(57)【要約】三角フラスコと、単一の開口部を有するライナーバッグであって、フラスコ内に嵌るサイズを有すると共に約０．０２５４ｍｍ〜約０．５０８ｍｍの厚さを有するライナーバッグとを含むフラスコアセンブリである。ライナーバッグは、細胞培養のために、およびフラスコ内への挿入が容易になるよう構成される。更に、ライナーバッグは気体透過性ポリマー材料を含む。更に、ライナーバッグは、着脱可能なフラスコ挿入要素を受け入れるよう構成されたポケット、および／または、フラスコ内へのバッグの挿入を容易にするよう構成された少なくとも１つの折り畳み可能なシームを含み得る。ライナーバッグは、バッグの残りの部分で用いられる気体透過性ポリマー材料の気体透過性より高い気体透過性を有するベントも含み得る。
2019516376.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
三角フラスコ用のライナーにおいて、
単一の開口部を有するライナーバッグであって、前記フラスコ内に嵌るサイズを有すると共に約０．０２５４ｍｍ〜約０．５０８ｍｍの厚さを有するライナーバッグを含み、
前記ライナーバッグが、細胞培養のために、および前記フラスコ内への挿入が容易になるよう構成されており、
更に、前記ライナーバッグが気体透過性ポリマー材料を含む
ことを特徴とするライナー。
【請求項２】
前記ライナーバッグが、着脱可能なフラスコ挿入要素を受け入れるよう構成されたポケットを更に含む、請求項１記載のライナー。
【請求項３】
前記ライナーバッグが、低密度ポリエチレン（ＬＤＰＥ）、ポリエチレン（ＰＥ）、エチルビニルアセテート（ＥＶＡ）、シリコーン、フッ素化エチレンプロピレン（ＦＥＰ）、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）、パーフルオロアルコキシアルカン（ＰＦＡ）、ポリプロピレン（ＰＰ）、塩化ポリビニル（ＰＶＣ）、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリスチレン（ＰＳ）、ポリカーボネート（ＰＣ）、ポリメチルペンテン（ＰＭＰ）、ポリエーテルエーテルケトン（ＰＥＥＫ）、およびそれらの組合せから成る群から選択される材料を含む、請求項１〜２のいずれか一項に記載のライナー。
【請求項４】
前記ライナーバッグが、前記気体透過性ポリマー材料の気体透過性より高い気体透過性を有するベントを更に含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載のライナー。
【請求項５】
前記ライナーバッグが基部および側面を有し、更に、前記側面が低密度ポリエチレン（ＬＤＰＥ）、ポリエチレン（ＰＥ）、エチルビニルアセテート（ＥＶＡ）、シリコーン、フッ素化エチレンプロピレン（ＦＥＰ）、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）、パーフルオロアルコキシアルカン（ＰＦＡ）、ポリプロピレン（ＰＰ）、塩化ポリビニル（ＰＶＣ）、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリスチレン（ＰＳ）、ポリカーボネート（ＰＣ）、ポリメチルペンテン（ＰＭＰ）、ポリエーテルエーテルケトン（ＰＥＥＫ）、およびそれらの組合せから成る群から選択される材料を含み、前記基部が、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）および白金硬化シリコーンから成る群から選択される材料を含む、請求項４記載のライナー。
【請求項６】
フラスコアセンブリにおいて、
三角フラスコと、
単一の開口部を有するライナーバッグであって、前記フラスコ内に嵌るサイズを有すると共に約０．０２５４ｍｍ〜約０．５０８ｍｍの厚さを有するライナーバッグと
を含み、
前記ライナーバッグが、細胞培養のために、および前記フラスコ内への挿入が容易になるよう構成されており、
更に、前記ライナーバッグが気体透過性ポリマー材料を含む
ことを特徴とするフラスコアセンブリ。
【請求項７】
前記ライナーバッグが、着脱可能なフラスコ挿入要素を受け入れるよう構成されたポケットを更に含む、請求項６記載のフラスコアセンブリ。
【請求項８】
前記ライナーバッグが、低密度ポリエチレン（ＬＤＰＥ）、ポリエチレン（ＰＥ）、エチルビニルアセテート（ＥＶＡ）、シリコーン、フッ素化エチレンプロピレン（ＦＥＰ）、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）、パーフルオロアルコキシアルカン（ＰＦＡ）、ポリプロピレン（ＰＰ）、塩化ポリビニル（ＰＶＣ）、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリスチレン（ＰＳ）、ポリカーボネート（ＰＣ）、ポリメチルペンテン（ＰＭＰ）、ポリエーテルエーテルケトン（ＰＥＥＫ）、およびそれらの組合せから成る群から選択される材料を含む、請求項６〜７のいずれか一項に記載のフラスコアセンブリ。
【請求項９】
前記ライナーバッグが、前記気体透過性ポリマー材料の気体透過性より高い気体透過性を有するベントを更に含む、請求項６〜８のいずれか一項に記載のフラスコアセンブリ。
【請求項１０】
前記ライナーバッグが基部および側面を有し、更に、前記側面が、低密度ポリエチレン（ＬＤＰＥ）、ポリエチレン（ＰＥ）、エチルビニルアセテート（ＥＶＡ）、シリコーン、フッ素化エチレンプロピレン（ＦＥＰ）、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）、パーフルオロアルコキシアルカン（ＰＦＡ）、ポリプロピレン（ＰＰ）、塩化ポリビニル（ＰＶＣ）、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリスチレン（ＰＳ）、ポリカーボネート（ＰＣ）、ポリメチルペンテン（ＰＭＰ）、ポリエーテルエーテルケトン（ＰＥＥＫ）、およびそれらの組合せから成る群から選択される材料を含み、前記基部が、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）および白金硬化シリコーンから成る群から選択される材料を含む、請求項９記載のフラスコアセンブリ。
【発明の詳細な説明】
【関連出願の相互参照】
【０００１】
本願は、２０１６年５月２０日に出願された米国仮特許出願第６２／３３９，２９４号による優先権を主張するものであり、その内容に依拠すると共に、その全体を参照して本明細書に組み込む。
【技術分野】
【０００２】
本開示は、一般的には、細胞培養のためのフラスコ装置に関し、より具体的には、細胞培養のための三角フラスコ用のライナー、およびライナーを含む三角フラスコアセンブリに関する。
【背景技術】
【０００３】
細胞培養のために三角フラスコを用いる場合には、コストおよび汚染が懸念事項となる。三角フラスコは、汚染の懸念の観点から、１回のみ用いられることが多く、これは細胞培養処理の高いコストにつながる。更に、三角フラスコを再使用するためにクリーニングおよびオートクレーブするための努力は、クリーニングおよびオートクレーブ工程において過剰なほどの注意を払っても、しばしば、これらのフラスコを、将来の細胞培養についての汚染リスクに晒されたままにする。追加のまたは強化されたクリーニングおよびオートクレーブ工程によって汚染リスクは抑制されるが、全体的な細胞培養コストは、これらの汚染除去処理の関数として、顕著に増加し得る。
【０００４】
三角フラスコにおける細胞培養は、性能も制限され得る。使い捨ての三角フラスコは、細胞培養を展開するために良好に用いることができるが、これらの処置の効率は、フラスコ構成および幾何形状によって提供される、細胞培養物の付近におけるガス交換によって制限され得る。直接ガス導入スキームを含む、ガス交換を改善するための多くの努力は、全体的な細胞培養処理に更なるコストを加え得る。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
従って、低減された細胞培養コストおよびより低い汚染リスクを提供する三角フラスコ技術の必要性がある。また、改善された細胞培養性能を提供できる三角フラスコ技術の必要性がある。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本開示の態様は、三角フラスコ用のライナーに関し、ライナーは、単一の開口部を有するライナーバッグであって、フラスコ内に嵌るサイズを有すると共に約０．０２５４ｍｍ〜約０．５０８ｍｍの厚さを有するライナーバッグを含む。更に、ライナーバッグは、細胞培養のために、および、フラスコ内への挿入が容易になるよう構成される。更に、ライナーバッグは気体透過性ポリマー材料を含む。
【０００７】
ライナーの一部の実施形態では、ライナーバッグは、着脱可能なフラスコ挿入要素を受け入れるよう構成されたポケットを更に含む。特定の態様では、ライナーバッグは、ライナーバッグの気体透過性ポリマー材料の気体透過性より高い気体透過性を有するベントも含み得る。ベントは、約０．２μｍ〜約５μｍの平均細孔径を有する膜も含み得る。ライナーの他の実装例では、ライナーバッグは、フラスコ内へのバッグの挿入を容易にするよう構成された少なくとも１つの折り畳み可能なシームも含み得る。
【０００８】
本開示の更なる態様では、フラスコアセンブリが提供され、フラスコアセンブリは、三角フラスコと、単一の開口部を有するライナーバッグであって、フラスコ内に嵌るサイズを有すると共に約０．０２５４ｍｍ〜約０．５０８ｍｍの厚さを有するライナーバッグとを含む。更に、ライナーバッグは、細胞培養のために、およびフラスコ内への挿入が容易になるよう構成される。更に、ライナーバッグは気体透過性ポリマー材料を含む。
【０００９】
上述のフラスコアセンブリの一部の実施形態では、ライナーバッグは、着脱可能なフラスコ挿入要素を受け入れるよう構成されたポケットを更に含む。フラスコアセンブリの他の態様では、ライナーバッグは約０．０２５４ｍｍ〜約０．２５４ｍｍの厚さを有する。上述のフラスコアセンブリの更なる実施形態では、ライナーバッグは、フラスコ内へのバッグの挿入を容易にするよう構成された少なくとも１つの折り畳み可能なシームを更に含む。
【００１０】
上述のフラスコアセンブリの他の実施形態では、フラスコアセンブリ内のライナーバッグは、ライナーバッグの気体透過性ポリマー材料の気体透過性より高い気体透過性を有するベントも含み得る。ベントは、約０．２μｍ〜約５μｍの平均細孔径を有する膜も含み得る。上述のフラスコアセンブリの別の実施形態では、フラスコは、フラスコ内に挿入されたライナーバッグのベントに対応するサイズおよび位置を有する切り抜き部を含み得る。
【００１１】
本開示の別の態様では、フラスコアセンブリが提供され、フラスコアセンブリは、複数のフラスコ部分を有する三角フラスコと、単一の開口部を有するライナーバッグであって、フラスコ内に嵌るサイズを有するライナーバッグとを含む。更に、各フラスコ部分は、他のフラスコ部分のうちの少なくとも１つと結合するよう構成される。更に、ライナーバッグは、細胞培養のために構成され、気体透過性ポリマー材料を含む。
【００１２】
上述の複数のフラスコ部分を有する三角フラスコを含むフラスコアセンブリの一実施形態では、ライナーバッグは約０．２５４ｍｍ〜約０．５０８ｍｍの厚さを有し得る。更に、ライナーバッグは、ライナーバッグの気体透過性ポリマー材料の気体透過性より高い気体透過性を有するベントを含み得る。ベントは、約０．２μｍ〜約５μｍの平均細孔径を有する膜も含み得る。上述のフラスコアセンブリの別の実施形態では、フラスコは、フラスコ内に挿入されたライナーバッグのベントに対応するサイズおよび位置を有する切り抜き部を含み得る。
【００１３】
上述のフラスコアセンブリの別の実施形態では、各フラスコ部分は、他のフラスコ部分のうちの少なくとも１つのフラスコ部分の位置決め特徴部と機械的に結合するのを補助するよう構成された位置決め特徴部を更に含む。
【００１４】
本開示のライナーバッグおよびフラスコアセンブリの更なる態様によれば、ライナーバッグは、低密度ポリエチレン（ＬＤＰＥ）、ポリエチレン（ＰＥ）、エチルビニルアセテート（ＥＶＡ）、シリコーン、フッ素化エチレンプロピレン（ＦＥＰ）、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）、パーフルオロアルコキシアルカン（ＰＦＡ）、ポリプロピレン（ＰＰ）、塩化ポリビニル（ＰＶＣ）、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリスチレン（ＰＳ）、ポリカーボネート（ＰＣ）、ポリメチルペンテン（ＰＭＰ）、ポリエーテルエーテルケトン（ＰＥＥＫ）、およびそれらの組合せから成る群から選択される材料を含み得る。更に、膜を含むベントを有するライナーバッグの実施形態では、膜は、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）、パーフルオロアルコキシアルカン（ＰＦＡ）、高密度ポリエチレン（ＨＤＰＥ）生地、フッ化ポリビニリデン（ＰＶＤＦ）とアクリルとのコポリマー、ナイロン、およびそれらの組合せから成る群から選択される材料を含み得る。更なる実施形態では、ライナーバッグは、基部および側面を含み得るものであり、更に、側面は、低密度ポリエチレン（ＬＤＰＥ）、ポリエチレン（ＰＥ）、エチルビニルアセテート（ＥＶＡ）、シリコーン、フッ素化エチレンプロピレン（ＦＥＰ）、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）、パーフルオロアルコキシアルカン（ＰＦＡ）、ポリプロピレン（ＰＰ）、塩化ポリビニル（ＰＶＣ）、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリスチレン（ＰＳ）、ポリカーボネート（ＰＣ）、ポリメチルペンテン（ＰＭＰ）、ポリエーテルエーテルケトン（ＰＥＥＫ）、およびそれらの組合せから成る群から選択される材料を含み、基部は、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）および白金硬化シリコーンから成る群から選択される材料を含む。
【００１５】
更なる特徴および長所は、以下の詳細な説明で述べられると共に、その説明から当業者に自明であり、または、以下の詳細な説明、特許請求の範囲、および添付の図面を含む本明細書に記載されるように実施形態を実施することによって認識される。
【００１６】
上記の概要説明および以下の詳細説明は、単に例示的なものであり、本開示の範囲の性質および特徴を理解するための概観または枠組みを提供することを意図したものであることを理解されたい。
【００１７】
添付の図面は、本開示の原理の更なる理解を提供するために含まれ、本明細書に組み込まれてその一部をなすものである。図面は１以上の実施形態を示しており、明細書と共に、本開示の原理および作用を例として説明する役割をするものである。本明細書および図面において開示される本開示の様々な特徴は、あらゆる組合せで用いられ得ることを理解されたい。限定するものではない例として、本開示の様々な特徴は、以下の態様に従って互いに組み合わされ得る。
【図面の簡単な説明】
【００１８】
【図１】本開示の態様による、三角フラスコ用の折り畳み可能なシームを有するライナーの模式的な斜視図
【図１Ａ】本開示の態様による、フラスコアセンブリ内に挿入されるために折り畳まれた図１に示されているライナーを含むフラスコアセンブリの模式的な斜視図
【図１Ｂ】ベントキャップを用いた封入の前に組み付けられた、図１Ａに示されているフラスコアセンブリの模式的な斜視図
【図２】本開示の態様による、三角フラスコ用の折り畳み可能なシームとフラスコ挿入ポケットとを有するライナーの模式的な斜視図
【図２Ａ】本開示の態様による、フラスコアセンブリ内に挿入されるために折り畳まれた図２に示されているライナーを含むフラスコアセンブリの模式的な斜視図
【図２Ｂ】ベントキャップを用いた封入の前に、ワイヤフラスコ挿入要素が組み付けられた、図２Ａに示されているフラスコアセンブリの模式的な斜視図
【図２Ｃ】ベントキャップを用いた封入の前に、フラスコの首を覆うように部分的に折り返されたライナーバッグが組み付けられた、図２Ａに示されているフラスコアセンブリの模式的な斜視図
【図２Ｄ】ベントキャップを用いた封入の前に、フラスコの首を覆うように完全折り返されたライナーバッグが組み付けられた、図２Ａに示されているフラスコアセンブリの模式的な斜視図
【図３】本開示の態様による、三角フラスコ用の複数のベントを有するライナーの模式的な斜視図
【図４】本開示の態様による、図３に示されているライナーのベントに対応するサイズおよび位置を有する切り抜き部を有するフラスコの模式的な斜視図
【図５】本開示の態様による、位置決め特徴部を有する２つのフラスコ部分を有するフラスコと、ライナーとを含むフラスコアセンブリの模式的な斜視図
【図５Ａ】組み付けられた状態の、図５に示されているフラスコアセンブリの模式的な斜視図
【図６】本開示の態様による、ベントおよび位置決め特徴部を有する２つのフラスコ部分を有するフラスコと、ライナーとを含むフラスコアセンブリの模式的な斜視図
【図６Ａ】組み付けられた状態の、図６に示されているフラスコアセンブリの模式的な斜視図
【図７】本開示の態様によるフラスコアセンブリの模式的な切り取り図
【発明を実施するための形態】
【００１９】
以下の詳細な説明では、本開示の様々な原理の完全な理解を提供するために、限定ではなく説明の目的で、具体的な詳細を開示する例示的な実施形態が述べられる。しかし、本開示の利益を得た当業者には、本開示が、本明細書において開示される具体的な詳細から離れた他の実施形態で実施され得ることが自明である。更に、本開示の様々な原理の説明を不明瞭にしないために、周知の装置、方法、および材料の説明は省略され得る。最後に、適用可能な場合には常に、類似の参照番号は類似の要素を参照する。
【００２０】
本明細書において、範囲は、「約」或る特定の値から、および／または、「約」別の特定の値までと表現され得る。そのような範囲が表現された場合には、別の実施形態は、その或る特定の値から、および／または、別の特定の値までを含む。同様に、値が「約」という語を用いて概算として表現された場合には、その特定の値が、別の態様を構成することを理解されたい。更に、各範囲の終点は、他方の終点との関係において、および他方の終点から独立して、有意であることを理解されたい。
【００２１】
本明細書において用いられる方向に関する用語（例えば、上、下、右、左、前、後、頂部、底部）は、単に描かれた図面を参照したものであり、絶対的な向きを意味することは意図しない。
【００２２】
特に明記しない限り、本明細書において述べられるいずれの方法も、その工程が特定の順序で行われることを要すると解釈されることは意図しない。従って、方法の請求項が、その工程が辿るべき順序を実際に記載していない場合、或いは、特許請求の範囲または説明において、その工程が特定の順序に限定されることが具体的に述べられていない場合には、どのような順序も推論されることは意図しない。このことは、工程の配列または動作フローに関する論理の問題、文法的な組織または句読点から導出される通常の意味、および、明細書に記載されている実施形態の数またはタイプを含む、どのような可能な明示されていない解釈の基礎についても成り立つ。
【００２３】
本明細書において用いられる単数形の、「a」、「an」、および「the」は、特に明記しない限り、複数の被参照物を含む。従って、例えば「a component」と言った場合には、特に明記しない限り、２以上のそのような構成要素を有する態様を含む。
【００２４】
本開示の態様は、一般的に、低減された細胞培養コスト、より低い汚染リスク、および高められた細胞培養性能を提供する三角フラスコ技術およびアセンブリに関する。これらのフラスコ技術およびアセンブリは、細胞培養のための三角フラスコ用のライナーバッグを含むライナーを含み、ライナーバッグは使い捨て用に構成され、フラスコは多数回使用するために保持される。これらのフラスコ技術は、三角フラスコと、フラスコに合わせたサイズを有するライナーバッグとを含むフラスコアセンブリも含む。更に、バッグは、細胞培養のために、フラスコ内への挿入が容易になるよう、および使い捨て用に構成される。更に、本フラスコ技術は、複数のフラスコ部分を有する三角フラスコと、フラスコに合わせたサイズを有するライナーバッグとを含むフラスコアセンブリも含む。更に、バッグは、細胞培養のために、および使い捨て用に構成される。
【００２５】
本開示のフラスコ技術は、幾つかの長所を提供する。まず、これらのフラスコ技術は、従来の手法を凌駕する顕著なコストの節約を提供する。具体的には、使い捨てライナーおよびライナーバッグと関連付けられた廃棄および交換コストは、使い捨てフラスコと関連付けられた廃棄コストよりも顕著に低い。更に、細胞培養処理の全体的なコストは、大半の細胞培養用途については各使用間のオードクレーブまたは他のクリーニングを必要としない本開示のフラスコ技術を用いれば、低減されるはずである。また、本明細書において開示されるライナーは、予め滅菌され得るものであり、従って、細胞培養を開始して維持するための滅菌環境を提供する。本開示のフラスコ技術によって提供される滅菌環境は、従来のフラスコ技術と関連付けられた汚染の懸念を効果的に低減または解消する。更に、本開示のフラスコ技術のうちの幾つかは、フラスコ内で培養されている細胞とのガス交換を高めるよう構成されたベント、膜、および他のより透過性が高い特徴物を含み、これにより、コストがかかる更なるガス交換対策（例えば、細胞培養物との直接的なガス供給および交換のためにフラスコに挿入される管等）の必要がなくなる。本明細書において開示されるライナー。
【００２６】
図１を参照すると、本開示の態様による三角フラスコ用のライナー１００が示されている。図示されるように、ライナー１００は、単一の開口部１０を有するライナーバッグ２０であって、フラスコ内に嵌るサイズを有すると共に、細胞培養のために構成されたライナーバッグ２０を含む。更に、ライナーバッグ２０は、首２２、基部２４、および側面２６を有する。
【００２７】
更に、図１に示されているライナー１００のライナーバッグ２０は、約０．０２５４ｍｍ〜約０．５０８ｍｍ、０．２５４ｍｍ〜０．５０８ｍｍ、および０．０２５４ｍｍ〜０．２５４ｍｍの厚さを有するよう構成され得る。例えば、ライナーバッグの厚さは、０．０２５４ｍｍ、０．０３ｍｍ、０．０４ｍｍ、０．０５ｍｍ、０．０６ｍｍ．０．０７ｍｍ、０．０８ｍｍ、０．０９ｍｍ、０．１０ｍｍ、０．２ｍｍ、０．３ｍｍ、０．４ｍｍ、０．５ｍｍ、０．５０８ｍｍ、およびこれらの値の間の全ての厚さであり得る。より一般的には、ライナーバッグ２０のこれらの範囲内のより小さい厚さ（例えば、０．０２５４ｍｍ〜０．２５４ｍｍの範囲の厚さ）は、フラスコの開口部を通してバッグを挿入する前に、バッグを折り畳むおよび／または丸めるのを容易にすることによって、三角フラスコ内へのライナーバッグ２０の挿入を向上させ得る。一部の実施形態では、より小さい厚さは、バッグの透過性を減少させることにより、ライナーバッグ２０内の細胞培養物および培地へのガス交換および供給を改善し得る。他の態様では、ライナーバッグ２０のより大きい厚さ（例えば、０．２５４ｍｍ〜０．５０８ｍｍの範囲の厚さ）も、フラスコ内に挿入可能な剛性のロールの展開を容易にすることにより、三角フラスコ内へのライナーバッグの挿入を向上させ得る。更に、ライナーバッグ２０のより大きい厚さ（例えば、０．２５４ｍｍ〜０．５０８ｍｍの範囲の厚さ）は、特に、フラスコの開口部を通してバッグを挿入する必要がない複数の部品からなるフラスコ（例えば、図６、図６Ａを参照）を用いる本開示の実施形態については、細胞培養のために利用可能なバッグ２０の空間を最大化するために、フラスコ内におけるより良好な形状制御を有するバッグを提供できる。
【００２８】
また、図１に示されているライナー１００のライナーバッグ２０は、三角フラスコ内への挿入を容易にするための折り畳み可能なシームと、関連する特徴とを有するよう構成され得る。例えば、特定の実施形態では、ライナー１００は、三角フラスコ内へのバッグ２０の挿入を容易にするための、少なくとも１つの折り畳み可能なシーム２８を有するライナーバッグ２０を用いる。図１に示されているように、折り畳み可能なシーム２８は、ライナーバッグ２０を三角フラスコの開口部内への挿入により適した管状の構成に折り畳むまたは丸める（図１Ａを参照）のを容易にするために、ライナーバッグ２０の側面２６に沿って延びている。他の実施形態によれば、折り畳み可能なシーム２８は、ライナーバッグ２０の基部２４に一体化され得る。折り畳み可能なシーム２８は、ライナーバッグ２０と一体であってもよく、または、例えば、バッグ２０に縫い付けられる別個の材料であってもよい。当業者には、三角フラスコ内へのバッグ２０の挿入を容易にするために、他の形状の１以上のシーム２８がバッグ２０に組み込まれてもよいことが容易にわかる。
【００２９】
図２に示されているように、ライナー１００のライナーバッグ２０は、三角フラスコ内へのバッグの挿入を容易にするための着脱可能なフラスコ挿入要素（例えば、ワイヤ４０（図２Ａを参照））を受け入れるよう構成されたポケット３０を有するよう構成され得る。図２に示されているように、ポケット３０はライナーバッグ２０の側面２６に沿って延び、着脱可能なフラスコ挿入要素（例えば、ワイヤ４０または他の類似の形状の要素）を受け入れるようよう構成されている。ポケット３０内にワイヤ４０または類似の構成の要素を挿入したら、ユーザは、ライナーバッグ２０を三角フラスコの開口部内に向かわせ（例えば、図２Ｂを参照）、次に、バッグ２０がフラスコ内に配置されたら、ワイヤ４０を除去し得る（例えば、図２Ｃを参照）。他の実施形態によれば、ポケット３０はライナーバッグ２０と一体であってもよく、または、例えば、ライナーバッグ２０の側面２６に沿ってポケットのような形態で縫い付けられる別個の材料で構成されてもよい。
【００３０】
図１および図２に例示的な形態で示されているように、ライナー１００のライナーバッグ２０は気体透過性ポリマー材料を含む。これにより、培地およびバッグ２０内で成長する細胞培養物（例えば、図７に示されている培養物３００）が、適切な成長のために十分なガス供給およびガス交換を有することが確実になる。従って、ライナーバッグ２０に用いられる材料は、意図される細胞培養用途のために十分な気体透過性レベルを示し、且つ、三角フラスコ内への挿入を容易にするのをサポートするための十分な厚さを有するべきである。特定の実装例では、ライナーバッグ２０は、低密度ポリエチレン（ＬＤＰＥ）、ポリエチレン（ＰＥ）、エチルビニルアセテート（ＥＶＡ）、シリコーン、フッ素化エチレンプロピレン（ＦＥＰ）、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）（例えば、ケマーズ社のテフロン（登録商標）ＰＴＦＥ材料）、パーフルオロアルコキシアルカン（ＰＦＡ）、ポリプロピレン（ＰＰ）、塩化ポリビニル（ＰＶＣ）、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリスチレン（ＰＳ）、ポリカーボネート（ＰＣ）、ポリメチルペンテン（ＰＭＰ）、ポリエーテルエーテルケトン（ＰＥＥＫ）、およびそれらの組合せを含む様々なポリマー材料から製造され得る。
【００３１】
ライナー１００の別の態様によれば、図３に示されているように、ライナーバッグ２０は、１以上のベント５０を含み得る。ベント５０は、バッグ２０の残りの部分において用いられる気体透過性ポリマー材料の残りの部分の気体透過性レベルと比較して、より高い気体透過性レベルを有するよう構成され得る。従って、バッグ２０は、高められたガス交換および細胞培養能力のために透過性が高いベント５０を有しつつ、三角フラスコ内への挿入を容易にするために、バッグ２０の残りの部分（例えば、側面２６および基部２４）にはより透過性が低い材料を選択することによって、十分な剛性を保持するよう構成され得る。
【００３２】
１以上のベント５０（図３を参照）を組み込んだライナーバッグ２０を有するライナー１００の１つの実装例によれば、各ベント５０は、約０．２μｍ〜約５μｍの平均細孔径を有する膜から製造される。例えば、ベントの平均細孔径は、０．２μｍ、０．３μｍ、０．４μｍ、０．５μｍ、０．６μｍ、０．７μｍ、０．８μｍ、０．９μｍ、１μｍ、１．５μｍ、２μｍ、２．５μｍ、３μｍ、３．５μｍ、４μｍ、４．５μｍ、５μｍ、およびこれらの細孔径値の間の全ての平均細孔径であり得る。特定の態様では、ベント５０に用いられる膜は、細胞培養物および他の液体培地がベント５０に付着するのを抑制するために、疎水性である。ライナー１００の更なる実施形態では、ライナーバッグ２０には、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）（例えば、ケマーズ社の「テフロン」ＰＴＦＥ材料）、パーフルオロアルコキシアルカン（ＰＦＡ）、高密度ポリエチレン（ＨＤＰＥ）生地（例えば、デュポン社のタイベック（登録商標）材料）、フッ化ポリビニリデン（ＰＶＤＦ）とアクリルとのコポリマー（例えば、ポール・コーポレーションのＶｅｒｓａｐｏｒ（登録商標）膜材料）、ナイロン、およびそれらの組合せを含む様々なポリマー材料から膜の形態で製造されるベント５０が組み込まれる。
【００３３】
ベント５０（図３を参照）を組み込んだライナーバッグ２０を有するライナー１００の別の実装例によれば、バッグの側面２６は、低密度ポリエチレン（ＬＤＰＥ）、ポリエチレン（ＰＥ）、エチルビニルアセテート（ＥＶＡ）、シリコーン、フッ素化エチレンプロピレン（ＦＥＰ）、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）（例えば、ケマーズ社の「テフロン」ＰＴＦＥ材料）、パーフルオロアルコキシアルカン（ＰＦＡ）、ポリプロピレン（ＰＰ）、塩化ポリビニル（ＰＶＣ）、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリスチレン（ＰＳ）、ポリカーボネート（ＰＣ）、ポリメチルペンテン（ＰＭＰ）、ポリエーテルエーテルケトン（ＰＥＥＫ）、およびそれらの組合せを含む様々なポリマー材料から製造され得るものであり、バッグの基部２４は、細胞培養中に細胞が基部に付着するのを抑制して、細胞培養の収率を高めるために、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）材料、白金硬化シリコーン材料、および他の付着防止材料から製造され得る。これらの構成では、ライナーバッグ２０の１または複数のベント５０および基部２４は、バッグの側面２６を作るために用いられる１または複数の材料と比較してより高い気体透過性レベルを有することにより、バッグ内の細胞培養物へのガス交換を高め得る。１以上のベント５０を有するライナー１００のこれらの多材料構成は、本開示における、ベントを含まず１つの材料から製造される他の態様のライナー１００より高い材料および製品コストを示すが、ライナー１００の特定の用途には、これらの構成によって提供される高められた細胞培養能力が有益であり得る。
【００３４】
ここで図１Ａを参照すると、本開示の別の態様による、ライナー１００（例えば、図１を参照）を有するフラスコアセンブリ２００が示されている。図１Ａに示されているように、フラスコアセンブリ２００に組み込まれるライナー１００は、先に概要を述べたもの（例えば、図１に示されている折り畳み可能なシーム２８を有するライナー１００、図２に示されている折り畳み可能なシーム２８およびポケット３０を有するライナー１００、並びに、図３に示されているベント５０を有するライナー１００を参照）と同じ特徴およびそれらの変形を有するよう構成され得る。従って、特に明記しない限り、類似の番号を有する要素は、同じまたは類似の構造および機能を有する。更に、図１Ａに示されているフラスコアセンブリ２００に関して、アセンブリは、三角フラスコ１２０と、単一の開口部１０を有するライナーバッグ１００（図１を参照）であって、フラスコ１２０内に嵌るサイズを有すると共に約０．０２５４ｍｍ〜約０．５０８ｍｍの厚さを有するライナーバッグ１００とを含む。図１Ａに例示的な形態で示されているように、フラスコ１２０は、首１２２、基部１２４、および側面１２６を有する。更に、アセンブリ２００の気体透過性ポリマー材料から製造されたライナーバッグ２０は、細胞培養のために、およびフラスコ１２０内への挿入が容易になるよう構成される。
【００３５】
図１Ａに示されているフラスコ１２０は、ガラス（例えば、コーニング社のパイレックス（登録商標））、ガラスセラミック、セラミック、ポリマー、金属、それらの複合材料または組合せから製造され得る。好ましい実施形態では、フラスコ１２０は、細胞培養に適した強度、破壊靱性、耐温度性、および耐浸出性を有する三角フラスコについて当業者が典型的に理解している材料から製造される。更に、フラスコ１２０は、本開示の分野の当業者が理解している任意の数の許容可能な製造方法によって製造され得る。特定の実装例では、フラスコ１２０は、ポリカーボネート材料から製造されてもよく、その厚さは、光学的な透明度を維持するために、およびフラスコ１２０がオードクレーブ処理後に再使用可能であることを確実にするために、２ｍｍ以下となるよう制限され得る。
【００３６】
再び図１Ａを参照すると、フラスコアセンブリ２００の態様は、フラスコ１２０の首１２２の開口部を通した挿入を容易にするよう構成されたライナーバッグ２０を有するライナー１００を組み込んだものである。より具体的には、ライナーバッグ２０は、フラスコ１２０内への挿入を容易にする形態に巻かれるか、または別様で折り畳まれ得る。特定の態様では、図１Ａに示されているように、ライナーバッグ２０は、この目的で、バッグのシーム２８の１以上に沿って折り畳まれ得る。ライナーバッグ２０がフラスコ１２０内に挿入されたら、ライナーバッグ２０は、効率的な細胞培養のために、図１Ｂに示されているようにフラスコ１２０の内容積を埋めるよう広がり得る。ベントキャップ１６０（図１Ｂを参照）をフラスコ１２０の首１２２上に固定できることを確実にするよう、ライナーバッグ２０はその厚さに応じて、首１２２（図１Ａを参照）を覆うように折り返されるか、切断されるか、または別様でそのようなサイズにされ得る。
【００３７】
ここで図２〜図２Ｄを参照すると、本開示の更なる態様による、ライナー１００を有するフラスコアセンブリ２００が示されている。図２に示されているように、ライナー１００は、少なくとも１つの折り畳み可能なシーム２８と、ポケット３０とを有するよう構成されたライナーバッグ２０を含む。図２Ａに示されているように、ライナー１００は、ポケット３０にワイヤ４０を入れることができる状態のまま、シーム２８の１以上に沿って巻かれ得る。これらの特徴の両方は、フラスコ１２０内へのライナーバッグ２０の挿入を容易にするために用いられ得る。図２Ｂに示されているように、ライナーバッグ２０は、フラスコ１２０内に挿入され（即ち、ライナーバッグ２０の首２２がちょうどフラスコ１２０の首１２２から外に出る状態で）、挿入を容易にするために、ポケット３０にワイヤ４０が導入されている。同じく図２Ｂに示されているように、ライナーバッグ２０の首２２（図２Ａを参照）は、フラスコ１２０の首１２２の上方に露出している。次に、図２Ｃおよび図２Ｄに示されているように、ライナーバッグ２０の首２２は、フラスコ１２０の開口部を閉じるためにベントキャップ１６０を設置するための間隙を設けるように、フラスコ１２０の首１２２を覆うように折り返され得る。アセンブリ２００のライナーバッグ２０内に細胞培養物が導入された後、ベントキャップ１６０はフラスコ１２０にしっかり留められ、アセンブリ２００内において細胞培養が開始され得る。
【００３８】
本開示の更なる態様によれば、図３に示されているように、フラスコアセンブリ２００は、例えば、フラスコ１２０（例えば、図１Ｂ、図２Ｂのフラスコ１２０を参照）等の三角フラスコ用のライナー１００であって、複数のベント５０を有するライナーバッグ２０を有するライナー１００を用い得る。先に述べたように、ライナーバッグ２０は、１以上のベント５０を含み得る。ベント５０は、バッグ２０の残りの部分において用いられる気体透過性ポリマー材料の残りの部分の気体透過性レベルと比較して、より高い気体透過性レベルを有するよう構成され得る。従って、バッグ２０は、高められたガス交換および細胞培養能力のために透過性が高いベント５０を有しつつ、三角フラスコ内への挿入を容易にするために、バッグ２０の残りの部分（例えば、側面２６および基部２４）にはより透過性が低い材料を選択することによって、十分な剛性を保持するよう構成され得る。更に、特定の実装例では、ライナーバッグ２０のベント５０は、ガス交換を阻害することになる細胞培養物および液体培地のベント５０への付着を抑制するために、疎水性膜または疎水性膜を含む材料を用いて製造される。また、フラスコアセンブリ２００は、約０．２μｍ〜約５μｍの平均細孔径を有する膜から各ベント５０（図３）が製造された、ライナーバッグ２０を有するライナー１００を用いてもよい。更なる実施形態では、ライナーバッグ２０には、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）（例えば、ケマーズ社の「テフロン」ＰＴＦＥ材料）、パーフルオロアルコキシアルカン（ＰＦＡ）、高密度ポリエチレン（ＨＤＰＥ）生地（例えば、デュポン社のタイベック材料）、フッ化ポリビニリデン（ＰＶＤＦ）とアクリルとのコポリマー（例えば、ポール・コーポレーションのＶｅｒｓａｐｏｒ膜材料）、ナイロン、およびそれらの組合せを含む様々なポリマー材料から膜の形態で製造されたベント５０が組み込まれる。更に、バッグ２０の側面２６は、低密度ポリエチレン（ＬＤＰＥ）、ポリエチレン（ＰＥ）、エチルビニルアセテート（ＥＶＡ）、シリコーン、フッ素化エチレンプロピレン（ＦＥＰ）、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）（例えば、ケマーズ社の「テフロン」ＰＴＦＥ材料）、パーフルオロアルコキシアルカン（ＰＦＡ）、ポリプロピレン（ＰＰ）、塩化ポリビニル（ＰＶＣ）、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリスチレン（ＰＳ）、ポリカーボネート（ＰＣ）、ポリメチルペンテン（ＰＭＰ）、ポリエーテルエーテルケトン（ＰＥＥＫ）、およびそれらの組合せを含む様々なポリマー材料から製造され得るものであり、バッグの基部２４は、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）および白金硬化シリコーン材料から製造され得る。
【００３９】
別の態様によれば、図４に示されているように、フラスコアセンブリ２００は、開口部１０を有するライナーバッグ２０であって、例えば、複数の切り抜き部１５０を有するフラスコ１２０等の三角フラスコ内に嵌るサイズを有するライナーバッグ２０を有するライナー１００を用い得る。図４に示されているフラスコ１２０のこれらの切り抜き部１５０は、ライナー１００のベント５０に対応するサイズおよび位置を有し得る（図３を参照）。フラスコアセンブリ２００の他の態様では、フラスコ１２０に切り抜き部１５０が組み込まれ、ライナーバッグ２０はベント５０を含まずに構成される。アセンブリ２００のこれらの構成では、切り抜き部１５０は、ライナーバッグ２０にベント５０が含まれることから独立して、ライナーバッグ２０内の細胞培養物とのガス交換を補助し得る。フラスコアセンブリ２００の更なる態様では、ライナーバッグ２０内に配置された細胞培養物とのガス交換を更に高めると共に、フラスコ１２０の切り抜き部１５０および／またはライナーバッグ２０に組み込まれたベント５０によって提供されるガス交換を増大させるために、フラスコ１２０は基部１２４に穿孔１２８を有するよう構成され得る。
【００４０】
本開示の更なる態様によれば、図５および図５Ａに示されているフラスコアセンブリ２００ａは、複数のフラスコ部分（例えば、必要に応じて設けられる位置決め特徴部１７０ａ、１７０ｂを有する２つのフラスコ部分１２０ａ、１２０ｂ）を有するフラスコを含む。当業者には認識されるように、フラスコアセンブリ２００ａには、３以上の部分を含むフラスコが組み込まれてもよく、これは、製造および／または梱包上の利益を提供し得る。更に、アセンブリ２００ａは、単一の開口部を有するライナーバッグ２０であって、フラスコ１２０ａ内に嵌るサイズを有するライナーバッグ２０（例えば、図１、図２、および図５に示されているライナーバッグ２０）を含む。フラスコアセンブリ２００ａのライナーバッグ２０は、細胞培養のために構成され、気体透過性材料を含む。フラスコ部分１２０ａ、１２０ｂは、基部１２４ａ、１２４ｂを含み得るものであり、ガラス材料（例えば、コーニング社の「パイレックス」）から製造されるのが一般的である。更に、フラスコ部分１２０ａ、１２０ｂは、ガラス（例えば、コーニング社の「パイレックス」）、ガラスセラミック、セラミック、ポリマー、金属、それらの複合材料または組合せから製造され得る。好ましい実施形態では、フラスコ部分１２０ａ、１２０ｂは、細胞培養に適した強度、破壊靱性、耐温度性、および耐浸出性を有する三角フラスコについて当業者が典型的に理解している材料から製造される。更に、フラスコ部分１２０ａ、１２０ｂは、本開示の分野の当業者が理解している任意の数の許容可能な製造方法によって製造され得る。特定の実装例では、フラスコ部分１２０ａ、１２０ｂは、ポリスチレン材料から製造されてもよく、それらの厚さは、光学的な透明度を維持するために、２ｍｍ以下となるよう制限され得る。フラスコアセンブリ２００ａのこの構成では、バッグ２０を折り畳む、ワイヤ（例えば、図２Ａに示されているようなワイヤ４０）によってバッグ２０をガイドする、および／または、フラスコ内にバッグ２０を配置するための他の何らかの外部の特徴に依拠する追加の工程を講じることなく、ライナーバッグ２０をフラスコ部分１２０ａまたは１２０ｂの一方の中に直接配置できる点が有利である。
【００４１】
図５および図５Ａに示されているフラスコアセンブリ２００ａの別の態様では、フラスコは、各々が他のフラスコ部分のうちの少なくとも１つと結合するよう構成されたフラスコ部分１２０ａ、１２０ｂを含み得る。特定の実装例では、フラスコ部分１２０ａ、１２０ｂには位置決め特徴部１７０ａ、１７０ｂが組み込まれ得る。従って、一部の実装例は、これらの要素を一体に、特に位置決め特徴部１７０ａ、１７０ｂと結合、接合、および／または係止することを容易にするために、ポリマーまたは金属から製造された部分１２０ａ、１２０ｂを用いる。気体透過性ポリマー材料から製造されたライナーバッグ２０をフラスコ部分１２０ａ、１２０ｂの一方の中に配置した後、ライナーバッグ２０が内部に配置されていない方のフラスコ部分が、位置決め特徴部１７０ａ、１７０ｂによって他方のフラスコ部分と位置合わせされ、機械的に結合され得る。一部の実施形態では、位置決め特徴部１７０ａ、１７０ｂは、ライナーバッグ２０がフラスコに挿入された後のフラスコ部分１２０ａ、１２０ｂの機械的結合を容易にするための係止リブ、磁石、スナップ嵌合式接合部、および他の機械的または電気機械的（例えば、磁石）特徴を含み得る。
【００４２】
ここで図６および図６Ａを参照すると、図５および図５Ａに示されているフラスコアセンブリ２００ａと同様に構成された、別の実施形態によるフラスコアセンブリ２００ａが示されている。従って、類似の番号の要素は、同じまたは類似の構造および機能を有する。しかし、図６および図６Ａに示されているフラスコアセンブリ２００ａは、位置決め特徴部１７０ａ、１７０ｂを有する２つのフラスコ部分１２０ａ、１２０ｂと、切り抜き部１５０ａ、１５０ｂとを有するフラスコを含む。これらの切り抜き部１５０ａ、１５０ｂは、ライナー１００のライナーバッグ２０のベント５０（図３を参照）に対応するサイズおよび位置を有し得る。フラスコアセンブリ２００ａの他の態様では、フラスコ部分１２０ａ、１２０ｂに切り抜き部１５０ａ、１５０ｂが組み込まれ、ライナーバッグ２０はベントを含まずに構成される。アセンブリ２００ａのこれらの構成では、切り抜き部１５０ａ、１５０ｂは、ライナーバッグ２０にベント５０が含まれることから独立して、ライナーバッグ２０内の細胞培養物とのガス交換を補助し得る。フラスコアセンブリ２００ａの更なる態様では、フラスコ部分１２０ａ、１２０ｂは、それぞれの基部部分１２４ａ、１２４ｂに穿孔（図４に示されている穿孔１２８を参照）を有するよう構成され得る。フラスコ部分１２０ａ、１２０ｂの基部部分１２４ａ、１２４ｂのこれらの穿孔は、ライナーバッグ２０内に配置された細胞培養物とのガス交換を更に高め得ると共に、フラスコの切り抜き部１５０ａ、１５０ｂおよび／またはライナーバッグ２０に組み込まれたベント５０によって提供されるガス交換を増大させ得る。
【００４３】
ここで図７を参照すると、組み付けられた状態のフラスコアセンブリ２００、２００ａおよび対応するライナー１００が、例示的な切り取り図で示されている。より具体的には、それぞれのフラスコ１２０またはフラスコ部分１２０ａ、１２０ｂを有するフラスコアセンブリ２００、２００ａが、ライナーバッグ２０を含むライナー１００を閉じているベントキャップ１６０と共に示されている。更に、ライナーバッグ２０によって細胞培養物３００が収容されている、フラスコアセンブリ２００、２００ａ、およびライナー１００が、図７に模式的に示されている。より一般的には、フラスコアセンブリ２００、２００ａ、ライナー１００、並びにこれらの本開示の態様の構成および設計原理に一致する他のアセンブリおよびライナーは、細胞培養のために従来の三角フラスコを用いる手法を凌駕する顕著なコストの節約を提供する。具体的には、フラスコアセンブリ２００、２００ａ（およびライナー１００に適合する他のフラスコアセンブリ）の使い捨てライナー（例えば、ライナー１００）およびライナーバッグ（例えば、ライナーバッグ２０）と関連付けられた廃棄および交換コストは、使い捨てフラスコと関連付けられた廃棄コストよりも顕著に低い。更に、細胞培養処理の全体的なコストは、大半の細胞培養用途については各使用間のオードクレーブまたは他のクリーニングを必要としないこれらのフラスコ技術を用いれば、低減されることが期待される。更に、本開示のフラスコアセンブリ２００、２００ａ、およびライナー１００（例えば、図１、図２、および図３に示されているライナー１００を参照）の幾つかの実施形態は、これらのフラスコアセンブリおよびライナーに、細胞培養で用いられる従来の三角フラスコを凌駕する、フラスコ内で培養されている細胞３００との高められたガス交換を提供するよう構成されたベント（例えば、ベント５０）、膜、および他のより透過性が高い特徴（例えば、図４に示されている穿孔１２８）を含む。
【００４４】
なお、本開示の任意の実施形態を含む上述の実施形態は、単に、可能な実装例であり、単に、本開示の様々な原理の明確な理解のために述べられたものであることが強調されるべきである。例えば、ベント５０を有するライナー１００およびライナーバッグ２０は、ベント５０が、図３に例示的な形態で示されている形状とは顕著に異なる形状を有するように、変更され得る。ベント５０は、例えば、図３に示されているベント５０と同じまたは類似のガス交換性能を有する、ライナーバッグ２０の穿孔であり得る。別の例として、図４に示されている切り抜き部１５０を有するフラスコ１２０は、切り抜き部１５０が、図４に例示的な形態で示されている形状とは顕著に異なる形状を有するように、変更され得る。切り抜き部１５０は、例えば、フラスコ１２０の側面１２６に足場状またはスケルトン状の構造として構成されることにより、フラスコ内に収容されたライナー１００およびライナーバッグ２０内の細胞培養物との高められたガス交換のためのより大きい表面積を生じてもよい。このフラスコ１２０の構造的な減少に対応するために、フラスコには高強度ポリマー材料が用いられ得る。
【００４５】
本開示の態様（１）によれば、三角フラスコ用のライナーが提供される。前記ライナーは、単一の開口部を有するライナーバッグであって、前記フラスコ内に嵌るサイズを有すると共に約０．０２５４ｍｍ〜約０．５０８ｍｍの厚さを有するライナーバッグを含み、前記ライナーバッグは、細胞培養のために、および前記フラスコ内への挿入が容易になるよう構成されており、更に、前記ライナーバッグは気体透過性ポリマー材料を含む。
【００４６】
本開示の態様（２）によれば、態様（１）のライナーが提供され、前記ライナーバッグは、着脱可能なフラスコ挿入要素を受け入れるよう構成されたポケットを更に含む。
【００４７】
本開示の態様（３）によれば、態様（１）〜（２）のいずれかのライナーが提供され、前記ライナーバッグは、低密度ポリエチレン（ＬＤＰＥ）、ポリエチレン（ＰＥ）、エチルビニルアセテート（ＥＶＡ）、シリコーン、フッ素化エチレンプロピレン（ＦＥＰ）、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）、パーフルオロアルコキシアルカン（ＰＦＡ）、ポリプロピレン（ＰＰ）、塩化ポリビニル（ＰＶＣ）、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリスチレン（ＰＳ）、ポリカーボネート（ＰＣ）、ポリメチルペンテン（ＰＭＰ）、ポリエーテルエーテルケトン（ＰＥＥＫ）、およびそれらの組合せから成る群から選択される材料を含む。
【００４８】
本開示の態様（４）によれば、態様（１）〜（３）のいずれかのライナーが提供され、前記ライナーバッグは、前記気体透過性ポリマー材料の気体透過性より高い気体透過性を有するベントを更に含む。
【００４９】
本開示の態様（５）によれば、態様（４）のライナーが提供され、前記ベントは、約０．２μｍ〜約５μｍの平均細孔径を有する膜を含む。
【００５０】
本開示の態様（６）によれば、態様（５）のライナーが提供され、前記膜は、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）、パーフルオロアルコキシアルカン（ＰＦＡ）、高密度ポリエチレン（ＨＤＰＥ）生地、フッ化ポリビニリデン（ＰＶＤＦ）とアクリルとのコポリマー、ナイロン、およびそれらの組合せから成る群から選択される材料を含む。
【００５１】
本開示の態様（７）によれば、態様（４）〜（６）のいずれかのライナーが提供され、前記ライナーバッグは基部および側面を有し、更に、前記側面は低密度ポリエチレン（ＬＤＰＥ）、ポリエチレン（ＰＥ）、エチルビニルアセテート（ＥＶＡ）、シリコーン、フッ素化エチレンプロピレン（ＦＥＰ）、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）、パーフルオロアルコキシアルカン（ＰＦＡ）、ポリプロピレン（ＰＰ）、塩化ポリビニル（ＰＶＣ）、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリスチレン（ＰＳ）、ポリカーボネート（ＰＣ）、ポリメチルペンテン（ＰＭＰ）、ポリエーテルエーテルケトン（ＰＥＥＫ）、およびそれらの組合せから成る群から選択される材料を含み、前記基部は、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）および白金硬化シリコーンから成る群から選択される材料を含む。
【００５２】
本開示の態様（８）によれば、態様（１）〜（７）のいずれかのライナーが提供され、前記ライナーバッグは、前記フラスコ内への前記バッグの挿入を容易にするよう構成された少なくとも１つの折り畳み可能なシームを更に含む。
【００５３】
本開示の態様（９）によれば、フラスコアセンブリが提供される。前記フラスコアセンブリは、三角フラスコと、単一の開口部を有するライナーバッグであって、前記フラスコ内に嵌るサイズを有すると共に約０．０２５４ｍｍ〜約０．５０８ｍｍの厚さを有するライナーバッグとを含み、前記ライナーバッグは、細胞培養のために、および前記フラスコ内への挿入が容易になるよう構成されており、更に、前記ライナーバッグは気体透過性ポリマー材料を含む。
【００５４】
本開示の態様（１０）によれば、態様（９）のフラスコアセンブリが提供され、前記ライナーバッグは、着脱可能なフラスコ挿入要素を受け入れるよう構成されたポケットを更に含む。
【００５５】
本開示の態様（１１）によれば、態様（９）〜（１０）のいずれかのフラスコアセンブリが提供され、前記ライナーバッグは、低密度ポリエチレン（ＬＤＰＥ）、ポリエチレン（ＰＥ）、エチルビニルアセテート（ＥＶＡ）、シリコーン、フッ素化エチレンプロピレン（ＦＥＰ）、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）、パーフルオロアルコキシアルカン（ＰＦＡ）、ポリプロピレン（ＰＰ）、塩化ポリビニル（ＰＶＣ）、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリスチレン（ＰＳ）、ポリカーボネート（ＰＣ）、ポリメチルペンテン（ＰＭＰ）、ポリエーテルエーテルケトン（ＰＥＥＫ）、およびそれらの組合せから成る群から選択される材料を含む。
【００５６】
本開示の態様（１２）によれば、態様（９）〜（１１）のいずれかのフラスコアセンブリが提供され、前記ライナーバッグは約０．０２５４ｍｍ〜約０．２５４ｍｍの厚さを有する。
【００５７】
本開示の態様（１３）によれば、態様（９）〜（１２）のいずれかのフラスコアセンブリが提供され、前記ライナーバッグは、前記気体透過性ポリマー材料の気体透過性より高い気体透過性を有するベントを更に含む。
【００５８】
本開示の態様（１４）によれば、態様（１３）のフラスコアセンブリが提供され、前記ベントは、約０．２μｍ〜約５μｍの平均細孔径を有する膜を含む。
【００５９】
本開示の態様（１５）によれば、態様（１４）のフラスコアセンブリが提供され、前記膜は、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）、パーフルオロアルコキシアルカン（ＰＦＡ）、高密度ポリエチレン（ＨＤＰＥ）生地、フッ化ポリビニリデン（ＰＶＤＦ）とアクリルとのコポリマー、ナイロン、およびそれらの組合せから成る群から選択される材料を含む。
【００６０】
本開示の態様（１６）によれば、態様（１３）〜（１５）のいずれかのフラスコアセンブリが提供され、前記ライナーバッグは基部および側面を有し、更に、前記側面は、低密度ポリエチレン（ＬＤＰＥ）、ポリエチレン（ＰＥ）、エチルビニルアセテート（ＥＶＡ）、シリコーン、フッ素化エチレンプロピレン（ＦＥＰ）、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）、パーフルオロアルコキシアルカン（ＰＦＡ）、ポリプロピレン（ＰＰ）、塩化ポリビニル（ＰＶＣ）、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリスチレン（ＰＳ）、ポリカーボネート（ＰＣ）、ポリメチルペンテン（ＰＭＰ）、ポリエーテルエーテルケトン（ＰＥＥＫ）、およびそれらの組合せから成る群から選択される材料を含み、前記基部は、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）および白金硬化シリコーンから成る群から選択される材料を含む。
【００６１】
本開示の態様（１７）によれば、態様（１３）〜（１６）のいずれかのフラスコアセンブリが提供され、前記フラスコは、前記フラスコ内に挿入された前記ライナーバッグの前記ベントに対応するサイズおよび位置を有する切り抜き部を含む。
【００６２】
本開示の態様（１８）によれば、態様（９）〜（１７）のいずれかのフラスコアセンブリが提供され、前記ライナーバッグは、前記フラスコ内への前記バッグの挿入を容易にするよう構成された少なくとも１つの折り畳み可能なシームを更に含む。
【００６３】
本開示の態様（１９）によれば、フラスコアセンブリが提供される。前記フラスコアセンブリは、複数のフラスコ部分を有する三角フラスコと、単一の開口部を有するライナーバッグであって、前記フラスコ内に嵌るサイズを有するライナーバッグとを含み、各前記フラスコ部分は、他の前記フラスコ部分のうちの少なくとも１つと結合するよう構成されており、更に、前記ライナーバッグは細胞培養のために構成され、気体透過性ポリマー材料を含む。
【００６４】
本開示の態様（２０）によれば、態様（１９）のフラスコアセンブリが提供され、前記ライナーバッグは、低密度ポリエチレン（ＬＤＰＥ）、ポリエチレン（ＰＥ）、エチルビニルアセテート（ＥＶＡ）、シリコーン、フッ素化エチレンプロピレン（ＦＥＰ）、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）、パーフルオロアルコキシアルカン（ＰＦＡ）、ポリプロピレン（ＰＰ）、塩化ポリビニル（ＰＶＣ）、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリスチレン（ＰＳ）、ポリカーボネート（ＰＣ）、ポリメチルペンテン（ＰＭＰ）、ポリエーテルエーテルケトン（ＰＥＥＫ）、およびそれらの組合せから成る群から選択される材料を含む。
【００６５】
本開示の態様（２１）によれば、態様（１９）〜（２０）のいずれかのフラスコアセンブリが提供され、前記ライナーバッグは約０．２５４ｍｍ〜約０．５０８ｍｍの厚さを有する。
【００６６】
本開示の態様（２２）によれば、態様（１９）〜（２１）のいずれかのフラスコアセンブリが提供され、前記ライナーバッグは、前記気体透過性ポリマー材料の気体透過性より高い気体透過性を有するベントを更に含む。
【００６７】
本開示の態様（２３）によれば、態様（２２）のフラスコアセンブリが提供され、前記ベントは、約０．２μｍ〜約５μｍの平均細孔径を有する膜を含む。
【００６８】
本開示の態様（２４）によれば、態様（２３）のフラスコアセンブリが提供され、前記膜は、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）、パーフルオロアルコキシアルカン（ＰＦＡ）、高密度ポリエチレン（ＨＤＰＥ）生地、フッ化ポリビニリデン（ＰＶＤＦ）とアクリルとのコポリマー、ナイロン、およびそれらの組合せから成る群から選択される材料を含む。
【００６９】
本開示の態様（２５）によれば、態様（２２）〜（２４）のいずれかのフラスコアセンブリが提供され、前記ライナーバッグは基部および側面を有し、更に、前記側面は、低密度ポリエチレン（ＬＤＰＥ）、ポリエチレン（ＰＥ）、エチルビニルアセテート、シリコーン、フッ素化エチレンプロピレン（ＦＥＰ）、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）、パーフルオロアルコキシアルカン（ＰＦＡ）、ポリプロピレン（ＰＰ）、塩化ポリビニル（ＰＶＣ）、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリスチレン（ＰＳ）、ポリカーボネート（ＰＣ）、ポリメチルペンテン（ＰＭＰ）、ポリエーテルエーテルケトン（ＰＥＥＫ）、およびそれらの組合せから成る群から選択される材料を含み、前記基部は、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）および白金硬化シリコーンから成る群から選択される材料を含む。
【００７０】
本開示の態様（２６）によれば、態様（２２）〜（２５）のいずれかのフラスコアセンブリが提供され、前記フラスコは、該フラスコ内に挿入された前記ライナーバッグの前記ベントに対応するサイズおよび位置を有する切り抜き部を含む。
【００７１】
本開示の態様（２７）によれば、態様（１９）〜（２６）のいずれかのフラスコアセンブリが提供され、各前記フラスコ部分は、他の前記フラスコ部分のうちの少なくとも１つの前記フラスコ部分の位置決め特徴部と機械的に結合するのを補助するよう構成された位置決め特徴部を更に有する。
【００７２】
本開示の趣旨および様々な原理から逸脱することなく、上述の本開示の実施形態に対して多くの変形および変更が行われ得る。そのような変更および変形の全ては、本開示の範囲内に含まれ、添付の特許請求の範囲によって保護されることが意図される。
【００７３】
以下、本発明の好ましい実施形態を項分け記載する。
【００７４】
実施形態１
三角フラスコ用のライナーにおいて、
単一の開口部を有するライナーバッグであって、前記フラスコ内に嵌るサイズを有すると共に約０．０２５４ｍｍ〜約０．５０８ｍｍの厚さを有するライナーバッグを含み、
前記ライナーバッグが、細胞培養のために、および前記フラスコ内への挿入が容易になるよう構成されており、
更に、前記ライナーバッグが気体透過性ポリマー材料を含む
ことを特徴とするライナー。
【００７５】
実施形態２
前記ライナーバッグが、着脱可能なフラスコ挿入要素を受け入れるよう構成されたポケットを更に含む、実施形態１記載のライナー。
【００７６】
実施形態３
前記ライナーバッグが、低密度ポリエチレン（ＬＤＰＥ）、ポリエチレン（ＰＥ）、エチルビニルアセテート（ＥＶＡ）、シリコーン、フッ素化エチレンプロピレン（ＦＥＰ）、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）、パーフルオロアルコキシアルカン（ＰＦＡ）、ポリプロピレン（ＰＰ）、塩化ポリビニル（ＰＶＣ）、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリスチレン（ＰＳ）、ポリカーボネート（ＰＣ）、ポリメチルペンテン（ＰＭＰ）、ポリエーテルエーテルケトン（ＰＥＥＫ）、およびそれらの組合せから成る群から選択される材料を含む、実施形態１〜２のいずれか１つに記載のライナー。
【００７７】
実施形態４
前記ライナーバッグが、前記気体透過性ポリマー材料の気体透過性より高い気体透過性を有するベントを更に含む、実施形態１〜３のいずれか１つに記載のライナー。
【００７８】
実施形態５
前記ベントが、約０．２μｍ〜約５μｍの平均細孔径を有する膜を含む、実施形態４記載のライナー。
【００７９】
実施形態６
前記膜が、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）、パーフルオロアルコキシアルカン（ＰＦＡ）、高密度ポリエチレン（ＨＤＰＥ）生地、フッ化ポリビニリデン（ＰＶＤＦ）とアクリルとのコポリマー、ナイロン、およびそれらの組合せから成る群から選択される材料を含む、実施形態５記載のライナー。
【００８０】
実施形態７
前記ライナーバッグが基部および側面を有し、更に、前記側面が低密度ポリエチレン（ＬＤＰＥ）、ポリエチレン（ＰＥ）、エチルビニルアセテート（ＥＶＡ）、シリコーン、フッ素化エチレンプロピレン（ＦＥＰ）、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）、パーフルオロアルコキシアルカン（ＰＦＡ）、ポリプロピレン（ＰＰ）、塩化ポリビニル（ＰＶＣ）、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリスチレン（ＰＳ）、ポリカーボネート（ＰＣ）、ポリメチルペンテン（ＰＭＰ）、ポリエーテルエーテルケトン（ＰＥＥＫ）、およびそれらの組合せから成る群から選択される材料を含み、前記基部が、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）および白金硬化シリコーンから成る群から選択される材料を含む、実施形態４〜６のいずれか１つに記載のライナー。
【００８１】
実施形態８
前記ライナーバッグが、前記フラスコ内への前記バッグの挿入を容易にするよう構成された少なくとも１つの折り畳み可能なシームを更に含む、実施形態１〜７のいずれか１つに記載のライナー。
【００８２】
実施形態９
フラスコアセンブリにおいて、
三角フラスコと、
単一の開口部を有するライナーバッグであって、前記フラスコ内に嵌るサイズを有すると共に約０．０２５４ｍｍ〜約０．５０８ｍｍの厚さを有するライナーバッグと
を含み、
前記ライナーバッグが、細胞培養のために、および前記フラスコ内への挿入が容易になるよう構成されており、
更に、前記ライナーバッグが気体透過性ポリマー材料を含む
ことを特徴とするフラスコアセンブリ。
【００８３】
実施形態１０
前記ライナーバッグが、着脱可能なフラスコ挿入要素を受け入れるよう構成されたポケットを更に含む、実施形態９記載のフラスコアセンブリ。
【００８４】
実施形態１１
前記ライナーバッグが、低密度ポリエチレン（ＬＤＰＥ）、ポリエチレン（ＰＥ）、エチルビニルアセテート（ＥＶＡ）、シリコーン、フッ素化エチレンプロピレン（ＦＥＰ）、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）、パーフルオロアルコキシアルカン（ＰＦＡ）、ポリプロピレン（ＰＰ）、塩化ポリビニル（ＰＶＣ）、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリスチレン（ＰＳ）、ポリカーボネート（ＰＣ）、ポリメチルペンテン（ＰＭＰ）、ポリエーテルエーテルケトン（ＰＥＥＫ）、およびそれらの組合せから成る群から選択される材料を含む、実施形態９〜１０のいずれか１つに記載のフラスコアセンブリ。
【００８５】
実施形態１２
前記ライナーバッグが約０．０２５４ｍｍ〜約０．２５４ｍｍの厚さを有する、実施形態９〜１１のいずれか１つに記載のフラスコアセンブリ。
【００８６】
実施形態１３
前記ライナーバッグが、前記気体透過性ポリマー材料の気体透過性より高い気体透過性を有するベントを更に含む、実施形態９〜１２のいずれか１つに記載のフラスコアセンブリ。
【００８７】
実施形態１４
前記ベントが、約０．２μｍ〜約５μｍの平均細孔径を有する膜を含む、実施形態１３記載のフラスコアセンブリ。
【００８８】
実施形態１５
前記膜が、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）、パーフルオロアルコキシアルカン（ＰＦＡ）、高密度ポリエチレン（ＨＤＰＥ）生地、フッ化ポリビニリデン（ＰＶＤＦ）とアクリルとのコポリマー、ナイロン、およびそれらの組合せから成る群から選択される材料を含む、実施形態１４記載のフラスコアセンブリ。
【００８９】
実施形態１６
前記ライナーバッグが基部および側面を有し、更に、前記側面が、低密度ポリエチレン（ＬＤＰＥ）、ポリエチレン（ＰＥ）、エチルビニルアセテート（ＥＶＡ）、シリコーン、フッ素化エチレンプロピレン（ＦＥＰ）、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）、パーフルオロアルコキシアルカン（ＰＦＡ）、ポリプロピレン（ＰＰ）、塩化ポリビニル（ＰＶＣ）、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリスチレン（ＰＳ）、ポリカーボネート（ＰＣ）、ポリメチルペンテン（ＰＭＰ）、ポリエーテルエーテルケトン（ＰＥＥＫ）、およびそれらの組合せから成る群から選択される材料を含み、前記基部が、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）および白金硬化シリコーンから成る群から選択される材料を含む、実施形態１３〜１５のいずれか１つに記載のフラスコアセンブリ。
【００９０】
実施形態１７
前記フラスコが、前記フラスコ内に挿入された前記ライナーバッグの前記ベントに対応するサイズおよび位置を有する切り抜き部を含む、実施形態１３〜１６のいずれか１つに記載のフラスコアセンブリ。
【００９１】
実施形態１８
前記ライナーバッグが、前記フラスコ内への前記バッグの挿入を容易にするよう構成された少なくとも１つの折り畳み可能なシームを更に含む、実施形態９〜１７のいずれか１つに記載のフラスコアセンブリ。
【００９２】
実施形態１９
フラスコアセンブリにおいて、
複数のフラスコ部分を有する三角フラスコと、
単一の開口部を有するライナーバッグであって、前記フラスコ内に嵌るサイズを有するライナーバッグと
を含み、
各前記フラスコ部分が、他の前記フラスコ部分のうちの少なくとも１つと結合するよう構成されており、
更に、前記ライナーバッグが細胞培養のために構成され、気体透過性ポリマー材料を含む
ことを特徴とするフラスコアセンブリ。
【００９３】
実施形態２０
前記ライナーバッグが、低密度ポリエチレン（ＬＤＰＥ）、ポリエチレン（ＰＥ）、エチルビニルアセテート（ＥＶＡ）、シリコーン、フッ素化エチレンプロピレン（ＦＥＰ）、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）、パーフルオロアルコキシアルカン（ＰＦＡ）、ポリプロピレン（ＰＰ）、塩化ポリビニル（ＰＶＣ）、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリスチレン（ＰＳ）、ポリカーボネート（ＰＣ）、ポリメチルペンテン（ＰＭＰ）、ポリエーテルエーテルケトン（ＰＥＥＫ）、およびそれらの組合せから成る群から選択される材料を含む、実施形態１９記載のフラスコアセンブリ。
【００９４】
実施形態２１
前記ライナーバッグが約０．２５４ｍｍ〜約０．５０８ｍｍの厚さを有する、実施形態１９〜２０のいずれか１つに記載のフラスコアセンブリ。
【００９５】
実施形態２２
前記ライナーバッグが、前記気体透過性ポリマー材料の気体透過性より高い気体透過性を有するベントを更に含む、実施形態１９〜２１のいずれか１つに記載のフラスコアセンブリ。
【００９６】
実施形態２３
前記ベントが、約０．２μｍ〜約５μｍの平均細孔径を有する膜を含む、実施形態２２記載のフラスコアセンブリ。
【００９７】
実施形態２４
前記膜が、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）、パーフルオロアルコキシアルカン（ＰＦＡ）、高密度ポリエチレン（ＨＤＰＥ）生地、フッ化ポリビニリデン（ＰＶＤＦ）とアクリルとのコポリマー、ナイロン、およびそれらの組合せから成る群から選択される材料を含む、実施形態２３記載のフラスコアセンブリ。
【００９８】
実施形態２５
前記ライナーバッグが基部および側面を有し、更に、前記側面が、低密度ポリエチレン（ＬＤＰＥ）、ポリエチレン（ＰＥ）、エチルビニルアセテート、シリコーン、フッ素化エチレンプロピレン（ＦＥＰ）、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）、パーフルオロアルコキシアルカン（ＰＦＡ）、ポリプロピレン（ＰＰ）、塩化ポリビニル（ＰＶＣ）、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリスチレン（ＰＳ）、ポリカーボネート（ＰＣ）、ポリメチルペンテン（ＰＭＰ）、ポリエーテルエーテルケトン（ＰＥＥＫ）、およびそれらの組合せから成る群から選択される材料を含み、前記基部が、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）および白金硬化シリコーンから成る群から選択される材料を含む、実施形態２２〜２４のいずれか１つに記載のフラスコアセンブリ。
【００９９】
実施形態２６
前記フラスコが、該フラスコ内に挿入された前記ライナーバッグの前記ベントに対応するサイズおよび位置を有する切り抜き部を含む、実施形態２２〜２５のいずれか１つに記載のフラスコアセンブリ。
【０１００】
実施形態２７
各前記フラスコ部分が、他の前記フラスコ部分のうちの少なくとも１つの前記フラスコ部分の位置決め特徴部と機械的に結合するのを補助するよう構成された位置決め特徴部を更に有する、実施形態１９〜２６のいずれか１つに記載のフラスコアセンブリ。
【符号の説明】
【０１０１】
１０  開口部
２０  ライナーバッグ
２２  首
２４  基部
２６  側面
２８  シーム
３０  ポケット
４０  ワイヤ
５０  ベント
１００  ライナー
１２０  フラスコ
１２０ａ、１２０ｂ  フラスコ部分
１２２  首
１２４、１２４ａ、１２４ｂ  基部
１２６  側面
１５０ａ、１５０ｂ  切り抜き部
１６０  ベントキャップ
１７０ａ、１７０ｂ  位置決め特徴部
２００、２００ａ  フラスコアセンブリ
【図１】
2019516376.tif 000003
【図１Ａ】
2019516376.tif 000004
【図１Ｂ】
2019516376.tif 000005
【図２】
2019516376.tif 000006
【図２Ａ】
2019516376.tif 000007
【図２Ｂ】
2019516376.tif 000008
【図２Ｃ】
2019516376.tif 000009
【図２Ｄ】
2019516376.tif 000010
【図３】
2019516376.tif 000011
【図４】
2019516376.tif 000012
【図５】
2019516376.tif 000013
【図５Ａ】
2019516376.tif 000014
【図６】
2019516376.tif 000015
【図６Ａ】
2019516376.tif 000016
【図７】
2019516376.tif 000017
【国際調査報告】
2019516376.tif 000018
2019516376.tif 000019