(57)【要約】本発明は、３−（５−フルオロインドリル）−４−アリールマレイミド化合物およびそれらを含有する医薬組成物に関する。本発明の化合物は抗腫瘍活性を有する。したがって、それらは、腫瘍、特に固形腫瘍の治療または予防に使用することができる。
2019500393.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）の３−（５−フルオロインドリル）−４−フェニルマレイミド化合物、および、式（Ｉ）の化合物の生理学的に許容し得る塩、溶媒和物、および、前記塩の溶媒和物：
【化３】
2019500393.tif 000020
式中、
Ｒ１はメトキシまたはヒドロキシルであり、
Ｒ２は２−アミノ−４−メチルブタノイルオキシエチル、２−アミノ−４−メチルブタノイルオキシプロピル、ヒドロキシエチル、ヒドロキシプロピル、または、Ｈであり、
Ｒ２がＨである場合にはＲ１はヒドロキシルである。
【請求項２】
Ｒ１がメトキシであり、Ｒ２が２−アミノ−４−メチルブタノイルオキシエチル、ヒドロキシエチルである、式（Ｉ）を有する請求項１に記載の化合物、および、式（Ｉ）の化合物の生理学的に許容し得る塩、溶媒和物、および、前記塩の溶媒和物。
【請求項３】
Ｒ１がヒドロキシであり、Ｒ２がヒドロキシエチルまたはＨである、式（Ｉ）を有する請求項１に記載の化合物、および、式（Ｉ）の化合物の生理学的に許容し得る塩、溶媒和物、および、前記塩の溶媒和物。
【請求項４】
Ｒ１がメトキシまたはヒドロキシルであり、Ｒ２がヒドロキシエチルである、式（Ｉ）を有する請求項１に記載の化合物、および、式（Ｉ）の化合物の生理学的に許容し得る塩、溶媒和物、および、前記塩の溶媒和物。
【請求項５】
【化４】
2019500393.tif 000021
式（Ｉａ）を有する請求項１に記載の化合物、および、式（Ｉａ）の化合物の生理学的に許容し得る塩、溶媒和物、および、前記塩の溶媒和物。
【請求項６】
【化５】
2019500393.tif 000022
式（Ｉｂ）を有する請求項１に記載の化合物、および、式（Ｉｂ）の化合物の生理学的に許容し得る塩、溶媒和物、および、前記塩の溶媒和物。
【請求項７】
【化６】
2019500393.tif 000023
式（Ｉｃ）を有する請求項１に記載の化合物、および、式（Ｉｃ）の化合物の生理学的に許容し得る塩、溶媒和物、および、前記塩の溶媒和物。
【請求項８】
【化７】
2019500393.tif 000024
式（Ｉｄ）を有する請求項１に記載の化合物、および、式（Ｉｄ）の化合物の生理学的に許容し得る塩、溶媒和物、および、前記塩の溶媒和物。
【請求項９】
【化８】
2019500393.tif 000025
式（Ｉｅ）を有する請求項１に記載の化合物、および、式（Ｉｅ）の化合物の生理学的に許容し得る塩、溶媒和物、および、前記塩の溶媒和物。
【請求項１０】
【化９】
2019500393.tif 000026
式（Ｉｆ）を有する請求項１に記載の化合物、および、式（Ｉｆ）の化合物の生理学的に許容し得る塩、溶媒和物、および、前記塩の溶媒和物。
【請求項１１】
【化１０】
2019500393.tif 000027
式（Ｉｇ）を有する請求項１に記載の化合物、および、式（Ｉｇ）の化合物の生理学的に許容し得る塩、溶媒和物、および、前記塩の溶媒和物。
【請求項１２】
請求項１から請求項１１までのいずれか１項に記載の１つ以上の化合物および薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物。
【請求項１３】
１つ以上の追加の化学療法剤をさらに含む、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１４】
前記追加の化学療法剤が、抗腫瘍剤、多剤耐性逆転剤、および、生物学的再補体改変剤、およびそれらの組み合わせから選択される、請求項１３に記載の組成物。
【請求項１５】
前記追加の化学療法剤が少なくとも１つのトポイソメラーゼＩ阻害剤である、請求項１３に記載の組成物。
【請求項１６】
前記トポイソメラーゼＩ阻害剤が、イリノテカンまたはトポテカンまたはそれらの混合物である、請求項１５に記載の組成物。
【請求項１７】
腫瘍の治療または予防における使用のための、請求項１から請求項１１までのいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１８】
１つ以上の追加の化学療法剤の使用をさらに含む、請求項１７に記載の使用のための化合物。
【請求項１９】
前記追加の化学療法剤が、抗腫瘍剤、多剤耐性逆転剤、および、生物学的応答調節剤、およびそれらの組み合わせから選択される、請求項１８に記載の使用のための化合物。
【請求項２０】
前記追加の化学療法剤が少なくとも１つのトポイソメラーゼＩ阻害剤である、請求項１８に記載の使用のための化合物。
【請求項２１】
前記トポイソメラーゼＩ阻害剤が、イリノテカンまたはトポテカンまたはそれらの混合物である、請求項２０に記載の使用のための化合物。
【請求項２２】
前記追加の化学療法剤および請求項１から請求項８までのいずれか１項に記載の化合物が、連続的に、断続的に、または、同時に投与される、請求項１８から請求項２１、までのいずれか１項に記載の使用のための化合物。
【請求項２３】
抗腫瘍有効量の請求項１から請求項１１までのいずれか１項に記載の化合物の少なくとも１つを、それを必要とする対象に投与することを含む、腫瘍の治療または予防方法。
【請求項２４】
追加の化学療法剤の投与をさらに含む、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
前記追加の化学療法剤が、抗腫瘍剤、多剤耐性逆転剤、および、生物学的応答調節剤、およびそれらの組み合わせから選択される、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記追加の化学療法剤が、少なくとも１つのトポイソメラーゼＩ阻害剤である、請求項２４に記載の方法。
【請求項２７】
前記トポイソメラーゼＩ阻害剤が、イリノテカンまたはトポテカンまたはそれらの混合物である、請求項２６に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、３−（５−フルオロインドリル）−４−アリールマレイミド化合物、それを含む薬剤組成物、および、腫瘍治療におけるその使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
タンパク質キナーゼは改良された癌療法の開発のための標的分子の興味あるクラスである。これらのたんぱく質は細胞経路の大部分を調節することが知られ、これには細胞増殖の制御、細胞運動、アポプトシス抵抗および生存に関連した経路が含まれ、すべて癌生育および進行に関連したプロセスである。事実、チロシンキナーゼは主として増殖因子レセプターとして作用する。血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）、上皮増殖因子（ＥＧＦ）および血小板成長因子（ＰＤＧＦ）の受容体は、腫瘍治療薬の開発における特に興味深い標的である（Ｎａｔ．  Ｒｅｖ．  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ．  １  （２００２）  ３０９−３１５）。新しい血管の形成（血管新生または新生血管形成）は、腫瘍の栄養素および酸素供給に不可欠であり、さらには転移に寄与する（Ｎａｔｕｒｅ  （１９９３），  ３６２，  ８４１−８４４）。したがって、関連するキナーゼ（ＶＥＧＦおよび非ＶＥＧＦ経路）または血管形成プロセスの調節を制御する活性化合物を見出すための戦略に焦点を合わせた研究が行われている。これにより、腫瘍および血管標的特性を有する３−（インドリル）−または３−（アザインドリル）−４−アリールマレイミド誘導体である低分子化合物のクラスであるモグンチノンが開発された。モグンチノンおよびそれらの使用は、ＷＯ２００６／０６１２１２，ＷＯ２００９／０７１６２０，ＷＯ２０１１／０７３０９１，ＷＯ２０１１／０７３０９２およびＷＯ２０１２／０８４６８３に開示されている。Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００６，４９：１２７１−１２８１；Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００６，４９：７５４９−７５５３；およびＪ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００８，５１：３８１４−３８２４におけるＰｅｉｆｅｒらの出版物は、血管新生阻害剤としての３，４−ジアリールマレイミドの設計、合成及び評価に関する。国際公開ＷＯ０２／３８５６１号パンフレットは、次の式のキナーゼ阻害剤を開示している。
【化１】
2019500393.tif 000003
ここで、Ｒは、例えばヒドロキシル置換フェニル基のようなアリール残基である。類似の構造の化合物は、ＥＰ３２８，０２６Ａ，ＷＯ０２／１０１５８，ＷＯ０３／０５７２０２，ＷＯ０３／０９５４５２，ＷＯ０３／１０３６６３，ＷＯ９５／０７９１０，ＷＯ００／３８６７５，ＷＯ９７／３４８９０，ＷＯ９１／１３０７１，ＥＰ３８４３４９Ａ，ＥＰ５４０，９５６，ＥＰ１，２２４，９３２Ａ，ＷＯ００／０２１９２７およびＢｉｏｏｒｇａｎｉｃ＆Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｌｅｔｔｅｒｓ  １４（２００４），３２４５−３２５０に記載されている。
【０００３】
ＥＰ１，８４５，０９４ＡおよびＷＯ２００６／０６９３９は、次の式のキナーゼ阻害剤と、癌処置のための関連化合物の使用を記載する。
【化２】
2019500393.tif 000004
【０００４】
上記の戦略は、ベバシズマブとチロシンキナーゼ阻害剤と組み合わせて実現されている（Ｊ．  Ｃｌｉｎ．  Ｏｎｃｏｌ．２０１３，３１，１２１９−１２３０；Ｏｎｃｏ  Ｔａｒｇｅｔｓ  ａｎｄ  Ｔｈｅｒａｐｙ，２０１５，８，８３５−８４３）。異なる標的を有する２つの活性化合物の組み合わせにおいて、化合物は効力、代謝および排泄に関して相互作用し得る。さらに、吸収および半減期に差異が生じることがある。したがって、異なる標的を有する２つの活性化合物による治療は制御することが困難である。
【０００５】
したがって、本発明の根底にある問題は、単一の治療において有用であり、所望の有効性および適合性を提供する化合物を提供することであった。
【発明の概要】
【０００６】
本発明は、式Ｉの化合物、および、式Ｉの化合物の生理学的に許容し得る塩、溶媒和物、および、塩の溶媒和物に関する。
【化３】
2019500393.tif 000005
ここで、
Ｒ１はメトキシまたはヒドロキシルであり、
Ｒ２は２−アミノ−４−メチルブタノイルオキシエチル（（ＣＨ３）２ＣＨＣＨ２ＣＨ（ＮＨ２）Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ２ＣＨ２−）、２−アミノ−４−メチルブタノイルオキシプロピル、ヒドロキシエチル、ヒドロキシプロピルまたはＨであり、
ただし、Ｒ２がＨである場合、Ｒ１はヒドロキシルである。
【図面の簡単な説明】
【０００７】
【図１】図１は、経時的なラット肝ミクロソームにおける化合物Ｉａの代謝を示す。
【図２】図２は、経時的なラット肝ミクロソームにおける化合物ＩＩａの代謝を示す。
【図３】図３は、ＨＴ−２９ヒト結腸腺癌細胞に対する化合物ＩｄおよびＩＩｄの抗増殖活性を示す。
【発明を実施するための形態】
【０００８】
本発明の１つの実施形態は、Ｒ１がメトキシであり、Ｒ２が２−アミノ−４−メチルブタノイルオキシエチル、２−アミノ−４−メチルブタノイルオキシプロピル、ヒドロキシエチルまたはヒドロキシプロピルである式（Ｉ）を有する化合物、および、式Ｉの化合物の生理学的に許容される塩、溶媒和物、および、塩の溶媒和物である。
【０００９】
さらなる実施形態は、Ｒ１がヒドロキシであり、Ｒ２がヒドロキシエチル、ヒドロキシプロピルまたはＨである式（Ｉ）を有する化合物、および、式Ｉの化合物の生理学的に許容される塩、溶媒和物、および、塩の溶媒和物である。
【００１０】
さらなる実施形態は、Ｒ１がメトキシまたはヒドロキシルであり、Ｒ２がヒドロキシエチルまたはヒドロキシプロピルである式（Ｉ）を有する化合物、および、式Ｉの化合物の生理学的に許容される塩、溶媒和物、および、塩の溶媒和物である。
【００１１】
さらなる実施形態は、（Ｉａ），（Ｉｂ），（Ｉｃ），（Ｉｄ），（Ｉｅ），（Ｉｆ）および（Ｉｇ）の化合物：
【化４】
2019500393.tif 000006
２−（３−（２，５−ジオキソ−４−（３，４，５−トリメトキシフェニル）−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−３−イル）−５−フルオロ−１Ｈ−インドール−１−イル）−エチル−２−アミノ−４−メチルペンタノエート；
【化５】
2019500393.tif 000007
３−（５−フルオロ−１−（２−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−インドール−３−イル）−４−（３，４，５−トリメトキシフェニル）−マレイミド；
【化６】
2019500393.tif 000008
３−（５−フルオロ−１−（２−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−インドール−３−イル）−４−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−マレイミド；
【化７】
2019500393.tif 000009
３−（５−フルオロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−４−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−マレイミド；
【化８】
2019500393.tif 000010
３−（３−（２，５−ジオキソ−４−（３，４，５−トリメトキシフェニル）−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−３−イル）−５−フルオロ−１Ｈ−インドール−１−イル）−プロピル−２−アミノ−４−メチルペンタノエート；
【化９】
2019500393.tif 000011
３−（５−フルオロ−１−（３−ヒドロキシプロピル）−１Ｈ−インドール−３−イル）−４−（３，４，５−トリメトキシフェニル）−マレイミド；
【化１０】
2019500393.tif 000012
３−（５−フルオロ−１−（３−ヒドロキシプロピル）−１Ｈ−インドール−３−イル）−４−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−マレイミド；
および、式（Ｉａ），（Ｉｂ），（Ｉｃ），（Ｉｄ），（Ｉｅ），（Ｉｆ）および（Ｉｇ）の化合物の生理学的に許容される塩、溶媒和物および塩の溶媒和物である。
【００１２】
式Ｉの化合物の生理学的に許容される塩としては、生理学的に許容される酸との酸付加塩が挙げられる。 適切な生理学的に許容される有機および無機酸の例は、塩酸、臭化水素酸、リン酸、硫酸、メタンスルホン酸などのＣ１−Ｃ４−アルキルスルホン酸、脂環式スルホン酸、例えばＳ−（＋）−カンファースルホン酸、芳香族スルホン酸、例えばベンゼンスルホン酸およびトルエンスルホン酸、カルボン酸、例えば酢酸、およびヒドロキシカルボン酸、例えばシュウ酸、マロン酸、マレイン酸、マンデル酸、アスコルビン酸、フマル酸、グルコン酸、乳酸、酒石酸、クエン酸、グリコリン酸、アジピン酸および安息香酸が挙げられる。他の利用可能な酸は、例えば、「Ｆｏｒｔｓｃｈｒｉｔｔｅ  ｄｅｒ  Ａｒｚｎｅｉｍｉｔｔｅｌｆｏｒｓｃｈｕｎｇ」（Ａｄｖａｎｃｅｓ  ｉｎ  ｄｒｕｇ  ｒｅｓｅａｒｃｈ）、第１０巻、２２４頁以降、ＢｉｒｋｈａｅｕｓｅｒＶｅｒｌａｇ、Ｂａｓｅｌ  ａｎｄ  Ｓｔｕｔｔｇａｒｔ、１９６６に記載されている。
【００１３】
式Ｉの化合物の生理学的に許容される塩には、生理学的に許容されるアニオンの塩、例えば、脱プロトン化された生理学的に許容される酸を式Ｉの化合物と含む。ここで１個以上の窒素原子は、例えば、アルキル残基（例えば、メチルまたはエチル）で置換されて、四級化されていてもよい。
【００１４】
生理学的に許容される溶媒和物は、特に水和物である。
【００１５】
本発明の化合物は、実施例で与えられた方法に従って調製することができる。
【００１６】
本発明の化合物は抗腫瘍活性を有する。 特定の利点は、式Ｉａ（またはＩｂ）の化合物が化合物Ｉｂを介して代謝され、さらに代謝されて化合物Ｉｃに、次に化合物Ｉｄに代謝されるため、「順次」療法に使用できることである。さらなる代謝経路は、化合物Ｉａから化合物Ｉｂを介して、Ｒ１がメトキシであり、Ｒ２がＨである式の化合物へ、さらに化合物Ｉｄへである。本発明の化合物は、異なるキナーゼに対処し、１つの単一化合物の「併用」療法を可能にする。
【００１７】
したがって、本発明の化合物は、腫瘍、特に固形腫瘍、例えば星細胞腫、膀胱癌、骨癌、脳腫瘍、乳癌、気管支腫瘍、子宮頸癌、大腸癌、子宮内膜癌、食道癌、胆嚢癌、消化管間質腫瘍、胚細胞腫瘍、神経膠腫、頭頸部癌、肝臓癌、リンパ腫、肉腫、肺癌、メラノーマ、卵巣癌、膵臓癌、甲状腺癌、神経芽細胞腫、前立腺癌、腎癌、皮膚癌、扁平上皮癌、胃癌、精巣腫瘍の治療または予防に使用され得る。本化合物は、子宮頸癌、大腸癌、消化管間質腫瘍、肝臓癌、肺癌、卵巣癌、前立腺癌、胃癌、および、膵臓癌の予防または治療に特に有用である。
【００１８】
さらなる実施形態によれば、本発明の化合物は、白血病の治療または予防に使用することができる。本発明による白血病は、特に、急性リンパ球性白血病（急性リンパ芽球性白血病またはＡＬＬとしても知られている）、急性骨髄性白血病（急性骨髄性白血病またはＡＭＬとしても知られる）、 慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、混合系白血病および慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）が含まれる。これらの白血病およびこれらの白血病のさらなるサブタイプは、当業者に周知の形態学的、組織化学的および免疫学的技術によって定義される。
【００１９】
さらなる実施形態では、本発明は、ＡＭＬまたはＡＬＬの治療に関する。
【００２０】
本発明のさらなる実施形態において、白血病は、ＦＬＴ３の発現が陽性である白血病細胞により特徴付けられる。本発明の特定の実施形態では、白血病は、同じ細胞型の非悪性細胞と比較して、ＦＬＴ３の発現の増強を示す白血病細胞によって特徴付けられる。
【００２１】
本発明の化合物は、１つ以上の他の化学療法剤と一緒に使用することができる。したがって、本発明のさらなる実施形態は、本発明の化合物と、下に例示する抗腫瘍薬、多剤耐性逆転薬を含む１つまたは複数の化学療法剤と、生物学的応答調節剤、およびそれらの組み合わせである。本発明の組合せは、増強された腫瘍活性を示す。
【００２２】
適切な抗腫瘍薬は、ＤＮＡの完全性および合成に影響を及ぼす化合物を含む群から選択することができ、例えば、トポイソメラーゼＩ阻害剤；アルキル化剤：インターカレート剤またはＤＮＡ結合性抗生物質；タキサン類のような抗有糸分裂化合物：ビンカアルカロイドまたはコルヒチン誘導体；タンパク質キナーゼ阻害剤、細胞膜受容体および可溶性デコイ受容体に結合する抗体などの標的癌治療のための化合物；例えば ファルネシル基転移酵素阻害剤、プリンまたはピリミジン類似体のような細胞代謝に影響を及ぼす化合物が挙げられる。
【００２３】
抗悪性腫瘍剤の例は、アフリベルセプト、アスパラギナーゼ、ブレオマイシン、ブスルファン、カルムスチン、クロラムブシル、クラドリビン、シクロホスファミド、シタラビン、ダカルバジン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、エトポシド、フルダラビン、ゲムシタビン、ヒドロキシ尿素、イダルビシン、イホスファミド、イリノテカン、ロムスチン、メクロレタミン、メルファラン、メルカプトプリン、メトトレキセート、マイトマイシン、ミトキサントロン、ペントスタチン、プロカルバジン、６−チグアニン、トポテカン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、レチノイン酸、オキサリプラチン、シスプラチン、カルボプラチン、５−ＦＵ（５−フルオロウラシル）、テニポシド、アマサクリン、ドセタキセル、パクリタキセル、ビノレルビン、ボルテゾミブ、クロファラビン、カペシタビン、アクチノマイシンＤ、エピルビシン、ビンデシン、メトトレキセート、チオグアニン（６−チオグアニン）、ティピファルニブである。
【００２４】
タンパク質キナーゼ阻害剤である抗腫瘍剤の例は、イマチニブ、エルロチニブ、ソラフェニブ、スニチニブ、ダサチニブ、ニロチニブ、ラパチニブ、ゲフィチニブ、テムシロリムス、エベロリムス、ラパマイシン、ボスチニブ、アキシチニブ、ネラチニブ、バタラニブ、パゾパニブ、ミドスタウリンおよびエンザスタウリンを含む。
【００２５】
抗体である抗腫瘍剤の例は、トラスツズマブ、セツキシマブ、パニツムマブ、リツキシマブ、ベバシズマブ、マパツムマブ、コナツムマブ、レキサツムマブなどを含む。
【００２６】
多剤耐性逆作用剤の例は、Ｐ−糖タンパク質によって媒介される抗腫瘍薬の流出の強力な阻害剤であるＰＳＣ  ８３３である。
【００２７】
適切な生物学的応答調節剤は、例えば、リツキサン、ＣＭＡ−６７６、インターフェロン−アルファ組換体、インターロイキン−２、インターロイキン−３、エリスロポエチン、エポエチン、Ｇ−ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、フィルグラスチム、サルグラモスチムおよびトロンボポエチンのような、インターフェロン、インターロイキンおよびコロニー刺激因子のような、モノクローナル抗体およびサイトカインからなる群から選択され得る。
【００２８】
特定の実施形態によれば、さらなる化学療法剤は、トポイソメラーゼＩ阻害剤、特にＰｏｍｍｉｅｒ，  Ｙ．  （２００６），  Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  Ｃａｎｃｅｒ  ６：  ７８９−８０２に記載されているようなカンプトテシン又はその誘導体である。トポイソメラーゼＩ阻害剤の例は、イリノテカン（特にイリノテカン塩酸塩）、トポテカン（特にトポテカン塩酸塩）、ルビテカン、エキセテカン（特にエキセテカンメシレート）、ルートテカン、ジマテカン、プロテカン、カレニテシン、ベロテカン（特にベロテカン塩酸塩）、シラテカンまたはジフロモテカンおよびそれらの塩のような化合物とその生理学的に許容可能な塩を含む。イリノテカン（特にイリノテカン塩酸塩）またはトポテカン（特にトポテカン塩酸塩）が好ましく、イリノテカン（特にイリノテカン塩酸塩）が特に好ましい。
【００２９】
化学療法剤に対する本発明の化合物の重量比は、一般に５：１〜１：５００、特に３：１〜１：２００の範囲である。
【００３０】
本発明のさらなる実施形態は、少なくとも１つの式Ｉの化合物を含む医薬組成物である。さらなる実施形態では、組成物は、上記に定義した少なくとも１つの追加の化学療法剤を含む。一般的に、製薬上許容される組成物は、本明細書で定義される少なくとも１つの式Ｉの化合物の腫瘍治療に治療上有効な量を含む。
【００３１】
本発明のさらなる実施形態は、本発明の化合物を、そのような治療を必要とする対象、好ましくはヒト対象に投与することによって腫瘍を治療する方法で使用するための式Ｉの化合物である。
【００３２】
さらなる実施形態によれば、該方法は、さらなる治療剤（式Ｉの化合物以外）の使用を含む。追加の治療剤は、上記で定義したものであってもよく、本発明の化合物の投与前、投与と同時に、または投与後に投与することができる。
【００３３】
使用のために、本発明の化合物または組み合わせは、標準的な医薬剤形に組み込むことができる。例えば、化合物または組合せは、全身または局所、経口または非経口適用で投与される場合に有用であり、この目的のために、通常の薬学的賦形剤、希釈剤およびアジュバント、例えば水、ゼラチン、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、タルク、植物油、ガム、ポリアルキレングリコール等の有機および無機不活性担体物質と組み合わせられる。これらの医薬製剤は、固体形態、例えば錠剤、カプセル剤として、特に哺乳類に適した口当たりの良い食品と組み合わせてまたは混合して使用することができ、または液体形態、例えば溶液およびエリキシル剤として投与することができる。添加することができる医薬用賦形剤およびアジュバントは、防腐剤、抗酸化剤、抗菌剤および他の安定剤；湿潤剤、乳化剤、および懸濁化剤、および固化防止剤；香料および着色添加剤；圧縮性を改善するため、または活性成分の遅延放出、持続放出、または制御放出を生成するための化合物；医薬組成物の浸透圧を変化させるか、または緩衝液として作用するための様々な塩を含む。
【００３４】
定義された式Ｉの化合物の治療有効量は、哺乳類に全身投与することができ、全身投与は、次のものを含む。（１）水溶液、エマルションまたは懸濁液のような、適切な液剤の前記化合物または組み合わせを含有する医薬組成物の動脈内、皮内または経皮（皮下を含む）、および、最も一般的には筋肉内または静脈内送達のため、または、それらの送達のためのデポとして機能するための適切な体組織または体腔内への注射または注入、（２）少なくとも１種の式Ｉの化合物の粒子が、その遅延放出、持続放出、および／または制御放出放出のための固体インプラント組成物として機能するために分散された、例えば、生体適合性および生体侵食性材料のマトリックスを含む、適切な固体形態の前記化合物または組合せを含有する医薬組成物の適切な体組織または体腔内への点滴、または、（３）経皮送達のための適切な固体または液体形態の前記化合物または組合せを含有する医薬組成物の摂取または投与であって、例えば、例えば経皮パッチまたは皮下（皮下）インプラントであって、その経口送達のためのものである。
【００３５】
本明細書に記載される剤形は、前記剤形からの活性成分の制御放出、持続放出、および／または、遅延放出を提供するように製剤化することができる。
【００３６】
全身投与のための好ましい経口投与形態は、固形物、例えば口当たりの良い口腔用組成物、例えば速溶性の口当たりの良いウェーハ、錠剤、カプセル、カプレット等、および、液体、例えば溶液、懸濁液、乳液などである。哺乳動物への経口投与に適した特殊なタイプの医薬組成物を使用することができ、限定ではなく、治療される哺乳動物の舌の背部に送達される経口ペースト、哺乳動物の食物に取り込まれることにより送達される粒状形態、有効成分が口当たりの良い噛み物とともに消費されるチュアブル形態、または、処置されている哺乳動物による咀嚼中に、消費されていない咀嚼体から浸出することによって活性成分を送達し得るチュアブル形態を含み得る。錠剤およびカプセル剤は好ましい剤形である。
【００３７】
上記の治療有効量の式Ｉの化合物を哺乳動物に局所投与することもでき、局所投与は以下を含む。（１）異常な血管新生および／または脈管機能障害に冒された局所部位への前記式Ｉの化合物またはその組み合わせを含む医薬組成物の送達のための、または、前記組成物が前記化合物の貯蔵と、その後のその遅延放出、制御放出、および／または、持続放出を提供する送達のためのデポとして機能するための、前記局所部位への前記化合物または組み合わせの遅延放出、制御放出、および／または、持続放出を提供する成分を含む適切な液体形態の注射または注入、または、（２）前記化合物または組み合わせを、その送達のために固体インプラントとして機能するために適切な固体形態において含む医薬組成物の点滴であり、前記組成物は任意で前記局所部位への前記化合物または組み合わせの遅延放出、制御放出、および／または、持続放出を提供する。
【００３８】
式Ｉの化合物の治療上有効な量は、治療すべき哺乳動物に、１日当たり、哺乳動物の体表面の平方メートル当たりのミリグラム「ｍｇ／ｍ２／日」で表される量で投与される。用量、すなわち式Ｉの化合物の治療有効量は、通常、約０．２ｍｇ／ｍ２／日〜約２０００ｍｇ／ｍ２／日、好ましくは約０．５ｍｇ／ｍ２／日〜約１５００ｍｇ／ｍ２／日、より好ましくは約１．０ｍｇ／ｍ２／日〜約１０００ｍｇ／ｍ２／日である。式Ｉの化合物と抗癌剤などの化学療法剤との組み合わせの場合、例えば、共製剤として、または別々に、または逐次的に、同時投与され得る。式Ｉの化合物の用量は、通常、化学療法剤の用量が約０．２ｍｇ／ｍ２／日〜約２０００ｍｇ／ｍ２／日、好ましくは約０．５ｍｇ／ｍ２／日〜約１５００ｍｇ／ｍ２／日、より好ましくは約１．０ｍｇ／ｍ２／日〜約１０００ｍｇ／ｍ２／日である。
【００３９】
当業者にとって、投与の好ましい経路および対応する剤形および量を決定するだけでなく、投与計画、すなわち投薬頻度も決定する必要がある。一般的に言えば、選択肢は１日１回（ｓ．ｉ．ｄ）投与と１日２回（ｂ．ｉ．ｄ）投与の間であり、前者はより迅速で深い治療を提供し、後者はより深くはないがより持続的な治療を提供する。
【００４０】
以下の実施例は本発明を限定することなく例証する。
【実施例】
【００４１】
赤外線スペクトルは、Ｔｈｅｒｍｏ  Ｎｉｃｏｌｅｔ  Ａｖａｔａｒ  ３３０  ＦＴ−ＩＲ分光計で記録された。１Ｈ（３００ＭＨｚ、デジタル分解能０．３７６８Ｈｚ）および１３Ｃ（７５ＭＨｚ、デジタル分解能１．１２９９Ｈｚ）ＮＭＲはＢｒｕｋｅｒ  ＡＣ  ３００で記録された。データは以下のように報告された：外部標準としてのＭｅ４Ｓｉからの化学シフト（ｐｐｍ）、多重度、および、カップリング定数（Ｈｚ）。ＥＩマススペクトルはＶａｒｉａｎ  ＭＡＴ  ４４ｓ（８０ｅＶ）上に記録され、ＦＤマススペクトルはＦｉｎ−ｇａｎ  ＭＡＴ  ７（５ｋＶ）上に記録された。分かりやすくするために、ＦＤ質量スペクトルについて最高の測定信号のみが示されている。元素分析は、Ｈａｅｒｅｕｓ  ＣＨＮ  ｒａｐｉｄ、Ｃａｒｌｏ  Ｅｒｂａ  Ｓｔｒｕｍｅｎｔａｚｉｏｎｅ  １１０６で行われた。特に断らない限り、燃焼分析は、計算されたデータと±０．４以内で一致した。融点（ｍｐ）／分解温度は、Ｄｒ．  Ｔｏｔｔｌｏｉに従ってＢｕｅｃｈｉ装置で決定され、補正されていない。Ｍｅｒｃｋシリカゲル６０（０．０６３−０．２００ｍｍ）を用いて粗前駆体についてカラムクロマトグラフィーを適切に実施した。試験化合物のカラムクロマトグラフィーは、Ｍｅｒｃｋシリカゲル（０．０１５−０．０４０ｍｍ）を用いたＭＰＬＣシステムＢ−６８０（Ｂｕｅｃｈｉ）を用いて行われた。反応の進行は、Ｍｅｒｃｋシリカゲル６０Ｆ−２５４プレートで行われた薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）によってモニターされた。必要に応じて、４Åモレキュラーシーブを用いて、窒素雰囲気中で反応を行った。すべての試薬および溶媒は商業的供給源から得られ、受け取ったまま使用された。
【００４２】
略語：
ｒｔ        室温
ＤＭＦ      ジメチルホルムアミド
ＤＭＡＰ    ジメチルアミノピリジン
ＤＣＭ      ジクロロメタン
ＴＨＦ      テトラヒドロフラン
ＤＭＳＯ    ジメチルスルホキシド
ＰＥ／ＥＥ  石油エーテル／酢酸エチル
Ｍｐ        融点
【００４３】
実施例１
２−（３−（２，５−ジオキソ−４−（３，４，５−トリメトキシフェニル）−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−３−イル）−５−フルオロ−１Ｈ−インドール−１−イル）−エチル−２−アミノ−４−メチルペンタンノエート
【化１１】
2019500393.tif 000013
【００４４】
（１）２−ブロモエトキシ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシラン
Ｇａｌｋａ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｌａｂ．  Ｃｏｍｐ．  Ｒａｄ．  ２００５，  ４８，  １１，  ７９７−８０９に記載の方法を変形して用いて標記化合物を調製した。２−ブロモエタノール（４０ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルクロライド（４０ｍｍｏｌ）およびイミダゾール（４４ｍｍｏｌ）の混合物を室温で３時間不活性雰囲気下で撹拌した。反応物を水でクエンチし、ジエチルエーテルで抽出した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧濃縮した。精製は、カラムクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥＥ）によって達成され、標記化合物（３６．４ｍｍｏｌ；９１％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ［ｐｐｍ］＝３．９１（ｔ；３Ｊ＝６．５Ｈｚ；２Ｈ；ＯＣＨ２）；３．４１（ｔ；３Ｊ＝６．５Ｈｚ；２Ｈ；ＣＨ２Ｂｒ）；０．９３（ｓ；９Ｈ；Ｃ（ＣＨ３）３）；０．１１（ｓ；６Ｈ；２ｘＣＨ３）。
【００４５】
（２）エチル−２−（５−フルオロ−１Ｈ−インドール）−２−オキソアセテート
ジエチルエーテル中の５−フルオロインドール（１６．２８ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃でピリジン（１７０ｍｌ）およびエチルクロロオキソアセテート（１９．８ｍｍｏｌ）を不活性ガス下でゆっくりと添加した。反応混合物を０℃で１時間、次いで室温で４時間撹拌した。沈殿物を濾過し、水およびエタノール（０℃）で洗浄して、標題化合物を無色結晶（１１ｍｍｏｌ；６６％）として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ［ｐｐｍ］＝９．２２（ｂｓ，１Ｈ；ＮＨ）；８．５３（ｄ；Ｊ＝３．３Ｈｚ；１Ｈ；インドール−Ｈ）；８．１１（ｄｄ；Ｊ＝２．５Ｈｚ；Ｊ＝９．０Ｈｚ；１Ｈ；インドール−Ｈ）；７．４１（ｄｄ；Ｊ＝４．３Ｈｚ；Ｊ＝９．０Ｈｚ；１Ｈ；インドール−Ｈ）；７．０６（ｄｔ；Ｊ＝２．５Ｈｚ；Ｊ＝９．０Ｈｚ；１Ｈ；インドール−Ｈ）；４．４１（ｑ；３Ｊ＝７．１Ｈｚ；２Ｈ；ＯＣＨ２ＣＨ３）；１．４３（ｔ；３Ｊ＝７．１Ｈｚ；３Ｈ；ＯＣＨ２ＣＨ３）。
【００４６】
（３）エチル２−（１−（３−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−エチル）−５−フルオロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−２−オキソアセテート
Ｆａｕｌ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  ｏｆ  Ｏｒｇ．  Ｃｈｅｍ，  １９９８，  ６３，  ６，  １９６１−１９７３およびＺｈａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｂｉｏｏｒｇ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  Ｌｅｔｔ．，  ２００４，  １４，  １２，  ３２４５−３２５０の方法を変形して用いた。エチル−２−（５−フルオロ−１Ｈ−インドール）−２−オキソアセテート（２）（４．３ｍｍｏｌ）、ＣｓＣＯ３（５．６ｍｍｏｌ）および２−ブロモエトキシ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシラン（１）（４．７ｍｍｏｌ）の無水ＤＭＦ中の撹拌懸濁液を窒素下で８時間７５〜８０℃に加熱した。反応物を室温に冷却し、酢酸エチル（４０ｍｌ）で希釈し、濾過した。混合物を水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮し、カラムクロマトグラフィーにより精製して、橙色油状物として標記化合物を得た（１２．５ｍｍｏｌ；７８％）。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ［ｐｐｍ］＝８．４４（ｓ，１Ｈ，インドール−Ｈ），８．１２（ｍ，１Ｈ，インドール−Ｈ），７．３０（ｍ，インドール−Ｈ），７．０６（インドール−Ｈ），４．４０（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ，ＣＨ２−ＣＨ３）、４．２７（ｔ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，２Ｈ，Ｎ−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ），３．９５（ｔ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，２Ｈ，Ｎ−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ），１．４４（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，３Ｈ，ＣＨ２−ＣＨ３），０．８０（ｓ，９Ｈ，Ｃ（ＣＨ３）３），−０．１６（ｓ，６Ｈ，Ｓｉ（ＣＨ３）２）。
【００４７】
（４）３，４，５−トリメトキシフェニルアセトアミド
無水ＤＣＭ中の３，４，５−トリメトキシフェニル酢酸（１０ｍｍｏｌ）および五塩化リン（１０ｍｍｏｌ）の混合物を不活性ガス下で撹拌した。２時間後、シリンジを介してアンモニア（２５％）１０ｍｌを加え、さらに１時間後、混合物を氷（１００ｍｌ）でクエンチし、酸性化し（１０％ＨＣｌ）、ＤＣＭで抽出した。有機画分を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濃縮し、次いで粗生成物をエタノール中で再結晶化させて、標題化合物を無色粉末として得た（８．５ｍｍｏｌ；８５％）。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ［ｐｐｍ］＝７．３９（ｂｓ；１Ｈ；ＮＨ）；６．８７（ｂｓ；１Ｈ；ＮＨ）；６．５５（ｓ；２Ｈ；Ａｒ−Ｈ）；３．７３（ｓ；６Ｈ；２ｘＯＣＨ３）；３．６１（ｓ；３Ｈ；ＯＣＨ３）；３．２８（ｓ；２Ｈ；ＣＨ２）。
【００４８】
（５）３−（１−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−エチル）−５−フルオロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−４−（３，４，５−トリメトキシフェニル）−マレイミド
Ｐｅｉｆｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  ＷＯ  ２００６／０６１２１２およびＪ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．，  ２００６，  ４９，  ４，  １２７１−１２８１の方法を変形して用いて３−フェニル−４−インドリル−マレインイミドを調製した。エチル２−（１−（３−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−エチル）−５−フルオロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−２−オキソアセテート（３）（３．２ｍｍｏｌ）と、ＴＨＦ（不活性ガス、活性化モレキュラーシーブ４Å）中の３，４，５−トリメトキシフェニルアセトアミド（４）（３．２ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＨＦ中のカリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（１４ｍｍｏｌ）をシリンジでゆっくり加えた。混合物を室温で２時間撹拌し、次いで酢酸エチルで希釈し、濾過した。水で洗浄した後、有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濃縮し、カラムクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥＥ）で精製して橙色の固体（１．３ｍｍｏｌ；４１％）として標記化合物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ［ｐｐｍ］＝８．０９（ｓ，１Ｈ，インドール−Ｈ），７．３４（ｓ，１Ｈ，イミド−Ｈ），７．２９（ｍ，１Ｈ，インドール−Ｈ），６．９０（ｍ，１Ｈ，インドール−Ｈ），６．７４（ｓ，２Ｈ，Ａｒ‐Ｈ），５．９９（ｍ，１Ｈ，インドール−Ｈ），４．２９（ｔ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，２Ｈ，Ｎ−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−），３．９７（ｔ，Ｊ＝５．１Ｈｚ，２Ｈ  Ｎ−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−），３．８８（ｓ，３Ｈ，ＯＣＨ３），３．５６（ｓ，６Ｈ，２ｘＯＣＨ３），０．８０（ｓ，９Ｈ，Ｃ（ＣＨ３）３），−０．１４（ｓ，６Ｈ，Ｓｉ（ＣＨ３）２）。
【００４９】
（６）３−（５−フルオロ−１−（２−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−インドール−３−イル）−４−（３，４，５−トリメトキシフェニル）−マレイミド
【化１２】
2019500393.tif 000014
ＴＨＦ中の３−（１−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）−エチル）−５−フルオロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−４−（３，４，５−トリメトキシフェニル）−マレイミド（５）（０．９１ｍｍｏｌ）にテトラブチルアンモニウムフルオライド（１．３ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で撹拌した。完了（ＴＬＣ）後、混合物を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濃縮し、カラムクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥＥ）によって精製して、標題化合物を橙色固体として得た（０．８４ｍｍｏｌ；９２％）。融点１７５℃；ＩＲ  波数［ｃｍ−１］＝３４６８，３２７６，２９９０，１６９５，１４９１，１３２７，１１２３，７５１。ＦＤ−ＭＳ  ｍ／ｚ（相対強度）＝４４０．１（１００％；Ｍ＋）。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ［ｐｐｍ］＝８．０５（ｓ，１Ｈ，インドール−Ｈ），７．４０（ｓ，１Ｈ，イミド−Ｈ），７．２８（ｍ，１Ｈ，インドール−Ｈ），６．９２（ｍ，１Ｈ，インドール−Ｈ），６．７５（ｓ，２Ｈ，Ａｒ−Ｈ），６．０８（ｍ，１Ｈ，インドール−Ｈ），４．３４（ｔ，Ｊ＝４．７Ｈｚ，２Ｈ，Ｎ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＯＨ），４．０４（ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，２Ｈ，Ｎ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＯＨ），３．８７（ｓ，３Ｈ，ＯＣＨ３），３．５６（ｓ，６Ｈ，２ｘＯＣＨ３）。１３Ｃ−ＮＭＲ（７５ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ［ｐｐｍ］＝１７２．５６（Ｃｑ），１７２．３３（Ｃｑ），１５５．６２（Ｃｑ），１５２．５９（２ｘＣｑ），１３８．７６（Ｃｑ），１３３．４５（ＣＨ），１３１．６２（Ｃｑ），１２８．７４（Ｃｑ），１２５．７６（Ｃｑ），１２５．２７（Ｃｑ），１０８．０８（２ｘＣＨ），１０７．０４（ＣＨ），１０６．７２（Ｃｑ），１０３．７４（２ｘＣＨ），６０．５０（ＣＨ３），６０．３７（ＣＨ２），５５．９７（２ｘＣＨ３），４９．３３（ＣＨ２）。Ｃ２３Ｈ２１ＦＮ２Ｏ６ｘＨ２Ｏの分析計算値：Ｃ，６２．７２；Ｈ，４．８１；Ｎ，６．３６。実測値：Ｃ，６２．７２；Ｈ，４．８８；Ｎ，６．１８。
【００５０】
（７）２−（３−（２，５−ジオキソ−４−（３，４，５−トリメトキシフェニル）−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−３−イル）−５−フルオロ−１Ｈ−インドール−１−イル）−エチル−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−アミノ）−４−メチルペンタノエート
無水ＤＣＭ中の１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（ＥＤＣＩ；１．３ｍｍｏｌ）およびジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ；０．２２ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、無水ＤＣＭ中の３−（５−フルオロ−１−（２−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−インドール−３−イル）−４−（３，４，５−トリメトキシフェニル）−マレイミド（６）（０．４５ｍｍｏｌ）をシリンジを介してゆっくり加えた。反応混合物を周囲温度で２４時間撹拌した。水でクエンチし、酢酸エチルで抽出した後、合わせた有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮し、カラムクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥＥ）により精製して橙色の固体（０．４ｍｍｏｌ；８９％）として標題化合物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ［ｐｐｍ］＝８．０５（ｓ，１Ｈ，インドール−Ｈ），７．４７（ｓ，１Ｈ，イミド−Ｈ），７．２９（ｍ，１Ｈ，インドール−Ｈ），６．９６（ｍ，１Ｈ，インドール−Ｈ），６．７５（ｓ，２Ｈ，Ａｒ−Ｈ），６．０８（ｄ，Ｊ＝１２，６７Ｈｚ，１Ｈ，インドール−Ｈ），５．００（ｄ，Ｊ＝８．７５Ｈｚ，１Ｈ，−ＮＨ−ＣＨ−ＣＯ），４．４８（ｍ，４Ｈ，−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−），３．８７（ｓ，３Ｈ，ＯＣＨ３），３．５６（ｓ，６Ｈ，２ｘＯＣＨ３），１．６８（ｍ，４Ｈ，−ＮＨ−ＣＨ−ＣＯおよび−ＣＨ２−ＣＨ（ＣＨ３）２，１．４２（ｓ，９Ｈ，Ｃ（ＣＨ３）３），０．８７（ｍ，６Ｈ，−ＣＨ２−ＣＨ（ＣＨ３）２。
【００５１】
（８）２−（３−（２，５−ジオキソ−４−（３，４，５−トリメトキシフェニル）−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−３−イル）−５−フルオロ−１Ｈ−インドール−１−イル）−エチル−２−アミノ−４−メチルペンタノエート
【化１３】
2019500393.tif 000015
ＤＣＭ中の２−（３−（２，５−ジオキソ−４−（３，４，５−トリメトキシフェニル）−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−３−イル）−５−フルオロ−１Ｈ−インドール−１−イル）−エチル−２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−アミノ）−４−メチルペンタノエート（７）（０．４ミリモル）に、トリクロロ酢酸（１５ｍｍｏｌ）を加え、混合物を不活性ガス下、２４時間撹拌した。次いで、溶液を酢酸エチル（０℃）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３溶液（０〜５℃）で３回洗浄した。乾燥された有機相（ＭｇＳＯ４）を濃縮し（水浴２５℃）、橙赤色固体として標題化合物を得た（０．３６ｍｍｏｌ；９０％）。融点１８０℃；ＩＲ  波数［ｃｍ−１］＝３６７３，２９７８，２８８８，１７０３，１４９５，１３８４，１１１９，９５９。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ［ｐｐｍ］＝１１．１３（ｓ；１Ｈ；イミド−ＮＨ），８．４４（ｓ；３Ｈ；−ＮＨ３＋），８．１９（ｓ；１Ｈ；インドール−Ｈ），７．６７（ｄ，Ｊ＝９，０Ｈｚ；１Ｈ；インドール−Ｈ），７．０３（ｔ；Ｊ＝９．０Ｈｚ；１Ｈ；インドール−Ｈ），６．６７（ｓ；２Ｈ；Ａｒ−Ｈ），５．８８（ｄ；Ｊ＝１０，６Ｈｚ；１Ｈ；インドール−Ｈ），４．４７（ｍ；４Ｈ，−ＣＨ２ＣＨ２−），３．８４（ｔ；Ｊ＝６．９Ｈｚ；１Ｈ；−ＮＨ−ＣＨ−ＣＯ−），３．６６（ｓ；３Ｈ；ＯＣＨ３），３．３４（ｓ；６Ｈ；２ｘＯＣＨ３），１．６０（ｍ；１Ｈ；−ＣＨ２−ＣＨ（ＣＨ３）２），１．４５（ｄｄ；Ｊ＝１２，３；６，８Ｈｚ；２Ｈ；−ＣＨ−ＣＨ２−ＣＨ−），０．７２（ｍ，６Ｈ；−ＣＨ２−ＣＨ（ＣＨ３）２）。Ｃ２９Ｈ３２ＦＮ３Ｏ７ｘＨＣｌｘＨ２Ｏの分析計算値：Ｃ，５７．２８；Ｈ，５．８０；Ｎ，６．９１。実測値：Ｃ，５７．０８；Ｈ，６．０３；Ｎ，６．５６。
【００５２】
化合物（Ｉｅ）は、２−ブロモエトキシ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシランの代わりに３−ブロモプロポキシ−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシランを用いて類似の方法で調製された。
【００５３】
実施例２
３−（５−フルオロ−１−（２−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−インドール−３−イル）−４−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−マレイミド
【化１４】
2019500393.tif 000016
ＤＣＭ中の塩化アルミニウム（３５ｍｍｏｌ）に、ＤＣＭ中の３−（５−フルオロ−１−（２−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−インドール−３−イル）−４−（３，４，５−トリメトキシフェニル）−マレイミド（６）（１．１３ｍｍｏｌ）を加え、混合物を周囲温度で４８時間撹拌した。完了後、氷２０ｍｌを加え（０〜３℃）、混合物を酢酸エチルで抽出した。有機相を水および塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濃縮して、生成物をオレンジ色の結晶（０．９ｍｍｏｌ；８０％）として得た。融点２３３℃。ＦＤ−ＭＳ  ｍ／ｚ（相対強度）＝４２６．１（１００％；Ｍ＋）。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ［ｐｐｍ］＝８．００（ｓ，１Ｈ，インドール−Ｈ），７．３１（ｓ，１Ｈ，イミド−ＮＨ），６．９６（ｍ，２Ｈ，インドール−Ｈ），６．８６（ｓ，２Ｈ，Ａｒ−Ｈ），６．２４（ｍ，１Ｈ，インドール−Ｈ），５．７４（ｓ，１Ｈ，Ａｒ−ＯＨ），４．３６（ｍ，２Ｈ，Ｎ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＯＨ），４．０６（ｔ，Ｊ＝５．１Ｈｚ，２Ｈ，Ｎ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＯＨ），３．６０（ｓ，６Ｈ，２ｘＯＣＨ３）。Ｃ２２Ｈ１９ＦＮ２Ｏ６の分析計算値：Ｃ，６１．９７；Ｈ，４．４９；Ｎ，６．５７。実測値：Ｃ，６１．５５；Ｈ，４．７９；Ｎ，６．３８。
【００５４】
化合物（Ｉｇ）は、３−（５−フルオロ−１−（３−ヒドロキシプロピル）−１Ｈ−インドール−３−イル）−４−（３，４，５−トリメトキシフェニル）−マレイミドを出発材料として使用して類似の方法によって調製された。
【００５５】
実施例３
（１）３−（５−フルオロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−４−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−マレイミド
【化１５】
2019500393.tif 000017
ＴＨＦ（不活性ガス、活性化モレキュラーシーブ４Å）中のエチル−２−（５−フルオロ−１Ｈ−インドール）−２−オキソアセテート（２）（３ｍｍｏｌ）および３，４，５−トリメトキシフェニルアセトアミド（４）（３ｍｍｏｌ）に、ＴＨＦ中のカリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（１４ｍｍｏｌ）をシリンジでゆっくり加えた。反応混合物を室温で２時間撹拌し、酢酸エチルで希釈し、濾過した。水で洗浄した後、有機層を乾燥し、濃縮し、カラムクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥＥ）により精製して、橙色の固体（１．２ｍｍｏｌ；４０％）として標題化合物を得た。融点２３２〜２３３℃。ＩＲ  波数［ｃｍ−１］＝３２８９；１７１６；１５７７。ＦＤ−ＭＳ  ｍ／ｚ（相対強度）＝３９８．１（１．７１％；  Ｍ＋・）。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ［ｐｐｍ］＝１１．９９（ｂｓ，１Ｈ，インドール−ＮＨ），１１．０７（ｂｓ，１Ｈ，イミド−ＮＨ），８．０６（ｄ，３Ｊ＝２．６Ｈｚ，１Ｈ，インドール−Ｈ），７．４４（ｄｄ，Ｊ＝４．７Ｈｚ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ，インドール−Ｈ），６．９４（ｄｔ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，Ｊ＝９．１Ｈｚ，１Ｈ，インドール−Ｈ）；６．７（ｓ，２Ｈ，Ａｒ−Ｈ），５．９１（ｄｄ，Ｊ＝２．１Ｈｚ，Ｊ＝１０．７Ｈｚ，１Ｈ，インドール−Ｈ），３．６７（ｓ，３Ｈ，ＯＣＨ３），３．４３（ｓ，６Ｈ，２ｘＯＣＨ３）。
【００５６】
（２）３−（５−フルオロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−４−（４−ヒドロキシ−３，５−ジメトキシフェニル）−マレイミド
ＤＣＭ中の塩化アルミニウム（３５ｍｍｏｌ）に、ＤＣＭ中の３−（５−フルオロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−４−（３，４，５−トリメトキシフェニル）−マレイミド（１０）（１．２ｍｍｏｌ）をゆっくり加えた。混合物を周囲温度で４時間撹拌した。 完了後、２０ｍｌの水を加え（０〜３℃）、混合物を酢酸エチルで抽出した。有機相を水および塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濃縮し、カラムクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥＥ）によって精製して、生成物を得た（０．８ｍｍｏｌ；６７％）。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ［ｐｐｍ］＝１１．９２（ｂｓ，１Ｈ，インドール−ＮＨ），１０．９８（ｂｓ，１Ｈ，イミド−ＮＨ），８．８５（ｓ，１Ｈ，インドール−Ｈ），７．９８（ｓ，１Ｈ，インドール−Ｈ），７．４４（ｄｄ，Ｊ＝４．５６Ｈｚ，Ｊ＝９．０３Ｈｚ，１Ｈ，インドール−Ｈ），６．８８（ｍ，１Ｈ，インドール−Ｈ）；６．７４（ｓ，２Ｈ，Ａｒ−Ｈ），６．０８（ｄ，Ｊ＝８．２０Ｈｚ，１Ｈ，インドール−Ｈ），３．４３（ｓ，６Ｈ，２ｘＯＣＨ３）。Ｃ２２Ｈ１９ＦＮ２Ｏ６ｘ０，５Ｈ２Ｏの分析計算値：Ｃ，６１．３８；Ｈ，４．１２；Ｎ，７．１６。実測値：Ｃ，６１．０７；Ｈ，４．４０；Ｎ，６．８４。
【００５７】
以下の試験のために、以下に示す非フッ素化化合物（ＩＩａ）、（ＩＩｂ）及び（ＩＩｄ）と比較して、上に示した化合物（Ｉａ）〜（Ｉｄ）を用いた。
【化１６】
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【００５８】
タンパク質キナーゼＧＳＫ−３β、ＶＥＧＦＲ２およびＦＬＴ−３の活性に対する試験化合物の効果を、Ｅｕｒｏｆｉｎｓ  Ｐｈａｒｍａ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ  ＵＫ  Ｌｉｍｉｔｅｄ，  Ｇｅｍｉｎｉ  Ｃｒｅｓｃｅｎｔ，  Ｄｕｎｄｅｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｐａｒｋ，  Ｄｕｎｄｅｅ，ＤＤ２  １ＳＷ（ＫｉｎａｓｅＰｒｏｆｉｌｅｒＴＭ）によって決定された半数阻害濃度（ＩＣ５０）に基づいて評価した。詳細な情報はhttp://www.eurofins.com/pharma-services/pharma-discovery-services/services/in-vitro-pharmacology/kinases/biochemical.aspxに見い出される。アッセイはＢｉｏｃｈｅｍ．  Ｊ．  （２０１３）  ４５１，  ３１３−３２８にも記載されている。結果を次の表１に示す。
【００５９】
【表１】
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【００６０】
示されているように、本発明のフッ素置換化合物ＩｂおよびＩｆは、ＧＳＫ−３βと同等の効果を示し、ＶＥＧＦＲ２およびＦＬＴ−３の活性の阻害において、フッ素置換をしない対応する化合物と比較して有意に高い効果を示す。
【００６１】
さらなる実験において、化合物（Ｉａ）および（ＩＩａ）の代謝転化を以下の手順に従って評価した。ラット肝ミクロソーム（Ｃｏｒｎｉｎｇ）を用いて以下に示す反応混合物中で試験化合物をインキュベートした。この目的のために、反応混合物（成分１〜５、以下参照）を３７℃で１０分間プレインキュベートした。反応は、１０μｌの試験化合物の添加、続いて３７℃で０〜３００分間のインキュベーションで開始された。各時点で、５０μｌの混合物を除去し、２５０μｌの氷冷アセトニトリルに加え、直ちにボルテックスした。遠心分離後、アセトニトリル溶液をＲＰ−ＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳシステムで分析した。
【００６２】
反応混合物：
１．塩化マグネシウム六水和物  ５０μｌ
２．グルコース−６−リン酸  ５０μｌ
３．ＮＡＤＰ＋  ５０μｌ
４．グルコース−６−リン酸−デヒドロゲナーゼ：１０μｌ
５．ミクロソーム：５０μｌ
６．化合物：４０μｌ（エタノール中の４ｍＭ溶液１０μｌ）
全量：０．１Ｍ  Ｔｒｉｚｍａ緩衝液（３７℃でｐＨ７．４）で１０００μｌ
【００６３】
ＲＰ−ＨＰＬＣ−ＭＳシステム：
Ａｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣ（登録商標）−Ｗａｔｅｒｓ社のＱｕａｔｔｒｏ  Ｐｒｅｍｉｅｒ  ＸＥ（ＭＳ）システム
カラム：ＢＥＨ  Ｃ１８，２．１×５０ｍｍ、１．２μｍ細孔径、Ｗａｔｅｒｓ社製
注入量：１０μｌ
溶媒Ａ：Ｈ２Ｏ、ＮＨ４−蟻酸塩２ｍＭ＋０．１％蟻酸
溶媒Ｂ：メタノール、ＮＨ４−蟻酸塩２ｍＭ＋０．１％蟻酸
流動様式：７０％溶媒Ａ／３０％溶媒Ｂから２．４分で１００％溶媒Ａ、次いで７０％溶媒Ａ／３０％溶媒Ｂで０．８分。
【００６４】
化合物（Ｉａ）の結果を図１に示し、化合物（ＩＩａ）の結果を図２に示す。両方の化合物の時間依存的分解および代謝産物（Ｉｂ）および（ＩＩｂ）の濃度の上昇が見られた。しかしながら、（Ｉａ）の代謝は、（ＩＩａ）の代謝よりもはるかに速い。すなわち、（Ｉａ）は１時間後に大部分が代謝されるが、（ＩＩａ）は同程度に代謝されるのに２時間かかる。（Ｉｂ）が高度に活性であるので、より速い代謝は、（ＩＩａ）と比較して有効成分がより速く入手できるので、重要な利点である。
【００６５】
さらなる実験では、本発明の化合物（Ｉｄ）および３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−２,５−ジフェニルテトラゾリウムブロミド（ＭＴＴ）を用いた非フッ素化化合物（ＩＩｄ）について、先に記載されているように（Ｍｏｓｍａｎｎ，  Ｔ．  ｅｔ  ａｌ．  （１９８３）  Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ６５，  ５５−６３）、ＭＴＴアッセイによって、ＨＴ−２９ヒト結腸腺癌細胞に対する抗増殖活性が決定された。指数増殖期の細胞を９６穴平底プレートに移した。２００μｌの細胞懸濁液中に含まれる１０，０００個の生存細胞を各ウェルに蒔き、一晩インキュベートした。次いで、細胞を様々な濃度の試験化合物（１００μｌ／ウェル）に３７℃、５％ＣＯ２で３日間曝露した。続いて、１０μｌ／ウェルＭＴＴストック溶液（５ｍｇ／ｍｌ；Ｂｉｏｍｏｌ、ドイツ）を添加し、細胞を３７℃、５％ＣＯ２で４時間インキュベートした。１００μｌの可溶化溶液（０．０１Ｍ  ＨＣｌ中の１０％ＳＤＳ）を添加し、細胞を３７℃、５％ＣＯ２で一晩インキュベートした。プレートをＥＬＩＳＡ−Ｒｅａｄｅｒ  ＥＬＸ  ８００（ＢＩＯ−ＴＥＫ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  ＫＣ  ４）で５６２ｎｍの吸光度で読み取った。各実験は三度行った。結果は図３に示され、本発明の化合物（Ｉｄ）が（ＩＩｄ）に比べて時間依存性でより高い活性を有することが示されている（標的の生存率が低いほど活性が高い）。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【国際調査報告】
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