(57)【要約】【課題】本出願は、限局性前立腺癌のための標的焦点治療の方法に関する。【解決手段】  前立腺癌を治療するか、又は前立腺癌のサイズを縮小させることを、それを必要とする対象において行う方法であって、ＰＲＸ３０２の１回の用量を、高密度焦点式超音波のガイドによって、事前に特定された臨床的に重要な病変部中に、又はその周辺に直接送達させることを含むことを特徴とする、方法。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
前立腺癌を治療するか、又は前立腺癌のサイズを縮小させることを、それを必要とする対象において行う方法であって、ＰＲＸ３０２の１回の用量を、高密度焦点式超音波のガイドによって、事前に特定された臨床的に重要な病変部中に、又はその周辺に直接送達させることを含むことを特徴とする、方法。
【請求項２】
前立腺癌を治療するか、又は前立腺癌のサイズを縮小させることを、それを必要とする対象において行う方法であって、ＰＲＸ３０２の１回以上の用量を、高密度焦点式超音波のガイドによって、事前に特定された臨床的に重要な病変部中に、又はその周辺に直接送達させることを含むことを特徴とする、方法。
【請求項３】
請求項１に記載の方法において、前記ＰＲＸ３０２の１回の用量が、腫瘍内及び／又は前立腺内に投与されることを特徴とする、方法。
【請求項４】
請求項１に記載の方法において、前記ＰＲＸ３０２の１回の用量が、腫瘍１ｇ当たり２００〜１，０００μｇになり得ることを特徴とする、方法。
【請求項５】
請求項１に記載の方法において、前記ＰＲＸ３０２の１回の用量が、腫瘍１ｇ当たり１，０００μｇ超であることを特徴とする、方法。
【請求項６】
請求項１に記載の方法において、前記ＰＲＸ３０２の１回の用量が、２０μｇ／ｍＬ〜１７０μｇ／ｍＬの範囲であることを特徴とする、方法。
【請求項７】
請求項１に記載の方法において、前記ＰＲＸ３０２の１回の用量が、１７０μｇ／ｍＬ超であることを特徴とする、方法。
【請求項８】
請求項１に記載の方法において、前記ＰＲＸ３０２の１回の用量が、１ｍＬ以上のアリコートで送達されることを特徴とする、方法。
【請求項９】
請求項１に記載の方法において、前記ＰＲＸ３０２の１回の用量が、前立腺１ｇ当たり最大で５μｇであることを特徴とする、方法。
【請求項１０】
請求項１に記載の方法において、前記ＰＲＸ３０２の１回の用量が、前立腺１ｇ当たり最大で１２μｇであることを特徴とする、方法。
【請求項１１】
請求項１に記載の方法において、前記ＰＲＸ３０２の１回の用量が、前立腺１ｇ当たり１２μｇ超であることを特徴とする、方法。
【請求項１２】
請求項１に記載の方法において、前記臨床的に重要な腫瘍が、限局性前立腺腫瘍であることを特徴とする、方法。
【請求項１３】
請求項１に記載の方法において、前記臨床的に重要な腫瘍が、転移性前立腺腫瘍であることを特徴とする、方法。
【請求項１４】
請求項１に記載の方法において、前記ＰＲＸ３０２の１回の投与が、前立腺腫瘍の容積の縮小をもたらすことを特徴とする、方法。
【請求項１５】
請求項１に記載の方法において、前記ＰＲＸ３０２の１回の投与が、転移性前立腺腫瘍の縮小をもたらすことを特徴とする、方法。
【請求項１６】
請求項１に記載の方法において、前記ＰＲＸ３０２の１回の投与が、前記転移性前立腺腫瘍の治療をもたらすことを特徴とする、方法。
【請求項１７】
請求項１に記載の方法において、前記ＰＲＸ３０２の１回の投与が、グリーソンパターンの低減をもたらすことを特徴とする、方法。
【請求項１８】
請求項１に記載の方法において、前記ＰＲＸ３０２の１回の投与が、最大癌コア長又はグリーソンパターンの低減をもたらすことを特徴とする、方法。
【請求項１９】
請求項１に記載の方法において、前記高密度焦点式超音波のガイドが、経直腸であることを特徴とする、方法。
【請求項２０】
請求項１に記載の方法において、前記ＰＲＸ３０２の１回の投与が、完全な腫瘍アブレーションをもたらすことを特徴とする、方法。
【請求項２１】
請求項２０に記載の方法において、腫瘍アブレーションが、再生検で確認されることを特徴とする、方法。
【請求項２２】
請求項２０に記載の方法において、腫瘍アブレーションが、ｍｐＭＲＩで確認されることを特徴とする、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、２０１６年１月２７日に出願された米国仮特許出願第６２／２８７，８７３号の利益を主張するものであり、その開示は、その全体が本明細書に記載されているように参照により本明細書に組み込まれる。
【０００２】
開示の分野
本出願は、前立腺癌の治療のためのＰＲＸ３０２の標的化前立腺内投与のための方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
開示の背景
前立腺癌は、男性の２番目に多い悪性腫瘍である。前立腺癌と診断される男性の人数増加は、平均余命の延長と共に前立腺特異的抗原（ＰＳＡ）の血液検査を用いる公式及び非公式スクリーニングの現在のやり方の結果である。
【０００４】
しかしながら、ＰＳＡスクリーニング時代の開始以来、低容積及び低リスクの疾患の検出が増加する状態で、疾患プロファイルがシフトしている。その結果、過剰処置、及び治療に関連する有害性のリスクが深刻である。更には中間型疾患の治療の有益性も曖昧であることが示されている。例えば、少なくとも１０年の平均余命を有する男性は、今のところ、彼らの寿命を延ばすことを期待して、根治治療を提供されている。
【０００５】
男性が療法から恩恵を受けることに関する知識も進化している。これは、癌の如何なる負担が臨床的に重要で、かつ治療を必要とするか、及び疾患の如何なる閾値が経時的に監視され得るかに本質的につながっている。限局性前立腺癌を有する男性が直面する現在の選択に関する問題のうちの１つは、管理のための選択肢がケアの両極端にあることである。一方の極端には、根治治療があり、これは、重要な治療に関連する病的状態を有する。現在、男性は、根治治療から以下の有害性の割合を予期し得る：３０〜９０％の勃起不全、５〜２０％の失禁、及び５〜２０％の直腸有害性。ケアの他方の極端には、積極的サーベイランスがある。これは、優れた中期的生存を立証している。しかしながら、臨床医及び患者は、臨床経過観察の負担、ＰＳＡ血液検査並びに生検法（それに関連するリスクを伴う）、及び治療的処置が求められるまでの未処置の疾患による生活の潜在的な心理的病的状態に関する懸念を提起している。癌の診断の結果から生じる複雑な心理的影響は、積極的サーベイランス中の生化学的又は病理組織学的進行がないにもかかわらず、かなりの割合の男性が治療を受けることを選択することによって裏付けられている（ほとんどのシリーズで約１０％）。
【０００６】
病変部への標的化生検と結合したマルチパラメトリック磁気共鳴撮像（ｍｐＭＲＩ）の使用の増加は、より正確なリスク階層化が今や可能になりつつあり、臨床的に重要な疾患を有する男性が、良好に特定されることを意味する。臨床的に重要な疾患は、容積及びグリーソン（Ｇｌｅａｓｏｎ）グレードの両方によって定義することができる。前者では、グリーソンスコア６の病変部がおよそ＞５ｍｍの最大癌コア長（ＭＣＣＬ）であるべきことが今では広く認められている。７以上のいかなるグリーソンスコアも、ＭＣＣＬに無関係に、重要であると一般に認められている。このようなパラダイムシフトは、現在、男性が情報に基づいて治療及び積極的サーベイランスを決定することを可能にしている。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
開示の概要
前立腺癌の治療へのいくつかの代替的アプローチが提案されている。その１つは、限局性疾患を、それが前立腺内になお存在し、したがって根治的局所療法によって潜在的に治療可能である間に積極的にスクリーニングするために方法が開発されている。限局性癌は、中分化型で、かつより小さい容積であることが多い。過去数十年の間に、限局性前立腺癌の外科的及び放射線療法的管理に対して改善が加えられている。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
対象の前立腺癌細胞を、ＰＲＸ３０２の１回の投与と接触させることを含む、対象において前立腺癌を治療するための方法が、本明細書に開示される。
【０００９】
対象の前立腺癌細胞を、ＰＲＸ３０２の１回以上の投与と接触させることを含む、対象において前立腺癌を治療するための方法が、本明細書に開示される。
【００１０】
本明細書に記載の方法において、ＰＲＸ３０２の１回の投与は、対象の事前に特定された、臨床的に重要な前立腺腫瘍の中に、及びその周囲に直接行われる。
【００１１】
本明細書に記載の方法において、ＰＲＸ３０２の１回の投与は、腫瘍内及び／又は前立腺内で行われる。
【００１２】
本明細書に記載の方法において、臨床的に重要な腫瘍は、限局性前立腺腫瘍である。
【００１３】
本明細書に記載の方法において、臨床的に重要な腫瘍は、転移性前立腺腫瘍である。
【００１４】
本明細書に記載の方法において、ＰＲＸ３０２の１回の投与は、前立腺１ｇ当たり最大で５μｇである。
【００１５】
本明細書に記載の方法において、ＰＲＸ３０２の１回の投与は、前立腺１ｇ当たり最大で１２μｇである。
【００１６】
本明細書に記載の方法において、ＰＲＸ３０２の１回の投与は、前立腺１ｇ当たり１２μｇ超である。
【００１７】
本明細書に記載の方法において、ＰＲＸ３０２の１回の投与は、腫瘍１ｇ当たり２００〜１，０００μｇである。
【００１８】
本明細書に記載の方法において、ＰＲＸ３０２の１回の投与は、腫瘍１ｇ当たり１，０００μｇ超である。
【００１９】
本明細書に記載の方法において、ＰＲＸ３０２の濃度は、２０μｇ／ｍＬ〜１７０μｇ／ｍＬの範囲である。
【００２０】
本明細書に記載の方法において、ＰＲＸ３０２の濃度は、１７０μｇ／ｍＬ超である。
【００２１】
本明細書に記載の方法において、ＰＲＸ３０２の１回の投与は、前立腺腫瘍の容積の縮小をもたらす。
【００２２】
本明細書に記載の方法において、ＰＲＸ３０２の１回の投与は、転移性前立腺腫瘍の縮小をもたらす。
【００２３】
本明細書に記載の方法において、ＰＲＸ３０２の１回の投与は、転移性前立腺腫瘍の治療をもたらす。
【００２４】
本明細書に記載の方法において、ＰＲＸ３０２の１回の投与は、グリーソンパターンの低減をもたらす。
【００２５】
本明細書に記載の方法において、ＰＲＸ３０２の１回の投与は、最大癌コア長又はグリーソンパターンの低減をもたらす。
【００２６】
本明細書に記載の方法において、ＰＲＸ３０２の１回の投与は、完全な腫瘍アブレーション、又はＭＣＣＬ若しくはグリーソングレードの低減として説明され得る、臨床的に重要なものから臨床的に重要でないものまでのダウングレードをもたらす。
【００２７】
本明細書に記載の方法において、腫瘍アブレーションは、再生検で確認される。
【００２８】
本明細書に記載の方法において、腫瘍アブレーションは、ｍｐＭＲＩで確認される。
【図面の簡単な説明】
【００２９】
【図１Ａ】≧０．５ｍＬの容積及び優勢なグリーソンパターン４の存在を有する病変部を表す。
【図１Ｂ】≧０．２ｍＬの容積を有する病変部及びグリーソンパターン４の任意の病変部を表す。
【図１Ｃ】非常に低いリスクの癌に一致する（及び緩徐に進行する上皮性病変部（ｉｎｄｏｌｅｎｔ  ｌｅｓｉｏｎｓ  ｏｆ  ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ  ｏｒｉｇｉｎ）、若しくは『ＩＤＬＥ』病変部の可能性がある）。ＴＣＣＬ：全癌コア長。ＭＣＣＬ：最大癌コア長。
【発明を実施するための形態】
【００３０】
開示における実施形態の詳細な説明
略語及び用語
以下の用語及び方法の説明は、本開示を十分に説明するために、かつ本開示の実施に際して当業者を導くために提供されている。本明細書及び添付の請求項で使用される場合、単数形「ａ」又は「ａｎ」又は「ｔｈｅ」は、文脈上別段の明確な指示がない限り、複数の指示対象を含む。
【００３１】
例外が特記されない限り、本明細書で使用される全ての技術的及び科学的用語は、本開示が属する技術分野における当業者によって一般的に理解されているものと同じ意味を有する。
【００３２】
一実施形態では、増強させるとは、あるものの品質、量、又は強さを改善することである。一実施形態では、療法は、対象が腫瘍抑制においてより有効であるならば、対象において前立腺癌などの腫瘍を縮小させるための対象の能力を増強させる。他の実施形態では、療法は、薬剤が腫瘍抑制においてより有効であるならば、対象において前立腺癌などの腫瘍を縮小させるための薬剤の能力を増強させる。このような増強は、本明細書に開示される方法を用いて、例えば、腫瘍容積の減少を決定することによって測定することができる。
【００３３】
治療有効量は、所望の生物学的効果を達成するのに十分な量、例えば、前立腺癌のサイズ（すなわち、容積）、重症度／臨床的重要性／グリーソングレード、副作用及び／又は転移性を減少させるのに有効である量である。一例では、これは、腫瘍のサイズなどの、前立腺癌の症状又は作用を減少させるのに十分な量である。特定な例では、これは、前立腺腫瘍のサイズ及び／又は前立腺癌転移を、少なくとも３０％、４０％、５０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９９％、又は更には１００％（腫瘍の完全な消去）まで減少させるのに有効な量である。
【００３４】
特定な実施形態では、これは、ＰＲＸ３０２が投与される対象において、例えば１つ以上の前立腺癌を有する対象においてなど、前立腺腫瘍及び／又はＰＲＸ３０２によって溶解される前立腺癌細胞の量を減少させるのに有効なＰＲＸ３０２（トプサリシン（ｔｏｐｓａｌｙｓｉｎ））の量である。他の実施形態では、これは、前立腺癌の転移のリスクを減少させるのに（すなわち、悪性度グリーソングレードを低減させることによる）有効な、ＰＲＸ３０２の量、及び／又はＰＲＸ３０２によって溶解される前立腺癌細胞の量である。
【００３５】
一実施形態では、治療有効量はまた、処置される対象において所望の効果を達成するのに十分な、ＰＲＸ３０２の分量及び／又はＰＲＸ３０２によって溶解される前立腺癌細胞の量も含む。例えば、これらは、癌、例えば前立腺癌などの疾患の兆候及び／又は症状を改善するために必要とされる量とすることができる。
【００３６】
別の実施形態では、ＰＲＸ３０２の有効量及び／又はＰＲＸ３０２によって前立腺癌が溶解されるための有効量は、治療の過程の間に、一回量で、又は数回の量で、例えば毎日、投与することができる。しかしながら、有効量は、処置される対象、処置される病態の重症度及び種類、及び投与の方法に依存するであろう。例えば、一実施形態では、治療有効量のＰＲＸ３０２は、少なくとも２０ｇの重量があり、０．１〜０．８ｇのサイズの腫瘍を有する前立腺に投与することができ、投与される全薬用量は、前立腺１ｇ当たり最大で５μｇ、腫瘍１ｇ当たり最大で１，０００μｇであった。別の実施形態では、ＰＲＸ３０２の治療有効量は、腫瘍のサイズ、全前立腺容積（ＰＶ）、及び前立腺１ｇ当たり１２μｇの上限用量に依存して、腫瘍１ｇ当たり２００〜１，０００μｇであるだろう。更に別の実施形態では、ＰＲＸ３０２の治療有効量は、腫瘍１ｇ当たり１，０００μｇ超である。
【００３７】
治療有効用量は、一例では、病的状態の軽減をもたらすか、又は病態によって引き起こされる兆候若しくは症状を緩和することができる、ＰＲＸ３０２が投与される対象において、前立腺癌などの腫瘍細胞容積を減少させるのに十分な、ＰＲＸ３０２の用量である。特定の例では、これは、前立腺癌の転移を減少させるのに十分なＰＲＸ３０２の用量である。
【００３８】
更に別の例では、これは、病的状態の軽減をもたらすか、又は病態によって引き起こされる兆候若しくは症状を緩和することができる、ＰＲＸ３０２が投与される対象において、前立腺癌などの腫瘍細胞容積を減少させるのに十分な、細胞のＰＲＸ３０２との接触の結果生じた細胞溶解物の用量である。特定の例では、これは、前立腺癌の転移を減少させるのに十分な、細胞のＰＲＸ３０２との接触の結果生じた細胞溶解物の用量である。
【００３９】
腫瘍は、新生物である。これには、固形腫瘍が挙げられるが、これに限定されない。
【００４０】
肉腫及び癌腫などの固形腫瘍の例には、線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、骨原性肉腫及び他の肉腫、滑膜腫、中皮腫、ユーイング腫、平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、結腸癌、リンパ系腫瘍、膵臓癌、乳癌、肺癌、卵巣癌、前立腺癌、腎臓癌、甲状腺癌、結腸直腸癌、膀胱癌、胃癌、肝細胞癌、扁平上皮癌、基底細胞癌、腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌、乳頭癌、乳頭腺癌、髄様癌、気管支原性癌、腎細胞癌、原発性肝細胞癌、胆管癌、絨毛癌、ウィルムス腫瘍、子宮頸癌、精巣腫瘍、膀胱癌、及びＣＮＳ腫瘍（神経膠腫、星細胞腫、髄芽腫、頭蓋咽頭腫、上衣腫、松果体腫、血管芽腫、聴神経腫、乏突起膠腫、髄膜腫、黒色腫、神経芽細胞腫、及び網膜芽細胞腫など）が挙げられるが、これらに限定されない。
【００４１】
特定の具体例の開示は、他の実施形態を除外することを意味するものではない。加えて、本明細書に記載されるいかなる治療も、他の治療を必ずしも排除するものではなく、他の生物活性剤又は治療法と併用することができる。
【００４２】
理論的根拠
前立腺癌の治療のための選択的標的化組織温存アプローチは、周辺の正常な前立腺組織を温存しつつ、癌の領域にぴったりと一致する治療を可能にするであろう。この概念は、「焦点治療（ｆｏｃａｌ  ｔｈｅｒａｐｙ）」と呼ばれており、周辺の解剖学的構造に対する治療による損傷を低減し、その結果、全体腺療法が提供する癌管理の有益性を維持しながら、ゆっくりとした速度の泌尿生殖器の副作用に潜在的につながることを目的として組織を温存するアプローチを提供する治療プロトコールの範囲を包含する。限局性前立腺癌の治療としての焦点治療の潜在的な役割に対する関心が高まってきている。
【００４３】
前立腺癌の治療でのこのような提案された変化は、臓器温存が機能温存において必須であるほとんど全ての他の（乳房、腎臓、肝臓、膵臓、甲状腺）固形臓器癌の管理を反映している。これは、他の（結腸直腸、膀胱、胃、肺）中空臓器癌においても行われる。前立腺の選択的治療を達成するために、前立腺癌の臨床的に重要な領域を正確に限局化することができる技術が必要とされる。マルチパラメトリックＭＲＩ及び経会陰並びに／又は経直腸生検（標的化及び／又はマッピング）は、この必要条件に最適な属性を厳密に一致させる。組織の離散領域を処置することができる技術も必要とされる。いくつかの切除治療、例えば、ＨＩＦＵ、冷凍手術、光線力学療法、小線源療法並びに高周波アブレーション、及び熱レーザーが、臨床診療及び研究ですでに利用可能である。
【００４４】
全ての療法は、焦点アブレーションが可能な技術としてのそれらの使用に関して開発の様々な段階にある。ごく最近、放射線療法技術、例えば、焦点治療の場での低線量率放射性シード小線源療法（ｌｏｗ  ｄｏｓｅ  ｒａｔｅ  ｒａｄｉｏａｃｔｉｖｅ  ｓｅｅｄ  ｂｒａｃｈｙｔｈｅｒａｐｙ）の評価についての研究が開始している。初期に公開された研究データは、泌尿生殖器機能の温存と共に初期腫瘍学的成果を得るための有望な結果を立証している。平均すると、凍結手術及びＨＩＦＵ焦点アブレーションにおける研究は、５％より低い失禁率及び５〜１０％の勃起不全率を示している。
【００４５】
疾患の検出及び限局化
有効な選択的標的化焦点アブレーションは、周辺の正常な組織に対する処置を最小限にとどめる、疾患の正確な限局化及び標的化に依存する。生検及び撮像技術は、ｍｐＭＲＩ及び標的化経会陰並びに／又は経直腸生検である。根治的前立腺摘出術標本に基づいて検証された分類システムを、コンピュータシミュレーション作業を用いて、経会陰テンプレート生検のために開発した（図１を参照）。これは、テンプレート生検について理想的な設定を表しているが、この分類システムは全て、陽性の生検コア内の癌のどれほどの最小量が、重要な病変部及び重要でない病変部を正確に表すかを定義している。
【００４６】
グリーソンパターン３＋３を有する男性において、本発明者らは、選択基準を満たすためには上回らねばならない最大癌コア長の下限値を規定した。この選択のための下限値を、５ｍｍの最大癌コア長に設定した。
【００４７】
グリーソンパターン７（３＋４又は４＋３）を有する男性は、臨床的に重要な疾患を有すると見なされる。
【００４８】
ＰＲＸ３０２：構造及び作用機序
新規な画期的医薬品の治験薬孔形成タンパク質であるＰＲＸ３０２（トプサリシン）は、中等度から重症の良性前立腺肥大症（ＢＰＨ）を有する男性における下部尿路症状（ＬＵＴＳ）の治療のために、及び前立腺癌を有する男性の治療のために、現在開発中である。ＰＲＸ３０２は、前立腺内直接注入を介して投与され、一部には日常的な前立腺生検との類似性のために、複雑な器具又は実質的な追加の臨床医の研修も必要としない。
【００４９】
ＰＲＸ３０２（５３ｋＤ、４７６個のアミノ酸）は、アエロモナス・サルモニシダ（Ａｅｒｏｍｏｎａｓ  ｓａｌｍｏｎｉｃｉｄａ）発現系を用いた、未変性の細菌孔形成タンパク質（プロアエロリシン）の遺伝子改変された組換えバージョンである。プロアエロリシンを活性アエロリシンに変換するための未変性のフリン認識及び活性化配列が、ＰＳＡによって認識かつ活性化されるペプチド配列で置き換えられている。ＰＳＡは、上皮前立腺細胞によって産生されるセリンプロテアーゼであり、前立腺、正常な精液、及び前立腺癌細胞の周辺の細胞外液中では活性であるが、血液循環中に漏れ出すいかなるＰＳＡも、豊富な血清プロテアーゼ阻害物質との共有結合複合体の形成を通して不活性化される。
【００５０】
ＰＲＸ３０２のＰＳＡによる活性化は、ＰＲＸ３０２の前立腺細胞の表面上で豊富に発現されるグリコホスファチジル−イノシトール（ＧＰＩ）固着タンパク質への急速な結合の後に発生する。ＰＳＡ開裂によるＰＲＸ３０２のＣ末端阻害ペプチドの放出は、エアロリシンタンパク質における構造変化をもたらし、その結果、オリゴマー化及び形質膜への急速かつ不可逆的な組み込みを引き起こす。結果として生じたアエロリシン七量体の孔は、細胞膜にまで至り、イオン漏出、細胞膨潤、膜完全性の急速な低下、及びその後の細胞死をもたらす。
【実施例】
【００５１】
実施例
実施例１
マルチパラメトリックＭＲＩ及び経会陰生検による疾患の同定
マルチパラメトリックＭＲＩ（ｍｐＭＲＩ）は、焦点アブレーションを受けることができる、組織学的に証明された、臨床的に重要な病変部の存在が特定されことになる非侵襲的な検査であるだろう。これは、説明への参加を招聘される以前にすでに実施されていることもあるだろう。しかしながら、ｍｐＭＲＩが本試験において計画された投与の６ヶ月より以前に取得されたものであるならば、追加のｍｐＭＲＩがスクリーニング時に取得されるであろう。
【００５２】
処置前及び全ての処置後の撮像は、１．５テスラ又は３テスラスキャナのいずれかを用いて実施されるであろう。男性は、試験全体を通して同じ磁界の強度で走査された。Ｔ１並びにＴ２強調ターボスピンエコー画像及びダイナミックポストガドリニウム容積取得の完全なプロトコールを、ＰＲＸ３０２の効果の処置前診断及び計画的スキャンと処置後の評価との両方に使用するであろう。
【００５３】
実施例２
疾患の限局化：経会陰前立腺生検
本試験の参加の招聘の前に、初期経会陰前立腺生検がすでに実施されていることがあり、本試験の選択の適格性を示すであろう。経会陰又は経直腸標的生検は、ｍｐＭＲＩで認められた病変部と一致する必要があるだろう。
【００５４】
イメージング表現型に基づいて注入による病変部の標的化をより正確に促進するために、ＰＲＸ３０２の注入中に、画像レジストレーションを使用して、ｍｐＭＲＩ画像を超音波画像に融合させるであろう。
【００５５】
実施例３
患者の試験薬治療
ＰＲＸ３０２（トプサリシン）は、酵素的に活性なＰＳＡのみに高度に特異的であるアミノ酸配列によって置き換えられたプロアエロリシン分子の未変性フリンプロテアーゼ活性化部位を有する、治験薬の遺伝子改変された孔形成タンパク質である。ＰＲＸ３０２は、酵素的に活性なＰＳＡの不在下で不活性のままであり、前立腺細胞から遠隔にあるＰＳＡ、例えば体循環中のＰＳＡによって活性化されない。活性化後に、ＰＲＸ３０２は、自発的に七量体にオリゴマー化し、この七量体は細胞膜を通して不可逆的に組み込まれ、細胞死をもたらす。
【００５６】
試験薬を、３００μｇ／ｍＬの濃度の水溶液中のＰＲＸ３０２製剤からなる、０．５ｍＬの凍結した（−２０±５℃）充填物を含む、使い捨ての２ｍＬバイアルとして供給した。
【００５７】
試験薬調製用の希釈剤は、冷蔵した（５±３℃）２０ｍＬバイアル中に２０ｍＬで提供された、リン酸緩衝生理食塩水中の組換えヒト血清アルブミン（ｒＨＳＡ）２重量％／体積％（０．０２ｇ／ｍＬ）である。
【００５８】
実施例４
試験デザインＩ
組織学的に証明された、臨床的に重要な、限局化した低リスクから中間リスクの前立腺癌を有する１８人の男性を選択した。これら男性は全て、少なくとも４０歳の年齢であり、少なくとも１０年の平均余命を有する。血清ＰＳＡレベルは、１５ｎｇ／ｍＬ以下である。患者は、ＰＲＸ３０２経会陰注入によってアクセス可能である、臨床的に重要な腫瘍／ｍｐＭＲＩで可視の病変部を有する。患者は、７の最大グリーソンスコアを伴う組織学的に証明された前立腺癌を有する。グリーソン合計スコアが６である場合、ＭＣＣＬは５ｍｍを超えねばならない。
【００５９】
以前に取得された患者については、ＰＲＸ３０２の事前に特定され組織学的に証明された、臨床的に重要な病変部への注入を容易にするために、ｍｐＭＲＩ画像を、融合ソフトウェアを用いてリアルタイム３Ｄ超音波画像にマッピングした。
【００６０】
本試験に選択された適格な男性は、全身麻酔下で、２０ｕｇ／ｍＬのＰＲＸ３０２投薬溶液の最大５ｍＬを経会陰注入される単一の病変部を有した（前立腺１ｇ当たり５ｕｇの最大用量）。
【００６１】
実施例５
試験薬投与
調製された試験薬投与溶液（２０μｇ／ｍＬの固定濃度でのＰＲＸ３０２）の最大で合計５ｍＬ（３００μｇの最大量）を、１ｍＬのアリコートで、事前に特定された病変部に経会陰注入するであろう。事前に特定された病変部中及びその周辺にそれぞれ１ｍＬの注入を最大５回までガイドするために、５ｍｍのテンプレートを用いるであろう。
【００６２】
表１を参照すると、異なる前立腺容積に基づいて注入された薬物の量が示されている。
【００６３】
【表１】
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【００６４】
実施例６
試験デザインＩからの結果
少なくとも２０ｇの重量で０．１〜０．８ｇの腫瘍サイズを有する前立腺において、投与された合計用量は、１ｇの前立腺当たり最大で５μｇ及び１ｇの腫瘍当たり最大で１，０００μｇであった。とりわけ、ＰＲＸ３０２に対して積極的に応答した３人の患者では、治療後２４週目にそれ以上臨床的に重要ではない病変部を有すると定義を下し、彼らの腫瘍サイズに正規化された用量は、１ｇの腫瘍当たり５００〜１，０００μｇであった。患者のうちの９人が、非応答者であり（すなわち、彼らの疾患の変化又は緩徐な進行がない）、彼らは、典型的には、１ｇの腫瘍当たり５００μｇ未満のＰＲＸ３０２の用量を投与されていた。残りの６人の患者は、部分的な応答者と見なされ（例えば、グリーソンパターンの改善、又はＭＣＣＬの減少）、彼らは１ｇの腫瘍当たり最大で１，０００μｇの全範囲に及ぶＰＲＸ３０２の用量を投与されていた。したがって、このデータは、腫瘍へのより高い局所用量が、より好ましい臨床転帰につながる潜在的な病変部アブレーションを増加させる１つの因子であり得ることを示唆している。
【００６５】
【表２】
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【００６６】
【表３】
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【００６７】
６ヶ月目の生検データを、処置された全ての１８人の患者から得た。２人の男性は、彼らの標的腫瘍の完全なアブレーションを経験した。７人の男性は、最大コア長の減少又はグリーソンパターンの減少のいずれかで治療に対する部分的応答を経験した。９人の男性は、治療に対して応答を有さなかった。
【００６８】
【表４】
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【００６９】
実施例７
試験デザインＩＩ
試験デザインＩＩにおけるＰＲＸ３０２の投与は、腫瘍のサイズ、全前立腺容積（ＰＶ）及び前立腺１ｇ当たり１２μｇの用量上限値に応じて、腫瘍１ｇ当たり２００〜１，０００μｇとなるであろう。この用量範囲へのサポートは、試験デザインＩ（組織学的に証明された、臨床的に重要な、限局化した低リスクから中間リスクの前立腺癌を有する１８人の男性におけるＰＲＸ３０２の標的化前立腺内注入を用いた実施例４〜６）に由来する。
【００７０】
腫瘍１ｇ当たり２００〜１，０００μｇの所望のＰＲＸ３０２の用量範囲が、２０ｇ以上の総ＰＶに対して６ｍＬの容量で送達されるであろう。したがって、前立腺内に注入される最大容量は、≦３０％であろう。製剤のこの量は、前立腺癌及びＢＰＨにおいてＰＲＸ３０２が以前の臨床試験において送達された量により、臨床的続発症が観察されずに投与されている（前立腺肥大は、容積負荷の影響をより受けやすく、下部尿路に悪影響を及ぼす）。この用量は、１ｍＬ以上のアリコートで、経直腸超音波（ＴＲＵＳ）のガイドを介して、事前に特定された標的病変部内に及びその周辺に送達され、この方法は、腫瘍細胞に向けられるＰＲＸ３０２の薬力学的効果を増幅するよう意図するものである。
【００７１】
試験デザインＩとは異なり、試験デザインＩＩにおけるＰＲＸ３０２は、手動で注入されるのではなく、むしろ、治験責任医師が、治療のために針を事前に特定された腫瘍内及びその周辺に配置すると、試験薬を針先端部からゆっくりと拡散させるために、針は輸液ポンプ又はスプリングフューザーのいずれかに取り付けられるであろう。このＰＲＸ３０２の送達は、腫瘍の密に詰まった細胞によって、薬剤を注入の意図する部位から離れてそらす「マイクロジェット」の立ち上げを最小限にとどめるよう意図するものである。
【００７２】
試験デザインＩＩはまた、第１のＰＲＸ３０２の投与後２６週目に標的病変部の再処置の可能性の選択肢も含み、安全性及びＰＲＸ３０２の薬理学的活性並びにいくつかの臨床効果の証拠に基づいて適格性を有する患者におけるＰＲＸ３０２の第２の投与を伴う。具体的には、治験責任医師の意見において第２の投与を受けるのに適格な患者は、試験薬若しくは投与処置、第１のＰＲＸ３０２の投与に対する臨床応答、及び臨床的に重要な腫瘍の持続的な存在に原因がある臨床的に重要な有害作用を有さない必要があるであろう。したがって、彼らの腫瘍が完全にアブレーションされた患者は再処置されることはない。臨床応答の決定は、腫瘍サイズの変化のみならず、グリーソンスコアの変化も考慮に入れるであろう。ＰＲＸ３０２の第２の前立腺内投与からの前立腺組織に対する成功した累積損傷が、２回の用量が等しく（前立腺１ｇ当たり約１４μｇ）、８週間空けて投与されたサルで示されている。両用量ともに全身的に良好な忍容性を示し、各投与期間の終わりには前立腺の回復が見られた。この試験プロトコールにおいては、２６週間空けた間隔の投与でより多くの時間をかけて前立腺を回復させる安全性対策が追加されている。
【００７３】
試験デザインＩＩにおいて、選択された用量は、対象の安全性のバランスを取りながら、低リスクから中間リスクの前立腺癌の治療適応の中枢試験のためのＰＲＸ３０２の最適有効用量の選択をガイドするデータを提供するであろう。試験プロトコールで概説されるＰＲＸ３０２の有効性及び安全性の評価が、治療選択肢がほとんどなくかつ不満足な治療選択肢を有することが多い患者集団に対して正当性を示すように、本試験に登録された患者への潜在的なリスクに対する潜在的な有益性は、好適であると見なされる。
【図１】
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【国際調査報告】
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