(57)【要約】  【解決手段】  本開示は、薬学および化学に関する。特に、本開示は、白金を用いた結晶化合物ＩＯ−１２５、これを有する組成物および製剤と、前記結晶化合物を調製する方法、およびその使用について提供する。2019521967.tif 000024  【選択図】      なし
2019521967.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
化合物ＩＯ−１２５の結晶形態。
【化１】
2019521967.tif 000023
【請求項２】
請求項１記載の化合物ＩＯ−１２５の結晶形態において、前記結晶形態は形態１であり、Ｘ線粉末回折パターンが回折角２θとして３．１６、６．３４、１２．９５、１５．５５、１６．４５、１７．４、２１．５６、および２１．９２°に特徴的なピークを有し、前記形態１は融点約３２０℃および純度約９７％を有する、化合物ＩＯ−１２５の結晶形態。
【請求項３】
請求項１記載の化合物ＩＯ−１２５の結晶形態において、前記形態１は、実質的に図４、図５、図１０、図１３、および図１６に示す粉末Ｘ線回折図、または実質的に図１７に示すサーモグラム、または実質的に図１５に示すクロマトグラムによって特徴付けられる、化合物ＩＯ−１２５の結晶形態。
【請求項４】
請求項１〜３記載の化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１を調整する方法であって、
（ｉ）少なくとも１種類の溶媒にＩＯ−１２５粗生成物を溶解することでＩＯ−１２５の溶液を調整する工程と、
（ｉｉ）前記溶液から生成物を結晶化する工程と、
（ｉｉｉ）選択的に工程（ｉｉ）を繰り返す工程と、
を有する方法。
【請求項５】
請求項４記載の方法において、前記溶媒は低級アルキルアルコール、ハロゲン化炭化水素溶媒、無機溶媒、有機溶媒、およびそれらの組み合わせから成る群から選択される方法。
【請求項６】
請求項４または請求項５記載の方法において、前記低級アルキルアルコールはメタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、ブタノール、イソ−ブタノール、ペンタノール、イソ−ペンタノール、およびそれらの組み合わせから成る群から選択され、前記ハロゲン化炭化水素溶媒はジクロロメタン、クロロホルム、およびそれらの組み合わせから成る群から選択され、前記無機溶媒は水であり、前記有機溶媒はジメチルホルムアミドである方法。
【請求項７】
請求項４〜６記載の方法において、前記溶媒は、メタノールとジクロロメタン、メタノールとクロロホルム、エタノールとジクロロメタン、エタノールとクロロホルム、およびそれらの組み合わせから成る群から選択される混合物である方法。
【請求項８】
請求項４〜７記載の方法において、前記溶媒はクロロホルム、または容積で約１０：９０〜９０：１０の濃度比を有するメタノールとジクロロメタン、容積で約１０：９０〜９０：１０の濃度比を有するメタノールとクロロホルム、容積で約１０：９０〜９０：１０の濃度比を有するエタノールとジクロロメタン、容積で約１０：９０〜９０：１０の濃度比を有するエタノールとクロロホルムから成る群から選択される混合物である方法。
【請求項９】
請求項４〜７記載の方法において、前記溶媒は容積で１０：９０または２０：８０または３０：７０の濃度比を有するメタノールとジクロロメタン、容積で約１０：９０または２０：８０または３０：７０の濃度比を有するメタノールとクロロホルム、容積で約１０：９０または２０：８０または３０：７０の濃度比を有するエタノールとジクロロメタン、容積で約１０：９０または２０：８０または３０：７０の濃度比を有するエタノールとクロロホルムから成る群から選択される混合物である方法。
【請求項１０】
請求項１記載の化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１を調整する方法であって、
（ｉ）有機酸およびハロゲン化炭化水素溶媒混合物にＩＯ−１２５粗生成物を溶解することでＩＯ−１２５の溶液を調整する工程と、
（ｉｉ）前記溶液に低級アルキルアルコールを加え、溶液２を得る工程と、
（ｉｉｉ）前記溶液２から生成物を結晶化する工程と、
を有する方法。
【請求項１１】
請求項１０記載の方法において、前記有機酸が酢酸であり、前記ハロゲン化炭化水素溶媒がジクロロメタンであり、前記低級アルキルアルコールがエタノールである方法。
【請求項１２】
請求項１０記載の方法において、酢酸とジクロロメタンの濃度比が重量で約０．５〜１：２５〜３０、好ましくは重量で約１：２６．５である方法。
【請求項１３】
請求項４または請求項１０記載の方法において、前記生成物を結晶化する工程が、ＩＯ−１２５溶液の管理された線形冷却、温度の変化、逆溶媒の追加、蒸留、およびシード使用、またはそれらのいずれかの組み合わせから成る群から選択される技術で行われる方法。
【請求項１４】
請求項１３記載の方法において、前記逆溶媒はへプタン、アセトニトリル、およびそれらの組み合わせから成る群から選択される方法。
【請求項１５】
請求項４記載の化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１を調整する方法であって、
（ｉ）低級アルキルアルコールとハロゲン化炭化水素溶媒系との混合物にＩＯ−１２５粗生成物を溶解することによってＩＯ−１２５の溶液を調整する工程と、
（ｉｉ）前記溶液から生成物を結晶化する工程と、
を有する方法。
【請求項１６】
請求項４記載の化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１を調整する方法であって、
（ｉ）低級アルキルアルコールとハロゲン化炭化水素溶媒系との混合物にＩＯ−１２５粗生成物を溶解することによってＩＯ−１２５の溶液を調整する工程と、
（ｉｉ）結晶ＩＯ−１２５のシードを前記溶液に加えて、その後加熱および冷却することによって、前記溶液から生成物を結晶化する工程と、
を有する方法。
【請求項１７】
請求項４記載の化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１を調整する方法であって、
（ｉ）低級アルキルアルコールとハロゲン化炭化水素溶媒系との混合物にＩＯ−１２５粗生成物を溶解することによってＩＯ−１２５の溶液を調整する工程と、
（ｉｉ）冷却および温度サイクルにより前記溶液から生成物を結晶化する工程と、
を有する方法。
【請求項１８】
請求項４記載の化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１を調整する方法であって、
（ｉ）低級アルキルアルコールとハロゲン化炭化水素溶媒系との混合物にＩＯ−１２５粗生成物を溶解することによってＩＯ−１２５の溶液を調整する工程と、
（ｉｉ）前記溶液に逆溶媒を加えて、その後冷却および温度サイクルを行うことによって、前記溶液から生成物を結晶化する工程と、
（ｉｉｉ）選択的に工程（ｉｉ）を繰り返す工程と、
を有する方法。
【請求項１９】
請求項４記載の化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１を調整する方法であって、
（ｉ）低級アルキルアルコールとハロゲン化炭化水素溶媒系との混合物にＩＯ−１２５粗生成物を溶解することによってＩＯ−１２５の溶液を調整する工程と、
（ｉｉ）逆溶媒と結晶ＩＯ−１２５のシードを前記溶液に加えて、冷却および温度サイクルを行い、その後加熱および冷却することによって、前記溶液から生成物を結晶化する工程と、
を有する方法。
【請求項２０】
請求項１５〜１９記載の方法において、前記低級アルキルアルコールは、メタノールおよびエタノールから成る群から選択され、前記ハロゲン化炭化水素溶媒はジクロロメタンおよびクロロホルムから成る群から選択され、前記低級アルキルアルコールとハロゲン化炭化水素溶媒との濃度比は容積で約１０：９０〜３０：７０である方法。
【請求項２１】
請求項１０記載の化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１を調整する方法であって、
（ｉ）酢酸およびジクロロメタン混合物にＩＯ−１２５粗生成物を溶解することによってＩＯ−１２５の溶液を調整する工程と、
（ｉｉ）前記溶液にエタノールを加え、溶液２を得る工程と、
（ｉｉｉ）冷却により前記溶液２から生成物を結晶化する工程と、
を有する方法。
【請求項２２】
請求項４〜２１記載の方法であって、さらに、調製した化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１の単離を有する方法。
【請求項２３】
請求項２２記載の方法において、前記単離が、溶媒の追加、蒸留、加熱、イオン樹脂の追加、クエンチ、ろ過、抽出、およびそれらの組み合わせから成る群から選択される行為によって行われる方法。
【請求項２４】
請求項４〜２３記載の方法において、前記方法は、約１時間〜４８時間にわたって、約０℃〜８０℃の温度範囲で行われ、前記線形冷却は０．１１℃／分の速度で５℃まで行われる方法。
【請求項２５】
請求項４〜２４記載の方法において、前記方法がＩＯ−１２５粗生成物を精製して、約９４％〜９７％の純度のＩＯ−１２５化合物を提供する方法。
【請求項２６】
請求項１〜３記載の化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１を有するナノ粒子。
【請求項２７】
請求項２６記載のナノ粒子において、前記ナノ粒子は、さらに、コリピッド（co-lipid）および／または安定剤を有するナノ粒子。
【請求項２８】
請求項２６〜２７記載のナノ粒子において、前記化合物とコリピッドおよび／または安定剤との比は、９９：１〜１：９９（ｗ／ｗ）、（ｍｏｌ／ｍｏｌ）または（ｖｏｌ／ｖｏｌ）であるナノ粒子。
【請求項２９】
請求項２６〜２８記載のナノ粒子において、前記ナノ粒子は、コリピッドとして大豆ホスファチジルコリンおよび１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタロンアミン−Ｎ−［メトキシ（ポリエチレングリコール）−２０００］を有し、前記化合物と前記コリピッドとの比は約１：１：０．０１〜約１：４：３であるナノ粒子。
【請求項３０】
請求項１〜３記載の化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１または請求項２６〜２９記載のナノ粒子と、少なくとも１種類の賦形剤とを有する医薬組成物。
【請求項３１】
請求項３０記載の医薬組成物において、前記賦形剤は、造粒剤、結合剤、潤滑剤、崩壊剤、甘味剤、流動促進剤、抗接着剤、帯電防止剤、界面活性物質、抗酸化剤、増粘剤、コーティング剤、着色剤、香料、コーティング剤、可塑剤、防腐剤、懸濁剤、乳化剤、植物セルロース系材料、球形化剤、またはそれらの組み合わせから成る群から選択される医薬組成物。
【請求項３２】
請求項３０〜３１記載の組成物において、前記組成物は、注射剤、錠剤、凍結乾燥粉末、リポソーム懸濁液、トローチ剤、薬用キャンデー、水性または油性懸濁液、軟膏剤、パッチ、ゲル、ローション、歯磨剤、カプセル、乳剤、クリーム、噴霧剤、滴剤、分散粉末または顆粒、硬質または軟質ゲルカプセルに入った乳剤、シロップ剤、エリキシル剤、および食品サプリメント、またはそれらの組み合わせから成る群から選択される投与形態に製剤化される組成物。
【請求項３３】
被験者の癌を治療または管理する方法であって、治療有効量の請求項１〜３記載の化合物ＩＯ−１２５の結晶形態、または請求項２６〜２９記載のナノ粒子、または請求項３０〜３２記載の組成物を、それを必要とする被験者に投与する工程を有する方法。
【請求項３４】
請求項３３記載の方法において、前記癌は、乳癌、頭部および頸部癌、卵巣癌、精巣癌、膵臓癌、口腔−食道癌、消化管癌、肝臓癌、胆嚢癌、肺癌、黒色腫、皮膚癌、肉腫、血液癌、脳腫瘍、神経膠芽細胞腫、神経外胚葉起源の腫瘍およびそれらの組み合わせから成る群から選択される方法。
【請求項３５】
請求項３３〜３４記載の方法において、前記投与は、静脈内投与、動脈内投与、膵十二指腸動脈投与、腹腔内投与、肝門投与、および筋肉内投与、またはそれらの組み合わせによるものである方法。
【請求項３６】
薬剤の製造における請求項１〜３記載の化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１、または請求項２６〜２９記載のナノ粒子、または請求項３０〜３２記載の組成物の使用。
【請求項３７】
乳癌、頭部および頸部癌、卵巣癌、精巣癌、膵臓癌、口腔−食道癌、胃腸癌、肝癌、胆嚢癌、肺癌、黒色腫、皮膚癌、肉腫、血液癌、脳腫瘍、神経膠芽細胞腫、神経外胚葉起源の腫瘍、およびそれらの組み合わせを有する群から選択される癌を治療するための、請求項１〜３記載の化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１、または請求項２６〜２９記載のナノ粒子、または請求項３０〜３２記載の組成物の使用。
【請求項３８】
薬剤として使用するための、請求項１〜３記載の化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１、または請求項２６〜２９記載のナノ粒子、または請求項３０〜３２記載の組成物。
【請求項３９】
乳癌、頭部および頸部癌、卵巣癌、精巣癌、膵臓癌、口腔−食道癌、胃腸癌、肝癌、胆嚢癌、肺癌、黒色腫、皮膚癌、肉腫、血液癌、脳腫瘍、神経膠芽細胞腫、神経外胚葉起源の腫瘍、およびそれらの組み合わせを有する群から選択される癌の治療における薬剤として使用するための、請求項１〜３記載の化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１、または請求項２６〜２９記載のナノ粒子、または請求項３０〜３２記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本開示は、白金を用いた化合物の結晶形態に関する。ＩＯ−１２５の結晶形態およびその結晶形態を作成する方法が本明細書に開示される。前記化合物ＩＯ−１２５の初期の特徴決定、おおよその溶媒溶解性、および少なくとも２０〜２５０ｍｇ規模のベンチスケール結晶化スクリーニングを含め、広範な研究が行われた。結晶ＩＯ−１２５は、さらにナノ粒子および医薬組成物として製剤化することができる。前記結晶性ＩＯ−１２５および対応するナノ粒子または医薬組成物は、例えば癌を含む疾患および疾病の治療において、治療薬として使用してもよい。
【化１】
2019521967.tif 000003
【背景技術】
【０００２】
一般に、薬物のアモルファス形態は温度、湿度、空気などの環境条件で通常不安定であるため、製薬産業において、薬物の結晶形態は薬物のアモルファス形態よりも好ましい。さらに、薬物のアモルファス形態は吸湿しやすいため、製剤の処理に使用可能な溶媒は無水のものに限られる。このため、製造コストがさらに増加する可能性がある。さらに、患者に投与する際に薬物が確実で再現性のある一定の血漿濃度プロファイルを示すようにするため、化学的安定性、固体状態の安定性、および有効成分の「有効期間」の管理は薬物開発において重要な要件である。これらのパラメータは、薬物の結晶形態でより優れた値を達成することができる。また、結晶形態では、薬物を可能な限り化学的に純粋な形態で提供することができる。結果として、市販可能で薬学的に許容できる薬物組成物の製造においては、薬物を実質的に結晶性で安定な形態で提供することが重要である。しかし、結晶形態の調製は非常に困難であり、常に達成可能な目標とは限らない。典型的には、分子構造のみから、化合物の結晶化の挙動を予測することはできない。これは通常、経験的に決めるしかない。より具体的には、脂質官能化白金を用いた薬物などの複合分子化合物の結晶を作り出すことは非常に困難である。
【０００３】
様々な白金を用いた抱合体／薬物の合成が当該分野で知られている。しかし、上述のとおり、薬物のアモルファス形態に伴うデメリットのため、薬学的処理および組成物において有利に利用できる、優れた物理化学的特性を有するそのような複合分子構造の結晶形態の需要がある。本開示は、前述の先行技術の需要について取り上げる。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００４】
本発明は、ＩＯ−１２５の結晶形態について説明する。ＩＯ−１２５の結晶形態、結晶性ＩＯ−１２５を含むナノ粒子、結晶ＩＯ−１２５または前記ナノ粒子の医薬組成物を作成する方法、および前記ＩＯ−１２５の結晶形態、そのナノ粒子または医薬組成物を使用し、様々な疾患を治療または予防する方法も提供される。
【０００５】
そのため、本開示は、ＩＯ−１２５の結晶形態１と、
【化２】
2019521967.tif 000004
【０００６】
化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１を調整する方法であって、
（ｉ）溶媒にＩＯ−１２５粗生成物を溶解することでＩＯ−１２５の溶液を調整する工程と、
（ｉｉ）前記溶液から前記生成物を結晶化する工程と、
（ｉｉｉ）選択的に工程（ｉｉ）を繰り返す工程と
を有する方法と、
【０００７】
化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１を調整する方法であって、
（ｉ）有機酸およびハロゲン化炭化水素溶媒混合物にＩＯ−１２５粗生成物を溶解することでＩＯ−１２５の溶液を調整する工程と、
（ｉｉ）前記溶液に低級アルキルアルコールを加え、溶液２を得る工程と、
（ｉｉｉ）前記溶液２から前記生成物を結晶化する工程と
を有する方法と、
【０００８】
化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１を有するナノ粒子と、
【０００９】
賦形剤とともに、化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１、または化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１のナノ粒子を有する医薬組成物と、
【００１０】
被験者の癌を治療または管理する方法であって、前記方法は治療有効量の化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１、または化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１のナノ粒子、または化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１の組成物を、それを必要とする被験者に投与する工程を有するものである方法と、
【００１１】
化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１または化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１のナノ粒子、または化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１の組成物を、乳癌、頭部および頸部癌、卵巣癌、精巣癌、膵臓癌、口腔−食道癌、胃腸癌、肝癌、胆嚢癌、肺癌、黒色腫、皮膚癌、肉腫、血液癌、脳腫瘍、神経膠芽細胞腫、神経外胚葉起源の腫瘍、およびその組み合わせを有する群から選択される癌の治療薬の製造に利用する工程と、
【００１２】
乳癌、頭部および頸部癌、卵巣癌、精巣癌、膵臓癌、口腔−食道癌、胃腸癌、肝癌、胆嚢癌、肺癌、黒色腫、皮膚癌、肉腫、血液癌、脳腫瘍、神経膠芽細胞腫、神経外胚葉起源の腫瘍およびその組み合わせを有する群から選択される癌の治療薬のとして利用するための化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１または化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１のナノ粒子、または化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１の組成物を提供する。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
本発明を容易に理解し、実現するため、ここでは添付の図を参照して示されるとおり、典型的な実施形態を参照する。以下の詳細な説明とともに、図は本明細書に組み込まれてその一部を形成し、本開示に沿ってさらに実施形態を図示し、様々な原理および利点を説明する。
【図１】図１は、プロトコール２により得られたＣＯＭＰ  ２５粗生成物の結晶化スクリーニングで成功し、回収された固体のＸＲＰＤ  ２θ回折図を示す。
【図２】図２は、プロトコール３により得られた温度サイクル後の固体のＸＲＰＤ  ２θ回折図を示す。
【図３】図３は、プロトコール３により得られたメタノール：ジクロロメタン（１０：９０％ｖ／ｖ）からシードを使用して得られた結晶性材料のＰＬＭ顕微鏡写真を示す。
【図４】図４は、プロトコール４により得られた濃度約１５０ｍｇ／ｍｌでの温度サイクル後の典型的固体のＸＲＰＤ  ２θ回折図を示す。
【図５】図５および６は、プロトコール５により得られ、逆溶媒としてヘプタンを用いた温度サイクル後の固体のＸＲＰＤ  ２θ回折図を示す。
【図６】図５および６は、プロトコール５により得られ、逆溶媒としてヘプタンを用いた温度サイクル後の固体のＸＲＰＤ  ２θ回折図を示す。
【図７】図７および８は、プロトコール６により得られた固体のＸＲＰＤ  ２θ回折図およびＰＬＭを示す。
【図８】図７および８は、プロトコール６により得られた固体のＸＲＰＤ  ２θ回折図およびＰＬＭを示す。
【図９】図９は、プロトコール６により得られた典型的冷却結晶化２の固体のＨＰＬＣクロマトグラムを示す。
【図１０】図１０および１１は、プロトコール７により得られた固体のＸＲＰＤ  ２θ回折図およびＰＬＭを示す。
【図１１】図１０および１１は、プロトコール７により得られた固体のＸＲＰＤ  ２θ回折図およびＰＬＭを示す。
【図１２】図１２は、プロトコール７により得られた固体のＨＰＬＣクロマトグラムを示す。
【図１３】図１３および１４は、プロトコール８により得られた固体のＸＲＰＤ  ２θ回折図およびＰＬＭを示す。
【図１４】図１３および１４は、プロトコール８により得られた固体のＸＲＰＤ  ２θ回折図およびＰＬＭを示す。
【図１５】図１５は、プロトコール８により得られた、逆溶媒としてヘプタンを用い、メタノール：ジクロロメタン（２０：８０％ｖ／ｖ）により単離した固体のＨＰＬＣクロマトグラムを示す。
【図１６】図１６は、ＩＯ−１２５の形態１の２θ回折図を示す。
【図１７】図１７は、ＩＯ−１２５の形態１のＴＧ／ＤＴＡサーモグラムを示す（ＴＧの軌跡−青、ＤＴの軌跡−緑）。
【図１８】図１８は、アモルファスＩＯ−１２５の２θ回折図を示す。
【図１９】図１９は、アモルファスＩＯ−１２５のＴＧ／ＤＴＡサーモグラムを示す（ＴＧの軌跡−青、ＤＴの軌跡−緑）。
【図２０】図２０は、アモルファスＩＯ−１２５のＨＰＬＣクロマトグラムを示す。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
本開示は先行技術の課題を取り上げ、白金を用いた化合物の結晶形態を提供する。
【００１５】
本開示は、ＩＯ−１２５の結晶形態に関連する。
【化３】
2019521967.tif 000005
【００１６】
本明細書に開示するとおり、本開示の化合物を指す用語として「ＩＯ−１２５」、「化合物２５」、および「ＣＯＭＰ  ２５」は同義的に使用される。
【００１７】
本開示の化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１は、回折角２θが３．１６、６．３４、１２．９５、１５．５５、１６．４５、１７．４、２１．５６、および２１．９２°で特徴的ピークを有するＸ線粉末回折パターンを有する。
【００１８】
本開示の化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１は、さらに、実質的に本明細書の図４、図５、図１０、図１３、および図１６に示されるとおり、粉末回折パターンで特徴付けられる。
【００１９】
本開示の化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１は、実質的に図１７に示されるとおりサーモグラムで、または実質的に図１５に示されるとおりクロマトグラムで特徴付けられる。
【００２０】
本開示の実施形態では、ＩＯ−１２５の結晶形態１の溶融開始／融点が約３２０℃である。
【００２１】
本開示の別の実施形態では、ＩＯ−１２５の結晶形態１のＨＰＬＣ純度が高く、約９６．７％である。
【００２２】
本開示は、化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１を調整する方法に関連し、
（ｉ）溶媒にＩＯ−１２５粗生成物を溶解することでＩＯ−１２５の溶液を調整する工程と、
（ｉｉ）前記溶液から前記生成物を結晶化する工程と、
（ｉｉｉ）選択的に工程（ｉｉ）を繰り返す工程と
を有する。
【００２３】
本開示の実施例では、前記溶媒は低級アルキルアルコール、ハロゲン化炭化水素溶媒、無機溶媒、有機溶媒、およびその組み合わせから成る群から選択される。
【００２４】
本開示の別の実施形態では、前記低級アルキルアルコールはメタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、ブタノール、イソ−ブタノール、ペンタノール、イソ−ペンタノール、およびその組み合わせから成る群から選択され、前記ハロゲン化炭化水素溶媒はジクロロメタン、クロロホルム、およびその組み合わせから成る群から選択され、前記無機溶媒は水から成る群から選択され、前記有機溶媒はジメチルホルムアミドであり、およびその組み合わせである。
【００２５】
本開示のさらに別の実施形態では、前記溶媒は、メタノールとジクロロメタン、メタノールとクロロホルム、エタノールとジクロロメタン、エタノールとクロロホルム、およびその組み合わせから成る群から選択される混合物である。
【００２６】
本開示のさらに別の実施形態では、前記溶媒は容積で約１０：９０〜９０：１０の濃度比を有するメタノールとジクロロメタン、容積で約１０：９０〜９０：１０の濃度比を有するメタノールとクロロホルム、容積で約１０：９０〜９０：１０の濃度比を有するエタノールとジクロロメタン、容積で約１０：９０〜９０：１０の濃度比を有するエタノールとクロロホルムから成る群から選択される混合物である。
【００２７】
本開示のまださらに別の実施形態では、前記溶媒は容積で１０：９０または２０：８０または３０：７０の濃度比を有するメタノールとジクロロメタン、容積で約１０：９０または２０：８０または３０：７０の濃度比を有するメタノールとクロロホルム、容積で約１０：９０または２０：８０または３０：７０の濃度比を有するエタノールとジクロロメタン、容積で約１０：９０または２０：８０または３０：７０の濃度比を有するエタノールとクロロホルムから成る群から選択される混合物である。
【００２８】
上記方法のまださらに別の実施形態では、前記溶液から前記生成物を結晶化する工程が、ＩＯ−１２５溶液の管理された線形冷却、温度の変化、逆溶媒の追加、蒸留、およびシード使用、またはそのいずれかの組み合わせから成る群から選択される技術により行われる。
【００２９】
本開示のさらに別の実施形態では、前記逆溶媒はへプタン、アセトニトリル、またはその組み合わせから成る群から選択される。
【００３０】
上述の方法のさらに別の実施形態では、前記方法が、さらに、調製した化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１の単離を有する。
【００３１】
本開示のまださらに別の実施形態では、前記調整した化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１の単離が、溶媒の追加、蒸留、加熱、イオン樹脂の追加、クエンチ、ろ過、抽出、およびその組み合わせから成る群から選択される行為により行われる。
【００３２】
本開示のさらに別の実施形態では、上述の方法が約０℃〜約８０℃の温度範囲で、約１時間〜約４８時間にわたって行われる。
【００３３】
本開示のさらに別の実施形態では、上述の方法がＩＯ−１２５の粗生成物を精製し、少なくとも９０％、好ましくは９４％〜９７％の純度の前記ＩＯ−１２５化合物を提供する。
【００３４】
前記ＩＯ−１２５の初期の特徴決定は、一連の参照データを提供する目的で最初に行った。ここでは、前記材料がアモルファスであり、それぞれＸＲＰＤおよびＰＬＭで解析すると明確な形態を有していないことが分かった。本開示の「アモルファスＩＯ−１２５」（粗化合物）は、さらに、２θ回折計（図１８）、ＴＧ／ＤＴＡサーモグラム（図１９）およびＨＰＬＣクロマトグラム（図２０）により特徴付けられる。ＩＯ−１２５の連結した熱重量／示差熱分析（ＴＧ／ＤＴＡ）では、測定開始（２５℃、周囲条件）から約１６０℃まででおおよその質量損失が２．９％であることが示された。この質量損失に伴う微分サーモグラムで観察された熱イベントはなかった。約２７０℃からの熱重量の追跡では有意な質量損失が認められ、大きな吸熱イベントがあり、微分サーモグラムでは２７１．２℃が開始、２７３．９℃がピークであった。これはＩＯ−１２５の分解と関連している可能性が最も高い。
【００３５】
初期の溶解性スクリーニングから、前記ＩＯ−１２５は純粋な溶媒にほとんど不溶性であるか、非常に難溶性であることが分かった［表１］。溶解性はメタノールまたはエタノール：ジクロロメタン混合物で著しく改善した。これにもかかわらず、前記スクリーニングは結晶化実験に使用される適切な溶媒／溶媒混合物および逆溶媒のリストを提供した。ＩＯ−１２５の溶解性に関する初期の検討から得られた情報を用い、結晶ＩＯ−１２５を生じる溶液による結晶化法の実施例を提供するため、一連のベンチスケールの結晶化実験を行った。この検討内では、様々な溶媒におけるＩＯ−１２５の管理された線形冷却、逆溶媒の追加、蒸発、およびシード使用を含む適切な結晶化条件を見つけるため、多数の技術がデザインされた。これらの実験から、溶媒系としてメタノール：ジクロロメタン（２０：８０％ｖ／ｖ）を使用し、シード使用、逆溶媒としてヘプタンを使用することは最も有望であることが証明され、（ＩＯ−１２５粗生成物を投入した場合と比較して）ＰＬＭでは明確な形態がなく、純度約９６．６１％で結晶製剤が回収された。これらの条件を適用することで、１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３：ＭｅＯＤ）により、約２．５０ｐｐｍの不純物ピークが０．１５Ｈに取り込まれていることが分かった。ＴＧ／ＤＴ分析では、測定開始（周囲条件）から約２５０℃まででおおよその質量損失が（質量で）１．９５％であることが示され、この質量損失に伴い微分サーモグラムで観察された熱イベントはなかった。約２７０℃からの熱重量の追跡では有意な質量損失が認められ、大きな吸熱イベントがあり、微分サーモグラムでは２８８．４℃が開始、２９７．２℃がピークであった。ここでも、これはＩＯ−１２５の分解が関連している可能性がある。
【００３６】
本開示は、純度が高くなった結晶ＩＯ−１２５を提供する一連の実施例の条件を提供する。
【００３７】
ＩＯ−１２５の純度を改善するため、化合物ＩＯ−１２５が結晶化し、明確な純度上昇を示す一連の条件が本開示で提供される。本実験中、様々な溶媒系で多数のアモルファス固体が認められた。ＰＸＲＤおよびＰＬＭ解析では、結晶化試験の一部で得られた固体が事実上、結晶であることが示された。
【００３８】
以下のプロトコールを行い、ＩＯ−１２５の粗生成物サンプルを精製し、結晶形態を得る：
【００３９】
プロトコール１：最初に、一連の溶媒および溶媒混合物をスクリーニングし、結晶化の手順に適した溶媒を選択した。表１に示すとおり、メタノール／エタノールおよびクロロホルム／ジクロロメタンなどのアルコール混合物は、結晶化手順に適した溶媒混合物である。
【表１】
2019521967.tif 000006
2019521967.tif 000007
【００４０】
プロトコール２：本開示の実施形態では、化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１を調整する方法は、
（ｉ）低級アルキルアルコールとハロゲン化炭化水素溶媒系との混合物にＩＯ−１２５粗生成物を溶解することでＩＯ−１２５の溶液を調整する工程と、
（ｉｉ）温度サイクルにより前記溶液から生成物を結晶化する工程と
を有する。
【００４１】
特定の溶媒に関する化合物２５粗生成物の結晶化スクリーニング：化合物２５（ＣＯＭＰ  ２５）粗生成物の結晶化スクリーニングはメタノール：ジクロロメタンおよびエタノール：ジクロロメタン溶媒混合物を用いて行った。温度サイクル後に各実験から単離した材料はＸＲＰＤにより解析し、結果を表２にまとめている。結晶ＣＯＭＰ  ２５はメタノール：ジクロロメタン（２０：８０％ｖ／ｖ）および（１０：９０％ｖ／ｖ）溶媒系を用いて得られた。他のメタノール：ジクロロメタンおよびエタノール：ジクロロメタン溶媒混合物はすべて、アモルファス材料を生じた。ＣＯＭＰ  ２５粗生成物の結晶化スクリーニングで成功し、回収された固体のＸＲＰＤ  ２θ回折図を図１に示す。
【００４２】
【表２】
2019521967.tif 000008
【００４３】
プロトコール３：本開示の別の実施形態では、化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１を調整する方法は、
（ｉ）低級アルキルアルコールとハロゲン化炭化水素溶媒系との混合物にＩＯ−１２５粗生成物を溶解することでＩＯ−１２５の溶液を調整する工程と、
（ｉｉ）結晶ＩＯ−１２５のシードを前記溶液に加えてから加熱および冷却することで、前記溶液から生成物を結晶化する工程と
を有する。
【００４４】
ＣＯＭＰ  ２５粗生成物のシードを用いた冷却結晶化−一般的手順：約２０ｍｇのＣＯＭＰ  ２５粗生成物を２ｍｌのガラスバイアルに計量し、約２５℃でそれぞれの溶媒系１００ＮＬを前記実験系に加えた。使用前に、すべての溶媒を予乾燥した３Ａモレキュラーシーブス（適切な場合）で乾燥させた。少量（約１ｍｇ）の結晶ＣＯＭＰ  ２５をシードとして前記実験系に加えた。前記実験系は約４０℃に加熱した。前記実験系を約０．１１℃／分で約５℃まで冷却した。前記実験系を約５℃で約３時間攪拌し、温度サイクルは一晩約０．２℃／分で５℃〜４０℃の範囲とした。固体材料を観察した実験では、前記固体を周囲温度（約２２℃）で遠心分離により単離し、ＸＲＰＤにより解析した。表３は、ＣＯＭＰ  ２５粗生成物のシードを用いた冷却結晶化に用いた溶媒系をまとめている。
【００４５】
【表３】
2019521967.tif 000009
【００４６】
再形成した結晶形態を回収する実験条件は、メタノール：ジクロロメタン（１０：９０％ｖ／ｖ）とした。メタノール：ジクロロメタン（２０：８０％ｖ／ｖ）では弱い結晶材料が回収された。すべてのエタノール：ジクロロメタン混合物およびメタノール：ジクロロメタン（３０：７０％ｖ／ｖ）でアモルファス材料が回収された。図２は温度サイクル後の固体のＸＲＰＤ  ２θ解説図を示し、図３はシードを使用したメタノール：ジクロロメタン（１０：９０％ｖ／ｖ）から得た結晶材料のＰＬＭ顕微鏡写真を示す。
【００４７】
プロトコール４：本開示のさらに別の実施形態では、化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１を調整する方法は、
（ｉ）低級アルキルアルコールとハロゲン化炭化水素溶媒系との混合物にＩＯ−１２５粗生成物を溶解することでＩＯ−１２５の溶液を調整する工程と、
（ｉｉ）冷却および温度サイクルにより前記溶液から生成物を結晶化する工程と
を有する。
【００４８】
ＣＯＭＰ  ２５粗生成物の冷却結晶化（２０ｍｇ試験）−一般的手順：ＣＯＭＰ  ２５粗生成物を２ｍＬのサンプルバイアルに計量し、約２５℃で既知量の溶媒を加えた。前記混合物は約２５℃で攪拌した。前記混合物を約２５℃から約５℃まで、０．１１℃／分で冷却した。前記混合物を再び約５℃で約３時間攪拌した。温度サイクルは、約０．２℃／分で約５℃〜４０℃とした。固体材料を観察した実験では、前記固体を約２５℃で遠心分離により単離し、ＸＲＰＤにより解析した。表４は冷却結晶化に用いた条件をまとめ、表５は２倍スケールでの冷却結晶化の条件をまとめている。表６および７は、冷却結晶化試験の結果と観察をまとめている。濃度約１５０ｍｇ／ｍｌでの温度サイクル後の典型的固体のＸＲＰＤ  ２θ回折図を図４に示す。
【表４】
2019521967.tif 000010
【表５】
2019521967.tif 000011
【表６】
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【表７】
2019521967.tif 000013
【００４９】
プロトコール５：本開示のさらに別の実施形態では、化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１を調整する方法は、
（ｉ）低級アルキルアルコールとハロゲン化炭化水素溶媒系の混合物にＩＯ−１２５粗生成物を溶解することでＩＯ−１２５の溶液を調整する工程と、
（ｉｉ）前記溶液に逆溶媒を加えた後、冷却および温度サイクルを行うことで、前記溶液から前記生成物を結晶化する工程と、
（ｉｉｉ）選択的に工程（ｉｉ）を繰り返す工程と
を有する。
【００５０】
ＣＯＭＰ  ２５粗生成物の逆溶媒／冷却結晶化−一般的手順：ＣＯＭＰ  ２５粗生成物約５０ｍｇを２ｍＬのサンプルバイアルに計量し、約２５℃で適量の各溶媒を加えた。各逆溶媒を約２５℃で２５μＬずつ適切なバイアルに加えた。前記実験系を約２５℃から約５℃まで、０．１１℃／分で冷却した。前記混合物を約５℃で約３時間攪拌した。前記実験系の温度サイクルは、一晩（約１８時間）、約０．２℃／分で約５℃〜４０℃とした。薄いスラリーまたは透明な溶液が認められた実験系に、さらに約２５℃で逆溶媒を加えた。前記実験系を約２５℃から約５℃まで、０．１１℃／分で冷却し、約５℃で約３時間攪拌した。前記実験系の温度サイクルは、一晩（約１８時間）、約０．２℃／分で約５℃〜４０℃とした。固体材料を観察した実験では、前記固体を周囲温度（約２２℃）で遠心分離により単離し、ＸＲＰＤにより解析した。単離したサンプルを真空、周囲温度で一晩乾燥させた。逆溶媒として２−メチルＴＨＦを用い、メタノール：ジクロロメタン溶媒混合物およびエタノール：ジクロロメタン（３０：７０％ｖ／ｖ）溶媒系を用いて、前記結晶化によりゲル様材料が形成した。逆溶媒としてヘプタンを用い、ほとんどの前記溶媒系で結晶材料が認められた。表８および９に示すとおり、逆溶媒としてアセトニトリルを用い、ほとんどの前記溶媒系で部分結晶材料が認められた。温度サイクル後、逆溶媒としてヘプタンを用いた固体のＸＲＰＤ  ２θ回折図を図５および６に示す。
【表８】
2019521967.tif 000014
【表９】
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【００５１】
プロトコール６：ＣＯＭＰ  ２５粗生成物の冷却結晶化（２００〜２５０ｍｇ試験）−一般的手順：ＣＯＭＰ  ２５粗生成物の各重量を２０ｍＬのサンプルバイアルに計量し、各溶媒系の適量を約２５℃で加えて前記サンプルを溶解した。前記実験系を約０．１℃／分で約５℃に冷却し、約５℃で約２時間攪拌した後、温度サイクルを約５℃〜４０℃とした。前記実験系はこの後約２時間で約４０℃まで加熱した（約０．３℃／分）。前記混合物を再び約４０℃で約２時間攪拌し、約５℃まで約２時間で冷却した後（約０．３℃／分）、約５℃で約２時間攪拌した。サンプルを真空下、周囲温度（約２２℃）においてワットマンろ紙Ｎｏ．１を用いたブフナー漏斗でろ過することで単離し、真空下、周囲温度で一晩（約１８時間）乾燥させた。次に、前記固体材料をＸＲＰＤおよびＰＬＭにより解析した。結果は表１０にまとめ、図７および８に示す。典型的な冷却結晶化２のＨＰＬＣクロマトグラムを図９に示す。
【表１０】
2019521967.tif 000016
【００５２】
プロトコール７：ＣＯＭＰ  ２５粗生成物のシードを用いた冷却結晶化（２５０ｍｇスケール）−一般的手順：ＣＯＭＰ  ２５粗生成物の各重量を２０ｍＬのサンプルバイアルに計量し、各溶媒系の適量を約２５℃で加えて前記サンプルを溶解した。結晶ＣＯＭＰ  ２５をシードとして前記実験系に加えた。前記実験系を約０．１℃／分で約５℃に冷却し、約５℃で約２時間攪拌した後、温度サイクルを約５℃〜４０℃とし、約２時間で約４０℃まで加熱した（約０．３℃／分）。この後、前記実験系を再び約４０℃で約２時間攪拌し、約５℃まで約２時間で冷却した後（約０．３℃／分）、約５℃で約２時間攪拌した。サンプルを真空下、周囲温度（約２２℃）においてワットマンろ紙Ｎｏ．１を用いたブフナー漏斗でろ過することで単離し、真空下、周囲温度で一晩（約１８時間）乾燥させた。次に、前記固体材料をＸＲＰＤおよびＰＬＭにより解析した。結果は表１１にまとめ、図１０および１１に示す。
【００５３】
濃度１６０ｍｇ／ｍｌの溶媒混合物であるメタノール：ジクロロメタン（１０：９０％ｖ／ｖ）を利用し、回収した材料は結晶であり、ＨＰＬＣで少なくとも純度９６．６５％であった。この実験系で計算した収率は約３６％であった。さらに、濃度１９０ｍｇ／ｍｌで溶媒混合物であるメタノール：ジクロロメタン（２０：８０％ｖ／ｖ）を利用し、回収した材料は結晶であり、ＨＰＬＣで少なくとも純度９６．２１％であった（図１２）。この実験系で計算した収率は約４１％であった。
【表１１】
2019521967.tif 000017
【００５４】
プロトコール８：本開示のさらに別の実施形態では、化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１を調整する方法は、
（ｉ）低級アルキルアルコールとハロゲン化炭化水素溶媒系との混合物にＩＯ−１２５粗生成物を溶解することでＩＯ−１２５の溶液を調整する工程と、
（ｉｉ）逆溶媒と結晶ＩＯ−１２５のシードを前記溶液に加えてから、冷却および温度サイクルを行い、その後加熱および冷却することで、前記溶液から生成物を結晶化する工程と
を有する。
シードの使用、逆溶媒、および冷却結晶化の一般的手順：ＣＯＭＰ  ２５粗生成物約２５０ｍｇを２０ｍＬのサンプルバイアルに計量し、各溶媒系の適量を約２５℃で加えて前記ＩＯ−１２５を溶解した。逆溶媒としてヘプタンを２５０μＬずつ加えた。各実験系に合計１ｍｌのヘプタンを加えた。前記実験系は結晶ＣＯＭＰ  ２５（約５ｍｇ）をシードとして使用した。前記実験系を約２５℃で約１時間攪拌し、約０．１℃／分で約５℃まで冷却した。前記サンプルを約５℃で約２時間攪拌し、温度サイクルを約５℃〜４０℃とした。約２時間で約４０℃まで加熱し（約０．３℃／分）、続いて約４０℃で約２時間攪拌し、約２時間で約５℃まで冷却し（約０．３℃／分）、再び約５℃で約２時間攪拌した。前記実験系を真空下、周囲温度（約２２℃）においてワットマンろ紙Ｎｏ．１を用いたブフナー漏斗でろ過することで単離し、真空下、周囲温度で一晩（約１８時間）乾燥させた。次に、前記固体材料をＸＲＰＤ（図１３）およびＰＬＭ（図１４）により解析した。３つの技術すべてを併用し、溶媒系から生成した材料に差があるか否かを確認し、最適な結晶化条件が見つかったか否かも確認した。収率の計算を行い、表１２にまとめている。逆溶媒としてヘプタンを用い、メタノール：ジクロロメタン（２０：８０％ｖ／ｖ）により単離した固体のＨＰＬＣクロマトグラムを図１５に示す。
【表１２】
2019521967.tif 000018
【００５５】
プロトコール９：有機酸およびハロゲン化炭化水素溶媒を用いた結晶化：
約３８．０ｇのＩＯ−１２５乾燥粗生成物に約４ｗ／ｗの水を入れた。約７０℃で１．５時間攪拌し、冷却、約１６ｗ／ｗのアセトンを追加後、約３５．８ｇの結晶化ＩＯ−１２５をろ過により単離し、約１ｗ／ｗの水で洗う。前記スラリーにもう一度これを繰り返すと、約５０℃、真空状態で乾燥した後、約３４．４ｇの乾燥粗生成物が得られる。これを次に約２６．５ｗ／ｗのジクロロメタンおよび約１ｗ／ｗの酢酸に溶解し、前記溶液をろ過した（研磨）。
約１０ｗ／ｗのエタノールを追加し、約８．６ｖ／ｗまで蒸留した後、結晶化し、湿った生成物（約３２．３ｇ）をろ過により単離し、約１ｗ／ｗのエタノールで洗う。乾燥は約４０℃、真空で行い、結晶化した乾燥生成物２１．８ｇが得られる。ＩＰＣは、酢酸が約１．６８ｗ／ｗであることを示した。酢酸の量を減らすためには、さらに約１７．８ｇでスラリーとし、材料を約１６．３ｇ、酢酸含有量を約０．２３％とした。分析結果の表１３に報告した値はｎ．ｄ．（非検出）であるが、これは、最初に誤って酢酸含有量が高くなったという分析の問題のため、別にスラリーとしているためである。
【００５６】
本開示は、化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１を調整する方法に関連し、
（ｉ）有機酸およびハロゲン化炭化水素溶媒混合物にＩＯ−１２５粗生成物を溶解することでＩＯ−１２５の溶液を調整する工程と、
（ｉｉ）前記溶液に低級アルキルアルコールを加え、溶液２を得る工程と、
（ｉｉ）前記溶液２から前記生成物を結晶化する工程と
を有する。
【００５７】
本開示の実施形態では、前記有機酸が酢酸であり、ハロゲン化炭化水素溶媒がジクロロメタンであり、前記低級アルキルアルコールがエタノールである。
【００５８】
本開示の別の実施形態では、前記酢酸とジクロロメタンの濃度比が重量で約０．５〜１：２５〜３０、好ましくは重量で約１：２６．５である。
【００５９】
本開示のまださらに別の実施形態では、前記生成物を結晶化する工程が、ＩＯ−１２５溶液の管理された線形冷却、温度の変化、逆溶媒の追加、蒸留、およびシード使用、またはそのいずれかの組み合わせから成る群から選択される技術で行われる。
【００６０】
本開示のさらに別の実施形態では、前記逆溶媒はへプタン、アセトニトリル、およびその組み合わせから成る群から選択される。
【００６１】
本開示のさらに別の実施形態では、化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１を調整する方法は、
（ｉ）酢酸およびジクロロメタン混合物にＩＯ−１２５粗生成物を溶解することでＩＯ−１２５の溶液を調整する工程と、
（ｉｉ）前記溶液にエタノールを加え、溶液２を得る工程と、
（ｉｉ）冷却により前記溶液２から前記生成物を結晶化する工程と
を有する。
【００６２】
本開示のさらに別の実施形態では、前記方法が、さらに、調製した化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１の単離を有する。
【００６３】
本開示のさらに別の実施形態では、前記単離が、溶媒の追加、蒸留、加熱、イオン樹脂の追加、クエンチ、ろ過、抽出、およびその組み合わせから成る群から選択される行為により行われる。
【００６４】
本開示のさらに別の実施形態では、前記方法が約０℃〜約８０℃の温度範囲で行われ、線形冷却が０．１１℃／分の速度で５℃まで、約１時間〜約４８時間にわたって行われる。
【００６５】
本開示のさらに別の実施形態では、前記方法がＩＯ−１２５の粗生成物を精製し、約９４％〜９７％、好ましくは約９４〜９６．６％の純度の前記ＩＯ−１２５化合物を提供する。
【００６６】
ＩＯ−１２５の結晶形態１は、粒子の形態とすることができる。本明細書に用いるとおり、「粒子」の用語は、リポソーム、エマルジョン、小胞、および脂質粒子を含む。一般に、前記粒子は、例えば、球、桿体、楕円、円柱、カプセル、または円盤などの何らかの形状または形態とすることができ、これらの粒子は網状組織または凝集体の一部とすることもできる。制限なく、前記粒子はｎｍ〜ミリメートルのいずれかのサイズとすることができる。一部の実施形態では、前記粒子は微粒子またはナノ粒子である。本明細書に用いるとおり、「微粒子」の用語は約１μｍ〜約１０００μｍの粒子サイズを有する粒子を指す。本明細書に用いるとおり、「ナノ粒子」の用語は約０．１ｎｍ〜約１０００ｎｍの粒子サイズを有する粒子を指す。一般に、本明細書で開示される粒子はナノ粒子であり、約５ｎｍ〜約５００ｎｍの平均粒径を有する。一部の実施形態では、前記粒子が約７５ｎｍ〜約５００ｎｍ、約２５ｎｍ〜約２５０ｎｍ、約５０ｎｍ〜約１５０ｎｍ、約７５ｎｍ〜約１２５ｎｍ、約５０ｎｍ〜約５００ｎｍ、約７５ｎｍ〜約２００ｎｍ、約１００ｎｍ〜約１７５ｎｍ、約１２５ｎｍ〜約１７５ｎｍ、約４０ｎｍ〜約９０ｎｍ、または約５０ｎｍ〜約８０ｎｍの平均粒径を有する。
【００６７】
一部の実施形態では、ナノ粒子の直径を約１ｕｍ未満、例えば、直径約１ｕｍ以下、直径約５００ｎｍ以下、直径約４００ｎｍ以下、直径約３００ｎｍ以下、直径約２００ｎｍ以下、直径約１００ｎｍ以下、直径約５０ｎｍ以下、または直径約１０ｎｍ以下とすることができる。一部の実施形態では、ナノ粒子の直径を１ｕｍ未満、例えば、直径１ｕｍ以下、直径５００ｎｍ以下、直径４００ｎｍ以下、直径３００ｎｍ以下、直径２００ｎｍ以下、直径１００ｎｍ以下、直径５０ｎｍ以下、または直径１０ｎｍ以下とすることができる。一部の実施形態では、組成物中の前記ナノ粒子を直径約１ｎｍ〜約１ｕｍ、例えば、直径約１ｎｍ〜約５００ｎｍ、直径約１ｎｍ〜約２００ｎｍ、直径約１０ｎｍ〜約２００ｎｍ、直径約１００ｎｍ〜約２００ｎｍ、または直径約１０ｎｍ〜約１００ｎｍとすることができる。一部の実施形態では、組成物中の前記ナノ粒子を直径１ｎｍ〜１ｕｍ、例えば、直径１ｎｍ〜５００ｎｍ、直径１ｎｍ〜２００ｎｍ、直径１０ｎｍ〜２００ｎｍ、直径１００ｎｍ〜２００ｎｍ、または直径１０ｎｍ〜１００ｎｍとすることができる。
【００６８】
一部の実施形態では、ナノ粒子を例えば直径約２００ｎｍ未満の特定のサイズとすることができる。特定サイズおよび／またはサイズ範囲のナノ粒子を選択する方法は当該分野で周知であり、制限されない例として、ろ過、沈降、遠心分離、および／またはクロマトグラフ法、例えばＳＥＣを含むことができる。
【００６９】
本開示は、化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１を有するナノ粒子に関する。
【００７０】
本開示の実施形態では、前記ナノ粒子がさらに、コリピッド（co-lipid）および／または安定剤を有し、前記化合物とコリピッドおよび／または安定剤との比率は、９９：１〜１：９９（ｗ／ｗ）、（ｍｏｌ／ｍｏｌ）または（ｖｏｌ／ｖｏｌ）である。
【００７１】
本開示の別の実施形態では、前記コリピッドは大豆ホスファチジルコリンまたは１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタロンアミン−Ｎ−［メトキシ（ポリエチレングリコール）−２０００］またはそのいずれかの組み合わせであり、前記化合物と前記コリピッドの比は約１：１：０．０１〜約１：４：３である。
【００７２】
また、本開示は、賦形剤とともに、ＩＯ−１２５の結晶化合物を有する組成物またはＩＯ−１２５の結晶化合物を有するナノ粒子を提供する。
【化４】
2019521967.tif 000019
【００７３】
本開示の実施形態では、前記賦形剤が造粒剤、結合剤、潤滑剤、崩壊剤、甘味剤、流動促進剤、抗接着剤、帯電防止剤、界面活性物質、抗酸化剤、増粘剤、コーティング剤、着色剤、香料、コーティング剤、可塑剤、防腐剤、懸濁剤、乳化剤、植物セルロース系材料、球形化剤、またはその組み合わせから成る群から選択される。
【００７４】
本開示の別の実施形態では、前記組成物は注射剤、錠剤、凍結乾燥粉末、リポソーム懸濁液、トローチ剤、薬用キャンデー、水性または油性懸濁液、軟膏剤、パッチ、ゲル、ローション、歯磨剤、カプセル、乳剤、クリーム、噴霧剤、滴剤、分散粉末または顆粒、硬質または軟質ゲルカプセルに入った乳剤、シロップ剤、エリキシル剤、および食品サプリメント、またはその組み合わせから成る群から選択される投与形態に製剤化される。
【００７５】
また、本開示は被験者の癌を治療または管理する方法に関し、前記方法は治療有効量の化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１、または化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１のナノ粒子、または化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１または化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１のナノ粒子を有する組成物を、それを必要とする被験者に投与する工程を有する。
【００７６】
本開示の実施形態では、前記癌が乳癌、頭部および頸部癌、卵巣癌、精巣癌、膵臓癌、口腔−食道癌、消化管癌、肝臓癌、胆嚢癌、肺癌、黒色腫、皮膚癌、肉腫、血液癌、脳腫瘍、神経膠芽細胞腫、神経外胚葉起源の腫瘍およびその組み合わせから成る群から選択される。
【００７７】
本開示の別の実施形態では、前記投与は静脈内投与、動脈内投与、膵十二指腸動脈投与、腹腔内投与、肝門投与、筋肉内投与、またはその組み合わせによる。
【００７８】
本開示はさらに、薬物の製造における、化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１または化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１のナノ粒子、または化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１の組成物の使用に関する。
【００７９】
本開示の実施形態では、化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１または化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１のナノ粒子、または化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１の組成物が、乳癌、頭部および頸部癌、卵巣癌、精巣癌、膵臓癌、口腔−食道癌、胃腸癌、肝癌、胆嚢癌、肺癌、黒色腫、皮膚癌、肉腫、血液癌、脳腫瘍、神経膠芽細胞腫、神経外胚葉起源の腫瘍およびその組み合わせから成る群から選択される癌の治療薬の製造に利用される。
【００８０】
また、本開示は、薬物として使用するための、化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１または化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１のナノ粒子、または化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１の組成物に関する。
【００８１】
本開示の実施形態では、化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１、化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１のナノ粒子、または化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１の組成物は、乳癌、頭部および頸部癌、卵巣癌、精巣癌、膵臓癌、口腔−食道癌、胃腸癌、肝癌、胆嚢癌、肺癌、黒色腫、皮膚癌、肉腫、血液癌、脳腫瘍、神経膠芽細胞腫、神経外胚葉起源の腫瘍およびその組み合わせから成る群から選択される癌の治療薬として利用するためのものである。
［実施例］
【００８２】
以下の実施例は、本発明の一部の実施形態および態様を図示している。関連分野の当業者には、本発明の精神または範囲を変更せずに様々な修飾、追加、置換などを行うことができ、そのような修飾および変形形態は以下の請求項に定義されるとおり、本発明の範囲に含まれることは理解される。以下の実施例は本発明を制限するものでは決してない。
【００８３】
本開示／実施例のすべての結晶実験試験は、ＩＯ−１２５の２θ回折図（図１８）、ＴＧ／ＤＴＡサーモグラム（図１９）およびＨＰＬＣクロマトグラム（図２０）で特徴付けられる「アモルファスＩＯ−１２５」（粗化合物）を用いて行っている。
【００８４】
実施例は、化合物ＩＯ−１２５の結晶形態１の調製を示す：
【実施例１】
【００８５】
メタノール：ジクロロメタンを用いた粗化合物２５の結晶化：粗化合物２５（ＣＯＭＰ  １４）の結晶化は、メタノール：ジクロロメタン（２０：８０％ｖ／ｖ）および（１０：９０％ｖ／ｖ）溶媒系を用いて行う。ＣＯＭＰ  ２５粗生成物の結晶化スクリーニングで成功し、回収された固体のＸＲＰＤ  ２θ回折図を図１に示す。
【実施例２】
【００８６】
ＣＯＭＰ  ２５粗生成物のシードを用いた冷却結晶化：
約２０ｍｇのＣＯＭＰ  ２５粗生成物を２ｍｌのガラスバイアルに計量し、約２５℃で前記実験系に１００μＬのメタノール：ジクロロメタン（１０：９０％ｖ／ｖ）またはメタノール：ジクロロメタン（２０：８０％ｖ／ｖ）溶媒系を加える。使用前に、すべての溶媒を予乾燥した３Ａモレキュラーシーブス（適切な場合）で乾燥させる。少量の結晶ＣＯＭＰ  ２５をシードとして前記実験系に加える。前記実験系は約４０℃に加熱する。前記実験系を約０．１１℃／分で約５℃まで冷却する。前記実験系を約５℃で約３時間攪拌し、温度サイクルは一晩（約１８時間）約０．２℃／分で５℃〜４０℃とする。前記固体を周囲温度（約２２℃）で遠心分離により単離し、ＸＲＰＤにより解析する。メタノール：ジクロロメタン（１０：９０％ｖ／ｖ）。メタノール：ジクロロメタン（２０：８０％ｖ／ｖ）では弱い結晶材料が回収された。図２は温度サイクル後の固体のＸＲＰＤ  ２θ解説図を示し、図３はシードを使用しメタノール：ジクロロメタン（１０：９０％ｖ／ｖ）から得た結晶材料のＰＬＭ顕微鏡写真を示す。
【実施例３】
【００８７】
ＣＯＭＰ  ２５粗生成物の冷却結晶化（２０ｍｇ試験）：
ＣＯＭＰ  ２５粗生成物を２ｍｌのサンプルバイアルに計量し、約２５℃で既知量の溶媒（メタノール：ジクロロメタン［１０：９０％］、エタノール：ジクロロメタン［１０：９０％または２０：８０％］）を加える。前記サンプルを約２５℃で攪拌し、約０．１１℃／分で２５℃から５℃に冷却し、再び約５℃で約３時間攪拌し、温度サイクルを約０．２℃／分で約５℃〜４０℃とする。前記固体を遠心分離により約２５℃で単離し、ＸＲＰＤにより解析する。（プロトコール４の）表４は冷却結晶化に用いた条件をまとめ、（プロトコール４の）表５は２倍スケールでの冷却結晶化の条件をまとめている。（プロトコール４の）表６および７は、冷却結晶化試験の結果と観察をまとめている。濃度約１５０ｍｇ／ｍｌでの温度サイクル後の典型的固体のＸＲＰＤ  ２θ回折図を図４に示す。表１２は形態１のＩＯ−１２５のＸＲＰＤピーク表を示す。
【実施例４】
【００８８】
ＣＯＭＰ  ２５粗生成物の逆溶媒／冷却結晶化：ＣＯＭＰ  ２５粗生成物約５０ｍｇを２ｍＬのサンプルバイアルに計量し、約２５℃で適量の各溶媒（メタノール：ジクロロメタン［１０：９０％または２０：８０％または３０：７０％］、エタノール：ジクロロメタン［１０：９０％または２０：８０％］）を加える。各逆溶媒を約２５℃で２５μＬずつ適切なバイアルに加える。前記実験系を約２５℃から約５℃まで、０．１１℃／分で冷却し、約３時間で約５℃に攪拌する。前記実験系の温度サイクルは、一晩（約１８時間）、約０．２℃／分で約５℃〜４０℃とする。薄いスラリーまたは透明な溶液が認められた実験系に、さらに約２５℃で逆溶媒を加える。前記実験系を約２５℃から約５℃まで、約０．１１℃／分で冷却し、再び約５℃で約３時間攪拌する。前記実験系の温度サイクルは、一晩（約１８時間）、約０．２℃／分で約５℃〜４０℃とする。固体材料を観察した実験では、前記固体を周囲温度（約２２℃）で遠心分離により単離し、ＸＲＰＤにより解析する。単離したサンプルを真空、周囲温度で一晩乾燥させる。逆溶媒として２−メチルＴＨＦを用い、メタノール：ジクロロメタン溶媒混合物およびメタノール：ジクロロメタン（３０：７０％ｖ／ｖ）溶媒系を用いて、前記結晶化によりゲル様材料が形成する。逆溶媒としてヘプタンを用い、ほとんどの溶媒系で結晶材料が認められる。［プロトコール５の］表８および９に示すとおり、逆溶媒としてアセトニトリルを用い、ほとんどの溶媒系で部分結晶材料が認められる。温度サイクル後、逆溶媒としてヘプタンを用いた固体のＸＲＰＤ  ２θ回折図を図５および６に示す。
【実施例５】
【００８９】
ＣＯＭＰ  ２５粗生成物の冷却結晶化（２００〜２５０ｍｇ試験）：ＣＯＭＰ  ２５粗生成物の各重量を２０ｍＬのサンプルバイアルに計量し、各溶媒系（メタノール：ジクロロメタン［１０：９０％または２０：８０％］）の適量を約２５℃で加えて前記サンプルを溶解する。前記実験系を約０．１℃／分で約５℃に冷却し、５℃で２時間攪拌した後、温度サイクルを約５℃〜４０℃とし、約２時間で約４０℃まで加熱する（約０．３℃／分）。前記サンプルを再び約４０℃で約２時間攪拌し、約５℃まで約２時間で冷却する（約０．３℃／分）。前記サンプルをさらに約５℃で約２時間攪拌する。サンプルを真空下、周囲温度（約２２℃）においてワットマンろ紙Ｎｏ．１を用いたブフナー漏斗でろ過することで単離し、真空下、周囲温度で一晩（約１８時間）乾燥させた。次に、前記固体材料をＸＲＰＤおよびＰＬＭにより解析した。結果を表１０にまとめ（プロトコール６を参照）、図７および８に示す。典型的な冷却結晶化２のＨＰＬＣクロマトグラムを図９に示す。
【実施例６】
【００９０】
ＣＯＭＰ  ２５粗生成物のシードを用いた冷却結晶化（２５０ｍｇスケール）：ＣＯＭＰ  ２５粗生成物の各重量を２０ｍＬのサンプルバイアルに計量し、各溶媒系（メタノール：ジクロロメタン［１０：９０％または２０：８０％］）の適量を約２５℃で加えて前記サンプルを溶解する。結晶ＣＯＭＰ  ２５をシードとして前記実験系に加える。前記実験系を約０．１℃／分で約５℃まで冷却し、約５℃で約２時間攪拌し、温度サイクルを約５℃〜４０℃とし、約２時間で約４０℃まで加熱し（約０．３℃／分）、続いて約４０℃で約２時間攪拌し、約２時間で約５℃まで冷却し（約０．３℃／分）、再び約５℃で約２時間攪拌する。サンプルを真空下、周囲温度（約２２℃）においてワットマンろ紙Ｎｏ．１を用いたブフナー漏斗でろ過することで単離し、真空下、周囲温度で一晩（約１８時間）乾燥させる。次に、前記固体材料をＸＲＰＤおよびＰＬＭにより解析した。結果を表１１にまとめ（プロトコール７を参照）、図１０および１１に示す。
【００９１】
濃度１６０ｍｇ／ｍｌのメタノール：ジクロロメタン（１０：９０％ｖ／ｖ）溶媒混合物：回収した材料は結晶であり、ＨＰＬＣ純度は約９６．６５％であった。この実験系で計算した収率は約３６％である。
【００９２】
濃度１９０ｍｇ／ｍｌのメタノール：ジクロロメタン（２０：８０％ｖ／ｖ）溶媒混合物：回収した材料は結晶であり、ＨＰＬＣ純度は約９６．２１％であった（図１２）。この実験系で計算した収率は約４１％である。
【実施例７】
【００９３】
シード使用、逆溶媒、および冷却結晶化：
ＣＯＭＰ  ２５粗生成物約２５０ｍｇを２０ｍＬのサンプルバイアルに計量し、各溶媒系（メタノール：ジクロロメタン［１０：９０％または２０：８０％］）の適量を約２５℃で加えて前記ＩＯ−１２５を溶解する。逆溶媒としてヘプタンを約２５０μＬずつ加える。各実験系に合計約１ｍｌのヘプタンを加える。前記実験系は結晶ＣＯＭＰ  ２５（約５ｍｇ）をシードとして使用する。前記実験系を約２５℃で約１時間攪拌し、約０．１℃／分で約５℃まで冷却し、約５℃で約２時間攪拌し、温度サイクルを約５℃〜４０℃とし、約２時間で約４０℃まで加熱し（約０．３℃／分）、続いて約４０℃で約２時間攪拌し、約２時間で約５℃まで冷却し（約０．３℃／分）、再び約５℃で約２時間攪拌する。前記実験系を真空下、周囲温度（約２２℃）においてワットマンろ紙Ｎｏ．１を用いたブフナー漏斗でろ過することで単離し、真空下、周囲温度で一晩（約１８時間）乾燥させる。次に、前記固体材料をＸＲＰＤ（図１３）およびＰＬＭ（図１４）により解析する。３つの技術すべてを併用し、溶媒系から生成した材料に差があるか否かを確認し、最適な結晶化条件も評価した。収率の計算を行い、表１２にまとめている（プロトコール８を参照）。逆溶媒としてヘプタンを用い、メタノール：ジクロロメタン（２０：８０％ｖ／ｖ）により単離した固体のＨＰＬＣクロマトグラムを図１５に示す。
【００９４】
本結晶ＩＯ−１２５（形態１）のＸＲＰＤピーク表を表１３に示す。
【００９５】
【表１３】
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【実施例８】
【００９６】
有機酸およびハロゲン化炭化水素溶媒を用いた結晶化：
３８．０ｇのＩＯ−１２５乾燥粗生成物に約４ｗ／ｗの水を入れる。約７０℃で１．５時間攪拌し、冷却、約１６ｗ／ｗのアセトンを追加し、３５．８ｇの結晶化ＩＯ−１２５をろ過により単離し、約１ｗ／ｗの水で洗う。スラリーにもう一度これを繰り返すと、約５０℃、真空状態で乾燥した後３４．４ｇの乾燥粗生成物が得られる。これを次に約２６．５ｗ／ｗのジクロロメタンおよび約１ｗ／ｗの酢酸に溶解し、前記溶液をろ過した（研磨）。
約１０ｗ／ｗのエタノールを追加し、約８．６ｖ／ｗまで蒸留した後、結晶化し、湿った生成物（３２．３ｇ）をろ過により単離し、約１ｗ／ｗのエタノールで洗う。乾燥は約４０℃、真空で行い、結晶化した乾燥生成物約２１．８ｇが得られる。ＩＰＣは、酢酸が約１．６８ｗ／ｗであることを示した。酢酸の量を減らすためには、さらに約１７．８ｇでスラリーとし、材料を１６．３ｇ、酢酸含有量を０．２３％とした。表１４は、試験ＩＯ−１２５結晶形態の分析結果を示す。
【００９７】
【表１４】
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したがって、本開示は脂質、白金を用いた化合物、特にＩＯ−１２５化合物の結晶形態を達成することができた。多数の結晶化条件を用いた広範な実験により、化合物ＩＯ−１２５の特殊な結晶形態１が得られている。本方法は簡単であり、費用対効果が高く、商業規模に拡張可能であり、有効期間の特性が良好で取り扱いやすく、結晶製剤は癌を含む様々な医療条件に利用可能である。
【００９８】
すべての特許、および文献参考資料、発行済み特許、公開済み特許出願書類、および同時係属の特許出願書類を含む他の出版物は、本出願書類で引用されるとおり、例えば本明細書に説明される技術と関連して使用されるかもしれない、そのような出版物で説明される方法を説明および開示する目的で、参照により本明細書に明白に組み込まれる。これらの出版物は、本出願書類の提出日前にその開示のためのみに提供される。この点で、本発明者には先行発明に基づき、またはいかなる理由でも、そのような開示に先行する権利はないことの承認として解釈されるものはない。これらの文書の内容に関する前記日付または表現についてのすべての記載は、当該出願者が得た情報に基づき、これらの文書の日付または内容が正確であることの承認となるものではない。
【００９９】
本発明は、本明細書に説明される特定の方法、プロトコール、および試薬などは変化する可能性があるため、これらに制限されないことは理解されるものとする。本明細書で使用される専門用語は特定の実施形態のみを説明することを目的としており、当該請求項のみで限定される本発明の範囲を制限する意図はない。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【国際調査報告】
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