(57)【要約】  本明細書の開示は、白血病、リンパ腫、及びトリプルネガティブ乳癌のような癌の治療への併用療法を提供する。本開示は、ＣＤＫ阻害剤（例、式（Ｉ）によって表されるＣＤＫ阻害剤又はその医薬的に許容される塩）のＢＣＬ−２阻害剤又はプロテアソーム阻害剤と一緒の併用療法を癌の治療のために提供する。
2019514854.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
血液癌を治療する方法であって、式Ｉ：
【化１】
2019514854.tif 000018
［式中：Ｒ１は、置換されていてもよいフェニルであり；
Ｒ２とＲ３は、それぞれ独立して、ヒドロキシとＯＲ８（ここでＲ８は、置換されていてもよいＣ１−Ｃ１０−アルキルである）より選択され；
Ｒ４は、置換されていてもよいＣ１−Ｃ４−アルキルであり；そして
Ｒ９は、水素又は置換されていてもよいＣ１−Ｃ４−アルキルである］によって表されるＣＤＫ阻害剤又はその医薬的に許容される塩の治療有効量とＢＣＬ−２阻害剤の治療有効量とを、血液癌を治療することの必要な被験者に投与することを含む、上記方法。
【請求項２】
式Ｉの化合物又は塩が、式Ｉａ：
【化２】
2019514854.tif 000019
によって表される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
Ｒ１が、ヒドロキシ、シアノ、ハロ、アミノ、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４−ヒドロキシアルキル、Ｃ１−Ｃ４−ハロアルキル、及びニトロより独立して選択される１以上の置換基で置換されていてもよい、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
Ｒ１が、ハロ及びＣ１−Ｃ４−ハロアルキルより独立して選択される１以上の置換基で置換されている、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
Ｒ１が２−クロロ−４−トリフルオロメチルフェニルである、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
Ｒ２及びＲ３が、それぞれ独立して、ヒドロキシ及びＯＲ８より選択され、ここでＲ８は、ヒドロキシ、シアノ、ハロ、アミノ、＝Ｏ、＝Ｓ、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ、及びニトロより独立して選択される１以上の置換基で置換されていてもよいＣ１−Ｃ１０−アルキルである、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
Ｒ２及びＲ３がそれぞれヒドロキシである、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
Ｒ４が、ヒドロキシ、シアノ、ハロ、アミノ、＝Ｏ、＝Ｓ、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ、及びニトロより選択される１以上の置換基で置換されているＣ１−Ｃ４−アルキルである、請求項１〜７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９】
Ｒ４が、ヒドロキシ、シアノ、ハロ、アミノ、＝Ｏ、＝Ｓ、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ、及びニトロより選択される１以上の置換基で置換されているＣ１−Ｃ４−アルキルである、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
Ｒ４が２−ヒドロキシメチルである、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
Ｒ９が、ヒドロキシ、シアノ、ハロ、アミノ、＝Ｏ、＝Ｓ、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ、及びニトロで置換されていてもよいＣ１−Ｃ４−アルキルである、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
Ｒ９がメチルである、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
式Ｉの化合物が、式Ｉｂ：
【化３】
2019514854.tif 000020
によって表されるか又はその医薬的に許容される塩である、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
ＢＣＬ−２阻害剤がＢＨ３−模倣薬である、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】
ＢＣＬ−２阻害剤がＢｃｌ−２タンパク質を特異的に阻害する、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１６】
ＢＣＬ−２阻害剤が、ナビトクラックス（navitoclax）、ベネトクラックス（venetoclax）、Ａ−１１５５４６３、Ａ−１３３１８５２、ＡＢＴ−７３７、オバトクラックス（obatoclax）、ＴＷ−３７、Ａ−１２１０４７７、ＡＴ１０１、ＨＡ１４−１、ＢＡＭ７、Ｓ４４５６３、サブトクラックス（sabutoclax）、ＵＭＩ−７７、ガンモギン酸（gambogic acid）、マリトクラックス（maritoclax）、ＭＩＭ１、メチルプレドニゾロン、ｉＭＡＣ２、Ｂａｘ阻害剤のペプチドＶ５、Ｂａｘ阻害剤のペプチドＰ５、Ｂａｘチャネルブロッカー、及びＡＲＲＹ５２０トリフルオロアセテートより選択される、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１７】
ＢＣＬ−２阻害剤が、ナビトクラックスとベネトクラックス、又はそのいずれか一方の医薬的に許容される塩より選択される、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
血液癌が、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ球性リンパ腫（ＡＬＬ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、原発性縦隔Ｂ細胞リンパ腫、血管内大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）、マントル細胞リンパ腫、辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、節外性辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、節性辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、脾辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、リンパ形質細胞性リンパ腫、及び原発性中枢神経系リンパ腫より選択される、請求項１〜１７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１９】
血液癌が、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、急性骨髄性白血病、又は慢性リンパ球性白血病である、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
ＣＤＫ阻害剤及びＢＣＬ−２阻害剤が同時的に投与される、請求項１〜１９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２１】
ＣＤＫ阻害剤及びＢＣＬ−２阻害剤が相互に約１２時間以内に連続的に投与される、請求項１〜１９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２２】
ＣＤＫ阻害剤及びＢＣＬ−２阻害剤が相互に約５時間以内に連続的に投与される、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
ＣＤＫ阻害剤及びＢＣＬ−２阻害剤が医薬組成物において共製剤化される、請求項１〜１９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２４】
ＣＤＫ阻害剤及びＢＣＬ−２阻害剤が毎日、１日おきに、又は２日おきに投与される、請求項１〜２３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２５】
癌を治療する方法であって、式Ｉ：
【化４】
2019514854.tif 000021
［式中：Ｒ１は、置換されていてもよいフェニルであり；
Ｒ２とＲ３は、それぞれ独立して、ヒドロキシとＯＲ８（ここでＲ８は、置換されていてもよいＣ１−Ｃ１０−アルキルである）より選択され；
Ｒ４は、置換されていてもよいＣ１−Ｃ４−アルキルであり；そして
Ｒ９は、水素又は置換されていてもよいＣ１−Ｃ４−アルキルである］によって表されるＣＤＫ阻害剤又はその医薬的に許容される塩の治療有効量とプロテアソーム阻害剤の治療有効量とを、癌を治療することの必要な被験者に投与することを含む、上記方法。
【請求項２６】
式Ｉの化合物又は塩が、式Ｉａ：
【化５】
2019514854.tif 000022
によって表される、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
Ｒ１が、ヒドロキシ、シアノ、ハロ、アミノ、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４−ヒドロキシアルキル、Ｃ１−Ｃ４−ハロアルキル、及びニトロより独立して選択される１以上の置換基で置換されていてもよい、請求項２５又は２６に記載の方法。
【請求項２８】
Ｒ１が、ハロ及びＣ１−Ｃ４−ハロアルキルより独立して選択される１以上の置換基で置換されている、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
Ｒ１が２−クロロ−４−トリフルオロメチルフェニルである、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
Ｒ２及びＲ３が、それぞれ独立して、ヒドロキシ及びＯＲ８より選択され、ここでＲ８は、ヒドロキシ、シアノ、ハロ、アミノ、＝Ｏ、＝Ｓ、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ、及びニトロより独立して選択される１以上の置換基で置換されていてもよいＣ１−Ｃ１０−アルキルである、請求項２５〜２９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３１】
Ｒ２及びＲ３がそれぞれヒドロキシである、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
Ｒ４が、ヒドロキシ、シアノ、ハロ、アミノ、＝Ｏ、＝Ｓ、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ、及びニトロより選択される１以上の置換基で置換されているＣ１−Ｃ４−アルキルである、請求項２５〜３１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３３】
Ｒ４が、ヒドロキシ、シアノ、ハロ、アミノ、＝Ｏ、＝Ｓ、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ、及びニトロより選択される１以上の置換基で置換されているＣ１−Ｃ４−アルキルである、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
Ｒ４が２−ヒドロキシメチルである、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
Ｒ９が、ヒドロキシ、シアノ、ハロ、アミノ、＝Ｏ、＝Ｓ、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ、及びニトロで置換されていてもよいＣ１−Ｃ４−アルキルである、請求項２５〜３４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３６】
Ｒ９がメチルである、請求項３５に記載の方法。
【請求項３７】
式Ｉの化合物が、式Ｉｂ：
【化６】
2019514854.tif 000023
によって表されるか又はその医薬的に許容される塩である、請求項２５に記載の方法。
【請求項３８】
プロテアソーム阻害剤が、ボルテゾミブ（bortezomib）、マリゾミブ（marizomib）、イクサゾミブ（ixazomib）、ジスルフィラム、エピガロカテキン−３−ガラート、サリノスポラミドＡ、カルフィルゾミブ（carfilzomib）、ＯＮＸ０９１２、ＣＥＰ−１８７７０、ＭＬＮ９７０８、エポキソミシン（epoxomicin）、ＭＧ１３２、及びこれらのいずれか１つの医薬的に許容される塩より選択される、請求項２５〜３７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３９】
プロテアソーム阻害剤が、ボルテゾミブ、マリゾミブ、イクサゾミブ、及びこれらのいずれか１つの医薬的に許容される塩より選択される、請求項３８に記載の方法。
【請求項４０】
癌が血液癌である、請求項２５〜３９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４１】
血液癌が、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ球性リンパ腫（ＡＬＬ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、原発性縦隔Ｂ細胞リンパ腫、血管内大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）、マントル細胞リンパ腫、辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、節外性辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、節性辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、脾辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、リンパ形質細胞性リンパ腫、及び原発性中枢神経系リンパ腫より選択される、請求項４０に記載の方法。
【請求項４２】
血液癌が、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、急性骨髄性白血病、又は慢性リンパ球性白血病である、請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】
癌がトリプルネガティブ乳癌（ＴＮＢＣ）である、請求項２５〜３９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４４】
ＣＤＫ阻害剤及びプロテアソーム阻害剤が同時的に投与される、請求項２５〜４３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４５】
ＣＤＫ阻害剤及びプロテアソーム阻害剤が相互に約１２時間以内に連続的に投与される、請求項２５〜４３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４６】
ＣＤＫ阻害剤及びプロテアソーム阻害剤が相互に約５時間以内に連続的に投与される、請求項４５に記載の方法。
【請求項４７】
ＣＤＫ阻害剤及びプロテアソーム阻害剤が医薬組成物において共製剤化される、請求項２４〜４３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４８】
ＣＤＫ阻害剤及びプロテアソーム阻害剤が毎日、１日おきに、又は２日おきに投与される、請求項２４〜４７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４９】
式Ｉ：
【化７】
2019514854.tif 000024
［式中：Ｒ１は、置換されていてもよいフェニルであり；
Ｒ２とＲ３は、それぞれ独立して、ヒドロキシとＯＲ８（ここでＲ８は、置換されていてもよいＣ１−Ｃ１０−アルキルである）より選択され；
Ｒ４は、置換されていてもよいＣ１−Ｃ４−アルキルであり；そして
Ｒ９は、水素又は置換されていてもよいＣ１−Ｃ４−アルキルである］によって表されるＣＤＫ阻害剤又はその医薬的に許容される塩の治療有効量とＢＣＬ−２阻害剤又はプロテアソーム阻害剤の治療有効量、及び医薬的に許容される賦形剤を含んでなる、医薬組成物。
【請求項５０】
式Ｉの化合物又は塩が、式Ｉａ：
【化８】
2019514854.tif 000025
によって表される、請求項４９に記載の医薬組成物。
【請求項５１】
Ｒ１が、ヒドロキシ、シアノ、ハロ、アミノ、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４−ヒドロキシアルキル、Ｃ１−Ｃ４−ハロアルキル、及びニトロより独立して選択される１以上の置換基で置換されていてもよい、請求項４９又は５０に記載の医薬組成物。
【請求項５２】
Ｒ１が、ハロ及びＣ１−Ｃ４−ハロアルキルより独立して選択される１以上の置換基で置換されている、請求項５１に記載の医薬組成物。
【請求項５３】
Ｒ１が２−クロロ−４−トリフルオロメチルフェニルである、請求項５２に記載の医薬組成物。
【請求項５４】
Ｒ２及びＲ３が、それぞれ独立して、ヒドロキシ及びＯＲ８より選択され、ここでＲ８は、ヒドロキシ、シアノ、ハロ、アミノ、＝Ｏ、＝Ｓ、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ、及びニトロより独立して選択される１以上の置換基で置換されていてもよいＣ１−Ｃ１０−アルキルである、請求項４９〜５３のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項５５】
Ｒ２及びＲ３がそれぞれヒドロキシである、請求項５４に記載の医薬組成物。
【請求項５６】
Ｒ４が、ヒドロキシ、シアノ、ハロ、アミノ、＝Ｏ、＝Ｓ、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ、及びニトロより選択される１以上の置換基で置換されているＣ１−Ｃ４−アルキルである、請求項４９〜５５のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項５７】
Ｒ４が、ヒドロキシ、シアノ、ハロ、アミノ、＝Ｏ、＝Ｓ、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ、及びニトロより選択される１以上の置換基で置換されているＣ１−Ｃ４−アルキルである、請求項５６に記載の医薬組成物。
【請求項５８】
Ｒ４が２−ヒドロキシメチルである、請求項５７に記載の医薬組成物。
【請求項５９】
Ｒ９が、ヒドロキシ、シアノ、ハロ、アミノ、＝Ｏ、＝Ｓ、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ、及びニトロで置換されていてもよいＣ１−Ｃ４−アルキルである、請求項４９〜５３のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項６０】
Ｒ９がメチルである、請求項５９に記載の医薬組成物。
【請求項６１】
式Ｉの化合物が、式Ｉｂ：
【化９】
2019514854.tif 000026
によって表されるか又はその医薬的に許容される塩である、請求項４９に記載の医薬組成物。
【請求項６２】
ＢＣＬ−２阻害剤を含み、該ＢＣＬ−２阻害剤が、ナビトクラックス、ベネトクラックス、Ａ−１１５５４６３、Ａ−１３３１８５２、ＡＢＴ−７３７、オバトクラックス、Ｓ４４５６３、ＴＷ−３７、Ａ−１２１０４７７、ＡＴ１０１、ＨＡ１４−１、ＢＡＭ７、サブトクラックス、ＵＭＩ−７７、ガンモギン酸、マリトクラックス、ＭＩＭ１、メチルプレドニゾロン、ｉＭＡＣ２、Ｂａｘ阻害剤のペプチドＶ５、Ｂａｘ阻害剤のペプチドＰ５、Ｂａｘチャネルブロッカー、ＡＲＲＹ５２０トリフルオロアセテート、及びこれらのいずれか１つの医薬的に許容される塩より選択される、請求項４９〜６１のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項６３】
ＢＣＬ−２阻害剤が、ナビトクラックスとベネトクラックス、又はそのいずれか一方の医薬的に許容される塩より選択される、請求項６２に記載の医薬組成物。
【請求項６４】
ＢＣＬ−２阻害剤がベネトクラックスである、請求項６３に記載の医薬組成物。
【請求項６５】
プロテアソーム阻害剤を含み、該プロテアソーム阻害剤が、ボルテゾミブ、マリゾミブ、イクサゾミブ、ジスルフィラム、エピガロカテキン−３−ガラート、サリノスポラミドＡ、カルフィルゾミブ、ＯＮＸ０９１２、ＣＥＰ−１８７７０、ＭＬＮ９７０８、エポキソミシン、ＭＧ１３２、及びこれらのいずれか１つの医薬的に許容される塩より選択される、請求項４９〜６１のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項６６】
プロテアソーム阻害剤が、ボルテゾミブ、マリゾミブ、イクサゾミブ、及びこれらのいずれか１つの医薬的に許容される塩より選択される、請求項６５に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
相互参照
[0001]  本出願は、その全内容が参照により本明細書に組み込まれる、米国仮特許出願シリアル番号：６２／３１４，３５６（２０１６年３月２８日出願）に対する優先権を主張する。
【背景技術】
【０００２】
[0002]  数多くの癌関連治療薬が第Ｉ相又は第ＩＩ相臨床試験と特別な時期での評価の下にあるが、そのほとんどは先に進めないものである。事実、癌関連治療薬の９０％より多くは、第Ｉ相又は第ＩＩ相臨床試験の評価に合格しないと推定されている。第ＩＩＩ相試験の不合格率はほぼ５０％であって、発見から第ＩＩＩ相試験に至る新薬開発のコストは、８億ドルと１７億ドルの間であって、８年〜１０年を要する可能性がある。
【０００３】
[0003]  加えて、多くの患者は、有効であることが示されてきた標準薬に対してさえ応答しないものである。現在よく理解されていないか又は容易に評価されない理由のために、個々の患者は、標準的な薬物療法に応答しない場合がある。ある症例では、癌を治療するのに、配合剤（drug combinations）の投与が個別に投与される薬物より有効な場合がある。これらの配合剤は、相乗的に作用して、薬物の抗癌活性を高めるのかもしれない。ある症例では、特に有効でない薬物が、追加の薬物療法と組み合わされる場合に、新たな予想外の使用を見出す場合がある。
【発明の概要】
【０００４】
[0004]  １つの側面において、本開示は、血液癌を治療する方法であって、式Ｉ：
【０００５】
【化１】
2019514854.tif 000003
【０００６】
［式中：Ｒ１は、置換されていてもよいフェニルであり；
Ｒ２とＲ３は、それぞれ独立して、ヒドロキシとＯＲ８（ここでＲ８は、置換されていてもよいＣ１−Ｃ１０−アルキルである）より選択され；
Ｒ４は、置換されていてもよいＣ１−Ｃ４−アルキルであり；そして
Ｒ９は、水素又は置換されていてもよいＣ１−Ｃ４−アルキルである］によって表されるＣＤＫ阻害剤又はその医薬的に許容される塩の治療有効量とＢＣＬ−２阻害剤の治療有効量とを、血液癌を治療することの必要な被験者に投与することを含んでなる、上記方法を提供する。
【０００７】
[0005]  ある側面において、本開示は、癌を治療する方法であって、式Ｉ：
【０００８】
【化２】
2019514854.tif 000004
【０００９】
［式中：Ｒ１は、置換されていてもよいフェニルであり；
Ｒ２とＲ３は、それぞれ独立して、ヒドロキシとＯＲ８（ここでＲ８は、置換されていてもよいＣ１−Ｃ１０−アルキルである）より選択され；
Ｒ４は、置換されていてもよいＣ１−Ｃ４−アルキルであり；そして
Ｒ９は、水素又は置換されていてもよいＣ１−Ｃ４−アルキルである］によって表されるＣＤＫ阻害剤又はその医薬的に許容される塩の治療有効量とプロテアソーム阻害剤の治療有効量とを、癌を治療することの必要な被験者に投与することを含んでなる、上記方法を提供する。ある態様において、癌は、血液癌とトリプルネガティブ乳癌（ＴＮＢＣ）より選択される。
【００１０】
[0006]  ある態様において、式Ｉの化合物は、式Ｉａ：
【００１１】
【化３】
2019514854.tif 000005
【００１２】
によって表されるか又はその医薬的に許容される塩である。
[0007]  式Ｉ又はＩａの化合物又は塩についてのある態様では、Ｒ１が、ヒドロキシ、シアノ、ハロ、アミノ、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４−ヒドロキシアルキル、Ｃ１−Ｃ４−ハロアルキル、及びニトロより独立して選択される１以上の置換基で置換されていてもよい。ある態様では、Ｒ１が、ハロとＣ１−Ｃ４−ハロアルキルより独立して選択される１以上の置換基で置換されている。ある態様では、Ｒ１が２−クロロ−４−トリフルオロメチルフェニルである。
【００１３】
[0008]  式Ｉ又はＩａの化合物又は塩についてのある態様では、Ｒ２とＲ３が、それぞれ独立して、ヒドロキシとＯＲ８より選択され、ここでＲ８は、ヒドロキシ、シアノ、ハロ、アミノ、＝Ｏ、＝Ｓ、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ、及びニトロより独立して選択される１以上の置換基で置換されていてもよいＣ１−Ｃ１０−アルキルである。ある態様では、Ｒ２とＲ３がそれぞれヒドロキシである。
【００１４】
[0009]  式Ｉ又はＩａの化合物又は塩についてのある態様では、Ｒ４が、ヒドロキシ、シアノ、ハロ、アミノ、＝Ｏ、＝Ｓ、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ、及びニトロより選択される１以上の置換基で置換されているＣ１−Ｃ４−アルキルである。ある態様では、Ｒ４が、ヒドロキシ、シアノ、ハロ、アミノ、＝Ｏ、＝Ｓ、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ、及びニトロより選択される１以上の置換基で置換されているＣ１−Ｃ４−アルキルである。ある態様では、Ｒ４が２−ヒドロキシメチルである。
【００１５】
[0010]  式Ｉ又はＩａの化合物又は塩についてのある態様では、Ｒ９が、ヒドロキシ、シアノ、ハロ、アミノ、＝Ｏ、＝Ｓ、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ、及びニトロで置換されていてもよいＣ１−Ｃ４−アルキルである。ある態様では、Ｒ９がメチルである。ある態様において、式Ｉの化合物は、式Ｉｂ：
【００１６】
【化４】
2019514854.tif 000006
【００１７】
によって表されるか又はその医薬的に許容される塩である。
[0011]  ある態様において、本明細書に記載される方法のＢＣＬ−２阻害剤は、ＢＨ３−模倣薬である。ＢＣＬ−２阻害剤は、Ｂｃｌ−２タンパク質を特異的に阻害し得る。ＢＣＬ−２阻害剤は、ナビトクラックス、ベネトクラックス、Ａ−１１５５４６３、Ａ−１３３１８５２、ＡＢＴ−７３７、オバトクラックス、Ｓ４４５６３、ＴＷ−３７、Ａ−１２１０４７７、ＡＴ１０１、ＨＡ１４−１、ＢＡＭ７、サブトクラックス、ＵＭＩ−７７、ガンモギン酸、マリトクラックス、ＭＩＭ１、メチルプレドニゾロン、ｉＭＡＣ２、Ｂａｘ阻害剤のペプチドＶ５、Ｂａｘ阻害剤のペプチドＰ５、Ｂａｘチャネルブロッカー、及びＡＲＲＹ５２０トリフルオロアセテートより選択され得る。ある態様において、本明細書に記載される方法のＢＣＬ−２阻害剤は、ナビトクラックスとベネトクラックス、又はそのいずれか一方の医薬的に許容される塩より選択される。
【００１８】
[0012]  ある態様において、本明細書に記載される方法の血液癌は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ球性リンパ腫（ＡＬＬ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、原発性縦隔Ｂ細胞リンパ腫、血管内大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）、マントル細胞リンパ腫、辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、節外性辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、節性辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、脾辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、リンパ形質細胞性リンパ腫、及び原発性中枢神経系リンパ腫より選択される。血液癌は、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、急性骨髄性白血病、又は慢性リンパ球性白血病であり得る。
【００１９】
[0013]  本明細書に記載されるある態様のために、ＣＤＫ阻害剤とＢＣＬ−２阻害剤は、同時的に投与され得る。本明細書に記載される方法のために、ＣＤＫ阻害剤とＢＣＬ−２阻害剤は、相互に約１２時間以内に、例えば、相互に５時間以内に、連続的に投与され得る。
【００２０】
[0014]  本明細書に記載されるある方法のために、ＣＤＫ阻害剤とＢＣＬ−２阻害剤は、医薬組成物において共製剤化され得る。
[0015]  本明細書に記載されるある方法のために、ＣＤＫ阻害剤とＢＣＬ−２阻害剤は、毎日、１日おきに、又は２日おきに投与され得る。
【００２１】
[0016]  本明細書に記載されるある方法のために、プロテアソーム阻害剤は、ボルテゾミブ、マリゾミブ、イクサゾミブ、ジスルフィラム、エピガロカテキン−３−ガラート、サリノスポラミドＡ、カルフィルゾミブ、ＯＮＸ０９１２、ＣＥＰ−１８７７０、ＭＬＮ９７０８、エポキソミシン、ＭＧ１３２、及びこれらのいずれか１つの医薬的に許容される塩より選択される。ある態様において、プロテアソーム阻害剤は、ボルテゾミブ、マリゾミブ、イクサゾミブ、及びこれらのいずれか１つの医薬的に許容される塩より選択される。
【００２２】
[0017]  本明細書に記載されるある方法において、ＣＤＫ阻害剤とプロテアソーム阻害剤は、同時的に投与される。ＣＤＫ阻害剤とプロテアソーム阻害剤は、相互に約１２時間以内に、例えば、相互に５時間以内に、連続的に投与され得る。
【００２３】
[0018]  本明細書に記載されるある方法において、ＣＤＫ阻害剤とプロテアソーム阻害剤は、医薬組成物において共製剤化される。
[0019]  本明細書に記載されるある方法において、ＣＤＫ阻害剤とＢＣＬ−２阻害剤は、毎日、１日おきに、又は２日おきに投与される。
【００２４】
[0020]  ある側面において、本開示は、式Ｉ：
【００２５】
【化５】
2019514854.tif 000007
【００２６】
［式中：Ｒ１は、置換されていてもよいフェニルであり；
Ｒ２とＲ３は、それぞれ独立して、ヒドロキシとＯＲ８（ここでＲ８は、置換されていてもよいＣ１−Ｃ１０−アルキルである）より選択され；
Ｒ４は、置換されていてもよいＣ１−Ｃ４−アルキルであり；そして
Ｒ９は、水素又は置換されていてもよいＣ１−Ｃ４−アルキルである］によって表されるＣＤＫ阻害剤又はその医薬的に許容される塩の治療有効量；ＢＣＬ−２阻害剤又はプロテアソーム阻害剤の治療有効量、及び医薬的に許容される賦形剤を含んでなる医薬組成物を提供する。
【００２７】
[0021]  ある態様において、式Ｉの化合物又は塩は、式Ｉａ：
【００２８】
【化６】
2019514854.tif 000008
【００２９】
によって表される。
[0022]  本明細書に記載される組成物のために、式Ｉ又はＩａの化合物又は塩では、Ｒ１が、ヒドロキシ、シアノ、ハロ、アミノ、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４−ヒドロキシアルキル、Ｃ１−Ｃ４−ハロアルキル、及びニトロより独立して選択される１以上の置換基で置換されていてもよい。ある態様では、Ｒ１が、ハロとＣ１−Ｃ４−ハロアルキルより独立して選択される１以上の置換基で置換されている。ある態様では、Ｒ１が２−クロロ−４−トリフルオロメチルフェニルである。
【００３０】
[0023]  本明細書に記載される組成物のために、式Ｉ又はＩａの化合物又は塩では、Ｒ２とＲ３が、それぞれ独立して、ヒドロキシとＯＲ８（ここでＲ８は、ヒドロキシ、シアノ、ハロ、アミノ、＝Ｏ、＝Ｓ、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ、及びニトロより独立して選択される１以上の置換基で置換されていてもよいＣ１−Ｃ１０−アルキルである）より選択され得る。ある態様では、Ｒ２とＲ３がそれぞれヒドロキシである。
【００３１】
[0024]  本明細書に記載される組成物のために、式Ｉ又はＩａの化合物又は塩では、Ｒ４が、ヒドロキシ、シアノ、ハロ、アミノ、＝Ｏ、＝Ｓ、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ、及びニトロより選択される１以上の置換基で置換されているＣ１−Ｃ４−アルキルである。ある態様では、Ｒ４が、ヒドロキシ、シアノ、ハロ、アミノ、＝Ｏ、＝Ｓ、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ、及びニトロより選択される１以上の置換基で置換されているＣ１−Ｃ４−アルキルである。ある態様では、Ｒ４が２−ヒドロキシメチルである。
【００３２】
[0025]  本明細書に記載される組成物のために、式Ｉ又はＩａの化合物又は塩では、Ｒ９が、ヒドロキシ、シアノ、ハロ、アミノ、＝Ｏ、＝Ｓ、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ、及びニトロで置換されていてもよいＣ１−Ｃ４−アルキルであり得る。ある態様では、Ｒ９がメチルである。
【００３３】
[0026]  本明細書に記載される組成物のために、式Ｉの化合物は、式Ｉｂ：
【００３４】
【化７】
2019514854.tif 000009
【００３５】
によって表されるか又は又はその医薬的に許容される塩であり得る。
[0027]  ＢＣＬ−２阻害剤を含んでなる、本明細書に記載される組成物のために、ＢＣＬ−２阻害剤は、ナビトクラックス、ベネトクラックス、Ａ−１１５５４６３、Ａ−１３３１８５２、ＡＢＴ−７３７、オバトクラックス、Ｓ４４５６３、ＴＷ−３７、Ａ−１２１０４７７、ＡＴ１０１、ＨＡ１４−１、ＢＡＭ７、サブトクラックス、ＵＭＩ−７７、ガンモギン酸、マリトクラックス、ＭＩＭ１、メチルプレドニゾロン、ｉＭＡＣ２、Ｂａｘ阻害剤のペプチドＶ５、Ｂａｘ阻害剤のペプチドＰ５、Ｂａｘチャネルブロッカー、ＡＲＲＹ５２０トリフルオロアセテート、及びこれらのいずれか１つの医薬的に許容される塩より選択され得る。ＢＣＬ−２阻害剤は、ナビトクラックスとベネトクラックス、又はそのいずれか一方の医薬的に許容される塩より選択され得る。ある態様において、ＢＣＬ−２阻害剤は、ベネトクラックスである。
【００３６】
[0028]  プロテアソーム阻害剤を含んでなる、本明細書に記載される組成物のために、プロテアソーム阻害剤は、ボルテゾミブ、マリゾミブ、イクサゾミブ、ジスルフィラム、エピガロカテキン−３−ガラート、サリノスポラミドＡ、カルフィルゾミブ、ＯＮＸ０９１２、ＣＥＰ−１８７７０、ＭＬＮ９７０８、エポキソミシン、ＭＧ１３２、及びこれらのいずれか１つの医薬的に許容される塩より選択され得る。ある態様において、プロテアソーム阻害剤は、ボルテゾミブ、マリゾミブ、イクサゾミブ、及びこれらのいずれか１つの医薬的に許容される塩より選択される。
【００３７】
参照による取込み
[0029]  本明細書において言及されるすべての公表文献、特許、及び特許出願は、それぞれ個別の公表文献、特許、又は特許出願が参照により取り込まれると具体的かつ個別に示されるのと同じ程度で、参照により本明細書に組み込まれる。
【図面の簡単な説明】
【００３８】
[0030]  本発明の新規の特徴は、付帯の特許請求項において特に詳述される。本発明の特徴及び利点についてのより良い理解は、本発明の原理が利用される例示の態様について詳述する以下の詳しい記載と、以下の付帯の図面を参照して得られよう。ここで：
【図１−１】[0031]  図面１は、ボルシクリブ（voruciclib）とフラボピラドール（flavopiradol）の、３８種のキナーゼに抗する活性の比較を例証する。
【図１−２】同上。
【図２】[0032]  図面２は、サイクリン依存性キナーゼに抗する、ボルシクリブの１桁（ｎＭ）の効力を例証する。
【図３】[0033]  図面３Ａ〜図面３Ｄは、ベネトクラックス（ＡＢＴ−１９９）と併用したボルシクリブの相乗効果を例証する。ボルシクリブは、ＮＵ−ＤＨＬ−１びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）細胞においてベネトクラックスによって誘導される骨髄性白血病細胞分化タンパク質（ＭＬＣ−１）の誘導を阻害する。ＭＣＬ−１＝赤色；ＤＡＰＩ＝青色；蛍光追跡マーカー（ＦＴＭ）＝緑色。
【図４】[0034]  図面４Ａ〜図面４Ｄは、ボルシクリブとベネトクラックスでの併用処理による、ＮＵ−ＤＨＬ−１びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）細胞におけるアポトーシスの増加を例証する。切断型カスパーゼ−３（ＣＣ３）＝赤色；ＤＡＰＩ＝青色；蛍光追跡マーカー（ＦＴＭ）＝緑色。
【図５】[0035]  図面５Ａ〜図面５Ｄは、ナビトクラックス（ＡＢＴ−２６３）と併用したボルシクリブの相乗効果を例証する。Ramos バーキットリンパ腫細胞系のボルシクリブとナビトクラックスでの処理は、アポトーシスを誘導する。切断型カスパーゼ−３（ＣＣ３）＝赤色；ＤＡＰＩ＝青色；蛍光追跡マーカー（ＦＴＭ）＝緑色。
【図６−１】[0036]  図面６Ａ〜図面６Ｅは、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫の５種のモデルにわたる、ベネトクラックスと併用したボルシクリブの相乗効果を例証する。
【図６−２】同上。
【図６−３】同上。
【図７】[0037]  図面７は、ＣＤＫ９を介したＭＣＬ−１の阻害が細胞をアポトーシスへ移行させるのに役立つことを例証する。
【図８−１】[0038]  図面８Ａ〜図面８Ｄは、プロテアソーム阻害がトリプルネガティブ乳癌（ＴＮＢＣ）におけるＭＣＬ−１の上方制御を誘導することを例証する。図面８Ａは、ＨＣＣ１１８７  ＴＮＢＣ異種移植片モデルにおいてスクリーニングした化合物のリストを例証する。図面８Ｂは、様々な化合物での処理による、ＭＣＬ−１誘導の平均変化率（％）を例証する。図面８Ｃ〜図面８Ｄは、担体での処理とボルテゾミブでの処理後のＣＣ３についての細胞の染色（赤色で示す）を例証する。
【図８−２】同上。
【図９】[0039]  図面９Ａ〜図面９Ｄは、ＮｕｄＨＬ１  ＤＬＢＣＬ細胞に対する、マリゾミブと併用したボルシクリブの相乗効果を例証する。切断型カスパーゼ−３（ＣＣ３）＝赤色；ＤＡＰＩ＝青色；蛍光追跡マーカー（ＦＴＭ）＝緑色。
【図１０】[0040]  図面１０Ａ〜図面１０Ｄは、ＮｕｄＨＬ１  ＤＬＢＣＬ細胞に対する、ボルテゾミブと併用したボルシクリブの相乗効果を例証する。切断型カスパーゼ−３（ＣＣ３）＝赤色；ＤＡＰＩ＝青色；蛍光追跡マーカー（ＦＴＭ）＝緑色。
【図１１】[0041]  図面１１Ａ〜図面１１Ｄは、トリプルネガティブ乳癌細胞に対する、ボルテゾミブと併用したボルシクリブの相乗効果を例証する。切断型カスパーゼ−３（ＣＣ３）＝赤色；ＤＡＰＩ＝青色；蛍光追跡マーカー（ＦＴＭ）＝緑色。
【図１２−１】[0042]  図面１２Ａ〜図面１２Ｅは、ＨＣＣ１１８７トリプルネガティブ乳癌細胞に対する、ボルテゾミブと併用したボルシクリブの相乗効果を例証する。図面１２Ａ〜図面１２Ｄは、ボルシクリブとボルテゾミブで処理されたＨＣＣ１１８７  ＴＮＢＣマウスモデルにおける腫瘍容積の減少を例証する。図面１２Ｅは、ボルシクリブとボルテゾミブ、又はボルシクリブとツニカマイシンで処理されたＨＣＣ１１８７  ＴＮＢＣ細胞におけるＭＣＬ−１発現の減少を明示しているウェスタンブロットを例証する。
【図１２−２】同上。
【図１３】[0043]  図面１３は、ＨＣＣ１１８７  ＴＮＢＣマウスモデルにおいて、ボルシクリブとボルテゾミブ、及びボルシクリブとボルテゾミブの併用の体重に及ぼす効果を例証する。
【図１４】[0044]  図面１４は、ＨＣＣ１１８７  ＴＮＢＣマウスモデルにおける、ＣＤＫ４／６阻害剤のパルボシクリブ（palbociclib）と併用したボルテゾミブの効果を例証する。
【図１５−１】[0045]  図面１５Ａ〜図面１５Ｂは、ボルテゾミブ誘導性のＭＣＬ−１とＥ３ユビキチン−タンパク質リガーゼＸＩＡＰ発現をボルシクリブが減少させることを例証する。図面１５Ａは、ボルシクリブによるＣＤＫ９の阻害についての提唱モデルを例証する。図面１５Ｂは、ＭＣＬ−１とＥ３ユビキチン−タンパク質リガーゼＸＩＡＰ発現のボルテゾミブ誘導性の増加をボルシクリブが減少させることを明示しているウェスタンブロットを例証する。
【図１５−２】同上。
【図１６】[0046]  図面１６Ａ〜図面１６Ｂは、ボルテゾミブ処理に抵抗する細胞を例証する。図面１６Ａは、ボルテゾミブ処理以外のやり方で細胞が一掃された視野における、ボルテゾミブ処理に抵抗する細胞を例証する。図面１６Ｂは、ボルテゾミブに抵抗する細胞がＧＲＰ７８（ＥＲストレス応答の一部として発現されるタンパク質）を発現することを例証する。
【図１７】[0047]  図面１７は、３種の異なるＥＲストレス応答経路を例証する。
【図１８−１】[0048]  図面１８Ａ〜図面１８Ｂは、ボルシクリブがＩＲＥ１α依存性ＥＲストレス応答経路に影響を及ぼし得ることを例証する。図面１８Ａは、ＩＲＥ１α依存性ＥＲストレス応答経路を例証する。図面１８Ｂは、ＥＲストレスインデューサーのツニカマイシンがＸボックス結合タンパク質１（ＸＢＰ１）［好生存（抗腫瘍細胞死）タンパク質］を劇的に上方制御することを明示しているウェスタンブロットを例証する。この効果は、ボルシクリブによって劇的に軽減される。６時間では、ツニカマイシンだけがこの効果を明示するが、２４時間では、ボルテゾミブとツニカマイシンがともにこの効果を明示する。
【図１８−２】同上。
【図１９−１】[0049]  図面１９Ａ〜図面１９Ｂは、ボルテゾミブ誘導性のＸＢＰ１転写のボルシクリブによる抑制を例証する。ＳＴＦ０８３０１０＝ＩＲＥ１αエンドリボヌクレアーゼ活性阻害剤；Ｔｍ＝ツニカマイシン。
【図１９−２】同上。
【図２０】[0050]  図面２０Ａ〜図面２０Ｄは、イクサゾミブと併用したボルシクリブの相乗効果を例証する。切断型カスパーゼ３（ＣＣ３）＝赤色；ＤＡＰＩ＝青色；蛍光追跡マーカー（ＦＴＭ）＝緑色。
【図２１】[0051]  図面２１Ａ〜図面２１Ｂは、イクサゾミブと併用したＣＤＫ阻害剤のボルシクリブ、パルボシクリブ、ジナシクリブ（dinaciclib）、及びフラボピラドールで処理された固形腫瘍切片を図解する。２４時間以内に明白腫瘍細胞除去を再現性よくもたらすのは、ボルシクリブ＋イクサゾミブだけである。
【図２２】[0052]  図面２２Ａ〜図面２２Ｂは、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）のＳＵ−ＤＨＬ−４モデルにおけるボルシクリブとベネトクラックスからのシナジーを例証する。
【図２３】[0053]  図面２３Ａ〜図面２３Ｃは、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）のＳＵ−ＤＨＬ−４モデル、ＯＣＩＬｙ１０モデル、及びＵ２９３２モデルにおける、ボルシクリブとベネトクラックスからのシナジーを例証する。
【図２４】[0054]  図面２４は、ボルシクリブがＤＬＢＣＬ異種移植片腫瘍におけるＭＣＬ１発現を抑制することを例証する。
【図２５−１】[0055]  図面２５Ａ〜図面２５Ｂは、マウスのＡＢＣ型（ＲＩＶＡ）ＤＬＢＣＬにおけるボルシクリブとベネトクラックスの相乗効果を例証する。
【図２５−２】同上。
【図２６−１】[0056]  図面２６Ａ〜図面２６Ｂは、マウスのＤＬＢＣＬのＵ２９３２モデルにおける、ボルシクリブとベネトクラックスの相乗効果と、体重に対するその効果を例証する。
【図２６−２】同上。
【図２７−１】[0057]  図面２７Ａ〜図面２７Ｂは、マウスのＤＬＢＣＬのＮＵＤＨＬ１モデルにおけるボルシクリブとベネトクラックスの相乗効果を例証する。
【図２７−２】同上。
【図２８】[0058]  図面２８は、ＧＣ  ＤＬＢＣＬのＳＵＤＨＬ４モデルにおけるボルシクリブとベネトクラックスの相乗効果を例証する。
【図２９】[0059]  図面２９は、ベネトクラックスによって抑止されるｐ５３をボルシクリブが回復させることを例証する。
【図３０】[0060]  図面３０Ａ〜図面３０Ｃは、ボルシクリブがＡＭＬ細胞系において単剤活性を有することを例証する。
【図３１】[0061]  図面３１は、ボルシクリブとベネトクラックスの併用がＡＭＬ細胞系において相乗的な細胞死を誘導することを例証する。
【図３２】[0062]  図面３２は、ボルシクリブとベネトクラックスの併用がＳＫＭ１  ＡＭＬ異種移植片における腫瘍増殖を妨げるという相乗効果を例証する。
【図３３】[0063]  図面３３は、ボルシクリブ誘導性のアポトーシスがＭＣＬの抑制と相関することを例証する。
【発明を実施するための形態】
【００３９】
[0064]  本開示は、癌の治療のための併用療法を提供する。特に、本開示は、癌を治療するための他の抗癌剤とＣＤＫ阻害剤の併用療法を提供する。１つの側面において、本開示は、ＣＤＫ阻害剤をＢＣＬ−２阻害剤と併用して癌を治療するための組成物及び方法を提供する。そのような併用は、癌の治療、特に血液癌（例、白血病とリンパ腫）の治療において相乗効果を提供する。
【００４０】
[0065]  別の側面において、本開示は、ＣＤＫ阻害剤をプロテアソーム阻害剤と併用して癌を治療するための組成物及び方法を提供する。そのような併用は、癌の治療、特に血液癌とトリプルネガティブ乳癌の治療において相乗効果を提供する。
【００４１】
[0066]  本明細書の上記及び下記に使用される一般用語は、好ましくは、他に断らなければ、本開示の文脈内で以下の意味を有する。従って、本発明の文脈において使用される一般用語の定義を本明細書の下記に提供する：
[0067]  単数形の「ａ」、「ａｎ」（１つの）［不定冠詞］と「ｔｈｅ」（その）［定冠詞］には、文脈が明らかに他のことを指定しなければ、複数の言及が含まれる。
【００４２】
[0068]  本明細書に使用される「約」という用語は、当業者によって決定されるような特別な数値について許容される誤差範囲に概して言及するが、それは、その数値が測定又は定量される方法に一部依拠する場合がある。例えば、「約」は、１又は１より多い標準偏差以内を意味し得る。あるいは、「約」は、任意値の２０％まで、１０％まで、５％まで、又は１％までの範囲を意味し得る。あるいは、特に生体系又は生体プロセスに関しては、この用語は、数値の１桁以内、５倍以内、及び２倍以内を意味し得る。
【００４３】
[0069]  本明細書に使用されるように、「少なくとも１つの」という用語は、１以上を意味する。例えば、「少なくとも１つの抗癌剤」という用語は、その併用が単一の抗癌剤又は１より多くの抗癌剤を含むことを意味する。
【００４４】
[0070]  本明細書に使用される「有効量」又は「治療有効量」という用語は、限定されないが疾患又は状態の治療が含まれる、企図される、所定される、又は処方される適用に影響を及ぼすのに十分である、本明細書に記載される化合物の量を概して意味する。治療有効量は、適用（例、試験管内（in vitro）又は生体内（in vivo））に、又は治療される被験者と疾患状態（例、被験者の体重及び年齢、疾患状態の重症度）に、及び投与の方法に依拠して変動する可能性がある。この用語は、標的細胞における特別な応答（例、その増殖の低下、又は標的タンパク質の活性の下方制御）を誘導する用量にも適用される場合がある。特定の用量は、選択される特別の化合物、遵守される投薬レジメン、それが他の化合物との併用で投与されるかどうか、投与のタイミング、それが投与される組織、及びそれが運ばれる物的送達系に依拠して変動する場合がある。
【００４５】
[0071]  本明細書に使用されるように、「医薬的に許容される」という用語は、担体、希釈剤、賦形剤、及び／又は塩が製剤の他の成分と適合可能でなければならくて、そのレシピエントに対して有害であってはならないことを意味する。「医薬的に許容される」はまた、その組成物又は剤形が健全な医療判断の範囲内にあること、過度の毒性、刺激、アレルギー反応、又は他の問題又は合併症を伴うことなく動物又はヒトへの使用に適していること、妥当な利益／リスク比と釣り合っていることを意味する。
【００４６】
[0072]  本明細書に使用されるように、「併用」又は「医薬併用」という用語は、抗癌剤の併用投与に言及する。本開示の併用には、ＣＤＫ阻害剤（例、式Ｉ、Ｉａ、又はＩｂの化合物）と、ＢＣＬ−２阻害剤とプロテアソーム阻害剤より選択される少なくとも１つ抗癌剤が含まれ；それらの抗癌剤は、その必要な被験者へ例えば、同時的又は連続的に投与してよい。
【００４７】
[0073]  本明細書に使用される「相乗的な」又は「相乗効果」又は「相乗作用（synergism）」という用語は、組成物の併用の１以上の効果が各成分単独の１以上の効果より大きいか、又はそれらが各成分単独の１以上の効果の総和より大きくなり得るような効果に概して言及する。相乗効果は、諸成分の１つ単独での被験者に対する効果、又は個々に投与される場合の諸成分のそれぞれの相加効果より約１０％、２０％、３０％、５０％、７５％、１００％、１１０％、１２０％、１５０％、２００％、２５０％、３５０％、又は５００％以上大きくなり得る。その効果は、本明細書に記載される測定可能な効果のいずれでもあり得る。有利にも、併用される場合の薬剤間のそのようなシナジーは、片方又は両方の薬剤のより少ない用量の使用を可能にし、同じ用量でより大きな効力を提供し、そして多剤耐性の発現を防止するか又は遅延させる場合がある。チョウ及びタラレイ（Chou and Talalay）の併用指数（ＣＩ）法は、併用で使用される薬剤の相乗、相加、又は拮抗効果を判定するのに使用され得る。ＣＩ値が１未満である場合、併用で使用される化合物の間にはシナジーがあり；ＣＩ値が１に等しい場合、併用で使用される化合物の間には相加効果があり、そしてＣＩ値が１より大きい場合は、拮抗効果がある。相乗効果は、医薬併用の薬剤を共製剤化することによって達成される場合がある。相乗効果は、２種以上の薬剤を投与される別々の製剤として同時的又は連続的に投与することによって達成される場合がある。
【００４８】
[0074]  サイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫ）は、細胞周期の特定期に活性化される酵素のファミリーである。ＣＤＫは、触媒サブユニット（事実上のサイクリン依存性キナーゼ又はＣＤＫ）と調節サブユニット（サイクリン）からなる。少なくとも９種のＣＤＫ（ＣＤＫ１、ＣＤＫ２、ＣＤＫ３、ＣＤＫ４、ＣＤＫ５、ＣＤＫ６、ＣＤＫ７、ＣＤＫ８、ＣＤＫ９、等）と少なくとも１５種の異なるタイプのサイクリン（サイクリンＡ、Ｂ１、Ｂ２、Ｄ１、Ｄ２、Ｄ３、Ｅ、Ｈ、等）がある。細胞周期の各段階は、そのようなＣＤＫ複合体によって調節される：Ｇ１／Ｓ移行期（ＣＤＫ２／サイクリンＡ、ＣＤＫ４／サイクリンＤ１〜Ｄ３、ＣＤＫ６／サイクリンＤ３）、Ｓ期（ＣＤＫ２／サイクリンＡ）、Ｇ２期３０（ＣＤＫ１／サイクリンＡ）、Ｇ２／Ｍ移行期（ＣＤＫ１／サイクリンＢ）。
【００４９】
[0075]  本明細書に使用されるように、「ＣＤＫ阻害剤」という用語は、１以上のサイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫ）を阻害することが可能である薬剤を意味する。癌のような多くの疾患状態では、これらキナーゼの異常な発現と過剰発現が証明されている。本発明の文脈において、本明細書に記載される配合剤のＣＤＫ阻害剤は、式Ｉ、Ｉａ、又はＩｂの化合物、又はその医薬的に許容される塩であり得る。本開示の化合物は、ＣＤＫ１／サイクリンＢ、ＣＤＫ２／サイクリンＥ、ＣＤＫ４／サイクリンＤ、ＣＤＫ４／サイクリンＤ１、及びＣＤＫ９／サイクリンＴ１の１以上を特異的に阻害し得る。ある態様では、本開示の化合物がＣＤＫ９／サイクリンＴ１又はＣＤＫ９を特異的に阻害する。
【００５０】
[0076]  本明細書に開示されるのは、癌（例、白血病、リンパ腫、及び乳癌）の治療のための併用療法である。本明細書に記載される方法及び組成物には、式Ｉ、Ｉａ、又はＩｂの化合物、又はその医薬的に許容される塩のようなサイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫ）阻害剤が含まれ得る。いくつかの例では、プロテアソーム阻害剤と併用したＣＤＫ阻害剤が併用療法に含まれ得る。他の例では、ＢＣＬ−２阻害剤と併用したＣＤＫ阻害剤が併用療法に含まれ得る。
【００５１】
[0077]  ある態様では、本開示のＣＤＫ阻害剤が、そのそれぞれの全内容が参照により本明細書に組み込まれる、米国特許第７，２７１，１９３号；７，９１５，３０１号；８，３０４，４４９号；７，８８４，１２７号；８，５６３，５９６号に開示される化合物によって表される。ある態様では、本開示のＣＤＫ阻害剤が式Ｉ：
【００５２】
【化８】
2019514854.tif 000010
【００５３】
［式中：Ｒ１は、置換されていてもよいフェニルであり；
Ｒ２とＲ３は、それぞれ独立して、ヒドロキシとＯＲ８（ここでＲ８は、置換されていてもよいＣ１−Ｃ１０−アルキルである）より選択され；
Ｒ４は、置換されていてもよいＣ１−Ｃ４−アルキルであり；そして
Ｒ９は、水素又は置換されていてもよいＣ１−Ｃ４−アルキルである］によって表されるか又はその医薬的に許容される塩である。
【００５４】
[0078]  ある態様において、式Ｉの化合物又は塩は、式Ｉａ：
【００５５】
【化９】
2019514854.tif 000011
【００５６】
によって表される。
[0079]  式Ｉ又はＩａの化合物又は塩についてのある態様では、Ｒ１が、ヒドロキシ、シアノ、ハロ、アミノ、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４−ヒドロキシアルキル、Ｃ１−Ｃ４−ハロアルキル、及びニトロより独立して選択される１以上の置換基で置換されていてもよい。ある態様では、Ｒ１が、ヒドロキシ、シアノ、ハロ、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、及びＣ１−Ｃ４−ハロアルキルより独立して選択される１以上の置換基で置換されている。ある態様では、Ｒ１が、ハロとＣ１−Ｃ４−ハロアルキルより独立して選択される１以上の置換基で置換されている。ある態様では、Ｒ１が２−クロロ−４−トリフルオロメチルフェニルである。
【００５７】
[0080]  「アルキル」という用語は、炭素原子と水素原子だけからなって、不飽和を含有しない、直鎖又は分岐鎖の炭化水素鎖ラジカルを意味する。ある態様では、アルキルが１〜８個の炭素原子を含む（即ち、Ｃ１−Ｃ８アルキル）。他の態様では、アルキルが１〜５個の炭素原子を含む（即ち、Ｃ１−Ｃ５アルキル）。他の態様では、アルキルが１〜４個の炭素原子を含む（即ち、Ｃ１−Ｃ４アルキル）。他の態様では、アルキルが１〜３個の炭素原子を含む（即ち、Ｃ１−Ｃ３アルキル）。他の態様では、アルキルが１〜２個の炭素原子を含む（即ち、Ｃ１−Ｃ２アルキル）。他の態様では、アルキルが１個の炭素原子を含む（即ち、Ｃ１アルキル）。他の態様では、アルキルが５〜８個の炭素原子を含む（即ち、Ｃ５−Ｃ８アルキル）。他の態様では、アルキルが２〜５個の炭素原子を含む（即ち、Ｃ２−Ｃ５アルキル）。他の態様では、アルキルが３〜５個の炭素原子を含む（即ち、Ｃ３−Ｃ５アルキル）。ある態様において、アルキル基は、メチル、エチル、１−プロピル（ｎ−プロピル）、１−メチルエチル（イソプロピル）、１−ブチル（ｎ−ブチル）、１−メチルプロピル（ｓｅｃ−ブチル）、２−メチルプロピル（イソブチル）、１，１−ジメチルエチル（ｔｅｒｔ−ブチル）、１−ペンチル（ｎ−ペンチル）より選択される。アルキルは、分子の残りへ単結合によって付く。本明細書において他に具体的に述べなければ、アルキル基は、本明細書に記載される置換基のような１以上の置換基によって置換されていてもよい。
【００５８】
[0081]  「アルコキシ」という用語は、式：−Ｏ−アルキル（ここでアルキルは、上記に定義されたようなアルキル鎖である）の酸素原子を介して結合するラジカルを意味する。
【００５９】
[0082]  「アミノ」という用語は、基：−ＮＲ’Ｒ”を意味し、ここでＲ’とＲ”は、水素と、アルキル、ヒドロキシル、アリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、及びヘテロアリール（これらのいずれも、ヒドロキシ、シアノ、ハロ、アミノ、Ｃ１−Ｃ４−アルキル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４−ヒドロキシアルキル、Ｃ１−Ｃ４−ハロアルキル、及びニトロのような１以上の置換基で置換されていてもよい）より独立して選択される。
【００６０】
[0083]  「Ｃｘ−ｙ」という用語は、アルキルのような化学部分と共に使用される場合、その鎖中にｘ〜ｙ個の炭素を含有する基が含まれることを意味する。例えば、「Ｃｘ−ｙアルキル」という用語は、その鎖中にｘ〜ｙ個の炭素を含有する直鎖アルキル基と分岐鎖アルキル基が含まれる、置換又は未置換の飽和炭化水素基を意味し、トリフルオロメチル、及び２，２，２−トリフルオロエチル、等のようなハロアルキル基が含まれる。
【００６１】
[0084]  「ハロアルキル」という用語は、１個以上のハロラジカルによって置換されているアルキル基（例えば、トリフルオロメチル、ジフルオロメチル、フルオロメチル、２，２，２−トリフルオロエチル、１−クロロメチル−２−フルオロエチル、等）を意味する。いくつかの態様において、ハロアルキルのアルキル部分は、本明細書に記載されるようにさらに置換されていてもよい。
【００６２】
[0085]  「ヒドロキシアルキル」という用語は、１以上のヒドロキシラジカルによって置換されているアルキル基（例えば、ヒドロキシメチル、ヒドロキシエチル、ジヒドロキシメチル、等）を意味する。いくつかの態様において、ヒドロキシアルキルのアルキル部分は、本明細書に記載されるようにさらに置換されていてもよい。
【００６３】
[0086]  式Ｉ又はＩａの化合物又は塩についてのある態様では、Ｒ２とＲ３が、それぞれ独立して、ヒドロキシとＯＲ８より選択され、ここでＲ８は、ヒドロキシ、シアノ、ハロ、アミノ、＝Ｏ、＝Ｓ、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ、及びニトロより独立して選択される１以上の置換基で置換されていてもよいＣ１−Ｃ１０−アルキルである。ある態様では、Ｒ８が、それぞれの出現時に、置換されていてもよいＣ１−Ｃ４−アルキルのような、置換されていてもよいＣ１−Ｃ６−アルキルより選択される。ある態様では、Ｒ２とＲ３が、それぞれ独立して、ヒドロキシである。
【００６４】
[0087]  式Ｉ又はＩａの化合物又は塩についてのある態様では、Ｒ４が置換されていてもよいＣ１−Ｃ４−アルキルであり、ここでＲ４は、ヒドロキシ、シアノ、ハロ、アミノ、＝Ｏ、＝Ｓ、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ、及びニトロより選択される１以上の置換基で置換されていてもよい。ある態様では、Ｒ４が置換されていてもよいＣ１−Ｃ２−アルキルである。ある態様では、Ｒ４がヒドロキシアルキル、例えば、２−ヒドロキシメチルである。
【００６５】
[0088]  式Ｉ又はＩａの化合物又は塩についてのある態様では、Ｒ９が、ヒドロキシ、シアノ、ハロ、アミノ、＝Ｏ、＝Ｓ、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシ、及びニトロで置換されていてもよいＣ１−Ｃ４−アルキルである。ある態様では、Ｒ９が置換されていてもよいＣ１−Ｃ２−アルキルである。ある態様では、Ｒ９がメチルである。ある態様では、Ｒ９が水素である。
【００６６】
[0089]  式Ｉ又はＩａの化合物又は塩についてのある態様では、式Ｉの化合物が、（＋）−ｔｒａｎｓ−２−（２−クロロ−４−トリフルオロメチルフェニル）−８−（２−ヒドロキシメチル−１−メチル−ピロリジン−３−イル）−５，７−ジメトキシ−クロメン−４−オン；（＋）−ｔｒａｎｓ−２−（２−クロロ−４−トリフルオロメチルフェニル）−５，７−ジヒドロキシ−８−（２−ヒドロキシメチル−１−メチルピロリジン−３−イル）−クロメン−４−オン；及び（＋）−ｔｒａｎｓ−２−（２−クロロ−４−トリフルオロメチルフェニル）−５，７−ジヒドロキシ−８−（２−ヒドロキシメチル−１−メチル−ピロリジン−３−イル）−クロメン−４−オン塩酸塩より選択される化合物又は医薬的に許容される塩である。
【００６７】
[0090]  ある態様では、式Ｉ又はＩａの化合物が、式Ｉｂ：
【００６８】
【化１０】
2019514854.tif 000012
【００６９】
によって表されるか又は又はその医薬的に許容される塩である。ある態様において、式Ｉ、Ｉａ、又はＩｂの化合物は、塩酸塩のような、酸付加塩の形態である。
[0091]  「置換された」という用語は、構造の１以上の炭素又はヘテロ原子上の水素に置換基が置き換わっている部分に言及する。「置換」又は「〜で置換された」には、そのような置換が置換される原子と置換基の許容される原子価に従うだけでなく、転位、環化、脱離、等のような変換を容易には受けない安定した化合物を表すという暗黙の条件が含まれる。本明細書に使用されるように、「置換された」という用語には、有機化合物の許容されるすべての置換基が含まれると考慮される。広い側面において、許容される置換基には、有機化合物の非環式及び環式、分岐鎖及び非分岐鎖、炭素環式及び複素環式、芳香族及び非芳香族の置換基が含まれる。許容される置換基は、適正な有機化合物について、１以上であり得て、同じでも異なってもよい。本開示の目的のために、窒素のようなヘテロ原子は、水素置換基、及び／又は、該ヘテロ原子の原子価を満足させる、本明細書に記載される有機化合物のどの許容される置換基も有し得る。
【００７０】
[0092]  置換基には、本明細書に記載されるあらゆる置換基、例えば、ハロゲン、ヒドロキシ、カルボニル（カルボキシル、アルコキシカルボニル、ホルミル、又はアシルのような）、チオカルボニル（チオエステル、チオアセテート、又はチオホルメートのような）、アルコキシル、ホスホリル、ホスフェート、ホスホネート、ホスフィナート、アミノ、アミド、アミジン、イミン、シアノ、ニトロ、アジド、スルフヒドリル、アルキルチオ、スルファート、スルホネート、スルファモイル、スルホンアミド、スルホニル、ヘテロシクリル、アラルキル、炭素環、複素環、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、芳香族及び複素芳香族部分が含まれ得る。いくつかの態様では、置換基に、本明細書に記載されるあらゆる置換基、例えば：ハロゲン、ヒドロキシ、オキソ（＝Ｏ）、チオキソ（＝Ｓ）、シアノ（−ＣＮ）、ニトロ（−ＮＯ２）、イミノ（＝Ｎ−Ｈ）、オキシム（＝Ｎ−ＯＨ）、ヒドラジノ（＝Ｎ−ＮＨ２）、−Ｒｂ−ＯＲａ、−Ｒｂ−ＯＣ（Ｏ）−Ｒａ、−Ｒｂ−ＯＣ（Ｏ）−ＯＲａ、−Ｒｂ−ＯＣ（Ｏ）−Ｎ（Ｒａ）２、−Ｒｂ−Ｎ（Ｒａ）２、−Ｒｂ−Ｃ（Ｏ）Ｒａ、−Ｒｂ−Ｃ（Ｏ）ＯＲａ、−Ｒｂ−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒａ）２、−Ｒｂ−Ｏ−Ｒｃ−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒａ）２、−Ｒｂ−Ｎ（Ｒａ）Ｃ（Ｏ）ＯＲａ、−Ｒｂ−Ｎ（Ｒａ）Ｃ（Ｏ）Ｒａ、−Ｒｂ−Ｎ（Ｒａ）Ｓ（Ｏ）ｔＲａ（ここでｔは、１又は２である）、−Ｒｂ−Ｓ（Ｏ）ｔＲａ（ここでｔは、１又は２である）、−Ｒｂ−Ｓ（Ｏ）ｔＯＲａ（ここでｔは、１又は２である）、及び−Ｒｂ−Ｓ（Ｏ）ｔＮ（Ｒａ）２（ここでｔは、１又は２である）；並びに、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、アラルキル、アラルケニル、アラルキニル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、ヘテロアリール、及びヘテロアリールアルキルが含まれ得て、これらのいずれも、アルキル、アルケニル、アルキニル、ハロゲン、ヒドロキシ、ハロアルキル、ハロアルケニル、ハロアルキニル、オキソ（＝Ｏ）、チオキソ（＝Ｓ）、シアノ（−ＣＮ）、ニトロ（−ＮＯ２）、イミノ（＝Ｎ−Ｈ）、オキシム（＝Ｎ−ＯＨ）、ヒドラジン（＝Ｎ−ＮＨ２）、−Ｒｂ−ＯＲａ、−Ｒｂ−ＯＣ（Ｏ）−Ｒａ、−Ｒｂ−ＯＣ（Ｏ）−ＯＲａ、−Ｒｂ−ＯＣ（Ｏ）−Ｎ（Ｒａ）２、−Ｒｂ−Ｎ（Ｒａ）２、−Ｒｂ−Ｃ（Ｏ）Ｒａ、−Ｒｂ−Ｃ（Ｏ）ＯＲａ、−Ｒｂ−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒａ）２、−Ｒｂ−Ｏ−Ｒｃ−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒａ）２、−Ｒｂ−Ｎ（Ｒａ）Ｃ（Ｏ）ＯＲａ、−Ｒｂ−Ｎ（Ｒａ）Ｃ（Ｏ）Ｒａ、−Ｒｂ−Ｎ（Ｒａ）Ｓ（Ｏ）ｔＲａ（ここでｔは、１又は２である）、−Ｒｂ−Ｓ（Ｏ）ｔＲａ（ここでｔは、１又は２である）、−Ｒｂ−Ｓ（Ｏ）ｔＯＲａ（ここでｔは、１又は２である）及び−Ｒｂ−Ｓ（Ｏ）ｔＮ（Ｒａ）２（ここでｔは、１又は２である）によって置換されていてもよく；ここでそれぞれのＲａは、水素、アルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、アリール、アラルキル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、ヘテロアリール、又はヘテロアリールアルキルより独立して選択され、ここでそれぞれのＲａは、原子価が許容するならば、アルキル���アルケニル、アルキニル、ハロゲン、ハロアルキル、ハロアルケニル、ハロアルキニル、オキソ（＝Ｏ）、チオキソ（＝Ｓ）、シアノ（−ＣＮ）、ニトロ（−ＮＯ２）、イミノ（＝Ｎ−Ｈ）、オキシム（＝Ｎ−ＯＨ）、ヒドラジン（＝Ｎ−ＮＨ２）、−Ｒｂ−ＯＲａ、−Ｒｂ−ＯＣ（Ｏ）−Ｒａ、−Ｒｂ−ＯＣ（Ｏ）−ＯＲａ、−Ｒｂ−ＯＣ（Ｏ）−Ｎ（Ｒａ）２、−Ｒｂ−Ｎ（Ｒａ）２、−Ｒｂ−Ｃ（Ｏ）Ｒａ、−Ｒｂ−Ｃ（Ｏ）ＯＲａ、−Ｒｂ−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒａ）２、−Ｒｂ−Ｏ−Ｒｃ−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒａ）２、−Ｒｂ−Ｎ（Ｒａ）Ｃ（Ｏ）ＯＲａ、−Ｒｂ−Ｎ（Ｒａ）Ｃ（Ｏ）Ｒａ、−Ｒｂ−Ｎ（Ｒａ）Ｓ（Ｏ）ｔＲａ（ここでｔは、１又は２である）、−Ｒｂ−Ｓ（Ｏ）ｔＲａ（ここでｔは、１又は２である）、−Ｒｂ−Ｓ（Ｏ）ｔＯＲａ（ここでｔは、１又は２である）及び−Ｒｂ−Ｓ（Ｏ）ｔＮ（Ｒａ）２（ここでｔは、１又は２である）で置換されていてもよく；そしてここでそれぞれのＲｂは、直結合、又は直鎖又は分岐鎖のアルキレン、アルケニレン、又はアルキニレン鎖より独立して選択され、そしてそれぞれのＲｃは、直鎖又は分岐鎖のアルキレン、アルケニレン、又はアルキニレン鎖である。
【００７１】
[0093]  式Ｉ、Ｉａ、及びＩｂの化合物又はそれらの医薬的に許容される塩の製造手順については、ＰＣＴ特許公開公報番号：ＷＯ２００４００４６３２（米国特許第７，２７１，１９３号に対応する）とＰＣＴ特許公開公報番号：ＷＯ２００７１４８１５８に見出し得る。
【００７２】
[0094]  本開示は、本明細書に記載されるあらゆる化合物、例えば、式Ｉ、Ｉａ、Ｉｂの化合物、ＢＣＬ−２阻害剤、及びプロテアソーム阻害剤の医薬的に許容される塩を提供する。医薬的に許容される塩には、例えば、酸付加塩と塩基付加塩が含まれる。化合物へ付加されて酸付加塩を生成する酸は、有機酸又は無機酸であり得る。化合物へ付加されて塩基付加塩を生成する塩基は、有機塩基又は無機塩基であり得る。いくつかの例では、医薬的に許容される塩が金属塩である。いくつかの例では、医薬的に許容される塩がアンモニウム塩である。
【００７３】
[0095]  酸付加塩は、本明細書に記載される化合物への酸の付加より生じ得る。いくつかの例において、その酸は、有機酸である。いくつかの例において、その酸は、無機酸である。好適な酸の非限定的な例には、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硝酸、亜硝酸、硫酸、亜硫酸、リン酸、ニコチン酸、イソニコチン酸、乳酸、サリチル酸、４−アミノサリチル酸、酒石酸、アスコルビン酸、ゲンチジン酸、グルコン酸、グルカロン酸、サッカリン酸、ギ酸、安息香酸、グルタミン酸、パントテン酸、酢酸、プロピオン酸、酪酸、フマル酸、コハク酸、クエン酸、シュウ酸、マレイン酸、ヒドロキシマレイン酸、メチルマレイン酸、グリコール酸、リンゴ酸、桂皮酸、マンデル酸、２−フェノキシ安息香酸、２−アセトキシ安息香酸、エンボン酸、フェニル酢酸、Ｎ−シクロヘキシルスルファミン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、エタン−１，２−ジスルホン酸、４−メチルベンゼンスルホン酸、ナフタレン−２−スルホン酸、ナフタレン−１，５−ジスルホン酸、２−ホスホグリセリン酸、３−ホスホグリセリン酸、グルコース−６−リン酸、及びアミノ酸が含まれる。
【００７４】
[0096]  金属塩は、本発明の化合物への無機塩基の付加より生じ得る。無機塩基は、例えば、水酸化物、炭酸イオン、重炭酸イオン、又はリン酸イオンのような塩基性の対イオンと対合した金属カチオンからなる。この金属は、アルカリ金属、アルカリ土類金属、遷移金属、又は典型金属であり得る。いくつかの態様において、この金属は、リチウム、ナトリウム、カリウム、セシウム、セリウム、マグネシウム、マンガン、鉄、カルシウム、ストロンチウム、コバルト、チタン、アルミニウム、銅、カドミウム、又は亜鉛である。
【００７５】
[0097]  いくつかの態様では、金属塩が、リチウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩、セシウム塩、セリウム塩、マグネシウム塩、マンガン塩、鉄塩、カルシウム塩、ストロンチウム塩、コバルト塩、チタン塩、アルミニウム塩、銅塩、カドミウム塩、又は亜鉛塩である。
【００７６】
[0098]  アンモニウム塩は、本明細書に記載される化合物へのアンモニア又は有機アミンの付加より生じ得る。好適な有機アミンの非限定的な例には、トリエチルアミン、ジイソプロピルアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、モルホリン、Ｎ−メチルモルホリン、ピペリジン、Ｎ−メチルピペリジン、Ｎ−エチルピペリジン、ジベンジルアミン、ピペラジン、ピリジン、ピラゾール、ピピラゾール（pipyrrazole）、イミダゾール、ピラジン、ピピラジン（pipyrazine）、エチレンジアミン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、プロカイン、クロロプロカイン、コリン、ジシクロヘキシルアミン、及びＮ−メチルグルカミンが含まれる。
【００７７】
[0099]  好適なアンモニウム塩の非限定的な例には、トリエチルアミン塩、ジイソプロピルアミン塩、エタノールアミン塩、ジエタノールアミン塩、トリエタノールアミン塩、モルホリン塩、Ｎ−メチルモルホリン塩、ピペリジン塩、Ｎ−メチルピペリジン塩、Ｎ−エチルピペリジン塩、ジベンジルアミン塩、ピペラジン塩、ピリジン塩、ピラゾール塩、ピピラゾール塩、イミダゾール塩、ピラジン塩、ピピラジン塩、エチレンジアミン塩、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン塩、プロカイン塩、クロロプロカイン塩、コリン塩、ジシクロヘキシルアミン塩、及びＮ−メチルグルカミン塩が含まれる。
【００７８】
[0100]  好適な酸付加塩の非限定的な例には、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、硝酸塩、亜硝酸塩、硫酸塩、亜硫酸塩、リン酸塩、リン酸水素塩、リン酸二水素塩、炭酸塩、重炭酸塩、ニコチン酸塩、イソニコチン酸塩、乳酸塩、サリチル酸塩、４−アミノサリチル酸塩、酒石酸塩、アスコルビン酸塩、ゲンチジン酸塩、グルコン酸塩、グルカロン酸塩、サッカリン酸塩、ギ酸塩、安息香酸塩、グルタミン酸塩、パントテン酸塩、酢酸塩、プロピオン酸塩、酪酸塩、フマル酸塩、コハク酸塩、クエン酸塩、シュウ酸塩、マレイン酸塩、ヒドロキシマレイン酸塩、メチルマレイン酸塩、グリコール酸塩、リンゴ酸塩、桂皮酸塩、マンデル酸塩、２−フェノキシ安息香酸塩、２−アセトキシ安息香酸塩、エンボン酸塩、フェニル酢酸塩、Ｎ−シクロヘキシルスルファミン酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、エタン−１，２−ジスルホン酸塩、４−メチルベンゼンスルホン酸塩、ナフタレン−２−スルホン酸塩、ナフタレン−１，５−ジスルホン酸塩、２−ホスホグリセリン酸塩、３−ホスホグリセリン酸塩、グルコース−６−リン酸塩、及びアミノ酸塩が含まれる。
【００７９】
[0101]  本明細書に記載される化合物、例えば、式Ｉ、Ｉａ、Ｉｂの化合物と塩、ＢＣＬ−２阻害剤、及びプロテアソーム阻害剤は、いくつかの例では、ジアステレオマー、エナンチオマー、又は他の立体異性型として存在する場合がある。本明細書に提示される化合物には、すべてのジアステレオマー型、エナンチオマー型、及びエピマー型、並びにこれらの適正な混合物が含まれる。立体異性体の分離は、クロマトグラフィーによるか又はジアステレオマーを生成して再結晶又はクロマトグラフィーによって分離すること、又はこれらの任意の組合せによって達成し得る（Jean Jacques, Andre Collet, Samuel H. Wilen,「Enantiomaers, Racemates and Resolutions（エナンチオマー、ラセミ化合物、及び分割法）」，ジョン・ウィリー・アンド・サンズ社（1981）、本開示のために参照により本明細書に組み込まれる）。立体異性体は、立体選択的な合成によっても入手し得る。
【００８０】
[0102]  本明細書に記載される化合物、例えば、式Ｉ、Ｉａ、Ｉｂの化合物と塩、ＢＣＬ−２阻害剤、及びプロテアソーム阻害剤には、結晶形だけでなく非晶形の使用が含まれる（多形としても知られる）。本明細書に記載される化合物は、医薬的に許容される塩の形態であり得る。同様に、本開示の範囲には、同種の活性を有するこれら化合物の活性代謝産物が含まれる。加えて、本明細書に記載される化合物は、非溶媒和形だけでなく、水、エタノール、等のような医薬的に許容される溶媒との溶媒和形でも存在し得る。本明細書に提示される化合物の溶媒和形も、本明細書に開示されているとみなされる。
【００８１】
[0103]  本明細書に記載される化合物、例えば、式Ｉ、Ｉａ、Ｉｂの化合物と塩、ＢＣＬ−２阻害剤、及びプロテアソーム阻害剤には、その天然同位体存在度を明示する化合物と、その原子の１以上が、同じ原子番号を有するが、原子量又は質量数が天然で支配的に見出される原子量又は質量数と異なる特別な同位体で人工的に濃縮された化合物が含まれる。本発明の化合物のすべての同位体変化物が、放射活性で有っても無くても、本発明の範囲内に含まれる。例えば、水素には、１Ｈ（プロチウム）、２Ｈ（ジュウテリウム）、及び３Ｈ（トリチウム）と表示される、３種の天然に存在する同位体がある。プロチウムは、天然で最も豊富な水素の同位体である。ジュウテリウムを濃縮することは、生体内（in vivo）半減期及び／又は曝露の増加といった、ある種の療法上の利点をもたらす場合があるか又は、薬物の消失及び代謝の生体内（in vivo）経路を検討するのに有用な化合物を提供する場合がある。同位体濃縮化合物は、製造し得る。
【００８２】
[0104]  本明細書に記載される化合物、例えば、式Ｉ、Ｉａ、Ｉｂの化合物と塩、ＢＣＬ−２阻害剤、及びプロテアソーム阻害剤は、該化合物が炭素−炭素二重結合又は炭素−窒素三重結合を有する場合、該当すれば、Ｚ又はＥ形（又は、シス又はトランス形）で存在し得る。さらに、ある化学成分（chemical entities）は、様々な互変異性形で存在し得る。他に特定されなければ、本明細書に記載される化学成分には、すべてのＺ形、Ｅ形、及び互変異性形が同様に含まれると企図される。
【００８３】
[0105]  ある事例では、本明細書に記載される化合物がプロドラッグであり得る（例えば、親化合物中に存在するカルボン酸がエステルとして提示される場合）。「プロドラッグ」という用語には、生理学的条件下に、本開示の薬剤（即ち、親化合物）へ変換される化合物が含まれると企図される。プロドラッグを作製するための１つの方法は、生理学的条件下に加水分解されて所望される分子を明らかにする１以上の選択部分を含めることである。ある態様において、プロドラッグは、宿主動物中の特定の標的酵素における酵素活性のような、宿主動物の酵素活性によって変換される。例えば、エステル類又は炭酸塩類（例、アルコール又はカルボン酸のエステル又は炭酸塩）が本開示の好ましいプロドラッグである。
【００８４】
[0106]  プロドラッグがしばしば有用であるのは、ある状況では、それらを親薬物より容易に投与し得るからである。例えば、それらは、親薬物がそうでないのに対して、経口投与によって生体利用可能である場合がある。プロドラッグは、親薬物に比べて、化合物の細胞透過性を高めるのに役立つ場合がある。例えば、プロドラッグは、親化合物に優って細胞透過性を向上させた場合がある。プロドラッグはまた、親薬物に優って医薬製剤中の溶解性を向上させた場合がある。いくつかの態様において、プロドラッグの設計は、薬剤の脂溶性を増加させる。いくつかの態様において、プロドラッグの設計は、有効な水溶性を増加させる。
【００８５】
[0107]  ある態様では、サイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫ）阻害剤（例、式Ｉ、Ｉａ、又はＩｂの化合物又は塩）をＢＣＬ−２ファミリー中の１以上のタンパク質の阻害剤と併用して使用し得る。ＢＣＬ−２抗アポトーシスファミリーのタンパク質の阻害剤は、少なくとも細胞生存経路を改変させる。アポトーシス活性化は、細胞表面の細胞死受容体の活性化が引き金になる外因性経路を介して、又は発生の手掛りと多様な細胞内ストレスが引き金になる内因性経路を介して起こり得る。この内因性経路は、ストレス経路又はミトコンドリア経路としても知られていて、主にＢＣＬ−２ファミリー［カスパーゼ活性化の主要な制御因子群であって、ＢＨ１〜ＢＨ４ドメインを有する抗アポトーシス（好生存）タンパク質（ＢＣＬ−２、即ち、ＢＣＬ−２抗アポトーシスタンパク質ファミリーのＢＣＬ−２タンパク質メンバー）、ＢＣＬ−ｘＬ、ＢＣＬ−ｗ、Ａ１、ＭＣＬ−１、及びＢＣＬ−Ｂ；ＢＨ１、ＢＨ２、及びＢＨ３ドメインを有する好アポトーシスタンパク質（ＢＡＸ、ＢＡＫ、及びＢＯＫ）；及び好アポト―シス性ＢＨ３のみのタンパク質（ＢＩＫ、ＢＡＤ、ＢＩＤ、ＢＩＭ、ＢＭＦ、ＨＲＫ、ＮＯＸＡ、及びＰＵＭＡ）からなる］によって制御される（例えば、Cory et l., Nature Reviews Cancer 2:647-56 (2002); Cory et al., Cancer Cell 8:5-6 (2005); Adams et al., Oncogene 26:1324-1337 (2007) を参照のこと）。ＢＣＬ−２抗アポトーシスタンパク質は、好アポトーシスマルチドメインタンパク質のＢＡＸ及びＢＡＫの活性化を妨げる（例えば、Adams et al., Oncogene 26:1324-37 (2007) を参照のこと）。
【００８６】
[0108]  本明細書に使用されるように、「ＢＣＬ−２阻害剤」という用語は、抗アポトーシスタンパク質のＢＣＬ−２ファミリー中の１以上のタンパク質（例えば、ＢＣＬ−２、ＢＣＬ−ｘＬ、及びＢＣＬ−ｗ）を阻害することが可能である薬剤を意味する。ある態様では、本開示のＢＣＬ−２阻害剤がＢＣＬ−２ファミリーの１つのタンパク質を選択的に阻害する、例えば、ＢＣＬ−２阻害剤がＢＣＬ−２を選択的に阻害し得て、ＢＣＬ−ｘｌもＢＣＬ−ｗも阻害し得ない。
【００８７】
[0109]  本明細書に記載されるＢＣＬ−２阻害剤は、ＢＣＬ−２、ＢＣＬ−ｘＬ、及びＢＣＬ−ｗの１以上を阻害し得る。ある態様において、ＢＣＬ−２抗アポトーシスファミリーのタンパク質の阻害剤は、ＢＣＬ−２を阻害する。ある態様において、ＢＣＬ−２抗アポトーシスファミリーのタンパク質の阻害剤は、ＢＣＬ−２を阻害して、ＢＣＬ−２ファミリーのタンパク質の他のメンバーを阻害しない（例えば、ＢＣＬ−ｘＬもＢＣＬ−ｗも阻害しない）。ある態様において、ＢＣＬ−２阻害剤は、ＢＨ３−模倣薬である。
【００８８】
[0110]  ある態様において、本開示のＢＣＬ−２阻害剤は、ＢＣＬ−ｘＬ機能を阻害する。ＢＣＬ−ｘＬの阻害に加えて、該阻害剤はまた、ＢＣＬ−２と相互作用する、及び／又はＢＣＬ−２の１以上の機能を阻害する場合がある（例えば、ＢＣＬ−ｘＬ／ＢＣＬ−２阻害剤）。ある態様では、本開示のＢＣＬ−２阻害剤が、ＢＣＬ−ｘＬとＢＣＬ−ｗのそれぞれを阻害する。ある態様では、本開示のＢＣＬ−２阻害剤が、ＢＣＬ−ｘＬ、ＢＣＬ−２、及びＢＣＬ−ｗを阻害する。
【００８９】
[0111]  ある態様では、ＢＣＬ−２阻害剤が、ＢＣＬ−２抗アポトーシスタンパク質ファミリーメンバーと（ＢＣＬ−２抗アポトーシスタンパク質ファミリーのメンバーが阻害剤の非存在下であれば結合するはずの）１以上のリガンド又は受容体との間の相互作用に干渉する。他の態様では、１以上のＢＣＬ−２抗アポトーシスタンパク質ファミリーメンバーの阻害剤が、この阻害剤が少なくとも１つのＢＣＬ−２タンパク質を特異的に阻害する場合、ＢＣＬ−ｘＬ、ＢＣＬ−２、ＢＣＬ−ｗの１以上に対してのみ結合して、Ｍｃｌ−１とＢＣＬ２Ａ１のような、他のＢｃｌ−２抗アポトーシスＢｃｌ−２ファミリーメンバーへは結合しない。
【００９０】
[0112]  ＢＣＬ−２阻害剤のＢＣＬ−２ファミリータンパク質への結合親和性を測定し得る。例を挙げると、競合蛍光偏光アッセイを使用してＢＣＬ−ｘＬ阻害剤の結合親和性を定量することができる（ここでは、先に記載したように、増加濃度のＢＣＬ−ＸＬ阻害剤の存在又は非存在下に、蛍光性のＢＡＫ  ＢＨ３ドメインペプチドをＢＣＬ−ｘＬタンパク質（又は他のＢＣＬ−２ファミリータンパク質）とともにインキュベートする）（例えば、米国特許公開公報：２０１４０００５１９０；Park et al., Cancer Res. 73:5485-96 (2013)；Wang et al., Proc. Natl. Acad. Sci USA 97:7124-9 (2000)；Zhang et al., Anal. Biochem. 307:70-5 (2002)；Bruncko et al., J. Med. Chem. 50:641-62 (2007) を参照のこと）。式：１−［（ウェルのｍＰ値−陰性対照）／範囲）］ｘ１００％によって阻害パーセントを決定し得る。阻害定数（Ｋｉ）値は、Bruncko et al., .Med. Chem. 50:641-62 (2007) に記載されたように、式：Ｋｉ＝［Ｉ］５０／（［Ｌ］５０／Ｋｄ＋［Ｐ］０／Ｋｄ＋１）によって決定する（Wang, FEBS Lett. 360: 111-114 (1995) も参照のこと）。
【００９１】
[0113]  ＢＣＬ−２阻害剤の例には、ＡＢＴ−２６３（４−［４−［［２−（４−クロロフェニル）−５，５−ジメチルシクロヘキセン−１−イル］メチル］ピペラジン−１−イル］−Ｎ−［４−［［（２Ｒ）−４−モルホリン−４−イル−１−フェニルスルファニルブタン−２−イル］アミノ］−３−（トリフルオロメチルスルホニル）フェニル］スルホニルベンズアミド、又はＩＵＰＡＣ、（Ｒ）−４−（４−（（４’−クロロ−４，４−ジメチル−３，４，５，６−テトラヒドロ−［１，１’−ビフェニル］−２−イル）メチル）ピペラジン−１−イル）−Ｎ−（（４−（（４−モルホリノ−１−（フェニルチオ）ブタン−２−イル）アミノ）−３−（（トリフルオロメチル）スルホニル）フェニル）スルホニル）ベンズアミド）（例えば、Park et al., 2008, J. Med. Chem. 51:6902；Tse et al., Cancer Res., 2008, 68:3421；国際特許出願公開公報番号：ＷＯ２００９／１５５３８６；米国特許第７３９０７９９号、７７０９４６７号、７９０６５０５号、８６２４０２７号を参照のこと）、及びＡＢＴ−７３７（４−［４−［（４’−クロロ［１，１’−ビフェニル］−２−イル）メチル］−１−ピペラジニル］−Ｎ−［［４−［［（１Ｒ）−３−（ジメチルアミノ）−１−［（フェニルチオ）メチル］プロピル］アミノ］−３−ニトロフェニル］スルホニル］ベンズアミド、ベンズアミド、４−［４−［（４’−クロロ［１，１’−ビフェニル］−２−イル）メチル］−１−ピペラジニル］−Ｎ−［［４−［［（１Ｒ）−３−（ジメチルアミノ）−１−［（フェニルチオ）メチル］プロピル］アミノ］−３−ニトロフェニル］スルホニル］−又は４−［４−［［２−（４−クロロフェニル）フェニル］メチル］ピペラジン−１−イル］−Ｎ−［４−［［（２Ｒ）−４−（ジメチルアミノ）−１−フェニルスルファニルブタン−２−イル］アミノ］−３−ニトロフェニル］スルホニルベンズアミド）（例えば、Oltersdorf et al., Nature, 2005, 435:677；米国特許第７９７３１６１号；米国特許第７６４２２６０号を参照のこと）が含まれる。
【００９２】
[0114]  他の態様において、ＢＣＬ−２阻害剤は、キナゾリンスルホンアミド化合物である（例えば、Sleebs et al., 2011, J. Med. Chem. 54:1914 を参照のこと）。なお別の態様において、ＢＣＬ−阻害剤は、Zhou et al., J. Med. Chem., 2012, 55:4664（例えば、化合物２１：（Ｒ）−４−（４−クロロフェニル）−３−（３−（４−（４−（４−（（４−（ジメチルアミノ）−１−（フェニルチオ）ブタン−２−イル）アミノ）−３−ニトロフェニルスルホンアミド）フェニル）ピペラジン−１−イル）フェニル）−５−エチル−１−メチル−１Ｈ−ピロール−２−カルボン酸を参照のこと）と Zhou et al., J. Med. Chem., 2012, 55:6149（例えば、化合物１４：（Ｒ）−５−（４−クロロフェニル）−４−（３−（４−（４−（４−（（４−（ジメチルアミノ）−１−（フェニルチオ）ブタン−２−イル）アミノ）−３−ニトロフェニルスルホンアミド）フェニル）ピペラジン−１−イル）フェニル）−１−エチル−２−メチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸；化合物１５：（Ｒ）−５−（４−クロロフェニル）−４−（３−（４−（４−（４−（（４−（ジメチルアミノ）−１−（フェニルチオ）ブタン−２−イル）アミノ）−３−ニトロフェニルスルホンアミド）フェニル）ピペラジン−１−イル）フェニル）−１−イソプロピル−２−メチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸を参照のこと）に記載されるような低分子化合物である。他の態様において、ＢＣＬ−阻害剤は、ＢＭ−１０７４（例えば、Aguilar et al., 2013, J. Med. Chem. 56:3048 を参照のこと）；ＢＭ−９５７（例えば、Chen et al., 2012, J. Med. Chem. 55:8502 を参照のこと）；ＢＭ−１１９７（例えば、Bai et al., PLoS One 2014 Jun 5;9(6):e99404. Doi: 10.1371/journal.pone. 009904 を参照のこと）；米国特許出願番号：２０１４／０１９９２３４；Ｎ−アシルスルホンアミド化合物（例えば、国際特許出願公開公報番号：ＷＯ２００２／０２４６３６、国際特許出願公開公報番号：ＷＯ２００５／０４９５９３、国際特許出願公開公報番号：ＷＯ２００５／０４９５９４、米国特許第７７６７６８４号、米国特許第７９０６５０５号を参照のこと）のようなＢＣＬ−２／ＢＣＬ−ｘＬ阻害剤である。なお別の態様において、ＢＣＬ−２阻害剤は、低分子の大環状化合物である（例えば、国際特許出願公開公報番号：ＷＯ２００６／１２７３６４、米国特許第７７７７０７６号を参照のこと）。なお別の態様において、ＢＣＬ−２阻害剤は、イソオキサゾリジン化合物である（例えば、国際特許出願公開公報番号：ＷＯ２００８／０６０５６９、米国特許第７８５１６３７号、米国特許第７８４２８１５号を参照のこと）。なお別の態様において、ＢＣＬ−２阻害剤は、Ｓ４４５６３である（例えば、Loriot et. al., Cell Death and Disease, 2014, 5, e1423 を参照のこと）。１つの態様において、ＢＣＬ−２阻害剤は、（Ｒ）−３−（（４’−クロロ−［１、１’−ビフェニル］−２−イル）メチル）−Ｎ−（（４−（（（Ｒ）−４−（ジメチルアミノ）−１−（フェニルチオ）ブタン−２−イル）アミノ）−３−ニトロフェニル）スルホニル）−２，３，４，４ａ，５，６−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラジノ［１，２−ａ］キノリン−８−カルボキサミドである。別の態様において、ＢＣＬ−２阻害剤は、低分子の複素環式化合物である（例えば、���国特許第９０１８３８１号を参照のこと）。
【００９３】
[0115]  ある事例では、ＢＣＬ−２阻害剤を式Ｉ、Ｉａ、又はＩｂの化合物又は塩と併用して使用する。どのＢＣＬ−２阻害剤も使用し得て、式Ｉ、Ｉａ、又はＩｂの化合物又は塩と併用して使用される場合に相乗効果を明示する場合がある。ＡＢＣＬ−２ファミリー阻害剤は、Ｂｃｌ−２、Ｂｃｌ−ｘＬ、Ｂｃｌ−ｗ、ＢＡＫ１、ＢＡＸ、ＢＣＬ２、ＢＣＬ２Ａ１、ＢＣＬ２Ｌ１、ＢＣＬ２Ｌ２、ＢＣＬ２Ｌ１０、ＢＣＬ２Ｌ１３、ＢＣＬ２Ｌ１４、ＢＯＫ、及びＭＣＬ１が含まれる、ＢＣＬ−２ファミリーの１以上のメンバーを阻害し得る。ある態様では、式Ｉ、Ｉａ、又はＩｂの化合物又は塩を以下のいずれとも併用して使用する：ナビトクラックス、ベネトクラックス、Ａ−１１５５４６３、Ａ−１３３１８５２、ＡＢＴ−７３７、オバトクラックス、ＴＷ−３７、Ａ−１２１０４７７、ＡＴ１０１、ＨＡ１４−１、ＢＡＭ７、サブトクラックス、ＵＭＩ−７７、ガンモギン酸、マリトクラックス、ＭＩＭ１、メチルプレドニゾロン、ｉＭＡＣ２、Ｂａｘ阻害剤のペプチドＶ５、Ｂａｘ阻害剤のペプチドＰ５、Ｂａｘチャネルブロッカー、及びＡＲＲＹ  ５２０トリフルオロアセテート。いくつかの実施例では、ボルシクリブをナビトクラックスと併用して使用する。ある態様では、ボルシクリブをベネトクラックスと併用して使用する。
【００９４】
[0116]  いくつかの態様では、ＢＣＬ−２阻害剤を本開示のＣＤＫ阻害剤、例えば、式Ｉ、Ｉａ、又はＩｂの化合物と併用して、血液癌の治療のために使用する。ある態様において、血液癌は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ球性リンパ腫（ＡＬＬ）、及び慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）のような白血病である。ある態様において、血液癌は、Ｂ細胞又はＴ細胞リンパ腫のような非ホジキンリンパ腫である。Ｂ細胞リンパ腫には、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、原発性縦隔Ｂ細胞リンパ腫、血管内大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）、マントル細胞リンパ腫、辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、節外性辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、節性辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、脾辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、リンパ形質細胞性リンパ腫、及び原発性中枢神経系リンパ腫が含まれる。Ｔ細胞リンパ腫には、前駆Ｔリンパ芽球性リンパ腫、末梢Ｔ細胞リンパ腫、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、成人Ｔ細胞リンパ腫（くすぶり型、慢性型、急性型、及びリンパ腫型のサブタイプがある）、血管免疫芽球性Ｔ細胞リンパ腫、節外性ナチュラルキラー／Ｔ細胞リンパ腫（鼻型）、腸管症関連消化管Ｔ細胞リンパ腫（ＥＡＴＬ）（サブタイプＩ型及びＩＩ型）、及び未分化大細胞型リンパ腫（ＡＬＣＬ）が含まれる。本明細書に記載される血液癌を治療するために、本開示の併用、例えば、本明細書に記載されるＣＤＫ阻害剤とＢＣＬ−２阻害剤の併用を使用し得る。
【００９５】
[0117]  本明細書に使用される「〜を治療する」、「〜を治療すること」又は「治療」、という用語には、疾患又は状態の諸症状を軽減すること、和らげること、又は改善すること、追加の症状を予防すること、諸症状の根本原因を改善するか又は予防すること、疾患又は状態を阻害すること（例えば、疾患又は状態の発展を阻止すること）、疾患又は状態を緩和すること、疾患又は状態の後退を引き起こすこと、疾患又は状態によって引き起こされる状態を緩和すること、又は疾患又は状態の諸症状を予防的及び／又は療法的に停止させることが含まれ得る。
【００９６】
[0118]  本開示は、癌の再発を予防するか又は抑制することの必要な被験者においてそれをする方法を提供する。ある態様において、疾患又は障害に関連した「〜を予防する」又は「〜を予防すること」という用語は、統計標本において、未治療対照標本に比べて治療標本（treated sample）における障害又は状態の発生を低下させる、又は未治療対照標本に比べて、障害又は状態の１以上の症状の発現を遅らせるか又はその重症度を低下させる化合物又は併用に言及する場合がある。この方法には、本明細書に記載される併用療法を、微小残存病変を治療するために、及び／又は維持療法として（例えば、別の癌治療の中止後の長期又は延長療法として）投与することが含まれる。
【００９７】
[0119]  ある側面では、プロテアソーム阻害剤を本開示のＣＤＫ阻害剤（例、式Ｉ、Ｉａ、又はＩｂのいずれかの化合物又は塩）と併用するか又は併用して使用し得る。真核細胞において、ユビキチン（Ｕｂ）−プロテアソーム経路（ＵＰＳ）は、Ｕｂ修飾とその後のタンパク質基質の分解に関与する。ＵＰＳは、多くの細胞調節タンパク質（転写因子、細胞周期調節タンパク質、及び多様な細胞プロセスに参画する因子が含まれる）のレベルを制御する。ＵＰＳ経路の一般的な特徴は、高度に保存されたＵｂが一連の酵素、即ち、Ｅ１  Ｕｂ活性化酵素、Ｅ２  Ｕｂ結合酵素、及びＥ３  Ｕｂリガーゼを介して標的タンパク質へ共有結合することである。Ｅ１は、最初にＵｂを活性化して、それをＥ２へ移す。このＥ２酵素から、Ｕｂは、標的タンパク質へ直接的に移されるか又はＥ３  Ｕｂリガーゼを介して間接的に移される。このポリユビキチン化タンパク質は、多重タンパク分解活性を有する大きな複合体である２６Ｓプロテアソームによって認識されて分解される。
【００９８】
[0120]  本明細書に使用されるように、「プロテアソーム阻害剤」という用語は、プロテアソームの作用を妨害する薬剤を意味する。プロテアソーム阻害は、ｐ５３タンパク質のような好アポトーシス因子の分解を予防し得て、好アポトーシス経路の抑制に依存した新生物細胞におけるプログラム化された細胞死の活性化を許容する。
【００９９】
[0121]  どのプロテアソーム阻害剤も使用し得て、ＣＤＫ阻害剤、例えば、式Ｉ、Ｉａ、又はＩｂの化合物又は塩と併用して使用される場合に相乗効果を明示する場合がある。プロテアソーム阻害剤の非限定的な例には、ボルテゾミブ、マリゾミブ、イクサゾミブ、ジスルフィラム、エピガロカテキン−３−ガラート、サリノスポラミドＡ、カルフィルゾミブ、ＯＮＸ０９１２、ＣＥＰ−１８７７０、ＭＬＮ９７０８、エポキソミシン、及びＭＧ１３２が含まれ得る。
【０１００】
[0122]  いくつかの態様では、プロテアソーム阻害剤を本開示のＣＤＫ阻害剤、例えば、式Ｉ、Ｉａ、又はＩｂの化合物と併用して、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫のような血液癌又はトリプルネガティブ乳癌の治療のために使用する。
【０１０１】
[0123]  いくつかの側面では、本明細書に記載される併用、例えば、ＣＤＫ阻害剤のＢＣＬ−２阻害剤又はプロテアソーム阻害剤との併用を癌の治療に利用することができる。本明細書に記載される併用療法は、転移の可能性を低下させることの必要な被験者においてそれをすることができる。いくつかの態様において、転移は、固形腫瘍である。いくつかの態様において、転移は、液性腫瘍である。液性腫瘍である癌は、例えば、血液、骨髄、及びリンパ節において発生するものであり得て、例えば、白血病、骨髄性白血病、リンパ球性白血病、リンパ腫、ホジキンリンパ腫、メラノーマ、及び多発性骨髄腫を含めることができる。白血病には、例えば、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、及び有毛細胞白血病が含まれる。固形腫瘍である癌には、例えば、前立腺癌、精巣癌、乳癌、脳腫瘍、膵臓癌、結腸癌、甲状腺癌、胃癌、肺癌、卵巣癌、カポシ肉腫、皮膚癌、扁平細胞癌、腎癌、頭頚部癌、咽喉癌、鼻、口、咽喉の湿った粘膜内層上に生成する扁平上皮癌、膀胱癌、骨肉腫、子宮頸部癌、子宮内膜癌、食道癌、肝臓癌、及び腎臓癌が含まれる。いくつかの態様において、本明細書に記載される方法によって治療される状態は、メラノーマ細胞、前立腺癌細胞、精巣癌細胞、乳癌細胞、脳腫瘍細胞、膵臓癌細胞、結腸癌細胞、甲状腺癌細胞、胃癌細胞、肺癌細胞、卵巣癌細胞、カポシ肉腫細胞、皮膚癌細胞、腎癌細胞、頭頚部癌細胞、咽喉癌細胞、扁平上皮癌細胞、膀胱癌細胞、骨肉腫細胞、子宮頸部癌細胞、子宮内膜癌細胞、食道癌細胞、肝臓癌細胞、又は腎臓癌細胞の転移である。
【０１０２】
[0124]  本明細書に記載される方法は、転移性の癌腫瘍の進行を阻害することにも使用し得る。癌の非限定的な例には、副腎皮質癌、小児副腎皮質癌、ＡＩＤＳ関連癌、肛門癌、盲腸癌、基底細胞癌、小児基底細胞癌、膀胱癌、小児膀胱癌、骨癌、脳腫瘍、小児星状細胞腫、小児脳幹グリオーマ、小児中枢神経系非定型奇形腫様／ラブロイド腫瘍、小児中枢神経系胎児性腫瘍、小児中枢神経系胚細胞腫瘍、小児頭蓋咽頭腫脳腫瘍、小児上衣腫脳腫瘍、乳癌、小児気管支腫瘍、カルチノイド腫瘍、小児カルチノイド腫瘍、消化管カルチノイド腫瘍、原発不明癌、小児原発不明癌、小児心腫瘍、子宮頸部癌、小児子宮頸部癌、小児脊索腫、慢性骨髄増殖性疾患、結腸癌、結直腸癌、小児結直腸癌、肝外胆管癌、非浸潤性乳管癌（ＤＣＩＳ）、子宮内膜癌、食道癌、小児食道癌、小児鼻腔神経芽細胞腫、眼癌、骨の悪性線維性組織球腫、胆嚢癌、胃（胃部）癌、小児胃癌、消化管間質腫瘍（ＧＩＳＴ）、小児消化管間質腫瘍（ＧＩＳＴ）、小児頭蓋外胚細胞腫瘍、性腺外胚細胞腫瘍、妊娠性絨毛性腫瘍、グリオーマ、頭頚部癌、小児頭頚部癌、肝細胞癌、下咽頭癌、腎臓癌、腎細胞腎臓癌、ウィルムス腫瘍、小児腎臓腫瘍、ランゲルハンス細胞組織球症、喉頭癌、小児喉頭癌、白血病、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、有毛細胞白血病、舌癌、肝臓癌（原発性）、小児肝臓癌（原発性）、非浸潤性小葉癌（ＬＣＩＳ）、肺癌、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、リンパ腫、ＡＩＤＳ関連リンパ腫、バーキットリンパ腫、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、原発性中枢神経系リンパ腫（ＣＮＳ）、メラノーマ、小児メラノーマ、眼内黒色腫、メルケル細胞癌、悪性中皮腫、小児悪性中皮腫、原発不明転移性扁平上皮性頸部癌、ＮＵＴ遺伝子関与の正中線癌、口腔（mouth）癌、小児多発性内分泌腺腫瘍症、菌状息肉症、骨髄異形成症候群、骨髄異形成新生物、骨髄増殖性新生物、多発性骨髄腫、鼻腔癌、鼻咽頭癌、小児鼻咽頭癌、神経芽細胞腫、口腔（oral）癌、小児口腔癌、口咽頭癌、卵巣癌、小児卵巣癌、上皮性卵巣癌、低悪性度腫瘍卵巣癌、膵臓癌、小児膵臓癌、膵臓内分泌腺腫瘍（膵島細胞腫瘍）、小児乳頭腫症、傍神経節腫瘍、副鼻腔癌、副甲状腺癌、陰茎癌、咽頭癌、褐色細胞腫、下垂体腫瘍、形質細胞新生物、小児胸膜肺芽腫、前立腺癌、直腸癌、腎盂移行上皮癌、網膜芽腫、唾液腺癌、小児唾液腺癌、ユーイング肉腫ファミリー腫瘍、カポシ肉腫、骨肉腫、横紋筋肉腫、小児横紋筋肉腫、軟部組織肉腫、子宮肉腫、セザリー症候群、小児皮膚癌、非黒色腫皮膚癌、小腸癌、扁平上皮癌、小児扁平上皮癌、精巣癌、小児精巣癌、咽喉癌、胸腺腫・胸腺癌、小児胸腺腫・胸腺癌、甲状腺癌、小児甲状腺癌、尿管移行上皮癌、尿道癌、子宮体癌、膣癌、外陰癌、及びワルデンシュトレームマクログロブリン血症が含まれる。
【０１０３】
[0125]  本明細書に記載される併用療法は、放射線療法のような他の療法と一緒に使用し得る。化学療法及び放射線療法の治療レジメンは、有限数の薬物療法サイクルに続く非薬物療法サイクルを含むか、又は化学療法又は放射線療法が投与される有限の時間枠を含むことが可能である。そのプロトコールは、臨床試験、薬物ラベル、及び治療される被験者と一体の医療スタッフによって決定され得る。化学療法又は放射線療法のサイクル回数、又は化学療法又は放射線療法のレジメンの全長時間は、癌療法に対する被験者の応答に依拠して変動する可能性がある。化学療法又は放射線療法の治療レジメンが完了した後で、本明細書に記載される薬剤を投与することができる。
【０１０４】
[0126]  いくつかの側面において、本明細書に記載される併用を利用して、その必要な被験者を治療することができる。いくつかの例において、本明細書に開示される方法及び組成物によって治療され得る被験者は、ヒト被験者であり得る。本明細書に開示される方法及び組成物によって治療され得る被験者は、非ヒト動物であり得る。非ヒト動物の非限定的な例には、非ヒト霊長動物、家畜動物、飼育用ペット、及び実験動物が含まれ得る。
【０１０５】
[0127]  ある態様において、本明細書に記載される併用療法は、別々の薬剤として投与しても、単一の医薬組成物中へ組み合わせてもよい。例えば、ＣＤＫ阻害剤（例、式Ｉ、Ｉａ、又はＩｂの化合物又は塩）とＢＣＬ−２阻害剤（例、ベネトクラックス又はナビトクラックス）の組合せを２つの別々の医薬組成物として製剤化しても、この２つの薬剤を単一の医薬組成物として共製剤化してもよい。
【０１０６】
[0128]  ある態様では、ＣＤＫ阻害剤（例、式Ｉ、Ｉａ、又はＩｂの化合物又は塩）をＢＣＬ−２阻害剤又はプロテアソーム阻害剤と共製剤化する。いくつかの例では、式Ｉ、Ｉａ、又はＩｂの化合物をナビトクラックス、ベネトクラックス、ボルテゾミブ、マリゾミブ、又はイクサゾミブのいずれか１つ、又はこれらの組合せと共製剤化する。
【０１０７】
[0129]  ある態様において、本開示は、式Ｉ、Ｉａ、又はＩｂの化合物又は塩を含んでなる、例えば、経口又は非経口投与用の医薬組成物を提供する。いくつかの側面において、該医薬組成物は、式Ｉ、Ｉａ、又はＩｂの化合物又は塩を少なくとも約１ｍｇ〜約１０００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約４００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約２００ｍｇ、約２００ｍｇ〜約４００ｍｇ、又は約２５０ｍｇ〜約３５０ｍｇの量で含む。例えば、本開示の医薬組成物は、約１００ｍｇ、約１２０ｍｇ、約１４０ｍｇ、約１６０ｍｇ、約１８０ｍｇ、約２００ｍｇ、約２２０ｍｇ、約２４０ｍｇ、約２６０ｍｇ、約２８０ｍｇ、約３００ｍｇ、約３２０ｍｇ、約３４０ｍｇ、約３６０ｍｇ、約３８０ｍｇ、約４００ｍｇ、約４２０ｍｇ、約４４０ｍｇ、約４６０ｍｇ、約４８０ｍｇ、又は約５００ｍｇの式Ｉ、Ｉａ、又はＩｂの化合物を含み得る。本明細書に記載される化合物、例えば式Ｉｂの化合物では、塩の形態で医薬組成物へ製剤化される場合、該化合物の量は、遊離塩基の重量を表し得て、塩形態の重量を表し得ない。ある態様において、式Ｉ、Ｉａ、又はＩｂの化合物又は塩の医薬組成物には、追加の抗癌剤、例えば、ＢＣＬ−２阻害剤又はプロテアソーム阻害剤が含まれない。ある態様において、該医薬組成物には、追加の抗癌剤、例えば、ＢＣＬ−２阻害剤又はプロテアソーム阻害剤が含まれる。
【０１０８】
[0130]  本開示の化合物、例えば、式Ｉ、Ｉａ、又はＩｂの化合物又は塩の治療有効量は、被験者の体重１ｋｇあたりの化合物のｍｇ数として表現することができる。いくつかの事例では、治療有効量の用量が、少なくとも約０．１ｍｇ／ｋｇ〜約２０ｍｇ／ｋｇ、例えば、約０．１ｍｇ／ｋｇ、０．２ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇ、０．４ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ／ｋｇ、０．６ｍｇ／ｋｇ、０．７ｍｇ／ｋｇ、０．８ｍｇ／ｋｇ、０．９ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、約２ｍｇ／ｋｇ、約３ｍｇ／ｋｇ、約４ｍｇ／ｋｇ、約５ｍｇ／ｋｇ、約６ｍｇ／ｋｇ、約７ｍｇ／ｋｇ、約８ｍｇ／ｋｇ、約９ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇ、又は約２０ｍｇ／ｋｇであり得る。本明細書に記載される化合物、例えば式Ｉｂの化合物では、塩の形態で医薬組成物へ製剤化される場合、該化合物の治療有効量は、遊離塩基の重量を表し得て、塩形態の重量を表し得ない。
【０１０９】
[0131]  ある態様において、本開示は、ＢＣＬ−２阻害剤、例えば、ベネトクラックス又はナビトクラックスを含んでなる、例えば、経口又は非経口投与用の医薬組成物を提供する。該医薬組成物は、ＢＣＬ−２阻害剤を少なくとも約１ｍｇ〜約１０００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約１０００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約８００ｍｇ、約２００ｍｇ〜約８００ｍｇ、又は約３００ｍｇ〜約８０００ｍｇの量で含み得る。例えば、本開示の医薬組成物は、約１００ｍｇ、約１２０ｍｇ、約１４０ｍｇ、約１６０ｍｇ、約１８０ｍｇ、約２００ｍｇ、約２２０ｍｇ、約２４０ｍｇ、約２６０ｍｇ、約２８０ｍｇ、約３００ｍｇ、約３２０ｍｇ、約３４０ｍｇ、約３６０ｍｇ、約３８０ｍｇ、約４００ｍｇ、約４２０ｍｇ、約４４０ｍｇ、約４６０ｍｇ、約４８０ｍｇ、約５００ｍｇ、約５２０ｍｇ、約５４０ｍｇ、約５６０ｍｇ、約５８０ｍｇ、約６００ｍｇ、約６２０ｍｇ、約６４０ｍｇ、約６６０ｍｇ、約６８０ｍｇ、約７００ｍｇ、約７２０ｍｇ、約７４０ｍｇ、約７６０ｍｇ、約７８０ｍｇ、約８００ｍｇ、約８２０ｍｇ、約８４０ｍｇ、約８６０ｍｇ、約８８０ｍｇ、約９００ｍｇ、約９２０ｍｇ、約９４０ｍｇ、約９６０ｍｇ、約９８０ｍｇ、又は約１０００ｍｇのＢＣＬ−２阻害剤、例えば、ベネトクラックス又はナビトクラックスを含み得る。
【０１１０】
[0132]  ある態様において、本開示は、プロテアソーム阻害剤、例えば、ボルテゾミブ、マリゾミブ、又はイクサゾミブを含んでなる、例えば、経口又は非経口投与用の医薬組成物を提供する。該医薬組成物は、プロテアソーム阻害剤を少なくとも約０．５ｍｇ〜約５０ｍｇ、約１ｍｇ〜約３０ｍｇ、約１ｍｇ〜約２０ｍｇ、約１ｍｇ〜約１０ｍｇ、又は約１ｍｇ〜約５ｍｇの量で含み得る。例えば、本開示の医薬組成物は、約０．５ｍｇ、約１ｍｇ、約２ｍｇ、約３ｍｇ、約４ｍｇ、約５ｍｇ、約６ｍｇ、約７ｍｇ、約８ｍｇ、約９ｍｇ、約１０ｍｇ、約１１ｍｇ、約１２ｍｇ、約１３ｍｇ、約１４ｍｇ、約１５ｍｇ、約１６ｍｇ、約１７ｍｇ、約１８ｍｇ、約１９ｍｇ、又は約２０ｍｇのプロテアソーム阻害剤、例えば、ボルテゾミブ、マリゾミブ、又はイクサゾミブを含み得る。
【０１１１】
[0133]  ある態様では、本開示の製剤が、式Ｉ、Ｉａ、又はＩｂの化合物又は塩、ＢＣＬ−２阻害剤、又はプロテアソーム阻害剤を含み、ここで該化合物又は塩は、不純物を約７０％〜約９９．９９％、約８０％〜約９９．９％、約８５％〜約９９％、約９０％〜約９９％、約９５％〜約９９％、約９７％〜約９９％、約９８％〜約９９％、約９８％〜約９９．９％、約９９％〜約９９．９９％、約９９．５％〜約９９．９９％、約９９．６％〜約９９．９９％、約９９．８％〜約９９．９９％、又は約９９．９％〜約９９．９９％含まない。
【０１１２】
[0134]  ある態様では、本開示の医薬組成物が式Ｉ、Ｉａ、又はＩｂの化合物又は塩とＢＣＬ−２阻害剤の両方を本明細書に記載される量のような量で含む（例えば、１００〜４００ｍｇの式Ｉｂの化合物又は塩と２００〜８００ｍｇのＢＣＬ−２阻害剤、例えばベネトクラックスを含む医薬組成物）。
【０１１３】
[0135]  ある態様では、本開示の医薬組成物が式Ｉ、Ｉａ、又はＩｂの化合物又は塩とプロテアソーム阻害剤の両方を本明細書に記載される量のような量で含む（例えば、１００〜４００ｍｇの式Ｉｂの化合物又は塩と１〜１０ｍｇのプロテアソーム阻害剤、例えばイクサゾミブを含む医薬組成物）。
【０１１４】
[0136]  本明細書に開示される医薬組成物は、液体製剤、固体製剤、又はこれらの組合せの形態であり得る。製剤の非限定的な例には、錠剤、カプセル剤、丸剤、ゲル剤、ペースト剤、液体溶液剤、及びクリーム剤が含まれ得る。いくつかの事例において、治療薬剤、例えば、式Ｉ、Ｉａ、又はＩｂの化合物又は塩、ＢＣＬ−２阻害剤、又はプロテアソーム阻害剤は、結晶化形態であり得る。２種以上の治療薬剤を含んでなる医薬組成物では、各薬剤を別々に結晶化してから組み合わせても、それらを一緒に結晶化してもよい。組成物は、２種以上の治療薬剤を１以上の物理状態で含み得る。例えば、組成物は、１つの治療薬剤を固体製剤において、そしてもう１つの治療薬剤又は薬物をゲル製剤において含んでなる錠剤であり得る。ある態様において、組成物は、式Ｉ、Ｉａ、又はＩｂの化合物又は塩を第一の物理状態で、そしてＢＣＬ−２ファミリー阻害剤又はプロテアソーム阻害剤を第二の物理状態で含んでなる、単一の医薬組成物である。
【０１１５】
[0137]  本開示の組成物は、賦形剤又は添加剤をさらに含み得る。賦形剤には、ありとあらゆる溶媒、コーティング剤、キレート形成剤、香味剤、着色剤、滑沢剤、崩壊剤、保存剤、甘味剤、消泡剤、緩衝剤、高分子剤、抗酸化剤、結合剤、希釈剤、及び媒体（又は担体）が含まれ得る。一般に、賦形剤は、本開示の治療用組成物と適合可能である。
【０１１６】
[0138]  経口投与用の液状製剤（liquid preparations）は、例えば、溶液剤、シロップ剤、又は懸濁液剤の形態をとり得るか、又はそれらは、使用前に水又は他の好適な媒体での復元用の乾燥製品として提示され得る。そのような液状製剤は、懸濁剤（例、ソルビトールシロップ、メチルセルロース、又は水素添加食用脂）；乳化剤（例、レシチン又はアカシア）；非水性媒体（例、落花生油、油性エステル類、又はエチルアルコール）；保存剤（例、ｐ−ヒドロキシ安息香酸メチル又はプロピル、又はソルビン酸）；及び人工又は天然の着色剤及び／又は甘味剤のような医薬的に許容される添加剤を用いた慣用のアプローチによって製造することができる。
【０１１７】
[0139]  本開示には、ある化合物の分解を水が促進する可能性があるので、有効成分を含んでなる無水の組成物及び剤形がさらに含まれる。本開示の無水の組成物及び剤形は、無水成分又は低水分含有成分と低水分又は低湿度条件を使用して製造することができる。製造、包装、及び／又は保存の間に水分及び／又は湿気との実質的な接触が予測されるならば、乳糖を含有する本開示の組成物及び剤形を無水化することができる。その無水性が維持されるように、無水組成物を製造して保存することができる。従って、水分への曝露を防ぐ材料が好適な処方キットに含まれ得るようにそれらを使用して、無水組成物を包装することができる。好適な包装容器の例には、限定されないが、密閉フォイル、プラスチック、単位用量容器、ブリスターパック、及びストリップパックが含まれる。
【０１１８】
[0140]  慣用の医薬配合技術に従って、本明細書に記載される成分を密接な混合物において医薬担体と組み合わせることができる。この担体は、投与に望まれる調製品の形態に依拠して、多種多様な形態をとることができる。経口剤形用の組成物を製造する場合には、例えば、水、グリコール類、油剤、アルコール類、香味剤、保存剤、着色剤のような通常の医薬媒体のいずれも、経口液状調製品（懸濁液剤、溶液剤、及びエリキシル剤のような）又はエアゾール剤の場合に担体として利用し得る；又は、経口固体調製品の場合は、いくつかの態様において、乳糖の使用を利用することなく、デンプン類、糖類、微結晶性セルロース、希釈剤、造粒剤、滑沢剤、結合剤、及び崩壊剤のような担体を使用することができる。例えば、好適な担体には、散剤、カプセル剤、及び錠剤が、固体経口調製品と共に含まれる。所望されるならば、標準的な水系又は非水系技術によって、錠剤をコートすることができる。
【０１１９】
[0141]  医薬的に許容される担体として役立ち得る材料のいくつかの例には：（１）乳糖、ブドウ糖、及びショ糖のような糖類；（２）トウモロコシデンプン及びジャガイモデンプンのようなデンプン類；（３）セルロースと、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、エチルセルロース、及び酢酸セルロースのようなその誘導体；（４）トラガカント末；（５）麦芽；（６）ゼラチン；（７）タルク；（８）ココア脂及び坐剤用ワックスのような賦形剤；（９）落花生油、綿実油、サフラワー油、ゴマ油、オリーブ油、トウモロコシ油、及び大豆油のような油剤；（１０）プロピレングリコールのようなグリコール類；（１１）グリセリン、ソルビトール、マンニトール、及びポリエチレングリコールのようなポリオール類；（１２）オレイン酸エチル及びラウリン酸エチルのようなエステル類；（１３）寒天；（１４）水酸化マグネシウム及び水酸化アルミニウムのような緩衝剤；（１５）アルギン酸；（１６）発熱性物質除去水；（１７）等張生理食塩水；（１８）リンゲル液；（１９）エチルアルコール；（２０）リン酸塩緩衝溶液剤；及び（２１）医薬製剤において利用される他の無害な適合性物質が含まれる。
【０１２０】
[0142]  剤形における使用に適した結合剤には、限定されないが、トウモロコシデンプン、ジャガイモデンプン、又は他のデンプン類、ゼラチン、アカシアのような天然及び合成ゴム、アルギン酸ナトリウム、アルギン酸、他のアルギン酸塩、トラガカント末、グアーゴム、セルロースとその誘導体（例、エチルセルロース、酢酸セルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、ナトリウムカルボキシメチルセルロース）、ポリビニルピロリドン、メチルセルロース、アルファ化（pre-gelatinized）デンプン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、微結晶性セルロース、及びこれらの混合物が含まれる。
【０１２１】
[0143]  本明細書に開示される組成物及び剤形における使用に適した充填剤の例には、限定されないが、タルク、炭酸カルシウム（例、顆粒又は粉末）、微結晶性セルロース、粉末セルロース、デキストレート類（dextrates）、カオリン、マンニトール、ケイ酸、ソルビトール、デンプン、アルファ化デンプン、及びこれらの混合物が含まれる。
【０１２２】
[0144]  水性の懸濁液剤及び／又はエリキシル剤が経口投与に所望される場合、その中の有効成分は、水、エタノール、プロピレングリコール、グリセリン、及びそれらの様々な組合せのような希釈剤と一緒に、様々な甘味剤又は香味剤、着色物質又は色素と、そしてそのように所望されるならば、乳化剤及び／又は懸濁剤と組み合わせることができる。
【０１２３】
[0145]  １つの態様において、組成物には、本開示の化合物の良好な可溶化及び／又は溶解を確実にして、本開示の化合物の沈殿を最小にするために、可溶化剤を含めることができる。このことは、非経口使用の組成物、例えば、注射用の組成物にとって特に重要であり得る。可溶化剤はまた、親水性の薬物、及び／又は界面活性剤のような他の成分の溶解性を高めるために、又は安定しているか又は均質な溶液又は分散液として組成物を維持するために加えることができる。
【０１２４】
[0146]  本明細書に記載される医薬組成物は、その必要な被験者への経口投与に適している場合がある。いくつかの例では、消化管中の体液と接触した活性薬剤の制御放出を達成して、活性薬剤の血漿における実質的に一定で有効なレベルを提供するために、経口投与用の徐放性製剤を製造し得る。この目的には、生分解性ポリマー、水溶性ポリマー、又はその両方の混合物（及び、任意選択的に好適な界面活性剤）のポリマーマトリックスの中にその結晶形を埋め込む場合がある。埋込みは、この文脈では、ポリマーのマトリックスに微粒子を取り込むことを意味し得る。制御放出製剤は、分散した微粒子又は乳化した微小滴の既知の分散又は乳化コーティング技術を介した被包化によっても入手される。
【０１２５】
[0147]  いくつかの態様において、該組成物は、食品組成物において製剤化することができる。例えば、該組成物は、フードキャリアが有るか又は無い、飲料又は他の液体、固形食、半固形食であり得る。例えば、該組成物には、本明細書に記載される組成物のいずれでも補充される紅茶を含めることができる。該組成物は、本明細書に記載される組成物のいずれでも補充される乳製品であり得る。いくつかの態様において、該組成物は、食品組成物において製剤化することができる。例えば、該組成物は、飲料、固形食、半固形食、又はフードキャリアを含み得る。
【０１２６】
[0148]  ある態様において、医薬製剤は、油性又は水性の媒体中の無菌の懸濁液剤、溶液剤、又は乳剤のような、非経口注射に適した形態であり得て、懸濁剤、安定化剤、及び／又は分散剤のような製剤用の薬剤を含有することができる。非経口投与用の医薬製剤には、例えば、水溶型の活性化合物の水溶液剤が含まれる。活性化合物の懸濁液剤は、例えば、油性の注射懸濁液剤として製造することができる。好適な脂溶性の溶媒又は媒体には、ゴマ油のような脂肪油剤、又はオレイン酸エチル、パルミチン酸イソプロピル、又は中鎖トリグリセリドのような合成脂肪酸エステル類、又はリポソーム剤が含まれる。好ましい態様では、非経口投与用の製剤が水性懸濁液剤である。
【０１２７】
[0149]  本明細書に記載される化合物は、組成物において、ある濃度範囲内で存在し得て、その範囲は、先述の濃度のいずれからも選択される上限値と下限値によって規定される。例えば、本開示の化合物又は塩は、製剤中において、約１ｎＭ〜約１００ｍＭ、約１０ｎＭ〜約１０ｍＭ、約１００ｎＭ〜約１ｍＭ、約５００ｎＭ〜約１ｍＭ、約１ｍＭ〜約５０ｍＭ、約１０ｍＭ〜約４０ｍＭ、約２０ｍＭ〜約３５ｍＭ、又は約２０ｍＭ〜約３０ｍＭの濃度で存在し得る。
【０１２８】
[0150]  本明細書に記載される化合物を含んでなる組成物の製造の方法には、１以上の不活性で医薬的に許容される賦形剤と一緒に該化合物を製剤化する工程を含めることができる。液性組成物には、例えば、化合物が溶解している溶液剤、化合物を含んでなる乳液剤、又は、本明細書に開示されるような化合物を含んでなるリポソーム、ミセル、又はナノ粒子を含有する溶液剤が含まれる。これらの組成物はまた、湿潤剤又は乳化剤、ｐＨ緩衝剤、及び他の医薬的に許容される添加剤といった、微量の無害な補助物質を含有する。
【０１２９】
[0151]  注射用の製剤は、追加保存剤と共に、単位剤形において（例えば、アンプル剤において）又は多用量容器において提示することができる。該組成物は、油性又は水性の媒体中の懸濁液剤、溶液剤、又は乳液剤のような形態をとり得て、懸濁剤、安定化剤、及び／又は分散剤のような製剤用の薬剤を含有し得る。該組成物は、単位用量又は多用量の容器（例えば、密封されたアンプル及びバイアル）において提示され得て、使用の直前に無菌の液性担体（例えば、生理食塩水又は発熱性物質除去無菌水）の添加だけを必要とする、粉末形態又は凍結−乾燥（凍結乾燥）状態で保存することができる。先に記載したような無菌の散剤、顆粒剤、及び錠剤より、用時調製用の注射溶液剤及び懸濁液剤を製造することができる。
【０１３０】
[0152]  非経口投与用の医薬製剤には、抗酸化剤、緩衝剤、静菌剤、及び該製剤を企図されるレシピエントの血液と等張にする溶質を含有し得る、活性化合物の水性及び非水性（油性）無菌注射溶液剤；並びに、懸濁剤と濃化剤が含まれ得る、水性及び非水性の無菌懸濁液剤が含まれる。好適な親油性の溶媒又は媒体には、ゴマ油のような脂肪油剤、又はオレイン酸エチル又はトリグリセリドのような合成脂肪酸エステル類、又はリポソーム剤が含まれる。
【０１３１】
[0153]  本明細書に記載される組成物（例えば、式Ｉ、Ｉａ、又はＩｂの化合物又は塩、又はＢＣＬ−２阻害剤、又はプロテアソーム阻害剤の医薬組成物、又は式Ｉ、Ｉａ、又はＩｂの化合物のＢＣＬ−２阻害剤又はプロテアソーム阻害剤との共製剤）は、毎日１回、又は１回より多く投与することができる。該組成物は、連続的に投与してよい（例えば、治療レジメンの期間に中断無しで毎日服用してよい）。いくつかの症例において、治療レジメンは、１週間未満、１週間、２週間、３週間、１ヶ月、又は１ヶ月より多くであり得る。いくつかの症例では、本開示の組成物を少なくとも１２週の期間にわたって投与する。他の症例において、該組成物は、１日、少なくとも２連続日、少なくとも３連続日、少なくとも４連続日、少なくとも５連続日、少なくとも６連続日、少なくとも７連続日、少なくとも８連続日、少なくとも９連続日、少なくとも１０連続日、又は少なくとも１０連続日より多くの間、投与される。いくつかの症例では、治療有効量を週１回、週２回、週３回、週４回、週５回、週６回、週７回、週８回、週９回、週１０回、週１１回、週１２回、週１３回、週１４回、週１５回、週１６回、週１７回、週１８回、週１９回、週２０回、週２５回、週３０回、週３５回、週４０回、又は週４０回より多く投与することができる。いくつかの症例では、治療有効量を１日１回、１日２回、１日３回、１日４回、１日５回、１日６回、１日７回、１日８回、１日９回、１日１０回、又は１日１０回より多く投与することができる。いくつかの症例において、該組成物は、１日に少なくとも２回投与される。さらなる症例において、該組成物は、少なくとも１時間ごとに、少なくとも２時間ごとに、少なくとも３時間ごとに、少なくとも４時間ごとに、少なくとも５時間ごとに、少なくとも６時間ごとに、少なくとも７時間ごとに、少なくとも８時間ごとに、少なくとも９時間ごとに、少なくとも１０時間ごとに、少なくとも１１時間ごとに、少なくとも１２時間ごとに、少なくとも１３時間ごとに、少なくとも１４時間ごとに、少なくとも１５時間ごとに、少なくとも１６時間ごとに、少なくとも１７時間ごとに、少なくとも１８時間ごとに、少なくとも１９時間ごとに、少なくとも２０時間ごとに、少なくとも２１時間ごとに、少なくとも２２時間ごとに、少なくとも２３時間ごとに、又は少なくとも毎日投与される。
【０１３２】
[0154]  本開示の医薬組成物は、急性的にも慢性的にも投与することができる。本発明の医薬組成物は、単回治療法としても治療のクールとしても投与することができる。治療薬は、１日１回、１日２回、１日３回、午前中、夕方、就寝前、又は１日中連続的に投与することができる。治療薬は、毎日、隔日、２日おき、週２回、週１回、隔週、毎月、６週に１回、隔月、３ヶ月に１回、６ヶ月に１回、毎年、隔年、５年に１回、又は必要に応じて適用することができる。
【０１３３】
[0155]  ある態様において、投与されている薬物の用量は、ある長さの時間の間、一時的に低減しても一時的に中断してもよい。ある態様において、患者は、該患者が薬物を服用しないか又は低減量の薬物を一定期間の間服用する、休薬日を有するものである。休薬日は、例えば、２日と１年の間であり得て、例だけを挙げると、２日、３日、４日、５日、６日、７日、１０日、１２日、１５日、２０日、２８日、又は２８日以上が含まれる。休薬日は、約１ヶ月、約２ヶ月、約３ヶ月、約４ヶ月、約５ヶ月、約６ヶ月、約７ヶ月、約８ヶ月、約９ヶ月、約１０ヶ月、約１１ヶ月、又は約１２ヶ月の間であってよい。休薬日の間の用量低減は、例えば、元の投与用量の１０％〜１００％であり得て、例だけを挙げると、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、及び１００％が含まれる。さらなる例として、用量低減は、１０％と１００％の間、２０％と８０％の間、３０％と７０％の間、５０％と９０％の間、８０％と１００％の間、又は９０％と１００％の間であり得る。
【０１３４】
[0156]  患者の状態の改善が生じたならばすぐに、必要に応じて維持用量を投与することができる。引き続き、投与量又は投与頻度、又はその両方は、疾患、障害、又は状態の改善を保持し得るレベルまで、症状に応じて低減することができる。
【０１３５】
[0157]  本明細書に記載される製剤を投与するための追加の方法には、例えば、限定されないが、経口、胃又は十二指腸栄養チューブ、肛門坐剤、浣腸が含まれる、経腸経路を介した送達と、注射、注入、動脈内、心臓内、皮内、十二指腸内、髄内、筋肉内、骨内、腹腔内、髄腔内、血管内、静脈内、硝子体内、前房内、硬膜内、皮下、吸入、経皮、経粘膜、舌下、頬内、局所、皮膚上、真皮、点眼・点耳、鼻腔内、及び膣内の投与が含まれる、非経腸経路を介した送達が含まれる。本明細書に記載される化合物は、例えば、外科手術の間の局部注入、クリーム剤又は軟膏剤のような局所適用、注射、カテーテル、又はインプラントによって、治療の必要な部位へ局所的に投与することができる。その投与は、疾患組織又は臓器の部位での直接注射によることも可能である。
【０１３６】
[0158]  投与期間の長さ、及び／又は投薬量は、内科医又は他のあらゆる種類の臨床医によって決定され得る。内科医又は臨床医は、投与される組成物に対する被験者の応答を観察して、被験者のパフォーマンスに基づいて投薬を調整することができる。例えば、エネルギー調節が低下した効果を示す被験者への投薬を高めて、所望される結果を達成することができる。
【０１３７】
[0159]  いくつかの態様において、本明細書に記載される併用療法は、同じ経路で同じ時間に一緒に投与することも、別々に投与することも可能である。いくつかの態様において、組成物中の成分は、同じか又は異なる経路を使用して投与することができる。
【０１３８】
[0160]  ある態様において、本開示はまた、本明細書に記載される組成物を製造するための方法を提供する。いくつかの態様において、本明細書に記載される組成物の製造は、２種以上の成分を混合するか又は一緒にする工程を含む。
【０１３９】
[0161]  いくつかの態様において、該組成物は、医薬的に活性な薬剤又は治療用薬剤、担体、及び／又は賦形剤と一緒にするか又は混合することができる。本明細書には、そのような成分の例が記載されている。この配合組成物は、錠剤、カプセル剤、ゲルカプセル剤、徐放性錠剤、等のような単位投与量へ成型することができる。
【０１４０】
[0162]  いくつかの態様において、該組成物は、１種以上の成分の実質的に均質な混合物を含有する固体組成物が達成されるように、１種以上の成分が組成物全体に均等に分散されて、該組成物が錠剤、丸剤、及びカプセル剤のような等しく有効な単位剤形へ容易に細分され得るように、製造される。
【０１４１】
[0163]  ユーザーへ運ばれ得る容器の中へ単位用量を包装し得る。単位用量をチューブ、ジャー、ボックス、バイアル、バッグ、トレイ、ドラム、ボトル、シリンジ、又は缶の中に包装し得る。
【０１４２】
[0164]  本開示の別の側面は、本明細書に記載される配合組成物の特定期間の間の投与の後で１人以上の被験者において所望される効果を達成することを提供する。例えば、本明細書に記載される組成物の有益な効果は、該組成物の被験者への１、２、３、４、６、８、１０、１２、２４、又は５２週間の投与後に観測することができる。
【０１４３】
[0165]  ある態様において、本明細書に記載される併用療法は、併用治療レジメンによって投与され得る。併用治療レジメンには、本明細書に記載される化合物又はその医薬的に許容される塩の投与が本明細書に記載される第二の薬剤での治療に先立って、その間に、又はその後で開始されて、その第二薬剤での治療の間の任意の時間まで、又は第二薬剤での治療の終了後も継続するという治療レジメンが含まれる可能性がある。本開示にはまた、本明細書に記載される化合物又はその医薬的に許容される塩と、併用して使用される第二薬剤が同時に、又は異なる時間に、及び／又は治療期間の間で減少又は増加する間隔で投与される治療が含まれる。併用治療には、様々な時点で開始及び停止させて患者の臨床管理を支援する、周期的治療がさらに含まれる。
【０１４４】
[0166]  ある態様において、併用療法は、２つの治療方式に関連した差異的な毒性に照らして、治療上の利点を提供する可能性がある。例えば、本明細書に記載されるようなＣＤＫ阻害剤での治療は、抗癌剤、例えば、ＢＣＬ−２阻害剤又はプロテアソーム阻害剤では見られない特別な毒性をもたらす可能性があり、逆も然りである。従って、この差異的な毒性は、前記毒性が存在しないか又はほとんど無い用量でそれぞれの治療薬を投与することを可能にするので、併用療法は、一緒になって治療用量を提供する一方で、この併用薬剤の各構成成分の毒性を回避するのである。さらに、併用治療の結果として達成される治療効果が相乗的である場合、各薬剤の用量はさらに低減し得て、それによって随伴する毒性をさらに大きな程度まで低下させることができる。
【０１４５】
[0167]  本明細書に記載される化合物、又はその医薬的に許容される塩、並びに併用療法薬は、疾患又は状態の出現の前、その間、又はその後に投与し得て、化合物を含有する組成物を投与するタイミングは、様々である。本明細書に記載される化合物は、予防薬として使用し得るし、状態又は疾患を発現する傾向のある被験者に対して、その疾患又は状態の出現を予防するために継続的に投与してよい。本明細書に記載される化合物とその組成物は、被験者へ症状の発現の間に投与しても、その発現の後で可及的速やかに投与してもよい。本明細書に記載される化合物は、疾患又は状態の発現が検出されるか又は疑われる後で、実践し得る限り速やかに投与し得て、その疾患の治療に必要な時間の長さの間、投与し得る。
【実施例】
【０１４６】
[0168]  以下の実施例は、本発明の様々な態様を例解する目的のために提示するのであって、本発明をいかなるやり方でも限定するものではない。今回の実施例は、本明細書に記載される方法とともに、目下のところ好ましい態様を代表し、例示であって、本発明の範囲に制限を加えるものとして企図されていない。当業者には、特許請求項の範囲内に規定されるような本発明の精神内に含まれる、その変更と他の使用が思い付くであろう。
【０１４７】
[0169]  すべての試験管内（in vitro）薬物作用機序試験で、下記に概説する材料及び方法を使用した。
[0170]  表１に示す細胞系は、付着又は懸濁状態で、それぞれ６ウェルディッシュ又はＴ１０フラスコにおいて処理し、処理に先立って、全量３〜１０ｍｌ中に１００万個／ｍｌの密度で播種した。試験管内（in vitro）細胞処理に使用するすべての薬剤は、必要とされる濃度を達成するように（それぞれの図面の表示／註に記述されるように）水／ＤＭＳＯにおいて処方して、ＤＭＳＯ濃度は、０．０１％を超えなかった。「ＣＩＶＯマイクロインジェクション試験」項の表に薬物の供給元を示す。下記のセクションに記載されるように、細胞を実験の各時点（それぞれの図面に示されるように、処理後２、６、又は２４時間）で採取し、初めに細胞を１５ｍｌファルコン管中の氷冷ＰＢＳにおいて２回洗浄し、１０００ｒｐｍで５分間の遠心分離に続いて、それぞれの細胞ペレットを溶解した。註：薬剤耐性ＮＵＤＨＬ１（Ｄｏｘ  １０００ｎＭ）及びＴｏｌｅｄｏ（Ｄｏｘ  １０００ｎＭ）の細胞系は、Presage にて、ドキソルビシン濃度を数回の継代にわたって段階的に増加させる培地において親細胞系を培養することによって産生した。これらの細胞を使用して、１μＭ  Ｄｏｘに対する耐性が達成される場合に、異種移植片を産生した。
【０１４８】
表１．
【０１４９】
【表１】
2019514854.tif 000013
【０１５０】
[0171]  すべてのウェスタンブロット分析試験で、下記に概説する材料及び方法を使用した。
[0172]  １Ｘ〜３Ｘ Halt プロテアーゼ及びホスファターゼ阻害剤カクテル（１００Ｘ，Pierce）入りの氷冷１Ｘ  ＲＩＰＡ緩衝液（１００Ｘ，Millipore）を細胞ペレットへ加えて、３回のパルス音波粉砕（約３〜５秒）を続けることによって、タンパク質溶解液を調製した。１４Ｋ  ｒｐｍで１５〜２０分間の遠心分離によって溶解液を澄明にして、上清（溶解液）をさらなる分析のために採取した。凍結保存された異種移植片腫瘍組織から溶解液を調製するには、手持ち式の組織組織ホモジェナイザー（Cole Palmer）を上記の溶解緩衝液において使用して組織を初めにホモジェナイズして、上記に記載したようなパルス音波粉砕と遠心分離を続けた。上記の工程は、氷冷条件の下で行った。タンパク質試料について、Bradford アッセイ（Biorad）を１：１０又はそれ以上の希釈で使用して定量し、適正なブランク対照を１ｘＲＩＰＡとともに使用した。各試料由来の２０〜２５マイクログラムのタンパク質を、ＢＯＬＴ  ４〜１２％  Ｂｉｓ−Ｔｒｉｓゲル（Thermofisher）を使用するＳＤＳ−ＰＡＧＥへ処して、製造業者のプロトコールを使用して孔径が０．４５ミクロン又は０．２ミクロンのいずれかの膜（タンパク質の分子サイズに基づいて適用可能）とニトロセルロース（ＮＣ）又はｐｖｄｆ（Thermofisher）のいずれかへ転写し、５％ミルクにおいて室温で１時間ブロックし、一次抗体（表２）を４℃で一晩、そして対応するＨＲＰ共役（conjugated）二次抗体（Jackson Immunoresearch，１：１０，０００〜１：２０，０００の希釈）を室温で１時間用いてプローブした。それぞれの抗体インキュベーションの後で、３回のＰＢＳ／０．０１％  Ｔｗｅｅｎ−２０洗浄（それぞれ５〜１０分）を行った。タンパク質シグナルの検出には、ＥＣＬ化学発光基質（Pierce 又は GE）とオートラジオグラフィーフィルム（Thermofisher）を使用した。
【０１５１】
表２．
【０１５２】
【表２】
2019514854.tif 000014
【０１５３】
[0173]  すべての生体内（in vivo）試験で、下記に概説する材料及び方法を使用した。
[0174]  マウスにおけるどの研究も、Presage Biosciences（ワシントン州シアトル）のＩＡＣＵＣ審査会によって承認された。すべての関連手順を麻酔下に実施して、疼痛及び苦痛を最小にするように最大限の努力をした。本試験へ貢献するマウスのいずれも、実験の終点に先立って病むことも死ぬこともなくて、下記に記載されるような薬物処理を受けたどのマウスにも定型的な健康モニタリングを施行して、実験の最後には、人道的に安楽死させた。下記（表３）に作表される以下の細胞系／マウス系統を使用して、皮下脇腹の異種移植片を産生した。１ｍｌシリンジ（BD 309659）と２７Ｇ注射針（BD 305109）を使用して、マトリゲル（Corning）と１：１比の２００μｌ細胞懸濁液を右脇腹に注射した。
【０１５４】
表３．
【０１５５】
【表３】
2019514854.tif 000015
【０１５６】
[0175]  すべてのＣＩＶＯマイクロインジェクション試験で、下記に概説する材料及び方法を使用した。
[0176]  マウスは、腫瘍容積がほぼ１０００ｍｍ３に達したときにＣＩＶＯ薬物試験に登録した。ＣＩＶＯデバイスを先の記載（Klinghoffer et al, Science Translational Medicine 2015）のように使用して、マイクロインジェクション試験を実施した。このデバイスは、６ｍｍの刺入深度と３μｌの全送達量に設定された６本の注射針で組み立てられた。各薬物又は薬物組合せと一緒の送達用の媒体中の各薬物リザバーへ蛍光追跡マーカー（ＦＴＭ）を加えた。いずれのマイクロドース（micro-dose）も、探索的ＩＮＤ（研究用新薬）研究についてのＦＤＡガイドラインの下で、そして薬物の媒体中への溶解度によって許容されるもの以下であった。注射薬剤の全量を下記の表４に作表する。
【０１５７】
表４．
【０１５８】
【表４】
2019514854.tif 000016
【０１５９】
[0177]  すべての全身薬効試験で、下記に概説する材料及び方法を使用した。
[0178]  マウスは、腫瘍が１５０〜２００ｍｍ３の平均容積に達したときに試験に登録した。腫瘍容積は、Ｖ＝長さｘ幅ｘ高さとして計算し、この３つの寸法は、体重と同時に、デジタルノギスを使用して測定した。腫瘍の３つの測定寸法のいずれかが２ｃｍを超える場合、容積が２５００ｍｍ３を超える場合、潰瘍形成の場合、又は体重損失が２０％より大きい場合、動物を本試験から外した。
【０１６０】
腫瘍増殖阻害％（ＴＧＩ）を下記のように定義する：
【式１】
【０１６１】
2019514854.tif 000017
【０１６２】
［ここで測定値は、それぞれの処理アームにおいて、腫瘍全体で平均する］。ウィルコックソン順位和検定又はマン・ウィットニー検定を統計検定として使用して、処理アーム間の差を決定した。
【０１６３】
[0179]  薬物用量、投与経路、投与スケジュール、及び製剤化のプロトコールについて下記に詳述する。経口強制飼養には、Instech（Ref: FTP--20--38）栄養チューブを使用して、ＩＶ（静脈内注射）には、ＢＤインスリンシリンジを使用した。
【０１６４】
ＤＬＢＣＬ試験：
・ＲＩＶＡ：ボルシクリブ  ２００ｍｐｋ（ＰＯ）６日オン／１日オフ、及びＡＢＴ  １９９（ＰＯ）１ｍｐｋ  ２ｘ／週、４週間
・ＳＵＤＨＬ４：ボルシクリブ  ２００ｍｐｋ（ＰＯ）６日オン／１日オフ、及びＡＢＴ  １９９（ＰＯ）２５ｍｐｋ  ６日オン／１日オフ、４週間
・Ｕ２９３２：ボルシクリブ  ２００ｍｐｋ（ＰＯ）６日オン／１日オフ、及びＡＢＴ  １９９（ＰＯ）１０ｍｐｋ  ２ｘ／週、４週間
ＡＭＬ試験：
・ＳＫＭ１：ボルシクリブ  ２００ｍｐｋ（ＰＯ）６日オン／１日オフ＋ＡＢＴ１９９（ＰＯ）１０ｍｐｋ  ６日オン／１日オフ、３週間
ＴＮＢＣ試験：
・ＨＣＣ１１８７：ボルシクリブ  ２００ｍｐｋ（ＰＯ）５日オン／２日オフ＋イクサゾミブ／ＭＬＮ２２３８（ＰＯ）３ｍｐｋ，３、６、１０、１３日目、２週間
・ＨＣＣ１１８７：パルボシクリブ  １２０ｍｐｋ（ＰＯ）ＱＤｘ１４日＋ボルテゾミブ０．４２ｍｐｋ（ＩＶ），１、４、８、１１日目、２週間
・ＨＣＣ１１８７：ボルシクリブ  ２００ｍｐｋ（ＰＯ）＋ボルテゾミブ  ０．４２ｍｐｋ（ＩＶ），１、４、８、１１日目、２週間。
【０１６５】
実施例１．ボルシクリブは、サイクリン依存性キナーゼ−９（ＣＤＫ９）の強力な阻害剤である
[0180]  ボルシクリブは、強力なＣＤＫ４／６阻害剤であると考えられている。３８種の異なるキナーゼに対するボルシクリブの活性について、既知のＣＤＫ９阻害剤であるフラボピラドールに比較して検定した。図面１は、ボルシクリブとフラボピラドールの構造、並びにボルシクリブとフラボピラドールの阻害プロフィールの比較を図示する。図面１は、フラボピラドールと同様に、ボルシクリブがＣＤＫ９の強力な阻害剤（Ｋｉ＜１０ｎＭ）であることを明示する。しかしながら、ボルシクリブは、ＣＤＫ群に対してフラボピラドールより特異的である。図面１は、フラボピラドールがセリン／スレオニンタンパク質キナーゼのＭＡＫ及びＩＣＫの強力な阻害剤である一方で、ボルシクリブがＭＡＫ又はＩＣＫのいずれに対しても強力な阻害を示さないことを示す。ＭＡＫとＩＣＫは、腸管上皮細胞に付随していて、フラボピラドール治療に関連した重症下痢の説明となる場合がある。一方、ボルシクリブは、消化管の副作用をさほど示し得ない。DiscoveRx と Thermofisher でのスクリーン：DiscoveRx ScanMax キナーゼパネルの４６８種のキナーゼアッセイと ThermoFisher SelectScreen キナーゼパネルの４１４種のキナーゼアッセイについての１０μＭと５０ｎＭでのキナーゼ活性の阻害パーセント。Presage にてシラン化処理した琥珀色のねじ口瓶の中で被験物質を予め秤量して、DiscoveRx と Reaction Biology へ輸送する。ThermoFisher では、化合物の重さを量って、１０ｍＭ  ＤＭＳＯに溶かした後に周囲条件で輸送する。受け取り後すぐに、バイアルを使用するまで−２０℃に保存する。粉末は、１０ｍＭでＤＭＳＯに溶かす。
【０１６６】
[0181]  図面２は、ＣＤＫ１、４、６、及び９に対するボルシクリブの１桁ｎＭの効力を示し、ＣＤＫ９の阻害が最も強い。Reaction Biology プロファイリング：本試験の目的は、４８種のキナーゼのボルシクリブ塩酸塩に対する感受性の順位を決定することであった。試験施設は、Reaction Biology 社であった。放射活性のあるγ−３３Ｐ−ＡＴＰをリン酸ドナーとするフィルター結合アッセイを使用して、キナーゼ活性を測定した。ＡＴＰ濃度は、それぞれのキナーゼのＫｍ付近であった。各キナーゼについて、被験物質の１０点濃度曲線よりＩＣ５０値を計算して、Ｋｉ値へ変換した。今回試験した４８種のキナーゼは、以前のスクリーニング実験において、最も有望な標的候補としてすでに同定されていた。
【０１６７】
実施例２．ボルシクリブは、Ｂｃｌ−２ファミリー阻害剤のベネトクラックス（ＡＢＴ−１９９）との併用時に相乗効果を明示する
[0182]  ＮＵ−ＤＨＬ−１びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）細胞を媒体、ボルシクリブ単独、ベネトクラックス（ＡＢＴ−１９９）単独、又はボルシクリブとベネトクラックスの併用で処理した。図面３Ａ〜図面３Ｄは、抗アポトーシスタンパク質である、誘導型（induced）骨髄性白血病細胞分化タンパク質Ｍｃｌ−１（ＭＣＬ−１）で染色されるＮＵ−ＤＨＬ−１細胞を示す（赤色で示す）。図面３Ａは、媒体のみで処理された細胞を示す。図面３Ｂでは、アウトライン（３０１）におけるより暗い領域アウトラインの増加によって示されるように、ボルシクリブ単独によりＭＣＬ−１の発現が減少した。ベネトクラックス単独では、図面３Ｃのアウトライン（３０２）内の明色領域に示されるように、ＭＣＬ−１の発現が増加した。ボルシクリブとベネトクラックスの併用は、図面３Ｄに示される、アウトライン（３０３）の暗色領域に示されるように、ＭＣＬ−１発現の顕著な減少をもたらした。
【０１６８】
[0183]  図面４Ａ〜図面４Ｄは、ＭＣＬ−１抑制とアポトーシスの相乗的な誘導との間の相関性を実証する。ＮＵ−ＤＨＬ−１びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）細胞を媒体、ボルシクリブ単独、ベネトクラックス（ＡＢＴ−１９９）単独、又はボルシクリブとベネトクラックスの併用で処理した。この細胞をアポトーシスのマーカーとしての切断型カスパーゼ−３（ＣＣ３）で染色した（赤色で示す）。図面４Ａは、媒体のみで処理された細胞を示す。ボルシクリブ単独では、図面４Ｂに示されるように、アウトライン（４０１）内の明色領域によって示されるように、ＣＣ３の発現の軽度増加を示した。同様に、ベネトクラックス単独では、図面４Ｃに示されるように、アウトライン（４０２）内の明色領域によって示されるように、ＣＣ３の発現の軽度増加を示した。図面４Ｄにおけるボルシクリブとベネトクラックスの併用は、アウトライン（４０３）内の多量の明色領域に示されるように、相乗的に増加したＣＣ３の発現を示し、処理細胞におけるアポトーシス誘導の増加を示唆した。
【０１６９】
[0184]  図面６Ａ〜図面６Ｅは、ボルシクリブとベネトクラックスのアポトーシスに対する相乗効果が多数のＤＬＢＣＬモデルにわたって再現可能であることを実証する。簡潔に言うと、図面６Ａ、図面６Ｂ、図面６Ｃ、図面６Ｄ、及び図面６Ｅにそれぞれ示されるように、ＲＩＶＡ、Ｔｏｌｅｄｏ、Ｔｏｌｅｄｏ／Ｄｏｘ１０００、ＮＵＤＨＬ、及びＮＵＤＨＬ／Ｄｏｘ１０００細胞をボルシクリブ単独、ベネトクラックス単独、又はボルシクリブとベネトクラックスの併用で処理した。ボルシクリブ単独とベネトクラックス単独は、ＣＣ３発現に対して軽度の効果を及ぼしたが、ボルシクリブとベネトクラックスの併用は、全５種のＤＬＢＣＬモデルにわたってＣＣ３発現の相乗的な誘導を実証した。
【０１７０】
[0185]  図面７は、この相乗効果についての提唱モデルを図示する。ボルシクリブは、ＣＤＫ９を介したＭＣＬ−１の阻害により、Ｂｃｌ−２阻害と一体化する場合に細胞をアポトーシスへ移行させるのかもしれない。
【０１７１】
実施例３．ボルシクリブは、Ｂｃｌ−２ファミリー阻害剤のナビトクラックスとの併用時に相乗効果を明示する
[0186]  Ramos バーキットリンパ腫細胞を媒体、ボルシクリブ単独、ナビトクラックス（ＡＢＴ−２６３）単独、又はボルシクリブとナビトクラックスの併用で処理した。図面５Ａ〜図面５Ｄは、アポトーシスのマーカーとしての切断型カスパーゼ−３（ＣＣ３）で染色された Ramos バーキットリンパ腫細胞を示す（赤色で示す）。図面５Ａは、媒体のみで処理された細胞を示す。ボルシクリブ単独では、図面５Ｂに示されるように、アウトライン（５０１）の明領域内に示されるように、ＣＣ３の発現の軽度増加を示した。同様に、ナビトクラックス単独では、図面５Ｃに示されるように、アウトライン（５０２）の明領域内に示されるように、ＣＣ３の発現の軽度増加を示した。ボルシクリブとナビトクラックスの併用は、図面５Ｄのアウトライン（５０３）内の多量の明色領域に示されるように、ＣＣ３の発現の顕著な増加を示し、処理細胞におけるアポトーシス誘導の増加を示唆した。
【０１７２】
実施例４．ボルシクリブは、プロテアソーム阻害剤との併用時に相乗効果を明示する
[0187]  薬物スクリーンを実施して、多数の薬物を同時に検定した。図面８Ａは、ＨＣＣ１１８７トリプルネガティブ乳癌（ＴＮＢＣ）異種移植片モデルへ注射した様々な化合物のリストを示す。図面８Ｂは、異種移植片におけるＭＣＬ−１誘導の平均変化率（％）を示す。プロテアソーム阻害剤のボルテゾミブは、ＭＣＬ−１の発現の増加を示した。図面８Ｃは、媒体で処理された異種移植片を明示する。図面８Ｄは、ボルテゾミブで処理されてＭＣＬ−１発現について染色された異種移植片を示す（赤色で示す）。ボルテゾミブは、アウトライン（８０１）内の明色領域の増加によって示されるように、これらの細胞においてＭＣＬ−１の発現を顕著に増加させた。
【０１７３】
実施例５．ボルシクリブは、プロテアソーム阻害剤のマリゾミブとの併用時に相乗効果を明示する
[0188]  ＮｕｄＨＬ１  ＤＬＢＣＬ異種移植片を媒体、ボルシクリブ単独、マリゾミブ単独、又はボルシクリブとマリゾミブの併用で６時間処理した。図面９Ａ〜図面９Ｄは、上記のように処理されてアポトーシスのマーカーとしての切断型カスパーゼ−３（ＣＣ３）で染色された細胞を図示する（赤色で示す）。図面９Ａは、媒体のみで処理された細胞を示す。ボルシクリブ単独で処理された細胞では、図面９Ｂに示されるように、アウトライン（９０１）内の少量の明色領域によって示されるように、ＣＣ３発現がほとんど〜全く増加しなかった。同様に、マリゾミブ単独で処理された細胞では、図面９Ｃに示されるように、アウトライン（９０２）内の少量の明色領域によって示されるように、ＣＣ３発現がほとんど〜全く増加しなかった。ボルシクリブとマリゾミブの併用で処理された細胞は、図面９Ｄのアウトライン（９０３）内の多量の明色領域によって示されるように、ＣＣ３発現の顕著な増加を示し、これらの細胞におけるアポトーシスの誘導に対する相乗効果を示唆した。
【０１７４】
実施例６．ボルシクリブは、プロテアソーム阻害剤のボルテゾミブとの併用時に相乗効果を明示する
[0189]  簡潔に言うと、ＮｕｄＨＬ１  ＤＬＢＣＬ異種移植片を媒体、ボルシクリブ単独、ボルテゾミブ単独、又はボルシクリブとボルテゾミブの併用で６時間処理した。図面１０Ａ〜図面１０Ｄは、上記のように処理されてアポトーシスのマーカーとしての切断型カスパーゼ−３（ＣＣ３）で染色された細胞を図示する（赤色で示す）。
【０１７５】
[0190]  図面１０Ａは、媒体のみで処理された細胞を示す。ボルシクリブ単独で処理された細胞では、図面１０Ｂに示されるように、ＣＣ３発現がほとんど〜全く増加しなかった。同様に、ボルテゾミブ単独で処理された細胞では、図面１０Ｃに示されるように、アウトライン（１００１）内の少量の明色領域によって示されるように、ＣＣ３発現がほとんど〜全く増加しなかった。ボルシクリブとボルテゾミブの併用で処理された細胞は、図面１０Ｄのアウトライン（１００２）内の多量の明色領域によって示されるように、ＣＣ３発現の顕著な増加を示し、これらの細胞におけるアポトーシスの誘導に対する相乗効果を示唆した。
【０１７６】
[0191]  図面１１は、ＨＣＣ１１８７トリプルネガティブ乳癌（ＴＮＢＣ）異種移植片モデルに対して実施した類似の実験を図示する。簡潔に言うと、細胞を媒体、ボルシクリブ単独、ボルテゾミブ単独、又はボルシクリブとボルテゾミブの併用で処理した。次いで、細胞をアポトーシスのマーカーとしてのＣＣ３発現について染色した（赤色で示す）。図面１１Ａは、媒体のみで処理された細胞を示す。ボルシクリブ単独で処理された細胞では、図面１１Ｂに示されるように、ＣＣ３発現がほとんど〜全く増加しなかった。同様に、ボルテゾミブ単独で処理された細胞では、図面１１Ｃに示されるように、ＣＣ３発現がほとんど〜全く増加しなかった。ボルシクリブとボルテゾミブの併用で処理された細胞は、図面１１Ｄのアウトライン（１１０１）内の多量の明色領域によって示されるように、ＣＣ３発現の顕著な増加を示し、これらの細胞におけるアポトーシスの誘導に対する相乗効果を示唆した。
【０１７７】
[0192]  ＨＣＣ１１８７トリプルネガティブ乳癌（ＴＮＢＣ）異種移植片マウスモデルを媒体、ボルシクリブ（２００ｍｇ／ｋｇ）、ボルテゾミブ（０．４２ｍｇ／ｋｇ）、又はボルシクリブ（２００ｍｇ／ｋｇ）とボルテゾミブ（０．４２ｍｇ／ｋｇ）の併用で処理した。各マウス中の腫瘍容積を経時的に測定して、その結果を図面１２Ａ〜図面１２Ｄに示す。ボルシクリブとボルテゾミブの併用で処理されたマウス（図面１２Ｄ）は、ボルシクリブ単独（図面１２Ｂ）又はボルテゾミブ単独（図面１２Ｃ）で処理されたマウスと比較して、正規化腫瘍容積の顕著な低減を経時的に示した。図面１２Ｅは、ＭＬＣ−１タンパク質発現についてのウェスタンブロットを示す。ボルシクリブで処理された細胞で、未処理試料と比較してＭＣＬ−１タンパク質発現が低下したのに対し、ボルテゾミブで処理された細胞では、未処理試料と比較してＭＣＬ−１タンパク質発現が増加した。さらに、ボルシクリブは、このボルテゾミブ誘導性のＭＣＬ−１発現の増加を減少させた。
【０１７８】
[0193]  図面１３は、マウスの体重がボルシクリブ単独、ボルテゾミブ単独、又はボルシクリブとボルテゾミブの併用での処理によって影響を受けなかったことを明示する。このデータは、ボルシクリブとボルテゾミブの併用療法がほとんど〜全く毒性を示さない可能性があることを示唆する。
【０１７９】
[0194]  さらに、ボルシクリブは、好生存タンパク質のＭＣＬ−１とＥ３ユビキチン−タンパク質リガーゼＸＩＡＰのボルテゾミブ誘導性の上方制御を無効にする。図面１５Ａは、ボルシクリブによるＣＤＫ９阻害についての提唱モデルを図示する。図面１５Ｂは、ボルシクリブ単独、ボルテゾミブ単独、又はボルシクリブとボルテゾミブの併用で処理された細胞における、ＭＣＬ−１とＸＩＡＰのタンパク質レベルを示す。ウェスタンブロットは、これらの細胞において、ボルシクリブがＭＣＬ−１タンパク質とＸＩＡＰタンパク質の両方のボルテゾミブ誘導性の上方制御を減衰させることを明示する。
【０１８０】
実施例７．ＣＤＫ４／６阻害剤のパルボシクリブは、ボルテゾミブとの併用時に相乗効果を示さない
[0195]  ＨＣＣ１１８７トリプルネガティブ乳癌（ＴＮＢＣ）異種移植片マウスモデルを媒体、パルボシクリブ（１２０ｍｇ／ｋｇ）、ボルテゾミブ（０．４２ｍｇ／ｋｇ）、又はパルボシクリブ（１２０ｍｇ／ｋｇ）とボルテゾミブ（０．４２ｍｇ／ｋｇ）の併用で処理した。各マウス中の腫瘍容積を経時的に測定して、その結果を図面１４に示す。ボルシクリブと異なり、パルボシクリブは、ボルテゾミブとの併用時に、腫瘍容積に対する相乗効果を示さなかった。ボルシクリブがＣＤＫ９を標的とするのに対して、パルボシクリブは、特異的なＣＤＫ４／６阻害剤である。従って、この差異は、ＣＤＫ９特異的であり得る。
【０１８１】
実施例８．ボルシクリブのボルテゾミブと併用時の相乗効果には、小胞体（ＥＲ）ストレス応答経路が何らかの役割を担う可能性がある
[0196]  図面１６Ａは、ボルテゾミブで処理された組織切片を示す。ボルテゾミブは、一部の細胞においてアポトーシスを誘導する一方で、ボルテゾミブ処理に抵抗するように見える細胞もある。これらの細胞を、ＥＲシャペロンタンパク質のＧＲＰ１７８／ＢｉＰについて染色した。図面１６Ｂは、ボルテゾミブによるアポトーシスに抵抗する細胞がＧＲＰ１７８／ＢｉＰを発現することを明示する。
【０１８２】
[0197]  次に、ＨＣＣ１１８７トリプルネガティブ乳癌細胞をボルシクリブ単独、ボルテゾミブ単独、ツニカマイシン単独（ＥＲストレスインデューサー）、又は併用で処理した。ツニカマイシン単独は、ＥＲストレス経路のＩＲＥ１αアームのＥＲストレスタンパク質であるＸ−ボックス結合タンパク質１（ＸＢＰ１）を６時間で強く誘導した。さらに、ツニカマイシンとボルテゾミブは、ＸＢＰ１発現を２４時間で強く誘導した（図面１８Ｂ）。ボルテゾミブ又はツニカマイシンのいずれかとボルシクリブの併用は、ＸＢＰ１の上方制御を減衰させた。これらの結果は、ボルシクリブがＥＲストレス経路のＩＲＥ１αアームを阻害し得ることを示唆する（図面１８Ｂ）。ボルシクリブはまた、ボルテゾミブ誘導性のＸＢＰ１の転写誘導を減少させた（図面１９Ａ〜図面１９Ｂ）。ＨＣＣ１１８７細胞をボルシクリブ（１．５μＭ）、ボルテゾミブ（１０ｎＭ）、ＳＴＦ０８３０１０  ＩＲＥ１ａエンドリボヌクレアーゼ活性阻害剤（Millipore）（６０μＭ）、又はツニカマイシン（Sigma）（１００ｎＭ）で４時間処理した。Qiagen RNAeasy キットを使用してｍＲＮＡを採取し、Nanodrop 分光光度計を使用して定量した。各条件からの１μｇのｍＲＮＡを使用し、「大容量ｃＤＮＡ逆転写キット（High Capacity cDNA Reverse Transcription Kit）」（Applied Biosystems）と製造業者のプロトコールを使用して、ｃＤＮＡを産生した。１００ｎｇ  ｃＤＮＡを使用してＰＣＲアッセイを実行して、ＸＢＰ１ｕ又はスプライシング型を増幅した（Thermofisher PCR Supermix）−９４℃で２分間、（９４℃で１５秒間、５５℃で３０秒間、７２℃で１分間）ｘ３０サイクル、７２℃で７分間、４℃で保持。ＸＢＰ１のスプライシング型と非スプライシング型の変異体を検出した。
【０１８３】
実施例９．ボルシクリブは、プロテアソーム阻害剤のイクサゾミブとの併用時に相乗効果を示す
[0198]  図面２０Ａ〜図面２０Ｄは、ＨＣＣ１１８７トリプルネガティブ乳癌（ＴＮＢＣ）異種移植片モデルを図示する。簡潔に言うと、細胞を媒体、ボルシクリブ単独、イクサゾミブ単独、又はボルシクリブとイクサゾミブの併用で処理した。次いで、細胞をアポトーシスのマーカーとしてのＣＣ３発現について染色した（赤色で示す）。
【０１８４】
[0199]  図面２０Ａは、媒体のみで処理された細胞を示す。図面２０Ｂに示されるように、ボルシクリブ単独で処理された細胞では、アウトライン（２００１）内の少量の明色領域によって示されるように、ＣＣ３発現がほとんど〜全く増加しなかった。同様に、図面２０Ｃに示されるように、イクサゾミブ単独で処理された細胞では、アウトライン（２００２）内の少量の明色領域によって示されるように、ＣＣ３発現がほとんど〜全く増加しなかった。ボルシクリブとイクサゾミブの併用で処理された細胞は、図面２０Ｄのアウトライン（２００３）内の多量の明色領域によって示されるように、ＣＣ３発現の顕著な増加を示し、これらの細胞におけるアポトーシスの誘導に対する相乗効果を示唆した。
【０１８５】
[0200]  図面２１Ａと図面２１Ｂに示されるように、様々なＣＤＫ阻害剤について、イクサゾミブと併用して検定した。アウトライン（２１０１）及び（２１０２）内の明色領域によって示されるように、イクサゾミブとの併用時に腫瘍細胞のアポトーシスに対して相乗効果を明示したのは、ボルシクリブだけである。媒体のみ、イクサゾミブのみ、パルボシクリブとイクサゾミブ、ジナシクリブとイクサゾミブ、及びフラボピラドールとイクサゾミブでは、いずれも、ボルシクリブとイクサゾミブの併用ほどは、腫瘍細胞のアポトーシスに対して相乗効果を示さなかった。
【０１８６】
実施例１０．ボルシクリブは、ベネトクラックスとの併用時に相乗効果を示す
[0201]  図面２２Ａ〜図面２２Ｂは、ＤＬＢＣＬのＳＵ−ＤＨＬ−４モデルにおいて、ボルシクリブとベネトクラックスからのシナジーを例証する。アポトーシスのバイオマーカーとして切断型ＰＡＲＰ（ｃＰＡＲＰ）を使用し得る。ボルシクリブとベネトクラックスの２剤が一緒の併用効果について評価するために、ＤＬＢＣＬのＳＵＤＨＬ４モデルにおいて、各剤の低用量（１５０ｎＭのボルシクリブと２０ｎＭのベネトクラックス）を単剤として、又は併用剤として検証した。細胞を薬物へ２４時間曝露した後で、細胞を溶解し、図面２２Ａでは、ＰＡＲＰの切断型、ＭＣＬ−１、Ｃ−ＭＹＣ、及びβ−アクチン（タンパク質ローディング対照として）に特異的な抗体、そして図面２２Ｂでは、ＢＣＬ２（追加のタンパク質ローディング対照として）に特異的な抗体を使用して、ウェスタンブロットによって検証した。図面２２Ａは、ボルシクリブがＤＬＢＣＬモデルにおいてＭＣＬ１を１．５μＭで抑制することを例証する。
【０１８７】
[0202]  図面２２Ｂでは、０．１５μＭ濃度のボルシクリブを利用するが、これは、単剤としてアポトーシスを効果的に誘導することが示されている濃度の１／１０である。このレベルのボルシクリブは、ＭＣＬ−１発現を抑制するためのいくらかの効力を維持する（図面２２Ｂのレーン１とレーン２を比較せよ）が、ベネトクラックスへの細胞曝露は、ＭＣＬ−１発現を誘導する（図面２２Ｂのレーン１とレーン３を比較せよ）。低いボルシクリブ曝露は、ベネトクラックス誘導性のＭＣＬ−１も抑制する（図面２２Ｂのレーン３とレーン４を比較せよ）。
【０１８８】
[0203]  図面２３Ａ〜図面２３Ｃは、ＤＬＢＣＬのＳＵ−ＤＨＬ−４モデル、ＯＣＩＬｙ１０モデル、及びＵ２９３２モデルにおいて、ボルシクリブとベネトクラックスからのシナジーを例証する。アポトーシスのバイオマーカーとして切断型ＰＡＲＰ（ｃＰＡＲＰ）を使用し得る。ボルシクリブとベネトクラックスの２剤が一緒の併用効果について評価するために、この３種のＤＬＢＣＬモデルにおいて、各剤の低用量を単剤として、又は併用剤として検証した。細胞を薬物へ２４時間曝露した後で、細胞を溶解し、ＰＡＲＰの切断型とβ−アクチン（タンパク質ローディング対照として）に特異的な抗体を使用して、ウェスタンブロットによって検証した。
【０１８９】
[0204]  図面２３Ａは、０．１５μＭのボルシクリブと２０ｎＭのベネトクラックスの併用が、いずれの化合物も単剤としてはアポトーシスを誘導しない、ＤＬＢＣＬのＳＵＤＨＬ４モデルにおいてアポトーシスを誘導するシナジーを示すことを例証する。図面２３Ｂは、５μＭのボルシクリブと５０ｎＭのベネトクラックスの併用が、いずれの化合物も単剤としてはアポトーシスを有意に誘導しない、ＤＬＢＣＬのＯＣＩＬｙ１０モデルにおいてアポトーシスを誘導するシナジーを示すことを例証する。図面２３Ｃは、５μＭのボルシクリブと５０ｎＭのベネトクラックスの併用がＤＬＢＣＬのＵ２９３２モデルにおいてアポトーシスを誘導するシナジーを示すことを例証するが、ここでは、この２つの化合物の併用効果が各化合物の単剤としての単なる相加効果より明瞭に大きい。
【０１９０】
実施例１１．ボルシクリブは、マウスのＤＬＢＣＬ異種移植片腫瘍においてＭＣＬ１発現を抑制する
[0205]  図面２４は、ボルシクリブがマウスのＤＬＢＣＬ異種移植片腫瘍においてＭＣＬ１発現を抑制することを例証する。ＤＬＢＣＬ異種移植片腫瘍（ＯＣＩＬＹ１０）を収容するマウスにボルシクリブ又は媒体対照を経口強制飼養によって５日間毎日投薬し、最終投薬後４時間で、ＭＣＬ−１発現の分析用に腫瘍を採取した。腫瘍試料を半分に切って、一方をウェスタンブロット分析のために溶解緩衝液に可溶化して、他の半分をホルマリンに固定して免疫組織化学用に調製した。各処理群につき３匹の個別マウス由来の腫瘍溶解液について、ＭＣＬ−１又はβ−アクチン（タンパク質ローディング対照）に特異的な抗体を用いてウェスタンブロットを行った。このグラフは、ボルシクリブが単剤としてＤＬＢＣＬ異種移植片腫瘍においてＭＣＬ１発現を１００ｍｐｋで抑制したことを例証する。
【０１９１】
実施例１２．ボルシクリブとベネトクラックスは、マウスにおいてＤＬＢＣＬ異種移植片腫瘍の増殖を妨げる
[0206]  図面２５Ａ〜図面２５Ｂは、ボルシクリブとベネトクラックスの併用がＤＬＢＣＬ異種移植片腫瘍の増殖を妨げることを例証する。免疫不全ＮＯＤ  ＳＣＩＤマウスに、ＤＬＢＣＬのＲＩＶＡ（活性化Ｂ細胞、又はＡＢＣ）モデルを移植した。この異種移植された腫瘍をＮＯＤ  ＳＣＩＤ宿主において２００ｍｍ３に達するまでそのまま増殖させて、その時点でこの異種移植された動物を４つの試験群：１．媒体対照；２．ボルシクリブ（２００ｍｐｋ）；３．ベネトクラックス（１ｍｐｋ）；及び４．ボルシクリブ（２００ｍｐｋ）とベネトクラックス（１ｍｐｋ）の併用へ無作為化した。ボルシクリブを経口強制飼養によって週６日間毎日投薬し、サイクル間に休薬日を入れた。ベネトクラックスを経口強制飼養によって各週サイクルの１日目と４日目に投薬した。薬物の効果については、本試験における各被験動物の処理について知らない技術者による週２回の腫瘍容積測定値により評価した。各処理アームにつきＮ＝５〜６匹の動物。
【０１９２】
[0207]  図面２５Ａは、４つの試験群：媒体、ボルシクリブ単剤、ベネトクラックス単剤、及びボルシクリブとベネトクラックスの併用のそれぞれについての平均腫瘍容積（ｍｍ３）をグラフ化する。単剤での処理は、より長期の試験日にわたる腫瘍容積の減少を見せた。併用処理は、腫瘍容積サイズのずっと高い減少、平均腫瘍容積の２倍以上の減少を試験の３週までに見せた。
【０１９３】
[0208]  図面２５Ｂは、先の４試験群：媒体、ボルシクリブ単剤、ベネトクラックス単剤、及びボルシクリブとベネトクラックスの併用のそれぞれからの動物の腫瘍の画像を例証する。媒体の腫瘍サイズは、アウトライン（２５０１）によって概観されるように、最大であった。ボルシクリブ単剤の腫瘍は、アウトライン（２５０２）によって概観されるように、より小さい。ベネトクラックス単剤の腫瘍も、アウトライン（２５０３）によって概観されるように、媒体より小さい。併用療法の腫瘍は、アウトライン（２５０４）によって概観されて、媒体又は単剤療法のいずれものそれより有意に小さくて、相乗効果を示唆する。
【０１９４】
[0209]  図面２６Ａ〜図面２６Ｂは、ボルシクリブとベネトクラックスの併用がＤＬＢＣＬ異種移植片腫瘍の増殖を妨げることを例証する。免疫不全ＮＯＤ  ＳＣＩＤマウスに、ＤＬＢＣＬのＵ２９３２モデルを移植した。この異種移植された腫瘍をＮＯＤ  ＳＣＩＤ宿主において２００ｍｍ３に達するまでそのまま増殖させて、その時点でこの異種移植された動物を４つの試験群：１．媒体対照；２．ボルシクリブ（２００ｍｐｋ）；３．ベネトクラックス（１０ｍｐｋ）；及び４．ボルシクリブ（２００ｍｐｋ）とベネトクラックス（１０ｍｐｋ）の併用へ無作為化した。ボルシクリブを経口強制飼養によって週６日間毎日投薬し、サイクル間に休薬日を入れた。ベネトクラックスを経口強制飼養によって各週サイクルの１日目と４日目に投薬した。薬物の効果については、本試験における各被験動物の処理について知らない技術者による週２回の腫瘍容積測定値により評価した。各処理アームにつきＮ＝５〜６匹の動物。
【０１９５】
[0210]  図面２６Ａは、先の４つの試験群のそれぞれについての平均腫瘍容積（ｍｍ３）をグラフ化する。単剤での処理は、より長期の試験日にわたる腫瘍容積の減少を見せた。併用処理は、腫瘍増殖をほとんど見せず、平均腫瘍容積は、２９日の試験期間を通して一定のままであった。
【０１９６】
[0211]  図面２６Ｂは、先の４試験群のそれぞれにおける被験動物の平均体重をグラム（ｇ）でグラフ化する。４つの試験群のいずれも、健康と安全性の一般指標である、安定した一定の体重を示した。
【０１９７】
[0212]  図面２７Ａ〜図面２７Ｂは、ボルシクリブとベネトクラックスの併用がＤＬＢＣＬ異種移植片腫瘍の増殖を妨げることを例証する。免疫不全ＮＯＤ  ＳＣＩＤマウスに、ＤＬＢＣＬのＮＵＤＨＬ１モデルを移植した。この異種移植された腫瘍をＮＯＤ  ＳＣＩＤ宿主において２００ｍｍ３に達するまでそのまま増殖させて、その時点でこの異種移植された動物を４つの試験群：１．媒体対照；２．ボルシクリブ（２００ｍｐｋ）；３．ベネトクラックス（５０ｍｐｋ）；及び４．ボルシクリブ（２００ｍｐｋ）とベネトクラックス（５０ｍｐｋ）の併用へ無作為化した。ボルシクリブを経口強制飼養によって週６日間毎日投薬し、サイクル間に休薬日を入れた。ベネトクラックスを経口強制飼養によって各週サイクルの１日目と４日目に投薬した。薬物の効果については、本試験における各被験動物の処理について知らない技術者による週２回の腫瘍容積測定値により評価した。各処理アームにつきＮ＝５〜６匹の動物。
【０１９８】
[0213]  図面２７Ａは、先の４試験群のそれぞれについての正規化腫瘍容積（ｍｍ３）をグラフ化する。単剤での処理は、より長期の試験日にわたる腫瘍容積の減少を見せた。併用処理は、腫瘍容積サイズのずっと高い減少、平均腫瘍容積の２倍以上の減少を試験の３週までに見せた。
【０１９９】
[0214]  図面２７Ｂは、先の４試験群：媒体、ボルシクリブ単剤、ベネトクラックス単剤、及びボルシクリブとベネトクラックスの併用のそれぞれからの動物の腫瘍の画像を例証する。媒体の腫瘍サイズは、アウトライン（２７０１）によって概観されるように、最大であった。ボルシクリブ単剤の腫瘍は、アウトライン（２７０２）によって概観されるように、より小さい。ベネトクラックス単剤の腫瘍も、アウトライン（２７０３）によって概観されるように、媒体より小さい。併用療法の腫瘍は、アウトライン（２７０４）によって概観されて、媒体又は単剤療法のいずれものそれより有意に小さくて、相乗効果を示唆する。
【０２００】
[0215]  図面２８は、ボルシクリブとベネトクラックスの併用がＤＬＢＣＬ異種移植片腫瘍の増殖を妨げることを例証する。免疫不全ＮＯＤ  ＳＣＩＤマウスに、ＤＬＢＣＬのＳＵＤＨＬ４モデルを移植した。この異種移植された腫瘍をＮＯＤ  ＳＣＩＤ宿主において２００ｍｍ３に達するまでそのまま増殖させて、その時点でこの異種移植された動物を４つの試験群：１．媒体対照；２．ボルシクリブ（２００ｍｐｋ）；３．ベネトクラックス（２５ｍｐｋ）；及び４．ボルシクリブ（２００ｍｐｋ）とベネトクラックス（２５ｍｐｋ）の併用へ無作為化した。ボルシクリブを経口強制飼養によって週６日間毎日投薬し、サイクル間に休薬日を入れた。ベネトクラックスを経口強制飼養によって週６日間毎日投薬し、サイクル間に休薬日を入れた。薬物の効果については、本試験における各被験動物の処理について知らない技術者による週２回の腫瘍容積測定値により評価した。各処理アームにつきＮ＝５〜６匹の動物。図面２８は、先の４試験群のそれぞれについての正規化腫瘍容積（ｍｍ３）をグラフ化する。単剤での処理は、その試験日にわたる腫瘍容積の増加を見せた。併用処理は、単剤処理や媒体処理より少ない腫瘍増殖を見せた。
【０２０１】
[0216]  図面２９の各レーンは、個々のＳＵＤＨＬ４異種移植片を表す。まとめると、このウェスタンブロットは、ベネトクラックスによって抑制されるｐ５３をボルシクリブが回復させることを例証する。２６日目、処理後４時間で腫瘍を採取した。各腫瘍を２つに分断した。一方をＦＦＰＥベースのＩＨＣ分析に使用して、他の半分をウェスタンブロット分析に使用した。
【０２０２】
実施例１３．ボルシクリブは、ＡＭＬ細胞系においてＭＣＬ１発現を抑制する
[0217]  図面３０Ａ〜図面３０Ｃは、ボルシクリブがＡＭＬ細胞系において単剤活性を有することを例証する。ＡＭＬ細胞系（ＳＫＭ−１、ＭＶ−４−１１、及びＯＣＩ−ＡＭＬ−３）を未処理のままにするか又は臨床的に達成可能なレベルのボルシクリブ（１．５及び５．０マイクロモル濃度）へ２、６、又は２４時間曝露した。所与の時点で細胞を溶解させて、リン酸化ＲＮＡ  ｐｏｌＩＩ（ｐＳｅｒ２）、ＭＣＬ−１、切断型ＰＡＲＰ、及びβ−アクチンを特異的に認識する抗体を用いたウェスタンブロット分析へ処した。この３種のＡＭＬ細胞系（ＳＫＭ−１、ＭＶ−４−１１、及びＯＣＩ−ＡＭＬ−３）のいずれにおいても、アウトライン（３００１）、（３００３）、及び（３００５）内に示されるように、ボルシクリブは、ＭＣＬ−１を抑制してアポトーシスを誘導する。アポトーシスのバイオマーカーとして切断型ＰＡＲＰ（ｃＰＡＲＰ）を使用し得る。３種のＡＭＬ細胞系（ＳＫＭ−１、ＭＶ−４−１１、及びＯＣＩ−ＡＭＬ−３）のいずれにおいても、アウトライン（３００２）、（３００４）、及び（３００６）内に示されるように、ボルシクリブは、アポトーシスを誘導する。
【０２０３】
実施例１４．ボルシクリブとベネトクラックスの併用は、ＡＭＬ細胞系において細胞死を誘導する
[0218]  図面３１は、ボルシクリブとベネトクラックスの併用がＡＭＬ細胞系において相乗的な細胞死を誘導することを例証する。ＡＭＬ細胞系（ＳＫＭ−１、ＭＶ−４−１１、及びＯＣＩ−ＡＭＬ−３）を未処理のままにするか又は、単剤でのアポトーシスを誘導するのに必要とされるレベル未満であることが以前示された、ボルシクリブ（１．５ミリモル濃度）又はベネトクラックス（１００ｎＭ）のレベル、又はこの併用２薬物のこれら有効未満の濃度へ２４時間曝露した。所与の時点で細胞を溶解させて、リン酸化ＲＮＡ  ｐｏｌＩＩ（ｐＳｅｒ２）、ＭＣＬ−１、切断型ＰＡＲＰ、及びβ−アクチンを特異的に認識する抗体を用いたウェスタンブロット分析へ処した。アウトライン（３１０１）及び（３１０２）内に示されるように、ボルシクリブとベネトクラックスの併用は、いずれの薬剤も単独ではアポトーシスを誘導しない場合に、アポトーシス（ＰＡＲＰ）を誘導する。この３種の細胞系のすべてにおいて、ベネトクラックスがＭＣＬ−１の上方制御を誘導することが観測される。この３種の細胞系のすべてにおいて、ボルシクリブは、ＭＣＬ−１推進性の耐性機序を弱める。
【０２０４】
実施例１５．ボルシクリブとベネトクラックスの併用は、ＡＭＬ異種移植片において腫瘍増殖を妨げる
[0219]  図面３２は、ボルシクリブとベネトクラックスの併用がＳＫＭ１  ＡＭＬ異種移植片において腫瘍増殖を妨げることを例証する。ベネトクラックスの単剤療法は、媒体のそれに類似した正規化腫瘍容積を有する。ボルシクリブ単剤での処理がやや低い腫瘍容積を示すのに対し、ボルシクリブとベネトクラックスの併用は、腫瘍増殖を大いに妨げて、生じる腫瘍容積は、試験の２２日目には、媒体のそれのほぼ半分になる。
【０２０５】
実施例１６．ボルシクリブは、ＤＬＢＣＬモデルにおいて単剤としてアポトーシスを誘導する
[0220]  図面３３は、ボルシクリブ誘導性アポトーシスがＭＣＬ−１の抑制と相関することを例証する。３種のＤＬＢＣＬモデル：ＳＵＤＨＬ４、ＲＩｖＡ、及びＵ２９３２を使用した。アポトーシスのバイオマーカーとして切断型ＰＡＲＰ（ｃＰＡＲＰ）を使用し得る。ウェスタンブロットは、ボルシクリブの濃度が増加するにつれてアポトーシスが増加することを示す。同様に、ボルシクリブは、ボルシクリブの濃度が増加するにつれて、ＭＣＬ−１を抑制してアポトーシスを誘導する。
【０２０６】
[0221]  本発明の好ましい態様を本明細書において示して記載してきたが、当業者には、そのような態様が例示のためにのみ提供されていることが明らかであろう。今や当業者には、本発明より逸脱することなく、数多くの変形、変更、及び代用が思い付くはずである。本発明を実践する場合には、本明細書に記載された本発明の態様に対する様々な代替態様を利用し得ると理解されたい。以下の特許請求項は、本発明の範囲を明確化するものであって、これら特許請求項の範囲内の方法及び構造とそれらの均等物がそれによって網羅されると企図される。
【図１−１】
2019514854.tif 000027
【図１−２】
2019514854.tif 000028
【図２】
2019514854.tif 000029
【図３】
2019514854.tif 000030
【図４】
2019514854.tif 000031
【図５】
2019514854.tif 000032
【図６−１】
2019514854.tif 000033
【図６−２】
2019514854.tif 000034
【図６−３】
2019514854.tif 000035
【図７】
2019514854.tif 000036
【図８−１】
2019514854.tif 000037
【図８−２】
2019514854.tif 000038
【図９】
2019514854.tif 000039
【図１０】
2019514854.tif 000040
【図１１】
2019514854.tif 000041
【図１２−１】
2019514854.tif 000042
【図１２−２】
2019514854.tif 000043
【図１３】
2019514854.tif 000044
【図１４】
2019514854.tif 000045
【図１５−１】
2019514854.tif 000046
【図１５−２】
2019514854.tif 000047
【図１６】
2019514854.tif 000048
【図１７】
2019514854.tif 000049
【図１８−１】
2019514854.tif 000050
【図１８−２】
2019514854.tif 000051
【図１９−１】
2019514854.tif 000052
【図１９−２】
2019514854.tif 000053
【図２０】
2019514854.tif 000054
【図２１】
2019514854.tif 000055
【図２２】
2019514854.tif 000056
【図２３】
2019514854.tif 000057
【図２４】
2019514854.tif 000058
【図２５−１】
2019514854.tif 000059
【図２５−２】
2019514854.tif 000060
【図２６−１】
2019514854.tif 000061
【図２６−２】
2019514854.tif 000062
【図２７−１】
2019514854.tif 000063
【図２７−２】
2019514854.tif 000064
【図２８】
2019514854.tif 000065
【図２９】
2019514854.tif 000066
【図３０】
2019514854.tif 000067
【図３１】
2019514854.tif 000068
【図３２】
2019514854.tif 000069
【図３３】
2019514854.tif 000070
【国際調査報告】
2019514854.tif 000071
2019514854.tif 000072
2019514854.tif 000073
2019514854.tif 000074