(57)【要約】  本発明は、脳アミロイド血管症の治療又は予防における使用のためのオキサジン誘導体ＢＡＣＥ−１阻害薬及びこうしたオキサジン誘導体を含む医薬組成物であって、特に、患者は、ＡｐｏＥ４アレルの１つ又は２つのコピーを保有する、オキサジン誘導体ＢＡＣＥ−１阻害薬及びこうしたオキサジン誘導体を含む医薬組成物に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
脳アミロイド血管症の治療又は予防における使用のための化合物Ｎ−（６−（（３Ｒ，６Ｒ）−５−アミノ−３，６−ジメチル−６−（トリフルオロメチル）−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−１，４−オキサジン−３−イル）−５−フルオロピリジン−２−イル）−３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピコリンアミド又はその薬学的に許容可能な塩。
【請求項２】
前記化合物は、アルツハイマー病を有する患者における脳アミロイド血管症の治療又は予防のために使用される、請求項１に記載の使用のための化合物又はその薬学的に許容可能な塩。
【請求項３】
前記化合物は、脳アミロイド血管症の発症に対する遺伝的素因を保有する患者における脳アミロイド血管症の治療又は予防において使用される、請求項１又は２に記載の使用のための化合物又はその薬学的に許容可能な塩。
【請求項４】
脳アミロイド血管症の発症に対する前記遺伝的素因は、
ｉ．ダウン症候群、
ｉｉ．アミロイド前駆体タンパク質又はプレセニリン−１に対する遺伝子の変異、又は
ｉｉｉ．ＡｐｏＥ４アレルの１つ又は２つのコピーの存在
である、請求項３に記載の使用のための化合物又はその薬学的に許容可能な塩。
【請求項５】
前記患者は、ＡｐｏＥ４アレルの１つ又は２つのコピーを保有する、請求項３に記載の使用のための化合物又はその薬学的に許容可能な塩。
【請求項６】
前記患者は、前記ＡｐｏＥ４アレルの１つのコピーを保有する、請求項５に記載の使用のための化合物又はその薬学的に許容可能な塩。
【請求項７】
前記患者は、前記ＡｐｏＥ４アレルの２つのコピーを保有する、請求項５に記載の使用のための化合物又はその薬学的に許容可能な塩。
【請求項８】
前記患者は、アミロイド陽性である、請求項１〜７のいずれか一項に記載の使用のための化合物又はその薬学的に許容可能な塩。
【請求項９】
前記アミロイド陽性は、ＰＥＴ又はＣＳＦ測定によって決定される、請求項８に記載の使用のための化合物又はその薬学的に許容可能な塩。
【請求項１０】
前記患者は、６０〜７５歳である、請求項１〜９のいずれか一項に記載の使用のための化合物又はその薬学的に許容可能な塩。
【請求項１１】
前記化合物は、２週間の化合物曝露後にＣＳＦ中のＡβ１−４０の少なくとも７０％の低下をもたらす１日用量で使用される、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の使用のための化合物又はその薬学的に許容可能な塩。
【請求項１２】
前記化合物は、２週間の化合物曝露後にＣＳＦ中のＡβ１−４０の少なくとも５０％の低下をもたらす１日用量で使用される、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の使用のための化合物又はその薬学的に許容可能な塩。
【請求項１３】
前記化合物は、１日１５ｍｇの用量で使用される、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の使用のための化合物又はその薬学的に許容可能な塩。
【請求項１４】
前記化合物は、１日５０ｍｇの用量で使用される、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の使用のための化合物又はその薬学的に許容可能な塩。
【請求項１５】
前記患者は、ＣＹＰ３Ａ４の阻害薬又は誘導薬と同時に治療されない、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の使用のための化合物又はその薬学的に許容可能な塩。
【請求項１６】
前記脳アミロイド血管症は、ＣＡＡ−１型である、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の使用のための化合物又はその薬学的に許容可能な塩。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、脳アミロイド血管症の治療又は予防における使用のためのオキサジン誘導体及びこうしたオキサジン誘導体を含む医薬組成物であって、特に、化合物は、ＡｐｏＥ４アレルの１つ又は２つのコピーを保有する患者における脳アミロイド血管症の治療又は予防において使用される、オキサジン誘導体及びこうしたオキサジン誘導体を含む医薬組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
脳アミロイド血管症（ＣＡＡ）は、大脳皮質並びにそれを覆う軟膜の小乃至中動脈、細動脈及び毛細血管の血管壁内のアミロイド−β（Ａβ）、特にＡβ４０の進行性の沈着を特徴とする、一般的な加齢に伴う脳小血管病である（Ｃｈａｒｉｄｉｍｏｕ  Ａ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１）。ＣＡＡは、多くの場合、アルツハイマー病（ＡＤ）と共存する。軽症型のＣＡＡは、多くの場合、無症候性であるように見える。しかし、ＣＡＡは、重度の血管病変をもたらす可能性もあり、無症候性微小出血から自然発症脳内出血、すなわち破壊的な型の脳卒中までの脳出血の危険因子である。
【０００３】
ＡＰＯＥ４は、ＡＤとＣＡＡとの両方の強力な遺伝的危険因子である（Ｓｈｉｎｏｈａｒａ  Ｍ  ｅｔ  ａｌ．，２０１６）。ヒトＡｐｏＥは、１９番染色体（ＡＰＯＥ遺伝子、Ｕｎｉｐｒｏｔ  Ｐ０２６４９）に位置する。ヒトでは、３つの主なアイソフォーム（ａｐｏＥ２、３及び４）が知られている。ＡｐｏＥ４（第１１２及び１５８位にＡｒｇを有する）は、ヒトでは５〜３５％のアレル頻度を有し（Ｖｅｒｇｈｅｓｅ  ＰＢ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１）、ＡｐｏＥ４ホモ接合体は、一般集団の約２〜３％に相当すると推定される（Ｑｕｉｎｔｉｎｏ−Ｓａｎｔｏｓ  ＳＲ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２）。
【０００４】
ＡｐｏＥ４アレルは、皮質毛細血管内のＡβ沈着、いわゆる毛細血管ＣＡＡ（ＣＡＡ−１型）と強く関連することが示されている（Ｔｈａｌ  ｅｔ  ａｌ．，２００２）。第２の型のＣＡＡ（ＣＡＡ−２型）は、軟髄膜及び皮質の血管（皮質毛細血管を除く）内のＡβ沈着を呈する。ＣＡＡ−２型は、ＡｐｏＥ４アレルと関係しない。
【０００５】
Ａβに対する能動又は受動免疫療法を用いてアミロイドクリアランスを増強すること、又はβ部位ＡＰＰ切断酵素−１（ＢＡＣＥ−１、アミロイド前駆体タンパク質［ＡＰＰ］のプロセシングに関与する酵素）の阻害を介して産生を低下させることにより、Ａβを減少させることを標的にする戦略は、ＣＡＡの治療における潜在的な治療的価値を有する可能性がある。しかし、ＣＡＡの有効な疾患修飾治療又はそれと関連する脳内出血は、依然として文献に記載されていない。
【０００６】
Ｂｅｃｋｍａｎｎ  Ｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１６は、インビボでの脳微小出血のモニタリングにおける長期的な非侵襲性の磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）の適合性を記載している。この研究では、著者らは、強力なＢＡＣＥ阻害薬、ＮＢ３６０及びＡβ抗体β１で老齢ＡＰＰ２３マウスを３か月間治療した。ＮＢ３６０で治療されたマウスでは、Ａβ抗体β１での治療とは対照的に、容積ＭＲＩ評価は、ＣＡＡ関連の微小出血に対する効果を示さなかった。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本明細書において「化合物１」と称される化合物Ｎ−（６−（（３Ｒ，６Ｒ）−５−アミノ−３，６−ジメチル−６−（トリフルオロメチル）−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−１，４−オキサジン−３−イル）−５−フルオロピリジン−２−イル）−３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピコリンアミドは、国際公開第２０１２／０９５４６９  Ａ１号パンフレットに以前に記載された経口活性ＢＡＣＥ阻害薬であり、ＢＡＣＥ−２と比べてＢＡＣＥ−１に対する選択性が約３倍高く、及び関連するオフターゲット結合又は活性がない。
【０００８】
いかなる実証された疾患修飾療法もない場合、いずれかの潜在的な治療薬がＣＡＡ及び関連する脳内出血の治療又は予防において有効であると判明するかどうかに関しては、不確実性の度合いが高い。しかし、脳血管の血管壁内のＡβ沈着を低下させることにおける本明細書で実証される化合物１による高い程度の有効性、及びＣＡＡのＡＰＰ２３トランスジェニックマウスモデルにおける化合物１での治療後に観察される脳内出血の低下は、化合物１がＣＡＡ及び関連する脳内出血の治療又は予防において有効であろうことを示唆している。化合物１が、ＡＰＰ２３トランスジェニックマウスにおいて皮質毛細血管Ａβ沈着を低下させる能力を実証する、本明細書に提供するデータを考慮すると、化合物１は、ＣＡＡ−１型の治療において特に有効であることが期待される。
【０００９】
化合物１は、ＣＡＡの発症の素因を有する患者、例えばＡｐｏＥ４アレルの１つ又は２つのコピーを保有する患者に特に有用であることも期待される。従って、ＡＤの予防における化合物１の有効性を実証し、且つ認知障害のないＡｐｏＥ４ホモ接合体患者又は認知障害のないアミロイド陽性ＡｐｏＥ４ヘテロ接合体患者の集団におけるＣＡＡに対するその有効性を評価するために設計されている第ＩＩ相／第ＩＩＩ相臨床試験を本明細書に記載する。現在の知識に基づき、この計画された臨床試験からの知見及び本明細書に記載した結果は、ＡｐｏＥ４ホモ接合体及びヘテロ接合体以外の患者における（例えば、加齢の結果としてＣＡＡを発症するか、ダウン症候群を有する（Ｋｕｍａｒ−Ｓｉｎｇｈ  Ｓ，２００８）か、又はプレセニリン−１（Ｄｅｒｍａｕｔ  Ｂ  ｅｔ  ａｌ．，２００１）若しくはアミロイド前駆体タンパク質（Ｋｕｍａｒ−Ｓｉｎｇｈ  Ｓ，２００８）の遺伝子の変異を保有する患者における）ＣＡＡに一般化及び適用することができる。なぜなら、ＢＡＣＥ阻害薬療法は、ＣＡＡの複数の潜在的原因とは無関係に脳の血管の血管壁内のＡβ蓄積及びそれによる沈着を低下させ且つ／又は予防することが期待されるであろうからである。
【００１０】
従って、本発明の第１の態様において、脳アミロイド血管症の治療又は予防における使用のための化合物Ｎ−（６−（（３Ｒ，６Ｒ）−５−アミノ−３，６−ジメチル−６−（トリフルオロメチル）−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−１，４−オキサジン−３−イル）−５−フルオロピリジン−２−イル）−３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピコリンアミド又はその薬学的に許容可能な塩が提供される。
【００１１】
本発明の第２の態様において、脳アミロイド血管症の治療又は予防における使用のためのＮ−（６−（（３Ｒ，６Ｒ）−５−アミノ−３，６−ジメチル−６−（トリフルオロメチル）−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−１，４−オキサジン−３−イル）−５−フルオロピリジン−２−イル）−３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピコリンアミド又はその薬学的に許容可能な塩を含む医薬組成物が提供される。
【００１２】
本発明の第３の態様において、脳アミロイド血管症の治療又は予防のための方法であって、それを必要とする患者に治療有効量の化合物Ｎ−（６−（（３Ｒ，６Ｒ）−５−アミノ−３，６−ジメチル−６−（トリフルオロメチル）−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−１，４−オキサジン−３−イル）−５−フルオロピリジン−２−イル）−３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピコリンアミド又はその薬学的に許容可能な塩を投与することを含む方法が提供される。
【００１３】
本発明の第４の態様において、脳アミロイド血管症の治療又は予防のための方法であって、治療有効量の化合物Ｎ−（６−（（３Ｒ，６Ｒ）−５−アミノ−３，６−ジメチル−６−（トリフルオロメチル）−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−１，４−オキサジン−３−イル）−５−フルオロピリジン−２−イル）−３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピコリンアミド又はその薬学的に許容可能な塩を含む医薬組成物を患者に投与することを含む方法が提供される。
【００１４】
本発明の第５の態様において、脳アミロイド血管症の治療又は予防のための化合物Ｎ−（６−（（３Ｒ，６Ｒ）−５−アミノ−３，６−ジメチル−６−（トリフルオロメチル）−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−１，４−オキサジン−３−イル）−５−フルオロピリジン−２−イル）−３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピコリンアミド又はその薬学的に許容可能な塩の使用が提供される。
【００１５】
本発明の第６の態様において、脳アミロイド血管症の治療又は予防のための化合物Ｎ−（６−（（３Ｒ，６Ｒ）−５−アミノ−３，６−ジメチル−６−（トリフルオロメチル）−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−１，４−オキサジン−３−イル）−５−フルオロピリジン−２−イル）−３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピコリンアミド又はその薬学的に許容可能な塩を含む医薬組成物の使用が提供される。
【００１６】
本発明の第７の態様において、脳アミロイド血管症の治療又は予防のための医薬を製造するための化合物Ｎ−（６−（（３Ｒ，６Ｒ）−５−アミノ−３，６−ジメチル−６−（トリフルオロメチル）−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−１，４−オキサジン−３−イル）−５−フルオロピリジン−２−イル）−３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピコリンアミド又はその薬学的に許容可能な塩の使用が提供される。
【図面の簡単な説明】
【００１７】
【図１】ＡＰＯＥ４−ＴＲ雄及び雌マウスの前脳Ａβ４０レベルに対する化合物１の急性投与の効果である。
【図２】ＡＰＯＥ４−ＴＲ雄及び雌マウスのＣＳＦ  Ａβ４０レベルに対する化合物１の急性投与の効果である。
【図３】ＡＰＯＥ４−ＴＲ雄及び雌マウスのＣＳＦ  Ａβ４２レベルに対する化合物１の急性投与の効果である。
【図４】ＡＰＯＥ４−ＴＲ雄及び雌マウスにおける化合物１急性曝露である。
【図５】脳ＰＫ／ＰＤ関係（個体データ）である。
【図６】脳ＰＫ／ＰＤ関係（平均値±ＳＤ）である。
【図７】ヒト対象の複数用量漸増経口投与試験における化合物１の２週間曝露後のＣＳＦ  Ａβ４０レベルに対する効果である。
【図８】ヒト対象のＣＳＦ  Ａβ４０レベルに対する化合物１の効果−３ヵ月時におけるベースラインからの％変化率である。
【図９】Ｔｒｉｔｏｎ  ＴＸ−１００抽出老齢ＡＰＰ２３脳のＡβ４０に対する化合物１の効果である。
【図１０】Ｔｒｉｔｏｎ  ＴＸ−１００抽出老齢ＡＰＰ２３脳のＡβ４２に対する化合物１の効果である。
【図１１】Ｔｒｉｔｏｎ  ＴＸ−１００抽出老齢ＡＰＰ２３脳のｓＡＰＰαに対する化合物１の効果である。
【図１２】Ｔｒｉｔｏｎ  ＴＸ−１００抽出老齢ＡＰＰ２３脳のｓＡＰＰβ（Ｓｗｅ）に対する化合物１の効果である。
【図１３】老齢ＡＰＰ２３マウスの脳脊髄液中のＡβ４０に対する化合物１治療の効果である。
【図１４】老齢ＡＰＰ２３マウスにおけるギ酸可溶性Ａβ４０に対する化合物１の効果である。
【図１５】老齢ＡＰＰ２３マウスにおけるギ酸可溶性Ａβ４２に対する化合物１の効果である。
【図１６】老齢ＡＰＰ２３マウスにおけるギ酸可溶性総Ａβ（４０＋４２）に対する化合物１の効果である。
【図１７】老齢ＡＰＰ２３マウスにおけるギ酸可溶性Ａβ４２／４０比に対する化合物１の効果である。
【図１８】老齢ＡＰＰ２３マウスにおける総ＣＤ３１＋脳血管の数に対する化合物１の効果である。
【図１９】老齢ＡＰＰ２３マウスにおける総小＋中及び大ＣＤ３１＋脳血管の数に対する化合物１の効果である。
【図２０】老齢ＡＰＰ２３マウスにおける＞１０％  Ａβ被覆を有する血管の割合（％）に対する化合物１の効果である。
【図２１】老齢ＡＰＰ２３マウスにおける＞１０％  Ａβ被覆を有する小＋中及び大血管の割合（％）に対する化合物１の効果である。
【図２２】老齢ＡＰＰ２３マウスにおける（＞１０％  Ａβ被覆を有する血管の）ＣＡＡ頻度に対する化合物１の効果である。
【図２３】老齢ＡＰＰ２３マウスにおける（＞１０％  Ａβ被覆を有する小＋中及び大血管の）ＣＡＡ頻度に対する化合物１の効果である。
【図２４】老齢ＡＰＰ２３マウスにおける総血管付着Ａβ面積に対する化合物１の効果である。
【図２５】老齢ＡＰＰ２３マウスにおける（小＋中及び大血管に関する）総血管付着Ａβ面積に対する化合物１の効果である。
【図２６】化合物１及びβ１抗体で治療したＡＰＰ２３マウスの体重である。
【図２７】ＭＲＩによってＡＰＰ２３マウスにおいて検出された総病変体積である。
【図２８】ベースラインに対して正規化された、ＡＰＰ２３マウスにおける総病変体積である。
【図２９】ベースラインに対して算出された病変体積増加係数である。
【図３０】単独で及び強力なＣＹＰ３Ａ４阻害薬イトラコナゾール又は強力なＣＹＰ３Ａ４誘導薬リファンピシンと組み合わせて投与された場合の化合物１のＰＫを評価するための、健康な対象における二段階の、非盲検の、二期の、固定順序の研究の設計である。
【発明を実施するための形態】
【００１８】
本発明の第１の態様のシリーズＡ実施形態
実施形態Ａ１：脳アミロイド血管症の治療又は予防における使用のための化合物Ｎ−（６−（（３Ｒ，６Ｒ）−５−アミノ−３，６−ジメチル−６−（トリフルオロメチル）−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−１，４−オキサジン−３−イル）−５−フルオロピリジン−２−イル）−３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピコリンアミド又はその薬学的に許容可能な塩。
【００１９】
実施形態Ａ２：化合物は、アルツハイマー病を有する患者における脳アミロイド血管症の治療又は予防のために使用される、実施形態Ａ１に係る使用のための化合物又はその薬学的に許容可能な塩。
【００２０】
実施形態Ａ３：化合物は、脳アミロイド血管症の発症に対する遺伝的素因を保有する患者における脳アミロイド血管症の治療又は予防において使用される、実施形態Ａ１又はＡ２に係る使用のための化合物又はその薬学的に許容可能な塩。
【００２１】
実施形態Ａ４：脳アミロイド血管症の発症に対する遺伝的素因は、
ｉ．ダウン症候群、
ｉｉ．アミロイド前駆体タンパク質又はプレセニリン−１に対する遺伝子の変異、又は
ｉｉｉ．ＡｐｏＥ４アレルの１つ又は２つのコピーの存在
である、実施形態Ａ３に係る使用のための化合物又はその薬学的に許容可能な塩。
【００２２】
実施形態Ａ５：患者は、ＡｐｏＥ４アレルの１つ又は２つのコピーを保有する、実施形態Ａ４に係る使用のための化合物又はその薬学的に許容可能な塩。
【００２３】
実施形態Ａ６：患者は、ＡｐｏＥ４アレルの１つのコピーを保有する、実施形態Ａ５に係る使用のための化合物又はその薬学的に許容可能な塩。
【００２４】
実施形態Ａ７：患者は、ＡｐｏＥ４アレルの２つのコピーを保有する、実施形態Ａ５に係る使用のための化合物又はその薬学的に許容可能な塩。
【００２５】
実施形態Ａ８：患者は、アミロイド陽性である、実施形態Ａ１〜Ａ７のいずれか１つに係る使用のための化合物又はその薬学的に許容可能な塩。
【００２６】
実施形態Ａ９：アミロイド陽性は、ＰＥＴ又はＣＳＦ測定によって決定される、実施形態Ａ８に係る使用のための化合物又はその薬学的に許容可能な塩。
【００２７】
実施形態Ａ１０：患者は、６０〜７５歳である、実施形態Ａ１〜Ａ９のいずれか１つに係る使用のための化合物又はその薬学的に許容可能な塩。
【００２８】
実施形態Ａ１１：化合物は、２週間の化合物曝露後にＣＳＦ中のＡβ１−４０の少なくとも７０％の低下をもたらす１日用量で使用される、実施形態Ａ１〜Ａ１０のいずれか１つに係る使用のための化合物又はその薬学的に許容可能な塩。
【００２９】
実施形態Ａ１２：化合物は、２週間の化合物曝露後にＣＳＦ中のＡβ１−４０の少なくとも５０％の低下をもたらす１日用量で使用される、実施形態Ａ１〜Ａ１０のいずれか１つに係る使用のための化合物又はその薬学的に許容可能な塩。
【００３０】
実施形態Ａ１３：化合物は、１日１０〜３０ｍｇの用量で使用される、実施形態Ａ１〜Ａ１０のいずれか１つに係る使用のための化合物又はその薬学的に許容可能な塩。
【００３１】
実施形態Ａ１４：化合物は、１日３０〜５０ｍｇの用量で使用される、実施形態Ａ１〜Ａ１０のいずれか１つに係る使用のための化合物又はその薬学的に許容可能な塩。
【００３２】
実施形態Ａ１５：化合物は、１日１５ｍｇの用量で使用される、実施形態Ａ１〜Ａ１０のいずれか１つに係る使用のための化合物又はその薬学的に許容可能な塩。
【００３３】
実施形態Ａ１６：化合物は、１日あたり５０ｍｇの用量で使用される、実施形態Ａ１〜Ａ１０のいずれか１つに係る使用のための化合物又はその薬学的に許容可能な塩。
【００３４】
実施形態Ａ１７：化合物は、７０〜１７０ｎｇ／ｍｌの血漿定常状態Ｃｍａｘ値をもたらす１日用量で使用される、実施形態Ａ１〜Ａ１０のいずれか１つに係る使用のための化合物又はその薬学的に許容可能な塩。
【００３５】
実施形態Ａ１８：化合物は、２００〜５００ｎｇ／ｍｌの血漿定常状態Ｃｍａｘ値をもたらす１日用量で使用される、実施形態Ａ１〜Ａ１０のいずれか１つに係る使用のための化合物又はその薬学的に許容可能な塩。
【００３６】
実施形態Ａ１９：アルツハイマー病を有する患者における脳アミロイド血管症の治療又は予防における使用のための化合物Ｎ−（６−（（３Ｒ，６Ｒ）−５−アミノ−３，６−ジメチル−６−（トリフルオロメチル）−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−１，４−オキサジン−３−イル）−５−フルオロピリジン−２−イル）−３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピコリンアミド又はその薬学的に許容可能な塩。
【００３７】
実施形態Ａ２０：ＡｐｏＥ４アレルの１つ又は２つのコピーを保有する患者における脳アミロイド血管症の治療又は予防における使用のための化合物Ｎ−（６−（（３Ｒ，６Ｒ）−５−アミノ−３，６−ジメチル−６−（トリフルオロメチル）−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−１，４−オキサジン−３−イル）−５−フルオロピリジン−２−イル）−３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピコリンアミド又はその薬学的に許容可能な塩。
【００３８】
実施形態Ａ２１：アルツハイマー病を有し、且つＡｐｏＥ４アレルの１つ又は２つのコピーを保有する患者における脳アミロイド血管症の治療又は予防における使用のための化合物Ｎ−（６−（（３Ｒ，６Ｒ）−５−アミノ−３，６−ジメチル−６−（トリフルオロメチル）−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−１，４−オキサジン−３−イル）−５−フルオロピリジン−２−イル）−３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピコリンアミド又はその薬学的に許容可能な塩。
【００３９】
実施形態Ａ２２：アルツハイマー病を有し、且つＡｐｏＥ４アレルの１つ又は２つのコピーを保有する患者における脳アミロイド血管症の治療又は予防における使用のための化合物Ｎ−（６−（（３Ｒ，６Ｒ）−５−アミノ−３，６−ジメチル−６−（トリフルオロメチル）−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−１，４−オキサジン−３−イル）−５−フルオロピリジン−２−イル）−３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピコリンアミド又はその薬学的に許容可能な塩であって、化合物は、１日あたり１５又は５０ｍｇの用量で使用される、化合物Ｎ−（６−（（３Ｒ，６Ｒ）−５−アミノ−３，６−ジメチル−６−（トリフルオロメチル）−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−１，４−オキサジン−３−イル）−５−フルオロピリジン−２−イル）−３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピコリンアミド又はその薬学的に許容可能な塩。
【００４０】
実施形態Ａ２３：遊離形態である、実施形態Ａ１〜Ａ２２のいずれか１つに係る使用のための化合物。
【００４１】
実施形態Ａ２４：患者は、ＣＹＰ３Ａ４の阻害薬又は誘導薬で同時に治療されない、実施形態Ａ１〜Ａ２３のいずれか１つに係る使用のための化合物。
【００４２】
実施形態Ａ２５：患者は、３ヵ月より長い期間にわたってＣＹＰ３Ａ４阻害薬又は誘導薬で同時に治療されない、実施形態Ａ１〜Ａ２３のいずれか１つに係る使用のための化合物。
【００４３】
実施形態Ａ２６：ＣＹＰ３Ａ４阻害薬は、ＣＹＰ３Ａ４の強力な、中程度の、又は弱い阻害薬であり、及びＣＹＰ３Ａ４誘導薬は、ＣＹＰ３Ａ４の強力な、中程度の、又は弱い誘導薬である、実施形態Ａ２４又はＡ２５に係る使用のための化合物。
【００４４】
実施形態Ａ２７：ＣＹＰ３Ａ４阻害薬は、ＣＹＰ３Ａ４の強力な阻害薬であり、及びＣＹＰ３Ａ４誘導薬は、ＣＹＰ３Ａ４の強力な誘導薬である、実施形態Ａ２６に係る使用のための化合物。
【００４５】
実施形態Ａ２８：脳アミロイド血管症は、ＣＡＡ−１型である、実施形態Ａ１〜Ａ２７のいずれか１つに係る使用のための化合物。
【００４６】
本発明の第２の態様のシリーズＢ実施形態
実施形態Ｂ１：脳アミロイド血管症の治療又は予防における使用のための化合物Ｎ−（６−（（３Ｒ，６Ｒ）−５−アミノ−３，６−ジメチル−６−（トリフルオロメチル）−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−１，４−オキサジン−３−イル）−５−フルオロピリジン−２−イル）−３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピコリンアミド又はその薬学的に許容可能な塩を含む医薬組成物。
【００４７】
実施形態Ｂ２：アルツハイマー病を有する患者における脳アミロイド血管症の治療又は予防のために使用される、実施形態Ｂ１に係る使用のための医薬組成物。
【００４８】
実施形態Ｂ３：脳アミロイド血管症の発症に対する遺伝的素因を保有する患者における脳アミロイド血管症の治療又は予防のために使用される、実施形態Ｂ１又はＢ２に係る使用のための医薬組成物。
【００４９】
実施形態Ｂ４：脳アミロイド血管症の発症に対する遺伝的素因は、
ｉ．ダウン症候群、
ｉｉ．アミロイド前駆体タンパク質又はプレセニリン−１に対する遺伝子の変異、又は
ｉｉｉ．ＡｐｏＥ４アレルの１つ又は２つのコピーの存在
である、実施形態Ｂ３に係る使用のための医薬組成物。
【００５０】
実施形態Ｂ５：患者は、ＡｐｏＥ４アレルの１つ又は２つのコピーを保有する、実施形態Ｂ４に係る使用のための医薬組成物。
【００５１】
実施形態Ｂ６：患者は、ＡｐｏＥ４アレルの１つのコピーを保有する、実施形態Ｂ５に係る使用のための医薬組成物。
【００５２】
実施形態Ｂ７：患者は、ＡｐｏＥ４アレルの２つのコピーを保有する、実施形態Ｂ５に係る使用のための医薬組成物。
【００５３】
実施形態Ｂ８：患者は、アミロイド陽性である、実施形態Ｂ１〜Ｂ７のいずれか１つに係る使用のための医薬組成物。
【００５４】
実施形態Ｂ９：アミロイド陽性は、ＰＥＴ又はＣＳＦ測定によって決定される、実施形態Ｂ８に係る使用のための医薬組成物。
【００５５】
実施形態Ｂ１０：患者は、６０〜７５歳である、実施形態Ｂ１〜Ｂ９のいずれか１つに係る使用のための医薬組成物。
【００５６】
実施形態Ｂ１１：化合物は、２週間の化合物曝露後にＣＳＦ中のＡβ１−４０の少なくとも７０％の低下をもたらす１日用量で使用される、実施形態Ｂ１〜Ｂ１０のいずれか１つに係る使用のための医薬組成物。
【００５７】
実施形態Ｂ１２：化合物は、２週間の化合物曝露後にＣＳＦ中のＡβ１−４０の少なくとも５０％の低下をもたらす１日用量で使用される、実施形態Ｂ１〜Ｂ１０のいずれか１つに係る使用のための医薬組成物。
【００５８】
実施形態Ｂ１３：化合物は、１日１０〜３０ｍｇの用量で使用される、実施形態Ｂ１〜Ｂ１０のいずれか１つに係る使用のための医薬組成物。
【００５９】
実施形態Ｂ１４：化合物は、１日３０〜５０ｍｇの用量で使用される、実施形態Ｂ１〜Ｂ１０のいずれか１つに係る使用のための医薬組成物。
【００６０】
実施形態Ｂ１５：化合物は、１日１５ｍｇの用量で使用される、実施形態Ｂ１〜Ｂ１０のいずれか１つに係る使用のための医薬組成物。
【００６１】
実施形態Ｂ１６：化合物は、１日あたり５０ｍｇの用量で使用される、実施形態Ｂ１〜Ｂ１０のいずれか１つに係る使用のための医薬組成物。
【００６２】
実施形態Ｂ１７：化合物は、７０〜１７０ｎｇ／ｍｌの血漿定常状態Ｃｍａｘ値をもたらす１日用量で使用される、実施形態Ｂ１〜Ｂ１０のいずれか１つに係る使用のための医薬組成物。
【００６３】
実施形態Ｂ１８：化合物は、２００〜５００ｎｇ／ｍｌの血漿定常状態Ｃｍａｘ値をもたらす１日用量で使用される、実施形態Ｂ１〜Ｂ１０のいずれか１つに係る使用のための医薬組成物。
【００６４】
実施形態Ｂ１９：アルツハイマー病を有する患者における脳アミロイド血管症の治療又は予防における使用のための化合物Ｎ−（６−（（３Ｒ，６Ｒ）−５−アミノ−３，６−ジメチル−６−（トリフルオロメチル）−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−１，４−オキサジン−３−イル）−５−フルオロピリジン−２−イル）−３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピコリンアミド又はその薬学的に許容可能な塩を含む医薬組成物。
【００６５】
実施形態Ｂ２０：ＡｐｏＥ４アレルの１つ又は２つのコピーを保有する患者における脳アミロイド血管症の治療又は予防における使用のための化合物Ｎ−（６−（（３Ｒ，６Ｒ）−５−アミノ−３，６−ジメチル−６−（トリフルオロメチル）−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−１，４−オキサジン−３−イル）−５−フルオロピリジン−２−イル）−３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピコリンアミド又はその薬学的に許容可能な塩を含む医薬組成物。
【００６６】
実施形態Ｂ２１：アルツハイマー病を有し、且つＡｐｏＥ４アレルの１つ又は２つのコピーを保有する患者における脳アミロイド血管症の治療又は予防における使用のための化合物Ｎ−（６−（（３Ｒ，６Ｒ）−５−アミノ−３，６−ジメチル−６−（トリフルオロメチル）−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−１，４−オキサジン−３−イル）−５−フルオロピリジン−２−イル）−３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピコリンアミド又はその薬学的に許容可能な塩を含む医薬組成物。
【００６７】
実施形態Ｂ２２：アルツハイマー病を有し、且つＡｐｏＥ４アレルの１つ又は２つのコピーを保有する患者における脳アミロイド血管症の治療又は予防における使用のための化合物Ｎ−（６−（（３Ｒ，６Ｒ）−５−アミノ−３，６−ジメチル−６−（トリフルオロメチル）−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−１，４−オキサジン−３−イル）−５−フルオロピリジン−２−イル）−３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピコリンアミド又はその薬学的に許容可能な塩を含む医薬組成物であって、化合物は、１日あたり１５又は５０ｍｇの用量で使用される、化合物Ｎ−（６−（（３Ｒ，６Ｒ）−５−アミノ−３，６−ジメチル−６−（トリフルオロメチル）−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−１，４−オキサジン−３−イル）−５−フルオロピリジン−２−イル）−３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピコリンアミド又はその薬学的に許容可能な塩を含む医薬組成物。
【００６８】
実施形態Ｂ２３：化合物は、遊離形態である、実施形態Ｂ１〜Ｂ２２のいずれか１つに係る使用のための医薬組成物。
【００６９】
実施形態Ｂ２４：患者は、ＣＹＰ３Ａ４の阻害薬又は誘導薬で同時に治療されない、実施形態Ｂ１〜Ｂ２３のいずれか１つに係る使用のための医薬組成物。
【００７０】
実施形態Ｂ２５：患者は、３ヵ月より長い期間にわたってＣＹＰ３Ａ４阻害薬又は誘導薬で同時に治療されない、実施形態Ｂ１〜Ｂ２３のいずれか１つに係る使用のための医薬組成物。
【００７１】
実施形態Ｂ２６：ＣＹＰ３Ａ４阻害薬は、ＣＹＰ３Ａ４の強力な、中程度の、又は弱い阻害薬であり、及びＣＹＰ３Ａ４誘導薬は、ＣＹＰ３Ａ４の強力な、中程度の、又は弱い誘導薬である、実施形態Ｂ２４又はＢ２５に係る使用のための医薬組成物。
【００７２】
実施形態Ｂ２７：ＣＹＰ３Ａ４阻害薬は、ＣＹＰ３Ａ４の強力な阻害薬であり、及びＣＹＰ３Ａ４誘導薬は、ＣＹＰ３Ａ４の強力な誘導薬である、実施形態Ｂ２６に係る使用のための医薬組成物。
【００７３】
実施形態Ｂ２８：脳アミロイド血管症は、ＣＡＡ−１型である、実施形態Ｂ１〜Ｂ２７のいずれか１つに係る使用のための医薬組成物。
【００７４】
シリーズＣ  本発明の第３の態様の実施形態
実施形態Ｃ１：脳アミロイド血管症の治療又は予防のための方法であって、それを必要とする患者に治療有効量の化合物Ｎ−（６−（（３Ｒ，６Ｒ）−５−アミノ−３，６−ジメチル−６−（トリフルオロメチル）−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−１，４−オキサジン−３−イル）−５−フルオロピリジン−２−イル）−３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピコリンアミド又はその薬学的に許容可能な塩を投与することを含む方法。
【００７５】
実施形態Ｃ２：患者は、アルツハイマー病を有する、実施形態Ｃ１に係る方法。
【００７６】
実施形態Ｃ３：患者は、脳アミロイド血管症の発症に対する遺伝的素因を保有する、実施形態Ｃ１又はＣ２に係る方法。
【００７７】
実施形態Ｃ４：脳アミロイド血管症の発症に対する遺伝的素因は、
ｉ．ダウン症候群、
ｉｉ．アミロイド前駆体タンパク質又はプレセニリン−１に対する遺伝子の変異、又は
ｉｉｉ．ＡｐｏＥ４アレルの１つ又は２つのコピーの存在
である、実施形態Ｃ３に係る方法。
【００７８】
実施形態Ｃ５：患者は、ＡｐｏＥ４アレルの１つ又は２つのコピーを保有する、実施形態Ｃ４に係る方法。
【００７９】
実施形態Ｃ６：患者は、ＡｐｏＥ４アレルの１つのコピーを保有する、実施形態Ｃ５に係る方法。
【００８０】
実施形態Ｃ７：患者は、ＡｐｏＥ４アレルの２つのコピーを保有する、実施形態Ｃ５に係る方法。
【００８１】
実施形態Ｃ８：患者は、アミロイド陽性である、実施形態Ｃ１〜Ｃ７のいずれか１つに係る方法。
【００８２】
実施形態Ｃ９：アミロイド陽性は、ＰＥＴ又はＣＳＦ測定によって決定される、実施形態Ｃ８に係る方法。
【００８３】
実施形態Ｃ１０：患者は、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４又は７５歳超である、実施形態Ｃ１〜Ｃ９のいずれか１つに係る方法。
【００８４】
実施形態Ｃ１１：患者は、６０〜７５歳である、実施形態Ｃ１〜Ｃ１０のいずれか１つに係る方法。
【００８５】
実施形態Ｃ１２：化合物を投与することは、２、１３、２６、５２、７８、１０４、１３０、１５６、１８２、２０８、２３４、２６０、２８６、３１２、３３８、３３２、３９０又は４１６週間の化合物曝露後にＣＳＦ中のＡβ１−４０の少なくとも１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０又は８０％の低下をもたらす、実施形態Ｃ１〜Ｃ１１のいずれか１つに係る方法。
【００８６】
実施形態Ｃ１３：化合物を投与することは、２、１３、２６、５２、７８、１０４、１３０、１５６、１８２、２０８、２３４、２６０、２８６、３１２、３３８、３３２、３９０又は４１６週間の化合物曝露後にＣＳＦ中、血中又は血漿中のＡβ１−４０の少なくとも７０％の低下をもたらす、実施形態Ｃ１〜Ｃ１１のいずれか１つに係る方法。
【００８７】
実施形態Ｃ１４：化合物を投与することは、２、１３、２６、５２、７８、１０４、１３０、１５６、１８２、２０８、２３４、２６０、２８６、３１２、３３８、３３２、３９０又は４１６週間の化合物曝露後にＣＳＦ中、血中又は血漿中のＡβ１−４０の少なくとも５０％の低下をもたらす、実施形態Ｃ１〜Ｃ１１のいずれか１つに係る方法。
【００８８】
実施形態Ｃ１５．化合物を投与することは、２、１３、２６、５２、７８、１０４、１３０、１５６、１８２、２０８、２３４、２６０、２８６、３１２、３３８、３３２、３９０又は４１６週間の化合物曝露後に１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０又は８０％〜９９、９７、９５、９３、９０、８７、８５、８０、７５、７０、６５、６０、５５又は５０％の範囲のＣＳＦ中、血中又は血漿中のＡβ１−４０の低下をもたらす、実施形態Ｃ１〜Ｃ１１のいずれか１つに係る方法。
【００８９】
実施形態Ｃ１６．化合物を投与することは、少なくとも８０、８５、９０、９３、９５、９７又は９９％の患者、或いは８０、８５又は９０〜９９、９７、９５若しくは９３％の患者に４０〜７０％、４５〜６５％若しくは５０〜６０％の範囲又は少なくとも５０％のＣＳＦ中、血中若しくは血漿中のＡβ１−４０の低下をもたらす、実施形態Ｃ１〜Ｃ１１のいずれか１つに係る方法。
【００９０】
実施形態Ｃ１７．化合物は、少なくとも８０、８５、９０、９３、９５、９７又は９９％の患者、或いは８０、８５又は９０〜９９、９７、９５若しくは９３％の患者に６５〜９５％、７５〜９０％若しくは８０〜９０％の範囲又は少なくとも８０％のＣＳＦ中、血中若しくは血漿中のＡβ１−４０の低下をもたらす１日用量で使用される、実施形態Ｃ１〜Ｃ１１のいずれか１つに係る方法。
【００９１】
実施形態Ｃ１８：化合物の治療有効量は、１日５〜１０、１０〜１５、１５〜２０、２０〜２５、２５〜３０、３０〜３５、３５〜４０、４５〜５０、５０〜５５ｍｇ、５５〜６０ｍｇ、６０〜１００ｍｇ、１００〜２００、２００〜３００ｍｇ、１５〜８５ｍｇ、５０〜８５ｍｇ、１５〜３００ｍｇ又は５０〜３００ｍｇの用量である、実施形態Ｃ１〜Ｃ１１のいずれか１つに係る方法。
【００９２】
実施形態Ｃ１９：化合物の治療有効量は、１日あたり１０〜３０ｍｇの用量である、実施形態Ｃ１〜Ｃ１１のいずれか１つに係る方法。
【００９３】
実施形態Ｃ２０：化合物の治療有効量は、１日あたり３０〜５０ｍｇの用量である、実施形態Ｃ１〜Ｃ１１のいずれか１つに係る方法。
【００９４】
実施形態Ｃ２１：化合物の治療有効量は、１日あたり１５ｍｇの用量である、実施形態Ｃ１〜Ｃ１１のいずれか１つに係る方法。
【００９５】
実施形態Ｃ２２：化合物の治療有効量は、１日あたり５０ｍｇの用量である、実施形態Ｃ１〜Ｃ１１のいずれか１つに係る方法。
【００９６】
実施形態Ｃ２３：化合物の治療有効量は、０〜５０、５０〜１００、１００〜１５０、１５０〜２００、２００〜２５０、２５０〜３００、３００〜３５０、３５０〜４００、４００〜４５０、４５０〜５００、５００〜５５０、５５０〜６００、６００〜６５０又は６５０〜７００ｎｇ／ｍｌの血漿定常状態Ｃｍａｘ値をもたらす用量である、実施形態Ｃ１〜Ｃ１１のいずれか１つに係る方法。
【００９７】
実施形態Ｃ２４：化合物の治療有効量は、７０〜１７０ｎｇ／ｍｌの血漿定常状態Ｃｍａｘ値をもたらす用量である、実施形態Ｃ１〜Ｃ１１のいずれか１つに係る方法。
【００９８】
実施形態Ｃ２５：化合物の治療有効量は、２００〜５００ｎｇ／ｍｌの血漿定常状態Ｃｍａｘ値をもたらす用量である、実施形態Ｃ１〜Ｃ１１のいずれか１つに係る方法。
【００９９】
実施形態Ｃ２６：脳アミロイド血管症の治療又は予防のための方法であって、治療有効量の化合物Ｎ−（６−（（３Ｒ，６Ｒ）−５−アミノ−３，６−ジメチル−６−（トリフルオロメチル）−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−１，４−オキサジン−３−イル）−５−フルオロピリジン−２−イル）−３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピコリンアミド又はその薬学的に許容可能な塩を患者に投与することを含み、患者は、アルツハイマー病を有する、方法。
【０１００】
実施形態Ｃ２７：脳アミロイド血管症の治療又は予防のための方法であって、治療有効量の化合物Ｎ−（６−（（３Ｒ，６Ｒ）−５−アミノ−３，６−ジメチル−６−（トリフルオロメチル）−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−１，４−オキサジン−３−イル）−５−フルオロピリジン−２−イル）−３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピコリンアミド又はその薬学的に許容可能な塩を患者に投与することを含み、患者は、ＡｐｏＥ４アレルの１つ又は２つのコピーを保有する、方法。
【０１０１】
実施形態Ｃ２８：脳アミロイド血管症の治療又は予防のための方法であって、治療有効量の化合物Ｎ−（６−（（３Ｒ，６Ｒ）−５−アミノ−３，６−ジメチル−６−（トリフルオロメチル）−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−１，４−オキサジン−３−イル）−５−フルオロピリジン−２−イル）−３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピコリンアミド又はその薬学的に許容可能な塩を患者に投与することを含み、患者は、アルツハイマー病を有し、且つＡｐｏＥ４アレルの１つ又は２つのコピーを保有する、方法。
【０１０２】
実施形態Ｃ２９：脳アミロイド血管症の治療又は予防のための方法であって、治療有効量の化合物Ｎ−（６−（（３Ｒ，６Ｒ）−５−アミノ−３，６−ジメチル−６−（トリフルオロメチル）−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−１，４−オキサジン−３−イル）−５−フルオロピリジン−２−イル）−３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピコリンアミド又はその薬学的に許容可能な塩を患者に投与することを含み、患者は、アルツハイマー病を有し、且つＡｐｏＥ４アレルの１つ又は２つのコピーを保有し、化合物の治療有効量は、１日あたり１５又は５０ｍｇの用量である、方法。
【０１０３】
実施形態Ｃ３０：化合物は、遊離形態である、実施形態Ｃ１〜Ｃ２９のいずれか１つに係る方法。
【０１０４】
実施形態Ｃ３１：化合物１は、医薬組成物中に含まれる、実施形態Ｃ１〜Ｃ３０のいずれか１つに係る方法。
【０１０５】
実施形態Ｃ３２：患者は、ＣＹＰ３Ａ４の阻害薬又は誘導薬で同時に治療されない、実施形態Ｃ１〜Ｃ３１のいずれか１つに係る方法。
【０１０６】
実施形態Ｃ３３：患者は、３ヵ月より長い期間にわたってＣＹＰ３Ａ４阻害薬又は誘導薬で同時に治療されない、実施形態Ｃ１〜Ｃ３１のいずれか１つに係る方法。
【０１０７】
実施形態Ｃ３４：ＣＹＰ３Ａ４阻害薬は、ＣＹＰ３Ａ４の強力な、中程度の、又は弱い阻害薬であり、及びＣＹＰ３Ａ４誘導薬は、ＣＹＰ３Ａ４の強力な、中程度の、又は弱い誘導薬である、実施形態Ｃ３２又はＣ３３に係る方法。
【０１０８】
実施形態Ｃ３５：ＣＹＰ３Ａ４阻害薬は、ＣＹＰ３Ａ４の強力な阻害薬であり、及びＣＹＰ３Ａ４誘導薬は、ＣＹＰ３Ａ４の強力な誘導薬である、実施形態Ｃ３４に係る方法。
【０１０９】
実施形態Ｃ３６：脳アミロイド血管症は、ＣＡＡ−１型である、実施形態Ｃ１〜Ｃ３５のいずれか１つに係る方法。
【０１１０】
シリーズＤ  本発明の第５の態様の実施形態
実施形態Ｄ１：脳アミロイド血管症の治療又は予防のための化合物Ｎ−（６−（（３Ｒ，６Ｒ）−５−アミノ−３，６−ジメチル−６−（トリフルオロメチル）−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−１，４−オキサジン−３−イル）−５−フルオロピリジン−２−イル）−３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピコリンアミド又はその薬学的に許容可能な塩の使用。
【０１１１】
実施形態Ｄ２：化合物は、アルツハイマー病を有する患者における脳アミロイド血管症の治療又は予防において使用される、実施形態Ｄ１に係る使用。
【０１１２】
実施形態Ｄ３：化合物は、脳アミロイド血管症の発症に対する遺伝的素因を保有する患者における脳アミロイド血管症の治療又は予防において使用される、実施形態Ｄ１又はＤ２に係る使用。
【０１１３】
実施形態Ｄ４：脳アミロイド血管症の発症に対する遺伝的素因は、
ｉ．ダウン症候群、
ｉｉ．アミロイド前駆体タンパク質又はプレセニリン−１に対する遺伝子の変異、又は
ｉｉｉ．ＡｐｏＥ４アレルの１つ又は２つのコピーの存在
である、実施形態Ｄ３に係る使用。
【０１１４】
実施形態Ｄ５：患者は、ＡｐｏＥ４アレルの１つ又は２つのコピーを保有する、実施形態Ｄ４に係る使用。
【０１１５】
実施形態Ｄ６：患者は、ＡｐｏＥ４アレルの１つのコピーを保有する、実施形態Ｄ５に係る使用。
【０１１６】
実施形態Ｄ７：患者は、ＡｐｏＥ４アレルの２つのコピーを保有する、実施形態Ｄ５に係る使用。
【０１１７】
実施形態Ｄ８：患者は、アミロイド陽性である、実施形態Ｄ１〜Ｄ７のいずれか１つに係る使用。
【０１１８】
実施形態Ｄ９：アミロイド陽性は、ＰＥＴ又はＣＳＦ測定によって決定される、実施形態Ｄ８に係る使用。
【０１１９】
実施形態Ｄ１０：患者は、６０〜７５歳である、実施形態Ｄ１〜Ｄ９のいずれか１つに係る使用。
【０１２０】
実施形態Ｄ１１：化合物は、２週間の化合物曝露後にＣＳＦ中のＡβ１−４０の少なくとも７０％の低下をもたらす１日用量で使用される、実施形態Ｄ１〜Ｄ１０のいずれか１つに係る使用。
【０１２１】
実施形態Ｄ１２：化合物は、２週間の化合物曝露後にＣＳＦ中のＡβ１−４０の少なくとも５０％の低下をもたらす１日用量で使用される、実施形態Ｄ１〜Ｄ１０のいずれか１つに係る使用。
【０１２２】
実施形態Ｄ１３：化合物は、１日１０〜３０ｍｇの用量で使用される、実施形態Ｄ１〜Ｄ１０のいずれか１つに係る使用。
【０１２３】
実施形態Ｄ１４：化合物は、１日３０〜５０ｍｇの用量で使用される、実施形態Ｄ１〜Ｄ１０のいずれか１つに係る使用。
【０１２４】
実施形態Ｄ１５：化合物は、１日１５ｍｇの用量で使用される、実施形態Ｄ１〜Ｄ１０のいずれか１つに係る使用。
【０１２５】
実施形態Ｄ１６：化合物は、１日あたり５０ｍｇの用量で使用される、実施形態Ｄ１〜Ｄ１０のいずれか１つに係る使用。
【０１２６】
実施形態Ｄ１７：化合物は、７０〜１７０ｎｇ／ｍｌの血漿定常状態Ｃｍａｘ値をもたらす１日用量で使用される、実施形態Ｄ１〜Ｄ１０のいずれか１つに係る使用。
【０１２７】
実施形態Ｄ１８：化合物は、２００〜５００ｎｇ／ｍｌの血漿定常状態Ｃｍａｘ値をもたらす１日用量で使用される、実施形態Ｄ１〜Ｄ１０のいずれか１つに係る使用。
【０１２８】
実施形態Ｄ１９：アルツハイマー病を有する患者における脳アミロイド血管症の治療又は予防のための化合物Ｎ−（６−（（３Ｒ，６Ｒ）−５−アミノ−３，６−ジメチル−６−（トリフルオロメチル）−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−１，４−オキサジン−３−イル）−５−フルオロピリジン−２−イル）−３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピコリンアミド又はその薬学的に許容可能な塩の使用。
【０１２９】
実施形態Ｄ２０：ＡｐｏＥ４アレルの１つ又は２つのコピーを保有する患者における脳アミロイド血管症の治療又は予防のための化合物Ｎ−（６−（（３Ｒ，６Ｒ）−５−アミノ−３，６−ジメチル−６−（トリフルオロメチル）−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−１，４−オキサジン−３−イル）−５−フルオロピリジン−２−イル）−３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピコリンアミド又はその薬学的に許容可能な塩の使用。
【０１３０】
実施形態Ｄ２１：アルツハイマー病を有し、且つＡｐｏＥ４アレルの１つ又は２つのコピーを保有する患者における脳アミロイド血管症の治療又は予防のための化合物Ｎ−（６−（（３Ｒ，６Ｒ）−５−アミノ−３，６−ジメチル−６−（トリフルオロメチル）−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−１，４−オキサジン−３−イル）−５−フルオロピリジン−２−イル）−３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピコリンアミド又はその薬学的に許容可能な塩の使用。
【０１３１】
実施形態Ｄ２２：アルツハイマー病を有し、且つＡｐｏＥ４アレルの１つ又は２つのコピーを保有する患者における脳アミロイド血管症の治療又は予防のための化合物Ｎ−（６−（（３Ｒ，６Ｒ）−５−アミノ−３，６−ジメチル−６−（トリフルオロメチル）−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−１，４−オキサジン−３−イル）−５−フルオロピリジン−２−イル）−３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピコリンアミド又はその薬学的に許容可能な塩の使用であって、化合物は、１日あたり１５又は５０ｍｇの用量で使用される、使用。
【０１３２】
実施形態Ｄ２３：化合物は、遊離形態である、実施形態Ｄ１〜Ｄ２２のいずれか１つに係る使用。
【０１３３】
実施形態Ｄ２４：化合物は、医薬組成物中に含まれる、実施形態Ｄ１〜Ｄ２３のいずれか１つに係る使用。
【０１３４】
実施形態Ｄ２５：患者は、ＣＹＰ３Ａ４の阻害薬又は誘導薬で同時に治療されない、実施形態Ｄ１〜Ｄ２４のいずれか１つに係る使用。
【０１３５】
実施形態Ｄ２６：患者は、３ヵ月より長い期間にわたってＣＹＰ３Ａ４阻害薬又は誘導薬で同時に治療されない、実施形態Ｄ１〜Ｄ２４のいずれか１つに係る使用。
【０１３６】
実施形態Ｄ２７：ＣＹＰ３Ａ４阻害薬は、ＣＹＰ３Ａ４の強力な、中程度の、又は弱い阻害薬であり、及びＣＹＰ３Ａ４誘導薬は、ＣＹＰ３Ａ４の強力な、中程度の、又は弱い誘導薬である、実施形態Ｄ２５又はＤ２６に係る使用。
【０１３７】
実施形態Ｄ２８：ＣＹＰ３Ａ４阻害薬は、ＣＹＰ３Ａ４の強力な阻害薬であり、及びＣＹＰ３Ａ４誘導薬は、ＣＹＰ３Ａ４の強力な誘導薬である、実施形態Ｄ２７に係る使用。
【０１３８】
実施形態Ｄ２９：脳アミロイド血管症は、ＣＡＡ−１型である、実施形態Ｄ１〜Ｄ２８のいずれか１つに係る使用。
【０１３９】
シリーズＥ  本発明の第７の態様の実施形態
実施形態Ｅ１：脳アミロイド血管症の治療又は予防のための医薬品の製造のための化合物Ｎ−（６−（（３Ｒ，６Ｒ）−５−アミノ−３，６−ジメチル−６−（トリフルオロメチル）−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−１，４−オキサジン−３−イル）−５−フルオロピリジン−２−イル）−３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピコリンアミド又はその薬学的に許容可能な塩の使用。
【０１４０】
実施形態Ｅ２：化合物は、アルツハイマー病を有する患者における脳アミロイド血管症の治療又は予防において使用される、実施形態Ｅ１に係る使用。
【０１４１】
実施形態Ｅ３：化合物は、脳アミロイド血管症の発症に対する遺伝的素因を保有する患者における脳アミロイド血管症の治療又は予防において使用される、実施形態Ｅ１又はＥ２に係る使用。
【０１４２】
実施形態Ｅ４：脳アミロイド血管症の発症に対する遺伝的素因は、
ｉ．ダウン症候群、
ｉｉ．アミロイド前駆体タンパク質又はプレセニリン−１に対する遺伝子の変異、又は
ｉｉｉ．ＡｐｏＥ４アレルの１つ又は２つのコピーの存在
である、実施形態Ｅ３に係る使用。
【０１４３】
実施形態Ｅ５：患者は、ＡｐｏＥ４アレルの１つ又は２つのコピーを保有する、実施形態Ｅ４に係る使用。
【０１４４】
実施形態Ｅ６：患者は、ＡｐｏＥ４アレルの１つのコピーを保有する、実施形態Ｅ５に係る使用。
【０１４５】
実施形態Ｅ７：患者は、ＡｐｏＥ４アレルの２つのコピーを保有する、実施形態Ｅ５に係る使用。
【０１４６】
実施形態Ｅ８：患者は、アミロイド陽性である、実施形態Ｅ１〜Ｅ７のいずれか１つに係る使用。
【０１４７】
実施形態Ｅ９：アミロイド陽性は、ＰＥＴ又はＣＳＦ測定によって決定される、実施形態Ｅ８に係る使用。
【０１４８】
実施形態Ｅ１０：患者は、６０〜７５歳である、実施形態Ｅ１〜Ｅ９のいずれか１つに係る使用。
【０１４９】
実施形態Ｅ１１：化合物は、２週間の化合物曝露後にＣＳＦ中のＡβ１−４０の少なくとも７０％の低下をもたらす１日用量で使用される、実施形態Ｅ１〜Ｅ１０のいずれか１つに係る使用。
【０１５０】
実施形態Ｅ１２：化合物は、２週間の化合物曝露後にＣＳＦ中のＡβ１−４０の少なくとも５０％の低下をもたらす１日用量で使用される、実施形態Ｅ１〜Ｅ１０のいずれか１つに係る使用。
【０１５１】
実施形態Ｅ１３：化合物は、１日１０〜３０ｍｇの用量で使用される、実施形態Ｅ１〜Ｅ１０のいずれか１つに係る使用。
【０１５２】
実施形態Ｅ１４：化合物は、１日３０〜５０ｍｇの用量で使用される、実施形態Ｅ１〜Ｅ１０のいずれか１つに係る使用。
【０１５３】
実施形態Ｅ１５：化合物は、１日あたり１５ｍｇの用量で使用される、実施形態Ｅ１〜Ｅ１０のいずれか１つに係る使用。
【０１５４】
実施形態Ｅ１６：化合物は、１日あたり５０ｍｇの用量で使用される、実施形態Ｅ１〜Ｅ１０のいずれか１つに係る使用。
【０１５５】
実施形態Ｅ１７：化合物は、７０〜１７０ｎｇ／ｍｌの血漿定常状態Ｃｍａｘ値をもたらす１日用量で使用される、実施形態Ｅ１〜Ｅ１０のいずれか１つに係る使用。
【０１５６】
実施形態Ｅ１８：化合物は、２００〜５００ｎｇ／ｍｌの血漿定常状態Ｃｍａｘ値をもたらす１日用量で使用される、実施形態Ｅ１〜Ｅ１０のいずれか１つに係る使用。
【０１５７】
実施形態Ｅ１９：アルツハイマー病を有する患者における脳アミロイド血管症の治療又は予防のための医薬品の製造のための化合物Ｎ−（６−（（３Ｒ，６Ｒ）−５−アミノ−３，６−ジメチル−６−（トリフルオロメチル）−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−１，４−オキサジン−３−イル）−５−フルオロピリジン−２−イル）−３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピコリンアミド又はその薬学的に許容可能な塩の使用。
【０１５８】
実施形態Ｅ２０：ＡｐｏＥ４アレルの１つ又は２つのコピーを保有する患者における脳アミロイド血管症の治療又は予防のための医薬品の製造のための化合物Ｎ−（６−（（３Ｒ，６Ｒ）−５−アミノ−３，６−ジメチル−６−（トリフルオロメチル）−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−１，４−オキサジン−３−イル）−５−フルオロピリジン−２−イル）−３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピコリンアミド又はその薬学的に許容可能な塩の使用。
【０１５９】
実施形態Ｅ２１：アルツハイマー病を有し、且つＡｐｏＥ４アレルの１つ又は２つのコピーを保有する患者における脳アミロイド血管症の治療又は予防のための医薬品の製造のための化合物Ｎ−（６−（（３Ｒ，６Ｒ）−５−アミノ−３，６−ジメチル−６−（トリフルオロメチル）−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−１，４−オキサジン−３−イル）−５−フルオロピリジン−２−イル）−３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピコリンアミド又はその薬学的に許容可能な塩の使用。
【０１６０】
実施形態Ｅ２２：アルツハイマー病を有し、且つＡｐｏＥ４アレルの１つ又は２つのコピーを保有する患者における脳アミロイド血管症の治療又は予防のための医薬品の製造のための化合物Ｎ−（６−（（３Ｒ，６Ｒ）−５−アミノ−３，６−ジメチル−６−（トリフルオロメチル）−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−１，４−オキサジン−３−イル）−５−フルオロピリジン−２−イル）−３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピコリンアミド又はその薬学的に許容可能な塩の使用であって、化合物は、１日あたり１５又は５０ｍｇの用量で使用される、使用。
【０１６１】
実施形態Ｅ２３：化合物は、遊離形態である、実施形態Ｅ１〜Ｅ２２のいずれか１つに係る使用。
【０１６２】
実施形態Ｅ２４：医薬は、医薬組成物である、実施形態Ｅ１〜Ｅ２３のいずれか１つに係る使用。
【０１６３】
実施形態Ｅ２５：患者は、ＣＹＰ３Ａ４の阻害薬又は誘導薬で同時に治療されない、実施形態Ｅ１〜Ｅ２４のいずれか１つに係る使用。
【０１６４】
実施形態Ｅ２６：患者は、３ヵ月より長い期間にわたってＣＹＰ３Ａ４阻害薬又は誘導薬で同時に治療されない、実施形態Ｅ１〜Ｅ２４のいずれか１つに係る使用。
【０１６５】
実施形態Ｅ２７：ＣＹＰ３Ａ４阻害薬は、ＣＹＰ３Ａ４の強力な、中程度の、又は弱い阻害薬であり、及びＣＹＰ３Ａ４誘導薬は、ＣＹＰ３Ａ４の強力な、中程度の、又は弱い誘導薬である、実施形態Ｅ２５又はＥ２６に係る使用。
【０１６６】
実施形態Ｅ２８：ＣＹＰ３Ａ４阻害薬は、ＣＹＰ３Ａ４の強力な阻害薬であり、及びＣＹＰ３Ａ４誘導薬は、ＣＹＰ３Ａ４の強力な誘導薬である、実施形態Ｅ２７に係る使用。
【０１６７】
実施形態Ｅ２９：脳アミロイド血管症は、ＣＡＡ−１型である、実施形態Ｅ１〜Ｅ２８のいずれか１つに係る使用。
【０１６８】
定義
本明細書で使用されるとき、用語「化合物１」又は「Ｃｍｐｄ  １」は、以下の構造式：
【化１】
2019534885.tif 000002
を有するＮ−（６−（（３Ｒ，６Ｒ）−５−アミノ−３，６−ジメチル−６−（トリフルオロメチル）−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−１，４−オキサジン−３−イル）−５−フルオロピリジン−２−イル）−３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピコリンアミドを指す。
【０１６９】
実施例１では、別の化学命名フォーマットを使用して、「化合物１」は、３−クロロ−５−トリフルオロメチル−ピリジン−２−カルボン酸［６−（（３Ｒ，６Ｒ）−５−アミノ−３，６−ジメチル−６−トリフルオロメチル−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−［１，４］オキサジン−３−イル）−５−フルオロ−ピリジン−２−イル］−アミドとも称される。
【０１７０】
用語「化合物１」、「Ｃｍｐｄ  １」及びその対応する完全な化学名は、本発明の記載全体を通じて同義的に使用される。この用語は、一方の形態の化合物のみを意図することが文脈上明らかに指示されない限り、遊離形態又は薬学的に許容可能な塩の形態のいずれの化合物も指すことが意図される。化合物１は、国際公開第２０１２／０９５４６９  Ａ１号パンフレット、実施例３４に記載される。国際公開第２０１２／０９５４６９  Ａ１号パンフレット、詳細には実施例３４の合成に関する開示は、全体として本明細書によって参照により援用される。
【０１７１】
本明細書で使用されるとき、用語「脳アミロイド血管症」又は「ＣＡＡ」は、皮質及び軟髄膜の血管の血管壁内のβ−アミロイド（Ａβ）タンパク質の蓄積を特徴とする疾患を指す。ＣＡＡは、致命的な又は日常生活に支障をきたす脳内出血（ＩＣＨ）並びに虚血傷害及び認知症の大きい要因となる、高齢者における血管壁破壊及び血管機能不全の一般的原因である（Ｇｕｒｏｌ  ＭＥ  ｅｔ  ａｌ．，２０１６）。本明細書で使用されるとき、用語「脳アミロイド血管症」又は「ＣＡＡ」は、ＣＡＡ−１型又はＣＡＡ−２型のみが意図されることを文脈が明らかにしない限り、ＣＡＡ−１型とＣＡＡ−２型との両方を包含する。
【０１７２】
本明細書で使用されるとき、用語「ＣＡＡ−１型」は、皮質毛細血管の血管壁内のＡβタンパク質沈着を特徴とする毛細血管ＣＡＡ（ｃａｐＣＡＡ）を指す（Ｔｈａｌ  ｅｔ  ａｌ．，２００２）。
【０１７３】
本明細書で使用されるとき、用語「ＣＡＡ−２型」は、軟髄膜の及び皮質の血管（皮質毛細血管を除く）の血管壁内のＡβタンパク質沈着を特徴とするＣＡＡを指す（Ｔｈａｌ  ｅｔ  ａｌ．，２００２）。
【０１７４】
本明細書で使用されるとき、用語「ＣＡＡの治療」は、ＣＡＡ又はＣＡＡの臨床症状、例えばＩＣＨ、虚血傷害又は認知症の少なくとも１つの発症を失速又は停止させるための患者への化合物１の投与を指す。ＣＡＡの発症は、陽電子放射断層撮影（ＰＥＴ）トレーサー、例えば１８Ｆ−フロルベタピルを使用して、皮質（例えば、後頭皮質）及び軟髄膜の血管の血管壁内のＡβの蓄積を測定することによって評価することができる（Ｇｕｒｏｌ  ＭＥ  ｅｔ  ａｌ．，２０１６）。代わりに、ＣＡＡの発症は、脳微小出血（ＣＭＢ）をＣＡＡの出血マーカーとしてモニタリングすることによって評価することができる（Ｇｒｅｅｎｂｅｒｇ  ＳＭ  ｅｔ  ａｌ．，２０１４）。ＣＭＢのモニタリングのための適切な技術としては、例えば、磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）、磁化率強調画像法（ＳＷＩ）及びＭＲＩ  Ｔ２＊強調勾配リコールエコー（ｇｒａｄｉｅｎｔ−ｒｅｃａｌｌｅｄ  ｅｃｈｏ）画像法（ＧＲＥ）が挙げられ、且つＣｈｅｎｇ  ＡＬ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３に記載されている。さらに、白質高信号域（ＷＭＨ）は、ＣＡＡと診断された患者において健康な高齢者よりもかなり大きい体積で、又はＡＤ若しくは軽度認知障害（ＭＣＩ）を患う患者において生じる（Ｇｒｅｅｎｂｅｒｇ  ＳＭ  ｅｔ  ａｌ．，２０１４）。従って、ＣＡＡ発症は、ＭＲＩを使用するＷＭＨ体積の測定によってモニタリングすることができる（Ｃｈｅｎ  ＹＷ  ｅｔ  ａｌ．，２００６）。「ＣＡＡの治療」は、ＣＡＡに対する治療を受けている患者における脳の虚血性イベントの可能性を低下させるという結果的な利益を有することが期待される。従って、本発明の一実施形態では、用語「ＣＡＡの治療」は、用語「脳内出血の治療」と均等である。本発明の別の実施形態では、用語「ＣＡＡの治療」は、用語「ＣＡＡ及び／又は脳内出血の治療」と均等である。本発明のさらなる実施形態では、用語「ＣＡＡの治療」は、用語「ＣＡＡ及びそれと関連する脳内出血の治療」と均等である。
【０１７５】
本明細書で使用されるとき、用語「ＣＡＡの予防」は、ＣＡＡの予防的治療、ＣＡＡの開始若しくは進行を遅延させること、又はＣＡＡの臨床症状の少なくとも１つの開始若しくは進行を遅延させることを指す。例えば、ＣＡＡの開始又は進行は、少なくとも０．５、１、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０年間遅らせられる。本発明の一実施形態では、用語「ＣＡＡの予防」は、用語「脳内出血の予防」と均等である。本発明の別の実施形態では、用語「ＣＡＡの予防」は、用語「ＣＡＡ及び／又は脳内出血の予防」と均等である。本発明のさらなる実施形態では、用語「ＣＡＡの予防」は、用語「ＣＡＡ及びそれと関連する脳内出血の予防」と均等である。
【０１７６】
本明細書で使用されるとき、用語「ＣＡＡの発症に対する遺伝的素因」には、限定されないが、遺伝的素因が、ダウン症候群、アミロイド前駆体タンパク質又はプレセニリン−１に対する遺伝子の変異、又はＡｐｏＥ４アレルの１つ又は２つのコピーの存在に起因する状況が含まれる。
【０１７７】
本明細書で使用されるとき、用語「アルツハイマー病」又は「ＡＤ」は、発症前アルツハイマー病又は臨床的アルツハイマー病のいずれか一方のみを意図することが文脈上明らかにならない限り、発症前アルツハイマー病及び臨床的アルツハイマー病の両方を包含する。
【０１７８】
本明細書で使用されるとき、用語「臨床的アルツハイマー病」又は「臨床的ＡＤ」は、ＡＤに起因する軽度認知障害（ＭＣＩ）又はＡＤに起因する認知症のいずれか一方のみを意図することが文脈上明らかにならない限り、ＡＤに起因するＭＣＩ及びＡＤに起因する認知症の両方を包含する。欧州医薬品庁（ＥＭＡ）は、その“Ｄｒａｆｔ  ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ  ｏｎ  ｔｈｅ  ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｍｅｄｉｃｉｎｅｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ＡＤ  ａｎｄ  ｏｔｈｅｒ  ｄｅｍｅｎｔｉａｓ”（ＥＭＡ／Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ  ｆｏｒ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ  ｆｏｒ  Ｈｕｍａｎ  Ｕｓｅ（ＣＨＭＰ）／５３９９３１／２０１４）において、ＡＤに起因するＭＣＩ及びＡＤによる認知症の診断のための米国国立老化研究所（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｏｎ  Ａｇｉｎｇ）基準を以下に示す通りまとめている。
【０１７９】
ＡＤに起因するＭＣＩの診断には、以下によって認められる個人内低下のエビデンスが必要である：
ａ）自己報告又は情報提供者の報告及び／又は臨床医の判断によって指摘される通りの、これまで達成されていたレベルからの認知の変化。
ｂ）年齢対応及び教育対応規範値と比べた少なくとも１つのドメイン（但し必ずしもエピソード記憶ではない）における認知障害、２つ以上の認知ドメインにおける障害は許容される。
ｃ）機能的能力の非依存性の維持、但しこの基準はまた、手段的日常生活動作（ＩＡＤＬ）の遂行における「軽度の問題」も、それが補助ありの場合のみであったとしても容認する（すなわち非依存性が強く要求されるというよりむしろ、この基準は機能喪失に起因する軽度の依存性を許容する）。
ｄ）認知症がない、これは名目上、ｃ（上記）に応じたものとなる。
ｅ）他の潜在的に認知症性の障害がない場合のＡＤの表現型と一致する臨床像。以下によって診断の確信度を高めることが推奨され得る。
１）最適：陽性Ａβバイオマーカー及び陽性変性バイオマーカー
２）最適未満：
ｉ．陽性Ａβバイオマーカー、変性バイオマーカーなし
ｉｉ．陽性変性バイオマーカー、Ａβバイオマーカー検査なし
【０１８０】
ＡＤ認知症の診断には、以下が必要である：
ａ）認知及び機能の個人内低下によって決定される通りの認知症の存在。
ｂ）潜行性発症及び進行性認知低下。
ｃ）２つ以上の認知ドメインにおける障害、健忘症症状が最も一般的であるが、この基準では、非健忘症症状（例えば、実行機能及び視空間能力の障害）に基づく診断も許容される。
ｄ）他の認知症障害に関連する顕著な特徴がないこと。
【０１８１】
上記のＡＤに起因するＭＣＩの節で考察したバイオマーカーアルゴリズムによって診断の確信度を高めることが推奨され得る。
【０１８２】
本明細書で使用されるとき、用語「前臨床期アルツハイマー病」又は「前臨床期ＡＤ」は、臨床症状の非存在下でのＡＤのインビボ分子バイオマーカーの存在を指す。米国国立老化研究所及びアルツハイマー病協会（Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ）は、前臨床期ＡＤの様々なステージを規定する表１に示すスキームを提供している（Ｓｐｅｒｌｉｎｇ  ＲＡ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１）。
【０１８３】
【表１】
2019534885.tif 000003
【０１８４】
本明細書で使用されるとき、用語「患者」は、ヒト対象を指す。
【０１８５】
本明細書で使用されるとき、用語「アミロイド陽性」は、検出可能なレベルの蓄積したＡβを脳に有する患者を指す。一実施形態において、ＣＳＦ中のＡβ若しくはアミロイドＰＥＴイメージング又は両方の評価に基づき患者が検出可能なレベルの蓄積したＡβを脳に有する場合、その患者は、「アミロイド陽性」である。
【０１８６】
本明細書で使用されるとき、用語「ＰＥＴによって決定されるアミロイド陽性」は、バックグラウンドと比較したアミロイドＰＥＴトレーサー貯留レベルの増加を指す。その比較は、目視による読み取りにより、及び／又は標準取り込み値比（ＳＵＶＲ）の半定量的尺度を使用して行うことができる。定性的な目視による読み取りを介するアミロイド陽性の測定に適したＰＥＴトレーサーとしては、１８Ｆ−フロルベタピル（Ｐａｌｍｑｖｉｓｔ  Ｓ  ｅｔ  ａｌ．，２０１５）、１８Ｆ−フロルベタベン（ＮｅｕｒａＣｅｑ）及び１８Ｆ−フルテメタモル（Ｖｉｚａｍｙｌ）が挙げられる。脳１８Ｆ−フロルベタピルＰＥＴスキャン（各スキャンについて２６０ＭＢｑ）に対する１．１以上のＳＵＶＲを、アミロイド陽性を示す半定量的診断閾値として使用することができる（Ｓｃｈｒｅｉｂｅｒ  Ｓ  ｅｔ  ａｌ．，２０１５）。１．２又は１．３のＳＵＶＲも閾値として使用できる可能性がある。
【０１８７】
本明細書で使用されるとき、用語「ＣＳＦ測定によって決定されるアミロイド陽性」は、健常対照群で観察されるものと比較したＣＳＦ  Ａβ１−４２値の減少を指す。例えば、アミロイド陽性は、ＣＳＦ中１９２ｎｇ／Ｌ以下のＡβ１−４２値によって決定され得る（Ｍａｔｔｓｓｏｎ  Ｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１５）。しかしながら、アミロイド陽性の決定に使用されるＣＳＦ  Ａβ１−４２カットオフ値は、用いられる詳細な技法に応じて変わることになる（Ｆｏｒｌｅｎｚａ  ＯＶ  ｅｔ  ａｌ．，２０１５）。アミロイド陽性はまた、ＣＳＦ中０．０９未満のＡβ１−４２／Ａβ１−４０比によって決定され得る（Ｊａｎｅｌｉｄｚｅ  Ｓ  ｅｔ  ａｌ．，２０１６）。一実施形態において、Ａβ１−４２／Ａβ１−４０比又はＡβ４２／Ａβ４０比は、０．２０、０．１５、０．１０、０．０９、０．０８、０．０７、０．０６又は０．０５未満又は０．２０〜０．０１、０．１５〜０．０１、０．１０〜０．０１又は０．０５〜０．０１である。Ａβ１−４０及びＡβ１−４２値は、例えば、Ｌｕｍｉｎｅｘプラットフォームでのモノクローナルシングル抗体サンドイッチ酵素結合免疫吸着（ＥＬＩＳＡ）アッセイ（Ｈｅｒｓｋｏｖｉｔｚ  ＡＺ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３）又はＭｅｓｏ  Ｓｃａｌｅ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ（ＭＳＤ）９６ウェルＭＵＬＴＩ−ＡＲＲＡＹヒト／げっ歯類（６Ｅ１０）Ａβ４０及び４２サンドイッチイムノアッセイ（Ｍｅｓｏ  Ｓｃａｌｅ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ，Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ，ＭＤ，ＵＳＡ）を使用した標準的なイムノアッセイ技法を用いて測定し得る。
【０１８８】
本明細書で使用されるとき、用語「ＣＹＰ３Ａ４」は、シトクロムＰ４５０  ３Ａ４を指す。ＣＹＰ３Ａ４は、多様な薬物の代謝において主要な役割を果たす酵素である（Ｌｕｏ  Ｇ  ｅｔ  ａｌ．，２００４）。
【０１８９】
本明細書で使用されるとき、用語「ＣＹＰ３Ａ４の誘導薬」は、ＣＹＰ３Ａ４活性レベルを増加させる薬物を指す。ＣＹＰ３Ａ４誘導薬の例としては、限定されないが、カルバマゼピン、フェニトイン、リファンピシン及びセント・ジョーンズ・ワートが挙げられる。ＣＹＰ３Ａ４活性の測定に好適な技法は周知である（例えば、Ｓｅｖｒｉｏｕｋｏｖａ  ＩＦ，Ｐｏｕｌｏｓ  ＴＬ，２０１５を参照されたい）。ＣＹＰ３Ａ４の「強力な」、「中程度の」及び「弱い」誘導薬は、化合物１の血漿曲線下面積（ＡＵＣ）（０〜無限大の曲線下面積（ＡＵＣｉｎｆ）として計算する）をそれぞれ≧８０％、≧５０％〜＜８０％及び≧２０％〜＜５０％だけ低下させる薬物である。一実施形態において、「ＣＹＰ３Ａ４の誘導薬」は、「ＣＹＰ３Ａ４の強力な誘導薬」である。ＣＹＰ３Ａの強力な誘導薬の例としては、限定されないが、カルバマゼピン、エンザルタミド、ミトタン、フェニトイン、リファンピン（別名リファンピシン）及びセント・ジョーンズ・ワートが挙げられる。ＣＹＰ３Ａの中程度の誘導薬の例としては、限定されないが、ボセンタン、エファビレンツ、エトラビリン及びモダフィニルが挙げられる。ＣＹＰ３Ａの弱い誘導薬の例としては、限定されないが、アルモダフィニル及びルフィナミドが挙げられる。ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｆｄａ．ｇｏｖ／Ｄｒｕｇｓ／ＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔＡｐｐｒｏｖａｌＰｒｏｃｅｓｓ／ＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔＲｅｓｏｕｒｃｅｓ／ＤｒｕｇＩｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓＬａｂｅｌｉｎｇ／ｕｃｍ０９３６６４．ｈｔｍ＃ｔａｂｌｅ３−３（最終表示日２０１６年１０月１１日）を参照されたい。
【０１９０】
本明細書で使用されるとき、用語「ＣＹＰ３Ａ４の阻害薬」は、ＣＹＰ３Ａ４活性レベルを低下させる薬物を指す。ＣＹＰ３Ａ４活性の測定に好適な技法は周知である（例えば、Ｓｅｖｒｉｏｕｋｏｖａ  ＩＦ，Ｐｏｕｌｏｓ  ＴＬ，２０１５を参照されたい）。ＣＹＰ３Ａ４阻害薬の例としては、限定されないが、クラリスロマイシン、グレープフルーツジュース及びイトラコナゾールが挙げられる。ＣＹＰ３Ａ４の「強力な」、「中程度の」及び「弱い」阻害薬は、化合物１の血漿ＡＵＣ（０〜無限大の曲線下面積（ＡＵＣｉｎｆ）として計算する）をそれぞれ≧５倍、≧２〜＜５倍及び≧１．２５〜＜２倍増加させる薬物である。一実施形態において「ＣＹＰ３Ａ４の阻害薬」は、「ＣＹＰ３Ａ４の強力な阻害薬」である。ＣＹＰ３Ａの強力な阻害薬の例としては、限定されないが、ボセプレビル、コビシスタット、コニバプタン、ダノプレビル及びリトナビル、エルビテグラビル及びリトナビル、グレープフルーツジュース、インジナビル及びリトナビル、イトラコナゾール、ケトコナゾール、ロピナビル及びリトナビル、パリタプレビル及びリトナビル及び（オムビタスビル及び／又はダサブビル）、ポサコナゾール、リトナビル、サキナビル及びリトナビル、テラプレビル、チプラナビル及びリトナビル、トロレアンドマイシン、ボリコナゾール、クラリスロマイシン、ジルチアゼム、イデラリシブ、ネファゾドン及びネルフィナビルが挙げられる。ＣＹＰ３Ａの中程度の阻害薬の例としては、限定されないが、アプレピタント、シメチジン、シプロフロキサシン、クロトリマゾール、クリゾチニブ、シクロスポリン、ドロネダロン、エリスロマイシン、フルコナゾール、フルボキサミン、イマチニブ、トフィソパム及びベラパミルが挙げられる。ＣＹＰ３Ａの弱い阻害薬の例としては、限定されないが、クロルゾキサゾン、シロスタゾール、ホスアプレピタント、イストラデフィリン、アイバカフトール、ロミタピド、ラニチジン、ラノラジン、タクロリムス及びチカグレロルが挙げられる。ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｆｄａ．ｇｏｖ／Ｄｒｕｇｓ／ＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔＡｐｐｒｏｖａｌＰｒｏｃｅｓｓ／ＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔＲｅｓｏｕｒｃｅｓ／ＤｒｕｇＩｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓＬａｂｅｌｉｎｇ／ｕｃｍ０９３６６４．ｈｔｍ＃ｔａｂｌｅ３−２（最終表示日２０１６年１０月１１日）を参照されたい。
【０１９１】
本明細書で使用されるとき、用語「ＣＹＰ３Ａ４の阻害薬又は誘導薬で同時に治療される」は、患者がＣＹＰ３Ａ４の阻害薬又は誘導薬による治療レジメンに供される一方で化合物１による治療レジメンにも供される状況を指す。一実施形態において、患者は、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５又は１６週間より長くＣＹＰ３Ａ４の阻害薬又は誘導薬と化合物１とで同時に治療されることはない。別の実施形態において、患者は、１、２、３、４、５、７、１０又は１２ヵ月より長くＣＹＰ３Ａ４の阻害薬又は誘導薬と化合物１とで同時に治療されることはない。特定の実施形態において、患者は、３ヵ月より長くＣＹＰ３Ａ４の阻害薬又は誘導薬と化合物１とで同時に治療されることはない。
【０１９２】
本明細書で使用されるとき、用語「薬学的に許容可能な塩」は、本発明の化合物の生物学的有効性を保持し、且つ典型的には生物学的に又は他に望ましくないものでない塩を指す（Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ：Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ，ａｎｄ  Ｕｓｅ，２ｎｄ  Ｒｅｖｉｓｅｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ（２０１１）Ｐ．Ｈｅｉｎｒｉｃｈ  Ｓｔａｈｌ，Ｃａｍｉｌｌｅ  Ｇ．Ｗｅｒｍｕｔｈ）。
【０１９３】
本明細書で使用されるとき、「医薬組成物」は、経口投与に好適な固体形態（典型的にはゼラチンカプセル）で、本発明の化合物又はその薬学的に許容可能な塩と、少なくとも１つの薬学的に許容可能な担体とを含む。薬学的に許容可能な担体のリストは、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓにおいて参照することができる。
【０１９４】
本発明の化合物の「治療有効量」という用語は、開始時ベースライン値と比べたＣＳＦ又は血漿Ａβ１−４０レベルの減少から明らかな通りの患者のＢＡＣＥ−１の阻害を誘発することになる本発明の化合物の量を指す。
【０１９５】
明確にするため、本明細書に範囲が提供されるときには常に、前記範囲が端点を含むことが意図される。例えば、１日３０〜５０ｍｇの用量範囲は、１日３０及び５０ｍｇの用量も含む。
【０１９６】
【表２】
2019534885.tif 000004
【０１９７】
【表３】
2019534885.tif 000005
【０１９８】
【表４】
2019534885.tif 000006
【実施例】
【０１９９】
以下の実施例は、化合物１をどのように調製することができるかを示し（実施例１）、ＡＰＯＥ４トランスジェニックマウスモデルでの化合物１のＰＫ／ＰＤ効果を示し（実施例２）、ファースト・イン・ヒューマン臨床研究での化合物１のＰＤ効果を示し（実施例３）、３か月臨床研究での化合物１の安全性及び忍容性を実証し（実施例４）、３か月臨床研究での化合物１のＰＤ反応に対するＡｐｏＥ４遺伝子型の効果を示し（実施例５）、ＡＰＰ２３  ＡＤマウスモデルでのＣＡＡの低下における化合物１の治療有効性を実証し（実施例６）、老齢ＡＰＰ２３マウスでの脳微小出血の低下における化合物１の明らかな治療有効性を実証し（実施例７）、ＣＹＰ３Ａ４の強力な阻害薬又は誘導薬と組み合わせて投与された場合に化合物１のＡＵＣがどのように影響を受けるかを示し（実施例８）、ＡｐｏＥ４ホモ接合体リスク患者でのＣＡＡ及びそれと関連する脳内出血の治療に関する化合物１有効性研究をどのように実施できたかを示す（実施例９）。
【０２００】
実施例１：化合物１の調製
化合物１の調製については、国際公開第２０１２／０９５４６９  Ａ１号パンフレット（実施例３４）に記載される。化合物１はまた、以下に記載する通り調製され得る。
【０２０１】
ＮＭＲ法
プロトンスペクトルは、特に注記されない限り、Ｂｒｕｋｅｒ  ４００ＭＨｚ  ｕｌｔｒａｓｈｉｅｌｄ分光計で記録する。化学シフトは、メタノール（δ３．３１）、ジメチルスルホキシド（δ２．５０）又はクロロホルム（δ７．２９）に対するｐｐｍ単位で報告する。少量の乾燥試料（２〜５ｍｇ）を適切な重水素化溶媒（０．７ｍＬ）に溶解する。シミングは、自動化され、スペクトルは、当業者に周知の手順に従って得られる。
【０２０２】
一般的クロマトグラフィー情報
ＨＰＬＣ方法Ｈ１（ＲｔＨ１）：
ＨＰＬＣ−カラム寸法：３．０ｘ３０ｍｍ
ＨＰＬＣ−カラムタイプ：ＺｏｒｂａｘＳＢ−Ｃ１８，１．８μｍ
ＨＰＬＣ−溶出液：Ａ）水＋０．０５Ｖｏｌ．−％ＴＦＡ；Ｂ）ＡＣＮ＋０．０５Ｖｏｌ．−％ＴＦＡ
ＨＰＬＣ−グラジエント：３０−１００％Ｂ  ３．２５分，流量＝０．７ｍｌ／分
ＬＣＭＳ方法Ｈ２（ＲｔＨ２）：
ＨＰＬＣ−カラム寸法：３．０ｘ３０ｍｍ
ＨＰＬＣ−カラムタイプ：ＺｏｒｂａｘＳＢ−Ｃ１８，１．８μｍ
ＨＰＬＣ−溶出液：Ａ）水＋０．０５Ｖｏｌ．−％ＴＦＡ，Ｂ）ＡＣＮ＋０．０５Ｖｏｌ．−％ＴＦＡ
ＨＰＬＣ−グラジエント：Ｂ１０−１００％３．２５分，流量＝０．７ｍｌ／分
ＵＰＬＣＭＳ方法Ｈ３（ＲｔＨ３）：
ＨＰＬＣ−カラム寸法：２．１ｘ５０ｍｍ
ＨＰＬＣ−カラムタイプ：Ａｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣＨＳＳ  Ｔ３，１．８μｍ
ＨＰＬＣ−溶出液：Ａ）水＋０．０５Ｖｏｌ．−％ギ酸＋３．７５ｍＭ酢酸アンモニウムＢ）ＡＣＮ＋０．０４Ｖｏｌ．−％ギ酸
ＨＰＬＣ−グラジエント：２−９８％Ｂ１．４分，９８％Ｂ０．７５分，流量＝１．２ｍｌ／分
ＨＰＬＣ−カラム温度：５０℃
ＬＣＭＳ方法Ｈ４（ＲｔＨ４）：
ＨＰＬＣ−カラム寸法：３．０ｘ３０ｍｍ
ＨＰＬＣ−カラムタイプ：Ｚｏｒｂａｘ  ＳＢ−Ｃ１８，１．８μｍ
ＨＰＬＣ−溶出液：Ａ）水＋０．０５Ｖｏｌ．−％ＴＦＡ；Ｂ）ＡＣＮ＋０．０５Ｖｏｌ．−％ＴＦＡ
ＨＰＬＣ−グラジエント：７０−１００％Ｂ３．２５分，流量＝０．７ｍｌ／分
ＬＣＭＳ方法Ｈ５（ＲｔＨ５）：
ＨＰＬＣ−カラム寸法：３．０ｘ３０ｍｍ
ＨＰＬＣ−カラムタイプ：ＺｏｒｂａｘＳＢ−Ｃ１８，１．８μｍ
ＨＰＬＣ−溶出液：Ａ）水＋０．０５Ｖｏｌ．−％ＴＦＡ；Ｂ）ＡＣＮ＋０．０５Ｖｏｌ．−％ＴＦＡ
ＨＰＬＣ−グラジエント：８０−１００％  Ｂ３．２５分，流量＝０．７ｍｌ／分
ＬＣＭＳ方法Ｈ６（ＲｔＨ６）：
ＨＰＬＣ−カラム寸法：３．０ｘ３０ｍｍ
ＨＰＬＣ−カラムタイプ：Ｚｏｒｂａｘ  ＳＢ−Ｃ１８，１．８μｍ
ＨＰＬＣ−溶出液：Ａ）水＋０．０５Ｖｏｌ．−％ＴＦＡ；Ｂ）ＡＣＮ＋０．０５Ｖｏｌ．−％ＴＦＡ
ＨＰＬＣ−グラジエント：４０−１００％  Ｂ３．２５分，流量＝０．７ｍｌ／分
【０２０３】
ａ）２−ブロモ−５−フルオロ−４−トリエチルシラニル−ピリジン
３７０ｍｌ  ＴＨＦ中ジイソプロピルアミン（２５．３ｇ、２５０ｍｍｏｌ）の溶液を−７５℃のドライアイスアセトン浴で冷却した。温度を−５０℃未満に維持しながらＢｕＬｉ（１００ｍｌ、２５０ｍｍｏｌ、ヘキサン中２．５Ｍ）を滴下して加えた。混合物の温度が再び−７５℃に達した後、４５ｍｌ  ＴＨＦ中２−ブロモ−５−フルオロピリジン（３６．７ｇ、２０８ｍｍｏｌ）の溶液を滴下して加えた。この混合物を−７５℃で１時間撹拌した。トリエチルクロロシラン（３９．２ｇ、２６０ｍｍｏｌ）を速やかに加えた。温度は、−５０℃未満のままであった。冷却浴を除去し、反応混合物を−１５℃に温まるまで放置し、ＮＨ４Ｃｌ水溶液（１０％）に注いだ。ＴＢＭＥを加え、層を分離させた。有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４・Ｈ２Ｏで乾燥させ、ろ過して蒸発させると、褐色の液体が得られ、これを０．５ｍｍＨｇで蒸留させて表題化合物を淡黄色の液体（ｂ．ｐ．１０５〜１１１℃）として得た。ＨＰＬＣ：ＲｔＨ４＝２．２８４ｍｉｎ；ＥＳＩＭＳ：２９０，２９２［（Ｍ＋Ｈ）＋，１Ｂｒ］；１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：８．１４（ｓ，１Ｈ），７．４０（ｄ，１Ｈ），１．００−０．８２（ｍ，１５Ｈ）．
【０２０４】
ｂ）１−（６−ブロモ−３−フルオロ−４−トリエチルシラニル−ピリジン−２−イル）−エタノン
５００ｍｌ  ＴＨＦ中ジイソプロピルアミン（２５．４ｇ、２５０ｍｍｏｌ）の溶液を−７５℃に冷却した。温度を−５０℃未満に維持しながらＢｕＬｉ（１００ｍｌ、２５０ｍｍｏｌ、ヘキサン中２．５Ｍ）を滴下して加えた。反応温度が再び−７５℃に達した後、６０ｍｌ  ＴＨＦ中２−ブロモ−５−フルオロ−４−トリエチルシラニル−ピリジン（５６．０４ｇ、１９３ｍｍｏｌ）の溶液を滴下して加えた。この混合物をドライアイス浴中で７０分間撹拌した。Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（２１．８７ｇ、２５０ｍｍｏｌ）を速やかに加え、反応温度が−５７℃に上昇した。この反応混合物をドライアイス浴中で１５分間撹拌し、次に−４０℃に温まるまで放置した。これを２Ｍ  ＨＣｌ水溶液（２５０ｍｌ、５００ｍｍｏｌ）、２５０ｍｌ水及び１００ｍｌブラインの混合物に注いだ。この混合物をＴＢＭＥで抽出し、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４・Ｈ２Ｏで乾燥させ、ろ過して蒸発させると、黄色の油が得られ、これをシリカゲルカラムでヘキサン／０〜５％ＴＢＭＥによる溶出によって精製して５８．５ｇの表題化合物を黄色の液体として得た。ＴＬＣ（Ｈｅｘ／ＴＢＭＥ  ９９／１）：Ｒｆ＝０．２５；ＨＰＬＣ：ＲｔＨ４＝１．９２１ｍｉｎ；ＥＳＩＭＳ：３３２，３３４［（Ｍ＋Ｈ）＋，１Ｂｒ］；１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：７．５７（ｄ，１Ｈ），２．６８（ｓ，３Ｈ），１．００−０．８４（ｍ，１５Ｈ）．
【０２０５】
ｃ）（Ｓ）−２−（６−ブロモ−３−フルオロ−４−トリエチルシラニル−ピリジン−２−イル）−２−トリメチルシラニルオキシ−プロピオニトリル
最初は、１００ｍｌ乾燥ＤＣＭ中に水（５４ｍｇ、３．００ｍｍｏｌ）を溶解させることにより触媒溶液を調製した（≦０．００１％水）。この湿潤ＤＣＭ（４４ｍｌ、１．３２ｍｍｏｌ含水量）を２０ｍｌ乾燥ＤＣＭ中チタン（ＩＶ）ブトキシド（５００ｍｇ、１．４７ｍｍｏｌ）の十分に撹拌した溶液に加えた。得られた澄明な溶液を１時間還流した。次に、この溶液を室温に冷却し、２，４−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−６−｛［（Ｅ）−（Ｓ）−１−ヒドロキシメチル−２−メチル−プロピルイミノ］−メチル｝−フェノール［ＣＡＳ  １５５０５２−３１−６］（４６９ｍｇ、１．４７ｍｍｏｌ）を加えた。得られた黄色の溶液を室温で１時間撹拌した。この触媒溶液（０．０２３Ｍ、４６．６ｍｌ、１．０７ｍｍｏｌ）を２２３ｍｌ乾燥ＤＣＭ中１−（６−ブロモ−３−フルオロ−４−トリエチルシラニル−ピリジン−２−イル）−エタノン（３５．５３ｇ、１０７ｍｍｏｌ）及びシアン化トリメチルシリル（１２．７３ｇ、１２８ｍｍｏｌ）の溶液に加えた。この混合物を２日間撹拌し、蒸発させて、４７ｇの粗表題化合物をオレンジ色の油として得た。ＨＰＬＣ：ＲｔＨ５＝２．７７３ｍｉｎ；ＥＳＩＭＳ：４３１，４３３［（Ｍ＋Ｈ）＋，１Ｂｒ］；１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：７．４６（ｄ，１Ｈ），２．０４（ｓ，３Ｈ），１．００（ｔ，９Ｈ），１．０３−０．８７（ｍ，１５Ｈ），０．２０（ｓ，９Ｈ）．
【０２０６】
ｄ）（Ｒ）−１−アミノ−２−（６−ブロモ−３−フルオロ−４−トリエチルシラニル−ピリジン−２−イル）−プロパン−２−オールヒドロクロリド
ボラン・硫化ジメチル錯体（１６．５５ｇ、２１８ｍｍｏｌ）を４７０ｍｌ  ＴＨＦ中の粗（Ｓ）−２−（６−ブロモ−３−フルオロ−４−トリエチルシラニル−ピリジン−２−イル）−２−トリメチルシラニルオキシ−プロピオニトリル（４７ｇ、１０９ｍｍｏｌ）の溶液に加えた。この混合物を２時間還流した。加熱浴を除去し、ＭｅＯＨを慎重に滴下して加えることにより反応混合物をクエンチした。気体の発生が止んだ後、６Ｍ  ＨＣｌ水溶液（２３．６ｍｌ、１４２ｍｍｏｌ）をゆっくりと加えた。得られた溶液を蒸発させて、残渣をＭｅＯＨ中に溶解して蒸発（２回）させて、以降の反応に十分な純度の４４．５ｇの黄色の泡を得た。ＨＰＬＣ：ＲｔＨ１＝２．６１７ｍｉｎ；ＥＳＩＭＳ：３６３，３６５［（Ｍ＋Ｈ）＋，１Ｂｒ］；１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：７．９３（ｓ，ｂｒ，３Ｈ），７．５３（ｄ，１Ｈ），６．１１（ｓ，ｂｒ，１Ｈ），３．３６−３．２７（ｍ，１Ｈ），３．１８−３．０９（ｍ，１Ｈ），１．５３（ｓ，３Ｈ），０．９９−０．８１（ｍ，１５Ｈ）．
【０２０７】
ｅ）（Ｒ）−Ｎ−（２−（６−ブロモ−３−フルオロ−４−（トリエチルシリル）ピリジン−２−イル）−２−ヒドロキシプロピル）−４−ニトロベンゼンスルホンアミド
３３５ｍｌ  ＴＨＦ中の粗（Ｒ）−１−アミノ−２−（６−ブロモ−３−フルオロ−４−トリエチルシラニル−ピリジン−２−イル）−プロパン−２−オールヒドロクロリド（４３．５ｇ、１０９ｍｍｏｌ）の溶液に５００ｍｌ水中ＮａＨＣＯ３（２１．０２ｇ、２５０ｍｍｏｌ）の溶液を加えた。この混合物を０〜５℃に冷却し、１００ｍｌ  ＴＨＦ中４−ニトロベンゼンスルホニルクロリド（２６．５ｇ、１２０ｍｍｏｌ）の溶液を滴下して加えた。温度を室温に到達させながら得られたエマルションを一晩撹拌した。この混合物をＴＢＭＥで抽出した。有機層をＭｇＳＯ４・Ｈ２Ｏで乾燥させ、ろ過して蒸発させると、オレンジ色の樹脂が得られ、これをシリカゲルカラムでヘキサン／１０〜２０％ＥｔＯＡｃによる溶出により精製して、３７．５６ｇの表題化合物を黄色の樹脂として得た。ＴＬＣ（Ｈｅｘ／ＥｔＯＡｃ  ３／１）：Ｒｆ＝０．３４；ＨＰＬＣ：ＲｔＨ４＝１．６７８ｍｉｎ；ＥＳＩＭＳ：５４８，５５０［（Ｍ＋Ｈ）＋，１Ｂｒ］；１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：８．４０（ｄ，２Ｈ），８．０６（ｔ，１Ｈ），７．９７（ｄ，２Ｈ），７．４５（ｄ，１Ｈ），５．４２（ｓ，１Ｈ），３．２３（ｄ，２Ｈ），１．４４（ｓ，３Ｈ）０．９７−０．８１（ｍ，１５Ｈ）；ＣｈｉｒａｌＨＰＬＣ（Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＤ−Ｈ  １２１３，ＵＶ  ２１０ｎｍ）：９０％ｅｅ．
【０２０８】
ｆ）６−ブロモ−３−フルオロ−２−［（Ｓ）−２−メチル−１−（４−ニトロ−ベンゼンスルホニル）−アジリジン−２−イル］−４−トリエチルシラニル−ピリジン
５１０ｍｌ  ＴＨＦ中トリフェニルホスフィン（２１．５５ｇ、８２ｍｍｏｌ）及び（Ｒ）−Ｎ−（２−（６−ブロモ−３−フルオロ−４−（トリエチルシリル）ピリジン−２−イル）−２−ヒドロキシプロピル）−４−ニトロベンゼンスルホンアミド（３７．５６ｇ、６９ｍｍｏｌ）の溶液を４℃に冷却した。温度を１０℃未満に維持しながらトルエン中アゾジカルボン酸ジエチルの溶液（４０重量％、３８．８ｇ、８９ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。冷却浴を除去し、反応混合物を室温で１時間撹拌した。この反応混合物を約１０００ｍｌトルエンで希釈し、ロータリーエバポレータにおける蒸発によってＴＨＦを除去した。得られた粗生成物のトルエン溶液をシリカゲルカラムでヘキサン／５〜１７％ＥｔＯＡｃによる溶出により予め精製した。最も純粋な画分を合わせ、蒸発させ、ＴＢＭＥ／ヘキサンから結晶化させて、２９．２ｇの表題化合物を白色の結晶として得た。ＨＰＬＣ：ＲｔＨ４＝２．５４６ｍｉｎ；ＥＳＩＭＳ：５３０，５３２［（Ｍ＋Ｈ）＋、１Ｂｒ］；１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：８．４０（ｄ，２Ｈ），８．１９（ｄ，２Ｈ），７．３９（ｄ，１Ｈ），３．１４（ｓ，１Ｈ），３．０２（ｓ，１Ｈ），２．０１（ｓ，３Ｈ）１．０３−０．８３（ｍ，１５Ｈ）；α［Ｄ］−３５．７°（ｃ＝０．９７，ＤＣＭ）．
【０２０９】
ｇ）６−ブロモ−３−フルオロ−２−［（Ｓ）−２−メチル−１−（４−ニトロ−ベンゼンスルホニル）−アジリジン−２−イル］−ピリジン
フッ化カリウム（１．１ｇ、１８．８５ｍｍｏｌ）を２５ｍｌ  ＴＨＦ中６−ブロモ−３−フルオロ−２−［（Ｓ）−２−メチル−１−（４−ニトロ−ベンゼンスルホニル）−アジリジン−２−イル］−４−トリエチルシラニル−ピリジン（５ｇ、９．４３ｍｍｏｌ）及びＡｃＯＨ（１．１３ｇ、９．４３ｍｍｏｌ）の溶液に加えた。ＤＭＦ（３５ｍｌ）を加え、懸濁液を室温で１時間撹拌した。反応混合物をＮａＨＣＯ３飽和水溶液及びＴＢＭＥの混合物に注いだ。層を分離し、ブライン及びＴＢＭＥで洗浄した。合わせた有機層をＭｇＳＯ４・Ｈ２Ｏで乾燥させ、ろ過して蒸発させると、黄色の油が得られ、これをＴＢＭＥ／ヘキサンから結晶化させて、３．４５ｇの表題化合物を白色の結晶として得た。ＨＰＬＣ：ＲｔＨ６＝２．６１２ｍｉｎ；ＥＳＩＭＳ：４１６，４１８［（Ｍ＋Ｈ）＋，１Ｂｒ］；１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：８．４１（ｄ，２Ｈ），８．１９（ｄ，２Ｈ），７．４８（ｄｄ，１Ｈ），７．３５（ｔ，１Ｈ），３．１４（ｓ，１Ｈ），３．０３（ｓ，１Ｈ），２．０４（ｓ，３Ｈ）；α［Ｄ］−３５．７°（ｃ＝０．８９，ＤＣＭ）．
【０２１０】
ｈ）（Ｒ）−２−［（Ｒ）−２−（６−ブロモ−３−フルオロ−ピリジン−２−イル）−２−（４−ニトロ−ベンゼンスルホニルアミノ）−プロポキシ］−３，３，３−トリフルオロ−２−メチル−プロピオン酸エチルエステル
ＤＭＦ（１５８ｍｌ）中（Ｒ）−３，３，３−トリフルオロ−２−ヒドロキシ−２−メチル−プロピオン酸エチルエステル（１１．９３ｇ、６４．１ｍｍｏｌ）の溶液の真空排気／窒素フラッシュを２回行った。水浴による冷却を用いて約２５℃の反応温度を維持しながらＤＭＦ（１７ｍｌ）中ＫＯｔＢｕ（６．２１ｇ、５５．５ｍｍｏｌ）の溶液を滴下して加えた。１５分後、固体の６−ブロモ−３−フルオロ−２−［（Ｓ）−２−メチル−１−（４−ニトロ−ベンゼンスルホニル）−アジリジン−２−イル］−ピリジン（１７．７８ｇ、４２．７ｍｍｏｌ）を加え、撹拌を３時間継続した。この反応混合物を１Ｍ  ＨＣｌ（５６ｍｌ）、ブライン及びＴＢＭＥの混合物に注いだ。層を分離し、ブライン及びＴＢＭＥで洗浄した。合わせた有機層をＭｇＳＯ４・Ｈ２Ｏで乾燥させ、ろ過して蒸発させた。粗反応生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン／２５〜３３％ＴＢＭＥ）によって精製すると１６．９３ｇの表題化合物が黄色の樹脂として得られ、これは、異性体副生成物により不純であった（１Ｈ−ＮＭＲによるとき７０：３０比）。
ＨＰＬＣ：ＲｔＨ６＝２．３８０ｍｉｎ；ＥＳＩＭＳ：６０２，６０４［（Ｍ＋Ｈ）＋，１Ｂｒ］；１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：８．３２（ｄ，２Ｈ），８．０７（ｄ，２Ｈ），７．４６−７．４１（ｍ，１Ｈ），７．３０−７．２３（ｍ，１Ｈ），６．９２（ｓ，１Ｈ），３．３９−４．３０（ｍ，２Ｈ），３．９５（ｄ，１Ｈ），３．８４（ｄ，１Ｈ），１．６８（ｓ，３Ｈ），１．５６（ｓ，３Ｈ），１．４０−１．３４（ｍ，３Ｈ）＋異性体副生成物．
【０２１１】
ｉ）（Ｒ）−２−［（Ｒ）−２−（６−ブロモ−３−フルオロ−ピリジン−２−イル）−２−（４−ニトロ−ベンゼンスルホニルアミノ）−プロポキシ］−３，３，３−トリフルオロ−２−メチル−プロピオンアミド
ＮＨ３／ＭｅＯＨ（７Ｍ、４８２ｍｌ）中（Ｒ）−２−［（Ｒ）−２−（６−ブロモ−３−フルオロ−ピリジン−２−イル）−２−（４−ニトロ−ベンゼンスルホニルアミノ）−プロポキシ］−３，３，３−トリフルオロ−２−メチル−プロピオン酸エチルエステル（１６．９３ｇ、２８．１ｍｍｏｌ）の溶液を密閉容器内において５０℃で２６時間撹拌した。この反応混合物を蒸発させ、残渣をＤＣＭから結晶化させて、９．１１ｇの表題化合物を無色の結晶として得た。
ＨＰＬＣ：ＲｔＨ６＝２．４２２ｍｉｎ；ＥＳＩＭＳ：５７３，５７５［（Ｍ＋Ｈ）＋，１Ｂｒ］；１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：８．３３（ｄ，２Ｈ），８．０６（ｄ，２Ｈ），７．４２（ｄｄ，１Ｈ），７．３０−７．２６（ｍ，１Ｈ），７．１７（ｓ，ｂｒ，１Ｈ），６．４１（ｓ，１Ｈ），５．５７（ｓ，ｂｒ，１Ｈ），４．１５（ｍ，２Ｈ），１．６８（ｓ，３Ｈ），１．６５（ｓ，３Ｈ）．
【０２１２】
ｊ）Ｎ−［（Ｒ）−１−（６−ブロモ−３−フルオロ−ピリジン−２−イル）−２−（（Ｒ）−１−シアノ−２，２，２−トリフルオロ−１−メチル−エトキシ）−１−メチル−エチル］−４−ニトロ−ベンゼンスルホンアミド
８５ｍｌ  ＤＣＭ中（Ｒ）−２−［（Ｒ）−２−（６−ブロモ−３−フルオロ−ピリジン−２−イル）−２−（４−ニトロ−ベンゼンスルホニルアミノ）−プロポキシ］−３，３，３−トリフルオロ−２−メチル−プロピオンアミド（８．４３ｇ、１４．７０ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（５．１２ｍｌ、３６．８ｍｍｏｌ）の懸濁液を０〜５℃に冷却した。無水トリフルオロ酢酸（２．４９ｍｌ、１７．６４ｍｍｏｌ）を３０分かけて滴下して加えた。更なるトリエチルアミン（１．５４ｍｌ、１１．０７ｍｍｏｌ）及び無水トリフルオロ酢酸（０．７５ｍｌ、５．２９ｍｍｏｌ）を加えて反応を完了させた。１４ｍｌアンモニア水（２５％）及び１４ｍｌ水を加えることにより反応混合物をクエンチした。このエマルションを１５分間撹拌し、更なる水及びＤＣＭを加え、層を分離した。有機層をＭｇＳＯ４  Ｈ２Ｏで乾燥させ、ろ過して蒸発させた。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／１０〜２５％ＥｔＯＡｃ）による精製により、８．０９ｇの表題化合物を黄色の樹脂として得た。
ＨＰＬＣ：ＲｔＨ６＝３．１２０ｍｉｎ；ＥＳＩＭＳ：５５５，５５７［（Ｍ＋Ｈ）＋、１Ｂｒ］；１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：８．３５（ｄ，２Ｈ），８．１１（ｄ，２Ｈ），７．５０（ｄｄ，１Ｈ），７．３２（ｄｄ，１Ｈ），６．７８（ｓ，１Ｈ），４．３９（ｄ  １Ｈ），４．２２（ｄ，１Ｈ），１．６８（ｓ，６Ｈ）．
【０２１３】
ｋ）（２Ｒ，５Ｒ）−５−（６−ブロモ−３−フルオロ−ピリジン−２−イル）−２，５−ジメチル−２−トリフルオロメチル−５，６−ジヒドロ−２Ｈ−［１，４］オキサジン−３−イルアミン
９２ｍｌエタノール中Ｎ−［（Ｒ）−１−（６−ブロモ−３−フルオロ−ピリジン−２−イル）−２−（（Ｒ）−１−シアノ−２，２，２−トリフルオロ−１−メチル−エトキシ）−１−メチル−エチル］−４−ニトロ−ベンゼンスルホンアミド（９．１８ｇ、１６．５３ｍｍｏｌ）及びＮ−アセチルシステイン（５．４０ｇ、３３．１０ｍｍｏｌ）の溶液を真空排気し、窒素でフラッシュした。Ｋ２ＣＯ３（４．５７ｇ、３３．１ｍｍｏｌ）を加え、混合物を８０℃で３日間撹拌した。反応混合物を元の容積の約１／４になるまで真空濃縮し、水とＴＢＭＥとに分配した。有機層を１０％Ｋ２ＣＯ３水溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、ろ過して蒸発させると、黄色の油が得られた。シリカカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／１４〜５０％（ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ  ９５：５））により、４．５５ｇの表題化合物をオフホワイトの固体として得た。
ＨＰＬＣ：ＲｔＨ２＝２．７４１ｍｉｎ；ＥＳＩＭＳ：３７０，３７２［（Ｍ＋Ｈ）＋，１Ｂｒ］；１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：７．７１−７．６２（ｍ，２Ｈ），５．９７（ｓ，ｂｒ，２Ｈ），４．０２（ｄ  １Ｈ），３．７０（ｄ，１Ｈ），１．５１（ｓ，３Ｈ），１．４７（ｓ，３Ｈ）．
【０２１４】
ｌ）（２Ｒ，５Ｒ）−５−（６−アミノ−３−フルオロ−ピリジン−２−イル）−２，５−ジメチル−２−トリフルオロメチル−５，６−ジヒドロ−２Ｈ−［１，４］オキサジン−３−イルアミン
ガラス／ステンレス鋼オートクレーブを窒素でパージし、エチレングリコール（１３０ｍｌ）中Ｃｕ２Ｏ（０．４６４ｇ、３．２４ｍｍｏｌ）、アンモニア（１０１ｍｌ、２５％、ａｑ．、６４８ｍｍｏｌ、３０当量）及び（２Ｒ，５Ｒ）−５−（６−ブロモ−３−フルオロ−ピリジン−２−イル）−２，５−ジメチル−２−トリフルオロメチル−５，６−ジヒドロ−２Ｈ−［１，４］オキサジン−３−イルアミン（８ｇ、２１．６ｍｍｏｌ）を加えた。オートクレーブを閉じ、懸濁液を６０℃に加熱し、溶液を約４８時間撹拌した（最大圧力０．７バール、内部温度５９〜６０℃）。反応混合物を酢酸エチル及び水で希釈した。有機相を水で洗浄し、１２％アンモニア水で４回洗浄し、及び最後にブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過して蒸発させた。粗生成物（７ｇ、幾らかのエチレングリコールを含む、定量的収率）を更なる精製なしに次の工程で使用した。
ＨＰＬＣ：ＲｔＨ３＝０．６０ｍｉｎ；ＥＳＩＭＳ：３０７［（Ｍ＋Ｈ）＋］．
【０２１５】
ｍ）［（２Ｒ，５Ｒ）−５−（６−アミノ−３−フルオロ−ピリジン−２−イル）−２，５−ジメチル−２−トリフルオロメチル−５，６−ジヒドロ−２Ｈ−［１，４］オキサジン−３−イル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
ジクロロメタン（１８５ｍｌ）中（２Ｒ，５Ｒ）−５−（６−アミノ−３−フルオロ−ピリジン−２−イル）−２，５−ジメチル−２−トリフルオロメチル−５，６−ジヒドロ−２Ｈ−［１，４］オキサジン−３−イルアミン（６．６２ｇ、２１．６ｍｍｏｌ）、Ｂｏｃ２Ｏ（４．７２ｇ、２１．６ｍｍｏｌ）及びヒューニッヒ塩基（５．６６ｍｌ、３２．４ｍｍｏｌ）の溶液を室温で１８時間撹拌した。反応混合物をＮａＨＣＯ３飽和水溶液及びブラインで洗浄した。水層をジクロロメタンで逆抽出し、合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過して蒸発させると、淡緑色の固体が得られた（１４ｇ）。この粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（シクロヘキサン：酢酸エチル９５：５〜６０：４０）にかけて、７．６８ｇの表題化合物を得た。
ＴＬＣ（シクロヘキサン：酢酸エチル３：１）：Ｒｆ＝０．２１；ＨＰＬＣ：ＲｔＨ３＝１．１４ｍｉｎ；ＥＳＩＭＳ：４０８［（Ｍ＋Ｈ）＋］；１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：１１．４７（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），７．２３（ｄｄ，Ｊ＝１０．４２，８．７８Ｈｚ，１Ｈ），６．４５（ｄｄ，Ｊ＝８．７８，２．６４Ｈｚ，１Ｈ），４．５０（ｂｒ．ｓ，２Ｈ），４．３２（ｄ，Ｊ＝２．３８Ｈｚ，１Ｈ），４．１０（ｄ，Ｊ＝１１．８０Ｈｚ，１Ｈ），１．６９（ｓ，３Ｈ，ＣＨ３），１．６５（ｓ，３Ｈ，ＣＨ３），１．５５（ｓ，９Ｈ）．
【０２１６】
ｎ）（（２Ｒ，５Ｒ）−５−｛６−［（３−クロロ−５−トリフルオロメチル−ピリジン−２−カルボニル）−アミノ］−３−フルオロ−ピリジン−２−イル｝−２，５−ジメチル−２−トリフルオロメチル−５，６−ジヒドロ−２Ｈ−［１，４］オキサジン−３−イル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
［（２Ｒ，５Ｒ）−５−（６−アミノ−３−フルオロ−ピリジン−２−イル）−２，５−ジメチル−２−トリフルオロメチル−５，６−ジヒドロ−２Ｈ−［１，４］オキサジン−３−イル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（３．３ｇ、８．１２ｍｍｏｌ）、３−クロロ−５−トリフルオロメチルピコリン酸（２．２ｇ、９．７４ｍｍｏｌ）、ＨＯＡｔ（１．９９ｇ、１４．６２ｍｍｏｌ）及び塩酸ＥＤＣ（２．３３ｇ、１２．１８ｍｍｏｌ）の混合物をＤＭＦ（８１ｍｌ）中、室温で４８時間撹拌した。この反応混合物を酢酸エチルで希釈し、水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過して蒸発させた。粗生成物（１２ｇ）をシリカゲルクロマトグラフィー（シクロヘキサン対シクロヘキサン：酢酸エチル１：１）にかけて、５．２ｇの表題化合物を得た。
ＴＬＣ（シリカ、シクロヘキサン：酢酸エチル３：１）：Ｒｆ＝０．４７；ＨＰＬＣ：ＲｔＨ３＝１．４０ｍｉｎ；ＥＳＩＭＳ：６１５，６１６［（Ｍ＋Ｈ）＋，１Ｃｌ］；１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：１１．６８（ｓ，１Ｈ），１０．４１（ｓ，１Ｈ），８．８１（ｄｄ，Ｊ＝１．８２，０．６９Ｈｚ，１Ｈ），８．４５（ｄｄ，Ｊ＝８．９１，３．１４Ｈｚ，１Ｈ），８．１９（ｄｄ，Ｊ＝１．８８，０．６３Ｈｚ，１Ｈ），７．５９（ｄｄ，Ｊ＝９．７９，９．１６Ｈｚ，１Ｈ），４．３８（ｄ，Ｊ＝２．１３Ｈｚ，１Ｈ），４．１８（ｄ，Ｊ＝１１．８０Ｈｚ，１Ｈ），１．７５（ｓ，３Ｈ），１．６２（ｓ，３Ｈ），１．６０（ｓ，９Ｈ）．
【０２１７】
ｏ）３−クロロ−５−トリフルオロメチル−ピリジン−２−カルボン酸［６−（（３Ｒ，６Ｒ）−５−アミノ−３，６−ジメチル−６−トリフルオロメチル−３，６−ジヒドロ−２Ｈ−［１，４］オキサジン−３−イル）−５−フルオロ−ピリジン−２−イル］−アミド
ジクロロメタン（８１ｍｌ）中（（２Ｒ，５Ｒ）−５−｛６−［３−クロロ−５−トリフルオロメチル−ピリジン−２−カルボニル）−アミノ］−３−フルオロ−ピリジン−２−イル｝−２，５−ジメチル−２−トリフルオロメチル−５，６−ジヒドロ−２Ｈ−［１，４］オキサジン−３−イル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（４．９９ｇ、８．１３ｍｍｏｌ）及びＴＦＡ（６．２６ｍｌ、８１ｍｍｏｌ）の混合物を室温で１８時間撹拌した。溶媒を蒸発させて、酢酸エチルなどの好適な有機溶媒及びアンモニア水で残渣を希釈した。氷を加え、有機相を水及びブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、蒸発させて、３．７８ｇの表題化合物を得た。
ＨＰＬＣ：ＲｔＨ３＝０．８７ｍｉｎ；ＥＳＩＭＳ：５１４，５１６［（Ｍ＋Ｈ）＋，１Ｃｌ］；１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  １１．１１（ｓ，１Ｈ），９．０６（ｓ，１Ｈ），８．６９（ｓ，１Ｈ），８．１３（ｄｄ，Ｊ＝８．８，２．６Ｈｚ，１Ｈ），７．８０−７．６８（ｍ，１Ｈ），５．８８（ｂｒ．ｓ，２Ｈ），４．１２（ｄ，Ｊ＝１１．５Ｈｚ，１Ｈ），３．７２（ｄ，Ｊ＝１１．４Ｈｚ，１Ｈ），１．５１（ｓ，３Ｈ），１．４９（ｓ，３Ｈ）．
【０２１８】
実施例２：ＡＰＯＥ４−ＴＲマウスにおける化合物１の急性ＰＫ／ＰＤ用量反応試験
ヒトＡＰＯＥ４コンテクストにおけるＡＰＰ代謝に対する化合物１の効果を調べるため、ヒトＡＰＯＥ４アレルを保有するトランスジェニックマウスにおけるＰＫ／ＰＤ試験を実施した（マウスＡｐｏｅ遺伝子をヒトＡＰＯＥ４に置き換えた；ＡＰＯＥ４−ＴＲ；（Ｋｎｏｕｆｆ  Ｃ  ｅｔ  ａｌ．，１９９９））。
【０２１９】
この試験では、３〜５ヵ月齢の雄及び雌ＡＰＯＥ４−ＴＲ動物を種々の用量（３、１０、３０ｕｍｏｌ／ｋｇ）の化合物１で急性治療し、治療後４及び２４時間で犠牲にした。
【０２２０】
動物
雄及び雌トランスジェニックホモ接合ＡＰＯＥ４−ＴＲ（Ｂ６．１２９Ｐ２−Ａｐｏｅｔｍ３（ＡＰＯＥ＊４）ＭａｅＮ８、Ｔａｃｏｎｉｃ、モデル００１５４９、３〜５ヵ月齢、ｎ＝４８）をＴａｃｏｎｉｃから入手した。
【０２２１】
用量選択
化合物１は、３、１０及び３０μｍｏｌ／ｋｇで投与した。
【０２２２】
化合物形態、製剤化及び用量設定
化合物１は、懸濁液として製剤化した。媒体又は化合物は、経口投与によって１０ｍｌ／ｋｇの容量で１回与えた。媒体：水中０．５％メチルセルロース中０．１％Ｔｗｅｅｎ８０。
【０２２３】
【表５】
2019534885.tif 000007
【０２２４】
体重
体重は、投与前に１回測った。
【０２２５】
エキソビボ試料及び試料採取方法
血液試料は、全血化合物レベルの分析に使用し、剖検日に体幹血液からＥＤＴＡエッペンドルフチューブ（Ｍｉｌｉａｎ  ＳＡ、ＣａｔＮｏＴＯＭ−１４、Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、Ｗｏｈｌｅｎ、スイス）又は血清チューブ（ＣＢ３００Ｚ、Ｓａｒｓｔｅｄｔ、Ｎｕｅｍｂｒｅｃｈｔ、ドイツ）に採った。
【０２２６】
アミロイド−β（Ａβ）分析用の血漿をＥＤＴＡ血液の遠心（８０００ｒｐｍ／６８００×ｇ、１５分、４℃）によって収集し、低タンパク質結合性エッペンドルフチューブ（００３  ０１０８．１１６、Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ、Ｈａｍｂｕｒｇ、ドイツ）に収集した。
【０２２７】
全ての血液／血漿／血清試料は、ドライアイスで凍結し、分析時まで−８０℃で保存した。
【０２２８】
断頭後、直ちに脳を摘出し、生理食塩水でリンスし、正中矢状断した。左小脳を化合物レベルの分析に使用し、ガラスチューブ（Ｃｈｒｏｍａｃｏｌ、１２５×５−ＳＶ  Ｔ０５１、Ｗｅｌｗｙｎ  Ｇａｒｄｅｎ  Ｃｉｔｙ、英国）に入れ、秤量してドライアイスで凍結し、前脳の左半分（嗅球なし）をＡβ分析に使用し、金属プレート上にドライアイスで凍結して、低タンパク質結合性チューブ（００３  ０１０８．１１６、Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ、Ｈａｍｂｕｒｇ、ドイツ）に入れた。右脳は、４％パラホルムアルデヒドに固定し、ＰＢＳで洗浄し、次に可能性のある今後の組織学的分析のためにパラフィンに包埋した。
【０２２９】
試験終了時に尾を採取し、−２０℃で保存した。
【０２３０】
【表６】
2019534885.tif 000008
【０２３１】
マウス脳内Ａβ４０並びにＣＳＦ中Ａβ４０及びＡβ４２の分析
脳のホモジナイゼーション
凍結マウス前脳を秤量し、９容量（ｗ／ｖ）の氷冷ＴＢＳ−Ｃｏｍｐｌｅｔｅ（２０ｍＭトリス−ＨＣｌ  ｐＨ７．４、１３７ｍＭ  ＮａＣｌ、１×Ｃｏｍｐｌｅｔｅ［プロテアーゼ阻害薬カクテル錠：１  ８３６  １４５、Ｒｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ  ＧｍｂＨ、Ｐｅｎｚｂｅｒｇ、ドイツ］）中で音波処理（９０％デューティサイクル、出力制御５、４０〜５５パルス、［Ｓｏｎｉｆｉｅｒ  ４５０、Ｂｒａｎｓｏｎ］）によってホモジナイズした。ホモジナイゼーション後、分析用に数個の５０μｌアリコートを調製し、−８０℃で保存した。
【０２３２】
標準としての合成Ａβ１−４０溶液の調製
ヒトＡβペプチド（１−４０）トリフルオロ酢酸塩（Ｈ  １１９４．１０００、Ｂａｃｈｅｍ、Ｂｕｂｅｎｄｏｒｆ、スイス）をＡβ１−４０の検量線として使用した。これを無水ＤＭＳＯ（４１６４７、Ｆｌｕｋａ）に１ｍｇ／ｍｌの濃度で室温（ＲＴ）において約３０分間可溶化し、次に完全に可溶化されたことを目視で確認した。
【０２３３】
残りの溶液の２０×５μｌアリコート及び１００μｌアリコートを低結合性チューブ（００３０  １０８．０９４、Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ、Ｈａｍｂｕｒｇ、ドイツ）に調製し、窒素ガスで覆ってＡβペプチドを酸化から保護し、−８０℃で保存した。検量線のために５μｌアリコートを一度のみ使用し、次に廃棄した。
【０２３４】
マウス脳内Ａβ４０の決定
マウスの内因性Ａβ４０をＭｅｓｏ  Ｓｃａｌｅ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ（ＭＳＤ）９６ウェルＭＵＬＴＩ−ＡＲＲＡＹヒト／げっ歯類（４Ｇ８）Ａβ４０超高感度アッセイ（＃Ｋ１１０ＦＴＥ−３、Ｍｅｓｏ  Ｓｃａｌｅ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ、Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ、ＵＳＡ）で決定した。このアッセイは、検量線及び試料調製を除いて製造者の指示に従って実施した。各１：１０前脳ホモジネートの５０μｌアリコートを使用してＴｒｉｔｏｎＸ−１００（ＴＸ−１００）可溶性Ａβ４０を１％ＴＸ−１００で前脳から抽出し、１％ＴＸ−１００の最終濃度及び１：２０前脳希釈度に達するようにＴＢＳ  ｃｏｍｐｌｅｔｅ（２０ｍＭトリス−ＨＣｌ  ｐＨ７．４、１３７ｍＭ  ＮａＣｌ、１×Ｃｏｍｐｌｅｔｅ［プロテアーゼ阻害薬カクテル錠：１  ８３６  １４５、Ｒｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ  ＧｍｂＨ、Ｐｅｎｚｂｅｒｇ  ドイツ］）中５０μｌ  ２％ＴＸ−１００と混合した。試料を氷上で１５分間インキュベートし、５分毎にボルテックスした。試料を超遠心（１０００００×ｇ、４℃、１５分）し、５０μｌの澄明な上清を新しいチューブに移した。Ａβ４０アッセイについては、上清を更に１：１００の最終前脳希釈度となるように３％Ｂｌｏｃｋｅｒ  Ａ溶液（キットからのもの）中に１：５希釈し、プレートに加えた。
【０２３５】
合成Ａβ１−４０ペプチド（１．５６〜１００ｐｇ／ｍｌ）でスパイクした１％Ｂｌｏｃｋｅｒ  Ａ溶液の対応する希釈物で検量線を作成し、但し非トランスジェニックマウス脳試料は別とした。この場合、検量線は、合成Ａβ１−４０ペプチド（１．５６〜１００ｐｇ／ｍｌ）でスパイクした、対応して希釈したＡＰＰノックアウトマウス前脳で作成した。全ての試料及び標準について、１ウェルあたり２５μｌを加えた。決定毎にデュプリケートウェルを行った。計算にはデュプリケートウェルからの平均値を使用した。ＭＳＤは、定量化ソフトウェアを提供していないため、試料及び標準の相対単位をＳＯＦＴｍａｘ  ＰＲＯ  ４．０にインポートして標準曲線の計算及び試料の定量化を行った。
【０２３６】
結果
ＡＰＯＥ４−ＴＲマウス（マウスＡＰＯＥ遺伝子をヒトＡＰＯＥ４に置き換えた）を３つの異なる用量（３、１０及び３０μｍｏｌ／ｋｇ）のＢＡＣＥ阻害薬化合物１で急性治療した。最終投与後４時間及び２４時間で動物を犠牲にし、前脳を分離した。様々な群のＡβ１−４０及びＡβ１−４２濃度を図１、図２及び図３並びに表５、表６及び表７にまとめる。媒体治療群に対するパーセント減少率を計算した。いずれの治療によっても、最終投与後４時間及び２４時間で有意且つ用量依存的なＡβ４０の減少が生じ、効果は、４時間で４３〜７７％及び２４時間で２０〜６６％の範囲であった。低い方の２つの用量群（３及び１０μｍｏｌ／ｋｇ）について、Ａβ４０低減効果は、４及び２４時間で有意に減少したが、最終投与後２４時間で実質的にベースラインレベルに近かった。高用量の化合物１（３０μｍｏｌ／ｋｇ）は、ほぼ平坦なプロファイルを示し、全２４時間の時間経過にわたって７７〜６６％のＡβ４０減少であった。
【０２３７】
【表７】
2019534885.tif 000009
【０２３８】
【表８】
2019534885.tif 000010
【０２３９】
【表９】
2019534885.tif 000011
【０２４０】
血液及び脳における急性投与についての４時間及び２４時間時点のＰＫデータを図４及び表７に示す。血液及び脳におけるＡＵＣ０−２４時間として表される２４時間にわたる化合物１の曝露を表８にまとめる。血液及び脳における化合物１曝露は、用量比例的であり、２４時間後に予想どおりの化合物レベルのわずかな低下を呈し、これも用量比例的であった。脳内の化合物曝露は、血中よりもはるかに高かった。脳血液比は、３、１０及び３０μｍｏｌ／ｋｇ用量群について同様であり、それぞれ４時間で５、３及び４及び２４時間で９、４及び３であった。異なる用量での化合物曝露の低下の比較を可能にする４時間／２４時間の曝露比を計算した（表７）。化合物１は、中程度の２〜５倍の曝露減少であり、異なる用量間及び血液と脳との間で大きい差はなかった。
【０２４１】
【表１０】
2019534885.tif 000012
【０２４２】
【表１１】
2019534885.tif 000013
【０２４３】
全ての用量群について個々の動物の脳の薬物動態学的／薬力学的関係を図５に示す。化合物１について明らかなＰＫ／ＰＤ関係が見られた。低化合物レベルでは、Ａβ減少の有効性は最小限であったが、高化合物レベルでは最大限の有効性効果が認められた。
【０２４４】
図６は、異なる用量における平均値のＰＫ／ＰＤ関係を示す。ここでもやはり、Ａβ減少に対する曝露依存的効果が見られ、明らかな最小限及び最大限の有効性効果があった。
【０２４５】
結論
本実施例に提供される試験は、化合物１が、ＡＰＯＥ４−ＴＲマウスにおいてインビボで経口アベイラビリティのある、中枢作用性であり且つ強力なＢＡＣＥ阻害薬であることを実証する。マウス内因性Ａｐｏｅ遺伝子座からヒトＡＰＯＥ４を発現するＡＰＯＥ４−ＴＲマウスを使用して化合物１のＰＫ／ＰＤ関係を調べた。ＡｐｏＥ４は、アルツハイマー病及びＣＡＡの高リスク因子とされている。
【０２４６】
ＡＰＯＥ４−ＴＲマウスにおける化合物１のＰＫ特性は、野生型マウスで観察されるものと違いがなかった。血液及び脳における用量依存的化合物１曝露（脳内レベルがはるかに高い）が観察された。更に、２４時間後の曝露低下は、野生型マウスで観察されるものと同様であった。３０μｍｏｌ／ｋｇの化合物１がＡＰＯＥ４−ＴＲの脳内のＡβ減少に対して最大の効果を生じ（＞７０％）、急性投与について同程度が２４時間にわたって続いた。ＰＫ／ＰＤ関係は野生型マウス及びラットと非常に類似していた。最も高い用量（３０μｍｏｌ／ｋｇ）でＡＰＯＥ４−ＴＲマウスの脳内のＡβ減少に対する最大有効性効果がわずかに低いことが見られた。これは、ＡＰＯＥ−４  ＴＲマウスで観察されるアミロイド−βのクリアランス速度が遅いことに起因し得る（Ｃａｓｔｅｌｌａｎｏ  ＪＭ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１）。
【０２４７】
実施例３：ファースト・イン・ヒューマン試験
この試験は、臨床的に完了しており、主として健康成人及び高齢対象における化合物１の安全性及び忍容性並びに薬物動態学及び薬力学を評価する無作為化、二重盲検、プラセボ対照、単一及び複数用量漸増経口投与試験であった。この試験の目的は、化合物１の単一及び複数最大耐量を決定すること、及び主要ＰＤバイオマーカーとしてＣＳＦ中Ａβを用いて薬物動態学／薬力学（ＰＫ／ＰＤ）関係を評価することであった。
【０２４８】
６０歳以上の健常高齢対象において、７５０ｍｇ単一用量及び２週間にわたる３００ｍｇ  ＱＤの最高試験用量が安全で忍容されることが決定された。薬物作用の主要バイオマーカーとしてＣＳＦ中Ａβ濃度を用いた薬力学的評価はまた、健常高齢対象にも適用された。Ａβ４０濃度の用量依存的低下が単回投与及び複数回投与後にそれぞれ最大約８０％及び９０％まで決定された（表９及び表１０、図７）。
【０２４９】
【表１２】
2019534885.tif 000014
【０２５０】
【表１３】
2019534885.tif 000015
【０２５１】
実施例４：３ヵ月用量範囲探索安全性及び忍容性試験
第Ｉ相臨床用量範囲探索安全性及び忍容性試験において６０歳以上の健常高齢対象に化合物１を投与した。この試験は、ＣｌｉｎｉｃａｌＴｒｉａｌｓ．ｇｏｖにＮＣＴ０２５７６６３９識別コードで収載されている。
【０２５２】
この無作為化、二重盲検、プラセボ対照試験は、並列群設計を有し、化合物１は、１日１回、経口用量で５治療群（化合物１：２ｍｇ、１０ｍｇ、３５ｍｇ又は８５ｍｇ  ＱＤ及びプラセボ）に投与した。
【０２５３】
この試験の主要目的は、ファースト・イン・ヒューマン試験で２週間及び４週間の継続期間にわたって得られたこれまでの安全性及び忍容性データを拡大し、それによりＡＤ及びＣＡＡのリスクがある対象における将来の長期有効性試験の開始を可能にすることであった。加えて、将来の有効性試験のための用量選択判断を裏付けるため、薬物動態学的／薬力学的モデル化に関連するデータを入手した。
【０２５４】
この試験では、化合物１は、３ヵ月にわたる２、１０、３５及び８５ｍｇの１日１回用量が安全で忍容されることが分かった。ＣＳＦ  Ａβレベルに対する化合物１投与の薬力学的効果を表１１及び図８に示す。Ａβ低減の程度は、時間が経っても安定しており、約２〜３週間後にＰＤ定常状態に達した。
【０２５５】
【表１４】
2019534885.tif 000016
【０２５６】
２、１０、３５及び８５ｍｇでの３か月（９１日）の毎日の投与後の化合物１の薬物動態パラメータを表１２に示す。
【０２５７】
【表１５】
2019534885.tif 000017
【０２５８】
Ｃｍａｘ，ｓｓ値は、指定用量で１日１回（ｑｄ）投与して９１日後の化合物１の最高血漿定常状態濃度を表す。「ＣＶ％」は、パーセンテージ変動係数を表す。これらの結果に基づき、１５ｍｇの化合物１の１日１回用量は、７０〜１７０ｎｇ／ｍｌの血漿Ｃｍａｘ，ｓｓ値をもたらすことが予想され、及び５０ｍｇの化合物１の１日１回用量は、２００〜５００ｎｇ／ｍｌの血漿Ｃｍａｘ，ｓｓ値をもたらすことが予想される。
【０２５９】
実施例３及び４に提供されるデータに基づき、計量薬理学的モデル化から、対象の９０％で８０％のＣＳＦ  Ａβ４０低下を達成するのに５０ｍｇの１日用量及び６０％のＣＳＦ  Ａβ４０低下を実現するのに１５ｍｇの用量が予測される。
【０２６０】
実施例５：化合物１による治療への応答性に対するＡｐｏＥ４遺伝子型の効果
実施例３及び４に記載する完了したファースト・イン・ヒューマン試験及び３ヵ月用量範囲探索安全性及び忍容性臨床試験において、初回投与前（ベースライン）並びにそれぞれ２週間及び３ヵ月間の複数回投与後に腰椎穿刺を用いてＣＳＦ中Ａβ濃度を得た。また、同意した対象のＡｐｏＥ４遺伝子型も得た。被験治療を受け、且つ薬力学的効果の判定に影響を及ぼす可能性のある大きいプロトコル逸脱がなかった対象において、Ａβ４０及びＡβ４２濃度のベースラインからのパーセント変化率を計算した。以下の表１３〜表１６は、治療群及びＡｐｏＥ遺伝子型（Ｅ４ヘテロ接合体対Ｅ４非保有者）別のベースラインからのパーセント変化率の要約統計量を提供する。ＣＳＦデータを有する１人の対象のみがＥ４ホモ接合体であった（３ヵ月用量範囲探索安全性及び忍容性試験から）。この対象は、プラセボで治療し、Ａβ４０及びＡβ４２の両方の濃度の１１％の低下を示したが、以下の表には含めない。データは、ＡｐｏＥ４保有者と非保有者との間に化合物１による治療へのＣＳＦ  Ａβ４０及びＡβ４２応答性に差がないことを示している。
【０２６１】
【表１６】
2019534885.tif 000018
【０２６２】
【表１７】
2019534885.tif 000019
【０２６３】
【表１８】
2019534885.tif 000020
【０２６４】
【表１９】
2019534885.tif 000021
【０２６５】
実施例６：プラーク担持雄ＡＰＰ２３マウスのＢＡＣＥ阻害薬化合物１による慢性治療処置及びＣＡＡの評価
概要
プラーク担持年齢（１２ヵ月）のＡＰＰ２３トランスジェニックマウスに化合物１を２つの用量で６ヵ月間慢性投与した。媒体のみを受けた群と比較して、０．０３ｇ／ｋｇ食餌の化合物１の投与により媒体群と比較してアミロイド−β４０及び４２のわずかな減少が生じ、及び０．３ｇ／ｋｇ食餌の投与により強い減少が生じた。マウス脳内Ａβ量は、ベースライン時（１２ヵ月齢）のマウスと同様であった。血漿及びＣＳＦ中可溶性Ａβは、高用量群で有意に減少したのみであった。ＣＤ３１及びアミロイド−β陽性の免疫反応性の共局在／近接分析は、Ａβ被覆が２５〜５０％及び５０〜７５％である脳血管が高用量の化合物１によって減少したことを示した。
【０２６６】
方法
動物及び用量選択
雄トランスジェニック、ヘテロ接合性ＡＰＰ２３（Ｂ６，Ｄ２−Ｔｇ（Ｔｈｙ１Ａｐｐ）２３Ｓｄｚ（Ｓｔｕｒｃｈｌｅｒ−Ｐｉｅｒｒａｔ  Ｃ  ｅｔ  ａｌ．，１９９７）、１２〜１４月齢、ｎ＝６４）を食餌ペレット中の０．３ｇ／ｋｇ又は０．０３ｇ／ｋｇ化合物１で治療した。
【０２６７】
【表２０】
2019534885.tif 000022
【０２６８】
エキソビボ試料及び試料採取方法
血液試料は全血化合物レベルの分析に使用し、剖検日に体幹血液からＥＤＴＡエッペンドルフチューブ（Ｍｉｌｉａｎ  ＳＡ、ＣａｔＮｏＴＯＭ−１４、Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、Ｗｏｈｌｅｎ、スイス）又は血清チューブ（ＣＢ３００Ｚ、Ｓａｒｓｔｅｄｔ、Ｎｕｅｍｂｒｅｃｈｔ、ドイツ）に採った。
【０２６９】
アミロイド−β（Ａβ）分析用の血漿をＥＤＴＡ血液の遠心（８０００ｒｐｍ／６８００×ｇ、１５分、４℃）によって収集し、低タンパク質結合性エッペンドルフチューブ（００３  ０１０８．１１６、Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ、Ｈａｍｂｕｒｇ、ドイツ）に収集した。
【０２７０】
全ての血液／血漿／血清試料は、ドライアイスで凍結し、分析時まで−８０℃で保存した。
【０２７１】
断頭後、直ちに脳を摘出し、生理食塩水でリンスし、正中矢状断した。脳の左半分を化合物レベルの分析に使用し、ガラスチューブ（Ｃｈｒｏｍａｃｏｌ、１２５×５−ＳＶ  Ｔ０５１、Ｗｅｌｗｙｎ  Ｇａｒｄｅｎ  Ｃｉｔｙ、英国）に入れ、秤量してドライアイスで凍結し、前脳の左半分（嗅球なし）をＡβ分析に使用し、金属プレート上にドライアイスで凍結して、低タンパク質結合性チューブ（００３  ０１０８．１１６、Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ、Ｈａｍｂｕｒｇ、ドイツ）に入れた。
【０２７２】
試験終了時に尾を採取し、−２０℃で保存した。
【０２７３】
化合物レベルの分析
生体試料の化合物１レベルを血液及び脳で液体クロマトグラフィー／タンデム質量分析法（ＨＰＬＣ／ＭＳ／ＭＳ）によって定量化した。脳試料は、２容量のＫＨ２ＰＯ４緩衝液と混合し、Ｃｏｖａｒｉｓ（登録商標）装置を使用してホモジナイズした。３０μＬの血液又は脳ホモジネートのいずれも構造的に関連性のある内部標準でスパイクし、続いて少なくとも６倍過剰容量のアセトニトリルと混合してタンパク質を沈殿させた。上清をＬＣ／ＭＳ／ＭＳシステムに直接注入して分析にかけた。
【０２７４】
【表２１】
2019534885.tif 000023
【０２７５】
マウス組織内Ａβ４０及びＡβ４２の分析
脳のホモジナイゼーション
凍結マウス前脳を秤量し、９容量（ｗ／ｖ）の氷冷ＴＢＳ−Ｃｏｍｐｌｅｔｅ（２０ｍＭトリス−ＨＣｌ  ｐＨ７．４、１３７ｍＭ  ＮａＣｌ、１×Ｃｏｍｐｌｅｔｅ［プロテアーゼ阻害薬カクテル錠：１  ８３６  １４５、Ｒｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ  ＧｍｂＨ、Ｐｅｎｚｂｅｒｇ、ドイツ］）中で音波処理（９０％デューティサイクル、出力制御５、４０〜５５パルス、［Ｓｏｎｉｆｉｅｒ  ４５０、Ｂｒａｎｓｏｎ］）によってホモジナイズした。ホモジナイゼーション後、分析用に数個の５０μｌアリコートを調製し、−８０℃で保存した。
【０２７６】
標準としての合成Ａβ溶液の調製
ヒトＡβペプチド（１−４０）トリフルオロ酢酸塩（Ｈ  １１９４．１０００、Ｂａｃｈｅｍ、Ｂｕｂｅｎｄｏｒｆ、スイス）をＡβ１−４０の検量線として使用した。これを無水ＤＭＳＯ（４１６４７、Ｆｌｕｋａ）に１ｍｇ／ｍｌの濃度で室温（ＲＴ）において約３０分間可溶化し、次に完全に可溶化されたことを目視で確認した。
【０２７７】
残りの溶液の２０×５μｌアリコート及び１００μｌアリコートを低結合性チューブ（００３０  １０８．０９４、Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ、Ｈａｍｂｕｒｇ、ドイツ）に調製し、窒素ガスで覆ってＡβペプチドを酸化から保護し、−８０℃で保存した。検量線のために５μｌアリコートを一度のみ使用し、次に廃棄した。
【０２７８】
ＡＰＰ２３マウス脳内Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００可溶性Ａβの決定
［ＲＤ−２０１０−００２８４］に記載されているように、マウスにおけるヒトＡβ４０及び４２をＭｅｓｏ  Ｓｃａｌｅ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ（ＭＳＤ）９６ウェルＭＵＬＴＩ−ＡＲＲＡＹヒト／げっ歯類（６Ｅ１０）Ａβ４０／４２アッセイ（Ｍｅｓｏ  Ｓｃａｌｅ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ、Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ、ＭＤ、ＵＳＡ）で決定した。このアッセイは、検量線及び試料調製を除いて製造者の指示に従って行った。各１：１０前脳ホモジネートの５０μｌアリコートを使用してＴｒｉｔｏｎＸ−１００（ＴＸ−１００）可溶性Ａβ４０及び４２を１％ＴＸ−１００で前脳から抽出し、１％ＴＸ−１００の最終濃度及び１：２０前脳希釈度に達するようにＴＢＳ  ｃｏｍｐｌｅｔｅ（２０ｍＭトリス−ＨＣｌ  ｐＨ７．４、１３７ｍＭ  ＮａＣｌ、１×Ｃｏｍｐｌｅｔｅ［プロテアーゼ阻害薬カクテル錠：１  ８３６  １４５、Ｒｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ  ＧｍｂＨ、Ｐｅｎｚｂｅｒｇ  ドイツ］）中５０μｌ  ２％ＴＸ−１００と混合した。試料を氷上で１５分間インキュベートし、５分毎にボルテックスした。試料を超遠心（１０００００×ｇ、４℃、１５分）し、５０μｌの澄明な上清を新しいチューブに移した。上清を更に１：１００の最終前脳希釈度となるように３％Ｂｌｏｃｋｅｒ  Ａ溶液（キットからのもの）で１：５希釈し、プレートに加えた。
【０２７９】
合成Ａβ１−４０ペプチド（１．５６〜１００ｐｇ／ｍｌ）でスパイクした１％Ｂｌｏｃｋｅｒ  Ａ溶液の対応する希釈物で検量線を作成し、但し非トランスジェニックマウス脳試料は別とした。この場合、検量線は、合成Ａβ１−４０ペプチド（１．５６〜１００ｐｇ／ｍｌ）でスパイクした、対応して希釈したＡＰＰノックアウトマウス前脳で作成した。全ての試料及び標準について、１ウェルあたり２５μｌを加えた。決定毎にデュプリケートウェルを行った。計算にはデュプリケートウェルからの平均値を使用した。試料及び標準の相対単位をＳＯＦＴｍａｘ  ＰＲＯ  ４．０にインポートして標準曲線の計算及び試料の定量化を行った。
【０２８０】
ＡＰＰ２３マウス脳内ギ酸可溶性Ａβの決定
５０マイクロリットルの前脳ホモジネートを１１６．６μｌ  １００％ギ酸と混合して、７０％の最終ギ酸濃度を得た。試料を氷上で保存し、５分毎にボルテックスした。中和のため、５０μｌの混合物を新しいチューブにピペッティングし、１×Ｃｏｍｐｌｅｔｅプロテアーゼ阻害薬を含有する９５０μｌの１Ｍトリス塩基を加えた。チューブを室温で一晩保存し、次にＥｐｐｅｎｄｏｒｆ  Ｍｉｃｒｏｚｅｎｔｒｉｆｕｇｅにおいて４℃で１５分間、１４０００ｒｐｍで遠心した。上層から１００μｌを取り出し、１００μｌの３％Ｂｌｏｃｋｅｒ  Ａ溶液（ＭｅｓｏＳｃａｌｅアッセイキットの一部）と混合した。この試料をアッセイプレートに直接加えるか（希釈１：１３３２）、又は１％Ｂｌｏｃｋｅｒ  Ａ溶液で更に希釈した。
【０２８１】
マウスＣＳＦ中Ａβ４０の分析
マウスＣＳＦ試料（３μｌ）を５７μＬの１％Ｂｌｏｃｋｅｒ  Ａ（ＭＳＤ）で希釈し、アッセイプレートに２５μｌを加えた。
【０２８２】
マウス血漿中のＡβ４０の分析
血漿試料（３０μｌ）を３０μｌの３％Ｂｌｏｃｋｅｒ  Ａ（ＭＳＤ）と混合し、アッセイプレートに２５μｌを適用した。
【０２８３】
二重蛍光免疫組織化学を使用するアミロイド−βプラーク及び血管内皮細胞の分析
アミロイドペプチドのＣ末端部を認識するウサギ抗Ａβ一次抗体（ＮＴ１２）（この抗体は、Ｓｃｈｒａｄｅｒ−Ｆｉｓｃｈｅｒ  Ｇ，Ｐａｇａｎｅｔｔｉ  ＰＡ，１９９６及びＳｃｈｒａｄｅｒ−Ｆｉｓｃｈｅｒ  Ｇ  ｅｔ  ａｌ．，１９９７に記載される通りに産生された）を使用してアミロイドプラークを染色した。血管内皮細胞を、Ｄｉａｎｏｖａ  ＧｍｂＨ（Ｈａｍｂｕｒｇ，ドイツ）からのラット抗ＣＤ３１抗体（リファレンスＤＩＡ３１０）を使用して検出した。全ての染色は、完全に自動化された機器Ｖｅｎｔａｎａ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ（登録商標）Ｕｌｔｒａ（Ｒｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ  Ｓｃｈｗｅｉｚ  ＡＧ、Ｒｏｔｋｒｅｕｚ、スイス）を用いて実施した。全ての化学物質は、Ｒｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃにより供給された。
【０２８４】
全ての被験動物を使用し、３マイクロメートルの脳組織切片を新しく切り出し、ＳｕｐｅｒＦｒｏｓｔ＋スライド上に収集した。組織切片を脱パラフィン化し、無溶媒条件下（ＥＺｐｒｅｐ溶液）で再水和させて、続いてＥＤＴＡベースの緩衝液（ＣＣ１溶液）中での３２分間の熱回復サイクルによって抗原回復（デマスキング）を実施した。続いて、ＤＩＳＣＯＶＥＲＹ阻害薬（リファレンス０７０１７９４４００１（Ｒｏｃｈｅ））を使用してスライドを４分間ブロックした。抗体希釈剤に１／１０，０００希釈した一次抗体を手作業で組織切片に加え、室温で１時間インキュベートした。短時間の後固定（０．０５％のグルタルアルデヒド）を実施した後、多量体ＵｌｔｒａＭａｐ−抗ウサギＨＲＰ既製抗体（リファレンス０５２６９７１７００１）を１６分間適用した。
【０２８５】
検出は、製造者の推奨に従ってＤＩＳＣＯＶＥＲＹ  ＦＩＴＣ（登録商標）を使用して実施した。次いで、スライドを９２℃で２０分間熱変性させた後、第２の一次抗体（抗体希釈剤で１／１，０００に希釈したラット抗ＣＤ３１）を手作業で適用し、１時間インキュベートした。多量体ＵｌｔｒａＭａｐ−抗ラットＨＲＰ抗体（リファレンス０５８９１８８４００１）を２０分間使用して、ＤＩＳＣＯＶＥＲＹローダミンキット（リファレンス０７２５９８８３００１）と組み合わせてＣＤ３１を検出した。
【０２８６】
スライドを洗浄し、Ｐｒｏｌｏｎｇ（登録商標）Ｇｏｌｄ退色防止試薬（リファレンスＰ３６９３１、ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ、スイス）を使用してマウントし、Ｈａｍａｍａｔｓｕスライドスキャナ機器（ＮａｎｏＺｏｏｍｅｒ  ２．０  ＨＴ、スキャニングソフトウェアＮＤＰ−Ｓｃａｎバージョン２．５、Ｈａｍａｍａｔｓｕ  Ｐｈｏｔｏｎｉｃｓ  Ｆｒａｎｃｅ、Ｓｗｉｓｓ  Ｏｆｆｉｃｅ、Ｓｏｌｏｔｈｕｒｎ、スイス）によって４０倍対物レンズで更にスキャンした。スキャニング設定は、以下の通りであった：ＤＡＰＩフィルタによる露光時間は、ＦＩＴＣフィルタ及びＴＲＩＴＣフィルタ（ローダミンの検出）についても２８．５ｍｓに設定した。
【０２８７】
画像解析
画像解析に基づく定量的プラーク及び血管付着アミロイド−β評価のために、ＭＳ  Ｖｉｓｕａｌ  Ｓｔｕｄｉｏ  ２０１０及びＭａｔｒｏｘ  ＭＩＬ  Ｖ９ライブラリ（Ｍａｔｒｏｘ  Ｉｎｃ，Ｑｕｅｂｅｃ，カナダ）からの多くの機能をベースとする独自の画像解析プラットフォーム（ＡＳＴＯＲＩＡ、自動保存画像解析）を開発した。
【０２８８】
β−アミロイドプラーク及び血管のため、以下の一連の工程を実施した：
−  スライドをＨａｍａｍａｔｓｕ  Ｎａｎｏｚｏｏｍｅｒによって４０倍の倍率でスキャンした。各蛍光標識（ＤＡＰＩ、ＦＩＴＣ及びＴＲＩＴＣ）について別個の画像を作成した。
−  緑色ＦＩＴＣチャンネル画像でのＡβプラーク評価用に脳切片において皮質を画定するため手作業でＲＯＩ（関心領域）の輪郭を描き、次に得られた輪郭を他の２つのチャンネル画像にも使用する（得られたｘｍｌファイルをコピーする）。
−  インハウスで開発したＩｍａｇｅＳｃｏｐｅ（Ｖ１２．１．０．５０２９、Ａｐｅｒｉｏ  Ｉｎｃ．，ＵＳＡ）プラグインを実行して、３つの蛍光チャンネルの各々について＊．ｔｉｆ画像タイル（１０倍の倍率）を作成及びエクスポートする。
【０２８９】
画像バッチ処理：
−  各個別の蛍光チャンネル画像へのアクセスを通じて各切片の組み合わせトゥルーカラー画像（ＤＡＰＩ、ＦＩＴＣ、ＴＲＩＴＣ）を得る。
−  黒色の未染色バックグラウンドからの有効試料（輪郭を描いたＲＯＩの範囲内にある）のセグメンテーション。
−  緑色チャンネル画像（ＦＩＴＣ標識Ａβプラーク）のオブジェクトのセグメンテーションに適応閾値処理法を適用する。
【０２９０】
ＣＤ３１に対して特異的
−  形態学的トップハット変換（１０、１５及び２０に設定）及び閾値処理、それに続くサイズフィルタリング（１５、３０、５０及び２００に設定）（トップハット１０とサイズ１５の組み合わせは、この報告における詳細な解析のために使用した）を介する、赤チャンネルにおけるＴＲＩＴＣ標識されたオブジェクト（血管を示すＣＤ３１染色に対して特異的）のセグメント化。
−  Ａβ評価のための有効範囲を特徴付けるための、拡大及び初期オブジェクトの消去を介する、（血管に隣接する）セグメント化された血管の周囲の環、いわゆる「影響域」の作成。
−  あらかじめ決定された影響域内の、ＮＴ１２陽性の割合に従う血管の分類。
【０２９１】
ＣＤ３１＋ＮＴ１２
血管（ＣＤ３１陽性）の、３つのサイズクラス（小：＜７０ピクセル、中：７０．．．５００ピクセル、大：＞５００ピクセル）への分類及び  −  各サイズクラス内の各血管に対する  −  ＮＴ１２陽性の５クラスの１つへの分類。
−  ０％（血管にＡβなし）
−  １．．．１０％  血管付着Ａβ
−  １１．．．２５％  血管付着Ａβ
−  ２６．．．５０％  血管付着Ａβ
−  ５１．．．７５％  血管付着Ａβ
−  ７６．．．１００％  血管付着Ａβ
以下の追加の算出。
−  ＲＯＩ内の総ＮＴ１２シグナル
−  ＲＯＩ内の総ＣＤ３１シグナル
−  血管付着Ａβ面積の割合、すなわち上に記載した通りの全「影響域」領域内のＮＴ１２シグナル
【０２９２】
結果
【０２９３】
【表２２】
2019534885.tif 000024
【０２９４】
２ヵ月及び４ヵ月の投与後及び６ヵ月時の試験終了時に化合物１の血中濃度を決定した。表１９に示される通り、試験期間中にわたって一定の曝露があり、動物間のばらつきは、平均して１８％（８〜３６％）で許容できるものであった。平均化合物１血中濃度は、０．０３ｇ／ｋｇ食餌投与群について０．２５±０．１３μＭ（平均値±ＳＤ）及び０．３ｇ／ｋｇ投与群について２．１０±０．４７μＭであり、化合物用量の１０倍差と良好に一致した。この試験で観察された曝露は、大まかに毎日５及び４５ｍｇ／ｋｇ経口用量の化合物１に対応した。実験終了時に決定された脳／血液比は、０．０３ｇ／ｋｇ群について２．７及び０．３ｇ／ｋｇ群について３．３であった。
【０２９５】
ＡＰＰ代謝産物の生化学的決定：マウス脳からのＴｒｉｔｏｎ  ＴＸ−１００可溶性ＡＰＰ代謝産物
脳ホモジネートを緩衝液中１％Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００で抽出し、得られた上清を可溶性形態のＡＰＰ代謝産物に相当すると見なした。Ａβ４０及び４２に加えて、本発明者らは、Ｎ末端ＡＰＰ断片ｓＡＰＰα（α−セクレターゼの直接の切断産物）及びｓＡＰＰβ（Ｓｗｅ）（ＢＡＣＥ１切断の直接の産物）を決定した。表２４に示される通り、可溶性Ａβ４０及び４２は非治療群において試験期間中にわたって中程度に（２倍未満）増加する。この年齢でＡＰＰ発現及びＡβ生成の変化が起こることは知られていないため、媒体群（１８〜２０ヵ月齢）の値の増加は、Ａβ沈着からの「漏出」（これは数倍増加する、以下を参照されたい）によって起こることが想定される。また、非治療群では、可溶性ＡＰＰ代謝産物ｓＡＰＰα及びβの値にも有意な変化はなかった。
【０２９６】
低用量（０．０３ｇ化合物１／ｋｇ食餌）の化合物１で治療したマウスは、可溶性Ａβ４０及び４２の弱い有意差のない減少並びにｓＡＰＰαの中程度の増加を示した（表２０及び表２１、図９〜図１１）。可溶性ＡＰＰβ（Ｓｗｅ）は、有意に２９％減少した（表２０及び表２１、図１２）。０．３ｇ／ｋｇ用量の化合物１で治療したマウスは、Ａβ及びｓＡＰＰβ（Ｓｗｅ）の両方の有意な減少並びにｓＡＰＰαの３倍の増加を示した（表２０及び表２１、図９〜図１２）。
【０２９７】
まとめると、化合物１治療は、全ての可溶性ＢＡＣＥ１切断産物の用量依存的減少及びｓＡＰＰαの用量依存的増加を生じさせた。
【０２９８】
【表２３】
2019534885.tif 000025
【０２９９】
【表２４】
2019534885.tif 000026
【０３００】
ＣＳＦ中ＡＰＰ代謝産物
剖検時に全てのマウスからＣＳＦを採取した。ベースライン群の試料は、約６ヵ月間保存し、試験終了時に残りの試料と共に分析した。表２２及び図１３のデータは、ＣＳＦ  Ａβがベースライン群（１２ヵ月齢のＡＰＰ２３マウス）で最も高いが、媒体群（１８ヵ月齢のＡＰＰ２３マウス）では下がることを示している。この媒体群と比較して、０．０３ｇ／ｋｇ食餌化合物１治療群ではＣＳＦ  Ａβ４０が非有意に減少し、０．３ｇ／ｋｇ食餌化合物１治療群では有意に減少する。高いベースライン値の理由は、現在のところ分かっていない。これは、オリゴマー型のＡβの解離がより高いモノマー濃度につながり得るときの長期保存の効果であると仮定される。ＣＳＦ  Ａβは、脳抽出物からのＴｒｉｔｏｎ  ＴＸ−１００可溶化ＡβよりもＡβ生成の変化に直接応答する可溶性アミロイド−βの定常状態濃度を代表する。低い化合物１用量（−４．６〜−２０％）での小さく有意でない治療効果並びに高い化合物１用量（−４３．７〜−７７％）での顕著で有意な効果は、脳組織から単離された可溶性Ａβ種とＣＳＦ中Ａβ４０との間で非常に類似している。
【０３０１】
【表２５】
2019534885.tif 000027
【０３０２】
前脳内のギ酸可溶性アミロイド−βペプチド
不溶性Ａβ種をギ酸で抽出した後、ＡＰＰ２３マウス脳内の沈着形態のアミロイド−βに対する化合物１の治療効果を調べた。表２３及び表２４及び図１４〜図１７に示される通り、媒体群では、ベースラインと比較して沈着Ａβの大幅な増加が観察された。Ａβ４２はＡβ４０より多く増加し（Ａβ４２／４０比は、媒体群で５５％増加した）、そのより高い凝集傾向と一致した。Ａβ４０及びＡβ４２は、低用量の化合物１による治療後に媒体と比較して約１７％の減少を示したが、これは、統計的有意性には達しなかった。抽出材料のＡβ４２／４０比は変化しなかった。高い化合物１治療群では沈着Ａβ４０及びＡβ４２の強力で高度に有意な（約８０％対媒体）減少が観察され、Ａβ４２／４０比が０．０７のベースライン値に戻った。要約すれば、高用量の化合物１による治療は、ＡＰＰ２３マウスのアミロイドβの増加をほぼ完全に阻止した。
【０３０３】
【表２６】
2019534885.tif 000028
【０３０４】
【表２７】
2019534885.tif 000029
【０３０５】
ＣＡＡに対する効果
老齢のＡＰＰ２３動物は、強い程度のＣＡＡを呈し、これをＣＤ３１の共局在／近接分析及び共免疫蛍光法におけるアミロイド−β（ＮＴ１２）陽性免疫反応性によって評価した。血小板内皮細胞接着分子−１（ＰＥＣＡＭ−１）としても公知であるＣＤ３１は、初期の及び成熟した内皮細胞、血小板及びほとんどの白血球亜集団上で高レベルで発現されるＩ型の膜内在性糖タンパク質である。ＣＤ３１免疫反応性は、多くの場合、脳血管の内皮細胞を可視化するためのマーカーとして使用される。定量的画像分析のために、皮質のＣＤ３１陽性構造を検出し、これらの構造の周囲の影響域を定義し、これらの影響域内のＡβを定量化した。ＣＤ３１＋血管の総数（全試料面積に対して正規化）及び様々なＡβ被覆を有するＣＤ３１＋血管の割合（％）を評価した（表２５）。ＣＤ３１＋血管のＡβ被覆を異なるカテゴリー：０％、１〜１０％、１０〜２５％、２５〜５０％、５０〜７５％及び＞７５％  Ａβ被覆に分けた（表２５）。さらに、Ａβ被覆が＞１０％である全てのＣＤ３１＋血管を合計した（表２５）。なぜなら、これは、非特異的なＡβシグナルの可能性を確実に排除するであろうからである。ＣＡＡ頻度（全試料面積に対して正規化された、Ａβ被覆が＞１０％であるＣＤ３１＋血管）を、Ｗｉｎｋｌｅｒ  ＤＴ  ｅｔ  ａｌ．，２００１によって記載されている通りに（Ａβによって影響を受けたＣＤ３１＋血管を評価するためにコンピュータを用いた定量的画像分析が使用されることが異なる）算出した（表３１）。最後に、総血管付着Ａβ面積を分析し、総ＣＤ３１＋面積に対して正規化した（表３１）。
【０３０６】
ＡＰＰ２３マウスでは、Ａβによって影響を受けた血管（＞１０％  Ａβ被覆）の割合は、マウスの年齢と共におよそ２倍に増加し、この増加は、高用量の化合物１治療によって低下した（表２８、図２０）。低用量の化合物１治療は、Ａβによって影響を受けた血管（Ａβ被覆が＞１０％である血管）の割合を低下させなかった。概ね、Ａβ被覆が２５〜５０％及び５０〜７５％である血管は、高用量化合物１治療により、Ａβ被覆が他の割合である血管よりも減少した（表２８）。重要なことに、総ＣＤ３１＋血管の数は、全ての治療群において同様であった（表２５、図１８）。興味深いことに、低用量の化合物１のみは、Ａβ被覆を有しない血管の数を有意に減少させ、同時に低いＡβ被覆（＜１０％  Ａβ被覆）を有する血管の数を増加させたが、年齢依存性の差がないこと及び高化合物１用量の治療効果がないことは、これらのパラメータで明らかではなかった（表２８）。
【０３０７】
さらに、ＣＡＡ頻度は、マウスの年齢と共におよそ２倍に増加し、この増加は、高用量の化合物１治療によって低下した（表３４、図２２）。やはり低用量の化合物１について有意な治療効果は存在しなかった。総ＣＤ３１＋面積に対して正規化された総血管付着Ａβ面積の分析は、高用量の化合物１での、媒体と比較した場合のわずかな治療効果を明らかにしたが、この効果は、統計的に有意ではない一方、このパラメータの年齢依存性の増加は、わずかに有意であった（表３４、図２４）。
【０３０８】
ＣＡＡ−１型とＣＡＡ−２型とを区別するために、上に記載したのと同様の方式で血管サイズ及びそのそれぞれのＡβ被覆を決定した（小＋中及び大）（表２６、表２７）。老齢のＡＰＰ２３動物は、小、中及び大血管（これらは、それぞれおそらく毛細血管、皮質動脈及び軟髄膜の血管に相当する）において強い程度のＣＡＡを呈する。ＡＰＰ２３マウスでは、小＋中サイズの血管（＞１０％  Ａβ被覆）に影響を与えるＡβの割合は、マウスの年齢と共におよそ２倍に増加し、この増加は、高用量の化合物１治療によって低下した（表２６及び２９、図２１）。低用量の化合物１治療は、Ａβによって影響を受けた小＋中サイズの血管（Ａβ被覆が＞１０％である血管）の割合を減少させなかった。概ね、Ａβ被覆が１０〜２５％、２５〜５０％及び５０〜７５％である小＋中サイズの血管は、Ａβ被覆が他の割合である血管よりも高用量化合物１治療によって減少した（表２９）。重要なことに、総ＣＤ３１＋小＋中サイズ血管の数は、全ての治療群において同様であった（表２６、図１９）。これらのパラメータの年齢依存性の増大が存在したにもかかわらず、観察された大血管では、高及び低用量の化合物１での治療効果は存在しなかった（表２７及び３０、図２１）。やはり、総ＣＤ３１＋大サイズ血管の数は、全ての治療群において同様であった（表２７、図１９）。
【０３０９】
さらに、小＋中サイズの血管のＣＡＡ頻度は、マウスの年齢と共におよそ２倍に増加し、この増加は、高用量の化合物１治療によって低下した（表３２、表３５、図２３）。やはり低用量の化合物１について有意な治療効果は存在しなかった。総ＣＤ３１＋小＋中サイズ血管面積に対して正規化された総血管付着Ａβ面積の分析は、高用量の化合物１での、媒体と比較した場合の有意な治療効果を明らかにした（表３２、表３５、図２５）。観察された高及び低用量の化合物１での大血管におけるＣＡＡ頻度に対する治療効果は存在しなかった（表３３、表３６、図２５）。
【０３１０】
「スウェーデン型」変異を保有するマウスモデルでは、ｗｔＡＰＰトランスジェニックマウスと比較して、有意なＢＡＣＥ−１阻害を達成するために高用量のＢＡＣＥ阻害薬が必要とされることから、低用量の化合物１での弱い時折の有意ではない効果は、驚くべきではない。
【０３１１】
【表２８】
2019534885.tif 000030
【０３１２】
【表２９】
2019534885.tif 000031
【０３１３】
【表３０】
2019534885.tif 000032
【０３１４】
【表３１】
2019534885.tif 000033
【０３１５】
【表３２】
2019534885.tif 000034
【０３１６】
【表３３】
2019534885.tif 000035
【０３１７】
【表３４】
2019534885.tif 000036
【０３１８】
【表３５】
2019534885.tif 000037
【０３１９】
【表３６】
2019534885.tif 000038
【０３２０】
【表３７】
2019534885.tif 000039
【０３２１】
【表３８】
2019534885.tif 000040
【０３２２】
【表３９】
2019534885.tif 000041
【０３２３】
実施例７：プラーク保有トランスジェニックＡＰＰ２３マウスにおける１３週の経口安全性研究
研究の目的
この研究の主目的は、有効な用量の化合物１での治療後、老齢ＡＰＰ２３マウスにおいて（ＭＲＩ及び脳病理組織診断によって）微小出血病変を評価することと、微小出血形成の程度を陽性対照（すなわちβ１抗体で受動免疫したマウス（Ｐａｇａｎｅｔｔｉ  ＰＡ  ｅｔ  ａｌ．，１９９６））と比較することとであった。同様の研究は、文献（Ｂｅｃｋｍａｎｎ  Ｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１６）において以前に記載されている。老齢の動物における微小出血の存在という理由で、ＡＰＰ２３マウス系統を選択した。全体的なＡβ負荷がかなり高く、Ａβ４０／Ａβ４２比がより高く、従って微小出血がより顕著であるという理由で雌を選択した。
【０３２４】
材料及び方法
被験物質：
化合物１；経口投与形態：飼料混合物中の０．３ｇ／ｋｇ（食餌）（ペレット）、自由
β１抗体（４．１２ｍｇ／ｍＬ（クエン酸緩衝液５０ｍＭ／１４０ｎＭ  ＮａＣｌ中）；凝集０．２４％）
β１抗体剤形：９０ｎＭ  ＮａＣｌ／５０ｎＭ  Ｔｒｉｓ  ｐＨ７．１でのβ１抗体の希釈物；濃度：１．２３６倍希釈して３．３３ｍｇ／ｍＬの最終濃度にする
β１抗体投与：腹腔内、週１回。投与体積：０．１５ｍＬ／マウス（最大１０ｍＬ／ｋｇ）
【０３２５】
実験動物：
動物種及び系統：マウス；トランスジェニックＡＰＰ２３（Ｂ６．Ｄ２−Ｔｇ（Ｔｈｙ１Ａｐｐ）２３／１Ｓｄｚ）
性別：雌（雌は、全体的なＡβ負荷がかなり高く、Ａβ４０／Ａβ４２比がより高く、従って微小出血がより顕著である）
投与段階に割り当てられる研究動物の数：ＡＰＰ２３：雌６０匹
年齢：およそ１７〜１８月齢（投与の開始時）
体重範囲：２６〜３６ｇ（投与の開始時）
【０３２６】
磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）
ＭＲＩ研究のために、マウスを、フェイスマスクを介して投与される酸素／Ｎ２Ｏ（２：１）の混合物中の１．５％イソフルラン（Ａｂｂｏｔｔ，Ｃｈａｍ，スイス）で麻酔し、プレキシグラスのクレードルに入れた。マウスの体温は、動物ベッドに組み込まれた水管を介して３６．５±０．５℃に維持した。定位固定は使用されなかった。取得全体を通して呼吸をモニタリングした。画像処理セッションの期間は、マウスの位置決めを含めて約１５分であった。
【０３２７】
測定は、アクティブシールド型勾配磁場システム（ａｃｔｉｖｅｌｙ  ｓｈｉｅｌｄｅｄ  ｇｒａｄｉｅｎｔ  ｓｙｓｔｅｍ）を備え付けた、７．０Ｔで作動するＢｉｏｓｐｅｃ  ７０／３０分光計（Ｂｒｕｋｅｒ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｅｔｔｌｉｎｇｅｎ，ドイツ）を用いて実施した。スキャナーの動作可能ソフトウェアは、Ｐａｒａｖｉｓｉｏｎ  ５．１（Ｂｒｕｋｅｒ）であった。以下の画像処理パラメータと共に三次元（３Ｄ）Ｔ２＊強調グラジエントエコーシーケンスを使用して画像を得た：繰り返し時間１９．３ｍｓ；エコー時間１０ｍｓ；マトリックス２５６×１２８×１９２；視野１．５×１．５×２．０ｃｍ３、２回の平均値。５９×１１７×１０４μｍ３のピクセルサイズを有する画像に対する総取得時間は、１１．８６分であった。
【０３２８】
ＭＲＩデータの取得及び解析は、盲検化された研究者によって実施した。最小直径が７０μｍである、シグナル減衰を示す皮質及び視床における部位（病変）を全脳にわたって解析した。同じ部位（病変）が複数回カウントされないことを確実にするために、その存在を３Ｄデータセットからのいくつかの連続した切片にわたって慎重に制御した。病変の総体積をＩｍｇＴｏｏｌ、すなわちＩＤＬ（Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｖｅ  Ｄａｔａ  Ｌａｎｇｕａｇｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｂｏｕｌｄｅｒ，Ｃｏｌｏｒａｄｏ，ＵＳＡ）ベースのソフトウェアを使用して評価した。画像を最初にガウシアンプロファイルフィルターで弱くローパスフィルター処理し、次いで適応するＬｌｏｙｄ−Ｍａｘヒストグラム量子化を使用して一連の４つのグレーレベルクラスに変換した。この方法により、各画像上の閾値の自由裁量の選択に起因する操作者バイアスが回避された。ソフトウェアの詳細な説明は、Ｂａｂｉｎ  ＡＬ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２において、又はＥｇｇｅｒ  Ｃ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３において参照することができる。３Ｄデータセットの各切片について、外側縁内のシグナル減衰部位の面積を、画像セグメント化アルゴリズムを適用することによって決定した。この分析は、３Ｄデータセットのあらゆる切片に対して繰り返される。次いで、病変面積の合計に切片の厚さ（１０４μｍ）を掛け合わせることにより、病変の総体積をコンピュータ算出した。
【０３２９】
組織の採取及び組織学的処理
脳の切片を、剖検時、全ての予定されていた動物から収集した。小脳、レベル７の後の最後の断片を化合物１の脳濃度の決定のために採取した（脳切片レベルの説明については、Ｂｏｌｏｎ  Ｂ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３を参照されたい）。脳の残りの部分は、１０％中性緩衝ホルマリンで固定した。
【０３３０】
４つの脳切片（Ｂｏｌｏｎ  Ｂ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３に記載された通りのレベル２、３、４及び視床下部レベル（レベル２’）での１つの追加のスライド）を処理し、ヘマトキシリン及びエオシン（Ｈ＆Ｅ）並びにヘモジデリン沈着物のためのペルルスのプルシアンブルーで染色した。
【０３３１】
脳収集のための手順：小脳を大脳から分離した。残った大脳（前側からレベル５まで）を病理学のためにホルマリンに移した。
【０３３２】
顕微鏡検査
ヘマトキシリン及びエオシン並びにペルルスのプルシアンブルーで染色した脳切片を光学顕微鏡下で検査した。ペルルスのプルシアンブルーで染色された切片におけるヘモジデリン沈着物の分布、サイズ及び染色強度を表３７の等級付けスキームに基づいて評価した。
【０３３３】
【表４０】
2019534885.tif 000042
【０３３４】
他の全ての脳変化の評価を、以下の通りに等級付けした出血、アミロイドプラーク及び血管の炎症を用いて、ヘマトキシリン及びエオシンで染色された切片上で行った：
・脳内の出血の分布、サイズ及び染色強度は、ヘモジデリンを等級付けするために使用した基準と同じ基準を使用して評価した。
・対照におけるアミロイドプラークの程度には、任意に中程度（グレード３）の値を与え、顕著に少ないプラークを有するあらゆる脳は、わずかな（グレード２）と等級付けした。
・血管の炎症の重症度は、影響を受けた５つ以下の血管／脳が特定された場合に「最小の」（グレード１）、又は影響を受けた６つ以上の血管／脳が特定された場合に「わずかな」（グレード２）と等級付けした。
【０３３５】
化合物１の血漿及び脳濃度
血液を剖検時に全ての動物から得た。安楽死後、大静脈からおよそ０．３ｍＬの全血を、抗凝固薬としてＥＤＴＡを含有する管に収集した。採取期間中、管を氷水に入れた。その後、血漿を遠心分離（１０分、１２７０Ｇ、＋４℃）によって分離し、１つの独自にラベルを付けた透明管（Ｔｈｅｒｍｏからの１．８ｍＬ  ＮＵＮＣ  ２Ｄコード化された管）に移し、−７０℃以下で凍結した。血漿中の化合物１の濃度を、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ方法を使用して測定した。
【０３３６】
化合物１の脳濃度を、脳試料（レベル７）において、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ方法を使用して決定した。約１００〜２００ｍｇの脳組織を収集し、Ｔｈｅｒｍｏからの１．８ｍＬ  ＮＵＮＣ  ２Ｄコード化された管に入れて計量し、−７０℃以下で凍結した。
【０３３７】
化合物１の飼料ペレット濃度決定
それぞれ個々のペレットを５０ｍＬ管に入れて計量し、砕いた。２〜３ｍＬの抽出溶媒（ＡＣＮ／水  ８：２（ｖ／ｖ））を添加し、得られた混合物を６００ｒｐｍで５時間振盪させた。次いで、この混合物を、遠心分離バイアル＋フィルター（低結合デュラポア（ｄｕｒａｐｏｒｅ）ＰＶＤＦ膜０．４５μｍを備えた遠心分離フィルター）中で２５００ｒｐｍで１０分間遠心分離し、１バイアルあたり２本の注入（１〜５μＬの注入）で超高性能液体クロマトグラフィー（ＵＰＬＣ）によって分析した。
【０３３８】
統計解析
相応に示した通りの平均値及び標準偏差（ＳＤ）、平均値の標準誤差（ＳＥＭ）並びに変動係数（ＣＶ）を算出し、分散分析（ＡＮＯＶＡ）を実施した。体重の分析のために、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ  ６を使用して、テューキーの多重比較検定を用いる２元配置ＡＮＯＶＡを実施した。Ｓｙｓｔａｔ  Ｖｅｒｓｉｏｎ  １３（Ｓｙｓｔａｔ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｉｎｃ．，Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ，ＣＡ，ＵＳＡ）を使用して、ＭＲＩデータに対して、変量効果統計解析を用いるＡＮＯＶＡを実施した。
【０３３９】
結果
体重
全ての治療群は、研究中、体重増加を示し、治療に関するいかなる体重減少の徴候も存在しなかった（図２６）。
【０３４０】
磁気共鳴画像法
総病変体積を実験の開始（ベースライン）時並びに治療の１、２及び３か月時に測定した（図２７）。病変体積増加係数をベースライン測定に対して算出したように（図２９）、ベースラインに対して正規化された（自然対数に変換した）総病変体積も決定した（図２８）。対照群では、加齢に起因する病変体積の増加が観察された。β１抗体治療群は、期待された通り研究中に病変体積増加の増悪を示した。有意性には達しないが、化合物１で治療されたマウスについては、対照ＡＰＰ２３マウスと比較して正規化された病変体積の減少の傾向があった（図２８及び２９）。加齢に伴う病変数増加が観察された。しかし、病変数は、治療群間に違いがなかった（３か月時の病変数（平均値±ＳＥＭ）対照：１１．２±１．５、化合物１：１１．５±２．０、β１抗体：１２．４±１．６）。
【０３４１】
まとめると、化合物１治療は、ＭＲＩによって検出される病変体積を増悪させず、正規化された病変体積の減少の傾向が観察された。
【０３４２】
毒物動態学
第２群動物における研究の最後に、マウス血漿及び脳組織中の化合物１の濃度を決定した。血漿中の平均化合物１濃度は、動物間のわずかな変動（１５．９％の変動係数）を伴いつつ、１２１０ｎｇ／ｍＬであった。
【０３４３】
脳組織における平均化合物１濃度は、動物間のわずかな変動（２９．４％の変動係数）を伴いつつ、４０３４ｎｇ／ｇであった。血漿に対する脳の比の平均は、３．３であった。脳に見られる化合物１濃度は、９６日目に血漿と比較すると、２．２〜６．１倍の範囲であった。
【０３４４】
死後研究
化合物１又はβ１抗体での３か月の治療後、研究の最後に死後分析を実施した。
【０３４５】
肉眼的所見
いずれの動物でも、剖検時に治療関連の明らかな肉眼的観察結果は存在しなかった。
【０３４６】
顕微鏡的所見（脳）
脳における顕微鏡的観察結果を表３８にまとめて示す。
【０３４７】
【表４１】
2019534885.tif 000043
【０３４８】
ペルルスのプルシアンブルーを用いるその青色染色反応によって同定されるヘモジデリン沈着物は、全ての群内の多くの動物において確認された。これらの沈着物は、通常、脳の大脳皮質内の小血管の近くに見られた。これらは、それほど頻繁ではないが、髄膜の血管の近くに存在していたか、又は脳内のアミロイドプラークに付着していた。化合物１で治療されたマウスでは、その発生率及び重症度は、治療していない対照と同様であり、罹患した脳内に１つ又は２つの沈着巣のみが存在する。対照的に、β１抗体投与は、１００％の発生率を伴っていた。
【０３４９】
出血は、Ｈ＆Ｅ染色切片において同定され、ヘモジデリンの存在よりも頻度が低かった。ある場合には、出血は、ヘモジデリンと同じ巣に存在していたが、最近の出血の巣にヘモジデリンは存在しなかった。出血は、化合物１で治療されたマウスでは、治療していない対照及びβ１抗体で治療された群と比較してあまり見られなかった。
【０３５０】
小血管の炎症は、髄膜において最も頻繁に観察され、脳自体には時折観察されるのみであった。形態は、単核細胞の外膜への浸潤から、血管壁の壊死及びヒアリン化を伴うより顕著な炎症まで様々であった。血管炎症は、化合物１で治療されたマウスで最も目立たず、β１抗体で治療された群で最も著しかった。
【０３５１】
血栓形成は、罹患した血管において非常に稀に見られたか、又は隣接している脳組織の小さい領域の以前の壊死（梗塞）は、治療していない対照及びβ１抗体で治療されたマウスで存在したが、化合物１で治療されたマウスで存在しなかった。
【０３５２】
プラーク形成の程度は、化合物１で治療された何匹かのマウスでは、他の３つの群のマウスと比べて低下したように見えた。
【０３５３】
あらゆる群の２匹の動物は、視床におけるプラークの石灰化を示し、この変化に対する化合物１又はβ１抗体による効果は示されなかった。
【０３５４】
結論
老齢ＡＰＰ２３マウスにおけるこの安全性研究の目的は、脳内の微小出血に対するアミロイド−βベースの療法の結果を評価することであった。化合物１は、飼料投与において０．３ｇ／ｋｇの用量で使用した。なぜなら、ＡＰＰ２３マウスにおけるアミロイド−β低下に対する最大の薬力学的効果は、この用量で以前に観察されているからである。β１抗体での受動免疫は、Ｐｆｅｉｆｅｒ  Ｍ  ｅｔ  ａｌ．，２００２の結果に基づき、陽性対照としての役割を果たし、微小出血の発生増大を示した。
【０３５５】
化合物１並びにβ１抗体での慢性治療は、いかなる体重の変化ももたらさなかった。飼料ペレット分析では、おそらく大規模製造プロセスが原因で、期待された０．３ｇ／ｋｇよりも２９％低い化合物１の値が明らかになった。しかし、研究の最後の毒物動態学分析では、化合物１は、動物間のわずかな変動を伴いつつ、治療された全ての動物において、化合物１の飼料に入れた投与後の血漿中で測定可能であった。血漿中の化合物１レベルは、予測された通りであり、標準化用量に基づく以前の研究に匹敵していた。剖検時、化合物１は、動物間のわずかな変動を伴いつつ、化合物１の飼料に入れた投与後の脳内で測定可能であった。やはり、脳内の化合物１レベルは、予測された通りであり、以前の研究に匹敵していた。脳／血漿比は、３．３であった。
【０３５６】
脳内の微小出血病変体積をベースライン時並びに治療の１、２及び３か月時にＭＲＩによって測定した。加齢を通して、病変体積は、対照群において観察された通りに増加していた。β１抗体治療は、期待された通り、研究の過程を通して病変体積増加を増悪した（Ｐｆｅｉｆｅｒ  Ｍ  ｅｔ  ａｌ．２００２，Ｂｅｃｋｍａｎｎ  Ｎ  ｅｔ  ａｌ．２０１６）。しかし、化合物１治療は、ＭＲＩによって検出される病変体積のいかなる増悪も示さなかった。さらに、有意性には達しないが、化合物１で治療されたマウスについては、対照ＡＰＰ２３マウスと比較して正規化された病変体積の減少の傾向があった。
【０３５７】
病理組織学的試験では、化合物１投与は、脳内の小血管の最近の微小出血及び炎症の発生率を低下させたように見えたが、治療していない対照と比較すると、ヘモジデリン形成（過去の微小出血を示す）の程度には影響を与えなかった。陽性対照β１抗体は、微小出血と血管の炎症との両方を増大させた。この研究は、アミロイドプラーク形成の程度を定量化するように設計しなかったが、これは、化合物１で治療された何匹かのマウスでは減少したように見えた。
【０３５８】
実施例８：単独で及び強力なＣＹＰ３Ａ４阻害薬イトラコナゾール又は強力なＣＹＰ３Ａ４誘導薬リファンピシンと組み合わせて投与された場合の化合物１の薬物動態のインヒューマン研究
健康なボランティアにおける薬物−薬物相互作用（ＤＤＩ）研究において、化合物１のＰＫに対する強力なＣＹＰ３Ａ４阻害薬（イトラコナゾール）及び強力なＣＹＰ３Ａ４誘導薬（リファンピシン）の効果を評価した。ＤＤＩ研究設計の概要を図３０に示す。イトラコナゾールは、２００ｍｇ  ｑ．ｄ．の用量で化合物１と共に投与された場合、化合物１が単独で投与された場合と比較すると、化合物１の平均ＡＵＣを２〜３倍に、化合物１の平均Ｃｍａｘを２５％増加させた（表３９）。リファンピシンは、６００ｍｇ  ｑ．ｄ．の用量で化合物１と共に投与された場合、化合物１が単独で投与された場合と比較すると、化合物１の平均ＡＵＣを５分の１〜６分の１に、化合物１の平均Ｃｍａｘを２．５分の１に低下させた（表４０）。結論として、第１相研究における化合物１曝露に対する強力なＣＹＰ３Ａ４誘導薬及び強力なＣＹＰ３Ａ４阻害薬の効果は、ＣＹＰ３Ａ４が化合物１の排除にとって非常に重要であることを示している。
【０３５９】
【表４２】
2019534885.tif 000044
【０３６０】
治療及び対象についての固定効果を用いるＡＮＯＶＡモデルを、それぞれ対数変換したＰＫパラメータに適合させた。結果を逆変換して、「調整された幾何平均値」、「幾何平均値の比」及び「９０％  ＣＩ」を得た。
【０３６１】
【表４３】
2019534885.tif 000045
【０３６２】
治療及び対象についての固定効果を用いるＡＮＯＶＡモデルを、それぞれ対数変換したＰＫパラメータに適合させた。結果を逆変換して、「調整された幾何平均値」、「幾何平均値の比」及び「９０％  ＣＩ」を得た。
【０３６３】
実施例９：ＡＤ及びＣＡＡの臨床症状の発生のリスクがある参加者における化合物１の有効性を評価するための無作為化、二重盲検、プラセボ対照研究の概要
本明細書の表４１に記載する臨床試験では、認知の実質的な悪化及び／又はＣＡＡの発症（及びその後の微小出血若しくは脳内出血）を有する可能性がより高い個人を妥当な時間枠内で選択するための予後診断強化戦略として、臨床試験のセッティング内で実質的に評価することができるＡｐｏＥ４ホモ接合体の同定を用いる。この試験は、ＣｌｉｎｉｃａｌＴｒｉａｌｓ．ｇｏｖにＮＣＴ０２５６５５１１識別コードで収載されている。代替として、本実施例は、認知障害のないＡｐｏＥ４保有者（ホモ接合体、又は脳アミロイドの更なる高濃度化（「アミロイド陽性」）が例えばＰＥＴ若しくはＣＳＦ測定により決定されたヘテロ接合体）、６０〜７５歳、１日１回経口用量の１５又は５０ｍｇ化合物１で行われ得る。この試験は、ＣｌｉｎｉｃａｌＴｒｉａｌｓ．ｇｏｖにＮＣＴ０３１３１４５３識別コードで収載されている。
【０３６４】
計画された臨床試験における少なくとも５年の治療期間中、かなりの割合の参加者がＡＤに起因する軽度認知障害（ＭＣＩ）、認知症と診断され、且つ／又はＣＡＡ若しくはＣＡＡの悪化を発症するであろうことが予想される。
【０３６５】
【表４４】
2019534885.tif 000046
【０３６６】
【表４５】
2019534885.tif 000047
【０３６７】
【表４６】
2019534885.tif 000048
【０３６８】
【表４７】
2019534885.tif 000049
【０３６９】
参考文献
Ｂａｂｉｎ  ＡＬ  ｅｔ  ａｌ．，（２０１２）Ｂｌｅｏｍｙｃｉｎ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｌｕｎｇ  ｉｎｊｕｒｙ  ｉｎ  ｍｉｃｅ  ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ  ｂｙ  ＭＲＩ：ｍｏｄｅｌ  ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ  ｆｏｒ  ｔａｒｇｅｔ  ａｎａｌｙｓｉｓ．Ｍａｇｎ．Ｒｅｓｏｎ．Ｍｅｄ．；６７（２）：４９９−５０９．
Ｂｅｃｋｍａｎｎ  Ｎ  ｅｔ  ａｌ．，（２０１６）Ｌｏｎｇｉｔｕｄｉｎａｌ  ｎｏｎｉｎｖａｓｉｖｅ  ｍａｇｎｅｔｉｃ  ｒｅｓｏｎａｎｃｅ  ｉｍａｇｉｎｇ  ｏｆ  ｂｒａｉｎ  ｍｉｃｒｏｈｅｍｏｒｒｈａｇｅｓ  ｉｎ  ＢＡＣＥ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ−ｔｒｅａｔｅｄ  ＡＰＰ  ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ  ｍｉｃｅ．Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌｏｇｙ  ｏｆ  Ａｇｉｎｇ；４５：５０−６０．
Ｂｏｌｏｎ  Ｂ  ｅｔ  ａｌ．，（２０１３）ＳＴＰ  Ｐｏｓｉｔｉｏｎ  Ｐａｐｅｒ：Ｒｅｃｏｍｍｅｎｄｅｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅｓ  ｆｏｒ  Ｓａｍｐｌｉｎｇ  ａｎｄ  Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ  ｔｈｅ  Ｎｅｒｖｏｕｓ  Ｓｙｓｔｅｍ（Ｂｒａｉｎ，Ｓｐｉｎａｌ  Ｃｏｒｄ，Ｎｅｒｖｅ，ａｎｄ  Ｅｙｅ）ｄｕｒｉｎｇ  Ｎｏｎｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｇｅｎｅｒａｌ  Ｔｏｘｉｃｉｔｙ  Ｓｔｕｄｉｅｓ．Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｉｃ  Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ；４１（７）：１０２８−１０４８．
Ｃａｒｌｓｓｏｎ  ＡＣ  ｅｔ  ａｌ．，（２０１３）Ｓｅｖｅｎ  ｍｏｄｉｆｉａｂｌｅ  ｌｉｆｅｓｔｙｌｅ  ｆａｃｔｏｒｓ  ｐｒｅｄｉｃｔ  ｒｅｄｕｃｅｄ  ｒｉｓｋ  ｆｏｒ  ｉｓｃｈｅｍｉｃ  ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ  ｄｉｓｅａｓｅ  ａｎｄ  ａｌｌ−ｃａｕｓｅ  ｍｏｒｔａｌｉｔｙ  ｒｅｇａｒｄｌｅｓｓ  ｏｆ  ｂｏｄｙ  ｍａｓｓ  ｉｎｄｅｘ：Ａ  ｃｏｈｏｒｔ  ｓｔｕｄｙ．Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃａｒｄｉｏｌｏｇｙ；１６８：９４６−９５２．
Ｃａｓｔｅｌｌａｎｏ  ＪＭ  ｅｔ  ａｌ．，（２０１１）Ｈｕｍａｎ  ａｐｏＥ  Ｉｓｏｆｏｒｍｓ  Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｌｙ  Ｒｅｇｕｌａｔｅ  Ｂｒａｉｎ  Ａｍｙｌｏｉｄ−ｂ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｃｌｅａｒａｎｃｅ．Ｓｃｉ．Ｔｒａｎｓｌ．Ｍｅｄ．；３（８９）：８９ｒａ５７．
Ｃｈａｒｉｄｉｍｏｕ  Ａ  ｅｔ  ａｌ．，（２０１１）Ｓｐｏｒａｄｉｃ  ｃｅｒｅｂｒａｌ  ａｍｙｌｏｉｄ  ａｎｇｉｏｐａｔｈｙ  ｒｅｖｉｓｉｔｅｄ：ｒｅｃｅｎｔ  ｉｎｓｉｇｈｔｓ  ｉｎｔｏ  ｐａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｓｐｅｃｔｒｕｍ．Ｊ．Ｎｅｕｒｏｌ．Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ．Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ；８３（２）：１２４−１３７．
Ｃｈｅｎ  ＹＷ  ｅｔ  ａｌ．，（２００６）Ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  ｗｈｉｔｅ  ｍａｔｔｅｒ  ｌｅｓｉｏｎｓ  ａｎｄ  ｈｅｍｏｒｒｈａｇｅｓ  ｉｎ  ｃｅｒｅｂｒａｌ  ａｍｙｌｏｉｄ  ａｎｇｉｏｐａｔｈｙ．Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ；６７（１）：８３−８７．
Ｃｈｅｎｇ  ＡＬ  ｅｔ  ａｌ．，（２０１３）Ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ−Ｗｅｉｇｈｔｅｄ  Ｉｍａｇｉｎｇ  ｉｓ  Ｍｏｒｅ  Ｒｅｌｉａｂｌｅ  Ｔｈａｎ  Ｔ２＊−Ｗｅｉｇｈｔｅｄ  Ｇｒａｄｉｅｎｔ−Ｒｅｃａｌｌｅｄ  Ｅｃｈｏ  ＭＲＩ  ｆｏｒ  Ｄｅｔｅｃｔｉｎｇ  Ｍｉｃｒｏｂｌｅｅｄｓ．Ｓｔｒｏｋｅ；４４（１０）：２７８２−２７８６．
Ｄｅｒｍａｕｔ  Ｂ  ｅｔ  ａｌ．，（２００１）Ｃｅｒｅｂｒａｌ  ａｍｙｌｏｉｄ  ａｎｇｉｏｐａｔｈｙ  ｉｓ  ａ  ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ  ｌｅｓｉｏｎ  ｉｎ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ  ｄｕｅ  ｔｏ  ａ  ｎｏｖｅｌ  ｐｒｅｓｅｎｉｌｉｎ  １  ｍｕｔａｔｉｏｎ．Ｂｒａｉｎ；１２４：２３８３−２３９２．
Ｅｇｇｅｒ  Ｃ  ｅｔ  ａｌ．，（２０１３）Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｂｌｅｏｍｙｃｉｎ  ｖｉａ  ｔｈｅ  ｏｒｏｐｈａｒｙｎｇｅａｌ  ａｓｐｉｒａｔｉｏｎ  ｒｏｕｔｅ  ｌｅａｄｓ  ｔｏ  ｓｕｓｔａｉｎｅｄ  ｌｕｎｇ  ｆｉｂｒｏｓｉｓ  ｉｎ  ｍｉｃｅ  ａｎｄ  ｒａｔｓ  ａｓ  ｑｕａｎｔｉｆｉｅｄ  ｂｙ  ＵＴＥ−ＭＲＩ  ａｎｄ  ｈｉｓｔｏｌｏｇｙ．ＰＬｏＳ  Ｏｎｅ；８（５）：ｅ６３４３２．
Ｆａｒｉａｓ  ＳＴ  ｅｔ  ａｌ．，（２００８）Ｔｈｅ  ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ  ｏｆ  ｅｖｅｒｙｄａｙ  ｃｏｇｎｉｔｉｏｎ（ＥＣｏｇ）：Ｓｃａｌｅ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ａｎｄ  ｐｓｙｃｈｏｍｅｔｒｉｃ  ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ．Ｎｅｕｒｏｐｓｙｃｈｏｌｏｇｙ；２２（４）：５３１−５４４．
Ｆｏｌｓｔｅｉｎ  ＭＦ  ｅｔ  ａｌ．，（１９７５）Ａ  ｐｒａｃｔｉｃａｌ  ｍｅｔｈｏｄ  ｆｏｒ  ｇｒａｄｉｎｇ  ｔｈｅ  ｃｏｇｎｉｔｉｖｅ  ｓｔａｔｅ  ｏｆ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｃｌｉｎｉｃｉａｎ．Ｊ．Ｐｓｙｃｈｉａｔ．Ｒｅｓ．；１２：１８９−１９８．
Ｆｏｒｌｅｎｚａ  ＯＶ  ｅｔ  ａｌ．，（２０１５）Ｃｅｒｅｂｒｏｓｐｉｎａｌ  ｆｌｕｉｄ  ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ  ｉｎ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ：Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ  ａｃｃｕｒａｃｙ  ａｎｄ  ｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｄｅｍｅｎｔｉａ；Ａｌｚｈｅｉｍｅｒｓ  Ｄｅｍｅｎｔ．（Ａｍｓｔ）；１（４）：４５５−４６３．
Ｇｒｅｅｎｂｅｒｇ  ＳＭ  ｅｔ  ａｌ．，（２０１４）Ｏｕｔｃｏｍｅ  Ｍａｒｋｅｒｓ  ｆｏｒ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｔｒｉａｌｓ  ｉｎ  Ｃｅｒｅｂｒａｌ  Ａｍｙｌｏｉｄ  Ａｎｇｉｏｐａｔｈｙ．Ｌａｎｃｅｔ  Ｎｅｕｒｏｌ．；１３（４）：４１９−４２８．
Ｇｕｒｏｌ  ＭＥ  ｅｔ  ａｌ．，（２０１６）Ｆｌｏｒｂｅｔａｐｉｒ−ＰＥＴ  ｔｏ  ｄｉａｇｎｏｓｅ  ｃｅｒｅｂｒａｌ  ａｍｙｌｏｉｄ  ａｎｇｉｏｐａｔｈｙ：Ａ  ｐｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅ  ｓｔｕｄｙ．Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ；８７（１９）：２０４３−２０４９．
Ｈｅｒｓｋｏｖｉｔｚ  ＡＺ  ｅｔ  ａｌ．，（２０１３）Ａ  Ｌｕｍｉｎｅｘ  ａｓｓａｙ  ｄｅｔｅｃｔｓ  ａｍｙｌｏｉｄ  β  ｏｌｉｇｏｍｅｒｓ  ｉｎ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ  ｃｅｒｅｂｒｏｓｐｉｎａｌ  ｆｌｕｉｄ．ＰＬｏＳ  ＯＮＥ；８（７）：ｅ６７８９８．ｄｏｉ：１０．１３７１／ｊｏｕｒｎａｌ．ｐｏｎｅ．００６７８９８．
Ｊａｎｅｌｉｄｚｅ  Ｓ  ｅｔ  ａｌ．，（２０１６）Ｓｗｅｄｉｓｈ  ＢｉｏＦＩＮＤＥＲ  ｓｔｕｄｙ  ｇｒｏｕｐ，Ｈａｎｓｓｏｎ  Ｏ．ＣＳＦ  Ａβ４２／Ａβ４０  ａｎｄ  Ａβ４２／Ａβ３８  ｒａｔｉｏｓ：ｂｅｔｔｅｒ  ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ  ｍａｒｋｅｒｓ  ｏｆ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ  ｄｉｓｅａｓｅ．Ａｎｎ  Ｃｌｉｎ  Ｔｒａｎｓｌ  Ｎｅｕｒｏｌ．３（３）：１５４−６５．
Ｋａｕｆｅｒ  ＤＩ  ｅｔ  ａｌ．，（２０００）Ｖａｌｉｄａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ＮＰＩ−Ｑ，ａ  ｂｒｉｅｆ  ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｆｏｒｍ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｎｅｕｒｏｐｓｙｃｈｉａｔｒｉｃ  Ｉｎｖｅｎｔｏｒｙ．Ｊ．Ｎｅｕｒｏｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ  Ｃｌｉｎ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ；１２（２）：２３３−２３９．
Ｋｎｏｕｆｆ  Ｃ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９９）Ａｐｏ  Ｅ  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｓ  ＶＬＤＬ  ｃｌｅａｒａｎｃｅ  ａｎｄ  ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ  ｒｉｓｋ  ｉｎ  ｍｉｃｅ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．；１０３（１１）：１５７９−１５８６．
Ｋｕｍａｒ−Ｓｉｎｇｈ  Ｓ，（２００８）Ｃｅｒｅｂｒａｌ  ａｍｙｌｏｉｄ  ａｎｇｉｏｐａｔｈｙ：ｐａｔｈｏｇｅｎｅｔｉｃ  ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ａｎｄ  ｌｉｎｋ  ｔｏ  ｄｅｎｓｅ  ａｍｙｌｏｉｄ  ｐｌａｑｕｅｓ．Ｇｅｎｅｓ  Ｂｒａｉｎ  Ｂｅｈａｖ．；７（Ｓｕｐｐｌ．１）：６７−８２．
Ｌａｎｇｂａｕｍ  ＪＢ  ｅｔ  ａｌ．，（２０１４）Ａｎ  ｅｍｐｉｒｉｃａｌｌｙ  ｄｅｒｉｖｅｄ  ｃｏｍｐｏｓｉｔｅ  ｃｏｇｎｉｔｉｖｅ  ｔｅｓｔ  ｓｃｏｒｅ  ｗｉｔｈ  ｉｍｐｒｏｖｅｄ  ｐｏｗｅｒ  ｔｏ  ｔｒａｃｋ  ａｎｄ  ｅｖａｌｕａｔｅ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ  ｆｏｒ  ｐｒｅｃｌｉｎｉｃａｌ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ．Ａｌｚｈｅｉｍｅｒｓ  Ｄｅｍｅｎｔ．；１０（６）：６６６−６７４．
Ｌｏｇｓｄｏｎ  ＲＧ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９９）Ｑｕａｌｉｔｙ  ｏｆ  ｌｉｆｅ  ｉｎ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ：Ｐａｔｉｅｎｔ  ａｎｄ  ｃａｒｅｇｉｖｅｒ  ｒｅｐｏｒｔｓ．Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｎｔａｌ  Ｈｅａｌｔｈ＆Ａｇｉｎｇ；５（１）：２１−３２．
Ｌｕｏ  Ｇ  ｅｔ  ａｌ．，（２００４）ＣＹＰ３Ａ４  Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ  ｂｙ  Ｘｅｎｏｂｉｏｔｉｃｓ：Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ａｎｄ  Ｉｍｐａｃｔ  ｏｎ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ａｎｄ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ．Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ；５（６）：４８３−５０５．
Ｍａｔｔｓｓｏｎ  Ｎ  ｅｔ  ａｌ．，（２０１５）Ｐｒｅｄｉｃｔｉｎｇ  Ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｃｅｒｅｂｒｏｓｐｉｎａｌ  Ｆｌｕｉｄ  β−Ａｍｙｌｏｉｄ  ４２  ｉｎ  Ｃｏｇｎｉｔｉｖｅｌｙ  Ｈｅａｌｔｈｙ  Ｃｏｎｔｒｏｌｓ．ＪＡＭＡ  Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ；７２（５）：５５４−５６０．
Ｍｏｒｒｉｓ  ＪＣ，（１９９３）Ｔｈｅ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｄｅｍｅｎｔｉａ  Ｒａｔｉｎｇ（ＣＤＲ）：Ｃｕｒｒｅｎｔ  ｖｅｒｓｉｏｎ  ａｎｄ  ｓｃｏｒｉｎｇ  ｒｕｌｅｓ．Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ；４３（１１）：２４１２−２４１４．
Ｐａｇａｎｅｔｔｉ  ＰＡ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９６）Ａｍｙｌｏｉｄ  ｐｒｅｃｕｒｓｏｒ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｔｒｕｎｃａｔｅｄ  ａｔ  ａｎｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｇａｍｍａ−ｓｅｃｒｅｔａｓｅ  ｓｉｔｅｓ  ｉｓ  ｎｏｔ  ｃｌｅａｖｅｄ  ｔｏ  ｂｅｔａ−ａｍｙｌｏｉｄ．Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．Ｒｅｓ．；４６（３）：２８３−２９３．
Ｐａｌｍｑｖｉｓｔ  Ｓ  ｅｔ  ａｌ．，（２０１６）Ｃｅｒｅｂｒｏｓｐｉｎａｌ  ｆｌｕｉｄ  ａｎａｌｙｓｉｓ  ｄｅｔｅｃｔｓ  ｃｅｒｅｂｒａｌ  ａｍｙｌｏｉｄ−β  ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ  ｅａｒｌｉｅｒ  ｔｈａｎ  ｐｏｓｉｔｒｏｎ  ｅｍｉｓｓｉｏｎ  ｔｏｍｏｇｒａｐｈｙ．Ｂｒａｉｎ；１３９：１２２６−１２３６．
Ｐｆｅｉｆｅｒ  Ｍ  ｅｔ  ａｌ．，（２００２）Ｃｅｒｅｂｒａｌ  Ｈｅｍｏｒｒｈａｇｅ  Ａｆｔｅｒ  Ｐａｓｓｉｖｅ  Ａｎｔｉ−Ａβ  Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ．Ｓｃｉｅｎｃｅ；２９８（５５９７）：１３７９．
Ｐｏｓｎｅｒ  Ｋ  ｅｔ  ａｌ．，（２０１１）Ｔｈｅ  Ｃｏｌｕｍｂｉａ−Ｓｕｉｃｉｄｅ  Ｓｅｖｅｒｉｔｙ  Ｒａｔｉｎｇ  Ｓｃａｌｅ：Ｉｎｉｔｉａｌ  Ｖａｌｉｄｉｔｙ  ａｎｄ  Ｉｎｔｅｒｎａｌ  Ｃｏｎｓｉｓｔｅｎｃｙ  Ｆｉｎｄｉｎｇｓ  Ｆｒｏｍ  Ｔｈｒｅｅ  Ｍｕｌｔｉｓｉｔｅ  Ｓｔｕｄｉｅｓ  Ｗｉｔｈ  Ａｄｏｌｅｓｃｅｎｔｓ  ａｎｄ  Ａｄｕｌｔｓ．Ａｍ．Ｊ．Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ；１６８（１２）：１２６６−１２７７．
Ｑｕｉｎｔｉｎｏ−Ｓａｎｔｏｓ  ＳＲ  ｅｔ  ａｌ．，（２０１２）Ｈｏｍｏｚｙｇｏｓｉｔｙ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ＡＰＯＥ  Ｅ４  ａｌｌｅｌｅ  ｉｓ  ｓｏｌｅｌｙ  ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  ｌｏｗｅｒ  ｃｏｇｎｉｔｉｖｅ  ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ  ｉｎ  Ｂｒａｚｉｌｉａｎ  ｃｏｍｍｕｎｉｔｙ  ｄｗｅｌｌｉｎｇ  ｏｌｄｅｒ  ａｄｕｌｔｓ  −  Ｔｈｅ  Ｂａｍｂｕｉ  Ｓｔｕｄｙ．Ｒｅｖ．Ｂｒａｓ．Ｐｓｉｑｕｉａｔｒ．；３４（４）：４４０−４４５．
Ｒａｎｄｏｌｐｈ  Ｃ，（１９９８）Ｔｈｅ  Ｒｅｐｅａｔａｂｌｅ  Ｂａｔｔｅｒｙ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｎｅｕｒｏｐｓｙｃｈｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｓｔａｔｕｓ（ＲＢＡＮＳ）．Ｐｅａｒｓｏｎ；Ｓａｎ  Ａｎｔｏｎｉｏ．
Ｒａｖｅｎ  ＪＣ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９２）Ｓｔａｎｄａｒｄ  ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｖｅ  ｍａｔｒｉｃｅｓ−１９９２  ｅｄｉｔｉｏｎ；Ｒａｖｅｎ  ｍａｎｕａｌ：Ｓｅｃｔｉｏｎ  ３．Ｏｘｆｏｒｄ  Ｐｓｙｃｈｏｌｏｇｉｓｔｓ  Ｐｒｅｓｓ；Ｏｘｆｏｒｄ．
Ｒａｖｅｎ  ＪＣ，（２０００）Ｓｔａｎｄａｒｄ  Ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｖｅ  Ｍａｔｒｉｃｅｓ−１９９８  Ｅｄｉｔｉｏｎ，ｕｐｄａｔｅｄ  ２０００．Ｍａｎｕａｌ  ｆｏｒ  Ｓｔａｎｄａｒｄ  Ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｖｅ  Ｍａｔｒｉｃｅｓ（Ｓｅｃｔｉｏｎ  ３）：ＮＣＳ  Ｐｅｒｓｏｎ，Ｉｎｃ．；Ｓａｎ  Ａｎｔｏｎｉｏ．
Ｓｃｈｒａｄｅｒ−Ｆｉｓｃｈｅｒ  Ｇ，Ｐａｇａｎｅｔｔｉ  ＰＡ，（１９９６）Ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ａｌｋａｌｉｚｉｎｇ  ａｇｅｎｔｓ  ｏｎ  ｔｈｅ  ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ  ｏｆ  ｔｈｅ  β−ａｍｙｌｏｉｄ  ｐｒｅｃｕｒｓｏｒ  ｐｒｏｔｅｉｎ．Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ；７１６（１−２）：９１−１００．
Ｓｃｈｒａｄｅｒ−Ｆｉｓｃｈｅｒ  Ｇ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９７）Ｉｎｓｅｒｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｌｙｓｏｓｏｍａｌ  Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｔｏ  ｔｈｅ  Ａｍｙｌｏｉｄ  Ｐｒｅｃｕｒｓｏｒ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｒｅｄｕｃｅｓ  Ｓｅｃｒｅｔｉｏｎ  ｏｆ  βＡ４．Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ６８（４）：１５７１−１５８０．
Ｓｃｈｒｅｉｂｅｒ  Ｓ  ｅｔ  ａｌ．（２０１５）Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ  ｏｆ  Ｖｉｓｕａｌ  ａｎｄ  Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ  Ｆｌｏｒｂｅｔａｐｉｒ  Ｆ  １８  Ｐｏｓｉｔｒｏｎ  Ｅｍｉｓｓｉｏｎ  Ｔｏｍｏｇｒａｐｈｙ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  ｉｎ  Ｐｒｅｄｉｃｔｉｎｇ  Ｍｉｌｄ  Ｃｏｇｎｉｔｉｖｅ  Ｉｍｐａｉｒｍｅｎｔ  Ｏｕｔｃｏｍｅｓ．ＪＡＭＡ  Ｎｅｕｒｏｌ．；７２（１０）：１１８３−１１９０．
Ｓｅｖｒｉｏｕｋｏｖａ  ＩＦ，Ｐｏｕｌｏｓ  ＴＬ，（２０１５）Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ  ｆｏｒ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｎｇ  ａｎｄ  Ｐｒｅｄｉｃｔｉｎｇ  Ｃｙｔｏｃｈｒｏｍｅ  Ｐ４５０  ３Ａ４−Ｌｉｇａｎｄ  Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ．Ａｄｖ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．Ｂｉｏｌ．；８５１：８３−１０５．
Ｓｈｅｉｋｈ  ＪＩ，Ｙｅｓａｖａｇｅ  ＪＡ，（１９８６）Ｇｅｒｉａｔｒｉｃ  Ｄｅｐｒｅｓｓｉｏｎ  Ｓｃａｌｅ（ＧＤＳ）．Ｒｅｃｅｎｔ  ｅｖｉｄｅｎｃｅ  ａｎｄ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｏｆ  ａ  ｓｈｏｒｔｅｒ  ｖｅｒｓｉｏｎ．Ｉｎ  Ｔ．Ｌ．Ｂｒｉｎｋ（Ｅｄ．），Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｇｅｒｏｎｔｏｌｏｇｙ：Ａ  Ｇｕｉｄｅ  ｔｏ  Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ  ａｎｄ  Ｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎ（ｐｐ．１６５−１７３）．ＮＹ：Ｔｈｅ  Ｈａｗｏｒｔｈ  Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．
Ｓｈｉｎｏｈａｒａ  Ｍ  ｅｔ  ａｌ．，（２０１６）Ｉｍｐａｃｔ  ｏｆ  ｓｅｘ  ａｎｄ  ＡＰＯＥ４  ｏｎ  ｃｅｒｅｂｒａｌ  ａｍｙｌｏｉｄ  ａｎｇｉｏｐａｔｈｙ  ｉｎ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ．Ａｃｔａ  Ｎｅｕｒｏｐａｔｈｏｌ．；１３２（２）：２２５−２３４．
Ｓｐｅｒｌｉｎｇ  ＲＡ  ｅｔ  ａｌ．，（２０１１）Ｔｏｗａｒｄ  ｄｅｆｉｎｉｎｇ  ｔｈｅ  ｐｒｅｃｌｉｎｉｃａｌ  ｓｔａｇｅｓ  ｏｆ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ：Ｒｅｃｏｍｍｅｎｄａｔｉｏｎｓ  ｆｒｏｍ  ｔｈｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｏｎ  Ａｇｉｎｇ  ａｎｄ  ｔｈｅ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｗｏｒｋｇｒｏｕｐ．Ａｌｚｈｅｉｍｅｒｓ  Ｄｅｍｅｎｔ．；７（３）：２８０−２９２．
Ｓｔｕｒｃｈｌｅｒ−Ｐｉｅｒｒａｔ  Ｃ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９７）Ｔｗｏ  ａｍｙｌｏｉｄ  ｐｒｅｃｕｒｓｏｒ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ  ｍｏｕｓｅ  ｍｏｄｅｌｓ  ｗｉｔｈ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ  ｄｉｓｅａｓｅ−ｌｉｋｅ  ｐａｔｈｏｌｏｇｙ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ．；９４（２４）：１３２８７−１３２９２．
Ｔｈａｌ  ＤＲ  ｅｔ  ａｌ．，（２００２）Ｔｗｏ  ｔｙｐｅｓ  ｏｆ  ｓｐｏｒａｄｉｃ  ｃｅｒｅｂｒａｌ  ａｍｙｌｏｉｄ  ａｎｇｉｏｐａｔｈｙ．Ｊ．Ｎｅｕｒｏｐａｔｈｏｌ．Ｅｘｐ．Ｎｅｕｒｏｌ．；６１：２８２−２９３．
Ｔｈｏｒｇｒｉｍｓｅｎ  Ｌ  ｅｔ  ａｌ．，（２００３）Ｗｈｏｓｅ  Ｑｕａｌｉｔｙ  ｏｆ  Ｌｉｆｅ  Ｉｓ  Ｉｔ  Ａｎｙｗａｙ？Ｔｈｅ  Ｖａｌｉｄｉｔｙ  ａｎｄ  Ｒｅｌｉａｂｉｌｉｔｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｑｕａｌｉｔｙ  ｏｆ  Ｌｉｆｅ−Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  Ｄｉｓｅａｓｅ（Ｑｏｌ−ＡＤ）Ｓｃａｌｅ．Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ  Ｄｉｓ．Ａｓｓｏｃ．Ｄｉｓｏｒｄ．；１７（４）：２０１−２０８．
Ｖｅｒｇｈｅｓｅ  ＰＢ  ｅｔ  ａｌ．，（２０１１）Ｒｏｌｅｓ  ｏｆ  Ａｐｏｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅ  ｉｎ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ  ａｎｄ  Ｏｔｈｅｒ  Ｎｅｕｒｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ．Ｌａｎｃｅｔ  Ｎｅｕｒｏｌ．；１０（３）：２４１−２５２．
Ｗｉｎｋｌｅｒ  ＤＴ  ｅｔ  ａｌ．，（２００１）．Ｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓ  ｈｅｍｏｒｒｈａｇｉｃ  ｓｔｒｏｋｅ  ｉｎ  ａ  ｍｏｕｓｅ  ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  ｃｅｒｅｂｒａｌ  ａｍｙｌｏｉｄ  ａｎｇｉｏｐａｔｈｙ．Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．；２１（５）：１６１９−１６２７．
【０３７０】
本明細書に引用される全ての参考文献、例えば科学刊行物又は特許出願公報は、各参考文献があらゆる目的から全体として参照により援用されることが具体的且つ個別的に指示されたものとみなすのと同程度に全体として及びあらゆる目的から参照により本明細書に援用される。前述の本発明は、理解を明確にするための例示及び実施例としていくらか詳細に記載されているが、当業者には、本発明の教示を踏まえれば、それに対して添付の特許請求の範囲の趣旨又は範囲から逸脱することなく特定の変更形態及び修正形態がなされ得ることは容易に明らかであろう。
【図１】
2019534885.tif 000050
【図２】
2019534885.tif 000051
【図３】
2019534885.tif 000052
【図４】
2019534885.tif 000053
【図５】
2019534885.tif 000054
【図６】
2019534885.tif 000055
【図７】
2019534885.tif 000056
【図８】
2019534885.tif 000057
【図９】
2019534885.tif 000058
【図１０】
2019534885.tif 000059
【図１１】
2019534885.tif 000060
【図１２】
2019534885.tif 000061
【図１３】
2019534885.tif 000062
【図１４】
2019534885.tif 000063
【図１５】
2019534885.tif 000064
【図１６】
2019534885.tif 000065
【図１７】
2019534885.tif 000066
【図１８】
2019534885.tif 000067
【図１９】
2019534885.tif 000068
【図２０】
2019534885.tif 000069
【図２１】
2019534885.tif 000070
【図２２】
2019534885.tif 000071
【図２３】
2019534885.tif 000072
【図２４】
2019534885.tif 000073
【図２５】
2019534885.tif 000074
【図２６】
2019534885.tif 000075
【図２７】
2019534885.tif 000076
【図２８】
2019534885.tif 000077
【図２９】
2019534885.tif 000078
【図３０】
2019534885.tif 000079
【国際調査報告】
2019534885.tif 000080
2019534885.tif 000081
2019534885.tif 000082
2019534885.tif 000083