(57)【要約】  インデノイソキノリン系トポイソメラーゼＩ（Ｔｏｐ１）阻害剤は、新規のクラスの抗癌剤である。本発明は、癌に対する有望な処置として現在臨床試験中の２種のインデノイソキノリン化合物の一連のプロドラッグを開示する。【選択図】図１
2019506410.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式：
【化１】
2019506410.tif 000039
を有する化合物であって、式中、
Ｒ１は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルケニル、Ｃ１〜Ｃ６アルキニル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ８複素環（複素環式）、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルケニル、アリール、ヘテロアリール、任意に置換されていてもよいアリール、または任意に置換されていてもよいヘテロアリールであり；
Ｒ２は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルケニル、Ｃ１〜Ｃ６アルキニル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ８複素環（複素環式）、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルキルアミド、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミド、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルケニル、アリール、ヘテロアリール、任意に置換されていてもよいアリール、または任意に置換されていてもよいヘテロアリールであり；
Ｒ３は、
【化２】
2019506410.tif 000040
である、
化合物、またはその医薬的に許容される塩、水和物もしくは溶媒和物。
【請求項２】
式：
【化３】
2019506410.tif 000041
を有する、請求項１の化合物であって、式中、
Ｒ１は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルケニル、Ｃ１〜Ｃ６アルキニル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ８複素環（複素環式）、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルケニル、アリール、ヘテロアリール、任意に置換されていてもよいアリール、または任意に置換されていてもよいヘテロアリールであり；
Ｒ３は、
【化４】
2019506410.tif 000042
である、
化合物。
【請求項３】
式：
【化５】
2019506410.tif 000043
を有する、請求項１の化合物であって、式中、
Ｒ１は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルケニル、Ｃ１〜Ｃ６アルキニル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ８複素環（複素環式）、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルケニル、アリール、ヘテロアリール、任意に置換されていてもよいアリール、または任意に置換されていてもよいヘテロアリールであり；
Ｒ３は、
【化６】
2019506410.tif 000044
である、
化合物。
【請求項４】
式：
【化７】
2019506410.tif 000045
を有する、請求項１の化合物であって、式中、
Ｒ１は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルケニル、Ｃ１〜Ｃ６アルキニル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ８複素環（複素環式）、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルケニル、アリール、ヘテロアリール、任意に置換されていてもよいアリール、または任意に置換されていてもよいヘテロアリールであり；
Ｒ３は、
【化８】
2019506410.tif 000046
である、
化合物。
【請求項５】
式：
【化９】
2019506410.tif 000047
を有する、請求項１の化合物であって、式中、
Ｒ１は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルケニル、Ｃ１〜Ｃ６アルキニル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ８複素環（複素環式）、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルケニル、アリール、ヘテロアリール、任意に置換されていてもよいアリール、または任意に置換されていてもよいヘテロアリールであり；
Ｒ３は、
【化１０】
2019506410.tif 000048
である、
化合物。
【請求項６】
式：
【化１１】
2019506410.tif 000049
を有する、請求項１の化合物であって、式中、
Ｒ１は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルケニル、Ｃ１〜Ｃ６アルキニル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ８複素環（複素環式）、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルケニル、アリール、ヘテロアリール、任意に置換されていてもよいアリール、または任意に置換されていてもよいヘテロアリールであり；
Ｒ３は、
【化１２】
2019506410.tif 000050
である、
化合物。
【請求項７】
式：
【化１３】
2019506410.tif 000051
を有する化合物であって、式中、
Ｒ１は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルケニル、Ｃ１〜Ｃ６アルキニル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ８複素環（複素環式）、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルケニル、アリール、ヘテロアリール、任意に置換されていてもよいアリール、または任意に置換されていてもよいヘテロアリールであり；
Ｒ３は、
【化１４】
2019506410.tif 000052
であり、
Ｒ４は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルケニル、Ｃ１〜Ｃ６アルキニル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ８複素環（複素環式）、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルキルアミド、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミド、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルケニル、アリール、ヘテロアリール、任意に置換されていてもよいアリール、または任意に置換されていてもよいヘテロアリールである、
化合物、またはその医薬的に許容される塩、水和物もしくは溶媒和物。
【請求項８】
Ｒ４がメチルである、請求項７の化合物。
【請求項９】
Ｒ４がフェニルである、請求項７の化合物。
【請求項１０】
Ｒ４が３−ピリジルである、請求項７の化合物。
【請求項１１】
Ｒ４が−ＣＨ２ＣＨ２ＣＯＯＣＨ３である、請求項７の化合物。
【請求項１２】
Ｒ４が−Ｎ（ＣＨ３）２である、請求項７の化合物。
【請求項１３】
式：
【化１５】
2019506410.tif 000053
を有する化合物であって、式中、
Ｒ１は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルケニル、Ｃ１〜Ｃ６アルキニル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ８複素環（複素環式）、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルケニル、アリール、ヘテロアリール、任意に置換されていてもよいアリール、または任意に置換されていてもよいヘテロアリールであり；
Ｒ３は、
【化１６】
2019506410.tif 000054
である、
化合物、またはその医薬的に許容される塩、水和物もしくは溶媒和物。
【請求項１４】
１種以上の医薬的に許容される担体、希釈剤および賦形剤と共に請求項１の化合物またはその医薬的に許容される塩を含む、医薬組成物。
【請求項１５】
１種以上の医薬的に許容される担体、希釈剤および賦形剤と共に請求項７の化合物またはその医薬的に許容される塩を含む、医薬組成物。
【請求項１６】
１種以上の医薬的に許容される担体、希釈剤および賦形剤と共に請求項１３の化合物またはその医薬的に許容される塩を含む、医薬組成物。
【請求項１７】
同じか異なる作用様式による治療活性のある１種以上の他の化合物と共に請求項１、７または１３の化合物と、１種以上の医薬的に許容される担体、希釈剤および賦形剤と、を含む医薬組成物。
【請求項１８】
癌を有する患者を処置するための方法であって、請求項１の化合物の治療有効量を、前記癌の緩和を必要とする患者に投与するステップを含む方法。
【請求項１９】
癌を有する患者を処置するための方法であって、請求項７の化合物の治療有効量を、前記癌の緩和を必要とする患者に投与するステップを含む方法。
【請求項２０】
癌を有する患者を処置するための方法であって、請求項１３の化合物の治療有効量を、前記癌の緩和を必要とする患者に投与するステップを含む方法。
【請求項２１】
癌を有する患者を処置するための方法であって、請求項１、７または１３の化合物の治療有効量を、同じか異なる作用様式による１種以上の治療上有効な化合物と組み合わせて、前記癌の緩和を必要とする患者に投与するステップを含む方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願との相互参照
この米国特許出願は、その内容の全体が参照により本開示に組み込まれる２０１６年２月４日に出願された米国仮特許出願第６２／２９１，２９２号に関連し、その優先権を主張する。
【０００２】
政府の権利
本発明は、国立衛生研究所（ｔｈｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ）により授与された助成金ＣＡ０８９５６６およびＣＡ０２３１６８に基づく政府の支援によってなされた。米国政府は、本発明に一定の権利を有する。
【０００３】
技術分野
本発明は一般に、癌治療薬としての新規化合物に関し、特に、抗がん剤であるインドテカン（ＬＭＰ４００）とインジミテカン（ＬＭＰ７７６）のプロドラッグに関する。本明細書に記載される発明はまた、これらのプロドラッグを用いて癌を有する患者を処置するための方法にも関する。
【背景技術】
【０００４】
背景
このセクションは、本開示のより良好な理解を容易にするのに役立つ可能性がある態様を紹介する。従って、これらの記載は、この点を踏まえて閲覧されるべきであり、先行技術であるかどうかについての承認として理解されるべきではない。
【０００５】
トポイソメラーゼは、複製、転写および他の核でのプロセスの間のＤＮＡ超らせん形成に付随するトポロジー問題を解消する遍在性の酵素である。ヒトのトポイソメラーゼＩ（Ｔｏｐ１）は、ＤＮＡホスホジエステルに対する酵素の求核攻撃によって１本のＤＮＡ鎖を切断して、切断されたＤＮＡ鎖の３’末端が酵素に共有結合した「切断複合体」を形成する（スキーム１）（Ｓｔａｋｅｒ，Ｂ．Ｌ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｔｈｅ  Ｍｅｃｈａｎｉｓｍ  ｏｆ  Ｔｏｐｏｉｓｏｍｅｒａｓｅ  Ｉ  Ｐｏｉｓｏｎｉｎｇ  ｂｙ  ａ  Ｃａｍｐｔｏｔｈｅｃｉｎ  Ａｎａｌｏｇ．  Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．  ２００２，  ９９，  １５３８７−１５３９２）。次いで、切断された（切れやすい）鎖は、切断されていない鎖を中心にした「制御された回転」を経て、ＤＮＡ超らせんの張力を緩和し、超らせんを除去する。切れやすい鎖の５’末端がホスホチロシル−ＤＮＡホスホジエステルに対する求核攻撃を行ってＤＮＡを再連結し、酵素を遊離させると、触媒サイクルが終了する。
【０００６】
Ｔｏｐ１阻害剤は、ＤＮＡ切断反応を阻害するＴｏｐ１抑制因子およびＤＮＡ再連結反応を阻害するＴｏｐ１毒性物質（Ｔｏｐ１  ｐｏｉｓｏｎｓ）として分類される（スキーム１）。Ｔｏｐ１は癌細胞で過剰発現し、いくつかのヒトの腫瘍では、ＤＮＡ損傷応答に欠陥がある。従って、「切断複合体」を安定化させるＴｏｐ１毒性物質は、化学療法剤として開発されている。Ｔｏｐ１毒性物質によって生じる癌細胞死のメカニズムは、二本鎖切断と細胞死を導く、ＤＮＡ−薬物−Ｔｏｐ１の三元複合体におけるＤＮＡ複製フォークとＤＮＡ切断部位との衝突を伴う（Ｐｏｍｍｉｅｒ，Ｙ．，  Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｃａｎｃｅｒ  ２００６，  ６，  ７８９−８０２）。
【０００７】
スキーム１
【化１】
2019506410.tif 000003
【０００８】
代表的なＴｏｐ１毒性物質を図１に示す（Ｗａｌｌ，Ｍ．Ｅ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．  １９６６，  ８８，  ３８８８−３８９０）。カンプトテシン（１）は、をその唯一の細胞内標的とする天然産物である。トポテカン（２）およびイリノテカン（３）は、癌の処置に関して食品医薬品局（ＦＤＡ）により承認されているが、カンプトテシン誘導体は、低い水溶性、用量制限毒性、およびラクトンの加水分解とその後のヒドロキシ酸の血漿タンパク質への結合とに起因するバイオアベイラビリティの制限を含む、いくつかの重大な欠点に悩まされている。これらの制限は、抗癌剤としてカンプトテシン以外のＴｏｐ１阻害剤を探索することを促している。ＮＳＣ３１４６２２（４）のＴｏｐ１毒性作用活性は、その細胞毒性プロファイルのＣＯＭＰＡＲＥアルゴリズム解析（Ｐａｕｌｌ，Ｋ．Ｄ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．Ｎａｔｌ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔ．  １９８９，  ８１，  １０８８−１０９２）が、カンプトテシン（１）および臨床的に有用な抗癌薬トポテカン（２）を含む他の公知のＴｏｐ１毒性物質のものと非常に類似していることを明らかにした後に発見された。
【０００９】
その後、４のラクタム窒素にヒドロキシエチル−アミノプロピル側鎖が連結された後にＭＪ−ＩＩＩ−６５（５）が強力なＴｏｐ１毒性物質であることが見出された。インデノイソキノリン類は、カンプトテシンに比べていくつかの利点を有する。２つのインデノイソキノリン系Ｔｏｐ１毒性物質であるインドテカン（６；ＬＭＰ４００としても知られている）とインジミテカン（７；ＬＭＰ７７６としても知られている）は、国立癌研究所（ｔｈｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ）における癌患者の処置についての第Ｉ相臨床試験に入っており、第ＩＩ相臨床試験を開始するために、具体的計画が策定されている（Ｔｅｉｃｈｅｒ，Ｂ．，  Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．  ２００８，  ７５，  １２６２−１２７１；Ｔｈｏｍａｓ，Ｃ．Ｊ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃａｍｐｔｏｔｈｅｃｉｎ：Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅｓ．  Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．  ２００４，  １２，  １５８５−１６０４；Ｐｏｍｍｉｅｒ，Ｙ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．  ２０１０，  １７，  ４２１−４３３）。
【００１０】
この分野における我々の継続的な研究努力は、インドテカン（６；ＬＭＰ４００）およびインジミテカン（７；ＬＭＰ７７６）の一連のプロドラッグの発見をもたらしている。プロドラッグは、生体内で酵素による、および／または化学的な、変換を経て活性のある親薬物を放出し、その後、この親薬物が所望の薬理効果を発揮できる、薬物分子の生体可逆的誘導体（ｂｉｏｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ  ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ）である（Ｓｔｅｌｌａ，Ｖ．Ｊ．，  Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ．Ｏｎ  Ｔｈｅｒ．Ｐａｔ．  ２００４，  １４，  ２７７−２８０；Ｔｅｓｔａ，Ｂ．，  Ｂｉｏｃｈｅｍ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．  ２００４，  ６８，  ２０９７−２１０６）。イリノテカン（３）は、投与後にカルバメートが、薬理活性のあるフェノールへと加水分解されるため、好例を提供する。プロドラッグの戦略は、薬理学的に強力な化合物の物理化学的特性、生物薬剤学的特性、または薬物動態学的特性を改善でき、それにより、見込みのある薬物製品の開発と有用性を向上させることができる（Ｒａｕｔｉｏ，Ｊ．  ｅｔ  ａｌ．  Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ．  ２００８，  ７，  ２５５−２７０；Ａｒｐｉｃｃｏ，Ｓ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｕｒｒ．Ｔｏｐ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．  ２０１１，  １１，  ２３４６−２３８１）。
【発明の概要】
【００１１】
発明の概要
一実施形態において、本明細書で開示されるのは、式（Ｉ）：
【化２】
2019506410.tif 000004
を有する化合物であって、式中、
Ｒ１は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルケニル、Ｃ１〜Ｃ６アルキニル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ８複素環（複素環式）、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルケニル、アリール、ヘテロアリール、任意に置換されていてもよいアリール、または任意に置換されていてもよいヘテロアリールであり；
Ｒ２は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルケニル、Ｃ１〜Ｃ６アルキニル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ８複素環（複素環式）、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルキルアミド、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミド、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルケニル、アリール、ヘテロアリール、任意に置換されていてもよいアリール、または任意に置換されていてもよいヘテロアリールであり；
Ｒ３は、
【化３】
2019506410.tif 000005
である、
化合物、またはその医薬的に許容される塩、水和物もしくは溶媒和物である。
【００１２】
別の実施形態では、本明細書で開示されるのは、式（ＩＩ）：
【化４】
2019506410.tif 000006
を有する化合物であって、式中、
Ｒ１は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルケニル、Ｃ１〜Ｃ６アルキニル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ８複素環（複素環式）、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルケニル、アリール、ヘテロアリール、任意に置換されていてもよいアリール、または任意に置換されていてもよいヘテロアリールであり；
Ｒ３は、
【化５】
2019506410.tif 000007
であり、
Ｒ４は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルケニル、Ｃ１〜Ｃ６アルキニル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ８複素環（複素環式）、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルキルアミド、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミド、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルケニル、アリール、ヘテロアリール、任意に置換されていてもよいアリール、または任意に置換されていてもよいヘテロアリールである、
化合物、またはその医薬的に許容される塩、水和物もしくは溶媒和物である。
【００１３】
一実施形態において、本明細書で開示されるのは、式（ＩＩＩ）：
【化６】
2019506410.tif 000008
を有する化合物であって、式中、
Ｒ１は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルケニル、Ｃ１〜Ｃ６アルキニル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ８複素環（複素環式）、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルケニル、アリール、ヘテロアリール、任意に置換されていてもよいアリール、または任意に置換されていてもよいヘテロアリールであり；
Ｒ３は、
【化７】
2019506410.tif 000009
である、
化合物、またはその医薬的に許容される塩、水和物もしくは溶媒和物である。
【００１４】
一実施形態において、本明細書で開示されるのは、式（Ｉ）の化合物と、１種以上の医薬的に許容される担体、希釈剤および賦形剤と、を含む医薬組成物である。
【００１５】
別の実施形態では、本明細書で開示されるのは、式（ＩＩ）の化合物と、１種以上の医薬的に許容される担体、希釈剤および賦形剤と、を含む医薬組成物である。
【００１６】
別の実施形態では、本明細書で開示されるのは、式（ＩＩＩ）の化合物と、１種以上の医薬的に許容される担体、希釈剤および賦形剤と、を含む医薬組成物である。
【００１７】
（Ｉ）、（ＩＩ）または（ＩＩＩ）の医薬組成物は、限定されるものではないが同じか異なる作用様式による治療活性のある他の化合物ならびに１種以上の医薬的に許容される担体、希釈剤、賦形剤等を含む、他の構成成分と組み合わされてもよいということが理解されるべきである。
【００１８】
別の実施形態では、本明細書に記載される医薬組成物は、本発明で開示される化合物を２種以上含んでもよい。
【００１９】
別の実施形態では、本明細書に記載される化合物は単独で、または癌の処置に有用である他の化合物（同じか異なる作用様式によって治療上有効である可能性がある化合物が包含される）と組み合わせて、使用されてもよいということが本明細書において理解される。
【００２０】
一実施形態において、本明細書で開示されるのは、癌を有する患者を処置するための方法であって、式（Ｉ）の化合物を含む医薬組成物の治療有効量を、前述の癌の緩和を必要とする患者に投与するステップを含む方法である。組成物は、限定されるものではないが同じか異なる作用様式による治療活性のある他の化合物ならびに１種以上の医薬的に許容される担体、希釈剤、賦形剤等を含む、他の構成成分を含んでもよいということが理解されるべきである。
【００２１】
一実施形態において、本明細書で開示されるのは、癌を有する患者を処置するための方法であって、式（ＩＩ）の化合物を含む医薬組成物の治療有効量を、前述の癌の緩和を必要とする患者に投与するステップを含む方法である。
【００２２】
一実施形態において、本明細書で開示されるのは、癌を有する患者を処置するための方法であって、式（ＩＩＩ）の化合物を含む医薬組成物の治療有効量を、前述の癌の緩和を必要とする患者に投与するステップを含む方法である。
【００２３】
別の実施形態では、本明細書で開示されるのは、癌を有する患者を処置するための方法であって、式（Ｉ）、（ＩＩ）または（ＩＩＩ）の化合物の治療有効量を、同じか異なる作用様式による１種以上の治療上有効な化合物と組み合わせて、前述の癌の緩和を必要とする患者に投与するステップを含む方法である。
【００２４】
別の実施形態では、本明細書に記載される化合物は、癌の他の症状を処置するために投与される他の化合物（悪心、嘔吐、疼痛、骨粗鬆症等を緩和するために投与される化合物など）と組み合わせて使用されてもよいということも本明細書において理解される。
【００２５】
本発明の上記および他の目的、特徴および利点は、以下の説明および図面と併せて理解するとより明らかになるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００２６】
【図１】図１は、代表的なＴｏｐ１毒性物質の構造を提示する。
【図２】図２は、インデノイソキノリン２０、１４、１０、１３および１１によって誘発されたＴｏｐ１媒介性ＤＮＡ切断の結果を示す：レーン１、ＤＮＡ単独；レーン２、Ｔｏｐ１＋ＤＮＡ；レーン３、１、１μＭ；レーン４、５、１μＭ；レーン５〜２４、左から右に、それぞれ０．１、１、１０および１００μＭの２０、１４、１０、１３および１１。左側の数字と矢印は、切断部位の位置を示す。
【発明を実施するための形態】
【００２７】
詳細な説明
本開示の原理の理解を促進することを目的として、図面に示される実施形態を以下で参照し、特定の言語を用いてこれを説明する。しかし、これによっては本開示の範囲の限定は意図されないということが理解されるであろう。
【００２８】
本明細書で開示される発明は、癌を有する患者の処置に有用である新規化合物を提供する。これらのフェノールエステル化合物は、インドテカン（ＬＭＰ４００）とインジミテカン（ＬＭＰ７７６）（Ｔｅｉｃｈｅｒ，Ｂ．，  Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．  ２００８，  ７５，  １２６２−１２７１；Ｐｏｍｍｉｅｒ，Ｙ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．  ２０１０，  １７，  ４２１−４３３）のプロドラッグである。
【００２９】
本明細書で使用される場合、以下の用語および表現は、以下に示す意味を有するものとする。他に定義されない限り、本明細書で使用される技術用語および科学用語は全て、当業者に一般に理解されるのと同じ意味を有する。
【００３０】
本開示において、「約」なる用語は、値または範囲におけるある程度の変動性（例えば、記載された値または記載された範囲の限界の１０％以内、５％以内、または１％以内）を許容し得る。本開示において、「実質的に」なる用語は、値または範囲におけるある程度の変動性（例えば、記載された値または記載された範囲の限界の９０％以内、９５％以内、または９９％以内）を許容し得る。
【００３１】
「ハロゲン」は、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩを指す。「ハロゲン置換」または「ハロ」置換は、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩによる１つ以上の水素原子の置き換えを指す。
【００３２】
本明細書で使用される場合、「アルキル」なる用語は、任意に分岐していてもよい、炭素原子の飽和した一価の鎖を指す。アルキルを包含する実施形態では、それらの実施形態の例示的な変形が、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、メチル、エチル、プロピル、３−メチルペンチル等などの低級アルキルを包含するということが理解される。
【００３３】
本明細書で使用される場合、「アルケニル」なる用語は、任意に分岐していてもよい、少なくとも１つの二重結合を含む炭素原子の不飽和の一価の鎖を指す。アルケニルを包含する実施形態では、それらの実施形態の例示的な変形が、Ｃ２〜Ｃ６、Ｃ２〜Ｃ４アルケニル等などの低級アルケニルを包含するということが理解される。
【００３４】
本明細書で使用される場合、「アルキニル」なる用語は、任意に分岐していてもよい、少なくとも１つの三重結合を含む炭素原子の不飽和の一価の鎖を指す。アルキニルを包含する実施形態では、それらの実施形態の例示的な変形が、Ｃ２〜Ｃ６、Ｃ２〜Ｃ４アルキニル等などの低級アルキニルを包含するということが理解される。
【００３５】
本明細書で使用される場合、「シクロアルキル」なる用語は、その一部が環を形成する、炭素原子の一価の鎖を指す。シクロアルキルを包含する実施形態では、それらの実施形態の例示的な変形が、Ｃ３〜Ｃ８シクロアルキル、シクロプロピル、シクロヘキシル、３−エチルシクロペンチル等などの低級シクロアルキルを包含するということが理解される。
【００３６】
本明細書で使用される場合、「シクロアルケニル」なる用語は、その一部が環を形成する、炭素原子の不飽和の一価の鎖を指す。シクロアルケニルを包含する実施形態では、それらの実施形態の例示的な変形が、Ｃ３〜Ｃ８、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルケニルなどの低級シクロアルケニルを包含するということが理解される。
【００３７】
本明細書で使用される場合、「アルキレン」なる用語は、任意に分岐していてもよい、炭素原子の飽和した二価の鎖を指す。アルキレンを包含する実施形態では、それらの実施形態の例示的な変形が、Ｃ２〜Ｃ４アルキレン、メチレン、エチレン、プロピレン、３−メチルペンチレン等などの低級アルキレンを包含するということが理解される。
【００３８】
本明細書で使用される場合、用語「複素環式」または「複素環」は、ヘテロ原子が窒素、酸素および硫黄から選択され、その一部、少なくとも１つのヘテロ原子、が環を形成する、炭素とヘテロ原子の一価の鎖を指す。「複素環」なる用語には、「芳香族複素環」と「非芳香族複素環」の両方が包含され得る。複素環には、イミダゾリル、チアゾリル、オキサゾリル、オキサジニル、チアジニル、ジチアニル、ジオキサニル、イソキサゾリル、イソチアゾリル、トリアゾリル、フラニル、テトラヒドロフラニル、ジヒドロフラニル、ピラニル、テトラゾリル、ピラゾリル、ピラジニル、ピリダジニル、イミダゾリル、ピリジニル、ピロリル、ジヒドロピロリル、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、ピリミジニル、モルホリニル、テトラヒドロチオフェニル、チオフェニル、アゼチジニル、オキセタニル、チイラニル、オキシラニル、アジリジニル等など、４〜７員の単環式の環および８〜１２員の二環式の環が包含される。「複素環」は、水素原子を有することができる任意の１つ以上の位置において任意に置換されていてもよい
【００３９】
本明細書で使用される場合、「アリール」なる用語は、単環式および多環式の芳香族炭素環基を包含し、これらの各々は、任意に置換されていてもよい。「任意に置換されていてもよいアリール」なる用語は、独立的に選択される１つ以上の置換基（ハロ、ヒドロキシル、アミノ、アルキル、またはアルコキシ、アルキルスルホニル、シアノ、ニトロ等など）で任意に置換されていてもよい、芳香族の単環式または多環式の炭素原子の環（フェニル、ナフチル等など）を指す。
【００４０】
用語「ヘテロアリール」または「芳香族複素環」は、その環構造が少なくとも１つのヘテロ原子（好ましくは１〜４つのヘテロ原子、より好ましくは１つまたは２つのヘテロ原子）を含む、置換された、または置換されていない、芳香族の単環構造（好ましくは５〜７員環、より好ましくは５〜６員環）を包含する。「ヘテロアリール」なる用語はまた、環の少なくとも１つがヘテロ芳香族である（例えば、他の環はシクロアルキル、シクロアルケニル、シクロアルキニル、芳香族炭素環、ヘテロアリールおよび／または複素環であってよい）、１つまたは２つの環を有する環系も包含し得る。ヘテロアリール基には、例えば、ピロール、フラン、チオフェン、イミダゾール、オキサゾール、チアゾール、ピラゾール、ピリジン、ピラジン、ピリダジンおよびピリミジンが包含される。
【００４１】
アルキル、シクロアルキル、アルケニル、シクロアルケニル、アルキレンおよび複素環の各々は、独立的に選択される基（アルキル、ハロアルキル、ヒドロキシアルキル、アミノアルキル、カルボン酸とその誘導体（エステル、アミドおよび亜硝酸エステルが包含される）、ヒドロキシ、アルコキシ、アシルオキシ、アミノ、アルキルアミノとジアルキルアミノ、アシルアミノ、チオ等およびそれらの組み合わせなど）で任意に置換されていてもよいということが理解される。
【００４２】
本明細書で使用される場合、用語「任意に置換されていてもよい」または「任意置換基」は、問題の基が、置換されていないか、あるいは指定された置換基のうちの１つ以上で置換されているということを意味する。問題の基が、２つ以上の置換基で置換されている場合、それらの置換基は同じであっても異なっていてもよい。さらに、「独立的に」なる用語を用いる場合、「独立的に〜である」および「〜から独立的に選択される」は、問題の基が同じであっても異なっていてもよいということを意味する。本明細書で定義される用語のいくつかは、構造中に２回以上出現してもよく、そのように出現する場合、各用語は、他のものとは独立して定義されるものとする。
【００４３】
「プロドラッグ」なる用語は、生体内で酵素による、および／または化学的な、変換を経て活性のある親薬物を放出し、その後、この親薬物が所望の薬理効果を発揮できる、薬物分子の生体可逆的誘導体を指す。プロドラッグの戦略は、薬理学的に強力な化合物の物理化学的特性、生物薬剤学的特性、または薬物動態学的特性を改善でき、それにより、見込みのある薬物製品の開発と有用性を向上させることができる
【００４４】
「患者」なる用語には、ヒトおよびヒト以外の動物（ペット（イヌおよびネコ等）および家畜など）が包含される。家畜は、食糧生産のために飼育される動物である。処置される患者は、好ましくは哺乳動物であり、特にヒトである。
【００４５】
「医薬的に許容される担体」なる用語は当技術分野で認識されており、これは、任意の対象組成物またはその構成成分の運搬または輸送に関与する、医薬的に許容される材料、組成物またはビヒクル（液体または固体のフィラー、希釈剤、賦形剤、溶媒または封入材料など）を指す。担体はそれぞれ、対象組成物およびその構成成分に適合するが患者に有害ではないという意味で「許容される」ものでなければならない。医薬的に許容される担体として役立つ可能性がある材料のいくつかの例としては、（１）ラクトース、グルコースおよびスクロースなどの糖；（２）トウモロコシデンプンおよびジャガイモデンプンなどのデンプン；（３）セルロースとその誘導体（カルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロースおよび酢酸セルロースなど）；（４）粉末化トラガカント；（５）麦芽；（６）ゼラチン；（７）タルク；（８）ココアバターおよび坐薬用ワックスなどの賦形剤；（９）ピーナッツ油、綿実油、ベニバナ油、ゴマ油、オリーブ油、トウモロコシ油および大豆油などの油；（１０）プロピレングリコールなどのグリコール；（１１）グリセリン、ソルビトール、マンニトールおよびポリエチレングリコールなどのポリオール；（１２）オレイン酸エチルおよびラウリン酸エチルなどのエステル；（１３）寒天；（１４）水酸化マグネシウムおよび水酸化アルミニウムなどの緩衝剤；（１５）アルギン酸；（１６）発熱物質を含まない水；（１７）等張食塩水；（１８）リンゲル液；（１９）エチルアルコール；（２０）リン酸緩衝液；ならびに（２１）医薬製剤に使用される他の無毒性適合物質が挙げられる。
【００４６】
本明細書で使用される場合、「投与する」なる用語は、本明細書に記載される化合物および組成物を患者に導入する全ての手段を包含し、これらには、限定されるものではないが経口（ｐｏ）投与、静脈内（ｉｖ）投与、筋肉内（ｉｍ）投与、皮下（ｓｃ）投与、経皮投与、吸入投与、頬側投与、点眼、舌下投与、膣内投与、直腸投与等が包含される。本明細書に記載される化合物および組成物は、従来の無毒性の医薬的に許容される担体、補助剤およびビヒクルを含む単位投与形態および／または製剤で投与されてもよい。
【００４７】
本明細書に記載される化合物および組成物の１日の総使用量は、妥当な医学的判断の範囲内で主治医によって決定されてもよいということが理解されるべきである。任意の特定の患者に対する特定の治療有効量のレベルは、処置される障害および障害の重症度；使用される特定の化合物の活性；使用される特定の組成物；患者の年齢、体重、全体的な健康状態、性別および食事；投与の時間、および使用される特定の化合物の排出速度、処置の持続期間、使用される特定の化合物と組み合わせて、または同時に、使用される薬物；ならびに研究者、獣医師、医師または通常の知識を有する他の臨床医に周知の同様の要因を含む、様々な要因に依存するであろう。
【００４８】
本明細書では、投与経路に応じて、広範囲の許容投与量が企図され、これには、約１μｇ／ｋｇ〜約１ｇ／ｋｇの範囲内の投与量が包含される。投与は１回であっても分割されてもよく、ｑ．ｄ．、ｂ．ｉ．ｄ．、ｔ．ｉ．ｄ．、さらには１日おき、週に１回、月に１回等を含む、多種多様な投薬プロトコルに従って投与されてもよい。それぞれの場合において、本明細書に記載される治療有効量は、投与の例に相当するか、あるいは１日、１週間または１ヵ月間の総用量に相当する。
【００４９】
本明細書で使用される場合、「治療有効量」なる用語は、処置されている疾患または障害の症状の軽減を含む、研究者、獣医師、医師または他の臨床医によって求められている組織系、動物またはヒトにおける生物学的応答または医学的応答を誘発する活性化合物または医薬物質の量を指す。一態様では、治療有効量は、任意の医学的処置に適用できる妥当な恩恵／リスク比で疾患または疾患の症状を処置または軽減する可能性がある量である。
【００５０】
本明細書で使用される場合、「治療有効量」なる用語は、患者に投与される量を指し、体表面積、患者の体重、および／または患者の状態に基づいてもよい。さらに、その開示が参照により本明細書に組み込まれるＦｒｅｉｒｅｉｃｈ，Ｅ．Ｊ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．Ｒｅｐ．  １９６６，  ５０（４），  ２１９によって説明されるように、ヒトについて決定された投与量と試験動物を含む動物について決定された投与量との相互関係（例示的には、体表面の１平方メートルあたりのミリグラムに基づく）が存在するということが理解される。体表面積は、患者の身長と体重から近似的に決定されてもよい（例えば、Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｔａｂｌｅｓ，  Ｇｅｉｇｙ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，  Ａｒｄｌｅｙ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  ページ５３７−５３８（１９７０）を参照のこと）。本明細書に記載される化合物の治療有効量は、悪性細胞または癌細胞の集団（そのような癌または悪性腫瘍の緩和を必要とする患者に見出され得るものなど）の増殖を阻害する（またはそれらを死滅させる）のに有用である任意の量と定義されてもよい。典型的には、そのような有効量は、患者の体重あたりの化合物で約５ｍｇ／ｋｇ〜約５００ｍｇ／ｋｇ、約５ｍｇ／ｋｇ〜約２５０ｍｇ／ｋｇおよび／または約５ｍｇ／ｋｇ〜約１５０ｍｇ／ｋｇの範囲である。有効用量はまた、投与経路、任意選択の賦形剤の使用、ならびに化合物と他の従来の、および非従来の、治療的処置（他の抗腫瘍剤、放射線療法等を含む）との同時使用の可能性に応じて変動することもあるということが理解される。
【００５１】
本発明は、以下の非限定的な化合物の例および方法の例を踏まえれば、より良好に理解される可能性がある。
【００５２】
例示的な一実施形態において、本明細書で開示されるのは、式（Ｉ）：
【化８】
2019506410.tif 000010
を有する化合物であって、式中、
Ｒ１は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルケニル、Ｃ１〜Ｃ６アルキニル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ８複素環（複素環式）、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルケニル、アリール、ヘテロアリール、任意に置換されていてもよいアリール、または任意に置換されていてもよいヘテロアリールであり；
Ｒ２は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルケニル、Ｃ１〜Ｃ６アルキニル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ８複素環（複素環式）、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルキルアミド、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミド、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルケニル、アリール、ヘテロアリール、任意に置換されていてもよいアリール、または任意に置換されていてもよいヘテロアリールであり；
Ｒ３は、
【化９】
2019506410.tif 000011
である、
化合物、またはその医薬的に許容される塩、水和物もしくは溶媒和物である。
【００５３】
一部の実施形態において、本明細書で開示されるのは、式：
【化１０】
2019506410.tif 000012
を有する化合物であって、式中、
Ｒ１は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルケニル、Ｃ１〜Ｃ６アルキニル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ８複素環（複素環式）、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルケニル、アリール、ヘテロアリール、任意に置換されていてもよいアリール、または任意に置換されていてもよいヘテロアリールであり；
Ｒ３は、
【化１１】
2019506410.tif 000013
である、
化合物である。
【００５４】
一部の実施形態において、本明細書で開示されるのは、式：
【化１２】
2019506410.tif 000014
を有する化合物であって、式中、
Ｒ１は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルケニル、Ｃ１〜Ｃ６アルキニル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ８複素環（複素環式）、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルケニル、アリール、ヘテロアリール、任意に置換されていてもよいアリール、または任意に置換されていてもよいヘテロアリールであり；
Ｒ３は、
【化１３】
2019506410.tif 000015
である、
化合物である。
【００５５】
一部の実施形態において、本明細書で開示されるのは、式：
【化１４】
2019506410.tif 000016
を有する化合物であって、式中、
Ｒ１は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルケニル、Ｃ１〜Ｃ６アルキニル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ８複素環（複素環式）、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルケニル、アリール、ヘテロアリール、任意に置換されていてもよいアリール、または任意に置換されていてもよいヘテロアリールであり；
Ｒ３は、
【化１５】
2019506410.tif 000017
である、
化合物である。
【００５６】
一部の実施形態において、本明細書で開示されるのは、式：
【化１６】
2019506410.tif 000018
を有する化合物であって、式中、
Ｒ１は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルケニル、Ｃ１〜Ｃ６アルキニル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ８複素環（複素環式）、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルケニル、アリール、ヘテロアリール、任意に置換されていてもよいアリール、または任意に置換されていてもよいヘテロアリールであり；
Ｒ３は、
【化１７】
2019506410.tif 000019
である、
化合物である。
【００５７】
一部の実施形態において、本明細書で開示されるのは、式：
【化１８】
2019506410.tif 000020
を有する化合物であって、式中、
Ｒ１は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルケニル、Ｃ１〜Ｃ６アルキニル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ８複素環（複素環式）、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルケニル、アリール、ヘテロアリール、任意に置換されていてもよいアリール、または任意に置換されていてもよいヘテロアリールであり；
Ｒ３は、
【化１９】
2019506410.tif 000021
である、
化合物である。
【００５８】
例示的な一実施形態において、本明細書で開示されるのは、式：
【化２０】
2019506410.tif 000022
を有する化合物であって、式中、
Ｒ１は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルケニル、Ｃ１〜Ｃ６アルキニル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ８複素環（複素環式）、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルケニル、アリール、ヘテロアリール、任意に置換されていてもよいアリール、または任意に置換されていてもよいヘテロアリールであり；
Ｒ３は、
【化２１】
2019506410.tif 000023
であり、
Ｒ４は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルケニル、Ｃ１〜Ｃ６アルキニル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ８複素環（複素環式）、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルキルアミド、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミド、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルケニル、アリール、ヘテロアリール、任意に置換されていてもよいアリール、または任意に置換されていてもよいヘテロアリールである、
化合物、またはその医薬的に許容される塩、水和物もしくは溶媒和物である。
【００５９】
一部の実施形態において、本明細書で開示されるのは、式：
【化２２】
2019506410.tif 000024
を有する化合物であって、式中、
Ｒ１は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルケニル、Ｃ１〜Ｃ６アルキニル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ８複素環（複素環式）、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルケニル、アリール、ヘテロアリール、任意に置換されていてもよいアリール、または任意に置換されていてもよいヘテロアリールであり；
Ｒ３は、
【化２３】
2019506410.tif 000025
である、
化合物である。
【００６０】
一部の実施形態において、本明細書で開示されるのは、式：
【化２４】
2019506410.tif 000026
を有する化合物であって、式中、
Ｒ１は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルケニル、Ｃ１〜Ｃ６アルキニル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ８複素環（複素環式）、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルケニル、アリール、ヘテロアリール、任意に置換されていてもよいアリール、または任意に置換されていてもよいヘテロアリールであり；
Ｒ３は、
【化２５】
2019506410.tif 000027
である、
化合物である。
【００６１】
一部の実施形態において、本明細書で開示されるのは、式：
【化２６】
2019506410.tif 000028
を有する化合物であって、式中、
Ｒ１は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルケニル、Ｃ１〜Ｃ６アルキニル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ８複素環（複素環式）、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルケニル、アリール、ヘテロアリール、任意に置換されていてもよいアリール、または任意に置換されていてもよいヘテロアリールであり；
Ｒ３は、
【化２７】
2019506410.tif 000029
である、
化合物である。
【００６２】
一部の実施形態において、本明細書で開示されるのは、式：
【化２８】
2019506410.tif 000030
を有する化合物であって、式中、
Ｒ１は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルケニル、Ｃ１〜Ｃ６アルキニル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ８複素環（複素環式）、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルケニル、アリール、ヘテロアリール、任意に置換されていてもよいアリール、または任意に置換されていてもよいヘテロアリールであり；
Ｒ３は、
【化２９】
2019506410.tif 000031
である、
化合物である。
【００６３】
一部の実施形態において、本明細書で開示されるのは、式：
【化３０】
2019506410.tif 000032
を有する化合物であって、式中、
Ｒ１は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルケニル、Ｃ１〜Ｃ６アルキニル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ８複素環（複素環式）、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルケニル、アリール、ヘテロアリール、任意に置換されていてもよいアリール、または任意に置換されていてもよいヘテロアリールであり；
Ｒ３は、
【化３１】
2019506410.tif 000033
である、
化合物である。
【００６４】
別の例示的な実施形態において、本明細書で開示されるのは、式：
【化３２】
2019506410.tif 000034
を有する化合物であって、式中、
Ｒ１は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルケニル、Ｃ１〜Ｃ６アルキニル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ８シクロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ８複素環（複素環式）、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルケニル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６シアノアルケニル、アリール、ヘテロアリール、任意に置換されていてもよいアリール、または任意に置換されていてもよいヘテロアリールであり；
Ｒ３は、
【化３３】
2019506410.tif 000035
である、
化合物、またはその医薬的に許容される塩、水和物もしくは溶媒和物である。
【００６５】
一実施形態において、本明細書で開示されるのは、式（Ｉ）の化合物と、１種以上の医薬的に許容される担体、希釈剤および賦形剤と、を含む医薬組成物である。
【００６６】
別の実施形態では、本明細書で開示されるのは、式（ＩＩ）の化合物と、１種以上の医薬的に許容される担体、希釈剤および賦形剤と、を含む医薬組成物である。
【００６７】
別の実施形態では、本明細書で開示されるのは、式（ＩＩＩ）の化合物と、１種以上の医薬的に許容される担体、希釈剤および賦形剤と、を含む医薬組成物である。
【００６８】
別の実施形態において、本明細書で開示されるのは、同じか異なる作用様式による治療活性のある１種以上の他の化合物と共に、式（Ｉ）、（ＩＩ）または（ＩＩＩ）の化合物と、１種以上の医薬的に許容される担体、希釈剤および賦形剤と、を含む医薬組成物である。
【００６９】
本明細書に記載される医薬組成物は、限定されるものではないが同じか異なる作用様式による治療活性のある他の化合物ならびに１種以上の医薬的に許容される担体、希釈剤、賦形剤等を含む、他の構成成分を含んでもよいということが理解されるべきである。
【００７０】
別の実施形態では、本明細書に記載される医薬組成物は、本発明で開示される化合物を２種以上含んでもよい。
【００７１】
一実施形態において、本明細書で開示されるのは、癌を有する患者を処置するための方法であって、式（Ｉ）の化合物を含む医薬組成物の治療有効量を、前述の癌の緩和を必要とする患者に投与するステップを含む方法である。組成物は、限定されるものではないが治療活性のある他の化合物ならびに１種以上の医薬的に許容される担体、希釈剤、賦形剤等を含む、他の構成成分を含んでもよいということが理解されるべきである。
【００７２】
一実施形態において、本明細書で開示されるのは、癌を有する患者を処置するための方法であって、式（ＩＩ）の化合物を含む医薬組成物の治療有効量を、前述の癌の緩和を必要とする患者に投与するステップを含む方法である。
【００７３】
一実施形態において、本明細書で開示されるのは、癌を有する患者を処置するための方法であって、式（ＩＩＩ）の化合物を含む医薬組成物の治療有効量を、前述の癌の緩和を必要とする患者に投与するステップを含む方法である。
【００７４】
別の実施形態では、本明細書で開示されるのは、癌を有する患者を処置するための方法であって、式（Ｉ）、（ＩＩ）または（ＩＩＩ）の化合物の治療有効量を、同じか異なる作用様式による１種以上の治療上有効な化合物と組み合わせて、前述の癌の緩和を必要とする患者に投与するステップを含む方法である。
【００７５】
一部の実施形態において、本明細書に記載される化合物は、癌の他の症状を処置するために投与される他の化合物（悪心、嘔吐、疼痛、骨粗鬆症等を緩和するために投与される化合物など）と組み合わせて使用されてもよいということが本明細書において理解される。
【００７６】
以下の非限定的で例示的な実施形態は、本発明をさらに説明するために本明細書に含まれる。これらの例示的な実施形態は決して、本発明の範囲を限定することは意図されておらず、そのように解釈されるべきではない。また、これらの例示的な実施形態の数多くの変形が本明細書において企図されるということも理解されるべきである。
【００７７】
阻害剤の構造改変を導くために、ならびにＴｏｐ１阻害の結果を理解するのを助けるために、Ｔｏｐ１−ＤＮＡ−インデノイソキノリンの三元切断複合体の結晶構造（ＰＤＢ  ＩＤ：１ＳＣ７）（Ｓｔａｋｅｒ，Ｂ．Ｌ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．  ２００５，  ４８，  ２３３６−２３４５）を用いて分子ドッキング研究を実施した。モルホリン誘導体８の最もエネルギーの小さい構造（図１）を、インデノイソキノリンリガンドのセントロイド座標を用いてＧＯＬＤでＴｏｐ１−ＤＮＡ切断部位の結晶構造中にドッキングさせた。化合物８は、＋１と−１の塩基対の間でＤＮＡ切断部位において容易にインターカレートする。環ＡとＢは、切れやすい鎖の塩基と重なるが、環ＣとＤは、切断されていない鎖の塩基と重なる。Ｃ環上のカルボニル基は、２．５ÅというＮ−Ｏの距離でＡｒｇ３６４側鎖の窒素と水素結合を形成し、これは、Ｔｏｐ１阻害活性に必須の接触である（Ｃｉｎｅｌｌｉ，Ｍ．Ａ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．  ２０１２，  ５５，  １０８４４−１０８６２）。
【００７８】
ＤＮＡおよびＴｏｐ１との三元複合体における、ラクタムの窒素上に３’−カルボキシプロピル置換基を有する４の類似体の以前に報告された結晶構造は、薬物上の置換基を収容する余地がより多い、切断されたＤＮＡ鎖にインデノイソキノリンのＡ環が隣接するということを示す。従って、出発物質として２−ＯＨインデノイソキノリン８を用いて一連のＯ−２改変インデノイソキノリン誘導体を設計および合成した。同時に、Ａ環改変インデノイソキノリンについての包括的な構造と活性の関係の分析を可能にするであろうＯ−３改変インデノイソキノリンプロドラッグを得るために一連のＯ−３改変インデノイソキノリン誘導体も調製した。
【００７９】
インデノイソキノリン８の合成は、一部を改変した、以前に報告されている方法に従って実施した。手元にある２−ヒドロキシル化インデノイソキノリン８を用いて、スキーム２に示されるようにカルバメート１０を最初に調製した。続いて、４つの異なるエステルを調製した。アセチル化誘導体１１は、ＤＭＡＰの存在下でフェノール８を無水酢酸と反応させることによって得た。ＤＭＡＰの存在下において化合物８を４−クロロ−４−オキソ酪酸メチルで処理して化合物１２を得た。ＤＭＡＰの存在下で化合物８を塩化ベンゾイルと反応させて化合物１３を得た。ニコチン酸エステル１４は、ＤＭＡＰの存在下で化合物８とニコチン酸をＥＤＣカップリングさせることによって調製した。
【００８０】
同時に、化合物１０〜１４のために用いたものと同様の方法によって一連のＯ−３改変インデノイソキノリン１５〜１９を合成した（スキーム３）。インドテカンの潜在的代謝物である硫酸エステル化合物２０は、還流無水アセトニトリル中において化合物９をＳＯ３・ＮＭｅ３錯体で処理することによって調製した。
【００８１】
スキーム２ａ  化合物１０〜１４の合成
【化３４】
2019506410.tif 000036
ａ試薬と条件：（ａ）１０の場合：ジメチルカルバモイルクロリド、ＤＭＡＰ、ＣＨＣｌ３、室温、３０時間；１１の場合：Ａｃ２Ｏ、ＤＭＡＰ、ＣＨＣｌ３、室温、５時間；１２の場合：ＣＨ３ＯＣＯＣＨ２ＣＨ２ＣＯＣｌ、ＤＭＡＰ、ＣＨＣｌ３、室温、４時間；１３の場合：塩化ベンゾイル、ＤＭＡＰ、ＣＨＣｌ３、室温、２７時間；１４の場合：ニコチン酸、ＥＤＣ・ＨＣｌ、ＤＭＡＰ、ＣＨＣｌ３、室温、３時間。
【００８２】
スキーム３ａ  化合物１５〜２０の合成
【化３５】
2019506410.tif 000037
ａ試薬と条件：（ａ）１５の場合：ジメチルカルバモイルクロリド、ＤＭＡＰ、ＣＨＣｌ３、室温、３０時間；１６の場合：Ａｃ２Ｏ、ＤＭＡＰ、ＣＨＣｌ３、室温、３時間；１７の場合：ＣＨ３ＯＣＯＣＨ２ＣＨ２ＣＯＣｌ、ＤＭＡＰ、ＣＨＣｌ３、室温、４時間；１８の場合：塩化ベンゾイル、ＤＭＡＰ、ＣＨＣｌ３、室温、２４時間；１９の場合：ニコチン酸、ＤＣＣ、ＤＭＡＰ、ＣＨＣｌ３、室温、６時間；２０の場合：ＳＯ３・ＮＭｅ３、ＭｅＣＮ、Ｅｔ３Ｎ、還流、４０時間。
【００８３】
新しいインデノイソキノリン誘導体の全てが、Ｔｏｐ１媒介性ＤＮＡ切断アッセイにおいて試験された。この目的のために、３２Ｐで３’末端を標識した１１７ｂｐのＤＮＡ断片を、試験化合物の４種類の濃度においてＴｏｐ１とインキュベートした。ＤＮＡ断片を２０％ＰＡＧＥ変性ゲル上で分離した。Ｔｏｐ１阻害活性は、Ｔｏｐ１媒介性ＤＮＡ切断の断片に対応するゲルのバンドの数と強度の目視検査に基づいて割り当て、化合物１および４のＴｏｐ１阻害活性と比較してスコア付けした。結果は半定量的に表される：０、検出可能な活性なし；＋、弱い活性；＋＋、化合物４と同様の活性；＋＋＋、４よりも高い活性；＋＋＋＋、１と等しい効力。曖昧なスコア（例えば、２つの値の間のもの）は、括弧を用いて表される（例えば、＋＋（＋）は＋＋と＋＋＋の間である）。代表的なＰＡＧＥの結果を図２に示す。表１に示されるように、２−ＯＨインデノイソキノリン８は、＋＋（＋）レベルの良好なＴｏｐ１阻害活性を有した。ヒドロキシルをジメチルカルバメートに変換した後、観察されたＴｏｐ１阻害活性は、化合物８の＋＋（＋）から化合物１０の＋＋＋に増加した。Ｏ−２の位置にアセチル基を導入して化合物１１を得たが、これも、＋＋レベルの活性を有するＴｏｐ１毒性物質であった。続いて、いくつかの疎水性置換基をＯ−２の位置に連結した。Ｏ−２の位置にそれぞれ脂肪族および芳香族の置換基を有する化合物１２および１３は両方とも、＋レベルの、低下したＴｏｐ１阻害活性を示した。Ｏ−２の位置にニコチノイル部分を有する化合物１４は、＋＋＋レベルの活性を有する有望なＴｏｐ１毒性物質であることが見出された。
【００８４】
Ｏ−３改変インデノイソキノリン１６〜２０のＴｏｐ１阻害活性は、消失するか、あるいはフェノール９と比べて著しく低下するということが見出されたが、これは、これらの誘導体が、大幅に低下したＴｏｐ１阻害活性を有するにもかかわらず細胞毒性を維持するため、プロドラッグとして機能している可能性があるということを示す。一方、２つの安息香酸エステル１３および１８は、それらのそれぞれの親化合物よりも細胞毒性が著しく低く、それらは両方とも、弱いＴｏｐ１毒性物質であり、これは、それらがプロドラッグとして作用していない可能性があるということを示す。一般に、Ｏ−２改変インデノイソキノリン１０〜１４は、それらのＯ−３改変対応物１５〜１９よりも強力なＴｏｐ１毒性物質である。
【００８５】
カンプトテシン（１）、インデノイソキノリン５ならびに化合物１０、１１、１３、１４および２０によって生じるＴｏｐ１媒介性ＤＮＡ断片化のパターンを図２に提示する。これらのインデノイソキノリンによるＴｏｐ１−ＤＮＡ切断複合体の捕捉のための配列嗜好性は互いに類似するが、そのパターンはカンプトテシンとは異なっており、これは、インデノイソキノリンがカンプトテシンとは異なる方法でゲノムを標的とするということを示す。
【００８６】
【表１】
2019506410.tif 000038
ａ細胞毒性のＧＩ５０値は、５０％の増殖阻害に対応する濃度である。
ｂ試験が成功した全てのヒト癌細胞株の増殖阻害についての平均グラフ中点、１０−８〜１０−４モーラーの範囲。
ｃ化合物によって誘発される、Ｔｏｐ１の阻害に起因するＤＮＡ切断は、１μＭのカンプトテシンと比較した以下の注釈によって等級付けされる；０、阻害活性なし；＋、２０〜５０％の活性；＋＋、５０〜７５％の活性；＋＋＋、７５〜９５％の活性；＋＋＋＋、等効力。
ｄ標準誤差が示されているＭＧＭのＧＩ５０値については、個々の細胞株のＧＩ５０値は、２回の測定の平均である。標準誤差を伴わない値は１回の測定からのものである。
【００８７】
インデノイソキノリンの全てを、国立癌研究所の６０種細胞株選抜（ｔｈｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ’ｓ  ６０  ｃｅｌｌ  ｌｉｎｅ  ｓｃｒｅｅｎ）（ＮＣＩ６０）における抗増殖活性について試験した。細胞を、１００、１０、１、０．１および０．０１μＭの濃度の試験化合物と４８時間インキュベートした後、スルホローダミンＢ色素で処理した。光学密度を記録し、対照の光学密度に対するそれらの比率を、試験した化合物の濃度のｌｏｇ１０に対する百分率増殖としてプロットした。５０％の百分率増殖より上の点と下の点との間での補間によって、５０％増殖阻害（ＧＩ５０）に対応する濃度を計算する。平均グラフ中点（ＭＧＭ）は、６０種のヒト癌細胞株のＮＣＩコレクションから得られたＧＩ５０値の推定平均であり、ここで、ＭＧＭの計算中に、０．０１〜１００μＭという試験範囲の外側にあるＧＩ５０値を有する抗癌剤は、それぞれ０．０１μＭおよび１００μＭという値を恣意的に割り当てられる。結果を表１に列挙する。新しい化合物の大部分は、ナノモーラーの範囲のＧＩ５０を伴って様々な細胞株に対して著しい効力を示すが、化合物１０、１３および１８は、マイクロモーラーの範囲である。また、個々のヒト癌細胞株に対する、これらの物質の多くのＧＩ５０値は、標準的なＮＣＩ試験プロトコルにおいて使用される最低濃度（０．０１μＭ）よりも低い。ニコチノイル誘導体１４は、＋＋＋レベルの良好な阻害活性ならびに０．１５８±０．０６５μＭというＭＧＭ値を伴う良好な抗増殖活性を有する。一般に、観察された細胞毒性の順位とＴｏｐ１の阻害との間の相関は明らかに欠如している。例えば、９、１５〜１７および１９のＭＧＭ細胞毒性値は全て、互いに非常に近いが、それらのＴｏｐ１阻害活性は、＋＋＋（＋）から０にまで及ぶ。これは、１５〜１７および１９が細胞内で加水分解されて、生物学的に活性のある同じ化学種９になるということを示唆する。８、１１および１２の場合、想定上のプロドラッグ１１および１２の細胞毒性は、実際のところ、親化合物８よりもほぼ１桁大きく、これは、その後に１１および１２の８への加水分解が起こる１１および１２の細胞透過が８よりも効率的であるということによって説明される可能性がある。
【００８８】
プロドラッグの加水分解が細胞内ではなく細胞外で起こる可能性を調べるために、細胞を含まない細胞培養培地に化合物１７を添加し、この混合物を３７℃でインキュベートした。親であるフェノール９への比較的遅い変換が観察され、９９時間後に変換率は２２％であった。この結果は、４８時間の細胞培養インキュベーション期間の間にプロドラッグが、細胞に取り込まれ、次いでフェノールへと加水分解されるということを示唆する。
【００８９】
可能性のあるプロドラッグとしての展開のために、２位および３位がエステル側鎖で置換された一連のインデノイソキノリンを設計および合成した。化合物１０および１４では、８と比べて、Ｔｏｐ１阻害活性の僅かな改善が観察された。想定上のプロドラッグの残りは、それらの親化合物よりもＴｏｐ１に対する活性が低い。酢酸エステル１１およびコハク酸エステル１２の細胞毒性は、親であるフェノール８と比べて著しく向上するが、これは、その後に親であるインデノイソキノリンへの代謝が起こる、より好ましい細胞取り込みと一致するであろう。誘導体の多くが、不活性であるか親薬物よりも著しく活性の低いＴｏｐ１毒性物質であるにもかかわらず同様の強さの非常に強力な細胞毒性を有するという事実は、それらが親化合物のプロドラッグとして機能しているということを示唆する。ＬＭＰ４００のこれらの新しいプロドラッグ類似体は、臨床開発のための新規候補である。
【００９０】
実験のセクション
【００９１】
一般：
溶媒と試薬は、民間の販売会社から購入し、さらに精製することなく使用した。融点は、Ｍｅｌ−Ｔｅｍｐ装置により毛細管を用いて決定した。融点は補正されていない。赤外スペクトルは、ＫＢｒペレットを用いて取得した。ＩＲスペクトルは、Ｐｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ  １６００シリーズまたはＳｐｅｃｔｒｕｍ  Ｏｎｅ  ＦＴＩＲ分光計を使用して記録した。１Ｈ  ＮＭＲスペクトルは、ＱＮＰプローブを備えたＢｒｕｋｅｒ  ＡＲＸ３００分光計を使用して３００ＭＨｚで記録した。ＥＳＩＭＳ分析は、ｔｈｅ  Ｐｕｒｄｕｅ  Ｃａｍｐｕｓ−Ｗｉｄｅ  Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ  ＣｅｎｔｅｒにてＦｉｎｎｅｇａｎ−ＭＡＴＴ  ＬＣＱ  Ｃｌａｓｓｉｃ質量分析計で実施した。分析用薄層クロマトグラフィーは、Ｂａｋｅｒ−ｆｌｅｘ  ｓｉｌｉｃａ  ｇｅｌ  ＩＢ２−Ｆプレート上で行い、短波長ＵＶ光およびニンヒドリン染色で化合物を可視化した。シリカゲルフラッシュクロマトグラフィーは、２３０〜４００メッシュのシリカゲルを用いて実施した。ＨＰＬＣ分析は、５μＭ  Ｃ１８逆相カラムを使用してＷａｔｅｒｓ  １５２５  ｂｉｎａｒｙ  ＨＰＬＣ  ｐｕｍｐ／Ｗａｔｅｒｓ  ２４８７  ｄｕａｌ  λ  ａｂｓｏｒｂａｎｃｅ  ｄｅｔｅｃｔｏｒ  ｓｙｓｔｅｍで完遂した。化合物の純度は、２５４ｎｍのＵＶ検出器を用いて逆相Ｃ１８  ＨＰＬＣにより評価したが、各試験化合物の主要ピークの面積は、合計ピーク面積の９５％以上であった。収率は全て、単離された化合物を指す。
【００９２】
３−メトキシ−６−（３−モルホリノプロピル）−５，１２−ジオキソ−６，１２−ジヒドロ−５Ｈ−［１，３］ジオキソロ［４’，５’：５，６］インデノ［１，２−ｃ］イソキノリン−２−イル  ジメチルカルバメート（１０）：
ＤＭＡＰ（０．２００ｇ）の存在下において化合物８（０．１００ｇ、０．２１６ｍｍｏｌ）のクロロホルム溶液（１０ｍＬ）をジメチルカルバモイルクロリド（０．０５０ｇ、０．５２２ｍｍｏｌ）で処理した。この混合物を室温で３０時間撹拌した。この混合物をＣＨＣｌ３で１５０ｍＬという体積に希釈し、Ｈ２Ｏ（２×５０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ水溶液（５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮した。得られた残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、約４０ｇ）により精製し、ＣＨＣｌ３中の１％ＭｅＯＨで溶出して、生成物を固体として得た（０．０６０ｇ、５２％）。ｍｐ  ２６８−２７０℃（ｄｅｃ）。ＩＲ（フィルム）  ２９３８，  １７１８，  １６５０，  １５０８，  １１６８，  １０３１，  ８６３ｃｍ−１；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）  δ  ８．２８（ｓ，  １Ｈ），  ７．７３（ｓ，  １Ｈ），  ７．３８（ｓ，  １Ｈ），  ７．２６（ｓ，  １Ｈ），  ７．０４（ｓ，  １Ｈ），  ６．０６（ｓ，  ２Ｈ），  ４．５７−４．５２（ｔ，  Ｊ＝７．５Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．９３（ｓ，  ３Ｈ），  ３．６９（ｓ，  ４Ｈ），  ３．１６（ｓ，  ３Ｈ），  ３．０３（ｓ，  ３Ｈ），  ２．５３（ｓ，  ６Ｈ），  ２．０１（ｓ，  ２Ｈ）；ＥＳＩＭＳ  ｍ／ｚ（相対強度）  ５３６（ＭＨ＋，  １００）；ＨＲＥＳＩＭＳ  ｍ／ｚ（相対強度）  ５３６．２０４１（ＭＨ＋）、Ｃ２８Ｈ３０Ｎ３Ｏ８の計算値  ５３６．２０３３。ＨＰＬＣ純度：９８．８３％（Ｃ−１８逆相、ＭｅＯＨ−Ｈ２Ｏ、９０：１０）。
【００９３】
３−メトキシ−６−（３−モルホリノプロピル）−５，１２−ジオキソ−６，１２−ジヒドロ−５Ｈ−［１，３］ジオキソロ［４’，５’：５，６］インデノ［１，２−ｃ］イソキノリン−２−イル  アセテート（１１）：
ＤＭＡＰ（０．２００ｇ）の存在下において化合物８（０．０９３ｇ、０．２００ｍｍｏｌ）のクロロホルム溶液（１０ｍＬ）をＡｃ２Ｏ（０．０５０ｇ、０．４５ｍｍｏｌ）で処理した。この混合物を室温で５時間撹拌した。この混合物をＣＨＣｌ３で１００ｍＬという体積に希釈し、Ｈ２Ｏ（２×５０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ水溶液（５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮した。得られた残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、約３０ｇ）により精製し、ＣＨＣｌ３中の１．２５％ＭｅＯＨで溶出して、表題の化合物を固体として得た（０．０５２ｇ、５０％）。ｍｐ  ２７２−２７４℃。ＩＲ（フィルム）  ２９４８，  １７７０，  １６６１，  １５１４，  １３７９，  １０２９，  ８６６ｃｍ−１；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）  δ  ８．２６（ｓ，  １Ｈ），  ７．７５（ｓ，  １Ｈ），  ７．４０（ｓ，  １Ｈ），  ７．０６（ｓ，  １Ｈ），  ６．０７（ｓ，  ２Ｈ），  ４．４６−４．５１（ｔ，  Ｊ＝７．８Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．９３（ｓ，  ３Ｈ），  ３．７５（ｓ，  ４Ｈ），  ２．５２（ｓ，  ６Ｈ），  ２．３２（ｓ，  ３Ｈ），  １．９９（ｓ，  ２Ｈ）；  ＥＳＩＭＳ  ｍ／ｚ（相対強度）  ５０７（ＭＨ＋，  １００）；ＨＲＥＳＩＭＳ  ｍ／ｚ（相対強度）  ５０７．１７６１（ＭＨ＋）、Ｃ２７Ｈ２７Ｎ２Ｏ８の計算値  ５０７．１７６７。ＨＰＬＣ純度：９６．３４％（Ｃ−１８逆相、ＭｅＯＨ−Ｈ２Ｏ、８５：１５）。
【００９４】
３−メトキシ−６−（３−モルホリノプロピル）−５，１２−ジオキソ−６，１２−ジヒドロ−５Ｈ−［１，３］ジオキソロ［４’，５’：５，６］インデノ［１，２−ｃ］イソキノリン−２−イル  メチルスクシネート（１２）：
ＤＭＡＰ（０．２００ｇ）の存在下において化合物８（０．１３４ｇ、０．２８８ｍｍｏｌ）のクロロホルム溶液（１０ｍＬ）を４−クロロ−４−オキソ酪酸メチル（０．０５０ｇ、０．３３３ｍｍｏｌ）で処理した。この混合物を室温で４時間撹拌した。この混合物をＣＨＣｌ３で１５０ｍＬという体積に希釈し、Ｈ２Ｏ（２×３０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ水溶液（８０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮した。得られた残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、約４０ｇ）により精製し、ＣＨＣｌ３中の１％ＭｅＯＨで溶出して、生成物を固体として得た（０．０６８ｇ、４１％）。ｍｐ  ２１９−２２０℃。ＩＲ（フィルム）  ２９３１，  １７７３，  １６５８，  １３０９，  １１２５，  １０３１，  ７８６ｃｍ−１；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）  δ  ８．１９（ｓ，  １Ｈ），  ７．７０（ｓ，  １Ｈ），  ７．３２（ｓ，  １Ｈ），  ６．９６（ｓ，  １Ｈ），  ６．０２（ｓ，  ２Ｈ），  ４．３９−４．４４（ｔ，  Ｊ＝７．８Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．９０（ｓ，  ３Ｈ），  ３．７４（ｓ，  ７Ｈ），  ２．９５−２．９９（ｔ，  Ｊ＝７．２Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．７５−２．７９（ｔ，  Ｊ＝６．９Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．５２（ｓ，  ６Ｈ），  １．９３−１．９８（ｍ，  ２Ｈ）。ＥＳＩＭＳ  ｍ／ｚ（相対強度）  ５７９（ＭＨ＋，  １００）；ＨＲＥＳＩＭＳ  ｍ／ｚ（相対強度）  ５７９．１９７５（ＭＨ＋）、Ｃ３０Ｈ３１Ｎ２Ｏ１０の計算値  ５７９．１９７９。ＨＰＬＣ純度：９９．０５％（Ｃ−１８逆相、ＭｅＯＨ−Ｈ２Ｏ、９０：１０）。
【００９５】
３−メトキシ−６−（３−モルホリノプロピル）−５，１２−ジオキソ−６，１２−ジヒドロ−５Ｈ−［１，３］ジオキソロ［４’，５’：５，６］インデノ［１，２−ｃ］イソキノリン−２−イル  ベンゾエート（１３）：
ＤＭＡＰ（０．２００ｇ）の存在下において化合物８（０．９４ｇ、０．２０１ｍｍｏｌ）のクロロホルム溶液（１０ｍＬ）を塩化ベンゾイル（０．０５０ｇ、０．３６２ｍｍｏｌ）で処理した。この混合物を室温で２７時間撹拌した。この混合物をＣＨＣｌ３で１００ｍＬという体積に希釈し、Ｈ２Ｏ（２×２５ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ水溶液（５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮した。得られた残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、約４０ｇ）により精製し、ＣＨＣｌ３中の２％ＭｅＯＨで溶出して、生成物を固体として得た（０．０６５ｇ、５７％）。ｍｐ  ２６１−２６３℃（ｄｅｃ）。ＩＲ（フィルム）  ２３４２，  １７４４，  １６５０，  １５０８，  １３０８，  １０３２，  ７８８ｃｍ−１；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）  δ  ８．３９（ｓ，  １Ｈ），  ８．１５−８．２２（ｍ，  ２Ｈ），  ７．８０（ｓ，  １Ｈ），  ７．６４−７．６７（ｍ，  １Ｈ），  ７．５２−７．５６（ｍ，  ３Ｈ），  ７．０７（ｓ，  １Ｈ），  ６．０８（ｓ，  ２Ｈ），  ４．５７−４．５２（ｔ，  Ｊ＝７．２Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．９１（ｓ，  ３Ｈ），  ３．６７（ｓ，  ４Ｈ），  ２．５９（ｓ，  ６Ｈ），  ２．０７（ｓ，  ２Ｈ）；ＥＳＩＭＳ  ｍ／ｚ（相対強度）  ５６９（ＭＨ＋，  １００）；ＨＲＥＳＩＭＳ  ｍ／ｚ（相対強度）  ５６９．１９３０（ＭＨ＋）、Ｃ３２Ｈ２９Ｎ２Ｏ８の計算値  ５６９．１９２４。ＨＰＬＣ純度：９６．５６％（Ｃ−１８逆相、ＭｅＯＨ−Ｈ２Ｏ、８０：２０）。
【００９６】
３−メトキシ−６−（３−モルホリノプロピル）−５，１２−ジオキソ−６，１２−ジヒドロ−５Ｈ−［１，３］ジオキソロ［４’，５’：５，６］インデノ［１，２−ｃ］イソキノリン−２−イル  ニコチネート（１４）：
ＥＤＣ・ＨＣｌ（０．１６０ｇ、０．８３ｍｍｏｌ）とＤＭＡＰ（２７０ｍｇ）の存在下において化合物８（０．１２０ｇ、０．２６ｍｍｏｌ）のクロロホルム溶液（１０ｍＬ）をニコチン酸（０．２００ｇ、１．６２ｍｍｏｌ）で処理した。この混合物を室温で３時間撹拌した。この混合物をＣＨＣｌ３で１２０ｍＬという体積に希釈し、Ｈ２Ｏ（２×６０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ水溶液（６０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮した。得られた残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、約４０ｇ）により精製し、ＣＨＣｌ３中の１．２５％ＭｅＯＨで溶出して、表題の化合物を固体として得た（０．０６６ｇ、４４％）。ｍｐ  ２７７−２７９℃（ｄｅｃ）。ＩＲ（フィルム）  ２９５６，  １７５０，  １５０８，  １３８１，  １２７２，  １１１６，  ８６５ｃｍ−１；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）  δ  ９．４２（ｓ，  １Ｈ），  ８．８９（ｓ，  １Ｈ），  ８．４７−８．４９（ｄ，  Ｊ＝８．１Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．４１（ｓ，  １Ｈ），  ７．８１（ｓ，  １Ｈ），  ７．４７−７．５２（ｍ，  １Ｈ），  ７．４１（ｓ，  １Ｈ），  ７．０８（ｓ，  １Ｈ），  ６．０９（ｓ，  ２Ｈ），  ４．５１−４．５６（ｔ，  Ｊ＝６．９Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．９２（ｓ，  ３Ｈ），  ３．６７（ｓ，  ４Ｈ），  ２．５８（ｓ，  ６Ｈ），  ２．０７（ｓ，  ２Ｈ）；ＥＳＩＭＳ  ｍ／ｚ（相対強度）  ５７０（ＭＨ＋，  １００）；ＨＲＥＳＩＭＳ  ｍ／ｚ（相対強度）  ５７０．１８７２（ＭＨ＋）、Ｃ３１Ｈ２８Ｎ３Ｏ８の計算値  ５７０．１８７６。ＨＰＬＣ純度：９５．８４％（Ｃ−１８逆相、ＭｅＯＨ、１００）。
【００９７】
２−メトキシ−６−（３−モルホリノプロピル）−５，１２−ジオキソ−６，１２−ジヒドロ−５Ｈ−［１，３］ジオキソロ［４’，５’：５，６］インデノ［１，２−ｃ］イソキノリン−３−イル  ジメチルカルバメート（１５）：
ＤＭＡＰ（０．０１５ｇ）の存在下において化合物９（０．１００ｇ、０．２１６ｍｍｏｌ）のクロロホルム溶液（１５ｍＬ）をジメチルカルバモイルクロリド（０．０３１ｇ、０．３２４ｍｍｏｌ）で処理した。この混合物を室温で３０時間撹拌した。この混合物をＣＨＣｌ３で１００ｍＬという体積に希釈し、Ｈ２Ｏ（２×５０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ水溶液（５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮した。得られた残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、約４０ｇ）により精製し、ＣＨＣｌ３中の２．５％ＭｅＯＨで溶出して、生成物を得た（０．０８１ｇ、７０％）。ｍｐ  ２９０−２９２℃。ＩＲ（フィルム）  ２９６０，  ２３５０，  １８７０，  １７３２，  １５０８，  １１６３，  １０３２，  ８６３ｃｍ−１；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）  δ  ８．０１（ｓ，  １Ｈ），  ７．９３（ｓ，  １Ｈ），  ７．２６（ｓ，  １Ｈ），  ６．８２（ｓ，  １Ｈ），  ６．０９（ｓ，  ２Ｈ），  ４．５０（ｍ，  ２Ｈ），  ３．９８（ｓ，  ３Ｈ），  ３．８２（ｍ，  ６Ｈ），  ３．１４（ｓ，  ３Ｈ），  ３．０２（ｓ，  ３Ｈ），  ２．６１（ｍ，  ４Ｈ），  ２．０５（ｍ，  ２Ｈ）；ＥＳＩＭＳ  ｍ／ｚ（相対強度）  ５３６（ＭＨ＋，  １００）；ＨＲＥＳＩＭＳ  ｍ／ｚ（相対強度）  ５３６．２０３７（ＭＨ＋）、Ｃ２８Ｈ３０Ｎ３Ｏ８の計算値  ５３６．２０３３。ＨＰＬＣ純度：９５．６３％（Ｃ−１８逆相、ＭｅＯＨ−Ｈ２Ｏ、９０：１０）。
【００９８】
２−メトキシ−６−（３−モルホリノプロピル）−５，１２−ジオキソ−６，１２−ジヒドロ−５Ｈ−［１，３］ジオキソロ［４’，５’：５，６］インデノ［１，２−ｃ］イソキノリン−３−イル  アセテート（１６）：
ＤＭＡＰ（０．０２５ｇ、０．２００ｍｍｏｌ）の存在下において化合物９（０．０４７ｇ、０．１００ｍｍｏｌ）のクロロホルム溶液（２０ｍＬ）をＡｃ２Ｏ（０．０１６ｇ、０．１５ｍｍｏｌ）で処理した。この混合物を室温で３時間撹拌した。この混合物をＣＨＣｌ３で１００ｍＬという体積に希釈し、Ｈ２Ｏ（２×５０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ水溶液（５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮した。得られた残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、約３０ｇ）により精製し、ＣＨＣｌ３中の１．２５％ＭｅＯＨで溶出して、表題の化合物を得た（０．０３５ｇ、６８％）。ｍｐ＞３５０℃。ＩＲ（フィルム）  ２３４６，  １７７３，  １６５６，  １５０８，  １３０８，  １１１５，  ６７０ｃｍ−１；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）  δ  ８．１０（ｓ，  １Ｈ），  ７．９０（ｓ，  １Ｈ），  ７．４３（ｓ，  １Ｈ），  ７．０８（ｓ，  １Ｈ），  ６．０９（ｓ，  ２Ｈ），  ４．４９（ｓ，  ２Ｈ），  ３．９８（ｓ，  ３Ｈ），  ３．８０（ｓ，  ４Ｈ），  ２．５８（ｓ，  ６Ｈ），  ２．３４（ｓ，  ３Ｈ），  ２．０５（ｍ，  ２Ｈ）；ＥＳＩＭＳ  ｍ／ｚ（相対強度）  ５０７（ＭＨ＋，  １００）；ＨＲＥＳＩＭＳ  ｍ／ｚ（相対強度）  ５０７．１７７２（ＭＨ＋）、Ｃ２７Ｈ２７Ｎ２Ｏ８の計算値  ５０７．１７６７。ＨＰＬＣ純度：９５．２６％（Ｃ−１８逆相、ＭｅＯＨ−Ｈ２Ｏ、９０：１０）。
【００９９】
２−メトキシ−６−（３−モルホリノプロピル）−５，１２−ジオキソ−６，１２−ジヒドロ−５Ｈ−［１，３］ジオキソロ［４’，５’：５，６］インデノ［１，２−ｃ］イソキノリン−３−イル  メチルスクシネート（１７）：
ＤＭＡＰ（０．１００ｇ）の存在下において化合物９（０．０６０ｇ、０．１２９ｍｍｏｌ）のクロロホルム溶液（１０ｍＬ）を４−クロロ−４−オキソ酪酸メチル（０．０５０ｇ、０．３３３ｍｍｏｌ）で処理した。この混合物を室温で４時間撹拌した。この混合物をＣＨＣｌ３で１００ｍＬという体積に希釈し、Ｈ２Ｏ（２×２５ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ水溶液（５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮した。得られた残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、約４０ｇ）により精製し、ＣＨＣｌ３中の１．２５％ＭｅＯＨで溶出して、生成物を固体として得た（０．０３９ｇ、５３％）。ｍｐ＞３５０℃。ＩＲ（フィルム）  ２３４８，  １７１７，  １６５０，  １５０８，  １１１６，  ６７０ｃｍ−１；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）  δ  ８．０５（ｓ，  １Ｈ），  ７．８９（ｓ，  １Ｈ），  ７．４２（ｓ，  １Ｈ），  ７．０４（ｓ，  １Ｈ），  ６．０７（ｓ，  ２Ｈ），  ４．４３−４．４８（ｔ，  Ｊ＝７．５Ｈｚ，  ２Ｈ），  ３．９６（ｓ，  ３Ｈ），  ３．７６（ｓ，  ４Ｈ），  ３．６５（ｓ，  ３Ｈ），  ２．９３−２．９７（ｔ，  Ｊ＝６．９Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．７４−２．７８（ｔ，  Ｊ＝６．６Ｈｚ，  ２Ｈ），  ２．５３（ｓ，  ６Ｈ），  １．９９（ｓ，  ２Ｈ）；ＥＳＩＭＳ  ｍ／ｚ（相対強度）  ５７９（ＭＨ＋，  １００）；ＨＲＥＳＩＭＳ  ｍ／ｚ（相対強度）  ５７９．１９７４（ＭＨ＋）、Ｃ３０Ｈ３１Ｎ２Ｏ１０の計算値  ５７９．１９７９。ＨＰＬＣ純度：９７．００％（Ｃ−１８逆相、ＭｅＯＨ−Ｈ２Ｏ、８０：２０）。
【０１００】
２−メトキシ−６−（３−モルホリノプロピル）−５，１２−ジオキソ−６，１２−ジヒドロ−５Ｈ−［１，３］ジオキソロ［４’，５’：５，６］インデノ［１，２−ｃ］イソキノリン−３−イル  ベンゾエート（１８）：
ＤＭＡＰ（０．０４４ｇ、０．３６６ｍｍｏｌ）の存在下において化合物９（０．８５ｇ、０．１８３ｍｍｏｌ）のクロロホルム溶液（１５ｍＬ）を塩化ベンゾイル（０．０３８ｇ、０．２７５ｍｍｏｌ）で処理した。この混合物を室温で２４時間撹拌した。この混合物をＣＨＣｌ３で５０ｍＬという体積に希釈し、Ｈ２Ｏ（２×２５ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ水溶液（５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮した。得られた残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、約４０ｇ）により精製し、ＣＨＣｌ３中の２．５％ＭｅＯＨで溶出して、生成物を得た（０．０６２ｇ、６１％）。ｍｐ  ３１６−３１８℃。ＩＲ（フィルム）  ２９５７，  ２３４８，  １６５１，  １５５９，  １３０９，  １１１６，  ８６４ｃｍ−１；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）  δ  ８．２０−８．２７（ｍ，  ２Ｈ），  ８．１４（ｓ，  １Ｈ），  ８．０３（ｓ，  １Ｈ），  ７．６３−７．７０（ｍ，  １Ｈ），  ７．５０−７．５６（ｍ，  ２Ｈ），  ７．４４（ｓ，  １Ｈ），  ７．０８（ｓ，  １Ｈ），  ６．０９（ｓ，  ２Ｈ），  ４．５０（ｓ，  ２Ｈ），  ３．９９（ｓ，  ３Ｈ），  ３．８０（ｓ，  ４Ｈ），  ２．５８（ｓ，  ６Ｈ），  ２．０５（ｓ，  ２Ｈ）；ＥＳＩＭＳ  ｍ／ｚ（相対強度）  ５６９（ＭＨ＋，  １００）；ＨＲＥＳＩＭＳ  ｍ／ｚ（相対強度）  ５６９．１９２１（ＭＨ＋）、Ｃ３２Ｈ２９Ｎ２Ｏ８の計算値  ５６９．１９２４。ＨＰＬＣ純度：９６．７５％（Ｃ−１８逆相、ＭｅＯＨ−Ｈ２Ｏ、８５：１５）。
【０１０１】
２−メトキシ−６−（３−モルホリノプロピル）−５，１２−ジオキソ−６，１２−ジヒドロ−５Ｈ−［１，３］ジオキソロ［４’，５’：５，６］インデノ［１，２−ｃ］イソキノリン−３−イル  ニコチネート（１９）：
ＤＣＣ（０．０７５ｇ、０．３６３ｍｍｏｌ）および触媒量のＤＭＡＰの存在下において化合物９（０．１５３ｇ、０．３３ｍｍｏｌ）のクロロホルム溶液（３０ｍＬ）をニコチン酸（０．０６１ｇ、０．４９５ｍｍｏｌ）で処理した。この混合物を室温で６時間撹拌した。この混合物をＣＨＣｌ３で１００ｍＬという体積に希釈し、Ｈ２Ｏ（２×６０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ水溶液（６０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮した。得られた残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、約４０ｇ）により精製し、ＣＨＣｌ３中の２．５％ＭｅＯＨで溶出して、表題の化合物を得た（０．０９７ｇ、５３％）。ｍｐ  ２７４−２７６℃（ｄｅｃ）。ＩＲ（フィルム）  ２９６１，  １７４９，  １６５７，  １５０４，  １２６１，  １０３３，  ８６４ｃｍ−１；１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）  δ  ９．４１（ｓ，  １Ｈ），  ８．８７（ｓ，  １Ｈ），  ８．４５−８．４８（ｄ，  Ｊ＝７．８Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．１６（ｓ，  １Ｈ），  ８．０４（ｓ，  １Ｈ），  ７．４６（ｓ，  ２Ｈ），  ７．１０（ｓ，  １Ｈ），  ６．１１（ｓ，  ２Ｈ），  ４．５２（ｍ，  ２Ｈ），  ３．９７（ｓ，  ３Ｈ），  ３．８０（ｓ，  ４Ｈ），  ２．６０（ｓ，  ６Ｈ），  ２．０７（ｓ，  ２Ｈ）；ＥＳＩＭＳ  ｍ／ｚ（相対強度）  ５７０（ＭＨ＋，  １００）；ＨＲＥＳＩＭＳ  ｍ／ｚ（相対強度）  ５７０．１８８４（ＭＨ＋）、Ｃ３１Ｈ２７Ｎ３Ｏ８の計算値  ５７０．１８７６。ＨＰＬＣ純度：９５．５３％（Ｃ−１８逆相、ＭｅＯＨ−Ｈ２Ｏ、８５：１５）。
【０１０２】
２−メトキシ−６−（３−モルホリノプロピル）−５，１２−ジオキソ−６，１２−ジヒドロ−５Ｈ−［１，３］ジオキソロ［４’，５’：５，６］インデノ［１，２−ｃ］イソキノリン−３−イル  硫酸水素エステル（２０）：
アルゴン下で室温にて、無水ＭｅＣＮ（８ｍＬ）中の化合物９（０．１５６ｇ、０．３３６ｍｍｏｌ）のよく撹拌された混合物にＳＯ３・ＮＭｅ３（０．２８ｇ、２．０１６ｍｍｏｌ）とＥｔ３Ｎ（０．７７ｍＬ、４．０３２ｍｍｏｌ）の混合物を添加した。この反応混合物をアルゴン下で４０時間加熱還流した。反応混合物を室温まで冷却し、デカンテーションし、減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルのカラムに２回アプライした（溶離液  １〜２０％ＭｅＯＨ−ＣＨＣｌ３）。標的の化合物を含む画分を濃縮し、分取シリカゲルＴＬＣ（２ｍｍ、ＣＨ３ＯＨ−ＣＨＣｌ３、１：５）によって標的の化合物２０（０．０９４ｇ、５２％）を得た。ｍｐ  ２８３−２８５℃（ｄｅｃ）。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ，  ３００ＭＨｚ）  ９．４２（ｓ，  １Ｈ），  ８．２４（ｓ，  １Ｈ），  ７．９１（ｓ，  １Ｈ），  ７．５５（ｓ，  １Ｈ），  ７．１３（ｓ，  １Ｈ），  ６．２１（ｓ，  ２Ｈ），  ４．４６（ｍ，  ２Ｈ），  ３．８８（ｓ，  ３Ｈ），  ３．５５（ｓ，  ４Ｈ），  ３．０７−３．１１（ｍ，  ２Ｈ），  ２．３７（ｓ，  ４Ｈ），  １．９０（ｍ，  ２Ｈ）；ＥＳＩＭＳ  ｍ／ｚ（相対強度）  負イオン  ５４３．１［（Ｍ−Ｈ＋）−、  １００］；ＨＲＥＳＩＭＳ  ｍ／ｚ（相対強度）  ５４３．１０７７［（Ｍ−Ｈ＋）−］、Ｃ２５Ｈ２３Ｎ２Ｏ１０Ｓの計算値  ５４３．１０７３。ＨＰＬＣ純度：９６．６７％（Ｃ−１８逆相、ＭｅＯＨ−Ｈ２Ｏ、９０：１０）。
【０１０３】
トポイソメラーゼＩ媒介性ＤＮＡ切断反応：
以前に説明されている通りにバキュロウイルスからヒトの組換えＴｏｐ１を精製した（Ｍｏｒｒｅｌｌ，Ａ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．  ２００７，  ５０，  ２０４０−２０４８）。ＤＮＡ切断反応系は、ＤＮＡ基質を除いて、以前に報告されている通りに調製した（Ｓｔｒｕｍｂｅｒｇ，Ｄ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．  １９９９，  ４２，  ４４６−４５７）。簡単に説明すると、以前に特定された、ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ  ＳＫ（−）ファージミドＤＮＡに由来する１６１ｂｐの断片中のＴｏｐ１切断部位を包含する１１７ｂｐのＤＮＡオリゴヌクレオチド（Ｉｎｔｅｇｒａｔｅｄ  ＤＮＡ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用した。この１１７ｂｐのオリゴヌクレオチドは、１つの５’−シトシン突出を含んでおり、これを、０．５ユニットのＤＮＡポリメラーゼＩ（Ｋｌｅｎｏｗ  ｆｒａｇｍｅｎｔ，  Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  ＢｉｏＬａｂｓ）を含むＲｅａｃｔ２バッファ（５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ，ｐＨ８．０、１００ｍＭ  ＭｇＣｌ２、５０ｍＭ  ＮａＣｌ）中での［α−３２Ｐ］ｄＧＴＰによるｆｉｌｌ−ｉｎ反応によって３’末端標識した。ｍｉｎｉ  Ｑｕｉｃｋ  Ｓｐｉｎ  ＤＮＡ  ｃｏｌｕｍｎｓ（Ｒｏｃｈｅ，  Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ，  ＩＮ）を用いて、組み込まれなかった［３２Ｐ］ｄＧＴＰを除去し、３’末端標識されたＤＮＡ基質を含む溶出液を回収した。約２ｎＭの放射標識されたＤＮＡ基質を、様々な濃度の化合物の存在下において２０μＬの反応バッファ［１０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７．５）、５０ｍＭ  ＫＣｌ、５ｍＭ  ＭｇＣｌ２、０．１ｍＭ  ＥＤＴＡ、および１５μｇ／ｍＬ  ＢＳＡ］中で２５℃にて２０分間、組換えＴｏｐ１と共にインキュベートした。ＳＤＳ（最終濃度０．５％）の添加によって反応を停止させた後、２容量のローディングダイ（８０％ホルムアミド、１０ｍＭ  水酸化ナトリウム、１ｍＭ  ＥＤＴＡナトリウム、０．１％キシレンシアノール、および０．１％ブロモフェノールブルー）を添加した。各反応混合物のアリコートを２０％変性ＰＡＧＥに供した。ゲルを乾燥させ、ホスホイメージャーおよびＩｍａｇｅＱｕａｎｔソフトウェア（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｙｎａｍｉｃｓ）を用いて可視化した。分かりやすくするために、切断部位は、１６１ｂｐの断片において以前に記載された通りに番号付けした。
【０１０４】
細胞培養培地中での化合物１７の安定性
ＲＰＭＩ  １６４０培地は、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，  ＭＯ）から購入した。化合物１７（１０μＭ）をＲＰＭＩ  １６４０培地と共に３７℃にてインキュベートした。９９時間後、アリコートをインキュベーション混合物から採取し、濾過してから、ＬＣ−ＭＳ（Ｗａｔｅｒｓ、ドイツ）を使用して分析した。流速は０．７５ｍＬ／分であり、溶離液を２８０ｎｍのＤＡＤで記録した。
【０１０５】
分子モデリング
ドッキング用のＴｏｐ１の結晶構造を用意し、ドッキングプロトコルを、以前に説明されている通りに検証した（Ｓｔｒｕｍｂｅｒｇ，Ｄ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．  １９９９，  ４２，  ４４６−４５７）。ドッキング用の三元複合体リガンドセントロイド座標は、Ｔｏｐ１−ＤＮＡ−ＭＪ２３８の結晶構造（ＰＤＢコード  １ＳＣ７）中のリガンドを結合ポケットの中心（ｘ＝２１．３４１９、ｙ＝−３．９８８８、ｚ＝２８．２１６３）として用いて定義した。その後、リガンドを削除した。モデル化するインデノイソキノリンをＳＹＢＹＬにおいて構築した。原子タイプは、ＳＹＢＹＬ原子タイピングを用いて割り当てた。水素を付け加え、リガンドを、ＭＭＦＦ９４電荷でのＭＭＦＦ９４ｓ力場、距離依存誘電関数および０．０１ｋｃａｌ  ｍｏｌ−１  Å−１のエネルギー勾配収束基準を用いた共役勾配法によって最小化した。デフォルトのパラメータでＧＯＬＤ３．２を用いて各リガンドを変異結晶構造にドッキングさせ、上述のように座標を結晶構造によって定義した。各リガンドの上位４つの状態を調べた。これらのリガンドの最上位の状態を結晶構造に統合し、続いて複合体全体を標準的なパウエル法、ＭＭＦＦ９４ｓ力場とＭＭＦＦ９４電荷、距離依存誘電関数および０．０５ｋｃａｌ  ｍｏｌ−１  Å−１のエネルギー勾配収束基準を用いて最小化した。エネルギーの最小化の間、リガンドおよびリガンドを取り囲む７Åの球体は動けるようにしたが、この球体の外側の構造は、全体として動かなくした。
【０１０６】
当業者であれば、上述した特定の実施態様に数多くの改変を加えることができるということを認識するであろう。これらの実施態様は、説明された特定の限定物に限定されるべきではない。他の実施態様が可能である可能性がある。
【０１０７】
図面および前述の説明において本発明が例示および詳述されているが、これらは、例示的なものであって限定的なものではないとみなされるべきであり、特定の実施形態のみが示され、説明されているということ、ならびに本発明の趣旨に含まれる全ての変更および改変が保護されることが望まれるということが理解される。本発明の方法と装置の範囲は、添付の特許請求の範囲によって規定されるということが意図される。しかし、本開示は、その趣旨または範囲から逸脱することなく、具体的に説明および例示されたものとは異なるように実施されてもよいということが理解されなければならない。特許請求の範囲を実施する際に、添付の特許請求の範囲で規定される趣旨および範囲から逸脱することなく、本明細書に記載される実施形態の様々な代替形態を採用してもよいということを当業者は理解すべきである。
【図１】
2019506410.tif 000055
【図２】
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【国際調査報告】
2019506410.tif 000057