(57)【要約】  ウリカーゼ療法に対する抗体応答を低減し、痛風の治療を改善し、尿酸レベルを低減し、かつインフュージョン・リアクションを予防および／または遅らせる方法が本明細書に記載される。この方法は、本明細書に記載のウリカーゼおよびステロイドの投与を含み得る。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
尿酸レベルを下げることを、それを必要とする対象において行う方法において、
前記対象にウリカーゼ分子およびステロイドを投与することにおいて、前記ウリカーゼ分子および前記ステロイドが共に、前記対象における前記尿酸レベルを下げ、かつ前記低下が、ウリカーゼまたはステロイドを単独で投与したよりも大きい、ことを含むことを特徴とする方法。
【請求項２】
請求項１に記載の方法において、前記ステロイドが、前記ウリカーゼ分子の投与前に投与されることを特徴とする方法。
【請求項３】
請求項２に記載の方法において、前記ステロイドが、前記ウリカーゼ分子を投与する１０日、９日、８日、７日、６日、５日、４日、４日、３日、２日、１日、１８時間、１２時間、６時間、４時間、２時間、または１時間前に投与されることを特徴とする方法。
【請求項４】
請求項１に記載の方法において、前記ステロイドが、前記ウリカーゼ分子と同時に投与されることを特徴とする方法。
【請求項５】
請求項１に記載の方法において、前記ステロイドが、前記ウリカーゼ分子の投与後に投与されることを特徴とする方法。
【請求項６】
請求項５に記載の方法において、前記ステロイドが、前記ウリカーゼ分子を投与して１０日、９日、８日、７日、６日、５日、４日、４日、３日、２日、１日、１８時間、１２時間、６時間、４時間、２時間、または１時間後に投与されることを特徴とする方法。
【請求項７】
尿酸レベルを下げることを、それを必要とする対象において行う方法において、
前記対象にウリカーゼ分子およびステロイドを投与することにおいて、前記ウリカーゼ分子が、前記対象における尿酸レベルを下げるのに十分な用量および／または回数で投与されることと、
前記尿酸レベルが、前記ウリカーゼ分子に応答して低下した後に、前記ウリカーゼ分子の前記投与を中止することと、
前記ウリカーゼ分子の前記投与を中止した後に、第２非ウリカーゼ尿酸低下療法を施すことと、
を含むことを特徴とする方法。
【請求項８】
請求項７に記載の方法において、前記第２非ウリカーゼ尿酸低下療法が、キサンタニンオキシダーゼ阻害剤、アロプリノール、およびフェブキソスタットから選択される経口尿酸降下薬（ＵＬＡ）であることを特徴とする方法。
【請求項９】
請求項７または８に記載の方法において、前記ウリカーゼ分子を中止した後に、前記対象の血清尿酸レベルが≦６ｍｇ／ｄＬであることを特徴とする方法。
【請求項１０】
請求項７〜９のいずれか一項に記載の方法において、前記対象の血清尿酸レベルが、前記ウリカーゼ分子を中止した後６か月以上の間、≦６ｍｇ／ｄＬであることを特徴とする方法。
【請求項１１】
請求項１〜１０のいずれか一項に記載の方法において、治療期間が、４〜１０日ごとに１回、前記ウリカーゼ分子の用量を投与することを含むことを特徴とする方法。
【請求項１２】
請求項１〜１０のいずれか一項に記載の方法において、前記治療期間が、７日ごとに１回、前記ウリカーゼ分子の用量を投与することを含むことを特徴とする方法。
【請求項１３】
請求項１〜１０のいずれか一項に記載の方法において、前記治療期間が、
前記ウリカーゼ分子の第１用量および前記ステロイドの第１用量を投与することと、
その後、前記治療期間中に１４日ごとに前記ウリカーゼ分子および前記ステロイドの次の用量を投与することと、
を含むことを特徴とする方法。
【請求項１４】
請求項１３に記載の方法において、前記第１用量から７日後に、前記ウリカーゼ分子および前記ステロイドの更なる用量を投与することをさらに含むことを特徴とする方法。
【請求項１５】
請求項１３に記載の方法において、前記ウリカーゼ分子の前記第１用量が１２ｍｇであり、かつ前記ウリカーゼ分子の前記次の用量が８ｍｇであり、かつ前記ステロイドの第１用量および前記次の用量が約４０ｍｇ〜約２００ｍｇであることを特徴とする方法。
【請求項１６】
請求項１３に記載の方法において、前記ウリカーゼ分子の前記第１用量が１６ｍｇであり、かつ前記ウリカーゼ分子の前記次の用量が８ｍｇであり、かつ前記ステロイドの前記第１用量および前記次の用量が約４０ｍｇ〜約２００ｍｇであることを特徴とする方法。
【請求項１７】
請求項１〜１６のいずれか一項に記載の方法において、前記ウリカーゼ分子が、約４ｍｇ、約５ｍｇ、約６ｍｇ、約７ｍｇ、約８ｍｇ、約１２ｍｇ、または約１６ｍｇの用量で投与され；かつ前記ステロイドが、約４０ｍｇ〜約２００ｍｇの用量で投与されることを特徴とする方法。
【請求項１８】
請求項１〜１７のいずれか一項に記載の方法において、前記ウリカーゼ分子が、約８ｍｇの用量で投与され、かつ前記ステロイドが、約４０ｍｇ〜約２００ｍｇの用量で投与されることを特徴とする方法。
【請求項１９】
請求項１５または１６に記載の方法において、前記ウリカーゼ分子および前記ステロイドの前記第１用量が、１２０ｋｇを超える体重の患者に投与されることを特徴とする方法。
【請求項２０】
請求項１〜１９のいずれか一項に記載の方法において、前記治療期間が、前記ウリカーゼ分子および前記ステロイドの１回用量、２回用量、３回用量、４回用量、または５回用量を投与することを含むことを特徴とする方法。
【請求項２１】
請求項１〜２０のいずれか一項に記載の方法において、前記治療期間が、前記ウリカーゼ分子および前記ステロイドの３回用量を投与することを含むことを特徴とする方法。
【請求項２２】
請求項１〜２１のいずれか一項に記載の方法において、前記ウリカーゼおよび前記ステロイドの前記投与が共に、前記ウリカーゼ分子の免疫クリアランスを減少し、前記ウリカーゼ分子に応答して抗体産生を低減し、前記ウリカーゼ分子に対する免疫応答を低減し、免疫抑制を増加し、抗原特異的な免疫抑制を増加し、かつ／またはインフュージョン・リアクションを低減することを特徴とする方法。
【請求項２３】
請求項１〜２２のいずれか一項に記載の方法において、前記ウリカーゼ分子および前記ステロイドの用量を１１〜１８日ごとに１回投与することを含むことを特徴とする方法。
【請求項２４】
請求項１〜２３のいずれか一項に記載の方法において、前記ウリカーゼ分子および前記ステロイドの用量を１４日ごとに１回投与することを含むことを特徴とする方法。
【請求項２５】
請求項１〜２４のいずれか一項に記載の方法において、
前記ウリカーゼ分子を約４ｍｇ、約５ｍｇ、約６ｍｇ、約７ｍｇ、約８ｍｇ、または約１２ｍｇの用量で投与することと、
前記ステロイドを約４０ｍｇ〜約２００ｍｇの用量で投与することと、
を含むことを特徴とする方法。
【請求項２６】
請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法において、
前記ウリカーゼ分子を約８ｍｇの用量および前記ステロイドを約４０ｍｇ〜約２００ｍｇの用量で投与することを含むことを特徴とする方法。
【請求項２７】
請求項１〜２６のいずれか一項に記載の方法において、
前記ウリカーゼ分子および前記ステロイドの４回用量、５回用量、６回用量、７回用量、８回用量、９回用量、１０回用量、１１回用量、１２回用量、２４回用量、または４８回用量を投与することを含むことを特徴とする方法。
【請求項２８】
請求項１〜２７のいずれか一項に記載の方法において、前記ウリカーゼ分子および前記ステロイドの４回用量を投与することを含むことを特徴とする方法。
【請求項２９】
請求項１〜２７のいずれか一項に記載の方法において、前記ウリカーゼ分子および前記ステロイドの１２回用量を投与することを含むことを特徴とする方法。
【請求項３０】
請求項１〜２９のいずれか一項に記載の方法において、前記血清尿酸レベルが、前記ウリカーゼおよびス前記テロイドで処置した結果、≦６ｍｇ／ｄＬに下げられることを特徴とする方法。
【請求項３１】
請求項１〜３０のいずれか一項に記載の方法において、血清尿酸レベルが、少なくとも６か月間、≦６ｍｇ／ｄＬに下げられることを特徴とする方法。
【請求項３２】
請求項１〜３１のいずれか一項に記載の方法において、前記ウリカーゼ分子がウリカーゼコンジュゲートであることを特徴とする方法。
【請求項３３】
請求項３２に記載の方法において、前記ウリカーゼコンジュゲートが、ポリエーテル、ポリエステル、ポリアミノ酸、ポリカーボネート、ポリアセタール、ポリケタール、多糖のうちの１つまたは複数、またはそれらの組み合わせを含むことを特徴とする方法。
【請求項３４】
請求項３３に記載の方法において、前記ポリエーテルが、ポリエチレングリコールおよびポリプロピレングリコールから選択されることを特徴とする方法。
【請求項３５】
請求項１〜３４のいずれか一項に記載の方法において、前記ウリカーゼ分子が真菌または微生物ウリカーゼを含むことを特徴とする方法。
【請求項３６】
請求項３５に記載の方法において、前記ウリカーゼが、アスペルギルス・フラブス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｆｌａｖｕｓ）、アルスロバクター・グロビフォルミス（Ａｒｔｈｒｏｂａｃｔｅｒ  ｇｌｏｂｉｆｏｒｍｉｓ）、バチルス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｐ．）またはカンジダ・ユチリス（Ｃａｎｄｉｄａ  ｕｔｉｌｉｓ）ウリカーゼから選択されることを特徴とする方法。
【請求項３７】
請求項１〜３４のいずれか一項に記載の方法において、前記ウリカーゼ分子が無脊椎動物ウリカーゼを含むことを特徴とする方法。
【請求項３８】
請求項３７に記載の方法において、前記ウリカーゼが、キイロショウジョウバエ（Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ  ｍｅｌａｎｏｇａｓｔｅｒ）およびウスグロショウジョウバエ（Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ  ｐｓｅｕｄｏｏｂｓｃｕｒａ）ウリカーゼからなる群から選択されることを特徴とする方法。
【請求項３９】
請求項１〜３４のいずれか一項に記載の方法において、前記ウリカーゼ分子が植物ウリカーゼを含むことを特徴とする方法。
【請求項４０】
請求項３９に記載の方法において、前記ウリカーゼがダイズ（Ｇｌｙｃｉｎｅ  ｍａｘ）由来であることを特徴とする方法。
【請求項４１】
請求項１〜３４のいずれか一項に記載の方法において、前記ウリカーゼ分子が哺乳類ウリカーゼを含むことを特徴とする方法。
【請求項４２】
請求項４１に記載の方法において、前記哺乳類ウリカーゼが、ウシ、ブタ、ヒツジ、およびヒヒのウリカーゼからなる群から選択されることを特徴とする方法。
【請求項４３】
請求項１〜４１のいずれか一項に記載の方法において、前記ウリカーゼ分子が、２種または複数種の哺乳類ウリカーゼ由来のアミノ酸を含むキメラウリカーゼを含むことを特徴とする方法。
【請求項４４】
請求項４２に記載の方法において、前記ウリカーゼ分子が、組換えブタ−ヒヒのキメラウリカーゼを含むことを特徴とする方法。
【請求項４５】
請求項１〜３３または４１〜４４のいずれか一項に記載の方法において、前記ウリカーゼ分子が、配列番号８と少なくとも９０％同一の配列を含むことを特徴とする方法。
【請求項４６】
請求項１〜３３または４１〜４４のいずれか一項に記載の方法において、前記ウリカーゼ分子が、配列番号８のアミノ酸配列を含むことを特徴とする方法。
【請求項４７】
請求項１〜４４のいずれか一項に記載の方法において、前記ウリカーゼ分子が、そのアミノ末端、そのカルボキシ末端、または両方で３〜１０アミノ酸が切り詰められたウリカーゼを含むことを特徴とする方法。
【請求項４８】
請求項１〜４４のいずれか一項に記載の方法において、前記ウリカーゼ分子が、そのアミノ末端、そのカルボキシ末端、または両方で４〜１３アミノ酸が切り詰められたウリカーゼを含むことを特徴とする方法。
【請求項４９】
請求項１〜４４のいずれか一項に記載の方法において、前記ウリカーゼ分子が、そのアミノ末端、そのカルボキシ末端、または両方で６アミノ酸が切り詰められたウリカーゼを含むことを特徴とする方法。
【請求項５０】
請求項１〜３３のいずれか一項に記載の方法において、前記ウリカーゼ分子が、配列番号２のアミノ酸配列を有するブタウリカーゼを含むことを特徴とする方法。
【請求項５１】
請求項１〜３３のいずれか一項に記載の方法において、前記ウリカーゼ分子が、アミノ酸置換Ｄ７Ｔ、Ｓ４６Ｔ、Ｒ２９１Ｋ、およびＴ３０１Ｓによって修飾された配列番号２のアミノ酸配列を有するブタウリカーゼを含むことを特徴とする方法。
【請求項５２】
請求項１〜３３のいずれか一項に記載の方法において、前記ウリカーゼ分子が、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、または配列番号８のいずれか１つのアミノ酸配列を含むことを特徴とする方法。
【請求項５３】
請求項１〜５２のいずれか一項に記載の方法において、前記ウリカーゼ分子がペグ化されていることを特徴とする方法。
【請求項５４】
請求項１〜５３のいずれか一項に記載の方法において、前記ウリカーゼ分子が、４つの同一の非共有結合ウリカーゼモノマーサブユニットを含むことを特徴とする方法。
【請求項５５】
請求項１〜５４のいずれか一項に記載の方法において、前記ウリカーゼ分子が四量体であることを特徴とする方法。
【請求項５６】
請求項１〜３３のいずれか一項に記載の方法において、前記ウリカーゼ分子が、脱−（１−６）−［７−トレオニン，４６−トレオニン，２９１−リジン，３０１−セリン］ブタ−ヒヒウリカーゼのアミノ酸配列を含むことを特徴とする方法。
【請求項５７】
請求項５３に記載の方法において、前記ウリカーゼ分子が、モノメトキシポリ（エチレングリコール）修飾組換え哺乳類ウリカーゼを含むことを特徴とする方法。
【請求項５８】
請求項５７に記載の方法において、前記ウリカーゼ分子が、ペグロティカーゼ（ＫＲＹＳＴＥＸＸＡ（登録商標））であることを特徴とする方法。
【請求項５９】
請求項１〜５８のいずれか一項に記載の方法において、前記対象が尿酸過剰血症であることを特徴とする方法。
【請求項６０】
請求項１〜５９のいずれか一項に記載の方法において、前記対象が、痛風、慢性痛風、難治性痛風、または結節性痛風を有することを特徴とする方法。
【請求項６１】
請求項１〜６０のいずれか一項に記載の方法において、前記対象が、経口尿酸降下療法、キサンタニンオキシダーゼ阻害剤、アロプリノール、およびフェブキソスタットのうちの１つまたは複数で以前に処置されたことを特徴とする方法。
【請求項６２】
請求項１〜６１のいずれか一項に記載の方法において、前記対象が、体重≧約８０ｋｇ、９０ｋｇ、１００ｋｇ、１１０ｋｇ、または１２０ｋｇを有することを特徴とする方法。
【請求項６３】
請求項１〜６２のいずれか一項に記載の方法において、前記対象が≧５５、６０、６５、または７０歳であることを特徴とする方法。
【請求項６４】
請求項１〜６３のいずれか一項に記載の方法において、前記対象における高尿酸血症の少なくとも１つの症状または測定可能な生理学的パラメーターを改善または低減することを含むことを特徴とする方法。
【請求項６５】
請求項１〜６４のいずれか一項に記載の方法において、前記対象における風痛の少なくとも１つの症状または測定可能な生理学的パラメーターを改善または低減することを含むことを特徴とする方法。
【請求項６６】
請求項１〜６５のいずれか一項に記載の方法において、前記対象の尿酸レベルの低減、痛風発赤の発生率の低減、関節の炎症の低減、痛風結節の形成の低減、痛風関節炎の低減、および／または尿酸腎症の低減を含むことを特徴とする方法。
【請求項６７】
請求項１〜６６のいずれか一項に記載の方法において、前記対象のＣ反応性タンパク質レベルの低減を含むことを特徴とする方法。
【請求項６８】
請求項１〜６７のいずれか一項に記載の方法において、前記対象のＨｅａｌｔｈ  Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ  Ｑｕｅｓｔｉｏｎｎａｉｒｅ  Ｄｉｓａｂｉｌｉｔｙ  Ｉｎｄｅｘ（ＨＡＱ−ＤＩ）の低減を含むことを特徴とする方法。
【請求項６９】
請求項１〜６８のいずれか一項に記載の方法において、痛風、慢性痛風、難治性痛風、または結節性痛風の改善または低減を含むことを特徴とする方法。
【請求項７０】
請求項１〜６９のいずれか一項に記載の方法において、前記対象におけるインフュージョン・リアクションを遅らせる、または予防することを含むことを特徴とする方法。
【請求項７１】
請求項１〜７０のいずれか一項に記載の方法において、前記対象における前記ウリカーゼに対する抗体応答の低減または予防を含むことを特徴とする方法。
【請求項７２】
請求項１〜７１のいずれか一項に記載の方法において、前記ウリカーゼ分子の投与前または投与と同時に、少なくとも１種類の免疫抑制薬を投与することをさらに含むことを特徴とする方法。
【請求項７３】
請求項１〜７２のいずれか一項に記載の方法において、前記ウリカーゼ分子の投与前または投与と同時に、少なくとも１種類の抗炎症化合物を投与することをさらに含むことを特徴とする方法。
【請求項７４】
請求項７３に記載の方法において、前記炎症化合物が、コルチコステロイド、抗ヒスタミン薬、コルヒチン、および非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）から選択されることを特徴とする方法。
【請求項７５】
請求項７４に記載の方法において、前記コルチコステロイドが、プレドニゾン、ヒドロコルチゾン、メチルプレドニゾロン、デポ・メドロール、ソル・メドロールからなる群から選択されることを特徴とする方法。
【請求項７６】
請求項１〜７４のいずれか一項に記載の方法において、前記ウリカーゼ分子および前記ステロイドが、医薬組成物で投与されることを特徴とする方法。
【請求項７７】
請求項１〜７５のいずれか一項に記載の方法において、前記ウリカーゼ分子および前記ステロイドが、ナノキャリア製剤で投与されることを特徴とする方法。
【請求項７８】
請求項１〜７６のいずれか一項に記載の方法において、前記ウリカーゼ分子および前記ステロイドが、静脈内注入によって投与されることを特徴とする方法。
【請求項７９】
キットにおいて、
ウリカーゼ分子；
ステロイド；および
請求項１〜７７のいずれか一項に記載の方法において使用するための説明書
を備えることを特徴とするキット。
【請求項８０】
対象における慢性痛風を治療する方法において、
前記対象にウリカーゼ分子およびステロイドを投与することにおいて、前記ウリカーゼおよび前記ステロイドが共に、前記対象における尿酸レベルを下げることを含むことを特徴とする方法。
【請求項８１】
対象における慢性痛風を治療する方法において、
前記対象にウリカーゼ分子およびステロイドを投与することにおいて、前記ウリカーゼ分子が、前記対象における尿酸レベルを下げるのに十分な用量および／または回数で投与されることと、
前記尿酸レベルが、前記ウリカーゼ分子に応答して低下した後に、前記ウリカーゼ分子の前記投与を中止することと、
前記ウリカーゼ分子の投与を中止した後に、第２非ウリカーゼ尿酸低下療法を施すことと、
を含むことを特徴とする方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、その開示内容全体が参照により本明細書に組み込まれる、２０１６年１１月１１日出願の米国仮特許出願第６２／４２１，０７９号明細書の利益を主張する。
【０００２】
配列表の組み込み
マイクロソフトウィンドウズ（Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ  Ｗｉｎｄｏｗｓ）オペレーティングシステムで計測された１８．６キロバイトの「ＨＯＲ００６４４０１ＰＣ＿ＳＴ２５」という名称のファイルに含まれ、２０１７年１１月１０日に作成された配列表が、ここに電子的にファイルされ、参照により本明細書に組み込まれる。
【０００３】
本発明の開示は一般に、痛風を治療するためのウリカーゼ療法に対する抗体応答を低減する方法に関する。
【背景技術】
【０００４】
高尿酸血症は、血中の異常に高レベルの尿酸を特徴とする症状である。尿酸（ＵＡ）は、ヒトのプリン異化経路における最終代謝産物である。生理学的ｐＨ条件下にて、尿酸は大部分が、尿酸塩として、ＵＡのイオン形で存在する。体内の尿酸塩の量は、食物摂取によって得られるプリンの量、体内で合成される尿酸塩の量、および尿中にまたは胃腸管を介して分泌される尿酸塩の量のバランスに依存する。ヒトにおいては、正常範囲の上限が、女性については約３６０μｍｏｌ／Ｌ（約６ｍｇ／ｄＬ）であり、男性では約４００μｍｏｌ／Ｌ（約６．８ｍｇ／ｄＬ）である。血清尿酸（ＳＵＡ）の濃度が溶解性の生化学的限度、例えば約６．８ｍｇ／ｄＬを超える場合には、尿酸一ナトリウム結晶が組織に沈着し得る。持続的な高尿酸血症の何年後かに、尿酸一ナトリウム結晶の蓄積によって、関節の急性炎症（痛風発赤）、痛風結節の形成、痛風性関節炎などの痛風の症状、およびＵＡ腎症（ＵＡ腎結石）を起こし得る。合計約８３０万人の患者が米国で痛風と診断されている。
【０００５】
血中の尿酸のレベルを下げる治療法であって、それを用いて高尿酸血症および関連する症状を治療することができる治療法の改善が必要とされている。
【発明の概要】
【０００６】
この開示は、ステロイドとウリカーゼ分子の組み合わせが、例えばウリカーゼ分子のみと比較して、対象における高尿酸血症および関連する症状の治療を改善するという発見に少なくとも一部基づく。一部の実施形態において、１つまたは複数の治療サイクル、それぞれの治療はステロイドとウリカーゼ分子の投与を含む。一部の実施形態において、ステロイド分子は、ウリカーゼ分子の前に、ウリカーゼ分子と同時に、またはウリカーゼ分子の後に投与される。
【０００７】
理論に束縛されることなく、本明細書に開示される新規な組み合わせは、例えばインフュージョン・リアクションを予防することによって、例えばインフュージョン・リアクションを遅らせる、かつ／または低減することによって、ウリカーゼ療法、例えばウリカーゼ分子を含む療法に対する対象の奏効性を高めると考えられる。したがって、ウリカーゼ療法の有効性を高める、方法、組成物、投与計画、およびキットが本明細書に開示されている。
【０００８】
一態様において、この開示は、尿酸レベルを下げることを、それを必要とする対象において行う方法であって：対象にウリカーゼ分子、およびステロイドを投与することを含み；そのウリカーゼ分子およびステロイドが共に、ウリカーゼおよび／またはステロイドを単独で投与した場合に見られる低下よりも大きな程度まで、対象における尿酸レベルを低下させる、方法を提供する。一実施形態において、ステロイドは、ウリカーゼ分子の投与前に投与される。他の実施形態において、ステロイドは、ウリカーゼ分子を投与する１０日前、９日前、８日前、７日前、６日前、５日前、４日前、４日前、３日前、２日前、１日前、１８時間前、１２時間前、６時間前、４時間前、２時間前、または１時間前に投与される。他の実施形態において、ステロイドは、ウリカーゼ分子と同時に投与される。他の実施形態において、ステロイドは、ウリカーゼ分子の投与後に投与される。他の実施形態において、ステロイドは、ウリカーゼ分子を投与して１０日後、９日後、８日後、７日後、６日後、５日後、４日後、４日後、３日後、２日後、１日後、１８時間後、１２時間後、６時間後、４時間後、２時間後、または１時間後に投与される。
【０００９】
他の態様において、この開示は、尿酸レベルを下げることを、それを必要とする対象において行う方法であって：対象にウリカーゼ分子、およびステロイドを投与することであって、ウリカーゼ分子が対象における尿酸レベルを下げるのに十分な用量および／または回数で投与されること；尿酸レベルが、ウリカーゼ分子に応答して低下した後に、ウリカーゼ分子の投与を中断すること；ウリカーゼ分子の投与を中断した後に、第２非ウリカーゼ尿酸降下療法を施すこと；を含む方法を提供する。一実施形態において、第２非ウリカーゼ尿酸降下療法は、キサンタニン（ｘａｎｔｈａｎｉｎｅ）オキシダーゼ阻害剤、アロプリノール、およびフェブキソスタットから選択される経口尿酸降下薬（ＵＬＡ）である。
【００１０】
他の実施形態において、対象の血清尿酸レベルは、ウリカーゼ分子の中断後に≦６ｍｇ／ｄＬである。他の実施形態において、対象の血清尿酸レベルは、ウリカーゼ分子を中断した後、６か月以上の間≦６ｍｇ／ｄＬである。
【００１１】
他の実施形態において、その治療期間は、４〜１０日ごとに１回、ウリカーゼ分子の用量を投与することを含む。他の実施形態において、治療期間は、７日ごとに１回ウリカーゼ分子の用量を投与することを含む。他の実施形態において、治療期間は、ウリカーゼ分子の第１用量およびステロイドの第１用量を投与すること；その後の治療期間に、１４日ごとにウリカーゼ分子およびステロイドの次の用量を投与すること；を含む。他の実施形態において、この方法はさらに、第１用量の７日後にウリカーゼ分子およびステロイドの追加用量を投与することを含む。
【００１２】
他の実施形態において、ウリカーゼ分子の第１用量は１２ｍｇであり、ウリカーゼ分子の次の用量は８ｍｇであり；ステロイドの第１用量およびその次の用量は約４０ｍｇ〜約２００ｍｇである。他の実施形態において、ウリカーゼ分子の第１用量は１６ｍｇであり、ウリカーゼ分子の次の用量は８ｍｇであり；ステロイドの第１用量およびその次の用量は約４０ｍｇ〜約２００ｍｇである。他の実施形態において、ウリカーゼ分子は、用量約４ｍｇ、約５ｍｇ、約６ｍｇ、約７ｍｇ、約８ｍｇ、約１２ｍｇ、または約１６ｍｇで投与され；ステロイドは、用量約４０ｍｇ〜約２００ｍｇで投与される。他の実施形態において、ウリカーゼ分子は、用量約８ｍｇで投与され、ステロイドは、用量約４０ｍｇ〜約２００ｍｇで投与される。他の実施形態において、ウリカーゼ分子およびステロイドの第１用量は、１２０ｋｇを超える体重の患者に投与される。
【００１３】
他の実施形態において、治療期間は、ウリカーゼ分子およびステロイドの１回用量、２回用量、３回用量、４回用量または５回用量の投与を含む。他の実施形態において、治療期間は、ウリカーゼ分子およびステロイドの３回用量の投与を含む。
【００１４】
他の実施形態において、ウリカーゼおよびステロイドを共に投与することによって、ウリカーゼ分子の免疫クリアランスが低減され、ウリカーゼ分子に応答して抗体産生が減少し、ウリカーゼ分子に対する免疫応答が減少し、免疫抑制が増加し、抗原特異的な免疫抑制が増加し、かつ／またはインフュージョン・リアクションが減少する。
【００１５】
他の実施形態において、この方法は、１１〜１８日ごとに１回、ウリカーゼ分子およびステロイドの用量を投与することを含む。他の実施形態において、この方法は、１４日ごとに１回ウリカーゼ分子およびステロイドの用量を投与することを含む。
【００１６】
他の実施形態において、この方法は、用量約４ｍｇ、約５ｍｇ、約６ｍｇ、約７ｍｇ、約８ｍｇ、または約１２ｍｇでウリカーゼ分子を投与すること；および用量約４０ｍｇ〜約２００ｍｇでステロイドを投与することを含む。他の実施形態において、この方法は、用量約８ｍｇでウリカーゼ分子および用量約４０ｍｇ〜約２００ｍｇでステロイドを投与することを含む。
【００１７】
他の実施形態において、この方法は、ウリカーゼ分子およびステロイドの４回用量、５回用量、６回用量、７回用量、８回用量、９回用量、１０回用量、１１回用量、１２回用量、２４回用量、または４８回用量を投与することを含む。他の実施形態において、この方法は、ウリカーゼ分子およびステロイドの４回用量を投与することを含む。他の実施形態において、この方法は、ウリカーゼ分子およびステロイドの１２回用量を投与することを含む。
【００１８】
他の実施形態において、血清尿酸レベルは、ウリカーゼおよびステロイドで治療した結果、≦６ｍｇ／ｄＬに下がる。他の実施形態において、血清尿酸レベルは、少なくとも６か月間≦６ｍｇ／ｄＬに下がる。
【００１９】
他の実施形態において、ウリカーゼ分子は、ウリカーゼコンジュゲートである。他の実施形態において、ウリカーゼコンジュゲートは、ポリエーテル、ポリエステル、ポリアミノ酸、ポリカーボネート、ポリアセタール、ポリケタール、多糖のうちの１つまたは複数、またはそれらの組み合わせを含む。他の実施形態において、ポリエーテルは、ポリエチレングリコールおよびポリプロピレングリコールから選択される。
【００２０】
他の実施形態において、ウリカーゼ分子は、真菌または微生物のウリカーゼを含む。他の実施形態において、ウリカーゼは、アスペルギルス・フラブス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｆｌａｖｕｓ）、アルスロバクター・グロビフォルミス（Ａｒｔｈｒｏｂａｃｔｅｒ  ｇｌｏｂｉｆｏｒｍｉｓ）、バシラス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｐ．）、およびカンジダ・ユチリス（Ｃａｎｄｉｄａ  ｕｔｉｌｉｓ）のウリカーゼから選択される。他の実施形態において、ウリカーゼ分子は、無脊椎動物ウリカーゼを含む。他の実施形態において、ウリカーゼは、キイロショウジョウバエ（Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ  ｍｅｌａｎｏｇａｓｔｅｒ）およびウスグロショウジョウバエ（Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ  ｐｓｅｕｄｏｏｂｓｃｕｒａ）ウリカーゼからなる群から選択される。他の実施形態において、ウリカーゼ分子は、植物のウリカーゼを含む。他の実施形態において、ウリカーゼは、ダイズ（Ｇｌｙｃｉｎｅ  ｍａｘ）に由来する。他の実施形態において、ウリカーゼ分子は哺乳類ウリカーゼを含む。他の実施形態において、哺乳類ウリカーゼは、ウシ、ブタ、ヒツジ、およびヒヒのウリカーゼからなる群から選択される。他の実施形態において、ウリカーゼ分子は、２種類以上の哺乳類ウリカーゼからのアミノ酸を含むキメラウリカーゼを含む。他の実施形態において、ウリカーゼ分子は、組換えブタ−ヒヒのキメラウリカーゼを含む。
【００２１】
他の実施形態において、ウリカーゼ分子は、配列番号８と少なくとも９０％同一の配列を含む。他の実施形態において、ウリカーゼ分子は、配列番号８のアミノ酸配列を含む。他の実施形態において、ウリカーゼ分子は、そのアミノ末端、そのカルボキシ末端、または両方で３〜１０アミノ酸が切り詰められたウリカーゼを含む。他の実施形態において、ウリカーゼ分子は、そのアミノ末端、そのカルボキシ末端、または両方で４〜１３アミノ酸が切り詰められたウリカーゼを含む。他の実施形態において、ウリカーゼ分子は、そのアミノ末端、そのカルボキシ末端、または両方で６アミノ酸が切り詰められたウリカーゼを含む。他の実施形態において、配列番号２のアミノ酸配列を有するブタのウリカーゼを含む。他の実施形態において、ウリカーゼ分子は、アミノ酸置換Ｄ７Ｔ、Ｓ４６Ｔ、Ｒ２９１Ｋ、およびＴ３０１Ｓによって修飾された配列番号２のアミノ酸配列を有するブタのウリカーゼを含む。他の実施形態において、ウリカーゼ分子は、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、または配列番号８のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含む。
【００２２】
他の実施形態において、ウリカーゼ分子はペグ化される。他の実施形態において、ウリカーゼ分子は、４つの同一の非共有結合ウリカーゼモノマーサブユニットを含む。他の実施形態において、ウリカーゼ分子は四量体である。
【００２３】
他の実施形態において、ウリカーゼ分子は、脱−（１−６）−［７−トレオニン，４６−トレオニン，２９１−リジン，３０１−セリン］ブタ−ヒヒウリカーゼのアミノ酸配列を含む。他の実施形態において、ウリカーゼ分子は、モノメトキシポリ（エチレングリコール）修飾組換え哺乳類ウリカーゼを含む。他の実施形態において、ウリカーゼ分子はペグロティカーゼ（Ｐｅｇｌｏｔｉｃａｓｅ）（ＫＲＹＳＴＥＸＸＡ（登録商標））である。
【００２４】
他の実施形態において、対象は尿酸過剰血症である。他の実施形態において、対象は、痛風、慢性痛風、難治性痛風、または結節性痛風を有する。他の実施形態において、対象は、経口尿酸降下療法、キサンタニンオキシダーゼ阻害剤、アロプリノール、およびフェブキソスタットのうちの１つまたは複数で以前に治療された。他の実施形態において、対象は、体重≧約８０ｋｇ、９０ｋｇ、１００ｋｇ、１１０ｋｇ、または１２０ｋｇを有する。他の実施形態において、対象は≧５５、６０、６５、または７０歳である。
【００２５】
他の実施形態において、この方法は、対象における高尿酸血症の少なくとも１つの症状または測定可能な生理学的パラメーターを改善または低減することを含む。他の実施形態において、この方法は、対象における痛風の少なくとも１つの症状または測定可能な生理学的パラメーターを改善または低減することを含む。他の実施形態において、この方法は、対象の尿酸レベルの低減、痛風発赤の発生率の低減、関節の炎症の低減、痛風結節の形成の低減、痛風関節炎の低減、および／または尿酸腎症の低減を含む。他の実施形態において、その方法は、対象のＣ反応性タンパク質レベルの低減を含む。他の実施形態において、その方法は、対象のＨｅａｌｔｈ  Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ  Ｑｕｅｓｔｉｏｎｎａｉｒｅ  Ｄｉｓａｂｉｌｉｔｙ  Ｉｎｄｅｘ（ＨＡＱ−ＤＩ）の低減を含む。他の実施形態において、その方法は、痛風、慢性痛風、難治性痛風、または結節性痛風の改善または低減を含む。他の実施形態において、その方法は、対象におけるインフュージョン・リアクションを遅らせること、または予防することを含む。他の実施形態において、その方法は、対象におけるウリカーゼに対する抗体応答を低減または予防することを含む。
【００２６】
他の実施形態において、この方法はさらに、ウリカーゼ分子の投与前または投与と同時に少なくとも１種類の免疫抑制薬を投与することを含む。他の実施形態において、この方法はさらに、ウリカーゼ分子の投与前または投与と同時に少なくとも１種類の抗炎症化合物を投与することを含む。他の実施形態において、その抗炎症化合物は、コルチコステロイド、抗ヒスタミン薬、コルヒチン、および非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）から選択される。他の実施形態において、コルチコステロイドは、プレドニゾン、ヒドロコルチゾン、メチルプレドニゾロン、デポ・メドロール、ソル・メドロールからなる群から選択される。
【００２７】
他の実施形態において、ウリカーゼ分子およびステロイドは、医薬組成物で投与される。他の実施形態において、ウリカーゼ分子およびステロイドは、ナノキャリア製剤で投与される。他の実施形態において、ウリカーゼ分子およびステロイドは、静脈内注入により投与される。
【００２８】
他の態様において、本発明の開示は、ウリカーゼ分子；ステロイド；および本明細書に記載の方法で使用するための説明書；を備えたキットを提供する。
【００２９】
他の態様において、本発明の開示は、対象における慢性痛風を治療する方法であって：対象にウリカーゼ分子およびステロイドを投与することを含み；そのウリカーゼおよびステロイドが共に、対象における尿酸レベルを下げる、方法を提供する。
【００３０】
他の態様において、本発明の開示は、対象における慢性痛風を治療する方法であって：対象にウリカーゼ分子およびステロイドを投与することであって、そのウリカーゼ分子が、対象における尿酸レベルを下げるのに十分な用量および／または回数で投与されること；ウリカーゼ分子に応答して尿酸レベルが下がった後、ウリカーゼ分子の投与を中断すること；およびウリカーゼ分子の投与を中断した後に、第２非ウリカーゼ尿酸低下療法を施すこと；を含む方法を提供する。
【００３１】
明細書に開示される方法、組成物、投与計画およびキットの更なる特徴および実施形態は、以下の１つまたは複数を含む。
【００３２】
併用療法／投与
一部の実施形態において、ステロイドは、ウリカーゼコンジュゲートの前、ウリカーゼコンジュゲートと同時に、またはウリカーゼコンジュゲートの後に投与される。一部の実施形態において、ウリカーゼコンジュゲートは、用量約４ｍｇ、約５ｍｇ、約６ｍｇ、約７ｍｇ、約８ｍｇ、または約１２ｍｇ、例えば約８ｍｇで投与される。
【００３３】
一部の実施形態において、本明細書に記載のステロイドは、プレドニゾン、ヒドロコルチゾン、メチルプレドニゾロン、デポ・メドロール、ソル・メドロールであり得る。当業者であれば、所望の結果を達成するために、明細書に記載の開示に従って、いずれのステロイドも有用であり得ることを認識されよう。例えば、プレドニゾン分子、例えば、メチルプレドニゾロンは、約０．１〜約５ｍｇ／ｋｇ、約０．２〜約４ｍｇ／ｋｇ、約０．３〜約３ｍｇ／ｋｇ、約０．４〜約２ｍｇ／ｋｇ、または約０．５〜約１．５ｍｇ／ｋｇ、または通常約０．５ｍｇ／ｋｇ、約０．６ｍｇ／ｋｇ、約０．７ｍｇ／ｋｇ、約０．８ｍｇ／ｋｇ、約０．９ｍｇ／ｋｇ、約１．０ｍｇ／ｋｇ、約１．１ｍｇ／ｋｇ、約１．２ｍｇ／ｋｇ、約１．３ｍｇ／ｋｇ、約１．４ｍｇ／ｋｇ、または約１．５ｍｇ／ｋｇの範囲の量で投与され得る。他の実施形態において、メチルプレドニゾロンは、フラット（ｆｌａｔ）用量として、例えば、約１ｍｇ〜約５００ｍｇ、約１０ｍｇ〜約４００ｍｇ、約２０ｍｇ〜約３００ｍｇ、約３０ｍｇ〜約２００ｍｇ、または約５０ｍｇ〜約１５０ｍｇ、または通常約５０ｍｇ、約６０ｍｇ、約７０ｍｇ、約８０ｍｇ、約９０ｍｇ、約１００ｍｇ、約１１０ｍｇ、約１２０ｍｇ、約１３０ｍｇ、約１４０ｍｇ、または約１５０ｍｇで投与される。
【００３４】
一部の実施形態において、本明細書に記載のステロイドは、ヒドロコルチゾン、メチルプレドニゾロン、プレドニゾン、または本発明の開示に従って適切であると考えられる他のいずれかのステロイドであり得る。一部の実施形態において、本明細書に記載のメチルプレドニゾロンは、例えば、デポ・メドロール、ソル・メドロール等であり得る。本明細書に記載のステロイドの投薬量は、適宜異なり得る。例えば、ヒドロコルチゾンは、ペグロティカーゼを注入する直前に２週間ごとに用量２００ｍｇで静脈内（ＩＶ）に投与され得る。一部の実施形態において、メチルプレドニゾロンは、ペグロティカーゼを注入する直前に２週間ごとに用量４０ｍｇでＩＶ投与され得る。一部の実施形態において、メチルプレドニゾロンは、ペグロティカーゼを注入する直前に２週間ごとに用量８０ｍｇでＩＶ投与され得る。かかる投薬量は通常の投薬量であり得るが、当業者であれば、本発明の開示に従って適宜、かつ有益であると考えられる他の投薬量が投与され得ることを認識されよう。
【００３５】
一部の実施形態において、プレドニゾンは、痛風発赤を防ぐために、痛風発赤の予防的治療としてペグロティカーゼと共に投与され得る。かかる場合には、プレドニゾンは、１日に５ｍｇまたは１０ｍｇの投薬量で経口（ＰＯ）投与され得る。当業者であれば理解されるように、一部の実施形態において、特定の薬物治療および／または投薬に適したいずれかの投与経路が用いられ得る。
【００３６】
一部の実施形態において、プレドニゾン分子、例えば、メチルプレドニゾロンは、ウリカーゼ分子の前に投与される。一部の実施形態において、プレドニゾン分子は、ウリカーゼ分子を投与する約１０分以上、約２０分以上、約３０分以上、約４０分以上、約５０分以上、約１時間以上、約２時間以上、または約３時間以上前に投与される。他の実施形態において、プレドニゾン分子は、ウリカーゼ分子を投与する約１０分、約２０分、約３０分、約４０分、約５０分、約１時間、約２時間、または約３時間前に投与される。他の実施形態において、プレドニゾン分子およびウリカーゼ分子の投与は一部、重複する。
【００３７】
一実施形態において、プレドニゾン分子は、静脈内（ＩＶ）、筋肉内（ＩＭ）、注入（ＩＶ注入）、経口、経直腸、または局所投与される。
【００３８】
一部の実施形態において、治療サイクルは、１１日、１２日、１３日、１４日、１５日、１６日、１７日、または１８日ごとに、例えば、１４日ごとに１回、例えば、隔週で繰り返される。一実施形態において、投与計画は、隔週に１回繰り返される。
【００３９】
一部の実施形態において、投与計画は、プレドニゾン分子およびウリカーゼ分子の１つまたは複数の第１治療サイクルと、プレドニゾンなしのウリカーゼ分子の１つまたは複数の第２治療サイクルと、を含む。
【００４０】
一部の実施形態において、投与計画は、７、１０、１２、２４、４８回、またはそれ以上の治療サイクルを含む。
【００４１】
ウリカーゼ分子
一部の実施形態において、ウリカーゼ分子は、天然ウリカーゼ、または天然ウリカーゼの変異体（ｖａｒｉａｎｔ）（例えば、突然変異型、切り詰め型、断片型、キメラ型、または派生型）である。
【００４２】
一部の実施形態において、ウリカーゼ分子は組換え分子である。
【００４３】
一部の実施形態において、ウリカーゼ分子は四量体、例えば、ホモ四量体である。
【００４４】
一部の実施形態において、ウリカーゼ分子は哺乳類のウリカーゼである。一部の実施形態において、ウリカーゼ分子は、ブタ、ウシ、またはヒツジ、またはヒヒのウリカーゼ、またはそのキメラの組み合わせである。一部の実施形態において、ウリカーゼ分子は、ブタ、ウシ、またはヒツジ、またはヒヒのウリカーゼ、またはそのキメラの組み合わせの実質的に同じ配列を含む。
【００４５】
一部の実施形態において、ウリカーゼ分子は、真菌または微生物のウリカーゼ、例えば、酵母ウリカーゼである。一部の実施形態において、真菌または微生物のウリカーゼは、アスペルギルス・フラブス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｆｌａｖｕｓ）、アルスロバクター・グロビフォルミス（Ａｒｔｈｒｏｂａｃｔｅｒ  ｇｌｏｂｉｆｏｒｍｕｓ）、またはカンジダ・ユチリス（Ｃａｎｄｉｄａ  ｕｔｉｌｉｓ）のウリカーゼに由来するか、あるいは前記真菌または微生物のウリカーゼのいずれかと実質的に同じ配列を含む。
【００４６】
一部の実施形態において、ウリカーゼ分子は植物のウリカーゼである。
【００４７】
一部の実施形態において、ウリカーゼ分子はキメラである。一部の実施形態において、ウリカーゼ分子は、ブタの肝臓およびヒヒの肝臓のウリカーゼの一部を含む。
【００４８】
一部の実施形態において、ウリカーゼ分子は、アミノ末端またはカルボキシ末端、またはその両方で（例えば、約１〜１３アミノ酸が）切り詰められた哺乳類ウリカーゼアミノ酸配列を含み、前記切り詰めは、配列番号２のアミノ酸配列を有する天然ブタウリカーゼに対するものである。一部の実施形態において、ウリカーゼ分子は、７番目のトレオニンでのアミノ酸置換（Ｄ７Ｔ）、４６番目のトレオニンでのアミノ酸置換（Ｓ４６Ｔ）、２９１番目のリジンでのアミノ酸置換（Ｒ２９１Ｋ）および３０１番目のセリンでのアミノ酸置換（Ｔ３０１Ｓ）を含み、前記アミノ酸置換は、配列番号２のアミノ酸配列を有する天然のブタウリカーゼに対するものである。
【００４９】
一部の実施形態において、ウリカーゼ分子のアミノ末端アミノ酸は、アラニン、グリシン、プロリン、セリン、またはトレオニンである。一部の実施形態において、ウリカーゼ分子のアミノ末端アミノ酸はトレオニンである。
【００５０】
一部の実施形態において、ウリカーゼ分子は、脱−（１−６）−［７−トレオニン，４６−トレオニン，２９１−リジン，３０１−セリン］ブタ−ヒヒウリカーゼのアミノ酸配列を含む。
【００５１】
一部の実施形態において、ウリカーゼ分子は、配列番号８のアミノ酸配列、またはそれと実質的に同一のアミノ酸配列（例えば、９５〜９８％同一）を含む。
【００５２】
一部の実施形態において、ウリカーゼ分子は、４つの同一の非共有結合ウリカーゼモノマーサブユニットを含む。
【００５３】
一部の実施形態において、ウリカーゼ分子は、約１３０〜１４０ｋＤａ、例えば約１３５〜１３７ｋＤａ（例えば、約１３６．８ｋＤａ）である。
【００５４】
一部の実施形態において、ウリカーゼ分子はさらに、ポリマーを含む。一部の実施形態において、ウリカーゼ分子は、コンジュゲートの形をとり、例えば、ポリマーに例えば直接または間接的に（例えば、リンカーを介して）結合されたウリカーゼ配列（例えば、ウリカーゼの突然変異型、切り詰め型、断片型、キメラ型）を含むコンジュゲートの形をとる。
【００５５】
一部の実施形態において、ポリマーは、ポリエーテル、ポリエステル、ポリアミノ酸、ポリカーボネート、ポリアセタール、ポリケタール、多糖類のうちの１つまたは複数、またはそれらの組み合わせを含む。一部の実施形態において、ポリエーテルは、ポリエチレングリコールまたはポリプロピレングリコールを含む。
【００５６】
一部の実施形態において、コンジュゲートは、ウリカーゼ分子のモノマー１つ当たりポリマー分子、例えばポリエチレングリコール分子１〜４０個を含む。他の実施形態において、コンジュゲートは、ウリカーゼ分子のモノマー１つ当たりポリマー分子、例えば、ポリエチレングリコール分子５〜２０個を含む。更なる実施形態において、コンジュゲートは、ウリカーゼ分子のモノマー１つ当たりポリマー分子、例えばポリエチレングリコール分子５〜１２個を含む。一部の実施形態において、コンジュゲートは、ウリカーゼ分子のモノマー１つ当たりポリマー分子、例えばポリエチレングリコール分子約１０個を含む。
【００５７】
一部の実施形態において、各ポリマー分子、例えばポリエチレングリコール分子は、分子量約１〜１００ｋＤａを有する。他の実施形態において、各ポリマー分子、例えばポリエチレングリコール分子は、分子量約５〜５０ｋＤａを有する。更なる実施形態において、各ポリマー分子、例えばポリエチレングリコール分子は、分子量約５〜２０ｋＤａを有する。一部の実施形態において、各ポリマー分子、例えばポリエチレングリコール分子は、分子量約１０ｋＤａを有する。
【００５８】
一部の実施形態において、コンジュゲートは、ポリマー重量約５００〜６００ｋＤａ、例えば約５４０〜５６０ｋＤａを有する。
【００５９】
一部の実施形態において、ウリカーゼ分子のコンジュゲートは、モノメトキシポリ（エチレングリコール）−ｐ−ニトロフェニルカーボネート（ｍＰＥＧ−ＮＰＣ）を用いて誘導体化される。
【００６０】
一部の実施形態において、ウリカーゼ分子のコンジュゲートは、メトキシＰＥＧ（ｍＰＥＧ）を含む。一実施形態において、各ウリカーゼ配列は、モノメトキシポリ（エチレングリコール）（ｍＰＥＧ）、例えば５〜５０ｋＤａ、例えば１０ｋＤａ、ｍＰＥＧ部位を含む。
【００６１】
一部の実施形態において、ウリカーゼ分子、例えばウリカーゼコンジュゲートは、薬学的に許容可能な担体または賦形剤を有する医薬組成物、例えば製剤の形をとる。
【００６２】
一部の実施形態において、ウリカーゼ分子、例えばウリカーゼコンジュゲートは、ナノキャリア製剤の形をとる。更なる実施形態において、ナノキャリア製剤は、脂質ナノ粒子、リポソーム、ポリマーナノ粒子、デンドリマー、または界面活性剤ベースのエマルジョンを含む。更なる実施形態において、ポリマーナノ粒子は、ポリエーテル、ポリエステル、ポリアミノ酸、ポリカーボネート、ポリアセタール、ポリケタール、多糖のうちの１つまたは複数、またはそれらの組み合わせを含む。一部の実施形態において、ポリエーテルは、ポリエチレングリコールまたはポリプロピレングリコールを含む。
【００６３】
更なる実施形態において、医薬組成物、例えば製剤は、免疫抑制薬を含む。更なる実施形態において、免疫抑制薬は、ｍＴＯＲ阻害剤、例えばラパマイシンまたはラパマイシン類似体である。
【００６４】
一部の実施形態において、ウリカーゼ分子、例えば、ウリカーゼコンジュゲートは、ペグロティカーゼ（ＫＲＹＳＴＥＸＸＡ（登録商標））である。
【００６５】
プレドニゾン分子
一部の実施形態において、プレドニゾン分子は、プレドニゾン、またはその変異体、代謝産物または誘導体（薬剤として許容されるその形態、例えばその塩を含む）である。
【００６６】
一実施形態において、プレドニゾン分子は、化合物１７，２１−ジヒドロキシプレグナ−１，４−ジエン−３，１１，２０−トリオン（ＩＵＰＡＣ名）、またはその変異体、代謝産物または誘導体である。
【００６７】
一実施形態において、プレドニゾン分子は、プレドニゾンのメチル化誘導体、例えばメプレドニゾンである。一実施形態において、メプレドニゾンは、化合物（１６β）−１７，２１−ジヒドロキシ−１６−メチルプレグナ−１，４−ジエン−３，１１，２０−トリオン（ＩＵＰＡＣ名）、その変異体、代謝産物または誘導体（薬剤として許容されるその形態、例えばその塩を含む）である。
【００６８】
一実施形態において、プレドニゾン分子は、プレドニゾンの活性代謝産物である。一実施形態において、プレドニゾンの活性代謝産物はプレドニゾロンである。
【００６９】
一部の実施形態において、プレドニゾン分子は、プレドニゾロンまたはその変異体、代謝産物または誘導体（薬剤として許容されるその形態、例えば、その塩を含む）であり、本明細書において総称してプレドニゾロン分子と呼ばれる。一実施形態において、プレドニゾロン分子は、酢酸プレドニゾロン、酢酸メチルプレドニゾロン、またはメチルプレドニゾロンコハク酸エステルナトリウムから選択される。
【００７０】
一実施形態において、プレドニゾロン分子は、化合物（１１β）−１１，１７，２１−トリヒドロキシプレグナ−１，４−ジエン−３，２０−ジオン（ＩＵＰＡＣ名）、またはその変異体、代謝産物または誘導体（薬剤として許容されるその形態、例えば、その塩を含む）である。
【００７１】
他の実施形態において、プレドニゾロン分子は、Ｂ環の炭素６でメチル化されたプレドニゾロンの変異体である。
【００７２】
さらに他の実施形態において、プレドニゾロン分子はメチルプレドニゾロンであり、例えば、化合物（１Ｓ、２Ｒ、８Ｓ，１０Ｓ，１１Ｓ，１４Ｒ，１５Ｓ，１７Ｓ）−１４，１７−ジヒドロキシ−１４−（２−ヒドロキシアセチル）−２，８，１５−トリメチルテトラシクロ［８．７．０．０２，７．０１１，１５］ヘプタデカ−３，６−ジエン−５−オン（ＩＵＰＡＣ名）、またはその変異体または誘導体（薬剤として許容されるその形態、例えば、その塩を含む）である。
【００７３】
一部の実施形態において、プレドニゾン分子は、メプレドニゾン、プレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、酢酸プレドニゾロン、酢酸メチルプレドニゾロン、またはメチルプレドニゾロンコハク酸エステルナトリウムである。
【００７４】
一実施形態において、プレドニゾン分子またはプレドニゾロン分子はヒドロコルチゾンではない。
【００７５】
その他の併用療法
一部の実施形態において、併用、例えば、治療サイクルはさらにコルヒチンまたは非ステロイド抗炎症薬を投与することを含む。一部の実施形態において、コルヒチンまたは非ステロイド抗炎症薬の投与は、ウリカーゼ分子の投与前、例えばウリカーゼ分子、例えばウリカーゼコンジュゲートを投与する４日、５日、６日、７日、８日、９日、または１０日前、例えばウリカーゼ分子、例えばウリカーゼコンジュゲートを投与する７日前に開始される。一部の実施形態において、コルヒチンは、１日に１回、１日に２回、または１日おきに、例えば１日に１回投与される。更なる実施形態において、コルヒチンは、用量０．６〜１．２ｍｇ／日で投与される。
【００７６】
一部の実施形態において、治療サイクルはさらに、ウリカーゼ分子、例えばウリカーゼコンジュゲートを投与する前に、少なくとも１種類の更なる抗炎症化合物を投与することを含む。更なる実施形態において、抗炎症化合物は、抗ヒスタミン薬および非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）から選択される。一部の実施形態において、少なくとも１種類のコルチコステロイド、少なくとも１種類の抗ヒスタミン薬および少なくとも１種類のＮＳＡＩＤが投与される。一部の実施形態において、コルチコステロイドとしては、限定されないが、プレドニゾン、ヒドロコルチゾン、メチルプレドニゾロン、デポ・メドロール、またはソル・メドロールが挙げられる。
【００７７】
一部の実施形態において、ＮＳＡＩＤは、イブプロフェン、インドメタシン、ナプロキセン、アスピリン、アセトアミノフェン、セレコキシブまたはバルデコキシブから選択される。特定の実施形態において、ＮＳＡＩＤはアセトアミノフェンである。一部の実施形態において、アセトアミノフェンは、投薬量５００〜１５００ｍｇで投与される。一部の実施形態において、アセトアミノフェンは、ウリカーゼ分子、例えばウリカーゼコンジュゲートを投与する１〜４時間前に投与される。
【００７８】
一部の実施形態において、抗ヒスタミン薬は、アザタジン、ブロムフェニルアミン、セチリジン、クロルフェニラミン、クレマスチン、シプロヘプタジン、デスロラタジン、デキスクロルフェニラミン、ジメンヒドリネート、ジフェンヒドラミン、ドキシラミン、フェキソフェナジン、ヒドロキシジン、ロラタジンおよびフェニンダミンから選択される。特定の実施形態において、抗ヒスタミン薬はフェキソフェナジンである。一部の実施形態において、フェキソフェナジンは、投薬量３０〜１８０ｍｇで投与される。特定の実施形態において、フェキソフェナジンは、ウリカーゼ分子、例えばウリカーゼコンジュゲートを投与する１〜４時間前に投与される。一部の実施形態において、フェキソフェナジンは、ウリカーゼ分子、例えばウリカーゼコンジュゲートを投与する前夜に投与される。
【００７９】
医薬組成物
一部の実施形態において、ウリカーゼ分子、例えばウリカーゼコンジュゲートは、例えば皮下または静脈内注射によって投与される。一実施形態において、ウリカーゼ分子、例えばコンジュゲートは、皮下注射によって投与される。
【００８０】
一部の実施形態において、ウリカーゼ分子、例えばウリカーゼコンジュゲートは、溶液１ミリリットル当たりコンジュゲート約４〜約１２ミリグラム、例えば約８ミリグラムを含む医薬組成物の形で提供される。一部の実施形態において、ウリカーゼ分子、例えばウリカーゼコンジュゲート、例えばコンジュゲート８ミリグラムが、注入用の生理食塩水溶液２５０ミリリットルに溶解される。更なる実施形態において、生理食塩水溶液は塩化ナトリウム０．４５％または０．９％を含む。
【００８１】
一部の実施形態において、ウリカーゼ分子、例えばウリカーゼコンジュゲートは、１００〜２００分間、例えば１２０分間にわたって投与される。
【００８２】
対象
一部の実施形態において、対象は、高尿酸血症、例えば痛風を有するか、または有すると思われる。一部の実施形態において、対象は慢性痛風を有する。他の実施形態において、対象は難治性または結節性痛風を有する。更なる実施形態において、対象は、経口ＵＬＡ療法に対して難治性の痛風を有する、または有すると同定されており、例えば、血清尿酸の標準化に失敗し、かつ／またはその徴候と症状のコントロールが、経口ＵＬＡ療法、例えばキサンタニンオキシダーゼでは不十分な対象である。
【００８３】
一部の実施形態において、対象は、尿酸過剰血症であり、例えば、血清尿酸レベル≧６ｍｇ／ｄｌを有する。
【００８４】
一部の実施形態において、対象は、経口ＵＬＡ、例えばキサンタニンオキシダーゼ阻害剤、アロプリノール、またはフェブキソスタットで予め処置された。
【００８５】
一部の実施形態において、治療された対象は高尿酸血症を示し、例えば、痛風を有する。特定の実施形態において、対象は難治性であるか、または尿酸降下療法、例えば経口ＵＬＡに対する奏効性が低い。一実施形態において、対象は、ウリカーゼ療法に対する有効性が低い、またはウリカーゼ療法に対する有効性が低いと同定されている（例えば、抗ウリカーゼ抗体（例えば、抗ペグロティカーゼ抗体）の発生率の増加および／またはウリカーゼ療法に応答したインフュージョン・リアクションの発生率の増加を示す）対象である。
【００８６】
対象のモニタリング
一部の実施形態において、この方法はさらに、対象における、例えば対象から採取された血液試料中のウリカーゼ分子、例えばウリカーゼコンジュゲートに対する抗体のレベルを測定することを含む。一部の実施形態において、ウリカーゼ分子、例えばウリカーゼコンジュゲートに対する抗体のレベルは、免疫測定法、例えば酵素結合免疫測定法（ＥＬＩＳＡ）によって測定される。一部の実施形態において、ウリカーゼ分子、例えばウリカーゼコンジュゲートに対する抗体のレベルは、コンジュゲートの投与前に、例えばウリカーゼ分子、例えばウリカーゼコンジュゲートを投与する７２、４８、２４、１２、６、４、または２時間前に投与される。他の実施形態において、ウリカーゼ分子、例えばウリカーゼコンジュゲートに対する抗体のレベルは、ウリカーゼ分子、例えばウリカーゼコンジュゲートの投与後に、例えばウリカーゼ分子、例えばウリカーゼコンジュゲートを投与して０．５、１、２、３、４、または５時間後に測定される。
【００８７】
一部の実施形態において、この方法はさらに、対象における尿酸のレベル、例えば血漿または血清尿酸レベルを測定することを含む。一部の実施形態において、ウリカーゼ分子、例えばウリカーゼコンジュゲートの投与前に、例えばウリカーゼ分子、例えばウリカーゼコンジュゲートを投与する７２、４８、２４、１２、６、４、または２時間前に、尿酸のレベルが、例えば尿酸のトラフレベルが測定される。他の実施形態において、ウリカーゼ分子、例えばウリカーゼコンジュゲートの投与後に、例えばウリカーゼ分子、例えばウリカーゼコンジュゲートを投与して０．５、１、２、３、４、または５時間後に、尿酸のレベルが、例えば尿酸のピークレベルが測定される。
【００８８】
一部の実施形態において、尿酸レベル、例えば血清または血漿尿酸レベルが、参照に対して対象において、例えば未治療の対象、または治療前もしくは以前の治療後の対象に対して低減される。更なる実施形態において、尿酸レベル、例えば血清または血漿尿酸レベルが、６．８ｍｇ／ｄｌ以下に下がる。
【００８９】
一部の実施形態において、その対象は、経口ＵＬＡ療法に対して難治性の痛風を有する対象であり、ウリカーゼ分子、例えばウリカーゼコンジュゲートの投与が中断され、ウリカーゼ分子、例えばウリカーゼコンジュゲート投与の中止後に、経口ＵＬＡ療法が施され、かつウリカーゼ分子、例えばウリカーゼコンジュゲート投与は、対象の尿酸レベルが中止後に６．８ｍｇ／ｄｌ未満を維持するような期間および量である。更なる実施形態において、ウリカーゼ分子、例えばウリカーゼコンジュゲート投与は、対象の尿酸レベルが中止後に６．０ｍｇ／ｄｌ未満を維持するような期間および量である。一部の実施形態において、ウリカーゼ分子、例えばウリカーゼコンジュゲートの投与は、対象の尿酸レベルが、中止した後６か月以上の間、６．８ｍｇ／ｄｌ未満を維持するような期間および量である。
【００９０】
一部の実施形態において、尿酸レベル、例えば血清または血漿尿酸レベルは、６．０ｍｇ／ｄｌ以下に下がる。一部の実施形態において、尿酸レベルは、コンジュゲートの投与前に測定され、尿酸レベルは、３回以上の継続した投与の間に６ｍｇ／ｄｌ以下に下がる。更なる実施形態において、尿酸レベル、例えば血清または血漿尿酸レベルは、５．０ｍｇ／ｄｌ以下に下がる。
【００９１】
標題または番号が付けられた要素もしくは文字入りの要素、例えば（ａ）、（ｂ）、（ｉ）等は、単に読むことを容易にするために示される。この文書における標題または番号が付けられた要素もしくは文字入りの要素の使用では、工程または要素をアルファベット順に行う必要はなく、あるいは工程または要素は必ずしも、互いに別々である必要はない。
【００９２】
本明細書に記載のすべての公開物、特許出願、特許、および他の参考文献は、その全体が参照により組み込まれる。
【００９３】
本発明の開示の他の特徴、目的、および利点は、明細書、および図面、および特許請求の範囲から明らかであるだろう。
【００９４】
配列の簡単な説明
配列番号１−カンジダ・ユチリス（Ｃａｎｄｉｄａ  ｕｔｉｌｉｓ）由来のウリカーゼの配列
配列番号２−ブタ由来のウリカーゼの配列
配列番号３−ヒヒ由来のウリカーゼの配列
配列番号４−キメラのブタ−Ｋ−ＳまたはＰＫＳウリカーゼの配列
配列番号５−そのアミノ末端で６アミノ酸が切り詰められたＰＫＳウリカーゼ（配列番号４）である、ブタ−ＫＳ−ΔＮの配列
配列番号６−４６番目にトレオニンを有する、Ｐｉｇ−ＫＳ−ΔＮ（配列番号５）の４４〜５６番目の配列
配列番号７−ブタ−ＫＳ−ΔＮ（配列番号５）のアミノ酸配列の８〜２８７番目である、ブタ−ＴＴＫＳ−ΔＮの配列
配列番号８−Ｎ−末端メチオニンが除去されたＰｉｇ−ＫＳ−ΔＮの８〜２８７番目である、ブタ−ＴＴＫＳ−ΔＮの配列
【図面の簡単な説明】
【００９５】
【図１】図１は、コルチコステロイド予防タイプによる注入の回数を示す。
【図２】図２は、療法を中止する患者のパーセンテージを示す。
【図３】図３は、予防法と療法の終了による注入の平均回数を示す。
【発明を実施するための形態】
【００９６】
特定の用語が定義される。
【００９７】
本明細書において使用される、「１つ」および「１種類」という冠詞は、冠詞の文法上の対象の１つまたは複数（例えば、少なくとも１つ）を意味する。
【００９８】
「または」という用語は本明細書において、明確に別の指定がない限り、「および／または」という用語を意味するために使用され、かつその用語と区別なく使用される。
【００９９】
「包含する」または「含む」という用語は、本明細書において区別なく使用される。
【０１００】
「約」および「およそ」とは一般に、測定の性質または精度を示す、測定された量の許容可能な程度の誤差を意味する。誤差の例示的な程度は、所定の値または値の範囲の２０パーセント（％）以内、一般に１０％以内、より一般的には５％以内である。
【０１０１】
本明細書で使用される、「ウリカーゼ分子」という用語は、未修飾（例えば、天然）分子の少なくとも１つの機能および／または活性を維持する限り、完全長、天然ウリカーゼ分子、ならびに変異体、例えば機能性変異体（例えば、切り詰め、断片、突然変異型（例えば、実質的に類似の配列）またはその誘導体化型）を包含する。一部の実施形態において、ウリカーゼ分子は、例えばコンジュゲートの形で、例えば本明細書に記載のウリカーゼコンジュゲートの形で誘導体化される。
【０１０２】
一部の実施形態において、ウリカーゼ分子は、真菌または微生物のウリカーゼであり、例えば、アスペルギルス・フラブス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｆｌａｖｕｓ）、アルスロバクター・グロビフォルミス（Ａｒｔｈｒｏｂａｃｔｅｒ  ｇｌｏｂｉｆｏｒｍｉｓ）、バチルス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｐ．）またはカンジダ・ユチリス（Ｃａｎｄｉｄａ  ｕｔｉｌｉｓ）由来の配列、あるいはそれと実質的に同一の配列を有する。一部の実施形態において、ウリカーゼ分子は、無脊椎動物のウリカーゼ、例えば、キイロショウジョウバエ（Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ  ｍｅｌａｎｏｇａｓｔｅｒ）またはウスグロショウジョウバエ（Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ  ｐｓｅｕｄｏｏｂｓｃｕｒａ）に由来する。一部の実施形態において、ウリカーゼ分子は植物のウリカーゼ、例えばダイズ（Ｇｌｙｃｉｎｅ  ｍａｘ）に由来する。
【０１０３】
一実施形態において、ウリカーゼ分子は哺乳類ウリカーゼ分子である。一実施形態において、哺乳類ウリカーゼ分子は、ブタ、ウシ、ヒツジまたはヒヒ肝臓ウリカーゼの配列の少なくとも一部、またはそれらの組み合わせを含む。一実施形態において、ウリカーゼ分子は、２種類以上のブタ、ウシ、ヒツジまたはヒヒ肝臓ウリカーゼの一部から選択される２種類以上の哺乳類ウリカーゼのキメラウリカーゼである。
【０１０４】
一実施形態において、ウリカーゼ分子は、ＮまたはＣ末端で切り詰められている。一実施形態において、ウリカーゼ分子は、そのアミノ末端で３〜１０アミノ酸、例えば、６アミノ酸が切り詰められている。他の実施形態において、ウリカーゼ分子は、そのカルボキシ末端で３〜１０アミノ酸、例えば６アミノ酸が切り詰められている。更なる実施形態において、ウリカーゼ分子は、そのカルボキシ末端とアミノ末端の両方で３〜１０アミノ酸、例えば６アミノ酸が切り詰められている。
【０１０５】
一実施形態において、アミノ酸突然変異は、例えば、配列番号８の７、４６、２９１、および３０１番目それぞれのトレオニン、トレオニン、リジン、およびセリンを含む。
【０１０６】
一実施形態において、ウリカーゼ分子は、配列番号８のアミノ酸配列、またはそれと９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一の配列、例えばそれと９５〜９８％同一の配列を包含する。
【０１０７】
本明細書で使用される「由来する」という用語は、第１分子と第２分子の間の関係を示す。それは一般に、第１分子と第２分子の間の構造類似性を意味し、第２分子に由来する第１分子に対するプロセスもしくは源の制限を意味しない、または包含しない。
【０１０８】
「ポリペプチド」、「ペプチド」および「タンパク質」（単鎖である場合）という用語は本明細書において区別なく使用され、いずれの長さのアミノ酸のポリマーを意味する。そのポリマーは直鎖状または分岐状であり得て、それは修飾アミノ酸を含み得て、かつ非アミノ酸がその間に介在し得る。この用語は、修飾されているアミノ酸ポリマー；例えば、ジスルフィド結合形成、グリコシル化、脂質化、アセチル化、リン酸化、または標識化成分とのコンジュゲーションなどの他の操作を包含する。ポリペプチドは天然源から単離することができ、組換え技術によって真核生物もしくは原核生物宿主から生成することができ、または合成手順の産物であることができる。
【０１０９】
「アミノ酸」という用語は、天然であろうと合成であろうと、アミノ官能性と酸官能性のどちらも含み、かつ天然アミノ酸のポリマーに含まれることができる、すべての分子を包含することが意図される。例示的なアミノ酸としては、天然アミノ酸；その類似体、誘導体および同属種；変異側鎖を有するアミノ酸類似体；および前述のいずれかのすべての立体異性体が挙げられる。本明細書で使用される「アミノ酸」という用語は、ＤまたはＬ光学異性体とペプチドミメティックのどちらも含む。
【０１１０】
本発明の開示の方法および投薬は、指定の配列、またはそれと実質的に同一もしくは類似の配列、例えば指定の配列と少なくとも８５％、９０％、９５％同一の、またはそれ以上同一の配列を有するポリペプチドおよび核酸を包含する。アミノ酸配列の文脈において、「実質的に同一」という用語が本明細書において使用され、第１および第２アミノ酸配列が共通の構造ドメインおよび／または共通の機能活性を有し得るように、ｉ）第２アミノ酸配列と同一であるか、あるいはｉｉ）第２アミノ酸配列におけるアラインされたアミノ酸残基の保存的置換を有する、十分な数または最小限の数のアミノ酸残基を含有する第１アミノ酸を意味する。例えば、共通の構造ドメインを含有するアミノ酸配列は、参照配列、例えば本明細書で提供される配列と少なくとも約８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％の同一性を有する。
【０１１１】
ヌクレオチド配列の文脈において、「実質的に同一」という用語が本明細書において使用され、第１および第２ヌクレオチド配列が、共通の機能活性を有するポリペプチドをコードする、または共通のポリペプチド構造ドメインまたは共通のポリペプチド機能活性をコードするように、第２核酸配列におけるアラインされたヌクレオチドと同一である、十分な数または最小限の数のヌクレオチドを含有する第１核酸配列を意味する。例えば、参照配列、例えば本明細書で提供される配列と少なくとも約８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％の同一性を有するヌクレオチド配列。
【０１１２】
配列間の相同性または配列同一性（これらの用語は本明細書において区別なく使用される）の計算は以下のように行われる。
【０１１３】
２つのアミノ酸配列または２つの核酸配列の同一性パーセントを決定するため、最適な比較のために配列がアラインメントされる（例えば、最適アラインメントのために、第１および第２アミノ酸または核酸配列の１つまたは両方にギャップが導入され得て、非相同配列は比較のために無視され得る）。一実施形態において、比較のためにアラインされた参照配列の長さは、参照配列の長さの少なくとも３０％、好ましくは少なくとも４０％、さらに好ましくは少なくとも５０％、６０％、またさらに好ましくは少なくとも７０％、８０％、９０％、１００％である。相当するアミノ酸位置またはヌクレオチド位置のアミノ酸残基またはヌクレオチドが次いで比較される。第１配列の位置が、第２配列での相当する位置と同じアミノ酸残基またはヌクレオチドによって占められる場合、分子はその位置にて同一である（本明細書において使用されるアミノ酸または核酸「同一性」はアミノ酸または核酸「相同性」と等しい）。
【０１１４】
２つの配列間の同一性パーセントは、配列によって共有される同一位置の数の関数であり、２つの配列の最適アラインメントのために導入する必要がある、ギャップ数および各ギャップの長さが考慮に入れられる。
【０１１５】
配列の比較および２つの配列間の同一性パーセントの決定は、数学的アルゴリズムを用いて達成することができる。一実施形態において、２つのアミノ酸配列間の同一性パーセントは、Ｂｌｏｓｓｕｍ６２マトリックスまたはＰＡＭ２５０マトリックス、および１６、１４、１２、１０、８、６、または４のギャップの重みおよび１、２、３、４、５、または６の長さの重みのいずれかを用いて、ＧＣＧソフトウェアパッケージ（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｇｃｇ．ｃｏｍにて入手可能である）のＧＡＰプログラムに組み込まれているＮｅｅｄｌｅｍａｎおよびＷｕｎｓｃｈ（（１９７０）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．４８：４４４−４５３）アルゴリズムを用いて決定される。さらに他の実施形態において、２つのヌクレオチド配列間の同一性パーセントは、ＧＣＧソフトウェアパッケージ（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｇｃｇ．ｃｏｍにて入手可能である）のＧＡＰプログラムを使用して、ＮＷＳｇａｐｄｎａ．ＣＭＰマトリックスおよび４０、５０、６０、７０、または８０のギャップの重みおよび１、２、３、４、５、または６の長さの重みを用いて決定される。１セットのパラメーター（および別段の指定がない限り使用されるべきであるもの）は、ギャップペナルティ１２、ギャップ伸張ペナルティ４、およびフレームシフトギャップペナルティ５を有するＢｌｏｓｓｕｍ６２スコアマトリックスである。
【０１１６】
２つのアミノ酸またはヌクレオチド配列間の同一性パーセントは、ＰＡＭ１２０残基重み付け表（ｗｅｉｇｈｔ  ｒｅｓｉｄｕｅ  ｔａｂｌｅ）、ギャップ長ペナルティ１２およびギャップペナルティ４を用いて、ＡＬＩＧＮプログラム（ｖｅｒｓｉｏｎ  ２．０）に組み込まれたＥ．ＭｅｙｅｒｓおよびＷ．Ｍｉｌｌｅｒ（（１９８９）ＣＡＢＩＯＳ，４：１１−１７）のアルゴリズムを使用して決定することができる。
【０１１７】
本明細書に記載の核酸およびタンパク質配列は、「問い合わせ配列」として使用され、例えば、他のファミリーメンバーまたは関連配列を同定するために公共データベースに対して検索することができる。かかる検索は、Ａｌｔｓｃｈｕｌ，ｅｔ  ａｌ．（１９９０）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１５：４０３−１０のＮＢＬＡＳＴおよびＸＢＬＡＳＴプログラム（ｖｅｒｓｉｏｎ  ２．０）を用いて実施され得る。ＢＬＡＳＴヌクレオチド検索は、ＮＢＬＡＳＴプログラム、スコア＝１００、ワード長＝１２で実施されて、本発明の開示の核酸分子と相同なヌクレオチド配列が得られる。ＢＬＡＳＴタンパク質検索は、ＸＢＬＡＳＴプログラム、スコア＝５０、ワード長＝３で実施されて、本発明の開示のタンパク質分子と相同なアミノ酸配列が得られる。比較の目的でギャップアライメントを得るために、Ａｌｔｓｃｈｕｌ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９７）Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．２５：３３８９−３４０２に記載のように、Ｇａｐｐｅｄ  ＢＬＡＳＴを利用することができる。ＢＬＡＳＴおよびＧａｐｐｅｄ  ＢＬＡＳＴプログラムを利用する場合、それぞれのプログラム（例えば、ＸＢＬＡＳＴおよびＮＢＬＡＳＴ）のデフォルトパラメーターが使用され得る。ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ．参照。
【０１１８】
ウリカーゼ分子は、その機能に実質的に影響を及ぼさない、更なる保存的または非必須アミノ酸置換を有し得ることが理解される。
【０１１９】
本発明の開示の文脈において、一般に出現する核酸塩基の以下の略語が使用される。「Ａ」はアデノシンを意味し、「Ｃ」はシトシンを意味し、「Ｇ」はグアノシンを意味し、「Ｔ」はチミジンを意味し、かつ「Ｕ」はウリジンを意味する。
【０１２０】
本明細書で使用される「保存的突然変異」は、タンパク質の挙動を実質的に変化させない位置での、またはその位置周辺での１つまたは複数のアミノ酸の突然変異である。一実施形態において、少なくとも１つの保存的突然変異を含むウリカーゼ分子は、かかる突然変異のないウリカーゼ分子と同じウリカーゼ活性を有する。代替の実施形態において、少なくとも１つの保存的突然変異を含むウリカーゼ分子は、かかる突然変異のないウリカーゼ分子の活性の５％以内、１０％以内、または３０％以内の、実質的に同じウリカーゼ活性を有する。
【０１２１】
保存的アミノ酸置換は、ペプチド、ポリペプチドまたはタンパク質、またはその断片のアミノ酸の変化によるアミノ酸の組成の変化として定義される。一部の実施形態において、ウリカーゼ分子は、１つ、２つ、３つまたは４つの保存的突然変異を有する。その置換は、一般に類似の性質（例えば、酸性、塩基性、芳香族、サイズ、正または負に荷電、極性、非極性）を有するアミノ酸の置換であり、その置換によって、ペプチド、ポリペプチドまたはタンパク質の特性（例えば、電荷、ＩＥＦ、親和性、結合活性、コンフォメーション、溶解性）または活性は実質的に変化しない。かかる保存的アミノ酸置換のために実施され得る通常の置換は、以下のようなアミノ酸の群の中で行われ得る：
グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、バリン（Ｖ）、ロイシン（Ｌ）およびイソロイシン（Ｉ）；
アスパラギン酸（Ｄ）およびグルタミン酸（Ｅ）；
アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）およびトレオニン（Ｔ）；
ヒスチジン（Ｈ）、リジン（Ｋ）およびアルギニン（Ｒ）；
アスパラギン（Ｎ）およびグルタミン（Ｑ）；
フェニルアラニン（Ｆ）、チロシン（Ｙ）およびトリプトファン（Ｗ）。
【０１２２】
１つまたは複数の保存的置換を有するタンパク質はその構造的安定性を維持し、かつそのＤＮＡ配列が元のタンパク質とは同じではないにもかかわらず、反応を触媒することができる。
【０１２３】
範囲：この開示全体を通して、開示の様々な態様は、範囲フォーマットで表され得る。範囲フォーマットにおける記述は単に、便宜上かつ簡潔にするためのものであり、開示の範囲に対する確固たる制限として解釈すべきではないと理解されるべきである。したがって、範囲の記述は、可能性のあるすべての部分範囲ならびにその範囲内の個々の数値を具体的に開示していると解釈されるべきである。例えば、１〜６などの範囲の記述は、１〜３、１〜４、１〜５、２〜４、２〜６、３〜６等の部分範囲、ならびにその範囲内の個々の数字、例えば、１、２、２．７、３、４、５、５．３、および６を具体的に開示していると解釈されるべきである。他の例として、９５〜９９％の同一性などの範囲は、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％の同一性の範囲を含み、９６〜９９％、９６〜９８％、９６〜９７％、９７〜９９％、９７〜９８％および９８〜９９％同一性などの部分範囲を含む。これは、その範囲の幅に関わらず適用される。
【０１２４】
本開示の種々の態様は、以下にさらに詳細に記述される。更なる定義は、本明細書全体を通して説明される。
【０１２５】
ウリカーゼ分子
本明細書に開示される方法および投与計画は、寛容化および治療的投与計画において単独で、または他の療法と併用して施され、例えば、尿酸レベルを低下し、痛風を治療し、インフュージョン・リアクションを予防し（例えば、遅らせる）、かつ／またはウリカーゼに対する抗体反応を低減する、ウリカーゼ分子、例えばウリカーゼコンジュゲートの使用を含む。本明細書に開示される方法および投与計画に適したウリカーゼとしては、細菌、真菌類および植物、および動物、脊椎動物と無脊椎動物の両方の組織から単離された天然尿酸オキシダーゼ、ならびにウリカーゼの組換え型、例えばウリカーゼの突然変異、ハイブリッドおよび／または切り詰め型の酵素活性のウリカーゼ変異体が挙げられる。
【０１２６】
ウリカーゼ分子は、真菌または微生物のウリカーゼであり得る。この実施形態の一態様において、真菌または微生物のウリカーゼ分子は、アスペルギルス・フラブス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｆｌａｖｕｓ）、アルスロバクター・グロビフォルミス（Ａｒｔｈｒｏｂａｃｔｅｒ  ｇｌｏｂｉｆｏｒｍｉｓ）、バチルス属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｐ．）由来のウリカーゼの天然または組換え型であり得る。一部の実施形態において、ウリカーゼ分子はカンジダ・ユチリス（Ｃａｎｄｉｄａ  ｕｔｉｌｉｓ）由来である（配列番号１）。その代わりとして、ウリカーゼ分子は、例えばキイロショウジョウバエ（Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ  ｍｅｌａｎｏｇａｓｔｅｒ）またはウスグロショウジョウバエ（Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ  ｐｓｅｕｄｏｏｂｓｃｕｒａ）由来のウリカーゼの天然または組換え型などの無脊椎動物ウリカーゼであり得る。本明細書に開示されるウリカーゼ分子は、植物ウリカーゼ、例えばダイズ根粒（Ｇｌｙｃｉｎｅ  ｍａｘ）由来のウリカーゼの天然または組換え型であることもできる。
【０１２７】
本明細書で使用されるウリカーゼ分子は、別段の指定がない限り、個々のサブユニット、ならびに四量体を含む。一部の実施形態において、ウリカーゼ分子はホモ四量体である。一部の実施形態において、ウリカーゼ分子は、４つの同一の非共有結合ウリカーゼモノマーサブユニットを含む。
【０１２８】
本明細書において使用される「切り詰めウリカーゼ分子」とは、最初のアミノ酸配列が短縮されたウリカーゼ分子を意味する。可能性のある切り詰めの中では、アミノおよび／またはカルボキシ末端での、またはその周辺での切り詰めがある。このタイプの特定の切り詰めは、天然タンパク質の最終アミノ酸（アミノおよび／またはカルボキシ末端のアミノ酸）が、切り詰めタンパク質に存在するような切り詰めであり得る。アミノ末端の切り詰めは、１、２、３、４、５または６番目で開始し得る。一部の実施形態において、アミノ末端の切り詰めは２番目で開始し、それによって、アミノ末端メチオニンが残る。このメチオニンは翻訳後修飾によって除去され得る。一部の実施形態において、アミノ末端メチオニンは、ウリカーゼが産生された後に除去される。一実施形態において、メチオニンは、内在性細菌性アミノペプチダーゼによって除去される。
【０１２９】
完全長配列に対する切り詰めウリカーゼ分子は、１つまたは複数のアミノ酸配列が排除されている。切り詰めウリカーゼを含むタンパク質は、切り詰めウリカーゼ配列に加えて、いずれかのアミノ酸配列を含み得る。一部の実施形態において、切り詰めウリカーゼを含むウリカーゼタンパク質であって、切り詰めが６番目で開始する（つまり、切り詰めウリカーゼが７番目で開始する）タンパク質は、切り詰めウリカーゼからすぐ上流に、野生型ウリカーゼを６番目に有するいかなるアミノ酸も持たない。
【０１３０】
他の配列または特定の配列番号について具体的な言及によって別段の指定がない限り、本明細書に記載のウリカーゼ分子のアミノ酸の番号付け位置は、ブタウリカーゼ配列のアミノ酸の番号付けに関して言及される。本明細書で使用される、「Ｘ〜Ｙ番目」のアミノ酸または核酸の言及は、Ｘ番目とＹ番目の両方でアミノ酸または核酸を含む、Ｘ番目で始まり、Ｙ番目で終わる隣接配列を意味する。
【０１３１】
一実施形態において、ウリカーゼ分子は、そのアミノ末端で４〜１３アミノ酸が切り詰められる。他の実施形態において、ウリカーゼ分子は、そのカルボキシ末端で４〜１３アミノ酸が切り詰められる。更なる実施形態において、ウリカーゼ分子は、そのカルボキシ末端とアミノ末端の両方で４〜１３アミノ酸が切り詰められる。
【０１３２】
一実施形態において、ウリカーゼ分子は、そのアミノ末端で６ミノ酸が切り詰められる。他の実施形態において、ウリカーゼ分子は、そのカルボキシ末端で６アミノ酸が切り詰められる。更なる実施形態において、ウリカーゼ分子は、そのカルボキシ末端とアミノ末端の両方で６アミノ酸が切り詰められる。
【０１３３】
１つの例示的な哺乳類ウリカーゼ分子は、そのどちらも最初にＷｕ，ｅｔ  ａｌ．，（１９８９）によって決定された、ブタ肝臓およびヒヒ肝臓ウリカーゼの配列の一部で構成される組換えブタ−ヒヒのキメラウリカーゼである。かかるキメラウリカーゼ分子の一例は、ブタの配列（配列番号２）からの最初の２８８アミノ酸およびヒヒ配列（配列番号３）からの最後の１６アミノ酸を含有する。後者の配列は、残基２９１にてアルギニンの代わりにリジン（Ｋ）を有し、かつ残基３０１にてトレオニンの代わりにセリン（Ｓ）を有し、２つの位置のみブタの配列と異なるため、この突然変異体（ｍｕｔａｎｔ）は、ブタ−Ｋ−ＳまたはＰＫＳウリカーゼ（配列番号４）と呼ばれる。一部の実施形態において、ＰＫＳウリカーゼは、そのアミノ末端で６アミノ酸が切り詰められ、「ブタ−ＫＳ−ΔＮ」（配列番号５）と呼ばれる。
【０１３４】
一実施形態において、ウリカーゼ分子は、ブタウリカーゼのアミノ酸配列の１３番目から２９２番目のアミノ酸配列を含む（配列番号５）。他の実施形態において、ウリカーゼ分子は、ブタ−ＫＳ−ΔＮ（配列番号５）のアミノ酸配列の８番目から２８７番目のアミノ酸配列を含む。
【０１３５】
他の実施形態において、ウリカーゼ分子は、４６番目にトレオニンを含む、ブタ−ＫＳ−ΔＮの４４番目から５６番目のアミノ酸配列を含む（配列番号６）。ウリカーゼのこの領域は、ウリカーゼのトンネリング・フォールド（ｔｕｎｎｅｌｉｎｇ  ｆｏｌｄ）（Ｔフォールド）ドメイン内の配列と相同性を有し、かつ天然ブタウリカーゼ配列に関して、その中に４６番目に突然変異を有する。
【０１３６】
一実施形態において、７、４６、２９１、および３０１番目にトレオニン、トレオニン、リジン、およびセリンを含むウリカーゼ分子は、ブタウリカーゼのアミノ酸配列の１３〜２９２番目のアミノ酸配列を含む。他の実施形態において、７、４６、２９１、および３０１番目にトレオニン、トレオニン、リジン、およびセリンを含むウリカーゼ分子は、ブタ−ＫＳ−ΔＮ（ブタ−ＴＴＫＳ−ΔＮ）のアミノ酸配列の８番目〜２８７番目のアミノ酸配列を含む（配列番号７）。他の実施形態において、７、４６、２９１、および３０１番目にトレオニン、トレオニン、リジン、およびセリンを含むウリカーゼ分子は、ブタ−ＫＳ−ΔＮのアミノ酸配列の８番目〜２８７番目のアミノ酸配列を含み、そのＮ−末端メチオニンは除去されている（ブタ−ＴＴＫＳ−ΔＮ）（配列番号８）。
【０１３７】
一実施形態において、ウリカーゼ分子は、配列番号８の配列、またはそれと９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一、例えば９５〜９８％同一の配列を含む。
【０１３８】
実施形態において、ウリカーゼ分子は、脱−（１−６）−［７−トレオニン，４６−トレオニン，２９１−リジン，３０１−セリン］ブタ−ヒヒウリカーゼのアミノ酸配列を含む。
【０１３９】
本明細書に開示される切り詰め型哺乳類ウリカーゼ分子はさらに、アミノ末端にメチオニンを含み得る。最後から２番目のアミノ酸は、細菌性メチオニンアミノペプチダーゼ（ＭＡＰ）によるＮ−末端メチオニンの除去を可能にするアミノ酸であり得る。Ｎ−末端メチオニンの最も完全な除去を可能にするアミノ酸は、アラニン、グリシン、プロリン、セリン、およびトレオニンである。一実施形態において、ウリカーゼ分子は、２つのアミノ末端アミノ酸を含み、その２つのアミノ末端アミノ酸は、メチオニンであり、次にアラニン、グリシン、プロリン、セリン、およびトレオニンからなる群から選択されるアミノ酸である。他の実施形態において、そのアミノ酸はトレオニンである。
【０１４０】
一実施形態において、ウリカーゼ分子は哺乳類ウリカーゼ分子である。ウリカーゼ遺伝子およびタンパク質は、いくつかの哺乳類種、例えばブタ、ヒヒ、ラット、ウサギ、マウス、およびアカゲザルにおいて同定されている。種々のウリカーゼタンパク質の配列は、以下の通りにその公共データベースアクセッション番号：ｇｉ｜５０４０３７２８｜ｓｐ｜Ｐ２５６８９；ｇｉ｜２０５１３６３４｜ｄｂｊ｜ＢＡＢ９１５５５．１；ｇｉ｜１７６６１０｜ｇｂ｜ＡＡＡ３５３９５．１；ｇｉ｜２０５１３６５４｜ｄｂｊ｜ＢＡＢ９１５５７．１；ｇｉ｜４７５２３６０６｜ｒｅｆ｜ＮＰ＿９９９４３５．１；ｇｉ｜６６７８５０９｜ｒｅｔ］ＮＰ＿０３３５００．１；ｇｉ｜５７４６３｜ｅｍｂ｜ＣＡＡ３１４９０．１；ｇｉ｜２０１２７３９５｜ｒｅｒ］ＮＰ＿＿４４６２２０．１；ｇｉ｜１３７１０７｜ｓｐ｜Ｐ１１６４５；ｇｉ｜５１４５８６６１｜ｒｅｆｊＸＰ＿４９７６８８．１；ｇｉ｜２０７６１９｜ｇｂ｜ＡＡＡ４２３１８．１；ｇｉ｜２６３４０７７０｜ｄｂｊ｜ＢＡＣ３４０４７．１；およびｇｉ｜５７４５９｜ｅｍｂ｜ＣＡＡ３０３７８．１を参照することによって本明細書に記載される。国立生物工学情報センター（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｅｎｔｅｒ  ｆｏｒ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ）（ＮＣＢＩ）を介してアクセス可能な公共データベースにおける、これらの配列およびそのアノテーションそれぞれの全体が参照により組み込まれる。
【０１４１】
一実施形態において、哺乳類ウリカーゼ分子は、ブタ、ウシ、ヒツジまたはヒヒ肝臓ウリカーゼの配列を含む。
【０１４２】
一実施形態において、ウリカーゼ分子はヒヒ肝臓ウリカーゼであることができ、その中のチロシン９７はヒスチジンで置き換えられており、ウリカーゼ分子の特異的活性は少なくとも約６０％増加され得る。
【０１４３】
一実施形態において、ウリカーゼ分子は、２つ以上の哺乳類ウリカーゼのキメラウリカーゼである。
【０１４４】
一実施形態において、キメラウリカーゼの哺乳類ウリカーゼは、ブタ、ウシ、ヒツジ、またはヒヒ肝臓ウリカーゼから選択される。
【０１４５】
一実施形態において、ウリカーゼ分子は、配列番号８の配列、またはそれと９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一の、例えば９５〜９８％同一の配列を含む。
【０１４６】
実施形態において、ウリカーゼ分子は、脱−（１−６）−［７−トレオニン，４６−トレオニン，２９１−リジン，３０１−セリン］ブタ−ヒヒウリカーゼのアミノ酸配列を含む。
【０１４７】
実施形態において、ウリカーゼ分子は８０〜２００ｋＤａである。実施形態において、ウリカーゼ分子は１００〜１６０ｋＤａである。実施形態において、ウリカーゼ分子は１１０〜１５０ｋＤａである。実施形態において、ウリカーゼ分子は１２０〜１８０ｋＤａである。実施形態において、ウリカーゼ分子は１３０〜１４０ｋＤａ、例えば約１３５〜１３７ｋＤａ（例えば、約１３６．８ｋＤａ）である。
【０１４８】
一実施形態において、ウリカーゼ分子は単離される。他の実施形態において、ウリカーゼ分子は精製される。更なる実施形態において、ウリカーゼ分子は単離かつ精製される。
【０１４９】
当業者に公知のいずれかの方法によって、ウリカーゼ分子が単離され、かつ／または精製され得る。発現されたポリペプチドは一般に、実質的に純粋な形で単離され得る。一部の実施形態において、ポリペプチドは少なくとも８０重量％の純度に単離される。更なる実施形態において、ポリペプチドは少なくとも９５重量％の純度に単離される。更なる実施形態において、ポリペプチドは少なくとも９９重量％の純度に単離される。一般に、かかる精製は、例えば硫酸アンモニウム分画、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ電気泳動、およびアフィニティークロマトグラフィーなどの標準技術を用いて達成することができる。参照によりその全体が本明細書に組み込まれる、「Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  Ｗｉｔｈ  Ｃａｔｉｏｎｉｃ  Ｓｕｒｆａｃｔａｎｔ」という題名の米国特許出願公開第２００９／０３１７８８９号明細書に記載の方法に従って、カチオン界面活性剤、例えば塩化セチルピリジニウム（ＣＰＣ）を使用して、ウリカーゼ分子を単離することができる。
【０１５０】
宿主細胞においてウリカーゼ分子を発現する方法は当技術分野で公知である。例えば、ウリカーゼ分子の発現を生じさせるために、宿主細胞が処理され得る。細胞へのベクターの導入は、使用され得る様々な他の方法（例えば、電気穿孔法）によってカルシウムイオンで沈降されたＤＮＡを用いて、達成することができる。ウリカーゼ分子を発現するベクターは、浸透圧感受性プロモーターの制御下にあり得る。プロモーターは、ＲＮＡへのＤＮＡの転写を開始する前に、ＲＮＡポリメラーゼが結合するＤＮＡ領域である。細胞によって感知される浸透圧の上昇の結果、浸透圧感受性プロモーターが転写を開始する。一実施形態において、プロモーターは修飾ｏｓｍＢプロモーターである。
【０１５１】
ウリカーゼコンジュゲート
特定の実施形態において、ウリカーゼ分子はコンジュゲートの形をとる。本明細書に開示されるウリカーゼ分子は、１つまたは複数のポリマー、例えば水溶性ポリマー（例えば、１つまたは複数のＰＥＧ部位）にコンジュゲートされ得る。
【０１５２】
コンジュゲート、例えばウリカーゼ分子を含むウリカーゼコンジュゲートが本明細書に開示される。これらのコンジュゲートは実質的に非免疫原性であり、未修飾酵素の尿酸分解活性の少なくとも７５％、８５％、または９５％以上を維持し得る。実施形態において、ポリマーは、ポリエーテル、ポリエステル、ポリアミノ酸、ポリカーボネート、ポリアセタール、ポリケタール、多糖のうちの１つまたは複数またはそれらの組み合わせを含む。実施形態において、ポリマーはポリプロピレングリコールである。実施形態において、ポリマーはポリエチレングリコールである。本明細書に開示される方法で使用するのに適した水溶性ポリマーとしては、直鎖状および分岐状ポリ（エチレングリコール）またはポリ（エチレンオキシド）（すべてＰＥＧとして一般に知られる）が挙げられる。分岐状ＰＥＧの例は、米国特許第５，６４３，５７５号明細書の対象である。直鎖状ＰＥＧの一例は、一般構造ＣＨ３Ｏ−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎＨ（ｎは約１００〜約２，３００と異なる）のモノメトキシＰＥＧである。
【０１５３】
実施形態において、それぞれのポリマー分子、例えばポリエチレングリコール分子は、分子量約１〜１００ｋＤａを有する。実施形態において、それぞれのポリマー分子、例えば、ポリエチレングリコール分子は、分子量約５〜５０ｋＤａを有する。実施形態において、それぞれのポリマー分子、例えば、ポリエチレングリコール分子は、分子量約５〜２０ｋＤａを有する。実施形態において、それぞれのポリマー分子、例えばポリエチレングリコール分子は、分子量約２０ｋＤａを有する。実施形態において、それぞれのポリマー分子、例えばポリエチレングリコール分子は、分子量約１０ｋＤａを有する。実施形態において、それぞれのポリマー分子、例えばポリエチレングリコール分子は、分子量約１０ｋＤａを有する。
【０１５４】
実施形態において、コンジュゲートはポリマー重量３００〜８００ｋＤａを有する。実施形態において、コンジュゲートはポリマー重量４００〜７００ｋＤａを有する。実施形態において、コンジュゲートはポリマー重量約５００〜６００ｋＤａ、例えば約５４０〜５６０ｋＤａを有する。
【０１５５】
実施形態において、コンジュゲートは、ウリカーゼ分子のモノマー１個当たりポリマー分子、例えばポリエチレングリコール分子１〜４０個を含む。実施形態において、コンジュゲートは、ウリカーゼ分子のモノマー１個当たりポリマー分子、例えばポリエチレングリコール分子５〜２０個を含む。実施形態において、コンジュゲートは、ウリカーゼ分子のモノマー１個当たりポリマー分子、例えばポリエチレングリコール分子５〜１２個を含む。実施形態において、コンジュゲートは、ウリカーゼ分子のモノマー１個当たりポリマー分子、例えばポリエチレングリコール分子約１０個を含む。
【０１５６】
ウリカーゼ分子は、ＰＥＧの比較的少数のストランドへの生物学的に安定な、非毒性共有結合を介してコンジュゲートされ得る。かかる結合としては、ウレタン（カルバメート）結合、第２級アミン結合、およびアミド結合が挙げられる。
【０１５７】
ウリカーゼへのウレタン結合は、ＰＥＧのスクシンイミジルカーボネート（ＳＣ）またはｐ−ニトロフェニルカーボネート（ＮＰＣ）誘導体の存在下にてウリカーゼをインキュベートすることによって形成され得る。参照により本明細書に組み込まれる、米国特許第５，６１２，４６０号明細書に記載の手順を用いて、ＳＣ−ＰＥＧを合成することができる。Ｖｅｒｏｎｅｓｅ，ＦＭ，ｅｔ  ａｌ．，（１９８５）Ａｐｐｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ  １１：１４１−１５２および参照により本明細書に組み込まれる米国特許第５，２８６，６３７号明細書に記載の方法に従って、ＰＥＧをｐ−ニトロフェニルクロロホルメートと反応させることによって、ＮＰＣ−ＰＥＧを合成することができる。米国特許第５，２８６，６３７号明細書に記載の方法は、同様な化学量論を維持するために反応物の濃度を調節することによって、より高い分子量のＰＥＧに適応される。ＮＰＣ−ＰＥＧの代替の合成方法は、Ｂｕｔｔｎｅｒ，Ｗらの東ドイツ特許明細書ＤＤ２７９  ４８６  Ａ１によって記述されている。実施形態において、コンジュゲートのウリカーゼ分子は、モノメトキシポリ（エチレングリコール）−ｐ−ニトロフェニルカーボネート（ｍＰＥＧ−ＮＰＣ）を使用して誘導体化される。
【０１５８】
ウリカーゼへのアミド結合は、ＰＥＧ（Ｓｈｅａｒｗａｔｅｒポリマー）のカルボン酸誘導体のＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステルを用いて得られる。２，２，２−トリフルオロエタンスルホニルＰＥＧ（ｔｒｅｓｙｌ  ＰＥＧ；Ｓｈｅａｒｗａｔｅｒポリマー）を使用して、またはＰＥＧアルデヒド（Ｓｈｅａｒｖａｔｅｒポリマー）および水素化シアノホウ素ナトリウムを使用した還元アルキル化によって、第２級アミン結合を形成することができる。
【０１５９】
米国特許第６，７８３，９６５号明細書に記載のように、分子量１０ｋＤａのＰＥＧを含有するコンジュゲートにおいて、未修飾酵素の尿酸分解活性の少なくとも７５％を維持すると同時に、サブユニット１つ当たりにカップリングされるＰＥＧストランドの最大数は、哺乳類ウリカーゼに関して約１２ストランドであった（例えば、ＰＫＳウリカーゼ、ブタウリカーゼのムテイン；実施例５のアッセイ条件を参照）。ペグ化の後者の程度は、全アミノ基の約４０％に相当する。最適な分子量および所定の形態のウリカーゼにカップリングするＰＥＧストランド数の選択に影響し得るいくつかの因子がある。一般に、尿酸分解活性を実質的に失うことなく、免疫原性を低減または除去するには、高分子量ＰＥＧの比較的少ないストランドと比べて、低分子量のＰＥＧの比較的多いストランドのカップリングが必要であり得る。同様に、ウリカーゼのそれぞれの異なる形態は、ストランドのサイズおよび数に関して異なる最適条件を有し得る。ＰＥＧのストランドおよびＰＥＧ分子量の最適数は、当技術分野で既知の方法を使用して容易に決定することができる。
【０１６０】
他の実施形態において、ウリカーゼコンジュゲートの実質的にすべての大きな凝集体が除去されている。除去の方法としては、結果として得られた実質的に凝集体不含のウリカーゼの調製物（ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ）をＰＥＧにコンジュゲートする前の、ｐＨ約９〜１０．５、例えば１０．２でのイオン交換クロマトグラフィーまたはサイズ排除クロマトグラフィーが挙げられる。分取カラムからの各画分中のウリカーゼの分子量は、サイズ依存的な分析技術、例えば、ＨＰＬＣ、従来のサイズ排除クロマトグラフィー、遠心分離、光散乱、キャピラリー電気泳動または非変性バッファー中でのゲル電気泳動によってモニターすることができる。サイズ排除クロマトグラフィーを用いて単離された凝集体不含ウリカーゼについて、１４０ｋＤａおよび２８０ｋＤａ形態の酵素のみ含有する画分をプールし、ＰＥＧへのコンジュゲートに使用することができる。イオン交換クロマトグラフィーを用いて単離された四量体＋八量体ウリカーゼについては、イオン交換カラムからの画分をサイズに関して分析して、光散乱により検出される大きな凝集体なく、実質的な量の四量体および八量体形態をどの画分が含有するかを決定することができる。精製された生成物において、不要な大きな凝集体は、全ウリカーゼの約１％以下と少ない量を占め得る。
【０１６１】
一部の実施形態において、ウリカーゼコンジュゲートはペグロティカーゼ（ＫＲＹＳＴＥＸＸＡ（登録商標））である。ペグロティカーゼは、従来の療法に対して難治性の成人患者における慢性痛風の治療に認可されているポリエチレングリコールにコンジュゲートされた組換え哺乳類ウリカーゼである。１成人患者に対するペグロティカーゼの推奨用量および投与計画は、隔週で静脈内注入として８ｍｇ（ウリカーゼタンパク質）が投与される。１注入前の予防法（抗ヒスタミン薬、コルチコステロイド）は、ペグロティカーゼを投与する場合にインフュージョン・リアクションのリスクを最小限にするために指示される。１ヒドロコルチゾン（ＩＶ２００ｍｇ）が、無作為化対照試験中に投与され、ペグロティカーゼの注入前予防の成分として通常使用されている。２メチルプレドニゾロンが、インフリキシマブなどの多くの生体タンパク質の注入前予防にうまく使用されている。３メチルプレドニゾロンは現在、ペグロティカーゼの代替の注入前予防コルチコステロイドとして一部の提供業者によって用いられている。ペグロティカーゼ注入の予防としてのメチルプレドニゾロンは体系的に評価されていない。本明細書に記載の使用され得る他の種類のコルチコステロイドとしては、限定されないが、プレドニゾン、ヒドロコルチゾン、メチルプレドニゾロン、デポ・メドロール、および／またはソル・メドロールが挙げられる。
【０１６２】
併用療法の使用
治療
評価される血清尿酸は、痛風の生化学的マーカーであり得る。血漿尿酸（ＰＵＡ）または血清尿酸（ＳＵＡ）レベルが持続的に高いと、関節および軟部組織の尿酸沈着を生じ得る。尿酸の総体内量が増加すると、再発性の有痛性痛風発赤を特徴とする関節炎などの痛風の徴候と症状が生じ、結果として慢性痛／炎症および物理的機能の結果的な低下を伴う痛風結節および関節の変形を発症する。
【０１６３】
本明細書で使用され、かつ別段の指定がない限り、「治療する」、「治療すること」および「治療」という用語は、治療的処置および予防的もしくは防止的処置のどちらも意味し、その目的は、望ましくない生理学的変化または疾患、例えば症状または疾患、例えば高尿酸血症（例えば、痛風）の発症または悪化などを予防する、または遅らせる（緩和する）ことである。有益な、または望ましい臨床結果としては、限定されないが、検出可能であろうとなかろうと、症状の緩和、疾患の程度の低減、疾患の安定化（つまり、悪化していない）状態、疾患進行を遅らせる、または減速すること、疾患状態の改善または寛解が挙げられる。治療の必要がある対象としては、その症状または疾患を既に有する対象、ならびに症状または疾患を有する傾向がある対象、あるいはその症状または疾患を予防すべきである対象が挙げられる。
【０１６４】
例えば、痛風の治療の場合には、一部の実施形態において、治療的処置とは、本明細書に記載の方法に従って投与した後、または本明細書に記載の医薬組成物を投与した後の、尿酸レベルの低減を意味し得る。例えば、尿酸レベルは、治療後に少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、または少なくとも約５０％低減される。他の実施形態において、尿酸レベルは、治療後に５０％を超えて、例えば、少なくとも約６０％、または少なくとも約７０％低減される。一実施形態において、尿酸レベルは、対照と比較して少なくとも約８０％、少なくとも約９０％以上低減される（例えば、本明細書に記載の医薬組成物の非存在下にて）。
【０１６５】
他の実施形態において、治療的処置とは、痛風に伴う少なくとも１種類の症状の軽減を意味する。測定可能な緩和は、治療後の血液試料中の血清／血漿尿酸レベルなど、測定可能なマーカーまたは症状の統計学的に有意な減少を含む。一実施形態において、少なくとも１種類のマーカーまたは症状が、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、または少なくとも約５０％軽減される。他の実施形態において、少なくとも１種類のマーカーまたは症状が、５０％を超えて、例えば、少なくとも約６０％、または少なくとも約７０％軽減される。一実施形態において、少なくとも１種類のマーカーまたは症状が、対照と比較して少なくとも約８０％、少なくとも約９０％以上低減される（例えば、本明細書に記載の医薬組成物の非存在下にて）。
【０１６６】
別段の指定がない限り、本明細書で使用される「予防する」、「予防すること」および「予防」という用語は、対照が検出可能に症状を有する、またはその病状に苦しむ、またはその症状の再発し始める前に起こす行為を意味する。一実施形態において、症状は痛風である。予防によって症状が完全に予防される必要はなく、症状もしくは症状の症候の部分的予防または低減、または症状を発症するリスクの低減がこの用語によって包含される。
【０１６７】
本明細書で使用され、かつ別段の指定がない限り、例えば、ウリカーゼ分子と併せての、化合物の「治療有効量」は、疾患（例えば、痛風、または痛風に伴う１つまたは複数の症候）の治療における治療上の利点を提供するのに十分な量、あるいは疾患に伴う１つまたは複数の症候を遅らせる、または最小限にするのに十分な量である。化合物の治療有効量とは、疾患の治療または管理において利点を提供する、単独での、または他の治療薬と併用しての、治療薬の量を意味する。「治療有効量」という用語は、療法全体を改善し、疾患（例えば、痛風、または痛風に伴う１つまたは複数の症候）の１つまたは複数の病候または原因を低減する、または防ぐ、あるいは他の治療薬の治療有効性を高める量を包含し得る。一部の実施形態において、治療有効量は、尿酸レベルの低下を達成する量である。一部の実施形態において、治療有効量は、約６ｍｇ／ｄｌ以下の尿酸レベルを達成する量である。
【０１６８】
本明細書で使用され、かつ別段の指定がない限り、化合物の「予防的に有効な量」は、疾患（例えば、痛風、または痛風に伴う１つまたは複数の症候）を予防するのに十分な量である。化合物の予防的に有効な量は、疾患の予防において予防的利益を提供する、単独での、または他の治療薬と併用しての、化合物の量を意味する。「予防的に有効な量」という用語は、予防法全体を改善する、あるいは他の予防薬の予防的有効性を高める量を包含し得る。
【０１６９】
本明細書に記載の「痛風」とは、関節および軟部組織における尿酸一ナトリウムの沈着を生じる慢性の尿酸代謝疾患であり、炎症を伴い、最終的には一部の患者において破壊的慢性関節症を伴う。痛風は、男性における関節炎の一般的な形態であり、どちらの性別の年配者の中でも発生率および有病率が増加している。痛風の治療は、経口ＵＬＡ（尿酸降下薬）、例えばキサンチンオキシダーゼ阻害剤、例えばアロプリノールおよびフェブキソスタット、およびウリカーゼを含む。一部の実施形態において、経口ＵＬＡに対して不反応性の患者がウリカーゼで治療される。
【０１７０】
「難治性痛風」とは、１つまたは複数の経口尿酸降下薬（ＵＬＡ）、例えばキサンタニンオキシダーゼ阻害剤に対して不反応性または反応性が乏しい、あるいはそれからの有害事象を経験したことがある、または経験するリスクが高い対象、例えば患者における痛風を意味する。アロプリノールで処置した患者のおよそ２％がアレルギー反応を起こし、患者の約０．４％で重篤な過敏性症候群を生じる（Ａｒｅｌｌａｎｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒ  １９９３；２７：３３７−４３）。アレルギー／過敏症のためにキサンタニンオキシダーゼ阻害剤に対する医学的禁忌を有する患者、またはこれらの投薬の医学的に適切な最大用量にてＳＵＡを正常化することができない患者は、慢性痛風を発症し得る。
【０１７１】
「従来の療法（ＧＲＴ）に対して難治性の慢性痛風」は稀であるが、進行性痛風の重篤な結果である。慢性痛風は、亜飽和範囲の血清尿酸レベルを低減し、かつ維持することによって尿酸結晶の沈着を防ぐ、利用可能な療法の実証された不耐性またはその療法に対する不応性から生じる。
【０１７２】
長年にわたり繰り返される痛風の発作または持続性高尿酸血症を有する対象は、結節性痛風を発症し得る。結節性痛風は、痛風結節と呼ばれる塊状の多数の尿酸結晶の蓄積と説明される。この形態の痛風を有する患者は、関節、包（組織を緩衝し、保護する液体で充填された嚢）、骨、および軟骨、または皮膚下の痛風結節を発症し得る。痛風結節は、骨の浸蝕を生じ、最終的には関節の損傷および変形（痛風性関節症）を生じ得る。
【０１７３】
一部の実施形態において、本明細書に開示される方法および投与計画において使用されるウリカーゼ分子は、ペグ化ウリカーゼである。ペグ化ウリカーゼは、モノメトキシポリ（エチレングリコール）（ＰＥＧ）修飾組換え哺乳類ウリカーゼ（尿酸オキシダーゼ）であり、アラントイン、尿酸よりも容易に尿中に排泄される水溶性代謝産物へのその転化を触媒することによって、血清（または血漿）中のＵＡレベルを低減する。ペグ化ウリカーゼは、痛風を有する患者におけるＳＵＡを低減する治療メカニズムを提供する。ペグ化ウリカーゼは、ＳＵＡを下げることによって、かつ痛風結節量を減らすことによって、応答する患者において医療的利点を提供する。
【０１７４】
ウリカーゼコンジュゲート、例えばペグ化ウリカーゼの寛容化および治療的投与計画が本明細書に記述される。特に、これらの投与計画の組み合わせによって、従来の投与スキームと比べて、尿酸レベルの低減の向上、痛風治療の向上、抗体応答の低減、およびインフュージョン・リアクションの予防（例えば、遅延）が提供される。
【０１７５】
インフュージョン・リアクション
ペグ化ウリカーゼ療法の場合には、インフュージョン・リアクション（ＩＲ）は、抗ペグ化ウリカーゼ抗体価の増加、ペグ化ウリカーゼ療法に対する奏効性の減少、またはその両方と関連することが示されている。
【０１７６】
本明細書で使用される、「インフュージョン・リアクション」という用語は、療法中またはその後に生じる、望ましくない、および／または意図しない作用、療法の、例えばウリカーゼ療法の有害事象である。一部の実施形態において、インフュージョン・リアクションはウリカーゼ療法中に起こる。他の実施形態において、インフュージョン・リアクションは、ウリカーゼ療法後に起こる。更なる実施形態において、インフュージョン・リアクションは、ウリカーゼ療法の後２時間以内に起こる。
【０１７７】
一部の実施形態において、ウリカーゼ療法は、ウリカーゼの注入、例えば静脈内注入を含む。インフュージョン・リアクションは、あらゆる有害事象であり得る。一部の実施形態において、インフュージョン・リアクションは痛風発赤である。一部の実施形態において、インフュージョン・リアクションは、蕁麻疹、呼吸困難、胸の不快感、胸痛、紅斑、またはかゆみを含む。一部の実施形態において、インフュージョン・リアクションはアレルギー性である。一部の実施形態において、インフュージョン・リアクションは非アレルギー性である。
【０１７８】
一部の実施形態において、インフュージョン・リアクションは、アナフィラキシーを含む。アナフィラキシーの症状としては、全身性じんま疹；かゆみまたは潮紅；唇、舌、または口蓋垂の腫れ；呼吸機能の低下（例えば、呼吸困難、喘鳴気管支痙攣、ぜん音、最大呼気流量の低下、低酸素血症）；および血圧低下が挙げられる。
【０１７９】
一部の実施形態において、インフュージョン・リアクションは、免疫複合体関連疾患を含む。免疫複合体関連疾患は、体内の小さな血管内に免疫複合体が沈着することによって生じ得る。免疫複合体関連疾患としては、糸球体腎炎、皮膚脈管炎、または関節炎が挙げられる。
【０１８０】
併用療法
痛風を治療する、またはウリカーゼ療法に応答してインフュージョン・リアクションを低減する方法が本明細書に開示される。一部の実施形態において、本明細書に開示される方法は、プレドニゾン分子とウリカーゼ分子の併用投与を含む。本明細書で使用される「併用して」投与されるとは、２種類（以上）の異なる処置が、その疾患を有する対象の苦痛の過程中に対象に施され、例えば、対象がその疾患であると診断された後、および疾患が治癒する、または解消される前、あるいは治療が他の理由で中止される前に、２種類以上の処置が施されることを意味する。一部の実施形態において、１つの治療の送達は、第２治療の送達が開始する時にまだ行われており、そのため、投与の期間が重なる。これは時に、本明細書において「同時の」または「同時送達（ｃｏｎｃｕｒｒｅｎｔ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ）」と呼ばれる。他の実施形態において、１つの処置の送達は、他の処置の送達が始まる前に終わる。いずれかの場合の一部の実施形態において、その処置は、併用投与であるためより有効である。例えば、第２の処置は、より有効であり、例えば少ない第２処置で等しい作用が見られる、あるいは第２処置が第１処置の非存在下で施された場合に見られるであろうよりも大幅に、第２処置によって症状が低減される、あるいは第１処置で類似の状況が見られる。一部の実施形態において、送達は、症状の低減、または疾患に関連する他のパラメーターが、もう１つの処置の非存在下にて施された１つの処置で観察されるよりも大きくなるような送達である。２つの処置の作用は部分的に相加的、完全に相加的、または相加的よりも大きい可能性がある。その送達は、第２処置が送達されたときに、送達された第１処置の作用がまだ検出可能であるような送達であり得る。
【０１８１】
一部の実施形態において、ウリカーゼ分子、例えばウリカーゼコンジュゲートは、用量約４ｍｇ、約５ｍｇ、約６ｍｇ、約７ｍｇ、約８ｍｇ、または約１２ｍｇ、例えば約８ｍｇで投与される。
【０１８２】
一部の実施形態において、プレドニゾン分子、例えばメチルプレドニゾロンは、約０．１〜約５ｍｇ／ｋｇ、約０．２〜約４ｍｇ／ｋｇ、約０．３〜約３ｍｇ／ｋｇ、約０．４〜約２ｍｇ／ｋｇ、または約０．５〜約１．５ｍｇ／ｋｇ、または通常約０．５ｍｇ／ｋｇ、約０．６ｍｇ／ｋｇ、約０．７ｍｇ／ｋｇ、約０．８ｍｇ／ｋｇ、約０．９ｍｇ／ｋｇ、約１．０ｍｇ／ｋｇ、約１．１ｍｇ／ｋｇ、約１．２ｍｇ／ｋｇ、約１．３ｍｇ／ｋｇ、約１．４ｍｇ／ｋｇ、または約１．５ｍｇ／ｋｇの範囲の量で投与される。他の実施形態において、メチルプレドニゾロンは、フラット用量として、例えば約１ｍｇ〜約５００ｍｇ、約１０ｍｇ〜約４００ｍｇ、約２０ｍｇ〜約３００ｍｇ、約３０ｍｇ〜約２００ｍｇ、または約５０ｍｇ〜約１５０ｍｇ、または通常約５０ｍｇ、約６０ｍｇ、約７０ｍｇ、約８０ｍｇ、約９０ｍｇ、約１００ｍｇ、約１１０ｍｇ、約１２０ｍｇ、約１３０ｍｇ、約１４０ｍｇ、または約１５０ｍｇで投与される。
【０１８３】
一部の実施形態において、プレドニゾン分子、例えばメチルプレドニゾロンは、ウリカーゼ分子の前に投与される。一部の実施形態において、プレドニゾンは、ウリカーゼ分子を投与する約１０分以上、約２０分以上、約３０分以上、約４０分以上、約５０分以上、約１時間以上、約２時間以上、または約３時間以上前に投与される。他の実施形態において、メチルプレドニゾンは、ウリカーゼ分子を投与する約１０分、約２０分、約３０分、約４０分、約５０分、約１時間、約２時間、または約３時間前に投与される。他の実施形態において、プレドニゾンおよびウリカーゼ分子の投与は、一部重複する。
【０１８４】
一実施形態において、プレドニゾン分子は、静脈内に（ＩＶ）、筋肉内に（ＩＭ）、注入（ＩＶ注入）によって、経口、経腸、または局所投与される。
【０１８５】
一部の実施形態において、治療サイクルは、１１日、１２日、１３日、１４日、１５日、１６日、１７日、または１８日ごとに１回、例えば１４日ごと、例えば隔週で繰り返される。一実施形態において、投与計画は、隔週に１回繰り返される。
【０１８６】
一部の実施形態において、投与計画は、プレドニゾンおよびウリカーゼ分子の１つまたは複数の第１治療サイクルと、プレドニゾンなしのウリカーゼ分子の１つまたは複数の第２治療サイクルと、を含む。
【０１８７】
一部の実施形態において、投与計画は、７、１０、１２、２４、４８回、またはそれ以上の治療サイクルを含む。
【０１８８】
対象
本明細書に記載の方法は、対象、例えばヒト対象を治療するのに有用である。一部の実施形態において、対象は、患者、例えばヒトの患者である。一部の実施形態において、対象は、痛風を有し、例えば、痛風を有する患者である。一部の実施形態において、対象は痛風と診断されている。一部の実施形態において、治療される対象は、高尿酸血症を示し、例えば対象は痛風を有する。特定の実施形態において、対象は、尿酸降下療法、例えば、経口ＵＬＡに対して難治性であるか、またはそれに対する奏効性が低い。一実施形態において、対象は、ウリカーゼ療法に対する有効性が低い、またはウリカーゼ療法に対する有効性が低いと同定されている（例えば、抗ウリカーゼ抗体（例えば、抗ペグロティカーゼ抗体）の発生率の増加および／またはウリカーゼ療法に応答したインフュージョン・リアクションの発生率の増加を示す）。一部の実施形態において、対象は、過体重または肥満であり、例えばベースライン体重＞１００ｋｇを有する。
【０１８９】
痛風の診断は、ＭＲＩ、Ｘ線、または超音波、滑液分析における結晶の存在、血液もしくは尿試験により決定される高い血清尿酸値、および／または痛風結節によって決定される炎症性関節に基づくことができる。一部の実施形態において、対象は痛風を有する可能性がある。一部の実施形態において、痛風は慢性痛風である。一部の実施形態において、痛風は結節性痛風である。一部の実施形態において、痛風は急性痛風である。一部の実施形態において、痛風は重篤である。一部の実施形態において、痛風は中等度である。
【０１９０】
一部の実施形態において、対象は難治性痛風を有し、例えば血清尿酸を正常化することができず、かつ／またはＵＬＡ、例えばキサンタニンオキシダーゼ阻害剤で不適切にコントロールされた徴候と症状を有する。一部の実施形態において、対象は、経口ＵＬＡ、例えばキサンタニンオキシダーゼ阻害剤、アロプリノール、またはフェブキソスタットで以前に治療されていた。
【０１９１】
血清尿酸飽和ポイントは約６．８ｍｇ／ｄＬであり得る。理論によって束縛されることなく、痛風症状の発症のリスクは、６ｍｇ／ｄＬよりも高い濃度で着実に高まると考えられる。一部の実施形態において、対象は尿酸過剰血症であり、例えば、血清尿酸レベル≧４ｍｇ／ｄｌ、≧４．１ｍｇ／ｄｌ、≧４．２ｍｇ／ｄｌ、≧４．３ｍｇ／ｄｌ、≧４．４ｍｇ／ｄｌ、≧４．５ｍｇ／ｄｌ、≧４．５ｍｇ／ｄｌ、≧４．６ｍｇ／ｄｌ、≧４．７ｍｇ／ｄｌ、≧４．８ｍｇ／ｄｌ、≧４．９ｍｇ／ｄｌ、≧５．０ｍｇ／ｄｌ、≧５．１ｍｇ／ｄｌ、≧５．２ｍｇ／ｄｌ、≧５．３ｍｇ／ｄｌ、≧５．４ｍｇ／ｄｌ、≧５．５ｍｇ／ｄｌ、≧５．６ｍｇ／ｄｌ、≧５．７ｍｇ／ｄｌ、≧５．８ｍｇ／ｄｌ、≧５．９ｍｇ／ｄｌ、≧６．０ｍｇ／ｄｌ、≧６．１ｍｇ／ｄｌ、≧６．２ｍｇ／ｄｌ、≧６．３ｍｇ／ｄｌ、≧６．４ｍｇ／ｄｌ、≧６．５ｍｇ／ｄｌ、≧６．６ｍｇ／ｄｌ、≧６．７ｍｇ／ｄｌ、≧６．８ｍｇ／ｄｌを有し、例えば、血清尿酸レベル≧６ｍｇ／ｄｌを有する。
【０１９２】
請求項に記載の方法から利益が得られる患者の１つのカテゴリーは、過体重または肥満患者である。理論によって束縛されないが、かかる患者において、ｍｇ／ｋｇで示されるウリカーゼコンジュゲートの投薬量が、正常な体重な患者と比べて低減され、これは、治療の有効性を下げ得る。治療期間の初めの投薬量の増加または投薬回数の増加を伴う治療的投与計画は、これらの患者におけるウリカーゼ療法に対する奏効性を高め得る。本明細書で使用される、「治療期間」とは、特定の個人の治療の長さまたは期間、つまり尿酸レベルを下げるために、特定の患者または個人がウリカーゼ分子を投与される時間の長さを意味する。治療期間は、本明細書に記載のウリカーゼ分子を投与する週の期間を意味し得て、またはウリカーゼ分子の個々の投与（つまり、注入）の時間の長さを意味し得る。治療期間は、本明細書に記載の個人に応じて異なり得る。治療期間は、患者におけるウリカーゼ分子の投与前に、投与と同時に、または投与後のいずれかに、ステロイドを投与する期間も意味する。治療期間は、個人に応じて異なり得る。一部の実施形態において、対象は、８０ｋｇ、９０ｋｇ、１００ｋｇ、１１０ｋｇ、１２０ｋｇ以上の、例えば１００ｋｇの体重を有する。一部の実施形態において、対象は、８０ｋｇ、９０ｋｇ、１００ｋｇ、１１０ｋｇ、１２０ｋｇ以上の、例えば１００ｋｇの体重を有すると確認されている。
【０１９３】
過体重および肥満症の評価は、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈからの「Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ  ｏｎ  ｔｈｅ  Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ，Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ，ａｎｄ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｏｖｅｒｗｅｉｇｈｔ  ａｎｄ  Ｏｂｅｓｉｔｙ  ｉｎ  Ａｄｕｌｔｓ」によって定義される肥満指数（ＢＭＩ）の分類によって決定することができる。肥満指数は、対象の体重（例えば、キログラム（ｋｇ））に対象の身長（例えば、メートル（ｍ））の２乗で割ることによって得られる。ＢＭＩ１８．５〜２４．９の対象は一般に、正常体重として分類され、ＢＭＩ２５．０〜２９．９の対象は過体重と分類される。ＢＭＩ３０．０以上の対象は肥満と分類され、３つのクラス：クラスＩ（ＢＭＩ＝３０．０〜３４．９）；クラスＩＩ（ＢＭＩ＝３５．０〜３９．９）；およびクラスＩＩＩ（ＢＭＩが４０以上である）にさらに分けられる。
【０１９４】
一実施形態において、対象は過体重であり、例えば対象は、２５．０以上であるが、２９．９以下のＢＭＩを有する。
【０１９５】
他の実施形態において、対象は、肥満であるが、または肥満であると確認されており、例えば、対象は、３０以上、例えば３０を超える、３５を超える、４０を超える、４５を超える、または５０を超えるＢＭＩを有する。
【０１９６】
一部の実施形態において、対象は、５５歳以上、６０歳以上、６５歳以上、または７０歳以上、例えば６５歳以上である。一部の実施形態において、対象は、７０歳未満、６５歳、６０歳、または５５歳、例えば６５歳未満である。
【０１９７】
対象のモニタリング
所定の投与計画の有効性を評価する適切な指標は、当業者には公知である。かかる指標の例としては、血清尿酸（ＳＵＡ）または血漿尿酸レベル（ＰＵＡ）の正常化または低下、および尿酸レベルの低下または維持が挙げられる。血漿尿酸（ＰＵＡ）または血清尿酸（ＳＵＡ）レベルが持続的に高い結果として、関節および軟部組織に尿酸が沈着することは知られている。尿酸の総体内量が増加すると、再発性の有痛性痛風発赤を特徴とする関節炎などの痛風結の徴候と症状が生じ、結果として慢性痛／炎症および物理的機能の結果的な低下を伴う痛風結節および関節の変形を発症する。
【０１９８】
実施形態において、尿酸レベル、例えば血清または血漿尿酸レベルが、６．８ｍｇ／ｄＬ以下、６．７ｍｇ／ｄＬ以下、６．６ｍｇ／ｄＬ以下、６．５ｍｇ／ｄＬ以下、６．４ｍｇ／ｄＬ以下、６．３ｍｇ／ｄＬ以下、６．２ｍｇ／ｄＬ以下、６．１ｍｇ／ｄＬ以下、６．０ｍｇ／ｄＬ以下、５．９ｍｇ／ｄＬ以下、５．８ｍｇ／ｄＬ以下、５．７ｍｇ／ｄＬ以下、５．６ｍｇ／ｄＬ以下、５．５ｍｇ／ｄＬ以下、５．４ｍｇ／ｄＬ以下、５．３ｍｇ／ｄＬ以下、５．２ｍｇ／ｄＬ以下、５．１ｍｇ／ｄＬ以下、５．０ｍｇ／ｄＬ以下、４．９ｍｇ／ｄＬ以下、４．８ｍｇ／ｄＬ以下、４．７ｍｇ／ｄＬ以下、４．６ｍｇ／ｄＬ以下、４．５ｍｇ／ｄＬ以下、４．４ｍｇ／ｄＬ以下、４．３ｍｇ／ｄＬ以下、４．２ｍｇ／ｄＬ以下、４．１ｍｇ／ｄＬ以下、または４．０ｍｇ／ｄＬ以下に低下され得る。実施形態において、尿酸レベル、例えば血清または血漿尿酸レベルが、６．８ｍｇ／ｄＬ以下に低下され得る。実施形態において、尿酸レベル、例えば血清または血漿尿酸レベルは、６ｍｇ／ｄＬ以下に低下され得る。実施形態において、尿酸レベルはコンジュゲートの投与前に測定され、尿酸レベルは、３回以上の連続投与の間に６ｍｇ／ｄＬ以下に低下され得る。実施形態において、尿酸レベル、例えば血清または血漿尿酸レベルは、５．０ｍｇ／ｄＬ以下に低下され得る。実施形態において、本明細書に開示される組成物で処置された対象は、全治療期間の少なくとも７０％、少なくとも８０％、または少なくとも９０％の間、ＳＵＡまたはＰＵＡ６ｍｇ／ｍｌ以下を有する。例えば、２４週の治療期間、対象は、２４週の治療期間の少なくとも８０％の間、つまり、１３４．４日の時間の長さに少なくとも等しい時間（２４週×７日／週×０．８＝１３４．４日）、ＳＵＡまたはＰＵＡ６ｍｇ／ｍｌ以下を有する。実施形態において、尿酸レベル、例えば血清または血漿尿酸レベルは、参照に対する、例えば未処置対象に対する対象において、あるいは処置前または以前の処置後の対象において低減され得る。
【０１９９】
実施形態において、尿酸レベルは、免疫測定法、例えば酵素結合免疫測定法（ＥＬＩＳＡ）によって測定することができる。実施形態において、尿酸のトラフレベルは、ウリカーゼコンジュゲートの投与前、例えばコンジュゲートを投与する７２、４８、２４、１２、６、４、または２時間前に測定され得る。実施形態において、尿酸のピークレベルは、コンジュゲートの投与後に、例えばコンジュゲートを投与して０．５、１、２、３、４、または５時間後に測定され得る。
【０２００】
所定の投与計画の有効性の他の尺度は、対象におけるコンジュゲートに対する抗体レベルの測定である。抗コンジュゲート抗体、例えば抗ペグ化ウリカーゼ抗体は、例えば対象の血液中で測定され得る。抗体のレベルを測定する方法は当技術分野でよく知られており、例えば酵素結合免疫測定法（ＥＬＩＳＡ）が挙げられる。実施形態において、コンジュゲートに対する抗体のレベルは、コンジュゲートの投与前、例えばコンジュゲートを投与する７２、４８、２４、１２、６、４、または２時間前に測定され得る。実施形態において、コンジュゲートに対する抗体のレベルは、コンジュゲートの投与後に、例えばコンジュゲートを投与して０．５、１、２、３、４、または５時間後に測定され得る。
【０２０１】
所定の投与計画の有効性の他の尺度は、対象におけるＨｅａｌｔｈ  Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ  Ｑｕｅｓｔｉｏｎｎａｉｒｅ  Ｄｉｓａｂｉｌｉｔｙ  Ｉｎｄｅｘ（ＨＡＱ−ＤＩ）の測定である。ＨＡＱ−ＤＩは、８カテゴリーにおける機能能力のレベルを評価するために設計されている（Ｂｒｕｃｅ  ａｎｄ  Ｆｒｉｅｓ，２００３）。それは、機能活性（衣服の着脱と身支度、起立、食事、歩行、衛生、届く範囲（ｒｅａｃｈ）、握力、および活動）の包括的なセットを表す２０の質問からなる。反応は０（困難なくできる）〜３（全くできない）のスケールでスコアリングされる。ＨＡＱは、痛みおよび全体的な機能的能力の自己評価も含む。実施形態において、対象のＨＡＱ−ＤＩは、参照と比べて下がり得る。一部の実施形態において、参照は、初期の時点での対象である。一部の実施形態において、初期の時点は、処置前である。一部の実施形態において、初期の時点は、処置の直前である。一部の実施形態において、初期の時点は、治療の初期である。一部の実施形態において、初期の時点は、以前の治療の後である。実施形態において、対象のＨＡＱ−ＤＩは、１、２、３以上のカテゴリーで１ポイント以上下がり得る。
【０２０２】
所定の投与計画の有効性の他の尺度は、対象におけるＣ反応性タンパク質のレベルである。Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）は、血漿中に見られる輪状（環状）五量体タンパクである。そのレベルは、痛風などの炎症状態などの炎症に応答して上昇する。タンパク質、例えば、ＣＲＰのレベルを測定する方法は技術分野でよく知られている。実施形態において、Ｃ反応性タンパク質のレベルは、参照に対して下がり得る。一部の実施形態において、参照は未処置対象である。一部の実施形態において、参照は、ウリカーゼで処置された対象である。一部の実施形態において、対象には、２週毎に治療的投与計画のみ、例えばポリエチレングリコール−ウリカーゼコンジュゲート８ｍｇが投与される。
【０２０３】
実施形態において、Ｃ反応性タンパク質のレベルは、初期の時点での対象におけるＣ反応性タンパク質と比べて下がり得る。一部の実施形態において、初期の時点は、コンジュゲートの投与前である。一部の実施形態において、初期の時点は、コンジュゲートを投与する直前である。一部の実施形態において、Ｃ反応性タンパク質のレベルは、コンジュゲートを投与する前の対象におけるＣ反応性タンパク質のレベルと比べて、１０％、２０％、３０％以上下がり得る。
【０２０４】
所定の投与計画の有効性の他の尺度は、痛風発赤の頻度である。実施形態において、対象は、痛風発赤の頻度が減少する。実施形態において、対象は、参照と比べて痛風発赤の頻度が減少する。一部の実施形態において、参照は、未処置対象である。一部の実施形態において、参照は、ウリカーゼで処理された対象である。一部の実施形態において、対象には、２週毎に治療的投与計画のみ、例えばポリエチレングリコール−ウリカーゼコンジュゲート８ｍｇが投与される。
【０２０５】
実施形態において、対象は、初期の時点に対する対象における痛風発赤の頻度と比較して、痛風発赤の頻度の減少を示す。一部の実施形態において、初期の時点は、コンジュゲートで処置する間の初期の時点である。一部の実施形態において、初期の時点は、コンジュゲートで処置する前である。一部の実施形態において、初期の時点は、コンジュゲートで処置する直前である。実施形態において、対象は、コンジュゲートを投与する前の対象における痛風発赤の頻度と比べて、痛風発赤頻度において５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、または９０％の減少を示す。
【０２０６】
医薬組成物
ウリカーゼ分子またはウリカーゼコンジュゲート、例えばペグ化ウリカーゼを含有する医薬製剤は、例えばＧｅｎｎａｒｏ，ＡＲ（Ｅｄ．）（１９９０）Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１８ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．：Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏに記載の従来の技術によって製造することができる。注射可能の溶液の調製に適した賦形剤としては、例えば、リン酸緩衝生理食塩水、乳酸加リンガー溶液、水、ポリオールおよびグリセロールが挙げられる。非経口注入用の医薬組成物は、薬剤として許容される滅菌水性液または非水性液、分散液、懸濁液、またはエマルジョン、ならびに使用直前に注射可能な滅菌溶液または分散液へと再構成するための滅菌粉末を含む。これらの配合物は、例えば、保存剤、可溶化剤、安定剤、湿潤剤、乳化剤、緩衝剤、酸化防止剤および希釈剤などの更なる成分を含有し得る。
【０２０７】
体液中の高い尿酸レベルを連続的にコントロールするために、個人へ植込まれる徐放性組成物としても、ウリカーゼ分子またはウリカーゼコンジュゲートを提供することができる。例えば、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、再生コラーゲン、ポリ−Ｌ−リジン、アルギン酸ナトリウム、ジェランガム、キトサン、アガロース、多重膜リポソームおよび多くの他の従来のデポー製剤は、生物活性組成物と配合することができる腐敗分解性または生分解性物質を含む。植え込まれた、または注入された場合に、これらの物質は徐々に分解し、周囲組織への活性物質を放出する。例えば、ＰＥＧ−ウリカーゼを封入する一方法は、参照により本明細書に組み込まれる米国特許第５，６５３，９７４号明細書に開示される方法を含む。一部の実施形態において、コンジュゲートは、腐敗分解性、生分解性または他のデポー製剤として提供される。実施形態において、注入ポンプおよびマトリックス封入システムが、ウリカーゼ分子またはウリカーゼコンジュゲートの送達に使用される。ウリカーゼ分子またはウリカーゼコンジュゲートは有利なことには、ミセルまたはリポソーム内に封入することもできる。リポソーム封入技術は当技術分野でよく知られている。例えば、Ｌａｓｉｃ，Ｄ，ｅｔ  ａｌ．，（Ｅｄｓ．）（１９９５）Ｓｔｅａｌｔｈ  Ｌｉｐｏｓｏｍｅｓ．Ｂｏｃａ  Ｒａｔｏｎ，Ｆｌａ．：ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓを参照。
【０２０８】
一部の実施形態において、ウリカーゼコンジュゲートは、ナノキャリア製剤で提供される。一部の実施形態において、ナノキャリア製剤は、脂質ナノ粒子、リポソーム、ポリマーナノ粒子、デンドリマー、または界面活性剤ベースのエマルジョンを含む。一部の実施形態において、ポリマーナノ粒子は、ポリエーテル、ポリエステル、ポリアミノ酸、ポリカーボネート、ポリアセタール、ポリケタール、多糖のうちの１つまたは複数、またはそれらの組み合わせを含む。
【０２０９】
一部の実施形態において、ナノキャリア製剤は免疫抑制薬を含む。一部の実施形態において、免疫抑制薬はｍＴＯＲ阻害剤、例えば、ラパマイシンまたはラパマイシン類似体である。
【０２１０】
本明細書に開示される組成物は、尿酸誘発腎不全のリスクが高い患者、例えば臓器移植レシピエント（Ｖｅｎｋａｔａｓｅｓｈａｎ，ＶＳ，ｅｔ  ａｌ．，（１９９０）Ｎｅｐｈｒｏｎ  ５６：３１７−３２１参照）およびいくつかの悪性疾患を有する患者における血液透析の必要性を低減し得る。尿酸結晶（痛風結節）の多量の蓄積を有する患者において、かかる医薬組成物は、現在利用可能な治療よりも迅速に生活の質を向上させることができる。
【０２１１】
一実施形態において、その組成物は、ウリカーゼの溶液である。他の実施形態において、その溶液は、滅菌溶液であり、注入に適している。一実施形態において、かかる組成物は、リン酸緩衝生理食塩水中の溶液としてウリカーゼを含む。一実施形態において、組成物は、ゴム製注入ストッパーを任意選択的に有するバイアル内に提供される。一部の実施形態において、組成物は、ウリカーゼ２〜１６ミリグラム／ミリリットル（溶液）、４〜１２ミリグラム／ミリリットルまたは６〜１０ミリグラム／ミリリットルの濃度でウリカーゼを溶解状態で含む。他の実施形態において、組成物は、８ミリグラム／ミリリットルの濃度でウリカーゼを含む。実施形態において、ウリカーゼの質量は、タンパク質質量に対して測定される。
【０２１２】
当業者に公知の適切な方法で、ウリカーゼは、例えば静脈内に、筋肉内にまたは皮下に投与され得る。一部の実施形態において、静脈内投与である場合には、ウリカーゼ０．５〜１２ｍｇが投与される。更なる実施形態において、投与が皮下である場合には、ウリカーゼ４〜２４ｍｇが投与される。一実施形態において、ウリカーゼは、３０〜２４０分間にわたって静脈内注入によって投与される。一部の実施形態において、その注入は、生理食塩水溶液１００〜５００ｍＬを使用して行われ得る。他の実施形態において、溶解状態のウリカーゼ８ｍｇが１２０分間にわたって投与される。一部の実施形態において、ウリカーゼは、注入のために生理食塩水溶液２５０ｍＬに溶解される。一部の実施形態において、生理食塩水溶液は、塩化ナトリウム０．４５％または０．９％を含む。一部の実施形態において、ウリカーゼの投与は、３ヵ月、６ヵ月、８ヵ月または１２ヵ月の治療期間にわたって行われる。他の実施形態において、治療期間は、１２週間、２４週間、３６週間または４８週間である。一実施形態において、治療期間は、長期間であり、例えば２年以上、治療される対象が生存するまでの間である。さらに、無治療の期間が点在する複数の治療期間、例えば６か月間の治療に続いて、無治療の３か月間、続いてさらに６か月間の治療などが用いられ得る。
【実施例】
【０２１３】
実施例１：ペグロティカーゼに対するインフュージョン・リアクションの予防：ＵＳ  Ｃｏｍｍｕｎｉｔｙ  Ｒｈｅｕｍａｔｏｌｏｇｙ  Ｐｒａｃｔｉｃｅｓにおける２通りの異なるコルチコステロイドの注入前投与計画における分析
注入前予防のために、ヒドロコルチゾンと比較してメチルプレドニゾロンを使用して、ペグロティカーゼ投与における治療期間およびインフュージョン・リアクションに対する影響を研究した。ヒドロコルチゾンと比べてメチルプレドニゾロンを使用すると、インフュージョン・リアクションが少なくなり、治療期間が長くなると仮定された。
【０２１４】
デザインおよび手順
２０１３年１月から２０１６年３月の間に、ペグロティカーゼで処置された患者であって、その治療過程が終了した患者の後向きチャート抽象化を行った。資格のある患者９２名のチャートが、データ分析に含まれた。地理的に分散された米国コミュニティをベースとする１９のリウマチ診療が、分析試料で表された。
【０２１５】
収集された変数は、人口統計、同時罹患率、疾患の期間、ｓＵＡ（各注入前の）、ペグロティカーゼ注入日時、注入前の予防法（ステロイドおよび抗ヒスタミン薬のどちらも含む）、およびペグロティカーゼ前および後の痛風治療を含んだ。
【０２１６】
データ分析
注入回数を応答変数として処理した。年齢、最後の注入前のｓＵＡ、および注入前コルチコステロイド（ヒドロコルチゾンまたはメチルプレドニゾロン）のタイプを予測変数として処理した。採択された有意水準として有意性ｐ＜０．０１で多項ロジスティック回帰分析によって分析を行った。
【０２１７】
結果
患者９６名からのデータを集めた。これらのうち、９２名の患者からのデータが研究選択基準を満たした。研究選択基準を満たさなかったため、患者３名の記録を分析から除外し、１名の患者が極端な異常値を表した。研究試料の人口統計的特性（表１に示される）は、慢性の難治性痛風を有する患者の一般集団と類似していた。使用されたヒドロコルチゾンの平均用量は、無作為化臨床試験中に用いられる標準的注入前予防法と一致する。
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【０２１８】
回帰分析
従属変数として治療期間（注入回数）と共に、コルチコステロイド予防法のタイプ、患者の年齢（＜６５対≧６５）および最終ｓＵＡ（最後の注入前のｓＵＡ）を予測変数として用いて、多項ロジスティック回帰分析を行った。メチルプレドニゾロンの使用および最終ｓＵＡは、治療期間の非常に有意な（ｐ＜０．００１）予測子であった。メチルプレドニゾロンの使用によって、治療期間の予測子として、そのモデルが最初に入れられた。コルチコステロイド予防のタイプと注入前ｓＵＡのどちらも含む線形モデルにおいて、注入前ｓＵＡは、インフュージョン・リアクションの有意な予測子（ｐ＜０．００１）であった。２つの群に関してペグロティカーゼ療法の開始前のｓＵＡレベルに有意差はなかった。コルチコステロイドのタイプのみ含有する線形モデルにおいて、コルチコステロイド予防のタイプは、インフュージョン・リアクションの有意な（ｐ＜０．００１）予測子であった。
【０２１９】
注入の回数
予防としてメチルプレドニゾロンを投与された患者のペグロティカーゼ注入の平均回数は、予防としてヒドロコルチゾンを投与された患者よりも有意に（ｐ＜０．００１）高い（図１）。ペグロティカーゼ注入の範囲は、ヒドロコルチゾンを投与された患者については３〜１６回であり、メチルプレドニゾロンを投与された患者では３〜１３回であった。
【０２２０】
療法の中止
計画された治療終了前に療法が、患者の選択およびインフュージョン・リアクションなどの多くの理由で中止された。早期の治療中止の最も多い理由は、注入時のインフュージョン・リアクションであった。すべてのインフュージョン・リアクションは、ペグロティカーゼのピボタル（ｐｉｖｏｔａｌ）試験と同様な症状で軽度または中等度と特徴付けられた。インフュージョン・リアクションが起こった場合には、注入を止めるか、または遅い速度で再開することによって注入を管理した。予防としてメチルプレドニゾロンを投与された患者の有意に低い割合が、予防としてヒドロコルチゾンを投与された患者（８．２％）と比べて早期に治療を終了した（４１．９％，ｐ＜０．０１）（図２）。
【０２２１】
療法の終了による注入の回数
患者の選択またはインフュージョン・リアクションによって終了されるのではなく、計画された期間まで療法が続けられた場合には、注入の平均回数は、予防法の両方のタイプでより多かった（ｐ＜０．０１）。しかしながら、両方の結果で、注入の平均回数は、予防のためにメチルプレドニゾロンを投与された患者の方が多かった。療法の中止についての注入平均回数の差は、メチルプレドニゾロンの場合に中止した患者については、おそらくｎが小さいために、有意ではなかった（ｐ＝０．１８）。中止されていない療法については、注入平均回数の差は有意であった（ｐ＜０．０１）（図３）。
【０２２２】
結論
注入前の予防のためにメチルプレドニゾロンがコルチコステロイドとして使用された場合、研究における患者は、有意に多い回数の注入を受けた。これらの結果から、注入前の予防のためのメチルプレドニゾロンによって、ヒドロコルチゾンと比較してペグロティカーゼ療法の期間を長くすることが可能となり得ることが示されている。この様式は、インフュージョン・リアクションの症状を抑え、かつ／またはペグロティカーゼ薬抗体の形成を阻害し得る、有意に高いグルココルチコイド負荷を課す。ペグロティカーゼの注入前予防としてヒドロコルチゾンと比較してメチルプレドニゾロンは、有効性と長期間の安全性のどちらも決定するために、更なる研究が必要である。
【０２２３】
均等物
当業者は、ただ通常の実験を用いて、本明細書に記載の開示の具体的な実施形態の多くの均等物を認識するか、または確認することができるだろう。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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