(57)【要約】本発明は、新規色彩を有する種子を産生する植物をもたらすＱＴＬを含むナス植物、特にソラヌム・メロンゲナ植物であって、ＱＴＬが代表的な試料が受託番号ＮＣＩＭＢ４２５０７でＮＣＩＭＢで寄託された種子から生育した植物からの遺伝子移入により入手可能な植物に関する。本発明はまた、植物の種子および他の繁殖材料ならびにその子孫に関し、並びに植物の消費できる部分を含む食品に関する。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ホモ接合的に存在する場合に新規色彩を有する種子を産生するナス植物をもたらすＱＴＬを含むナス植物（Ｓｏｌａｎｕｍ  ｍｅｌｏｎｇｅｎａ  Ｌ．）であって、前記ＱＴＬが、受託番号ＮＣＩＭＢ４２５０７の種子から生育した植物のゲノムに存在するＱＴＬと同一であり、かつ配列番号１、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９、配列番号１１、配列番号１３および配列番号１５からなる群から選択される少なくとも１つのマーカーに連鎖している、ナス植物。
【請求項２】
前記ＱＴＬが、代表的な試料が受入番号ＮＣＩＭＢ４２５０７でＮＣＩＭＢで寄託された種子から生育したナス植物のゲノムに存在するか、または代表的な試料が受入番号ＮＣＩＭＢ４２５０７でＮＣＩＭＢで寄託された種子から生育したナス植物から入手可能である、請求項１に記載のナス植物。
【請求項３】
新規種子色が、前記ＱＴＬをホモ接合的に含まない植物により産生される種子と比較して、成熟種子段階で明るい色を有する植物により産生される新鮮種子として規定される、請求項１または２に記載のナス植物。
【請求項４】
新規種子色が、前記ＱＴＬをホモ接合的に含まない植物により産生される種子と比較して、成熟種子段階で明るい色を有する植物により産生される乾燥種子として規定される、請求項１−３のいずれか一項に記載のナス植物。
【請求項５】
前記植物により産生された成熟種子の種皮が、前記ＱＴＬをホモ接合的に含まない植物により産生される成熟種子の種皮と比較して、減少した量の茶色の色素を有する、請求項１−４のいずれかに記載のナス植物。
【請求項６】
前記ＱＴＬがホモ接合的に存在する、請求項１−５のいずれかに記載のナス植物。
【請求項７】
請求項１または２に記載のＱＴＬを含み、前記ＱＴＬが好ましくはホモ接合的に存在する、請求項１−６のいずれかに記載のナス植物の種子。
【請求項８】
請求項１または２に記載のＱＴＬを含み、前記ＱＴＬが好ましくはホモ接合的に存在する、請求項１−６のいずれかに記載のナス植物に生育することができる、種子。
【請求項９】
請求項１−４のいずれかに記載のナス植物の子孫または請求項５または６に記載の種子から生育したナス植物の子孫であって、植物の子孫が請求項１または２に記載のＱＴＬを含む、植物の子孫。
【請求項１０】
請求項１−６または９のいずれか一項に記載のナス植物に由来する、または請求項５または６に記載のナス種子に由来する繁殖材料であって、繁殖材料が請求項１または２に記載のＱＴＬを含み、前記ＱＴＬが好ましくはホモ接合的に存在する、繁殖材料。
【請求項１１】
請求項１−６または９のいずれか一項に記載のナス植物に生育することができる繁殖材料であって、請求項１または２に記載のＱＴＬを含み、ＱＴＬが好ましくはホモ接合的に存在する、繁殖材料。
【請求項１２】
繁殖材料が、カルス、小胞子、花粉、子房、胚珠、胚、胚嚢、卵細胞、カッティング（ｃｕｔｔｉｎｇ）、根、茎、細胞、プロトプラスト、葉、子葉、胚軸、分裂組織的細胞、根、根端、小胞子、葯、花、種子および茎からなる群から選択される、またはそれらの一部または組織培養物である、請求項８または９に記載の繁殖材料。
【請求項１３】
請求項１または２に記載のＱＴＬを含み、前記ＱＴＬが好ましくはホモ接合的に存在する、請求項１−６または９のいずれか一項に記載のナスから収集された、ナス果実もしくはその一部、または果実もしくはその一部でできている食品、またはそれらでできている加工食品。
【請求項１４】
請求項３、４または５に記載の新規種子色を有する種子を産生する植物をもたらすＱＴＬを含むナス植物の開発のための育種プログラムにおける生殖質としての、請求項１−６または９のいずれか一項に記載のナス植物の使用。
【請求項１５】
新規種子色を引き起こす、所望により単離形態である核酸またはその一部であって、核酸が請求項１−６または９のいずれかに記載のナス植物に由来し、かつ配列番号１、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９、配列番号１１、配列番号１３および配列番号１５からなる群から選択される少なくとも１つのマーカーに連鎖している、核酸またはその一部。
【請求項１６】
新規色彩を有する種子を産生するナス植物、特に請求項３、４または５に記載のナス植物を選択する、および／または開発するための、配列番号１、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９、配列番号１１、配列番号１３および配列番号１５からなる群から選択される分子マーカーの使用。
【請求項１７】
請求項１−６または９のいずれか一項に記載のナス植物における請求項１または２に記載のＱＴＬを同定するための、配列番号１、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９、配列番号１１、配列番号１３および配列番号１５からなる群から選択される分子マーカーの使用。
【請求項１８】
請求項１または２に記載のＱＴＬに連鎖している他のマーカーを開発するための、配列番号１、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９、配列番号１１、配列番号１３および配列番号１５からなる群から選択される分子マーカーの使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規種子色を有する種子を産生する新規のナス（Ｓｏｌａｎｕｍ  ｍｅｌｏｎｇｅｎａ  Ｌ．）に関する。本発明はさらに、かかる植物の種子および子孫ならびにかかる植物を得るための繁殖材料に関する。さらに、本発明は、育種プログラムにおける生殖質としての植物、種子およびかかる植物に由来する繁殖材料の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
ナス（ｅｇｇｐｌａｎｔ）またはナス（ａｕｂｅｒｇｉｎｅ）（Ｓｏｌａｎｕｍ  ｍｅｌｏｎｇｅｎａ  Ｌ．）はナス科（ｎｉｇｈｔｓｈａｄｅ）ファミリー（Ｓｏｌａｎａｃｅａｅ）の植物であり、かつナス（Ｓｏｌａｎｕｍ）属に属する。それは、トマトおよびジャガイモに密接に関連する。ナスは同じ名前の果実の実ができ、調理において一般に使用される。植物の種類が異なれば異なる大きさ、形、および色彩の果実を産生する。ナスは重要な食用作物であり、全ての条件ならびに保護栽培および野外（ｏｐｅｎ  ｆｉｅｌｄ）の両方の気候で、世界中で栽培されている。
【０００３】
ナス果実はそれらの心地よい苦味および海綿状のテクスチャーのために人気がある。果実の皮は艶やかであり、かつ白、黄、緑から、紫の色素沈着の程度からほとんど黒まで、色彩が異なる場合があり、果肉は白またはクリーム色であり、かつ海綿状のテクスチャーである。果実の果肉に含有されるのは、円錐のパターンで配置される種子である。種子発育の初期のナス種子は、白またはクリーム色を有するが、商業的に許容できる果実段階では（ナス果実がヒト消費のために売られるために収穫される段階）、ナス種子は茶色を有する。その段階ではナス果実における種子はまだ完全に成熟していない。種子は、ナス果実が消費者により熟しすぎていると考えられる段階にある場合にのみ、それらの茶色が最も濃い成熟した段階に達する。ナス種子の茶色は、茶色の色素を含有する種子の最外層、種皮（外種皮（ｔｅｓｔａ）とも呼ばれる）が原因である。
【０００４】
多くの種における種皮は、暗い（茶色から黒）色素を含有する。種皮の着色はシロイヌナズナ（Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ  ｔｈａｌｉａｎａ）で最もよく研究されている。シロイヌナズナの種子では、種子の発育の遅い段階で種皮の色素沈着が観察されている。しかしながら、プロアントシアニジン（ＰＡ）または縮合タンニンと呼ばれる色素の実際の合成は、胚発生の初期段階（受粉後１−２日）に始まる。これらのフラボノイドは、最初に、外皮の最も内側の細胞層である内皮の液胞中に無色の化合物として蓄積し、種子の乾燥中に酸化され、そして成熟種子に茶色を与える。いくつかのシロイヌナズナ種皮色素沈着変異体が知られている。これらのいわゆる透明な外種皮（ｔｒａｎｓｐａｒｅｎｔ  ｔｅｓｔａ）変異体では、シロイヌナズナの種皮は白から淡黄色を呈する。多くのＴＲＡＮＳＰＡＲＥＮＴ  ＴＥＳＴＡ遺伝子は、フラボノイド生合成経路における酵素をコードし、他のものは経路のいくつかの点に関与する調節遺伝子をコードする。フラボノイド経路におけるほとんどの遺伝子はシングルコピー遺伝子である。種皮においてプロアントシアニジン蓄積の破壊を有することに加えて、それらのフラボノールおよび／またはアントシアニン産生が他の植物部分または植物全体で破壊されているため、多くのｔｒａｎｓｐａｒｅｎｔ  ｔｅｓｔａ変異体では、植物の他の部分（例えば花および果実）の色に影響している。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
商業的に許容できる果実段階でのナス果実の茶色の種子は、白またはクリーミーホワイトの果肉の中で目立ち、かつナス果実を顧客に魅力的でないように見せるので、果実に明るい色を有する種子を産生させることは好ましい形質である。この明るい種子色が果実の皮の色彩に非依存的であれば特にである。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
したがって、本発明の目的は、新たな色彩を有する種子、特に、明るい色を有する種子を産生する新たなナス植物を提供することである。
【発明を実施するための形態】
【０００７】
本発明をもたらす研究において、本明細書中にさらに開示されるように、新規色彩、特に明るい色を有する種子を産生することが見出された新たなナス植物が開発された。この明るい色を有する種子の生産は、代表的な試料が受入番号４２０５４でＮＣＩＭＢで寄託された種子から生育した植物に存在し、かつ代表的な試料が受入番号４２０５４でＮＣＩＭＢで寄託された種子から生育した植物から入手可能なＱＴＬのソラヌム・メロンゲナ（ソラヌム・メロンゲナ）ゲノムにおけるホモ接合体の存在と相関することが見出された。当該寄託物の種子から生育した植物のゲノムにおいて、配列番号１、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９、配列番号１１、配列番号１３および配列番号１５（表１に全配列データが示される）のマーカーのそれぞれが本発明の新規種子色を引き起こすＱＴＬに連鎖していることが見出された。任意のこれらのマーカーまたはこれらのマーカーの任意の組み合わせが本発明の新規種子色の形質を引き起こすＱＴＬを同定するために使用されてもよいが、マーカー配列番号１１および配列番号１３が統計検定において最も高いＬＯＤスコアを有するため、好ましい。
【０００８】
植物のゲノムにおける本発明の新規種子色の形質を引き起こすＱＴＬの存在は、配列番号１、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９、配列番号１１、配列番号１３および配列番号１５のマーカーの組み合わせ、配列番号１、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９、配列番号１１および配列番号１３のマーカーの組み合わせ、配列番号１、配列番号３、配列番号５および配列番号７のマーカーの組み合わせ、配列番号９、配列番号１１、配列番号１３および配列番号１５のマーカーの組み合わせ、配列番号９、配列番号１１および配列番号１３のマーカーの組み合わせ、または配列番号１１および配列番号１３のマーカーの組み合わせを使用することにより決定され得る。
【０００９】
当該ＱＴＬは、したがって、寄託された材料のゲノムに存在し、かつこの材料は、したがって、他のナス植物に新規種子色形質を遺伝子移入するために使用され得るＱＴＬの供給源である。かかる植物は、新規種子色を有するさらなる品種を開発するために出発点として使用されてもよい。このＱＴＬの供給源にかかわらず、本発明のＱＴＬを含む任意のソラヌム・メロンゲナ植物は、本発明の植物である。
【００１０】
本明細書中で使用される「遺伝子移入」は、形質が見えるようになる世代、またはＱＴＬが選択され得る世代における交配および選択を用いて、該形質を保有しない植物にその形質をもたらすＱＴＬを遺伝子移入することによる形質の導入を意味することを意図する。かかる遺伝子移入は断片内マーカーなどのマーカーの利用可能性により促進される。
【００１１】
寄託された種子において、ＱＴＬは配列番号１、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９、配列番号１１、配列番号１３および配列番号１５の分子マーカーのそれぞれと連鎖している。これらのマーカーはまた、新規種子色形質を他の植物に移すための交配における親として使用されるいずれかまたは両方のナス植物に含まれるＱＴＬに連鎖していてもよいが、上述の少なくとも１つのマーカーの存在は該形質を引き起こすＱＴＬが存在する限り必須ではない。ＱＴＬが新規種子色形質をコードする遺伝情報であるため、新規種子色表現型の存在は、本発明のＱＴＬが存在するという直接の指標である。したがって、本明細書中に記載される新規種子色形質を有する本発明の植物は、表現型が根底にあるＱＴＬが存在するがマーカーがもはや存在しない場合でも、依然として本発明の植物である。マーカーは、時々しかし常ではないが、形質の遺伝的原因である。マーカーは当該形質を引き起こす遺伝子に位置しているか、またはそれに遺伝的に連鎖していてもよい。それらはしばしば形質の遺伝を追跡するための道具として使用される。育種中、寄託された種子において遺伝的決定因子と関連する分子マーカーは、したがって他の植物への新規種子色形質を移すことを補助するために使用されてもよい。熟練した育種家は、ナス植物への新規種子色形質の移入が外観検査、分光光度法またはイメージ解析または本明細書中に記載される分子マーカーの存在についてのモニタリングおよび育種（すなわちマーカー補助選択）、または両方によりモニターされてもよいことを理解するだろう。特定のゲノム領域へのかかるマーカーの局在化は、さらに育種における関連配列の使用およびさらなる連鎖遺伝的マーカーの開発を可能にする。従って、マーカーが他の植物へ新規種子色形質を移すための交配の親間で多型であるならば、本発明は、同定した領域内で遺伝的にマッピングする任意の分子マーカーを使用して実施され得ることを強調する。
【００１２】
したがって、本発明は、本明細書に記載されるように、ホモ接合的に存在する場合に新規色彩を有する種子を産生するナス植物をもたらすＱＴＬを含むナス植物（Ｓｏｌａｎｕｍ  ｍｅｌｏｎｇｅｎａ  Ｌ．）であって、ＱＴＬが、受託番号ＮＣＩＭＢ４２５０７の種子から生育した植物のゲノムに存在するＱＴＬと同一であるまたは類似し、かつ配列番号１、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９、配列番号１１、配列番号１３および配列番号１５からなる群から選択される少なくとも１つのマーカーに連鎖しており、かつＱＴＬが好ましくはホモ接合的に存在する植物を提供する。該ＱＴＬは、代表的な試料が受入番号ＮＣＩＭＢ４２５０７でＮＣＩＭＢで寄託された種子から生育したナス植物のゲノムに存在し、代表的な試料が受入番号ＮＣＩＭＢ４２５０７でＮＣＩＭＢで寄託された種子から生育したナス植物から入手可能である。
【００１３】
本開示において、「ナス」はｓｏｌａｎｕｍ  ｍｅｌｏｎｇｅｎａ  Ｌ．を含むことを意図する。
【００１４】
本発明の形質は、産生された種子の種皮における茶色の色素の減少または完全な不存在であり、それは明るい色を有する種子をもたらし、劣性の形質である。したがって、植物が産生する種子において本発明の形質が見えるようにするためには、本発明のＱＴＬは本発明のナス植物においてホモ接合状態で存在しなければならない。
【００１５】
種皮は種子の外側の保護層であり、かつ胚珠の外皮に由来する。種皮は、したがって、二倍体母性起源である。従って、種子の色彩は、種子を産生する植物（交配において花粉を受け取る母植物）の遺伝子型により決定される。
【００１６】
本発明はまた、第一のナス植物を第二のナス植物と交配すること、ここで当該植物の少なくとも１つは、受入番号ＮＣＩＭＢ４２５０７でＮＣＩＭＢで寄託されたナス植物代表的種子、またはＱＴＬを保有するそれらの子孫植物に含まれるＱＴＬを含む、および本発明の形質について好ましくはＦ２において外観検査により選択することにより、および／または本明細書中に記載される分子マーカーの存在について選択することにより入手可能な本発明のナス植物に関する。
【００１７】
本発明の形質は、本発明のＱＴＬを保有していない野生型植物を本発明のＱＴＬについてホモ接合またはヘテロ接合のいずれかである植物と交配すること、かつ好ましくはその交配のＦ２において望ましい表現型について選択すること、および／または好ましくはその交配のＦ１および／またはＦ２において本明細書中に記載される分子マーカーの存在を選択することにより、野生型ナス植物に導入できる。Ｆ２はＦ１を自家受粉させることにより得られる。
【００１８】
本発明の形質が導入されてもよいナス植物は、任意の種類、任意の果実形態または果実色のナス植物であり得る。
【００１９】
本発明のＱＴＬをホモ接合的に保有する植物により産生される種子の新規種子色は、ＱＴＬをホモ接合的に含まない植物により産生される種子の色彩と比較して成熟種子段階で明るい色を有する種子として規定される。当該種子の種皮は、ＱＴＬをホモ接合的に含まない植物により産生された成熟種子段階で種子の種皮に存在する茶色の色素の減少した量を有する。特に、当該種子の種皮は、野生型種子の種皮に通常存在する茶色の色素が少量であるため、本発明の植物の種子の種皮における茶色は目により検出できない。より特には、種皮は野生型種子の種皮に通常存在する茶色の色素を完全に欠く。
【００２０】
ホモ接合的に遺伝的決定因子を保有する本発明の植物は、したがって、それらの種子の新規色彩により同定されてもよい。本発明のＱＴＬをホモ接合的に保有する本発明の植物により産生される種子と遺伝的決定因子をヘテロ接合的にか、または全く保有しない同質遺伝子的な植物の種子との間の色の違いは、熟練したナス栽培者により容易に観察できる。本発明のＱＴＬをホモ接合的に保有する本発明の植物により産生される種子の色彩と遺伝的決定因子をヘテロ接合的にか、または全く保有しない同質遺伝子的な植物の種子を比較する場合、全ての種子が同じ発育段階になければならない。種子の色の違いは商業的に許容できる果実段階または好ましくは成熟種子段階で評価されてもよい。本発明のＱＴＬをホモ接合的に保有する本発明の植物により産生される種子と遺伝的決定因子をヘテロ接合的にか、または全く保有しない同質遺伝子的な植物の種子との間の色の違いは商業的に許容できる果実段階で既に明確であるが、成熟種子段階で最も明確である。
【００２１】
「成熟種子」という用語は、熟練したナス栽培者に明らかであり、かつ特に生理学的に完全に発育した種子の種子段階を意味する。成熟種子は、生理学的に完全に発育したナス果実に存在するように、種子段階にある。かかる生理学的に完全に発育したナス果実は、商業的に許容できる果実段階−ナス果実がヒト消費のために売られるために収穫される段階−を過ぎており、かつ消費者によって熟しすぎていると考えられるだろう。熟練したナス栽培者はナス果実が商業的に許容できる果実段階である時、およびナス果実が生理学的に完全に発育した時がわかる。
【００２２】
ホモ接合的に遺伝的決定因子を保有する本発明の植物の成熟種子の色彩は、遺伝的決定因子をヘテロ接合的にか、または全く保有しない同質遺伝子的な植物の色彩よりはるかに明るい。遺伝的決定因子をヘテロ接合的にか、または全く保有しない同質遺伝子的な植物と比較して、ホモ接合的に遺伝的決定因子を保有する植物の成熟種子のこの明るい色は、果実の収穫直後の新鮮種子で最も明らかである。
【００２３】
「新鮮種子」という用語はまた当業者に明らかであり、かつ特に収穫直後のナス果実に存在するような、またはごく最近で果実から取られかつまだ湿っているような種子を意味する。言い換えると、新鮮種子は、まだ乾燥していない種子である。
【００２４】
本発明のＱＴＬを保有していない新鮮成熟した野生型ナス種子の色彩はミドルブラウン、サンディブラウン、ブロンズ、またはコッパー色と呼ばれ得るが、ホモ接合的に遺伝的決定因子を保有する本発明の植物の新鮮成熟種子の色彩はオフホワイト、クリーミーホワイト、ベージュ、ベリーライトイエローまたはライトグレイッシュイエローとして示され得る。
【００２５】
種子の乾燥の際に、野生型種子および本発明の植物の種子の両方の色彩が変化する。しかしながら、完全に乾燥した場合も、本発明の植物の種子の色彩は乾燥野生型種子の色彩と明確に区別され、かつ乾燥野生型種子の色彩より明るい。本発明のＱＴＬを保有していない乾燥成熟した野生型ナス種子の色彩は茶色、サンディブラウン、ミドルブラウン、ブロンズまたはコッパー色と呼ばれ得るが、ホモ接合的に遺伝的決定因子を保有する本発明の植物の乾燥成熟種子の色彩はベージュ、ライトイエロー、ペールイエロー、バフ（ｂｕｆｆ）またはカーキとして示され得る。種子の色を比較する際に、これが同じ段階で行わなければならないこと、すなわち新鮮種子と新鮮種子を比較することおよび乾燥種子と乾燥種子を比較すること、また、成熟種子段階の種子を成熟種子段階種子と比較すること、および商業的に許容できる果実段階の種子を商業的に許容できる果実段階の種子と比較すること、は明らかである。
【００２６】
したがって、本発明の新規種子色は、ＱＴＬをホモ接合的に含まない植物により産生される種子と比較して成熟種子段階で明るい色を有する本発明の植物により産生される新鮮種子および／またはＱＴＬをホモ接合的に含まない植物により産生される種子と比較して成熟種子段階で明るい色を有する植物により産生される乾燥種子として規定されてもよい。
【００２７】
本発明の種子の新規種子色表現型は、外種皮とも呼ばれる種皮における茶色の色素の減少または不存在に起因し、種皮の下の子葉の色彩を現出する。
【００２８】
本発明の種子および野生型種子の呈色はまた、ＲＨＳカラーチャート（Ｔｈｅ  Ｒｏｙａｌ  Ｈｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒａｌ  ｓｏｃｉｅｔｙ、Ｌｏｎｄｏｎ、ＵＫ）を使用して決定されてもよい。本発明のＱＴＬを保有していない新鮮成熟した野生型種子の色彩は、その最も暗い部分で１６５Ｂおよびその最も明るい部分で１６５Ｃの色と似ているが、本発明の新鮮成熟種子の色彩は、その最も明るい部分で１６１Ｄおよびその最も暗い部分で１６１Ｃの色と似ている（表２）。乾燥成熟した野生型種子の色彩は、１６２Ａの色と似ているが、本発明の乾燥成熟種子の色彩は、１６４Ｂの色と似ている（表２）。
【００２９】
ＲＨＳカラーチャートが植物の色を決定するために植物育種家および栽培者により一般に使用されるが、色彩はまた他のカラーチャートまたはシステムを使用して決定されてもよいことは明らかである。色彩は、例えば、マンセル・カラー・システムを使用してＲＧＢカラーコードで特定されてもよいし、または比色計またはイメージ解析を使用して決定されてもよい。当業者はこれらの異なるカラーシステムの使い方および異なるカラーシステム間でカラーコードを転換する方法がわかる。これらのＲＨＳカラーについてのＲＧＢ、ＣＩＥＬａｂおよびＣＩＥＬＣｈ値は下記表に記載される。
【表Ａ】
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【００３０】
例えば比色計またはイメージ解析を使用する色彩を測定するために広く使用されるカラースケールはＣＩＥＬＡＢカラースケールである。当該スケールは、３データ変数：Ｌ＊、ａ＊およびｂ＊を含む。Ｌ＊は０から１００までのスケールの明度を示し、０は黒であり、かつ１００は白である。変数ａ＊およびｂ＊は、赤、緑、青および黄の色の量を示す：ａ＊値は、緑（負の値）から赤（正の値）への色の変化を示し、一方でｂ＊は、黄色（正の値）から青（負の値）への色の変化を示す。２つのサンプル間の色の違いは、Ｌ＊および／またはａ＊、および／またはｂ＊の変化によって表すことができる。
【００３１】
当業者には明らかなように、色彩パラメータは色を定量化するために使用される方法に応じて変わる。それでも、野生型の新鮮成熟種子の特定の色彩定量化方法（ＲＨＳカラーチャート、比色分析またはイメージ解析を使用するいずれかの色推定）についてのＬ＊（１０°／Ｄ６５）スコアを本発明の新鮮成熟種子と比較すると、Ｌ＊スコアは本発明のＱＴＬを保有していない野生型種子と比較した場合に本発明の種子につき一貫してより高い。また、野生型の乾燥成熟種子の特定の色彩定量化方法（ＲＨＳカラーチャート、比色分析またはイメージ解析を使用するいずれかの色推定）についてのＬ＊（１０°／Ｄ６５）スコアを本発明の乾燥成熟種子と比較すると、Ｌ＊スコアは、本発明のＱＴＬを保有していない野生型種子と比較した場合に本発明の種子につき常に高い。より高いＬ＊スコアは、明るい色を示す。
【００３２】
一実施形態では、本発明は、本発明のＱＴＬをホモ接合的に含むナス（ソラヌム・メロンゲナ）植物であって、ここで植物の乾燥成熟種子についてＲＨＳカラーチャートを使用し、ＲＨＳカラーコードを対応するＣＩＥＬＡＢカラースケールに変換して決定される場合に、Ｌ＊（１０°／Ｄ６５）スコアが少なくとも、増加する優先順に４７、５０、５４、５８、５９、６５、７０、８０、９０である、植物に関する。当該植物の乾燥成熟種子についてＲＨＳカラーチャートを使用して決定される場合に、Ｌ＊（１０°／Ｄ６５）スコアは適切には９９以下である。
【００３３】
一実施形態では、本発明は、本発明のＱＴＬをホモ接合的に含むナス（ソラヌム・メロンゲナ）植物であって、ここで植物の新鮮成熟種子についてＲＨＳカラーチャートを使用し、ＲＨＳカラーコードを対応するＣＩＥＬＡＢカラースケールに変換して決定される場合に、Ｌ＊（１０°／Ｄ６５）スコアが少なくとも、増加する優先順に４９、５２、５７、６３、６７、７０、８０、９０である、植物に関する。当該植物の新鮮成熟種子についてＲＨＳカラーチャートを使用して決定される場合に、Ｌ＊（１０°／Ｄ６５）スコアは適切には９９以下である。
【００３４】
一実施形態では、本発明は、本発明のＱＴＬをホモ接合的に含むナス（ソラヌム・メロンゲナ）植物であって、ここで、植物の乾燥成熟種子について比色計を使用して決定される場合に、Ｌ＊（１０°／Ｄ６５）スコアが少なくとも、増加する優先順に６１．５、６２、６３、６５、７０、８０、９０である植物に関する。当該植物の乾燥成熟種子について比色計を使用して決定される場合に、Ｌ＊（１０°／Ｄ６５）スコアは適切には９９以下である。
【００３５】
一実施形態では、本発明は、本発明のＱＴＬをホモ接合的に含むナス（ソラヌム・メロンゲナ）植物であって、ここで、植物の新鮮成熟種子について比色計を使用して決定される場合に、Ｌ＊（１０°／Ｄ６５）スコアが少なくとも、増加する優先順に８５、８７、８９、９０である植物に関する。当該植物の新鮮成熟種子について比色計を使用して決定される場合に、Ｌ＊（１０°／Ｄ６５）スコアは適切には９９以下である。
【００３６】
一実施形態では、本発明は、本発明のＱＴＬをホモ接合的に含むナス（ソラヌム・メロンゲナ）植物であって、ここで、植物の乾燥成熟種子について例えば実施例３に記載されるようにイメージ解析を使用して決定される場合に、Ｌ＊（１０°／Ｄ６５）スコアが少なくとも、増加する優先順に５５、５８、６０、６２、６５、７０、８０、９０である植物に関する。当該植物の乾燥成熟種子について比色計を使用して決定される場合に、Ｌ＊（１０°／Ｄ６５）スコアは適切には９９以下である。
【００３７】
一実施形態では、本発明は、本発明のＱＴＬをホモ接合的に含むナス（ソラヌム・メロンゲナ）植物であって、ここで、植物の新鮮成熟種子について例えば実施例３に記載されるようにイメージ解析を使用して決定される場合に、Ｌ＊（１０°／Ｄ６５）スコアが少なくとも、増加する優先順に６２、６４、６６、６８、７０、８０、９０である植物に関する。当該植物の新鮮成熟種子について比色計を使用して決定される場合に、Ｌ＊（１０°／Ｄ６５）スコアは適切には９９以下である。
【００３８】
したがって、本明細書中で使用される「新規種子色」という用語は、オフホワイト、クリーミーホワイト、ベージュ、ベリーライトイエローまたはライトグレイッシュイエローである、および／またはその最も明るい部分でＲＨＳカラーコードによる１６１Ｄおよびその最も暗い部分でＲＨＳカラーコードによる１６１Ｃの色を示す新鮮成熟種子の種子色、およびベージュ、ライトイエロー、ペールイエロー、バフ（ｂｕｆｆ）またはカーキである、および／またはＲＨＳカラーコードによる１６４Ｂの色を示す乾燥成熟種子の種子色を指すことを意図する。
【００３９】
本発明はまた、本発明のナス植物の種子および有性生殖に適した植物の他の部分に関する。かかる植物部分は小胞子、花粉、子房、胚珠、胚嚢および卵細胞からなる群から選択されてもよい。
【００４０】
さらに、本発明はまた、栄養繁殖に適した本発明のナス植物の部分、例えば、組織培養、カッティング（ｃｕｔｔｉｎｇ）、根、茎、細胞およびプロトプラストに関する。組織培養は、葉、花粉、胚、子葉、胚軸、分裂組織的細胞、根、葯、花、種子または茎から生育してもよい。
【００４１】
本発明はさらに、ホモ接合的に存在する場合に新規色彩を有する種子を産生するナス植物をもたらすＱＴＬを含む本発明のナス植物の種子に関する。かかる種子において、ＱＴＬがホモ接合的にまたはヘテロ接合的に存在してもよいが、好ましくはホモ接合的に存在する。
【００４２】
本発明はまた、本発明のナス植物に生育することができる種子に関し、ここで、コショウ種子のゲノムは、種子から生育し得る植物にホモ接合的に存在する場合に新規種子色の形質を引き起こすＱＴＬを含む。かかる種子において、ＱＴＬはホモ接合的にまたはヘテロ接合的に存在してもよいが、好ましくはホモ接合的に存在する。
【００４３】
さらに、本発明は、ハイブリッド種子ならびに第一の親植物を第二の親植物と交配させること、および得られたハイブリッド種子を収穫することを含むハイブリッド種子の製造方法に関する。かかるハイブリッド種子は、本発明のＱＴＬをヘテロ接合的またはホモ接合的のいずれかで含んでもよい。全てのハイブリッド種子が本発明の形質をホモ接合的に保有し、ハイブリッド種子から生育した植物が新規色彩を有する種子を産生するためには、両方の親が新規種子色の形質を引き起こすＱＴＬにつきホモ接合である必要がある。両方の親は、したがって、本発明のＱＴＬを保有する。それらは、他の形質について均一である必要はない。
【００４４】
ナス植物の種子に加えて、本発明はまた、ホモ接合的に存在する場合に新規色彩を有する種子を産生するナスをもたらすＱＴＬを含むナス植物に由来する子孫を包含する。かかる子孫は本発明の植物またはその子孫植物の有性生殖または栄養繁殖により産生されてもよい。当該子孫は本発明の植物に見出され、代表的な試料が番号ＮＣＩＭＢ４２５０７でＮＣＩＭＢで寄託された種子から生育した植物に存在するようなＱＴＬを保有する。当該ＱＴＬはホモ接合的およびヘテロ接合的の両方で子孫に存在してもよく、好ましくは第一の選択肢である。これに加えて、植物は当該種子色以外の１以上の特徴的において改変されてもよい。かかるさらなる改変は例えば、交配および選択、突然変異誘発また導入遺伝子での形質転換により行われる。
【００４５】
本明細書中で使用される「子孫」という用語は、任意のナス植物の新規種子色形質を基礎とする本発明のＱＴＬを保有する本発明の植物との交配による子孫または第一のおよびすべてのさらなる子孫を意味することを意図する。本発明の子孫は、本発明の新規種子色形質を引き起こすＱＴＬを保有する本発明の植物との任意の交配の子孫を含む。かかる子孫は例えば、第一のナス植物を第二のナス植物と交配することにより入手可能であり、ここで、植物の１つが代表的な試料が受入番号ＮＣＩＭＢ４２５０７で寄託された種子から生育しているが、ＮＣＩＭＢ４２５０７に存在する本発明のＱＴＬを保有する他のナス植物の子孫であってもよい。
【００４６】
さらに、本発明はまた、本発明のナス植物の子孫または本発明の植物に由来する種子から生育したナス植物の子孫を包含し、ここで、当該植物の子孫はＱＴＬを含み、かつＱＴＬはヘテロ接合状態で存在してもよいが、ＱＴＬは好ましくはホモ接合状態で存在する。
【００４７】
本発明のナス植物に由来する、または本発明のナス植物からのナス種子からの繁殖材料もまた、本発明に含まれ、ここで当該繁殖材料は、ホモ接合的に存在する場合に新規種子色を引き起こすＱＴＬを含み、かつＱＴＬは好ましくはホモ接合状態で存在する。
【００４８】
本発明はまた、本発明のナス植物に生育することができる繁殖材料に関し、ここで当該繁殖材料は、ホモ接合的に存在する場合に新規種子色を引き起こすＱＴＬを含み、かつＱＴＬは好ましくはホモ接合状態で存在する。
【００４９】
本発明のナス植物に由来する繁殖材料並びに本発明の植物に生育することができる繁殖材料は例えば、カルス、小胞子、花粉、子房、胚珠、胚、胚嚢、卵細胞、カッティング（ｃｕｔｔｉｎｇ）、根、茎、細胞、プロトプラスト、葉、子葉、胚軸、分裂組織的細胞、根、根端、小胞子、葯、花、種子および茎からなる群から選択される、またはそれらの一部または組織培養物である。
【００５０】
本発明はさらに、本発明のナス植物の細胞に関し、当該細胞は、ホモ接合状態で新規種子色形質を与えるＱＴＬを含み、ここで当該ＱＴＬは代表的な試料が受入番号ＮＣＩＭＢ４２５０７でＮＣＩＭＢで寄託された種子から生育したナス植物のゲノムに存在する。当該ナス植物は、あるナス植物を第二のナス植物、特には受入番号ＮＣＩＭＢ４２５０７で寄託されたような種子から生育したナス植物と交配させ、本発明の新規種子色形質を有するナス植物について好ましくはＦ２において選択することにより入手可能である。当該細胞はしたがって、代表的な試料がＮＣＩＭＢ受入番号４２５０７で寄託された種子から生育したナス植物の新規種子色形質をコードする遺伝情報、より特には本明細書中に記載されるＱＴＬ、と実質的に同一の、好ましくは完全に同一の遺伝情報を含む。好ましくは、本発明の細胞は植物の一部または植物部分であるが、細胞はまた、単離形態であってもよい。
【００５１】
一実施形態では、本発明は、本発明の新規種子色形質を与える本発明のＱＴＬを別のナス植物に移入するための、ＮＣＩＭＢ受入番号ＮＣＩＭＢ４２５０７の種子の使用に関する。本発明はまた、本発明のＱＴＬを別のナス植物に移入するための、寄託された種子と同一のＱＴＬを有するナス植物の使用に関する。
【００５２】
もう一つの実施形態では、本発明は、作物としての本発明のＱＴＬを保有するナス植物の使用に関する。
【００５３】
本発明はまた、種子の供給源としての本発明のＱＴＬを保有するナス植物の使用に関する。
【００５４】
さらに別の実施形態では、本発明は、繁殖の材料の供給源としての本発明のＱＴＬを保有するナス植物の使用に関する。
【００５５】
さらに、本発明は、消費のための本発明のＱＴＬを保有するナス植物の使用に関する。
【００５６】
もう一つの実施形態では、本発明は、ナス植物にＱＴＬを与えるための本発明のＱＴＬを保有するナス植物の使用に関する。
【００５７】
さらに別の実施形態では、本発明は、本発明のＱＴＬのレシピエントとしてのナス植物、特にＮＣＩＭＢ受入番号ＮＣＩＭＢ４２５０７の種子から生育したナス植物の使用に関する。
【００５８】
本発明はまた、本発明のナス植物から収穫され、新規種子色を有する種子を有する果実を産生し、かつ本明細書に記載されるＱＴＬを含むナス果実またはその一部に関する。当然、これはまた、ナス果実でできている任意の食品または加工食品に関する。
【００５９】
本発明はまた、本発明のナス植物から収穫され、本明細書に記載されるＱＴＬをヘテロ接合状態で含むナス果実、またはその部分に関する。当然これはまた、ナス果実でできている任意の食品または加工食品に関する。新規種子色の形質はかかる植物において見えないが、それらは依然としてＱＴＬの供給源であり、かつ例えば、育種において使用され得る。
【００６０】
加工ナス果実はまた、ソース、ババガヌーシュ、カレー、パイ、ムサカ、スープまたはラビオリ、トルテッリーニ、カネロニ等などの乾燥または生パスタ製品などの別の食品に含まれてもよい。かかる食品は通常は事前包装されており、スーパーマーケットでの販売を意図している。したがって、本発明はまた、食品、特にソース、サラダ、パイ、スープおよびパスタの製造における、本発明のナス植物またはその部分から収穫されたナス果実の使用に関する。加工形態においても、ナス果実は、依然として本発明のＱＴＬを含む。
【００６１】
本発明のナス植物はまた、新規種子色を引き起こすＱＴＬを含む他のナス植物の開発のための育種プログラムにおける生殖質として使用され得る。この種の使用も本発明に包含される。
【００６２】
さらに、本発明は、本明細書に記載されるようにナス植物においてホモ接合状態で存在する場合に新規種子色を引き起こす、所望により単離形態である核酸またはその一部に関し、当該核酸は、Ｈｉｒａｋａｗａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｄｒａｆｔ  Ｇｅｎｏｍｅ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  ｏｆ  Ｅｇｇｐｌａｎｔ（Ｓｏｌａｎｕｍ  ｍｅｌｏｎｇｅｎａ  Ｌ．）：ｔｈｅ  Ｒｅｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｖｅ  Ｓｏｌａｎｕｍ  Ｓｐｅｃｉｅｓ  Ｉｎｄｉｇｅｎｏｕｓ  ｔｏ  ｔｈｅ  Ｏｌｄ  Ｗｏｒｌｄ、２０１４、ＤＮＡ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ２１、６４９−６６０で与えられるゲノム配列に基づいて連鎖群１１に由来し、かつ配列番号１、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９、配列番号１１、配列番号１３および配列番号１５からなる群から選択される少なくとも１つの分子マーカーと連鎖し、および／またはＮＣＩＭＢ受入番号ＮＣＩＭＢ４２５０７の種子に存在する。特に、当該核酸は、配列番号１、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９、配列番号１１および配列番号１３のマーカーの組み合わせ、より特には配列番号９、配列番号１１および配列番号１３のマーカーの組み合わせ、もっとも特には配列番号１１および配列番号１３のマーカーの組み合わせまたは配列番号１、配列番号３、配列番号５および配列番号７のマーカーの組み合わせに連鎖している。当業者は本発明のナス植物のゲノムから本発明の種子色形質を引き起こす核酸またはその一部を単離でき、かつ当該ＱＴＬおよび本発明の形質と連鎖する新たな分子マーカーを作製するためにそれを使用できるだろう。
【００６３】
本発明はまた、分子マーカーの使用に関し、ここで、当該マーカーは、本発明のナス植物におけるＱＴＬを同定するまたは新規種子色を有するナス植物を開発するために、配列番号１、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９、配列番号１１、配列番号１３および配列番号１５からなる群から選択される。
【００６４】
本発明はさらに、新規種子色を引き起こすＱＴＬに連鎖している他のマーカーを同定するまたは開発するための分子マーカーの使用に関する。
【００６５】
種子または植物のゲノムにおける本発明のＱＴＬの存在を立証するために、少なくとも１つの分子マーカーが必要であるが、配列番号１、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９、配列番号１１、配列番号１３および配列番号１５による分子マーカーの任意の組み合わせが使用されてもよい。本発明の種子色形質について均一ではない植物の集団または集まりの遺伝子型判定は、配列番号１と配列番号２、配列番号３と配列番号４、配列番号５と配列番号６、配列番号７と配列番号８、配列番号９と配列番号１０、配列番号１１と配列番号１２、配列番号１３と配列番号１４および配列番号１５と配列番号１６からなる群から選択される少なくとも１つの分子マーカーセットを使用して行われてもよい。
【００６６】
植物における本発明の新規種子色ＱＴＬのホモ接合の存在はまた、その植物により産生される成熟種子の色彩を調べることにより表現型的に決定されてもよい。本発明の新規種子色形質の存在は、任意の植物または植物集団について表現型的に決定されてもよい。遺伝子移入プロセスにおいて、本発明の新規種子色形質の存在を表現型的に決定することは、形質が分離している任意の世代、好ましくはＦ２において、遺伝子移入プロセスについてもっとも有益である。
【００６７】
一態様において、本発明は、
ａ）ホモ接合的に存在する場合に新規種子色をもたらすＱＴＬを含む植物を別の植物と交配させること；
ｂ）Ｆ１および／またはＦ２世代において新規種子色を有する植物を選択すること；
ｃ）所望により、１以上のさらなる自家受粉および／または好ましい親との交配および／または戻し交配の繰り返しを行い、そして本発明の形質を含む／示す植物について選択すること、
を含む、新規色彩を有する種子を産生する形質を有するナス植物の生産方法に関する。
【００６８】
新規色彩を有する種子を産生する形質を有する植物を選択することは、本明細書中に記載される形質に連鎖している分子マーカーを使用して分子的に行われ得、および／または形質が分離するＦ２または任意のさらなる世代において表現型的に行われ得る。
【００６９】
本出願の文脈において、「形質」という用語は、植物の表現型を指す。特に、「形質」という用語は、本発明の形質を指し、より特には新規色彩を有する種子を産生するナス植物の形質を指す。「ＱＴＬ」（すなわち「量的形質遺伝子座」）という用語はホモ接合状態で本発明の新規種子色形質を引き起こす植物のゲノムにおける遺伝情報のために使用される。植物のゲノムが本発明の形質を引き起こすＱＴＬを含む場合に、当該植物により産生される種子は、本発明の新規種子色を有する。したがって、当該植物は、本発明のＱＴＬを有する。
【００７０】
本発明の形質を提供する親が、必ずしも寄託された種子から直接生育した植物ではないことは明らかである。親はまた、例えば、自家受粉または交配により得られる寄託された種子由来の子孫植物、または他の手段により本発明の形質を有することが同定された種子由来の子孫植物であってもよい。
【００７１】
本発明は、：
ａ）代表的な種子が受託番号ＮＣＩＭＢ４２５０７で寄託された新規種子色の形質を有するナス植物を望ましい形質を含む第二のナス植物と交配させてＦ１子孫を産生すること；
ｂ）当該新規種子色の形質および望ましい形質を含むＦ２子孫植物において選択すること；
ｃ）選択されたＦ２子孫植物をいずれかの親と交配させて、戻し交配子孫を産生させること；
ｄ）望ましい形質および新規種子色の形質を含む戻し交配子孫植物を選択すること；および
ｅ）所望により工程ｃ）およびｄ）を連続して１回以上繰り返し、望ましい形質および新規種子色の形質を含む、選択された第四以上の戻し交配子孫を産生すること
を含む、別の望ましい形質を新規色彩を有する種子を産生する形質を有するナス植物に導入する方法をさらに提供する。本発明は、この方法により産生されたナス植物を含む。
【００７２】
一実施形態では、新規種子色の形質を有する植物についての選択は、配列番号１、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９、配列番号１１、配列番号１３および配列番号１５によるマーカーのいずれか、または任意の組み合わせを使用することによりＦ１または任意のさらなる世代で行われる。別の態様では、本発明の形質についての選択は、交配またはあるいは戻し交配のＦ２において開始される。Ｆ２における植物の選択は、表現型的に並び当該形質が根底にあるＱＴＬを直接的にまたは間接的に検出するマーカーを使用することにより行われ得る。表現型選択は、参照のためにＲＨＳカラーチャートを使用して種子の色彩を決定することにより、および／またはナス種子の比色分析および／またはイメージ解析による色彩特性を決定することにより適切に行われ得る。
【００７３】
一実施形態では、新規種子色の形質を有する植物についての選択は、Ｆ３以降の世代において開始される。
【００７４】
一実施形態では、当該ＱＴＬを含む植物は、近交系、ハイブリッド、倍加半数体の植物、または分離集団の植物である。
【００７５】
一実施形態では、本発明の植物、すなわち本発明のＱＴＬを含む植物は、農学的にエリートなナス植物である。
【００７６】
この発明の文脈では、農学的にエリートなナス植物は、定方向の交配および人間の介入による選択の結果として生産者が商業的に重要な製品を収穫することを可能にする識別できかつ望ましい農学的形質の蓄積をもたらす遺伝子型を有する植物である。
【００７７】
本発明のＱＴＬを保有する新たなナス植物を育種する過程において、望ましい農学的形質は本発明のＱＴＬとは独立して当該ナス植物に導入されてもよい。本明細書中で使用されるように、「望ましい形質」は、例えば改善した収量、果実の形、果実の大きさ、果実の色、種子の大きさ、植物の活力、植物の丈、および１以上の疾病または疾病を引き起こす生物に対する抵抗性を含むが、それらに限定されない。これらの望ましい形質のいずれか１つは本発明のＱＴＬと組み合わせられてもよい。
【００７８】
なおさらなる実施形態では、本発明の農学的にエリートなナス植物は、近交系またはハイブリッドである。
【００７９】
本明細書中で使用されるように、近交系の植物は、３回以上の自家受粉または戻し交配の繰り返しの結果である植物の集団の植物である；または植物が倍加半数体である。近交系は市販のハイブリッド生産に使用される親系統であってもよい。
【００８０】
本明細書中で使用されるように、ハイブリッド植物は異なる遺伝子型を有する２つの異なる植物間の交配の結果である植物である。より特には、ハイブリッド植物は、２つの異なる近交系の植物間の交配の結果であり、かかるハイブリッド植物は、例えば市販のＦ１ハイブリッド品種の植物であってもよい。
【００８１】
一実施形態では、本発明のＱＴＬを含む植物は、Ｆ１ハイブリッド品種である。
【００８２】
本発明は、倍加半数体生成技術を使用して当該形質を含む倍加半数体系統を生み出すことによる、新規種子色の形質を有するナス植物の生産方法をさらに提供する。
【００８３】
本発明はさらに、新規種子色の形質を有する植物に生育できるハイブリッド種子ならびに第一の親植物を第二の親植物と交配させること、および得られたハイブリッド種子を収穫することを含むかかるハイブリッド種子の生産方法であって、第一の親植物および／または第二の親植物が請求項に記載の植物である、方法に関する。
【００８４】
一実施形態では、本発明は、第一の親ナス植物を第二の親ナス植物と交配させることおよび得られたハイブリッド種子を収穫すること、ここでその第一の親植物および第二の親植物は新規種子色の形質を有する、およびハイブリッド種子を新規種子色の形質を有するハイブリッド植物に生育させること、とを含む、新規種子色の形質を有するハイブリッドナス植物の生産方法に関する。
【００８５】
本発明はまた、ナス植物を生育させるための本発明のＱＴＬをホモ接合的に含む種子を使用することによる新規種子色の形質を有するナス植物の生産方法に関する。当該種子は適切には代表的な試料が受託番号ＮＣＩＭＢ４２５０７でＮＣＩＭＢで寄託された種子である。
【００８６】
本発明はまた、代表的な試料が受託番号ＮＣＩＭＢ４２５０７でＮＣＩＭＢで寄託された種子からのナス植物を生育させること、植物に種子を産生させることを可能にすること、およびそれらの種子を収穫することを含む種子生産方法に関する。種子の産物は適切には交配または自家受粉により行われる。
【００８７】
一実施形態では、本発明は、組織培養を使用することによる新規色彩を有する種子を産生する形質を有するナス植物の生産方法に関する。
【００８８】
本発明はさらに、栄養繁殖を使用することによる新規色彩を有する種子を産生する形質を有するナス植物の生産方法に関する。
【００８９】
一実施形態では、本発明は、当該形質を引き起こすＱＴＬをナス植物に遺伝子移入するための、遺伝的改変方法を使用することによる新規色彩を有する種子を産生する形質を有するナス植物の生産方法に関する。遺伝的改変は、非交差種（ｎｏｎ−ｃｒｏｓｓａｂｌｅ  ｓｐｅｃｉｅｓ）からの遺伝子または合成遺伝子を使用するトランスジェニック改変もしくは遺伝子組換え、ならびに作物植物それ自体または性的に適合性（ｓｅｘｕａｌｌｙ  ｃｏｍｐａｔｉｂｌｅ  ｐｌａｎｔ）のドナー植物からの（農業的）形質をコードする天然の遺伝子を使用するシスジェニック（ｃｉｓｇｅｎｉｃ）改変またはシスジェネシス（ｃｉｓｇｅｎｅｓｉｓ）を含む。
【００９０】
一実施形態では、遺伝情報が得られる供給源、特にＱＴＬは、寄託された種子から生育した植物、またはその有性もしくは栄養的子孫により形成される。
【００９１】
本発明はまた、新規色彩の種子を産生する形質を有するナス植物の開発のための育種方法に関し、ここで、当該形質を引き起こすＱＴＬを含む生殖質が使用される。生殖質は全ての生物の遺伝的特徴により構成され、かつ本発明によれば少なくとも本発明の新規種子色形質を包含する。ＱＴＬを含みかつ生殖質について代表的である植物の代表的な種子は、受託番号ＮＣＩＭＢ４２５０７でＮＣＩＭＢで寄託された。
【００９２】
さらなる実施形態では、本発明は、新規色彩を有する種子を産生する形質を有するナス植物の生産方法に関し、ここで、当該形質を与えるＱＴＬを含む植物の子孫または繁殖材料は別のナス植物に当該形質を遺伝子移入するための供給源として使用される。当該ＱＴＬを含む植物の代表的な種子は受託番号ＮＣＩＭＢ４２５０７でＮＣＩＭＢで寄託された。
【００９３】
さらに、本発明は、本発明の新規種子色形質を有するナス植物をもたらす新規種子色遺伝子に関し、ここで新規種子色遺伝子が代表的な試料が受託番号ＮＣＩＭＢ４２５０７でＮＣＩＭＢで寄託された植物のゲノムに存在する。熟練した育種家は新規種子色遺伝子を植物に遺伝子移入するための新規種子色遺伝子の供給源としてかかる植物を使用する方法を知っている。
【００９４】
本発明はまた、新規種子色の形質を有する植物、特にＱＴＬが代表的な試料が受託番号ＮＣＩＭＢ４２５０７で寄託された植物のゲノムに存在する、新規種子色形質を有するナス植物を産生するための新規種子色を有する種子を産生する形質を有するナス植物をもたらすＱＴＬの使用に関する。
【００９５】
それらの別の態様によれば、本発明は、新規種子色を有する種子を産生する天然に存在しない植物に関し、ここで新規種子色は、代表的な試料が受入番号４２５０７で寄託された植物のゲノムに存在するＱＴＬの植物のゲノムにおける存在の結果である。天然に存在しない植物は特に変異体植物である。
【００９６】
「核酸」という用語は、本発明の形質を引き起こす遺伝情報を含有する高分子、ＤＮＡまたはＲＮＡ分子について使用される。植物が本発明の表現型形質を示す場合、そのゲノムは、その形質を引き起こす核酸を含む。したがって、当該植物は、本発明の核酸を有する。本発明において、当該核酸は、代表的な試料が受託番号ＮＣＩＭＢ４２５０７で寄託された植物のゲノムに存在するＱＴＬの一部である。
【００９７】
本発明は、好ましくは新規種子色の形質を有するナス植物を提供し、当該植物は本明細書中に記載される任意の方法および／または当業者によく知られている任意の方法により得られる。
【００９８】
分子マーカーが存在しない場合、またはＱＴＬとマーカー間に組換えが起こったために、マーカーが植物のゲノムにおけるＱＴＬの存在についてそれ以上予測するものではない場合、遺伝的決定因子と本発明のＱＴＬの同等性は対立性検定により決定され得る。対立性検定を行うために、本発明の既知のＱＴＬについてホモ接合である材料、すなわち試験植物は、試験される遺伝的決定因子についてホモ接合である材料と交配される。この後者の植物は、ドナー植物と呼ばれる。試験されるドナー植物は試験される決定要因についてホモ接合である、またはホモ接合にされるべきである。当業者は試験される決定要因についてホモ接合である植物を得る方法を知っている。ドナー植物および試験植物間の交配のＦ２において本発明の遺伝子座に関する表現型について分離が観察されない場合、ドナー植物の決定要因および試験植物の既知の遺伝子座は同等であることが証明されている。観察されるべき表現型は新規種子色であり、特に本明細書に記載される明るい種子色である。試験植物は受入番号４２０５４でＮＣＩＭＢで寄託された種子から生育した植物であってもよいが、それに限定されない。
【００９９】
１以上の遺伝子が特定の形質に関与している可能性があり、そして同等性を決定するために対立性検定が行われる場合、当該検定をする当業者は、検定が適切に機能するためにすべての関連する遺伝子がホモ接合的に存在することを確認しなければならない。
【０１００】
寄託情報
新規種子色を有する種子を産生するナス植物をもたらすＱＴＬを有するソラヌム・メロンゲナ植物の種子は２０１６年１月５日にＮＣＩＭＢ受託番号ＮＣＩＭＢ４２５０７で、Ｆｅｒｇｕｓｏｎ  Ｂｕｉｌｄｉｎｇ，Ｃｒａｉｂｓｔｏｎｅ  Ｅｓｔａｔｅ，Ｂｕｃｋｓｂｕｒｎ，Ａｂｅｒｄｅｅｎ，ＡＢ２１  ９ＹＡ，ＵＫにあるＮＣＩＭＢ  Ｌｔｄ．に寄託された。この寄託物の種子は、ＱＴＬをホモ接合的に含む。これらの種子から生育した植物は、本明細書に記載されるように新規種子色を有する種子を産生する。
【０１０１】
寄託された種子は植物新種保護（ｐｌａｎｔ  ｖａｒｉｅｔｙ  ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ）を得るために必要とされるＤＵＳ判断基準を満たさず、従って植物品種であるとは見なすことはできない。
【０１０２】
マーカー
マーカー情報
【表１−１】
2019520836.tif 000004
【表１−２】
2019520836.tif 000005
【表１−３】
2019520836.tif 000006
【０１０３】
マーカー配列番号１、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９、配列番号１１、配列番号１３および配列番号１５のＳＮＰ配列は寄託物ＮＣＩＭＢ４２５０７の種子のゲノムにあり、ナス植物に新規種子色を有する種子を産生する形質を与える本発明のＱＴＬに連鎖している。配列番号２、配列番号４、配列番号６、配列番号８、配列番号１０、配列番号１２、配列番号１４および配列番号１６の配列は、それぞれ分子ＳＮＰマーカー配列番号１、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９、配列番号１１、配列番号１３および配列番号１５についての野生型Ｓ．ｍｅｌｏｎｇｅｎａアレルを表す。
【０１０４】
本発明の形質に連鎖しているマーカーおよび野生型間で異なるヌクレオチドは下線されかつ太字である。
【０１０５】
マーカーアレル配列番号１は、ヌクレオチドの違いによるものではなく、一塩基対欠失によりマーカーアレル配列番号２と異なる：マーカー配列番号２の４７位に存在するＡは配列番号１において欠損している。マーカーアレル配列番号３は１０１位のＳＮＰによりマーカーアレル配列番号４と異なり、ここで配列番号３は１０１位のＧを有し、かつ配列番号４は１０１位のＡを有する。マーカーアレル配列番号５は７７位のＳＮＰによりマーカーアレル配列番号６と異なり、ここで配列番号５は７７位のＴを有し、かつ配列番号６は７７位のＣを有する。マーカーアレル配列番号７は１０１位のＳＮＰによりマーカーアレル配列番号８と異なり、ここで配列番号７は１０１位のＡを有し、かつ配列番号８は１０１位のＧを有する。マーカーアレル配列番号９は１０１位のＳＮＰによりマーカーアレル配列番号１０と異なり、ここで配列番号９は１０１位のＴを有し、かつ配列番号１０は１０１位のＧを有する。マーカーアレル配列番号１１は１０１位のＳＮＰによりマーカーアレル配列番号１２と異なり、ここで配列番号１１は１０１位のＴを有し、かつ配列番号１２は１０１位のＣを有する。マーカーアレル配列番号１３は１０１位のＳＮＰによりマーカーアレル配列番号１４と異なり、ここで配列番号１３は１０１位のＣを有し、かつ配列番号１４は１０１位のＧを有する。マーカーアレル配列番号１５は９２位のＳＮＰによりマーカーアレル配列番号１６と異なり、ここで配列番号１５は９２位のＴを有し、かつ配列番号１６は９２位のＣを有する。
【０１０６】
これらのマーカー配列におけるＳＮＰは、本発明のＱＴＬの存在を検出するための分子マーカーとして使用されてもよい。これらのＳＮＰｓは、実際のマーカーである。マーカーとしてＳＮＰを使用する場合、ＳＮＰ周辺配列は必ずしもここで与えられる配列と同じ長さというわけではない。ＳＮＰｓは例えば、本発明のＱＴＬを含まないナス植物および本発明のＱＴＬを含むナス植物間の交配の子孫における本発明のＱＴＬの存在を検出するために使用され得、植物は代表的な試料がＮＣＩＭＢ受入番号４２５０７でＮＣＩＭＢで寄託された種子から生育した植物であってもよい。
【図面の簡単な説明】
【０１０７】
以下の実施例において本発明をさらに説明するが、それらは決して本発明の範囲を限定することを意図するものではない。実施例において、以下の図を参照する：
【図１】図１は内側の種子を示す商業的に許容できる段階（Ｂ）での本発明のナス果実および商業的に許容できる段階（Ａ）での野生型ナス果実の断面を示す。
【図２】図２は内側の種子を示す商業的に許容できる段階（Ｂ）での本発明のナス果実および商業的に許容できる段階（Ａ）での野生型ナス果実の断面のクローズアップ図を示す。
【図３】図３は本発明の乾燥成熟したナス種子（Ａ）および乾燥成熟した野生型ナス種子（Ｂ）を示す。
【図４】図４は（Ａ）種皮（Ｂ）インタクトな半分の種子、および（Ｃ）半分の種子の胚と胚乳を示すために分解された野生型成熟ナス種子を示す。（Ａ）種皮、（Ｂ）インタクトな半分の種子、および（Ｃ）半分の種子の胚と胚乳を示すために分解された本発明の成熟ナス種子。
【実施例】
【０１０８】
実施例１
本発明の植物の開発
本発明のナス植物は以下の方法で得られた：Ｆ１ハイブリッドナス植物から始まり生成した倍加半数体ナス植物の選択において、４１植物のうち２つが驚くべきことに本発明の新規色彩を有する種子を産生することがみられた。倍加半数体集団を生成するための基礎として使用されたＦ１ハイブリッド植物も、Ｆ１ハイブリッド植物での自家受粉から生じるＦ２植物以降の世代も本発明の新規色彩を有する種子を産生したことがないため、これは驚くべきことである。本発明の最初に開発された植物ＣＢ−２を野生型植物と交配させた。いくつかのさらなる自家受粉、交配および選択の繰り返しにより、ホモ接合状態で本発明のＱＴＬを含むソラヌム・メロンゲナの種子が得られた。
【０１０９】
これらの種子は２０１６年１月５日に受入番号ＮＣＩＭＢ４２５０７でＦｅｒｇｕｓｏｎ  Ｂｕｉｌｄｉｎｇ，Ｃｒａｉｂｓｔｏｎｅ  Ｅｓｔａｔｅ，Ｂｕｃｋｓｂｕｒｎ，Ａｂｅｒｄｅｅｎ  ＡＢ２１  ９ＹＡ，ＵＫにあるＮＣＩＭＢ  Ｌｔｄで寄託した。この寄託物の種子は、ホモ接合状態で当該ＱＴＬを含む。
【０１１０】
実施例２
本発明の植物の表現型特性解析
ホモ接合的に遺伝的決定因子を保有する本発明の植物は、それらの種子の新規色彩により同定されてもよい。
【０１１１】
本発明のＱＴＬをホモ接合的に保有する本発明の植物の成熟種子の色彩は、本発明のＱＴＬをヘテロ接合的にか、または全く保有しない同質遺伝子的な植物の色彩よりもはるかに明るい（図１および２）。遺伝的決定因子をヘテロ接合的にか、または全く保有しない同質遺伝子的な植物と比較してホモ接合的に遺伝的決定因子を保有する植物の成熟種子のこの明るい色は、果実の収穫直後の新鮮成熟種子において最も明白だった。成熟種子は生理学的に完全に発育したナス果実に存在するようなものである。新鮮種子は収穫直後のナス果実に存在するようなもの、またはごく最近で果実から取られかつまだ湿っているようなものである。本発明のＱＴＬを保有していない新鮮成熟した野生型ナス種子の色彩をミドルブラウン、サンディブラウン、ブロンズ、またはコッパー色と呼ばれ得るが、ホモ接合的に遺伝的決定因子を保有する本発明の植物の新鮮成熟種子の色彩は、オフホワイト、クリーミーホワイト、ベージュ、ベリーライトイエローまたはライトグレイッシュイエローとして示され得た。
【０１１２】
種子の乾燥の際に、野生型種子および本発明の植物の種子の両方の色彩が変化した。しかしながら、完全に乾燥した場合、本発明の植物の成熟種子の色彩はまた、成熟した野生型種子の色彩と明確に区別されかつ成熟した野生型種子の色彩より明るかった（図３）。本発明のＱＴＬを保有していない乾燥成熟した野生型ナス種子の色彩は茶色、サンディブラウン、ミドルブラウン、ブロンズまたはコッパー色と呼ばれ得るが、ホモ接合的に遺伝的決定因子を保有する本発明の植物の乾燥成熟種子の色彩はベージュ、ライトイエロー、ペールイエロー、バフ（ｂｕｆｆ）またはカーキとして示され得た。
【０１１３】
新規種子色表現型を示す植物の成熟種子および野生型コントロール種子の両方から種皮を剥いた場合、本発明の種子の新規種子色表現型が外種皮とも呼ばれる種皮における茶色の色素の減少または不存在に起因し、種皮の下の子葉の色彩を現出することが明らかとなった（図４）。
【０１１４】
本発明の種子および野生型種子の呈色をＲＨＳカラーチャート（Ｔｈｅ  Ｒｏｙａｌ  Ｈｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒａｌ  ｓｏｃｉｅｔｙ，Ｌｏｎｄｏｎ，ＵＫ）を使用してスコア化した。本発明のＱＴＬを保有していない新鮮成熟した野生型種子の色彩はその最も暗い部分で１６５Ｂおよびその最も明るい部分で１６５Ｃとスコアされ、一方で本発明の新鮮成熟種子の色彩はその最も明るい部分で１６１Ｄおよびその最も暗い部分で１６１Ｃをスコアした（表２）。乾燥成熟した野生型種子の色彩は１６２Ａをスコアし、一方で本発明の乾燥成熟種子の色彩は１６４Ｂをスコアした（表２）。
表２
新鮮および乾燥野生型ナス種子ならびに本発明のＱＴＬをホモ接合的に保有する本発明のナスの種子のＲＨＳカラー推定。ＲＨＳカラーコードはまた、ＣＩＥＬＡＢ  Ｌ＊ａ＊ｂ＊色彩値（Ｄ６５光源および１０度観測者角度）に変換した。
【表２】
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【０１１５】
光源、対象の大きさ、色背景、および視野角もしくは照明を含む環境条件は、人間の観測者に色づいた対象がどのように見えるかに影響を与えてもよい。この主観性を克服するために、色彩を定量化し、色彩を記述する変数に関して色を表現するための色彩測定システムおよび機器が開発されてきた。上述のようにＲＨＳカラーチャートを使用して種子色を推定することに加えて、２つの実験方法論：比色分析／分光光度法およびイメージ解析を使用した。
【０１１６】
３ｍｍ測定径のコニカミノルタ（Ｋｏｎｉｃａ  Ｍｉｎｏｌｔａ）ハンドヘルド比色計モデルＣＭ７００ｄをオランダ、Ｄｅ  Ｌｉｅｒで使用し、ＣＩＥＬＡＢ  Ｌ＊ａ＊ｂ＊色空間、Ｄ６５光源および１０度観測者角度を使用して成熟ナス種子の色彩をスコア化した。当該機器を製造者の指示に従い使用前に較正した。比色計測定について、約１０個の種子を白い背景上に集め、被可能な限り種子で背景を覆った。成熟した野生型種子および本発明の種子は同様の大きさであった。比色計スコアは各試料につき４回得た。試料あたりの平均値を表３に示す。
表３
ＣＩＥＬＡＢ  Ｌ＊ａ＊ｂ＊色空間、Ｄ６５光源および１０度観測者角度を使用してコニカミノルタ比色計ＣＭ７００ｄにより決定される、新鮮および乾燥野生型ナス種子ならびに本発明のＱＴＬをホモ接合的に保有する本発明のナスの種子の平均色。
【表３】
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【０１１７】
写真は、サーキュラーＢ＋Ｗ偏光フィルターを備えるＮｉｋｏｎ  ＡＦ−Ｓ  ３５ｍｍ  ｆ／１．８Ｇ  ＤＸ  ３５ｍｍレンズを備えるＮｉｋｏｎ  Ｄ７０００カメラを使用して、暗室における標準化された設定で行った。標準化されたカメラ設定は、偏光フィルターを備える昼光蛍光灯（４ｘ３６ワット、５４００Ｋ、ＣＲＩ９８、４０ｋＨｚ）を使用した。ランプヘッドは、試料台に対して４５度で傾斜していた。写真を撮る前に、ランプを点灯し、少なくとも３０分間ウォームアップさせた。レンズを下に向けてカメラをスタンドに取り付け、試料台の上に配置した。互いに明瞭に分離された約１０個の成熟種子を各試料につき写真撮影した。
【０１１８】
写真の色補正は、ＩｍａｇｅＪマクロ（１．４８ｕ）およびＸ−ｒｉｔｅ  ｃｏｌｏｒｃｈｅｃｋｅｒ  ｐａｓｓｐｏｒｔカラーチャートを使用して行った。較正ＲＧＢ値のイメージ解析および生成はＣｅｌｌＰｒｏｆｉｌｅｒ  ｐｉｐｅｌｉｎｅを使用して行った。その後、較正ＲＧＢ色彩値は、色彩較正アルゴリズムを使用してＣＩＥＬＡＢ  Ｌ＊ａ＊ｂ＊色彩値（Ｄ６５光源および１０度観測者角度）に変換した。
表４
イメージ解析により決定される新鮮および乾燥野生型ナス種子ならびに本発明のＱＴＬをホモ接合的に保有する本発明のナスの種子の較正ＲＧＢ値および較正ＣＩＥ  Ｌ＊ａ＊ｂ＊値（１０°／Ｄ６５）における平均色。
【表４】
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【０１１９】
ＣＩＥＬＡＢカラースケールは色彩を測定し、色彩における差を示すために広く使用されている。当該スケールは、３データ変数：Ｌ＊、ａ＊およびｂ＊を含む。Ｌ＊は０から１００までのスケールの明度を示し、０は黒であり、かつ１００は白である。変数ａ＊およびｂ＊は、赤、緑、青および黄の色の量を示す：ａ＊値は、緑（負の値）から赤（正の値）への色の変化を示し、一方でｂ＊は、黄色（正の値）から青（負の値）への色の変化を示す。２つのサンプル間の色の違いは、Ｌ＊および／またはａ＊、および／またはｂ＊の変化によって表すことができる。
【０１２０】
表２−４における異なるＬ＊ａ＊ｂ＊スコアから明らかなように、色彩パラメータは色彩を定量化するために使用される方法に依存して変化する。それでもなお、野生型成熟新鮮種子の特定の色彩定量化方法（ＲＨＳカラーチャート、比色分析またはイメージ解析を使用するいずれかの色推定）についてのＬ＊（１０°／Ｄ６５）スコアを本発明の新鮮成熟種子と比較する場合、Ｌ＊スコアは、本発明のＱＴＬを保有していない野生型種子と比較して本発明の種子につき常に高い。これは野生型乾燥成熟種子の特定の色彩定量化方法（ＲＨＳカラーチャート、比色分析またはイメージ解析を使用するいずれかの色推定）についてのＬ＊（１０°／Ｄ６５）スコアを本発明の乾燥成熟種子と比較する場合と同じであり、Ｌ＊スコアは本発明のＱＴＬを保有していない野生型種子と比較して本発明の種子につき常に高い。
【０１２１】
実施例３
本発明の形質についてのＱＴＬ解析
本発明の形質をマッピングしかつ本発明の形質についてのＱＴＬを同定するために、ホモ接合的に遺伝的決定因子を保有する倍加半数体（ＤＨ）系統ＣＢ−２を通常の色の種子を産生し、かつ本発明の遺伝的決定因子を保有しないＤＨ系統ＢＢ−１５と交配させた。この交配から生じるＦ１植物を使用して３７１ＤＨ系統で構成されるＧＨ集団を生成した。これらの３７１ＤＨ植物を生育させ、それらが産生する種子の色について表現型決定した。
【０１２２】
ＧＨ集団からのすべてのＤＨ植物を２つの遺伝子型：ホモ接合親ＣＢ−２につきＡＡおよびホモ接合親ＢＢ−１５につきＢＢでスコア化した。非多形的なマーカー、強く高い欠損値ならびに強いゆがみを有するマーカーを除外し、マーカー位相補性を行った後に、残っている９１個のＳＮＰマーカーの遺伝子地図作成をＪｏｉｎＭａｐ  ４．０ソフトウェア（Ｋｙａｚｍａ  Ｂ．Ｖ．、Ｗａｇｅｎｉｎｇｅｎ）で行った。最尤マッピングアプローチは連鎖群におけるマーカーの順序を推定するために最初に使用した。この後に、最尤マッピングから得られるマーカー開始順序を使用して連鎖群におけるマーカーの位置を予想するための回帰マッピングした。Ｈａｌｄａｎｅマッピング機能はマーカー間の組換え頻度をマーカー間の遺伝的距離（ｃｅｎｔｉＭｏｒｇａｎ、ｃＭ）に変換するために使用した。連鎖群の番号付けはナス（Ｓｏｌａｎｕｍ  ｍｅｌｏｎｇｅｎａ  Ｌ．）のドラフトゲノム配列に従った（Ｈｉｒａｋａｗａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｄｒａｆｔ  Ｇｅｎｏｍｅ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  ｏｆ  Ｅｇｇｐｌａｎｔ（Ｓｏｌａｎｕｍ  ｍｅｌｏｎｇｅｎａ  Ｌ．）：  ｔｈｅ  Ｒｅｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｖｅ  Ｓｏｌａｎｕｍ  Ｓｐｅｃｉｅｓ  Ｉｎｄｉｇｅｎｏｕｓ  ｔｏ  ｔｈｅ  Ｏｌｄ  Ｗｏｒｌｄ、２０１４、ＤＮＡ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ２１、６４９−６６０）。地図上のマーカーの向きは内部参照地図の位置を使用して調整した。
【０１２３】
データ分布を見るために本発明の形質についてヒストグラムを構築した：本発明の形質は２つのスコア：新規種子色および通常の種子色の均等な分布を有した。
【０１２４】
本発明の形質のＱＴＬマッピングをＧＨ集団において実施した。段階的回帰アプローチをＲ統計ソフトウェアを使用したＱＴＬマッピングについて使用した。本発明の形質についての１つの主要なＱＴＬは７１％の説明された分散（ｅｘｐｌａｉｎｅｄ  ｖａｒｉａｎｃｅ）で連鎖群１１上に検出された。１６個のマーカーが連鎖群１１上にマッピングされ、その合計で６３．４ｃＭの長さを有する。連鎖群１１の３６．７ｃＭのマーカー配列番号１３はピークマーカーとして同定された。ピークマーカーでのＬＯＤスコアは１９３．６、説明された分散（ｅｘｐｌａｉｎｅｄ  ｖａｒｉａｎｃｅ）７１％および相加効果−０．４８であった。上部隣接マーカーは３４．４ｃＭでの配列番号９であり、かつ下部隣接マーカーは４０．８ｃＭでの配列番号１５。さらなるマーカーは３４．４ｃＭでの配列番号７、配列番号５、配列番号３および配列番号１であり、３６．７ｃＭでの配列番号１１マーカーである。
【０１２５】
実施例４
他のナスへの本発明の形質の移入
本発明のＱＴＬをホモ接合的に保有する本発明のナス植物（ドナー親；寄託物、ＮＣＩＭＢ４２５０７の種子から生育した）を本発明の形質を保有しないが、種類、果実の形および果実の色が異なるいくつかの異なる野生型ナス植物と交配させた。本発明のナス植物を当該交配において母として使用し、花粉ドナーとして野生型植物を使用した場合、この交配から得られるＦ１種子は本発明の新規種子色を有する。しかしながら、野生型植物が当該交配において母として選択され、かつ本発明の植物が花粉ドナーとして選択された場合、この交配から得られるＦ１種子は通常の種子色を有する。したがって、種子の色彩は、種子を産生する植物（交配における母植物）の遺伝子型により決定される。
【０１２６】
野生型植物との交配における母としてまたは花粉ドナーとして使用されたかにかかわらず、得られたＦ１種子から生育した植物は野生型植物と同じ表現型を有していた、すなわち、それらは通常の色彩の種子を産生し、当該形質が劣性であることを示唆した。それにもかかわらず、ヘテロ接合状態での本発明の形質の存在が分子マーカーにより全てのＦ１植物において検出できた。この目的のために使用された一塩基多型（ＳＮＰ）マーカーは配列番号１、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９、配列番号１１、配列番号１３および配列番号１５として表１に示される。
【０１２７】
Ｆ２世代において、本発明の形質は単一遺伝子劣性遺伝と一致する様式で分離した（表５）。
表５
本発明の植物のＷＴナス親（通常の色の種子を有する）との交配からのＦ２集団における本発明の形質の分離。
【表５】
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【０１２８】
カイ二乗検定により、野生型親表現型（通常の種子色）およびドナー親表現型（新規種子色）を有するＦ２植物の観察数は、形質が単一遺伝子劣性様式で分離した場合に予想されるもの、すなわち３：１（ＷＴ親表現型：ドナー親表現型）と一致することが確認された。カイ二乗確率値は０．０５である。したがって、表５の分離データから本発明のＱＴＬが単一遺伝子劣性形質として振る舞うと結論づけることができる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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2019520836.tif 000016
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