(57)【要約】  本開示は、線維症、ならびに皮膚硬化症候群および全身性硬化症等のいくつかの線維症介在性障害の治療に使用するための、式（Ｉ）の無翅型（Ｗｉｎｇｌｅｓｓ−ｔｙｐｅ）（Ｗｎｔ）阻害剤に関する。本開示はまた、線維症を治療するための方法、線維症の治療に使用するための、式（Ｉ）のＷｎｔ阻害剤および第２の有効成分を含む薬学的組合せ物、またならびに線維症および線維症介在性障害（Ｉ）を治療するための医薬の製造のための、式（Ｉ）のＷｎｔ阻害剤またはその薬学的に許容可能な塩の使用を提供する。
2019522658.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
線維症の治療に使用するための、式（Ｉ）
【化１】
2019522658.tif 000010
（式中、Ｒ１が、
【化２】
2019522658.tif 000011
であり、Ｒ２が、ＣＨ３またはＦである）のＷｎｔ阻害剤、またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項２】
治療有効量のＷｎｔ阻害剤を、それを必要とする患者に投与するステップを含む、線維症を治療するための方法。
【請求項３】
式（Ｉ）の化合物が、Ｎ−（５−（４−アセチルピペラジン−１−イル）ピリジン−２−イル）−２−（２’−フルオロ−３−メチル−２，４’−ビピリジン−５−イル）アセトアミド、および２−（２’，３−ジメチル−２，４’−ビピリジン−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミド、またはその薬学的に許容可能な塩からなる群から選択される、請求項１に記載の、線維症の治療に使用するための式（Ｉ）のＷｎｔ阻害剤、または請求項２に記載の、線維症を治療するための方法。
【請求項４】
線維症の回復が判定される、請求項１もしくは３に記載の、線維症の治療に使用するための式（Ｉ）のＷｎｔ阻害剤、または請求項２もしくは３に記載の、線維症を治療するための方法。
【請求項５】
前記線維症が、皮膚線維症、特発性線維症、肺線維症、間質性腎線維症、肝線維症、強皮症、全身性硬化症、皮膚硬化症候群および特発性肺線維症から選択される、請求項１、３もしくは４のいずれか一項に記載の、線維症の治療に使用するための式（Ｉ）のＷｎｔ阻害剤、または請求項２〜４のいずれか一項に記載の、線維症を治療するための方法。
【請求項６】
前記線維症が全身性硬化症である、請求項１、もしくは３〜５のいずれか一項に記載の、線維症の治療に使用するための式（Ｉ）のＷｎｔ阻害剤、または請求項２〜５のいずれか一項に記載の、線維症を治療するための方法。
【請求項７】
前記線維症が皮膚硬化症候群である、請求項１、もしくは３〜５のいずれか一項に記載の、線維症の治療に使用するための式（Ｉ）のＷｎｔ阻害剤、または請求項２〜５のいずれか一項に記載の、線維症を治療するための方法。
【請求項８】
治療有効量の前記Ｗｎｔ阻害剤が、それを必要とする対象に投与される、請求項１、もしくは３〜７のいずれか一項に記載の、線維症の治療に使用するための式（Ｉ）のＷｎｔ阻害剤、または請求項２〜７のいずれか一項に記載の、線維症を治療するための方法。
【請求項９】
前記Ｗｎｔ阻害剤が、２カ月まで、好ましくは１カ月まで、好ましくは５週間まで、好ましくは３週間までの投与期間と、その後の休止期間を含む治療サイクルで投与される、請求項１、もしくは３〜８のいずれか一項に記載の、線維症の治療に使用するための式（Ｉ）のＷｎｔ阻害剤、または請求項２〜８のいずれか一項に記載の、線維症を治療するための方法。
【請求項１０】
前記休止期間が、少なくとも１週間〜３カ月、好ましくは前記休止期間が、１〜４週間の長さである、請求項９に記載の、線維症の治療に使用するための式（Ｉ）のＷｎｔ阻害剤または線維症を治療するための方法。
【請求項１１】
前記Ｗｎｔ阻害剤が、１カ月までの投与期間を含む治療サイクルで投与される、請求項９または１０に記載の、線維症の治療に使用するための式（Ｉ）のＷｎｔ阻害剤または線維症を治療するための方法。
【請求項１２】
前記Ｗｎｔ阻害剤が、５週間までの投与期間を含む治療サイクルで投与される、請求項９〜１１のいずれか一項に記載の、線維症の治療に使用するための式（Ｉ）のＷｎｔ阻害剤または線維症を治療するための方法。
【請求項１３】
前記Ｗｎｔ阻害剤が、３週間までの投与期間を含む治療サイクルで投与される、請求項９〜１２のいずれか一項に記載の、線維症の治療に使用するための式（Ｉ）のＷｎｔ阻害剤または線維症を治療するための方法。
【請求項１４】
前記休止期間が、４週間である、請求項９〜１３のいずれか一項に記載の、線維症の治療に使用するための式（Ｉ）のＷｎｔ阻害剤または線維症を治療するための方法。
【請求項１５】
前記Ｗｎｔ阻害剤が、Ｎ−（５−（４−アセチルピペラジン−１−イル）ピリジン−２−イル）−２−（２’−フルオロ−３−メチル−２，４’−ビピリジン−５−イル）アセトアミドまたはその薬学的に許容可能な塩であり、４０〜８０ｍｇ／日の用量で投与される、請求項１、もしくは３〜１４のいずれか一項に記載の、線維症の治療に使用するための式（Ｉ）のＷｎｔ阻害剤、または請求項２〜１４のいずれか一項に記載の、線維症を治療するための方法。
【請求項１６】
前記Ｗｎｔ阻害剤が、２−（２’，３−ジメチル−２，４’−ビピリジン−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミドまたはその薬学的に許容可能な塩であり、５〜５０ｍｇ／日の用量で投与される、請求項１、もしくは３〜１４のいずれか一項に記載の、線維症の治療に使用するための式（Ｉ）のＷｎｔ阻害剤、または請求項２〜１４のいずれか一項に記載の、線維症を治療するための方法。
【請求項１７】
前記Ｗｎｔ阻害剤またはその薬学的に許容可能な塩が、唯一の有効成分として投与される、請求項１、もしくは３〜１６のいずれか一項に記載の、線維症の治療に使用するための式（Ｉ）のＷｎｔ阻害剤、または請求項２〜１６のいずれか一項に記載の、線維症を治療するための方法。
【請求項１８】
前記Ｗｎｔ阻害剤またはその薬学的に許容可能な塩が、第２の有効成分と組み合わせて投与される、請求項１、もしくは３〜１７のいずれか一項に記載の、線維症の治療に使用するための式（Ｉ）のＷｎｔ阻害剤、または請求項２〜１７のいずれか一項に記載の、線維症を治療するための方法。
【請求項１９】
前記第２の有効成分が、ＴＧＦベータシグナル伝達経路の阻害剤である、請求項１８に記載の、線維症の治療に使用するための式（Ｉ）のＷｎｔ阻害剤または線維症を治療するための方法。
【請求項２０】
前記第２の有効成分が、フレソリムマブおよびメテリムマブから選択されるＴＧＦベータシグナル伝達経路の阻害剤である、請求項１９に記載の、線維症の治療に使用するための式（Ｉ）のＷｎｔ阻害剤または線維症を治療するための方法。
【請求項２１】
前記第２の有効成分が、２Ｂ型アクチビン受容体の阻害剤である、請求項１８に記載の、線維症の治療に使用するための式（Ｉ）のＷｎｔ阻害剤または線維症を治療するための方法。
【請求項２２】
前記第２の有効成分が、ビマグルマブ、ＡＣＥ−０３１、ＬＹ２４９５６５５およびＰＦ−０６２５２６１６から選択される、請求項２１に記載の、線維症の治療に使用するための式（Ｉ）のＷｎｔ阻害剤または線維症を治療するための方法。
【請求項２３】
前記第２の有効成分がビマグルマブである、請求項２１または２２に記載の、線維症の治療に使用するための式（Ｉ）のＷｎｔ阻害剤または線維症を治療するための方法。
【請求項２４】
請求項１に記載の式（Ｉ）のＷｎｔ阻害剤および第２の有効成分を含む、薬学的組合せ物。
【請求項２５】
皮膚線維症の治療に使用するための、請求項１に記載の式（Ｉ）のＷｎｔ阻害剤および第２の有効成分を含む、薬学的組合せ物。
【請求項２６】
前記Ｗｎｔ阻害剤が、Ｎ−（５−（４−アセチルピペラジン−１−イル）ピリジン−２−イル）−２−（２’−フルオロ−３−メチル−２，４’−ビピリジン−５−イル）アセトアミド、その薬学的に許容可能な塩、および２−（２’，３−ジメチル−２，４’−ビピリジン−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミド、またはその薬学的に許容可能な塩からなる群から選択される、請求項２４に記載の薬学的組合せ物、または請求項２５に記載の使用のための薬学的組合せ物。
【請求項２７】
前記第２の有効成分が、フレソリムマブ、メテリムマブ、ビマグルマブ、ＡＣＥ−０３１、ＬＹ２４９５６５５およびＰＦ−０６２５２６１６から選択される、請求項２４もしくは２６に記載の薬学的組合せ物、または請求項２５もしくは２６に記載の使用のための薬学的組合せ物。
【請求項２８】
前記第２の有効成分がビマグルマブである、請求項２４、２６もしくは２７のいずれか一項に記載の薬学的組合せ物、または請求項２５〜２７のいずれか一項に記載の使用のための薬学的組合せ物。
【請求項２９】
前記Ｗｎｔ阻害剤および前記第２の有効成分が、別々に、または一緒に投与される、請求項２４、もしくは２６〜２８のいずれか一項に記載の薬学的組合せ物、または請求項２５〜２８のいずれか一項に記載の使用のための薬学的組合せ物。
【請求項３０】
前記Ｗｎｔ阻害剤および前記第２の有効成分が、独立して同時に、または時間間隔内で別々に投与される、請求項２４、もしくは２６〜２９のいずれか一項に記載の薬学的組合せ物、または請求項２５〜２９のいずれか一項に記載の使用のための薬学的組合せ物。
【請求項３１】
時間間隔により組合せパートナーが共同して活性となる、請求項２４、もしくは２６〜３０のいずれか一項に記載の薬学的組合せ物、または請求項２５〜３０のいずれか一項に記載の使用のための薬学的組合せ物。
【請求項３２】
線維症の治療に使用するための、請求項２４、または２６〜３１のいずれか一項に記載の薬学的組合せ物。
【請求項３３】
線維症が、皮膚線維症、特発性線維症、肺線維症、間質性腎線維症、肝線維症、強皮症、全身性硬化症、皮膚硬化症候群、特発性肺線維症から選択される、請求項３２に記載の使用のための薬学的組合せ物。
【請求項３４】
線維症が全身性硬化症である、請求項３２に記載の使用のための薬学的組合せ物。
【請求項３５】
線維症が皮膚硬化症候群である、請求項３２に記載の使用のための薬学的組合せ物。
【請求項３６】
線維症を治療するための医薬の製造のための、Ｗｎｔ阻害剤またはその薬学的に許容可能な塩の使用。
【請求項３７】
前記Ｗｎｔ阻害剤が、第２の有効成分と組み合わせて投与される、請求項３６に記載のＷｎｔ阻害剤またはその薬学的に許容可能な塩の使用。
【請求項３８】
前記Ｗｎｔ阻害剤が、Ｎ−（５−（４−アセチルピペラジン−１−イル）ピリジン−２−イル）−２−（２’−フルオロ−３−メチル−２，４’−ビピリジン−５−イル）アセトアミドまたはその薬学的に許容可能な塩である、請求項１、もしくは３〜２３のいずれか一項に記載の、線維症の治療に使用するための式（Ｉ）のＷｎｔ阻害剤、請求項２〜２３のいずれか一項に記載の、線維症を治療するための方法、請求項２４、もしくは２６〜３１のいずれか一項に記載の薬学的組合せ物、請求項２５〜３１のいずれか一項に記載の使用のための薬学的組合せ物、請求項３２〜３５のいずれか一項に記載の、線維症の治療に使用するための薬学的組合せ物、または請求項３６もしくは３７に記載の、Ｗｎｔ阻害剤もしくはその薬学的に許容可能な塩の使用。
【請求項３９】
前記Ｗｎｔ阻害剤が、２−（２’，３−ジメチル−２，４’−ビピリジン−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミドまたはその薬学的に許容可能な塩である、請求項１、もしくは３〜２３のいずれか一項に記載の、線維症の治療に使用するための式（Ｉ）のＷｎｔ阻害剤、請求項２〜２３のいずれか一項に記載の、線維症を治療するための方法、請求項２４、もしくは２６〜３１のいずれか一項に記載の薬学的組合せ物、請求項２５〜３１のいずれか一項に記載の使用のための薬学的組合せ物、請求項３２〜３５のいずれか一項に記載の、線維症の治療に使用するための薬学的組合せ物、または請求項３６もしくは３７に記載の、Ｗｎｔ阻害剤もしくはその薬学的に許容可能な塩の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本開示は、薬学の分野、特に特定の適応症に使用するためのＷｎｔ阻害剤に関する。具体的には、本開示は、疾患の治療に使用するための式（Ｉ）のＷｎｔ阻害剤、式（Ｉ）のＷｎｔ阻害剤を投与するステップを含む疾患を治療するための方法、式（Ｉ）のＷｎｔ阻害剤および第２の有効成分を含む薬学的組合せ物、ならびにその治療用医薬の製造のための、式（Ｉ）のＷｎｔ阻害剤またはその薬学的に許容可能な塩の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
Ｗｎｔ（無翅の、Ｗｉｎｇｌｅｓｓ）ファミリーは、胚発生中の細胞間相互作用を制御する高度に保存された分泌タンパク質の群であり、発がん、加齢、および線維症に関与している。Ｗｎｔ遺伝子は、マウス乳癌のがん遺伝子であると３０年前に同定され、多くの研究において重要な発がん経路であると確認された。Ｗｎｔ遺伝子ファミリーは、Ｉｎｔ１／Ｗｎｔ１がん原遺伝子およびショウジョウバエ（Drosophila）Ｗｎｔ１相同体である無翅のショウジョウバエ（Drosophila）（「Ｗｇ」）に関連した多くの種類の分泌タンパク質をコードする（Cadigan et al. Genes & Development 1997, 11, 3286-3305）。Ｗｎｔは、種々の組織および臓器で発現し、ショウジョウバエ（Drosophila）における分節化、線虫（C. elegans）における内胚葉の発生、ならびに哺乳動物における肢の極性の確立、神経堤の分化、腎臓形成、性決定、および脳の発達を含む多くの発生過程において重要な役割を果たす（Parr et al. Curr. Opinion Genetics & Devel. 1994, 4, 523-528）。Ｗｎｔ経路は、胚発生中および成熟した生物中の両方において、動物の発生の主要な制御因子である（Eastman et al. Curr. Opin. Cell Biol. 1999, 11, 233-240およびPeifer et al. Science 2000, 287, 1606-1609）。
【０００３】
Ｗｎｔシグナルは、７回膜貫通型受容体のＦｒｉｚｚｌｅｄ（「Ｆｚｄ」）ファミリーにより伝達される（Bhanot et al. Nature 1996, 382, 225-230）。ＷｎｔリガンドはＦｚｄに結合し、その際、Ｄｉｓｈｅｖｅｌｌｅｄ細胞質タンパク質（ヒトおよびマウスにおいてはＤｖｌ−１、２および３）を活性化し（Boutros et al. Mech. Dev. 1999, 83, 27-37）、ＬＲＰ５／６をリン酸化する。アルマジロ／β（ベータ）−カテニンのリン酸化および分解を防ぎ、次いで、β−カテニンの安定化をもたらすシグナルは、これにより発生する（Perrimon et al., Cell 1994, 76, 781-784）。この安定化は、Ｄｖｌのアキシンとの関連性により引き起こされる（Zeng et al. Cell 1997, 90:181-192）。このアキシンは、ＧＳＫ３、ＡＰＣ、ＣＫ１、およびβ−カテニンを含む種々のタンパク質を結集して、β−カテニン分解複合体を形成する、足場タンパク質である。
【０００４】
線維増殖反応は、傷害後の正常な創傷治癒の必要な機能である。しかし、この反応が制御されずに持続すると、細胞外マトリックスが過剰に蓄積され、これにより最終的に、臓器の機能喪失を伴う線維症を生じ得る。過量に線維または瘢痕組織を形成する線維症は、医学に内在する共通の病理学的問題である。瘢痕組織は、動脈を閉塞させ、関節および損傷した内臓を固定して、生命機能を維持する身体能力に大損害を与える。線維症は、癒着、ケロイド腫瘍、または肥厚性（極めて重症）瘢痕の形で手術が必要となる可能性がある。線維症は、重度の熱傷、創傷、または整形外科的損傷の後の拘縮および関節脱臼を引き起こす。すなわち、あらゆる臓器で起こり得る線維症は、肝炎（肝硬変）、高血圧（心不全）、結核（肺線維症）、強皮症（皮膚および内臓の線維化）、糖尿病（腎症）、およびアテローム性動脈硬化症（血管の線維化）等の多くの病態からの続発症である。線維性増殖はまた、元の傷害が治癒した後であっても、回りの正常組織を増殖させ、それに浸潤し得る。多くの場合、線維症は、反応の一過程であり、いくつかの異なる因子が、組織の線維化を生じる経路を調整し得るようである。このような因子は、初期炎症反応、線維芽細胞群の局所的増加、線維芽細胞の合成機能の調整、ならびにコラーゲンの生合成および分解の制御機構の変化を含む。
【０００５】
線維症は、多くの慢性炎症性疾患の最終的な、共通の病理学的転帰である。線維症は、炎症性または損傷を受けた組織とその周辺の線維性結合組織（コラーゲンおよびフィブロネクチン等の細胞外マトリックス（ＥＣＭ）の成分）の過剰な蓄積により定義され、この線維症は、末期の肝疾患、腎疾患、特発性肺線維症および心不全に見られる場合、永続的瘢痕、臓器不全、および最終的には死に至らしめる可能性がある。線維症はまた、強皮症、関節リウマチ、クローン病、潰瘍性大腸炎、骨髄線維症および全身性エリテマトーデスを含む、多くの慢性自己免疫疾患の主要な病理学的特徴である。線維症はまた、腫瘍の浸潤および転移、慢性移植片拒絶ならびに多くの進行性ミオパシーの病態形成に影響する。これは、個別化した治療を必要とする、その臨床的および自己免疫症状（例えば、特発性肺線維症、皮膚硬化症候群（stiff skin syndrome）、全身性硬化症）において非常に異質である。
【０００６】
１９７１年にＥｓｔｅｒｌｙおよびＭｃＫｕｓｉｃｋにより初めて報告された（Esterly et al. Pediatrics 1971, 47, 360-369）皮膚硬化症候群（ＳＳＳ）は、皮膚の著しい強皮症様変化と関連する、まれな先天性の疾患であり、これは、関節の可動性を制限し、屈曲拘縮を引き起こす、通常、全身に広がる硬く、厚い皮膚を特徴とする。他の時々見られる特徴には、限局性リポジストロフィーおよび筋力低下が挙げられる。フィブリリン−１遺伝子のドメイン特異的変異、ならびにミクロフィブリル集合体およびミクロフィブリル−インテグリン相互作用の両方の結果として生じる摂動は、ＴＧＦ−βシグナル伝達の制御不全により、皮膚硬化症候群の病態形成の部分的な要因となる（Loeys et al. Science Trans. Med. 2010, 2, 1-10）。
【０００７】
全身性硬化症（ＳＳｃ）は、一般的であり、病原学的に謎である強皮症の一病型である。ＳＳｃは、例えば、米国では約５，０００人に１人に発症する。家族性の再発は極めてまれであり、原因遺伝子は特定されていない。ＳＳｃにおける線維症の発症は、典型的に自己抗体の産生と相関するが、これらが病因に関与するのか、または単純に疾患のマーカーとしての機能を果たすのかは、依然として議論の余地があり、抗体誘導の機構は、ほとんど知られていない。
【０００８】
皮膚および内臓の線維化は、全身性硬化症（ＳＳｃ）の重要な特徴である。線維症が、生理学的組織構造を破壊し、臓器不全を生じ得るため、線維症は、全身性硬化症（ＳＳｃ）患者における罹患率および死亡率の大半の原因となる。特に、全身性硬化症（ＳＳｃ）は、皮膚、ならびに肺、心臓、消化管および腎臓等いくつかの内臓を冒す、特発性全身性線維性疾患の原型である。他の線維性疾患と同様に、罹患臓器の不全は一般的であり、結果として罹患率が高くなり、死亡率が著しく増加する。疾患経路を理解するために、近年、げっ歯類を用いた、いくつかの予備試験を行った。これに関しては、ＳＳｃの病態形成および模倣複合体の疾患過程を示す、適切なインビボモデルが利用可能である。いくつかのマウスおよびトリモデルが、この疾患の様々な態様の研究に利用可能である。
【０００９】
ブレオマイシン誘発皮膚線維症のモデルは、ＳＳｃ研究において広く使用されている（Beyer C. et al. Arthritis and Rheumatism. 2010, 62, 2831-2844）。ブレオマイシン誘発皮膚線維症のモデルは、疾患経過の初期に頻発する、ＳＳｃの炎症性変化を模倣する。ブレオマイシンによる治療は、活性酸素種の産生を誘導し、内皮細胞および他の細胞種に損傷を与え、接着分子の発現を生じさせる。これは、Ｔリンパ球およびＢリンパ球、マクロファージ、好酸球、ならびに肥満細胞を含む白血球を誘引し、このすべては、病変皮膚中に浸潤し、常在線維芽細胞を活性化する。次いで、活性化線維芽細胞は、大量のＥＣＭを産生、放出し、これにより、ブレオマイシンの注射部位で皮膚線維症が生じる。
【００１０】
使用可能な別のモデルは、ＴＳＫ−１およびＴＳＫ−２マウスモデルである（Beyer C. et al. Arthritis and Rheumatism 2010, 62, 2831-2844）。ＴＳＫ−１マウスでは、フィブリリン１遺伝子（Ｆｂｎ１）の縦列重複により、皮膚の硬化を伴う特徴的な表現型が生じる（Siracusa L. D. et al. Genome Res. 1996, 6, 300-313）。線維症は、健常な対象と比較して、コラーゲン濃度（Avouac J. et al. Arthritis and rheumatism 2012, 64, 5, 1642-1652）、ヒドロキシプロリン含量（Woessner J. F. Arch. Biochem. Biophys. 1961, 93, 440-447）、筋線維芽細胞数（Akhmetshina A. et al. Arthritis and Rheumatism 2009, 60, 1, 219-224）および真皮の厚さ（Akhmetshina A. et al. FASEB J. 2008, 22, 2214-2222）等の特定のパラメータの増加によって確立され得る。同様に、候補医薬品の有効性は、前述のパラメータの減少または全く完全な回復に基づいて評価される。
【００１１】
線維性疾患の中でも全身性硬化症（ＳＳｃ）は、最高の罹患率の１つに関係し、患者の汎発性サブセットにおいて６０〜７０％の１０年生存率を示す（Nikpour, M. et al. Current opinion in rheumatology 2014, 26, 131-137）。現在のところ、ＳＳｃに対する疾患修飾性療法はなく、シクロホスファミドまたは自家造血幹細胞移植等の免疫調節療法は、患者の期待に反する結果を示した（Silver, K. C. et al. Rheumatic diseases clinics of North America 2015, 41, 439-457; Van Laar, J. M. et al. Jama 2014, 311, 2490-2498）。
【００１２】
線維形成は、ほとんどの慢性炎症性疾患における罹患率および死亡率の主原因であるとますます認識されつつあるが、線維症の原因を特異的に標的とする利用可能な治療戦略は、あるとしてもごくわずかで、ほとんどないに等しい。さらに、患者の治療に利用可能な線維症医薬品または治療は、未だ存在しない。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１３】
驚くべきことに、Ｗｎｔ阻害剤は、唯一の有効成分として、線維症経路中で相互作用して、線維症に治療の選択肢をもたらし得ることが認められた。本明細書に提示するＷｎｔ阻害剤は、線維症の回復にさえも十分有効であると判明した。同様に、Ｗｎｔ阻害剤および第２の有効成分を含む組合せ物もまた、効果的に作用し得る。
【課題を解決するための手段】
【００１４】
本開示の第１の態様は、線維症の治療に使用するための、式（Ｉ）
【００１５】
【化１】
2019522658.tif 000003
（式中、Ｒ１は、
【００１６】
【化２】
2019522658.tif 000004
であり、Ｒ２は、ＣＨ３またはＦである）のＷｎｔ阻害剤、またはその薬学的に許容可能な塩である。
【００１７】
本開示の別の態様は、治療有効量のＷｎｔ阻害剤を、それを必要とする患者に投与するステップを含む、線維症を治療するための方法を提供する。
【００１８】
本開示のさらなる態様は、式（Ｉ）のＷｎｔ阻害剤および第２の有効成分を含む、薬学的組合せ物に関する。
【００１９】
本開示のさらなる態様は、線維症の治療における医薬としての使用のための、式（Ｉ）のＷｎｔ阻害剤および第２の有効成分を含む、薬学的組合せ物に関する。
【００２０】
本開示のまたさらなる態様は、線維症を治療するための医薬の製造のための、Ｗｎｔ阻害剤またはその薬学的に許容可能な塩の使用を開示する。
【図面の簡単な説明】
【００２１】
【図１−１】図１Ａは、経口投与した式（Ｉ’）の化合物が、マウスブレオマイシンモデルにおいて線維症を阻害することを示す図である。６週齢の雌Ｃ５７／Ｂｌ６に３週間、ブレオマイシンを注射した。対照群には、生理食塩水を注射した。ブレオマイシンで処置した動物に、式（Ｉ’）の化合物を用いて、または用いずに、もう３週間さらなる投与を行った。
【図１−２】図１Ｂは、経口投与した式（Ｉ’）の化合物が、マウスブレオマイシンモデルにおいて線維症を阻害することを示すグラフである。グラフは、式（Ｉ’）の化合物を２．５、５および１０ｍｇ／ｋｇの用量で使用した場合の、ブレオマイシン誘発マウス線維症モデルにおける皮膚の厚さの減少を示す。図１Ｃは、経口投与した式（Ｉ’）の化合物が、マウスブレオマイシンモデルにおいて線維症を阻害することを示すグラフである。グラフは、式（Ｉ’）の化合物を２．５、５および１０ｍｇ／ｋｇの用量で使用した場合の、ブレオマイシン誘発マウス線維症モデルにおけるヒドロキシプロリン含量の減少を示す。
【図１−３】図１Ｄは、経口投与した式（Ｉ’）の化合物が、マウスブレオマイシンモデルにおいて線維症を阻害することを示すグラフである。グラフは、式（Ｉ’）の化合物を２．５、５および１０ｍｇ／ｋｇの用量で使用した場合の、ブレオマイシン誘発マウス線維症モデルにおける筋線維芽細胞数の減少を実証する。図１Ｅは、経口投与した式（Ｉ’）の化合物が、マウスブレオマイシンモデルにおいて線維症を阻害することを示し、最後の投与後の式（Ｉ’）の化合物の薬物動態（ＰＫ）測定値およびパラメータを示すグラフである。
【図２−１】図２Ａは、式（Ｉ’）の化合物が、インビボでＷｎｔ経路を阻害することを示すグラフである。５ｍｇ／ｋｇの式（Ｉ’）の化合物を経口投与した、または投与しないＢａｌｂ／Ｃマウスに、ブレオマイシンを注射した。グラフは、２５日目の最後の投与後、指定の時点で採取した血液試料を示す。血漿中薬物濃度および曝露は、ＬＣＭＳにより定量した。
【図２−２】図２Ｂは、式（Ｉ’）の化合物が、インビボでＷｎｔ経路を阻害することを示すグラフである。５ｍｇ／ｋｇの式（Ｉ’）の化合物を経口投与した、または投与しないＢａｌｂ／Ｃマウスに、ブレオマイシンを注射した。最後の投与から７時間後に、皮膚組織試料を採取し、Ａｘｉｎ２およびＧａｐｄｈのｍＲＮＡ発現レベルをＴａｑＭａｎにより検査した。
【図３−１】図３Ａは、式（Ｉ’）の化合物を使用した場合のＴｓｋモデルにおける線維症の回復のエビデンスを示し、５週齢の野生型または皮膚硬化マウス（Ｔｓｋ−１モデル）に、式（Ｉ’）の化合物を用いて、または用いずに５週間投与を行った、マウス試験スキームを示す図である。
【図３−２】図３Ｂは、式（Ｉ’）の化合物を使用した場合のＴｓｋモデルにおける線維症の回復のエビデンスを示し、式（Ｉ’）の化合物を２．５、５および１０ｍｇ／ｋｇの用量で使用した場合の、皮膚硬化マウス（Ｔｓｋ−１モデル）における皮膚の厚さの減少を示すグラフである。図３Ｃは、式（Ｉ’）の化合物を使用した場合のＴｓｋモデルにおける線維症の回復のエビデンスを示し、式（Ｉ’）の化合物を２．５、５および１０ｍｇ／ｋｇの用量で使用した場合の、皮膚硬化マウス（Ｔｓｋ−１モデル）におけるヒドロキシプロリン含量の減少を示すグラフである。図３Ｄは、式（Ｉ’）の化合物を使用した場合のＴｓｋモデルにおける線維症の回復のエビデンスを示し、式（Ｉ’）の化合物を２．５、５および１０ｍｇ／ｋｇの用量で使用した場合の、皮膚硬化マウス（Ｔｓｋ−１モデル）における筋線維芽細胞数の減少を示すグラフである。
【図３−３】図３Ｅは、式（Ｉ’）の化合物を使用した場合のＴｓｋモデルにおける線維症の回復のエビデンスを示し、最後の投与後の式（Ｉ’）の化合物の薬物動態（ＰＫ）測定値およびパラメータを示すグラフである。図３Ｆは、式（Ｉ’）の化合物を使用した場合のＴｓｋモデルにおける線維症の回復のエビデンスを示し、すべての投与群から採取した皮膚組織試料のヘマトキシリンおよびエオシン染色を示す図である。
【図４】図４は、マウスブレオマイシンモデルにおける線維症の回復のエビデンスを示すグラフである。グラフは、式（Ｉ’）の化合物を使用した場合、また式（Ｉ”）の化合物を使用した場合の、ブレオマイシン誘発マウス線維症モデルにおける皮膚の厚さの減少を示す。
【発明を実施するための形態】
【００２２】
本開示は、線維症障害の患者における線維芽細胞と相互作用し活性化を制御するＷｎｔ阻害剤を、唯一の有効成分として、または組み合わせて使用して、線維症を治療する新規の方法を説明する。発明者らは、全身性硬化症（ＳＳｃ）（ＨＶおよびＳＳｃの発現プロファイリング）および皮膚硬化症候群（ＳＳＳ）において活性化されるＷｎｔシグナル伝達を、発現プロファイリングに基づいて同定した。さらに、Ｗｎｔ阻害剤の使用は、げっ歯類の線維症モデルであるＴｓｋ−１マウスモデルにおいて有効であることが見出された。式（Ｉ’）のＷｎｔ阻害剤は、ブレオマイシン誘発皮膚線維症モデルにおいても高い有効性を示した。線維症を発現している両方のマウスモデルにおいては、無処置または健常のマウスと比較して、真皮の厚さ、ヒドロキシプロリン含量および筋線維芽細胞数の増加が認められた。唯一の有効成分として本発明の化合物を用いた治療では、驚くべきことに、線維症の退行、すなわち真皮の厚さ、ヒドロキシプロリン含量および筋線維芽細胞数の健常レベルへの回復を示し、したがって、皮膚線維症の有効な治療への道を開いた。
【００２３】
したがって、本開示によれば、式（Ｉ）
【００２４】
【化３】
2019522658.tif 000005
（式中、Ｒ１は、
【００２５】
【化４】
2019522658.tif 000006
であり、Ｒ２は、ＣＨ３またはＦである）のＷｎｔ阻害剤、またはその薬学的に許容可能な塩は、線維症の治療において使用され得る。
【００２６】
用語「治療（treatment）」は、例えば、疾患を治癒すること、または疾患の退行もしくは疾患進行の遅延に効果を有することを目的として、このような治療を必要とする温血動物、特にヒトへ本明細書に記載のＷｎｔ阻害剤を治療的に投与することを含む。任意の疾患または障害を「治療する」、「治療している」または「治療」の用語は、疾患もしくは障害を改善させること（例えば、疾患またはその臨床症状の少なくとも１種の進行の緩徐または停止または減少）、疾患もしくは障害の発症もしくは進行もしくは増悪を防ぐこと、または遅らせることを指す。さらに、このような用語は、患者によって識別不可能であり得るものを含む、少なくとも１種の身体的パラメータを軽減または改善すること、および疾患または障害を身体的（例えば、識別可能な症状の安定化）、生理学的（例えば、身体的パラメータの安定化）、または両方によって調節することをも指す。
【００２７】
Ｗｎｔ阻害剤は、細胞におけるＷｎｔシグナル伝達の活性を標的とするか、減少させるか、または阻害する、任意の化合物であってもよい。Ｗｎｔ阻害剤は、国際公開第２０１０／１０１８４９号に開示されている化合物を含むが、これらに限定されない。線維症の治療に使用するためのＷｎｔ阻害剤は、例えば、Ｎ−（５−（４−アセチルピペラジン−１−イル）ピリジン−２−イル）−２−（２’−フルオロ−３−メチル−２，４’−ビピリジン−５−イル）アセトアミド、および２−（２’，３−ジメチル−２，４’−ビピリジン−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミド、またはその薬学的に許容可能なそれらの塩からなる群から選択することができる。
【００２８】
さらに詳細には、Ｗｎｔ阻害剤は、国際公開第２０１０／１０１８４９号（化合物１９３、例４１）に開示のような、式（Ｉ’）
【００２９】
【化５】
2019522658.tif 000007
の、Ｎ−（５−（４−アセチルピペラジン−１−イル）ピリジン−２−イル）−２−（２’−フルオロ−３−メチル−［２，４’ビピリジン］−５−イル）アセトアミド、またはその薬学的に許容可能な塩であってもよい。
【００３０】
Ｗｎｔ阻害剤は、国際公開第２０１０／１０１８４９号（化合物８６、例１０）に開示のような、式（Ｉ”）
【００３１】
【化６】
2019522658.tif 000008
の、２−（２’，３−ジメチル−［２，４’−ビピリジン］−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミド、またはその薬学的に許容可能な塩であってもよい。
【００３２】
用語「薬学的に許容可能な塩」は、例えば、酸付加塩として形成することができ、有機または無機酸を用いることが好ましい。適した無機酸は、例えば、塩酸等のハロゲン酸である。適した有機酸は、例えば、フマル酸またはメタンスルホン酸等のカルボン酸またはスルホン酸である。単離または精製のために、例えば、ピクリン酸塩または過塩素酸塩等の薬学的に許容不可能な塩を使用することも可能である。治療的使用のためには、薬学的に許容可能な塩または遊離化合物のみが用いられ（この場合、医薬製剤の形態で適用可能である）、そのため、これらは好ましい。以上および以下の遊離化合物のいかなる言及も、対応する塩も適切および好都合なものとして言及していると理解するべきである。式（Ｉ）の化合物の塩は、薬学的に許容可能な塩であることが好ましい。薬学的に許容可能な塩を形成する、適した対イオンは、当分野で知られている。用語「薬学的に許容可能」は、過度の毒性、刺激、アレルギー反応、または他の問題もしくは合併症のない、合理的なベネフィット／リスク比に見合った、ヒトおよび動物の組織と接触する使用に適する化合物、物質、組成物、および／または剤形を指す。
【００３３】
本開示により治療可能な線維症は、強皮症、関節リウマチ、クローン病、潰瘍性大腸炎、骨髄線維症および全身性エリテマトーデス、心血管線維症、例えば、左室肥大、心筋梗塞、拡張型心筋症、心臓弁膜症、および心筋炎と関連するもの等を含む、多くの慢性自己免疫疾患の主要な病理学的特徴である。本来線維性であり、本開示により治療可能な他の病態は、皮膚線維症、特発性線維症、肺線維症、間質性腎線維症（renal interstitial fibrosis）、肝線維症、強皮症、全身性硬化症、皮膚硬化症候群および特発性肺線維症である。
【００３４】
本開示によれば、上述のＷｎｔ阻害剤で治療するのに特に適している病状は、全身性硬化症および皮膚硬化症候群である。より具体的には、Ｗｎｔ阻害剤は、全身性硬化症（ＳＳｃ）の治療に使用することができる。皮膚硬化症候群（ＳＳＳ）の動物モデルを用いたテストからの良好な結果が得られており、したがって、Ｗｎｔ阻害剤は、上記皮膚硬化症候群（ＳＳＳ）の症状の治療にも使用することができる。
【００３５】
特に、皮膚硬化症候群（ＳＳＳ）および全身性硬化症は、通常、全身に広がる硬く厚い皮膚等の皮膚の著しい強皮症様変化を伴う疾患であり、この疾患は、関節の可動性を制限し、屈曲拘縮だけでなく、炎症性または損傷を受けた組織とその周辺の線維性結合組織（コラーゲンおよびフィブロネクチン等）の過剰な蓄積をも引き起こす。本開示は、コラーゲン濃度、ヒドロキシプロリン含量、筋線維芽細胞数および皮膚の厚さ等のパラメータを正常に戻すことにより線維症の回復が可能な、有効な治療を提供する。
【００３６】
Ｗｎｔ阻害剤は、唯一で使用した場合、皮膚線維症の進行を止めるのに十分な有効性を有することが示された。さらに、本明細書に記載のＷｎｔ阻害剤は、線維症の回復をももたらすことができた。実験では、線維症の回復は、真皮の厚さ、ヒドロキシプロリンレベルおよび筋線維芽細胞数等のパラメータに注目して検査した場合に観察され、確認された。パラメータレベルは、減少し、ヒドロキシプロリン含量レベルが、ベースラインレベルに戻った。したがって、式（Ｉ）のＷｎｔ阻害剤は、線維症、またはＳＳｃもしくはＳＳＳ等の任意の線維症の特定の病型の治療において、使用することができる。治療の効果は、線維症の回復をももたらし得る。
【００３７】
線維症の「回復」の用語は、健常な対象において認められるレベルへ線維症が減少または退行することを指す（皮膚肥厚の進行の停止ではなく）。線維症は、健常な対象と比較して、真皮の厚さ（健常な対象より１〜３倍の厚さ）、ヒドロキシプロリン含量（健常な対象より１〜２倍上昇）および筋線維芽細胞数（健常な対象より２倍上昇）の増加を伴う。したがって、線維症症状の回復は、線維症と関連する身体的パラメータを、健常な対象のレベルへ軽減または改善させることを指す。より具体的には、回復は、ヒドロキシプロリン含量を線維症の約２０％〜約１００％、より好ましくは線維症の約４０％〜１００％、より好ましくは線維症の約５０％〜１００％退行させることを含む。これは同様に、真皮の厚さの測定にも適用する。特定の実施形態では、線維症は、吸収される。筋線維芽細胞数を測定するには、数が少なくとも５０％、好ましくは少なくとも７０％減少する場合、または、より好ましくは数が少なくとも８０％減少する場合、回復と判定する。各パラメータは、実験のセクションに記載の方法により測定することができる。
【００３８】
本開示の別の態様は、線維症の回復が判定される、線維症の治療に使用するための式（Ｉ）のＷｎｔ阻害剤を提供する。
【００３９】
本開示の別の態様は、治療有効量の式（Ｉ）のＷｎｔ阻害剤を、それを必要とする患者に投与するステップを含む、線維症を治療するための方法を提供する。
【００４０】
用語「患者」は、温血動物、特に、この治療から生物学的に、医学的に、または生活の質において恩恵を受けると思われる、ヒトを指す。Ｗｎｔ阻害剤を唯一の有効成分として、または組合せ物として投与され得る対象または患者は、哺乳動物および非哺乳動物を包含する。最も好ましい実施形態では、対象または患者は、ヒトである。それは、本明細書に開示の疾患または障害の治療を必要とすると診断されたヒトでもよい。
【００４１】
用語「有効量」は、研究者、獣医師、医師または他の臨床医により追究されている、細胞、組織、臓器、系、動物またはヒトにおける生物学的または医学的反応を生じる、本開示の化合物の量を意味する。本開示により用いる各Ｗｎｔ阻害剤の有効用量は、用いる特定の化合物または医薬組成物、投与方法、治療する症状、治療する症状の重症度によって変化し得る。通常の技術を有する医師、臨床医または獣医師は、症状の増悪の予防、対抗または停止に必要とされる有効量の薬物を容易に決定し、処方し得る。薬物濃度が有効性を生じる範囲内に達するための最適精度には、Ｗｎｔ阻害剤の標的部位に対する有効性の動態学に基づいた、処方計画を必要とする。これは、薬物の分布、平衡および排出の考察を含む。本開示のＷｎｔ阻害剤、または医薬組成物の治療上有効用量は、治療する対象の種、体重、年齢および個々の状態、障害もしくは疾患またはその重症度に依存し、標準臨床技術により決定し得る。さらに、インビトロまたはインビボアッセイを任意選択で用いて、最適用量範囲の特定を助けることができる。用いる正確な用量はまた、投与経路、および治療する症状の重篤度に依存することとなり、施術者の判断および各対象の状況により、例えば、公表された臨床試験を考慮して決定することができる。これは、Ｗｎｔ阻害剤および第２の有効成分を含む組合せ物にも同様に適用する。
【００４２】
式（Ｉ）のＷｎｔ阻害剤は、本明細書に記載の上記のＷｎｔ阻害剤が、２カ月まで、好ましくは１カ月までの投与期間と、その後、少なくとも１週間〜３カ月の休止期間、好ましくは１〜４週間の休止期間を含む治療サイクルで投与することができる、線維症の治療において、または線維症を治療するための方法において使用することができる。Ｗｎｔ阻害剤は、１カ月までの投与期間と、その後、４週間の休止期間を含む治療サイクルで投与することが、より好ましい。Ｗｎｔ阻害剤は、１カ月までの投与期間と、その後、３週間の休止期間を含む治療サイクルで投与することが、より好ましい。または、Ｗｎｔ阻害剤は、１カ月までの投与期間と、その後、２週間の休止期間を含む治療サイクルで投与することが、より好ましい。Ｗｎｔ阻害剤は、５週間までの投与期間と、その後の休止期間を含む治療サイクルで投与することが、より好ましい。休止期間は、少なくとも１週間〜３カ月持続してもよい。Ｗｎｔ阻害剤は、３週間までの投与期間と、その後、少なくとも１週間〜３カ月の休止期間を含む治療サイクルで投与することが、より好ましい。休止期間は、例えば、少なくとも１週間の長さであってもよい。３週間までの治療サイクルの後の休止期間は、３カ月まで持続してもよい。
【００４３】
上記のように、式（Ｉ）のＷｎｔ阻害剤は、唯一の有効成分として投与することができる。Ｗｎｔ阻害剤が、Ｎ−（５−（４−アセチルピペラジン−１−イル）ピリジン−２−イル）−２−（２’−フルオロ−３−メチル−２，４’−ビピリジン−５−イル）アセトアミドまたはその薬学的に許容可能な塩である場合、これは、４０〜８０ｍｇ／日の用量で投与することができる。Ｗｎｔ阻害剤が、２−（２’，３−ジメチル−２，４’−ビピリジン−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミドまたはその薬学的に許容可能な塩である場合、これは、５〜５０ｍｇ／日の用量で投与することができる。
【００４４】
線維症の治療または線維症を治療するための方法における使用のための式（Ｉ）のＷｎｔ阻害剤はまた、第２の有効成分と組み合わせて投与することができる。より具体的には、第２の有効成分は、ＴＧＦベータシグナル伝達経路の阻害剤であってもよい。特に、第２の有効成分は、フレソリムマブおよびメテリムマブからなる群から選択することができる。より具体的には、第２の有効成分は、２型アクチビン受容体（２Ｂ型）の阻害剤である。さらにより具体的には、第２の有効成分は、ＡＣＥ−０３１（Ａｃｃｅｌｅｒｏｎ／ｓｈｉｒｅ）、ＬＹ２４９５６５５（Ｌｉｌｌｙ）、ＰＦ−０６２５２６１６（Ｐｆｉｚｅｒ）およびビマグルマブからなる群から選択される。より具体的には、第２の有効成分は、ビマグルマブである。
【００４５】
ヒトにおいて、トランスフォーミング増殖因子ベータ（ＴＧＦ−ベータまたはＴＧＦ−β）スーパーファミリーは、骨形成タンパク質（ＢＭＰ）、増殖分化因子（ＧＤＦ）、アクチビン、ＴＧＦ−β、ノーダル、および抗ミュラー管ホルモン（ＡＭＨ）を含む、増殖因子の多様な集合を代表する（Padua et al Cell Research 2009, 19, 89-102）。このファミリーメンバーのほとんどは、３種のアイソフォーム、ＴＧＦ−β１、ＴＧＦ−β２、およびＴＧＦ−β３からなるＴＧＦ−βサイトカインを含む異型で存在する。ＴＧＦ−βリガンドは、二量体プロホルモンとして細胞中で合成される（Gray et al. Science 1990, 247, 1328-1330）。潜在型二量体形は、細胞外マトリックス中に分泌され、その細胞外マトリックス中で、これらは、フューリンおよび他の転換酵素によって分解されて、活性シグナル伝達分子を形成する（Constam et al. J. Cell. Biol. 1999, 144, 139-149）。次いで、活性化ＴＧＦ−βサイトカインは、２組の受容体セリン／スレオニンキナーゼ、Ｉ型およびＩＩ型受容体を結合させて、異種複合体を形成することにより、シグナルを伝達し得る。ヒトゲノムは、７種のＩ型受容体（ＡＬＫ１〜７）および５種のＩＩ型受容体（ＡｃｔＲ−ＩＩａ、ＡｃｔＲ−ＩＩＢ、ＢＭＰＲＩＩ、ＡＭＨＲＩＩ、およびＴβＲＩＩ）をコードし、これらは、ＴＧＦ−βファミリーの様々なメンバーの受容体複合体として、異なる組合せで対をなす。ＴＧＦ−β１リガンドは、ＴβＲＩＩ型受容体およびＡＬＫ５Ｉ型受容体を介して、選択的にシグナルを伝達する。このような２種のクラスの受容体に加えて、ベータグリカン等のＩＩＩ型受容体は、ＴＧＦ−βリガンドが、これらの同族のＴＧＦ−β受容体に、より効率的に結合するのを助ける（Shi et al. Cell 2003, 113, 685-700）。
【００４６】
アクチビンは、構造的に類似するシグナル伝達タンパク質のトランスフォーミング増殖因子ベータ（ＴＧＦ−ベータ）スーパーファミリーに属する、二量体の増殖分化因子である。アクチビンは、少なくとも２種のＩ型（ＩおよびＩＢ）および２種のＩＩ型（ＩＩおよびＩＩＢ、別名ＡＣＶＲ２ＡおよびＡＣＶＲ２Ｂ）受容体を含む、受容体セリンキナーゼのヘテロ二量体の複合体を介してシグナルを伝達する。このような受容体はすべて、高システイン領域を有するリガンド結合細胞外ドメイン、膜貫通ドメイン、およびセリン／スレオニン特異性が予測される細胞質ドメインで構成される、膜貫通タンパク質である。Ｉ型受容体は、シグナル伝達に必須であるが、ＩＩ型受容体は、リガンドとの結合およびＩ型受容体の発現／動員に必要とされる。ＩおよびＩＩ型受容体は、リガンドと結合した後、安定複合体を形成し、その結果、ＩＩ型受容体によりＩ型受容体がリン酸化される。アクチビン受容体ＩＩ（ＡｃｔＲＩＩ）は、ミオスタチンの受容体である。Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ（登録商標）、ＭＮ、ＵＳＡ製造のもの等の、研究グレードのポリクローナルおよびモノクローナル抗ＡｃｔＲＩＩＢ抗体が、当分野で知られている。
【００４７】
特に好ましい阻害剤であり、ＢＹＭ３３８としても知られるビマグルマブは、ＩＩ型アクチビン受容体（ＡｃｔＲＩＩ）に対して競合的に結合するように開発された、ミオスタチンまたはその本来のリガンドであるアクチビンよりも大きな親和性を有するモノクローナル抗体である。ビマグルマブは、国際公開第２０１０／１２５００３号に開示されており、そのＩＮＮは、the WHO-INN proposed list 108, 2012, vol 26, No 4, page 407-408に公表された（ｂｉｍａｇｒｕｍａｂｕｍとも称される）。ビマグルマブは、ＡｃｔＲＩＩのリガンド結合ドメインに結合し、それによって、そのリガンド（そのうちの１種はミオスタチンおよびアクチビンである）の結合および後続のシグナル伝達を妨げる、完全ヒト抗体（修飾ＩｇＧ１、２３４−２３５−Ａｌａ−Ａｌａ、λ２）である。トランスフォーミング増殖因子ベータ（ＴＧＦ−β）スーパーファミリーのメンバーである、ミオスタチンは、動物およびヒトの骨格筋量を負に制御する、分泌タンパク質である。ビマグルマブは、ヒトおよびマウスのＡｃｔＲＩＩＡおよびＡｃｔＲＩＩＢと交差反応性であり、ヒト、カニクイザル、マウスおよびラットの骨格筋細胞に対して有効である。ビマグルマブは、極めて高い親和性でヒトＡｃｔＲＩＩＢに（ＫＤ１．７±０．３ｐＭ）、および比較的低い親和性でヒトＡｃｔＲＩＩＡに（ＫＤ４３４±２５ｐＭ）結合し、静脈内（ｉ．ｖ．）投与用に製剤化される。ビマグルマブの製造についてはまた、国際公開第２０１０／１２５００３号に記載されている。
【００４８】
皮膚線維症はまた、本明細書に定義する、式（Ｉ）のＷｎｔ阻害剤および第２の有効成分を含む、薬学的組合せ物によって治療することができる。特に、Ｗｎｔ阻害剤は、Ｎ−（５−（４−アセチルピペラジン−１−イル）ピリジン−２−イル）−２−（２’−フルオロ−３−メチル−２，４’−ビピリジン−５−イル）アセトアミド、またはその薬学的に許容可能な塩、および２−（２’，３−ジメチル−２，４’−ビピリジン−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミド、またはその薬学的に許容可能な塩から選択され、第２の有効成分は、ＴＧＦ−βシグナルを伝達するフレソリムマブおよびメテリムマブ、ならびにＴＧＦ−βシグナルを伝達するＩＩ型アクチビン受容体である、ＡＣＥ−０３１、ＬＹ２４９５６５５、ＰＦ−０６２５２６１６およびビマグルマブから選択される。より詳細には、第２の有効成分は、ビマグルマブである。
【００４９】
このように、Ｗｎｔ阻害剤は、第２の有効成分と共に投与してもよい。このような組合せ物は、線維症の治療に適する。具体的には、組合せ物は、ＳＳｃおよびＳＳＳの治療に適する。
【００５０】
本明細書で使用する用語「薬学的組合せ物」は、有効成分、例えば、（ｉ）Ｗｎｔ阻害剤またはその薬学的に許容可能な塩、および（ｉｉ）第２の有効成分を混合すること、または別々にもしくは一緒に本明細書に記載のように非固定的組合せで組み合わせることから得られる生成物を指す。用語「非固定的組合せ」は、例えば、（ｉ）Ｗｎｔ阻害剤、またはその薬学的に許容可能な塩および（ｉｉ）第２の有効成分等の有効成分の両方を、別々に、または一緒に、独立して同時に、または時間間隔内で別々に投与することであり、このように投与することによって、治療上有効なレベルの有効成分を必要とする患者に提供することを意味する。後者はまた、例えば、３種以上の有効成分の投与等のカクテル療法に適用する。この用語は、本明細書に記載の（ｉ）Ｗｎｔ阻害剤、またはその薬学的に許容可能な塩および（ｉｉ）第２の有効成分（および存在する場合は、さらなる１種または複数の共用剤（co-agent））の組合せ物が、互いに独立して投与され得るという意味では、特に「パーツのキット」を定義する。いずれにしても、（ｉ）Ｗｎｔ阻害剤、またはその薬学的に許容可能な塩および（ｉｉ）第２の有効成分を、薬物を唯一で用いる場合に使用するそれぞれの用量と比較して、低減した用量で投与し得ることもまた、本明細書で検討する。特にこれは、その化合物を使用した場合に、忍容性および薬物関連有害事象が問題となるケースでは、有利となり得る。このような場合では、薬物用量の低減は、例えば、組合せパートナーを加えながら、薬物に対して対象を耐容性にしておく助けとなり得る。総じて、このような方法は、対象に対する治療選択肢について、より良好な柔軟性を臨床チームにもたらす。
【００５１】
用語「共同して活性である」は、治療する対象が、好ましくは温血動物、特にヒトである場合において、（好ましくは相乗）相互作用（共同治療効果）を依然として示すような時間間隔で、別々に、または順次に（時間をずらして、特に順序特異的に）、化合物を与えることができることを意味し得る。共同治療効果は、とりわけ、両方の化合物が、少なくとも一定の時間間隔中に、治療するヒトの血中に存在することを示す血中濃度を監視することにより判定され得るが、これは、化合物が血中に同時には存在しないが、化合物が共同して活性である場合を除外しない。
【００５２】
本開示の別の態様は、線維症が、皮膚線維症、特発性線維症、肺線維症、腎間質性線維症、肝線維症、強皮症、全身性硬化症（ＳＳｃ）、皮膚硬化症候群（ＳＳＳ）、特発性肺線維症から選択される、線維症の治療に共同して治療的に有効である量を含む、薬学的組合せ物を提供する。より詳細には、線維症は、全身性硬化症である。好ましくは、線維症は、皮膚硬化症候群である。
【００５３】
本開示はまた、併用投与のための「パーツのキット」の形態の、本開示による薬学的組合せ物を説明する。組合せ物は、（ｉ）Ｗｎｔ阻害剤、またはその薬学的に許容可能な塩、および（ｉｉ）第２の有効成分を、独立して同時に、または時間間隔内で別々に投与することができ、特に、この場合、このような時間間隔により、組合せパートナーが、協同的（＝共同的）な作用を示すことが可能となる、１つの投与単位形態での固定的組合せ物、または併用投与のためのパーツのキットを指す。次いで、単独の製剤、または製剤、製品もしくは組成物のパーツを、例えば、同時にまたは時間をずらして投与することができ、この場合、パーツのキットのいかなる部分についても、様々な時点で、および等しい、または異なる時間間隔で投与することができる。本開示の組合せ治療では、本開示による有用な化合物は、同一の、または異なる製造者により製造および／または製剤化してもよい。さらに、組合せパートナーは、（ｉ）組合せ製品を医師へ渡す前に（例えば、Ｗｎｔ阻害剤および第２の有効成分を含むキットの場合）、（ｉｉ）投与直前に医師自身により（または医師の指導の下）、（ｉｉｉ）例えば、本開示の化合物および他の治療剤の順次投与中に患者自身で、組合せ治療に組み合わせてもよい。一実施形態では、組合せ物の効果は、相乗的である。
【００５４】
本開示の組合せ物、または医薬組成物の治療上有効な用量は、治療する対象の種、体重、年齢および個々の状態、障害もしくは疾患またはその重症度に依存し、標準臨床技術により決定することができる。さらに、インビトロまたはインビボアッセイを任意選択で用いて、最適用量範囲の特定を助けることができる。用いる正確な用量はまた、投与経路、および治療する症状の重篤度に依存することとなり、施術者の判断および各対象の状況により、例えば、公表された臨床試験を考慮して決定することができる。一般には、良好な結果が、４０ｍｇ〜８０ｍｇのＮ−（５−（４−アセチルピペラジン−１−イル）ピリジン−２−イル）−２−（２’−フルオロ−３−メチル−２，４’−ビピリジン−５−イル）アセトアミド、またはその薬学的に許容可能な塩の１日経口用量で系統的に得られたと示される。一般には、良好な結果が、５ｍｇ〜５０ｍｇの２−（２’，３−ジメチル−２，４’−ビピリジン−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミド、またはその薬学的に許容可能な塩の１日経口用量で系統的に得られたと示される。例えば、Ｗｎｔ阻害剤は、通常の１日用量に組み合わせることができる。場合によっては、Ｗｎｔ阻害剤の１日用量はまた、調整することができる。
【００５５】
本開示に記載の組合せ物の治療上有効な用量は、例えば、ビマグルマブ等の抗ＡｃｔＲＩＩ抗体を、宿主体重の１〜１０ｍｇ／ｋｇの用量範囲で投与することにより得ることができる。より詳細には、用量は、好ましくは４週間毎に１回、約１ｍｇ／ｋｇ体重または約３ｍｇ／ｋｇ体重または約１０ｍｇ／ｋｇ体重を含む。このような投与は、静脈内に行うことが好ましい。あるいは、投与は、皮下に行う。本発明の別の態様は、例えば、ビマグルマブ等の組合せパートナーの抗ＡｃｔＲＩＩ抗体を、活性物質７０ｍｇ〜７００ｍｇの一律な用量で投与するステップを提供する。より詳細には、用量は、皮下注射で、好ましくは８週間毎に１回、好ましくは４週間毎に１回、約７０ｍｇまたは２０１ｍｇまたは３０１ｍｇまたは７００ｍｇの一律な用量を含む。
【００５６】
本開示の組合せ物は、例えば、相乗的相互作用、強力なインビボおよびインビトロ抗腫瘍反応等の、医薬として使用可能である有益な治療特性を有することが示された。その特性により、本開示の組合せ物が、線維症の治療に特に有用となる。特に、本開示は、線維症を治療するための医薬の製造のための、Ｗｎｔ阻害剤またはその薬学的に許容可能な塩の使用を提供する。
【００５７】
【表１】
2019522658.tif 000009
【実施例】
【００５８】
発明者らは、本明細書で、式（Ｉ’）および式（Ｉ”）の化合物、ポーキュパイン阻害剤が、複数の実験的線維症マウスモデルにおいて、Ｗｎｔシグナル伝達を減弱し、線維症を回復させることを実証するデータを提示する。このような試験は、皮膚線維症の原因となる分子機構としてのＷｎｔ経路の重要性を指摘し、皮膚線維症疾患を治療および予防するための化合物の使用の基礎を提供する。
【００５９】
方法
動物試験
すべての動物を、４Ｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（Ｇｅｒｍａｎｙ）の動物飼養場で飼養した。実験プロトコルは、動物福祉規則に従い、ＧＮＦのＩＡＣＵＣ委員会および４Ｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓの動物福祉委員会により承認された。
【００６０】
２種の異なるＳＳｃのマウスモデルである、ブレオマイシン誘発皮膚線維症および皮膚硬化（Ｔｓｋ−１）モデルを使用した。
【００６１】
ブレオマイシンモデル（図１（Ａ〜Ｅ）および図２（Ａ〜Ｂ））では、６週齢の雌Ｃ５７／Ｂｌ６マウス（Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ、Ｓｕｌｚｆｅｌｄ、Ｇｅｒｍａｎｙ）において、１００μＬ  ０．５ｍｇ／ｍＬのブレオマイシンを、背部の肩の間１ｃｍ２の特定皮膚領域へ隔日６週間まで注射することにより、線維症を誘発した。対照マウスには、ブレオマイシンの溶媒である０．９％のＮａＣｌを注射した。別のマウス群には、ブレオマイシン注射を３週間、続いて、生理食塩水（ＮａＣｌ）注射を次３週間行って、線維症の自然退行を調整した。式（Ｉ’）の化合物を用いて、または用いずに、複数の用量で１日２回、指定の週の間、０．５％のメチルセルロースおよび０．５％のｔｗｅｅｎ８０を含有する懸濁製剤により動物を処置した。各群のマウスを犠死させ、皮膚切片を分析した。
【００６２】
Ｔｓｋ−１モデル（図３（Ａ〜Ｆ））では、式（Ｉ’）の化合物を用いた治療を５週齢で開始し、５週間継続した。式（Ｉ’）の化合物を用いて、または用いずに、複数の用量で１日２回、０．５％のメチルセルロースおよび０．５％のｔｗｅｅｎ８０を含有する懸濁製剤により動物を処置した。
【００６３】
マウス線維症モデルにおいて、式（Ｉ’）の化合物および式（Ｉ”）の化合物を試験するために、式（Ｉ’）の化合物（５ｍｇ／ｋｇをｂ．ｉ．ｄ．で）および式（Ｉ”）の化合物（１ｍｇ／ｋｇをｂ．ｉ．ｄ．で）を３週間、経口投与した、または投与しないＢａｌｂ／Ｃマウスに、ブレオマイシンを注射した。皮膚組織試料を試験終了時に採取し、パラフィンに包埋し、皮膚の厚さを測定した（図４）。
【００６４】
ＰＫ分析
式（Ｉ’）の化合物の血漿中濃度を、液体クロマトグラフィー−タンデム質量分析（ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ）アッセイにより定量した。簡潔には、マウス血漿試料を、メタノール−アセトニトリル混合物（３：１、ｖ／ｖ）で抽出した。Ｗａｔｅｒｓ  Ａｔｌａｎｔｉｓ  Ｔ３分析カラム（２．１×３０ｍｍ、３．５μｍ、Ｗａｔｅｒｓ  Ｃｏｒｐ．、Ｍｉｌｆｏｒｄ、ＭＡ、ＵＳＡ）で、ＨＰＬＣシステム上に上清を注入した。移動相は、水中０．１％のギ酸（溶媒Ａ）およびアセトニトリル中０．１％のギ酸（溶媒Ｂ）からなり、グラディエント溶離法（０〜１．５分、１０％Ｂ〜９５％Ｂ；１．５〜２．０分、９５％Ｂ；２．０１分、１０％Ｂ）を流量８００μＬ／分で、クロマトグラフィーによる分離に用いた。ＳＣＩＥＸ  ＡＰＩ−４０００トリプル四重極質量分析計（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ、Ｆｏｓｔｅｒ  Ｃｉｔｙ、ＣＡ、ＵＳＡ）上で、大気圧化学イオン化（ＡＰＣＩ）をポジティブイオンモードで使用して質量分光分析を実施した。式（Ｉ’）の化合物および内部標準の多重反応モニタリング（ＭＲＭ）を定量測定に使用し、Ａｎａｌｙｓｔ（商標）１．４ソフトウェアを使用してピーク積分を行った。このアッセイの検出下限値は、１ｎｇ／ｍＬであった。非コンパートメント回帰分析により自己適合プログラムを使用して、薬物動態パラメータを算出した。
【００６５】
ＴａｑＭａｎによるＲＮＡ抽出およびＲＴ−ＰＣＲ分析
上述のとおり、製造者の指示に従って、全ＲＮＡを組織試料から単離し、内部標準として作用するＧａｐｄｈで処理して、Ａｘｉｎ２のｍＲＮＡ発現の定量的ＲＴ−ＰＣＲ分析を行った。
【００６６】
ＳＤＳ２．０ソフトウェア（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）でデータを分析し、ＰＲＩＳＭを使用して統計解析を行った。
【００６７】
組織検査、ヒドロキシプロリン含量および筋線維芽細胞数
実験的皮膚線維症に対する式（Ｉ’）の化合物の抗線維化作用を、真皮または皮下組織それぞれの肥厚の定量化、筋線維芽細胞数の分析およびヒドロキシプロリン含量の判定により評価した。１０％のリン酸緩衝ホルマリン中に２４時間、組織試料を固定し、次いで、パラフィンに包埋し、５μｍの切片に切り分けた。組織構造をより良く可視化するために、ヘマトキシリンおよびエオシンで、このスライドを染色した。
【００６８】
hydroxyproline content（Woessner J. F. Arch. Biochem. Biophys. 1691, 93, 440-447）に記載の方法により、ヒドロキシプロリン含量を測定した。
【００６９】
顕微鏡で、各マウスの４カ所の異なる皮膚切片において、表皮−真皮接合部と真皮−皮下脂肪接合部との間の最大距離を測定することにより、真皮の厚さを分析した。
【００７０】
各マウス上背部の４カ所の異なる部位で、皮筋層の真下の皮下結合組織の厚さを測定することにより、ＴＳＫ−１マウスにおける皮下組織の厚さを定量した。評価は、２人の独立した検査員により行った。
【００７１】
筋線維芽細胞の定量化では、皮膚切片を脱パラフィンし、５％のウシ血清アルブミンで６０分間培養した。モノクローナル抗α−ＳＭＡ抗体（クローン１Ａ４、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ、Ｓｔｅｉｎｈｅｉｍ、Ｇｅｒｍａｎｙ）と共に２時間、室温で培養し、続いて、３％の過酸化水素で１０分間培養することにより、α平滑筋アクチン（α−ＳＭＡ）に陽性を示す細胞を検出した。西洋ワサビペルオキシダーゼで標識されたヤギの抗ウサギ抗体を二次抗体として使用した。α−ＳＭＡの発現を３，３’−ジアミノベンジジン四塩酸塩で可視化した。モノクローナルマウスＩｇＧ抗体を対照として使用した。
【００７２】
統計解析のためにＰＲＩＳＭでデータを処理した。
【００７３】
結果
ブレオマイシン誘発マウス線維症モデルにおける式（Ｉ’）のポーキュパイン阻害化合物
式（Ｉ’）の化合物を抗線維化作用について試験するために、６週齢の雌Ｃ５７／Ｂｌ６マウスに３週間、ブレオマイシンを注射して、線維症を誘発した（図１Ａ）。対照群には、生理食塩水を注射した。ブレオマイシンで処置した動物に、式（Ｉ’）の化合物を用いて、または用いずに、ｂ．ｉ．ｄ．でもう３週間さらなる投与を行った。図１Ｂに示すように、式（Ｉ’）の化合物は、すべての用量において用量依存的に、真皮の厚さを減少させた。最も顕著なことには、５ｍｇ／ｋｇおよび１０ｍｇ／ｋｇの群は、さらなる線維症の増悪を停止させただけでなく、皮膚の厚さをベースラインより低いレベルまで減少させて、線維症の回復を示唆した。同様の所見が、図１Ｃおよび図１Ｄに示すように、マウス皮膚試料のヒドロキシプロリン含量および筋線維芽細胞数を検査した場合に得られている。式（Ｉ’）の化合物は、すべての用量において線維症を阻害し、ヒドロキシプロリン含量（図１Ｃ）および筋線維芽細胞数（図１Ｄ）をベースラインより低く、対照群（生理食塩水６週間のマウス）に近いレベルまで減少させて線維症の回復を示唆し、加えて、５および１０ｍｇ／ｋｇ群は、線維症回復の強力なエビデンスを示した。
【００７４】
最後の経口投与後に、式（Ｉ’）の化合物の血漿中曝露量を定量した。ＰＫデータを図１Ｅに示す。式（Ｉ’）の化合物は、吸収率が高く、高い経口曝露量を示した。式（Ｉ’）の化合物の血漿中曝露量は、２．５ｍｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇの用量にほぼ比例して増加した。
【００７５】
さらに、ブレオマイシンで処置した動物を、用量５ｍｇ／ｋｇの式（Ｉ’）の化合物をｂ．ｉ．ｄ．で、および用量１ｍｇ／ｋｇの式（Ｉ”）の化合物をｂ．ｉ．ｄ．で３週間経口投与して、または投与せずに処置した。図４に示す結果は、両方の化合物が、このようなモデルにおいて、真皮の厚さの減少を誘導したことを実証する。式（Ｉ”）の化合物（２−（２’，３−ジメチル−２，４’−ビピリジン−５−イル）−Ｎ−（５−（ピラジン−２−イル）ピリジン−２−イル）アセトアミド）は、式（Ｉ’）の化合物と比較して、より優れたインビボ活性を示した（図４）。
【００７６】
マウス線維症モデルにおける式（Ｉ’）の化合物の標的に対する的確な活性を確認するための別の試験では、５ｍｇ／ｋｇの式（Ｉ’）の化合物をｂ．ｉ．ｄ．で３週間経口投与した、または投与しないＢａｌｂ／Ｃマウスに、ブレオマイシンを注射した。血液試料を最後の投与後、複数の時点で採取した。化合物のＰＫ分析により、化合物が、良好な経口バイオアベイラビリティを有することが示された（図２Ａ）。最後の投与から７時間後、組織試料を採取し、Ｗｎｔ経路標的遺伝子であるＡｘｉｎ２のｍＲＮＡの発現レベルを、ハウスキーピング遺伝子であるＧａｐｄｈを内部標準として用いて、ｑＲＴ−ＰＣＲで測定した。図２Ｂに示すように、式（Ｉ’）の化合物は、処置した場合、５４パーセントのＡｘｉｎ２の減少によって、頑強な経路阻害を実証した。
【００７７】
皮膚硬化マウスモデル（Ｔｓｋ−１）における式（Ｉ’）のポーキュパイン阻害化合物
式（Ｉ’）の化合物の抗線維化作用をさらに試験するために、発明者らは、マウスの遺伝的線維症モデルである皮膚硬化モデル（Ｔａｋ−１）に着目した。Ｔｓｋ−１マウスは、ＴＧＦβシグナル伝達の活性化、および続発する線維症（真皮および皮下組織の厚さの増加）をもたらす、フィブリリン−１遺伝子の自然発生的重複突然変異を有する。
【００７８】
５週齢の野生型またはＴｓｋ−１マウスを、式（Ｉ）’の化合物をｂ．ｉ．ｄ．で５週間用いて、または用いずに処置した（図３Ａ）。ブレオマイシンモデルの結果と同様に、式（Ｉ’）の化合物は、皮膚の厚さ、ヒドロキシプロリン含量および筋線維芽細胞数の減少によって測定した場合、すべての用量において、有意な抗線維化作用を示した（図３Ｂ、図３Ｃおよび図３Ｄ）。５および１０ｍｇ／ｋｇの群は、上述のデータにおいて線維症の回復のエビデンスを示した。図３Ｂは、皮膚の厚さが、ベースラインより低く、対照群（野生型（ＷＴ）マウス１０週間）に近いレベルまで減少したというエビデンスを示し、図３Ｃは、ヒドロキシプロリン含量レベルに関して同様の結果を示し、図３Ｄはまた、筋線維芽細胞数が対照レベル近くまで減少したエビデンスを示した。図３Ｆに示すように、式（Ｉ’）の化合物による治療は、Ｔｓｋ−１マウスにおける線維症の特徴である、マウス皮膚試料のＨ＆Ｅ染色によって実証されたとおり、皮下組織の皮膚の厚さを有意に減少させた。
【００７９】
ブレオマイシン誘発マウス線維症モデルについて説明したものと同様に、この皮膚硬化モデルにおける式（Ｉ’）の化合物の血漿中曝露をまた、最後の経口投与の後、定量した。ＰＫデータを図３Ｅに示す。式（Ｉ’）の化合物の血漿中曝露は、２種の異なるモデルにおける２種の別々の実験間で同等であり、式（Ｉ’）の化合物の血漿中曝露は、２．５ｍｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇの用量にほぼ比例して増加した。
【００８０】
Ｗｎｔ阻害剤および第２の有効成分の組合せ物
Ｗｎｔシグナル伝達経路は、線維症における別の重要な推進要素であるＴＧＦβシグナル伝達経路との意義深いクロストークを有することで知られている。皮膚線維症マーカーの減少が、抗ＴＧＦβ抗体であるフレソリムマブによる臨床試験において認められている（Rice, L. M. et al. The Journal of clinical investigation 2015, 125, 2795-2807）。Ｔｓｋ−１モデルおよびアデノウイルス系活性ＴＧＦＢＲ１過剰発現モデルを含む、ＴＧＦβシグナル伝達活性マウスモデルでは、ＤＫＫ１の過剰発現によるＷｎｔ経路の阻害により、Ｗｎｔシグナル伝達活性が強力に減少し、ＴＧＦβによって推進される線維症が減弱した。これは、Ｗｎｔシグナル伝達が、ＴＧＦβ線維症の下流エフェクターであることを示唆している（Akhmetshina, A. et al. Nature communications 2012, 3, 735）。発明者らが、Ｔｓｋ−１モデルにおいて、式（Ｉ’）の化合物および式（Ｉ”）の化合物でマウスを処置した場合、式（Ｉ’）の化合物および式（Ｉ”）の化合物は、一貫して、頑強な抗線維化作用を実証した。同様に、別のポーキュパイン阻害剤であるＣ５９は、初代腎線維芽細胞におけるＴＧＦβ誘導性Ａｘｉｎ２誘導を抑止することができた（Madan, B. et al. Kidney international 2016, 89, 1062-1074）。線維症の背後に同時発生的に存在する主要な病原学的推進要素、ＴＧＦβおよびＷｎｔシグナル伝達経路を標的とすることにより、ポーキュパイン阻害剤およびＴＧＦβ阻害剤の組合せ物が、ＳＳｃおよびＳＳＳを含む線維症の治療において、有効であることが期待されている。
【図１−１】
2019522658.tif 000012
【図１−２】
2019522658.tif 000013
【図１−３】
2019522658.tif 000014
【図２−１】
2019522658.tif 000015
【図２−２】
2019522658.tif 000016
【図３−１】
2019522658.tif 000017
【図３−２】
2019522658.tif 000018
【図３−３】
2019522658.tif 000019
【図４】
2019522658.tif 000020
【国際調査報告】
2019522658.tif 000021
2019522658.tif 000022
2019522658.tif 000023
2019522658.tif 000024