(57)【要約】  本発明は、新規の生体ポリマー、すなわちアミノペプチド構成単位の重合プロセスによって得られる、ペプチド構成単位を組み込んだ生物有機ナイロンに関する。本発明の方法は、アミノペプチド構成単位を、ジアミノアルカンと一緒にまたはジアミノアルカン無しに混合し、均一または不均一媒体中でジアシルクロライドと重縮合によって反応させる工程を含む。【特許請求の範囲】
【請求項１】
生物有機ナイロン型ポリマーの製造方法であって、
ｉ）以下のＡ、Ｂ、Ｃ、ＤおよびＥの構成単位からなる群から選択される少なくとも１つのタイプのペプチド性アミノ構成単位を含む塩基性溶液を調製する工程：
【化１】
2019504906.tif 000022
ｉｉ）ｉ）の溶液と、下記式（Ｇ）のジアシルＧを含む溶液とを接触させることにより重合を開始する工程：
Ｘ（ＣＯ）−Ｙ−（ＣＯ）Ｘ
［式中、
Ｘはハロゲンであり、好ましくはＣｌであり、
Ｙは（ＣＨ２）ｑ、Ｃ６Ｈ４、Ｃ６Ｈ４−Ｗ−Ｃ６Ｈ４、Ｃ６Ｆ４、Ｃ６Ｆ４−Ｗ−Ｃ６Ｆ４、Ｃ１０Ｈ６であり、
Ｗは結合、ＳｉＯ２［（ＣＨ２）ｒＣＨ３］２、ＣＨ２、ＯまたはＳであり、ｒは１〜４であり、
ｑは１〜１２である］
を含む、前記方法。
【請求項２】
ｉ）の溶液が、一般式（Ｆ）のジアミノ−アルカン構成単位：
Ｈ２Ｎ−Ｚ−ＮＨ２
［式中、
Ｚは（ＣＨ２）ｐ、Ｃ６Ｈ４、Ｃ６Ｈ４−Ｗ’−Ｃ６Ｈ４、Ｃ６Ｆ４、Ｃ６Ｆ４−Ｗ’−Ｃ６Ｆ４、Ｃ１０Ｈ６であり、
Ｗ’は結合、ＣＨ２、Ｏ、ＳまたはＳｉＯ２［（ＣＨ２）ｓＣＨ３］２であり、ｓは１〜４であり、
ｐは１〜１４である］
からなる群から選択されるジアミノ構成単位Ｆをさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
重合が均一相または不均一相で達成される、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
重合が均質相で達成され、構成単位Ａ〜Ｆが、ジアシル化合物Ｇの溶媒でもある溶媒に溶解される、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
重合が不均一相で達成され、重合が界面重合によって開始される、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
ポリマーが回収され、洗浄される、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
前記ｉ）の塩基性溶液が７を超える、具体的には８を超える、より具体的には９を超える、さらにより具体的には１０を超える、さらにより具体的には１１を超えるｐＨを有する、請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
ジアシル化合物（Ｇ）がジアシルクロライド、より具体的にはアジポイルジクロライドである、請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
ペプチド−ジアミノ構成単位［Ａ＋Ｂ＋Ｃ＋Ｄ＋Ｅ］のモル濃度が１〜１００％で変化し、ジアミノアルカン構成単位［Ｆ］のモル濃度が０〜９９％であり、両者のモル量の合計が１００％であり、１００％として表されるジアシル化合物［Ｇ］のモル量に相当する、請求項１〜８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
前記ＡＡまたはペプチドの保護されたＮ末端が、Ｆｍｏｃ、Ｂｏｃ、Ｃｂｚ、Ｄｄｅ、トリチル、ＮＶｏｃ、ＡｌｌｏｃおよびＴｒｏｃからなる群から選択される保護基によって保護されている、請求項１〜９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
前記アミノペプチド構成単位が、そのペプチド鎖内またはＮ末端もしくはＣ末端のいずれかに、以下の構造：
（ＣＨ２）ｍ−ＮＨ２
［ｍは０〜１０、好ましくは２〜８である］
を含む側鎖を有するリジンまたはアミノ酸残基を含む、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
前記ペプチドが、以下のモチーフのホモ−またはヘテロ−オリゴマーに対応する、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の方法：
【化２】
2019504906.tif 000023
［式中、
・ｎは２〜２５、具体的には２〜１５、より具体的には２〜１０、さらにより具体的には２〜５であり、
・Ｒは、天然アミノ酸側鎖、非天然アミノ酸側鎖、修飾アミノ酸側鎖からなる群から選択することができるアミノ酸の側鎖であり、
・Ｒ’は、Ｈ、またはＲと結合してＲ−Ｒ’環を形成するＣ３−Ｃ６アルキルであり、
・ｄおよびｅは、ｄ＋ｅ＝０〜１０である］。
【請求項１３】
アミノ構成単位が、フルオロフォア等のプローブで標識されている、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
請求項１〜１３のいずれか一項に記載の方法によって得られる、生物有機ナイロン型ポリマー。
【請求項１５】
少なくとも１つの繰り返し単位基を含むか、またはそれからなる生物有機ナイロン型ポリマーであって、前記基が、
ａ）式Ａ１およびＡ２の繰り返し単位からなる基ａ：
【化３】
2019504906.tif 000024
および／または
ｂ）式Ｂ１〜Ｂ８の繰り返し単位からなる基ｂ：
【化４】
2019504906.tif 000025
2019504906.tif 000026
および／または
ｃ）式Ｃ１およびＣ２の繰り返し単位からなる基ｃ：
【化５】
2019504906.tif 000027
および／または
ｄ）式Ｄ１およびＤ２の繰り返し単位からなる基ｄ：
【化６】
2019504906.tif 000028
および／または
ｅ）式Ｅ１およびＥ２の繰り返し単位からなる基ｅ：
【化７】
2019504906.tif 000029
［式中、
ＡＡ、ペプチド、ＹおよびＺは、それぞれ独立して上記定義の通りであり、
ＰＧ（Ｎ末端）はＡＡまたはペプチドの保護されたＮ末端を示し、
（Ｃ末端）はＡＡまたはペプチドのＣ末端を示す］
から選択される、前記生物有機ナイロン型ポリマー。
【請求項１６】
基ａ、基ｃ、基ｄおよび／または基ｅから選択される少なくとも１つの繰り返し単位からなる、請求項１５に記載の生物有機ナイロン型ポリマー。
【請求項１７】
以下の式（ＩＡ）、（ＩＣ）、（ＩＤ）または（ＩＥ）である、請求項１６に記載の生物有機ナイロン型ポリマー：
【化８】
2019504906.tif 000030
［式中、
ＡＡ、ペプチド、ＰＧ（Ｎ末端）、（Ｃ末端）、ＹおよびＺは、それぞれ独立して請求項１４で定義した通りであり、
ｍおよびｍ’は独立して正の実数から選択され、例えば０および２０００から選択される整数であり、
ｍおよびｍ’は同時に０でなくてもよく、かつ、
ｔは好ましくは１〜２０００の正の整数である］。
【請求項１８】
材料、具体的には抗菌材料、より具体的には生体材料、さらにより具体的には生体吸収性材料の製造のための、請求項１４〜１７のいずれか一項に記載の生体有機ナイロン型ポリマーの使用。
【請求項１９】
請求項１４〜１７のいずれか一項に記載の生物有機ナイロン型ポリマーを含む、織物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規の生体ポリマー、すなわちアミノペプチド構成単位の重合プロセスによって得られる、ペプチド構成単位を組み込んだ生物有機ナイロンに関する。アミノペプチド構成単位を、ジアミノアルカン（diaminoalcane）と一緒にまたはジアミノアルカン無しに混合し、混合物を均一または不均一媒体中でジアシルクロライドと重縮合反応させる。本発明の方法は、最終的なナイロン型ポリマー中に挿入されたペプチド構成単位の比率の微調整を可能にし、このようにして得られた生物有機ナイロンの生物学的特性および活性を制御することを可能にする。
【０００２】
ナイロンは、頑丈で、耐久性があり、安定であるため、日常生活において、また生物医学および日々の用途において広く使用されているポリマーの一種である（A. Abdal-hay, A. Salam Hamdy, Y. Morsi, K. Abdelrazek Khalil, J. Hyun Lim, Mater. Lett. 2014, 137, 378-381）。さらに、それらは、興味深い硬度および良好な滑り特性を示し、これは、例えば効率的で除去可能なステッチ（stitch）を実現するために不可欠である。しかしながら、様々な用途のために、特定の位置に特定の密度で特定の官能基を導入することによって所望の特性を付与することが必要である。ポリマー鎖を開裂させないアミド選択的反応を用いて官能基をナイロン表面に導入するためのいくつかの化学的変性方法が開発されている（Jia et al Polymer. Volume 47, Issue 14, 28 June 2006, Pages 4916-4924）。
【０００３】
ナイロンポリマーの変性は重合後に行われ、従って、添加された官能基の比、分布、分散および量の精密な制御は実現不可能である。
【０００４】
生体材料の特定の場合について、生物活性分子により、ナイロンの変性は有望な研究分野であると思われる。
【０００５】
ＵＳ７７０９６０１には、ナイロン表面に対して高い親和性を有するペプチドを選択および同定する方法が記載されている。この場合、生物活性ペプチドによる官能化は、ナイロンの重合後に達成され、生物活性ペプチドは表面上にのみ吸着される。
【０００６】
Wang et al.には、ペプチドではなく、単純な単なるアミノ酸をナイロン足場構造（scaffold structure）に導入する方法が記載されている。記載された方法は、ジアシルクロライドとして活性化され、１，６−ヘキサンジアミンとの界面重縮合によって反応するセバコイル二酸を介して結合したアミノ酸の二量体の合成を含む（Synthesis and Characterization of Novel Biodegradable Polyamides Containing α-amino Acid Journal of Macromolecular Science, Part A: Pure and Applied Chemistry; Vol 46 (3); 2009; p312-320）。
【０００７】
Nagata et al.には、このようにして得られたナイロンの生物分解性を向上させるための、６−アミノ−ｎ−ヘキサン酸とアラニン、ロイシン、フェニルアラニン、リジンとの共重合が記載されている（Nylon-6 copolymers: Copolymerization with α-amino acids European Polymer Journal; Vol 28(9); 1992; p.1069-1072）。得られたナイロンは、それぞれが１つのアミン官能基と１つの酸官能基とを有する２つの構成単位からなる。
【０００８】
これらの技術は、ナイロンに有利な生物学的特性を付与し、ナイロン型構造にペプチドではなく単一のアミノ酸の導入を可能にするよりも、ナイロンの生物分解性を向上させるために適している。
【０００９】
ＵＳ６５１７９３３には、天然に存在する構成単位と合成された構成単位とを組み合わせたハイブリッドポリマー材料またはハイブリッドポリマー系が記載されている。天然に存在する構成単位と合成された構成単位とのセットを混合し、分子レベルまたはナノスケールレベルで結合させて、得られる混合ポリマー系に均質またはミクロ相分離した形態を付与する。これらのハイブリッドポリマーは、天然材料の快適性と合成材料の堅牢性およびデザイン性とを組み合わせるものである。
【００１０】
この文献には、天然の構成単位を組み込んだ一般的なポリマー構造が記載されているが、特定の天然の生物活性ペプチドをどのようにしてナイロン型のポリマーに組み込むことができるかについては開示されておらず、また、組み込む際の比をどのようにして制御するかについても開示されていない。
【００１１】
従って、ナイロンポリマー中に生物活性残基、特にペプチド残基を正確にかつ制御して組み込むことを可能にする方法が必要とされている。
【００１２】
従って、本発明は、生物有機ナイロン型ポリマーの製造方法であって、
ｉ）以下のＡ、Ｂ、Ｃ、ＤおよびＥの構成単位からなる群から選択される少なくとも１つのタイプのペプチド性アミノ構成単位を含む塩基性溶液を調製する工程：
【化１】
2019504906.tif 000002
ｉｉ）ｉ）の溶液と、下記の式（Ｇ）のジアシルＧを含む溶液とを接触させることにより重合を開始する工程：
Ｘ（ＣＯ）−Ｙ−（ＣＯ）Ｘ
［式中、
Ｘはハロゲンであり、好ましくはＣｌであり、
Ｙは（ＣＨ２）ｑ、Ｃ６Ｈ４、Ｃ６Ｈ４−Ｗ−Ｃ６Ｈ４、Ｃ６Ｆ４、Ｃ６Ｆ４−Ｗ−Ｃ６Ｆ４、Ｃ１０Ｈ６であり、
ｑは１〜１２であり、
Ｗは結合、ＣＨ２、Ｏ、ＳまたはＳｉＯ２［（ＣＨ２）ｒＣＨ３］２であり、ｒは１〜４であり、好ましくはｒは１である］
を含む方法を開示する。
【００１３】
本明細書で使用される場合、Ｃ１０Ｈ６は、式
【化２】
2019504906.tif 000003
のナフチル基を表す。
【００１４】
好ましくは、Ｙは（ＣＨ２）ｑまたはＣ６Ｈ４であり、ｑは１〜１２である。一つの実施形態では、Ｙは（ＣＨ２）ｑであり、ｑは１〜１２であり、具体的には１〜８であり、より具体的には１〜６である。例えば、ｑは４または８である。
【００１５】
一つの実施形態では、ｉ）で調製される溶液は、Ａ、Ｂ、Ｃ、ＤおよびＥの構成単位からなる群から選択される２つのタイプのペプチド性アミノ構成単位を含む。
【００１６】
一つの実施形態では、ｉ）で調製される溶液は、Ａ、Ｂ、Ｃ、ＤおよびＥの構成単位からなる群から選択される３つのタイプのペプチド性アミノ構成単位を含む。
【００１７】
一つの実施形態では、ｉ）で調製される溶液は、Ａ、Ｂ、Ｃ、ＤおよびＥの構成単位からなる群から選択される４つのタイプのペプチド性アミノ構成単位を含む。
【００１８】
一つの実施形態では、ｉ）で調製される溶液は、Ａ、Ｂ、Ｃ、ＤおよびＥの構成単位からなる群から選択される５つのタイプのペプチド性アミノ構成単位を含む。
【００１９】
本発明の別の実施形態では、ｉ）の溶液は、一般式（Ｆ）のジアミノアルカン構成単位からなる群から選択されるジアミノ構成単位Ｆをさらに含む：
Ｈ２Ｎ−Ｚ−ＮＨ２
［式中、
Ｚは（ＣＨ２）ｐ、Ｃ６Ｈ４、Ｃ６Ｈ４−Ｗ’−Ｃ６Ｈ４、Ｃ６Ｆ４、Ｃ６Ｆ４−Ｗ’−Ｃ６Ｆ４、Ｃ１０Ｈ６であり、
ｐは１〜１４であり、
Ｗ’は結合、ＣＨ２、Ｏ、ＳまたはＳｉＯ２［（ＣＨ２）ｓＣＨ３］２であり、ｓは１〜４であり、好ましくはｓは１である］。
【００２０】
好ましくは、Ｚは（ＣＨ２）ｐまたはＣ６Ｈ４であり、ｐは１〜１４である。一つの実施形態では、Ｚは（ＣＨ２）ｐであり、ｐは１〜１４であり、具体的には１〜８であり、より具体的には１〜６である。例えば、ｐは４または８である。
【００２１】
異なるペプチド性アミノ構成単位およびジアミノアルカン構成単位のモル量は、それがジアシル化合物Ｇのモル量に等しくなるモル量である：［Ａ＋Ｂ＋Ｃ＋Ｄ＋Ｅ］＋［Ｆ］＝［Ｇ］。
【００２２】
実際、［Ｆ］は０から９９まで変化し得、［Ａ＋Ｂ＋Ｃ＋Ｄ＋Ｅ］は、［Ｇ］が１００に等しいと仮定した場合には１から１００まで変化し得る。
【００２３】
様々な構成単位Ａ、Ｂ、Ｃ、ＤまたはＥのモル量は、それぞれ［Ａ＋Ｂ＋Ｃ＋Ｄ＋Ｅ］の合計の０から１００％まで変化し得る。従って、様々なタイプのペプチド性アミノ構成単位の任意の組み合わせを使用することができる。次いで、タイプＡの構成単位のみ、タイプＢの構成単位のみ、またはタイプＣの構成単位のみ、またはタイプＤの構成単位のみ、またはタイプＥの構成単位のみ、またはそれらの任意の組み合わせを使用することができる。
【００２４】
さらに、上述したように、任意のジアミノアルカン構成単位を含む異なるペプチド性アミノ構成単位のモル量が、ジアシル化合物Ｇのモル量に等しいと仮定した場合、１、２、３、４または５種のペプチド性アミノ構成単位の任意の組み合わせが可能である。
【００２５】
好ましい実施形態では、ジアシル化合物Ｇはジアシルクロライドであり、より具体的にはアジポイルジクロライドである。
【００２６】
一つの実施形態では、重合は均一相または不均一相中で行うことができる。
【００２７】
重合が均一相中で行われる場合、構成単位Ａ〜Ｆは、ジアシル化合物Ｇの溶媒でもある溶媒に溶解される。
【００２８】
構成単位Ａ〜Ｆおよびジアシル化合物Ｇの両方と適合する利用可能な溶媒は、例えば、ＤＭＦ、ＤＭＳＯおよびジクロロメタンからなる群から選択することができる。
【００２９】
そのような場合、得られるポリマーは、２つの溶液の混合時に媒体中に即時に形成され、例えば濾過によって回収される。このようにして形成され回収されたポリマーは、水性または有機溶媒で洗浄することができる。
【００３０】
均一相中で重合が行われる場合、均一重合において使用される溶媒と混和性の塩基を媒体中に添加することにより、媒体のアルカリ性が確保される。好適な塩基は、例えば、ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＥＡ）であり得る。
【００３１】
さらなる実施形態では、重合は不均一相中で行われ、界面重合によって開始される。界面重合技術は、当業者に公知の技術である。
【００３２】
このような実施形態では、構成単位Ａ〜Ｆを塩基性水溶液に可溶化し、この溶液とジアシル化合物Ｇを含む有機溶媒とを接触させる。両方の溶液を接触させると、両方の非混和性液体の間界面において重合が起こる。
【００３３】
従って、ナイロン型ポリマーは、徐々にそれを引っ張ることによって界面から回収することができ、それにより、２つの相の間に新しい界面が形成され、そこで新しい重合が起こり、新しいポリマーが連続的に形成される。
【００３４】
次いで、回収されたポリマーを洗浄することができる。洗浄は、水または任意の好適な有機溶媒等の溶媒により行うことができる。
【００３５】
本発明において、ｉ）の塩基性溶液（expression basic solution）という表現は、ｐＨが７を超える、具体的には８を超える、より具体的には９を超える、さらにより具体的には１０を超える、さらにより具体的には１１を超える媒体と理解されるべきである。
【００３６】
界面重合による不均一重合の実施形態では、ジアシル化合物Ｇを、例えばジクロロメタン、トリクロロエチレンおよびそれらの混合物からなる群から選択することができる有機溶媒に溶解することができる。
【００３７】
重合は、ジアミノ構成単位を含む塩基性水溶液と、有機溶媒相、特にジアシル化合物Ｇ、特に塩化ジアシルを含むジクロロメタン相との間の界面で開始させることができる。ジアミノ構成単位Ａ〜Ｆのアミン官能基は、酸塩化物と反応して、界面にポリマーフィルムを形成する。
【００３８】
いくつかの型のペプチド−ナイロンをこの方法により調製することができる。第１に、ナイロン中のペプチド構成単位の割合およびアルカン（alcane）構成単位の割合を、ペプチド−ジアミノ構成単位／ジアミノ−アルカン構成単位の比を選択することによって簡単に調節することができる。
【００３９】
従って、さらなる実施形態では、本発明は、ペプチド−ジアミノ構成単位［Ａ＋Ｂ＋Ｃ＋Ｄ＋Ｅ］のモル濃度が１〜１００％で変化し、ジアミノアルカン構成単位［Ｆ］のモル濃度が０〜９９％であり、両者のモル量の合計が１００％であり、１００％として表されるジアシル化合物［Ｇ］のモル量に相当する方法に関する。
【００４０】
本発明の方法によれば、アミノペプチド構成単位の選択により、ポリマー鎖内のペプチドの配向を選択することができる。ペプチドのＣ末端がジアミンで誘導体化される場合、ペプチド配列はポリマー鎖に直線状に組み込まれる。そのような状況では、ＡＡまたはペプチドが、重合反応に関与する遊離の第１級または第２級アミノ基を有する１つ以上の側鎖を含む場合、その遊離アミノ基は、工程ｉｉ）における重合においてその結合を防止するために、保護基により保護される。
【００４１】
本発明の方法により得られるポリマーは、少なくとも１つのペプチドモチーフがポリマー鎖中に完全に組み込まれ、そのようなペプチドモチーフの量および分布が、ジアミノペプチド構成単位およびジアミノアルカン構成単位によって精密に調整され得るという事実によって特徴づけられる。このようにして得られたポリマーは、従来技術のナイロン型ポリマーとは異なり、ペプチドモチーフのペプチド鎖全体がポリマー中に完全に組み込まれており、そこから離脱していない（not pending from it）ことを特徴とする。従って、本発明の方法によれば、該方法におけるこれらの２つのタイプの構成単位の比率により、アルカン構成単位とペプチド構成単位とが交互になる様々なモチーフを得ることができる。
【００４２】
本発明の方法は、ジアシル化合物Ｇ、および場合により式Ｈ２Ｎ−Ｚ−ＮＨ２のジアミンと反応する、ペプチドカップリングに利用可能な少なくとも２つのアミノ基（２つの第１級または第２級アミン、好ましくは２つの第２級アミン）を有するアミノペプチド構成単位を含む。従って、本発明の方法は、異なる配向（Ｃ末端からＮ末端へ、またはＮ末端からＣ末端へ）のナイロン鎖内にペプチドモチーフを組み込むことを可能にし、その結果、一般に対称性のないポリマーをもたらす。
【００４３】
アミノ保護基は、当業者に公知である。アミノ保護基は、好ましくはペプチドカップリングに適しており、例えば、Ｆｍｏｃ、Ｂｏｃ、Ｃｂｚ、Ｄｄｅ、トリチル、ＮＶｏｃ、ＡｌｌｏｃおよびＴｒｏｃからなる群から選択することができる。
【００４４】
一つの実施形態では、ＡＡまたはペプチドの保護されたＮ末端（ＰＧ（Ｎ末端）とも呼ばれる）は、Ｆｍｏｃ、Ｂｏｃ、Ｃｂｚ、Ｄｄｅ、トリチル、ＮＶｏｃ、ＡｌｌｏｃおよびＴｒｏｃからなる群から選択される保護基によって保護することができる。
【００４５】
これらの基は公知であり、ペプチドの様々なアミノ官能基およびＮ末端を保護するためにアミノ酸保護が必要とされるペプチド合成において一般的に使用されている。同じ化合物上の異なる基を選択的に保護および脱保護するために、多くの場合において、アミンの直交保護（orthogonal protection）が必要とされ得る。これは、Ｂｏｃ（塩基安定性、酸不安定性）およびＦｍｏｃ（酸安定性、塩基不安定性）アミン保護基の使用によって達成することができ、ペプチド合成において頻繁に使用される方法である。このような上記保護基でアミノ基を保護する方法は当業者に公知であり、当該技術分野において詳細かつ十分に記載されている：Greene, “Protective Groups in Organic Synthesis”, Wiley, New York, 2007 4thedition; Harrison et al. “Compendium of Synthetic Organic Methods”, Vol. 1-8 (J. Wiley & sons, 1971-1996)；Paul Lloyd-Williams, Fernando Albericio, Ernest Giralt, “Chemical Approaches to the Synthesis of Peptides and Proteins”, CRC Press, 1997またはHouben-Weyl, “Methods of Organic Chemistry, Synthesis of Peptides and Peptidomimetics”, Vol. E 22a, Vol. E 22b, Vol. E 22c, Vol. E 22d., M. Goodmann Ed., Georg Thieme Verlag, 2002。
【００４６】
アミノ酸またはペプチドのＣ末端基のアミノ誘導体化は、当業者に公知のペプチド化学技術によって達成することができる。本出願の実施例は、例えば、トリチル樹脂上でのＳＰＰＳ技術によるエチレンジアミンの導入の１つの方法を記載する。Ｃ末端のアミノ誘導体化のための他の方法を適用してもよい。
【００４７】
ペプチドの生物活性配列の末端がその活性に必要でない場合、あるいはエンドペプチダーゼ（例えば、マトリックスメタロプロテアーゼ、トリプシン）の基質を導入することによってナイロンの分解性を調節し、特定の環境に置かれたポリマー鎖の分解を誘発する場合、ポリマー鎖中のペプチドの直線状の組み込みが問題となり得る。
【００４８】
ペンダントペプチド鎖はまた、ポリマー主鎖に容易に導入することができる。従って、アミノペプチド構成単位は、そのペプチド鎖内またはそのＮ末端もしくはＣ末端のいずれかに、構造−（ＣＨ２）ｍ−ＮＨ２を含み、ｍが０〜１０であり、好ましくは２〜８である側鎖を有するリジンまたはアミノ酸残基を含む。
【００４９】
この後者の実施形態によれば、ポリアミドポリマー鎖の官能化後に得られるものと構造的に類似した「くし型」形態を得ることができる。しかしながら、本発明の方法は、ポリマー鎖上に存在する生物活性官能基の数の優れた制御を可能にすることから、官能化後アプローチよりもはるかに魅力的である。最後に、いくつかの構成単位を適切な比率で組み合わせて、いくつかの生物学的／物理的特性を示す多機能材料を得ることも可能である。
【００５０】
本発明の方法で使用されるペプチド性アミノ構成単位は、重合に関与することができる少なくとも２つで最大３つの遊離アミノ基を含む。
【００５１】
重合に関与することができる本発明のアミノ基の表現は、第１級または第２級アミノ基Ｒ’’−ＮＨ２、またはＲ’’およびＲ’’’がＣ１−Ｃ８アルキル基であるＲ’’Ｒ’’’−ＮＨに対応する。
【００５２】
上記のように、ＡＡまたはペプチドの側鎖の遊離アミノ基は、リジン残基の側鎖またはｍが０〜１０であり、好ましくは２〜８である一般式−（ＣＨ２）ｍ−ＮＨ２の側鎖のアミノ基であってもよい。
【００５３】
ヒスチジン、トリプトファンまたはアルギニン等のアミノ酸は、ＮＨ基を有する側鎖を含むが、そのようなＮＨ基が芳香族環またはグアニジンのいずれかにおいて塩の形態で含まれ、重合反応に関与することができないという意味で、本発明における反応性の第１級または第２級アミノ基には対応しない。
【００５４】
ペプチド性アミノ構成単位が２つの遊離アミノ基を含む場合、第１の遊離アミノ基はＡＡまたはペプチドのＮ末端であり得、第２の遊離アミノ基は誘導体化されたＣ末端アミノであり得、この場合はタイプＡに相当する。
【００５５】
別の実施形態では、ペプチド性アミノ構成単位が３つの遊離アミノ基を含み、第１の遊離アミノ基はＡＡのＮ末端であり、第２の遊離アミノ基はＡＡの側鎖の遊離アミノ基またはペプチドのアミノ酸の遊離アミノ基であり、第３の遊離アミノ基は誘導体化されたＣ末端アミノであり、この場合はタイプＢに相当する。
【００５６】
さらに、ペプチド性アミノ構成単位が２つの遊離アミノ基を含む実施形態では、第１の遊離アミノ基はＡＡまたはペプチドのＮ末端でありえ、第２の遊離アミノ基はＡＡの側鎖の遊離アミノ基またはペプチドのアミノ酸の遊離アミノ基であり得、この場合はタイプＣに相当する。
【００５７】
さらに、ペプチド性アミノ構成単位が２つの遊離アミノ基を含む実施形態では、第１の遊離アミノ基は誘導体化されたＣ末端アミノであり得、第２の遊離アミノ基はＡＡの側鎖の遊離アミノ基またはペプチドのアミノ酸の遊離アミノ基であり得、この場合はタイプＤに相当する。
【００５８】
さらに、ペプチド性アミノ構成単位が２つの遊離アミノ基を含む実施形態では、両者はペプチドのアミノ酸の側鎖の遊離アミノ基であり得、この場合はタイプＥに相当する。
【００５９】
本明細書において、式（ＣＨ２）ｍまたは（ＣＨ２）ｐまたは（ＣＨ２）ｑは、直鎖状または分岐状アルキル鎖を含むものとして理解されるべきである。
【００６０】
本発明の文脈において、ペプチドという表現は、ペプチド結合によって結合されたアミノ酸残基の鎖の意味での天然ペプチド、または擬似ペプチドもしくは修飾ペプチドに対応する。従って、本発明の文脈における定義の問題として、ペプチドという表現は、以下のモチーフのホモ−またはヘテロオリゴマーに対応する：
【化３】
2019504906.tif 000004
［式中、
・ｎは２〜２５であり、具体的には２〜１５であり、より具体的には２〜１０であり、さらにより具体的には２〜５であり；
・Ｒは、天然アミノ酸側鎖、非天然アミノ酸側鎖、修飾アミノ酸側鎖または保護アミノ酸側鎖からなる群から選択することができるアミノ酸の側鎖であり；
・Ｒ’はＨまたは直鎖状もしくは分岐状アルキル鎖であり、好ましくはメチル、エチル、ブチル、プロピル、ベンジル、またはＲに結合してＲ−Ｒ’環を形成するＣ３−Ｃ６アルキルであり；
・ｄおよびｅは、ｄ＋ｅ＝０〜１０である］。
【００６１】
ペプチドの性質のために、所定のタイプＡ、Ｂ、Ｃ、ＤまたはＥに属するいくつかの異なるペプチドアミノ構成単位を使用することができる。そのような構成単位は、ペプチドに含まれるアミノ酸の量および性質によって異なり得るが、それらは、利用可能な２つまたは３つの第１級または第２級の遊離アミノ基を示すという意味で、一般式Ａ、Ｂ、Ｃ、ＤまたはＥに対応する重合に関与する。
【００６２】
従って、ポリペプチド鎖のアミノ酸残基の性質および／または量が異なる、異なるタイプＡ構成単位を使用することができる。
【００６３】
従って、ポリペプチド鎖のアミノ酸残基の性質および／または量が異なる、異なるタイプＢ構成単位を使用することができる。
【００６４】
従って、ポリペプチド鎖のアミノ酸残基の性質および／または量が異なる、異なるタイプＣ構成単位を使用することができる。
【００６５】
従って、ポリペプチド鎖のアミノ酸残基の性質および／または量が異なる、異なるタイプＤ構成単位を使用することができる。
【００６６】
従って、ポリペプチド鎖のアミノ酸残基の性質および／または量が異なる、異なるタイプＥ構成単位を使用することができる。
【００６７】
アミノ構成単位のペプチドは任意のタイプのペプチドであり得るが、好ましくは生物活性ペプチドである。
【００６８】
ペプチドの好ましい配列は、Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ａｒｇ、Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ａｒｇ、Ａｒｇ−ＡｒｇおよびＬｙｓ−Ａｈｘ−Ａｒｇ−Ａｒｇからなる群から選択することができる。
【００６９】
本発明のさらなる実施形態において、アミノ構成単位は、フルオロフォア等のプローブで標識することができる。従って、第１の実施形態では、ＡＡの側鎖の遊離アミノ基またはペプチドのアミノ酸残基の遊離アミノ基をプローブで修飾することができる。
【００７０】
プローブは、フルオレセイン、フルオレセイン塩、４’，５’−ビス［Ｎ，Ｎ−ビス（カルボキシメチル）−アミノメチル］フルオレセイン、６−［フルオレセイン−５（６）−カルボキサミド］ヘキサン酸、６−［フルオロセイン−５（６）−カルボキサミド］ヘキサン酸、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドフルオレセイン−５（６）−イソチオシアネートエステル、フルオレセイン−α−Ｄ−Ｎ−アセチルノイラミニド−ポリアクリルアミド、フルオレセインアミダイト、フルオレセイン−ジ（β−Ｄ−ガラクトピラノシド）、フルオレセイン−ジ−（β−Ｄ−グルコピラノシド）、フルオレセインジアセテート、フルオレセイン−５（６）−イソチオシアネートジアセテート、フルオレセイン−５−マレイミドジアセテート、フルオレセイン−６−イソチオシアネートジアセテート、フルオレセインジブチレート、フルオレセインジラウレート、フルオレセイン−ヒアルロン酸、フルオレセインイソチオシアネート（isothiocyanate de fluorescein）、フルオレセイン−デキストランイソチオシアネート、水銀−フルオレセインアセテート、モノ−ｐ−グアニジノベンゾエート−フルオレセインクロロハイドレート、フルオレセインＯ，Ｏ’−ジアクリレート、フルオレセインＯ，Ｏ’−ジメタクリレート、フルオレセインｏ−アクリレート、フルオレセインｏ−メタクリレート、フルオレセインＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステル、フルオレセイン−５−チオセミカルバジド、フルオレセイン−α−Ｄ−ガラクトサミンポリアクリルアミド、フルオレセイン−α−Ｄ−マンノピラノシド−ポリアクリルアミド、４（５）−（ヨードアセタミド）フルオレセイン、アミノフェニル−フルオレセイン、ビオチン−４−フルオレセイン、ヒドロキシフェニル−フルオレセイン、ＭＴＳ−４−フルオレセイン、ポリ（フルオレセイン−ｏ−アクリレート）、ポリ（フルオレセイン−ｏ−メタクリレート）、ＰＰＨＴ−フルオレセインアセテート、５（６）−（ビオチンアミドヘキアサノイルアミド）ペンチルチオウレイジルフルオレセイン、Ｎ−（５−フルオレセイニル）マレイミド、フルオレセイン−ジ−［メチレン−Ｎ−メチルグリシン］、エリスロシンＢ、エチルエオシン、５−カルボキシフルオレセイン、５−カルボキシフルオレセインＮ−スクシンイミジルエステル、６−カルボキシ−フルオレセインＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステル、ジベンジルフルオレセイン、ロードル（rhodol）、６−アミノフルオレセイン、ローダミン６Ｇ、ローダミンＢおよびローダミン１２３からなる群から選択される。
【００７１】
ペプチド、特にアミノ酸の側鎖のアミノ基上にプローブをグラフトする方法は、当業者に公知であり、容易に利用可能である。
【００７２】
別の実施形態では、プローブは、ＡＡまたはペプチドのＮ末端にグラフトさせることができ、この場合、プローブは、上記したように重合に関与する遊離アミノ基を有する側鎖と、誘導体化されたＣ末端アミノとを含む。
【００７３】
本発明はさらに、本発明の方法により得られる生物有機ナイロン型ポリマーに関する。
【００７４】
本発明の生物有機ナイロン型ポリマーは、少なくとも１つの繰り返し単位基を含むか、またはそれからなり、該基は、
ａ）式Ａ１およびＡ２の繰り返し単位からなる基ａ：
【化４】
2019504906.tif 000005
および／または
ｂ）式Ｂ１〜Ｂ８の繰り返し単位からなる基ｂ：
【化５】
2019504906.tif 000006
2019504906.tif 000007
および／または
ｃ）式Ｃ１およびＣ２の繰り返し単位からなる基ｃ：
【化６】
2019504906.tif 000008
および／または
ｄ）式Ｄ１およびＤ２の繰り返し単位からなる基ｄ：
【化７】
2019504906.tif 000009
および／または
ｅ）式Ｅ１およびＥ２の繰り返し単位からなる基ｅ：
【化８】
2019504906.tif 000010
［式中、
ＡＡ、ペプチド、ＰＧ（Ｎ末端）、ＹおよびＺは、それぞれ独立して上記定義の通りであり、（Ｃ末端）はＡＡまたはペプチドのＣ末端を示す］。
【００７５】
本明細書中で使用される場合、ＡＡまたはペプチドのＣ末端は、誘導体化されているか、または誘導体化されていないと理解される。
【００７６】
一つの実施形態では、ＡＡまたはペプチドのＣ末端は誘導体化されておらず、Ｃ末端は遊離カルボン酸ＣＯＯＨである。
【００７７】
別の実施形態では、ＡＡまたはペプチドのＣ末端は誘導体化されている。誘導体化されたＣ末端の例は、ＣＯＮＨ２、ＣＯＯＲ、ＣＯＮＨＲ、ＣＯＮＲａＲｂであり、ＲａおよびＲｂは独立して直鎖状または分岐状（Ｃ１−Ｃ６、好ましくはＣ１−Ｃ４）アルキル、アリールまたはアラルキルを表す。
【００７８】
本明細書中で使用される場合、「アルキル」とは直鎖状または分岐状の一価の飽和炭化水素鎖であり、好ましくは１〜６個の炭素原子を含み、限定されないが、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル等である。
【００７９】
用語「アリール」とは、本発明で使用される場合、好ましくは５〜１０個の炭素原子を含み、例えばフェニル基またはナフチル基等の１つ以上の縮合環を含む芳香族基を指す。有利には、それはフェニル基である。アリールは、例えばアルキル、ＯＨ、Ｏアルキル、ＮＨ２、ＮＨアルキル、Ｎ（アルキル）２から選択される１つ以上の置換基により置換されてもよい。
【００８０】
用語「アラルキル」または「アリール−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル」は、本発明で使用される場合、上記で定義したアルキル基を介して分子に結合した上記で定義したアリール基を指す。具体的には、アラルキル基はベンジル基である。
【００８１】
破線の結合
【化９】
2019504906.tif 000011
は、１つの繰り返し単位と別の単位とを接続する結合である。
【００８２】
注目すべきことに、ペプチドの分野における通常の慣習に従い、上記の繰り返し単位は、Ｎ末端（単位の左側）からＣ末端（単位の右側）に向けられている。また、モノマーＢ、Ｃ、ＤおよびＥに関して上記で説明したように、繰り返し単位Ｂ１〜Ｂ８、Ｃ１、Ｃ２、Ｄ１、Ｄ２、Ｅ１およびＥ２は、少なくとも１つ（１つの場合はＣ１、Ｃ２、２つの場合はＤ１、Ｄ２、Ｅ１およびＥ２、および３つの場合はＢ１〜Ｂ８）の離脱していないアミノ基（pending amino group）を有するアミノ酸またはペプチドを、２つの繰り返し単位間の結合部として有する。
【００８３】
構成単位Ｂが本発明の方法で使用されたかどうかに応じて、生物有機ナイロン型ポリマーは直鎖状であるかまたは架橋される。
【００８４】
第１の実施形態では、生物有機ナイロン型ポリマーは直鎖状である。各アミノペプチド性モノマーは、ジアシル基との重合反応に関与することができる少なくとも２つの遊離アミノ基を含み、生物有機ナイロン型ポリマーは対称性を有さない。換言すれば、本発明の生物有機ナイロン型ポリマーは、交互共重合体ではなく、むしろランダム共重合体として定義されてもよい。
【００８５】
この第１の実施形態では、生物有機ナイロン型ポリマーは、上記で定義したような基ａ、ｃ、ｄおよび／またはｅから選択される繰り返し単位を含むか、またはそれらからなる。
【００８６】
この第１の実施形態の特定の変法では、生物有機ナイロン型ポリマーは、基ａ、基ｃ、基ｄおよび基ｅから選択される２つの繰り返し単位基を含む。別の変形では、生物有機ナイロン型ポリマーは、基ａ、基ｃ、基ｄおよび基ｅから選択される３つの繰り返し単位基を含む。別の変法では、生物有機ナイロン型ポリマーは、４つの繰り返し単位基ａ、ｃ、ｄおよびｅのすべてを含む。
【００８７】
特定の変法では、生物有機ナイロン型ポリマーは、アミノ構成単位Ａのみを使用することによって得られる。生物有機ナイロン型ポリマーは、繰り返し単位（Ａ１）および（Ａ２）からなる。この変法では、生物有機ナイロン型ポリマーは、下記式を有する：
【化１０】
2019504906.tif 000012
［式中、
ＡＡ、ペプチド、ＹおよびＺは、それぞれ独立して上記定義の通りであり、
ｍおよびｍ’は独立して正の実数から選択され、例えば０および２０００から選択される整数であり、例えば１〜１０００から選択される整数であり、
ｍおよびｍ’は同時に０でなくてもよく、かつ、
ｔは好ましくは１〜２０００または１〜１０００の正の整数である］。
【００８８】
例えば、生物有機ナイロン型ポリマーは、下記式を有する：
【化１１】
2019504906.tif 000013
［式中、
Ｒ、Ｒ’、Ｙ、Ｚ、ｄおよびｅは、それぞれ独立して上記定義の通りであり、
ｎは正の実数であり、例えば０でない整数であり、好ましくは２〜１０００の整数であり、
ｍおよびｍ’は独立して正の実数から選択され、例えば０および２０００から選択される整数であり、例えば１〜１０００から選択される整数であり、
ｍおよびｍ’は同時に０でなくてもよく、かつ、
ｔは好ましくは１〜２０００または１〜１０００の正の整数である］。
【００８９】
特定の変法では、生物有機ナイロン型ポリマーは、アミノ構成単位Ｃのみを使用することによって得られる。生物有機ナイロン型ポリマーは、繰り返し単位（Ｃ１）および（Ｃ２）からなる。この変法では、生物有機ナイロン型ポリマーは、下記式を有する：
【化１２】
2019504906.tif 000014
［式中、
ＡＡ、ペプチド、（Ｃ末端）、ＹおよびＺは、それぞれ独立して上記定義の通りであり、
ｍおよびｍ’は独立して正の実数から選択され、例えば０および２０００から選択される整数であり、例えば１〜１０００から選択される整数であり、
ｍおよびｍ’は同時に０でなくてもよく、かつ、
ｔは好ましくは１〜２０００または１〜１０００の正の整数である］。
【００９０】
例えば、生物有機ナイロン型ポリマーは、下記式を有する：
【化１３】
2019504906.tif 000015
［式中、
ＡＡ、ペプチド、ＰＧ（Ｃ末端）、Ｒ’、Ｒ’’、Ｙ、Ｚ、ｄおよびｅは、それぞれ独立して上記定義の通りであり、
ｍおよびｍ’は独立して正の実数から選択され、例えば０および２０００から選択される整数であり、例えば１〜１０００から選択される整数であり、
ｍおよびｍ’は同時に０でなくてもよく、かつ、
ｔは好ましくは１〜２０００または１〜１０００の正の整数である］。
【００９１】
特定の変法では、生物有機ナイロン型ポリマーは、アミノ構成単位Ｄのみを使用することによって得られる。生物有機ナイロン型ポリマーは、繰り返し単位（Ｄ１）および（Ｄ２）からなる。この変法では、生物有機ナイロン型ポリマーは、下記式を有する：
【化１４】
2019504906.tif 000016
［式中、
ＡＡ、ペプチド、ＰＧ（Ｎ末端）、ＹおよびＺは、それぞれ独立して上記定義の通りであり、
ｍおよびｍ’は独立して正の実数から選択され、例えば０および２０００から選択される整数であり、例えば１〜１０００から選択される整数であり、
ｍおよびｍ’は同時に０でなくてもよく、かつ、
ｔは好ましくは１〜２０００または１〜１０００の正の整数である］。
【００９２】
例えば、生物有機ナイロン型ポリマーは、下記式を有する：
【化１５】
2019504906.tif 000017
［式中、
ＡＡ、ペプチド、ＰＧ（Ｎ末端）、Ｒ’、Ｒ’’、Ｙ、Ｚ、ｄおよびｅは、それぞれ独立して上記定義の通りであり、
ｍおよびｍ’は独立して正の実数から選択され、例えば０および２０００から選択される整数であり、例えば１〜１０００から選択される整数であり、
ｍおよびｍ’は同時に０でなくてもよく、かつ、
ｔは好ましくは１〜２０００または１〜１０００の正の整数である］。
【００９３】
特定の変法では、生物有機ナイロン型ポリマーは、アミノ構成単位Ｅのみを使用することによって得られる。生物有機ナイロン型ポリマーは、繰り返し単位（Ｅ１）および（Ｅ２）からなる。この変法では、生物有機ナイロン型ポリマーは、下記式を有する：
【化１６】
2019504906.tif 000018
［式中、
ＡＡ、ペプチド、ＰＧ（Ｎ末端）、（Ｃ末端）、ＹおよびＺは、それぞれ独立して上記定義の通りであり、
ｍおよびｍ’は独立して正の実数から選択され、例えば０および２０００から選択される整数であり、例えば１〜１０００から選択される整数であり、
ｍおよびｍ’は同時に０でなくてもよく、かつ、
ｔは好ましくは１〜２０００または１〜１０００の正の整数である］。
【００９４】
例えば、生物有機ナイロン型ポリマーは、下記式を有する：
【化１７】
2019504906.tif 000019
［式中、
ＡＡ、ペプチド、ＰＧ（Ｎ末端）、（Ｃ末端）、Ｒ’、Ｒ’’、Ｙ、Ｚ、ｄおよびｅは、それぞれ独立して上記定義の通りであり、
ｍおよびｍ’は独立して正の実数から選択され、例えば０および２０００から選択される整数であり、例えば１〜１０００から選択される整数であり、
ｍおよびｍ’は同時に０でなくてもよく、かつ、
ｔは好ましくは１〜２０００または１〜１０００の正の整数である］。
【００９５】
第２の実施形態では、生物有機ナイロン型ポリマーは架橋されている。従って、それは、上記で定義した繰り返し単位Ｂ１〜Ｂ８（すなわち、繰り返し単位の基ｂ）を少なくとも含有する。
【００９６】
特定の変法では、架橋された生物有機ナイロン型ポリマーは、繰り返し単位Ａ１およびＡ２をさらに含む。
【００９７】
特定の変法では、架橋された生物有機ナイロン型ポリマーは、繰り返し単位Ｃ１およびＣ２をさらに含む。
【００９８】
特定の変法では、架橋された生物有機ナイロン型ポリマーは、繰り返し単位Ｄ１およびＤ２をさらに含む。
【００９９】
特定の変法では、架橋された生物有機ナイロン型ポリマーは、繰り返し単位Ｅ１およびＥ２をさらに含む。
【０１００】
特定の変法では、架橋された生物有機ナイロン型ポリマーは、基ａ、基ｃ、基ｄおよび基ｅから選択される繰り返し単位の任意の２つの基をさらに含む。
【０１０１】
特定の変法では、架橋された生物有機ナイロン型ポリマーは、基ａ、基ｃ、基ｄおよび基ｅから選択される繰り返し単位の任意の３つの基をさらに含む。
【０１０２】
特定の変法では、架橋された生物有機ナイロン型ポリマーは、繰り返し単位Ａ１、Ａ２、Ｃ１、Ｃ２、Ｄ１、Ｄ２、Ｅ１およびＥ２をさらに含む。具体的には、それは、繰り返し単位Ａ１、Ａ２、Ｂ１〜Ｂ８、Ｃ１、Ｃ２、Ｄ１、Ｄ２、Ｅ１およびＥ２からなる。
【０１０３】
このような生物有機ナイロン型ポリマー（直鎖状または架橋型である）は、例えば示差走査熱量測定、元素分析、立体排除クロマトグラフィー、アミノ酸分析によって特徴付けることができる。
【０１０４】
本発明はまた、材料、具体的には生体材料、より具体的には抗菌材料の製造のための、本発明の方法により得られる生物有機ナイロン型ポリマーの使用に関する。
【０１０５】
一つの実施形態では、材料は吸収性であり、具体的には生体吸収性である。
【０１０６】
一つの実施形態では、本発明は、材料、具体的には抗菌材料、より具体的には生体材料、さらにより具体的には生体吸収性材料の製造のための、本発明の生物有機ナイロン型ポリマーの使用に関する。
【０１０７】
本発明の目的はまた、本発明による生物有機ナイロン型ポリマーを含む、またはそれからなる材料を提供することである。
【０１０８】
このような材料は、抗菌材料、抗炎症材料、殺生物材料、殺菌材料からなる群から選択することができる。
【０１０９】
本発明の目的はまた、本発明による生物有機ナイロン型ポリマーを含む医療装置または織物を提供することである。有利には、生物有機ナイロン型ポリマーは、抗菌性、抗炎症性、殺生物性および／または殺菌性を有する医療装置または織物を提供する。
【０１１０】
医療装置は、例えば体液のためのフィルター、または縫合糸もしくはカテーテル、または包帯もしくは埋め込み可能な装置であってもよい。
【０１１１】
織物は、例えば靴下、靴底、ストッキングまたはシャツであってもよい。
【０１１２】
本発明のさらなる目的は、センサ材料、具体的には環境改変に反応する材料の製造のための、本発明による生物有機ナイロン型材料の使用にある。
【０１１３】
実際、ペプチド、特に本発明の生物有機ナイロン型ポリマー中に組み込まれた生物活性ペプチドの存在により、環境の任意の改変に反応し、バイオセンサーとして使用され得る材料を得ることが可能になる。
【図面の簡単な説明】
【０１１４】
【図１】図１は、本発明の生物有機ナイロン型ポリマーの調製のための一般的な手順を示す。
【図２】図２は、表１のアミノペプチド構成単位２および４の調製のための合成経路の一般的な手順を示す。
【図３】図３は、表１のアミノペプチド構成単位３および５の調製のための合成経路の一般的手順を示す。
【実施例】
【０１１５】
実施例１：アミノ構成単位化合物１ＤａｎＬｙｓＮＨＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２を用いたナイロンＮ１の製造
最初にエチレンジアミンと反応させた塩化トリチル樹脂を用いて、Ｆｍｏｃ  ＳＰＰＳにより化合物１を調製した。
【０１１６】
２−クロロトリチルへの式Ｈ２Ｎ−（ＣＨ２）２−ＮＨ２のエチルジアミンの導入は、多くの論文に記載されており、例えば、A New Way to Silicone Based Peptide Polymers, Said Jebors, Jeremie Ciccione, Soultan Al-Halifa, Benjamin Nottelet, Christine Enjalbal, Celine M’Kadmi, Muriel Amblard, Ahmad Mehdi, Jean Martinez and Gilles Subra. Angew.Chem.Int.Ed., Volume 54, Issue 12, pages 3778-3782, March 16, 2015に記載されている。
【０１１７】
ここでは、塩化物樹脂へのジアミンの導入は以下のように行われた。
予め膨潤させたＣＨ２Ｃｌ２中の２−クロロトリチルクロリド樹脂（１．４４ｍｍｏｌ  Ｃｌ／ｇ、５ｇ）の懸濁液に、ＤＭＦ（５０ｍｌ）中のエチレンジアミン（１．４４ｍｌ、３当量）、ＤＩＥＡ（８．８ｍｌ、７当量）の溶液を添加した。反応混合物を室温で一晩撹拌し、次いでＤＭＦ（３×）、ＤＣＭ（３×）、ＭｅＯＨ（１×）およびＤＣＭ（１×）で洗浄した。
【０１１８】
第１級アミン基にＦｍｏｃＬｙｓ（Ｂｏｃ）ＯＨをカップリングさせた後、以下のスキームに従って化合物１を得、さらに精製することなく使用した。
【０１１９】
【化１８】
2019504906.tif 000020
【０１２０】
蛍光ナイロンＮ１を、アジポイルジクロライドをＤＣＭ（０．４Ｍ）に可溶化することによって最初に調製した。次いで、０．５ＭのＮａＯＨ溶液の薄層を、ピペットで有機相上に沈着させた。最後に、０．５ＭのＮａＯＨ中の化合物１および１，６ジアミノヘキサン（１０／１００、１／１００および０．１／１００；全濃度＝０．４Ｍ）の混合物を、有機相上にゆっくりと沈着させた。
【０１２１】
重合は界面で直ちに起こる。得られたポリマーを、ビーカーからスティックにより手動で引き出した。その長さに応じて、１メートルを超える白色で耐久性のある糸を様々な厚さ（thickness）で得ることができる。
【０１２２】
未反応の材料（species）を除去するために様々な溶媒中で洗浄し、真空下で乾燥させた後、糸は荒く耐性があるように見えるが、柔軟性を有していてもあまり弾性を有さない。収率はほぼ定量的（＞９９％）であり、ポリマー中のジアミン構成単位としてペプチドがおそらく完全に消費されたことを意味する。
【０１２３】
実施例２：様々なナイロンの調製
同様に、実施例１において記載された実験手順を使用して、Ｒｉｎｋアミド−ＰＳ（タイプＣ）、または最初にＦｍｏｃエチレンジアミンで官能化した２−クロロ−クロロ−トリチル−ＰＳ樹脂（タイプＬ）のいずれかで、４つの他のペプチド配列（表１の２〜５）を合成した。
【０１２４】
樹脂から切断した後、ペプチドを分取ＲＰ−ＨＰＬＣにより精製した。化合物２および３は、Ｎ末端リジンを介して直鎖状（Ｌ型）にまたはペンダント鎖（Ｃ型）としてポリマー骨格に組み込まれた同じＧｌｙ−Ｐｈｅ−Ａｒｇペプチド配列を共有していた。ペプチド４および５は、本発明者らの研究室で設計された短い抗菌性両親媒性のＰａｌｍ−Ａｒｇ−Ａｒｇ−ＮＨ２ペプチド由来のカチオン性配列であった。興味深いことに、このようなペプチドの誘導体は、ガラス表面上にグラフトされるか、またはペプチド−シリコーンを含む新しい生物有機ポリマーに組み込まれた。得られたハイブリッド材料は、E. coliに対して抗菌特性を維持し、この抗菌性ペプチドの作用様式が細菌膜の不安定化に関するという事実を裏付けた。ペプチド５からは、櫛形状の抗菌性ペプチド配列を含むナイロンが得られ、ペプチド４からは、抗菌性ペプチド配列を含む直鎖状のナイロンが得られた。他のペプチドナイロンの合成にも、Ｎ１について用いたのと同じ手順を適用した。ペプチド２〜５を１，６−ジアミノヘキサンと異なるｘ／ｙ比で使用して、１２種類の異なるナイロンを得た（表１）。さらに、ダンシル誘導体１（１％）およびペプチド４（９％）を組み込んだ蛍光ナイロンＮ６を調製した。
【０１２５】
ペプチド配列を含まないＮ０を含むすべてのナイロンを、ガラス転移温度、融解および固化温度を決定するためにＡＴＧおよびＤＳＣによって特徴付けた。このプロファイルは、従来の１−６ナイロンに匹敵し、従来の１．６−ジアミノに関連する１〜１０％のペプチドの導入が、実際には機械的特性に影響しないことを示している。
【０１２６】
表１．ペプチドナイロン
［ａ］図１参照：Ｌは直鎖状ペプチド−ナイロンを意味し、Ｃは櫛状ペプチド−ナイロンを意味し、Ｍは多官能性ペプチドナイロンを意味する
［ｂ］ペプチド／ジアミノヘキサンのｘ／ｙモル比
［ｃ］ペプチド４／ジアミノヘキサン／化合物１のモル比ｘ／ｙ／ｚ
【表１】
2019504906.tif 000021
【０１２７】
実施例３：ペプチド−ナイロンＮ２−１％の合成手順
最初に、ジクロロメタン（１０．７ｍｌ）中の塩化アジポイル（６２５μＬ）の０．４Ｍ溶液を２０ｍＬビーカーに入れた。
【０１２８】
次いで、１０．７ｍＬの０．５Ｍ  ＮａＯＨ中の１．６ジアミノヘキサン（４４９ｍｇ）およびペプチド配列３（２２１ｍｇ）の混合物の０．４Ｍの溶液を、ピペットで塩化アジポイルの有機溶液上に静かに沈着させた。
【０１２９】
重合は界面で直ちに起こる。得られたポリマーを、ビーカーからスティックにより手動で引き出し、１０ｍＬのメタノール（３×）、１０ｍＬの水（３×）、１０ｍＬのアセトン（３×）で洗浄し、乾燥させた。
【０１３０】
実施例４：ペプチド−ナイロンＮ２−１００％の合成手順：
最初に、ジクロロメタン（５．３ｍｌ）中の塩化アジポイル（３１２．５μＬ）の０．４Ｍ溶液を２０ｍＬビーカーに入れた。
【０１３１】
次いで、５．３ｍＬの０．５Ｍ  ＮａＯＨ中の０．４Ｍのペプチド配列２（１．４ｇ）の溶液を、ピペットで塩化アジポイルの有機溶液上に静かに沈着させた。
【０１３２】
重合は界面で直ちに起こる。得られたポリマーを、ビーカーからスティックにより手動で引き出し、１０ｍＬのメタノール（３×）、１０ｍＬの水（３×）、１０ｍＬのアセトン（３×）で洗浄し、乾燥させた。
【０１３３】
実施例５：ペプチド−ナイロンＮ２−１００％の合成手順：
ＤＭＦ中のペプチド配列２（０．３５ｇ）の０．１Ｍ溶液に、ＤＩＥＡ（６当量、６８４μＬ）および塩化アジポイル（１当量、７８．１μＬ）を添加した。反応混合物をポリマーが沈殿するまで撹拌した。得られたポリマーを濾過し、１０ｍＬのメタノール（３×）、１０ｍＬの水（３×）、１０ｍＬのアセトン（３×）で洗浄し、乾燥させた。
【０１３４】
実施例６：ペプチド−ナイロンＮ３−１％の合成手順
最初に、ジクロロメタン（６．１５ｍｌ）中の塩化アジポイル（６２５μＬ）の０．４Ｍ溶液を２０ｍＬビーカーに入れた。
【０１３５】
次いで、６．１５ｍＬの０．５Ｍ  ＮａＯＨ中の１．６Ｍジアミノヘキサン（４４９ｍｇ）およびペプチド配列３（２２１ｍｇ）の混合物の０．４Ｍ溶液を、ピペットで塩化アジポイルの有機溶液上に静かに沈着させた。
【０１３６】
重合は界面で直ちに起こる。得られたポリマーを、ビーカーからスティックにより手動で引き出し、１０ｍＬのメタノール（３×）、１０ｍＬの水（３×）、１０ｍＬのアセトン（３×）で洗浄し、乾燥させた。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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