(57)【要約】本発明は、外陰部膣カンジダ症（ＶＶＣ）、特に再発性ＶＶＣの予防及び治療で使用するための方法及びキットを特徴とする。ａ）外陰部膣カンジダ症（ＶＶＣ）を有する対象に有効量の抗真菌剤を投与するステップと、ｂ）前記対象に免疫原性量のＡｌｓ３ポリペプチドを投与して、前記対象におけるＶＶＣを軽減するステップと、を含む、方法。ａ）抗真菌剤と、ｂ）Ａｌｓ３ポリペプチドと、を含む、キット。再発性ＶＶＣ（ＲＶＶＣ）を発症するリスクがある対象を治療する方法であって、前記対象に治療有効量のＡｌｓ３ポリペプチドを投与して、前記対象におけるＶＶＣの再発を軽減することを含み、前記有効量は、少なくとも５．０マイクログラムの前記Ａｌｓ３ポリペプチドである、前記方法。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ）外陰部膣カンジダ症（ＶＶＣ）を有する対象に有効量の抗真菌剤を投与するステップと、
ｂ）前記対象に免疫原性量のＡｌｓ３ポリペプチドを投与して、
前記対象におけるＶＶＣを軽減するステップと、を含む、方法。
【請求項２】
前記免疫原性量の前記Ａｌｓ３ポリペプチドは、前記抗真菌剤の投与に続いて投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記ＶＶＣは、再発性ＶＶＣ（ＲＶＶＣ）である、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記抗真菌剤は、フルコナゾールである、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５】
前記フルコナゾールは、約１００ｍｇ〜２００ｍｇの用量で経口投与される、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記フルコナゾールは、約１５０ｍｇの用量で経口投与される、請求項４に記載の方法。
【請求項７】
前記抗真菌剤の第２の用量が、ステップａ）の前記抗真菌剤の投与の約２〜約４日後に投与される、請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
前記抗真菌剤の第３の用量が、前記抗真菌剤の前記第２の用量の投与の約２〜約４日後に投与される、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記Ａｌｓ３ポリペプチドは、Ａｌｓ３−２に対して少なくとも８０％の同一性を有する、請求項１〜８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
前記Ａｌｓ３ポリペプチドは、Ａｌｓ３−１に対して少なくとも８０％の同一性を有する、請求項１〜８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
前記Ａｌｓ３ポリペプチドは、Ａｌｓ３に対して少なくとも８０％の同一性を有する、請求項１〜８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
前記Ａｌｓ３ポリペプチドは、Ａｌｓ３（１８−３２４）に対して少なくとも８０％の同一性を有する、請求項１〜８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
前記Ａｌｓ３ポリペプチドは、Ａｌｓ３（Ｓｅｒ／Ｔｈｒリッチ配列）に対して少なくとも８０％の同一性を有する、請求項１〜８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
約５〜３００マイクログラムの前記Ａｌｓ３ポリペプチドが投与される、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】
約１０〜２００マイクログラム、２０〜１００マイクログラム、３０〜９０マイクログラム、または４０〜８０マイクログラムの前記Ａｌｓ３ポリペプチドが投与される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
約３００マイクログラムの前記Ａｌｓ３ポリペプチドが投与される、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１７】
約１００〜３００マイクログラム、１５０〜２００マイクログラム、２００〜２５０マイクログラム、または２５０〜３００マイクログラムの前記Ａｌｓ３ポリペプチドが、単回投与一次レジメンにおいて前記対象に投与される、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１８】
約５〜６０マイクログラム、１０〜５０マイクログラム、２０〜４０マイクログラム、または３０マイクログラムの前記Ａｌｓ３ポリペプチドが、複数回投与一次レジメンにおいて前記対象に投与される、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１９】
前記Ａｌｓ３ポリペプチドは、ステップａ）の前記抗真菌剤の投与の約７日〜約２１日後に投与される、請求項１〜１８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２０】
前記Ａｌｓ３ポリペプチドは、ステップａ）の前記抗真菌剤の投与の約１４日後に投与される、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
１つ以上のブースター用量の前記Ａｌｓ３ポリペプチドが投与される、請求項１〜２０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２２】
ステップｂ）の後に、有効量の抗真菌剤が前記対象に投与される、請求項２に記載の方法。
【請求項２３】
前記抗真菌剤は、前記Ａｌｓ３ポリペプチドの投与の約５〜約８日後に投与される、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記抗真菌剤は、前記Ａｌｓ３ポリペプチドの投与の約１３〜約１５日後に投与される、請求項２２に記載の方法。
【請求項２５】
前記Ａｌｓ３ポリペプチドは、前記Ａｌｓ３ポリペプチドとアジュバントとを含むワクチン組成物の形態で投与される、請求項１〜２４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２６】
前記アジュバントは、アルミニウム化合物である、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
前記アルミニウム化合物は、水酸化アルミニウムである、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
ＶＶＣを有する前期対象は、４０歳未満である、請求項１〜２７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２９】
ａ）抗真菌剤と、
ｂ）Ａｌｓ３ポリペプチドと、を含む、キット。
【請求項３０】
前記抗真菌剤は、フルコナゾールである、請求項２９に記載のキット。
【請求項３１】
前記Ａｌｓ３ポリペプチドは、Ａｌｓ３−２に対して少なくとも８０％の同一性を有する、請求項２９または３０に記載のキット。
【請求項３２】
前記Ａｌｓ３ポリペプチドは、Ａｌｓ３−１に対して少なくとも８０％の同一性を有する、請求項２９または３０に記載のキット。
【請求項３３】
前記Ａｌｓ３ポリペプチドは、Ａｌｓ３に対して少なくとも８０％の同一性を有する、請求項２９または３０に記載のキット。
【請求項３４】
前記Ａｌｓ３ポリペプチドは、Ａｌｓ３（１８−３２４）に対して少なくとも８０％の同一性を有する、請求項２９または３０に記載のキット。
【請求項３５】
前記Ａｌｓ３ポリペプチドは、Ａｌｓ３（Ｓｅｒ／Ｔｈｒリッチ配列）に対して少なくとも８０％の同一性を有する、請求項２９または３０に記載のキット。
【請求項３６】
再発性ＶＶＣ（ＲＶＶＣ）を発症するリスクがある対象を治療する方法であって、前記対象に治療有効量のＡｌｓ３ポリペプチドを投与して、前記対象におけるＶＶＣの再発を軽減することを含み、前記有効量は、少なくとも５．０マイクログラムの前記Ａｌｓ３ポリペプチドである、前記方法。
【請求項３７】
前記対象は、ＲＶＶＣを発症するリスクがある、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
前記治療有効量のＡｌｓ３ポリペプチドは、約５マイクログラム〜約３００マイクログラムである、請求項３６または３７に記載の方法。
【請求項３９】
前記治療有効量のＡｌｓ３ポリペプチドは、約１０マイクログラム〜約２００マイクログラムである、請求項３６または３７に記載の方法。
【請求項４０】
前記治療有効量のＡｌｓ３ポリペプチドは、約２０マイクログラム〜約１００マイクログラムである、請求項３６または３７に記載の方法。
【請求項４１】
前記治療有効量のＡｌｓ３ポリペプチドは、約３０マイクログラム〜約９０マイクログラムである、請求項３６または３７に記載の方法。
【請求項４２】
前記治療有効量のＡｌｓ３ポリペプチドは、約４０マイクログラム〜約８０マイクログラムである、請求項３６または３７に記載の方法。
【請求項４３】
前記治療有効量のＡｌｓ３ポリペプチドは、約３００マイクログラムである、請求項３６または３７に記載の方法。
【請求項４４】
前記対象は、過去１２か月の間に少なくとも１回、ＶＶＣに以前に感染している、請求項３６〜４３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４５】
前記対象は、過去１２か月の間に少なくとも２回、ＶＶＣに以前に感染している、請求項４４に記載の方法。
【請求項４６】
前記対象は、過去１２か月の間に少なくとも３回、ＶＶＣに以前に感染している、請求項４５に記載の方法。
【請求項４７】
前記Ａｌｓ３ポリペプチドは、Ａｌｓ３−２に対して少なくとも８０％の同一性を有する、請求項３６〜４６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４８】
前記Ａｌｓ３ポリペプチドは、Ａｌｓ３−１に対して少なくとも８０％の同一性を有する、請求項３６〜４６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４９】
前記Ａｌｓ３ポリペプチドは、Ａｌｓ３に対して少なくとも８０％の同一性を有する、請求項３６〜４６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５０】
前記Ａｌｓ３ポリペプチドは、Ａｌｓ３（１８−３２４）に対して少なくとも８０％の同一性を有する、請求項３６〜４６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５１】
前記Ａｌｓ３ポリペプチドは、Ａｌｓ３（Ｓｅｒ／Ｔｈｒリッチ配列）に対して少なくとも８０％の同一性を有する、請求項３６〜４６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５２】
１つ以上のブースター用量の前記Ａｌｓ３ポリペプチドが投与される、請求項３６〜５１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５３】
前記対象は、前記投与時に、ＶＶＣと現在診断されていないか、または現在ＶＶＣエピソード発現をしていない、請求項３６〜５２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５４】
前記対象は、前記投与時に、３以上のＶＶＣ兆候及び症状包括的質問票スコアを有しない、請求項３６〜５２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５５】
前記対象は、ＶＶＣまたは再発性ＶＶＣと以前に診断されている、請求項３６〜５４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５６】
前記対象は、４０歳未満である、請求項３６〜５５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５７】
前記抗真菌剤は、フルコナゾールである、請求項１に記載の方法。
【請求項５８】
前記フルコナゾールは、約１００ｍｇ〜２００ｍｇの用量で前記対象に経口投与される、請求項５７に記載の方法。
【請求項５９】
前記フルコナゾールは、約１５０ｍｇの用量で前記対象に経口投与される、請求項５７に記載の方法。
【請求項６０】
前記抗真菌剤の第２の用量が、ステップａ）の前記抗真菌剤の投与の約２〜約４日後に前記対象に投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項６１】
前記抗真菌剤の第３の用量が、前記抗真菌剤の前記第２の用量の投与の約２〜約４日後に前記対象に投与される、請求項６０に記載の方法。
【請求項６２】
前記Ａｌｓ３ポリペプチドは、Ａｌｓ３−２に対して少なくとも８０％の同一性を有する、請求項１に記載の方法。
【請求項６３】
前記Ａｌｓ３ポリペプチドは、Ａｌｓ３−１に対して少なくとも８０％の同一性を有する、請求項１に記載の方法。
【請求項６４】
前記Ａｌｓ３ポリペプチドは、Ａｌｓ３に対して少なくとも８０％の同一性を有する、請求項１に記載の方法。
【請求項６５】
前記Ａｌｓ３ポリペプチドは、Ａｌｓ３（１８−３２４）に対して少なくとも８０％の同一性を有する、請求項１に記載の方法。
【請求項６６】
前記Ａｌｓ３ポリペプチドは、Ａｌｓ３（Ｓｅｒ／Ｔｈｒリッチ配列）に対して少なくとも８０％の同一性を有する、請求項１に記載の方法。
【請求項６７】
約５〜３００マイクログラムの前記Ａｌｓ３ポリペプチドが前記対象に投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項６８】
約１０〜２００マイクログラム、２０〜１００マイクログラム、３０〜９０マイクログラム、または４０〜８０マイクログラムの前記Ａｌｓ３ポリペプチドが前記対象に投与される、請求項６７に記載の方法。
【請求項６９】
約３００マイクログラムの前記Ａｌｓ３ポリペプチドが前記対象に投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項７０】
約１００〜３００マイクログラム、１５０〜２００マイクログラム、２００〜２５０マイクログラム、または２５０〜３００マイクログラムの前記Ａｌｓ３ポリペプチドが、単回投与一次レジメンにおいて前記対象に投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項７１】
約５〜６０マイクログラム、１０〜５０マイクログラム、２０〜４０マイクログラム、または３０マイクログラムの前記Ａｌｓ３ポリペプチドが、複数回投与一次レジメンにおいて前記対象に投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項７２】
前記Ａｌｓ３ポリペプチドは、ステップａ）の前記抗真菌剤の投与の約７日〜約２１日後に前記対象に投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項７３】
前記Ａｌｓ３ポリペプチドは、ステップａ）の前記抗真菌剤の投与の約１４日後に前記対象に投与される、請求項７２に記載の方法。
【請求項７４】
１つ以上のブースター用量の前記Ａｌｓ３ポリペプチドが前記対象に投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項７５】
前記Ａｌｓ３ポリペプチドは、前記Ａｌｓ３ポリペプチドとアジュバントとを含むワクチン組成物の形態で前記対象に投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項７６】
前記アジュバントは、アルミニウム化合物である、請求項７５に記載の方法。
【請求項７７】
前記アルミニウム化合物は、水酸化アルミニウムである、請求項７６に記載の方法。
【請求項７８】
ＶＶＣを有する前期対象は、４０歳未満である、請求項１に記載の方法。
【請求項７９】
前記対象は、過去１２か月の間に少なくとも１回、ＶＶＣに以前に感染している、請求項３６に記載の方法。
【請求項８０】
前記対象は、過去１２か月の間に少なくとも２回、ＶＶＣに以前に感染している、請求項７９に記載の方法。
【請求項８１】
前記対象は、過去１２か月の間に少なくとも３回、ＶＶＣに以前に感染している、請求項８０に記載の方法。
【請求項８２】
前記Ａｌｓ３ポリペプチドは、Ａｌｓ３−２に対して少なくとも８０％の同一性を有する、請求項３６に記載の方法。
【請求項８３】
前記Ａｌｓ３ポリペプチドは、Ａｌｓ３−１に対して少なくとも８０％の同一性を有する、請求項３６に記載の方法。
【請求項８４】
前記Ａｌｓ３ポリペプチドは、Ａｌｓ３に対して少なくとも８０％の同一性を有する、請求項３６に記載の方法。
【請求項８５】
前記Ａｌｓ３ポリペプチドは、Ａｌｓ３（１８−３２４）に対して少なくとも８０％の同一性を有する、請求項３６に記載の方法。
【請求項８６】
前記Ａｌｓ３ポリペプチドは、Ａｌｓ３（Ｓｅｒ／Ｔｈｒリッチ配列）に対して少なくとも８０％の同一性を有する、請求項３６に記載の方法。
【請求項８７】
１つ以上のブースター用量の前記Ａｌｓ３ポリペプチドが投与される、請求項３６に記載の方法。
【請求項８８】
前記対象は、前記投与時に、ＶＶＣと現在診断されていないか、または現在ＶＶＣエピソード発現をしていない、請求項３６に記載の方法。
【請求項８９】
前記対象は、前記投与時に、３以上のＶＶＣ兆候及び症状包括的質問票スコアを有しない、請求項３６に記載の方法。
【請求項９０】
前記対象は、ＶＶＣまたは再発性ＶＶＣと以前に診断されている、請求項３６に記載の方法。
【請求項９１】
前期対象は、４０歳未満である、請求項３６に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
概して、本発明は、外陰部膣カンジダ症の予防及び治療で使用するための方法及びキットに関する。
【背景技術】
【０００２】
膣感染の多くの原因のうち、外陰部膣カンジダ症（ＶＶＣ）は、最もよく見られるものの１つであり、症状を示す女性の推定１７％〜３９％を占める（Ａｎｄｅｒｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．（２００４），ＪＡＭＡ  ２９１（１１）：１３６８−１３７９）。再発性外陰部膣カンジダ症（ＲＶＶＣ）は、依然として世界的によくある問題であり、全ての社会層に影響を及ぼす。毎年４回以上のＶＶＣのエピソードとして一般に定義されるＲＶＶＣ（Ｃｅｎｔｅｒｓ  ｆｏｒ  Ｄｉｓｅａｓｅ  Ｃｏｎｔｒｏｌ  ＭＭＷＲ  Ｒｅｃｏｍｍｅｎｄａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｒｅｐｏｒｔｓ  ２０１５，６４（３）：７７）は、女性の生殖期間中に５〜８％の女性において生じると推定されている（Ｆｏｘｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．（１９９３）、上記を参照；Ｓｐｉｎｉｌｌｏ  ｅｔ  ａｌ．（１９９３），Ｏｂｓｔ  Ｇｙｎｅｃｏｌ  ８１（５  Ｐｔ１））：７２１−７２７）。ＲＶＶＣを有する女性の過半数は、認識できる危険因子がない（Ｓｐｉｎｉｌｌｏ  ｅｔ  ａｌ．（１９９２），Ｊ  Ｒｅｐｒｏｄ  Ｍｅｄ  ３７（４）：３４３−３４７；Ｓｏｂｅｌ（２００２），Ｃｕｒｒ  Ｉｎｆｅｃｔ  Ｄｉｓ  Ｒｅｐ  ４（６）：５１４−５１９）。症候性外陰膣炎は、かなりの苦痛及び費用をもたらし、性的幸福及び関係に著しい悪影響を及ぼす（Ｆｏｘｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．（２０００），Ｓｅｘ  Ｔｒａｎｓｍ  Ｄｉｓ  ２７（４）：２３０−２３５）。
【０００３】
外陰部膣カンジダ症の診断及び治療は、生産性の損失と合わせて、米国において１年あたり１０億米ドルの推定費用をもたらす（Ｆｏｘｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．（２０００）、上記を参照）。外陰部膣カンジダ症は、細菌性膣炎に次いで２番目に多い膣感染の原因である（Ｆｌｅｕｒｙ（１９８１），Ｃｌｉｎ  Ｏｂｓｔｅｔ  Ｇｙｎｅｃｏｌ  ２４（２）：４０７−４３８）。
【０００４】
ＶＶＣの症候性エピソードの大部分の原因であるＣ．ａｌｂｉｃａｎｓは、無症候性コロニー形成から深刻な症候性感染に及ぶ一連の症状を含み得る（Ｓｏｂｅｌ  ｅｔ  ａｌ．（１９９８），Ａｍ  Ｊ  Ｏｂｓｔｅｔ  Ｇｙｎｅｃｏｌ  １７８（２）：２０３−２１１）。２つの要因が症候性ＶＶＣの発症において重要である。第１に、会陰及び胃腸管からの局所的広がり、指の導入、及び性行為感染を含むいくつかの異なる原因によって生じ得る膣内コロニー形成が確立されなければならない。第２に、無症候性から症候性状態への変化をもたらす変換が生じなければならない（Ｎｙｉｒｊｅｓｙ（２００８），Ｉｎｆｅｃｔ  Ｄｉｓ  Ｃｌｉｎ  Ｎｏｒｔｈ  Ａｍ  ２２（４）：６３７−６５２）。再発性ＶＶＣは、持続性のＣ．ａｌｂｉｃａｎｓ株または新しいＣ．ａｌｂｉｃａｎｓもしくは他の種の導入の結果であり得る（Ｖａｚｑｕｅｚ  ｅｔ  ａｌ．（１９９４），Ｊ  Ｉｎｆｅｃｔ  Ｄｉｓ  １７０（６）：１５６６−１５６９）。
【０００５】
現在の治療は、大部分が真菌細胞壁代謝を阻害するアゾール薬剤（例えば、ブトコナゾール、フルコナゾール、ミコナゾール、テルコナゾール、及びチオコナゾール）からなる。維持フルコナゾール療法は、ＲＶＶＣのために処方されるが、長期治癒を見つけるのは依然として困難である。Ｓｏｂｅｌ  ｅｔ  ａｌ．（（２００４）Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ  ３５１（９）：８７６−８８３）によって報告された近年の研究において、フルコナゾール群における臨床的再発までの平均期間は、プラセボ群における４か月と比較して１０．２か月であった。
したがって、ＲＶＶＣを含むＶＶＣを治療及び予防するための有効な方法の必要性がある。本発明は、これらの必要性を満たし、関連した利点も提供する。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Ａｎｄｅｒｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．（２００４），ＪＡＭＡ  ２９１（１１）：１３６８−１３７９
【非特許文献２】Ｃｅｎｔｅｒｓ  ｆｏｒ  Ｄｉｓｅａｓｅ  Ｃｏｎｔｒｏｌ  ＭＭＷＲ  Ｒｅｃｏｍｍｅｎｄａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｒｅｐｏｒｔｓ  ２０１５，６４（３）：７７
【非特許文献３】Ｓｐｉｎｉｌｌｏ  ｅｔ  ａｌ．（１９９３），Ｏｂｓｔ  Ｇｙｎｅｃｏｌ  ８１（５  Ｐｔ１））：７２１−７２７
【非特許文献４】Ｓｐｉｎｉｌｌｏ  ｅｔ  ａｌ．（１９９２），Ｊ  Ｒｅｐｒｏｄ  Ｍｅｄ  ３７（４）：３４３−３４７
【非特許文献５】Ｓｏｂｅｌ（２００２），Ｃｕｒｒ  Ｉｎｆｅｃｔ  Ｄｉｓ  Ｒｅｐ  ４（６）：５１４−５１９
【非特許文献６】Ｆｏｘｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．（２０００），Ｓｅｘ  Ｔｒａｎｓｍ  Ｄｉｓ  ２７（４）：２３０−２３５
【非特許文献７】Ｆｌｅｕｒｙ（１９８１），Ｃｌｉｎ  Ｏｂｓｔｅｔ  Ｇｙｎｅｃｏｌ  ２４（２）：４０７−４３８
【非特許文献８】Ｓｏｂｅｌ  ｅｔ  ａｌ．（１９９８），Ａｍ  Ｊ  Ｏｂｓｔｅｔ  Ｇｙｎｅｃｏｌ  １７８（２）：２０３−２１１
【非特許文献９】Ｎｙｉｒｊｅｓｙ（２００８），Ｉｎｆｅｃｔ  Ｄｉｓ  Ｃｌｉｎ  Ｎｏｒｔｈ  Ａｍ  ２２（４）：６３７−６５２
【非特許文献１０】Ｖａｚｑｕｅｚ  ｅｔ  ａｌ．（１９９４），Ｊ  Ｉｎｆｅｃｔ  Ｄｉｓ  １７０（６）：１５６６−１５６９
【非特許文献１１】Ｓｏｂｅｌ  ｅｔ  ａｌ．（２００４）Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ  ３５１（９）：８７６−８８３
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明は、再発性ＶＶＣ（ＲＶＶＣ）を含む外陰部膣カンジダ症（ＶＶＣ）の予防及び治療で使用するための方法を提供する。
【０００８】
それに応じて、第１の態様では、本発明は、（ａ）外陰部膣カンジダ症（ＶＶＣ；例えば、再発性ＶＶＣ（ＲＶＶＣ））を有する対象（例えば、ヒト女性）に有効量の抗真菌剤（例えば、フルコナゾール、１００ｍｇ〜２００ｍｇに及ぶ、例えば、１５０ｍｇの量の経口投与による）を投与するステップと、（ｂ）対象に免疫原性量のＡｌｓ３ポリペプチド（例えば、例えば、ＮＤＶ−３の一部としてのＡｌｓ３−１（配列番号３）、または例えば、ＮＤＶ−３Ａの一部としてのＡｌｓ３−２（配列番号２））を投与して、対象におけるＶＶＣを軽減するステップとを含む、方法を提供する。様々な実施形態では、免疫原性量のＡｌｓ３ポリペプチドは、抗真菌剤の投与に続いて（例えば、７日〜２１日後、または１４日後に）投与される。
【０００９】
本発明の方法はまた、任意に、ステップ（ａ）の抗真菌剤の投与の約２〜約４日後の第２の用量の抗真菌剤の投与も含む。方法はまた、抗真菌剤の第２の用量の投与の約２〜約４日後の第３の用量の抗真菌剤の任意の投与も含む。
【００１０】
本発明の方法に従って投与されるＡｌｓ３ポリペプチドは、例えば、Ａｌｓ３−２、Ａｌｓ３−１、Ａｌｓ３、Ａｌｓ３（１８−３２４）、またはＡｌｓ３（Ｓｅｒ／Ｔｈｒリッチ配列）に対して少なくとも８０％の同一性（例えば、少なくとも８５％、９０％、９５％、９７％、９９％、または１００％の同一性）を有することができる。
【００１１】
本発明の方法に従って投与されるＡｌｓ３ポリペプチドの量は、例えば、５〜５００マイクログラム、例えば、１０〜２００マイクログラム、２０〜１００マイクログラム、３０〜９０マイクログラム、または４０〜８０マイクログラム、または約３００マイクログラムであってもよい。様々な例では、約１００〜３００マイクログラム、１５０〜２００マイクログラム、２００〜２５０マイクログラム、または２５０〜３００マイクログラムのＡｌｓ３ポリペプチドが、単回投与一次レジメンにおいて対象に投与される。他の例では、約５〜６０マイクログラム、１０〜５０マイクログラム、２０〜４０マイクログラム、または３０マイクログラムのＡｌｓ３ポリペプチドが、複数回投与一次レジメンにおいて対象に投与される。
【００１２】
本発明の方法はまた、１つ以上のブースター用量のＡｌｓ３ポリペプチドの投与も含むことができる。
【００１３】
さらに、本発明の方法は、ステップ（ｂ）の後に、対象への有効量の抗真菌剤の任意の投与を含む。これらの方法において、抗真菌剤は任意に、Ａｌｓ３ポリペプチドの投与の約５〜約８日または約１３〜約１５日後に投与され得る。
【００１４】
Ａｌｓ３ポリペプチドは、Ａｌｓ３ポリペプチド及び例えば、アルミニウム化合物（例えば、水酸化アルミニウム）などのアジュバントを含むワクチン組成物の形態で、本発明の方法で投与され得る。他の実施形態では、Ａｌｓ３ポリペプチドは、Ａｌｓ３ポリペプチドを含むがアジュバントを含まないワクチン組成物の形態で、本発明の方法で投与され得る。
【００１５】
第２の態様では、本発明は、（ａ）抗真菌剤（例えば、フルコナゾール）と、（ｂ）Ａｌｓ３ポリペプチド（例えば、Ａｌｓ３−２、Ａｌｓ３−１、Ａｌｓ３、Ａｌｓ３（１８−３２４）、またはＡｌｓ３（Ｓｅｒ／Ｔｈｒリッチ配列）に対して少なくとも８０％の同一性（例えば、少なくとも８５％、９０％、９５％、９７％、９９％、または１００％の同一性）を有するＡｌｓ３ポリペプチド）とを含む、キットを提供する。抗真菌剤及び／またはＡｌｓ３ポリペプチドは、アジュバントを含む、または含まない組成物中で製剤化されてもよい。
【００１６】
第３の態様では、本発明は、再発性ＶＶＣ（ＲＶＶＣ）を発症するリスクがある対象を治療する方法を提供し、対象に治療有効量のＡｌｓ３ポリペプチドを投与して、対象におけるＶＶＣの再発を軽減することを含み、有効量は、少なくとも５．０マイクログラムのＡｌｓ３ポリペプチドである。したがって、投与される治療有効量のＡｌｓ３ポリペプチドは、例えば、約５マイクログラム〜約１０００マイクログラム、約５マイクログラム〜約５００マイクログラム、約１０マイクログラム〜約３００マイクログラム、約２０マイクログラム〜約１００マイクログラム、約３０マイクログラム〜約９０マイクログラム、約４０マイクログラム〜約８０マイクログラム、または約３００マイクログラムであってもよい。さらに、Ａｌｓ３ポリペプチドは、例えば、Ａｌｓ３−２、Ａｌｓ３−１、Ａｌｓ３、Ａｌｓ３（１８−３２４）、またはＡｌｓ３（Ｓｅｒ／Ｔｈｒリッチ配列）に対して少なくとも８０％の同一性（例えば、少なくとも８５％、９０％、９５％、９７％、９９％、または１００％の同一性）を有することができる。これらの方法はまた、１つ以上のブースター用量のＡｌｓ３ポリペプチドの任意の投与も含むことができる。さらに、対象は、ＶＶＣと現在診断されていない可能性があるか、現在ＶＶＣエピソード発現をしていない可能性があるか、または投与時に、３以上のＶＶＣ兆候及び症状包括的質問票スコアを有しない可能性がある（付属書１：ＶＶＣ兆候及び症状包括的質問票を参照されたい）。さらに、対象は、ＶＶＣまたは再発性ＶＶＣと以前に診断されている可能性がある。
【００１７】
本発明の方法において、抗真菌剤及び／またはＡｌｓ３ポリペプチドは、アジュバントを含む、または含まない組成物中で製剤化されてもよい。
【００１８】
本発明の全ての態様において、対象は、女性ヒト対象である。本発明の全ての態様において、抗真菌剤は、アゾール（例えば、トリアゾール、例えば、フルコナゾール、アルバコナゾール、エフィナコナゾール、エポキシコナゾール、イサブコナゾール、イトラコナゾール、ポサコナゾール、プロピコナゾール、ラブコナゾール、テルコナゾール、及びボリコナゾール；イミダゾール、例えば、ビホナゾール、ブトコナゾール、クロトリマゾール、エベルコナゾール、エコナゾール、フェンチコナゾール、フルトリマゾール、イソコナゾール、ケトコナゾール、ルリコナゾール、ミコナゾール、オモコナゾール、オキシコナゾール、セルタコナゾール、スルコナゾール、及びチオコナゾール；ならびにチアゾール、例えば、アバファンギン）、ポリエン（例えば、アムホテリシンＢ、カンジシジン、フィリピン、ハマイシン、ナタマイシン、ナイスタチン、及びリモシジン）、アリルアミン（例えば、アモロルフィン、ブテナフィン、ナフチフィン、及びテルビナフィン）、エキノカンジン（例えば、アニデュラファンギン、ビアファンギン（例えば、ＣＤ１０１）、カスポファンギン、及びミカファンギン）、ラノステロールデメチラーゼ阻害剤（例えば、ＶＴ−１１６１）、ならびに安息香酸、シクロピロックスオラミン（ｃｉｃｌｏｐｉｒｏｘ  ｏａｍｉｎｅ）、エンフマファンギン（例えば、ＳＣＹ−０７８）、５−フルシトシン、グリセオフルビン、ハロプロギン、トルナフテート、アミノカンジン、クロダントイン、クロルフェネシン、ニフロキシム、ウンデシレン酸、及びクリスタルバイオレットが挙げられるが、これらに限定されない他の抗真菌剤、ならびにこれらの薬学的に許容される塩またはエステルから選択される１つであってもよい。特に、抗真菌剤は、フルコナゾールである。
【００１９】
「アジュバント」とは、免疫系の刺激を引き起こす１つ以上の物質を意味する。これに関連して、アジュバントは、１つ以上のワクチン抗原（例えば、本明細書に記載のＡｌｓ３ポリペプチドのうちの１つ以上）への免疫応答を強化するために使用される。アジュバントは、ワクチンの投与前、ワクチンと組み合わせて、またはワクチン投与後に対象に投与されてもよい。アジュバントとして使用される化合物の例としては、アルミニウム化合物（例えば、ミョウバン、水酸化アルミニウム、Ａｌｈｙｄｒｏｇｅｌ）、油、ブロックポリマー、免疫刺激複合体、ビタミン及びミネラル（例えば、ビタミンＥ、ビタミンＡ、セレニウム、及びビタミンＢ１２）、Ｑｕｉｌ  Ａ（サポニン）、細菌及び真菌細胞壁成分（例えば、リポ多糖、リポタンパク質、及び糖タンパク質）、ホルモン、サイトカイン、ならびに共刺激因子が挙げられるが、これらに限定されない。
【００２０】
「抗原」とは、抗体が選択的に結合することができる分子を意味する。標的抗原は、タンパク質（例えば、抗原ペプチド）、炭水化物、核酸、脂質、ハプテン、または他の天然もしくは合成化合物であってもよい。標的抗原はまた、ポリペプチドまたはペプチド模倣体であってもよい。抗原はまた、動物における免疫応答をもたらすために、動物に投与されてもよい。
【００２１】
コンジュゲートとの関連で、「担体」とは、本明細書に記載されるポリペプチドに結合されるか、または提示するのに好適である部分または粒子、例えば、ＫＬＨ、ＣＲＭ１９７、破傷風トキソイド、ファージ、酵母、ウイルス、ウィロゾーム、または組み換えウイルス様粒子を意味する。
【００２２】
「キメラワクチン」とは、例えば、共有結合した少なくとも２つの異なる抗原を含む、ワクチンを意味する。キメラワクチンの一例は、例えば、ファージ、ウイルス、酵母、ウィロゾーム、または組み換えウイルス様粒子などの粒子の表面上に提示されたポリペプチドを含む組成物である。
【００２３】
「コンジュゲート」とは、別の部分または粒子、例えば、ＫＬＨ、ＣＲＭ１９７、破傷風トキソイド、ファージ、酵母、ウイルス、ウィロゾーム、または組み換えウイルス様粒子に結合した本発明のポリペプチドを含む化合物を意味する。
【００２４】
アミノ酸配列における「保存的置換」とは、あるアミノ酸を、アミノ酸の側鎖の化学的性質に関連するそれらのアミノ酸のファミリー内の別のアミノ酸に置き換えることを意味する。
【００２５】
遺伝的にコードされたアミノ酸は、４つのファミリーに分割され得る：酸性（アスパラギン酸、グルタミン酸）；塩基性（リジン、アルギニン、ヒスチジン）；非極性（アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン、トリプトファン）；及び非荷電極性（グリシン、アスパラギン、グルタミン、システイン、セリン、トレオニン、チロシン）。フェニルアラニン、トリプトファン、及びチロシンは、時に、芳香族アミノ酸としてグループ化される。同様に、アミノ酸はまた、以下の群に分離され得る：酸性（アスパラギン酸、グルタミン酸）；塩基性（リジン、アルギニン、ヒスチジン）；脂肪族（グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、セリン、トレオニン）（セリン及びトレオニンは任意に、脂肪族ヒドロキシルとして別々にグループ化される）；芳香族（フェニルアラニン、チロシン、トリプトファン）；アミド（アスパラギン、グルタミン）；及び硫黄含有（システイン、メチオニン）。
【００２６】
アミノ酸配列の変化が機能変異体をもたらすかどうかは、本明細書に記載されるような標準的な方法を使用して、変異体ポリペプチドが野生型ポリペプチドと同様に機能する能力を評価することによって決定され得る。
【００２７】
「有効量」とは、単回または複数回投与にかかわらず、所望の臨床応答を達成するのに必要とされる薬学的組成物の量を意味する。本明細書に記載の方法を実施するために使用される有効量の薬学的組成物は、投与様式、対象の年齢、体重、及び全身の健康によって異なる。最終的に、処方者が適量及び投与レジメンを決定する。
【００２８】
「フランキングアミノ酸」とは、特定の定義された配列のＮまたはＣ末端のすぐ隣にあるポリペプチド配列中のアミノ酸を意味する。望ましくは、フランキングアミノ酸は、配列番号１、２、３、４、もしくは５のアミノ酸配列のＮ及び／またはＣ末端またはそのフラグメント上に存在し、より望ましくは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０個のフランキングアミノ酸が、配列番号１、２、３、４、もしくは５のアミノ酸配列のＮ及び／またはＣ末端またはそのフラグメント上に存在する。
【００２９】
「融合タンパク質」とは、本発明のポリペプチド、例えば、ペプチドフラグメントまたは変異体、及び融合パートナーを含む、タンパク質を意味する。
【００３０】
「融合パートナー」とは、本発明のポリペプチドまたはペプチドに融合され得る配列を意味する。融合パートナーの例としては、検出マーカーなどの異種配列、安定化ドメイン、タンパク質の産生もしくは精製を補助する配列、またはポリペプチドの抗原性を高めるドメインが挙げられる。他の実施例では、融合パートナーとしては、成熟Ａｌｓ３のＮ末端配列を含むＡｌｓ３ポリペプチドの場合、天然に隣接するプレタンパク質の部分から開裂されないＡｌｓ３  Ｎ末端シグナル配列か、または成熟Ａｌｓ３の天然のＮ末端配列を含まないＡｌｓ３ポリペプチドのＮ末端配列に融合されるＡｌｓ３  Ｎ末端シグナル配列のいずれかが挙げられる。そのようなＮ末端シグナル配列の一例は、以下の通りである：ＭＬＱＱＹＴＬＬＬＩＹＬＳＶＡＴＡ（配列番号６）。本明細書に定義されるようなこの配列の変異体もまた、本発明に含まれる。
【００３１】
「Ａｌｓ３ポリペプチド」とは、一般に、配列番号１、２、３、４、または５のアミノ酸配列を有するポリペプチドを意味する。場合によっては、Ａｌｓ３タンパク質は、配列番号１、２、３、４、または５との実質的な同一性を有する。
【００３２】
「免疫原性」とは、対象における免疫応答を誘導することが可能である任意の物質を意味する。
【００３３】
ワクチンとの関連で、「免疫原性量」とは、臨床的に意義のある様式で、対象における免疫応答を誘導するために必要とされるワクチンの量を意味する。本明細書に記載のワクチン接種方法を実施するために使用される免疫原性量のワクチンは、投与様式、対象の年齢、体重、及び全身の健康によって異なる。最終的に、処方者が適量及び投与レジメンを決定する。
【００３４】
「単離された」または「精製された」とは、他の天然に付随する構成成分から分離されていることを意味する。典型的には、化合物（例えば、核酸、ポリペプチド、抗体、または低分子）は、それが天然に関連するタンパク質及び／または天然の有機分子を少なくとも６０重量％含まないときに、実質的に単離されている。定義はまた、例えば、その隣接配列から分離されたポリペプチドまたは核酸分子に及ぶ（例えば、アミノ酸配列に関して、単離されたとは、配列がポリペプチド中で天然に関連するフランキングアミノ酸を含まない配列を指す）。場合によっては、化合物は、少なくとも７５重量％、より好ましくは少なくとも９０重量％、最も好ましくは少なくとも９９重量％単離されている。単離された化合物、例えば、ポリペプチドは、標準的な技術によって、例えば、天然源からの抽出（例えば、Ｃａｎｄｉｄａに感染した細胞からの精製）によって、Ａｌｓ３もしくはＣＮＡフラグメントもしくは変異体、またはその融合タンパク質をコードする組み換え核酸の発現によって、あるいはポリペプチドの化学的合成によって得られ得る。純度は、任意の適切な方法、例えば、カラムクロマトグラフィ、ポリアクリルアミドゲル電気泳動、またはＨＰＬＣ分析によって測定され得る。
【００３５】
コンジュゲートとの関連で、「〜に結合された」または「コンジュゲートされた」とは、ポリペプチドと担体または融合パートナーとの間の共有または非共有結合的相互作用を意味する。非共有結合的相互作用としては、水素結合、荷電基間のイオン相互作用、ファンデルワールス相互作用、静電結合、非極性基間の疎水性相互作用、疎油性相互作用、及びＬｏｇＰベースの引力が挙げられるが、これらに限定されない。
【００３６】
「患者」または「対象」とは、ヒト、またはウシ、ウマ、イヌ、ヒツジ、もしくはネコのような非ヒト哺乳動物が挙げられるが、これらに限定されない哺乳動物を意味する。特に、対象は、雌である。
【００３７】
「ペプチド」、「ポリペプチド」、及び「タンパク質」という用語は、互換的に使用され、翻訳後修飾（例えばグリコシル化またはリン酸化）にかかわらず、本明細書に記載されるように、天然に存在するか、または天然に存在しないポリペプチドまたはペプチドの全部または一部を構成する、２つ以上の天然または非天然アミノ酸の任意の鎖を指す。
【００３８】
本明細書で使用される場合、天然アミノ酸は、天然ポリペプチド中に通常発生するような、L型立体配置を有する天然α−アミノ酸である。非天然アミノ酸は、ポリペプチド中に通常発生しないアミノ酸、例えば、L型立体配置を有する天然α−アミノ酸のエピマー、つまり、非天然Ｄ型立体配置を有するアミノ酸；またはその（Ｄ，Ｌ）−異性体混合物；またはそのようなアミノ酸の相同体、例えば、β−アミノ酸、α，α−二置換アミノ酸、もしくはアミノ酸側鎖がメチレン基１個もしくは２個分短縮されているか、もしくは最大１０個の炭素原子まで延長されているα−アミノ酸、例えば、直鎖中に５個から最大１０個（１０個を含む）の炭素原子を有するα−アミノアルカン酸、非置換もしくは置換芳香族（α−アリールもしくはα−アリール低級アルキル）、例えば、置換フェニルアラニンもしくはフェニルグリシンを指す。
【００３９】
「薬学的に許容される担体」及び「薬学的に許容される賦形剤」は、互換的に使用され、一緒に投与されている化合物の治療的特性を維持しながら、治療されている患者にとって生理学的に許容できる担体または賦形剤を意味する。１つの例示的な薬学的に許容される担体物質は、生理食塩水である。他の生理学的に許容できる担体及びそれらの製剤は、当業者に既知であり、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，（２０ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ），ｅｄ．Ａ．Ｇｅｎｎａｒｏ，２０００，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，ＰＡに記載されている。
【００４０】
「薬学的組成物」とは、本発明のポリペプチド、コンジュゲート、ワクチン、または抗真菌剤を含有し、薬学的に許容される賦形剤と共に製剤化され、かつ哺乳動物における疾病または事象の治療または予防のための治療レジメンの一部として、政府規制機関の承認を得て製造または販売される、組成物を意味する。薬学的組成物は、例えば、静脈内投与（例えば、微粒子塞栓がなく、かつ静脈内使用に好適な溶媒系中の滅菌溶液として）、経口投与（例えば、錠剤、カプセル、カプレット、ジェルキャップ、もしくはシロップ）、または例えば、単位投与形態の本明細書に記載の任意の他の処方のために製剤化され得る。
【００４１】
「再発性外陰部膣カンジダ症」またはＲＶＶＣとは、１年に少なくとも２回（例えば、少なくとも３回もしくは４回以上）の感染の特異的エピソードによって特徴付けられるか、または１年以内に生じる抗生物質療法とは無関係である少なくとも１回（例えば、少なくとも２回もしくは３回以上）の感染のエピソードによって特徴付けられる、対象（例えば、ヒト女性）における外陰部膣カンジダ症（ＶＶＣ）感染を意味する。そのような対象は、例えば、治療前の過去１２か月の間に１回、２回、３回、またはそれ以上ＶＶＣに感染している可能性がある。さらに、治療時に、これらの対象は、ＶＶＣと現在診断されていない可能性があるか、及び／または現在ＶＶＣエピソード発現をしていない可能性がある。さらに、治療時に、これらの患者は、その時点で３以上のＶＶＣ兆候及び症状包括的質問票スコアを有しない可能性がある（以下を参照されたい）。
【００４２】
「実質的に同一」とは、参照配列に対して少なくとも５０％の同一性を呈するアミノ酸配列または核酸配列を意味する。そのような配列は、一般に、参照配列に対して、アミノ酸レベルまたは核酸レベルにおいて少なくとも、例えば、５０％、６０％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一である。一般に、ポリペプチドに関して、比較配列の長さは、少なくとも５個のアミノ酸、例えば、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１２５、１５０、１７５、２００、２５０、３００、４００、５００、６００、７００、８００、９００、１０００、１１００個、またはそれ以上のアミノ酸、最大でポリペプチドの全長であってもよい（例えば、配列番号１、２、３、４、及び５を参照されたい）。核酸に関して、比較配列の長さは、一般に、少なくとも１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１２５、１５０、１７５、２００、２５０、３００、４００、５００、６００、７００、８００、９００個、またはそれ以上のヌクレオチド、最大で核酸分子の全長であってもよい。ＤＮＡ配列をＲＮＡ配列と比較したときに配列同一性を決定する目的で、チミンヌクレオチドがウラシルヌクレオチドと同等であることを理解されたい。
【００４３】
本明細書で使用される場合、ポリペプチドまたは核酸配列が参照配列に対して「少なくともＸ％の配列同一性」を有するものと称される場合、ポリペプチドまたは核酸中のアミノ酸またはヌクレオチドの少なくともＸパーセントが、配列が最適に整列したときに参照配列に同一であることを意味する。配列の最適なアライメントは、当該技術分野の技術の範囲内にある様々な方法、例えば、スミス−ウォーターマンアライメントアルゴリズム（Ｓｍｉｔｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１４７：１９５−７，１９８１）及びＢＬＡＳＴ（Ｂａｓｉｃ  Ｌｏｃａｌ  Ａｌｉｇｎｍｅｎｔ  Ｓｅａｒｃｈ  Ｔｏｏｌ；Ａｌｔｓｃｈｕｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１５：４０３−１０，１９９０）で決定され得る。これら及び他のアライメントアルゴリズムは、ＧｅｎｅＭａｔｃｈｅｒ  ＰｌｕｓＴＭ（Ｓｃｈｗａｒｚ  ａｎｄ  Ｄａｙｈｏｆ，Ａｔｌａｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，Ｄａｙｈｏｆｆ，Ｍ．Ｏ．，Ｅｄ  ｐｐ  ３５３−３５８，１９７９）に組み込まれた「Ｂｅｓｔ  Ｆｉｔ」（Ｓｍｉｔｈ  ａｎｄ  Ｗａｔｅｒｍａｎ，Ａｄｖａｎｃｅｓ  ｉｎ  Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｍａｔｈｅｍａｔｉｃｓ，４８２−４８９，１９８１）、ＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ−２、ＢＬＡＳＴ−Ｐ、ＢＬＡＳＴ−Ｎ、ＢＬＡＳＴ−Ｘ、ＷＵ−ＢＬＡＳＴ−２、ＡＬＩＧＮ、ＡＬＩＧＮ−２、ＣＬＵＳＴＡＬ、またはＭｅｇａｌｉｇｎ（ＤＮＡＳＴＡＲ）などの公的に入手可能なコンピュータソフトウェアを使用してアクセス可能である。加えて、当業者は、比較されている配列の長さにわたって最適なアライメントを達成するために必要とされる任意のアルゴリズムを含む、アライメントを測定するための適切なパラメータを決定することができる。
【００４４】
「治療すること」または「治療」とは、薬学的組成物を投与することによって、疾病、病的状態、障害、または事象を治癒する、改善する、安定化する、それらの可能性を低減する、または予防することを目的とした、患者の医学的管理を意味する。この用語は、積極的治療、つまり、疾病、病的状態、障害、または事象の改善に特に向けられた、またはそれらの治癒と関連した治療を含み、また原因治療、つまり、関連した疾病、病的状態、障害、または事象の原因の除去に向けられた治療を含む。加えて、この用語は、姑息的治療、つまり、疾病、病的状態、障害、または事象の治癒よりも症状の緩和のために設計された治療；対症治療、つまり、関連した疾病、病的状態、障害、または事象の全身症状に向けられた治療；予防的治療、つまり、例えば、まだ病気ではないが、特定の疾病、病的状態、障害、または事象にかかりやすいか、または別様にそれらのリスクがある患者において、関連した疾病、病的状態、障害、または事象の発症を最小限に抑えるか、または部分的もしくは完全に阻害することに向けられた治療、ならびに補助的治療、つまり、関連した疾病、病的状態、障害、または事象の改善に向けられた別の特定の療法を補うために用いられる治療を含む。
【００４５】
本明細書で使用される場合、「ワクチン」とは、それが投与される対象における免疫応答を誘発する組成物を意味する。
【００４６】
本明細書で使用される場合、「ワクチン接種する」とは、例えば、疾病、病的状態、障害、または事象を予防または改善するために、ワクチンを投与することによって患者を治療することを意味する。
【００４７】
本明細書に記載のポリペプチドもしくはその部分、またはそれをコードする核酸分子との関連で、「変異体」とは、例えば、実質的に同一の配列をもたらす、アミノ酸配列または核酸配列中の置換または改変を含むことを意味する。変異体配列を有するポリペプチドは、元のポリペプチドの少なくとも１つの生物活性、例えば、免疫活性を維持し得る。「変異体」という用語は、例えば、アミノ及び／またはカルボキシル末端融合などのアミノ酸挿入誘導体、ならびに単一もしくは複数のアミノ酸の配列内挿入を含む。挿入アミノ酸変異体は、１つ以上のアミノ酸残基がタンパク質中の所定の部位に導入される変異体である。ランダム挿入はまた、得られる生成物の好適なスクリーニングで可能である。欠失変異体は、配列からの１つ以上のアミノ酸の除去によって特徴付けられる。置換アミノ酸変異体は、少なくとも１つの残基がその定位置に挿入された変異体である。タンパク質がアミノ酸置換によって誘導体化されたとき、アミノ酸は、一般に、保存的置換、例えば、疎水性、親水性、電気陰性度、かさ高い側鎖などの同様の物理的化学的特性を有する他のアミノ酸によって置き換えられる。
【００４８】
本発明の目的で、変異体はまた、炭水化物、脂質、及び／または他のタンパク質性部分など、ポリペプチドが得られ得る天然タンパク質の部分と天然または人工的に関連した任意の成分（複数可）の単一または複数の置換、欠失、及び／または付加を含む。全てのそのような分子は、「変異体」という用語によって包含される。
【００４９】
「変異体配列」とは、本明細書に定義される変異体のアミノ酸または核酸配列を意味する。
【００５０】
本発明の他の特徴及び利点は、発明を実施するための形態、図面、及び特許請求の範囲から明らかになるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００５１】
【図１Ａ】図１Ａ及び１Ｂは、ワクチン接種後２７０日目までの血漿抗Ａｌｓ３抗体力価を示すグラフである。図１Ａは、総ＩｇＧ抗体力価を示すグラフである。図１Ｂは、総ＩｇＡ１力価を示すグラフである。
【図１Ｂ】図１Ａ及び１Ｂは、ワクチン接種後２７０日目までの血漿抗Ａｌｓ３抗体力価を示すグラフである。図１Ａは、総ＩｇＧ抗体力価を示すグラフである。図１Ｂは、総ＩｇＡ１力価を示すグラフである。
【図２Ａ】図２Ａ及び２Ｂは、ワクチン接種後１８０日目までの血漿抗Ａｌｓ３ｐ抗体力価の倍数上昇の増加を示すグラフである。図２Ａは、総ＩｇＧ抗体力価を示すグラフである。図２Ｂは、総ＩｇＡ１抗体力価を示すグラフである。
【図２Ｂ】図２Ａ及び２Ｂは、ワクチン接種後１８０日目までの血漿抗Ａｌｓ３ｐ抗体力価の倍数上昇の増加を示すグラフである。図２Ａは、総ＩｇＧ抗体力価を示すグラフである。図２Ｂは、総ＩｇＡ１抗体力価を示すグラフである。
【図３Ａ】図３Ａ及び３Ｂは、ワクチン接種後２７０日目までの、３０μｇの用量を投与された全対象に対する、ＰＢＭＣによるＡｌｓ３刺激されたサイトカイン産生を示すグラフである。図３Ａは、Ａｌｓ３刺激されたＩＦＮ−γ産生を示すグラフである。図３Ｂは、Ａｌｓ３刺激されたＩＬ−１７Ａ産生を示すグラフである。
【図３Ｂ】図３Ａ及び３Ｂは、ワクチン接種後２７０日目までの、３０μｇの用量を投与された全対象に対する、ＰＢＭＣによるＡｌｓ３刺激されたサイトカイン産生を示すグラフである。図３Ａは、Ａｌｓ３刺激されたＩＦＮ−γ産生を示すグラフである。図３Ｂは、Ａｌｓ３刺激されたＩＬ−１７Ａ産生を示すグラフである。
【図４Ａ】図４Ａ及び４Ｂは、ワクチン接種後２７０日目までの、３００μｇの用量を投与された全対象に対する、ＰＢＭＣによるＡｌｓ３刺激されたサイトカイン産生を示すグラフである。図４Ａは、Ａｌｓ３刺激されたＩＦＮ−γ産生を示すグラフである。図４Ｂは、Ａｌｓ３刺激されたＩＬ−１７Ａ産生を示すグラフである。
【図４Ｂ】図４Ａ及び４Ｂは、ワクチン接種後２７０日目までの、３００μｇの用量を投与された全対象に対する、ＰＢＭＣによるＡｌｓ３刺激されたサイトカイン産生を示すグラフである。図４Ａは、Ａｌｓ３刺激されたＩＦＮ−γ産生を示すグラフである。図４Ｂは、Ａｌｓ３刺激されたＩＬ−１７Ａ産生を示すグラフである。
【図５Ａ】図５Ａ及び５Ｂは、ワクチン接種後２７０日目までのサイトカイン産生ＰＭＢＣに応答する対象の割合を示すグラフである。図５Ａは、ＩＦＮ−γ産生ＰＢＭＣに応答する対象の割合を示すグラフである。図５Ｂは、ＩＬ−１７Ａ産生ＰＢＭＣに応答する対象の割合を示すグラフである。
【図５Ｂ】図５Ａ及び５Ｂは、ワクチン接種後２７０日目までのサイトカイン産生ＰＭＢＣに応答する対象の割合を示すグラフである。図５Ａは、ＩＦＮ−γ産生ＰＢＭＣに応答する対象の割合を示すグラフである。図５Ｂは、ＩＬ−１７Ａ産生ＰＢＭＣに応答する対象の割合を示すグラフである。
【図６Ａ】図６Ａ〜６Ｄは、血清（図６Ａ及び図６Ｃ）ならびに膣洗浄液（図６Ｂ及び６Ｄ）中の抗Ａｌｓ３抗体レベルを示すグラフである。図６Ａは、血清ＩｇＧ力価を示し、図６Ｂは、膣ＩｇＧ力価を示し、図６Ｃは、血清ＩｇＡ力価を示し、図６Ｄは、膣ＩｇＡ力価を示す。ミョウバンを用いた３００μｇ（黒色三角形）は、ミョウバンを用いない同じ用量（黒色正方形）よりも２〜３倍高い抗体応答を有する。皮内投与された３０μｇの用量（灰色菱形）は、筋肉内送達された同じ用量（ミョウバンを用いた）と同様の抗体応答を示した。プラセボ対照は、黒色の円形で示される。
【図６Ｂ】図６Ａ〜６Ｄは、血清（図６Ａ及び図６Ｃ）ならびに膣洗浄液（図６Ｂ及び６Ｄ）中の抗Ａｌｓ３抗体レベルを示すグラフである。図６Ａは、血清ＩｇＧ力価を示し、図６Ｂは、膣ＩｇＧ力価を示し、図６Ｃは、血清ＩｇＡ力価を示し、図６Ｄは、膣ＩｇＡ力価を示す。ミョウバンを用いた３００μｇ（黒色三角形）は、ミョウバンを用いない同じ用量（黒色正方形）よりも２〜３倍高い抗体応答を有する。皮内投与された３０μｇの用量（灰色菱形）は、筋肉内送達された同じ用量（ミョウバンを用いた）と同様の抗体応答を示した。プラセボ対照は、黒色の円形で示される。
【図６Ｃ】図６Ａ〜６Ｄは、血清（図６Ａ及び図６Ｃ）ならびに膣洗浄液（図６Ｂ及び６Ｄ）中の抗Ａｌｓ３抗体レベルを示すグラフである。図６Ａは、血清ＩｇＧ力価を示し、図６Ｂは、膣ＩｇＧ力価を示し、図６Ｃは、血清ＩｇＡ力価を示し、図６Ｄは、膣ＩｇＡ力価を示す。ミョウバンを用いた３００μｇ（黒色三角形）は、ミョウバンを用いない同じ用量（黒色正方形）よりも２〜３倍高い抗体応答を有する。皮内投与された３０μｇの用量（灰色菱形）は、筋肉内送達された同じ用量（ミョウバンを用いた）と同様の抗体応答を示した。プラセボ対照は、黒色の円形で示される。
【図６Ｄ】図６Ａ〜６Ｄは、血清（図６Ａ及び図６Ｃ）ならびに膣洗浄液（図６Ｂ及び６Ｄ）中の抗Ａｌｓ３抗体レベルを示すグラフである。図６Ａは、血清ＩｇＧ力価を示し、図６Ｂは、膣ＩｇＧ力価を示し、図６Ｃは、血清ＩｇＡ力価を示し、図６Ｄは、膣ＩｇＡ力価を示す。ミョウバンを用いた３００μｇ（黒色三角形）は、ミョウバンを用いない同じ用量（黒色正方形）よりも２〜３倍高い抗体応答を有する。皮内投与された３０μｇの用量（灰色菱形）は、筋肉内送達された同じ用量（ミョウバンを用いた）と同様の抗体応答を示した。プラセボ対照は、黒色の円形で示される。
【図７Ａ】図７Ａ及び７Ｂは、血漿抗Ａｌｓ３の総ＩｇＧ力価及びＩｇＡ１力価と、Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓオプソニン作用性死滅（ＯＰＫ）活性との間の関連を示すグラフである。図７Ａは、治療群による幾何平均の抗Ａｌｓ３抗体力価及びＣ．ａｌｂｉｃａｎｓ  ＯＰＫ活性を示す。図７Ｂは、ワクチン接種後１４日目の試料に対するＣ．ａｌｂｉｃａｎｓ  ＯＰＫ力価対抗Ａｌｓ３  ＩｇＧ血漿抗体力価を示す。
【図７Ｂ】図７Ａ及び７Ｂは、血漿抗Ａｌｓ３の総ＩｇＧ力価及びＩｇＡ１力価と、Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓオプソニン作用性死滅（ＯＰＫ）活性との間の関連を示すグラフである。図７Ａは、治療群による幾何平均の抗Ａｌｓ３抗体力価及びＣ．ａｌｂｉｃａｎｓ  ＯＰＫ活性を示す。図７Ｂは、ワクチン接種後１４日目の試料に対するＣ．ａｌｂｉｃａｎｓ  ＯＰＫ力価対抗Ａｌｓ３  ＩｇＧ血漿抗体力価を示す。
【図８Ａ】図８Ａ及び８Ｂは、Ａｌｓ３抗原によるＴｈ１（図８Ａ）及びＴｈ１７（図８Ｂ）Ｔ細胞刺激を示すグラフである。ミョウバンを用いた、または用いない３００μｇの筋肉内投与が同様の応答をもたらす一方で、３０μｇの皮内注射は、低減したが全体的に同様の応答をもたらした。
【図８Ｂ】図８Ａ及び８Ｂは、Ａｌｓ３抗原によるＴｈ１（図８Ａ）及びＴｈ１７（図８Ｂ）Ｔ細胞刺激を示すグラフである。ミョウバンを用いた、または用いない３００μｇの筋肉内投与が同様の応答をもたらす一方で、３０μｇの皮内注射は、低減したが全体的に同様の応答をもたらした。
【図９】Ａｌｓ３抗原を投与された各個体のワクチン接種後の血清（薄灰色の棒）をワクチン接種前の血清（濃灰色の棒、１００％に正規化）と比較するグラフである。
【図１０】第１相の３つの治療群間のＥＬＩＳＡによって測定された抗Ａｌｓ３抗体の幾何平均濃度（棒）と比較した、各治療群のワクチン接種後の対象における幾何平均の機能的オプソニン作用性死滅（ＯＰＫ）活性（線）を示すグラフである。
【図１１Ａ】図１１Ａ〜１１Ｄは、血清（図１１Ａ及び図１１Ｃ）ならびに膣洗浄液（図１１Ｂ及び１１Ｄ）中の抗Ａｌｓ３抗体レベルを示すグラフである。各グラフは、プラセボ（黒色の線）に対するＮＤＶ−３Ａ（濃灰色の線）に対する抗体応答とＮＤＶ−３（薄灰色の線）に対する抗体応答との間の比較を示す。図１１Ａは、血清ＩｇＧ力価を示し、図１１Ｂは、膣ＩｇＧ力価を示し、図１１Ｃは、血清ＩｇＡ力価を示し、図１１Ｄは、膣ＩｇＡ力価を示す。
【図１１Ｂ】図１１Ａ〜１１Ｄは、血清（図１１Ａ及び図１１Ｃ）ならびに膣洗浄液（図１１Ｂ及び１１Ｄ）中の抗Ａｌｓ３抗体レベルを示すグラフである。各グラフは、プラセボ（黒色の線）に対するＮＤＶ−３Ａ（濃灰色の線）に対する抗体応答とＮＤＶ−３（薄灰色の線）に対する抗体応答との間の比較を示す。図１１Ａは、血清ＩｇＧ力価を示し、図１１Ｂは、膣ＩｇＧ力価を示し、図１１Ｃは、血清ＩｇＡ力価を示し、図１１Ｄは、膣ＩｇＡ力価を示す。
【図１１Ｃ】図１１Ａ〜１１Ｄは、血清（図１１Ａ及び図１１Ｃ）ならびに膣洗浄液（図１１Ｂ及び１１Ｄ）中の抗Ａｌｓ３抗体レベルを示すグラフである。各グラフは、プラセボ（黒色の線）に対するＮＤＶ−３Ａ（濃灰色の線）に対する抗体応答とＮＤＶ−３（薄灰色の線）に対する抗体応答との間の比較を示す。図１１Ａは、血清ＩｇＧ力価を示し、図１１Ｂは、膣ＩｇＧ力価を示し、図１１Ｃは、血清ＩｇＡ力価を示し、図１１Ｄは、膣ＩｇＡ力価を示す。
【図１１Ｄ】図１１Ａ〜１１Ｄは、血清（図１１Ａ及び図１１Ｃ）ならびに膣洗浄液（図１１Ｂ及び１１Ｄ）中の抗Ａｌｓ３抗体レベルを示すグラフである。各グラフは、プラセボ（黒色の線）に対するＮＤＶ−３Ａ（濃灰色の線）に対する抗体応答とＮＤＶ−３（薄灰色の線）に対する抗体応答との間の比較を示す。図１１Ａは、血清ＩｇＧ力価を示し、図１１Ｂは、膣ＩｇＧ力価を示し、図１１Ｃは、血清ＩｇＡ力価を示し、図１１Ｄは、膣ＩｇＡ力価を示す。
【図１２Ａ】図１２Ａ及び１２Ｂは、Ａｌｓ３抗原によるＴｈ１（図１２Ａ）及びＴｈ１７（図１２Ｂ）Ｔ細胞刺激を示すグラフである。各群は、プラセボ（黒色の棒）に対するＮＤＶ−３Ａ（濃灰色の棒）に対するサイトカイン応答とＮＤＶ−３（薄灰色の棒）に対するサイトカイン応答との間の比較を示す。図１２Ａは、ＩＦＮ−γ陽性応答者の割合を示し、図１２Ｂは、ＩＬ−１７Ａ陽性応答者の割合を示す。
【図１２Ｂ】図１２Ａ及び１２Ｂは、Ａｌｓ３抗原によるＴｈ１（図１２Ａ）及びＴｈ１７（図１２Ｂ）Ｔ細胞刺激を示すグラフである。各群は、プラセボ（黒色の棒）に対するＮＤＶ−３Ａ（濃灰色の棒）に対するサイトカイン応答とＮＤＶ−３（薄灰色の棒）に対するサイトカイン応答との間の比較を示す。図１２Ａは、ＩＦＮ−γ陽性応答者の割合を示し、図１２Ｂは、ＩＬ−１７Ａ陽性応答者の割合を示す。
【図１３】健康なプラセボレシピエント（黒色の点線）と、健康なワクチン受容者（灰色の点線）と、ＲＶＶＣを有するプラセボレシピエント（黒色の実線）と、ＲＶＶＣを有するワクチンレシピエント（灰色の実線）との間の抗Ａｌｓ３抗体力価を比較するグラフである。
【図１４Ａ】図１４Ａ〜１４Ｃは、第１の再発までの時間を示すカプラン−マイヤー曲線である。図１４Ａは、全ての年齢の患者のコホートからの、プラセボ患者（破線）と比較したＮＤＶ−３Ａで治療された患者（実線）における兆候／症状スコアによって測定された非再発の割合を示す。図１４Ｂは、全ての年齢の患者のコホートからの、プラセボ患者（破線）と比較したＮＤＶ−３Ａで治療された患者（実線）における患者症状スコアによって測定された非再発の割合を示す。図１４Ｃは、４０歳未満の患者のコホートからの、プラセボ患者（破線）と比較したＮＤＶ−３Ａで治療された患者（実線）における患者症状スコアによって測定された非再発の割合を示す。
【図１４Ｂ】図１４Ａ〜１４Ｃは、第１の再発までの時間を示すカプラン−マイヤー曲線である。図１４Ａは、全ての年齢の患者のコホートからの、プラセボ患者（破線）と比較したＮＤＶ−３Ａで治療された患者（実線）における兆候／症状スコアによって測定された非再発の割合を示す。図１４Ｂは、全ての年齢の患者のコホートからの、プラセボ患者（破線）と比較したＮＤＶ−３Ａで治療された患者（実線）における患者症状スコアによって測定された非再発の割合を示す。図１４Ｃは、４０歳未満の患者のコホートからの、プラセボ患者（破線）と比較したＮＤＶ−３Ａで治療された患者（実線）における患者症状スコアによって測定された非再発の割合を示す。
【図１４Ｃ】図１４Ａ〜１４Ｃは、第１の再発までの時間を示すカプラン−マイヤー曲線である。図１４Ａは、全ての年齢の患者のコホートからの、プラセボ患者（破線）と比較したＮＤＶ−３Ａで治療された患者（実線）における兆候／症状スコアによって測定された非再発の割合を示す。図１４Ｂは、全ての年齢の患者のコホートからの、プラセボ患者（破線）と比較したＮＤＶ−３Ａで治療された患者（実線）における患者症状スコアによって測定された非再発の割合を示す。図１４Ｃは、４０歳未満の患者のコホートからの、プラセボ患者（破線）と比較したＮＤＶ−３Ａで治療された患者（実線）における患者症状スコアによって測定された非再発の割合を示す。
【図１５Ａ】図１５Ａ〜１５Ｄは、経時的な累積再発を示すグラフである。図１５Ａは、全ての年齢の患者のコホートからの、プラセボ患者（実線）と比較したＮＤＶ−３Ａで治療された患者（破線）における兆候／症状スコアによって測定された再発エピソードの平均累積数を示す。図１５Ｂは、４０歳未満の患者のコホートからの、プラセボ患者（実線）と比較したＮＤＶ−３Ａで治療された患者（破線）における兆候／症状スコアによって測定された再発エピソードの平均累積数を示す。図１５Ｃは、全ての年齢の患者のコホートからの、プラセボ患者（実線）と比較したＮＤＶ−３Ａで治療された患者（破線）における患者症状スコアによって測定された再発エピソードの平均累積数を示す。図１５Ｄは、４０歳未満の患者のコホートからの、プラセボ患者（実線）と比較したＮＤＶ−３Ａで治療された患者（破線）における患者症状スコアによって測定された再発エピソードの平均累積数を示す。
【図１５Ｂ】図１５Ａ〜１５Ｄは、経時的な累積再発を示すグラフである。図１５Ａは、全ての年齢の患者のコホートからの、プラセボ患者（実線）と比較したＮＤＶ−３Ａで治療された患者（破線）における兆候／症状スコアによって測定された再発エピソードの平均累積数を示す。図１５Ｂは、４０歳未満の患者のコホートからの、プラセボ患者（実線）と比較したＮＤＶ−３Ａで治療された患者（破線）における兆候／症状スコアによって測定された再発エピソードの平均累積数を示す。図１５Ｃは、全ての年齢の患者のコホートからの、プラセボ患者（実線）と比較したＮＤＶ−３Ａで治療された患者（破線）における患者症状スコアによって測定された再発エピソードの平均累積数を示す。図１５Ｄは、４０歳未満の患者のコホートからの、プラセボ患者（実線）と比較したＮＤＶ−３Ａで治療された患者（破線）における患者症状スコアによって測定された再発エピソードの平均累積数を示す。
【図１５Ｃ】図１５Ａ〜１５Ｄは、経時的な累積再発を示すグラフである。図１５Ａは、全ての年齢の患者のコホートからの、プラセボ患者（実線）と比較したＮＤＶ−３Ａで治療された患者（破線）における兆候／症状スコアによって測定された再発エピソードの平均累積数を示す。図１５Ｂは、４０歳未満の患者のコホートからの、プラセボ患者（実線）と比較したＮＤＶ−３Ａで治療された患者（破線）における兆候／症状スコアによって測定された再発エピソードの平均累積数を示す。図１５Ｃは、全ての年齢の患者のコホートからの、プラセボ患者（実線）と比較したＮＤＶ−３Ａで治療された患者（破線）における患者症状スコアによって測定された再発エピソードの平均累積数を示す。図１５Ｄは、４０歳未満の患者のコホートからの、プラセボ患者（実線）と比較したＮＤＶ−３Ａで治療された患者（破線）における患者症状スコアによって測定された再発エピソードの平均累積数を示す。
【図１５Ｄ】図１５Ａ〜１５Ｄは、経時的な累積再発を示すグラフである。図１５Ａは、全ての年齢の患者のコホートからの、プラセボ患者（実線）と比較したＮＤＶ−３Ａで治療された患者（破線）における兆候／症状スコアによって測定された再発エピソードの平均累積数を示す。図１５Ｂは、４０歳未満の患者のコホートからの、プラセボ患者（実線）と比較したＮＤＶ−３Ａで治療された患者（破線）における兆候／症状スコアによって測定された再発エピソードの平均累積数を示す。図１５Ｃは、全ての年齢の患者のコホートからの、プラセボ患者（実線）と比較したＮＤＶ−３Ａで治療された患者（破線）における患者症状スコアによって測定された再発エピソードの平均累積数を示す。図１５Ｄは、４０歳未満の患者のコホートからの、プラセボ患者（実線）と比較したＮＤＶ−３Ａで治療された患者（破線）における患者症状スコアによって測定された再発エピソードの平均累積数を示す。
【図１６】４０歳以上のプラセボレシピエント（黒色の点線）と、４０歳未満のプラセボレシピエント（灰色の点線）と、４０歳以上のワクチンレシピエント（黒色の実線）と、４０歳未満のワクチンレシピエント（灰色の実線）との間の抗Ａｌｓ３抗体力価を比較するグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００５２】
本発明は、再発性ＶＶＣ（ＲＶＶＣ）を含む外陰部膣カンジダ症（ＶＶＣ）の予防及び治療で使用するための方法を提供する。方法は、（ｉ）Ｃａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓのアグルチニン様配列３（Ａｌｓ３）ポリペプチド、及び（ｉｉ）抗真菌剤の協調的使用を伴う治療を含む。治療方法は、以下の通り、さらに記載される。
【００５３】
Ａｌｓ３ポリペプチド
Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓのアグルチニン様配列３（Ａｌｓ３）プレタンパク質の配列は、以下の通り記載され、配列番号１として指定される。
【化１】
2019507759.tif 000002
このプレタンパク質は、成熟Ａｌｓ３タンパク質の精製において除去される１７個のアミノ酸（上記の下線付き）のＮ末端シグナル配列を含む。
【００５４】
本発明で使用され得るＡｌｓ３ポリペプチドの例としては、Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ  Ａｌｓ３及びその変異体の成熟形態のＮ末端部分を含むものが挙げられる。したがって、例えば、Ａｌｓ３ポリペプチドは、成熟Ａｌｓ３のＮ末端配列の４１６個のアミノ酸を含むことができる。
【００５５】
本発明で使用され得るＡｌｓ３ポリペプチドの特定の例は、Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ由来の成熟Ａｌｓ３のＮ末端領域（４１６個の残基）に基づく、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ中で発現した組み換えポリペプチドである、Ａｌｓ３−２である。Ａｌｓ３−２の配列は、以下の通り記載され、配列番号２として指定される。
【化２】
2019507759.tif 000003
【００５６】
本発明で使用され得るＡｌｓ３ポリペプチドの別の特定の例は、Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ由来の成熟Ａｌｓ３のＮ末端領域（４１６個の残基）に基づく、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ中で発現した組み換えポリペプチドである、Ａｌｓ３−２に類似のＡｌｓ３−１である。Ａｌｓ３−２とは対照的に、Ａｌｓ３−１は、精製を促進するためにＮ末端上に６Ｈｉｓタグ領域を含有する１５アミノ酸を含む。Ａｌｓ３−１の配列は、以下の通り記載され、配列番号３として指定される。
【化３】
2019507759.tif 000004
【００５７】
さらなるＡｌｓ３ポリペプチドは、Ａｌｓ３（１８−３２４）及びＡｌｓ３（Ｓｅｒ／Ｔｈｒ−ｒｉｃｈ配列）を含む。
【００５８】
Ａｌｓ３（１８−３２４）の配列は、以下の通り記載され、配列番号４として指定される。
【化４】
2019507759.tif 000005
【００５９】
Ａｌｓ３（Ａｌｓ３  Ｓｅｒ／Ｔｈｒ−ｒｉｃｈ配列）の配列は、以下の通り記載され、配列番号５として指定される。
【化５】
2019507759.tif 000006
【００６０】
本発明は、上記のようなＡｌｓ３タンパク質及びポリペプチド（例えば、配列番号１、２、３、４、または５）、ならびにそのフラグメントを含むか、またはそれらからなる、タンパク質またはポリペプチドの使用を含む。具体的には、本発明は、Ａｌｓ３−１（配列番号３）を含むワクチン製剤である、ＮＤＶ−３の使用を含む。本発明はまた、Ａｌｓ３−２（配列番号２）を含むワクチン製剤である、ＮＤＶ−３Ａの使用を含む。加えて、本発明はまた、上記のＡｌｓ３タンパク質及びポリペプチドの変異体の使用を含む。変異体は、上記の「実質的に同一」の定義を参照して、上記の配列番号１、２、３、４、または５と実質的に同一である、タンパク質及びポリペプチド（またはそのフラグメント）を含む。
【００６１】
場合によっては、本明細書に記載のポリペプチドの修飾は、ポリペプチドの生物活性、例えば、免疫原性活性を実質的に低減しない。修飾ポリペプチドは、インビボ安定性、バイオアベイラビリティ、毒性、免疫学的活性、免疫学的同一性、またはコンジュゲーション特性などのポリペプチドの特徴を有し得えるか、またはその特徴を最適化し得る。
【００６２】
修飾は、翻訳後プロセシングなどの自然過程によるもの、または当該技術分野において既知の化学修飾技術によるものを含む。修飾は、ポリペプチド骨格、アミノ酸側鎖、及びアミノまたはカルボキシ末端を含む、ポリペプチド中のいかなる場所でも生じ得る。同じ種類の修飾が、所与のポリペプチド中のいくつかの部位において同じまたは異なる程度で存在し得、ポリペプチドは、２つ以上の種類の修飾を含み得る。
【００６３】
変異体または別様に修飾されたポリペプチドはまた、ポリペプチド配列中で保存的または非保存的のいずれかの１つ以上のアミノ酸挿入、欠失、または置換（例えば、Ｄ−アミノ酸、デスアミノ酸）を含むことができる。例えば、本発明のポリペプチドのうちにいずれかのアミノまたはカルボキシ末端への１つ以上のシステイン残基の付加は、これらのポリペプチドのコンジュゲーションを促進することができる。例示的なポリペプチドは、ＮまたはＣ末端システインを有する。
【００６４】
アミノ酸置換は、保存的（すなわち、残基が同じ一般タイプまたは基の別のアミノ酸によって置き換えられる）、または非保存的（すなわち、残基が別のタイプのアミノ酸によって置き換えられる）であってもよい。加えて、天然に存在しないアミノ酸が、天然に存在するアミノ酸を置き換えることができる（すなわち、天然に存在しないアミノ酸保存置換または天然存在しないアミノ酸非保存置換）。
【００６５】
例えば、当該技術分野において既知の方法を使用して合成的に作製されるポリペプチドは、ＤＮＡによって天然にコードされないアミノ酸の置換を含むことができる（例えば、天然に存在しないまたは非天然アミノ酸）。天然に存在しないアミノ酸の例としては、Ｄ−アミノ酸、システインの硫黄原子に付着したアセチルアミノメチル基を有するアミノ酸、ペグ化アミノ酸、式ＮＨ２（ＣＨ２）ｎＣＯＯＨ（式中、ｎは２〜６）のオメガアミノ酸、中性非極性アミノ酸、例えば、サルコシン、ｔ−ブチルアラニン、ｔ−ブチルグリシン、Ｎ−メチルイソロイシン、及びノルロイシンが挙げられる。フェニルグリシンはＴｒｐ、Ｔｙｒ、またはＰｈｅを置換してもよく、シトルリン及びメチオニンスルホキシドは中性非極性であり、システイン酸は酸性であり、オルニチンは塩基性である。プロリンは、ヒドロキシプロリンで置換され得、立体配座付与特性を保持し得る。
【００６６】
変異体は、置換突然変異によって生成され得、元のポリペプチドの生物活性、例えば、免疫原性活性を保持し得るか、または高めることもあり得る。
【００６７】
本明細書に記載のポリペプチドは、例えば、市販の自動ペプチド合成器を使用した化学合成によって得ることができる。合成タンパク質またはポリペプチドは、例えば、高速液体クロマトグラフィ（ＨＰＬＣ）によって、沈殿させることができ、さらに精製することができる。あるいは、タンパク質及びポリペプチドは、当該技術分野において周知である組み換え法（例えば、Ｓ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅにおける発現）によって得ることができる。
【００６８】
コンジュゲート
本発明のポリペプチドは、ある特定の実施形態では、別の部分または粒子にコンジュゲートされ得る。
【００６９】
タンパク質部分
場合によっては、例えば、当該技術分野において既知の二官能性薬剤または誘導体化薬剤、例えば、マレイミドベンゾイルスルホスクシンイミドエステル（システイン残基を通じたコンジュゲーション）、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（リジン残基を通じて）、グルタルアルデヒド、または無水コハク酸を使用して、免疫化される種において免疫原性であるタンパク質、例えば、キーホールリンペットヘモシアニン（ＫＬＨ）、ＣＲＭ１９７及びその変異体、破傷風トキソイド、ジフテリアトキソイド、血清アルブミン、ウシサイログロブリン、大豆トリプシン阻害剤、またはポリカチオン（ポリ−Ｌ−リジンもしくはポリ−Ｌ−アルギニン）に、ポリペプチドをコンジュゲートさせることが有用であり得る。
【００７０】
場合によっては、コンジュゲートは、例えば、ポリペプチドの発現及び精製を促進するために作製された組み換え融合タンパク質であってもよい。
【００７１】
コンジュゲーションのための粒子またはポリペプチドの提示
場合によっては、ポリペプチドは、粒子、例えば、ファージ、酵母、ウイルス、ウィロゾーム、または組み換えウイルス様粒子にコンジュゲートされるか、またはその上に提示される。
【００７２】
例えば、１つ以上のポリペプチドがファージ、酵母、またはウイルス粒子に、例えば、粒子の表面にコンジュゲートされてもよい。一実施形態では、ポリペプチドをコードする核酸分子は、ファージ、酵母、またはウイルス粒子に挿入され、例えば、粒子の表面におけるファージ、酵母、またはウイルス中のポリペプチドの発現をもたらす。次いで、ポリペプチドを含有するファージ、酵母、またはウイルス集団は、薬学的に許容される賦形剤を添加することによって、例えば、ワクチンとして単離及び調製され得る。
【００７３】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のポリペプチドは、ウィロゾームまたはウイルス様粒子（ＶＬＰ）にコンジュゲートされる。ウィロゾーム及びＶＬＰは、一般に、ウイルスからの１つ以上のタンパク質を含有し、任意にリン脂質と組み合わされるか、またはそれとともに製剤化される。それらは、一般に、非病原性、非複製であり、一般に、天然ウイルスゲノムのいずれも含有しない。ウイルスタンパク質は、全ウイルスから組み換え技術によって産生または単離され得る。ウィロゾームまたはＶＬＰで使用するのに好適なウイルスタンパク質としては、インフルエンザウイルス（ＨＡまたはＮＡなど）、Ｂ型肝炎ウイルス（コアまたはカプシドタンパク質など）、Ｅ型肝炎ウイルス、麻疹ウイルス、シンドビスウイルス、ロタウイルス、口蹄疫ウイルス、レトロウイルス、ノーウォークウイルス、ヒトパピローマウイルス、ＨＩＶ、ＲＮＡ−ファージ、Ｑβ−ファージ（コートタンパク質など）、ＧＡ−ファージ、ｆｒ−ファージ、ＡＰ２０５ファージ、及びＴｙ（レトロトランスポゾンＴｙタンパク質ｐ１など）由来のタンパク質が挙げられる。ウィロゾームは、例えば、Ｇｌｕｃｋ  ｅｔ  ａｌ．（２００２），Ｖａｃｃｉｎｅ  ２０：Ｂ１０−Ｂ１６でさらに考察され、それは、参照によりその全体が組み込まれる。
【００７４】
ＶＬＰは、例えば、Ｎｉｉｋｕｒａ  ｅｔ  ａｌ．（２００２），Ｖｉｒｏｌｏｇｙ  ２９３：２７３−２８０；Ｌｅｎｚ  ｅｔ  ａｌ．（２００１），Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １６６：５３４６−５３５５；Ｐｉｎｔｏ  ｅｔ  ａｌ．（２００３），Ｊ  Ｉｎｆｅｃｔ  Ｄｉｓ  １８８：３２７−３３８；Ｇｅｒｂｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（２００１），Ｖｉｒａｌ  ７５：４７５２−４７６０；ＷＯ０３／０２４４８０；及びＷＯ０３／０２４４８１でさらに考察され、それらの各々は、参照によりその全体が組み込まれる。
【００７５】
抗真菌剤
本発明で使用され得る抗真菌剤としては、例えば、アゾール（例えば、トリアゾール、例えば、フルコナゾール、アルバコナゾール、エフィナコナゾール、エポキシコナゾール、イサブコナゾール、イトラコナゾール、ポサコナゾール、プロピコナゾール、ラブコナゾール、テルコナゾール、及びボリコナゾール；イミダゾール、例えば、ビホナゾール、ブトコナゾール、クロトリマゾール、エベルコナゾール、エコナゾール、フェンチコナゾール、フルトリマゾール、イソコナゾール、ケトコナゾール、ルリコナゾール、ミコナゾール、オモコナゾール、オキシコナゾール、セルタコナゾール、スルコナゾール、及びチオコナゾール；ならびにチアゾール、例えば、アバファンギン）、ポリエン（例えば、アムホテリシンＢ、カンジシジン、フィリピン、ハマイシン、ナタマイシン、ナイスタチン、及びリモシジン）、アリルアミン（例えば、アモロルフィン、ブテナフィン、ナフチフィン、及びテルビナフィン）、エキノカンジン（例えば、アニデュラファンギン、ビアファンギン（例えば、ＣＤ１０１）、カスポファンギン、及びミカファンギン）、ラノステロールデメチラーゼ阻害剤（例えば、ＶＴ−１１６１）、ならびに安息香酸、シクロピロックスオラミン、エンフマファンギン（例えば、ＳＣＹ−０７８）、５−フルシトシン、グリセオフルビン、ハロプロギン、トルナフテート、アミノカンジン、クロダントイン、クロルフェネシン、ニフロキシム、ウンデシレン酸、及びクリスタルバイオレットが挙げられるが、これらに限定されない他の抗真菌剤、ならびにこれらの薬学的に許容される塩またはエステルを含む、カンジダ症の治療において医療専門家によって標準的に使用されるものが挙げられる。
【００７６】
特に、抗真菌剤は、フルコナゾールである。フルコナゾールは、市販されており、米国でＤＩＦＬＵＣＡＮ（登録商標）という名で販売されている。フルコナゾールの化学名は、２−（２，４−ジフルオロフェニル）−１，３−ビス（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）プロパン−２−オールであり、それは、以下の構造を有する：
【化６】
2019507759.tif 000007
。
フルコナゾールを合成する方法は、米国特許第４，４０４，２１６号及び米国特許第５，７１０，２８０号に記載されている。
【００７７】
患者識別
患者は、臨床環境で広く使用されている標準的な方法を使用して、本発明の方法に従った治療のために識別され得る。これらの方法は、任意に、以下の例示的な方法の１つ以上の態様を含むことができる。
【００７８】
ＶＶＣの診断は、Ｃａｎｄｉｄａに対する陽性の菌類学的結果を含み得る。また、他の感染を除外するために、標準的な試験が行われ得る。例えば、細菌性膣炎（ＢＶ）を除外するために、臭気試験及び膣ｐＨ試験が行われ得る。加えて、ＢＶと関連したクルー細胞を除外するために、かつＴｒｉｃｈｏｍｏｎａｓ  ｖａｇｉｎａｌｉｓによる感染を除外するために、垢検査が行われ得る。ＤＮＡ増幅アッセイを使用して、例えば、市販のシステム（例えば、ＢＤ  ＰｒｏｂｅＴｅｃ（商標）ＥＴ  Ｓｙｓｔｅｍ，ＢＤ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ，Ｓｐａｒｋｓ，ＭＤ）を使用して、試料を分析し、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｔｒａｃｏｍａｔｉｓ及びＮｅｉｓｓｅｒｉａ  ｇｏｎｏｒｒｈｅａを除外することができる。別の例として、Ｃａｎｄｉｄａは、明確に識別することができ、Ｇａｒｄｎｅｒｅｌｌａ  ｖａｇｉｎａｌｉｓ及びＴｒｉｃｈｏｍｏｎａｓ  ｖａｇｉｎａｌｉｓは、例えば、市販のＤＮＡプローブ試験（例えば、ＢＤ  Ａｆｆｉｒｍ（商標）ＶＰＩＩＩ  Ｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  Ｓｙｓｔｅｍ；ＢＤ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ，Ｓｐａｒｋｓ，ＭＤ）を使用して除外することができる。
【００７９】
これらの方法に加えて、最低限の兆候及び症状包括的質問票スコアが利用され得る。１９９８年に出版されたドラフトＦＤＡガイダンスに従って、ＶＶＣの兆候及び症状は、対象及び検査している臨床医の両方によって採点される。ＶＶＣ兆候及び症状質問票の一例は、対象に以下の症状：かゆみ、刺激、及び灼熱痛を、無し（０）、軽度（１）、中等度（２）、または重度（３）として採点するよう求めることを含む。検査している臨床医は、対象を検査し、以下の兆候：紅斑、浮腫、及び擦りむき／裂溝形成を、無し（０）、軽度（１）、中等度（２）、または重度（３）として採点する。
【００８０】
包括的質問票スコアを作成するために、２つのスコアが組み合わされる。「０〜２」の包括的質問票スコアは、ＶＶＣを臨床的に示さない。以下のスコア範囲は、ＶＶＣを臨床的に示している。
３〜６
＝軽度の疾病
７〜１２
＝中等度の疾病
≧１３
＝重度の疾病
【００８１】
あるいは、ＶＶＣまたはＲＶＶＣの診断は、対象によって記入された兆候及び症状包括的質問票スコアのみに基づき行われ得る。
【００８２】
再発性ＶＶＣ（ＲＶＶＣ）は、一般に、前年に４回以上のＶＶＣのエピソードとして定義され、これらのエピソードのうちの少なくとも１つは、培養で実証されている（Ｗｏｒｋｏｗｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ．（２００６），ＭＭＷＲ  Ｒｅｃｏｍｍ．Ｒｅｐ．５５（ＲＲ−１１）：１−９４）。
【００８３】
本発明は、本明細書で定義されるようなＲＶＶＣを有する患者、ならびにＶＶＣを有する患者（例えば、初めてのカンジダ症の事例を有する患者、または前年内に１回または２回の以前のエピソードを有する患者）の治療を含む。
【００８４】
以下にさらに記載されるように、本発明はまた、ＲＶＶＣを発症するリスクがある対象の治療も含む。そのような患者は、治療時に、ＶＶＣと現在診断されていない可能性があるか、及び／または現在ＶＶＣエピソード発現をしていない可能性がある。これらの対象は、例えば、治療時に、３以上のＶＶＣ兆候及び症状包括的質問票スコアを有しない可能性がある。さらに、これらの患者は、ＶＶＣまたは再発性ＶＶＣと以前に診断されている可能性がある。診断は、陽性培養結果を伴って、またはそれを伴わずに行われてもよい。
【００８５】
ＲＶＶＣ治療のために患者を識別する標準的な方法に加えて、本発明は、患者の年齢に基づき患者を識別する方法を提供する。以下にさらに記載されるように、本発明の方法または組成物のいずれかによる治療に好適な患者は、４０歳未満の女性であり得る。
【００８６】
ワクチン組成物
本明細書に記載のワクチン組成物のための製剤は、当業者にとって容易に入手可能である標準的な医薬製剤化学及び方法を使用して調製され得る。例えば、本明細書に記載のポリペプチドまたはコンジュゲートは、１つ以上の薬学的に許容される賦形剤またはビヒクルと組み合わされ得る。補助物質、例えば、湿潤剤または乳化剤、ｐＨ緩衝物質などが賦形剤またはビヒクル中に存在してもよい。これらの賦形剤、ビヒクル、及び補助物質は、一般に、組成物を投与される個体における免疫応答を誘導せず、かつ過度の毒性がなく投与され得る医薬品である。薬学的に許容される賦形剤としては、液体、例えば、水、生理食塩水、ポリエチレングリコール、ヒアルロン酸、グリセロール、及びエタノールが挙げられるが、これらに限定されない。例えば、鉱酸塩、例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、リン酸塩、硫酸塩など、及び有機酸の塩、例えば、酢酸塩、プロピオン酸塩、マロン酸塩、安息香酸塩などの薬学的に許容される塩もまた、その中に含まれ得る。薬学的に許容される賦形剤、ビヒクル、及び補助物質の徹底的な考察は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（Ｍａｃｋ  Ｐｕｂ．Ｃｏ．，Ｎ．Ｊ．１９９１）で入手可能である。
【００８７】
そのような組成物は、ボーラス投与または連続投与に好適な形態で調製、包装、または販売され得る。注射可能な組成物は、アンプルまたは防腐剤を含有する複数回投与容器などの単位投与形態で調製、包装、または販売され得る。組成物としては、懸濁液、溶液、油性もしくは水性ビヒクル中の乳剤、ペースト、及び埋め込み型持続放出または生分解性製剤が挙げられ得るが、これらに限定されない。そのような組成物は、懸濁化剤、安定剤、または分散剤が挙げられるが、これらに限定されない、１つ以上の追加の成分をさらに含んでもよい。非経口投与のための組成物の一実施形態では、再構成組成物の非経口投与の前に、好適なビヒクル（例えば、滅菌発熱性物質除去蒸留水）との再構成のために、活性成分が乾燥（例えば、粉末または顆粒）形態で提供される。組成物は、滅菌の注射可能な水性または油性懸濁液または溶液の形態で調製、包装、または販売され得る。この懸濁液または溶液は、既知の技術に従って製剤化されてもよく、活性成分に加えて、本明細書に記載の分散剤、湿潤剤、または懸濁化剤などの追加の成分を含んでもよい。そのような滅菌の注射可能な製剤は、例えば、水または１，３−ブタンジオールなどの非毒性の非経口で許容される希釈剤または溶媒を使用して調製されてもよい。他の許容される希釈剤及び溶媒としては、リンガー溶液、等張塩化ナトリウム溶液、及び合成モノ−またはジ−グリセリドなどの固定油が挙げられるが、これらに限定されない。
【００８８】
有用である他の非経口投与可能な組成物としては、微結晶形態で、リポソーム調製物中で、または生分解性ポリマー系の構成成分として、活性成分を含む組成物が挙げられる。持続放出または埋め込みのための組成物は、乳剤、イオン交換樹脂、難溶性ポリマー、または難溶性塩などの薬学的に許容されるポリマーまたは疎水性材料を含んでもよい。
【００８９】
あるいは、本明細書に記載のポリペプチド及びコンジュゲートは、微粒子担体にカプセル化されるか、それらに吸着されるか、またはそれらと会合されてもよい。好適な微粒子担体としては、ポリメチルメタクリレートポリマー由来の微粒子担体、ならびにポリ（ラクチド）及びポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）由来のＰＬＧ微粒子が挙げられる。例えば、Ｊｅｆｆｅｒｙ  ｅｔ  ａｌ．（１９９３）  Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．１０：３６２−３６８を参照されたい。他の微粒子系及びポリマー、例えば、ポリリジン、ポリアルギニン、ポリオルニチン、スペルミン、スペルミジン、ならびにこれらの分子のコンジュゲートなどのポリマーもまた使用され得る。
【００９０】
製剤化された組成物は、免疫応答を開始するのに十分である本明細書に記載の１つ以上のポリペプチドまたはコンジュゲートの量を含む。免疫原性量は、当業者によって容易に決定され得る。そのような量は、比較的広い範囲内に入り、日常試験を通して決定され得る。組成物は、約０．１％〜約９９．９％のポリペプチド、コンジュゲート、または抗真菌剤を含有してもよく、当業者に既知の方法を使用して、対象に直接投与され得るか、あるいは対象から得られた細胞にエクスビボで送達され得る。
【００９１】
組成物は、本明細書に記載の異なるポリペプチドまたはコンジュゲートの混合物を含むことができる。例えば、ワクチンは、例えば、配列番号１、２、３、４、もしくは５のアミノ酸、または配列番号１、２、３、４、もしくは５のうちのいずれか１つのアミノ酸配列に対する最大３つの置換（例えば、保存的置換）、欠失、もしくは付加を有するその変異体配列を含有するか、またはそれらからなる、例えば、２、３、４、５、６、７、８個、またはそれ以上の本明細書に記載の異なるポリペプチドまたはコンジュゲートの混合物を含んでもよい。
【００９２】
免疫応答を刺激する物質、例えば、アジュバントが、組成物中、例えば、ワクチン中に含まれてもよい。アジュバントとして使用される化合物の例としては、アルミニウム化合物（例えば、ミョウバン、Ａｌｈｙｄｒｏｇｅｌ（水酸化アルミニウム）、Ａｄｊｕｐｈｏｓ（リン酸アルミニウム））、油、ブロックポリマー、免疫刺激複合体、ビタミン及びミネラル（例えば、ビタミンＥ、ビタミンＡ、セレニウム、及びビタミンＢ１２）、Ｑｕｉｌ  Ａ（サポニン）、細菌及び真菌細胞壁成分（例えば、リポ多糖、リポタンパク質、及び糖タンパク質）、ホルモン、サイトカイン、ならびに共刺激因子が挙げられるが、これらに限定されない。
【００９３】
任意にアジュバント（例えば、水酸化アルミニウム、上記も参照されたい）と組み合わせたＡｌｓ３ポリペプチドは、例えば、緩衝液及び塩を含む組成物中で製剤化され得る。したがって、そのような組成物は、例えば、リン酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム、ヒスチジン、またはコハク酸ナトリウム（２〜２０ｍＭ、例えば、５〜１５ｍＭまたは１０ｍＭ）、ｐＨ  ６．０〜８．０（例えば、ｐＨ  ６．５〜７．５またはｐＨ  ７．０）、ならびに塩化ナトリウム（１００〜３００ｍＭ、例えば、１００〜２００ｍＭまたは１５４ｍＭ）を含むことができる。
【００９４】
本発明で使用され得るワクチン製剤の特定の例は、１０ｍＭのリン酸ナトリウム、ｐＨ  ７．０、及び１５４ｍＭの塩化ナトリウム中で製剤化された、Ａｌｓ３−１を含むＮＤＶ−３である。別の例は、１０ｍＭのリン酸ナトリウム、ｐＨ  ６．５、及び１５４ｍＭの塩化ナトリウム中で製剤化された、Ａｌｓ３−２を含むＮＤＶ３−Ａである。ＮＤＶ−３及びＮＤＶ−３Ａワクチンは、Ａｌｓ３−１（またはＡｌｓ３−２）  ６００μｇ／ｍＬと、水酸化アルミニウムとしてのＡｌ  １．０ｍｇ／ｍＬと、リン酸緩衝生理食塩水とを含有する０．７ｍＬの体積で、２ｍＬガラスバイアルに、任意に充填され得る。注射用針及びシリンジを用いてバイアルから引き出されると、約０．５ｍＬが注射され（例えば、筋肉内経路によって）、３００μｇのＡｌｓ３−１（またはＡｌｓ３−２）の送達用量をもたらし得る。
【００９５】
治療方法
上述のように、本発明の方法は、（ｉ）Ｃａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓのアグルチニン様配列３（Ａｌｓ３）ポリペプチド、及び（ｉｉ）抗真菌剤の協調的投与を伴う。Ａｌｓ３ポリペプチド及び抗真菌剤は、一般に、本明細書の別の箇所に記載されている通りであるが、例として、Ａｌｓ３−１、Ａｌｓ３−２、Ａｌｓ３（１８−３２４）、及び／またはＡｌｓ３（Ｓｅｒ／Ｔｈｒ−ｒｉｃｈ配列）、またはその変異体（任意にそれぞれＮＤＶ−３もしくはＮＤＶ−３Ａの形態であるＡｌｓ３−１もしくはＡｌｓ３−２）、及びフルコナゾールであってもよい。
【００９６】
以下にさらに記載されるように、本発明で使用され得るＡｌｓ３ポリペプチド及び抗真菌剤の協調的投与には、多くの異なるアプローチが存在する。例えば、方法は、Ａｌｓ３ポリペプチド投与の前に抗真菌剤を用いた治療を含んでもよい。このアプローチをとることで、抗真菌剤を用いて急性エピソードを迅速に治療する一方で、再発を予防し、及び／または急性発病に対処する抗真菌剤の作用を補助するために、その後にＡｌｓ３ポリペプチドを用いてワクチン接種することが可能になる。
【００９７】
一実施例では、患者は、ワクチン接種前に１〜４回、例えば、２〜３回抗真菌剤で治療され、抗真菌剤治療が、例えば、ワクチン接種前に１、２、または３週間の時間枠内で行われる。したがって、特定の実施例では、抗真菌剤を用いた治療は、Ａｌｓ３ポリペプチドを用いたワクチン接種が行われる日である０日目に対して、１４、１１、及び８日目に実施され得る。抗真菌剤治療日及び／またはワクチン接種日のうちのいずれも、例えば、上述の日の１または２日前もしくは後に変更され得る。
【００９８】
他の実施例では、抗真菌剤治療は、例えば、上述のスケジュールに従った事前の抗真菌剤治療に加えて（またはその代わりに）、ワクチン接種日に行われる。したがって、１つの特定の実施例では、抗真菌剤治療は、１４、１１、及び８日目（各投与日に対して±１または２日）、ならびにワクチン接種と同一日である０日目（±１または２日）に行われる。
【００９９】
さらなる実施例では、抗真菌剤治療は、例えば、上述のスケジュールに従った事前の抗真菌剤治療に加えて（またはその代わりに）、かつ任意に上述の０日目の抗真菌剤治療に加えて、ワクチン接種日の後に行われる。ワクチン接種日の後の治療は、例えば、ワクチン接種後３〜４週間以内のいかなる時点においても行われ得、例えば、１〜４回の治療の形態をとることができる。一実施例では、ワクチン接種後の治療は、７日目及び／または１４日目（±１または２日）に行われる。したがって、１つの特定の実施例では、抗真菌剤治療は、１４、１１、及び８日目（各投与日に対して±１または２日）に行われ、さらなる抗真菌剤治療及びワクチン接種が０日目（±１または２日）に行われ、続いて７日目及び／または１４日目（±１または２日）になおさらなる抗真菌剤治療を行う。この段落に記載される実施例では、「ワクチン接種」は、単回投与一次ワクチン接種レジメン、または複数回投与一次ワクチン接種レジメンの初期投与である（以下を参照されたい）。
【０１００】
上述のレジメンに従った治療は、当業者が適切であると判断するように変更され得る。例えば、特に急性の場合の例において、患者は、治療の初日に単回用量または２倍用量の抗真菌剤で治療されてもよく、抗真菌剤の毎日の投与は、症状が当業者の判断で十分に消失するまで継続し得る。したがって、例えば、毎日の治療は、２〜６日間、１週間、または１〜２週間継続して、ワクチン接種がその後に続いてもよい（任意に、例えば、本明細書に記載されるような同日のさらなる抗真菌剤治療、及び／またはワクチン接種後のさらなる抗真菌剤治療を含む）。
【０１０１】
上記のＡｌｓ３ポリペプチド及び抗真菌剤の協調的投与に加えて、本発明はまた、ＲＶＶＣのリスクがある対象（例えば、ＶＶＣまたはＲＶＶＣと以前に診断されている対象）に、抗真菌剤を伴わずにＡｌｓ３ポリペプチドの投与を伴う方法を含む。そのような対象は、例えば、治療前の過去１２か月の間に１回、２回、３回、またはそれ以上ＶＶＣに感染している可能性がある。さらに、治療時に、これらの対象は、ＶＶＣと現在診断されていない可能性があるか、及び／または現在ＶＶＣエピソード発現をしていない可能性がある。さらに、治療時に、これらの患者は、その時点で３以上のＶＶＣ兆候及び症状包括的質問票スコアを有しない可能性がある（上記を参照されたい）。
【０１０２】
本発明の方法はまた、本明細書に記載のＡｌｓ３ポリペプチドの、一次ワクチン接種レジメン及び後続のブースター用量の任意の投与も含む。一次ワクチン接種レジメンは、投与される投与回数及び投与間の時間間隔によって定義される。一次ワクチン接種レジメンは、新しくワクチン接種された患者における最適な初期防御を達成するように最適化される。一次ワクチン接種レジメンにおける投与回数は、典型的には１〜４回である。一次ワクチン接種レジメンの完了までの期間は、１〜１２か月である。これらの一次ワクチン接種用量は、例えば、当業者が適切であると判断して、初期ワクチン接種後１〜１１か月目に投与され得る。したがって、様々な実施例では、１回以上の一次ワクチン接種用量が、初期ワクチン接種後２〜１０、３〜９、４〜８、５〜７、または６か月目に投与され得る。ブースター用量が一次ワクチン接種レジメン後に投与されて、長期の防御持続時間を延ばすことができる。ブースター用量は、一次シリーズの初回投与後１〜１０年目に投与され得、典型的には、単回投与である。全ての一次ワクチン接種用量及びブースター用量中に存在するＡｌｓ３ポリペプチドの量は、典型的には同じであるが、異なってもよく、例えば、本明細書の別の箇所に記載されている量であってもよく、または任意に、初期投与量の５〜２０％、例えば、１０％であってもよい。
【０１０３】
本発明はまた、ＶＶＣの再発を検出する方法を特徴とする。再発は、患者自身の症状の観察によって検出され得る。加えて、またはあるいは、再発は、医師によって検出され得、医師による感染の兆候または症状の観察により、患者が再発を経験しているかどうかが判断される。これらの検出方法に加えて、またはその代わりに、Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓに対して陽性である膣真菌培養物が単独で、または患者自身による感染の判断及びＶＶＣの再発が生じているかどうかを判断するための医師による感染の評価のうちの一方もしくは両方と組み合わせて使用されてもよい。
【０１０４】
本明細書に記載の組成物は、様々な既知の経路及び技術を使用して、哺乳動物対象（例えば、ヒトまたは本明細書に記載の他の哺乳動物）に送達され得る。例えば、組成物は、注射可能な溶液、懸濁液、またはエマルションとして提供され得、従来の針及びシリンジを使用して、または液体ジェット注射システムを使用して、筋肉内、皮下、皮内、腔内、非経口、表皮、動脈内、腹腔内、または静脈内注射を介して投与され得る。組成物はまた、例えば経鼻的に、気管内に、経腸的に、経直腸的に、もしくは経膣的に、皮膚もしくは粘膜組織に局所的に投与され得るか、または呼吸器もしくは経肺投与に好適な微粉化スプレーとして提供され得る。他の投与方式としては、経口投与、坐薬、及び能動的または受動的経皮送達技術が挙げられる。
【０１０５】
本明細書に記載の組成物は、投与製剤に適合し、かつ予防的及び／または治療的に有効である量で、対象（例えば、ＶＶＣもしくはＲＶＶＣを有するか、またはそれを発症するリスクがあるヒト患者）に投与され得る。適切な有効量は、比較的広い範囲内に入るが、日常試験により、当業者によって容易に決定され得る。「Ｐｈｙｓｉｃｉａｎ’ｓ  Ｄｅｓｋ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ」及び「Ｇｏｏｄｍａｎ  ａｎｄ  Ｇｉｌｍａｎ’ｓ  Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ」は、必要とされる量を決定する目的で有用である。本明細書に記載の活性抗真菌薬の適切な用量は、調製方法、投与方法、患者の年齢及び体重、症状の重症度、投与時間、投与経路、排泄速度、及び応答性などの要因に応じて異なり得る。本明細書に記載のワクチンの適切な用量は、一次ワクチン接種レジメン、投与経路、アジュバントの使用、ならびに患者の年齢及び免疫能力に応じて異なり得る。当該技術分野における通常の技術を有する医師は、治療のために有効な投与量を容易に決定及び診断する。
【０１０６】
例えば、フルコナゾールの場合、典型的な用量は、経口投与で１５０ｍｇであるが、投与量は、任意に、例えば、５０〜２００ｍｇの範囲であり得、したがって、当業者が適切であると判断して、例えば、５０、１００、１５０、または２００ｍｇであってもよい。フルコナゾール以外の抗真菌剤が投与される場合、抗真菌剤の投与量は、その抗真菌剤に関して日常的に投与される投与量であってもよい。
【０１０７】
Ａｌｓ３ポリペプチドワクチンの場合、単回投与一次ワクチン接種レジメンのための典型的な用量は、筋肉内注射によって投与される３００μｇであるが、投与量は任意に、例えば、６０〜３００μｇの範囲であってもよい。様々な実施例では、単回投与一次ワクチン接種レジメンに関して、投与量は、１００〜３００μｇ、例えば、１５０〜２００μｇ、２００〜２５０μｇ、または２５０〜３００μｇである。複数回投与一次ワクチン接種レジメンに関するさらなる実施例では、投与量は、５〜６０μｇ、例えば、１０〜５０μｇ、２０〜４０μｇ、または３０μｇである。Ａｌｓ３ポリペプチドワクチンは、１．０ｍＬ以下、例えば、０．７５ｍＬ、０．５ｍＬ、または０．２５ｍＬの体積で患者に注射されてもよい（例えば、０．５ｍＬ中３００μｇの投与量）。
【０１０８】
組成物は、当該技術分野において既知の方法に従って、薬学的に許容される担体及び／または賦形剤を使用して、当業者によって単回投与または複数回投与製剤に調製されてもよい。
【０１０９】
キット
本発明はまた、本発明の方法を実施するために使用され得るキットを含む。したがって、本発明のキットは、任意に、例えば、水酸化アルミニウムなどのアジュバントを含むワクチン組成物の形態で、１つ以上のＡｌｓ３ポリペプチド（例えば、Ａｌｓ３−２、Ａｌｓ３−１、Ａｌｓ３（１８−３２４）、及び／またはＡｌｓ３（Ｓｅｒ／Ｔｈｒ−ｒｉｃｈ配列））を含むことができる。いくつかの実施例では、Ａｌｓ３ポリペプチド（例えば、Ａｌｓ３−２、Ａｌｓ３−１、Ａｌｓ３（１８−３２４）、及び／またはＡｌｓ３（Ｓｅｒ／Ｔｈｒ−ｒｉｃｈ配列））は、液体形態で（例えば、水または緩衝塩溶液中、例えば、１０ｍＭのリン酸ナトリウム、ｐＨ  ６．５または７．０、及び１５４ｍＭの塩化ナトリウム、使用され得る緩衝液及び塩の条件の他の例に関しては上記を参照されたい）、容器（例えば、ガラスバイアル）内に存在する。他の実施例では、Ａｌｓ３ポリペプチド（例えば、Ａｌｓ３−２、Ａｌｓ３−１、Ａｌｓ３（１８−３２４）、及び／またはＡｌｓ３（Ｓｅｒ／Ｔｈｒ−ｒｉｃｈ配列））は、凍結乾燥形態で容器（例えば、ガラスバイアル）内に存在する。そのような実施例では、キットはまた、任意に、投与前に凍結乾燥ポリペプチドを液体形態に再構成するための希釈剤（例えば、水または緩衝塩溶液）を含んでもよい。ポリペプチドはまた、本明細書に記載されるように、または当該技術分野において許容されることが既知であるように、別の製剤中に存在してもよい。本キットの組成物中に存在するポリペプチド及び任意にアジュバントの量は、例えば、上記に記載される通りであってもよい。したがって、例えば、キットは、本明細書に記載の用量の投与を促進する量で、Ａｌｓ３ポリペプチド（例えば、Ａｌｓ３−２、Ａｌｓ３−１、Ａｌｓ３（１８−３２４）、及び／またはＡｌｓ３（Ｓｅｒ／Ｔｈｒ−ｒｉｃｈ配列））を含むことができる。
【０１１０】
Ａｌｓ３ポリペプチド（複数可）に加えて、本発明のキットは、１つ以上の抗真菌剤（例えば、フルコナゾール、ケトコナゾール、ブトコナゾール、ミコナゾール、テルコナゾール、チオコナゾール、クロトリマゾール、及びナイスタチン、または上記の他の抗真菌剤のうちのいずれか）を含む。例えば、フルコナゾールの場合、キットは、経口投与のための錠剤中で製剤化される、本明細書に記載の量の１つ以上の用量を含むことができる（例えば、フルコナゾールは、５０、１００、または２００ｍｇの投与量で錠剤中に存在してもよく、錠剤はまた、以下の不活性成分を含んでもよい：微結晶セルロース、無水二塩基性リン酸カルシウム、ポビドン、クロスカルメロースナトリウム、及びステアリン酸マグネシウム）。キットは、単回用量の抗真菌剤（例えば、フルコナゾール）、または２、３、４、５、６、７、８、９、もしくは１０回用量（例えば、少なくとも３回の用量）の抗真菌剤（例えば、フルコナゾール）を含んでもよい。ブトコナゾール、ミコナゾール、テルコナゾール、チオコナゾール、及びクロトリマゾールなどの他の薬剤が、クリームの形態で本発明のキット内に存在し得る一方で、クロトリマゾール、ミコナゾール、及びテルコナゾールは、当該技術分野において既知のように、膣坐薬の形態で存在し得る。これらの薬剤は、単回用量または複数回用量中に存在し得る。抗真菌剤は、ユーザ（例えば、医師）が抗真菌剤を含むパッケージを患者に提供することができるように、キット内の別個の容器で包装されてもよい。
【０１１１】
キット構成要素は、投与を促進する投与形態で提供され得、任意に、例えば、本明細書に記載の方法と一致する患者治療のために必要とされる材料、及び／またはそのための説明書を含むことができる。
【０１１２】
例えば、キットは、Ａｌｓ３ワクチンの投与（例えば、ポイントオブケアの場所における）に関してユーザ（例えば、医師）を指導する、使用説明書を含むことができる。キットはまた、医師に第１の用量の抗真菌剤（例えば、フルコナゾール）を投与するように指導する説明書を含むことができる。キット内のこれらの説明書または別個の説明書の組により、抗真菌剤が後の自宅投与のために患者に与えられ得るように、キット内で別に包装され得る抗真菌剤の投与に関して、ユーザ（例えば、患者）を指導してもよい。例えば、説明書により、ユーザにすぐに第１の用量の抗真菌剤を投与するように、かつ１２時間毎、２４時間毎、３６時間毎、４８時間毎、もしくは７２時間毎、または抗真菌剤が消費されるまで、第２の、かつ後続の用量の抗真菌剤を投与するように指導してもよい。
【０１１３】
例えば、患者が１年以内に１回以下のエピソードを経験している単純性ＶＶＣに関して、症状は軽度または中等度であり、不十分な免疫機能などの有意な宿主要因は存在せず、説明書により、ユーザが単回投与として１５０ｍｇの錠剤を内服するように指導してもよい。患者が１年以内に２回以上のエピソードを経験している合併ＶＶＣに関して、外陰膣炎症の重度の症状が経験される場合、または症状が妊娠、管理不良の糖尿病、もしくは不十分な免疫機能を伴う場合、説明書により、ユーザが３回以上の投与のために７２時間毎に１５０ｍｇの錠剤を内服するように指導してもよい。患者が１年以内に４回以上のエピソードを経験している再発性ＶＶＣに関して、説明書により、合計３回の投与を受けるまで３日毎に１５０ｍｇの錠剤を内服するように指導してもよい。
【０１１４】
キットは、３５°Ｆ〜４６°Ｆ（２°Ｃ〜８°Ｃ）の温度の冷蔵庫内での保存に好適な材料で包装されてもよい。所望の冷蔵庫のワクチン保存平均温度は、約４０°Ｆ（約５°Ｃ）である。これらの範囲外の温度への曝露は、ワクチン効力の低減及びワクチン予防疾患のリスクの増加をもたらす可能性がある。
【実施例】
【０１１５】
以下の実施例は、本発明を例示するよう意図される。これらは、いかなる方法によっても本発明を制限するよう意図されない。
【０１１６】
実施例１：臨床試験
方法
目的
この試験の第１ｂ相部分の目的は、対象となる患者集団（ＲＶＶＣを有する女性）においてＮＤＶ−３Ａワクチン、ＮＤＶ−３ワクチン、及びプラセボを直接比較して、安全性及び免疫原性を評価することであった。安全性及び免疫原性を比較するための試験サイズ（１群当たりＮ＝１５）は、ＮＤＶ３−００１で使用される用量比較設計に基づく（Ｓｃｈｍｉｄｔ  ｅｔ  ａｌ．（２０１２）Ｖａｃｃｉｎｅ  ３０（５２）：７５９４−７６００）。
【０１１７】
この試験の第２ａ相部分の目的は、ＮＤＶ−３Ａワクチンがプラセボと比較して、１８〜５０歳の女性対象におけるＲＶＶＣの再発率を減少させるかどうかを判断することである。有効性を評価するための試験サイズ（１群当たりＮ＝８６）は、プラセボ群における６か月にわたる５０％発病率及び５０％ワクチン有効性に基づく。
【０１１８】
第１ａ相試験設計
第１ａ相試験は、単一試験施設において健康な成人を登録させた二重盲検、プラセボ対照、用量漸増試験（３０及び３００μｇ）であった。ワクチン接種を試験０日目に行い、経過観察評価を試験３、７、１４、２８、９０、及び１８０日目に行った。ワクチン接種者の部分集合が、試験１８０日目に第２の用量のワクチンを投与され、第２の投与の７、１４、及び９０日後に経過観察検診を受けることに再同意した。第２の投与を受ける群におけるより低い参加率（３０μｇの用量に対して１５名中９名、及び３００μｇの用量に対して１５名中１０名）であるのは、主に真夏の個人的なスケジュールとぶつかる第２の投与及び経過観察のタイミングによるものとして報告された。
【０１１９】
第１ｂ／２ａ相試験設計
第１ｂ及び２ａ相試験は、単回用量のＮＤＶ−３Ａワクチン、ＮＤＶ−３ワクチン、またはプラセボの投与後に、再発性外陰部膣カンジダ症を有する対象における外陰部膣カンジダ症の予防の安全性、忍容性、免疫原性、及び有効性を評価するための多施設、二重盲検、無作為化、プラセボ対照試験であった。試験の第２ａ相部分において、ＮＤＶ−３Ａワクチン群及びプラセボ群における、ワクチン接種後１２か月間中の安全性及び忍容性、ＮＤＶ−３Ａワクチン群及びプラセボ群における、１２か月間中の所定の時点における液性及び細胞性免疫応答、ならびにプラセボと対比したＲＶＶＣ対象におけるＶＶＣの再発率を低下させるＮＤＶ−３Ａの臨床的有効性に対する、再発性外陰部膣カンジダ症（ＲＶＶＣ）と診断された患者（１群当たりＮ＝８６）に筋肉内投与された単回用量のＮＤＶ−３Ａまたはプラセボの効果を評価した。
【０１２０】
Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓの膣培養物を、登録時、及び試験中の所定の時点に、ＶＶＣの臨床兆候及び症状の収集と同時に得た。
【０１２１】
ＮＤＶ−３Ａワクチン群、ＮＤＶ−３ワクチン群、及びプラセボ群の液性及び細胞性免疫応答を比較するために、対象の追加の部分集団が含まれていた。安全性及び免疫原性を比較するための試験サイズ（１群当たりＮ＝１５）は、ＮＤＶ３−００１で使用される用量比較設計に基づくものであった。
【０１２２】
選択及び除外基準
対象は試験の性質を知らされ、これに同意し、、スクリーニング前に同意説明文書を読み、見直し、かつそれに署名することが可能である。女性対象は、１８〜５０歳（１８歳及び５０歳を含む）で、ワクチン接種時に許容される形態の避妊の状態である必要があった。対象は、ＶＶＣの急性兆候及び症状（３以上の包括的質問票スコア）、陽性ＫＯＨ塗抹、Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓの陽性膣真菌培養物で確認され得る、ＶＶＣの現在のエピソード（スクリーニング／１４日目において）を有する必要があった。対象は、スクリーニング前の１２か月間に、Ｃａｎｄｉｄａの存在に対して特異的な診断検査試験による陽性結果（例えば、ＤＮＡ／Ａｆｆｉｒｍ、ＰＣＲ、真菌培養物）によって確認された以前のエピソードのうちの少なくとも１つを含む、ＶＶＣの２つ以上のエピソード歴について報告されていなければならなかった。さらなるエピソードは、自己報告され得る。対象に３回の用量の経口フルコナゾールを投与し（スクリーニング期間中３日間おいて、１４、１１、及び８日目に１５０ｍｇの用量が経口投与される）、０日目の３未満の包括的質問票スコアによって明らかなように抗真菌剤への応答に関してスクリーニングした。対象は、治験責任医師（複数可）が判断及び実証して、参加時に臨床的に有意なパパニコロー（Ｐａｐ）塗抹上の異常を示さないか、または過去１２か月からの正常なＰａｐ試験結果を示す必要があった。試験期間中、対象がＶＶＣの再発を経験した場合、対象に３回の用量の経口フルコナゾールを投与した（３日間おいて１５０ｍｇの用量が経口投与される）。
【０１２３】
一般に、対象は、病歴、身体検査（心臓血管系、胃腸系、精神系、呼吸器系、及び中枢神経系の評価が挙げられるが、これらに限定されなくてもよい）、バイタルサイン評価、臨床検査評価において、かつ全身観察によって、治験責任医師（複数可）によって判断及び実証されるように、良好な健康状態でなければならない。
【０１２４】
対象は、対象の試験への参加中に施設によって提供される経口フルコナゾール以外に、ワクチン接種前の４週間に、任意の全身的または局所的膣抗真菌剤療法を受けたことを報告した場合、不適格であった。対象は、ワクチン接種前の４週間以内の菌類学的結果が、膣炎の原因として他の酵母種（例えば、Ｃ．ｇｌａｂｒａｔａ、Ｃ．ｔｒｏｐｉｃａｌｉｓなど）を示した場合、不適格であった。対象は、治験責任医師が判断して、スクリーニングにおいて外陰膣炎の任意の他の活動性感染原因（例えば、細菌性膣炎、Ｔｒｉｃｈｏｍｏｎａｓ  ｖａｇｉｎａｌｉｓ、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｇｏｎｏｒｒｈｅａ、症候性ＨＳＶ−１、症候性ＨＳＶ−２、もしくは症候性ヒトパピローマウイルス）、または臨床応答の解釈を困惑させる他の膣もしくは外陰部の状態を有した場合、不適格であった。対象は、試験の開始時に、子宮頸部上皮内腫瘍（ＣＩＮ）または子宮頸癌のための治療または手術を受けている場合、不適格であった。対象は、治験責任医師が判断して、心臓血管系、呼吸器系、腎臓系、胃腸系、免疫系、血液系、内分泌系、または神経系（複数可）を含む臨床的に有意な障害、臨床応答の解釈を困惑させる真性糖尿病（管理されている、もしくは管理されていない）または精神疾患の診断の存在または既往歴を有した場合、不適格であった。対象は、ニッケル、アルミニウム、もしくは酵母製品に対するアレルギー反応（複数可）もしくは他の深刻な反応、またはフルコナゾールの任意の禁忌の既往歴を有した場合、不適格であった。対象は、食物または薬物アレルギー、ワクチンに対するアナフィラキシー（または他の深刻な反応）を含む、臨床的に有意なアレルギーの既往歴を有した場合、不適格であった。対象は、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、またはヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）の既知の既往歴またはそれによる活動性感染を有した場合、不適格であった。対象は、ワクチン接種前の４週間以内に、及び試験への参加中の任意の他の時点において、任意の治験薬、治験ワクチン、または治験デバイスを投与されているか、または投与される計画があった場合、不適格であった。対象は、ワクチン接種前の３週間以内に任意の他の生ワクチンを投与されているか、または投与される計画があった場合、不適格であった。対象は、薬物またはアルコール乱用の最近の既往歴を有したか、またはその証拠を示した場合、不適格であった。対象は、身体上の別の箇所で使用された局所ステロイド（例えば、ＯＴＣヒドロコルチゾン）を除いて、ワクチン接種前の４週間以内に、全身性または局所性膣コルチコステロイドを含む任意の免疫抑制薬の使用または使用の計画を報告した場合、不適格であった。対象は、ワクチン接種前の３週間以内に、試験ワクチンに対する免疫応答を変化させ得る任意の薬剤または治療（例えば、シクロスポリン、タクロリムス、細胞毒性薬、免疫グロブリン、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  Ｃａｌｍｅｔｔｅ−Ｇｕｅｒｉｎ（ＢＣＧ）、モノクローナル抗体、放射線療法）の使用または使用の計画を報告した場合、不適格であった。対象は、ワクチン接種前の３週間以内に、かつ試験全体を通して、任意の血液製剤を投与された場合、不適格であった。対象は���ワクチン接種前の４週間以内に、血液／血漿を提供したことを報告した場合、不適格であった。対象は、試験の過程にわたって妊娠していたか、または妊娠する意図があった場合、授乳していたか、または治験責任医師の意見によって、試験の参加を妨げる任意の他の医学的及び／またはは社会的（例えば、非順守）理由を有した場合、不適格であった。対象は、自己承認（自己報告）または治験責任医師の意見のいずれかによって、経過観察検診を約束することができなかった場合、及び／または経過観察連絡のための電話へのアクセスが信頼を欠いた場合、不適格であった。
【０１２５】
ワクチン接種前のＶＶＣエピソードの報告は、選択基準で指定された条件を満たさなければならない。Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓの陽性膣真菌培養物に加えて、Ｃａｎｄｉｄａの存在に対して特異的な診断検査試験の例としては、Ａｆｆｉｒｍ（商標）（ＢＤ）、ＮｕＳｗａｂ（登録商標）（ＬａｂＣｏｒｐ）、ＳｕｒｅＳｗａｂ（登録商標）（Ｑｗｅｓｔ）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１２６】
ワクチン及びアジュバント
ＮＤＶ−３ワクチンの活性構成成分は、６Ｈｉｓタグ及びリンカー配列の付加による、Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓアグルチニン様配列３タンパク質（Ａｌｓ３ｐ）のＮ末端領域（４１６個のアミノ酸）の組み換え型である（Ｓｐｅｌｌｂｅｒｇ  ｅｔ  ａｌ．（２００６）Ｊ  Ｉｎｆｅｃｔ．Ｄｉｓ．１９４（２）：２５６−６０）。Ａｌｓ３ｐを、１００ＬスケールでのＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ発現細胞株のバッチ発酵によって産生し、遠心分離によって採取し、２つのクロマトグラフィカラム（ニッケル親和性及び疎水性相互作用樹脂）を使用して精製し、続いてリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）、ｐＨ  ７にダイアフィルトレーションして濃縮しし、濾過した。精製されたＡｌｓ３ｐバルク原薬はインタクトであり、クマシー染色を用いたＳＤＳ−ＰＡＧＥによって９９％純粋であり、ｐＨ  ７ＰＢＳ中Ａｌ  １．０ｍｇ／ｍＬの水酸化アルミニウムと共に製剤化した。２つの最終容器ワクチン臨床ロット：ロット０９３９（Ａｌｓ３ｐ  ６０μｇ／ｍＬ）及びロット０９４０（Ａｌｓ３ｐ  ６００μｇ／ｍＬ）を、この試験のために使用した。臨床ロットを製造後に２〜８℃で保存し、安定性に関して監視した。ｃＧＭＰを使用したバルク原薬及び最終容器ロットの製造を、Ａｌｔｈｅａ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）によって実施した。ＮＤＶ−３ワクチン（３００μｇのＡｌｓ３−１（配列番号３）を含有する０．５ｍＬの用量）を、等張ＰＢＳ中の水酸化アルミニウム（０．５ｍｇのＡｌ）と共に製剤化した。ＮＤＶ−３Ａワクチン（３００μｇのＡｌｓ３−２（配列番号２）を含有する０．５ｍＬの用量）を、等張リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）中の水酸化アルミニウム（０．５ｍｇのＡｌ）と共に製剤化した。対象に、試験ワクチンＮＤＶ−３Ａ、試験ワクチンＮＤＶ−３、または等張ＰＢＳ中に水酸化アルミニウム（０．５ｍｇのＡｌ）を含有するプラセボのいずれかの０．５ｍＬの筋肉内（ＩＭ）注射をした。
【０１２７】
免疫原性分析
ワクチン接種後の指定の日に、対象から血液試料を得た。標準化された手順を使用して、血漿及びＰＢＭＣを単離した。標準化されたＥＬＩＳＡ法によって、抗Ａｌｓ３総ＩｇＧ及び抗Ａｌｓ３  ＩｇＡ１に関して血漿試料を評価した。結果は、希釈−１の単位で表される。ＰＢＭＣをＥＬＩＳｐｏｔ分析によって評価して、ＩＦＮ−γまたはＩＬ−１７Ａを産生するために刺激され得る細胞の部分を決定した（２つの別々のアッセイ）。結果は、１０６細胞のスポット形成単位（ＳＦＵ）の単位で表される。
【０１２８】
統計分析
アッセイ結果の統計分析は、ウィルコクソンの順位和検定を使用したンパラメトリック分析を使用した（Ｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．（１９４７）Ａｎｎ．Ｍａｔｈ．Ｓｔａｔ．１８：５０−６０）。群にわたる傾向の評価は、クラスカル−ウォリス検定を使用した（Ｃｕｚｉｃｋ（１９８５）Ｓｔａｔ．Ｍｅｄ．４：８７−９０）。
【０１２９】
結果
安全性
この試験集団において、ＮＤＶ−３は、１回または２回の投与後、安全であり、概して忍容性良好であった。プラセボ（第１の投与後）ならびにワクチン（第１及び第２の投与後）に対する局所注射部位反応が、表１に要約される。
【表１】
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【０１３０】
第１または第２の投与のいずれかの後に、少なくとも２名の試験対象において生じた全身及び注射部位ＡＥが、表１に示される。最も多い愁訴は、典型的には軽度の注射部位疼痛であり、ワクチン接種後１〜２日間持続し、後遺症なしで２〜３日以内に消散した。第１の投与後、表１に示される全身ＡＥの各々は、４０名の対象のうち２名以上において反映された。第２の投与後、最もよく見られる全身ＡＥは、疲労感及び頭痛であった（それぞれについて、１９名の対象のうち５名（２６％））。全身ＡＥは、通常軽度であり、時に中等度であったが、全てが後遺症なしで数日以内に消散した。２つの用量レベル間で、全身ＡＥの顕著な差はなかった。
【０１３１】
免疫応答
血漿抗Ａｌｓ３ｐ総ＩｇＧ及びＩｇＡ１。ワクチン接種前（０日目）、４０名の対象のうち３６名が、１１４〜２６０８希釈−１に及ぶ、検出可能な既存の抗Ａｌｓ３ｐ総ＩｇＧ力価を呈し、４名の対象が、アッセイの検出限界（ＬＯＤ）未満のＩｇＧ力価を示した（５０希釈−１未満）。ＩｇＡ１力価に関して、４０名の対象のうち３６名が、１０２〜６４７３希釈−１に及ぶ、既存の検出可能な抗Ａｌｓ３ｐ  ＩｇＡ１力価を呈し、４名の対象が、ＬＯＤ未満のＩｇＡ１力価を示した（５０希釈−１未満）。２名の対象が、ワクチン接種前に検出可能な抗Ａｌｓ３ｐ  ＩｇＧまたはＩｇＡ１を有しなかった。
【０１３２】
抗Ａｌｓ３ｐ総ＩｇＧ力価（図１Ａ）及びＩｇＡ１力価（図１Ｂ）の幾何平均は、第１のワクチン投与後に急速に上昇し、ワクチン接種後７日目に実質的な上昇を示し、ワクチン接種後１４日目に最大に達した。７日目以降のＩｇＧ及びＩｇＡ１力価は、３０μｇの用量と対比して３００μｇの用量に関して有意により高く（マン−ホィットニー検定、ｐ＜０．０５）、両方がプラセボレシピエントの力価範囲を超えていた（マン−ホィットニー検定、ｐ＜０．００１）。ワクチン接種後１８０日間の抗体力価は、最大力価からおよそ２倍の減少を示した。
【０１３３】
第２のワクチン投与後に、抗Ａｌｓ３ｐ総ＩｇＧ及びＩｇＡ１の著しい増加が認められ、３０ｇレシピエントの幾何平均のＩｇＧ力価の増加は、３００μｇのレシピエントよりも大きかった。
【０１３４】
ワクチン接種前の力価を超える抗Ａｌｓ３ｐ総ＩｇＧ力価（図２Ａ）及びＩｇＡ１力価（図２Ｂ）の上昇倍数は全て、ワクチン接種後１４日目にピークに達した。７日目から１８０日目のＩｇＧに関する上昇倍数は、３０μｇの用量と対比して３００μｇの用量に対して有意により高く（マン−ホィットニー検定、ｐ＜０．０５）、両方の用量レベルに関して、平均上昇倍数は、ワクチン接種後１８０日目までワクチン接種前の力価を７倍超上回ったままであった。ワクチン接種前の抗体力価と対比して、抗体力価が４倍以上上昇する血清変換の定義に基づき、単回用量のＮＤＶ−３の結果として、対象の１３％及び５３％が７日目までにＩｇＧにおいて血清変換し（３０及び３００μｇの用量のそれぞれ）、１００％が両方の投与群において１４日目までに血清変換した（表２を参照されたい）。同様の結果が、ＩｇＡ１血清変換に関して認められた。３００μｇの投与群に関して、血清変換は、１８０日目までＩｇＧでは１００％のままであったが、ＩｇＡ１では、２８日目以降１００％からの減少があった。３０μｇの投与群に関して、ＩｇＧの血清変換率が２８日目以降１００％から減少した一方で、ＩｇＡ１の血清変換率は、１４日目以降１００％から減少した（表２）。
【表２】
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【０１３５】
試験対象に第１の用量と同一の第２の用量のワクチンを投与したとき、１４日後の抗体力価の増加は、３００μｇの用量を投与された対象に関して比較的穏やかであり、ＩｇＧ及びＩｇＡ１のＧＭＴの増加は、１．８倍及び２．０倍であった。３０μｇの用量を投与された対象に関して、１４日後のＩｇＧ力価のＧＭＴは、４．１倍増加し、ＩｇＡ１のＧＭＴは、２．４倍増加した。いずれの用量レベルにおいても、ＩｇＧ及びＩｇＡ１力価の減少の反応速度論は、第１の投与後に見られるのとほぼ同じ速度を取り戻すように見える（図１）。
【０１３６】
刺激されたＰＢＭＣによる抗Ａｌｓ３  ＩＦＮ−γ及びＩＬ−１７Ａ産生。図３Ａ及び３Ｂは、３０μｇの用量のワクチンを投与された対象に関するＩＦＮ−γ（図３Ａ）及びＩＬ−１７Ａ（図３Ｂ）ＥＬＩＳｐｏｔ結果の概要を提供する。各時点における対象を、結果が１０６細胞当たり２５ＳＦＵの経験的カットオフ値を超えたかどうかに応じて、「非応答者」及び「応答者」に区別した。ＩＦＮ−γ及びＩＬ−１７Ａの両方に関して、最大応答は、ワクチン接種後２８日目に見られた。各アッセイにおける応答者に対する平均応答（１０６細胞当たりのＳＦＵ）は、７〜１８０日目に同様であり、有意により多数の細胞がＩＬ−１７ＡよりもＩＦＮ−γを産生した。
【０１３７】
図４Ａ及び４Ｂは、３００μｇの用量のワクチンを投与された対象に関するＩＦＮ−γ及びＩＬ−１７ＡのＥＬＩＳｐｏｔ結果のそれぞれの概要を提供する。この場合、３００μｇのＡｌｓ３ｐを投与された対象は、３０μｇのＡｌｓ３ｐを投与された対象よりも迅速に、すなわち、７日目までに応答し、より多数の細胞が両方のサイトカインを産生した。しかしながら、応答の低下がより急速であるように見え、両方のサイトカインに対してワクチン接種後９０日目に応答が減少した。この場合も同様に、ＩＦＮ−γ産生細胞は、全ての時点において応答者のＩＬ−１７Ａ細胞の数をはるかに上回った。
【０１３８】
図５Ａ及び５Ｂは、各時点における、プラセボレシピエントを含む各群に対する陽性応答者のパーセントとして、ＩＦＮ−γ及びＩＬ−１７ＡのＥＬＩＳｐｏｔデータのそれぞれを示す。この提示が上記の観察を強化すると同時に、それはまた、ＩＦＮ−γ応答がＩＬ−１７Ａ応答よりも堅固であったことを明確にし、より大きい割合の対象が各時点において応答し、プラセボ応答との差がより大きかった。ワクチン接種後７日目に、３０μｇの投与群に対して３００μｇの投与群において、ＩＦＮ−γ及びＩＬ−１７Ａ応答者の両方の割合のより急速な上昇があった。しかしながら、２８日目までに、３０μｇの投与群は、３００ｇの投与群において見られるよりもわずかに高い応答速度を示した。さらに、１８０日目における第２の用量の投与は、応答者の割合を著しく増加させ、ＩＦＮ−γ応答は、３０μｇの用量によって最も上昇し、ＩＬ−１７Ａ応答は、３００μｇの用量によって最も上昇した。
【０１３９】
図６Ａ及び６Ｂは、血清（図６Ａ）及び膣洗浄液（図６Ｂ）中の抗Ａｌｓ３  ＩｇＧ抗体レベルを示す。図６Ｃ及び６Ｄは、血清（図６Ａ）及び膣洗浄液（図６Ｂ）中の抗Ａｌｓ３  ＩｇＡ１抗体レベルを示す。応答は、ＩｇＧとＩｇＡ１との間で同様であった。ミョウバンを用いた３００μｇが、ミョウバンを用いない同じ用量よりも２〜３倍高い抗体応答を有する一方で、皮内投与された３０μｇの用量は、筋肉内送達された同じ用量（ミョウバンを用いた）と同様の抗体応答を示した。ＡｌＯＨを用いた３００μｇの用量は、ＡｌＯＨを用いない３００μｇの用量よりも有意に高い力価をもたらした（ウィルコクソンの順位和、ｐ＜０．００１）。膣洗浄液ＩｇＧ及びＩｇＡ１力価は、血清力価と相関した。加えて、膣洗浄液において検出された粘膜抗体レベルは、血漿中に見られるものと非常に似たプロファイルを反映する。
【０１４０】
図７Ａ及び７Ｂは、Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓオプソニン作用性死滅（ＯＰＫ）活性アッセイによって評価されるように、抗Ａｌｓ３抗体の機能活性を示す。ＯＰＫ活性は、抗Ａｌｓ３  ＩｇＧ及びＩｇＡ１抗体力価と相関し、抗Ａｌｓ３抗体を誘導するワクチンが、Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓに対する免疫応答を誘導したことを示す。
【０１４１】
図８Ａ及び８Ｂは、Ａｌｓ３抗原によるＴｈ１（図７Ａ）及びＴｈ１７（図７Ｂ）Ｔ細胞刺激を示す。製剤中でＡｌＯＨを用いたか、または用いない、ＩＭ投与された３００μｇの用量に応答する７日目の対象の割合は、ＩＤ投与された３０μｇのＡｌｓ３に関して見られるものよりも有意に高かった。１４日目または９０日目までに、全ての用量及びレジメンに対する応答は、ＩＦＮ−γ応答に関して同様のレベルに達した。ＩＬ−１７Ａ応答に関して、３００μｇの投与群は、７日目に最大になり、１４日目及び９０日目に減少するように見える。ＩＤ投与された３０μｇの用量は、両方のサイトカインに対して低いがより持続的な活性を有し得るように見える。
【０１４２】
図９は、Ａｌｓ３抗原を投与された各個体のワクチン接種後の血清（薄灰色の棒）をワクチン接種前の血清（濃灰色の棒、１００％に正規化）と比較するグラフである。３つの別々のアッセイを実施した。
付着及び侵入アッセイ：生きているＣａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓを、ワクチン血清と混合し、次いで、ヒト内皮細胞でインキュベートする。ワクチン接種後の血清の存在下で、細胞に会合して（付着して）、取り込まれた（侵入した）Ｃａｎｄｉｄａは、ワクチン接種前の付着及び侵入レベルの５９％及び５４％までそれぞれ減少した（ワクチン接種後対ワクチン接種前に関してｐ＜０．０５）。
【０１４３】
細胞傷害アッセイ：このアッセイは、Ｃａｎｄｉｄａによるヒト上皮細胞への細胞傷害を測定し、この場合も同様に、ワクチン接種後及びワクチン接種前の血清による防御レベルを比較した。ワクチン接種後の血清の存在下での細胞傷害は、ワクチン接種前の血清の約５２％であった（ワクチン接種後対ワクチン接種前に対してｐ＜０．０５）。
【０１４４】
膣粘膜の付着及び侵入の遮断は、再発性ＶＶＣを有する患者における膣炎の症状を予防するために特に重要であると考えられている。抗Ａｌｓ３抗体はまた、好中球Ｃａｎｄｉｄａを特異的に認識し取り込む（貪食する）ように、好中球を標的化する能力を呈しており、これは、ワクチン接種後の第１相対象からの血清がＣａｎｄｉｄａを死滅させるように好中球を誘導する能力を測定するインビトロアッセイである、オプソニン作用性死滅（ＯＰＫ）アッセイを使用して評価する。これらのデータは、ＮＤＶ−３ワクチンに応答して作製された抗Ａｌｓ３抗体が、大量に存在しただけではなく、インビトロでＣａｎｄｉｄａに対して機能的に活性でもあったことを実証する。
【０１４５】
図１０は、第１相の３つの治療群間の、ＥＬＩＳＡによって測定された抗Ａｌｓ３抗体の幾何平均の濃度（棒）と比較した、各治療群のワクチン接種後の対象における幾何平均の機能的ＯＰＫ活性（線）を示す。抗体濃度とＯＰＫ活性との間の相関は、ＮＤＶ−３ワクチンに応答して作製された抗Ａｌｓ３抗体が、インビトロでＣａｎｄｉｄａを死滅させるように好中球を誘導することにおいて機能的に活性であったことを実証する。これらのデータは、ＮＤＶ−３ワクチンに応答して作製された抗Ａｌｓ３抗体が、大量に存在しただけではなく、インビトロでＣａｎｄｉｄａに対して機能的に活性でもあったことを実証する。
【０１４６】
第１ｂ相試験を実施して、以下のパラメータにおいて、再発性外陰部膣カンジダ症（ＲＶＶＣ）と診断された患者（１群当たりＮ＝１５）に筋肉内投与された単回用量のＮＤＶ−３Ａ、ＮＤＶ−３、またはプラセボの効果を評価した。第１に、ＮＤＶ−３Ａワクチン群、ＮＤＶ−３ワクチン群、及びプラセボ群におけるワクチン接種後１２か月の期間中の安全性及び忍容性を評価した。図１２Ａ〜１２Ｄは、ＮＤＶ−３ワクチンをＮＤＶ−３Ａワクチンと比較した抗体応答結果を示す。図１１Ａ及び１１Ｂは、血清（図１１Ａ）及び膣洗浄液（図１１Ｂ）中の抗Ａｌｓ３  ＩｇＧ抗体レベルの誘導におけるＮＤＶ−３ワクチンとＮＤＶ−３Ａワクチンとの間の差を示す。図１１Ｃ及び１１Ｄは、血清（図１１Ｃ）及び膣洗浄液（図１１Ｄ）中の抗Ａｌｓ３  ＩｇＡ抗体レベルの誘導におけるＮＤＶ−３ワクチンとＮＤＶ−３Ａワクチンとの間の差を示す。応答は、ＩｇＧとＩｇＡ１との間で同様であった。
【０１４７】
ＮＤＶ−３Ａワクチン群、ＮＤＶ−３ワクチン群、及びプラセボ群における１２か月の期間中の所定の時点における液性及び細胞性免疫応答も評価した。図１３Ａ、１３Ｂは、Ａｌｓ３抗原によるＴｈ１（図１２Ａ）及びＴｈ１７（図１２Ｂ）Ｔ細胞刺激を示す。結果は、ＮＤＶ−３ワクチンとＮＤＶ−３Ａワクチンとの間の比較を示す。ＮＤＶ−３ワクチンへのＩＦＮ−γ応答を示す１４日目の対象の割合は、ＮＤＶ−３Ａワクチンで治療された対象の割合よりも約２０％高かった。両方の群が、９０日目に高い（約６０％の）ＩＦＮ−γ応答速度を保持した。ＩＬ−１７Ａ応答を示す対象の割合は、両方の治療コホートに対してより低く、ＮＤＶ−３Ａ患者は、９０日目にわずかに（約１０％）強化された応答を示した。
【０１４８】
図１３は、第１ａ相試験の健康な志願者と、ＲＶＶＣを有する第２ａ相試験からの血清中の抗Ａｌｓ３  ＩｇＧ抗体力価を比較するグラフである。健康な志願者と第２ａ相患者との間に顕著な差はない。ＲＶＶＣ患者が、ワクチン接種（０日目）の２週間前にＣａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓの検査で陽性と出たため、野生型Ｃａｎｄｉｄａ感染に対する免疫記憶応答の明らかな欠如は、驚くべきことである。しかしながら、組み換えＡｌｓ３がミョウバン上でＩＭ投与された場合、記憶応答が引き起こされる。
【０１４９】
再発試験
ＮＤＶ−３Ａで治療された患者を、ＲＶＶＣの再発に関して監視し、プラセボ対照患者のＲＶＶＣの再発と比較した。最初の再発までの時間、ならびに各時点における再発の累積数を監視した。再発をいくつかの測定基準によって定義し、結果を、対応する再発の定義に関して分析した。いくつかの試験において、再発を患者による症状の観察（「患者症状スコア」）として定義した。他の試験において、再発を医師による感染の兆候または症状の観察（「兆候／症状スコア」）として定義した。他の試験において、再発を、陽性培養試験に加えて医師による感染の兆候または症状の観察（「兆候＋症状＆陽性培養」）として定義した。
【０１５０】
図１４Ａ〜１４Ｃは、ＮＤＶ−３Ａで治療された患者対プラセボ対照における経時的なＲＶＶＣの非再発の割合を示す、カプラン−マイヤー曲線である。全ての年齢の患者間の兆候／症状スコアによって再発を定義する試験において（図１４Ａ）、８８名のうち３０名（３４％）のＮＤＶ−３Ａで治療された患者が、９７日間にわたって疾病の再発を経験した一方で、８２名のうち３８名（４６％）のプラセボ患者が疾病の再発を経験した。カプラン−マイヤー再発曲線間の差の有意な差は、０．１０であり、ワクチン有効性は、３３％であった。
【０１５１】
全ての年齢の患者間の患者症状スコアによって再発を定義する試験において（図１４Ｂ）、８２名のうち５３名（６５％）のプラセボ患者が再発を経験したのと比較して、８８名のうち４４名（５０％）のＮＤＶ−３Ａで治療された患者が、３７４日間にわたって疾病の再発を経験した。カプラン−マイヤー再発曲線間の差の有意な差は、０．０６であり、ワクチン有効性は、３１％であった。患者症状スコアによる再発の定義によって生じるより低い有意値は、結果におけるより大きい統計的信頼性を示し、さらに広く見ると、患者症状スコアが、兆候／症状スコアと比較してより正確な読み取り値であることを示す。
【０１５２】
４０歳未満の患者間の患者症状スコアによって再発を定義する試験において（図１４Ｃ）、６３名のうち４０名（６３％）のプラセボ患者が再発を経験したのと比較して、６８名のうち３２名（４７％）のＮＤＶ−３Ａで治療された患者が、３７４日間にわたって疾病の再発を経験した。カプラン−マイヤー再発曲線間の差の有意な差は、０．０２であり、ワクチン有効性は、４２％であった。これらのデータは、４０歳未満の患者における著しく改善されたワクチン応答を示す。具体的には、ＮＤＶ−３Ａは、最初の再発までの時間を伸ばし（ｐ＜０．０５）、１２か月間無再発のままである患者の割合（「治癒率」）は、プラセボ群における約３０％からＮＤＶ−３Ａ群における約５０％に増加する。プラセボレシピエントは、３か月以内に再発を経験する可能性がプラセボ群よりも２．５倍高い（ｐ＜０．０５）。３か月検診における各スコア測定基準によって測定された最初の再発に対するオッズ比は、以下の表３に示され、各時点における各患者コホートに関する患者症状スコアによって測定された最初の再発に対するオッズ比は、以下の表４に示される。
【表３】
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【表４】
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【０１５３】
図１５Ａ〜１５Ｄは、ＮＤＶ−３Ａで治療された患者対プラセボ対照における再発エピソードの平均累積数を示す、累積再発グラフである。全ての年齢の患者間の兆候／症状スコアによって再発を定義する試験において（図１５Ａ）、ＮＤＶ−３Ａで治療された患者は、０．１５の有意レベルでプラセボ対照と比較して、より少ない累積的再発を経験した。４０歳未満の患者間の兆候／症状スコアによって再発を定義する試験において（図１５Ｂ）、ＮＤＶ−３Ａで治療された患者は、０．０２の有意レベルでプラセボ対照と比較して、より少ない累積的再発を経験した。これらの結果は、ＮＤＶ−３Ａで治療された患者とプラセボ対照との間の非再発傾向を反映する。具体的には、全ての年齢に対する４０歳未満のコホートのより低い有意レベルは、再発が兆候／症状スコアによって測定された場合、４０歳未満の患者が、ワクチンの結果として、より少ない累積的再発を経験する可能性がより高いことを示す。
【０１５４】
全ての年齢の患者間の患者症状スコアによって再発を定義する試験において（図１５Ｃ）、ＮＤＶ−３Ａで治療された患者は、０．２０の有意レベルでプラセボ対照と比較して、より少ない累積的再発を経験した。４０歳未満の患者間の兆候／症状スコアによって再発を定義する試験において（図１５Ｄ）、ＮＤＶ−３Ａで治療された患者は、０．０３の有意レベルでプラセボ対照と比較して、より少ない累積的再発を経験した。１２か月の期間にわたる患者当たりの平均再発数は、ＮＤＶ−３Ａ治療に応答して約３０％低減した。
【０１５５】
ＲＶＶＣの発病は、主に４０歳未満の対象において生じる。我々を代表して実施された試験において、我々は、ＲＶＶＣの発病の最初の年齢において、対象の約９０％（ｎ＝１２７）が４０歳未満であったことを判定した。本明細書に示される試験は、４０歳未満の患者が、最初の再発までの時間及び累積再発数の観点からＮＤＶ−３Ａ治療に対してより応答することを明確に示す。この差が２つの年齢コホート間のワクチンに対する抗体応答の差と対応したかどうかを判断するために、抗体力価を経時的に定量化し、比較した。図１６は、力価比較の結果を示すグラフである。４０歳未満のワクチンレシピエントは、４０歳以上のワクチンレシピエントよりも有意に高い力価応答を示さなかった。
【０１５６】
実施例２：外陰部膣カンジダ症を治療するためのキットの使用
重い白色の凝乳状膣分泌物、膣及び外陰部の灼熱感、ならびに／または外陰部及び周囲皮膚上のかゆみを伴う発疹のうちの１つ以上の症状を示す女性患者は、ポイントオブケアの場所（例えば、医師の診療所または病院）において、外陰部膣カンジダ症（ＶＶＣ）を有すると診断され得る。医師は、使用説明書ならびに２つの容器：ａ）例えば、アジュバント、例えば、水酸化アルミニウムを含むワクチン組成物の形態で、Ａｌｓ３ポリペプチド（例えば、Ａｌｓ３−２、Ａｌｓ３−１、Ａｌｓ３（１８−３２４）、及び／またはＡｌｓ３（Ｓｅｒ／Ｔｈｒ−ｒｉｃｈ配列））を含む容器（例えば、Ａｌｓ３ｐワクチンは、６００μｇ／ｍＬの用量で製剤化されてもよい）、及びｂ）抗真菌剤を含む容器（例えば、フルコナゾール、例えば、経口投与のための錠剤の形態で、かつ例えば、錠剤当たり５０、１００、１５０、または２００ｍｇの用量で）を含むキットを取り出すことができる。医師は、キットから第１の用量の抗真菌剤（例えば、フルコナゾール）を取り出し、それを患者に投与するか、または患者に可能な限り早く第１の用量を自己投与するように指導することができる。続いて、または抗真菌剤の投与前に、医師は、ある体積（例えば、０．５ｍＬ）のＡｌｓ３ワクチンを患者に投与して、約６０〜５００μｇ（例えば、３００μｇ）の総用量のワクチンを提供することができる。キットは、患者が処方箋の薬を出すための薬局を訪れる必要なく、ただちに抗真菌剤療法の過程を開始することを可能にする。これは、患者にとってより便利であり、検診中に初期用量の抗真菌剤及びワクチンを投与され、かつ医療提供者から後続の投与に関する追加の説明を受けるため、より高い順守をもたらすことができる。
【０１５７】
患者が単純性ＶＶＣと診断された場合、医師は、改善に関して状態を監視し、症状が１〜３日以内に改善しない場合に追加の医療ケアを受けるという指導をして患者を帰宅させてもよい。患者が合併ＶＶＣと診断された場合、医師は、説明書及び患者が３回以上の投与のために７２時間毎に１５０ｍｇの錠剤を内服するのに十分な量の抗真菌剤と共に、抗真菌剤を有する容器を患者に提供してもよい。患者が再発性ＶＶＣと診断された場合、医師は、説明書及び患者が合計３回の投与を受けるまで３日毎に１５０ｍｇの錠剤を内服するのに十分な量の抗真菌剤と共に、抗真菌剤を有する容器を患者に提供してもよい。追加の用量が必要に応じてキットに含まれてもよく、または患者は、再処方を含む処方箋を与えられてもよい。
【０１５８】
他の実施形態
上記の明細書で言及された全ての出版物、特許、及び特許出願は、参照により本明細書に組み込まれる。本発明の記載された方法の様々な修正及び変更は、本発明の範囲及び精神から逸脱することなく、当業者に明らかとなるであろう。本発明が特定の実施形態と関連して記載されているが、特許請求の範囲に記載されるような本発明は、そのような特定の実施形態に過度に限定されるべきではないことが理解されるべきである。実際に、当業者に明らかである本発明を実施するための記載された方式の様々な修正は、本発明の範囲内に入るよう意図される。
【０１５９】
他の実施形態は、特許請求の範囲内にある。
【表５】
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【図１Ａ】
2019507759.tif 000013
【図１Ｂ】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図６Ａ】
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【図６Ｂ】
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【図６Ｃ】
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【図６Ｄ】
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【図７Ａ】
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【図７Ｂ】
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【図８Ａ】
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【図８Ｂ】
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【図９】
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【図１０】
2019507759.tif 000032
【図１１Ａ】
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【図１１Ｂ】
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【図１１Ｃ】
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【図１１Ｄ】
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【図１２Ａ】
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【図１２Ｂ】
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【図１３】
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【図１４Ａ】
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【図１４Ｂ】
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【図１４Ｃ】
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【図１５Ａ】
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【図１５Ｂ】
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【図１５Ｃ】
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【図１５Ｄ】
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【図１６】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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