(57)【要約】  ２−（１−｛６−［（２−［Ｆ−１８］フルオロエチル）（メチル）アミノ］−２−ナフチル｝エチリデン）−マロノニトリル（［Ｆ−１８］ＦＤＤＮＰ）の製造方法であって、半自動モジュールを用い、これはフッ素化、予精製、分離、生成物抽出、および調製に使用される。この方法は、ジクロロメタン（ＤＣＭ）、メタノール（ＭｅＯＨ）、およびテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）などの危険な有機溶媒を必要とせずに、既存のＦＤＡ規制の下で、ヒトに投与するための［Ｆ−１８］ＦＤＤＮＰを高収率で製造することができる。この方法はまた、この方法を用いて［Ｆ−１８］ＦＤＤＮＰを合成する速度を向上させ、約９０乃至１００分以内に最終生成物を生成することができる。この合成方法は、ＦＤＡに登録され承認された自動合成システムに容易に適応できる。【選択図】  図２Ａ
2019534284.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
２−（１−｛６−［（２−［Ｆ−１８］フルオロエチル）（メチル）アミノ］−２−ナフチル｝エチリデン）−マロノニトリル（［Ｆ−１８］ＦＤＤＮＰ）の製造方法において：
［Ｆ−１８］フッ化物イオンを樹脂製カートリッジに捕捉するステップと；
前記樹脂製カートリッジにカリウム塩溶液、続いて水を通すことによって、その中に含まれているクリプタンド溶液を有する反応容器に［Ｆ−１８］フッ化物イオンを溶出させるステップであって、その中に［Ｆ−１８］フッ化物／クリプタンド錯体を形成するステップと；
前記［Ｆ−１８］フッ化物イオン／クリプタンド錯体を、無水アセトニトリルで複数回共沸蒸発させて、前記反応容器中で乾燥［Ｆ−１８］フッ化物イオン／クリプタンド錯体残基を形成するステップと；
無水アセトニトリル中で、前記乾燥［Ｆ−１８］フッ化物イオン／クリプタンド錯体を、トシルオキシ前駆体２−｛［６−（２，２−ジシアノ−１−メチルビニル）−２−ナフチル］（メチル）アミノ｝（エチル１−４−メチルベンゼンスルホネート（ＤＤＮＰＴ）と反応させて、反応生成物を形成するステップと；
前記反応生成物をアルミナカートリッジに通して注入容器に入れるステップと；
注入容器に入っている反応生成物をＨＰＬＣカラムに注入するステップと；
前記ＨＰＬＣ容器から［Ｆ−１８］ＦＤＤＮＰを含有する画分を希釈容器に回収するステップと；
前記希釈容器内に含まれている回収された［Ｆ−１８］ＦＤＤＮＰを水で希釈するステップと；
前記希釈した［Ｆ−１８］ＦＤＤＮＰを固相抽出カートリッジに通し、［Ｆ  −  １８］ＦＤＤＮＰをエタノールで溶出するステップと；
エタノールに含まれる［Ｆ−１８］ＦＤＤＮＰを生理食塩水とヒト血清アルブミンで希釈して、最終生成物を形成するステップと；
を具えることを特徴とする方法。
【請求項２】
前記最終生成物を滅菌バイアルに移すステップをさらに具えることを特徴とする、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記滅菌バイアルへの移送中に前記最終生成物をフィルターで濾過することを特徴とする、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記最終生成物の残基を、前記フィルターを通して前記滅菌バイアル中で生理食塩水およびヒト血清アルブミンを用いてすすぐステップをさらに具えることを特徴とする、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記滅菌バイアル中の［Ｆ−１８］ＦＤＤＮＰが３５％を超える放射化学収率を有することを特徴とする、請求項２に記載の方法。
【請求項６】
前記滅菌バイアル中の［Ｆ−１８］ＦＤＤＮＰが、サイクロトロンで精製した活性が開始するときの１ＣｉのＦ−１８フッ化物での３５％以上の放射化学的収率で、４００ｍＣｉ以上の量（ＥＯＢに補正）で生成される、ことを特徴とする請求項２に記載の方法。
【請求項７】
反応生成物を、直接前記アルミナカートリッジを介して注入容器に通すステップが、反応容器を無水アセトニトリルですすぐステップと、前記すすぎをアルミナカートリッジを通して流すステップとを、さらに具えることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記反応生成物を前記アルミナカートリッジを介して前記注入容器に通した後に、前記注入容器に冷却した酢酸アンモニウム（ＮＨ４ＯＡｃ）／Ｌ−アスコルビン酸を加えるステップをさらに具えることを特徴とする、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
前記ＨＰＬＣカラムが、ＭｅＣＮ／酢酸アンモニウム（ＮＨ４ＯＡｃ）およびＬ−アスコルビン酸を用いて調製されることを特徴とする、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
前記最終製品が１２０分未満で製造されることを特徴とする、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
前記最終製品が約１００分以内に製造されることを特徴とする、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
前記［Ｆ−１８］ＦＤＤＮＰが、自動合成装置を用いて製造されることを特徴とする、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
前記［Ｆ−１８］ＦＤＤＮＰが少なくともいくつかの手動操作を用いて生成されることを特徴とする、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
請求項１に記載の方法によって製造された生成物において、前記最終生成物が、ＦＤＡが設定したガイドライン（４１０ｐｐｍ）未満の濃度で、微量のアセトニトリル（０ないし５０ｐｐｍ）を含有することを特徴とする生成物。
【請求項１５】
前記最終生成物がメタノール、ジクロロメタン、および／またはテトラヒドロフランを含まないことを特徴とする、請求項１に記載の方法によって製造された生成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、２０１６年１１月８日に出願された、米国仮特許出願番号第６２／４１９，２８６号の優先権を主張する。この出願は、全体が参照により本明細書に組み入れられている。優先権は、３５ＵＳＣ§１１９およびその他の該当する法律に従って主張されている。
【０００２】
技術分野は、一般に、半自動合成モジュールを使用した２−（１−｛６−［（２−［Ｆ−１８］フルオロエチル）（メチル）アミノ］−２−ナフチル｝エチリデン）−マロノニトリル（［Ｆ−１８］ＦＤＤＮＰ）の合成方法に関する。この方法は、ヒトへの投与にすぐに使用できる、［Ｆ−１８］ＦＤＤＮＰの高収率かつ短い生産時間での合成に用いられる。この方法はまた、非水性の検査手順を導入しており、従来の合成操作において使用されてきた危険な有機溶媒の組み合わせは使用しない。
【背景技術】
【０００３】
２−（１−｛６−［（２−［Ｆ−１８）フルオロエチル）（メチル）アミノ］−２−ナフチル｝エチリデン）−マロノニトリル（［Ｆ−１８］ＦＤＤＮＰ）ＰＥＴ撮像は、アルツハイマー病（ＡＤ）や慢性外傷性脳症（ＣＴＥ）などの進行性疾患の分類および病期分類に従来から使用されてきた。米国、ヨーロッパ、およびアジアでの約２０年間の臨床研究経験は、アルツハイマー病（ＡＤ）を正常な老化、軽度の認知障害、およびその他のいくつかの神経変性疾患（例えば、進行性核上性麻痺、レビー小体型認知症、ダウン症候群）と区別する［Ｆ−１８］ＦＤＤＮＰの能力を実証した。ＡＤを正常な老化と区別する［Ｆ−１８］ＦＤＤＮＰの能力は、２−デオキシ−２−［Ｆ−１８］フルオロ−Ｄ−グルコース（［Ｆ−１８］ＦＤＧ）の能力に匹敵する。さらに最近の臨床研究は、外傷性脳損傷および疑わしいＣＴＥの病歴を有する引退した運動選手や軍事職員における明確な［Ｆ−１８］ＦＤＤＮＰがかかわるパターンを示しており、このパターンはＡＤのパターンと容易に区別することができる。現在、危険にさらされている人の疑わしいＣＴＥを検出できる利用可能なバイオマーカはなく、そしてこの目的のためのその他のＰＥＴリガンドは、非常に早期の開発段階にある。
【０００４】
Ｌｉｕ  ｅｔ  ａｌ．は、［Ｆ−１８］ＦＤＤＮＰの自動放射能合成のための一方法を開示している。Ｌｉｕ，Ｊ．ｅｔ  ａｌ．，動物またはヒトへの投与用の２−（１−｛  ６−［２−［Ｆ］フルオロ  エチル）（メチル）アミノ］−２−ナフチル｝エチリデン−マロノニトリル（［Ｆ］ＦＤＤＮＰ）の高収率、自動放射能合成、Ｍｏｌ．Ｉｍａｇｉｎｇ  Ｂｉｏｌ．，９：６−１６（２００７）参照。しかしながら、これまでに報告されている複数用量のトレーサー調製用の［Ｆ−１８］ＦＤＤＮＰの合成には、一定の制限がある。第一に、この方法は、半分取ＨＰＬＣ精製を行う前に、面倒な複数のカートリッジと蒸発プロセスを使用した、Ｆ−１８フッ素化反応混合物のかなり複雑な予精製を使用している。第二に、この方法は、予精製および半分取ＨＰＬＣ精製工程において、毒性で、潜在的に有害な有機溶媒（例えば、ジクロロメタン、メタノール（ＭｅＯＨ）、およびテトラヒドロフラン）を使用する。第三に、［Ｆ−１８］ＦＤＤＮＰの自己放射線分解が、予精製およびＨＰＬＣ精製プロセスの間に潜在的に起こり得る。自己放射線分解は、一般に、放射化学収率の低下、生成物の安定性の低下、および放射化学不純物の増加をもたらす、高い比活性を有するＦ−１８標識化合物に伴う深刻な問題となり得る。以前に報告されている合成では、ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）中での生成物の製剤および滅菌も、最終生成物の放射化学収率を約２７％に低下させる。［Ｆ−１８］ＦＤＤＮＰのようなポジトロンエミッタ標識バイオマーカーは半減期が比較的短い（Ｆ−１８同位体の半減期は１１０分である）ので、放射化学収率は特に重要である。
【０００５】
臨床現場でこれらのバイオマーカーを使用するには、２つの検討事項が重要であり、これらの事項は、その他の神経変性疾患の中でもとりわけ、ＣＴＥとＡＤを特徴付けるための［Ｆ−１８］ＦＤＤＮＰの使用の主な目的である。第一に、そのようなバイオマーカーまたはプローブはしばしば１つの地理的位置（例えばサイクロトロンが位置する場所）で製造されるが、遠隔の地理的領域で使用される。比較的長い地理的距離にわたるＦ−１８標識バイオマーカーの輸送は、必然的に最終使用可能線量が低くなる。したがって、できるだけ高い放射化学収率を達成して、１バッチの［Ｆ−１８］ＦＤＤＮＰを地理的に離れた場所でも効率的に使用できる、複数のドーズに分割できるようにすることがきわめて重要である。第二に、米国食品医薬品局（ＦＤＡ）が支援する臨床試験およびＰＥＴバイオマーカーの臨床的使用においては、すぐに注射できる最終製品の容易さ、再現性および信頼性が不可欠である。
【発明の概要】
【０００６】
［Ｆ−１８］ＦＤＤＮＰを合成するモジュラー方法が臨床現場用に開示されている。このアプローチは非常に信頼性が高く、最高で（１００）１０ｍＣｉバッチ用量の入手可能な生物医学的サイクロトロンを使用してヒト注射用の純粋な高い比活性（通常、１乃至５Ｃｉ／マイクロモル）を生成し、５乃至１０Ｃｉまでの［Ｆ−１８］フッ化物イオンを日常的に生成できる。したがって、訓練を受けた技術者によるこの方法を使用した製品調製は容易に達成可能であり、ハイスループット臨床設定における重要な条件である。代替的に、この合成方法は、自動放射線合成器で実施することができる。この方法は合成時間を短縮し、合成手順、最も具体的には面倒な複数のカートリッジや有機溶媒を使用するＦ−１８フッ素化反応混合物の複雑な予精製、および半分取ＨＰＬＣ精製前の蒸発プロセスを大幅に単純化する。とりわけ、この方法でなされた重要な改良には、粗製放射性反応混合物の精製用のアルミナベースのカートリッジの利用と、半分取ＨＰＬＣ移動相へのアスコルビン酸の包含がある。本明細書に開示されている合成手順の主な目的は、ハイスループット化学合成、本質的に２つの目的をカバーする信頼性のある化学的方法を得ることである。（１）純粋な最終生成物を比較的離れた場所に輸送できるようにした高収率合成と、Ｆ−１８同位体の短い半減期（半減期：１１０分）による製品の減衰を（少なくともある程度までは）補償する。（２）合成が容易であるため、サイクロトロンを有する任意の場所でこの合成を任意のＦＤＡ承認自動ラジオシンセサイザー（または手動／半自動合成装置）に容易に適合させることができる。したがって、このＰＥＴプローブは、複数の臨床現場で非常に容易に使用できるようになる。本明細書に開示されている［Ｆ−１８］ＦＤＤＮＰの合成方法は、ほとんどのＰＥＴバイオマーカー用のＦＤＡ承認自動合成装置に容易に適用可能である。
【０００７】
アルミナカートリッジの使用は、Ｆ−１８フッ素化反応混合物の初期精製で以前に使用されていた不便な多重カートリッジシステムよりも優れていることがわかった。本明細書で使用されている方法では、単一のアルミナカートリッジが効率的に、単一工程で、無機物質（例えば、Ｋ２ＣＯ３）とクリプタンド（例えば、Ｋｒｙｐｔｏｆｉｘ（登録商標））、及びＦ−１８フッ素化反応の間に形成された有機副生成物の一部を除去するが、分解が少ない。準分取ＨＰＬＣ移動相にアスコルビン酸を含有させることは、特に精製プロセスにおいてアセトニトリル水溶液を使用する場合に有益な効果をもたらした。例えば、アスコルビン酸は、ＨＰＬＣ精製プロセス中の［Ｆ−１８］ＦＤＤＮＰの自己放射能分解を防止する。
【０００８】
一実施形態では、９０乃至９８％濃縮された［Ｏ−１８］水の１１ＭｅＶプロトン衝撃によって、担体無添加［Ｆ−１８］フッ化物イオンを生成している。水性［Ｆ−１８］フッ化物イオンをアニオン樹脂カートリッジに捕捉して［Ｏ−１８］水を回収した。カリウム塩（例えば、Ｋ２ＣＯ３）の０．２５％（重量：体積ベース）水溶液（０．４ｍＬ）を、アセトニトリル１．０ｍＬに溶解させた４，７，１３，１６，２１，２４−ヘキサオキサ−１，１０−ジアザビシクロ［８．８．８］ヘキサコサンのクリプタンド（例えば、Ｋｒｙｐｔｏｆｉｘ（登録商標）２．２．２。）（１０ｍｇ）を予め装填したガラス反応容器に通過させることによって、［Ｆ−１８］フッ化物イオンを順次放出させた。窒素ガス流を吹き込みながら、溶液を１１５℃で蒸発させた。残基をアセトニトリル（３×０．５ｍＬ）との共沸蒸留によって乾燥させた。乾燥させた残基に、アセトニトリル（０．７ｍＬ）中のトシルオキシ前駆体２−｛［６−（２，２−ジシアノ−１−メチルビニル）−２−ナフチル］（メチル）アミノ｝エチル−４−メチルベンゼンスルホネート（ＤＤＮＰＴ）（２．２乃至２．５ｍｇ）を加え、反応混合物を１５分間９３℃で加熱した。この溶液を窒素流で１分間冷却した。次いで、この混合物を、無水ＭｅＣＮ（６ｍＬ）で予めすすいだ中性アルミナ含有カートリッジ（例えば、Ｓｅｐ−Ｐａｋ（登録商標）Ｌｉｇｈｔ）に通過させた。より無水のＭｅＣＮ（２×０．５ｍＬ）を用いて反応容器とアルミナ含有カートリッジをすすいだ。回収したＭｅＣＮ溶離液を、０．１Ｍ酢酸アンモニウム（ＮＨ４ＯＡｃ）および０．０２Ｍアスコルビン酸（１．５ｍＬ）の氷冷水溶液で希釈し、次いで、分取ＨＰＬＣカラム（Ｗａｔｅｒｓ  Ｓｙｍｍｅｔｒｙ、ＰｒｅｐＣ１８７μ、７．８×３００ｍｍ）に注入した。ＨＰＬＣカラムを０．１ＭのＮＨ４ＯＡｃと０．０２Ｍのアスコルビン酸の水溶液中で、５０％ＭｅＣＮを用いて５．０ｍＬ／分の流速で溶出した。ＨＰＬＣカラムからの流出物をＵＶ検出器（λ＝４４０ｎｍ）でモニタし、続いてガンマ放射性検出器でモニタした。約２１分の保持時間で溶出した化学的および放射化学的に純粋な［Ｆ−１８］ＦＤＤＮＰ生成物を含有するＨＰＬＣ画分を１．２５分間回収した。この回収したＨＰＬＣ画分を水（９ｍＬ）で希釈した後、固相抽出カートリッジ（例えば、ｔＣ１８１ｃｃｖａｃＳｅｐ−Ｐａｋ（登録商標）（５０ｍｇ））を通過させた。抽出カートリッジを滅菌水（２０ｍＬ）で洗浄した。次いで、［Ｆ−１８］ＦＤＤＮＰをエタノール（ＥｔＯＨ（０．５ｍＬ））を用いて固相抽出カートリッジからガラス容器に溶出し、生理食塩水（合計５．５ｍＬ）および２５％のヒト血清アルブミン（合計４ｍＬ）と混合した。ＥｔＯＨ／アリン／ヒト血清アルブミン中の純粋な［Ｆ−１８］ＦＤＤＮＰ製品を、Ｍｉｌｌｅｘ（登録商標）ＧＶフィルター（０．２２μｍ）を通過させることによって滅菌し、滅菌多用量バイアルに収集した。
【０００９】
一実施形態において、２−（１−｛６−［（２−［Ｆ−１８］フルオロエチル）（メチル）アミノ］−２−ナフチル｝エチリデン−マロノニトリル（［Ｆ−１８］ＦＤＤＮＰ）の製造方法は、樹脂カートリッジ内の［Ｆ−１８］フッ化物イオン含有溶液から［Ｆ−１８］フッ化物イオンを捕捉するステップを具える。次いで、［Ｆ−１８］フッ化物イオンを、カリウム塩溶液（例えば、Ｋ２ＣＯ３）を通過させることによって、その中に含有されているクリプタンド溶液を反応容器中に溶出させる。このようにして形成された［Ｆ−１８］フッ化物／クリプタンド錯体を、無水アセトニトリルを用いた複数回の共沸蒸発に供して、反応容器中に乾燥［Ｆ−１８］フッ化物イオン／クリプタンド錯体残基を形成する。乾燥［Ｆ−１８］フッ化物イオン／クリプタンド錯体は、トシルオキシ前駆体２−｛［６−２，２−ジシアノ−１−メチルビニル）−２−ナフチル］（メチル）アミノ｝エチル−４−メチルベンゼンスルホネート（ＤＤＮＰＴ）と、無水アセトニトリル中で反応して、反応生成物を形成する。次いで、この反応生成物をアルミナカートリッジを通過させて注入容器に入れる。注入容器に含まれる反応生成物を、氷冷したＮＨ４ＯＡｃ／Ｌ−アスコルビン酸溶液で希釈し、ＨＰＬＣカラムに通過させるか、またはこれに流す。［Ｆ−１８］ＦＤＤＮＰを含有する画分をＨＰＬＣカラムから希釈容器に回収する。次いで、希釈容器に収容されている回収した［Ｆ−１８］ＦＤＤＮＰを水で希釈し、固相抽出カートリッジに通過させるかまたは流し、次いで［Ｆ−１８］ＦＤＤＮＰをエタノールで溶出する。次いで、溶出した［Ｆ−１８］ＦＤＤＮＰ（エタノールを含む）を生理食塩水およびヒト血清アルブミンで希釈して最終生成物（すなわち製剤）を形成する。
【００１０】
この方法を用いて、ヒトに投与する準備ができた［Ｆ−１８］ＦＤＤＮＰを高収率かつ短い生産時間で合成することができる。この方法はまた、以前の合成操作で使用されていた危険な有機溶媒の組み合わせを使用しない。例えば、最終生成物中にメタノール、ジクロロメタン、またはテトラヒドロフランは存在しない。最終生成物に微量のアセトニトリルが含まれている限りでは、その量はＦＤＡのガイドラインレベルを大幅に下回っている。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】図１は、［Ｆ−１８］ＦＤＤＮＰの製造に使用する反応を概略的に示す図である。
【図２】図２Ａ及び２Ｂは、［Ｆ−１８］ＦＤＤＮＰの合成に使用される半自動合成モジュールの概略図であり、モジュールのさまざまな構成要素で実行される単位操作を示す。
【図３Ａ】図３Ａは、個々の分析用ＨＰＬＣカラムからの［Ｆ−１８］ＦＤＤＮＰの溶出を示す放射トレースを示す図である。［Ｆ−１８］ＦＤＤＮＰの溶出は、異なるＨＰＬＣカラムならびに約９．５分で溶出させる異なる移動相の条件を利用した品質管理設定を用いて行われる。これは、半分取ＨＰＬＣカラムでの溶出時間よりはるかに短い。
【図３Ｂ】図３Ｂは、図３Ａに示すＨＰＬＣカラムからの［Ｆ−１８］ＦＤＤＮＰの溶出を示す紫外（ＵＶ）光吸収トレースを示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
図１は、トシルオキシ前駆体からの２−｛［６−（２，２−ジシアノ−１−メチルビニル）−２−ナフチル］（メチル）アミノ｝エチル−４−メチルベンゼンスルホネート（ＤＤＮＰＴ）から、バイオマーカーまたはＰＥＴトレーサーである２−（１−｛６−［（２−［Ｆ−１８］フルオロエチル）（メチル）アミノ］−２−ナフチル｝エチリデン）マロノニトリル（［Ｆ−１８］ＦＤＤＮＰ）を生成する放射化学反応を示す。調製または合成に続いて、ＰＥＴトレーサー［Ｆ−１８］ＦＤＤＮＰを、半調製用高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）によって精製する。図２Ａ及び２Ｂは、［Ｆ−１８］ＦＤＤＮＰの調製に使用する半自動化モジュール１０の概略図を示す。半自動モジュール１０は、サイクロトロンまたは他の放射化学実験室に見られる「ホットセル」内に設置される。ホットセルは、放射性物質の取り扱いに使用される専用の筐体である。ホットセルは排気され、技術者やオペレータがガンマ線エミッタからの放射線にさらされるのを防ぐ放射線遮蔽エンクロージャである。遮蔽材には、各種のコンクリート、鉛、鉛ガラス、鋼鉄、劣化ウランを使用できる。
【００１３】
本明細書で説明しているように、半自動モジュール１０のいくつかの構成要素は、ホットセルの外に配置することができる。これらは、キャリブレータ目盛１２、加熱器コントローラ１４、ＨＰＬＣポンプ１８、ＨＰＬＣ溶媒リザーバ１９、およびストリップチャート記録装置またはプロッター２０、ならびに様々な試薬および溶媒をモジュール１０に送達するのに使用される入力ラインまたはチューブを具えていてもよい。加熱槽２２、バルブ（Ｖ１乃至Ｖ５）、ＨＰＬＣ注入器２４、検出器２６、２８、攪拌機３０は、ホットセルの外に配置された電源スイッチ（図示せず）を介して遠隔制御される。
【００１４】
図２Ａ及び図２Ｂに示すように、半自動化モジュール１０は５つの機能ユニット（すなわち、ユニット１乃至５）を有し、各ユニットが５つの放射能合成ステップ（フッ素化、前精製、分離、生成物抽出、製剤）のうちの１つを実行する。ユニット１乃至５は物理的に別々のユニットではなく、単体の半自動化モジュール１０を合成に使用できることは自明である。本明細書に記載されているユニット１乃至５は、合成および最終調製においてそれぞれ異なる操作またはプロセスを実行するが、単体の全体モジュール１０の一部である個別ユニットを意味する。これらのユニットの個々の構成要素は、チューブまたはライン（例えば、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）またはテフロン（登録商標）製チューブ）で互いに接続されており、チューブの端子には、活栓／シリンジと接続するためのオスまたはメスのルアーチップが取り付けられている。操作中は、チューブまたはライン（例えば、図２Ａおよび２Ｂに見られるライン１乃至ライン１０）を介して、６０ｍＬのシリンジ、窒素ガス（正圧を加えるための）、またはその他の真空源を用いて、真空または正圧をホットセルの外側から加えることによって、試薬または溶媒をシステムに遠隔的に加えることができる。
【００１５】
以下に、個々のユニットならびにそれらの構造および機能について説明する。
【００１６】
ＵＮＩＴ−１  フッ素化ユニット：このユニットは、［Ｆ−１８］フッ化物イオンを、続く溶出用樹脂カートリッジ４２に送達するのに使用するループまたは流路を有する自動ピンチバルブ（ＶＩ）を具える。一実施形態では、樹脂カートリッジ４２は、［Ｆ−１８］フッ化物イオンをプロトン照射した［Ｏ−１８］水から単離するように調製された陰イオン交換樹脂カートリッジであり、［Ｏ−１８］水を節約して、合成中に蒸発させる必要がある水の量を減らす。一実施形態では、樹脂カートリッジ４２は、０．１２５インチ（内径）、０．１６０インチ（外径）のＰＴＦＥチューブに、ＢｉｏＲａｄ（登録商標）ＭＰ−１樹脂（ＢｉｏＲａｄ（登録商標）、Ｈｅｒｃｕｌｅｓ、ＣＡから入手可能であり、カタログ番号１４１１８５１）を装填することによってカスタムメイドされている。ＢｉｏＲａｄ（登録商標）ＭＰ−１樹脂は、スチレンジビニルベンゼンのマトリックスを使用し、マクロ多孔性の強陰イオン交換樹脂である。官能基はＲ−ＣＨ２Ｎ＋（ＣＨ３）３である。ＢｉｏＲａｄ（登録商標）ＭＰ−１樹脂は、真空とチューブ内の樹脂を沈降させるまたは引っ張る重力のいずれかを使用して、チューブ内に装填されている。樹脂は、１／８インチのホールパンチで形成しフリット対（細孔径７０μｍのポリエチレンフリット材料製）を用いてチューブ内に保持されている。このフリットが樹脂材料をチューブの内側に固定し、流体が樹脂材料を通過できるようにする。チューブの端部には、樹脂カートリッジ４２の完成させるルアーフィッティングを取り付けるようにしてもよい。
【００１７】
Ｖ１がオフ（通常は開）のとき、バルブＶ１は、図２ＡのバルブＶ１の右側の流路を挟む、あるいは閉じて、標的の水が樹脂カートリッジ４２（カートリッジＭＰ−１ともいう）を通過できるようにする。ここで、［Ｆ−１８］フッ化物イオンは樹脂カートリッジ４２に含まれる樹脂上に装填され、一方で［Ｏ−１８］水は、回収バイアル３４に進む。Ｖ１がオンのときは、バルブＶ１がバルブＶ１の左側の流路を挟む、あるいは閉じて、炭酸カリウム（又は他のカリウム塩）溶液が樹脂カートリッジ４２を通って流れ、［Ｆ−１８］フッ化物イオンを反応容器４４に溶出させる。
【００１８】
バルブＶＩに関連するフローループ内に配置されている陰イオン交換樹脂カートリッジ４２（例えば、ＭＰ−１カートリッジ）は、サイクロトロン照射標的水から［Ｆ−１８］フッ化物イオンを捕捉するためのものである。カートリッジ４２は、［Ｆ−１８］フッ化物イオンを捕捉し、［Ｏ−１８］水を通過させて、３０ｍＬのガラスバイアル３４中に回収する。線量キャリブレータ４５（モデルＣＲＣ−１５Ｒ、Ｃａｐｉｎｔｅｃ、Ｉｎｃ．，Ｆｌｏｒｈａｍ，ＮＪ）を用いて、樹脂カートリッジ４２で捕捉した放射能を測定する。線量キャリブレータ４５は、ホットセル内に配置され、バルブＶ１と樹脂カートリッジ４２を保持するウェルである。線量キャリブレータセンサ４５に接続された機器読み取りユニット１２のＦ−１８キーを押すことによって放射能を読み取る。樹脂カートリッジ４２に捕捉された［Ｆ−１８］フッ化物イオンは、０．４ｍＬの０．２５％炭酸カリウム水溶液を添加することによって放出される（他のカリウム塩も使用できる）。これは、ライン１（ＰＴＦＥ製）を介して添加され、送出ライン４６（これもＰＴＦＥ製）を介してフッ素化反応容器４４に回収される。加熱オイルバス２２が電動ジャッキプラットフォーム（図示せず）上に配置されており、バスを反応容器４４と選択的に接触させる。ガラスフッ素化反応容器４４は、３つのＰＴＦＥチューブ（チューブ４６、ライン２、及びチューブ５０）を担持するシリコンストッパー４８と共にバス２２の上方に配置されている。ライン２は、水性［Ｆ−１８］フッ化物イオンの共沸乾燥用のアセトニトリルの添加に使用される。ライン２はまた、クリプタンド溶液（例えば、Ｋｒｙｐｔｏｆｉｘ（登録商標）／ＭｅＣＮ溶液）ならびにＤＤＮＰＴを含む前駆体試薬を、乾燥［Ｆ−１８］フッ化物イオン／クリプタンド錯体残基を含む反応容器４４に添加するのにも使用される。フッ素化反応容器４４からアセトニトリルが蒸発する間、チューブ５０を介して窒素を移送する窒素源をユニット２内のＰＴＦＥライン３に接続することによって、穏やかなガスバブリングが可能になる。
【００１９】
ＵＮＩＴ−２  アルミナＳｅｐ−Ｐａｋ（登録商標）予精製ユニット：ＵＮＩＴ−１からのフッ素化反応混合物を、反応容器４４からＰＴＦＥチューブ５０を介してガラスシリンジバレル５２に反応混合物を引き込むライン３を介して真空を適用することにより、アルミナ含有カートリッジ５４（Ｓｅｐ−Ｐａｋ（登録商標）Ａｌｍｉｎａ  Ｎ  Ｐｌｕｓ  Ｌｉｇｈ  Ｃａｒｔｒｉｄｇｅ、製品番号ＷＡＴ０２３５６１、Ｗａｔｅｒｓ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、Ｍｉｌｆｏｒｄ  Ｍａｓｓａｃｈｕｓｅｔｔｓ）に連結されたガラスシリンジバレル５２（３ｍＬ）に移す。アルミナカートリッジ５４は、ＰＴＦＥチューブ５８を介して、ＨＰＬＣ注入容器５６に連結されている。アルミナカートリッジ５４を通る流体経路は、ライン３を通ってガラスシリンジバレル５２内に正圧（例えば、窒素の）をかけることによって達成される。
【００２０】
ＵＮＩＴ−３  セミプレパラティブＨＰＬＣユニット：次いで、注入容器５６内の粗生成物の混合物を、３ｍＬのループ容積を有するラインまたはチュービング６０を介して、連結されたＰＴＦＥライン（例えば、ライン５）を通して真空を適用することによって電気的に作動するＨＰＬＣインジェクターバルブ２４に移す。ＰＴＦＥライン４は、ＵＮＩＴ−２に見られるように、ＨＰＬＣ注入容器５６への水溶液の添加に使用される。ＨＰＬＣバルブ２４を用いて、粗反応混合物をＨＰＬＣカラム６２（Ｗａｔｅｒｓ  Ｓｙｍｍｅｔｒｙ  ＰｒｅｐＣ１８、７μ、７．８×３００ｍｍ）に注入すると、カラム流出物がＵＶ検出器２６を通過し、続いてガンマ放射能検出器２８を通過する。三方電磁弁Ｖ２により、ＨＰＬＣ溶離液を廃棄位置６４または収集位置のいずれかに方向転換させることができ、それによって溶離液がユニット６６（図２Ｂに示す）への移送用のチューブ６６に入る。バルブＶ２、Ｖ３、およびＶ４については、「ＮＯ」は常開を意味する。ＮＣは、常閉を意味する。
【００２１】
ＵＮＩＴ−４  生成物抽出ユニット：ＵＮＩＴ−３からのＨＰＬＣ画分を、チューブ６６を介してガラス希釈容器６８で受けて、複数のラインを有する隔壁７０で蓋をする。ＰＴＦＥライン６はＨＰＬＣ画分を水で希釈するために使用され、移送ライン７２は三方電磁弁Ｖ３を通して容器６８の内容物を吸い上げるために使用され、ライン７は通気ラインとして作用する。希釈容器６８の内容物は、攪拌装置３０と磁気攪拌子７４を用いて磁気的に攪拌される。攪拌子７４は、調製前に希釈容器６８内に配置されており、容器内の液体を均質化する。強疎水性のシリカベースの結合相を含むカートリッジ７６が（Ｓｅｐ−Ｐａｋ（登録商標）ｔＣ１８  １ＣＣ  Ｖａｃのカートリッジ、製品番号ＷＡＴ０５４９、Ｗａｔｅｒｓ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、Ｍｉｌｆｏｒｄ  Ｍａｓｓａｃｈｕｓｅｔｔｓ）が、電磁弁Ｖ３の出力に接続されている。希釈容器６８の内容物は、ライン６を通して（ライン７がキャップされている間）圧力を加えることによって、カートリッジ７６を通して流されて、製剤原料をカートリッジ７６に捕捉する一方で、ライン７８を介して溶媒は三方電磁弁Ｖ４を通って廃棄物バイアル６４に入る。カートリッジ７６をＰＴＦＥチューブライン８を介して水ですすぎ、すすいだ水も廃棄物バイアル６４内に入る。カートリッジ７６内に捕捉された放射性生成物がエタノール（同様にＰＴＦＥチューブライン８から投入）の添加によって放出されると、この生成物は電磁弁Ｖ４を通過し、チューブまたはライン８２を介して混合容器８０に集められる。次いで、混合容器８０中のエタノール中の生成物を通常の生理食塩水（合計５．５ｍＬ）と、ＰＴＦＥライン９を介して添加したヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）（合計４．０ｍＬ）で希釈する。
【００２２】
ＵＮＩＴ−５  最終薬品滅菌ユニット：最終薬品バイアル８４は、２５ｍｍの滅菌フィルター８６（製品溶液の滅菌用）と、４ｍｍの滅菌フィルター８８（通気用）と、滅菌針／無菌注射器９０に連結されており、事前に層流フード内で無菌条件下で組み立てられている。接続されたＰＴＦＥライン１０を通して真空を適用することにより、ＵＮＩＴ−４からの混合容器８０の内容物を、ライン９２を介した二方向ソレノイドバルブＶ５を通してガラスシリンジバレル９６（１０ｍＬ）に移す。移送後、ライン１０を通る正圧の適用で、チェックバルブ９８および滅菌フィルター８６を介してこの製品を滅菌最終医薬品バイアル８４内に押しだす。
【００２３】
以下の操作を行って、半自動化反応モジュールをセットアップする：
Ａ）すべての容器、ガラス製品、チューブ部品、およびバルブを、組み立て前に洗浄し乾燥させる。
Ｂ）１８０ｍＬの８０％メタノール水溶液でカラムを逆に溶離することにより、半分取ＨＰＬＣカラム６２を再生する。
Ｃ）ホットセルの表面を７０％のアルコールで洗浄する。
Ｄ）モジュール１０とその他の機器の電源を入れる。
Ｅ）オイルバス２２（前面パネル；４０ボルト入力）用のヒーターコントローラ１４をオンにして、１１５℃に設定して、デジタル温度計でオイルバスの温度を確認する。
Ｆ）ＨＰＬＣカラム６２を２００ｍＬの移動相で再平衡化した後、半分取ＨＰＬＣシステムをチェックする。１０ｍＬのグラデュアルシリンダ内の「回収ライン」を介して移動相を回収することにより、５ｍＬ／分で２分間、ポンプ流量を測定する。その流速での圧力にして、流速を１ｍＬ／分に下げ、Ｖ２を「廃棄」に切り替える。
Ｇ）６ｍＬのシリンジを用いて、６ｍＬの無水ＭｅＣＮでアルミナカートリッジ５４をすすぐ。
Ｈ）０．１Ｍ  ＮＨ４ＯＡｃ／０．０２ＭのＬ−アスコルビン酸溶液を冷蔵庫で冷却する。
Ｉ）１２ｍＬの１Ｍ  ＫＨＣＯ３溶液で、次いで２×１２ｍＬの１８ＭΩの水で  洗浄することによって、ＭＰ−１アニオン樹脂カートリッジ４２を活性化する。
Ｊ）活性化したＭＰ−１樹脂カートリッジ４２をピンチバルブ（ＶＩ）ループに挿入し、フッ化物トラップをＣａｐｉｎｔｅｃウェル４５に入れる  。
Ｋ）Ｋｒｙｐｔｏｆｉｘ（登録商標）／ＭｅＣＮ溶液（１ｍＬ、プラスチックシリンジ）を反応容器４４に加える。
Ｌ）２つの滅菌フィルター（１つは濾過用８６およびもう１つは通気用）を有する製品バイアル８４をＣｙｃｌｏｔｒｏｎ社に注文し、Ｃｙｃｌｏｔｒｏｎ社のスタッフによって滅菌環境で組み立てる。
Ｍ）あらかじめ組み立てられた３０ｍＬの滅菌製品バイアル８４に、ラベル「１８ＦＤＤＮＰ  ＨＳＡ／生理食塩水／ＥｔＯＨ」と、バッチ番号「ＭＭ−ＤＤ−ＹＹ」のラベル付けをする。
Ｎ）ＨＰＬＣ画分希釈容器６８中に、攪拌棒７４と９ｍＬの１８ＭΩ水を加える。
Ｏ）１０個のＰＴＦＥチューブ端子をホットセルのドアに下げて、モジュール１０を組み立てる。
Ｐ）２．５ｍＬの生理食塩水を６ｍＬのプラスチックシリンジを用いて開放混合容器８０に加える。
Ｑ）ライン５を介してＨＰＬＣ注入ループ２４をＨＰＬＣ移動相で満たす。
【００２４】
反応工程の前に多数の溶液を調製する。これには：（１）Ｋｒｙｐｔｏｆｉｘ（登録商標）／ＭｅＣＮ溶液（１０ｍｇ／ｍＬ）；（２）ＫＨＣＯ３溶液（１Ｍ）；（３）Ｋ２ＣＯ３溶液（０．２５％重量：体積ベース）；（４）ＮＨ４ＯＡｃ／Ｌ−アスコルビン酸溶液（０．１Ｍ／０．０２Ｍ）；（５）ＨＰＬＣ移動相（ＭｅＣＮ／０．１Ｍ  ＮＨ４ＯＡｃ＋０．０２ＭＬ−アスコルビン酸）；が含まれる。
【００２５】
［Ｆ−１８］フッ素化反応：
（１）［Ｆ−１８］フッ化物イオン溶液（通常、サイクロトロンの製造能力に基づいて１乃至５Ｃｉ）の反応容器４４への送達：
ａ．読み出し１２を用いてアニオン樹脂カートリッジ４２に捕捉された［Ｆ−１８］フッ化物イオンの放射能（及び時間）を書き留める：
ｂ．バルブＶ１をオンにする（ホットセルパネルの電気スイッチを押す）：
ｃ．［Ｆ−１８］フッ化物イオンを、０．４ｍＬの０．２５％Ｋ２ＣＯ３溶液を通過させ、次いで０．１ｍＬの１８ＭΩ水をライン１を介して樹脂カートリッジを通すことによって、Ｋｒｙｐｔｏｆｉｘ（登録商標）をあらかじめ装填した反応容器４４に放出する：
ｄ．Ｖ１をオフにする（ホットセルパネルの電気スイッチを上げる）：
ｅ．読み出し１２を用いて［Ｆ−１８］フッ化物イオン残留物の放射能（＆時間）を書き留める：
ｆ．ホットセルのサイドドアを開き、反応容器からＦ−１８送達ラインを素早く取り外す。
【００２６】
（２）［Ｆ−１８］フッ化物／Ｋｒｙｐｔｏｆｉｘ（登録商標）複合体の乾燥：
ａ．定量バルブで窒素流量を調製して、ライン３を介して［Ｆ−１８］フッ化物イオン溶液に穏やかな窒素流を導入する；
ｂ．オイルバス２２を保持しているジャッキを持ち上げて、反応容器４４を１１５℃に加熱したオイルバス２２に浸す；
ｃ．反応容器４４の上部のすりガラス接合部が部分的に乾燥しているように見えたら（約５乃至６分）、ライン２を介して０．５ｍＬの無水アセトニトリルを反応容器４４に加え、窒素バブリングを続ける；
ｄ．各回０．５ｍＬの無水アセトニトリルで、共沸蒸発をさらに２回繰り返し、この時点で、反応容器４４のすりガラス接合部は完全に乾燥しているように見えるはずである（トータル約１５分）；
ｅ．最後の２回のアセトニトリルの蒸発の間に、オイルバス２２の温度を１１５℃から９３℃に下げる。
【００２７】
（３）［Ｆ−１８］フッ素化反応：
ａ．オイルバス２２を下げて、ライン２を介して１ｍＬのガラスシリンジを用いて、無水アセトニトリル（０．７ｍＬ）中の前駆体ＤＤＮＰＴ（２．２乃至２．５ｍｇ）を、反応容器中の乾燥［Ｆ−１８］フッ化物イオン／Ｋｒｙｐｔｏｆｉｘ（登録商標）錯体残基に加える。ＤＤＮＰＴの合成に関する詳細は、Ｌｉｕ  ｅｔ  ａｌ，Ｈｉｇｈ−Ｙｉｅｌｄ、Ａｕｔｏｍａｔｅｄ  Ｒａｄｉｏｓｙｎｔｈｅｉｓ  ｏｆ  ２−１−｛６−ｊ２−［１８Ｆ］Ｆｌｕｏｒｏｅｔｈｙｌ）（ｍｅｔｈｙｌ）ａｍｉｎｏ］−２−ｎａｐｈｔｈｙｌ｝ｅｔｈｙｌｉｄｅｎｅ）ｍａｌｏｎｏｎｉｔｒｉｌｅ｛１８  Ｆ）ＦＤＤＮＰ｝Ｒｅａｄｙ  ｆｏｒ  ａＡｎｉｍａｌ  ｏｒ  Ｈｕｍａｎ  Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｉｍａｇｉｎｇ  ａｎｄ  Ｂｉｏｌｏｇｙ、Ｖｏｌ．９，ｐｐ．６−１６（２００７）に記載されている。
数秒間窒素を穏やかにバブリングすることによって反応容器の内容物を混合させる。
ｂ．オイルバス２２を上昇させて反応混合物を９０乃至９５℃に加熱する。
ｃ．オイルバス２２を下げることにより、１５分の時点で反応容器４４の加熱を停止する。
ｄ．窒素流を２分間バブリングして反応混合物を冷却する。
【００２８】
予精製：
（１）ライン３を介して６０ｍＬのプラスチックシリンジで真空引きすることにより、冷却した反応混合物を反応容器４４からシリンジバレル５２に移す。
（２）ライン３を介して空気圧でアルミナＳｅｐ−Ｐａｋ（登録商標）カートリッジ５４を通って液体を押して、注入容器５６に押し込む。
（３）０．５ｍＬの無水ＭｅＣＮを反応容器４４に加え、ステップ１と２を繰り返す。
（４）さらに０．５ｍＬの無水ＭｅＣＮを反応容器４４に加え、再びステップ１と２を繰り返す。
【００２９】
ＨＰＬＣ精製：
（１）例えば、分取ＨＰＬＣ移動相として、ＭｅＣＮ／０．１Ｍ  ＮＨ４ＯＡｃ＋０．０２Ｍ  Ｌ−アスコルビン酸（１：１）をポンピングする［００４６−４７］の操作といった、冷却中のＨＰＬＣポンプ１８の流速を５ｍＬ／分に設定する。
（２）１．５ｍＬの氷冷した／冷却したＮＨ４ＯＡｃ／Ｌ−アスコルビン酸（０．１Ｍ／０．０２Ｍ）溶液（３ｍＬプラスチックシリンジを使用）をライン４を介してＨＰＬＣ注入容器５６に加える。
（３）ライン５を通して真空を適用して、ライン６０を介してＨＰＬＣ注入容器５６内の混合物をＨＰＬＣ注入器２４のループに移す（注入ループ２４をＨＰＬＣ移動相で満たすのにも使用される、取り付けたシリンジを引き出す）。
（４）ホットセルの外のコントロールボックスを「注入」に切り替えて注入する。
（５）ストリップチャートレコーダまたはプロッタ２０と、ストップウォッチを始動させる。
（６）潜在的な目詰まりに対して、ＨＰＬＣポンプ１８の背圧を監視する。
（７）９ｍＬの１８ＭΩ水を含む希釈容器６８に対して、攪拌装置３０をオンにする。
（８）ストリップチャートレコーダ／プロッタ２０上のＵＶおよび放射性トレースを監視し、ストリップチャートレコーダ／２１で観察された、約２１分の保持時間で（Ｖ２をオンにすることによって）放射性ピークを希釈容器６８に回収する。１分１５秒後に（Ｖ２をオフにすることによって）回収を停止する。
【００３０】
ＨＰＬＣ画分からの製剤原料の抽出：
（１）さらに１分間撹拌を続ける。
（２）希釈容器６８内の混合液をカートリッジ７６に通し、ライン６を介して圧力を加えることにより流出液をＨＰＬＣ廃棄物フラスコ６４に入れる。溶液をカートリッジ７６に通過させるのに高圧が必要であれば、停止コックでベントチューブライン７を塞ぐ。
（３）Ｖ３をオンにし、ライン８を介して１２＋８ｍＬの滅菌水（１２ｍＬのプラスチック製シリンジを使用する）を通過させてカートリッジ７６を洗浄する。流出液を廃棄物６４に入れる。
（４）カートリッジ７６を窒素気流で乾燥させる。
【００３１】
ＱＣのための薬物投与量の調製とサンプリング：
（１）「製品３方弁」Ｖ４を「回収」にする。
（２）０．５ｍＬのＥｔＯＨ（１ｍＬ滅菌シリンジを使用）を用いて、２．５ｍＬの滅菌生理食塩水を含む混合容器８０にカートリッジ７６をゆっくりと溶出させる。
（３）ライン８を介して混合容器８０に窒素を穏やかにバブリングする。
（４）バブリングを止める。
（５）ＱＣのために容器８０から１００μＬの１６．７％ＥｔＯＨ／生理食塩水（サンプル−１）を取り出す。
（６）ライン９を介して３ｍＬの２５％ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）を非常に穏やかな窒素のバブリングによって混合容器８０に加える。
（７）窒素バブリングを停止し、Ｖ５をオンにし、ライン１０を介してＨＳＡシリンジバレル９６に真空を適用することによってＨＳＡ／ＥｔＯＨ／生理食塩水を移送する。
（８）Ｖ５をオフにし、ライン１０を介して圧力をかけて、無菌フィルタ８６を通して、製品を無菌製品バイアル８４内に押しだす。
（９）ライン９を介して、混合容器８０中の残基に、さらに１ｍＬの２５％ヒト血清アルブミンおよび３ｍＬの無菌生理食塩水を加える。
（１０）Ｖ５をオンにし、シリンジバレル９６にライン１０を介して真空をかけることによってすすぎＨＳＡを移送する。
（１１）Ｖ５をオフにし、ライン１０を介して圧力を加えて、ＨＳＡを滅菌フィルター８６を通して製品バイアル８４に移す。
（１２）フィルタの完全性をチェックする。
（１３）細菌性エンドトキシンと、無菌性ＱＣ試験用に０．３ｍＬの医薬品サンプル（サンプル−２）を採取する。
【００３２】
パワーダウン
（１）ホットセル内のモジュール１０全体の電源を切る。約２５分の時点でＨＰＬＣポンプ１８をオフにする。ホットセルの外側にある機器の電源タップ２０をオフにする。
【００３３】
この方法を用いて生成される放射化学収率（％）は高く、下記の表１に見られるように概ね３５％以上である。放射化学収率は、ＥＯＢ×１００に補正された反応容器４４に送達され、ＥＯＢ÷放射能に補正された製品の放射能から計算される。
【００３４】
表１−本明細書に記載の方法を用いて最終的に調製した［Ｆ−１８］ＦＤＤＮＰの典型的な放射化学収率
2019534284.tif 000003
開始［Ｆ−１８］活性（ＥＯＢに補正されたｍＣｉ）
［Ｆ−１８］ＦＤＤＮＰ収率（ＥＯＢに補正されたｍＣｉ）
放射化学収率（％）
ＥＯＢ＝［Ｆ−１８］フッ化物イオンのサイクロトロン製造のためのエンドオブボンバードメント
【００３５】
図３Ａは、個別分析用ＨＰＬＣカラムからの［Ｆ−１８］ＦＤＤＮＰの溶出を示す放射トレースである。［Ｆ−１８］ＦＤＤＮＰの溶出は、異なるＨＰＬＣカラム（すなわち分析カラム）を用いた品質管理設定と、約９．５分で溶出を引き起こす様々な移動相条件を用いて行われることに留意されたい。図３Ｂは、図３ＡのＨＰＬＣカラムからの［Ｆ−１８］ＦＤＤＮＰの溶出を示す紫外（ＵＶ）光吸収トレースを示す。品質管理の目的で、ラジオ薄層クロマトグラフィ（ＴＬＣ）試験やガスクロマトグラフィ試験も実施できる。
【００３６】
本明細書に開示されている［Ｆ−１８］ＦＤＤＮＰの製造方法にはいくつかの重要な利点がある。第一に、この方法は有害な有機溶媒の組み合わせを組み入れていない。従来の合成方法は、ジクロロメタン（ＤＣＭ）、メタノール（ＭｅＯＨ）、およびテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）の使用が必要であった。例えば、上述したＬｉｕ  ｅｔ  ａｌ．（２００７）を参照されたい。これらの有機溶媒は、ＦＤＡクラス２溶媒に分類されており、現在のＦＤＡの規制および指針の下では、それらの固有の毒性のために医薬品においては制限されている。例えば、ＦＤＡは工業用Ｑ３Ｃ不純物である、残留溶媒についての指針を出しており、これは、どのくらいの量の残留溶媒が薬剤において安全と考えらえるかについて推奨するものである。米国保健福祉省、食品医薬品局、改訂３、６月、２０１７の業界向けＱ３Ｃの表およびリストガイダンスを参照。これは、参照により本明細書に組み入れられている。ＤＣＭおよびＴＨＦなどの溶媒は、医薬品中に含めることが望ましくない。例えば、ＤＣＭは既知の発がん物質である。ＴＨＦは、体組織に対する既知の刺激剤である過酸化物形成化合物である。したがって、実施形態では、製造プロセスは、ＤＣＭ、ＭｅＯＨ、またはＴＨＦなどの有機溶媒を実質的に含んでいない。最終製品は、ＦＤＡで定められたガイドラインの限度（４１０ｐｐｍ）を下回る微量のアセトニトリル（０−５０ｐｐｍ）のみを含んでいるため、記載されている最終製品は既存のＦＤＡ規制および指針の下でヒトへの投与用のものである。最終生成物はいくらかのエタノールを含んでいてもよいが、エタノールの量はヒトへの投与用に希釈され、濃度はＦＤＡガイドラインの限度を大幅に下回る。本製造方法のその他の利点は、より短い経過時間（例えば１２０分と比較して合計１００分）で最終製品を製造することができることである。これは、反応を抑えるために１％ＨＣｌ水溶液を使用し、続いてＣ−１８Ｓｅｐ−Ｐａｋ（登録商標）抽出を行う従来の合成方法に代えて、有機溶媒と続く溶離液の蒸発を単一のアルミナカートリッジ（例えば、Ｓｅｐ−Ｐａｋ（登録商標））を使用して行うことによって可能となる。例えば、上述したＬｉｕ  ｅｔ  ａｌ．（２００７）、を参照されたい。重要なことに、これは予精製のためのフッ素化反応の直後に単一のアルミナカートリッジを使用する非水性後処理である。これは合成時間を短縮することに加えて、［Ｆ−１８］ＦＤＤＮＰの自己放射能分解を低減するのに重要な役割を果たしている。すなわち、この方法は、いくつかの実施形態では１２０分未満で最終生成物を製造することができ、より好ましくは１００分以下で最終生成物を製造することができる。例えば、一実施形態では、最終製品は約９０から１００分で製造することができる。放射性フッ素同位体（フッ素−１８の半減期は１１０分である）が発生するとすぐに急速な放射性崩壊が起こり始めるので、このことは重要である。その他の利点は、本明細書に記載の方法を用いて達成される高い収率である。一般に、最終生成物収率（最終的な配合生成物で測定した場合）は約３０％から約４０％の範囲である。しかしながら、これより高い収率が得られており、最も高い収率は約４５乃至４６���である。本明細書に記載の方法は高い信頼性があり、最大１００の１０ｍＣｉバッチ用量の純粋な比活性が高い（通常１乃至５のＣｉ／マイクロモル）の［Ｆ−１８］ＦＤＤＮＰバイオマーカーを製造することができる。これは、ヒトへの注射用であり、市販の生物医学的サイクロトロンを用いて、ルーチンで最大５−１０Ｃｉの［Ｆ−１８］フッ化物イオンを生成する。
【００３７】
本発明の実施形態を説明してきたが、本発明の範囲から逸脱することなく様々な修正を加えることができる。したがって、本発明は、添付の特許請求の範囲およびそれらの均等物を除いて限定されるべきではない。
【図１】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【国際調査報告】
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