(57)【要約】  本発明は、患者を処置するのに使用するためのメトホルミンであって、患者が、メトホルミン処置に反応してＧＤＦ１５レベルの上昇を示すメトホルミン；メトホルミン処置から利益を得るか、または利益を得ない患者を特定する方法；疾患または障害を発症するかまたはそれに罹患する危険性を有する患者を処置する方法であって、治療有効量のメトホルミンを投与することを含む方法；メトホルミンの投薬量を適合させる方法；メトホルミン処置から利益を得るか、または利益を得ない患者を特定するためのバイオマーカーとしてのＧＤＦ１５の利用、メトホルミン処置から利益を得る患者を特定するのに使用するためのキットおよびキットの使用、ならびにメトホルミン処置から利益を得ない患者を処置する方法に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
患者を処置するのに使用するためのメトホルミンであって、
患者が、メトホルミン処置に反応してＧＤＦ１５レベルの上昇を示し、
患者が、前糖尿病、糖尿病、糖尿病の状況下での低血糖、多嚢胞性卵巣症候群、多毛症、無月経症、非アルコール性脂肪性肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎、繁殖不能、肥満、ビタミンＢ１２欠乏症、インスリン抵抗性、およびこれらに限定されないが、狭心症、脂質異常、高血圧、がん、認知機能低下、認知症、フレイル、転倒、不安定、勃起不全、性機能障害、慢性疼痛、足部潰瘍形成、網膜症、視力減退、腎疾患または寿命の短縮などのような虚血性心疾患または心筋梗塞に対する他の危険因子からなる群から選択される疾患または障害を発症するかまたはそれに罹患する危険性を有する前記メトホルミン。
【請求項２】
メトホルミン処置から利益を得る患者を特定する方法であって、
（ｉ）有効量のメトホルミンを患者に投与する工程と、
（ｉｉ）患者のサンプルのＧＤＦ１５レベルを決定する工程と、
（ｉｉｉ）工程（ｉｉ）で決定したＧＤＦ１５レベルを基準のＧＤＦ１５レベルと比較する工程であって、ＧＤＦ１５レベルの上昇によってメトホルミン投与に対する患者の反応が示される工程
とを含む前記方法。
【請求項３】
メトホルミンならびに患者の糖尿病、特にＩ型またはＩＩ型糖尿病を処置するのに使用するための少なくとも１種の薬学的に許容される担体、アジュバントおよび／または賦形剤を含む医薬組成物であって、患者が、メトホルミン処置に反応してＧＤＦ１５レベルの上昇を示す前記医薬組成物。
【請求項４】
メトホルミンの投薬量を適合させる方法であって、
（ｉ）メトホルミンを患者に投与する工程と、
（ｉｉ）患者のサンプルのＧＤＦ１５レベルを決定する工程と、
（ｉ）工程（ｉｉ）で決定したＧＤＦ１５レベルを基準と比較する工程と
（ｉｉ）ＧＤＦ１５レベルが上昇しない場合にはメトホルミンを用いる処置が停止され、ＧＤＦ１５レベルが上昇する場合にはメトホルミンの投薬量が維持されるかまたは増加されるという点でメトホルミンの投薬量を調整する工程
とを含む前記方法。
【請求項５】
メトホルミン処置から利益を得る患者を特定するためのバイオマーカーとしてのＧＤＦ１５の使用。
【請求項６】
メトホルミン処置から利益を得る患者を特定するのに使用するためのキットであって、ＧＤＦ１５の発現レベルを検出するための手段を含む前記キット。
【請求項７】
請求項８から１６のいずれか１項に記載の方法における請求項６のキットの使用。
【請求項８】
前糖尿病、糖尿病、糖尿病の状況下での低血糖、多嚢胞性卵巣症候群、多毛症、無月経症、非アルコール性脂肪性肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎、繁殖不能、肥満、ビタミンＢ１２欠乏症、インスリン抵抗性、およびこれらに限定されないが、狭心症、脂質異常、高血圧、がん、認知機能低下、認知症、フレイル、転倒、不安定、勃起不全、性機能障害、慢性疼痛、足部潰瘍形成、網膜症、視力減退、腎疾患および寿命の短縮などのような虚血性心疾患または心筋梗塞に対する他の危険因子からなる群から選択される疾患または障害を発症するかまたはそれに罹患する危険性を有する患者を処置する方法であって、治療有効量のメトホルミンを前記患者に投与する工程を含み、前記患者が、（最初の）メトホルミン処置に反応してＧＤＦ１５レベルの上昇を示す前記方法。
【請求項９】
前糖尿病、糖尿病、糖尿病の状況下での低血糖、多嚢胞性卵巣症候群、多毛症、無月経症、非アルコール性脂肪性肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎、繁殖不能、肥満、ビタミンＢ１２欠乏症、インスリン抵抗性、およびこれらに限定されないが、狭心症、脂質異常、および高血圧などのような虚血性心疾患または心筋梗塞に対する他の危険因子からなる群から選択される疾患または障害を発症するかまたはそれに罹患する危険性を有する患者を処置する方法。
【請求項１０】
がん、認知機能低下、認知症、フレイル、転倒、不安定、勃起不全、性機能障害、慢性疼痛、足部潰瘍形成、網膜症、視力減退、腎疾患および寿命の短縮からなる群から選択される疾患または障害を発症するかまたはそれに罹患する危険性を有する患者を処置する方法であって、治療有効量のメトホルミンを前記患者に投与する工程を含み、前記患者が、（最初の）メトホルミン処置に反応してＧＤＦ１５レベルの上昇を示す前記方法。
【請求項１１】
メトホルミン処置から利益を得る患者の群を処置する方法であって、
（ｉ）有効量のメトホルミンを患者に投与する工程と、
（ｉｉ）患者のサンプルのＧＤＦ１５レベルを決定する工程と、
（ｉｉｉ）工程（ｉｉ）で決定したＧＤＦ１５レベルを基準のＧＤＦ１５レベルと比較する工程と
（ｉｖ）ＧＤＦ１５レベルの上昇を示すこれらの患者にメトホルミンを投与し続ける工程
とを含む前記方法。
【請求項１２】
メトホルミン処置から利益を得ない患者の群を処置する方法であって、
（ｉ）有効量のメトホルミンを患者に投与する工程と、
（ｉｉ）患者のサンプルのＧＤＦ１５レベルを決定する工程と、
（ｉｉｉ）工程（ｉｉ）で決定したＧＤＦ１５レベルを基準のＧＤＦ１５レベルと比較する工程と
（ｉｖ）ＧＤＦ１５レベルの低下を示すこれらの患者へのメトホルミン投与を中断する工程と、場合により、
（ｖ）ＧＤＦ１５レベルの低下を示すこれらの患者に代替処置を投与する工程
とを含む前記方法。
【請求項１３】
メトホルミン処置から利益を得ない患者を特定する方法であって、
（ｉ）有効量のメトホルミンを患者に投与する工程と、
（ｉｉ）患者のサンプルのＧＤＦ１５レベルを決定する工程と、
（ｉｉｉ）工程（ｉｉ）で決定したＧＤＦ１５レベルを基準のＧＤＦ１５レベルと比較する工程であって、ＧＤＦ１５レベルの未変更または低下がメトホルミン投与に反応しない患者を示す工程とを含む前記方法。
【請求項１４】
患者を処置するのに使用するためのスルホニル尿素、ドーパミンアゴニスト、ＤＰＰ−４阻害剤、グルカゴン様ペプチド、メグリチニド、アミリン模倣体、アルファ−グルコシダーゼ阻害剤、ＳＧＬＴ２阻害剤、および／またはチアゾリジンジオンであって、患者が、メトホルミン処置に反応してＧＤＦ１５レベルの未変更または低下を示し、患者が、前糖尿病、糖尿病、糖尿病の状況下での低血糖、多嚢胞性卵巣症候群、多毛症、無月経症、非アルコール性脂肪性肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎、繁殖不能、肥満、ビタミンＢ１２欠乏症、インスリン抵抗性、およびこれらに限定されないが、狭心症、脂質異常、高血圧、がん、認知機能低下、認知症、フレイル、転倒、不安定、勃起不全、性機能障害、慢性疼痛、足部潰瘍形成、網膜症、視力減退、腎疾患および寿命の短縮などのような虚血性心疾患または心筋梗塞に対する他の危険因子からなる群から選択される疾患または障害を発症するかまたはそれに罹患する危険性を有する前記スルホニル尿素、ドーパミンアゴニスト、ＤＰＰ−４阻害剤、グルカゴン様ペプチド、メグリチニド、アミリン模倣体、アルファ−グルコシダーゼ阻害剤、ＳＧＬＴ２阻害剤、および／またはチアゾリジンジオン。
【請求項１５】
患者がメトホルミン投与に反応するか否かを決定するための時間を短縮する方法であって、
（ｉ）有効量のメトホルミンを患者に投与する工程と、
（ｉｉ）患者のサンプルのＧＤＦ１５レベルを決定する工程と、
（ｉｉｉ）工程（ｉｉ）で決定したＧＤＦ１５レベルを基準のＧＤＦ１５レベルと比較する工程
とを含み、
ＧＤＦ１５レベルの上昇が、メトホルミン投与に反応する患者を示し、ＧＤＦ１５レベルの未変更または低下がメトホルミン投与に反応しない患者を示す前記方法。
【請求項１６】
患者の糖尿病に関連する合併症を予防し、遅延させ、および／または処置する方法であって、
（ｉ）有効量のメトホルミンを患者に投与する工程と、
（ｉｉ）患者のサンプルのＧＤＦ１５レベルを決定する工程と、
（ｉｉｉ）工程（ｉｉ）で決定したＧＤＦ１５レベルを基準のＧＤＦ１５レベルと比較する工程と、
（ｉｖ）ＧＤＦ１５レベルの上昇を示すこれらの患者にメトホルミンを投与し続け、ＧＤＦ１５レベルの未変更または低下を示すこれらの患者へのメトホルミン投与を中断する工程と、場合により、
（ｖ）ＧＤＦ１５レベルの未変更または低下を示すこれらの患者に代替処置を投与する工程
とを含む前記方法。
【請求項１７】
患者の糖尿病に関連する合併症を予防し、遅延させ、および／または処置する方法であって、
（ｉ）有効量のメトホルミンを患者に投与する工程と、
（ｉｉ）患者のサンプルのＧＤＦ１５レベルを決定する工程と、
（ｉｉｉ）工程（ｉｉ）で決定したＧＤＦ１５レベルを基準のＧＤＦ１５レベルと比較する工程であって、ＧＤＦ１５レベルの上昇が、メトホルミン処置に反応する患者を示し、ＧＤＦ１５レベルの未変更または低下がメトホルミン処置に反応しない患者を示す工程と、場合により、
（ｉｖ）前記患者における糖尿病に関連する合併症を低減するために、ＧＤＦ１５レベルの未変更または低下を示すこれらの患者に対する代替処置を考慮する工程
とを含む前記方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、患者を処置するのに使用するメトホルミンであって、患者が、メトホルミン処置に反応してＧＤＦ１５レベルの上昇を示すメトホルミン；メトホルミン処置から利益を得るか、または利益を得ない患者を特定する方法；疾患または障害を発症するかまたはそれに罹患する危険性を有する患者を処置する方法であって、治療有効量のメトホルミンを投与することを含む方法；メトホルミンの投薬量を適合させる方法；メトホルミン処置から利益を得るか、または利益を得ない患者を特定するためのバイオマーカーとしてのＧＤＦ１５の利用（usage）、メトホルミン処置から利益を得る患者を特定するのに使用するためのキットおよびキットの使用、ならびにメトホルミン処置から利益を得ない患者を処置する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
メトホルミンは、現在、世界中で最も広く使用されるグルコース降下剤である。メトホルミンは、動物モデルとヒトの両方で広範囲にわたって研究されており、多数の臨床的特性と生化学的特性を有する。メトホルミンがグルコースレベルを有効に低下させることが臨床試験により明瞭かつ再現性良く示され、またメトホルミンは、その目的のために、１９５７年から使用されてきた。臨床試験によって、メトホルミンの代謝作用が糖尿病を有するヒトに限定されないことも示された。したがって、いくつかの試験によって、メトホルミンが適度に体重を低減させ、グルコース耐性障害から糖尿病への血糖異常症（dysglycemia）の進行を有効に低減させることが示された１、２。他の調査によって、メトホルミンが虚血性心疾患の発症率、および通院の参加者と他の疾病を有する参加者の両方における死亡率を低減させることが強く示唆され、メトホルミンが様々な悪性腫瘍の発症または進行を低減させ３、４、寿命を増加させる３７、３８、３９可能性を高めた。実際に、メトホルミンに関与する１５００を超える臨床試験が、多くの異なる種類の疾患において現在進行中である（非特許文献１）。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００３】
【非特許文献１】ｗｗｗ．ｃｌｉｎｉｃａｌｔｒｉａｌｓ．ｇｏｖ
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
前述の薬物の臨床的特性は、７０年を超える期間、強い興味を引いてきた。したがって、その作用機序のほとんどが未知のままであることは注目すべきことである。臨床研究により、メトホルミンが血糖を低下させる主要な機序が、直接またはインスリンの作用を増強することによる、肝臓のグルコース産生の低減によるものであることが示された５。生化学的には、メトホルミンが、ミトコンドリアの機能の破壊６〜８およびＡＭＰ活性化プロテインキナーゼ（細胞のエネルギーバランスを調節し、炎症も阻害し、インスリン作用も改善する重要な分子）の活性化９、１０を介してその治療作用を引き出すという証拠が増えている。この研究の本体にもかかわらず、グルコースおよび糖化ヘモグロビン以外に、メトホルミンの存在または用量に対する信頼できるバイオマーカーが特定されていないことは特に興味深い。このことによって、通常のグルコース恒常性を有するヒトにおけるメトホルミンの作用を評価する能力が明らかに制限される。さらに、現在、メトホルミンを用いる処置が、患者に対して実際に有益であるか否かを見出すこと（例えば、ＨｂＡ１ｃの低減により）、すなわち、患者が、メトホルミン反応者であるか否かを決定することに数カ月を要する。ＨｂＡ１ｃ測定値の基礎である赤血球の低代謝率により、メトホルミン処置が特定の患者において功を奏するか否かを決定するのに３〜６カ月を要する。患者がメトホルミン処置に反応するか否かというこの時間枠の間、メトホルミン処置に反応しない患者は基本的に処置なしのままである。この処置されない長い期間の間、糖尿病性腎症、網膜症、および足部潰瘍形成を含む微小血管の合併症、ならびに心筋梗塞および心血管死を含む大血管性の合併症などの患者にさらなる有害作用が起こる。したがって、メトホルミン処置に反応しないこれらの患者が、可能な限り早く、代替の、より適切な処置を得ることができるよう保証するメトホルミン処置の効能についての診断時間枠を減少することが強く望まれる。さらに、このようなメトホルミン処置の効能についての診断時間枠における減少は、メトホルミン処置に反応しない患者が効果なく数カ月間メトホルミンで処置される必要がないため、医療費も低減させ、メトホルミン処置のコスト低減と、代替の、より適切な処置を用いた遅すぎる治療によるフォローアップ合併症の処置に対するコスト低減をもたらす。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
第１の態様では、本発明は、患者を処置するのに使用するメトホルミンであって、患者が、メトホルミン処置に反応してＧＤＦ１５レベルの上昇を示し、患者が、前糖尿病、糖尿病、糖尿病の状況下での低血糖、多嚢胞性卵巣症候群、多毛症、無月経症、非アルコール性脂肪性肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎、繁殖不能、肥満、ビタミンＢ１２欠乏症、インスリン抵抗性、およびこれらに限定されないが、狭心症、脂質異常、高血圧、がん、認知機能低下、認知症、フレイル、転倒、不安定、勃起不全、性機能障害、慢性疼痛、足部潰瘍形成、網膜症、視力減退、腎疾患または寿命の短縮などの虚血性心疾患または心筋梗塞に対する他の危険因子からなる群から選択される疾患または障害を発症するかまたはそれに罹患する危険性を有する、メトホルミンに関する。
【０００６】
第２の態様では、本発明は、メトホルミン処置から利益を得る患者または患者の群を特定する方法であって、
（ｉ）有効量のメトホルミンを患者に投与する工程と、
（ｉｉ）患者のサンプルのＧＤＦ１５レベルを決定する工程と、
（ｉｉｉ）工程（ｉｉ）で決定したＧＤＦ１５レベルを基準のＧＤＦ１５レベルと比較する工程であって、ＧＤＦ１５レベルの上昇によってメトホルミン投与に対する患者の反応が示される工程
とを含む方法に関する。
【０００７】
第３の態様では、本発明は、メトホルミンならびに患者の糖尿病、特にＩ型またはＩＩ型糖尿病を処置するのに使用するための少なくとも１種の薬学的に許容される担体、アジュバントおよび／または賦形剤を含む医薬組成物であって、患者が、メトホルミン処置に反応してＧＤＦ１５レベルの上昇を示す医薬組成物に関する。
【０００８】
第４の態様では、本発明は、メトホルミンの投薬量を適合させる方法であって、
（ｉ）メトホルミンを患者に投与する工程と、
（ｉｉ）患者のサンプルのＧＤＦ１５レベルを決定する工程と、
（ｉｉｉ）工程（ｉｉ）で決定したＧＤＦ１５レベルを基準と比較する工程と
（ｉｖ）ＧＤＦ１５レベルが上昇しない場合にはメトホルミンを用いる処置が停止され、ＧＤＦ１５レベルが上昇する場合にはメトホルミンの投薬量が維持されるかまたは増加されるという点でメトホルミンの投薬量を調整する工程
とを含む方法に関する。
【０００９】
第５の態様では、本発明は、メトホルミン処置から利益を得る患者または患者の群を特定するためのバイオマーカーとしてのＧＤＦ１５の使用に関する。
【００１０】
第６の態様では、本発明は、メトホルミン処置から利益を得る患者または患者の群を特定するのに使用するためのキットであって、ＧＤＦ１５の発現レベルを検出するための手段を含むキットに関する。
【００１１】
第７の態様では、本発明は、第２または第４の態様の方法における第６の態様のキットの使用に関する。
【００１２】
第８の態様では、本発明は、前糖尿病、糖尿病、糖尿病の状況下での低血糖、多嚢胞性卵巣症候群、多毛症、無月経症、非アルコール性脂肪性肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎、繁殖不能、肥満、ビタミンＢ１２欠乏症、インスリン抵抗性、およびこれらに限定されないが、狭心症、脂質異常、高血圧、がん、認知機能低下、認知症、フレイル、転倒、不安定、勃起不全、性機能障害、慢性疼痛、足部潰瘍形成、網膜症、視力減退、腎疾患および寿命の短縮などの虚血性心疾患または心筋梗塞に対する他の危険因子からなる群から選択される疾患または障害を発症するかまたはそれに罹患する危険性を有する患者を処置する方法であって、治療有効量のメトホルミンを前記患者に投与する工程を含み、前記患者が、（最初の）メトホルミン処置に反応してＧＤＦ１５レベルの上昇を示す方法に関する。
【００１３】
第９の態様では、本発明は、メトホルミン処置から利益を得る患者または患者の群を処置する方法であって、
（ｉ）有効量のメトホルミンを患者に投与する工程と、
（ｉｉ）患者のサンプルのＧＤＦ１５レベルを決定する工程と、
（ｉｉｉ）工程（ｉｉ）で決定したＧＤＦ１５レベルを基準のＧＤＦ１５レベルと比較する工程と
（ｉｖ）ＧＤＦ１５レベルの上昇を示すこれらの患者にメトホルミンを投与し続ける工程
とを含む方法に関する。
【００１４】
第１０の態様では、本発明は、メトホルミン処置から利益を得ない患者または患者の群を処置する方法であって、
（ｉ）有効量のメトホルミンを患者に投与する工程と、
（ｉｉ）患者のサンプルのＧＤＦ１５レベルを決定する工程と、
（ｉｉｉ）工程（ｉｉ）で決定したＧＤＦ１５レベルを基準のＧＤＦ１５レベルと比較する工程と
（ｉｖ）ＧＤＦ１５レベルの未変更または低下を示すこれらの患者へのメトホルミン投与を中断する工程と、場合により、
（ｖ）ＧＤＦ１５レベルの未変更または低下を示すこれらの患者に代替処置を投与する工程
とを含む方法に関する。
【００１５】
第１１の態様では、本発明は、メトホルミン処置から利益を得ない患者または患者の群を特定する方法であって、
（ｉ）有効量のメトホルミンを患者に投与する工程と、
（ｉｉ）患者のサンプルのＧＤＦ１５レベルを決定する工程と、
（ｉｉｉ）工程（ｉｉ）で決定したＧＤＦ１５レベルを基準のＧＤＦ１５レベルと比較する工程であって、ＧＤＦ１５レベルの未変更または低下がメトホルミン投与に反応しない患者を示す工程
とを含む方法に関する。
【００１６】
第１２の態様では、本発明は、患者を処置するのに使用するためのスルホニル尿素、ドーパミンアゴニスト、ＤＰＰ−４阻害剤、グルカゴン様ペプチド、メグリチニド、アミリン模倣体、アルファ−グルコシダーゼ阻害剤、ＳＧＬＴ２阻害剤、および／またはチアゾリジンジオンであって、患者が、メトホルミン処置に反応してＧＤＦ１５レベルの未変更または低下を示し、患者が、前糖尿病、糖尿病、糖尿病の状況下での低血糖、多嚢胞性卵巣症候群、多毛症、無月経症、非アルコール性脂肪性肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎、繁殖不能、肥満、ビタミンＢ１２欠乏症、インスリン抵抗性、およびこれらに限定されないが、狭心症、脂質異常、高血圧、がん、認知機能低下、認知症、フレイル、転倒、不安定、勃起不全、性機能障害、慢性疼痛、足部潰瘍形成、網膜症、視力減退、腎疾患または寿命の短縮などの虚血性心疾患または心筋梗塞に対する他の危険因子からなる群から選択される疾患または障害を発症するかまたはそれに罹患する危険性を有する、スルホニル尿素、ドーパミンアゴニスト、ＤＰＰ−４阻害剤、グルカゴン様ペプチド、メグリチニド、アミリン模倣体、アルファ−グルコシダーゼ阻害剤、ＳＧＬＴ２阻害剤、および／またはチアゾリジンジオンに関する。
【００１７】
第１３の態様では、本発明は、患者がメトホルミン投与に反応するか否かを決定するための時間を短縮する方法であって、
（ｉ）有効量のメトホルミンを患者に投与する工程と、
（ｉｉ）患者のサンプルのＧＤＦ１５レベルを決定する工程と、
（ｉｉｉ）工程（ｉｉ）で決定したＧＤＦ１５レベルを基準のＧＤＦ１５レベルと比較する工程
とを含み、
ＧＤＦ１５レベルの上昇が、メトホルミン投与に反応する患者を示し、ＧＤＦ１５レベルの未変更または低下がメトホルミン投与に反応しない患者を示す方法に関する。
【００１８】
第１４の態様では、本発明は、患者の糖尿病に関連する合併症を予防し、遅延させおよび／または処置する方法であって、
（ｉ）有効量のメトホルミンを患者に投与する工程と、
（ｉｉ）患者のサンプルのＧＤＦ１５レベルを決定する工程と、
（ｉｉｉ）工程（ｉｉ）で決定したＧＤＦ１５レベルを基準のＧＤＦ１５レベルと比較する工程と
（ｉｖ）ＧＤＦ１５レベルの上昇を示すこれらの患者にメトホルミンを投与し続け、ＧＤＦ１５レベルの未変更または低下を示すこれらの患者へのメトホルミン投与を中断する工程と、場合により、
（ｖ）ＧＤＦ１５レベルの未変更または低下を示すこれらの患者に代替処置を投与する工程
とを含む方法に関する。
【００１９】
第１５の態様では、本発明は、患者の糖尿病に関連する合併症を予防し、遅延させおよび／または処置する方法であって、
（ｉ）有効量のメトホルミンを患者に投与する工程と、
（ｉｉ）患者のサンプルのＧＤＦ１５レベルを決定する工程と、
（ｉｉｉ）工程（ｉｉ）で決定したＧＤＦ１５レベルを基準のＧＤＦ１５レベルと比較する工程であって、ＧＤＦ１５レベルの上昇が、メトホルミン処置に反応する患者を示し、ＧＤＦ１５レベルの未変更または低下がメトホルミン処置に反応しない患者を示す工程と、場合により、
（ｉｖ）前記患者における糖尿病に関連する合併症を低減するために、ＧＤＦ１５レベルの未変更または低下を示すこれらの患者に対する代替処置を考慮する工程
とを含む方法に関する。
【図面の簡単な説明】
【００２０】
【図１】ＧＤＦ１５レベルとメトホルミン使用の間の関係を示すグラフである。パネルＡのモデル１〜５は、メトホルミン使用と２３７種の利用可能なバイオマーカーのすべてに関連する臨床因子について考慮した後、自然対数変換ＧＤＦ１５レベルが１標準偏差高いごとのメトホルミンに関するオッズを示す。パネルＢのモデル１〜４は、メトホルミン使用に関連する臨床因子についてのみ考慮した後、自然対数変換ＧＤＦ１５レベルが１標準偏差高いごとのメトホルミンに関するオッズを示す。
【図２】メトホルミン用量とＧＤＦ１５レベルの間の関係を示すグラフである。様々な用量のメトホルミンを摂取するヒトのＧＤＦ１５濃度が示される。平均と平均の上の標準誤差が示される。
【図３】メトホルミンに対するＧＤＦ１５反応を示すグラフである。パネルＡは、ビヒクルまたはメトホルミン（０．５ｍｍｏｌ／Ｌ）のいずれかに２４時間曝露された４頭の雄Ｃ５７ＢＩ６野生型マウス由来の初代培養肝細胞（三連でアッセイした４つの独立した実験に基づく）の培地中のＧＤＦ１５の平均濃度およびＳＥＭが示される。パネルＢは、ビヒクルまたはメトホルミン（０．５ｍＭ）のいずれかに反応した相対的なＧＤＦ１５メッセンジャーＲＮＡの発現（底が２の対数の単位で）を示す。
【図４】ＧＤＦ１５放出に関するＡＭＰＫアクチベーターＡ７６９６６２（ＡＢ−１０μＭ）、過酸化水素（Ｈ２Ｏ２−０．５ｍＭ）およびインスリン（１０ｎＭ）の作用を示すグラフである。曝露なしに対して、４頭のＣ５７ＢＩ６野生型マウス由来の初代培養肝細胞の２４時間の曝露後、これらの成分のどれも培地内のＧＤＦ１５の濃度に影響を及ぼさなかった（三連でアッセイした２つの独立した実験に基づく）。データは平均で表されている（ＳＥＭ）。
【図５】野生型マウスにおける血清中ＧＤＦ１５濃度に関するメトホルミンの作用を示すグラフである。体重１ｋｇ当たり２５０ｍｇのメトホルミン（Ｎ＝６）またはビヒクル（Ｎ＝６）のいずれかを用いる注射の９０分後に得られた尾静脈サンプルで測定されたＧＤＦ１５濃度がパネルＡに示される。６０％高脂肪飼料を５週間、その後、薬物を含有しないか（Ｎ＝４）または２．５ｇ／ｋｇのメトホルミンを含有する（Ｎ＝４）６０％高脂肪飼料をさらに５週間給餌された野生型マウスにおいて得られた尾静脈サンプルで測定された濃度がパネルＢに示される。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
配列表
配列番号１  ヒトＧＤＦ１５のアミノ酸配列（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ：Ｑ９９９８８．３）：
MPGQELRTVNGSQMLLVLLVLSWLPHGGALSLAEASRASFPGPSELHSEDSRFRELRKRYEDLLTRLRANQSWEDSNTDLVPAPAVRILTPEVRLGSGGHLHLRISRAALPEGLPEASRLHRALFRLSPTASRSWDVTRPLRRQLSLARPQAPALHLRLSPPPSQSDQLLAESSSARPQLELHLRPQAARGRRRARARNGDHCPLGPGRCCRLHTVRASLEDLGWADWVLSPREVQVTMCIGACPSQFRAANMHAQIKTSLHRLKPDTVPAPCCVPASYNPMVLIQKTDTGVSLQTYDDLLAKDCHCI
【００２２】
参照文献のリスト
1.     Knowler WC, Barrett-Connor E, Fowler SE, et al. Reduction in the incidence of type 2 diabetes with lifestyle intervention or metformin. N Engl J Med 2002;346:393-403.
2.     Ramachandran A, Snehalatha C, Mary S, Mukesh B, Bhaskar AD, Vijay V. The Indian Diabetes Prevention Programme shows that lifestyle modification and metformin prevent type 2 diabetes in Asian Indian subjects with impaired glucose tolerance (IDPP-1). Diabetologia 2006;49:289-97.
3.     Gandini S, Puntoni M, Heckman-Stoddard BM, et al. Metformin and cancer risk and mortality: a systematic review and meta-analysis taking into account biases and confounders. Cancer Prev Res (Phila) 2014 Sep ;7 (9 ):867 -85 doi : 10 1158 /1940 -6207 CAPR -13-0424 Epub 2014 Jul 1;7:867-85.
4.     Stevens RJ, Ali R, Bankhead CR, et al. Cancer outcomes and all-cause mort
ality in adults allocated to metformin: systematic review and collaborative meta-analysis of randomised clinical trials. Diabetologia 2012;55:2593-603.
5.     Natali A, Ferrannini E. Effects of metformin and thiazolidinediones on suppression of hepatic glucose production and stimulation of glucose uptake in type 2 diabetes: a systematic review. Diabetologia 2006;49:434-41.
6.     Owen MR, Doran E, Halestrap AP. Evidence that metformin exerts its anti-diabetic effects through inhibition of complex 1 of the mitochondrial respiratory
chain. Biochem J 2000;348 Pt 3:607-14.
7.     Miller RA, Chu Q, Xie J, Foretz M, Viollet B, Birnbaum MJ. Biguanides suppress hepatic glucagon signalling by decreasing production of cyclic AMP. Nature
2013;494:256-60.
8.     Madiraju AK, Erion DM, Rahimi Y, et al. Metformin suppresses gluconeogenesis by inhibiting mitochondrial glycerophosphate dehydrogenase. Nature 2014;510:542-6.
9.     Steinberg GR. AMPK and the endocrine control of energy metabolism. Mol Cell Endocrinol 2013;366:125-6.
10.    Fullerton MD, Steinberg GR, Schertzer JD. Immunometabolism of AMPK in insulin resistance and atherosclerosis. Mol Cell Endocrinol 2013;366:224-34.
11.    Gerstein HC, Bosch J, Dagenais GR, et al. Basal insulin and cardiovascular and other outcomes in dysglycemia. N Engl J Med 2012;367:319-28.
12.    Bosch J, Gerstein HC, Dagenais GR, et al. n-3 fatty acids and cardiovascular outcomes in patients with dysglycemia. N Engl J Med 2012;367:309-18.
13.    Gerstein HC, Pare G, McQueen MJ, et al. Identifying Novel Biomarkers for Cardiovascular Events or Death in People With Dysglycemia. Circulation 2015.
14.    Fullerton MD, Galic S, Marcinko K, et al. Single phosphorylation sites in
Acc1 and Acc2 regulate lipid homeostasis and the insulin-sensitizing effects of
metformin. Nat Med 2013;19:1649-54.
15.    Plancade S, Rozenholc Y, Lund E. Generalization of the normal-exponential
model: exploration of a more accurate parametrisation for the signal distribution on Illumina BeadArrays. BMC Bioinformatics 2012;13:329.
16.    Schmid R, Baum P, Ittrich C, et al. Comparison of normalization methods for Illumina BeadChip HumanHT-12 v3. BMC Genomics 2010;11:349.
17.    Ford RJ, Fullerton MD, Pinkosky SL, et al. Metformin and salicylate synergistically activate liver AMPK, inhibit lipogenesis and improve insulin sensitivity. Biochem J 2015;468:125-32.
18.    Wilcock C, Bailey CJ. Accumulation of metformin by tissues of the normal and diabetic mouse. Xenobiotica 1994;24:49-57.
19.    Cool B, Zinker B, Chiou W, et al. Identification and characterization of a small molecule AMPK activator that treats key components of type 2 diabetes and the metabolic syndrome. Cell Metab 2006;3:403-16.
20.    Scott JW, van Denderen BJ, Jorgensen SB, et al. Thienopyridone drugs are selective activators of AMP-activated protein kinase beta1-containing complexes.
Chem Biol 2008;15:1220-30.
21.    Ding Q, Mracek T, Gonzalez-Muniesa P, et al. Identification of macrophage
inhibitory cytokine-1 in adipose tissue and its secretion as an adipokine by human adipocytes. Endocrinology 2009;150:1688-96.
22.    Schlittenhardt D, Schober A, Strelau J, et al. Involvement of growth differentiation factor-15/macrophage inhibitory cytokine-1 (GDF-15/MIC-1) in oxLDL-induced apoptosis of human macrophages in vitro and in arteriosclerotic lesions. Cell Tissue Res 2004;318:325-33.
23.    Williams CC, Singleton BA, Llopis SD, Skripnikova EV. Metformin induces a
senescence-associated gene signature in breast cancer cells. J Health Care Poor
Underserved 2013;24:93-103.
24.    Breit SN, Johnen H, Cook AD, et al. The TGF-beta superfamily cytokine, MIC-1/GDF15: a pleotrophic cytokine with roles in inflammation, cancer and metabolism. Growth Factors 2011;29:187-95.
25.    Kalko SG, Paco S, Jou C, et al. Transcriptomic profiling of TK2 deficient
human skeletal muscle suggests a role for the p53 signalling pathway and identifies growth and differentiation factor-15 as a potential novel biomarker for mitochondrial myopathies. BMC Genomics 2014;15:91.
26.    Fujita Y, Ito M, Kojima T, Yatsuga S, Koga Y, Tanaka M. GDF15 is a novel biomarker to evaluate efficacy of pyruvate therapy for mitochondrial diseases. Mitochondrion 2015;20:34-42.
27.    Koene S, de LP, van Tienoven DH, et al. Serum GDF15 Levels Correlate to Mitochondrial Disease Severity and Myocardial Strain, but Not to Disease Progression in Adult m.3243A>G Carriers. JIMD Rep 2015.
28.    Preusch MR, Baeuerle M, Albrecht C, et al. GDF-15 protects from macrophage accumulation in a mousemodel of advanced atherosclerosis. Eur J Med Res 2013;18:19.
29.    de Jager SC, Bermudez B, Bot I, et al. Growth differentiation factor 15 deficiency protects against atherosclerosis by attenuating CCR2-mediated macrophage chemotaxis. J Exp Med 2011;208:217-25.
30.    Mazagova M, Buikema H, van BA, et al. Genetic deletion of growth differentiation factor 15 augments renal damage in both type 1 and type 2 models of diabetes. Am J Physiol Renal Physiol 2013;305:F1249-F64.
31.    Tsai VW, Macia L, Johnen H, et al. TGF-b superfamily cytokine MIC-1/GDF15
is a physiological appetite and body weight regulator. PLoS ONE 2013;8:e55174.
32.    Holman RR, Paul SK, Bethel MA, Matthews DR, Neil HA. 10-Year Follow-up of
Intensive Glucose Control in Type 2 Diabetes. N Engl J Med 2008;359:1577-89.
33.    Martin-Montalvo A, Mercken EM, Mitchell SJ, et al. Metformin improves healthspan and lifespan in mice. Nat Commun 2013;4:2192.
34.    Ho JE, Mahajan A, Chen MH, et al. Clinical and genetic correlates of growth differentiation factor 15 in the community. Clin Chem 2012;58:1582-91.
35.    Adela R, Banerjee SK. GDF-15 as a Target and Biomarker for Diabetes and Cardiovascular Diseases: A Translational Prospective. J Diabetes Res 2015;2015:490842.
36.    Hong JH, Chung HK, Park HY, et al. GDF15 Is a Novel Biomarker for Impaired Fasting Glucose. Diabetes Metab J 2014;38:472-9.
37.    Castillo-Quan JJ, Kinghorn KJ, Bjedov Genetics and Pharmacology of Longevity: The Road to Therapeutics for Healthy Aging. Adv Genetics 2015; 90, 1-73.
38.    Martin-Montalvo A, Mercken EM, Mitchell SJ et al. Metformin improves healthspan and lifespan in mice. Nature Communic. 2013; 4: 2192, 1-9. 
39.    Bannister CA, Holden SE, Jenkins-Jones S et al. Can people with type 2 diabetes live longer than those without? A comparison of mortality in people initiated with metformin or sulphonylurea monotherapy and matched, non-diabetic controls. Diabetes, Obesity and Metabolism 2014; 16: 1165-1173.
40.    Gerstein HC, Pare G, McQueen MJ, Heinz Haenel, et al. Identifying Novel Biomarkers for Cardiovascular Events or Death in People With Dysglycemia. Circulation. published online before print October 30, 2015
【００２３】
発明の詳細な説明
定義
本発明を以下に詳述する前に、本明細書に記載された特定の方法論、プロトコルおよび試薬は変更する場合があるため、この発明はこれらに限定されないことが理解されるべきである。本明細書で使用される用語は特定の実施形態を記載することのみを目的とするものであり、添付の特許請求の範囲によってのみ限定される本発明の範囲を限定しようとするものではないことも理解されるべきである。他に定義しなければ、本明細書で使用されるすべての技術および科学用語は、当業者によって通常理解されるものと同じ意味を有する。
【００２４】
いくつかの文献がこの明細書本文全体を通して引用される。本明細書で引用される文献（特許、特許出願、科学出版物、製造業者の仕様書、取扱説明書など）のそれぞれは、上述のものか後述のものにかかわらず、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。本明細書のいずれの事項も、本発明が、先行する発明のためにこのような開示に先行するものとして権利を与えられないことの承認として解釈されるべきではない。本明細書で引用される文献の一部は、「参照により組み込まれる」ものとして特徴付けられる。このような組み込まれる参照の定義または教示と本明細書に記載される定義または教示の間で矛盾する事象では、本明細書の本文が優先される。
【００２５】
以下に、本発明の要素が記載される。これらの要素は具体的な実施形態により列挙されるが、これらの要素は、さらなる実施形態を創出するために任意の方式および任意の数で組み合わされることが理解されるべきである。様々に記載される実施例および好ましい実施形態は、本発明を、明示的に記載される実施形態のみに限定して解釈されるべきではない。この記述は、明示的に記載される実施形態を任意の数の開示された、および／または好ましい要素と組み合わせた実施形態を支持および包含するものとして理解されるべきである。さらに、この出願において記載されるすべての要素の任意の並べ替えおよび組合せは、文脈において他に示されていなければ、本出願の記載によって開示されたものとみなすべきである。
【００２６】
文脈が他の意味を必要としていなければ、この明細書および後に続く特許請求の範囲全体を通して、語句「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」、ならびに「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」および「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」などの変形体は、所定の整数もしくは工程または整数もしくは工程の群の包含を意味するが、任意の他の整数もしくは工程または整数もしくは工程の群の除外を意味するものではないことが理解されよう。
【００２７】
この明細書および添付の特許請求の範囲で使用されるように、単数形「１つの（ａ）」、「１つの（ａｎ）」、および「その（ｔｈｅ）」は、文脈が他にはっきりと示していなければ、複数の指示対象を含む。
【００２８】
用語「約」は、数値と接続して使用する場合、指示された数値より５％小さい下限と、指示された数値より５％大きい上限とを有する範囲内の数値を包含することを意味する。
【００２９】
アミノ酸は、各アミノ酸に特異的な側鎖と一緒に、アミン（−ＮＨ２）およびカルボン酸（−ＣＯＯＨ）官能基から構成される有機化合物である。典型的には、アミノ酸は、これらの側鎖の特性によって４つの群に分類される：側鎖によって、弱酸性または弱塩基性、側鎖が極性である場合は親水性、または側鎖が非極性である場合は疎水性のアミノ酸が作製される。
【００３０】
本発明の異なる態様の文脈では、用語「ペプチド」は、ペプチド結合によって連結したアミノ酸の短いポリマーを指す。ペプチドは、タンパク質と同じ化学（ペプチド）結合を有するが、一般的に長さが短い。最も短いペプチドはジペプチドであり、単一のペプチド結合によって接続した２つのアミノ酸からなる。トリペプチド、テトラペプチド、ペンタペプチドなども存在する。好ましくは、ペプチドは、最大８、１０、１２、１５、１８または２０アミノ酸の長さを有する。ペプチドは、環状ペプチドでなければ、アミノ末端とカルボキシル末端を有する。
【００３１】
本発明の異なる態様の文脈では、用語「ポリペプチド」は、ペプチド結合によって一緒に結合したアミノ酸の単一の直鎖を指し、好ましくは、少なくとも約２１個のアミノ酸を含む。ポリペプチドは、１本より多い鎖から構成されるタンパク質の１つの鎖であり、タンパク質が１本の鎖から構成される場合は、タンパク質それ自体である。
【００３２】
本発明の異なる態様の文脈では、用語「タンパク質」は、二次および三次構造を回復する１つまたはそれ以上のポリペプチドを含む分子を指し、さらに、四次構造を形成するいくつかのポリペプチド、すなわち、いくつかのサブユニットから構成されるタンパク質を指す。本発明の文脈では、タンパク質またはポリペプチドの一次構造は、ポリペプチド鎖におけるアミノ酸の配列である。タンパク質中の二次構造は、タンパク質の局所セグメントの一般的な三次元形態である。しかし、それは、三次構造であると考えられる三次元空間での具体的な原子の位置について記載していない。タンパク質において、二次構造は、骨格アミドとカルボキシル基の間の水素結合のパターンによって定義される。タンパク質の三次構造は、原子座標によって決定されるタンパク質の三次元構造である。四次構造は、マルチサブユニット複合体における複数の折り畳まれたまたはコイル状のタンパク質またはポリペプチド分子の配置である。用語「アミノ酸鎖」および「ポリペプチド鎖」は本発明の文脈において同義的に使用される。
【００３３】
本発明のタンパク質およびポリペプチド（タンパク質誘導体、タンパク質バリアント、タンパク質フラグメント、タンパク質セグメント、タンパク質エピトープおよびタンパク質ドメインを含む）は、化学的修飾によってさらに修飾することができる。これは、このような化学的修飾ポリペプチドが、２０個の天然に存在するアミノ酸以外の他の化学基を含むことを意味する。このような他の化学基の例としては、非限定的に、グリコシル化アミノ酸およびリン酸化アミノ酸が挙げられる。ポリペプチドの化学的修飾は、親ポリペプチドと比較して有利な特性、例えば、増強された安定性、増大した生物学的半減期、または増大した水溶性のうちの１つまたはそれ以上を提供する。本発明において有用なバリアントに適用可能な化学的修飾としては、非限定的に、以下が挙げられる：ＰＥＧ化、非グリコシル化親ポリペプチドのグリコシル化、または親ポリペプチに存在するグリコシル化パターンの修飾。タンパク質は、結合した非ペプチド基、例えば、補欠分子族または補助因子なども有する。
【００３４】
増殖分化因子１５（ＧＤＦ１５）は、トランスフォーミング増殖因子ベータスーパーファミリーに属するタンパク質であり、損傷した組織で、および疾患プロセス中に、炎症およびアポトーシス経路を調節する役割を果たす（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ．受託番号：Ｑ９９９８８．３）。ＧＤＦ１５は、ＴＧＦ−ＰＬ、マクロファージ阻害サイトカイン−１（ＭＩＣ−１）、ＰＤＦ、胎盤骨形成タンパク質Ｂ（ＰＬＡＢ）、および胎盤トランスフォーミング増殖因子β（ＰＴＧＦＢ）としても知られる。ＧＤＦ１５ｍＲＮＡは、肝臓に最も豊富に存在し、より低いレベルでは一部の他の組織でも見られる。肝臓でのＧＤＦ１５ｍＲＮＡの発現は、肝臓、腎臓、心臓、および肺などの器官が損傷している間、著しく上方調節される。ＧＤＦ１５遺伝子（非ステロイド性抗炎症薬活性化遺伝子−１（ＮＡＧ−１）としても知られる）は、第１９染色体のｐ１２−１３．１に位置し、ＧＤＦ１５は、小胞体で切断され、２５−ｋＤａの活性循環二量体タンパク質を放出する４０−ｋＤａのプロペプチドとして発現される。マウスにおけるＧＤＦ１５遺伝子の欠失により、アテローム性動脈硬化症の増加２８、２９、糖尿病性腎障害（ｄｉａｂｅｔｉｃ  ｋｉｄｎｅｙ  ｉｎｊｕｒｙ）３０、および食欲増加による肥満３１が生じ、ＧＤＦ１５によって、おそらく炎症を抑制して２８〜３０これらの作用が妨害されることが示唆される。これらの所見は、メトホルミンが心保護的であり、寿命を増加させる場合さえある３２、３３ことを示唆する文献とも一致している。したがって、ヒトの研究において、心血管疾患、糖尿病および腎機能障害で高レベルのＧＤＦ１５３４〜３６が報告されたことは注目に値する。
【００３５】
本明細書で使用される場合、用語「バリアント」は、導出されるポリペプチドまたはタンパク質と比較して、その長さまたは配列における１つまたはそれ以上の変化により異なるポリペプチドまたはタンパク質として理解されるべきである。ポリペプチドバリアントまたはタンパク質バリアントが導出されるポリペプチドまたはタンパク質は、親ポリペプチドまたはタンパク質としても知られる。用語「バリアント」は、親分子の「フラグメント」または「誘導体」を含む。典型的には、「フラグメント」は親分子より長さまたはサイズが小さいが、「誘導体」は親分子と比較してその配列において１つまたはそれ以上の相違を示す。これらに限定されないが、翻訳後修飾タンパク質（例えば、グリコシル化、ビオチン化、リン酸化、ユビキチン化、パルミトイル化、またはタンパク質分解により切断されたタンパク質）などの修飾分子も包含される。親ポリペプチドまたはタンパク質は野生型ポリペプチドまたはタンパク質であるが、バリアントは、人工的に、好ましくは、遺伝子工学的手段によって構築される。しかし、天然に存在するバリアントも本明細書で使用される用語「バリアント」に包含されることが理解されるべきである。さらに、本発明において有用なバリアントは、親分子のホモログ、オルソログ、もしくはパラログから、または人工的に構築されたバリアントからも導出されるが、但し、バリアントが少なくとも１つの親分子の生物学的活性を示す、すなわち、機能的に活性であることを条件とする。
【００３６】
本明細書で使用される「バリアント」は、導出される親ポリペプチドまたは親タンパク質に対する配列同一性のある特定の度合いによって特徴付けることができる。より正確には、本発明の文脈におけるタンパク質のバリアントは、親ポリペプチドに対して少なくとも８０％の配列同一性を示す。用語「少なくとも８０％の配列同一性」は、ポリペプチド配列の比較に関して、明細書全体を通して使用される。この表現は、好ましくは、それぞれの基準ポリペプチドまたはそれぞれの基準ポリヌクレオチドに対して少なくとも８０％、少なくとも８１％、少なくとも８２％、少なくとも８３％、少なくとも８４％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％の配列同一性を指す。好ましくは、問題のポリペプチドおよび基準のポリペプチドは、２０、３０、４０、４５、５０、６０、７０、８０、９０、１００もしくはそれより多いアミノ酸の連続する区画または基準ポリペプチドの全長にわたって示された配列同一性を示す。
【００３７】
本発明の誘導体は、アミノ酸配列において総数が最大１００まで（１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、または５０まで）の変化（すなわち、交換、挿入、欠失、Ｎ末端のトランケーション、および／またはＣ末端のトランケーション）を示す。アミノ酸交換は、保存的および／または非保存的である。好ましい実施形態では、本発明の誘導体は、最大１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、または５０個のアミノ酸の交換、好ましくは、アミノ酸の保存的交換で、導出されるポリペプチドまたはタンパク質またはドメインと異なる。
【００３８】
用語「欠失バリアント」および「フラグメント」は、本明細書において互換的に使用される。このようなバリアントは、Ｎ末端トランケーション、Ｃ末端トランケーションおよび／または内部の欠失を含む。フラグメントは、天然に存在する（例えば、スプライスバリアント）か、または人工的に、好ましくは、遺伝子工学的手段によって構築される。好ましくは、フラグメント（または欠失バリアント）は、親ポリペプチドと比較して、そのＮ末端および／またはそのＣ末端および／または内部で、好ましくは、そのＮ末端で、そのＮおよびＣ末端で、またはそのＣ末端で、最大１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、または１００個のアミノ酸の欠失を有する。
【００３９】
２つの配列が比較され、それと比較して配列同一性の割合が計算されることになる基準配列が指定されていない場合、他に具体的に示されていなければ、配列同一性は比較される２つの配列の長い方を基準として計算されるべきである。基準配列が示される場合、他に具体的に示されていなければ、配列同一性は配列番号で示される基準配列の全長を基準として決定される。アミノ酸配列の類似性、すなわち配列同一性の割合は、配列アラインメントにより決定することができる。このようなアラインメントは、いくつかの当技術分野で知られたアルゴリズムにより、好ましくは、ＫａｒｌｉｎおよびＡｌｔｓｃｈｕｌの数学的アルゴリズム（Ｋａｒｌｉｎ＆Ａｌｔｓｃｈｕｌ（１９９３）  Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９０：５８７３〜５８７７）により、ｈｍｍａｌｉｇｎ（ＨＭＭＥＲ  ｐａｃｋａｇｅ、ｈｔｔｐ：／／ｈｍｍｅｒ．ｗｕｓｔｌ．ｅｄｕ／）により、または、例えば、ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｅｂｉ．ａｃ．ｕｋ／Ｔｏｏｌｓ／ｃｌｕｓｔａｌｗ／もしくはｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｅｂｉ．ａｃ．ｕｋ／Ｔｏｏｌｓ／ｃｌｕｓｔａｌｗ２／ｉｎｄｅｘ．ｈｔｍｌもしくはｈｔｔｐ：／／ｎｐｓａ−ｐｂｉｌ．ｉｂｃｐ．ｆｒ／ｃｇｉ−ｂｉｎ／ｎｐｓａ＿ａｕｔｏｍａｔ．ｐｌ？ｐａｇｅ＝／ＮＰＳＡ／ｎｐｓａ＿ｃｌｕｓｔａｌｗ．ｈｔｍｌで利用可能なＣＬＵＳＴＡＬアルゴリズム（Ｔｈｏｍｐｓｏｎ，Ｊ．Ｄ．、Ｈｉｇｇｉｎｓ，Ｄ．Ｇ．＆Ｇｉｂｓｏｎ，Ｔ．Ｊ．（１９９４）  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．２２、４６７３〜８０）により実行できる。使用される好ましいパラメーターは、ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｅｂｉ．ａｃ．ｕｋ／Ｔｏｏｌｓ／ｃｌｕｓｔａｌｗ／またはｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｅｂｉ．ａｃ．ｕｋ／Ｔｏｏｌｓ／ｃｌｕｓｔａｌｗ２／ｉｎｄｅｘ．ｈｔｍｌでそれらが設定されているような、初期設定パラメーターである。配列同一性の程度（配列同一性）は、例えば、ＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＴまたはＢｌａｓｔＺ（またはＢｌａｓｔＸ）を使用して計算される。類似のアルゴリズムは、Ａｌｔｓｃｈｕｌら（１９９０）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１５：４０３〜４１０のＢＬＡＳＴＮおよびＢＬＡＳＴＰプログラムに組み込まれている。ＢＬＡＳＴタンパク質サーチを、ＢＬＡＳＴＰプログラム、スコア＝５０、文字長＝３を用いて実行して、親ポリペプチドに相同なアミノ酸配列を得る。比較のためのギャップアライメントを得るためには、Ａｌｔｓｃｈｕｌら（１９９７）Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．２５：３３８９−３４０２に記載のギャップＢＬＡＳＴが利用される。ＢＬＡＳＴおよびギャップＢＬＡＳＴプログラムを利用する場合、それぞれのプログラムのデフォルトパラメーターが使用される。配列同一性解析は、Ｓｈｕｆｆｌｅ−ＬＡＧＡＮ（Ｂｒｕｄｎｏ  Ｍ．、Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ  ２００３ｂ、１９  Ｓｕｐｐｌ  １：Ｉ５４〜Ｉ６２）のような確立された相同性マッピング法またはマルコフ確率場（Ｍａｒｋｏｖ  ｒａｎｄｏｍ  ｆｉｅｌｄｓ）により、追加で行うことができる。配列同一性の割合が本出願で言及される場合、これらの割合は、他に具体的に示されていなければ、より長い配列の全長と関連��て計算される。
【００４０】
さらにまたはあるいは、欠失バリアントは、上述のそれぞれのアミノ酸の構造的欠失に起因せず、それらの生物学的機能が阻害されているか、またはそうでなければ、それらの生物学的機能を満たすことができないこれらのアミノ酸に起因して起こり得る。典型的には、このような機能の欠失は、これらに限定されないが、結果として得られるタンパク質の化学的特性における変化（すなわち、疎水性アミノ酸の親水性アミノ酸への交換）、結果として得られるタンパク質の翻訳後修飾（例えば、翻訳後切断またはグリコシル化パターン）における変化、または二次もしくは三次タンパク質構造における変化などの、結果として得られるタンパク質の機能的特性を変化させる、アミノ酸配列への挿入またはアミノ酸配列の交換に起因して起こる。さらにまたはあるいは、機能の欠失は、転写もしくは転写後遺伝子サイレンシング（例えば、ｓｉＲＮＡを介する）、これらに限定されないが、タンパク質阻害剤もしくは阻害抗体などの阻害分子の有無に起因しても起こり得る。
【００４１】
アミノ酸が化学的に関連するアミノ酸で置換される半保存的、特に保存的アミノ酸置換が好ましい。典型的な置換は、脂肪族アミノ酸間、脂肪族ヒドロキシル側鎖を有するアミノ酸間、酸性残基を有するアミノ酸間、アミド誘導体間、塩基性残基を有するアミノ酸間、または芳香族残基を有するアミノ酸間にある。新たなシステインが遊離チオールとして残っている場合、Ａ、Ｆ、Ｈ、Ｉ、Ｌ、Ｍ、Ｐ、Ｖ、ＷまたはＹからＣへの変化は半保存的である。さらに、当業者は、立体的に厳しい位置（sterically demanding position）のグリシンは置換されるべきではなく、Ｐはアルファヘリックスまたはベータシート構造を有するタンパク質の部分に導入されるべきではないことを理解するだろう。
【００４２】
用語「サンプル」または「目的のサンプル」は、本明細書において互換的に使用され、組織、器官または個体の一部または一片を指し、典型的には、組織、器官または個体の全体を表すことを意図したこのような組織、器官または個体より小さい。解析に際し、サンプルは器官または個体の組織状態または健康または疾患状態についての情報を提供する。サンプルの例として、これらに限定されないが、液体サンプル、例えば、血液、血清、血漿、滑液、尿、唾液、およびリンパ液、または固体サンプル、例えば、組織抽出物、軟骨組織、骨、滑膜、および結合組織が挙げられる。サンプルの解析は、視覚または化学基準で達成される。視覚解析として、これらに限定されないが、組織、器官または個体の顕微鏡イメージングまたは放射線走査が挙げられ、サンプルの形態学的評価が可能となる。化学的解析として、これらに限定されないが、その量またはレベルにおける特異的指標または変化の有無の検出が挙げられる。
【００４３】
本明細書で使用される用語「基準サンプル」は、目的のサンプルと実質的に同一の方式で解析されるサンプルを指し、その情報は目的のサンプルの情報と比較される。基準サンプルによって、標準が提供されて、目的のサンプルから得られる情報の評価が可能となる。基準サンプルは、交換されるか、失われるかまたは添加される１つの構成成分を除いて、目的のサンプルと同一である。
【００４４】
本明細書で使用される用語「基準値」は、ある特定の状態に対して示されることが知られている値を指す。基準値は、本明細書で開示されるバイオマーカーの量または濃度を表す。用語「前記バイオマーカーのレベルが、基準値と比較して変更される、特に上昇または低下する」は、本明細書で使用される場合、前記バイオマーカーの量または濃度が、基準値と比較して、少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも１００％、少なくとも１１０％、少なくとも１２０％、少なくとも１３０％、少なくとも１４０％、少なくとも１５０％、少なくとも２００％、少なくとも２５０％、少なくとも３００％、少なくとも４００％、または少なくとも５００％変更される、特に上昇または低下することを意味する。基準値は、１またはそれ以上の健康な個体から単離された１つまたはそれ以上の基準サンプルを測定することによって決定された前記バイオマーカーのレベルである。基準値は、１またはそれ以上の基準サンプル、例えば、少なくとも１、少なくとも２、少なくとも５、少なくとも１０、少なくとも２０、少なくとも３０、少なくとも４０、少なくとも５０、少なくとも６０、少なくとも７０、少なくとも８０、少なくとも９０、少なくとも１００、少なくとも２００、少なくとも３００、少なくとも４００、少なくとも５００、少なくとも６００、少なくとも７００、少なくとも８００、少なくとも９００、少なくとも１０００、少なくとも１５００、または少なくとも２０００の基準サンプル、１またはそれ以上の健康な対象由来の、例えば、少なくとも１、少なくとも２、少なくとも５、少なくとも１０、少なくとも２０、少なくとも３０、少なくとも４０、少なくとも５０、少なくとも６０、少なくとも７０、少なくとも８０、少なくとも９０、少なくとも１００、少なくとも２００、少なくとも３００、少なくとも４００、少なくとも５００、少なくとも６００、少なくとも７００、少なくとも８００、少なくとも９００、少なくとも１０００、少なくとも１５００、または少なくとも２０００の健康な対象を測定することによって決定される。典型的には、対象当たり１つの基準サンプルが測定される。少なくとも２つの対象について試験されるのが有利である。
【００４５】
基準値は、９５％信頼区間の上限値を有し、健康な個体から計算された平均値に属する閾値レベルを指す。９５％信頼区間と平均値は、当技術分野で知られた技法によって決定される。平均値の決定のために、少なくとも２つの対象、特に、少なくとも５、少なくとも１０、少なくとも２０、少なくとも３０、少なくとも４０、少なくとも５０、少なくとも６０、少なくとも７０、少なくとも８０、少なくとも９０、少なくとも１００、少なくとも２００、少なくとも３００、少なくとも４００、少なくとも５００、少なくとも６００、少なくとも７００、少なくとも８００、少なくとも９００、少なくとも１０００、少なくとも１５００、または少なくとも２０００の健康な対象が試験される。対照が閾値レベルである場合、用語「前記少なくとも１つのバイオマーカーのレベルが、閾値レベルと比較して上昇（低下）する」は、「前記少なくとも１つのバイオマーカーのレベルが、閾値レベルより高い（低い）」と理解されるべきである。
【００４６】
タンパク質についての用語「低い」または「低下した」レベルは、基準、特に、基準サンプルまたは基準値と比較して低減した、サンプル中のこのようなタンパク質のレベルを指す。タンパク質についての用語「高い」または「上昇した」レベルは、基準値または基準サンプルと比較して高い、サンプル中のこのようなタンパク質のレベルを指す。
【００４７】
用語「疾患」および「障害」は、本明細書において互換的に使用され、異常な状態、特に、組織、器官または個体がその機能をもはや有効に果たすことができない、疾病または傷害などの異常な医学的状態を指す。典型的には、必ずしもそうではないが、疾患は、このような疾患の存在を示す特異的な症状または徴候に関連する。したがって、このような症状または徴候の存在は、疾患に罹患している組織、器官または個体に対して示される。これらの症状または徴候の変化は、このような疾患の進行に対して示される。疾患の進行は、典型的には、疾患の「悪化」または「改善」を示すこのような症状または徴候の増加または減少によって特徴付けられる。疾患の「悪化」は、その機能を有効に果たす組織、器官または生物の能力を低下させることによって特徴付けられ、一方、疾患の「改善」は、典型的には、その機能を有効に果たす組織、器官または個体の能力の増加によって特徴付けられる。疾患を「発症する危険性のある」組織または個体は、健康な状態にあるが疾患が出現する可能性を示す。典型的には、疾患を発症する危険性は、このような疾患の早期または弱い徴候または症状に関連する。このような場合、疾患の発生は、依然として、処置によって予防される。疾患の例として、これらに限定されないが、外傷性疾患、炎症性疾患、感染性疾患、皮膚状態、内分泌疾患、腸疾患、神経障害、関節疾患、遺伝性障害、自己免疫疾患、および種々のタイプのがんが挙げられる。
【００４８】
典型的には、必ずしもそうではないが、疾患または傷害は、このような疾患または傷害の存在を示す特異的な「症状」または「徴候」と関連する。したがって、このような症状または徴候の存在は、疾患または傷害に罹患している組織、器官または個体に対して示される。これらの症状または徴候の変化は、このような疾患または傷害の進行について示される。疾患または傷害の進行は、典型的には、疾患または傷害の「悪化」または「改善」を示すこのような症状または徴候の増加または減少によって特徴付けられる。疾患または傷害の「悪化」は、その機能を有効に果たす組織、器官または生物の能力を低下させることによって特徴付けられ、一方、疾患または傷害の「改善」は、典型的には、その機能を有効に果たす組織、器官または個体の能力の増加によって特徴付けられる。疾患または傷害を「発症する危険性のある」組織、器官または個体は、健康な状態にあるが疾患または傷害が出現する可能性を示す。典型的には、疾患または傷害を発症する危険性は、このような疾患の早期または弱い徴候または症状に関連する。このような場合、疾患または傷害の発生および／または進行は、依然として、処置によって予防される。
【００４９】
疾患の「症状」は、このような疾患を有する組織、器官または生物によって注目される疾患の影響であり、これらに限定されないが、組織、器官または個体の疼痛、虚弱、圧痛、筋挫傷、こわばり、および痙攣が挙げられる。疾患の「徴候」または「シグナル」としては、これらに限定されないが、バイオマーカーもしくは分子マーカーなどの特異的指標の存在、非存在、増大または上昇、低下または減退などの変化または変更、または症状の発症、存在、もしくは悪化が挙げられる。疼痛の症状としては、これらに限定されないが、持続的または様々な激しい、拍動性の、むずがゆいまたはずきずきする痛みとして感じられる不快な感覚が挙げられる。
【００５０】
用語「指標」は、本明細書で使用される場合、状態に対する徴候またはシグナルを指すか、または状態をモニタリングするために使用される。このような「状態」は、細胞、組織または器官の生物学的状態を指すか、または個体の健康および／または疾患状態を指す。指標は、これらに限定されないが、ペプチド、タンパク質、および核酸を含む分子の有無であるか、細胞、または組織、器官または個体におけるこのような分子の発現レベルまたはパターンにおける変化である。指標は、個体における疾患の発生、発症または存在に対する徴候であるか、またはこのような疾患のさらなる進行に対する徴候である。指標は、個体における疾患の発症の危険性に対する徴候でもある。指標についての用語「低い」または「低下した」レベルは、基準または基準サンプルと比較して低減した、サンプル中のこのような指標のレベルを指す。指標についての用語「高い」または「上昇した」レベルは、基準または基準サンプルと比較して高い、サンプル中のこのような指標のレベルを指す。
【００５１】
真性糖尿病（ＤＭ）は、血糖の上昇によって特徴付けられる重篤な慢性疾患である。高血糖の症状として、これらに限定されないが、頻尿、口渇感の増大および空腹感の増大が挙げられる。糖尿病を未処置のままである場合、急性かつ長期にわたる合併症を引き起こす可能性がある。急性の合併症として、これらに限定されないが、糖尿病性ケトアシドーシスおよび非ケトン性高浸透圧状態が挙げられる。長期的転帰としては、これらに限定されないが、心臓発作、脳卒中、末梢血管疾患、ＴＩＡ、腎機能不全、腎不全、慢性神経因性疼痛、足部潰瘍形成、切断、盲目、網膜損傷、白内障、骨折、認知機能低下、非アルコール性脂肪性肝炎、肝硬変および様々ながんが挙げられる。糖尿病は、膵臓が絶食と給餌両方の状態で正常なグルコースレベルを維持するのに十分なインスリンを作製することができないために生じ、糖尿病を有する多くのヒトは、産生されるインスリンに正確に反応しない細胞も有する。糖尿病は、以下の一般的カテゴリーに分類することができる：１．１型糖尿病；２．２型糖尿病；３．妊娠糖尿病（ＧＤＭ）；および４．他の原因による特異的なタイプの糖尿病。
【００５２】
１型真性糖尿病は、膵臓が十分なインスリンを産生できないことから生じる。この形態は、以前に、「インスリン依存性真性糖尿病」（ＩＤＤＭ）または「若年性糖尿病」と称された。１型真性糖尿病は、インスリン欠乏を導く、膵臓のランゲルハンス島のインスリン産生ベータ細胞の損失によって特徴付けられる。この種類は、免疫媒介性または突発性としてさらに分類することができる。１型糖尿病の大多数は、免疫媒介性のものであり、ここで、Ｔ細胞媒介性自己免疫発作は、ベータ細胞の損失、したがって、インスリンの損失を導く。
【００５３】
２型糖尿病は、膵臓が、インスリンの作用に対する抵抗性を克服するのに十分なインスリンを作製することができない場合に生じる。この形態は、以前に、「非インスリン依存性真性糖尿病」（ＮＩＤＤＭ）または「成年型糖尿病」と称された。主要な原因は、過剰な体重および運動不足である。２型真性糖尿病は、比較的低減されたインスリン分泌と組み合わされるインスリン抵抗性によって特徴付けられる。体組織のインスリンへの不完全な反応は、インスリン受容体に関与すると考えられる。しかし、具体的な欠点は知られていない。２型真性糖尿病は、真性糖尿病の最も一般的な型である。２型の早期段階では、主な異常は、インスリン感受性の低減である。この段階では、高血糖は、インスリン感受性を改善するかまたは肝臓のグルコース産生を低減する様々な手段および薬物治療によって回復することができる。
【００５４】
妊娠糖尿病は、第３の主要形態であり、糖尿病の既往歴のない妊娠した女性が高い血糖レベルを生じる場合に起こる。妊娠真性糖尿病（ＧＤＭ）は、比較的不適当なインスリン分泌と反応性の組合せを含むいくつかの点で２型真性糖尿病に類似する。妊娠真性糖尿病は、全妊娠の約２〜１０％で起こり、出産後に改善されるか、または消失する。しかし、妊娠後に、妊娠糖尿病を有する女性のおよそ５〜１０％が、真性糖尿病、最も一般的には２型を有することが見出される。妊娠糖尿病は、十分に処置可能であるが、妊娠中を通して、注意深い医学的管理を必要とする。
【００５５】
他の種類の糖尿病としては、これらに限定されないが、単一遺伝子糖尿病症候群（例えば、新生児糖尿病および若者の成人発症型糖尿病［ＭＯＤＹ］）、膵外分泌の疾患（例えば、嚢胞性線維症）、および薬物または化学物質誘導型糖尿病（例えば、ＨＩＶ／ＡＩＤＳの処置中または器官の移植後など）が挙げられる。
【００５６】
前糖尿病は、ヒトの血糖値が標準より高いが、２型糖尿病と診断されるほどは高くない場合に起こる状態を示す。２型真性糖尿病を発症する運命にある多くのヒトは、何年も前糖尿病の状態で過ごす。
【００５７】
インスリン投与の他に、これらに限定されないが、メトホルミン、スルホニル尿素、ドーパミンアゴニスト、ＤＰＰ−４阻害剤、グルカゴン様ペプチド、メグリチニド、アミリン模倣体、アルファ−グルコシダーゼ阻害剤、ＳＧＬＴ２阻害剤、および／またはチアゾリジンジオンの投与を含むいくつかの他の糖尿病処置が知られている。
【００５８】
低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）および高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）は、リポタンパク質の群に属する。リポタンパク質は、細胞外液中で脂肪を体中に運び、血液からサンプリングすることができ、受容体が媒介するエンドサイトーシスによって脂肪を体内の細胞に取り込むことが可能である。リポタンパク質は、細胞の外側の水中ですべての脂肪分子（脂質）を体中に輸送する複数のタンパク質から構成される複合粒子である。リポタンパク質は、典型的には、８０〜１００個のタンパク質／粒子（ＬＤＬに対する単一アポリポタンパク質Ｂとより大きな粒子によって組織化される）から構成される。運搬される脂肪には、コレステロール、リン脂質、およびトリグリセリドが含まれ；それぞれの量はかなり変動する。ＬＤＬ粒子は、酸化形態がプロテオグリカンによってより保持されやすいため、内皮に侵入し、酸化されると、心血管疾患のリスクが生じる。複雑な一連の生化学反応によって、主に、内皮内のネクローシス細胞デブリとフリーラジカルの存在に刺激され、ＬＤＬ粒子の酸化が調節される。ＬＤＬ粒子の濃度の上昇は、経時的な動脈壁内のアテローム性動脈硬化の蓄積率の増加と強い関連性があり、最終的に、突然のプラーク崩壊、動脈開口部内での血餅の誘発、または開口部の狭窄または閉塞、すなわち、心血管疾患、脳卒中、および他の血管疾患合併症を生じる。ＬＤＬ粒子は、脂肪分子であるその内容物を動脈壁に輸送し、マクロファージを誘引し、それによりアテローム性動脈硬化を引き起こすため、悪玉コレステロールと称されることもある。対照的に、ＨＤＬ粒子は、脂肪分子を動脈壁のマクロファージから除去することができるため、善玉コレステロールまたは健康コレステロールと称されることが多い。
【００５９】
血清クレアチニン（血液測定）は、腎臓により未変化のまま排出される、容易に測定される筋肉代謝の副産物であるため、腎臓の健康の重要な指標である。クレアチニン自体は、クレアチン、ホスホクレアチン（クレアチンリン酸としても知られる）、およびアデノシン三リン酸（ＡＴＰ、身体の直接的エネルギー供給）を含む生体システムを介して産生される。クレアチンは、Ｓ−アデノシルメチオニンによるグリコシアミン（アミノ酸であるアルギニンとグリシンから腎臓で合成されるグアニジノ酢酸）のメチル化から主に肝臓で合成される。次いで、クレアチンは、血液を介して、他の器官、筋肉、および脳に輸送され、そこで、リン酸化を介して、高エネルギー化合物であるホスホクレアチンとなる。反応の間、クレアチンとホスホクレアチンはクレアチンキナーゼによって触媒され、クレアチニンへの自発的変換が起こる。クレアチニンは、主に腎臓で、主として糸球体濾過によって、血液から除去されるが、近位尿細管分泌によっても除去される。クレアチンの尿細管再吸収はわずかばかり起こるか、または全く起こらない。腎臓での濾過が不十分であると、クレアチニン血中レベルが上昇する。したがって、血液および尿中のクレアチニンレベルを使用して、糸球体濾過率（ＧＦＲ）と相関するクレアチニンクリアランス（ＣｒＣｌ）を計算する。血中クレアチニンレベルを単独で使用して、ＧＦＲの推定値（ｅＧＦＲ）を計算することもできる。ＧＦＲは、腎機能の尺度であるため、臨床上重要である。尿素の血中（血漿）濃度と一緒にクレアチニンの血中（血漿）濃度を解釈すると、腎機能の代替的な評価を行うことができる。ＢＵＮ／クレアチニン比（血中尿素窒素のクレアチニンに対する比）は、腎臓に固有のものの他に、他の問題を示すことができ、例えば、クレアチニンに対して割合が上昇した尿素レベルは、体液量減少などの腎前性の問題を示す。
【００６０】
上記したように、糖尿病は、非常に多くの重大な長期に及ぶ結果に関連する。これらの結果には、虚血性心疾患およびその後遺症、脳血管疾患、脳溢血、末梢血管疾患、多発ニューロパチーまたは単ニューロパチー、有痛性ニューロパチー、腎機能不全、アルブミン尿、腎不全、白内障、視力低下、盲目、網膜症、足部潰瘍形成、下肢切断、認知機能低下、認知症、転倒、骨折、疲労、性機能障害、勃起不全、がん、うつ、睡眠時無呼吸、腸の問題およびその他が含まれる。これらの結果の一部は、順に、糖尿病の重症度の進行を促す。他のもの、例えば、ＮＡＦＬＤは、糖尿病が起こる前に存在し、その発病に寄与する。
【００６１】
アルブミン尿は、タンパク質であるアルブミンが尿中に存在する病態である。タンパク尿の一種である。腎臓は、通常、大きな分子は尿中に濾過しないため、アルブミン尿は、腎臓への損傷または過剰な塩摂取の指標である。長年の糖尿病、特に１型糖尿病を有する患者でも起こる。
【００６２】
多嚢胞性卵巣症候群（ＰＣＯＳ）は、高アンドロゲン無排卵症（ＨＡ）またはシュタイン−レベンタール症候群とも称され、女性のホルモン不均衡による一連の症状を指す。ＰＣＯＳの徴候および症状として、不規則または無月経期間、重い月経、過剰な身体および顔の毛、ざ瘡、骨盤痛、妊娠しにくい、および厚みのある、色の濃い、柔らかい皮膚の斑点が挙げられる。関連する状態として、２型糖尿病、肥満、閉塞性睡眠時無呼吸、心疾患、気分障害、および子宮内膜がんが挙げられる。ＰＣＯＳは、遺伝的および環境因子の組合せによるものである。危険因子として、肥満、運動不足、およびその状態を有する者の家族歴が挙げられる。診断は、以下の３つの所見のうちの２つに基づく：無排卵、高アンドロゲンレベル、および卵巣嚢胞。ＰＣＯＳには治療法がない。処置は、ライフスタイルの変化、例えば、減量および運動に関与する。経口避妊薬が、規則正しい月経、過剰な体毛、およびざ瘡を改善する役に立つ。メトホルミンと抗アンドロゲンも役立つ。
【００６３】
非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）は、過剰なアルコール使用以外の原因により肝臓に脂肪が沈着する場合（脂肪過多症）に起こる、脂肪肝の原因の１つである。ＮＡＦＬＤは、先進国で最も一般的な肝臓障害である。ＮＡＦＬＤは、インスリン抵抗性およびメタボリックシンドロームに関し、他のインスリン抵抗性の状態（例えば、２型真性糖尿病）のために本来開発された処置、例えば、減量、メトホルミン、およびチアゾリジンジオンに反応する。非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）は、ＮＡＦＬＤの最も極端な形態であり、未知の原因の肝硬変の主要な原因であるとみなされている。
【００６４】
本明細書で使用される場合、用語「多毛症」は、これらに限定されないが、ひげまたは胸毛を含む、硬毛が通常生じないかまたは最小限である身体の部分の女性の過剰な毛深さを指す。
【００６５】
無月経は、生殖可能年齢の女性の月経がないことを指す。
【００６６】
繁殖不能は、ヒト、動物または植物が自然の手段によって生殖できないことである。繁殖不能は、通常、健康な成人の自然な状態ではない。
【００６７】
肥満は、過剰な体脂肪が、健康に負の影響を及ぼし、平均余命の低減および／または健康問題の増加を引き起こす程度まで蓄積する健康状態である。西欧諸国では、肥満度指数（ＢＭＩ）が３０ｋｇ／ｍ２を超えたヒトは肥満とみなされ、２５〜３０ｋｇ／ｍ２の範囲は体重超過と定義される。一部の東アジア諸国は、より厳しい基準を使用する。肥満により、種々の疾患、特に、心疾患、２型糖尿病、閉塞性睡眠時無呼吸、ある特定の種のがん、および変形性関節炎の傾向が増大する。肥満は、最も一般的には、過剰な食物エネルギー摂取、身体活動の欠如、および遺伝的感受性の組合せによって引き起こされるが、主として、遺伝子、内分泌障害、薬物治療、または精神病によって引き起こされる場合もある。基礎代謝が低いことにより一部のヒトでは小食にもかかわらず体重が増加するという見解を支持するエビデンスは限定されている。
【００６８】
ビタミンＢ１２欠乏症は、コバラミン欠乏症としても知られ、ビタミンＢ１２の血中レベルが低いことを指す。思考能力の低下および性格の変化、例えば、うつ、過敏、および精神異常を含む多様な徴候および症状が生じる。知覚異常、反射の変化、および筋肉機能の衰えも、舌の炎症、味覚の低下、赤血球の減少、心機能の低減、および繁殖力の低下として生じる場合がある。小児の症状として、成長不良、発育不良、および運動困難が挙げられる。早期に処置しなければ、変化の一部は永続する。一般的な原因として、胃または腸からの吸収不足、摂食の低下、および必要量の増加が挙げられる。吸収が低下するのは、悪性貧血、胃の外科手術による除去、膵臓の慢性的炎症、腸内寄生虫、ある特定の薬物治療、および一部の遺伝性障害に起因する場合がある。摂食の低下は、ビーガン食の摂食または栄養失調の者に起こる。必要量の増加は、ＨＩＶ／ＡＩＤＳおよび赤血球の急速な破壊を有する者で起こる。診断は、典型的には、成人では、１２０〜１８０ピコモル／Ｌ（１７０〜２５０ｐｇ／ｍＬ）未満のビタミンＢ１２の血中レベルを基準とする。メチルマロン酸レベルの上昇（値が＞０．４マイクロモル／Ｌ）も欠乏を示す。巨赤芽球性貧血として知られる赤血球の減少の種類は、いつもという訳ではないが存在することが多い。妊娠中のベジタリアンでは、欠乏を防ぐために栄養補充が推奨される。特定されると、経口または注射による栄養補充により容易に処置される。その他では健康である者の中では、過剰なビタミンＢ１２に対する懸念はない。一部の場合には、根底にある原因を処置することにより助けられる場合もある。他の場合には、根底にある原因が治療可能でないため、栄養補充を続けることが求められる。ビタミンＢ１２欠乏症は一般的である。６０歳未満の者の約６％、６０歳を超える者の約２０％で起こると推定される。
【００６９】
心血管疾患（ＣＶＤ）は、心臓または血管に関与する疾患の分類である。心血管疾患として、これらに限定されないが、冠動脈疾患（ＣＡＤ）、例えば、狭心症および心筋梗塞（通常、心臓発作として知られる）、脳卒中、高血圧性心疾患、リウマチ性心疾患、心筋症、心房細動、先天性心疾患、心内膜炎、大動脈瘤、末梢動脈疾患、および静脈血栓症が挙げられる。
【００７０】
最も一般的な心血管疾患の１つは、虚血性心疾患（ＩＨＤ）としても知られる冠動脈疾患（ＣＡＤ）であり、これらに限定されないが、安定狭心症、不安定狭心症、心筋梗塞、脂質異常、高血圧、および突然の冠動脈死を含む疾患の群である。一般的な症状は、胸部痛または肩、腕、背中、首、または顎に伝わる不快感である。時折、胸やけを感じる場合もある。通常、症状は、運動または精神的ストレスに伴って起こり、数分未満続き、安静と共に良くなる。呼吸困難が起こる場合もあり、症状がない場合もある。最初の徴候は、時として心臓発作である。他の合併症として、心不全または不整脈が挙げられる。危険因子として、これらに限定されないが、血圧上昇（high blood pressure）、喫煙、糖尿病、運動不足、肥満、血中高コレステロール、粗食、および過剰なアルコール、ならびにうつが挙げられる。根底にあるメカニズムは、心臓の動脈のアテローム性動脈硬化に関与する。これらに限定されないが、心電図、心臓負荷試験、冠動脈コンピュータ断層血管撮影、および冠血管造影を含むいくつかの検査が診断の助けとなる。２０１３年には、ＣＡＤは、地球規模で、最も一般的な死因であり、１９９０年の５７４万人の死亡（１２％）から８１４万人の死亡（１６．８％）まで上昇した。所定の年齢に対するＣＡＤを原因とする死のリスクは、特に先進諸国で、１９８０年から２０１０年の間に減少した。所定の年齢に対するＣＡＤの原因の数も、１９９０年から２０１０年の間に減少した。米国では、２０１０年に、６５歳を超えたヒトの約２０％がＣＡＤを有したが、４５から６４歳では７％、１８から４５歳では１．３％であった。所定の年齢の比率は、女性よりも男性で高い。
【００７１】
心筋梗塞（ＭＩ）または急性心筋梗塞（ＡＭＩ）は、心筋に損傷をもたらす心臓の部分への血流が停止する場合に生じる。最も一般的な症状は、胸部痛または肩、腕、背中、首、または顎に伝わる不快感である。最も一般的な症状は、胸部の中心または左側であることが多く、数分を超えて続く。不快感により、時折、胸やけを感じることもある。他の症状として、呼吸困難、吐き気、めまい、冷や汗、または疲労感が挙げられる。約３０％のヒトが異常症状を有し、男性よりも女性に異常が見られる傾向にある。７５歳を超えるヒトの中で、約５％がそれまでの症状がほとんどないかまたは全くないＭＩを有した。ＭＩは、心不全、不整脈、または心停止を引き起こす場合がある。冠動脈疾患により、ほとんどのＭＩが起こる。危険因子として、これらに限定されないが、血圧上昇、喫煙、糖尿病、運動不足、肥満、血中高コレステロール、粗食、および過剰なアルコール摂取が挙げられる。ＭＩのメカニズムは、冠動脈の完全な遮蔽をもたらす動脈硬化プラークの崩壊に関与することが多い。これらに限定されないが、心電図（ＥＣＧ）、血液検査、および冠血管造影を含むいくつかの検査が診断を助けるのに有用である。
【００７２】
用語「がん」および「がんの」は、典型的には、調節できない細胞増殖によって特徴付けられる哺乳動物の生理的状態を指すかまたは説明する。がんの例として、これらに限定されないが、癌腫、リンパ腫、芽腫、肉腫、および白血病が挙げられる。このようながんのより特定の例として、扁平上皮がん、肺がん（小細胞肺がん、非小細胞肺がん、肺の腺癌、および肺の扁平上皮癌を含む）、腹膜のがん、肝細胞がん、胃がん（ｇａｓｔｒｉｃ
ｏｒ  ｓｔｏｍａｃｈ  ｃａｎｃｅｒ）（例えば、胃腸がんを含む）、膵がん（例えば、転移性膵がんを含む）、神経膠芽腫、子宮頸がん、卵巣がん、肝臓がん、膀胱がん、肝細胞がん、乳がん（局所的に進行した、再発性または転移性のＨＥＲ−２陰性乳がんを含む）、結腸がん、結腸直腸がん、子宮内膜または子宮癌、唾液腺癌、腎臓または腎がん、肝臓がん、前立腺がん、外陰がん、甲状腺がん、肝細胞癌および様々な種類の頭頚部がん、ならびにＢ細胞リンパ腫（グレードの低い／濾胞性の非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）；小リンパ球性（ＳＬ）ＮＨＬ；中間グレード／濾胞性のＮＨＬ、中間グレードの拡散ＮＨＬ；グレードの高い免疫芽細胞のＮＨＬ；グレードの高いリンパ芽球性ＮＨＬ；グレードの高い小型非切れ込み核細胞性ＮＨＬ；巨大腫瘤病変ＮＨＬ；マントル細胞リンパ腫；ＡＩＤＳ関連リンパ腫；およびワルデンストレーム高ガンマグロブリン血症を含む）；慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）；急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）；ヘアリー細胞白血病；慢性骨髄芽球性白血病；および移植後リンパ増殖性障害（ＰＴＬＤ）、ならびに母斑症、浮腫（脳腫瘍に関連するものなど）、およびメグズ症候群と関連する異常な血管増殖が挙げられる。
【００７３】
認知症は、老衰としても知られるが、ヒトの日々の機能に影響を及ぼすのに十分な思考および記憶能力を長期かつ多くの場合徐々に低下させる広いカテゴリーの脳疾患である。他の一般的な症状として、情緒面の問題、言語に関する問題、および意欲の低下が挙げられる。ヒトの意識には影響を及ぼさない。認知症の診断には、ヒトの通常の精神機能からの変化および加齢により予期されるものより大きな衰えが要求される。認知症の最も一般的な種類はアルツハイマー病であり、５０％から７０％までの事例を構成する。他の一般的な種類として、血管性認知症（２５％）、レビー小体型認知症（１５％）、および前頭側頭型認知症が挙げられる。あまり一般的ではない原因として、とりわけ、正常圧水頭症、パーキンソン病、梅毒、クロイツフェルト−ヤコブ病が挙げられる。２種以上の認知症が同じヒトに存在する場合もある。
【００７４】
用語「フレイル」は、高齢者の中で、健康および機能における破局的な衰えのリスクの上昇が具体化する一般的な老年症候群を指す。フレイルは、何世紀にもわたって認識されてきた、加齢に関連する状態である。
【００７５】
用語「足部潰瘍形成」は、真性糖尿病の主要な合併症、およびおそらく、糖尿病性足変症の主要な構成成分を指す。創傷治癒は、ほとんどの時間確実に作動する生来の作用機序である。創傷治癒の重要な特徴は、真皮皮膚層の最も大きな構成成分を形成する細胞外マトリックス（ＥＣＭ）の損失を段階的に修復することである。真性糖尿病では、創傷治癒プロセスの通常のステップが妨げられる。多くの研究が、成熟した肉芽組織の形成の遅延および傷の引張強度の平行低減を引き起こす、糖尿病の傷の炎症相の延長を示す。
【００７６】
用語「網膜症」は、網膜の任意の疾患および障害を指し、これらに限定されないが、加齢黄斑変性、糖尿病性網膜症、黄斑部円孔／パッカー、網膜芽細胞種、網膜剥離、河川盲目症／オンコセルカ症、および網膜色素変性症が挙げられる。
【００７７】
用語「腎疾患」および「腎臓不全」は、腎臓の任意の疾患および障害を指し、これらに限定されないが、急性腎臓不全および慢性腎臓疾患が挙げられる。腎疾患は、血液が腎臓の糸球体で濾過される比率である糸球体濾過率の低下によって主に決定される。状態は、尿生成の減少または尿生成がないことまたは血中の老廃物（クレアチニンまたは尿素）の決定によって検出される。原因に応じて、血尿（尿における血液の損失）およびタンパク尿（尿におけるタンパク質の損失）が注目される。体液の増加（発汗をもたらす）、酸レベルの上昇、カリウムレベルの上昇、カルシウムレベルの低下、リン酸レベルの上昇、および後期の貧血に関する問題がある。骨の健康にも影響を及ぼす場合がある。長期にわたる腎臓の問題は、心血管疾患のリスクの増大と関連する。
【００７８】
急性腎臓傷害（ＡＫＩ）は、以前は急性腎不全（ＡＲＦ）と称されており、一般的に、乏尿症（成人で１日に４００ｍＬ未満、小児で０．５ｍＬ／ｋｇ／時未満または幼児で１ｍＬ／ｋｇ／時間未満と定量化される尿生成の低下）；ならびに液体と電解質の不均衡によって特徴付けられる、急激に進行する腎機能の損失である。ＡＫＩは、一般的に、腎前性の、固有の、および腎後性のと分類される様々な原因から生じる。進行を停止させるために、根底にある原因を特定し、処置しなければならず、これらの根本的原因を処置するために必要とされる時間のずれをうめるために透析が必要である。
【００７９】
慢性腎臓疾患（ＣＫＤ）は、慢性腎疾患としても知られており、数カ月または数年の期間にわたって進行する腎臓機能の損失である。腎臓機能を悪化させる症状は特異的ではなく、一般的に、気分が優れないと感じることや食欲の減退を経験することを含む。慢性腎臓疾患は、多くの場合、血圧上昇または糖尿病を有するおよびＣＫＤを有する血縁者がいるなど腎臓の問題の危険性を有することが知られたヒトをスクリーニングした結果として診断される。この疾患は、その認識された合併症、例えば、心血管疾患、貧血、または心膜炎のうちの１つをもたらす場合にも特定される。この疾患は、腎臓機能の低減が３カ月を超えて存在しなければならないという点で、急性腎臓疾患と異なる。慢性腎臓疾患は、筋肉代謝の分解産物である、クレアチニンに対する血液検査によって特定される。クレアチニンレベルが高いと、糸球体濾過率が低いことを示し、結果として、老廃物を排出する腎臓の能力の低下を示す。クレアチニンレベルは、ＣＫＤの早期段階で正常であり、尿分析（尿サンプルの検査）により、腎臓がタンパク質または赤血球を尿中に損失させることが示される場合にその状態を知ることとなる。腎臓損傷の根底にある原因を十分に調査するために、種々の形態の医用画像、血液検査、および時には腎臓生検（腎臓組織から小さなサンプルを取り除く）を用いて、腎臓機能不全の可逆的原因が存在するかどうかを見出す。
【００８０】
糖化ヘモグロビン（ヘモグロビンＡ１ｃ、ＨｂＡ１ｃ、Ａ１Ｃ、またはＨｂ１ｃ；時にはまた、ＨｂＡ１ｃまたはＨＧＢＡ１Ｃ）は、主として、長期間にわたって平均血漿グルコース濃度を特定するために測定されるヘモグロビンの形態である。糖化ヘモグロビンは、ヘモグロビンを血漿グルコースに曝露することによって、非酵素的糖化経路において形成される。ＨｂＡ１ｃは、ヘモグロビンのベータ−Ｎ−１−デオキシフルクトシル構成成分の尺度である。正常レベルのグルコースは、正常量の糖化ヘモグロビンを生じる。血漿グルコースの平均量が増加するのにつれて、糖化ヘモグロビンの画分も予想通り増加する。したがって、ＨｂＡ１ｃは、赤血球の寿命であるため、測定の前の数カ月にわたって、平均血糖値に対するマーカーとして機能する。真性糖尿病では、血糖値の制御がより不十分であることを示す、より多量の糖化ヘモグロビンは、合併症、例えば、心血管疾患、腎障害、および網膜症と関連する。１型糖尿病患者のＨｂＡ１ｃをモニタリングすることにより転帰は改善される。
【００８１】
グルコース試験を使用することにより、血中のグルコース量を決定することが可能である。これらは、主に、前糖尿病または糖尿病のスクリーニングに使用される。患者は、絶食期間に水以外のいずれも摂取しないよう指示される。カフェインによっても結果は歪められる。既に糖尿病を有するヒトでは、血糖モニタリングは、状態の管理下、頻繁な間隔で使用される。いくつかの異なる種類のグルコース試験：空腹時血糖（ＦＢＳ）、空腹時血漿グルコース（ＦＰＧ）が存在し、グルコースレベルは摂食の８または１２または１４時間後に測定される。
【００８２】
恒常性モデル評価（ＨＯＭＡ）は、インスリン抵抗性およびベータ細胞の機能を定量化するために使用される方法である。恒常性モデル評価は、最初に、１９８５年にＭａｔｔｈｅｗｓらによって、ＨＯＭＡの名称で説明された。
【００８３】
糖化アルブミン（ＧＡ）は、血清アルブミンの非酵素的糖化反応を介して形成されるケトアミンであり、２から３週間にわたって平均糖血症を反映する。ＧＡは、臨床的に測定されたヘモグロビンＡ１ｃレベルが不正確である貧血または異常ヘモグロビン症を有する患者に対して使用することができる。血清および血漿サンプルの両方を使用することができるため、ＧＡは、一般的な生物学的マーカーと同じサンプルから解析することができる。ＧＡは、医学的評価において、糖尿病をスクリーニングするために有用なマーカーである。ＧＡは、糖尿病患者に対する薬物治療を開始または変更する前に、処置の有効性を決定するためにも使用することができる。
【００８４】
血圧（ＢＰ）は、血管の壁を血液が循環することによって及ぼされる圧力である。さらに詳述することなく使用する場合、「血圧」は、通常、全身循環の動脈圧を指す。血圧は、通常、ヒトの上腕で測定される。血圧は、通常、収縮期（最大）圧を拡張期（最低）圧で割ったものに関して表現し、水銀柱ミリメートル（ｍｍＨｇ）で測定される。血圧は、呼吸数、心拍数、酸素飽和度、および体温と共にバイタルサインのうちの１つである。成人の正常な安静時血圧は、およそ１２０／８０ｍｍＨｇである。
【００８５】
肥満度指数（ＢＭＩ）またはケトレー指数は、個体の質量（体重）および身長に由来する値である。ＢＭＩは、体重を身長の２乗で割ったものとして定義され、一般に、キログラムの質量とメートルの高さから得られるｋｇ／ｍ２の単位で表される。ＢＭＩは、個体の組織質量（筋肉、脂肪、および骨）の量を定量化する試みであり、次いで、標準体重未満、標準体重、体重超過、または肥満と、その値に基づいてそのヒトを分類する。一般的に容認されたＢＭＩの範囲は、標準体重未満：１８．５未満；標準体重：１８．５から２５；体重超過：２５から３０；肥満：３０より大きい。
【００８６】
本明細書で使用される場合、疾患または傷害を「処置する（ｔｒｅａｔ）」、「処置すること（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」または「処置（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」は、以下の１つまたはそれ以上を達成することを意味する：（ａ）疾患または傷害の重症度を低減すること；（ｂ）処置される疾患または傷害に特徴的な症状の発症を制限または予防すること；（ｃ）処置される疾患または傷害に特徴的な症状の悪化を阻害すること；（ｄ）以前に疾患または傷害を有していた個体における疾患または傷害の再発を制限または予防すること；および（ｅ）以前に疾患または傷害の兆候を示した個体における症状の再発を制限または予防すること。
【００８７】
本明細書で使用される場合、疾患または傷害を「予防する（ｐｒｅｖｅｎｔ）」、「予防すること（ｐｒｅｖｅｎｔｉｎｇ）」、「予防（ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ）」または「予防的な（ｐｒｏｐｈｙｌａｘｉｓ）」は、このような疾患または傷害が患者に生じることを予防することを意味する。
【００８８】
用語、疾患を「遅延させる（ｄｅｌａｙ）」または「遅延させること（ｄｅｌａｙｉｎｇ）」は、疾患または障害の進行の低下を指し、すなわち、疾患を遅延させることは、疾患の症状または徴候または原因が悪化する時間枠を延長することを指す。
【００８９】
用語「医薬」、「医薬組成物」、「薬」および「薬物」は、本明細書で互換的に使用され、疾患または傷害の特定、予防または処置のために使用される物質および／または物質の組合せを指す。
【００９０】
ビグアナイドは、式ＨＮ（Ｃ（ＮＨ）ＮＨ２）２の有機化合物である。ビグアナイドの様々な誘導体は、これらに限定されないが、メトホルミンおよびその機能的誘導体を含む医薬品として使用される。メトホルミンは、例えば、食事改善に反応しない患者の非インスリン依存性真性糖尿病（２型真性糖尿病）の処置において使用されるビグアナイドグルコース降下剤である。
【００９１】
メトホルミンの化学構造は以下の通りである：
【化１】
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【００９２】
メトホルミンは、インスリン感受性を改善し、グルコースの腸吸収を低下させ、肝臓によるグルコース産生を抑制することによって血糖コントロールを改善する。メトホルミンは、特に、体重超過で肥満のヒトおよび正常な腎臓機能を有するヒトの２型糖尿病の処置に対する、第一選択薬である。妊娠糖尿病におけるその使用は、安全性についての懸念により制限されている。メトホルミンは、多嚢胞性卵巣症候群の処置においても使用され、非アルコール性脂肪性肝疾患および性的早熟などの、インスリン抵抗性が重要な因子である他の疾患について調査されている。メトホルミンは、ＬＤＬコレステロールおよびトリグリセリドレベルを低減するのを助け、体重増加には関連せず、一部のヒトでは、体重減少を促進する。メトホルミンは、Ｗｏｒｌｄ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ  Ｍｏｄｅｌ  Ｌｉｓｔ  ｏｆ  Ｅｓｓｅｎｔｉａｌ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅｓのわずか２つの経口抗糖尿病薬のうちの１つである（もう１つはグリベンクラミドである）。メトホルミンは、適当に処方された場合、ほとんど有害事象を引き起こさず（最も一般的なものは消化器不調である）、低血糖を有する低い危険性と関連している。乳酸アシドーシス（血中の乳酸の蓄積）は、過剰投与の重大な関心事であり、禁忌を有するヒトに処方される場合、それ以外でも、有意な危険性は存在しない。用語「メトホルミン」は、その誘導体も含む。
【００９３】
ウエスタンブロッティングにより、任意の精製工程の前または後に、細胞または組織から作製された抽出物由来の特異的タンパク質（ネイティブまたは変性させた）を決定することが可能となる。タンパク質は、一般的に、ドライ、セミドライ、またはウェットブロッティング法により、合成膜（典型的には、ニトロセルロースまたはＰＶＤＦ）に移す前に、ゲル電気泳動を使用して、サイズにより分離する。次いで、免疫組織化学と同様であるが固定を必要としない方法を使用して、抗体を使用して膜をプロービングすることができる。検出は、典型的には、化学ルミネセンス反応を触媒するために、ペルオキシダーゼを連結した抗体を使用して実施する。ウエスタンブロッティングは、抽出物間のタンパク質レベルを半定量的または定量的に比較するために使用することができる通常の分子生物学的方法である。ブロッティングの前のサイズ分離により、公知の分子量マーカーと比較して、タンパク質分子量を測定することが可能となる。ウエスタンブロッティングは、組織ホモジネートまたは抽出物の所定のサンプル中の特異的タンパク質を検出するために使用される解析技法である。ウエスタンブロッティングは、ゲル電気泳動を使用して、ポリペプチドの長さ（変性状態）またはタンパク質の３−Ｄ構造（ネイティブ／非変性状態）によってタンパク質を分離する。
【００９４】
用語「酵素結合免疫吸着アッセイ」または「ＥＬＩＳＡ」は、マルチウェルプレートフォーマット（通常、プレート当たり９６ウェル）で血漿、血清または細胞／組織抽出物からタンパク質濃度を定量的または半定量的に決定するための診断方法を指す。おおまかに、溶液中のタンパク質は、ＥＬＩＳＡプレートに吸着される。目的のタンパク質に特異的な抗体を使用して、プレートをプロービングする。ブロッキングおよび洗浄方法を最適化することによって（ＩＨＣに関する）、バックグラウンドを最少化し、特異性は、陽性および陰性対照の存在により確認される。検出方法は、通常、比色分析または化学ルミネセンスに基づく。
【００９５】
免疫沈降（ＩＰ）は、特定のタンパク質に特異的に結合する抗体を使用して、溶液からタンパク質抗原を沈降させる技法である。このプロセスを使用して、何千もの異なるタンパク質を含有するサンプルから特定のタンパク質を単離し、濃縮することができる。免疫沈降には、抗体が、手順のいくつかの点で、固体基質にカップリングすることが必要である。
【００９６】
タンパク質マイクロアレイ（またはタンパク質チップ）は、特に大規模スケールで、タンパク質の存在および活性を決定し、タンパク質の機能を解析するために使用されるハイスループット法である。チップは、捕捉タンパク質のアレイが結合するスライドガラス、ニトロセルロース膜、ビーズ、またはマイクロタイタープレートなどの支持体表面からなる。典型的には、蛍光色素で標識したプローブ分子をアレイに添加する。プローブと固定したタンパク質の間の任意の反応により蛍光シグナルが発光し、これをレーザースキャナーで読み取る。タンパク質マイクロアレイは、迅速であり、自動化されており、経済的で、感受性が高く、サンプルと試薬の消費量が少ない。
【００９７】
アッセイごとに１つの分析物を定量化するシングルプレックスイムノアッセイなどの抗体ベースのイムノアッセイおよびｎ個の分析物はｎ回の独立したアッセイを必要とする。単一の分析物に対するＥＬＩＳＡと比較して、マルチプレックスアッセイは、高度な並行的な分析においてより信頼できる定量的情報を得る可能性をもたらす。これらの定量的マルチプレックスイムノアッセイにより、抗原−抗体相互作用の基本原理は定量的読み出しを与える多様な検出方法と結び付けられる。
【００９８】
タンパク質シークエンシングは、タンパク質のアミノ酸配列、ならびにどの立体構造をタンパク質がとるかおよびタンパク質が任意の非ペプチド分子と複合化する程度を決定するための技法である。タンパク質シークエンシングの２つの主要な直接的方法は、質量分析とエドマン分解反応である。
【００９９】
用語「質量分析（ＭＳ）」は、質量対電荷数の比およびガス相イオンの存在量を測定することにより、サンプル中に存在する化学物質の量および種類の特定を可能とする分析化学技法を指す。マススペクトル（ｓｐｅｃｔｒｕｍ）（複数形はｓｐｅｃｔｒａ）は、質量対電荷数の比の関数としてのイオンシグナルのプロットである。スペクトルを使用して、サンプルの元素または同位体の符号、粒子および分子の質量決定し、ペプチドおよび他の化合物などの分子の化学構造を説明する。質量分析は、化合物をイオン化して、荷電分子または分子の断片を生成し、それらの質量対電荷数の比を測定することで働く。典型的なＭＳの手順では、固体、液体、または気体のサンプルは、例えば、電子を衝突させることによりイオン化される。このことにより、サンプルの分子の一部が荷電した断片へと分解されることになる。次いで、これらのイオンを、典型的には、加速させて、電場または磁場にそれらを供することによって、質量対電荷数の比にしたがって分離し：同じ質量対電荷数の比のイオンは、同じ量の偏向（deflection）を受けることになる。荷電した粒子を検出することができるメカニズム、例えば、電子増倍管によってイオンを検出する。結果は、質量対電荷数の比の関数として、検出したイオンの相対的存在量のスペクトルとして提示する。サンプル中の原子または分子は、知られている質量を特定された質量に相関させることにより、または特徴的な断片化パターンにより、特定することができる。
【０１００】
用語「クロマトグラフィー」は、吸着に関与する物質移動プロセスを指す。高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）は、ポンプにより、加圧した液体とサンプル混合物を吸着剤で満たしたカラムに通し、サンプル構成成分を分離させる。カラムの有効な構成成分である、吸着剤は、典型的には、サイズが２〜５０マイクロメートルの固体粒子からなる粒状材料（例えば、シリカ、ポリマーなど）である。サンプル混合物の構成成分は、吸着剤粒子との相互作用の異なる度合いによって互いに分離される。加圧した液体は、典型的には、溶媒（例えば、水、アセトニトリルおよび／またはメタノール）の混合物であり、「移動相」と称される。サンプルの構成成分と溶媒の間に起こる相互作用に影響を及ぼすため、その組成および温度は分離プロセスにおいて主要な役割を果たす。これらの相互作用は、疎水性（分散性）、二極性−二極性およびイオン性など、物理的な性質のもので、最も多いのは組合せである。普通の液体クロマトグラフィーは、典型的には、重力の力により、移動相をカラムに通すが、ＨＰＬＣは、操作圧力が著しく高い（５０〜３５０バール）ため、従来の（「低圧力」）液体クロマトグラフィーと区別される。解析ＨＰＬＣで分離されるサンプルは少量であるため、典型的なカラムの寸法は、２．１〜４．６ｍｍの直径と３０〜２５０ｍｍの長さである。また、ＨＰＬＣカラムは、より小さい吸着剤粒子（２〜５０マイクロメートルの平均粒径）を用いて構成される。このことにより、ＨＰＬＣは、混合物を分離する際に優れた分解能（化合物間を区別する能力）を得ることとなり、ポピュラーなクロマトグラフィー技術となっている。
【０１０１】
本明細書で使用される場合、「投与すること」は、ｉｎ  ｖｉｖｏ投与、および静脈移植などのｅｘ  ｖｉｖｏで組織に直接投与することも含む。
【０１０２】
「有効量」は、意図した目的を達成するのに十分な薬剤の量である。所定の薬剤の有効量は、薬剤の性質、投与経路、薬剤を受容する対象のサイズおよび種、ならびに投与の目的などの因子により変化する。それぞれの個々の事例の有効量は、当技術分野において確立されている方法にしたがって当業者が経験的に決定することができる。
【０１０３】
用語「治療有効量」は、意図した予防または治療効果を達成するのに十分な治療剤の量、すなわち、処置される障害または疾患の症状の徴候の改善を達成するか、または予防される障害または疾患の症状の徴候の発生を予防すると考えられる前記治療剤の量である。所定の治療剤の有効量は、薬剤の性質、投与経路、治療剤を受容する動物のサイズおよび種、ならびに投与の目的などの因子により変化する。それぞれの個々の事例の治療有効量は、当技術分野において確立されている方法にしたがって当業者が経験的に決定することができる。
【０１０４】
「薬学的に許容される」は、動物において、とりわけヒトにおいて使用するために、連邦政府もしくは州政府の監督官庁によって認可されているか、または米国薬局方もしくは他の一般的に認められている薬局方に列挙されていることを意味する。
【０１０５】
用語「有効成分」は、生物学的に活性である、すなわち、薬学的価値をもたらす医薬組成物または製剤中の物質を指す。医薬組成物は、互いと共にまたは互いに独立して作用する１つまたはそれ以上の有効成分を含む。有効成分は、中性または塩形態として製剤化することができる。薬学的に許容される塩は、遊離のアミノ基と形成される塩、例えば、塩酸、リン酸、酢酸、シュウ酸、酒石酸などに由来する塩、および遊離のカルボキシル基と形成される塩、例えば、これらに限定されないが、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化アンモニウム、水酸化カルシウム、水酸化第二鉄、イソプロピルアミン、トリエチルアミン、２−エチルアミノエタノール、ヒスチジン、プロカインなどに由来する塩を含む。
【０１０６】
用語「調製物」および「組成物」は、活性化合物と担体としての封入材料（他の担体を有するかまたは有さない活性成分が、担体で取り囲まれ、よって担体と会合するカプセルを提供する）との配合物を含むことを意図する。
【０１０７】
用語「担体」は、本明細書で使用される場合、これらに限定されないが、それと一緒に治療有効成分が投与される希釈剤、賦形剤、またはビヒクルなどの薬理学的に不活性な物質を指す。このような薬学的担体は、液体または固体である。液体の担体は、これらに限定されないが、無菌の液体、例えば、生理食塩水、および油（石油、動物、植物、または合成起源のものを含む）、例えば、ラッカセイ油、ダイズ油、鉱油、ゴマ油などを含む。生理食塩水、ならびにデキストロースおよびグリセリンの水溶液を、液体の担体として、特に注射溶液用に用いることもできる。生理食塩水は、医薬組成物を静脈内投与する場合に好ましい担体である。適切な薬学的担体の例が、Ｅ．Ｗ．Ｍａｒｔｉｎによる「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ」に記載されている。
【０１０８】
適切な薬学的「賦形剤」は、デンプン、グルコース、ラクトース、ショ糖、ゼラチン、麦芽、米、小麦粉、チョーク、シリカゲル、ステアリン酸ナトリウム、グリセロールモノステアレート、タルク、塩化ナトリウム、乾燥脱脂乳、グリセリン、プロピレン、グリコール、水、エタノールなどを含む。
【０１０９】
用語「アジュバント」は、有効成分の治療効果を増大させる、刺激する、活性化する、増強する、またはモジュレートする薬剤を指す。このようなアジュバントの例として、これらに限定されないが、無機アジュバント（例えば、無機金属塩、例えば、リン酸アルミニウムまたは水酸化アルミニウム）、有機アジュバント（例えば、サポニンまたはスクアレン）、油ベースのアジュバント（例えば、フロイントの完全アジュバントおよびフロイントの不完全アジュバント）、サイトカイン（例えば、ＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−７、ＩＬ−１２、ＩＬ−１８、ＧＭ−ＣＦＳ、およびＩＮＦ−γ）  粒子アジュバント（例えば、免疫刺激複合体（ＩＳＣＯＭＳ）、リポソーム、または生分解性ミクロスフィア）、ビロソーム、細菌性アジュバント（例えば、モノホスホリルリピドＡ、またはムラミルペプチド）、合成アジュバント（例えば、非イオン性ブロックコポリマー、ムラミルペプチド類似体、または合成リピドＡ）、または合成ポリヌクレオチドアジュバント（例えば、ポリアルギニンまたはポリリシン）が挙げられる。
【０１１０】
本明細書で使用される場合、「患者」は、本発明から利益を得る任意の哺乳動物、爬虫類動物またはトリを意味する。好ましくは、患者は、実験動物（例えば、マウス、ラットまたはウサギ）、飼育動物（例えば、モルモット、ウサギ、ウマ、ロバ、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ブタ、ニワトリ、アヒル、ラクダ、ネコ、イヌ、ウミガメ、カメ、ヘビ、またはトカゲを含む）、またはチンパンジー、ボノボ、ゴリラ、およびヒトを含む霊長動物からなる群から選択される。「患者」はヒトであるのが特に好ましい。
【０１１１】
実施形態
メトホルミンの効果を評価または予測することを可能にする候補バイオマーカーを特定するために、２３７種の生化学マーカーの大パネルをスクリーニングした。これらは、８，４０１名の参加者（そのおよそ２５％は様々な用量のメトホルミンを受けていた）において回収したベースライン血清サンプルで、組織および動物モデルを使用して重要な知見を調査することによりアッセイした。血糖異常症とさらに心血管危険因子を有するヒトのメトホルミン使用に対する反応を示す適切なバイオマーカーとしてＧＤＦ１５レベルを特定した。さらに、ＧＤＦ１５の濃度は、メトホルミン用量を厳密に反映することを見出した。
【０１１２】
第１の態様では、本発明は、患者を処置するのに使用するためのメトホルミンであって、患者が、メトホルミン処置に反応してＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルの上昇を示すメトホルミンに関する。
【０１１３】
実施形態では、前記患者は、前糖尿病、糖尿病、糖尿病の状況下での低血糖、多嚢胞性卵巣症候群、多毛症、無月経症、非アルコール性脂肪性肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎、繁殖不能、肥満、ビタミンＢ１２欠乏症、インスリン抵抗性、およびこれらに限定されないが、狭心症、脂質異常、高血圧、がん、認知機能低下、認知症、フレイル、転倒、不安定、勃起不全、性機能障害、慢性疼痛、足部潰瘍形成、網膜症、視力減退、腎疾患または寿命の短縮などの虚血性心疾患または心筋梗塞に対する他の危険因子からなる群から選択される疾患または障害を発症するかまたはそれに罹患する危険性を有する。
【０１１４】
特定の実施形態では、患者は、前糖尿病、糖尿病、糖尿病の状況下での低血糖、多嚢胞性卵巣症候群、多毛症、無月経症、非アルコール性脂肪性肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎、繁殖不能、肥満、ビタミンＢ１２欠乏症、インスリン抵抗性、およびこれらに限定されないが、狭心症、脂質異常、および高血圧などの虚血性心疾患または心筋梗塞に対する他の危険因子からなる群から選択される疾患または障害を発症するかまたはそれに罹患する危険性を有する。
【０１１５】
さらなる実施形態では、患者は、がん、認知機能低下、認知症、フレイル、転倒、不安定、勃起不全、性機能障害、慢性疼痛、足部潰瘍形成、網膜症、視力減退、腎疾患または寿命の短縮からなる群から選択される疾患または障害を発症するかまたはそれに罹患する危険性を有する。
【０１１６】
特定の実施形態では、疾患または障害は糖尿病である。特に、疾患または障害は、Ｉ型糖尿病、ＩＩ型糖尿病、または妊娠糖尿病である。
【０１１７】
特定の実施形態では、ＧＤＦ１５は、配列番号１で与えられるアミノ酸配列を含む。実施形態では、機能的バリアントは、ネイティブＧＤＦ１５と同じ機能的特性を示す。特に、機能的バリアントは、配列番号１によるＧＤＦ１５と少なくとも８０％の配列同一性を示す。特に、機能的バリアントは、配列番号１によるＧＤＦ１５と少なくとも８５％、９０％、９５％、９７％または９９％の配列同一性を示す。特定の実施形態では、機能的バリアントは、配列番号１によるＧＤＦ１５と８０％、９０％、または９９％の配列同一性を示す。
【０１１８】
特定の実施形態では、ＧＤＦ１５レベルは、少なくとも２５％上昇し、すなわち、ＧＤＦ１５またはそのバリアントのレベルは、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、または２００％上昇する。特定の実施形態では、ＧＤＦ１５レベルは、少なくとも５０％、特に、少なくとも７５％または少なくとも１００％上昇する。特定の実施形態では、ＧＤＦ１５レベルは、２５％から２００％まで、特に、３０％から１５０％まで、特に、５０％から１００％まで上昇する。
【０１１９】
実施形態では、患者は、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントの発現レベルの上昇を示す。
【０１２０】
特定の実施形態では、ＧＤＦ１５レベルは、基準と比較して上昇する。基準は、メトホルミン投与前の患者の基準サンプル、特に、メトホルミン投与前の時点で採取した患者の基準サンプルで測定したＧＤＦ１５レベルである。基準は、代表的な基準値、特に、メトホルミン投与を得ていない対象のＧＤＦ１５レベルの代表的な基準値である。基準値は、メトホルミンを処方する傾向と関連する因子に対して調整される。特に、これらの因子は、年齢、性別、体重、以前の心血管事象、以前の糖尿病の診断、血清クレアチニン、ＨｂＡ１ｃ、および空腹時血漿グルコースからなる群から選択される。
【０１２１】
特定の実施形態では、患者は、本発明から利益を得る個体である。特に、患者は、哺乳動物、爬虫類動物またはトリからなる群から選択される。特定の実施形態では、患者は、実験動物（例えば、マウス、ラットまたはウサギ）、飼育動物（例えば、モルモット、ウサギ、ウマ、ロバ、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ブタ、ニワトリ、アヒル、ラクダ、ネコ、イヌ、ウミガメ、カメ、ヘビ、またはトカゲを含む）、またはチンパンジー、ボノボ、ゴリラ、およびヒトを含む霊長動物からなる群から選択される。特に、患者はヒトである。
【０１２２】
第２の態様では、本発明は、メトホルミン処置から利益を得る患者または患者の群を特定する方法であって、
（ｉ）有効量のメトホルミンを患者に投与する工程と、
（ｉｉ）患者のサンプルのＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルを決定する工程と、
（ｉｉｉ）工程（ｉｉ）で決定したＧＤＦ１５レベルを基準のＧＤＦ１５レベルと比較する工程であって、ＧＤＦ１５レベルの上昇によってメトホルミン投与に対する患者の反応が示される工程
とを含む方法を提供する。
【０１２３】
特定の実施形態では、工程（ｉ）で投与されるメトホルミンの有効量は、意図した目的を達成するのに十分であり、すなわち、メトホルミン処置に反応する対象の反応を誘導するのに十分である。したがって、工程（ｉ）で投与されるメトホルミンの有効量は、メトホルミンに反応する対象のメトホルミン処置に対する反応を誘導する量である。特定の実施形態では、メトホルミンは、工程（ｉ）において、５００〜２０００ｍｇの量で、特に５００、５５０、６００、６５０、７００、７５０、８００、８５０、９００、９５０、１０００、１１００、１２００、１３００、１４００、１５００、１６００、１７００、１８００、１９００、または２０００ｍｇの量で、投与される。メトホルミンに反応する個体のメトホルミン処置に対する反応を誘導するのに十分なメトホルミンの量をどのように決定するかについては、当業者に周知されている。
【０１２４】
特定の実施形態では、工程（ｉｉ）で決定したＧＤＦ１５は、配列番号１で与えられるアミノ酸配列を含む。実施形態では、機能的バリアントは、ネイティブＧＤＦ１５と同じ機能的特性を示す。特に、機能的バリアントは、配列番号１によるＧＤＦ１５と少なくとも８０％の配列同一性を示す。特に、機能的バリアントは、配列番号１によるＧＤＦ１５と少なくとも８５％、９０％、９５％、９７％または９９％の配列同一性を示す。特定の実施形態では、機能的バリアントは、配列番号１によるＧＤＦ１５と８０％、９０％、または９９％の配列同一性を示す。
【０１２５】
特定の実施形態では、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、工程（ｉｉ）で、当技術分野でよく知られた任意の方法により決定される。特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、工程（ｉｉ）で、ＥＬＩＳＡ、ウエスタンブロット、免疫沈降、ＨＰＬＣ、マイクロアレイ、質量分析、およびシークエンシングからなる群から選択される方法により決定される。特定の実施形態では、ＧＤＦ１５レベルは、免疫検出アッセイを使用して、特に、ＥＬＩＳＡにより決定される。
【０１２６】
特定の実施形態では、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、工程（ｉｉ）で、ＧＤＦ１５結合分子を使用して、直接的または間接的に決定される。特に、ＧＤＦ１５レベルは、ＧＤＦ１５に特異的な抗体を使用して決定される。特に、ＧＤＦ１５レベルは、ＧＤＦ１５に特異的なモノクローナル抗体を使用して決定される。特に、抗体は、配列番号１によるＧＤＦ１５のアミノ酸１９７〜３０８を含むペプチドを認識する抗体と競合する。特に、抗体は、配列番号１によるＧＤＦ１５のアミノ酸１９７〜３０８を含む抗原を認識する。
【０１２７】
特定の実施形態では、患者のサンプルにおけるＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後数時間以内に決定される。特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、または２４時間以内に決定される。特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後１２時間以内、特に、メトホルミン投与後６時間以内に決定される。特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後１から１２時間、２から１０時間、または４から８時間以内に決定される。
【０１２８】
特定の実施形態では、患者のサンプルにおけるＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後数日以内に決定される。特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後１、２、３、４、５、６、または７日以内に決定される。特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後１から７日以内、特に、１から５日以内、特に、１から２日以内に決定される。
【０１２９】
特定の実施形態では、患者のサンプルは、体液および組織サンプルからなる群から選択される。特に、体液サンプルは、全血、血清、血漿、痰、唾液、および尿からなる群から選択される。
【０１３０】
特定の実施形態では、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベル、特に、発現レベルは、少なくとも２５％上昇し、すなわち、ＧＤＦ１５またはそのバリアントのレベルは、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、または２００％上昇する。特定の実施形態では、ＧＤＦ１５レベルは、少なくとも５０％、特に、少なくとも７５％または少なくとも１００％上昇する。特定の実施形態では、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、２５％から２００％、特に、３０％から１５０％、特に、５０％から１００％上昇する。
【０１３１】
特定の実施形態では、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、基準と比較して上昇する。基準は、メトホルミン投与前に採取した患者の基準サンプルで測定したＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルである。特に、メトホルミン投与前の時点で採取した患者の基準サンプル。基準は、代表的な基準値、特に、メトホルミン投与を得ていない対象のＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルの代表的な基準値である。基準値は、メトホルミンを処方する傾向と関連する因子に対して調整される。特に、これらの因子は、年齢、性別、体重、以前の心血管事象、以前の糖尿病の診断、血清クレアチニン、ＨｂＡ１ｃ、および空腹時血漿グルコースからなる群から選択される。
【０１３２】
さらなる実施形態では、１つまたはそれ以上の因子は、ＧＤＦ１５に加えて、場合による工程（ｉｖ）で決定される。特に、さらなる１つまたはそれ以上の因子は、
（ａ）空腹時グルコースレベル
（ｂ）食後のグルコースレベル
（ｃ）フルクトサミンレベル
（ｄ）糖化アルブミン
からなるリストから選択される。
【０１３３】
特定の実施形態では、
（ａ）ＨｂＡ１ｃ
（ｂ）無作為グルコースレベル
（ｃ）空腹時インスリンレベル
（ｄ）インスリン抵抗性の恒常性モデル評価（ＨＯＭＡＩＲ）
（ｅ）インスリン抵抗性の他の尺度
（ｆ）特に、ＨＤＬ、ＬＤＬ、総コレステロール、トリグリセリド、アポリポタンパク質Ｂからなる群から選択される脂質レベル、
（ｇ）アルブミン尿、特に、微量アルブミン尿または顕性アルブミン尿
（ｈ）クレアチニンまたは推定ＧＦＲ、
（ｉ）ＡＬＴレベル
（ｊ）ビタミンＢ１２レベル
（ｋ）コチニンレベル
（ｌ）テロメア長
（ｍ）ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ、トレフォイル因子３、アポリポタンパク質Ｂ、アンギオポエチン−２、オステオプロテゲリン、アルファ−２−マクログロブリン、肝細胞増殖因子受容体、グルタチオンＳトランスフェラーゼアルファ、クロモグラニンＡ、ＩＧＦ結合タンパク質４、テネイシン−Ｃ、セレンタンパク質Ｐ、マクロファージ由来ケモカイン、ＹＫＬ−４０、ＩＧＦ結合タンパク質２からなる群から選択される１つまたはそれ以上のバイオマーカー
（ｎ）血圧、体重、ＢＭＩ、ウエストヒップ比、ウエスト周囲、糖尿病の期間、喫煙状況、脂肪肝の画像エビデンス、トロポニンレベル、ＬＶ機能不全、心血管リスク、他の糖尿病の合併症、網膜像、および神経伝導検査からなる群から選択される１つまたはそれ以上の因子
からなるリストから選択される１つまたはそれ以上の因子は、場合による工程（ｖ）で、特に、工程（ｉ）から（ｉｉｉ）または（ｉ）から（ｉｖ）の方法で得られた結果を確認するために検出される。
【０１３４】
特定の実施形態では、患者は、本発明から利益を得る個体である。特に、患者は、哺乳動物、爬虫類動物またはトリからなる群から選択される。特定の実施形態では、患者は、実験動物（例えば、マウス、ラットまたはウサギ）、飼育動物（例えば、モルモット、ウサギ、ウマ、ロバ、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ブタ、ニワトリ、アヒル、ラクダ、ネコ、イヌ、ウミガメ、カメ、ヘビ、またはトカゲを含む）、またはチンパンジー、ボノボ、ゴリラ、およびヒトを含む霊長動物からなる群から選択される。特に、患者はヒトである。
【０１３５】
特定の実施形態では、患者は、前糖尿病、糖尿病、糖尿病の状況下での低血糖、多嚢胞性卵巣症候群、多毛症、無月経症、非アルコール性脂肪性肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎、繁殖不能、肥満、ビタミンＢ１２欠乏症、インスリン抵抗性、およびこれらに限定されないが、狭心症、脂質異常、高血圧、がん、認知機能低下、認知症、フレイル、転倒、不安定、勃起不全、性機能障害、慢性疼痛、足部潰瘍形成、網膜症、視力減退、腎疾患または寿命の短縮などの虚血性心疾患または心筋梗塞に対する他の危険因子からなる群から選択される疾患または障害を発症するかまたはそれに罹患する危険性を有する。
【０１３６】
特定の実施形態では、患者は、前糖尿病、糖尿病、糖尿病の状況下での低血糖、多嚢胞性卵巣症候群、多毛症、無月経症、非アルコール性脂肪性肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎、繁殖不能、肥満、ビタミンＢ１２欠乏症、インスリン抵抗性、およびこれらに限定されないが、狭心症、脂質異常、および高血圧などの虚血性心疾患または心筋梗塞に対する他の危険因子からなる群から選択される疾患または障害を発症するかまたはそれに罹患する危険性を有する。
【０１３７】
特定の実施形態では、患者は、がん、認知機能低下、認知症、フレイル、転倒、不安定、勃起不全、性機能障害、慢性疼痛、足部潰瘍形成、網膜症、視力減退、腎疾患または寿命の短縮からなる群から選択される疾患または障害を発症するかまたはそれに罹患する危険性を有する。
【０１３８】
特定の実施形態では、疾患または障害は糖尿病である。特に、疾患または障害は、Ｉ型糖尿病、ＩＩ型糖尿病、または妊娠糖尿病である。
【０１３９】
第３の態様では、本発明は、メトホルミンならびに疾患または障害を処置するのに使用するための少なくとも１種の薬学的に許容される担体、アジュバントおよび／または賦形剤を含む医薬組成物であって、患者が、メトホルミン処置に反応してＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルの上昇を示す医薬組成物を提供する。
【０１４０】
実施形態では、疾患または障害は、前糖尿病、糖尿病、糖尿病の状況下での低血糖、多嚢胞性卵巣症候群、多毛症、無月経症、非アルコール性脂肪性肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎、繁殖不能、肥満、ビタミンＢ１２欠乏症、インスリン抵抗性、およびこれらに限定されないが、狭心症、脂質異常、高血圧、がん、認知機能低下、認知症、フレイル、転倒、不安定、勃起不全、性機能障害、慢性疼痛、足部潰瘍形成、網膜症、視力減退、腎疾患または寿命の短縮などの虚血性心疾患または心筋梗塞に対する他の危険因子からなる群から選択される。
【０１４１】
特定の実施形態では、疾患または障害は、前糖尿病、糖尿病、糖尿病の状況下での低血糖、多嚢胞性卵巣症候群、多毛症、無月経症、非アルコール性脂肪性肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎、繁殖不能、肥満、ビタミンＢ１２欠乏症、インスリン抵抗性、およびこれらに限定されないが、狭心症、脂質異常、および高血圧などの虚血性心疾患または心筋梗塞に対する他の危険因子からなる群から選択される。
【０１４２】
さらなる実施形態では、疾患または障害は、がん、認知機能低下、認知症、フレイル、転倒、不安定、勃起不全、性機能障害、慢性疼痛、足部潰瘍形成、網膜症、視力減退、腎疾患または寿命の短縮からなる群から選択される。
【０１４３】
特定の実施形態では、疾患または障害は糖尿病である。特定の実施形態では、疾患または障害は、Ｉ型糖尿病、ＩＩ型糖尿病、または妊娠糖尿病である。
【０１４４】
特定の実施形態では、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベル、特に、発現レベルは、少なくとも２５％上昇し、すなわち、ＧＤＦ１５またはそのバリアントのレベルは、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、または２００％上昇する。特定の実施形態では、ＧＤＦ１５レベルは、少なくとも５０％、特に、少なくとも７５％または少なくとも１００％上昇する。特定の実施形態では、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、２５％から２００％、特に、３０％から１５０％、特に、５０％から１００％上昇する。
【０１４５】
特定の実施形態では、ＧＤＦ１５は、配列番号１で与えられるアミノ酸配列を含む。実施形態では、機能的バリアントは、ネイティブＧＤＦ１５と同じ機能的特性を示す。特に、機能的バリアントは、配列番号１によるＧＤＦ１５と少なくとも８０％の配列同一性を示す。特に、機能的バリアントは、配列番号１によるＧＤＦ１５と少なくとも８５％、９０％、９５％、９７％または９９％の配列同一性を示す。特定の実施形態では、機能的バリアントは、配列番号１によるＧＤＦ１５と８０％、９０％、または９９％の配列同一性を示す。
【０１４６】
特定の実施形態では、患者は、本発明から利益を得る個体である。特に、患者は、哺乳動物、爬虫類動物またはトリからなる群から選択される。特定の実施形態では、患者は、実験動物（例えば、マウス、ラットまたはウサギ）、飼育動物（例えば、モルモット、ウサギ、ウマ、ロバ、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ブタ、ニワトリ、アヒル、ラクダ、ネコ、イヌ、ウミガメ、カメ、ヘビ、またはトカゲを含む）、またはチンパンジー、ボノボ、ゴリラ、およびヒトを含む霊長動物からなる群から選択される。特に、患者はヒトである。
【０１４７】
特定の実施形態では、患者は、前糖尿病、糖尿病、糖尿病の状況下での低血糖、多嚢胞性卵巣症候群、多毛症、無月経症、非アルコール性脂肪性肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎、繁殖不能、肥満、ビタミンＢ１２欠乏症、インスリン抵抗性、およびこれらに限定されないが、狭心症、脂質異常、高血圧、がん、認知機能低下、認知症、フレイル、転倒、不安定、勃起不全、性機能障害、慢性疼痛、足部潰瘍形成、網膜症、視力減退、腎疾患または寿命の短縮などの虚血性心疾患または心筋梗塞に対する他の危険因子からなる群から選択される疾患または障害を発症するかまたはそれに罹患する危険性を有する。
【０１４８】
特定の実施形態では、患者は、前糖尿病、糖尿病、糖尿病の状況下での低血糖、多嚢胞性卵巣症候群、多毛症、無月経症、非アルコール性脂肪性肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎、繁殖不能、肥満、ビタミンＢ１２欠乏症、インスリン抵抗性、およびこれらに限定されないが、狭心症、脂質異常、および高血圧などの虚血性心疾患または心筋梗塞に対する他の危険因子からなる群から選択される疾患または障害を発症するかまたはそれに罹患する危険性を有する。
【０１４９】
特定の実施形態では、患者は、がん、認知機能低下、認知症、フレイル、転倒、不安定、勃起不全、性機能障害、慢性疼痛、足部潰瘍形成、網膜症、視力減退、腎疾患または寿命の短縮からなる群から選択される疾患または障害を発症するかまたはそれに罹患する危険性を有する。
【０１５０】
特定の実施形態では、疾患または障害は糖尿病である。特に、疾患または障害は、Ｉ型糖尿病、ＩＩ型糖尿病、または妊娠糖尿病である。
【０１５１】
第４の態様では、本発明は、メトホルミンの投薬量を適合させる方法であって、
（ｉ）メトホルミンを患者に投与する工程と、
（ｉｉ）患者のサンプルのＧＤＦ１５レベルを決定する工程と、
（ｉｉｉ）工程（ｉｉ）で決定したＧＤＦ１５レベルを基準と比較する工程と
（ｉｖ）ＧＤＦ１５レベルが上昇しない場合にはメトホルミンを用いる処置が停止され、ＧＤＦ１５レベルが上昇する場合にはメトホルミンの投薬量が維持されるかまたは増加されるという点でメトホルミンの投薬量を調整する工程
とを含む方法を提供する。
【０１５２】
特定の実施形態では、メトホルミンは、工程（ｉ）で、意図した目的を達成するのに十分な量で、すなわち、メトホルミン処置に反応する対象の反応を誘導するのに十分である量で投与される。したがって、工程（ｉ）で投与されるメトホルミンの有効量は、メトホルミンに反応する対象のメトホルミン処置に対する反応を誘導する量である。特定の実施形態では、メトホルミンは、工程（ｉ）において、５００〜２０００ｍｇの量で、特に５００、５５０、６００、６５０、７００、７５０、８００、８５０、９００、９５０、１０００、１１００、１２００、１３００、１４００、１５００、１６００、１７００、１８００、１９００、または２０００ｍｇの量で、投与される。メトホルミンに反応する個体のメトホルミン処置に対する反応を誘導するのに十分なメトホルミンの量をどのように決定するかについては、当業者に周知されている。
【０１５３】
特定の実施形態では、工程（ｉｉ）で決定されるＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベル、特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントの発現レベルは、少なくとも２５％上昇し、すなわち、ＧＤＦ１５またはそのバリアントのレベルは、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、または２００％上昇する。特定の実施形態では、ＧＤＦ１５レベルは、少なくとも５０％、特に、少なくとも７５％または少なくとも１００％上昇する。特定の実施形態では、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、２５％から２００％、特に、３０％から１５０％、特に、５０％から１００％上昇する。
【０１５４】
特定の実施形態では、工程（ｉｉ）で決定されたＧＤＦ１５は、配列番号１で与えられるアミノ酸配列を含む。実施形態では、機能的バリアントは、ネイティブＧＤＦ１５と同じ機能的特性を示す。特に、機能的バリアントは、配列番号１によるＧＤＦ１５と少なくとも８０％の配列同一性を示す。特に、機能的バリアントは、配列番号１によるＧＤＦ１５と少なくとも８５％、９０％、９５％、９７％または９９％の配列同一性を示す。特定の実施形態では、機能的バリアントは、配列番号１によるＧＤＦ１５と８０％、９０％、または９９％の配列同一性を示す。
【０１５５】
特定の実施形態では、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、工程（ｉｉ）において当技術分野でよく知られた任意の方法により決定される。特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、工程（ｉｉ）で、ＥＬＩＳＡ、ウエスタンブロット、免疫沈降、ＨＰＬＣ、マイクロアレイ、質量分析、およびシークエンシングからなる群から選択される方法により決定される。特定の実施形態では、ＧＤＦ１５レベルは、免疫検出アッセイを使用して決定される。
【０１５６】
特定の実施形態では、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、工程（ｉｉ）で、ＧＤＦ１５結合分子を使用して、直接的または間接的に決定される。特に、ＧＤＦ１５レベルは、ＧＤＦ１５に特異的な抗体を使用して決定される。特に、ＧＤＦ１５レベルは、ＧＤＦ１５に特異的なモノクローナル抗体を使用して決定される。特に、抗体は、ＧＤＦ１５のアミノ酸１９７〜３０８を含むペプチドを認識する抗体と競合する。特に、抗体は、配列番号１によるＧＤＦ１５のアミノ酸１９７〜３０８を含むペプチドを認識する抗体と競合する。特に、抗体は、配列番号１によるＧＤＦ１５のアミノ酸１９７〜３０８を含むペプチドを認識する。
【０１５７】
特定の実施形態では、患者のサンプルにおけるＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、工程（ｉｉ）で、メトホルミン投与後数時間以内に決定される。特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、または２４時間以内に決定される。特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後１２時間以内、特に、メトホルミン投与後６時間以内に決定される。特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後１から１２時間、２から１０時間、または４から８時間以内に決定される。
【０１５８】
特定の実施形態では、患者のサンプルにおけるＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、工程（ｉｉ）で、メトホルミン投与後数日以内に決定される。特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後１、２、３、４、５、６、または７日以内に決定される。特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後１から７日以内、特に、１から５日以内、特に、１から２日以内に決定される。
【０１５９】
特定の実施形態では、患者のサンプルは、体液および組織サンプルからなる群から選択される。特に、体液サンプルは、全血、血清、血漿、痰、唾液、および尿からなる群から選択される。
【０１６０】
特定の実施形態では、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、基準と比較して上昇する。基準は、メトホルミン投与前に採取した患者の基準サンプルで測定したＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルである。特に、メトホルミン投与前の時点で採取した患者の基準サンプルでは。基準は、代表的な基準値、特に、メトホルミン投与を得ていない対象のＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルの代表的な基準値である。基準値は、メトホルミンを処方する傾向と関連する因子に対して調整される。特に、これらの因子は、年齢、性別、体重、以前の心血管事象、以前の糖尿病の診断、血清クレアチニン、ＨｂＡ１ｃ、および空腹時血漿グルコースからなる群から選択される。
【０１６１】
実施形態では、ＧＤＦ１５レベルが、特に最初のメトホルミン投与に反応して上昇する場合、メトホルミンの投薬量は、工程（ｉｖ）で、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１５０、または２００％増加する。
【０１６２】
特定の実施形態では、患者は、本発明から利益を得る個体である。特に、患者は、哺乳動物、爬虫類動物またはトリからなる群から選択される。特定の実施形態では、患者は、実験動物（例えば、マウス、ラットまたはウサギ）、飼育動物（例えば、モルモット、ウサギ、ウマ、ロバ、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ブタ、ニワトリ、アヒル、ラクダ、ネコ、イヌ、ウミガメ、カメ、ヘビ、またはトカゲを含む）、またはチンパンジー、ボノボ、ゴリラ、およびヒトを含む霊長動物からなる群から選択される。特に、患者はヒトである。
【０１６３】
特定の実施形態では、患者は、前糖尿病、糖尿病、糖尿病の状況下での低血糖、多嚢胞性卵巣症候群、多毛症、無月経症、非アルコール性脂肪性肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎、繁殖不能、肥満、ビタミンＢ１２欠乏症、インスリン抵抗性、およびこれらに限定されないが、狭心症、脂質異常、高血圧、がん、認知機能低下、認知症、フレイル、転倒、不安定、勃起不全、性機能障害、慢性疼痛、足部潰瘍形成、網膜症、視力減退、腎疾患または寿命の短縮などの虚血性心疾患または心筋梗塞に対する他の危険因子からなる群から選択される疾患または障害を発症するかまたはそれに罹患する危険性を有する。
【０１６４】
特定の実施形態では、患者は、前糖尿病、糖尿病、糖尿病の状況下での低血糖、多嚢胞性卵巣症候群、多毛症、無月経症、非アルコール性脂肪性肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎、繁殖不能、肥満、ビタミンＢ１２欠乏症、インスリン抵抗性、およびこれらに限定されないが、狭心症、脂質異常、および高血圧などの虚血性心疾患または心筋梗塞に対する他の危険因子からなる群から選択される疾患または障害を発症するかまたはそれに罹患する危険性を有する。
【０１６５】
特定の実施形態では、患者は、がん、認知機能低下、認知症、フレイル、転倒、不安定、勃起不全、性機能障害、慢性疼痛、足部潰瘍形成、網膜症、視力減退、腎疾患または寿命の短縮からなる群から選択される疾患または障害を発症するかまたはそれに罹患する危険性を有する。
【０１６６】
特定の実施形態では、疾患または障害は糖尿病である。特に、疾患または障害は、Ｉ型糖尿病、ＩＩ型糖尿病、または妊娠糖尿病である。
【０１６７】
さらなる実施形態では、１つまたはそれ以上の因子は、ＧＤＦ１５に加えて、場合による工程（ｖ）で決定される。特に、さらなる１つまたはそれ以上の因子は、
（ａ）空腹時グルコースレベル
（ｂ）食後のグルコースレベル
（ｃ）フルクトサミンレベル
（ｄ）糖化アルブミン
からなるリストから選択される。
【０１６８】
特定の実施形態では、
（ａ）ＨｂＡ１ｃ
（ｂ）無作為グルコースレベル
（ｃ）空腹時インスリンレベル
（ｄ）インスリン抵抗性の恒常性モデル評価（ＨＯＭＡＩＲ）
（ｅ）インスリン抵抗性の他の尺度
（ｆ）特に、ＨＤＬ、ＬＤＬ、総コレステロール、トリグリセリド、アポリポタンパク質Ｂからなる群から選択される脂質レベル、
（ｇ）アルブミン尿、特に、微量アルブミン尿または顕性アルブミン尿
（ｈ）クレアチニンまたは推定ＧＦＲ、
（ｉ）ＡＬＴレベル
（ｊ）ビタミンＢ１２レベル
（ｋ）コチニンレベル
（ｌ）テロメア長
（ｍ）ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ、トレフォイル因子３、アポリポタンパク質Ｂ、アンギオポエチン−２、オステオプロテゲリン、アルファ−２−マクログロブリン、肝細胞増殖因子受容体、グルタチオンＳトランスフェラーゼアルファ、クロモグラニンＡ、ＩＧＦ結合タンパク質４、テネイシン−Ｃ、セレンタンパク質Ｐ、マクロファージ由来ケモカイン、ＹＫＬ−４０、ＩＧＦ結合タンパク質２からなる群から選択される１つまたはそれ以上のバイオマーカー
（ｎ）血圧、体重、ＢＭＩ、ウエストヒップ比、ウエスト周囲、糖尿病の期間、喫煙状況、脂肪肝の画像エビデンス、トロポニンレベル、ＬＶ機能不全、心血管リスク、他の糖尿病の合併症、網膜像、および神経伝導検査からなる群から選択される１つまたはそれ以上の因子
からなるリストから選択される１つまたはそれ以上の因子は、場合による工程（ｖｉ）で、特に、工程（ｉ）から（ｉｉｉ）または（ｖ）の方法で得られた結果を確認するために検出される。
【０１６９】
場合による工程（ｖ）または（ｖｉ）で決定される任意のこれらのさらなる因子は、工程（ｉｉｉ）の後、かつ工程（ｉｖ）の前に決定される。
【０１７０】
第５の態様では、本発明は、メトホルミン処置から利益を得る患者を特定するためのバイオマーカーとしてのＧＤＦ１５またはその機能的バリアントの使用を提供する。
【０１７１】
第６の態様では、本発明は、メトホルミン処置から利益を得るかまたは得ない患者を特定するのに使用するためのキットであって、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルを検出するための手段を含むキットを提供する。
【０１７２】
特定の実施形態では、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルを検出するための手段は、当技術分野でよく知られた任意の方法によりＧＤＦ１５またはその機能的バリアントを検出するのに適している。特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルを検出するための手段は、ＥＬＩＳＡ、ウエスタンブロット、免疫沈降、ＨＰＬＣ、マイクロアレイ、質量分析、およびシークエンシングからなる群から選択される方法によりＧＤＦ１５またはその機能的バリアントを検出するのに適している。特定の実施形態では、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルを検出するための手段は、免疫検出アッセイによりＧＤＦ１５またはその機能的バリアントを検出するのに適している。
【０１７３】
特定の実施形態では、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントの発現レベルを検出するための手段は、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルを直接的または間接的に決定するのに適している。特定の実施形態では、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルを検出するための手段は、ＧＤＦ１５結合分子を含む。特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルを検出するための手段は、ＧＤＦ１５に特異的な抗体を含む。特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルを検出するための手段は、ＧＤＦ１５に特異的なモノクローナル抗体を含む。特に、抗体は、配列番号１によるＧＤＦ１５のアミノ酸１９７〜３０８を含むペプチドを認識する抗体と競合する。特に、抗体は、配列番号１によるＧＤＦ１５のアミノ酸１９７〜３０８を含むペプチドを認識する。
【０１７４】
特定の実施形態では、キットは、所望の検出方法を実施するために必要な試薬をさらに含む。
【０１７５】
特定の実施形態では、試薬は、緩衝液、希釈液、および溶媒からなる群から選択される。
【０１７６】
特定の実施形態では、キットは、以下の
（ａ）容器、
（ｂ）適切な対照、および／または
（ｃ）
（ｉ）メトホルミン処置に反応する高い傾向を有する患者を特定する方法に関する説明書
（ｉｉ）ＧＤＦ１５レベルを検出するための手段の使用に関する説明書、
（ｉｉｉ）品質情報、例えば、ＧＤＦ１５レベルを検出する手段および／もしくはキットのロット／バッチ番号、製造もしくは組み立て部位もしくは使用期限もしくは販売日についての情報、キットの正しい保存もしくは取り扱いに関する情報、
（ｉｖ）ＧＤＦ１５レベルを検出するための緩衝液、希釈液、試薬の組成に関する情報、
（ｖ）メトホルミン処置に反応する高い傾向を有する患者を特定する上述の方法を実施する場合に得られる情報の解釈に関する情報、
（ｖｉ）不適切な方法および／もしくは不適切な手段を適用した場合に可能性のある誤った解釈もしくは誤った結果に関する警告、ならびに／または
（ｖｉｉ）不適切な試薬および／もしくは緩衝液を使用した場合に可能性のある誤った解釈もしくは誤った結果に関する警告
などの情報を含むデータキャリア
のうちの１つまたはそれ以上をさらに含む。
【０１７７】
第７の態様では、本発明は、第２の態様の方法における第６の態様のキットの使用を提供する。したがって、上記で開示されたキットは、前記患者由来のサンプル中のＧＤＦ１５レベルを検出することにより、メトホルミン処置から利益を得るかまたは得ない患者を特定する方法で使用するためのものである。
【０１７８】
第８の態様では、本発明は、前糖尿病、糖尿病、糖尿病の状況下での低血糖、多嚢胞性卵巣症候群、多毛症、無月経症、非アルコール性脂肪性肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎、繁殖不能、肥満、ビタミンＢ１２欠乏症、インスリン抵抗性、およびこれらに限定されないが、狭心症、脂質異常、高血圧、がん、認知機能低下、認知症、フレイル、転倒、不安定、勃起不全、性機能障害、慢性疼痛、足部潰瘍形成、網膜症、視力減退、腎疾患および寿命の短縮などの虚血性心疾患または心筋梗塞に対する他の危険因子からなる群から選択される疾患または障害を発症するかまたはそれに罹患する危険性を有する患者を処置する方法であって、治療有効量のメトホルミンを前記患者に投与する工程を含み、前記患者が、（最初の）メトホルミン投与に反応してＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルの上昇を示す方法を提供する。
【０１７９】
特定の実施形態では、前糖尿病、糖尿病、糖尿病の状況下での低血糖、多嚢胞性卵巣症候群、多毛症、無月経症、非アルコール性脂肪性肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎、繁殖不能、肥満、ビタミンＢ１２欠乏症、インスリン抵抗性、およびこれらに限定されないが、狭心症、脂質異常、および高血圧などの虚血性心疾患または心筋梗塞に対する他の危険因子からなる群から選択される疾患または障害を発症するかまたはそれに罹患する危険性を有する患者を処置する方法を提供する。
【０１８０】
特定の実施形態では、がん、認知機能低下、認知症、フレイル、転倒、不安定、勃起不全、性機能障害、慢性疼痛、足部潰瘍形成、網膜症、視力減退、腎疾患または寿命の短縮からなる群から選択される疾患または障害を発症するかまたはそれに罹患する危険性を有する患者を処置するための方法であって、治療有効量のメトホルミンを前記患者に投与する工程を含み、前記患者が、（最初の）メトホルミン処置に反応してＧＤＦ１５レベルの上昇を示す方法を提供する。
【０１８１】
特定の実施形態では、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベル、特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントの発現レベルは、少なくとも２５％上昇し、すなわち、ＧＤＦ１５またはそのバリアントのレベルは、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、または２００％上昇する。特定の実施形態では、ＧＤＦ１５レベルは、少なくとも５０％、特に、少なくとも７５％または少なくとも１００％上昇する。特定の実施形態では、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、２５％から２００％、特に、３０％から１５０％、特に、５０％から１００％上昇する。
【０１８２】
特定の実施形態では、ＧＤＦ１５は、配列番号１で与えられるアミノ酸配列を含む。実施形態では、機能的バリアントは、ネイティブＧＤＦ１５と同じ機能的特性を示す。特に、機能的バリアントは、配列番号１によるＧＤＦ１５と少なくとも８０％の配列同一性を示す。特に、機能的バリアントは、配列番号１によるＧＤＦ１５と少なくとも８５％、９０％、９５％、９７％または９９％の配列同一性を示す。特定の実施形態では、機能的バリアントは、配列番号１によるＧＤＦ１５と８０％、９０％、または９９％の配列同一性を示す。患者のサンプルにおいてＧＤＦ１５レベルが測定され、特に処置前の患者のサンプルにおいてＧＤＦ１５レベルが測定される、請求項２５から２８のいずれかに記載の方法。
【０１８３】
特定の実施形態では、特に、本明細書に開示された態様２または４の方法にしたがって、メトホルミン処置を投与する前に、ＧＤＦ１５レベルを（ｉ）患者のサンプルにおいて決定し、（ｉｉ）基準と比較する。
【０１８４】
特定の実施形態では、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、当技術分野でよく知られた任意の方法により決定される。特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、工程（ｉｉ）で、ＥＬＩＳＡ、ウエスタンブロット、免疫沈降、ＨＰＬＣ、マイクロアレイ、質量分析、およびシークエンシングからなる群から選択される方法により決定される。特定の実施形態では、ＧＤＦ１５レベルは、免疫検出アッセイを使用して決定される。
【０１８５】
特定の実施形態では、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、ＧＤＦ１５結合分子を使用して、直接的または間接的に決定される。特に、ＧＤＦ１５レベルは、ＧＤＦ１５に特異的な抗体を使用して決定される。特に、ＧＤＦ１５レベルは、ＧＤＦ１５に特異的なモノクローナル抗体を使用して決定される。実施形態では、抗体は、ＧＤＦ１５のアミノ酸１９７〜３０８を含むペプチドを認識する抗体と競合する。特に、抗体は、配列番号１によるＧＤＦ１５のアミノ酸１９７〜３０８を含むペプチドを認識する抗体と競合する。特に、抗体は、配列番号１によるＧＤＦ１５のアミノ酸１９７〜３０８を含むペプチドを認識する。
【０１８６】
特定の実施形態では、患者のサンプルにおけるＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後数時間以内に決定される。特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、または２４時間以内に決定される。特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後１２時間以内、特に、メトホルミン投与後６時間以内に決定される。特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後１から１２時間、２から１０時間、または４から８時間以内に決定される。
【０１８７】
特定の実施形態では、患者のサンプルにおけるＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後数日以内に決定される。特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後１、２、３、４、５、６、または７日以内に決定される。特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後１から７日以内、特に、１から５日以内、特に、１から２日以内に決定される。
【０１８８】
特定の実施形態では、患者のサンプルは、体液および組織サンプルからなる群から選択される。特に、体液サンプルは、全血、血清、血漿、痰、唾液、および尿からなる群から選択される。
【０１８９】
特定の実施形態では、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、基準と比較して上昇する。基準は、メトホルミン投与前に採取した患者の基準サンプルで測定したＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルである。特に、メトホルミン投与前の時点で採取した患者の基準サンプルでは。基準は、代表的な基準値、特に、メトホルミン投与を得ていない対象のＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルの代表的な基準値である。基準値は、メトホルミンを処方する傾向と関連する因子に対して調整される。特に、これらの因子は、年齢、性別、体重、以前の心血管事象、以前の糖尿病の診断、血清クレアチニン、ＨｂＡ１ｃ、および空腹時血漿グルコースからなる群から選択される。
【０１９０】
さらなる実施形態では、１つまたはそれ以上の因子は、ＧＤＦ１５に加えて決定される。特に、さらなる１つまたはそれ以上の因子は、
（ａ）空腹時グルコースレベル
（ｂ）食後のグルコースレベル
（ｃ）フルクトサミンレベル
（ｄ）糖化アルブミン
からなるリストから選択される。
【０１９１】
特定の実施形態では、
（ａ）ＨｂＡ１ｃ
（ｂ）無作為グルコースレベル
（ｃ）空腹時インスリンレベル
（ｄ）インスリン抵抗性の恒常性モデル評価（ＨＯＭＡＩＲ）
（ｅ）インスリン抵抗性の他の尺度
（ｆ）特に、ＨＤＬ、ＬＤＬ、総コレステロール、トリグリセリド、アポリポタンパク質Ｂからなる群から選択される脂質レベル、
（ｇ）アルブミン尿、特に、微量アルブミン尿または顕性アルブミン尿
（ｈ）クレアチニンまたは推定ＧＦＲ、
（ｉ）ＡＬＴレベル
（ｊ）ビタミンＢ１２レベル
（ｋ）コチニンレベル
（ｌ）テロメア長
（ｍ）ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ、トレフォイル因子３、アポリポタンパク質Ｂ、アンギオポエチン−２、オステオプロテゲリン、アルファ−２−マクログロブリン、肝細胞増殖因子受容体、グルタチオンＳトランスフェラーゼアルファ、クロモグラニンＡ、ＩＧＦ結合タンパク質４、テネイシン−Ｃ、セレンタンパク質Ｐ、マクロファージ由来ケモカイン、ＹＫＬ−４０、ＩＧＦ結合タンパク質２からなる群から選択される１つまたはそれ以上のバイオマーカー
（ｎ）血圧、体重、ＢＭＩ、ウエストヒップ比、ウエスト周囲、糖尿病の期間、喫煙状況、脂肪肝の画像エビデンス、トロポニンレベル、ＬＶ機能不全、心血管リスク、他の糖尿病の合併症、網膜像、および神経伝導検査からなる群から選択される１つまたはそれ以上の因子
からなるリストから選択される１つまたはそれ以上の因子がさらに検出される。
【０１９２】
第９の態様では、本発明は、メトホルミン処置から利益を得る患者の群を処置する方法であって、
（ｉ）有効量のメトホルミンを患者に投与する工程と、
（ｉｉ）患者のサンプルのＧＤＦ１５レベルを決定する工程と、
（ｉｉｉ）工程（ｉｉ）で決定したＧＤＦ１５レベルを基準のＧＤＦ１５レベルと比較する工程と
（ｉｖ）ＧＤＦ１５レベルの上昇を示すこれらの患者にメトホルミンを投与し続ける工程
とを含む方法に関する。
【０１９３】
特定の実施形態では、患者は、前糖尿病、糖尿病、糖尿病の状況下での低血糖、多嚢胞性卵巣症候群、多毛症、無月経症、非アルコール性脂肪性肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎、繁殖不能、肥満、ビタミンＢ１２欠乏症、インスリン抵抗性、およびこれらに限定されないが、狭心症、脂質異常、高血圧、がん、認知機能低下、認知症、フレイル、転倒、不安定、勃起不全、性機能障害、慢性疼痛、足部潰瘍形成、網膜症、視力減退、腎疾患または寿命の短縮などの虚血性心疾患または心筋梗塞に対する他の危険因子からなる群から選択される疾患または障害を発症するかまたはそれに罹患する危険性を有する。
【０１９４】
特定の実施形態では、患者は、前糖尿病、糖尿病、糖尿病の状況下での低血糖、多嚢胞性卵巣症候群、多毛症、無月経症、非アルコール性脂肪性肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎、繁殖不能、肥満、ビタミンＢ１２欠乏症、インスリン抵抗性、およびこれらに限定されないが、狭心症、脂質異常、および高血圧などの虚血性心疾患または心筋梗塞に対する他の危険因子からなる群から選択される疾患または障害を発症するかまたはそれに罹患する危険性を有する。
【０１９５】
特定の実施形態では、患者は、がん、認知機能低下、認知症、フレイル、転倒、不安定、勃起不全、性機能障害、慢性疼痛、足部潰瘍形成、網膜症、視力減退、腎疾患または寿命の短縮からなる群から選択される疾患または障害を発症するかまたはそれに罹患する危険性を有する。
【０１９６】
特定の実施形態では、疾患または障害は糖尿病である。特に、疾患または障害は、Ｉ型糖尿病、ＩＩ型糖尿病、または妊娠糖尿病である。
【０１９７】
特定の実施形態では、工程（ｉ）で投与されるメトホルミンの有効量は、意図した目的を達成するのに十分であり、すなわち、メトホルミン処置に反応する対象の反応を誘導するのに十分である。したがって、工程（ｉ）で投与されるメトホルミンの有効量は、メトホルミンに反応する対象のメトホルミン処置に対する反応を誘導する量である。特定の実施形態では、メトホルミンは、工程（ｉ）において、５００〜２０００ｍｇの量で、特に５００、５５０、６００、６５０、７００、７５０、８００、８５０、９００、９５０、１０００、１１００、１２００、１３００、１４００、１５００、１６００、１７００、１８００、１９００、または２０００ｍｇの量で、投与される。メトホルミンに反応する個体のメトホルミン処置に対する反応を誘導するのに十分なメトホルミンの量をどのように決定するかについては、当業者に周知されている。
【０１９８】
特定の実施形態では、工程（ｉｉ）で決定されたＧＤＦ１５は、配列番号１で与えられるアミノ酸配列を含む。実施形態では、機能的バリアントは、ネイティブＧＤＦ１５と同じ機能的特性を示す。特に、機能的バリアントは、配列番号１によるＧＤＦ１５と少なくとも８０％の配列同一性を示す。特に、機能的バリアントは、配列番号１によるＧＤＦ１５と少なくとも８５％、９０％、９５％、９７％または９９％の配列同一性を示す。特定の実施形態では、機能的バリアントは、配列番号１によるＧＤＦ１５と８０％、９０％、または９９％の配列同一性を示す。
【０１９９】
特定の実施形態では、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、工程（ｉｉ）で、当技術分野でよく知られた任意の方法により決定される。特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、工程（ｉｉ）で、ＥＬＩＳＡ、ウエスタンブロット、免疫沈降、ＨＰＬＣ、マイクロアレイ、質量分析、およびシークエンシングからなる群から選択される方法により決定される。特定の実施形態では、ＧＤＦ１５レベルは、免疫検出アッセイを使用して決定される。
【０２００】
特定の実施形態では、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、工程（ｉｉ）で、ＧＤＦ１５結合分子を使用して、直接的または間接的に決定される。特に、ＧＤＦ１５レベルは、ＧＤＦ１５に特異的な抗体を使用して決定される。特に、ＧＤＦ１５レベルは、ＧＤＦ１５に特異的なモノクローナル抗体を使用して決定される。実施形態では、抗体は、ＧＤＦ１５のアミノ酸１９７〜３０８を含むペプチドを認識する抗体と競合する。特に、抗体は、配列番号１によるＧＤＦ１５のアミノ酸１９７〜３０８を含むペプチドを認識する抗体と競合する。特に、抗体は、配列番号１によるＧＤＦ１５のアミノ酸１９７〜３０８を含むペプチドを認識する。
【０２０１】
特定の実施形態では、患者のサンプルにおけるＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後数時間以内に決定される。特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、または２４時間以内に決定される。特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後１２時間以内、特に、メトホルミン投与後６時間以内に決定される。特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後１から１２時間、２から１０時間、または４から８時間以内に決定される。
【０２０２】
特定の実施形態では、患者のサンプルにおけるＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後数日以内に決定される。特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後１、２、３、４、５、６、または７日以内に決定される。特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後１から７日以内、特に、１から５日以内、特に、１から２日以内に決定される。
【０２０３】
特定の実施形態では、患者のサンプルは、体液および組織サンプルからなる群から選択される。特に、体液サンプルは、全血、血清、血漿、痰、唾液、および尿からなる群から選択される。
【０２０４】
さらなる実施形態では、１つまたはそれ以上の因子は、ＧＤＦ１５に加えて、場合による工程（ｖ）で決定される。特に、さらなる１つまたはそれ以上の因子は、
（ａ）空腹時グルコースレベル
（ｂ）食後のグルコースレベル
（ｃ）フルクトサミンレベル
（ｄ）糖化アルブミン
からなるリストから選択される。
【０２０５】
特定の実施形態では、
（ａ）ＨｂＡ１ｃ
（ｂ）無作為グルコースレベル
（ｃ）空腹時インスリンレベル
（ｄ）インスリン抵抗性の恒常性モデル評価（ＨＯＭＡＩＲ）
（ｅ）インスリン抵抗性の他の尺度
（ｆ）特に、ＨＤＬ、ＬＤＬ、総コレステロール、トリグリセリド、アポリポタンパク質Ｂからなる群から選択される脂質レベル、
（ｇ）アルブミン尿、特に、微量アルブミン尿または顕性アルブミン尿
（ｈ）クレアチニンまたは推定ＧＦＲ、
（ｉ）ＡＬＴレベル
（ｊ）ビタミンＢ１２レベル
（ｋ）コチニンレベル
（ｌ）テロメア長
（ｍ）ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ、トレフォイル因子３、アポリポタンパク質Ｂ、アンギオポエチン−２、オステオプロテゲリン、アルファ−２−マクログロブリン、肝細胞増殖因子受容体、グルタチオンＳトランスフェラーゼアルファ、クロモグラニンＡ、ＩＧＦ結合タンパク質４、テネイシン−Ｃ、セレンタンパク質Ｐ、マクロファージ由来ケモカイン、ＹＫＬ−４０、ＩＧＦ結合タンパク質２からなる群から選択される１つまたはそれ以上のバイオマーカー
（ｎ）血圧、体重、ＢＭＩ、ウエストヒップ比、ウエスト周囲、糖尿病の期間、喫煙状況、脂肪肝の画像エビデンス、トロポニンレベル、ＬＶ機能不全、心血管リスク、他の糖尿病の合併症、網膜像、および神経伝導検査からなる群から選択される１つまたはそれ以上の因子
からなるリストから選択される１つまたはそれ以上の因子は、場合による工程（ｖｉ）で、特に、工程（ｉ）から（ｉｉｉ）または（ｖ）の方法で得られた結果を確認するために検出される。
【０２０６】
場合による工程（ｖ）または（ｖｉ）で決定される任意のこれらのさらなる因子は、工程（ｉｉｉ）の後、かつ工程（ｉｖ）の前に決定される。
【０２０７】
特定の実施形態では、工程（ｉｖ）で、治療有効量のメトホルミンは、ＧＤＦ１５レベルの上昇を示すこれらの患者に投与される。特定の実施形態では、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベル、特に、発現レベルは、少なくとも２５％上昇し、すなわち、ＧＤＦ１５またはそのバリアントのレベルは、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、または２００％上昇する。特定の実施形態では、ＧＤＦ１５レベルは、少なくとも５０％、特に、少なくとも７５％または少なくとも１００％上昇する。特定の実施形態では、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、２５％から２００％、特に、３０％から１５０％、特に、５０％から１００％上昇する。
【０２０８】
特定の実施形態では、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、基準と比較して上昇する。基準は、メトホルミン投与前に採取した患者の基準サンプルで測定したＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルである。特に、メトホルミン投与前の時点で採取した患者の基準サンプルでは。基準は、代表的な基準値、特に、メトホルミン投与を得ていない対象のＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルの代表的な基準値である。基準値は、メトホルミンを処方する傾向と関連する因子に対して調整される。特に、これらの因子は、年齢、性別、体重、以前の心血管事象、以前の糖尿病の診断、血清クレアチニン、ＨｂＡ１ｃ、および空腹時血漿グルコースからなる群から選択される。
【０２０９】
特定の実施形態では、患者は、本発明から利益を得る個体である。特に、患者は、哺乳動物、爬虫類動物またはトリからなる群から選択される。特定の実施形態では、患者は、実験動物（例えば、マウス、ラットまたはウサギ）、飼育動物（例えば、モルモット、ウサギ、ウマ、ロバ、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ブタ、ニワトリ、アヒル、ラクダ、ネコ、イヌ、ウミガメ、カメ、ヘビ、またはトカゲを含む）、またはチンパンジー、ボノボ、ゴリラ、およびヒトを含む霊長動物からなる群から選択される。特に、患者はヒトである。
【０２１０】
第１０の態様では、本発明は、メトホルミン処置から利益を得ない患者または患者の群を処置する方法であって、
（ｉ）有効量のメトホルミンを患者に投与する工程と、
（ｉｉ）患者のサンプルのＧＤＦ１５レベルを決定する工程と、
（ｉｉｉ）工程（ｉｉ）で決定したＧＤＦ１５レベルを基準のＧＤＦ１５レベルと比較する工程と
（ｉｖ）ＧＤＦ１５レベルの低下を示すこれらの患者へのメトホルミン投与を中断する工程と、場合により、
（ｖ）ＧＤＦ１５レベルの低下を示すこれらの患者に代替処置を投与する工程
とを含む方法に関する。
【０２１１】
特定の実施形態では、患者は、前糖尿病、糖尿病、糖尿病の状況下での低血糖、多嚢胞性卵巣症候群、多毛症、無月経症、非アルコール性脂肪性肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎、繁殖不能、肥満、ビタミンＢ１２欠乏症、インスリン抵抗性、およびこれらに限定されないが、狭心症、脂質異常、高血圧、がん、認知機能低下、認知症、フレイル、転倒、不安定、勃起不全、性機能障害、慢性疼痛、足部潰瘍形成、網膜症、視力減退、腎疾患または寿命の短縮などの虚血性心疾患または心筋梗塞に対する他の危険因子からなる群から選択される疾患または障害を発症するかまたはそれに罹患する危険性を有する。
【０２１２】
特定の実施形態では、患者は、前糖尿病、糖尿病、糖尿病の状況下での低血糖、多嚢胞性卵巣症候群、多毛症、無月経症、非アルコール性脂肪性肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎、繁殖不能、肥満、ビタミンＢ１２欠乏症、インスリン抵抗性、およびこれらに限定されないが、狭心症、脂質異常、および高血圧などの虚血性心疾患または心筋梗塞に対する他の危険因子からなる群から選択される疾患または障害を発症するかまたはそれに罹患する危険性を有する。
【０２１３】
特定の実施形態では、患者は、がん、認知機能低下、認知症、フレイル、転倒、不安定、勃起不全、性機能障害、慢性疼痛、足部潰瘍形成、網膜症、視力減退、腎疾患または寿命の短縮からなる群から選択される疾患または障害を発症するかまたはそれに罹患する危険性を有する。
【０２１４】
特定の実施形態では、疾患または障害は糖尿病である。特に、疾患または障害は、Ｉ型糖尿病、ＩＩ型糖尿病、または妊娠糖尿病である。
【０２１５】
特定の実施形態では、工程（ｉ）で投与されるメトホルミンの有効量は、意図した目的を達成するのに十分であり、すなわち、メトホルミン処置に反応する対象の反応を誘導するのに十分である。したがって、工程（ｉ）で投与されるメトホルミンの有効量は、メトホルミンに反応する対象のメトホルミン処置に対する反応を誘導する量である。特定の実施形態では、メトホルミンは、工程（ｉ）において、５００〜２０００ｍｇの量で、特に５００、５５０、６００、６５０、７００、７５０、８００、８５０、９００、９５０、１０００、１１００、１２００、１３００、１４００、１５００、１６００、１７００、１８００、１９００、または２０００ｍｇの量で、投与される。メトホルミンに反応する個体のメトホルミン処置に対する反応を誘導するのに十分なメトホルミンの量をどのように決定するかについては、当業者に周知されている。
【０２１６】
特定の実施形態では、工程（ｉｉ）で決定されたＧＤＦ１５は、配列番号１で与えられるアミノ酸配列を含む。実施形態では、機能的バリアントは、ネイティブＧＤＦ１５と同じ機能的特性を示す。特に、機能的バリアントは、配列番号１によるＧＤＦ１５と少なくとも８０％の配列同一性を示す。特に、機能的バリアントは、配列番号１によるＧＤＦ１５と少なくとも８５％、９０％、９５％、９７％または９９％の配列同一性を示す。特定の実施形態では、機能的バリアントは、配列番号１によるＧＤＦ１５と８０％、９０％、または９９％の配列同一性を示す。
【０２１７】
特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、工程（ｉｉ）で、ＥＬＩＳＡ、ウエスタンブロット、免疫沈降、ＨＰＬＣ、マイクロアレイ、質量分析、およびシークエンシングからなる群から選択される方法により決定される。特定の実施形態では、ＧＤＦ１５レベルは、免疫検出アッセイを使用して決定される。
【０２１８】
特定の実施形態では、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、工程（ｉｉ）で、ＧＤＦ１５結合分子を使用して、直接的または間接的に決定される。特に、ＧＤＦ１５レベルは、ＧＤＦ１５に特異的な抗体を使用して決定される。特に、ＧＤＦ１５レベルは、ＧＤＦ１５に特異的なモノクローナル抗体を使用して決定される。実施形態では、抗体は、ＧＤＦ１５のアミノ酸１９７〜３０８を含むペプチドを認識する抗体と競合する。特に、抗体は、配列番号１によるＧＤＦ１５のアミノ酸１９７〜３０８を含むペプチドを認識する抗体と競合する。特に、抗体は、配列番号１によるＧＤＦ１５のアミノ酸１９７〜３０８を含むペプチドを認識する。
【０２１９】
特定の実施形態では、患者のサンプルにおけるＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後数時間以内に決定される。特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、または２４時間以内に決定される。特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後１２時間以内、特に、メトホルミン投与後６時間以内に決定される。特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後１から１２時間、２から１０時間、または４から８時間以内に決定される。
【０２２０】
特定の実施形態では、患者のサンプルにおけるＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後数日以内に決定される。特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後１、２、３、４、５、６、または７日以内に決定される。特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後１から７日以内、特に、１から５日以内、特に、１から２日以内に決定される。
【０２２１】
特定の実施形態では、患者のサンプルは、体液および組織サンプルからなる群から選択される。特に、体液サンプルは、全血、血清、血漿、痰、唾液、および尿からなる群から選択される。
【０２２２】
さらなる実施形態では、１つまたはそれ以上の因子は、ＧＤＦ１５に加えて、場合による工程（ｖｉ）で決定される。特に、さらなる１つまたはそれ以上の因子は、
（ｅ）空腹時グルコースレベル
（ｆ）食後のグルコースレベル
（ｇ）フルクトサミンレベル
（ｈ）糖化アルブミン
からなるリストから選択される。
【０２２３】
特定の実施形態では、
（ｏ）ＨｂＡ１ｃ
（ｐ）無作為グルコースレベル
（ｑ）空腹時インスリンレベル
（ｒ）インスリン抵抗性の恒常性モデル評価（ＨＯＭＡＩＲ）
（ｓ）インスリン抵抗性の他の尺度
（ｔ）特に、ＨＤＬ、ＬＤＬ、総コレステロール、トリグリセリド、アポリポタンパク質Ｂからなる群から選択される脂質レベル、
（ｕ）アルブミン尿、特に、微量アルブミン尿または顕性アルブミン尿
（ｖ）クレアチニンまたは推定ＧＦＲ、
（ｗ）ＡＬＴレベル
（ｘ）ビタミンＢ１２レベル
（ｙ）コチニンレベル
（ｚ）テロメア長
（ａａ）ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ、トレフォイル因子３、アポリポタンパク質Ｂ、アンギオポエチン−２、オステオプロテゲリン、アルファ−２−マクログロブリン、肝細胞増殖因子受容体、グルタチオンＳトランスフェラーゼアルファ、クロモグラニンＡ、ＩＧＦ結合タンパク質４、テネイシン−Ｃ、セレンタンパク質Ｐ、マクロファージ由来ケモカイン、ＹＫＬ−４０、ＩＧＦ結合タンパク質２からなる群から選択される１つまたはそれ以上のバイオマーカー
（ｂｂ）血圧、体重、ＢＭＩ、ウエストヒップ比、ウエスト周囲、糖尿病の期間、喫煙状況、脂肪肝の画像エビデンス、トロポニンレベル、ＬＶ機能不全、心血管リスク、他の糖尿病の合併症、網膜像、および神経伝導検査からなる群から選択される１つまたはそれ以上の因子
からなるリストから選択される１つまたはそれ以上の因子は、場合による工程（ｖｉｉ）で、特に、工程（ｉ）から（ｉｖ）までの方法で得られた結果を確認するために検出される。
【０２２４】
特定の実施形態では、工程（ｉｖ）で、メトホルミン投与は、ＧＤＦ１５レベルの上昇を示さないこれらの患者、特に、ＧＤＦ１５レベルの未変更または低下を示す患者で中断される。特定の実施形態では、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、基準と比較して低下する。基準は、メトホルミン投与前に採取した患者の基準サンプルで測定したＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルである。特に、メトホルミン投与前の時点で採取した患者の基準サンプルでは。基準は、代表的な基準値、特に、メトホルミン投与を得ていない対象のＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルの代表的な基準値である。基準値は、メトホルミンを処方する傾向と関連する因子に対して調整される。特に、これらの因子は、年齢、性別、体重、以前の心血管事象、以前の糖尿病の診断、血清クレアチニン、ＨｂＡ１ｃ、および空腹時血漿グルコースからなる群から選択される。
【０２２５】
特定の実施形態では、患者は、哺乳動物、爬虫類動物またはトリからなる群から選択される。特定の実施形態では、患者は、実験動物（例えば、マウス、ラットまたはウサギ）、飼育動物（例えば、モルモット、ウサギ、ウマ、ロバ、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ブタ、ニワトリ、アヒル、ラクダ、ネコ、イヌ、ウミガメ、カメ、ヘビ、またはトカゲを含む）、またはチンパンジー、ボノボ、ゴリラ、およびヒトを含む霊長動物からなる群から選択される。特に、患者はヒトである。
【０２２６】
特定の実施形態では、場合による工程（ｖ）の代替処置が、スルホニル尿素、ドーパミンアゴニスト、ＤＰＰ−４阻害剤、グルカゴン様ペプチド、メグリチニド、アミリン模倣体、アルファ−グルコシダーゼ阻害剤、ＳＧＬＴ２阻害剤、およびチアゾリジンジオンからなる群から選択される。
【０２２７】
第１１の態様では、本発明は、メトホルミン処置から利益を得ない患者を特定する方法であって、
（ｉ）有効量のメトホルミンを患者に投与する工程と、
（ｉｉ）患者のサンプルのＧＤＦ１５レベルを決定する工程と、
（ｉｉｉ）工程（ｉｉ）で決定したＧＤＦ１５レベルを基準のＧＤＦ１５レベルと比較する工程であって、ＧＤＦ１５レベルの未変更または低下がメトホルミン投与に反応しない患者を示す工程
とを含む方法に関する。
【０２２８】
特定の実施形態では、患者は、前糖尿病、糖尿病、糖尿病の状況下での低血糖、多嚢胞性卵巣症候群、多毛症、無月経症、非アルコール性脂肪性肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎、繁殖不能、肥満、ビタミンＢ１２欠乏症、インスリン抵抗性、およびこれらに限定されないが、狭心症、脂質異常、高血圧、がん、認知機能低下、認知症、フレイル、転倒、不安定、勃起不全、性機能障害、慢性疼痛、足部潰瘍形成、網膜症、視力減退、腎疾患または寿命の短縮などの虚血性心疾患または心筋梗塞に対する他の危険因子からなる群から選択される疾患または障害を発症するかまたはそれに罹患する危険性を有する。
【０２２９】
特定の実施形態では、患者は、前糖尿病、糖尿病、糖尿病の状況下での低血糖、多嚢胞性卵巣症候群、多毛症、無月経症、非アルコール性脂肪性肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎、繁殖不能、肥満、ビタミンＢ１２欠乏症、インスリン抵抗性、およびこれらに限定されないが、狭心症、脂質異常、および高血圧などの虚血性心疾患または心筋梗塞に対する他の危険因子からなる群から選択される疾患または障害を発症するかまたはそれに罹患する危険性を有する。
【０２３０】
特定の実施形態では、患者は、がん、認知機能低下、認知症、フレイル、転倒、不安定、勃起不全、性機能障害、慢性疼痛、足部潰瘍形成、網膜症、視力減退、腎疾患または寿命の短縮からなる群から選択される疾患または障害を発症するかまたはそれに罹患する危険性を有する。
【０２３１】
特定の実施形態では、疾患または障害は糖尿病である。特に、疾患または障害は、Ｉ型糖尿病、ＩＩ型糖尿病、または妊娠糖尿病である。
【０２３２】
特定の実施形態では、工程（ｉ）で投与されるメトホルミンの有効量は、意図した目的を達成するのに十分であり、すなわち、メトホルミン処置に反応する対象の反応を誘導するのに十分である。したがって、工程（ｉ）で投与されるメトホルミンの有効量は、メトホルミンに反応する対象のメトホルミン処置に対する反応を誘導する量である。特定の実施形態では、メトホルミンは、工程（ｉ）において、５００〜２０００ｍｇの量で、特に５００、５５０、６００、６５０、７００、７５０、８００、８５０、９００、９５０、１０００、１１００、１２００、１３００、１４００、１５００、１６００、１７００、１８００、１９００、または２０００ｍｇの量で、投与される。メトホルミンに反応する個体のメトホルミン処置に対する反応を誘導するのに十分なメトホルミンの量をどのように決定するかについては、当業者に周知されている。
【０２３３】
特定の実施形態では、工程（ｉｉ）で決定されたＧＤＦ１５は、配列番号１で与えられるアミノ酸配列を含む。実施形態では、機能的バリアントは、ネイティブＧＤＦ１５と同じ機能的特性を示す。特に、機能的バリアントは、配列番号１によるＧＤＦ１５と少なくとも８０％の配列同一性を示す。特に、機能的バリアントは、配列番号１によるＧＤＦ１５と少なくとも８５％、９０％、９５％、９７％または９９％の配列同一性を示す。特定の実施形態では、機能的バリアントは、配列番号１によるＧＤＦ１５と８０％、９０％、または９９％の配列同一性を示す。
【０２３４】
特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、工程（ｉｉ）で、ＥＬＩＳＡ、ウエスタンブロット、免疫沈降、ＨＰＬＣ、マイクロアレイ、質量分析、およびシークエンシングからなる群から選択される方法により決定される。特定の実施形態では、ＧＤＦ１５レベルは、免疫検出アッセイを使用して決定される。
【０２３５】
特定の実施形態では、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、工程（ｉｉ）で、ＧＤＦ１５結合分子を使用して、直接的または間接的に決定される。特に、ＧＤＦ１５レベルは、ＧＤＦ１５に特異的な抗体を使用して決定される。特に、ＧＤＦ１５レベルは、ＧＤＦ１５に特異的なモノクローナル抗体を使用して決定される。実施形態では、抗体は、ＧＤＦ１５のアミノ酸１９７〜３０８を含むペプチドを認識する抗体と競合する。特に、抗体は、配列番号１によるＧＤＦ１５のアミノ酸１９７〜３０８を含むペプチドを認識する抗体と競合する。特に、抗体は、配列番号１によるＧＤＦ１５のアミノ酸１９７〜３０８を含むペプチドを認識する。
【０２３６】
特定の実施形態では、患者のサンプルにおけるＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後数時間以内に決定される。特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、または２４時間以内に決定される。特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後１２時間以内、特に、メトホルミン投与後６時間以内に決定される。特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後１から１２時間、２から１０時間、または４から８時間以内に決定される。
【０２３７】
特定の実施形態では、患者のサンプルにおけるＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後数日以内に決定される。特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後１、２、３、４、５、６、または７日以内に決定される。特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後１から７日以内、特に、１から５日以内、特に、１から２日以内に決定される。
【０２３８】
特定の実施形態では、患者のサンプルは、体液および組織サンプルからなる群から選択される。特に、体液サンプルは、全血、血清、血漿、痰、唾液、および尿からなる群から選択される。
【０２３９】
さらなる実施形態では、１つまたはそれ以上の因子は、ＧＤＦ１５に加えて、場合による工程（ｉｖ）で決定される。特に、さらなる１つまたはそれ以上の因子は、
（ｉ）空腹時グルコースレベル
（ｊ）食後のグルコースレベル
（ｋ）フルクトサミンレベル
（ｌ）糖化アルブミン
からなるリストから選択される。
【０２４０】
特定の実施形態では、
（ｃｃ）ＨｂＡ１ｃ
（ｄｄ）無作為グルコースレベル
（ｅｅ）空腹時インスリンレベル
（ｆｆ）インスリン抵抗性の恒常性モデル評価（ＨＯＭＡＩＲ）
（ｇｇ）インスリン抵抗性の他の尺度
（ｈｈ）特に、ＨＤＬ、ＬＤＬ、総コレステロール、トリグリセリド、アポリポタンパク質Ｂからなる群から選択される脂質レベル、
（ｉｉ）アルブミン尿、特に、微量アルブミン尿または顕性アルブミン尿
（ｊｊ）クレアチニンまたは推定ＧＦＲ、
（ｋｋ）ＡＬＴレベル
（ｌｌ）ビタミンＢ１２レベル
（ｍｍ）コチニンレベル
（ｎｎ）テロメア長
（ｏｏ）ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ、トレフォイル因子３、アポリポタンパク質Ｂ、アンギオポエチン−２、オステオプロテゲリン、アルファ−２−マクログロブリン、肝細胞増殖因子受容体、グルタチオンＳトランスフェラーゼアルファ、クロモグラニンＡ、ＩＧＦ結合タンパク質４、テネイシン−Ｃ、セレンタンパク質Ｐ、マクロファージ由来ケモカイン、ＹＫＬ−４０、ＩＧＦ結合タンパク質２からなる群から選択される１つまたはそれ以上のバイオマーカー
（ｐｐ）血圧、体重、ＢＭＩ、ウエストヒップ比、ウエスト周囲、糖尿病の期間、喫煙状況、脂肪肝の画像エビデンス、トロポニンレベル、ＬＶ機能不全、心血管リスク、他の糖尿病の合併症、網膜像、および神経伝導検査からなる群から選択される１つまたはそれ以上の因子
からなるリストから選択される１つまたはそれ以上の因子は、場合による工程（ｖ）で、特に、工程（ｉ）から（ｉｉｉ）までの方法で得られた結果を確認するために検出される。
【０２４１】
特定の実施形態では、工程（ｉｖ）で、メトホルミン投与は、ＧＤＦ１５レベルの上昇を示さないこれらの患者、特に、ＧＤＦ１５レベルの未変更または低下を示す患者で中断される。特定の実施形態では、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、基準と比較して低下する。基準は、メトホルミン投与前に採取した患者の基準サンプルで測定したＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルである。特に、メトホルミン投与前の時点で採取した患者の基準サンプルでは。基準は、代表的な基準値、特に、メトホルミン投与を得ていない対象のＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルの代表的な基準値である。基準値は、メトホルミンを処方する傾向と関連する因子に対して調整される。特に、これらの因子は、年齢、性別、体重、以前の心血管事象、以前の糖尿病の診断、血清クレアチニン、ＨｂＡ１ｃ、および空腹時血漿グルコースからなる群から選択される。
【０２４２】
特定の実施形態では、患者は、哺乳動物、爬虫類動物またはトリからなる群から選択される。特定の実施形態では、患者は、実験動物（例えば、マウス、ラットまたはウサギ）、飼育動物（例えば、モルモット、ウサギ、ウマ、ロバ、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ブタ、ニワトリ、アヒル、ラクダ、ネコ、イヌ、ウミガメ、カメ、ヘビ、またはトカゲを含む）、またはチンパンジー、ボノボ、ゴリラ、およびヒトを含む霊長動物からなる群から選択される。特に、患者はヒトである。
【０２４３】
第１２の態様では、本発明は、患者を処置するのに使用するためのスルホニル尿素、ドーパミンアゴニスト、ＤＰＰ−４阻害剤、グルカゴン様ペプチド、メグリチニド、アミリン模倣体、アルファ−グルコシダーゼ阻害剤、ＳＧＬＴ２阻害剤、および／またはチアゾリジンジオンであって、患者が、メトホルミン処置に反応してＧＤＦ１５レベルの未変更または低下を示し、患者が、前糖尿病、糖尿病、糖尿病の状況下での低血糖、多嚢胞性卵巣症候群、多毛症、無月経症、非アルコール性脂肪性肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎、繁殖不能、肥満、ビタミンＢ１２欠乏症、インスリン抵抗性、およびこれらに限定されないが、狭心症、脂質異常、高血圧、がん、認知機能低下、認知症、フレイル、転倒、不安定、勃起不全、性機能障害、慢性疼痛、足部潰瘍形成、網膜症、視力減退、腎疾患および寿命の短縮などの虚血性心疾患または心筋梗塞に対する他の危険因子からなる群から選択される疾患または障害を発症するかまたはそれに罹患する危険性を有する、スルホニル尿素、ドーパミンアゴニスト、ＤＰＰ−４阻害剤、グルカゴン様ペプチド、メグリチニド、アミリン模倣体、アルファ−グルコシダーゼ阻害剤、ＳＧＬＴ２阻害剤、および／またはチアゾリジンジオンに関する。
【０２４４】
特定の実施形態では、患者は、前糖尿病、糖尿病、糖尿病の状況下での低血糖、多嚢胞性卵巣症候群、多毛症、無月経症、非アルコール性脂肪性肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎、繁殖不能、肥満、ビタミンＢ１２欠乏症、インスリン抵抗性、およびこれらに限定されないが、狭心症、脂質異常、および高血圧などの虚血性心疾患または心筋梗塞に対する他の危険因子からなる群から選択される疾患または障害を発症するかまたはそれに罹患する危険性を有する。
【０２４５】
特定の実施形態では、患者は、がん、認知機能低下、認知症、フレイル、転倒、不安定、勃起不全、性機能障害、慢性疼痛、足部潰瘍形成、網膜症、視力減退、腎疾患または寿命の短縮からなる群から選択される疾患または障害を発症するかまたはそれに罹患する危険性を有する。
【０２４６】
特定の実施形態では、疾患または障害は糖尿病である。特に、疾患または障害は、Ｉ型糖尿病、ＩＩ型糖尿病、または妊娠糖尿病である。
【０２４７】
特定の実施形態では、ＧＤＦ１５は、配列番号１で与えられるアミノ酸配列を含む。実施形態では、機能的バリアントは、ネイティブＧＤＦ１５と同じ機能的特性を示す。特に、機能的バリアントは、配列番号１によるＧＤＦ１５と少なくとも８０％の配列同一性を示す。特に、機能的バリアントは、配列番号１によるＧＤＦ１５と少なくとも８５％、９０％、９５％、９７％または９９％の配列同一性を示す。特定の実施形態では、機能的バリアントは、配列番号１によるＧＤＦ１５と８０％、９０％、または９９％の配列同一性を示す。
【０２４８】
特定の実施形態では、ＧＤＦ１５レベルは少なくとも２５％上昇しない。特に、ＧＤＦ１５レベルは未変更であるか低下する。実施形態では、患者は、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントの発現レベルの未変更または低下を示す。
【０２４９】
特定の実施形態では、ＧＤＦ１５レベルは、基準と比較して上昇しない。基準は、メトホルミン投与前の患者の基準サンプルで測定したＧＤＦ１５レベルである。特に、メトホルミン投与前の時点で採取した患者の基準サンプルでは。基準は、代表的な基準値、特に、メトホルミン投与を得ていない対象のＧＤＦ１５レベルの代表的な基準値である。基準値は、メトホルミンを処方する傾向と関連する因子に対して調整される。特に、これらの因子は、年齢、性別、体重、以前の心血管事象、以前の糖尿病の診断、血清クレアチニン、ＨｂＡ１ｃ、および空腹時血漿グルコースからなる群から選択される。
【０２５０】
特定の実施形態では、患者は、本発明から利益を得る個体である。特に、患者は、哺乳動物、爬虫類動物またはトリからなる群から選択される。特定の実施形態では、患者は、実験動物（例えば、マウス、ラットまたはウサギ）、飼育動物（例えば、モルモット、ウサギ、ウマ、ロバ、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ブタ、ニワトリ、アヒル、ラクダ、ネコ、イヌ、ウミガメ、カメ、ヘビ、またはトカゲを含む）、またはチンパンジー、ボノボ、ゴリラ、およびヒトを含む霊長動物からなる群から選択される。特に、患者はヒトである。
【０２５１】
第１３の態様では、本発明は、患者がメトホルミン投与に反応するか否かを決定するための時間を短縮する方法であって、
（ｉ）有効量のメトホルミンを患者に投与する工程と、
（ｉｉ）患者のサンプルのＧＤＦ１５レベルを決定する工程と、
（ｉｉｉ）工程（ｉｉ）で決定したＧＤＦ１５レベルを基準のＧＤＦ１５レベルと比較する工程
とを含み、
ＧＤＦ１５レベルの上昇が、メトホルミン投与に反応する患者を示し、ＧＤＦ１５レベルの未変更または低下がメトホルミン投与に反応しない患者を示す方法に関する。
【０２５２】
特定の実施形態では、患者がメトホルミン投与に反応するか否かを決定するための時間は４週間未満である。特定の実施形態では、患者がメトホルミン投与に反応するか否かを決定するための時間は１週間未満である。特定の実施形態では、患者がメトホルミン投与に反応するか否かを決定するための時間は１日未満である。特定の実施形態では、患者がメトホルミン投与に反応するか否かを決定するための時間は１２時間未満である。特定の実施形態では、患者がメトホルミン投与に反応するか否かを決定するための時間は８時間以内である。
【０２５３】
特定の実施形態では、患者がメトホルミン投与に反応するか否かを決定するための時間は４時間から４週間の間である。特定の実施形態では、患者がメトホルミン投与に反応するか否かを決定するための時間は４時間から１週間の間である。特定の実施形態では、患者がメトホルミン投与に反応するか否かを決定するための時間は４時間から１２時間の間である。特定の実施形態では、患者がメトホルミン投与に反応するか否かを決定するための時間は４時間から８時間の間である。
【０２５４】
特定の実施形態では、患者がメトホルミン投与に反応するか否かを決定するための時間は４週間までに低減される。特定の実施形態では、患者がメトホルミン投与に反応するか否かを決定するための時間は１週間までに低減される。
【０２５５】
特定の実施形態では、患者がメトホルミン投与に反応するか否かを決定するための時間は１日までに低減される。特定の実施形態では、患者がメトホルミン投与に反応するか否かを決定するための時間は１２時間までに低減される。特定の実施形態では、患者がメトホルミン投与に反応するか否かを決定するための時間は８時間までに低減される。特定の実施形態では、患者がメトホルミン投与に反応するか否かを決定するための時間は６時間までに低減される。
【０２５６】
特定の実施形態では、患者がメトホルミン投与に反応するか否かを決定するための時間は４時間から４週間までに低減される。特定の実施形態では、患者がメトホルミン投与に反応するか否かを決定するための時間は４時間から１週間までに低減される。特定の実施形態では、患者がメトホルミン投与に反応するか否かを決定するための時間は４時間から１２時間までに低減される。特定の実施形態では、患者がメトホルミン投与に反応するか否かを決定するための時間は４時間から８時間までに低減される。
【０２５７】
特定の実施形態では、患者がメトホルミン投与に反応するか否かを決定するための時間はＨｂＡ１ｃ測定と比較して低減される。
【０２５８】
特定の実施形態では、患者は、前糖尿病、糖尿病、糖尿病の状況下での低血糖、多嚢胞性卵巣症候群、多毛症、無月経症、非アルコール性脂肪性肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎、繁殖不能、肥満、ビタミンＢ１２欠乏症、インスリン抵抗性、およびこれらに限定されないが、狭心症、脂質異常、高血圧、がん、認知機能低下、認知症、フレイル、転倒、不安定、勃起不全、性機能障害、慢性疼痛、足部潰瘍形成、網膜症、視力減退、腎疾患または寿命の短縮などの虚血性心疾患または心筋梗塞に対する他の危険因子からなる群から選択される疾患または障害を発症するかまたはそれに罹患する危険性を有する。
【０２５９】
特定の実施形態では、患者は、前糖尿病、糖尿病、糖尿病の状況下での低血糖、多嚢胞性卵巣症候群、多毛症、無月経症、非アルコール性脂肪性肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎、繁殖不能、肥満、ビタミンＢ１２欠乏症、インスリン抵抗性、およびこれらに限定されないが、狭心症、脂質異常、および高血圧などの虚血性心疾患または心筋梗塞に対する他の危険因子からなる群から選択される疾患または障害を発症するかまたはそれに罹患する危険性を有する。
【０２６０】
特定の実施形態では、患者は、がん、認知機能低下、認知症、フレイル、転倒、不安定、勃起不全、性機能障害、慢性疼痛、足部潰瘍形成、網膜症、視力減退、腎疾患または寿命の短縮からなる群から選択される疾患または障害を発症するかまたはそれに罹患する危険性を有する。
【０２６１】
特定の実施形態では、疾患または障害は糖尿病である。特に、疾患または障害は、Ｉ型糖尿病、ＩＩ型糖尿病、または妊娠糖尿病である。
【０２６２】
特定の実施形態では、工程（ｉ）で投与されるメトホルミンの有効量は、意図した目的を達成するのに十分であり、すなわち、メトホルミン処置に反応する対象の反応を誘導するのに十分である。したがって、工程（ｉ）で投与されるメトホルミンの有効量は、メトホルミンに反応する対象のメトホルミン処置に対する反応を誘導する量である。特定の実施形態では、メトホルミンは、工程（ｉ）において、５００〜２０００ｍｇの量で、特に５００、５５０、６００、６５０、７００、７５０、８００、８５０、９００、９５０、１０００、１１００、１２００、１３００、１４００、１５００、１６００、１７００、１８００、１９００、または２０００ｍｇの量で、投与される。メトホルミンに反応する個体のメトホルミン処置に対する反応を誘導するのに十分なメトホルミンの量をどのように決定するかについては、当業者に周知されている。
【０２６３】
特定の実施形態では、工程（ｉｉ）で決定されたＧＤＦ１５は、配列番号１で与えられるアミノ酸配列を含む。実施形態では、機能的バリアントは、ネイティブＧＤＦ１５と同じ機能的特性を示す。特に、機能的バリアントは、配列番号１によるＧＤＦ１５と少なくとも８０％の配列同一性を示す。特に、機能的バリアントは、配列番号１によるＧＤＦ１５と少なくとも８５％、９０％、９５％、９７％または９９％の配列同一性を示す。特定の実施形態では、機能的バリアントは、配列番号１によるＧＤＦ１５と８０％、９０％、または９９％の配列同一性を示す。
【０２６４】
特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、工程（ｉｉ）で、ＥＬＩＳＡ、ウエスタンブロット、免疫沈降、ＨＰＬＣ、マイクロアレイ、質量分析、およびシークエンシングからなる群から選択される方法により決定される。特定の実施形態では、ＧＤＦ１５レベルは、免疫検出アッセイを使用して決定される。
【０２６５】
特定の実施形態では、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、工程（ｉｉ）で、ＧＤＦ１５結合分子を使用して、直接的または間接的に決定される。特に、ＧＤＦ１５レベルは、ＧＤＦ１５に特異的な抗体を使用して決定される。特に、ＧＤＦ１５レベルは、ＧＤＦ１５に特異的なモノクローナル抗体を使用して決定される。特に、抗体は、配列番号１によるＧＤＦ１５のアミノ酸１９７〜３０８を含むペプチドを認識する抗体と競合する。特に、抗体は、配列番号１によるＧＤＦ１５のアミノ酸１９７〜３０８を含むペプチドを認識する。
【０２６６】
特定の実施形態では、患者のサンプルにおけるＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後数時間以内に決定される。特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、または２４時間以内に決定される。特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後１２時間以内、特に、メトホルミン投与後６時間以内に決定される。特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後１から１２時間、２から１０時間、または４から８時間以内に決定される。
【０２６７】
特定の実施形態では、患者のサンプルにおけるＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後数日以内に決定される。特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後１、２、３、４、５、６、または７日以内に決定される。特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後１から７日以内、特に、１から５日以内、特に、１から２日以内に決定される。
【０２６８】
特定の実施形態では、患者のサンプルは、体液および組織サンプルからなる群から選択される。特に、体液サンプルは、全血、血清、血漿、痰、唾液、および尿からなる群から選択される。
【０２６９】
さらなる実施形態では、１つまたはそれ以上の因子は、ＧＤＦ１５に加えて、場合による工程（ｉｖ）で決定される。特に、さらなる１つまたはそれ以上の因子は、
（ａ）空腹時グルコースレベル
（ｂ）食後のグルコースレベル
（ｃ）フルクトサミンレベル
（ｄ）糖化アルブミン
からなるリストから選択される。
【０２７０】
特定の実施形態では、
（ａ）ＨｂＡ１ｃ
（ｂ）無作為グルコースレベル
（ｃ）空腹時インスリンレベル
（ｄ）インスリン抵抗性の恒常性モデル評価（ＨＯＭＡＩＲ）
（ｅ）インスリン抵抗性の他の尺度
（ｆ）特に、ＨＤＬ、ＬＤＬ、総コレステロール、トリグリセリド、アポリポタンパク質Ｂからなる群から選択される脂質レベル、
（ｇ）アルブミン尿、特に、微量アルブミン尿または顕性アルブミン尿
（ｈ）クレアチニンまたは推定ＧＦＲ、
（ｉ）ＡＬＴレベル
（ｊ）ビタミンＢ１２レベル
（ｋ）コチニンレベル
（ｌ）テロメア長
（ｍ）ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ、トレフォイル因子３、アポリポタンパク質Ｂ、アンギオポエチン−２、オステオプロテゲリン、アルファ−２−マクログロブリン、肝細胞増殖因子受容体、グルタチオンＳトランスフェラーゼアルファ、クロモグラニンＡ、ＩＧＦ結合タンパク質４、テネイシン−Ｃ、セレンタンパク質Ｐ、マクロファージ由来ケモカイン、ＹＫＬ−４０、ＩＧＦ結合タンパク質２からなる群から選択される１つまたはそれ以上のバイオマーカー
（ｎ）血圧、体重、ＢＭＩ、ウエストヒップ比、ウエスト周囲、糖尿病の期間、喫煙状況、脂肪肝の画像エビデンス、トロポニンレベル、ＬＶ機能不全、心血管リスク、他の糖尿病の合併症、網膜像、および神経伝導検査からなる群から選択される１つまたはそれ以上の因子
からなるリストから選択される１つまたはそれ以上の因子は、場合による工程（ｖ）で、特に、工程（ｉ）から（ｉｉｉ）までの方法で得られた結果を確認するために検出される。
【０２７１】
特に、患者は、哺乳動物、爬虫類動物またはトリからなる群から選択される。特定の実施形態では、患者は、実験動物（例えば、マウス、ラットまたはウサギ）、飼育動物（例えば、モルモット、ウサギ、ウマ、ロバ、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ブタ、ニワトリ、アヒル、ラクダ、ネコ、イヌ、ウミガメ、カメ、ヘビ、またはトカゲを含む）、またはチンパンジー、ボノボ、ゴリラ、およびヒトを含む霊長動物からなる群から選択される。特に、患者はヒトである。
【０２７２】
第１４の態様では、本発明は、患者の糖尿病に関連する合併症を予防し、遅延させおよび／または処置する方法であって、
（ｉ）有効量のメトホルミンを患者に投与する工程と、
（ｉｉ）患者のサンプルのＧＤＦ１５レベルを決定する工程と、
（ｉｉｉ）工程（ｉｉ）で決定したＧＤＦ１５レベルを基準のＧＤＦ１５レベルと比較する工程と
（ｉｖ）ＧＤＦ１５レベルの上昇を示すこれらの患者にメトホルミンを投与し続け、ＧＤＦ１５レベルの未変更または低下を示すこれらの患者へのメトホルミン投与を中断する工程と、場合により、
（ｖ）ＧＤＦ１５レベルの未変更または低下を示すこれらの患者に代替処置を投与する工程
とを含む方法に関する。
【０２７３】
特定の実施形態では、糖尿病に関連する合併症は、低血糖、多嚢胞性卵巣症候群、多毛症、無月経症、非アルコール性脂肪性肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎、繁殖不能、肥満、ビタミンＢ１２欠乏症、インスリン抵抗性、およびこれらに限定されないが、狭心症、脂質異常、高血圧、がん、認知機能低下、認知症、フレイル、転倒、不安定、勃起不全、性機能障害、慢性疼痛、足部潰瘍形成、網膜症、視力減退、腎疾患または寿命の短縮などの虚血性心疾患または心筋梗塞に対する他の危険因子からなる群から選択される。
【０２７４】
特定の実施形態では、糖尿病に関連する合併症は、低血糖、多嚢胞性卵巣症候群、多毛症、無月経症、非アルコール性脂肪性肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎、繁殖不能、肥満、ビタミンＢ１２欠乏症、インスリン抵抗性、およびこれらに限定されないが、狭心症、脂質異常、および高血圧などの虚血性心疾患または心筋梗塞に対する他の危険因子からなる群から選択される。
【０２７５】
特定の実施形態では、糖尿病に関連する合併症は、がん、認知機能低下、認知症、フレイル、転倒、不安定、勃起不全、性機能障害、慢性疼痛、足部潰瘍形成、網膜症、視力減退、腎疾患または寿命の短縮からなる群から選択される。
【０２７６】
特定の実施形態では、患者は、糖尿病を発症するかまたはそれに罹患する危険性を有する。特に、患者は、Ｉ型糖尿病、ＩＩ型糖尿病、または妊娠糖尿病を発症するかまたはそれに罹患する危険性を有する。
【０２７７】
特定の実施形態では、工程（ｉ）で投与されるメトホルミンの有効量は、意図した目的を達成するのに十分であり、すなわち、メトホルミン処置に反応する対象の反応を誘導するのに十分である。したがって、工程（ｉ）で投与されるメトホルミンの有効量は、メトホルミンに反応する対象のメトホルミン処置に対する反応を誘導する量である。特定の実施形態では、メトホルミンは、工程（ｉ）において、５００〜２０００ｍｇの量で、特に５００、５５０、６００、６５０、７００、７５０、８００、８５０、９００、９５０、１０００、１１００、１２００、１３００、１４００、１５００、１６００、１７００、１８００、１９００、または２０００ｍｇの量で、投与される。メトホルミンに反応する個体のメトホルミン処置に対する反応を誘導するのに十分なメトホルミンの量をどのように決定するかについては、当業者に周知されている。
【０２７８】
特定の実施形態では、工程（ｉｉ）で決定されたＧＤＦ１５は、配列番号１で与えられるアミノ酸配列を含む。実施形態では、機能的バリアントは、ネイティブＧＤＦ１５と同じ機能的特性を示す。特に、機能的バリアントは、配列番号１によるＧＤＦ１５と少なくとも８０％の配列同一性を示す。特に、機能的バリアントは、配列番号１によるＧＤＦ１５と少なくとも８５％、９０％、９５％、９７％または９９％の配列同一性を示す。特定の実施形態では、機能的バリアントは、配列番号１によるＧＤＦ１５と８０％、９０％、または９９％の配列同一性を示す。
【０２７９】
特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、工程（ｉｉ）で、ＥＬＩＳＡ、ウエスタンブロット、免疫沈降、ＨＰＬＣ、マイクロアレイ、質量分析、およびシークエンシングからなる群から選択される方法により決定される。特定の実施形態では、ＧＤＦ１５レベルは、免疫検出アッセイを使用して決定される。
【０２８０】
特定の実施形態では、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、工程（ｉｉ）で、ＧＤＦ１５結合分子を使用して、直接的または間接的に決定される。特に、ＧＤＦ１５レベルは、ＧＤＦ１５に特異的な抗体を使用して決定される。特に、ＧＤＦ１５レベルは、ＧＤＦ１５に特異的なモノクローナル抗体を使用して決定される。特に、抗体は、配列番号１によるＧＤＦ１５のアミノ酸１９７〜３０８を含むペプチドを認識する抗体と競合する。特に、抗体は、配列番号１によるＧＤＦ１５のアミノ酸１９７〜３０８を含むペプチドを認識する。
【０２８１】
特定の実施形態では、患者のサンプルにおけるＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後数時間以内に決定される。特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、または２４時間以内に決定される。特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後１２時間以内、特に、メトホルミン投与後６時間以内に決定される。特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後１から１２時間、２から１０時間、または４から８時間以内に決定される。
【０２８２】
特定の実施形態では、患者のサンプルにおけるＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後数日以内に決定される。特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後１、２、３、４、５、６、または７日以内に決定される。特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後１から７日以内、特に、１から５日以内、特に、１から２日以内に決定される。
【０２８３】
特定の実施形態では、患者のサンプルは、体液および組織サンプルからなる群から選択される。特に、体液サンプルは、全血、血清、血漿、痰、唾液、および尿からなる群から選択される。
【０２８４】
さらなる実施形態では、１つまたはそれ以上の因子は、ＧＤＦ１５に加えて、場合による工程（ｖｉ）で決定される。特に、さらなる１つまたはそれ以上の因子は、
（ａ）空腹時グルコースレベル
（ｂ）食後のグルコースレベル
（ｃ）フルクトサミンレベル
（ｄ）糖化アルブミン
からなるリストから選択される。
【０２８５】
特定の実施形態では、
（ａ）ＨｂＡ１ｃ
（ｂ）無作為グルコースレベル
（ｃ）空腹時インスリンレベル
（ｄ）インスリン抵抗性の恒常性モデル評価（ＨＯＭＡＩＲ）
（ｅ）インスリン抵抗性の他の尺度
（ｆ）特に、ＨＤＬ、ＬＤＬ、総コレステロール、トリグリセリド、アポリポタンパク質Ｂからなる群から選択される脂質レベル、
（ｇ）アルブミン尿、特に、微量アルブミン尿または顕性アルブミン尿
（ｈ）クレアチニンまたは推定ＧＦＲ、
（ｉ）ＡＬＴレベル
（ｊ）ビタミンＢ１２レベル
（ｋ）コチニンレベル
（ｌ）テロメア長
（ｍ）ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ、トレフォイル因子３、アポリポタンパク質Ｂ、アンギオポエチン−２、オステオプロテゲリン、アルファ−２−マクログロブリン、肝細胞増殖因子受容体、グルタチオンＳトランスフェラーゼアルファ、クロモグラニンＡ、ＩＧＦ結合タンパク質４、テネイシン−Ｃ、セレンタンパク質Ｐ、マクロファージ由来ケモカイン、ＹＫＬ−４０、ＩＧＦ結合タンパク質２からなる群から選択される１つまたはそれ以上のバイオマーカー
（ｎ）血圧、体重、ＢＭＩ、ウエストヒップ比、ウエスト周囲、糖尿病の期間、喫煙状況、脂肪肝の画像エビデンス、トロポニンレベル、ＬＶ機能不全、心血管リスク、他の糖尿病の合併症、網膜像、および神経伝導検査からなる群から選択される１つまたはそれ以上の因子
からなるリストから選択される１つまたはそれ以上の因子は、場合による工程（ｖｉｉ）で、特に、工程（ｉ）から（ｉｉｉ）までの方法で得られた結果を確認するために検出される。
【０２８６】
場合による工程（ｖｉ）または（ｖｉｉ）で決定される任意のこれらのさらなる因子は、工程（ｉｉｉ）の後、かつ工程（ｉｖ）の前に決定される。
【０２８７】
特定の実施形態では、場合による工程（ｖ）の代替処置は、スルホニル尿素、ドーパミンアゴニスト、ＤＰＰ−４阻害剤、グルカゴン様ペプチド、メグリチニド、アミリン模倣体、アルファ−グルコシダーゼ阻害剤、ＳＧＬＴ２阻害剤、およびチアゾリジンジオンからなる群から選択される。
【０２８８】
特に、患者は、哺乳動物、爬虫類動物またはトリからなる群から選択される。特定の実施形態では、患者は、実験動物（例えば、マウス、ラットまたはウサギ）、飼育動物（例えば、モルモット、ウサギ、ウマ、ロバ、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ブタ、ニワトリ、アヒル、ラクダ、ネコ、イヌ、ウミガメ、カメ、ヘビ、またはトカゲを含む）、またはチンパンジー、ボノボ、ゴリラ、およびヒトを含む霊長動物からなる群から選択される。特に、患者はヒトである。
【０２８９】
第１５の態様では、本発明は、患者の糖尿病に関連する合併症を予防し、遅延させおよび／または処置する方法であって、
（ｉ）有効量のメトホルミンを患者に投与する工程と、
（ｉｉ）患者のサンプルのＧＤＦ１５レベルを決定する工程と、
（ｉｉｉ）工程（ｉｉ）で決定したＧＤＦ１５レベルを基準のＧＤＦ１５レベルと比較する工程であって、ＧＤＦ１５レベルの上昇が、メトホルミン処置に反応する患者を示し、ＧＤＦ１５レベルの未変更または低下がメトホルミン処置に反応しない患者を示す工程と、場合により、
（ｉｖ）前記患者における糖尿病に関連する合併症を低減するために、ＧＤＦ１５レベルの未変更または低下を示すこれらの患者に対する代替処置を考慮する工程
とを含む方法に関する。
【０２９０】
特定の実施形態では、糖尿病に関連する合併症は、低血糖、多嚢胞性卵巣症候群、多毛症、無月経症、非アルコール性脂肪性肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎、繁殖不能、肥満、ビタミンＢ１２欠乏症、インスリン抵抗性、およびこれらに限定されないが、狭心症、脂質異常、高血圧、がん、認知機能低下、認知症、フレイル、転倒、不安定、勃起不全、性機能障害、慢性疼痛、足部潰瘍形成、網膜症、視力減退、腎疾患または寿命の短縮などの虚血性心疾患または心筋梗塞に対する他の危険因子からなる群から選択される。
【０２９１】
特定の実施形態では、糖尿病に関連する合併症は、低血糖、多嚢胞性卵巣症候群、多毛症、無月経症、非アルコール性脂肪性肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎、繁殖不能、肥満、ビタミンＢ１２欠乏症、インスリン抵抗性、およびこれらに限定されないが、狭心症、脂質異常、および高血圧などの虚血性心疾患または心筋梗塞に対する他の危険因子からなる群から選択される。
【０２９２】
特定の実施形態では、糖尿病に関連する合併症は、がん、認知機能低下、認知症、フレイル、転倒、不安定、勃起不全、性機能障害、慢性疼痛、足部潰瘍形成、網膜症、視力減退、腎疾患または寿命の短縮からなる群から選択される。
【０２９３】
特定の実施形態では、患者は、糖尿病を発症するかまたはそれに罹患する危険性を有する。特に、患者は、Ｉ型糖尿病、ＩＩ型糖尿病、または妊娠糖尿病を発症するかまたはそれに罹患する危険性を有する。
【０２９４】
特定の実施形態では、工程（ｉ）で投与されるメトホルミンの有効量は、意図した目的を達成するのに十分であり、すなわち、メトホルミン処置に反応する対象の反応を誘導するのに十分である。したがって、工程（ｉ）で投与されるメトホルミンの有効量は、メトホルミンに反応する対象のメトホルミン処置に対する反応を誘導する量である。特定の実施形態では、メトホルミンは、工程（ｉ）において、５００〜２０００ｍｇの量で、特に５００、５５０、６００、６５０、７００、７５０、８００、８５０、９００、９５０、１０００、１１００、１２００、１３００、１４００、１５００、１６００、１７００、１８００、１９００、または２０００ｍｇの量で、投与される。メトホルミンに反応する個体のメトホルミン処置に対する反応を誘導するのに十分なメトホルミンの量をどのように決定するかについては、当業者に周知されている。
【０２９５】
特定の実施形態では、工程（ｉｉ）で決定されたＧＤＦ１５は、配列番号１で与えられるアミノ酸配列を含む。実施形態では、機能的バリアントは、ネイティブＧＤＦ１５と同じ機能的特性を示す。特に、機能的バリアントは、配列番号１によるＧＤＦ１５と少なくとも８０％の配列同一性を示す。特に、機能的バリアントは、配列番号１によるＧＤＦ１５と少なくとも８５％、９０％、９５％、９７％または９９％の配列同一性を示す。特定の実施形態では、機能的バリアントは、配列番号１によるＧＤＦ１５と８０％、９０％、または９９％の配列同一性を示す。
【０２９６】
特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、工程（ｉｉ）で、ＥＬＩＳＡ、ウエスタンブロット、免疫沈降、ＨＰＬＣ、マイクロアレイ、質量分析、およびシークエンシングからなる群から選択される方法により決定される。特定の実施形態では、ＧＤＦ１５レベルは、免疫検出アッセイを使用して決定される。
【０２９７】
特定の実施形態では、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、工程（ｉｉ）で、ＧＤＦ１５結合分子を使用して、直接的または間接的に決定される。特に、ＧＤＦ１５レベルは、ＧＤＦ１５に特異的な抗体を使用して決定される。特に、ＧＤＦ１５レベルは、ＧＤＦ１５に特異的なモノクローナル抗体を使用して決定される。実施形態では、抗体は、ＧＤＦ１５のアミノ酸１９７〜３０８を含むペプチドを認識する抗体と競合する。特に、抗体は、配列番号１によるＧＤＦ１５のアミノ酸１９７〜３０８を含むペプチドを認識する抗体と競合する。特に、抗体は、配列番号１によるＧＤＦ１５のアミノ酸１９７〜３０８を含むペプチドを認識する。
【０２９８】
特定の実施形態では、患者のサンプルにおけるＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後数時間以内に決定される。特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、または２４時間以内に決定される。特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後１２時間以内、特に、メトホルミン投与後６時間以内に決定される。特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後１から１２時間、２から１０時間、または４から８時間以内に決定される。
【０２９９】
特定の実施形態では、患者のサンプルにおけるＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後数日以内に決定される。特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後１、２、３、４、５、６、または７日以内に決定される。特に、ＧＤＦ１５またはその機能的バリアントのレベルは、メトホルミン投与後１から７日以内、特に、１から５日以内、特に、１から２日以内に決定される。
【０３００】
特定の実施形態では、患者のサンプルは、体液および組織サンプルからなる群から選択される。特に、体液サンプルは、全血、血清、血漿、痰、唾液、および尿からなる群から選択される。
【０３０１】
さらなる実施形態では、１つまたはそれ以上の因子は、ＧＤＦ１５に加えて、場合による工程（ｖ）で決定される。特に、さらなる１つまたはそれ以上の因子は、
（ｅ）空腹時グルコースレベル
（ｆ）食後のグルコースレベル
（ｇ）フルクトサミンレベル
（ｈ）糖化アルブミン
からなるリストから選択される。
【０３０２】
特定の実施形態では、
（ｏ）ＨｂＡ１ｃ
（ｐ）無作為グルコースレベル
（ｑ）空腹時インスリンレベル
（ｒ）インスリン抵抗性の恒常性モデル評価（ＨＯＭＡＩＲ）
（ｓ）インスリン抵抗性の他の尺度
（ｔ）特に、ＨＤＬ、ＬＤＬ、総コレステロール、トリグリセリド、アポリポタンパク質Ｂからなる群から選択される脂質レベル、
（ｕ）アルブミン尿、特に、微量アルブミン尿または顕性アルブミン尿
（ｖ）クレアチニンまたは推定ＧＦＲ、
（ｗ）ＡＬＴレベル
（ｘ）ビタミンＢ１２レベル
（ｙ）コチニンレベル
（ｚ）テロメア長
（ａａ）ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ、トレフォイル因子３、アポリポタンパク質Ｂ、アンギオポエチン−２、オステオプロテゲリン、アルファ−２−マクログロブリン、肝細胞増殖因子受容体、グルタチオンＳトランスフェラーゼアルファ、クロモグラニンＡ、ＩＧＦ結合タンパク質４、テネイシン−Ｃ、セレンタンパク質Ｐ、マクロファージ由来ケモカイン、ＹＫＬ−４０、ＩＧＦ結合タンパク質２からなる群から選択される１つまたはそれ以上のバイオマーカー
（ｂｂ）血圧、体重、ＢＭＩ、ウエストヒップ比、ウエスト周囲、糖尿病の期間、喫煙状況、脂肪肝の画像エビデンス、トロポニンレベル、ＬＶ機能不全、心血管リスク、他の糖尿病の合併症、網膜像、および神経伝導検査からなる群から選択される１つまたはそれ以上の因子
からなるリストから選択される１つまたはそれ以上の因子は、場合による工程（ｖｉ）で、特に、工程（ｉ）から（ｉｉｉ）までの方法で得られた結果を確認するために検出される。
【０３０３】
場合による工程（ｖ）または（ｖｉ）で決定される任意のこれらのさらなる因子は、工程（ｉｉｉ）の後、かつ工程（ｉｖ）の前に決定される。
【０３０４】
特定の実施形態では、場合による工程（ｖ）で考慮される代替処置は、スルホニル尿素、ドーパミンアゴニスト、ＤＰＰ−４阻害剤、グルカゴン様ペプチド、メグリチニド、アミリン模倣体、アルファ−グルコシダーゼ阻害剤、ＳＧＬＴ２阻害剤、およびチアゾリジンジオンからなる群から選択される。
【０３０５】
特に、患者は、哺乳動物、爬虫類動物またはトリからなる群から選択される。特定の実施形態では、患者は、実験動物（例えば、マウス、ラットまたはウサギ）、飼育動物（例えば、モルモット、ウサギ、ウマ、ロバ、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ブタ、ニワトリ、アヒル、ラクダ、ネコ、イヌ、ウミガメ、カメ、ヘビ、またはトカゲを含む）、またはチンパンジー、ボノボ、ゴリラ、およびヒトを含む霊長動物からなる群から選択される。特に、患者はヒトである。
【０３０６】
特に、本発明は、以下の項目に関する：
１．患者を処置するのに使用するためのメトホルミンであって、
患者が、メトホルミン処置に反応してＧＤＦ１５レベルの上昇を示し、
患者が、前糖尿病、糖尿病、糖尿病の状況下での低血糖、多嚢胞性卵巣症候群、多毛症、無月経症、非アルコール性脂肪性肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎、繁殖不能、肥満、ビタミンＢ１２欠乏症、インスリン抵抗性、およびこれらに限定されないが、狭心症、脂質異常、高血圧、がん、認知機能低下、認知症、フレイル、転倒、不安定、勃起不全、性機能障害、慢性疼痛、足部潰瘍形成、網膜症、視力減退、腎疾患または寿命の短縮などの虚血性心疾患または心筋梗塞に対する他の危険因子からなる群から選択される疾患または障害を発症するかまたはそれに罹患する危険性を有する、使用するためのメトホルミン。
【０３０７】
２．糖尿病が、Ｉ型糖尿病、ＩＩ型糖尿病、または妊娠糖尿病である、項目１に記載の使用するためのメトホルミン。
【０３０８】
３．患者が、前糖尿病、糖尿病、糖尿病の状況下での低血糖、多嚢胞性卵巣症候群、多毛症、無月経症、非アルコール性脂肪性肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎、繁殖不能、肥満、ビタミンＢ１２欠乏症、インスリン抵抗性、およびこれらに限定されないが、狭心症、脂質異常、および高血圧などの虚血性心疾患または心筋梗塞に対する他の危険因子からなる群から選択される疾患または障害を発症するかまたはそれに罹患する危険性を有する、
項目１に記載の使用するためのメトホルミン。
【０３０９】
４．患者が、がん、認知機能低下、認知症、フレイル、転倒、不安定、勃起不全、性機能障害、慢性疼痛、足部潰瘍形成、網膜症、視力減退、腎疾患または寿命の短縮からなる群から選択される疾患または障害を発症するかまたはそれに罹患する危険性を有する、
項目１に記載の使用するためのメトホルミン。
【０３１０】
５．ＧＤＦ１５レベルが少なくとも２５％上昇する、項目１から４のいずれかに記載の使用するためのメトホルミン。
【０３１１】
６．ＧＤＦ１５レベルが基準と比較して上昇している、項目１から５のいずれかに記載の使用するためのメトホルミン。
【０３１２】
７．基準が、
（ｉ）特に、メトホルミン投与前の時点で採取された患者の基準サンプルにおける、メトホルミン投与前の患者のＧＤＦ１５レベル、または
（ｉｉ）代表的基準値
である、項目６に記載の使用するためのメトホルミン。
【０３１３】
８．メトホルミン処置から利益を得る患者を特定する方法であって、
（ｉ）有効量のメトホルミンを患者に投与する工程と、
（ｉｉ）患者のサンプルのＧＤＦ１５レベルを決定する工程と、
（ｉｉｉ）工程（ｉｉ）で決定したＧＤＦ１５レベルを基準のＧＤＦ１５レベルと比較する工程であって、ＧＤＦ１５レベルの上昇によってメトホルミン投与に対する患者の反応が示される工程
とを含む方法。
【０３１４】
９．ＧＤＦ１５レベルが少なくとも２５％上昇する、項目８に記載の方法。
【０３１５】
１０．基準が、特に、メトホルミン投与前の時点で採取された患者の基準サンプルにおける、メトホルミン投与前のＧＤＦ１５レベルの代表または代表的基準値である、項目８または９に記載の方法。
【０３１６】
１１．患者のサンプルのＧＤＦ１５レベルが、メトホルミン投与後数時間以内；特に、メトホルミン投与後１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２時間以内に決定される、項目８から１０のいずれかに記載の方法。
【０３１７】
１２．患者のサンプルのＧＤＦ１５レベルが、メトホルミン投与後数日以内、特に、メトホルミン投与後１、２、３、４、５、６、または７日以内に決定される、項目８から１０のいずれかに記載の方法。
【０３１８】
１３．患者のサンプルが、体液および組織のサンプル、特に、全血、血清、血漿、痰、唾液、および尿からなる群から選択される、項目８から１２のいずれかに記載の方法。
【０３１９】
１４．ＧＤＦ１５レベルがＧＤＦ１５結合分子を使用して直接的または間接的に決定される、項目８から１３のいずれかに記載の方法。
【０３２０】
１５．ＧＤＦ１５レベルが、ＧＤＦ１５に特異的な抗体、特に、ＧＤＦ１５のアミノ酸１９７〜３０８を含むペプチドを認識する抗体と競合する抗体を使用して決定される、項目１４に記載の方法。
【０３２１】
１６．１つまたはそれ以上のさらなる因子が決定され、１つまたはそれ以上の因子は、
（ａ）ＨｂＡ１ｃ
（ｂ）空腹時グルコースレベル
（ｃ）食後のグルコースレベル
（ｄ）無作為グルコースレベル
（ｅ）フルクトサミンレベル
（ｆ）空腹時インスリンレベル
（ｇ）インスリン抵抗性の恒常性モデル評価（ＨＯＭＡＩＲ）
（ｈ）インスリン抵抗性の他の尺度
（ｉ）糖化アルブミン
（ｊ）脂質レベル（ＨＤＬ、ＬＤＬ、総コレステロール、トリグリセリド、アポリポタンパク質Ｂ）、
（ｋ）アルブミン尿（微量アルブミン尿または顕性アルブミン尿）
（ｌ）クレアチニンまたは推定ＧＦＲ、
（ｍ）ＡＬＴレベル
（ｎ）ビタミンＢ１２レベル
（ｏ）コチニンレベル
（ｐ）テロメア長
（ｑ）ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ、トレフォイル因子３、アポリポタンパク質Ｂ、アンギオポエチン−２、オステオプロテゲリン、アルファ−２−マクログロブリン、肝細胞増殖因子受容体、グルタチオンＳトランスフェラーゼアルファ、クロモグラニンＡ、ＩＧＦ結合タンパク質４、テネイシン−Ｃ、セレンタンパク質Ｐ、マクロファージ由来ケモカイン、ＹＫＬ−４０、ＩＧＦ結合タンパク質２からなる群から選択される１つまたはそれ以上のバイオマーカー
（ｒ）血圧、体重、ＢＭＩ、ウエストヒップ比、ウエスト周囲、糖尿病の期間、喫煙状況、脂肪肝の画像エビデンス、トロポニンレベル、ＬＶ機能不全、心血管リスク、他の糖尿病の合併症、網膜像、および神経伝導検査からなる群から選択される１つまたはそれ以上の因子
からなるリストから選択される、項目８から１５のいずれかに記載の方法。
【０３２２】
１７．メトホルミンならびに患者の糖尿病、特にＩ型またはＩＩ型糖尿病を処置するのに使用するための少なくとも１種の薬学的に許容される担体、アジュバントおよび／または賦形剤を含む医薬組成物であって、患者が、メトホルミン処置に反応してＧＤＦ１５レベルの上昇を示す医薬組成物。
【０３２３】
１８．メトホルミンの投薬量を適合させる方法であって、
（ｉ）メトホルミンを患者に投与する工程と、
（ｉｉ）患者のサンプルのＧＤＦ１５レベルを決定する工程と、
（ｉｖ）工程（ｉｉ）で決定したＧＤＦ１５レベルを基準と比較する工程と
（ｖ）ＧＤＦ１５レベルが上昇しない場合にはメトホルミンを用いる処置が停止され、ＧＤＦ１５レベルが上昇する場合にはメトホルミンの投薬量が維持されるかまたは増加されるという点でメトホルミンの投薬量を調整する工程
とを含む方法。
【０３２４】
１９．工程（ｉ）で、５００〜２０００ｍｇの量で、特に５００、５５０、６００、６５０、７００、７５０、８００、８５０、９００、９５０、１０００、１１００、１２００、１３００、１４００、１５００、１６００、１７００、１８００、１９００、または２０００ｍｇの量で、メトホルミンが投与される、項目１８に記載の方法。
【０３２５】
２０．工程（ｉｉｉ）で、ＧＤＦ１５レベルが、特に最初のメトホルミン投与に反応して上昇する場合、メトホルミンの投薬量が、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１５０、または２００％増加する、項目１８または１９に記載の方法。
【０３２６】
２１．メトホルミン処置から利益を得る患者を特定するためのバイオマーカーとしてのＧＤＦ１５の使用。
【０３２７】
２２．メトホルミン処置から利益を得る患者を特定するのに使用するためのキットであって、ＧＤＦ１５の発現レベルを検出するための手段を含むキット。
【０３２８】
２３．
（ａ）容器、
（ｂ）適切な対照、および／または
（ｃ）
（ｉ）メトホルミン処置に反応する高い傾向を有する患者を特定する方法に関する説明書
（ｉｉ）ＧＤＦ１５レベルを検出するための手段の使用に関する説明書、
（ｉｉｉ）品質情報、例えば、ＧＤＦ１５レベルを検出する手段および／もしくはキットのロット／バッチ番号、製造もしくは組み立て部位もしくは使用期限もしくは販売日についての情報、キットの正しい保存もしくは取り扱いに関する情報、
（ｉｖ）ＧＤＦ１５レベルを検出するための緩衝液、希釈液、試薬の組成に関する情報、
（ｖ）メトホルミン処置に反応する高い傾向を有する患者を特定する上述の方法を実施する場合に得られる情報の解釈に関する情報、
（ｖｉ）不適切な方法および／もしくは不適切な手段を適用した場合に可能性のある誤った解釈もしくは誤った結果に関する警告、ならびに／または
（ｖｉｉ）不適切な試薬および／もしくは緩衝液を使用した場合に可能性のある誤った解釈もしくは誤った結果に関する警告
などの情報を含むデータキャリア
をさらに含む、項目２２に記載のメトホルミン処置から利益を得る患者を特定するのに使用するためのキット。
【０３２９】
２４．項目８から１６のいずれかに記載の方法における項目２２または２３に記載のキットの使用。
【０３３０】
２５．前糖尿病、糖尿病、糖尿病の状況下での低血糖、多嚢胞性卵巣症候群、多毛症、無月経症、非アルコール性脂肪性肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎、繁殖不能、肥満、ビタミンＢ１２欠乏症、インスリン抵抗性、およびこれらに限定されないが、狭心症、脂質異常、高血圧、がん、認知機能低下、認知症、フレイル、転倒、不安定、勃起不全、性機能障害、慢性疼痛、足部潰瘍形成、網膜症、視力減退、腎疾患および寿命の短縮などの虚血性心疾患または心筋梗塞に対する他の危険因子からなる群から選択される疾患または障害を発症するかまたはそれに罹患する危険性を有する患者を処置する方法であって、治療有効量のメトホルミンを前記患者に投与する工程を含み、前記患者が、（最初の）メトホルミン処置に反応してＧＤＦ１５レベルの上昇を示す方法。
【０３３１】
２６．前糖尿病、糖尿病、糖尿病の状況下での低血糖、多嚢胞性卵巣症候群、多毛症、無月経症、非アルコール性脂肪性肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎、繁殖不能、肥満、ビタミンＢ１２欠乏症、インスリン抵抗性、およびこれらに限定されないが、狭心症、脂質異常、および高血圧などの虚血性心疾患または心筋梗塞に対する他の危険因子からなる群から選択される疾患または障害を発症するかまたはそれに罹患する危険性を有する患者を処置する方法。
【０３３２】
２７．がん、認知機能低下、認知症、フレイル、転倒、不安定、勃起不全、性機能障害、慢性疼痛、足部潰瘍形成、網膜症、視力減退、腎疾患および寿命の短縮からなる群から選択される疾患または障害を発症するかまたはそれに罹患する危険性を有する患者を処置する方法であって、治療有効量のメトホルミンを前記患者に投与する工程を含み、前記患者が、（最初の）メトホルミン処置に反応してＧＤＦ１５レベルの上昇を示す方法。
【０３３３】
２８．ＧＤＦ１５レベルが少なくとも２５％上昇する、項目２５から２７のいずれかに記載の方法。
【０３３４】
２９．患者のサンプルにおいてＧＤＦ１５レベルが測定され、特に処置前の患者のサンプルにおいてＧＤＦ１５レベルが測定される、項目２５から２８のいずれかに記載の方法。
【０３３５】
３０．患者のサンプルにおいてＧＤＦ１５レベルが測定され、基準と比較される、項目２５から２９のいずれかに記載の方法。
【０３３６】
３１．基準が、特に、メトホルミン投与前の時点で採取された患者の基準サンプルにおける、メトホルミン投与前のＧＤＦ１５レベルの代表または代表的基準値である、項目３０に記載の方法。
【０３３７】
３２．ＧＤＦ１５レベルが、最初のメトホルミン投与後数時間以内；特に、最初のメトホルミン投与後１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２時間以内に患者のサンプル中で決定される、項目２５から３１のいずれかに記載の方法。
【０３３８】
３３．ＧＤＦ１５レベルが、最初のメトホルミン投与後数日以内；特に、最初のメトホルミン投与後１、２、３、４、５、６、または７日以内に患者のサンプル中で決定される、項目２５から３２のいずれかに記載の方法。
【０３３９】
３４．ＧＤＦ１５レベルが、患者のサンプル中、特に、体液および組織のサンプル、特に、全血、血清、血漿、痰、唾液、および尿からなる群から選択される患者のサンプル中で決定される、項目２５から３３のいずれかに記載の方法。
【０３４０】
３５．ＧＤＦ１５レベルがＧＤＦ１５結合分子を使用して直接的または間接的に患者のサンプル中で決定される、項目２３から３０のいずれかに記載の方法。
【０３４１】
３６．ＧＤＦ１５レベルが、ＧＤＦ１５に特異的な抗体、特に、ＧＤＦ１５のアミノ酸１９７〜３０８を含むペプチドを認識する抗体と競合する抗体を使用して決定される、項目３５に記載の方法。
【０３４２】
３７．１つまたはそれ以上の因子が決定され、１つまたはそれ以上の因子は、
（ａ）ＨｂＡ１ｃ
（ｂ）空腹時グルコースレベル
（ｃ）食後のグルコースレベル
（ｄ）無作為グルコースレベル
（ｅ）フルクトサミンレベル
（ｆ）空腹時インスリンレベル
（ｇ）インスリン抵抗性の恒常性モデル評価（ＨＯＭＡＩＲ）
（ｈ）インスリン抵抗性の他の尺度
（ｉ）糖化アルブミン
（ｊ）脂質レベル（ＨＤＬ、ＬＤＬ、総コレステロール、トリグリセリド、アポリポタンパク質Ｂ）、
（ｋ）アルブミン尿（微量アルブミン尿または顕性アルブミン尿）
（ｌ）クレアチニンまたは推定ＧＦＲ、
（ｍ）ＡＬＴレベル
（ｎ）ビタミンＢ１２レベル
（ｏ）コチニンレベル
（ｐ）テロメア長
（ｑ）ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ、トレフォイル因子３、アポリポタンパク質Ｂ、アンギオポエチン−２、オステオプロテゲリン、アルファ−２−マクログロブリン、肝細胞増殖因子受容体、グルタチオンＳトランスフェラーゼアルファ、クロモグラニンＡ、ＩＧＦ結合タンパク質４、テネイシン−Ｃ、セレンタンパク質Ｐ、マクロファージ由来ケモカイン、ＹＫＬ−４０、ＩＧＦ結合タンパク質２からなる群から選択される１つまたはそれ以上のバイオマーカー、ならびに
（ｒ）血圧、体重、ＢＭＩ、ウエストヒップ比、ウエスト周囲、糖尿病の期間、喫煙状況、脂肪肝の画像エビデンス、トロポニンレベル、ＬＶ機能不全、心血管リスク、他の糖尿病の合併症、網膜像、および神経伝導検査からなる群から選択される１つまたはそれ以上の因子
からなるリストから選択される、項目２５から３６のいずれかに記載の方法。
【０３４３】
３８．メトホルミン処置から利益を得る患者の群を処置する方法であって、
（ｉ）有効量のメトホルミンを患者に投与する工程と、
（ｉｉ）患者のサンプルのＧＤＦ１５レベルを決定する工程と、
（ｉｉｉ）工程（ｉｉ）で決定したＧＤＦ１５レベルを基準のＧＤＦ１５レベルと比較する工程と
（ｉｖ）ＧＤＦ１５レベルの上昇を示すこれらの患者にメトホルミンを投与し続ける工程
とを含む方法。
【０３４４】
３９．メトホルミン処置から利益を得ない患者の群を処置する方法であって、
（ｉ）有効量のメトホルミンを患者に投与する工程と、
（ｉｉ）患者のサンプルのＧＤＦ１５レベルを決定する工程と、
（ｉｉｉ）工程（ｉｉ）で決定したＧＤＦ１５レベルを基準のＧＤＦ１５レベルと比較する工程と
（ｉｖ）ＧＤＦ１５レベルの低下を示すこれらの患者へのメトホルミン投与を中断する工程と、場合により、
（ｉ）ＧＤＦ１５レベルの低下を示すこれらの患者に代替処置を投与する工程
とを含む方法。
【０３４５】
４０．場合による工程（ｖ）の代替処置が、スルホニル尿素、ドーパミンアゴニスト、ＤＰＰ−４阻害剤、グルカゴン様ペプチド、メグリチニド、アミリン模倣体、アルファ−グルコシダーゼ阻害剤、ＳＧＬＴ２阻害剤、およびチアゾリジンジオンからなる群から選択される、項目３９に記載の方法。
【０３４６】
４１．メトホルミン処置から利益を得ない患者を特定する方法であって、
（ｉ）有効量のメトホルミンを患者に投与する工程と、
（ｉｉ）患者のサンプルのＧＤＦ１５レベルを決定する工程と、
（ｉｉｉ）工程（ｉｉ）で決定したＧＤＦ１５レベルを基準のＧＤＦ１５レベルと比較する工程であって、ＧＤＦ１５レベルの未変更または低下がメトホルミン投与に反応しない患者を示す工程
とを含む方法。
【０３４７】
４２．患者を処置するのに使用するためのスルホニル尿素、ドーパミンアゴニスト、ＤＰＰ−４阻害剤、グルカゴン様ペプチド、メグリチニド、アミリン模倣体、アルファ−グルコシダーゼ阻害剤、ＳＧＬＴ２阻害剤、および／またはチアゾリジンジオンであって、患者が、メトホルミン処置に反応してＧＤＦ１５レベルの未変更または低下を示し、患者が、前糖尿病、糖尿病、糖尿病の状況下での低血糖、多嚢胞性卵巣症候群、多毛症、無月経症、非アルコール性脂肪性肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎、繁殖不能、肥満、ビタミンＢ１２欠乏症、インスリン抵抗性、およびこれらに限定されないが、狭心症、脂質異常、高血圧、がん、認知機能低下、認知症、フレイル、転倒、不安定、勃起不全、性機能障害、慢性疼痛、足部潰瘍形成、網膜症、視力減退、腎疾患および寿命の短縮などの虚血性心疾患または心筋梗塞に対する他の危険因子からなる群から選択される疾患または障害を発症するかまたはそれに罹患する危険性を有する、スルホニル尿素、ドーパミンアゴニスト、ＤＰＰ−４阻害剤、グルカゴン様ペプチド、メグリチニド、アミリン模倣体、アルファ−グルコシダーゼ阻害剤、ＳＧＬＴ２阻害剤、および／またはチアゾリジンジオン。
【０３４８】
４３．患者がメトホルミン投与に反応するか否かを決定するための時間を短縮する方法であって、
（ｉ）有効量のメトホルミンを患者に投与する工程と、
（ｉｉ）患者のサンプルのＧＤＦ１５レベルを決定する工程と、
（ｉｉｉ）工程（ｉｉ）で決定したＧＤＦ１５レベルを基準のＧＤＦ１５レベルと比較する工程
とを含み、
ＧＤＦ１５レベルの上昇が、メトホルミン投与に反応する患者を示し、ＧＤＦ１５レベルの未変更または低下がメトホルミン投与に反応しない患者を示す方法。
【０３４９】
４４．患者がメトホルミン投与に反応するか否かを決定するための時間が４週間未満である、項目４３に記載の方法。
【０３５０】
４５．患者の糖尿病に関連する合併症を予防し、遅延させ、および／または処置する方法であって、
（ｉ）有効量のメトホルミンを患者に投与する工程と、
（ｉｉ）患者のサンプルのＧＤＦ１５レベルを決定する工程と、
（ｉｉｉ）工程（ｉｉ）で決定したＧＤＦ１５レベルを基準のＧＤＦ１５レベルと比較する工程と、
（ｉｖ）ＧＤＦ１５レベルの上昇を示すこれらの患者にメトホルミンを投与し続け、ＧＤＦ１５レベルの未変更または低下を示すこれらの患者へのメトホルミン投与を中断する工程と、場合により、
（ｖ）ＧＤＦ１５レベルの未変更または低下を示すこれらの患者に代替処置を投与する工程
とを含む方法。
【０３５１】
４６．患者の糖尿病に関連する合併症を予防し、遅延させ、および／または処置する方法であって、
（ｉ）有効量のメトホルミンを患者に投与する工程と、
（ｉｉ）患者のサンプルのＧＤＦ１５レベルを決定する工程と、
（ｉｉｉ）工程（ｉｉ）で決定したＧＤＦ１５レベルを基準のＧＤＦ１５レベルと比較する工程であって、ＧＤＦ１５レベルの上昇が、メトホルミン処置に反応する患者を示し、ＧＤＦ１５レベルの未変更または低下がメトホルミン処置に反応しない患者を示す工程と、場合により、
（ｉｖ）前記患者における糖尿病に関連する合併症を低減するために、ＧＤＦ１５レベルの未変更または低下を示すこれらの患者に対する代替処置を考慮する工程
とを含む方法。
【０３５２】
４７．糖尿病に関連する合併症が、多嚢胞性卵巣症候群、多毛症、無月経症、非アルコール性脂肪性肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎、繁殖不能、肥満、ビタミンＢ１２欠乏症、インスリン抵抗性、およびこれらに限定されないが、狭心症、脂質異常、高血圧、がん、認知機能低下、認知症、フレイル、転倒、不安定、勃起不全、性機能障害、慢性疼痛、足部潰瘍形成、網膜症、視力減退、腎疾患または寿命の短縮などの虚血性心疾患または心筋梗塞に対する他の危険因子からなるリストから選択される、項目４５または４６に記載の方法。
【０３５３】
４８．代替処置が、スルホニル尿素、ドーパミンアゴニスト、ＤＰＰ−４阻害剤、グルカゴン様ペプチド、メグリチニド、アミリン模倣体、アルファ−グルコシダーゼ阻害剤、ＳＧＬＴ２阻害剤、およびチアゾリジンジオンからなる群から選択される、項目４５〜４７のいずれかに記載の方法。
【０３５４】
本発明は、本発明の範囲を限定するものとして理解されるべきではない実施例および図面において、より詳細に記載される。
【実施例】
【０３５５】
付加的なＣＶ危険因子１１、１２を有する糖尿病、グルコース耐性障害または空腹時血中ブドウ糖不良のいずれかを有する１２，５３７名のヒトを募った。基礎のインスリングラルギンを媒介した正常血糖または標準治療、および要因分析法を使用するオメガ３脂肪酸の補充またはプラセボに無作為に割り当てた後、彼らを心血管事象および他の健康転帰について中央値６．２年の間追跡した。無作為化の前に、８，４９４名（６８％）の参加
者が、スピンし、分離し、アリコートし、凍結し（回収の２時間以内）、カナダのハミルトンのＰｏｐｕｌａｔｉｏｎ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ（ＰＨＲＩ）  ｂｉｏｂａｎｋ（ここで、摂氏−１６０度の窒素蒸気冷却タンク中で保存された）に輸送したベースラインの血液サンプルを提供した。これらの参加者のサブセット（５，０７８名）は、バフィーコートサンプル由来の遺伝子材料の保存および解析についてさらに同意した。
【０３５６】
試験が完了した後、先の研究が心血管疾患または糖尿病に関連することを示唆した２８４種のバイオマーカーの多重分析のために、１ｍｌの血清アリコートをＭｙｒｉａｄ  ＲＢＭ（Ａｕｓｔｉｎ、Ｔｅｘａｓ、ＵＳＡ）に輸送した。Ｍｙｒｉａｄ  ＲＢＭ社で、サンプルは室温（ＲＴ）で解凍され、ボルテックスされ、１３，０００ｇで５分間スピンして清澄化され、アリコートを分析のためにマスターマイクロタイタープレートへと取り除いた。自動分注器を使用して、各サンプルのアリコートをＨｕｍａｎ  ＤｉｓｃｏｖｅｒｙＭＡＰの捕捉ミクロスフェアマルチプレックスの１つに導入した。サンプルと捕捉ミクロスフェアの混合物を完全に混合し、室温で１時間インキュベートした。次いで、各マルチプレックス（例えば、ＧＤＦ１５）に対するビオチン化レポーター抗体のマルチプレックス化カクテルをロボット制御によって添加し、完全に混合した後、室温でさらに１時間インキュベートした。各マルチプレックス中に完全に混合し、室温で１時間インキュベートした過剰なストレプトアビジンフィコエリスリン溶液を使用して、マルチプレックスを発色させた。各マルチプレックス化反応液の容量を真空濾過で減少させ、次に、分析用のマトリックス緩衝液中に希釈することによって容量を増大させた。Ｌｕｍｉｎｅｘ  １００および２００装置で解析を実施し、得られたデータ流を、ＲＢＭで開発された独自のデータ解析ソフトウェアを使用して解釈した。各マルチプレックスについて、各マイクロタイタープレート上に校正物質と対照の両方を含めた。各プレートの最初と最後の列に８点の校正物質を入れ、３つの品質レベルの対照を２つ１組で含めた。適当なアッセイ性能を保証するために、各マルチプレックスの高レベルと中レベルと低レベルの対照について、最初に、検査結果決定した。データ解析パッケージ４０に含まれる４および５パラメーターの、加重および非加重曲線フィッティングアルゴリズムを使用して、特定のマルチプレックス中に位置づけられた各々の分析物についての未知値を決定した。特定番号のみ（すなわち、他の情報は含まない）をサンプルと共に提供した。以前に報告されたように、報告された結果の覆面検査の後、８，４０１名の参加者由来の２３７種のバイオマーカーが、さらなる解析１３に適していると思われた。遺伝子解析に同意したこれら個人の４３９０名のサブセットも以下に記載されたようにゲノタイピングした。
【実施例１】
【０３５７】
メトホルミン使用に関連するバイオマーカーの特定
未調整のロジスティック回帰モデルおよび前進的選択を使用して、メトホルミン使用の統計的に独立した決定因子となるものを特定するために、２３７種の利用可能なバイオマーカーを解析した。この手法を使用して特定した３１種の有意なバイオマーカーのうち、１つのバイオマーカー（増殖分化因子１５−ＧＤＦ１５）は、他のいずれのものよりも３倍大きい効果量を有した。したがって、残りのすべての解析は、以下に詳細に記載するように、この１種のバイオマーカーに焦点を当てた。
【０３５８】
測定したバイオマーカーを有する合計２３１７／８４０１（２７．６％）の参加者が、メトホルミンを摂取していた。表１に記すように、メトホルミンを摂取していないヒトと比較して、メトホルミンを受けたヒトは、ａ）女性で、より若く、より体重が重く；ｂ）糖尿病、高血圧、およびアルブミン尿を有し；ｃ）腎機能は良く；ｄ）ＡＣＥ阻害剤またはアンギオテンシン受容体ブロッカーを受けている傾向が高い。メトホルミンを受けたヒトは、以前に心血管事象を有したか、またはベータブロッカーもしくは抗血小板薬を受けた傾向が少なかった。
【０３５９】
【表１】
2019506374.tif 000003
【０３６０】
年齢、性別、体重、以前の心血管事象、以前の糖尿病の診断、血清クレアチニン、ＨｂＡ１ｃ、および空腹時血糖値を含む、メトホルミンを処方する傾向に関連する因子を調整した後、前進的選択手法により、メトホルミン使用に独立して関連する２６種のバイオマーカー（すなわち、各バイオマーカーのｐ値が＜０．０００２１）が特定された。ＧＤＦ１５を除いて、１標準偏差ごとのメトホルミン使用のオッズは、０．７１から１．２４の範囲のこれらのバイオマーカーのレベルで増加した（表２）。
【０３６１】
【表２】
2019506374.tif 000004
【０３６２】
逆に、図１Ａに記すように、ＧＤＦ１５レベルが１単位増加するごとのメトホルミン使用のオッズは、含まれる具体的臨床変数に応じて、３．７３（９５％ＣＩ  ３．４０、３．４９）から３．９４（９５％ＣＩ  ３．５９、４．３３）まで変化した。他の２３６種のバイオマーカーがＧＤＦ１５とメトホルミン使用の間の観察された関連に影響を及ぼす程度を決定するために、ＧＤＦ１５と臨床変数のみを含む（すなわち、他のバイオマーカーを含まない）ロジスティック回帰モデルを調査した。これらのモデルは、一貫して、およそ２．６の小さなオッズ比を示した（図１Ｂ）。
【０３６３】
ＧＤＦ１５の平均濃度は、次第に多くなるメトホルミンの用量と共に上昇した（図２）。年齢、性別、体重、以前の心血管事象、以前の糖尿病、クレアチニン、ＨｂＡ１ｃおよびＦＰＧについて考慮した後、標準偏差が１高いごとの自然対数変換したＧＤＦ１５レベル（戻し変換増分１．５２ｎｇ／ｍｌに等しい）は、約２８２ｍｇ高いメトホルミン用量（Ｐ＜０．０００１）を予測した。
【０３６４】
グルコース耐性障害、空腹時血中ブドウ糖不良または初期の糖尿病のいずれかを有するヒトの血清における２３７種のバイオマーカーについてのこの解析により、メトホルミンの使用および用量に対する新規の重要なバイオマーカーとしてＧＤＦ１５が明らかに特定された。メトホルミン使用は、より高いまたはより低いレベルの２５種の他の測定されたバイオマーカーにも独立して（それほど強くないが）関係した（表２）。残りのバイオマーカーは、以下のいずれかの理由でメトホルミンに統計的に関係しなかった：ａ）それらがメトホルミンに本当のところ関係しなかった；またはｂ）メトホルミンへのそれらの関係が、メトホルミンに関係したＧＤＦ１５または他の２５種のバイオマーカーのうちの１種もしくはそれ以上のいずれかへの関係によって統計的に説明された。これらの可能性を、ＧＤＦ１５の遺伝的かつバイオマーカーの決定因子を評価することによって調査した。ＧＤＦ１５レベルに関係する遺伝子多型と他のバイオマーカーの間にいずれの関係もないことにより、任意の他のバイオマーカーへのメトホルミンの作用は、ＧＤＦ１５へのメトホルミンの作用により媒介される傾向にないことが示唆される。
【０３６５】
メトホルミンは、有効なグルコース降下薬であり、これらのデータは、ＧＤＦ１５レベルがメトホルミンの使用および用量の強力な指標であることをはっきりと示す。これらの解析はまた、ＧＤＦ１５レベルへのメトホルミンの作用は、いくつかの理由でグルコースレベルへのメトホルミンの作用と独立しているようであることを示す。第一に、上記、ならびに図１および表２に記したように、ＧＤＦ１５レベルとメトホルミンの使用および用量の間の観察された強力な関係は、メトホルミンと、ＨｂＡ１ｃレベル、空腹時グルコースレベル、インスリンレベルおよびプロインスリンレベルを含むグルコース代謝のマーカーの間の関係と独立している。第二に、インスリン自体は、ＧＤＦ１５の肝細胞分泌に作用しない。第三に、より高いＧＤＦ１５レベルに関係する遺伝子バリアントは、グルコース生理機能に関連する任意の他のバイオマーカーと統計的に関係しない。
【実施例２】
【０３６６】
マウス肝細胞研究におけるＧＤＦ１５産生と分泌に関するメトホルミンの作用
メトホルミンとＧＤＦ１５レベルの間の関係についてさらに理解するために、マウス肝細胞を使用して、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ実験を行った。４頭の異なるＣ５７ＢＩ６野生型雄マウス由来の初代肝細胞を、以前に記載した１４コラーゲン消化によって単離した。簡単には、細胞を、１０％のウシ胎仔血清（ＦＢＳ）と１％の抗生物質−抗真菌剤を含有するＷｉｌｌｉａｍ’ｓ  Ｍｅｄｉａ  Ｅの１２ウェルコラーゲンコーティングプレートに終夜置いた。翌朝、細胞をリン酸緩衝生理食塩水で洗浄し、培地を、０．１％のＦＢＳと、薬物なし、メトホルミン（２５０〜１０００μＭの範囲の濃度）、直接ＡＭＰＫアクチベーターＡ７６９６６２（１０μＭ；ＬＣ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、Ｗｏｂｕｒｎ、ＭＡ）、インスリン（１０ｎＭ；Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）または過酸化水素（０．５ｍＭ、ＥＭＤ  Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）のいずれかを含有する新鮮なＷｉｌｌｉａｍ’ｓ  Ｍｅｄｉａ  Ｅと２４時間置き換えた。次いで、培地を急速凍結し、後の解析のために−８０℃で保存し、総タンパク質またはＲＮＡの評価のための細胞溶解緩衝液に細胞を採取した。
【０３６７】
培地へのＧＤＦ１５放出を市販のＥＬＩＳＡキット（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ、ＭＮ）を使用して測定し、肝細胞タンパク質１ｍｇ当たりで表現した。総ＲＮＡをＴｒｉｚｏｌ  ｐｌｕｓ  ＲＮＡ  Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｋｉｔ（Ａｍｂｉｏｎ）を使用して単離し、Ｓｐｅｅｄｖａｃ（Ｔｈｅｒｍｏ）で濃縮し、次いで、Ｑｕａｎｔ−ＩＴ  ＲｉｂｏＧｒｅｅｎ（ＬｉｆｅＴｅｃｈ）を使用して定量化した。次いで、総ＲＮＡを逆転写し、Ｉｌｌｕｍｉｎａ  ＴｏｔａｌＰｒｅｐ  ＲＮＡ  Ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ  Ｋｉｔ（ＬｉｆｅＴｅｃｈ）を製造業者のプロトコルに従って使用して増幅した。サンプルをＩｌｌｕｍｉｎａ  Ｍｏｕｓｅ  Ｒｅｆ−８  ｖ２．０の相補的ＤＮＡ  ＢｅａｄＣｈｉｐにハイブリダイズし、ｉＳｃａｎ  Ｓｙｓｔｅｍ（Ｉｌｌｕｍｉｎａ）でスキャンした。生サンプルのプローブプロファイルと対照のプローブプロファイルをＧｅｎｏｍｅＳｔｕｄｉｏ  ｖｅｒｓｉｏｎ  １．９．０（Ｉｌｌｕｍｉｎａ）からエクスポートした。発現値は、陰性対照プローブ１５を使用してバックグラウンド作用に対して調整し、ｑｕａｎｔｉｌｅ−ｎｏｒｍａｌｉｚａｔｉｏｎを使用して正規化し、自然対数変換１６した。＞５０％のサンプルにおいて検出Ｐ値＜０．０５を有する合計１２３８１個のＲＮＡ転写プローブを解析した。
【０３６８】
肝臓はメトホルミンが蓄積する主要な器官であるため１８、その作用を単離したマウス肝細胞で試験した。ビヒクルではなくメトホルミン（０．５ｍＭ）が肝細胞培地中のＧＤＦ１５タンパク質を増加させた（図３、パネルＡ）。さらに、増加したＧＤＦ１５タンパク質の分泌は、ＧＤＦ１５ｍＲＮＡの１．６倍の増加を伴った（図３、パネルＢ；Ｐ＝０．００３）。注目すべきことに、ＧＤＦ１５の分泌は、直接ＡＭＰＫアクチベーターＡ７６９６６２１９、２０、またはインスリン２１および過酸化水素２２を含む他の細胞株におけるＧＤＦ１５発現を変更することが示される因子のいずれによっても影響を受けなかった（図４Ａ）。
【０３６９】
メトホルミン−ＧＤＦ１５の関係がグルコースおよびＨｂＡ１ｃレベルの調整後に若干だけ弱まるという事実は、ＧＤＦ１５がメトホルミンの非血糖作用を反映することを示す。
【実施例３】
【０３７０】
マウスのｉｎ  ｖｉｖｏ研究におけるＧＤＦ１５産生および分泌に関するメトホルミンの作用
次に、血清ＧＤＦ１５に関するメトホルミンの作用を、メトホルミンにより急性的にと慢性的にの両方でマウスを処置することによりｉｎ  ｖｉｖｏで調査した。急性実験として、１２頭（すなわち、１群当たり６頭）の２０週齢の雄Ｃ５７ｂＩ６マウス（Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）を１２時間絶食させ、次いで、メトホルミン（体重１ｇ当たり１０μｌの生理食塩水中２５０ｍｇ／ｋｇ）またはビヒクル（体重１ｇ当たり１０μｌの生理食塩水）のいずれかを腹腔内注射する前に、２時間自由に摂食させた。９０分後に血液を尾静脈出血により回収し、血清を上述のＥｌｉｓａ（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ、ＭＮ）を使用してＧＤＦ１５についてアッセイした。次いで、この作用の耐久性を、高脂肪飼料（ＨＦＤ；脂肪から６０％ｋｃａｌ）を６週間摂食した８週齢の肥満の雄Ｃ５７ｂＩ６マウスの血清ＧＤＦ１５レベルを測定することによる慢性的処置実験１７で評価した。次いで、８頭のこのようなマウス（すなわち、１群当たり４頭）は、メトホルミン（飼料１ｋｇ当たり２．５ｇ）または薬物なしのいずれかを加えたＨＦＤをさらに６週間与えられた。処置期間の終わりに、動物から尾静脈出血により供給された血液をサンプリングし、血清ＧＤＦ１５を上述のように測定した。動物実験はすべて、ＭｃＭａｓｔｅｒ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ａｎｉｍａｌ  Ｅｔｈｉｃｓ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅにより承認された。
【０３７１】
生理食塩水の注射と比較して、メトホルミン（２５０ｍｇ／ｋｇ）は、ＧＤＦ１５の９０分血清レベルを有意に上昇させた（Ｐ＜０．０５）（図５、パネルＡ）。この反応の耐久性は、メトホルミンを補充した高脂肪飼料（６０％の高脂肪飼料中２．５ｇ／ｋｇのメトホルミン−血清メトホルミンの臨床的に相関する濃度を引き出し、グルコース恒常性を改善する用量として送達）１７、１８で６週間処置した肥満のインスリン抵抗性マウスで評価した。図５（パネルＢ）に記すように、メトホルミンは、未処置対照と比較して、血清ＧＤＦ１５レベルを有意に上昇させた（Ｐ＜０．０５）。
【実施例４】
【０３７２】
参加者のゲノタイピング
サンプルを、Ｉｌｌｕｍｉｎａ’ｓ  ＨｕｍａｎＣｏｒｅ  Ｅｘｏｍｅ  ｃｈｉｐでゲノタイピングした。標準の品質管理測定を評価した。ＳＮＰは、低いコール率（＜９９％）、ハーディーワインベルグからの偏差（ｐ＜１０−７）、および低いマイナー対立遺伝子頻度（ＭＡＦ＜０．０１）を基準として除外した。低いコール率（＜９９％）、潜在的同系性（ｃｒｙｐｔｉｃ  ｒｅｌａｔｅｄｎｅｓｓ）および遺伝的および報告された性別または民族性の間の不一致を有するサンプルも除去した。品質管理後、サンプルは、４，３９０名の参加者と２８４，０２４種のＳＮＰからなった。ＧＷＡＳは、２８４，０２４種のＳＮＰを使用してＯＲＩＧＩＮの各バイオマーカーについて完了した。各バイオマーカーに関する各ＳＮＰの線形回帰を、従属変数としてバイオマーカーの濃度を用いて、ＰＬＩＮＫソフトウェア（バージョン１．０７）を使用して実施した。回帰モデルは、最初に、各民族群（アフリカ人、欧州人／コーカサス人およびラテンアメリカ人）で別々に計算処理し、年齢、性別、および主要構成成分１〜５を調整した。次いで、結果を、これらの群にわたってメタ解析し、民族群にわたって相対的な一致傾向を確認し、偽陽性数を低減し、集団の階層化によって引き起こされる混同のリスクを最少化させた。
【０３７３】
２つの手法を使用して、ＧＤＦ１５とＧＤＦ１５と共同して変化する他のバイオマーカーの間の関係を調査した。第一に、ＧＤＦ１５遺伝子のイントロン内の遺伝子多型がより高いＧＤＦ１５レベルに関係することが示された（ｒｓ１２２７７３１；対立遺伝子当たり濃度で０．３７８の増加、Ｐ＝４．０１ｅ−４０）。第二に、この多型と２３６種のバイオマーカーレベルのそれぞれの間の関係を、遺伝子解析に同意した４３９０名の参加者の２３６個の線形回帰モデルを使用して評価した。他のバイオマーカーはいずれも、メトホルミン使用のための調整前または後に、０．０００２１未満のＰ値のこの多型に関係しなかった。
【実施例５】
【０３７４】
統計解析
統計解析をＳＡＳのＵＮＩＸ版バージョン９．２（ＳＡＳ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  Ｉｎｃ．、Ｃａｒｙ、Ｎｏｒｔｈ  Ｃａｒｏｌｉｎａ）またはＲ（バージョン３．０．１）を使用して行い、データの解析は自然対数変換ＧＤＦ１５レベルをベースとした。回帰モデルを使用してヒトのデータを解析し、ステューデントのｔ検定またはターキーの検定を使用して肝細胞およびマウスの研究データを解析した。
【０３７５】
医師がメトホルミンを処方する傾向に関係することが知られる年齢、性別、および臨床特性（すなわち、体重、以前の心血管疾患、以前の糖尿病、クレアチニン、ＨｂＡ１ｃおよび空腹時血糖値）に焦点を当てた５つの異なる回帰モデルの結果を精査することによって、ＧＤＦ１５バイオマーカーを特定した。これらのモデルで前進的選択手法を使用し、有意性に対するボンフェローニ補正したＰ値２３７／０．０５（すなわち、０．０００２１）に基づいて２３７種のバイオマーカーすべてからのメトホルミン使用の独立したバイオマーカーの決定因子を特定した。ＧＤＦ１５をメトホルミン使用の非常に強い決定因子として特定した後、次いで、これらの多変量の回帰解析を再度実行し、これらのバイオマーカーを含むことによりＧＤＦ１５とメトホルミン使用の間の関係が弱まるか増幅されるかを決定した。次いで、異なる用量のメトホルミンを摂取するヒトのＧＤＦ１５の平均濃度を計算し、メトホルミン用量とＧＤＦ１５レベルの間の関係を、上記独立した変数について考慮した後、線形回帰を使用して推定した。最後に、同様の前進的選択手法を使用して、ＧＤＦ１５に独立して関係するバイオマーカーを特定した。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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