【手続補正書】
【提出日】令和3年11月26日(2021.11.26)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
頭部への損傷を負った、又は負った可能性があるヒト対象が、中等度〜重度の外傷性脳損傷（ＴＢＩ）を有するのかどうかの決定の一助となる方法であって、
実際の損傷又は推測される損傷の後、約４８時間以内に、前記対象から得られた試料に対して、アッセイを実施して、グリア原線維性酸性タンパク質（ＧＦＡＰ）の前記試料中レベルと、ユビキチンカルボキシ末端ヒドロラーゼＬ１（ＵＣＨ−Ｌ１）の前記試料中レベルとの組合せを測定するステップ；及び
ＧＦＡＰの前記試料中レベルが、ＧＦＡＰの、約１０５ｐｇ／ｍＬ〜約８９０ｐｇ／ｍＬの基準レベルと等しく、ＵＣＨ−Ｌ１の前記試料中レベルが、ＵＣＨ−Ｌ１の、約１１０ｐｇ／ｍＬ〜約２０００ｐｇ／ｍＬの基準レベルと等しい場合に、前記対象が、中等度、重度又は中等度〜重度のＴＢＩを負っていないことを決定するステップ
を含む方法。
【請求項２】
前記対象が、前記アッセイが実施される前に、又は実施された後において、ＧＣＳ（Ｇｌａｓｇｏｗ  Ｃｏｍａ  Ｓｃａｌｅ）スコアを受けており、前記対象が、前記ＧＣＳスコアに基づき、中等度、重度又は中等度〜重度のＴＢＩを有すると推測される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
（ａ）ＧＦＡＰの前記基準レベルが、約１０５ｐｇ／ｍＬであり、ＵＣＨ−Ｌ１の前記基準レベルが、約８４０ｐｇ／ｍＬである；（ｂ）ＧＦＡＰの前記基準レベルが、約１５０ｐｇ／ｍＬであり、ＵＣＨ−Ｌ１の前記基準レベルが、約２０００ｐｇ／ｍＬである；（ｃ）ＧＦＡＰの前記基準レベルが、約２４０ｐｇ／ｍＬであり、ＵＣＨ−Ｌ１の前記基準レベルが、約８６０ｐｇ／ｍＬである；（ｄ）ＧＦＡＰの前記基準レベルが、約２６５ｐｇ／ｍＬであり、ＵＣＨ−Ｌ１の前記基準レベルが、約８６０ｐｇ／ｍＬである；（ｅ）ＧＦＡＰの前記基準レベルが、約３７０ｐｇ／ｍＬであり、ＵＣＨ−Ｌ１の前記基準レベルが、約１１０ｐｇ／ｍＬである；（ｆ）ＧＦＡＰの前記基準レベルが、約５０５ｐｇ／ｍＬであり、ＵＣＨ−Ｌ１の前記基準レベルが、約１５８０ｐｇ／ｍＬである；（ｇ）ＧＦＡＰの前記基準レベルが、約６９５ｐｇ／ｍＬであり、ＵＣＨ−Ｌ１の前記基準レベルが、約１５７０ｐｇ／ｍＬである；又は（ｈ）ＧＦＡＰの前記基準レベルが、約８９０ｐｇ／ｍＬであり、ＵＣＨ−Ｌ１の前記基準レベルが、約９２０ｐｇ／ｍＬである、請求項１又は２のいずれかに記載の方法。
【請求項４】
ＧＦＡＰの基準レベル及びＵＣＨ−Ｌ１の基準レベルが、約７９％以上の感度及び約３３％以上の特異度を有するアッセイにより決定される、請求項１〜３のいずれかに記載の方法。
【請求項５】
前記試料が、前記実際の損傷又は推測される損傷の後、約８時間〜約１６時間以内に、前記対象から得られる、請求項１〜４のいずれかに記載の方法。
【請求項６】
前記アッセイが、ＧＦＡＰ又はＵＣＨ−Ｌ１を、個別に測定又は検出するアッセイと比較して、少なくとも２％高い感度及び少なくとも３％高い特異度を有する、請求項１〜５のいずれかに記載の方法。
【請求項７】
（ａ）前記試料が、前記実際の損傷又は推測される損傷の後、約８時間〜約１２時間以内に、前記対象から得られ；ＧＦＡＰの前記基準レベルが、約２４０ｐｇ／ｍＬであり、ＵＣＨ−Ｌ１の前記基準レベルが、約８６０ｐｇ／ｍＬであり；前記アッセイが、９７％以上の感度及び５１％以上の特異度を有する；
（ｂ）前記試料が、前記実際の損傷又は推測される損傷の後、約１２時間〜約１６時間以内に、前記対象から得られ；ＧＦＡＰの前記基準レベルが、約１０５ｐｇ／ｍＬであり、ＵＣＨ−Ｌ１の前記基準レベルが、約８４０ｐｇ／ｍＬであり；前記アッセイが、９７．５％以上の感度及び３６％以上の特異度を有する；
（ｃ）前記試料が、前記実際の損傷又は推測される損傷の後、約８時間〜約１２時間以内に、前記対象から得られ；ＧＦＡＰの前記基準レベルが、約８９０ｐｇ／ｍＬであり、ＵＣＨ−Ｌ１の前記基準レベルが、約９２０ｐｇ／ｍＬであり；前記アッセイが、９０％以上の感度及び７９％以上の特異度を有する；又は
（ｄ）前記試料が、前記実際の損傷又は推測される損傷の後、約１２時間〜約１６時間以内に、前記対象から得られ；ＧＦＡＰの前記基準レベルが、約５０５ｐｇ／ｍＬであり、ＵＣＨ−Ｌ１の前記基準レベルが、約１５８０ｐｇ／ｍＬであり；前記アッセイが、９０％以上の感度及び６６％以上の特異度を有する、
請求項１〜６のいずれかに記載の方法。
【請求項８】
頭部への損傷を負った、又は負った可能性があるヒト対象に対して、頭部コンピュータ断層撮影（ＣＴ）スキャンを実施するのかどうかの決定の一助となる方法であって、
実際の損傷又は推測される損傷の後、約４８時間以内に、前記対象から得られた試料に対して、アッセイを実施して、グリア原線維性酸性タンパク質（ＧＦＡＰ）の前記試料中レベルと、ユビキチンカルボキシ末端ヒドロラーゼＬ１（ＵＣＨ−Ｌ１）の前記試料中レベルとの組合せを測定するステップ；及び
ＧＦＡＰの前記試料中レベルが、ＧＦＡＰの、約５０ｐｇ／ｍＬ〜約９７５ｇ／ｍＬの基準レベルと等しく、ＵＣＨ−Ｌ１の前記試料中レベルが、ＵＣＨ−Ｌ１の、約９０ｐｇ／ｍＬ〜約２０００ｐｇ／ｍＬの基準レベルと等しい場合に、前記対象が、ＣＴスキャンを必要としないと決定するステップ
を含む方法。
【請求項９】
（ａ）ＧＦＡＰの前記基準レベルが、約５０ｐｇ／ｍＬであり、ＵＣＨ−Ｌ１の前記基準レベルが、約２０００ｐｇ／ｍＬである；（ｂ）ＧＦＡＰの前記基準レベルが、約９５ｐｇ／ｍＬであり、ＵＣＨ−Ｌ１の前記基準レベルが、約２０００ｐｇ／ｍＬである；（ｃ）ＧＦＡＰの前記基準レベルが、約１１０ｐｇ／ｍＬであり、ＵＣＨ−Ｌ１の前記基準レベルが、約２０００ｐｇ／ｍＬである；（ｄ）ＧＦＡＰの前記基準レベルが、約１１５ｐｇ／ｍＬであり、ＵＣＨ−Ｌ１の前記基準レベルが、約１１０ｐｇ／ｍＬである；（ｅ）ＧＦＡＰの前記基準レベルが、約１４０ｐｇ／ｍＬであり、ＵＣＨ−Ｌ１の前記基準レベルが、約２０００ｐｇ／ｍＬである；（ｆ）ＧＦＡＰの前記基準レベルが、約１５０ｐｇ／ｍＬであり、ＵＣＨ−Ｌ１の前記基準レベルが、約１９０ｐｇ／ｍＬである；（ｇ）ＧＦＡＰの前記基準レベルが、約１９０ｐｇ／ｍＬであり、ＵＣＨ−Ｌ１の前記基準レベルが、約９０ｐｇ／ｍＬである；（ｈ）ＧＦＡＰの前記基準レベルが、約２４０ｐｇ／ｍＬであり、ＵＣＨ−Ｌ１の前記基準レベルが、約３００ｐｇ／ｍＬである；（ｉ）ＧＦＡＰの前記基準レベルが、約２８５ｐｇ／ｍＬであり、ＵＣＨ−Ｌ１の前記基準レベルが、約１９０ｐｇ／ｍＬである；（ｊ）ＧＦＡＰの前記基準レベルが、約５００ｐｇ／ｍＬであり、ＵＣＨ−Ｌ１の前記基準レベルが、約１４５０ｐｇ／ｍＬである；（ｋ）ＧＦＡＰの前記基準レベルが、約５５５ｐｇ／ｍＬであり、ＵＣＨ−Ｌ１の前記基準レベルが、約８１０ｐｇ／ｍＬである；（ｌ）ＧＦＡＰの前記基準レベルが、約８００ｐｇ／ｍＬであり、ＵＣＨ−Ｌ１の前記基準レベルが、約９００ｐｇ／ｍＬである；（ｍ）ＧＦＡＰの前記基準レベルが、約８４０ｐｇ／ｍＬであり、ＵＣＨ−Ｌ１の前記基準レベルが、約２０００ｐｇ／ｍＬである；（ｎ）ＧＦＡＰの前記基準レベルが、約８８０ｐｇ／ｍＬであり、ＵＣＨ−Ｌ１の前記基準レベルが、約８１０ｐｇ／ｍＬである；又は（ｏ）ＧＦＡＰの前記基準レベルが、約９７５ｐｇ／ｍＬであり、ＵＣＨ−Ｌ１の前記基準レベルが、約１５８０ｐｇ／ｍＬである、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
ＧＦＡＰの基準レベル及びＵＣＨ−Ｌ１の基準レベルが、約５４％以上の感度及び約３２％以上の特異度を有するアッセイにより決定される、請求項８又は９に記載の方法。
【請求項１１】
前記試料が、前記実際の損傷又は推測される損傷の後、約４時間〜約１６時間以内に、前記対象から得られる、請求項８〜１０のいずれかに記載の方法。
【請求項１２】
前記アッセイが、ＧＦＡＰ又はＵＣＨ−Ｌ１を、個別に測定又は検出するアッセイと比較して、少なくとも２％高い感度及び少なくとも４％高い特異度を有する、請求項８〜１１のいずれかに記載の方法。
【請求項１３】
（ａ）前記試料が、前記実際の損傷又は推測される損傷の後、約４時間〜約８時間以内に、前記対象から得られ；ＧＦＡＰの前記基準レベルが、約１１０ｐｇ／ｍＬであり、ＵＣＨ−Ｌ１の前記基準レベルが、約２０００ｐｇ／ｍＬであり；前記アッセイが、９５％以上の感度及び６２％以上の特異度を有する；
（ｂ）前記試料が、前記実際の損傷又は推測される損傷の後、約８時間〜約１２時間以内に、前記対象から得られ；ＧＦＡＰの前記基準レベルが、約２４０ｐｇ／ｍＬであり、ＵＣＨ−Ｌ１の前記基準レベルが、約３００ｐｇ／ｍＬであり；前記アッセイが、９１．５％以上の感度及び５２％以上の特異度を有する；又は
（ｃ）前記試料が、前記実際の損傷又は推測される損傷の後、約１２時間〜約１６時間以内に、前記対象から得られ；ＧＦＡＰの前記基準レベルが、約１９０ｐｇ／ｍＬであり、ＵＣＨ−Ｌ１の前記基準レベルが、約９０ｐｇ／ｍＬであり；前記アッセイが、９９％以上の感度及び３６％以上の特異度を有する、
請求項８〜１２のいずれかに記載の方法。
【請求項１４】
頭部への損傷を負ったヒト対象が、外傷性脳損傷（ＴＢＩ）を負ったのかどうかの決定の一助となる方法であって、
損傷の後、約４８時間以内に、前記対象から得られた試料に対して、アッセイを実施して、グリア原線維性酸性タンパク質（ＧＦＡＰ）の前記試料中レベルと、ユビキチンカルボキシ末端ヒドロラーゼＬ１（ＵＣＨ−Ｌ１）の前記試料中レベルとの組合せを測定するステップ；及び
ＧＦＡＰの前記試料中レベルが、ＧＦＡＰの、約１５ｐｇ／ｍＬ〜約４０ｇ／ｍＬの基準レベルと等しく、ＵＣＨ−Ｌ１の前記試料中レベルが、ＵＣＨ−Ｌ１の、約７０ｐｇ／ｍＬ〜約１５０ｐｇ／ｍＬの基準レベルと等しい場合に、前記対象が、ＴＢＩを負っている可能性が、そうでない可能性より高いと決定するステップ
を含む方法。
【請求項１５】
（ａ）ＧＦＡＰの前記基準レベルが、約１０ｐｇ／ｍＬであり、ＵＣＨ−Ｌ１の前記基準レベルが、約６０ｐｇ／ｍＬである；（ｂ）ＧＦＡＰの前記基準レベルが、約１５ｐｇ／ｍＬであり、ＵＣＨ−Ｌ１の前記基準レベルが、約７０ｐｇ／ｍＬである；（ｃ）ＧＦＡＰの前記基準レベルが、約１５ｐｇ／ｍＬであり、ＵＣＨ−Ｌ１の前記基準レベルが、約９０ｐｇ／ｍＬである；（ｄ）ＧＦＡＰの前記基準レベルが、約１５ｐｇ／ｍＬであり、ＵＣＨ−Ｌ１の前記基準レベルが、約１５０ｐｇ／ｍＬである；（ｅ）ＧＦＡＰの前記基準レベルが、約２０ｐｇ／ｍＬであり、ＵＣＨ−Ｌ１の前記基準レベルが、約６０ｐｇ／ｍＬである；（ｆ）ＧＦＡＰの前記基準レベルが、約３０ｐｇ／ｍＬであり、ＵＣＨ−Ｌ１の前記基準レベルが、約７０ｐｇ／ｍＬである；又は（ｇ）ＧＦＡＰの前記基準レベルが、約３０ｐｇ／ｍＬであり、ＵＣＨ−Ｌ１の前記基準レベルが、約１１０ｐｇ／ｍＬである、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
ＧＦＡＰの基準レベル及びＵＣＨ−Ｌ１の基準レベルが、約９０％以上の感度及び約３５％以上の特異度を有するアッセイにより決定される、請求項１４又は１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記試料が、前記損傷後、約４時間〜約１６時間以内に、前記対象から得られる、請求項１４〜１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８】
前記アッセイが、ＧＦＡＰ又はＵＣＨ−Ｌ１を、個別に測定又は検出するアッセイと比較して、少なくとも３％高い感度及び少なくとも１７％高い特異度を有する、請求項１４〜１７のいずれかに記載の方法。
【請求項１９】
（ａ）前記試料が、前記損傷の後、約８時間〜約１２時間以内に、前記対象から得られ；ＧＦＡＰの前記基準レベルが、約３０ｐｇ／ｍＬであり、ＵＣＨ−Ｌ１の前記基準レベルが、約１１０ｐｇ／ｍＬであり；前記アッセイが、９２％以上の感度及び９９％以上の特異度を有する；
（ｂ）前記試料が、前記損傷の後、約１２時間〜約１６時間以内に、前記対象から得られ；ＧＦＡＰの前記基準レベルが、約３０ｐｇ／ｍＬであり、ＵＣＨ−Ｌ１の前記基準レベルが、約１１０ｐｇ／ｍＬであり；前記アッセイが、９０％以上の感度及び９９％以上の特異度を有する；
（ｃ）前記試料が、前記損傷の後、約４時間〜約８時間以内に、前記対象から得られ；ＧＦＡＰの前記基準レベルが、約４０ｐｇ／ｍＬであり、ＵＣＨ−Ｌ１の前記基準レベルが、約１００ｐｇ／ｍＬであり；前記アッセイが、９０％以上の感度及び９４％以上の特異度を有する；
（ｄ）前記試料が、前記損傷の後、約８時間〜約１２時間以内に、前記対象から得られ；ＧＦＡＰの前記基準レベルが、約１５ｐｇ／ｍＬであり、ＵＣＨ−Ｌ１の前記基準レベルが、約１５０ｐｇ／ｍＬであり；前記アッセイが、９５％以上の感度及び８２％以上の特異度を有する；又は
（ｅ）前記試料が、前記損傷の後、約１２時間〜約１６時間以内に、前記対象から得られ；ＧＦＡＰの前記基準レベルが、約２０ｐｇ／ｍＬであり、ＵＣＨ−Ｌ１の前記基準レベルが、約６０ｐｇ／ｍＬであり；前記アッセイが、９５％以上の感度及び６５％以上の特異度を有する、
請求項１４〜１８のいずれかに記載の方法。
【請求項２０】
頭部への損傷を負った、又は負った可能性があるヒト対象に対して、頭部核磁気共鳴イメージング（ＭＲＩ）手順を実施するのかどうかの決定の一助となる方法であって、
実際の損傷又は推測される損傷の後、約４８時間以内に、前記対象から得られた試料に対して、アッセイを実施して、グリア原線維性酸性タンパク質（ＧＦＡＰ）の前記試料中レベルと、ユビキチンカルボキシ末端ヒドロラーゼＬ１（ＵＣＨ−Ｌ１）の前記試料中レベルとの組合せを測定するステップ；及び
（ａ）ＧＦＡＰの前記試料中レベルが、ＧＦＡＰの、約１５ｐｇ／ｍＬの基準レベル未満であり、ＵＣＨ−Ｌ１の前記試料中レベルが、ＵＣＨ−Ｌ１の、約５０ｐｇ／ｍＬの基準レベル未満である場合に、前記対象が、ＭＲＩ手順を必要としないと決定するステップ；又は
（ｂ）ＧＦＡＰの前記試料中レベルが、ＧＦＡＰの、約１５ｐｇ／ｍＬ〜約１０００ｇ／ｍＬの基準レベルと等しく、ＵＣＨ−Ｌ１の前記試料中レベルが、ＵＣＨ−Ｌ１の、約５０ｐｇ／ｍＬ〜約２０００ｇ／ｍＬの基準レベルと等しい場合に、前記対象が、ＭＲＩ手順を必要とする可能性が、そうでない可能性より高いと決定するステップ；又は
（ｃ）ＧＦＡＰの前記試料中レベルが、ＧＦＡＰの、約１０００ｐｇ／ｍＬの基準レベルより高く、ＵＣＨ−Ｌ１の前記試料中レベルが、ＵＣＨ−Ｌ１の、約２０００ｐｇ／ｍＬの基準レベルより高い場合に、前記対象が、ＭＲＩ手順を必要とする可能性が、そうでない可能性より高いと決定するステップ
を含む方法。
【請求項２１】
ＧＦＡＰの基準レベル及びＵＣＨ−Ｌ１の基準レベルが、約８０％〜約９８％の感度及び約３０％〜約８５％の特異度を有するアッセイにより決定される、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記対象が、前記アッセイが実施される前に、陰性のＣＴスキャン結果を受けている、請求項２０又は２１に記載の方法。
【請求項２３】
頭部損傷を負った、又は負った可能性があるヒト対象の転帰を予測する一助となる、又は予測するための方法であって、
実際の損傷又は推測される損傷の後、約４８時間以内に、前記対象から得られた試料に対して、アッセイを実施して、グリア原線維性酸性タンパク質（ＧＦＡＰ）の前記試料中レベルと、ユビキチンカルボキシ末端ヒドロラーゼＬ１（ＵＣＨ−Ｌ１）の前記試料中レベルとの組合せを測定又は検出するステップ；及び
ＧＦＡＰの前記試料中レベルが、ＧＦＡＰの、約８０ｐｇ／ｍＬ〜約２０００ｇ／ｍＬの基準レベルと等しく、ＵＣＨ−Ｌ１の前記試料中レベルが、ＵＣＨ−Ｌ１の、約１３０ｐｇ／ｍＬ〜約２０００ｐｇ／ｍＬの基準レベルと等しい場合に、前記対象について、思わしくない転帰を予測する可能性が、そうでない可能性より高いステップ
を含む方法。
【請求項２４】
ＧＦＡＰのレベルを測定するステップが、
（ａ）前記試料を、同時に、又は逐次的に、任意の順序において、
（１）ＧＦＡＰ上又はＧＦＡＰ断片上のエピトープに結合して、少なくとも１つのＧＦＡＰ捕捉抗体−ＧＦＡＰ抗原複合体を形成する、少なくとも１つのＧＦＡＰ捕捉抗体、及び
（２）検出可能な標識を含み、前記ＧＦＡＰ捕捉抗体が結合していないＧＦＡＰ上のエピトープに結合する、少なくとも１つのＧＦＡＰ検出抗体
と接触させて、少なくとも１つのＧＦＡＰ捕捉抗体−ＧＦＡＰ抗原−少なくとも１つのＧＦＡＰ検出抗体複合体を形成すること；並びに
（ｂ）ＧＦＡＰの、前記試料中量又は前記試料中濃度を、前記少なくとも１つのＧＦＡＰ捕捉抗体−ＧＦＡＰ抗原−少なくとも１つのＧＦＡＰ検出抗体複合体内の検出可能な標識により発生したシグナルに基づき測定すること
を含む、請求項１〜２３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２５】
ＵＣＨ−Ｌ１のレベルを測定するステップが、
（ａ）前記試料を、同時に、又は逐次的に、任意の順序において、
（１）ＵＣＨ−Ｌ１上又はＵＣＨ−Ｌ１断片上のエピトープに結合して、少なくとも１つのＵＣＨ−Ｌ１捕捉抗体−ＵＣＨ−Ｌ１抗原複合体を形成する、少なくとも１つのＵＣＨ−Ｌ１捕捉抗体、及び
（２）検出可能な標識を含み、前記少なくとも１つのＵＣＨ−Ｌ１捕捉抗体が結合していないＵＣＨ−Ｌ１上のエピトープに結合する、少なくとも１つのＵＣＨ−Ｌ１検出抗体
と接触させて、少なくとも１つのＵＣＨ−Ｌ１捕捉抗体−ＵＣＨ−Ｌ１抗原−少なくとも１つのＵＣＨ−Ｌ１検出抗体複合体を形成すること；並びに
（ｂ）ＵＣＨ−Ｌ１の、前記試料中量又は前記試料中濃度を、前記少なくとも１つのＵＣＨ−Ｌ１捕捉抗体−ＵＣＨ−Ｌ１抗原−少なくとも１つのＵＣＨ−Ｌ１検出抗体複合体内の検出可能な標識により発生したシグナルに基づき測定すること
を含む、請求項１〜２４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２６】
前記試料が、全血試料、血清試料、脳脊髄液試料、組織試料、体液及び血漿試料からなる群から選択される、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２７】
前記試料が：
（ａ）前記対象が、物理的振盪、閉鎖性頭部外傷若しくは開放性頭部外傷をもたらす外部の機械的力若しくは他の力、１回以上の転倒、爆発若しくは爆破による鈍的衝撃により引き起こされた頭部への損傷又は他の種類の鈍力外傷を負った後において；
（ｂ）前記対象が、化学物質、毒素又は化学物質と毒素との組合せを摂取した、又はこれらへと曝露された後において；又は
（ｃ）自己免疫疾患、代謝性障害、脳腫瘍、低酸素症、ウイルス、髄膜炎、水頭症又はこれらの組合せを患う対象から
得られる、請求項１〜２６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２８】
前記対象を、モニタリングするステップをさらに含む、請求項１〜２７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２９】
前記試料が、前記対象が整形外科損傷を負った後において得られる、請求項１〜２８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３０】
前記アッセイが、（ａ）イムノアッセイ；（ｂ）臨床化学アッセイ又は（ｃ）単一分子検出アッセイである、請求項１〜２９のいずれか一項に記載の方法。