(57)【要約】本開示は概して、ピロロベンゾジアゼピンの誘導体およびその抗体-薬物結合体、ならびに治療薬および/または診断薬としてのこれらの結合体の使用法に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（I）の化合物もしくはその互変異性体、または該化合物もしくは互変異性体の薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物：
2019522660.tif 000285
式中、
Dは、D1、D2、またはD3：
2019522660.tif 000286
であり；
ここでD1におけるC2とC3との間またはC2とC1との間の点線は一重または二重結合の存在を示し；
mは、0、1、または2であり；
DがD1であり、C2とC3との間の点線が二重結合であり、かつmが1である場合、R1は、
（i）-OH、ハロ、-NO2、-CN、-N3、-OR2、-COOH、-COOR2、-COR2、-OCONR13R14、C1-10アルキル、C3-10シクロアルキル、C2-10アルケニル、C2-10アルキニル、ポリエチレングリコール単位-(OCH2CH2)r-ORa、3〜14員ヘテロシクロアルキル、5〜12員ヘテロアリール、ビス-オキシ-C1-3アルキレン、-NR13R14、-S(=O)2R12、-S(=O)2NR13R14、-SR12、-SOxM、-OSOxM、-NR9COR19、-NH(C=NH)NH2から選択される1つまたは複数の置換基で置換されていてもよい、C6-10アリール基；
（ii）C1-5アルキル；
（iii）C3-6シクロアルキル；
2019522660.tif 000287
または
（viii）ハロであり；または
DがD1であり、C2とC3との間の点線が一重結合であり、かつmが1である場合、R1は、
（i）-OH、=O、=CH2、-CN、-R2、-OR2、ハロ、=CH-R6、=C(R6)2、-O-SO2R2、-CO2R2、-COR2、-CHO、または-COOH；または
2019522660.tif 000288
であり；または
DがD1であり、かつmが2である場合、各R1は独立にハロであり、かつ両方のR1は同じ炭素原子に結合しているか、または一方はC2に結合し、他方はC3に結合しているかのいずれかであり：
TはC1-10アルキレンリンカーであり；
Aは
2019522660.tif 000289
であり、ここでAの-NH基は式（I）の-C(O)-T-部分に連結し、AのC=O部分はEに連結し；かつ各
2019522660.tif 000290
は独立に
2019522660.tif 000291
であり；
Eは、E1、E2、E3、E4、E5、またはE6：
2019522660.tif 000292
であり；
Gは、-OH、-NH-(C1-6アルキレン)-R13a、-NR13R14、G1、G2、G3、またはG4：
2019522660.tif 000293
であり；ここでG1またはG4における点線は一重または二重結合の存在を示し；
R2およびR3の各出現は独立に、置換されていてもよいC1-8アルキル、置換されていてもよいC2-8アルケニル、置換されていてもよいC2-8アルキニル、置換されていてもよいC3-8シクロアルキル、置換されていてもよい3〜20員ヘテロシクロアルキル、置換されていてもよいC6-20アリール、または置換されていてもよい5〜20員ヘテロアリールであり、かつ、任意で基NR2R3に関して、R2およびR3はそれらが結合している窒素原子と一緒に、置換されていてもよい4、5、6もしくは7員ヘテロシクロアルキルまたは置換されていてもよい5もしくは6員ヘテロアリールを形成し；
R4、R5、およびR7はそれぞれ独立に、-H、-R2、-OH、-OR2、-SH、-SR2、-NH2、-NHR2、-NR2R3、-NO2、-SnMe3、ハロ、またはポリエチレングリコール単位-(OCH2CH2)r-ORaであり；またはR4およびR7は一緒に、ビス-オキシ-C1-3アルキレンを形成し；
各R6は独立に、-H、-R2、-CO2R2、-COR2、-CHO、-CO2H、またはハロであり；
各R8は独立に、-OH、ハロ、-NO2、-CN、-N3、-OR2、-COOH、-COOR2、-COR2、-OCONR13R14、-CONR13R14、-CO-NH-(C1-6アルキレン)-R13a、-OCO-NH-(C1-6アルキレン)-R13a、C1-10アルキル、C3-10シクロアルキル、C2-10アルケニル、C2-10アルキニル、ポリエチレングリコール単位-(OCH2CH2)r-ORa、3〜14員ヘテロシクロアルキル、5〜12員ヘテロアリール、-S(=O)2R12、-S(=O)2NR13R14、-SR12、-SOxM、-OSOxM、-NR9COR19、-NH(C=NH)NH2、または-R20-R21-NR13R14であり；各R9は独立に、C1-10アルキル、C3-10シクロアルキル、C2-10アルケニル、またはC2-10アルキニルであり；
R10は、-Hまたは窒素保護基であり；
R11は、-QRQまたは-SOxMであり；
またはR10およびR11は、それらがそれぞれ結合している窒素原子および炭素原子と一緒にN=C二重結合を形成し；
各R12は独立に、C1-7アルキル、3〜20員ヘテロシクロアルキル、5〜20員ヘテロアリール、またはC6-20アリールであり；
R13およびR14の各出現はそれぞれ独立に、H、C1-10アルキル、C3-10シクロアルキル、3〜20員ヘテロシクロアルキル、5〜20員ヘテロアリール、またはC6-20アリールであり；
各R13aは独立に、-OHまたは-NR13R14であり；
R15、R16、R17、およびR18はそれぞれ独立に、-H、-OH、ハロ、-NO2、-CN、-N3、-OR2、-COOH、-COOR2、-COR2、-OCONR13R14、C1-10アルキル、C3-10シクロアルキル、C2-10アルケニル、C2-10アルキニル、ポリエチレングリコール単位-(OCH2CH2)r-ORa、3〜14員ヘテロシクロアルキル、5〜12員ヘテロアリール、-NR13R14、-S(=O)2R12、-S(=O)2NR13R14、-SR12、-SOxM、-OSOxM、-NR9COR19、または-NH(C=NH)NH2であり；
各R19は独立に、C1-10アルキル、C3-10シクロアルキル、C2-10アルケニル、またはC2-10アルキニルであり；
各R20は独立に、結合、C6-10アリーレン、3〜14員ヘテロシクロアルキレン、または5〜12員ヘテロアリーレンであり；
各R21は独立に、結合またはC1-10アルキレンであり；
R31、R32、およびR33はそれぞれ独立に、-H、C1-3アルキル、C2-3アルケニル、C2-3アルキニル、またはシクロプロピルであり、ここでR1基における炭素原子の総数は5以下であり；
R34は、-H、C1-3アルキル、C2-3アルケニル、C2-3アルキニル、シクロプロピル、またはフェニルであり、ここでフェニルは、ハロ、メチル、メトキシ、ピリジル、またはチオフェニルのうち1つまたは複数で置換されていてもよく；
R35aおよびR35bの一方は-Hであり、かつ他方は、ハロ、メチル、メトキシ、ピリジル、またはチオフェニルのうち1つまたは複数で置換されていてもよいフェニル基であり；
R36a、R36b、R36cはそれぞれ独立に、-HまたはC1-2アルキルであり；
R36dは、-OH、-SH、-COOH、-C(O)H、-N=C=O、-NHNH2、-CONHNH2、
2019522660.tif 000294
、またはNHRNであり、ここでRNは、-HまたはC1-4アルキルであり；
R37aおよびR37bはそれぞれ独立に、-H、-F、C1-4アルキル、C2-3アルケニルであり、ここでアルキルおよびアルケニル基は、C1-4アルキルアミドまたはC1-4アルキルエステルで置換されていてもよく；またはR37aおよびR37bの一方が-Hである場合、他方は-CNまたはC1-4アルキルエステルであり；
X0は、CH2、NR6、C=O、BH、SO、またはSO2であり；
Y0は、O、CH2、NR6、またはSであり；
Z0は、非存在または(CH2)nであり；
各X1は独立に、CRbまたはNであり；
各Y1は独立に、NRa、O、またはSであり；
各Z1は独立に、NRa、O、またはSであり；
X2は、CH、CH2、またはNであり；
X3は、CHまたはNであり；
X4は独立に、CRbまたはNであり；
X5は、NH、O、またはSであり；
Y2は独立に、NRa、O、またはSであり；
Z2は、CHまたはNであり；
各Raは独立に、HまたはC1-4アルキルであり；
各Rbは独立に、H、OH、C1-4アルキル、またはC1-4アルコキシルであり；
Qは、O、S、またはNHであり；
RQは、-H、置換されていてもよいC1-7アルキル、または-SOxMであり；
QがSまたはNHである場合、RQは-Hまたは置換されていてもよいC1-7アルキルであり；または
QがOである場合、RQは、-H、または置換されていてもよいC1-7アルキル、または-SOxMであり；
各Mは独立に、Hまたは一価の薬学的に許容されるカチオンであり；
nは、1、2、または3であり；
各rは独立に1〜200の整数であり；
sは、0、1、2、または3であり；
tは、0、1、または2であり；
各xは独立に、2または3であり；かつ
GがG4であり、点線が二重結合の存在を示し、X3がCHであり、かつX5がOまたはSである場合、sは2、3、4、5、または6であり；ただし
（i）Dが
2019522660.tif 000295
であり、かつsが0であり、かつTが-(CH2)3または4-である場合、EはE3ではなく、ここでX4はNであり、Y2はOまたはSであり、Z2はCHであり、tは0、1、または2であり、かつR8はフルオロであり；
（ii）sが1であり、かつEがE3である場合、tは0ではなく、かつR8はC1-4アルキル、-C(O)-O-C1-4アルキル、3〜14員ヘテロシクロアルキル、または-O-(CH2)1-4-(3〜14員ヘテロシクロアルキル)ではなく；
（iii）sが1であり、かつEがE4またはE5であり、ここでX4はCHであり、Y2はOまたはSであり、かつZ2はCHである場合、tは0ではなく、かつR8は、C1-4アルキル、-C(O)-O-C1-4アルキル、3〜14員ヘテロシクロアルキル、または-O-(CH2)1-4-(3〜14員ヘテロシクロアルキル)ではなく；または
（iv）sが0であり、EがE1であり、かつGが-NR13R14であり、ここでR13およびR14の一方はHである場合、他方は5〜9員ヘテロアリールまたはフェニルではない。
【請求項２】
DがD1である、請求項1記載の化合物。
【請求項３】
DがD2である、請求項1記載の化合物。
【請求項４】
DがD3である、請求項1記載の化合物。
【請求項５】
TがC2-6アルキレンリンカーである、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項６】
TがC2-4アルキレンリンカーである、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項７】
Tがプロピレンである、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項８】
式（II）、（II-1）、もしくは（II-2）の化合物：
2019522660.tif 000296
またはその互変異性体、あるいは該化合物または互変異性体の薬学的に許容される塩または溶媒和物である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項９】
式（III）の化合物：
2019522660.tif 000297
もしくはその互変異性体、または該化合物もしくは互変異性体の薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１０】
式（IV）の化合物：
2019522660.tif 000298
もしくはその互変異性体、または該化合物もしくは互変異性体の薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１１】
R1が、-OH、ハロ、-NO2、-CN、-N3、-OR2、-COOH、-COOR2、-COR2、-OCONR13R14、C1-10アルキル、C3-10シクロアルキル、C2-10アルケニル、C2-10アルキニル、ポリエチレングリコール単位-(OCH2CH2)r-ORa、3〜14員ヘテロシクロアルキル、5〜12員ヘテロアリール、ビス-オキシ-C1-3アルキレン、-NR13R14、-S(=O)2R12、-S(=O)2NR13R14、-SR12、-SOxM、-OSOxM、-NR9COR19、および-NH(C=NH)NH2から選択される1つまたは複数の置換基で置換されていてもよいC6-10アリール基である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１２】
R1が、-OH、ハロ、-NO2、-CN、-N3、-OR2、-COOH、-COOR2、-COR2、-OCONR13R14、C1-10アルキル、C3-10シクロアルキル、C2-10アルケニル、C2-10アルキニル、ポリエチレングリコール単位-(OCH2CH2)r-ORa、3〜14員ヘテロシクロアルキル、5〜12員ヘテロアリール、-NR13R14、-S(=O)2R12、-S(=O)2NR13R14、-SR12、および-NH(C=NH)NH2から選択される1つまたは複数の置換基で置換されていてもよいC6-10アリール基である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１３】
R1がC1-5アルキルである、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１４】
R1がC3-6シクロアルキルである、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１５】
R1が
2019522660.tif 000299
である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１６】
R1が
2019522660.tif 000300
である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１７】
R1が
2019522660.tif 000301
である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１８】
R1が
2019522660.tif 000302
である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１９】
R1がハロである、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項２０】
R1が、-OH、=O、=CH2、-CN、-R2、-OR2、ハロ、=CH-R6、=C(R6)2、-O-SO2R2、-CO2R2、-COR2、-CHO、または-COOHである、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項２１】
R1が
2019522660.tif 000303
である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項２２】
mが2であり、かつ各R1が独立にハロであり、かつ両方のR1が同じ炭素原子に結合しているか、または一方がC2に結合し、他方がC3に結合しているかのいずれかである、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項２３】
各
2019522660.tif 000304
が独立に、
2019522660.tif 000305
である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項２４】
各
2019522660.tif 000306
が独立に、
2019522660.tif 000307
である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項２５】
Aが
2019522660.tif 000308
である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項２６】
sが0であり、かつAが一重結合である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項２７】
sが1である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項２８】
sが2である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項２９】
sが3である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項３０】
Aが
2019522660.tif 000309
であり、ここで各X1は独立にCHまたはNである、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項３１】
Aが
2019522660.tif 000310
である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項３２】
Aが
2019522660.tif 000311
であり、ここで各X1は独立にCHまたはNである、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項３３】
Aが
2019522660.tif 000312
である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項３４】
tが0である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項３５】
tが1である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項３６】
tが2である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項３７】
Eが
2019522660.tif 000313
である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項３８】
Eが
2019522660.tif 000314
である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項３９】
sが1である場合、Eは
2019522660.tif 000315
であり；ここで各R80は独立に、-OH、ハロ、-NO2、-CN、-N3、-COOH、-COR2、-OCONR13R14、C3-10シクロアルキル、C2-10アルケニル、C2-10アルキニル、ポリエチレングリコール単位-(OCH2CH2)r-ORa、5〜12員ヘテロアリール、-S(=O)2R12、-S(=O)2NR13R14、-SR12、-SOxM、-OSOxM、-NR9COR19、-NH(C=NH)NH2、または-R20-R21-NR13R14であり；かつttは1または2である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項４０】
Eが
2019522660.tif 000316
である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項４１】
Eが
2019522660.tif 000317
である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項４２】
Eが
2019522660.tif 000318
である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項４３】
Eが
2019522660.tif 000319
である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項４４】
Eが
2019522660.tif 000320
である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項４５】
Eが
2019522660.tif 000321
である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項４６】
Eが
2019522660.tif 000322
である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項４７】
EがE3であり；かつ
X4がNであり、Y2がOまたはSであり、Z2がCHである場合、tは1または2であり、かつ各R8は独立に、-OH、-NO2、-CN、-N3、-OR2、-COOH、-COR2、-OCONR13R14、-CONR13R14、-CO-NH-(C1-6アルキレン)-R13a、-OCO-NH-(C1-6アルキレン)-R13a、C3-10シクロアルキル、C2-10アルケニル、C2-10アルキニル、ポリエチレングリコール単位-(OCH2CH2)r-ORa、5〜12員ヘテロアリール、-S(=O)2R12、-S(=O)2NR13R14、-SR12、-NR9COR19、-NH(C=NH)NH2、または-R20-R21-NR13R14である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項４８】
EがE3であり；かつ
Z2がNである場合、tは1または2であり、かつ各R8は独立に、-OH、ハロ、-NO2、-CN、-N3、-OR2、-COOH、-COR2、-OCONR13R14、-CONR13R14、-CO-NH-(C1-6アルキレン)-R13a、-OCO-NH-(C1-6アルキレン)-R13a、C3-10シクロアルキル、C2-10アルケニル、C2-10アルキニル、ポリエチレングリコール単位-(OCH2CH2)r-ORa、5〜12員ヘテロアリール、-S(=O)2R12、-S(=O)2NR13R14、-SR12、-NR9COR19、-NH(C=NH)NH2、または-R20-R21-NR13R14である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項４９】
EがE3であり；かつ
X3がNである場合、tは1または2であり、かつ各R8は独立に、-OH、ハロ、-NO2、-CN、-N3、-OR2、-COOH、-COR2、|-OCONR13R14、-CONR13R14、-CO-NH-(C1-6アルキレン)-R13a、 -OCO-NH-(C1-6アルキレン)-R13a、C3-10シクロアルキル、C2-10アルケニル、C2-10アルキニル、ポリエチレングリコール単位-(OCH2CH2)r-ORa、5〜12員ヘテロアリール、-S(=O)2R12、-S(=O)2NR13R14、-SR12、-NR9COR19、-NH(C=NH)NH2、または-R20-R21-NR13R14である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項５０】
EがE3であり；かつ
X4がCRbである場合、tは1または2であり、かつ各R8は独立に、-OH、ハロ、-NO2、-CN、-N3、-OR2、-COOH、-COR2、-OCONR13R14、-CONR13R14、-CO-NH-(C1-6アルキレン)-R13a、-OCO-NH-(C1-6アルキレン)-R13a、C3-10シクロアルキル、C2-10アルケニル、C2-10アルキニル、ポリエチレングリコール単位-(OCH2CH2)r-ORa、5〜12員ヘテロアリール、-S(=O)2R12、-S(=O)2NR13R14、-SR12、-NR9COR19、-NH(C=NH)NH2、または-R20-R21-NR13R14である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項５１】
EがE4またはE5であり、かつX4がNである、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項５２】
EがE4またはE5であり、かつZ2がNである、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項５３】
Gが-NH-(C1-6アルキレン)-R13aである、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項５４】
Gが-NH-(C1-6アルキレン)-OHである、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項５５】
Gが-NR13R14であり、かつR13およびR14の一方がHであり、他方がH、C1-10アルキル、C3-10シクロアルキル、または3〜20員ヘテロシクロアルキルである、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項５６】
Gが-NHR14である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項５７】
Gが
2019522660.tif 000323
である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項５８】
Gが
2019522660.tif 000324
である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項５９】
Gが
2019522660.tif 000325
である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項６０】
Gが
2019522660.tif 000326
である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項６１】
R4、R5、およびR7がそれぞれ独立に、-H、-R2、-OH、-OR2、-SH、-SR2、-NH2、-NHR2、-NR2R3、-NO2、ハロ、またはポリエチレングリコール単位-(OCH2CH2)r-ORaである、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項６２】
R4およびR7が一緒にビス-オキシ-C1-3アルキレンを形成する、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項６３】
各R8が独立に、-OH、ハロ、-NO2、-CN、-N3、-OR2、-COOH、-COOR2、-COR2、-OCONR13R14、C1-10アルキル、C3-10シクロアルキル、C2-10アルケニル、C2-10アルキニル、ポリエチレングリコール単位-(OCH2CH2)r-ORa、3〜14員ヘテロシクロアルキル、5〜12員ヘテロアリール、-S(=O)2R12、-S(=O)2NR13R14、-SR12、-NH(C=NH)NH2、または-R20-R21-NR13R14である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項６４】
各R8が独立に、-OH、-ハロ、-NO2、-CN、-N3、C3-10シクロアルキル、C2-10アルケニル、C2-10アルキニル、ポリエチレングリコール単位-(OCH2CH2)r-ORa、または-R20-R21-NR13R14である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項６５】
R20およびR21のそれぞれが結合である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項６６】
R20およびR21の一方が結合であり、かつ他方が結合ではない、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項６７】
R20が結合であり、かつR21がC1-10アルキレンである、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項６８】
R21が結合であり、かつR20が、C6-10アリーレン、3〜14員ヘテロシクロアルキレン、または5〜12員ヘテロアリーレンである、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項６９】
R13およびR14のそれぞれが独立に、HまたはC1-10アルキルである、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項７０】
各R8が独立に、-OH、-OR2、-COOH、-COOR2、-COR2、-OCONR13R14、ポリエチレングリコール単位-(OCH2CH2)r-ORa、3〜7員ヘテロシクロアルキル、5〜6員ヘテロアリール、-S(=O)2R12、-S(=O)2NR13R14、-SR12、または-R20-R21-NR13R14であり；
ここでR13およびR14はそれぞれ独立に、-HまたはC1-10アルキルであり；
各R20は結合またはフェニレンであり；かつ
各R21は独立に結合またはC1-4アルキレンである、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項７１】
R10およびR11が、それらがそれぞれ結合している窒素原子および炭素原子と一緒に、N=C二重結合を形成する、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項７２】
R10が-Hまたは窒素保護基であり、かつR11が-QRQである、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項７３】
R15、R16、R17、およびR18がそれぞれ独立に、-H、-OH、ハロ、-NO2、-CN、-N3、-OR2、-COOH、-COOR2、-COR2、-OCONR13R14、C1-10アルキル、C3-10シクロアルキル、C2-10アルケニル、C2-10アルキニル、ポリエチレングリコール単位-(OCH2CH2)r-ORa、3〜14員ヘテロシクロアルキル、5〜12員ヘテロアリール、-NR13R14、-S(=O)2R12、-S(=O)2NR13R14、-SR12、または-NH(C=NH)NH2である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項７４】
R15、R16、およびR18がそれぞれ-Hであり、かつR17が-NH2である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項７５】
R15、R16、およびR17がそれぞれ-Hであり、かつR18が-NH2である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項７６】
mが0である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項７７】
mが1である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項７８】
mが2である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項７９】
式（II-a）〜（II-p）のいずれかの化合物：
2019522660.tif 000327
2019522660.tif 000328
2019522660.tif 000329
2019522660.tif 000330
またはその互変異性体、あるいは該化合物または互変異性体の薬学的に許容される塩または溶媒和物である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項８０】
式（III-a）〜（III-c）のいずれかの化合物：
2019522660.tif 000331
またはその互変異性体、あるいは該化合物または互変異性体の薬学的に許容される塩または溶媒和物である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項８１】
最大で1つの-SOxMまたは-OSOxMを含む、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項８２】
R11が-OSOxMまたは-SOxMである、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項８３】
2019522660.tif 000332
2019522660.tif 000333
2019522660.tif 000334
またはその互変異性体、あるいは該化合物または互変異性体の薬学的に許容される塩または溶媒和物である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項８４】
2019522660.tif 000335
またはその互変異性体、あるいは該化合物または互変異性体の薬学的に許容される塩または溶媒和物である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項８５】
2019522660.tif 000336
またはその互変異性体、あるいは該化合物または互変異性体の薬学的に許容される塩または溶媒和物である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項８６】
2019522660.tif 000337
またはその互変異性体、あるいは該化合物または互変異性体の薬学的に許容される塩または溶媒和物である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項８７】
2019522660.tif 000338
もしくはその互変異性体、または該化合物もしくは互変異性体の薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項８８】
2019522660.tif 000339
もしくはその互変異性体、または該化合物もしくは互変異性体の薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項８９】
2019522660.tif 000340
もしくはその互変異性体、または該化合物もしくは互変異性体の薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項９０】
2019522660.tif 000341
もしくはその互変異性体、または該化合物もしくは互変異性体の薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物である、前記請求項のいずれか一項記載の化合物。
【請求項９１】
前記化合物に直接または間接的に連結された抗体または抗体断片を含む、前記請求項のいずれか一項記載の化合物の結合体。
【請求項９２】
抗体または抗体断片および化合物の両方に連結された1つまたは複数のポリマー骨格をさらに含み、該化合物が1つまたは複数のポリマー骨格を介して該抗体または抗体断片に連結されている、前記請求項のいずれか一項記載の結合体。
【請求項９３】
1つまたは複数のポリマー骨格が独立に、ポリ(1-ヒドロキシメチルエチレンヒドロキシメチル-ホルマール)（PHF）を含む、前記請求項のいずれか一項記載の結合体。
【請求項９４】
PHFが約2kDa〜約40kDaの範囲の分子量を有する、前記請求項のいずれか一項記載の結合体。
【請求項９５】
前記請求項のいずれか一項記載の化合物が、抗体または抗体断片との結合後に、式（VI）の化合物：
2019522660.tif 000342
もしくはその互変異性体、または該化合物もしくは互変異性体の薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物であり、
抗体または抗体断片が、E''、D''、R''7、またはR''10のうちの1つの位置で該化合物に直接または間接的に連結され、かつE''、D''、R''7、またはR''10の残りがそれぞれE、D、R7、またはR10であり；
E''はEまたは
2019522660.tif 000343
であり、ここで
2019522660.tif 000344
はEの官能基を介した抗体または抗体断片への直接または間接的連結を示し；
D''はDまたは
2019522660.tif 000345
であり、ここで
2019522660.tif 000346
はDの官能基を介した抗体または抗体断片への直接または間接的連結を示し；
R''7はR7または
2019522660.tif 000347
であり、ここで
2019522660.tif 000348
はR7の官能基を介した抗体または抗体断片への直接または間接的連結を示し；かつ
R''10はR10または
2019522660.tif 000349
であり、ここで
2019522660.tif 000350
はR10の官能基を介した抗体または抗体断片への直接または間接的連結を示す、
前記請求項のいずれか一項記載の結合体。
【請求項９６】
E''が
2019522660.tif 000351
であり；D''がDであり；R''7がR7であり；かつR''10がR10である、前記請求項のいずれか一項記載の結合体。
【請求項９７】
D''が
2019522660.tif 000352
であり；E''がEであり；R''7がR7であり；かつR''10がR10である、前記請求項のいずれか一項記載の結合体。
【請求項９８】
R''7が
2019522660.tif 000353
であり；E''がEであり；D''がDであり；かつR''10がR10である、前記請求項のいずれか一項記載の結合体。
【請求項９９】
R''10が
2019522660.tif 000354
であり；E''がEであり；D''がDであり；かつR''7がR7である、前記請求項のいずれか一項記載の結合体。
【請求項１００】
2019522660.tif 000355
2019522660.tif 000356
2019522660.tif 000357
2019522660.tif 000358
またはその互変異性体、あるいは該化合物または互変異性体の薬学的に許容される塩または溶媒和物であり、ここでAbは抗体または抗体断片を示す、前記請求項のいずれか一項記載の結合体。
【請求項１０１】
前記請求項のいずれか一項記載の化合物または結合体と、薬学的に許容される担体とを含む、薬学的組成物。
【請求項１０２】
医学的処置のための方法における使用のための、前記請求項のいずれか一項記載の化合物またはその結合体。
【請求項１０３】
がんを処置するための方法における使用のための、前記請求項のいずれか一項記載の化合物またはその結合体。
【請求項１０４】
前記請求項のいずれか一項記載の化合物または結合体の有効量を、それを必要としている対象に投与する段階を含む、がんを処置するための方法。
【請求項１０５】
がんを処置するための薬剤の製造における、前記請求項のいずれか一項記載の化合物または結合体の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願
本出願は、2016年6月24日提出の米国特許仮出願第62/354,609号および2017年4月18日提出の第62/486,750号に対する優先権およびそれらの恩典を主張する。これらの出願それぞれの内容はその全体が参照により本明細書に組み入れられる。
【背景技術】
【０００２】
背景
ピロロ[2,1-c][1,4]ベンゾジアゼピン（PBD）は天然の単官能性DNAアルキル化抗腫瘍抗生物質のファミリーで、アントラマイシン、DC-81、トメイマイシン、およびシビロマイシンが含まれる。これらの化合物は副溝におけるグアニンの環外N2にもっぱら結合し、配列特異的様式で3塩基対にわたる（5'PuGPu）。最初のPBD抗腫瘍抗生物質、アントラマイシンは、1965年に見出された（Leimgruber et al., 1965 J. Am. Chem. Soc., 87, 5793-5795（非特許文献1）；およびLeimgruber et al., 1965 J. Am. Chem. Soc., 87, 5791-5793（非特許文献2））。それ以来、いくつかの天然PBDおよび様々な類縁体が報告されている。
【０００３】
PBDは以下の一般構造を有する。
2019522660.tif 000002
【０００４】
PBDは、それらの芳香族A環およびピロロC環両方の置換基の数、種類および位置、ならびにC環の飽和度が異なる。B環には、DNAのアルキル化を担う求電子中心であるN10-C11位に、イミン（N=C）、カルビノールアミン（NH-CH(OH)）またはカルビノールアミンメチルエーテル（NH-CH(OMe)）のいずれかがある。公知の天然物はすべて、キラルなC11a位に(S)-配置を有し、これはC環からA環に向かって見た場合に右回りのねじれをこの天然物に提供する。これは、B型DNAの副溝とイソらせん性（isohelicity）となるのに適した3次元形状を与えて、結合部位でぴったり合うようになる（Kohn, 1975 In Antibiotics III. Springer-Verlag, New York, pp. 3-11（非特許文献3）；およびHurley and Needham-VanDevanter, 1986 Acc. Chem. Res., 19, 230-237（非特許文献4））。それらが副溝内で付加体を形成しうることは、それらがDNAのプロセシングを妨げることを可能にし、したがって抗腫瘍剤としてのそれらの使用を可能にする。
【０００５】
臨床に参入した最初のPBD、SJG-136（NSC 694501）は、DNA鎖間架橋を引き起こす強力な細胞毒性物質である（S.G Gregson et al., 2001, J. Med. Chem., 44: 737-748；M.C. Alley et al., 2004, Cancer Res., 64: 6700-6706；J.A. Hartley et al., 2004, Cancer Res., 64: 6693-6699；C. Martin et al., 2005, Biochemistry., 44: 4135-4147；S. Arnould et al., 2006, Mol. Cancer Ther., 5: 1602- 1509（非特許文献5〜9））。SJG-136の第I相臨床評価の結果は、この薬物が非常に低用量で毒性であることを明らかにした（最大耐用量45μg/m2で、血管漏出症候群、末梢浮腫、肝毒性、および疲労を含む、いくつかの有害作用が認められた）。循環リンパ球において、すべての用量でDNA損傷が認められた。
【０００６】
したがって、副作用が最小限で決定的なDNA損傷を与え得る、より選択的かつ有効な薬物が必要とされ続けている。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Leimgruber et al., 1965 J. Am. Chem. Soc., 87, 5793-5795
【非特許文献２】Leimgruber et al., 1965 J. Am. Chem. Soc., 87, 5791-5793
【非特許文献３】Kohn, 1975 In Antibiotics III. Springer-Verlag, New York, pp. 3-11
【非特許文献４】Hurley and Needham-VanDevanter, 1986 Acc. Chem. Res., 19, 230-237
【非特許文献５】S.G Gregson et al., 2001, J. Med. Chem., 44: 737-748
【非特許文献６】M.C. Alley et al., 2004, Cancer Res., 64: 6700-6706
【非特許文献７】J.A. Hartley et al., 2004, Cancer Res., 64: 6693-6699
【非特許文献８】C. Martin et al., 2005, Biochemistry., 44: 4135-4147
【非特許文献９】S. Arnould et al., 2006, Mol. Cancer Ther., 5: 1602-1509
【発明の概要】
【０００８】
概要
1つの局面において、本開示は式（I）の化合物：
2019522660.tif 000003
もしくはその互変異性体、または化合物もしくは互変異性体の薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物を特徴とする。
【０００９】
前記式（I）中、
Dは、D1、D2、またはD3：
2019522660.tif 000004
であり、
D1におけるC2とC3との間またはC2とC1との間の点線は一重または二重結合の存在を示し；かつ
mは0、1または2であり；
DがD1であり、C2とC3との間の点線が二重結合であり、かつmが1である場合、R1は、
（i）-OH、ハロ、-NO2、-CN、-N3、-OR2、-COOH、-COOR2、-COR2、-OCONR13R14、C1-10アルキル、C3-10シクロアルキル、C2-10アルケニル、C2-10アルキニル、ポリエチレングリコール単位-(OCH2CH2)r-ORa、3〜14員ヘテロシクロアルキル、5〜12員ヘテロアリール、ビス-オキシ-C1-3アルキレン、-NR13R14、-S(=O)2R12、-S(=O)2NR13R14、-SR12、-SOxM、-OSOxM、-NR9COR19、-NH(C=NH)NH2から選択される1つまたは複数の置換基で置換されていてもよい、C6-10アリール基；
（ii）C1-5アルキル；
（iii）C3-6シクロアルキル；
2019522660.tif 000005
または
（viii）ハロであり；
DがD1であり、C2とC3との間の点線が一重結合であり、かつmが1である場合、R1は、
（i）-OH、=O、=CH2、-CN、-R2、-OR2、ハロ、=CH-R6、=C(R6)2、-O-SO2R2、-CO2R2、-COR2、-CHO、または-COOH；または
2019522660.tif 000006
であり；
DがD1であり、かつmが2である場合、各R1は独立にハロであり、かつ両方のR1は同じ炭素原子に結合しているか、または一方はC2に結合し、他方はC3に結合しているかのいずれかであり；
TはC1-10アルキレンリンカーであり；
Aは
2019522660.tif 000007
であり、ここでAの-NH基は式（I）の-C(O)-T-部分に連結し、AのC=O部分はEに連結し；かつ各
2019522660.tif 000008
は独立に
2019522660.tif 000009
であり；
Eは、E1、E2、E3、E4、E5、またはE6：
2019522660.tif 000010
であり；
Gは、-OH、-NH-(C1-6アルキレン)-R13a、-NR13R14、G1、G2、G3、またはG4：
2019522660.tif 000011
であり；
ここでG1またはG4における点線は一重または二重結合の存在を示し；
R2およびR3の各出現は独立に、置換されていてもよいC1-8アルキル、置換されていてもよいC2-8アルケニル、置換されていてもよいC2-8アルキニル、置換されていてもよいC3-8シクロアルキル、置換されていてもよい3〜20員ヘテロシクロアルキル、置換されていてもよいC6-20アリール、または置換されていてもよい5〜20員ヘテロアリールであり、かつ、任意で基NR2R3に関して、R2およびR3はそれらが結合している窒素原子と一緒に、置換されていてもよい4、5、6、もしくは7員ヘテロシクロアルキルまたは置換されていてもよい5もしくは6員ヘテロアリールを形成し；
R4、R5、およびR7はそれぞれ独立に、-H、-R2、-OH、-OR2、-SH、-SR2、-NH2、-NHR2、-NR2R3、-NO2、-SnMe3、ハロ、またはポリエチレングリコール単位-(OCH2CH2)r-ORaであり；またはR4およびR7は一緒にビス-オキシ-C1-3アルキレンを形成し；
各R6は独立に、-H、-R2、-CO2R2、-COR2、-CHO、-CO2H、またはハロであり；
各R8は独立に、-OH、ハロ、-NO2、-CN、-N3、-OR2、-COOH、-COOR2、-COR2、-OCONR13R14、-CONR13R14、-CO-NH-(C1-6アルキレン)-R13a、-OCO-NH-(C1-6アルキレン)-R13a、C1-10アルキル、C3-10シクロアルキル、C2-10アルケニル、C2-10アルキニル、ポリエチレングリコール単位-(OCH2CH2)r-ORa、3〜14員ヘテロシクロアルキル、5〜12員ヘテロアリール、-S(=O)2R12、-S(=O)2NR13R14、-SR12、-SOxM、-OSOxM、-NR9COR19、-NH(C=NH)NH2、または-R20-R21-NR13R14であり；
各R9は独立に、C1-10アルキル、C3-10シクロアルキル、C2-10アルケニル、またはC2-10アルキニルであり；
R10は-Hまたは窒素保護基であり；
R11は-QRQまたは-SOxMであり；
またはR10およびR11はそれらがそれぞれ結合している窒素原子および炭素原子と一緒にN=C二重結合を形成し；
各R12は独立に、C1-7アルキル、3〜20員ヘテロシクロアルキル、5〜20員ヘテロアリール、またはC6-20アリールであり；
R13およびR14の各出現はそれぞれ独立に、H、C1-10アルキル、C3-10シクロアルキル、3〜20員ヘテロシクロアルキル、5〜20員ヘテロアリール、またはC6-20アリールであり；
各R13aは独立に、-OHまたは-NR13R14であり；
R15、R16、R17、およびR18はそれぞれ独立に、-H、-OH、ハロ、-NO2、-CN、-N3、-OR2、-COOH、-COOR2、-COR2、-OCONR13R14、C1-10アルキル、C3-10シクロアルキル、C2-10アルケニル、C2-10アルキニル、ポリエチレングリコール単位-(OCH2CH2)r-ORa、3〜14員ヘテロシクロアルキル、5〜12員ヘテロアリール、-NR13R14、-S(=O)2R12、-S(=O)2NR13R14、-SR12、-SOxM、-OSOxM、-NR9COR19、または-NH(C=NH)NH2であり；
各R19は独立に、C1-10アルキル、C3-10シクロアルキル、C2-10アルケニル、またはC2-10アルキニルであり；
各R20は独立に、結合、C6-10アリーレン、3〜14員ヘテロシクロアルキレン、または5〜12員ヘテロアリーレンであり；
各R21は独立に結合またはC1-10アルキレンであり；
R31、R32、およびR33はそれぞれ独立に、-H、C1-3アルキル、C2-3アルケニル、C2-3アルキニルまたはシクロプロピルであり、ここでR1基における炭素原子の総数は5以下であり；
R34は、-H、C1-3アルキル、C2-3アルケニル、C2-3アルキニル、シクロプロピル、またはフェニルであり、ここでフェニルはハロ、メチル、メトキシ、ピリジル、またはチオフェニルの1つまたは複数で置換されていてもよく；
R35aおよびR35bの一方は-Hであり、かつ他方はハロ、メチル、メトキシ、ピリジル、またはチオフェニルの1つまたは複数で置換されていてもよいフェニル基であり；
R36a、R36b、R36cはそれぞれ独立に、-HまたはC1-2アルキルであり；
R36dは、-OH、-SH、-COOH、-C(O)H、-N=C=O、-NHNH2、-CONHNH2、
2019522660.tif 000012
、またはNHRNであり、ここでRNは-HまたはC1-4アルキルであり；
R37aおよびR37bはそれぞれ独立に、-H、-F、C1-4アルキル、C2-3アルケニルであり、ここでアルキルおよびアルケニル基は、C1-4アルキルアミドまたはC1-4アルキルエステルで置換されていてもよく；またはR37aおよびR37bの一方が-Hである場合、他方は-CNまたはC1-4アルキルエステルであり；
X0は、CH2、NR6、C=O、BH、SO、またはSO2であり；
Y0は、O、CH2、NR6、またはSであり；
Z0は非存在または(CH2)nであり；
各X1は独立に、CRbまたはNであり；
各Y1は独立に、NRa、O、またはSであり；
各Z1は独立に、NRa、O、またはSであり；
X2は、CH、CH2、またはNであり；
X3はCHまたはNであり；
X4は独立に、CRbまたはNであり；
X5は、NH、O、またはSであり；
Y2は独立に、NRa、O、またはSであり；
Z2はCHまたはNであり；
各Raは独立に、HまたはC1-4アルキルであり；
各Rbは独立に、H、OH、C1-4アルキル、またはC1-4アルコキシルであり；
Qは、O、S、またはNHであり；
RQは、-H、置換されていてもよいC1-7アルキル、または-SOxMであり；
QがSまたはNHである場合、RQは-Hまたは置換されていてもよいC1-7アルキルであり；または
QがOである場合、RQは-Hまたは置換されていてもよいC1-7アルキル、または-SOxMであり；
各Mは独立にHまたは一価の薬学的に許容されるカチオンであり；
nは1、2または3であり；
各rは独立に1〜200の整数であり；
sは0、1、2または3であり；
tは0、1、または2であり；かつ
各xは独立に2または3であり；ただし
（i）Dが
2019522660.tif 000013
であり、かつsが0であり、かつTが-(CH2)3または4-である場合、EはE3ではなく、ここでX4はNであり、Y2はOまたはSであり、Z2はCHであり、tは0、1、または2であり、かつR8はフルオロであり；
（ii）sが1であり、かつEがE3である場合、tは0ではなく、かつR8はC1-4アルキル、-C(O)-O-C1-4アルキル、3〜14員ヘテロシクロアルキル、または-O-(CH2)1-4-(3〜14員ヘテロシクロアルキル)ではなく；
（iii）sが1であり、かつEがE4またはE5であり、ここでX4はCHであり、Y2はOまたはSであり、かつZ2はCHである場合、tは0ではなく、かつR8はC1-4アルキル、-C(O)-O-C1-4アルキル、3〜14員ヘテロシクロアルキル、または-O-(CH2)1-4-(3〜14員ヘテロシクロアルキル)ではなく；または
（iv）sが0であり、EがE1であり、かつGが-NR13R14であり、ここでR13およびR14の一方はHである場合、他方は5〜9員ヘテロアリールまたはフェニルではない。
【００１０】
一定の態様において、GがG4であり、点線が二重結合の存在を示し、X3がCHであり、かつX5がOまたはSである場合、sは2、3、4、5または6であり、例えば、sは2であり、sは3であり、sは4であり、sは5であり、またはsは6である。
【００１１】
一定の態様において、X5がOまたはSである場合、sは2、3、4、5または6であり、例えば、sは2であり、sは3であり、sは4であり、sは5であり、またはsは6である。
【００１２】
式（I）の化合物のサブセットには、式（II）、（II-1）、もしくは（II-2）の化合物：
2019522660.tif 000014
またはその互変異性体、あるいは化合物または互変異性体の薬学的に許容される塩または溶媒和物が含まれる。
【００１３】
式（I）の化合物の別のサブセットには、式（III）の化合物：
2019522660.tif 000015
もしくはその互変異性体、または化合物もしくは互変異性体の薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物が含まれる。
【００１４】
式（I）の化合物のさらに別のサブセットには、式（IV）の化合物：
2019522660.tif 000016
もしくはその互変異性体、または化合物もしくは互変異性体の薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物が含まれる。
【００１５】
式（I）の化合物のさらに他のサブセットには、式（II-a）〜（II-p）の化合物：
2019522660.tif 000017
2019522660.tif 000018
2019522660.tif 000019
2019522660.tif 000020
またはその互変異性体、あるいは化合物または互変異性体の薬学的に許容される塩または溶媒和物が含まれる。
【００１６】
式（I）の化合物の他のサブセットには、式（III-a）、（III-b）、もしくは（III-c）のいずれかの化合物：
2019522660.tif 000021
またはその互変異性体、あるいは化合物または互変異性体の薬学的に許容される塩または溶媒和物が含まれる。
【００１７】
別の局面において、本開示は式（I）の化合物の結合体であって、化合物に直接または間接的に連結された抗体または抗体断片を含む結合体を特徴とする。
【００１８】
さらに別の局面において、本開示は式（I）の化合物の結合体であって、化合物に間接的に連結された抗体または抗体断片を含み、化合物は1つまたは複数のポリマー骨格を介して抗体または抗体断片に連結されている結合体を特徴とする。1つの態様において、1つまたは複数のポリマー骨格はポリ(1-ヒドロキシメチルエチレンヒドロキシメチル-ホルマール)（PHF）を含む。1つの態様において、PHFは約2kDa〜約40kDaの範囲の分子量を有する。別の態様において、PHFは約20kDa〜約300kDaの範囲の分子量を有する。
【００１９】
一定の態様において、抗体または抗体断片との結合後に、結合体は、式（VI）の化合物：
2019522660.tif 000022
もしくはその互変異性体、または該化合物もしくは互変異性体の薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物であり、ここで、
抗体または抗体断片は、E''、D''、R''7、またはR''10のうちの1つの位置で化合物に直接または間接的に連結され、かつE''、D''、R''7、またはR''10の残りはそれぞれE、D、R7、またはR10であり；
E''はEまたは
2019522660.tif 000023
であり、ここで
2019522660.tif 000024
はEの官能基を介した抗体または抗体断片への直接または間接的連結を示し；
D''はDまたは
2019522660.tif 000025
であり、ここで
2019522660.tif 000026
はDの官能基を介した抗体または抗体断片への直接または間接的連結を示し；
R''7はR7または
2019522660.tif 000027
であり、ここで
2019522660.tif 000028
はR7の官能基を介した抗体または抗体断片への直接または間接的連結を示し；かつ
R''10はR10または
2019522660.tif 000029
であり、ここで
2019522660.tif 000030
はR10の官能基を介した抗体または抗体断片への直接または間接的連結を示す。
【００２０】
本明細書において同様に提供するのは、式（I）の化合物またはその結合体および薬学的に許容される担体を含む薬学的組成物である。
【００２１】
さらに別の局面において、本開示は、医学的処置法、例えば、がんの処置法において用いるための、式（I）の化合物またはその結合体を特徴とする。
【００２２】
1つの局面において、本開示は、がんの処置法であって、式（I）の化合物または式（VI）の結合体の有効量をそれを必要としている対象に投与する段階を含む方法を特徴とする。
【００２３】
特に記載がないかぎり、処置法の任意の記載は、本明細書に記載のそのような処置または予防を提供するための化合物の使用、ならびにそのような状態を処置または予防する薬剤を調製するための化合物の使用を含む。処置は、ヒトまたは齧歯類および他の疾患モデルを含む非ヒト動物の処置を含む。
【００２４】
さらに、本明細書に記載の化合物または方法は、研究および他の非治療目的のために用いることもできる。
【００２５】
特に定義されないかぎり、本明細書において用いられるすべての技術および科学用語は、本開示が属する分野の当業者によって一般に理解されるのと同じ意味を有する。本明細書において、単数形は、文脈が明らかにそうではないと示さないかぎり、複数も含む。本明細書に記載のものと類似または等価の方法および材料を、本開示の実施または試験において使用し得るが、適切な方法および材料を以下に記載する。本明細書において言及するすべての出版物、特許出願、特許および他の文献は、参照により本明細書に組み入れられる。本明細書において引用する文献は、特許請求する発明に対する先行技術であると認められるものではない。矛盾がある場合、定義を含む本明細書が優先される。加えて、材料、方法および実施例は例示にすぎず、限定を意図するものではない。本明細書に開示する化合物の化学構造と名称との間に矛盾がある場合、化学構造が優先される。
【００２６】
本開示の他の特徴および利点は、以下の詳細な説明および特許請求の範囲から明らかになるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００２７】
【図１】図1は、時間に対する腫瘍体積のプロットであり、NCI-N87細胞を皮下接種したマウス（各群n＝10）において、媒体またはトラスツズマブ-PBD結合体、すなわち結合体51、53、55、57、67、69、71、78、および103を、それぞれ3mg/kgで第1日に単一用量でIV投与した後の腫瘍反応を示す。
【図２】図2は、時間に対する腫瘍体積のプロットであり、NCI-N87細胞を皮下接種したマウス（各群n＝10）において、媒体またはトラスツズマブ-PBD結合体、すなわち結合体63、65、83および85を、3mg/kgで第1日に単一用量でIV投与した後の腫瘍反応を示す。
【発明を実施するための形態】
【００２８】
詳細な説明
本開示は式（I）の化合物：
2019522660.tif 000031
もしくはその互変異性体、または化合物もしくは互変異性体の薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物を特徴とする。
【００２９】
前記式（I）中、
Dは、D1、D2、またはD3：
2019522660.tif 000032
であり；
D1におけるC2とC3との間またはC2とC1との間の点線は一重または二重結合の存在を示し；かつ
mは0、1または2であり；
DがD1であり、C2とC3との間の点線が二重結合であり、かつmが1である場合、R1は、
（i）-OH、ハロ、-NO2、-CN、-N3、-OR2、-COOH、-COOR2、-COR2、-OCONR13R14、C1-10アルキル、C3-10シクロアルキル、C2-10アルケニル、C2-10アルキニル、ポリエチレングリコール単位-(OCH2CH2)r-ORa、3〜14員ヘテロシクロアルキル、5〜12員ヘテロアリール、ビス-オキシ-C1-3アルキレン、-NR13R14、-S(=O)2R12、-S(=O)2NR13R14、-SR12、-SOxM、-OSOxM、-NR9COR19、-NH(C=NH)NH2から選択される1つまたは複数の置換基で置換されていてもよい、C6-10アリール基；
（ii）C1-5アルキル；
（iii）C3-6シクロアルキル；
2019522660.tif 000033
または
（viii）ハロであり；
DがD1であり、C2とC3との間の点線が一重結合であり、かつmが1である場合、R1は、
（i）-OH、=O、=CH2、-CN、-R2、-OR2、ハロ、=CH-R6、=C(R6)2、-O-SO2R2、-CO2R2、-COR2、-CHO、または-COOH；または
2019522660.tif 000034
であり；
DがD1であり、かつmが2である場合、各R1は独立にハロであり、かつ両方のR1は同じ炭素原子に結合しているか、または一方はC2に結合し、他方はC3に結合しているかのいずれかであり；
TはC1-10アルキレンリンカーであり；
Aは
2019522660.tif 000035
であり、ここでAの-NH基は式（I）の-C(O)-T-部分に連結し、AのC=O部分はEに連結し；かつ各
2019522660.tif 000036
は独立に
2019522660.tif 000037
であり；
Eは、E1、E2、E3、E4、E5、またはE6：
2019522660.tif 000038
であり；
Gは、-OH、-NH-(C1-6アルキレン)-R13a、-NR13R14、G1、G2、G3、またはG4：
2019522660.tif 000039
であり；
ここでG1またはG4における点線は一重または二重結合の存在を示し；
R2およびR3の各出現は独立に、置換されていてもよいC1-8アルキル、置換されていてもよいC2-8アルケニル、置換されていてもよいC2-8アルキニル、置換されていてもよいC3-8シクロアルキル、置換されていてもよい3〜20員ヘテロシクロアルキル、置換されていてもよいC6-20アリール、または置換されていてもよい5〜20員ヘテロアリールであり、かつ、任意で基NR2R3に関して、R2およびR3はそれらが結合している窒素原子と一緒に、置換されていてもよい4、5、6もしくは7員ヘテロシクロアルキルまたは置換されていてもよい5もしくは6員ヘテロアリールを形成し；
R4、R5、およびR7はそれぞれ独立に、-H、-R2、-OH、-OR2、-SH、-SR2、-NH2、-NHR2、-NR2R3、-NO2、-SnMe3、ハロ、またはポリエチレングリコール単位-(OCH2CH2)r-ORaであり；またはR4およびR7は一緒にビス-オキシ-C1-3アルキレンを形成し；
各R6は独立に、-H、-R2、-CO2R2、-COR2、-CHO、-CO2H、またはハロであり；
各R8は独立に、-OH、ハロ、-NO2、-CN、-N3、-OR2、-COOH、-COOR2、-COR2、-OCONR13R14、-CONR13R14、-CO-NH-(C1-6アルキレン)-R13a、-OCO-NH-(C1-6アルキレン)-R13a、C1-10アルキル、C3-10シクロアルキル、C2-10アルケニル、C2-10アルキニル、ポリエチレングリコール単位-(OCH2CH2)r-ORa、3〜14員ヘテロシクロアルキル、5〜12員ヘテロアリール、-S(=O)2R12、-S(=O)2NR13R14、-SR12、-SOxM、-OSOxM、-NR9COR19、-NH(C=NH)NH2、または-R20-R21-NR13R14であり；
各R9は独立に、C1-10アルキル、C3-10シクロアルキル、C2-10アルケニル、またはC2-10アルキニルであり；
R10は-Hまたは窒素保護基であり；
R11は-QRQまたは-SOxMであり；
またはR10およびR11は、それらがそれぞれ結合している窒素原子および炭素原子と一緒に、N=C二重結合を形成し；
各R12は独立に、C1-7アルキル、3〜20員ヘテロシクロアルキル、5〜20員ヘテロアリール、またはC6-20アリールであり；
R13およびR14の各出現はそれぞれ独立に、H、C1-10アルキル、C3-10シクロアルキル、3〜20員ヘテロシクロアルキル、5〜20員ヘテロアリール、またはC6-20アリールであり；
各R13aは独立に、-OHまたは-NR13R14であり；
R15、R16、R17、およびR18はそれぞれ独立に、-H、-OH、ハロ、-NO2、-CN、-N3、-OR2、-COOH、-COOR2、-COR2、-OCONR13R14、C1-10アルキル、C3-10シクロアルキル、C2-10アルケニル、C2-10アルキニル、ポリエチレングリコール単位-(OCH2CH2)r-ORa、3〜14員ヘテロシクロアルキル、5〜12員ヘテロアリール、-NR13R14、-S(=O)2R12、-S(=O)2NR13R14、-SR12、-SOxM、-OSOxM、-NR9COR19、または-NH(C=NH)NH2であり；
各R19は独立に、C1-10アルキル、C3-10シクロアルキル、C2-10アルケニル、またはC2-10アルキニルであり；
各R20は独立に、結合、C6-10アリーレン、3〜14員ヘテロシクロアルキレン、または5〜12員ヘテロアリーレンであり；
各R21は独立に、結合またはC1-10アルキレンであり；
R31、R32、およびR33はそれぞれ独立に、-H、C1-3アルキル、C2-3アルケニル、C2-3アルキニル、またはシクロプロピルであり、ここでR1基における炭素原子の総数は5以下であり；
、R34は、-H、C1-3アルキル、C2-3アルケニル、C2-3アルキニル、シクロプロピル、またはフェニルであり、ここでフェニルはハロ、メチル、メトキシ、ピリジル、またはチオフェニルの1つまたは複数で置換されていてもよく；
、R35aおよびR35bの一方は-Hであり、かつ他方はハロ、メチル、メトキシ、ピリジル、またはチオフェニルの1つまたは複数で置換されていてもよいフェニル基であり；
R36a、R36b、R36cはそれぞれ独立に、-HまたはC1-2アルキルであり；
R36dは、-OH、-SH、-COOH、-C(O)H、-N=C=O、-NHNH2、-CONHNH2、
2019522660.tif 000040
、またはNHRNであり、ここでRNは-HまたはC1-4アルキルであり；
R37aおよびR37bはそれぞれ独立に、-H、-F、C1-4アルキル、C2-3アルケニルであり、ここでアルキルおよびアルケニル基はC1-4アルキルアミドまたはC1-4アルキルエステルで置換されていてもよく；またはR37aおよびR37bの一方が-Hである場合、他方は-CNまたはC1-4アルキルエステルであり；
X0は、CH2、NR6、C=O、BH、SO、またはSO2であり；
Y0は、O、CH2、NR6、またはSであり；
Z0は非存在または(CH2)nであり；
各X1は独立にCRbまたはNであり；
各Y1は独立にNRa、O、またはSであり；
各Z1は独立にNRa、O、またはSであり；
X2はCH、CH2、またはNであり；
X3はCHまたはNであり；
X4は独立にCRbまたはNであり；
X5はNH、O、またはSであり；
Y2は独立にNRa、O、またはSであり；
Z2はCHまたはNであり；
各Raは独立にHまたはC1-4アルキルであり；
各Rbは独立に、H、OH、C1-4アルキル、またはC1-4アルコキシルであり；
QはO、S、またはNHであり；
RQは、-H、置換されていてもよいC1-7アルキル、または-SOxMであり；
QがSまたはNHである場合、RQは-Hまたは置換されていてもよいC1-7アルキルであり；または
QがOである場合、RQは-Hまたは置換されていてもよいC1-7アルキル、または-SOxMであり；
各Mは独立にHまたは一価の薬学的に許容されるカチオンであり；
nは1、2または3であり；
各rは独立に1〜200の整数であり；
sは0、1、2、または3であり；
tは0、1、または2であり；かつ
各xは独立に2または3であり；ただし
（i）Dが
2019522660.tif 000041
であり、かつsが0であり、かつTが-(CH2)3または4-である場合、EはE3ではなく、ここでX4はNであり、Y2はOまたはSであり、Z2はCHであり、tは0、1、または2であり、かつR8はフルオロであり；
（ii）sが1であり、かつEがE3である場合、tは0ではなく、かつR8はC1-4アルキル、-C(O)-O-C1-4アルキル、3〜14員ヘテロシクロアルキル、または-O-(CH2)1-4-(3〜14員ヘテロシクロアルキル)ではなく；
（iii）sが1であり、かつEがE4またはE5であり、ここでX4はCHであり、Y2はOまたはSであり、かつZ2はCHである場合、tは0ではなく、かつR8はC1-4アルキル、-C(O)-O-C1-4アルキル、3〜14員ヘテロシクロアルキル、または-O-(CH2)1-4-(3〜14員ヘテロシクロアルキル)ではなく；または
（iv）sが0であり、EがE1であり、かつGが-NR13R14であり、ここでR13およびR14の一方はHである場合、他方は5〜9員ヘテロアリールまたはフェニルではない。
【００３０】
式（I）の化合物は、該当する場合、以下の特徴の1つまたは複数を有し得る。
【００３１】
例えば、式（I）の化合物には、式（I-a）の化合物：
2019522660.tif 000042
もしくはその互変異性体、または化合物もしくは互変異性体の薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物が含まれる。
【００３２】
例えば、DはD1である。
【００３３】
例えば、DはD2である。
【００３４】
例えば、DはD3である。
【００３５】
例えば、式（I）の化合物には、式（II）、（II-1）、もしくは（II-2）の化合物：
2019522660.tif 000043
またはその互変異性体、あるいは化合物または互変異性体の薬学的に許容される塩または溶媒和物が含まれる。
【００３６】
例えば、式（I）の化合物には、式（III）の化合物：
2019522660.tif 000044
もしくはその互変異性体、または化合物もしくは互変異性体の薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物が含まれる。
【００３７】
例えば、式（I）の化合物には、式（IV）の化合物：
2019522660.tif 000045
もしくはその互変異性体、または化合物もしくは互変異性体の薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物が含まれる。
【００３８】
例えば、DがD1であり、C2とC3との間の点線が二重結合であり、かつmが1である場合、R1は、-OH、ハロ、-NO2、-CN、-N3、-OR2、-COOH、-COOR2、-COR2、-OCONR13R14、C1-10アルキル、C3-10シクロアルキル、C2-10アルケニル、C2-10アルキニル、ポリエチレングリコール単位-(OCH2CH2)r-ORa、3〜14員ヘテロシクロアルキル、5〜12員ヘテロアリール、ビス-オキシ-C1-3アルキレン、-NR13R14、-S(=O)2R12、-S(=O)2NR13R14、-SR12、-SOxM、-OSOxM、-NR9COR19、および-NH(C=NH)NH2から選択される1つまたは複数の置換基で置換されていてもよい、C6-10アリール基である。
【００３９】
例えば、DがD1であり、C2とC3との間の点線が二重結合であり、かつmが1である場合、R1は、-OH、ハロ、-NO2、-CN、-N3、-OR2、-COOH、-COOR2、-COR2、-OCONR13R14、C1-10アルキル、C3-10シクロアルキル、C2-10アルケニル、C2-10アルキニル、ポリエチレングリコール単位-(OCH2CH2)r-ORa、3〜14員ヘテロシクロアルキル、5〜12員ヘテロアリール、-NR13R14、-S(=O)2R12、-S(=O)2NR13R14、-SR12、-NR9COR19、および-NH(C=NH)NH2から選択される1つまたは複数の置換基で置換されていてもよい、C6-10アリール基である。
【００４０】
例えば、DがD1であり、C2とC3との間の点線が二重結合であり、かつmが1である場合、R1は、-OH、ハロ、-OR2、-COOH、-COOR2、-COR2、3〜14員ヘテロシクロアルキル、および-NR13R14から選択される1つまたは複数の置換基で置換されていてもよい、C6-10アリール基である。
【００４１】
例えば、DがD1であり、C2とC3との間の点線が二重結合であり、かつmが1である場合、R1は-OH、ハロ、-OR2、-COOH、-COOR2、-COR2、3〜14員ヘテロシクロアルキル、および-NR13R14から選択される1つまたは複数の置換基で置換されている、C6-10アリール基である。
【００４２】
例えば、DがD1であり、C2とC3との間の点線が二重結合であり、かつmが1である場合、R1は、-OH、ハロ、-OR2、-COOH、-COOR2、-COR2、3〜14員ヘテロシクロアルキル、および-NR13R14から選択される1つの置換基で置換されている、C6-10アリール基である。
【００４３】
例えば、DがD1であり、C2とC3との間の点線が二重結合であり、かつmが1である場合、R1は、-OH、-OR2、-COOH、-COOR2、3〜14員ヘテロシクロアルキル、および-NR13R14から選択される1つの置換基で置換されている、C6-10アリール基である。
【００４４】
例えば、DがD1であり、C2とC3との間の点線が二重結合であり、かつmが1である場合、R1は-OHおよび-COOHから選択される1つの置換基で置換されている、C6-10アリール基である。
【００４５】
例えば、DがD1であり、C2とC3との間の点線が二重結合であり、かつmが1である場合、R1は-OR2および-COOR2から選択される1つの置換基で置換されている、C6-10アリール基である。
【００４６】
例えば、DがD1であり、C2とC3との間の点線が二重結合であり、かつmが1である場合、R1は1つの3〜14員ヘテロシクロアルキルで置換されている、C6-10アリール基である。
【００４７】
例えば、DがD1であり、C2とC3との間の点線が二重結合であり、かつmが1である場合、R1は1つの-NR13R14で置換されている、C6-10アリール基である。
【００４８】
例えば、DがD1であり、C2とC3との間の点線が二重結合であり、かつmが1である場合、R1はC1-5アルキルである。
【００４９】
例えば、DがD1であり、C2とC3との間の点線が二重結合であり、かつmが1である場合、R1はC3-6シクロアルキルである。
【００５０】
例えば、DがD1であり、C2とC3との間の点線が二重結合であり、かつmが1である場合、R1はシクロプロピルである。
【００５１】
例えば、DがD1であり、C2とC3との間の点線が二重結合であり、かつmが1である場合、R1は、
2019522660.tif 000046
である。
【００５２】
例えば、DがD1であり、C2とC3との間の点線が二重結合であり、かつmが1である場合、R1は、
2019522660.tif 000047
である。
【００５３】
例えば、DがD1であり、C2とC3との間の点線が二重結合であり、かつmが1である場合、R1は、
2019522660.tif 000048
である。
【００５４】
例えば、DがD1であり、C2とC3との間の点線が二重結合であり、かつmが1である場合、R1は、
2019522660.tif 000049
である。
【００５５】
例えば、DがD1であり、C2とC3との間の点線が二重結合であり、かつmが1である場合、R1はハロである。
【００５６】
例えば、DがD1であり、C2とC3との間の点線が一重結合であり、かつmが1である場合、R1は、-OH、=O、=CH2、-CN、-R2、-OR2、ハロ、=CH-R6、=C(R6)2、-O-SO2R2、-CO2R2、-COR2、-CHO、または-COOHである。
【００５７】
例えば、DがD1であり、C2とC3との間の点線が一重結合であり、かつmが1である場合、R1は、=CH2、=CH-R6、または=C(R6)2である。
【００５８】
例えば、DがD1であり、かつmが2である場合、各R1は独立にハロであり、かつ両方のR1は同じ炭素原子に結合しているか、または一方はC2に結合し、他方はC3に結合しているかのいずれかである。
【００５９】
例えば、TはC2-6アルキレンリンカーである。
【００６０】
例えば、TはC2-4アルキレンリンカーである。
【００６１】
例えば、Tはブチレンである。
【００６２】
例えば、Tはsec-ブチレンである。
【００６３】
例えば、Tはプロピレンである。
【００６４】
例えば、Tはn-プロピレンである。
【００６５】
例えば、Tはエチレンである。
【００６６】
例えば、各
2019522660.tif 000050
は独立に
2019522660.tif 000051
である。
【００６７】
例えば、各
2019522660.tif 000052
は独立に
2019522660.tif 000053
である。
【００６８】
例えば、sは0、1、2、または3である。
【００６９】
例えば、sは0、1、または2である。
【００７０】
例えば、sは1、2、または3である。
【００７１】
例えば、sは0または1である。
【００７２】
例えば、sは1または2である。
【００７３】
例えば、sは2または3である。
【００７４】
例えば、sは0である。
【００７５】
例えば、sは0であり、かつAは一重結合である。
【００７６】
例えば、sは1である。
【００７７】
例えば、sは2である。
【００７８】
例えば、sは3である。
【００７９】
例えば、Aは
2019522660.tif 000054
である。
【００８０】
例えば、Aは
2019522660.tif 000055
であり、ここで各X1は独立にCHまたはNである。
【００８１】
例えば、Aは
2019522660.tif 000056
である。
【００８２】
例えば、Aは
2019522660.tif 000057
であり、ここで各X1は独立にCHまたはNである。
【００８３】
例えば、Aは
2019522660.tif 000058
である。
【００８４】
例えば、Eは
2019522660.tif 000059
である。
【００８５】
例えば、tは0である。
【００８６】
例えば、tは1である。
【００８７】
例えば、tは2である。
【００８８】
例えば、Eは
2019522660.tif 000060
である。
【００８９】
例えば、ttは1である。
【００９０】
例えば、ttは2である。
【００９１】
例えば、Gは-OHである。
【００９２】
例えば、Gは-NH-(C1-6アルキレン)-OHであり、ここでC1-6アルキレンは直鎖または分枝アルキレンである。
【００９３】
例えば、Gは-NH-(CH2)u-OHであり、ここでuは1、2、3、4、5、または6である。
【００９４】
例えば、Gは-NH-(CH2)u-OHであり、ここでuは2、3、4、5、または6である。
【００９５】
例えば、Gは-NH-(CH2)3-OHである。
【００９６】
例えば、Gは-NH-CH2-CH(CH3)-OHである。
【００９７】
例えば、Gは-NR13R14であり、ここでR13およびR14はそれぞれ独立に、H、C1-10アルキル、3〜20員ヘテロシクロアルキル、5〜20員ヘテロアリール、またはC6-20アリールである。
【００９８】
例えば、Gが-NR13R14であり、かつR13およびR14の一方がHであり、他方はH、C1-10アルキル、C3-10シクロアルキル、または3〜20員ヘテロシクロアルキルである。
【００９９】
例えば、Gは-NR13R14であり、ここでR13およびR14はそれぞれ独立にHまたはC1-10アルキルである。
【０１００】
例えば、Gは-NHR14である。
【０１０１】
例えば、Gは-NH2である。
【０１０２】
例えば、Gは
2019522660.tif 000061
である。
【０１０３】
例えば、Gは
2019522660.tif 000062
である。
【０１０４】
例えば、Gは
2019522660.tif 000063
である。
【０１０５】
例えば、Gは
2019522660.tif 000064
である。
【０１０６】
例えば、Gは
2019522660.tif 000065
である。
【０１０７】
例えば、Gは
2019522660.tif 000066
である。
【０１０８】
例えば、Gは
2019522660.tif 000067
である。
【０１０９】
例えば、Gは
2019522660.tif 000068
である。
【０１１０】
例えば、Gは
2019522660.tif 000069
である。
【０１１１】
例えば、Gは
2019522660.tif 000070
である。
【０１１２】
例えば、Gは
2019522660.tif 000071
である。
【０１１３】
例えば、Gは
2019522660.tif 000072
である。
【０１１４】
例えば、Gは
2019522660.tif 000073
である。
【０１１５】
例えば、Eは
2019522660.tif 000074
である。
【０１１６】
例えば、Eは
2019522660.tif 000075
である。
【０１１７】
例えば、Eは
2019522660.tif 000076
である。
【０１１８】
例えば、Eは
2019522660.tif 000077
である。
【０１１９】
例えば、Eは
2019522660.tif 000078
である。
【０１２０】
例えば、Eは
2019522660.tif 000079
である。
【０１２１】
例えば、Eは
2019522660.tif 000080
である。
【０１２２】
例えば、Eは
2019522660.tif 000081
である。
【０１２３】
例えば、Eは
2019522660.tif 000082
である。
【０１２４】
例えば、Eは
2019522660.tif 000083
である。
【０１２５】
例えば、Eは
2019522660.tif 000084
である。
【０１２６】
例えば、Eは
2019522660.tif 000085
である。
【０１２７】
例えば、Eは
2019522660.tif 000086
である。
【０１２８】
例えば、Eは
2019522660.tif 000087
である。
【０１２９】
例えば、Eは
2019522660.tif 000088
である。
【０１３０】
例えば、Eは
2019522660.tif 000089
である。
【０１３１】
例えば、Eは
2019522660.tif 000090
である。
【０１３２】
例えば、Eは
2019522660.tif 000091
である。
【０１３３】
例えば、Eは
2019522660.tif 000092
である。
【０１３４】
例えば、Eは
2019522660.tif 000093
である。
【０１３５】
例えば、Eは
2019522660.tif 000094
である。
【０１３６】
例えば、Eは
2019522660.tif 000095
である。
【０１３７】
例えば、Eは
2019522660.tif 000096
である。
【０１３８】
例えば、Eは
2019522660.tif 000097
である。
【０１３９】
例えば、Eは
2019522660.tif 000098
である。
【０１４０】
例えば、Eは
2019522660.tif 000099
である。
【０１４１】
例えば、Eは
2019522660.tif 000100
である。
【０１４２】
例えば、Eは
2019522660.tif 000101
である。
【０１４３】
例えば、Eは
2019522660.tif 000102
である。
【０１４４】
例えば、Eは
2019522660.tif 000103
である。
【０１４５】
例えば、Eは
2019522660.tif 000104
である。
【０１４６】
例えば、Eは
2019522660.tif 000105
である。
【０１４７】
例えば、Eは
2019522660.tif 000106
である。
【０１４８】
例えば、Eは
2019522660.tif 000107
である。
【０１４９】
例えば、Eは
2019522660.tif 000108
である。
【０１５０】
例えば、Eは
2019522660.tif 000109
である。
【０１５１】
例えば、Eは
2019522660.tif 000110
である。
【０１５２】
例えば、Eは
2019522660.tif 000111
である。
【０１５３】
例えば、Eは
2019522660.tif 000112
である。
【０１５４】
例えば、Eは
2019522660.tif 000113
である。
【０１５５】
例えば、Eは
2019522660.tif 000114
である。
【０１５６】
例えば、Eは
2019522660.tif 000115
である。
【０１５７】
例えば、Eは
2019522660.tif 000116
である。
【０１５８】
例えば、Eは
2019522660.tif 000117
である。
【０１５９】
例えば、Eは
2019522660.tif 000118
である。
【０１６０】
例えば、Eは
2019522660.tif 000119
である。
【０１６１】
例えば、Eは
2019522660.tif 000120
である。
【０１６２】
例えば、Eは
2019522660.tif 000121
である。
【０１６３】
例えば、Eは
2019522660.tif 000122
である。
【０１６４】
例えば、Eは
2019522660.tif 000123
である。
【０１６５】
例えば、Eは
2019522660.tif 000124
である。
【０１６６】
例えば、Eは
2019522660.tif 000125
である。
【０１６７】
例えば、Eは
2019522660.tif 000126
である。
【０１６８】
例えば、Eは
2019522660.tif 000127
である。
【０１６９】
例えば、Eは
2019522660.tif 000128
である。
【０１７０】
例えば、Eは
2019522660.tif 000129
である。
【０１７１】
例えば、Eは
2019522660.tif 000130
である。
【０１７２】
例えば、Eは
2019522660.tif 000131
である。
【０１７３】
例えば、Eは
2019522660.tif 000132
である。
【０１７４】
例えば、Eは
2019522660.tif 000133
である。
【０１７５】
例えば、Eは
2019522660.tif 000134
である。
【０１７６】
例えば、Eは
2019522660.tif 000135
である。
【０１７７】
例えば、Eは
2019522660.tif 000136
である。
【０１７８】
例えば、Eは
2019522660.tif 000137
である。
【０１７９】
例えば、Eは
2019522660.tif 000138
である。
【０１８０】
例えば、Eは
2019522660.tif 000139
である。
【０１８１】
例えば、Eは
2019522660.tif 000140
である。
【０１８２】
例えば、Eは
2019522660.tif 000141
である。
【０１８３】
例えば、Eは
2019522660.tif 000142
である。
【０１８４】
例えば、Eは
2019522660.tif 000143
である。
【０１８５】
例えば、Eは
2019522660.tif 000144
である。
【０１８６】
例えば、Eは
2019522660.tif 000145
である。
【０１８７】
例えば、Eは
2019522660.tif 000146
である。
【０１８８】
例えば、Eは
2019522660.tif 000147
である。
【０１８９】
例えば、Eは
2019522660.tif 000148
である。
【０１９０】
例えば、Eは
2019522660.tif 000149
である。
【０１９１】
例えば、Eは
2019522660.tif 000150
である。
【０１９２】
例えば、Eは
2019522660.tif 000151
である。
【０１９３】
例えば、各R8は独立に、-OH、ハロ、-NO2、-CN、-N3、-OR2、-COOH、-COOR2、-COR2、-OCONR13R14、-CO-NH-(C1-6アルキレン)-R13a、-OCO-NH-(C1-6アルキレン)-R13a、C1-10アルキル、C3-10シクロアルキル、C2-10アルケニル、C2-10アルキニル、ポリエチレングリコール単位-(OCH2CH2)r-ORa、3〜14員ヘテロシクロアルキル、5〜12員ヘテロアリール、-S(=O)2R12、-S(=O)2NR13R14、-SR12、-SOxM、-OSOxM、-NR9COR19、-NH(C=NH)NH2、または-R20-R21-NR13R14である。
【０１９４】
例えば、各R8は独立に-CONR13R14である。例えば、Eが
2019522660.tif 000152
である場合、少なくとも1つのR8は-CONR13R14である。
【０１９５】
例えば、各R8は独立に-CO-NH-(C1-6アルキレン)-R13aまたは-OCO-NH-(C1-6アルキレン)-R13aである。例えば、Eが
2019522660.tif 000153
である場合、少なくとも1つのR8は-CO-NH-(C1-6アルキレン)-R13aまたは-OCO-NH-(C1-6アルキレン)-R13aである。
【０１９６】
例えば、各R8は独立に、-OH、ハロ、-NO2、-CN、-N3、-OR2、-COOH、-COOR2、-COR2、-OCONR13R14、C1-10アルキル、C3-10シクロアルキル、C2-10アルケニル、C2-10アルキニル、ポリエチレングリコール単位-(OCH2CH2)r-ORa、3〜14員ヘテロシクロアルキル、5〜12員ヘテロアリール、-S(=O)2R12、-S(=O)2NR13R14、-SR12、-SOxM、-OSOxM、-NR9COR19、-NH(C=NH)NH2、または-R20-R21-NR13R14である。
【０１９７】
例えば、各R8は独立に、-OH、-NO2、-CN、-N3、-OR2、-COOH、-COR2、-OCONR13R14、C3-10シクロアルキル、C2-10アルケニル、C2-10アルキニル、ポリエチレングリコール単位-(OCH2CH2)r-ORa、5〜12員ヘテロアリール、-S(=O)2R12、-S(=O)2NR13R14、-SR12、-NR9COR19、-NH(C=NH)NH2、または-R20-R21-NR13R14である。
【０１９８】
例えば、各R8は独立に、-OH、-OR2、-COOH、-COOR2、-COR2、-OCONR13R14、ポリエチレングリコール単位-(OCH2CH2)r-ORa、3〜7員ヘテロシクロアルキル、5〜6員ヘテロアリール、-S(=O)2R12、-S(=O)2NR13R14、-SR12、または-R20-R21-NR13R14であり；
ここでR13およびR14はそれぞれ独立に-HまたはC1-10アルキルであり；
各R20は結合またはフェニレンであり；かつ
各R21は独立に結合またはC1-4アルキレンである。
【０１９９】
例えば、各R8は独立に-OH、-OR2、-COOH、-COOR2、-COR2、-S(=O)2R12、-SR12または-R20-R21-NR13R14である。
【０２００】
例えば、各R8は独立に-OHまたは-OR2である。
【０２０１】
例えば、各R8は独立に-COOH、-COOR2、または-COR2である。
【０２０２】
例えば、各R8は独立に-S(=O)2R12または-SR12である。
【０２０３】
例えば、各R8は独立に-R20-R21-NR13R14である。
【０２０４】
例えば、R8は-NH2である。
【０２０５】
例えば、R8は-CH2NH2である。
【０２０６】
例えば、R8は-CH2CH2NH2である。
【０２０７】
例えば、R8は-CH2CH2CH2NH2である。
【０２０８】
例えば、R80は、-OH、ハロ、-NO2、-CN、-N3、-COOH、-COR2、-OCONR13R14、C3-10シクロアルキル、C2-10アルケニル、C2-10アルキニル、ポリエチレングリコール単位-(OCH2CH2)r-ORa、5〜12員ヘテロアリール、-S(=O)2R12、-S(=O)2NR13R14、-SR12、-SOxM、-OSOxM、-NR9COR19、-NH(C=NH)NH2、または-R20-R21-NR13R14である。
【０２０９】
例えば、各R80は、-OH、-COOH、-COR2、-OCONR13R14、ポリエチレングリコール単位-(OCH2CH2)r-ORa、5〜12員ヘテロアリール、-S(=O)2R12、-S(=O)2NR13R14、-SR12、または-R20-R21-NR13R14であり；
ここでR13およびR14はそれぞれ独立に-HまたはC1-10アルキルであり；
各R20は結合またはフェニレンであり；かつ
各R21は独立に結合またはC1-4アルキレンである。
【０２１０】
例えば、各R80は独立に、-OH、 -COOH、-COR2、-S(=O)2R12、-SR12、または-R20-R21-NR13R14である。
【０２１１】
例えば、各R80は独立に-OHである。
【０２１２】
例えば、各R80は独立に-COOHまたは-COR2である。
【０２１３】
例えば、各R80は独立に-S(=O)2R12または-SR12である。
【０２１４】
例えば、各R80は独立に-R20-R21-NR13R14である。
【０２１５】
例えば、R80は-NH2である。
【０２１６】
例えば、R80は-CH2NH2である。
【０２１７】
例えば、R80は-CH2CH2NH2である。
【０２１８】
例えば、R80は-CH2CH2CH2NH2である。
【０２１９】
例えば、各R13aは独立にOHまたはNHR13である。
【０２２０】
例えば、R13の各出現は独立にHまたはC1-10アルキル（例えば、C1-6アルキル）である。
【０２２１】
例えば、R14の各出現は独立にHまたはC1-10アルキル（例えば、C1-6アルキル）である。
【０２２２】
例えば、R13の各出現は独立に3〜20員（例えば、4〜14員）ヘテロシクロアルキルまたは5〜20員（例えば、5〜10員）ヘテロアリールである。
【０２２３】
例えば、R14の各出現は独立に3〜20員（例えば、4〜14員）ヘテロシクロアルキルまたは5〜20員（例えば、5〜10員）ヘテロアリールである。
【０２２４】
例えば、R4、R5、およびR7はそれぞれ独立に、-H、-R2、-OH、-OR2、-SH、-SR2、-NH2、-NHR2、-NR2R3、-NO2、ハロ、またはポリエチレングリコール単位-(OCH2CH2)r-ORaである。
【０２２５】
例えば、R4、R5、およびR7の少なくとも1つは-OR2である。
【０２２６】
例えば、R4、R5、およびR7の少なくとも1つはポリエチレングリコール単位-(OCH2CH2)r-ORaである。
【０２２７】
例えば、R4、R5、およびR7の少なくとも2つは-Hである。
【０２２８】
例えば、R4、R5、およびR7の2つは-Hであり、かつ他は-OR2である。
【０２２９】
例えば、R4、R5、およびR7の2つは-Hであり、かつ他は-OCH3である。
【０２３０】
例えば、R4およびR5はそれぞれ-Hであり、かつR7は-OCH3である。
【０２３１】
例えば、R4およびR5はそれぞれ-Hであり、かつR7は-(OCH2CH2)r-ORaである。
【０２３２】
例えば、R4およびR7は一緒にビス-オキシ-C1-3アルキレンを形成する。
【０２３３】
例えば、R20およびR21のそれぞれは結合である。
【０２３４】
例えば、R20およびR21の一方は結合であり、かつ他方は結合ではない。
【０２３５】
例えば、R20は結合であり、かつR21は結合ではない。
【０２３６】
例えば、R20は結合であり、かつR21はC1-10アルキレンである。
【０２３７】
例えば、R21は結合であり、かつR20は結合ではない。
【０２３８】
例えば、R21は結合であり、かつR20はC6-10アリーレン、3〜14員ヘテロシクロアルキレンまたは5〜12員ヘテロアリーレンである。
【０２３９】
例えば、R10およびR11はそれらがそれぞれ結合している窒素原子および炭素原子と一緒にN=C二重結合を形成する。
【０２４０】
例えば、R10は-Hまたは窒素保護基であり、かつR11は-QRQである。
【０２４１】
例えば、R10は-Hであり、かつR11は-QRQである。
【０２４２】
例えば、R10は窒素保護基であり、かつR11は-QRQであり、ここで窒素保護基はアリルオキシカルボニル（alloc）、カルボベンジルオキシ（Cbz）、p-メトキシベンジルカルボニル（MozまたはMeOZ）、アセチル（Ac）、ベンゾイル（Bz）、ベンジル（Bn）、トリクロロエトキシカルボニル（Troc）、t-ブトキシカルボニル（BOC）、または9-フルオレニルメチレンオキシカルボニル（Fmoc）である。
【０２４３】
例えば、R11は-OSOxMである。
【０２４４】
例えば、R11は-SOxMである。
【０２４５】
例えば、R15、R16、R17、およびR18はそれぞれ独立に、-H、-OH、ハロ、-NO2、-CN、-N3、-OR2、-COOH、-COOR2、-COR2、-OCONR13R14、C1-10アルキル、C3-10シクロアルキル、C2-10アルケニル、C2-10アルキニル、ポリエチレングリコール単位-(OCH2CH2)r-ORa、3〜14員ヘテロシクロアルキル、5〜12員ヘテロアリール、-NR13R14、-S(=O)2R12、-S(=O)2NR13R14、-SR12、または-NH(C=NH)NH2である。
【０２４６】
例えば、R15、R16、R17、およびR18の少なくとも1つは-Hである。
【０２４７】
例えば、R15、R16、R17、およびR18の少なくとも2つは-Hである。
【０２４８】
例えば、R15、R16、R17、およびR18の少なくとも3つは-Hである。
【０２４９】
例えば、R15、R16、R17、およびR18はそれぞれ-Hまたは-NR13R14である。
【０２５０】
例えば、R15、R16、R17、およびR18の少なくとも1つは-NR13R14である。
【０２５１】
例えば、R15、R16、R17、およびR18の少なくとも1つは-NH2である。
【０２５２】
例えば、R15、R16、R17、およびR18の1つは-NR13R14である。
【０２５３】
例えば、R15、R16、R17、およびR18の1つは-NH2である。
【０２５４】
例えば、R16、R17、およびR18はそれぞれ-Hであり；かつR15は-NH2である。
【０２５５】
例えば、R15、R17、およびR18はそれぞれ-Hであり；かつR16は-NH2である。
【０２５６】
例えば、R15、R16、およびR18はそれぞれ-Hであり；かつR17は-NH2である。
【０２５７】
例えば、R15、R16、およびR17はそれぞれ-Hであり；かつR18は-NH2である。
【０２５８】
例えば、X0はCH2、NR6、またはC=Oである。
【０２５９】
例えば、Y0はO、CH2、またはNR6である。
【０２６０】
例えば、Z0は非存在である。
【０２６１】
例えば、Z0は(CH2)nであり；かつnは1または2である。
【０２６２】
例えば、QがSまたはNHである場合、RQは-Hである。
【０２６３】
例えば、QがSまたはNHである場合、RQは置換されていてもよいC1-7アルキルである。
【０２６４】
例えば、QがOである場合、RQは-Hである。
【０２６５】
例えば、QがOである場合、RQは置換されていてもよいC1-7アルキルである。
【０２６６】
例えば、QがOである場合、RQは-SOxMである。
【０２６７】
例えば、式（I）の化合物は最大で1つの-SOxMまたは-OSOxMを含む。例えば、R11は-OSOxMまたは-SOxMである。
【０２６８】
例えば、式（I）の化合物には、式（II-a）〜（II-p）のいずれかの化合物：
2019522660.tif 000154
2019522660.tif 000155
2019522660.tif 000156
2019522660.tif 000157
またはその互変異性体、あるいは化合物または互変異性体の薬学的に許容される塩または溶媒和物が含まれる。
【０２６９】
例えば、式（I）の化合物には、式（III-a）〜（III-c）のいずれかの化合物：
2019522660.tif 000158
またはその互変異性体、あるいは化合物または互変異性体の薬学的に許容される塩または溶媒和物が含まれる。
【０２７０】
例えば、式（I）の化合物は、
2019522660.tif 000159
、もしくはその互変異性体、または化合物もしくは互変異性体の薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物を含み、
R13はHであり；
R14はHまたはメチルであり；かつ
pは1、2、3または4である。
【０２７１】
本開示は、式（V）の化合物：
2019522660.tif 000160
もしくはその互変異性体、または化合物もしくは互変異性体の薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物も特徴とする。
【０２７２】
前記式（V）の化合物において、X4はC=S、CH2、SO、SO2、またはBHであり；かつE、A、T、D、R4、R5、R7、R10、およびR11は本明細書の定義のとおりである。
【０２７３】
例えば、式（V）の化合物には、式（V-a）〜（V-e）のいずれかの化合物：
2019522660.tif 000161
またはその互変異性体、あるいは化合物または互変異性体の薬学的に許容される塩または溶媒和物が含まれる。
【０２７４】
例えば、式（I）の化合物には、D、T、E、A、G、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R13a、R14、R15、R16、R17、R18、R19、R20、R21、R31、R32、R33、R34、R35a、R35b、R36a、R36b、R36c、R36d、R37a、R37b、R80、Ra、Rb、RN、RQ、X0、Y0、Z0、X1、Y1、Z1、X2、X3、X4、X5、Y2、Z2、M、Q、m、n、r、s、t、tt、およびxの1つに対して定義された部分のそれぞれが、D、T、E、A、G、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R13a、R14、R15、R16、R17、R18、R19、R20、R21、R31、R32、R33、R34、R35a、R35b、R36a、R36b、R36c、R36d、R37a、R37b、R80、Ra、Rb、RN、RQ、X0、Y0、Z0、X1、Y1、Z1、X2、X3、X4、X5、Y2、Z2、 M、Q、m、n、r、s、t、tt、およびxの他に対して定義された部分のいずれかと組み合わされ得るものが含まれる。
【０２７５】
本開示の化合物の代表例には、表1に挙げるもの、もしくはその互変異性体、または化合物もしくは互変異性体の薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物が含まれる。
【０２７６】
【表１】
2019522660.tif 000162
2019522660.tif 000163
2019522660.tif 000164
【０２７７】
いくつかの態様において、本開示は以下に挙げる化合物、もしくはその互変異性体、または化合物もしくは互変異性体の薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物を提供する。
2019522660.tif 000165
【０２７８】
本開示は、リンカーを含むための式（I）の化合物の修飾も特徴とする。リンカーを有する式（I）の化合物は、それが抗体または抗体断片と直接または間接的に連結されて本開示の結合体を形成し得るように、さらに修飾することもできる。本開示の結合体は、抗体-薬物結合体（ADC）とも呼ぶ。
【０２７９】
リンカーを有する式（I）の化合物の代表例には、表2に挙げるもの、もしくはその互変異性体、または化合物もしくは互変異性体の薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物が含まれる。
【０２８０】
【表２】
2019522660.tif 000166
2019522660.tif 000167
2019522660.tif 000168
【０２８１】
本開示は式（I）の化合物の結合体もまた特徴とし、該結合体は、該化合物に直接または間接的に連結された抗体または抗体断片を含む。
【０２８２】
例えば、式（I）の化合物の結合体は1つまたは複数のポリマー骨格をさらに含み、ここで化合物は1つまたは複数のポリマー骨格を介して抗体または抗体断片に連結されている。
【０２８３】
例えば、1つまたは複数のポリマー骨格はポリ(1-ヒドロキシメチルエチレンヒドロキシメチル-ホルマール)（PHF）を含む。
【０２８４】
例えば、PHFは約2kDa〜約300kDa（例えば、約2〜40kDa、約6〜20kDa、約8〜15kDa、20〜150kDa、約40〜150kDa、または約50〜100kDa）の範囲の分子量を有する。
【０２８５】
例えば、40kDa以上（例えば、80kDa以上、100kDa以上、150kDa以上、200kDa以上または250kDa以上）の分子量を有する抗体または抗体断片を結合するために、用いるPHFは約2kDa〜約40kDa（例えば、約6〜20kDaまたは約8〜15kDa）の範囲の分子量（すなわち、非修飾PHFのMW）を有する。
【０２８６】
200kDa以下（例えば、150kDa以下、100kDa以下、80kDa以下または50kDa以下）の分子量を有する抗体または抗体断片を結合するために、用いるPHFは約20kDa〜約300kDa（例えば、約20〜150kDa、約40〜150kDaまたは約50〜100kDa）の範囲の分子量（すなわち、非修飾PHFのMW）を有する。
【０２８７】
例えば、式（I）の化合物は、抗体または抗体断片との結合後に、式（VI）の化合物：
2019522660.tif 000169
もしくはその互変異性体、または該化合物もしくは互変異性体の薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物であり、
抗体または抗体断片は、E''、D''、R''7、またはR''10のうちの1つの位置で化合物に直接または間接的に連結され；かつE''、D''、R''7、またはR''10の残りはそれぞれE、D、R7、またはR10であり；
E''はEまたは
2019522660.tif 000170
であり、ここで
2019522660.tif 000171
はEの官能基を介した抗体または抗体断片への直接または間接的連結を示し；
D''はDまたは
2019522660.tif 000172
であり、ここで
2019522660.tif 000173
はDの官能基を介した抗体または抗体断片への直接または間接的連結を示し；
R''7はR7または
2019522660.tif 000174
であり、ここで
2019522660.tif 000175
はR7の官能基を介した抗体または抗体断片への直接または間接的連結を示し；かつ
R''10はR10または
2019522660.tif 000176
であり、ここで
2019522660.tif 000177
はR10の官能基を介した抗体または抗体断片への直接または間接的連結を示す。
【０２８８】
例えば、E''は
2019522660.tif 000178
であり；D''はDであり；R''7はR7であり；かつR''10はR10である。
【０２８９】
例えば、D''は
2019522660.tif 000179
であり；E''はEであり；R''7はR7であり；かつR''10はR10である。
【０２９０】
例えば、R''7は
2019522660.tif 000180
であり；E''はEであり；D''はDであり；かつR''10はR10である。
【０２９１】
例えば、R''10は
2019522660.tif 000181
であり；E''はEであり；D''はDであり；かつR''7はR7である。
【０２９２】
例えば、式（VI）の結合体には、E''、D''、R''7、R''10、D、T、E、A、G、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R13a、R14、R15、R16、R17、R18、R19、R20、R21、R31、R32、R33、R34、R35a、R35b、R36a、R36b、R36c、R36d、R37a、R37b、R80、Ra、Rb、RN、RQ、X0、Y0、Z0、X1、Y1、Z1、X2、X3、X4、X5、Y2、Z2、M、Q、m、n、r、s、t、tt、およびxの1つに対して定義された部分のそれぞれが、E''、D''、R''7、R''10、D、T、E、A、G、R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R13a、R14、R15、R16、R17、R18、R19、R20、R21、R31、R32、R33、R34、R35a、R35b、R36a、R36b、R36c、R36d、R37a、R37b、R80、Ra、Rb、RN、RQ、X0、Y0、Z0、X1、Y1、Z1、X2、X3、X4、X5、Y2、Z2、M、Q、m、n、r、s、t、tt、およびxの他に対して定義された部分のいずれかと組み合わされ得るものが含まれる。
【０２９３】
本開示の化合物-抗体結合体または化合物-抗体断片結合体の代表例には、表3に挙げるもの、もしくはその互変異性体、または化合物もしくは互変異性体の薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物が含まれる。
【０２９４】
【表３】
2019522660.tif 000182
2019522660.tif 000183
2019522660.tif 000184
【０２９５】
本明細書において用いられる「アルキル」、「C1、C2、C3、C4、C5またはC6アルキル」、または「C1-C6アルキル」は、C1、C2、C3、C4、C5またはC6直鎖（線状）飽和脂肪族炭化水素基およびC3、C4、C5またはC6分枝飽和脂肪族炭化水素基を含むことが意図される。例えば、C1-C6アルキルは、C1、C2、C3、C4、C5およびC6アルキル基を含むことが意図される。アルキルの例には、メチル、エチル、n-プロピル、i-プロピル、n-ブチル、s-ブチル、t-ブチル、n-ペンチル、s-ペンチルまたはn-ヘキシルなどであるが、それらに限定されない、1〜6つの炭素原子を有する部分が含まれる。
【０２９６】
一定の態様において、直鎖または分枝アルキルは6つ以下の炭素原子を有し（例えば、直鎖についてはC1-C6、分枝鎖についてはC3-C6）、かつ別の態様において、直鎖または分枝アルキルは4つ以下の炭素原子を有する。
【０２９７】
本明細書において用いられる、「シクロアルキル」なる用語は、3〜30の炭素原子を有する（例えば、C3-C10）、飽和または不飽和非芳香族炭化水素単環または多環（例えば、縮合、架橋、またはスピロ環）系を意味する。シクロアルキルの例には、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチル、シクロペンテニル、シクロヘキセニル、シクロヘプテニル、1,2,3,4-テトラヒドロナフタレニル、およびアダマンチルが含まれるが、それらに限定されない。「ヘテロシクロアルキル」なる用語は、環原子として1つまたは複数のヘテロ原子（O、N、S、P、またはSeなどの）を有する飽和または不飽和非芳香環系、例えば、特に記載がないかぎり、窒素、酸素および硫黄からなる群より独立に選択される、1もしくは1〜2もしくは1〜3もしくは1〜4もしくは1〜5もしくは1〜6つのヘテロ原子、または例えば、1、2、3、4、5、もしくは6つのヘテロ原子を有する、3〜8員単環式、7〜12員二環式（縮合、架橋、またはスピロ環）、または11〜14員三環式環系（縮合、架橋、またはスピロ環）を意味する。ヘテロシクロアルキル基の例には、ピペリジニル、ピペラジニル、ピロリジニル、ジオキサニル、テトラヒドロフラニル、イソインドリニル、インドリニル、イミダゾリジニル、ピラゾリジニル、オキサゾリジニル、イソオキサゾリジニル、トリアゾリジニル、オキシラニル、アゼチジニル、オキセタニル、チエタニル、1,2,3,6-テトラヒドロピリジニル、テトラヒドロピラニル、ジヒドロピラニル、ピラニル、モルホリニル、テトラヒドロチオピラニル、1,4-ジアゼパニル、1,4-オキサゼパニル、2-オキサ-5-アザビシクロ[2.2.1]ヘプタニル、2,5-ジアザビシクロ[2.2.1]ヘプタニル、2-オキサ-6-アザスピロ[3.3]ヘプタニル、2,6-ジアザスピロ[3.3]ヘプタニル、1,4-ジオキサ-8-アザスピロ[4.5]デカニル、1,4-ジオキサスピロ[4.5]デカニル、1-オキサスピロ[4.5]デカニル、1-アザスピロ[4.5]デカニル、3'H-スピロ[シクロヘキサン-1,1'-イソベンゾフラン]-イル、7'H-スピロ[シクロヘキサン-1,5'-フロ[3,4-b]ピリジン]-イル、3'H-スピロ[シクロヘキサン-1,1'-フロ[3,4-c]ピリジン]-イルなどが含まれるが、それらに限定されない。多環式非芳香環の場合、環の1つだけが非芳香族でなければならない（例えば、1,2,3,4-テトラヒドロナフタレニルまたは2,3-ジヒドロインドール）。「シクロアルキレン」および「ヘテロシクロアルキレン」なる用語は、それぞれ対応する二価基を意味する。
【０２９８】
「置換されていてもよいアルキル」なる用語は、無置換アルキルまたは炭化水素骨格の1つもしくは複数の炭素上の1つもしくは複数の水素原子に置き代わる指定の置換基を有するアルキルを意味する。そのような置換基には、例えば、アルキル、アルケニル、アルキニル、ハロゲン、ヒドロキシル、アルキルカルボニルオキシ、アリールカルボニルオキシ、アルコキシカルボニルオキシ、アリールオキシカルボニルオキシ、カルボキシレート、アルキルカルボニル、アリールカルボニル、アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、アルキルアミノカルボニル、ジアルキルアミノカルボニル、アルキルチオカルボニル、アルコキシル、ホスフェート、ホスホナト、ホスフィナト、アミノ（アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノおよびアルキルアリールアミノを含む）、アシルアミノ（アルキルカルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、カルバモイルおよびウレイドを含む）、アミジノ、イミノ、スルフヒドリル、アルキルチオ、アリールチオ、チオカルボキシレート、スルフェート、アルキルスルフィニル、スルホナト、スルファモイル、スルホンアミド、ニトロ、トリフルオロメチル、シアノ、アジド、ヘテロシクリル、アルキルアリール、または芳香族もしくはヘテロ芳香族部分が含まれ得る。
【０２９９】
本明細書において用いられる、「アルキルリンカー」または「アルキレンリンカー」は、C1、C2、C3、C4、C5またはC6直鎖（線状または分枝）飽和二価脂肪族炭化水素基およびC3、C4、C5またはC6分枝飽和脂肪族炭化水素基を含むことが意図される。例えば、C1-C6アルキレンリンカーはC1、C2、C3、C4、C5およびC6アルキレンリンカー基を含むことが意図される。アルキレンリンカーの例には、メチル（-CH2-）、エチル（-CH2CH2-）、n-プロピル（-CH2CH2CH2-）、i-プロピル（-CHCH3CH2-）、n-ブチル（-CH2CH2CH2CH2-）、s-ブチル（-CHCH3CH2CH2-）、i-ブチル（-C(CH3) 2CH2-）、n-ペンチル（-CH2CH2CH2CH2CH2-）、s-ペンチル（-CHCH3CH2CH2CH2-）、またはn-ヘキシル（-CH2CH2CH2CH2CH2CH2-）などであるが、それらに限定されない、1〜6つの炭素原子を有する部分が含まれる。
【０３００】
「アルケニル」は、前述のアルキルに長さおよび可能な置換が類似であるが、少なくとも1つの二重結合を含む、不飽和脂肪族基を含む。例えば、「アルケニル」なる用語は、直鎖アルケニル基（例えば、エテニル、プロペニル、ブテニル、ペンテニル、ヘキセニル、ヘプテニル、オクテニル、ノネニル、デセニル）、および分枝アルケニル基を含む。
【０３０１】
一定の態様において、直鎖または分枝アルケニル基はその骨格に6つ以下の炭素原子を有する（例えば、直鎖についてはC2-C6、分枝鎖についてはC3-C6）。「C2-C6」なる用語は、2〜6つの炭素原子を含むアルケニル基を含む。「C3-C6」なる用語は、3〜6つの炭素原子を含むアルケニル基を含む。
【０３０２】
「置換されていてもよいアルケニル」なる用語は、無置換アルケニルまたは1つもしくは複数の炭化水素骨格炭素原子上の1つもしくは複数の水素原子に置き代わる指定の置換基を有するアルケニルを意味する。そのような置換基には、例えば、アルキル、アルケニル、アルキニル、ハロゲン、ヒドロキシル、アルキルカルボニルオキシ、アリールカルボニルオキシ、アルコキシカルボニルオキシ、アリールオキシカルボニルオキシ、カルボキシレート、アルキルカルボニル、アリールカルボニル、アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、アルキルアミノカルボニル、ジアルキルアミノカルボニル、アルキルチオカルボニル、アルコキシル、ホスフェート、ホスホナト、ホスフィナト、アミノ（アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノおよびアルキルアリールアミノを含む）、アシルアミノ（アルキルカルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、カルバモイルおよびウレイドを含む）、アミジノ、イミノ、スルフヒドリル、アルキルチオ、アリールチオ、チオカルボキシレート、スルフェート、アルキルスルフィニル、スルホナト、スルファモイル、スルホンアミド、ニトロ、トリフルオロメチル、シアノ、ヘテロシクリル、アルキルアリール、または芳香族もしくはヘテロ芳香族部分が含まれ得る。
【０３０３】
「アルキニル」は、前述のアルキルに長さおよび可能な置換が類似であるが、少なくとも1つの三重結合を含む、不飽和脂肪族基を含む。例えば、「アルキニル」は、直鎖アルキニル基（例えば、エチニル、プロピニル、ブチニル、ペンチニル、ヘキシニル、ヘプチニル、オクチニル、ノニニル、デシニル）、および分枝アルキニル基を含む。一定の態様において、直鎖または分枝アルキニル基はその骨格に6つ以下の炭素原子を有する（例えば、直鎖についてはC2-C6、分枝鎖についてはC3-C6）。「C2-C6」なる用語は、2〜6つの炭素原子を含むアルキニル基を含む。「C3-C6」なる用語は、3〜6つの炭素原子を含むアルキニル基を含む。
【０３０４】
「置換されていてもよいアルキニル」なる用語は、無置換アルキニルまたは1つもしくは複数の炭化水素骨格炭素原子上の1つもしくは複数の水素原子に置き代わる指定の置換基を有するアルキニルを意味する。そのような置換基には、例えば、アルキル、アルケニル、アルキニル、ハロゲン、ヒドロキシル、アルキルカルボニルオキシ、アリールカルボニルオキシ、アルコキシカルボニルオキシ、アリールオキシカルボニルオキシ、カルボキシレート、アルキルカルボニル、アリールカルボニル、アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、アルキルアミノカルボニル、ジアルキルアミノカルボニル、アルキルチオカルボニル、アルコキシル、ホスフェート、ホスホナト、ホスフィナト、アミノ（アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノおよびアルキルアリールアミノを含む）、アシルアミノ（アルキルカルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、カルバモイルおよびウレイドを含む）、アミジノ、イミノ、スルフヒドリル、アルキルチオ、アリールチオ、チオカルボキシレート、スルフェート、アルキルスルフィニル、スルホナト、スルファモイル、スルホンアミド、ニトロ、トリフルオロメチル、シアノ、アジド、ヘテロシクリル、アルキルアリール、または芳香族もしくはヘテロ芳香族部分が含まれ得る。
【０３０５】
他の置換されていてもよい部分（置換されていてもよいシクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、またはヘテロアリールなどの）には、無置換部分および指定の置換基の1つまたは複数を有する部分の両方が含まれる。例えば、置換ヘテロシクロアルキルには、2,2,6,6-テトラメチル-ピペリジニルおよび2,2,6,6-テトラメチル-1,2,3,6-テトラヒドロピリジニルなどの、1つまたは複数のアルキル基で置換されているものが含まれる。
【０３０６】
「アリール」は、1つまたは複数の芳香環と「結合した」、またはそれらとの多環式系を含む、芳香族性を有し、環構造中にいかなるヘテロ原子も含まない基を含む。例には、フェニル、ナフタレニルなどが含まれる。「アリーレン」なる用語は、フェニレンなどの、対応する二価基を意味する。
【０３０７】
「ヘテロアリール」基は、環構造中に1〜4つのヘテロ原子を有する以外は、前述の定義のアリール基であり、「アリール複素環」または「ヘテロ芳香族」と呼んでもよい。本明細書において用いられる、「ヘテロアリール」なる用語は、炭素原子および1つまたは複数のヘテロ原子、例えば、窒素、酸素および硫黄からなる群より独立に選択される、1もしくは1〜2もしくは1〜3もしくは1〜4もしくは1〜5もしくは1〜6つのヘテロ原子、または例えば、1、2、3、4、5、もしくは6つのヘテロ原子からなる、安定な5、6、もしくは7員単環式または7、8、9、10、11もしくは12員二環式芳香族複素環などの、安定な芳香族複素環を含むことが意図される。窒素原子は置換されていても、または無置換であってもよい（すなわち、NまたはNR、ここでRはHまたは定義した他の置換基である）。窒素および硫黄ヘテロ原子は、任意に酸化されていてもよい（すなわち、N→OおよびS(O)p、ここでp＝1または2）。芳香族複素環中のSおよびO原子の総数は1以下であることに留意すべきである。
【０３０８】
ヘテロアリール基の例には、ピロール、フラン、チオフェン、チアゾール、イソチアゾール、イミダゾール、トリアゾール、テトラゾール、ピラゾール、オキサゾール、イソオキサゾール、ピリジン、ピラジン、ピリダジン、ピリミジンなどが含まれる。「ヘテロアリーレン」なる用語は、対応する二価基を意味する。
【０３０９】
さらに、「アリール」および「ヘテロアリール」なる用語は、多環式アリールおよびヘテロアリール基、例えば、三環式、二環式、例えば、ナフタレン、ベンゾキサゾール、ベンゾジオキサゾール、ベンゾチアゾール、ベンゾイミダゾール、ベンゾチオフェン、キノリン、イソキノリン、ナフチリジン、インドール、ベンゾフラン、プリン、ベンゾフラン、デアザプリン、インドリジンを含む。
【０３１０】
シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、またはヘテロアリール環は、1つまたは複数の環の位置（例えば、環形成炭素またはNなどのヘテロ原子）で前述などの置換基、例えば、アルキル、アルケニル、アルキニル、ハロゲン、ヒドロキシル、アルコキシ、アルキルカルボニルオキシ、アリールカルボニルオキシ、アルコキシカルボニルオキシ、アリールオキシカルボニルオキシ、カルボキシレート、アルキルカルボニル、アルキルアミノカルボニル、アラルキルアミノカルボニル、アルケニルアミノカルボニル、アルキルカルボニル、アリールカルボニル、アラルキルカルボニル、アルケニルカルボニル、アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、アルキルチオカルボニル、ホスフェート、ホスホナト、ホスフィナト、アミノ（アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノおよびアルキルアリールアミノを含む）、アシルアミノ（アルキルカルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、カルバモイルおよびウレイドを含む）、アミジノ、イミノ、スルフヒドリル、アルキルチオ、アリールチオ、チオカルボキシレート、スルフェート、アルキルスルフィニル、スルホナト、スルファモイル、スルホンアミド、ニトロ、トリフルオロメチル、シアノ、アジド、ヘテロシクリル、アルキルアリール、または芳香族もしくはヘテロ芳香族部分で置換され得る。アリールおよびヘテロアリール基は、芳香族ではない脂環式または複素環と縮合または架橋して多環式系（例えば、テトラリン、ベンゾ[d][1,3]ジオキソール-5-イルなどのメチレンジオキシフェニル）を形成することもできる。
【０３１１】
本明細書において用いられる、「炭素環」または「環状炭素」は、明示された数の炭素を有する任意の安定な単環式、二環式または三環式環を含むことが意図され、任意のこれらの環は飽和、不飽和、または芳香族であってもよい。炭素環には、シクロアルキルおよびアリールが含まれる。例えば、C3-C14炭素環は、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13または14の炭素原子を有する単環式、二環式または三環式環を含むことが意図される。炭素環の例には、シクロプロピル、シクロブチル、シクロブテニル、シクロペンチル、シクロペンテニル、シクロヘキシル、シクロヘプテニル、シクロヘプチル、シクロヘプテニル、アダマンチル、シクロオクチル、シクロオクテニル、シクロオクタジエニル、フルオレニル、フェニル、ナフチル、インダニル、アダマンチルおよびテトラヒドロナフチルが含まれるが、それらに限定されない。[3.3.0]ビシクロオクタン、[4.3.0]ビシクロノナン、および[4.4.0]ビシクロデカンならびに[2.2.2]ビシクロオクタンを含む、架橋環も炭素環の定義に含まれる。架橋環は、1つまたは複数の炭素原子が2つの非隣接炭素原子を連結する場合に出現する。1つの態様において、架橋環は1つまたは2つの炭素原子である。架橋は常に単環式環を三環式環に変換することになる。環が架橋されている場合、環について列挙した置換基は架橋上に存在してもよい。縮合（例えば、ナフチル、テトラヒドロナフチル）およびスピロ環も含まれる。
【０３１２】
本明細書において用いられる、「複素環」または「複素環式基」は、少なくとも1つの環ヘテロ原子（例えば、N、OおよびSから選択される1〜4つのヘテロ原子）を含む任意の環構造（飽和、不飽和、または芳香族）を含む。複素環はヘテロシクロアルキルおよびヘテロアリールを含む。複素環の例には、モルホリン、ピロリジン、テトラヒドロチオフェン、ピペリジン、ピペラジン、オキセタン、ピラン、テトラヒドロピラン、アゼチジン、およびテトラヒドロフランが含まれるが、それらに限定されない。
【０３１３】
複素環式基の例には、アクリジニル、アゾシニル、ベンズイミダゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾチオフラニル、ベンゾチオフェニル、ベンゾキサゾリル、ベンゾキサゾリニル、ベンズチアゾリル、ベンズトリアゾリル、ベンズテトラゾリル、ベンズイソキサゾリル、ベンズイソチアゾリル、ベンズイミダゾリニル、カルバゾリル、4aH-カルバゾリル、カルボリニル、クロマニル、クロメニル、シンノリニル、デカヒドロキノリニル、2H,6H-1,5,2-ジチアジニル、ジヒドロフロ[2,3-b]テトラヒドロフラン、フラニル、フラザニル、イミダゾリジニル、イミダゾリニル、イミダゾリル、1H-インダゾリル、インドレニル、インドリニル、インドリジニル、インドリル、3H-インドリル、イサチノイル、イソベンゾフラニル、イソクロマニル、イソインダゾリル、イソインドリニル、イソインドリル、イソキノリニル、イソチアゾリル、イソキサゾリル、メチレンジオキシフェニル（例えば、ベンゾ[d][1,3]ジオキソール-5-イル）、モルホリニル、ナフチリジニル、オクタヒドロイソキノリニル、オキサジアゾリル、1,2,3-オキサジアゾリル、1,2,4-オキサジアゾリル、1,2,5-オキサジアゾリル、1,3,4-オキサジアゾリル、1,2,4-オキサジアゾl5(4H)-オン、オキサゾリジニル、オキサゾリル、オキシインドリル、ピリミジニル、フェナントリジニル、フェナントロリニル、フェナジニル、フェノチアジニル、フェノキサチニル、フェノキサジニル、フタラジニル、ピペラジニル、ピペリジニル、ピペリドニル、4-ピペリドニル、ピペロニル、プテリジニル、プリニル、ピラニル、ピラジニル、ピラゾリジニル、ピラゾリニル、ピラゾリル、ピリダジニル、ピリドオキサゾール、ピリドイミダゾール、ピリドチアゾール、ピリジニル、ピリジル、ピリミジニル、ピロリジニル、ピロリニル、2H-ピロリル、ピロリル、キナゾリニル、キノリニル、4H-キノリジニル、キノキサリニル、キヌクリジニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロイソキノリニル、テトラヒドロキノリニル、テトラゾリル、6H-1,2,5-チアジアジニル、1,2,3-チアジアゾリル、1,2,4-チアジアゾリル、1,2,5-チアジアゾリル、1,3,4-チアジアゾリル、チアントレニル、チアゾリル、チエニル、チエノチアゾリル、チエノオキサゾリル、チエノイミダゾリル、チオフェニル、トリアジニル、1,2,3-トリアゾリル、1,2,4-トリアゾリル、1,2,5-トリアゾリル、1,3,4-トリアゾリル、およびキサンテニルが含まれるが、それらに限定されない。
【０３１４】
本明細書において用いられる「置換された」なる用語は、指定の原子上の任意の1つまたは複数の水素原子が示した基から選択されるもので置き代えられていることを意味し、ただし指定の原子の通常の原子価は超過せず、かつ置換は安定な化合物を生じる。置換基がオキソまたはケト（すなわち、=O）である場合、原子上の2つの水素原子が置き代えられる。ケト置換基は芳香族部分上には存在しない。本明細書において用いられる環二重結合は、2つの隣接環原子の間で形成される二重結合（例えば、C=C、C=NまたはN=N）である。「安定な化合物」および「安定な構造」は、反応混合物から有用な程度の純度までの単離、および有効な治療剤への製剤を生き残るのに十分強い化合物を示すことが意図される。
【０３１５】
置換基への結合が、環の2つの原子を連結している結合を横切るように示される場合、そのような置換基は環の任意の原子に結合されてもよい。置換基が、所与の式の化合物の残部にそれを介してそのような置換基が結合される原子を示すことなく列挙される場合、そのような置換基はそのような式中の任意の原子を介して結合されてもよい。置換基および/または変数の組み合わせは、そのような組み合わせが安定な化合物を生じる場合にのみ許容される。
【０３１６】
任意の変数（例えば、R）が化合物の任意の成分または式中に複数回出現する場合、各出現におけるその定義は、その他すべての出現におけるその定義とは無関係である。したがって、例えば、基が0〜2つのR部分で置換されていると示される場合、基は最大2つのR部分で置換されていてもよく、各出現におけるRはRの定義から独立に選択される。また、置換基および/または変数の組み合わせは、そのような組み合わせが安定な化合物を生じる場合にのみ許容される。
【０３１７】
「ヒドロキシ」または「ヒドロキシル」なる用語は、-OHまたは-O-を有する基を含む。
【０３１８】
本明細書において用いられる、「ハロ」または「ハロゲン」は、フルオロ、クロロ、ブロモおよびヨードを意味する。「過ハロゲン化された」なる用語は、一般にはすべての水素原子がハロゲン原子で置き代えられている部分を意味する。「ハロアルキル」または「ハロアルコキシル」なる用語は、1つまたは複数のハロゲン原子で置換されたアルキルまたはアルコキシルを意味する。
【０３１９】
本明細書において用いられる、「ビス-オキシ-アルキレン」なる用語は、-O-アルキレン-O-を意味し、ここでアルキレンは直鎖または分枝、例えば、-CH2-、-CH(CH3)2-、または-(CH2)2-であり得る。
【０３２０】
「カルボニル」なる用語は、酸素原子に二重結合で連結された炭素を含む化合物および部分を含む。カルボニルを含む部分の例には、アルデヒド、ケトン、カルボン酸、アミド、エステル、無水物などが含まれるが、それらに限定されない。
【０３２１】
「カルボキシル」なる用語は、-COOHまたはそのC1-C6アルキルエステルを意味する。
【０３２２】
「アシル」は、アシル基（R-C(O)-）またはカルボニル基を含む部分を含む。「置換アシル」は、水素原子の1つまたは複数が、例えば、アルキル基、アルキニル基、ハロゲン、ヒドロキシル、アルキルカルボニルオキシ、アリールカルボニルオキシ、アルコキシカルボニルオキシ、アリールオキシカルボニルオキシ、カルボキシレート、アルキルカルボニル、アリールカルボニル、アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、アルキルアミノカルボニル、ジアルキルアミノカルボニル、アルキルチオカルボニル、アルコキシル、ホスフェート、ホスホナト、ホスフィナト、アミノ（アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノおよびアルキルアリールアミノを含む）、アシルアミノ（アルキルカルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、カルバモイルおよびウレイドを含む）、アミジノ、イミノ、スルフヒドリル、アルキルチオ、アリールチオ、チオカルボキシレート、スルフェート、アルキルスルフィニル、スルホナト、スルファモイル、スルホンアミド、ニトロ、トリフルオロメチル、シアノ、アジド、ヘテロシクリル、アルキルアリール、または芳香族もしくはヘテロ芳香族部分によって置き代えられているアシル基を含む。
【０３２３】
「アロイル」は、カルボニル基に結合されたアリールまたはヘテロ芳香族部分を有する部分を含む。アロイル基の例には、フェニルカルボキシ、ナフチルカルボキシなどが含まれる。
【０３２４】
「アルコキシアルキル」、「アルキルアミノアルキル」、および「チオアルコキシアルキル」は、酸素、窒素、または硫黄原子が1つまたは複数の炭化水素骨格炭素原子に置き代わる、前述のアルキル基を含む。
【０３２５】
「アルコキシ」または「アルコキシル」なる用語は、酸素原子に共有結合された置換および無置換アルキル、アルケニルおよびアルキニル基を含む。アルコキシ基またはアルコキシル基の例には、メトキシ、エトキシ、イソプロピルオキシ、プロポキシ、ブトキシ、およびペントキシ基が含まれるが、それらに限定されない。置換アルコキシ基の例には、ハロゲン化アルコキシ基が含まれる。アルコキシ基は、アルケニル、アルキニル、ハロゲン、ヒドロキシル、アルキルカルボニルオキシ、アリールカルボニルオキシ、アルコキシカルボニルオキシ、アリールオキシカルボニルオキシ、カルボキシレート、アルキルカルボニル、アリールカルボニル、アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、アルキルアミノカルボニル、ジアルキルアミノカルボニル、アルキルチオカルボニル、アルコキシル、ホスフェート、ホスホナト、ホスフィナト、アミノ（アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノ、およびアルキルアリールアミノを含む）、アシルアミノ（アルキルカルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、カルバモイルおよびウレイドを含む）、アミジノ、イミノ、スルフヒドリル、アルキルチオ、アリールチオ、チオカルボキシレート、スルフェート、アルキルスルフィニル、スルホナト、スルファモイル、スルホンアミド、ニトロ、トリフルオロメチル、シアノ、アジド、ヘテロシクリル、アルキルアリール、または芳香族もしくはヘテロ芳香族部分などの基で置換され得る。ハロゲン置換アルコキシ基の例には、フルオロメトキシ、ジフルオロメトキシ、トリフルオロメトキシ、クロロメトキシ、ジクロロメトキシ、およびトリクロロメトキシが含まれるが、それらに限定されない。
【０３２６】
「エーテル」または「アルコキシ」なる用語は、2つの炭素原子またはヘテロ原子に結合された酸素を含む化合物または部分を含む。例えば、この用語は「アルコキシアルキル」を含み、これはアルキル基に共有結合されている酸素原子に共有結合されたアルキル、アルケニル、またはアルキニル基を意味する。
【０３２７】
「エステル」なる用語は、カルボニル基の炭素に結合されている酸素原子に結合された炭素またはヘテロ原子を含む化合物または部分を含む。「エステル」なる用語は、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、プロポキシカルボニル、ブトキシカルボニル、ペントキシカルボニルなどのアルコキシカルボキシ基を含む。
【０３２８】
「チオアルキル」なる用語は、硫黄原子と連結されたアルキル基を含む化合物または部分を含む。チオアルキル基は、アルキル、アルケニル、アルキニル、ハロゲン、ヒドロキシル、アルキルカルボニルオキシ、アリールカルボニルオキシ、アルコキシカルボニルオキシ、アリールオキシカルボニルオキシ、カルボキシレート、カルボン酸、アルキルカルボニル、アリールカルボニル、アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、アルキルアミノカルボニル、ジアルキルアミノカルボニル、アルキルチオカルボニル、アルコキシル、アミノ（アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アリールアミノ、ジアリールアミノおよびアルキルアリールアミノを含む）、アシルアミノ（アルキルカルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、カルバモイルおよびウレイドを含む）、アミジノ、イミノ、スルフヒドリル、アルキルチオ、アリールチオ、チオカルボキシレート、スルフェート、アルキルスルフィニル、スルホナト、スルファモイル、スルホンアミド、ニトロ、トリフルオロメチル、シアノ、アジド、ヘテロシクリル、アルキルアリール、または芳香族もしくはヘテロ芳香族部分などの基で置換され得る。
【０３２９】
「チオカルボニル」または「チオカルボキシ」なる用語は、硫黄原子に二重結合で連結された炭素を含む化合物および部分を含む。
【０３３０】
「チオエーテル」なる用語は、2つの炭素原子またはヘテロ原子に結合された硫黄原子を含む部分を含む。チオエーテルの例には、アルクチオアルキル、アルクチオアルケニル、およびアルクチオアルキニルが含まれるが、それらに限定されない。「アルクチオアルキル」なる用語は、アルキル基に結合されている硫黄原子に結合されたアルキル、アルケニル、またはアルキニル基を有する部分を含む。同様に、「アルクチオアルケニル」なる用語は、アルキル、アルケニルまたはアルキニル基が、アルケニル基に共有結合されている硫黄原子に結合されている部分を意味し；かつ「アルクチオアルキニル」は、アルキル、アルケニルまたはアルキニル基が、アルキニル基に共有結合されている硫黄原子に結合されている部分を意味する。
【０３３１】
本明細書において用いられる「アミン」または「アミノ」は-NH2を意味する。「アルキルアミノ」は、-NH2の窒素が少なくとも1つのアルキル基に結合されている化合物の基を含む。アルキルアミノ基の例には、ベンジルアミノ、メチルアミノ、エチルアミノ、フェネチルアミノなどが含まれる。「ジアルキルアミノ」は、-NH2の窒素が2つのアルキル基に結合されている基を含む。ジアルキルアミノ基の例には、ジメチルアミノおよびジエチルアミノが含まれるが、それらに限定されない。「アリールアミノ」および「ジアリールアミノ」は、それぞれ、窒素が少なくとも1つまたは2つのアリール基に結合されている基を含む。「アミノアリール」および「アミノアリールオキシ」は、アミノで置換されたアリールおよびアリールオキシを意味する。「アルキルアリールアミノ」、「アルキルアミノアリール」または「アリールアミノアルキル」は、少なくとも1つのアルキル基および少なくとも1つのアリール基に結合されているアミノ基を意味する。「アルカミノアルキル」は、同じくアルキル基に結合されている窒素原子に結合されたアルキル、アルケニル、またはアルキニル基を意味する。「アシルアミノ」は、窒素がアシル基に結合されている基を含む。アシルアミノの例には、アルキルカルボニルアミノ、アリールカルボニルアミノ、カルバモイル、およびウレイド基が含まれるが、それらに限定されない。
【０３３２】
「アミド」または「アミノカルボキシ」なる用語は、カルボニルまたはチオカルボニル基の炭素に結合されている窒素原子を含む化合物または部分を含む。この用語は、カルボニルまたはチオカルボニル基の炭素に結合されているアミノ基に結合されたアルキル、アルケニルまたはアルキニル基を含む「アルカミノカルボキシ」基を含む。この用語は、カルボニルまたはチオカルボニル基の炭素に結合されているアミノ基に結合されたアリールまたはヘテロアリール部分を含む「アリールアミノカルボキシ」基も含む。「アルキルアミノカルボキシ」、「アルケニルアミノカルボキシ」、「アルキニルアミノカルボキシ」および「アリールアミノカルボキシ」なる用語は、アルキル、アルケニル、アルキニルおよびアリール部分がそれぞれ、カルボニル基の炭素に結合されている窒素原子に結合された部分を含む。アミドは、直鎖アルキル、分枝アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリールまたは複素環などの置換基で置換され得る。アミド基上の置換基は、さらに置換されていてもよい。
【０３３３】
窒素を含む本開示の化合物を、酸化剤（例えば、3-クロロ過安息香酸（m-CPBA）および/または過酸化水素）での処理によってN-オキシドに変換して、本開示の他の化合物を得ることができる。したがって、表示および特許請求するすべての窒素含有化合物は、原子価および構造によって許容される場合、表示する化合物およびそのN-オキシド誘導体（N→OまたはN+-O-と示すことができる）の両方を含むと考えられる。さらに、他の場合において、本開示の化合物内の窒素は、N-ヒドロキシまたはN-アルコキシ化合物に変換することができる。例えば、N-ヒドロキシ化合物は、m-CPBAなどの酸化剤による親アミンの酸化によって調製することができる。表示および特許請求するすべての窒素含有化合物は、原子価および構造によって許容される場合、表示する化合物ならびにそのN-ヒドロキシ（すなわち、N-OH）およびN-アルコキシ（すなわち、N-OR、ここでRは置換または無置換C1-C6アルキル、C1-C6アルケニル、C1-C6アルキニル、3〜14員炭素環または3〜14員複素環である）誘導体の両方を含むとも考えられる。
【０３３４】
本明細書において、化合物の構造式は、いくつかの場合において便宜上一定の異性体を表すが、本開示は幾何異性体、不斉炭素に基づく光学異性体、立体異性体、互変異性体などのすべての異性体を含み、ただしすべての異性体が同じレベルの活性を有し得ないことが理解される。加えて、その式によって表される化合物に結晶多形が存在してもよい。任意の結晶形態、結晶形態混合物、またはその無水物もしくは水和物が本開示の範囲に含まれる。
【０３３５】
「異性」は、同一の分子式を有するが、それらの原子の結合の順序または空間内でのそれらの原子の配置が異なる化合物を意味する。空間内でのそれらの原子の配置が異なる異性体は「立体異性体」と呼ぶ。互いに鏡像でない立体異性体は「ジアステレオマー」と呼び、互いに重ねることができない鏡像体である立体異性体は「エナンチオマー」、または時には光学異性体と呼ぶ。反対のキラリティーを有する個々のエナンチオマー形態を等量含有する混合物は「ラセミ混合物」と呼ぶ。
【０３３６】
4つの同一ではない置換基に結合された炭素原子は「キラル中心」と呼ぶ。
【０３３７】
「キラル異性体」は、少なくとも1つのキラル中心を有する化合物を意味する。複数のキラル中心を有する化合物は、個々のジアステレオマーとして、または「ジアステレオマー混合物」と呼ぶジアステレオマーの混合物としてのいずれかで存在してもよい。1つのキラル中心が存在する場合、立体異性体を、そのキラル中心の絶対配置（RまたはS）によって特徴づけてもよい。絶対配置は、キラル中心に結合された置換基の空間における配置を意味する。考慮中のキラル中心に結合された置換基は、Sequence Rule of Cahn, Ingold and Prelogに従って順位付けされる。(Cahn et al., Angew. Chem. Inter. Edit. 1966, 5, 385; errata 511；Cahn et al., Angew. Chem. 1966, 78, 413；Cahn and Ingold, J. Chem. Soc. 1951 (London), 612；Cahn et al., Experientia 1956, 12, 81；Cahn, J. Chem. Educ. 1964, 41, 116）。
【０３３８】
「幾何異性体」は、二重結合またはシクロアルキルリンカー（例えば、1,3-シクロブチル）のまわりの回転障害により存在する、ジアステレオマーを意味する。これらの立体配置は、接頭辞シスおよびトランス、またはCahn-Ingold-Prelogの規則に従って、基が分子中の二重結合の同じ側にあるか反対側にあるかを示すZおよびEによってその名称が区別される。
【０３３９】
本開示の化合物は、異なるキラル異性体または幾何異性体として示し得ることが理解されるべきである。同様に、化合物がキラル異性形態または幾何異性形態を有する場合、すべての異性形態は本開示の範囲内に含まれることが意図され、化合物の名称は任意の異性形態を除外しないことも理解されるべきであるが、すべての異性体が同じレベルの活性を有し得ないことが理解される。
【０３４０】
さらに、本開示において論じる構造および他の化合物は、そのすべてのアトロプ異性体を含むが、すべてのアトロプ異性体が同じレベルの活性を有し得ないことが理解される。「アトロプ異性体」は、2つの異性体の原子が空間中で異なる配置をとる立体異性体の一種である。アトロプ異性体は、中心結合のまわりの大きな基の回転障害によって、回転が制限されるために生じる。このようなアトロプ異性体は典型的には混合物として存在するが、最近のクロマトグラフィ技術の進歩の結果、特定の場合には2つのアトロプ異性体の混合物を分離することが可能となった。
【０３４１】
「互変異性体」は、平衡状態で存在し、1つの異性形態から別の異性形態に容易に変換される2つ以上の構造異性体の1つである。この変換は、隣接する共役二重結合の交換を伴う水素原子のホルマール移動を生じる。互変異性体は、溶液中では、互変異性の組の混合物として存在する。互変異性体化が起こり得る溶液では、互変異性体の化学平衡に到達すると考えられる。互変異性体の正確な割合は、温度、溶媒およびpHを含むいくつかの因子に依存する。互変異性化によって相互変換可能な互変異性体の概念は、互変異性と呼ぶ。
【０３４２】
可能な互変異性の様々な種類のうち、2つが一般的に観察される。ケト-エノール互変異性において、電子と水素原子の同時シフトが起こる。環鎖互変異性は、糖鎖分子中のアルデヒド基（-CHO）が同じ分子中のヒドロキシ基（-OH）の1つと反応して、グルコースによって表される環式（環状）形態を生じた結果として起こる。
【０３４３】
一般的な互変異性体の対は、ケトン-エノール、アミド-ニトリル、ラクタム-ラクチム、複素環におけるアミド-イミド酸互変異性（例えば、グアニン、チミンおよびシトシンなどの核酸塩基において）、アミン-エナミンおよびエナミン-エナミンである。
【０３４４】
本開示の化合物は、異なる互変異性体として示されてもよいことが理解されるべきである。化合物が互変異性形態を有する場合、すべての互変異性形態は本開示の範囲内に含まれることが意図され、化合物の名称は任意の互変異性形態を除外しないことも理解されるべきである。一定の互変異性体は他の互変異性体よりも高いレベルの活性を有し得ることが理解されるであろう。
【０３４５】
「結晶多形」、「多形」または「結晶形態」なる用語は、化合物（またはその塩もしくは溶媒和物）が異なる結晶充填配置で結晶化し得る結晶構造であって、その配置がすべて同じ元素組成を有するものを意味する。異なる結晶形態は通常、異なるX線回折パターン、赤外スペクトル、融点、密度硬度、結晶形状、光学および電気的特性、安定性ならびに溶解性を有する。再結晶溶媒、結晶化速度、貯蔵温度、および他の因子により、1つの結晶形態が優勢となることがある。化合物の結晶多形は、異なる条件下での結晶化によって調製することができる。
【０３４６】
本明細書に記載の任意の式の化合物は、化合物自体、ならびに該当する場合はそれらの塩、およびそれらの溶媒和物を含む。本明細書に記載の任意の式の化合物は、任意の方法によって産生された、例えば、合成的に産生された、または代謝的に産生された化合物を含む。例えば、塩はアニオンと、本開示の化合物上の正に荷電した基（例えば、アミノ）との間で形成され得る。適切なアニオンには、塩素イオン、臭素イオン、ヨウ素イオン、硫酸イオン、硫酸水素イオン、スルファミン酸イオン、硝酸イオン、リン酸イオン、クエン酸イオン、メタンスルホン酸イオン、トリフルオロ酢酸イオン、グルタミン酸イオン、グルクロン酸イオン、グルタル酸イオン、リンゴ酸イオン、マレイン酸イオン、コハク酸イオン、フマル酸イオン、酒石酸イオン、トシル酸イオン、サリチル酸イオン、乳酸イオン、ナフタレンスルホン酸イオン、および酢酸イオン（例えば、トリフルオロ酢酸イオン）が含まれる。「薬学的に許容されるアニオン」なる用語は、薬学的に許容される塩を形成するのに適したアニオンを意味する。同様に、塩はカチオンと、本開示の化合物上の負に荷電した基（例えば、カルボン酸）との間でも形成され得る。適切なカチオンには、ナトリウムイオン、カリウムイオン、マグネシウムイオン、カルシウムイオン、およびテトラメチルアンモニウムイオンなどのアンモニウムカチオンが含まれる。いくつかの適切な置換アンモニウムイオンの例は、エチルアミン、ジエチルアミン、ジシクロヘキシルアミン、トリエチルアミン、ブチルアミン、エチレンジアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、ピペラジン、ベンジルアミン、フェニルベンジルアミン、コリン、メグルミン、およびトロメタミン、ならびにリジンおよびアルギニンアドのアミノ酸から誘導されるものである。本開示の化合物は、四級窒素原子を含む塩も含む。
【０３４７】
適切な無機アニオンの例には、以下の無機酸から誘導されるものが含まれるが、それらに限定されない：塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、亜硫酸、硝酸、亜硝酸、リン酸、および亜リン酸。適切な有機アニオンの例には、以下の有機酸から誘導されるものが含まれるが、それらに限定されない：2-アセチオキシ安息香酸、酢酸、アスコルビン酸、アスパラギン酸、安息香酸、カンファースルホン酸、ケイ皮酸、クエン酸、エデト酸、エタンジスルホン酸、エタンスルホン酸、フマル酸、グルコヘプトン酸、グルコン酸、グルタミン酸、グリコール酸、ヒドロキシマレイン酸、ヒドロキシナフタレンカルボン酸、イセチオン酸、乳酸、ラクトビオン酸、ラウリン酸、マレイン酸、リンゴ酸、メタンスルホン酸、ムチン酸、オレイン酸、シュウ酸、パルミチン酸、パモ酸、パントテン酸、フェニル酢酸、フェニルスルホン酸、プロピオン酸、ピルビン酸、サリチル酸、ステアリン酸、コハク酸、スルファニル酸、酒石酸、トルエンスルホン酸、および吉草酸。適切なポリマー有機アニオンには、以下のポリマー酸から誘導されるものが含まれるが、それらに限定されない：タンニン酸、カルボキシメチルセルロース。
【０３４８】
加えて、本開示の化合物、例えば、化合物の塩は、水和もしくは非水和（無水）形態、または他の溶媒分子との溶媒和物としてのいずれかで存在し得る。水和物の非限定例には、一水和物、二水和物などが含まれる。溶媒和物の非限定例には、エタノール溶媒和物、アセトン溶媒和物などが含まれる。
【０３４９】
「溶媒和物」は、化学量論量または非化学量論量のいずれかの溶媒を含む溶媒付加形態を意味する。いくつかの化合物は、結晶性固体状態において固定モル比の溶媒分子を捕捉する傾向があり、したがって溶媒和物を形成する。溶媒が水である場合、形成される溶媒和物は水和物であり；溶媒がアルコールである場合、形成される溶媒和物はアルコラートである。水和物は、水の1つまたは複数の分子と物質の1つの分子との組み合わせによって形成され、ここで水はその分子状態をH2Oとして保持する。水和物は、例えば、一水和物、二水和物、三水和物などと呼ぶ。
【０３５０】
活性化合物の対応する溶媒和物を調製する、精製する、および/または扱うことが好都合であり得る。本開示の化合物は、求核性溶媒（H2O、RAOH、RANH2、RASH）がPBD部分のイミン結合に付加する化合物を含み、溶媒が水またはアルコール（RAOH、ここでRAは前述のエーテル置換基である）である場合を以下に例示する。
2019522660.tif 000185
【０３５１】
これらの形態はPBDのカルビノールアミンおよびカルビノールアミンエーテル形態と呼ぶことができる。これらの平衡のバランスは、化合物が見出される状態、ならびに部分自体の性質に依存する。
【０３５２】
これらの化合物は、例えば、凍結乾燥によって、固体形態で単離してもよい。
【０３５３】
本明細書において定義する「誘導体」なる用語は、共通のコア構造を有し、本明細書に記載の様々な基で置換された化合物を意味する。例えば、式（I）によって表される化合物はすべて、ピロロ[2,1-c][1,4]ベンゾジアゼピン化合物（PBD）であり、共通のコアとして式（I）を有する。
【０３５４】
「バイオアイソスター」なる用語は、原子または原子団を、別の大まかに類似した原子または原子団と交換することによって生じる化合物を意味する。バイオアイソスターによる置き代えの目的は、親化合物と類似の生物学的特性を有する新しい化合物を作ることである。バイオアイソスターによる置き代えは、物理化学またはトポロジーに基づいてもよい。カルボン酸バイオアイソスターの例には、アシルスルホンイミド、テトラゾール、スルホネートおよびホスホネートが含まれるが、それらに限定されない。例えば、Patani and LaVoie, Chem. Rev. 96, 3147-3176, 1996を参照されたい。
【０３５５】
本開示は、本発明の化合物に存在する原子のすべての同位体を含むことが意図される。同位体は、同じ原子番号を有するが異なる質量数を有する原子を含む。一般的な例として、水素の同位体にはトリチウムおよびジュウテリウムが含まれ、炭素の同位体にはC-13およびC-14が含まれるが、それらに限定されない。
【０３５６】
本開示は、本明細書に記載の任意の式の化合物およびその結合体の合成法を提供する。本開示は、実施例に示す以下のスキームによる、本開示の様々な開示する化合物および結合体の詳細な合成法も提供する。
【０３５７】
説明全体を通して、組成物が特定の成分を有する、包含する、または含むと記載されている場合、組成物は列挙される成分から本質的になるか、または列挙される成分からなることも企図される。同様に、方法またはプロセスが特定の処理段階を有する、包含する、または含むと記載されている場合、プロセスは列挙される処理段階から本質的になるか、または列挙される処理段階からなる。さらに、段階の順序または特定の行為を実施する順序は、本発明が操作可能である限り、重要ではないことが理解されるべきである。さらに、2つ以上の段階または行為を同時に実施することもできる。
【０３５８】
本開示の合成プロセスは、多様な官能基を許容することができ、したがって、様々な置換された出発物質を用いることができる。プロセスは一般には、全プロセスの終了時または終了近くで所望の最終化合物を提供するが、一定の場合には、化合物をその薬学的に許容される塩にさらに変換することが望ましいこともある。
【０３５９】
本開示の化合物は、市販の出発原料、文献で公知の化合物を用いて、または容易に調製される中間体から、当業者には公知の、または本明細書の教示に照らせば当業者には明らかな、標準の合成法および手順を用いることによって、様々なやり方で調製することができる。有機分子の調製ならびに官能基変換および操作のための標準の合成法および手順は、関連する科学文献または当該分野の標準の教科書から得ることができる。任意の1つまたはいくつかの情報源に限定されないが、参照により本明細書に組み入れられるSmith, M. B., March, J., March's Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure, 5th edition, John Wiley & Sons: New York, 2001；Greene, T.W., Wuts, P.G. M., Protective Groups in Organic Synthesis, 4th Edition, Wiley-Interscience, 2007；R. Larock, Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers (1989)；L. Fieser and M. Fieser, Fieser and Fieser's Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1994)；およびL. Paquette, ed., Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1995)などの古典的な教科書が有用であり、当業者に公知の有機合成の基準教科書と認識されている。以下の合成法の説明は、本開示の化合物を調製する一般手順を例示することを企図しており、限定することを企図するものではない。
【０３６０】
本明細書に記載の任意の式を有する本開示の化合物は、市販の出発原料または文献の手順を用いて調製し得る出発原料から、スキーム1Aおよび1Bならびに実施例に例示する手順に従って調製してもよい。スキーム1Aおよび1Bならびに実施例中の変数（m、t、R1、R7、R8、X1、Y1、Z1、X2、X3、Z2などの）は、特に記載がないかぎり、本明細書に記載の任意の式中で定義されるとおりである。
【０３６１】
当業者であれば、本明細書に記載の反応順序および合成スキーム中、保護基の導入および除去などの、一定の段階の順序は変更し得ることに気づくであろう。
【０３６２】
当業者であれば、一定の基は保護基の使用を介して反応条件からの保護を必要とし得ることを理解するであろう。保護基は、分子内の類似の官能基を区別するために用いてもよい。保護基のリストならびにこれらの保護基をいかにして導入および除去するかは、Greene, T.W., Wuts, P.G. M., Protective Groups in Organic Synthesis, 4th Edition, Wiley-Interscience, 2007において見出すことができる。
【０３６３】
好ましい保護基には下記が含まれるが、それらに限定されない：
ヒドロキシル部分に対して：TBS、ベンジル、THP、Ac；
カルボン酸に対して：ベンジルエステル、メチルエステル、エチルエステル、アリルエステル；
アミンに対して：Cbz、BOC、DMB；
ジオールに対して：Ac（×2）、TBS（×2）、または一緒になる場合はアセトニド；
チオールに対して：Ac；
ベンズイミダゾールに対して：SEM、ベンジル、PMB、DMB；
アルデヒドに対して：ジアルキルアセタール、例えば、ジメトキシアセタールまたはジエチルアセチル。
【０３６４】
本明細書に記載の反応スキームにおいて、複数の立体異性体が生じることがある。特定の立体異性体が示されない場合、反応から生成し得るすべての可能な立体異性体を意味することが理解される。当業者であれば、1つの異性体を優先的に得るために反応を最適化することができ、または単一の異性体を生成するために新しいスキームを考案してもよいことを理解するであろう。混合物が生じた場合、分取薄層クロマトグラフィ、分取HPLC、分取キラルHPLC、または分取SFC（超臨界流体クロマトグラフィ）などの技術を用いて、異性体を分離してもよい。
【０３６５】
式（I）の化合物をスキーム1Aおよび1Bの様式で調製してもよく、ここでスキーム1Aおよび1BはそれぞれX4がCHまたはNである式（I）の化合物のためのものである。
【０３６６】
スキーム1A。式（I）の化合物を調製するための一般手順
2019522660.tif 000186
【０３６７】
1つの態様において、前記スキーム1Aに例示するとおり、化合物A中のR8を標準の保護基を用いて保護する。合成の次の段階、パートIは、化合物Aの化合物Bへの薗頭カップリングで、続いて化合物Cを塩基により環化して（パートII）化合物Dを得る。次の段階は化合物Dを保護複素環化合物にカップリングし、続いて新しく付加した複素環化合物を脱保護して化合物Eを得る（パートIII）。必要があれば、カップリングおよび脱保護（パートIII）のさらなる周期を行うこともできる。カップリングおよび脱保護の段階を、標準のアミドカップリングおよび脱保護試薬を用いて実施する。
【０３６８】
化合物Eの化合物Fとの結合は、標準のアミド結合形成条件下、例えば、HOBtまたはDMAPおよびEDC.HClまたはEDAC存在下で行う。この段階（パートIV）で、化合物F中、R10''は、例えば、アリルオキシカルボニル（alloc）、カルボベンジルオキシ（Cbz）、p-メトキシベンジルカルボニル（MozまたはMeOZ）、アセチル（Ac）、ベンゾイル（Bz）、ベンジル（Bn）、トリクロロエトキシカルボニル（Troc）、t-ブトキシカルボニル（BOC）または9-フルオレニルメチレンオキシカルボニル（Fmoc）などの窒素保護基であり；かつR11''は、例えば、テトラヒドロピラニル（THP）、シリルエーテル、メチルエーテル、アルキルエーテル、またはベンジルエーテルなどの水素または酸素保護基である。
【０３６９】
合成における最終段階（パートV）では、化合物Gを脱保護し、同時にR8基を脱保護して、化合物Hを得る。
【０３７０】
スキーム1B。式（I）の化合物を調製するための一般手順
2019522660.tif 000187
【０３７１】
1つの態様において、前記スキーム1Bに例示するとおり、化合物A中のR8を標準の保護基を用いて保護する。合成の次の段階、パートIは、化合物AとR10'''が窒素保護基である化合物Bとの間の酸化的カップリングで、続く脱保護により化合物Cを得る（パートI）。化合物Cから化合物Gの合成は、化合物Dから化合物Hの合成についてスキーム1Aに記載したのと同じである。
【０３７２】
官能基の保護および脱保護の方法は、当技術分野において周知で、例えば、Wuts, P. G. M. and Greene, T. W., Protective Groups in Organic Synthesis, 4th Edition, Wiley-Interscience, 2007に記載されている。窒素およびヒドロキシル保護基の両方が存在する場合、これらは好ましくは同じ条件で除去できるように選択される。
【０３７３】
この脱保護を式HQRQの溶媒中で実施する場合、R10およびR11はそれぞれHおよびQRQである。または、これらの基は、脱保護を実施する溶媒とは異なる溶媒に化合物を加えることによって導入してもよい。
【０３７４】
前述の式（I）の化合物の、-SOxMとしてR11を有する化合物への変換は、適切な亜硫酸水素塩またはスルフィン酸塩の添加と、続く精製段階により達成してもよい。さらなる方法は米国特許第4,309,437号およびWO2012/128868に記載されており、これらはそれぞれ参照により本明細書に組み入れられる。
【０３７５】
本開示の結合体は、市販の出発原料、それぞれ文献で公知の化合物、抗体、および抗体断片を用いて、または容易に調製される中間体から、当業者には公知の、または本明細書の教示に照らせば当業者には明らかな、標準の合成法および手順を用いることによって、様々なやり方で調製することができる。例えば、抗体または抗体断片が式（VI）の位置E''またはD''で化合物に直接または間接的に連結されている、式（I）の化合物の結合体の合成のために、WO2011/13063、WO2011/130616、WO2015/159076、WO2015/052535、WO2015/052534、WO2015/052321、WO2014/130879、WO2014/096365、WO2014/057122、WO2014/057073、WO2013/164593、WO2013/055993、WO2013/055990、WO2013/053873、WO2013/053871、WO2013/041606、WO2011/130616、およびWO2011/130613に開示されている方法およびリンカーを用いてもよい。これらの公報はそれぞれその全体が参照により本明細書に組み入れられる。
【０３７６】
別の例として、抗体または抗体断片が位置R''7で化合物に直接または間接的に連結されている、式（I）の化合物の結合体の合成のために、WO2014/140174(A1)およびWO2016/037644に開示されている方法およびリンカーを用いてもよい。これらの公報はそれぞれその全体が参照により本明細書に組み入れられる。
【０３７７】
別の例として、抗体または抗体断片が位置R''10で化合物に直接または間接的に連結されている、式（I）の化合物の結合体の合成のために、WO 2016/044560、WO 2016/044396、WO 2016/040723、WO2015/159076、WO2015/095227、WO2015/095124、WO2015/052535、WO2015/052534、WO2015/052322、WO 2015/023355、WO2014/174111、WO2014/096368、WO2014/057122、WO2014/057074、WO2014/022679、WO2014/011519、WO2014/011518、WO2013/177481、WO2013/055987、WO2011/130598、およびWO2011/128650に開示されている方法およびリンカーを用いてもよい。これらの公報はそれぞれその全体が参照により本明細書に組み入れられる。
【０３７８】
一般手順A：タンパク質（抗体）の部分選択還元
ポリマー-薬物結合体との結合の前に、関連する抗体中の鎖間ジスルフィド基または不対ジスルフィドの部分選択還元を、例えば、TCEP、DTT、またはβ-メルカプトエタノールなどの還元剤を用いて達成する。還元を過剰の還元剤で実施する場合、SECによる結合の前に還元剤を除去する。抗体ジスルフィド基の反応性スルフヒドリル基への変換の程度は、抗体、還元剤の化学量論、pH、温度および/または反応の持続時間に依存する。抗体中のジスルフィド基のいくらかが還元されたが、すべてではない場合、還元された抗体は部分還元抗体である。
【０３７９】
一般手順B：部分還元抗体のポリマー薬物結合体との結合
部分還元抗体のポリマー-薬物結合体との結合を、中性またはわずかに塩基性条件（pH6.5〜8.5）下、1〜10mg/mLの抗体濃度および0.5〜10mg/mLのポリマー-薬物結合体濃度で行う。ポリマー-薬物結合体は、典型的には、所望のタンパク質-ポリマー-薬物結合体の化学量論に対して1〜5.0倍過剰で用いる。抗体をポリマー-薬物結合体のマレイミド基に結合する場合、例えば、N-アセチルシステイン、システインメチルエステル、N-メチルシステイン、2-メルカプトエタノール、3-メルカプトプロパン酸、2-メルカプト酢酸、メルカプトメタノール（すなわち、HOCH2SH）、ベンジルチオールなどの、水溶性マレイミドブロッキング化合物の添加により、結合を任意に停止する。
【０３８０】
得られる抗体-ポリマー-薬物結合体を、典型的には、透析ろ過により精製して、任意の非結合ポリマー-薬物結合体、非結合薬物および小分子不純物を除去する。代わりに、または加えて、例えば、サイズ排除クロマトグラフィ、疎水性相互作用クロマトグラフィ、例えば、WCXクロマトグラフィなどのイオンクロマトグラフィ；逆相クロマトグラフィ、ヒドロキシルアパタイトクロマトグラフィ、アフィニティクロマトグラフィまたはそのクロマトグラフィなどの、適切なクロマトグラフィによる分離手順を用いて、抗体-ポリマー-薬物結合体を精製してもよい。得られる精製した抗体-ポリマー-薬物結合体を、典型的には、pH5.0〜6.5の緩衝液中で製剤する。
【０３８１】
他の抗体および/または抗体断片を含む、他の抗体-薬物結合体を、本明細書に記載の手順に類似の方法で合成する。同様に、薬物と抗体との様々な比を有する抗体-薬物結合体を、抗体スルフヒドリル基の数および薬物負荷を変動させることにより得る。
【０３８２】
前述の方法によって設計、選択、および/または最適化した化合物および結合体を生成した後、当業者には公知の様々な検定を用いて特徴づけて、化合物または結合体が生物活性を有するかどうかを判定することができる。例えば、化合物または結合体を、以下に記載する検定を含むが、それらに限定されない、通常の検定により特徴づけて、予想される活性、結合活性および/または結合特異性を有するかどうかを判定することができる。
【０３８３】
さらに、高処理量スクリーニングを用いて、そのような検定を用いた分析を迅速化することもできる。その結果、本明細書に記載の結合体分子の活性を、当技術分野において公知の技術を用いて速やかにスクリーニングすることが可能であり得る。高処理量スクリーニングを実施するための一般的方法論は、例えば、Devlin (1998) High Throughput Screening, Marcel Dekker；および米国特許第5,763,263号に記載されている。高処理量検定は、以下に記載するものを含むが、それらに限定されない、1つまたは複数の異なる検定技術を用いることができる。
【０３８４】
一定の態様において、本明細書に開示する化合物および結合体の活性は、インビトロ試験（例えば、DNA結合検定またはCellTiter-Glo(登録商標) Luminescent Cell Viability Assay）またはインビボ試験（例えば、マウスにおける腫瘍異種移植試験）により特徴づけることができる。DNA、特にオリゴヌクレオチドに結合する本開示の化合物の能力は、Rahman, K. M., et al., Journal of the American Chemical Society 2009, 131, 13756 - 12766およびNarayanaswamy, M., et al., Analytical Biochemistry 2008, 374, 173-181に記載の、イオン対逆相HPLC検定を用いて測定することができる。DNA結合親和性は、Wells, G., et al., Journal of Medicinal Chemistry 2006, 49, 5442-5461；Jenkins, T. C., et al., Journal of Medicinal Chemistry 1994, 37, 4529-4537；およびGregson, S. J., et al., Journal of Medicinal Chemistry 2001, 44, 737-748に記載の、ウシ胸腺DNA熱変性検定を用いて評価することもできる。抗体-薬物結合体のインビトロでの効力は、細胞増殖検定により測定することができる。CellTiter-Glo(登録商標) Luminescent Cell Viability Assayは、鞘翅目ルシフェラーゼの組換え発現に基づく、市販（Promega Corp., Madison, Wis.）のホモジニアス検定法である。（米国特許第5,583,024号；第5,674,713号および第5,700,670号）。
【０３８５】
腫瘍成長阻害（％TGI）は、処置群と対照群との間の腫瘍体積中央値（MTV）の相違パーセントと定義される。処置の有効性を、試験中に観察された腫瘍サイズの退縮反応の発生率および規模から判定することができる。処置は動物の腫瘍の部分退縮（PR）または完全退縮（CR）を引き起こし得る。
【０３８６】
同様に含まれるのは、安定化剤、緩衝剤などの許容される担体中に、本明細書に開示する1つまたは複数の化合物および/または結合体を含む、薬学的組成物である。結合体は、薬学的組成物を形成するための安定化剤、緩衝剤などと共に、またはこれらなしで、標準的手段によって対象に投与および導入することができる。投与は局所（眼ならびに膣および直腸送達を含む粘膜を含む）、肺、例えば、ネブライザーを含む、散剤またはエアロゾルの吸入または通気による；気管内、鼻内、表皮および経皮、経口または静脈内、動脈内、皮下、腹腔内もしくは筋肉内注射もしくは注入を含む非経口投与、あるいは頭蓋内、例えば、くも膜下腔内または脳室内投与であってもよい。結合体は、注射投与用の滅菌溶液および/もしくは懸濁液；注射/注入前の再構成用の凍結乾燥粉末；局所組成物；経口投与用の錠剤、カプセル剤、もしくはエリキシル剤；または直腸投与用の坐剤、ならびに当技術分野において公知の他の組成物として製剤し、使用することができる。
【０３８７】
薬理学的組成物または製剤とは、細胞または、例えば、ヒトを含む対象への投与、例えば、全身投与に適した形態の組成物または製剤を意味する。適切な形態は、部分的には、用途または侵入経路、例えば、経口、吸入、経皮、もしくは注射/注入に依存する。そのような形態は、組成物または製剤の標的細胞（すなわち、薬物の送達が望ましい細胞）への到達を妨げてはならない。例えば、血流中に注射する薬理学的組成物は可溶性でなければならない。他の因子は当技術分野において公知で、毒性および組成物または製剤の効果発揮を妨げる形態などの考察を含む。
【０３８８】
「全身投与」とは、インビボ全身吸収または修飾ポリマーの血流中の蓄積と、その後の全身への分布を意味する。全身吸収につながる投与経路には、静脈内、皮下、腹腔内、吸入、経口、肺内、および筋肉内が含まれるが、それらに限定されない。これらの投与経路はそれぞれ、化合物または結合体を到達可能な患部組織に曝露する。活性作用物質の循環中への侵入速度は、分子量またはサイズの関数であることが明らかにされている。本開示の結合体の使用は、抗体の特異性を介して、がん細胞などの一定の細胞に薬物送達を局在化させ得る。
【０３８９】
「薬学的に許容される製剤」とは、結合体の所望の活性に最も適した身体の位置における結合体の有効な分布を可能にする組成物または製剤を意味する。1つの態様において、有効な送達は、有効性の低減または毒性を引き起こし得る、網内系によるクリアランスまたは非特異的結合の前に起こる。結合体との製剤に適した作用物質の非限定例には：活性作用物質のCNS中への侵入を増強し得る、P-糖タンパク質阻害剤（プルロニックP85などの）；脳内移植後の持続放出送達のための、ポリ(DL-ラクチド-コグリコリド)ミクロスフェアなどの、生分解性ポリマー；および活性作用物質を血液脳関門を通して送達し得、かつニューロン取り込みメカニズムを変更し得る、ポリブチルシアノアクリレート製のものなどの、負荷ナノ粒子が含まれる。
【０３９０】
同様に本明細書に含まれるのは、貯蔵または投与のために調製された薬学的組成物で、これらは薬学的に許容される担体または希釈剤中に所望の化合物および/または結合体の有効量を含む。治療的使用のために許容される担体、希釈剤、および/または賦形剤は、薬学の技術分野において周知である。例えば、緩衝剤、保存剤、充填剤、分散剤、安定化剤、色素が提供され得る。加えて、抗酸化剤および懸濁化剤を用いることができる。適切な担体、希釈剤および/または賦形剤の例には：（1）約1mg/ml〜25mg/mlのヒト血清アルブミンを含む、ダルベッコリン酸緩衝食塩水、pH約6.5、（2）0.9％食塩水（0.9％w/v NaCl）、および（3）5％（w/v）デキストロースが含まれるが、それらに限定されない。
【０３９１】
本明細書において用いられる「有効量」なる用語は、特定された疾患もしくは状態を処置、改善、もしくは予防するため、または検出可能な治療もしくは阻害効果を示すための、薬剤の量を意味する。効果は、当技術分野において公知の任意の検定または方法によって検出することができる。対象のための正確な有効量は、対象の体重、サイズ、および健康；状態の性質および程度；ならびに投与のために選択した治療剤または治療剤の組み合わせに依存することになる。所与の状況のための有効量は、臨床医の技術および判断の範囲内である日常的実験によって決定することができる。好ましい局面において、疾患または状態は遺伝子サイレンシングを介して処置することができる。
【０３９２】
任意の化合物または結合体について、有効量を最初は、例えば、新生細胞の細胞培養検定において、または動物モデル、通常はラット、マウス、ウサギ、イヌ、もしくはブタにおいて推定することができる。動物モデルはまた、適切な濃度範囲および投与経路を決定するために用いてもよい。次いで、そのような情報を用いて、ヒトにおける有用な用量および投与経路を決定することができる。治療的/予防的有効性および毒性は、細胞培養または実験動物における標準の薬学的手順、例えば、ED50（集団の50％で治療的に有効な用量）およびLD50（集団の50％に対して致死的な用量）によって決定してもよい。毒性と治療効果との間の用量比が治療指数であり、LD50/ED50の比として表すことができる。大きい治療指数を示す薬学的組成物が好ましい。用量は、用いる剤形、患者の感受性、および投与経路に応じて、この範囲内で変動し得る。
【０３９３】
例えば、薬物もしくはその誘導体、薬物-ポリマー結合体またはADC（抗体-薬物-ポリマー結合体および抗体-薬物結合体を含む）を、CellTiter Glo(登録商標)を用いていくつかの細胞株における腫瘍成長を阻害するそれらの能力について評価することができる。用量反応曲線を、SoftMax Proソフトウェアを用いて作成することができ、IC50値を4パラメーター曲線フィッティングから決定することができる。用いる細胞株は、試験結合体に含まれる抗体の標的であるもの、および抗体の標的でない対照細胞株を含み得る。
【０３９４】
1つの態様において、本開示のPBD化合物および/または結合体を、通常のカテーテル技術または注入の使用を含む注射による非経口投与用に製剤する。注射用製剤は、単位剤形、例えば、保存剤を添加したアンプルまたは多用量容器で提供してもよい。化合物および/または結合体は、無菌媒質中で非経口投与することができる。化合物および/または結合体は、用いる媒体および濃度に依存して、媒体中に懸濁または溶解することができる。有利に、局所麻酔剤、保存剤、および緩衝剤などの補助剤を媒体に溶解することができる。本明細書において用いられる「非経口」なる用語は、経皮、皮下、血管内（例えば、静脈内）、筋肉内、またはくも膜下腔内注射または注入技術などを含む。化合物および/または結合体の1つまたは複数は、1つまたは複数の非毒性の薬学的に許容される担体および/または希釈剤および/または補助剤、ならびに望まれる場合には他の活性成分と共に存在することができる。
【０３９５】
無菌注射用製剤は、非毒性の非経口的に許容される希釈剤または溶媒中の、例えば、1,3-ブタンジオール溶液としての、注射用液剤または懸濁剤であることもできる。用いることができる、許容される媒体および溶媒の中には、水、リンゲル液、および等張塩化ナトリウム溶液がある。加えて、無菌固定油は溶媒または懸濁媒として慣習的に用いられる。この目的のために、合成モノまたはジグリセリドを含む、無刺激固定油を用いることができる。加えて、オレイン酸などの脂肪酸も注射剤の製剤において用いられる。
【０３９６】
本明細書に記載のPBD化合物、結合体および組成物は、適切な剤形で、好ましくは非経口、より好ましくは静脈内投与してもよい。非経口投与のために、化合物、結合体または組成物は、水性または非水性無菌液剤、懸濁剤または乳剤であり得る。プロピレングリコール、植物油およびオレイン酸エチルなどの注射用有機エステルを溶媒または媒体として用いることができる。組成物は補助剤、乳化剤または分散剤を含むこともできる。
【０３９７】
本明細書において開示するPBD化合物について、適切な用量レベルは、例えば、処置する疾患の種類、疾患の重症度および経過、化合物を予防または治療目的のいずれで投与するか、以前の治療、患者の病歴などの、いくつかの因子に依存することになる。疾患の種類および重症度に応じて、例えば、1回もしくは複数回の別々の投与によるか、または持続的注入によるかにかかわらず、約100ng〜約25mg（例えば、約1μg/kg〜15mg/kg、約0.1〜20mg/kg）の化合物が、患者への投与のための初期候補用量である。典型的な1日用量は、前述の因子に応じて、約1μg/kg〜100mg/kgまたはそれ以上の範囲である。患者に投与する化合物の例示的用量は、患者の体重1kgあたり約0.1〜約10mgの範囲である。数日間またはそれ以上にわたる繰り返し投与のために、状態に応じて、疾患症状の所望の抑制が得られるまで処置を続ける。例示的な投与計画は、化合物の約4mg/kgの初回負荷量と、続いて毎週、2週間毎、または3週間毎の追加用量を投与するクールを含む。他の投与計画が有用であることもある。本治療の進捗は、通常の技術および検定により容易にモニターされる。本明細書において開示する範囲は、対象の体重に基づく投与量で表し、当業者であれば対象の体表面積あたりの投与量として容易に表すことができる。例えば、成人の1mg/kg体重は約37mg/m2に、また小児の1mg/kg体重は約25mg/m2に等しい。
【０３９８】
本明細書において開示するPBD結合体について、1日に体重1kgあたり約0.01mg〜約200mgの間の程度の用量レベルが、標的状態の処置において有用である（1日に対象1人あたり約0.05mg〜約7gの間）。いくつかの態様において、患者に投与する用量は対象の体重1kgあたり約0.01mg〜約100mgの間である。いくつかの態様において、患者に投与する用量は対象の体重1kgあたり約0.01mg〜約15mgの間である。いくつかの態様において、患者に投与する用量は対象の体重1kgあたり約0.1mg〜約15mgの間である。いくつかの態様において、患者に投与する用量は対象の体重1kgあたり約0.1mg〜約20mgの間である。いくつかの態様において、投与する用量は対象の体重1kgあたり約0.1mg〜約5mgの間または約0.1mg〜約10mgの間である。いくつかの態様において、投与する用量は対象の体重1kgあたり約1mg〜約15mgの間である。いくつかの態様において、投与する用量は対象の体重1kgあたり約1mg〜約10mgの間である。
【０３９９】
単一剤形を生成するために担体材料と組み合わせ得る化合物または結合体の量は、処置する宿主および特定の投与様式に応じて変動する。単位剤形は一般に約0.01mg〜約200mgの間；0.01mg〜約150mgの間；0.01mg〜約100mgの間；約0.01mg〜約75mgの間；または約0.01mg〜約50mgの間；または約0.01mg〜約25mgの間の結合体を含み得る。例えば、本開示のPBD化合物または結合体を、それを必要としている対象（例えば、ヒト患者）に、約100mgを1日3回、または約150mgを1日2回、または約200mgを1日2回、または約50〜70mgを1日3〜4回、または約100〜125mgを1日2回の用量で投与することができる。
【０４００】
いくつかの態様において、結合体を以下のとおりに投与することができる。結合体を毎日、約5日間、各日に静脈内ボーラスで約5日間、または持続的注入で約5日間のいずれかで投与することができる。
【０４０１】
または、結合体を1週間に1回、6週間またはそれ以上投与することができる。別の代替法として、結合体を2週間または3週間に1回投与することもできる。ボーラス用量は約50〜約400mlの生理食塩水中で投与し、これに約5〜約10mlのヒト血清アルブミンを加えることができる。持続的注入は、24時間の間に約250〜約500mlの生理食塩水中で投与し、これに約25〜約50mlのヒト血清アルブミンを加えることができる。
【０４０２】
いくつかの態様において、処置の約1〜約4週間後、患者は治療の第2クールを受けることができる。投与経路、賦形剤、希釈剤、用量、および回数に関する特定の臨床プロトコルは、臨床状況の正当な理由として、当業者が決定することができる。
【０４０３】
特定の対象のための特定の用量レベルは、特定の化合物または結合体の活性、年齢、体重、全身の健康、性別、食事、投与の時間、投与経路、および排出速度、他の活性作用物質との組み合わせ、および治療中の特定の疾患の重症度を含む、様々な因子に依存することが理解される。
【０４０４】
非ヒト動物への投与のために、化合物または結合体を動物飼料または飲料水に加えることもできる。動物飼料および飲料水を、動物が治療的に適切な量の化合物または結合体をその食餌と共に摂取するように調合することが好都合であり得る。化合物または結合体を、試料または飲料水に加えるためのプレミックスとして提供することも好都合であり得る。
【０４０５】
本明細書において開示するPBD化合物および結合体を、全体の治療効果を高めるために他の治療化合物と組み合わせて対象に投与することもできる。適応症を処置するための複数の化合物の使用は、有益な効果を増大させる一方で、副作用の存在を低減することができる。いくつかの態様において、化合物または結合体を、米国特許第7,303,749号、U.S. 2016/0031887およびU.S. 2015/0133435に開示されるものなどの、化学療法剤との組み合わせで用い、これらの開示はそれぞれその全体が参照により本明細書に組み入れられる。他の態様において、化学療法剤には、レトロゾール、オキサリプラチン、ドセタキセル、5-FU、ラパチニブ、カペシタビン、ロイコボリン、エルロチニブ、ペルツズマブ、ベバシズマブ、およびゲムシタビンが含まれるが、それらに限定されない。
【０４０６】
本開示は、1つまたは複数の化学療法剤を含む、本開示の1つまたは複数の化合物、結合体および/または組成物を充填した、1つまたは複数の容器を含む、薬学的キットも提供する。そのようなキットは、例えば、他の化合物および/または組成物、化合物および/または組成物を投与するためのデバイス、ならびに薬学的または生物学的製品の製造、使用または販売を規制する政府機関によって規定された形態の説明書も含み得る。
【０４０７】
別の局面において、本開示のPBD化合物および結合体を、動物（好ましくは哺乳動物、最も好ましくはヒトで、男性、女性、乳幼児、小児および成人を含む）の処置法において用いる。
【０４０８】
本開示の結合体を用いて、標的部位にPBD結合体を提供してもよい。
【０４０９】
標的部位は好ましくは増殖細胞集団である。抗体は増殖細胞集団中に存在する抗原に対する抗体である。
【０４１０】
1つの態様において、増殖細胞集団、例えば腫瘍細胞集団中に存在する抗原の量に比べて、非増殖細胞集団中に抗原は存在しないか、または低いレベルで存在する。
【０４１１】
標的部位は、インビトロ、インビボ、またはエクスビボであってもよい。
【０４１２】
本開示の抗体-薬物結合体（ADC）には、抗がん活性の有用性を有するものが含まれる。特に、ADCには、PBD部分にリンカーによって結合された、すなわち共有結合された抗体が含まれる。
【０４１３】
標的部位において、リンカーは切断されなくてもよい。本開示のADCは、PBD薬物部分を遊離するためにリンカーを切断することなく、細胞毒性効果を有してもよい。本開示のADCは、細胞毒性物質を腫瘍組織に選択的に送達し、それによってより高い選択性、すなわちより低い有効用量が達成され得る。
【０４１４】
さらなる局面において、本明細書に記載の結合体は増殖性疾患の処置において使用するためのものである。本開示の第2の局面は、増殖性疾患を処置するための薬剤の製造における結合体化合物の使用を提供する。
【０４１５】
当業者であれば、候補結合体が任意の特定の細胞種の増殖性状態を処置するか否かを容易に判定することができる。例えば、特定の化合物によって提供される活性を評価するために都合よく使用し得る検定を、以下の実施例に記載する。
【０４１６】
「増殖性疾患」なる用語は、インビトロまたはインビボにかかわらず、新生物または過形成成長など、望まれない過剰な細胞または異常な細胞の、望まれないまたは無制御の細胞増殖に関する。
【０４１７】
増殖性状態の例には、新生物および腫瘍（例えば、組織球腫、神経膠腫、星状細胞腫、骨腫）、がん（例えば、肺がん、小細胞肺がん、胃腸がん、腸がん、結腸がん、乳がん、卵巣がん、前立腺がん、精巣がん、肝がん、腎がん、膀胱がん、膵がん、脳がん、肉腫、骨肉腫、カポジ肉腫、黒色腫）、白血病、乾癬、骨疾患、線維増殖性障害（例えば、結合組織の）、およびアテローム性動脈硬化を含むが、それらに限定されない、良性、前悪性、および悪性細胞増殖が含まれるが、それらに限定されない。特に興味が持たれるがんには、白血病および卵巣がんが含まれるが、それらに限定されない。
【０４１８】
肺、胃腸（例えば、腸、結腸を含む）、胸部（乳房）、卵巣、前立腺、肝臓（肝）、腎臓（腎）、膀胱、膵臓、脳、および皮膚を含むが、それらに限定されない、任意の種の細胞を処置し得る。
【０４１９】
1つの態様において、処置は膵がんの処置である。
【０４２０】
1つの態様において、処置は細胞の表面にαvβ6インテグリンを有する腫瘍の処置である。
【０４２１】
本開示のADCを用いて、例えば、腫瘍抗原の過剰発現によって特徴づけられる、様々な疾患または障害を処置し得ることが企図される。例示的状態または過剰増殖性障害には、良性または悪性腫瘍；白血病、血液、およびリンパ球悪性病変が含まれる。他にはニューロン障害、グリア障害、星状細胞障害、視床下部障害、腺障害、マクロファージ障害、上皮障害、間質障害、割腔障害、炎症性障害、血管新生障害、および自己免疫を含む免疫学的障害が含まれる。
【０４２２】
概して処置する疾患または障害は、がんなどの過剰増殖性疾患である。本明細書において処置するがんの例には、がん腫、リンパ腫、芽細胞腫、肉腫、および白血病またはリンパ球悪性病変が含まれるが、それらに限定されない。そのようながんのより具体的な例には、扁平上皮がん（例えば、上皮扁平上皮がん）、小細胞肺がん、非小細胞肺がん、肺の腺がんおよび肺の扁平上皮がんを含む肺がん、腹腔のがん、肝細胞がん、胃腸がんを含む胃がん、膵がん、膠芽腫、子宮頸がん、卵巣がん、肝臓がん、膀胱がん、肝細胞腫、乳がん、結腸がん、直腸がん、結腸直腸がん、子宮内膜または子宮がん、唾液腺がん、腎がん、前立腺がん、外陰がん、甲状腺がん、肝がん、肛門がん、陰茎がん、ならびに頭頸部がんが含まれる。
【０４２３】
処置においてADC化合物を用い得る自己免疫疾患には、リウマチ学的障害（例えば、関節リウマチ、シェーグレン症候群、強皮症、SLEおよびループス腎炎などのループス、多発性筋炎/皮膚筋炎、クリオグロブリン血症、抗リン脂質抗体症候群、および乾癬性関節炎などの）、骨関節炎、自己免疫性胃腸および肝障害（例えば、炎症性腸疾患（例えば、潰瘍性大腸炎およびクローン病）、自己免疫性胃炎および悪性貧血、自己免疫性肝炎、原発性胆汁性肝硬変、原発性硬化性胆管炎、およびセリアック病などの）、血管炎（例えば、チャーグ・ストラウス血管炎、ウェゲナー肉芽腫症、および多発動脈炎を含むANCA関連血管炎などの）、自己免疫性神経障害（例えば、多発性硬化症、眼球クローヌス・ミオクローヌス症候群、重症筋無力症、視神経脊髄炎、パーキンソン病、アルツハイマー病、および自己免疫性多発ニューロパチーなどの）、腎障害（例えば、糸球体腎炎、グッドパスチャー症候群、およびベルジェ病などの）、自己免疫性皮膚障害（例えば、乾癬、じん麻疹（urticaria）、じん麻疹（hives）、尋常性天疱瘡、類天疱瘡、および皮膚エリテマトーデスなどの）、血液障害（例えば、血小板減少性紫斑病、血栓性血小板減少性紫斑病、輸血後紫斑病、および自己免疫性溶血性貧血などの）、アテローム性動脈硬化、ぶどう膜炎、自己免疫性聴覚疾患（例えば、内耳疾患および難聴などの）、ベーチェット症候群、レイノー症候群、臓器移植、ならびに自己免疫性内分泌障害（例えば、インスリン依存性糖尿病（IDDM）、アジソン病、および自己免疫性甲状腺疾患（例えば、グレーブス病および甲状腺炎）などの糖尿病関連自己免疫疾患などの）が含まれる。より好ましいそのような疾患には、例えば、関節リウマチ、潰瘍性大腸炎、ANCA関連血管炎、ループス、多発性硬化症、シェーグレン症候群、グレーブス病、IDDM、悪性貧血、甲状腺炎、および糸球体腎炎が含まれる。
【０４２４】
状態を処置する文脈において本明細書において用いられる「処置」なる用語は通常、ヒトまたは動物（例えば、獣医学的適用において）のいずれかにかかわらず、その処置および治療に関し、ここでいくらかの所望の治療効果、例えば、状態の進行の阻害が達成され、進行速度の低下、進行速度の停止、状態の退行、状態の改善、および状態の治癒を含む。予防的手段（すなわち、予防、防止）としての処置も含まれる。
【０４２５】
それを必要としている対象/患者は、動物、哺乳動物、有胎盤哺乳動物、有袋類（例えば、カンガルー、ウォンバット）、単孔類（例えば、カモノハシ）、げっ歯類（例えば、モルモット、ハムスター、ラット、マウス）、ネズミ（例えば、マウス）、ウサギ類（例えば、ウサギ）、鳥類（例えば、トリ）、イヌ科（例えば、イヌ）、ネコ科（例えば、ネコ）、ウマ科（例えば、ウマ）、ブタ類（例えば、ブタ）、ヒツジ類（例えば、ヒツジ）、ウシ属（例えば、雌ウシ）、霊長類、シミアン（例えば、サルまたは類人猿）、サル（例えば、マモセット、ヒヒ）、類人猿（例えば、ゴリラ、チンパンジー、オランウータン、テナガザル）、またはヒトであり得る。
【０４２６】
さらに、対象/患者は、任意のその発生の形態、例えば、胎児であってもよい。1つの好ましい態様において、対象/患者はヒトである。
【０４２７】
1つの態様において、患者は、各患者が細胞の表面にαvβ6インテグリンを有する腫瘍を有する集団である。
【０４２８】
本発明の方法を実施する際の、一定の態様において、結合体はさらに診断標識を含むか、またはそれを伴う。一定の例示的態様において、診断標識は、ガンマシンチグラフィおよびPETのための放射性薬剤または放射性同位体、磁気共鳴画像法（MRI）のための造影剤、コンピュータ断層撮影法のための造影剤、X線画像法のための造影剤、超音波診断法のための薬剤、中性子活性化のための薬剤、X線を反射、散乱または影響し得る部分、超音波、ラジオ波およびマイクロ波、ならびにフルオロフォアからなる群より選択される。一定の例示的態様において、結合体をインビボでさらにモニターする。
【０４２９】
診断標識の例には、ガンマシンチグラフィおよびPETのための診断用放射性薬剤または放射性同位体、磁気共鳴画像法（MRI）のための造影剤（例えば、常磁性原子および超常磁性ナノ結晶）、コンピュータ断層撮影法のための造影剤、X線画像法のための造影剤、超音波診断法のための薬剤、中性子活性化のための薬剤、およびX線を反射、散乱または影響し得る部分、超音波、ラジオ波およびマイクロ波、ならびに様々な光学手順におけるフルオロフォアなどが含まれるが、それらに限定されない。診断用放射性薬剤には、□-放射性核種、例えば、インジウム-111、テクネチウム-99mおよびヨウ素-131などが含まれる。MRI（磁気共鳴画像法）のための造影剤には、帯磁化合物、例えば、常磁性イオン、鉄、マンガン、ガドリニウム、ランタニド、有機常磁性部分ならびに超常磁性、強磁性および反強磁性化合物、例えば、酸化鉄コロイド、フェライトコロイドなどが含まれる。コンピュータ断層撮影法および他のX線による画像法のための造影剤には、X線を吸収する化合物、例えば、ヨウ素、バリウムなどが含まれる。超音波による方法のための造影剤には、超音波を吸収、反射および散乱し得る化合物、例えば、乳剤、結晶、気泡などが含まれる。さらに他の例には、ボロンおよびガドリニウムなどの、中性子活性化のために有用な物質が含まれる。さらに、X線、超音波、ラジオ波、マイクロ波および診断手順において有用な他の光線を反射、屈折、散乱、またはそれ以外に影響し得る標識を用いることができる。蛍光標識を光画像法のために用いることができる。一定の態様において、モディファイヤーは常磁性イオンまたは基を含む。
【０４３０】
本明細書において引用するすべての出版物および特許文書は、それぞれのそのような出版物または文書が参照により本明細書に組み入れられると具体的かつ個別に示されたがごとく、参照により本明細書に組み入れられる。出版物および特許文書の引用は、いずれかが関連する先行技術であると自認する意図はなく、またその内容または日付に関するいかなる自認を構成するものでもない。本発明を書面によって記載してきたが、当業者であれば、本発明を様々な態様で実施することができ、かつ前述の説明および以下の実施例は例示のためのものであって、添付の特許請求の範囲を限定するものではないことを理解するであろう。
【実施例】
【０４３１】
以下の作業実施例は、リンカー、薬物分子および抗体または抗体断片、ならびにそれらの調製法の例示である。これらは限定を意図するものではなく、当業者であれば、他の試薬または方法を用い得ることを容易に理解するであろう。
【０４３２】
略語
以下の略語を、以下の反応スキームおよび合成実施例において用いる。有機合成の当業者には容易に理解される、さらなる標準的略語も、合成スキームおよび実施例において使用し得るため、このリストは本出願において用いられる略語の包括的リストを意味するものではない。
略語：
ACN  アセトニトリル
Alloc  アリルオキシカルボニル
BAIB  (ジアセトキシヨード)ベンゼン
BOC  tert-ブチルオキシカルボニル
DIC  N,N'-ジイソプロピルカルボジイミド
DABCO  1,4-ジアザビシクロ[2.2.2]オクタン
DBU  2,3,4,6,7,8,9,10-オクタヒドロピリミド[1,2-a]アゼピン
DCM  ジクロロメタン
DIEA  N,N-ジイソプロピルエチルアミン
DMAP  N,N-ジメチルピリジン-4-アミン
DMA  ジメチルアセトアミド
DMF  ジメチルホルムアミド
EDAC  N1-((エチルイミノ)メチレン)-N3,N3-ジメチルプロパン-1,3-ジアミン塩酸塩
EDC.HCl  1-エチル-3-[3-ジメチルアミノプロピル]カルボジイミド塩酸塩
EG2  ジエチレングリコール
EDTA  エチレンジアミン四酢酸
EtOH  エタノール
EtOAc  酢酸エチル
HATU  2-(1H-7-アザベンゾトリアゾル-1-イル)-1,1,3,3-テトラメチルウロニウムヘキサフルオロリン酸塩
HOAt  1-ヒドロキシ-7-アザベンゾトリアゾール
HOBt  ヒドロキシベンゾトリアゾール
Hex  ヘキサン
MES  2-(N-モルホリノ)エタンスルホン酸
NMP  N-メチルピロリドン
TCEP  トリス[2-カルボキシエチル]ホスフィン
TEAA  酢酸トリエチルアンモニウム
TEMPO  2,2,6,6-テトラメチル-1-ピペリジニルオキシ
TFA  トリフルオロ酢酸
THF  テトラヒドロフラン
MI  マレイミド
pTSA  パラトルエンスルホン酸
PDI  多分散指数
PHF  ポリ(1-ヒドロキシメチルエチレンヒドロキシルメチルホルマール)、またはFLEXIMER(登録商標)
RP-HPLC  逆相高性能液体クロマトグラフィ
SEC  サイズ排除クロマトグラフィ
WCX  弱カチオン交換クロマトグラフィ
【０４３３】
一般情報
4-(tert-ブトキシカルボニルアミノ)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボン酸はChem-Impex International, Wood Dale, ILから購入した。
【０４３４】
4-(4-(4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキサミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボン酸はAlberta Research Chemicals, Inc., Edmonton, Canadaから購入した。
【０４３５】
4-(4-(4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボン酸はAlberta Research Chemicals, Inc., Edmonton, Canadaから購入した。5-(6-(アリルオキシカルボニルアミノ)-1H-ベンゾ[d]イミダゾル-2-イル)-1-メチル-1H-ピロル-3-アミニウムクロリドカルボキシレートはAlberta Research Chemicals, Inc., Edmonton, Canadaから購入した。
【０４３６】
4-(4-(4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボン酸メチルはAlberta Research Chemicals, Inc., Edmonton, Canadaから購入した。
【０４３７】
3-(2-(2-(3-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロル-1-イル)プロパンアミド)エトキシ)エトキシ)プロパン酸2,5-ジオキソピロリジン-1-イルはQuanta BioDesign, San Diego, CAから購入した。
【０４３８】
腫瘍成長阻害（％TGI）は、処置群と対照群との間の腫瘍体積中央値（MTV）の差パーセントと定義した。
【０４３９】
処置有効性は、試験中に観察された腫瘍サイズの退縮反応の発生率および程度から判定した。処置は、動物の腫瘍の部分退縮（PR）または完全退縮（CR）を引き起こし得る。PR反応では、腫瘍体積は試験中の連続3回の測定でその第1日の体積の50％以下であり、かつこれら3回の測定の1つまたは複数で13.5mm3以上であった。CR反応では、腫瘍体積は試験中の連続3回の測定で13.5mm3未満であった。試験終了時にCR反応を示した動物を、無腫瘍生存動物（TFS）としてさらに分類した。動物を退縮反応についてモニターした。
【０４４０】
HPLC精製をPhenomenex Gemini 5μm 110Å、250×10mm、5ミクロン、半分取用カラムで実施した。
【０４４１】
可能な場合はいつでも、結合体の薬物含有量を分光測定により判定するか、さもなくば薬物含有量の判定のためにLC/MSまたは1H-NMRを実施した。
【０４４２】
タンパク質-ポリマー-薬物結合体のタンパク質含有量は、280nmの分光測定により、またはELISAにより判定した。
【０４４３】
本明細書に記載の薬物-ポリマー-抗体結合体、薬物-ポリマー結合体、薬物担持ポリマー骨格、または抗体担持ポリマー骨格はそれぞれ典型的には≦1.5、例えば、＜1.2の多分散指数（PDI）を有する。
【０４４４】
抗体-ポリマー-薬物結合体、薬物担持ポリマー骨格、または抗体担持ポリマー骨格は、高度透析ろ過により精製（すなわち、残存する未反応薬物、抗体、またはポリマー出発原料の除去）することができる。必要があれば、サイズ排除クロマトグラフィによるさらなる精製を行って、任意の凝集抗体-ポリマー-薬物結合体を除去することもできる。通常、精製した抗体-ポリマー-薬物結合体は、典型的には、SECで判定して5％未満（例えば、＜2重量％）の凝集抗体-ポリマー-薬物結合体；RP-HPLCで判定して0.5％未満（例えば、＜0.1重量％）の遊離（非結合）薬物；SECで判定して1％未満のポリマー-薬物結合体；およびHIC-HPLCで判定して2％未満（例えば、＜1重量％）の非結合抗体または抗体断片を含む。
【０４４５】
実施例1：
(S,Z)-N-(4-(5-アミノ-1H-ベンゾ[d]イミダゾル-2-イル)フェニル)-4-(4-(7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-2,3,5,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イルオキシ)ブタンアミド)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド（9）の合成
2019522660.tif 000188
【０４４６】
パートA：
DMF/水（30：1、5.0mL）中の4-ニトロベンゼン-1,2-ジアミン（0.487g、3.18mmol）（1）および(4-ホルミルフェニル)カルバミン酸tert-ブチル（0.774g、3.50mmol）の溶液に、オキソン（2.07g、2.07mmol）を加えた。混合物を室温で3時間撹拌し、次いでNaHCO3の飽和水溶液（50mL）に加えた。水性混合物をEtOAc（3×50mL）で抽出した。有機抽出物を合わせ、水（50mL）および食塩水（50mL）で逐次洗浄し、次いでMgSO4で乾燥した。粗生成物をシリカゲル（ヘキサン：EtOAc、0〜80％B）で精製して、tert-ブチル4-(5-ニトロ-1H-ベンゾ[d]イミダゾル-2-イル)フェニルカルバメート（2）を 赤色固体で得た（1.10g、収率82％、純度80％）。
2019522660.tif 000189
【０４４７】
パートB：
THF（5mL）中の化合物2（1.1g、3.10mmol）の溶液に、トリエチルアミン（0.433mL、3.10mmol）、DMAP（0.038g、0.310mmol）、および二炭酸ジ-t-ブチル（1.02g、4.66mmol）を逐次加えた。反応混合物を遮光、アルゴン雰囲気下、室温で終夜撹拌した。粗製反応混合物をEtOAc（60mL）で希釈し、NH4Cl（20mL）と、続いて食塩水（20mL）で洗浄した。有機相をMgSO4で乾燥し、減圧下で濃縮した。粗製反応混合物をシリカゲル（ヘキサン：EtOAc、0〜50％B）で精製して、ジ-bocおよびトリ-boc保護材料の混合物を得た（0.724gの黄色固体）。次いで、この混合物をboc脱保護条件（7.5mL DCM/TFA、2：1、0 C、5時間）にかけて、粗製TFA塩を得た。粗製TFA塩をMeOH（10mL）に溶解し、塩化アセチル（3mL）と共に30分間撹拌した。溶媒を減圧下で除去して、4-(5-ニトロ-1H-ベンゾ[d]イミダゾル-2-イル)ベンゼンアミニウムクロリド（3）を褐色固体で得た（0.394g、1.2mmol）。
2019522660.tif 000190
【０４４８】
パートC：
DMF（1.5mL）中の4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボン酸（204mg、0.847mmol）の懸濁液に、EDC.HCl（162mg、0.847mmol）およびHOAt（115mg、0.847mmol）を加え、混合物を室温で約10分間撹拌した。この混合物に、化合物3（271mg、0.932mmol）と、続いてDIEA（0.443mL、2.54mmol）を加え、混合物をアルゴン雰囲気下、室温で終夜撹拌した。4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボン酸（0.423mmol）、HOAt（0.423mmol）、およびEDC.HCl（0.423mmol）の追加分を加え、混合物を5時間撹拌し、この時点でLCMSは反応の完了を示した。粗製混合物をEtOAc（90mL）で希釈し、水（2×30mL）および食塩水（30mL）で逐次洗浄し、次いでMgSO4で乾燥して減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲル（24gカラム、Hex：EtOAc、0〜100％B）で精製して、tert-ブチル1-メチル-2-(4-(5-ニトロ-1H-ベンゾ[d]イミダゾル-2-イル)フェニルカルバモイル)-1H-イミダゾル-4-イルカルバメート（4）を得た（195mg、収率44％）。
2019522660.tif 000191
【０４４９】
パートD：
DMF/MeOH（1.7：1、4mL）中の化合物4（125mg、0.262mmol）の溶液に、10％Pd/C（12.4mg）を加えた。フラスコを脱気し、アルゴン（3×）を充填し、最後に脱気してH2（3×）を充填した。4時間後、さらにPd/C（10mg）を加え、混合物を室温で終夜撹拌した。粗製反応混合物をセライトを通してろ過し、次いで減圧下で濃縮した。粗製残渣をEtOAc（200mL）で希釈し、水（2×60mL）で洗浄した。水相をEtOAc（40mL）で抽出した。有機相を食塩水（75mL）で洗浄し、MgSO4で乾燥し、次いで減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲル（DCM：MeOH、0〜15％B）で精製して、tert-ブチル2-(4-(5-アミノ-1H-ベンゾ[d]イミダゾル-2-イル)フェニルカルバモイル)-1-メチル-1H-イミダゾル-4-イルカルバメート（5）を黄色固体で得た（116mg、収率99％）。
2019522660.tif 000192
【０４５０】
パートE：
無水DCM（2mL）中の化合物5（110mg、0.246mmol）およびDIEA（42.8μL、0.246mmol）の氷冷溶液に、クロロギ酸アリル（27.5μL、0.258mmol）を加えた。氷浴を除去し、混合物を室温で終夜撹拌した。DIEA（42.8μL）およびクロロギ酸アリル（27.5μL）の追加分を加え、反応混合物を数時間撹拌した。クロロギ酸エステル（0.5当量）の最終分を加え、混合物を終夜撹拌した。反応混合物をDCM（30mL）で希釈し、各10mLの飽和NH4Cl水溶液、水、飽和NaHCO3水溶液、水、および食塩水で逐次洗浄した。有機相をMgSO4で乾燥し、減圧下で濃縮して、アリル5-(アリルオキシカルボニルアミノ)-2-(4-(4-(tert-ブトキシカルボニルアミノ)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド)フェニル)-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-1-カルボキシレート（6）を粘稠固体で得（136mg、収率90％）、これをそれ以上精製せずに次の段階で用いた。ESI-MS: C31H34N7O7 (M + H) 616.3; found 616.1。
【０４５１】
パートF：
無水DCM（3mL）中の化合物6（136mg、0.221mmol）の氷冷溶液に、アルゴン雰囲気下、TFA（1.5mL）を加えた。混合物を、LCMSが反応完了を示すまで0℃で撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をMeOH（5mL）に溶解した。水（1mL）中のK2CO3（0.184g）の溶液を加え、混合物を室温で1時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、残渣を飽和NaHCO3水溶液（30mL）で希釈し、EtOAc（3×30mL）で抽出した。有機層をMgSO4で乾燥し、減圧下で濃縮し、次いでシリカゲル（DCM：MeOH、0〜15％B）で精製して、アリル2-(4-(4-アミノ-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド)フェニル)-1H-ベンゾ[d]イミダゾル-5-イルカルバメート（7）を得た（40mg、収率42％）。
2019522660.tif 000193
【０４５２】
パートG：
THF（0.4mL）中の4-(((11S,11aS)-10-((アリルオキシ)カルボニル)-7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-11-((テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)オキシ)-2,3,5,10,11,11a-ヘキサヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イル)オキシ)ブタン酸（US20150133435(A1))に記載の手順の改変により調製、40mg、0.075mmol）の溶液に、NMP（0.1mL）と、続いてEDC.HCl（14mg、0.090mmol）を加えた。混合物を約5分間撹拌した後、NMP（0.2mL）中の化合物7（39mg、0.090mmol）、DIEA（16.4μL、0.105mmol）、およびDMAP（9.2mg、0.075mmol）の混合物を加えた。得られた混合物を室温で終夜撹拌した。EDC.HCl（9.6mg）およびDIEA（8.2μL）の追加分を加え、撹拌をさらに数時間続けた。次いで、反応混合物をEtOAc（30mL）で希釈し、各10mLの飽和NH4Cl水溶液、水、飽和NaHCO3、および食塩水で逐次洗浄した。粗製反応混合物をシリカゲル（DCM：MeOH、0〜10％B）で精製して、(11S,11aS)-アリル8-(4-(2-(4-(5-(アリルオキシカルボニルアミノ)-1H-ベンゾ[d]イミダゾル-2-イル)フェニルカルバモイル)-1-メチル-1H-イミダゾル-4-イルアミノ)-4-オキソブトキシ)-7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-11-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イルオキシ)-2,3,11,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-10(5H)-カルボキシレート（8）を得た（54mg、収率65％）。ESI-MS C49H54N9O11 (M + H) 944.4; found 944.2。
【０４５３】
パートH：
THF（無水、脱気、1mL）中の化合物8（54mg、0.049mmol）の溶液に、トリフェニルホスフィン（24mg、0.024mmol）およびピロリジン（9.98μL、0.122mmol）を加え、混合物を室温で撹拌した。5分後、テトラキストリフェニルホスフィンパラジウム（5.6mg、0.0049mmol）を加え、混合物をアルゴン雰囲気下、室温で約2時間撹拌し、この時点でLCMSは反応完了を示した。反応混合物をろ過して不溶性材料を除去し、分取逆相HPLC（いずれも0.1％ギ酸を含む水：ACN；勾配：25分で10〜90％）で精製して、表題化合物（9）を得た（12mg、収率37％）。ESI-MS: C36H36N9O5 (M + H) 674.3; found 674.2。
【０４５４】
実施例2：
(S)-N-(4-(5-アミノ-1H-インドル-2-イル)フェニル)-4-(4-((7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-2,3,5,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イル)オキシ)ブタンアミド)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド（18）の合成
2019522660.tif 000194
【０４５５】
パートA：
THF（3.5mL、あらかじめ5〜10分間脱気）中の2-ヨード-4-ニトロアニリン（10）（500mg、1.9mol）、ビス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(II)二塩酸塩（66.5mg、0.095mmol）、およびヨウ化銅(I)（18mg、0.095mmol）の懸濁液に、トリエチルアミン（792μL、5.68mmol）および4-エチニルニリン（266mg、2.3mmol）を逐次加えた。混合物をアルゴン雰囲気下、室温で3時間撹拌し、この時点でLCMSは反応完了を示した。粗製反応混合物をEtOAc（90mL）で希釈し、水および食塩水（各30mL）で逐次洗浄した。有機層をMgSO4で乾燥し、減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲル（ヘキサン：EtOAc、0〜100％B）で精製して、2-((4-アミノフェニル)エチニル)-4-ニトロアニリン（11）を橙色固体で得た（454mg、収率95％）。
2019522660.tif 000195
【０４５６】
パートB：
無水NMP（6mL）中の化合物11（454mg、1.8mmol）の溶液に、カリウムt-ブトキシド（362mg、3.2mmol）を加え、得られた混合物をアルゴン雰囲気下、80℃で2時間撹拌した。次いで、反応混合物をEtOAc（180mL）で希釈し、水で洗浄した。次いで、水相をEtOAc（60mL）で抽出した。合わせた有機相をMgSO4で乾燥し、次いで減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲル（ヘキサン：EtOAc、0〜100％B）で精製して、4-(5-ニトロ-1H-インドル-2-イル)アニリン（12）を赤橙色固体で得た（340mg、収率75％）。
2019522660.tif 000196
【０４５７】
パートC：
無水DMF（4mL）中の化合物12（340mg、1.3mmol）の溶液に、4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボン酸（324mg、1.3mmol）、EDC.HCl（309mg、1.6mmol）、DMAP（164mg、1.3mmol）、およびDIEA（234μL、1.3mmol）を加えた。DMF（2mL）を追加して、混合物の均質性を改善し、内容物を室温で終夜撹拌した。EDC.HCl（0.6当量）をさらに加え、混合物を室温で2日間撹拌した。反応混合物をEtOAc（90mL）で希釈し、飽和NH4Cl水溶液（30mL）、水（30mL）、飽和NaHCO3水溶液（30mL）、および食塩水（30mL）で逐次洗浄した。有機相をMgSO4で乾燥し、減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲル（ヘキサン：EtOAc、0〜100％B）で精製して、tert-ブチル1-メチル-2-(4-(5-ニトロ-1H-インドル-2-イル)フェニルカルバモイル)-1H-イミダゾル-4-イルカルバメート（13）を橙色固体で得た（214mg、収率34％）。
2019522660.tif 000197
【０４５８】
パートD：
EtOH/水（4mL、20：1）中の化合物13（210mg、0.375mmol）の懸濁液に、Fe粉末（21mg、0.38mmol）およびCaCl2（42mg、0.38mmol）を加え、混合物をアルゴン雰囲気下、60℃で撹拌した。反応をLCMSでモニターした。DMF（4mL）を加えて、混合物の均質性を改善し、Fe粉末（121mg）およびCaCl2（62mg）を追加した。2日後、反応混合物をセライトを通してろ過し、減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲル（DCM/MeOH、0〜20％B）で精製して、tert-ブチル2-(4-(5-アミノ-1H-インドル-2-イル)フェニルカルバモイル)-1-メチル-1H-イミダゾル-4-イルカルバメート（14）を得た（118mg、収率71％）。
2019522660.tif 000198
【０４５９】
パートE：
アセトン（1mL）中の化合物14（110mg、0.246mmol）の溶液に、アセトン（約0.3mL）中のアリル(2,5-ジオキソピロリジン-1-イル)カーボネート（54mg、0.271mmol）の溶液と、続いて水（0.3mL）中のNaHCO3（23mg、0.27mmol）を加えた。混合物を室温で3〜4時間撹拌し、この時点でLCMSは反応完了を示した。反応混合物をEtOAc（45mL）で希釈し、水（15mL）と、次いで食塩水（15mL）で逐次洗浄した。有機相をMgSO4で乾燥し、減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲル（ヘキサン：EtOAc、0〜60％B）で精製して、化合物15を黄色泡状物で得た（59mg、収率45％）。
2019522660.tif 000199
【０４６０】
パートF：
ジオキサン（2mL）中の化合物15（59mg、0.11mmol）の溶液に、ジオキサン中の4M HCl溶液（2mL）をアルゴン雰囲気下で加えた。溶液を遮光下、室温で終夜撹拌した。次いで、アルゴンを反応混合物に通気して、過剰のHClを除去し、混合物を濃縮し、高減圧下で乾燥して、5-(アリルオキシカルボニルアミノ)-2-(4-(4-アンモニオ-1-メチル-1H-イミダゾル-2--3-イウムカルボキサミド)フェニル)-1H-インドリウムクロリド（16）を赤色固体で得た（16）（77mg、収率100％）。ESI-MS: C23H23N6O3 (M + H) 431.2; found 430.9。
【０４６１】
パートG：
DMA（1.5mL）中の化合物16（80mg、0.15mmol）、DMAP（18.9mg、0.16mmol）、4-(((11S,11aS)-10-((アリルオキシ)カルボニル)-7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-11-((テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)オキシ)-2,3,5,10,11,11a-ヘキサヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イル)オキシ)ブタン酸（（US20150133435(A1)に記載の手順の改変により調製、82.1mg、0.16mmol））およびDIEA（107.8μL、0.60mmol）の溶液に、EDC.HCl（35.6mg、0.19mmol）を加え、得られた混合物を遮光、アルゴン雰囲気下で終夜撹拌した。反応混合物をEtOAc（30mL）で希釈し、飽和NH4Cl、水、および食塩水（各10mL）で逐次洗浄した。有機相をMgSO4で乾燥し、減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲル（DCM：MeOH、0〜10％B）で精製して、(11aS)-アリル8-(4-(2-(4-(5-(アリルオキシカルボニルアミノ)-1H-インドル-2-イル)フェニルカルバモイル)-1-メチル-1H-イミダゾル-4-イルアミノ)-4-オキソブトキシ)-7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-11-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イルオキシ)-2,3,11,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-10(5H)-カルボキシレート（17）を淡橙色固体で得た（28.9mg、収率20％）。
2019522660.tif 000200
【０４６２】
パートH：
無水、脱気THF（1mL）中の化合物17（25mg、0.027mmol）の溶液に、トリフェニルホスフィン（3.5mg、0.013mmol）およびピロリジン（5.5μL、0.066mmol）を加え、混合物を室温で撹拌した。5分後、テトラキストリフェニルホスフィンパラジウム（3mg、0.003mmol）を加え、得られた混合物を室温で2時間撹拌し、この時点でLCMSは反応完了を示した。粗製混合物を逆相HPLC（いずれも0.1％ギ酸を含む水：ACN；勾配：25分間で10〜90％）で精製し、凍結乾燥して、表題化合物（18）を淡黄色固体で得た（3.4mg、収率19％）。ESI-MS: C37H37N8O5 673.3; found 672.8。
【０４６３】
実施例3：
(S,Z)-N-(5-(4-(5-アミノ-1H-ベンゾ[d]イミダゾル-2-イル)フェニルカルバモイル)-1-メチル-1H-ピロル-3-イル)-4-(4-(7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-2,3,5,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イルオキシ)ブタンアミド)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド（24）の合成
2019522660.tif 000201
【０４６４】
パートA：
MeOH（20mL）中のtert-ブチル(4-(5-ニトロ-1H-ベンゾ[d]イミダゾル-2-イル)フェニル)カルバメート2（実施例1に記載のとおりに調製、1g、2.82mmol）および10％Pd炭素（0.030g、0.282mmol）の溶液を水素（1気圧）中で6時間撹拌した。LC-MSは反応完了を示した。反応混合物をセライトを通してろ過し、触媒を除去した、ろ液を濃縮し、ISCOカラム（0〜15％MeOH/DCM）で精製して、tert-ブチル(4-(5-アミノ-1H-ベンゾ[d]イミダゾル-2-イル)フェニル)カルバメート（19）を得た（710mg、収率78％）。ESI MS: C18H18N4O4 (M+H) 354.1; found 353.9。
【０４６５】
パートB：
ACN（3mL）および水（5mL）中の化合物19（710mg、2.189mmol）および炭酸水素ナトリウム（221mg、2.63mmol）の氷冷混合物に、ACN（2mL）中のアリル(2,5-ジオキソピロリジン-1-イル)カーボネート（480mg、2.408mmol）の溶液を加えた。得られた混合物を室温で16時間撹拌した。反応混合物をEtOAc（30mL）で希釈し、食塩水で洗浄した。有機相をMgSO4で乾燥し、減圧下で濃縮した。次いでシリカゲル（Hex：EtOAc、0〜80％B）で精製して、tert-ブチル(4-(5-(((アリルオキシ)カルボニル)アミノ)-1H-ベンゾ[d]イミダゾル-2-イル)フェニル)カルバメート（20）を得た（625mg、収率69.9％）。ESI MS: C22H24N4O4 (M+H) 409.2; found 408.9。
【０４６６】
パートC：
ジオキサン（3.0mL）中の化合物20（625mg、1.530mmol）に、窒素雰囲気下、0℃でジオキサン中のHCl（3.0mL、12.00mmol）を加え、混合物を約1時間で室温までゆっくり加温し、次いで濃縮して、アリル(2-(4-アミノフェニル)-1H-ベンゾ[d]イミダゾル-5-イル)カルバメート（21）を得た（528mg、収率100％）。ESI MS: C17H17N4O2 (M+H) 309.2; found 309.0。
【０４６７】
パートD：
DCM（2mL）中の化合物21（56.9mg、0.165mmol）、N,N-ジメチルピリジン-4-アミン4-(4-(tert-ブトキシカルボニルアミノ)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキシレート（36.3mg、0.297mmol）、およびDIEA（0.087mL、0.495mmol）の溶液を室温で18時間撹拌した。混合物をDCMで希釈し、水と、次いで食塩水で洗浄し、Na2SO4で乾燥した。溶液を濃縮し、残渣をISCOカラム、0〜50％EtOAc/ヘキサンで精製して、アリル(2-(4-(4-(4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキサミド)フェニル)-1H-ベンゾ[d]イミダゾル-5-イル)カルバメート（22）を得た（72mg、収率66.7％）。ESI MS: C33H35N9O6 (M+H) 654.3; found 653.9。
【０４６８】
パートE：
ジオキサン（3.0mL）中の化合物22（72.0mg、0.110mmol）に、窒素雰囲気下、0℃でジオキサン中のHCl（3.0mL、12.00mmol）を加え、混合物を約1時間で室温までゆっくり加温し、次いで濃縮して、アリル(2-(4-(4-(4-アミノ-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキサミド)フェニル)-1H-ベンゾ[d]イミダゾル-5-イル)カルバメート塩酸塩（23）を得た（60mg、収率92％）。ESI MS: C28H28ClN9O4 (M+H) 554.2; found 553.9。
【０４６９】
パートFおよびパートG：
表題化合物24を化合物23から実施例1、パートGおよびパートHに記載の手順を用いて調製した。
2019522660.tif 000202
【０４７０】
実施例4：
(S,Z)-N-(5-(6-アミノ-1H-ベンゾ[d]イミダゾル-2-イル)-1-メチル-1H-ピロル-3-イル)-4-(7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-2,3,5,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イルオキシ)ブタンアミド（27）の合成
2019522660.tif 000203
【０４７１】
パートA：
5-(6-(アリルオキシカルボニルアミノ)-1H-ベンゾ[d]イミダゾル-2-イル)-1-メチル-1H-ピロル-3-アミニウムクロリド（25）（100mg、288μmol）、4-(((11S,11aS)-10-((アリルオキシ)カルボニル)-7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-11-((テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)オキシ)-2,3,5,10,11,11a-ヘキサヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イル)オキシ)ブタン酸（US20150133435(A1)）に記載の手順の改変により調製、153mg）、無水DCM（5mL）、DIEA（2.5当量、125μL）、EDAC（1.2当量、66mg）およびDMAP（1.5当量、53mg）を窒素雰囲気下、室温で22時間撹拌した。反応混合物をDCMで希釈し、水（3×）および飽和NaHCO3（3×）で洗浄した。有機相をNa2SO4で乾燥し、ろ過し、蒸発させて、(11S,11aS)-アリル8-(4-(5-(6-(アリルオキシカルボニルアミノ)-1H-ベンゾ[d]イミダゾル-2-イル)-1-メチル-1H-ピロル-3-イルアミノ)-4-オキソブトキシ)-7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-11-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イルオキシ)-2,3,11,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-10(5H)-カルボキシレート（26）を赤色泡状物で得た（96mg、収率34％）。ESI MS: C43H49N7O10 (M+H) 824.9; found 825.2。
【０４７２】
パートB：
化合物26（96mg、117μmol）、トリフェニルホスフィン（0.25当量、7.6mg）、ピロリジン（1.25当量、12μL）およびDCM（3.2mL）を室温で10分間撹拌し、次いでPd(PPh3)4（0.05当量、6.7mg）を加え、撹拌をアルゴン雰囲気下で2時間続けた。溶媒を除去し、残渣をクロマトグラフィ（ISCO、4gカラム、5％MeOH/DCM溶離剤）で精製して、化合物27を赤色固体で得た（30mg、収率47％）。
2019522660.tif 000204
【０４７３】
実施例5：
(Z)-メチル2-(4-(4-(4-(7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-2,3,5,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イルオキシ)ブタンアミド)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド)フェニル)-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-6-カルボキシレート（33）の合成
2019522660.tif 000205
【０４７４】
パートA：
ジオキサン（4mL）およびMeOH（3mL）中のメチル2-(4-(tert-ブトキシカルボニルアミノ)フェニル)-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-5-カルボキシレート（28）（4-ニトロベンゼン-1,2-ジアミン、化合物1の代わりに3,4-ジアミノ安息香酸メチル（561mg、1.52mmol）を用いた以外は、実施例1、パートAに記載のとおりに調製）の溶液に、ジオキサン中4M HCl（4mL）を加えた。混濁溶液は瞬間的に澄明となり、次いで固体が沈澱した。混合物を室温で23時間撹拌した。溶媒を除去し、残渣を高減圧下で乾燥して、メチル2-(4-アミノフェニル)-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-6-カルボキシレート塩酸塩（29）をオフホワイト粉末で得た（531mg、収率100％）。ESI MS: C15H14ClN3O2 (M+H) 303.7; found 268.1。
【０４７５】
パートB：
4-(tert-ブトキシカルボニルアミノ)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボン酸（1.2当量、379mg、83μmol）、DIEA（798μL、3.5当量）、EDAC.HCl（2.0当量、502mg）、DMAP（3.0当量、480mg）および無水DCM（5mL）の混合物を室温で15分間撹拌した。次いで、化合物29（1当量、445mg）を加え、撹拌を20時間続けた。反応混合物をDCMで希釈し、次いで水（3×）および飽和炭酸水素ナトリウム溶液（1×）で洗浄した。有機相をNa2SO4で乾燥し、ろ過し、蒸発させて、濃色油状物を得、これをクロマトグラフィ（ISCO、24gカラム、100％EtOAc溶離剤）で精製して、メチル2-(4-(4-(tert-ブトキシカルボニルアミノ)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド)フェニル)-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-6-カルボキシレート（30）を得た（187mg、収率29.1％）。ESI MS: C25H26N6O5 (M+H) 491.5; found 491.1。
【０４７６】
パートC：
ジオキサン（3mL）中の化合物30（187mg、381μmol）の溶液に、ジオキサン中4M HCl（3mL）を加えた。混合物を室温で16時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去して、メチル2-(4-(4-アミノ-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド)フェニル)-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-6-カルボキシレート塩酸塩（31）を褐色アモルファス固体で得た（192mg、収率100％）。ESI MS: C20H19ClN6O3 (M+H) 426.9; found 391.1。
【０４７７】
パートD：
4-(((11S,11aS)-10-((アリルオキシ)カルボニル)-7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-11-((テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)オキシ)-2,3,5,10,11,11a-ヘキサヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イル)オキシ)ブタン酸（US20150133435(A1)に記載の手順の改変により調製、264mg、498μmol）、DIEA（202μL、3.5当量）、EDAC.HCl（2.0当量、127mg）、DMAP（3.0当量、122mg）および無水DCM（3mL）の混合物を室温で15分間撹拌した。次いで、化合物31（1当量、146mg）を加え、反応混合物を室温で21時間撹拌し、DCMで希釈し、次いで水（3×）および飽和炭酸水素ナトリウム溶液（1×）で洗浄した。有機相をNa2SO4で乾燥し、ろ過し、蒸発させて、濃色油状物を得、これをクロマトグラフィ（ISCO、24gカラム、100％EtOAc溶離剤）で精製して、アリル7-メトキシ-8-(4-(2-(4-(6-(メトキシカルボニル)-1H-ベンゾ[d]イミダゾル-2-イル)フェニルカルバモイル)-1-メチル-1H-イミダゾル-4-イルアミノ)-4-オキソブトキシ)-2-メチレン-5-オキソ-11-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イルオキシ)-2,3,11,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-10(5H)-カルボキシレート（32）を黄色粉末で得た（180mg、収率58.3％）。ESI MS: C47H50N8O11 (M+H) 903.9; found 903.2。
【０４７８】
パートE：
化合物32（30mg、33μmol）、Pd(PPh3)4（0.1当量、4mg）、DABCO（5当量、19mg）および無水DCM（2mL）を室温で0.5時間撹拌した。反応混合物を蒸発させ、粗生成物をクロマトグラフィ（ISCO、4gカラム、0〜20％MeOH/DCM）で精製して、表題化合物（33）を黄色油状物で得た（4mg、収率17％）。
2019522660.tif 000206
【０４７９】
実施例6：
(S,Z)-N-(3-ヒドロキシプロピル)-4-(4-(4-(4-(7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-2,3,5,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イルオキシ)ブタンアミド)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキサミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキサミド（37）の合成
2019522660.tif 000207
【０４８０】
パートA：
4-(4-(4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキサミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボン酸（1.05g、2.395mmol、HATU（1.366g、3.59mmol）、HOBt（0.550g、3.59mmol）およびDMF（7.5mL）を合わせ、氷浴中で撹拌した。10分後、3-アミノプロパン-1-オール（0.270g、3.59mmol）およびDIPEA（1.255mL、7.18mmol）を加え、撹拌を約1.5時間続けた。反応混合物を冷水に加え、得られた固体をろ取し、冷水で洗浄し、風乾して、tert-ブチル5-(4-(5-(3-ヒドロキシプロピルカルバモイル)-1-メチル-1H-ピロル-3-イル)フェニルカルバモイル)-1-メチル-1H-ピロル-3-イルカルバメート（34）を淡黄色固体で得た（1.165g、収率98％）。ESI MS: C26H33N5O5 (M+H) 496.5; found 496.1。
【０４８１】
パートB：
MeOH（3mL）中の化合物34（140mg、0.258mmol）の溶液に、0℃でジオキサン中4N HCl（3mL、12mmol）を加え、得られた混合物を1時間撹拌し、次いで室温まで加温した。反応をLC/MSでモニターした。16時間後、反応混合物をロータリーエバポレーションと、続いて高減圧ポンピングにより濃縮して、4-アミノ-N-(4-(5-(3-ヒドロキシプロピルカルバモイル)-1-メチル-1H-ピロル-3-イル)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキサミド（35）をHCl塩として定量的収率で得た。ESI MS: C21H25N5O3 (M+H) 396.4; found 396.0。
【０４８２】
パートC：
DMF（3mL）中のUS20150133435(A1)に記載の手順の改変により調製した4-(((11aR)-10-((アリルオキシ)カルボニル)-7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-11-((テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)オキシ)-2,3,5,10,11,11a-ヘキサヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イル)オキシ)ブタン酸（216mg、0.407mmol）、EDC.HCl（156mg、0.815mmol）およびDMAP（149mg、1.222mmol）を室温で30分間撹拌した。得られた混合物に化合物35（176mg、0.407mmol）を加えた。反応をLC/MSでモニターした。2時間後、混合物を氷水に加え、有機層をEtOAcで洗浄し、NaHCO3で希釈し、Na2SO4で乾燥して、濃縮した。残渣を、DCM/MeOHを移動相として5〜20％MeOH勾配で用いたシリカゲルクロマトグラフィにより精製して、(11aS)-アリル8-(4-(5-(4-(5-(3-ヒドロキシプロピルカルバモイル)-1-メチル-1H-ピロル-3-イル)フェニルカルバモイル)-1-メチル-1H-ピロル-3-イルアミノ)-4-オキソブトキシ)-7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-11-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イルオキシ)-2,3,11,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-10(5H)-カルボキシレート（36）を琥珀色のガラス状固体で得た（227mg、収率61％）。ESI MS: C48H57N7O11 (M+H) 958; found 908.2。
【０４８３】
パートD：
DCM（5mL）中の化合物36（60mg、0.063mmol）の溶液に、アルゴン雰囲気下、室温でトリフェニルホスフィン（4.12mg、0.016mmol）およびピロリジン（6.24μl、0.075mmol）を加え、室温で10分間撹拌した。これに、テトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(0)（3.63mg、3.14μmol）を加え、溶液を室温で2時間撹拌した。LC-MSは反応完了を示した。溶媒をロータリーエバポレーションで除去し、残渣を、0.1％ギ酸で緩衝化したアセトニトリル/水勾配を用いた逆相クロマトグラフィにより精製して、表題化合物（37）をアモルファス固体で得た（26mg、収率54％）。ESI MS: C39H43N7O7 (M+H) 721.8; found 722.1。
【０４８４】
実施例7：
(S,Z)-N-(3-ヒドロキシプロピル)-4-(4-(4-(4-(7-メトキシ-5-オキソ-2,3,5,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イルオキシ)ブタンアミド)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキサミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキサミド（38）の合成
2019522660.tif 000208
表題化合物を、4-(((11aR)-10-((アリルオキシ)カルボニル)-7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-11-((テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)オキシ)-2,3,5,10,11,11a-ヘキサヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イル)オキシ)ブタン酸の代わりに4-((11aS)-10-(アリルオキシカルボニル)-7-メトキシ-5-オキソ-11-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イルオキシ)-2,3,5,10,11,11a-ヘキサヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イルオキシ)ブタン酸（170mg、0.328mmol）を用いた以外は、実施例6に記載の手順を用いて調製し、表題化合物（38）を半固体材料で得た。ESI MS: C38H43N7O7 (M+H) 710.3; found 710.1。
【０４８５】
実施例8：
(S)-N-(4-(5-((3-ヒドロキシプロピル)カルバモイル)-1-メチル-1H-ピロル-3-イル)フェニル)-4-(4-((7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-2,3,5,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イル)オキシ)ブタンアミド)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド（39）の合成
2019522660.tif 000209
表題化合物39を、4-(4-(4-(tert-ブトキシカルボニルアミノ)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキサミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボン酸の代わりに4-(4-(4-(tert-ブトキシカルボニルアミノ)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボン酸（200mg、0.403mmol）を用いた以外は、実施例6に記載の手順を用いて調製した。ESI MS: C38H44N10O8 (M+H) 768.8; found 769.2。
【０４８６】
実施例9：
(S,Z)-N-(4-(5-(3-ヒドロキシプロピルカルバモイル)-1-メチル-1H-ピロル-3-イル)フェニル)-4-(4-(7-メトキシ-5-オキソ-2,3,5,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イルオキシ)ブタンアミド)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド（40）の合成
2019522660.tif 000210
表題化合物40を、4-(((11aR)-10-((アリルオキシ)カルボニル)-7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-11-((テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)オキシ)-2,3,5,10,11,11a-ヘキサヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イル)オキシ)ブタン酸の代わりに4-((11aS)-10-(アリルオキシカルボニル)-7-メトキシ-5-オキソ-11-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イルオキシ)-2,3,5,10,11,11a-ヘキサヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イルオキシ)ブタン酸（78mg、0.150mmol）を用いた以外は、実施例8に記載の手順を用いて調製した。ESI MS: C37H42N8O7 (M+H) 711.3; found 711.1。
【０４８７】
実施例10：
(S,Z)-3-アミノプロピル4-(4-(4-(4-(7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-2,3,5,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イルオキシ)ブタンアミド)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキシレート（41）の合成
2019522660.tif 000211
表題化合物を、3-アミノプロパン-1-オールの代わりにアリル(3-ヒドロキシプロピル)カルバメート（91mg、0.569mmol）を用いた以外は、実施例6に記載の手順を用いて調製した。ESI MS: C38H42N8O7 (M+H) 722.8; found 723.2。
【０４８８】
実施例11：
N-(4-(5-((S)-2-ヒドロキシプロピルカルバモイル)-1-メチル-1H-ピロル-3-イル)フェニル)-4-(4-((S,Z)-7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-2,3,5,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イルオキシ)ブタンアミド)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド（42）の合成
2019522660.tif 000212
表題化合物を、3-アミノプロパン-1-オールの代わりに(S)-1-アミノプロパン-2-オール（51.3mg、0.683mmol）を用いた以外は、実施例6に記載の手順を用いて調製した。ESI MS: C38H42N8O7 (M+H) 722.8; found 723.2。
【０４８９】
実施例12：
(S,Z)-4-(4-(4-(4-(7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-2,3,5,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イルオキシ)ブタンアミド)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボン酸（43）の合成
2019522660.tif 000213
表題化合物を、tert-ブチル5-((4-(5-((3-ヒドロキシプロピル)カルバモイル)-1-メチル-1H-ピロル-3-イル)フェニル)カルバモイル)-1-メチル-1H-ピロル-3-イル)カルバメートの代わりにメチル4-(4-(4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキシレート（75mg、0.165mmol）を用いた以外は、実施例6に記載の手順を用いて調製した。ESI MS: C35H35N7O7 (M+H) 665.7; found 666.2。
【０４９０】
実施例13：
(S,Z)-4-(4-(4-(4-(7-メトキシ-5-オキソ-2,3,5,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イルオキシ)ブタンアミド)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボン酸（44）の合成
2019522660.tif 000214
表題化合物を、4-(((11aR)-10-((アリルオキシ)カルボニル)-7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-11-((テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イル)オキシ)-2,3,5,10,11,11a-ヘキサヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イル)オキシ)ブタン酸の代わりに4-((11aS)-10-(アリルオキシカルボニル)-7-メトキシ-5-オキソ-11-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イルオキシ)-2,3,5,10,11,11a-ヘキサヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イルオキシ)ブタン酸（106mg、0.205mmol）を用いた以外は、実施例12に記載の手順を用いて調製した。ESI MS: C34H35N7O7 (M+H) 654.26; found 654.2。
【０４９１】
実施例14：
1-アミノプロパン-2-イル4-(4-(4-(4-((S,Z)-7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-2,3,5,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イルオキシ)ブタンアミド)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキシレート（45）の合成
2019522660.tif 000215
表題化合物を、3-アミノプロパン-1-オールの代わりにアリル(2-ヒドロキシプロピル)カルバメート（109mg、0.683mmol）を用いた以外は、実施例6に記載の手順を用いて調製した。ESI MS: C38H42N807 722.8; found 723.2。
【０４９２】
実施例15：
(S)-3-(4-(4-(4-(4-((S,Z)-7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-2,3,5,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イルオキシ)ブタンアミド)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキサミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキサミド)プロピル16-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロル-1-イル)-2-メチル-4,14-ジオキソ-7,10-ジオキサ-3,13-ジアザヘキサデカン-1-オエート（48)の合成
2019522660.tif 000216
【０４９３】
パートA：
DCM（2mL）中の(S)-2-(((アリルオキシ)カルボニル)アミノ)プロパン酸（30mg、0.173mmol）の溶液に0℃でDIC（0.054mL、0.52mmol）を加え、得られた混合物を15分間撹拌し、化合物36（157mg、0.173mmol）およびDMAP（64mg、0.519mmol）を加えた。得られた混合物を室温で1時間撹拌した。(S)-2-(((アリルオキシ)カルボニル)アミノ)-3-メチルブタン酸の第二の一定量を加え、撹拌をさらに1時間続けた。LC/MSは反応が本質的に完了したことを示した。反応混合物をEtOAcで希釈し、有機層をNaHCO3、食塩水で洗浄し、Na2SO4で乾燥して濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィによりDCM中0〜10％MeOHを溶離剤として用いて精製し、(11aS)-アリル8-(4-(5-(4-(5-(3-((S)-2-(アリルオキシカルボニルアミノ)プロパノイルオキシ)プロピルカルバモイル)-1-メチル-1H-ピロル-3-イル)フェニルカルバモイル)-1-メチル-1H-ピロル-3-イルアミノ)-4-オキソブトキシ)-7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-11-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イルオキシ)-2,3,11,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-10(5H)-カルボキシレート（46）を固体で得た（161mg、収率93％）。ESI MS: C55H66N8O14 (M+H) 1063.1; found 1063.2。
【０４９４】
パートB：
アルゴン雰囲気下、室温で、化合物46（171.6mg、0.161mmol）、トリフェニルホスフィン（10.58mg、0.040mmol）、DCM（2mL）に、ピロリジン（33.4μl、0.404mmol）を加え、反応混合物を10分間撹拌した。テトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(0)（18.65mg、0.016mmol）を加え、反応をLC/MSでモニターした。2時間後、反応混合物をC18カラムのHPLCにより、0.1％ギ酸で緩衝化したACN/水を移動相として精製し、(S)-3-(4-(4-(4-(4-((S,Z)-7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-2,3,5,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イルオキシ)ブタンアミド)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキサミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキサミド)プロピル2-アミノプロパノエートギ酸塩（47）を得た（98mg、収率77％）。ESI MS: C42H48N8O8 (M+H) 792.8; found 793.2。
【０４９５】
パートC：
化合物47（22mg、0.026mmol）、2,5-ジオキソピロリジン-1-イル3-(2-(2-(3-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロル-1-イル)プロパンアミド)エトキシ)エトキシ)プロパノエート（3.85mg、9.04μmol）、HOBt（1.384mg、9.04μmol）およびDMF（0.5mL）に、室温でトリエチルアミン（1.890μl、0.014mmol）を加えた。反応をLC/MSでモニターした。完了すれば、反応混合物を逆相クロマトグラフィにより0.1％ギ酸で緩衝化したアセトニトリル/水を用いて精製し、表題化合物（48)を得た（16mg、収率55％）。ESI MS: C56H66N10O14 (M+H) 1103.1; found 1103.1。
【０４９６】
実施例16：
化合物48のトラスツズマブ結合体（結合体49）の調製
2019522660.tif 000217
【０４９７】
TEAA緩衝液（50mM、1mM EDTA、pH7、2mL）中のトラスツズマブ（20mg、0.135μmol）の溶液に、TCEP（0.087mg、0.304μmol）の溶液を加え、得られた混合物を37℃で1時間インキュベートした。反応混合物を室温まで冷却し、次いでTEAA緩衝液（1mL）およびプロピレングリコール（0.7mL）で希釈した。次いで、反応混合物を激しく撹拌しながら、0.435mLのACN/プロピレングリコール（7：3）中の化合物48（1.5mg、1.35mmol）の溶液をゆっくり加えた。反応混合物を室温で約1時間撹拌した後、システイン（0.344mg、2.84μmol、TEAA緩衝液中16.4mg/mL保存液21.5μL）により約1時間で反応停止した。粗生成物をSEC（Biosep SEC 3000、pH5.5、50mMリン酸ナトリウム、300mM NaCl）と、続いて製剤緩衝液（25mMクエン酸、75mM NaCl、50mg/mLトレハロース、pH5.5）への緩衝液交換によって精製し、結合体（8.1mg、収率41％）を得た。精製した結合体49は、化合物48のモル吸光度ε320nm＝28,013cm-1M-1およびε280nm＝43,307cm-1M-1ならびにトラスツズマブのε280nm＝226,107cm-1M-1を用いてUV-Visにより判定して、PBD：トラスツズマブの比＝約3.4を有した。
【０４９８】
実施例17：
(S)-((S)-1-(4-(4-(4-(4-((S,Z)-7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-2,3,5,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イルオキシ)ブタンアミド)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキサミド)プロパン-2-イル)16-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロル-1-イル)-2-メチル-4,14-ジオキソ-7,10-ジオキサ-3,13-ジアザヘキサデカン-1-オエート（50）の合成
2019522660.tif 000218
表題化合物を、(11aS)-アリル8-(4-(5-(4-(5-(3-ヒドロキシプロピルカルバモイル)-1-メチル-1H-ピロル-3-イル)フェニルカルバモイル)-1-メチル-1H-ピロル-3-イルアミノ)-4-オキソブトキシ)-7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-11-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イルオキシ)-2,3,11,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-10(5H)-カルボキシレート（36）の代わりに(11aS)-アリル8-(4-(2-(4-(5-((S)-2-ヒドロキシプロピルカルバモイル)-1-メチル-1H-ピロル-3-イル)フェニルカルバモイル)-1-メチル-1H-イミダゾル-4-イルアミノ)-4-オキソブトキシ)-7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-11-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イルオキシ)-2,3,11,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-10(5H)-カルボキシレート（126mg、0.319mmol）を用いた以外は、実施例15に記載の手順を用いて調製した。ESI MS: C55H65N11O14 1104.2; found 1104.3。
【０４９９】
実施例18：
化合物50のトラスツズマブ結合体（結合体51）の調製
2019522660.tif 000219
表題結合体を、化合物48の代わりに(S)-(S)-1-(4-(4-(4-(4-(((S)-7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-2,3,5,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イル)オキシ)ブタンアミド)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキサミド)プロパン-2-イル16-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロル-1-イル)-2-メチル-4,14-ジオキソ-7,10-ジオキサ-3,13-ジアザヘキサデカン-1-オエート（50）（1.492mg、1.351μmol）を用いた以外は、実施例16に記載の手順を用いて調製した。精製した結合体は、化合物39のモル吸光度ε310nm＝37,500cm-1M-1およびε280nm＝39,015cm-1M-1ならびにトラスツズマブのε280nm＝226,107cm-1M-1を用いてUV-Visにより判定して、PBD：トラスツズマブの比＝約3.3を有した。
【０５００】
実施例19：
(S)-3-(4-(4-(4-(4-((S,Z)-7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-2,3,5,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イルオキシ)ブタンアミド)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキサミド)プロピル16-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロル-1-イル)-2-イソプロピル-4,14-ジオキソ-7,10-ジオキサ-3,13-ジアザヘキサデカン-1-オエート（52）の合成
2019522660.tif 000220
表題化合物を、(S)-2-(((アリルオキシ)カルボニル)アミノ)プロパン酸の代わりに(S)-2-(((アリルオキシ)カルボニル)アミノ)-3-メチルブタン酸（32mg、0.165mmol）を用いた以外は、実施例15に記載の手順を用いて調製した。ESI MS: C57H69N11O14 1132.2; found 1132.4。
【０５０１】
実施例20：
化合物52のトラスツズマブ結合体（結合体53）の調製
2019522660.tif 000221
表題結合体を、化合物48の代わりに(S)-3-(4-(4-(4-(4-(((S)-7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-2,3,5,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イル)オキシ)ブタンアミド)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキサミド)プロピル16-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロル-1-イル)-2-イソプロピル-4,14-ジオキソ-7,10-ジオキサ-3,13-ジアザヘキサデカン-1-オエート（52）（0.115mg、0.101μmol）を用いた以外は、実施例16に記載の手順を用いて調製した。精製した結合体は、化合物39のモル吸光度ε310nm＝37,500cm-1M-1およびε280nm＝39,015cm-1M-1ならびにトラスツズマブのε280nm＝226,107cm-1M-1を用いてUV-Visにより判定して、PBD：トラスツズマブの比＝約4.0を有した。
【０５０２】
実施例21：
(S,Z)-1-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロル-1-イル)-3,13-ジオキソ-7,10-ジオキサ-4,14-ジアザヘプタデカン-17-イル4-(4-(4-(4-(7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-2,3,5,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イルオキシ)ブタンアミド)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキシレート（54）の合成
2019522660.tif 000222
無水DMF（約1mL）中の化合物41（10mg、0.014mmol）の溶液に、HOBt（2.331mg、0.015mmol）、2,5-ジオキソピロリジン-1-イル3-(2-(2-(3-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロル-1-イル)プロパンアミド)エトキシ)エトキシ)プロパノエート（47mg、0.015mmol）およびトリエチルアミン（5.79μl、0.042mmol）を加えた。混合物を室温で約2時間撹拌し、この時点でLCMSは反応完了を示した。次いで、反応混合物を分取HPLC（いずれも0.1％ギ酸を含む水：ACN；勾配：25分間で10〜90％）で精製して、表題化合物（54）（11mg、収率77％）をオフホワイトアモルファス固体で得た。ESI MS: C52H60N10O13 1033.1; found 1033.2。
【０５０３】
実施例22：
化合物54のトラスツズマブ結合体（結合体55）の調製
2019522660.tif 000223
表題結合体を、化合物48の代わりに(S,Z)-1-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロル-1-イル)-3,13-ジオキソ-7,10-ジオキサ-4,14-ジアザヘプタデカン-17-イル4-(4-(4-(4-(7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-2,3,5,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イルオキシ)ブタンアミド)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキシレート（54）（1.396mg、1.351μmol）を用いた以外は、実施例16に記載の手順を用いて調製した。精製した結合体は、化合物39のモル吸光度ε310nm＝37,500cm-1M-1およびε280nm＝39,015cm-1M-1ならびにトラスツズマブのε280nm＝226,107cm-1M-1を用いてUV-Visにより判定して、PBD：トラスツズマブの比＝約4.3を有した。
【０５０４】
実施例23：
1-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロル-1-イル)-3,13-ジオキソ-7,10-ジオキサ-4,14-ジアザヘプタデカン-16-イル4-(4-(4-(4-((S,Z)-7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-2,3,5,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イルオキシ)ブタンアミド)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキシレート（56）の合成
2019522660.tif 000224
表題化合物を、化合物41の代わりに1-アミノプロパン-2-イル4-(4-(4-(4-((S,Z)-7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-2,3,5,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イルオキシ)ブタンアミド)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキシレート（45）（52mg、0.072mmol）を用いた以外は、実施例21に記載のとおりに調製した。ESI MS: C52H60N10O13 1033.1; found 1033.3。
【０５０５】
実施例24：
化合物56のトラスツズマブ結合体（結合体57）の調製
2019522660.tif 000225
表題結合体を、化合物48の代わりに1-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロル-1-イル)-3,13-ジオキソ-7,10-ジオキサ-4,14-ジアザヘプタデカン-16-イル4-(4-(4-(4-(((S)-7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-2,3,5,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イル)オキシ)ブタンアミド)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキシレート（56）（1.4mg、1.36μmol）を用いた以外は、実施例16に記載の手順を用いて調製した。精製した結合体は、化合物39のモル吸光度ε310nm＝37,500cm-1M-1およびε280nm＝39,015cm-1M-1ならびにトラスツズマブのε280nm＝226,107cm-1M-1を用いてUV-Visにより判定して、PBD：トラスツズマブの比＝約5.5を有した。
【０５０６】
実施例25：
(S,Z)-3-(4-(4-(4-(4-(7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-2,3,5,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イルオキシ)ブタンアミド)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキサミド)プロピル1-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロル-1-イル)-3,13-ジオキソ-7,10-ジオキサ-4,14-ジアザヘプタデカン-17-イルカルバメート（62）の合成
2019522660.tif 000226
【０５０７】
パートA：
THF（10mL）中の(11aS)-アリル8-(4-(2-(4-(5-(3-ヒドロキシプロピルカルバモイル)-1-メチル-1H-ピロル-3-イル)フェニルカルバモイル)-1-メチル-1H-イミダゾル-4-イルアミノ)-4-オキソブトキシ)-7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-11-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イルオキシ)-2,3,11,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-10(5H)-カルボキシレート（58）（225mg、0.248mmol）の溶液に、HOBt（47.4mg、0.309mmol）と、続いてクロロギ酸p-ニトロフェニル（62.4mg、0.309mmol）およびトリエチルアミン（0.104mL、0.743mmol）を加えた。反応混合物を室温で撹拌し、LC/MSでモニターした。HOBt、クロロギ酸p-ニトロフェニルおよびトリメチルアミンの第二の一定量を加え、撹拌を終夜続けた。反応混合物をセライトを通してろ過し、濃縮して黄色油状物を得、これをシリカ12gカートリッジで、10〜100％EtOAcのDCM/EtOAc勾配により精製して、(11aS)-アリル7-メトキシ-8-(4-(1-メチル-2-(4-(1-メチル-5-(3-((4-ニトロフェノキシ)カルボニルオキシ)プロピルカルバモイル)-1H-ピロル-3-イル)フェニルカルバモイル)-1H-イミダゾル-4-イルアミノ)-4-オキソブトキシ)-2-メチレン-5-オキソ-11-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イルオキシ)-2,3,11,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-10(5H)-カルボキシレート（59）を得た（150mg、収率56％）。ESI MS: C54H59N9O15 1074.1; found 1074.2。
【０５０８】
パートB：
THF（4mL）中の化合物59（150mg、0.140mmol）の溶液に、HOBt（21.41mg、0.140mmol）を加え、混合物を室温で10分間撹拌した。この反応混合物をTHF（4mL）中のプロパン-1,3-ジアミン（31.1mg、0.419mmol）、トリエチルアミン（0.097mL、0.699mmol）の冷溶液に滴加した。2時間後、反応混合物を濃縮し、C18カラムにより0.1％ギ酸で緩衝化したACN/水を移動相として精製し、(11aS)-アリル8-(4-(2-(4-(5-(3-(3-アミノプロピルカルバモイルオキシ)プロピルカルバモイル)-1-メチル-1H-ピロル-3-イル)フェニルカルバモイル)-1-メチル-1H-イミダゾル-4-イルアミノ)-4-オキソブトキシ)-7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-11-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イルオキシ)-2,3,11,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-10(5H)-カルボキシレート（60）をアモルファス固体で得た。（109mg、収率77％）。ESI MS: C51H64N10O12 (M+H) 1009.1; found 1009.3。
【０５０９】
パートC：
アルゴン雰囲気下、室温で、DCM（5mL）中、化合物60（100mg、0.099mmol）、ピロリジン（0.016mL、0.198mmol）およびトリフェニルホスフィン（6.50mg、0.025mmol）を合わせた。15分後、テトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(0)（11.45mg、9.91μmol）を加え、反応混合物を終夜撹拌した。反応混合物を濃縮し、残渣をDMFに溶解し、分取HPLCにより、0.1％ギ酸で緩衝化したACN/水から精製して、(S,Z)-3-(4-(4-(4-(4-(7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-2,3,5,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イルオキシ)ブタンアミド)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキサミド)プロピル3-アミノプロピルカルバメート（61）（21mg、収率26％）をオフホワイトアモルファス固体で得た。ESI MS: C42H50N10O8 822.9; found 823.0。
【０５１０】
パートD：
DMF（1.5mL）中の化合物61（20.4mg、0.025mmol）、2,5-ジオキソピロリジン-1-イル3-(2-(2-(3-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロル-1-イル)プロパンアミド)エトキシ)エトキシ)プロパノエート（12.65mg、0.030mmol）およびHOBt（4.56mg、0.030mmol）に、トリエチルアミン（10.37μl、0.074mmol）を加え、反応をLC/MSでモニターした。2時間後、粗生成物を分取HPLCにより、0.1％ギ酸で緩衝化した10〜90％アセトニトリル/水の勾配を用いて精製し、表題化合物62をオフホワイトアモルファス固体で得た。（16mg、収率57％）。ESI MS: C56H68N12O14 (M+H) 1133.2.1; found 1132.7。
【０５１１】
実施例26：
化合物62のトラスツズマブ結合体（結合体63）の調製
2019522660.tif 000227
表題結合体を、化合物48の代わりに(S,Z)-3-(4-(4-(4-(4-(7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-2,3,5,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イルオキシ)ブタンアミド)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキサミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキサミド)プロピル1-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロル-1-イル)-3,13-ジオキソ-7,10-ジオキサ-4,14-ジアザヘプタデカン-17-イルカルバメート（62）（1.531mg、1.351μmol）を用いた以外は、実施例16に記載の手順を用いて調製した。精製した結合体は、化合物39のモル吸光度ε310nm＝37,500cm-1M-1およびε280nm＝39,015cm-1M-1ならびにトラスツズマブのε280nm＝226,107cm-1M-1を用いてUV-Visにより判定して、PBD：トラスツズマブの比＝約4.1を有した。
【０５１２】
実施例27：
(S,Z)-3-(4-(4-(4-(4-(7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-2,3,5,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イルオキシ)ブタンアミド)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキサミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキサミド)プロピル1-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロル-1-イル)-3,13-ジオキソ-7,10-ジオキサ-4,14-ジアザヘプタデカン-17-イルカルバメート（64）の合成
2019522660.tif 000228
表題化合物を、化合物36の代わりに(11aS)-アリル8-(4-(5-(4-(5-(3-ヒドロキシプロピルカルバモイル)-1-メチル-1H-ピロル-3-イル)フェニルカルバモイル)-1-メチル-1H-ピロル-3-イルアミノ)-4-オキソブトキシ)-7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-11-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イルオキシ)-2,3,11,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-10(5H)-カルボキシレート（176mg、0.445mmol）を用いた以外は、実施例25に記載のとおりに調製した。ESI MS: C57H69N11O14 1132.2; found 1131.7。
【０５１３】
実施例28：
化合物64のトラスツズマブ結合体（結合体65）の調製
2019522660.tif 000229
表題結合体を、化合物48の代わりに(S,Z)-3-(4-(4-(4-(4-(7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-2,3,5,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イルオキシ)ブタンアミド)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキサミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキサミド)プロピル1-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロル-1-イル)-3,13-ジオキソ-7,10-ジオキサ-4,14-ジアザヘプタデカン-17-イルカルバメート（62）（1.531mg、1.351μmol）を用いた以外は、実施例16に記載の手順を用いて調製した。精製した結合体は、化合物39のモル吸光度ε310nm＝37,500cm-1M-1およびε280nm＝39,015cm-1M-1ならびにトラスツズマブのε280nm＝226,107cm-1M-1を用いてUV-Visにより判定して、PBD：トラスツズマブの比＝約3.6を有した。
【０５１４】
実施例29：
(S,Z)-3-(4-(4-(4-(4-(7-メトキシ-5-オキソ-2,3,5,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イルオキシ)ブタンアミド)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキサミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキサミド)プロピル1-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロル-1-イル)-3,13-ジオキソ-7,10-ジオキサ-4,14-ジアザヘプタデカン-17-イルカルバメート（66）の合成
2019522660.tif 000230
表題化合物を、化合物36の代わりに(11aS)-アリル8-(4-(5-(4-(5-(3-ヒドロキシプロピルカルバモイル)-1-メチル-1H-ピロル-3-イル)フェニルカルバモイル)-1-メチル-1H-ピロル-3-イルアミノ)-4-オキソブトキシ)-7-メトキシ-5-オキソ-11-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イルオキシ)-2,3,11,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-10(5H)-カルボキシレート（55mg、）を用いた以外は、実施例15に記載のとおりに調製した。ESI MS: C57H69N11O14 (M+H) 1121.2。
【０５１５】
実施例30：
化合物66のトラスツズマブ結合体（結合体67）の調製
2019522660.tif 000231
表題結合体を、化合物48の代わりに(S,Z)-3-(4-(4-(4-(4-(7-メトキシ-5-オキソ-2,3,5,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イルオキシ)ブタンアミド)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキサミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキサミド)プロピル1-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロル-1-イル)-3,13-ジオキソ-7,10-ジオキサ-4,14-ジアザヘプタデカン-17-イルカルバメート（66）（2.52mg、2.36mmol）を用いた以外は、実施例16に記載の手順を用いて調製した。精製した結合体は、化合物72のモル吸光度ε318nm＝35020cm-1M-1およびトラスツズマブのε280nm＝226,107cm-1M-1を用いてUV-Visにより判定して、PBD：トラスツズマブの比＝約3.2を有した。
【０５１６】
実施例31：
((S)-3-(4-(4-(4-(4-((S,Z)-7-メトキシ-5-オキソ-2,3,5,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イルオキシ)ブタンアミド)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキサミド)プロピル16-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロル-1-イル)-2-イソプロピル-4,14-ジオキソ-7,10-ジオキサ-3,13-ジアザヘキサデカン-1-オエート（68）の合成
2019522660.tif 000232
表題化合物を、化合物46の代わりに(11aS)-アリル8-(4-(2-(4-(5-(3-((S)-2-(アリルオキシカルボニルアミノ)プロパノイルオキシ)プロピルカルバモイル)-1-メチル-1H-ピロル-3-イル)フェニルカルバモイル)-1-メチル-1H-イミダゾル-4-イルアミノ)-4-オキソブトキシ)-7-メトキシ-5-オキソ-11-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イルオキシ)-2,3,11,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-10(5H)-カルボキシレート（8mg、7.52μmol）を用いた以外は、実施例15に記載の手順を用いて調製した。ESI MS: C56H69N11O14 (M+H) 1120.3; found 1120.4。
【０５１７】
実施例32：
化合物68のトラスツズマブ結合体（結合体69）の調製
2019522660.tif 000233
表題結合体を、化合物48の代わりに((S)-3-(4-(4-(4-(4-((S,Z)-7-メトキシ-5-オキソ-2,3,5,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イルオキシ)ブタンアミド)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキサミド)プロピル16-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロル-1-イル)-2-イソプロピル-4,14-ジオキソ-7,10-ジオキサ-3,13-ジアザヘキサデカン-1-オエート（68）（23.78mg、3.24mmol）を用いた以外は、実施例16に記載の手順を用いて調製した。精製した結合体は、化合物39のモル吸光度ε318nm＝39015cm-1M-1およびトラスツズマブのε280nm＝226,107cm-1M-1を用いてUV-Visにより判定して、PBD：トラスツズマブの比＝約6.2を有した。
【０５１８】
実施例33：
(R)-1-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロル-1-イル)-3,13-ジオキソ-7,10-ジオキサ-4,14-ジアザヘプタデカン-16-イル4-(4-(4-(4-((S,Z)-7-メトキシ-5-オキソ-2,3,5,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イルオキシ)ブタンアミド)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキシレート（70）の合成
2019522660.tif 000234
表題化合物を、化合物41の代わりに(R)-1-アミノプロパン-2-イル4-(4-(4-(4-((S,Z)-7-メトキシ-5-オキソ-2,3,5,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イルオキシ)ブタンアミド)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキシレート（40mg、0.053mmol）を用いた以外は、実施例21に記載のとおりに調製した。ESI MS: C51H60N10O13 (M+H) 1022.1; found 1022.3。
【０５１９】
実施例34：
化合物70のトラスツズマブ結合体（結合体71）の調製
2019522660.tif 000235
表題結合体を、化合物48の代わりに(R)-1-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロル-1-イル)-3,13-ジオキソ-7,10-ジオキサ-4,14-ジアザヘプタデカン-16-イル4-(4-(4-(4-((S,Z)-7-メトキシ-5-オキソ-2,3,5,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イルオキシ)ブタンアミド)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキシレート（70)（6.99mg、6.85mmol）を用いた以外は、実施例16に記載の手順を用いて調製した。精製した結合体は、化合物72のモル吸光度ε318nm＝35020cm-1M-1およびトラスツズマブのε280nm＝226,107cm-1M-1を用いてUV-Visにより判定して、PBD：トラスツズマブの比＝約2.9を有した。
【０５２０】
実施例35：
(S)-3-(4-(4-(4-(4-((S,Z)-7-メトキシ-5-オキソ-2,3,5,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イルオキシ)ブタンアミド)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキサミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキサミド)プロピル2-アミノプロパノエート（72)
2019522660.tif 000236
表題化合物を、化合物46の代わりに(11aS)-アリル8-(4-(2-(4-(5-(3-((S)-2-(アリルオキシカルボニルアミノ)プロパノイルオキシ)プロピルカルバモイル)-1-メチル-1H-ピロル-3-イル)フェニルカルバモイル)-1-メチル-1H-イミダゾル-4-イルアミノ)-4-オキソブトキシ)-7-メトキシ-5-オキソ-11-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イルオキシ)-2,3,11,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-10(5H)-カルボキシレート（20mg、0.019mmol）を用いた以外は、実施例15に記載のとおりに調製した。ESI MS: C41H48N8O8 (M+H) 781.3; found 781.1。
【０５２１】
実施例36
6K PHF-BA（22％）-PEG2-MI（3％）-化合物72（8％）（73)の合成
2019522660.tif 000237
MES緩衝液（10mM、pH5.8、2.87mL）中の6K PHF-BA（22％）-EG2-MI（3.5％）（37.8mg、4.59μmol、US2015010440、実施例2に記載のとおりに調製）の溶液に、NMP（0.862mL）中の化合物72（5.70mg、6.9μmol）の溶液と、続いてNHS（1.3mg）を加えた。この混合物に、EDC.HCLを3分割（3×1.3mg）で2時間かけて加え、混合物を室温で終夜撹拌した。粗生成物をC-18 RP HPLC（移動相A：20mM MES、pH6.0；移動相B：アセトニトリル；勾配：23分間で10〜70％）で直接精製した。精製した結合体をまず減圧下で濃縮してアセトニトリルを除去し、次いで1K MWCOのstir cell膜でさらに濃縮して、表題化合物（73）を水溶液で得た（3.0mL、1.53mg/mL、4.6mg；分子量8.2kDa；化合物73：PHFの比＝約1.5：1。
【０５２２】
実施例37
化合物73のトラスツズマブ結合体（結合体74）の調製
2019522660.tif 000238
2.1 TEAA緩衝液（0.79mL、pH7、1mM EDTAを含む50mM）中のトラスツズマブ（10mg、0.068μmol）の溶液に、TCEPの溶液（0.053mgの13.9μL、0.186μmol）を加えた。混合物を37℃で90分間撹拌し、次いで室温まで冷却し、TEAA緩衝液、pH7中の結合体73の溶液（2.52mL、3.86mg）にゆっくり加えた。混合物を室温で45分間撹拌し、次いでシステイン（0.079mL、2.3mg、19μmol）と室温で約60分間反応させることにより反応停止した。粗製混合物を遠心分離し、上清をWCX（移動相A：20mM MES、pH5.8；移動相B：20mM MES、300mM NaCl；勾配：35分間で10〜65％）で精製して、表題結合体を水溶液で得た（2.94mg、1mL、2.94mg/mL）；化合物72のε310nm＝18,639cm-1M-1およびε280nm＝10,317cm-1M-1ならびにトラスツズマブのε280nm＝226,107cm-1M-1を用いてUV-Vis分光光度法により判定して、トラスツズマブ：化合物73の比＝約5.8であった。
【０５２３】
実施例38：
(11S,11aS)-4-((2S,5S)-19-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロル-1-イル)-5-イソプロピル-2-メチル-4,7,17-トリオキソ-10,13-ジオキサ-3,6,16-トリアザノナデカンアミド)ベンジル11-ヒドロキシ-8-(4-(5-(4-(5-(3-ヒドロキシプロピルカルバモイル)-1-メチル-1H-ピロル-3-イル)フェニルカルバモイル)-1-メチル-1H-ピロル-3-イルアミノ)-4-オキソブトキシ)-7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-2,3,11,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-10(5H)-カルボキシレート（77)の合成
2019522660.tif 000239
【０５２４】
パートA：
THF（0.4mL）中の4-((11S,11aS)-10-((4-((S)-2-((S)-2-(アリルオキシカルボニルアミノ)-3-メチルブタンアミド)プロパンアミド)ベンジルオキシ)カルボニル)-11-ヒドロキシ-7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-2,3,5,10,11,11a-ヘキサヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イルオキシ)ブタン酸（40mg、0.052mmol、US20150133435(A1)に記載の手順の改変により調製）に、NMP（0.1mL）と、続いてEDC.HCl（9.7mg、0.051mmol）を加えた。混合物を約5分間撹拌した後、NMP（0.2mL）中の化合物35（実施例6に記載のとおりに調製、26.8mg、0.062mmol）、DIEA（19.5μL、0.125mmol）、およびDMAP（6.4mg、0.094mmol）の混合物を加えた。混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物をEtOAc（90mL）で希釈し、各30mLの飽和NH4Cl水溶液、水、および食塩水で逐次洗浄した。有機相を減圧下で濃縮し、次いでシリカゲルに吸着させ、シリカゲル（DCM：MeOH、0〜20％B）で精製して、(11S,11aS)-4-((S)-2-((S)-2-(アリルオキシカルボニルアミノ)-3-メチルブタンアミド)プロパンアミド)ベンジル11-ヒドロキシ-8-(4-(5-(4-(5-(3-ヒドロキシプロピルカルバモイル)-1-メチル-1H-ピロル-3-イル)フェニルカルバモイル)-1-メチル-1H-ピロル-3-イルアミノ)-4-オキソブトキシ)-7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-2,3,11,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-10(5H)-カルボキシレート（75）を黄色固体で得た（35mg、収率59％）。ESI-MS: C59H71N10O14 (M + H) 1143.5; found 1143.6。
【０５２５】
パートB：
無水脱気THF（1mL）中の化合物75（35mg、0.031mmol）に、トリフェニルホスフィン（2mg、0.008mmol）およびピロリジン（3.2μL、0.038mmol）を加え、混合物を室温で撹拌した。5分後、テトラキストリフェニルホスフィンパラジウム（1.8mg、0.002mmol）を加え、得られた混合物を室温で2時間撹拌した。粗製反応混合物をシリカゲルに吸着させ、移動相AおよびB両方で0.5％TEAを含むDCM：MeOH（勾配＝0〜10％B）を用いてシリカゲルで精製して、(11S,11aS)-4-((S)-2-((S)-2-アミノ-3-メチルブタンアミド)プロパンアミド)ベンジル11-ヒドロキシ-8-(4-(5-(4-(5-(3-ヒドロキシプロピルカルバモイル)-1-メチル-1H-ピロル-3-イル)フェニルカルバモイル)-1-メチル-1H-ピロル-3-イルアミノ)-4-オキソブトキシ)-7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-2,3,11,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-10(5H)-カルボキシレート（76）を黄色固体で得た（15mg、収率46％）。ESI-MS: C55H67N10O12 (M + H) 1059.5; found 1059.6。
【０５２６】
パートC：
無水DMF（0.5mL）中の化合物76（14mg、0.013mmol）にHOBt（3.6mg、0.026mmol）、2,5-ジオキソピロリジン-1-イル3-(2-(2-(3-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロル-1-イル)プロパンアミド)エトキシ)エトキシ)プロパノエート（Quanta Biodesignから購入、11.3mg、0.026mmol）、およびトリエチルアミン（2.0μL、0.015mmol）を加えた。混合物を室温で約1.5時間撹拌した。粗生成物を逆相HPLC（いずれも0.1％ギ酸を含む水：ACN；勾配：25分間で10〜90％）で精製して、表題化合物77を淡黄色固体で得た（12.3mg、収率68％）。ESI-MS: C69H85N12O18 (M + H) 1369.6; found 1369.6。
【０５２７】
実施例39：
化合物77のトラスツズマブ結合体（結合体78）の調製
2019522660.tif 000240
表題結合体を、化合物48の代わりに(11S,11aS)-4-((2S,5S)-19-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロル-1-イル)-5-イソプロピル-2-メチル-4,7,17-トリオキソ-10,13-ジオキサ-3,6,16-トリアザノナデカンアミド)ベンジル11-ヒドロキシ-8-(4-(5-(4-(5-(3-ヒドロキシプロピルカルバモイル)-1-メチル-1H-ピロル-3-イル)フェニルカルバモイル)-1-メチル-1H-ピロル-3-イルアミノ)-4-オキソブトキシ)-7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-2,3,11,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-10(5H)-カルボキシレート（77）（1.9mg、1.4μmol）を用いた以外は、実施例16に記載の手順を用いて調製した。精製した結合体は、化合物77のε312nm＝36,629cm-1M-1およびε280nm＝22,123cm-1M-1ならびにトラスツズマブのε280nm＝226,107cm-1M-1を用いてUV-Vis分光光度法により判定して、PBD：トラスツズマブの比＝約4.6を有した。
【０５２８】
実施例40：
(S)-3-(4-(4-(4-(4-((S,Z)-7-メトキシ-5-オキソ-2,3,5,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イルオキシ)ブタンアミド)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキサミド)プロピル2-アミノプロパノエート（79）
2019522660.tif 000241
表題化合物を、化合物46の代わりに(11aS)-アリル8-(4-(2-(4-(5-(3-((S)-2-(アリルオキシカルボニルアミノ)プロパノイルオキシ)プロピルカルバモイル)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド)フェニル)-1-メチル-1H-イミダゾル-4-イルアミノ)-4-オキソブトキシ)-7-メトキシ-5-オキソ-11-(テトラヒドロ-2H-ピラン-2-イルオキシ)-2,3,11,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-10(5H)-カルボキシレート（38mg、0.036mmol）を用いた以外は、実施例15に記載のとおりに調製した。ESI-MS: C41H48N8O8 (M + H) 780.9; found 780.8。
【０５２９】
実施例41
6K PHF-BA（22％）-PEG2-MI（3％）-化合物79（3.4％）（80）の合成
2019522660.tif 000242
表題化合物を、化合物72の代わりに(S)-3-(4-(4-(4-(4-((S,Z)-7-メトキシ-5-オキソ-2,3,5,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イルオキシ)ブタンアミド)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキサミド)プロピル2-アミノプロパノエート（79）（9.81mg、0.012mmol）を用いた以外は、実施例36に記載のとおりに調製した。精製した結合体は、8.9kDaの分子量を有し；化合物79：PHFの比は約1.6：1であった。
【０５３０】
実施例42
化合物80のトラスツズマブ結合体（結合体81）の調製
2019522660.tif 000243
表題結合体を、結合体73の代わりに結合体80（4.23mg、0.473μmol）を用いた以外は、実施例37に記載の手順を用いて調製した。精製した結合体は、化合物79のε310nm＝18,639cm-1M-1およびε280nm＝10,317cm-1M-1ならびにトラスツズマブのε280nm＝226,107cm-1M-1を用いてUV-Vis分光光度法により判定して、PBD：トラスツズマブの比＝約4.7を有した。
【０５３１】
実施例43：
(11S,11aS)-4-((2S,5S)-19-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロル-1-イル)-5-イソプロピル-2-メチル-4,7,17-トリオキソ-10,13-ジオキサ-3,6,16-トリアザノナデカンアミド)ベンジル11-ヒドロキシ-7-メトキシ-8-(4-(2-(4-(6-(メトキシカルボニル)-1H-ベンゾ[d]イミダゾル-2-イル)フェニルカルバモイル)-1-メチル-1H-イミダゾル-4-イルアミノ)-4-オキソブトキシ)-2-メチレン-5-オキソ-2,3,11,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-10(5H)-カルボキシレート（82）の合成
2019522660.tif 000244
表題化合物を、化合物35の代わりに2-(4-(6-(メトキシカルボニル)-1H-ベンゾ[d]イミダゾル-2-イル)フェニルカルバモイル)-1-メチル-1H-イミダゾル-4-アミニウム（31）（19mg、0.044mmol）を用いた以外は、実施例38に記載のとおりに合成した。ESI-MS: C58H64N11O14 (M + H) 1138.5; found 1138.3。
【０５３２】
実施例44：
化合物82のトラスツズマブ結合体（結合体83）の調製
2019522660.tif 000245
表題結合体を、化合物48の代わりに11S,11aS)-4-((2S,5S)-19-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロル-1-イル)-5-イソプロピル-2-メチル-4,7,17-トリオキソ-10,13-ジオキサ-3,6,16-トリアザノナデカンアミド)ベンジル11-ヒドロキシ-7-メトキシ-8-(4-(2-(4-(6-(メトキシカルボニル)-1H-ベンゾ[d]イミダゾル-2-イル)フェニルカルバモイル)-1-メチル-1H-イミダゾル-4-イルアミノ)-4-オキソブトキシ)-2-メチレン-5-オキソ-2,3,11,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-10(5H)-カルボキシレート（82）（1.8mg、1.35μmol）を用いた以外は、実施例16に記載の手順を用いて調製した。精製した結合体は、化合物82のε336nm＝64,296cm-1M-1およびε280nm＝21,411cm-1M-1ならびにトラスツズマブのε280nm＝226,107cm-1M-1を用いてUV-Vis分光光度法により判定して、PBD：トラスツズマブの比＝約3.3を有した。
【０５３３】
実施例45：
4-(4-(4-(4-((11S,11aS)-10-((4-((2S,5S)-19-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロル-1-イル)-5-イソプロピル-2-メチル-4,7,17-トリオキソ-10,13-ジオキサ-3,6,16-トリアザノナデカンアミド)ベンジルオキシ)カルボニル)-11-ヒドロキシ-7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-2,3,5,10,11,11a-ヘキサヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イルオキシ)ブタンアミド)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボン酸（84）の合成
2019522660.tif 000246
表題化合物を、化合物35の代わりに2-(4-(5-カルボキシ-1-メチル-1H-ピロル-3-イル)フェニルカルバモイル)-1-メチル-1H-イミダゾル-4-アミニウムクロリド（26mg、0.063mmol）を用いた以外は、実施例38に記載のとおりに合成した。ESI-MS (M + H) calc for C65H77N12O18 1313.6; found 1313.0。
【０５３４】
実施例46：
化合物84のトラスツズマブ結合体（結合体85）の調製
2019522660.tif 000247
表題結合体を、化合物48の代わりに2-(4-(4-(4-((11S,11aS)-10-((4-((2S,5S)-19-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロル-1-イル)-5-イソプロピル-2-メチル-4,7,17-トリオキソ-10,13-ジオキサ-3,6,16-トリアザノナデカンアミド)ベンジルオキシ)カルボニル)-11-ヒドロキシ-7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-2,3,5,10,11,11a-ヘキサヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イルオキシ)ブタンアミド)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド)フェニル)-1H-ベンゾ[d]イミダゾール-6-カルボン酸（84）（1.8mg、1.35μmol）を用いた以外は、実施例16に記載の手順を用いて調製した。精製した結合体は、化合物84のε336nm＝27,870cm-1M-1およびε280nm＝16,095cm-1M-1ならびにトラスツズマブのε280nm＝226,107cm-1M-1を用いてUV-Vis分光光度法により判定して、PBD：トラスツズマブの比＝約4.0を有した。
【０５３５】
実施例47
4 4-(4-(4-(4-(((S)-3-((2S,5S)-19-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロル-1-イル)-5-イソプロピル-2-メチル-4,7,17-トリオキソ-10,13-ジオキサ-3,6,16-トリアザノナデカンアミド)-8-メトキシ-6-オキソ-12a,13-ジヒドロ-6H-ベンゾ[5,6][1,4]ジアゼピノ[1,2-a]インドル-9-イル)オキシ)ブタンアミド)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボン酸の合成
2019522660.tif 000248
【０５３６】
パートA：
2019522660.tif 000249
(S)-メチル6-ニトロインドリン-2-カルボキシレート（2.0g、9.0mmol、メチル(S)-インドリン-2-カルボキシレート塩酸塩からSynthesis, 2002, 320-322に記載の手順の改変により調製）、二炭酸ジ-tert-ブチル（7.9g、4当量）、THF（320mL）およびDMAP（55mg、0.05当量) を、アルゴン雰囲気下、室温で24時間撹拌した。反応混合物を蒸発させて濃縮し、クロマトグラフィ（ISCOカラム、120g、0〜20％EtOAc/Hex）で精製して、(S)-1-tert-ブチル2-メチル6-ニトロインドリン-1,2-ジカルボキシレート（86）を黄色ガムで得た（2.54g、収率87.6％）。
2019522660.tif 000250
【０５３７】
パートB：
2019522660.tif 000251
無水THF（0.55mL）中の化合物86（50mg、155μmol）に、0℃でLiBH4（10mg、3当量）を加え、反応混合物を室温まで加温した。4時間後、飽和塩化アンモニウム溶液（約3mL）を加え、反応混合物をEtOAc（3×）で抽出した。有機相を飽和炭酸水素ナトリウム溶液で洗浄し、MgSO4で乾燥し、減圧下で濃縮して、(S)-tert-ブチル2-(ヒドロキシメチル)-6-ニトロインドリン-1-カルボキシレート（87）を黄色油状物で得た（29mg、収率60.7％）。
2019522660.tif 000252
【０５３８】
パートC：
2019522660.tif 000253
EtOH（36mL）中の化合物87（1.82g、792μmol）に、10％Pd-C触媒（5重量％、12mg）を加えた。フラスコを水素ガスでパージし、反応を水素雰囲気下で20時間続けた。反応混合物をセライトを通してろ過し、触媒を除去した。ろ液を濃縮し、クロマトグラフィ（ISCOカラム、40g、30％EtOAc/Hex）で精製して、(S)-tert-ブチル6-アミノ-2-(ヒドロキシメチル)インドリン-1-カルボキシレート（88）を白色固体で得た（1.45g、収率89％）。
2019522660.tif 000254
【０５３９】
パートD：
2019522660.tif 000255
(S)-2-((S)-2-アミノ-3-メチルブタンアミド)プロパン酸（1.74g、9.24mmol）、アリル(2,5-ジオキソピロリジン-1-イル)カーボネート（1.84g、1当量）、NaHCO3（776mg、1当量）、水（37mL）およびアセトン（37mL）を室温で16時間撹拌した。アセトンをロータリーエバポレーションで除去し、残渣を水（250mL）で希釈し、濃HCl（17mL）を用いてpHを3に調節し、続いてEtOAc（3×400mL）で抽出した。有機層をNa2SO4で乾燥し、ろ過し、蒸発させて、((アリルオキシ)カルボニル)-L-バリル-L-アラニン（89）を白色固体で得た（2.28g、収率91％）。
2019522660.tif 000256
【０５４０】
パートE：
2019522660.tif 000257
HATU（309mg、1当量）、DIEA（395μL、2当量）、HOAt（156mg、1当量）、DMA（10mL）および化合物89（309mg、1当量）に、0℃で化合物88（300mg、1.135mmol）を加えた。反応混合物を撹拌し、室温まで加温した。15時間後、反応混合物をEtOAcで希釈し、次いで水（3×）で洗浄した。有機相をNa2SO4で乾燥し、ろ過し、濃縮し、クロマトグラフィ（ISCO、24gカラム、30％EtOAc/hex）で精製して、tert-ブチル(S)-6-((S)-2-((S)-2-(((アリルオキシ)カルボニル)アミノ)-3-メチルブタンアミド)プロパンアミド)-2-(ヒドロキシメチル)インドリン-1-カルボキシレート（90）を白色泡状物で得た（550mg、収率93％）。
2019522660.tif 000258
【０５４１】
パートF：
2019522660.tif 000259
ジオキサン（4mL）中の化合物90（420mg、810μmol）に、4M HCl/ジオキサン（4mL）を加えた。反応混合物を室温で22時間撹拌し、次いで濃縮して、アリル((S)-1-(((S)-1-(((S)-2-(ヒドロキシメチル)インドリン-6-イル)アミノ)-1-オキソプロパン-2-イル)アミノ)-3-メチル-1-オキソブタン-2-イル)カルバメート塩酸塩（91）を黄緑色泡状物で得た（408mg、収率100％）。
【０５４２】
パートG：
2019522660.tif 000260
化合物91（1.44g、3.17mmol）、ピリジン（1.18mL）、無水THF（29mL）および無水DMA（11.5mL）に、アルゴン雰囲気下、-40℃で無水THF（11mL）中のメチル4-(4-(クロロカルボニル)-2-メトキシ-5-ニトロフェノキシ)ブタノエート（1.05当量、1.11g）を加えた。反応混合物を室温まで加温した。18時間後、反応混合物を濃縮し、EtOAcで希釈し、水（3×）、飽和NaHCO3、食塩水で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、ろ過し、濃縮し、クロマトグラフィ（ISCO、80gカラム、5％MeOH/DCM）で精製して、メチル4-(4-((S)-6-((S)-2-((S)-2-(((アリルオキシ)カルボニル)アミノ)-3-メチルブタンアミド)プロパンアミド)-2-(ヒドロキシメチル)インドリン-1-カルボニル)-2-メトキシ-5-ニトロフェノキシ)ブタノエート（92）を黄色泡状物で得た（1.40g、収率62.0％）。
2019522660.tif 000261
【０５４３】
パートH：
2019522660.tif 000262
ACN（18.3mL）および水（9.2mL）中の化合物92（1.22g、1.71mmol）に、塩化アンモニウム（0.5当量、46mg）およびFe粉末（478mg、5当量）を加え、混合物を80℃で2時間撹拌した。反応混合物をろ過し、固体をEtOAcで洗浄し、ろ液を濃縮し、EtOAcで希釈し、有機層を食塩水で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、ろ過し、濃縮し、クロマトグラフィ（ISCO、12gカラム、50％EA/hex溶離剤）で精製して、メチル4-(4-((S)-6-((S)-2-((S)-2-(((アリルオキシ)カルボニル)アミノ)-3-メチルブタンアミド)プロパンアミド)-2-(ヒドロキシメチル)インドリン-1-カルボニル)-5-アミノ-2-メトキシフェノキシ)ブタノエート（93）を黄色泡状物で得た（865mg、収率74％）。
2019522660.tif 000263
【０５４４】
パートI：
2019522660.tif 000264
無水DMF（17.5mL）中の化合物93（827mg、1.210mmol）およびピリジン（1.25当量、122μL）に、アルゴン雰囲気下、-40℃でTHF（17.5mL）中のクロロギ酸アリル（1当量、129μL）を滴加した。反応混合物を室温まで加温した。19.5時間後、反応混合物を濃縮し、EtOAcで希釈し、水（3×）、5％HCl水溶液、食塩水で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、ろ過し、濃縮し、クロマトグラフィ（ISCO、12gカラム、40％EtOAc/hex）で精製して、メチル4-(5-(((アリルオキシ)カルボニル)アミノ)-4-((S)-6-((S)-2-((S)-2-(((アリルオキシ)カルボニル)アミノ)-3-メチルブタンアミド)プロパンアミド)-2-(ヒドロキシメチル)インドリン-1-カルボニル)-2-メトキシフェノキシ)ブタノエート（94）を黄色泡状物で得た（835mg、収率90％）。
2019522660.tif 000265
【０５４５】
パートJ：
2019522660.tif 000266
DCM（10mL）中の化合物94（805mg、1.050mmol）に、TEMPO（0.1当量、16mg）およびBAIB（1.1当量、372mg）を加え、反応混合物を室温で撹拌した。18時間後、反応混合物を濃縮し、クロマトグラフィ（ISCO、24gカラム、30％EA/hex）で精製して、アリル(12S,12aS)-3-((S)-2-((S)-2-(((アリルオキシ)カルボニル)アミノ)-3-メチルブタンアミド)プロパンアミド)-12-ヒドロキシ-8-メトキシ-9-(4-メトキシ-4-オキソブトキシ)-6-オキソ-12a,13-ジヒドロ-6H-ベンゾ[5,6][1,4]ジアゼピノ[1,2-a]インドール-11(12H)-カルボキシレート（95）を緑色泡状物で得た（713mg、収率89％）。
2019522660.tif 000267
【０５４６】
パートK：
2019522660.tif 000268
化合物95（470mg、614μmol）、pTSA.H2O（5当量、584mg）およびMeOH（9.4mL）を65℃で5時間還流した。反応混合物を濃縮し、EtOAcで希釈し、有機相を飽和NaHCO3、食塩水で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、ろ過し、濃縮し、クロマトグラフィ（ISCO、12gカラム、0〜5％MeOH/DCM）で精製して、アリル(12S,12aS)-3-((S)-2-((S)-2-(((アリルオキシ)カルボニル)アミノ)-3-メチルブタンアミド)プロパンアミド)-8,12-ジメトキシ-9-(4-メトキシ-4-オキソブトキシ)-6-オキソ-12a,13-ジヒドロ-6H-ベンゾ[5,6][1,4]ジアゼピノ[1,2-a]インドール-11(12H)-カルボキシレート（96）を黄色粉末で得た（206mg、収率43％）。
2019522660.tif 000269
【０５４７】
パートL：
2019522660.tif 000270
THF（5.4mL）中の化合物96（243mg、312μmol）に、水（4.9mL）中のLiOH.H2O（2当量、26.8mg）を加えた。反応混合物を室温で2.5時間撹拌した。次いで、5％HCl水溶液（約5mL）でpHを約3に調節した。水層をEtOAc（3×）で洗浄し、合わせた有機相をNa2SO4で乾燥し、ろ過し、濃縮し、クロマトグラフィ（ISCO、4gカラム、50％EtOAc/Hex）で精製して、4-(((12S,12aS)-11-((アリルオキシ)カルボニル)-3-((S)-2-((S)-2-(((アリルオキシ)カルボニル)アミノ)-3-メチルブタンアミド)プロパンアミド)-8,12-ジメトキシ-6-オキソ-11,12,12a,13-テトラヒドロ-6H-ベンゾ[5,6][1,4]ジアゼピノ[1,2-a]インドル-9-イル)オキシ)ブタン酸（97）を得た（137mg、収率57％）。
2019522660.tif 000271
【０５４８】
パートM：
2019522660.tif 000272
無水DMF（1.9mL）中の4-(4-(4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボン酸（190mg、23μmol）に、室温でDIEA（2当量、151μL）および臭化アリル（2当量、76μL）を滴加した。反応混合物を室温で17時間撹拌し、次いでEtOAcで希釈し、水（3×）で洗浄した。有機相を飽和NaHCO3溶液、食塩水で洗浄し、Na2SO4で乾燥し、ろ過し、濃縮し、クロマトグラフィ（ISCO、4gカラム、20％EtOAc/Hex）で精製して、アリル4-(4-(4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキシレート（98）を黄色固体で得た（154mg、収率74.3％）。ESI-MS (M + H) calc for C25H30N5O5 480.2; found 480.2。
【０５４９】
パートN：
2019522660.tif 000273
ジオキサン（4mL）中の化合物98（125mg、261μmol）に、ジオキサン中の4M HClの溶液（4mL）を加えた。反応混合物を室温で26時間撹拌し、次いで濃縮し、クロマトグラフィ（ISCO、12gカラム、50％EtOAC/Hexと、続いて0〜10％MeOH/DCM）で精製して、アリル4-(4-(4-アミノ-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキシレート塩酸塩（99）を得た（62mg、収率57％）。ESI-MS (M + H) calc for C20H22N5O3 380.2; found 380.1。
【０５５０】
パートO：
2019522660.tif 000274
化合物99（39μmol、16mg）、化合物97（1当量、30mg）、無水DCM（2mL）およびDIEA（2.5当量、17μL）に、EDAC（1.2当量、9mg）およびDMAP（1.5当量、7mg）を加えた。反応混合物を室温で22時間撹拌した。次いで、DCMを加え、得られた混合物を水（3×）および飽和NaHCO3（3×）で洗浄した。有機相をNa2SO4で乾燥し、ろ過し、濃縮し、クロマトグラフィ（ISCO、4gカラム、0〜5％MeOH/DCM）で精製して、アリル(12S,12aS)-9-(4-((2-((4-(5-((アリルオキシ)カルボニル)-1-メチル-1H-ピロル-3-イル)フェニル)カルバモイル)-1-メチル-1H-イミダゾル-4-イル)アミノ)-4-オキソブトキシ)-3-((S)-2-((S)-2-(((アリルオキシ)カルボニル)アミノ)-3-メチルブタンアミド)プロパンアミド)-8,12-ジメトキシ-6-オキソ-12a,13-ジヒドロ-6H-ベンゾ[5,6][1,4]ジアゼピノ[1,2-a]インドール-11(12H)-カルボキシレート（100）を黄色粉末で得た（20mg、収率45％）。
【０５５１】
パートP：
2019522660.tif 000275
出発原料（10mg、8.9μmol）、DABCO（15当量、15mg）、Pd(PPh3)4（0.3当量、3mg）および無水DCM（600μL）をアルゴン雰囲気下、室温で25分間撹拌した。反応混合物を濃縮し、DMF（250μL）に溶解し、水（150μL）で希釈し、分取HPLCで精製して、4-(4-(4-(4-(((S)-3-((S)-2-((S)-2-アミノ-3-メチルブタンアミド)プロパンアミド)-8-メトキシ-6-オキソ-12a,13-ジヒドロ-6H-ベンゾ[5,6][1,4]ジアゼピノ[1,2-a]インドル-9-イル)オキシ)ブタンアミド)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボン酸（1010を黄色油状物で得た（5mg、収率63.5％）。
【０５５２】
パートQ：
2019522660.tif 000276
化合物101（6mg、6.8μmol）、HOBt（2当量、1.8mg）、2,5-ジオキソピロリジン-1-イル3-(2-(2-(3-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロル-1-イル)プロパンアミド)エトキシ)エトキシ)プロパノエート（2当量、5.8mg）、TEA（1.1当量、1μL）および無水DMF（1mL）を室温で撹拌した。2時間後、粗生成物を分取HPLC（0.1％HCOOH）で精製して、4-(4-(4-(4-(((S)-3-((2S,5S)-19-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロル-1-イル)-5-イソプロピル-2-メチル-4,7,17-トリオキソ-10,13-ジオキサ-3,6,16-トリアザノナデカンアミド)-8-メトキシ-6-オキソ-12a,13-ジヒドロ-6H-ベンゾ[5,6][1,4]ジアゼピノ[1,2-a]インドル-9-イル)オキシ)ブタンアミド)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボン酸（102）を得た（3mg、収率37％）。ESI MS: C60H68N12O15 (M+H) 1198.2; found 1197.5。
【０５５３】
実施例48：
化合物102のトラスツズマブ結合体（結合体103）の調製
2019522660.tif 000277
表題結合体を、化合物48の代わりに4-(4-(4-(4-(((S)-3-((2S,5S)-19-(2,5-ジオキソ-2,5-ジヒドロ-1H-ピロル-1-イル)-5-イソプロピル-2-メチル-4,7,17-トリオキソ-10,13-ジオキサ-3,6,16-トリアザノナデカンアミド)-8-メトキシ-6-オキソ-12a,13-ジヒドロ-6H-ベンゾ[5,6][1,4]ジアゼピノ[1,2-a]インドル-9-イル)オキシ)ブタンアミド)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボン酸（102）（1.213mg、1.014μmol）を用いた以外は、実施例16に記載の手順を用いて調製した。精製した結合体は、化合物102のε317nm＝22,908cm-1M-1およびε280nm＝7,628cm-1M-1ならびにトラスツズマブのε280nm＝226,107cm-1M-1を用いてUV-Vis分光光度法により判定して、PBD：トラスツズマブの比＝約5.9を有した。
【０５５４】
実施例49：
(Z)-N-(4-(5-(5-アミノ-1H-インドール-1-カルボニル)-1-メチル-1H-ピロル-3-イル)フェニル)-4-(4-(7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-2,3,5,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イルオキシ)ブタンアミド)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド（105）の合成
2019522660.tif 000278
【０５５５】
パートA：
DMF（6mL）中の4-(4-(4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボキサミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボン酸（610mg、1.387mmol）に、ジ(1H-イミダゾル-1-イル)メタノンを加え、得られた混合物を終夜撹拌した。溶媒をロータリーエバポレーションで除去した。DMF（10mL）中の残渣に、アリル1H-インドル-5-イルカルバメート（300mg、1.387mmol）と、続いてDBU（0.103mL、0.694mmol）を加えた。得られた混合物を約50℃で18時間撹拌した。溶媒をロータリーエバポレーションで除去し、残渣をEtOAc（60mL）に溶解し、続いて飽和NaHCO3（水溶液、20mL）、水（20mL）、およびNH4Cl（20mL）で逐次洗浄した。有機層をMgSO4で乾燥し、蒸発させ、シリカゲル（ヘキサン：EtOAc、0〜60％B、40gカラム）で精製して、アリル(1-(4-(4-(4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボニル)-1H-インドル-5-イル)カルバメート（104）を得た（470mg、収率53.1％）。ESI-MS: C34H36N7O6 (M+H) 638.3; found 637.8。
【０５５６】
パートB、パートC、およびパートD：
表題化合物（105）を、化合物34の代わりにアリル(1-(4-(4-(4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボニル)-1H-インドル-5-イル)カルバメート（104）（470mg、0.74mmol）を用いた以外は、実施例6、パートB、パートCおよびパートDに記載の手順を用いて調製した。ESI-MS: C43H42N9O6 (M + H) 780.3; found 779.9。
【０５５７】
実施例50：
(S,Z)-N-(4-(5-メトキシ-1H-ベンゾ[d]イミダゾル-2-イル)フェニル)-4-(4-(7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-2,3,5,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イルオキシ)ブタンアミド)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド（106）の合成
2019522660.tif 000279
表題化合物を、化合物28の代わりにtert-ブチル4-(5-メトキシ-1H-ベンゾ[d]イミダゾル-2-イル)フェニルカルバメート（1.38mg、4.07mmol）を用いた以外は、実施例5に記載のとおりに調製した。ESI MS: C37H36N8O6 (M+H) 689.7、found 689.4。
【０５５８】
実施例51：
(Z)-N-(4-(5-(5-メトキシ-1H-インドール-1-カルボニル)-1-メチル-1H-ピロル-3-イル)フェニル)-4-(4-(7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-2,3,5,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イルオキシ)ブタンアミド)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド（107）の合成
2019522660.tif 000280
表題化合物を、化合物104の代わりにtert-ブチル2-(4-(5-(5-メトキシ-1H-インドール-1-カルボニル)-1-メチル-1H-ピロル-3-イル)フェニルカルバモイル)-1-メチル-1H-イミダゾル-4-イルカルバメート（57.8mg、0.302mmol）を用いた以外は、実施例49に記載のとおりに調製した。ESI MS: C44H43N8O7 795.3 (M+H); found 795.2。
【０５５９】
実施例52：
(S,Z)-N-(4-(5-メトキシ-1H-インドル-2-イル)フェニル)-4-(4-(7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-2,3,5,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イルオキシ)ブタンアミド)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド（108）
2019522660.tif 000281
表題化合物を、化合物14の代わりにtert-ブチル2-(4-(5-メトキシ-1H-インドル-2-イル)フェニルカルバモイル)-1-メチル-1H-イミダゾル-4-イルカルバメート（300mg、0.650mmol）を用いた以外は、実施例2に記載のとおりに調製した。ESI MS: C38H38N7O6 688.3 (M+H)；Found 688.3
【０５６０】
実施例53：
メチル1-(4-(4-(4-(4-((7-メトキシ-2-メチレン-5-オキソ-2,3,5,11a-テトラヒドロ-1H-ベンゾ[e]ピロロ[1,2-a][1,4]ジアゼピン-8-イル)オキシ)ブタンアミド)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボニル)-1H-インドール-5-カルボキシレートの合成
2019522660.tif 000282
表題化合物を、化合物104の代わりにメチル1-(4-(4-(4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)-1-メチル-1H-イミダゾール-2-カルボキサミド)フェニル)-1-メチル-1H-ピロール-2-カルボニル)-1H-インドール-5-カルボキシレートを用いた以外は、実施例49に記載のとおりに調製した。ESI MS: C45H43N8O8 823.3 (M+H); found 823.3。
【０５６１】
実施例54：
抗体-ポリマー-薬物結合体の細胞生存度検定
PBD化合物およびその結合体の、インビトロでの腫瘍細胞株における抗増殖特性を、CellTiter-Glo(登録商標)（Promega Corp）を用いて評価した。細胞を側面黒色96穴プレートに播種し、5％CO2の加湿雰囲気下、37℃で終夜接着させた。BT474、SKBR3、NCI-N87細胞（HER2発現細胞）、JIMT1細胞（HER2中程度発現レベル細胞）、およびMCF7細胞（HER2低発現レベル細胞）を、5,000細胞/ウェルの密度で播種した。翌日、培地を50μL新鮮培地に交換し、PBD化合物または抗体-PBD結合体の2×保存液50μLを適切なウェルに加え、混合し、72時間インキュベートした。CellTiter-Glo(登録商標)試薬をウェルに室温で加え、発光シグナルを10分後にSpectraMax M5プレート読み取り器（Molecular Devices）を用いて測定した。用量反応曲線をSoftMax Proソフトウェアを用いて作成した。IC50値を4パラメーター曲線フィッティングから決定した。
【０５６２】
表Iおよび表IIは、それぞれPBD化合物およびその結合体の抗増殖特性の例示的結果を示す。
【０５６３】
【表Ｉ】
2019522660.tif 000283
【０５６４】
【表ＩＩ】
2019522660.tif 000284
【０５６５】
表IおよびIIに示すとおり、化合物および抗体-薬物結合体は、試験した細胞株で有効性を示す。
【０５６６】
実施例55：
抗体-ポリマー-薬物結合体の投与に対する腫瘍成長反応
雌CB-17 SCIDマウスに、NCI-N87細胞を皮下接種した（各群n＝10）。試験化合物または媒体を第1日に単一用量でIV投与した。腫瘍サイズを、図1に示した時点で、デジタルノギスを用いて測定した。腫瘍体積を計算し、腫瘍成長の遅延を判定するために用いた。腫瘍が800mm3のサイズに達した時点でマウスを屠殺した。腫瘍体積を各群の平均±SEMで報告する。
【０５６７】
図1は、NCI-N87細胞を皮下接種したマウス（各群n＝10）において、媒体；トラスツズマブ-薬物結合体；結合体51、実施例18；結合体53、実施例20；結合体55、実施例22；結合体57、実施例24；結合体67、実施例30；結合体69、実施例32；結合体71、実施例34；結合体78、実施例39；または結合体103、実施例48を、それぞれ3mg/kgで第1日に単一用量でIV投与した後の腫瘍反応の結果を示す。結果は、第78日に3mg/kgで、結合体78が1例の部分反応をもたらし；結合体51が3例の部分反応をもたらし；結合体103が2例の部分反応をもたらし、かつ結合体71が1例の部分反応をもたらしたことを示す。
【０５６８】
図2は、NCI-N87細胞を皮下接種したマウス（各群n＝10）において、媒体；トラスツズマブ-薬物結合体；結合体63、実施例26；結合体65、実施例28；結合体83、実施例44または結合体85、実施例46を、3mg/kgで第1日に単一用量でIV投与した後の腫瘍反応の結果を示す。結果は、第78日に3mg/kgで、結合体63が1例の部分反応をもたらし、結合体65が3例の部分反応をもたらし、結合体83が10例の部分反応をもたらし、かつ結合体85が4例の部分反応、4例の完全反応、および4例の無腫瘍生存動物をもたらしたことを示す。
【０５６９】
本発明は、その精神または本質的特徴から逸脱することなく、他の特定の形態で実施することができる。前述の態様は、したがって、すべての点で、本明細書に記載の発明に限定するものではなく、例示的であると考えるべきである。したがって、本発明の範囲は前述の記載ではなく、添付の特許請求の範囲によって示され、特許請求の範囲の等価性の意味および範囲内に入るすべての変更はその中に含まれることが意図される。
【図１】
2019522660.tif 000359
【図２】
2019522660.tif 000360
【国際調査報告】
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