(57)【要約】  ＭＣＴ４の発現の調節またはがんの治療のための組成物、方法および使用を提供する。組成物は、ＭＣＴ４の発現上昇を特徴とするがん細胞に投与するためのアンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）を含む。がんは前立腺がん、腎細胞癌、乳がん、子宮頸がん、肝がん、膀胱がん、および小細胞肺がんのうち１つまたは複数から選択される。前立腺がんは、去勢抵抗性前立腺がん（ＣＲＰＣ）であってもよい。【選択図】図５Ａ
2019500334.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
配列番号１〜２３および配列番号４６〜４９のうち１つまたは複数から選択される配列を有するアンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）を投与するステップを含む、がんを治療する方法。
【請求項２】
ＡＳＯが改変ヌクレオシド間結合をさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
改変ヌクレオシド間結合が、ペプチド−核酸結合、モルホリノ結合、Ｎ３’〜Ｐ５’ホスホロアミデート結合、メチルホスホネート結合またはホスホロチオエート結合である、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
ＡＳＯが改変糖部分をさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
改変糖部分が２’−Ｏ−アルキルオリゴリボヌクレオチドである、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
ＡＳＯが２’ＭＯＥギャップマー改変を有する、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
ＡＳＯが改変核酸塩基をさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
改変核酸塩基が５−メチルピリミジンまたは５−プロピニルピリミジンである、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
細胞がヒト細胞である、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
がんがＭＣＴ４の発現上昇を特徴とする、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
がんが、前立腺がん、腎細胞癌、乳がん、子宮頸がん、肝がん、膀胱がん、および小細胞肺がんのうち１つまたは複数から選択される、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前立腺がんが去勢抵抗性前立腺がん（ＣＲＰＣ）である、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前立腺がんがエンザルタミド（ＥＮＺ）抵抗性ＣＲＰＣである、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
ＡＳＯが、ＭＣＴ４のｍＲＮＡに対し実質的に相補的である、請求項１に記載の方法。
【請求項１５】
ＡＳＯが静脈内投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項１６】
ＡＳＯが組織に対し局所的に投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項１７】
ＡＳＯが投与前に脂質粒子と混合される、請求項１に記載の方法。
【請求項１８】
ＡＳＯが投与前にリポソームに被包される、請求項１に記載の方法。
【請求項１９】
オリゴヌクレオチドが、
（ａ）ＴＣＣＣＡＴＧＧＣＣＡＧＧＡＧＧＧＴＴＧ（配列番号１）；
（ｂ）ＧＴＣＣＣＧＧＡＡＧＡＣＧＣＴＣＡＧＧＴ（配列番号２）；
（ｃ）ＡＡＧＧＡＣＧＣＡＧＣＣＡＣＣＡＴＧＣＣ（配列番号３）；
（ｄ）ＴＴＧＧＣＧＴＡＧＣＴＣＡＣＣＡＣＧＡＡ（配列番号４）；
（ｅ）ＡＧＡＴＧＣＡＧＡＡＧＡＣＣＡＣＧＡＧＧ（配列番号５）；
（ｆ）ＣＣＡＣＴＣＴＧＧＡＡＴＧＡＣＡＣＧＧＴ（配列番号６）；
（ｇ）ＧＴＡＧＧＡＧＡＡＧＣＣＡＧＴＧＡＴＧＡＣ（配列番号７）；
（ｈ）ＡＧＣＡＴＧＧＣＣＡＧＣＡＧＧＡＴＧＧＡ（配列番号８）；
（ｉ）ＧＧＣＴＧＧＡＡＧＴＴＧＡＧＴＧＣＣＡＡ（配列番号９）；
（ｊ）ＣＡＴＧＣＣＧＴＡＧＧＡＧＡＴＧＣＣＡＡ（配列番号１０）；
（ｋ）ＣＴＣＡＧＧＣＴＧＴＧＧＣＴＣＴＴＴＧＧ（配列番号１１）；
（ｌ）ＴＡＧＣＧＧＴＴＣＡＧＣＡＴＧＡＴＧＡ（配列番号１２）；
（ｍ）ＡＧＣＡＣＧＧＣＣＣＡＧＣＣＣＣＡＧＣＣ（配列番号１３）；
（ｎ）ＧＡＧＣＴＣＣＴＴＧＡＡＧＡＡＧＡＣＡＣＴ（配列番号１４）；
（ｏ）ＣＡＧＧＡＴＧＧＡＧＧＡＧＡＴＣＣＡＧＧ（配列番号１５）；
（ｐ）ＡＧＡＣＣＣＣＣＣＡＣＡＡＧＣＡＴＧＡＣ（配列番号１６）；
（ｑ）ＧＡＡＧＴＴＧＡＧＴＧＣＣＡＡＡＣＣＣＡＡ（配列番号１７）；
（ｒ）ＣＣＣＧＴＴＧＧＣＣＡＴＧＧＧＧＣＧＣＣ（配列番号１８）；
（ｓ）ＧＣＣＡＧＣＣＣＧＴＴＧＧＣＣＡＴＧＧＧ（配列番号１９）；
（ｔ）ＡＧＧＡＡＧＡＣＡＧＧＧＣＴＡＣＣＴＧＣ（配列番号２０）；
（ｕ）ＧＣＡＣＡＣＡＧＧＡＡＧＡＣＡＧＧＧＣＴ（配列番号２１）；
（ｖ）ＣＡＧＧＧＣＡＣＡＣＡＧＧＡＡＧＡＣＡＧ（配列番号２２）；
（ｗ）ＣＡＧＣＡＧＴＴＧＡＧＣＡＧＣＡＧＧＣＣ（配列番号２３）；
（ｘ）ＡＴＧＧＣＣＡＧＧＡＧＧＧＴＴＧ（配列番号４６）；
（ｙ）ＣＡＴＧＧＣＣＡＧＧＡＧＧＧＴＴ（配列番号４７）；
（ｚ）ＣＣＡＴＧＧＣＣＡＧＧＡＧＧＧＴ（配列番号４８）；および
（ａａ）ＣＣＣＡＴＧＧＣＣＡＧＧＡＧＧＧ（配列番号４９）
から選択される配列を有する、アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）。
【請求項２０】
ＡＳＯが改変ヌクレオシド間結合をさらに含む、請求項１９に記載のＡＳＯ。
【請求項２１】
改変ヌクレオシド間結合が、ペプチド−核酸結合、モルホリノ結合、Ｎ３’〜Ｐ５’ホスホロアミデート結合、メチルホスホネート結合またはホスホロチオエート結合である、請求項２０に記載のＡＳＯ。
【請求項２２】
ＡＳＯが改変糖部分をさらに含む、請求項１９に記載のＡＳＯ。
【請求項２３】
改変糖部分が２’−Ｏ−アルキルオリゴリボヌクレオチドである、請求項２２に記載のＡＳＯ。
【請求項２４】
ＡＳＯが２’ＭＯＥギャップマー改変を有する、請求項１９に記載のＡＳＯ。
【請求項２５】
ＡＳＯが改変核酸塩基をさらに含む、請求項１９に記載のＡＳＯ。
【請求項２６】
改変核酸塩基が５−メチルピリミジンまたは５−プロピニルピリミジンである、請求項２５に記載のＡＳＯ。
【請求項２７】
がんの治療において使用するための、請求項１９から２６のいずれか１項に記載のＡＳＯ。
【請求項２８】
（ａ）配列番号１〜２３および配列番号４６〜４９のうち１つまたは複数から選択される配列を有するアンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）、ならびに（ｂ）薬学的に許容される担体を含む医薬組成物。
【請求項２９】
ＡＳＯが改変ヌクレオシド間結合をさらに含む、請求項２８に記載の医薬組成物。
【請求項３０】
改変ヌクレオシド間結合が、ペプチド−核酸結合、モルホリノ結合、Ｎ３’〜Ｐ５’ホスホロアミデート結合、メチルホスホネート結合またはホスホロチオエート結合である、請求項２９に記載の医薬組成物。
【請求項３１】
ＡＳＯが改変糖部分をさらに含む、請求項２８に記載の医薬組成物。
【請求項３２】
ＡＳＯが改変糖部分をさらに含む、請求項３０に記載の医薬組成物。
【請求項３３】
改変糖部分が２’−Ｏ−アルキルオリゴリボヌクレオチドである、請求項３２に記載の医薬組成物。
【請求項３４】
ＡＳＯが２’ＭＯＥギャップマー改変を有する、請求項２８に記載の医薬組成物。
【請求項３５】
ＡＳＯが改変核酸塩基をさらに含む、請求項２８に記載の医薬組成物。
【請求項３６】
改変核酸塩基が５−メチルピリミジンまたは５−プロピニルピリミジンである、請求項３２に記載の医薬組成物。
【請求項３７】
ａ．配列番号１〜２３および配列番号４６〜４９のうち１つまたは複数から選択される配列を有するＡＳＯ、ならびに
ｂ．がんの治療のための説明書
を含む商用パッケージ。
【請求項３８】
がんが、前立腺がん、腎細胞癌、乳がん、子宮頸がん、肝がん、膀胱がん、および小細胞肺がんのうち１つまたは複数から選択される、請求項３７に記載の商用パッケージ。
【請求項３９】
前立腺がんが去勢抵抗性前立腺がん（ＣＲＰＣ）である、請求項３７に記載の商用パッケージ。
【請求項４０】
がんを治療するための、配列番号１〜２３および配列番号４６〜４９のうち１つまたは複数から選択される配列を有するアンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）の使用。
【請求項４１】
がんを治療するための医薬の製造における、配列番号１〜２３および配列番号４６〜４９のうち１つまたは複数から選択される配列を有するアンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）の使用。
【請求項４２】
ＡＳＯが改変ヌクレオシド間結合をさらに含む、請求項４０または４１に記載の使用。
【請求項４３】
改変ヌクレオシド間結合が、ペプチド−核酸結合、モルホリノ結合、Ｎ３’〜Ｐ５’ホスホロアミデート結合、メチルホスホネート結合またはホスホロチオエート結合である、請求項４２に記載の使用。
【請求項４４】
ＡＳＯが改変糖部分をさらに含む、請求項４０または４１に記載の使用。
【請求項４５】
改変糖部分が２’−Ｏ−アルキルオリゴリボヌクレオチドである、請求項４４に記載の使用。
【請求項４６】
ＡＳＯが２’ＭＯＥギャップマー改変を有する、請求項４０または４１に記載の使用。
【請求項４７】
ＡＳＯが改変核酸塩基をさらに含む、請求項４０または４１に記載の使用。
【請求項４８】
改変核酸塩基が５−メチルピリミジンまたは５−プロピニルピリミジンである、請求項４７に記載の使用。
【請求項４９】
細胞がヒト細胞である、請求項４０または４１に記載の使用。
【請求項５０】
がんがＭＣＴ４の発現上昇を特徴とする、請求項４０または４１に記載の使用。
【請求項５１】
がんが、前立腺がん、腎細胞癌、乳がん、子宮頸がん、肝がん、膀胱がん、および小細胞肺がんのうち１つまたは複数から選択される、請求項５０に記載の使用。
【請求項５２】
前立腺がんが去勢抵抗性前立腺がん（ＣＲＰＣ）である、請求項５１に記載の使用。
【請求項５３】
前立腺がんがエンザルタミド（ＥＮＺ）抵抗性ＣＲＰＣである、請求項５２に記載の使用。
【請求項５４】
ＡＳＯがＭＣＴ４のｍＲＮＡに対し実質的に相補的である、請求項４０または４１に記載の使用。
【請求項５５】
ＡＳＯが静脈内投与される、請求項４０または４１に記載の使用。
【請求項５６】
ＡＳＯが組織に対し局所的に投与される、請求項４０または４１に記載の使用。
【請求項５７】
ＡＳＯが投与前に脂質粒子と混合される、請求項４０または４１に記載の使用。
【請求項５８】
ＡＳＯが投与前にリポソームに被包される、請求項４０または４１に記載の使用。
【請求項５９】
（ａ）配列番号１〜２３および配列番号４６〜４９のうち１つまたは複数から選択される配列を有するアンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）、ならびに（ｂ）ドセタキセルを含む、組合せ療法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、モノカルボン酸トランスポーター４（ＭＣＴ４）の発現を調節する化合物、組成物および方法を提供する。詳細には、本発明は、ヒトＭＣＴ４  ｍＲＮＡ発現を調節することができるアンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）、ならびにそれらの使用、および各種がんを含む各種徴候の治療方法に関する。詳細には、本発明は、去勢抵抗性前立腺がん（ＣＲＰＣ）を含む前立腺がんなどのがんの療法および治療方法に関する。
【０００２】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１５年１１月３０日出願、表題「ＡＮＴＩＳＥＮＳＥ  ＯＬＩＧＯＮＵＣＬＥＯＴＩＤＥＳ  ＡＳ  ＭＯＮＯＣＡＲＢＯＸＹＬＡＴＥ  ＴＲＡＮＳＰＯＲＴＥＲ  ４  ＴＨＥＲＡＰＥＵＴＩＣ  ＣＯＭＰＯＳＩＴＩＯＮＳ  ＡＮＤ  ＭＥＴＨＯＤＳ  ＦＯＲ  ＴＨＥＩＲ  ＵＳＥ  ＩＮ  ＴＨＥ  ＴＲＥＡＴＭＥＮＴ  ＯＦ  ＣＡＮＣＥＲ」の米国仮特許出願第６２／２６０，８３７号の利益を主張するものである。
【背景技術】
【０００３】
前立腺がんは最も一般的な非皮膚がんであり、西洋諸国における男性のがん関連死の原因第２位である（シーゲル  Ｒ（Ｓｉｅｇｅｌ  Ｒ）、ら、２０１２年、６２巻（１号）、ｐ．１０〜２９）。前立腺がんは、初期にはアンドロゲン依存性であり、アンドロゲン除去療法（ＡＤＴ）により顕著な腫瘍退縮が誘導されうるが、ＡＤＴに対する抵抗性が必然的に生じ、去勢抵抗性前立腺がん（ＣＲＰＣ）につながる。ＣＲＰＣを治療するための現行の標準的ケアは、ドセタキセルベースの全身化学療法であり、ミトキサントロンベースの療法と比較して患者の全生存率を約２ヶ月増加させる（ペトリラック  ＤＰ（Ｐｅｔｒｙｌａｋ  ＤＰ）、ら、ニュー  イングランド  ジャーナル  オブ  メディスン（Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ．）、２００４年、３５１巻（１５号）ｐ．１５１３〜１５２０；タノック  ＩＦ（Ｔａｎｎｏｃｋ  ＩＦ）、ら、ニュー  イングランド  ジャーナル  オブ  メディスン（Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ．）、２００４年、３５１巻（１５号）ｐ．１５０２〜１５１２）。近年、シプロイセルＴ、カバジタキセル、アビラテロン、ＭＤＶ３１００およびラジウム２２３が、より長期の全生存率ベネフィットを示しており、ＣＲＰＣの治療用にＦＤＡの承認を受けている（ビシャー  Ｍ（Ｂｉｓｈｒ  Ｍ）およびサード  Ｆ（Ｓａａｄ  Ｆ）、ネイチャー  レビューズ  ウロロジー（Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｕｒｏｌ．）、２０１３年、１０巻（９号）ｐ．５２２〜５２８）。転移性去勢抵抗性前立腺がん（ｍＣＲＰＣ）治療の有効性は、エンザルタミド（Ｎｉｎｇら、２０１３）およびアビラテロン（デボーノ（ｄｅ  Ｂｏｎｏ）ら、２０１１年）などの、アンドロゲン受容体（ＡＲ）シグナル伝達軸を標的とするより強力な化学治療薬を使用することにより近年改善されてきてはいるものの、患者の全生存率はわずかに増加したのみである（バドレイシン（Ｂａｄｒｉｓｉｎｇ）ら、２０１４年；ロリオ（Ｌｏｒｉｏｔ）ら、２０１３年；タノック（Ｔａｎｎｏｃｋ）ら、２００４年）。さらに、このような薬物のさらなる改善型により、前立腺腺癌が、現時点では不治の疾患のサブタイプである神経内分泌前立腺がん（ＮＥＰＣ）に分化転換するのが促進される可能性があると考えられる（ベルトラン（Ｂｅｌｔｒａｎ）ら、２０１１年；ナダル（Ｎａｄａｌ）ら、２０１４年；ユアン（Ｙｕａｎ）ら、２００７年）。しかし、これらの薬物にはいずれも治癒力がなく、全生存率を徐々にしか改善しない。より有効な治療標的および薬物、特に転移性ＣＲＰＣおよびｍＣＲＰＣの分子ドライバーを標的とするものを確立することが、疾患管理および患者生存の改善にきわめて重要である（リン  Ｄ（ＬｉｎＤ）、ら、カレント  オピニオン  イン  ウロロジー（Ｃｕｒｒ  Ｏｐｉｎ  Ｕｒｏｌ．）、２０１３年、２３巻（３号）ｐ．２１４〜２１９）。
【０００４】
がんの再プログラムされたエネルギー代謝を標的とすることで、有効な治療介入のための独自の手法が与えられる、という証拠が増加している（ザング（Ｚｈａｎｇ）およびヤン（Ｙａｎｇ）、２０１３年）。グルコース利用において、がん細胞は概して、正常な休止細胞とは異なり、乳酸産生につながる解糖を優先する、すなわちこれは好気的解糖またはワールブルグ効果（ワールブルグ（Ｗａｒｂｕｒｇ）、１９５６年）と呼ばれるプロセスである。これが、原発および転移性がんのほぼ普遍的な特性であるグルコース消費の上昇につながる。さらに、これもまた乳酸産生の上昇につながるグルタミンの異常利用が、がんに高度に共通することが観察されている（クーチェクポール（Ｋｏｏｃｈｅｋｐｏｕｒら）、２０１２年）。これらの代謝エネルギー経路により、がん細胞による微小環境への乳酸分泌が増加し、組織浸潤／転移、血管新生および低酸素への応答を含む、乳酸で刺激される複数の発癌プロセスが促進される（チョイ（Ｃｈｏｉ）ら、２０１３年；チョイ（Ｃｈｏｉ）ら、２０１４年；ドハティー（Ｄｏｈｅｒｔｙ）およびクリーブランド（Ｃｌｅｖｅｌａｎｄ）、２０１３年；ウッラ（Ｕｌｌａｈ）ら、２００６年）。さらに、乳酸により誘導されるがん細胞微小環境の酸性化（ｐＨ６．０〜６．５まで）により、局所的な宿主抗がん免疫が抑制されうる（チョイ（Ｃｈｏｉ）ら、２０１３年；パークス（Ｐａｒｋｓ）ら、２０１３）。がんによりグルコース代謝が増強される現象は、１８Ｆ−フルオロデオキシグルコースポジトロン断層撮影（ＦＤＧ−ＰＥＴ）で臨床的に、最も一般的に活用されている。この画像化技術は概して、前立腺がんには使用されない（ジャバー（Ｊａｄｖａｒ）、２００９年）が、ＡＲシグナル伝達および治療抵抗性への進行により前立腺がん細胞のグルコース代謝が増大することを示唆する証拠が存在する（テナクーン（Ｔｅｎｎａｋｏｏｎ）ら、２０１４年；ヴァズ（Ｖａｚ）ら、２０１２年）。したがって、好気的解糖経路を標的とすることは、進行性前立腺がんを治療するのに有効となりうる。
【０００５】
モノカルボン酸トランスポーター（ＭＣＴ）ファミリーは、乳酸および代謝に関するその他のモノカルボン酸の輸送に関与する細胞膜トランスポータータンパク質からなる。具体的には、細胞での乳酸／Ｈ＋の排出は、ＭＣＴ４（ＳＬＣ１６Ａ３）により主に媒介されると考えられている（ダイマー（Ｄｉｍｍｅｒ）ら、２０００年）。ＭＣＴ４の発現は、高度に解糖を行う細胞に関連しており（ヘイルストラップ（Ｈａｌｅｓｔｒａｐ）、２０１３年；マンニングフォックス（Ｍａｎｎｉｎｇ  Ｆｏｘ）ら、２０００年；ウッラ（Ｕｌｌａｈ）ら、２００６年）、また、腫瘍におけるＭＣＴ４の発現上昇は、前立腺がんを含む（ハオ（Ｈａｏ）ら、２０１０；ペルトガ−ゴメス（Ｐｅｒｔｅｇａ−Ｇｏｍｅｓ）ら、２０１１年）複数のがん型における患者の予後不良に関連するため臨床的に意義がある（フィセル（Ｆｉｓｅｌ）ら、２０１３年；リサンチ（Ｌｉｓａｎｔｉ）ら、２０１３年；オオノ（Ｏｈｎｏ）ら、２０１４年）。さらに、ＭＣＴ４発現の上昇は、前立腺がんの進行を促進するがん−間質相互作用において重要である可能性がある（サニータ（Ｓａｎｉｔａ）ら、２０１４年）。この情報は、がんにより生成される乳酸のがん増殖を促進する能力と併せて、ＭＣＴの発現または機能を阻害することで、多様な新生物に対する有望な治療戦略がもたらされることを示唆している（マーシン（Ｍａｒｃｈｉｑ）ら、２０１５年）。しかし、ＭＣＴ４により媒介される乳酸排出を特異的に標的とする治療戦略は未だ存在しない。
【０００６】
去勢抵抗性前立腺がん（ＣＲＰＣ）治療における治療選択肢は、患者生存を改善する新しい薬剤を近年ＦＤＡが承認していることによりかなり変化してきている。具体的には、第２世代アンドロゲン受容体アンタゴニストであるエンザルタミド（ＥＮＺ）が、ドセタキセル後、およびより最近ではドセタキセル前環境で転移性ＣＲＰＣを治療するのに承認されている。しかし、臨床的実施から２年以内に、ＥＮＺ抵抗性が生じたことが患者の大部分で明らかとなり（クレーセンス（Ｃｌａｅｓｓｅｎｓ）ら、２０１４年）、現在まで既知の療法はＥＮＺ抵抗性ＣＲＰＣに対し有効であることが示されていなかった。したがって、ＥＮＺ抵抗性ＣＲＰＣを有効に抑制しうる新規の治療剤が有用であろう。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は一部において、ＭＣＴ４アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）（配列番号１〜２３および配列番号４６〜５０）によるＭＣＴ４発現の阻害が、がんの治療に有用でありうるという発見に基づいている。特定のＡＳＯによるＭＣＴ４発現の阻害が、がん細胞の増殖低下につながる。さらに、その増殖低下が去勢抵抗性前立腺がん（ＣＲＰＣ）に及ぶ。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
第１の態様において、がん細胞の治療のための組成物、および配列番号１〜２３または配列番号４６〜５０から選択される１つまたは複数のオリゴヌクレオチドを細胞に投与するステップを含む方法が提供される。
【０００９】
さらなる態様において、（ａ）配列番号１〜２３および配列番号４６〜５０のうち１つまたは複数のオリゴヌクレオチドから選択されうるアンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）；ならびに（ｂ）薬学的に許容される担体を含む医薬組成物が提供される。
【００１０】
さらなる態様によれば、（ａ）本明細書に記載されるアンチセンスオリゴヌクレオチド配列および薬学的に許容される担体、ならびに（ｂ）ＭＣＴ４活性を調節するための、その使用説明書を含む商用パッケージが提供される。
【００１１】
さらなる態様において、（ａ）配列番号１〜２３または配列番号４６〜５０のオリゴヌクレオチドから選択されうるＡＳＯ、および（ｂ）がんの治療のための説明書を含む商用パッケージが提供される。
【００１２】
さらなる態様において、配列番号１〜２３および配列番号４６〜４９のうち１つまたは複数から選択される配列を有しうるアンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）を投与するステップを含む、がんを治療する方法が提供される。
【００１３】
さらなる態様において、配列番号１〜２３および配列番号４６〜４９のうち１つまたは複数から選択される配列を有するＭＣＴ４アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）を投与するステップを含む、がんを治療する方法が提供される。
【００１４】
さらなる態様において、オリゴヌクレオチドが以下の、（ａ）ＴＣＣＣＡＴＧＧＣＣＡＧＧＡＧＧＧＴＴＧ（配列番号１）；（ｂ）ＧＴＣＣＣＧＧＡＡＧＡＣＧＣＴＣＡＧＧＴ（配列番号２）；（ｃ）ＡＡＧＧＡＣＧＣＡＧＣＣＡＣＣＡＴＧＣＣ（配列番号３）；（ｄ）ＴＴＧＧＣＧＴＡＧＣＴＣＡＣＣＡＣＧＡＡ（配列番号４）；（ｅ）ＡＧＡＴＧＣＡＧＡＡＧＡＣＣＡＣＧＡＧＧ（配列番号５）；（ｆ）ＣＣＡＣＴＣＴＧＧＡＡＴＧＡＣＡＣＧＧＴ（配列番号６）；（ｇ）ＧＴＡＧＧＡＧＡＡＧＣＣＡＧＴＧＡＴＧＡＣ（配列番号７）；（ｈ）ＡＧＣＡＴＧＧＣＣＡＧＣＡＧＧＡＴＧＧＡ（配列番号８）；（ｉ）ＧＧＣＴＧＧＡＡＧＴＴＧＡＧＴＧＣＣＡＡ（配列番号９）；（ｊ）ＣＡＴＧＣＣＧＴＡＧＧＡＧＡＴＧＣＣＡＡ（配列番号１０）；（ｋ）ＣＴＣＡＧＧＣＴＧＴＧＧＣＴＣＴＴＴＧＧ（配列番号１１）；（ｌ）ＴＡＧＣＧＧＴＴＣＡＧＣＡＴＧＡＴＧＡ（配列番号１２）；（ｍ）ＡＧＣＡＣＧＧＣＣＣＡＧＣＣＣＣＡＧＣＣ（配列番号１３）；（ｎ）ＧＡＧＣＴＣＣＴＴＧＡＡＧＡＡＧＡＣＡＣＴ（配列番号１４）；（ｏ）ＣＡＧＧＡＴＧＧＡＧＧＡＧＡＴＣＣＡＧＧ（配列番号１５）；（ｐ）ＡＧＡＣＣＣＣＣＣＡＣＡＡＧＣＡＴＧＡＣ（配列番号１６）；（ｑ）ＧＡＡＧＴＴＧＡＧＴＧＣＣＡＡＡＣＣＣＡＡ（配列番号１７）；（ｒ）ＣＣＣＧＴＴＧＧＣＣＡＴＧＧＧＧＣＧＣＣ（配列番号１８）；（ｓ）ＧＣＣＡＧＣＣＣＧＴＴＧＧＣＣＡＴＧＧＧ（配列番号１９）；（ｔ）ＡＧＧＡＡＧＡＣＡＧＧＧＣＴＡＣＣＴＧＣ（配列番号２０）；（ｕ）ＧＣＡＣＡＣＡＧＧＡＡＧＡＣＡＧＧＧＣＴ（配列番号２１）；（ｖ）ＣＡＧＧＧＣＡＣＡＣＡＧＧＡＡＧＡＣＡＧ（配列番号２２）；（ｗ）ＣＡＧＣＡＧＴＴＧＡＧＣＡＧＣＡＧＧＣＣ（配列番号２３）；（ｘ）ＡＴＧＧＣＣＡＧＧＡＧＧＧＴＴＧ（配列番号４６）；（ｙ）ＣＡＴＧＧＣＣＡＧＧＡＧＧＧＴＴ（配列番号４７）；（ｚ）ＣＣＡＴＧＧＣＣＡＧＧＡＧＧＧＴ（配列番号４８）；および（ａａ）ＣＣＣＡＴＧＧＣＣＡＧＧＡＧＧＧ（配列番号４９）から選択される配列を有しうる、アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）が提供される。
【００１５】
さらなる態様において、（ａ）配列番号１〜２３および配列番号４６〜４９のうち１つまたは複数から選択される配列を有するアンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）、ならびに（ｂ）薬学的に許容される担体を含む医薬組成物が提供される。
【００１６】
さらなる態様において、がんを治療するための、配列番号１〜２３および配列番号４６〜４９のうち１つまたは複数から選択される配列を有するアンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）の使用が提供される。
【００１７】
さらなる態様において、がんを治療するための医薬の製造における、配列番号１〜２３および配列番号４６〜４９のうち１つまたは複数から選択される配列を有するアンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）の使用が提供される。
【００１８】
さらなる態様において、（ａ）配列番号１〜２３および配列番号４６〜４９のうち１つまたは複数から選択される配列を有するアンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）、ならびに（ｂ）ドセタキセルを含む組合せ療法が提供される。組合せ療法は、薬学的に許容される担体または賦形剤をさらに含んでいてよい。
【００１９】
さらなる態様において、配列番号１〜２３および配列番号４６〜４９のうち１つまたは複数から選択される配列を有するＡＳＯ、ならびにがんの治療のための説明書を含む商用パッケージが提供される。
【００２０】
アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）は、配列番号１〜２３または配列番号４６〜４９の配列を有しうる。アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）は配列番号１の配列を有しうる。アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）は配列番号２の配列を有しうる。アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）は配列番号３の配列を有しうる。アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）は配列番号４の配列を有しうる。アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）は配列番号５の配列を有しうる。アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）は配列番号６の配列を有しうる。アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）は配列番号７の配列を有しうる。アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）は配列番号８の配列を有しうる。アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）は配列番号９の配列を有しうる。アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）は配列番号１０の配列を有しうる。アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）は配列番号１１の配列を有しうる。アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）は配列番号１２の配列を有しうる。アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）は配列番号１３の配列を有しうる。アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）は配列番号１４の配列を有しうる。アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）は配列番号１５の配列を有しうる。アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）は配列番号１６の配列を有しうる。アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）は配列番号１７の配列を有しうる。アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）は配列番号１８の配列を有しうる。アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）は配列番号１９の配列を有しうる。アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）は配列番号２０の配列を有しうる。アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）は配列番号２１の配列を有しうる。アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）は配列番号２２の配列を有しうる。アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）は配列番号２３の配列を有しうる。アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）は配列番号４６の配列を有しうる。アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）は配列番号４７の配列を有しうる。アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）は配列番号４８の配列を有しうる。アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）は配列番号４９の配列を有しうる。
【００２１】
ＡＳＯは、改変ヌクレオシド間結合をさらに含みうる。改変ヌクレオシド間結合は、ペプチド−核酸結合、モルホリノ結合、Ｎ３’〜Ｐ５’ホスホロアミデート結合、メチルホスホネート結合またはホスホロチオエート結合であってよい。改変ヌクレオシド間結合は、ペプチド−核酸結合であってよい。改変ヌクレオシド間結合は、モルホリノ結合であってよい。改変ヌクレオシド間結合は、Ｎ３’〜Ｐ５’ホスホロアミデート結合であってよい。改変ヌクレオシド間結合は、メチルホスホネート結合であってよい。改変ヌクレオシド間結合は、ホスホロチオエート結合であってよい。ＡＳＯは、改変糖部分をさらに含みうる。改変糖部分が２’−Ｏ−アルキルオリゴリボヌクレオチドであってよい。ＡＳＯは、２’ＭＯＥギャップマー改変を有しうる。ＡＳＯは、改変核酸塩基をさらに含みうる。改変核酸塩基は、５−メチルピリミジンまたは５−プロピニルピリミジンであってよい。細胞は、ヒト細胞であってよい。がんは、ＭＣＴ４の発現上昇を特徴とするものであってよい。がんは、前立腺がん、腎細胞癌、乳がん、子宮頸がん、肝がん、膀胱がん、および小細胞肺がんのうち１つまたは複数から選択されうる。がんは、前立腺がん、腎細胞癌、乳がん、子宮頸がん、肝がん、および膀胱がんのうち１つまたは複数から選択されうる。がんは、前立腺がん、腎細胞癌、乳がん、子宮頸がん、および肝がんのうち１つまたは複数から選択されうる。がんは、前立腺がん、腎細胞癌、乳がん、および子宮頸がんのうち１つまたは複数から選択されうる。がんは、前立腺がん、腎細胞癌、および乳がんのうち１つまたは複数から選択されうる。がんは、前立腺がん、および腎細胞癌のうち１つまたは複数から選択されうる。がんは、前立腺がん、および小細胞肺がんのうち１つまたは複数から選択されうる。がんは、前立腺がん、腎細胞癌、乳がん、子宮頸がん、肝がん、および小細胞肺がんのうち１つまたは複数から選択されうる。がんは、前立腺がん、腎細胞癌、乳がん、子宮頸がん、膀胱がん、および小細胞肺がんのうち１つまたは複数から選択されうる。がんは、前立腺がん、腎細胞癌、乳がん、肝がん、膀胱がん、および小細胞肺がんのうち１つまたは複数から選択されうる。がんは、前立腺がん、腎細胞癌、子宮頸がん、肝がん、膀胱がん、および小細胞肺がんのうち１つまたは複数から選択されうる。がんは、前立腺がんであってよい。前立腺がんは、去勢抵抗性前立腺がん（ＣＲＰＣ）であってよい。がんは、前立腺がん、腎細胞癌、乳がん、肝がん、および膀胱がんのうち１つまたは複数から選択されうる。前立腺がんは、エンザルタミド（ＥＮＺ）抵抗性ＣＲＰＣであってよい。がんは、転移性前立腺がんであってよい。ＡＳＯは、ＭＣＴ４のｍＲＮＡに対し実質的に相補的であってよい。ＡＳＯは、静脈内投与されうる。ＡＳＯは、組織に対し局所的に投与されうる。ＡＳＯは、投与前に脂質粒子と混合されうる。ＡＳＯは、投与前にリポソームに被包されうる。
【００２２】
ＡＳＯは、改変ヌクレオシド間結合をさらに含みうる。改変ヌクレオシド間結合は、ペプチド−核酸結合、モルホリノ結合、Ｎ３’〜Ｐ５’ホスホロアミデート結合、メチルホスホネート結合またはホスホロチオエート結合であってよい。ＡＳＯは、改変糖部分をさらに含みうる。改変糖部分は、２’−Ｏ−アルキルオリゴリボヌクレオチドであってよい。ＡＳＯは、２’ＭＯＥギャップマー改変を有しうる。ＡＳＯは、改変核酸塩基をさらに含みうる。改変核酸塩基は、５−メチルピリミジンまたは５−プロピニルピリミジンであってよい。
【００２３】
細胞は、ヒト細胞であってよい。がんは、ＭＣＴ４の発現上昇を特徴とするものであってよい。がんは、前立腺がん、腎細胞癌、乳がん、子宮頸がん、肝がん、膀胱がん、および小細胞肺がんのうち１つまたは複数から選択されうる。前立腺がんは、去勢抵抗性前立腺がん（ＣＲＰＣ）であってよい。前立腺がんは、エンザルタミド（ＥＮＺ）抵抗性ＣＲＰＣまたは転移性ＣＲＰＣ（ｍＣＲＰＣ）であってよい。
【００２４】
ＡＳＯは、ＭＣＴ４のｍＲＮＡに対し実質的に相補的であってよい。ＡＳＯは、静脈内投与されうる。ＡＳＯは、組織に対し局所的に投与されうる。ＡＳＯは、投与前に脂質粒子と混合されうる。ＡＳＯは、投与前にリポソームに被包されうる。アンチセンスオリゴヌクレオチドは、外科手術、放射線（小線源療法または外照射）、またはその他の療法（例えば、ＨＩＦＵ）とともに、ネオアジュバント療法（術前）、補助的療法（術中）、および／またはアジュバント療法（術後）として使用可能である。例えば、本明細書に記載されるＭＣＴ４アンチセンスオリゴヌクレオチドを、ドセタキセル、ＭＤＶ３１００、またはグルコース代謝調節薬（ドキシサイクリンまたはその他のミトコンドリア阻害剤を含む）と組み合わせて使用することができる。
【図面の簡単な説明】
【００２５】
【図１Ａ】図１は、バンクーバー前立腺センター組織バンク（Ｖａｎｃｏｕｖｅｒ  Ｐｒｏｓｔａｔｅ  Ｃｅｎｔｒｅ  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｂａｎｋ）で入手可能な患者由来前立腺がん試料に由来し、ＭＣＴ４発現について染色した組織マイクロアレイ（ＴＭＡ）におけるＭＣＴ４発現について示すグラフである。図１Ａは、ＭＣＴ４発現の上昇がグリーソングレードの高さと関連することを確証する棒グラフを示す。
【図１Ｂ】図１Ｂは、ＭＣＴ４発現の上昇がグリーソングレードの高さと関連することを確証する棒グラフを示す。
【図１Ｃ】図１Ｃは、血清ＰＳＡの増加により測定されたように、ＭＣＴ４が高発現することが、再発までの時間がより早いことと関連する、プロットを示す。
【図１Ｄ】図１Ｄは、長期のネオアジュバントホルモン療法（ＮＨＴ）を受けている患者およびＣＲＰＣ患者もＭＣＴ４発現の上昇を示すことを表す棒グラフを示す。
【図１Ｅ】図１Ｅは、長期のネオアジュバントホルモン療法（ＮＨＴ）を受けている患者およびＣＲＰＣ患者もＭＣＴ４発現の上昇を示すことを表す棒グラフを示す。
【図２Ａ】図２は、ＭＣＴ４発現および細胞増殖を阻害するための、インビトロでの、ＰＣ−３細胞を使用した、ＭＣＴ４を標的とするＡＳＯの有効性スクリーニングについて示すグラフである。ＭＣＴ４  ＡＳＯ＃１（配列番号１）および＃１４（配列番号５）が用量依存的にインビトロでの効果を発揮し、効果はトランスフェクションの９６時間後も持続する。図２Ａは、ＰＣ−３細胞におけるＭＣＴ４のｓｉＲＮＡでのサイレンシングにより、有意な細胞増殖阻害が示されたことを示し、ＭＣＴ４発現の阻害が潜在的な治療有効性を有しうることを示す。
【図２Ｂ】図２Ｂは、ＭＣＴ４を標的とする１０種のＡＳＯのスクリーニングにより、細胞増殖に対する阻害効果が様々であることが明らかとなり、配列＃１（配列番号１）および＃１４（配列番号５）が最も大きな阻害を示したことを示す。
【図２Ｃ】図２Ｃは、ｑＰＣＲおよびウェスタンブロットで測定したところ、ＭＣＴ４  ＡＳＯが各種レベルのＭＣＴ４ノックダウンを誘導し、ＡＳＯ＃１および＃１４が最も有効であったことを示す。
【図２Ｄ】図２Ｄは、ＭＣＴ４  ｍＲＮＡ発現と生じた細胞数の間に強い相関関係（ｐ０．００１未満）が見られたことを示し、細胞増殖に対する阻害効果がＭＣＴ４発現の減少と強く関連していることを示す（点線は９５％信頼区間を表す）。
【図２Ｅ】図２Ｅは、５ｎＭ〜２００ｎＭのＭＣＴ４  ＡＳＯのトランスフェクションにより、細胞増殖およびＭＣＴ４発現の阻害が同様に用量依存性である（ＡＳＯ＃１４でＩＣ５０＝３２ｎＭ、ＡＳＯ＃１でＩＣ５０＝５０ｎＭ）ことが示される。
【図２Ｆ】図２Ｆは、ＭＣＴ４  ＡＳＯトランスフェクション後の細胞増殖およびＭＣＴ４発現の阻害が、トランスフェクションの少なくとも９６時間後まで持続することが時間経過実験により実証されることを示す。
【図３Ａ】図３は、ＭＣＴ４  ＡＳＯ＃１（配列番号１）および＃１４（配列番号５）が、ＰＣ−３以外のヒト前立腺がん細胞に対してはインビトロで有効であるが、マウス前立腺がん細胞に対しては有効でないことを示すグラフである。図３Ａは、候補ＭＣＴ４  ＡＳＯが、ＰＣ−３細胞で観察されたものと同等のＩＣ５０値で、用量依存的にＣ４−２ヒト前立腺がん細胞の増殖およびＭＣＴ４発現も阻害できることを示す。
【図３Ｂ】図３Ｂは、候補ＭＣＴ４  ＡＳＯが、その他の細胞株で得られたものと同様のＩＣ５０値で、用量依存的にＤＵ１４５ヒト前立腺がん細胞の増殖も阻害し、細胞増殖の阻害にはＭＣＴ４発現の減少が伴うことを示す。
【図３Ｃ】図３Ｃは、候補ＭＣＴ４  ＡＳＯがＴＲＡＭＰＣ２マウス前立腺がん細胞には評価可能（ａｐｐｒｅｃｉａｂｌｅ）な効果を有さず、試験を行った最大濃度である２００ｎＭでも細胞増殖にもマウスＭＣＴ４発現レベルにも影響を及ぼさないことを示し、試験を行ったＡＳＯがヒトＭＣＴ４に特異的であり、細胞増殖の阻害がＭＣＴ４ノックダウンに関連する現象であることを示す。
【図４Ａ】図４は、候補ＭＣＴ４  ＡＳＯのトランスフェクションにより、ＰＣ−３細胞のグルコース代謝が阻害されることを示す図である。図４Ａは、トランスフェクションの４８時間後に、ＭＣＴ４  ＡＳＯにより乳酸分泌が顕著に阻害され、それに対応する細胞内乳酸の蓄積およびグルコース消費の阻害も観察される（ｕ．ｄ．＝検出不能）ことを示す。
【図４Ｂ】図４Ｂは、解糖経路、ならびに解糖および乳酸変換に関与する各種遺伝子の遺伝子発現レベルをｑＰＣＲ分析することで特徴付けられた、ＭＣＴ４ノックダウンにより引き起こされる代謝の変化についての概略図を示し、解糖における各種遺伝子の有意な発現減少により、グルコース代謝全体の減少が示唆され、ＬＤＨＡおよびＰＤＫ１の発現減少により、酸化的リン酸化のため、乳酸産生からＴＣＡサイクルにピルビン酸が再指向化（ｒｅｄｉｒｅｃｔｉｏｎ）されることが示唆される。
【図５Ａ】図５は、合計１５日間で、５日間毎日、１０ｍｇ／ｋｇのＭＣＴ４  ＡＳＯ＃１（配列番号１）、＃１４（配列番号５）、対照ＡＳＯ、または溶媒（ＰＢＳ）の腹腔内注射により治療を行い、その後２日間治療を休んだ、皮下ＰＣ−３腫瘍を有する無胸腺ヌードマウスに基づいて、インビボでの、ＰＣ−３腫瘍細胞における、ＭＣＴ４  ＡＳＯにより誘導されるＭＣＴ４発現の減少が、アポトーシスの増加および細胞増殖の阻害を特徴とするＰＣ−３腫瘍増殖の阻害と関連していたことを示すグラフである。図５Ａは、腫瘍増殖率に関してＭＣＴ４  ＡＳＯを比較した、治療日数ごとのパーセント腫瘍体積を表すプロットを示す。
【図５Ｂ】図５Ｂは、ＭＣＴ４  ＡＳＯによる治療後の、細胞アポトーシスの増加および細胞増殖の減少に起因する、パーセントカスパーゼ３陽性細胞およびパーセントＫｉ−６７陽性細胞を表す棒グラフを示す。
【図５Ｃ】図５Ｃは、ＩＨＣ染色で測定すると、ＭＣＴ４  ＡＳＯでの治療により、腫瘍におけるＭＣＴ４発現が減少したことを示す。
【図６Ａ】図６は、ＭＣＴ４を標的とするＡＳＯが、免疫細胞凝集を増大させ、インビボでの腫瘍関連免疫細胞の割合（すなわちＮＫ細胞およびＣＤ３陽性細胞）を変化させることを示すグラフである。図６Ａは、ＭＣＴ４  ＡＳＯによる治療の免疫調節効果が、このような免疫細胞凝集の程度の有意な増加を介して部分的に発揮される、棒グラフを示す。
【図６Ｂ】図６Ｂは、ＭＣＴ４  ＡＳＯでの治療により、腫瘍に関連するＮＫ細胞の割合が増加した、棒グラフを示す。
【図６Ｃ】図６Ｃは、対照と比較した、ＭＣＴ４  ＡＳＯ存在下での、活性化ＮＫ細胞のマーカーとしてのＣＤ３陽性細胞（ヌードマウスはＴ細胞を持たないため）の割合を表す棒グラフを示す。
【図７Ａ】図７は、ＭＣＴ４を標的とする候補ＡＳＯが、トランスフェクションの４８時間後にＬＮＣａＰヒト前立腺がん細胞の細胞増殖およびＭＣＴ４発現を阻害できることを示すグラフである。図７Ａは、ＭＣＴ４  ＡＳＯが、その他のヒト前立腺がん細胞株で観察されたものと同等のレベルまでＬＮＣａＰ細胞増殖を阻害できることを示す。
【図７Ｂ】図７Ｂは、細胞増殖の減少がＭＣＴ４発現の減少と関連していることを示し、ＭＣＴ４  ＡＳＯの阻害効果がアンドロゲン受容体状態よりもむしろ解糖の表現型に関連する可能性があることを示唆している。
【図８Ａ】図８は、候補ＭＣＴ４  ＡＳＯがインビトロでＰＣ−３細胞の遊走および組織浸潤を阻害できることを示すグラフである。図８Ａは、観察された遊走細胞数の減少が示すように、候補ＭＣＴ４  ＡＳＯでのＰＣ３細胞処理により、トランスウェル（ｔｒａｎｓｗｅｌｌ）を通る細胞遊走の阻害がもたらされたことを示す。
【図８Ｂ】図８Ｂは、ＭＣＴ４  ＡＳＯでの処理により、ＰＣ−３細胞のマトリゲルに浸潤する能力も阻害されたことを示し、ＭＣＴ４に媒介される乳酸分泌が、がん転移において重要な役割を果たしうることを示唆している。
【図９Ａ】図９は、ＭＣＴ４  ＡＳＯによるヌードマウスの治療では、動物体重により測定したところ、宿主毒性が引き起こされなかったことを示すグラフである。図９Ａは、インビボでの研究期間を通しての動物体重のプロットを示し、ＭＣＴ４  ＡＳＯでの治療は各群の平均動物体重に有意な影響を及ぼさなかった。
【図９Ｂ】図９Ｂは、個々の動物体重も、治療期間を通して安定なままであったことを示す。
【図１０Ａ】図１０は、配列番号５のＡＳＯ、メトホルミン、ドキシサイクリン、ドセタキセルおよびＭＤＶ３１００による処理の４８時間後に評価した総生細胞数の比較について示すグラフであり、配列番号５のＡＳＯを、メトホルミン、ドキシサイクリン、ドセタキセルおよびＭＤＶ３１００のそれぞれ単独、ならびに配列番号５のＡＳＯと組み合わせたものと比較して試験した。図１０Ａは、配列番号５のＡＳＯおよびメトホルミンについての総生ＰＣ３細胞数を示す。
【図１０Ｂ】図１０Ｂは、配列番号５のＡＳＯおよびドキシサイクリンについての総生ＰＣ３細胞数を示す。
【図１０Ｃ】図１０Ｃは、配列番号５のＡＳＯおよびドセタキセルについての総生ＰＣ３細胞数を示す。
【図１０Ｄ】図１０Ｄは、配列番号５のＡＳＯおよびＭＤＶ３１００についての総生Ｃ４−２細胞数を示す。
【発明を実施するための形態】
【００２６】
本明細書で直接定義されない語はいずれも、本技術分野内で理解されるように、これらの語と一般的に関連する意味を有すると理解されるものとする。実施形態の組成物、機器、方法など、およびそれらの作製または使用の仕方について記載することにおいて当業者にさらなる手引きを提供するため、特定の語について以下で、または明細書の別の箇所で論じる。１つを超える方法で同じ事物について述べる可能性があることが理解されよう。その結果、本明細書で論じる語のうちいずれか１つまたは複数について、代替の言い回しおよびシノニムを使用することがある。本明細書で語について詳しく述べるまたは論じるか否かについては重視すべきでない。いくつかのシノニムまたは代用可能な方法、物品などが提供される。明記されない限り、１つまたは数種のシノニムまたは同等物の記載によりその他のシノニムまたは同等物の使用が除外されることはない。明細書において、語の例を含む例の使用は説明のためだけのものであり、本明細書に記載される実施形態の範囲および意味を限定するものではない。
【００２７】
がん細胞を「治療する」方法が提供され、ここで、治療する、は細胞の増殖を防止すること、がんに関連する症状を寛解させること、およびがん細胞を根絶することを包含することを意図している。本明細書で使用される場合、「治療する」という語は、化合物の早期投与または後期投与を含む、がんの任意のステージでの投与を含むことも意図している。「寛解させる」という語が、がんを、がんに罹患した対象にとってより許容できるものにする（例えば、腫瘍量を減少させることにより）見込みを含むことを意図していることを、当業者は理解している。がんに関する「根絶」という語が、対象から全体的にまたは部分的にがん細胞が除去されることを含むことも、当業者は理解している。したがって、本明細書で使用される場合、「治療」は、対象におけるがん細胞増殖の防止、がんに関連する症状の寛解、対象からのがんの根絶、またはこれらの組合せを指しうる。
【００２８】
アンチセンスオリゴヌクレオチド化合物は、通常一本鎖ＲＮＡ化合物であり、標的ｍＲＮＡ分子などの相補的ＲＮＡ化合物に結合し、正常な翻訳機構を立体的に妨害することにより相補的ＲＮＡ化合物からの翻訳を遮断する。このプロセスは、ＲＮＡ干渉プロセスを媒介するのにさらなる酵素が必要であるわけでも関与するわけでもないという点において、通常は受動的である。望ましい遺伝子の発現を阻害するための、アンチセンスＲＮＡ化合物の特異的な標的化には概して、望ましい遺伝子に対し相同な相補的配列を有するようにアンチセンスＲＮＡ化合物を設計することが伴いうる。ＲＮＡ干渉効果には完全な相同性が必要なわけではない。本発明の一実施形態で、アンチセンスＲＮＡ化合物は、ＭＣＴ４タンパク質の翻訳の減少を引き起こす、ＭＣＴ４  ｍＲＮＡ転写物に結合するのに十分な相補的相同性を有する任意のＲＮＡ化合物を含む。本発明の別の実施形態では、アンチセンスＲＮＡ化合物は、ＭＣＴ４タンパク質の翻訳の減少を引き起こす、ＭＣＴ４  ｍＲＮＡ転写物に結合するのに十分な相補的相同性を有する任意のＲＮＡ化合物を含む。アンチセンス化合物は、特にインビボで使用するため、オリゴヌクレオチドの安定性を増強するように改変されていてよい。アンチセンスＲＮＡ化合物を設計および最適化する方法についての数多くの例が文献に記載されている（すなわちパン（Ｐａｎ）およびクロースン（Ｃｌａｗｓｏｎ）、２００６年；パツェル（Ｐａｔｚｅｌ）、２００７年；ピーク（Ｐｅｅｋ）およびベールケ（Ｂｅｈｌｋｅ）、２００７年）。標的遺伝子の発現を調節するのに、アンチセンス化合物には完全な配列相同性が必要なわけではない。本発明者らは、ＭＣＴ４の発現を調節するアンチセンス化合物の非限定的な例を提供する。
【００２９】
本明細書に記載される（表ＡおよびＢを参照のこと）、または本明細書に記載されるように使用するためのアンチセンスオリゴヌクレオチド配列は、埋込剤、移植片、プロテーゼ、ステントなどの医療機器または器具により投与可能である。また、このような化合物または組成物を含みかつ放出することを意図した埋込剤が考案されてもよい。一例は、一定期間かけて化合物を放出するのに適した高分子物質製の埋込剤であろう。
【００３０】
試験を行ったＭＣＴ４  ＡＳＯ全てについての阻害パーセントを以下の表Ａに示す。概して、ＭＣＴ４  ＡＳＯでは５０％阻害を、活性であるとみなした。
【００３１】
【表１】
2019500334.tif 000003
【００３２】
ＭＣＴ４を標的とするアンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）が本明細書で提供される。細胞に投与するためのＭＣＴ４  ＡＳＯの使用は、本明細書に記載される方法に包含される。実施例セクションで使用したＡＳＯの一部は、改変ヌクレオシド間結合を有していた。具体的には、ＡＳＯは全てのヌクレオシド間にホスホロチオエート結合を有していた。ＭＣＴ４  ＡＳＯは、改変ホスホロチオエート結合を有する１６〜２０ｍｅｒのオリゴヌクレオチドである。しかし、ＭＣＴ４  ＡＳＯの変化形は、未改変のホスホジエステル結合、または改変された結合を部分的に（すなわち１〜１９の間の任意の整数個のホスホロチオエート結合またはその他の改変結合を）有していてもよい。代替となる改変も当技術分野で既知である。
【００３３】
ＭＣＴ４を標的とする鎖長１６〜２０ｍｅｒのアンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）が本明細書で提供される。しかし、配列番号１〜２３または配列番号４６〜４９の、１６、１９または２０個のヌクレオチドを含む生物的に活性なオリゴヌクレオチドも使用可能であることが当業者には明白であろう。
【００３４】
ホスホロチオエートオリゴヌクレオチド結合の改変では、非架橋酸素のうち１つを硫黄で置き換えることによりリン酸結合を変化させる。ホスホロチオエート結合の導入により、オリゴヌクレオチドの化学的特性が変化する。具体的には、ホスホロチオエート結合の追加でヌクレアーゼによるオリゴヌクレオチドの分解が減少し、それによりインサイチューでの半減期が増加する。したがって、細胞または生体マトリックスに導入すると特定の転写物の発現をサイレンシングするように標的核酸と相互作用しうるアンチセンスオリゴヌクレオチドに、この改変は特に有用である。ホスホロチオエート結合を含むオリゴヌクレオチドは、翻訳の直接遮断、または標的転写物の酵素による分解（例えば、ＲＮａｓｅＨによる）を可能にすることいずれかを介してこの偉業を達成する。
【００３５】
ホスホロチオエート結合により半減期の改善がもたらされるものの、これらの結合をオリゴヌクレオチドに導入することで、アンチセンスオリゴヌクレオチドとしての機能に対する制限も導入されうる。各ホスホロチオエート結合は各結合においてキラル中心を作り出し、それにより、合成中に生成されるオリゴヌクレオチドの複数の異性体が生じる可能性があり、異性体は異なる特徴および機能特性を有しうる。しかし、異性体効果の大部分は、改変の位置取りを慎重にすることにより、またはホスホロチオエート結合と併せてさらなる改変を使用することにより軽減することができる。
【００３６】
オリゴヌクレオチド部分における１つまたは複数のホスホロチオジエステル結合は、結合における２つの架橋酸素原子の一方または両方を、−ＮＨ、−ＣＨ２、または−Ｓなどのアナログで置き換えることにより改変することができる。当技術分野で既知のその他の酸素アナログも使用可能である。
【００３７】
本明細書で使用される場合、「改変オリゴヌクレオチド」は、置換または改変されたオリゴヌクレオチドを含むことを意図する。天然に存在する主要な塩基であるアデニン、グアニン、シトシン、およびチミン、または、イノシン、デオキシイノシン、およびヒポキサンチンなどのその他の天然の塩基に加えて、その他の数多くの改変が存在する。例えば、安定性および標的とのハイブリダイゼーションを改善するため、アイソスターであるプリン２’デオキシ−フラノシドアナログ、２’−デオキシネブラリンまたは２’デオキシキサントシン、またはその他のプリン、および５−メチルピリミジンまたは５−プロピニルピリミジンなどのピリミジンアナログも利用可能である。
【００３８】
本明細書で使用される場合、「改変糖」は、オリゴヌクレオチド部分について論じる場合、リボース、グルコース、スクロース、もしくはガラクトース、または任意のその他の糖となるように改変されたか置き換えられた糖である。あるいは、オリゴヌクレオチドは、その糖のうち１つまたは複数が２’位、すなわち２’アルキルまたは２’−０−アルキルにおいて置換または改変されていてもよい。２’−Ｏ−アリル糖の一例は２’−Ｏ−メチルリボヌクレオチドである。さらに、オリゴヌクレオチドは、その糖のうち１つまたは複数が、α−アノマー糖を形成するように置換または改変されていてもよい。
【００３９】
本明細書で使用される場合、「第２世代」オリゴヌクレオチドは、細胞ヌクレアーゼによる分解に対し抵抗性であり、第１世代ＡＳＯと等しいかこれより大きい親和性で標的ｍＲＮＡと特異的にハイブリダイズすることができるオリゴヌクレオチドとして定義することができる。第２世代ＡＳＯの一例は、２’−Ｏ−（２−メトキシエチル）−ＲＮＡ（２’ＭＯＥギャップマー改変）である。２’−ＭＯＥギャップマーでは、５’および３’末端は分解を防ぐように２’−ＭＯＥ改変ヌクレオチドを有していてよいが、５’および３’末端間のギャップは未改変のホスホジエステル結合であってよい。ＡＳＯを改善するため、その他の数多くの化学修飾が開発されている。例えば、モルホリノ、Ｎ３’〜Ｐ５’ホスホロアミデート、およびメチルホスホネート化学修飾が当技術分野で知られている（Ｎ．ディアス（Ｎ．Ｄｉａｓ）、およびＣ．Ａ．ステイン（Ｃ．Ａ．Ｓｔｅｉｎ）、２００２年）。さらに、ペプチド核酸（ＰＮＡ）も使用可能である。
【００４０】
試験を行った、配列番号１の１６ｍｅｒトランケーションのアラインメントを、それらのＭＣＴ４阻害％とともに表Ｂに示す。
【００４１】
【表２】
2019500334.tif 000004
【００４２】
本明細書に記載される化合物は単独であってもよく、トレーサー化合物、リポソーム、糖担体、高分子担体、または当業者にとって明白であるように、その他の薬剤もしくは賦形剤と結合しているかこれらと組み合わせてもよい。代替的な実施形態では、このような化合物はさらなる医薬をさらに含んでいてよく、ここで、このような化合物は薬理学的有効量で存在していてよい。
【００４３】
本明細書で使用される場合、「医薬」という語は、患者または試験対象に投与してよく、患者または試験対象において効果を生じうる組成物を指す。効果は化学的でも、生物学的でも物理的でもよく、患者または試験対象はヒトであっても、げっ歯類（例えば、トランスジェニックマウス、マウスまたはラット）、イヌ、ネコ、ウシ、ヒツジ、ウマ、ハムスター、モルモット、ウサギまたはブタなどの非ヒト動物であってもよい。医薬は、有効な化学的実体単独から構成されていても、薬学的に許容される賦形剤と組み合わせてもよい。
【００４４】
「薬学的に許容される賦形剤」という語には、生理的に適合する任意のおよび全ての溶媒、分散媒、コーティング、抗細菌剤、抗菌剤または抗真菌剤、等張剤および吸収遅延剤などが含まれていてよい。賦形剤は、静脈内、腹腔内、筋肉内、皮下、髄腔内、局所または経口投与に適していてよい。賦形剤には、無菌の注射用溶液または分散媒を即座に調製するための、無菌の水溶液または分散媒が含まれていてよい。医薬調製のためのこのような媒質の使用については、当技術分野で既知である。
【００４５】
本明細書に記載される一部の実施形態による組成物または化合物は、様々な既知の経路のいずれかで投与することができる。化合物の投与に適し得る方法の例には、経口、静脈内、吸入、筋肉内、皮下、局所、腹腔内、直腸内または膣内坐剤、舌下などが含まれる。本明細書に記載される化合物は、無菌の水溶液として投与してもよく、脂溶性賦形剤中で、または適切な別の溶液、懸濁液、パッチ、錠剤もしくはペースト形式で投与してもよい。本明細書に記載される化合物を含む組成物は、吸入による投与用に製剤化されていてもよい。例えば、化合物を、エアロゾル中に分散させるように賦形剤と組み合わせることができる。吸入製剤の例は当業者に既知である。取り込みもしくは代謝を助けるため、または放出制御製剤などにおいて宿主内での分散を遅らせるため、その他の薬剤が本明細書に記載される化合物と組み合わせて含まれていてもよい。放出制御製剤の例は当業者に既知であり、マイクロカプセル化、糖またはポリマーマトリックス中の塞栓などを含んでいてよい。製剤を作製するための、当技術分野で既知のその他の方法が、例えば、「レミントンの調剤科学（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）」、（第１９版）、編Ａ．ジェンナロ（Ａ．Ｇｅｎｎａｒｏ）、１９９５年、マック出版社（Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ）、イーストン（Ｅａｓｔｏｎ）、ペンシルバニア（Ｐａ）に記載されている。
【００４６】
本明細書に記載される一部の実施形態の組成物または化合物の投与量は、投与経路（経口、静脈内、吸入など）、および組成物または化合物が投与される形態（溶液、放出制御など）に応じて変動しうる。適切な投与量の決定は当業者の能力の範囲内である。本明細書で使用される場合、化合物の「有効量」、「治療有効量」、または「薬理学的有効量」は、化合物が使用される期間中に送達される治療レベルの化合物をもたらす濃度に存在する、本明細書に記載されるＡＳＯの量を指す。これは、送達様式、投薬期間、化合物を投与される対象の年齢、体重、全身の健康状態、性別および食事によって決まりうる。有効量を決定する方法は当技術分野で既知である。ＭＣＴ４発現の阻害が望ましい標的組織または細胞への、本明細書に記載される化合物の送達を制限することが場合によって有益でありうることが理解される。本明細書に記載される化合物を望ましい組織または細胞型に対して標的化させることが望ましい場合があることも理解される。このように、本明細書に記載される化合物は標的とする部分に結合することができる。化合物は細胞取り込み部分に結合することもできる。標的とする部分が細胞取り込み部分として機能する場合もある。
【００４７】
概して、本明細書に記載されるアンチセンスオリゴヌクレオチドは、実質的な毒性を引き起こすことなく使用することができる。本明細書に記載される化合物の毒性は、例えば、細胞培養物または実験動物で試験して、治療指数、すなわち、ＬＤ５０（集団の５０％を死に至らしめる用量）とＬＤ１００（集団の１００％を死に至らしめる用量）の間の比を決定することによる、標準的な技術を使用して決定可能である。しかし、重度の疾患状態などの一部の状況では、実質的な過剰量の組成物を投与することが適切である場合がある。本明細書に記載される一部のアンチセンスオリゴヌクレオチドは、ある濃度では毒性となる場合がある。毒性および非毒性濃度を決定するのに、用量設定試験を使用することができる。毒性は、細胞株全体での特定のアンチセンスオリゴヌクレオチドの特異性を試験することでも評価可能である。化合物がその他の組織に対して何らかの効果を有するかどうかについて示すため、動物研究が使用可能である。
【００４８】
一部の実施形態で、本明細書に記載される少なくとも１種のアンチセンスオリゴヌクレオチドが、例えば、これに限定されないが、がん細胞を治療するために使用可能である。本明細書で使用される場合、「少なくとも１つの」は、１つまたは複数、すなわち１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１，２２、２３、２４、２５、２６、２７などを意味することを意図している。
【００４９】
一部の実施形態で、本明細書に記載されるアンチセンスオリゴヌクレオチドは、例えば、これに限定されないが、ＭＣＴ４の発現上昇が観察される悪性疾患から選択される少なくとも１つの徴候に対するその他の治療方法と組み合わせて使用可能である。これらには、ヒトを含む哺乳動物における、前立腺がん、腎細胞癌、乳がん、子宮頸がん、肝がん、膀胱がん、および小細胞肺がんが含まれるが、これらに限定されない。アンチセンスオリゴヌクレオチドは、外科手術、放射線（小線源療法または外照射）、またはその他の療法（例えば、ＨＩＦＵ）とともに、ネオアジュバント療法（術前）、補助的療法（術中）、および／またはアジュバント療法（術後）として使用可能である。例えば、本明細書に記載されるＭＣＴ４アンチセンスオリゴヌクレオチドを、ドセタキセル、ＭＤＶ３１００、またはグルコース代謝調節薬（ドキシサイクリンまたはその他のミトコンドリア阻害剤を含む）と組み合わせて使用することができる。
【００５０】
方法および材料
本明細書に記載される実施例に関して、以下の方法および材料を使用した。
【００５１】
細胞培養物
ヒトＰＣ−３およびＤＵ１４５ＣＲＰＣ細胞、ヒトＬＮＣａＰ前立腺がん細胞、ならびにマウスＴＲＡＭＰＣ２前立腺がん細胞をアメリカン  タイプ  カルチャー  コレクション（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ）（ＡＴＣＣ）より購入し、Ｃ４−２ＣＲＰＣ細胞をバンクーバー前立腺センター（Ｖａｎｃｏｕｖｅｒ  Ｐｒｏｓｔａｔｅ  Ｃｅｎｔｒｅ）、バンクーバー（Ｖａｎｃｏｕｖｅｒ）、ブリティッシュコロンビア（ＢＣ）、カナダ（Ｃａｎａｄａ）より購入した。ヒト単層培養物は１０％ウシ胎児血清（ＦＢＳ）（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  Ｈｙｃｌｏｎｅ（商標）、Ｌｏｇａｎ、ＵＴ）を補充したＲＰＭＩ−１６４０（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  Ｈｙｃｌｏｎｅ（商標）、Ｌｏｇａｎ、ＵＴ）で維持し、ＴＲＡＭＰＣ２細胞は５％ＦＢＳを補充したＤＭＥＭ（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  Ｈｙｃｌｏｎｅ（商標）、Ｌｏｇａｎ、ＵＴ）で維持した。細胞計数については、単細胞懸濁液を形成するように細胞をトリプシン処理し、ＴＣ２０  Ａｕｔｏｍａｔｅｄ  Ｃｅｌｌ  Ｃｏｕｎｔｅｒ（Ｂｉｏ−Ｒａｄ、Ｈｅｒｃｕｌｅｓ、ＣＡ）を使用して計数した。細胞生存率をトリパンブルー排除により評価した。
【００５２】
ヒト前立腺がん組織マイクロアレイ（ＴＭＡ）構築および免疫組織化学
書面による患者のインフォームドコンセント、臨床情報および施設研究の承認を得て、バンクーバー前立腺センター組織バンク（Ｖａｎｃｏｕｖｅｒ  Ｐｒｏｓｔａｔｅ  Ｃｅｎｔｒｅ  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｂａｎｋ）より入手した各種グリーソングレードを示す前立腺がん検体（ｎ＝３４２）を使用して、以前に記載された（チャン（Ｃｈｉａｎｇ）ら、２０１４年；トーマス（Ｔｈｏｍａｓ）ら、２０１１年）ようにＴＭＡを手作業で構築した。前立腺の経尿道的切除（ＴＵＲＰ）によって得たＣＲＰＣ試料を除いて、全ての検体を前立腺全摘除によって得た。酵素標識ビオチン−ストレプトアビジンシステムおよび溶媒抵抗性ＤＡＢ  Ｍａｐキット（Ｖｅｎｔａｎａ（商標））とともに、Ｖｅｎｔａｎａ（商標）自動染色装置（ｍｏｄｅｌ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒ  ＸＴ（商標）；Ｖｅｎｔａｎａ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｓｙｓｔｅｍ（商標）、Ｔｕｃｓｏｎ、ＡＺ）を使用して免疫組織化学的染色を実施した。染色強度を、熟練した病理学者が４ポイント段階で採点した。０は、いずれの腫瘍細胞にも染色がないことを示し、１は、かすかであるか限局性で、染色の存在が疑わしいことを示し、２は、少数の細胞で染色が確かな強度であることを示し、３は、大半の細胞で染色が確かな強度であることを示す。
【００５３】
抗体
以下の抗体およびコンジュゲートを使用した。ウサギ抗ＭＣＴ４抗体（Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ（商標）、Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ、ＣＡ；ＷＢ  １：４０００、ＩＨＣ  １：１００）、マウス抗ビンキュリン抗体（Ｓｉｇｍａ（商標）；ＷＢ  １：１０００）、ウサギ抗切断型カスパーゼ３抗体（Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｌｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（商標）、Ｄａｎｖｅｒｓ、ＭＡ；ＩＨＣ  １：５０）、マウス抗Ｋｉ６７抗体（Ｄａｋｏ（商標）、Ｂｕｒｌｉｎｇｔｏｎ、ＯＮ；ＩＨＣ  １：５０）、ラット抗ＣＤ３１抗体（Ｄｉａｎｏｖａ（商標）、Ｈａｍｂｕｒｇ、Ｇｅｒｍａｎｙ；ＩＨＣ  １：２０）、マウス抗汎Ｔ細胞マーカーＣＤ３抗体（Ｄａｋｏ（商標）；ＩＨＣ  １：５０）、ビオチン化マウス抗ＮＫ１．１抗体（Ｃｅｄａｒｌａｎｅ（商標）、Ｂｕｒｌｉｎｇｔｏｎ、ＯＮ；ＩＨＣ  １：１００）、ＩＲＤｙｅ８００ＣＷヤギ抗マウス抗体（Ｌｉ−Ｃｏｒ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ（商標）、Ｌｉｎｃｏｌｎ、ＮＥ；ＷＢ  １：１０，０００）、ＩＲＤｙｅ６８０ＲＤヤギ抗ウサギ抗体（Ｌｉ−Ｃｏｒ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ（商標）；ＷＢ  １：１０，０００）、ビオチン化ヤギ抗ウサギ抗体（Ｖｅｃｔｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（商標）、Ｂｕｒｌｉｎｇａｍｅ、ＣＡ；ＩＨＣ  １：２００）、ビオチン化ヤギ抗ラット抗体（Ｖｅｃｔｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（商標）；ＩＨＣ  １：２００）、およびビオチン化ヤギ抗マウス抗体（Ｖｅｃｔｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（商標）；ＩＨＣ  １：２００）。
【００５４】
ＡＳＯ設計および選択
好ましいモチーフを含む配列を選択する一方で好ましくないものを除くことにより、ヒトＭＣＴ４に対する第１世代ホスホロチオエート改変ＡＳＯを合理的に設計した（マドヴェーエワ（Ｍａｔｖｅｅｖａ）ら、２０００年）。ヒトおよびマウス遺伝子（２０塩基中少なくとも３塩基がミスマッチ）と比較した、ＭＣＴ４を標的とする配列の特異性を、ＢＬＡＳＴを使用して評価した。ヒトＭＣＴ４転写物バリアント全て（ＮＭ＿００１０４２４２２．２、ＮＭ＿００１０４２４２３．２、ＮＭ＿００１２０６９５０．１、ＮＭ＿００１２０６９５１．１、ＮＭ＿００１２０６９５２．１、およびＮＭ＿００４２０７．３）に対し完全な相補性を有する転写物の全長にわたって分布する、配列番号１、４、５、９、１１、３０、３６、３７、４０および４１の１０種の配列（表Ａを参照のこと）が選択され、Ｅｕｒｏｆｉｎｓ  ＭＷＧ  Ｏｐｅｒｏｎにより合成された。これら１０種のＡＳＯのノックダウン効率を、ｑＰＣＲおよびウェスタンブロッティングを使用して、細胞トランスフェクションから４８時間後の標的ｍＲＮＡおよびタンパク質発現を決定することにより試験した。２種の候補ＡＳＯ（＃１および＃１４−それぞれ配列番号：１および５）をさらなる研究のために選択した。配列：ＡＳＯ＃１（配列番号１）、５’−ＴＣＣＣＡＴＧＧＣＣＡＧＧＡＧＧＧＴＴＧ−３’；ＡＳＯ＃１４（配列番号５）、５’−ＡＧＡＴＧＣＡＧＡＡＧＡＣＣＡＣＧＡＧＧ−３’；公開されている非標的化対照ＡＳＯ、５’−ＣＣＴＴＣＣＣＴＧＡＡＧＧＴＴＣＣＴＣＣ−３’（ムリック（Ｍｕｌｌｉｃｋ）ら、２０１１年；サミュエル（Ｓａｍｕｅｌ）ら、２００６年）。
【００５５】
当業者は、当技術分野の一般的な知識および本明細書で提供される情報に基づいて、本明細書に記載されるＡＳＯを合成するか、本明細書に記載されるＡＳＯを改変することができるであろう。
【００５６】
ＡＳＯおよびｓｉＲＮＡトランスフェクション
６ウェルプレートで、製造業者の説明書に従い、Ｏｌｉｇｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ（商標）（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ（商標）、Ｃａｒｌｓｂａｄ、ＣＡ）を使用して、１００ｎＭのＡＳＯを細胞に４８時間トランスフェクト（別途示さない限り）するか、Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ（商標）２０００（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ（商標））を使用して、ＭＣＴ４を標的とする５０ｎＭのｓｉＲＮＡおよび対照（Ｄｈａｒｍａｃｏｎ（商標）、Ｃｈｉｃａｇｏ、ＩＬ）を細胞に４８時間トランスフェクトした。
【００５７】
定量的ＰＣＲ
ＲＮｅａｓｙ  Ｍｉｎｉ  Ｋｉｔ（商標）（Ｑｉａｇｅｎ  Ｉｎｃ．（商標）Ｈｉｌｄｅｎ、Ｇｅｒｍａｎｙ）を使用して総ＲＮＡを単離し、ＱｕａｎｔｉＴｅｃｔ  Ｒｅｖｅｒｓｅ  Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ  Ｋｉｔ（商標）（Ｑｉａｇｅｎ（商標））を使用してｃＤＮＡを合成した。Ｐｒｉｍｅｒ−ＢＬＡＳＴ（商標）を使用してプライマーを設計した。ＫＡＰＡ  ＳＹＢＲ  Ｆａｓｔ  Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ（商標）（Ｋａｐａ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ（商標）、Ｗｏｂｕｒｎ、ＭＡ）を使用して、ＶｉｉＡ  ７  Ｒｅａｌ−Ｔｉｍｅ  ＰＣＲ（商標）システム（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ（商標）、Ｆｏｓｔｅｒ  Ｃｉｔｙ、ＣＡ）において３連でｑＲＴ−ＰＣＲ反応を実施した。標的遺伝子を、３つの内部参照遺伝子の幾何平均に正規化した（バンドソンペル（Ｖａｎｄｅｓｏｍｐｅｌｅ）ら、２００２年）。
【００５８】
ウェスタンブロッティング
細胞を採取し、ｃｏｍｐｌｅｔｅプロテアーゼ阻害剤カクテル（Ｒｏｃｈｅ、Ｎｕｔｌｅｙ、ＮＪ）を補充したＲＩＰＡ緩衝液（５０ｍＭトリス−Ｃｌ  ｐＨ７．４、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、１％Ｉｇｅｐａｌ、０．５％デオキシコール酸Ｎａ、０．１％ＳＤＳ）で溶解させた。Ｐｉｅｒｃｅ  ＢＣＡ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ａｓｓａｙ（商標）（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ（商標）、Ｗａｌｔｈａｍ、ＭＡ）により溶解物のタンパク質濃度を決定した。溶解物を８％ＳＤＳポリアクリルアミドゲルで泳動し（１レーンあたりタンパク質２０μｇ）、タンパク質をＰＶＤＦ膜（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ（商標）、Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ、ＭＡ）に転写した。ブロットをＯｄｙｓｓｅｙ（商標）ブロッキング緩衝液（Ｌｉ−ｃｏｒ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ（商標））でブロッキングし、抗ＭＣＴ４抗体でプローブ付加した。ローディング対照としてビンキュリンを使用した。４℃で一晩インキュベートした後、対応する二次抗体で一次抗体にプローブ付加し、Ｏｄｙｓｓｅｙ  Ｉｎｆｒａｒｅｄ  Ｉｍａｇｉｎｇ  Ｓｙｓｔｅｍ（商標）（Ｌｉ−ｃｏｒ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ（商標））およびＩｍａｇｅ  Ｓｔｕｄｉｏ  Ｖｅｒｓｉｏｎ３．１（商標）（Ｌｉ−ｃｏｒ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ（商標））を使用して検出を行った。ＩｍａｇｅＪ（アメリカ国立衛生研究所、Ｂｅｔｈｅｓｄａ、ＭＤ）を使用して濃度測定分析を行った。
【００５９】
改変ボイデンチャンバーアッセイ
ＭＣＴ４  ＡＳＯによる処理後のＰＣ−３細胞の遊走および浸潤可能性について、以前に記載された（チャン（Ｃｈｉａｎｇ）ら、２０１４年）ように、マトリゲルコーティングされた改変ボイデンチャンバー（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ（商標）、Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ、ＣＡ）を使用して研究した。簡潔に言えば、ＡＳＯで処理した細胞を、１ウェルあたり生細胞５０，０００個で上側チャンバーに播種した。次いで４８時間後に、カルセインＡＭＳ（１２．５ｍＭ；Ｔｒｅｖｉｇｅｎ（商標））を含む解離緩衝液（Ｔｒｅｖｉｇｅｎ（商標）、Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ、ＭＤ）を使用して細胞を再懸濁させた。Ｉｎｆｉｎｉｔｅ  Ｆ５００  ｆｌｕｏｒｏｍｅｔｅｒ（商標）（Ｔｅｃａｎ（商標）、Ｍａｎｎｅｄｏｒｆ、Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）を使用した細胞懸濁液の蛍光測定（４８５ｎｍ励起、５２０ｎｍ発光）により、下側チャンバー内の遊走／浸潤細胞数を決定した。
【００６０】
乳酸およびグルコース決定
４８時間ＡＳＯをトランスフェクトしたＰＣ−３細胞を、乳酸およびグルコースレベルについて評価した。細胞を新しい培地とともに４時間インキュベートした。次いで、培地試料を採取して１０Ｋ  Ｓｐｉｎ  Ｃｏｌｕｍｎｓ（商標）（ＢｉｏＶｉｓｉｏｎ（商標）、Ｍｉｌｐｉｔａｓ、ＣＡ）によりタンパク質を除き、その後Ｌａｃｔａｔｅ  Ａｓｓａｙ  Ｋｉｔ（ＢｉｏＶｉｓｉｏｎ）を使用して乳酸濃度を、またＧｌｕｃｏｓｅ  Ａｓｓａｙ  Ｋｉｔ（商標）（ＢｉｏＶｉｓｉｏｎ（商標））を使用してグルコース濃度を決定した。ＡＳＯをトランスフェクトした細胞をＭＱＨ２Ｏで溶解させることにより細胞内乳酸レベルを決定した。生細胞の総数に正規化することにより最終濃度を決定した。
【００６１】
ＰＣ−３腫瘍を有するヌードマウスの、ＭＣＴ４  ＡＳＯによる治療
オスの無胸腺ヌードマウス（Ｓｉｍｏｎｓｅｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（商標）、Ｇｉｌｒｏｙ、ＣＡ）２４匹の両側腹に、ＰＣ−３細胞（ＨＢＳＳ：マトリゲル  １：１中に細胞１０６個）を皮下注射した。平均腫瘍体積が約１００ｍｍ３に達すると、マウスを４群に無作為化し、合計１５日間で、５日間毎日、１０ｍｇ／ｋｇのＭＣＴ４  ＡＳＯ＃１（配列番号１）、＃１４（配列番号５）、対照ＡＳＯ、または溶媒（ＰＢＳ）の腹腔内注射により治療を行い、その後２日間治療を休みとした。研究を通して、体重を測定し、嗜眠、水分補給の欠如、および脱力のさらなる徴候などの異常な行動を検査することによりマウスの健康状態をモニタリングした。腫瘍サイズを週２回測定し、式：体積＝長さ×幅×深さ×０．５２３６（ｍｍ３）を使用して腫瘍体積を算出した。組織を採取するため、最終投与の１時間後にマウスを屠殺した。
【００６２】
腫瘍組織の免疫組織化学
免疫組織化学的分析のため、腫瘍組織をホルマリン固定してパラフィン包埋した。以前に記載された（Ｗａｎｇら、２００５）ように、組織を切片化し、プローブ付加し、ＤＡＢ（Ｓｉｇｍａ（商標））で染色した。Ｋｉ−６７および切断型カスパーゼ３染色では、倍率４００×で、腫瘍１つあたり５ヶ所のランダムな範囲の画像を撮り、細胞を計数して、陽性染色された細胞のパーセンテージを決定した。ＭＣＴ４では、倍率２００×で、腫瘍１つあたり５ヶ所のランダムな範囲の画像を撮り、パーセンテージ採点により、式：強度＝（％領域スコア３）×３＋（％領域スコア２）×２＋（％領域スコア１）×１を使用して染色強度を評価した。ＣＤ３１染色後に、倍率２００×で、腫瘍１つあたり５ヶ所の、凝集物の最も際立った領域を画像化し、これらが占める範囲のパーセント面積を決定することにより、免疫細胞凝集の程度を定量化した。同じ５ヶ所の際立った領域において免疫細胞凝集物が占める面積に正規化された陽性染色面積として、免疫細胞の割合を評価した。
【００６３】
統計解析
プールされた結果は全て平均値±ＳＥＭとして表される。統計解析はＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ  ６（商標）（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ、Ｉｎｃ．、Ｌａ  Ｊｏｌｌａ、ＣＡ）を使用して実施した。Ｓｔｕｄｅｎｔのｔ検定を実施して２群間の平均値を比較した。一元配置分散分析（Ｏｎｅ−ｗａｙ  ＡＮＯＶＡ）、その後ダネット（Ｄｕｎｎｅｔｔ）の事後検定を使用して、２群超の平均値を比較した。二元配置分散分析（Ｔｗｏ−ｗａｙ  ＡＮＯＶＡ）、その後の事後多重比較を適用して、腫瘍増殖を比較した。分割表の検定を行って、組織マイクロアレイにおける患者コホート間の染色強度を比較した。ログランク検定を行って、患者生存曲線を比較した。カイ二乗検定を行って、ＭＣＴ４発現レベルを各種臨床パラメータと関連付けた。ｐ値０．０５未満の結果を統計的に有意であるとみなし、ｐ０．０５未満は＊で、ｐ０．０１未満は＊＊で、ｐ０．００１未満は＊＊＊で示す。
【実施例】
【００６４】
＜実施例１＞
ＭＣＴ４タンパク質発現の上昇はＣＲＰＣと関連する
グリーソングレード３、４および５のヒト前立腺がん由来の組織から構成される組織マイクロアレイ（ＴＭＡ）を、ＭＣＴ４タンパク質について染色した。図１ＡおよびＢに示すように、グリーソングレード５の前立腺がんでは、グリーソングレード３および４の検体と比較してＭＣＴ４タンパク質発現が有意に増加した。また、血清ＰＳＡレベルの増加により測定したところ、ＭＣＴ４発現の上昇は、一次治療から再発までの時間がより早いことと関連しており、ＭＣＴ４高発現コホートでは、再発までの時間の中央値が、ＭＣＴ４低発現コホートでの９４．２ヶ月に対し６３．３ヶ月であった（図１Ｃ）。さらに、ＭＣＴ４が高発現することは、診断および臨床Ｔステージ時の血清ＰＳＡレベルがより高いことなどの予後不良と関連するその他の臨床的特徴と相関していた（表Ｃ）。さらに、ＭＣＴ４タンパク質発現の上昇が、長期のネオアジュバントホルモン療法（６ヶ月超）を受けた患者、およびＣＲＰＣ患者由来の腫瘍において見られ（図１ＤおよびＥ）、前立腺がんにおけるＭＣＴ４タンパク質の発現上昇がＣＲＰＣ発症と関連していることが示された。
【００６５】
【表３】
2019500334.tif 000005
【００６６】
＜実施例２＞
ＭＣＴ４のノックダウンによりＰＣ−３細胞の増殖が阻害される
ＭＣＴ４発現阻害の潜在的な治療有効性について、ＭＣＴ４を標的とするｓｉＲＮＡおよびＡＳＯを使用して研究した。ＭＣＴ４発現に関連する特性である明確な解糖代謝プロファイルを呈する（ヴァズ（Ｖａｚ）ら、２０１２年）ことから、ヒトＰＣ−３  ＣＲＰＣ細胞を使用した。図２Ａに示すように、ＭＣＴ４  ｓｉＲＮＡによるＰＣ−３細胞の処理で細胞増殖の阻害がもたらされ、ＭＣＴ４ノックダウン手法の潜在的な治療有効性が示唆された。したがって、ヒトＭＣＴ４を特異的に標的とするＡＳＯを設計した。１０種のＭＣＴ４  ＡＳＯのスクリーニングにより、ＰＣ−３細胞増殖およびＭＣＴ４発現を阻害する能力が様々であることが明らかとなり、ＡＳＯ＃１（配列番号１）および＃１４（配列番号５）が最も大きい効力を示した（図２Ｂおよび２Ｃ）。各種ＡＳＯで処理されたＰＣ−３細胞におけるＭＣＴ４  ｍＲＮＡレベルの減少と、生じた細胞数の間に強い相関関係が見られ（図２Ｄ）、ＡＳＯによる増殖阻害がＭＣＴ４ノックダウンと直接関連していることが示された。
【００６７】
＜実施例３＞
ＭＣＴ４  ＡＳＯはＰＣ−３細胞の増殖を阻害する
ＭＣＴ４  ＡＳＯ＃１（配列番号１）および＃１４（配列番号５）の増殖阻害活性の特徴をさらに明らかにした。図２Ｅに示すように、ＰＣ−３細胞の増殖は両ＡＳＯにより用量依存的に阻害され、ＡＳＯ＃１（ＩＣ５０＝５０ｎＭ）と比較してＡＳＯ＃１４がわずかにより有効であった（ＩＣ５０＝２６ｎＭ）。ＡＳＯによりＭＣＴ４  ｍＲＮＡレベルも用量依存的に減少し、ＡＳＯによる細胞増殖阻害を反映していた（ＩＣ５０  ＡＳＯ＃１４＝３２ｎＭ、ＩＣ５０  ＡＳＯ＃１＝５０ｎＭ）。図２Ｆに示すように、両ＡＳＯはトランスフェクション後９６時間時点でも細胞増殖阻害を維持していた。ＭＣＴ４  ｍＲＮＡレベルはトランスフェクションの４８時間後からわずかに増加し始めたが、９６時間時点でもＭＣＴ４タンパク質レベルは低いままであった。
【００６８】
＜実施例４＞
ＭＣＴ４  ＡＳＯは様々なヒト前立腺がん細胞株で増殖の阻害およびＭＣＴ４発現の減少を発揮するが、マウスＭＣＴ４では発揮しない
ＭＣＴ４  ＡＳＯ＃１（配列番号１）および＃１４（配列番号５）をヒトＣ４−２  ＣＲＰＣ細胞にトランスフェクトすると、ＡＳＯは、ＰＣ−３細胞で観察されたものと同等のＩＣ５０値でヒトＣ４−２  ＣＲＰＣ細胞の増殖を阻害した、すなわちＡＳＯ＃１＝４０ｎＭ、ＡＳＯ＃１４＝２７ｎＭであった。同様に、ＡＳＯは、ＡＳＯ＃１で５０ｎＭおよびＡＳＯ＃１４で２６ｎＭのＩＣ５０値でＭＣＴ４発現を減少させた（図３Ａ）。さらに、ＡＳＯをヒトＤＵ１４５前立腺がん細胞にトランスフェクトすると、ほぼ同一のＩＣ５０値で、細胞増殖およびＭＣＴ４発現に対し同様の阻害効果が観察された（図３Ｂ）。ＡＳＯをＬＮＣａＰ前立腺がん細胞にトランスフェクションすることでも、細胞増殖およびＭＣＴ４発現が同様に阻害されることが示され（図７）、阻害効果が、アンドロゲン受容体の状態よりもむしろ解糖の表現型に関連することが示唆された。重要なことには、ＭＣＴ４  ＡＳＯ＃１および＃１４をマウスＴＲＡＭＰＣ２前立腺がん細胞にトランスフェクションしても、細胞増殖またはマウスＭＣＴ４発現の有意な低下につながらなかった（図３Ｃ）。まとめると、結果より、これらのＡＳＯがヒトＭＣＴ４を特異的に標的とし、細胞増殖に対するその阻害効果はＭＣＴ４ノックダウンの結果であることが示唆される。
【００６９】
＜実施例５＞
候補ＭＣＴ４  ＡＳＯは、インビトロでＣＲＰＣ細胞のグルコース代謝および組織浸潤／遊走を阻害する
ＭＣＴ４を標的とするＡＳＯの、前立腺がん細胞に対する効果をさらに試験するため、我々は、ＰＣ−３細胞の乳酸分泌、細胞内乳酸濃度、およびグルコース消費に対するＡＳＯの効果を測定した。ＭＣＴ４  ＡＳＯ＃１（配列番号１）および＃１４（配列番号５）を細胞にトランスフェクションすると、トランスフェクションの４８時間後に測定したところ、乳酸分泌の顕著な阻害、それに対応する細胞内乳酸の蓄積およびグルコース消費の大幅な減少が生じた（図４Ａ）。さらに、図４Ｂに示すように、ＡＳＯでの処理により、解糖に関与する各種遺伝子、すなわちＧＡＰＤＨ、ＰＧＫ１、ＰＧＡＭ１およびＥＮＯ１のダウンレギュレーションが生じた。さらに、乳酸デヒドロゲナーゼＡ（ＬＤＨＡ）の発現が抑制されたことが判明し、ピルビン酸の乳酸への変換が減少したことが示された。さらに、ピルビン酸をＴＣＡサイクルから分流させ、乳酸への変換を促進する酵素であるピルビン酸デヒドロゲナーゼキナーゼ−１（ＰＤＫ１）での発現の減少が判明した。したがってＭＣＴ４  ＡＳＯでの処理により、好気的解糖が阻害された。
【００７０】
ＭＣＴ４  ＡＳＯでの処理により、改変ボイデンチャンバーにおけるＰＣ−３細胞の遊走および組織浸潤も阻害され（図８）、ＭＣＴ４により促進される乳酸分泌が、転移プロセスでも重要な役割を果たしうることが示唆された。
【００７１】
＜実施例６＞
ＭＣＴ４  ＡＳＯで治療を行ったヌードマウスにおけるＰＣ−３異種移植片の増殖
皮下ＰＣ−３腫瘍を有するオスの無胸腺ヌードマウスを、ＭＣＴ４  ＡＳＯ＃１（配列番号１）および＃１４（配列番号５）で合計１５日間治療を行った。動物の体重（図９）および行動をモニタリングすることで評価したところ、両ＡＳＯは、重大な宿主毒性を誘導することなく腫瘍の増殖を著しく阻害した（図５Ａ）。免疫組織化学的分析により、ＡＳＯにより誘導された腫瘍増殖阻害が、切断型カスパーゼ３染色で測定された細胞アポトーシスの増加、およびＫｉ−６７染色で測定された細胞増殖の減少と関連することが明らかとなった（図５Ｂ）。腫瘍増殖の減少はＭＣＴ４タンパク質発現の減少と関連しており（図５Ｃ）、ＭＣＴ４ノックダウンにより生じた抗増殖効果と一致した。各群の代表的な腫瘍画像は、ＭＣＴ４  ＡＳＯで治療を行った腫瘍には存在しなかった、対照腫瘍での強い膜染色の存在を示した（顕微鏡像は図示しない）。
【００７２】
＜実施例７＞
ヌードマウスにおける免疫細胞凝集物に対するＭＣＴ４  ＡＳＯの効果
乳酸により誘導される腫瘍の酸性化は、局所的な宿主抗がん免疫の抑制に関連している（チョイ（Ｃｈｏｉ）ら、２０１３年）ため、ＰＣ−３腫瘍を有するヌードマウスをＭＣＴ４  ＡＳＯで治療することにより、免疫反応が非常に制限されていてもこれらのマウスの局所宿主免疫応答の変化が引き起こされるか否かを決定するのは興味深いことである。その目的のため、特に腫瘍周辺において、ＣＤ３１陽性血管から遊出した免疫細胞凝集物を定量化した。図６Ａに示すように、２種のＭＣＴ４  ＡＳＯで処理された異種移植片は、対照腫瘍と比較して有意に大きい免疫細胞凝集物を有していた。顕微鏡像を調べたところ、顕微鏡像は、免疫凝集物が、周囲の腫瘍細胞とは異なる小型で円形の密集した核の領域を特徴とし、また、ＣＤ３１の染色により、これらの免疫細胞が腫瘍周辺において血管から遊出し、血管を取り囲んでいることが明らかとなることを示した（顕微鏡像は図示しない）。ヌードマウスにおける主要な細胞毒性免疫細胞サブタイプである（シュルツ（Ｓｈｕｌｔｚ）ら、２００７年）ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞集団の定量化により、ＭＣＴ４  ＡＳＯによる治療で腫瘍関連ＮＫ細胞の割合が著しく増加したことが明らかとなった（図６Ｂ）。さらに、ＮＫ細胞の活性化は、Ｔ細胞受容体複合体と会合するためＴ細胞マーカーと通常みなされる分子であるＣＤ３により促進される（コッホ（Ｋｏｃｈ）ら、２０１３年）。ＮＫ細胞におけるＣＤ３の発現は免疫組織化学で検出可能であり（モリス（Ｍｏｒｉｃｅ）、２００７年）、ヌードマウスにはＴ細胞が存在しないことを考慮すると、ＮＫ細胞活性化の指標として使用可能である（ラニア（Ｌａｎｉｅｒ）ら、１９９２年）。ＭＣＴ４  ＡＳＯでの治療により、凝集物として存在する免疫細胞の組成も顕著に変化し、それにより、ＮＫ細胞マーカーＮＫ１．１を使用する染色で、腫瘍に関連するＮＫ細胞の割合が増加したことが明らかとなった（顕微鏡像は図示しない）。図６Ｃに示すように、ＣＤ３陽性細胞の割合がＭＣＴ４  ＡＳＯ治療により増加した。染色により、ＡＳＯで治療を行った腫瘍に関連する活性化ＮＫ細胞の割合も増加したことが明らかとなり、抗がん免疫が刺激されたことが示唆された。
【００７３】
＜実施例８＞
配列番号５との組合せ療法
現行のがん治療薬（表Ｄを参照のこと）をＭＣＴ４  ＡＳＯ配列番号５と組み合わせることで相乗効果が見られるか否かを決定するため、およそのＩＣ５０濃度で各種組合せ方法をスクリーニングした。図１０Ａ〜Ｃでは、メトホルミン、ドキシサイクリンおよびドセタキセルを単独で、ならびにＭＣＴ４  ＡＳＯ配列番号５と組み合わせて処理した４８時間後に、総生ＰＣ３細胞数を評価した。しかし、ＭＤＶ３１００、配列番号５、ならびに配列番号５およびＭＤＶ３１００の組合せを試験するのにはＣ４−２細胞を使用した（図１０Ｄ）。ドセタキセルとＭＣＴ４  ＡＳＯ配列番号５の組合せは、コンビネーションインデックス＝０．７８０で相乗効果を示した。
【００７４】
【表４】
2019500334.tif 000006
【００７５】
本明細書に記載される実施形態は、理解を明瞭にする目的で、説明および例示のためある程度詳細に記載されるが、添付の特許請求の範囲の趣旨または範囲から逸脱することなく変更および改変を行うことができることが、本明細書に記載される教示の観点から、当業者には容易に分かる。このような改変は、実質的に同じ方法で同じ結果を実現するために、本発明の任意の態様を既知の同等物で置換することを含む。数値範囲は、範囲を定義する数を含む。「〜を含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という語は、「〜を含むがこれに限定されない（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ，  ｂｕｔ  ｎｏｔ  ｌｉｍｉｔｅｄ  ｔｏ）」という成句と実質的に同等であるオープンエンドな語として本明細書で使用され、「〜を含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」という語はそれに対応する意味を有する。本明細書で使用される場合、単数形「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」は、文脈で別途明らかに定められない限り複数の指示対象を含む。したがって、例えば、「ある事物（ａ  ｔｈｉｎｇ）」に言及することは、１つを超えるそのような事物を含む。本明細書で参考文献を引用することは、このような参考文献が本発明の実施形態に対する先行技術であると認めることとはならない。本発明は、本明細書で記載されるように、図を参照して、実質的に実施形態および変化形を全て含む。
【００７６】
参考文献
アルバートセン，Ｐ．Ｃ．（Ａｌｂｅｒｔｓｅｎ，Ｐ．Ｃ．）、ハンリー，Ｊ．Ａ．（Ｈａｎｌｅｙ，Ｊ．Ａ．）、およびファイン，Ｊ（Ｆｉｎｅ，Ｊ）著、「臨床的限局前立腺がんの保存的管理による２０年後の成果（２０−ｙｅａｒ  ｏｕｔｃｏｍｅｓ  ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ  ｃｏｎｓｅｒｖａｔｉｖｅ  ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ  ｏｆ  ｃｌｉｎｉｃａｌｌｙ  ｌｏｃａｌｉｚｅｄ  ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｃａｎｃｅｒ．）」、米国医師会雑誌（ＪＡＭＡ）、２００５年、２９３巻、ｐ．２０９５−２１０１
バドレイシン，Ｓ．（Ｂａｄｒｉｓｉｎｇ，Ｓ．）、ファン  デル  ノールト，Ｖ．（ｖａｎ  ｄｅｒ  Ｎｏｏｒｔ，Ｖ．）、ファン  オールト，Ｉ．Ｍ．（ｖａｎ  Ｏｏｒｔ，Ｉ．Ｍ．）、ファン  デン  バーグ，Ｈ．Ｐ．（ｖａｎ  ｄｅｎ  Ｂｅｒｇ，Ｈ．Ｐ．）、ロス，Ｍ．（Ｌｏｓ，Ｍ．）、ハンバーグ，Ｐ．（Ｈａｍｂｅｒｇ，Ｐ．）、クーネン，Ｊ．Ｌ．（Ｃｏｅｎｅｎ，Ｊ．Ｌ．）、ファン  デン  エートウェグ，Ａ．Ｊ．（ｖａｎ  ｄｅｎ  Ｅｅｒｔｗｅｇｈ，Ａ．Ｊ．）、デヨング，Ｉ．Ｊ．（ｄｅ  Ｊｏｎｇ，Ｉ．Ｊ．）、ケルヴェ，Ｅ．Ｄ．（Ｋｅｒｖｅｒ，Ｅ．Ｄ．）、ら著、「ドセタキセルおよびアビラテロン治療後に進行する転移性去勢抵抗性前立腺がん患者におけるエンザルタミド（ＭＤＶ３１００）の臨床活性および耐容性（Ｃｌｉｎｉｃａｌ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ａｎｄ  ｔｏｌｅｒａｂｉｌｉｔｙ  ｏｆ  ｅｎｚａｌｕｔａｍｉｄｅ（ＭＤＶ３１００）ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ，ｃａｓｔｒａｔｉｏｎ−ｒｅｓｉｓｔａｎｔ  ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｃａｎｃｅｒ  ｗｈｏ  ｐｒｏｇｒｅｓｓ  ａｆｔｅｒ  ｄｏｃｅｔａｘｅｌ  ａｎｄ  ａｂｉｒａｔｅｒｏｎｅ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ．）」、キャンサー（Ｃａｎｃｅｒ）、２０１４年、１２０巻、ｐ．９６８−９７５
ベルトラン，Ｈ．（Ｂｅｌｔｒａｎ，Ｈ．）、リックマン，Ｄ．Ｓ．（Ｒｉｃｋｍａｎ，Ｄ．Ｓ．）、パーク，Ｋ．（Ｐａｒｋ，Ｋ．）、チョエン，Ｓ．Ｓ．（Ｃｈａｅ，Ｓ．Ｓ．）、スボナー，Ａ．（Ｓｂｏｎｅｒ，Ａ．）、マクドナルド，Ｔ．Ｙ．（ＭａｃＤｏｎａｌｄ，Ｔ．Ｙ．）、ワン，Ｙ．（Ｗａｎｇ，Ｙ．）、シェイク，Ｋ．Ｌ．（Ｓｈｅｉｋｈ，Ｋ．Ｌ．）、テリー，Ｓ．（Ｔｅｒｒｙ，Ｓ．）、タガワ，Ｓ．Ｔ．（Ｔａｇａｗａ，Ｓ．Ｔ．）、ら著、「神経内分泌性前立腺がんの分子的特徴および新薬標的の同定（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｎｅｕｒｏｅｎｄｏｃｒｉｎｅ  ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｃａｎｃｅｒ  ａｎｄ  ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｎｅｗ  ｄｒｕｇ  ｔａｒｇｅｔｓ．）」、キャンサー  ディスカバリー（Ｃａｎｃｅｒ  Ｄｉｓｃｏｖ）、２０１１年、１巻、ｐ．４８７−４９５
ビシャー  Ｍ（Ｂｉｓｈｒ  Ｍ）およびサード  Ｆ（Ｓａａｄ  Ｆ）著、「去勢抵抗性前立腺がんの最新治療法の概要（Ｏｖｅｒｖｉｅｗ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｌａｔｅｓｔ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ  ｆｏｒ  ｃａｓｔｒａｔｉｏｎ−ｒｅｓｉｓｔａｎｔ  ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｃａｎｃｅｒ．）」、ネイチャー  レビューズ  ウロロジー（Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｕｒｏｌ）、２０１３年、１０巻（９号）、ｐ．５２２−５２８
チャン，Ｙ．Ｔ．（Ｃｈｉａｎｇ，Ｙ．Ｔ．）、ワン，Ｋ．（Ｗａｎｇ，Ｋ．）、ファズリー，Ｌ．（Ｆａｚｌｉ，Ｌ．）、チー，Ｒ．Ｚ．（Ｑｉ，Ｒ．Ｚ．）、グリーブ，Ｍ．Ｅ．（Ｇｌｅａｖｅ，Ｍ．Ｅ．）、コリンズ，Ｃ．Ｃ．（Ｃｏｌｌｉｎｓ，Ｃ．Ｃ．）、ゴート，Ｐ．Ｗ．（Ｇｏｕｔ，Ｐ．Ｗ．）、およびワン，Ｙ．（Ｗａｎｇ，Ｙ．）著、「ＧＡＴＥ２は前立腺がんにおける転移ドライビング遺伝子の可能性がある（ＧＡＴＡ２  ａｓ  ａ  ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ−ｄｒｉｖｉｎｇ  ｇｅｎｅ  ｉｎ  ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｃａｎｃｅｒ．）」、オンコターゲット（Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ）、２０１４年、５巻、ｐ．４５１−４６１
チョイ，Ｓ．Ｙ．（Ｃｈｏｉ，Ｓ．Ｙ．）、コリンズ，Ｃ．Ｃ．（Ｃｏｌｌｉｎｓ，Ｃ．Ｃ．）、ゴート，Ｐ．Ｗ．（Ｇｏｕｔ，Ｐ．Ｗ．）、およびワン，Ｙ．（Ｗａｎｇ，Ｙ）著、「がん生成乳酸：調整上の免疫抑制代謝物か？（Ｃａｎｃｅｒ−ｇｅｎｅｒａｔｅｄ  ｌａｃｔｉｃ  ａｃｉｄ：ａ  ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ，ｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅ  ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅ？）」、ジャーナル  オブ  パソロジー（Ｊ  Ｐａｔｈｏｌ）、２０１３年、２３０巻、ｐ．３５０−３５５
チョイ，Ｓ．Ｙ．（Ｃｈｏｉ，Ｓ．Ｙ．）、リン，Ｄ．（Ｌｉｎ，Ｄ．），ゴート，Ｐ．Ｗ．（Ｇｏｕｔ，Ｐ．Ｗ．）、コリンズ，Ｃ．Ｃ．（Ｃｏｌｌｉｎｓ，Ｃ．Ｃ．）、シュ，Ｙ．（Ｘｕ，Ｙ．）、およびワン，Ｙ．（Ｗａｎｇ，Ｙ）著、「ヒト癌のより優れたインビトロモデリングのための患者由来異種移植のレッスン（Ｌｅｓｓｏｎｓ  ｆｒｏｍ  ｐａｔｉｅｎｔ−ｄｅｒｉｖｅｄ  ｘｅｎｏｇｒａｆｔｓ  ｆｏｒ  ｂｅｔｔｅｒ  ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ｍｏｄｅｌｉｎｇ  ｏｆ  ｈｕｍａｎ  ｃａｎｃｅｒ．）」、アドバンスド  ドラッグ  デリバリー  レビューズ（Ａｄｖ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ  Ｒｅｖ）、２０１４年、ｐ．７９−８０，２２２−２３７
クレーセンス  Ｆ（Ｃｌａｅｓｓｅｎｓ  Ｆ）、ヘルセン  Ｃ（Ｈｅｌｓｅｎ  Ｃ）、プレコビッチ  Ｓ（Ｐｒｅｋｏｖｉｃ  Ｓ）、ファン  デン  ブルーク  Ｔ（Ｖａｎ  ｄｅｎ  Ｂｒｏｅｃｋ  Ｔ）、スパンス  Ｌ（Ｓｐａｎｓ  Ｌ）、ファン  ポッペル  Ｈ（Ｖａｎ  Ｐｏｐｐｅｌ  Ｈ）およびジャニス  Ｓ（Ｊｏｎｉａｕ  Ｓ）著、「前立腺癌におけるエンザルタミド耐性の発現機構（Ｅｍｅｒｇｉｎｇ  ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ｏｆ  ｅｎｚａｌｕｔａｍｉｄｅ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ｉｎ  ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｃａｎｃｅｒ．）」、ネイチャー  レビューズ  ウロロジー（Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｕｒｏｌ）、２０１４年、１１巻（１２号）、ｐ．７１２−７１６
デボーノ，Ｊ．Ｓ．（ｄｅ  Ｂｏｎｏ，Ｊ．Ｓ．）、ロゴテティス，Ｃ．Ｊ．（Ｌｏｇｏｔｈｅｔｉｓ，Ｃ．Ｊ．）、モリーナ，Ａ．（Ｍｏｌｉｎａ，Ａ．）、フィザジ，Ｋ．（Ｆｉｚａｚｉ，Ｋ．）、ノース，Ｓ．（Ｎｏｒｔｈ，Ｓ．）、チュウ，Ｌ．（Ｃｈｕ，Ｌ．）、カイ，Ｋ．Ｎ．（Ｃｈｉ，Ｋ．Ｎ．）、ジョーンズ，Ｒ．Ｊ．（Ｊｏｎｅｓ，Ｒ．Ｊ．）、グッドマン，Ｏ．Ｂ．（Ｇｏｏｄｍａｎ，Ｏ．Ｂ．）、サード，Ｆ．（Ｓａａｄ，Ｆ．）、ら著、「転移性前立腺癌におけるアビラテロンおよび生存率の増加（Ａｂｉｒａｔｅｒｏｎｅ  ａｎｄ  ｉｎｃｒｅａｓｅｄ  ｓｕｒｖｉｖａｌ  ｉｎ  ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ  ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｃａｎｃｅｒ．）」、ニュー  イングランド  ジャーナル  オブ  メディスン（Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ）、２０１１年、３６４巻、ｐ．１９９５−２００５
ディアス，Ｎ．（Ｄｉａｓ，Ｎ．）、およびステイン，Ｃ．Ａ．（Ｓｔｅｉｎ，Ｃ．Ａ）著、「アンチセンスオリゴヌクレオチド：基本的な概念とメカニズム（Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ  ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ：ｂａｓｉｃ  ｃｏｎｃｅｐｔｓ  ａｎｄ  ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ．）」、モレキュラー  キャンサー  セラピューティクス（Ｍｏｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒ）、２００２年、１巻、ｐ．３４７−３５５
ダイマー，Ｋ．Ｓ．（Ｄｉｍｍｅｒ，Ｋ．Ｓ．）、フライドリッチ，Ｂ．（Ｆｒｉｅｄｒｉｃｈ，Ｂ．）、ランク，Ｆ．（Ｌａｎｇ，Ｆ．）、デイトマー，Ｊ．Ｗ．（Ｄｅｉｔｍｅｒ，Ｊ．Ｗ．）、およびブロアー，Ｓ．（Ｂｒｏｅｒ，Ｓ）著、「低親和性モノカルボキシレートトランスポーターＭＣＴ４は、高解糖系細胞における乳酸塩の排出に適合している（Ｔｈｅ  ｌｏｗ−ａｆｆｉｎｉｔｙ  ｍｏｎｏｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ  ＭＣＴ４  ｉｓ  ａｄａｐｔｅｄ  ｔｏ  ｔｈｅ  ｅｘｐｏｒｔ  ｏｆ  ｌａｃｔａｔｅ  ｉｎ  ｈｉｇｈｌｙ  ｇｌｙｃｏｌｙｔｉｃ  ｃｅｌｌｓ．）」、バイオケミカルジャーナル（Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｊ）、２０００年、３５０巻、第１号、ｐ．２１９−２２７
ドハティー，Ｊ．Ｒ．（Ｄｏｈｅｒｔｙ，Ｊ．Ｒ．）、およびクリーブランド，Ｊ．Ｌ．（Ｃｌｅｖｅｌａｎｄ，Ｊ．Ｌ）著、「癌治療薬における乳酸代謝の標的（Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｌａｃｔａｔｅ  ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  ｆｏｒ  ｃａｎｃｅｒ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ．）」、ジャーナル  オブ  クリニカル  インベスティゲイション（Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｉｎｖｅｓｔ）、２０１３年、１２３巻、ｐ．３６８５−３６９２
フィセル，Ｐ．（Ｆｉｓｅｌ，Ｐ．）、クラック，Ｓ．（Ｋｒｕｃｋ，Ｓ．）、ウィンター，Ｓ．（Ｗｉｎｔｅｒ，Ｓ．）、ベック，Ｊ．（Ｂｅｄｋｅ，Ｊ．）、ヘネンロッター，Ｊ．（Ｈｅｎｎｅｎｌｏｔｔｅｒ，Ｊ．）、ニーズ，Ａ．Ｔ．（Ｎｉｅｓ，Ａ．Ｔ．）、シャープフ，Ｍ．（Ｓｃｈａｒｐｆ，Ｍ．）、フェンド，Ｆ．（Ｆｅｎｄ，Ｆ．）、シュテンツル，Ａ．（Ｓｔｅｎｚｌ，Ａ．）、シュヴァーブ，Ｍ．（Ｓｃｈｗａｂ，Ｍ．）、ら著、「ＳＬＣ１６Ａ３プロモーターのＤＮＡメチル化は、腎癌におけるヒト乳酸トランスポーターＭＣＴ４の発現を調節し、臨床結果に帰結する（ＤＮＡ  ｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ＳＬＣ１６Ａ３  ｐｒｏｍｏｔｅｒ  ｒｅｇｕｌａｔｅｓ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｈｕｍａｎ  ｌａｃｔａｔｅ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ  ＭＣＴ４  ｉｎ  ｒｅｎａｌ  ｃａｎｃｅｒ  ｗｉｔｈ  ｃｏｎｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｆｏｒ  ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｏｕｔｃｏｍｅ．）」、クリニカル  キャンサー  リサーチ（Ｃｌｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ）、２０１３年、１９巻、ｐ．５１７０−５１８１
ゲーリンガー，Ｍ．（Ｇｅｒｌｉｎｇｅｒ，Ｍ．）、サントス，Ｃ．Ｒ．（Ｓａｎｔｏｓ，Ｃ．Ｒ．）、スペンサーデン，Ｂ．（Ｓｐｅｎｃｅｒ−Ｄｅｎｅ，Ｂ．）、マルチネス，Ｐ．（Ｍａｒｔｉｎｅｚ，Ｐ．）、エンデスフェルダー，Ｄ．（Ｅｎｄｅｓｆｅｌｄｅｒ，Ｄ．）、バール，Ｒ．Ａ．（Ｂｕｒｒｅｌｌ，Ｒ．Ａ．）、フェッター，Ｍ．（Ｖｅｔｔｅｒ，Ｍ．）、ジャン，Ｍ．（Ｊｉａｎｇ，Ｍ．）、サンダース，Ｒ．Ｅ．（Ｓａｕｎｄｅｒｓ，Ｒ．Ｅ．）、ケリー，Ｇ．（Ｋｅｌｌｙ，Ｇ．）、ら著、「腎癌生存調節因子のゲノムワイドＲＮＡ干渉分析は、ＭＣＴ４をワールブルグ効果代謝標的として同定する（Ｇｅｎｏｍｅ−ｗｉｄｅ  ＲＮＡ  ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ  ａｎａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  ｒｅｎａｌ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｓｕｒｖｉｖａｌ  ｒｅｇｕｌａｔｏｒｓ  ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｓ  ＭＣＴ４  ａｓ  ａ  Ｗａｒｂｕｒｇ  ｅｆｆｅｃｔ  ｍｅｔａｂｏｌｉｃ  ｔａｒｇｅｔ．）」、ジャーナル  オブ  パソロジー（Ｊ  Ｐａｔｈｏｌ）、２０１２年、２２７巻、ｐ．１４６−１５６
グラベル，Ｓ．Ｐ．（Ｇｒａｖｅｌ，Ｓ．Ｐ．）、アンジェイェフスキ，Ｓ．（Ａｎｄｒｚｅｊｅｗｓｋｉ，Ｓ．）、アビゾニス，Ｄ．（Ａｖｉｚｏｎｉｓ，Ｄ．）、およびサンピエール，Ｊ．（Ｓｔ−Ｐｉｅｒｒｅ，Ｊ．）著、「哺乳類から単離されたミトコンドリアにおける安定同位体トレーサー分析（Ｓｔａｂｌｅ  ｉｓｏｔｏｐｅ  ｔｒａｃｅｒ  ａｎａｌｙｓｉｓ  ｉｎ  ｉｓｏｌａｔｅｄ  ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａ  ｆｒｏｍ  ｍａｍｍａｌｉａｎ  ｓｙｓｔｅｍｓ．）」、メタボライツ（Ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ）、２０１４ａ、４巻、ｐ．１６６−１８３
グラベル，Ｓ．Ｐ．（Ｇｒａｖｅｌ，Ｓ．Ｐ．）、フェア，Ｌ．（Ｈｕｌｅａ，Ｌ．）、トバン，Ｎ．（Ｔｏｂａｎ，Ｎ．）、バーマン，Ｅ．（Ｂｉｒｍａｎ，Ｅ．）、ブルーイン，Ｍ．Ｊ．（Ｂｌｏｕｉｎ，Ｍ．Ｊ．）、ザキカーニ，Ｍ．（Ｚａｋｉｋｈａｎｉ，Ｍ．）、ザオ，Ｙ．（Ｚｈａｏ，Ｙ．）、トピシロビッチ，Ｉ．（Ｔｏｐｉｓｉｒｏｖｉｃ，Ｉ．）、サンピエール，Ｊ．（Ｓｔ−Ｐｉｅｒｒｅ，Ｊ．）、およびポラック，Ｍ．（Ｐｏｌｌａｋ，Ｍ．）著、「セリンの枯渇はビグアナイドの抗腫瘍活性を増強する（Ｓｅｒｉｎｅ  ｄｅｐｒｉｖａｔｉｏｎ  ｅｎｈａｎｃｅｓ  ａｎｔｉｎｅｏｐｌａｓｔｉｃ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  ｂｉｇｕａｎｉｄｅｓ．）」、キャンサー  リサーチ（Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ）、２０１４ｂ、７４巻、ｐ．７５２１−７５３３
ヘイルストラップ，Ａ．Ｐ．（Ｈａｌｅｓｔｒａｐ，Ａ．Ｐ．）著、「ＳＬＣ１６遺伝子ファミリー：健康と疾病における構造、役割と調節（Ｔｈｅ  ＳＬＣ１６  ｇｅｎｅ  ｆａｍｉｌｙ  −  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，ｒｏｌｅ  ａｎｄ  ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  ｄｉｓｅａｓｅ．）」、モレキュラー  アスペクツ  オブ  メディスン（Ｍｏｌ  Ａｓｐｅｃｔｓ  Ｍｅｄ）、２０１３年、３４巻、３３７−３４９、
ハナハン，Ｄ．（Ｈａｎａｈａｎ，Ｄ．）、およびワインバーグ，Ｒ．Ａ．（Ｗｅｉｎｂｅｒｇ，Ｒ．Ａ．）著、「がんの特徴：次世代（Ｈａｌｌｍａｒｋｓ  ｏｆ  ｃａｎｃｅｒ：ｔｈｅ  ｎｅｘｔ  ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ．）」、セル（Ｃｅｌｌ）、２０１１年、１４４巻、ｐ．６４６−６７４
ハオ，Ｊ．（Ｈａｏ，Ｊ．）、チェン，Ｈ．（Ｃｈｅｎ，Ｈ．）、マディガン，Ｍ，Ｃ．（Ｍａｄｉｇａｎ，Ｍ．Ｃ．）、コッツィ，Ｐ．Ｊ．（Ｃｏｚｚｉ，Ｐ．Ｊ．）、ベルトフ，Ｊ．（Ｂｅｒｅｔｏｖ，Ｊ．）、シャオ，Ｗ．（Ｘｉａｏ，Ｗ．）、デルプラド，Ｗ．Ｊ．（Ｄｅｌｐｒａｄｏ，Ｗ．Ｊ．）、ラッセル，Ｐ．Ｊ．（Ｒｕｓｓｅｌｌ，Ｐ．Ｊ．）、およびリー，Ｙ．（Ｌｉ，Ｙ．）著、「ＣＤ１４７（ＥＭＭＰＲＩＮ）、ＣＤ４４ｖ３−１０、ＭＤＲ１およびモノカルボキシレートトランスポーターの共発現は、前立腺癌の薬物耐性および進行に関連する（Ｃｏ−ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  ＣＤ１４７（ＥＭＭＰＲＩＮ），ＣＤ４４ｖ３−１０，ＭＤＲ１  ａｎｄ  ｍｏｎｏｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｓ  ｉｓ  ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｃａｎｃｅｒ  ｄｒｕｇ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ａｎｄ  ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ．）」、ブリティッシュ  ジャーナル  オブ  キャンサー（Ｂｒ  Ｊ  Ｃａｎｃｅｒ）、２０１０年、１０３巻、ｐ．１００８−１０１８
ジャバー，Ｈ．（Ｊａｄｖａｒ，Ｈ．）著、「１８Ｆ-フルオロデオキシグルコースＰＥＴによる前立腺癌の分子イメージング（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｉｍａｇｉｎｇ  ｏｆ  ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｃａｎｃｅｒ  ｗｉｔｈ  １８Ｆ−ｆｌｕｏｒｏｄｅｏｘｙｇｌｕｃｏｓｅ  ＰＥＴ」、ネイチャー  レビューズ  ウロロジー（Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｕｒｏｌ）、２００９年、６巻、ｐ．３１７−３２３
コッホ，Ｊ．（Ｋｏｃｈ，Ｊ．）、シュタインレ，Ａ．（Ｓｔｅｉｎｌｅ，Ａ．）、ヴェイル，Ｃ．（Ｗａｔｚｌ，Ｃ．）、およびマンデルボーム，Ｏ．（Ｍａｎｄｅｌｂｏｉｍ，Ｏ．）著、「癌および感染におけるナチュラルキラー細胞の自然細胞障害性受容体を活性化する（Ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ  ｎａｔｕｒａｌ  ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ  ｏｆ  ｎａｔｕｒａｌ  ｋｉｌｌｅｒ  ｃｅｌｌｓ  ｉｎ  ｃａｎｃｅｒ  ａｎｄ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ．）」、トレンズ  イン  イムノロジー（Ｔｒｅｎｄｓ  Ｉｍｍｕｎｏｌ）、２０１３年、３４巻、ｐ．１８２−１９１
クーチェクポール，Ｓ．（Ｋｏｏｃｈｅｋｐｏｕｒ，Ｓ．）、マジュムダール，Ｓ．（Ｍａｊｕｍｄａｒ，Ｓ．）、アザブダフタリ，Ｇ．（Ａｚａｂｄａｆｔａｒｉ，Ｇ．）、アトウッド，Ｋ．（Ａｔｔｗｏｏｄ，Ｋ．）、サイオノー，Ｒ．（Ｓｃｉｏｎｅａｕｘ，Ｒ．）、スブラマニ，Ｄ．（Ｓｕｂｒａｍａｎｉ，Ｄ．）、マンハート、Ｃ．（Ｍａｎｈａｒｄｔ，Ｃ．）、ロルッソ，Ｇ．Ｄ．（Ｌｏｒｕｓｓｏ，Ｇ．Ｄ．）、ウィラード，Ｓ．Ｓ．（Ｗｉｌｌａｒｄ，Ｓ．Ｓ．）、トンプソン，Ｈ．（Ｔｈｏｍｐｓｏｎ，Ｈ．）、ら著、「血清グルタミン酸レベルはグリーソンスコアと相関し、グルタミン酸遮断は前立腺癌細胞の増殖、遊走および浸潤を減少させ、アポトーシスを誘導する（Ｓｅｒｕｍ  Ｇｌｕｔａｍａｔｅ  Ｌｅｖｅｌｓ  Ｃｏｒｒｅｌａｔｅ  ｗｉｔｈ  Ｇｌｅａｓｏｎ  Ｓｃｏｒｅ  ａｎｄ  Ｇｌｕｔａｍａｔｅ  Ｂｌｏｃｋａｄｅ  Ｄｅｃｒｅａｓｅｓ  Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ，Ｍｉｇｒａｔｉｏｎ，ａｎｄ  Ｉｎｖａｓｉｏｎ  ａｎｄ  Ｉｎｄｕｃｅｓ  Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ  ｉｎ  Ｐｒｏｓｔａｔｅ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｌｌｓ．）」、クリニカル  キャンサー  リサーチ（Ｃｌｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ）、２０１２年、１８巻、ｐ．５８８８−５９０１
ラニア，Ｌ．Ｌ．（Ｌａｎｉｅｒ，Ｌ．Ｌ．）、チャン，Ｃ．（Ｃｈａｎｇ，Ｃ．）、スピッツ，Ｈ．（Ｓｐｉｔｓ，Ｈ．）、およびフィリップス，Ｊ．Ｈ．（Ｐｈｉｌｌｉｐｓ，Ｊ．Ｈ．）、「胎児ＮＫ細胞における活性化ヒト成人ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞およびＣＤ３ガンマ、デルタ、イプシロン複合体における細胞質ＣＤ３イプシロンタンパク質の発現：ＮＫ細胞とＴリンパ球の関係についての示唆（Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  ｃｙｔｏｐｌａｓｍｉｃ  ＣＤ３  ｅｐｓｉｌｏｎ  ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｉｎ  ａｃｔｉｖａｔｅｄ  ｈｕｍａｎ  ａｄｕｌｔ  ｎａｔｕｒａｌ  ｋｉｌｌｅｒ（ＮＫ）ｃｅｌｌｓ  ａｎｄ  ＣＤ３  ｇａｍｍａ，ｄｅｌｔａ，ｅｐｓｉｌｏｎ  ｃｏｍｐｌｅｘｅｓ  ｉｎ  ｆｅｔａｌ  ＮＫ  ｃｅｌｌｓ．Ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ  ｏｆ  ＮＫ  ａｎｄ  Ｔ  ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ」、ジャーナル  オブ  イムノロジー（Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ）、１９９２年、１４９巻、ｐ．１８７６−１８８０
リン  Ｄ（Ｌｉｎ  Ｄ）、ゴート  ＰＷ（Ｇｏｕｔ  ＰＷ）、およびワン  Ｙ（Ｗａｎｇ  Ｙ．）著、「去勢抵抗性前立腺癌のインビボモデルからの教え（Ｌｅｓｓｏｎｓ  ｆｒｏｍ  ｉｎ−ｖｉｖｏ  ｍｏｄｅｌｓ  ｏｆ  ｃａｓｔｒａｔｉｏｎ−ｒｅｓｉｓｔａｎｔ  ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｃａｎｃｅｒ．）」、カレント  オピニオン  イン  ウロロジー（Ｃｕｒｒ  Ｏｐｉｎ  Ｕｒｏｌ）、２０１３年、２３巻（３号）、ｐ．２１４−２１９
リサンチ，Ｍ．Ｐ．（Ｌｉｓａｎｔｉ，Ｍ．Ｐ．）、ソッジャ，Ｆ．（Ｓｏｔｇｉａ，Ｆ．）、ペステル，Ｒ．Ｇ．（Ｐｅｓｔｅｌｌ，Ｒ．Ｇ．）、ハウエル，Ａ．（Ｈｏｗｅｌｌ，Ａ．）、およびマルチネス−アウトコーン，Ｕ．Ｅ．（Ｍａｒｔｉｎｅｚ−Ｏｕｔｓｃｈｏｏｒｎ，Ｕ．Ｅ．）著、「間質解糖およびＭＣＴ４は、浸潤性乳癌に対するＤＣＩＳ進行の特徴である（Ｓｔｒｏｍａｌ  ｇｌｙｃｏｌｙｓｉｓ  ａｎｄ  ＭＣＴ４  ａｒｅ  ｈａｌｌｍａｒｋｓ  ｏｆ  ＤＣＩＳ  ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ  ｔｏ  ｉｎｖａｓｉｖｅ  ｂｒｅａｓｔ  ｃａｎｃｅｒ．）」、セル  サイクル（Ｃｅｌｌ  Ｃｙｃｌｅ）、２０１３年、１２巻、ｐ．２９３５−２９３６
ロリオ，Ｙ．（Ｌｏｒｉｏｔ，Ｙ．）、ビアンチーニ，Ｄ．（Ｂｉａｎｃｈｉｎｉ，Ｄ．）、イレアナ，Ｅ．（Ｉｌｅａｎａ，Ｅ．）、サンデュ，Ｓ．（Ｓａｎｄｈｕ，Ｓ．）、パトリキド，Ａ．（Ｐａｔｒｉｋｉｄｏｕ，Ａ．）、ペザロ，Ｃ．（Ｐｅｚａｒｏ，Ｃ．）、アルビージュ，Ｌ．（Ａｌｂｉｇｅｓ，Ｌ．）、アタード，Ｇ．（Ａｔｔａｒｄ，Ｇ．）、フィザジ，Ｋ．（Ｆｉｚａｚｉ，Ｋ．）、デボーノ，Ｊ．Ｓ．（Ｄｅ  Ｂｏｎｏ，Ｊ．Ｓ．）、ら著、「ドセタキセルおよびエンザルタミド（ＭＤＶ３１００）の後に進行する転移性去勢抵抗性前立腺癌に対するアビラテロンアセテートの抗腫瘍活性（Ａｎｔｉｔｕｍｏｕｒ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  ａｂｉｒａｔｅｒｏｎｅ  ａｃｅｔａｔｅ  ａｇａｉｎｓｔ  ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ  ｃａｓｔｒａｔｉｏｎ−ｒｅｓｉｓｔａｎｔ  ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｃａｎｃｅｒ  ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｎｇ  ａｆｔｅｒ  ｄｏｃｅｔａｘｅｌ  ａｎｄ  ｅｎｚａｌｕｔａｍｉｄｅ（ＭＤＶ３１００）．）」、アナルズ  オブ  オンコロジー（Ａｎｎ  Ｏｎｃｏｌ）、２０１３年、２４巻、ｐ．１８０７−１８１２
マンニングフォックス，Ｊ．Ｅ．（Ｍａｎｎｉｎｇ  Ｆｏｘ，Ｊ．Ｅ．）、メレディス，Ｄ．（Ｍｅｒｅｄｉｔｈ，Ｄ．）、および  ヘイルストラップ，Ａ．Ｐ．（Ｈａｌｅｓｔｒａｐ，Ａ．Ｐ．）著、「ヒトモノカルボキシレートトランスポーター４のキャラクタリゼーションは、骨格筋からの乳酸流出におけるその役割を立証する（Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｈｕｍａｎ  ｍｏｎｏｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ  ４  ｓｕｂｓｔａｎｔｉａｔｅｓ  ｉｔｓ  ｒｏｌｅ  ｉｎ  ｌａｃｔｉｃ  ａｃｉｄ  ｅｆｆｌｕｘ  ｆｒｏｍ  ｓｋｅｌｅｔａｌ  ｍｕｓｃｌｅ．）」、ジャーナル  オブ  フィジオロジー（Ｊ  Ｐｈｙｓｉｏｌ）、２０００年、５２９巻、第２号、ｐ．２８５−２９３
マーシン，Ｉ．（Ｍａｒｃｈｉｑ，Ｉ．）、ルフロック，Ｒ．（Ｌｅ  Ｆｌｏｃｈ，Ｒ．）、ルー，Ｄ．（Ｒｏｕｘ，Ｄ．）、シモン，Ｍ．Ｐ．（Ｓｉｍｏｎ，Ｍ．Ｐ．）、およびポイセガール，Ｊ．（Ｐｏｕｙｓｓｅｇｕｒ，Ｊ．）著、「乳酸塩／Ｈ＋共輸送体（ＭＣＴ）およびそのサブユニットＣＤ１４７/ベイシジンの遺伝的破壊は、解糖腫瘍細胞をフェンホルミンに感作させる（Ｇｅｎｅｔｉｃ  Ｄｉｓｒｕｐｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｌａｃｔａｔｅ／Ｈ＋  Ｓｙｍｐｏｒｔｅｒｓ（ＭＣＴｓ）ａｎｄ  Ｔｈｅｉｒ  Ｓｕｂｕｎｉｔ  ＣＤ１４７／ＢＡＳＩＧＩＮ  Ｓｅｎｓｉｔｉｚｅｓ  Ｇｌｙｃｏｌｙｔｉｃ  Ｔｕｍｏｒ  Ｃｅｌｌｓ  ｔｏ  Ｐｈｅｎｆｏｒｍｉｎ．）」、キャンサー  リサーチ（Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ）、２０１５年、７５巻、ｐ．１７１−１８０
マドヴェーエワ，Ｏ．Ｖ．（Ｍａｔｖｅｅｖａ，Ｏ．Ｖ．）、ツォジコフ，Ａ．Ｄ．（Ｔｓｏｄｉｋｏｖ，Ａ．Ｄ．）、ギディングス，Ｍ．（Ｇｉｄｄｉｎｇｓ，Ｍ．）、フレアー，Ｓ．Ｍ．（Ｆｒｅｉｅｒ，Ｓ．Ｍ．）、ワイアット，Ｊ．Ｒ．（Ｗｙａｔｔ，Ｊ．Ｒ．）、スピリドノフ，Ａ．Ｎ．（Ｓｐｉｒｉｄｏｎｏｖ，Ａ．Ｎ．）、シャバリーナ，Ｓ．Ａ．（Ｓｈａｂａｌｉｎａ，Ｓ．Ａ．）、ゲステランド，Ｒ．Ｆ．（Ｇｅｓｔｅｌａｎｄ，Ｒ．Ｆ．）、およびアトキンス，Ｊ．Ｆ．（Ａｔｋｉｎｓ，Ｊ．Ｆ．）著、「アンチセンス活性と相関するオリゴヌクレオチド中の配列モチーフの同定（Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｓｅｑｕｅｎｃｅ  ｍｏｔｉｆｓ  ｉｎ  ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ  ｗｈｏｓｅ  ｐｒｅｓｅｎｃｅ  ｉｓ  ｃｏｒｒｅｌａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  ａｎｔｉｓｅｎｓｅ  ａｃｔｉｖｉｔｙ．）」、ヌクレイック  アシッズ  リサーチ（Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ）、２０００年、２８巻、ｐ．２８６２−２８６５
モリス，Ｗ．Ｇ．（Ｍｏｒｉｃｅ，Ｗ．Ｇ．）著、「ＮＫ細胞およびＮＫ細胞分化リンパ増殖性疾患の免疫表現型の性質（Ｔｈｅ  ｉｍｍｕｎｏｐｈｅｎｏｔｙｐｉｃ  ａｔｔｒｉｂｕｔｅｓ  ｏｆ  ＮＫ  ｃｅｌｌｓ  ａｎｄ  ＮＫ−ｃｅｌｌ  ｌｉｎｅａｇｅ  ｌｙｍｐｈｏｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ  ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ．）」、アメリカン  ジャーナル  オブ  クリニカル  パソロジー（Ａｍ  Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｐａｔｈｏｌ）、２０００年、１２７巻、ｐ．８８１−８８６．
ムリック，Ａ．Ｅ．（Ｍｕｌｌｉｃｋ，Ａ．Ｅ．）、フー，Ｗ．（Ｆｕ，Ｗ．）、グラハム，Ｍ．Ｊ．（Ｇｒａｈａｍ，Ｍ．Ｊ．）、リー，Ｒ．Ｇ．（Ｌｅｅ，Ｒ．Ｇ．）、ウィッチェル，Ｄ．（Ｗｉｔｃｈｅｌｌ，Ｄ．）、ベル，Ｔ．Ａ．（Ｂｅｌｌ，Ｔ．Ａ．）、ウィップル，Ｃ．Ｐ．（Ｗｈｉｐｐｌｅ，Ｃ．Ｐ．）、およびクルック，Ｒ．Ｍ．（Ｃｒｏｏｋｅ，Ｒ．Ｍ．）著、「ＬＤＬ受容体欠損マウスにおけるａｐｏＢ改善アテローム性動脈硬化症のアンチセンスオリゴヌクレオチド低減（Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ  ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ  ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ａｐｏＢ−ａｍｅｌｉｏｒａｔｅｄ  ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ  ｉｎ  ＬＤＬ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ−ｄｅｆｉｃｉｅｎｔ  ｍｉｃｅ．）」、ジャーナル  オブ  リピッド  リサーチ（Ｊ  Ｌｉｐｉｄ  Ｒｅｓ）、２０１１年、５２巻、ｐ．８８５−８９６
ナダル，Ｒ．（Ｎａｄａｌ，Ｒ．）、シュヴァイツァー，Ｍ．（Ｓｃｈｗｅｉｚｅｒ，Ｍ．）、クライヴェンコ，Ｏ．Ｎ．（Ｋｒｙｖｅｎｋｏ，Ｏ．Ｎ．）、エプスタイン，Ｊ．Ｉ．（Ｅｐｓｔｅｉｎ，Ｊ．Ｉ．）、およびアイゼンベルガー，Ｍ．Ａ．（Ｅｉｓｅｎｂｅｒｇｅｒ，Ｍ．Ａ．）著、「前立腺の小細胞癌（Ｓｍａｌｌ  ｃｅｌｌ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｐｒｏｓｔａｔｅ．）」、ネイチャー  レビューズ  ウロロジー（Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｕｒｏｌ）、２０１４年、１１巻、ｐ．２１３−２１９
ニン，Ｙ．Ｍ．（Ｎｉｎｇ，Ｙ．Ｍ．）、ピアース，Ｗ．（Ｐｉｅｒｃｅ，Ｗ．）、マーハ，Ｖ．Ｅ．（Ｍａｈｅｒ，Ｖ．Ｅ．）、カルリ，Ｓ．（Ｋａｒｕｒｉ，Ｓ．）、タン，Ｓ．Ｈ．（Ｔａｎｇ，Ｓ．Ｈ．）、チウ，Ｈ．Ｊ．（Ｃｈｉｕ，Ｈ．Ｊ．）、パームバイ，Ｔ．（Ｐａｌｍｂｙ，Ｔ．）、ザーケルバッチ，Ｊ．Ｆ．（Ｚｉｒｋｅｌｂａｃｈ，Ｊ．Ｆ．）、マラタ，Ｄ．（Ｍａｒａｔｈｅ，Ｄ．）、メイロトラ，Ｎ．（Ｍｅｈｒｏｔｒａ，Ｎ．）、ら著、「以前ドセタキセルを受けていた転移性去勢抵抗性前立腺癌患者の治療のためのエンザルタミド：米国食品医薬品局（ＦＤＡ）の医薬品承認要約（Ｅｎｚａｌｕｔａｍｉｄｅ  ｆｏｒ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ  ｃａｓｔｒａｔｉｏｎ−ｒｅｓｉｓｔａｎｔ  ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｃａｎｃｅｒ  ｗｈｏ  ｈａｖｅ  ｐｒｅｖｉｏｕｓｌｙ  ｒｅｃｅｉｖｅｄ  ｄｏｃｅｔａｘｅｌ：Ｕ．Ｓ．Ｆｏｏｄ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ  ｄｒｕｇ  ａｐｐｒｏｖａｌ  ｓｕｍｍａｒｙ．）」、クリニカル  キャンサー  リサーチ（Ｃｌｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ）、２０１３年、１９巻、ｐ．６０６７−６０７３
オオノ，Ａ．（Ｏｈｎｏ，Ａ．）、ヨリタ，Ｋ．（Ｙｏｒｉｔａ，Ｋ．）、ハルヤマ，Ｙ．（Ｈａｒｕｙａｍａ，Ｙ．）、コンドウ，Ｋ．（Ｋｏｎｄｏ，Ｋ．）、カトウ，Ａ．（Ｋａｔｏ，Ａ．）、オオトモ，Ｔ．（Ｏｈｔｏｍｏ，Ｔ．）、カワグチ，Ｍ．（Ｋａｗａｇｕｃｈｉ，Ｍ．）、マルツカ，Ｋ．（Ｍａｒｕｔｕｓｋａ，Ｋ．）、チジイワ，Ｋ．（Ｃｈｉｊｉｉｗａ，Ｋ．）、およびカタオカ，Ｈ．（Ｋａｔａｏｋａ，Ｈ．）著、「腫瘍細胞におけるモノカルボキシレートトランスポーター４の異常発現は、肝細胞癌患者における好ましくない結果を予測する（Ａｂｅｒｒａｎｔ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  ｍｏｎｏｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ  ４（ＭＣＴ４）ｉｎ  ｔｕｍｏｒ  ｃｅｌｌｓ  ｐｒｅｄｉｃｔｓ  ａｎ  ｕｎｆａｖｏｒａｂｌｅ  ｏｕｔｃｏｍｅ  ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ．）」、リバー  インターナショナル（Ｌｉｖｅｒ  Ｉｎｔ）、２０１４年
オーブンス，Ｍ．Ｊ．（Ｏｖｅｎｓ，Ｍ．Ｊ．）、デイビース，Ａ．Ｊ．（（Ｄａｖｉｅｓ，Ａ．Ｊ．）、ウィルソン，Ｍ．Ｃ．（Ｗｉｌｓｏｎ，Ｍ．Ｃ．）、マーリ，Ｃ．Ｍ．（Ｍｕｒｒａｙ，Ｃ．Ｍ．）、およびヘイルストラップ，Ａ．Ｐ．（Ｈａｌｅｓｔｒａｐ，Ａ．Ｐ．）著、「ＡＲ−Ｃ１５５８５８は、膜貫通ヘリックス７−１０を含む細胞内部位に結合するモノカルボキシレートトランスポーターＭＣＴ１およびＭＣＴ２の強力な阻害剤である（ＡＲ−Ｃ１５５８５８  ｉｓ  ａ  ｐｏｔｅｎｔ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｏｆ  ｍｏｎｏｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｓ  ＭＣＴ１  ａｎｄ  ＭＣＴ２  ｔｈａｔ  ｂｉｎｄｓ  ｔｏ  ａｎ  ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  ｓｉｔｅ  ｉｎｖｏｌｖｉｎｇ  ｔｒａｎｓｍｅｍｂｒａｎｅ  ｈｅｌｉｃｅｓ  ７−１０．）」、バイオケミカルジャーナル（Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｊ）、２０１０年、４２５巻、ｐ．５２３−５３０
パン  ＷＨ（Ｐａｎ  ＷＨ）、クロースン  ＧＡ（Ｃｌａｗｓｏｎ  ＧＡ．）著、「ＲＮＡにおけるアクセシブルな部位の同定：アンチセンス試薬の設計の第一歩（Ｉｄｅｎｔｉｆｙｉｎｇ  ａｃｃｅｓｓｉｂｌｅ  ｓｉｔｅｓ  ｉｎ  ＲＮＡ：ｔｈｅ  ｆｉｒｓｔ  ｓｔｅｐ  ｉｎ  ｄｅｓｉｇｎｉｎｇ  ａｎｔｉｓｅｎｓｅ  ｒｅａｇｅｎｔｓ．）」、カレント  メディシナル  ケミストリー（Ｃｕｒｒ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ）、２００６年、１３巻（２５号）、３０８３−１０３
パークス，Ｓ．Ｋ．（Ｐａｒｋｓ，Ｓ．Ｋ．）、シーシェ，Ｊ．（Ｃｈｉｃｈｅ，Ｊ．）、およびポイセガール，Ｊ．（Ｐｏｕｙｓｓｅｇｕｒ，Ｊ．）著、「癌治療のためのプロトン動態およびエネルギー代謝妨害（Ｄｉｓｒｕｐｔｉｎｇ  ｐｒｏｔｏｎ  ｄｙｎａｍｉｃｓ  ａｎｄ  ｅｎｅｒｇｙ  ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  ｆｏｒ  ｃａｎｃｅｒ  ｔｈｅｒａｐｙ．）」、ネイチャー  レビューズ  キャンサー（Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｃａｎｃｅｒ）、２０１３年、１３巻、ｐ．６１１−６２３
パツェル  Ｖ（Ｐａｔｚｅｌ  Ｖ）著、「活性型ｓｉＲＮＡのインシリコセレクション（Ｉｎ  ｓｉｌｉｃｏ  ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ａｃｔｉｖｅ  ｓｉＲＮＡ．）」、ドラッグ  ディスカバリー  トゥデイ（Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ  Ｔｏｄａｙ）、２００７年２月、１２巻（３−４号）、ｐ．１３９−１４８
ピーク  ＡＳ（Ｐｅｅｋ  ＡＳ），ベールケ  ＭＡ（Ｂｅｈｌｋｅ  ＭＡ）著、「活性型低分子干渉ＲＮＡの設計（Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  ａｃｔｉｖｅ  ｓｍａｌｌ  ｉｎｔｅｒｆｅｒｉｎｇ  ＲＮＡｓ．）」、カレント  オピニオン  モレキュラー  セラピューティクス（Ｃｕｒｒ  Ｏｐｉｎ  Ｍｏｌ  Ｔｈｅｒ）、２００７年４月、９巻（２号）、ｐ．１１０−８
ペルトガ−ゴメス，Ｎ．（Ｐｅｒｔｅｇａ−Ｇｏｍｅｓ，Ｎ．）、ヴィスカイノ，Ｊ．Ｒ．（Ｖｉｚｃａｉｎｏ，Ｊ．Ｒ．）、ミランダ−ゴンカルブズ，Ｖ．（Ｍｉｒａｎｄａ−Ｇｏｎｃａｌｖｅｓ，Ｖ．）、ピネイロ，Ｃ．（Ｐｉｎｈｅｉｒｏ，Ｃ．）、シルバ，Ｊ．（Ｓｉｌｖａ，Ｊ．）、ペレイラ，Ｈ．（Ｐｅｒｅｉｒａ，Ｈ．）、モンテリオ，Ｐ．（Ｍｏｎｔｅｉｒｏ，Ｐ．）、エンリケ，Ｒ．Ｍ．（Ｈｅｎｒｉｑｕｅ，Ｒ．Ｍ．）、ライス，Ｒ．Ｍ．（Ｒｅｉｓ，Ｒ．Ｍ．）、ロープス，Ｃ．（Ｌｏｐｅｓ，Ｃ．）、ら著、「モノカルボキシレートトランスポーター４（ＭＣＴ４）およびＣＤ１４７の過剰発現は、前立腺癌の予後不良と関連している（Ｍｏｎｏｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ  ４（ＭＣＴ４）ａｎｄ  ＣＤ１４７  ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｉｓ  ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  ｐｏｏｒ  ｐｒｏｇｎｏｓｉｓ  ｉｎ  ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｃａｎｃｅｒ．）」、ＢＭＣキャンサー（ＢＭＣ  Ｃａｎｃｅｒ）、２０１１年、１１巻、ｐ．３１２
ペトリラック  ＤＰ（Ｐｅｔｒｙｌａｋ  ＤＰ）、タンゲン  ＣＭ（Ｔａｎｇｅｎ  ＣＭ）、フセイン  ＭＨ（Ｈｕｓｓａｉｎ  ＭＨ）、ララ  ＰＮ（Ｌａｒａ  ＰＮ），ジュニア．ジョーンズ  ＪＡ（Ｊｒ．，Ｊｏｎｅｓ  ＪＡ）、タップリン  ＭＥ（Ｔａｐｌｉｎ  ＭＥ）、バーチ  ＰＡ（Ｂｕｒｃｈ  ＰＡ）、ベリー  Ｄ（Ｂｅｒｒｙ  Ｄ）、モインポール  Ｃ（Ｍｏｉｎｐｏｕｒ  Ｃ）、コーリ  Ｍ（Ｋｏｈｌｉ  Ｍ）、ベンソン  ＭＣ（Ｂｅｎｓｏｎ  ＭＣ）、スモール  ＥＪ（Ｓｍａｌｌ  ＥＪ）、ラガバン  Ｄ（Ｒａｇｈａｖａｎ  Ｄ）およびクローフォード  ＥＤ（Ｃｒａｗｆｏｒｄ  ＥＤ）著、「進行性難治性前立腺癌のためのドキセタキセルおよびエストラムスチンのミトキサントロンおよびプレドニゾンとの比較（Ｄｏｃｅｔａｘｅｌ  ａｎｄ  ｅｓｔｒａｍｕｓｔｉｎｅ  ｃｏｍｐａｒｅｄ  ｗｉｔｈ  ｍｉｔｏｘａｎｔｒｏｎｅ  ａｎｄ  ｐｒｅｄｎｉｓｏｎｅ  ｆｏｒ  ａｄｖａｎｃｅｄ  ｒｅｆｒａｃｔｏｒｙ  ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｃａｎｃｅｒ．）」、ニュー  イングランド  ジャーナル  オブ  メディスン（Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ）、２００４年、３５１巻（１５号）、ｐ．１５１３−１５２０
サミュエル，Ｖ．Ｔ．（Ｓａｍｕｅｌ，Ｖ．Ｔ．）、チョイ，Ｃ．Ｓ．（Ｃｈｏｉ，Ｃ．Ｓ．）、フィリップス，Ｔ．Ｇ．（Ｐｈｉｌｌｉｐｓ，Ｔ．Ｇ．）、ロマネッリ，Ａ．Ｊ．（Ｒｏｍａｎｅｌｌｉ，Ａ．Ｊ．）、ガイスラー，Ｊ．Ｇ．（Ｇｅｉｓｌｅｒ，Ｊ．Ｇ．）、バノット，Ｓ．（Ｂｈａｎｏｔ，Ｓ．）、マッケイ，Ｒ．（ＭｃＫａｙ，Ｒ．）、モニア，Ｂ．（Ｍｏｎｉａ，Ｂ．）、シャッター，Ｊ．Ｒ．（Ｓｈｕｔｔｅｒ，Ｊ．Ｒ．）、リンドバーグ，Ｒ．Ａ．（Ｌｉｎｄｂｅｒｇ，Ｒ．Ａ．）、ら著、「アンチセンスオリゴヌクレオチドを用いてマウスのｆｏｘｏ１を標的とすると、肝臓および末梢インスリン作用が改善される（Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｆｏｘｏ１  ｉｎ  ｍｉｃｅ  ｕｓｉｎｇ  ａｎｔｉｓｅｎｓｅ  ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ  ｉｍｐｒｏｖｅｓ  ｈｅｐａｔｉｃ  ａｎｄ  ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ  ｉｎｓｕｌｉｎ  ａｃｔｉｏｎ．）」、ダイアビーティス（Ｄｉａｂｅｔｅｓ）、２００６年、５５巻、ｐ．２０４２−２０５０
サニータ，Ｐ．（Ｓａｎｉｔａ，Ｐ．）、カプルーリ，Ｍ．（Ｃａｐｕｌｌｉ，Ｍ．）、テーティ，Ａ．（Ｔｅｔｉ，Ａ．）、ガラティオト，Ｇ．Ｐ．（Ｇａｌａｔｉｏｔｏ，Ｇ．Ｐ．）、ビンセンティーニ，Ｃ．（Ｖｉｃｅｎｔｉｎｉ，Ｃ．）、キアルージ，Ｐ．（Ｃｈｉａｒｕｇｉ，Ｐ．）、ボローニャ，Ｍ．（Ｂｏｌｏｇｎａ，Ｍ．）、およびアンジェルッチ，Ａ．（Ａｎｇｅｌｕｃｃｉ，Ａ．）著、「乳酸塩シャトルに基づく腫瘍：間質代謝関係は、前立腺癌の進行を維持することができる（Ｔｕｍｏｒ−ｓｔｒｏｍａ  ｍｅｔａｂｏｌｉｃ  ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ  ｂａｓｅｄ  ｏｎ  ｌａｃｔａｔｅ  ｓｈｕｔｔｌｅ  ｃａｎ  ｓｕｓｔａｉｎ  ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｃａｎｃｅｒ  ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ．）」、ＢＭＣキャンサー（ＢＭＣ  Ｃａｎｃｅｒ）、２０１４年、１４巻、ｐ．１５４
シュルツ，Ｌ．Ｄ．（Ｓｈｕｌｔｚ，Ｌ．Ｄ．）、イシカワ，Ｆ．（Ｉｓｈｉｋａｗａ，Ｆ．）、およびグライナー，Ｄ．Ｌ．（Ｇｒｅｉｎｅｒ，Ｄ．Ｌ．）著、「翻訳生物医学研究におけるヒト化マウス（Ｈｕｍａｎｉｚｅｄ  ｍｉｃｅ  ｉｎ  ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ  ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ  ｒｅｓｅａｒｃｈ．）」、ネイチャー  レビューズ  イムノロジー（Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｉｍｍｕｎｏｌ）、２００７年、７巻、ｐ．１１８−１３０
シーゲル，Ｒ．Ｌ．（Ｓｉｅｇｅｌ，Ｒ．Ｌ．）、ミラー，Ｋ．Ｄ．（Ｍｉｌｌｅｒ，Ｋ．Ｄ．）、およびジェマル，Ａ．（Ｊｅｍａｌ，Ａ．）著、「癌の統計（Ｃａｎｃｅｒ  ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ．）」、ＣＡ  キャンサー  ジャーナル  フォア  クリニシャン（ＣＡ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｊ  Ｃｌｉｎ．）、２０１５年、６５巻、ｐ．５−２９
タノック  ＩＦ（Ｔａｎｎｏｃｋ  ＩＦ）、デウィット  Ｒ（ｄｅ  Ｗｉｔ  Ｒ）、ベリー  ＷＲ（Ｂｅｒｒｙ  ＷＲ）、ホルティ  Ｊ（Ｈｏｒｔｉ  Ｊ）、プルツァンスカ  Ａ（Ｐｌｕｚａｎｓｋａ  Ａ）、カイ  ＫＮ（Ｃｈｉ  ＫＮ）、オーダード  Ｓ（Ｏｕｄａｒｄ  Ｓ）、シアドア  Ｃ（Ｔｈｅｏｄｏｒｅ  Ｃ）、ジェイムズ  ＮＤ（Ｊａｍｅｓ  ＮＤ）、トゥレッソン  Ｉ（Ｔｕｒｅｓｓｏｎ  Ｉ）、ローゼンタール  ＭＡ（Ｒｏｓｅｎｔｈａｌ  ＭＡ）およびアイゼンベルガー  ＭＡ（Ｅｉｓｅｎｂｅｒｇｅｒ  ＭＡ）著、「前立腺がんに対するドセタキセル＋プレドニゾンまたはミトキサントロン＋プレドニゾン（Ｄｏｃｅｔａｘｅｌ  ｐｌｕｓ  ｐｒｅｄｎｉｓｏｎｅ  ｏｒ  ｍｉｔｏｘａｎｔｒｏｎｅ  ｐｌｕｓ  ｐｒｅｄｎｉｓｏｎｅ  ｆｏｒ  ａｄｖａｎｃｅｄ  ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｃａｎｃｅｒ．）」、ニュー  イングランド  ジャーナル  オブ  メディスン（Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ）、２００４年、３５１巻（１５号）ｐ．１５０２−１５１２
テナクーン，Ｊ．Ｂ．（Ｔｅｎｎａｋｏｏｎ，Ｊ．Ｂ．）、シー，Ｙ．（Ｓｈｉ，Ｙ．）、ハン，Ｊ．Ｊ．（Ｈａｎ，Ｊ．Ｊ．）、ツォーコ，Ｅ．（Ｔｓｏｕｋｏ，Ｅ．）、ホワイト，Ｍ．Ａ．（Ｗｈｉｔｅ，Ｍ．Ａ．）、バーンズ，Ａ．Ｒ．（Ｂｕｒｎｓ，Ａ．Ｒ．）、ザング，Ａ．（Ｚｈａｎｇ，Ａ．）、シア，Ｘ．（Ｘｉａ，Ｘ．）、イルカエヴァ，Ｏ．Ｒ．（Ｉｌｋａｙｅｖａ，Ｏ．Ｒ．）、シン，Ｌ．（Ｘｉｎ，Ｌ．）、ら著、「アンドロゲンは、ＡＭＰＫ−ＰＧＣ−１α調節代謝スイッチを介して前立腺癌細胞の増殖を調節する（Ａｎｄｒｏｇｅｎｓ  ｒｅｇｕｌａｔｅ  ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｃａｎｃｅｒ  ｃｅｌｌ  ｇｒｏｗｔｈ  ｖｉａ  ａｎ  ＡＭＰＫ−ＰＧＣ−１α−ｍｅｄｉａｔｅｄ  ｍｅｔａｂｏｌｉｃ  ｓｗｉｔｃｈ．）」、オンコジーン（Ｏｎｃｏｇｅｎｅ）、２０１４年、３３巻、ｐ．５２５１−５２６１
トーマス，Ｃ．（Ｔｈｏｍａｓ，Ｃ．）、ゾベイジ，Ａ．（Ｚｏｕｂｅｉｄｉ，Ａ．）、クルマ，Ｈ．（Ｋｕｒｕｍａ，Ｈ．）、ファズリー，Ｌ．（Ｆａｚｌｉ，Ｌ．）、ラムルー，Ｆ．（Ｌａｍｏｕｒｅｕｘ，Ｆ．）、ベラルディ，Ｅ．（Ｂｅｒａｌｄｉ，Ｅ．）、モニア，Ｂ．Ｐ．（Ｍｏｎｉａ，Ｂ．Ｐ．）、マクロード，Ａ．Ｒ．（ＭａｃＬｅｏｄ，Ａ．Ｒ．）、シュロフ，Ｊ．Ｗ．（Ｔｈｕｒｏｆｆ，Ｊ．Ｗ．）、およびグリーブ，Ｍ．Ｅ．（Ｇｌｅａｖｅ，Ｍ．Ｅ．）著、「転写因子Ｓｔａｔ５のノックダウンは、アンドロゲン受容体の分解を促進し、インビボでの去勢抵抗性前立腺癌進行を遅延させる（Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ  ｆａｃｔｏｒ  Ｓｔａｔ５  ｋｎｏｃｋｄｏｗｎ  ｅｎｈａｎｃｅｓ  ａｎｄｒｏｇｅｎ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｄｅｌａｙｓ  ｃａｓｔｒａｔｉｏｎ−ｒｅｓｉｓｔａｎｔ  ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｃａｎｃｅｒ  ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ  ｉｎ  ｖｉｖｏ．）」、モレキュラー  キャンサー  セラピューティクス（Ｍｏｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒ）、２０１１年、１０巻、ｐ．３４７−３５９
ウッラ，Ｍ．Ｓ．（Ｕｌｌａｈ，Ｍ．Ｓ．）、デイビース，Ａ．Ｊ．（Ｄａｖｉｅｓ，Ａ．Ｊ．）、およびヘイルストラップ，Ａ．Ｐ．（Ｈａｌｅｓｔｒａｐ，Ａ．Ｐ．）著、「細胞膜乳酸トランスポーターＭＣＴ１ではなくＭＣＴ４は、ＨＩＦ−１α依存性機構を介して低酸素によって上方制御される（Ｔｈｅ  ｐｌａｓｍａ  ｍｅｍｂｒａｎｅ  ｌａｃｔａｔｅ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ  ＭＣＴ４，ｂｕｔ  ｎｏｔ  ＭＣＴ１，ｉｓ  ｕｐ−ｒｅｇｕｌａｔｅｄ  ｂｙ  ｈｙｐｏｘｉａ  ｔｈｒｏｕｇｈ  ａ  ＨＩＦ−１ａｌｐｈａ−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  ｍｅｃｈａｎｉｓｍ．）」、ジャーナル  オブ  バイオロジカル  ケミストリー（Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｃｈｅｍ）、２００６年、２８１巻、ｐ．９０３０−９０３７
バンドソンペル，Ｊ．（Ｖａｎｄｅｓｏｍｐｅｌｅ，Ｊ．）、デプレター，Ｋ．（Ｄｅ  Ｐｒｅｔｅｒ，Ｋ．）、パティン，Ｆ．（Ｐａｔｔｙｎ，Ｆ．）、ポップ，Ｂ．（Ｐｏｐｐｅ，Ｂ．）、ファン  ロイ，Ｎ．（Ｖａｎ  Ｒｏｙ，Ｎ．）、デペップ，Ａ．（Ｄｅ  Ｐａｅｐｅ，Ａ．）、およびスペルマン，Ｆ．（Ｓｐｅｌｅｍａｎ，Ｆ．）著、「複数の内部コントロール遺伝子の幾何学的平均によるリアルタイム定量的ＲＴ−ＰＣＲデータの正確な標準化（Ａｃｃｕｒａｔｅ  ｎｏｒｍａｌｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｒｅａｌ−ｔｉｍｅ  ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ  ＲＴ−ＰＣＲ  ｄａｔａ  ｂｙ  ｇｅｏｍｅｔｒｉｃ  ａｖｅｒａｇｉｎｇ  ｏｆ  ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｉｎｔｅｒｎａｌ  ｃｏｎｔｒｏｌ  ｇｅｎｅｓ．）」、ゲノム  バイオロジー（Ｇｅｎｏｍｅ  Ｂｉｏｌ）、３巻、２００２年、ＲＥＳＥＡＲＣＨ００３４
ヴァズ，Ｃ．Ｖ．（Ｖａｚ，Ｃ．Ｖ．）、アルヴィス，Ｍ．Ｇ．（Ａｌｖｅｓ，Ｍ．Ｇ．）、マーカス，Ｒ．（Ｍａｒｑｕｅｓ，Ｒ．）、モレイラ，Ｐ．Ｉ．（Ｍｏｒｅｉｒａ，Ｐ．Ｉ．）、オリヴェイラ，Ｐ．Ｆ．（Ｏｌｉｖｅｉｒａ，Ｐ．Ｆ．）、マイア，Ｃ．Ｊ．（Ｍａｉａ，Ｃ．Ｊ．）、およびソコロ，Ｓ．（Ｓｏｃｏｒｒｏ，Ｓ．）著、「アンドロゲン応答性および非応答性前立腺癌細胞は、明確な解糖代謝プロフィールを示す（Ａｎｄｒｏｇｅｎ−ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅ  ａｎｄ  ｎｏｎｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅ  ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｃａｎｃｅｒ  ｃｅｌｌｓ  ｐｒｅｓｅｎｔ  ａ  ｄｉｓｔｉｎｃｔ  ｇｌｙｃｏｌｙｔｉｃ  ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  ｐｒｏｆｉｌｅ．）」、インターナショナル  ジャーナル  オブ  バイオケミストリー  アンド  セル  バイオロジー（Ｉｎｔ  Ｊ  Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ）、２０１２年、４４巻、ｐ．２０７７−２０８４
ワン，Ｙ．（Ｗａｎｇ，Ｙ．）、シュエ，Ｈ．（Ｘｕｅ，Ｈ．）、カッツ，Ｊ．Ｃ．（Ｃｕｔｚ，Ｊ．Ｃ．）、バヤニ，Ｊ．（Ｂａｙａｎｉ，Ｊ．）、マウジ，Ｎ．Ｒ．（Ｍａｗｊｉ，Ｎ．Ｒ．）、チェン，Ｗ．Ｇ．（Ｃｈｅｎ，Ｗ．Ｇ．）、ゲッツ，Ｌ．Ｊ．（Ｇｏｅｔｚ，Ｌ．Ｊ．）、ヘイワード，Ｓ．Ｗ．（Ｈａｙｗａｒｄ，Ｓ．Ｗ．）、サダル，Ｍ．Ｄ．（Ｓａｄａｒ，Ｍ．Ｄ．）、ギルクス，Ｃ．Ｂ．（Ｇｉｌｋｓ，Ｃ．Ｂ．）、ら著、「移植可能なヒト前立腺腫瘍細胞の移植によるＳＣＩＤマウスの同所性転移性前立腺癌モデル（Ａｎ  ｏｒｔｈｏｔｏｐｉｃ  ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ  ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｃａｎｃｅｒ  ｍｏｄｅｌ  ｉｎ  ＳＣＩＤ  ｍｉｃｅ  ｖｉａ  ｇｒａｆｔｉｎｇ  ｏｆ  ａ  ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｂｌｅ  ｈｕｍａｎ  ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｔｕｍｏｒ  ｌｉｎｅ．）」、ラボラトリー  インベスティゲイション（Ｌａｂ  Ｉｎｖｅｓｔ）、２００５年、８５巻、ｐ．１３９２−１４０４
ワールブルグ，Ｏ．（Ｗａｒｂｕｒｇ，Ｏ．）著、「がん細胞の呼吸機能障害について（Ｏｎ  ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ  ｉｍｐａｉｒｍｅｎｔ  ｉｎ  ｃａｎｃｅｒ  ｃｅｌｌｓ．）」、サイエンス（Ｓｃｉｅｎｃｅ）、１９５６年、１２４巻、ｐ．２６９−２７０
ユアン，Ｔ．Ｃ．（Ｙｕａｎ，Ｔ．Ｃ．）、ビーラマニ，Ｓ．（Ｖｅｅｒａｍａｎｉ，Ｓ．）、およびリン，Ｍ．Ｆ．（Ｌｉｎ，Ｍ．Ｆ．）著、「神経内分泌様前立腺癌細胞：前立腺腺癌細胞の神経内分泌分化転換（Ｎｅｕｒｏｅｎｄｏｃｒｉｎｅ−ｌｉｋｅ  ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｃａｎｃｅｒ  ｃｅｌｌｓ：ｎｅｕｒｏｅｎｄｏｃｒｉｎｅ  ｔｒａｎｓｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｐｒｏｓｔａｔｅ  ａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｃｅｌｌｓ．）」、エンドクリン  リレイテッド  キャンサー（Ｅｎｄｏｃｒ  Ｒｅｌａｔ  Ｃａｎｃｅｒ）、２００７年、１４巻、ｐ．５３１−５４７
ザング，Ｙ．（Ｚｈａｎｇ，Ｙ．）、およびヤン，Ｊ．Ｍ．（Ｙａｎｇ，Ｊ．Ｍ．）著、「癌におけるエネルギー代謝の変化：治療介入のためのユニークな機会（Ａｌｔｅｒｅｄ  ｅｎｅｒｇｙ  ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  ｉｎ  ｃａｎｃｅｒ：ａ  ｕｎｉｑｕｅ  ｏｐｐｏｒｔｕｎｉｔｙ  ｆｏｒ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎ．）」、キャンサー  バイオロジー  アンド  セラピー（Ｃａｎｃｅｒ  Ｂｉｏｌ  Ｔｈｅｒ）、２０１３年、１４巻、ｐ．８１−８９
【図１Ａ】
2019500334.tif 000007
【図１Ｂ】
2019500334.tif 000008
【図１Ｃ】
2019500334.tif 000009
【図１Ｄ】
2019500334.tif 000010
【図１Ｅ】
2019500334.tif 000011
【図２Ａ】
2019500334.tif 000012
【図２Ｂ】
2019500334.tif 000013
【図２Ｃ】
2019500334.tif 000014
【図２Ｄ】
2019500334.tif 000015
【図２Ｅ】
2019500334.tif 000016
【図２Ｆ】
2019500334.tif 000017
【図３Ａ】
2019500334.tif 000018
【図３Ｂ】
2019500334.tif 000019
【図３Ｃ】
2019500334.tif 000020
【図４Ａ】
2019500334.tif 000021
【図４Ｂ】
2019500334.tif 000022
【図５Ａ】
2019500334.tif 000023
【図５Ｂ】
2019500334.tif 000024
【図５Ｃ】
2019500334.tif 000025
【図６Ａ】
2019500334.tif 000026
【図６Ｂ】
2019500334.tif 000027
【図６Ｃ】
2019500334.tif 000028
【図７Ａ】
2019500334.tif 000029
【図７Ｂ】
2019500334.tif 000030
【図８Ａ】
2019500334.tif 000031
【図８Ｂ】
2019500334.tif 000032
【図９Ａ】
2019500334.tif 000033
【図９Ｂ】
2019500334.tif 000034
【図１０Ａ】
2019500334.tif 000035
【図１０Ｂ】
2019500334.tif 000036
【図１０Ｃ】
2019500334.tif 000037
【図１０Ｄ】
2019500334.tif 000038
【配列表】
2019500334000001.app
【国際調査報告】
2019500334.tif 000039
2019500334.tif 000040
2019500334.tif 000041
2019500334.tif 000042
2019500334.tif 000043
2019500334.tif 000044