリンＫ；脂肪酸；ナイアシン、カリウム、可溶性繊維；及び／又はプレバイオティクスから選択される１種以上の成分を含む、請求項１〜５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７】
前記スタチンが、フルバスタチン、プラバスタチン、シンバスタチン、アトルバスタチン及び／又はロスバスタチンの１種以上から選択される、請求項６に記載の組成物。
【請求項８】
前記脂肪酸が、アルファ−リノレン酸、オメガ−３多価不飽和脂肪酸及び／又はオメガ−６多価不飽和脂肪酸の１種以上から選択される、請求項６又は７に記載の組成物。
【請求項９】
前記可溶性繊維が、β−グルカン、ペクチン、グルコマンナン、サイリウム及び／又はキトサンの１種以上から選択される、請求項６〜８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１０】
前記プレバイオティクスが、イヌリン、フラクトオリゴ糖（ＦＯＳ）、ガラクトオリゴ糖（ＧＯＳ）、キトオリゴ糖（ＣＯＳ）、キシロオリゴ糖（ＸＯＳ）、ゲンチオオリゴ糖、セロビオース及び／又は大豆オリゴ糖の１種以上から選択される、請求項６〜９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１１】
個体における血中脂質及び／又は高血圧の減少又は調節に使用するための、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１２】
個体における高血中脂質及び／又は高血圧の管理、処置又は防止に使用するための、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１３】
血中脂質が、総コレステロール（ＴＣ：ｔｏｔａｌ  ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ）、低比重リポタンパクコレステロール（ＬＤＬ−Ｃ：ｌｏｗ  ｄｅｎｓｉｔｙ  ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ  ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ）、高比重リポタンパクコレステロール（ＨＤＬ−Ｃ：ｈｉｇｈ  ｄｅｎｓｉｔｙ  ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ  ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ）及び／又はトリグリセリド（ＴＡＧ）の１種以上を含む、請求項１１及び１２に記載の組成物。
【請求項１４】
個体における高コレステロール血症及び／又は高血圧の管理、処置又は防止に使用するための、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１５】
前記ラクトバチルス  プランタルムが、２×１０５〜２×１０１２個の細胞の範囲の１日量で存在する、請求項４〜１０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１６】
前記ラクトバチルス  プランタルムが２×１０８〜２×１０１０個の細胞の範囲の１日量で存在する、請求項１５に記載の組成物。
【請求項１７】
前記ラクトバチルス  プランタルムが、約２．６×１０９個の細胞を供給する活性株約２００ｍｇ〜３００ｍｇの範囲の１日量で存在する、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１８】
前記１種以上の活性成分が、１日量２０〜８０ｍｇの範囲のフルバスタチン、１０〜４０ｍｇの範囲のプラバスチン、１日量１０〜８０ｍｇの範囲のシンバスチン、１日量５〜４０ｍｇの範囲のロスバスチン及び／又は１日量１０〜８０ｍｇの範囲のアトルバスチンを含む、請求項７〜１７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１９】
前記１種以上の活性成分が、１日量最高約２０ｍｇのフルバスタチン、１日量最高約１０ｍｇのプラバスチン、１日量最高約１０ｍｇのシンバスチン、１日量最高５ｍｇのロスバスチン、及び／又は１日量最高１０ｍｇのアトルバスチンを含む、請求項７〜１７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２０】
前記１種以上の活性成分が１日量０．７ｇ〜３ｇの範囲の植物スタノール及びステロールを含む、請求項６〜１９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２１】
前記１種以上の活性成分が１日量最高０．５ｇの植物スタノール及びステロールを含む、請求項６〜１９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２２】
前記１種以上の活性成分が１日量２．５〜１０ｍｇの範囲のモナコリンＫを含む、請求項６〜１７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２３】
前記１種以上の活性成分が１日量最高２．５ｍｇのモナコリンＫを含む、請求項６〜１７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２４】
前記１種以上の活性成分がＡＬＡ０．１〜３．５ｇ、オメガ−３ＰＵＦＡ１〜４ｇ及び／又はオメガ−６ＰＵＦＡ１〜６０ｇの範囲の１日量の脂肪酸を含む、請求項６〜２３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２５】
前記１種以上の活性成分がＡＬＡ最高０．１ｇ、オメガ−３ＰＵＦＡ最高１ｇ及び／又はオメガ−６ＰＵＦＡ最高１ｇの範囲の１日量の脂肪酸を含む、請求項６〜２３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２６】
前記１種以上の活性成分が、１日量２〜１０ｇの範囲のβ−グルカン、１日量２〜９ｇの範囲のペクチン、１日量５〜１５ｇの範囲のサイリウム及び／又は１日量１〜３ｇの範囲のキトサンを含む、請求項９〜２５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２７】
β−グルカンの１日量が最高１０ｇであり、ペクチンが最高１．７５ｇであり、及び／又はキトサンが１〜３ｇの範囲である、請求項９〜２５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２８】
前記１種以上の活性成分が、１日量５〜２０ｇの範囲のイヌリン、１日量５〜１５ｇの範囲のフラクトオリゴ糖（ＦＯＳ）及び／又は１０〜１５ｇの範囲のガラクトオリゴ糖（ＧＯＳ）を含む、請求項１０〜２７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２９】
イヌリンが最高５ｇであり、フラクトオリゴ糖（ＦＯＳ）が最高５ｇであり、及び／又はガラクトオリゴ糖（ＧＯＳ）が最高１０ｇである、請求項１０〜２７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３０】
前記組成物がカプセル化されている、請求項１〜２９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３１】
前記ラクトバチルス  プランタルムが濃縮形態及び／又は凍結乾燥形態である、請求項１〜３０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３２】
前記組成物が、ビタミン、ミネラル、抗酸化剤及びそれらの組合せから選択される１種以上の活性成分を更に含む、請求項１〜３１のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３３】
前記組成物がカプセル剤、錠剤、散剤又は液剤の形である、請求項１〜３２のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３４】
前記組成物が、約２０億〜約６０億個の細胞の範囲のＬ．プランタルム及び１種以上の以下：約２．５ｍｇ〜約１５ｍｇの範囲のモナコリンＫ、約０．５ｍｇ〜１．５ｍｇの範囲のビタミンＢ１、約１０ｍｇ〜２０ｍｇの範囲のビタミンＢ３、約２００ｍｇ〜約６００ｍｇの範囲の植物スタノール、約２００ｍｇ〜３００ｍｇの範囲のオメガ−３脂肪酸ＥＰＡ及びＤＨＡ、約１００ｍｇ〜約２００ｍｇの範囲のカリウム、及び／又は約１０μｇ〜５０μｇの範囲のクロムを含む、請求項１〜５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３５】
前記組成物が、約２５億〜約５０億個の細胞の範囲のＬ．プランタルム及び１種以上の以下：約５ｍｇ〜約１０ｍｇの範囲のモナコリンＫ、ビタミンＢ１約１ｍｇ、ビタミンＢ３約１６ｍｇ、植物スタノール約４００ｍｇ、オメガ−３脂肪酸ＥＰＡ及びＤＨＡ約２５０ｍｇ、カリウム約１５０ｍｇ及び／又はクロム約２０μｇを含む、請求項３４に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、血中脂質レベル（例えば、コレステロール、トリグリセリド）の処置、防止若しくは制御、及び／又は高血圧の管理に使用するための１種以上の活性成分と組み合わせてラクトバチルス  プランタルム（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｌａｎｔａｒｕｍ）を含む組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
循環器疾患（ＣＶＤ）は、世界的に死亡の一主因である。世界保健機構（ＷＨＯ：Ｗｏｒｌｄ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ）の予測によれば、２０２０年までに、すべての人の死の最高４０％がＣＶＤに関連することになる。高血中脂質レベル、特に、高い低比重リポタンパクコレステロール（ＬＤＬ−Ｃ：ｌｏｗ  ｄｅｎｓｉｔｙ  ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ  ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ）レベルは、ＣＶＤ及び冠動脈疾患（ＣＡＤ：ｃｏｒｏｎａｒｙ  ａｒｔｅｒｙ  ｄｉｓｅａｓｅ）の公知の危険因子である。高トリグリセリドレベルが、動脈硬化又は動脈壁肥厚（アテローム性動脈硬化症）の一因になり、心血管リスクの重要なバイオマーカーを提示し得るという証拠が増えている。
【０００３】
血中脂質レベル、特にＬＤＬ−Ｃ及びトリグリセリドレベルの低下及び制御のための療法が集中的に研究されている。
【０００４】
高血圧は、他の方法では高い血圧としても知られ、主要な健康問題であり、ＣＶＤの危険因子である。世界保健機構（ＷＨＯ）の予測によれば、２０２０年までに、すべての人の死の最高４０％がＣＶＤに関連することになる。高コレステロールは、血管中のコレステロールプラークの蓄積による高血圧と関連づけられることが多い。
【０００５】
現在使用されるコレステロール低下療法の大部分は、スタチンである。しかし、スタチンは、コンプライアンスに影響するある範囲の不耐性及び安全性への懸念があり、高価である。植物ステロール及びスタノールは、スタチンの可能な代替として探索されている。しかし、多量のこれらの物質、茶匙３〜４杯を、７〜１０．５％のＬＤＬ−Ｃの平均減少を達成するのに摂取する必要がある。植物ステロール及びスタノールは高価であるので、これは問題である。
【０００６】
血中コレステロールプロファイルを改善するためのプロバイオティクスなどの非薬物療法への関心が高まっている。多数の研究は、脂質、グルコース及びエネルギー代謝の調節におけるシグナル伝達分子としての胆汁酸の役割を確認している。胆汁酸は、食餌性脂肪及びコレステロールを循環中へ輸送する。胆汁酸調節因子の調節によるコレステロールレベル、したがって潜在的に高血圧の低下における微生物株の使用は公知である。胆汁酸塩加水分解酵素（ＢＳＨ：Ｂｉｌｅ  Ｓａｌｔ  Ｈｙｄｒｏｌａｓｅ）活性プロバイオティクスは、腔内胆汁酸脱抱合を増加させ、ヒト及び動物試験における循環脱抱合胆汁酸塩のレベルを増加させることが示された。胆汁酸は腸内で脱抱合されるので、食餌性及び胆汁性コレステロール吸収が減少し、胆汁の再循環が変わり、血中（ＬＤＬ−Ｃ）レベルの制御が改善する。多数の研究は、市販ヨーグルトにおけるプロバイオティックの脂質低下効果を試験し、示している。
【０００７】
複数の研究が血圧低下におけるプロバイオティクスの役割を示唆している。９件の試験のメタアナリシス（非特許文献１）によれば、プロバイオティック消費は、対照群と比較して、収縮期ＢＰを−３．５６ｍｍＨｇ（９５％信頼区間、−６．４６〜−０．６６）及び拡張期ＢＰを−２．３８ｍｍＨｇ（９５％信頼区間、−２．３８〜−０．９３）変化させたことが示された。
【０００８】
特許文献１においては、ラクトバチルス  プランタルム株が上部消化管生存特性の高いＢＳＨ活性プロバイオティクスとして示唆されている。
【０００９】
本発明の一目的は、高コレステロール治療の改善若しくは代替及び／又は高血圧の管理を提供し、そうすることで心血管リスクを低下させることである。個体におけるコレステロール及び／又はトリグリセリドレベル及び／又は高血圧を処置、防止又は他の方法で制御する方法を提供することも一目的である。本発明の更なる一目的は、コレステロール及び／若しくはトリグリセリドレベルを低下させるのに使用することができるプロバイオティック組成物を提供すること、並びに／又は個体における正しい血圧の維持を助けることである。プロバイオティック組成物が、既存の機能的又は薬学的活性成分と一緒に使用することができ、相乗的に作用し、又は異なるが相補的な作用様式を有することができれば、それも有益であろう。プロバイオティック組成物が、利用される既存のコレステロール及び／若しくはトリグリセリド減少成分の用量を減少させ、又は全体的な健康上の利点を高め、心血管リスクを低下させるのに使用することができれば、望ましいであろう。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１０】
【特許文献１】国際公開第２０１５／０６７９４７号
【非特許文献】
【００１１】
【非特許文献１】Ｋｈａｌｅｓｉら、（２０１４）、Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ、６４、（４）、８９７〜９０３
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明の第１の態様によれば、１種以上のプロバイオティック菌株と１種以上の脂質改変活性成分とを含む組成物が提供される。組成物の成分は、有利なことに、相乗的に働いて、心血管リスクを低下させる。
【００１３】
１種以上の菌株は、好ましくは、血中脂質レベルを変化させることが示された株（単数又は複数）を含む。１種以上の菌株は、機構的に異なる様式で作用して、血中脂質レベルを１種以上の脂質改変活性成分のそれに変更することが望ましい。好ましくは、１種以上の菌株は乳酸菌株を含む。乳酸菌株は、ラクトバチルス  プランタルム、ラクトバチルス  ラムノサス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｒｈａｍｎｏｓｕｓ）、ラクトバチルス  ロイテリ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｒｅｕｔｅｒｉ）、ラクトバチルス  アシドフィルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ）、ラクトバチルス  パラカゼイ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐａｒａｃａｓｅｉ）、ラクトバチルス  クリスパタス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｒｉｓｐａｔｕｓ）、ラクトバチルス  サリバリウス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓａｌｉｖａｒｉｕｓ）及び／又はラクトバチルス  カゼイ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃａｓｅｉ）の１種以上から選択される株を含むことができる。好ましくは、１種以上の菌株はラクトバチルス  プランタルムを含む。より好ましくは、ラクトバチルス  プランタルムは、ラクトバチルス  プランタルムＥＣＧＣ１３１１０４０２又はその変異株（単数又は複数）を含む。
【００１４】
１種以上の活性成分は、スタチン；スタノール及びステロール；モナコリンＫ；脂肪酸；ナイアシン、カリウム、可溶性繊維；及び／又はプレバイオティクスから選択される１種以上の成分を含むことができる。
【００１５】
スタチンは、フルバスタチン、プラバスタチン、シンバスタチン、アトルバスタチン及び／又はロスバスタチンの１種以上から選択することができる。本発明は、開発され得る将来のスタチンに適合することも予想される。
【００１６】
脂肪酸は、アルファ−リノレン酸（ＡＬＡ：ａｌｐｈａ−ｌｉｎｏｌｅｎｉｃ  ａｃｉｄ）、オメガ−３多価不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡ）及び／又はオメガ−６多価不飽和脂肪酸の１種以上から選択することができる。
【００１７】
可溶性繊維は、β−グルカン、ペクチン及び／又はキトサンの１種以上から選択することができる。
【００１８】
プレバイオティクスは、イヌリン、フラクトオリゴ糖（ＦＯＳ）、ガラクトオリゴ糖（ＧＯＳ）、キトオリゴ糖（ＣＯＳ）、キシロオリゴ糖（ＸＯＳ）、ゲンチオオリゴ糖、セロビオース及び／又は大豆オリゴ糖の１種以上から選択することができる。
【００１９】
組成物は、個体における血中脂質及び／又は高血圧の低下又は調節における使用のためであり得る。その代わりに、又はそれに加えて、組成物は、個体における高血中脂質及び／又は高血圧の管理、処置又は防止における使用のためであり得る。血中脂質は、総コレステロール（ＴＣ：ｔｏｔａｌ  ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ）、低比重リポタンパクコレステロール（ＬＤＬ−Ｃ）、高比重リポタンパクコレステロール（ＨＤＬ−Ｃ：ｈｉｇｈ  ｄｅｎｓｉｔｙ  ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ  ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ）及び／又はトリグリセリド（ＴＡＧ）の１種以上を含むことができる。その代わりに、又はそれに加えて、組成物は、個体における高コレステロール血症及び／又は高血圧の管理、処置又は防止における使用のためであり得る。その代わりに、又はそれに加えて、組成物は、高コレステロール血症及び／又は高血圧の処置又は防止のための医薬品の製造における使用のためであり得る。好ましくは、組成物は、１つを超える血中脂質パラメータに作用し、高コレステロール血症及び／又は高血圧を処置又は防止する。例えば、組成物は、高血圧の低下に加えて、低比重リポタンパクコレステロール（ＬＤＬ−Ｃ）を減少させるように作用することができる。こうした組成物は、低比重リポタンパクコレステロール（ＬＤＬ−Ｃ）を減少させるためのモナコリンＫ、及び高血圧を処置するためのラクトバチルス  プランタルムＥＣＧＣ１３１１０４０２を含むことができる。別の例として、組成物は、高血圧の処置に加えて低比重リポタンパクコレステロール（ＬＤＬ−Ｃ）及びトリグリセリドの減少などの複数の血中脂質パラメータに作用することができる。こうした組成物は、低比重リポタンパクコレステロール（ＬＤＬ−Ｃ）を減少させるためのモナコリンＫ、トリグリセリドを減少させるためのイヌリン、及び高血圧を低下させるためのラクトバチルス  プランタルムＥＣＧＣ１３１１０４０２を含むことができる。このようにして複数の標的に取り組む際に、本発明の組成物の成分は、機構的観点から異なって作用するが、単一の成分が単独で投与された場合よりも全体の心血管リスクを低下させる併用効果を有する。
【００２０】
本発明の一関連態様においては、高コレステロール血症及び／又は高血圧の処置又は防止の方法における、ラクトバチルス  プランタルムＥＣＧＣ１３１１０４０２又はその変異株（単数又は複数）と１種以上のコレステロール改変活性成分とを含む組成物が提供される。
【００２１】
本発明の別の関連態様においては、高コレステロール血症及び／又は高血圧の管理、処置又は防止のための栄養補助食品又は食品成分の製造における使用のための、ラクトバチルス  プランタルムＥＣＧＣ１３１１０４０２又はその変異株（単数又は複数）と１種以上のコレステロール改変活性成分とを含む組成物が提供される。
【００２２】
好ましくは、ラクトバチルス  プランタルムＥＣＧＣ１３１１０４０２は、１回当たり１０５ｃｆｕ〜１０１２ｃｆｕの範囲の量で個体に投与される。より好ましくは、ラクトバチルス  プランタルムＥＣＧＣ１３１１０４０２は、１回当たり１０８ｃｆｕ〜１０１０ｃｆｕの範囲の量とすることができる。けれども、個体の状態に応じて異なる投与量を投与できることを理解されたい。更に最も好ましくは、ラクトバチルス  プランタルムは、１回当たり約１．８×１０９ｃｆｕを供給する活性株約５０ｍｇ〜約１５０ｍｇの範囲の量である。最も好ましくは、ラクトバチルス  プランタルムは、１回当たり約１．８×１０９ｃｆｕを供給する活性株約１２０ｍｇの量である。用量は毎日１回又は２回投与されることが予想される。
【００２３】
組成物は、２×１０５〜２×１０１２個の細胞の範囲の用量でラクトバチルス  プランタルムＥＣＧＣ１３１１０４０２を供給することができる。より好ましくは、ラクトバチルス  プランタルムは２×１０８〜２×１０１０個の細胞の範囲の用量で存在する。更により好ましくは、ラクトバチルス  プランタルムは、約２．６×１０９個の細胞を供給する活性株約１００〜約３００ｍｇの範囲の用量で存在する。最も好ましくは、ラクトバチルス  プランタルムは、１回当たり約１．８×１０９個の細胞を供給する活性株約１２０ｍｇの範囲の用量で存在する。用量は、毎日１回又は２回投与することができる。
【００２４】
組成物は、ラクトバチルス  プランタルムＥＣＧＣ１３１１０４０２を２×１０５〜２×１０１２個の細胞の範囲の１日量で供給することができる。より好ましくは、ラクトバチルス  プランタルムは２×１０８〜２×１０１０個の細胞の範囲の１日量で存在する。更により好ましくは、ラクトバチルス  プランタルムは、約２．６×１０９個の細胞を供給する活性株約１００〜約３００ｍｇの範囲の１日量で存在する。最も好ましくは、ラクトバチルス  プランタルムは、約１．８×１０９個の細胞を供給する活性株約１２０ｍｇの範囲の１日量で存在する。
【００２５】
１種以上の活性成分は、約２０ｍｇ〜約８０ｍｇの範囲の１日量のフルバスタチン、約１０ｍｇ〜約４０ｍｇの範囲のプラバスチン、約１０ｍｇ〜約８０ｍｇの範囲の１日量のシンバスチン、約５ｍｇ〜約４０ｍｇの範囲の１日量のロスバスチン、及び／又は約１０ｍｇ〜約８０ｍｇの範囲の１日量のアトルバスチンを含むことができる。
【００２６】
低強度（２０〜３０％のＬＤＬ−Ｃの減少）の作用が望ましい場合、組成物は、約２０ｍｇ〜約４０ｍｇの範囲の１日量のフルバスタチン、約１０ｍｇ〜約４０ｍｇの範囲の１日量のプラバスタチン、又は約１０ｍｇの１日量のシンバスタチンを含むことができる。
【００２７】
中強度（３１〜４０％のＬＤＬ−Ｃの減少）の作用が望ましい場合、組成物は、約１０ｍｇの１日量のアトルバスタチン、約８０ｍｇの１日量のフルバスタチン、約５ｍｇの１日量のロスバスタチン、又は約２０〜約４０ｍｇの範囲の１日量のシンバスタチンを含むことができる。
【００２８】
高強度（４０％を超えるＬＤＬ−Ｃの減少）の作用が望ましい場合、組成物は、約２０〜約８０ｍｇの範囲の１日量のアトルバスタチン、約１０〜約４０ｍｇの範囲の１日量のロスバスタチン、又は約８０ｍｇの１日量のシンバスタチンを含むことができる。
【００２９】
本発明の利点の一つは、ラクトバチルス  プランタルムＥＣＧＣ１３１１０４０２の供給によって、同等の及び／又は相乗的な血中脂質低下効果を供給しながら、使用されるスタチンなどのコレステロール改変活性成分のより低い用量が可能になることである。したがって、１種以上の活性成分は、１日量最高約２０ｍｇのフルバスタチン、１日量最高約１０ｍｇのプラバスチン、１日量最高約１０ｍｇのシンバスチン、１日量最高約５ｍｇのロスバスチン、及び／又は１日量最高約１０ｍｇのアトルバスチンを含むことができる。より好ましくは、スタチンはより低用量で使用され、したがって、１種以上の活性成分は、１日量最高約１８ｍｇのフルバスタチン、１日量最高約８ｍｇのプラバスチン、１日量最高約８ｍｇのシンバスチン、１日量最高約３ｍｇのロスバスチン、及び／又は１日量最高約８ｍｇのアトルバスチンを含むことができる。
【００３０】
１種以上の活性成分は、１日量約０．７ｇ〜約３ｇの範囲の植物スタノール及びステロールを含むことができる。より好ましくは、１種以上の活性成分は、１日量約０．７ｇ〜約２．５ｇの範囲の植物スタノール及びステロールを含むことができる。更により好ましくは、スタノール及びステロールはより低用量で使用され、したがって、１種以上の活性成分は、１日量最高約０．７ｇ、より好ましくは最高約０．６ｇ、更により好ましくは最高約０．５ｇの植物スタノール及びステロールを含むことができる。
【００３１】
１種以上の活性成分は、１日量約２．５ｍｇ〜約１５ｍｇ又は〜約１０ｍｇの範囲のモナコリンＫを含む。より好ましくは、モナコリンＫはより低用量で使用され、したがって、１種以上の活性成分は、１日量最高約２．５ｍｇ、より好ましくは最高約２．３ｍｇ、更により好ましくは最高約２ｍｇのモナコリンＫを含むことができる。
【００３２】
１種以上の活性成分は、１日量約０．１ｇ〜約３．５ｇの範囲のＡＬＡを含む脂肪酸を含むことができる。好ましくは、１種以上の活性成分は、より少ない範囲の用量で使用され、したがって１日量約０．１ｇ〜約２ｇの範囲のＡＬＡを含むことができる。最も好ましくは、１種以上の活性成分は、１日量約０．１ｇ〜約１ｇの範囲のＡＬＡを含む脂肪酸を含む。あるいはまた、１種以上の活性成分は、１日量最高約３．５ｇのＡＬＡを含む脂肪酸を含むことができる。より好ましくは、１種以上の活性成分は、１日量最高約０．１ｇのＡＬＡを含む脂肪酸を含むことができる。最も好ましくは、１種以上の活性成分は、１日量最高約０．０５ｇのＡＬＡを含む脂肪酸を含むことができる。
【００３３】
１種以上の活性成分は、１日量約０．５ｇ〜約４ｇの範囲のオメガ−３ＰＵＦＡを含む脂肪酸を含むことができる。好ましくは、１種以上の活性成分は、より少ない範囲の用量で使用され、したがって、１日量約１ｇ〜約４ｇの範囲のオメガ−３ＰＵＦＡを含むことができる。最も好ましくは、１種以上の活性成分は、１日量約１ｇ〜約２ｇの範囲のオメガ−３ＰＵＦＡを含む脂肪酸を含む。あるいはまた、１種以上の活性成分は、１日量最高約４ｇのオメガ−３ＰＵＦＡを含む脂肪酸を含むことができる。より好ましくは、１種以上の活性成分は、１日量最高約３ｇのオメガ−３ＰＵＦＡを含む脂肪酸を含むことができる。更により好ましくは、１種以上の活性成分は、１日量最高約１ｇのオメガ−３ＰＵＦＡを含む脂肪酸を含むことができる。より好ましくは、１種以上の活性成分は、１日量最高約０．５ｇ又は約０．２５ｇのオメガ−３ＰＵＦＡを含む脂肪酸を含むことができる。
【００３４】
１種以上の活性成分は、１日量約１ｇ〜約６０ｇの範囲のオメガ−６ＰＵＦＡを含む脂肪酸を含むことができる。好ましくは、１種以上の活性成分は、より少ない範囲の用量で使用され、したがって、１日量約１ｇ〜約３０ｇの範囲のオメガ−６ＰＵＦＡを含むことができる。最も好ましくは、１種以上の活性成分は、１日量約１ｇ〜約１０ｇの範囲のオメガ−６ＰＵＦＡを含む脂肪酸を含む。あるいはまた、１種以上の活性成分は、１日量最高約６０ｇのオメガ−６ＰＵＦＡを含む脂肪酸を含むことができる。より好ましくは、１種以上の活性成分は、１日量最高約１０ｇのオメガ−６ＰＵＦＡを含む脂肪酸を含むことができる。更により好ましくは、１種以上の活性成分は、１日量最高約１ｇのオメガ−６ＰＵＦＡを含む脂肪酸を含むことができる。最も好ましくは、１種以上の活性成分は、１日量最高約０．５ｇのオメガ−６ＰＵＦＡを含む脂肪酸を含むことができる。
【００３５】
１種以上の活性成分は、１日量約２ｇ〜約１０ｇの範囲のβ−グルカンを含むことができる。好ましくは、１種以上の活性成分は、１日量約２ｇ〜約６ｇの範囲のβ−グルカンを含む。より好ましくは、１種以上の活性成分は、１日量約２ｇ〜約４ｇの範囲のβ−グルカンを含む。更により好ましくは、１種以上の活性成分は、１日量最高約３ｇのβ−グルカンを含む。あるいはまた、１種以上の活性成分は、１日量最高約１０ｇのβ−グルカンを含むことができる。好ましくは、１種以上の活性成分は、１日量最高約８ｇのβ−グルカンを含むことができる。より好ましくは、１種以上の活性成分は、１日量最高約７ｇのβ−グルカンを含むことができる。
【００３６】
１種以上の活性成分は、１日量約１ｇ〜約１０ｇの範囲のペクチンを含むことができる。好ましくは、１種以上の活性成分は、１日量約１ｇ〜約６ｇの範囲のペクチンを含む。より好ましくは、１種以上の活性成分は、１日量約１ｇ〜約４ｇの範囲のペクチンを含む。最も好ましくは、１種以上の活性成分は、１日量約１ｇ〜約３ｇの範囲のペクチンを含む。あるいはまた、１種以上の活性成分は、１日量最高約１０ｇのペクチンを含むことができる。好ましくは、１種以上の活性成分は、１日量最高約９ｇのペクチンを含む。より好ましくは、１種以上の活性成分は、１日量最高約２ｇのペクチンを含む。最も好ましくは、１種以上の活性成分は、１日量最高約１．７５ｇのペクチンを含む。
【００３７】
１種以上の活性成分は、１日量約５ｇ〜約１５ｇの範囲のサイリウムを含むことができる。好ましくは、１種以上の活性成分は、１日量約５ｇ〜約１０ｇの範囲のサイリウムを含む。より好ましくは、１種以上の活性成分は、１日量約５ｇ〜約８ｇの範囲のサイリウムを含む。あるいはまた、１種以上の活性成分は、１日量最高約１５ｇのサイリウムを含むことができる。好ましくは、１種以上の活性成分は、１日量最高約１０ｇのサイリウムを含む。より好ましくは、１種以上の活性成分は、１日量最高約７ｇのサイリウムを含む。
【００３８】
１種以上の活性成分は、１日量約１ｇ〜約５ｇの範囲のキトサンを含むことができる。好ましくは、１種以上の活性成分は、１日量約１ｇ〜約３ｇの範囲のキトサンを含む。より好ましくは、１種以上の活性成分は、１日量約２ｇ〜約３ｇの範囲のキトサンを含む。あるいはまた、１種以上の活性成分は、１日量最高約５ｇのキトサンを含むことができる。好ましくは、１種以上の活性成分は、１日量最高約４ｇのキトサンを含む。より好ましくは、１種以上の活性成分は、１日量最高約３ｇのキトサンを含む。
【００３９】
１種以上の活性成分は、１日量約５ｇ〜約２０ｇの範囲のイヌリンを含むことができる。好ましくは、１種以上の活性成分は、１日量約５ｇ〜約２０ｇの範囲のイヌリンを含む。より好ましくは、１種以上の活性成分は、１日量約１０ｇ〜約２０ｇの範囲のイヌリンを含む。あるいはまた、１種以上の活性成分は、１日量最高約２０ｇのイヌリンを含むことができる。好ましくは、１種以上の活性成分は、１日量最高約１５ｇのイヌリンを含む。より好ましくは、１種以上の活性成分は、１日量最高約１０ｇのイヌリンを含む。更により好ましくは、１種以上の活性成分は、１日量最高約５ｇのイヌリンを含む。
【００４０】
１種以上の活性成分は、１日量約５ｇ〜約１５ｇの範囲のフラクトオリゴ糖（ＦＯＳ）を含むことができる。好ましくは、１種以上の活性成分は、１日量約５ｇ〜約１２ｇの範囲のＦＯＳを含む。より好ましくは、１種以上の活性成分は、１日量約５ｇ〜約１０ｇの範囲のＦＯＳを含む。最も好ましくは、１種以上の活性成分は、１日量約５ｇ〜約８ｇの範囲のＦＯＳを含む。あるいはまた、１種以上の活性成分は、１日量最高約１５ｇのＦＯＳを含むことができる。好ましくは、１種以上の活性成分は、１日量最高約１２ｇのＦＯＳを含む。より好ましくは、１種以上の活性成分は、１日量最高約１０ｇのＦＯＳを含む。最も好ましくは、１種以上の活性成分は、１日量最高約８ｇのＦＯＳを含む。最も好ましくは、１種以上の活性成分は、１日量最高約５ｇのＦＯＳを含む。
【００４１】
１種以上の活性成分は、１日量約１０ｇ〜約２０ｇの範囲のガラクトオリゴ糖（ＧＯＳ）を含むことができる。好ましくは、１種以上の活性成分は、１日量約１０ｇ〜約１７ｇの範囲のＧＯＳを含む。より好ましくは、１種以上の活性成分は、１日量約１０ｇ〜約１５ｇの範囲のＧＯＳを含む。最も好ましくは、１種以上の活性成分は、１日量約５ｇ〜約１０ｇの範囲のＧＯＳを含む。あるいはまた、１種以上の活性成分は、１日量最高約２０ｇのＧＯＳを含むことができる。好ましくは、１種以上の活性成分は、１日量最高約１７ｇのＧＯＳを含む。より好ましくは、１種以上の活性成分は、１日量最高約１５ｇのＧＯＳを含む。最も好ましくは、１種以上の活性成分は、１日量最高約１２ｇのＧＯＳを含む。最も好ましくは、１種以上の活性成分は、１日量最高約１０ｇのＧＯＳを含む。
【００４２】
組成物は、剤形の製造及びその摂取後の分解に必要な更なる賦形剤を含むことができる。組成物は、更に崩壊剤、結合剤、潤滑剤及び流動化剤を含むことができる。
【００４３】
組成物は、更に、ポリビニルピロリドン、デンプングリコール酸ナトリウム及びカルボキシメチルセルロースから選択される１種以上の崩壊剤を含むことができる。
【００４４】
組成物は、更に、デンプン、糖類、セルロース、糖アルコール、ゼラチン、ポリビニルピロリドン及びポリエチレングリコールから選択される１種以上の結合剤を含むことができる。好ましくは、組成物は、更にコーンスターチを含む。
【００４５】
組成物は、更に、タルク、炭酸マグネシウム、ヒュームドシリカ及び二酸化ケイ素から選択される１種以上の流動化剤を含むことができる。好ましくは、組成物は、更に二酸化ケイ素を含む。
【００４６】
組成物は、更に、ステアリン酸、植物性ステアリン及びステアリン酸マグネシウムから選択される１種以上の潤滑剤を含むことができる。好ましくは、組成物は、更にステアリン酸マグネシウムを含む。
【００４７】
投与頻度は個体の状態にもよるが、好ましくは、組成物は毎日２回投与される。
【００４８】
組成物は、任意の時刻に投与することができる。しかし、好ましくは、組成物を食事前に投与する。
【００４９】
組成物が任意の容易に投与される剤形、例えば、散剤、錠剤又はカプセル剤の形であり得ることは熟練者には明らかであろう。あるいはまた、組成物は、食料品又は食品添加物の形とすることができる。組成物は、飲料、スプレッド、及び／又は固体若しくは液体食料品と混合することができる散剤の形とすることができる。組成物は、例えば、食品／飲料とブレンドされる、又は食品／飲料と一緒に消費される、栄養補助食品として使用することができる。
【００５０】
組成物は、更に、腸環境を介した１種以上の成分の放出プロファイルを改変する賦形剤又は担体化合物を含むことができる。放出は、コレステロール吸収を減少させるのに最も適切な時間で起こるべきである。典型的に、培養物は、小腸の腸細胞に到達するまで比較的無傷で生存しなければならない。
【００５１】
組成物はカプセル化することができる。多数のカプセル化技術が熟練者には明らかであろう。使用されるカプセル化技術は、消化移行中にラクトバチルス  プランタルムＥＣＧＣ１３１１０４０２及び／又は活性成分の必要な安定性に合わせて調整される。
【００５２】
ラクトバチルス  プランタルムＥＣＧＣ１３１１０４０２成分は、濃縮及び／又は凍結乾燥することができる。有利なことに、ラクトバチルス  プランタルムＥＣＧＣ１３１１０４０２は、パイロット規模製造試験において優れた凍結乾燥生存を示した。
【００５３】
組成物は、更に、ビタミン、ミネラル、植物化学物質、抗酸化剤及びそれらの組合せから選択される１種以上の活性成分を含むことができる。
【００５４】
ビタミンとしては、ビタミンＡ、ビタミンＤ、ビタミンＥ及びビタミン、それらの組合せなどの脂溶性ビタミンが挙げられる。いくつかの実施形態においては、ビタミンとしては、ビタミンＣ（アスコルビン酸）、Ｂビタミン（チアミン、すなわちＢ１、リボフラビン、すなわちＢ２５、ナイアシン、すなわちＢ３、ピリドキシン、すなわちＢ６、葉酸、すなわちＢ９、シアノコバラミン、すなわちＢ１２、パントテン酸、ビオチン）、それらの組合せなどの水溶性ビタミンが挙げられる。
【００５５】
ミネラルとしては、ナトリウム、マグネシウム、クロム、ヨウ素、鉄、マンガン、カルシウム、銅、フッ化物、カリウム、リン、モリブデン、セレン、亜鉛及びそれらの組合せが挙げられるが、それらに限定されない。
【００５６】
抗酸化剤としては、アスコルビン酸、クエン酸、ローズマリー油、ビタミンＡ、ビタミンＥ、ビタミンＥホスファート、トコフェロール、ジ−アルファ−トコフェリルホスファート、トコトリエノール、アルファリポ酸、ジヒドロリポ酸、キサントフィル、ベータクリプトキサンチン、リコペン、ルテイン、ゼアキサンチン、アスタキサンチン、ベータ−カロテン、カロテン、混合カロテノイド、ポリフェノール、フラボノイド及びそれらの組合せが挙げられるが、それらに限定されない。
【００５７】
植物化学物質としては、カロテノイド、葉緑素、クロロフィリン、繊維、フラバノイド、アントシアニン、シアン化、デルフィニジン、マルビジン、ペラルゴニジン、ペオニジン、ペツニジン、フラバノール、カテキン、エピカテキン、エピガロカテキン、没食子酸エピガロカテキン、テアフラビン、テアルビジン、プロアントシアニン、フラボノール、クェルセチン、ケンフェロール、ミリセチン、イソラムネチン、フラボノンヘスペレチン、ナリンゲニン、エリオジクチオール、タンゲレチン、フラボン、アピゲニン、ルテオリン、リグナン、植物エストロゲン、レスベラトロール、イソフラボン、ダイゼイン、ゲニステイン、グリシテイン、大豆イソフラボン及びそれらの組合せが挙げられるが、それらに限定されない。
【００５８】
組成物は、ラクトバチルス  プランタルムＥＣＧＣ１３１１０４０２に対して特に調整されたプレバイオティクスを含むことができる。プレバイオティクスは、ラクトバチルス  プランタルムＥＣＧＣ１３１１０４０２の増殖及び生存可能性を選択的に強めることができる。
【００５９】
組成物は、更に１種以上の充填剤を含むことができる。組成物は、更に、マルトデキストリン、スクロース、又はコレステロール減少能力を有する充填剤から選択される１種以上の充填剤を含むことができる。好ましくは、組成物は、更に、コレステロールを減少させ、したがって組成物中の他の賦形剤のコレステロール減少／制御機能を協同的に高めることができるベータグルカンを含む。
【００６０】
組成物は、１種以上のスタチン、ステロール及び／又はスタノールと一緒に投与することができる。有利なことに、公知のコレステロール低下治療用物質と同時投与すると、コレステロール減少及び／又は制御を強化することができる。植物ステロールは、動脈硬化巣の一部並びに長期植物ステロール及びスタノール使用者の網膜に見られる血清植物ステロールのレベルを増加させることが示された。ＢＳＨ活性プロバイオティクス細菌は、循環コレステロール及び植物ステロールを減少させることが示された。植物ステロールとＢＳＨ活性プロバイオティクスの組合せは、したがって、コレステロールレベルを低下／制御し、植物ステロール血清レベルを低下させ、有利にはステロール生成物の安全性プロファイルを改善することができる。機構的に、ＢＳＨ活性細菌は、スタチンと相補的に働いて、ＬＤＬ受容体活性及び血清コレステロールのクリアランスを増大させるはずである。というのは、それらは、胆汁酸塩脱抱合を増加させ、ステロール吸収を減少させるからである。したがって、ＢＳＨ活性プロバイオティクスとスタチンの同時投与は、血清ＬＤＬ−Ｃのより大きな減少を潜在的にもたらし、スタチン投与量の減少を可能にし、したがってコスト及び副作用を減少させ、患者の服薬遵守を改善することができる。
【００６１】
好ましくは、組成物は４℃以下で貯蔵される。細菌増殖は、この温度範囲で安定化され、したがって組成物の安定性を確保する。
【００６２】
組成物は、更に、ラクトバチルス  プランタルム株の増殖に特異的であるプレバイオティック増殖培地を含むことができる。プレバイオティック増殖培地は、好ましくは、逆酵素反応によってラクトバチルス  プランタルム株によって生成することができる。酵素は、糖分解又はグリコシダーゼ酵素を含むことができる。これらの糖分解又はグリコシダーゼ酵素は、細菌又は真菌から誘導することができる。
【００６３】
プレバイオティック増殖培地は、様々な濃度のガラクトオリゴ糖（ＧＯＳ）、グルコオリゴ糖、又はフルクトオリゴ糖（ＦＯＳ）などのオリゴ糖を含むことができる。オリゴ糖の形態は、菌株のβ−ガラクトシダーゼ、α−ガラクトシダーゼ、α−及びβ−グルコシダーゼ、α−マンノシダーゼ並びにβ−キシロシダーゼ逆反応によって生成される形態とほぼ同じであることが好ましい。
【００６４】
プレバイオティック増殖培地は、安全性、耐性及び品質保持期間に影響せずに、腸内で菌株の最適な増殖及び生存をもたらす量で存在することができる。
【００６５】
組成物がカプセル剤、錠剤、散剤又は液剤の形などの多数の異なる生成物形式及び形態で製造され得ることは熟練者には明らかであろう。上記組成物は、約２０億〜約６０億個の細胞の範囲のＬ．プランタルム及び１種以上の以下：約２．５ｍｇ〜約１５ｍｇの範囲のモナコリンＫ、約０．５ｍｇ〜１．５ｍｇの範囲のビタミンＢ１、約１０ｍｇ〜２０ｍｇの範囲のビタミンＢ３、約２００ｍｇ〜約６００ｍｇの範囲の植物スタノール、約２００ｍｇ〜３００ｍｇの範囲のオメガ−３脂肪酸ＥＰＡ及びＤＨＡ、約１００ｍｇ〜約２００ｍｇの範囲のカリウム、並びに／又は約１０μｇ〜５０μｇの範囲のクロムを含むことができる。
【００６６】
より好ましくは、組成物は、約２５億〜約５０億個の細胞の範囲のＬ．プランタルム及び１種以上の以下：約５ｍｇ〜約１０ｍｇの範囲のモナコリンＫ、ビタミンＢ１約１ｍｇ、ビタミンＢ３約１６ｍｇ、植物スタノール約４００ｍｇ、オメガ−３脂肪酸ＥＰＡ及びＤＨＡ約２５０ｍｇ、カリウム約１５０ｍｇ及び／又はクロム約２０μｇを含む。
【００６７】
本発明の更なる一態様によれば、高コレステロール血症を防止、処置又は調節する方法に使用するためのラクトバチルス  プランタルムＥＣＧＣ１３１１０４０２又はその変異株（単数又は複数）が提供され、ラクトバチルス  プランタルムは１日２回１×１０５〜１０１２個の細胞の範囲の量で投与される。
【００６８】
より好ましくは、ラクトバチルス  プランタルムは、１×１０８〜１×１０１０個の細胞の範囲の量で投与することができる。最も好ましくは、ラクトバチルス  プランタルムは、約１．８×１０９個の細胞の量で投与される。同様に好ましくは、ラクトバチルス  プランタルムは、活性株約１２０ｍｇの量で投与される。
【００６９】
ラクトバチルス  プランタルムは、朝食及び夕食の直前、食中又は食後に投与することができる。好ましくは、ラクトバチルス  プランタルムは、朝食及び夕食の直前に投与される。
【００７０】
ラクトバチルス  プランタルムは、医薬品又は栄養補助食品として投与することができる。
【００７１】
ラクトバチルス  プランタルムは、凍結乾燥形態とすることができる。
【００７２】
ラクトバチルス  プランタルムは、ラクトバチルス  プランタルム株の増殖に特異的であるプレバイオティック増殖培地と組み合わせて投与することができる。プレバイオティック増殖培地は、好ましくは、逆酵素反応によってラクトバチルス  プランタルム株によって生成することができる。プレバイオティック増殖培地は、好ましくはガラクト−オリゴ糖（ＧＯＳ）を含む、オリゴ糖を含むことができる。好ましくは、ラクトバチルス  プランタルムは、投与前に４℃以下で貯蔵される。
【００７３】
本発明の更なる態様によれば、医薬品又は栄養補助食品の調製に使用するための、上記組成物を製造する方法であって、
ａ）培養ブロスを生成するのに十分な条件下でラクトバチルス  プランタルムＥＣＧＣ１３１１０４０２又はその変異株（単数又は複数）を発酵させるステップ、
ｂ）ラクトバチルス  プランタルム細胞の濃縮物を形成するようにラクトバチルス  プランタルムを培養ブロスから濃縮するステップ、
ｃ）混合物を形成するように濃縮物を凍結防止剤にさらすステップ、
ｄ）混合物を凍結乾燥させるステップ、及び
ｅ）組成物を形成するように１種以上のコレステロール改変活性成分を混合物に添加するステップ
を含む、前記方法が提供される。
【００７４】
こうした方法によるラクトバチルス  プランタルム細胞の凍結乾燥の生存率は、７０％を超える。さらに、方法は、有利なことに、最高８×１０１１ｃｆｕ／ｇの量のラクトバチルス  プランタルム細胞を生成することが見出された。
【００７５】
本発明の多数の態様に関して列挙した組成物の多数の特徴が、本方法において投与される組成物と互換性のあることが熟練者には明らかであろう。
【００７６】
以下、本発明の実施形態を単なる例として、以下の図を参照して記述する。
【図面の簡単な説明】
【００７７】
【図１】Ｌａｂ１５８ＦＩＳＨプローブを用いて数え上げられる糞便バッチ培養物（ｎ＝３）における平均ラクトバチルス濃度（±ＳＤ）を示すグラフである。
【図２Ａ】Ｌ．プランタルムＧＯＳが、ラクトバチルス  プランタルムＥＣＧＣ１３１１０４０２の胆汁酸塩加水分解酵素活性を高めることを示すグラフであり、グリコール酸の加水分解レベルを示す。
【図２Ｂ】Ｌ．プランタルムＧＯＳが、ラクトバチルス  プランタルムＥＣＧＣ１３１１０４０２の胆汁酸塩加水分解酵素活性を高めることを示すグラフであり、グリコデオキシコール酸の加水分解レベルを示す。
【図２Ｃ】Ｌ．プランタルムＧＯＳが、ラクトバチルス  プランタルムＥＣＧＣ１３１１０４０２の胆汁酸塩加水分解酵素活性を高めることを示すグラフであり、タウロコール酸の加水分解を示す。
【図２Ｄ】Ｌ．プランタルムＧＯＳが、ラクトバチルス  プランタルムＥＣＧＣ１３１１０４０２の胆汁酸塩加水分解酵素活性を高めることを示すグラフであり、タウロデオキシコール酸の加水分解を示す。
【図３】糞便バッチ培養物（ｎ＝３）における平均コレステロール減少（±ＳＤ）を示すグラフである。ラクトバチルス  プランタルムＥＣＧＣ１３１１０４０２は、炭水化物源の非存在下でもコレステロールを有意に減少させる。効果は、ＰＧＯＳの存在下で有意に増強される。
【実施例】
【００７８】
実施例１−ラクトバチルス  プランタルムＥＣＧＣ１３１１０４０２の投与
ヒトボランティア研究を行い、ラクトバチルス  プランタルムＥＣＧＣ１３１１０４０２を含む組成物を４９名の軽度の高コレステロール血症成人に投与することによって、安全性、コンプライアンス並びにコレステロール減少及び高血圧制御の程度を明らかにした。研究は、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｒｅａｄｉｎｇ、ＵＫのＤｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｆｏｏｄ  ａｎｄ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓによって独立に行われた。研究はヘルシンキ宣言に従って行われ、文書のインフォームドコンセントをすべてのボランティアから得た。研究手順は、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  ＲｅａｄｉｎｇのＲｅｓｅａｒｃｈ  Ｅｔｈｉｃｓ委員会によって承認された。
【００７９】
対象は、男性又は女性、年齢３０〜６５歳であった。対象は、最近６か月以内に既往の心血管イベントがあった場合、甲状腺機能障害に関連した続発性脂質異常症が存在した場合、過去３か月以内に脂質代謝に影響する任意の薬物を使用した場合、アルコール中毒の病歴がある場合、過去６か月以内に抗生物質を摂取した場合、又は最近１か月以内にプレバイオティクス／プロバイオティック製剤を摂取した場合、除外された。
【００８０】
参加基準を満たす人を研究開始前に選抜した。ベースライン血液試料を採取し、そのＢＭＩ及び血圧を測定した。スクリーニング血液試料の全血球数（ＦＢＣ：ｆｕｌｌ  ｂｌｏｏｄ  ｃｏｕｎｔ）及び肝機能検査（ＬＦＴ：ｌｉｖｅｒ  ｆｕｎｃｔｉｏｎ  ｔｅｓｔ）を分析して、健康全般を判定した。総コレステロール（ＴＣ）、低比重リポタンパクコレステロール（ＬＤＬ−Ｃ）、高比重リポタンパクコレステロール（ＨＤＬ−Ｃ）、空腹時トリアシルグリセロール（ＴＡＧ）及びビタミンＤも測定した。尿、血液及び糞便を胆汁酸並びにメタゲノム及びメタボロミクス研究のために収集した。
【００８１】
研究は、単一施設、前向き、無作為、二重盲検、プラセボ対照、並行群間試験であった。対象をプラセボ又はラクトバチルス  プランタルムＥＣＧＣ１３１１０４０２での処置の２群に無作為に分けた。プラセボ及び処置群にブリスターパックのＤＲ１カプセル剤を与えた。処置群にカプセル剤１個当たり細胞１．８×１０９個の用量を与える活性ラクトバチルス  プランタルムＥＣＧＣ１３１１０４０２  １２０ｍｇを施与し、それを毎日１回又は２回、朝食時に１回、夕方に１回栄養補助食品として投与した。参加者に試験期間を通してその通常食又は身体活動を変えないように勧告した。前もって検証された５日間の食品日誌（週末２日及び平日３日）によって習慣的な食事を評価した。
【００８２】
活性及びプラセボ処方の処方の詳細をそれぞれ下表１及び２に示す。
【００８３】
【表１】
2019520353.tif 000003
【００８４】
【表２】
2019520353.tif 000004
【００８５】
ボランティアを研究開始の２週間前に前もって選抜し、いかなるプレ／プロバイオティック摂取をも控えるように勧告した。研究は、処置期間（１２週間）と休薬期間（４週間）の２期からなった。研究は、選抜時のベースライン来診、処置期間の中間点及び終点における来診（それぞれ０、６及び１２週）、並びに休薬期間後の第４の来診（１６週）を含んだ。
【００８６】
分析の最初の一組は、ベースラインにおける人口統計及び結果の変数を調べて、２群が確実に調和するようにした。連続変数を独立ｔ検定を使用して分析し、一方カイ二乗検定をカテゴリー変数に対して使用した。
【００８７】
２つの研究群間の研究結果を時点間の変化に関して分析した。ベースライン〜中間点（０〜６週）、中間点〜終点（６〜１２週）、ベースライン〜終点（０〜１２週）及び終点〜休薬（１２〜１６週）の４つの研究期間で結果の変化を調べた。各分析のためのデータを分析における特定の２つの時点に限定した。分析を、共分散分析（ＡＮＣＯＶＡ）を使用して行った。後の時点を結果変数として使用し、前の時点を共変数とみなした。この手法は、試験群及び対照群に対して可変の出発値を考慮するので、群間の経時変化を単に比較するのに数学的に好ましい。分析の最初の組は、すべての研究参加者及び様々な患者亜群を考えた。これらの亜群は、ベースライン総コレステロール（５ｍｍｏｌ／ｌ未満、５〜５．９ｍｍｏｌ／ｌ及び６．０ｍｍｏｌ／ｌ以上）、性別並びに年齢（５０歳未満、５０〜５９歳、６０歳以上）に基づいた。
【００８８】
ボランティアによって報告された安全性、コンプライアンス又は耐性の問題は研究を通してなかった。３名のボランティアが、無関係な疾病の抗生物質処置によって更なる研究参加から除外されたため、研究から離脱した。
【００８９】
ボランティアは、研究期間を通して毎日の胃腸症状の日誌を書き、経験したあらゆる有害作用を報告するように依頼された。腹痛、鼓脹及び膨満のＧＩ症状は、ボランティアによって、なし（０）、軽度（１）、中程度（２）又は重度（３）として記録された。下表３に示したように、ベースライン〜１２週の自己申告の胃腸（ＧＩ）症状の平均スコアは、群間の１日当たりの便通又は便の硬さ（Ｂｒｉｓｔｏｌ便チャート）に有意差を示さなかった。活性群の１名のボランティアが中程度の腹痛、鼓脹及び膨満を報告し、一方プラセボ群においては、２名のボランティアが中程度の膨満を報告した。研究参加者のだれもベースライン〜１２週の処置期間に重度のＧＩ副作用を報告せず、便形態及び頻度の有意差は処置群間で認められなかった。他のすべてのボランティアは、症状がないことを報告した。
【００９０】
【表３】
2019520353.tif 000005
【００９１】
ベースライン特性（総コレステロール、人体測定値、収縮期及び拡張期血圧）をプラセボ（ｎ＝２３）群と活性（ｎ＝２３）群との間で比較し、下表４に示す。結果は、２つの研究群間でそれらの人口統計（年齢、性別）に関しても、ベースラインにおける脂質又は人体測定値のいずれでも、有意差がないことを示唆した。
【００９２】
【表４】
2019520353.tif 000006
【００９３】
独立した統計解析を行って、研究期間に２つの研究群間で変動する脂質測定値の変化の仕方を調べた。時点の４つの組合せ（０〜６週、０〜１２週、６〜１２週、１２〜１６週）の変化を調べた。別段の記載がない限り、ベースライン〜処置の最後（０〜１２週）のデータの分析のみを示す。別の時点間の臨床的又は統計的に有意な変化を強調して示す。
【００９４】
下表５〜７は、ベースライン及び１２週の処置の最後における平均及び標準偏差を示す。表５は、全対象（ｎ＝４６）についてのベースライン〜１２週の脂質測定値の変化を示す。表６は、ＴＣ＜５ｍｍｏｌ／ｌの対象（ｎ＝２３）についてのベースライン〜１２週の脂質測定値の変化を示す。表７は、ＴＣ５〜５．９ｍｍｏｌ／ｌの対象（ｎ＝１７）についてのベースライン〜１２週の脂質測定値の変化を示す。分析は６．０＋ｍｍｏｌ／ｌに対して行われたが、この群は６名の対象（３名の活性、３名のプラセボ）しか含まないので、適切な注意と一緒に統計的有意差のみを報告する。
【００９５】
ＡＮＣＯＶＡ分析からの群の差を、平均差及び対応する信頼区間と一緒に報告する。これらを活性群の結果マイナスプラセボ群の結果としてベースライン値を調節して報告する。結果の有意性を示すＰ値を報告する。
【００９６】
ＴＣ、ＬＤＬ−Ｃ、ＨＤＬ−Ｃ及びＴＡＧ濃度をｍｍｏｌ／ｌ単位で表す。
【００９７】
群を、表５〜７に示すようにベースラインコレステロールレベルに従って、さらに年齢（５０歳未満ｎ＝１６、５０〜５９歳ｎ＝１８、６０歳以上ｎ＝１２）及び性別（女性＝３２、男性ｎ＝１４）に従って層化した。
【００９８】
【表５】
2019520353.tif 000007
【００９９】
【表６】
2019520353.tif 000008
【０１００】
【表７】
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【０１０１】
ベースライン〜１２週の総コレステロール（ＴＣ）は、すべての群においてプラセボ群と比較して減少した（表５〜７）。全対象におけるＴＣレベルのベースライン調節値は、活性群においてプラセボ群と比較して０．１２ｍｍｏｌ／ｌ低く、２．３％の減少であった。ベースラインＴＣ濃度による層化は、より高いＴＣ亜群と中間〜低亜群との間の変化を明らかにした。ＴＣ＜５．０ｍｍｏｌ／ｌ亜群においては、ベースラインと処置の最後との間の変化は、活性群においてプラセボ群と比較して４．２％低かった（０．１９ｍｍｏｌ／ｌの低下）。同様に、ＴＣ５〜５．９ｍｍｏｌ／ｌ群においては、ベースライン調節された処置の最後のＴＣ濃度は、活性群において０．２３ｍｍｏｌ／ｌ低く、４．１７％の減少に相当した。ＴＣ≧６．０ｍｍｏｌ／ｌ（０〜６週間）群においては、２．４４ｍｍｏｌ／ｌのＴＣの統計的に有意な減少が観察され、３６．７％の減少に相当した（Ｐ＝０．０４５）（表５〜７にデータ示さず）。しかし、この群のサイズは極めて小さく（ｎ＝３プラセボ／３活性）、したがって、その統計的有意性にもかかわらず、群の関連性をこの効果に帰すべきではない。ＴＣに対する性別の有意な効果は確認されなかった。大部分の結果は統計的に有意ではなかったが、プラセボと比較した場合に積極的処置群においてはＴＣの減少に対する共通した群の傾向が存在した。結果は、ＴＣの初期レベルが高い患者ほど他よりもＴＣの減少が大きい利点があり得ることも示唆した。
【０１０２】
ＨＤＬ−Ｃは、プラセボ群と活性群との両方でベースラインと１２週との間でわずかに増加した。可変のベースラインを調節すると、全対象及びＴＣ＜５ｍｍｏｌ／ｌ群のＨＤＬ−Ｃ濃度は、活性群においてプラセボと比較した場合に０．０６ｍｍｏｌ／ｌ（４．５％）及び０．０９ｍｍｏｌ／ｌ（７．４％）高かった。この差の大部分は６〜１２週の期間に生じ、統計的有意性に近い差が全対象（ｐ＝０．０６）とＴＣ＜５ｍｍｏｌ／ｌ群（ｐ＝０．０９）との両方で見られた。この期間の全対象及びＴＣ＜５ｍｍｏｌ／ｌ群は、プラセボ群と比較した場合にそれぞれ０．０９ｍｍｏｌ／ｌ（６．５％）及び０．１０ｍｍｏｌ／ｌ（７．８％）のＨＤＬコレステロールレベルの平均増加を示した。
【０１０３】
年齢層化は、プラセボ群と比較した場合にＨＤＬコレステロールの平均増加が０．２３ｍｍｏｌ／ｌ（＋１４．７％）である６０＋群（ｎ＝１２）において統計的に有意な群の差（ｐ＝０．０３）を明らかにした。ベースラインＴＣ濃度及び性別による層化は、ＨＤＬレベルに対して有意な処置効果を示さなかった。
【０１０４】
ＬＤＬ−Ｃコレステロールは、すべての積極的処置群においてベースラインと１２週との間で減少した。この効果はプラセボ群では認められなかった。
【０１０５】
可変のベースラインを調節すると、全対象群のＬＤＬ−Ｃ濃度は、プラセボと比較した場合に平均して０．２４ｍｍｏｌ／ｌ（７．２％）低かった。ＴＣ＜５．０ｍｍｏｌ／ｌ群のＬＤＬ−Ｃ濃度は、活性群においてプラセボ群と比較して０．３９ｍｍｏｌ／ｌ（１３．９％）有意に低かった（Ｐ＝０．０３）。これらの減少には、臨床及び商業的な意義がある。ＴＣ５．０〜５．９ｍｍｏｌ／ｌ群においては、ＬＤＬ−Ｃは平均０．４７ｍｍｏｌ／ｌの減少（１３．１％）を示したが、これは統計的有意性には達しなかった。ＬＤＬ減少効果は、０〜６週と６〜１２週との両方の期間で一貫して生じるように見えた。結果は、ＬＤＬコレステロールの初期レベルが高い患者ほど、他よりもＬＤＬ−Ｃのより高い減少からの利点を享受し得ることを示唆している。
【０１０６】
性別による層化は、男性と比較して女性ボランティアにおいてより明白なＬＤＬ−Ｃ減少効果を明らかにした（ｐ＝０．０６）。活性群濃度は、女性の場合、プラセボに比べて０．４１ｍｍｏｌ／ｌ（１２．４％）低く、一方活性男性群の場合、プラセボに比べて０．０６ｍｍｏｌ／ｌ（１．８％、Ｐ＝０．０６）の増加が認められた（Ｐ＝０．８３）。
【０１０７】
年齢による層化によれば、ＬＤＬ−Ｃ濃度の減少は年齢が高いほど大きかった。＜５０歳群におけるベースライン調節されたＬＤＬ−Ｃ濃度はわずかな変化しか認められなかった（０．０８ｍｍｏｌ／ｌの増加）。ＬＤＬ−Ｃの減少は、５０〜５９歳群（０．４９ｍｍｏｌ／ｌ）及び≧６０歳群（０．３１ｍｍｏｌ／ｌ）でより明白であり、プラセボに比べて活性群においてそれぞれ１５％及び９．１４％の減少に相当した。
【０１０８】
トリアシルグリセリド濃度に対する有意な効果は、全対象、ＴＣ＝＜５ｍｍｏｌ／ｌ又はＴＣ５〜５．９ｍｍｏｌ／ｌ群において積極的処置又はプラセボ処置のいずれを取り入れても認められなかった。年齢層化は、６０＋群においてプラセボと活性群との間で０．４８ｍｍｏｌ／ｌ（５３．９％）の統計的に有意（ｐ＝０．００２）なトリグリセリド減少を示した。この大きなトリグリセリド減少は、全試験期間を通して一貫し、６〜１２週の期間で０．２６ｍｍｏｌ／ｌ（３２．９％）の統計的に有意な減少（ｐ＝０．０３）及びベースライン〜６週の期間で０．２８ｍｍｏｌ／ｌ（３１．４％、ｐ＝０．０７）の減少であった。
【０１０９】
プラセボ及び積極的処置群における全対象（ｎ＝４６）の人体測定値の変化は、下表８においてベースライン〜１２週後の処置の最後から示される。ベースライン及び１２週後における各測定結果の平均値及び標準偏差を表８に示す。ＡＮＣＯＶＡ分析の群の差も平均差及び対応する信頼区間と一緒に示す。これらを活性群の結果マイナスプラセボ群の結果としてベースライン値を調節して報告する。結果の有意性を示すＰ値を報告する。体重をｋｇ単位、ＢＭＩをｋｇ／ｍ２単位、腹囲をｃｍ単位、収縮期／拡張期血圧をｍｍＨｇ単位で表す。
【０１１０】
【表８】
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【０１１１】
ベースラインと１２週の処置の最後との間で体重、ＢＭＩ及び腹囲に関連する人体測定パラメータに有意な変化は認められなかった。
【０１１２】
ベースラインと１２週との間で収縮期及び拡張期血圧の差の群の証拠が存在した。収縮期血圧の差は、統計的にも臨床的にも有意であった。全対象においては、積極的処置群の収縮期血圧が３．６ｍｍＨｇ低く（−３％）、一方拡張期血圧が１．６ｍｍＨｇ（２．２％）低下した。収縮期血圧の低下の大部分は、６〜１２週の期間に生じた。これは、プラセボ群と比較した場合に活性群における６ｍｍＨｇ（５．１％）の収縮期血圧の統計的に有意な低下を示した（Ｐ＝０．００３）（表４にデータ示さず）。これは、ＡＣＥ阻害薬、ＡＲＢ及びレニン阻害剤によって得られる平均３ｍｍＨｇの脈圧低下、並びに非選択的ベータ遮断薬による２ｍｍＨｇの脈圧低下より高い。この低下はまた、プロバイオティクスによる血圧低下を分析した研究（Ｋｈａｌｅｓｉら、２０１４）で示された対照群と比較した−３．５６ｍｍＨｇ（９５％信頼区間、−６．４６〜−０．６６）による収縮期ＢＰの低下よりも大きい。
【０１１３】
結果の示すところによれば、ラクトバチルス  プランタルムＥＣＧＣ１３１１０４０２は、少なくとも軽度の高コレステロール血症の対象において収縮期血圧、血中ＴＣ及びＬＤＬ−Ｃを低下させる可能性がある。これらの結果は、最適化されていない生成物において、植物ステロール／スタノール１．５〜２．４ｇ／日と同等以上の効力を示唆している。
【０１１４】
活性ラクトバチルス  プランタルムＥＣＧＣ１３１１０４０２及びプラセボカプセル剤は、研究期間を通して４℃で貯蔵された。生成物安定性は、研究のベースライン、６週及び１２週（処置の最後）において調べられ、細菌数に有意な変化は認められなかった。細菌増殖はプラセボカプセル剤において検出されなかった。
【０１１５】
安全性パラメータの分析は、ラクトバチルス  プランタルム（ＥＣＧＣ１３１１０４０２）を消費する有害作用を示さなかった。ラクトバチルス  プランタルムは、米国食品医薬品局（ＦＤＡ：Ｆｏｏｄ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）によって「一般的に安全と認められる（ＧＲＡＳ：Ｇｅｎｅｒａｌｌｙ  Ｒｅｇａｒｄｅｄ  ａｓ  Ｓａｆｅ）」と考えられる広く用いられるプロバイオティックであり、Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｆｏｏｄ  Ｓｔａｎｄａｒｄ  Ａｇｅｎｃｙによって「安全性適格推定（ＱＰＳ：Ｑｕａｌｉｆｉｅｄ  Ｐｒｅｓｕｍｐｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｓａｆｅｔｙ）」に指定されている。これは、ラクトバチルス  プランタルムＥＣＧＣ１３１１０４０２が、高コレステロール血症及び高血圧の処置に関して安全で有効な処置である可能性があることを示唆している。
【０１１６】
ラクトバチルス  プランタルムＥＣＧＣ１３１１０４０２に関する工業的スケールアップ実験も行われた。以下の行為が行われた：ａ）種々の低アレルギー性媒体に対するフラスコの試験、ｂ）１〜５Ｌの発酵、研究のための少量の濃縮及び凍結乾燥、ｃ）種々の凍結防止剤の試験、ｄ）種々の凍結乾燥曲線の試験、ｅ）８０Ｌでの発酵、濃縮及び凍結乾燥。最終ステップは、８０Ｌ発酵槽中での製造であり、それによって（ｉ）細胞数＞８×１０１１ｃｆｕ／ｇ、（ｉｉ）Ａｗ：０．１１、（ｉｉｉ）凍結乾燥され、いかなる賦形剤でも希釈／規格化されなかった、７００ｇの量の濃縮バイオマスが得られた。したがって、この特別な株は、製造の観点から極めて有望に見えた。細胞の生存率は７０％を超えることが見出され、収率は１．２５％と極めて高かった。
【０１１７】
実施例２−ヒト糞便マイクロバイオームに対する精製ラクトバチルス  プランタルムＥＣＧＣ１３１１０４０２ＧＯＳ単独及びラクトバチルス  プランタルムＥＣＧＣ１３１１０４０２との組合せの効果
ヒト糞便マイクロバイオームに対する精製Ｌ．プランタルムＥＣＧＣ１３１１０４０２ＧＯＳ（ＬＰＧＯＳ）単独及びＬ．プランタルムＥＣＧＣ１３１１０４０２（ＬＰ）との組合せの効果を嫌気性、ｐＨ及び温度制御、微小規模バッチ培養においてコレステロールの存在下で評価した。精製、市販ビフィドバクテリウムＧＯＳ（ＢＧＯＳ）を正の対照として使用した。
【０１１８】
並行した微小規模糞便バッチ培養物（１０ｍｌ）試験：糞便、糞便＋ＬＰ、糞便＋ＬＰＧＯＳ、糞便＋ＬＰＧＯＳ＋ＬＰ、糞便＋ＢＧＯＳ、及び糞便＋ＢＧＯＳ＋ＬＰ。
【０１１９】
培養（２４ｈ）を３名の健康な成人の各々からの糞便を用いて３つ組で行った。細菌学（ＦＩＳＨ）、代謝産物、ＢＳＨ活性及びコレステロール低下測定用の試料を得た。
【０１２０】
図１に示すように、ＬＰＧＯＳは、ラクトバチルス個体数、ＢＳＨ及びコレステロール低下活性を有意に選択的に増加させた。ＬＰＧＯＳをＬ．プランタルムＥＣＧＣ１３１１０４０２と組み合わせることによって効果は更に増強された。
【０１２１】
図２Ａ〜２Ｄによれば、実験中、Ｌ．プランタルムＥＣＧＣ１３１１０４０２によるグリコール酸及びタウロコール酸加水分解が糞便に比べて有意に高いことが示される。ＰＧＯＳ及びＢＧＯＳは、糞便に比べて胆汁酸塩加水分解を有意に増加させることが見出された。胆汁酸塩加水分解は、ＰＧＯＳの場合、Ｌ．プランタルムＥＣＧＣ１３１１０４０２と併用するとＢＧＯＳの組合せと比較して有意に高いことが見出された。
【０１２２】
図３に示すように、代謝活性に対する効果はラクトバチルス濃度と相関し、Ｌ．プランタルムＥＣＧＣ１３１１０４０２をＢＧＯＳと併用したときに認められなかった真の相乗効果を示した。ＢＧＯＳは、コレステロール低下に影響しなかった。
【０１２３】
これらの実験においては、Ｌ．プランタルムＥＣＧＣ１３１１０４０２によって発現されるβ−ガラクトシダーゼの使用が、親株と真の相乗作用で働くＧＯＳの合成を実現し、その個体数を増加させるだけでなく、プロバイオティックが選択された生物活性に対しても影響することが見出された。これらの実験の結果によれば、プロバイオティックの存在は、増殖を増加させ、ＢＳＨ活性を高め、コレステロール低下を最高３倍高めることが示される。
【０１２４】
実施例３−活性成分
コレステロールを改変することが示された多数の活性成分をラクトバチルス  プランタルムＥＣＧＣ１３１１０４０２と組み合わせることができる。
【０１２５】
活性成分の組入れ基準
活性成分の数種は、ヒトにおける無作為対照介入試験から主要な終点測定基準である血清ＬＤＬコレステロール（ＬＤＬ−Ｃ）に対する有効性が十分証明された証拠が存在する食品又は食品由来成分であるべきである。エネルギー摂取、グルコースホメオスタシス、脂質異常症、血圧及び血管機能不全などの心血管代謝リスクの副次的終点に対する有益な効果は、１つの利点であろう。化合物は、人の消費に対して安全で容認できなければならず、その作用部位（単数又は複数）（例えば、腸及び／又は末梢組織）への実行可能な送達経路を持たなければならない。主要及び副次的評価項目に対する効果に関して、その作用機構（単数又は複数）は、ラクトバチルス  プランタルムＥＣＧＣ１３１１０４０２のそれを補完すべきである。
【０１２６】
扱われる化合物の大部分は、欧州食品安全機関（Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｆｏｏｄ  Ｓａｆｅｔｙ  Ａｇｅｎｃｙ（ＥＦＳＡ））を介して承認された健康強調表示を有し、少なくとも１つの症例においてそれらの健康強調表示の実証についての基準に従う。ＥＦＳＡ基準は、化合物が、人の健康に利するべきであり、関係の強さ、一貫性、特異性、用量応答及び生物学的妥当性に基づく因果関係の証拠が存在すべきであるということである。強調表示される効果を得るのに必要な化合物の量及びその消費パターンは、均衡食の範囲内で達成可能でなければならず、証拠が得られた特定の研究群は、強調表示が意図される標的集団の代表でなければならない。
【０１２７】
選択された化合物の背景情報
選択された化合物の数種は、非消化性炭水化物（食物繊維）、植物由来ポリフェノール（フィトステロール及びスタノール）並びにポリケチド（モナコリンＫ）に分類することができる。これらの化合物は、ＮＩＣＥガイドラインによって２０〜３０％の「低強度の血清ＬＤＬ−Ｃの減少（ｌｏｗ  ｉｎｔｅｎｓｉｔｙ  ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ  ｉｎ  ｓｅｒｕｍ  ＬＤＬ−Ｃ）」と分類されたものを生じる。それらの作用様式は、モナコリンＫを除いて、主に腸におけるものであり、したがって非全身的である。
【０１２８】
スタチン
スタチンは、酵素ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素を阻害し、個体におけるコレステロールレベルの制御に使用される、脂質低下薬の一クラスである。ＵＫのＮａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｆｏｒ  Ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  Ｃａｒｅ  Ｅｘｃｅｌｌｅｎｃｅ（ＮＩＣＥ）は、スタチン（ｓａｔｉｎ）の投与量に関するガイドラインを提供している。スタチンは、低比重リポタンパクコレステロールの減少の百分率に従って３つの異なる強度カテゴリーに分類される。
・低強度（２０〜３０％のＬＤＬ−Ｃの減少）：
○フルバスタチン毎日２０〜４０ｍｇ
○プラバスタチン毎日１０〜４０ｍｇ
○シンバスタチン毎日１０ｍｇ
・中強度（３１〜４０％のＬＤＬ−Ｃの減少）：
○アトルバスタチン毎日１０ｍｇ
○フルバスタチン毎日８０ｍｇ
○ロスバスタチン毎日５ｍｇ
○シンバスタチン毎日２０〜４０ｍｇ
・高強度（４０％を超えるＬＤＬ−Ｃの減少）：
○アトルバスタチン毎日２０〜８０ｍｇ
○ロスバスタチン毎日１０〜４０ｍｇ
○シンバスタチン毎日８０ｍｇ
【０１２９】
これらの医薬品はすべて、コレステロールを減少させることが臨床的に証明されている。
【０１３０】
植物／フィトスタノール及びステロール
食品成分として、フィトステロールは、植物由来β−シトステロールのエステルであり、一方フィトスタノールは、食品用植物油（例えば、ダイズ）由来のそれぞれの植物ステロールの還元から得られるシトスタノール及びカンペスタノールのエステルである。どちらの化合物も、軽度の高コレステロール血症において血清ＬＤＬ−Ｃを減少させる同等であり、十分に確立された効力を有し、２〜３ｇ／ｄの摂取は、メタアナリシスにおいておよそ数週間〜数か月で７〜１０％の血清ＬＤＬ−Ｃの平均減少を達成する。この効果は、低脂肪製品を含めた食品マトリックスの範囲で実証された。炎症、血液凝固及び一部の癌のマーカーに関して健康上の二次的利点の幾らかの証拠がある。フィトステロールとスタノールの違いは、前者がフィトスタノールよりも有意に多量に吸収される（次いで、腸細胞ＡＢＣＧ５＆Ｇ８において排出輸送体によって再分泌される）ということである（食餌性及び胆汁性コレステロール約５５％に対してそれぞれ０．５〜２％対０．０４〜０．２％）。ＬＤＬ低下効果は、２つの機序、混合ミセルへの取り込み及び可溶化に対する食餌性及び胆汁性コレステロールとの競合、並びにニーマンピックＣ１−Ｌ１輸送体の下方制御によって媒介され、その両方が、腸細胞へのコレステロールの取り込みを減少させる。食餌性（０〜０．５ｇ／ｄ）及び胆汁性コレステロール（約１ｇ／ｄ）の吸収のこの非全身的減少は、主に肝臓へのコレステロール供給を制限し、細胞内遊離コレステロールを激減させる。これは、ＬＤＬ受容体遺伝子発現及び活性の代償的上方制御、並びに細胞中への循環ＬＤＬの除去を促進する。健康強調表示及び勧告−ＥＦＳＡによれば、植物ステロール及びスタノールは、「正常コレステロールレベルの管理を助け」（ＩＤ５４９、５５０、５６７、７１３、１２３４、１２３５、１４６６、１６３４、１９８４、２９０９、３１４０）、これらの化合物と血清ＬＤＬ−Ｃの減少との間の因果関係が確立されていると述べられている。ＵＳＡにおけるＡＴＰ−ＩＩＩガイドラインによれば、フィトステロール及びスタノールは、高コレステロール血症の長期管理に、さらに、ＣＶＤリスクの低下におけるスタチン療法の有用な補助として推奨されるべきであると述べられている。安全性及び耐性−主要な安全性の問題は、脂溶性ビタミンの吸収の減少に関係し、そのためフィトステロール及びスタノールは、妊娠中及び母乳育児中の女性、並びに５歳未満の小児では禁忌である。それらはまた、そのコレステロール排出輸送体（ＡＢＣＧ５／Ｇ８）に変異を有し、したがって吸収された植物ステロールを再分泌することができず、それによって細胞及び動脈壁中でのそれらの蓄積がもたらされる、シトステロール血症の希少遺伝性疾患を有する個体でも禁忌である。この希少状態のない少数の個体もステロールエステルを蓄積し得、したがってＣＶＤリスクが高いことを示唆する限定的な証拠がある。
【０１３１】
ＥＦＳＡによるスタノール及びステロールの総説の結論によれば、用量１．５ｇ〜１．９ｇ及び２．０ｇ〜２．４ｇ／日の遊離（非エステル化）スタノール及びステロールは、血中ＬＤＬコレステロールをそれぞれ平均８．５％及び８．９％減少させた（ＥＦＳＡ  Ｊｏｕｒｎａｌ（２００９）１１７５、１〜９）。しかし、研究（Ｋａｔａｎ  ＭＢら、（２００３）Ｍａｙｏ．Ｃｌｉｎ．Ｐｒｏｃ．７８、９６５〜９７８）は、０．７ｇ〜１．１ｇ／日のより低用量のスタノール及びステロールがＬＤＬコレステロールを６．７％減少させ、２．５ｇ／日を超えるより高用量がＬＤＬコレステロールを１１．３％減少させたことも示した。
【０１３２】
（遊離又はエステル化ステロールとして添加された）フィトステロールは、乳及びヨーグルトなどの適切な食品中に包含されている。植物スタノールエステルも食品（主にマーガリンタイプのスプレッド、しかしまたヨーグルト、マヨネーズ、ゲルカプセル、バター、低脂肪チーズ、乳、ミューズリー、「既製低脂肪食」及びパスタを含む）に添加されている。
【０１３３】
紅麹中のモナコリンＫ
スタチン（ｓｔａｉｎ）は、高コレステロール血症の管理の第一選択薬であるが、安全記録が不十分であり、一般的な副作用（例えば、筋痛）の耐性が低い。その結果、スタチンの長期アドヒアランスは、４０％と低い場合もある。あるいはまた、発酵性紅麹（ＲＹＲ：ｒｅｄ  ｙｅａｓｔ  ｒｉｃｅ）は、比較的安全な栄養補助食品及び生薬として何世紀も使用されてきた伝統的な中華食品であり、その活性成分として、第一世代のスタチンの１つであるロバスタチンと構造が同じであるモナコリンＡを含む。ＲＹＲは、シンバスタチン及びプラバスタチンと同じＬＤＬ−Ｃ低下効力を有することが報告されている。この知見は、これらのスタチンが投与される高用量（２０〜５０ｍｇ／ｄ）のＲＹＲでは再現されなかった一方、１０ｍｇ／ｄにおいては、ＲＹＲは、無作為対照試験においてＬＤＬ−Ｃを１５〜２０％を超えて減少させることが示された。健康強調表示−ＥＦＳＡ（ＩＤ１６４８、１７００）健康強調表示に関連した「コレステロール管理及び心臓の健康（ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ  ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ  ａｎｄ  ｈｅａｒｔ  ｈｅａｌｔｈ）」及び特にＲＹＲ由来のモナコリンＫは、「正常血中コレステロールレベルの管理に寄与する」。さらに、一般集団におけるＬＤＬ−Ｃに対する効果の因果関係が確立された。安全性−５ｍｇ／ｄもの低摂取量のモナコリンＫに対する有害副作用の多数の報告があり、安全警告が発せられた。
【０１３４】
ＥＦＳＡによる紅麹（紅色酵母ベニコウジカビ（Ｍｏｎａｓｃｕｓ  ｐｕｒｐｕｒｅｕｓ）を用いて発酵された米）由来のモナコリンＫの総説の結論によれば、紅麹由来のモナコリンＫの消費と正常血中ＬＤＬコレステロール濃度の維持との間にはある関係がある（Ｔｈｅ  ＥＦＳＡ  Ｊｏｕｒｎａｌ（２０１１）、９、（７）、２３０４）。
【０１３５】
ＥＦＳＡは、正常血中ＬＤＬコレステロール濃度の維持を得るために、発酵紅麹調製物由来のモナコリンＫ１０ｍｇを毎日消費すべきであると考えた。種々の紅麹調製物が栄養補助食品として入手可能である。紅麹由来の調製物は、典型的に、デンプン、タンパク質、脂肪（一不飽和脂肪酸、植物ステロールを含む）、イソフラボン及び他の化合物を含む。使用するベニコウジ菌株及び発酵条件に依存して、生成物は、発酵中に生成される二次代謝産物であるモナコリンと呼ばれるポリケチドを含み得る（Ｌｉｕ，Ｊ．ら、（２００６）Ｃｈｉｎｅｓｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、１、４）。
【０１３６】
ラクトン型（ロバスタチン又はメビノリンとしても知られる）及びヒドロキシ酸型のモナコリンＫは、ベニコウジカビ発酵米中の主要なモナコリンである（総モナコリン含有量の７５〜９０％）（Ｈｅｂｅｒ  Ｄ．ら、（２００４）Ａｍ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ、６９、２３１〜２３６、及びＬｉ、Ｙ．Ｇら、（２００４）Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ａｎａｌｙｓｉｓ、３５、１１０１〜１１１２）。市販紅麹製品は、モナコリンＫ及び全モナコリンの含有量が様々である。１２週間にわたる用量７．５ｍｇ／日は、ＬＤＬ−コレステロール濃度をベースラインから１６％低下させることが示されている。用量２．５ｍｇ／日を８週間使用した別の研究もＬＤＬ−コレステロール濃度低下を示した。
【０１３７】
大豆タンパク質
大豆タンパク質は、大豆イソフラボンを含んでも、含まなくても、コレステロールを減少させることが見出された（Ｈａｒｌａｎｄ，Ｊ．Ｉ．ら、（２０１２）Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｒｅｖｉｅｗｓ、２５、（２）、２４９〜２６６）。大豆タンパク質２５ｇを毎日摂取すると、５．５％のＬＤＬコレステロール減少との等価が提供されることが示された。動物タンパク質食品を大豆タンパク質含有食品１３〜５８ｇ／日に換えるとＬＤＬコレステロールの３．６〜６．０％減少が示された。現在、欧州及びＵＳＡにおける健康強調表示は、血中コレステロール低下に関連する大豆２５ｇの摂取に対して認められている。
【０１３８】
食物繊維
慢性変性疾患（循環器疾患、糖尿病及びある種の癌）のリスクを低下させる食物繊維の有益な効果については強力で明白な証拠があり、これらの疾患のリスクがある集団は、摂取に対する食事勧告に従うことが決定的に必要である（例えば、ＵＫ、現在の国民の平均摂取量約１２ｇ／ｄ成人から３０ｇ／ｄ、ＮＤＮＳ  ２０１４）。食物繊維は、その水溶性、粘度、発酵及び機能的特性によって分類される、全粒粉、果実、野菜及びマメ科植物中の非消化性炭水化物である。下記繊維の選択は、血清ＬＤＬ−Ｃを減少させるその有効性に対する既存及び新規の証拠の重み、並びに容認された健康強調表示の存在に主に基づく。
【０１３９】
可溶性繊維
β−グルカン
β−グルカンは、オートムギ及びオオムギに主に由来するグルコースの線状鎖で構成される可溶性、高粘稠性及び発酵性食物繊維である。２〜１０ｇ／ｄの摂取は、メタアナリシスにおいて血清ＬＤＬ−Ｃの減少に一貫して関連するが、３ｇ／ｄの摂取は、約０．３ｍｍｏｌ／ｌ（約１０％）のＬＤＬ−Ｃの減少を得るための臨界閾値として確認され、それを超えても更なる効果はない。ＬＤＬ−Ｃ低下の効力は、高コレステロール血症の個体において、並びに分子量及び粘度のより高いβ−グルカンの形態において、より大きい。β−グルカンが血清グルコースも減少させ、ＨＤＬ−Ｃを増加させることを示唆する幾らかの証拠がある。ＬＤＬ−Ｃに対するβ−グルカンの作用機序は、主に胆汁酸の結合、排出及びしたがって更なる肝臓分泌を介してである。胆汁酸の腸肝循環のこの妨害は、遊離コレステロールの肝臓プールを激減させ、それは、ＬＤＬ受容体の遺伝子発現及び活性を上方制御する。健康強調表示−ＥＦＳＡ「β−グルカンの規則的消費は、正常血中コレステロール濃度の維持に寄与する」（ＩＤ１２３６、１２９９）；満腹を増大させ、エネルギー摂取の減少をもたらし得る（ＩＤ８５１、８５２）；食後の血糖応答を低下させ得る（ＩＤ８２１、８２４）。前者と後者の強調表示の因果関係が確立されている。米国連邦規制によれば、オートムギ若しくはオオムギ全体又は組合せから３ｇ／ｄ以上は、冠動脈心疾患のリスクを低下させることができると述べられている。
【０１４０】
オートムギ（オートミール３人前、各２８ｇ）からの可溶性繊維３ｇもＬＤＬコレステロールを約０．１３ｍｍｏｌ／ｌ減少させることが見出された（Ｂｒｏｗｎ  Ｌ．ら、（１９９９）Ａｍ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｎｕｔｒ．６９、３０〜４２）。オオムギβ−グルカンは、コレステロール低下特性を有することも示された。サブ解析を参照して、オオムギβ−グルカン３ｇは最小有効量であり、このレベルの含有では、ＬＤＬコレステロールは０．２８ｍｍｏｌ／ｌ減少し、ベースラインと比較して約７％の減少であり、総コレステロールは０．３４ｍｍｏｌ／ｌ減少し、５．７％の減少であることが確認された（ＥＦＳＡ  Ｒｅｐｏｒｔ（２０１０）ＥＦＳＡ  Ｊ、８、１８８５）。欧州において健康強調表示を実施するために、食品は、オートムギ、オートムギのふすま、オオムギ、オオムギぬかから、又は非加工若しくは最小限加工β−グルカンの混合物からのβ−グルカン３ｇ／日が１人前以上の分量に含まれるべきであるという条件を満たさなければならない。このレベルのβ−グルカン摂取を達成するために、必要な典型的な１人前の穀類は約８４ｇ／日である。
【０１４１】
サイリウム
便秘を処置する膨張性下剤として使用されるオオバコ植物の種子の小麦殻由来の可溶性、粘稠性（ゲル形成性）、非発酵性食物繊維。その代謝活性成分がアラビノキシランである。５〜１５ｇ／ｄを摂取すると血清ＬＤＬ−Ｃが５〜１２％低下することが報告された。血清トリグリセリドを減少させ、ＨＤＬ−Ｃを増加させ、特に２型糖尿病における、血糖コントロールを改善することも報告された。その作用機序は、糜粥の粘度を増加させ、消化酵素との接触を減少させ、したがって栄養素の吸収を遅らせる、そのゲル形成性のためであり得る。増加した量の炭水化物を回腸に送達すると、ＧＬＰ−１が増加し得、これは、血糖コントロールを改善し、食欲低下及び満腹増大によってエネルギー摂取を減少させることが知られている。健康強調表示−ＥＦＳＡ「この繊維が健康食及び生活様式に含まれると、血中コレステロールが減少し得る」（ＩＤ４３３０）。米国連邦規制によれば、サイリウム種子殻由来の繊維７ｇ以上／日は、ＣＨＤのリスクを低下させることができると述べられている。安全性−ガス及び胃痙攣を起こす可能性があり、咽頭での膨潤及び窒息を避けるために水と一緒に摂取しなければならない。
【０１４２】
グルコマンナン
食品中に天然に存在しないが、コンニャク植物の塊茎から抽出され、食品中の乳化剤及び増粘剤として使用される、水溶性、高粘稠性タイプの繊維。それが過体重及び肥満の個体において体重減少を促進するのに役立ち、血清ＬＤＬ−Ｃを含めた心血管代謝健康の幾つかのバイオマーカーに対して好都合な効果をもたらし得ることを示唆する証拠がある。その有益な効果の証拠の多くは動物試験（主にラット）に由来する。ヒトにおける無作為対照試験からのデータは、体重減少に対する適度の効果を裏づけているが、長期研究（３か月超）はない。リスクのバイオマーカーに対するその効果は、決定的ではない。健康強調表示−ＥＦＳＡ「エネルギー制限食に関連して体重減少に寄与する」（３ｇ／ｄ）、「生理学的脂質レベル（コレステロール及びトリグリセリド）．．．並びに心臓健康を維持するのに役立つ」。グルコマンナンと体重との間の因果関係には十分な証拠があるが、血中脂質に対する強調表示には十分な証拠がない。後者は、多数の別の強調表示にも当てはまる。安全性−「リスク」群における安全性データはない。グルコマンナンは、正常グルコースホメオスタシスを妨害し得、腸閉塞を含む身体的副作用を有する。
【０１４３】
ペクチン
ペクチンの形の粘稠性繊維も血中コレステロール低下効果が認められている（Ｂｒｏｗｎ（１９９９））。摂取量２．２〜９ｇ／日における総及びＬＤＬコレステロールに対するペクチンの統計的に有意な効果が報告されている。可溶性繊維（ペクチンを含む）の摂取と総及びＬＤＬコレステロール低下との間の有意な用量−応答関係も存在した。ペクチン１ｇ／日は、それぞれ２０．０７（９５％ＣＩ２０．１１７、２０．０２２）及び２０．０５（９５％ＣＩ２０．０８７、２０．０２２）ｍｍｏｌ／ｌの総及びＬＤＬコレステロールの有意な変化を生じると推定された（共にＰ、０．０５）。コレステロール効果に関する強調表示をするために、食品は１人前以上の分量にペクチン少なくとも６ｇ／日を供給すべきであると示唆されている（Ｔｈｅ  ＥＦＳＡ  Ｊｏｕｒｎａｌ（２００６）８、１７４７）。
【０１４４】
キトサン
ＬＤＬコレステロールの維持とその消費との間に関連性が存在する別の多糖成分はキトサンである（Ｔｈｅ  ＥＦＳＡ  Ｊｏｕｒｎａｌ（２０１１）９、２２１４）。ＥＦＳＡは、甲殻類の外骨格及び真菌の細胞壁の一成分であるこのβ１−４結合Ｄ−グルコサミン及びＮ−アセチル−Ｄ−グルコサミンのポリマーに関する証拠を評価した。その示唆するところによれば、証拠は、総コレステロール（５つの研究の組合せ）濃度とＬＤＬコレステロール（２つの研究の組合せ）濃度との両方の減少に対して小さいが統計的に有意な効果を示し、ＨＤＬコレステロールに対する効果は認められなかった。パネルの示唆するところによれば、血中脂質に対する効果を生じるために、キトサン３ｇ／日を消費すべきである。キトサンが強調表示される効果を発揮すると推定される機序は決定的なものには程遠いが、それが負に帯電した脂質に結合し、その胃腸取り込みを減少させることが示唆された。
【０１４５】
木の実
ナッツの摂取と血中脂質に対するその効果との間の関係を調べた研究の系統的な総説においては、３個のアーモンド（摂取量５０〜１００ｇ／日）、２個のアメリカホドイモ（３５〜６８ｇ／日）、１個のペカンナッツ（７２ｇ／日）及び４個のクルミ（４０〜８４ｇ／日）の研究において、対照食を消費した対象と比較して、総コレステロール減少が２〜１６％であり、ＬＤＬコレステロール減少が２〜１９％であることが見出された（Ｍｕｋｕｄｄｅｍ−Ｐｅｔｅｒｓｅｎ  Ｊ．ら、（２００５）Ｊ  Ｎｕｔｒ  １３５、２０８２〜２０８９）。
【０１４６】
摂取量が２５〜１６８ｇ／日であるアーモンドを用いて特異的に行われた５つのＲＣＴ（無作為化対照試験（ｒａｎｄｏｍｉｚｅｄ  ｃｏｎｔｒｏｌ  ｔｒｉａｌｓ））（ｎ１４２）の更なるメタアナリシスでは、総コレステロール減少が０．１８（９５％ＣＩ２０．３４、２０．０２）ｍｍｏｌ／ｌ（Ｐ、０．０５）及びＬＤＬコレステロール減少が０．１５（９５％ＣＩ２０．２９、０．００）ｍｍｏｌ／ｌ（ＮＳ）であることが例証された。クルミを用いて行われた研究が概説され、血中脂質結果の変量効果メタアナリシスが１３のＲＣＴ（ｎ３６５）で行われた。これらのＲＣＴにおいては、クルミは、総エネルギー摂取の１０〜２４％を供給した。クルミを補充した食事によって、総及びＬＤＬコレステロールの有意な減少はそれぞれ０．２７及び０．２４ｍｍｏｌ／ｌであった（両方のＰ、０．００１）。
【０１４７】
２００３年のＵＳＡにおいては、条件付き健康強調表示が認可され、それによれば、ナッツ１．５オンス（４２ｇ）／日を摂取すると心疾患リスクが低下し得ることをデータが示唆していることが確認された。
【０１４８】
フラボノイド
最近、緑茶及びチョコレートなどの食品中に存在するフラボノイドがコレステロールを減少させ得るという幾らかの証拠がある。
【０１４９】
ニンニク
最近、ニンニクがコレステロールを減少させ得るという幾らかの証拠がある。
【０１５０】
プレバイオティクス
イヌリン
３週間の研究によれば、イヌリン２０ｇを毎日摂取すると、８名の健康なボランティア（２３〜３２歳、ＢＭＩ１９〜２５ｋｇｍ−２）において、血清トリグリセリドが有意に（Ｐ＜０．０５）減少したことが見出された。同様に、イヌリン１０ｇを３週間毎日消費した８名の健康なボランティアが関与する研究も同様の結論に達し、トリグリセリドの減少が１６．３％の領域であった（Ｌｅｔｅｘｉｅｒ，Ｄ．ら、（２００３）Ａｍ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｎｕｔｒ．２００３、７７、５５９〜５６４）。動物研究においては、１０匹の雄性ゴールデンシリアンハムスター、平均ＢＷ５８±４ｇに１６％のイヌリンを５週間毎日与えた結果、ＴＣ：２９％減少（Ｐ＜０．０５）及びＴＧ：６３％減少（Ｐ＜０．０５）であった（Ｔｒａｕｔｗｅｉｎ，Ｅ．Ａ．ら、（１９９８）Ｊ．Ｎｕｔｒ．１２８、１９３７〜１９４３）。
【０１５１】
出芽したオオムギ、オリゴデキストラン、グルコン酸、ラクトース、グルタミン、ヘミセルロースリッチ基質、難消化性デンプン及びその誘導体、ラクトフェリン由来ペプチド、並びにＮ−アセチルキトオリゴ糖などの他の消化しにくい、かつ発酵性の化合物も、コレステロール低下効果を有するプレバイオティクスの可能性を有することが確認された。
【０１５２】
フラクトオリゴ糖（ＦＯＳ）
空腹時血清ＴＣ濃度＞６ｍｍｏｌ／Ｌの２０名の糖尿病性及び高コレステロール血症ボランティアに２回の２０日間の処置期間、処置間の休薬期間なしで１５ｇ／日を与えた。ＨＤＬ−Ｃが２．８％増加することが見出された（Ａｌｌｅｓ，Ｍ．Ｓ．ら（１９９９）Ａｍ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｎｕｔｒ．６９、６４〜６９）。
【０１５３】
ガラクトオリゴ糖（ＧＯＳ）
４４名の高齢ボランティア（男性１６名、女性２８名、６４〜７９歳）にＧＯＳ５．５ｇ／日を４週間の休薬期間を挟んで２回の１０週間の処置期間与えた（Ｖｕｌｅｖｉｃ，Ｊ．ら、（２００８）Ａｍ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｎｕｔｒ．８８、１４３８〜１４４６）。脂質プロファイルの有意な改善は確認されなかったが、それでもＧＯＳは正しい濃度ではコレステロール低下効果を与え得ると考えられる。
【０１５４】
キトオリゴ糖（ＣＯＳ）
４９匹の雄性Ａｒｂｏｒ  Ａｃｒｅｓブロイラー（１９６日齢）に１００ｍｇ／ｋｇＢＷを４２日間毎日与えた。この結果、ＴＧ：２６．９％減少（Ｐ＜０．０５）及びＨＤＬ−Ｃ：１２．３％増加（Ｐ＜０．０５）であった（Ｌｉ，Ｘ．Ｊ．ら、（２００７）Ｐｏｕｌｔｒｙ  Ｓｃｉ．８６、１１０７〜１１１４）。
【０１５５】
キシロオリゴ糖（ＸＯＳ）
４０匹の雄性スプレーグドーリーラット（６週齢）にＸＯＳ６０ｇ／ｋｇ食餌を３５日間与えた。この結果、ＴＧ：３３．９％減少（Ｐ＜０．０５）であった（Ｈｓｕ，Ｃ．Ｋ．ら、（２００４）Ｊ．Ｎｕｔｒ．１３４、１５２３〜１５２８）。
【０１５６】
大豆オリゴ糖
５０匹のウィスターラット（４週齢）に高コレステロール血症を誘発させ、４５０ｍｇ／ｋｇＢＷ／日の食餌を４５日間与えた。この結果、ＴＣ：３８．５％減少（Ｐ＜０．０５）ＬＤＬ−Ｃ：４３．０％減少（Ｐ＜０．０５）ＴＧ：４０．８％減少（Ｐ＜０．０５）ＨＤＬ−Ｃ：８１．９％増加（Ｐ＜０．０５）であった（正の対照群との比較）（Ｃｈｅｎ，Ｈ．ら、（２０１０）Ｆｏｏｄ  Ｃｈｅｍ．１１９、１６３３〜１６３６）。
【０１５７】
脂肪酸
アルファ−リノレン酸（ＡＬＡ：Ａｌｐｈａ−ｌｉｎｏｌｅｎｉｃ  ａｃｉｄ）
ＥＦＳＡによるＡＬＡの総説の結論によれば、ＡＬＡの食事摂取量と血中コレステロール濃度低下の間にはある関係があった（Ｔｈｅ  ＥＦＳＡ  Ｊｏｕｒｎａｌ（２００９）、７、（９）、１２５２）。機能的強調表示を有するためには、食品は、提案された表示参照摂取値ＡＬＡ２ｇ／日の少なくとも１５％を含むべきである。
【０１５８】
実際、正常リポタンパク対象における血清脂質に対する種々の植物油の効果を比較した臨床試験によれば、血清コレステロールに対するアルファリノレン酸（ＡＬＡ）の効果は、リノール酸（ＬＡ：ｌｉｎｏｌｅｉｃ  ａｃｉｄ）と同様であることが示されている。
【０１５９】
（ロールパンにおける亜麻仁油及び米糠油の使用による）ＡＬＡ３．４ｇ／日で観察した研究の結果、４、８及び１２週後に収縮期ＢＰが有意に低下した（約−４ｍｍＨｇ）（Ｔａｋｅｕｃｈｉ  Ｈ．ら、（２００７）Ｊ．Ｏｌｅｏ．Ｓｃｉ．５６、３４７〜３６０）。１２週の研究は、脂質異常症の中年男性のＢＰに対するアマニ油（ＡＬＡ８ｇ及びＬＡ２ｇを供給する１５ｍｌ、ｎ＝５９）を毎日補給した効果をサフラワー油（ＡＬＡ０．１ｇ及びＬＡ１１ｇを供給する１５ｍｌ、ｎ＝２８）と比較した。２つの群のバックグラウンド食は、ＡＬＡ（１ｇ／ｄ）及び総ＰＵＦＡ（１２ｇ／ｄ）の量が類似していた。１２週後、対照に比べて介入群における収縮期ＢＰの３％及び拡張期ＢＰの６％の中央値減少が認められた（約−５ｍｍＨｇの中央値減少）（Ｐａｓｃｈｏｓ  Ｇ．Ｋ．ら、（２００７）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｎｕｔｒ．６１、１２０１〜１２０６）。
【０１６０】
ＡＬＡは、亜麻仁約２〜３ｇ中に見出され得、全体又はそのリグニン成分として供給することができる。
【０１６１】
長鎖ｎ−３多価不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡ）
食餌性長鎖ｎ−３ＰＵＦＡ、エイコサペンタエン酸及びドコサヘキサエン酸（ＥＰＡ、ＤＨＡ、すなわち「オメガ−３」）は、脂っこい魚から主に誘導され、その抗不整脈効果及び動脈硬化巣を安定化する能力によって、ＣＶＤリスク低減及び心臓突然死の防止に部分的に関連する。これらの脂肪酸は、血管機能不全の改善、血圧低下、炎症及び免疫機能の調節並びに食後及び吸収後（絶食）状態における血清トリグリセリド減少などの心血管代謝危険因子に対して好都合な生理学的効果も発揮する。後者は、主に、ＴＧリッチリポタンパク質を加水分解し、アテローム生成リポタンパク質レムナントの血清中濃度を低下させる能力を高めることによって、リポタンパク質プロファイルを改善し、そうすることによって、内臓脂肪及び肝臓における異所性脂肪を堆積させる傾向を低下させる。ＥＰＡ／ＤＨＡの１つの潜在的有害作用は、血清ＬＤＬ−Ｃを５〜１０％増加させることである。しかし、高い血清ＬＤＬ−Ｃは、肥満、代謝症候群及び２型糖尿病のインスリン抵抗性状態における心血管代謝危険因子と共存し得るが（体内のコレステロール生合成は体重増加とともに増加する）、それは厳密には「心血管代謝」危険因子ではない。心血管代謝リスクは、コレステロールが比較的枯渇し、ＬＤＬ受容体に対する親和性が低下し、アテローム生成可能性が高い、圧倒的多数の小型高密度ＬＤＬ（ｓｄＬＤＬ：ｓｍａｌｌ，ｄｅｎｓｅ  ＬＤＬ）を特徴とする。ＥＰＡ／ＤＨＡのトリグリセリド低下作用の１つの好都合な効果は、ｓｄＬＤＬを大型ＬＤＬ粒子に再構築することである。これは、血清ＬＤＬ−Ｃをわずかに増加させるが、同時にＬＤＬをより受容体活性的及びより低アテローム生成的にする。
【０１６２】
実際には、この効果は、ＬＤＬ受容体活性を上方制御することによって働くＬＤＬ−Ｃ低下剤とＥＰＡ／ＤＨＡを組み合わせることによって、直接的に（例えば、スタチン）、又は腸におけるコレステロール吸収を減少させることによって間接的に（例えば、ステロール／スタノール若しくはプロバイオティクス）、利用することができる。これらの相補的作用機序は、魚油の添加が血清ＬＤＬ−Ｃの減少においてスタチンの効力を増加させる理由を説明するのに役立つ。
【０１６３】
魚の多い食事（エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）及びドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）１．２３ｇ／日）は、中程度の高脂血症の高齢男性及び女性における魚の少ない食事に比べて、非絶食時血漿トリグリセリドを減少させ、同時にトリグリセリドリッチリポタンパク質（ＴＲＬ：ｔｒｉｇｌｙｃｅｒｉｄｅ−ｒｉｃｈ  ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ）ａｐｏＢ−１００濃度及び生成速度を減少させることが知られている（Ｏｏｉ，Ｅ．Ｍ．ら、（２０１２）Ｊ．Ｌｉｐｉｄ  Ｒｅｓ．５３、１９５８〜１９６７）。研究は、経口脂肪負荷（合計４８００ｋＪ、脂肪１３０ｇ、タンパク質１７ｇ及び炭水化物２１ｇ）の摂取後の肥満男性及び女性におけるＴＲＬ  ａｐｏＢ−４８代謝について、低カロリー食単独と比べた、低カロリー食（１９００ｋＪ以上のエネルギー欠乏）及びｎ−３ＰＵＦＡ補助剤（Ｏｍａｃｏｒ４ｇ／日、４６％ＥＰＡ及び３８％ＤＨＡ）の１２週、無作為介入試験であった。研究によれば、体重減少及びｎ−３ＰＵＦＡ補助剤は、体重減少単独に比べて、空腹時及び総食後ＴＲＬ  ａｐｏＢ−４８曲線下面積（ＡＵＣ：ａｒｅａ  ｕｎｄｅｒ  ｔｈｅ  ｃｕｒｖｅ）を減少させたことが示されている。
【０１６４】
オメガ−６多価不飽和脂肪酸（ｎ６−ＰＵＦＡ）
ｖａｎ  Ｓｃｈａｌｋｗｉｊｋらによる最近の研究は、１２名の過体重肥満男性における空腹時リポタンパク質プロファイル及び代謝に対する、中鎖脂肪酸（ＭＣＦＡ：ｍｅｄｉｕｍ−ｃｈａｉｎ  ｆａｔｔｙ  ａｃｉｄ、６９％Ｃ８：０及びＣ１０：０）補充と比較した、食餌性ｎ−６ＰＵＦＡ（７１％リノール酸）６０ｇ／日の効果を、無作為二重盲検交差試験設計を用いて試験した（Ｖａｎ  Ｓｃｈａｌｋｗｉｊｋ，Ｄ．Ｂ．，ら、（２０１４）ＰＬｏＳ  ＯＮＥ、９、ｅ１００３７６）。ｎ−６  ＰＵＦＡを３週間補充すると、ＭＣＦＡに比べて、空腹時総、超低密度リポタンパク質（ＶＬＤＬ：ｖｅｒｙ  ｌｏｗ−ｄｅｎｓｉｔｙ  ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ）及びＬＤＬコレステロール、並びに総血漿、ＶＬＤＬ及びＬＤＬトリグリセリド濃度が低下した。
【０１６５】
実施例４−組合せ
以下の処方は、現在開発、処方及び試験中の製品におけるラクトバチルス  プランタルムＥＣＧＣ１３１１０４０２と上記活性成分の１種以上との組合せの１日量を例示する。
【０１６６】
組合せ１−Ｌ．プランタルム、モナコリンＫ及びビタミンＢ３（ナイアシン）
この組合せは、健康なコレステロールの維持用である。
・ラクトバチルス  プランタルムＥＣＧＣ１３１１０４０２（５０億個の細胞）、肝臓からの胆汁酸の代謝を調節し、腸におけるその再吸収を減少させる有効性が臨床的に証明された、本発明者らによって同定された天然の所有権のあるマイクロバイオーム調節株。
・肝臓によるコレステロールの合成を阻害することによって正常血中コレステロールレベルの維持に寄与する、紅麹由来のモナコリンＫ（１０ｍｇ）。それは、中国において高コレステロールの伝統療法として使用される、酵母ベニコウジカビによる米の発酵によって得られる天然物である。
・細胞中の脂肪の分解を調節することによって正常エネルギーを生成する代謝に寄与する、ビタミンＢ３（ナイアシン）（１６ｍｇ）。
【０１６７】
組合せ２−Ｌ．プランタルム、植物スタノール
この組合せは、健康なコレステロールの維持用である。
・ラクトバチルス  プランタルムＥＣＧＣ１３１１０４０２（２５億個の細胞）、肝臓からの胆汁酸の代謝を調節し、腸におけるその再吸収を減少させる有効性が臨床的に証明された、本発明者らによって同定された天然の所有権のあるマイクロバイオーム調節株。
・腸における吸収を食餌性コレステロールと競合することによって正常血中コレステロールレベルの維持に寄与する、植物スタノール（４００ｍｇ）。植物スタノールは、実質的に非吸収性であり、そのため植物ステロールよりも理想的なコレステロール低下剤になる。
【０１６８】
組合せ３−Ｌ．プランタルム、オメガ−３脂肪酸ＥＰＡ及びＤＨＡ
この組合せは、心血管及び心臓全般の健康維持用である。
・ラクトバチルス  プランタルムＥＣＧＣ１３１１０４０２（５０億個の細胞）、肝臓からの胆汁酸の代謝を調節し、腸におけるその再吸収を減少させる有効性が臨床的に証明された、本発明者らによって同定された天然の所有権のあるマイクロバイオーム調節株
・必須トリグリセリドを体に供給し、健康な血管を維持することによって、心臓の正常機能の維持を助ける、オメガ−３脂肪酸ＥＰＡ及びＤＨＡ（２５０ｍｇ）。さらに、ＥＰＡ／ＤＨＡ２〜３ｇを毎日摂取すると、正常血圧及びトリグリセリドレベルが支持される。
【０１６９】
組合せ４−Ｌ．プランタルム、ビタミンＢ１（チアミン）
この組合せは、心血管及び心臓全般の健康維持用である。
・ラクトバチルス  プランタルムＥＣＧＣ１３１１０４０２（５０億個の細胞）、肝臓からの胆汁酸の代謝を調節し、腸におけるその再吸収を減少させる有効性が臨床的に証明された、本発明者らによって同定された天然の所有権のあるマイクロバイオーム調節株
・心筋の正常機能を可能にすることによって心臓の正常機能に寄与する２、ビタミンＢ１（チアミン）（１ｍｇ）
【０１７０】
組合せ５−Ｌ．プランタルム、カリウム
この組合せは、健康な血圧の維持用である。
・ラクトバチルス  プランタルムＥＣＧＣ１３１１０４０２（２５億個の細胞）、肝臓からの胆汁酸の代謝を調節し、腸におけるその再吸収を減少させる有効性が臨床的に証明された、本発明者らによって同定された天然の所有権のあるマイクロバイオーム調節株。マイクロバイオーム由来胆汁酸代謝産物は、ストレスホルモンに起因する血管収縮を減少させ、血管を弛緩させ得ることが示された。
・ナトリウムの代謝及び血管の活性を調節することによって正常血圧の維持に寄与する、カリウム（１５０ｍｇ）
【０１７１】
組合せ６−Ｌ．プランタルム、モナコリンＫ、カリウム、クロム
この組合せは、代謝の健康的老化用である。
・ラクトバチルス  プランタルムＥＣＧＣ１３１１０４０２（２５億個の細胞）、肝臓からの胆汁酸の代謝を調節し、腸におけるその再吸収を減少させる有効性が臨床的に証明された、本発明者らによって同定された天然の所有権のあるマイクロバイオーム調節株。マイクロバイオーム由来胆汁酸代謝産物は、ストレスホルモンに起因する血管収縮を減少させ、血管を弛緩させ得ることが示された。
・肝臓によるコレステロールの合成を阻害することによって正常血中コレステロールレベルの維持に寄与する、紅麹由来のモナコリンＫ（５ｍｇ）。それは、中国において高コレステロールの伝統療法として使用される酵母ベニコウジカビによる米の発酵によって得られる天然物である。
・ナトリウムの代謝及び血管の活性を調節することによって正常血圧の維持に寄与する、カリウム（１５０ｍｇ）。
・グルコースの代謝を調節し、生理学的インスリン抵抗性を低下させることによって、正常血糖値の維持、及び全体的な正常多量栄養素代謝に寄与する、クロム（２０μｇ）。クロム「クロム」という用語は、食品及び水中に痕跡量天然に存在する三価クロム（Ｃｒ（ＩＩＩ）又はＣｒ３＋）を含めて、すべての食餌性クロム塩を含む。好ましくは、クロム塩は、ピコリン酸クロムを含む。
【０１７２】
実施例５−加工実施例（Ｗｏｒｋｅｄ  Ｅｘａｍｐｌｅｓ）
以下の処方は、ラクトバチルス  プランタルムＥＣＧＣ１３１１０４０２と上記活性成分の１種以上との組合せの１日量を例示する。
【０１７３】
処方Ａ
【表９】
2019520353.tif 000011
【０１７４】
処方Ｂ
【表１０】
2019520353.tif 000012
【０１７５】
処方Ｃ
【表１１】
2019520353.tif 000013
【０１７６】
処方Ｄ
【表１２】
2019520353.tif 000014
【０１７７】
処方Ｅ
【表１３】
2019520353.tif 000015
【０１７８】
処方Ｆ
【表１４】
2019520353.tif 000016
【０１７９】
処方Ｇ
【表１５】
2019520353.tif 000017
【０１８０】
処方Ｈ
【表１６】
2019520353.tif 000018
【０１８１】
処方Ｉ
【表１７】
2019520353.tif 000019
【０１８２】
処方Ｊ
【表１８】
2019520353.tif 000020
【０１８３】
処方Ｋ
【表１９】
2019520353.tif 000021
【０１８４】
処方Ｌ
【表２０】
2019520353.tif 000022
【０１８５】
処方Ｍ
【表２１】
2019520353.tif 000023
【０１８６】
処方Ｎ
【表２２】
2019520353.tif 000024
【０１８７】
処方Ｏ
【表２３】
2019520353.tif 000025
【０１８８】
処方Ｐ
【表２４】
2019520353.tif 000026
【０１８９】
処方Ｑ
【表２５】
2019520353.tif 000027
【０１９０】
処方Ｒ
【表２６】
2019520353.tif 000028
【０１９１】
処方Ｓ
【表２７】
2019520353.tif 000029
【０１９２】
処方Ｔ
【表２８】
2019520353.tif 000030
【０１９３】
処方Ｕ
【表２９】
2019520353.tif 000031
【０１９４】
処方Ｖ
【表３０】
2019520353.tif 000032
【０１９５】
処方Ｗ
【表３１】
2019520353.tif 000033
【０１９６】
処方Ｘ
【表３２】
2019520353.tif 000034
【０１９７】
処方Ｙ
【表３３】
2019520353.tif 000035
【０１９８】
処方Ｚ
【表３４】
2019520353.tif 000036
【０１９９】
上記処方が、表中などの多数の方法で、又は食料品若しくは栄養補助食品として処方することができ、述べた１日量が得られるように、複数回に分割して投与できることは、熟練者には明らかであろう。
【０２００】
上記実施形態は、特許請求の範囲によって与えられる保護範囲を限定することを意図したものではなく、本発明を実施することができる方法の例を記述するものである。
【０２０１】
生物の寄託
本願は、寄託された生物学的材料の以下の表示を参照する。
名称：Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｃｅｌｌ  Ｃｕｌｔｕｒｅｓ
住所：Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｐｏｒｔｏｎ  Ｄｏｗｎ，
Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅｓ，
ＰＨＥ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎｓ，Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，
Ｐｏｒｔｏｎ  Ｄｏｗｎ，
Ｓａｉｌｓｂｕｒｙ，
ＳＰ４  ０ＪＧ
Ｕｎｉｔｅｄ  Ｋｉｎｇｄｏｍ
日付：２０１３年１１月４日
受託番号：１３１１０４０２
寄託者：Ｏｐｔｉｂｉｏｔｉｘ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｌｉｍｉｔｅｄ（その後、２０１４年８月４日にＯｐｔｉｂｉｏｔｉｘ  Ｌｉｍｉｔｅｄに改名）
【図１】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図２Ｃ】
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【図２Ｄ】
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【図３】
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【国際調査報告】
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