(57)【要約】  本発明は、ケラチン物質、特に皮膚を脱色、明色化および／または白色化するための美容的方法であって、式（Ｉ）の化合物：式（Ｉ）の化合物：（Ｉ）を含む美容的組成物の適用を含む方法に関する。本発明は、さらに式（Ｉ）の新規な化合物、同一物を含有する組成物、さらにケラチン物質を白色化、明色化および／または脱色するための作用物質としての化合物（Ｉ）の美容的使用にも関する。2019500367.tif 000035
2019500367.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ケラチン物質を脱色、明色化および／または白色化するための非治療的な美容的方法であって、生理学的に許容される媒体中に、式（Ｉ）：
【化１】
2019500367.tif 000024
（式中、
Ｒ１は：
ａ）  水素原子；
ｂ）  飽和直鎖状Ｃ１〜Ｃ６アルキル基、から選択される基を表す、
Ｒ２は：
ａ）  水素原子；
ｂ）  飽和直鎖状Ｃ１〜Ｃ１０アルキル基；
ｃ）  飽和分枝状Ｃ３〜Ｃ１０アルキル基；
ｄ）  Ｃ１〜Ｃ６フェニルアルキル基、例えばベンジル、から選択される基を表す）の化合物、およびそれらの互変異性体、それらの塩、それらの溶媒和物およびそれらの光学異性体ならびにそれらのラセミ体の少なくとも１つを、単独または混合物として含む美容的組成物の適用を含む方法。
【請求項２】
Ｒ１は：
ａ）  水素原子；
ｂ）  飽和直鎖状Ｃ１〜Ｃ４アルキル基および好ましくはメチル、から選択される基を表し、
Ｒ２は：
ａ）  水素原子；
ｂ）  飽和直鎖状Ｃ１〜Ｃ６アルキル基；
ｃ）  飽和分枝状Ｃ３〜Ｃ６アルキル基、から選択される基を表す、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
Ｒ１は：
ａ）  水素原子；
ｂ）  メチル基、から選択される基を表し、
Ｒ２は：
ａ）  水素原子；
ｂ）  飽和直鎖状Ｃ１〜Ｃ４アルキル基、好ましくはエチル；
ｃ）  飽和分枝状Ｃ３〜Ｃ４アルキル基、好ましくはイソプロピルおよびイソブチル、から選択される基を表す、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
式（Ｉ）の前記化合物が：
【表１】
2019500367.tif 000025
およびそれらの互変異性体、それらの塩、それらの溶媒和物およびそれらの光学異性体ならびにそれらのラセミ体から、単独または混合物として選択される、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
式（Ｉ）の前記化合物は、下記の化合物：
【表２】
2019500367.tif 000026
から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
式（Ｉ）の前記化合物は、単独または混合物として、前記組成物中で、前記組成物の総重量に対して、０．０１重量％〜１０重量％、好ましくは０．１重量％〜５重量％および特に０．５重量％〜３重量％の量で存在する、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
前記組成物は、水；有機溶媒、特にＣ１〜Ｃ６アルコールおよびＣ２〜Ｃ１０カルボン酸エステル；鉱物、動物および／または植物起源の炭素ベースの油および／またはシリコ−ン油；ワックス、顔料、フィラー、染料、界面活性剤、乳化剤、共乳化剤；化粧用もしくは皮膚科学活性剤、ＵＶ遮断剤、ポリマー、親水性もしくは親油性ゲル化剤、増粘剤、防腐剤、香料、殺菌剤、セラミド、悪臭吸収剤、酸化防止剤からなる群から選択される少なくとも１種のアジュバントを含む、請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
前記組成物は：落屑剤；鎮静剤、有機もしくは無機光保護剤、保湿剤；脱色剤もしくは色素沈着促進剤；抗糖化剤；ＮＯシンターゼ阻害剤；真皮もしくは表皮高分子の合成を刺激する、および／またはその分解を防止するための作用物質；線維芽細胞および／またはケラチン生成細胞の増殖を刺激するため、またはケラチン生成細胞分化を刺激するための作用物質；筋弛緩剤および／または皮膚収縮低減剤；伸張剤；汚染防止剤および／またはフリーラジカル捕捉剤；毛細血管循環に作用する作用物質；細胞のエネルギー代謝に作用する作用物質；およびそれらの混合物から選択される少なくとも１種の活性剤を含む、請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
ケラチン物質を白色化、明色化および／または脱色するための作用物質としての、請求項１〜６のいずれか一項に規定された式（Ｉ）の化合物の非治療的な美容的使用。
【請求項１０】
式（ＩＩ）：
【化２】
2019500367.tif 000027
（式中、
Ｒ１は：
ａ）  水素原子；
ｂ）  飽和直鎖状Ｃ１〜Ｃ６アルキル基から選択される基を表す、
Ｒ２は：
ａ）  水素原子；
ｂ）  飽和直鎖状Ｃ１〜Ｃ４アルキル基；
ｃ）  飽和分枝状Ｃ３〜Ｃ１０アルキル基；
ｄ）  Ｃ１〜Ｃ６フェニルアルキル基、例えばベンジルから選択される基を表す）の化合物、およびそれらの互変異性体、それらの塩、それらの溶媒和物およびそれらの光学異性体ならびにそれらのラセミ体の、単独または混合物としての化合物であって、
ただし、下記の２種の化合物（ａ）および（ｂ）：
【化３】
2019500367.tif 000028
ならびにそれらの互変異性体を除く化合物。
【請求項１１】
式（ＩＩ）中、
Ｒ１は：
ａ）  水素原子；
ｂ）  飽和直鎖状Ｃ１〜Ｃ４アルキル基および好ましくはメチル、から選択される基を表し、
Ｒ２は：
ａ）  水素原子；
ｂ）  飽和直鎖状Ｃ１〜Ｃ６アルキル基；
ｃ）  飽和分枝状Ｃ３〜Ｃ６アルキル基、から選択される基を表す化合物、およびそれらの互変異性体、それらの塩、それらの溶媒和物およびそれらの光学異性体ならびにそれらのラセミ体の、単独または混合物としての、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の化合物であって、
ただし、下記の２種の化合物（ａ）：
【化４】
2019500367.tif 000029
およびその互変異性体を除く化合物。
【請求項１２】
【表３】
2019500367.tif 000030
から選択される式（ＩＩ）の化合物、およびそれらの互変異性体、それらの塩、それらの溶媒和物およびそれらの光学異性体ならびにそれらのラセミ体の、単独または混合物としての、請求項１０または１１に記載の化合物。
【請求項１３】
請求項１０〜１２のいずれか一項に記載の式（ＩＩ）の少なくとも１種の化合物を含む組成物、特に化粧用組成物。
【請求項１４】
前記式（ＩＩ）の化合物は、前記組成物の前記総重量に対して、０．０１重量％〜１０重量％、好ましくは０．１重量％〜５重量％および特に０．５重量％〜３重量％の量で存在することを特徴とする、請求項１３に記載の組成物。
【請求項１５】
下記のスキーム：
【化５】
2019500367.tif 000031
（式中、Ｒ１、Ｒ２およびＸは上記で規定した意味と同一の意味を有する）にしたがって、請求項１〜１２のいずれか一項に規定した式（Ｉ）および（ＩＩ）の化合物を調製するための方法。
【請求項１６】
下記の工程：
（ｉ）式（Ｗ）：
【化６】
2019500367.tif 000032
（式中、Ｘは、酸を活性化するための従来の方法によってカルボン酸を活性化するための作用物質の存在下で２−クロロニコチン酸のカルボン酸基の活性化によって酸ハロゲン化物、混合無水物、カルバムイミデートもしくはアシルホスホネートを形成する）の化合物を調製する工程：次に
ｉｉ）前記化合物（Ｗ）を式（Ｖ）：
【化７】
2019500367.tif 000033
（式中、Ｒ１およびＲ２は、請求項１に記載した意味と同一の意味を有する）のアミンと反応させて、式（Ｙ）：
【化８】
2019500367.tif 000034
の化合物を形成する工程；
次に
ｉｉｉ）式（Ｉ）および（ＩＩ）の化合物を形成できるように、例えば二亜硫酸ナトリウム、チオ尿素、チオ硫酸ナトリウムもしくはチオ酢酸などの試薬によって塩素と硫黄を交換する工程、次に任意選択により場合によっては
ｉｖ）Ｒ２基が水素を表す式（Ｉ）および（ＩＩ）の化合物については、直接得るか、または無機塩基を使用して対応するエステルの鹸化とそれに続く酸性化の追加の工程によって得ることができる工程を含む、請求項１５に記載の調製方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、チオピリジノン型の少なくとも１種の化合物を使用して、特に皮膚を脱色および／または白色化するための美容処置方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
人生の様々な時期において、一部の人々の皮膚の上で、より特別には手の上で、皮膚に異質性をもたらす浅黒い斑点および／またはより濃色の斑点が出現することがある。これらの斑点は、特に皮膚の表面に所在するケラチン生成細胞中の高濃度のメラニンに起因する。
【０００３】
優れた有効性を備える無害の局所用脱色物質の使用は、色素沈着斑点を治療するためには特に最も望ましい。
【０００４】
皮膚の色素沈着の形成、すなわちメラニンの形成の機序は、特に複雑であり、概略的に表すと、次の主要な段階：チロシン−−−＞ドーパ−−−＞ドパキノン−−−＞ドパクロム−−−＞メラニンを包含する。チロシナーゼ（モノフェノールジヒドロキシルフェニルアラニン：酸素オキシドレダクターゼＥＣ１．１４．１８．１）は、この一連の反応に包含される必須酵素である。チロシナーゼは、特に、そのヒドロキシラーゼ活性によってチロシンをドーパ（ジヒドロキシフェニルアラニン）へ転換させる反応、およびそのオキシダーゼ活性によってドーパをドパキノンへ転換させるための反応を触媒する。このチロシナーゼは、所定の生物学的因子の作用下でその成熟形にある場合にのみ作用する。
【０００５】
物質は、メラニン形成が発生する場所である表皮メラニン細胞の活力に直接的に作用する場合、および／またはメラニン形成に包含される酵素の１つを阻害するか、またはメラニン合成鎖の化学的化合物の１つの構造的アナログとして入り込んで、その後にその鎖を遮断できることによって脱色を保証するいずれかによってメラニン生合成の工程の１つを妨害する場合に、脱色性であると認識される。
【０００６】
アルブチン、ナイアシンアミドおよびコジック酸は、皮膚脱色剤として公知である。
【０００７】
効果的な脱色作用、特にアルブチン、ナイアシンアミドおよびコジック酸より大きな脱色作用を有する物質が探し求められてきた。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
これに関連して、本出願人は、驚くべきことにかつ予想外にも、所定のチオピリジノン化合物が低濃度でさえも優れた脱色活性を有することを見いだした。
【０００９】
本発明の主題は、したがって、ケラチン物質、特に皮膚を脱色、明色化および／または白色化するための非治療的な美容的方法であって、生理学的に許容される媒体中に、下記に定義する式（Ｉ）の少なくとも１種の化合物を含む美容的組成物の適用を含む方法である。
【００１０】
本発明は、さらにケラチン物質、特に皮膚を白色化、明色化および／または脱色するための作用物質としての式（Ｉ）の化合物の非治療的な美容的使用に関する。
【００１１】
本発明によって使用される化合物は、ヒトの皮膚を効率的に脱色および／または明色化または白色化さえすることができる。それらは特に、褐色の色素沈着斑点もしくは老化斑点を有する個人の皮膚に、またはメラニン形成によって誘発された褐色の外見に対処したいと考える個人の皮膚に適用することが意図されている。
【００１２】
それらはさらに、体毛、まつ毛、頭髪およびさらに唇および／または爪を脱色および／または明色化することも可能にできる。
【００１３】
本発明の主題は、さらに上述した式（Ｉ）の化合物の、皮膚、体毛、まつ毛もしくは頭髪ならびに唇および／または爪、および好ましくは皮膚を白色化および／または脱色するため、特に色素沈着斑点もしくは老化斑点を除去するための作用物質としての、および／または日焼け防止剤としての美容的使用である。
【課題を解決するための手段】
【００１４】
このため本発明によって使用する化合物は、下記の式（Ｉ）：
【化１】
2019500367.tif 000003
（式中、
Ｒ１は：
ａ）  水素原子；
ｂ）  飽和直鎖状Ｃ１〜Ｃ６アルキル基、から選択される基を表す、
Ｒ２は：
ａ）  水素原子；
ｂ）  飽和直鎖状Ｃ１〜Ｃ１０アルキル基；
ｃ）  飽和分枝状Ｃ３〜Ｃ１０アルキル基；
ｄ）  Ｃ１〜Ｃ６フェニルアルキル基、例えばベンジル、から選択される基を表す）
および、それらの互変異性体、それらの塩、それらの溶媒和物およびそれらの光学異性体ならびにそれらのラセミ体の、単独または混合物に対応する。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
式（Ｉ）の化合物の塩は、前記化合物の従来型の非毒性塩、例えば酸もしくは塩基から形成された塩を含む。
【００１６】
式（Ｉ）の化合物の塩としては、（それが酸性基を含む場合は）式（Ｉ）の化合物を無機塩基、例えば水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、水酸化アンモニウム、水酸化マグネシウム、水酸化リチウム、および炭酸ナトリウム、炭酸カリウムもしくは炭酸カルシウム、または炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウムもしくは炭酸水素カルシウムに；または有機塩基、例えば第１級、第２級もしくは第３級アルキルアミン、例えばトリエチルアミンもしくはブチルアミンに添加することによって得られる塩を挙げることができる。この第１級、第２級もしくは第３級アルキルアミンは、１個以上の窒素原子および／または酸素原子を含む可能性があるので、したがって、１つ以上のアルコール官能基を含む可能性がある；特に、２−アミノ−２−メチルプロパノール、エタノールアミン、トリエタノールアミン、２−ジメチルアミノプロパノール、２−アミノ−２−（ヒドロキシメチル）−１，３−プロパンジオールおよび３−（ジメチルアミノ）プロピルアミンを挙げることができる。
【００１７】
さらに、アミノ酸、例えば、リシン、アルギニン、グアニジン、グルタミン酸およびアスパラギン酸の塩を挙げることができる。有益にも、式（Ｉ）の化合物の塩は（それが酸性基を含む場合は）、アルカリ金属塩もしくはアルカリ土類金属塩、例えば、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩もしくはマグネシウム塩、アンモニウム塩から選択できる。
【００１８】
本発明に記載した化合物の許容される溶媒和物は、従来型の溶媒和物、例えば溶媒の存在に起因して前記化合物の調製中に形成される溶媒和物を含む。例としては、水または直鎖もしくは分岐アルコール、例えばエタノールもしくはイソプロパノールなどの存在に起因する溶媒和物を挙げることができる。
【００１９】
光学異性体は、特に、エナンチオマーおよびジアステレオ異性体である。
【００２０】
優先的には、直鎖状もしくは分枝状の基は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチルおよびｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニルおよびデシルから選択されてよい。
【００２１】
より優先的には、飽和直鎖状もしくは分枝状アルキル基は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチルおよびｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチルおよびオクチルから選択されてよい。
【００２２】
化合物ａ）は、ＰｕｂＣＨＥＭデータベース（第４７３２９２９０号）
ｈｔｔｐ：／／ｐｕｂｃｈｅｍ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／ｃｏｍｐｏｕｎｄ／４７３２９２９０？ｆｒｏｍ＝ｓｕｍｍａｒｙ＃ｓｅｃｔｉｏｎ＝Ｔｏｐ  ｅｎｔｒｙ：２０１０−１１−２６
に開示されている。
【００２３】
化合物ｂ）ＣＡＳ＞１２４０６６４−４１−８は、刊行物：Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  Ｎ−（２−ｍｅｒｃａｐｔｏｐｙｒｉｄｙｌ−３−ｆｏｒｍｙｌ）−Ｎ−ａｌｋｙｌ  ｇｌｙｃｉｎｅ  ａｎｄ  ｔｈｅ  ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ  ｄｉｓｕｌｆｉｄｅｓ，Ｌｕｏ，Ｙ．Ｌ．；Ｙａｎｇ，Ｚ．Ｘ．；Ｐｅｎｇ，Ｓ．Ｘ．，Ｄｉｖ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，Ｃｈｉｎａ  Ｐｈａｒｍ．Ｕｎｉｖ．，Ｎａｎｊｉｎｇ，２１０００９，Ｐｅｏｐ．Ｒｅｐ．Ｃｈｉｎａ，Ｙａｏｘｕｅ  Ｘｕｅｂａｏ（１９９０），２５（５），３７４−８に記載されている。
【００２４】
好ましくは、式（Ｉ）の化合物は、下記の意味：
（Ｒ１は：
ａ）  水素原子；
ｂ）  飽和直鎖状Ｃ１〜Ｃ４アルキル基および好ましくはメチル、から選択される基を表し、
Ｒ２は：
ａ）  水素原子；
ｂ）  飽和直鎖状Ｃ１〜Ｃ６アルキル基；
ｃ）  飽和分枝状Ｃ３〜Ｃ６アルキル基、から選択される基を表す）
およびさらに単独または混合物としての、それらの互変異性体、それらの塩、それらの溶媒和物およびそれらの光学異性体ならびにそれらのラセミ体を有する。
【００２５】
より特別には、式（Ｉ）の化合物は、下記の意味：
（Ｒ１は：
ａ）  水素原子；
ｂ）  メチル基、から選択される基を表す、
Ｒ２は：
ａ）  水素原子；
ｂ）  飽和直鎖状Ｃ１〜Ｃ４アルキル基、好ましくはエチル；
ｃ）  飽和分枝状Ｃ３〜Ｃ４アルキル基、好ましくはイソプロピルおよびイソブチル、から選択される基を表す）
およびさらに単独または混合物としての、それらの互変異性体、それらの塩、それらの溶媒和物およびそれらの光学異性体ならびにそれらのラセミ体を有する。
【００２６】
新規な化合物
本発明のまた別の主題は、式（ＩＩ）：
【化２】
2019500367.tif 000004
（式中、
Ｒ１は：
ａ）  水素原子；
ｂ）  飽和直鎖状Ｃ１〜Ｃ６アルキル基から選択される基を表し、
Ｒ２は：
ａ）  水素原子；
ｂ）  飽和直鎖状Ｃ１〜Ｃ１０アルキル基；
ｃ）  飽和分枝状Ｃ３〜Ｃ１０アルキル基；
ｄ）  Ｃ１〜Ｃ６フェニルアルキル基、例えばベンジルから選択される基を表す）の新規な化合物、およびそれらの互変異性体、それらの塩、それらの溶媒和物およびそれらの光学異性体ならびにそれらのラセミ体の、単独または混合物としての化合物であるが、
ただし、下記の２種の化合物（ａ）および（ｂ）：
【化３】
2019500367.tif 000005
ならびにそれらの互変異性体を除く。
【００２７】
好ましくは、式（ＩＩ）の化合物は、下記の意味：
（Ｒ１は：
ａ）  水素原子；
ｂ）  飽和直鎖状Ｃ１〜Ｃ４アルキル基および好ましくはメチル、から選択される基を表し、
Ｒ２は：
ａ）  水素原子；
ｂ）  飽和直鎖状Ｃ１〜Ｃ６アルキル基；
ｃ）  飽和分枝状Ｃ３〜Ｃ６アルキル基、から選択される基を表す）
および、それらの互変異性体、それらの塩、それらの溶媒和物およびそれらの光学異性体ならびにそれらのラセミ体の、単独または混合物としての意味を有するが、
ただし、下記の化合物（ａ）：
【化４】
2019500367.tif 000006
およびその互変異性体を除く。
【００２８】
より特別には、式（ＩＩ）の化合物は、下記の意味：
（Ｒ１は：
ａ）  水素原子；
ｂ）  メチル基、から選択される基を表し、
Ｒ２は：
ａ）  水素原子；
ｂ）  飽和直鎖状Ｃ１〜Ｃ４アルキル基、好ましくはエチル；
ｃ）  飽和分枝状Ｃ３〜Ｃ４アルキル基、好ましくはイソプロピルおよびイソブチル、から選択される基を表す）
および、それらの互変異性体、それらの塩、それらの溶媒和物およびそれらの光学異性体ならびにそれらのラセミ体の、単独または混合物として意味を有するが、
ただし、下記の化合物（ａ）：
【化５】
2019500367.tif 000007
およびそれらの互変異性体を除く。
【００２９】
式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物の中では、好ましくは下記の化合物、およびそれらの互変異性体、それらの塩、それらの溶媒和物およびそれらの光学異性体ならびにそれらのラセミ体が、単独または混合物として使用される。
【００３０】
【表１】
2019500367.tif 000008
【００３１】
これらの化合物の中では、単独または混合物としての、化合物１および２ならびにさらにそれらの塩、それらの溶媒和物、それらの異性体およびそれらのラセミ体がより特別に好ましい。
【００３２】
式（Ｉ）の化合物は、公知の方法で、２−メルカプトニコチン酸と式（Ｖ）：
【化６】
2019500367.tif 000009
（Ｒ１およびＲ２は、上述した意味を有する）のアミンとを特にカップリング剤もしくはカルボニルジイミダゾールなどの塩基の存在下で反応させる工程によって得ることができる。
【００３３】
式（Ｉ）および（ＩＩ）の化合物は、さらに、酸を活性化するための従来の方法（例えば、Ｗｉｌｅｙ  ＶＣＨによって発行されたＲ．ＬａｒｏｃｋによるＣｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎの中の、Ｉｎｔｅｒｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎ  ｏｆ  ｎｉｔｒｉｌｅｓ，ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ  ａｃｉｄｓ  ａｎｄ  ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓの章に記載されている）によってカルボン酸を活性化するための作用物質の存在下で２−クロロニコチン酸のカルボン酸基の活性化によって、式（Ｗ）：
【化７】
2019500367.tif 000010
（式中、Ｘは、酸ハロゲン化物、混合無水物、カルバムイミデートもしくはアシルホスホネートを形成する）の形態でカルボン酸を活性させた後に、公知の方法で、２−メルカプトニコチン酸もしくは２−クロロニコチン酸と式（Ｖ）（Ｒ１およびＲ２は上述した意味を有する）のアミンとを反応させる工程によって得ることができる。好ましくは、カルボン酸を活性化するための作用物質が使用されるが、これによって酸塩化物を（例えば、塩化チオニルもしくは塩化オキサリルまたは１−クロロ−Ｎ，Ｎ，２−トリメチル−１−プロペンアミンを使用することによって）形成する、または混合無水物を（クロロギ酸アルキルもしくはクロロギ酸アリールを使用して）形成する、またはカルボジイミドもしくはシアノホスホン酸ジエチルを使用してカルバムイミデートもしくはアシルホスホネートを形成することが可能になる（Ｐｈｏｓｐｈｏｒｕｓ  ｉｎ  ｏｒｇａｎｉｃ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  −  ＸＩ，Ａｍｉｎｏ  ａｃｉｄｓ  ａｎｄ  ｐｅｐｔｉｄｅｓ  −  ＸＸＩ，Ｒｅａｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｄｉｅｔｈｙｌ  ｐｈｏｓｐｈｏｒｏｃｙａｎｉｄａｔｅ  ｗｉｔｈ  ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ  ａｃｉｄｓ．Ａ  ｎｅｗ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ  ｅｓｔｅｒｓ  ａｎｄ  ａｍｉｄｅｓ，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ，３２，１９７６，２２１１−２２１７）。
【００３４】
２−クロロニコチン酸が出発試薬として使用された場合は、得られた式（Ｙ）のクロロアミドは、例えばＮａＳＨ、チオ尿素、ブンテ塩、チオ硫酸ナトリウムもしくはチオ酢酸などの試薬（塩基性媒体中）による塩素と硫黄との間の交換反応において使用される。
【００３５】
下記の全合成スキーム：
【化８】
2019500367.tif 000011
（式中、Ｒ１、Ｒ２およびＸは以前に定義された意味と同一の意味を有する）による。
【００３６】
さらに、最終化合物（Ｉ）および（ＩＩ）がＲ２基上に遊離カルボン酸を有する場合は、前記化合物は、対応するアミノ酸から、または、例えば、エタノールもしくはテトラヒドロフランもしくは水などのプロトン性もしくは非プロトン性溶媒の存在下において０〜１００℃の範囲内の温度で、例えばＮａＯＨもしくはＬｉＯＨなどの無機塩基を使用した対応するエステルの鹸化によるか、いずれかで得ることができる。得られた塩は、次に例えば、塩酸またはクエン酸などの無機酸または有機酸を用いて酸性化できる。
【００３７】
本発明による式（Ｉ）および／または（ＩＩ）の化合物は、化粧品分野において極めて特別な用途を有する。
【００３８】
本発明によって使用される組成物は、生理学的に許容される媒体中に、上述した式（Ｉ）および／または（ＩＩ）の化合物を含む。
【００３９】
化合物（Ｉ）および／または（ＩＩ）は、本発明によって使用される組成物中に、本組成物の総重量に対して０．０１重量％〜１０重量％、好ましくは０．１重量％〜５重量％、特に０．５重量％〜３重量％の量で存在してよい。
【００４０】
用語「生理学的に許容される媒体」は、例えば身体もしくは顔の皮膚、唇、粘膜、まつ毛、爪、頭皮および／または毛髪などのヒトのケラチン物質と適合する媒体を意味することが意図されている。
【００４１】
本発明によって使用される組成物は、そこで化粧品分野において一般に使用される任意のアジュバントを含むことができる。特に挙げることができるのは、水；有機溶媒、特にＣ１〜Ｃ６、より優先的にはＣ２〜Ｃ６、アルコールおよびＣ２〜Ｃ１０カルボン酸エステル；油、特に鉱物、動物および／または植物起源の炭化水素ベースの油および／またはシリコーン油；ワックス、顔料、フィラー、染料、界面活性剤、乳化剤；化粧品用もしくは皮膚科学的活性剤、ＵＶ遮断剤、ポリマー、親水性もしくは親油性ゲル化剤、増粘剤、防腐剤、香料、殺菌剤、セラミド、悪臭吸収剤および酸化防止剤である。
【００４２】
これらの任意選択的な化粧品用アジュバントは、本組成物中に、本組成物の総重量に対して、０．００１重量％〜８０重量％および特に０．１重量％〜４０重量％の比率で存在してよい。どんな場合でも、これらのアジュバントおよびそれらの比率は、本発明による化合物の有益な特性が想定される添加によって有害な影響を受けない、または実質的には有害な影響を受けないように当業者によって選択されるであろう。
【００４３】
活性剤としては、落屑剤；鎮静剤、有機もしくは無機光保護剤、保湿剤；脱色剤もしくは色素沈着促進剤；抗糖化剤；ＮＯシンターゼ阻害剤；真皮もしくは表皮高分子の合成を刺激する、および／またはその分解を防止するための作用物質；線維芽細胞および／またはケラチン生成細胞の増殖を刺激するため、またはケラチン生成細胞分化を刺激するための作用物質；筋弛緩剤および／または皮膚収縮低減剤；伸張剤；汚染防止剤および／またはフリーラジカル捕捉剤；毛細血管循環に作用する作用物質；細胞のエネルギー代謝に作用する作用物質；およびそれらの混合物から選択される少なくとも１種の化合物を本発明によって使用される組成物中に導入することが有益であろう。
【００４４】
そのような追加の化合物の例は：レチノールおよびその誘導体、例えばパルミチン酸レチニル；アスコルビン酸およびその誘導体、例えばリン酸アスコルビルマグネシウムおよびアスコルビルグルコシド；トコフェロールおよびその誘導体、例えば酢酸トコフェリル；ニコチン酸およびその前駆体、例えばニコチンアミド；ユビキノン；グルタチオンおよびその前駆体、例えばＬ−２−オキソチアゾリジン−４−カルボン酸；植物抽出物および特に植物タンパク質およびその加水分解物、およびさらに植物ホルモン；海産物抽出物、例えば藻類抽出物；細菌抽出物；サポゲニン、例えばジオスゲニンおよび同一物を含有する野生ヤマノイモの抽出物；セラミド；ヒドロキシ酸、例えばサリチル酸および５−ｎ−オクタノイルサリチル酸；レスベラトロール；オリゴペプチドおよび擬ジペプチドおよびそれらのアシル化誘導体；マンガン塩およびマグネシウム塩、特にグルコン酸塩；ならびにそれらの混合物である。
【００４５】
用語「落屑剤」は：
−  剥離を促進することにより落屑に直接的に作用できる任意の化合物、例えばβ−ヒドロキシ酸、特にサリチル酸およびその誘導体（５−ｎ−オクタノイルサリチル酸を含む）；α−ヒドロキシ酸、例えばグリコール酸、クエン酸、乳酸、酒石酸、リンゴ酸もしくはマンデル酸；尿素；ゲンチシン酸；オリゴフコース；ケイ皮酸；サフォラ・ジャポニカ（Ｓａｐｈｏｒａ  ｊａｐｏｎｉｃａ）の抽出物；レスベラトロールなど；
−  またはコルネオデスモゾーム、グリコシダーゼ、角質層キモトリプシン酵素（ＳＣＣＥ）もしくは他のプロテアーゼ（トリプシン、キモトリプシン様）の落屑もしくは分解に関係する酵素のいずれかに作用できる任意の化合物を意味することが意図されている。挙げることができるのは、無機塩キレート剤：ＥＤＴＡ；Ｎ−アシル−Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−エチレンジアミン三酢酸；アミノスルホン酸化合物および特に（Ｎ−２−ヒドロキシエチルピペラジン−Ｎ−２−エタン）スルホン酸（ＨＥＰＥＳ）；２−オキソチアゾリジン−４−カルボン酸（プロシステイン）誘導体；グリシン型のα−アミノ酸の誘導体（欧州特許第０８５２９４９号明細書に記載されている、およびさらにＢＡＳＦ社によって商標名Ｔｒｉｌｏｎ  Ｍの下で販売されている二酢酸グリシンメチルナトリウム）；蜂蜜；糖誘導体、例えばＯ−オクタノイル−６−Ｄ−マルトースおよびＮ−アセチルグルコサミンである。
【００４６】
落屑剤は、一般には、本発明による組成物中に、本組成物の総重量に対して０．０１重量％〜１５重量％の範囲に及ぶ、好ましくは０．１重量％〜１０重量％の範囲に及ぶ比率で存在する。
【００４７】
本発明による組成物中に使用できる鎮静剤としては、五環系トリテルペンおよび同一物を含有する植物（例えばカンゾウ（Ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚａ  ｇｌａｂｒａ））由来の抽出物、例えばβ−グリチルレチン酸ならびにそれらの塩および／または誘導体（グリチルレチン酸モノグルクロニド、グリチルレチン酸ステアリル、３−ステアロイルオキシグリチルレチン酸）、ウルソル酸およびその塩、オレアノール酸およびその塩、ベツリン酸およびその塩、ボタン（Ｐａｅｏｎｉａ  ｓｕｆｆｒｕｔｉｃｏｓａ）および／またはシャクヤク（Ｐａｅｏｎｉａ  ｌａｃｔｉｆｌｏｒａ）の抽出物、サリチル酸塩および特にサリチル酸亜鉛、Ｃｏｄｉｆ社製のフィコサッカリド（ｐｈｙｃｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ）、ラミナリア・サッカリナ（Ｌａｍｉｎａｒｉａ  ｓａｃｃｈａｒｉｎａ）の抽出物、キャノーラ油、ビサボロールおよびカモミールの抽出物、アラントイン、ＳＥＰＰＩＣ社製のＳｅｐｉｖｉｔａｌ  ＥＰＣ（ビタミンＥおよびＣのリン酸ジエステル）、ω−３不飽和油、例えばマスクローズ油、クロフサスグリ油、エキウム（ｅｃｃｈｉｕｍ）油、魚油、プランクトン抽出物、カプリロイルグリシン、ＳＥＰＰＩＣ社製のＳｅｐｐｉｃａｌｍ  ＶＧ（パルミトイルプロリンナトリウムおよびニンフェア・アルバ（Ｎｙｍｐｈｅａ  ａｌｂａ））、ピジウム（Ｐｙｇｅｕｍ）の抽出物、ボスウェリア・セラータ（Ｂｏｓｗｅｌｌｉａ  ｓｅｒｒａｔａ）の抽出物、センチペダ・カニンガーミ（Ｃｅｎｔｉｐｅｄａ  ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍｉ）の抽出物、ヒマワリ（Ｈｅｌｉａｎｔｈｕｓ  ａｎｎｕｕｓ）の抽出物、アマ（Ｌｉｎｕｍ  ｕｓｉｔａｔｉｓｓｉｍｕｍ）の抽出物、トコトリエノール、コラノキ（Ｃｏｌａ  ｎｉｔｉｄａ）の抽出物、ピペロナール、クローブの抽出物、ヤナギラン（Ｅｐｉｌｏｂｉｕｍ  ａｎｇｕｓｔｉｆｏｌｉｕｍ）の抽出物、アロエベラ（Ａｌｏｅ  ｖｅｒａ）、バコパ・モニエラ（Ｂａｃｏｐａ  ｍｏｎｉｅｒａ）の抽出物、フィトステロール類、コルチゾン、ヒドロコルチゾン、インドメタシンおよびベタメタゾンを挙げることができる。
【００４８】
鎮静剤は、一般には、本発明による組成物中に、本組成物の総重量に対して０．０１重量％〜１５重量％の範囲に及ぶ、好ましくは０．１重量％〜１０重量％の範囲に及ぶ比率で存在する。
【００４９】
有機光保護剤は、特に、アントラニル酸塩；ケイ皮酸誘導体；ジベンゾイルメタン誘導体；サリチル酸誘導体、ショウノウ誘導体；トリアジン誘導体、例えば特許出願である米国特許第４３６７３９０号明細書、欧州特許第８６３１４５号明細書、同第５１７１０４号明細書、同第５７０８３８号明細書、同第７９６８５１号明細書、同第７７５６９８号明細書、同第８７８４６９号明細書、同第９３３３７６号明細書、同第５０７６９１号明細書、同第５０７６９２号明細書、同第７９０２４３号明細書および同第９４４６２４号明細書に記載されているトリアジン誘導体；ベンゾフェノン誘導体；β，β−ジフェニルアクリレート誘導体；ベンゾトリアゾール誘導体；ベンザルマロン酸誘導体；ベンズイミダゾール誘導体；イミダゾリン類；欧州特許第６６９３２３号明細書および米国特許第２４６３２６４号明細書に記載されたｂｉｓ−ベンザゾリル誘導体；ｐ−アミノ安息香酸（ＰＡＢＡ）誘導体；特許出願の米国特許第５２３７０７１号明細書、同第５１６６３５５号明細書、英国特許第２３０３５４９号明細書、独国特許第１９７２６１８４号明細書および欧州特許第８９３１１９号明細書に記載されたメチレンビス（ヒドロキシフェニルベンゾトリアゾール）誘導体；例えば国際公開第９３／０４６６５号パンフレットに記載されたスクリーニングポリマーおよびスクリーニングシリコーン；例えば特許出願独国特許第１９８５５６４９号明細書に記載されたものなどのα−アルキルスチレンベースの二量体から選択される。
【００５０】
無機光保護剤は、特に、全部が周知のＵＶ光保護剤である被覆もしくは非被覆金属酸化物顔料もしくはナノ顔料（一次粒子の平均径は一般には５ｎｍ〜１００ｎｍ、好ましくは１０ｎｍ〜５０ｎｍ）、例えば酸化チタン（非晶質もしくはルチル型および／またはアナターゼ型で結晶化している）、酸化鉄、酸化亜鉛、酸化ジルコニウムもしくは酸化セリウムナノ顔料から選択することができる。従来型コーティング剤は、さらに、アルミナおよび／またはステアリン酸アルミニウムである。そのような被覆もしくは非被覆金属酸化物のナノ顔料は、特に特許出願の欧州特許第５１８７７２号明細書および同第５１８７７３号明細書に記載されている。
【００５１】
光保護剤は、一般には、本発明による組成物中に、本組成物の総重量に対して０．１重量％〜２０重量％の範囲に及ぶ、好ましくは０．２重量％〜１５重量％の範囲に及ぶ比率で存在する。
【００５２】
本発明によって使用される組成物は、通常は化粧品分野において使用される任意の製剤形および特に任意選択的にゲル化された水溶液もしくは水性アルコール溶液、ローションタイプの分散液、任意選択的に二相分散液、水中油型もしくは油中水型もしくは多重（例えばＷ／Ｏ／Ｗ型もしくはＯ／Ｗ／Ｏ型）エマルジョン、水性ゲル、球状体による水相内の油の分散液であってこれらの球状体は例えばナノスフェアおよびナノカプセルなどのポリマーナノ粒子である可能性がある分散液、さらにイオン型および／または非イオン型の脂質小胞；水性もしくは油性ゲルの形態にあってよい。これらの組成物は、通常の方法にしたがって調製される。本発明によると、好ましくはエマルジョンの形態にある、特に水中油型エマルジョンの形態にある組成物が使用される。
【００５３】
本発明によって使用される組成物は、スキンケア組成物、および特に顔、手、足、主要な解剖学的折曲部もしくは身体を清浄化、保護、処置もしくはケアするクリーム（例えば、デイクリーム、ナイトクリーム、メイクアップ除去クリーム、ファンデーションクリームもしくは日焼け止めクリーム）；液体ファンデーション、メイクアップ除去ミルク、保護もしくはケアボディミルクもしくは日焼け止めミルク；スキンケアローション、ジェルもしくはムース、例えばクレンジングローションを構成することができる。
【００５４】
以下では、本発明について非限定的な実施例を用いて詳細に例示する。
【実施例】
【００５５】
実施例１：化合物３  −  エチルＮ−［（２−チオキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）カルボニル］グリシネート  −  の合成
【化９】
2019500367.tif 000012
ルート１：２−メルカプトニコチン酸を経由する
【化１０】
2019500367.tif 000013
丸底フラスコ内で、チオニコチン酸をアセトニトリル中に導入し、その後にカルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）を導入した。この混合物を１時間還流させた。この混合物を周囲温度に戻し、塩酸グリシン酸エチルを加え、その後に６０℃で加熱を再開して３時間継続し、次に周囲温度で一晩置いた。一晩の期間後、反応媒体を蒸発させた。残留物をジクロロメタン中にとり、２ＮのＨＣｌを用いて２回洗浄した。有機相を無水硫酸ナトリウムの上方で乾燥させ、次に蒸発させて、シリカ、９７／３のジクロロメタン／メタノール上で精製した。分画を蒸発させた。淡黄色粉末が得られた：収率：３７％。
【００５６】
ルート２：２−クロロニコチン酸を経由する
【化１１】
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三つ口フラスコ内で、２−クロロニコチン酸（２５０．０ｇ、１．５８７モル）を酢酸エチル（５００ｍＬ）およびＳＯＣｌ２（２１０．０ｇ、１．７６１モル）中に滴下した。この混合物を完全転換が得られるまで還流させた。媒体を周囲温度に冷却し、酢酸エチル（３７５ｍＬ）により希釈した。次に、水（４００ｍＬ）中に希釈した塩酸グリシン酸エチル（２６５．８ｇ、１．９０４モル）溶液およびトリエチルアミン（３９３．５ｇ、３．８８モル）を加えた。この混合液を３〜４時間撹拌し、真空下で酢酸エチルを除去した。得られた水溶液を水（１，２５０ｍＬ）により希釈し、３ＮのＨＣｌ（２５ｍＬ）を用いて酸性化した。生じた溶液にチオ硫酸ナトリウム（１，３７９ｇ、５．５５５モル）を入れ、この混合液を６時間にわたり還流させた。１０℃に冷却した後、黄色固体を濾過により除去し、水（３×７５０ｍＬ）で洗浄した。
【００５７】
カーボンブラックを用いて粗生成物を７５／２５のエタノール／水混合液中にとった。カーボンブラックは、高温条件下で濾過により除去し、エタノールを蒸発させた。生成物を周囲温度に冷却し、濾過し、真空下で乾燥させた。淡黄色粉末が得られた：収率：８８％。
【００５８】
１Ｈ  ＮＭＲおよび質量スペクトルは、構造と一致していた。融点：１５１℃（キャピラリーチューブ）
【００５９】
実施例２：化合物１の合成
化合物３からＮ−［（２−チオキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）カルボニル］グリシン
【化１２】
2019500367.tif 000015
エチルＮ−［（２−チオキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）カルボニル］グリシネート（４８ｇ、０．３１７モル）、９５％のＥｔＯＨ（４８ｍＬ）は三つ口フラスコ内に導入し、１０℃に冷却した。１４４ｍＬの水中のＮａＯＨ（１６ｇ）の溶液を滴下した。有機溶媒を蒸発させ、ｐＨを３〜４に調整した。生じた生成物を０〜１０℃に冷却して濾過した。生成物を水で洗浄して真空下で乾燥させた。淡黄色粉末が得られた：収率：９６％。
【００６０】
１Ｈ  ＮＭＲおよび質量スペクトルは、構造と一致していた。融点：２４１．０〜２４１．８℃（キャピラリーチューブ）
【００６１】
実施例３：化合物４  −  エチルＮ−メチル−Ｎ−［（２−チオキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）カルボニル］グリシネート  −  の合成
【化１３】
2019500367.tif 000016
ルート１：２−メルカプトニコチン酸を経由する
【化１４】
2019500367.tif 000017
丸底フラスコ内で、チオニコチン酸をアセトニトリル中に導入し、その後にカルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）を導入した。この混合物を１時間還流させた。この混合物を周囲温度に戻し、塩酸サルコシン酸エチルを加え、その後に６０℃で加熱を再開して３時間継続し、次に周囲温度で一晩置いた。一晩の期間後、反応媒体を蒸発させた。残留物をシリカ、２０／８０の酢酸エチル／ヘプタン上で精製した。分画を蒸発させ、次に生成物をジクロロメタン中にとり、イソプロピルエーテルから沈殿させた。淡黄色粉末が得られた：収率：２２％。
【００６２】
ルート２：２−クロロニコチン酸を経由する
【化１５】
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三つ口フラスコ内で、２−クロロニコチン酸（３００．０ｇ、１．９０４モル）を酢酸エチル（６００ｍＬ）およびＳＯＣｌ２（２４９．０ｇ、２．０９５モル）中に滴下した。この混合物を完全転換が得られるまで還流させた。媒体を周囲温度に冷却し、酢酸エチル（４５０ｍＬ）により希釈した。次に、水（４８０ｍＬ）中に希釈した塩酸サルコシン酸エチル（３５１ｇ、２．２８５モル）溶液およびトリエチルアミン（４８１．８ｇ、４．７６モル）を加えた。この混合液を３〜４時間撹拌し、真空下で酢酸エチルを除去した。得られた水溶液を水（１，５００ｍＬ）により希釈し、３ＮのＨＣｌ（３０ｍＬ）を用いて酸性化した。チオ硫酸ナトリウム（１，７９６ｇ、７．２４モル）を生じた溶液に装填し、混合液を完全転換が得られるまで還流させた。１０℃に冷却した後、黄色固体を濾過により除去し、水（３×９００ｍＬ）で洗浄した。カーボンブラックを用いて粗生成物を７５／２５のエタノール／水混合液中にとった。カーボンブラックは、高温条件下で濾過により除去し、エタノールを蒸発させた。生成物を周囲温度に冷却し、濾過し、真空下で乾燥させた。淡黄色粉末が得られた：収率：６９％。
【００６３】
１Ｈ  ＮＭＲおよび質量スペクトルは、構造と一致していた。融点：１７５℃（キャピラリーチューブ）
【００６４】
実施例４：化合物４からの化合物２の合成
Ｎ−メチル−Ｎ−［（２−チオキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）カルボニル］グリシン
【化１６】
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エチルＮ−メチル−Ｎ−［（２−チオキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−イル）カルボニル］グリシネート（５０ｇ、０．３１７モル）、９５％のＥｔＯＨ（１００ｍＬ）および水（８０ｍＬ）を三つ口フラスコ内に導入した。この混合物を１０℃に冷却した。７０ｍＬの水中のＮａＯＨ（２３．６ｇ）の溶液を滴下した。完全転換後、有機溶媒を蒸発させ、ｐＨを２〜３に調整した。生じた生成物を０〜１０℃に冷却して濾過した。生成物を水で洗浄して真空下で乾燥させた。淡黄色粉末が得られた：収率：４５％。
【００６５】
１Ｈ  ＮＭＲおよび質量スペクトルは、構造と一致していた。融点：２１０．９〜２２１．８℃（キャピラリーチューブ）
【００６６】
実施例５：構成的メラニン形成での活性の証明
皮膚の色素沈着の予防もしくは減少および／または皮膚の明色化の作用を評価するために、下記の方法で実施例を実施した。
【００６７】
式（Ｉ）の化合物の脱色活性（メラニン生成の減少）の測定は、下記のようにｉｎ  ｖｉｔｒｏでの正常ヒトメラニン形成細胞を評価することによって実施した。
【００６８】
まず第一に、正常ヒトメラニン形成細胞を培養し、３８４ウエル内に分注した。２４時間後、培養培地は、評価対象の式（Ｉ）の化合物を含有する培地と交換した。細胞を７２時間にわたり培養し、その後に、メラニン形成細胞によって生成されたメラニンの量を測定する最終光学密度を測定した。用量−効果は、評価対象の化合物の広い濃度範囲を用いて実施した。したがって、濃度とメラニン測定値とを対応させることによって、メラニン合成における５０％減少が達成される濃度であるＩＣ５０（単位μＭ）を決定することが可能になった。試験で使用した最高濃度は、２００μＭであった。
【００６９】
式（Ｉ）の化合物は、強力な脱色作用を証明した。
【００７０】
【表２】
2019500367.tif 000020
【００７１】
また別の態様では、化合物３を仏国特許第２９６８６６１号明細書に記載された先行技術による最も近い化合物と比較した。
【００７２】
【表３】
2019500367.tif 000021
【００７３】
本発明の化合物は、本発明外の化合物（ＣＡＳ１３７９８６７−５９−０）の活性よりも大きいメラニン形成減少への活性を有した。
【００７４】
実施例６：化粧品組成物
下記（単位、ｇ）を含む皮膚脱色組成物を調製した。
化合物番号４    ２ｇ
ＰＥＧ  ４００        ６８ｇ
エタノール        ３０ｇ
【００７５】
皮膚に適用された組成物は、褐色斑点がより目立たなくなることを可能にした。
【００７６】
実施例７：ゲル
下記（単位、重量％）を含む皮膚脱色ジェルを調製した。
化合物番号１    ０．５％
カルボマー（Ｌｕｂｒｉｚｏｌ社製のＣａｒｂｏｐｏｌ  ９８１）    １％
防腐剤  十分量
水          １００％まで十分量
【００７７】
皮膚に適用された組成物は、褐色斑点がより目立たなくなることを可能にした。
【００７８】
実施例８：色素沈着再構成表皮サンプルについての試験
ＤＭＳＯ中の３００μＭの化合物１、２、３もしくは４を含む組成物を色素沈着再構成表皮のサンプルに塗布した（欧州特許第１８７８７９０号明細書を参照されたい）。コントロールは、ＤＭＳＯであった。メラニンは、フォンタナ・マッソン染料を用いた染色後に組織学的切片上での画像分析によって定量した。色素沈着表皮の各サンプルは、顕微鏡に接続したカメラを使用してその全長にわたって撮影した。メラニンを閾値化し、自動画像解析ソフトウエアを使用して各視野においてメラニンのピクセル数を測定した。測定の有意性を決定するために、ノンパラメトリック統計学的試験（マン・ホイットニー試験）を実施した。
【００７９】
色素沈着再構成表皮標準試験モデルは、Ｒｅｇｎｉｅｒ  Ｍ，Ｄｕｖａｌ  Ｃ，Ｇａｌｅｙ  ＪＢ，Ｐｈｉｌｉｐｐｅ  Ｍ，Ｌａｇｒａｎｇｅ  Ａ，Ｔｕｌｏｕｐ  Ｒ，Ｓｃｈｍｉｄｔ  Ｒ，Ｃｅｌｌｕｌａｒ  ａｎｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，１９９９，４５，７，９６９−９８０：“Ｋｅｒａｔｉｎｏｃｙｔｅ−Ｍｅｌａｎｏｃｙｔｅ  ｃｏ−ｃｕｌｔｕｒｅｓ  ａｎｄ  ｐｉｇｍｅｎｔｅｄ  ｒｅｃｏｎｓｔｒｕｃｔｅｄ  ｈｕｍａｎ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｓ：ｍｏｄｅｌｓ  ｔｏ  ｓｔｕｄｙ  ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｍｅｌａｎｏｇｅｎｅｓｉｓ”によって公表された。
【００８０】
【表４】
2019500367.tif 000022
【００８１】
化合物１および２について有意な脱色活性を１００μＭで評価した。（ｐ値＜０．０５：有意な脱色活性）。
【００８２】
【表５】
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【００８３】
化合物３および４について有意な脱色活性を３００μＭで評価した。（ｐ値＜０．０５：有意な脱色活性）。
【国際調査報告】
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