(57)【要約】  本発明は、１種または複数種のオメガ３脂肪酸塩を含む組成物を製造する方法、この方法によって得ることができる、または得られる当該組成物、ならびに食料品、栄養補助食品、または製薬品のためのこの組成物の使用に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
１種または複数種のオメガ３脂肪酸と、１種または複数種の塩基性アミンと、ペーストの総重量に対して２０重量％以下の水とを含む該ペーストが、１３０℃以下の温度において、均一なペーストが得られるまで、３０秒間から６０分間の間において混錬されることを特徴とする、１種または複数種のオメガ３脂肪酸塩を含む組成物を製造する方法。
【請求項２】
前記塩基性アミンは、リジン、アルギニン、オルニチン、コリン、またはそれらの混合物から選択されることを特徴とする、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
塩基性アミンとして、Ｌ−リジンまたはＬ−リジンとＬ−アルギニンとの混合物が使用され、ならびにＬ−リジンとＬ−アルギニンとの比率が、１０：１から１：１の間であることを特徴とする、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
オメガ３脂肪酸の供給源が、以下：魚油、イカ油、オキアミ油、亜麻仁油、ボラージオイル、藻油、麻実油、なたね油、亜麻仁油、カノーラ油、大豆油、のうちの少なくとも１つから選択されることを特徴とする、請求項１から３のいずれかに記載の方法。
【請求項５】
前記組成物は、さらに、１重量％から１０重量％の間、好ましくは３重量％から７重量％の間のアルカリ土類金属塩、好ましくはマグネシウム塩を含むことを特徴とする、請求項１から４のいずれかに記載の方法。
【請求項６】
前記組成物は、さらに、グリシン、水酸化マグネシウム（Ｍｇ（ＯＨ）２）、ステアリン酸マグネシウム、ＰＵＦＡナトリウム塩、ＰＵＦＡカリウム塩、塩化ナトリウム（ＮａＣｌ）、モノアシルグリセリド、コリン、アルギニン、グリセリン、クレアチン、あるいはロイシン、イソロイシン、バリン、ヒスチジン、メチオニン、フェニルアラニン、およびトレオニンから選択される必須アミノ酸からなる群より選択される、１重量％から１０重量％の間の賦形剤を含むことを特徴とする、請求項１から５のいずれかに記載の方法。
【請求項７】
前記分散液は、該分散液の総重量に対して、５重量％−１０重量％の水、好ましくは７重量％−８重量％水を含むことを特徴とする、請求項１から６のいずれかに記載の方法。
【請求項８】
前記温度は、２５℃−１００℃の範囲、好ましくは４０℃−８０℃の範囲であることを特徴とする、請求項１から７のいずれかに記載の方法。
【請求項９】
前記オメガ３脂肪酸は、該脂肪酸の総重量に対して、合計で３０重量％以上、好ましくは５０重量％以上、特に好ましくは７０重量％以上、とりわけ好ましくは９０重量％以上のエイコサペンタエン酸およびドコサヘキサエン酸を含むことを特徴とする、請求項１から８のいずれかに記載の方法。
【請求項１０】
全ての塩基性アミン分子の総和に対する前記脂肪酸の全てのカルボキシル基の総和のモル比Ｍが、０．８≦Ｍ≦１．２の範囲、好ましくは０．９≦Ｍ≦１．１の範囲、より好ましくは０．９５≦Ｍ≦１．０５の範囲、とりわけ好ましくは０．９８≦Ｍ≦１．０２の範囲であることを特徴とする、請求項１から９のいずれかに記載の方法。
【請求項１１】
前記組成物は、固体が得られるまで、好ましくは５０℃−６０℃の温度範囲において乾燥されることを特徴とする、請求項１から１０のいずれかに記載の方法。
【請求項１２】
前記組成物は、固体材料を得るために、連続プロセスにおいて、混錬後に押し出されることを特徴とする、請求項１から１０のいずれかに記載の方法。
【請求項１３】
前記固体は、カールフィッシャー滴定によって測定した場合の、≦２重量％、好ましくは≦１重量％の水分含有量を有することを特徴とする、請求項１１または１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記固体はミル粉砕されることを特徴とする、請求項１１から１３のいずれかに記載の方法。
【請求項１５】
９０重量％以上のオメガ３脂肪酸塩を含む、請求項１から１３のいずれかに記載の方法によって得ることができる、または得られる組成物であって、少なくとも０．３ｇ／ｍｌの嵩密度を有することを特徴とする組成物。
【請求項１６】
９０重量％以上のオメガ３脂肪酸塩を含む、請求項１から１３のいずれかに記載の方法によって得ることができる、または得られる組成物であって、前記組成物は粉砕された場合、１００μｍ以上の粒径ｄ９０および１７μｍ以上の粒径ｄ５０および５μｍ以上の粒径ｄ１０を有することを特徴とする組成物。
【請求項１７】
食料品、栄養補助食品、または製薬品の製造のための、請求項１５または１６に記載の組成物の使用。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
ここ数十年にわたって科学的証拠が広範に集められたことにより、多数の健康利点が、多価不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡ）の補助摂取に関連付けられてきた。中でも、心血管疾患の予防および炎症の症状の緩和は、最も重要な例であり、とりわけ、いくつかのタイプの癌の促進および進行フェーズの予防、血圧およびコレステロールレベルの低減、ならびにうつ病、統合失調症、アルツハイマー病、失読症、注意欠陥障害、および運動亢進の治療への好影響が報告されている。いくつかのＰＵＦＡは、脳、神経系、および目の発育にとって必須であると考えられているため、近年、調整粉乳に対してある特定のＰＵＦＡを富化することも日常的である。
【０００２】
しかしながら、ＰＵＦＡの酸化に対する感度の高さが、ＰＵＦＡを含む食料品、栄養補助食品、または製薬品の調製を困難にしている。ＰＵＦＡの酸化は、好ましくない栄養生理学的および感覚刺激性の結果、例えば、重要な脂肪酸の分解による栄養素含有量の変化；異臭（ｆｌａｖｏｕｒ  ｔａｉｎｔ）および著しい臭気を生じる酸敗臭；油脂の暗色化などの色変化；ならびに風味の減少など、を有する。ＰＵＦＡの酸化的分解は、揮発性の二次酸化生成物の複合混合物を発生させ、これらは、特に、不快な異臭を生じさせる。
【０００３】
本発明の文脈において、用語「ＰＵＦＡ」および「多価不飽和脂肪酸」は、同じ意味において使用され、以下のように定義される：脂肪酸は、長さおよびそれらの炭素鎖の飽和に従って分類される。短鎖脂肪酸は、２個から約６個の炭素原子を有し、典型的に、飽和または不飽和である。中鎖脂肪酸は、約６個から約１４個の炭素原子を有し、それらも、典型的に、飽和または不飽和である。長鎖脂肪酸は、約１６個から２４個またはそれ以上の炭素原子を有し、飽和または不飽和であり得る。長鎖脂肪酸は、１つまたは複数の不飽和部位を有し得、その場合、用語「単不飽和」または「多価不飽和」となる。本発明の文脈において、１８個以上の炭素原子を有する長鎖多価不飽和脂肪酸は、「多価不飽和脂肪酸」または「ＰＵＦＡ」と呼ばれる。
【０００４】
正式名称では、ＰＵＦＡは、二重結合の数および位置に従って分類される。ＰＵＦＡには、脂肪酸のメチル末端の最も近くの二重結合の位置に応じて、いくつかのシリーズまたはファミリーが存在する。特定の栄養生理学的な意味において２つのシリーズ：三番目の炭素原子に１つの二重結合を有するオメガ３シリーズと、６番目の炭素原子まで二重結合を持たないオメガ６シリーズ、が存在する。したがって、ドコサヘキサエン酸（「ＤＨＡ」）は、メチル末端から三番目の炭素原子を最初として６個の二重結合を伴う２２個の炭素原子の鎖長を有し、「２２：６ｎ−３」（全−ｃｉｓ−４，７，１０，１３，１６，１９−ドコサヘキサエン酸）と呼ばれる。別の重要なオメガ３脂肪酸は、エイコサペンタエン酸（「ＥＰＡ」）であり、これは、「２０：５ｎ−３」（全−ｃｉｓ−５，８，１１，１４，１７−エイコサペンタエン酸）と呼ばれる。重要なオメガ６脂肪酸は、アラキドン酸（「ＡＲＡ」）であり、これは、「２０：４ｎ−６」（全−ｃｉｓ−５，８，１１，１４−エイコサテトラエン酸）と呼ばれる。
【０００５】
塩基性アミノ酸による多価不飽和オメガ３脂肪酸の塩は公知であり、例えば、欧州特許第０７３４３７３（Ｂ１）号などに記載される。オメガ３脂肪酸のＬ−リジン塩は、遊離オメガ３脂肪酸ならびにオメガ３脂肪酸のアルカリ金属塩およびアルカリ土類金属塩と比べて、酸化に対して安定であることが分かっている。オメガ３脂肪酸のアルカリ金属塩およびアルカリ土類金属塩、ならびのそれらの調製は、例えば、欧州特許出願公開第１２６０４９６（Ａ１）号に記載されている。
【０００６】
したがって、これまで、オメガ３脂肪酸のＬ−リジン塩は、極性溶媒または極性溶媒混合物中において遊離オメガ３脂肪酸をＬ−リジンと反応させ、結果として得られる混合物を乾固するまで蒸発させることによって調製される。水または水−アルコール混合物が、溶媒または溶媒混合物として使用される。当該オメガ３脂肪酸Ｌ−リジン塩は、例えば、欧州特許第０７３４３７３（Ｂ１）号に記載されるように、ろう状の粘度を有する固体として得られるか、または、例えば、独国特許第３９０７６４９（Ｃ２）号に記載されるように、およそ１９０℃の分解を伴う融点を有する結晶性物質として得られる。
【０００７】
減圧下での水または水−アルコール混合物中におけるオメガ３脂肪酸Ｌ−リジン塩の溶液の蒸発は、非常にエネルギー消費型のプロセスである。その上、当該プロセスは、達成するのが技術的に非常に困難であり、というのも、オメガ３脂肪酸Ｌ−リジン塩は界面活性剤特性を有しており、したがって、その溶液は、蒸発するときに泡を形成する傾向があり、蒸発の際、当該溶液の粘度は、粘着性のゲルが形成されるまで著しく増加し、さらなる乾燥の際には、固形発泡体を形成するためである。
【０００８】
当該オメガ３脂肪酸Ｌ−リジン塩を単離するためのさらなる可能性は、＞５０重量％のオメガ３脂肪酸Ｌ−リジン塩の濃度において水性エタノール溶液を噴霧乾燥する工程からなる。しかしながら、噴霧乾燥における有機溶媒の使用は、特定の安全対策、例えば、不活性ガス雰囲気などを必要とする。さらに、必要な溶媒の凝縮によって、コストも著しく増加される。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
したがって、エネルギー効率的およびコスト効率的の両方において、ならびに特定の安全対策を用いずに標準的な機器を使用して実施することができ、食品添加物としての使用に必要な純度においてオメガ３脂肪酸塩を提供する、オメガ３脂肪酸塩を調製するための最もシンプルで効率的な方法が依然として必要とされている。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
驚くべきことに、オメガ３脂肪酸塩は、単純に、１種または複数種のオメガ３脂肪酸と、１種または複数種の塩基性アミンと、ペーストの総重量に対して２０重量％以下の水とを含むペーストを、１３０℃以下の温度において混錬することによって得ることができることが見出された。
【００１１】
したがって、本発明は、第一態様において、１種または複数種のオメガ３脂肪酸と、１種または複数種の塩基性アミンと、ペーストの総重量に対して２０重量％以下の水とを含むペーストが、１３０℃以下の温度において、均一なペーストが得られるまで、３０秒間から６０分間の間において混錬されることを特徴とする、１種または複数種のオメガ３脂肪酸塩を含む組成物を調製する方法に関する。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
本発明の文脈において、おそらく当該塩基性アミン中に存在する結晶水は、水分含有量の計算において考慮される。
【００１３】
本発明の文脈において、用語「ペースト」は、十分な大きさの負荷または応力が加えられるまで固体として振る舞い、その時点において流体のように流動する、懸濁物として理解される。当該ペーストは、背景流体（水）中における粒状材料の懸濁物からなる。権利請求されるプロセスにおいて、当該ペーストは、練り粉のような材料であり、固く、可鍛性で、弾性のペーストを意味する。権利請求されるプロセス内において、当該ペーストは、混錬することができ、従来の練り粉のように取り扱うことができる。
【００１４】
当該ペーストは、水中において、３０秒間から６０分間の間において、オメガ３脂肪酸を塩基性アミンと混合する（最大２０重量％）ことによって得られる。当該ペーストは、背景流体中に粒状材料と油相とが均一に分配されるとき、均一であるとみなされる。当該ペーストは、従来の練り粉と比較することができる。
【００１５】
本発明の文脈において、用語「混錬する」は、分散物が、「ｗｏｒｋｅｄ  ｉｎｔｏ  ａ  ｕｎｉｆｏｒｍ  ｍｉｘｔｕｒｅ  ｂｙ  ｐｒｅｓｓｉｎｇ（加圧によって均一な混合物にする）」という「辞書」における定義に一致すると理解される。
【００１６】
最も単純な例では、例えば、実験施設において、分散物は、ミキサーを使用することによって混錬され得る。工業的用途では、分散物の混錬は、例えば、押出機によって行われる。したがって、本発明によりここで説明される方法を継続的に実施することも可能である。
【００１７】
反応の転化率は、この場合、ＩＲ分光法によって、詳細には、遊離オメガ３脂肪酸の約１７０７ｃｍ−１から、塩形成後の約１５７８ｃｍ−１へのＣ＝Ｏ吸収帯のシフトによって定量的に特定することができる。したがって、オメガ３脂肪酸からオメガ３脂肪酸塩への９０重量％以上の転化は、１０％以下へのオメガ３脂肪酸の１７０７ｃｍ−１のＣ＝Ｏ吸収帯の減少に対応する。ＩＲスペクトルの定量評価を可能にする好適なソフトウェアは、例えば、Ｂｒｕｋｅｒ  Ｏｐｔｉｃｓ製のプログラムＯｐｕｓ  バージョン７．５である。
【００１８】
各場合において、オメガ３脂肪酸の９０重量％以上をオメガ３脂肪酸塩に転化ために必要な時間は、使用される水の量および温度設定に相互的に関連する。本発明により、オメガ３脂肪酸の９０重量％以上をオメガ３脂肪酸塩に転化するために必要な時間は、３０秒間から６０分間の間、好ましくは１分間から３０分間の間である。
【００１９】
最初に言及したように、オメガ３脂肪酸は、酸化および温度に影響を受けやすい。酸化分解の１つの指標として、典型的には、アニシジン価（ＡＮ）および過酸化物価（ＰＮ）が、特定される。熱分解に対しては、ゲルクロマトグラフィによって特定することができるオリゴマー含有量が、好適な指標である。
【００２０】
過酸化物価（ＰＮ）は、一次酸化生成物（二重結合のヒドロペルオキシド形成）の指標であり、アニシジン価（ＡＮ）は、二次分解生成物（カルボニル化合物）の指標である。ＴＯＴＯＸ価は、ＴＯＴＯＸ＝２＊ＰＮ＋ＡＮ（ここで、ＰＮは、試料の１ｋｇあたりのＯ２のミリ当量において述べられる）として計算される。過酸化物価（ＰＮ）およびアニシジン価（ＡＮ）を特定する方法は、例えば、Ｄａｖｉｄ  Ｆｉｒｅｓｔｏｎｅによって発行された「Ｏｆｆｉｃｉａｌ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ａｎｄ  Ｒｅｃｏｍｍｅｎｄｅｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ＡＯＣＳ」，第６版  ２０１３年、ＩＳＢＮ９７８−１−８９３９９７−７４−５などの文献に記載されているため、参照されたい。ＰＮは、Ｐｈ．Ｅｕｒ．２．５．５（０１／２００８：２０５０５）により特定することもでき、ＡＮは、Ｐｈ．Ｅｕｒ．２．５．３６（０１７２００８：２０５３６）により特定することもできる。
【００２１】
試料の過酸化物価（ＰＮ）を特定する方法の例は、以下のように実施される。
試薬および溶液：
１．酢酸−クロロホルム溶液（７．２ｍｌの酢酸と４．８ｍｌのクロロホルム）。
２．ヨウ化カリウム飽和溶液。光から保護して保管。
３．チオ硫酸ナトリウム溶液、０．１Ｎ。商業的に入手可能。
４．１％デンプン溶液。商業的に入手可能。
５．蒸留水または脱イオン水。
方法：
試薬のブランク値の決定を実施する。
１．スライドガラスストッパを備える１００ｍｌの三角フラスコに２．００（±０．０２）ｇの試料を計量する。０．０１ｇの精度まで重量を計量する。
２．メスシリンダを使用して１２ｍｌの酢酸−クロロホルム溶液を加える。
３．試料が完全に溶解するまで三角フラスコを回し振る（ホットプレート上において注意深く加熱する必要の可能性もある）。
４．メスピペットによって０．２ｍｌのヨウ化カリウム飽和溶液を加える。
５．ストッパで三角フラスコに封をし、正確に１分間、フラスコの内容物を回し振る。
６．すぐにメスシリンダによって１２ｍｌの蒸留水または脱イオン水を加え、ストッパでフラスコの封をし、クロロホルム層からヨウ素を分離するために激しく振盪する。
７．ビュレットを０．１Ｎのチオ硫酸ナトリウムで満たす。
８．溶液の出発色が深い赤橙色の場合、色がより明るくなるまで当該混合物でゆっくりと滴定する。溶液が最初から明るい琥珀色の場合、ステップ９に進む。
９．計量装置を使用して、指示薬として１ｍｌのデンプン溶液を加える。
１０．水相（上側の層）の青灰色が消えるまで滴定する。
１１．小数第２位まで滴定剤の正確なｍｌ値を記録する。
計算：
Ｓ＝試料の滴定
Ｂ＝ブランクの滴定
過酸化物価＝（Ｓ−Ｂ）＊チオ硫酸のＮ＊１０００／試料重量
【００２２】
試料のアニシジン価（ＡＮ）を特定する方法の例は、以下のように実施した。
当該アニシジン価は、以下の方法に従って、溶媒と試薬との混合物１００ｍｌ中における調査対象物質１ｇを含む溶液の、１ｃｍのセルにおいて測定される光学濃度の１００倍として定義される。作業手順は、可能な限り迅速に実施されなければならず、化学光の導入を避けなければならない。
【００２３】
試料溶液（ａ）：０．５００ｇの調査対象の溶液をトリメチルペンタンに溶解させ、２５．０ｍｌの同じ溶媒で希釈する。
【００２４】
試料溶液（ｂ）：氷酢酸中におけるｐ−アニシジンの２．５ｇ／ｌ溶液の１．０ｍｌを、５．０ｍｌの試料溶液（ａ）に加え、振盪し、光から保護しながら保管する。
【００２５】
比較溶液：氷酢酸中におけるｐ−アニシジンの２．５ｇ／ｌ溶液の１．０ｍｌを、５．０ｍｌのトリメチルペンタンに加え、振盪し、光から保護しながら保管する。補償液体としてトリメチルペンタンを使用した場合の最大値である３５０ｎｍにおいて、試料溶液（ａ）の吸光度を測定する。補償液体として比較溶液を使用した調製から正確に１０分後に、３５０ｎｍにおいて試料溶液（ｂ）の吸光度を測定する。アニシジン価（ＡＮ）を以下の方程式から算出する。
ＡＮ＝（２５＊（１．２＊Ａ１−Ａ２））／ｍ
Ａ１＝３５０ｎｍでの試料溶液（ｂ）の吸光度
Ａ２＝３５０ｎｍでの試料溶液（ａ）の吸光度
ｍ＝試料溶液中における調査対象の物質のグラムでの質量
【００２６】
酸化に対する試料の安定性が、（１）酸化度を測定する工程、（２）試料を酸化条件に晒す工程、および（３）酸化度を再び測定する工程、によって比較される場合、工程（１）および（３）における、本発明の文脈における酸化度は、好ましくは、過酸化物価（ＰＮ）および／またはアニシジン価（ＡＮ）を特定することによって評価され、さらに、工程（２）における酸化条件は、好ましくは、以下のうちの１つから選択される：少なくとも１０日の所定の期間にわたっての、室温において空気に晒されている状態での、開放された容器での貯蔵；少なくとも３日の所定の期間にわたっての、５０℃において空気に晒されている状態での、開放された容器での貯蔵。
【００２７】
驚くべきことに、本発明に従って調製されたオメガ３脂肪酸塩の酸化に対する感度は、調製プロセスにおいて設定された温度だけでなく、調製プロセスにおいて使用された水分含有量にも依存することが見出された。
【００２８】
本発明による方法の好ましい実施形態において、塩基性アミンは、リジン、アルギニン、オルニチン、または様々な比率でのそれらの混合物から選択される塩基性アミノ酸である。
【００２９】
塩基性アミンとして、Ｌ−リジンまたはＬ−リジンとＬ−アルギニンとの混合物を使用すること、ならびにＬ−リジンとＬ−アルギニンとの比率が、１０：１から１：１の間であることは、さらに好ましい。
【００３０】
さらに有利な実施形態において、当該組成物は、さらに、１重量％から１０重量％の間、好ましくは３重量％から７重量％の間のアルカリ土類金属塩、好ましくはマグネシウム塩を含む。ステアリン酸マグネシウムまたは水酸化マグネシウムから選択されるマグネシウム塩の使用は、さらに好ましい。
【００３１】
さらなる好ましい実施形態において、１重量％から１０重量％の間の賦形剤を当該組成物に加えることができる。「賦形剤」は、有効成分と共に配合される物質であり、長期安定化、固形製剤の嵩増しまたは吸収の促進、粘度の低下、溶解性の向上、または有効物質の取り扱いを助力するために製造プロセスにおいて有用にするなどの目的のために含ませられる。
【００３２】
好ましい賦形剤は、崩壊剤：水酸化マグネシウム（Ｍｇ（ＯＨ）２）、ステアリン酸マグネシウム、ＰＵＦＡナトリウム塩、ＰＵＦＡカリウム塩、グリシン、塩化ナトリウム（ＮａＣｌ）、グリセリン、または可塑剤：水酸化マグネシウム（Ｍｇ（ＯＨ）２）、ステアリン酸マグネシウム、コリン、アルギニン、グリセリンから選択される。矯味のため、グリシンまたはグリセリンを使用することができる。その上、モノアシルグリセリド、クレアチン、または必須アミノ酸、例えば、ロイシン、イソロイシン、バリン、ヒスチジン、メチオニン、フェニルアラニン、およびトレオニンなど、から選択される、追加の健康効果を有するさらなる物質を、当該組成物に加えることができる。
【００３３】
本発明による方法の好ましい構成において、使用される分散液は、当該分散液の総重量に対して、５重量％から１０重量％の水、好ましくは７重量％から８重量％水を含む。
【００３４】
本発明による方法のさらなる好ましい構成において、調節された温度は、２５℃から１００℃の範囲、好ましくは４０℃から８０℃の範囲である。
【００３５】
本発明の好ましい態様において、好ましい出発分散液は、かなりの量の遊離脂肪酸を含む。したがって、脂肪酸（すなわち、遊離カルボキシル基を有する脂肪酸）の総量は、好ましくは、揮発性成分を考慮に入れずに、出発分散液の少なくともｘ重量パーセントであり、この場合、ｘは、３０、４０、５０、６０、６５から選択される。
【００３６】
本発明の好ましい態様において、好ましい出発分散液は、かなりの量の塩基性アミノ酸を含む。したがって、当該塩基性アミノ酸の総量は、好ましくは、揮発性成分を考慮に入れずに、出発分散液の少なくともｙ重量パーセントであり、この場合、ｘは、１５、２０、２５、３０から選択される。
【００３７】
オメガ３脂肪酸は、本発明による方法において個別にまたは任意の組み合わせにおいて使用することができ、例えば、α−リノレン酸（ＡＬＡ）１８：３（ｎ−３）（ｃｉｓ，ｃｉｓ，ｃｉｓ−９，１２，１５−オクタデカトリエン酸）、ステアリドン酸（ＳＤＡ）１８：４（ｎ−３）（全−ｃｉｓ−６，９，１２，１５，−オクタデカテトラエン酸）、エイコサトリエン酸（ＥＴＥ）２０：３（ｎ−３）（全−ｃｉｓ−１１，１４，１７−エイコサトリエン酸）、エイコサテトラエン酸（ＥＴＡ）２０：４（ｎ−３）（全−ｃｉｓ−８，１１，１４，１７−エイコサテトラエン酸）、ヘネイコサペンタエン酸（ＨＰＡ）２１：５（ｎ−３）（全−ｃｉｓ−６，９，１２，１５，１８−ヘネイコサペンタエン酸）、ドコサペンタエン酸（クルパノドン酸）（ＤＰＡ）２２：５（ｎ−３）（全−ｃｉｓ−７，１０，１３，１６，１９−ドコサペンタエン酸、テトラコサペンタエン酸２４：５（ｎ−３）（全−ｃｉｓ−９，１２，１５，１８，２１−テトラコサペンタエン酸）、テトラコサヘキサエン酸（ニシン酸）２４：６（ｎ−３）（全−ｃｉｓ−６，９，１２，１５，１８，２１−テトラコサヘキサエン酸）を含む。
【００３８】
本発明による方法において使用され得る多価不飽和オメガ３脂肪酸は、任意の好適な出発材料から得ることができ、さらに任意の好適な方法によって処理することができる。典型的な出発材料としては、魚の全ての部分、野菜および他の植物、ならびに微生物発酵または藻の発酵由来の材料が挙げられる。そのような出発材料に対する典型的な処理方法は、とりわけ、粗油抽出のための工程、例えば、出発物質の抽出および分離、ならびに粗油精製のための工程、例えば、析出および脱ガム、脱酸、脱色、および脱臭など、である（例えば、「ＥＦＳＡ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｏｎ  Ｆｉｓｈ  Ｏｉｌ  ｆｏｒ  Ｈｕｍａｎ  Ｃｏｎｓｕｍｐｔｉｏｎ」を参照されたい）。出発材料として様々な植物油、例えば、亜麻仁油、藻油、麻実油、なたね油、ボラージオイル、亜麻仁油、カノーラ油、大豆油など、を使用することは有利である。さらなる処理方法としては、とりわけ、対応する遊離オメガ３脂肪酸またはそれらの無機塩への、オメガ３脂肪酸エステルの少なとも部分的転化が挙げられる。
【００３９】
本発明のさらなる好ましい実施形態において、オメガ３脂肪酸の供給源は、以下：魚油、イカ油、オキアミ油、亜麻仁油、ボラージオイル、藻油、麻実油、なたね油、亜麻仁油、カノーラ油、大豆油、のうちの少なくとも１つから選択される。
【００４０】
本発明による方法において使用され得る多価不飽和オメガ３脂肪酸は、オメガ３脂肪酸エステルを切断する工程と、それに続く、主にオメガ３脂肪酸エステルからなる組成物からのエステルとして前もって結合されたアルコールの除去によっても得ることができる。エステルの切断は、好ましくは、塩基性条件下で実施される。エステル切断の方法は、先行技術から周知である。
【００４１】
本発明の文脈において、使用される好ましいオメガ３脂肪酸は、エイコサペンタエン酸（「ＥＰＡ」）およびドコサヘキサエン酸（「ＤＨＡ」）である。エイコサペンタエン酸（「ＥＰＡ」）とドコサヘキサエン酸（「ＤＨＡ」）とによる混合物を使用することは、さらに好ましい。
【００４２】
本発明による方法の好ましい構成において、脂肪酸の総重量に対して、合計で３０重量％以上、好ましくは５０重量％以上、特に好ましくは７０重量％以上、とりわけ好ましくは９０重量％以上のエイコサペンタエン酸およびドコサヘキサエン酸を含むオメガ３脂肪酸の混合物が使用される。
【００４３】
全ての塩基性アミン分子の総和に対する当該脂肪酸の全てのカルボキシル基の総和のモル比Ｍは、最大量での塩形成を可能にするために、可能な限り等モルであるべきである。
【００４４】
本発明による方法の好ましい構成において、全ての塩基性アミン分子の総和に対する当該脂肪酸の全てのカルボキシル基の総和のモル比Ｍは、０．８≦Ｍ≦１．２の範囲、より好ましくは０．９≦Ｍ≦１．１の範囲、さらにより好ましくは０．９５≦Ｍ≦１．０５の範囲、とりわけ好ましくは０．９８≦Ｍ≦１．０２の範囲である。
【００４５】
驚くべきことに、本発明に従って調製されたオメガ３脂肪酸塩は、難なく乾燥することができる。
【００４６】
したがって、本発明による方法の好ましい構成において、結果として得られる組成物は、固体が得られるまで、好ましくは５０℃−６０℃の温度範囲および２０ｍｂａｒ以下の圧力において乾燥される。結果として得られる固体は、好ましくは、カールフィッシャー滴定によって測定した場合の、≦２重量％、特に好ましくは≦１重量％の水分含有量を有する。
【００４７】
代替の実施形態において、当該組成物は、固体材料を得るために、連続プロセスにおいて混錬後に押し出される。
【００４８】
驚くべきことに、本発明に従って調製されたオメガ３脂肪酸塩は、非常に脆く、標準的ミル、例えば、Ｒｅｔｓｃｈボールミルなど、によって容易に粉砕することができることも見出されたが、これは、前に説明したオメガ３脂肪酸塩の特性により、必ずしも予想されたわけではない。
【００４９】
したがって、本発明による方法の好ましい構成において、得られた固体は、粉砕される。
【００５０】
９０重量％以上のオメガ３脂肪酸を含む本発明による組成物は、典型的には、当該組成物を、毎分２５０回転の粉砕速度および３０ｍｍの粉砕ボール直径において、Ｒｅｔｓｃｈボールミル  タイプＳＭ１で３０秒間粉砕した場合の、１００μｍ以上の粒径Ｄ９０および１７μｍ以上の粒径Ｄ５０および５μｍ以上の粒径Ｄ１０を有する。
【００５１】
したがって、本発明は、９０重量％以上のオメガ３脂肪酸を含む組成物であって、当該組成物が、当該組成物を、毎分２５０回転の粉砕速度および３０ｍｍの粉砕ミル直径において、Ｒｅｔｓｃｈボールミル  タイプＳＭ１で３０秒間粉砕した場合の、１００μｍ以上、好ましくは１２０μｍ以上、特に好ましくは１４０μｍ以上の粒径Ｄ９０、および１７μｍ以上、好ましくは１９μｍ以上、特に好ましくは２１μｍ以上の粒径Ｄ５０、および５μｍ以上、好ましくは６μｍ以上、特に好ましくは７μｍ以上の粒径Ｄ１０を有することを特徴とする、組成物にも関する。
【００５２】
本発明は、さらなる態様において、ここで説明される本発明による方法によって得ることができる、または得られる組成物にも関する。したがって、本発明は、１種または複数種のオメガ３脂肪酸と、１種または複数種の塩基性アミンと、ペーストの総重量に対して２０重量％以下の水とを含むペーストが、１３０℃以下の温度において、均一なペーストが得られるまで、３０秒間から６０分間の間において混錬されることを特徴とする方法によって得ることができる、または得られる組成物にも関する。当該組成物は、粉砕された生成物に関して、高密度、特に高嵩密度の利点を有する。得られた生成物の嵩密度は、少なくとも０．３ｇ／ｍｌ、好ましくは少なくとも０．５ｇ／ｍｌ、より好ましくは少なくとも０．６ｇ／ｍｌである。
【００５３】
本発明は、食料品、栄養補助食品、または製薬品の調製のための、本発明による組成物の使用にも関する。
【００５４】
本発明の文脈において、食料品および栄養補助食品は、これらに限定されるわけではないが、パン製品、ビタミン添加剤、飲料粉末、練り生地、バター、焼き菓子、例えば、ケーキ、チーズケーキ、パイ、カップケーキ、ビスケット、パン、ロールパン、クッキー、マフィン、ペストリー、スコーン、およびクルトンなど；液体食料品、例えば、飲料、栄養ドリンク、調整粉乳、流動食、果実ジュース、総合ビタミンシロップ、ミールリプレイスメントなど；半固体食料品、例えば、調製粉乳、ヨーグルト、チーズ、シリアルフレーク、パンケーキミックスなど；栄養バー、例えば、エネルギーバーなど；加工肉；アイスクリーム；フローズンデザート；冷凍ヨーグルト；ウェハ混合物；サラダドレッシング；卵の代用品混合物；クッキー、クラッカー、菓子、スナック食品、ミューズリー／スナックバー、ポップターツ、塩味のニブル、例えば、ポテトチップ、コーンチップ、トルティヤチップ、押出しスナック、ポップコーン、およびナッツなど；特定のスナック、例えば、ディップ、ドライフルーツ、ミートスナック、フライスナック、健康バー、および米／コーンのウェハなど；菓子、例えば、スウィーツなど；インスタント食品、例えば、即席めん、インスタントの固形スープ、または即席粉末などを含む。
【００５５】
本発明の文脈において、製薬品は、ここで説明されるオメガ３脂肪酸塩に加えて、薬学的に許容される助剤および薬学的有効成分、例えば、スタチン、降圧薬、抗糖尿病薬、抗痴呆薬、抗うつ薬、抗肥満薬、食欲抑制剤、ならびに記憶および／または認識機能を改善する薬剤などを含み得る。
【００５６】
既に述べたように、塩基性アミノ酸と多価不飽和脂肪酸とによる塩は、先行技術により公知であるが（欧州特許第０７３４３７３（Ｂ１）号を参照されたい）、Ｌ−リジンまたは他の塩基性アミンと多価不飽和脂肪酸とによる塩が、多価不飽和脂肪酸と、Ｌ−リジンもしくは他の塩基性アミノ酸と、水とによるペーストを混錬することによって調製することができることは知られていなかった。この文脈において、塩基性アミノ酸と多価不飽和脂肪酸とによる塩が、これまで、「非常に濃く、透明な油であり、低温においてろう状の外観およびろう状の性質を有する固体へと変化する」として説明されてきたことは重要である（欧州特許第０７３４３７３（Ｂ１）号、第１頁、第４７−４８行を参照されたい）。その結果、当業者は、オメガ３脂肪酸塩が、オメガ３脂肪酸と、Ｌ−リジンもしくは他の塩基性アミンと、水とによるペーストを混錬することによって調製することができるとは予想していなかったであろう。したがって、本発明の文脈において、実際にオメガ３脂肪酸塩を混錬によって容易に得ることができるということが見出されたことは、驚くべきことである。既に最初に説明したように、当該混錬条件は、各場合における温度設定および使用される水の量に対して調節することができる。しかしながら、そのような調節は、平均的な当業者の日常的な実験研究の一部である。
【００５７】
以下において、本発明による方法について、オメガ３脂肪酸による使用に対して詳細に説明する。ただし、オメガ６脂肪酸の使用も可能である。
【００５８】
オメガ６脂肪酸は、本発明による方法において個別にまたは任意の組み合わせにおいて使用することができ、例えば、γ−リノレン酸（ＧＬＡ）１８：３（ｎ−６）（全−ｃｉｓ−６，９，１２−オクタデカトリエン酸）、リノール酸（ＬＡ）１８：２（ｎ−６）（（９Ｚ，１２Ｚ）−９，１２−オクタデカジエン酸）、エイコサジエン酸２０：２（ｎ−６）（全−ｃｉｓ−１１，１４−エイコサジエン酸）、ジホモガンマリノレン酸（ＤＧＬＡ）２０：３（ｎ−６）（全−ｃｉｓ−８，１１，１４−エイコサトリエン酸）、アラキドン酸（ＡＲＡ）２０：４（ｎ−６）（全−ｃｉｓ−５，８，１１，１４−エイコサテトラエン酸）、ドコサジエン酸２２：２（ｎ−６）（全−ｃｉｓ−１３−１６−ドコサジエン酸）、アドレン酸２２：４（ｎ−６）（全−ｃｉｓ−７，１０，１３，１６−ドコサテトラエン酸）、ドコサペンタエン酸（オスボンド酸）２２：５（ｎ−６）（全−ｃｉｓ−４，７，１０，１３，１６−ドコサペンタエン酸）、テトラコサテトラエン酸２４：４（ｎ−６）（全−ｃｉｓ−９，１２，１５，１８−テトラコサテトラエン酸）、テトラコサペンタエン酸２４：５（ｎ−６）（全−ｃｉｓ−６，９，１２，１５，１８−テトラコサペンタエン酸）を含む。
【００５９】
本発明を、以下の非限定的な実験によって詳細に説明する。
【００６０】
実験：
分析方法：
一次酸化生成物（二重結合におけるヒドロ過酸化物）は、Ｐｈ．Ｅｕｒ．２．５．５（０１／２００８：２０５０５）に従って過酸化物価（ＰＮ）の特定によって定量的に特定した。二次酸化生成物（カルボニル化合物）は、Ｐｈ．Ｅｕｒ．２．５．３６（０１／２００８：２０５３６）に従ってアニシジン価（ＡＮ）の特定によって定量的に特定した。
【００６１】
オリゴマー性オメガ３脂肪酸成分およびそれらの誘導体（まとめて、オリゴマー含有量と呼ぶ）は、ゲルクロマトグラフィ（ＧＰＣ、溶離液として、トリフルオロ酢酸を含有するテトラヒドロフランを用いたスチレン−ジビニルベンゼン相）によって定量した。当該特定のために、屈折率検出器（ＲＩ）を使用した。試料の構成に特定の反応因子は不明であったため、量的比率は、クロマトグラムの総面積の屈折率比に基づいて計算した。
【００６２】
水分含有量は、カールフィッシャー滴定によって特定した。
【００６３】
酸価は、水酸化カリウムによる滴定によって特定した。
【００６４】
１．  ３．８％の水の添加による実験
１７８．８５ｍｇＫＯＨ／ｇの酸価を有する脂肪酸（５０％のＥＰＡおよび２０％のＤＨＡの脂肪酸含有量の魚油から調製した）の２７０．０ｇと、１４１．４ｇのリジン一水和物（これは、１２５．９ｇのＬ−リジンおよび１５．５ｇの水に相当する）を、混錬機（サーモフィッシャー  Ｒｈｅｏｍｉｘ  ３０００Ｅ、容積：約３１０ｍｌ、ローラロータ（Ｒ３）を備える）に装入し、続いて、最初に７０−９０℃で混錬した。最初、均一な混合物が形成されなかったため、温度を１２０℃に上げた。泡状の水蒸気が放出され、均一な溶融物が形成された。１２０℃において約１０分後、当該混合物を混錬機から排出させた。これにより、３３９ｇの生成物が得られ、冷却すると固化した。２９４．２ｇの当該湿った生成物を、乾燥キャビネットにおいて５０−６０℃および２０ｍｂａｒで一晩乾燥させた。細かく粉砕した後、０．６６５ｇ／ｍｌの嵩密度を有する固体２８３ｇが得られた。
【００６５】
２．  ７．５％の水の添加による実験
実験１と類似して、１７８．８５ｍｇＫＯＨ／ｇの酸価を有する脂肪酸（５０％のＥＰＡおよび２０％のＤＨＡの脂肪酸含有量の魚油から調製した）の２５０．０ｇと、１３１．０ｇのリジン一水和物（これは、１１６．６ｇのＬ−リジンおよび１４．４ｇの水に相当する）を、１５．３ｇの水を添加して、５０℃で１０分間反応させた。これにより、塑性固体として、３７６ｇの湿った生成物を得た。３３５．８ｇの当該湿った生成物を、乾燥キャビネットにおいて５０−６０℃および２０ｍｂａｒで一晩乾燥させた。これを細かく粉砕した後、０．５８５ｇ／ｍｌの嵩密度を有する固体３１３ｇが得られた。
【００６６】
３．  １５％の水の添加による実験
実験１と類似して、１７５．３ｍｇＫＯＨ／ｇの酸価を有する脂肪酸（５０％のＥＰＡおよび２０％のＤＨＡの脂肪酸含有量の魚油から調製した）の２３０．０ｇと、１１７．８ｇのリジン一水和物（これは、１０４．９ｇのＬ−リジンおよび１２．９ｇの水に相当する）を、４６．２ｇの水を添加して、２５℃で６０分間反応させた。これにより、クリーム状の３７３ｇの湿った生成物を得た。３３３ｇの当該湿った生成物を、乾燥キャビネットにおいて５０−６０℃および２０ｍｂａｒで一晩乾燥させたところ、固体発泡体が形成された。これを細かく粉砕した後、０．３７５ｇ／ｍｌの嵩密度を有する固体２８２ｇが得られた。
【００６７】
４．  ２０．４％の水の添加による実験
実験１と類似して、１７５．３ｍｇＫＯＨ／ｇの酸価を有する脂肪酸（５０％のＥＰＡおよび２０％のＤＨＡの脂肪酸含有量の魚油から調製した）の２００．０ｇと、１０２．５ｇのリジン一水和物（これは、９１．２ｇのＬ−リジンおよび１１．３ｇの水に相当する）を、６３．５ｇの水を加えて、２５℃で６０分間反応させた。これにより、粘着性のペースト状の３７１ｇの湿った生成物を得た。３３０ｇの当該湿った生成物を、乾燥キャビネットにおいて５０−６０℃および２０ｍｂａｒで一晩乾燥させたところ、固体発泡体が形成された。これを細かく粉砕した後、０．３４７ｇ／ｍｌの嵩密度を有する固体２６５ｇが得られた。
【００６８】
５．  水を添加しない比較実験
１７５．３ｍｇＫＯＨ／ｇの酸価を有する脂肪酸（５０％のＥＰＡおよび２０％のＤＨＡの脂肪酸含有量の魚油から調製した）の２５０．０ｇと、１１４ｇの無水リジンを、混錬機（サーモフィッシャーＲｈｅｏｍｉｘ  ３０００Ｅ、容積：約３１０ｍｌ、ローラロータ（Ｒ３）を備える）に装入し、続いて、最初に１００℃で混錬した。最初、均一な混合物が形成されなかったため、温度を段階的に１５０℃まで上げた。１５０℃において２０分後、実験を停止し、当該混合物を混錬機から排出させた。これにより、３３０ｇの生成物が得られ、これは、かなりの固体リジンを依然として含んでいることは明白であった。
【００６９】
サーモフィッシャーＲｈｅｏｍｉｘ  ３０００Ｅでの混錬実験の条件および５０−６０℃／２０ｍｂａｒでの乾燥後の水分含有量を表１にまとめる。当該実験において、生成物は、冷却後に機械的に混錬機からかき取った。
【００７０】
【表１】
2019516845.tif 000002
【００７１】
２０．４％および１５．０％の水の場合、室温で混錬することによって均一な混合物が既に得られたが、７．５％および３．８％の実験では（これは、リジン一水和物の使用に対応する）、これに対して５５℃および１３０℃の温度を適用しなければならなかった。水を添加しない実験において、１５０℃において２０分後でさえ、均一な混合物は達成されなかった。固体リジンのある特定の量は、その後の生成物において、依然として目についた。
【００７２】
０％、３．８％、および７．５％の水を用い、減圧下において５０−６０℃で乾燥させた生成物は、それらの形態を顕著には変化しなかったが、１５％および２０．４％の水を用いた生成物は、固体発泡体を形成したが、容易に細かく粉砕することができた。しかしながら、発泡体形成は、乾燥状態の粉砕固体の嵩密度において際立った減少を生じる（表１）。３．８％および７．５％の水を用いた生成物は、それぞれ、０．６６５ｇ／ｍｌまたは０．５８５ｇ／ｍｌであるが、１５％および２０．４％の水を用いた生成物は、それぞれ、０．３７５ｇ／ｍｌまたは０．３４７ｇ／ｍｌの嵩密度しか有さないものが得られた。ただし、ミル粉砕後は、有意な差は認められなかった。全ての場合において、０．５％未満の残留水分含有量が達成された。
【００７３】
サーモフィッシャーＲｈｅｏｍｉｘ  ３０００Ｅでの混錬実験による生成物のアニシジン価（ＡＮ）および過酸化物価（ＰＮ）ならびにオリゴマー含有量を、表２にまとめる。      
【００７４】
【表２】
2019516845.tif 000003
【００７５】
当該試料から特定された値が示すように、ＴＯＴＯＸ価およびオリゴマー含有量の両方は、温度と共に増加している。３．８％の水を用いた試料の場合、値は、依然として許容可能であるが、水を添加していない試料では、ＴＯＴＯＸ価およびオリゴマー含有量の両方は、著しく増加している。
【００７６】
６．  実験１−５からの生成物によるミル粉砕実験
各場合において、実験１−４からの乾燥試料の約７０ｇを、Ｒｅｔｓｃｈボールミル  タイプＳＭ１により、毎分２５０回転の粉砕速度および３０ｍｍの粉砕ボール直径において、３０分間、ミル粉砕した。ミル粉砕ポットの容量は、２５０ｍｌであり、ミル粉砕ポットおよびボールミルの両方は、Ａｃｈａｔ製であった。ミル粉砕された生成物の粒径分布を表３にまとめる。
【００７７】
【表３】
2019516845.tif 000004
【００７８】
標準的ボールミルを使用することにより、混錬実験の全ての生成物を、乾燥後に５０μｍ未満の平均粒径にミル粉砕することができた。水を添加しない実験から得られた生成物は、塩形成が完了しなかったが、約５ｍｍの直径のボールミルにおいて、薄いフレークが得られ、それは、容易に曲げることができた。より高い残留水分含有量を有する生成物に対して、同様の結果を予想することができる。
【００７９】
７．  ピンドディスクミル（ｐｉｎｎｅｄ  ｄｉｓｃ  ｍｉｌｌ）によるミル粉砕実験
２００μｍの平均粒径を有する約２００ｇの粒状生成物を、Ｊｅｈｍｌｉｃｈピンドディスクミル  Ｒｅｋｏｒｄ  ２２４において１７，０００ｒｐｍでミル粉砕した。当該生成物は、当該ミル粉砕において認識可能な粘結を生じることなく、１３．２μｍのｄ９０および３．２μｍのｄ５０の粒径にミル粉砕することができた。
【００８０】
様々な比率（モル％に関して）のリジンおよびアルギニンを塩形成に使用して、混錬実験を行った。
【００８１】
８．  リジン−アルギニン混合物（モル比９５：５）による実験
１２３．２ｇのリジン一水和物（これは、１０９．７ｇのＬ−リジンおよび１３．５ｇの水に相当する）と６．９ｇのアルギニンを、２７．５ｇの水を添加して、混錬機（Ｃｏｏｋｉｎｇ  Ｃｈｅｆ  Ｍａｊｏｒ、モデルＫＭ０９６、ケンウッド）に装入し、続いて、最初に５０−６０℃で混錬した。３．２ｍｍｏｌＫＯＨ／ｇの酸価を有する脂肪酸（５０％のＥＰＡおよび２０％のＤＨＡの脂肪酸含有量を有する魚油から調製した）の２５０．０ｇの添加の後、当該混合物を、さらに、均一なペーストが形成されるまで、５０−６０℃においてプラネタリー型混錬フックにより約６０ｒｐｍで混錬した。これにより、押し出された４０７．６ｇの生成物ペーストが得られ、当該押し出されたストランドを６０℃で乾燥させ、当該押出物の構造を維持するために、穏やかな窒素フロー下に維持した。得られた練り粉状のペーストは、脆く、不十分な結着性を有していた。当該押出物は容易に壊れた。
【００８２】
９．  リジン−アルギニン混合物（モル比９０：１０）による実験
実験８と類似して、１１６．７ｇのリジン一水和物（これは、１０３．９ｇのＬ−リジンおよび７ｇの水に相当する）と１３．８ｇのアルギニンを、２７．６ｇの水および、３．２ｍｍｏｌＫＯＨ／ｇの酸価を有する脂肪酸（５０％のＥＰＡおよび２０％のＤＨＡの脂肪酸含有量を有する魚油から調製した）の２５０．０ｇと反応させた。これにより、押し出された４０８．１ｇの生成物ペーストが得られ、当該押し出されたストランドを実験８において説明したように乾燥させた。得られた練り粉状のペーストは、安定であり、許容可能な結着性により良好に加工可能であった。当該押出物は安定であった。
【００８３】
１０．  リジン−アルギニン混合物（モル比７０：３０）による実験
実験８と類似して、１８１．６ｇのリジン一水和物（これは、１６１．７ｇのＬ−リジンおよび１９．９ｇの水に相当する）と８２．６ｇのアルギニンを、５５．８ｇの水および、３．２ｍｍｏｌＫＯＨ／ｇの酸価を有する脂肪酸（５０％のＥＰＡおよび２０％のＤＨＡの脂肪酸含有量を有する魚油から調製した）の５００．０ｇと反応させた。これにより、押し出された８２０．０ｇの生成物ペーストが得られ、当該押し出されたストランドを実験８において説明したように乾燥させた。得られた練り粉状のペーストは、優れた結着性により非常に良好に加工可能であった。当該押出物は安定であった。
【００８４】
１１．  リジン−アルギニン混合物（モル比３０：７０）による実験
実験８と類似して、７７．８ｇのリジン一水和物（これは、６９．３ｇのＬ−リジンおよび８．５ｇの水に相当する）と１９２．７ｇのアルギニンを、３８．１ｇの水および、３．２ｍｍｏｌＫＯＨ／ｇの酸価を有する脂肪酸（５０％のＥＰＡおよび２０％のＤＨＡの脂肪酸含有量を有する魚油から調製した）の５００．０ｇと反応させた。これにより、押し出された８０８．６ｇの生成物ペーストが得られ、当該押し出されたストランドを実験８において説明したように乾燥させた。得られた練り粉状ペーストは、非常に硬く、混錬機ではほとんど加工可能でなかった。当該押出物は粘着性であった。
【００８５】
１２．  リジン−アルギニン混合物（モル比９５：５）による実験
実験８と類似して、１２３．２ｇのリジン一水和物（これは、１０９．７ｇのＬ−リジンおよび１３．５ｇの水に相当する）と９．６ｇのコリン溶液（５０重量％のコリン、これは４．８ｇのコリンを含有する）を、１０．０ｇの水および、３．２ｍｍｏｌＫＯＨ／ｇの酸価を有する脂肪酸（５０％のＥＰＡおよび２０％のＤＨＡの脂肪酸含有量を有する魚油から調製した）の２５０．０ｇと反応させた。これにより、押し出された４０６．３ｇの生成物ペーストが得られ、当該押し出されたストランドを実験８において説明したように乾燥させた。得られた練り粉状のペーストは、許容可能な結着性により良好に加工可能であった。当該押出物は安定であった。
【００８６】
１３．  水酸化マグネシウムの添加を伴う実験
実験８と類似して、１１６．７ｇのリジン一水和物（これは、１０３．９ｇのＬ−リジンおよび７ｇの水に相当する）と４．６ｇの水酸化マグネシウム（１．９ｇのマグネシウムに相当する）を、２０．０ｇの水および、３．２ｍｍｏｌＫＯＨ／ｇの酸価を有する脂肪酸（５０％のＥＰＡおよび２０％のＤＨＡの脂肪酸含有量を有する魚油から調製した）の２５０．０ｇと反応させた。これにより、押し出された３９８．８ｇの生成物ペーストが得られ、当該押し出されたストランドを実験８において説明したように乾燥させた。得られた練り粉状のペーストは、許容可能な結着性により良好に加工可能であった。当該押出物は安定であった。
【００８７】
１４．  亜麻仁油およびリジン−アルギニン混合物（モル比９０：１０）を使用した実験
実験８と類似して、１３３．０ｇのリジン一水和物（これは、１１８．４ｇのＬ−リジンおよび１４．６ｇの水に相当する）と１５．７ｇのアルギニンを、２８．８ｇの水および、３．６ｍｍｏｌＫＯＨ／ｇの酸価を有する脂肪酸（亜麻仁油から調製した）の２５０．０ｇと反応させた。これにより、押し出された４２７．５ｇの生成物ペーストが得られ、当該押し出されたストランドを実験８において説明したように乾燥させた。得られた練り粉状のペーストは、安定であり、優れた結着性により良好に加工可能であった。当該押出物は安定であった。
【００８８】
同様の結果が、亜麻仁油から調製した脂肪酸とＬ−リジン一水和物とにおいて得られた。さらに、添加剤として１０ｍｏｌ％の水酸化マグネシウムを伴うボラージオイルを使用して混錬実験を実施し、同様の安定な押出物が生成された。このことは、当該方法が、魚油調製物によってだけでなく、さらなる非動物性ＰＵＦＡ源によっても使用することができることを示している。
【００８９】
当該押し出された試料の乾燥後の水分含有量のおよび密度、ならびにＫｅｎｗｏｏｄフードプロセッサでの混錬実験の生成物のアニシジン価（ＡＮ）および過酸化物価（ＰＮ）を表４にまとめる。
【００９０】
【表４】
2019516845.tif 000005
【００９１】
当該押し出された試料の密度は、０．９１−０．９７ｇ／ｃｃｍの範囲であった。当該生成物は、押出加工後にミル粉砕しなかったため、当該押出加工されたストランドの密度を測定したところ、全ての実験において０．９０ｇ／ｃｃｍより高かった。押出加工のためのノズル直径は、３．２ｍｍであり、押し出されたストランドの直径は、３．３ｍｍであった。
【００９２】
Ｌ−リジンおよびＬ−オルニチンがＥＰＡと反応して脂肪酸塩を生成することを示すことができた。さらに、ＥＰＡ／ＤＨＡ混合物もＬ−アルギニンおよびＬ−オルニチンによって試験し、脂肪酸塩の形成が認められた。さらに、いくつかのオメガ６脂肪酸（アラキドン酸、γ−リノレン酸、リノレン酸、リノール酸）を試験し、これらは、Ｌ−リジンおよびＬ−アルギニンとの塩の形成を生じた。これら全ての実験は、エタノール−水混合物中において実施し、全ての実験において、固体が得られた。脂肪酸塩の形成は、これらの全ての実験において達成されたため、これらの混合物も、混錬を使用して、本発明による方法により加工することができると予想される。
【国際調査報告】
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