(57)【要約】本開示は、炭酸脱水酵素ＩＸ阻害剤の組成物および方法に関する。本開示はまた、炭酸脱水酵素ＩＸ阻害剤の標的抱合体に関する。本開示はまた、ＳＰＥＣＴ画像化方法における炭酸脱水酵素ＩＸ阻害剤の標的抱合体の使用に関する。
2019512511.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｂ−Ｌ−Ａ
［式中、Ｂは、炭酸無水酵素ＩＸの結合リガンドであり、Ｌは、任意のリンカーであり、ならびにＡは、治療剤およびイメージング剤である］
で示される抱合体。
【請求項２】
前記ＣＡ ＩＸリガンドが、式
【化１】
2019512511.tif 000087
［式中、
各ＲＡは、独立して、Ｈ、ハロゲン、−ＯＲ１’、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１’、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−ＯＳ（Ｏ）Ｒ１’、−ＯＳ（Ｏ）２Ｒ１’、−ＳＲ１’、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１’、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１’、−Ｓ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１’Ｒ２’、−ＯＳ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−ＯＳ（Ｏ）２ＮＲ１’Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｃ（Ｏ）Ｒ１’、−ＮＲ１’Ｃ（Ｏ）ＯＲ２’、−ＮＲ１’Ｃ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｓ（Ｏ）Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｓ（Ｏ）２Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｓ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１’Ｒ２’、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１’、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１’、および−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’からなる群から選択され；
Ｙ１は、−ＯＲＢ、−ＳＲＢ、−ＮＲＢＲＢ’、−Ｓ（Ｏ）２ＲＢ、−ＮＲＢＣ（Ｏ）ＲＢ’、または−ＮＲＢＣ（Ｏ）ＮＲＢＲＢ’であり；
各ＲＢおよびＲＢ’は、独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ２−Ｃ１０アルケニル、またはフェニルであって；Ｃ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ２−Ｃ１０アルケニル、およびフェニルにおける各水素原子は、−ＣＮ、Ｃ１−Ｃ６アルキル−（５〜９員ヘテロアリール）、−ＮＲ３’Ｒ４’、−ＮＲ３’（ＣＨ２）ｍ２ＮＲ３’Ｒ４’、または−Ｃ６Ｈ４ＯＲ３’で適宜置換されていてもよく；
各Ｒ３’およびＲ４’は、独立して、Ｈ、−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）＊、−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＯＲ５’、−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＮＲ５’Ｒ６’、または前記抱合体の残部に対する結合であり；
各Ｒ５’およびＲ６’は、独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ８アルキル、またはフェニルであって、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ２−Ｃ１０アルケニル、およびフェニルにおける各水素原子は、Ｃ１−Ｃ６アルキル−（フェニル）、−ＯＲ１’、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１’、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−ＯＳ（Ｏ）Ｒ１’、−ＯＳ（Ｏ）２Ｒ１’、−ＳＲ１’、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１’、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１’、−Ｓ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１’Ｒ２、−ＯＳ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−ＯＳ（Ｏ）２ＮＲ１’Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｃ（Ｏ）Ｒ１’、−ＮＲ１’Ｃ（Ｏ）ＯＲ２’、−ＮＲ１’Ｃ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｓ（Ｏ）Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｓ（Ｏ）２Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｓ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１’Ｒ２’、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１’、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１’、または−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’で適宜置換されていてもよく；
各Ｒ１’およびＲ２’は、独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、およびＣ３−Ｃ９シクロアルキルからなる群から選択され；
ｍ１は、１、２、３、４、または５であり；ならびに
＊は、前記抱合体の残部に対する共有結合を示す］
で示されるものである、請求項１に記載の抱合体。
【請求項３】
前記ＣＡ ＩＸリガンドが、
【化２】
2019512511.tif 000088
［式中、
各Ｒ１およびＲ３は、独立して、Ｈ、ＯＲ４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ４、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５、−ＯＳ（Ｏ）Ｒ４、−ＯＳ（Ｏ）２Ｒ４、−ＳＲ４、−Ｓ（Ｏ）Ｒ４、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ４、−Ｓ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ４Ｒ５、−ＯＳ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５、−ＯＳ（Ｏ）２ＮＲ４Ｒ５、−ＮＲ４Ｒ５、−ＮＲ４Ｃ（Ｏ）Ｒ５、−ＮＲ４Ｃ（Ｏ）ＯＲ５、−ＮＲ４Ｃ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５、−ＮＲ４Ｓ（Ｏ）Ｒ５、−ＮＲ４Ｓ（Ｏ）２Ｒ５、−ＮＲ４Ｓ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５、−ＮＲ４Ｓ（Ｏ）２ＮＲ４Ｒ５、−Ｃ（Ｏ）Ｒ４、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ４、および−Ｃ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５からなる群から選択され；
Ｒ２は、Ｈ、−ＣＮ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、およびＣ２−Ｃ６アルキニルからなる群から選択され；
Ｗは、−Ｏ−、−ＣＨ２−、または−ＮＲ４’−であり；
Ｘは、−Ｏ−、−ＣＨ２−、または−ＮＲ５’−であり；
各Ｒ４、Ｒ５、Ｒ４’、およびＲ５’は、独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、およびＣ２−Ｃ６アルキニルからなる群から選択され；
ｍは、１〜４の整数であり；
ｎは、０〜２の整数であり；
各Ｒ６およびＲ７は、独立して、Ｈ、ＯＲ９、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ９、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０、−ＯＳ（Ｏ）Ｒ９、−ＯＳ（Ｏ）２Ｒ９、−ＳＲ９、−Ｓ（Ｏ）Ｒ９、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ９、−Ｓ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ９Ｒ１０、−ＯＳ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０、−ＯＳ（Ｏ）２ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ９Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＲ９Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＮＲ９Ｃ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ９Ｓ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＲ９Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０、−ＮＲ９Ｓ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ９Ｓ（Ｏ）２ＮＲ９Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ９、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ９、および−Ｃ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０からなる群から選択され；
Ｒ８は、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１１、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１１、および−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１１Ｒ１２からなる群から選択され；
Ｙは、−Ｏ−、−ＣＨ２−、または−ＮＲ９’−であり；
Ｚは、−Ｏ−、−ＣＨ２−、または−ＮＲ１０’−であり；
各Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ９’、Ｒ１０’、Ｒ１１、およびＲ１２は、独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、およびＣ２−Ｃ６アルキニルからなる群から選択され；
ｐは、１〜４の整数であり；
ｒは、０〜４の整数であり；
ｔは、１〜３の整数であり；
各Ｒ１３およびＲ１４は、独立して、Ｈ、−ＯＲ１５、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ１５Ｒ１６、−ＯＳ（Ｏ）Ｒ１５、−ＯＳ（Ｏ）２Ｒ１５、−ＳＲ１５、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１５、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１５、−Ｓ（Ｏ）ＮＲ１５Ｒ１６、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１５Ｒ１６、−ＯＳ（Ｏ）ＮＲ１５Ｒ１６、−ＯＳ（Ｏ）２ＮＲ１５Ｒ１６、−ＮＲ１５Ｒ１６、−ＮＲ１５Ｃ（Ｏ）Ｒ１６、−ＮＲ１５Ｃ（Ｏ）ＯＲ１６、−ＮＲ１５Ｃ（Ｏ）ＮＲ１５Ｒ１６、−ＮＲ１５Ｓ（Ｏ）Ｒ１６、−ＮＲ１５Ｓ（Ｏ）２Ｒ１６、−ＮＲ１５Ｓ（Ｏ）ＮＲ１５Ｒ１６、−ＮＲ１５Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１５Ｒ１６、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１５、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１５、および−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１５Ｒ１６からなる群から選択され；
Ｗ１は、−Ｏ−、−ＣＨ２−、または−ＮＲ１５’−であり；
Ｘ１は、−Ｏ−、−ＣＨ２−、または−ＮＲ１６’−であり；
各Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１５’、Ｒ１６’、およびＲ１７は、独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、およびＣ２−Ｃ６アルキニルからなる群から選択され；
ｕは、１〜４の整数であり；
ｖは、０〜２の整数であり；ならびに
各＊は、前記抱合体の残部に対する共有結合を示す］
からなる群から選択される、請求項２に記載の抱合体またはその医薬的に許容される塩。
【請求項４】
前記ＣＡ ＩＸリガンドが、式
【化３】
2019512511.tif 000089
で示されるものである、請求項３に記載の抱合体またはその医薬的に許容される塩。
【請求項５】
前記ＣＡ ＩＸリガンドが、式
【化４】
2019512511.tif 000090
で示されるものである、請求項３に記載の抱合体またはその医薬的に許容される塩。
【請求項６】
前記ＣＡ ＩＸリガンドが、式
【化５】
2019512511.tif 000091
で示されるものである、請求項５に記載の抱合体またはその医薬的に許容される塩。
【請求項７】
前記ＣＡ ＩＸリガンドが、式
【化６】
2019512511.tif 000092
で示されるものである、請求項３に記載の抱合体またはその医薬的に許容される塩。
【請求項８】
前記ＣＡ ＩＸリガンドが、式
【化７】
2019512511.tif 000093
で示されるものである、請求項７に記載の抱合体またはその医薬的に許容される塩。
【請求項９】
前記リンカーが、−Ｃ（Ｏ）（Ｃ１−Ｃ１２アルキル）Ｃ（Ｏ）−、−ＮＨ−Ｃ１−Ｃ１２アルキル−ＮＨ−、−Ｎ（Ｃ１−Ｃ６アルキル）−Ｃ１−Ｃ１２アルキル−Ｎ（Ｃ１−Ｃ６アルキル）−、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２ＣＨ２（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｑＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２ＣＨ２（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｑ１Ｎ（Ｃ１−Ｃ６アルキル）−、−ＮＨ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｑ２ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（Ｏ）−、および−Ｎ（Ｃ１−Ｃ６アルキル）（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｑ３ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（Ｏ）−［式中、ｑ、ｑ１、ｑ２、およびｑ３の各々は、１〜４０の整数である］からなる群から選択される部分を含む、請求項１〜８のいずれか１項に記載の抱合体またはその医薬的に許容される塩。
【請求項１０】
式
【化８】
2019512511.tif 000094
［式中、＊は、前記抱合体の残部に対する共有結合を示す］
を含む、請求項３もしくは４に記載の抱合体またはその医薬的に許容される塩。
【請求項１１】
式
【化９】
2019512511.tif 000095
［式中、＊は、前記抱合体の残部に対する共有結合を示す］
を含む、請求項１、２、３、４、もしくは１０に記載の抱合体またはその医薬的に許容される塩。
【請求項１２】
式
【化１０】
2019512511.tif 000096
［式中、＊は、前記抱合体の残部に対する共有結合を示す］
を含む、請求項３もしくは５に記載の抱合体またはその医薬的に許容される塩。
【請求項１３】
式
【化１１】
2019512511.tif 000097
［式中、＊は、前記抱合体の残部に対する共有結合を示す］
を含む、請求項１、２、３、５、６、もしくは１２に記載の抱合体またはその医薬的に許容される塩。
【請求項１４】
式
【化１２】
2019512511.tif 000098
［式中、ｑは、１〜４０の整数であり、ならびに、＊は、前記抱合体の残部に対する共有結合を示す］
を含む、請求項３もしくは７に記載の抱合体またはその医薬的に許容される塩。
【請求項１５】
式
【化１３】
2019512511.tif 000099
［式中、ｑは、１〜４０の整数であり、ならびに、＊は、前記抱合体の残部に対する共有結合を示す］
を含む、請求項１、２、３、７、８、もしくは１４に記載の抱合体またはその医薬的に許容される塩。
【請求項１６】
ｑが、４である、請求項１４もしくは１５に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項１７】
ｑが、１２である、請求項１４もしくは１５に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項１８】
ｑが、３６である、請求項１４もしくは１５に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項１９】
式
【化１４】
2019512511.tif 000100
［式中、ｑ２は、１〜４０の整数であり、ならびに、＊は、前記抱合体の残部に対する共有結合を示す］
を含む、請求項３もしくは５に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項２０】
式
【化１５】
2019512511.tif 000101
［式中、ｑ２は、１〜４０の整数であり、ならびに、＊は、前記抱合体の残部に対する共有結合を示す］
を含む、請求項１、２、３、５、６、もしくは１９に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項２１】
ｑ２が、４である、請求項１９もしくは２０に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項２２】
ｑ２が、１２である、請求項１９もしくは２０に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項２３】
ｑ２が、３６である、請求項１９もしくは２０に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項２４】
式
【化１６】
2019512511.tif 000102
［式中、ｑ２は、１〜４０の整数であり、ならびに、＊は、前記抱合体の残部に対する共有結合を示す］
を含む、請求項３もしくは５に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項２５】
式
【化１７】
2019512511.tif 000103
［式中、ｑ２は、１〜４０の整数であり、ならびに、＊は、前記抱合体の残部に対する共有結合を示す］
を含む、請求項１、２、３、５、６、もしくは２４に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項２６】
ｑ２が、４である、請求項２４もしくは２５に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項２７】
ｑ２が、１２である、請求項２４もしくは２５に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項２８】
ｑ２が、３６である、請求項２４もしくは２５に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項２９】
前記薬剤が、ＳＰＥＣＴイメージング剤である、請求項１〜２８のいずれか１項に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項３０】
前記薬剤が、式
【化１８】
2019512511.tif 000104
［式中、
Ｒ’は、Ｈであるか、あるいはＲ’は、Ｃ１−Ｃ６アルキル、アミノ−Ｃ１−Ｃ６アルキル、カルボキシ−Ｃ１−Ｃ６アルキル、ヒドロキシル−Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ６−Ｃ１０アリール、Ｃ６−Ｃ１０アリール−Ｃ１−Ｃ６アルキル、およびＣ５−Ｃ１０ヘテロアリール−Ｃ１−Ｃ６アルキルからなる群から選択され；ならびに、＊は、前記抱合体の残部に対する共有結合を示す］
で示されるＳＰＥＣＴイメージング剤である、請求項１〜２９のいずれか１項に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項３１】
放射性核種が、前記抱合体に結合している、請求項３０に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項３２】
前記薬剤が、式
【化１９】
2019512511.tif 000105
［式中、
Ｍは、放射性核種の陽イオンであり、Ｒ’は、Ｈであるか、あるいはＲ’は、Ｃ１−Ｃ６アルキル、アミノ−Ｃ１−Ｃ６アルキル、カルボキシ−Ｃ１−Ｃ６アルキル、ヒドロキシル−Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ６−Ｃ１０アリール、Ｃ６−Ｃ１０アリール−Ｃ１−Ｃ６アルキル、およびＣ５−Ｃ１０ヘテロアリール−Ｃ１−Ｃ６アルキルからなる群から選択され、ならびに、＊は、前記抱合体の残部に対する共有結合を示す］
で示されるＳＰＥＣＴイメージング剤である、請求項１〜２９のいずれか１項に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項３３】
前記放射性核種が、ガリウムの同位体、インジウムの同位体、銅の同位体、テクネチウムの同位体、およびレニウムの同位体からなる群から選択される、請求項３１もしくは３２に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項３４】
前記放射性核種が、テクネチウムの同位体である、請求項３３に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項３５】
前記放射性核種が、９９ｍＴｃである、請求項３４に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項３６】
前記薬剤が、式
【化２０】
2019512511.tif 000106
［式中、＊は、前記抱合体の残部に対する共有結合を示す］
で示されるＳＰＥＣＴイメージング剤である、請求項１〜２９のいずれか１項に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項３７】
放射性核種が、前記抱合体に結合している、請求項３６に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項３８】
前記薬剤が、式
【化２１】
2019512511.tif 000107
［式中、Ｍは、放射性核種の陽イオンであり、ならびに、＊は、前記抱合体の残部に対する共有結合を示す］
で示されるＳＰＥＣＴイメージング剤である、請求項１〜２９のいずれか１項に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項３９】
前記放射性核種が、ガリウムの同位体、インジウムの同位体、銅の同位体、テクネチウムの同位体、およびレニウムの同位体からなる群から選択される、請求項３７もしくは３８に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項４０】
前記放射性核種が、テクネチウムの同位体である、請求項３９に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項４１】
前記放射性核種が、９９ｍＴｃである、請求項４０に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項４２】
前記薬剤が、イメージング剤である、請求項１〜２８のいずれか１項に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項４３】
前記イメージング剤が、ローダミン色素である、請求項４２に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項４４】
【化２２】
2019512511.tif 000108
からなる群から選択される、請求項１に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項４５】
【化２３】
2019512511.tif 000109
からなる群から選択される、請求項１に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項４６】
【化２４】
2019512511.tif 000110
からなる群から選択される、請求項４５に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項４７】
前記リンカーが、少なくとも１個のアミノ酸を含む、請求項１〜９のいずれか１項に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項４８】
前記リンカーが、ＤＡＰ、Ｐｒｏ、Ａｓｐ、およびＣｙｓからなる群から選択される少なくとも１個のアミノ酸を含む、請求項１〜９のいずれか１項に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項４９】
前記リンカーが、３個のプロリンアミノ酸を含む、請求項４７もしくは４８に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項５０】
前記リンカーが、アミノ酸配列ＤＡＰ−Ａｓｐを含む、請求項４７もしくは４８に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項５１】
前記リンカーが、放出可能なリンカーを含む、請求項１〜２８もしくは４７〜５０のいずれか１項に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項５２】
前記放出可能なリンカーが、ジスルフィド結合を含む、請求項５１に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項５３】
前記放出可能なリンカーが、式
【化２５】
2019512511.tif 000111
［式中、各＊は、前記抱合体の残部に対する共有結合を示す］
で示される部分を含む、請求項５１もしくは５２に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項５４】
前記リンカーが、ヒドラジド部分を含む、請求項１〜２８もしくは４７〜５３のいずれか１項に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項５５】
式
【化２６】
2019512511.tif 000112
［式中、ｑ２は、１〜４０の整数であり、ならびに、＊は、前記抱合体の残部に対する共有結合を示す］
を含む、請求項２、５、１９、もしくは２１〜２３のいずれか１項に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項５６】
式
【化２７】
2019512511.tif 000113
［式中、ｑ２は、１〜４０の整数であり、ならびに、＊は、前記抱合体の残部に対する共有結合を示す］
を含む、請求項２、５、６、もしくは１９〜２３のいずれか１項に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項５７】
前記薬剤が、治療剤である、請求項１〜２８もしくは４７〜５６のいずれか１項に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項５８】
前記治療剤が、ツブリシンである、請求項５７に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項５９】
式
【化２８】
2019512511.tif 000114
で示される、請求項１に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【請求項６０】
対象における細胞の集団を画像化する方法であって、
ａ．有効な量の式Ｂ−Ｌ−Ａ［式中、Ｂは、ＣＡ ＩＸリガンドであり、Ｌは、任意のリンカーであり、ならびにＡは、治療剤およびイメージング剤である］で示される抱合体を前記対象に投与すること
を含む、方法。
【請求項６１】
前記ＣＡ ＩＸリガンドが、式
【化２９】
2019512511.tif 000115
［式中、
各ＲＡは、独立して、Ｈ、ハロゲン、−ＯＲ１’、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１’、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−ＯＳ（Ｏ）Ｒ１’、−ＯＳ（Ｏ）２Ｒ１’、−ＳＲ１’、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１’、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１’、−Ｓ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１’Ｒ２’、−ＯＳ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−ＯＳ（Ｏ）２ＮＲ１’Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｃ（Ｏ）Ｒ１’、−ＮＲ１’Ｃ（Ｏ）ＯＲ２’、−ＮＲ１’Ｃ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｓ（Ｏ）Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｓ（Ｏ）２Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｓ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１’Ｒ２’、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１’、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１’、および−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’からなる群から選択され；
Ｙ１は、−ＯＲＢ、−ＳＲＢ、−ＮＲＢＲＢ’、−Ｓ（Ｏ）２ＲＢ、−ＮＲＢＣ（Ｏ）ＲＢ’、または−ＮＲＢＣ（Ｏ）ＮＲＢＲＢ’であり；
各ＲＢおよびＲＢ’は、独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ２−Ｃ１０アルケニル、またはフェニルであって；Ｃ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ２−Ｃ１０アルケニル、およびフェニルにおける各水素原子は、−ＣＮ、Ｃ１−Ｃ６アルキル−（５〜９員ヘテロアリール）、−ＮＲ３’Ｒ４’、−ＮＲ３’（ＣＨ２）ｍ２ＮＲ３’Ｒ４’、または−Ｃ６Ｈ４ＯＲ３’で適宜置換されていてもよく；
各Ｒ３’およびＲ４’は、独立して、Ｈ、−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）＊、−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＯＲ５’、−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＮＲ５’Ｒ６’、または前記抱合体の残部に対する結合であり；
各Ｒ５’およびＲ６’は、独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ８アルキル、またはフェニルであって、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ２−Ｃ１０アルケニル、およびフェニルにおける各水素原子は、Ｃ１−Ｃ６アルキル−（フェニル）、−ＯＲ１’、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１’、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−ＯＳ（Ｏ）Ｒ１’、−ＯＳ（Ｏ）２Ｒ１’、−ＳＲ１’、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１’、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１’、−Ｓ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１’Ｒ２、−ＯＳ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−ＯＳ（Ｏ）２ＮＲ１’Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｃ（Ｏ）Ｒ１’、−ＮＲ１’Ｃ（Ｏ）ＯＲ２’、−ＮＲ１’Ｃ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｓ（Ｏ）Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｓ（Ｏ）２Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｓ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１’Ｒ２’、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１’、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１’、または−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’で適宜置換されていてもよく；
各Ｒ１’およびＲ２’は、独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、およびＣ３−Ｃ９シクロアルキルからなる群から選択され；
ｍ１は、１、２、３、４、または５であり；ならびに
＊は、前記抱合体の残部に対する共有結合を示す］
で示されるものである、請求項６７に記載の方法。
【請求項６２】
前記ＣＡ ＩＸリガンドが、
【化３０】
2019512511.tif 000116
［式中、
各Ｒ１およびＲ３は、独立して、Ｈ、ＯＲ４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ４、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５、−ＯＳ（Ｏ）Ｒ４、−ＯＳ（Ｏ）２Ｒ４、−ＳＲ４、−Ｓ（Ｏ）Ｒ４、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ４、−Ｓ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ４Ｒ５、−ＯＳ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５、−ＯＳ（Ｏ）２ＮＲ４Ｒ５、−ＮＲ４Ｒ５、−ＮＲ４Ｃ（Ｏ）Ｒ５、−ＮＲ４Ｃ（Ｏ）ＯＲ５、−ＮＲ４Ｃ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５、−ＮＲ４Ｓ（Ｏ）Ｒ５、−ＮＲ４Ｓ（Ｏ）２Ｒ５、−ＮＲ４Ｓ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５、−ＮＲ４Ｓ（Ｏ）２ＮＲ４Ｒ５、−Ｃ（Ｏ）Ｒ４、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ４、および−Ｃ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５からなる群から選択され；
Ｒ２は、Ｈ、−ＣＮ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、およびＣ２−Ｃ６アルキニルからなる群から選択され； 
Ｗは、−Ｏ−、−ＣＨ２−、または−ＮＲ４’−であり；
Ｘは、−Ｏ−、−ＣＨ２−、または−ＮＲ５’−であり；
各Ｒ４、Ｒ５、Ｒ４’、およびＲ５’は、独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、およびＣ２−Ｃ６アルキニルからなる群から選択され；
ｍは、１〜４の整数であり；
ｎは、０〜２の整数であり；
各Ｒ６およびＲ７は、独立して、Ｈ、ＯＲ９、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ９、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０、−ＯＳ（Ｏ）Ｒ９、−ＯＳ（Ｏ）２Ｒ９、−ＳＲ９、−Ｓ（Ｏ）Ｒ９、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ９、−Ｓ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ９Ｒ１０、−ＯＳ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０、−ＯＳ（Ｏ）２ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ９Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＲ９Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＮＲ９Ｃ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ９Ｓ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＲ９Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０，−ＮＲ９Ｓ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ９Ｓ（Ｏ）２ＮＲ９Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ９、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ９、および−Ｃ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０からなる群から選択され；
Ｒ８は、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、およびＣ２−Ｃ６アルキニル、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１１、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１１、および−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１１Ｒ１２からなる群から選択され；
Ｙは、−Ｏ−、−ＣＨ２−、または−ＮＲ９’−であり；
Ｚは、−Ｏ−、−ＣＨ２−、または−ＮＲ１０’−であり；
各Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ９’、Ｒ１０’、Ｒ１１、およびＲ１２は、独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、およびＣ２−Ｃ６アルキニルからなる群から選択され；
ｐは、１〜４の整数であり； 
ｒは、０〜４の整数であり；
ｔは、１〜３の整数であり；
各Ｒ１３およびＲ１４は、独立して、Ｈ、−ＯＲ１５、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ１５Ｒ１６、−ＯＳ（Ｏ）Ｒ１５、−ＯＳ（Ｏ）２Ｒ１５、−ＳＲ１５、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１５、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１５、−Ｓ（Ｏ）ＮＲ１５Ｒ１６、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１５Ｒ１６、−ＯＳ（Ｏ）ＮＲ１５Ｒ１６、−ＯＳ（Ｏ）２ＮＲ１５Ｒ１６、−ＮＲ１５Ｒ１６、−ＮＲ１５Ｃ（Ｏ）Ｒ１６、−ＮＲ１５Ｃ（Ｏ）ＯＲ１６、−ＮＲ１５Ｃ（Ｏ）ＮＲ１５Ｒ１６、−ＮＲ１５Ｓ（Ｏ）Ｒ１６、−ＮＲ１５Ｓ（Ｏ）２Ｒ１６、−ＮＲ１５Ｓ（Ｏ）ＮＲ１５Ｒ１６、−ＮＲ１５Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１５Ｒ１６、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１５、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１５、および−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１５Ｒ１６からなる群から選択され；
Ｗ１は、−Ｏ−、−ＣＨ２−、または−ＮＲ１５’−であり；
Ｘ１は、−Ｏ−、−ＣＨ２−、または−ＮＲ１６’−であり；
各Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１５’、Ｒ１６’、およびＲ１７は、独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、およびＣ２−Ｃ６アルキニルからなる群から選択され；
ｕは、１〜４の整数であり；
ｖは、０〜２の整数であり；ならびに
各＊は、前記抱合体またはその医薬的に許容される塩の残部に対する共有結合を示す］
からなる群から選択される、請求項６０または６１に記載の方法。
【請求項６３】
前記ＣＡ ＩＸリガンドが、式
【化３１】
2019512511.tif 000117
［式中、＊は、前記抱合体またはその医薬的に許容される塩の残部に対する共有結合を示す］
で示されるものである、請求項６１または６２に記載の方法。
【請求項６４】
前記抱合体が、式
【化３２】
2019512511.tif 000118
［式中、ｑ２は、１〜４０の整数であり、ならびに、＊は、前記抱合体またはその医薬的に許容される塩の残部に対する共有結合を示す］
で示されるものを含む、請求項６１または６２に記載の方法。
【請求項６５】
前記ＣＡ ＩＸリガンドが、式
【化３３】
2019512511.tif 000119
［式中、＊は、前記抱合体またはその医薬的に許容される塩の残部に対する共有結合を示す］
で示されるものである、請求項６１〜６４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６６】
前記抱合体が、式
【化３４】
2019512511.tif 000120
［式中、ｑ２は、１〜４０の整数であり、ならびに、＊は、前記抱合体またはその医薬的に許容される塩の残部に対する共有結合を示す］
で示されるものを含む、請求項６１〜６４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６７】
ｑ２が、４である、請求項６４または６６に記載の方法。
【請求項６８】
ｑ２が、１２である、請求項６４または６６に記載の方法。
【請求項６９】
ｑ２が、３６である、請求項６４または６６に記載の方法。
【請求項７０】
前記抱合体が、式
【化３５】
2019512511.tif 000121
［式中、ｑ２は、１〜４０の整数であり、ならびに、＊は、前記抱合体またはその医薬的に許容される塩の残部に対する共有結合を示す］
で示されるものを含む、請求項６１または６２に記載の方法。
【請求項７１】
前記抱合体が、式
【化３６】
2019512511.tif 000122
［式中、ｑ２は、１〜４０の整数であり、ならびに、＊は、前記抱合体またはその医薬的に許容される塩の残部に対する共有結合を示す］
で示されるものを含む、請求項６１、６２、または７０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７２】
ｑ２が、４である、請求項７０または７１に記載の方法。
【請求項７３】
ｑ２が、１２である、請求項７０または７１に記載の方法。
【請求項７４】
ｑ２が、３６である、請求項７０または７１に記載の方法。
【請求項７５】
前記ＣＡ ＩＸリガンドが、式
【化３７】
2019512511.tif 000123
［式中、＊は、前記抱合体またはその医薬的に許容される塩の残部に対する共有結合を示す］
で示されるものである、請求項６１または６２に記載の方法。
【請求項７６】
前記ＣＡ ＩＸリガンドが、式
【化３８】
2019512511.tif 000124
［式中、＊は、前記抱合体またはその医薬的に許容される塩の残部に対する共有結合を示す］
で示されるものである、請求項６１、６１、または７５に記載の方法。
【請求項７７】
前記抱合体が、式
【化３９】
2019512511.tif 000125
［式中、ｑは、１〜４０の整数であり、ならびに、＊は、前記抱合体またはその医薬的に許容される塩の残部に対する共有結合を示す］
で示されるものを含む、請求項６１、６２、または７５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７８】
前記抱合体が、式
【化４０】
2019512511.tif 000126
［式中、ｑは、１〜４０の整数であり、ならびに、＊は、前記抱合体またはその医薬的に許容される塩の残部に対する共有結合を示す］
で示されるものを含む、請求項６１、６２、または７５〜７７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７９】
ｑが、４である、請求項７７または７８に記載の方法。
【請求項８０】
ｑが、１２である、請求項７７または７８に記載の方法。
【請求項８１】
ｑが、３６である、請求項７７または７８に記載の方法。
【請求項８２】
前記イメージング剤が、ＳＰＥＣＴイメージング剤、またはその医薬的に許容される塩である、請求項６０〜８１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８３】
前記イメージング剤が、式
【化４１】
2019512511.tif 000127
［式中、
Ｒ’は、Ｈであるか、あるいはＲ’は、Ｃ１−Ｃ６アルキル、アミノ−Ｃ１−Ｃ６アルキル、カルボキシ−Ｃ１−Ｃ６アルキル、ヒドロキシル−Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ６−Ｃ１０アリール、Ｃ６−Ｃ１０アリール−Ｃ１−Ｃ６アルキル、およびＣ５−Ｃ１０ヘテロアリール−Ｃ１−Ｃ６アルキルからなる群から選択され；＊は、前記抱合体の残部に対する共有結合を示し、ならびに放射性核種は、前記抱合体またはその医薬的に許容される塩に結合している］
で示されるイメージング剤である、請求項６０〜８１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８４】
前記イメージング剤が、式
【化４２】
2019512511.tif 000128
［式中、
Ｍは、放射性核種の陽イオンであり、Ｒ’は、Ｈであるか、あるいはＲ’は、Ｃ１−Ｃ６アルキル、アミノ−Ｃ１−Ｃ６アルキル、カルボキシ−Ｃ１−Ｃ６アルキル、ヒドロキシル−Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ６−Ｃ１０アリール、Ｃ６−Ｃ１０アリール−Ｃ１−Ｃ６アルキル、およびＣ５−Ｃ１０ヘテロアリール−Ｃ１−Ｃ６アルキルからなる群から選択され、ならびに、＊は、前記抱合体またはその医薬的に許容される塩の残部に対する共有結合を示す］
で示されるイメージング剤である、請求項６０〜８３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８５】
前記薬剤が、式
【化４３】
2019512511.tif 000129
［式中、＊は、前記抱合体の残部に対する共有結合を示し、ならびに放射性核種は、前記抱合体またはその医薬的に許容される塩に結合している］
で示されるイメージング剤である、請求項６０〜８３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８６】
前記薬剤が、式
【化４４】
2019512511.tif 000130
［式中、Ｍは、放射性核種の陽イオンであり、ならびに、＊は、前記抱合体またはその医薬的に許容される塩の残部に対する共有結合を示す］
で示されるイメージング剤である、請求項６０〜８５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８７】
前記放射性核種が、ガリウムの同位体、インジウムの同位体、銅の同位体、テクネチウムの同位体、レニウムの同位体からなる群から選択される、請求項８３〜８６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８８】
前記放射性核種が、テクネチウムの同位体である、請求項８３〜８７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８９】
前記放射性核種が、９９ｍＴｃである、請求項８３〜８８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９０】
前記抱合体が、
【化４５】
2019512511.tif 000131
からなる群またはその医薬的に許容される塩から選択されるものである、請求項６１に記載方法。
【請求項９１】
請求項１〜５９のいずれか１項に記載の抱合体またはその医薬的に許容される塩を含み、適宜、少なくとも１個の医薬的に許容される賦形剤を含んでいてもよい組成物。
【請求項９２】
対象における細胞の集団を画像化する方法において使用するための、請求項１〜４６のいずれか１項に記載の抱合体。
【請求項９３】
前記方法が、前記細胞を画像化するために有効な前記抱合体の量を前記対象に投与することを含むものである、請求項９２に記載の使用。
【請求項９４】
対象における細胞の集団を画像化するために有用な薬剤の製造における、請求項１〜４６のいずれか１項に記載の抱合体の使用。
【請求項９５】
前記方法が、前記細胞を画像化するために有効な前記抱合体の量を前記対象に投与することを含むものである、請求項９４に記載の使用。
【請求項９６】
対象における癌を治療する方法において使用するための、請求項１〜２８または４７〜５９のいずれか１つに記載の抱合体。
【請求項９７】
前記方法が、前記癌を画像化するために有効な抱合体の量を前記対象に投与することを含むものである、請求項９６に記載の抱合体。
【請求項９８】
インビトロで細胞の集団を画像化する方法であって、ａ．前記細胞を請求項１〜２８、４２、または４４のいずれか１項に記載の抱合体と接触させて、標識された細胞を供し、次いでｂ．蛍光光源を用いて前記標識された細胞を視覚化することを含む方法。
【請求項９９】
対象における癌の治療方法であって、有効な量の請求項１〜２８または４７〜５９のいずれか１項に記載の抱合体；またはその医薬的に許容される塩を前記対象に投与することを特徴とする方法。
【請求項１００】
ｂ．画像化によって治療するための患者を同定することをさらに含む、請求項９９に記載の方法。
【請求項１０１】
前記画像化が、ａ．有効な量の請求項２９〜４１、４５、または４６のいずれか１項に記載の抱合体を前記患者に投与し；次いでｂ．前記患者をＣＡ ＩＸを発現する癌に罹っていると同定することを含むものである、請求項１００に記載の方法。
【請求項１０２】
前記癌が、肺、結腸直腸、胃、膵臓、乳房、子宮頸、膀胱、卵巣、脳、頭頸部、口腔、および腎臓癌からなる群から選択されるものである、請求項９９〜１０１のいずれか１項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、出典明示により本明細書に取り込まれる２０１６年３月１６日に提出した米国仮特許出願第６２／３０９，２６４号、および２０１６年３月１６日に提出した米国仮特許出願第６２／３０９，２６８号の３５ Ｕ．Ｓ．Ｃ．§ １１９（ｅ）下での利益を請求するものである。
【０００２】
技術分野
本開示は、炭酸脱水酵素ＩＸ阻害剤の組成物および方法に関する。本開示はまた、炭酸脱水酵素ＩＸ阻害剤の標的抱合体に関する。本開示はまた、ＳＰＥＣＴ画像化方法において炭酸脱水酵素ＩＸ阻害剤の抱合体を標的とするための使用に関する。
【背景技術】
【０００３】
微小環境は、腫瘍内の癌細胞の表現形に著しく影響を与えうる。このような微小環境の影響の１つは、腫瘍内に存在する脈管構造の形成が乏しいことによる低酸素症である（例えば、Noman MZ, Hasmim M, Messai Y, Terry S, Kieda C, Janji B, Chouaib S.  Hypoxia: a key player in anti-tumor immune response.  A review in the Theme:  Cellular Responses to Hypoxia.  Am J Physiol Cell Physiol.  2015, 309(1):C569-C579を参照のこと）。研究により、全遺伝子の１％〜１．５％が低酸素症により調節されることが示されている（Harris AL.  Hypoxia - a key regulatory factor in tumour growth.  Nat Rev Cancer.  2002.  2(1):38-47）。そして、予想どおり、低酸素状態の癌細胞は、著しく異なる遺伝子発現のパターンを示しうる。これらの変化は、化学療法に対する感受性の相違を生じ、次いで低酸素状態の微小環境において、癌の攻撃性と再発が高まりうる（Yamada S, Utsunomiya T, Morine Y, Imura S, Ikemoto T, Arakawa Y, Kanamoto M, Iwahashi S, Saito Y, Takasu C, Ishikawa D, Shimada M.  Expressions of hypoxia-inducible factor-1 and epithelial cell adhesion molecule are linked with aggressive local recurrence of hepatocellular）。
【０００４】
低酸素症の効果により、イメージングを利用するために、癌特異的な低酸素症マーカーを同定することが行われてきた。このようなマーカーの１つである炭酸脱水酵素ＩＸ（ＣＡ ＩＸ）は、低酸素誘導因子−１（ＨＩＦ−１）の活性化により発現される。ＣＡ ＩＸは、二酸化炭素の可逆的な水和反応（（ＣＯ２＋Ｈ２Ｏ⇔ＨＣＯ３−＋Ｈ＋）を触媒する亜鉛を通常含有する金属タンパク質の一群のメンバーである。ＣＡ ＩＸは、ＣＯ２水和反応について最も活性ななＣＡであり、配列相同性に基づく４つのドメイン：Ｎ末端プロテオグリカン様（ＰＧ）ドメイン、ＣＡ触媒ドメイン、膜貫通部位（ＴＭ）、および細胞質内（ＩＣ）部分を含有する。ＣＡ ＩＸは、肺、結腸直腸、胃、膵臓、乳房、子宮頸、膀胱、卵巣、脳、頭頸、および口腔癌を含む多くの癌で発現される。また、構成的なＨＩＦ−１活性を生じるＶＨＬ遺伝子の突然変異により、腎臓の明細胞癌のような癌は、ＣＡ ＩＸを、基準レベルより１５０倍まで上流調節することが示されている。一方で、正常な細胞において、ＣＡ ＩＸは、胃および胆嚢の上皮細胞でのみ発現され、触媒的に不活性である可能性が高い。
【０００５】
ＣＡ ＩＸは、イメージング剤の特異的な送達のための優れた標的としてもてはやされてきたため、小分子−および抗体−抱合体の両方が、低酸素の腫瘍を画像化するために作り出されてきた。例えば、ＣＡ ＩＸ特異的なリガンドは、結腸、腎臓、および子宮頸癌のマウス異種移植モデルを画像化するために用いられている。ＣＡ ＩＸ特異的な抗体は、明細胞腎臓癌に罹っているヒト患者に加えて、明細胞腎臓、頭頸、大腸、および子宮頸癌のマウス異種移植モデルを画像化するために用いられている。
【０００６】
さらに、ＣＡ ＩＸを標的としたイメージング剤に対して多大な努力がなされている一方で、ＣＡ ＩＸを発現する癌に対する標的治療剤についてはほとんど行われていなかった。ＩＸを標的とした治療の数本の論文は、治療用の放射性核種で直接標識され（Muselaers CH, Oosterwijk E, Bos DL, Oyen WJ, Mulders PF, Boerman OC.  Optimizaing lutetium 177-anti-carbonic anhydrase IX radioimmunotherapy in an intraperitoneal clear cell renal cell carcinoma xenograft model.  Mol Imaging.  2014.  13:1-7）、または薬物を含有するリポソームに抱合された（Wong BC, Zhang H, Qin L, Chen H, Fang C, Lu A, Yang Z.  Carbonic anhydrase IX-directed immunoliposomes for targeted drug delivery to human lung cancer cells in vitro.  Drug Des Devel Ther.  2014, 8:993-1001）抗ＣＡ ＩＸ抗体の使用に関するものである。我々の知る限り、高い効力の抗癌薬に直接抱合された小分子ＣＡ ＩＸリガンドの有効性は、インビボマウス異種移植モデルで報告されていない。
【０００７】
小分子抱合体が、主に、ＰＥＴおよび蛍光発光を用いて低酸素の腫瘍を画像化するが、さらなる選択性イメージング剤の開発が必要とされている。また、ＣＡ ＩＸ標的治療の開発が必要とされている。
【発明の概要】
【０００８】
概要
ある実施態様において、本開示は、治療剤およびイメージング剤からなる群から選択される少なくとも１個の薬剤；またはその医薬的に許容される塩にリンカーを介して共有結合しているＣＡ ＩＸリガンドを含む抱合体を提供する。ある実施態様において、本開示は、治療剤およびイメージング剤からなる群から選択される少なくとも１個の薬剤；またはその医薬的に許容される塩に共有結合されているＣＡ ＩＸリガンドを含む抱合体を提供する。ある実施態様において、本開示は、式Ｂ−Ｌ−Ａ（式中、Ｂは、炭酸脱水酵素ＩＸの結合リガンドであり、Ｌは、任意のリンカーであり、ならびにＡは、治療剤およびイメージング剤である）で示される抱合体を提供する。これらの実施態様のある態様において、前記ＣＡ ＩＸリガンドは、アリールスルホンアミドを含有する化合物である。これらの実施態様のある態様において、前記ＣＡ ＩＸリガンドは、式
【化１】
2019512511.tif 000003
［式中、
各ＲＡは、独立して、ハロゲン、−ＯＲ１’、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１’、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−ＯＳ（Ｏ）Ｒ１’、−ＯＳ（Ｏ）２Ｒ１’、−ＳＲ１’、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１’、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１’、−Ｓ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１’Ｒ２’、−ＯＳ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−ＯＳ（Ｏ）２ＮＲ１’Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｃ（Ｏ）Ｒ１’、−ＮＲ１’Ｃ（Ｏ）ＯＲ２’、−ＮＲ１’Ｃ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｓ（Ｏ）Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｓ（Ｏ）２Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｓ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１’Ｒ２’、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１’、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１’、および−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’からなる群から選択され；
Ｙ１は、−ＯＲＢ、−ＳＲＢ、−ＮＲＢＲＢ’、−Ｓ（Ｏ）２ＲＢ、−ＮＲＢＣ（Ｏ）ＲＢ’、または−ＮＲＢＣ（Ｏ）ＮＲＢＲＢ’であり；
各ＲＢおよびＲＢ’は、独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ２−Ｃ１０アルケニル、またはフェニルであって；Ｃ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ２−Ｃ１０アルケニル、およびフェニルにおける各水素原子は、−ＣＮ、Ｃ１−Ｃ６アルキル−（５〜９員ヘテロアリール）、−ＮＲ３’Ｒ４’、−ＮＲ３’（ＣＨ２）ｍ２ＮＲ３’Ｒ４’、または−Ｃ６Ｈ４ＯＲ３’で適宜置換されていてもよく；
各Ｒ３’およびＲ４’は、独立して、Ｈ、−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）＊、−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＯＲ５’、−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＮＲ５’Ｒ６’、または前記抱合体の残部に対する結合であり；
各Ｒ５’およびＲ６’は、独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ８アルキル、またはフェニルであって、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ２−Ｃ１０アルケニル、およびフェニルにおける各水素原子は、Ｃ１−Ｃ６アルキル−（フェニル）、−ＯＲ１’、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１’、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−ＯＳ（Ｏ）Ｒ１’、−ＯＳ（Ｏ）２Ｒ１’、−ＳＲ１’、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１’、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１’、−Ｓ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１’Ｒ２、−ＯＳ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−ＯＳ（Ｏ）２ＮＲ１’Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｃ（Ｏ）Ｒ１’、−ＮＲ１’Ｃ（Ｏ）ＯＲ２’、−ＮＲ１’Ｃ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｓ（Ｏ）Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｓ（Ｏ）２Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｓ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１’Ｒ２’、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１’、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１’、または−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’で適宜置換されていてもよく；
各Ｒ１’およびＲ２’は、独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、およびＣ３−Ｃ９シクロアルキルからなる群から選択され； 
ｍ１は、１、２、３、４、または５であり；ならびに
＊は、前記抱合体の残部に対する共有結合を示す］
で示される化合物である。
【０００９】
ある実施態様において、ＲＡの少なくとも１個は、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１’Ｒ２’である。ある実施態様において、ｍ１は、１であり、ならびにＲＡは、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１’Ｒ２’である。
【００１０】
ある実施態様において、前記ＣＡ ＩＸリガンドは、
【化２】
2019512511.tif 000004
からなる群から選択されるものであって、
式中、各Ｒ１およびＲ３は、独立して、Ｈ、−ＯＲ４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ４、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５、−ＯＳ（Ｏ）Ｒ４、−ＯＳ（Ｏ）２Ｒ４、−ＳＲ４、−Ｓ（Ｏ）Ｒ４、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ４、−Ｓ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ４Ｒ５、−ＯＳ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５、−ＯＳ（Ｏ）２ＮＲ４Ｒ５、−ＮＲ４Ｒ５、−ＮＲ４Ｃ（Ｏ）Ｒ５、−ＮＲ４Ｃ（Ｏ）ＯＲ５、−ＮＲ４Ｃ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５、−ＮＲ４Ｓ（Ｏ）Ｒ５、−ＮＲ４Ｓ（Ｏ）２Ｒ５，−ＮＲ４Ｓ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５、−ＮＲ４Ｓ（Ｏ）２ＮＲ４Ｒ５、−Ｃ（Ｏ）Ｒ４、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ４、および−Ｃ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５からなる群から選択され；
Ｒ２は、Ｈ、−ＣＮ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、およびＣ２−Ｃ６アルキニルからなる群から選択され；
Ｗは、−Ｏ−、−ＣＨ２−、または−ＮＲ４’−であり；
Ｘは、−Ｏ−、−ＣＨ２−、または−ＮＲ５’−であり；
各Ｒ４、Ｒ５、Ｒ４’、およびＲ５’は、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、およびＣ２−Ｃ６アルキニルからなる群から選択され；
ｍは、１〜４の整数であり；
ｎは、０〜２の整数であり；
各Ｒ６およびＲ７は、独立して、Ｈ、−ＯＲ９、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ９、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０、−ＯＳ（Ｏ）Ｒ９、−ＯＳ（Ｏ）２Ｒ９、−ＳＲ９、−Ｓ（Ｏ）Ｒ９、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ９、−Ｓ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ９Ｒ１０、−ＯＳ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０、−ＯＳ（Ｏ）２ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ９Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＲ９Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＮＲ９Ｃ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ９Ｓ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＲ９Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０，−ＮＲ９Ｓ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ９Ｓ（Ｏ）２ＮＲ９Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ９、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ９、および−Ｃ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０からなる群から選択され；
Ｒ８は、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、およびＣ２−Ｃ６アルキニル、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１１、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１１、および−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１１Ｒ１２からなる群から選択され；
Ｙは、−Ｏ−、−ＣＨ２−、または−ＮＲ９’−であり；
Ｚは、−Ｏ−、−ＣＨ２−、または−ＮＲ１０’−であり；
各Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ９’、Ｒ１０’Ｒ１１、およびＲ１２は、独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、およびＣ２−Ｃ６アルキニルからなる群から選択され；
ｐは、１〜４の整数であり；
ｒは、０〜４の整数であり；
ｔは、１〜３の整数であり；
各Ｒ１３およびＲ１４は、独立して、Ｈ、−ＯＲ１５、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ１５Ｒ１６、−ＯＳ（Ｏ）Ｒ１５、−ＯＳ（Ｏ）２Ｒ１５、−ＳＲ１５、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１５、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１５、−Ｓ（Ｏ）ＮＲ１５Ｒ１６、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１５Ｒ１６、−ＯＳ（Ｏ）ＮＲ１５Ｒ１６、−ＯＳ（Ｏ）２ＮＲ１５Ｒ１６、−ＮＲ１５Ｒ１６、−ＮＲ１５Ｃ（Ｏ）Ｒ１６、−ＮＲ１５Ｃ（Ｏ）ＯＲ１６、−ＮＲ１５Ｃ（Ｏ）ＮＲ１５Ｒ１６、−ＮＲ１５Ｓ（Ｏ）Ｒ１６、−ＮＲ１５Ｓ（Ｏ）２Ｒ１６、−ＮＲ１５Ｓ（Ｏ）ＮＲ１５Ｒ１６、−ＮＲ１５Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１５Ｒ１６、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１５、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１５、および−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１５Ｒ１６からなる群から選択され；
Ｗ１は、−Ｏ−、−ＣＨ２−、または−ＮＲ１５’−であり；
Ｘ１は、−Ｏ−、−ＣＨ２−、または−ＮＲ１６’−であり；
各Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１５’、Ｒ１６’、およびＲ１７は、独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、およびＣ２−Ｃ６アルキニルからなる群から選択され；
ｕは、１〜４の整数であり；
ｖは、０〜２の整数であり；ならびに
各＊は、前記抱合体の残部に対する共有結合を示すものである。
【００１１】
他の実施態様において、本開示は、対象における細胞の集団を画像化する方法であって、
ａ．少なくとも１個のイメージング剤；またはその医薬的に許容される塩にリンカーを介して共有結合しているＣＡ ＩＸリガンドを含む抱合体の有効な量を、前記対象に投与することを含む方法を提供する。
【００１２】
他の実施態様において、本開示は、対象における細胞の集団を画像化する方法であって、
ａ．式Ｂ−Ｌ−Ａ［式中、Ｂは、炭酸無水酵素ＩＸの結合リガンドであり、Ｌは、任意のリンカーであり、ならびにＡは、イメージング剤である］で示される抱合体の有効な量を、前記対象に投与することを含む方法を提供する。これらの実施態様のある態様において、前記ＣＡ ＩＸリガンドは、アリールスルホンアミドを含有する化合物である。
【００１３】
これらの実施態様のある態様において、前記ＣＡ ＩＸリガンドは、式
【化３】
2019512511.tif 000005
［式中、ＲＡ、Ｙ１、およびｍ１は、本明細書で定義されるとおりである］
で示されるものである。
【００１４】
これらの実施態様のある態様において、前記ＣＡ ＩＸリガンドは、
【化４】
2019512511.tif 000006
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３Ｒ４、Ｒ５、Ｒ４’、Ｒ５’、Ｒ４’’、Ｒ５’’、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ９’、Ｒ１０’Ｒ９’’、Ｒ１０’’、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６Ｒ１５’、Ｒ１６’Ｒ１５’’、Ｒ１６’’、Ｒ１７、Ｗ、Ｗ１、Ｘ、Ｘ１、Ｙ、Ｚ、ｍ、ｎ、ｐ、ｒ、ｔ、ｕ、およびｖは、本明細書に記載されるとおりであり、各＊は、前記抱合体、またはその医薬的に許容される塩の残部に対する共有結合を示す］
からなる群から選択されるものである。これらの実施態様のある態様において、前記イメージング剤は、ＳＰＥＣＴイメージング剤、またはその医薬的に許容される塩である。これらの実施態様のある態様において、前記イメージング剤は、式
【化５】
2019512511.tif 000007
［式中、Ｒ’は、Ｈであるか、あるいはＲ’は、Ｃ１−Ｃ６アルキル、アミノ−Ｃ１−Ｃ６アルキル、カルボキシ−Ｃ１−Ｃ６アルキル、ヒドロキシル−Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ６−Ｃ１０アリール、Ｃ６−Ｃ１０アリール−Ｃ１−Ｃ６アルキルアルキル、およびＣ５−Ｃ１０ヘテロアリール−Ｃ１−Ｃ６アルキルからなる群から選択され；＊は、前記抱合体の残部に対する共有結合を示し、放射性核種は、前記抱合体に結合している］
で示されるイメージング剤、またはその医薬的に許容される塩である。これらの実施態様のある態様において、前記イメージング剤は、式
【化６】
2019512511.tif 000008
［式中、Ｍは、放射性核種の陽イオンであり、ならびに、＊は、前記抱合体、またはその医薬的に許容される塩の残部に対する共有結合を示す］
で示されるイメージング剤、またはその医薬的に許容される塩である。これらの実施態様のある態様において、前記放射性核種は、ガリウムの同位体、インジウムの同位体、銅の同位体、テクネチウムの同位体、およびレニウムの同位体からなる群から選択されるものである。これらの実施態様のある態様において、前記放射性核種は、テクネチウムの同位体である。これらの実施態様のある態様において、前記放射性核種は、９９ｍＴｃである。これらの実施態様のある態様において、前記抱合体は、
【化７】
2019512511.tif 000009
からなる群またはその医薬的に許容される塩から選択される。
【００１５】
他の実施態様において、本開示は、本明細書に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩を含み、適宜、少なくとも１個の医薬的に許容される賦形剤を含んでいてもよい組成物を提供する。
【００１６】
他の実施態様において、本開示は、対象における細胞の集団を画像化する方法における使用のための本明細書に記載の抱合体を提供する。これらの実施態様のある態様において、前記方法は、前記細胞を画像化するために有効な抱合体の量を、前記対象に投与することを含む。
【００１７】
他の実施態様において、本開示は、対象における細胞の集団を画像化するために有用な薬剤の製造における本明細書に記載の抱合体の使用を提供する。これらの実施態様のある態様において、前記方法は、前記細胞を画像化するために有効な抱合体の量を、前記対象に投与することを含む。
【００１８】
他の実施態様において、本開示は、対象における癌の治療方法であって、ａ．有効な量の本明細書に記載の抱合体；またはその医薬的に許容される塩を前記対象に投与することを含む方法を提供する。他の実施態様において、前記方法は、さらに、ｂ．画像化することによる治療のための患者を同定することを含む。これらの実施態様のある態様において、前記画像化は、ｃ．有効な量の抱合体（前記薬剤は、本明細書に記載されるイメージング剤である）を前記患者に投与すること；ならびにｄ．対象を、ＣＡ ＩＸを発現する癌に罹っていると同定することを含む。これらの実施態様のある態様において、前記癌は、肺、結腸直腸、胃、膵臓、乳房、子宮頸、膀胱、卵巣、脳、頭頸部、口腔、および腎臓癌からなる群から選択される。
【００１９】
他の実施態様において、本開示は、対象における癌の治療方法において使用するための本明細書に記載される抱合体を提供する。これらの実施態様のある態様において、前記方法は、前記癌を治療するために有効な抱合体の量を前記対象に投与することを含む。これらの実施態様のある態様において、前記癌は、肺、結腸直腸、胃、膵臓、乳房、子宮頸、膀胱、卵巣、脳、頭頸、口腔、および腎臓癌からなる群から選択されるものである。
【００２０】
他の実施態様において、本開示は、対象における癌を治療するために有用な薬剤の製造における本明細書に記載の抱合体の使用を提供する。これらの実施態様のある態様において、前記方法は、前記細胞を治療するために有効な抱合体の量を前記対象に投与することを含む。これらの実施態様のある態様において、前記癌は、肺、結腸直腸、胃、膵臓、乳房、子宮頸、膀胱、卵巣、脳、頭頸、口腔、および腎臓癌からなる群から選択されるものである。
【００２１】
他の実施態様において、本開示は、インビトロで細胞の集団を画像化する方法であって、
ａ．前記細胞を本明細書に記載の抱合体と接触させて、標識された細胞を供し、
ｂ．前記標識された細胞を蛍光光源で視覚化すること
を含む方法を提供する。ある実施態様において、本開示は、式ＶＩで示される抱合体（本明細書では、Ｈｙｐｏｘｙｆｌｕｏｒとも呼ばれる）
【化８】
2019512511.tif 000010
またはその医薬的に許容される塩を提供する。
【００２２】
ある実施態様において、本開示は、本明細書に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩を含み、適宜、少なくとも１個の医薬的に許容される賦形剤を含んでいてもよい組成物を提供する。
【００２３】
ある実施態様において、本開示は、対象における細胞の集団を画像化する方法であって、ａ．式ＶＩで示される抱合体またはその医薬的に許容される塩を前記対象に投与して、ＣＡ ＩＸタンパク質を発現する細胞に結合する抱合体を供し；ｂ．近赤外波長光による照射によって前記細胞に結合した抱合体を照射し、次いでｃ．発光波長で前記細胞から放出される光を検出することを含む方法を提供する。
【００２４】
ある実施態様において、本開示は、対象における細胞の集団を画像化する方法であって、ａ．式ＶＩで示される抱合体またはその医薬的に許容される塩を前記対象に投与して、ＣＡ ＩＸタンパク質を発現する細胞に結合する抱合体を供し；次いでｂ．近赤外波長光による照射によって前記細胞に結合した抱合体を視覚化することを含む方法を提供する。
【００２５】
ある実施態様において、本開示は、対象における癌を画像化する方法であって、ａ．式ＶＩで示される抱合体またはその医薬的に許容される塩を前記対象に投与して、ＣＡ ＩＸタンパク質を発現する癌細胞に結合する抱合体を供し；ｂ．近赤外波長光を用いて癌細胞に結合した抱合体を照射し、次いでｃ．発光波長で前記癌細胞から放出される光を検出することを含む方法を提供する。これらの実施態様のある態様において、前記癌は、肺、結腸直腸、胃、膵臓、乳房、子宮頸、膀胱、卵巣、脳、頭頸、口腔、および腎臓癌からなる群から選択される。
【００２６】
ある実施態様において、本開示は、対象における癌を画像化する方法であって、ａ．式ＶＩで示される抱合体またはその医薬的に許容される塩を前記対象に投与して、ＣＡ ＩＸタンパク質を発現する癌細胞に結合する抱合体を供し；次いでｂ．近赤外波長光による照射によって前記癌細胞に結合した抱合体を視覚化することを含む方法を提供する。これらの実施態様のある態様において、前記癌は、肺、結腸直腸、胃、膵臓、乳房、子宮頸、膀胱、卵巣、脳、頭頸、口腔、および腎臓癌からなる群から選択される。
【００２７】
他の実施態様において、本開示は、患者における癌を画像化する方法において使用するための式ＶＩで示される抱合体またはその医薬的に許容される塩を提供する。これらの実施態様のある態様において、前記方法は、ａ．前記抱合体またはその医薬的に許容される塩を前記対象に投与して、ＣＡ ＩＸタンパク質を発現する細胞に結合する抱合体を供し；次いでｂ．近赤外波長光による照射によって前記細胞に結合した抱合体を視覚化することを含む。これらの実施態様のある態様において、前記方法は、ａ．式ＶＩで示される抱合体またはその医薬的に許容される塩を前記対象に投与して、ＣＡ ＩＸタンパク質を発現する癌細胞に結合する抱合体を供し；ｂ．近赤外波長光を用いて前記癌細胞に結合した抱合体を照射し、次いでｃ．蛍光波長で前記癌細胞から放出された光を検出することを含む。これらの実施態様のある態様において、前記癌は、肺、結腸直腸、胃、膵臓、乳房、子宮頸、膀胱、卵巣、脳、頭頸、口腔、および腎臓癌からなる群から選択される。
【００２８】
ある実施態様において、本開示は、患者における癌を画像化するために有用な薬剤の製造における式ＶＩで示される化合物またはその医薬的に許容される塩の使用を提供する。これらの実施態様のある態様において、前記方法は、ａ．前記抱合体またはその医薬的に許容される塩を前記患者に投与して、ＣＡ ＩＸタンパク質を発現する細胞に結合する抱合体を供し；次いでｂ．近赤外波長光による照射によって前記細胞に結合した抱合体を視覚化することを含む。これらの実施態様のある態様において、前記方法は、ａ．式ＶＩで示される抱合体またはその医薬的に許容される塩を前記対象に投与して、ＣＡ ＩＸタンパク質を発現する癌細胞に結合する抱合体を供し；ｂ．近赤外波長光を用いて前記癌細胞に結合した抱合体を照射し、次いでｃ．蛍光波長で前記癌細胞から放出された光を検出することを含む。これらの実施態様のある態様において、前記癌は、肺、結腸直腸、胃、膵臓、乳房、子宮頸、膀胱、卵巣、脳、頭頸、口腔、および腎臓癌からなる群から選択される。
【００２９】
ある実施態様において、本開示は、インビボで細胞の集団を画像化する方法であって、ａ．前記細胞を式ＶＩで示される抱合体と接触させて、標識された細胞を供し、次いでｂ．前記標識された細胞を蛍光光源で視覚化することを含む方法を提供する。ある実施態様において、本開示は、インビトロで細胞の集団を画像化する方法であって、ａ．前記細胞を式ＶＩで示される抱合体と接触させて、標識された細胞を供し、ｂ．近赤外波長光を用いて前記細胞に結合した抱合体を照射し、次いでｃ．蛍光波長で細胞から放出された光を検出することを含む方法を提供する。
【００３０】
本発明の実施態様は、下記の番号付けされた項によってさらに記載される。本明細書に記載の実施態様のいずれもは、本願明細書に記載の他の実施態様のいずれもと相互に矛盾しない程度で組み合わせて用いることができるものと理解される。
【００３１】
１．式Ｂ−Ｌ−Ａ
［式中、Ｂは、炭酸無水酵素ＩＸの結合リガンドであり、Ｌは、任意のリンカーであり、ならびにＡは、治療剤およびイメージング剤である］
で示される抱合体。
【００３２】
２．前記ＣＡ ＩＸリガンドが、式
【化９】
2019512511.tif 000011
［式中、
各ＲＡは、独立して、Ｈ、ハロゲン、−ＯＲ１’、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１’、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−ＯＳ（Ｏ）Ｒ１’、−ＯＳ（Ｏ）２Ｒ１’、−ＳＲ１’、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１’、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１’、−Ｓ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１’Ｒ２’、−ＯＳ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−ＯＳ（Ｏ）２ＮＲ１’Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｃ（Ｏ）Ｒ１’、−ＮＲ１’Ｃ（Ｏ）ＯＲ２’、−ＮＲ１’Ｃ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｓ（Ｏ）Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｓ（Ｏ）２Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｓ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１’Ｒ２’、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１’、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１’、および−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’からなる群から選択され；
Ｙ１は、−ＯＲＢ、−ＳＲＢ、−ＮＲＢＲＢ’、−Ｓ（Ｏ）２ＲＢ、−ＮＲＢＣ（Ｏ）ＲＢ’、または−ＮＲＢＣ（Ｏ）ＮＲＢＲＢ’であり；
各ＲＢおよびＲＢ’は、独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ２−Ｃ１０アルケニル、またはフェニルであって；Ｃ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ２−Ｃ１０アルケニル、およびフェニルにおける各水素原子は、−ＣＮ、Ｃ１−Ｃ６アルキル−（５〜９員ヘテロアリール）、−ＮＲ３’Ｒ４’、−ＮＲ３’（ＣＨ２）ｍ２ＮＲ３’Ｒ４’、または−Ｃ６Ｈ４ＯＲ３’で適宜置換されていてもよく；
各Ｒ３’およびＲ４’は、独立して、Ｈ、−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）＊、−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＯＲ５’、−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＮＲ５’Ｒ６’、または前記抱合体の残部に対する結合であり；
各Ｒ５’およびＲ６’は、独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ８アルキル、またはフェニルであって、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ２−Ｃ１０アルケニル、およびフェニルにおける各水素原子は、Ｃ１−Ｃ６アルキル−（フェニル）、−ＯＲ１’、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１’、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−ＯＳ（Ｏ）Ｒ１’、−ＯＳ（Ｏ）２Ｒ１’、−ＳＲ１’、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１’、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１’、−Ｓ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１’Ｒ２、−ＯＳ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−ＯＳ（Ｏ）２ＮＲ１’Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｃ（Ｏ）Ｒ１’、−ＮＲ１’Ｃ（Ｏ）ＯＲ２’、−ＮＲ１’Ｃ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｓ（Ｏ）Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｓ（Ｏ）２Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｓ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１’Ｒ２’、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１’、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１’、および−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’で適宜置換されていてもよく；
各Ｒ１’およびＲ２’は、独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、およびＣ３−Ｃ９シクロアルキルからなる群から選択され；
ｍ１は、１、２、３、４、または５であり；ならびに
＊は、前記抱合体の残部に対する共有結合を示す］
で示されるものである、項１に記載の抱合体。
【００３３】
３．前記ＣＡ ＩＸリガンドが、
【化１０】
2019512511.tif 000012
［式中、
各Ｒ１およびＲ３は、Ｈ、ＯＲ４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ４、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５、−ＯＳ（Ｏ）Ｒ４、−ＯＳ（Ｏ）２Ｒ４、−ＳＲ４、−Ｓ（Ｏ）Ｒ４、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ４、−Ｓ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ４Ｒ５、−ＯＳ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５、−ＯＳ（Ｏ）２ＮＲ４Ｒ５、−ＮＲ４Ｒ５、−ＮＲ４Ｃ（Ｏ）Ｒ５、−ＮＲ４Ｃ（Ｏ）ＯＲ５、−ＮＲ４Ｃ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５、−ＮＲ４Ｓ（Ｏ）Ｒ５、−ＮＲ４Ｓ（Ｏ）２Ｒ５，−ＮＲ４Ｓ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５、−ＮＲ４Ｓ（Ｏ）２ＮＲ４Ｒ５、−Ｃ（Ｏ）Ｒ４、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ４、および−Ｃ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５からなる群から選択され；
Ｒ２は、Ｈ、−ＣＮ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、およびＣ２−Ｃ６アルキニルからなる群から選択され； 
Ｗは、−Ｏ−、−ＣＨ２−、または−ＮＲ４’−であり；
Ｘは、−Ｏ−、−ＣＨ２−、または−ＮＲ５’−であり；
各Ｒ４、Ｒ５、Ｒ４’、およびＲ５’は、独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、およびＣ２−Ｃ６アルキニルからなる群から選択され；
ｍは、１〜４の整数であり；
ｎは、０〜２の整数であり；
各Ｒ６およびＲ７は、独立して、Ｈ、ＯＲ９、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ９、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０、−ＯＳ（Ｏ）Ｒ９、−ＯＳ（Ｏ）２Ｒ９、−ＳＲ９、−Ｓ（Ｏ）Ｒ９、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ９、−Ｓ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ９Ｒ１０、−ＯＳ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０、−ＯＳ（Ｏ）２ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ９Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＲ９Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＮＲ９Ｃ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ９Ｓ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＲ９Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０，−ＮＲ９Ｓ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ９Ｓ（Ｏ）２ＮＲ９Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ９、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ９、および−Ｃ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０からなる群から選択され；
Ｒ８は、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１１、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１１、および−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１１Ｒ１２からなる群から選択され；
Ｙは、−Ｏ−、−ＣＨ２−、または−ＮＲ９’−であり；
Ｚは、−Ｏ−、−ＣＨ２−、または−ＮＲ１０’−であり；
各Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ９’、Ｒ１０’Ｒ１１、およびＲ１２は、独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、およびＣ２−Ｃ６アルキニルからなる群から選択され；
ｐは、１〜４の整数であり；
ｒは、０〜４の整数であり；
ｔは、１〜３の整数であり；
各Ｒ１３およびＲ１４は、独立して、Ｈ、−ＯＲ１５、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ１５Ｒ１６、−ＯＳ（Ｏ）Ｒ１５、−ＯＳ（Ｏ）２Ｒ１５、−ＳＲ１５、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１５、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１５、−Ｓ（Ｏ）ＮＲ１５Ｒ１６、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１５Ｒ１６、−ＯＳ（Ｏ）ＮＲ１５Ｒ１６、−ＯＳ（Ｏ）２ＮＲ１５Ｒ１６、−ＮＲ１５Ｒ１６、−ＮＲ１５Ｃ（Ｏ）Ｒ１６、−ＮＲ１５Ｃ（Ｏ）ＯＲ１６、−ＮＲ１５Ｃ（Ｏ）ＮＲ１５Ｒ１６、−ＮＲ１５Ｓ（Ｏ）Ｒ１６、−ＮＲ１５Ｓ（Ｏ）２Ｒ１６、−ＮＲ１５Ｓ（Ｏ）ＮＲ１５Ｒ１６、−ＮＲ１５Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１５Ｒ１６、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１５、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１５、および−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１５Ｒ１６からなる群から選択され；
Ｗ１は、−Ｏ−、−ＣＨ２−、または−ＮＲ１５’−であり；
Ｘ１は、−Ｏ−、−ＣＨ２−、または−ＮＲ１６’−であり；
各Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１５’、Ｒ１６’、およびＲ１７は、独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、およびＣ２−Ｃ６アルキニルからなる群から選択され；
ｕは、１〜４の整数であり；
ｖは、０〜２の整数であり；ならびに
各＊は、前記抱合体の残部に対する共有結合を示す］
からなる群から選択されるものである、項２に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【００３４】
４．前記ＣＡ ＩＸリガンドが、式
【化１１】
2019512511.tif 000013
で示されるものである、項３に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【００３５】
５．前記ＣＡ ＩＸリガンドが、式
【化１２】
2019512511.tif 000014
で示されるものである、項３に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【００３６】
６．前記ＣＡ ＩＸリガンドが、式
【化１３】
2019512511.tif 000015
で示されるものである、項５に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【００３７】
７．前記ＣＡ ＩＸリガンドが、式
【化１４】
2019512511.tif 000016
で示されるものである、項３に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【００３８】
８．前記ＣＡ ＩＸリガンドが、式
【化１５】
2019512511.tif 000017
で示されるものである、項７に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【００３９】
９．前記リンカーが、−Ｃ（Ｏ）（Ｃ１−Ｃ１２アルキル）Ｃ（Ｏ）−、−ＮＨ−Ｃ１−Ｃ１２アルキル−ＮＨ−、−Ｎ（Ｃ１−Ｃ６アルキル）−Ｃ１−Ｃ１２アルキル−Ｎ（Ｃ１−Ｃ６アルキル）−、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２ＣＨ２（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｑＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２ＣＨ２（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｑ１Ｎ（Ｃ１−Ｃ６アルキル）−、−ＮＨ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｑ２ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（Ｏ）−、および−Ｎ（Ｃ１−Ｃ６アルキル）（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｑ３ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（Ｏ）−からなる群から選択される部分を含むものであって；ｑ、ｑ１、ｑ２、およびｑ３の各々は、１〜４０の整数である、前記項のいずれ１つに記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【００４０】
１０．式
【化１６】
2019512511.tif 000018
［式中、＊は、前記抱合体の残部に対する共有結合を示す］
を含む、項３もしくは４に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【００４１】
１１．式
【化１７】
2019512511.tif 000019
［式中、＊は、前記抱合体の残部に対する共有結合を示す］
を含む、項１、２、３、４、もしくは１０に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【００４２】
１２．式
【化１８】
2019512511.tif 000020
［式中、＊は、前記抱合体の残部に対する共有結合を示す］
を含む、項３もしくは５に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【００４３】
１３．式
【化１９】
2019512511.tif 000021
［式中、＊は、前記抱合体の残部に対する共有結合を示す］
を含む、項１、２、３、５、６、もしくは１２に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【００４４】
１４．式
【化２０】
2019512511.tif 000022
［式中、ｑは、１〜４０の整数であり、ならびに、＊は、前記抱合体の残部に対する共有結合を示す］
を含む、項３もしくは７に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【００４５】
１５．式
【化２１】
2019512511.tif 000023
［式中、ｑは、１〜４０の整数であり、ならびに、＊は、前記抱合体の残部に対する共有結合を示す］
を含む、項１、２、３、７、８、もしくは１４に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【００４６】
１６．ｑが、４である、項１４もしくは１５に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【００４７】
１７．ｑが、１２である、項１４もしくは１５に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【００４８】
１８．ｑが、３６である、項１４もしくは１５に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【００４９】
１９．式
【化２２】
2019512511.tif 000024
［式中、ｑ２は、１〜４０の整数であり、ならびに、＊は、前記抱合体の残部に対する共有結合を示す］
を含む、項３もしくは５に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【００５０】
２０．式
【化２３】
2019512511.tif 000025
［式中、ｑ２は、１〜４０の整数であり、ならびに、＊は、前記抱合体の残部に対する共有結合を示す］
を含む、項１、２、３、５、６、もしくは１９に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【００５１】
２１．ｑ２が、４である、項１９もしくは２０に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【００５２】
２２．ｑ２が、１２である、項１９もしくは２０に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【００５３】
２３．ｑ２が、３６である、項１９もしくは２０に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【００５４】
２４．式
【化２４】
2019512511.tif 000026
［式中、ｑ２は、１〜４０の整数であり、ならびに、＊は、前記抱合体の残部に対する共有結合を示す］
を含む、項３もしくは５に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【００５５】
２５．式
【化２５】
2019512511.tif 000027
［式中、ｑ２は、１〜４０の整数であり、ならびに、＊は、前記抱合体の残部に対する共有結合を示す］
を含む、項１、２、３、５、６、もしくは２４に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【００５６】
２６．ｑ２が、４である、項２４もしくは２５に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【００５７】
２７．ｑ２が、１２である、項２４もしくは２５に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【００５８】
２８．ｑ２が、３６である、項２４もしくは２５に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【００５９】
２９．前記薬剤が、ＳＰＥＣＴイメージング剤である、前記項のいずれか１つに記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【００６０】
３０．前記薬剤が、式
【化２６】
2019512511.tif 000028
［式中、Ｒ’は、Ｈであるか、あるいはＲ’は、Ｃ１−Ｃ６アルキル、アミノ−Ｃ１−Ｃ６アルキル、カルボキシ−Ｃ１−Ｃ６アルキル、ヒドロキシル−Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ６−Ｃ１０アリール、Ｃ６−Ｃ１０アリール−Ｃ１−Ｃ６アルキルアルキル、およびＣ５−Ｃ１０ヘテロアリール−Ｃ１−Ｃ６アルキルからなる群から選択され；ならびに、＊は、前記抱合体の残部に対する共有結合を示す］
で示されるＳＰＥＣＴイメージング剤である、前記項のいずれか１つに記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【００６１】
３１．放射性核種が、前記抱合体に結合している、項３０に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【００６２】
３２．前記薬剤が、式
【化２７】
2019512511.tif 000029
［式中、Ｍは、放射性核種の陽イオンであり、Ｒ’は、Ｈであるか、あるいはＲ’は、Ｃ１−Ｃ６アルキル、アミノ−Ｃ１−Ｃ６アルキル、カルボキシ−Ｃ１−Ｃ６アルキル、ヒドロキシル−Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ６−Ｃ１０アリール、Ｃ６−Ｃ１０アリール−Ｃ１−Ｃ６アルキルアルキル、およびＣ５−Ｃ１０ヘテロアリール−Ｃ１−Ｃ６アルキルからなる群から選択され、＊は、前記抱合体の残部に対する共有結合を示す］
で示されるＳＰＥＣＴイメージング剤である、項１〜２９のいずれか１つに記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【００６３】
３３．前記放射性核種が、ガリウムの同位体、インジウムの同位体、銅の同位体、テクネチウムの同位体、およびレニウムの同位体からなる群から選択されるものである、項３１もしくは３２に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【００６４】
３４．前記放射性核種が、テクネチウムの同位体である、項３３に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【００６５】
３５．前記放射性核種が、９９ｍＴｃである、項３４に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【００６６】
３６．前記薬剤が、式
【化２８】
2019512511.tif 000030
［式中、＊は、前記抱合体の残部に対する共有結合を示す］
で示されるＳＰＥＣＴイメージング剤である、項１〜２９のいずれか１つに記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【００６７】
３７．放射性核種が、前記抱合体に結合している、項３６に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【００６８】
３８．前記薬剤が、式
【化２９】
2019512511.tif 000031
［式中、Ｍは、放射性核種の陽イオンであり、ならびに、＊は、前記抱合体の残部に対する共有結合を示す］
で示されるＳＰＥＣＴイメージング剤である、項１〜２９のいずれか１つに記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩
【００６９】
３９．前記放射性核種が、ガリウムの同位体、インジウムの同位体、銅の同位体、テクネチウムの同位体、およびレニウムの同位体からなる群から選択されるものである、項３７もしくは３８に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【００７０】
４０．前記放射性核種が、テクネチウムの同位体である、項３９に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【００７１】
４１．前記放射性核種が、９９ｍＴｃである、項４０に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【００７２】
４２．前記薬剤が、イメージング剤である、項１〜２８のいずれか１つに記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【００７３】
４３．前記イメージング剤が、ローダミン色素である、項４２に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【００７４】
４４．
【化３０】
2019512511.tif 000032
からなる群から選択される、項１に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【００７５】
４５．
【化３１】
2019512511.tif 000033
からなる群から選択される、項１に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【００７６】
４６．
【化３２】
2019512511.tif 000034
からなる群から選択される、項４５に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【００７７】
４７．前記リンカーが、少なくとも１個のアミノ酸を含む、項１〜９のいずれか１つに記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【００７８】
４８．前記リンカーが、ＤＡＰ、Ｐｒｏ、Ａｓｐ、およびＣｙｓからなる群から選択される少なくとも１個のアミノ酸を含む、項１〜９のいずれか１つに記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【００７９】
４９．前記リンカーが、３個のプロリンアミノ酸を含む、項４７もしくは４８に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【００８０】
５０．前記リンカーが、アミノ酸配列ＤＡＰ−Ａｓｐを含む、項４７もしくは４８に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【００８１】
５１．前記リンカーが、放出可能なリンカーを含む、項１〜２８もしくは４７〜５０のいずれか１つに記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【００８２】
５２．前記放出可能なリンカーが、ジスルフィド結合を含む、項５１に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【００８３】
５３．前記放出可能なリンカーが、式
【化３３】
2019512511.tif 000035
［式中、各＊は、前記抱合体の残部に対する共有結合を示す］
で示される部分を含む、項５１もしくは５２に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【００８４】
５４．前記リンカーが、ヒドラジド部分を含む、項１〜２８もしくは４７〜５３のいずれか１つに記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【００８５】
５５．式
【化３４】
2019512511.tif 000036
［式中、ｑ２は、１〜４０の整数であり、ならびに、＊は、前記抱合体の残部に対する共有結合を示す］
を含む、項２、５、１９、もしくは２１〜２３のいずれか１つに記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【００８６】
５６．式
【化３５】
2019512511.tif 000037
［式中、ｑ２は、１〜４０の整数であり、ならびに、＊は、前記抱合体の残部に対する共有結合を示す］
を含む、項２、５、６、もしくは１９〜２３のいすれか１つに記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【００８７】
５７．前記薬剤が、治療剤である、項１〜２８、もしくは４７〜５６のいずれか１つに記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【００８８】
５８．前記治療剤が、ツブリシンである、項５７に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【００８９】
５９．式
【化３６】
2019512511.tif 000038
で示される、項１に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩。
【００９０】
６０．対象における細胞の集団を画像化する方法であって、
ａ．式Ｂ−Ｌ−Ａ［式中、Ｂは、ＣＡ ＩＸリガンドであり、Ｌは、任意のリンカーであり、ならびにＡは、治療剤およびイメージング剤である］で示される抱合体の有効な量を前記対象に投与すること
を含む方法。
【００９１】
６１．前記ＣＡ ＩＸリガンドが、式
【化３７】
2019512511.tif 000039
［式中、
各ＲＡは、独立して、Ｈ、ハロゲン、−ＯＲ１’、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１’、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−ＯＳ（Ｏ）Ｒ１’、−ＯＳ（Ｏ）２Ｒ１’、−ＳＲ１’、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１’、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１’、−Ｓ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１’Ｒ２’、−ＯＳ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−ＯＳ（Ｏ）２ＮＲ１’Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｃ（Ｏ）Ｒ１’、−ＮＲ１’Ｃ（Ｏ）ＯＲ２’、−ＮＲ１’Ｃ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｓ（Ｏ）Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｓ（Ｏ）２Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｓ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１’Ｒ２’、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１’、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１’、および−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’からなる群から選択され；
Ｙ１は、−ＯＲＢ、−ＳＲＢ、−ＮＲＢＲＢ’、−Ｓ（Ｏ）２ＲＢ、−ＮＲＢＣ（Ｏ）ＲＢ’、または−ＮＲＢＣ（Ｏ）ＮＲＢＲＢ’であり；
各ＲＢおよびＲＢ’は、独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ２−Ｃ１０アルケニル、またはフェニルであって；Ｃ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ２−Ｃ１０アルケニル、およびフェニルにおける各水素原子は、−ＣＮ、Ｃ１−Ｃ６アルキル−（５〜９員ヘテロアリール）、−ＮＲ３’Ｒ４’、−ＮＲ３’（ＣＨ２）ｍ２ＮＲ３’Ｒ４’、または−Ｃ６Ｈ４ＯＲ３’で適宜置換されていてもよく；
各Ｒ３’およびＲ４’は、独立して、Ｈ、−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）＊、−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＯＲ５’、−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＮＲ５’Ｒ６’、または前記抱合体の残部に対する結合であり；
各Ｒ５’およびＲ６’は、独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ８アルキル、またはフェニルであって、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ２−Ｃ１０アルケニル、およびフェニルにおける各水素原子は、Ｃ１−Ｃ６アルキル−（フェニル）、−ＯＲ１’、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１’、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−ＯＳ（Ｏ）Ｒ１’、−ＯＳ（Ｏ）２Ｒ１’、−ＳＲ１’、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１’、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１’、−Ｓ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１’Ｒ２、−ＯＳ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−ＯＳ（Ｏ）２ＮＲ１’Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｃ（Ｏ）Ｒ１’、−ＮＲ１’Ｃ（Ｏ）ＯＲ２’、−ＮＲ１’Ｃ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｓ（Ｏ）Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｓ（Ｏ）２Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｓ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１’Ｒ２’、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１’、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１’、または−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’で適宜置換されていてもよく；
各Ｒ１’およびＲ２’は、独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、およびＣ３−Ｃ９シクロアルキルからなる群から選択され；
ｍ１は、１、２、３、４、または５であり；ならびに
＊は、前記抱合体の残部に対する共有結合を示す］
で示されるものである、項６７に記載の方法。
【００９２】
６２．前記ＣＡ ＩＸリガンドが、
【化３８】
2019512511.tif 000040
［式中、
各Ｒ１およびＲ３は、独立して、Ｈ、ＯＲ４、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ４、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５、−ＯＳ（Ｏ）Ｒ４、−ＯＳ（Ｏ）２Ｒ４、−ＳＲ４、−Ｓ（Ｏ）Ｒ４、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ４、−Ｓ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ４Ｒ５、−ＯＳ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５、−ＯＳ（Ｏ）２ＮＲ４Ｒ５、−ＮＲ４Ｒ５、−ＮＲ４Ｃ（Ｏ）Ｒ５、−ＮＲ４Ｃ（Ｏ）ＯＲ５、−ＮＲ４Ｃ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５、−ＮＲ４Ｓ（Ｏ）Ｒ５、−ＮＲ４Ｓ（Ｏ）２Ｒ５、−ＮＲ４Ｓ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５、−ＮＲ４Ｓ（Ｏ）２ＮＲ４Ｒ５、−Ｃ（Ｏ）Ｒ４、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ４、および−Ｃ（Ｏ）ＮＲ４Ｒ５からなる群から選択され；
Ｒ２は、Ｈ、−ＣＮ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、およびＣ２−Ｃ６アルキニルからなる群から選択され；
Ｗは、−Ｏ−、−ＣＨ２−、または−ＮＲ４’−であり；
Ｘは、−Ｏ−、−ＣＨ２−、または−ＮＲ５’−であり；
各Ｒ４、Ｒ５、Ｒ４’、およびＲ５’は、独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、およびＣ２−Ｃ６アルキニルからなる群から選択され；
ｍは、１〜４の整数であり；
ｎは、０〜２の整数であり；
各Ｒ６およびＲ７は、独立して、Ｈ、ＯＲ９、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ９、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０、−ＯＳ（Ｏ）Ｒ９、−ＯＳ（Ｏ）２Ｒ９、−ＳＲ９、−Ｓ（Ｏ）Ｒ９、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ９、−Ｓ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ９Ｒ１０、−ＯＳ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０、−ＯＳ（Ｏ）２ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ９Ｃ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＲ９Ｃ（Ｏ）ＯＲ１０、−ＮＲ９Ｃ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ９Ｓ（Ｏ）Ｒ１０、−ＮＲ９Ｓ（Ｏ）２Ｒ１０，−ＮＲ９Ｓ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０、−ＮＲ９Ｓ（Ｏ）２ＮＲ９Ｒ１０、−Ｃ（Ｏ）Ｒ９、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ９、および−Ｃ（Ｏ）ＮＲ９Ｒ１０からなる群から選択され；
Ｒ８は、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１１、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１１、および−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１１Ｒ１２からなる群から選択され；
Ｙは、−Ｏ−、−ＣＨ２−、または−ＮＲ９’−であり；
Ｚは、−Ｏ−、−ＣＨ２−、または−ＮＲ１０’−であり；
各Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ９’、Ｒ１０’、Ｒ１１、およびＲ１２は、独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、およびＣ２−Ｃ６アルキニルからなる群から選択され；
ｐは、１〜４の整数であり；
ｒは、０〜４の整数であり；
ｔは、１〜３の整数であり；
各Ｒ１３およびＲ１４は、独立して、Ｈ、−ＯＲ１５、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１５、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ１５Ｒ１６、−ＯＳ（Ｏ）Ｒ１５、−ＯＳ（Ｏ）２Ｒ１５、−ＳＲ１５、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１５、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１５、−Ｓ（Ｏ）ＮＲ１５Ｒ１６、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１５Ｒ１６、−ＯＳ（Ｏ）ＮＲ１５Ｒ１６、−ＯＳ（Ｏ）２ＮＲ１５Ｒ１６、−ＮＲ１５Ｒ１６、−ＮＲ１５Ｃ（Ｏ）Ｒ１６、−ＮＲ１５Ｃ（Ｏ）ＯＲ１６、−ＮＲ１５Ｃ（Ｏ）ＮＲ１５Ｒ１６、−ＮＲ１５Ｓ（Ｏ）Ｒ１６、−ＮＲ１５Ｓ（Ｏ）２Ｒ１６、−ＮＲ１５Ｓ（Ｏ）ＮＲ１５Ｒ１６、−ＮＲ１５Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１５Ｒ１６、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１５、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１５、および−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１５Ｒ１６からなる群から選択され；
Ｗ１は、−Ｏ−、−ＣＨ２−、または−ＮＲ１５’−であり；
Ｘ１は、−Ｏ−、−ＣＨ２−、または−ＮＲ１６’−であり；
各Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１５’、Ｒ１６’、およびＲ１７は、独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、およびＣ２−Ｃ６アルキニルからなる群から選択され；
ｕは、１〜４の整数であり；
ｖは、０〜２の整数であり；ならびに
各＊は、前記抱合体、またはその医薬的に許容される塩の残部に対する共有結合を示す］
からなる群から選択される、項６０または６１に記載の方法。
【００９３】
６３．前記ＣＡ ＩＸリガンドが、式
【化３９】
2019512511.tif 000041
［式中、＊は、前記抱合体、またはその医薬的に許容される塩の残部に対する共有結合を示す］
で示されるものである、項６１または６２に記載の方法。
【００９４】
６４．前記抱合体が、式
【化４０】
2019512511.tif 000042
［式中、ｑ２は、１〜４０の整数であり、ならびに、＊は、前記抱合体、またはその医薬的に許容される塩の残部に対する共有結合を示す］
を含むものである、項６１または６２に記載の方法。
【００９５】
６５．前記ＣＡ ＩＸリガンドが、式
【化４１】
2019512511.tif 000043
［式中、＊は、前記抱合体、またはその医薬的に許容される塩の残部に対する共有結合を示す］
で示されるものである、項６１〜６４のいずれか１つに記載の方法。
【００９６】
６６．前記抱合体が、式
【化４２】
2019512511.tif 000044
［式中、ｑ２は、１〜４０の整数であり、ならびに、＊は、前記抱合体、またはその医薬的に許容される塩の残部に対する共有結合を示す］
で示されるものである、項６１〜６４のいずれか１つに記載の方法。
【００９７】
６７．ｑ２が、４である、項６４または６６に記載の方法。
【００９８】
６８．ｑ２が、１２である、項６４または６６に記載の方法。
【００９９】
６９．ｑ２が、３６である、項６４または６６に記載の方法。
【０１００】
７０．前記抱合体が、式
【化４３】
2019512511.tif 000045
［式中、ｑ２は、１〜４０の整数であり、ならびに、＊は、前記抱合体、またはその医薬的に許容される塩の残部に対する共有結合を示す］
を含む、項６１または６２に記載の方法。
【０１０１】
７１．前記抱合体が、式
【化４４】
2019512511.tif 000046
［式中、ｑ２は、１〜４０の整数であり、ならびに、＊は、前記抱合体、またはその医薬的に許容される塩の残部に対する共有結合を示す］
を含む、項６１、６２、または７０のいずれか１つに記載の方法。
【０１０２】
７２．ｑ２が、４である、項７０または７１に記載の方法。
【０１０３】
７３．ｑ２が、１２である、項７０または７１に記載の方法。
【０１０４】
７４．ｑ２が、３６である、項７０または７１に記載の方法。
【０１０５】
７５．前記ＣＡ ＩＸリガンドが、式
【化４５】
2019512511.tif 000047
［式中、＊は、前記抱合体、またはその医薬的に許容される塩の残部に対する共有結合を示す］
で示されるものである、項６１または６２に記載の方法。
【０１０６】
７６．前記ＣＡ ＩＸリガンドが、式
【化４６】
2019512511.tif 000048
［式中、＊は、前記抱合体、またはその医薬的に許容される塩の残部に対する共有結合を示す］
で示されるものである、項６１、６１、または７５に記載の方法。
【０１０７】
７７．前記抱合体が、式
【化４７】
2019512511.tif 000049
［式中、ｑは、１〜４０の整数であり、ならびに、＊は、前記抱合体、またはその医薬的に許容される塩の残部に対する共有結合を示す］
を含む、項６１、６２、または７５のいずれか１つに記載の方法。
【０１０８】
７８．前記抱合体が、式
【化４８】
2019512511.tif 000050
［式中、ｑは、１〜４０の整数であり、ならびに、＊は、前記抱合体、またはその医薬的に許容される塩の残部に対する共有結合を示す］
を含む、項６１、６２、または７５〜７７のいずれか１つに記載の方法。
【０１０９】
７９．ｑが、４である、項７７または７８のいずれか１つに記載の方法。
【０１１０】
８０．ｑが、１２である、項７７または７８のいずれか１つに記載の方法。
【０１１１】
８１．ｑが、３６である、項７７または７８のいずれか１つに記載の方法。
【０１１２】
８２．前記イメージング剤が、ＳＰＥＣＴイメージング剤、またはその医薬的に許容される塩である、項６０〜８１のいずれか１つに記載の方法。
【０１１３】
８３．前記イメージング剤が、式
【化４９】
2019512511.tif 000051
［式中、Ｒ’は、Ｈであるか、あるいはＲ’は、Ｃ１−Ｃ６アルキル、アミノ−Ｃ１−Ｃ６アルキル、カルボキシ−Ｃ１−Ｃ６アルキル、ヒドロキシル−Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ６−Ｃ１０アリール、Ｃ６−Ｃ１０アリール−Ｃ１−Ｃ６アルキル、およびＣ５−Ｃ１０ヘテロアリール−Ｃ１−Ｃ６アルキルからなる群から選択され；ならびに、＊は、前記抱合体の残部に対する共有結合を示し、放射性核種は、前記抱合体、またはその医薬的に許容される塩に結合している］
で示されるイメージング剤である、項６０〜８１のいずれか１つに記載の方法。
【０１１４】
８４．前記イメージング剤が、式
【化５０】
2019512511.tif 000052
［式中、Ｍは、放射性核種の陽イオンであり、Ｒ’は、Ｈであるか、あるいはＲ’は、Ｃ１−Ｃ６アルキル、アミノ−Ｃ１−Ｃ６アルキル、カルボキシ−Ｃ１−Ｃ６アルキル、ヒドロキシル−Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ６−Ｃ１０アリール、Ｃ６−Ｃ１０アリール−Ｃ１−Ｃ６アルキル、およびＣ５−Ｃ１０ヘテロアリール−Ｃ１−Ｃ６アルキルからなる群から選択され、ならびに、＊は、前記抱合体、またはその医薬的に許容される塩の残部に対する共有結合を示す］
で示されるイメージング剤である、項６０〜８３のいずれか１つに記載の方法。
【０１１５】
８５．前記薬剤が、式
【化５１】
2019512511.tif 000053
［式中、＊は、前記抱合体の残部に対する共有結合を示し、ならびに放射性核種は、前記抱合体、またはその医薬的に許容される塩に結合している］
で示されるイメージング剤である、項６０〜８３のいずれか１つに記載の方法。
【０１１６】
８６．前記薬剤が、式
【化５２】
2019512511.tif 000054
［式中、Ｍは、放射性核種の陽イオンであり、ならびに、＊は、前記抱合体、またはその医薬的に許容される塩の残部に対する共有結合を示す］
で示されるイメージング剤である、項６０〜８５のいずれか１つに記載の方法。
【０１１７】
８７．前記放射性核種が、ガリウムの同位体、インジウムの同位体、銅の同位体、テクネチウムの同位体、およびレニウムの同位体からなる群から選択される、項８３〜８６のいずれか１つに記載の方法。
【０１１８】
８８．前記放射性核種が、テクネチウムの同位体である、項８３〜８７のいずれか１つに記載の方法。
【０１１９】
８９．前記放射性核種が、９９ｍＴｃである、項８３〜８８のいずれか１つに記載の方法。
【０１２０】
９０．前記抱合体が、
【化５３】
2019512511.tif 000055
からなる群またはその医薬的に許容される塩から選択されるものである、項９０に記載の方法。
【０１２１】
９１．項１〜５９のいずれか１つに記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩を含み、少なくとも１個の医薬的に許容される賦形剤を含んでいてもよい組成物。
【０１２２】
９２．対象における細胞の集団を画像化する方法において使用するための、項１〜４６のいずれか１つに記載の抱合体。
【０１２３】
９３．前記方法が、前記細胞を画像化するために有効な抱合体の量を前記対象に投与することを含むものである、項９２に記載の使用。
【０１２４】
９４．対象における細胞の集団を画像化するために有用な薬剤の製造における、項１〜４６のいずれか１つに記載の抱合体の使用。
【０１２５】
９５．前記方法が、前記細胞を画像化するために有効な抱合体の量を前記対象に投与することを含む、項９４に記載の使用。
【０１２６】
９６．対象における癌を治療する方法において使用するための、項１〜２８または４７〜５９のいずれか１つに記載の抱合体。
【０１２７】
９７．前記方法が、前記癌を画像化するために有効な抱合体の量を前記対象に投与することを含むものである、項９６に記載の抱合体。
【０１２８】
９８．インビトロで細胞の集団を画像化する方法であって、ａ．前記細胞を項１〜２８、４２、または４４のいずれか１つに記載の抱合体と接触させて、標識された細胞を供し、次いでｂ．蛍光光源を用いて前記標識された細胞を視覚化することを含む方法。
【０１２９】
９９．対象における癌の治療方法であって、有効な量の項１〜２８または４７〜５９のいずれか１つに記載の抱合体；またはその医薬的に許容される塩を前記対象に投与することを特徴とする方法。
【０１３０】
１００．ｂ．画像化によって治療するための患者を同定することをさらに含む、項９９に記載の方法。
【０１３１】
１０１．前記画像化が、ａ．有効な量の項２９〜４１、４５、または４６のいずれか１つに記載の抱合体を前記患者に投与し；次いでｂ．前記患者をＣＡ ＩＸを発現する癌に罹っていると同定することを含むものである、項１００に記載の方法。
【０１３２】
１０２．前記癌が、肺、結腸直腸、胃、膵臓、乳房、子宮頸、膀胱、卵巣、脳、頭頸部、口腔、および腎臓癌からなる群から選択される、項９９〜１０１のいずれか１つに記載の方法。
【図面の簡単な説明】
【０１３３】
【図１】図１は、ローダミン標識ＣＡ ＩＸ抱合体のＨＴ−２９細胞へのインビトロ結合を示す。蛍光抱合体を、１００倍過剰量の非標識リガンドの存在下もしくは非存在下でＨＴ−２９細胞とインキュベートさせた。洗浄後、白色蛍光顕微鏡を用いて結合を視覚化した。
【図２】図２は、ＣＡ ＩＸローダミン抱合体の様々なＣＡ ＩＸ発現細胞株へのインビトロ結合を示す。蛍光ＣＡ ＩＸ−ローダミン抱合体（１００ｎＭ）を、１００倍過剰量の非標識ＣＡ ＩＸリガンド（１０μＭ）の存在下もしくは非存在下で様々な細胞株とインキュベートさせた。洗浄後、白色蛍光顕微鏡を用いて結合を視覚化した。
【図３】図３は、ＨｙｐｏｘｙｆｌｕｏｒおよびＣＡ ＩＸ標的ローダミンのＨＴ−２９細胞への結合を示す。図３Ａにおいて、ＨＴ−２９細胞を、１００倍過剰量のＣＡ ＩＸ阻害剤の存在下もしくは非存在下で１００ｎＭ Ｈｙｐｏｘｙｆｌｕｏｒとインキュベートさせた。洗浄後、細胞に結合した蛍光を、７４７ｎｍ（すなわち、ＮＩＲ染料が吸収する波長）で励起されうる非共焦点蛍光顕微鏡を用いて画像化した。励起された光は目で見ることができないため、前記画像は見かけ上の緑色である。図３Ｂにおいて、ＨＴ−２９細胞を、同様に、１００倍過剰量のＣＡ ＩＸ阻害剤の存在下もしくは非存在下で１００ｎＭのＣＡ ＩＸ標的ローダミンとインキュベートさせた。洗浄後、細胞に結合した蛍光を共焦点顕微鏡で画像化した。
【図４】図４は、１００倍過剰量のＣＡ ＩＸ阻害剤の存在下もしくは非存在下で様々な濃度のＨｙｐｏｘｙｆｌｕｏｒとインキュベートさせたＨＴ−２９細胞を示す。洗浄後、残存する蛍光を蛍光分光法により定量化した。エラーバーは標準偏差を示す。
【図５】図５は、対照と比較した注射４時間後におけるＬ２−ＰＥＧ３６−ＥＣ２０のインビボ画像化と生体分布を示す：図５Ａは、尾静脈注射により９９ｍＴｃを用いたＬ２−ＰＥＧ３６−ＥＣ２０（１０ｎｍｏｌ）（図中、左のマウス）または１００ｎｍｏｌ非標識Ｌ２リガンド（図中、右のマウス）を投与したＨＴ−２９異種移植腫瘍を有するマウスの画像を示す。全ての動物の画像を注射４時間後に撮影した。図５Ｂは、注射４時間で臓器を除去し、洗浄し、重量をはかり、残存放射能を測定した後の生体分布を示す。組織１グラムあたりの注射された用量の割合を調べ、プロットした。エラーバーは、標準偏差を示す。（□）競合物質；（■）Ｌ２−ＰＥＧ３６−ＥＣ２０。
【図６】図６は、対照と比較した注射４時間後におけるＬ２−ＰＥＧ３６−ＥＣ２０のインビボ画像化と生体分布を示す：図６Ａは、尾静脈注射により９９ｍＴｃを用いたＬ２−ＰＥＧ３６−ＥＣ２０（１０ｎｍｏｌ）（図中、左のマウス）または１００ｎｍｏｌ非標識Ｌ２リガンド（図中、右のマウス）を投与したＨＴ−２９異種移植腫瘍を有するマウスの画像を示す。全ての動物の画像を注射９時間後に撮影した。図６Ｂは、注射９時間で臓器を除去し、洗浄し、重量をはかり、残存放射能を測定した後の生体分布を示す。組織１グラムあたりの注射された用量の割合を調べ、プロットした。エラーバーは、標準偏差を示す。（□）競合物質；（■）Ｌ２−ＰＥＧ３６−ＥＣ２０。
【図７】図７は、対照と比較した注射４時間後におけるＬ２−ＰＥＧ３６−ＥＣ２０のインビボ画像化と生体分布を示す：図７Ａは、尾静脈注射により９９ｍＴｃを用いたＬ２−ＰＥＧ３６−ＥＣ２０（１０ｎｍｏｌ）（図中、左のマウス）または１００ｎｍｏｌ非標識Ｌ２リガンド（図中、右のマウス）を投与したＨＴ−２９異種移植腫瘍を有するマウスの画像を示す。全ての動物の画像を注射２４時間後に撮影した。図７Ｂは、注射９時間で臓器を除去し、洗浄し、重量をはかり、残存放射能を測定した後の生体分布を示す。組織１グラムあたりの注射された用量の割合を調べ、プロットした。エラーバーは、標準偏差を示す。（□）競合物質；（■）Ｌ２−ＰＥＧ３６−ＥＣ２０。
【図８】図８は、様々なＣＡ ＩＸ抱合体のインビボでの生体分布を示す。ＨＴ−２９異種移植腫瘍を有するマウスに、尾静脈注射により１０ｎｍｏｌの９９ｍＴｃを用いた抱合体Ｌ２−ＰＥＧ１２−ＥＣ２０（図８Ａ）、Ｌ２−ＰＥＧ３６−ＥＣ２０（図８Ｂ）、Ｌ２−Ｐｒｏ３−ＰＥＧ１２−ＥＣ２０（図８Ｃ）、およびＬ３−ＰＥＧ１２−ＥＣ２０（図８Ｄ）を投与した。さらなるマウスに、１００ｎｍｏｌの非標識Ｌ２またはＬ３リガンドを同時に注射した。主要な組織／臓器を除去し、放射能の量を測定した。注射された用量／組織１ｇの割合を算出し、プロットした。エラーバーは、標準偏差を示す。図８Ａ：（□）競合物質；（■）Ｌ２−ＰＥＧ１２−ＥＣ２０、図８Ｂ：（□）競合物質；（■）Ｌ２−ＰＥＧ３６−ＥＣ２０、図８Ｃ：（□）競合物質；（■）Ｌ２−Ｐｒｏ３−ＰＥＧ１２−ＥＣ２０、図８Ｄ：（□）競合物質；（■）Ｌ３−ＰＥＧ１２−ＥＣ２０。
【図９】図９は、Ｌ２−ツブリシンＢのインビトロでのＨＴ−２９細胞毒性及びインビボ最大耐容用量を示す。１００倍過剰量のＣＡ ＩＸリガンドＬ２を含むか、もしくは含まない様々な濃度のＬ２−ツブリシンＢを、ＨＴ−２９細胞で１時間インキュベートした。洗浄後、該細胞を２４時間インキュベートし、それらの生存率を３Ｈ−チミジン取り込み法により調べた。
【図１０】図１０は、Ｌ２−ツブリシンＢのインビボ有効性を示す。マウスに１０６ＨＴ−２９細胞を注入した。腫瘍が〜１００ｍｍ３の体積に達したら、マウスを様々な処理群にランダム化した（各ＩＰ群についてｎ＝３）。Ｌ２−ツブリシンＢ（２μｍｏｌ／ｋｇ）を、１００倍過剰量のＣＡ ＩＸリガンドＬ２の存在下もしくは非存在下で隔日に腹腔内で９回用量投与した。腫瘍体積および重量を隔日で測定した。エラーバーは、標準偏差を示す。図１０Ａ：（●）ＰＢＳ対照、（▲）Ｌ２−ツブリシンＢ、（□）競合物質。図１０Ｂ：（●）ＰＢＳ対照、（▲）Ｌ２−ツブリシンＢ、（□）競合物質。
【図１１】図１１は、Ｌ２−ツブリシンＢのインビボでの有効性を示す。マウスに１０６個のＨＴ−２９細胞を注入した。腫瘍が〜１００ｍｍ３の体積に達したら、マウスを様々な処理群にランダム化した（各ＩＶ群につきｎ＝５）。ＣＡ ＩＸ−ツブリシンＢ（２μｍｏｌ／ｋｇ）を、１００倍過剰量のＣＡ ＩＸリガンドの存在下もしくは非存在下で隔日に尾静脈注射により９回用量投与した。腫瘍体積および重量を隔日で測定した。エラーバーは、標準偏差を示す。図１１Ａ：（●）ＰＢＳ対照、（▲）Ｌ２−ツブリシンＢ、（□）競合物質。図１１Ｂ：（●）ＰＢＳ対照、（▲）Ｌ２−ツブリシンＢ、（□）競合物質。
【図１２】図１２は、Ｈｙｐｏｘｙｆｌｕｏｒで処理したＨＴ−２９腫瘍を有するマウスの代表的な画像を示す。ＨＴ−２９腫瘍を有するマウスに、尾静脈により４ｎｍｏｌのＨｙｐｏｘｙｆｌｕｏｒ単独で、または１００倍過剰量のＣＡ ＩＸ阻害剤と組み合わせて注射した。蛍光画像を注射４時間後に得た。
【図１３】図１３は、図１２からのマウスの内部組織および器官におけるＨｙｐｏｘｙｆｌｕｏｒの蓄積を示す。組織および器官を全ての動物の画像化後に取り出し、単離された組織の蛍光画像を得た。
【図１４】図１４は、増加する用量のＨｙｐｏｘｙｆｌｕｏｒで処理したＨＴ−２９腫瘍を有するマウスの代表的なインビボ画像を示す。ＨＴ−２９腫瘍を有するマウスに、尾静脈により示される濃度のＨｙｐｏｘｙｆｌｕｏｒで注射し、蛍光画像を注射４時間後に得た。
【図１５】図１５は、図１４からのマウスの内部組織および器官におけるＨｙｐｏｘｙｆｌｕｏｒの蓄積を示す。組織および器官を全ての動物の画像化後に取り出し、単離された組織の蛍光画像を得た。
【発明を実施するための形態】
【０１３４】
定義
本明細書で用いられるように、用語「アルキル」は、分岐されていてもよい炭素原子鎖を含み、１〜２０個の炭素原子を含有する。ある実施態様において、アルキルは有利には、限定された長さ（Ｃ１−Ｃ１２、Ｃ１−Ｃ１０、Ｃ１−Ｃ９、Ｃ１−Ｃ８、Ｃ１−Ｃ７、Ｃ１−Ｃ６、およびＣ１−Ｃ４を含む）であってもよいことがさらに理解されるべきである。例示として、このような特に限定された長さのアルキル基（Ｃ１−Ｃ８、Ｃ１−Ｃ７、Ｃ１−Ｃ６、およびＣ１−Ｃ４などを含む）は、「低級アルキル」とも呼ばれうる。アルキル基の例として、以下に限定されないが、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、２−ペンチル、３−ペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチルなどが挙げられる。アルキルは、置換されていてもよく、または置換されていなくてもよい。典型的な基として、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロ脂環（heteroalicyclic）、ヒドロキシ、アルコキシ、アリールオキシ、メルカプト、アルキルチオ、アリールチオ、シアノ、ハロ、カルボニル、オキソ、（＝Ｏ）、チオカルボニル、Ｏ−カルバミル、Ｎ−カルバミル、Ｏ−チオカルバミル、Ｎ−チオカルバミル、Ｃ−アミド、Ｎ−アミド、Ｃ−カルボキシ、Ｏ−カルボキシ、ニトロ、およびアミノが挙げられ、あるいは本明細書で提供される様々な実施態様で記載されるとおりである。「アルキル」は、上記で供される基などの他の基と合わせて、官能基を有するアルキルを形成してもよいことが理解される。一例として、「アルキル」基と「カルボキシ」基との組み合わせは、本明細書に記載されるように、「カルボキシアルキル」基とも称されうる。他の非限定的な例として、ヒドロキシアルキル、アミノアルキルなどが挙げられる。
【０１３５】
本明細書で用いられるように、用語「アルケニル」は、分岐されていてもよい炭素原子鎖を含み、２〜２０個の炭素原子を含有し、さらに少なくとも１個の炭素−炭素二重結合（すなわち、Ｃ＝Ｃ）を含む。ある実施態様において、アルケニルは有利には、限定された長さ（Ｃ２−Ｃ１２、Ｃ２−Ｃ９、Ｃ２−Ｃ８、Ｃ２−Ｃ７、Ｃ２−Ｃ６、およびＣ２−Ｃ４）であってもよいことが理解される。例示として、このような特に限定された長さのアルケニル基（Ｃ２−Ｃ８、Ｃ２−Ｃ７、Ｃ２−Ｃ６、およびＣ２−Ｃ４を含む）は、低級アルケニルとも呼ばれうる。アルケニルは、置換されていなくてもよく、あるいはアルキルについて記載されるか、または本明細書で提供される様々な実施態様に記載されるように、置換されていてもよい。アルケニル基の例として、以下に限定されないが、エテニル、１−プロペニル、２−プロペニル、１−、２−、もしくは３−ブテニルなどが挙げられる。
【０１３６】
本明細書で用いられるように、用語「アルキニル」は、分岐されていてもよい炭素原子鎖を含み、２〜２０個の炭素原子を含有し、さらに少なくとも１個の炭素−炭素三重結合（すなわち、Ｃ≡Ｃ）を含む。ある実施態様において、アルキニルは有利には、限定された長さ（Ｃ２−Ｃ１２、Ｃ２−Ｃ９、Ｃ２−Ｃ８、Ｃ２−Ｃ７、Ｃ２−Ｃ６、およびＣ２−Ｃ４を含む）であってもよいことが理解される。例示として、このような特に限定された長さのアルキニル基（Ｃ２−Ｃ８、Ｃ２−Ｃ７、Ｃ２−Ｃ６、およびＣ２−Ｃ４を含む）は、低級アルキニルとも呼ばれうる。アルケニルは、置換されていなくてもよく、あるいはアルキルについて記載されるか、または本明細書で提供される様々な実施態様に記載されるように、置換されていてもよい。アルケニル基の例として、以下に限定されないが、エチニル、１−プロピニル、２−プロピニル、１−、２−、もしくは３−ブチニルなどが挙げられる。
【０１３７】
本明細書で用いられるように、用語「アリール」は、完全に共役されたπ電子系を有する６〜１２個の炭素原子の全炭素単環式または縮合環多環式基を意味する。ある実施態様において、アリールは有利には、Ｃ６−Ｃ１０アリールなどの限定された大きさであってもよいことが理解される。アリール基の例として、以下に限定されないが、フェニル、ナフタレニル、およびアントラセニルが挙げられる。前記アリール基は、置換されていなくてもよく、あるいはアルキルについて記載されるか、または本明細書で提供される様々な実施態様に記載されるように、置換されていてもよい。
【０１３８】
本明細書で用いられるように、用語「シクロアルキル」は、３〜１５員全炭素単環式環、全炭素５員／６員または６員／６員縮合二環式環、または複数環縮合環（「縮合」環基は、基における各環が当該基中で互いの環に隣接する炭素原子対を共有することを意味する）基を意味し、該基の１つまたはそれ以上は、１つまたはそれ以上の二重結合を含有しうるが、該シクロアルキルは、完全に共役されたπ電子系を含有しない。ある実施態様において、シクロアルキルは、Ｃ３−Ｃ１３、Ｃ３−Ｃ６、Ｃ３−Ｃ６、およびＣ４−Ｃ６などの限定された大きさであってもよいことが理解される。シクロアルキルは、置換されていなくてもよく、あるいはアルキルについて記載されるか、または本明細書で提供される様々な実施態様に記載されるように、置換されていてもよい。シクロアルキル基の例として、以下に限定されないが、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロペンテニル、シクロペンタジエニル、シクロヘキシル、シクロヘキセニル、シクロヘプチル、アダマンチル、ノルボルニル、ノルボルネニル、９Ｈ−フルオレン−９−イルなどが挙げられる。
【０１３９】
本明細書で用いられるように、用語「ヘテロシクロアルキル」は、環中に３〜１２個の環原子を有する単環式または縮合環基であって、少なくとも１個の環原子がヘテロ原子（例えば、窒素、酸素、または硫黄）であり、残りの環原子が炭素原子である基を意味する。ヘテロシクロアルキルは、適宜、１、２、３、または４個のヘテロ原子を含有していてもよい。ヘテロシクロアルキルはまた、１つまたはそれ以上の二重結合（窒素への二重結合（例えば、Ｃ＝ＮまたはＮ＝Ｎ）を含む）を有していてもよいが、完全に共役されたπ電子系を含有しない。ある実施態様において、ヘテロシクロアルキルは有利には、３〜７員ヘテロシクロアルキル、５〜７員ヘテロシクロアルキルなどの限定された大きさであってもよいことが理解される。ヘテロシクロアルキルは、置換されていなくてもよく、あるいはアルキルについて記載されるか、または本明細書で提供される様々な実施態様に記載されるように、置換されていてもよい。ヘテロシクロアルキル基の例として、以下に限定されないが、オキシラニル、チアナリル（thianaryl）、アゼチジニル、オキセタニル、テトラヒドロフラニル、ピロリジニル、テトラヒドロピラニル、ピペリジニル、１，４−ジオキサニル、モルホリニル、１，４−ジチアニル、ピペラジニル、オキセパニル、３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラニル、５，６−ジヒドロ−２Ｈ−ピラニル、２Ｈ−ピラニル、１、２、３、４−テトラヒドロピリジニルなどが挙げられる。
【０１４０】
本明細書で用いられるように、用語「ヘテロアリール」は、窒素、酸素および硫黄からなる群から選択される、１、２、３または４個の環ヘテロ原子を含み、残りの環原子が炭素原子であり、さらに完全に共役したπ電子系を有する、５から１２個の環原子の単環式または縮合環式基を意味する。ある実施態様において、ヘテロアリールは有利には、３〜９員ヘテロアリール、３〜７員ヘテロアリール、５〜７員ヘテロアリール、５〜９員ヘテロアリールなどの限定された大きさであってもよいことが理解される。ヘテロアリールは、置換されていなくてもよく、あるいはアルキルについて記載されるか、または本明細書で提供される様々な実施態様に記載されるように、置換されていてもよい。ヘテロアリール基の例としては、以下に限定されないが、ピロリル、フラニル、チオフェニル、イミダゾリル、オキサゾリル、チアゾリル、ピラゾリル、ピリジニル、ピリミジニル、キノリニル、イソキノリニル、プリニル、テトラゾリル、トリアジニル、ピラジニル、テトラジニル、キナゾリニル、キノキサリニル、チエニル、イソオキサゾリル、イソチアゾリル、オキサジアゾリル、チアジアゾリル、トリアゾリル、ベンズイミダゾリル、ベンゾオキサゾリル、ベンズチアゾリル、ベンズイソオキサゾリル、ベンゾイソチアゾリル、インドリル、およびカルバゾロイルなどが挙げられる。
【０１４１】
本明細書で用いられるように、「ヒドロキシ」または「ヒドロキシル」は、−ＯＨ基を意味する。
【０１４２】
本明細書で用いられるように、「アルコキシ」は、−Ｏ−（アルキル）または−Ｏ−（置換されていないシクロアルキル）基の両方を意味する。代表的な例として、以下に限定されないが、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシ、シクロプロピルオキシ、シクロブチルオキシ、シクロペンチルオキシ、シクロヘキシルオキシなどが挙げられる。
【０１４３】
本明細書で用いられるように、「アリールオキシ」は、−Ｏ−アリールまたは−Ｏ−ヘテロアリール基を意味する。代表的な例として、以下に限定されないが、フェノキシ、ピリジニルオキシ、フラニルオキシ、チエニルオキシ、ピリミジニルオキシ、ピラジニルオキシなどが挙げられる。
【０１４４】
本明細書で用いられるように、「メルカプト」は、−ＳＨ基を意味する。
【０１４５】
本明細書で用いられるように、「アルキルチオ」は、−Ｓ−（アルキル）または−Ｓ−（置換されていないシクロアルキル）基を意味する。代表的な例として、以下に限定されないが、メチルチオ、エチルチオ、プロピルチオ、ブチルチオ、シクロプロピルチオ、シクロブチルチオ、シクロペンチルチオ、シクロヘキシルチオなどが挙げられる。
【０１４６】
本明細書で用いられるように、「アリールチオ」は、−Ｓ−アリールまたは−Ｓ−ヘテロアリール基を意味する。代表的な例として、以下に限定されないが、フェニルチオ、ピリジニルチオ、フラニルチオ、チエニルチオ、ピリミジニルチオなどが挙げられる。
【０１４７】
本明細書で用いられるように、「ハロ」または「ハロゲン」は、フッ素、塩素、臭素、またはヨウ素を意味する。
【０１４８】
本明細書で用いられるように、「トリハロメチル」は、３個のハロ置換基を有するメチル基（例えば、トリフルオロメチル基など）を意味する。
【０１４９】
本明細書で用いられるように、「シアノ」は、−ＣＮ基を意味する。
【０１５０】
本明細書で用いられるように、「スルフィニル」は、−Ｓ（Ｏ）Ｒ’’基［式中、Ｒ’’は、本明細書で提供される様々な実施態様で記載されるＲ基のいずれかであるか、あるいはＲ’’は、ヒドロキシル基であってもよい］を意味する。
【０１５１】
本明細書で用いられるように、「スルホニル」は、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ’’基［式中、Ｒ’’は、本明細書で提供される様々な実施態様で記載されるＲ基のいずれかであるか、あるいはＲ’’は、ヒドロキシル基であってもよい］を意味する。
【０１５２】
本明細書で用いられるように、「Ｓ−スルホンアミド」は、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ’’Ｒ’’基［式中、Ｒ’’は、本明細書で提供される様々な実施態様で記載されるＲ基のいずれかである］を意味する。
【０１５３】
本明細書で用いられるように、「Ｎ−スルホンアミド」は、−ＮＲ’’Ｓ（Ｏ）２Ｒ’’基［式中、Ｒ’’は、本明細書で提供される様々な実施態様で記載されるＲ基のいずれかである］を意味する。
【０１５４】
本明細書で用いられるように、「Ｏ−カルバミル」は、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ’’Ｒ’’基［式中、Ｒ’’は、本明細書で提供される様々な実施態様で記載されるＲ基のいずれかである］を意味する。
【０１５５】
本明細書で用いられるように、「Ｎ−カルバミル」は、Ｒ’’ＯＣ（Ｏ）ＮＲ’’−基［式中、Ｒ’’は、本明細書で提供される様々な実施態様で記載されるＲ基のいずれかである］を意味する。
【０１５６】
本明細書で用いられるように、「Ｏ−チオカルバミル」は、−ＯＣ（Ｓ）ＮＲ’’Ｒ’’基［式中、Ｒ’’は、本明細書で提供される様々な実施態様で記載されるＲ基のいずれかである］を意味する。
【０１５７】
本明細書で用いられるように、「Ｎ−チオカルバミル」は、Ｒ’’ＯＣ（Ｓ）ＮＲ’’−基［式中、Ｒ’’は、本明細書で提供される様々な実施態様で記載されるＲ基のいずれかである］を意味する。
【０１５８】
本明細書で用いられるように、「アミノ」は、−ＮＲ’’Ｒ’’基［式中、Ｒ’’は、本明細書で提供される様々な実施態様で記載されるＲ基のいずれかである］を意味する。
【０１５９】
本明細書で用いられるように、「Ｃ−アミド」は、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ’’Ｒ’’基［式中、Ｒ’’は、本明細書で提供される様々な実施態様で記載されるＲ基のいずれかである］を意味する。
【０１６０】
本明細書で用いられるように、「Ｎ−アミド」は、Ｒ’’Ｃ（Ｏ）ＮＲ’’−基［式中、Ｒ’’は、本明細書で提供される様々な実施態様で記載されるＲ基のいずれかである］を意味する。
【０１６１】
本明細書で用いられるように、「ニトロ」は、−ＮＯ２基を意味する。
【０１６２】
本明細書で用いられるように、「結合」は、共有結合を意味する。
【０１６３】
本明細書で用いられるように、「任意の」または「適宜」は、後に記載される事象もしくは状況が生じてもよいが、必要ではないことを意味し、その記載は、その事象もしくは状況が生じる例および生じない例が含まれる。例えば、「アルキル基で適宜置換されていてもよいヘテロ環基」は、アルキルであってもよいが、存在することは必要ではないことを意味し、前記記載には、ヘテロ環基がアルキル基で置換される状況とヘテロ環基がアルキル基で置換されない状況が含まれる。
【０１６４】
本明細書で用いられるように、「独立して」は、後に記載される事象もしくは状況が、他の同様の事象もしくは状況に対してそれ自体のものと読まれるべきである。例えば、いくつかの同等の水素基がその状況に記載される別の基によって適宜置換されてもよい状況において、「独立して適宜」の使用は、基における水素原子の各例が別の基によって置換されていてもよく、水素原子の各々を置き換える基は、同一もしくは異なっていてもよいことを意味する。あるいは例えば、複数の基が、可能な基の一組から選択することができる全てに存在する場合、「独立して」の使用は、基の各々が、いずれか他の基とは別に可能な基の組から選択することができ、当該状況で選択される基が同一もしくは異なっていてもよいことを意味する。
【０１６５】
本明細書で用いられるように、「アミノ酸」（「ＡＡ」とも知られる）は、アミノ基および酸性基に共有結合しているアルファ炭素原子を含むいずれかの分子を意味する。前記酸性基は、カルボキシル基を含みうる。「アミノ酸」は、式：
【化５４】
2019512511.tif 000056
［式中、Ｒ’は、側基であり、ならびにΦは、少なくとも３個の炭素原子を含む］のうちの１つを有する分子を含みうる。「アミノ酸」には、Ｄ−アミノ酸およびＬ−アミノ酸型のような立体異性体が含まれる。アミノ酸基の例としては、以下に限定されないが、２０個の内在性ヒトアミノ酸およびそれらの誘導体、例えば、リジン（Ｌｙｓ）、アスパラギン（Ａｓｎ）、スレオニン（Ｔｈｒ）、セリン（Ｓｅｒ）、イソロイシン（Ｉｌｅ）、メチオニン（Ｍｅｔ）、プロリン（Ｐｒｏ）、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、グルタミン（Ｇｌｎ）、アルギニン（Ａｒｇ）、グリシン（Ｇｌｙ）、アスパラギン酸（Ａｓｐ）、グルタミン酸（Ｇｌｕ）、アラニン（Ａｌａ）、バリン（Ｖａｌ）、フェニルアラニン（Ｐｈｅ）、ロイシン（Ｌｅｕ）、チロシン（Ｔｙｒ）、システイン（Ｃｙｓ）、トリプトファン（Ｔｒｐ）、ホスホセリン（ＰＳＥＲ）、スルホシステイン、アルギニノコハク酸（ＡＳＡ）、ヒドロキシプロリン、ホスホエタノールアミン（ＰＥＡ）、サルコシン（ＳＡＲＣ）、タウリン（ＴＡＵ）、カルノシン（ＣＡＲＮ）、シトルリン（ＣＩＴ）、アンセリン（ＡＮＳ）、１，３−メチル−ヒスチジン（ＭＥ−ＨＩＳ）、アルファ−アミノ−アジピン酸（ＡＡＡ）、ベータ−アラニン（ＢＡＬＡ）、エタノールアミン（ＥＴＮ）、ガンマ−アミノ−酪酸（ＧＡＢＡ）、ベータ−アミノ−イソ酪酸（ＢＡＩＡ）、アルファ−アミノ−酪酸（ＢＡＢＡ）、Ｌ−アロ−シスタチオニン（シスタチオニン−Ａ；ＣＹＳＴＡ−Ａ）、Ｌ−シスタチオニン（シスタチオニン−Ｂ；ＣＹＳＴＡ−Ｂ）、シスチン、アロ−イソロイシン（ＡＬＬＯ−ＩＬＥ）、ＤＬ−ヒドロキシリジン（ヒドロキシリジン（Ｉ））、ＤＬ−アロ−ヒドロキシリジン（ヒドロキシリジン（２））、オルニチン（ＯＲＮ）、ホモシスチン（ＨＣＹ）、およびこれらの誘導体が挙げられる。本明細書に記載の実施態様に関して、アミノ酸は、それらのアルファ−アミノおよびカルボキシ官能基（すなわち、ペプチド結合構造において）を介して、あるいはそれらの側鎖官能基（例えば、グルタミン酸中の側鎖カルボキシ基において）およびそれらのアルファ−アミノまたはカルボキシ官能基を介して、本明細書に記載の抱合体の他の部分に共有結合することができる。アミノ酸は、本明細書に記載の抱合体と組み合わせて用いられる場合、それらが導入される抱合体において双性イオンとして存在していてもよいものと理解される。
【０１６６】
本明細書で用いられるように、「プロドラッグ」は、薬理学的に不活性な形態で対象に投与することができ、続いて通常の代謝プロセス（例えば、オキサゾリジンの加水分解など）により薬理学的に活性な形態に変換することができる化合物を意味する。プロドラッグが活性な薬物に変換することができる代謝プロセスには、以下に限定されないが、１つまたはそれ以上の自然化学反応、酵素触媒化学反応、および／または他の代謝性化学反応、またはこれらの組み合わせが含まれるものと理解される。様々な代謝プロセスは当該技術分野で公知であり、本明細書に記載のプロドラッグが活性な薬物に変換される代謝プロセスは、非限定的なものであると理解される。プロドラッグは、対象において治療効果を有する薬物の前駆体化学化合物でありうる。
【０１６７】
本明細書で用いられるように、用語「治療上の有効量」は、研究者、獣医、医者または他の治療者によって求められる、対象（すなわち、組織系、動物、またはヒト）における生物学的もしくは医薬的反応を引き起こす薬物もしくは医薬薬剤の量を意味し、以下に限定されないが、治療される疾患もしくは障害の症状の軽減が含まれる。ある態様において、治療上の有効量は、医学的な治療に適用される妥当な利益／リスクの割合で疾患または疾患の症状を治療し、または軽減しうる活性な量である。別の態様において、治療上の有効量は、通常の代謝プロセスにより変換される場合、求められる対象における生物学的もしくは医薬的反応を引き起こすことができる活性な薬物の量を生成するように有する不活性なプロドラッグの量である。
【０１６８】
用量は、単一療法もしくは併用療法であるか、１つもしくはそれ以上の本明細書に記載の抱合体の投与時に発生しうるいずれの毒性または他の所望されない副作用を参照して有利に選択されることも認められる。さらに、本明細書に記載の共療法は、このような毒性または他の所望されない副作用を示す低用量の抱合体の投与を可能にし、これらの低用量は、毒性の閾値以下であるか、または共治療の非存在下で投与される治療濃度域より低いものと認められる。
【０１６９】
本明細書で用いられるように、「投与する」は、本明細書に記載の抱合体および組成物を宿主動物に導入する全ての方法を含むものであり、以下に限定されないが、経口（ｐｏ）、静脈内（ｉｖ）、筋肉内（ｉｍ）、皮下（ｓｃ）、経皮、吸入、バッカル、眼、舌下、膣、直腸などが挙げられる。本明細書に記載の抱合体および組成物は、従来の非毒性の医薬的に許容される担体、補助剤、および／またはベヒクルを含有する単位剤形および／または製剤で投与されてもよい。
【０１７０】
本明細書で用いられるように、「医薬組成物」または「組成物」は、１つもしくはそれ以上の本明細書に記載の抱合体、またはその医薬的に許容される塩、溶媒和物、水和物と、他の化学的構成成分（例えば、医薬的に許容される賦形剤）との混合物を意味する。医薬組成物の目的は、抱合体の対象への投与を容易にすることである。本明細書に記載の抱合体の送達に適する医薬組成物およびそれらの調製のための方法は、当業者にとって明らかである。このような組成物およびそれらの調製のための方法は、例えば、'Remington's Pharmaceutical Sciences', 19the Editionn (Mack Publishing Company, 1995)で見出されうる。
【０１７１】
本明細書および特許請求の範囲で用いられるように、単数形「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」には、文脈が特に明確に示していなければ、複数の対象を含む。
【０１７２】
他に定義されていない限り、本明細書で用いられる全ての技術および科学用語は、その発明の属する当業者に一般に理解される意味と同一の意味を有する。本明細書に記載の方法、装置、および物質と類似もしくは同等のいずれのものも本発明の実施もしくは試験で用いることができるが、好ましい方法、装置、および物質が本明細書に記載される。
【０１７３】
詳細な説明
本明細書に記載の出願人の開示によれば、上記の発明の概要で供される番号付けされた項の実施態様、またはそのいずれの組み合わせも、本特許出願の詳細な説明の欄に記載の実施態様のいずれとも組み合わせるものとされる。
【０１７４】
前記および下記の実施態様の各々において、前記抱合体の全ての医薬的に許容される塩だけではなく、前記抱合体の式のいずれの全ての水和物および／または溶媒和物を含み、表すものと理解される。一定の官能基（例えば、ヒドロキシ、アミノなどの基）は、抱合体の様々な物理的形態において水および／または様々な溶媒と複合体および／または協調抱合体を形成することが認められる。従って、上記式は、これらの様々な水和物および／または溶媒和物を含み、表すものと理解されるべきである。前記抱合体の式の非水和物および／または非溶媒和物は、このような式、ならびに前記抱合体の式の水和物および／または溶媒和物によって記載されるものとも理解される。
【０１７５】
ある実施態様において、本開示は、式Ｂ−Ｌ−Ａ［式中、Ｂは、炭酸無水酵素ＩＸの結合リガンドであり、Ｌは、任意のリンカーであり、ならびにＡは、治療剤およびイメージング剤である］で示される抱合体を提供する。
【０１７６】
本開示について有用なＣＡ ＩＸリガンドは、特に構造によって限定されないことが理解される。有用なＣＡ ＩＸ阻害剤は、ＣＡ ＩＸ（例えば、ＣＡ ＩＸ阻害剤、ＣＡ ＩＸアゴニスト、またはＣＡ ＩＸアンタゴニストなど）に対する結合親和性を示すいずれの薬物または化合物でありうる。これらの実施態様のある態様において、ＣＡ ＩＸリガンドは、アリールスルホンアミドを含有する化合物である。これらの実施態様のある態様において、前記ＣＡ ＩＸリガンドは、式
【化５５】
2019512511.tif 000057
［式中、
各ＲＡは、独立して、Ｈ、ハロゲン、−ＯＲ１’、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１’、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−ＯＳ（Ｏ）Ｒ１’、−ＯＳ（Ｏ）２Ｒ１’、−ＳＲ１’、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１’、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１’、−Ｓ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１’Ｒ２’、−ＯＳ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−ＯＳ（Ｏ）２ＮＲ１’Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｃ（Ｏ）Ｒ１’、−ＮＲ１’Ｃ（Ｏ）ＯＲ２’、−ＮＲ１’Ｃ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｓ（Ｏ）Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｓ（Ｏ）２Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｓ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１’Ｒ２’、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１’、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１’、および−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’ からなる群から選択され；
Ｙ１は、−ＯＲＢ、−ＳＲＢ、−ＮＲＢＲＢ’、−Ｓ（Ｏ）２ＲＢ、−ＮＲＢＣ（Ｏ）ＲＢ’、または−ＮＲＢＣ（Ｏ）ＮＲＢＲＢ’であり；
各ＲＢおよびＲＢ’は、独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ２−Ｃ１０アルケニル、またはフェニルであって；Ｃ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ２−Ｃ１０アルケニル、およびフェニルにおける各水素原子は、−ＣＮ、Ｃ１−Ｃ６アルキル−（５〜９員ヘテロアリール）、−ＮＲ３’Ｒ４’、−ＮＲ３’（ＣＨ２）ｍ２ＮＲ３’Ｒ４’、または−Ｃ６Ｈ４ＯＲ３’で適宜置換されていてもよく；
各Ｒ３’およびＲ４’は、独立して、Ｈ、−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）＊、−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＯＲ５’、−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＮＲ５’Ｒ６’、または抱合体の残部に対する結合であり；
各Ｒ５’およびＲ６’は、独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ８アルキル、またはフェニルであって、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ２−Ｃ１０アルケニル、およびフェニルにおける各水素原子は、Ｃ１−Ｃ６アルキル−（フェニル）、−ＯＲ１’、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１’、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−ＯＳ（Ｏ）Ｒ１’、−ＯＳ（Ｏ）２Ｒ１’、−ＳＲ１’、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１’、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１’、−Ｓ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１’Ｒ２、−ＯＳ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−ＯＳ（Ｏ）２ＮＲ１’Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｃ（Ｏ）Ｒ１’、−ＮＲ１’Ｃ（Ｏ）ＯＲ２’、−ＮＲ１’Ｃ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｓ（Ｏ）Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｓ（Ｏ）２Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｓ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’、−ＮＲ１’Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１’Ｒ２’、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１’、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１’、および−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１’Ｒ２’で適宜置換されていてもよく；
各Ｒ１’およびＲ２’は、独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、およびＣ３−Ｃ９シクロアルキルからなる群から選択され；
ｍ１は、１、２、３、４、または５であり；ならびに
＊は、前記抱合体の残部に対する共有結合を示す］
で示されるものである。
【０１７７】
ある実施態様において、少なくとも１個のＲＡは、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１’Ｒ２’である。ある実施態様において、ｍ１は、１であり、ならびにＲＡは、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１’Ｒ２’である。ある実施態様において、１〜３個のヘテロ原子を有する５〜７員ヘテロアリールは、チアジアゾリル環である。
【０１７８】
ある実施態様において、ＣＡ ＩＸリガンドは、式
【化５６】
2019512511.tif 000058
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｗ、Ｘ、ｍ、ｎ、および＊は、本明細書で定義されるとおりである］
で示されるものである。
【０１７９】
これらの実施態様のある態様において、ｍは、１である。これらの実施態様のある態様において、ｎは、０である。これらの実施態様のある態様において、Ｒ１は、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ４Ｒ５である。これらの実施態様のある態様において、Ｒ１は、Ｒ１が結合している環のパラ位において、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ４Ｒ５ である。これらの実施態様のある態様において、Ｒ４およびＲ５は、Ｈである。これらの実施態様のある態様において、Ｒ２は、−ＣＮである。これらの実施態様のある態様において、
【化５７】
2019512511.tif 000059
は、π結合である。これらの実施態様のある態様において、Ｗは、−ＮＲ４’−である。これらの実施態様のある態様において、Ｘは、−Ｏ−である。これらの実施態様のある態様において、Ｒ４’は、Ｈまたは−ＣＨ３である。これらの実施態様のある態様において、ＣＡ ＩＸリガンドは、式
【化５８】
2019512511.tif 000060
［式中、＊は、本明細書で定義されるとおりである］
で示されるものである。
【０１８０】
ある実施態様において、ＣＡ ＩＸリガンドは、式
【化５９】
2019512511.tif 000061
［式中、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｙ、Ｚ、ｐ、ｒ、ｔ、および＊は、本明細書で定義されるとおりである］
で示されるものである。これらの実施態様のある態様において、ｐは、１である。これらの実施態様のある態様において、ｒは、１である。これらの実施態様のある態様において、ｔは、１である。これらの実施態様のある態様において、Ｒ６は、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ９Ｒ１０である。これらの実施態様のある態様において、Ｒ６は、Ｒ６が結合している環のパラ位において、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ９Ｒ１０である。これらの実施態様のある態様において、Ｒ７は、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ９Ｒ１０である。これらの実施態様のある態様において、Ｒ７は、Ｒ７が結合している環のパラ位において、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ９Ｒ１０である。これらの実施態様のある態様において、Ｒ９およびＲ１０は、Ｈである。これらの実施態様のある態様において、Ｒ８は、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１１である。これらの実施態様のある態様において、Ｒ１１は、Ｈまたは−ＣＨ３である。これらの実施態様のある態様において、Ｙは、−ＮＲ９’−である。これらの実施態様のある態様において、Ｚは、−ＮＲ１０’−である。これらの実施態様のある態様において、Ｒ９’は、Ｈまたは−ＣＨ３である。これらの実施態様のある態様において、Ｒ１０’は、Ｈまたは−ＣＨ３である。これらの実施態様のある態様において、ＣＡ ＩＸリガンドは、式
【化６０】
2019512511.tif 000062
［式中、＊は、本明細書で定義されるとおりである］
で示されるものである。
【０１８１】
ある実施態様において、ＣＡ ＩＸリガンドは、式
【化６１】
2019512511.tif 000063
［式中、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｙ、Ｚ、ｐ、ｒ、ｔ、および＊は、本明細書で定義されるとおりである］
で示されるものである。これらの実施態様のある態様において、ｕは、１である。これらの実施態様のある態様において、ｖは、０である。これらの実施態様のある態様において、Ｒ１３は、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１５Ｒ１６である。これらの実施態様のある態様において、Ｒ１３は、Ｒ１３が結合している環のパラ位において、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１５Ｒ１６である。これらの実施態様のある態様において、Ｒ１５およびＲ１６は、Ｈである。これらの実施態様のある態様において、Ｒ１７は、−Ｈである。これらの実施態様のある態様において、Ｗ１は、−ＮＲ１５’−である。これらの実施態様のある態様において、Ｘ１は、−ＮＲ１６’−である。これらの実施態様のある態様において、Ｒ１５’は、Ｈまたは−ＣＨ３である。これらの実施態様のある態様において、Ｒ１６’は、Ｈまたは−ＣＨ３である。これらの実施態様のある態様において、ＣＡ ＩＸリガンドは、式
【化６２】
2019512511.tif 000064
［式中、＊は、本明細書で定義されるとおりである］
で示されるものである。
【０１８２】
本開示について有用なリンカーは、構造によって特に限定されないものと認められる。前記リンカーは、長さ２〜１００個の原子であり、ＣＡ ＩＸリガンドを薬剤に共有結合するＣ、Ｎ、ＯおよびＳを含む構成要素から構成されるリンカーのいずれかでありうる。ある実施態様において、前記リンカーは、アルキル鎖部分、エーテル部分（例えば、ＰＥＧ）、長鎖アミン部分、アミノ酸鎖部分、ヒドラジン部分、およびこれらの組み合わせなどの単一基を含む。ある実施態様において、本開示について有用なリンカーは、−Ｃ（Ｏ）（ＣＨ２）２−１０ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）（ＣＨ２）２−１０Ｃ６Ｈ４Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）（Ｃ１−Ｃ１２アルキル）Ｃ（Ｏ）−、−ＮＨ−Ｃ１−Ｃ１２アルキル−ＮＨ−、−Ｎ（Ｃ１−Ｃ６アルキル）−Ｃ１−Ｃ１２アルキル−Ｎ（Ｃ１−Ｃ６アルキル）−、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２ＣＨ２（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｑＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２ＣＨ２（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｑ１Ｎ（Ｃ１−Ｃ６アルキル）−、−ＮＨ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｑ２ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（Ｏ）−、および−Ｎ（Ｃ１−Ｃ６アルキル）（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｑ３ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（Ｏ）−（式中、ｑ、ｑ１、ｑ２、およびｑ３の各々は、１〜４０の整数である）からなる群から選択される少なくとも１個の部分を含む。ある実施態様において、前記リンカーは、アミノ酸鎖を含みうる。ある実施態様において、前記リンカーは、ジペプチドまたはトリペプチドを含みうる。
【０１８３】
ある実施態様において、前記リンカーには、放出可能なリンカーが含まれ、用語「放出可能なリンカー」は、物理的条件下で壊すことができる少なくとも１個の結合を含むリンカーを意味し、例えば、ｐＨに不安定、酸に不安定、塩基に不安定、酸化に不安定、代謝的に不安定、生化学的に不安定、または酵素に不安定な結合である。結合を破壊するこのような生理学的条件は、必ずしも生物学的または代謝プロセスを含む必要はなく、加水分解反応などの標準的な化学反応、例えば、生理学的ｐＨにおける場合や細胞質ｐＨより低いｐＨを有するエンドソームなどの細胞小器官への区画化の結果としてなどが挙げられるものと認められる。ある実施態様において、前記放出可能なリンカーには、ジスルフィド結合が含まれる。ある実施態様において、前記放出可能なリンカーは、式
【化６３】
2019512511.tif 000065
［式中、各＊は、前記抱合体の残部に対する共有結合を示す］
で示される部分を含む。
【０１８４】
本明細書に記載の抱合体のいずれについて用いられる薬剤は、細胞の機能を調節するか、または改変することができるいずれかの分子（医薬的に活性な化合物（例えば、治療剤）を含む）、あるいは細胞または組織を画像化し、または可視化するための測定可能なシグナルを提供することができるいずれかの分子（例えば、イメージング剤）でありうる。
【０１８５】
治療剤として有用な適切な分子としては、下記に限定されないが、ペプチド、オリゴペプチド、レトロインベルソ型オリゴペプチド、タンパク質、タンパク質類似体（少なくとも１個の非ペプチド連結がペプチド連結に置き換わっている）、アポタンパク質、糖タンパク質、酵素、補酵素、酵素阻害剤、アミノ酸およびそれらの誘導体、受容体、ならびに他の膜タンパク質；抗原およびこれらの抗体；ハプテンおよびこれらの抗体；ホルモン、脂質、リン脂質、リポソーム；毒素；抗生物質；鎮痛薬；気管支拡張薬；ベータ遮蔽薬；抗菌薬；降圧剤；心血管治療薬（抗不整脈薬、強心配糖体、抗狭心症薬、および血管拡張薬を含む）；中枢神経系作用薬（刺激薬、向精神薬、抗躁薬、および抑制薬を含む）；抗ウイルス薬；抗ヒスタミン薬；抗癌剤（化学療法剤を含む）；精神安定薬；抗うつ薬；Ｈ−２アンタゴニスト；抗けいれん薬；制嘔吐剤；プロスタグランジンおよびプロスタグランジン類似物質；筋弛緩薬；抗炎症物質；刺激薬；うっ血除去薬；制吐薬；利尿薬；鎮痙薬；抗喘息薬；抗パーキンソン病薬；去痰薬；鎮咳薬；粘液溶解薬；ならびにミネラルおよび栄養添加物が挙げられる。
【０１８６】
ある実施態様において、前記治療剤は、ツブリシンでありうる。天然ツブリシンは、一般に、Ｎ−メチルピペコリン酸（Ｍｅｐ）、イソロイシン（Ｉｌｅ）、非天然アミノ酸（ツブバリン（Ｔｕｖ）と呼ばれる）、およびツブチロシンと呼ばれる非天然アミノ酸（Ｔｕｔ、チロシン類似体）またはツブフェニルアラニンと呼ばれる非天然アミノ酸（Ｔｕｐ、フェニルアラニン類似体）からなる直鎖テトラペプチドである。
【０１８７】
ある実施態様において、前記治療剤は、式
【化６４】
2019512511.tif 000066
［式中、
Ｒ１ａ、Ｒ３ａ、Ｒ３ａ’、およびＲ３ａ’’は、各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、およびＣ３−Ｃ６シクロアルキルからなる群から選択されるものであって、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、およびＣ３−Ｃ６シクロアルキルにおける各水素原子は、独立して、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル、３〜７員ヘテロシクロアルキル、Ｃ６−Ｃ１０アリール、５〜７員ヘテロアリール、−ＯＲ１３ａ、−ＯＣ（Ｏ）Ｒ１３ａ、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ１３ａＲ１３ａ’、−ＯＳ（Ｏ）Ｒ１３ａ、−ＯＳ（Ｏ）２Ｒ１３ａ、−ＳＲ１３ａ、−ＳＣ（Ｏ）Ｒ１３ａ、−Ｓ（Ｏ）Ｒ１３ａ、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ１３ａ、−Ｓ（Ｏ）２ＯＲ１３ａ、−Ｓ（Ｏ）ＮＲ１３ａＲ１３ａ’、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ１３ａＲ１３ａ’、−ＯＳ（Ｏ）ＮＲ１３ａＲ１３ａ’、−ＯＳ（Ｏ）２ＮＲ１３ａＲ１３ａ’、−ＮＲ１３ａＲ１３ａ’、−ＮＲ１３ａＣ（Ｏ）Ｒ１４ａ、−ＮＲ１３ａＣ（Ｏ）ＯＲ１４ａ、−ＮＲ１３ａＣ（Ｏ）ＮＲ１４ａＲ１４ａ’、−ＮＲ１３ａＳ（Ｏ）Ｒ１４ａ、−ＮＲ１３ａＳ（Ｏ）２Ｒ１４ａ、−ＮＲ１３ａＳ（Ｏ）ＮＲ１３ａＲ１４ａ’、−ＮＲ１３ａＳ（Ｏ）２ＮＲ１４ａＲ１４ａ’、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１３ａ）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１３ａ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１３ａ、または−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１３ａＲ１３ａ’で適宜置換されていてもよく；
Ｒ２ａ、Ｒ４ａ、およびＲ１２ａは、各々独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニルからなる群から選択され；
Ｒ５ａおよびＲ６ａは、各々独立して、Ｈ、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、−ＯＲ１５ａ、−ＳＲ１５ａ、および−ＮＲ１５ａＲ１５ａ’からなる群から選択されるものであって、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、およびＣ２−Ｃ６アルキニルにおける各水素原子は、独立して、ハロゲン、−ＯＲ１６ａ、−ＳＲ１６ａ、−ＮＲ１６ａＲ１６ａ’、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１６ａ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１６ａ、または−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１６ａＲ１６ａ’で適宜置換されていてもよく；あるいはＲ５ａおよびＲ６ａは、それらが結合している炭素原子と一緒になって、−Ｃ（Ｏ）−を形成し；
各Ｒ７ａ、Ｒ８ａ、Ｒ９ａ、Ｒ１０ａ、およびＲ１１ａは、独立して、Ｈ、ハロゲン、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、−ＣＮ、−ＮＯ２、−ＮＣＯ、−ＯＲ１７ａ、−ＳＲ１７ａ、−Ｓ（Ｏ）２ＯＲ１７ａ、−ＮＲ１７ａＲ１７ａ’、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１７ａ）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１７ａ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１７ａ、および−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１７ａＲ１７ａ’からなる群から選択されるものであって、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、およびＣ２−Ｃ６アルキニルにおける各水素原子は、独立して、ハロゲン、−ＯＲ１８ａ、−ＳＲ１８ａ、−ＮＲ１８ａＲ１８ａ’、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１８ａ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１８ａ、または−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１８ａＲ１８ａ’で適宜置換されていてもよく；
各Ｒ１３ａ、Ｒ１３ａ’、Ｒ１４ａ、Ｒ１４ａ’、Ｒ１５ａ、Ｒ１５ａ’、Ｒ１６ａ、Ｒ１６ａ’、Ｒ１７ａ、およびＲ１７ａ’は、独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル、３〜７員ヘテロシクロアルキル、Ｃ６−Ｃ１０アリール、および５〜７員ヘテロアリールからなる群から選択されるものであって、Ｃ１−Ｃ７アルキル、Ｃ２−Ｃ７アルケニル、Ｃ２−Ｃ７アルキニル、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル、３〜７員ヘテロシクロアルキル、Ｃ６−Ｃ１０アリール、または５〜７員ヘテロアリールにおける各水素原子は、ハロゲン、−ＯＨ、−ＳＨ、−ＮＨ２、または−ＣＯ２Ｈで適宜置換されていてもよく；
各Ｒ１８ａおよびＲ１８ａ’は、独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル、３〜７員ヘテロシクロアルキル、Ｃ６−Ｃ１０アリール、５〜７員ヘテロアリール、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１９ａ、−Ｐ（Ｏ）（ＯＲ１９ａ）２、および−Ｓ（Ｏ）２ＯＲ１９ａからなる群から選択され；
各Ｒ１９は、独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル、３〜７員ヘテロシクロアルキル、Ｃ６−Ｃ１０アリール、および５〜７員ヘテロアリールから選択され；
ａは、１、２、または３であり；ならびに
＊は、前記抱合体の残部に対する共有結合を示す］
で示されるテトラペプチドである。
【０１８８】
ある実施態様において、前記治療剤は、式
【化６５】
2019512511.tif 000067
［式中、Ｒ１ａ、Ｒ２ａ、Ｒ３ａ、Ｒ３ａ’、Ｒ３ａ’’、Ｒ４ａ、Ｒ５ａ、Ｒ７ａ、Ｒ８ａ、Ｒ９ａ、Ｒ１０ａ、Ｒ１１ａ、およびＲ１２ａは、本明細書に記載されるとおりであり、ならびに、＊は、前記抱合体の残部に対する共有結合を示す］
で示されるものである。
【０１８９】
別の態様において、前記治療剤は、下記一般式
【化６６】
2019512511.tif 000068
［式中、Ｒ９ａおよびＲ１３ａは、本明細書に記載されるとおりであり、＊は、前記抱合体の残部に対する共有結合を示す］
で示される、天然に存在するツブリシン、またはその類似体もしくは誘導体でありうる。
【０１９０】
前記ツブリシンの各々の抱合体は、本明細書に記載されるとおりである。
【０１９１】
ある実施態様において、前記治療剤は、下記一般式 
【化６７】
2019512511.tif 000069
【表１】
2019512511.tif 000070
［式中、＊は、前記抱合体の残部に対する共有結合を示す］
で示される天然に存在するツブリシンでありうる。
【０１９２】
イメージング剤として有用な適切な分子としては、以下に限定されないが、色素、例えば、フルオレセイン色素、ローダミン色素、近赤外線色素、およびＳＰＥＣＴイメージング剤、例えば、当該技術分野で公知のいずれかの放射性核種キレート化剤が挙げられる。ローダミン色素の例としては、以下に限定されないが、５−カルボキシテトラメチルローダミン（５−ＴＡＭＲＡ）、ローダミンＢ、ローダミン６Ｇ、ＴＲＩＴＣ、テキサスレッド、ローダミン１２３、スルホローダミン１０１などが挙げられる。ローダミン色素の例としては、以下に限定されないが、フルオレセイン、５−アミノ−フルオレセイン、６−アミノ−フルオレセイン、フルオレセインイソシアネート（ＦＩＴＣ）、ＮＨＳ−フルオレセイン、オレゴングリーン、トウキョウグリーン、シンガポールグリーン、フィラデルフィアグリーンなどが挙げられる。近赤外線色素の例としては、Ｓ−０４５６が挙げられる。放射性核種キレート化剤の例としては、下記に限定されないが、ＷＯ０３／０９２７４２に記載のものが挙げられる。ある実施態様において、前記薬剤は、ＳＰＥＣＴイメージング剤である。ある実施態様において、前記薬剤は、式
【化６８】
2019512511.tif 000071
［式中、Ｒ’は、Ｈであるか、あるいはＲ’は、Ｃ１−Ｃ６アルキル、アミノ−Ｃ１−Ｃ６アルキル、カルボキシ−Ｃ１−Ｃ６アルキル、ヒドロキシル−Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６ヘテロアルキル、Ｃ６−Ｃ１０アリール、Ｃ６−Ｃ１０アリール−Ｃ１−Ｃ６アルキル、およびＣ５−Ｃ１０ヘテロアリール−Ｃ１−Ｃ６アルキルからなる群から選択され；ならびに、＊は、前記抱合体の残部に対する共有結合を示す］
で示されるＳＰＥＣＴイメージング剤である。ある実施態様において、放射性核種は、前記ＳＰＥＣＴイメージング剤に結合している。
【０１９３】
ある実施態様において、前記薬剤は、式
【化６９】
2019512511.tif 000072
［式中、Ｍは、放射性核種の陽イオンであり、ならびに、＊は、前記抱合体の残部に対する共有結合を示す］
で示されるＳＰＥＣＴイメージング剤である。
【０１９４】
ある実施態様において、前記薬剤は、式
【化７０】
2019512511.tif 000073
［式中、＊は、前記抱合体の残部に対する共有結合を示す］
で示されるＳＰＥＣＴイメージング剤である。ある実施態様において、放射性核種は、前記ＳＰＥＣＴイメージング剤に結合している。ある実施態様において、前記薬剤は、式
【化７１】
2019512511.tif 000074
［式中、Ｍは、放射性核種の陽イオンであり、ならびに、＊は、前記抱合体の残部に対する共有結合を示す］
で示されるＳＰＥＣＴイメージング剤である。ある実施態様において、前記放射性核種は、ガリウムの同位体、インジウムの同位体、銅の同位体、テクネチウムの同位体、レニウムの同位体からなる群から選択される。ある実施態様において、前記放射性核種は、テクネチウムの同位体である。ある実施態様において、前記放射性核種は、９９ｍＴｃである。
【０１９５】
ある実施態様において、本明細書に記載の方法は、「対象」としてヒト臨床医学的適用および獣医学的適用の両方について使用することができる。よって、「対象」は、本明細書に記載の抱合体を投与することができ、ヒト（「患者」）でありうるか、あるいは獣医学的適用の場合、実験動物、家畜動物、愛玩動物、または野生動物でありうる。ある態様において、前記対象は、ヒト患者、実験動物（例えば、げっ歯類（例えば、マウス、ラット、ハムスターなど））、ウサギ、サル、チンパンジー、愛玩動物（例えば、イヌ、ネコ、およびウサギなど）、家畜動物（例えば、ウシ、ウマ、ブタ、ヒツジ、ヤギなど）、および飼育されている野生動物（例えば、クマ、パンダ、ライオン、トラ、ヒョウ、ゾウ、シマウマ、キリン、ゴリラ、イルカ、およびクジラなど）でありうる。
【０１９６】
様々な実施態様において、本明細書に記載の癌は、腫瘍原性である癌細胞集団（良性腫瘍および悪性腫瘍を含む）でありうるか、あるいは前記癌は、非腫瘍原性でありうる。前記癌は、自然に発生し、または患者の生殖系列に存在する突然変異もしくは体細胞突然変異などのプロセスにより発生しうるか、あるいは前記癌は、化学的に、ウイルスにより、または放射線により誘発されうる。本明細書に記載の発明に適用可能な癌としては、以下に限定されないが、癌、肉腫、リンパ腫、メラノーマ、中皮腫、上咽頭癌、白血病、腺癌、および骨髄腫が挙げられる。
【０１９７】
ある態様において、前記癌は、肺癌、骨癌、膵臓癌、皮膚癌、頭部癌、頸部癌、皮膚黒色腫、眼球内黒色腫、子宮癌、卵巣癌、子宮体癌、平滑筋肉腫、直腸癌、胃癌、大腸癌、乳癌、三種陰性乳癌、卵管癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、腟癌、産卵口癌、ホジキン病、食道癌、小腸癌、内分泌系癌、甲状腺癌、副甲状腺癌、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、副腎癌、柔組織肉腫、尿道癌、陰茎癌、前立腺癌、慢性白血病、急性白血病、リンパ性リンパ腫、胸膜中皮腫、膀胱癌、バーキットリンパ腫、尿管癌、腎臓癌、腎細胞癌、腎盂腎癌、中枢神経系（ＣＮＳ）腫瘍、原発性ＣＮＳリンパ腫、脊髄軸腫瘍、脳幹神経膠腫、下垂体腺腫、胆管細胞癌、甲状腺好酸性細胞腫瘍、または食道胃接合部の腺癌でありうる。
【０１９８】
ある実施態様において、本開示は、標的としたＮＩＲ画像化に関するものであって、式ＶＩで示される抱合体は、ＣＡ ＩＸタンパク質を発現する細胞および組織の選択的な画像化を提供する。式ＶＩで示される抱合体について用いられるインビトロまたはインビボ画像化方法は、特に限定されず、当該技術分野で公知のいずれの従来のインビトロまたはインビボ画像化方法であってもよいことが認められる。さらに、このような当技術分野で公知の画像化方法は、当該技術分野で公知のいずれの装置もしくはアッセイキットを用いて実施することができ、下記に限定されないが、蛍光顕微鏡系（例えば、Ｎｉｋｏｎ ９０ｉ）、インビボ蛍光画像化系（例えば、Ｃａｌｉｐｅｒ ＩＶＩＳ Ｌｕｍｉｎａ ＩＩ画像化ステーション（多くの場合、ＩＳＯＯＮ５１６０ Ａｎｄｏｒ Ｎｉｋｏｎ ｃａｍｅｒａなどのカメラが取り付けられている））などが挙げられる。
【０１９９】
ある実施態様において、本開示は、インビトロまたはインビボで細胞または組織の集団を画像化するための方法を提供する。このようなインビトロ方法は、当該技術分野で公知の方法のいずれかによって行うことができることが認められる。ある実施態様において、本明細書に記載のインビトロ画像化方法には、ａ．細胞の集団を前記抱合体ＶＩと接触させて、ＣＡ ＩＸタンパク質を発現する細胞に結合する抱合体を供し、続いてｂ．細胞に結合した前記抱合体を近赤外波長光による照射によって視覚化することが含まれうる。細胞に結合した前記抱合体を近赤外波長光による照射によって視覚化することには、励起波長での照射および発光波長での検出が含まれうることが認められる。よって、ある実施態様において、本明細書に記載のインビトロ画像化方法 には、ａ．細胞の集団を前記抱合体ＶＩと接触させて、ＣＡ ＩＸタンパク質を発現する細胞に結合する抱合体を供し、ｂ．ＣＡ ＩＸタンパク質を発現する細胞に結合した抱合体を、近赤外波長光を用いて照射し、続いてｃ．蛍光波長で前記癌細胞から励起した光を検出することが含まれうる。
【０２００】
ある実施態様において、組織（例えば、癌性腫瘍）は、本明細書に記載の方法によって画像化することができる。例えば、ある実施態様において、本明細書に記載のインビボ画像化方法には、ａ．式ＶＩで示される抱合体；またはその医薬的に許容される塩を患者に投与して、ＣＡ ＩＸタンパク質を発現する細胞に結合する抱合体を供し；続いてｂ．ＣＡ ＩＸタンパク質を発現する細胞に結合した前記抱合体を、近赤外波長光による照射によって視覚化することが含まれうる。細胞に結合した前記抱合体を近赤外波長光による照射によって視覚化することには、励起波長での照射および蛍光波長での検出が含まれうることが認められる。よって、ある実施態様において、本明細書に記載のインビボ画像化方法には、ａ．式ＶＩで示される抱合体；またはその医薬的に許容される塩を患者に投与して、ＣＡ ＩＸタンパク質を発現する細胞に結合する抱合体を供し；ｂ．ＣＡ ＩＸタンパク質を発現する細胞に結合した前記抱合体を、近赤外波長光によって照射し；続いてｃ．発光波長で癌細胞から励起された光を検出することが含まれうる。細胞に結合した前記抱合体を近赤外波長光による照射によって視覚化することは、いずれの公知のＮＩＲ画像化技術（診断用または他の用途）または当該技術分野で公知の装置を用いて実施擦ることができることが認められる。
【０２０１】
本明細書に記載の画像化方法について用いられる光の波長は、例えば、約６００ｎｍ〜約２５００ｎｍの範囲内の近赤外波長領域内でありうる。このような波長は、複数波長または単一波長の範囲でありうる。ある実施態様において、励起波長は、約６００ｎｍ〜約２５００ｎｍの範囲内でありうる。ある実施態様において、励起波長は、約６００ｎｍ〜約９００ｎｍの範囲内でありうる。ある実施態様において、励起波長は、約７００ｎｍ〜約７５０ｎｍの範囲内でありうる。ある実施態様において、励起波長は、約７４５ｎｍでありうる。ある実施態様において、蛍光波長は、約６００ｎｍ〜約２５００ｎｍの範囲内でありうる。ある実施態様において、蛍光波長は、約７５０ｎｍ〜約９００ｎｍの範囲内でありうる。ある実施態様において、蛍光波長は、約７５０ｎｍ〜約７９０ｎｍの範囲内でありうる。ある実施態様において、蛍光波長は、約７９０ｎｍでありうる。ある実施態様において、蛍光波長は、ＩＣＧ（インドシアニングリーン色素としても公知）の蛍光波長でありうる。
【０２０２】
ある実施態様において、本開示は、スキーム１に示されるように式ＶＩの抱合体の調製する方法を提供する。
スキーム１
【化７２】
2019512511.tif 000075
【０２０３】
本明細書に記載の方法の他の実施態様において、本明細書に記載の抱合体の医薬的に許容される塩が提供される。本明細書に記載の抱合体の医薬的に許容される塩には、その酸付加塩および塩基性塩が含まれる。
【０２０４】
適する酸付加塩は、非毒性塩を形成する酸から形成される。例示的な例としては、酢酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベシル酸塩、重炭酸塩／炭酸塩、重硫酸塩／硫酸塩、ホウ酸塩、カンシル酸塩、クエン酸塩、エジシル酸塩、エシレート、ギ酸塩、フマル酸塩、グルセプト酸塩、グルコン酸塩、グルクロン酸塩、ヘキサフルオロリン酸塩、ヒベンズ酸塩、塩酸塩／塩化物塩、臭化水素酸塩／臭化物塩、ヨウ化水素酸塩／ヨウ化物塩、イセチオン酸塩、乳酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メシル酸塩、メチル硫酸塩、ナフタレート、２−ナプシル酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、オロト酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、パモ酸塩、リン酸塩／リン酸水素塩／リン酸二水素塩、サッカリン酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、トシル酸塩、およびトリフルオロ酢酸塩が挙げられる。
【０２０５】
本明細書に記載の抱合体の適する塩基性塩は、非毒性塩を形成する塩基から形成される。例示的な例として、アルギニン塩、ベンザチン塩、カルシウム塩、コリン塩、ジエチルアミン塩、ジオラミン塩、グリシン塩、リジン塩、マグネシウム塩、メグルミン塩、オラミン塩、カリウム塩、ナトリウム塩、トロメタミン塩、および亜鉛塩が挙げられる。酸および塩基のヘミ塩はまた形成されてもよく、例えば、ヘミ硫酸塩およびヘミカルシウム塩である。
【０２０６】
ある実施態様において、本明細書に記載の抱合体は、１つまたはそれ以上の医薬的に許容される担体とともに製剤として投与されてもよい。前記担体は、賦形剤でありうる。担体の選択は、特定の投与様式、溶解性および安定性における担体の効果、および製剤の性質などの因子によって広い範囲までである。本明細書に記載される抱合体の送達に適する医薬組成物およびそれらの調製のための方法は当業者に明らかである。このような組成物およびそれらの調製方法は、例えば、出典明示により本明細書に取り込まれるRemington: The Science & Practice of Pharmacy, 21th Edition (Lippincott Williams & Wilkins, 2005)に見出される。
【０２０７】
ある例示的な態様において、医薬的に許容される担体には、生理学的に適合する、いずれか全ての溶媒、分散媒、コーティング剤、抗菌薬および抗真菌薬、等張および吸収遅延剤など、ならびにこれらの組み合わせが含まれる。ある実施態様において、前記担体は非経口投与に適する。医薬的に許容される担体には、無菌注射可能な溶液または分散剤の即時調製のための無菌水溶液もしくは分散剤および無菌散剤が含まれる。さらなる活性な化合物もまた本発明の組成物に取り込ませることができる。
【０２０８】
様々な実施態様において、液体製剤には、懸濁液および溶液が含まれうる。このような製剤には、担体、例えば、水、エタノール、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、メチルセルロースまたは適する油、ならびに１つもしくはそれ以上の乳化剤および／または懸濁化剤が含まれてもよい。液体製剤はまた、固形物の再構成によって調製されてもよい。
【０２０９】
ある実施態様において、水性懸濁液は、適当な賦形剤と混合して、活性物質を含有していてもよい。このような賦形剤は、懸濁化剤、例えば、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、トラガントゴム、およびアラビアゴム；分散剤もしくは湿潤剤（天然に存在するリン脂質であってもよい）、例えば、レシチン；アルキレンオキシドと脂肪酸との縮合生成物、例えば、ステアリン酸ポリオキシエチレン；エチレンオキシドと長鎖脂肪族アルコールとの縮合生成物、例えば、ヘプタデカエチレンオキシセタノール；エチレンオキシドと脂肪酸およびヘキシトールに由来する部分エステルとの縮合生成物、例えば、モノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビトール；あるいはエチレンオキシドと、脂肪酸およびヘキシトール無水物に由来する部分エステとの縮合生成物、例えば、モノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビタンである。前記水性懸濁液はまた、１つまたはそれ以上の保存剤、例えば、アスコルビン酸、エチル、ｎ−プロピル、またはｐ−ヒドロキシベンゾエート；あるいは１つまたはそれ以上の着色剤を含有していてもよい。
【０２１０】
ある例示的な実施態様において、水の添加による水性懸濁液の調製に適する分散性散剤および顆粒剤は、分散剤もしくは湿潤剤、懸濁化剤および１つもしくはそれ以上の保存剤と混合して活性成分を供する。さらなる賦形剤、例えば、着色剤が存在していてもよい。
【０２１１】
適切な乳化剤は、天然に存在するゴム、例えば、アラビアゴムまたはトラガントゴム；天然に存在するリン脂質、例えば、大豆レシチン；ならびにエステル（脂肪酸とヘキシトール無水物に由来する部分エステル、例えば、モノオレイン酸ソルビタン、および前記部分エステルとエチレンオキシドとの縮合生成物、例えば、モノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビタンを含む）であってもよい。
【０２１２】
他の実施態様において、等張剤（例えば、糖、ポリアルコール、例えば、マンニトール、ソルビトール、または塩化ナトリウム）が前記組成物に含まれうる。注射可能な組成物の持続的な吸収は、組成物中に吸収を遅延させる薬剤（例えば、モノステアリン酸塩およびゼラチン）を含ませることによって達成することができる。
【０２１３】
経口投与のための例示的な形態には、錠剤、カプセル剤、エリキシル剤、シロップなどが含まれる。
【０２１４】
本明細書に記載される癌のタイプに応じて、投与経路および／または抱合体が局所または全身に投与されるかが決定され、広範囲の許容可能な用量が本明細書に包含され、約１μｇ／ｋｇ〜約１ｇ／ｋｇの範囲の用量が含まれる。投薬は、単一であってもよく、または分割されてもよく、様々な種類のプロトコールに従って投与されてもよく、ｑ．ｄ．、ｂ．ｉ．ｄ．、ｔ．ｉ．ｄ．、または隔日、隔週（ｂ．ｉ．ｗ．）、１日に１回、１ヶ月に１回、四半期に１回などが含まれる。これらの各場合において、本明細書に記載の治療上の有効量は、投与の例に対応するものであるか、あるいは投薬プロトコールによって決定されるような、合計の１日の用量、１週間の用量、１ヶ月の用量、または四半期の用量であることが理解される。
【０２１５】
ある態様において、本明細書に記載される抱合体は、血流、筋肉、または内部器官に直接投与されてもよい。このような非経口投与のための適する経路としては、静脈内、動脈内、腹腔内、くも膜下腔内、硬膜外、脳室内、尿道内、胸骨内、脳内、腫瘍内、筋肉内、および皮下送達が挙げられる。非経口投与のための適する方法としては、ニードル（マイクロニードルを含む）注射器、ニードルなし注射器、吸入技術が挙げられる。
【０２１６】
ある例示的な態様において、非経口製剤は、典型的に、担体または賦形剤、例えば、塩、炭水化物、および緩衝剤（好ましくは、３〜９のｐＨ）などを含有していてもよい水溶液であるが、ある場合においては、それらは、無菌非水性溶液として、または乾燥された形態として適切に製剤化させて、無菌のパイロジェンを含まない水などの適するベヒクルと合わせて用いられてもよい。他の実施態様において、本明細書に記載の液体製剤のいずれもが、本明細書に記載の抱合体の非経口投与に適用されてもよい。無菌条件下での非経口製剤の調製（例えば、無菌条件下での凍結乾燥）は、当業者に周知の標準的な医薬技術を用いて容易に行われうる。ある実施態様において、非経口製剤の調製に用いられる本明細書に記載される抱合体の溶解性は、適当な製剤化技術の使用、例えば、溶解性亢進薬剤を含ませることによって高められてもよい。
【０２１７】
様々な実施態様において、非経口投与のための製剤は、即時放出および／または改良放出のために製剤化されうる。ある例示的な態様において、本発明の活性薬剤（すなわち、本明細書に記載の抱合体）は、徐放性製剤、例えば、徐放性ポリマーを含む組成物中で投与されてもよい。前記活性薬剤は、前記抱合体を急速な放出から保護する担体とともに調製することができ、例えば、制御放出製剤（留置剤およびマイクロカプセル化送達系を含む）などである。生物分解性生体適合ポリマーを用いることができ、例えば、酢酸絵エチレンビニル、ポリ酸無水物、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオルトエステル、ポリ乳酸およびポリ乳酸コポリマー、ポリグリコール酸コポリマー（ＰＧＬＡ）などである。このような製剤の調製方法は、一般的に当業者に公知である。別の態様において、本明細書に記載の抱合体または前記抱合体を含む組成物は、適宜、継続的に投与されうる。
【０２１８】
ある実施態様において、キットが提供される。本明細書に記載される活性な抱合体の組み合わせが投与される場合、２つもしくはそれ以上の医薬組成物は、前記組成物の連続投与または共投与に適切なキットの形態で組み合わされていてもよい。このようなキットには、２つもしくはそれ以上の別の医薬組成物（そのうちの少なくとも１個は本明細書に記載の抱合体を含有する）、ならびに前記組成物を別々に保持するための手段、例えば、容器、別々のボトル、または別々のアルミ箔小包が含まれる。別の態様において、患者の選別および／または治療についての本明細書に記載される抱合体の使用説明書を提供する表示がある容器中の本明細書に記載される１つまたはそれ以上の抱合体を含む組成物が提供される。
【０２１９】
ある実施態様において、無菌注射溶液は、前記活性薬剤を、上記に記載の成分の１つまたは組み合わせとともに、適当な溶媒中に必要とされる量で含ませ、必要に応じて、濾過し、滅菌することによって調製することができる。典型的には、分散剤は、前記抱合体を、分散媒および上記に記載のさらなる成分のいずれかを含有する無菌ベヒクルに含ませることによって調製される。無菌注射溶液の調製のための無菌散剤の場合、好ましい調製方法は、真空乾燥および凍結乾燥であり、活性成分の粉末とさらなる所望成分を以前に無菌濾過したその溶液から生成し、あるいはこれらの成分は一緒に無菌濾過されてもよい。
【０２２０】
前記組成物は、溶液、マイクロエマルション、リポソーム、または高薬物濃度に適する他の規則構造として製剤化することができる。前記担体は、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、および液体ポリエチレングリコールなど）、およびこれらの適する混合物を含有する溶媒または分散媒でありうる。ある実施態様において、適正な流動性は、例えば、レシチンなどのコーティング剤の使用、分散剤の場合に必要とされる粒子径の維持、および界面活性剤の使用によって維持することができる。
【０２２１】
本明細書に記載の抱合体を投与するための有効な計画のいずれをも用いることができる。例えば、本明細書に記載の抱合体は、単回用量として投与することができ、あるいは前記用量は、複数回の日常の投薬計画として分割し、投与することができる。さらに、時間差計画、例えば、１週間に１〜５日が毎日治療の代わりとして用いることができ、本明細書に記載の方法のために、このような間欠もしくは時差の日常の計画は、毎日治療と同等と考えられ、意図される。ある例示的な実施態様において、前記患者は、癌を治療するために、本明細書に記載の抱合体の複数回の注射で治療される。ある実施態様において、前記患者は、本明細書に記載の抱合体で、例えば、１２−７２時間間隔または４８−７２時間間隔で複数回（好ましくは、約２〜約５０回まで）にて注射される。本明細書に記載の抱合体のさらなる注射は、最初の注射後数日または数ヶ月で患者に投与することができ、さらなる注射は、癌の再発を予防することができる。
【０２２２】
本明細書に記載の抱合体による適切な治療過程が用いられうる。ある実施態様において、各用量および投薬計画は、約１５ｍｇの１ヶ月間で投与される合計容量を提供するように選択される。１の例示的な例において、本明細書に記載の抱合体は、各４週間周期の第１、２、および３週目に、１週間に５日は単回１日用量で投与され、４週目に投与されない。別の例において、本明細書に記載の抱合体は、各４週間周期の第１および３週目に、１週間に３日は単回１日用量で投与され、第２および４週眼に投与されない。別の例において、本明細書に記載の抱合体は、第１および２週目に２週間に１回、すなわち、３週間周期の第１、４、８、１１日目に投与される。別の例において、本明細書に記載の抱合体は、第１および２週目に１週間に１回、すなわち、３週間周期の第１および８日目に投与される。
【０２２３】
本明細書に記載の抱合体の単一の１日用量は、患者の状態、治療される癌、本明細書に記載の抱合体の投与経路および組織分布、ならびに他の治療上の処置（例えば、放射線治療または併用療法におけるさらなる薬剤など）の同時使用の可能性に応じて大きく変動しうる。患者に投与されるべき有効な量は、体表面積、体重、および患者の状態の医師の評価に基づくものである。治療上の有効用量（本明細書では「治療上の有効量」ともいう）は、例えば、約０．５ｍｇ／ｍ２〜約２０．０ｍｇ／ｍ２の範囲でありうる。
【０２２４】
本明細書に記載の抱合体は、１つまたはそれ以上のキラル中心を含んでいてもよく、あるいは複数の立体異性体として存在していてもよい。よって、純粋な立体異性体、ならびにエナンチオマー、ジアステレオマー、およびエナンチオマーもしくはジアステレオマーを豊富に含む混合物などの立体異性体の混合物を含むことが理解されるべきである。本明細書に記載の抱合体は、幾何異性体として存在することができる。よって、本発明には、純粋な幾何異性体または幾何異性体の混合物が含まれることが理解されるべきである。
【０２２５】
本明細書に記載の抱合体は、非溶媒和形態ならびに溶媒和形態（水和形態を含む）で存在しうることが理解される。一般に、溶媒和形態は、非溶媒形態と等価であり、本発明の範囲に包含される。本明細書に記載の抱合体は、複数の結晶形またはアモルファス形態で存在しうる。一般に、全ての物理的な形態は、本発明が意図している使用と等価であり、本発明の範囲内とされる。
【０２２６】
別の態様において、本明細書に記載の抱合体の投与のための組成物および／または製剤は、少なくとも約９０％、または約９５％、または約９６％、または約９７％、または約９８％、または約９９％、または約９９．５％の純度を有する本明細書に記載の抱合体から調製される。別の態様において、本明細書に記載の抱合体の投与のための組成物および製剤は、少なくとも９０％、または少なくとも９５％、または少なくとも９６％、または少なくとも９７％、または少なくとも９８％、または少なくとも９９％、または少なくとも９９．５％の純度を有する本明細書に記載の抱合体から調製される。
【実施例】
【０２２７】
物質
保護されたアミノ酸は、Ｃｈｅｍ−Ｉｍｐｅｘ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ（イリノイ州、シカゴ）から購入した。Ｈ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−２−Ｃｌ−Ｔｒｔ樹脂は、Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ（カリフォルニア州、サンディエゴ）から入手した。ツブリシンＢ及びその活性化された誘導体は、Ｅｎｄｏｃｙｔｅ Ｉｎｃ．（インディアナ州、ウェストラファイエット）から贈与を受けた。２−（１Ｈ−７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチル ウロニウム ヘキサフルオロホスフェート メタンアミニウム（ＨＡＴＵ）は、Ｇｅｎｓｃｒｉｐｔ Ｉｎｃ．（ニュージャージー州、ピスカタウェイ）から入手した。硫酸、メタノール、ＤＭＳＯ、ＤＭＦ、ＴＦＡ、イソプロピルアルコール、ＮＨ２−ＰＥＧ１２−ＣＯＯＨ−ｔＢｕ、ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）、ピペリジン、ＣＦ３ＣＯＯＨ、ＣＨ２Ｃｌ２、Ｋ２ＣＯ３、チラミン、および全ての他の化学試薬は、Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈから購入した。Ｐｕｒｅ ｃｏａｔ Ａｍｉｎｅ ２４ウェルマイクロタイタープレートは、ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ（カリフォルニア州、サンノゼ）から購入した。全ての他の細胞培養試薬、シリンジ、および使い捨ての器具は、ＶＷＲ（イリノイ州、シカゴ）から購入した。
【０２２８】
実施例１：Ｌ１−ローダミン、Ｌ２−ローダミン、およびＬ３−ローダミンの合成
【化７３】
2019512511.tif 000076
Ｌ１−ローダミン
【化７４】
2019512511.tif 000077
Ｌ２−ローダミン
【化７５】
2019512511.tif 000078
Ｌ３−ローダミン
ＣＡ ＩＸ阻害剤Ｌ１、Ｌ２、およびＬ３は、以前に報告されるとおりに調製した（Rami M, Winum JY, Innocenti A, Montero JL, Scozzafava A, Supuran CT.  Carbonic anhydrase inhibitors:  copper(II) complexes of polyamino-polycarboxylamido aromatic/heterocyclic sulfonamides are very potent inhibitors of the tumor-associated isoforms of IX and XII.  Bioorg Med Chem Lett.  2008, 18(2):836-841, and Pacchiano F, Carta F, McDonald PC, Lou Y, Vullo D, Scozzafava A, Dedhar S, Supuran CT.  Ureido-substituted benzenesulfonamides potently inhibit carbonic anhydrase IX and show antimetastatic activity in a model of breast cancer metastasis.  J Med Chem.  2011, 54(6):1896-1902を参照のこと）。前記ＣＡ ＩＸ阻害剤を、ＤＭＳＯ中のＥＤＣ．ＨＣｌおよびＨＯＢｔの存在下でローダミン誘導体（５−（（５−アミノペンチル）カルバモイル）−２−（６−（ジメチルアミノ）−３−（ジメチルイミニオ）−３Ｈ−キサンテン−９−イル）ベンゾエート塩酸塩）と１２時間カップリングさせて、標的抱合体を得た。Ｌ１−ローダミンについて、LRMS-LC/MS (m/z):[M + H]+ C４８H４８N７O９Sの理論値 ８９８．３２；実測値 ８９８。Ｌ２−ローダミンについて、LRMS-LC/MS (m/z): [M + H]+ C５２H６０N１０O１３S２の理論値 １０９７．３９；実測値 １０９７。Ｌ３−ローダミンについて、LRMS-LC/MS (m/z): [M + H]+ C４９H５６N７O１２Sの理論値 ９６６．３７；実測値 ９６６．１。
【０２２９】
実施例２：Ｌ２−ＰＥＧ１２−ＥＣ２０、Ｌ２−ＰＥＧ３６−ＥＣ２０、Ｌ２−Ｐｒｏ３−ＰＥＧ１２−ＥＣ２０、およびＬ３−ＰＥＧ１２−ＥＣ２０の合成
【化７６】
2019512511.tif 000079
Ｌ２−ＰＥＧ１２−ＥＣ２０
【化７７】
2019512511.tif 000080
Ｌ２−ＰＥＧ３６−ＥＣ２０
【化７８】
2019512511.tif 000081
Ｌ２−Ｐｒｏ３−ＰＥＧ１２−ＥＣ２０
【化７９】
2019512511.tif 000082
Ｌ３−ＰＥＧ１２−ＥＣ２０
全ての画像化抱合体は、下記の固相法により合成した。Ｈ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−２−クロロトリチル樹脂（１００ｍｇ，０．５６ｍＭ）を、３ｍＬのジクロロメタン（ＤＣＭ）、続いて３ｍＬのジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）で膨脹させた。３回目について、ＤＭＦ中の２０％ ピペリジンの３ｍＬ溶液をアルゴンで５分間泡立てながら該樹脂に加えた。該樹脂を３ｍＬのＤＭＦで３回洗浄し、３ｍＬのイソプロピルアルコール（ｉ−ＰｒＯＨ）で３回洗浄した。該樹脂をＤＭＦ中で膨脹させ、ＤＭＦ中のＦｍｏｃ−Ａｓｐ（ｔＢｕ）−ＯＨ（２．５当量）、ＰｙＢＯＰ（２．５当量）、およびＤＩＰＥＡ（４．０当量）の溶液を加えた。アルゴンを２時間泡立て、該樹脂を３ｍＬのＤＭＦで３回洗浄し、３ｍＬのｉ−ＰｒＯＨで３回洗浄した。
【０２３０】
Ｌ２−ＰＥＧ１２−ＥＣ２０について、上記工程は、Ｂｏｃ−ＤＡＰ（Ｆｍｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−ＮＨ−ＰＥＧ１２−ＣＯＯＨ、およびＣＡ ＩＸ阻害剤Ｌ２の付加のためのカップリングステップを３回以上繰り返した。Ｌ２−ＰＥＧ３６−ＥＣ２０について、上記工程は、Ｂｏｃ−ＤＡＰ（Ｆｍｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−ＮＨ−ＰＥＧ３６−ＣＯＯＨ、およびＣＡ ＩＸ阻害剤Ｌ２の付加のためのカップリングステップを３回以上繰り返した。Ｌ２−Ｐｒｏ３−ＰＥＧ１２−ＥＣ２０について、上記工程は、Ｂｏｃ−ＤＡＰ（Ｆｍｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−ＮＨ−ＰＥＧ３６−ＣＯＯＨ、３回のプロリン、およびＣＡ ＩＸ阻害剤Ｌ２の付加のためのカップリングステップを６回以上繰り返した。Ｌ３−ＰＥＧ１２−ＥＣ２０について、上記工程は、Ｂｏｃ−ＤＡＰ（Ｆｍｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−ＮＨ−ＰＥＧ１２−ＣＯＯＨ、およびＣＡ ＩＸ阻害剤Ｌ３の付加のためのカップリングステップを３回以上繰り返した。
【０２３１】
最終化合物は、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）：Ｈ２Ｏ：トリイソプロピルシラン：混合物（９５：２．５：２．５）を用いて該樹脂から切断し、減圧濃縮した。該濃縮した生成物をジエチルエーテル中で沈殿させ、減圧下で乾燥させた。粗抱合体をプレパラティブＲＰ−ＨＰＬＣにより精製して［Ａ＝２ｍＭ 酢酸アンモニウム緩衝液（ｐＨ７．０）、Ｂ＝ＣＨ３ＣＮ、溶媒グラジエント：３０分で０％ Ｂ〜１００％ Ｂ］、所望生成物を得た。
【０２３２】
Ｌ２−ＰＥＧ１２−ＥＣ２０抱合体について、LRMS-LC/MS (m/z):[M + H]+ C５９H９７N１１O２８S３の理論値 １５０３．５７；実測値 ７５２．８（半分量）。Ｌ２−ＰＥＧ３６−ＥＣ２０抱合体について、LRMS-LC/MS (m/z): [M + H]+ C１０８H１９５N１１O５２S３の理論値 ２５７４．２１；実測値 １２８１．６（半分量）。Ｌ２−Ｐｒｏ３−ＰＥＧ１２−ＥＣ２０について、LRMS-LC/MS (m/z): [M + H]+ C１０８H１９５N１１O５２S３の理論値 １８１０．０３；実測値 １８１１．５。Ｌ３−ＰＥＧ１２−ＥＣ２０について、LRMS-LC/MS (m/z): [M + H]+ C５４H８７N９O２４S２の理論値 １３１０．４４；実測値 ６５５．８（半分量）。
【０２３３】
実施例３：ＣＡ ＩＸ抱合された近赤外蛍光色素（抱合体ＶＩ）の調製
【化８０】
2019512511.tif 000083
ステップ１：遊離カルボン酸基の１つは、ＣＡ ＩＸリガンドをメタノール中で濃スルホン酸と４時間反応させることによって保護して、化合物ＩＩを収率８３％および純度９６％で供した。該粗生成物はプレパラティブ逆相高速液体クロマトグラフィーにより精製した。正確な質量：６００．１３（分子量６００．６２）
【０２３４】
ステップ２：化合物ＩＩは、ＮＨ２−ＰＥＧ１２−ＣＯＯ−ｔ−ＢｕとＤＭＳＯ溶媒中でＨＡＴＵおよびＤＩＰＥＡの存在下で２４時間反応して、化合物ＩＩＩを収率７６％および純度８７％で供した。該粗生成物はプレパラティブ逆相高速液体クロマトグラフィーにより精製した。正確な質量：１２３９．５５（分子量１２４０．４４） 
【０２３５】
ステップ３：化合物ＩＩＩは、トリフルオロ酢酸と塩化メチレン中で４時間反応することにより脱保護されて、化合物ＩＶを収率８７％および純度８４％で供した。該粗生成物をプレパラティブ逆相高速液体クロマトグラフィーにより精製した。正確な質量：１１９９．４８（分子量１２００．３３） 
【０２３６】
ステップ４：化合物ＩＶは、ＤＭＳＯ溶媒中でＨＡＴＵおよびＤＩＰＥＡの存在下で２４時間反応することによりチラミンとカップリングして、化合物Ｖを収率７０％および純度９０％で供した。該粗生成物をプレパラティブ逆相高速液体クロマトグラフィーにより精製した。正確な質量：１３１８．５６（分子量１３１９．５０）
【０２３７】
ステップ５：化合物Ｖは、ＤＭＳＯ中でＫ２ＣＯ３の存在下にて近赤外色素（Ｓ０４５６）と３時間反応して、最終的な標的抱合体ＶＩ（Ｈｙｐｏｘｙｆｌｕｏｒ）を生じた。粗生成物をプレパラティブ逆相高速液体クロマトグラフィーにより精製した（２０ｍＭ 酢酸アンモニウム緩衝液および５％〜８０％ アセトニトリルからなるグラジエント移動相で３０分間（ｘＴｅｒｒａ Ｃ１８；Ｗａｔｅｒs；１０ｕｍ；１９×２５０ｍｍ））。該抱合体の溶出は２８０ｎｍでモニターし、溶出された化合物の同定は液体クロマトグラフィー質量分析により分析した。正確な質量：２１６９．７６（分子量２１７１．５４）。λｅｘ＝７７０ｎｍおよびλｅｍ＝７９０ｎｍ
【０２３８】
実施例４：ＣＡ ＩＸと抱合されたローダミン（ＣＡ ＩＸ−ローダミン）の調製
ステップ１：遊離カルボン酸基の１つが、該ＣＡ ＩＸリガンドをメタノール中で濃スルホン酸と４時間反応させることにより保護されて、化合物ＩＩを収率８３％および純度９６％で供した。該粗生成物をプレパラティブ逆相高速液体クロマトグラフィーにより精製した。正確な質量：６００．１３（分子量６００．６２）
【０２３９】
ステップ２：化合物ＩＩは、ＤＭＳＯ溶媒中でＨＡＴＵおよびＤＩＰＥＡの存在下にてＮＨ２−ＰＥＧ１２−ＣＯＯ−ｔ−Ｂｕと２４時間反応して、化合物ＩＩＩを収率７６％および純度８７％で供した。該粗生成物をプレパラティブ逆相高速液体クロマトグラフィーにより精製した。正確な質量：１２３９．５５（分子量１２４０．４４）
【０２４０】
ステップ３：化合物ＩＩＩは、塩化メチレン中でトリフルオロ酢酸と４時間反応することにより脱保護されて、化合物ＩＶを収率８７％および純度８４％で供した。該粗生成物をプレパラティブ逆相高速液体クロマトグラフィーにより精製した。正確な質量：１１９９．４８（分子量１２００．３３）
【０２４１】
ステップ４：化合物ＩＶは、ＤＭＳＯ中でＥＤＣ．ＨＣｌおよびＨＯＢｔの存在下にて、（５−（（５−アミノペンチル）カルバモイル）−２−（６−（ジメチルアミノ）−３−（ジメチルイミニオ）−３Ｈ−キサンテン−９−イル）ベンゾエート塩酸塩）と１２時間反応して、最終的な標的抱合体ＣＡ ＩＸ−ローダミンを供した。該近赤外フルオレセイン色素について、得られた保護化合物をチラミンとカップリングさせて、フェノール基を導入し、続いて該近赤外色素（Ｓ０４５６）と反応させて、最終的な標的抱合体（Ｈｙｐｏｘｙｆｌｕｏｒと呼ばれる）を得た。粗生成物をプレパラティブ逆相高速液体クロマトグラフィーにより精製した（２０ｍＭ 酢酸アンモニウム緩衝液および５％〜８０％ アセトニトリルからなるグラジエント移動相で３０分間（ｘＴｅｒｒａ Ｃ１８；Ｗａｔｅｒｓ；１０ｕｍ；１９×２５０ｍｍ））。該抱合体の溶出は２８０ｎｍでモニターし、溶出された化合物の同定は、液体クロマトグラフィー質量分析により分析した。
【０２４２】
実施例５：ツブリシンＢ抱合体の合成
【化８１】
2019512511.tif 000084
Ｌ２−ツブリシンＢは、Ｌ２−ＰＥＧ１２−ＥＣ２０から合成した。ＨＰＬＣグレード水中の飽和炭酸水素ナトリウム溶液（２ｍＬ）をアルゴンで継続して１０分間泡立てた。Ｌ２−ＰＥＧ１２−ＥＣ２０（５０ｍｇ，０．０３３ｍｍｏｌ）をアルゴンでパージしたＨＰＬＣグレード水（２．０ｍＬ）中に溶解させ、該反応混合物のｐＨを、アルゴンでパージした炭酸水素ナトリウムを用いて７まで上げた。ＴＨＦ（２．０ｍＬ）中のジスルフィド活性化ツブリシンＢ（３７．４７ｍｇ，０．０３４ｍｍｏｌ）の溶液を前記反応混合物に加えた。該反応の進行は、ＬＣＭＳ分析を用いてモニターし、３０分間攪拌後、該反応が完了したことが認められた。粗Ｌ２−ツブリシンＢをプレパラティブＲＰ−ＨＰＬＣにより精製して［Ａ＝２ｍＭ 酢酸アンモニウム緩衝液（ｐＨ７．０）、Ｂ＝ＣＨ３ＣＮ、溶媒グラジエント：０％ Ｂ〜１００％ Ｂで３０分間］、所望生成物を得た。 LRMS-LC/MS (m/z): [M + H]+ C１０４H１６４N１８O３９S５の理論値 ２４５０．８４；実測値 １２２５（半分量）。
【０２４３】
インビトロ実験
実施例６：蛍光顕微鏡
ａ．ＨＴ−２９細胞（１０５）を、室のあるカバーガラスプレートに撒種し、４８−７２時間かけて密集するまで増殖させた。使用済み培地を、０．５ｍＬの新鮮な培地（適宜、０．５％ ウシ血清アルブミンおよび様々な濃度の色素抱合体（Ｌ１−ローダミン、Ｌ２−ローダミン、またはＬ３−ローダミン）を単独で、または該色素抱合体に１００倍過剰量のＣＡ ＩＸ阻害剤Ｌ１、Ｌ２、またはＬ３を加えて含有）に交換した。３７℃で１時間インキュベートし、細胞を１ｍＬのインキュベーション溶液で２回すすいで、結合していない蛍光を取り除き、０．５ｍｌの新鮮なインキュベーション培地を該ウェルに加えた。画像は、共焦点顕微鏡（ＦＶ１０００，Ｏｌｙｍｐｕｓ）を用いて取得した。結果を図１に示す。２つの抱合体Ｌ２−ローダミンまたはＬ３−ローダミンの両方とも該細胞に結合し、過剰量の非抱合阻害剤の存在中で競合したことから、特異的な受容体特異的結合事象であることが示された。
【０２４４】
ｂ．ＨＣＴ−１１６、ＨＴ−２９、ＲＣＣ４、およびＳＫ−ＲＣ−３８ヒト癌細胞株（１０５）を、室のあるカバーガラスプレートに撒種し、４８−７２時間かけて密集するまで増殖させた。使用済み培地を、０．５ｍＬの新鮮な培地（０．５％ ウシ血清アルブミン、および様々な濃度の色素抱合体（Ｌ２−ローダミン）を単独で、または該色素抱合体に１００倍過剰量のＣＡ ＩＸ阻害剤Ｌ２を加えて含有）に交換した。３７℃で１時間インキュベートし、細胞をインキュベーション溶液でそそいで（２×１．０ｍＬ）、結合していない抱合体を取り除き、続いてＰＢＳで洗浄した（１×１．０ｍＬ）。画像は、共焦点顕微鏡（ＦＶ１０００，Ｏｌｙｍｐｕｓ）を用いて得た。結果を図２に示す。図２に示されるように、結合が全ての試験した細胞株で見られ、蛍光抱合体を１０倍の競合する非抱合ＣＡ ＩＸ阻害剤の存在下でインキュベートする場合、ほとんど結合が見られなかった。理論に縛られなければ、この結果は、高度に特異的な受容体を介在する結合を示す。また、前記細胞株のいくつかにおける点状の形態は、結合した抱合体の急速な内部移行を示す。
【０２４５】
ｃ．ＨＴ−２９細胞（１０５）を、室のあるカバーガラスプレートに撒種し、４８−７２時間かけて密集するまで増殖させた。使用済み培地を、０．５ｍＬの新鮮な血清を含まない培地（１００倍過剰量のＣＡ ＩＸ阻害剤の存在下または非存在下で５０ｎＭ ＨｙｐｏｘｙｆｌｕｏｒまたはＣＡ ＩＸ−ローダミンを含有）に交換した。３７℃で１時間インキュベートし、細胞を、１ｍＬのインキュベーション溶液で３回すすいで、結合していない蛍光を取り除き、０．５ｍＬの新鮮な培地を該ウェルに加えた。画像は、ＣＡ ＩＸ−ローダミンに対して共焦点顕微鏡（ＦＶ１０００，Ｏｌｙｍｐｕｓ）およびＨｙｐｏｘｙｆｌｕｏｒに対して蛍光顕微鏡（Ｎｉｋｏｎ ９０ｉ）を用いて得た。
【０２４６】
ＣＡ ＩＸを天然で発現するＨＴ−２９細胞を用いて、新たに合成した抱合体の癌細胞の取り込みおよび結合親和性を調べた。このために、様々な濃度のＨｙｐｏｘｙｆｌｕｏｒおよび蛍光ローダミン抱合体（ＣＡ ＩＸ−ローダミン）をＨＴ−２９細胞と１時間インキュベートし、続いて、結合していない抱合体を洗浄して取り除いた。細胞に結合した蛍光を、Ｈｙｐｏｘｙｆｌｕｏｒに対して蛍光顕微鏡およびＣＡ ＩＸ−ローダミンに対して共焦点顕微鏡により画像化した。蛍光を上記に記載されるように定量して、結合親和性を決定した。図３Ａおよび図３Ｂに示されるように、ＨｙｐｏｘｙｆｌｕｏｒおよびＣＡ ＩＸ−ローダミン結合は、培養したＨＴ−２９細胞の細胞表面および内部エンドソームの両方で見られた。
【０２４７】
実施例７：９９ｍＴｃ抱合体のＨＴ−２９細胞への結合
ＨＴ−２９細胞（５００μＬ中で１５０，０００細胞／ウェル）を２４ウェルのＦａｌｃｏｎプレートに撒種し、単層を４８時間かけて形成させた。各ウェル内の使用済み培地を、０．５ｍＬの新鮮な培地（適宜、１００倍過剰量のＣＡ ＩＸ阻害剤Ｌ１、Ｌ２、またはＬ３の存在下または非存在下において、高い濃度の９９ｍＴｃを結合した様々な抱合体（Ｌ２−ＰＥＧ１２−ＥＣ２０、Ｌ２−ＰＥＧ３６−ＥＣ２０、Ｌ２−Ｐｒｏ３−ＰＥＧ１２−ＥＣ２０、およびＬ３−ＰＥＧ１２−ＥＣ２０）を含有）に交換した。３７℃で１時間インキュベートし、細胞を１ｍＬの培地および１ｍＬのトリス緩衝液で２回すすいだ。０．５ｍＬの０．２５Ｍ ＮａＯＨ（水溶液）中に溶解させ、細胞をそれぞれγ−カウンターチューブに移し、放射能をγ−カウンター（Ｐａｃｋａｒｄ，Ｐａｃｋａｒｄ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ Ｃｏｍｐａｎｙ）を用いてカウントした。見掛けのＫＤは、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ ４を用いて、放射性トレーサー濃度に対して結合放射能をプロットすることにより算出した。結果を表１に示す。
表１
【表２】
2019512511.tif 000085
【０２４８】
Ｌ２−ＰＥＧ１２−ＥＣ２０およびＬ３−ＰＥＧ１２−ＥＣ２０はそれぞれ、５４および１４６ｎＭの結合親和性を示した。元々のリガンドＬ２およびＬ３の報告されているＫｉはそれぞれ、７．８および０．９ｎＭであり（本明細書で引用されるＲａｍｉらおよびＰａｃｃｈｉａｎｏらの文献を参照のこと）、これは、ＰＥＧ１２−ＥＣ２０の付加がそれぞれ〜７倍および１６２倍まで結合を低下させることを示す。
【０２４９】
Ｌ２の結合親和性は前記リンカーの付加によってあまり影響を受けなかったため、ＰＥＧ３６およびプロリン３−ＰＥＧ１２リンカーを用いた２種類のさらなる抱合体を合成して、異なるリンカーの結合効果を調べた。２つの新たに合成した抱合体の結合親和性はそれぞれ、５７および６７ｎＭであり；Ｌ２−ＰＥＧ１２−ＥＣ２０抱合体とほぼ同一であった。
【０２５０】
実施例８：ＨｙｐｏｘｙｆｌｕｏｒのＨＴ−２９細胞への結合。
ＨＴ−２９細胞（１０５）を、２４ウェルのＢＤ ｐｕｒｅｃｏａｔアミンプレートに撒種し、４８−７２時間かけて密集するまで増殖させた。使用済み培地を、０．５ｍＬの新鮮な培地（０．５％ ウシ血清アルブミン、および様々な濃度の色素抱合体を単独で、または該色素抱合体に１００倍過剰量のＣＡ ＩＸリガンドを加えて含有）に交換した。３７℃で１時間インキュベートし、細胞をインキュベーション溶液ですすいで（２×１．０ｍＬ）、結合していない蛍光を取り除き、０．５ｍＬの１％ ドデシル硫酸ナトリウム溶液中に溶解させた。細胞に結合した蛍光を、７４５ｎｍの励起および７９０ｎｍの発光を用いて測定した。全ての実験を３回行った。解離定数（ＫＤ）は、プログラムＧｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｓｍを用いて、添加した蛍光抱合体の濃度に対する細胞結合蛍光（ＲＦＵ）のプロットから算出し、非協力単一部位結合均衡と推定される。
【０２５１】
Ｈｙｐｏｘｙｆｌｕｏｒ結合は、４５ｎＭの見掛けの解離定数で飽和されることが見出された（図４）。改変されていない元々のリガンドの報告されているＫＩは、７．８ｎＭであるため（Ｒａｍｉらを参照）、ＰＥＧリンカーおよび蛍光色素分子のみの結合は、ＣＡ ＩＸ結合親和性を適度に弱める。１００倍過剰量の非抱合リガンドをＨＴ−２９細胞で予めインキュベートさせると、ＨｙｐｏｘｙｆｌｕｏｒまたはＣＡ ＩＸ−ローダミン結合の大半は競合し、細胞取り込みの大半は受容体特異的であることが示された。
【０２５２】
インビボ実験
実施例９：畜産
無胸腺ｎｕ／ｎｕマウスは、Ｈａｒｌａｎ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓから購入し、標準的な１２時間の明暗サイクルで無菌環境下にて飼育し、通常のげっ歯類用食で維持した。全ての動物手順は、アメリカ国立衛生研究所のガイドラインに従ってパデュー動物実験委員会によって認可された。
【０２５３】
実施例１０： ９９ｍＴｃ−Ｌ２−ＰＥＧ３６−ＥＣ２０インビボ画像化および生体分布
５週齢の雄ｎｕ／ｎｕマウスに、それらの肩にＨＴ−２９細胞（５．０×１０６／マウス）を皮下で接種した。腫瘍の増殖は、キャリパーを用いて２つの直交する軸を２日ごとに測定し（重量は同一スケジュールでモニターした）、腫瘍体積を０．５×Ｌ×Ｗ２（Ｌ＝最も長い軸およびＷ＝Ｌに対して直交する軸（ミリメートル））として算出した。腫瘍が４００および５００ｍｍ３の体積に達したら、動物に、生理食塩水（１００μＬ）中の９９ｍＴｃ−結合抱合体Ｌ２−ＰＥＧ３６−ＥＣ２０（１０ｎｍｏｌ，１５０μＣｉ）を尾静脈注射により投与した。様々な時間において、動物をＣＯ２窒息死により屠殺した。画像は、腎臓をＣＣＤカメラおよびＫｏｄａｋ ｍｏｌｅｃｕｌａｒイメージングソフトウェア（バージョン４．０）を組み合わせたＫｏｄａｋイメージングステーション（Ｉｎ−Ｖｉｖｏ ＦＸ，Ｅａｓｔｍａｎ Ｋｏｄａｋ Ｃｏｍｐａｎｙ）により遮蔽することで取得した。放射性画像：照明光源＝放射性同位体、取得時間＝３分、ｆ−停止＝４、焦平面＝５、ＦＯＶ＝１６０、ビニング＝４。白色画像：照明光源＝白色光透光、取得時間＝０．０５秒、ｆ−停止＝１６、焦平面＝５、ＦＯＶ＝１６０（ビニングなし）。画像化後、動物を解剖し、選択した組織を、γ−カウンターチューブに収集して、予め重量を測定した。生理食塩水（１００μＬ）中の予め重量を測定した組織および９９ｍＴｃ−結合抱合体（１０ｎｍｏｌ，１５０μＣｉ）の放射能を、γ−カウンターでカウントした。ＣＰＭ値を減衰補正し、結果を注射用量％（ＩＤ）／湿組織のグラムとして算出した。４、９、および２４時間での画像の結果を図５、６、および７に示す。
【０２５４】
ＨＴ−２９異種移植を保有する３匹のマウスに、１０ｎｍｏｌの抱合体を尾静脈注射により投与し、一方で、さらに３匹のマウスにも１００倍過剰量の非抱合阻害剤を投与した。２つの群の各々に由来する１匹のマウスを、注射４、９、および２４時間後に全体の動物の画像化および組織／器官生体分布分析のために屠殺した。図５Ａ、６Ａ、および７Ａに示されるように、腎臓が遮蔽された場合、放射能の強度は、４、９、および２４時間でそれぞれ、〜１３００、７５０、および３５０の相対平均強度を有する腫瘍に局在した。重要なことに、１００倍過剰量の非抱合阻害剤を同時に注射した全てのマウスは、腫瘍で強度を全く示さず、これにより受容体依存的な結合／取り込みであることが示された。よって、生体分布（図５Ｂ、６Ｂ、および７Ｂ）はまた、肝臓および脾臓におけるクリアランスを伴い（特に４時間および９時間の間の時点で迅速に）、全ての組織で時間と共に抱合体の量の減少を示す。
【０２５５】
実施例１１：９９ｍＴｃ抱合体の生体分布
ＣＡ ＩＸ発現腫瘍における様々な９９ｍＴｃ−結合抱合体の取り込みを調べるために、１０ｎｍｏｌの４つの抱合体Ｌ２−ＰＥＧ１２−ＥＣ２０、Ｌ２−ＰＥＧ３６−ＥＣ２０、Ｌ２−Ｐｒｏ３−ＰＥＧ１２−ＥＣ２０、およびＬ３−ＰＥＧ１２−ＥＣ２０の各々を、１００倍過剰量の適当な非抱合体ＣＡ ＩＸ阻害剤Ｌ２またはＬ３の存在下もしくは非存在下でＨＴ−２９異種移植を保有するマウスに注射した。これらの実験は、実施例７に記載の方法に従って行った。。図８Ａ、８Ｂ、８Ｃ、および８Ｄに示されるように、該腫瘍は、競合する阻害剤が共投与された場合、４つの抱合体全てで低い結合を示した組織のみであり、このことは、他の組織の結合が、介在されるＣＡ ＩＸ受容体ではないことを示す。よって、前記４つの抱合体は、極めて類似する生体分布プロファイルを示した。しかしながら、Ｌ２−ＰＥＧ１２−ＥＣ２０は、組織に残存する注射用量のいくらか低い全割合を示した。他に、全ての抱合体は、測定可能な活性が４時間後であっても血液中で明らかに存在するため、血流から急速に除去されないようである。腎臓に局在する高い活性は、排出によるものである可能性が高く、腎臓系が主な排出経路であることを示している。しかしながら、肝臓もまた、いくらかの活性が肝臓にも存在しているため、これらの抱合体の一部を血流から排除している可能性がある。
【０２５６】
実施例１２：Ｌ２−ツブリシンＢのインビトロ細胞毒性
ＨＴ−２９細胞をアミンでコーティングした２４ウェルプレートに撒種し、単層を形成させた。各ウェル内の使用済み培地を、１００倍過剰量のＣＡ ＩＸ阻害剤Ｌ２の存在下もしくは非存在下で新鮮な培地（０．５ｍＬ）（様々な濃度のツブリシンＢまたはＬ２−ツブリシンＢを含有）に交換した。３７℃で２時間インキュベートし、細胞を新鮮な培地で３回すすぎ、次いで新鮮な培地で３７℃にて６６時間さらにインキュベートした。各ウェル内の使用済み培地を、新鮮な培地（０．５ｍＬ）（３Ｈ−チミジン（１μＣｉ／ｍｌ）を含有）に再度交換し、該細胞をさらに４時間インキュベートした。細胞を培地で３回洗浄し、それらを０．５ｍＬの０．２５Ｍ ＮａＯＨ中に溶解させた。チミジン取り込みは、シンチレーションカウンター（Ｐａｃｋａｒｄ、Ｐａｃｋａｒｄ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ Ｃｏｍｐａｎｙ）を用いて、細胞結合放射能をカウントすることにより決定した。ＩＣ５０値は、Ｇｒａｐｈ Ｐａｄ Ｐｒｉｓｍ ４およびＴａｂｌｅＣｕｒｖｅ ２Ｄソフトウェアを用いて、ｌｏｇ濃度に対する３Ｈ−チミジン取り込みの割合のプロットから求めた。結果を図９で示す。図９に示されるように、該抱合体のＩＣ５０は、４．４ｎＭであったが、非抱合ツブリシンＢが０．０８ｎＭであった。該抱合体が１００倍過剰量の非抱合体阻害剤と競合する場合、細胞毒性効果が完全に消滅し、このことは、細胞毒性には受容体結合が必要であることを示す。
【０２５７】
最大耐容用量
様々な濃度のＬ２−ツブリシンＢを、雄ｎｕ／ｎｕマウスに、尾静脈注射により１週間に３回投与した。明らかに病気になったマウスを記録し、必要に応じて実験終了前に安楽死させた。一群あたり３匹のマウスからなる３つの群を、ＣＡ ＩＸ−ツブリシンＢの高い濃度で処理した。表２に示されるように、１μｍｏｌ／ｋｇのＣＡ ＩＸ−ツブリシンＢが投与された場合、有害事象は同定されなかった。しかしながら、最も高い用量（５μｍｏｌ／ｋｇ）では、全てのマウスが毒性の兆候を示した。それゆえ、２μｍｏｌ／ｋｇの用量をさらなるインビボ有効性試験に用いた。
表２
【表３】
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【０２５８】
Ｌ２−ツブリシンＢのインビボ異種移植腫瘍有効性
ＨＴ−２９細胞（５．０×１０６）を５−６週齢の雌ｎｕ／ｎｕマウスの肩に注射した。腫瘍は、バーニアキャリパーを用いて２つの直交する方向を１週間に３回測定し、それらの体積を０．５ｘＬｘＷ２（式中、Ｌは、最も長い軸（ミリメートル）であり、Ｗは、Ｌに対して直交する軸（ミリメートル）である）として算出した。１００倍過剰量のＣＡ ＩＸ阻害剤Ｌ２の存在下もしくは非存在下でのＬ２−ツブリシンＢの投薬は、皮下腫瘍が〜１００ｍｍ３の体積となったら開始した。投薬溶液は、生理食塩水中で調製し、０．２２μｍフィルターに通して濾過した。溶液を尾静脈注射によりまたは腹腔内に投与した。各マウスは、１回の注射で２μｍｏｌ／ｋｇのＬ２−ツブリシンＢを受けた。注射を３週間で１週間に３回与え、同時にマウスの重量を測定した。結果を図１０および図１１で示す。図１０Ａおよび図１１Ａに示されるように、両方の投与経路は腫瘍の成長をほぼ停止させた。重要なことに、細胞毒性抱合体が１００倍過剰量のＣＡ ＩＸ阻害剤Ｌ２と組み合わせて投与された場合、腫瘍の増殖は、対照群と同様であり、このことはさらに、活性における受容体依存性であることが示す。全ての場合において、この用量レベルでは目立った毒性が見られず、重量喪失も見られなかった（図１０Ｂおよび図１１Ｂを参照）。
【０２５９】
実施例１３：Ｈｙｐｏｘｙｆｌｕｏｒの蛍光画像化および生体分布
２５ゲージのニードルを用いて、６週齢の雌ｎｕ／ｎｕマウスに、ＲＰＭＩ１６４０培地中のＨＴ−２９細胞（１匹のマウスあたり５．０×１０６細胞）をそれらの肩に皮下で接種した。腫瘍の増殖は、キャリパーを用いて２つの直交する方向を２日ごとに測定した。腫瘍体積は、式０．５×Ｌ×Ｗ２（式中、Ｌは、最も長い軸の測定であり、ならびにＷは、Ｌに対して直交する軸の測定である）を用いて算出した。腫瘍を保有するマウスを、１００倍のＣＡ ＩＸリガンドの存在下または非存在下において、異なる濃度のＨｙｐｏｘｙｆｌｕｏｒを用いて尾静脈注射により処理して、全ての開いているＣＡ ＩＸ結合部位を遮蔽した。マウスを、Ｌｉｖｉｎｇ Ｉｍａｇｅ Ｓｏｆｔｗａｒｅ Ｖｅｒｓｉｏｎ ４．０を搭載したＩＳＯＯＮ５１６０ Ａｎｄｏｒ Ｎｉｋｏｎカメラを結合したＣａｌｉｐｅｒ ＩＶＩＳ Ｌｕｍｉｎａ ＩＩ画像化ステーションを用いて、注射４時間後に画像化した。画像を取得した設定は下記のとおりであった：ランプレベル、高；励起、７４５ｎＭ；発光、ＩＣＧ；落射照明；ビニング（Ｍ）４；ＦＯＶ、１２．５；ｆ−停止、４；取得時間、１秒。
【０２６０】
結果：ＨＴ−２９腫瘍異種移植を保有するマウスを４ｎｍｏｌのＨｙｐｏｘｙｆｌｕｏｒで尾静脈を介して注射し、４時間後に画像化した。図１２に示されるように、Ｈｙｐｏｘｙｆｌｕｏｒ抱合体蛍光が腫瘍で優位に検出された（図１２Ａを参照）。さらに、４００ｎｍｏｌのＣＡ ＩＸリガンドが４ｎｍｏｌのＨｙｐｏｘｙｆｌｕｏｒとともに注射された場合、蛍光シグナルは全ての動物画像で検出できず、このことから、腫瘍細胞への取り込みもまた、インビボでＣＡ ＩＸ受容体特異的であることが示された（図１２Ｂを参照）。
【０２６１】
主要な器官／組織を取り出し、注射４時間後に蛍光について試験した。図１３に示されるように、蛍光が腫瘍および腎臓で明確であり、他の組織のいずれではシグナルがほとんどないか、あるいはなかった。全ての動物画像と同様に、Ｈｙｐｏｘｙｆｌｕｏｒの取り込みを過剰量の非抱合リガンドの同時注射により測定した場合、蛍光はいずれの組織でも観察されなかった（図１３Ａおよび図１３Ｂを参照）。
【０２６２】
Ｈｙｐｏｘｙｆｌｕｏｒの用量漸増試験を行った（３、１３、および４０ｎｍｏｌのＨｙｐｏｘｙｆｌｕｏｒ抱合体をＨＴ−２９腫瘍を保有するマウスにおいて尾静脈により注射した）。図１４に示されるように、低用量および中間用量が投与された場合、蛍光が腫瘍に限定された（図１４Ａおよび１４Ｂを参照）。対照的に、４０ｎｍｏｌ／マウスの注射後では、非腫瘍に関連する蛍光が全ての体の画像で明確となった（図１４Ｃを参照）。主要な器官および組織を取り出し、画像化したところ、さらなる蛍光が４０ｎｍｏｌ／マウスの肝臓において見られた一方（図１５Ｃを参照）、このような蛍光は、３ｎｍｏｌおよび１３ｎｍｏｌで観察されなかった（図１５Ａおよび１５Ｂを参照）。この結果は、高注射用量では、Ｈｙｐｏｘｙｆｌｕｏｒが肝臓を介して一部明確となりうることを示す。
【図１】
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【図２】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図４】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図６Ａ】
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【図６Ｂ】
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【図７Ａ】
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【図７Ｂ】
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【図８Ａ】
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【図８Ｂ】
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【図８Ｃ】
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【図８Ｄ】
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【図９】
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【図１０Ａ】
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【図１０Ｂ】
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【図１１Ａ】
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【図１１Ｂ】
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【図１２Ａ】
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【図１２Ｂ】
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【図１３Ａ】
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【図１３Ｂ】
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【図１４Ａ】
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【図１４Ｂ】
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【図１４Ｃ】
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【図１５Ａ】
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【図１５Ｂ】
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【図１５Ｃ】
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【国際調査報告】
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