(57)【要約】一態様では、本出願は、式（Ｉ）のアミノチオール複合体に関し、式中、コア、リンカー、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、ｍ、ｎ及びｐは、明細書に記載のとおりである。本発明はまた、式（Ｉ）のアミノチオール複合体を使用したアミノチオール治療を必要とする対象を治療する方法にも関する。2019500407.tif 000055【選択図】なし
2019500407.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）のアミノチオール複合体
2019500407.tif 000047
であって、
式中、
2019500407.tif 000048
が、原子、分子または高分子であり、
2019500407.tif 000049
がリンカー基であり、前記リンカー基がポリマー、ポリマーの一部、ポリマーのアーム、コポリマーのアーム、またはデンドリマーの分枝であり、
Ｒ１、Ｒ２及びＲ３が、水素及びＣ１−６アルキルから独立して選択され、
ｍが１〜１００，０００であり、
ｎが１〜１０であり、かつ
ｐが０〜２５００である、前記アミノチオール複合体。
【請求項２】
2019500407.tif 000050
が、ポリマーコア、デンドリマーコア、内部樹枝状構造（すなわち、分枝）を有するデンドリマーコア、治療物質または治療物質の誘導体である、請求項１に記載のアミノチオール複合体。
【請求項３】
2019500407.tif 000051
が、
2019500407.tif 000052
2019500407.tif 000053
、葉酸、葉酸誘導体、スペルミンポリマー、及びスペルミンポリマー誘導体からなる群から選択され、ａは０〜２５００であり、ｂは０〜２５００であり、ｃは０〜２５００であり、ｄは０〜２５００であり、Ｒは、水素、Ｃ１−６アルキル及びハロゲンから独立して選択され、Ｘは、原子、分子または高分子であり、Ｙは多価基である、請求項１に記載のアミノチオール複合体。
【請求項４】
ＸがＯ、Ｓ、Ｃ（Ｒ４）２、またはＮＲ４であり、Ｒ４が水素またはＣ１−６アルキルである、請求項３に記載のアミノチオール複合体。
【請求項５】
以下の構造
2019500407.tif 000054
を有し、
式中、ｋが１〜２５００である、請求項１に記載のアミノチオール複合体。
【請求項６】
請求項１に記載のアミノチオール複合体を含む、医薬組成物。
【請求項７】
細胞内送達システムを更に含む、請求項６の医薬組成物。
【請求項８】
前記細胞内送達システムが（ａ）細胞透過性物質を含むシステム、（ｂ）ｐＨ応答性担体、（ｃ）Ｃ２ストレプトアビジン送達システム、（ｄ）ＣＨ（３）−ＴＤＤＳ薬物送達システム、（ｅ）疎水性生物活性担体、（ｆ）エキソソーム、（ｇ）脂質ベースの送達システム、（ｈ）リポソームベースの送達システム、（ｉ）ミセル送達システム、（ｊ）微小粒子、（ｋ）分子担体、（ｌ）ナノ担体、（ｍ）ナノスケールのマルチバリアント担体、（ｎ）ナノゲル、（ｏ）２つ以上の微粒子送達システムの構成要素からなるハイブリッドナノ担体システム、（ｐ）ナノ粒子、（ｑ）ペプチドベースの薬物送達システム、及び（ｒ）ポリマーまたはコポリマーベースの送達システム、からなる群から選択される、請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項９】
前記細胞内送達システムがナノ粒子である、請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
界面活性剤を更に含む、請求項７の医薬組成物。
【請求項１１】
還元剤を更に含む、請求項７の医薬組成物。
【請求項１２】
１つ以上の、請求項１に記載のアミノチオール複合体を含む、組成物。
【請求項１３】
１つ以上の、請求項１に記載のアミノチオール複合体を含む、キット。
【請求項１４】
１つ以上の追加の治療物質を更に含む、請求項１３に記載のキット。
【請求項１５】
アミノチオール治療を必要とする対象を治療する方法であって、
前記アミノチオール複合体、または請求項１〜１２のいずれか一項に記載のアミノチオール複合体を含む医薬組成物を前記対象に投与すること
を含む、前記方法。
【請求項１６】
前記対象が、抗ウイルス剤、化学保護剤（ｃｈｅｍｏｐｒｏｔｅｃｔａｎｔ）、細胞保護剤、放射線防護剤、抗線維化剤、抗腫瘍剤、または酸化防止剤を用いた治療を必要とする対象からなる群から選択される、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記対象がウイルスに感染しており、前記アミノチオール複合体または前記アミノチオール複合体を含む医薬組成物が、前記ウイルスを治療するのに効果的な条件下で投与される、請求項１５に記載の方法。
【請求項１８】
前記対象がＨＩＶ、オルソミクソウイルス、インフルエンザウイルスまたはアデノウイルスに感染している、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記インフルエンザウイルスが、Ｈ１Ｎ１及びＨ３Ｎ２からなる群から選択される型である、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記アデノウイルスが、Ｂ、Ｃ及びＥからなる群から選択される種である、請求項１８に記載の方法。
【請求項２１】
前記対象がＨＩＶに感染していない、請求項１７に記載の方法。
【請求項２２】
前記対象が新生物状態を患っており、前記アミノチオール複合体または前記アミノチオール複合体を含む医薬組成物が、前記新生物状態を治療するのに効果的な条件下で投与される、請求項１５に記載の方法。
【請求項２３】
前記新生物状態が、乳房、卵巣、子宮頚部、結腸、肺、皮膚（悪性黒色腫）、リンパ網内系腫瘍及びこれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記新生物状態が骨髄異形成状態である、請求項２２に記載の方法。
【請求項２５】
前記対象が放射線療法、化学療法またはこれらの組み合わせを受け、かつ
前記アミノチオール複合体またはアミノチオール複合体を含む医薬組成物が、前記放射線療法、前記化学療法またはこれらの組み合わせの有害なまたは望ましくない副作用を低減させるまたは減少させるために効果的な条件下で投与される、請求項１５に記載の方法。
【請求項２６】
前記対象が抗菌療法を必要とし、かつ
前記アミノチオール複合体またはアミノチオール複合体を含む医薬組成物が、前記対象において１種類以上の病原微生物を殺すのに効果的な条件下で投与される、
請求項１５に記載の方法。
【請求項２７】
前記微生物がバクテリア、酵母、真菌または寄生虫からなる群から選択される、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
前記寄生虫が細胞内寄生虫である、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
前記寄生虫が細胞外寄生虫である、請求項２７に記載の方法。
【請求項３０】
前記対象が哺乳動物である、請求項１５に記載の方法。
【請求項３１】
前記哺乳動物がヒトである、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
ｍが２〜１００，０００である、請求項１に記載のアミノチオール複合体。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、２０１５年１１月１７日出願の米国特許仮出願第６２／２５６，５４５号の優先権利益を主張し、これは参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０００２】
発明の分野
本発明は、アミノチオール複合体、組成物、ならびにその作製及び使用方法に関する。前記複合体は、アミノチオール治療を必要とする対象（例えば、抗ウイルス剤、化学保護剤（ｃｈｅｍｏｐｒｏｔｅｃｔａｎｔ）、細胞保護剤、放射線防護剤、抗線維化剤、抗腫瘍剤、酸化防止剤または抗菌もしくは抗寄生虫剤を用いた治療を必要とする対象）の治療に有用である。
【背景技術】
【０００３】
発明の背景
ホスホロチオエートと呼ばれる現在のアミノチオール製剤において、生物活性アミノチオール部分の保護は、リン酸基へのアミノチオールの結合に依存する。この製剤において、リン酸基はアミノチオールのスルフヒドリル部分に結合し、標的及び非標的細胞への薬物送達の工程中、それは偶発的反応から活性代謝物を保護するために機能する。細胞膜の近くで、リン酸基は、細胞膜結合型アルカリホスファターゼによって除去される。それから活性代謝物（アミノチオール）は、ポリアミン輸送系による受動拡散、またはいくつかの条件下では能動輸送によって、細胞内に取り込まれる。
【０００４】
多くの／ほとんどの非ストレス／非疾患細胞が、細胞膜に局在化するアルカリホスファターゼを産生するので、正常な細胞へのホスホロチオエートの送達は成功する。しかし同じプロドラッグは、（ｉ）血液循環からの急速な排出、（ｉｉ）いくつかの細胞、特にストレスを受けたまたは疾患に侵された細胞が、ホスホロチオエートをその活性な形態に代謝することができないこと、（ｉｉｉ）標的細胞に対して遠位での代謝に対する脆弱性、ならびに（ｉｖ）有毒な副産物への転換に対する脆弱性を含む、いくつかの理由から、ストレスを受けたもしくは疾患に侵された細胞の治療に有効なものではない、または効果がない（Ｂｌｏｃｋ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｃｏｍｍｅｎｔａｒｙ：ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ  Ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ−Ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  Ｒｅｃｅｎｔ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ｆｏｒ  Ｉｎｔｅｇｒａｔｉｖｅ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｃａｒｅ，”Ｉｎｔｅｇｒ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒ．４：３２９−３５１（２００５）（非特許文献１）、Ｃａｌａｂｒｏ−Ｊｏｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｔｈｅ  Ｌｉｍｉｔｓ  ｔｏ  Ｒａｄｉｏｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｃｈｉｎｅｓｅ  Ｈａｍｓｔｅｒ  Ｖ７９  ｃｅｌｌｓ  ｂｙ  ＷＲ−１０６５  ｕｎｄｅｒ  Ａｅｒｏｂｉｃ  Ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ，”Ｒａｄｉａｔ．Ｒｅｓ．１４９：５５０−５５９（１９９８）（非特許文献２）、Ｍｅｉｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ  ｏｆ  ２−（３−ａｍｉｎｏｐｒｏｐｙｌａｍｉｎｏ）−ｅｔｈａｎｅｔｈｉｏｌ（ＷＲ−１０６５）ｂｙ  Ｃｕ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  Ａｍｉｎｅ  Ｏｘｉｄａｓｅｓ  ａｎｄ  Ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ  ｏｎ  Ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ  Ｓｔａｔｕｓ  ｏｆ  Ｃｈｉｎｅｓｅ  Ｈａｍｓｔｅｒ  Ｏｖａｒｙ  Ｃｅｌｌｓ，”Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．５０：４８９−４９６（１９９５）（非特許文献３）。これらはそれぞれ、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。他の制約は、（ｉ）複数の異なる薬物吸収メカニズム（これは、疾患に侵された細胞対正常な細胞の間で、及び異なる病理を有する疾患に侵された細胞と細胞の間で異なる可能性がある）を利用することができないこと、（ｉｉ）細胞内への薬物の取り込みを強化するために細胞の取り込みまたは輸送系を標的とできないこと、（ｉｉｉ）特異的細胞型を標的とする、または除外することができないこと、（ｉｖ）薬物循環または保持時間を変えることができないこと、ならびに（ｖ）特異的薬物クリアランス機序を標的とするまたは除外することができないことを含む。アミノチオールの新規な製剤が、これらの課題及び制約に対処するために必要である。
【０００５】
本発明は、当該技術分野のこれらの及び他の欠陥に対処することを目的とする。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Ｂｌｏｃｋ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｃｏｍｍｅｎｔａｒｙ：ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ  Ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ−Ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  Ｒｅｃｅｎｔ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ｆｏｒ  Ｉｎｔｅｇｒａｔｉｖｅ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｃａｒｅ，”Ｉｎｔｅｇｒ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒ．４：３２９−３５１（２００５）
【非特許文献２】Ｃａｌａｂｒｏ−Ｊｏｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｔｈｅ  Ｌｉｍｉｔｓ  ｔｏ  Ｒａｄｉｏｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｃｈｉｎｅｓｅ  Ｈａｍｓｔｅｒ  Ｖ７９  ｃｅｌｌｓ  ｂｙ  ＷＲ−１０６５  ｕｎｄｅｒ  Ａｅｒｏｂｉｃ  Ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ，”Ｒａｄｉａｔ．Ｒｅｓ．１４９：５５０−５５９（１９９８）
【非特許文献３】Ｍｅｉｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ  ｏｆ  ２−（３−ａｍｉｎｏｐｒｏｐｙｌａｍｉｎｏ）−ｅｔｈａｎｅｔｈｉｏｌ（ＷＲ−１０６５）ｂｙ  Ｃｕ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  Ａｍｉｎｅ  Ｏｘｉｄａｓｅｓ  ａｎｄ  Ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ  ｏｎ  Ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ  Ｓｔａｔｕｓ  ｏｆ  Ｃｈｉｎｅｓｅ  Ｈａｍｓｔｅｒ  Ｏｖａｒｙ  Ｃｅｌｌｓ，”Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．５０：４８９−４９６（１９９５）
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明の一態様は、式（Ｉ）のアミノチオール複合体に関し、
2019500407.tif 000003
式中、
2019500407.tif 000004
は、原子、分子または高分子であり、
2019500407.tif 000005
はリンカー基であり、リンカー基は、ポリマー、ポリマーの一部、ポリマーのアーム、コポリマーのアーム、デンドリマーの分枝または分子であり、
Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は、水素及びＣ１−６アルキルから独立して選択され、
ｍは１〜１００，０００であり、
ｎは１〜１０であり、かつ
ｐは０〜２５００である。
【０００８】
本発明の別の態様は、アミノチオール治療を必要とする対象を治療する方法に関する。前記方法は、対象に
（ｉ）式（Ｉ）のアミノチオール複合体であって、
2019500407.tif 000006
式中、
2019500407.tif 000007
は、原子、分子または高分子であり、
2019500407.tif 000008
はリンカー基であり、リンカー基は、ポリマー、ポリマーの一部、ポリマーのアーム、コポリマーのアーム、デンドリマーの分枝、原子または分子であり、
Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は、水素及びＣ１−６アルキルから独立して選択され、
ｍは１〜１００，０００であり、
ｎは１〜１０であり、かつ
ｐは０〜２５００である、前記アミノチオール複合体、または
（ｉｉ）アミノチオール複合体を含む医薬組成物、
を投与することを含む。
【０００９】
本開示は概して、担体分子が目的の分子に共有結合しているポリマー担体（複数可）の使用を含む、薬物送達の分野に関する。この薬物送達システムで一般的な目的は、以下のうちの１つ以上を得ることである。（ｉ）増大した水溶性、（ｉｉ）分解酵素または細網内皮系による取り込みの減少に対する安定性、（ｉｉｉ）特定部位への薬物のターゲティングされた送達。それは、１つ以上の活性部分を保護するために、ならびにヒト及び他の動物への送達において再調製した成分の薬物動態及び薬力学を強化するためにアミノチオール剤を再調製することにも関する。下記の実施例に記述されるように、予想外の薬物効果が、本明細書に記載のアミノチオール複合体において示された。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】ＷＲ１０６５、アミホスチンの活性部分の構造を示す。化学式は、ＮＨ２（ＣＨ２）３ＮＨ（ＣＨ２）２ＳＨである。
【図２】ＷＲ２５５５９１、ホスホエノールの活性部分の構造を示す。化学式は、ＣＨ３ＮＨ（ＣＨ２）３ＮＨ（ＣＨ２）２ＳＨである。
【図３】図３Ａ〜図３Ｂは、アミノチオール（及びその類似体）の２つの一般構造を示し、Ｘは、−ＰＯ３Ｈ２、水素、スルフヒドリル、硫黄、アセチル、イソブチリル、ピバロイル及びベンゾイルからなる群から選択され、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３のそれぞれは、水素及びＣ１−６アルキルから独立して選択され、ｎは１〜１０の整数であり、（図３Ｂでは、）ｎ’は１〜１０の整数である。図３Ａ〜図３Ｂに示す一般的なアミノチオールの活性部分の２つの代表的な構造は、Ｘが水素である。
【図４】ポリエチレングリコール（酸化ポリエチレン）の一般的な構造を示し、「ｎ」は１以上の任意の整数であり得る。化学式は、Ｈ−（Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２）ｎ−ＯＨであり、「ｎ」は、ここで提示した適用にとって最も望ましい１〜２５００の範囲の任意の整数であり得る。一般に使用されるバリアントは、モノメトキシＰＥＧまたはジヒドロキシルＰＥＧを含む。例えば、その全体が参照により本明細書に組み込まれる、Ｓｉｇｍａａｌｄｒｉｃｈ．ｃｏｍの好適なモノメトキシポリ（エチレングリコール）またはジヒドロキシルポリ（エチレングリコール）を参照されたい。
【図５】図５Ａ〜図５Ｂは、チオール末端ポリエチレングリコール（酸化ポリエチレン）の一般的な構造を示し、「ｎ」は１〜２５００の任意の整数であり得る。例えば、その全体が参照により本明細書に組み込まれる、Ｓｉｇｍａａｌｄｒｉｃｈ．ｃｏｍの好適なポリ（エチレングリコール）ジチオール、ホモ二官能性ＰＥＧを参照されたい。
【図６】４アーム型チオール末端星型ポリエチレングリコールの一般的な構造を示し、「ｎ」は、ここで提示した適用にとって最も望ましい１〜２５００の範囲の任意の整数であり得る。例えば、その全体が参照により本明細書に組み込まれる、Ｓｉｇｍａａｌｄｒｉｃｈ．ｃｏｍの好適なＰＥＧポリマー及びデンドリマー、ＰＥＧデンドリマー及びマルチアーム型ＰＥＧを参照されたい。
【図７】アミノチオールへのジスルフィド結合を介して結合したチオール末端ポリエチレングリコールの一般的な構造を示し、「ｎ１」は１〜４の任意の整数であり得、「ｎ２」は１〜４の任意の整数であり得る。例えば、その全体が参照により本明細書に組み込まれる、Ｓｉｇｍａａｌｄｒｉｃｈ．ｃｏｍの好適なＰＥＧポリマー及びデンドリマー、ＰＥＧデンドリマー及びマルチアーム型ＰＥＧを参照されたい。本明細書に記載されるように、本発明の特定の実施形態による複合体は、アミノチオールへのジスルフィド結合を介して結合した４アーム型チオール末端星型ポリエチレングリコールであり、図７に示す構造を有し、「ｎ２」は４である。
【図８】６アーム型ＰＥＧの一般的な構造を示す。例えば、その全体が参照により本明細書に組み込まれる、Ｓｉｇｍａａｌｄｒｉｃｈ．ｃｏｍの好適なＰＥＧポリマー及びデンドリマー、ＰＥＧデンドリマー及びマルチアーム型ＰＥＧを参照されたい。この一般的な設計は、例えば８アーム星型ＰＥＧスキャフォールドを作製するために更に拡大され得ることに留意されたい。
【図９】葉酸塩（葉酸）の一般的な構造を示す。化学式は、Ｃ１９Ｈ１９Ｎ７Ｏ６である。末端カルボキシル基を適切な部分（例えば、ＳＨ）に変えて、それからアミノチオールまたはＰＥＧの追加をそれぞれ実施することによって、葉酸とアミノチオールまたはＰＥＧの複合体を合成できる（Ｃｈｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｆｏｌａｔｅ−ｍｅｄｉａｔｅｄ  ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  ｄｒｕｇ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｉｎｃｒｅａｓｅｓ  ｔｈｅ  ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  ｅｆｆｉｃａｃｙ  ｏｆ  ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｕｌａｔｅ  ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａｒｓｅｎｉｃ  ｔｒｉｏｘｉｄｅ，”Ｍｏｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒ  ８（７）：１９５５−６３（２００９）、Ｋａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｆｏｌｉｃ  ａｃｉｄ−ｔｅｔｈｅｒｅｄ  Ｐｅｐ−１  ｐｅｐｔｉｄｅ−ｃｏｎｊｕｇａｔｅｄ  ｌｉｐｏｓｏｍａｌ  ｎａｎｏｃａｒｒｉｅｒ  ｆｏｒ  ｅｎｈａｎｃｅｄ  ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  ｄｒｕｇ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｔｏ  ｃａｎｃｅｒ  ｃｅｌｌｓ：ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎａｌ  ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ｃｅｌｌｕｌａｒ  ｕｐｔａｋｅ  ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ，”Ｉｎｔ  Ｊ  Ｎａｎｏｍｅｄ  ８：１１５５−６５（２０１３）。これらはそれぞれ、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。葉酸複合体は、それが細胞の表面上の葉酸受容体と相互作用して、細胞サイトゾル内へのプロドラッグの能動輸送を惹起させることができるという利点を提供する。
【図１０】スペルミンポリマーの一般的な構造を示す。化学式はＮＨ２Ｃ２Ｈ４（ＮＣ３Ｈ６ＮＨＣ４Ｈ８）ｎ−ＮＨＣ３Ｈ６ＮＨ２であり、「ｎ」は１以上の任意の整数であり得る。末端ＮＨ−基を適切な部分（例えば、ＳＨ）に変えて、それからアミノチオールまたはＰＥＧの添加をそれぞれ実施することによって、スペルミンとアミノチオールまたはＰＥＧの複合体を合成できる。スペルミンポリマー複合体は、それが細胞の表面上のポリアミン受容体と相互作用して、細胞サイトゾル内へのプロドラッグの能動輸送を惹起させることができるという利点を提供する（Ｚｈａｎｇ  ａｎｄ  Ｖｉｎｏｇｒａｄｏｖ，“Ｓｈｏｒｔ  ｂｉｏｄｅｇｒａｄａｂｌｅ  ｐｏｌｙａｍｉｎｅ  ｆｏｒ  ｇｅｎｅ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ａｎｄ  ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｂｒａｉｎ  ｃａｐｉｌｌａｒｙ  ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  ｃｅｌｌｓ”，Ｊ  Ｃｏｎｔｒｏｌ  Ｒｅｌｅａｓｅ  １４３：３５９−３６６（２０１０）。それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
【図１１】図１１Ａ〜図１１Ｂは、本明細書に記載されるようなアミノチオール複合体の一般的な構造を示す。複合体は図３〜図１０に示すように任意の構造を含んでもよく、それは、薬物送達、ならびに治療的な介入が求められているストレス状態または疾患の薬物活性化条件及びその必要性によって変化し得ることに留意されたい。２つの複合体を組み合わせることができる点にも留意されたい。例えば葉酸は、ジスルフィド結合を介してアミノチオールに結合されるＰＥＧ含有ポリマーに結合できる。図１１Ｂに示すように、アミノチオールの硫黄部分と最初の窒素の間の炭素鎖の長さが変化し得る（上述の図３Ｂを参照）実施形態も意図される。
【図１２】４ＳＰ６５、アミホスチンまたはＷＲ１０６５単独に曝露される腫瘍細胞の用量反応曲線（すべての結果の平均）を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
発明の詳細な説明
本出願は、チオリン酸化合物（すなわち、アミノチオール）の活性部分（複数可）の保護、保護化合物の送達、ならびにヒト及び動物の所望部位でのインビボ活性化を達成するための改善された方法に関する。
【００１２】
本出願は、増大した薬物効果及び毒性の減少を達成するための方法にも関する。本出願は、本明細書に記載のアミノチオール複合体を用いることにより、前述のアミノチオール、その代謝物、その類似体、二量体及びヘテロ二量体の改善された治療有効性ならびに低い毒性を達成する方法に関する。このような保護された薬物は、追加の送達方法またはモジュールを使用することなく送達されることができる、または細胞内、細胞質内の、能動もしくは受動的なターゲティングされた細胞送達もしくは除外、及び／または細胞内小器官内送達を達成する薬物送達システムと組み合わせることができる。
【００１３】
本明細書で使用する場合「活性成分」とは、アミホスチン、ホスホエノールならびに構造上関連する化合物及び類似体の活性代謝産物の構造の一部を構成する反応性基（例えば−ＳＨ及び／または−ＮＨ）ならびにこれらの基を含有する化合物を意味する。
【００１４】
本明細書で使用する場合「アミホスチン」は、アミホスチンの生物学的活性部分及び生理学的代謝物であるＷＲ−１０６５、ＷＲ−１０６５のホスホロチオエートの形態に付された名称を意味する。
【００１５】
本明細書で使用する場合「アミノチオール」とは、図３に示される構造を有する任意の分子を意味する。
【００１６】
本明細書中で使用する場合「アミノチオールプロドラッグ」とは、生物的に還元されるジスルフィド結合を介して複合体分子に結合されるアミノチオールまたはアミノチオール類似体から部分的に構成された、治療的に不活性なプロドラッグを意味する。好適な条件下で、ジスルフィド結合が還元されてアミノチオールの放出をもたらし、それにより、その治療効果が達成され得る。
【００１７】
本明細書で使用する場合「生物的に還元される」または「生物的に還元されるジスルフィド結合」とは、処理、酵素、反応、もしくはインビボに、器官系に、及び／または細胞内部に存在する他の機序によって還元され得る結合またはジスルフィド結合を意味する。
【００１８】
本明細書で使用する場合「複合体」とは、治療効果のあるアミノチオールまたはアミノチオール類似体に結合（ｂｉｎｄ）もしくは結合（ｃｏｎｊｕｇａｔｅ）する任意の合成もしくは天然起源のポリマー、コポリマー、デンドリマー、他の複合体、分子、化学物質または上述の組み合わせを意味する。
【００１９】
本明細書で使用する場合「デンドリマー」とは、分岐、樹木様の構造を有する任意の合成ポリマーを意味する。
【００２０】
本明細書で使用する場合「ＰＥＧ」とは、「ポリエチレングリコール」の省略形である。
【００２１】
本明細書で使用する場合「ホスホエノール」とは、ホスホエノールの生物学的活性部分または代謝物であるＷＲ−２５５５９１を有する、ホスホロチオエートＷＲ−３７８９に付された名称を意味する。
【００２２】
本明細書で使用する場合「ホスホロチオエート」とは、スルフヒドリル部分に結合するリン酸基を有するアミノチオールに付された一般名を指す。
【００２３】
本明細書で使用する場合「ポリエチレングリコール」（同様に、ポリ（エチレングリコール）、酸化ポリエチレンも）とは、Ｈ−（Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２）ｎ−ＯＨの一般的な構造を有する分子に付された名称である。ＰＥＧ（下を参照）が代替の基（例えばスルフヒドリル部分）を有することができることに留意されたい。それはこの一般式で示されない（ｅｎ．ｗｉｋｉｐｅｄｉａ．ｏｒｇ／ｗｉｋｉ／Ｐｏｌｙｅｔｈｙｌｅｎｅ＿ｇｌｙｃｏｌも参照）。このような他の代替の基の例は、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ及びＮＨ２を含む。
【００２４】
本明細書で使用する場合「プロドラッグ」とは、細胞及び／または身体内部で及び好ましくは作用部位で活性型に転換される不活性薬物誘導体を意味する。一例は、式（Ｉ）のアミノチオール複合体である（図１１Ａを参照）。別の例を図１１Ｂに示す。
【００２５】
本明細書で使用する場合「４ＳＰ６５」とは、４アーム星型ＰＥＧ（分子量１０，０００ダルトン）にジスルフィド結合によって結合したＷＲ−１０６５からなるプロドラッグのトリフルオロ酢酸塩を指すために使用する省略形である（その全体が参照により本明細書に組み込まれる、ＳｉｇｍａＡｌｄｒｉｃｈ．ｃｏｍのＰＥＧデンドリマー及びマルチアーム型ＰＥＧを参照されたい）。
【００２６】
本明細書で使用する場合「ＷＲ−１０６５」とは、アミホスチンの活性部分に付された名称である。それは、ホスホロチオエート薬物の活性部分の代表として本明細書において使用される。
【００２７】
本明細書で使用する場合「ＷＲ−２７２１」とは、アミホスチンの同義語である。
【００２８】
本明細書に記載されるように、ホスホロチオエートの代謝物質は、アミノチオール、アミノチオール、システアミン及びシスタミンの繋ぎ止められた形状として記述される化合物を含む。アミノチオールは、アミホスチン（ＷＲ−２７２１）、ホスホエノール（ＷＲ−３６８９）、ＷＲ−１３１５２７、構造上関連するホスホロチオエート、アミノチオールまたはホスホロチオエートの類似体、その脱リン酸化活性代謝物、及びＳｔｏｇｎｉｅｗに対する米国特許第６，４８９，３１２号（その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載の薬剤と称されるホスホロチオエートの活性代謝物を含むが、これらに限定されない。
【００２９】
本出願は、送達工程中の、これらの薬物のスルフヒドリル部分を保護する方法にも関する。例えば本出願は、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、他の複合体またはそれらの組み合わせ（したがって「複合体」と称される）を完全または部分的に構成するポリマーまたはコポリマーの使用に関する。これらの複合体の分子量は、特定の目的用に製剤を最適化するために希望に応じて変化でき、ポリマーは、直鎖、マルチアーム型（星型）もしくは分枝状、樹木様（デンドリマーの場合）を含む、任意の形状を有することができる（Ｂａｌｏｇｈ，“Ｄｅｎｄｒｉｍｅｒ  １０１”Ａｄｖ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．Ｂｉｏｌ．６２０：１３６−１５５（２００７）、Ｍｉｎｔｚｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｅｘｐｌｏｉｔｉｎｇ  Ｄｅｎｄｒｉｍｅｒ  Ｍｕｌｔｉｖａｌｅｎｃｙ  ｔｏ  Ｃｏｍｂａｔ  Ｅｍｅｒｇｉｎｇ  ａｎｄ  Ｒｅ−Ｅｍｅｒｇｉｎｇ  Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ  Ｄｉｓｅａｓｅｓ，”Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ  ９：３４２−３５４（２０１２）。これらはそれぞれ、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）、または不規則形状であり得る。複合体は、細胞表面受容体と相互作用する、及び／または細胞媒介性能動輸送系による化合物の取り込みを強化するその能力のために選択されることもできる。複合体は、アミノチオールのスルフヒドリル部分に結合するジスルフィドの形成により、アミノチオールに結合する。ジスルフィド結合は、好適な細胞内条件、酵素、反応経路またはそれらの組み合わせの存在下で、生物的に還元される。
【００３０】
本発明の一態様は、式（Ｉ）のアミノチオール複合体に関し、
2019500407.tif 000009
式中、
2019500407.tif 000010
は、原子、分子または高分子であり、
2019500407.tif 000011
はリンカー基であり、リンカー基は、ポリマー、ポリマーの一部、ポリマーのアーム、コポリマーのアーム、デンドリマーの分枝、原子または分子であり、
Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は、水素及びＣ１−６アルキルから独立して選択され、
ｍは１〜１００，０００であり、
ｎは１〜１０であり、かつ
ｐは０〜２５００である。
【００３１】
本発明の別の態様は、図１１Ｂに示す式（式ＩＶ）のアミノチオール複合体に関し、
式中、
2019500407.tif 000012
は、原子、分子または高分子であり、
2019500407.tif 000013
はリンカー基であり、リンカー基は、ポリマー、ポリマーの一部、ポリマーのアーム、コポリマーのアーム、デンドリマーの分枝、原子または分子であり、
Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は、水素及びＣ１−６アルキルから独立して選択され、
ｍは１〜１００，０００であり、
ｎは１〜１０であり、
ｎ’は１〜１０であり、かつ
ｐは０〜２５００である。
【００３２】
「アルキル」という用語は、約１〜約６つの炭素原子を鎖中に有する直鎖または分枝状であり得る、脂肪族炭化水素基を意味する。「分枝状」とは、１つ以上の低級アルキル基（例えばメチル、エチルまたはプロピル）が直鎖アルキル鎖に結合していることを意味する。代表的なアルキル基としては、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル、ｎ−ペンチル及び３−ペンチルが挙げられる。
【００３３】
「ハロ」または「ハロゲン」という用語は、フルオロ、クロロ、ブロモまたはヨードを意味する。
【００３４】
代表的なアミノチオール複合体は、以下を含む。
2019500407.tif 000014
2019500407.tif 000015
等、及び最大
2019500407.tif 000016
【００３５】
一実施形態において、アミノチオール複合体の分子量は、１００，０００ダルトン以下である。アミノチオール複合体の分子量は、約１００，０００ダルトン、２０，０００ダルトン、１０，０００ダルトン、５，０００ダルトン、３，０００ダルトン、２，０００ダルトン、または１，０００ダルトンでもよい。一実施形態において、アミノチオール複合体の分子量は、約１０，０００ダルトンである。特定の実施形態において、アミノチオール複合体の分子量は、約９，０００〜約１１，０００ダルトンである。特定の実施形態において、アミノチオール複合体の分子量は、約９，０００〜約１１，０００ダルトンである。
【００３６】
本発明によれば
2019500407.tif 000017
はリンカー基であり、リンカー基は、ポリマー、ポリマーの一部、ポリマーのアーム、コポリマーのアーム、またはデンドリマーの分枝、原子または分子である。特定の実施形態において、ポリマーの一部とはポリマーの繰り返し単位を指す。
【００３７】
リンカーは、１００，０００ダルトン以下、２０，０００ダルトン以下、１０，０００ダルトン以下、５，０００ダルトン以下、３，０００ダルトン以下、２，０００ダルトン以下、１，０００ダルトン以下、５００ダルトン以下、４００ダルトン以下、または２００ダルトン以下の分子量を有する部分でもよい。リンカーは、２００ダルトン〜１００，０００ダルトン、２００ダルトン〜２０，０００ダルトン、２００ダルトン〜１０，０００ダルトン、２００ダルトン〜５，０００ダルトン、２００ダルトン〜３，０００ダルトン、２００ダルトン〜２，０００ダルトン、２００ダルトン〜１，０００ダルトン、２００ダルトン〜５００ダルトン、または２００ダルトン〜４００ダルトンの分子量を有する部分でもよい。リンカーは、４００ダルトン〜１００，０００ダルトン、４００ダルトン〜２０，０００ダルトン、４００ダルトン〜１０，０００ダルトン、４００ダルトン〜５，０００ダルトン、４００ダルトン〜３，０００ダルトン、４００ダルトン〜２，０００ダルトン、４００ダルトン〜１，０００ダルトン、または４００ダルトン〜５００ダルトンの分子量を有する部分でもよい。リンカーは、５００ダルトン〜１００，０００ダルトン、５００ダルトン〜２０，０００ダルトン、５００ダルトン〜１０，０００ダルトン、５００ダルトン〜５，０００ダルトン、５００ダルトン〜３，０００ダルトン、５００ダルトン〜２，０００ダルトン、または５００ダルトン〜１，０００ダルトンの分子量を有する部分でもよい。リンカーは、１，０００ダルトン〜１００，０００ダルトン、１，０００ダルトン〜２０，０００ダルトン、１，０００ダルトン〜１０，０００ダルトン、１，０００ダルトン〜５，０００ダルトン、１，０００ダルトン〜３，０００ダルトン、または１，０００ダルトン〜２，０００ダルトンの分子量を有する部分でもよい。リンカーは、２，０００ダルトン〜１００，０００ダルトン、２，０００ダルトン〜２０，０００ダルトン、２，０００ダルトン〜１０，０００ダルトン、２，０００ダルトン〜５，０００ダルトン、または２，０００ダルトン〜３，０００ダルトンの分子量を有する部分でもよい。リンカーは、３，０００ダルトン〜１００，０００ダルトン、３，０００ダルトン〜２０，０００ダルトン、３，０００ダルトン〜１０，０００ダルトン、または３，０００ダルトン〜５，０００ダルトンの分子量を有する部分でもよい。リンカーは、５，０００ダルトン〜１００，０００ダルトン、５，０００ダルトン〜２０，０００ダルトン、または５，０００ダルトン〜１０，０００ダルトンの分子量を有する部分でもよい。リンカーは、１０，０００ダルトン〜１００，０００ダルトン、１０，０００ダルトン〜２０，０００ダルトンの分子量を有する部分でもよい。リンカーは、２０，０００ダルトン〜１００，０００ダルトンの分子量を有する部分でもよい。リンカーは、約１００，０００ダルトン、２０，０００ダルトン、１０，０００ダルトン、５，０００ダルトン、３，０００ダルトン、２，０００ダルトン、１，０００ダルトン、５００ダルトン、４００ダルトンまたは２００ダルトンの分子量を有する部分でもよい。
【００３８】
本明細書に記載されるようにポリマーは、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、分枝状ＰＥＧ、ポリシアル酸（ＰＳＡ）、多糖類、プルラン、キトサン、ヒアルロン酸、コンドロイチン硫酸、デルマタン硫酸、デンプン、デキストラン、カルボキシメチル−デキストラン、ポリアルキレンオキシド（ＰＡＯ）、ポリアルキレンオキシドのコポリマー、ポリオキサマー（例えば、ＰＬＵＲＯＮＩＣ）、ポリアルキレングリコール（ＰＡＧ）、ポリプロピレングリコール（ＰＰＧ）、ポリオキサゾリン、ポリアクリロイルモルホリン、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、ポリカルボン酸塩、ポリビニルピロリドン、ポリホスファゼン、ポリエチレン−コ−マレイン酸無水物、ポリスチレン−コ−マレイン酸無水物、ポリ（１−ヒドロキシメチルエチレンヒドロキシメチルホルム）（ＰＨＦ）、及び２−メタクリロイルオキシ−２’−エチルトリメチルアンモニウムリン酸塩（ＭＰＣ）、スペルミンポリマー（Ｚｈａｎｇ  ａｎｄ  Ｖｉｎｏｇｒａｄｏｖ，“Ｓｈｏｒｔ  ｂｉｏｄｅｇｒａｄａｂｌｅ  ｐｏｌｙａｍｉｎｅ  ｆｏｒ  ｇｅｎｅ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ａｎｄ  ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｂｒａｉｎ  ｃａｐｉｌｌａｒｙ  ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  ｃｅｌｌｓ”，Ｊ  Ｃｏｎｔｒｏｌ  Ｒｅｌｅａｓｅ  １４３：３５９−３６６（２０１０）。それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）ならびに他のポリマーを含む。
【００３９】
いくつかの実施形態で、リンカーは、ポリエチレングリコール（酸化ポリエチレン）、チオール末端ポリエチレングリコール（酸化ポリエチレン）、葉酸誘導体、葉酸誘導体とＰＥＧの複合体、スペルミン、及びスペルミンポリマーからなる群から選択される。
【００４０】
いくつかの実施形態で、リンカーは、ポリエチレングリコール（酸化ポリエチレン）またはポリエチレングリコール（酸化ポリエチレン）誘導体である（例えば、図４を参照）。一実施形態において、リンカーは、ポリエチレングリコール（酸化ポリエチレン）であり、「ｎ」は１以上の任意の整数であり得る。化学式は、Ｈ−（Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２）ｎ−ＯＨであり、「ｎ」は、ここで提示した適用にとって最も望ましい１〜２５００の範囲の任意の整数であり得る。ＰＥＧは、末端基を含んでもよく、例えばＰＥＧは、水酸基、チオール基、メトキシ基もしくは他のアルコキシル基、メチル基もしくは他のアルキル基、アリール基、カルボン酸、アミン、アミド、アセチル基、グアニジノ基またはイミダゾールで末端処理されてもよい。他の意図される末端基は、アジド、アルキン、マレイミド、アルデヒド、ヒドラジド、ヒドロキシルアミンまたはアルコキシアミン部分を含む。
【００４１】
好適なリンカーは、チオール末端ポリエチレングリコール（酸化ポリエチレン）でもよく、「ｎ」は１〜２５００の任意の整数であり得る（図５Ａ〜図５Ｂに示す代表的な構造を参照）。代表的な好適なポリ（エチレングリコール）ジチオールは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる、Ｓｉｇｍａａｌｄｒｉｃｈ．ｃｏｍでホモ二官能性ＰＥＧが記載されている。図４は、ポリエチレングリコール（酸化ポリエチレン）の一般的な構造を示し、図５Ａ〜図５Ｂは、チオール末端ポリエチレングリコール（酸化ポリエチレン）の一般的な構造を示し、「ｎ」は１〜２５００の任意の整数であり得る。
【００４２】
上述したとおり、リンカー及び／またはコアは、ＰＥＧの有無に関わらず、葉酸酸誘導体の複合体でもよい。葉酸塩（葉酸）の一般的な構造を図９に示す。末端カルボキシル基を適切な部分（例えば、ＳＨ）に変えて、それからアミノチオールまたはＰＥＧの追加をそれぞれ実施することによって、葉酸とアミノチオールまたはＰＥＧの複合体を合成できる（Ｃｈｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｆｏｌａｔｅ−ｍｅｄｉａｔｅｄ  ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  ｄｒｕｇ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｉｎｃｒｅａｓｅｓ  ｔｈｅ  ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  ｅｆｆｉｃａｃｙ  ｏｆ  ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｕｌａｔｅ  ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａｒｓｅｎｉｃ  ｔｒｉｏｘｉｄｅ，”Ｍｏｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒ  ８（７）：１９５５−６３（２００９）、Ｋａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｆｏｌｉｃ  ａｃｉｄ−ｔｅｔｈｅｒｅｄ  Ｐｅｐ−１  ｐｅｐｔｉｄｅ−ｃｏｎｊｕｇａｔｅｄ  ｌｉｐｏｓｏｍａｌ  ｎａｎｏｃａｒｒｉｅｒ  ｆｏｒ  ｅｎｈａｎｃｅｄ  ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  ｄｒｕｇ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｔｏ  ｃａｎｃｅｒ  ｃｅｌｌｓ：ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎａｌ  ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ｃｅｌｌｕｌａｒ  ｕｐｔａｋｅ  ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ，”Ｉｎｔ  Ｊ  Ｎａｎｏｍｅｄ  ８：１１５５−６５（２０１３）。これらはそれぞれ、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。葉酸複合体は、それが細胞の表面上の葉酸受容体と相互作用して、細胞サイトゾル内へのプロドラッグの能動輸送を惹起させることができるという利点を提供する。
【００４３】
上述したとおり、リンカー及び／またはコアは、スペルミンまたはスペルミンのポリマーでもよい。末端ＮＨ（２）基を適切な部分（例えば、ＳＨ）に変えて、それからアミノチオールまたはＰＥＧの添加をそれぞれ実施することによって、スペルミンポリマーとアミノチオールまたはＰＥＧの複合体を合成できる。スペルミンポリマーの一般的な構造を図１０に示す。化学式はＮＨ２Ｃ２Ｈ４（ＮＣ３Ｈ６ＮＨＣ４Ｈ８）ｎ−ＮＨＣ３Ｈ６ＮＨ２であり、「ｎ」は１以上の任意の整数であり得る。スペルミンポリマー複合体は、それが細胞の表面上のポリアミン受容体と相互作用して、細胞サイトゾル内へのプロドラッグの能動輸送を惹起させることができるという利点を提供する。
【００４４】
特定の実施形態において、リンカーは、チオール末端ポリエチレングリコールを形成するためにコアに結合することができる（図６及び図８を参照）。特定の実施形態において、リンカーは、マルチアーム型チオール末端ポリエチレングリコールの１つのアームを形成するためにコアに結合することができる（図６及び図８を参照）。特定の実施形態において、アミノチオール複合体は、１〜８つのアームを有するチオール末端星型ポリエチレングリコールである。例えばリンカーは、チオール末端２アームＰＥＧ、３アームＰＥＧ、４アームＰＥＧ、６アームＰＥＧ及び８アームＰＥＧを形成するためにコアに結合することができる。例えば、その全体が参照により本明細書に組み込まれる、Ｓｉｇｍａａｌｄｒｉｃｈ．ｃｏｍで好適なＰＥＧポリマー及びデンドリマー、ＰＥＧデンドリマー及びマルチアーム型ＰＥＧを参照されたい。
【００４５】
アミノチオールへのジスルフィド結合を介して結合したチオール末端ポリエチレングリコールの代表的な構造を図７に示す。図中、「ｎ１」は１〜２５００の任意の整数であり得、「ｎ２」は、望ましくない立体障害または干渉を誘発することのなく、コア周辺に収容されることができる、任意の数のアームであり得る。一実施形態において、「ｎ１」は１〜２５００の任意の整数であり得、「ｎ２」は１〜８の任意の整数であり得る。特定の実施形態において、アミノチオールへのジスルフィド結合を介して結合したチオール末端ポリエチレングリコールの代表的な構造を図７に示す。図中、「ｎ１」は１〜４の任意の整数であり得、「ｎ２」は１〜４の任意の整数であり得る。例えば、その全体が参照により本明細書に組み込まれる、Ｓｉｇｍａａｌｄｒｉｃｈ．ｃｏｍの好適なＰＥＧポリマー及びデンドリマー、ＰＥＧデンドリマー及びマルチアーム型ＰＥＧを参照されたい。一実施形態において、アミノチオール複合体は、アミノチオールへのジスルフィド結合を介した４アーム型チオール末端星型ポリエチレングリコールである。この実施形態では、アミノチオールへのジスルフィド結合を介した４アーム型チオール末端星型ポリエチレングリコールは、図７に示した構造を有しており、「ｎ２」は４である。
【００４６】
本明細書に記載されるように、本明細書に記載のプロドラッグは、アミノチオール複合体である。式Ｉのアミノチオール複合体のアミノチオール部分は、以下の式を有し、
2019500407.tif 000018
式中、各Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は、水素及びＣ１−６アルキルから独立して選択され、ｎは１〜１０の整数である。本明細書に記載のアミノチオール複合体を合成するために使用され得るアミノチオール（及びその類似体）は、図３Ａ及び図３Ｂに示す代表的な一般構造のものを含む。例えばアミノチオールの一般構造は、
2019500407.tif 000019
であり、
式中、Ｘは、−ＰＯ３Ｈ２、水素、スルフヒドリル、硫黄、アセチル、イソブチリル、ピバロイル及びベンゾイルからなる群から選択され、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３のそれぞれは、水素及びＣ１−６アルキルから独立して選択され、ｎは１〜１０の整数である。更に、本明細書に記載のアミノチオール複合体を合成するために使用され得る図３Ａ〜図３Ｂに示す一般的なアミノチオールの活性部分の２つの代表的な構造は、Ｘが水素である。特定の実施形態において、アミノチオールは、アミホスチン（ＮＨ２（ＣＨ２）３ＮＨ（ＣＨ２）２ＳＨ）またはホスホエノール（ＣＨ３ＮＨ（ＣＨ２）３ＮＨ（ＣＨ２）２ＳＨ）の活性部分である。
【００４７】
本発明の別の態様はアミノチオール複合体に関し、
2019500407.tif 000020
は、ポリマーコア、デンドリマーコア、内部樹枝状構造（すなわち、分枝）を有するデンドリマーコア、治療物質または治療物質の誘導体である。
【００４８】
一実施形態において、コアの分子量は１００，０００ダルトン以下である。
【００４９】
デンドリマーは、治療用物質送達用のビヒクルとして、またはインビボ撮像の担体として広範囲に調査された（Ｌｅｅ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｄｅｓｉｇｎｉｎｇ  Ｄｅｎｄｒｉｍｅｒｓ  ｆｏｒ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，”Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．２３（１２）：１５１７−２６（２００５）、Ｅｓｆａｎｄ  ＆  Ｔｏｍａｌｉａ，“Ｐｏｌｙ（ａｍｉｄｏａｍｉｎｅ）（ＰＡＭＡＭ）Ｄｅｎｄｒｉｍｅｒｓ：Ｆｒｏｍ  Ｂｉｏｍｉｍｉｃｒｙ  ｔｏ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，”Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ．Ｔｏｄａｙ  ６（８）：４２７−３６（２００１）、Ｓａｄｌｅｒ  ＆  Ｔａｍ，“Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｄｅｎｄｒｉｍｅｒｓ：Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，”Ｒｅｖ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．９０：１９５−２２９（２００２）、Ｃｌｏｎｉｎｇｅｒ，“Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  Ｄｅｎｄｒｉｍｅｒｓ，”Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．６：７４２−４８（２００２）、Ｎｉｅｄｅｒｈａｆｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｄｅｎｄｒｉｍｅｒｓ，”Ｊ．Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｃｉ．１１：７５７−８８（２００５）、Ｔｅｋａｄｅ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｄｅｎｄｒｉｍｅｒｓ  ｉｎ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ：Ａｎ  Ｅｘｐａｎｄｉｎｇ  Ｈｏｒｉｚｏｎ，”Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．１０９（１）：４９−８７（２００９）。これらはそれぞれ、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。デンドリマーは、明確な３次元構造を有する高度に分枝した高分子である（Ｇｅｏｒｇｅ  Ｒ．Ｎｅｗｋｏｍｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｄｅｎｄｒｉｍｅｒｓ  ａｎｄ  Ｄｅｎｄｒｏｎｓ：Ｃｏｎｃｅｐｔｓ，Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ（２００１）。それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）。デンドリマーの魅力は、その固有の完全に分枝した構造にあり、それは同じ組成物及び分子量の対応する直鎖ポリマーとは異なる特性を付与する（Ｌｅｅ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｄｅｓｉｇｎｉｎｇ  Ｄｅｎｄｒｉｍｅｒｓ  ｆｏｒ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，”Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．２３（１２）：１５１７−２６（２００５）。それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）。デンドリマーの生成が増加するにつれて、それらは終端の数を指数関数的に増加させ、一方で半径は線形にのみ増加し、したがって終端は、構造全体に球状の形状を付与する、より高密度に密集するようになり、終端は中核から外側へ放射状に広がる。様々な種類のアミドデンドリマーコアは、当該技術分野において説明されてきた。好適なコアとしては、Ｔａｒａｌｌｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｔ’ｌ  Ｊ．Ｎａｎｏｍｅｄ．８：５２１−３４（２０１３）、Ｃａｒｂｅｒｒｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｈｅｍ．Ｅｕｒ．Ｊ．１８１３６７８−８５（２０１２）、Ｊｕｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ  ４４：９０７５−８３（２０１１）、Ｏｒｎｅｌａｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１３２：３９２３−３１（２０１０）、Ｏｒｎｅｌａｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍｕｎ．５７１０−１２（２００９）、Ｇ���ｙａｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｄｖ．Ｓｙｎｔｈ．Ｃａｔａｌ．３５０：１８１６−２２（２００８）、及びＹｏｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｏｒｇ．Ｌｅｔｔ．９：２０５１−５４（２００７）に記載されるものが挙げられ、これらはそれぞれその全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【００５０】
任意の種類のデンドリマーの使用が意図されており、それは、ポリ（アミドアミン）（ＰＡＭＡＭ）デンドリマー（例えば、高密度星型ポリマー及びスターバーストポリマー）、ポリ（アミドアミン−有機ケイ素）（ＰＡＭＡＭＯＳ）デンドリマー、（ポリ（プロピレンイミン））（ＰＰＩ）デンドリマー、テクトデンドリマー、マルチリンガルデンドリマー、キラルデンドリマー、ハイブリッドデンドリマー／直鎖ポリマー、両親媒性デンドリマー、ミセルデンドリマー及びフレシェット型デンドリマーを含むが、これらに限定されない。
【００５１】
本発明の別の態様は、請求項１に記載のアミノチオール複合体に関し、
式中、
2019500407.tif 000021
は、
2019500407.tif 000022
、葉酸、葉酸誘導体、スペルミンポリマー、及びスペルミンポリマー誘導体からなる群から選択され、ａは０〜２５００であり、ｂは０〜２５００であり、ｃは０〜２５００であり、ｄは０〜２５００であり、Ｒは、水素、Ｃ１−６アルキル及びハロゲンから独立して選択され、Ｘは、原子、分子または高分子であり、Ｙは、多価基、分子または原子である。
【００５２】
本発明の更に別の態様はアミノチオール複合体に関し、ここで、Ｘは、Ｏ、Ｓ、Ｃ（Ｒ４）２、またはＮＲ４であり、Ｒ４は、水素またはＣ１−６アルキルである。
【００５３】
本発明の更なる態様は、以下
2019500407.tif 000023
の構造を有するアミノチオール複合体に関し、
式中、ｋは１〜２５００である。
【００５４】
本発明の別の態様は、式Ｉに従ったアミノチオール複合体に関し、ｍは２〜１００，０００である。
【００５５】
一実施形態において、アミノチオール複合体は、以下
2019500407.tif 000024
の構造を有する。
【００５６】
特定の実施形態において、本発明によるアミノチオール複合体は、以下の式（Ｖ）の化合物でも、式（ＶＩ）の化合物でもない：
2019500407.tif 000025
式中、Ｘは、−ＰＯ３Ｈ２、水素、アセチル、イソブチリル、ピバロイル及びベンゾイルからなる群から選択され、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３のそれぞれは、独立して水素及びＣ１−６アルキルからなる群から選択され、ｎは１〜１０の値を有する整数である。一実施形態において、本発明によるアミノチオール複合体はアミホスチンではない。
【００５７】
特定の実施形態において、本発明によるアミノチオール複合体は、式中、Ｘが、ペプチド、硫黄含有アミノ酸、グルタチオン、硫黄含有酸化防止剤、酸素含有酸化防止剤、光可逆的チオールタグ、及び（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル−２−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ］−３−（トリチルスルファニル）プロパノエイトからなる群から選択される細胞内で切断可能な保護基である、式（Ｖ）の化合物でも式（ＶＩ）の化合物でもない。
【００５８】
特定の実施形態において、本発明によるアミノチオール複合体は、式中、Ｘが、アミノチオールのホモ二量体、アミノチオール及び異なるアミノチオールのヘテロ二量体ならびにシステアミンからなる群から選択されるアミノチオールのチオール保護型である、式（Ｖ）の化合物でも式（ＶＩ）の化合物でもない。
【００５９】
治療効果が所望される、アミノチオール、その代謝物及び／またはその類似体の細胞への細胞内薬物送達システム（複数可）と組み合わせた改良されたスルフヒドリル保護基は、３つの条件を満たさなければならない。第１に、保護基は、薬物送達の間、アミノチオールの偶然的反応を防ぐ能力を有しなければならない。第２は、保護基は、標的細胞で、特に細胞内環境の範囲内で及び／またはリソソーム内で利用可能なシステムまたは方法によって除去可能でなければならない。第３に、保護基は、動物及びヒト細胞に非毒性でなければならない。満たされ得る他の望ましい条件は、（ｉ）薬物循環時間を増加させること、（ｉｉ）アミノチオール単独には適用できない機序を介して、薬を細胞吸収させやすくすること、（ｉｉｉ）細胞受容体輸送系（葉酸及びポリアミン輸送系は２つの例である）によって、薬物を細胞内取り込みさせやすくすること、ならびに（ｉｉｉ）薬が循環及び／またはヒトもしくは動物の身体から除去される機序を変えること、を含む。
【００６０】
アミノチオール及びその類似体は、速やかにタンパク質及び核酸と反応し、したがって、活性部分は、反応度が薬物の治療有効性を得ることが望ましい部位で、またはその近くで放出されることを必要とする。これらの薬物の治療有効性は、細胞外とは対照的に細胞内で発生することが示されたので、細胞内送達は最適な送達部位を表す。細胞内送達は、非限定的に細胞外標的を含む治療的有効性と関連しない標的との反応とは対照的に、標的細胞要素との活性剤代謝物の反応性の機会を最適化する。
【００６１】
薬物動態及び薬力学を対応するホスホロチオエートのものから変えることを目的とした、別の分子に対する治療的アミノチオールの結合は、ストレスを受けたもしくは罹患した細胞へのアミノチオールの送達及びそこでの活性化を変える、または強化するために使用することができる方法である。薬物の薬物動態及び薬力学を変更かつ改善するように設計されたＰＥＧまたは同等の生体適合材料を完全にまたは部分的に構成し、かつアミノチオールの細胞の取り込み及び細胞内送達もしやすいデンドリマーを含むポリマーまたはコポリマーは、これらの目的を達成するために使用することができる。本細書に記載の複合体に結合するアミノチオール部分からなる製剤を使用して、これらの課題を解決するための方法を以下に示す。このような製剤は、最適な細胞質内薬物送達及び薬物効果を得るために、単独で使用することができる、または追加の方法と組み合わせることができる。
【００６２】
細胞内送達方法及び組成物は、他の薬物分子の細胞内送達を達成するために他で開発されてきた。それらの方法及び組成物のいくつか（例えば、本明細書で明確に記載されているまたは参照されるもの）は、アミノチオールの細胞内配送を達成するために使用することができる。しかし、以前は、アミノチオールに関連してこのような組成物及び方法を使用するつもりでなかったと考えられている。したがって、有効医薬成分のスルフヒドリル基を保護するための他で記載されている組成物及び方法は、それらの組成物及び方法が本開示に明確に記載されているものに含まれるものでない場合でも、アミノチオール化合物の細胞内送達を促進にするために使用することができる。
【００６３】
ホスホロチオエートとして知られている薬物の種類を代表するアミホスチンは、治療上有効なアミノチオールＷＲ１０６５、及びアミノチオールのスルフヒドリル基への結合を介してアミノチオールに結合したリン酸基からなる不活性プロドラッグである。このプロドラッグは、すべてのヒト及び他の動物の正常な細胞（すなわちストレスを受けていない、または疾患のない細胞）とは限らないが多くの細胞への送達に好適な、またはそれによって活性化される特定の薬物動態及び薬力学特徴を有する。しかし、これらの特徴は、ほとんどのストレスを受けたまたは疾患の細胞へのプロドラッグの送達、及びそれによる活性化に適していない。したがって、アミノチオールの治療効果を実現するために、ストレス及び／または疾患の生理適条件下でならびにストレスを受けているまたは疾患の細胞に、アミノチオールを含有してならびにそれを放出できる新規なプロドラッグが必要である。
【００６４】
以下の説明で、「アミホスチン」及び「ＷＲ−１０６５」（アミホスチンの活性部分）という用語は、すべてのホスホロチオエート、アミノチオール、その類似体及び親薬物（プロドラッグ）の活性代謝物の代表例として使用される。
【００６５】
アミホスチンは、その活性部分ＷＲ−１０６５にインビボ代謝されるホスホロチオエートである（Ｇｒｄｉｎａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｔｈｉｏｌ  ａｎｄ  Ｄｉｓｕｌｆｉｄｅ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｒａｄｉａｔｉｏｎ  Ｐｒｏｔｅｃｔｏｒ  ａｎｄ  Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  Ｃｈｅｍｏｐｒｅｖｅｎｔｉｖｅ  Ａｇｅｎｔ  ＷＲ−２７２１  ａｒｅ  Ｌｉｎｋｅｄ  ｔｏ  Ｂｏｔｈ  ｉｔｓ  Ａｎｔｉ−Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ  ａｎｄ  Ａｎｔｉ−Ｍｕｔａｇｅｎｉｃ  Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ｏｆ  Ａｃｔｉｏｎ，”Ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ  １６：７６７−７７４（１９９５）、Ｐｕｒｄｉｅ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｃｕｌｔｕｒｅｄ  Ｍａｍｍａｌｉａｎ  Ｃｅｌｌｓ  ｗｉｔｈ  ＷＲ−２７２１  ａｎｄ  ｉｔｓ  Ｔｈｉｏｌ，ＷＲ−１０６５：Ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｆｏｒ  Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ｏｆ  Ｒａｄｉｏｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ，”Ｉｎｔ．Ｊ．Ｒａｄｉａｔ．Ｂｉｏｌ．Ｒｅｌａｔ．Ｓｔｕｄ．Ｐｈｙｓ．Ｃｈｅｍ．Ｍｅｄ．４３：５１７−５２７（１９８３）、Ｓｈａｗ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃ  Ｐｒｏｆｉｌｅ  ｏｆ  Ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ，”Ｓｅｍｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．２３：１８−２２（１９９６）。これらはそれぞれ、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。ＷＲ１０６５のスルフヒドリル部分は、その治療効果に関与しており（Ｇｒｄｉｎａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ：Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ｏｆ  Ａｃｔｉｏｎ  Ｕｎｄｅｒｌｙｉｎｇ  Ｃｙｔｏｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｃｈｅｍｏｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ，”Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂｏｌ．Ｄｒｕｇ  Ｉｎｔｅｒａｃｔ．１６：２３７−２７９（２０００）、Ｇｒｄｉｎａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ  Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｎｕｃｌｅａｒ  Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ  Ｆａｃｔｏｒ  Ｋａｐｐａｂ，Ｇｅｎｅ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ，ａｎｄ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｂｙ  Ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ’ｓ  Ｆｒｅｅ  Ｔｈｉｏｌ  ｉｎ  Ｈｕｍａｎ  Ｍｉｃｒｏｖａｓｃｕｌａｒ  Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  ａｎｄ  Ｇｌｉｏｍａ  Ｃｅｌｌｓ，”Ｓｅｍｉｎ．Ｒａｄｉａｔ．Ｏｎｃｏｌ．１２：１０３−１１１（２００２）、Ｇｒｄｉｎａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓ  ｂｅｔｗｅｅｎ  Ｃｙｔｏｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｍｕｔａｔｉｏｎ  Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ  ｂｙ  ＷＲ−１０６５，”Ｍｉｌ  Ｍｅｄ  １６７：５１−５３（２００２）、Ｇｒｄｉｎａ  ｅｔ  ａｌ．“Ｒａｄｉｏｐｒｏｔｅｃｔｏｒｓ：Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｓｔａｔｕｓ  ａｎｄ  Ｎｅｗ  Ｄｉｒｅｃｔｉｏｎｓ，”Ｒａｄｉａｔ．Ｒｅｓ．１６３：７０４−７０５（２００２）。これらはそれぞれ、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）、したがって、この部分は、薬物送達の間及び薬物が細胞内環境へ取り込まれるまで、それぞれ偶発的なものからの保護を必要としており、アミホスチンの場合のこの保護はリン酸基によって提供される。薬物が細胞形質膜に近接してもたらされる及び／または薬物が原形質膜に取り込まれるとき、リン酸基は除去される。脱リン酸化工程は、ヒト及び動物のすべてとは限らないが多くの細胞により産生される���素、膜結合型アルカリホスファターゼによって実行される。リン酸基の除去後、活性部分は細胞内環境に組み込まれ、そこから、更に細胞内小器官にまたは他の細胞に分布されることができ、そこで治療有効性は誘発される。アミノチオールのすべてではないが多くの形態の細胞取り込みは、受動拡散によって生じるが、いくつかの薬物形態は、ポリアミン輸送系による能動輸送によって取り込まれ、他の薬物形態の能動輸送は一部の薬剤濃度だけで生じる場合がある（Ｇｒｄｉｎａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ  Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｎｕｃｌｅａｒ  Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ  Ｆａｃｔｏｒ  Ｋａｐｐａｂ，Ｇｅｎｅ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ，ａｎｄ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  Ｂｙ  Ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ’ｓ  Ｆｒｅｅ  Ｔｈｉｏｌ  ｉｎ  Ｈｕｍａｎ  Ｍｉｃｒｏｖａｓｃｕｌａｒ  Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  ａｎｄ  Ｇｌｉｏｍａ  Ｃｅｌｌｓ，”Ｓｅｍｉｎ．Ｒａｄｉａｔ．Ｏｎｃｏｌ．１２：１０３−１１１（２００２）、Ｇｒｄｉｎａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓ  ｂｅｔｗｅｅｎ  Ｃｙｔｏｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｍｕｔａｔｉｏｎ  Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ  ｂｙ  ＷＲ−１０６５，”Ｍｉｌ  Ｍｅｄ  １６７：５１−５３（２００２）、Ｇｒｄｉｎａ  ｅｔ  ａｌ．“Ｒａｄｉｏｐｒｏｔｅｃｔｏｒｓ：Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｓｔａｔｕｓ  ａｎｄ  Ｎｅｗ  Ｄｉｒｅｃｔｉｏｎｓ，”Ｒａｄｉａｔ．Ｒｅｓ．１６３：７０４−７０５（２００２）。これらはそれぞれ、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。薬物を取り込むことができない及び／または薬物を代謝できない細胞において、活性型は、細胞及び組織分布工程を介して、これらの細胞に送達されることができる。ヒトまたは動物にホスホロチオエートを投与するための既知の方法は、経口送達、腹腔内注射、皮下注射、静脈注射、吸入、ナノ粒子への取り込み（Ｐａｍｕｊｕｌａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｏｒａｌ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｏｆ  Ｓｐｒａｙ  Ｄｒｉｅｄ  ＰＬＧＡ／Ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ  Ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ，”Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．５６：１１１９−１１２５（２００４）、Ｐａｍｕｊｕｌａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｉｎ  Ｖｉｔｒｏ  Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ  Ｂｉｏｄｅｇｒａｄａｂｌｅ  Ｍｉｃｒｏｃａｐｓｕｌｅｓ，”Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｉｏｐｈａｒｍ．５７：２１３−２１８（２００４）、Ｐａｍｕｊｕｌａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｒａｄｉｏｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ  ｉｎ  Ｍｉｃｅ  Ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ  Ｏｒａｌ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｏｆ  Ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ  Ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ，”Ｉｎｔ．Ｊ．Ｒａｄｉａｔ．Ｂｉｏｌ．８１：２５１−２５７（２００５）。これらはそれぞれ、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）、または他の薬物送達システムを使用すること（Ｇｕ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｔａｉｌｏｒｉｎｇ  Ｎａｎｏｃａｒｒｉｅｒｓ  ｆｏｒ  Ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ，”Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｒｅｖ．４０：３６３８−３６５５（２０１１）、Ｈｏｆｆｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｔｈｅ  Ｏｒｉｇｉｎｓ  ａｎｄ  Ｅｖｏｌｕｔ���ｏｎ  ｏｆ“Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ”Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，”Ｊ．ｏｆ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ  １３２：１５３−１６３（２００８）、Ｉｍｂｕｌｕｚｑｕｅｔａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｎｏｖｅｌ  Ｂｉｏａｃｔｉｖｅ  Ｈｙｄｒｏｐｈｏｂｉｃ  Ｇｅｎｔａｍｉｃｉｎ  Ｃａｒｒｉｅｒｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｂａｃｔｅｒｉａｌ  Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ，”Ａｃｔａ．Ｂｉｏｍａｔｅｒ．７：１５９９−１６０８（２０１１）、Ｌｅｕｃｕｔａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｓｙｓｔｅｍｉｃ  ａｎｄ  Ｂｉｏｐｈａｓｅ  Ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ  ａｎｄ  Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ  ｏｆ  Ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｕｌａｔｅ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，”Ｃｕｒｒ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌ．１０：２０８−２４０（２０１３）、Ｐａｔｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｒｅｃｅｎｔ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｓ  ｉｎ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  ａｎｄ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｐａｒｅｎｔｅｒａｌ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ，”Ｔｈｅｒ．Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ５：３３７−３６５（２０１４）、Ｐａｔｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｐａｒｔｉｃｌｅ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  ｔｏ  Ｅｎｈａｎｃｅ  ｏｒ  Ｌｅｓｓｅｎ  Ｐａｒｔｉｃｌｅ  Ｕｐｔａｋｅ  ｂｙ  Ａｌｖｅｏｌａｒ  Ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ  ａｎｄ  ｔｏ  Ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ  ｔｈｅ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ｏｕｔｃｏｍｅ，”Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｉｏｐｈａｒｍ．８９：１６３−１７４（２０１５）、Ｓａｋａｇａｍｉ，“Ｓｙｓｔｅｍｉｃ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｏｆ  Ｂｉｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ  ｔｈｒｏｕｇｈ  ｔｈｅ  Ｌｕｎｇ：Ｏｐｐｏｒｔｕｎｉｔｉｅｓ  ａｎｄ  Ｃｈａｌｌｅｎｇｅｓ  ｆｏｒ  Ｉｍｐｒｏｖｅｄ  Ｌｕｎｇ  Ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ，”Ｔｈｅｒ．Ｄｅｌ．４：１５１１−１５２５（２０１３）、Ｔｏｒｃｈｉｌｉｎ，“Ｒｅｃｅｎｔ  Ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ  ｔｏ  Ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｏｆ  Ｄｒｕｇｓ  ａｎｄ  ＤＮＡ  ａｎｄ  Ｏｒｇａｎｅｌｌｅ  Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ，”Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ｅｎｇ．８：３４３−３７５（２００６）。これらはそれぞれ、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）を含むが、これらに限定されない。
【００６６】
アミホスチンは、細胞膜結合型アルカリホスファターゼ（リン酸基を除去することによって、細胞内取り込みのためにＷＲ１０６５にその遊離チオールを放出させる）によって代謝されるまで不活性である（Ｃａｐｉｚｚｉ，“Ｔｈｅ  Ｐｒｅｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｆｏｒ  Ｂｒｏａｄ−Ｓｐｅｃｔｒｕｍ  Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  Ｃｙｔｏｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｎｏｒｍａｌ  Ｔｉｓｓｕｅｓ  ｆｒｏｍ  Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ  Ｔｈｅｒａｐｉｅｓ  ｂｙ  Ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ（Ｅｔｈｙｏｌ），”Ｅｕｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ  ３２Ａ：Ｓｕｐｐｌ  ４：Ｓ５−１６（１９９６）、Ｓｈａｗ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃ  Ｐｒｏｆｉｌｅ  ｏｆ  Ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ，”Ｓｅｍｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．２３：１８−２２（１９９６）、Ｙｕ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｔｈｅ  Ｒａｄｉｏｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ａｇｅｎｔ，Ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ，Ｓｕｐｐｒｅｓｓｅｓ  ｔｈｅ  Ｒｅａｃｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  Ｉｎｔｒａｌｙｓｏｓｏｍａｌ  Ｉｒｏｎ，”Ｒｅｄｏｘ  Ｒｅｐｏｒｔ：Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ  ｉｎ  Ｆｒｅｅ  Ｒａｄｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ８：３４７−３５５（２００３）。これらはそれぞれ、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。病原体感染細胞、腫瘍細胞及び転移細胞の微小環境の細胞を含む多くの罹患細胞が、膜結合型酵素をほとんど〜全く生成しないが、細胞外環境または血液循環内に放出される、大量の種々のアルカリホスファターゼ同位酵素を生成できる、及び多くの場合それを生成するので、アミホスチンは、罹患したまたはストレスを受けた細胞でほとんど〜全く活性を有さず（Ｇｕｅｒｒｅｉｒｏ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｄｉｓｔｉｎｃｔ  Ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ａｌｋａｌｉｎｅ  Ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ  Ｉｓｏｅｎｚｙｍｅｓ  ｂｙ  １７ｂｅｔａ−Ｅｓｔｒａｄｉｏｌ  ａｎｄ  Ｘａｎｔｈｏｈｕｍｏｌ  ｉｎ  Ｂｒｅａｓｔ  Ｃａｎｃｅｒ  ＭＣＦ−７  Ｃｅｌｌｓ”，Ｃｌｉｎ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．４０：２６８−２７３（２００７）、Ｋａｔｏ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  Ｈｙｐｅｒｏｓｍｏｌａｌｉｔｙ  ｏｎ  Ａｌｋａｌｉｎｅ  Ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ  ａｎｄ  Ｓｔｒｅｓｓ−Ｒｅｓｐｏｎｓｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  ２７  ｏｆ  ＭＣＦ−７  Ｂｒｅａｓｔ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｌｌｓ，”Ｂｒｅａｓｔ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ  Ｔｒｅａｔ．２３：２４１−２４９（１９９２）、Ｖａｎ  Ｈｏｏｆ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｉｎｔｅｒｐｒｅｔａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ  ｏｆ  Ａｌｋａｌｉｎｅ  Ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ  Ｉｓｏｅｎｚｙｍｅ  Ｐａｔｔｅｒｎｓ，”Ｃｒｉｔ．Ｒｅｖ．ｉｎ  Ｃｌｉｎ．Ｌａｂ．Ｓｃｉ．３１：１９７−２９３（１９９４）、Ｗａｌａｃｈ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ  Ａｌｋａｌｉｎｅ  Ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ，ＣＡ１５−３，ＣＡ１２５，ａｎｄ  ＣＥＡ  ｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｐａｔｉｅｎｔｓ，”Ｔｕｍｏｒｉ  ８４：３６０−３６３。これらはそれぞれ、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）、その結果、アミホスチンの生体内活性化は標的細胞から離れている。細胞膜結合アルカリホスファターゼは、すべてではないがいくつかの細胞型を発��する、ＧＰＩアンカータンパク質である（Ｍａｒｔｙ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  Ａｎｔｉ−Ａｌｋａｌｉｎｅ  Ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｏｎ  Ｂ  Ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ  Ｆｕｎｃｔｉｏｎ，”Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｌｅｔｔ．３８：８７−９５（１９９３）。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。ＧＰＩアンカー合成の欠陥は、ＧＰＩアンカー合成に必須の鍵遺伝子の突然変異またはエピジェネティックな変化から生じることがあり得、高い頻度の突然変異及びエピジェネティックな変化は癌で一般的であり、重要なＧＰＩアンカー合成遺伝子で生じることが報告されている（Ｄｏｂｏ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｄｅｆｉｎｉｎｇ  ＥＭＳ  ａｎｄ  ＥＮＵ  Ｄｏｓｅ−Ｒｅｓｐｏｎｓｅ  Ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓ  ｕｓｉｎｇ  ｔｈｅ  Ｐｉｇ−ａ  Ｍｕｔａｔｉｏｎ  Ａｓｓａｙ  ｉｎ  Ｒａｔｓ，”Ｍｕｔａｔ．Ｒｅｓ．７２５：１３−２１（２０１１）、Ｄｏｂｒｏｖｏｌｓｋｙ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｉｎ  Ｖｉｖｏ  Ｍｕｔａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｈｐｒｔ  ａｎｄ  Ｐｉｇ−ａ  Ｇｅｎｅｓ  ｏｆ  Ｒａｔ  Ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ，”Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１０４４：７９−９５（２０１３）。これらはそれぞれ、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。アルカリホスファターゼは、それが合成される粗面小胞体で、追加処理が生じ得るゴルジ体で、ゴルジ体由来小胞で、いくつかのリソソームで及び核膜周辺で、細胞内にも存在する（Ｔｏｋｕｍｉｔｓｕ  ｅｔ  ａｌ．，“Ａｌｋａｌｉｎｅ  Ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ  Ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｅｎｄｏｐｌａｓｍｉｃ  Ｒｅｔｉｃｕｌｕｍ  ａｎｄ  ｉｔｓ  Ｔｒａｎｓｐｏｒｔ  Ｔｈｒｏｕｇｈ  ｔｈｅ  Ｇｏｌｇｉ  Ａｐｐａｒａｔｕｓ  ｔｏ  ｔｈｅ  Ｐｌａｓｍａ  Ｍｅｍｂｒａｎｅ：Ｃｙｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｅｖｉｄｅｎｃｅ，”Ｊ．Ｈｉｓｔｏｃｈｅｍ．Ｃｙｔｏｃｈｅｍ．３１：６４７−６５５（１９８３）。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。その局在は、細胞周期の分裂期付近で生じる合成により（Ｔｏｋｕｍｉｔｓｕ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｉｍｍｕｎｏｃｙｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｉｎｔｒａｃｙｔｏｐｌａｓｍｉｃ  Ａｌｋａｌｉｎｅ  Ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ  ｉｎ  ＨｅＬａ  ＴＣＲＣ−１  Ｃｅｌｌｓ，”Ｊ．Ｈｉｓｔｏｃｈｅｍ．Ｃｙｔｏｃｈｅｍ．２９：１０８０−１０８７（１９８１）。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）、活性化されたＢリンパ球の細胞周期によって変化する（Ｓｏｕｖａｎｎａｖｏｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ａｎｄ  Ｖｉｓｕａｌｉｚａｔｉｏｎ  Ｄｕｒｉｎｇ  Ｃｅｌｌ  Ｃｙｃｌｅ  Ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  Ａｌｋａｌｉｎｅ  Ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ  ｉｎ  Ｂ  Ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ  ｆｒｏｍ  Ｃ３Ｈ／ＨｅＪ  Ｍｉｃｅ，”Ｊ．Ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ  Ｂｉｏｌ．５５：６２６−６３２（１９９４）。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。細胞形質膜結合型アルカリホスファターゼは、正常な微小管構成に依存して、細胞膜でのその正常な配向を達成し（Ｇ��ｌｂｅｒｔ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｍｉｃｒｏｔｕｂｕｌａｒ  Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｉｔｓ  Ｉｎｖｏｌｖｅｍｅｎｔ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｂｉｏｇｅｎｅｔｉｃ  Ｐａｔｈｗａｙｓ  ｏｆ  Ｐｌａｓｍａ  Ｍｅｍｂｒａｎｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｉｎ  Ｃａｃｏ−２  Ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  Ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ  Ｃｅｌｌｓ，”Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．１１３：２７５−２８８（１９９１）。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）、微小管構成は、癌細胞及びウイルスに感染した細胞で変化する可能性がある（Ｎｙｃｅ，“Ｄｒｕｇ−Ｉｎｄｕｃｅｄ  ＤＮＡ  Ｈｙｐｅｒｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ｉｎ  Ｈｕｍａｎ  Ｔｕｍｏｒｓ，”Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．４９：５８２９−５８３６（１９８９）、Ｏｓｈｉｍｕｒａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｃｈｅｍｉｃａｌｌｙ  Ｉｎｄｕｃｅｄ  Ａｎｅｕｐｌｏｉｄｙ  ｉｎ  Ｍａｍｍａｌｉａｎ  Ｃｅｌｌｓ：Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ａｎｄ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ  ｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ，”Ｅｎｖｉｒｏｎ．Ｍｕｔａｇｅｎ．８：１２９−１５９（１９８６）。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
【００６７】
アルカリホスファターゼの局在化及び発現は、すべての細胞型にわたって、またはすべての細胞状態もしくは条件にわたって均一ではないが、その代わりに非常に可変的である。薬物の所望の送達先であるいくつかの細胞は、膜結合型アルカリホスファターゼを生成しないか、または限定された条件下でのみそれを生成するか、または期間が限定されている発生段階中にのみそれを生成する。炎症、感染または腫瘍性形質転換中などのいくつかの疾患状態で、膜結合型アルカリホスファターゼ発現及び局在化は変化する。アルカリホスファターゼは、病原体への一般的な反応として、いくつかの感染状態中、細胞外環境へ放出される。（Ｍｕｒｔｈｙ  ｅｔ  ａｌ．，“Ａｌｋａｌｉｎｅ  Ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ  Ｂａｎｄ−１０  Ｆｒａｃｔｉｏｎ  ａｓ  ａ  Ｐｏｓｓｉｂｌｅ  Ｓｕｒｒｏｇａｔｅ  Ｍａｒｋｅｒ  ｆｏｒ  Ｈｕｍａｎ  Ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ  Ｖｉｒｕｓ  Ｔｙｐｅ  １  Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ  ｉｎ  Ｃｈｉｌｄｒｅｎ，”Ａｒｃｈ．Ｐａｔｈ．＆  Ｌａｂ．Ｍｅｄ．１１８：８７３−８７７（１９９４）。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。活性化Ｂリンパ球は、アルカリホスファターゼを周囲の細胞環境内に流すことができ（Ｂｕｒｇ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｌａｔｅ  Ｅｖｅｎｔｓ  ｉｎ  Ｂ  Ｃｅｌｌ  Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ．Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ｏｆ  Ｍｅｍｂｒａｎｅ  Ａｌｋａｌｉｎｅ  Ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ  Ａｃｔｉｖｉｔｙ，”Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４２：３８１−３８７（１９８９）。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）、アルカリホスファターゼはまた、血清にも存在する。アルカリホスファターゼは、静止期のＢリンパ球で発現せず、活性及び不活性Ｔリンパ球でも発現しない。細胞外環境へのアルカリホスファターゼの放出は、細胞膜から少し離れた所で、ホスホロチオエートのその活性代謝物への代謝をもたらすことができる。この現象は、細胞による取り込みを低減し、非治療的反応へ関与する代謝物の利用可能性を増加させ、活性部分を、細胞傷害性効果を有するアルデヒド及び他の化合物への更なる代謝に利用可能にする。
【００６８】
アミホスチン（ＷＲ−１０６５）の活性型は、観察される有益な効果のために細胞内部に存在しなければならない。ＷＲ−２７２１（アミホスチン）、ＷＲ−１０６５、ＷＲ−３３２７８、ＷＲ−１０６５−システイン及び親化合物ＷＲ−２７２１の他のジスルフィド型は、Ｖ７９細胞の外側に存在する場合、活性が認められなかった（Ｓｍｏｌｕｋ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｒａｄｉｏｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｃｅｌｌｓ  ｉｎ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  ｂｙ  ＷＲ−２７２１  ａｎｄ  Ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ：Ｆｏｒｍ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｄｒｕｇ  Ｒｅｓｐｏｎｓｉｂｌｅ  ｆｏｒ  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ，”Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．４８：３６４１−３６４７（１９８８）。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。対照的に、ＷＲ−１０６５の細胞内濃度は、ガンマ放射線に対する著しい防護と相関した。ヒーラー細胞、ｍｅ−１８０細胞、卵巣２００８細胞、ＨＴ−２９／ＳＰ−１ｄ細胞及びＣｏｌｏ３９５腫瘍細胞株についても、結果は類似していた（Ｓｍｏｌｕｋ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｒａｄｉｏｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｃｅｌｌｓ  ｉｎ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  ｂｙ  ＷＲ−２７２１  ａｎｄ  Ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ：Ｆｏｒｍ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｄｒｕｇ  Ｒｅｓｐｏｎｓｉｂｌｅ  ｆｏｒ  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ，”Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．４８：３６４１−３６４７（１９８８）。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。最適な細胞保護のために、ＷＲ−１０６５（アミホスチンの活性型）の十分かつ持続した細胞内濃度が必要だった（Ｓｏｕｉｄ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｃｙｔｏｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ａｇｅｎｔ  ＷＲ−２７２１（Ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ，  Ｅｔｈｙｏｌ）  ａｎｄ  ｉｔｓ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ  ｉｎ  Ｈｕｍａｎ  Ｂｌｏｏｄ  ｕｓｉｎｇ  Ｍｏｎｏｂｒｏｍｏｂｉｍａｎｅ  Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ  Ｌａｂｅｌｉｎｇ  ａｎｄ  Ｈｉｇｈ−Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ  Ｌｉｑｕｉｄ  Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，”Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．４２：４００−４０６（１９９８）。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。細胞が、放射線への曝露前に４時間、薬物のない媒体へ移される場合、ＷＲ−１０６５及びＷＲ−３３２７８の細胞内濃度は、放射線障害からの細胞保護と共に、著しく減少した（Ｇｒｄｉｎａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｔｈｉｏｌ  ａｎｄ  Ｄｉｓｕｌｆｉｄｅ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｒａｄｉａｔｉｏｎ  Ｐｒｏｔｅｃｔｏｒ  ａｎｄ  Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  Ｃｈｅｍｏｐｒｅｖｅｎｔｉｖｅ  Ａｇｅｎｔ  ＷＲ−２７２１  ａｒｅ  Ｌｉｎｋｅｄ  ｔｏ  Ｂｏｔｈ  ｉｔｓ  Ａｎｔｉ−Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ  ａｎｄ  Ａｎｔｉ−Ｍｕｔａｇｅｎｉｃ  Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ｏｆ  Ａｃｔｉｏｎ，”Ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ  １６：７６７−７７４（１９９５）。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。ＷＲ−１０６５のインビボ組織レベルはサル及びヒトで同様であり、薬物の組織レベルは細胞保護作用に関して参考になった（Ｃａｓｓａｔｔ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｐｒｅｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｍｏｄｅｌｉｎｇ  ｏｆ  Ｉｍｐｒｏｖｅｄ  Ａｍ��ｆｏｓｔｉｎｅ（Ｅｔｈｙｏｌ）ｕｓｅ  ｉｎ  Ｒａｄｉａｔｉｏｎ  Ｔｈｅｒａｐｙ，”Ｓｅｍｉｎ．Ｒａｄｉａｔ．Ｏｎｃｏｌ．１２：９７−１０２（２００２）、Ｓｈａｗ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｍｅｔａｂｏｌｉｃ  ｐａｔｈｗａｙｓ  ｏｆ  ＷＲ−２７２１（ｅｔｈｙｏｌ，ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ）ｉｎ  ｔｈｅ  ＢＡＬＢ／ｃ  ｍｏｕｓｅ，”Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂ  Ｄｉｓｐｏｓ．２２：８９５−９０２（１９９４）。これらはそれぞれ、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
【００６９】
要約すると、その治療上有効な活性代謝物（アミノチオール）の送達におけるホスホロチオエートとして周知の製剤への信頼性は、以下を含む、いくつかの重大な問題を伴う：（１）非限定的にストレスを受けたまたは罹患した細胞を含む一部の細胞型は、この薬物をその活性型に代謝させることができないこと、（２）一部の生理学的または疾患条件下では、この薬物を活性化／代謝させることができないこと、（３）その活性が求められていない環境でのこの薬物の活性化、（４）最適な細胞または細胞内環境から少し離れた所でのこの薬物の活性化、（５）生成物が毒素に代謝されやすい環境での活性化、ならびに（６）ターゲティングされた細胞送達またはターゲティングされた細胞除外を達成する能力の欠如。これらの課題は、ストレスを受けたまたは罹患した細胞の治療効果を得る能力に悪影響を与える。
【００７０】
総合すれば、送達中のアミノチオールのスルフヒドリル部分の保護のためのリン酸基への依存、及び親薬物のその活性部分への代謝のためのアルカリホスファターゼへの依存は、薬物効果に不利な影響を及ぼす可能性のある著しい不都合があるという結論を、これらの知見は支持する。上述の考慮は、新規な製剤の必要性を示す。これらの結果を達成する方法を、本明細書に記載する。
【００７１】
３つの評価基準は、上述の課題に対処するために適合しなければならない。スルフヒドリル基は、生体の身体及び細胞中に存在する様々な部分と共有結合を形成する高反応部分である。したがって、その薬物の薬理効果で役割を果たす１つ以上のスルフヒドリル基を含有する治療薬物は、薬物の所望の治療効果に関連していない隣接分子との反応性を防ぐために、送達中、スルフヒドリル部分の保護を必要とする。この保護を得るために、（ｉ）送達中、所望の保護効果を得る、（ｉｉ）サイトゾル内への細胞取り込みをしやすい、（ｉｉｉ）細胞内で除去することができる、（ｉｖ）（活性アミノチオール部分からの除去前またその後）細胞に有毒ではない、（ｖ）循環血中のプロドラッグの半減期を前提として、達成することができる時間枠に（すなわち許容可能な時間枠内に）、細胞内の治療的アミノチオールレベルを達成する、という必要条件を満たすならば、任意の分子群を使用することができる。
【００７２】
非限定的に細胞内小器官への送達を含む、許容可能な時間枠内に治療的な細胞内濃度で細胞内薬物送達を達成する、任意の方法は、その活性が求められ及びそれが有益な効果を有する環境に、アミノチオール剤を送達する目的に適している。すなわち本開示でなされる観察は重要なことに、細胞内で切断可能アミノチオール保護部分複合体の細胞内送達が、アミノチオールの投与に有益な影響を及ぼすということの実現に関する。本開示でなされる観察は、反応活性部分を有するアミノチオール化合物の細胞内送達は、どのように達成されたとしても、アミノチオール化合物の対応するホスホロチオエートの細胞外送達と有利に関連するということの実現にも関する。
【００７３】
ターゲティングされた細胞送達及び／またはターゲティングされた細胞除外は、アミノチオールの周知の毒性故に望ましい。特定の方法（例えば経口送達または吸入送達）による送達において、送達方法またはシステムは、それを通って薬物が通過する器官の管腔で見いだせる酵素による分解及び／または反応から薬物を保護する能力を有するものでなければならない。したがって、経口送達において、前記方法は、胃腸管の管腔酵素及び因子からの保護を達成しなければならず、吸入送達において、前記方法は、気道の滲出液／分泌物による分解から保護しなければならない。
【００７４】
ターゲティングされた薬物送達は、受動または能動であり得る（Ｂａｎｅｒｊｅｅ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｐｏｌｙ（ｅｔｈｙｌｅｎｅ  ｇｌｙｃｏｌ）−ｐｒｏｄｒｕｇ  ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ：ｃｏｎｃｅｐｔ，  ｄｅｓｉｇｎ，ａｎｄ  ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，”Ｊ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ  ２０１２：１−１７（２０１２）。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。透過性増加及び貯留（ＥＰＲ）効果は、標的部位の外側に薬物を放出する、またはその蓄積を引き起こすことによって受動的薬物ターゲティングを達成し、それは変化した環境条件に依存する。ＥＰＲ効果は、腫瘍及び炎症領域の高透過性脈管構造ならびに減少したリンパ排出を利用して、これらの領域の薬物の蓄積を増加させ、それによって受動的なターゲティングを提供する。能動的なターゲティングは、リガンド−受容体、抗原−抗体、酵素基質（生物学的対）の間の潜在的相互作用を利用することに基づく。ターゲティング物質は、結合の化学的作用によってプロドラッグの表面に結合する。一般的なターゲティング部分の例は、その生物学的対として、細胞または器官によって発現される受容体、セレクチン、抗原もしくはｍＲＮＡを有するペプチドリガンド、糖残基、抗体またはアプタマーを含む。例えば黄体形成ホルモン放出ホルモンペプチドは、いくつかの癌細胞によって過剰発現する受容体を標的とするために使用する。追加の基は、受容体のためのリガンドとして機能する、及び／または受容体媒介性エンドサイトーシスを惹起させるものであり得る。
【００７５】
最後に、薬物の活性化を達成するために、アミノチオールのスルフヒドリル基を保護するために使用する任意の基は、薬物が標的及び／または非標的の細胞の細胞質内に正常に送達されれば、放出されるまたは除去されることができるものでなければならない。
【００７６】
本明細書に記載されるように、薬物の活性型は、送達中、保護されており、送達が完了すれば、アミノチオールの放出を得ることが望ましい。概して、送達中アミノチオールのスルフヒドリル基の保護を提供する、所望の部位（複数可）への送達後に活性型薬物の細胞内放出をもたらす、及び治療的な細胞内薬物レベルをもたらす、任意の組成物または方法（複数可）を使用することができる。細胞内送達前のアミノチオールのスルフヒドリル部分の保護は、これらの薬物の治療効果を得るために必須である。細胞質内送達が達成されると、保護システムが薬物の活性部分を放出することが可能である特徴を有しなければならないので、送達中の保護及び送達後の放出の両方を検討するシステムが一括して考察される。
【００７７】
本明細書に記載の複合体について、共通の特徴は以下のものを含む。アミノチオールは、アミノチオールのスルフヒドリル基と、複合体の、またはマルチアームポリマー／コポリマーの１つ以上のアームの末端の、または分枝デンドリマーの１つ以上の分枝の末端のスルフヒドリル基の間の生物的に還元されるジスルフィド結合を介して複合体に結合する。ジスルフィド結合は、サイトゾル及び細胞外ではなく標的細胞のサイトゾル条件で、または循環条件で主として機能する、チオール−ジスルフィド交換反応によって還元される。（Ｎａｖａｔｈ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｓｔｉｍｕｌｉ−Ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅ  Ｓｔａｒ  Ｐｏｌｙ（Ｅｔｈｙｌｅｎｅ  Ｇｌｙｃｏｌ）Ｄｒｕｇ  Ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ  ｆｏｒ  Ｉｍｐｒｏｖｅｄ  Ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｄｒｕｇ  ｉｎ  Ｎｅｕｒｏｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ，”Ｊ．Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ  １４２：４４７−４５６（２０１０）。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。アミノチオールを複合体に結合し、かつ細胞プロセス、反応、酵素または他の要素によって還元可能である、スルフヒドリル基への結合を使用することができる。ジスルフィド結合または他の連結結合の還元は、その治療有効性が実現できるように、アミノチオールの放出をもたらす。複合体は直鎖、分枝またはデンドリマー構造を有することができ、複合体の分子量は、ポリマー／コポリマーの繰り返し単位の数及び／またはデンドリマーの分枝及び繰り返し単位の数に基づき、低から高まで変化できる。複合体は、生物活性を有しても、有さなくてもよい。
【００７８】
これらの条件を満たす複合体は、以下を含む。
（ｉ）全体的にまたは部分的に酸化ポリエチレン（ＰＥＧ）から構成される複合体（Ｂｏｎｄａｒ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｌｉｐｉｄ−Ｌｉｋｅ  Ｔｒｉｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  Ｂｌｏｃｋ  Ｃｏｐｏｌｙｍｅｒｓ  ｏｆ  Ｅｔｈｙｌｅｎｅ  Ｏｘｉｄｅ  ａｎｄ  Ｐｒｏｐｙｌｅｎｅ  Ｏｘｉｄｅ：Ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ  ａｎｄ  Ｃｙｔｏｃｏｍｐａｔｉｂｌｅ  Ｍｏｄｕｌａｔｏｒｓ  ｏｆ  Ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ，”Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．４６１：９７−１０４．（２０１４）、Ｋｈｏｒｓａｎｄ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｎａｎｏｃａｒｒｉｅｒｓ  ｏｆ  Ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ−Ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅ  Ｄｅｇｒａｄａｂｌｅ  Ｂｌｏｃｋ  Ｃｏｐｏｌｙｍｅｒｓ  Ｈａｖｉｎｇ  Ｐｅｎｄａｎｔ  Ｄｉｓｕｌｆｉｄｅ  Ｌｉｎｋａｇｅｓ，”Ｂｉｏｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ  １４：２１０３−２１１１（２０１３）。これらはそれぞれ、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。上記の他の特徴が適用される。
（ｉｉ）全体的にまたは部分的に葉酸から構成される複合体。
（ｉｉｉ）全体的にもしくは部分的にスペルミンまたはスペルミンポリマーから構成される複合体。
（ｉｖ）還元できるジスルフィド結合を介してアミノチオールのスルフヒドリル基に結合できるスルフヒドリル部分を含む、生体適合部分。アミノチオールのスルフヒドリル部分に結合でき、ならびに上述の状態及び必要条件を場合により満たすことができる異なる部分の数が非常に大きく、新しい研究の結果として将来拡大し続け得るという点に留意すべきである。この多数の基から、以下の特徴を有する部分は、治療的アミノチオールへの結合で保護基として機能することができる：（ａ）１００，０００ダルトン以下の分子量を有する部分、（ｂ）生体適合性で、非毒性の材料から構成される部分、（ｃ）プロドラッグの循環半減期内で１０６細胞当たりの１マイクロモル以下の範囲でアミノチオールの細胞内濃度を達成する割合で、細胞取り込みされやすい部分、及び（ｄ）毒素へ転換されにくい、またはアミノチオールの治療有効性もたらす用量レベルで低毒性を有する部分。
（ｖ）上に列挙した薬物送達システムが、互いに組み合わせて使用可能である点に留意する必要がある。それらは、ターゲティングされた細胞もしくは組織型送達、または標的とされる細胞／組織型の除外を提供するために更に操作されることもできる。更に、新しいナノスケール送達システムが頻繁に開発されており、ナノスケールの薬物送達ビヒクルの形成で使用するための様々な材料は、急速に広がっている。
【００７９】
アミノチオールまたはアミノチオール類似体、及びＰＥＧポリマー、ＰＥＧ含有コポリマーまたはデンドリマーからなるプロドラッグの合成方法を以下に述べる。
【００８０】
概して、次の工程は、アミノチオールまたはアミノチオール類似体のスルフヒドリル基に複合体を結合するために完了しなければならない。最初に、アミノチオールのアミン基を反応性から保護することが必要である。この工程は「ボーシング（ｂｏｃｉｎｇ）」と称され、様々な異なる保護基を使用して実施されることができる。満たされなければならない１つの条件は、プロドラッグのポリマー、コポリマーもしくはデンドリマー、またはアミノチオール成分に損害を与えない機序による合成の最終工程として、保護基は除去可能でなければならないということである。第２段階で、アミノチオールのスルフヒドリル基は、複合体のスルフヒドリル基とアミノチオールのスルフヒドリル基の間のジスルフィド結合を介して中間体に結合する。第３段階で、このジスルフィドは、ポリマー、コポリマーまたはデンドリマーと反応する。これらの複合体は、分子（直鎖ポリマーまたはコポリマー）の一端で、または１つ以上のアーム（マルチアーム型ポリマーまたはコポリマー）の端で、またはデンドリマーの分枝の端で少なくとも１つのスルフヒドリル基を有しなければならない。最終段階で、アミン保護基は、新しく合成されたプロドラッグの構造に損害を与えない方法を使用して、除去されなければならない。
【００８１】
本発明のアミノチオール複合体は、下で概説するスキームによって調製されることができる。
2019500407.tif 000026
（ｉ）ジチオジピリジン（ＴＰ−ＴＰ）（２）、（ｉｉ）４アームＰＥＧ−チオール（ＭＷ１０ｋＤａｌ）（４）。
2019500407.tif 000027
【００８２】
４星型ＰＥＧ−Ｓ−Ｓ−ＷＲ１０６５複合体（５）の合成をスキーム１に示す。ＷＲ１０６５ジヒドロクロリド（１）をジチオジピリジン（ＴＰ−ＴＰ）（２）と室温で反応させて、ＷＲ１０６５−Ｓ−ＴＰを形成した。中間体（３）を４アームＰＥＧ−チオール（ＭＷ１０ｋＤａｌ）（４）と反応させ、Ｍｗ１０．５３６ｋＤａｌの４星型ＰＥＧ−Ｓ−Ｓ−ＷＲ１０６５複合体（５）を形成した。上述のスキームは、が４星型ＰＥＧ−Ｓ−Ｓ−ＷＲ１０６５複合体（５）の合成の間、ＷＲ１０６５中の窒素を保護して、それから脱保護するための工程を示さない。ＷＲ１０６５（１）上のニトロゲンは保護されていなければならず、最終工程で、保護基は除去されなければならなかった（スキーム２〜５）。
【００８３】
2019500407.tif 000028
（ｉ）保護基（ＰＧ）の導入、（ｉｉ）ジチオピルイジン（ＴＰ−ＴＰ）（２）との反応、（ｉｉｉ）４アームＰＥＧ−チオール（ＭＷ１０ｋＤａｌ）（４）との反応、（ｉｖ）脱保護。
2019500407.tif 000029
ＰＧは、任意の好適な保護基である。
【００８４】
2019500407.tif 000030
（ｉ）保護基（ＰＧ）の導入、（ｉｉ）ジチオピルイジン（ＴＰ−ＴＰ）（２）との反応、（ｉｉｉ）４アームＰＥＧ−チオール（ＭＷ１０ｋＤａｌ）（４）との反応、（ｉｖ）脱保護。
2019500407.tif 000031
ＰＧ及びＰＧ１は、それぞれ好適な保護基である。ＰＧ及びＰＧ１は、同一であるまたは異なっていることができる。
【００８５】
2019500407.tif 000032
（ｉ）保護基（ＰＧ）（２）の導入、（ｉｉ）ジチオピルイジン（ＴＰ−ＴＰ）との反応、（ｉｉｉ）４アームＰＥＧ−チオール（ＭＷ１０ｋＤａｌ）（４）との反応、（ｉｖ）脱保護。
2019500407.tif 000033
ＰＧは、任意の好適な保護基である。
【００８６】
2019500407.tif 000034
（ｉ）保護基（ＰＧ）（２）の導入、（ｉｉ）ジチオピルイジン（ＴＰ−ＴＰ）との反応、（ｉｉｉ）４アームＰＥＧ−チオール（ＭＷ１０ｋＤａｌ）（４）との反応、（ｉｖ）脱保護。
2019500407.tif 000035
ＰＧ及びＰＧ１は、それぞれ好適な保護基である。ＰＧ及びＰＧ１は、同一であるまたは異なっていることができる。
【００８７】
スキーム１〜５は、式（Ｉ）の代表的なアミノチオール複合体の合成について記載する。スキーム１〜５に記載されている合成は、式（Ｉ）のアミノチオール複合体を調製するために変更されることができ、
式中、
2019500407.tif 000036
、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、ｍ、ｎ及びｐは、上述のスキームで例示されたものとは異なる。したがって式（Ｉ）のアミノチオール複合体は、スキーム６に記載されているものから変更されたプロトコルを使用して調製されることもできる。
【００８８】
本発明のアミノチオール複合体は、周知の方法に従って作製することができる。例えば式（Ｉ）のアミノチオール複合体は、下で概説するスキーム６に従って調製されることができる。
2019500407.tif 000037
Ｘ及びＹは、それぞれＨ、好適な脱離基または好適な活性化基である。Ｘ及びＹは、同一であるまたは異なることができる。
【００８９】
ジスルフィド（ＩＩ）とアミン化合物（ＩＩＩ）の反応は、アミノチオール複合体（Ｉ）の形成を引き起こす。前記反応は、様々な溶媒（例えば水、緩衝液、メタノール（ＭｅＯＨ）、エタノール（ＥｔＯＨ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）もしくは他のこのような溶媒）またはこのような溶媒の混合物で実施されることができる。反応は、０℃〜１００℃の温度で、０℃〜４０℃の温度で、または０℃〜２５℃の温度で実施されることができる。反応プロセス中、式ＩＩＩの化合物のアミノ基は、所望する場合、その後選択的に除去されることができる好適な保護基によって保護されることができる。これらの基及びその選択及び成分の詳細な説明は、“Ｔｈｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ，Ｖｏｌ．３”，Ｇｒｏｓｓ  ａｎｄ  Ｍｅｉｎｅｎｈｏｆｅｒ，Ｅｄｓ．，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９８１に含まれ、それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。したがってアミノ基に有用な保護基は、ベンジルオキシカルボニル（Ｃｂｚ）、ｔ−ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）、２，２，２−トリクロロエトキシカルボニル（Ｔｒｏｃ）、ｔ−アミルオキシカルボニル、４−メトキシベンジルオキシカルボニル、２−（トリクロロシリル）エトキシカルボニル、９−フルオレニルメトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）、フタロイル、アセチル（Ａｃ）、ホルミル、トリフルオロアセチルなどである。任意の好適な市販のジスルフィド（ＩＩ）を本発明に従って使用することができる。あるいはジスルフィド（ＩＩ）は周知の方法に従って調製されることができる。
【００９０】
ＷＲ１０６５複合体のためのスキャフォールドとして使用するＰＥＧ−ＳＨ分子は、異なる長さ及び分子量の直鎖ＰＥＧポリマー、または異なる数のアーム（例えば上述の（４）に示すように４アームもしくは６、８などのアーム）及び分子量を有するマルチアーム型ポリマーであり得る。
【００９１】
代表的なアミノチオール複合体は、以下
2019500407.tif 000038
2019500407.tif 000039
及び最大
2019500407.tif 000040
を含む。
【００９２】
本発明によれば
2019500407.tif 000041
はリンカー基であり、リンカー基は、ポリマー、ポリマーの一部、ポリマーのアーム、コポリマーのアーム、デンドリマーの分枝、原子または分子である。特定の実施形態において、ポリマーの一部とはポリマーの繰り返し単位を指す。
【００９３】
複合体化プロドラッグ（またはその活性部分）は、細胞（例えば標的細胞）へ細胞内でまたは細胞質内で送達されてよい。概して、文献に記載された、または任意の生物学的もしくは細胞機序によってもアミノチオールの放出を許容する特徴を有する将来に開発される任意の方法を使用することができる。したがって増大した薬物送達を得るために、下で示される他の薬物送達モジュールと組み合わせて、複合体化プロドラッグを送達することができる。ターゲティングされた薬物送達及びターゲティングされた薬物除外は、望ましいが必要でない。
【００９４】
細胞内薬物送達のための様々な粒子状担体が開発されてきた及び／または記載されてきた。ナノ粒子は、ナノ小胞体、ナノ担体またはナノカプセルとも称され、リソソーム、ミセル、カプセル、ポリマーソーム、ナノゲル、樹枝状及び高分子薬物複合体、ならびにナノサイズの核酸複合体を含む。ナノ粒子が分類されることがあるカテゴリの概要は、以下の品目（１）〜（１８）を含む。
（１）両親媒性ポリプロリンヘリックスＰ１１ＬＲＲなどの細胞透過性物質（例えば、Ｌｉ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｃａｔｉｏｎｉｃ  Ａｍｐｈｉｐｈｉｌｉｃ  Ｐｏｌｙｐｒｏｌｉｎｅ  Ｈｅｌｉｘ  Ｐ１１ＬＲＲ  Ｔａｒｇｅｔｓ  Ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａ，”Ｊ．Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ  １４２：２５９−２６６（２０１０）に記載のものなど。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）、またはペプチド機能性量子ドット（例えば、Ｌｉｕ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｃｅｌｌ−Ｐｅｎｅｔｒａｔｉｎｇ  Ｐｅｐｔｉｄｅ−Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｉｚｅｄ  Ｑｕａｎｔｕｍ  Ｄｏｔｓ  ｆｏｒ  Ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ，”Ｊ．Ｎａｎｏｓｃｉ．Ｎａｎｏｔｅｃｈｎｏｌ．１０：７８９７−７９０５（２０１０）に記載のものなど。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
（２）炭酸アパタイトなどのｐＨに反応する担体（Ｈｏｓｓａｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｃａｒｂｏｎａｔｅ  Ａｐａｔｉｔｅ−Ｆａｃｉｌｉｔａｔｅｄ  Ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｌｙ  Ｄｅｌｉｖｅｒｅｄ  ｓｉＲＮＡ  ｆｏｒ  Ｅｆｆｉｃｉｅｎｔ  Ｋｎｏｃｋｄｏｗｎ  ｏｆ  Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  Ｇｅｎｅｓ，”Ｊ．Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ  １４７：１０１−１０８（２０１０）。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
（３）Ｃ２−ストレプトアビジン送達システム（マクロファージ及びＴ白血病細胞への薬物送達を促進するために使用されてきた）（例えば、Ｆａｈｒｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｔｈｅ  Ｃ２−Ｓｔｒｅｐｔａｖｉｄｉｎ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍ  Ｐｒｏｍｏｔｅｓ  ｔｈｅ  Ｕｐｔａｋｅ  ｏｆ  Ｂｉｏｔｉｎｙｌａｔｅｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ  ｉｎ  Ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ  ａｎｄ  Ｔ−ｌｅｕｋｅｍｉａ  ｃｅｌｌｓ，”Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．３９１，１３１５−１３２５（２０１０）に記載のものなど。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
（４）ＣＨ（３）−ＴＤＤＳ薬物送達システム。
（５）疎水性生物活性担体（例えば、Ｉｍｂｕｌｕｚｑｕｅｔａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｎｏｖｅｌ  Ｂｉｏａｃｔｉｖｅ  Ｈｙｄｒｏｐｈｏｂｉｃ  Ｇｅｎｔａｍｉｃｉｎ  Ｃａｒｒｉｅｒｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｂａｃｔｅｒｉａｌ  Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ，”Ａｃｔａ．Ｂｉｏｍａｔｅｒ．７：１５９９−１６０８（２０１１）に記載のものなど。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
（６）エキソソーム（例えば、Ｌａｋｈａｌ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｉｎｔｒａｎａｓａｌ  Ｅｘｏｓｏｍｅｓ  ｆｏｒ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｎｅｕｒｏｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ？  Ｐｒｏｓｐｅｃｔｓ  ａｎｄ  Ｌｉｍｉｔａｔｉｏｎｓ，”Ｍｏｌ．Ｔｈｅｒ．１９：１７５４−１７５６（２０１１）、Ｚｈａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｎｅｗｌｙ  Ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ  Ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ  ｆｏｒ  Ｍｕｌｔｉｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  Ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａ−Ｔａｒｇｅｔｅｄ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ，”Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｔｏｄａｙ  １６：１４０−１４６（２０１１）に記載のものなど。これらはそれぞれ、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
（７）微小管（例えば、Ｋｏｌａｃｈａｌａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｔｈｅ  Ｕｓｅ  ｏｆ  Ｌｉｐｉｄ  Ｍｉｃｒｏｔｕｂｅｓ  ａｓ  ａ  Ｎｏｖｅｌ  Ｓｌｏｗ−Ｒｅｌｅａｓｅ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍ  ｆｏｒ  Ｌａｒｙｎｇｅａｌ  Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ，”Ｔｈｅ  Ｌａｒｙｎｇｏｓｃｏｐｅ  １２１：１２３７−１２４３（２０１１）に記載のものなど。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）を含む、脂質ベースの送達システム（例えば、Ｂｉｌｄｓｔｅｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｔｒａｎｓｍｅｍｂｒａｎｅ  Ｄｉｆｆｕｓｉｏｎ  ｏｆ  Ｇｅｍｃｉｔａｂｉｎｅ  ｂｙ  ａ  Ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｕｌａｔｅ  Ｓｑｕａｌｅｎｏｙｌ  Ｐｒｏｄｒｕｇ：  Ａｎ  Ｏｒｉｇｉｎａｌ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｐａｔｈｗａｙ，”Ｊ．Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ  １４７：１６３−１７０（２０１０）、Ｆｏｇｅｄ，“ｓｉＲＮＡ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｗｉｔｈ  Ｌｉｐｉｄ−Ｂａｓｅｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ：Ｐｒｏｍｉｓｅｓ  ａｎｄ  Ｐｉｔｆａｌｌｓ，”Ｃｕｒｒ．Ｔｏｐ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１２：９７−１０７（２０１２）、Ｈｏｌｐｕｃｈ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ  ｆｏｒ  Ｌｏｃａｌ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｔｏ  ｔｈｅ  Ｏｒａｌ  Ｍｕｃｏｓａ：Ｐｒｏｏｆ  ｏｆ  Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅ  Ｓｔｕｄｉｅｓ，”Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．２７：１２２４−１２３６（２０１０）、Ｋａｐｏｏｒ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｐｈｙｓｉｃｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  ｆｏｒ  Ｌｉｐｉｄ  Ｂａｓｅｄ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  ｆｏｒ  ｓｉＲＮＡ，”Ｉｎｔ．Ｊ．ｏｆ  Ｐｈａｒｍ．４２７，３５−５７（２０１２）に記載のものなど。これらはそれぞれ、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
（８）リポソームまたはリポソームベースの送達システム。
（９）ジスルフィド架橋型ミセルを含むミセル（例えば、Ｌｉ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｏｆ  Ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ−Ａｃｔｉｎｇ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃｓ  ｉｎ  Ｐｒｏ−Ａｐｏｐｔｏｔｉｃ  Ｔｈｅｒａｐｉｅｓ，”Ｃｕｒｒ．Ｐｈａｒｍ．Ｄｅｓ．１７：２９３−３１９（２０１１）に記載のものなど。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。ジスルフィド結合を有する担体を、１つ以上のジスルフィド結合がアミノチオールへ連結するように調製できる。様々なミセルが記載されてきた（例えば肺送達でのリン脂質−ポリアスパルトアミドミセル）。
（１０）微小粒子（例えば、Ａｔｅｈ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｔｈｅ  Ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｕｐｔａｋｅ  ｏｆ  ＣＤ９５  Ｍｏｄｉｆｉｅｄ  Ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ−Ｌｏａｄｅｄ  Ｐｏｌｙ（Ｌａｃｔｉｃ−Ｃｏ−Ｇｌｙｃｏｌｉｃ  Ａｃｉｄ）Ｍｉｃｒｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ，”Ｂｉｏｍａｔｅｒ．３２：８５３８−８５４７（２０１１）に記載のものなど。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
（１１）分子担体（例えば、Ｈｅｔｔｉａｒａｃｈｃｈｉ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｂｙ  Ｃｕｃｕｒｂｉｔ［ｎ］ｕｒｉｌ  Ｔｙｐｅ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｏｎｔａｉｎｅｒｓ，”ＰｌｏＳ  Ｏｎｅ５：ｅ１０５１４（２０１０）に記載のものなど。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
（１２）「ナノ担体」と称されるナノ粒子（例えば、Ｇｕ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｔａｉｌｏｒｉｎｇ  Ｎａｎｏｃａｒｒｉｅｒｓ  ｆｏｒ  Ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ，”Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｒｅｖ．４０：３６３８−３６５５（２０１１）に記載のものなど。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。そのいくつかは、ＨＩＶ感染細胞への薬剤の送達のために調製されてきた（例えば、Ｇｕｎａｓｅｅｌａｎ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｓｕｒｆａｃｅ  Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  Ｎａｎｏｃａｒｒｉｅｒｓ  ｆｏｒ  Ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ  Ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｏｆ  Ａｎｔｉ−ＨＩＶ  Ｄｒｕｇｓ，”Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖ．６２：５１８−５３１（２０１０）に記載のものなど。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
（１３）ナノスケールのマルチバリアント担体。
（１４）ナノゲル（例えば、Ｚｈａｎ  ｅｔ  ａｌ．，“Ａｃｉｄ−Ａｃｔｉｖａｔａｂｌｅ  Ｐｒｏｄｒｕｇ  Ｎａｎｏｇｅｌｓ  ｆｏｒ  Ｅｆｆｉｃｉｅｎｔ  Ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ  Ｒｅｌｅａｓｅ，”Ｂｉｏｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ  １２：３６１２−３６２０（２０１１）及びＺｈａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｆｏｌａｔｅ−Ｍｅｄｉａｔｅｄ  ｐｏｌｙ（３−ｈｙｄｒｏｘｙｂｕｔｙｒａｔｅ−ｃｏ−３−ｈｙｄｒｏｘｙｏｃｔａｎｏａｔｅ）Ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ  ｆｏｒ  Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ，”Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｉｏｐｈａｒｍ．７６：１０−１６（２０１０）に記載のものなど。これらはそれぞれ、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
（１５）ハイブリッドナノ担体システム（２つ以上の微粒子送達システムの構成要素からなる）（例えば、Ｐｉｔｔｅｌｌａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｅｎｈａｎｃｅｄ  Ｅｎｄｏｓｏｍａｌ  Ｅｓｃａｐｅ  ｏｆ  ｓｉＲＮＡ−Ｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｉｎｇ  Ｈｙｂｒｉｄ  Ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ  ｆｒｏｍ  Ｃａｌｃｉｕｍ  Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ  ａｎｄ  ＰＥＧ−Ｂｌｏｃｋ  Ｃｈａｒｇｅ−Ｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎａｌ  Ｐｏｌｙｍｅｒ  ｆｏｒ  Ｅｆｆｉｃｉｅｎｔ  Ｇｅｎｅ  Ｋｎｏｃｋｄｏｗｎ  Ｗｉｔｈ  Ｎｅｇｌｉｇｉｂｌｅ  Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ，”Ｂｉｏｍａｔｅｒ．３２：３１０６−３１１４（２０１１）に記載のものなど。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。コポリマーミセル型ナノ担体（例えば、Ｃｈｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，“ｐＨ  ａｎｄ  Ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ  Ｄｕａｌ−Ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ  Ｃｏｐｏｌｙｍｅｒｉｃ  Ｍｉｃｅｌｌｅｓ  ｆｏｒ  Ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ，”Ｂｉｏｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ  １２：３６０１−３６１１（２０１１）に記載のものなど。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。リポソーム型ナノ担体（例えば、Ｋａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  ａ  Ｐｅｐ−１  Ｐｅｐｔｉｄｅ−Ｍｏｄｉｆｉｅｄ  Ｌｉｐｏｓｏｍａｌ  Ｎａｎｏｃａｒｒｉｅｒ  Ｓｙｓｔｅｍ  ｆｏｒ  Ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ：Ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎａｌ  Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｕｐｔａｋｅ  Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ，”Ｊ．ｏｆ  Ｄｒｕｇ  Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  １９：４９７−５０５（２０１１）に記載のものなど。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
（１６）ナノ粒子は、様々なナノ材料によって作製することができる（例えば、Ａｄｅｌｉ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  Ｎｅｗ  Ｈｙｂｒｉｄ  Ｎａｎｏｍａｔｅｒｉａｌｓ：Ｐｒｏｍｉｓｉｎｇ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  ｆｏｒ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ，”Ｎａｎｏｍｅｄ．  Ｎａｎｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｂｉｏｌ．Ｍｅｄ．７：８０６−８１７（２０１１）、Ａｌ−Ｊａｍａｌ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｅｎｈａｎｃｅｄ  Ｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｉｎｔｅｒｎａｌｉｚａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｇｅｎｅ  Ｓｉｌｅｎｃｉｎｇ  ｗｉｔｈ  ａ  Ｓｅｒｉｅｓ  ｏｆ  Ｃａｔｉｏｎｉｃ  Ｄｅｎｄｒｏｎ−Ｍｕｌｔｉｗａｌｌｅｄ  Ｃａｒｂｏｎ  Ｎａｎｏｔｕｂｅ：ｓｉＲＮＡ  Ｃｏｍｐｌｅｘｅｓ，”ＦＡＳＥＢ  Ｊ２４：４３５４−４３６５（２０１０）、Ｂｕｌｕｔ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｓｌｏｗ  Ｒｅｌｅａｓｅ  ａｎｄ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｏｆ  Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ  Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ  Ｄｒｕｇ  ｂｙ  Ｓｅｌｆ−Ａｓｓｅｍｂｌｅｄ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ａｍｐｈｉｐｈｉｌｅ  Ｎａｎｏｆｉｂｅｒｓ，”Ｂｉｏｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ  １２：３００７−３０１４（２０１１）に記載のものなど。これらはそれぞれ、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
（１７）ペプチドベースの薬物送達システム（様々な細胞膜透過ペプチドを含み、ＴＡＴベースの送達システムを含むがこれに限定されない）（例えば、Ｊｏｈｎｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  Ｃｅｌｌ−Ｐｅｎｅｔｒａｔｉｎｇ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ，”Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．６８３：５３５−５５１（２０１１）に記載のものなど。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
（１８）ポリマーまたはコポリマーベースの送達システム（例えば、Ｅｄｉｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｂｉｏｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅ  Ｐｏｌｙｍｅｒｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ，”Ｗｉｌｅｙ  Ｉｎｔｅｒｄｉｓｃｉｐ．Ｒｅｖ．Ｎａｎｏｍｅｄ．ａｎｄ  Ｎａｎｏｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．３：３３−４６（２０１１），に記載のものなど。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
【００９５】
ナノ粒子のカテゴリに分類されると判定されてもよい追加の細胞内薬物送達システムは、以下の品目（ａ）〜（ｕ）を含む。
（ａ）アプタマー（例えば、Ｏｒａｖａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｄｅｌｉｖｅｒｉｎｇ  Ｃａｒｇｏｅｓ  ｉｎｔｏ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｌｌｓ  Ｕｓｉｎｇ  ＤＮＡ  Ａｐｔａｍｅｒｓ  Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  Ｉｎｔｅｒｎａｌｉｚｅｄ  Ｓｕｒｆａｃｅ  Ｐｏｒｔａｌｓ，”Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ．１７９８：２１９０−２２００（２０１０）に記載のものなど。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
（ｂ）細菌性薬物送達システム（例えば、Ｐｏｎｔｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ  Ｌａｃｔｉｓ  ａｓ  ａ  Ｌｉｖｅ  Ｖｅｃｔｏｒ：Ｈｅｔｅｒｏｌｏｇｏｕｓ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  ＤＮＡ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，”Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ｐｕｒｉｆ．７９：１６５−１７５（２０１１）に記載のものなど。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
（ｃ）タンパク質ベースの自己組織化細胞内細菌小器官（細菌外殻）（例えば、Ｃｏｒｃｈｅｒｏ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｓｅｌｆ−Ａｓｓｅｍｂｌｉｎｇ，Ｐｒｏｔｅｉｎ−Ｂａｓｅｄ  Ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｂａｃｔｅｒｉａｌ  Ｏｒｇａｎｅｌｌｅｓ：Ｅｍｅｒｇｉｎｇ  Ｖｅｈｉｃｌｅｓ  ｆｏｒ  Ｅｎｃａｐｓｕｌａｔｉｎｇ，Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  Ａｎｄ  Ｄｅｌｉｖｅｒｉｎｇ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃａｌ  Ｃａｒｇｏｅｓ，”Ｍｉｃｒｏｂ．Ｃｅｌｌ  Ｆａｃｔｏｒｉｅｓ  １０：９２（２０１１）に記載のものなど。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
（ｄ）混合されたシステム（例えば、Ｌｅｅ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｌｉｐｏ−Ｏｌｉｇｏａｒｇｉｎｉｎｅｓ  ａｓ  Ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｖｅｃｔｏｒｓ  ｔｏ  Ｐｒｏｍｏｔｅ  Ｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｕｐｔａｋｅ，”Ｍｏｌ．Ｂｉｏｓｙｓｔ．６：２０４９−２０５５（２０１０）に記載のものなど。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
（ｅ）共有結合的に変性されたタンパク質（例えば、Ｍｕｌｌｅｒ，“Ｏｒａｌ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｄｒｕｇｓ：Ｄｒｉｖｅｒ  ｆｏｒ  Ｐｅｒｓｏｎａｌｉｚｅｄ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，”Ｃｕｒｒ．Ｍｏｌｅｃ．Ｂｉｏ．１３：１３−２４（２０１１）に記載のものなど。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
（ｆ）薬物負荷した照射済み腫瘍細胞（例えば、Ｋｉｍ，  ｅｔ  ａｌ．，“Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｏｆ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｕｓｉｎｇ  Ｄｒｕｇ−Ｌｏａｄｅｄ  Ｉｒｒａｄｉａｔｅｄ  Ｔｕｍｏｒ  Ｃｅｌｌｓ  ｔｏ  Ｔｒｅａｔ  Ｍｕｒｉｎｅ  Ｏｖａｒｉａｎ  Ｔｕｍｏｒｓ，”Ｊ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ｓｃｉ．１７：６１（２０１０）に記載のものなど。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
（ｇ）ミセル体を用いた二重負荷（例えば、Ｙｕ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｏｖｅｒｃｏｍｉｎｇ  Ｅｎｄｏｓｏｍａｌ  Ｂａｒｒｉｅｒ  ｂｙ  Ａｍｐｈｏｔｅｒｉｃｉｎ  Ｂ−Ｌｏａｄｅｄ  Ｄｕａｌ  ｐＨ−Ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅ  ＰＤＭＡ−ｂ−ＰＤＰＡ  Ｍｉｃｅｌｌｅｐｌｅｘｅｓ  ｆｏｒ  ｓｉＲＮＡ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ，”ＡＣＳ  Ｎａｎｏ  ５：９２４６−９２５５（２０１１）に記載のものなど。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
（ｈ）エソソーム（例えば、Ｇｏｄｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｅｔｈｏｓｏｍｅｓ：Ｎｅｗ  Ｐｒｏｓｐｅｃｔｓ  ｉｎ  Ｔｒａｎｓｄｅｒｍａｌ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ，”Ｃｒｉｔ．Ｒｅｖ．Ｔｈｅｒ．Ｄｒｕｇ  Ｃａｒｒｉｅｒ  Ｓｙｓｔ．２０：６３−１０２（２００３）に記載のものなど。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
（ｉ）吸入ベースの送達システム（例えば、Ｐａｔｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｔｈｅ  Ｐａｒｔｉｃｌｅ  Ｈａｓ  Ｌａｎｄｅｄ−−Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚｉｎｇ  ｔｈｅ  Ｆａｔｅ  ｏｆ  Ｉｎｈａｌｅｄ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，”Ｊ．ｏｆ  Ａｅｒｏｓｏｌ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  ａｎｄ  Ｐｕｌ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌ．２３：Ｓｕｐｐｌ  ２：Ｓ７１−８７（２０１０）に記載のものなど。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
（ｊ）照射済み腫瘍細胞ベースの送達システム（例えば、Ｋｉｍ，  ｅｔ  ａｌ．，“Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｏｆ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｕｓｉｎｇ  Ｄｒｕｇ−Ｌｏａｄｅｄ  Ｉｒｒａｄｉａｔｅｄ  Ｔｕｍｏｒ  Ｃｅｌｌｓ  ｔｏ  Ｔｒｅａｔ  Ｍｕｒｉｎｅ  Ｏｖａｒｉａｎ  Ｔｕｍｏｒｓ，”Ｊ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ｓｃｉ．１７：６１（２０１０）に記載のものなど。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
（ｋ）脂質ベースの担体。
（ｌ）リポスフィア（例えば、聴覚上活性なリポスフィア）。
（ｍ）マイクロカプセル化した薬物送達（例えば、Ｏｅｔｔｉｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｍｉｃｒｏｅｎｃａｐｓｕｌａｔｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ：Ａ  Ｎｅｗ  Ａｐｐｒｏａｃｈ  ｔｏ  Ｐｒｏ−Ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  Ｃｙｔｏｋｉｎｅ  Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ，”Ｊ．Ｍｉｃｒｏｅｎｃａｐｓｕｌａｔｉｏｎ（２０１２）に記載のものなど。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
（ｎ）分子アンブレラと称される送達システム。（例えば、Ｃｌｉｎｅ  ｅｔ  ａｌ．，“Ａ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｕｍｂｒｅｌｌａ  Ａｐｐｒｏａｃｈ  ｔｏ  ｔｈｅ  Ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｏｆ  Ｓｍａｌｌ  Ｉｎｔｅｒｆｅｒｉｎｇ  ＲＮＡ，”Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．２２：２２１０−２２１６（２０１１）に記載のものなど。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
（ｏ）ニオソーム（ノニオン性界面活性剤系リポソーム）。
（ｐ）光活性化薬物送達システム。
（ｑ）高分子マイクロカプセル（例えば、Ｐａｖｌｏｖ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｎｅｕｒｏｎ  Ｃｅｌｌｓ  Ｕｐｔａｋｅ  ｏｆ  Ｐｏｌｙｍｅｒｉｃ  Ｍｉｃｒｏｃａｐｓｕｌｅｓ  ａｎｄ  Ｓｕｂｓｅｑｕｅｎｔ  Ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｒｅｌｅａｓｅ，”Ｍａｃ．Ｂｉｏ．１１：８４８−８５４（２０１１）に記載のものなど。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
（ｒ）自己乳化薬物送達システム（例えば、Ｌｅｉ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｏｆ  ａ  Ｎｏｖｅｌ  Ｓｅｌｆ−Ｍｉｃｒｏｅｍｕｌｓｉｆｙｉｎｇ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍ  ｆｏｒ  Ｒｅｄｕｃｉｎｇ  ＨＩＶ  Ｐｒｏｔｅａｓｅ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ−Ｉｎｄｕｃｅｄ  Ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  Ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ  Ｂａｒｒｉｅｒ  Ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ，”Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ  ７：８４４−８５３（２０１０）に記載のものなど。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
（ｓ）トロイの木馬送達システム。
（ｔ）非限定的に還元感受性小胞体を含む小胞体。（例えば、Ｐａｒｋ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ−Ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ，Ｒｏｂｕｓｔ  Ｖｅｓｉｃｌｅｓ  ｗｉｔｈ  ａ  Ｎｏｎ−Ｃｏｖａｌｅｎｔｌｙ  Ｍｏｄｉｆｉａｂｌｅ  Ｓｕｒｆａｃｅ  ａｓ  ａ  Ｍｕｌｔｉｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  Ｄｒｕｇ−Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｐｌａｔｆｏｒｍ，”Ｓｍａｌｌ  ６：１４３０−１４４１（２０１０）に記載のものなど。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
（ｕ）ウイルスベクター及びウイルス様システム（例えば、Ｂａｃｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｏｒｇａｎ−Ｓｐｅｃｉｆｉｃ  Ｓｈｉｆｔｓ  ｉｎ  ｍｔＤＮＡ  Ｈｅｔｅｒｏｐｌａｓｍｙ  Ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ  Ｓｙｓｔｅｍｉｃ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｏｆ  ａ  Ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａ−Ｔａｒｇｅｔｅｄ  Ｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎ  Ｅｎｄｏｎｕｃｌｅａｓｅ，”Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒ．１７：７１３−７２０（２０１０）、Ｃｈａｉｌｅｒｔｖａｎｉｔｋｕｌ  ｅｔ  ａｌ．，“Ａｄｅｎｏｖｉｒｕｓ：ａ  Ｂｌｕｅｐｒｉｎｔ  ｆｏｒ  Ｎｏｎ−Ｖｉｒａｌ  Ｇｅｎｅ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ，”Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．２１：６２７−６３２（２０１０）に記載のものなど。これらはそれぞれ、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
【００９６】
上に列挙した薬物送達システムが、互いに組み合わせて使用可能である点に留意する必要がある。それらは、標的の細胞もしくは組織型への送達、またはターゲティングされた細胞／組織型除外を提供するために更に操作することもできる。更に、新しいナノスケールの送達システムが頻繁に開発されており、ナノスケールの薬物送達ビヒクルの形成で使用するための様々な材料は、急速に広がっている。
【００９７】
上述の送達システムは、改良された送達技術と組み合わせて使用することができる。このような技術の例には以下の項目（Ｉ）〜（ＸＶ）が含まれる。
（Ｉ）アムホテリシンＢ媒介性薬物送達強化。
（ＩＩ）超音波媒介性技術（例えば、Ｇｒｉｍａｌｄｉ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｕｌｔｒａｓｏｕｎｄ−Ｍｅｄｉａｔｅｄ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ  Ｃｈａｎｇｅｓ  ｉｎ  Ｃｅｌｌｓ  Ｒｅｖｅａｌｅｄ  ｂｙ  ＦＴＩＲ  Ｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｙ：ａ  Ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｉｏｎ  ｔｏ  ｔｈｅ  Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｇｅｎｅ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ，”Ｓｐｅｃｔｒｏｃｈｉｍ．Ａｃｔａ  Ｐａｒｔ  Ａ８４：７４−８５（２０１１）、Ｙｕｄｉｎａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｕｌｔｒａｓｏｕｎｄ−Ｍｅｄｉａｔｅｄ  Ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｕｓｉｎｇ  Ｍｉｃｒｏｂｕｂｂｌｅｓ  ａｎｄ  Ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ−Ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ  Ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ，”Ｊ．Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ  １５５：４４２−４４８（２０１１）に記載のものなど。これらはそれぞれ、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
（ＩＩＩ）温度感受性送達及び／または放出システム。
（ＩＶ）ｐＨ感受性送達及び／または放出システム。
（Ｖ）レドックス反応性送達システム（例えば、Ｚｈａｏ  ｅｔ  ａｌ．，“Ａ  Ｎｏｖｅｌ  Ｈｕｍａｎ  Ｄｅｒｉｖｅｄ  Ｃｅｌｌ−Ｐｅｎｅｔｒａｔｉｎｇ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  ｉｎ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ，”Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．Ｒｅｐ．３８：２６４９−２６５６（２０１１）に記載のものなど。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
（ＶＩ）生物的に還元される送達システム（例えば、Ｌｉｕ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｂｉｏｒｅｄｕｃｉｂｌｅ  Ｍｉｃｅｌｌｅｓ  Ｓｅｌｆ−Ａｓｓｅｍｂｌｅｄ  ｆｒｏｍ  Ａｍｐｈｉｐｈｉｌｉｃ  Ｈｙｐｅｒｂｒａｎｃｈｅｄ  Ｍｕｌｔｉａｒｍ  Ｃｏｐｏｌｙｍｅｒ  ｆｏｒ  Ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ−Ｍｅｄｉａｔｅｄ  Ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ，”Ｂｉｏｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ  １２：１５６７−１５７７（２０１１）に記載のものなど。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
（ＶＩＩ）リソソーム内逃避を増大させる方法（例えば、Ｐａｉｌｌａｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｔｈｅ  Ｉｍｐｏｒｔａｎｃｅ  ｏｆ  Ｅｎｄｏ−Ｌｙｓｏｓｏｍａｌ  Ｅｓｃａｐｅ  ｗｉｔｈ  Ｌｉｐｉｄ  Ｎａｎｏｃａｐｓｕｌｅｓ  ｆｏｒ  Ｄｒｕｇ  Ｓｕｂｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ，”Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ  ３１：７５４２−７５５４（２０１０）に記載のものなど。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
（ＶＩＩＩ）吸入方法（例えば、Ｚｈｕａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｂｒａｉｎ  Ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  Ｄｉｓｅａｓｅｓ  ｂｙ  Ｄｅｌｉｖｅｒｉｎｇ  Ｅｘｏｓｏｍｅ  Ｅｎｃａｐｓｕｌａｔｅｄ  Ａｎｔｉ−Ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  Ｄｒｕｇｓ  ｆｒｏｍ  ｔｈｅ  Ｎａｓａｌ  Ｒｅｇｉｏｎ  ｔｏ  ｔｈｅ  Ｂｒａｉｎ，”Ｍｏｌ．Ｔｈｅｒ．１９：１７６９−１７７９（２０１１）に記載のものなど。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
（ＩＸ）経口送達を強化するための方法（例えば、Ｍｕｌｌｅｒ，“Ｏｒａｌ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｄｒｕｇｓ：Ｄｒｉｖｅｒ  ｆｏｒ  Ｐｅｒｓｏｎａｌｉｚｅｄ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，”Ｃｕｒｒ．Ｍｏｌｅｃ．Ｂｉｏ．１３：１３−２４（２０１１）に記載のものなど。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
（Ｘ）ターゲティングされた細胞送達システム（これらのいくつかは抗ＨＩＶ薬の送達で使用するために開発されてきた）（例えば、Ｂｒｏｎｓｈｔｅｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｃｅｌｌ  Ｄｅｒｉｖｅｄ  Ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ  ＣＣＲ５  ａｓ  ａ  Ｎｅｗ  Ｔａｒｇｅｔｅｄ  Ｄｒｕｇ−Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍ  ｆｏｒ  ＨＩＶ  Ｉｎｆｅｃｔｅｄ  Ｃｅｌｌｓ，”Ｊ．Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ  １５１：１３９−１４８（２０１１）、Ｇｕｎａｓｅｅｌａｎ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｓｕｒｆａｃｅ  Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  Ｎａｎｏｃａｒｒｉｅｒｓ  ｆｏｒ  Ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ  Ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｏｆ  Ａｎｔｉ−ＨＩＶ  Ｄｒｕｇｓ，”Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖ．６２：５１８−５３１（２０１０）、Ｋｅｌｌｙ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｔａｒｇｅｔｅｄ  Ｌｉｐｏｓｏｍａｌ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｔｏ  Ｍｏｎｏｃｙｔｅｓ  ａｎｄ  Ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ．，”Ｊ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ７２７２４１（２０１１）に記載のものなど。これらはそれぞれ、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
（ＸＩ）緩徐またはオンデマンド型放出システム（例えば、Ｈｕ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｍｕｌｔｉｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  Ｎａｎｏｃａｐｓｕｌｅｓ  ｆｏｒ  Ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ  Ｅｎｃａｐｓｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｈｙｄｒｏｐｈｉｌｉｃ  ａｎｄ  Ｈｙｄｒｏｐｈｏｂｉｃ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ  ａｎｄ  Ｏｎ−Ｄｅｍａｎｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ，”ＡＣＳ  Ｎａｎｏ  ６：２５５８−２５６５（２０１２）に記載のものなど。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
（ＸＩＩ）１つ以上の受容体へのターゲティングされた送達（例えば、Ｍｉｎｇ，“Ｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｏｆ  ｓｉＲＮＡ  ａｎｄ  Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ  Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ  ｖｉａ  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ−Ｍｅｄｉａｔｅｄ  Ｅｎｄｏｃｙｔｏｓｉｓ，”Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ．ｏｎ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ８：４３５−４４９（２０１１）に記載のものなど。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
（ＸＩＩＩ）１つ以上の異なる細胞内小器官へのターゲティングされた送達（例えば、Ｐａｕｌｏ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ  ｆｏｒ  Ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ−Ｔａｒｇｅｔｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ，”Ｎａｎｏｔｅｃｈｎｏｌ．２２：４９４００２（２０１１）、Ｚｈａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｎｅｗｌｙ  Ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ  Ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ  ｆｏｒ  Ｍｕｌｔｉｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  Ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａ−Ｔａｒｇｅｔｅｄ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ，”Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｔｏｄａｙ  １６：１４０−１４６（２０１１）に記載のものなど。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
（ＸＩＶ）薬物の取り込みを改善するまたは調節するための方法（例えば、Ｌｏｒｅｎｚ，Ｓ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｔｈｅ  Ｓｏｆｔｅｒ  ａｎｄ  Ｍｏｒｅ  Ｈｙｄｒｏｐｈｏｂｉｃ  ｔｈｅ  Ｂｅｔｔｅｒ：  Ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｓｉｄｅ  Ｃｈａｉｎ  Ｏｆ  Ｐｏｌｙｍｅｔｈａｃｒｙｌａｔｅ  Ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ  ｆｏｒ  Ｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｕｐｔａｋｅ，”Ｍａｃｒｏｍｏｌ．Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ  １０：１０３４−１０４２（２０１０）、Ｍａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｄｉｓｔｉｎｃｔ  Ｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎ  Ｍｏｄｅｓ  ｏｆ  Ａｒｇｉｎｉｎｅ−Ｒｉｃｈ  Ｃｅｌｌ−Ｐｅｎｅｔｒａｔｉｎｇ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ｆｏｒ  Ｃａｒｇｏ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｉｎｔｏ  Ｔｕｍｏｒ  Ｃｅｌｌｓ，”Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．４１９：２００−２０８（２０１１）に記載のものなど。これらはそれぞれ、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
（ＸＶ）薬物担体として赤血球を使用する方法（例えば、Ｍｉｌｌａｎ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｄｒｕｇ，  Ｅｎｚｙｍｅ  ａｎｄ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｕｓｉｎｇ  Ｅｒｙｔｈｒｏｃｙｔｅｓ  Ａｓ  Ｃａｒｒｉｅｒｓ，”Ｊ．Ｃｏｎｔｒｏｌ  Ｒｅｌｅａｓｅ  ９５：２７−４９（２００４）に記載のものなど。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
【００９８】
ナノ粒子を使用したアミホスチン（ホスホロチオエート）の送達が以前報告されていたが（Ｐａｍｕｊｕｌａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｏｒａｌ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｏｆ  Ｓｐｒａｙ  Ｄｒｉｅｄ  ＰＬＧＡ／Ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ  Ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ，”Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．５６：１１１９−１１２５（２００４）、Ｐａｍｕｊｕｌａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｉｎ  Ｖｉｔｒｏ  Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ  Ｂｉｏｄｅｇｒａｄａｂｌｅ  Ｍｉｃｒｏｃａｐｓｕｌｅｓ，”Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｉｏｐｈａｒｍ．５７：２１３−２１８（２００４）、Ｐａｍｕｊｕｌａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｒａｄｉｏｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ  ｉｎ  Ｍｉｃｅ  Ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ  Ｏｒａｌ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｏｆ  Ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ  Ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ，”Ｉｎｔ．Ｊ．Ｒａｄｉａｔ．Ｂｉｏｌ．８１：２５１−２５７（２００５）、（Ｐａｍｕｊｕｌａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｒａｄｉｏｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｍｉｃｅ  ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ  ｏｒａｌ  ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  ＷＲ−１０６５．ＰＬＧＡ  ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ，”Ｉｎｔ．Ｊ．Ｒａｄｉａｔ．Ｂｉｏｌ．８４：９００−９０８（２００８）、これらはそれぞれ、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）、この送達システムは、本明細書に記載のアミノチオール複合体及び組成物とは異なるものであり、薬物活性化におけるアルカリホスファターゼへの依存と関連する課題を解決しない。本明細書に記載のアミノチオール複合体とは異なり、このような送達システムは、循環血中の偶発的薬物反応性の問題も、末梢部の標的細胞に対して遠位での薬物放出の問題も解決しない。この以前の試みも、細胞外部での薬物の活性化と関連した潜在的な毒性問題に対処できない。
【００９９】
薬物送達及び／または取り込みを変えるまたは改善するために使用可能な他の方法は、Ｓｔｏｇｎｉｅｗへの米国特許第６，４８９，３１２号に記載のとおり、界面活性剤の使用を含み、それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【０１００】
特定の実施形態では、アミノチオール（またはその類似体）の活性型は、治療有効性を得るために細胞質内に放出される。概して、細胞質内送達の後に薬物の活性型を放出する能力を含む任意の薬物送達システム及び／または薬物保護方法を使用することができる。上述の保護及び送達システムの１つ以上の選択の鍵は、薬物が標的細胞の細胞質内に送達されたら、送達／保護方法がアミノチオールの放出を可能にさせなければならないことを認識することである。したがって複合体をアミノチオールに結合することは、還元される（生物的に還元される）ジスルフィド結合をもたらすために、実施されなければならない（Ｂｅｎｈａｍ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｄｉｓｕｌｆｉｄｅ  Ｂｏｎｄｉｎｇ  Ｐａｔｔｅｒｎｓ  ａｎｄ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｔｏｐｏｌｏｇｉｅｓ，”Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｃｉ．２：４１−５４（１９９３）、Ｌｉｕ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｄｉｓｕｌｆｉｄｅ  Ｂｏｎｄ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ  ｏｆ  ＩｇＧ  Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ：Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ  Ｖａｒｉａｔｉｏｎｓ，  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  Ｐｏｓｓｉｂｌｅ  Ｉｍｐａｃｔｓ  ｔｏ  Ｓｔａｂｉｌｉｔｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｆｕｎｃｔｉｏｎ，”ｍＡｂｓ４：１７−２３（２０１２）、これらはそれぞれ、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
【０１０１】
本発明の別の態様は、アミノチオール治療を必要とする対象を治療する方法に関する。前記方法は、それを必要とする対象に、本明細書に記載のアミノチオール複合体のうちの１つ以上を投与することを含む。前記方法は、上述のように対象に（ｉ）式（ＩＶ）のアミノチオール複合体を投与することを含んでもよい。前記方法は、上述のように対象に（ｉ）式（Ｉ）のアミノチオール複合体を投与することを含んでもよい。
【０１０２】
本明細書で使用する場合、「治療」とは、疾患もしくは障害の症状のうちの１つ以上が改善されるまたは有利に変化される任意の方法を意味する。本明細書に記載のアミノチオール複合体の治療上有効な量は、例えば、疾患状態の開始を防ぐ、または疾患状態の期間を短縮させる、または１つ以上の症状の重篤度を低減させるのに十分な量であり得る。治療は、例えば対象のウイルスまたは病原微生物の抑制及び減弱を含む。
【０１０３】
アミホスチン、ホスホエノール、ならびに構造上関連するホスホロチオエート及び類似体は、化学保護剤、細胞保護剤、放射線防護剤、抗線維化剤、抗転移性、抗浸潤性及び抗突然変異性効果を有する抗腫瘍剤、酸化防止剤、フリーラジカル捕捉剤、抗ウイルス剤として、ならびに腫瘍の誘発を防ぎ、腫瘍細胞の増殖を遅延させ、抗腫瘍／抗癌作用を有して及び／または抗癌剤の効能を強化する薬剤として使用するとき、治療有効性を有すると示されてきた（Ｇｒｄｉｎａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ  Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｎｕｃｌｅａｒ  Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ  Ｆａｃｔｏｒ  Ｋａｐｐａｂ，Ｇｅｎｅ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ，ａｎｄ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  Ｂｙ  Ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ’ｓ  Ｆｒｅｅ  Ｔｈｉｏｌ  ｉｎ  Ｈｕｍａｎ  Ｍｉｃｒｏｖａｓｃｕｌａｒ  Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  ａｎｄ  Ｇｌｉｏｍａ  Ｃｅｌｌｓ，”Ｓｅｍｉｎ．Ｒａｄｉａｔ．Ｏｎｃｏｌ．１２：１０３−１１１（２００２）、Ｇｒｄｉｎａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓ  ｂｅｔｗｅｅｎ  Ｃｙｔｏｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｍｕｔａｔｉｏｎ  Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ  ｂｙ  ＷＲ−１０６５，”Ｍｉｌ  Ｍｅｄ  １６７：５１−５３（２００２）、Ｇｒｄｉｎａ  ｅｔ  ａｌ．“Ｒａｄｉｏｐｒｏｔｅｃｔｏｒｓ：Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｓｔａｔｕｓ  ａｎｄ  Ｎｅｗ  Ｄｉｒｅｃｔｉｏｎｓ，”Ｒａｄｉａｔ．Ｒｅｓ．１６３：７０４−７０５（２００２）、Ｐｏｉｒｉｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，“Ａｎｔｉｒｅｔｒｏｖｉｒａｌ  Ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｍｉｎｏｔｈｉｏｌ  ＷＲ１０６５  Ａｇａｉｎｓｔ  Ｈｕｍａｎ  Ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ  Ｖｉｒｕｓ  （ＨＩＶ−１）ｉｎ  Ｖｉｔｒｏ  ａｎｄ  Ｓｉｍｉａｎ  Ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ  Ｖｉｒｕｓ（ＳＩＶ）Ｅｘ  Ｖｉｖｏ，”ＡＩＤＳ  Ｒｅｓ．Ｔｈｅｒ．６：２４（２００９）、Ｗａｌｋｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，“ＷＲ１０６５  Ｍｉｔｉｇａｔｅｓ  ＡＺＴ−ｄｄＩ−Ｉｎｄｕｃｅｄ  Ｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓ  ａｎｄ  Ｉｎｈｉｂｉｔｓ  Ｖｉｒａｌ  Ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ，”Ｅｎｖｉｒｏｎ．Ｍｏｌ．Ｍｕｔａｇｅｎ．５０：４６０−４７２（２００９）、これらはそれぞれ、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。実験の結果は、ＷＲ−１０６５（アミホスチンの活性代謝物）がＨＩＶ、インフルエンザウイルスＡ及びＢ、ならびにアデノウイルスの３つの種に対して抗ウイルス効果を提示したことを示した。その後の研究はＳＩＶに対する有効性も示し（Ｐｏｉｒｉｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，“Ａｎｔｉｒｅｔｒｏｖｉｒａｌ  Ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｍｉｎｏｔｈｉｏｌ  ＷＲ１０６５  Ａｇａｉｎｓｔ  Ｈｕｍａｎ  Ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ  Ｖｉｒｕｓ（ＨＩＶ−１）ｉｎ  Ｖｉｔｒｏ  ａｎｄ  Ｓｉｍｉａｎ  Ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ  Ｖｉｒｕｓ（ＳＩＶ）Ｅｘ  Ｖｉｖｏ，”ＡＩＤＳ  Ｒｅｓ．Ｔｈｅｒ．６：２４（２００９）、それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）、及びＮＩＡＩＤ／ＤＭＩＤ契約研究所は、エボラウイルスに対する効果を示した。
【０１０４】
特定の実施形態において、対象は、抗ウイルス剤、化学保護剤、細胞保護剤、放射線防護剤、抗線維化剤、抗腫瘍剤、酸化防止剤、またはこれらの組み合わせを用いた治療を必要とするものである。
【０１０５】
特定の実施形態において、対象はＨＩＶに感染していない。
【０１０６】
特定の実施形態において、対象は抗菌療法を必要とし、かつアミノチオール複合体またはアミノチオール複合体を含む医薬組成物は、対象において１種類以上の病原微生物を殺すのに効果的な条件下で投与される。微生物は、例えばバクテリア、酵母、真菌または寄生虫でもよい。寄生虫は、細胞内寄生虫または細胞外寄生虫でもよい。
【０１０７】
一実施形態において、対象はウイルスに感染しており、アミノチオール複合体（またはアミノチオール複合体を含む医薬組成物）はウイルスを治療するのに効果的な条件下で投与される。特定の実施形態において、本明細書に記載のアミノチオール複合体の治療上有効な量は、対象の標的ウイルスのウイルス量を減らすのに十分な量である。
【０１０８】
対象は、ＨＩＶ、オルソミクソウイルス、インフルエンザウイルス、アデノウイルスまたはこれらの組み合わせに感染したものでもよい。一実施形態において、対象はＨＩＶに感染していない。
【０１０９】
一実施形態において、対象はインフルエンザに感染しているものである。インフルエンザウイルスは、例えばＨ１Ｎ１またはＨ３Ｎ２でもよい。
【０１１０】
一実施形態において、対象はアデノウイルスに感染しているものである。アデノウイルスは、Ｂ、ＣまたはＥ種でもよい。
【０１１１】
一実施形態において、対象はエボラウイルスに感染しているものである。
【０１１２】
上述したとおり、本発明の一態様は、新生物状態を治療するのに効果的な条件下で、アミノチオール複合体、または本明細書に記載のアミノチオール複合体を含む医薬組成物を投与することによって、対象の新生物状態を治療する方法に関する。本発明の別の態様は、アミノチオール複合体、または新生物状態を発症する危険性を低減するのに効果的な条件下で本明細書に記載のアミノチオール複合体を含む医薬組成物を投与することによって、新生物状態を発症する危険性がある対象を治療する方法に関する。新生物状態を発症する危険性があるこのような対象は、例えば診断のための繰り返し放射線被曝を受ける対象を含む。
【０１１３】
例えばインビトロ試験により特定される感受性腫瘍型は、乳癌、卵巣癌、悪性黒色腫（Ｂｒｅｎｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｖａｒｉａｂｌｅ  Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ  ｏｆ  Ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ  ｉｎ  Ｍａｌｉｇｎａｎｔ  ａｎｄ  Ｎｏｎ−Ｍａｌｉｇｎａｎｔ  Ｃｅｌｌ  Ｌｉｎｅｓ，”Ｏｎｃｏｌ．Ｒｅｐ．１０（５）：１６０９−１３（２００３）、それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）、卵巣癌（Ｃａｌａｂｒｏ−Ｊｏｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｔｈｅ  Ｌｉｍｉｔｓ  ｔｏ  Ｒａｄｉｏｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｃｈｉｎｅｓｅ  Ｈａｍｓｔｅｒ  Ｖ７９  Ｃｅｌｌｓ  ｂｙ  ＷＲ−１０６５  Ｕｎｄｅｒ  Ａｅｒｏｂｉｃ  Ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ，”Ｒａｄｉａｔ．Ｒｅｓ．１４９：５５０−５５９（１９９８）（“Ｃａｌａｂｒｏ−Ｊｏｎｅｓ”）、それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）、子宮頸癌細胞（ＨｅＬａ細胞及びＭｅ−１８０−ＶＣＩＩ）（Ｃａｌａｂｒｏ−Ｊｏｎｅｓを参照）、結腸癌（Ｃａｌａｂｒｏ−Ｊｏｎｅｓを参照）、肺癌（Ａ５４９細胞及びＨ１２９９）（Ｄｒ．Ａ．Ｋａｊｏｎからの口頭でのやりとり、Ｐａｔａｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ  ｉｎ  Ｈｕｍａｎ  Ｌｕｎｇ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｌｌｓ  Ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  Ｗｉｔｈ  Ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ  ａｎｄ  ａｎ  Ａｄｅｎｏｖｉｒａｌ  Ｖｅｃｔｏｒ  Ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ  Ｗｉｌｄ−Ｔｙｐｅ  ｐ５３，”Ｃａｎｃｅｒ  Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒ．１３（８）：８０６−１４（２００６）、それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）、ならびに骨髄異形成症候群（Ｒｉｂｉｚｚｉ  ｅｔ  ａｌ．，“Ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ  Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ  ａｎｄ  Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ  ｉｎ  ａ  Ｈｕｍａｎ  Ｍｙｅｌｏｄｙｓｐｌａｓｔｉｃ  Ｃｅｌｌ  Ｌｉｎｅ，”Ｌｅｕｋ．Ｒｅｓ．２４（６）：５１９−２５（２０００）、それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）を含む。インビボ試験により特定した感受性腫瘍型は、例えば転移性黒色腫（Ｇｌｏｖｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，“ＷＲ−２７２１  ａｎｄ  Ｈｉｇｈ−Ｄｏｓｅ  Ｃｉｓｐｌａｔｉｎ：Ａｎ  Ａｃｔｉｖｅ  Ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ  Ｍｅｌａｎｏｍａ，”Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．５（４）：５７４−８（１９８７）、それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）、放射線誘発性腫瘍型（Ｇｒｄｉｎａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ  Ａｇａｉｎｓｔ  Ｌａｔｅ  Ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  Ｒａｄｉａｔｉｏｎ  ｂｙ  Ｓ−２−（３−ａｍｉｎｏｐｒｏｐｙｌａｍｉｎｏ）−ｅｔｈｙｌｐｈｏｓｐｈｏｒｏｔｈｉｏｉｃ  Ａｃｉｄ，”Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．５１（１６）：４１２５−３０（１９９１）、それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）（マウスの広範囲にわたる放射線誘発腫瘍型の１６０の腫瘍分類コードを表すすべての腫瘍の発生を、アミホスチンが減らしたと報告する）、リンパ網内系腫瘍（例えば、線維肉腫−リンパ節、組織球白血病、組織球リンパ腫、リンパ球性リンパ芽球性リンパ腫、骨髄性白血病、形質細胞腫瘍、未���化白血病、未分化リンパ腫、未分類リンパ腫、混合組織球リンパ球性白血病及び混合組織球リンパ球性リンパ腫）（Ｇｒｄｉｎａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ  Ａｇａｉｎｓｔ  Ｌａｔｅ  Ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  Ｒａｄｉａｔｉｏｎ  ｂｙ  Ｓ−２−（３−ａｍｉｎｏｐｒｏｐｙｌａｍｉｎｏ）−ｅｔｈｙｌｐｈｏｓｐｈｏｒｏｔｈｉｏｉｃ  Ａｃｉｄ，”Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．５１（１６）：４１２５−３０（１９９１）、それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）、放射線誘発乳房腫瘍（Ｉｎａｎｏ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ  Ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  ＷＲ−２７２１  ａｎｄ  Ｃｙｓｔｅａｍｉｎｅ  ｏｎ  Ｔｕｍｏｒ  Ｉｎｉｔｉａｔｉｏｎ  ｉｎ  Ｍａｍｍａｒｙ  Ｇｌａｎｄｓ  ｏｆ  Ｐｒｅｇｎａｎｔ  Ｒａｔｓ  ｂｙ  Ｒａｄｉａｔｉｏｎ，”Ｒａｄｉａｔ  Ｒｅｓ．１５３（１）：６８−７４（２０００）、それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）、放射線誘発肉腫（Ｍｉｌａｓ  ｅｔ  ａｌ．“Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｒａｄｉａｔｉｏｎ  Ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ  ｉｎ  Ｍｉｃｅ  ｂｙ  Ｓ−２−（３−ａｍｉｎｏｐｒｏｐｙｌａｍｉｎｏ）−ｅｔｈｙｌｐｈｏｓｐｈｏｒｏｔｈｉｏｉｃ  Ａｃｉｄ，”Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．４４（１２Ｐｔ  １）：５５６７−９（１９８４）、それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）、中性子誘発腫瘍形成能（Ｇｒｄｉｎａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ  ｂｙ  ＷＲ−１５１３２７  Ａｇａｉｎｓｔ  Ｌａｔｅ−Ｅｆｆｅｃｔ  Ｄａｍａｇｅ  Ｆｒｏｍ  Ｆｉｓｓｉｏｎ−Ｓｐｅｃｔｒｕｍ  Ｎｅｕｔｒｏｎｓ，”Ｒａｄｉａｔ．Ｒｅｓ．１２８（１  Ｓｕｐｐｌ）：Ｓ１２４−７（１９９１）（照射の３０分前に投与されるとき、ＷＲ１０６５類似体ＷＲ１５１３２７が、雄及び雌マウスの核分裂スペクトル中性子誘発型腫瘍誘発を低減したと報告する）及びＣａｒｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｉｎ  Ｖｉｖｏ  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ  ｂｙ  ｔｈｅ  Ａｍｉｎｏｔｈｉｏｌ  ＷＲ−２７２１  Ａｇａｉｎｓｔ  Ｎｅｕｔｒｏｎ−Ｉｎｄｕｃｅｄ  Ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ，”Ｉｎｔ．Ｊ．Ｒａｄｉａｔ．Ｂｉｏｌ．６１（５）：５６７−７６（１９９２）（ＷＲ２７２１が、雄及び雌Ｂ６Ｃ３Ｆ１マウスの中性子誘発型腫瘍誘導を防いだと報告する）、これらはそれぞれ、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）、骨髄異形成症候群（Ｍａｔｈｅｗ  ｅｔ  ａｌ．，“Ａ  Ｐｈａｓｅ  ＩＩ  Ｓｔｕｄｙ  ｏｆ  Ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ  ｉｎ  Ｃｈｉｌｄｒｅｎ  Ｗｉｔｈ  Ｍｙｅｌｏｄｙｓｐｌａｓｔｉｃ  Ｓｙｎｄｒｏｍｅ：Ａ  Ｒｅｐｏｒｔ  Ｆｒｏｍ  ｔｈｅ  Ｃｈｉｌｄｒｅｎ’ｓ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ  Ｇｒｏｕｐ  Ｓｔｕｄｙ（ＡＡＭＬ０１２１），”Ｐｅｄｉａｔｒ．Ｂｌｏｏｄ  Ｃａｎｃｅｒ５７（７）：１２３０−２（２０１１）、それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）ならびに動物モデルの放射線または化学療法により誘発される二次性腫瘍（Ｇｒｄｉｎａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ  Ａｇａｉｎｓｔ  Ｌａｔｅ  Ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  Ｒａｄｉａｔｉｏｎ  ｂｙ  Ｓ−２−（３−ａｍｉｎｏｐｒｏｐｙｌａｍｉｎｏ）−ｅｔｈｙｌｐｈｏｓｐｈｏｒｏｔｈ���ｏｉｃ  Ａｃｉｄ，”Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．５１（１６）：４１２５−３０（１９９１）、Ｇｒｄｉｎａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｒａｄｉｏｐｒｏｔｅｃｔａｎｔｓ：Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｓｔａｔｕｓ  ａｎｄ  ｎｅｗ  Ｄｉｒｅｃｔｉｏｎｓ，”Ｏｎｃｏｌｏｇｙ６３（Ｓｕｐｐｌ．２）：２−１０（２００２）、Ｇｒｄｉｎａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｒａｄｉｏｐｒｏｔｅｃｔｏｒｓ  ｉｎ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  Ｔｈｅｒａｐｙ  ｔｏ  Ｒｅｄｕｃｅ  Ｒｉｓｋ  ｉｎ  Ｓｅｃｏｎｄａｒｙ  Ｔｕｍｏｒ  Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ，”Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｈｅｒ．３９（１−３）：２１−５（１９８８）、これらはそれぞれ、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）を含む。
【０１１４】
更にアミノチオール（例えば、アミホスチン（ＷＲ２７２１）及びＷＲ１０６５）の抗癌作用は、十分に確立している。代表的な抗癌作用は、抗腫瘍性形質転換、正常細胞の抗突然変異誘発、抗脈管形成、腫瘍細胞増殖の抑制または低減、腫瘍細胞浸潤の抑制または低減、及び腫瘍細胞転移の抑制または低減を含む。インビトロまたはインビボ実験により特定した代表的な抗癌作用を以下にまとめた。
【０１１５】
抗腫瘍性形質転換：インビトロ実験で、Ｖ７９細胞はガンマ線で照射され、同時に１ミリＭのＷＲ１０６５に曝露され、腫瘍性形質転換の発現率を評価した（Ｈｉｌｌ  ｅｔ  ａｌ．，“２−［（Ａｍｉｎｏｐｒｏｐｙｌ）ａｍｉｎｏ］ｅｔｈａｎｅｔｈｉｏｌ（ＷＲ１０６５）ｉｓ  Ａｎｔｉ−Ｎｅｏｐｌａｓｔｉｃ  ａｎｄ  Ａｎｔｉ−Ｍｕｔａｇｅｎｉｃ  Ｗｈｅｎ  Ｇｉｖｅｎ  Ｄｕｒｉｎｇ  ６０Ｃｏ  Ｇａｍｍａ−Ｒａｙ  Ｉｒｒａｄｉａｔｉｏｎ，”Ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ  ７（４）：６６５−８（１９８６）、それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）。細胞生存度が変わらなかった場合でも、腫瘍性形質転換は著しく減少した。インビトロ実験で、ＷＲ１０６５及びＷＲ１５１３２６はそれぞれ１ミリＭで、核分裂中性子への曝露によって誘発される新生物変換からＣ３Ｈ／１０Ｔ１／２細胞を保護することを示し、この効果は２つの異なる放射線被曝プロトコルにおいて観察された（Ｂａｌｃｅｒ−Ｋｕｂｉｃｚｅｋ  ｅｔ  ａｌ，“Ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  ＷＲ−１０６５  ａｎｄ  ＷＲ−１５１３２６  ｏｎ  Ｓｕｒｖｉｖａｌ  ａｎｄ  Ｎｅｏｐｌａｓｔｉｃ  Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ  ｉｎ  Ｃ３Ｈ／１０Ｔ１／２  Ｃｅｌｌｓ  Ｅｘｐｏｓｅｄ  ｔｏ  ＴＲＩＧＡ  ｏｒ  ＪＡＮＵＳ  Ｆｉｓｓｉｏｎ  Ｎｅｕｔｒｏｎｓ，”Ｉｎｔ．Ｊ．Ｒａｄｉａｔ．Ｂｉｏｌ．６３（１）：３７−４６（１９９３）、それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）。細胞は、放射線曝露の前、その間及びその後にＷＲ１０６５またはＷＲ１５１３２６に曝露された。ＷＲ１０６５の保護係数は３．２３であり、一方でＷＲ１５１３２６では１．８だった。インビボ実験で、体重１ｇ当たり１００マイクログラムで投与されるＷＲ２７２１は、若年ラットを放射線誘発性肝増殖巣の形成から保護した。この効果は、肝細胞の病巣形成に最も影響されやすい性別、雌ラットでより顕著だった（Ｇｒｄｉｎａ  ｅｔ  ａｌ，“Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  Ｓ−２−（３−ａｍｉｎｏｐｒｏｐｙｌａｍｉｎｏ）ｅｔｈｙｌｐｈｏｓｐｈｏｒｏｔｈｉｏｉｃ  Ａｃｉｄ  Ａｇａｉｎｓｔ  Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ａｌｔｅｒｅｄ  Ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ  Ｆｏｃｉ  ｉｎ  Ｒａｔｓ  Ｔｒｅａｔｅｄ  Ｏｎｃｅ  Ｗｉｔｈ  Ｇａｍｍａ−Ｒａｄｉａｔｉｏｎ  Ｗｉｔｈｉｎ  ｏｎｅ  ｄａｙ  Ａｆｔｅｒ  Ｂｉｒｔｈ，”Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．４５（１１  Ｐｔ  １）：５３７９−８１（１９８５）、それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）。インビボ実験において、ＷＲ２７２１曝露は、放射線だけを受けたマウスの８７％と比較して、ＷＲ２７２１プラス放射線を受けたマウスの２６％が腫瘍を発症し、マウスモデルの放射線誘発性細胞形質転換を抑制した（Ｍｉｌａｓ  ｅｔ  ａｌ．“Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｒａｄｉａｔｉｏｎ  Ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ  ｉｎ  Ｍｉｃｅ  ｂｙ  Ｓ−２−（３−ａｍｉｎｏｐｒｏｐｙｌａｍｉｎｏ）−ｅｔｈｙｌｐｈｏｓｐｈｏｒｏｔｈｉｏｉｃ  Ａｃｉｄ，”Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．４４（１２  Ｐｔ  １）：５５６７−９（１９８４）、それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）。ＷＲ２７２１が、マウスモデルの全身照射プラスシクロホスファミドによる化学療法の損傷効果から免疫系細胞を保護できるか判定する（線維肉腫を使用した肺コロニー形成及び増加した腫瘍生着／播種量）ために、インビボ実験を実施した（Ｍｉｌａｓ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ  ｂｙ  Ｓ−２−（３−ａｍｉｎｏｐｒｏｐｙｌａｍｉｎｏ）ｅｔｈｙｌｐｈｏｓｐｈｏｒｏｔｈｉｏｉｃ  Ａｃｉｄ  Ａｇａｉｎｓｔ  Ｒａｄｉａｔｉｏｎ−  ａｎｄ  Ｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ−Ｉｎｄｕｃｅｄ  Ａｔｔｅｎｕａｔｉｏｎ  ｉｎ  Ａｎｔｉｔｕｍｏｒ  Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ，”Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．４４（６）：２３８２−６（１９８４）、それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）。ＷＲ２７２１がＣ３Ｈｆ／Ｋａｍマウスの全身照射の効果を強化する、腫瘍生着をほぼ完全に除去することを、著者は見いだした。インビボ実験で、雌Ｃ５７／ＢＬ／６ＪＡＮＬ×ＢＡＬＢ／ｃＪＡＮＬＦｌマウスを、０、２０６ｃＧｙのガンマ線、４１７ｃＧｙのガンマ線または４００ｍｇ／ｋｇのＷＲ２７２１を伴う同じ照射量の放射線に曝露した。動物は死亡するまでその状態を続けた（Ｇｒｄｉｎａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ  Ａｇａｉｎｓｔ  Ｌａｔｅ  Ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  Ｒａｄｉａｔｉｏｎ  ｂｙ  Ｓ−２−（３−ａｍｉｎｏｐｒｏｐｙｌａｍｉｎｏ）−ｅｔｈｙｌｐｈｏｓｐｈｏｒｏｔｈｉｏｉｃ  Ａｃｉｄ，”Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．５１（１６）：４１２５−３０（１９９１）、それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）。照射した動物の９０％は腫瘍で死亡した。有意な保護は、２０６ｃＧｙによる照射を受けたＷＲ２７２１処置マウスで観察された。リンパ網内系腫瘍は、保護効果に特に影響を受けた。全体の期待寿命は６５日間を延びた。インビボ実験において、アミホスチンは、妊娠ラットの放射線誘発性乳房腫瘍を減らすことを示した（Ｇｒｄｉｎａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ：Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ｏｆ  Ａｃｔｉｏｎ  Ｕｎｄｅｒｌｙｉｎｇ  Ｃｙｔｏｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｃｈｅｍｏｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ，”Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂｏｌ．Ｄｒｕｇ  Ｉｎｔｅｒａｃｔ．１６（４）：２３７−７９（２０００）、それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
【０１１６】
正常な細胞の抗突然変異誘発：Ｖ７９細胞にＷＲ１０６５を４ミリＭ及び同時にガンマ線照射を使用するインビトロ実験で、ＨＰＲＴ突然変異が著しく低減し、細胞生存度が増加した（Ｈｉｌｌ  ｅｔ  ａｌ．，“２−［（Ａｍｉｎｏｐｒｏｐｙｌ）ａｍｉｎｏ］ｅｔｈａｎｅｔｈｉｏｌ（ＷＲ１０６５）ｉｓ  Ａｎｔｉ−Ｎｅｏｐｌａｓｔｉｃ  ａｎｄ  Ａｎｔｉ−Ｍｕｔａｇｅｎｉｃ  Ｗｈｅｎ  Ｇｉｖｅｎ  Ｄｕｒｉｎｇ  ６０Ｃｏ  Ｇａｍｍａ−Ｒａｙ  Ｉｒｒａｄｉａｔｉｏｎ，”Ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ  ７（４）：６６５−８（１９８６）、それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）。インビトロ実験で、４ミリＭの投与量は細胞内のグルタチオン濃度及びシステイン濃度の有意な増加をもたらし、これらは、６０Ｃｏガンマ光子及び中性子放射線に対する有意な細胞保護及び抗突然変異誘発と関係していた（Ｇｒｄｉｎａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｔｈｉｏｌ  ａｎｄ  Ｄｉｓｕｌｆｉｄｅ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｒａｄｉａｔｉｏｎ  Ｐｒｏｔｅｃｔｏｒ  ａｎｄ  Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  Ｃｈｅｍｏｐｒｅｖｅｎｔｉｖｅ  Ａｇｅｎｔ  ＷＲ−２７２１  ａｒｅ  Ｌｉｎｋｅｄ  ｔｏ  Ｂｏｔｈ  ｉｔｓ  Ａｎｔｉ−Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ  ａｎｄ  Ａｎｔｉ−Ｍｕｔａｇｅｎｉｃ  Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ｏｆ  Ａｃｔｉｏｎ，”Ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ  １６：７６７−７４（１９９５）、それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。インビトロ実験で、ＷＲ１０６５は、非周期細胞の保護を示して、電離放射線が原因のＧ０期Ｔリンパ球を突然変異誘発から保護した（Ｃｌａｒｋ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｈｐｒｔ  Ｍｕｔａｔｉｏｎｓ  ｉｎ  Ｈｕｍａｎ  Ｔ−Ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ  Ｒｅｆｌｅｃｔ  Ｒａｄｉｏｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｍｉｎｏｔｈｉｏｌ，ＷＲ−１０６５，”Ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ  １７（１２），２６４７−２６５３（１９９６）、それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）。Ｇ０期Ｔリンパ球のインビトロ実験で、ＷＲ１０６５は、肉眼的構造変化を示す突然変異の誘発を低減した（Ｃｌａｒｋ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｔｈｅ  Ａｍｉｎｏｔｈｉｏｌ  ＷＲ−１０６５  Ｐｒｏｔｅｃｔｓ  Ｔ  Ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ  Ｆｒｏｍ  Ｉｏｎｉｚｉｎｇ  Ｒａｄｉａｔｉｏｎ−Ｉｎｄｕｃｅｄ  Ｄｅｌｅｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ＨＰＲＴ  Ｇｅｎｅ，”Ｃａｎｃｅｒ  Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌ．Ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ．Ｐｒｅｖ．６（１２）：１０３３−７（１９９７）、それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）。インビトロ実験で、アミホスチンは、マウス脾細胞でＨＰＲＴ遺伝子のシクロホスファミド誘発突然変異を１／８まで減らした（Ｇｒｄｉｎａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｃｈｅｍｏｐｒｅｖｅｎｔｉｖｅ  Ｄｏｓｅｓ  ｏｆ  Ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ  Ｃｏｎｆｅｒ  ｎｏ  Ｃｙｔｏｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ  ｔｏ  Ｔｕｍｏｒ  Ｎｏｄｕｌｅｓ  Ｇｒｏｗｉｎｇ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｌｕｎｇｓ  ｏｆ  Ｍｉｃｅ  Ｔｒｅａｔｅｄ  Ｗｉｔｈ  Ｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ，”Ｓｅｍｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．２６（２  Ｓｕｐｐｌ  ７）：２２−７（１９９９）、それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）。肺に��ロニーを形成することを意図する線維肉腫細胞を静脈内注入されたマウスモデルを使用するインビトロ実験で、シクロホスファミド曝露が原因のＨＰＲＴ突然変異を防ぐＷＲ１０６５の能力を評価した（Ｋａｔａｏｋａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ａｎｔｉｍｕｔａｇｅｎｉｃ  Ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  Ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ：Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，”Ｓｅｍｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．２３（４  Ｓｕｐｐｌ  ８）：５３−７（１９９６）、それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）。１００ｍｇ／ｋｇで、ＷＲ１０６５は、シクロホスファミドの抗癌作用を低減しなかったが、この化学療法薬により誘発されるＨＰＲＴ突然変異頻度を著しく減らした。インビトロ実験で、ＷＲ１０６５が、４ミリＭの濃度で、化学療法薬シスＤＤＰへの曝露が原因のＨＰＲＴ遺伝子の突然変異の誘発からの有意な保護を提供することが判明した（Ｎａｇｙ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ  Ａｇａｉｎｓｔ  ｃｉｓ−ｄｉａｍｍｉｎｅｄｉｃｈｌｏｒｏｐｌａｔｉｎｕｍ  Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ  ａｎｄ  Ｍｕｔａｇｅｎｉｃｉｔｙ  ｉｎ  Ｖ７９  Ｃｅｌｌｓ  ｂｙ  ２−［（ａｍｉｎｏｐｒｏｐｙｌ）ａｍｉｎｏ］ｅｔｈａｎｅｔｈｉｏｌ，”Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．４６（３）：１１３２−５（１９８６）、それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）。インビトロ実験で、４ミリＭのＷＲ１０６５の能力は、ＨＰＲＴ遺伝子の突然変異誘発を防ぐために、１本鎖切断の誘発、及びブレオマイシン、窒素マスタード、シスＤＤＰまたはＸ線放射による細胞殺傷を評価した（Ｎａｇｙ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  ２−［（ａｍｉｎｏｐｒｏｐｙｌ）ａｍｉｎｏ］Ｅｔｈａｎｅｔｈｉｏｌ  Ａｇａｉｎｓｔ  Ｂｌｅｏｍｙｃｉｎ  ａｎｄ  Ｎｉｔｒｏｇｅｎ  Ｍｕｓｔａｒｄ−Ｉｎｄｕｃｅｄ  Ｍｕｔａｇｅｎｉｃｉｔｙ  ｉｎ  Ｖ７９  Ｃｅｌｌｓ，”Ｉｎｔ．Ｊ．Ｒａｄｉａｔ．Ｏｎｃｏｌ．１２（８）：１４７５−８，（１９８６．）、それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）。ＷＲ１０６５は、各薬剤のこれらの効果のすべてから保護したが、保護の程度は薬剤によって変化した。インビトロ実験で、ＷＲ１０６５及びＷＲ１５１３２６は、核分裂スペクトル中性子への曝露が原因のＨＰＲＴ遺伝子での突然変異誘発を防ぐ能力を試験した（Ｇｒｄｉｎａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ  ｂｙ  ＷＲ１０６５  ａｎｄ  ＷＲ１５１３２６  Ａｇａｉｎｓｔ  Ｆｉｓｓｉｏｎ−Ｎｅｕｔｒｏｎ−Ｉｎｄｕｃｅｄ  Ｍｕｔａｔｉｏｎｓ  ａｔ  ｔｈｅ  ＨＧＰＲＴ  Ｌｏｃｕｓ  ｉｎ  Ｖ７９  Ｃｅｌｌｓ，”Ｒａｄｉａｔ．Ｒｅｓ．１１７（３）：５００−１０（１９８９）、それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）。両方の薬剤が突然変異誘発を防ぎ、突然変異を防ぐ点で、ＷＲ１０６５はＷＲ１５１３２６より効果的であった。Ｂ６Ｃ３Ｆ１雄マウスを使用したインビボ実験で、ＪＡＮＵＳ核分裂スペクトル中性子による突然変異誘発を防ぐＷＲ２７２１の能力は、４００ｍｇ／ｋｇの用量で評価した（Ｇｒｄｉｎａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｔｈｅ  Ｒａｄｉｏｐｒｏｔｅｃｔｏｒ  ＷＲ−２７２１  Ｒｅｄｕｃｅｓ  Ｎｅｕｔｒｏｎ−Ｉｎｄｕｃ��ｄ  Ｍｕｔａｔｉｏｎｓ  ａｔ  ｔｈｅ  ｈｙｐｏｘａｎｔｈｉｎｅ−ｇｕａｎｉｎｅ  Ｐｈｏｓｐｈｏｒｉｂｏｓｙｌ  Ｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ  Ｌｏｃｕｓ  ｉｎ  Ｍｏｕｓｅ  Ｓｐｌｅｎｏｃｙｔｅｓ  Ｗｈｅｎ  Ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｅｄ  Ｐｒｉｏｒ  ｔｏ  ｏｒ  Ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ  Ｉｒｒａｄｉａｔｉｏｎ，”Ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ  １３（５）：８１１−４（１９９２）、それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）。ＷＲ１０６５は、照射前に、照射中に、または照射後に投与されるとき、突然変異頻度を減らした。しかし、投与される用量が４００ｍｇ／ｋｇの代わりに５０ｍｇ／ｋｇのとき、最も高い低減因子を得た。
【０１１７】
抗脈管形成：アミホスチンは、毒性の徴候と関連していない用量で、ニワトリ胚漿尿膜のＶＥＧＦアイソフォームＶＥＧＦ（１６５）及びＶＥＧＦ（１９０）のｍＲＮＡ濃度、ならびに脈管形成を減らした（Ｇｉａｎｎｏｐｏｕｌｏｕ  ｅｔ  ａｌ．，“Ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ  ｈａｓ  Ａｎｔｉａｎｇｉｏｇｅｎｉｃ  Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ  ｉｎ  Ｖｉｔｒｏ  ｂｙ  Ｃｈａｎｇｉｎｇ  ｔｈｅ  Ｒｅｄｏｘ  Ｓｔａｔｕｓ  ｏｆ  Ｈｕｍａｎ  Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  Ｃｅｌｌｓ，”Ｆｒｅｅ  Ｒａｄｉｃ．Ｒｅｓ．３７（１１）：１１９１−９（２００３）、それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）。ＷＲ２７２１は、誘発性一酸化窒素シンターゼのｍＲＮＡ濃度も低下させて、更に「対応する遺伝子の発現に影響を及ぼさずに」同じモデルのラミニン及びコラーゲン沈着量を減らした。同上を参照のこと。ＭＭＰ−２タンパク質レベルは影響を受けなかったが、遺伝子発現は低減した。最後にプラスミン活性は、アミホスチンによって増加した。これらの効果はＷＲ１０６５が脈管形成を阻害するという証拠を示すと、著者は結論づけた。別の試験で、アミホスチンは、血清アンジオスタチン濃度を４倍上昇させることを示した（Ｇｒｄｉｎａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓ  Ｍｅｔａｓｔａｓｅｓ  Ｆｏｒｍａｔｉｏｎ  ｂｙ  Ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ，”Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ  ９７（２）：１３５−４１（２００２）、それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）。Ｇｒｄｉｎａらで使用した、同じインビボマウスモデルシステムを使用して（Ｇｒｄｉｎａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓ  Ｍｅｔａｓｔａｓｅｓ  Ｆｏｒｍａｔｉｏｎ  ｂｙ  Ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ，”Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ  ９７（２）：１３５−４１（２００２）、それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）、２００ｍｇ／ｍｌ（５０ｍｇ／ｍｌの代わりに）のＷＲ２７２１の用量がアンジオスタチン濃度を変えないことを、著者は見いだした（Ｇｒｄｉｎａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ａｎｔｉｍｅｔａｓｔａｔｉｃ  Ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｎｅｓｓ  ｏｆ  Ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ  Ｔｈｅｒａｐｙ  Ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ  Ｓｕｒｇｉｃａｌ  Ｒｅｍｏｖａｌ  ｏｆ  Ｓａ−ＮＨ  Ｔｕｍｏｒｓ  ｉｎ  Ｍｉｃｅ，”Ｓｅｍｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．２９（６  Ｓｕｐｐｌ  １９）：２２−８（２００２）、それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）。これらの効果の機序がレドックスによって駆動されるプロセスであると、著者は結論づけた。
【０１１８】
腫瘍細胞増殖の抑制または低減：放射線誘発性肉腫に関する試験で、マウスの１／２を、アミホスチンに曝露して、３０分後、すべてのマウス（対照及びアミホスチン処置）の右後肢を３４００〜５７００ラドに曝露した（Ｍｉｌａｓ  ｅｔ  ａｌ．“Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｒａｄｉａｔｉｏｎ  Ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ  ｉｎ  Ｍｉｃｅ  ｂｙ  Ｓ−２−（３−ａｍｉｎｏｐｒｏｐｙｌａｍｉｎｏ）−ｅｔｈｙｌｐｈｏｓｐｈｏｒｏｔｈｉｏｉｃ  Ａｃｉｄ，”Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．４４（１２  Ｐｔ  １）：５５６７−９（１９８４）、それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）。腫瘍細胞の成長速度は、放射線だけに曝露したマウスと比較して、ＷＲ−２７２１プラス放射線に曝露したマウスで低下した。Ｓａ−ＮＨ肉腫細胞に関する試験で、Ｃ３Ｈｆ／ＫａｍマウスはＳａ−ＮＨ肉腫細胞を注入し、腫瘍が成長すると６日間１日おきに５０ｍｇ／ｋｇのＷＲ２７２１で処置した。それから腫瘍を肢切断によって除去して、ＷＲ２７２１を手術後すぐ及び２日後に再度投与した（Ｇｒｄｉｎａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓ  Ｍｅｔａｓｔａｓｅｓ  Ｆｏｒｍａｔｉｏｎ  ｂｙ  Ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ，”Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ  ９７（２）：１３５−４１（２００２）、それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）。この点に対して結果は、腫瘍が切断に理想的なサイズに達するため１２〜１３日間、アミホスチンが腫瘍増殖のわずかな遅延を誘発することが可能であることを示した。チャイニーズハムスター卵巣細胞（ＣＨＯ細胞）を使用している研究で、ＷＲ１０６５ｍは、チャイニーズハムスター卵巣細胞に４ミリＭで投与するとき、Ｇ２／Ｍ期で細胞周期の遅延をもたらした（Ｇｒｄｉｎａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｔｏｐｏｉｓｏｍｅｒａｓｅ  ＩＩ  Ａｌｐｈａ  Ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｉｎ  ＣＨＯ  Ｋ１  Ｃｅｌｌｓ  ｂｙ  ２−［（ａｍｉｎｏｐｒｏｐｙｌ）ａｍｉｎｏ］ｅｔｈａｎｅｔｈｉｏｌ（ＷＲ−１０６５），”Ｒａｄｉａｔ．Ｒｅｓ．１３８（１）：４４−５２（１９９４）、それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）。ＣＨＯ細胞に関する更なる試験で、３０分間の４マイクロＭ〜４ミリモルの範囲のＷＲ１０６５曝露は、Ｇ２期で細胞の蓄積をもたらした（Ｍｕｒｌｅｙ  ｅｔ  ａｌ．，“ＷＲ−１０６５，  Ａｎ  Ａｃｔｉｖｅ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｃｙｔｏｐｒｏｔｅｃｔｏｒ  Ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ，  Ａｆｆｅｃｔｓ  Ｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｔｏｐｏｉｓｏｍｅｒａｓｅ  ＩＩ  Ａｌｐｈａ  Ｌｅａｄｉｎｇ  ｔｏ  Ｃｈａｎｇｅｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｅ  Ａｃｔｉｖｉｔｙ  ａｎｄ  Ｃｅｌｌ  Ｃｙｃｌｅ  Ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ  ｉｎ  ＣＨＯ  ＡＡ８  Ｃｅｌｌｓ，”Ｃｅｌｌ  Ｐｒｏｌｉｆ．３０（６−７）：２８３−９４（１９９７）、それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）。更に、トポイソメラーゼＩｌ−αのＷＲ１０６５誘発性抑制が、細胞周期の全体にわたって細胞集団分布の変質をもたらし得ることが示された（Ｋａｔａｏｋａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎｕｃｌｅａｒ  Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ  Ｆａｃｔｏｒ  ｋａｐｐａＢ（ＮＦｋａｐｐａＢ）ａｎｄ  Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ  Ｇｅｎｅ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｉｎ  Ｕ８７  Ｇｌｉｏｍａ  Ｃｅｌｌｓ  Ａｆｔｅｒ  Ｅｘｐｏｓｕｒｅ  ｔｏ  ｔｈｅ  Ｃｙｔｏｐｒｏｔｅｃｔｏｒ  Ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ，”Ｉｎｔ．Ｊ．Ｒａｄｉａｔ．５３（１）：１８０−９（２００２）、それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
【０１１９】
腫瘍細胞浸潤の抑制または低減：ニワトリ胚漿尿膜を使用するモデルのインビトロ実験で、ＷＲ１０６５は、毒性の徴候と関連しない用量で、ＭＭＰ−２（腫瘍細胞浸潤と関連した酵素）の遺伝子発現を低減したが、タンパク質レベルは影響を受けなかった（Ｇｉａｎｎｏｐｏｕｌｏｕ  ｅｔ  ａｌ．，“Ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ  ｈａｓ  Ａｎｔｉａｎｇｉｏｇｅｎｉｃ  Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ  ｉｎ  Ｖｉｔｒｏ  ｂｙ  Ｃｈａｎｇｉｎｇ  ｔｈｅ  Ｒｅｄｏｘ  Ｓｔａｔｕｓ  ｏｆ  Ｈｕｍａｎ  Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  Ｃｅｌｌｓ，”Ｆｒｅｅ  Ｒａｄｉｃ．Ｒｅｓ．３７（１１）：１１９１−９（２００３）、それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）。インビトロ実験で、ＷＲ２７２１は、３０〜４０％だけマトリックスメタロプロテイナーゼ（ＭＭＰ）−２及び−９の活性を減少させた。ＷＲ２７２１は、用量依存的方法のマトリゲルによるＳａ−ＮＨ細胞の移動も阻害した（Ｇｒｄｉｎａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓ  Ｍｅｔａｓｔａｓｅｓ  Ｆｏｒｍａｔｉｏｎ  ｂｙ  Ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ，”Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ  ９７（２）：１３５−４１（２００２）、それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）。インビボ実験で、Ｃ３Ｈｆ／ＫａｍマウスにＳａ−ＮＨ肉腫細胞を注入し、腫瘍が成長すると６日間１日おきに５０ｍｇ／ｋｇのＷＲ２７２１で処置した。それから腫瘍を肢切断によって除去して、ＷＲ２７２１を手術後すぐ及び２日後に再度投与した（Ｇｒｄｉｎａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓ  Ｍｅｔａｓｔａｓｅｓ  Ｆｏｒｍａｔｉｏｎ  ｂｙ  Ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ，”Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ  ９７（２）：１３５−４１（２００２）、それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
【０１２０】
腫瘍細胞転移の抑制または低減：ＷＲ１０６５の抗転移効果を調べるために、Ｃ３Ｈｆ／ＫａｍマウスにＳａ−ＮＨ肉腫細胞を注入し、腫瘍が成長すると６日間１日おきに５０ｍｇ／ｋｇのＷＲ２７２１で処置した。それから腫瘍を肢切断によって除去して、ＷＲ２７２１を手術後すぐ及び２日後に再度投与した（Ｇｒｄｉｎａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓ  Ｍｅｔａｓｔａｓｅｓ  Ｆｏｒｍａｔｉｏｎ  ｂｙ  Ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ，”Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ  ９７（２）：１３５−４１（２００２）、それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）。アミホスチンは、転移した動物数及び動物当たりの転移数を低減した。別の試験で、アミホスチンは奇異反応を有することが示された。肺の腫瘍転移は、５０ｍｇ／ｋｇを投与した動物で著しく減退した。１００ｍｇ／ｋｇの投与量は効果が弱く、２００ｍｇ／ｋｇは本試験の転移に影響を及ぼさなかった（Ｇｒｄｉｎａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ａｎｔｉｍｅｔａｓｔａｔｉｃ  Ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｎｅｓｓ  ｏｆ  Ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ  Ｔｈｅｒａｐｙ  Ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ  Ｓｕｒｇｉｃａｌ  Ｒｅｍｏｖａｌ  ｏｆ  Ｓａ−ＮＨ  Ｔｕｍｏｒｓ  ｉｎ  Ｍｉｃｅ，”Ｓｅｍｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．２９（６  Ｓｕｐｐｌ  １９）：２２−８（２００２）、それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）。更なる試験で、ＷＲ２７２１が、Ｃ３Ｈｆ／Ｋａｍマウスの全身照射の腫瘍生着増大作用をほぼ完全に除去すること、及び５日早いシクロホスファミドの有無に関係なく、ＷＢＩを受けたマウスの肺結節形成を著しく低下させることを、著者は見いだした（Ｍｉｌａｓ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ  ｂｙ  Ｓ−２−（３−ａｍｉｎｏｐｒｏｐｙｌａｍｉｎｏ）ｅｔｈｙｌｐｈｏｓｐｈｏｒｏｔｈｉｏｉｃ  Ａｃｉｄ  Ａｇａｉｎｓｔ  Ｒａｄｉａｔｉｏｎ−  ａｎｄ  Ｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ−Ｉｎｄｕｃｅｄ  Ａｔｔｅｎｕａｔｉｏｎ  ｉｎ  Ａｎｔｉｔｕｍｏｒ  Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ，”Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．４４（６）：２３８２−６（１９８４）、それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）。更に、転移性黒色腫の患者で観察される部分奏功のうち、５３％は以前の化学療法を受けた患者で生じ、反応した転移部位は、皮下部位、リンパ節、肺及び肝臓を含んだ（Ｇｌｏｖｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，“ＷＲ−２７２１  ａｎｄ  Ｈｉｇｈ−Ｄｏｓｅ  Ｃｉｓｐｌａｔｉｎ：Ａｎ  Ａｃｔｉｖｅ  Ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ  Ｍｅｌａｎｏｍａ，”Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．５（４）：５７４−８（１９８７）、それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）。平均応答時間は４．５か月だった。
【０１２１】
上述の抗癌作用に加えて、アミノチオール（例えば、アミホスチン（ＷＲ２７２１）及びＷＲ１０６５）は、他の抗癌療法に影響を及ぼすことが示されてきた。他の抗癌療法に対する代表的な作用は、他の抗癌療法の強化を含む（例えば、化学療法剤の増強された細胞毒性、放射線療法の増強された細胞傷害性作用、化学療法への向上した反応、非癌細胞に対する選択的な放射線防護作用）。インビトロまたはインビボ試験により特定した他の抗癌療法の代表的な効果を以下にまとめた。
【０１２２】
抗癌療法の増強：インビトロ実験で、ＷＲ１０６５は、細胞周期のＧ０期で、ヒトリンパ球の化学療法剤ブレオマイシンの細胞毒性を増強した（Ｈｏｆｆｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ−Ａｃｔｉｖｉｔｙ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｐｏｔｅｎｔｉａｔｉｏｎ  ｂｙ  Ａｍｉｎｏｔｈｉｏｌｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ−Ｄａｍａｇｉｎｇ  Ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  Ｂｌｅｏｍｙｃｉｎ  ｉｎ  Ｇ０  Ｈｕｍａｎ  Ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ，”Ｅｎｖｉｒｏｎ．Ｍｏｌ．Ｍｕｔａｇｅｎ．３７（２）：１１７−２７（２００１）、それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）。インビトロ実験で、マホスファミドと組み合わせたＷＲ２７２１は、白血病細胞の細胞死の程度を増加させると共に、正常な脊髄及び赤血球前駆細胞を生存させた（Ｌｉｓｔ，“Ｕｓｅ  ｏｆ  Ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ  ｉｎ  Ｈｅｍａｔｏｌｏｇｉｃ  Ｍａｌｉｇｎａｎｃｉｅｓ，  Ｍｙｅｌｏｄｙｓｐｌａｓｔｉｃ  Ｓｙｎｄｒｏｍｅ，ａｎｄ  Ａｃｕｔｅ  Ｌｅｕｋｅｍｉａ，”Ｓｅｍｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．２６（２  Ｓｕｐｐｌ  ７）：６１−５（１９９９）、それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）。インビボ実験で、ＷＲ２７２１及びシスプラチンの組み合わせは、進行悪性黒色腫を有する患者のシスプラチン単独と比較して、向上した部分奏功が得られた（それぞれ１０％対５３％の部分奏功）（Ｇｌｏｖｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，“ＷＲ−２７２１  ａｎｄ  Ｈｉｇｈ−Ｄｏｓｅ  Ｃｉｓｐｌａｔｉｎ：Ａｎ  Ａｃｔｉｖｅ  Ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ  Ｍｅｌａｎｏｍａ，”Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．５（４）：５７４−８（１９８７）、それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）。軽微な反応は、患者３６人中更に３人（８％）観察された。Ｃａｎｉｎｅ  Ｓａｒｃｏｍａ  Ｓｔｕｄｙのインビボ実験で、ＷＲ２７２１が、腫瘍のサブセットの放射線療法の細胞傷害性効果を増強し、残存する腫瘍の放射線の細胞傷害性に影響を及ぼさなかったという証拠が見いだされた（Ｋｏｕｋｏｕｒａｋｉｓ，“Ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ：Ｉｓ  Ｔｈｅｒｅ  Ｅｖｉｄｅｎｃｅ  ｏｆ  Ｔｕｍｏｒ  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ？”Ｓｅｍｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．３０（６  Ｓｕｐｐｌ．１８）：１８−３０（２００３）、それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）。インビボ実験で、ＷＲ２７２１は、酸素ラジカル産生化学療法剤と組み合わせてマウスに投与されるとき、相乗的細胞毒性を有した。ＷＲ２７２１で処置したマウスにおいて、グルタチオン合成経路は、不活性のように見えた。更に、ＷＲ３３２７８がγ‐グルタミルシステインシンテターゼに対する強力な抑制作用を有することがわかり、それはグルタチオン合成の酵素を制限する比率である。類似の結果は、システアミン及び酸素ラジカルについて得られた。酸素ラジカルは、ＷＲ１０６５がＷＲ３３２７８に酸化した比率を増加させた（Ｓｃｈｏｒ，“Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ｏｆ  Ｓｙｎｅｒｇｉｓｔｉｃ  Ｔｏｘｉｃｉｔｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｒａｄｉｏｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ａｇｅｎｔ，ＷＲ２７２１，ａｎｄ  ６−ｈｙｄｒｏｘｙｄｏｐａｍｉｎｅ，”Ｂｉｏｃｈｅｍ��Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．３７（９）：１７５１−６２（１９８８）、それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）。インビボ実験で、全身照射の３０分前に投与したＷＲ２７２１は、直径８ｍｍの線維肉腫腫瘍の局所放射線治癒率を著しく増加させた（Ｍｉｌａｓ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ  ｂｙ  Ｓ−２−（３−ａｍｉｎｏｐｒｏｐｙｌａｍｉｎｏ）ｅｔｈｙｌｐｈｏｓｐｈｏｒｏｔｈｉｏｉｃ  Ａｃｉｄ  Ａｇａｉｎｓｔ  Ｒａｄｉａｔｉｏｎ−  ａｎｄ  Ｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ−Ｉｎｄｕｃｅｄ  Ａｔｔｅｎｕａｔｉｏｎ  ｉｎ  Ａｎｔｉｔｕｍｏｒ  Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ，”Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．４４（６）：２３８２−６（１９８４）、それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）。皮下ヒト卵巣癌異種移植片ＯＶＣＡＲ−３を含有するマウスのインビボ実験で、ＷＲ２７２１は、カルボプラチンの抗腫瘍効果を増強した（Ｔｒｅｓｋｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｍｏｄｕｌａｔｉｎｇ  Ａｇｅｎｔ  ＷＲ２７２１  ｏｎ  Ｍｙｅｌｏｔｏｘｉｃｉｔｙ  ａｎｄ  Ａｎｔｉｔｕｍｏｕｒ  Ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｉｎ  Ｃａｒｂｏｐｌａｔｉｎ−Ｔｒｅａｔｅｄ  Ｍｉｃｅ，”Ｅｕｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ．３０Ａ（２）：１８３−７（１９９４）、それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）。２つの異なる腫瘍型のマウスモデルのインビボ実験で、アミホスチンがＭＩＳＯと組み合わされるとき、相加的な毒性効果が観察された（Ｒｏｊａｓ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｍｉｓｏｎｉｄａｚｏｌｅ  ａｎｄ  ＷＲ−２７２１−−ＩＩ．Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｔｕｍｏｕｒ  Ｒａｄｉｏｓｅｎｓｉｔｉｚａｔｉｏｎ，”Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ  ４７（１）：６５−７２（１９８３）、それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）。薬物の作用は腫瘍の酸素動態に関連があるように見え、ＭＩＳＯは、ＷＲ２７２１の放射線防護を減らすために酸素模倣型として機能することができる。インビボ実験で、アミホスチンは、いくつかの化学療法剤（例えばシスプラチン、カルボプラチン及びパクリタキセル）の細胞傷害性効果を増強することを示した（Ｋｕｒｂａｃｈｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｃｈｅｍｏｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ  ｉｎ  Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒａｐｙ：Ｔｈｅ  Ｅｍｅｒｇｉｎｇ  Ｒｏｌｅ  ｏｆ  Ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ（ＷＲ−２７２１），”Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．１８（３Ｃ）：２２０３−１０（１９９８）。それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
【０１２３】
更に、抗癌作用が、ウシ動脈の内皮細胞（Ｂｒｅｎｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｖａｒｉａｂｌｅ  Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ  ｏｆ  Ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ  ｉｎ  Ｍａｌｉｇｎａｎｔ  ａｎｄ  Ｎｏｎ−Ｍａｌｉｇｎａｎｔ  Ｃｅｌｌ  Ｌｉｎｅｓ，”Ｏｎｃｏｌ．Ｒｅｐ．１０（５）：１６０９−１３（２００３）を参照。それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）、肝臓（インビボ）（Ｓｈａｗ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｍｅｔａｂｏｌｉｃ  Ｐａｔｈｗａｙｓ  ｏｆ  ＷＲ−２７２１（ｅｔｈｙｏｌ，ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ）ｉｎ  ｔｈｅ  ＢＡＬＢ／ｃ  Ｍｏｕｓｅ，”Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂ．Ｄｉｓｐｏｓ．２２（６）：８９５−９０２（１９９４））（観察可能な細胞毒性なし＞７４００ピコモル／１０（６）細胞）、腎臓（インビボ）（Ｓｈａｗ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｍｅｔａｂｏｌｉｃ  Ｐａｔｈｗａｙｓ  ｏｆ  ＷＲ−２７２１（ｅｔｈｙｏｌ，ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ）ｉｎ  ｔｈｅ  ＢＡＬＢ／ｃ  Ｍｏｕｓｅ，”Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂ．Ｄｉｓｐｏｓ．２２（６）：８９５−９０２（１９９４））（観察可能な細胞毒性なし＞１７，０００ピコモル／１０（６）細胞）、小腸（インビボ）（Ｓｈａｗ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｍｅｔａｂｏｌｉｃ  Ｐａｔｈｗａｙｓ  ｏｆ  ＷＲ−２７２１（ｅｔｈｙｏｌ，ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ）ｉｎ  ｔｈｅ  ＢＡＬＢ／ｃ  Ｍｏｕｓｅ，”Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂ．Ｄｉｓｐｏｓ．２２（６）：８９５−９０２（１９９４））（観察可能な細胞毒性なし＞３０００ピコモル／１０（６）細胞）、を含む正常な細胞では細胞傷害性作用を欠いているかまたは細胞傷害性作用が最小限である薬物投与量で生じることが示された。上で引用した文献のそれぞれは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【０１２４】
したがって、本発明による対象は新生物状態を患っており、アミノチオール複合体またはアミノチオール複合体を含む医薬組成物は、新生物状態を治療するのに効果的な条件下で投与される。治療は、本明細書に記載されているように対象の任意の抗癌作用を含んでよい（例えば、抗腫瘍性形質転換、正常細胞の抗突然変異誘発、抗脈管形成、腫瘍細胞増殖の抑制または低減、腫瘍細胞浸潤の抑制または低減、及び腫瘍細胞転移の抑制または低減）。
【０１２５】
一実施形態において、新生物状態は、乳房、卵巣、子宮頚部、結腸、肺、皮膚（悪性黒色腫）、リンパ網内系腫瘍及びこれらの組み合わせからなる群から選択される。一実施形態において、新生物状態は骨髄異形成状態である。
【０１２６】
一実施形態において、対象は放射線療法、化学療法またはこれらの組み合わせを受ける対象であり、アミノチオール複合体またはアミノチオール複合体を含む医薬組成物は、放射線療法、化学療法またはこれらの組み合わせの有害なまたは望ましくない副作用を低減させるまたは減少させるために効果的な条件下で、投与される。
【０１２７】
一実施形態において、対象は癌治療（例えば放射線療法、化学療法またはこれらの組み合わせ）を受ける対象であり、アミノチオール複合体またはアミノチオール複合体を含む医薬組成物は、癌治療の効果を増強させるために効果的な条件下で投与される。
【０１２８】
一実施形態において、対象は哺乳動物である。
【０１２９】
一実施形態において、哺乳動物はヒトである。一実施形態において、哺乳動物は非ヒトの動物である。
【０１３０】
上述の改良された薬物送達システムは、非限定的に、静脈内に、皮下に、経口で、腹腔内に、鼻孔内に、直腸内で、局所的に、吸入及び／または経皮パッチによって、周知のまたは将来記載される任意の好適な薬剤投与方法（複数可）を使用して投与できる。所望の標的細胞に薬物送達を達成する任意の送達モジュールに薬物を封入することができ、これはナノ粒子、ミセル、リポソーム、ナノゲルもしくはその他内へのカプセル化または取り込みによるものを含む（上述を参照）。
【０１３１】
薬物投与濃度は、送達されるアミノチオール（またはその類似体）の濃度に基づかなければならない。したがって以下の説明は、投与されているプロドラッグの総量と比較して、投与されているアミノチオールの投与量を考える。プロドラッグの総量は、投与されているプロドラッグの性質に応じて変化する。活性部分（アミノチオール）を、６０ｋｇＢＷのヒト成人に対して９１０ｍｇ／ｍ２以下の等量を提供するために選択される投与量で投与できる。この投与量は、６０ｋｇＢＷのヒト成人に対する２４．３ｍｇ／ｋｇＢＷ（または６０ｋｇＢＷの成人に対する総用量１４５６ｍｇ）に等しい。小児は、アミホスチンの形態でアミノチオール総用量２７００ｍｇ／ｍ２まで投与された。
【０１３２】
繰り返し投与が必要であるまたは求められているとき、この濃度より低い投与量でアミノチオールを投与することが望ましい場合がある。更に、化合物を最初の高用量（ボーラス投与）を使用して投与し、次いでより低い用量に漸減させて、１週間に複数回繰り返したまたは１日１回の頻度で投与することが望ましい場合がある。アミノチオールまたはアミノチオール等価物の７４０ｍｇ／ｍ２の用量は、より少ない副作用と関連し（Ｌｉｓｔ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｈｅｍａｔｏｐｏｉｅｓｉｓ  ｂｙ  Ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ  ｉｎ  Ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  Ｍｙｅｌｏｄｙｓｐｌａｓｔｉｃ  Ｓｙｎｄｒｏｍｅ，”Ｂｌｏｏｄ  ９０：３３６４−３３６９（１９９７）。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）、したがって一般的に望ましい。毎日の投与で、アミホスチン２００〜３４０ｍｇ／ｍ２（６０ｋｇＢＷの成人の総用量５４４ｍｇ）は一般的には望ましい（Ｓａｎｔｉｎｉ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｔｈｅ  Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  ｏｆ  Ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ：ｆｒｏｍ  Ｃｙｔｏｐｒｏｔｅｃｔａｎｔ  ｔｏ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ａｇｅｎｔ，”Ｈａｅｍａｔｏｌｏｇｉｃａ  ８４：１０３５−１０４２（１９９９）、Ｓｃｈｕｃｈｔｅｒ，“Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ，”Ｓｅｍｉｎ  Ｏｎｃｏｌ  ２３：４０−４３（１９９６）。これらはそれぞれ、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。５００〜９１０ｍｇ／ｍ２で注射によって投与されるＷＲ２０６５は、約１０分間の血漿Ｔ１／２を有し、約１００μＭのピーク血漿濃度を有する。
【０１３３】
齧歯動物の実験は、高用量の使用を示唆する。例えばマウスのＷＲ−１０６５（アミホスチン形態）の最大耐量（ＭＴＤ）は腹腔内投与４３２ｍｇ／ｋｇＢＷ及び、経口投与７２０ｍｇ／ｋｇＢＷであり、１００％の有効な放射線防護用量はＭＴＤの約１／２であった。ホスホエノールの形態で送達されるアミノチオールで、ＭＴＤは、腹腔内投与８９３ｍｇ／ｋｇＢＷ、経口投与１４８８ｍｇ／ｋｇＢＷであり、１００％の有効な放射線防護用量はＭＴＤの約１／２であった。すべてのアミノチオールは、４００ｍｇ／ｋｇＢＷ超の齧歯動物のＭＴＤを有する。
【０１３４】
ＷＲ−１０６５を含むアミノチオールは、超低濃度で有効であり得る（例えば、いくつかのインビトロ試験で０．４マイクロモル濃度まで低減）。
【０１３５】
経口投与用にアミノチオール複合体薬物を調製するのが一般的には望ましい一方で、薬物は他の経路で投与され得るように調製されることができる。有効性を最大化させるために静脈内投与用の薬物を調製することは、特定の実施形態において望ましいことがあり得る。ＷＲ−１０６５とＷＲ−２５５５９１の間の構造類似点、特に分子のスルフヒドリル端部の類似点が理由で、ＷＲ−２５５５９１はＷＲ−１０６５と類似のやり方で挙動することが見込まれる。
【０１３６】
アミノチオール、及び特にＷＲ１０６５の独特の特徴は、アミノチオールの細胞内濃度を測定することができることである（Ｂａｉ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｎｅｗ  Ｌｉｑｕｉｄ  Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ  Ａｓｓａｙ  ｗｉｔｈ  Ｅｌｅｃｔｒｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ  ｏｆ  Ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ  ａｎｄ  ＷＲ１０６５，”Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ．Ｂ．Ａｎａｌｙｔ．Ｔｅｃｈｎｏｌ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ｌｉｆｅ．Ｓｃｉ．７７２：２５７−２６５（２００２）、Ｅｌａｓ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｏｒａｌ  Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ  ｉｓ  ａｓ  Ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ  ａｓ  Ｉｎｔｒａｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ  Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ  ｉｎ  Ｄｅｃｒｅａｓｉｎｇ  Ｎｉｔｒｏｘｉｄｅ  ＥＰＲ  Ｓｉｇｎａｌ  Ｄｅｃａｙ  Ｉｎ  Ｖｉｖｏ．Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ．１６３７：１５１−１５５（２００３）、Ｓｈａｗ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃ  Ｐｒｏｆｉｌｅ  ｏｆ  Ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ，”Ｓｅｍｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．２３：１８−２２（１９９６）。これらはそれぞれ、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。これは、薬物投与のガイドとして細胞内アミノチオール濃度を使用することを可能にする。抗癌作用のために、１０６細胞当たりアミノチオール３０〜１００ナノモルになる濃度のプロドラッグ投与が推奨される。いくつかの腫瘍型に対して、より低い細胞内濃度が同様に効果的であり、使用することができる。ＭＤＡ−ＭＢ−４６８細胞と同じ分類に入る、及び／または同じもしくは類似の遺伝的な、エピジェネティックな及び遺伝子の発現変化を有する乳癌において、１０６細胞当たりアミノチオール０．００１〜３０ナノモルの範囲の細胞内濃度が効果的である。抗ウイルス効果について、１０６細胞当たりアミノチオール０．００１〜３０ナノモルの範囲の細胞内濃度になる用量レベルで、プロドラッグを投与することが推奨される。
【０１３７】
アミノチオールの最適な治療効果を得るために、２回以上プロドラッグを投与することが望ましい場合がある。複数日または複数週の投与で、１０６細胞当たりアミノチオール０．０００００１〜３０ナノモルになる用量レベルのプロドラッグの投与が推奨される。放射線防護及び細胞保護作用を含むすべての他の治療効果において、１０６細胞当たりアミノチオール１〜１００ナノモルの範囲の細胞内濃度になる用量レベルで、プロドラッグを投与できる。
【０１３８】
治療効果を調べられるプロドラッグの構造及び標的細胞の性質に基づいて、投与されるプロドラッグ濃度が著しく変化する点に留意する必要がある。ポリアミンまたは葉酸輸送システムを発現する標的細胞に対して、細胞内に能動的に輸送されないプロドラッグを使用する同等の細胞内濃度を得るために必要とされた、より低い量で、これらの能動輸送系を利用するように設計されたプロドラッグを通常投与することができる。更に、能動輸送系の発現レベルは、疾患またはストレスのある細胞の間で変化する可能性があり、かつ、複数回投与がある期間にわたって投与されるとき、より低いプロドラッグ用量が治療効果を得るのに十分であり得るという結果を伴って、プロドラッグ処置により影響を受ける可能性がある。
【０１３９】
本明細書に記載のアミノチオール複合体プロドラッグ及び１つ以上の他の薬剤を含む併用療法も意図される。本明細書に記載のプロドラッグを、アミノチオールの治療効果を得るために使用される他の薬剤と組み合わせて投与できる。このような併用療法の利点の１つは、より低い用量の治療物質が投与できる及び／またはより高い治療効果を得ることができるということである。このようなより低い用量は、遺伝子毒性及びミトコンドリア毒性を有することが周知の抗レトロウイルス薬で特に有利であり得る。
【０１４０】
本明細書に記載のアミノチオール複合体（誘導体、異性体、代謝物または薬学的に許容されるそのエステル、塩及び溶媒和物を含む）は、アミノチオールの治療効果を必要とする個人へ投与するために、ナノ粒子内への取り込みを含む薬学的に許容される担体内へ組み込むことができる。
【０１４１】
本発明の一態様は、本明細書に記載されるようにアミノチオール複合体を含む医薬組成物に関する。一実施形態において、アミノチオール複合体は上記のように式（ＩＶ）を有する。一実施形態において、アミノチオール複合体は上記のように式（Ｉ）を有する。
【０１４２】
医薬組成物は、更に細胞内送達システムを含んでもよい。細胞内送達システムは、（ａ）細胞透過性物質を含むシステム、（ｂ）ｐＨ応答性担体、（ｃ）Ｃ２ストレプトアビジン送達システム、（ｄ）ＣＨ（３）−ＴＤＤＳ薬物送達システム、（ｅ）疎水性生物活性担体、（ｆ）エキソソーム、（ｇ）脂質ベースの送達システム、（ｈ）リポソームベースの送達システム、（ｉ）ミセル送達システム、（ｊ）微小粒子、（ｋ）分子担体、（ｌ）ナノ担体、（ｍ）ナノスケールのマルチバリアント担体、（ｎ）ナノゲル、（ｏ）２つ以上の微粒子送達システムの構成要素からなるハイブリッドナノ担体システム、（ｐ）ナノ粒子、（ｑ）ペプチドベースの薬物送達システム、及び（ｒ）ポリマーまたはコポリマーベースの送達システムからなる群より選択されてもよい。特定の実施形態において、細胞内送達システムはナノ粒子である。
【０１４３】
特定の実施形態において、医薬組成物はナノ粒子送達システムを含まない。
【０１４４】
医薬組成物は界面活性剤も含み得る。
【０１４５】
医薬組成物は還元剤も含み得る。
【０１４６】
本発明の別の態様は、本明細書に記載されるように１つ以上の異なるアミノチオール複合体を含む組成物に関する。特定の実施形態において、１つ以上の異なるアミノチオール複合体は、１００，０００ダルトン以下の平均分子量を有する。特定の実施形態において、１つ以上の異なるアミノチオール複合体は、約１００，０００ダルトン、２０，０００ダルトン、１０，０００ダルトン、５，０００ダルトン、３，０００ダルトン、２，０００ダルトンまたは１，０００ダルトンの平均分子量を有する。特定の実施形態において、平均分子量は、約９，０００〜約１１，０００ダルトンである。特定の実施形態において、平均分子量は、約９，０００〜約１１，０００ダルトンである。一実施形態において、平均分子量は約１０，０００ダルトンである。一実施形態において、平均分子量は約１０，５００ダルトンである。
【０１４７】
本発明の別の態様は、本明細書に記載されるように１つ以上の異なるアミノチオール複合体を含むキットに関する。
【０１４８】
本発明の更に別の態様は、１つ以上の追加の治療物質を更に含むキットに関する。
【０１４９】
アミノチオール複合体プロドラッグのいくつかは酸化に感応性があってもよいので、これらに限定されないがビタミンＣ及びビタミンＥを含む還元剤と組み合わせてプロドラッグを投与することが望ましい場合がある。他の還元剤は、有機アルデヒド、水酸基含有アルデヒド、ならびに還元糖（例えばグルコース、マンノース、ガラクトース、キシロース、リボース及びアラビノース）を含む。ヘミアセタールまたはケト型を含む他の還元糖（例えばマルトース、ショ糖、ラクトース、フルクトース及びソルボース）を用いることができる。他の還元剤は、アルコール、好ましくは多価アルコール（例えばグリセロール、ソルビトール、グリコール、特にエチレングリコール及びプロピレングリコール、ならびにポリエチレン及びポリプロピレングリコールなどのポリグリコール）を含む。
【０１５０】
本明細書に記載のアミノチオール複合体及びその複数の部分は、その薬理学的に許容される塩を含む。本明細書で使用する場合「薬学的に許容される塩」及び「その薬理学的に許容される塩」という用語は広義語あり、当業者にはその通常の及び慣習的な意味が付与されるものであり（ならびに特別なまたはカスタマイズされた意味に限定されていない）、これらに限定されないが、薬学的に許容される非毒性の酸または塩基を指す。好適な薬学的に許容される塩は、金属塩（例えば、アルミニウム、亜鉛の塩、リチウム、ナトリウム及びカリウム塩などのアルカリ金属塩、カルシウム及びマグネシウム塩などのアルカリ土類金属塩）；有機塩（例えば、リシン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、クロロプロカイン、コリン、ジエタノールアミン、エチレンジアミン、メグルミン（Ｎ−メチルグルカミン）、プロカイン及びトリスの塩）；遊離酸及び塩基の塩；トリフルオロ酢酸の塩；無機塩（例えば、硫酸塩、塩酸塩及び臭化水素酸塩）；ならびに現在広く製薬学的に使用されており、当業者に周知の出典（例えばＭｅｒｃｋ  Ｉｎｄｅｘ）で示されている他の塩を含む。本明細書で説明する治療物質の塩を作製するために、任意の好適な成分を選択することができ、これは、それが無毒性であり、所望の活性を実質的に妨げないことを条件とする。塩に加えて、化合物の薬学的に許容される前駆体及び誘導体を用いることができる。薬学的に許容されるアミド、低級アルキルエステル及び保護誘導体も、組成物で使用するために好適であり得る。薬学的に許容される塩の形態で好ましい実施形態の化合物を投与することが可能であるが、中性型の化合物を投与するのが一般的には望ましい。
【０１５１】
好ましい実施形態の化合物を経口で投与するのが一般的には望ましいが、他の投与経路が意図される。投与の意図される経路は、経口、非経口、静脈内、皮下、直腸内、鼻孔内、経皮的、及び吸入によるものを含むが、これらに限定されない。プロドラッグは、例えば経口投与用に液状製剤に配合することができる。好適な形態は、懸濁液、シロップ剤、エリキシル剤などを含む。経口投与用に特に好ましい単位投与形態は、錠剤及びカプセルを含む。
【０１５２】
プロドラッグの医薬組成物は、レシピエントの血液または他の体液と好ましくは等張性である。組成物の等張性は、酒石酸ナトリウム、プロピレングリコールまたは他の無機もしくは有機溶質を使用して達成されることができる。塩化ナトリウムは、特に好ましい。緩衝剤（例えば、酢酸及び塩、クエン酸及び塩、ホウ酸及び塩、ならびにリン酸及び塩）を用いることができる。非経口溶媒は、塩化ナトリウム溶液、リンゲルのデキストロース、デキストロース及び塩化ナトリウム、乳酸リンゲルまたは不揮発油を含む。静脈内溶媒は、流体及び栄養素補充剤、電解質補充剤（例えばリンゲルデキストロースに基づくもの）などを含む。特定の実施形態において、還元状態の活性化合物を維持することが望ましい場合がある。したがって、製剤の還元剤（例えばビタミンＣ、ビタミンＥまたは医薬分野で既知の他の還元剤）を含むことが望ましい場合がある。
【０１５３】
医薬組成物の粘性を、薬学的に許容される増粘剤を使用して選択したレベルに維持できる。メチルセルロースは、それが手軽にかつ経済的に利用可能であり、かつ扱いが容易であるため、好ましい。他の好適な増粘剤は、例えばキサンガム、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、カルボマーなどを含む。増粘剤の好適な濃度は、選択された増粘剤に依存する。選択された粘性を達成する量が、好ましくは使われる。粘稠組成物は通常、このような増粘剤を加えることによって溶液から調製される。
【０１５４】
薬学的に許容される防腐剤は、医薬組成物の貯蔵寿命を増加するために用いることができる。ベンジルアルコールは好適であり得るが、例えばパラベン、チメロサール、クロロブタノールまたは塩化ベンザルコニウムを含む様々な防腐剤も使用することができる。防腐剤の適切な濃度は、通常、組成物の総重量に基づいて約０．０２％〜約２％であるが、それより大きいまたは少ない量が選択した薬剤に応じて望ましくなる場合がある。上述のように還元剤は、製剤の良好な貯蔵寿命を維持するために有利には使用することができる。
【０１５５】
プロドラッグは、好適な担体、希釈剤または賦形剤（例えば滅菌水、生理食塩水、グルコースなど）との混合物であることができ、投与経路及び所望の製剤に応じて、湿潤または乳化剤、ｐＨ緩衝剤、ゲル化または粘性促進添加剤、防腐剤、香味料、色素などの補助物質を含有できる。例えば、“Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ”，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ、２０ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ（２００３年６月１日）ならびに“Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，”Ｍａｃｋ  Ｐｕｂ．Ｃｏ．、１８ｔｈ  ａｎｄ  １９ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎｓ（それぞれ１９８５年１２月及び１９９０年６月）を参照。このような製剤は、錯化剤、金属イオン、ポリマー化合物（例えばポリ酢酸、ポリグリコール酸、ヒドロゲル、デキストランなど）、リポソーム、マイクロエマルション、ミセル、単層もしくは多層小胞、赤血球ゴーストまたはスフェロプラストを含むことができる。リポソーム製剤に適切な脂質は、モノグリセリド、ジグリセリド、スルファチド、リゾレシチン、リン脂質、サポニン、胆汁酸などを含むが、これらに限定されない。このような追加の成分の存在は、物理的状態、可溶性、安定性、インビボ放出速度及びインビボ消失速度に影響を与えることができ、したがって目的の用途によって選択され、その結果、担体の特性は選択された投与経路に合わせて調整される。
【０１５６】
経口投与のために、医薬組成物は、錠剤、水性または油性懸濁液、分散性粉末または顆粒、エマルション、ハードまたはソフトカプセル、シロップまたはエリキシルとして提供されることができる。経口使用を目的とする医薬組成物は、医薬組成物の製造分野で周知の任意の方法に従って調製されることができ、以下の薬剤、甘味剤、香味剤、着色剤及び防腐剤などのうちの１つ以上を含有することができる。水性懸濁液は、水性懸濁液の製造に適した賦形剤との混合物中に活性成分を含有する。
【０１５７】
経口使用のための製剤は、硬質ゼラチンカプセル剤として提供されることもでき、活性成分（複数可）は、不活性固体希釈剤（例えば炭酸カルシウム、リン酸カルシウムまたはカオリンまたはソフトゼラチンカプセル）と混合される。ソフトカプセルにおいて活性成分（複数可）は、水または油性媒質（例えば落花生油、オリーブ油、脂肪油、流動パラフィンもしくは液体ポリエチレングリコール）などの液体など好適な液体中に溶解または懸濁し得る。経口投与用に調製した安定剤及びマイクロスフィアも使用することができる。カプセルは、ゼラチン製の押し込み式カプセル、ならびにゼラチン及び可塑剤（例えばグリセロールまたはソルビトール）製のソフト封入カプセルが含まれる。押し込み式カプセルには、ラクトースなどの賦形剤、デンプンなどの結合剤、及び／またはタルクもしくはステアリン酸マグネシウムなどの滑沢剤、ならびに所望により安定剤の混合物中に活性成分を含有することができる。好ましい実施形態の化合物を還元体で維持することが望ましい場合（特定の活性代謝物の場合）、カプセルまたは他の投与剤形の還元剤を含むことが望ましい場合がある。
【０１５８】
錠剤はコーティングされていない、または胃腸管内での分解及び吸収を遅らせるために周知の方法でコーティングされることができ、それにより長期間持続的な効果を提供することができる。例えば、モノステアリン酸グリセリルなどの時間遅延物質を使用することができる。錠剤形態などの固体形態で投与する場合、固体形態は通常、約０．００１重量％以下〜約５０重量％以上、好ましくは約０．００５、０．０１、０．０２、０．０３、０．０４、０．０５、０．０６、０．０７、０．０８、０．０９、０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９または１重量％〜約２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０または４５重量％の活性成分（複数可）を含む。
【０１５９】
錠剤は、不活性材料を含む非毒性の薬学的に許容される賦形剤との混合物中に活性成分を含有する。例えば錠剤は、所望により１つ以上の追加成分と共に、圧縮または成形することにより調製され得る。圧縮錠剤は、所望により結合剤、滑沢剤、不活性希釈剤、表面活性または分散剤と混合された粉末または顆粒などの自由流動形態の有効成分を、好適な機械中で圧縮して調製される。成形錠剤は、不活性液体希釈剤で湿らせた粉末化合物の混合物を好適な機械で成形することにより作製することができる。
【０１６０】
好ましくは各錠剤またはカプセル剤は、約１０ｍｇ以下〜約１，０００ｍｇ以上、より好ましくは約２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０または１００ｍｇ〜約１５０、２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０、５００、５５０、６００、６５０、７００、７５０、８００または９００ｍｇの最適なプロドラッグを含む。最も好ましくは錠剤またはカプセル剤は、投与される分割した投与量を可能にするために投与量の範囲で提供される。患者に適した投与量及び毎日投与される用量数は、したがって好都合に選択されることができる。特定の用途のために、投与されるプロドラッグの２つ以上を単一の錠剤または他の剤形（例えば、併用療法で）内に包含することが好ましい。しかし他の用途では、治療物質を別個の剤形で提供することが好ましい可能性がある。
【０１６１】
好適な不活性材料は、希釈剤（例えば炭水化物、マンニトール、ラクトース、無水ラクトース、セルロース、ショ糖、改質デキストラン、デンプンなど）、または無機塩（例えば三リン酸カルシウム、リン酸カルシウム、リン酸ナトリウム、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、炭酸マグネシウム及び塩化ナトリウム）を含む。崩壊剤または造粒剤（例えば、コーンスターチなどのデンプン、アルギン酸、デンプングリコール酸ナトリウム、アンバーライト、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ウルトラミロペクチン、アルギン酸ナトリウム、ゼラチン、オレンジピール、酸性カルボキシメチルセルロース、海綿及びベントナイト、不溶性カチオン性交換樹脂、粉末ガム（例えばアガー、カラヤもしくはトラガカント）、またはアルギン酸またはその塩）を、製剤に含めることができる。
【０１６２】
結合剤は、硬質錠剤を形成するために使用できる。結合剤は、天然物（例えばアカシア、トラガカント、デンプン及びゼラチン、メチルセルロース、エチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、ヒドロキシプロピルメチルセルロースなど）由来の材料を含む。
【０１６３】
滑沢剤（例えばステアリン酸またはそのマグネシウムもしくはカルシウム塩、ポリテトラフルオロエチレン、流動パラフィン、植物油及びワックス、ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリル硫酸マグネシウム、ポリエチレングリコール、デンプン、タルク、焼成シリカ、ケイ酸アルミニウム水和物など）を、錠剤形に含めることができる。
【０１６４】
界面活性剤、例えばアニオン性界面活性剤（例えば、ラウリル硫酸ナトリウム、ジオクチルスルホコハク酸ナトリウム及びジオクチルスルホン酸ナトリウム）、カチオン性（例えば、塩化ベンザルコニウムまたは塩化ベンゼトニウム）、または非イオン性界面活性剤（例えば、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、モノステアリン酸グリセロール、ポリソルベート、ショ糖脂肪酸エステル、メチルセルロースまたはカルボキシメチルセルロース）も用いることができる。Ｓｔｏｇｎｉｅｗへの米国特許第６，４８９，３１２号に記載されているような界面活性剤（それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）も使用してよい。
【０１６５】
アミホスチンまたはその類似体（複数可）が、拡散または浸出機序による放出を可能にする不活性基質内に組み込まれている制御放出製剤も用いることができる。緩徐変性マトリックスも、製剤中に組み込むことができる。他の送達システムは、持続放出、遅延解放または徐放性送達システムを含むことができる。
【０１６６】
コーティング（例えば、非腸溶性材料（例えばメチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、メチルヒドロキシ−エチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピル−メチルセルロース、ナトリウムカルボキシ−メチルセルロース、プロビドン及びポリエチレングリコール）または腸溶性材料（例えばフタル酸エステル））を使用することができる。染料または顔料は、活性化合物投与量の異なる組み合わせを識別または特徴づけるために加えることができる。
【０１６７】
液体で経口投与されるとき、液体担体（例えば水、石油、動物もしくは植物起源の油（例えば落花生油、鉱油、ダイズ油もしくは胡麻油）または合成油）を、活性成分（複数可）に加えることができる。生理食塩水液、デキストロースもしくは他の糖溶液、またはグリコール（例えばエチレングリコール、プロピレングリコールもしくはポリエチレングリコール）も適切な液体担体である。医薬組成物は水中油型エマルションの形態でもあり得る。油相は、植物油（例えばオリーブ油もしくは落花生油）、鉱油（例えば流動パラフィン）、またはこれらの混合物であり得る。好適な乳化剤は、天然起源のガム（例えばアカシアガム及びトラガカントガム）、ダイズレシチンなどの天然起源のリン脂質、脂肪酸と無水ヘキシトールから誘導されたエステルまたは部分エステル（例えばモノオレイン酸ソルビタン）、及びこれら部分エステルと酸化エチレンとの縮合生成物（例えばポリオキシエチレンソルビタンモノ−オレート）を含む。乳濁液は、甘味剤及び香味剤も含むことができる。
【０１６８】
選択したプロドラッグが静脈内、非経口または他の注入により投与されるとき、それは、好ましくは発熱物質のない、非経口的に受け入れられる水溶液または油性懸濁液の形態である。懸濁液は、適切な分散または湿潤剤及び懸濁化剤を使用して、当該技術分野において周知の方法に従って調製することができる。適切なｐＨ、等張性、安定性などを有する許容可能な水溶液の調製は、当該技術分野の技術範囲内である。注入のための好適な医薬組成物は、好ましくは等張溶媒（例えば１，３−ブタンジオール、水、等張食塩水、リンゲル液、デキストロース溶液、デキストロース及び塩化ナトリウム溶液、乳酸リンゲル液または当該技術分野において周知の他の溶媒）を含む。更に滅菌された固定油を、溶媒または懸濁媒質として通常使用することができる。この目的のために、合成モノまたはジグリセリドを含む、任意の無刺激性固定油を用いることができる。更にオレイン酸などの脂肪酸も同様に注射用製剤の調製に使用することができる。医薬組成物は、安定剤、防腐剤、緩衝剤、酸化防止剤または当業者に周知の他の添加物も含むことができる。
【０１６９】
注入の持続期間は様々な要因に応じて調整することができ、持続静脈内投与の数秒以下〜０．５、０．１、０．２５、０．５、０．７５、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３または２４時間以上にわたって投与される単回注入を含むことができる。
【０１７０】
１つ以上の選択したプロドラッグからなる医薬組成物は、従来から医薬組成物中に見いだされる補助成分を、それらの当該技術分野にて確立された様式で、当該技術分野にて確立された濃度で追加的に用いることができる。すなわち例えば、組成物は、併用療法のための追加の適合性のある薬学的活性材料（例えば補助抗菌剤、鎮痒薬、収斂剤、局所麻酔薬、抗炎症剤、還元剤など）を含むことができる、または好ましい実施形態の種々の投与剤形を物理的に製剤化するのに有用な材料（例えば賦形剤、染料、増粘剤、安定剤、防腐剤または酸化防止剤）を含むことができる。
【０１７１】
プロドラッグは、キットの形態で投与する医師または他の健康管理の専門家に提供されることができる。キットは、適切な医薬組成物中の化合物（複数可）を含む容器を収容するパッケージ、及び対象に医薬組成物を投与するための使用説明書である。キットは所望により、１つ以上の追加の治療物質も含むことができる。例えば、１つ以上の追加の治療物質（抗菌剤、鎮痒薬、収斂剤、局所麻酔薬、抗炎症剤、還元剤など）と組み合わせた１つ以上のプロドラッグを含む１つ以上の組成物を含有するキットを提供することができる、または１つ以上の選択したプロドラッグ及び追加の治療物質を含有する別個の医薬組成物を提供することができる。キットは、連続的または経時的投与のためのプロドラッグの別個の投与量も含むことができる。キットは所望により、１つ以上の診断ツール及び使用説明書を含むことができる。キットは、化合物（複数可）及び他の任意の治療物質を投与するための指示書とともに、適切な送達装置（例えば、注射器など）を含むことができる。キットは所望により、貯蔵、再構成（適用される場合）及び含まれる一部または全部の治療物質の投与のための指示書を含むことができる。キットは、対象に行われる投与数を反映する複数の容器を含むことができる。
【０１７２】
プロドラッグは、このような治療を必要とする個人の細胞のストレス状態または疾患状態の誘導防止のために、予防的に投与されることができる。あるいは治療は好ましくは、ストレス状態または疾患状態の徴候及び症状の開始の後、できるだけ早く開始される。投与経路、投与される量及び投与頻度は、患者の年齢、感染の重篤度及び任意の関連症状に応じて変化する。疾患状態（例えば癌または病原性微生物への感染）の治療のためのプロドラッグ投与の意図される量、投与量及び経路は、従来の抗癌及び抗ウイルス薬について確立されたものと類似している。従来の抗レトロウイルス剤の投与及び投与量に関する詳細な情報は、Ｐｈｙｓｉｃｉａｎ’ｓ  Ｄｅｓｋ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ（第４７版）に見いだすことができ、それはその全体が参照により本明細書に組み込まれる。この情報は、プロドラッグを利用した治療レジメンを設計する際に適合されることができる。
【０１７３】
癌、病原体／微生物感染症を治療する経口投与のためのまたは細胞保護のためのプロドラッグの意図される量は、約２４時間ごとまたはそれ以下〜約６時間ごとまたはそれ以上（または毎日約１回〜毎日約６回）、約５日間以下〜約１０日間以上投与される、（４０ｍｇ／日以下〜約１５，０００ｍｇ／日以上）、または状態が著しく改善するまでの、約１０ｍｇ以下〜約２０００ｍｇ以上の範囲である。感染しやすい個人の癌または感染症の発症を阻害するための抑制療法において、約１０ｍｇ以下〜約１０００ｍｇ以上の投与量が、１日１回、２回または複数回、通常は最高約１２か月までまたは特定の状況では無期限に（約１０ｍｇ／日〜約１，０００ｍｇ／日）経口投与される。治療が長期間の場合、治療初期により高い用量及び治療後期により低い用量を使用して、投与量を変化させることが望ましい場合がある。
【０１７４】
文献中に実証された成人ヒトに投与されるアミホスチンの単回最高投与量は、１３３０ｍｇ／ｍ２であった。小児は、不適当な作用がない場合、最高２７００ｍｇ／ｍ２のアミホスチン単回投与量が投与された。複数回投与（推奨された７４０〜９１０ｍｇ／ｍ２の単回投与を３回まで）が２４時間以内に安全に投与されたことを、文献は示す。初回投薬の２時間後及び４時間後のアミホスチンの反復投与は、副作用、特に悪心、嘔吐または低血圧の増加をもたらさないようである。アミホスチン投与に由来する最も重要な有害な副作用は、低血圧であるように思われる。
【０１７５】
ＡＩＤＳを患う個人のための好ましい実施形態の化合物の意図される量、投与方法及び治療スケジュールは概ね、ＨＩＶ治療のための上述のものと類似している。
【０１７６】
アミホスチンの周知の副作用は、最大血圧の低下、悪心及び嘔吐を含む。このような副作用が、投与される特定のチオホスファートで観測される場合、それは一般的に、チオホスファートの前にまたはそれと共に制吐薬を投与するのが望ましい。適切な制吐薬は、抗ヒスタミン剤（例えば、ブクリジン、シクリジン、ジメンヒドリナート、ジフェンヒドラミン、メクリジン）、抗コリン剤（例えば、スコポラミン）、ドーパミン拮抗剤（例えば、クロルプロマジン、ドロペリドール、メトクロプラミド、プロクロルペラジン、プロメタジン）、セロトニン拮抗剤（例えば、ドラセトロン、グラニセトロン、オンダンセトロン）または他の薬剤（例えば、デキサメタゾン、メチルプレドニゾロン、トリメトベンズアミド）を含む。
【実施例】
【０１７７】
実施例１  ６つの腫瘍細胞株の４アーム星型ＰＥＧ−ＷＲ１０６５（ＷＲ１０６５に結合した４アームＰＥＧ）の細胞傷害性効果
ＷＲ−１０６５に結合した４アーム星型ポリエチレングリコール（４ＳＰ６５）の抗癌活性を評価するために、４ＳＰ６５の抗癌有効性を、ＮＩＨ／ＮＣＩによって使用した同じ細胞株のいくつかにおいて判定し、使用した方法論は、現在使用されている化学療法剤を評価するためにＮＣＩで用いるものと同じだった（Ｏ’Ｃｏｎｎｏｒ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｐ５３  Ｔｕｍｏｒ  Ｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒ  Ｐａｔｈｗａｙ  ｉｎ  Ｃｅｌｌ  Ｌｉｎｅｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  Ｄｒｕｇ  Ｓｃｒｅｅｎ  ａｎｄ  Ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｓ  Ｗｉｔｈ  ｔｈｅ  Ｇｒｏｗｔｈ−Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ  Ｐｏｔｅｎｃｙ  ｏｆ  １２３  Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  Ａｇｅｎｔｓ，”Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．５７（１９）：４２８５−３００（１９９７）。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。以下の６つの癌型の試験を完了した。（ｉ）乳癌（ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞）、（ｉｉ）肺癌（Ａ５４９）、（ｉｉｉ）悪性黒色腫（ＳＫ−ＭＥＬ−２８）、（ｉｖ）骨髄性白血病（ＨＬ６０細胞）、（ｖ）卵巣癌（ＳＫ−ＯＶ−３）、及び（ｖｉ）前立腺癌（ＤＵ−１４５）。各細胞株の５０％増殖抑制用量を、表１に示す。
【０１７８】
比較目的のために、正常なヒト乳腺上皮細胞の増殖を５０％減らすのに必要な４ＳＰ６５の増殖抑制用量は、３００マイクロモル超だった。４ＳＰ６５が、３００マイクロモル超の濃度で存在するとき、媒質中にヒドロゲルを形成するという事実が原因で、現在までのところ、正確な値は測定されていない。
【０１７９】
（表１）４ＳＰ６５への４８時間の曝露後、インビトロ細胞増殖を５０％低減するのに必要な平均増殖抑制用量
2019500407.tif 000042
【０１８０】
表１に示されるＥＣ（５０）値を得るために使用する方法は、以下のとおりだった。各細胞株を、ＡＴＣＣにより推奨される、またはその細胞株について文献で示される媒質で成長させた。すべての細胞を、３６〜３７℃で及び５％のＣＯ２の存在下で、ウォータージャケットインキュベーターで培養した。最適な増殖及び生存度を確実にするために、すべての細胞を、ＦＮＣ（ＩｎＶｉｔｒｏｇｅｎ）でコーティングしたプレート上で増殖させた。細胞に、それらが６０〜７０％のコンフルエンスに到達するまで、週２回増殖培地を再供給した。この時点で、培地を、０〜３００ミクロモルの範囲の投与量で４ＳＰ６５を補充した増殖培地と交換した。細胞を、４８時間、この補充した培地の存在下で増殖させて、次いでそれらをトリプシン処理によって剥離させ、トリパンブルーで染色し、血球計数器で計数した。１実験当たり、各投与量群について、３〜４つの反復実験を実施した。細胞死パーセントは、４ＳＰ６５に曝露させた生存細胞の平均数対シャムに曝露させた生存細胞の平均数を比較することによって決定した。マイクロモルで、試験した各細胞株の５０％平均増殖抑制用量（ＥＣ（５０））を、表１に示す。使用する方法論は、細胞殺傷対細胞増殖停止を十分に区別しない点に留意する必要があり、したがってＥＣ（５０）は、一方または両方の効果を誘導するのに必要な薬物の投与量を表す。
【０１８１】
実施例２  薬物の抗癌作用の予想外の変化
４ＳＰ６５の抗癌活性に関するこれらの実験で、予想外の薬物効果が明らかになった。手短に述べると、これらの効果は、以下であった：（ｉ）薬物１モル当たりの利用可能なＷＲ１０６５分子の数に基づいて予測され得たより大きな４ＳＰ６５対アミホスチンまたはＷＲ１０６５単独の抗癌活性、（ｉｉ）アミホスチンが不活性であるかまたはアミホスチンが腫瘍保護作用を有する細胞型における細胞障害活性、及び（ｉｉｉ）周知の抗癌剤についてＮＩＨ−ＮＣＩ６０スクリーニングにおいて示されるよりも狭い範囲の、腫瘍型に対する活性。図１２は、試験したすべての腫瘍（表１を参照）の、及び１つの腫瘍型（ＨＬ６０細胞）でのアミホスチン及びＷＲ１０６５の効果の平均結果を示す。他の腫瘍型のアミホスチン及びＷＲ１０６５の結果は、図１２に示したものと類似していた。
【０１８２】
アミホスチン（ＷＲ−２７２１）と同様に送達した場合、前立腺癌を除いて、ＷＲ−１０６５が表１に列挙される腫瘍のすべてに対してインビトロ及び／またはインビボ抗癌活性を有することを、報告した実験は見いだした。文献が示していないのは、モル対モルベースで活性成分ＷＲ−１０６５またはＷＲ−２７２１と比較した場合、アミホスチンの−ＰＯ３部分をチオール化４アーム星型ＰＥＧ分子と置換することが薬物有効性を増加させたということである。特定の腫瘍型の間で認められる差異について、４ＳＰ６５の活性は、ＷＲ−１０６５より８〜１２倍、アミホスチンより１００倍〜数千倍の範囲で大きかった。モル対モルベースで、４アーム星型ＰＥＧ−ＷＲ１０６５（４ＳＰ６５）の各モルは、ＷＲ−１０６５またはＷＲ−２７２１の各１分子に対して４分子のＷＲ１０６５を有し、その結果、ＷＲ−１０６５またはアミホスチンと比較して、活性に最大で４倍の増大が期待される。
【０１８３】
この増大した活性が予想されなかった他の理由は、以下を含む。ＷＲ１０６５及びアミホスチンは、それぞれ１３４．２５及び２１４．２ダルトンの低分子量を有する。したがってそれらは、アミホスチンより大きな受動拡散の能力を有するＷＲ−１０６５によって、主に細胞膜を通過して受動拡散により細胞に入る（Ｌｉｐｉｎｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ａｎｄ  Ｃｏｍｐｕｔａｔｉｏｎａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ  ｔｏ  Ｅｓｔｉｍａｔｅ  Ｓｏｌｕｂｉｌｉｔｙ  ａｎｄ  Ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙ  ｉｎ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ａｎｄ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  Ｓｅｔｔｉｎｇｓ，”Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ．Ｒｅｖ．４６（１−３）：３−２６（２００１）。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。低細胞濃度で存在する場合、ＷＲ−１０６５がポリアミン輸送系を介して細胞に能動的に輸送されるという証拠を、何人かの研究者が見いだしたが（Ｍｉｔｃｈｅｌｌ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｉｎｖｏｌｖｅｍｅｎｔ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｐｏｌｙａｍｉｎｅ  Ｔｒａｎｓｐｏｒｔ  Ｓｙｓｔｅｍ  ｉｎ  Ｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｕｐｔａｋｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｒａｄｉｏｐｒｏｔｅｃｔａｎｔｓ  ＷＲ−１０６５  ａｎｄ  ＷＲ−３３２７８，”Ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ．１６（１２）：３０６３−８（１９９５）、Ｍｉｔｃｈｅｌｌ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｍａｍｍａｌｉａｎ  Ｃｅｌｌ  Ｐｏｌｙａｍｉｎｅ  Ｈｏｍｅｏｓｔａｓｉｓ  ｉｓ  Ａｌｔｅｒｅｄ  ｂｙ  ｔｈｅ  Ｒａｄｉｏｐｒｏｔｅｃｔｏｒ  ＷＲ１０６５，”Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．３３５（Ｐｔ２）：３２９−３４（１９９８）。これらはそれぞれ、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）、すべての研究者がこれらのデータに同意するというわけではなかった（Ｎｅｗｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｔｒａｎｓｐｏｒｔ  ｏｆ  Ａｍｉｎｏｔｈｉｏｌ  Ｒａｄｉｏｐｒｏｔｅｃｔｏｒｓ  Ｉｎｔｏ  Ｍａｍｍａｌｉａｎ  Ｃｅｌｌｓ：Ｐａｓｓｉｖｅ  Ｄｉｆｆｕｓｉｏｎ  Ｖｅｒｓｕｓ  Ｍｅｄｉａｔｅｄ  Ｕｐｔａｋｅ，”Ｒａｄｉａｔ．Ｒｅｓ．１４６（２）：２０６−１５（１９９６）。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。薬物４ＳＰ６５は、約１０，５８４ダルトンの分子量（細胞膜を通過する受動拡散を防ぐサイズ）を有し、したがって細胞内取り込みは、他の機序（例えばエンドサイトーシス／ピノサイトーシス）によって行われなければならない（Ｌｉｐｉｎｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ａｎｄ  Ｃｏｍｐｕｔａｔｉｏｎａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ  ｔｏ  Ｅｓｔｉｍａｔｅ  Ｓｏｌｕｂｉｌｉｔｙ  ａｎｄ  Ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙ  ｉｎ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ａｎｄ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  Ｓｅｔｔｉｎｇｓ，”Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ．Ｒｅｖ．４６（１−３）：３−２６（２００１）。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。後者は受動拡散または能動輸送と比べて遅いプロセスであるので、４ＳＰ６５の取り込みは、ＷＲ−１０６５またはアミホスチンより著しく低いと予想された。より低い取り込みは、増大した薬物活性ではなく、低下した薬物有効性をもたらす。
【０１８４】
４ＳＰ６５が、アミホスチンが不活性であるかまたはアミホスチンが細胞傷害性効果の代わりに細胞保護作用を有する細胞において活性を有することも、報告した文献は示していない。アミホスチンの活性は、少なくとも一部、細胞膜結合型アルカリホスファターゼの発現レベルに依存することは公知であるが、この情報だけでは、薬物活性を予測可能にするのに十分ではない（Ｓｈｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｂｉｎｄｉｎｇ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｍｉｎｏｔｈｉｏｌ  ＷＲ−１０６５  ｔｏ  Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ  Ｆａｃｔｏｒｓ  Ｉｎｆｌｕｅｎｃｅｓ  Ｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｔｏ  Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  Ｄｒｕｇｓ，”Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．２９７（３）：１０６７−７３（２００１）。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。例えばアミホスチンは、薬物が内皮細胞（豊富な量の膜結合型アルカリホスファターゼを産生し、薬物をＷＲ−１０６５に代謝してそれを隣接する腫瘍細胞に渡すことができる）によって血液循環から最初に取り込まれる場合でも、多くの腫瘍型において活性がない。文献報告は、アミホスチンが前立腺癌細胞に対する放射線防護作用を有するが（Ｑｕｉｎｏｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  Ｅｘｃｌｕｓｉｏｎ  ｂｙ  ｔｈｅ  Ｐｏｌｙａｍｉｎｅ  Ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ  ａｓ  ａ  Ｍｅｃｈａｎｉｓｍ  ｆｏｒ  Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ  Ｒａｄｉｏｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ  Ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ，”Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．８（５）：１２９５−３００（２００２），それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）、４ＳＰ６５は、ＤＵ−１４５細胞に対してインビトロで細胞傷害性作用を有すると記載している。このような逆の作用の理由は利用できる文献から判定することができず、したがって、原型の前立腺癌細胞株の細胞に対する４ＳＰ６５の抗癌有効性は、事前に予測することができない。
【０１８５】
薬物有効性を増加させる予測可能な方法として、タンパク質、薬物または薬物の活性部分へのＰＥＧの添加を使用することができない点にも留意しなければならない。このような添加または置換は、増大した活性、低下した活性をもたらすか、または活性に影響を及ぼさない可能性がある（Ｍｅｈｖａｒ，“Ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ  ａｎｄ  Ｐｈａｒｍａｃｏｄｙｎａｍｉｃｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｂｙ  Ｐｏｌｙｅｔｈｙｌｅｎｅ  Ｇｌｙｃｏｌ  Ｃｏｎｊｕｇａｔｉｏｎ，”Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．３（１）：２５−３６（２０００）。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
【０１８６】
Ｏ’Ｃｏｎｎｏｒに基づき（Ｏ’Ｃｏｎｎｏｒ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｐ５３  Ｔｕｍｏｒ  Ｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒ  Ｐａｔｈｗａｙ  ｉｎ  Ｃｅｌｌ  Ｌｉｎｅｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  Ｄｒｕｇ  Ｓｃｒｅｅｎ  ａｎｄ  Ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｓ  Ｗｉｔｈ  ｔｈｅ  Ｇｒｏｗｔｈ−Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ  Ｐｏｔｅｎｃｙ  ｏｆ  １２３  Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  Ａｇｅｎｔｓ，”Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．５７（１９）：４２８５−３００（１９９７）。それは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）、最も感受性が高い〜最も感受性が低い腫瘍細胞型までの、４つの一般的に使用されている化学療法剤についてのＥＣ（５０）測定値の範囲は、約１００倍である。４ＳＰ６５において、この範囲はわずか約５倍である。この差異の理由は不明であり、利用できる文献から予測することができない。
【０１８７】
実施例３  マウスコクサッキーＢウイルスに感染した細胞における４アームＰＥＧ−ＷＲ１０６５の抗ウイルス作用（予想（ｐｒｏｐｈｅｔｉｃ））
マウス心筋細胞を、増殖培地に７０〜８０％コンフルエンスで蒔き、被膜形成させて、２４時間の成長周期に入れる。それから増殖培地が除去され、細胞は３０分間、マウスコクサッキーＢウイルスマウスの希釈液を含有する培地に曝露される。この期間の終わりに、ウイルス含有培地が除去され、細胞に、４アームＰＥＧ−ＷＲ１０６５補充培地を供給し、この培地において、４アームＰＥＧ−ＷＲ１０６５の投与量は０．５〜２０のマイクロＭの範囲である。対照細胞のプレートを、コクサッキーＢウイルスの希釈液を含有する培地に曝露し、それから非補充増殖培地を６時間の時点で再供給する。すべてのプレートは、３日毎にそれぞれの培地を再供給する。７２時間の時点で、及びその後３日間毎に、培地を除去して、ウイルス複製についてＲＴ−ＰＣＲで解析する。対照（ウイルス感染細胞）と比較して、ウイルス複製は、曝露の６日間後までに９０％〜９９％減少すると予測される。ウイルス複製の程度は、曝露の最高１０日後まで低下し続けると思われる。
【０１８８】
実施例４  細菌、酵母及び真菌に対する４アームＰＥＧ−ＷＲ１０６５（４ＳＰ６５）の細胞傷害性作用（予想）
４ＳＰ６５の抗菌活性を、その全体が参照により本明細書に組み込まれるＳｔｏｇｎｉｅｗ及びＢｏｕｒｔｈｉｓ（「Ｓｔｏｇｎｉｅｗ及びＢｏｕｒｔｈｉｓ」）への米国特許出願公開第２００８／００２７０３０号、標題「Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ  Ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ  Ａｍｉｆｏｓｔｉｎｅ  ａｎｄ  Ｒｅｌａｔｅｄ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ」に記載の細菌、酵母及び菌類に対して試験する。試験した抗菌剤がアミホスチンの代わりに４ＳＰ６５である、本明細書に記載の実験を、実施する。４ＳＰ６５の増殖阻害活性を、単独で，及び更に他の薬物と組み合わせて試験する。４ＳＰ６５の抗菌作用は、Ｓｔｏｇｎｉｅｗ及びＢｏｕｒｔｈｉｓでアミホスチンについて記載されているものより少なくとも８倍〜１２倍大きいと予測される。
【０１８９】
実施例５  シクロホスファミドに曝露した細胞における４アームＰＥＧ−ＷＲ１０６５の細胞保護作用
対数増殖期にあるＴＫ６ヒトリンパ芽球様細胞を、５０〜６０％コンフルエンスで増殖培地に蒔き、２４時間増殖させた。それから増殖培地を除去して、３種類の培地（ｉ）１ミリＭのシクロホスファミドを補充した増殖培地、（ｉｉ）１ミリＭのシクロホスファミドプラス１００〜４００マイクロＭの４アームＰＥＧ−ＷＲ１０６５を補充した増殖培地、（ｉｉｉ）非補充増殖培地（対照）の１つを補充した培地と置き換えた。プレートは、細胞死の証拠について４８時間及び７２時間後に評価した。参照としての対照プレートを使用して、１ミリＭのシクロホスファミドに曝露した細胞に関する７２時間の時点での細胞死は、トリパンブルー色素排除に基づいて７０％であったが、一方で、１ミリＭのシクロホスファミドプラス１００〜４００マイクロＭの４アームＰＥＧ−ＷＲ１０６５に曝露した細胞で、細胞死はほぼ１９％だった。
【０１９０】
実施例６  正常なヒト乳腺上皮細胞（Ｍ９９００５）に対する４アームＰＥＧ−ＷＲ１０６５の細胞傷害性作用
正常なヒト乳腺上皮細胞を、増殖培地がＭＥＢＭ（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎから購入）などであったという点を除いて、実施例１に記載のとおり増殖させた。細胞が５０〜６０％に達したとき、増殖培地を除去し、０〜３００マイクロＭの４ＳＰ６５を補充した培地を、細胞を含有する各ウェルに加えた。４８時間の時点で、細胞をトリプシン処理によって剥離させ、トリパンブルーで染色し、血球計数器を使用して計数した。細胞増殖の抑制は、１００マイクロＭの曝露レベル以外では、いかなる薬物濃度でも観察されなかった。細胞増殖は、約２２％〜４０％阻害された。１００マイクロＭ超及び最高３００マイクロＭでは、細胞増殖抑制の証拠は、観察されなかった。したがって前記の結果は、５０％成長阻害に達しなかった二相曲線を示した。ＷＲ−１０６５についての二相増殖抑制曲線の所見は、以前に報告されている（Ｃａｌａｂｒｏ−Ｊｏｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．“Ｔｈｅ  ｌｉｍｉｔｓ  ｔｏ  ｒａｄｉｏｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｃｈｉｎｅｓｅ  ｈａｍｓｔｅｒ  Ｖ７９  ｃｅｌｌｓ  ｂｙ  ＷＲ−１０６５  ｕｎｄｅｒ  ａｅｒｏｂｉｃ  ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ．”Ｒａｄｉａｔ  Ｒｅｓ．１４９：５５０−５５９（１９９８）。これらはそれぞれ、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）。
【０１９１】
実施例７  Ｚｉｋａウイルス及び／または他のプラス鎖ＲＮＡウイルスに対する４アームＰＥＧ−ＷＲ−１０６５の抗ウイルス作用（予想）
Ｚｉｋａウイルスによる感染に許容状態のベロ細胞または他の細胞を、５０〜７０％コンフルエントまで、上述のように（実施例１を参照）増殖させる。それから細胞を、０〜１００マイクロＭの範囲の薬物濃度で、最高４８時間４ＳＰ６５で処理する。この曝露期間の終わりに、４ＳＰ６５を補充した増殖培地を除去し、Ｚｉｋａウイルスの異なる感染単位を含む増殖培地と交換する。ウイルス誘発細胞傷害性作用の証拠を、ウイルス感染を低減するまたはそれを防ぐ４ＳＰ６５の能力を判定するために、ウイルス曝露後の複数の時点で評価する。類似の実験において、細胞を３０分間、ウイルスに感染させ、それから０〜１００マイクロＭの範囲の用量で、０〜４８時間の範囲の期間４ＳＰ６５に曝露させる。４ＳＰ６５の抗ウイルス治療有効性を判定し、これは０．１〜１３マイクロＭの範囲に入ると予想される。同じ実験計画が、ヒトまたは動物に懸念される他のウイルス病原体に対する４ＳＰ６５の抗ウイルス作用を試験するために使用される。０．１〜１３マイクロＭの範囲の抗ウイルス作用は、全実験で観察されることが見込まれる。
【０１９２】
実施例８  化合物７の調製
工程１．Ｂｏｃ保護
2019500407.tif 000043
基質１（ジヒドロクロリド塩１．２１ｍｍｏｌなど）を、無水ジクロロメタン（５ｍｌ）中に溶解させた。トリエチルアミン（６当量）及びｂｏｃ無水物（２．１当量）を加えて、反応物を陽性窒素雰囲気下で周囲温度にて一晩撹拌した。翌日、反応物をジクロロメタンで希釈し、塩水で洗浄した。有機層を硫酸マグネシウム上で乾燥して、減圧下で濃縮し、化合物２を収率８５％で透明な油として得た。化合物は、精製せずに次工程にて使用した。
【０１９３】
工程２．ジスルフィドとのカップリング
2019500407.tif 000044
基質２（１．０３ｍｍｏｌ）を１／１の水／メタノール（１０ｍｌ）に溶解させて、ジスルフィド３（２当量）を加えた。反応物を、一晩、窒素雰囲気下で周囲温度にて撹拌した。翌日、反応物を減圧下で濃縮し、ジクロロメタンで希釈した。それを塩水で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させた。生成物４を、シリカゲル及びヘキサン／酢酸エチル勾配によるカラムクロマトグラフィーで精製した。生成物を収率４６％で単離した。
【０１９４】
工程３．星型ポリマーとのカップリング
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星型ポリマー５（０．７５ｇ、平均分子量１０，０００）をＰＢＳ（８ｍｌ、ｐＨ７．４）に溶かした溶液に、ジスルフィド５（０．４５ｍｍｏｌ）をエタノール（２ｍｌ）に溶かした溶液を加えた。反応物を周囲温度にて４時間撹拌し、それから一晩凍結乾燥した。粗生成物を、水（４ｍｌ）及びＤＭＳＯ（２ｍｌ）に溶解させて、４回水を交換して４８時間、水で透析処理した。その後、溶液を凍結乾燥して、８１４ｍｇの複合体６を単離した。
【０１９５】
工程４．複合体７を得るための脱保護
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複合体６（８１４ｍｇ）を、３０分間１／１のＴＦＡ／ジクロロメタン（５ｍｌ）で処理した。溶媒を真空中で除去し、残留物を真空ポンプで一晩乾燥した。翌日、残留物をエチルエーテルで洗浄し（２回）、一晩真空ポンプで更に乾燥した。７５０ｍｇの複合体７を得た。ＭＡＬＤＩ解析は１０，５３１．９５の平均量を示し、平均で４つのＷＲ１０６５単位の取り込みを示唆した。
【０１９６】
特定の実施形態が本明細書で示されかつ詳述されてきたが、関連技術分野の当業者には、様々な変更、追加、代用などが、本発明の趣旨から逸脱することなくなされ得ることは明白であり、したがってこれらは、以下の特許請求の範囲に記載される本発明の範囲内に含まれるとみなされる。
【図１】
2019500407.tif 000056
【図２】
2019500407.tif 000057
【図３】
2019500407.tif 000058
【図４】
2019500407.tif 000059
【図５】
2019500407.tif 000060
【図６】
2019500407.tif 000061
【図７】
2019500407.tif 000062
【図８】
2019500407.tif 000063
【図９】
2019500407.tif 000064
【図１０】
2019500407.tif 000065
【図１１】
2019500407.tif 000066
【図１２】
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【国際調査報告】
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