(57)【要約】  粒径や偏光弾性散乱に基づき、リアルタイムで、個々の浮遊生物学的、非生物学的粒子を検出し分類する方法、装置及びシステム。自動蛍光発光含有量も、さらなる直交分類のために、粒径や偏光弾性散乱に加えて使ってもよい。偏光弾性散乱で、粒子形態、屈折率、内部の非対称構造及び分子の光学活性から得た直線又は円偏光解消度が個々の浮遊粒子を分類するために用いられる。また、円強度微分散乱（ＣＩＤＳ）又は直線強度微分散乱（ＬＩＤＳ）が個々の粒子を識別するために使用される。
2019520551.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
単浮遊粒子を検出し分類する方法であって、前記方法は、
（ａ）光学検出器の光学感知ゾーンにたくさんの浮遊粒子を有する空中サンプルを検出し、ここに前記空中サンプルは光学検出器を囲む環境から採取されものであり、
（ｂ）前記光学感知ゾーンにある単浮遊粒子を第１の偏光ビームで照らし、
（ｃ）前記第１の偏光ビームでの前記単浮遊粒子の照明によって生ずる弾性光散乱を検出し、
（ｄ）前記第１の偏光ビームでの前記単浮遊粒子の照明により検出した弾性光散乱を使用して、次の、
（ｉ）前記単浮遊粒子の大きさ、と
（ｉｉ）前記単浮遊粒子の第１の値、ここに前記第１の値は前記単浮遊粒子の偏光解消値と前記単浮遊粒子の強度微分弾性散乱値のうち１つである、
とを決定し、そして
（ｅ）前記単浮遊粒子の大きさや前記単浮遊粒子の第１の値に基づく前記単浮遊粒子の少なくとも１つの特性を決定する。
【請求項２】
請求項１に記載の方法において、
（ａ）前記単浮遊粒子が１０ミクロン以下の空気力学的径を有している。
【請求項３】
請求項１に記載の方法において、
（ａ）前記少なくとも１つの特性は、前記単浮遊粒子を生物学的か非生物学的か見分ける。
【請求項４】
請求項１に記載の方法において、
（ａ）前記少なくとも１つの特性は、前記単浮遊粒子を生物学的粒子の特定類型と見極める。
【請求項５】
請求項１の方法は、さらに、
（ａ）第２の偏光ビームを備えた前記光学視界領域の単浮遊粒子を照らし、ここに前記第２の偏光ビームは前記第１の偏光ビームから予め設定した間隔を設けられ、前記第１の偏光ビームが水平偏光ビームで、第２の偏光ビームが垂直偏光ビームとされ、そして、
（ｂ）前記水平偏光ビーム及び前記垂直偏光ビームと前記単浮遊粒子の照明に起因する弾性光散乱を検出する工程を含む。
【請求項６】
請求項５の方法は、さらに、
（ａ）請求項５の検出工程の前に、前記水平偏光ビーム及び前記垂直偏光ビームと前記単浮遊粒子の照明に起因する弾性光散乱を水平偏光フィルターに透過させる工程を含む。
【請求項７】
請求項６の方法において、
（ａ）第１の値が直線偏光値である。
【請求項８】
請求項１の方法において、さらに：
（ａ）第２の偏光ビームを備えた前記光学視界領域の単浮遊粒子を照らし、ここに前記第２の偏光ビームは前記第１の偏光ビームから予め設定した間隔を設けられ、前記第１の偏光ビームが右回り円偏光ビームで、第２の偏光ビームが左回り円偏光ビームとされる工程を含む。
【請求項９】
請求項８の方法において、
（ａ）第１の値が円偏光解消値と円強度微分散乱値のうちの１つである。
【請求項１０】
請求項１の方法において、
（ａ）前記第１の値が偏光解消値である場合、次の等式
（ｉ）δＮ ＝［ＩＶ］／［ＩＨ ＋ ＩＶ］
ここに、δＮが正常化された偏光解消を表し、ＩＨは水平偏光の弾性散乱強度を表して照明ビームの偏光状態と同一であり、ＩＶは垂直偏光の強度を表し、
（ｉｉ）δ =  ＩＨＶ／ＩＨＨ
ここに、δが偏光解消を表し、ＩＨＨは水平偏光と水平偏光入射ビームの散乱強度を表し、ＩＨＶは垂直偏光入射ビームの強度を表し、
（ｉｉｉ）δ+C =［I⊥］／［I||+ I⊥］
ここに、δ+C は照明源として右回り円偏光を使うときの円偏光解消を表し、I⊥ 垂直偏光の弾性散乱強度を示し、I||は平行偏光の弾性散乱強度を表し、
（ｉｖ）δ-C =［I||］／［I||+ I⊥］
ここに、δ-C は照明源として左回り円偏光を使うときの円偏光解消を表し、I⊥ 垂直偏光の弾性散乱強度を示し、I||は平行偏光の散乱強度を表す、
の少なくとも１つを使って前記偏光解消値を決定し、そして
（ｂ）前記第１の値が強度微分弾性散乱値である場合、次の方程式
（ｉ）［ＩＬ（θ）−ＩＲ（θ）］／［ＩＬ（θ）＋ＩＲ（θ）］
ここに、ＩＬ（θ）は入射ビームが左回り円偏光されるとき角度θで散乱した光で、ＩＲ（θ）は入射ビームが右回り円偏光であるとき角度θで散乱する光であり、そして、
（ｉｉ）［ＩＨ（θ）−ＩＶ（θ）］／［ＩＨ（θ）＋ＩＶ（θ）］
ここに、ＩＨ（θ）は入射ビームが水平偏光されるとき角度θで散乱した光で、ＩＶ（θ）は入射ビームが垂直偏光であるとき角度θで散乱する光であるの少なくとも１つを使って前記偏光解消値を決定する。
【請求項１１】
単浮遊粒子を検出し分類する方法であって、前記方法は、
（ａ）真空源を使ってたくさんの浮遊粒子を有する空中サンプルを光学検出器の周辺環境から光学検出器の光学感知ゾーンに引き込み、
（ｂ）前記光学感知ゾーンの単浮遊粒子に水平偏光ビームを照らし、
（ｃ）前記光学感知ゾーンの単浮遊粒子に垂直偏光ビームを照らし、ここにおいて、前記垂直偏光ビームは前記水平偏光ビームが前記単浮遊粒子を照らす前又は後に前記単浮遊粒子を照らすものとし、
（ｄ）前記水平偏光ビームと垂直偏光ビームによる前記単浮遊粒子の照明に起因する弾性光散乱を検出し、そして
（ｅ）段落（ｄ）の検出工程の前に、前記水平偏光ビームによる前記単浮遊粒子の照明に起因する弾性光散乱を水平偏光フィルターに透過させる。
【請求項１２】
請求項１１の方法は、
（ａ）請求項１１の段落（ｄ）の検出工程の前に、前記垂直偏光ビームによる前記単浮遊粒子の照明に起因する弾性光散乱を水平偏光フィルターに透過させる更なる工程を含む。
【請求項１３】
請求項１１の方法は、
（ａ）請求項１１の段落（ｄ）の検出工程の前に、前記垂直偏光ビームによる前記単浮遊粒子の照明に起因する弾性光散乱を垂直偏光フィルターに透過させる更なる工程を含む。
【請求項１４】
請求項１２の方法は、
（ａ）前記単浮遊粒子の照明に起因する検出弾性散乱を使って、次の
（ｉ）単浮遊粒子の大きさ、と
（ｉｉ）前記単浮遊粒子の直線偏光解消値
とをそれぞれ決定し、
（ｂ）前記単浮遊粒子の大きさと前記単浮遊粒子の直線偏光解消値に基づいて前記単浮遊粒子の少なくとも１つの特性を決定する更なる工程を含む。
【請求項１５】
請求項１１の方法において、
（ａ）前記単浮遊粒子が０．５〜１．５ミクロンの範囲の空気力学的径を有している。
【請求項１６】
請求項１１の方法において、
（ａ）前記単浮遊粒子が１０ミクロン以下の空気力学的径を有している。
【請求項１７】
請求項１１の方法は、さらに、
（ａ）前記水平偏光ビームと垂直偏光ビームによる前記単浮遊粒子の照明に起因する弾性光散乱を直交蛍光発光検出チャンネルに透過させる工程を含む。
【請求項１８】
請求項１２の方法は、さらに、
（ａ）単独の光検出器に前記水平偏光フィルターを透過する弾性光散乱を検出する工程を含む。
【請求項１９】
単浮遊粒子を検出して分類する単浮遊粒子光学分析装置であって、該単浮遊粒子光学分析装置は、
（ａ）光学感知ゾーン、
（ｂ）前記光学感知ゾーンが配置される環境から光学検出器の光学感知ゾーンにたくさんの浮遊粒子を有する空中サンプルを引き込むための真空源、
（ｃ）前記光学感知ゾーンの単浮遊粒子を少なくとも１つの偏光ビームで照明する手段、
（ｄ）前記単浮遊粒子の照明に起因する弾性光散乱を検出するための光検出器、
（ｅ）前記単浮遊粒子の照明に起因する検出弾性光散乱を使って、
（ｉ）前記単浮遊粒子の大きさ、及び
（ｉｉ）前記単浮遊粒子の第１の値、ここに第１の値は前記単浮遊粒子の偏光解消値と前記単浮遊粒子の強度微分弾性散乱値のうち１つである、
のそれぞれを決定するプロセッサを含み、
（ｆ）さらに前記プロセッサは、前記単浮遊粒子の大きさ及び前記単浮遊粒子の第１の値に基づく前記単浮遊粒子の少なくとも１つの特性を決定するように構成されている。
【請求項２０】
請求項１９の単浮遊粒子光学分析装置において、
（ａ）前記単浮遊粒子は１０ミクロン以下の空気力学的径を有している。
【請求項２１】
請求項１９の単浮遊粒子光学分析装置において、
（ａ）少なくとも１つの特性は前記単浮遊粒子を生物学的か非生物学的か見分ける。
【請求項２２】
（ａ）前記少なくとも１つの特性は前記単浮遊粒子を生物学的粒子の特定類型と見極める。
【請求項２３】
請求項１９の単浮遊粒子光学分析装置において、
（ａ）前記照明手段がレーザー、１／４波リターダ及び複屈折結晶を含み、前記１／４波リターダが前記レーザーによって発生されたビームを円状偏光し、そして、前記複屈折結晶が予め設定された距離だけ間隔を開けられた垂直水平偏光ビームを発生し、且つ、前記複屈折結晶は、前記単浮遊粒子が前記光学感知ゾーンを透過する際、前記垂直水平偏光ビームによって照明されるように前記光学感知ゾーンに対応して配置されている。
【請求項２４】
請求項２３の単浮遊粒子光学分析装置において、さらに
（ａ）前記弾性光散乱が前記光検出器で検出される前に、前記垂直水平偏光ビームによる前記単浮遊粒子の照明に起因する弾性光散乱が透過するように、前記光学感知ゾーンと前記光検出器に対応して配置される水平偏光フィルターを含んでいる。
【請求項２５】
単浮遊粒子を検出し分類する方法であって、該方法は、
（ａ）光学検出器の光学感知ゾーンにたくさんの浮遊粒子を有する空中サンプルを検出し、ここに前記空中サンプルは光学検出器を囲む環境から採取されものであり、
（ｂ）前記光学感知ゾーンにある単浮遊粒子を第１の偏光ビームで照らし、
（ｃ）前記第１の偏光ビームでの前記単浮遊粒子の照明により
（ｉ）粒子自動蛍光、と
（ｉｉ）前記単浮遊粒子の第１の値で、この第１の値は前記単浮遊粒子の偏光解消値である、をそれぞれ決定し、そして
（ｄ）粒子自動蛍光に基づく前記単浮遊粒子と前記単浮遊粒子の前記第１の値のうち少なくとも１つの特性を決定する。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、エアロゾル検光器に関するものであり、詳しくは、空中浮遊する生物学的及び非生物学的粒子のリアルタイム検出及び分類のための光学分析装置に関する。
【背景技術】
【０００２】
空中浮遊する生物学的及び非生物学的粒子をリアルタイム検出及び分類する方法とシステムの発展において、ここ１５年間、重要な進歩がある。ほとんどの方法とシステムは、非生物学的粒子から生物学的粒子を識別するために粒子サイズ測定とレーザー誘起蛍光（ＬＩＦ）を利用する光学アプローチに基づいている。これらの方法は、生物学的粒子によく見られる刺激的な内因性蛍光物質に特有な様々の波長を用いる照明アプローチを含んでいる。ＬＩＦに基づくアプローチもまた、向上した分類には異なる波長で作動する複数の励起源を含んでいる。他のアプローチは、単粒子のラマン分光法及びフーリエ変換赤外分光法と同様に、単粒子のミネラル含有量と自己蛍光発光の両方を測定するＬＩＦ検出を伴ったレーザーブレイクダウン分光法を含んでいる。
【０００３】
戦場や本土防衛のような地域における改善された環境生物学的監視、屋内や屋外の空気質監視、空気院内感染制御、生物製剤や他の製造作業、下水処理場、動物生産小屋や常時監視従業員が早期警告する他の作業の汚染制御監視、及び微生物、ウイルスや他類の生物学的粒子の有害曝露の防止を発展させる必要がある。守備目的に関しては、生物学的攻撃の最も致命的な形はエアゾール化薬剤によるものである。現在まで、粒子サイズ測定とレーザー誘起蛍光の両方を利用する光学法が、戦場や本土防衛に適用されてきた。このアプローチは、特に、屋内の生物攻撃を監視する保護適用を構築するために効果的な早期警告性能であることを立証した。ある程度、ＬＩＦ系検出を用いるリアルタイム空中浮遊微生物監視が生物製剤製造の汚染制御監視や他のクリーンルーム作業に適用されてきた。これらのＬＩＦ系生物学的粒子計測法は有益な早期警告システムであることを示しているが、それらは制限がないわけではなく、重要な改良の余地が存在する。
【０００４】
ＬＩＦ系生物学的微粒子検出には３つの主な制限がある。第一に、単一の植物型又は胞子型有機体を検出する能力である。現分野のＬＩＦ系生物学的粒子検出器は、エアロゾル粒子毎に、栄養細胞と、胞子集合粒子又は多数の栄養細胞若しくは胞子を含む粒子の検出に限定される。生体防御やその他の適用に、単一の栄養細胞や胞子の検出が要求され、充分な保護または効果的な汚染制御監視を提供することが必要である。ＬＩＦ系アプローチでは、相当な光パワーを持ったレーザー源が使われなければ、不足量の光は、粒子サイズが０．５〜１．５ミクロン径のとき非生物学的粒子から生物学的粒子を確実且つ正確に分類するために、蛍光励起から放射される。これは特に、大半の事例では、２５０〜３００ｎｍの波長範囲のような短波長に対して適用されるだけでなく、３５０〜４５０ｎｍの波長範囲のような長い励起波長に対してあてはまる。
【０００５】
第二に、非生物学的粒子と生物学的粒子を識別したり、細菌胞子、カビ胞子、栄養細菌、ウイルス集合体、タンパク毒素集合体、及び細菌、ウイルスまたは菌類を含有する媒介粒子のような生物学的粒子類型を識別したりする能力は、非常に制限される。非生物学的と生物学的の識別の最小限の必要性とともに、ＬＩＦ系粒子検出アプローチの利用は無機粒子と非蛍光人工粒子からの識別には有益であるが、紙粒子または光学増白剤を含む衣服粒子のような蛍光体をドープされた粒子や、皮膚細胞断片や動物麟屑のような内部蛍光を持ったよく遭遇する粒子に対しては重大な制限に直面している。ＬＩＦ系多波長励起アプローチの利用は、単一源アプローチを超えた幾つかの改良された分類を有するが、当該アプローチは広範囲にわたる適用には費用効率が良くない。
【０００６】
第三に、現行のＬＩＦ系アプローチは、対象の生物学的粒子濃度レベルを検出する能力、特に、空気リットル当たりの２、３の粒子に対するごくわずかの検出が要求される適用において制限される。適時に検出し、よく遭遇するエアロゾル背景からこれらの低いレベルを識別するのは、ＬＩＦ系生物学的粒子検出アプローチにはとても難しくなる。現行システムは、毎分１〜３リットルの空気採取流量に制限されている。これは、低濃度の生物学的粒子の存在を検出し警報を発するためのゆっくりとした応答時間や長い採取時間と同等である。これを補填するためのエアロゾル濃縮器の利用は、識別問題が採取流量や背景のエアロゾル濃度の増加と共に増えるので、その適用に制限される。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明の好ましい実施の形態は、偏光弾性散乱に基づき、リアルタイムに、個々の空中浮遊生物学的及び非生物学的粒子を検出し分類する方法、装置並びにシステムに関するものである。粒径及び／又は自発蛍光含有量は更なる直交分類の偏光弾性散乱と一緒に用いてもよい。偏光弾性散乱で、粒子形態、屈折率、内部の非対称構造及び分子光学活性から産出された直線又は円偏光解消度は個々の空中浮遊粒子を分類するために使用することができる。その上、円強度微分散乱（ＣＩＤＳ）及び直線強度微分散乱（ＬＩＤＳ）は個々の粒子を分類する手段を提供する。ＣＩＤＳは、主に、生物学的粒子に一般的に見られる不斉高分子複合体及び集合体由来のような、粒子の固有分子光学活性及び内部非対称構造に基づいている。ＬＩＤＳは、粒子の形状又は形態、屈折率、固有の光学活性及び内部非対称構造に基づいている。
【０００８】
直線偏光解消検出を使用するとき、粒子から散乱された光の正規化偏光解消は関係式：
δＮ ＝［ＩＶ］／［ＩＨ ＋ ＩＶ］
によって決定できる。
δＮが正規化された偏光解消を表すとき、ＩＨは水平偏光の散乱強度を表して照明ビームの偏光状態と同様であり、ＩＶは垂直偏光の強度を表す。他の構成では、直交する直線偏光の２つの入射ビームを個々の粒子の照明に使用することができ、散乱水平偏光が偏光解消度を測定するのに使用される。この構成では、直交する直線偏光入射ビームが空間的に２つに分離されている間に収集された水平偏光の散乱強度の割合は個々の粒子を分類するために使用することができ、関係式：
δ =  ＩＨＶ／ＩＨＨ
によって得られる。
δが偏光解消を表すとき、ＩＨＨは水平偏光と水平偏光入射ビームの散乱強度を表し、ＩＨＶは垂直偏光入射ビームの強度を表す。
【０００９】
円偏光検出を使用するとき、粒子から散乱した光の正規化偏光解消は関係式：
δ+C =［I⊥］／［I||+ I⊥］
δ-C =［I||］／［I||+ I⊥］
によって決定できる。
δ+C は照明源として右回り偏光を使うときの円偏光解消を表し、δ-C は照明源として左回り偏光を使うときの円偏光解消を表し、I⊥ は垂直偏光の散乱強度を示し、I||は平行偏光の散乱強度を表す。このアプローチで、単一円偏光源が照明に使用されるか、左右回り円偏光の２つの入射ビームが個々の粒子の照明に使用され、散乱した垂直及び平行の偏光が偏光解消度を測定するために使用される。二重ビーム構成において、左右回りの円偏光入射ビームが空間的に２つに分離されている間に収集された垂直及び平行の偏光散乱強度の比率は個々の粒子を分類するために使用することができる。
【００１０】
ＣＩＤＳ検出を使用するとき、左右の円状偏光の微分散乱は生体高分子の円偏光二色性に寄与する。粒子又は高分子複合体の直径が励起波長の２０分の１を超えると、円偏光二色性に対する微分散乱寄与が重要になる。キラル粒子の吸収帯外で励起波長を使用すると、微分散乱のみが円偏光二色性に寄与する。キラル散乱粒子はシグナルと大きさが共に相対的向き及びキラル散乱要素間距離に直接関与する微分散乱シグナルを産出することになる。このシグナルは定量的に得られ、非生物学的粒子から生物学的粒子の識別や他からの１つの生物学的類型粒子を識別するために使用することができる。例えば、タンパク質におけるＤＮＡ分子又はαヘリックス成分のようなヘリカル構造にとって左右の円状偏光の微分散乱は、励起源の波長と同様、ヘリックスのピッチや半径に対して高感度である。散乱角度θにおける円強度微分散乱（ＣＩＤＳ）は次の関係式：
［ＩＬ（θ）−ＩＲ（θ）］／［ＩＬ（θ）＋ＩＲ（θ）］
で決定することができる。
ＩＬ（θ）は入射ビームが左回り円偏光であるとき角度θで散乱した光で、ＩＲ（θ）は入射ビームが右回り円偏光であるとき角度θで散乱する光である。ＣＩＤＳはサイズ、形状、又は屈折率に高感度ではないが、全ての空中浮遊細菌、菌類、ウイルスやタンパク質凝集分子に存在する生体高分子のキラリティに対して高感度である。
【００１１】
ＬＩＤＳ検出が使用されるとき、垂直及び水平偏光の微分散乱が形状、粒子の屈折率及びキラル含有量、又は具体的には、内部の非対称構造及び分子光学活性に対して高感度である。散乱角度θにおける線形強度微分散乱（ＬＩＤＳ）は関係式：
［ＩＨ（θ）−ＩＶ（θ）］／［ＩＨ（θ）＋ＩＶ（θ）］
で決定することができる。
ＩＨ（θ）は入射ビームが水平偏光されるとき角度θで散乱した光で、ＩＶ（θ）は入射ビームが垂直偏光であるとき角度θで散乱する光である。ＬＩＤＳはサイズ、形状、及び屈折率に高感度であり、また全ての空中浮遊細菌、菌類、ウイルスやタンパク質凝集分子に存在する生体高分子のキラリティに対しても高感度である。
【００１２】
直線偏光解消検出を使用するとき、本発明の好ましい実施形態は、粒子が照明領域を通過する際、偏光解消が単一源から発生した２つの垂直に間隔を開けたビームで水平から垂直に交互に起こるように直線偏光ビームで粒子を照らすこととした単粒子を検出し分類する方法を含んでいる。それによる水平偏光フィルターを用いる単一の検出器は単粒子に偏光及び偏光解消された散乱シグナルを取り込む。粒子のサイズは水平偏光源で弾性散乱強度を測定することによって決定できる。特定の粒径範囲の偏光解消度は、それから、様々の生物学的及び非生物学的類型エアロゾルに対するシグネチャーのライブラリと比較してもよい。この方法では、源の励起の選択が生物学的粒子によく遭遇される望ましい内因性蛍光体を励起できるものであれば、直交蛍光検出チャンネルを追加することができる。
【００１３】
円偏光解消検出を使用するとき、本発明の１つの好ましい実施形態は、粒子が照明領域を通過する際、単一源から発生した２つの垂直に間隔を開けられたビームで偏光が右回りから左回りに交互に起きる円偏光ビームで粒子を照らすこととした単粒子を検出し分類する方法を含んでいる。２つの検出器を備えた偏光ビームスプリッタは、単粒子上に平行及び垂直に偏光された散乱シグナルを取り込む。粒子のサイズは、２つの偏光散乱シグナルの強度を合計することによって決定される。特定の粒径範囲の偏光解消度は、それから、様々の生物学的及び非生物学的類型エアロゾルに対するシグネチャーのライブラリと比較してもよい。この方法では、源の励起の選択が生物学的粒子によく遭遇される望ましい内因性蛍光体を励起できるものであれば、直交蛍光検出チャンネルを追加することができる。
【００１４】
ＣＩＤＳ検出を使用するとき、本発明の好ましい実施形態は、粒子が単粒子上の円強度微分散乱シグナルを取り込むことによって照明領域を通過して、偏光が単一源から発生した２つの垂直に間隔を開けられたビームと左から右（右から左）回りに交互に起きる円偏光ビームで粒子を照らすこととした単粒子を検出し分類する方法を含んでいる。粒子のサイズは、弾性散乱強度を測定することによって決定される。左回り及び右回り円散乱シグナルの強度はエアロゾルイベント毎のＣＩＤＳ値を決定するために使用される。ＣＩＤＳ値は、それから、様々の生物学的及び非生物学的類型エアロゾルに対するシグネチャーのライブラリと比較してもよい。この方法でも、源の励起の選択が生物学的粒子によく遭遇される望ましい内因性蛍光体を励起できるものであれば、直交蛍光検出チャンネルを追加することができる。
【００１５】
ＬＩＤＳ検出を使用するとき、本発明の１つの好ましい実施形態は、単粒子上の直線強度微分散乱シグナルを取り入れることによって粒子が照明領域を通過する際、偏光が単一源から発生した２つの垂直に間隔を開けたビームと水平から垂直に交互に起きる直線偏光ビームで粒子を照らすこととした単粒子を検出し分類する方法を含んでいる。粒子のサイズは、弾性散乱強度を測定することによって決定される。垂直及び水平偏光散乱シグナルの強度はエアロゾルイベント毎のＬＩＤＳ値を決定するために使用される。ＬＩＤＳ値は、それから、様々の生物学的及び非生物学的類型エアロゾルに対するシグネチャーのライブラリと比較してもよい。この方法でも、源の励起の選択が生物学的粒子によく遭遇される望ましい内因性蛍光体を励起できるものであれば、直交蛍光検出チャンネルを追加することができる。
【００１６】
上記概要は、本発明の好ましい形式を記載するものであり、クレームされた発明を好ましい形式に限定するように何ら構成されるものではない。
【図面の簡単な説明】
【００１７】
【図１】図１は、二重垂直水平偏光ビーム源と水平偏光フィルターを備えた単一の検出器を有する直線偏光解消検出構造を含む光学検出器を示す図式表現である。
【図１Ａ】図１Ａは、２つの照明箇所又は区域を有する好ましい光学視界領域を示す拡大図式表現である。
【図２】図２は、単一の水平偏光ビーム源と、１つが水平偏光フィルターを備え、もう１つが垂直偏光フィルターを備える２つの検出器とを有する直線偏光解消検出構造を含む光学検出器を示す図式表現である。
【図３】図３は、二重垂直水平偏光ビーム源と、水平偏光フィルター及び直交蛍光検出チャンネルを備える単一の検出器とを有する直線偏光解消検出構造を含む光学検出器を示す図式表現である。
【図４】図４は、垂直水平偏光ビーム源と、偏光ビームスプリッタと、平行及び直交偏光散乱を検出する２つの検出器とを有する直線偏光解消検出構造を含む光学検出器を示す図式表現である。
【図５】図５は、二重の左回り及び右回り円偏光ビーム源、偏光ビームスプリッタ並びに平行及び直交偏光散乱を検出する２つの検出器を有する円偏光解消検出構造を含む光学検出器を示す図式表現である。
【図６】図６は、二重の左回り及び右回り円偏光ビーム源と、単一の検出器とを有する円強度微分散乱検出構造を含む光学検出器を示す図式表現である。
【図７】図７は、二重の垂直水平偏光ビーム源と、単一の検出器とを有する直線強度微分散乱検出構造を含む光学検出器を示す図式表現である。
【図８】図８は、単一の水平偏光ビーム源と、垂直偏光フィルター及び直交蛍光検出チャンネルを備える単一の検出器とを有する直線偏光解消検出構造を含む光学検出器を示す図式表現である。
【図９】図９は、図１に示された光学分析計への単粒子の検出イベントを図示している。
【図１０】図１０は、偏光解消度が水平偏光濾過シグナルと水平偏光励起源から集めた散乱強度と、水平偏光濾過シグナル及び垂直偏光励起源から集めた散乱強度とを分割することによって決定される直線偏光解消反応を図示している。
【図１１】図１１は、偏光解消度が水平偏光濾過シグナルと水平偏光励起源から集めた散乱強度と、水平偏光濾過シグナル及び垂直偏光励起源から集めた散乱強度とを分割することによって決定される直線偏光解消反応を図示している。
【図１２】図１２は、図１０及び図１１と同様の比率測定を用いる付加的な直線偏光解消反応を図示し、偏光解消比率の使用は異なる環境からの遭遇する粒子から目的の粒子を分類するのに貢献する。３つの異なる環境、例えば、屋内建築物、地下鉄ホーム及び都市環境が設定される。
【図１３】図１３は、図１０、１１及び３Ｄ分散分析アプローチと同様の比率測定を用いる付加的な直線偏光解消応答を図示している。
【発明を実施するための形態】
【００１８】
本発明の好ましい形態を、図１−１３を参照して説明する。添付の特許請求の範囲は、好ましい形態に限定されるものではなく、またここに使用される句は、そうでないと明確に述べない場合には、その通常の意味以外の意味が与えられるものではない。類似の参照符号の使用は、指摘する時を除いて同じ構成成分及び／又は特徴を示している。
【００１９】
本発明の好ましい形態は、リアルタイムで生物学的及び非生物学的微粒子を検出分類する強化法、装置及びシステムに関する。いろんな検出体系が単エアロゾル粒子との光の相互作用を含む１つの光学現象を開発している（即ち、偏光弾性散乱）。単エアロゾル粒子との光の相互作用を含む第２の物理学的現象を用いてもよい（即ち、蛍光発光）。この光学現象（即ち、偏光弾性散乱及び蛍光発光）に加えて、粒子のサイズは、好ましくは実質的に同時に決定される。
【００２０】
本発明の好ましい形態は、１０ミクロン以下（例えば、０．５から１．５ミクロン）の空気力学的径を有する単空中浮遊粒子を検出し分類することができる。
【００２１】
ここに、直線偏光及び円偏光の励起アプローチの変種であるエアロゾル計測配列を有する８つの光学検出器が記載される。偏光弾性散乱検出を使用する粒子測定は図８を除いて全ての計測配列に適用できる。全ての配列において、好ましくは、エアロゾルは真空源（図示せず）によって光学視界領域に毎分０．０１から１００リットルで引かれ、粒子は１つ以上の光ビームで１つずつ照らされる。
【００２２】
図１−４及び８は、好ましい光学検出器の様々の実施態様の概要を述べる分解組立図を提供するもので、直線偏光解消測定が１つ以上の励起源を使って個々の粒子に対して行われている。図５は、好ましい光学検出器の実施形態の概要を述べる分解組立図を提供するもので、円偏光解消測定が１つ以上の励起源を使って個々の粒子に対して行われている。図６は、好ましい光学検出器の実施態様の概要を述べる分解組立図を提供するもので、円強度微分散乱又はＣＩＤＳ測定が１つ以上の励起源を使って個々の粒子に行われている。図７は、好ましい光学検出器の実施態様の概要を述べる分解組立図を提供するもので、直線強度微分散乱又はＬＩＤＳ測定が１つ以上の励起源を使って個々の粒子に行われている。
【００２３】
好ましい光学検出器のそれぞれにおいては、粒径及び偏光弾性散乱のみを測定するとき、広範囲の波長が励起に用いられる（例えば、２００−１５００ｎｍ）。粒径、偏光弾性散乱及び蛍光発光を測定するとき、励起波長は２５０−３００ｎｍ及び３５０−４５０ｎｍのような目的とする内因性蛍光体の吸収帯内にある必要がある。計測配列に応じて、励起源は、端面発光レーザーダイオード、垂直キャビティ面発光レーザーダイオード、発光レーザーダイオード又は他のレーザー源であってもよい。また、１つ以上の源を、２つ以上の波長を持つ単粒子を照らす複屈折光学と、粒子を励起するときの各波長の２つの偏光状態を使って、空間に分割された（例えば、縦方向に分割された）二重の円又は直線偏光ビームを発生するように構成することができる。
【００２４】
毎分１リットルを超える流速には、レーザー線発生光学を、凡そ５ミクロンから凡そ３００ミクロンのレーザー線厚と、入口（エアロゾル口）径の少なくとも２倍の被写界深度とレーザー線幅を生じるように使用してもよい。毎分２０リットルを超える流速には、円形の入口の使用を制限してもよく、むしろ長方形の入口を選んでもよい。毎分２０リットルを超えるサンプリングフローを収容するために使われる長方形の入口の場合、レーザー線発生アプローチは、最小限、全ての長方形ノズル領域を照らすように調整された被写界深度とレーザー線幅を有するよう選ばれる。上記レーザー線発生アプローチは、サンプリングされたエアロゾル粒子を１００％近く照らす目的をもって、空気サンプリング範囲の完璧な照明を確保するものである。レーザー線厚は、粒子一致を最小にするように、対象のサイズ範囲において、１つより多くのエアロゾル粒子を照らさずに最高限度のエアロゾル計数率を確実にするために小さくても光学設計で許されるようにするのが望ましい。
【００２５】
サンプリング中の圧力低下及び／又は作動中の低い可聴ノイズがほとんどないことを求める適用において、本発明に記載された構造はエアロゾル入口ノズルなしで操作することができる。これらの構造では、レーザー線照明幾何学及び収集光学が、真空源として軸流ファンを介して個別粒子検出手段に低圧力低下と低可聴ノイズを提供してサンプリング量の好ましい範囲を照合するために使用される。
【００２６】
様々の光収集幾何学は、測定される異なる物理学的現象に適用される異なるパラメーターと共に用いることができる。粒子測定には、偏光弾性散乱検出を用いて、取り入れることができる多数のアプローチが有り、当業者であれば放物線コレクターを用いた前方散乱収集、側方散乱収集、後方散乱収集及び広角収集に精通している。偏光弾性検出には、処置が角度で測った集光角に感度がよく、そのため、主に側方散乱収集を含むエアロゾル計測構造が好ましい。蛍光発光検出には、光ビーム方向に直交する蛍光発光の収集が蛍光発光シグナルへの迷光の影響を最小限にするのに好ましい。
【００２７】
図１は二重垂直水平偏光ビーム源と、水平偏光フィルターを有する単一の検出器とを備える直線偏光解消検出構造を含む光学検出器を示す図式表現である。光学検出器を囲む空気からのエアロゾルは、図１Ａに示されるように、エアロゾルノズルを介してセンサセル１４０に又は真空源（図示しない）によってノズルのない吸気ポートに引き込まれ、光学視界領域１４５に導入される。適当な真空源を使ってもよい。エアロゾルノズルを使う場合、エアロゾルノズルは、好ましくは、毎分２０リットル未満の流速用に円形であって、集光光学の汚れ速度を加速させてしまうエアロゾル濃度を含む適用にシースフローを組み込むことができる。毎分２０リットルを超える流速には、好ましくはノズルが使われる。ノズルは、光ビーム路をたどるノズル入口の長辺と光ビームに直交する短辺を持つ長方形であるのが好ましい。
【００２８】
励起源１００は、好ましくは、連続スペクトル光源又は２０ＭＨｚ以上の周波数で変調され、端面発光レーザーダイオード、垂直キャビティ面発光レーザーダイオード、発光レーザーダイオード又は幾つかの他のレーザーとすることができる。励起源１００の波長は、２００−１５００ｎｍの範囲とすることができる。励起源１００から放射された光は非球面レンズ１１０を使ってコリメートされる。励起源１００と非球面レンズとの間の、又はレンズ１１０の前ではなく後の源空間濾過に応じて、エアロゾルセル１４０が必要となるかもしれない。コリメートされた光は次いでビーム整形光学系１２５に導入される。ビーム整形光学系１２５は、厚さが凡そ５ミクロンから凡そ３００ミクロンで、好ましくは入口（エアロゾル口）径の少なくとも２倍の被写界深度とビーム幅である１枚の光シートをエアロゾルノズル領域につくるように設計された単レンズ又は集合レンズとすることができる。１つの実施形態では、ビーム整形光学系１２５は、上記幾何学を生じるよう設計された球面レンズや柱面レンズとすることができる。他の実施形態では、柱面レンズのみがビーム整形光学系１２５として使用される。さらに実施形態において、ビーム整形光学系１２５は、ガウシアンビームのエネルギーをトップハット型プロファイルに分布させるトップハット型ビーム整形光学からなる。１つの実施例は、その平面に配置された回折パターンを有する平凸レンズである。他の例は、ガウシアンビームをトップハット型プロファイルに変換するための単玉非球面レンズの使用である。他の実施形態では、ビーム整形光学系１２５は、単一パウエルレンズ、又は、パウエルレンズを伴った球面レンズとすることができる。長方形ノズルが使われるとき、ビーム整形光学系１２５は、円形レンズ用に上記したのと同じ構成部品からなってもよいが、光学設計は、好ましくは、被写界深度がこれらの列においてレーザー線幅より長いので、被写界深度の要件を叶えることを求められる。これらの列における被写界深度の長さはレーザー線幅の１０倍より大きくすることができる。サンプリングされた粒子の１００％近い照明を成し遂げるには、好ましいサイズ範囲内で、ビーム整形光学系１２５によって生成された光のシートの幅と深度が最低長方形ノズル寸法を超えるようにされる。
【００２９】
ビーム光学系１２５からの光は、好ましくは１００対１から１０００００００対１の範囲の消光比率を有する直線偏光子１２０に伝えられる。端面発光レーザーダイオードや垂直キャビティ面発光レーザーダイオードのような特定の源は、約１００対１の固有偏光比率を持ち、ある特定のアプリケーション用の偏光測定の精度要件に応じ、直線偏光子１２０は省略することができる。直線偏光後、コリメートされた光は、複屈折性結晶１３５に伝えられる前にビームを円偏光させるために１／４波リターダ１３０に伝えられる。使用できる複屈折性結晶の例は、バナジン酸イットリウム、ホウ酸バリウム、方解石及び金紅石を含む。複屈折性結晶１３５への円偏光の導入は、同強度で結晶の長さに応じて一定距離だけ離れた垂直水平偏光ビームを発生させる。様々の構造において、２５０ミクロンから１０００ミクロンの分離が好ましい。
【００３０】
それから光ビームが図１Ａに示すように光学視界領域１４５に導入される。空間的に分離されたビームは光学感知ゾーン１４０に入るので、光学視界領域１４５は、図１Ａに見られるように、各ビームの１つに、２つの空間的に分離された照明箇所又は範囲を含む。粒子は、ノズル寸法及びノズルが使用されるかどうかに応じた１００ナノ秒から１０マイクロ秒のエアロゾル泳動時間、試料噴霧速度、及びレーザー線厚の対応ビームにより領域１４５の２つの空間的に分離された照明範囲のそれぞれにおいて、一度に１つ、照らされる。この領域を前方方向に出射する光は光トラップ１５０を使って収集される。好ましくは、図１Aに見られるように、水平偏光ビームで照らされた照明範囲は垂直偏光ビームで照らされた照明範囲の下側に位置する。
【００３１】
図１Ａに示される好ましい実施形態では、偏光弾性散乱として照らされた光はエアロゾルセル１４０の一方側で光ビームに直交する側に収集される。粒径測定及び偏光弾性分散分析のために、好ましくは、集光レンズ１７０が弾性散乱光を収集するために使用される。使用される受光器２１０の感度に応じ、いろんな型式の集光レンズや角型の集光範囲を使用することができる。光電子増倍管チューブ、シリコン光電子増倍管又はアバランシェ光ダイオードのような大きな作用面積を持った最も高感度の光検出器に対し、集光レンズ１７０は幾つかの事例において省略することができる。集光レンズ１７０を要する構造には、非球面コレクタレンズ、パラボラコレクタ、又は柱面レンズを使用することができる。角型の集光範囲は、非球面又は柱面レンズのサイズ若しくはパラボラコレクタの幾何学によって集光することができる。当業者であれば、集光レンズ１７０のような非球面レンズ又はパラボラコレクタを用いる多数のアプローチがあることに気づく。使用する集光レンズ１７０は取り込んだ光検出器２１０の感度や適用に依存している。サンプリングされたエアロゾル濃度が高いと判断される適用には、きれいにするのが簡単で試料エアロゾルからの汚損率の低い集光レンズ１７０を使用するのが好ましい。この場合、集光レンズ１７０は省略してもよいし、或いは、非球面レンズをパラボラコレクタの代わりに集光レンズ１７０として使用することができる。
【００３２】
直線偏光解消検出や粒径測定には、レーザー源に直交して散乱した光がまず水平偏光フィルター２０７を通過し、それから集光レンズ１７０に導入され、その後に光検出器２１０に導入される。光検出器２１０は、シリコン光ダイオード、ひ化ガリウム光ダイオード、アバランシェ光ダイオード、シリコン光電子増倍管、光電子増倍管チューブ又はこれらの型式の検出器を配列したものを使用することができる。検出器の型式は、使われる集光レンズ１７０に応じて、エアロゾルイベント毎に除去された散乱光の量、検出器のダイナミックレンジ及び検出器の遮断周波数或いは応答時間が変更される。それから、光検出器２１０からのシグナルは増幅回路２２０に導入され、それにより１００ナノ秒から１０マイクロ秒の電流パルスがまずアナログ電圧に変換され、それからアナログ−デジタル転換装置２３０を使ってデジタルシグナルに変換される。それから、シグナル形２３０は解析のためにシグナルプロセッサ２４０に導入される。シグナルプロセッサ２４０は、シグナル処理分野の当業者に理解されやすいように、マイクロコントローラ、デジタルシグナルプロセッサ、フィールドプログラマブルゲートアレイ又はマイクロコンピュータとすることができる。
【００３３】
先に説明したように、図１に示す構造には、図１Ａに見られるように、単エアロゾルイベントが予め設定された距離だけ離れた光学視界領域１４５内の２つの照明範囲に導入される。第１照明範囲は、好ましくは、５−３００ミクロンのレーザー線厚の水平偏光ビームによって照らされる。第２の照明範囲は、好ましくは、同等厚さの垂直偏光ビームと約２５０−１０００ミクロンの好ましい距離離れたレーザー強度によって照らされる。粒子がビームを横切るので、２つの１００ナノ秒から１０マイクロ秒の電流パルスが生成され処理される。
【００３４】
各チャンネルの増幅回路２２０は、アナログシグナル処理機能を実行するよう構成することができる。各チャンネルの増幅回路２２０のアナログ入力の帯域幅は、最速の期待される電流パルスを捕らえるように構成することができる。パルス時間は主として光学視界領域１４５を介したエアロゾル粒子の泳動時間の働きをし、１００ナノ秒から１０マイクロ秒の範囲内にあることが予測される。追加のアナログシグナル処理機能は、検出チャンネルからのシグナル電圧レベルが初期設定を超えるときのパルス検出回路のトリガー、各検出イベントの光検出パルスの調整及び保持、各検出チャンネルの波高値レベルの生成、粒子を空気力学直径のサブミクロンから２５ミクロンより大きいサイズに整列させる全シグナル範囲を捕らえるための各検出チャンネルへの１以上の低周波段の使用、及び２つの検出イベントの各々へのアナログ−デジタル変換シグナルの生成を含む。
【００３５】
粒径測定及び直線偏光解消検出に対し、シグナルプロセッサ２４０は、好ましくは、単粒子が水平及び垂直偏光ビームを横切ったときに発生する２つの検出イベントからデジタルシグナルを受け取るように構成されている。粒径測定に対しては、第１の検出イベントは、好ましくは、粒子を測定するために使用され、パルス高解析が第１及び第２照明箇所又は光学視界領域１４５の範囲内で発生するエアロゾルイベントの各々に対して行われる。直線偏光解消検出に対しては、エアロゾルイベント毎の各検出の振幅が偏光解消測定のために使用される。各エアロゾルイベントの偏光解消度は以下の計算式の１つを実行することによって計算できる。
δＮ ＝［ＩＶ］／［ＩＨ ＋ ＩＶ］  又は  δ =  ＩＨＶ／ＩＨＨ
それから直線偏光解消値は、好ましくは、各エアロゾルイベントの粒径と共にビニングされる。各エアロゾル粒子の粒径と直線偏光解消値を使用して、好ましくは、細菌胞子、栄養細胞、ウイルス、ウイルス性凝集体、タンパク毒素凝集体、真菌性粒子、花粉粒子、人工生物学的粒子及び、塩粒子、水滴、有機炭素粒子や適用に応じた他の関連非生物学的粒子のような非生物学的粒子を含む公知のエアロゾルの前記測定からエアロゾル類型のライブラリに対して比較することができる。ライブラリと知られていない粒子データと共に、偏光弾性散点図を生物学的及び非生物学的粒子の検出及び分類を許可する粒径の機能として生成することができる。
【００３６】
図９は、上記直線偏光解消構造のための単粒子の検出イベントを説明している。この実施形態では、単粒子は２つのビーム、始めに水平偏光ビーム次いで垂直偏光ビームを横切る。粒子は各ビームを横切るので、エアロゾル粒子イベント毎に２つのシグナルを作成する偏光弾性散乱光を放射する。図９は、１つのエアロゾルイベントと１つの検出器のデータを示す。データは３ミクロンの空気力学的径の枯草菌胞子凝集体に対する直線偏光解消反応を表している。粒子は、ＥＣＢＣインクジェットエアロゾル発生機を使って生成された。偏光解消度は、上記の計算式の１つを実行することにより計算することができる。
【００３７】
図１０及び１１は、偏光解消度が水平偏光フィルターシグナルと垂直偏光励起源から収集された散乱強度によって水平偏光フィルターシグナルと水平偏光励起源から収集された散乱強度を分割することによって決定される直線偏光解消反応を説明している。このデータは、以下のチャンネル範囲：０．５−０．７ミクロン、０．７−１ミクロン、１−２ミクロン、２−５ミクロン、５−７ミクロン及び７ミクロンより大きい範囲の６つの粒径チャンネルを示す。１０倍の偏光比率増加量は、プログラム制御できる偏光解消比率増加量を有するシグナルプロセッサとともに、全部で６０チャンネルを付与する各粒径範囲に対して使用される。それから、エアロゾル粒子イベントが検出され、それらの径や直線偏光解消度に応じて６０チャンネルのうちの１つにビニングされる。粒子類型を分類する能力の説明に、ポリスチレンミクロスフェア上の３つの異なる径（０．７、１．０及び３．０ミクロン直径）と２．５ミクロン径の枯草菌胞子凝集体が例として提供される。グラフからわかるように、粒子類型はバチルス属胞子凝集体（０．２−０．５）より低い偏光解消反応（０−０．２）を付与するポリスチレンミクロスフェアと共にそれらのサイズと偏光解消度に基づいて分類することができる。
【００３８】
図１２は、図１０及び１１におけるのと同じ比率測定を用いる追加の直線偏光解消反応を説明し、偏光解消比率の使用は、異なる環境と通例遭遇する粒子から目的の粒子を分類するのに貢献する。３つの異なる環境は、例として、屋内建築物、地下鉄ホーム及び都市環境が準備される。３Ｄ散点図は与えられた粒径範囲の３つの偏光解消比率を表している。３Ｄ散点図の各球体は、１０リットルの空気サンプルを表し、毎分１００リットルのサンプリング比率又は６秒のエアロゾルデータのセンサーを使って収集された。４つの生物学的類型はまた３Ｄ散点図に適用される。それらは乾燥伝播した枯草菌胞子（胞子模擬物質）、乾燥伝播オバルブミン（毒素模擬物質）、エルウイニアーヘルビコラ（栄養模擬物質）及びＭＳ２ウイルス（ウイルス性模擬物質）である。３軸座標は特定の粒子径範囲での３つの偏光解消増加量を選択することによって得られる。１０リットルのサンプリング率に３つの選択された偏光解消増加量の各々の粒子総数は特定の粒径範囲で３つの偏光解消増加量の各々の全粒子総数の合計で割られる。それから、各偏光解消増加比率は３Ｄ散点図の３つの座標の１つとして使用される。図１２において、４つの生物学的脅威部類類型はａからｄをラベル付けされ、それぞれ乾燥胞子、乾燥毒素、ウイルス及び栄養類を表している。図１２は、各バックグランド環境に、２つの粒径範囲、１−２ミクロン及び２−５ミクロンの３Ｄ散点図を提供する。バックグランド環境を表す空気サンプルはｅからｇをラベル付けされ、それぞれ屋内建築物、地下鉄ホーム及び都市環境を表している。図からわかるように、この環境に適応された直線偏光解消アプローチは、関連する操作的環境から４つの生物学的脅威類型の全てを識別するのにとても有益な方法を提供する。そのアプローチは、生物学的脅威に対する迅速な略リアルタイム早期警告能力及び、施設又は地下鉄の組織網や予防法のもっと多くの迅速適応で広がったエアロゾルを削減する対策を適用する追加オプションをエンドユーザーに提供する生物学的脅威類型を分類する能力を提供する。
【００３９】
図１３は、図１０及び１１におけるのと同じ比率測定や３Ｄ散乱解析を用いて、追加の直線偏光解消反応を説明している。このデータは、湿った分散性又は散布性の枯草菌胞子サンプルを説明するもので、エアロゾル化されたほぼ全てのサンプルが個別胞子からなる。ｈがラベル付けされたグラフはエアロゾル化されたサンプルの粒径分布を提供する。エアロゾル分布は、ＴＳＩ３３２１エアロダイナミック粒子寸法計測器を使って測定され、１．２０の幾何標準偏差を有する０．８１９ミクロンのエアロダイナミック中位径、又は単分散個体数を示す。図１２に示すように、４つの生物学的脅威類型はａからｄをラベル付けされ、それぞれ乾燥胞子、乾燥毒素、ウイルス及び栄養類を表している。散布型枯草菌胞子サンプルは散点図にｉをラベル付けされる。この実施例は、現在利用できるＬＩＦ生物学的エアロゾル検出器ではとても困難な単バチルス属胞子を検出し分類する偏光解消アプローチの有効性を説明している。
【００４０】
図２は、１つの水平偏光ビームと、２つの検出器、１つが水平偏光フィルターを備え、もう１つが垂直偏光フィルターを備える、直線偏光解消検出構造を含む好ましい光学検出器を説明する図式表現である。エアロゾルは図１Ａに示されるようなエアロゾルノズル又は真空源（図示しない）によりノズルのない吸気ポートを介してセンサセル１４０に引き込まれ、図１に記載されたのと同様に光学視界領域１４５に導入される。照明機構と検出機構は、この構造において、図１に用いられたものとは異なる。励起源１００は、好ましくは、連続スペクトル光源か、または２０ＭＨｚ以上の周波数に調整されており、端面発光レーザーダイオード、垂直キャビティ面発光レーザーダイオード、発光レーザーダイオード又は他のレーザーとすることができる。励起源１００の波長は、２００−１５００ｎｍの範囲とすることができる。励起源１００から発光された光は非球面レンズ１１０を使ってコリメートされる。光源に応じて、光源１００と非球面レンズ１１０との間、又はエアロゾルセル１４０の前ではなくてレンズ１１０の後の空間フィルタリングが必要になるかもしれない。それから、コリメートされた光は図１に記載するようにビーム整形光学系１２５に導入され、水平偏光フィルター１２０によってあとを継がれる。
【００４１】
図２で説明した実施態様では、偏光弾性散乱として発光された光は、光ビームに直交するエアロゾルセル１４０の両サイドに収集される。粒径測定及び偏光弾性散乱解析には、図１で説明した実施態様に記載されたのと同一の集光光学部品や検出器部品を適用することができる。この実施態様では、散乱した水平偏光が集光光学部品１７０によって引き継がれる水平偏光フィルター２０５を透過して収集される。散乱した垂直偏光は、集光光学部品１７０によって引き継がれる垂直偏光フィルター２０７を透過して収集される。この実施態様では、水平偏光励起を使った垂直及び水平両方の偏光からの散乱振幅が、直線偏光解消を測定するために使用される。図１で説明した実施態様に記載されたのと同様の検出器や電子装置が光学視界領域１４５が１つの照明範囲または箇所を有するので、垂直及び水平偏光からの散乱振幅に対応し同時に発生する２つの光散乱パルスが偏光解消測定に使用されることを除いて、この構造を適用する。
【００４２】
粒径測定では、水平偏光散乱シグナルが粒子を測定するのに使用され、波高分析が垂直及び水平偏光からの散乱振幅に対して実行される。直線偏光解消検出では、２つの検出器の各検出イベントからの振幅が偏光解消測定に使用される。各エアロゾルイベントの偏光解消度は以下の計算式の１つを実行することによって計算することができる。
δＮ ＝［ＩＶ］／［ＩＨ ＋ ＩＶ］  又は  δ =  ＩＨＶ／ＩＨＨ
それから直線偏光解消値は、好ましくは、各エアロゾルイベントの粒径と共にビニングされる。各エアロゾル粒子の粒径と直線偏光解消値を用いて、好ましくは、細菌胞子、栄養細胞、ウイルス、ウイルス性凝集体、タンパク毒素凝集体、真菌性粒子、花粉粒子、人工生物学的粒子及び、塩粒子、水滴、有機炭素粒子や適用に応じた他の関連非生物学的粒子のような非生物学的粒子を含む公知のエアロゾルの前記測定とエアロゾル類型のライブラリが比較される。ライブラリと知られていない粒子データと共に、偏光弾性散点図を生物学的及び非生物学的粒子の検出や分類を許容する粒径の相関関係としてつくることができる。
【００４３】
図３は、二重の垂直水平偏光ビーム源と、水平偏光フィルター及び直交蛍光検出チャンネルを備える１つの検出器とを有する直線偏光解消検出構造を含む好ましい光学検出器を示す図式表現である。その構造は、追加的な蛍光発光検出チャンネル２０８と、対応する集光光学部品１７０、光検出器２１０、増幅回路２２０及びアナログ−デジタル変換器２３０を除いて、図１で説明した実施態様に記載されたのど同じである。
【００４４】
粒径、偏光弾性散乱及び蛍光発光を測定するとき、励起波長は２５０−３００ｎｍ及び３５０−４５０ｎｍのような対象の内因性蛍光体の吸収帯内にある必要がある。これらの励起波長範囲は、芳香族アミノ酸、ＮＡＤＨ、フラビン、クロロフィル及びシデロホアに限定されるのではなく、これらを含む生物学的粒子に通常遭遇する１以上の内因性蛍光体の吸収帯に対応している。蛍光発光検出チャンネルには、上記実施態様で記載されたのと同様の検出電子装置や検出器が、望ましい内因性蛍光体の発光波長と一致する一条の光を透過させる追加的な蛍光発光フィルター２０８とともに使用することができる。この実施態様において、粒子それぞれに得られた直線偏光解消値と蛍光発光や蛍光発光強度の有無の両方を、非生物学的粒子からの生物学的粒子の分類やお互いから生物学的類型を分類するために使用することができる。
【００４５】
図４は、１つの垂直水平偏光ビーム源、１つの偏光ビームスプリッタと平行及び直交偏光散乱を検出する２つの検出器とを有する直線偏光解消検出構造を含む好ましい光学検出器を示す図式表現である。この実施態様では、水平及び垂直偏光フィルターを用いる２つの検出器の代わりに、偏光ビームスプリッタ１９５が２つの偏光を分散するために使用されるので、垂直と水平両方の偏光の散乱強度の測定を行うことができる。随意の集束レンズ２００は、光検出器２１０上に散乱された光の焦点を合わせるために使用される。図２で説明した実施態様で概説したのと同じシグナル処理工程を適用することができる。
【００４６】
図５は、１つの二重の左回り及び右回り円偏光ビーム源、１つの偏光ビームスプリッタと平行及び直交偏光散乱を検出する２つの検出器とを有する円偏光解消検出構造を含む好ましい光学検出器を示す図式表現である。この実施態様では、図１で説明した実施態様に記載されたような二重偏光ビームは、１／４波リターダ１３０が複屈折結晶１３５の後に取り付けられることを除いて、二重の右回り円及び左回り円偏光ビームを生成するために使用される。
【００４７】
円偏光検出に伴い、粒子から散乱した光の正常化偏光解消は、関係式：
δ+C =［I⊥］／［I||+ I⊥］
δ-C =［I||］／［I||+ I⊥］
によって得られる。
δ+C は照明源として右回り偏光を使うときの円偏光解消を表し、δ-C は照明源として左回り偏光を使うときの円偏光解消を表し、I⊥ 垂直偏光の散乱強度を示し、I||は平行偏光の散乱強度を表す。この実施態様において、円偏光解消測定は、左回り及び右回り両方の円偏光励起を使用して単粒子上で実行することができる。図４で説明した実施態様と同じ検出器と電子装置を使用することができる。
【００４８】
この実施態様のシグナル処理は、エアロゾル粒子毎の各照明イベントの平行及び垂直偏光の偏光散乱強度を測定し、それから各粒子の左回り及び右回り円偏光解消比率を計算することを含む。それから、円偏光解消値は各エアロゾルイベントの粒径とビニングされる。その後で、各エアロゾル粒子の粒径と円偏光解消値のデータは、細菌胞子、栄養細胞、ウイルス、ウイルス性凝集体、タンパク毒素凝集体、真菌性粒子、花粉粒子、人工生物学的粒子及び、塩粒子、水滴、有機炭素粒子や適用に応じた他の関連非生物学的粒子のような非生物学的粒子を含む公知のエアロゾルの前記測定からのエアロゾル類型のライブラリと比較される。ライブラリと知られていない粒子データと共に、偏光弾性散点図を生物学的及び非生物学的粒子の検出や分類を許容する粒径の相関関係としてつくることができる。
【００４９】
図６は、二重の左回り及び右回り円偏光ビーム源と、単一検出器とを有する円強度微分散乱検出（ＣＩＤＳ）構造を含む好ましい光学検出器を説明する図式表現である。この実施態様の励起源は、図５で説明した実施態様のものと類似している。図１で説明したのと同様の単一検出器体系が偏光弾性散乱シグナルを捕捉しながら使用され、そして、散乱強度はエアロゾル粒子毎に右回り及び左回り両方の円偏光励起を使用しながら測定される。無濾過散乱シグナルが照明イベント毎に収集されるように、検出器チャンネルにはフィルターは使用されない。各エアロゾルイベントの円強度微分散乱（ＣＩＤＳ）値は、次の方程式：
［ＩＬ−ＩＲ］／［ＩＬ＋ＩＲ］
を使って決定することができる
ＩＬは入射ビームが左回り円偏光されるときの光散乱強度で、ＩＲは入射ビームが右回り円偏光されるときの光散乱強度である。検出イベントから生成された電流パルスは各粒子のＣＩＤＳ値を測定するために使用される。それから、ＣＩＤＳ値は各エアロゾルイベントの粒径とビニングされる。各エアロゾル粒子に粒径やＣＩＤＳ値データを使用して、細菌胞子、栄養細胞、ウイルス、ウイルス性凝集体、タンパク毒素凝集体、真菌性粒子、花粉粒子、人工生物学的粒子及び、塩粒子、水滴、有機炭素粒子や適用に応じた他の関連非生物学的粒子のような非生物学的粒子を含む公知のエアロゾルの前記測定からのエアロゾル類型のライブラリと比較することができる。ライブラリと知られていない粒子データと共に、偏光弾性散点図を生物学的及び非生物学的粒子の検出及び分類を許容する粒径の相関関係としてつくることができる。  
【００５０】
図７は、二重の垂直水平偏光ビーム源と、単一検出器とを有する直線強度微分散乱検出（ＬＩＤＳ）構造を含む好ましい光学検出器を説明する図式表現である。ＬＩＤＳ構造は、１／４波リターダ１３０が使用されないことを除いてＣＩＤＳ構造と同一である。各エアロゾルイベントの直線強度微分散乱（ＬＩＤＳ）値は以下の方程式：
［ＩＨ−ＩＶ］／［ＩＨ＋ＩＶ］
を使って決定することができる。
ＩＨは入射ビームが水平偏光されるときの光散乱強度で、ＩＶは入射ビームが垂直偏光されるときの光散乱強度である。検出イベントから生成された電流パルスは各粒子のＬＩＤＳ値を測定するために使用される。それから、ＬＩＤＳ値は各エアロゾルイベントの粒径とビニングされる。各エアロゾル粒子に粒径やＬＩＤＳ値データを使用して、細菌胞子、栄養細胞、ウイルス、ウイルス性凝集体、タンパク毒素凝集体、真菌性粒子、花粉粒子、人工生物学的粒子及び、塩粒子、水滴、有機炭素粒子や適用に応じた他の関連非生物学的粒子のような非生物学的粒子を含む公知のエアロゾルの前記測定からのエアロゾル類型のライブラリと比較することができる。ライブラリと知られていない粒子データと共に、偏光弾性散点図を生物学的及び非生物学的粒子の検出及び分類を許容する粒径の相関関係としてつくることができる。
【００５１】
図８は、単一水平偏光ビーム源と、垂直偏光フィルター２０７及び直交蛍光検出チャンネル２０８を備える単一検出器とを有する直線偏光解消検出構造を含む好ましい光学検出器を説明する図式表現である。図２に記載したように、単一水平偏光ビーム源は光学視界領域１４５を透過するサンプル列の単粒子を照らすために使用される。この構造では、偏光解消散乱イベントのみが、粒径と形態の相関関係である偏光解消度で検出される。蛍光発光検出チャンネル２０８を用いて、粒子自己蛍光も各偏光解消散乱イベントのために測定される。偏光解消弾性散乱及び蛍光発光を測定するとき、励起波長は、２５０−３００ｎｍや３５０−４５０ｎｍのような対象の内因性蛍光体の吸収帯内にある必要がある。これらの励起波長範囲は、芳香族アミノ酸、ＮＡＤＨ、フラビン、クロロフィル及びシデロホアに限定されるのではなく、これらを含む生物学的粒子に通常遭遇する１以上の内因性蛍光体の吸収帯に対応している。蛍光発光検出チャンネルには、上記実施態様で記載されたのと同様の検出電子装置や検出器が、望ましい内因性蛍光体の発光波長と一致する一条の光を透過させる追加的な蛍光発光フィルター２０８とともに使用することができる。この実施態様において、粒子それぞれに得られた偏光解消弾性散乱強度と蛍光発光や蛍光発光強度の有無の両方を、非生物学的粒子からの生物学的粒子の分類やお互いから生物学的類型を分類するために使用することができる。
【００５２】
本発明の好ましい実施の形態の上記開示は、図面及び明細書のために提出されている。本発明を開示された明確な型式に限定したり網羅的であったりすることを意図するものではない。ここに記載された実施態様の多くのバリエーションや変更は、上記記載の光学分野の当業者には明かである。発明の範囲は、ここに添付した特許請求の範囲、及びその同等範囲によってのみ限定されることになる。特許請求の範囲は、好ましい実施の形態に限定されるものではなく、クレーム分化の原則を用いてそのような狭い構成を排除するために記載されている。
【００５３】
また、本発明の典型的な実施態様を記載するに際し、明細書はある一連の手順として本発明の好ましい方法及び／又はプロセスを提供してきたかもしれない。しかし、方法又はプロセスがここに記載の工程の順序に依らない範囲まで、方法又はプロセスを記載したある一連の工程に限定するものではない。当業者が認識するように、他の一連の工程が可能であってもよい。よって、明細書に記載の工程の順序は、請求の範囲への限定として構成されるものではない。また、本発明の方法及び／又はプロセスに導く請求の範囲は、提供される順序の工程の実行に限定されるものではなく、当業者は順序が本発明の要旨の範囲内で変更され、またそのままでもよいと容易に認識することができる。
【図１】
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【図１Ａ】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【国際調査報告】
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