(57)【要約】Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｐ．、Ａｓｔｒａｎｔｉａ  ｍａｊｏｒまたはこれらの組合せから得られる抽出物、および対象における炎症性−皮膚関連の状態を処置または軽減する方法が提供される。本方法は、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｐ．、Ａｓｔｒａｎｔｉａ  ｍａｊｏｒまたはこれらの組合せ由来の有効量の抽出物および担体を含む組成物を投与または適用するステップを含み、有効量の抽出物は、腫瘍壊死因子アルファおよびインターロイキン−１ベータ活性を阻害する。炎症は、皮膚の炎症であり得、組成物は、外用のための皮膚調製物であり得る。
2019514981.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
炎症関連の皮膚状態を処置または軽減する方法であって、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｐ．、Ａｓｔｒａｎｔｉａ  ｍａｊｏｒまたはこれらの組合せ由来の有効量の抽出物および担体を含む組成物を投与するステップを含み、前記有効量の前記抽出物が、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）−アルファ活性を阻害する、方法。
【請求項２】
前記ＴＮＦ−アルファ活性が、アクチノマイシンＤ（ＡｃｔＤ）の存在下で、ＴＮＦ−アルファ感受性細胞株におけるＴＮＦ−アルファの用量依存性細胞傷害性を測定するｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイによって測定可能であり、前記抽出物が、前記細胞株における外因的ＴＮＦ−アルファの細胞傷害性を阻害する、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記抽出物が、水抽出物である、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記抽出物が、アルコール／水抽出物である、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｐ．が、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ、Ｃｈｒｙｓｏｓｐｌｅｎｉｕｍ  ａｌｔｅｒｎｉｆｏｌｉｕｍ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｎｄｒｏｓａｃｅａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｓｊｅｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｉｆｌｏｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｒｙｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃａｅｓｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｅｘａｒａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｍｕｓｃｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｏｐｐｏｓｉｔｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｅｌｌａｒｉｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｅｇｕｉｅｒｉ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｐａｎｉｃｕｌａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃｕｎｅｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｉｚｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｏｌｏｎｉｆｅｒａの群から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記抽出物が、１０００ｎｇ／ｍｌのＴＮＦ−アルファを超えるＴＮＦ−アルファ濃度において、ＴＮＦ−アルファの細胞傷害性を阻害する、請求項４に記載の方法。
【請求項７】
前記抽出物が、約０．０１ｎｇ／ｍｌ〜約１０００ｎｇ／ｍｌのＴＮＦ−アルファのＴＮＦ−アルファ濃度において、ＴＮＦ−アルファの細胞傷害性を阻害する、請求項４に記載の方法。
【請求項８】
前記抽出物が、５．０〜９ｍｇ／ｍｌの濃度範囲にわたり、ＣＯＸ１、ＣＯＸ２およびリポキシゲナーゼ活性を阻害する、請求項３に記載の方法。
【請求項９】
前記炎症関連の皮膚状態が、咬傷、刺傷、皮疹、皮膚のそう痒、皮膚の水疱形成、日焼け、太陽によるしみ、皮膚の熱傷、ＵＶ曝露または照射、皮膚の老化、皮膚の発赤の低下、皮膚の堅さの減少の低下、皮膚アレルギー、加齢性のしみ、アトピー性皮膚、乾癬、アトピー性皮膚炎、脱毛症、化学的刺激物への皮膚の曝露、汚染物質への皮膚の曝露、汚物への皮膚の曝露、デブリへの皮膚の曝露およびこれらの組合せから選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
前記組成物が、外用のための皮膚調製物である、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
前記抽出物が、１種もしくは２種以上のフェニルプロピオン酸または１種もしくは２種以上のフラボノイドを含む、請求項２に記載の方法。
【請求項１２】
前記１種または２種以上のフェニルプロピオン酸が、クロロゲン酸である、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記抽出物が、抗ＩＬ１細胞応答をさらに誘導する、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
前記炎症関連の皮膚状態が、咬傷、刺傷、皮疹、皮膚のそう痒、皮膚の水疱形成、日焼け、太陽によるしみ、皮膚の熱傷、ＵＶ曝露または照射、皮膚の老化、皮膚の発赤の低下、皮膚の堅さの減少の低下、皮膚アレルギー、加齢性のしみ、アトピー性皮膚、乾癬、アトピー性皮膚炎、脱毛症、化学的刺激物への皮膚の曝露、汚染物質への皮膚の曝露、汚物への皮膚の曝露、デブリへの皮膚の曝露およびこれらの組合せから選択される、請求項５に記載の方法。
【請求項１５】
皮膚状態を処置または軽減する方法であって、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｐ．、Ａｓｔｒａｎｔｉａ  ｍａｊｏｒまたはこれらの組合せ由来の有効量の抽出物および担体を含む組成物を投与するステップを含み、前記有効量の前記抽出物が、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）−アルファ活性を阻害し、前記皮膚状態が、咬傷、刺傷、皮疹、皮膚のそう痒、皮膚の水疱形成、日焼け、太陽によるしみ、皮膚の熱傷、ＵＶ曝露または照射、皮膚の老化、皮膚の発赤の低下、皮膚の堅さの減少の低下、皮膚アレルギー、加齢性のしみ、アトピー性皮膚、乾癬、アトピー性皮膚炎、脱毛症、化学的刺激物への皮膚の曝露、汚染物質への皮膚の曝露、汚物への皮膚の曝露、デブリへの皮膚の曝露およびこれらの組合せに起因する、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
本発明は、Ｓａｘｉｆｒａｇａから得られる抽出物およびその使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
発明の背景
Ｓａｘｉｆｒａｇａは、多年生草本高山植物である。この種は、イベリア半島、アルプス山脈およびバルカン半島における、中欧および南欧に生育する。
【０００３】
Bastianら、２００９年（Revue  Suisse  Vitic.  Arboric.  Hortic.（２００９年）、４１巻（６号）、３６３〜３６７頁）は、その起源に応じて、また、フェニルプロピオン酸（phenylpropenoic  acid）、フラボノールおよびフラボノイドグリコシドの含有量に基づく収穫の最適な生物季節学ステージの定義において、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ植物の地上部における活性化合物の濃度の変化を評価した。Bastianらは、満開時に、クロロゲン酸（０．１％の乾物、ＤＭ）、クエルシトリン（０．４％ＤＭ）およびラムノシド（rhamnosid）ルテオリン（０．０２％ＤＭ）の濃度が最高であったこと、そして、ミリシトリン（myricitrin）（１．３％ＤＭ）の含有量が、満開期からの相対的に僅かな変動により、種子形成時にその最大に達したことを決定した。
【０００４】
ＵＳ２０１５／００５０３１６は、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｏｐｐｏｓｉｔｉｆｏｌｉａ、Ｓｏｌｄａｎｅｌｌａ  ａｌｐｉｎａおよび任意選択でＣｈｌａｍｙｄｏｍｏｎａｓ  ｓｐ由来の油溶性かつハイドロ−エタノール性の抽出物、ならびに化粧品または皮膚科学的調製物におけるその使用を教示する。
炎症は、例えば、病原体、感染、刺激物または細胞に対する損傷等、有害な刺激に応答した免疫系の活性化が関与する。損傷した細胞が、免疫系細胞、例えば、マクロファージを区域にリクルートするシグナルを分泌すると、局所的免疫系活性化が始まる。マクロファージは、炎症誘発性サイトカイン、例えば、インターロイキン−１ベータ（「ＩＬ−１β」）および腫瘍壊死因子アルファ（「ＴＮＦα」または「ＴＮＦ−アルファ」）を放出する。
急性炎症は、組織統合性を維持し、組織修復に寄与することによる、傷害性刺激を除去するための身体の初期保護的応答である。重篤なまたは遷延した侵害性刺激は、組織傷害の部位に存在する細胞の型の進行性シフトを生じる慢性炎症性応答をもたらし得る。慢性炎症は、組織の同時の破壊および炎症の過程からの治癒として特徴付けることができ、修復媒介ではなくむしろ傷害誘発の最終結果によるものである。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】米国特許出願公開第２０１５／００５０３１６号明細書
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Bastianら、Revue  Suisse  Vitic.  Arboric.  Hortic.（２００９年）、４１巻（６号）、３６３〜３６７頁
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
非刺激性であり、炎症関連の皮膚状態の軽減、例えば、抗老化、抗発赤またはこれらの組合せにおいて有用である、皮膚への適用における使用のための、植物学的および植物由来の化合物および抽出物の必要性がある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明は、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｐ．、Ａｓｔｒａｎｔｉａ  ｍａｊｏｒ、またはこれらの組合せから得られる抽出物、およびその使用に関する。さらに、本発明は、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ、Ｃｈｒｙｓｏｓｐｌｅｎｉｕｍ  ａｌｔｅｒｎｉｆｏｌｉｕｍ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｎｄｒｏｓａｃｅａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｓｊｅｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｉｆｌｏｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｒｙｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃａｅｓｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｅｘａｒａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｍｕｓｃｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｏｐｐｏｓｉｔｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｅｌｌａｒｉｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｅｇｕｉｅｒｉ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｐａｎｉｃｕｌａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃｕｎｅｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｉｚｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｏｌｏｎｉｆｅｒａのうちの１種または１種より多く、Ａｓｔｒａｎｔｉａ  ｍａｊｏｒ、およびこれらの組合せから得られた抽出物、ならびにその使用を提供する。
【０００９】
Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ、Ｃｈｒｙｓｏｓｐｌｅｎｉｕｍ  ａｌｔｅｒｎｉｆｏｌｉｕｍ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｎｄｒｏｓａｃｅａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｓｊｅｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｉｆｌｏｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｒｙｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃａｅｓｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｅｘａｒａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｍｕｓｃｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｏｐｐｏｓｉｔｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｅｌｌａｒｉｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｅｇｕｉｅｒｉ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｐａｎｉｃｕｌａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃｕｎｅｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｉｚｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｏｌｏｎｉｆｅｒａのうちの１種または１種より多く、Ａｓｔｒａｎｔｉａ  ｍａｊｏｒおよびこれらの組合せから得られる抽出物を含む組成物を、皮膚または関連組織に投与することにより、炎症関連の皮膚状態の軽減をもたらすための方法であって、抽出物が、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）アルファ活性を阻害またはモジュレートする、方法が、本明細書に記載されている。抽出物は、抽出物が、ＴＮＦ−アルファ産生またはＴＮＦ−アルファ合成を阻害しないという特性により特徴付けられる。炎症関連の皮膚状態は、咬傷または刺傷、皮疹、皮膚のそう痒、皮膚の水疱形成、日焼け、皮膚の熱傷、ＵＶ曝露または照射、皮膚の老化、太陽によるしみ（sunspot）、皮膚アレルギー、脱毛症、および化学的刺激物への曝露のうちの１種または複数種を含むことができる。
【００１０】
さらに、上に定義されている炎症関連の皮膚状態の軽減をもたらす方法において、組成物は、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ、Ｃｈｒｙｓｏｓｐｌｅｎｉｕｍ  ａｌｔｅｒｎｉｆｏｌｉｕｍ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｎｄｒｏｓａｃｅａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｓｊｅｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｉｆｌｏｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｒｙｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃａｅｓｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｅｘａｒａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｍｕｓｃｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｏｐｐｏｓｉｔｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｅｌｌａｒｉｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｅｇｕｉｅｒｉ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｐａｎｉｃｕｌａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃｕｎｅｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｉｚｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｏｌｏｎｉｆｅｒａのうちの１種または１種より多く、Ａｓｔｒａｎｔｉａ  ｍａｊｏｒおよびこれらの組合せ由来の抽出物を含むことができる。
【００１１】
炎症関連の皮膚状態は、咬傷、刺傷、皮疹、皮膚のそう痒、皮膚の水疱形成、日焼け、太陽によるしみ、皮膚の熱傷、ＵＶ曝露または照射、皮膚の老化、皮膚の発赤の低下、皮膚の堅さの減少の低下、皮膚アレルギー、加齢性のしみ、アトピー性皮膚、乾癬、アトピー性皮膚炎、脱毛症、化学的刺激物への皮膚の曝露、汚染物質への皮膚の曝露、汚物への皮膚の曝露、デブリへの皮膚の曝露およびこれらの組合せから選択され得るか、またはそれらから生じ得る。
【００１２】
ＴＮＦ−アルファ活性は、ヒト上皮細胞からのＴＮＦ−アルファ誘導性ＩＬ−６放出の濃度依存性阻害を測定するｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイを使用してモニターすることができる。
【００１３】
ＴＮＦ−アルファ活性は、アクチノマイシンＤ（ＡｃｔＤ）の存在下で、ＴＮＦ−アルファ感受性細胞株におけるＴＮＦ−アルファの用量依存性細胞傷害性（cytotoxity）を測定するｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイを使用してモニターすることができ、抽出物は、細胞株における外因的ＴＮＦ−アルファの細胞傷害性を阻害する。
【００１４】
抽出物は、１０００ｎｇ／ｍｌのＴＮＦ−アルファを超えるＴＮＦ−アルファ濃度において、ＴＮＦ−アルファの細胞傷害性を阻害することができる。抽出物は、約０．０１ｎｇ／ｍｌ〜約１０００ｎｇ／ｍｌのＴＮＦ−アルファのＴＮＦ−アルファ濃度において、ＴＮＦ−アルファの細胞傷害性を阻害することができる。
【００１５】
別の態様では、本発明は、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｐ．、例えば、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ、Ｃｈｒｙｓｏｓｐｌｅｎｉｕｍ  ａｌｔｅｒｎｉｆｏｌｉｕｍ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｎｄｒｏｓａｃｅａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｓｊｅｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｉｆｌｏｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｒｙｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃａｅｓｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｅｘａｒａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｍｕｓｃｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｏｐｐｏｓｉｔｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｅｌｌａｒｉｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｅｇｕｉｅｒｉ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｐａｎｉｃｕｌａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃｕｎｅｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｉｚｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｏｌｏｎｉｆｅｒａのうちの１種または１種より多く、Ａｓｔｒａｎｔｉａ  ｍａｊｏｒおよびこれらの組合せ由来の抽出物を含む組成物を投与することにより、ＩＬ−１ベータ誘導性細胞応答を阻害する方法に関する。抽出物は、水抽出物またはアルコール／水抽出物であり得る。
【００１６】
ＩＬ−１ベータ誘導性細胞応答は、咬傷、刺傷、皮疹、皮膚のそう痒、皮膚の水疱形成、日焼け、太陽によるしみ、皮膚の熱傷、ＵＶ曝露または照射、皮膚の老化、皮膚の発赤の低下、皮膚の堅さの減少の低下、皮膚アレルギー、加齢性のしみ、アトピー性皮膚、乾癬、アトピー性皮膚炎、脱毛症、化学的刺激物への皮膚の曝露、汚染物質への皮膚の曝露、汚物への皮膚の曝露、デブリへの皮膚の曝露、およびこれらの組合せに起因し得る。
【００１７】
皮膚状態を処置または軽減する方法もまた提供される。この方法は、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ、Ｃｈｒｙｓｏｓｐｌｅｎｉｕｍ  ａｌｔｅｒｎｉｆｏｌｉｕｍ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｎｄｒｏｓａｃｅａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｓｊｅｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｉｆｌｏｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｒｙｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃａｅｓｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｅｘａｒａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｍｕｓｃｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｏｐｐｏｓｉｔｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｅｌｌａｒｉｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｅｇｕｉｅｒｉ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｐａｎｉｃｕｌａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃｕｎｅｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｉｚｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｏｌｏｎｉｆｅｒａのうちの１種または１種より多く、Ａｓｔｒａｎｔｉａ  ｍａｊｏｒおよびこれらの組合せから得られた有効量の抽出物および担体を含む組成物を投与するステップを含み、前記有効量の前記抽出物が、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）−アルファ活性を阻害し、前記皮膚状態が、咬傷、刺傷、皮疹、皮膚のそう痒、皮膚の水疱形成、日焼け、太陽によるしみ、皮膚の熱傷、ＵＶ曝露または照射、皮膚の老化、皮膚の発赤の低下、皮膚の堅さの減少の低下、皮膚アレルギー、加齢性のしみ、アトピー性皮膚、乾癬、アトピー性皮膚炎、脱毛症、化学的刺激物への皮膚の曝露、汚染物質への皮膚の曝露、汚物への皮膚の曝露、デブリへの皮膚の曝露およびこれらの組合せに起因する。組成物は、クリーム製剤、スプレー、液体擦り込み剤（rub）、シャンプー、パッチ内において、皮膚に適用することができる。
【００１８】
本明細書に記載されている抽出物は、細胞内のＴＮＦおよびＩＬ１の効果を抑制する能力を示す。さらに、抽出物は、有意な抗フリーラジカル活性を保有し、種々の適用、例えば、咬傷または刺傷、皮疹、皮膚のそう痒、皮膚の水疱形成、日焼け、太陽によるしみ、皮膚の熱傷、皮膚の発赤化、皮膚の老化、皮膚アレルギー、脱毛症その他のうち１種または２種以上からの軽減をもたらすことにおいて使用することができ、皮膚に適用されると、加齢性のしみを低下させ、皮膚の堅さを保持し、皮膚の皺を減弱し、抗老化効果を示す。
【００１９】
上述の発明の概要は、本発明のあらゆる特色を必ずしも記載するとは限らない。
【００２０】
本発明の上述および他の特色は、添付の図面の参照が為される次の記載からより明らかになるであろう。図面については次に説明する。
【図面の簡単な説明】
【００２１】
【図１】図１Ａは、ヒト上皮細胞からのＴＮＦアルファ誘導性ＩＬ−６およびＩＬ−１ベータ誘導性ＩＬ−６放出におけるＳａｘｉｆｒａｇａ  ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａの濃度効果を示す。図１Ｂは、ヒトケラチノサイトからのＴＮＦアルファ誘導性ＩＬ−６およびＩＬ−１ベータ誘導性ＩＬ−６放出におけるＳａｘｉｆｒａｇａ  ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａの濃度効果を示す。Ｃｈｒｙｓｏｓｐｌｅｎｉｕｍ  ａｌｔｅｒｎｉｆｏｌｉｕｍ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｎｄｒｏｓａｃｅａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｓｊｅｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｉｆｌｏｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｒｙｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃａｅｓｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｅｘａｒａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｍｕｓｃｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｏｐｐｏｓｉｔｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｅｌｌａｒｉｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｅｇｕｉｅｒｉ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｐａｎｉｃｕｌａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃｕｎｅｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｉｚｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｏｌｏｎｉｆｅｒａおよびＡｓｔｒａｎｔｉａ  ｍａｊｏｒから得られる抽出物により、同様の結果（表２、実施例３を参照）を得た。
【００２２】
【図２】図２は、アクチノマイシンＤ（ＡｃｔＤ）の存在下、および腫瘍壊死因子受容体１−Ｆｃ（ＴＮＦＲ１−ＦＣ）またはＳａｘｉｆｒａｇａ  ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ由来の水抽出物（ＳＲＸ０１）の非存在または存在下での、細胞生存率における外因的ＴＮＦ−アルファの濃度効果を示す。
【００２３】
【図３】図３Ａは、クロマメトリー（chromametry）を使用して測定される、０、２、４、６、２４および４８時間のＵＶ光曝露後の皮膚の色におけるＳＲＸ０１および対照処置の効果を示す。図３Ｂは、視覚的に測定される、０、２、４、６、２４および４８時間のＵＶ光曝露後の皮膚発赤におけるＳＲＸ０１および対照処置の効果を示す。
【発明を実施するための形態】
【００２４】
詳細な説明
本発明は、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｐ．、Ａｓｔｒａｎｔｉａ  ｍａｊｏｒならびにＳａｘｉｆｒａｇａ  ｓｐ．およびＡｓｔｒａｎｔｉａ  ｍａｊｏｒの組合せから得られる抽出物、ならびにこれらの使用に関する。さらに、本発明は、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ、Ｃｈｒｙｓｏｓｐｌｅｎｉｕｍ  ａｌｔｅｒｎｉｆｏｌｉｕｍ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｎｄｒｏｓａｃｅａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｓｊｅｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｉｆｌｏｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｒｙｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃａｅｓｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｅｘａｒａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｍｕｓｃｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｏｐｐｏｓｉｔｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｅｌｌａｒｉｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｅｇｕｉｅｒｉ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｐａｎｉｃｕｌａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃｕｎｅｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｉｚｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｏｌｏｎｉｆｅｒａのうちの１種または１種より多く、Ａｓｔｒａｎｔｉａ  ｍａｊｏｒおよびこれらの組合せから得られる抽出物、ならびにこれらの使用を提供する。
【００２５】
本明細書に記載されている通り、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｐ．、例えば、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ、Ｃｈｒｙｓｏｓｐｌｅｎｉｕｍ  ａｌｔｅｒｎｉｆｏｌｉｕｍ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｎｄｒｏｓａｃｅａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｓｊｅｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｉｆｌｏｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｒｙｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃａｅｓｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｅｘａｒａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｍｕｓｃｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｏｐｐｏｓｉｔｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｅｌｌａｒｉｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｅｇｕｉｅｒｉ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｐａｎｉｃｕｌａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃｕｎｅｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｉｚｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｏｌｏｎｉｆｅｒａのうち１種または２種以上、Ａｓｔｒａｎｔｉａ  ｍａｊｏｒおよびこれらの組合せから得られる抽出物が提供される。抽出物は、植物材料の水抽出プロセスを使用して得ることができる。抽出物は、化粧品適用のために製剤化し、皮膚および関連組織に適用して、炎症関連の皮膚状態の軽減をもたらすことができる。抽出物を使用して、皮膚および関連組織における老化を低下（抗老化）、発赤を低下（抗発赤）、またはこれらの組合せを為すこともできる。抽出物を使用して、脱毛症を低下させることもできる。
【００２６】
本開示はまた、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｐ．、例えば、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ、Ｃｈｒｙｓｏｓｐｌｅｎｉｕｍ  ａｌｔｅｒｎｉｆｏｌｉｕｍ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｎｄｒｏｓａｃｅａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｓｊｅｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｉｆｌｏｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｒｙｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃａｅｓｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｅｘａｒａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｍｕｓｃｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｏｐｐｏｓｉｔｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｅｌｌａｒｉｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｅｇｕｉｅｒｉ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｐａｎｉｃｕｌａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃｕｎｅｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｉｚｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｏｌｏｎｉｆｅｒａのうちの１種または１種より多く、Ａｓｔｒａｎｔｉａ  ｍａｊｏｒおよびこれらの組合せ由来の抽出物を含む組成物を、皮膚および関連組織に投与することにより、炎症関連の皮膚状態の軽減をもたらすための方法を提供する。Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ、Ｃｈｒｙｓｏｓｐｌｅｎｉｕｍ  ａｌｔｅｒｎｉｆｏｌｉｕｍ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｎｄｒｏｓａｃｅａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｓｊｅｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｉｆｌｏｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｒｙｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃａｅｓｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｅｘａｒａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｍｕｓｃｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｏｐｐｏｓｉｔｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｅｌｌａｒｉｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｅｇｕｉｅｒｉ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｐａｎｉｃｕｌａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃｕｎｅｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｉｚｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｏｌｏｎｉｆｅｒａのうちの１種または１種より多く、Ａｓｔｒａｎｔｉａ  ｍａｊｏｒおよびこれらの組合せ由来の抽出物を含む組成物を、皮膚および関連組織に投与することにより、炎症関連の皮膚状態の軽減をもたらす、皮膚および関連組織の老化を遅延させる、皮膚および関連組織の発赤を低下させる、太陽によるしみを低下させる、脱毛症を低下させる、またはこれらの組合せを為すための方法もまた提供される。抽出物は、抽出物が、ＴＮＦ−アルファ活性をｉｎ  ｖｉｔｒｏで阻害するという特性によって特徴付けることができる。
【００２７】
理論に制約されることは望まないが、皮膚の発赤の低下、太陽によるしみの低下、皮膚の老化、加齢性のしみ、アトピー性皮膚、乾癬、アトピー性皮膚炎もしくはこれらの組合せの低下、脱毛症の低下、または炎症関連の皮膚状態の軽減をもたらすことにおいて有用な、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ、Ｃｈｒｙｓｏｓｐｌｅｎｉｕｍ  ａｌｔｅｒｎｉｆｏｌｉｕｍ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｎｄｒｏｓａｃｅａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｓｊｅｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｉｆｌｏｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｒｙｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃａｅｓｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｅｘａｒａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｍｕｓｃｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｏｐｐｏｓｉｔｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｅｌｌａｒｉｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｅｇｕｉｅｒｉ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｐａｎｉｃｕｌａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃｕｎｅｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｉｚｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｏｌｏｎｉｆｅｒａのうち１種または１種より多く、Ａｓｔｒａｎｔｉａ  ｍａｊｏｒおよびこれらの組合せ由来の抽出物に関連する特性は、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）アルファ活性を阻害もしくはモジュレートする、抗ＩＬ１誘導性細胞応答を阻害もしくはモジュレートする、ＣＯＸ１、ＣＯＸ２活性を阻害する、リポキシゲナーゼ活性を阻害する、またはこれらの組合せを為す抽出物の能力の結果であり得る。
【００２８】
組成物は、化粧品、例えば、化粧品クリームとして使用し、皮膚または関連組織に適用して、皮膚および関連組織の老化を遅延させる（抗老化特性）、皮膚および関連組織の発赤を低下させる（抗発赤特性）、または抗老化および抗発赤特性の組合せを為す、または１種もしくは２種以上の炎症関連の皮膚状態を緩和するもしくはその軽減をもたらすことができる。組成物は、外用（external  use）のために皮膚に適用されるべき調製物として製剤化することができる。組成物は、例えば、脱毛症を低下させるために、シャンプー、スプレーまたはクリームとして適用することもできる。
【００２９】
本明細書において、用語「を含む（comprising）」、「を有する（having）」、「を含む（including）」および「を含有する（containing）」ならびにこれらの文法的変異は、包括的またはオープンエンドであり、追加的な列挙されていない要素および／または方法ステップを除外するものではない。用語「から本質的になる」は、組成物、使用または方法に関連して本明細書で使用される場合、追加的な要素、方法ステップ、または追加的な要素および方法ステップの両方が存在し得るが、このような追加が、列挙されている組成物、方法または使用が機能する様式に実質的な影響を与えないことを表示する。用語「からなる」は、組成物、使用または方法に関連して本明細書で使用される場合、追加的な要素および／または方法ステップの存在を除外する。
【００３０】
単語「単数（a）」または「単数（an）」の使用は、用語「を含む（comprising）」と併せて本明細書で使用される場合、「１つ」を意味することができるが、「１つまたは複数」、「少なくとも１つ」および「１つまたは２つ以上」の意義とも一貫する。単数形で表現されるいずれかの要素は、その複数形も包含する。複数形で表現されるいずれかの要素は、その単数形も包含する。用語「複数」は、本明細書において、２つ以上、例えば、２つまたはそれよりも多く、３つまたはそれよりも多く、４つまたはそれよりも多く、その他を意味する。本明細書において、用語「約」は、所与の値からのおよそ＋／−１０％変動を指す。かかる変動は、特に言及されているか否かにかかわらず、本明細書に提供されているいずれか所与の値に常に含まれることを理解されたい。
【００３１】
本明細書において、用語「抽出物」または「植物抽出物」は、１種または複数種の抽出技法を用いて所望の活性構成要素を単離または精製することによって得られる、植物材料の濃縮された調製物を指す。抽出技法の例として、溶媒抽出、限定されないが例えば、水、エタノール、メタノール、水／エタノール混合物、水／メタノール混合物、酢酸エチル、クロマトグラフィーその他を使用した抽出が挙げられるがこれらに限定されない。
【００３２】
本明細書に記載されている植物抽出物は、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｐ．、例えば、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ、Ｃｈｒｙｓｏｓｐｌｅｎｉｕｍ  ａｌｔｅｒｎｉｆｏｌｉｕｍ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｎｄｒｏｓａｃｅａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｓｊｅｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｉｆｌｏｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｒｙｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃａｅｓｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｅｘａｒａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｍｕｓｃｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｏｐｐｏｓｉｔｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｅｌｌａｒｉｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｅｇｕｉｅｒｉ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｐａｎｉｃｕｌａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃｕｎｅｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｉｚｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｏｌｏｎｉｆｅｒａのうち１種または１種より多く、Ａｓｔｒａｎｔｉａ  ｍａｊｏｒおよびこれらの組合せに由来する。本明細書において、用語「から派生する」または「に由来する」は、所与の明確な供給源から得られるまたはこれに遡ることができる、産物、化合物または組成物を指す。Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｐ．、例えば、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ、Ｃｈｒｙｓｏｓｐｌｅｎｉｕｍ  ａｌｔｅｒｎｉｆｏｌｉｕｍ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｎｄｒｏｓａｃｅａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｓｊｅｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｉｆｌｏｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｒｙｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃａｅｓｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｅｘａｒａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｍｕｓｃｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｏｐｐｏｓｉｔｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｅｌｌａｒｉｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｅｇｕｉｅｒｉ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｐａｎｉｃｕｌａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃｕｎｅｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｉｚｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｏｌｏｎｉｆｅｒａのうち１種または１種より多く、Ａｓｔｒａｎｔｉａ  ｍａｊｏｒおよびこれらの組合せ由来の抽出物は、１種もしくは２種以上のＴＮＦ−アルファ阻害剤または１種もしくは２種以上のＴＮＦ−アルファアンタゴニストを含むことができる、すなわち、抽出物は、本明細書に記載されている通りＴＮＦ−アルファ活性を阻害する特性を示す、化合物または化合物の組合せを含むことができる。
【００３３】
「Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ」（または「Ｓ．ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ」）、Ｃｈｒｙｓｏｓｐｌｅｎｉｕｍ  ａｌｔｅｒｎｉｆｏｌｉｕｍ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｎｄｒｏｓａｃｅａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｓｊｅｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｉｆｌｏｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｒｙｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃａｅｓｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｅｘａｒａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｍｕｓｃｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｏｐｐｏｓｉｔｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｅｌｌａｒｉｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｅｇｕｉｅｒｉ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｐａｎｉｃｕｌａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃｕｎｅｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｉｚｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｏｌｏｎｉｆｅｒａおよびＡｓｔｒａｎｔｉａ  ｍａｊｏｒは、イベリア半島、アルプス山脈およびバルカン半島における、中欧および南欧に一般的に生育する植物を指す。好ましくは、本開示に係る植物抽出物を得るために、葉、茎および／または根が使用されるが、花、果実、塊茎、球茎等、他の植物組織を使用することもできる。当業者であれば理解できるであろうが、Ｓａｘｉｆｒａｇａｃａｅ科は、３つの属（gender）を含む：Ｂｅｒｇｅｎｉａ、ＳａｘｉｆｒａｇａおよびＣｈｒｙｓｏｓｐｌｅｎｉｕｍ。本明細書に記載されている通り、用語「Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｐ．」は、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｎｄｒｏｓａｃｅａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｓｊｅｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｉｆｌｏｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｒｙｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃａｅｓｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｅｘａｒａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｍｕｓｃｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｏｐｐｏｓｉｔｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｅｌｌａｒｉｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｅｇｕｉｅｒｉ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｐａｎｉｃｕｌａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃｕｎｅｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｉｚｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｏｌｏｎｉｆｅｒａおよびＣｈｒｙｓｏｓｐｌｅｎｉｕｍ  ａｌｔｅｒｎｉｆｏｌｉｕｍを含む。
【００３４】
「ＴＮＦ−アルファ活性を阻害する」とは、因子のＴＮＦ誘導性放出、ＴＮＦ−アルファ誘導性アポトーシスまたはＴＮＦ−アルファ誘導性細胞傷害性が挙げられるがこれらに限定されない、ＴＮＦ−アルファ誘導性の過程の選択的で、完全または部分的な阻害を意味する。直接的なＴＮＦ−アルファ誘導性の過程の例として、ＴＮＦ−アルファ誘導性アポトーシス、または外因的ＴＮＦ−アルファ誘導性サイトカイン放出の阻害、またはＴＮＦ−アルファアポトーシス、またはＴＮＦ−アルファ誘導性細胞傷害性の阻害が挙げられるがこれらに限定されない。当業者には明らかであろうが、代替アッセイを使用して、直接的なＴＮＦ−アルファ誘導性の過程を決定することもできる。
【００３５】
ＴＮＦ−アルファ活性は、例えば、ヒト上皮細胞からのＴＮＦ−アルファ誘導性ＩＬ−６放出の濃度依存性阻害を測定するｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイによって測定することができる。
【００３６】
ヒト上皮細胞は、その膜表面にＴＮＦおよびＩＬ１受容体を有するため、ＴＮＦまたはＩＬ１の外因的添加は、このような添加された化合物の含量に比例する、このような細胞における測定可能な生物学的反応を誘発する。本明細書に記載されている抽出物の有効性は、この生物学的応答の阻害を決定し、その有効性を定量化することにより評価することができる。
【００３７】
ＴＮＦ−アルファ活性は、例えば、アクチノマイシンＤ（ＡｃｔＤ）の存在下で、ＴＮＦ−アルファ感受性細胞株におけるＴＮＦ−アルファの用量依存性細胞傷害性を測定するｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイによって測定することができ、抽出物は、細胞株における外因的ＴＮＦ−アルファの細胞傷害性を阻害する（例えば、Vercammen  Dら、１９９８年、J.  Exp  Med.１８７巻：１４７７〜１４８５頁に記載されている方法を使用して）。しかし、当業者には明らかであろうが、他のｉｎ  ｖｉｔｒｏまたはｉｎ  ｖｉｖｏアッセイを使用して、ＴＮＦ−アルファ誘導性の過程を決定することができる。
【００３８】
腫瘍壊死因子アルファ阻害剤（またはアゴニスト）、腫瘍壊死因子α阻害剤（またはアゴニスト）、ＴＮＦα阻害剤（またはアゴニスト）とも称されるＴＮＦ−アルファ阻害剤（またはアゴニスト）とは、ＴＮＦ−アルファに対する生理的応答を遮断、阻害、防止、抑制または弱化する、化合物または組成物を意味する。阻害剤は、直接的または間接的のいずれかによりＴＮＦ−アルファの活性を遮断または低下させることができる。ＴＮＦ−アルファ阻害剤は、ＴＮＦ−アルファ応答を遅くする、干渉する、部分的に遮断するまたは遮断することができる。本明細書において、ＴＮＦ−アルファ阻害剤またはＴＮＦ−アルファアンタゴニストは、細胞におけるＴＮＦ−アルファの合成または産生を遮断または修飾しない。本明細書に記載されている抽出物は、ＴＮＦ−アルファ活性を遮断する。
【００３９】
本明細書に記載されている方法は、炎症関連の皮膚状態の軽減を得ること、太陽によるしみを低下させること、皮膚および関連組織の老化を遅延させること（抗老化）、皮膚および関連組織の発赤を低下させること（抗発赤）、またはこれらの組合せを為すことを必要とする対象への、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ、Ｃｈｒｙｓｏｓｐｌｅｎｉｕｍ  ａｌｔｅｒｎｉｆｏｌｉｕｍ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｎｄｒｏｓａｃｅａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｓｊｅｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｉｆｌｏｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｒｙｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃａｅｓｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｅｘａｒａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｍｕｓｃｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｏｐｐｏｓｉｔｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｅｌｌａｒｉｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｅｇｕｉｅｒｉ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｐａｎｉｃｕｌａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃｕｎｅｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｉｚｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｏｌｏｎｉｆｅｒａ、Ａｓｔｒａｎｔｉａ  ｍａｊｏｒのうちの１種もしくは１種より多くおよびこれらの組合せ由来の抽出物、またはＳａｘｉｆｒａｇａ  ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ、Ｃｈｒｙｓｏｓｐｌｅｎｉｕｍ  ａｌｔｅｒｎｉｆｏｌｉｕｍ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｎｄｒｏｓａｃｅａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｓｊｅｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｉｆｌｏｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｒｙｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃａｅｓｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｅｘａｒａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｍｕｓｃｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｏｐｐｏｓｉｔｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｅｌｌａｒｉｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｅｇｕｉｅｒｉ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｐａｎｉｃｕｌａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃｕｎｅｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｉｚｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｏｌｏｎｉｆｅｒａ、Ａｓｔｒａｎｔｉａ  ｍａｊｏｒのうちの１種もしくは１種より多くおよびこれらの組合せ由来の抽出物を含む組成物の投与を含む。皮膚発赤、皮膚老化の低下、炎症関連の皮膚状態からの軽減、またはこれらの組合せは、抽出物によりｉｎ  ｖｉｔｒｏで観察される抗炎症活性の結果であり得る。したがって、組成物は、適した担体または化粧品として許容される媒体（ｖｅｈｉｃａｌ）と共に、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ、Ｃｈｒｙｓｏｓｐｌｅｎｉｕｍ  ａｌｔｅｒｎｉｆｏｌｉｕｍ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｎｄｒｏｓａｃｅａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｓｊｅｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｉｆｌｏｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｒｙｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃａｅｓｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｅｘａｒａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｍｕｓｃｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｏｐｐｏｓｉｔｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｅｌｌａｒｉｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｅｇｕｉｅｒｉ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｐａｎｉｃｕｌａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃｕｎｅｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｉｚｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｏｌｏｎｉｆｅｒａ、Ａｓｔｒａｎｔｉａ  ｍａｊｏｒのうちの１種または１種より多くおよびこれらの組合せ���来の有効量の抽出物を含み、有効量の抽出物は、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）アルファ活性の阻害によって特徴付けられる。
【００４０】
本明細書において、「抗炎症活性」または「炎症のモジュレート」は、急性および／または慢性炎症性応答の低下における、および／または炎症関連の状態、好ましくは、皮膚関連の状態、例えば、炎症関連の皮膚状態の防止または処置における物質または組成物の特性を指す。本明細書に記載されている組成物を使用して軽減され得る炎症関連の皮膚状態の非限定的な例として、咬傷または刺傷、皮疹、皮膚のそう痒、皮膚の水疱形成、日焼け、太陽によるしみ、皮膚の熱傷、ＵＶ曝露または照射、皮膚の老化、皮膚アレルギー、加齢性のしみ、アトピー性皮膚、乾癬、アトピー性皮膚炎、脱毛症、および化学的刺激物、汚染物質、汚物またはデブリへの曝露のうち１種または２種以上が挙げられる。
【００４１】
皮膚老化は、慢性炎症の結果として生じる状態の例であり、公知判断基準を使用して測定することができる（例えば、参照により本明細書に組み込むFarage  M.A.ら、２０１３年、Adv  Wound  Care  ２巻：５〜１０頁）。皮膚老化は、例えば、皮膚状態に関連する生化学的マーカーの変化；皮膚の構造的評価、例えば、皮膚の厚さ、コラーゲンおよびエラスチン含有量およびターンオーバー、コラゲナーゼおよびエラスターゼ産生、細胞サイズ、ケラチノサイト（より短く太くなった）および／または角質細胞（表皮ターンオーバー減少の結果としてより大きくなった）の形状の変化、皮膚脂質含有量の低下、アミノ酸含有量の変化、真皮表皮接合部の平板化、弾性、ねじれ伸展性、神経知覚（neuroperception）、経表皮水分喪失（ＴＥＷＬ）および皮膚増殖速度を含む皮膚の機能的評価を使用して決定することができる。皮膚発赤は、皮膚（sin）の定性的測定を使用して、または皮膚呈色に関連する生化学的マーカーを使用して決定することができる。
【００４２】
ある特定の太陽光線、特に、ＵＶ  ＡおよびＢ、寒冷、機械的刺激作用ならびに汚染は全て、疼痛感覚に関連する発赤および膨潤の出現をもたらす、皮膚における急性反応を引き起こす因子である。これは、炎症性応答である。このような侵害は、低い強度のものであっても、特に、表皮のケラチノサイトによる、ＴＮＦおよびＩＬ１の放出を直接的に引き起こす。ＴＮＦは、有益な生理学的警告シグナルではあるが、皮膚の早期および加速された老化をもたらす損傷の直接的な原因となる因子となり得る、極めて強力な因子である。ＴＮＦは実際に、コラーゲンおよびエラスチンで構成された真皮のマトリックスの線維を効率的に分解する酵素（コラゲナーゼおよびエラスターゼ）の放出を引き起こし、これは、後者の局所的崩壊をもたらし、皮膚弾性の喪失および皺の出現を引き起こす。この効果は、特に、皮膚の堅さの維持に関与し、生まれてから最初の３年間に主に産生され、その後ははるかに少なくなるタンパク質である、エラスチンにとって重要である。
【００４３】
皮膚の柔軟性および無傷真皮構造タンパク質を維持する皮膚の能力におけるその有害効果に加えて、太陽は、太陽によるしみ（黒子とも呼ばれる）の形成における直接的効果も有する。このような加齢性のしみは、太陽への反復したまたは長すぎる曝露に起因し、若年者に目に見える場合もある。これは、太陽への長いまたは激烈な曝露に反応するメラニン形成細胞の過剰産生から生じるメラニン（melanine）凝集体に対応する。２種のサイトカインが、メラニン形成細胞による太陽光線の効果を介したメラニン産生の刺激に関与し得る；ＴＮＦおよびＩＬ１。
【００４４】
炎症性皮膚状態からの軽減または炎症性皮膚状態の処置とは、炎症に関連する症状、不快感、外観またはこれらの組合せの低下を意味する。軽減または処置の程度は、有効量の本発明の抽出物を含む組成物を受けた対象に関連する１種または複数種の定性的または定量的因子を、組成物を受けていない対象、または有効量の本明細書に記載されている抽出物を含まない組成物を受けた対象における同じ１種または複数種の因子と比較することにより決定することができる。１種もしくは複数の因子は、定性的因子、例えば、そう痒低下、発赤低下その他であり得、指標を使用してカテゴリー化することができ、１種もしくは複数の因子は、定量的因子であり得、例えば、対象から得られる試料のアッセイおよび例えば、ＴＮＦ−アルファ活性の決定に基づく、または１種もしくは複数の因子は、定性的および定量的因子の組合せであり得る。
【００４５】
本開示はまた、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ、Ｃｈｒｙｓｏｓｐｌｅｎｉｕｍ  ａｌｔｅｒｎｉｆｏｌｉｕｍ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｎｄｒｏｓａｃｅａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｓｊｅｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｉｆｌｏｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｒｙｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃａｅｓｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｅｘａｒａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｍｕｓｃｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｏｐｐｏｓｉｔｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｅｌｌａｒｉｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｅｇｕｉｅｒｉ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｐａｎｉｃｕｌａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃｕｎｅｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｉｚｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｏｌｏｎｉｆｅｒａ、Ａｓｔｒａｎｔｉａ  ｍａｊｏｒのうちの１種もしくは１種より多くおよびこれらの組合せ由来の抽出物、またはＳａｘｉｆｒａｇａ  ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ、Ｃｈｒｙｓｏｓｐｌｅｎｉｕｍ  ａｌｔｅｒｎｉｆｏｌｉｕｍ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｎｄｒｏｓａｃｅａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｓｊｅｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｉｆｌｏｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｒｙｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃａｅｓｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｅｘａｒａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｍｕｓｃｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｏｐｐｏｓｉｔｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｅｌｌａｒｉｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｅｇｕｉｅｒｉ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｐａｎｉｃｕｌａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃｕｎｅｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｉｚｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｏｌｏｎｉｆｅｒａ、Ａｓｔｒａｎｔｉａ  ｍａｊｏｒのうちの１種もしくは１種より多くおよびこれらの組合せ由来の抽出物を含む組成物を対象に投与することにより、炎症関連の皮膚状態、限定されないが例えば、皮膚老化、皮膚発赤またはその両方に関連し得るＴＮＦ−アルファ惹起サイトカイン活性またはＩＬ−１β（ＩＬ−１ベータ）惹起サイトカイン活性の効果を低下させる方法を提供する。
【００４６】
ＴＮＦ−アルファの直接的活性またはＴＮＦアルファの生理学的応答は、例えば、ヒト上皮細胞からのＴＮＦ−アルファ誘導性ＩＬ−６放出の濃度依存性阻害を測定するｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイを使用してモニターすることができる。
【００４７】
ＩＬ−１ベータの直接的活性またはＩＬ−１ベータの生理学的応答は、例えば、ヒト上皮細胞からのＴＮＦ−アルファ誘導性ＩＬ−６放出の濃度依存性阻害を測定するｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイを使用してモニターすることができる。
【００４８】
例えば、ＴＮＦ−アルファまたはＩＬ−１ベータによるＩＬ−６産生における抽出物の直接的刺激は、ヒト腸上皮Ｃａｃｏ−２細胞を使用して決定し、植物抽出物における、続くＴＮＦ−アルファまたはＩＬ−１ベータの添加による細胞のインキュベーション後に細胞培地に分泌されるＩＬ−６の量を決定することができる。図１Ａに示す通り、ＴＮＦ−アルファまたはＩＬ−１ベータの存在下でのＳａｘｉｆｒａｇａ  ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ水抽出物は、増加する量の植物抽出物によりＩＬ−６産生を低下させることが観察された。ヒトケラチノサイト（kerationocycte）において同様の応答が観察された（図１Ｂ）。Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ水抽出物の抗ＴＮＦ誘導性細胞応答は、０．０４０３ｍｇ乾物／ｍｌのＩＣ５０を示した。Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｎｄｒｏｓａｃｅａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｓｊｅｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｉｆｌｏｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｒｙｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃａｅｓｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｅｘａｒａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｍｕｓｃｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｏｐｐｏｓｉｔｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｅｌｌａｒｉｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｅｇｕｉｅｒｉ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｐａｎｉｃｕｌａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃｕｎｅｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｉｚｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｏｌｏｎｉｆｅｒａ、Ｃｈｒｙｓｏｓｐｌｅｎｉｕｍ  ａｌｔｅｒｎｉｆｏｌｉｕｍおよびＡｓｔｒａｎｔｉａ  ｍａｊｏｒから調製された抽出物を使用して、同様の結果が観察され（実施例３の表２を参照）、それによると、抗ＴＮＦ誘導性細胞応答のＩＣ５０は、０．０３９２ｍｇ／ｍｌ  ＤＭ〜０．５１ｍｇ／ｍｌ  ＤＭに及んだ。表２には同様に、０．０２９９ｍｇ／ｍｌ  ＤＭ〜０．５３ｍｇ／ｍｌ  ＤＭに及んだ抗ＩＬ−１ベータ誘導性細胞応答のＩＣ５０が示されている。
【００４９】
ＴＮＦ−アルファの活性またはＴＮＦ−アルファの生理学的応答は、例えば、アクチノマイシンＤ（ＡｃｔＤ）の存在下でＴＮＦ−アルファ感受性細胞株における外因的ＴＮＦ−アルファの用量依存性細胞傷害性を測定するｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイによって決定することができる。図２に示す通り（実施例３も参照）、ＴＮＦ−アルファ活性におけるＳａｘｉｆｒａｇａ  ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ抽出物の効果は、外因的ＴＮＦ−アルファの直接的阻害に起因し、効果は、数分間〜数時間内の短い期間内に観察される。ＴＮＦ−アルファ活性における抽出物の効果は、図２に示す通り、全体的ＴＮＦ活性の部分的遮断をもたらし得る。Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ由来の抽出物の添加は、したがって、細胞に対するＴＮＦ−アルファの細胞傷害性を阻害し、炎症の過程をモジュレートすることができる。
【００５０】
抽出物は、ＴＮＦ−アルファまたはＩＬ−１ベータ活性を、例えば、本明細書に記載されているｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイを使用して決定される通り、３０％〜１００％またはその間のいずれかの量、例えば、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００％またはその間のいずれかの量だけ低下させることができる。
【００５１】
さらに、抽出物は、ＴＮＦ−アルファ／ＡｃｔＤ誘導性細胞死を、例えば、本明細書に記載されているｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイを使用して決定される通り、３０％〜１００％またはその間のいずれかの量、例えば、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００％またはその間のいずれかの量だけ低下させることができる。
【００５２】
別の態様では、本開示は、炎症関連の皮膚状態、例えば、皮膚老化、太陽によるしみ、皮膚発赤、加齢性のしみ、アトピー性皮膚、乾癬、アトピー性皮膚炎、脱毛症またはこれらの組合せに関連し得る、ＩＬ−１β誘導性の活性を阻害する方法に関する。
【００５３】
抽出物は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏでのヒト上皮細胞からのＴＮＦ誘導性ＩＬ−６放出またはｉｎ  ｖｉｔｒｏでのヒト上皮細胞からのＩＬ−１誘導性ＩＬ−６放出（本明細書に記載されている通り）または本技術分野で公知のいずれかのｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイを使用して決定される通り、０．００５ｍｇ／ｍｌ〜２．５ｍｇ／ｍｌの間またはその間のいずれかの量、０．０２ｍｇ／ｍｌ〜２．５ｍｇ／ｍｌの間またはその間のいずれかの量、例えば、０．００５ｍｇ／ｍｌ、０．００６ｍｇ／ｍｌ、０．００７ｍｇ／ｍｌ、０．００８ｍｇ／ｍｌ、０．００９ｍｇ／ｍｌ、０．０１ｍｇ／ｍｌ、０．０１２ｍｇ／ｍｌ、０．０１５ｍｇ／ｍｌ、０．０１８ｍｇ／ｍｌ、０．０２ｍｇ／ｍｌ、０．０２５ｍｇ／ｍｌ、０．０３ｍｇ／ｍｌ、０．０３５ｍｇ／ｍｌ、０．０４ｍｇ／ｍｌ、０．０４５ｍｇ／ｍｌ、０．０５ｍｇ／ｍｌ、０．０５５ｍｇ／ｍｌ、０．０６ｍｇ／ｍｌ、０．０６５ｍｇ／ｍｌ、０．０７ｍｇ／ｍｌ、０．０７５ｍｇ／ｍｌ、０．０８ｍｇ／ｍｌ、０．０８５ｍｇ／ｍｌ、０．０９ｍｇ／ｍｌ、０．０９５ｍｇ／ｍｌ  ０．１ｍｇ／ｍｌ、０．１５ｍｇ／ｍｌ、０．２ｍｇ／ｍｌ、０．２２ｍｇ／ｍｌ、０．２３ｍｇ／ｍｌ、０．２４ｍｇ／ｍｌ、０．２５ｍｇ／ｍｌ、０．３ｍｇ／ｍｌ、０．３５ｍｇ／ｍｌ、０．４ｍｇ／ｍｌ、０．４５ｍｇ／ｍｌ、０．５ｍｇ／ｍｌ、１．０ｍｇ／ｍｌ、１．５ｍｇ／ｍｌ、２．０ｍｇ／ｍｌ、２．５ｍｇ／ｍｌまたはその間のいずれかの量のＩＣ５０を有することができる。
【００５４】
Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ、Ｃｈｒｙｓｏｓｐｌｅｎｉｕｍ  ａｌｔｅｒｎｉｆｏｌｉｕｍ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｎｄｒｏｓａｃｅａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｓｊｅｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｉｆｌｏｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｒｙｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃａｅｓｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｅｘａｒａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｍｕｓｃｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｏｐｐｏｓｉｔｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｅｌｌａｒｉｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｅｇｕｉｅｒｉ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｐａｎｉｃｕｌａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃｕｎｅｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｉｚｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｏｌｏｎｉｆｅｒａ、Ａｓｔｒａｎｔｉａ  ｍａｊｏｒのうち１種または２種以上およびこれらの組合せ由来の抽出物は、エタノール／水抽出物または水抽出物（水性抽出物とも呼ばれる）であり得る。例えば、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ、Ｃｈｒｙｓｏｓｐｌｅｎｉｕｍ  ａｌｔｅｒｎｉｆｏｌｉｕｍ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｎｄｒｏｓａｃｅａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｓｊｅｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｉｆｌｏｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｒｙｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃａｅｓｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｅｘａｒａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｍｕｓｃｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｏｐｐｏｓｉｔｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｅｌｌａｒｉｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｅｇｕｉｅｒｉ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｐａｎｉｃｕｌａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃｕｎｅｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｉｚｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｏｌｏｎｉｆｅｒａ、Ａｓｔｒａｎｔｉａ  ｍａｊｏｒのうち１種または２種以上およびこれらの組合せ由来の水抽出物は、約０．０２〜約２．５ｍｇ乾物／ｍｌの間またはその間のいずれかの量のＩＣ５０による、直接的抗ＴＮＦおよび抗ＩＬ１誘導性細胞応答を有することができる。
【００５５】
ＴＮＦ−アルファは、免疫および炎症性応答の主要メディエーターである。本明細書において、「ＴＮＦ−アルファ媒介性応答」。ＴＮＦ媒介性応答として、急性および慢性免疫および自己免疫性状態、炎症性状態その他を挙げることができるがこれらに限定されない。例えば、炎症関連の皮膚状態。
【００５６】
本開示の一態様は、抗（ant-）炎症活性、例えば、炎症関連の皮膚状態を有する、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ、Ｃｈｒｙｓｏｓｐｌｅｎｉｕｍ  ａｌｔｅｒｎｉｆｏｌｉｕｍ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｎｄｒｏｓａｃｅａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｓｊｅｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｉｆｌｏｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｒｙｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃａｅｓｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｅｘａｒａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｍｕｓｃｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｏｐｐｏｓｉｔｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｅｌｌａｒｉｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｅｇｕｉｅｒｉ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｐａｎｉｃｕｌａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃｕｎｅｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｉｚｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｏｌｏｎｉｆｅｒａ、Ａｓｔｒａｎｔｉａ  ｍａｊｏｒのうち１種または２種以上およびこれらの組合せ由来の植物抽出物に関し、抽出物は、ＴＮＦ−アルファまたはＩＬ−１ベータ活性を阻害する。
【００５７】
図２を参照しつつ示す通り、対照細胞への外因的ＴＮＦ−アルファの添加増加は、細胞生存率の有意な減少をもたらす（１ｎｇ／ｍｌを上回るＴＮＦ−アルファ濃度）。高濃度のＴＮＦ−アルファにおける細胞生存率の減少は、ＴＮＦ−アルファに特異的な抗体（ＴＮＲＦ１−Ｆｃ）を使用しても寛解されない。しかし、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ由来の植物抽出物（ＳＲＸ０１）の添加は、外因的ＴＮＦ−アルファ濃度の５桁の範囲にわたる、ＴＮＦ−アルファ誘導性細胞死に対する細胞集団の部分的保護を示す。１ｎｇ／ｍｌを上回るＴＮＦ−アルファ濃度で、細胞生存率の０〜５％低下が観察され、細胞集団のおよそ５０〜７０％は、最大１０００ｎｇ／ｍｌのＴＮＦ−アルファ濃度の存在下で生存可能なままであった。
【００５８】
これらの結果は、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｐ．由来の抽出物、限定されないが例えば、ＳＲＸ０１またはＡｓｔｒａｎｔｉａ  ｍａｊｏｒ由来の抽出物が、直接的様式で作用して、ＴＮＦ効果を遮断し、ＴＮＦ誘導性細胞死から細胞を保護することを示す。ＳＲＸ０１抽出物の保護的効果は、ＴＮＦ−アルファ濃度に依存しない。ＴＮＦ−アルファ誘導性細胞死におけるＳＲＸ０１の保護的効果は、０．０１〜１０００ｎｇ／ｍｌ  ＴＮＦ−アルファ（ＴＮＦ−アルファの細胞内の量をはるかに超えて）の、５桁の範囲にわたり観察されるため、この効果は、ＴＮＦ−アルファ合成の結果ではない。さらに、ＳＲＸ０１の存在下、およびいずれかの添加ＴＮＦの非存在下で、ＴＮＦ誘導性細胞死は観察されない。
【００５９】
理論に制約されることは望まないが、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｐ．由来の抽出物、例えば、ＳＲＸ０１またはＡｓｔｒａｎｔｉａ  ｍａｊｏｒ由来の抽出物の保護的効果は、ＴＮＦ−アルファ誘導性細胞応答の修飾、例えば、ＴＮＦ−アルファの効果に影響し得るトランスポーターのモジュレート、生化学的経路のモジュレーション、ＴＮＦ−アルファ活性に関与する過程の阻害剤もしくは活性化因子としての作用、遺伝子発現のモジュレート（ＴＮＦ−アルファ誘導性の活性に関する遺伝子の発現の活性化または抑制のいずれか）、またはこれらの組合せの結果であり得る。
【００６０】
皮膚（または皮膚性）は、ケラチノサイトを含む表皮層、基底膜、および基底膜を介して表皮に接続された真皮層（乳頭部領域および網状領域を含む）を含む。皮膚の関連組織は、皮下組織、皮下性組織、および外胚葉または中胚葉の組織を含むこともできる。皮膚は、環境刺激に対し高度に反応性であり、ケラチノサイトの表皮構成成分は、アラキドン酸ならびに炎症誘発性サイトカインのＩＬ−１ベータおよびＴＮＦ−アルファの両方の非常に豊富な供給源である。皮膚樹状細胞、ランゲルハンス細胞は、様々なリンパ球のさらなる免疫応答のための抗原を認識およびプロセシングし、これらの細胞は全て、サイトカインによって、その特異的細胞表面受容体を介して主に調節される。高度に神経支配された皮膚は、発赤、膨潤および発熱のための高い能力を有する。皮膚系において、組織損傷の程度は、その結果得られる炎症性応答と比例せずに高頻度で拡大される。
【００６１】
皮膚がストレスを経験する際に産生されたフリーラジカルは、皮膚細胞の漸進的増悪に寄与することができ、フリーラジカルは、早期老化にも関係づけられる。本明細書に記載されている通り、ストレスへの曝露後の皮膚組織におけるフリーラジカルの含量は、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｐ．由来の抽出物、例えば、ＳＲＸ０１またはＡｓｔｒａｎｔｉａ  ｍａｊｏｒ由来の抽出物によって低下され、これにより、皮膚老化過程を遅くする。例えば、ＳＲＸ０１は、２，２−ジフェニル（dipenyl）−１−ピクリルヒドラジル（ＤＰＰＨ）検査を使用して測定される抗フリーラジカル活性を示す（実施例２を参照）。この検査において、ＳＲＸ０１は、０．２ｍｇ／ｍＬの乾物のＥＣ５０による濃度依存性抗酸化活性を示した。
【００６２】
また、後述する実施例３に記載されている通り、老化線維芽細胞の細胞培養モデルへのＳａｘｉｆｒａｇａ  ｓｐ．由来の抽出物、例えば、ＳＲＸ０１またはＡｓｔｒａｎｔｉａ  ｍａｊｏｒ由来の抽出物の添加は、培地へのコラゲナーゼおよびエラスターゼの放出を低下させた。コラゲナーゼおよびエラスターゼは、ストレッサー、例えば、ＵＶ光に応答した皮膚の早期老化の原因となる。さらに、ＵＶ光に曝露された皮膚試料外植片において、ＳＲＸ０１の添加は、これらの酵素の産生を低下させた。したがって、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｐ．由来の抽出物、例えば、ＳＲＸ０１またはＡｓｔｒａｎｔｉａ  ｍａｊｏｒ由来の抽出物の適用は、皮膚の早期老化の低下において有効となり得る。
【００６３】
したがって、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ、Ｃｈｒｙｓｏｓｐｌｅｎｉｕｍ  ａｌｔｅｒｎｉｆｏｌｉｕｍ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｎｄｒｏｓａｃｅａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｓｊｅｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｉｆｌｏｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｒｙｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃａｅｓｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｅｘａｒａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｍｕｓｃｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｏｐｐｏｓｉｔｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｅｌｌａｒｉｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｅｇｕｉｅｒｉ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｐａｎｉｃｕｌａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃｕｎｅｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｉｚｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｏｌｏｎｉｆｅｒａ、Ａｓｔｒａｎｔｉａ  ｍａｊｏｒおよびこれらの組合せ由来の抽出物は、皮膚の炎症の処置において有用となることもでき、本開示は、が挙げられるがこれらに限定されない、炎症性皮膚状態を処置するための方法を提供する。炎症関連の皮膚状態は、咬傷または刺傷、皮疹、皮膚のそう痒、皮膚の水疱形成、日焼け、太陽によるしみ、皮膚の熱傷、ＵＶ曝露または照射、皮膚の老化、皮膚アレルギー、加齢性のしみ、アトピー性皮膚、乾癬、アトピー性皮膚炎、脱毛症、および化学的刺激物または汚染物質への曝露のうち１種または複数種を含むことができる。
【００６４】
したがって、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ、Ｃｈｒｙｓｏｓｐｌｅｎｉｕｍ  ａｌｔｅｒｎｉｆｏｌｉｕｍ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｎｄｒｏｓａｃｅａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｓｊｅｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｉｆｌｏｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｒｙｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃａｅｓｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｅｘａｒａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｍｕｓｃｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｏｐｐｏｓｉｔｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｅｌｌａｒｉｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｅｇｕｉｅｒｉ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｐａｎｉｃｕｌａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃｕｎｅｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｉｚｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｏｌｏｎｉｆｅｒａ、Ａｓｔｒａｎｔｉａ  ｍａｊｏｒおよびこれらの組合せ由来の有効量の抽出物を含む組成物は、適した担体または化粧品として許容される媒体を含む化粧品製品として製剤化することができる。かかる製品の非限定的な例として、皮膚クリーム、皮膚洗浄剤製品、皮膚化粧水製品、皮膚保湿剤製品、皮膚使用のためのマスク製品、ヘアトリートメントのためのシャンプー；スキンまたはヘアトリートメントのためのスプレーが挙げられる。組成物内の有効量の抽出物は、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）アルファまたはＩＬ−１ベータ活性の阻害をもたらす。
【００６５】
Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ、Ｃｈｒｙｓｏｓｐｌｅｎｉｕｍ  ａｌｔｅｒｎｉｆｏｌｉｕｍ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｎｄｒｏｓａｃｅａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｓｊｅｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｉｆｌｏｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｒｙｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃａｅｓｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｅｘａｒａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｍｕｓｃｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｏｐｐｏｓｉｔｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｅｌｌａｒｉｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｅｇｕｉｅｒｉ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｐａｎｉｃｕｌａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃｕｎｅｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｉｚｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｏｌｏｎｉｆｅｒａ、Ａｓｔｒａｎｔｉａ  ｍａｊｏｒおよびこれらの組合せ由来の有効量の抽出物を含む組成物は、適した担体を含む製品として製剤化することができ、組成物内の有効量の抽出物は、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）アルファ活性の阻害をもたらす。
【００６６】
Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ、Ｃｈｒｙｓｏｓｐｌｅｎｉｕｍ  ａｌｔｅｒｎｉｆｏｌｉｕｍ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｎｄｒｏｓａｃｅａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｓｊｅｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｉｆｌｏｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｒｙｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃａｅｓｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｅｘａｒａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｍｕｓｃｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｏｐｐｏｓｉｔｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｅｌｌａｒｉｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｅｇｕｉｅｒｉ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｐａｎｉｃｕｌａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃｕｎｅｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｉｚｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｏｌｏｎｉｆｅｒａ、Ａｓｔｒａｎｔｉａ  ｍａｊｏｒおよびこれらの組合せ由来の有効量の抽出物を含む組成物を使用して、それを必要とする対象における皮膚、脱毛症または炎症関連の皮膚状態を処置する方法も開示されている。組成物は、皮膚におけるＴＮＦ−アルファ活性の阻害、低下、または阻害および低下の両方を為すことができる。組成物は、皮膚におけるＣＯＸ１、ＣＯＸ２および／またはリポキシゲナーゼ活性をさらに阻害することができる。
【００６７】
本明細書に記載されている組成物を使用して、咬傷または刺傷、皮疹、皮膚のそう痒、皮膚の水疱形成、日焼け、太陽によるしみ、皮膚の熱傷、皮膚の発赤化、皮膚の堅さの低下（すなわち、皮膚の堅さの保持）、皮膚の老化、皮膚アレルギー、脱毛症その他のうち１種または２種以上からの軽減をもたらすこともできる。例えば、実施例５および６に示す通り、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ由来の抽出物（ＳＲＸ０１）を含むクリーム製剤は、皮疹を緩和し（実施例５；図３Ａ、３Ｂ）、加齢性のしみを低下させ、皮膚の堅さを保持する（実施例６；表３および４）ことが観察され、皺の減弱（実施例６；表５）に向かう傾向も示し、これにより、組成物および組成物を含むクリーム製剤の有益な抗老化潜在力を実証する。
【００６８】
一態様では、Ｓａｘｉｆｒａｇｅ  ｓｐ．、例えば、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ、Ｃｈｒｙｓｏｓｐｌｅｎｉｕｍ  ａｌｔｅｒｎｉｆｏｌｉｕｍ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｎｄｒｏｓａｃｅａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｓｊｅｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｉｆｌｏｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｒｙｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃａｅｓｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｅｘａｒａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｍｕｓｃｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｏｐｐｏｓｉｔｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｅｌｌａｒｉｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｅｇｕｉｅｒｉ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｐａｎｉｃｕｌａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃｕｎｅｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｉｚｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｏｌｏｎｉｆｅｒａ、Ａｓｔｒａｎｔｉａ  ｍａｊｏｒおよびこれらの組合せ由来の局部（topical）皮膚組成物抽出物が開示されており、抽出物は、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｐ．、例えば、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ、Ｃｈｒｙｓｏｓｐｌｅｎｉｕｍ  ａｌｔｅｒｎｉｆｏｌｉｕｍ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｎｄｒｏｓａｃｅａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｓｊｅｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｉｆｌｏｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｒｙｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃａｅｓｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｅｘａｒａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｍｕｓｃｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｏｐｐｏｓｉｔｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｅｌｌａｒｉｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｅｇｕｉｅｒｉ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｐａｎｉｃｕｌａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃｕｎｅｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｉｚｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｏｌｏｎｉｆｅｒａ、Ａｓｔｒａｎｔｉａ  ｍａｊｏｒおよびこれらの組合せの全草（またはそのいずれかの部分）由来の水性抽出物である。Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｐ．、例えば、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ、Ｃｈｒｙｓｏｓｐｌｅｎｉｕｍ  ａｌｔｅｒｎｉｆｏｌｉｕｍ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｎｄｒｏｓａｃｅａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｓｊｅｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｉｆｌｏｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｒｙｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃａｅｓｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｅｘａｒａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｍｕｓｃｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｏｐｐｏｓｉｔｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｅｌｌａｒｉｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｅｇｕｉｅｒｉ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｐａｎｉｃｕｌａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃｕｎｅｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｉｚｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｏｌｏｎｉｆｅｒａ、Ａｓｔｒａｎｔｉａ  ｍａｊｏｒおよびこれらの組合せ由来の抽出物を使用して、増加したＴＮＦ−アルファ活性を有する皮膚細胞、例えば、炎症した皮膚におけるＴＮＦ−アルファ活性を低下させることができる。
【００６９】
Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ、Ｃｈｒｙｓｏｓｐｌｅｎｉｕｍ  ａｌｔｅｒｎｉｆｏｌｉｕｍ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｎｄｒｏｓａｃｅａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｓｊｅｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｉｆｌｏｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｒｙｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃａｅｓｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｅｘａｒａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｍｕｓｃｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｏｐｐｏｓｉｔｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｅｌｌａｒｉｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｅｇｕｉｅｒｉ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｐａｎｉｃｕｌａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃｕｎｅｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｉｚｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｏｌｏｎｉｆｅｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｏｌｏｎｉｆｅｒａ、Ａｓｔｒａｎｔｉａ  ｍａｊｏｒおよびこれらの組合せ、本明細書に記載されている抽出物は、抗酸化特性も示し、したがって、抽出物を使用して、外部環境因子、例えば、汚染、日焼け、化学物質その他から皮膚細胞への酸化的損傷を処置、防止または低下させることができる。したがって、本明細書により開示されている抽出物を使用して、皮膚細胞の酸化に関連する皮膚状態を処置することができる。
【００７０】
本開示はさらに、適した担体、希釈剤または賦形剤と組み合わせた、本明細書に定義されている植物抽出物および／または本明細書における精製方法のいずれかによって得られる植物抽出物を含む組成物に関する。
【００７１】
植物は、当業者に公知の標準栽培および抽出技法によって得ることができる。本技術分野で公知のいずれか適した抽出技法を使用して、本明細書に記載されている特性を有する植物抽出物を調製することができる。非限定的な一例では、植物（または葉、茎、樹皮、根、果実、花または花蕾、種子、種子莢、樹液、全草等、植物のいずれかの部分）は、植物を粉砕することにより破壊することができ、抽出物は、粉砕された材料から加速溶媒抽出（ＡＳＥ）によって得ることができる。他の抽出プロセスは、浸漬、注入、浸出、消化、煎じ、熱連続的抽出、水性−アルコール性抽出物、向流抽出物、マイクロ波支援抽出、超音波抽出、超臨界流体抽出物、植物用（phytonic）抽出物（例えば、ヒドロ−フルオロ（flouro）−カーボン溶媒による）その他を含むことができる。
【００７２】
水性、アルコール性もしくは油性抽出技法またはこれらの組合せを、全草またはそのいずれかの部分（例えば、葉、茎、樹皮、根、果実、花または花蕾、種子、種子莢、樹液、全草等）において使用して、抽出物を産生することができる。かかるプロセスにおいて、植物の所望の部分または全草は、破砕され（例えば、ブレンダー）、次いで、所望の溶媒（例えば、水、アルコール、水／アルコールまたは油性溶媒）に晒されて、抽出物を得る。エタノール抽出物または水性／アルコール性抽出物は、このプロセスを使用して得ることができる。好まれる抽出物は、水性抽出物である。
【００７３】
次に、抽出物は、液体形態で貯蔵する、凍結乾燥する、またはさらなる加工技法（例えば、加熱、冷却等）に付すことができる。抽出物は、例えば、実施例４に記載されている通り、局部使用（topical  use）のためのクリームへと製剤化することもできる。
【００７４】
本明細書に記載されている植物抽出物は、有益な抗炎症性特性を有し、したがって、炎症の防止および／または処置において有用な適用を有することができる。したがって、本開示は、本明細書に定義されている有効量の植物抽出物および／または組成物の使用または投与を含む、使用方法および処置方法および１種または複数種の炎症関連の皮膚状態を緩和する方法をさらに企図する。Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｐ．またはＡｓｔｒａｎｔｉａ  ｍａｊｏｒ由来の有効量の抽出物を含む組成物は、化粧品製品として製剤化することができる。化粧品製剤は、例えば、参照により本明細書に組み込む「Cosmetic  Formulation  of  Skin  Care  Products」（２００６年、Zoe  Diana  Draelos、Lauren  A  Thaman編、Taylor  &  Francis）に記載されている通り、本技術分野で周知である。
【００７５】
「担体」または「化粧品として許容される媒体」は、それと共に化合物が投与される、希釈剤、アジュバント、賦形剤を指す。「化粧品として許容される」は、過度の毒性、不適合性、不安定性、刺激作用、アレルギー応答その他を伴わずにヒトおよび動物の皮膚組織と接触した使用に適し、本発明の抽出物と混合（add-mixed）することができる、追加的な構成成分、不活性成分等を指す。担体または化粧品として許容される媒体は、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコールおよび液体ポリエチレングリコールその他）、これらの適した混合物および植物油、エチルアルコール、ポリエチレングリコールおよびポリプロピレングリコール等が挙げられるがこれらに限定されない水混和性媒体；ならびにトウモロコシ油、綿実油、ピーナッツ油、ゴマ油、オレイン酸エチル、ミリスチン酸イソプロピルおよび安息香酸ベンジル等が挙げられるがこれらに限定されない非水性媒体を含有する、溶媒または分散媒であり得る。一般的な保湿成分（密封剤（occlusive  agent））は、皮膚から水が逃げ出すことを遮断する障壁を作製し、ペトロラタム、ミネラルオイルおよびジメチコンを含む。水を誘引する成分（保水剤）、例えば、グリセリンは、ヤシ油、セチルエステルおよび一部のシリコーン等の軟化薬と共に、ローションに添加して、皮膚における組成物の感触を改善することもできる。軟化薬は、他の保湿成分に起因する粘着性および脂っぽさを低下させることができる。組成物内の追加的な成分は、乳化剤、例えば、ステアリン酸グリセリルおよびステアリン酸を含むことができ、油材料を水と組み合わせることができる。増粘剤、香料、保存料および着色料が含まれてもよい。
【００７６】
組成物における微生物の作用の防止は、様々な抗細菌および抗真菌剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、アスコルビン酸、チメロサールその他によって達成することができる。等張剤、例えば、糖、塩化ナトリウム、またはマンニトールおよびソルビトール等の多価アルコールが、組成物に含まれてもよい。
【実施例】
【００７７】
（実施例１）
Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ由来の抽出物の調製
培養および収穫
Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ植物は、ＢＩＯ  Ｓｕｉｓｓｅラベル（駆除薬、殺虫剤または化成肥料なし）にて、アルプス山脈において１０００メートル超で栽培される。植物は収穫され、原材料は乾燥され、温度および湿度制御環境中に維持する。
【００７８】
植物の粉砕
収穫バッチ全体は、１５００ｒｐｍのＲｅｔｓｃｈ  ＺＭ３００を使用して、４ｍｍガーゼを備える遠心分離カットによりホモジナイズされる。粉砕したら、抽出するまで、真空包装されたアルミ箔バッグ（８３０ｍｂａｒ、溶接１，５秒間）中に材料を維持する。
【００７９】
抽出
Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ抽出物は、次のパラメータを使用して、粉砕された植物材料から、例えば加速溶媒抽出（ＡＳＥ；Ｄｉｏｎｅｘ）によって得られる：
セルサイズ：６６ｍｌ
植物の量：４ｇ
支持体の量：４ｇ
溶媒：Ｈ２Ｏ  ｍｉｌｌｉＱ
温度：４０または１００℃
加熱時間：５分間
抽出持続時間：１０分間
％フラッシュ（Flush）：６５
サイクル数：１
【００８０】
ＡＳＥ後に、抽出物を濾過することができる。
【００８１】
Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ抽出物は、押し出しプロセス（ヘリカルまたはねじプレスを使用）によって得ることもできる。ＡＳＥおよび押し出しプロセスの両方は、溶媒としての水、アルコール／水溶媒、例えば、エタノール／水溶媒の使用のいずれかにより行うことができる。水は、好まれる溶媒である。アルコール／水溶媒が使用される場合、例えば、Bastianら、２００９年（上記参照）に記載されている通り、アルコール：水、典型的にはエタノール：水の比は、３０％：７０％である。
【００８２】
Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ抽出物は、浸漬、注入、浸出、消化、煎じ、熱連続的抽出、水性−アルコール性抽出物、向流抽出物、マイクロ波支援抽出、超音波抽出、超臨界流体抽出物、植物用抽出物（例えば、ヒドロ−フルオロ−カーボン溶媒による）その他を含む他のいずれかの抽出プロセスによって得ることもできる。
【００８３】
ＡＳＥ、浸漬、および溶媒として水を使用した圧力下の浸漬によって得られる抽出物の例は、「ＳＲＸ０１」である。
【００８４】
上述の方法を使用して、次の植物：Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ、Ｃｈｒｙｓｏｓｐｌｅｎｉｕｍ  ａｌｔｅｒｎｉｆｏｌｉｕｍ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｎｄｒｏｓａｃｅａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｓｊｅｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｉｆｌｏｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｒｙｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃａｅｓｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｅｘａｒａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｍｕｓｃｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｏｐｐｏｓｉｔｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｅｌｌａｒｉｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｅｇｕｉｅｒｉ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｐａｎｉｃｕｌａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃｕｎｅｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｉｚｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｏｌｏｎｉｆｅｒａおよびＡｓｔｒａｎｔｉａ  ｍａｊｏｒ由来の抽出物も調製した。
【００８５】
（実施例２）
抽出物の特徴付け
乾物の決定
抽出物の５ｍｌアリコートは、１０５℃のオーブン内で蒸発乾固される。乾物は、２回反復した重量測定決定によって決定される。
【００８６】
高圧液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）プロファイル
３個の主要ピーク（クロロゲン酸、ミリシトリンおよびクエルシトリン）が次の通りに測定される。抽出物のアリコートは、０．４６μｍフィルターを通して濾過される。ＨＰＬＣは、オートサンプラー、ポンプおよび分析セルを有するＤＡＤ検出器を備えるＷａｔｅｒｓシステムで行われる。ランは、０．８ｍｌ／分の流動によりＫｉｎｅｔｅｘ  ５μ  Ｃ１８  １５０×４．６ｍｍ（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ）カラムで行われる。検出は、３６０ｎｍ波長で行われる。注射容量は、２０μｌに設定される。ピーク面積は、抽出物の乾物により正規化される。
【００８７】
ＤＰＰＨ測定
７つの系列希釈（希釈因数４）が行われ、各希釈の２０μｌ試料が、透明マイクロウェルプレートにて３回反復して分析される。測定は、Ｂｅｒｔｈｏｌｄマイクロプレートリーダーにて５２０ｎｍ波長で行われる。３００μｌのＤＰＰＨ反応性（２，２−ジフェニル−１−ピクリルヒドラジル（hadrazyl）、４０ｍｇ／ｌ、メタノール中）が、ウェルに添加され、３０分間のインキュベーション後に、プレートの吸光度が測定される。得られる阻害曲線は、ｍｇ／ｍｌ単位の乾物でのＥＣ５０の決定を可能にする。
【００８８】
抽出物のいくつかの構成成分は、表１に収載されている。
【表１】
2019514981.tif 000003
【００８９】
（実施例３）
抽出物の生物学的活性
腫瘍壊死因子（ＴＮＦα）またはインターロイキン−１ベータ（ＩＬ−１β）活性の阻害
ＩＬ−６産生
ＴＮＦ−アルファの活性またはＴＮＦ−アルファの生理学的応答は、例えば、ヒト上皮（ＣＡＣＯ２）細胞からのＴＮＦ−アルファ誘導性ＩＬ−６放出（図１Ａを参照）またはヒトケラチノサイト（keratinocye）からのＩＬ−８放出（図１Ｂ）の濃度依存性阻害を測定するｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイを使用してモニターすることができる。
【００９０】
腫瘍壊死因子（ＴＮＦ−アルファ）またはインターロイキン−１（ＩＬ−１ベータ）によるＩＬ−６産生の直接的刺激における抽出物の効果は、次の通りに測定される。接着性ヒト腸上皮Ｃａｃｏ−２細胞は、検査されるべき抽出物と共に４５分間インキュベートされる。その後、応答を誘発するために、ＴＮＦ−アルファまたはＩＬ−１ベータのいずれかが、細胞に添加される。２４時間後、細胞培地中に分泌されるインターロイキン−６（ＩＬ−６）の量は、ＥＬＩＳＡによって測定される。この値は、対照としての、抽出物による事前のインキュベーションなしで、ＴＮＦ−アルファまたはＩＬ−１ベータによって刺激された細胞から得られる値と比較される。細胞生存率は、３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−２，５−ジフェニルテトラゾリウムブロミド（ＭＴＴ）検査を使用することにより、被験化合物の細胞傷害性を試験するために、並行して評価される。スルホラファンは、培地（１％ＦＣＳを含有）において調製された最終濃度６μＭにおいて陽性対照として使用される。
【００９１】
Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａから得られる水抽出物は、０．０４０３ｍｇ乾物／ｍｌのＩＣ５０による直接的抗ＴＮＦ誘導性細胞応答を有することが観察された（図１Ａを参照）。同様に、ＳＲＸ０１は、培養中のヒトケラチノサイトにおけるＴＮＦ誘導性ＩＬ８放出において乾物０．００４ｍｇ／ｍＬのＩＣ５０を示した。このＩＣ５０は、ＣＡＣＯ２上皮細胞に観察されるものの１０分の１であり（図１Ａ）、この抽出物が、表皮のこの主要細胞集団において効果的であることを示唆する。
【００９２】
Ｃｈｒｙｓｏｓｐｌｅｎｉｕｍ  ａｌｔｅｒｎｉｆｏｌｉｕｍ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｎｄｒｏｓａｃｅａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｓｊｅｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｉｆｌｏｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｒｙｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃａｅｓｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｅｘａｒａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｍｕｓｃｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｏｐｐｏｓｉｔｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｅｌｌａｒｉｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｅｇｕｉｅｒｉ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｐａｎｉｃｕｌａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃｕｎｅｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｉｚｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｏｌｏｎｉｆｅｒａおよびＡｓｔｒａｎｔｉａ  ｍａｊｏｒの水抽出物を実施例１の方法に従って調製し、上述の通りＴＮＦαまたはＩＬ−１β活性の阻害について検査した。これらの植物から得られる抽出物のＩＣ５０の結果は、表２に提示されている。
【００９３】
【表２】
2019514981.tif 000004
【００９４】
ＴＮＦ−アルファ活性の阻害はまた、２４時間の期間、アクチノマイシンＤ（ＡｃｔＤ；図２を参照）の存在下でＴＮＦ−アルファ感受性細胞株内の外因的ＴＮＦ−アルファの用量依存性細胞傷害性を測定するｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイを使用して決定される。ＤＭＳＯにおいて（対照）、ＴＮＦＲ１−Ｆｃ抗体の存在下で［ｒｅｆ］、または実施例１の方法に従って産生された抽出物（ＳＲＸ０１）の存在下で、細胞をインキュベートし、４９０ｎｍで細胞生存率を決定した。
【００９５】
ＤＭＳＯの存在下、および外因的ＴＮＦ−アルファの非存在下で、細胞は、アッセイの持続時間にわたって生存可能であった。ＤＭＳＯ処置細胞への外因的ＴＮＦ−アルファの添加増加に伴い、１ｎｇ／ｍｌを上回るＴＮＦ−アルファ濃度で、細胞生存率の著明な減少が観察される。ＴＮＦ−アルファに特異的な抗体であるＴＮＲＦ１−Ｆｃの添加は、およそ１００ｎｇ／ｍｌ外因的ＴＮＦ−アルファまで細胞生存率を維持し、続いて、ＴＮＦ−アルファ濃度増加に伴い、細胞生存率が劇的に減少した。理論に制約されることは望まないが、一定濃度のＴＮＦ−アルファの後に、ＴＮＲＦ１−Ｆｃ抗体は、飽和され、追加的なＴＮＦ−アルファの結合に利用できなくなる可能性がある。
【００９６】
ＳＲＸ０１の添加が、広範囲の外因的ＴＮＦ−アルファ濃度にわたってＴＮＦ−アルファ誘導性細胞死から細胞を部分的に保護したことが興味深い。１ｎｇ／ｍｌを上回るＴＮＦ−アルファ濃度において細胞生存率の僅かな低下が観察されたが、細胞集団のおよそ５０〜７０％は、非常に高いＴＮＦアルファ濃度の１０００ｎｇ／ｍｌでインキュベートされた場合であっても生存可能なままであった。この結果は、ＳＲＸ０１が、高濃度のＴＮＦ−アルファの存在下でこれらの細胞に部分的保護をもたらすことができることを示す。
【００９７】
ＴＮＦ−アルファ誘導性細胞死におけるＳＲＸ０１の保護的効果は、非常に高濃度の外因的ＴＮＦ−アルファ（５桁の範囲にわたる；０．０１〜１０００ｎｇ／ｍｌ  ＴＮＦ−アルファ）の存在下、および様々な処置の結果として細胞内で産生され得るいずれかの内部ＴＮＦ−アルファのものをはるかに超える濃度で観察される。したがって、ＳＲＸ０１抽出物の保護的効果は、ＴＮＦ−アルファ合成の結果ではない。
【００９８】
ＴＮＦ−アルファ活性におけるＳａｘｉｆｒａｇａ  ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ抽出物の効果は、外因的ＴＮＦ−アルファの効果の阻害またはモジュレーションに起因し、この効果は、短い期間（時間）内に観察され、このことは、直接的応答を示唆する。この阻害は、ＴＮＦ−アルファの合成または産生の修飾の結果ではない。
【００９９】
したがって、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ由来の抽出物の添加を使用して、細胞における外因的ＴＮＦ−アルファの細胞傷害性効果を阻害する、例えば、炎症性応答をモジュレートすることができる。
【０１００】
ＴＮＦ−アルファ活性における抽出物の効果は、ＴＮＦの外因的適用の効果の直接的阻害／遮断に起因しており、ＴＮＦ−アルファの合成または産生の修飾の結果であるとは思われない。さらに、ＴＮＦ−アルファ活性における「ＳＲＸ０１」とも称される水抽出物の効果は、図１Ａおよび１Ｂから分かる通り、全体的ＴＮＦ活性の部分的遮断をもたらし得る。
【０１０１】
コラゲナーゼおよびエラスターゼにおけるＳＲＸ０１の効果
ＳＲＸ０１の抗ＴＮＦ効果が、ストレッサー、ＵＶ光に応答した皮膚の早期老化の原因となるコラゲナーゼおよびエラスターゼの放出における阻害効果を示すことができるか研究するために、２種のモデルを分析したが、これらは、ＵＶ光に曝露した、加齢したヒト線維芽細胞および皮膚外植片である。
【０１０２】
多数回複製する培養中のヒト線維芽細胞は、マトリックスメタロプロテイナーゼ１（ＭＭＰ−１；間質コラゲナーゼとしても公知）の分泌の有意な増加を伴い、セネッセンスに特徴的な表現型を進行性に呈する（Ｈａｙｆｌｉｃｋモデル）。ＭＭＰ−１は、真皮のマトリックスにおけるコラーゲン線維の分解の原因となる。この検査に使用される線維芽細胞は、加齢しており（１７回複製）、ＭＭＰ−１のレベルを比較した。加齢した対照線維芽細胞は、より若い対照線維芽細胞よりもおよそ４倍多いＭＭＰ−１を分泌した。乾物０．０２ｍｇ／ｍＬの濃度のＳＲＸ０１の添加は、加齢した線維芽細胞によるＭＭＰ−１の分泌のおよそ４０％を阻害した。これらの結果は、したがって、皮膚の構造を攻撃する酵素、ＭＭＰ−１の産生におけるＳＲＸ０１の有益な阻害効果を実証する。
【０１０３】
細胞培養において観察される効果を、無傷組織において再現することができることを実証するために、２４時間生きたままにし、ＵＶ曝露に付した、皮膚外植片からのエラスターゼおよびコラゲナーゼの放出におけるＳＲＸ０１の効果を検査した。皮膚外植片は、形成外科後の患者から得た。ＵＶへのドナーの皮膚曝露の感受性に依存して、皮膚（sin）外植片の処置は、カスケードを介したこれら２種の酵素の有意な放出を引き起こし、表皮において産生されるＴＮＦの効果を暗示する。乾物２．６５８ｍｇ／ｍＬの濃度のＳＲＸ０１は、統計的に有意な様式で、ＭＭＰ−１の産生の９３．５％およびエラスターゼの産生の６７．２％を抑制した。効果は、より低い濃度においても観察されたが、より高い可変性であった（一部の外植片は、ＵＶ刺激に応答を示さなかったため、これは、検査した様々な皮膚外植片における結果となり得る）。
【０１０４】
（実施例４）
抽出物の製剤
当業者には公知であろうが、実施例１に記載されている方法を使用して、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｐ．、例えば、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ、Ｃｈｒｙｓｏｓｐｌｅｎｉｕｍ  ａｌｔｅｒｎｉｆｏｌｉｕｍ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｎｄｒｏｓａｃｅａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｓｊｅｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｉｆｌｏｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｒｙｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃａｅｓｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｅｘａｒａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｍｕｓｃｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｏｐｐｏｓｉｔｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｅｌｌａｒｉｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｅｇｕｉｅｒｉ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｐａｎｉｃｕｌａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃｕｎｅｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｉｚｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｏｌｏｎｉｆｅｒａ、Ａｓｔｒａｎｔｉａ  ｍａｊｏｒおよびこれらの組合せから得られる抽出物は、化粧品として許容されるクリーム、シャンプーまたはスプレー内に製剤化することができ、限定されないが例えば、「Cosmetic  Formulation  of  Skin  Care  Products」（２００６年、Zoe  Diana  Draelos、Lauren  A  Thaman編、Taylor  &  Francis；参照により本明細書に組み込む）。
【０１０５】
化粧品における活性成分としてのＳＲＸ０１の潜在力を研究するために、また、ヒトにおけるその臨床有効性を検査することができるように、これは、異なる化粧品処方に組み込まれた。抽出物を組み込むいくつかの医薬品形態（ゲル−クリーム、エマルション）を開発した。製剤の不安定性または検査したモデル−処方の主要感覚受容変化は観察されなかった。
【０１０６】
単純エマルション処方において５％（ｗ／ｗ）でＳＲＸ０１を製剤化した。５％（ｗ／ｗ）のＳＲＸ０１の濃度は、Ｋｅｒａｔｉｎｏｓｅｎｓ検査において乾物０．４ｍｇ／ｍＬで行われた毒性学研究に従って決定された（OECD  guide  line  N°442D、２０１５年２月４日：In  vitro  Ski  Sensitisation:  ARE-Nrf2  Luciferase  Test  Method）。この濃度は、ＳＲＸ０１を含有するクリームの毎日反復した適用および累積的使用を可能にした。このようにして製作されたクリームは、安定であり、負荷検査（ＩＳＯ  １１９３０に従った２８日目の判断基準Ａに準拠している）および皮膚耐性検査（非刺激物パッチ検査）を通過した。０．０２ｍｌの被験試料の単一適用を、腕の外部表面に置き、密封パッチ；（Ｆｉｎｎ  Ｃｈａｍｂｅｒ）の助けを借りて皮膚と接触して４８時間維持した。
【０１０７】
（実施例５）
皮疹の低下
敏感肌を有する年齢１８〜６０歳の２３名の女性ボランティアにおける、ＵＶ曝露に起因する光線性発疹におけるＳＲＸ０１の効果のランダム化単盲検臨床研究を行った。本研究は、ＵＶ光処置後に異なる皮膚区域に適用された、活性化合物がない以外は同一組成を有するクリーム（プラセボ）に対して、ＵＶ光処置後に皮膚区域に適用された、５％（乾物０．４ｍｇ／ｍＬ）のＳＲＸ０１を含有するクリームの効果を評価した。ＵＶ光処置は、同じ持続時間のものであり、紅斑の誘導に十分であった。
【０１０８】
ＵＶ光への皮膚処置区域の曝露は、発疹発症をもたらした。ＵＶ曝露の２、４、６および２４時間後に、適切な皮膚区域にクリーム処置を適用した。１回目の適用前に、次いで曝露後２、４、６、２４および４８時間目に、発疹の発症および強度をクロマメトリーによって測定し（クロマメーター（chromameter）ＣＲ４００  ＫＯＮＩＣＡ  ＭＩＮＯＬＴＡを使用してクロマメトリー測定を行った；図３Ａを参照）、また、訓練を受けた技術者によって視覚的に評価した（図３Ｂ）。
【０１０９】
図３Ｂに示す通り、クロマメトリー測定は、プラセボクリームと比較した、５％ＳＲＸ０１を含有するクリームの効果を示し、これは、ＵＶ曝露６時間後に目に見えるようになり、ＵＶ曝露２４および４８時間後に統計的に有意である。視覚的評価（図３Ｂ）は、観察される発疹の強度の低下による、同様の結果を与え、ＳＲＸ０１を含有するクリームは、ＵＶ曝露６時間後に出現し、ＵＶ曝露４８時間後に統計的に有意になった。
【０１１０】
これらの結果は、ＳＲＸ０１抽出物が、皮疹発症を低下させ、処置２４および４８時間後に統計的有意差が観察されることを実証する。光線性または機械的発疹のための抽出物の使用の考慮に加えて、これは、表皮における活性成分の浸透を確認し、炎症性応答悪化をもたらす皮膚侵襲の効果における現実の阻害力を実証する。この効果は、これらの種類の皮膚侵襲の全てによって誘導される老化加速を遅くすることへと有効に変えるべきである。
【０１１１】
上に概要を述べる特性は、ＳＲＸ０１を含むクリーム製剤が、太陽、寒冷、汚染および機械的刺激作用への反復した長期曝露によって誘導される、皮膚の老化加速および皺形成を有効に防止することを示唆する。
【０１１２】
（実施例６）
ＳＲＸ０１の抗老化効果
年齢５０〜７０歳の３４名の女性パネリストにおける３ヶ月間の二重盲検プラセボ対照臨床治験を行って、眼の輪郭の皺、加齢性のしみおよび皮膚の堅さにおけるＳＲＸ０１の効果を決定した。顔および首の半分にＳＲＸ０１を有するクリームを、または顔および首の残りの半分にＳＲＸ０１を欠く同じクリーム（プラセボ／対照）を適用する前に（Ｄ０）、ならびにその１（Ｄ２８）、２（Ｄ３６）および３（Ｄ５６）ヶ月後に、機器測定値を得た。プラセボ／対照クリームは、湿潤および皮膚保護効果を有することが公知の保湿成分（グリセリン、脂肪酸）を含有した。
【０１１３】
皮膚の堅さの機器測定は、較正エアブラスト（Ｄｙｎａｓｋｉｎ−４Ｄ（商標））に関連する縞投影技法を使用した。クリーム製品またはプラセボ／対照クリームの反復適用の前および後に、皮膚変形の体積、面積および最大深度を測定した。ＳＲＸ０１を有するクリームまたはプラセボ／対照クリームに曝露された顔の各側面の皮膚の色素沈着したしみおよび隣接するしみなし区域におけるＫｏｎｉｃａ−Ｍｉｎｏｌｔａ  ＣＭ−７００ｄ分光光度計を使用したクロマメトリーによって、加齢性のしみにおける効果を評価した。光変数Ｌ＊、個々の類型学的角度ＩＴＡ°および色度（chromacity）座標ｂ＊を評価した。
【０１１４】
シリコーンゴム（Ｓｉｌｆｌｏ（商標）、Ｆｌｅｘｉｃｏ  Ｃｏｒｐ．）により右および左眼の輪郭（両方の半顔の目尻のしわおよび頬骨の上部）の皮膚性レプリカを取ることにより、眼の輪郭の皺の総数、皺を有する総表面（ｍｍ２）、皺の全長（ｍｍ）および平均深度（μｍ）を測定した。治験の完了時の分析は、公知入射角（３５°）を有するどんよりした光の下、稜の後ろでの影の作製が関与する。ビデオ画像分析システムを用いて、階調レベルの分析を行って（Ｑｕａｎｔｉｒｉｄｅｓ（商標）バージョン２．２．１．０ソフトウェア、フィルターあり、Ｍｏｎａｄｅｒｍ）、皮膚性軽減を特徴付ける。
【０１１５】
皮膚の堅さ
下表３に提示されている結果に示す通り、エアブラスト誘導性皮膚変形の体積および最大深度は、１、２および３ヶ月間の処置後に、ＳＲＸ０１を含有するクリーム（クレームヴィサージュ（creme  visage）ｒｅｆ．：２１２９．０４）で処置された顔の側面で有意に減少される。加えて、プラセボクリーム（クレームヴィサージュｒｅｆ．：２１２９．０８）で処置された皮膚において測定される効果よりも、ＳＲＸ０１を含有するクリームに曝露された皮膚において効果が増加される。１ヶ月後に、ＳＲＸ０１に曝露された皮膚において測定される体積および最大深度は、プラセボ／対照クリームに曝露された皮膚において測定される効果よりも有意に良好であった。
【０１１６】
これらの結果は、１ヶ月間の処置後に、ＳＲＸ０１を含むクリーム製剤は、プラセボ／対照クリームと比較して、皮膚の堅さの３種のパラメータのうち２種を有意に改善したことを実証する。
【０１１７】
加齢性皮膚しみ：
色素沈着の減少を反映する、皮膚しみの色に関連づけられる全指標の有意な変化が、ＳＲＸ０１を含有するクリーム（クレームヴィサージュｒｅｆ．：２１２９．０４；表４）の適用により経時的に観察された。プラセボ／対照クリーム（クレームヴィサージュｒｅｆ．：２１２９．０８）で処置した皮膚において、経時的な効果は観察されなかった。この効果は、色度座標ｂ＊を参照して観察され、全時点にわたって、プラセボ／対照クリームと比較して、有意な変化が、ＳＲＸ０１を含むクリーム製剤で処置した皮膚において観察された。その上、個々の類型学的角度（ＩＴＡ）結果を参照すると、最大＋２３％の増加が、３ヶ月後に観察される。ＩＴＡ増加が、Ｄ２８のプラセボ／対照クリームと比較して観察され、ＩＴＡ増加は、Ｄ５６で有意に異なる。
【表３】
2019514981.tif 000005
【表４】
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【０１１８】
眼の輪郭の皺：
下表５を参照すると、異なる時点における皺のシリコーンインプリントにより得られる皺の総数、皺の総表面、長さおよび深度を測定して得られた結果が提供されている。
【表５】
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【０１１９】
ＳＲＸ０１を含有するクリーム（クレームヴィサージュｒｅｆ．：２１２９．０４）により、これらのパラメータのうちいくつかを改善する経時的な傾向を観察することができる。しかし、本研究に使用した期間にわたり、これらの効果は、プラセボクリーム（クレームヴィサージュｒｅｆ．：２１２９．０８）により測定されるものとは統計的に有意に異ならない。皮膚構造損傷の保護におけるＳＲＸ０１の効力は、現存している皺の低下ではなく皺形成の防止をもたらし得る。
【０１２０】
加齢性のしみおよび皮膚の堅さにおけるこれらの結果、ならびに皺の減弱に向かう傾向は、ＳＲＸ０１およびＳＲＸ０１を含むクリーム製剤の有益な抗老化潜在力を説明する。
【０１２１】
加えて、ＳＲＸ０１を含むクリーム製剤は、加齢性のしみおよび皮膚の堅さにおける有意な効果を示す。理論に制約されることは望まないが、これらの効果は、ＳＲＸ０１に関して上の実施例３に記載されている作用機序に起因し得ることがある。
【０１２２】
あらゆる引用は、参照により本明細書に組み込む。
【０１２３】
本発明を、１種または複数種の実施形態に関して記載してきた。しかし、当業者であれば、特許請求の範囲に定義されている本発明の範囲から逸脱することなく、多数の変動および修飾を為すことができることが明らかであろう。
【図１】
2019514981.tif 000008
【図２】
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【図３】
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【手続補正書】
【提出日】平成31年1月8日(2019.1.8)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
炎症関連の皮膚状態を処置または軽減するための組成物であって、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｅｌｌａｒｉｓ、Ｓ．ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ、Ｓ．ｓｅｇｕｉｅｒｉ、Ｓ．ｐａｎｉｃｕｌａｔａまたはこれらの組合せ由来の有効量の水抽出物および担体を含み、
前記組成物が、前記炎症関連の皮膚状態を引き起こす因子への皮膚の曝露後に前記皮膚へと投与されることにより、前記炎症関連の皮膚状態を処置または軽減することを特徴とし、
前記炎症関連の皮膚状態が、咬傷、刺傷、皮疹、皮膚のそう痒、皮膚の水疱形成、日焼け、太陽によるしみ、皮膚の熱傷、皮膚の堅さの減少の低下、皮膚アレルギー、加齢性のしみ、乾癬、アトピー性皮膚炎、脱毛症、汚染物質への皮膚の曝露およびこれらの組合せからなる群から選択され、
前記有効量の前記水抽出物が、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）−アルファ活性を３０〜１００％阻害する、組成物。
【請求項２】
前記ＴＮＦ−アルファ活性が、アクチノマイシンＤ（ＡｃｔＤ）の存在下で、ＴＮＦ−アルファ感受性細胞株におけるＴＮＦ−アルファの用量依存性細胞傷害性を測定するｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイによって測定可能であり、前記抽出物が、前記細胞株における外因的ＴＮＦ−アルファの細胞傷害性を阻害する、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記ＴＮＦ−アルファ活性が、ヒト上皮（ＣＡＣＯ２）細胞からのＴＮＦ−アルファ誘導性ＩＬ−６放出の濃度依存性阻害を測定するｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイによって測定可能である、請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
前記抽出物が、１０００ｎｇ／ｍｌのＴＮＦ−アルファを超えるＴＮＦ−アルファ濃度において、ＴＮＦ−アルファの細胞傷害性を阻害する、請求項１に記載の組成物。
【請求項５】
前記抽出物が、約０．０１ｎｇ／ｍｌ〜約１０００ｎｇ／ｍｌのＴＮＦ−アルファのＴＮＦ−アルファ濃度において、ＴＮＦ−アルファの細胞傷害性を阻害する、請求項１に記載の組成物。
【請求項６】
前記抽出物が、５．０〜９ｍｇ／ｍｌの濃度範囲にわたり、ＣＯＸ１、ＣＯＸ２およびリポキシゲナーゼ活性を阻害する、請求項１に記載の組成物。
【請求項７】
前記組成物が、外用のための皮膚調製物である、請求項１に記載の組成物。
【請求項８】
前記抽出物が、１種もしくは２種以上のフェニルプロピオン酸または１種もしくは２種以上のフラボノイドを含む、請求項２に記載の組成物。
【請求項９】
前記１種または２種以上のフェニルプロピオン酸が、クロロゲン酸である、請求項８に記載の組成物。
【請求項１０】
前記抽出物が、抗ＩＬ１細胞応答をさらに誘導する、請求項１に記載の組成物。
【請求項１１】
前記組成物が、Ａｓｔｒａｎｔｉａ  ｍａｊｏｒ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ、Ｃｈｒｙｓｏｓｐｌｅｎｉｕｍ  ａｌｔｅｒｎｉｆｏｌｉｕｍ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｎｄｒｏｓａｃｅａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｓｊｅｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｉｆｌｏｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｒｙｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃａｅｓｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｅｘａｒａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｍｕｓｃｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｏｐｐｏｓｉｔｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｅｌｌａｒｉｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｅｇｕｉｅｒｉ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｐａｎｉｃｕｌａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃｕｎｅｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｉｚｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｏｌｏｎｉｆｅｒａおよびこれらの組合せの群から得られた水抽出物をさらに含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項１２】
炎症応答をもたらす因子への皮膚の曝露後に前記皮膚において腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）−アルファ活性を３０〜１００％低減するための組成物であって、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｅｌｌａｒｉｓ、Ｓ．  ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ、Ｓ．  ｓｅｇｕｉｅｒｉ、Ｓ．  ｐａｎｉｃｕｌａｔａまたはこれらの組合せから得られた水抽出物を含む、組成物。
【請求項１３】
前記水抽出物は、担体と混合されて、製品を形成し、前記製品は、前記皮膚へと適用され、前記炎症応答は、咬傷、刺傷、皮疹、皮膚のそう痒、皮膚の水疱形成、日焼け、太陽によるしみ、皮膚の熱傷、皮膚の堅さの減少の低下、皮膚アレルギー、加齢性のしみ、乾癬、アトピー性皮膚炎、脱毛症、汚染物質への皮膚の曝露またはこれらの組合せからもたらされる、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１４】
前記製品が、Ａｓｔｒａｎｔｉａ  ｍａｊｏｒ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ、Ｃｈｒｙｓｏｓｐｌｅｎｉｕｍ  ａｌｔｅｒｎｉｆｏｌｉｕｍ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｎｄｒｏｓａｃｅａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｓｊｅｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｉｆｌｏｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｒｙｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃａｅｓｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｅｘａｒａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｍｕｓｃｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｏｐｐｏｓｉｔｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｅｌｌａｒｉｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｅｇｕｉｅｒｉ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｐａｎｉｃｕｌａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃｕｎｅｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｉｚｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｏｌｏｎｉｆｅｒａおよびこれらの組合せの群から得られた水抽出物をさらに含む、請求項１３に記載の組成物。
【請求項１５】
前記ＴＮＦ−アルファ活性が、ヒト上皮細胞におけるＩＬ−６の濃度依存性産生を測定するｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイによって測定可能である、請求項１に記載の組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１９】
上述の発明の概要は、本発明のあらゆる特色を必ずしも記載するとは限らない。
特定の実施形態において、例えば、以下が提供される：
（項目１）
炎症関連の皮膚状態を処置または軽減する方法であって、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｐ．、Ａｓｔｒａｎｔｉａ  ｍａｊｏｒまたはこれらの組合せ由来の有効量の抽出物および担体を含む組成物を投与するステップを含み、前記有効量の前記抽出物が、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）−アルファ活性を阻害する、方法。
（項目２）
前記ＴＮＦ−アルファ活性が、アクチノマイシンＤ（ＡｃｔＤ）の存在下で、ＴＮＦ−アルファ感受性細胞株におけるＴＮＦ−アルファの用量依存性細胞傷害性を測定するｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイによって測定可能であり、前記抽出物が、前記細胞株における外因的ＴＮＦ−アルファの細胞傷害性を阻害する、項目１に記載の方法。
（項目３）
前記抽出物が、水抽出物である、項目１に記載の方法。
（項目４）
前記抽出物が、アルコール／水抽出物である、項目１に記載の方法。
（項目５）
前記Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｐ．が、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ、Ｃｈｒｙｓｏｓｐｌｅｎｉｕｍ  ａｌｔｅｒｎｉｆｏｌｉｕｍ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｎｄｒｏｓａｃｅａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｓｊｅｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｉｆｌｏｒａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｂｒｙｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃａｅｓｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｅｘａｒａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｍｕｓｃｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｏｐｐｏｓｉｔｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｅｌｌａｒｉｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｅｇｕｉｅｒｉ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｐａｎｉｃｕｌａｔａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｃｕｎｅｉｆｏｌｉａ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ａｉｚｏｉｄｅｓ、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｔｏｌｏｎｉｆｅｒａの群から選択される、項目１に記載の方法。
（項目６）
前記抽出物が、１０００ｎｇ／ｍｌのＴＮＦ−アルファを超えるＴＮＦ−アルファ濃度において、ＴＮＦ−アルファの細胞傷害性を阻害する、項目４に記載の方法。
（項目７）
前記抽出物が、約０．０１ｎｇ／ｍｌ〜約１０００ｎｇ／ｍｌのＴＮＦ−アルファのＴＮＦ−アルファ濃度において、ＴＮＦ−アルファの細胞傷害性を阻害する、項目４に記載の方法。
（項目８）
前記抽出物が、５．０〜９ｍｇ／ｍｌの濃度範囲にわたり、ＣＯＸ１、ＣＯＸ２およびリポキシゲナーゼ活性を阻害する、項目３に記載の方法。
（項目９）
前記炎症関連の皮膚状態が、咬傷、刺傷、皮疹、皮膚のそう痒、皮膚の水疱形成、日焼け、太陽によるしみ、皮膚の熱傷、ＵＶ曝露または照射、皮膚の老化、皮膚の発赤の低下、皮膚の堅さの減少の低下、皮膚アレルギー、加齢性のしみ、アトピー性皮膚、乾癬、アトピー性皮膚炎、脱毛症、化学的刺激物への皮膚の曝露、汚染物質への皮膚の曝露、汚物への皮膚の曝露、デブリへの皮膚の曝露およびこれらの組合せから選択される、項目１に記載の方法。
（項目１０）
前記組成物が、外用のための皮膚調製物である、項目１に記載の方法。
（項目１１）
前記抽出物が、１種もしくは２種以上のフェニルプロピオン酸または１種もしくは２種以上のフラボノイドを含む、項目２に記載の方法。
（項目１２）
前記１種または２種以上のフェニルプロピオン酸が、クロロゲン酸である、項目１１に記載の方法。
（項目１３）
前記抽出物が、抗ＩＬ１細胞応答をさらに誘導する、項目１に記載の方法。
（項目１４）
前記炎症関連の皮膚状態が、咬傷、刺傷、皮疹、皮膚のそう痒、皮膚の水疱形成、日焼け、太陽によるしみ、皮膚の熱傷、ＵＶ曝露または照射、皮膚の老化、皮膚の発赤の低下、皮膚の堅さの減少の低下、皮膚アレルギー、加齢性のしみ、アトピー性皮膚、乾癬、アトピー性皮膚炎、脱毛症、化学的刺激物への皮膚の曝露、汚染物質への皮膚の曝露、汚物への皮膚の曝露、デブリへの皮膚の曝露およびこれらの組合せから選択される、項目５に記載の方法。
（項目１５）
皮膚状態を処置または軽減する方法であって、Ｓａｘｉｆｒａｇａ  ｓｐ．、Ａｓｔｒａｎｔｉａ  ｍａｊｏｒまたはこれらの組合せ由来の有効量の抽出物および担体を含む組成物を投与するステップを含み、前記有効量の前記抽出物が、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）−アルファ活性を阻害し、前記皮膚状態が、咬傷、刺傷、皮疹、皮膚のそう痒、皮膚の水疱形成、日焼け、太陽によるしみ、皮膚の熱傷、ＵＶ曝露または照射、皮膚の老化、皮膚の発赤の低下、皮膚の堅さの減少の低下、皮膚アレルギー、加齢性のしみ、アトピー性皮膚、乾癬、アトピー性皮膚炎、脱毛症、化学的刺激物への皮膚の曝露、汚染物質への皮膚の曝露、汚物への皮膚の曝露、デブリへの皮膚の曝露およびこれらの組合せに起因する、方法。
【国際調査報告】
2019514981.tif 000011
2019514981.tif 000012
2019514981.tif 000013