(57)【要約】ソベチロムと比較して改善された薬理学的特性を有する、ソベチロムのハロ置換誘導体化合物、これらの化合物を含む医薬組成物、及びこれらの医薬組成物を使用して神経変性疾患などの疾患を治療する方法が、開示される。2019516739.tif 000014
2019516739.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉの化合物
2019516739.tif 000013
またはその任意の薬学的に許容される塩：
式中、
Ｒ１及びＲ２は、フルオロ、クロロ、ブロモ及びヨードからなる群から独立して選択され、ならびに
Ｒ３は、−ＯＨ及び−ＮＲ３ａＲ３ｂからなる群から独立して選択され、
Ｒ３ａは水素及びＣ１〜６アルキルから独立して選択され、ならびに
Ｒ３ｂはＣ１〜６アルキルである。
【請求項２】
Ｒ１及びＲ２が、クロロ及びブロモからなる群から独立して選択される、請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
【請求項３】
Ｒ１及びＲ２の両方がブロモである、請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
【請求項４】
Ｒ３が−ＯＨである、請求項３に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
【請求項５】
Ｒ３が−ＮＨＲ３ｂであり、Ｒ３ｂがＣ１〜６アルキルである、請求項３に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
【請求項６】
Ｒ３ｂがメチルである、請求項５に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
【請求項７】
Ｒ１及びＲ２の両方がクロロである、請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
【請求項８】
Ｒ３が−ＯＨである、請求項７に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
【請求項９】
Ｒ３が−ＮＨＲ３ｂであり、Ｒ３ｂがＣ１〜６アルキルである、請求項７に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１０】
Ｒ３ｂがメチルである、請求項１５に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１１】
神経変性疾患の治療に使用するための、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１２】
前記神経変性疾患が脱髄疾患である、請求項１１に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１３】
前記神経変性疾患が、Ｘ連鎖性副腎白質ジストロフィーまたは多発性硬化症である、請求項１１に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１４】
請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩、及び１つ以上の薬学的に許容される担体を含む、医薬組成物。
【請求項１５】
神経変性疾患の治療に使用するための、請求項１４に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
前記神経変性疾患が脱髄疾患である、請求項１５に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
前記神経変性疾患が、Ｘ連鎖性副腎白質ジストロフィーまたは多発性硬化症である、請求項１４に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
有効量の請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩を、それを必要とする対象に投与することで神経変性疾患を治療することを含む、神経変性疾患を治療する方法。
【請求項１９】
前記神経変性疾患が脱髄疾患である、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記神経変性疾患が、Ｘ連鎖性副腎白質ジストロフィーまたは多発性硬化症を含む、請求項１８に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１６年５月１８日に出願された米国仮特許出願第６２／３３８，１７８号に対する優先権を主張し、その出願は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【０００２】
連邦政府による資金提供を受けた研究開発の下でなされた発明に対する権利の記載
本発明は、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈにより付与された助成金番号ＤＫ−５２７９８の下で政府の支援によってなされた。政府は本発明において一定の権利を有する。
【背景技術】
【０００３】
発明の背景
甲状腺ホルモン（ＴＨ）は、成長の間のオリゴデンドロサイト分化及び髄鞘化の重要なシグナルであり、多発性硬化症（ＭＳ）の成人モデルにおいても再髄鞘化を刺激する（Ｃａｌｚａ  Ｌ  ｅｔ  ａｌ．Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ  Ｒｅｖｓ４８，３３９−３４６（２００５（非特許文献1））、参照により本明細書に組み込まれる）。しかしながら、ＴＨは、慢性甲状腺機能亢進症に伴う心毒性及び骨の脱灰を回避しながら髄鞘化を達成することができる治療域が事実上存在しないことから、許容可能な長期療法ではない。いくつかの甲状腺ホルモン類似体は、甲状腺ホルモン応答性遺伝子を活性化する一方で、甲状腺ホルモン受容体の分子的及び生理学的特徴を活用することによってＴＨに関連する欠点を回避することができる（Ｍａｌｍ  Ｊ  ｅｔ  ａｌ．Ｍｉｎｉ  Ｒｅｖ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ７，７９−８６（２００７）（非特許文献2）、参照により本明細書に組み込まれる）。これらの受容体は、異種組織分布及び重複するが異なる標的遺伝子セット（Ｙｅｎ  ＰＭ，Ｐｈｙｓｉｏｌ  Ｒｅｖ８１，１０９７−１１４２（２００１）（非特許文献3）、参照により本明細書に組み込まれる）を有する２つの主な形態で発現する。ＴＲαは心臓、脳及び骨に多く、ＴＲβは肝臓に多い（Ｏ’Ｓｈｅａ  ＰＪ  ｅｔ  ａｌ．Ｎｕｃｌ  Ｒｅｃｅｐｔ  Ｓｉｇｎａｌ４，ｅ０１１（２００６）（非特許文献4）、参照により本明細書に組み込まれる）。選択的な甲状腺ホルモン様物質の開発は、甲状腺ホルモン受容体サブタイプの高い配列相同性、つまりリガンド結合ドメインの空洞の内部表面において、α１型とβ１型の間で１つのアミノ酸残基しか異ならないために困難であった。ＧＣ−１は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ（Ｃｈｉｅｌｌｉｎｉ  Ｇ  ｅｔ  ａｌ．Ｃｈｅｍ  Ｂｉｏｌ５、２９９−３０６（１９９８）（非特許文献5）及びＹｏｓｈｉｈａｒａ  ＨＡＩ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ４６，３１５２−３１６１（２００３）（非特許文献6）、いずれも参照により本明細書に組み込まれる）及びｉｎ  ｖｉｖｏ  （Ｔｒｏｓｔ  ＳＵ  ｅｔ  ａｌ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ１４１，３０５７−３０６４（２０００）（非特許文献7）、Ｇｒｏｖｅｒ  ＧＪ  ｅｔ  ａｌ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ１４５，１６５６−１６６１（２００４）（非特許文献8）、ならびにＢａｘｔｅｒ  ＪＤ  ｅｔ  ａｌ．Ｔｒｅｎｄｓ  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ  Ｍｅｔａｂ１５，１５４−１５７（２００４）（非特許文献9）、これらの全ては参照により本明細書に組み込まれる）で有意なＴＲβ選択性を示した最初の有望な類似体の１つであった。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】Ｃａｌｚａ  Ｌ  ｅｔ  ａｌ．Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ  Ｒｅｖｓ４８，３３９−３４６（２００５）
【非特許文献２】Ｍａｌｍ  Ｊ  ｅｔ  ａｌ．Ｍｉｎｉ  Ｒｅｖ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ７，７９−８６（２００７）
【非特許文献３】Ｙｅｎ  ＰＭ，Ｐｈｙｓｉｏｌ  Ｒｅｖ８１，１０９７−１１４２（２００１）
【非特許文献４】Ｏ’Ｓｈｅａ  ＰＪ  ｅｔ  ａｌ．Ｎｕｃｌ  Ｒｅｃｅｐｔ  Ｓｉｇｎａｌ４，ｅ０１１（２００６）
【非特許文献５】Ｃｈｉｅｌｌｉｎｉ  Ｇ  ｅｔ  ａｌ．Ｃｈｅｍ  Ｂｉｏｌ５、２９９−３０６（１９９８）
【非特許文献６】Ｙｏｓｈｉｈａｒａ  ＨＡＩ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ４６，３１５２−３１６１（２００３）
【非特許文献７】Ｔｒｏｓｔ  ＳＵ  ｅｔ  ａｌ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ１４１，３０５７−３０６４（２０００）
【非特許文献８】Ｇｒｏｖｅｒ  ＧＪ  ｅｔ  ａｌ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ１４５，１６５６−１６６１（２００４）
【非特許文献９】Ｂａｘｔｅｒ  ＪＤ  ｅｔ  ａｌ．Ｔｒｅｎｄｓ  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ  Ｍｅｔａｂ１５，１５４−１５７（２００４）
【発明の概要】
【０００５】
発明の簡単な概要
本明細書に開示されるのは、以下の式Ｉによる化合物、
2019516739.tif 000003
またはその任意の薬学的に許容される塩であり、
式中、
Ｒ１及びＲ２は、フルオロ、クロロ、ブロモ及びヨードからなる群から独立して選択され、ならびに
Ｒ３は、−ＯＨ及び−ＮＲ３ａＲ３ｂからなる群から独立して選択され、
Ｒ３ａは、水素及びＣ１〜６アルキルからなる群から独立して選択され、ならびに
Ｒ３ｂはＣ１〜６アルキルである。
【０００６】
有効量の開示化合物またはその薬学的に許容される塩、及び１つ以上の薬学的に許容される担体を含む医薬組成物もまた、開示される。いくつかの実施例において、医薬組成物は、脱髄疾患、例えばＸ連鎖性副腎白質ジストロフィーまたは多発性硬化症に分類される複数の神経変性疾患を含む神経変性疾患の治療に使用するためのものである。
【０００７】
対象における神経変性疾患を治療する方法も開示され、そのような方法には、開示された医薬組成物を対象に投与することによって神経変性疾患を治療することが含まれる。いくつかの態様において、神経変性疾患は、Ｘ連鎖性副腎白質ジストロフィーまたは多発性硬化症などの脱髄疾患として分類することができる。
【図面の簡単な説明】
【０００８】
【図１Ａ】一過性にトランスフェクトされたＨＥＫ２９３細胞において、ｈＴＲα１に対して計算されたシグモイド用量反応曲線によるＴＲＥ駆動デュアルルシフェラーゼトランス活性化アッセイのデータのプロットである。プロットは、Ｔ３応答に対して正規化したエラーバーを有する、３連測定の平均値を示す。
【図１Ｂ】一過性にトランスフェクトされたＨＥＫ２９３細胞において、ｈＴＲβ１に対して計算されたシグモイド用量反応曲線によるＴＲＥ駆動デュアルルシフェラーゼトランス活性化アッセイのデータのプロットである。プロットは、Ｔ３応答に対して正規化したエラーバーを有する、３連測定の平均値を示す。
【図２】９．１４μｍｏｌ／ｋｇ用量のＧＣ−１、ＪＤ−２０及びＪＤ−２１を腹腔内投与（ｉｐ）して１時間後のＣ５７／Ｂマウス組織の脳及び血清の、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳにより測定したＧＣ−１、ＪＤ−２０及びＪＤ−２１のｉｎ  ｖｉｖｏ濃度を示す３つの棒グラフのセットである。
【図３】飽和用量のＴ３（０．３０５μｍｏｌ／ｋｇ）またはＧＣ−１（９．１４μｍｏｌ／ｋｇ）に加えて漸増用量（０．９１４及び９．１４μｍｏｌ／ｋｇ）のＪＤ−２０及びＪＤ−２１の腹腔内投与（ｉｐ）２時間後のＣ５７／Ｂマウス脳（３匹／用量）における、ｑＰＣＲで測定したグリセルアルデヒド３−リン酸デヒドロゲナーゼ（ＧＡＰＤＨ）ｍＲＮＡで標準化されたＴＲ制御遺伝子Ｈａｉｒｌｅｓｓ（Ｈｒ）ｍＲＮＡの発現を示す棒グラフである。
【図４】ＧＣ−１、ＪＤ−２０及びＪＤ−２１の腹腔内投与（ｉｐ）２時間後のＣ５７／Ｂマウス脳（３匹／用量）における、ｑＰＣＲで測定したグリセルアルデヒド３−リン酸デヒドロゲナーゼ（ＧＡＰＤＨ）ｍＲＮＡに対して標準化された、ＴＲ制御遺伝子Ｈａｉｒｌｅｓｓ（Ｈｒ）ｍＲＮＡの発現のプロットである。
【図５Ａ】腹腔内投与後のＣ５７Ｂｌ／６マウスにおける脳の薬物濃度のプロットである。
【図５Ｂ】腹腔内投与後のＣ５７Ｂｌ／６マウスにおける血清の薬物濃度のプロットである。
【図５Ｃ】腹腔内投与後のＣ５７Ｂｌ／６マウスにおける薬物の血清濃度に対する脳濃度の比率を示す。
【図６Ａ】経口投与後のＣ５７Ｂｌ／６マウスにおける脳の薬物濃度のプロットである。
【図６Ｂ】経口投与後のＣ５７Ｂｌ／６マウスにおける血清の薬物濃度のプロットである。
【図６Ｃ】経口投与後のＣ５７Ｂｌ／６マウスにおける薬物の血清濃度に対する脳濃度の比率を示す。
【図７Ａ】化合物をマウスに経口投与した後の２４時間の経時変化試験にわたる脳内のＪＤ−２０濃度のプロットを示す。
【図７Ｂ】化合物をマウスに経口投与した後の２４時間の経時変化試験にわたる血清中のＪＤ−２０濃度のプロットを示す。
【図８】化合物をマウスに経口投与した後のＪＤ−２０、ＭＡ−ＪＤ２０、ＪＤ−２１及びＭＡ−ＪＤ２１によるＨｒ遺伝子発現の誘導を示す。
【図９】ＭＡ−ＪＤ２０及びＭＡ−ＪＤ２１が脂肪酸アミド加水分解酵素（ＦＡＡＨ）の基質であることを示す。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
発明の詳細な説明
Ｉ．定義
特に別様に定義されない限り、本明細書で使用される技術用語は、当技術分野で理解されるような通常の意味を有する。以下の用語及び方法の説明は、本発明の化合物、組成物及び方法をより良く説明し、本開示の実施において当業者を導くために提供される。本開示において使用される用語は、特定の実施形態及び実施例のみを説明するためのものであり、限定することを意図するものではないことも理解されたい。
【００１０】
本明細書で使用する場合、単数の用語「１つ（ａ）」、「１つ（ａｎ）」及び「その（ｔｈｅ）」は、文脈が別様であることを明白に示さない限り、複数の指示対象を含む。同様に、「または」という語は、文脈が別様であることを明白に示さない限り、「及び」を含むことが意図される。また、本明細書で使用する場合、用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」は、「含む（ｉｎｃｌｕｄｅ）」を意味する。したがって、「ＡまたはＢを含む」とは、Ａ、ＢまたはＡ及びＢを含むことを意味する。
【００１１】
Ｒなどの変数が本開示を通じて使用される場合、その全ての下位変数（Ｒ１、Ｒ２など）を含み、逆のことが明記されない限り、先に定義したものと同じ変数である。
【００１２】
本明細書で使用する場合、用語「アルキル」は、それ自体または別の置換基の一部として、示された炭素原子数を有する直鎖または分枝鎖の飽和脂肪族基を指す。アルキルは、Ｃ１〜２、Ｃ１〜３、Ｃ１〜４、Ｃ１〜５、Ｃ１〜６、Ｃ１〜７、Ｃ１〜８、Ｃ１〜９、Ｃ１〜１０、Ｃ２〜３、Ｃ２〜４、Ｃ２〜５、Ｃ２〜６、Ｃ３〜４、Ｃ３〜５、Ｃ３〜６、Ｃ４〜５、Ｃ４〜６及びＣ５〜６などの任意の炭素数を含むことができる。例えば、Ｃ１〜６アルキルは、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチル、ヘキシルなどを含むが、これらに限定されない。アルキルはまた、例えばヘプチル、オクチル、ノニル、デシルなどに限定されない最大２０個の炭素原子を含むアルキル基を指すことができる。
【００１３】
本明細書で使用する場合、用語「急性散在性脳脊髄炎」及び「ＡＤＥＭ」は、中枢神経系の免疫介在性脱髄疾患を指す。ＡＤＥＭは通常、ウイルス感染後に起こるが、ワクチン接種後または細菌感染もしくは寄生虫感染後に出現することもある。場合により、ＡＤＥＭは自然発症する。この疾患は、多発性硬化症に類似した自己免疫性脱髄を含むため、多発性硬化症の境界疾患と考えられている。ＡＤＥＭは、脳及び脊髄の、とりわけ白質において、多発性の炎症性病変を生じる。病変は典型的には、皮質下及び中央の白質ならびに大脳半球、小脳、脳幹及び脊髄の皮質灰白質接合部において見出されるが、脳室周囲白質及び皮質、視床及び基底核の灰白質も関与している可能性がある。患者が１回以上の脱髄性症状を患う場合、この疾患は、再発性散在性脳脊髄炎または多相性散在性脳脊髄炎と呼ばれる。
【００１４】
本明細書で使用される場合、用語「急性出血性白質脳炎」、「ＡＨＬ」及び「ＡＨＬＥ」は、超急性及び高頻度の致命的な形態のＡＤＥＭを指す。この疾患は、急性壊死性脳症（ＡＮＥ）、急性出血性脳脊髄炎（ＡＨＥＭ）、急性壊死性出血性白質脳炎（ＡＮＨＬＥ）、ウエストン−ハースト（Ｗｅｓｔｏｎ−Ｈｕｒｓｔ）症候群、またはハースト病としても知られている。
【００１５】
本明細書で使用する場合、用語「投与」は、本明細書に記載の化合物、化合物のプロドラッグ、または化合物もしくはプロドラッグを含む医薬組成物を提供することを指す。化合物または組成物は、別の人によって対象に投与され得るか、または対象によって自己投与され得る。
【００１６】
本明細書で使用する場合、用語「成人レフサム病」は、細胞及び組織におけるフィタン酸の過剰蓄積に関連する常染色体劣性神経疾患を指す。成人レフサム病は、成人レフサム病１と成人レフサム病２のサブタイプに分類される。レフサム病患者は、神経学的損傷、小脳変性、及び末梢神経障害を呈している。発症は段階的経過を伴う小児期／思春期で最も一般的であるが、停滞または寛解の期間が生じる。症状には、運動失調、鱗状皮膚（魚鱗癬）、難聴、及び白内障及び夜盲症を含む眼の問題も含まれる。
【００１７】
本明細書で使用する場合、用語「アレキサンダー病」は、非常に稀な先天性脱髄疾患を指す。この疾患は主に幼児及び小児に影響を及ぼし、発達遅延及び身体的特徴の変化をもたらす。アレキサンダー病は、白質ジストロフィーの一種である。
【００１８】
本明細書で使用する場合、用語「アルツハイマー病」は、最も一般的な型の認知症を指す。アルツハイマー病の症状には、記憶喪失、混乱、過敏性、攻撃性、気分変動、言語障害が含まれる。この疾患は、大脳皮質及び特定の皮質下領域におけるニューロン及びシナプスの喪失を特徴とする。この喪失により、側頭葉ならびに前頭皮質及び帯状回の部分の変性を含む影響を受けた領域の著しい萎縮が生じる。アミロイド斑及び神経原線維変化は、この疾患に罹患した人々の脳において、顕微鏡で見ることができる。アルツハイマー病の原因は不明であるが、この疾患には、年齢に関連した脳のミエリン分解によって引き起こされるということを含む、いくつかの仮説が存在する。
【００１９】
本明細書で使用する場合、用語「バロー同心性硬化症」は、標準的な多発性硬化症に類似した脱髄疾患を指すが、脱髄した組織が同心円状の層を形成するという特殊性を有する。この疾患の患者は生存することができ、及び／または自然寛解を有することができる。通常、臨床経過は原発性進行性であるが、再発寛解の経過が報告されている。
【００２０】
本明細書で使用する場合、用語「カナバン病」は、脳の神経細胞に進行性の損傷を引き起こす常染色体劣性変性疾患を指す。カナバン病は、白質ジストロフィーであり、乳児期の最も一般的な変性性脳疾患の１つである。この疾患は、カナバン−ファン・ボーゲル−ベルトラン（Ｃａｎａｖａｎ−Ｖａｎ  Ｂｏｇａｅｒｔ−Ｂｅｒｔｒａｎｄ）病、アスパルトアシラーゼ欠損症及びアミノアシラーゼ２欠損症とも呼ばれる。
【００２１】
本明細書で使用する場合、用語「橋中心髄鞘崩壊症」及び「ＣＰＭ」は、脳幹における神経細胞のミエリン鞘、より正確には橋と呼ばれる領域の重度な損傷によって引き起こされる神経疾患を指す。最も一般的な原因は、低い血中ナトリウム濃度（低ナトリウム血症）の急速な矯正である。この疾患で頻繁に観察される症状は、急激な不全対麻痺または四肢不全麻痺、嚥下困難、構音障害、複視及び意識喪失である。患者は、認知機能は損なわれていないが、目の瞬きを除くすべての筋肉が麻痺する、閉じ込め症候群になることもある。
【００２２】
本明細書で使用する場合、用語「脳性麻痺」は、身体的障害を引き起こす永続的で非進行性の運動障害の群を指す。脳性麻痺は、発達中の脳の運動中枢に対する損傷によって引き起こされ、妊娠中、出産中、または生後約３歳までに起こり得る。脳性麻痺の患者は、ミエリン鞘に損傷を示す。
【００２３】
本明細書で使用される場合、用語「脳腱黄色腫症」は、脳及び他の組織におけるコレステロール（コレスタノール）の一種の蓄積に関連し、血漿中のコレステロールレベルは上昇を伴うが、正常な総コレステロールレベルを有する、遺伝性疾患を指す。これは、思春期後に始まる進行性小脳性運動失調ならびに、若年性白内障、若年期または乳児期に発症する慢性下痢、小児期の神経障害、および腱黄色腫または結節性黄色腫を特徴とする。この疾患は、常染色体劣性型の黄色腫症である。これは、白質ジストロフィーと呼ばれる遺伝性疾患の群の中に入る。
【００２４】
本明細書で使用する場合、用語「慢性炎症性脱髄性多発ニューロパチー」及び「ＣＩＤＰ」は、末梢神経系の後天性免疫介在性炎症性疾患を指す。この疾患は、慢性再発性多発ニューロパチー（ＣＲＰ）または慢性炎症性脱髄性多発神経根ニューロパチー（神経根を伴うため）と呼ばれることもある。ＣＩＤＰはギラン−バレー症候群と密接に関連しており、それはその急性疾患の慢性的な疾患と考えられている。その症状は、進行性炎症性ニューロパチーとも類似している。ＣＩＤＰの非対称性の変種は、ルイス−サムナー症候群として知られる。疾患の病理学的特徴はミエリン鞘の喪失である。
【００２５】
本明細書で使用する場合、用語「脱髄疾患」は、ミエリンが損傷もしくは喪失している、またはミエリン鞘の成長もしくは発達が障害されている神経系の疾患を指す。脱髄は、冒された神経においてシグナルの伝達を阻害し、これにより感覚、運動、認知、または神経が関与する他の機能に障害が生じる。脱髄疾患は、多くの異なる原因を有し、遺伝性または後天性であり得る。場合によって、脱髄疾患は、感染因子、自己免疫応答、毒性物質または外傷によって引き起こされる。他の場合において、脱髄疾患の原因は不明であり（「特発性」）、または複数の因子の組み合わせにより発症する。
【００２６】
本明細書で使用する場合、用語「誘導体」は、親化合物に由来するか、または親化合物から理論的に誘導可能である化合物または化合物の部分を指す。
【００２７】
本明細書で使用する場合、用語「デビック症候群」は、ヒトの免疫系が視神経及び脊髄を攻撃することにより視神経の炎症（視神経炎）及び脊髄の炎症（脊髄炎）が結果として起こる、自己免疫性炎症性疾患を指す。脊髄病変は、脚または腕の様々な程度の衰弱または麻痺、感覚の喪失、及び／または膀胱及び腸の機能不全をもたらす。炎症は脳にも影響するが、病変はＭＳで観察される病変とは異なる。デビック症候群は、身体の免疫系が神経細胞を囲むミエリンを攻撃するという点でＭＳと類似している。標準的なＭＳとは異なり、この攻撃は免疫系のＴ細胞によって媒介されるのではなく、むしろＮＭＯ−ＩｇＧと呼ばれる抗体によって媒介されると考えられている。これらの抗体は、星状細胞の細胞膜中のアクアポリン４と呼ばれるタンパク質（細胞膜を横切る水の輸送のためのチャネルとして作用する）を標的とする。デビック症候群は、デビック症候群または視神経脊髄炎（ＮＭＯ）としても知られている。
【００２８】
本明細書で使用する場合、用語「びまん性髄鞘破壊硬化症（ｄｉｆｆｕｓｅ  ｍｙｅｌｉｎｏｃｌａｓｔｉｃ  ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ）」は、偽腫瘍脱髄病変として臨床的に存在する、珍しい神経変性疾患を指す。それは通常５歳から１４歳の子供に影響を与える小児期に始まるが、大人の場合もあり得る。この疾患は、ＭＳの境界型の１つと考えられ、時にはシルダー病と呼ばれる。
【００２９】
本明細書で使用する場合、用語「有効量」は、その薬剤で処置される対象において所望の効果を達成するのに十分な特定の薬剤の量を指す。理想的には、薬剤の有効量とは、対象において実質的な毒性をもたらすことなく疾患を抑制または治療するのに十分な量である。薬剤の有効量は、処置される対象、疾患の重症度、及び医薬組成物の投与方法に依存され得る。対象において所望の効果を達成するのに十分な開示化合物の有効量を決定する方法は、本開示を踏まえて当業者に理解されるであろう。
【００３０】
本明細書で使用する場合、用語「脳脊髄炎」という用語は、脳及び脊髄の炎症を指す。
【００３１】
本明細書で使用する場合、用語「実験的自己免疫性脳脊髄炎」及び「ＥＡＥ」は、ＭＳの動物モデルを指す（例えば、Ｇｏｌｄ  ｅｔ  ａｌ．Ｂｒａｉｎ１２９，１９５３−１９７１（２００６）を参照）。ＥＡＥ動物は、中枢神経系の至るところに散在する組織傷害の特徴的なプラークを示す。プラークは、脳及び脊髄における神経細胞軸索を囲むミエリン鞘の破壊を引き起こすリンパ球、形質細胞、及びマクロファージによる神経組織の浸潤を示す。いくつかの場合、ＥＡＥは、ミエリンまたはミエリンの種々の成分のいずれかでの、感受性動物（例えば、マウス、ラット、モルモットまたはヒト以外の霊長類）の免疫化によって誘導される。例えば、ＥＡＥは、ミエリン塩基性タンパク質、プロテオリピドタンパク質、またはミエリンオリゴデンドロサイト糖タンパク質（ＭＯＧ）などのミエリン鞘の成分での免疫化によって誘導することができる。ＥＡＥは、自己免疫性ＣＮＳ組織傷害のメカニズムを研究するため、そしてＭＳに対する有望な治療法を試験するために有用であり、広く受け入れられているモデルである。ＥＡＥはまた、ドナー動物において同じ様式で誘導される「受動的ＥＡＥ」も含むが、ドナー動物のリンパ節から回収された活性化Ｔ細胞の、未処置の被移植動物への移植を含む。
【００３２】
本明細書で使用する場合、用語「ギラン−バレー症候群」は、末梢神経系に影響を与える疾患である、急性多発ニューロパチーを指す。上行性麻痺、足と手から始まり体幹に移行する衰弱が最も典型的な症状であり、一部のサブタイプは感覚または痛みの変化ならびに自律神経系の機能不全を引き起こす。特に呼吸筋が冒されている場合、または自律神経系が関与している場合、命に関わる合併症を引き起こす可能性がある。この病気は、通常、感染によって引き起こされる。急性炎症性脱髄性多発ニューロパチー（ＡＩＤＰ）は、この疾患の最も一般的なサブタイプである。ギラン−バレー症候群の他のサブタイプには、Ｍｉｌｌｅｒ  Ｆｉｓｈｅｒ症候群、急性運動性軸索型ニューロパチー（Ｃｈｉｎｅｓｅ  ｐａｒａｌｙｔｉｃ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、急性運動感覚性軸索型ニューロパチー、急性全自律神経ニューロパチー（ａｃｕｔｅ  ｐａｎａｕｔｏｎｏｍｉｃ  ｎｅｕｒｏｐａｔｈｙ）、及びビッカースタッフ脳幹脳炎が含まれる。
【００３３】
本明細書で使用する場合、用語「出血」は、血管から出血すること、または血管からの血液の漏出を指す。
【００３４】
本明細書で使用する場合、用語「低酸素症」は、身体の組織への、正常レベル未満の酸素供給不足を指す。
【００３５】
本明細書で使用する場合、用語「特発性炎症性脱髄疾患」及び「ＩＩＤＤ」は、通常、臨床所見、画像所見、検査所見及び病理所見に基づいて区別され得る広範囲の中枢神経系障害を指す。特発性炎症性脱髄疾患は、時に、多発性硬化症の境界型として知られる。ＩＩＤＤは、一般的に視神経脊髄型ＭＳ、デビック病、ＡＤＥＭ、急性出血性白質脳炎、バロー同心性硬化症、シルダー病、マールブルグ多発性硬化症、腫瘤様多発性硬化症（ｔｕｍｅｆａｃｔｉｖｅ  ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ）及び単発性硬化症（ｓｏｌｉｔａｒｙ  ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ）を含むが、これらに限定されない多発性硬化症の変種の疾患の集合を指す。
【００３６】
本明細書で使用する場合、用語「乳児型レフサム病」は、極長鎖脂肪酸及び分枝鎖脂肪酸（フィタン酸など）ならびにプラスマロゲン生合成の異化の欠損に関連するペルオキシソーム形成異常症を指す。乳児型レフサム病は、稀な常染色体劣性先天性疾患であり、ペルオキシソーム形成異常症のツェルウェーガースペクトラムに属する、３つのペルオキシソーム形成異常症の１つである。
【００３７】
本明細書で使用する場合、用語「傷害」は、細胞、組織または身体に対する任意の種類の物理的損傷を指す。いくつかの場合において、神経系（例えば、ＣＮＳまたはＰＮＳ）の傷害により、脱髄及び／または脱髄疾患が生じる。
【００３８】
本明細書で使用する場合、用語「虚血」とは、例えば、１つ以上の血管の狭窄または閉塞によって、身体の器官、組織または部分への血液供給の低下が引き起こされる血管現象を指す。虚血は、時には血管収縮、血栓症または塞栓症により生じる。虚血は、直接的な虚血傷害、減少した酸素供給によって引き起こされる細胞死による組織損傷をもたらす可能性がある。場合によっては、虚血により脱髄がもたらされ得る。
【００３９】
本明細書で使用する場合、用語「クラッベ病」は、神経系のミエリン鞘に影響を及ぼす、稀で多くの場合に致命的な変性疾患を指す。それはスフィンゴ脂質の機能障害性の代謝を伴うので、スフィンゴリピドーシスの一種である。この病状は、常染色体劣性様式で遺伝する。クラッベ病は、グロボイド細胞白質ジストロフィーまたはガラクトシルセラミドリピドーシスとしても知られる。
【００４０】
本明細書で使用する場合、用語「レーバー遺伝性視神経障害」は、ミトコンドリアに遺伝した（母から子孫に伝達される）急性または亜急性の中心視の喪失につながる網膜神経節細胞（ＲＧＣ）及びその軸索の変性を指し、これは若年成人男性に主に影響を与える。
【００４１】
本明細書で使用する場合、用語「白質ジストロフィー」は、ミエリン鞘の成長または発達に影響を及ぼす疾患群を指す。
【００４２】
本明細書で使用する場合、用語「白質脳症」は、脳の白質に影響を及ぼす任意の疾患群を指し、例えば、「白質の消失を伴う白質脳症」及び「中毒性白質脳症」を含むいくつかの疾患を具体的に指すことができる。白質脳症は、白質ジストロフィー様の疾患である。
【００４３】
本明細書で使用する場合、用語「マールブルグ多発性硬化症」は、中枢神経系が、標準的な多発性硬化症に対して非典型的な特徴を伴う、複数の脱髄病変を有する病態を指す。この疾患は、多発性硬化症の境界型であり、腫瘤様多発性硬化症（ｔｕｍｅｆａｃｔｉｖｅ  ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ）または劇症型多発性硬化症（ｆｕｌｍｉｎａｎｔ  ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ）としても知られる。病変は「腫瘤様」であり、臨床的に、放射線学的に、そして時には病理学的に腫瘤に似ているため、腫瘤様と呼ばれる。
【００４４】
本明細書で使用する場合、用語「マルキアファーヴァ−ビニャミ病」は、脳梁脱髄及び壊死ならびにその後の萎縮を特徴とする進行性の神経疾患を指す。これは典型的に慢性アルコール依存症に関連している。
【００４５】
本明細書で使用する場合、用語「異染性白質ジストロフィー」及び「ＭＬＤ」は、白質ジストロフィーのファミリーに加えて、スフィンゴ脂質の代謝に影響を及ぼすようなスフィンゴリピドーシスに一般に列挙される、リソソーム蓄積症を指す。ＭＬＤは、酵素のアリールスルファターゼＡの欠損によって直接的に引き起こされる。
【００４６】
本明細書で使用する場合、用語「多巣性運動ニューロパチー」及び「ＭＭＮ」は、四肢の筋肉が徐々に弱くなり、徐々に悪化していく病態を指す。この疾患（運動ニューロパチー症候群）は、特に筋肉の繊維束性収縮が存在する場合、臨床像における類似性のために、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）と時に誤認されることがある。ＭＭＮは通常非対称であり、自己免疫性であると考えられている。
【００４７】
本明細書で使用する場合、用語「多発性硬化症」及び「ＭＳ」は、脳及び脊髄における脱髄の散在性の斑によって特徴付けられる緩徐進行型のＣＮＳ疾患を指し、通常は寛解及び悪化を伴う複数の様々な神経学的症状及び徴候を生じる。ＭＳの原因は不明であるが、免疫学的異常が疑われる。家族発生率の増加は遺伝的感受性を示唆し、女性は男性よりもいくらか多く影響を受けやすい。ＭＳの症状には、衰弱、協調運動障害、感覚異常、言語障害、及び視覚障害（最も一般的には複視）が含まれる。より具体的な徴候及び症状は、病変の場所ならびに炎症及び硬化の過程の重症度及び破壊性に依存する。再発寛解型多発性硬化症（ＲＲＭＳ）は、明確に定義された、発症の間に完全または部分的な回復を伴い、及び発症の間の疾患の進行がない急性発症を特徴とする、ＭＳの臨床経過である。二次進行型多発性硬化症（ＳＰＭＳ）は、当初は再発寛解型であり、次に時々の再発と軽度の寛解を伴って、様々な速度で進行性になるＭＳの臨床経過である。一次進行型多発性硬化症（ＰＰＭＳ）は、最初に進行型で現れる。臨床的に特定された症候群は、ＣＮＳの１つ以上の部位の炎症／脱髄によって引き起こされる、最初の神経症状である。進行性再発性多発性硬化症（ＰＲＭＳ）は、急な再発であるが寛解を伴わずに発症からの病状が徐々に悪化することを特徴とする、稀な形態のＭＳ（約５％）である。
【００４８】
本明細書で使用する場合、用語「ミエリン」は、ある特定の神経線維の軸索の周りに鞘（ミエリン鞘として知られる）を形成する脂質の物質を指す。ミエリンは、神経線維の神経インパルスの伝導を速めるのに役立つ電気絶縁体である。「ミエリン化」（「髄鞘化」も）は、神経線維周囲のミエリン鞘を発達または形成させることを指す。同様に、「再ミエリン化」（「再髄鞘化」も）は、傷害、毒性物質への曝露、または炎症反応などのミエリン鞘の修復または再形成、または脱髄疾患の経過中のミエリン鞘の修復または再形成を指す。
【００４９】
本明細書で使用する場合、用語「神経変性疾患」は、神経系の進行性の悪化を特徴とする任意の型の疾患を指す。
【００５０】
本明細書で使用する場合、用語「ニューロパチー」は、末梢神経系における機能障害または病理学的変化を指す。軸索型ニューロパチーは、軸索の正常な機能を妨害する疾患を指す。
【００５１】
本明細書で使用する場合、用語「パラプロテイン血症性脱髄性多発ニューロパチー（ｐａｒａｐｒｏｔｅｉｎｅｍｉｃ  ｄｅｍｙｅｌｉｎａｔｉｎｇ  ｐｏｌｙｎｅｕｒｏｐａｔｈｙ）」は、ミエリン関連糖タンパク質（ＭＡＧ）に対する自己抗体を特徴とする一種の末梢神経障害を指す。 抗ＭＡＧ抗体は、ミエリンの産生を阻害することによってニューロパチーを引き起こす。
【００５２】
本明細書で使用する場合、用語「ペリツェウス−メルツバッハ病」及び「ＰＭＤ」は、協調、運動機能及び知的機能が可変範囲に対して遅滞している稀な中枢神経系障害を指す。この疾患は、総じて白質ジストロフィーとして知られる、一連の遺伝性疾患群の１つである。
【００５３】
本明細書で使用する場合、用語「腓骨筋萎縮」及び「ＰＭＡ」は、身体の様々な部分にわたる筋組織及び触覚の進行性喪失を特徴とする、末梢神経系の遺伝的及び臨床的に異種の群の遺伝性疾患を指す。この疾患は、シャルコー−マリー−トゥース病（ＣＭＴ）、シャルコー−マリー−トゥースニューロパチー及び遺伝性運動感覚ニューロパチー（ＨＭＳＮ）としても知られる。
【００５４】
本明細書で使用する場合、用語「医薬組成物」は、薬学的に許容される担体と共に製剤化された、本明細書に記載の１つ以上の化合物またはその薬学的に許容される塩を含む組成物を指し、これには他の添加物を含めることも可能であり、そして哺乳動物おける疾患の治療のための治療レジメンの一部として、政府規制機関の承認により製造または販売される。医薬組成物は、例えば、単位剤形での経口投与用（例えば、錠剤、カプセル、カプレット、ジェルキャップまたはシロップ）、局所投与用（例えば、クリーム、ゲル、ローション、または軟膏として）、静脈内投与用（例えば、塞栓性の粒子を含まない滅菌溶液として、及び静脈内使用に適した溶媒系で）、または本明細書に記載される任意の他の製剤に製剤化することができる。
【００５５】
本明細書で使用する場合、用語「薬学的に許容される担体」は、開示される化合物以外の任意の成分、またはその薬学的に許容される塩を指し（例えば、活性化合物を懸濁または溶解することができる担体）、患者において非毒性かつ非炎症性であるという特性を有する。賦形剤には、例えば、固結防止剤、抗酸化剤、結合剤、コーティング剤、圧縮助剤、崩壊剤、染料（着色剤）、軟化剤、乳化剤、充填剤（希釈剤）、フィルム形成剤またはフィルムコーティング剤、着香剤、芳香剤、滑剤（流動促進剤）、潤滑剤、防腐剤、印刷インク、吸着剤、懸濁剤または分散剤、甘味料、または水和水（ｗａｔｅｒｓ  ｏｆ  ｈｙｄｒａｔｉｏｎ）が含まれ得る。例示的な賦形剤には、ブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム（二塩基性）、ステアリン酸カルシウム、クロスカルメロース、架橋ポリビニルピロリドン、クエン酸、クロスポビドン、システイン、エチルセルロース、ゼラチン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、乳糖、ステアリン酸マグネシウム、マルチトール、マンニトール、メチオニン、メチルセルロース、メチルパラベン、微結晶性セルロース、ポリエチレングリコール、ポリビニルピロリドン、ポビドン、アルファー化デンプン、プロピルパラベン、レチニルパルミテート、セラック、二酸化ケイ素、カルボキシメチルセルロースナトリウム、クエン酸ナトリウム、デンプングリコール酸ナトリウム、ソルビトール、デンプン（トウモロコシ）、ステアリン酸、ステアリン酸、精製白糖、タルク、二酸化チタン、ビタミンＡ、ビタミンＥ、ビタミンＣ、及びキシリトールが含まれるが、これらに限定されない。
【００５６】
本明細書で使用される場合、用語「薬学的に許容される塩」は、従来の方法によって調製される塩を指す。これらには、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、リンゴ酸、酢酸、シュウ酸、酒石酸、クエン酸、乳酸、フマル酸、コハク酸、マレイン酸、サリチル酸、安息香酸、フェニル酢酸、及びマンデル酸などの無機酸及び有機酸の塩基性塩が含まれるが、これらに限定されない。現在開示されている化合物の「薬学的に許容される塩」には、ナトリウム、カリウム、アルミニウム、カルシウム、リチウム、マグネシウム、亜鉛などのカチオンから、ならびにアンモニア、エチレンジアミン、Ｎ−メチル−グルタミン、リジン、アルギニン、オルニチン、コリン、Ｎ、Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、クロロプロカイン、ジエタノールアミン、プロカイン、Ｎ−ベンジルフェネチルアミン、ジエチルアミン、ピペラジン、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン、及び水酸化テトラメチルアンモニウムのような塩基から形成される化合物も含まれる。これらの塩は、標準的な手順、例えば、遊離酸と適切な有機塩基または無機塩基との反応によって調製され得る。あるいは、本明細書に列挙された任意の化合物は、その薬学的に許容される塩として投与され得る。薬学的に許容される塩には、開示される化合物の遊離の酸、塩基、及び両性イオン形態も含まれる。例示的な薬学的に許容される塩についての説明は、Ｓｔａｈｌ  ａｎｄ  Ｗｅｒｍｕｔｈ，Ｅｄｓ．，Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ；Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，  Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｕｓｅ，Ｗｉｌｅｙ  ＶＣＨ（２００８）に見出すことができる。本明細書に開示される化合物がカルボキシ基などの酸性基を含む場合、カルボキシ基のための適切な薬学的に許容されるカチオン対は、当業者によく知られており、これにはアルカリ、アルカリ土類、アンモニウム及び第４級アンモニウムカチオンが含まれるが、これらに限定されない。このような塩は、当業者に知られている。同様に、本明細書に開示される化合物がアミノ基のような塩基性基を含む場合、塩基性基の適切な薬学的に許容されるアニオン対は同様によく知られており、これにはハロゲン化物、水酸化物、過ハロゲン酸塩（ｐｅｒｈａｌａｔｅ）、亜ハロゲン酸塩（ｈａｌｉｔｅ）、次亜ハロゲン酸塩（ｈｙｐｏｈａｌｉｔｅ）、硫酸塩、亜硫酸塩、リン酸塩、亜リン酸塩、硝酸塩、亜硝酸塩、及び当業者に公知の他のものが挙げられる。薬学的に許容される塩のさらなる例については、Ｂｅｒｇｅ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．６６，１（１９７７）を参照されたい。
【００５７】
本明細書で使用する場合、用語「進行性多巣性白質脳症」及び「ＰＭＬ」は、複数の場所における脳の白質の進行性損傷または炎症を特徴とする、稀で通常は致命的なウイルス性疾患を指す。ＰＭＬは、ほぼ例外なく、重度の免疫不全を有する人々に生じる。ＰＭＬの原因は、ＪＣウイルスと呼ばれるポリオーマウイルスの一種である。このウイルスは広範に行き渡っており、一般人口の８６％が抗体を提示しているが、通常は不顕性のままであり、免疫システムが著しく弱まった場合にしか発症しない。ＰＭＬは脱髄疾患であり、神経細胞の軸索を覆うミエリン鞘が徐々に破壊されると、神経インパルスの伝達は損なわれる。この疾患は、免疫抑制薬を受けている移植患者または特定の種類の薬物療法を受けている移植患者のような、重篤な免疫不全を有する対象（例えば、ヒト）で起こり得る。例えば、ＰＭＬはリツキシマブ（多発性硬化症の治療における適応外使用）の投与に使用されている。それは大部分が脳の最外部（皮質）からの軸索で構成される白質に影響を及ぼす。症状としては、衰弱または麻痺、失明、言語障害、及び認知力低下が挙げられる。
【００５８】
本明細書で使用する場合、用語「ソベチロム」は、高コレステロール血症の有望な治療薬として臨床的に検討された合成ジアリールメタン誘導体を指す（参照により本明細書に組み込まれる、米国特許第５，８８３，２９４号を参照）。文献及び規制当局への申請書に記載されているソベチロムの他の名称には、ＱＲＸ−４３１及びＧＣ−１が含まれる。ソベチロムは本明細書において、化合物１とも呼ばれる。
【００５９】
本明細書で使用する場合、用語「対象」は、動物（例えば、ヒトなどの哺乳動物）を指す。本明細書に記載の方法に従って治療される対象は、脱髄、不十分な髄鞘形成、またはミエリン鞘の形成不全を伴う神経変性疾患と診断された対象、例えば多発性硬化症または脳性麻痺と診断された対象、またはその病状を発症するリスクのある対象であり得る。診断は、当分野で公知の任意の方法または技術によって実施され得る。当業者は、本開示に従って治療される対象は、病気もしくは病態に関連する１つ以上の危険因子の存在によりリスクのある対象の場合、標準的な試験に供されても良く、または検査をせずに特定されても良いことを理解するであろう。
【００６０】
本明細書で使用する場合、用語「横断性脊髄炎」は、脊髄の灰質及び白質の炎症過程によって引き起こされる神経疾患を指し、軸索の脱髄をもたらす。脱髄は、感染もしくはワクチン接種後、または多発性硬化症により特発的に起こる。症状には、四肢の衰弱及び麻痺、ならびに運動障害、感覚障害、及び括約筋障害が挙げられる。重篤な背部痛は、疾患の発症時に一部の患者で生じ得る。
【００６１】
本明細書で使用する場合、用語「治療」は、疾患または病的状態の徴候または症状を改善させる介入を指す。本明細書で使用する場合、疾患、病的状態または症状に関して「治療（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」、「治療する（ｔｒｅａｔ）」及び「治療（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」という用語は、治療の観察可能で有益なあらゆる効果も指す。有益な効果は、例えば、感受性対象における疾患の臨床症状の発症の遅延、疾患のいくつかまたは全ての臨床症状の重症度の低下、疾患の進行の緩徐化、疾患の再発回数の減少、対象の全体的な健康状態または幸福の向上、または特定の疾患に特異的である当技術分野で周知の他のパラメータによって証明され得る。予防的処置は、疾患の徴候を示さない、または早期の徴候のみを示す対象に、病状を発症するリスクを減少させる目的で施される処置である。治療的処置は、疾患の徴候及び症状が発現した後に対象に施される処置である。
【００６２】
本明細書で使用する場合、用語「熱帯性痙攣不全対麻痺」及び「ＴＳＰ」は、不全対麻痺、脚の衰弱をもたらすヒトＴリンパ好性ウイルスによる脊髄感染を指す。ＴＳＰは、ＨＴＬＶ関連ミエロパシーまたは慢性進行性ミエロパシーとしても知られる。名前が示すように、この疾患はカリブ海やアフリカを含む熱帯地域で最も一般的である。
【００６３】
本明細書で使用する場合、用語「ファン・デル・ナップ（Ｖａｎ  ｄｅｒ  Ｋｎａａｐ）病」は、遺伝性ＣＮＳ脱髄疾患の一形態を指す。この病気は一種の白質ジストロフィーであり、皮質下嚢胞を伴う大頭型白質脳症（ＭＬＣ）としても知られる。
【００６４】
本明細書で使用する場合、用語「Ｘ連鎖性副腎白質ジストロフィー」、「Ｘ−ＡＬＤ」、「ＡＬＤ」及び「Ｘ連鎖性ＡＬＤ」は、進行性脳損傷、精神機能低下、副腎不全、筋痙攣、失明及び最終的には死に至る、稀で遺伝性代謝異常を指す。ＡＬＤは、白質ジストロフィーと呼ばれる遺伝性疾患群のうちの１つの疾患である。副腎白質ジストロフィーにより、徐々にミエリンは損傷を受ける。Ｘ連鎖性ＡＬＤの男性患者は、７つの表現型、すなわち小児大脳（植物状態につながる進行性の神経変性衰弱）、思春期（小児大脳型に類似しているが、進行が遅い）、副腎脊髄ニューロパチー（進行性神経障害、不全対麻痺により脳合併症へと進行し得る）、成人大脳（認知症、小児大脳型と同様の進行）、オリーブ橋小脳（脳及び脳幹の合併症）、アジソン病（副腎不全）、無症状（臨床症状なし、無症候性副腎不全、またはＡＭＮ表現型）に分けられ得る。Ｘ連鎖ＡＬＤ女性患者は、５つの表現型、すなわち無症候（神経または副腎の合併症がない）、軽度のミエロパシー、中等度〜重度のミエロパシー（男性ＡＭＮ表現型と類似）、大脳（進行性認知症及び衰弱）、及び副腎（原発性副腎皮質機能不全）に分類され得る。Ｘ連鎖ＡＬＤ患者は、１つの表現型から別の表現型へ、その生涯にわたって進行し得る。ＡＬＤはアジソン−シルダー病またはシーメリング−クロイツフェルト（Ｓｉｅｍｅｒｌｉｎｇ−Ｃｒｅｕｔｚｆｅｌｄｔ）病としても知られている。
【００６５】
本明細書で使用する場合、用語「ツェルウェーガー症候群」は、個体の細胞における機能性ペルオキシソームの減少または欠損を特徴とする稀な先天性疾患を指す。この疾患は、白質ジストロフィーとして分類され、そしてこれはペルオキシソーム形成異常症のツェルウェーガースペクトラムに属する３つのペルオキシソーム形成異常症の１つである。
【００６６】
ＩＩ．ソベチロム誘導体
第１の態様において、本発明は式Ｉに記載の化合物、
2019516739.tif 000004
またはその任意の薬学的に許容される塩を提供し、
式中、
Ｒ１及びＲ２は、フルオロ、クロロ、ブロモ及びヨードからなる群から独立して選択され、ならびに
Ｒ３は、−ＯＨ及び−ＮＲ３ａＲ３ｂからなる群から独立して選択され、
Ｒ３ａは、水素及びＣ１〜６アルキルからなる群から独立して選択され、ならびに
Ｒ３ｂはＣ１〜６アルキルである。
【００６７】
いくつかの実施形態において、Ｒ１はフルオロであり、かつＲ２はクロロ、ブロモ、及びヨードからなる群から選択され、またはＲ１はクロロであり、かつＲ２はフルオロ、ブロモ、及びヨードからなる群から選択され、またはＲ１はブロモであり、かつＲ２はフルオロ、クロロ、及びヨードからなる群から選択され、またはＲ１はヨードであり、かつＲ２はフルオロ、クロロ、及びブロモからなる群から選択される。
【００６８】
いくつかの実施形態において、Ｒ２はフルオロであり、かつＲ１はクロロ、ブロモ、及びヨードからなる群から選択され、またはＲ２はクロロであり、かつＲ１はフルオロ、ブロモ、及びヨードからなる群から選択され、またはＲ２はブロモであり、かつＲ１はフルオロ、クロロ、及びヨードからなる群から選択され、またはＲ２はヨードであり、かつＲ１はフルオロ、クロロ、及びブロモからなる群から選択される。
【００６９】
いくつかの実施形態において、Ｒ３は−ＯＨであり、Ｒ１はフルオロであり、かつＲ２はクロロ、ブロモ、及びヨードからなる群から選択され、またはＲ３は−ＯＨであり、Ｒ１はクロロであり、かつＲ２はフルオロ、ブロモ、及びヨードからなる群から選択され、またはＲ３は−ＯＨであり、Ｒ１はブロモであり、かつＲ２はフルオロ、クロロ、及びヨードからなる群から選択され、またはＲ３は−ＯＨであり、Ｒ１はヨードであり、かつＲ２はフルオロ、クロロ、及びブロモからなる群から選択される。
【００７０】
いくつかの実施形態において、Ｒ３は−ＯＨであり、Ｒ２はフルオロであり、かつＲ１はクロロ、ブロモ、及びヨードからなる群から選択され、またはＲ３は−ＯＨであり、Ｒ２はクロロであり、かつＲ１はフルオロ、ブロモ、及びヨードからなる群から選択され、またはＲ３は−ＯＨであり、Ｒ２はブロモであり、かつＲ１はフルオロ、クロロ、及びヨードからなる群から選択され、またはＲ３は−ＯＨであり、Ｒ２はヨードであり、かつＲ１はフルオロ、クロロ、及びブロモからなる群から選択される。
【００７１】
いくつかの実施形態において、Ｒ３は−ＮＨＲ３ｂであり、Ｒ１はフルオロであり、かつＲ２はクロロ、ブロモ、及びヨードからなる群から選択され、またはＲ３は−ＮＨＲ３ｂであり、Ｒ１はクロロであり、かつＲ２はフルオロ、ブロモ、及びヨードからなる群から選択され、またはＲ３は−ＮＨＲ３ｂであり、Ｒ１はブロモであり、かつＲ２はフルオロ、クロロ、及びヨードからなる群から選択され、またはＲ３は−ＮＨＲ３ｂであり、Ｒ１はヨードであり、かつＲ２はフルオロ、クロロ、及びブロモからなる群から選択される。いくつかのそのような実施形態において、Ｒ３ｂはＣ１〜６アルキルである。Ｒ３ｂは、例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、分枝ペンチル、ｎ−ヘキシルまたは分枝ヘキシルであり得る。いくつかの実施形態において、Ｒ３ｂはメチルである。
【００７２】
いくつかの実施形態において、Ｒ３は−ＮＨＲ３ｂであり、Ｒ２はフルオロであり、かつＲ１はクロロ、ブロモ、及びヨードからなる群から選択され、またはＲ３は−ＮＨＲ３ｂであり、Ｒ２はクロロであり、かつＲ１はフルオロ、ブロモ、及びヨードからなる群から選択され、またはＲ３は−ＮＨＲ３ｂであり、Ｒ２はブロモであり、かつＲ１はフルオロ、クロロ、及びヨードからなる群から選択され、またはＲ３は−ＮＨＲ３ｂであり、Ｒ２はヨードであり、かつＲ１はフルオロ、クロロ、及びブロモからなる群から選択される。いくつかのそのような実施形態において、Ｒ３ｂはＣ１〜６アルキルである。Ｒ３ｂは、例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、分枝ペンチル、ｎ−ヘキシルまたは分枝ヘキシルであり得る。いくつかの実施形態において、Ｒ３ｂはメチルである。
【００７３】
いくつかの実施形態において、Ｒ１及びＲ２は、クロロ及びブロモからなる群から独立して選択される。
【００７４】
いくつかの実施形態において、Ｒ１及びＲ２は、ともにブロモである。いくつかの実施形態において、Ｒ１及びＲ２は、ともにブロモであり、かつＲ３は−ＯＨである。
【００７５】
いくつかの実施形態において、Ｒ１及びＲ２はともにブロモであり、Ｒ３は−ＮＨＲ３ｂであり、かつＲ３ｂはＣ１〜６アルキルである。Ｒ３ｂは、例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、分枝ペンチル、ｎ−ヘキシルまたは分枝ヘキシルであり得る。いくつかの実施形態において、Ｒ３ｂはメチルである。
【００７６】
いくつかの実施形態において、Ｒ１及びＲ２は、ともにクロロである。いくつかの実施形態において、Ｒ１及びＲ２は、ともにクロロであり、かつＲ３は−ＯＨである。
【００７７】
いくつかの実施形態において、Ｒ１及びＲ２は、ともにクロロであり、Ｒ３は−ＮＨＲ３ｂ、かつＲ３ｂはＣ１〜６アルキルである。Ｒ３ｂは、例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、分枝ペンチル、ｎ−ヘキシルまたは分枝ヘキシルであり得る。いくつかの実施形態において、Ｒ３ｂはメチルである。
【００７８】
いくつかの実施形態において、本発明は以下の構造の化合物、
2019516739.tif 000005
またはその薬学的に許容される塩を提供し、ここでＲ１及びＲ２は、ともにハロ（フルオロ、ブロモ、クロロ、またはヨードを含む）である。いくつかの実施形態において、Ｒ１及びＲ２は、ともにブロモである。いくつかの実施形態において、Ｒ１及びＲ２は、ともにクロロである。いくつかの実施形態において、Ｒ１はブロモ、かつＲ２はクロロである。いくつかの実施形態において、Ｒ１はクロロ、かつＲ２はブロモである。
【００７９】
ＧＣ−１は、肝臓でＴＲβを活性化することによる高コレステロール血症のための心臓温存治療として設計されたが、最近の研究では、多発性硬化症（Ｂａｘｉ  ＥＧ  ｅｔ  ａｌ．Ｇｌｉａ６２，１５１３−１５２９（２０１４）、参照により本明細書に組み込まれる）からＸ連鎖性副腎白質ジストロフィー（Ｈａｒｔｌｅｙ，Ｍ．Ｄ．ｅｔ  ａｌ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ１５８，１３２８−１３３８（２０１７）、Ｇｅｎｉｎ  ＥＣ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ  Ｓｔｅｒｏｉｄ  Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ  １１６，３７−４３（２００９）、これらの両方が参照によって本明細書に組み込まれる）に及ぶ脱髄疾患において、その可能性が実証されている。これらの有望な結果にもかかわらず、脱髄の治療におけるＧＣ−１の有効性は、低い脳取り込みによって潜在的に制限され（Ｔｒｏｓｔ  ｅｔ  ａｌ．２００（前掲））、そして甲状腺ホルモンＴ３（すなわち、トリヨードチロニン、（２Ｓ）−２−アミノ−３−［４−（４−ヒドロキシ−３−ヨード−フェノキシ）−３，５−ジヨード−フェニル］プロパン酸）と比較して受容体活性化が低下した。ＧＣ−１の構造的特徴の多くは、その結合親和性及び受容体選択性にとって重要であるが、（Ｙｏｓｈｉｈａｒａ  ｅｔ  ａｌ．２００３、前掲）、３，５−ジメチル成分は最適ではない。数多くの構造−活性相関及び定量的構造−活性相関データが存在し、内環メチル置換を有する甲状腺ホルモン様物質は、内環ハロゲン置換を有する構造的に類似の類似体と比較して、有意に低下した活性を有することを示している。
【００８０】
ヨードを含まない類似体の３’−イソプロピル−３，５−ジブロモ−Ｌ−チロニン（ＤＩＢＩＴ）は、ラットの心拍上昇及び抗甲状腺腫アッセイにおいて、Ｌ−Ｔ４よりも２〜７倍強力であった（Ｔａｙｌｏｒ  ＲＥ  ｅｔ  ａｌ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ８０，１１４３−１１４７（１９６７）、参照により本明細書に組み込まれる）が、ハロゲンを含まない類似体３’−イソプロピル−３，５−ジメチル−ＤＬ−チロニン（ＤＩＭＩＴ）は、同じアッセイにおいて、僅かな測定可能な活性を有していた（Ｊｏｒｇｅｎｓｅｎ  ＥＣ  ａｎｄ  Ｗｒｉｇｈｔ  Ｊ，Ｊ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ１３，７４５−７４７（１９７０）、参照により本明細書に組み込まれる）。ＴＲα選択的化合物ＣＯ２２及びＣＯ２４については、内環メチル基の臭素による置換が、結合親和性を１５倍向上させた（Ｏｃａｓｉｏ  ＣＡ  ａｎｄ  Ｓｃａｎｌａｎ  ＴＳ、ＡＣＳ  Ｃｈｅｍ  Ｂｉｏｌ１，５８５−５９３（２００６）及びＯｃａｓｉｏ  ＣＡ  ａｎｄ  Ｓｃａｎｌａｎ  ＴＳ、Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ１６、７６２−７７０（２００８）、これらの両方とも参照により本明細書に組み込まれる）。
【００８１】
スキーム１．ＴＲアゴニストの化学構造
2019516739.tif 000006
【００８２】
甲状腺ホルモン類似体のＱＳＳＲ研究から、これらの知見に対する機構、すなわち内環ハロゲンがＴＲリガンド結合ドメインの主鎖カルボニルと双極子相互作用を形成することで結合親和性及び選択性に影響を及ぼすことが示唆された（Ｖａｌａｄａｒｅｓ  ＮＦ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ  Ｃｈｅｍ  Ｉｎｆ  Ｍｏｄｅｌ４９，２６０６−２６１６（２００９）、参照により本明細書に組み込まれる）。これらのデータから、ＧＣ−１は、内環メチル基をハロゲンで置換した新しい類似体を合成することによって改善され得ることが示唆される。
【００８３】
ＧＣ−１の内環メチル基をハロゲンで置換するには、新しい合成アプローチが必要であった。参照により本明細書に組み込まれる、Ｄａｂｒｏｗｓｋｉ  Ｍ  ｅｔ  ａｌ．Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔｅｒｓ４６，４１７５−４１７８（２００５）に記載される研究では、リチウムアミド試薬を用いてシリル保護された３，５−ジハロフェノールの４位を選択的に脱プロトン化することによって、必要な４−ヒドロキシ−２，６−ジハロベンズアルデヒド中間体を生成するための鋳型がもたらされた。この方法は、Ｄａｂｒｏｗｓｋｉによって使用されたメチルエーテル及びトリメチルシリルエーテル保護基を、より立体的で嵩高いトリエチルシリルエーテル保護基で置き換えることによって改善され、これは脱プロトン化の選択性を有意に改善した。これらの中間体は、参照により本明細書に組み込まれる、Ｐｌａｃｚｅｋ  ＡＴ  ａｎｄ  Ｓｃａｎｌａｎ  ＴＳ，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ７１，５９４６−５９５１（２０１５）で報告されたＧＣ−１合成を僅かに改変したバージョンで使用された。４−ヒドロキシ−２，６−ジハロベンズアルデヒド中間体は、フェノールの求核性を低下させるハロゲン置換のために、標準的な炭酸セシウム／ＤＭＦ条件を使用してクロロ酢酸ｔｅｒｔブチルでアルキル化することができなかった。しかし、ｉｎ  ｓｉｔｕでフィンケルシュタイン反応を介して塩化アルキルをヨウ化アルキルに変換した後、その反応を完了し、そして良好な収率となった。
【００８４】
スキーム２．ＪＤ−２０（９ａ）及びＪＤ−２１（９ｂ）の合成
2019516739.tif 000007
試薬及び条件：（ａ）トリエチルシリルクロリド、イミダゾール、ＤＣＭ、０℃、９５％、（ｂ）（ｉ）ｎＢｕＬｉ、ＤＩＡ／ＴＭＰ、ＴＨＦ、−７８℃（ｉｉ）ＤＭＦ、５６〜６７％、（ｃ）ｔｅｒｔクロロアセテート、ＮａＩ、Ｃｓ２ＣＯ３、アセトン、６０〜６５℃、８４〜８８％、（ｄ）ＮａＩ、ＮａＯＨ、ＮａＯＣｌ、ＭｅＯＨ、Ｈ２Ｏ、８７％（ｅ）ＭＯＭＣｌ、ＴＢＡＩ、ＮａＯＨ、ＤＣＭ、Ｈ２Ｏ、８１％、（ｆ）（ｉ）ｉＰＭｇＣｌ、ＴＨＦ、０℃〜ＲＴ（ｉｉ）４、−７８℃、５４〜７９％、（ｇ）ＴＦＡ、トリエチルシラン、ＤＣＭ、０℃〜ＲＴ、５８〜６９％。
【００８５】
ｔｅｒｔ−ブチルオキシアセテート中間体を形成した後、炭素−炭素結合形成は、ベンズアルデヒドを攻撃してカルビノール中間体を形成する７を用いてアリールマグネシウムを形成することにより、ＧＣ−１を用いた場合と同様の様式で行われた。アリールマグネシウム求核剤は、極低温でアリールクロリドまたはブロミドと置換されにくく、ｔｅｒｔ−ブチルエステル保護基と適合する。カルビノールの還元及びｔｅｒｔ−ブチルエステル保護基及びメトキシメチルエーテル保護基の脱保護は、ジクロロメタン中ＴＦＡ及びトリエチルシランを用いて同時に行った。ジブロモ類似体のＪＤ−２０は２７％の全収率で合成され、ジクロロ類似体のＪＤ−２１は１７％の収率で合成され、ともに５工程であった。
【００８６】
ＩＩＩ．医薬組成物
本明細書中に開示される化合物は、典型的には１種以上の薬学的に許容される担体（ビヒクルと同じ意味合いで知られる）及び任意選択で他の治療成分とともに組み合わされて医薬組成物（治療用及び予防用製剤を含む）に含めることができる。
【００８７】
そのような医薬組成物は、経口、直腸、鼻腔内、肺内、硝子体内、もしくは経皮送達を含む様々な粘膜投与様式、または眼を含む他の表面への局所送達によって対象に投与するために製剤化することができる。任意選択で、組成物は、筋肉内、皮下、静脈内、動脈内、関節内、腹腔内、髄腔内、脳室内、または非経口経路を含む非粘膜経路によって投与することができる。別の実施例において、化合物は、対象に由来する細胞、組織または器官への直接的な曝露によってｅｘ  ｖｉｖｏで投与することができる。
【００８８】
医薬組成物を製剤化するために、化合物は、種々の薬学的に許容される添加剤と組み合わせることができる。所望の添加剤としては、アルギニン、水酸化ナトリウム、グリシン、塩酸、クエン酸などのｐＨ調整剤が挙げられるが、これらに限定されない。加えて、局所麻酔薬（例えば、ベンジルアルコール）、等張化剤（例えば、塩化ナトリウム、マンニトール、ソルビトール）、吸着阻害剤（例えば、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）−８０）、溶解促進剤（例えば、シクロデキストリン及びその誘導体）、安定化剤（例えば、血清アルブミン）、及び還元剤（例えば、グルタチオン）を含めることができる。
【００８９】
組成物が液体である場合、製剤の張度は、０．９％（ｗ／ｖ）の生理食塩水の張度を基準にして決定され、典型的には、投与部位で誘導され得る実質的に不可逆的な組織損傷が生じない値に調整される。一般に、溶液の張度は、約０．３〜約３．０、例えば約０．５〜約２．０、または約０．８〜約１．７の値に調整される。化合物は、任意の薬学的に許容される担体中に分散させることができ、これは化合物を分散させる能力を有する親水性化合物及び任意の所望の添加物を含めることができる。担体は、幅広い適切な化合物から選択することができ、ポリカルボン酸またはその塩のコポリマー、他のモノマー（例えば、メチル（メタ）アクリレート、アクリル酸など）とのカルボン酸無水物（例えば、無水マレイン酸）、親水性ビニルポリマー、例えばポリ酢酸ビニル、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、セルロース誘導体、例えばヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロースなど、キトサン、コラーゲン、アルギン酸ナトリウム、ゼラチン、ヒアルロン酸、及びそれらの非毒性金属塩などの天然ポリマーが挙げられるが、これらに限定されない。多くの場合、生分解性ポリマーは、例えばポリ乳酸、ポリ（乳酸−グリコール酸）コポリマー、ポリヒドロキシ酪酸、ポリ（ヒドロキシ酪酸グリコール酸）コポリマー及びそれらの混合物が担体として選択される。
【００９０】
代替的または追加的に、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステルなどの合成脂肪酸エステルを担体として使用することができる。親水性ポリマー及び他のビヒクルは、単独でまたは組み合わせて使用することができ、強化された構造的完全性が部分的結晶化、イオン結合、架橋などによってビヒクルに付与され得る。担体は、粘膜表面への直接的な塗布のために、流体または粘性溶液、ゲル、ペースト、粉末、マイクロスフェア、及びフィルムを含む様々な形態で提供され得る。
【００９１】
化合物は、様々な方法に従って担体と組み合わせることができ、化合物の放出は、拡散、ビヒクルの崩壊、または関連する水路の形成によることができる。場合により、化合物は適切なポリマー、例えば、５−イソブチル２−シアノアクリレート（例えば、Ｍｉｃｈａｅｌ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｙ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．４３，１‐５，（１９９１）を参照）から調製されたマイクロカプセル（マイクロスフェア）またはナノ粒子に分散され、そして生体適合性の分散媒体中に分散されて、長期間にわたって持続的な送達及び生物学的活性をもたらす。
【００９２】
化合物を投与するための医薬組成物は、高濃度の有効成分に適した溶液、マイクロエマルジョン、または他の秩序構造として製剤化することもできる。ビヒクルは、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、液体ポリエチレングリコールなど）及びそれらの適切な混合物を含有する溶媒または分散媒であってもよい。溶液のための適切な流動性は、例えば、レシチンなどのコーティングの使用、分散性製剤の場合には、所望の粒子サイズの維持によって、及び界面活性剤の使用によって維持することができる。多くの場合、等張剤、例えば糖、マンニトール及びソルビトールのようなポリアルコール、または塩化ナトリウムを組成物中に含むことが望ましいであろう。吸収を遅らせる薬剤、例えばモノステアリン酸塩及びゼラチンを組成物に含めることにより、化合物の長期の吸収がもたらされる。
【００９３】
ある特定の実施形態において、化合物は、例えば組成物に徐放性ポリマーを含む徐放性製剤で投与することができる。これらの組成物は、急速な放出を防ぐビヒクル、例えばポリマー、マイクロカプセル化送達システムまたは生体接着性ゲルなどの徐放性ビヒクルを用いて調製することができる。本開示の様々な組成物の長期の送達は、吸収を遅らせる薬剤、例えばモノステアリン酸アルミニウムヒドロゲル及びゼラチンを組成物に含めることによって、もたらされ得る。徐放性製剤が所望される場合、本開示に従う使用に適した徐放性結合剤は、活性物質に対して不活性であり、化合物及び／または他の生物学的活性物質を組み込むことができる任意の生体適合性の徐放性材料を含む。多くのそのような材料が当技術分野で公知である。有用な徐放性結合剤は、それらの送達後の生理学的条件下で（例えば、粘膜表面で、または体液の存在下で）緩やかに代謝される物質である。適切な結合剤には、徐放性製剤に使用するための当分野で公知の生体適合性ポリマー及びコポリマーが含まれるが、これらに限定されない。そのような生体適合性化合物は、毒性がなく周囲の組織に対して不活性であり、鼻の刺激、免疫応答、炎症などの著しく有害な副作用を引き起こさない。それらは代謝産物へと代謝され、これらは生体適合性で体から容易に除去される。
【００９４】
本開示における使用のための例示的なポリマー材料には、加水分解可能なエステル結合を有するコポリマーポリエステル及びホモポリマーポリエステルから誘導されたポリマーマトリックスが含まれるが、これに限定されない。これらの多くは生分解性であり、毒性がないかまたは低い毒性を有する分解産物を生じることが当分野で公知である。例示的なポリマーには、ポリグリコール酸及びポリ乳酸、ポリ（ＤＬ−乳酸ｃｏ−グリコール酸）、ポリ（Ｄ−乳酸−ｃｏ−グリコール酸）及びポリ（Ｌ−乳酸−ｃｏグリコール酸）が含まれる。他の有用な生分解性または生体浸食性ポリマーには、ポリ（ε−カプロラクトン）、ポリ（ε−アプロラクトン（ａｐｒｏｌａｃｔｏｎｅ）−ｃｏ−乳酸）、ポリ（ε−アプロラクトン−ｃｏ−グリコール酸）、ポリ（ベタヒドロキシ酪酸）、ポリ（アルキル−２−シアノアクリレート）、ポリ（ヒドロキシエチルメタクリレート）などのヒドロゲル、ポリアミド、ポリ（アミノ酸）（例えば、Ｌ−ロイシン、グルタミン酸、Ｌ−アスパラギン酸など）、ポリ（エステル尿素）、ポリ（２−ヒドロキシエチルＤＬ−アスパルトアミド）、ポリアセタールポリマー、ポリオルトエステル、ポリカーボネート、ポリマレイミド、多糖類、などのポリマー、及びこれらのコポリマーが挙げられるが、これらに限定されない。そのような製剤を調製するための多くの方法が、当業者によく知られている（例えば、Ｓｕｓｔａｉｎｅｄ  ａｎｄ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｊ．Ｒ．Ｒｏｂｉｎｓｏｎ，ｅｄ．，Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，ＮｅｗＹｏｒｋ，１９７８を参照）。他の有用な製剤には、徐放性マイクロカプセル（米国特許第４，６５２，４４１号及び第４，９１７，８９３号）、マイクロカプセル及び他の製剤の製造に有用な乳酸−グリコール酸コポリマー（米国特許第４，６７７，１９１号及び第４，７２８，７２１号）及び水溶性ペプチドの徐放性組成物（米国特許第４，６７５，１８９号）が挙げられる。
【００９５】
本開示の医薬組成物は、典型的には滅菌されており、製造、貯蔵及び使用の条件下で、安定である。滅菌溶液は、必要に応じて１つまたは組合せの本明細書に列挙した成分とともに、必要な量の化合物を適切な溶媒中に混合し、その後濾過滅菌することによって調製することができる。一般に、分散液は、塩基性分散媒及び本明細書に列挙した成分の中から必要な他の成分を含む滅菌ビヒクル中に、当化合物及び／または他の生物学的活性物質を混合させることによって調製される。滅菌粉末の場合、調製方法には真空乾燥及び凍結乾燥が含まれ、これにより予め滅菌濾過したその溶液に由来する化合物と任意の追加の所望の成分の粉末が得られる。微生物活動の予防は、種々の抗菌剤及び抗真菌剤、例えばパラベン、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸、チメロサールなどによって達成することができる。
【００９６】
ＩＶ．神経変性疾患を治療するための方法
１つ以上の開示化合物の投与を介して、神経変性疾患を有する対象を治療する方法が、本明細書中で開示される。化合物は、経口的投与、非経口的投与、または局所的投与を含む、任意の適切な経路によって投与され得る。特定の実施例において、ソベチロムまたはその薬学的に許容される塩は、経口投与される。ある特定の実施例において、ソベチロムまたはその薬学的に許容される塩は、非経口的に投与される。いくつかの実施形態において、ソベチロムまたはその薬学的に許容される塩は、口腔内、舌下、口唇下、または吸入によって投与される。別の実施形態において、ソベチロムまたはその薬学的に許容される塩は、舌下投与される。さらに別の実施形態において、ソベチロムまたはその薬学的に許容される塩は、非経口的に投与される。特定の実施形態において、ソベチロムまたはその薬学的に許容される塩は、動脈内、静脈内、脳室内、筋肉内、皮下、脊髄内、眼窩内、頭蓋内または髄腔内投与される。
【００９７】
開示された化合物を含む医薬組成物の投与は、予防目的または治療目的のためのものであり得る。予防及び治療目的のために、治療薬は単回のボーラス送達で、長期間にわたる連続的な送達（例えば、連続的な経皮、粘膜または静脈内送達）を介して、または反復投与プロトコル（例えば、１時間ごと、毎日または毎週の反復投与プロトコル）で、対象に投与することができる。ウイルス感染のための治療有効量の治療薬は、神経変性疾患に関連する１つ以上の症状または検出可能な症状を緩和する、臨床的に有意な転帰をもたらす長期の予防または治療レジメンの範囲内で、反復投与として提供され得る。
【００９８】
開示される化合物の有効量または濃度は、単独または１つ以上のさらなる治療薬と一緒である組成物の任意の量であってもよく、対象において所望の効果を達成するのに十分な量である。薬剤の有効量は、治療される対象及び治療組成物の投与様式を含む、いくつかの因子に依存し得るが、これらに限定されない。一実施例において、治療有効量または治療有効濃度は、疾病の進行を防ぐため、進行を遅らせるため、もしくは退行を引き起こすために十分なものであり、または神経変性疾患を含む任意の疾患によって引き起こされる症状を軽減することができるものである。
【００９９】
一実施例において、所望の効果は神経変性疾患に関連する１つ以上の症状を軽減または抑制することである。組成物が有効となるために、１つ以上の症状が完全に排除される必要はない。例えば、組成物は所望の量により、例えば、組成物の非存在下で徴候もしく症状がどの程度進行したかと比較して、または現在利用可能な治療薬と比較して、例えば少なくとも２０％、少なくとも５０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、あるいは少なくとも１００％の徴候または症状を減少させることができる。
【０１００】
実際の有効量は、予防される／治療的に処置される神経疾患の種類及び対象の特定の状態（例えば、対象の年齢、大きさ、健康状態、症状の程度、感受性因子など）、投与の時間及び経路、同時に投与される他の薬物または治療薬、ならびに対象において所望の活性または生物学的応答を誘発するウイルス感染用治療薬の特定の薬理学などの要素に応じて変動する。投与レジメンは、最適な予防的または治療的応答を生じるように調整することができる。
【０１０１】
有効量とはまた、臨床用語において、治療的に有益な効果が、化合物及び／または他の生物学的活性物質の任意の毒性または有害な副作用を上回る量である。本開示の方法及び製剤の範囲内での、ウイルス感染に対する治療有効量の非限定的な範囲は、１用量につき約０．０００１μｇ／ｋｇ体重〜約１０ｍｇ／ｋｇ体重、例えば１用量につき約０．０００１μｇ／ｋｇ体重〜約０．００１μｇ／ｋｇ体重、１用量につき約０．００１μｇ／ｋｇ体重〜約０．０１μｇ／ｋｇ体重、１用量につき約０．０１μｇ／ｋｇ体重〜約０．１μｇ／ｋｇ体重、１用量につき約０．１μｇ／ｋｇ〜約１０μｇ／ｋｇ体重、１用量につき約１μｇ／ｋｇ体重〜約１００μｇ／ｋｇ体重、１用量につき約１００μｇ／ｋｇ体重〜約５００μｇ／ｋｇ体重、１用量につき約５００μｇ／ｋｇ体重〜１用量につき約１０００μｇ／ｋｇ体重、または１用量につき約１．０ｍｇ／ｋｇ体重〜約１０ｍｇ／ｋｇ体重である。
【０１０２】
有効量の決定は、典型的には、動物モデル試験に続いて行われるヒトの臨床試験に基づいており、対象における標的疾患症状または病態の発生または重症度を有意に低下させる投与プロトコルによって誘導される。これに関して、適切なモデルには、例えば、多発性硬化症のＥＡＥモデルを含む、マウス、ラット、ブタ、ネコ、ヒト以外の霊長類、及び当分野で公知の他の容認された動物モデル対象が含まれる。このようなモデルを使用することで、ウイルス感染に対する治療有効量（例えば、神経変性疾患の１つまたは複数の症状を緩和するために有効な量）を投与するのに適切な濃度及び用量を決定するために、通常の計算及び調整だけが必要となる。
【実施例】
【０１０３】
Ｖ．実施例
以下の実施例は、説明のためだけのものである。本開示の見地から、当業者は、これらの実施例の変形形態及び開示された本発明の別の実施例が過度な実験をすることなくできることを理解するであろう。
【０１０４】
実施例１．材料及び方法
トランス活性化アッセイ。１０％ウシ胎仔血清、５０単位／ｍＬペニシリン及び５０μｇ／ｍＬストレプトマイシンを含有するＤｕｂｅｌｃｃｏ改変イーグル４．５ｇ／Ｌグルコース培地（高グルコースＤＭＥＭ）において、ヒト上皮腎臓細胞（ＨＥＫ２９３）を８０％コンフルエントになるまで増殖させた。細胞を０．２５％トリプシンでトリプシン処理し、次いで高グルコースＤＭＥＭで５ｘ１０５細胞／ｍＬに希釈した。細胞を５ｘ１０４細胞／ウェルでＣｏｓｔａｒ３９１７の９６ウェルプレートに添加し、次いで３７℃で２４時間インキュベートした。ＴＲ発現ベクター（全長ＴＲα−ＣＭＶまたはＴＲβ−ＣＭＶ）を１．５μｇ、ホタルルシフェラーゼコード配列に連結された最小チミジンキナーゼプロモーターの上流にクローン化された４ヌクレオチド（ＡＧＧＴＣＡｃａｇｇＡＧＧＴＣＡ）により間隔の空いたＤＲ４甲状腺ホルモン応答エレメント（ＴＲＥ）直列反復配列を含有するレポータープラスミドを１．５μｇ、及びｐＲＬ−ＳＶ４０構成Ｒｅｎｉｌｌａルシフェラーゼレポータープラスミド０．７５μｇを、５４０μｌのＯｐｔｉＭＥＭに希釈した。２７μＬのリポフェクタミン試薬を５４０μＬのＯｐｔｉＭＥＭに希釈した。プラスミド及びリポフェクタミン希釈液を合わせ、次いで室温で１０分間インキュベートした。次いで、その混合物を４．２９ｍＬのＯｐｔｉＭＥＭに希釈した。プレートは、１ウェル当たりマグネシウムまたは塩化カルシウムを含まないｐＨ７．２のリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）１００μＬで洗浄した。トランスフェクション混合物を１ウェル当たり５０μＬで添加し、次いで３７℃で４時間インキュベートした。１５ｍＭのＨＥＰＥＳ及び重炭酸塩、５ｍＭのＬ−グルタミン、チャコール処理済みＦＢＳ、５０単位／ｍＬペニシリン及び５０μｇ／ｍＬストレプトマイシンを含有するフェノールレッド不含の改変ＤＭＥ／Ｆ−１２ハム培地を５０μＬ／ウェルで添加し、次いでプレートを３７℃で２０時間インキュベートした。薬剤ストックをＤＭＳＯ中１０ｍＭで作製し、次いでＤＭＥ／Ｆ−１２ハムで１Ｘ濃度まで連続希釈した。１ウェル当たり１００μＬのＰＢＳ（ｐＨ７．２）でプレートを洗浄した。１００μＬの各薬剤ストックを３連でウェルに添加し、次いでプレートを３７℃で２４時間インキュベートした。
【０１０５】
細胞は、Ｐｒｏｍｅｇａ  ＤｕａｌＧｌｏキットを用いてルシフェラーゼ活性についてアッセイされた。１ウェル当たり５０μｌのルシフェラーゼ試薬を添加し、プレートを室温で１５分間揺らした後に、ホタルルシフェラーゼ活性についてプレートを読み取った。１ウェル当たり５０μｌ容量のＳｔｏｐ＆Ｇｌｏ  Ｒｅａｇｅｎｔを添加し、次いでＲｅｎｉｌｌａルシフェラーゼ活性についてプレートを読み取った。Ｒｅｎｉｌｌａ内部標準に対して標準化したデータを、シグモイド用量反応モデルを用いてＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ  ｖ．４ａで解析し、ＥＣ５０値±ＳＥＭを生成した。
【０１０６】
動物試験。実験プロトコルは、実験動物のケア及び使用のための国立衛生研究所のガイドラインに準拠しており、オレゴン保健科学大学機関動物用ケア及び使用委員会によって承認された。８〜１０週齢の野生型雄Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウスを、気温湿度が制御された部屋で１２時間の明暗サイクルにて飼育し、食物及び水を自由に摂取させた。
【０１０７】
分布試験。マウスに、９．１４μｍｏｌ／ｋｇのＧＣ−１、及び０．９１４、９．１４、及び３０．５μｍｏｌ／ｋｇの類似体を腹腔内（ｉｐ）に単回注射した。１時間あたり１用量につき３匹のマウスに対して安楽死を行い、組織及び血液を回収した。組織は直ちに凍結させ、そして血液は氷上で最低３０分間維持してから７，５００×Ｇで１５分間遠心沈殿させた。血清（１００μＬ）を採取し、試料が処理されるまで−８０℃で組織と共に保存した。
【０１０８】
血清の処理。血清サンプルを室温まで温め、２．９９μＭの内部標準（Ｄ６−ＧＣ−１）１０μＬをそれに添加した。アセトニトリル（５００μＬ）を加え、試料を２０秒間ボルテックスした。次いで、試料を４℃で１５分間、１０，０００×Ｇで遠心分離した。次に、上清の９０％をガラス試験管に移し、ｓｐｅｅｄｖａｃを用いて４５℃で１．５時間濃縮した。乾燥した試料を４００μＬの５０：５０のＡＣＮ：Ｈ２Ｏに溶解させ、２０秒間ボルテックスした。得られた混合物をエッペンドルフチューブに移し、１０，０００×Ｇで１５分間遠心した。上清を０．２２μＭの遠心フィルターで濾過し、ＬＣＭＳ／ＭＳ分析に供した。検量線は、Ｔ３、ＧＣ−１または類似体を注射していない８〜１０週齢のマウスの血清１００μＬを用いて作成した。濾過後、試料を６つのバイアルに分けた以外は、全く同じ処理を行った。ＧＣ−１、ＪＤ−２０及びＪＤ−２１は、（０．１ｐｇ／μＬ、１ｐｇ／μＬ、１０ｐｇ／μＬ、１００ｐｇ／μＬ、及び１０００ｐｇ／μＬ）の各化合物の最終濃度／マトリックスを作製するために、６つのバイアルのうちの５つに加えた。
【０１０９】
脳の処理。脳試料を室温に温め、５ＧｏｌｄＳｐｅｃ１／８クロム鋼球（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）とともにホモジナイザーチューブに移した。得られたチューブを秤量し、次いで１ｍＬのＨ２Ｏを添加し、続いて１０μＬの２．９９μＭの内部標準（Ｄ６−ソベチロム）を添加した。チューブをＢｅａｄ  Ｂｕｇで３０秒間ホモジナイズし、次いで３ｍＬのＡＣＮを含むＦａｌｃｏｎ（登録商標）チューブに移した。１ｍｌ容量のＡＣＮを用いてホモジナイザーチューブを洗浄した。次いで、その溶液をＦａｌｃｏｎ（登録商標）チューブに戻した。サンプルを４５℃で４時間スピードバックを用いてガラス管に濃縮した以外は、上記の血清処理と同じ方法を用いてサンプルを処理した。
【０１１０】
遺伝子活性化。マウスにビヒクル（１：１食塩水／ＤＭＳＯ）、０．３０５μｍｏｌ／ｋｇのＴ３、９．１４μｍｏｌ／ｋｇのＧＣ−１、及び０．９１４、９．１４、及び３０．５μｍｏｌ／ｋｇの類似体を腹腔内（ｉｐ）に単回注射した。２時間で１用量につき３匹のマウスに対して安楽死を行い、組織を回収した。ｑＰＣＲ分析のために採取された脳組織を、Ｔｒｉｚｏｌ試薬及びＰｕｒｅＬｉｎｋ  ＲＮＡミニキットを用いたＲＮＡ抽出のためのプロトコルに従って、オプションのＤＮａｓｅ処理工程中にＱｉａｇｅｎ  ＲＮａｓｅ−ｆｒｅｅ  ＤＮａｓｅキットを用いて処理した。１μｇの抽出ＲＮＡを用いて、Ｑｉａｇｅｎ  ＱｕａｎｔｉＴｅｃｔ  Ｒｅｖｅｒｓｅ  Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎキットを使用した逆転写（ＲＴ）反応によりｃＤＮＡを合成した。ＲＴ酵素を添加せずに１つの試料を複製することにより、ＤＮＡ混入を管理した。Ｈａｉｒｌｅｓｓ（Ｈｒ）遺伝子の発現は、ＱｉａｇｅｎのＱｕａｎｔｉＴｅｃｔ  ＳＹＢＲ  ｇｒｅｅｎ  ＰＣＲキットを用いてＱＰＣＲにより測定した。Ｈａｉｒｌｅｓｓのプライマー配列
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は、Ｂａｒｃａ−Ｍａｙｏ１９により以前に記載された。鋳型ｃＤＮＡを、ｑＰＣＲ反応におけるＲＴ試薬の干渉を最小限にするために２倍希釈した。グリセルアルデヒド−３−リン酸脱水素酵素（ＧＡＰＤＨ）は、試料間の標準化に使用されるハウスキーピング遺伝子であった。Ｈｒ遺伝子発現の相対的差異を調べるために、比較ＣＴ法を用いて、単回投与試験のデータ解析を行った。用量反応試験のためのデータ解析は、ＥＣ５０値±ＳＥＭを生成するためにシグモイド用量反応モデルを用いてＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ  ｖ．４ａを用いて行った。
【０１１１】
一般化学。１Ｈ  ＮＭＲは、Ｂｒｕｋｅｒ４００で行った。全ての１Ｈ  ＮＭＲは、ＮＭＲ溶媒の参照ピーク（Ｄ６−アセトン、ＣＤＣｌ３）に対して校正した。無水テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）及びジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）は、Ｓｅｃａ  Ｓｏｌｖｅｎｔ  Ｓｙｓｔｅｍから入手した。使用した他の溶媒はすべてＳｉｇｍａ−ＡｌｄｒｉｃｈまたはＦｉｓｈｅｒから購入した。最終化合物の純度分析では、ＨＰＬＣにより＞９５％であると決定された。ＨＰＬＣ分析は、Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｅｃｌｉｐｓｅ  Ｐｌｕｓ  Ｃ１８  ５μＭカラム（４．６×２５０ｍｍ）を用いたＶａｒｉａｎ  ＰｒｏＳｔａｒ  ＨＰＬＣ上で、１５分間にわたって１０％〜９５％アセトニトリル（０．１％ＴＦＡ）の勾配で行った。
【０１１２】
実施例２．（３，５−ジブロモフェノキシ）トリエチルシラン（２ａ）の調製
１ａ（５．０４ｇ、２０ｍｍｏｌ）及びイミダゾール（４．０９ｇ、６０ｍｍｏｌ）を８０ｍＬのＤＣＭに溶解した。溶液を０℃に冷却し、次いでトリエチルシリルクロリド（５．０３ｍＬ、３０ｍｍｏｌ）を加え、次いで反応物を０℃で３０分間撹拌した。反応物を１６０ｍＬのＥｔ２Ｏで希釈し、５０ｍＬのＨ２Ｏで２回、５０ｍＬのブラインで２回洗浄してからＭｇＳＯ４で脱水させ、濾過し、濃縮して定量的収率で２ａを得、これを精製せずに使用した。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨＺ， ＣＤＣｌ３）： δ ７．３７ （ｔ， １Ｈ）， ７．１０ （ｄ， ２Ｈ）， １．０２ （ｔ， ９Ｈ）， ０．８２ （ｑ， ６Ｈ）。
【０１１３】
実施例３．４−ヒドロキシ−２，６−ジブロモベンズアルデヒド（３ａ）の調製
フラスコにモレキュラーシーブを入れ、次いで真空下で火炎乾燥させた。アルゴン下で冷却した後、２ａ（５．４９ｇ、１５ｍｍｏｌ）を添加し、次いでフラスコを密閉して脱気し、そしてアルゴンを流した。３０ｍＬの脱水ＴＨＦを添加して脱気した後、溶液を−７８℃に冷却した。第２のフラスコにモレキュラーシーブを入れて、真空下で火炎乾燥させた。アルゴン下で冷却した後、ジイソプロピルアミン（４．６ｍＬ、３３ｍｍｏｌ）、続いて脱水ＴＨＦ６０ｍＬを加えてから溶液を脱気し、−７８℃に冷却した。ヘキサン中２．５Ｍのｎ−ブチルリチウム溶液（１２ｍＬ、３０ｍｍｏｌ）を添加し、次いで溶液を−７８℃で１時間撹拌した。リチウムジイソプロピルアミド溶液を、カニューレを介して２ａ溶液に滴下して移し、次いで脱プロトンを−７８℃で１時間撹拌した。５．８ｍＬの脱水ＤＭＦ（７５ｍｍｏｌ）を加え、次いで反応物を−７８℃で１時間撹拌した。反応物を５０ｍＬの１Ｎ  ＨＣｌ水溶液にデカントした。水層を９０ｍＬのＥｔ２Ｏで３回抽出した。有機画分を合わせ、５０ｍＬのブラインで２回洗浄し、次いでＭｇＳＯ４で脱水させ、濾過、濃縮して粗生成物を得、これを−７８℃にてヘキサンで沈殿させて、２．８ｇの３ａを得た（収率６７％）。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ｄ６−アセトン） δ １０．１６ （ｓ， １Ｈ）， ７．２７ （ｓ， ２Ｈ）。
【０１１４】
実施例４．ｔｅｒｔ−ブチル２−（３，５−ジブロモ−４−ホルミルフェノキシ）アセテート（４ａ）の調製
３ａ（２．８ｇ、１０ｍｍｏｌ）、ヨウ化ナトリウム（３ｇ、２０ｍｍｏｌ）及び炭酸セシウム（３．２４ｇ、１０ｍｍｏｌ）を４０ｍＬのアセトンに溶解させた。クロロ酢酸ｔｅｒｔ−ブチル２．８６ｍＬ（２０ｍｍｏｌ）を加え、次いで反応物を６５℃で２時間還流した。反応物を８０ｍＬのＥｔ２Ｏで希釈し、３０ｍＬの水で２回、３０ｍＬのブラインで２回洗浄し、次いでＭｇＳＯ４で脱水させ、濾過し、そして濃縮した。生成物をヘキサンで沈殿させ、濾過により回収してから真空下で乾燥させて、３．４９ｇの４ａを得た（収率８８％）。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ １０．２３ （ｓ， １Ｈ）， ７．１９ （ｓ， ２Ｈ）， ４．５９ （ｓ， ２Ｈ）， １．５２ （ｓ， ９Ｈ）。
【０１１５】
実施例５．（３，５−ジクロロフェノキシ）トリエチルシラン（２ｂ）の調製
１ｂ（６．５４ｇ、４０ｍｍｏｌ）及びイミダゾール（８．１８ｇ、１２０ｍｍｏｌ）を１６０ｍＬのＤＣＭに溶解させた。溶液を０℃に冷却し、次いでトリエチルシリルクロリド（１０ｍＬ、６０ｍｍｏｌ）を加えてから反応物を０℃で３０分間撹拌した。反応物を３２０ｍＬのＥｔ２Ｏで希釈し、１００ｍＬのＨ２Ｏで２回、７５ｍＬのブラインで２回洗浄し、次いでＭｇＳＯ４で脱水させ、濾過し、濃縮して２ｂを得、これを精製せずに使用し、乾燥後に秤量した（１０．５８ｇ、収率９５％）。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ６．９８ （ｔ， １Ｈ）， ６．７６ （ｄ， ２Ｈ）， １．０２ （ｔ， ９Ｈ）， ０．７７ （ｑ， ６Ｈ）。
【０１１６】
実施例６．４−ヒドロキシ−２，６−ジクロロベンズアルデヒド（３ｂ）の調製
フラスコにモレキュラーシーブを入れ、次いで真空下で火炎乾燥させた。アルゴン下で冷却した後、２ｂ（３．６ｇ、１３ｍｍｏｌ）を入れ、次いでフラスコを密閉し、排気し、アルゴンを流した。１３ｍＬの脱水ＴＨＦを添加して脱気した後、溶液を−７８℃に冷却した。第２のフラスコにモレキュラーシーブを入れて、真空下で火炎乾燥させた。アルゴン下で冷却した後、２，２，６，６−テトラメチルピペリジン（１．８４ｇ、１３ｍｍｏｌ）、続いて１３ｍＬの脱水ＴＨＦを加え、次いで溶液を脱気し、−７８℃に冷却した。２．５Ｍのｎ−ブチルリチウムのヘキサン溶液（５．２ｍＬ、１３ｍｍｏｌ）を加えてから、溶液を０℃で２０分間撹拌した。リチウムＴＭＰ溶液を、カニューレを介して２ｂ溶液に滴下して移し、次いで脱プロトンでは−７８℃で３０分間撹拌した。５ｍＬの脱水ＤＭＦ（６５ｍｍｏｌ）を加え、次いで反応物は−７８℃で３０分間撹拌した。反応物を１５ｍＬの１Ｎ  ＨＣｌ水溶液にデカントした。水層を１５ｍＬのＥｔＯＡｃで３回抽出した。有機画分を合わせ、１５ｍＬのブラインで２回洗浄し、次いでＭｇＳＯ４で脱水させ、濾過、濃縮して粗生成物を得、これを−２０℃にてヘキサンで再結晶させて、１．３９ｇの３ｂを得た（収率５６％）。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ｄ６−アセトン） δ １０．３７ （ｓ， １Ｈ）， ７．０１ （ｓ， ２Ｈ）。
【０１１７】
実施例７．ｔｅｒｔ−ブチル２−（３，５−ジクロロ−４−ホルミルフェノキシ）アセテート（４ｂ）の調製
３ｂ（１．１５ｇ、６ｍｍｏｌ）、ヨウ化ナトリウム（１．８ｇ、１２ｍｍｏｌ）及び炭酸セシウム（１．９４ｇ、６ｍｍｏｌ）を２４ｍＬのアセトンに溶解させた。クロロ酢酸ｔｅｒｔ−ブチル１．７２ｍＬ（１２ｍｍｏｌ）を加え、次いで反応物を６０℃で２４時間還流した。反応物を３０ｍＬのＥｔ２Ｏで希釈し、１０ｍＬの水で２回、そして１０ｍＬのブラインで２回洗浄し、次いでＭｇＳＯ４で脱水させ、濾過して濃縮した。粗製油状物を最小量のＥｔ２Ｏに再溶解させ、次いで−７８℃で激しく撹拌しているヘキサン１００ｍＬに滴下した。沈殿物を濾過により回収し、真空下で乾燥して、１．５４５ｇの４ｂ（収率８４％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ １０．４３ （ｓ， １Ｈ）， ６．９２ （ｓ， ２Ｈ）， ４．５９ （ｓ， ２Ｈ）， １．５２ （ｓ， ９Ｈ）。
【０１１８】
実施例８．４−ヨード−２−イソプロピルフェノール（６）の調製
５（６．８ｇ、５０ｍｍｏｌ）及びＮａＩ（７．５ｇ、５０ｍｍｏｌ）を７０ｍＬのＭｅＯＨに溶解させた。１０ＭのＮａＯＨ水溶液（５ｍＬ、５０ｍｍｏｌ）を加え、次いで溶液を０℃に冷却した。６．２５％ｗ／ｖのＮａＯＣｌ水溶液（６２．５ｍＬ、５０ｍｍｏｌ）を０℃で２４時間かけて滴下した。反応物を１２ＮのＨＣｌ水溶液でｐＨ７に酸性化し、次いで１０ｍＬの飽和Ｎａ２Ｓ２Ｏ３水溶液で反応停止した。水層をＥｔ２Ｏで３回抽出した。有機画分を合わせ、ブラインで２回洗浄し、次いでＭｇＳＯ４で脱水させ、濾過し、濃縮して粗生成物を得、これをフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、ヘキサン／酢酸エチル、１〜２０％）で精製して赤色の油状物として１１．３５ｇの６（収率８７％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ７．４７ （ｄ， １Ｈ）， ７．３６ （ｄｄ， １Ｈ）， ６．５４ （ｄ， １Ｈ）， ３．１６ （ｍ， １Ｈ）， １．２５ （ｄ， ６Ｈ）。
【０１１９】
実施例９．４−ヨード−２−イソプロピル−１−（メトキシメトキシ）ベンゼン（７）の調製
６（２．６２ｇ、１０ｍｍｏｌ）及びテトラブチルアンモニウムヨージド（３６９ｍｇ、１ｍｍｏｌ）を１００ｍＬのＤＣＭに溶解させた。１０ＭのＮａＯＨ水溶液を１０ｍＬ加え、続いて５ｍＬの６Ｍクロロメチルメチルエーテル／ＭｅＯＡｃを添加した。反応物を室温で３０分間撹拌し、次いで２００ｍＬのＥｔ２Ｏで希釈した。有機層を１００ｍＬのＨ２Ｏで２回、１００ｍＬのブラインで２回洗浄し、次いでＭｇＳＯ４で脱水させ、濾過、濃縮して粗生成物を得、これをフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、ヘキサン／酢酸エチル、１〜２０％）で精製して、２．４８ｇの７を得た（収率８１％）。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ７．４７ （ｄ， １Ｈ）， ７．４２ （ｄｄ， １Ｈ）， ６．８３ （ｄ， １Ｈ）， ５．１８ （ｓ， ２Ｈ）， ３．４７ （ｓ， ３Ｈ）， ３．２７ （ｍ， １Ｈ）， １．２０ （ｄ， ６Ｈ）。
【０１２０】
実施例１０．ｔｅｒｔ−ブチル２−（３，５−ジブロモ−４−（ヒドロキシ（３−イソプロピル−４−（メトキシメトキシ）フェニル）メチル）フェノキシ）アセテート（８ａ）の調製
フラスコに４Åモレキュラーシーブを入れ、真空下で火炎乾燥させた。７（１．４７ｇ、４．８ｍｍｏｌ）を入れ、フラスコを密閉し、排気し、アルゴンを流した。２４ｍＬの脱水ＴＨＦを添加し、脱気してから溶液を０℃に冷却した。イソプロピルマグネシウムクロリド（２Ｍ  ＴＨＦ、５．５ｍＬ、７．２ｍｍｏｌ）を加え、次いで反応物を室温で２時間撹拌した。第２のフラスコに４Åモレキュラーシーブを入れ、真空下で火炎乾燥させた。４ａ（９４６ｍｇ、２．４ｍｍｏｌ）を入れ、フラスコを密閉し、排気し、アルゴンを流した。１２ｍＬの脱水ＴＨＦを添加し、脱気した。アリールマグネシウム溶液を−７８℃に冷却し、次いで４ａ溶液を、カニューレを介して滴下して添加し、反応物を−７８℃で１時間攪拌した。反応を１Ｎ  ＨＣｌ水溶液１０ｍＬで停止させた。水層を１０ｍＬのＥｔＯＡｃで３回抽出した。有機画分を合わせ、１０ｍＬのブラインで２回洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４で脱水させ、濾過し、濃縮して粗生成物を得、これをフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ４〜４０％）で精製して１．０８９ｇの８ａ（収率７９％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ７．２４ （ｄ， １Ｈ）， ７．１７ （ｓ， ２Ｈ）， ７．００ （ｄ， １Ｈ）， ６．９０ （ｄｄ， １Ｈ）， ６．５１ （ｄ， １Ｈ）， ５．２１ （ｓ， ２Ｈ）， ４．５３ （ｓ， ２Ｈ）， ３．４９ （ｓ， ３Ｈ）， ３．３４ （ｍ， ３Ｈ）， １．５２ （ｓ， ９Ｈ）， １．２１ （ｔ， ６Ｈ）。
【０１２１】
実施例１１．２−（３，５−ジブロモ−４−（（３−イソプロピル−４−ヒドロキシフェニル）メチル）−フェノキシ）酢酸（９ａ）の調製
８ａ（１．０８９ｇ、１．９ｍｍｏｌ）を１９ｍＬのＤＣＭに１．２１ｍＬのトリエチルシラン（７．５８ｍｍｏｌ）と共に溶解させた。溶液を０℃に冷却してから４．３５ｍＬのトリフルオロ酢酸（５６．９ｍｍｏｌ）を加え、反応物を０℃で３０分間、次いで室温で２時間撹拌した。溶媒を真空下で除去し、次いで生成物をヘキサンの添加により沈殿させ、そして濾過により回収した。固形物を真空乾燥させて５０５ｍｇのＪＤ−２０（９ａ）を得た（収率５８％）。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ７．１９ （ｓ， ２Ｈ）， ７．１０ （ｄ， １Ｈ）， ６．８２ （ｄｄ， １Ｈ）， ６．６４ （ｄ， １Ｈ）， ４．６８ （ｓ， ２Ｈ）， ４．２８ （ｓ， ２Ｈ）， ３．１８ （ｍ， １Ｈ）， １．２４ （ｄ， ６Ｈ）。
【０１２２】
実施例１２．ｔｅｒｔ−ブチル２−（３，５−ジクロロ−４−（ヒドロキシ（３−イソプロピル−４−（メトキシメトキシ）フェニル）メチル）フェノキシ）アセテート（８ｂ）の調製
フラスコに４Åモレキュラーシーブを入れ、真空下で火炎乾燥させた。７（４５９ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）を入れ、フラスコを密閉し、排気し、アルゴンを流した。６ｍＬの脱水ＴＨＦを添加し、脱気してから溶液を０℃に冷却した。イソプロピルマグネシウムクロリド（２Ｍ  ＴＨＦ、１．１２５ｍＬ、２．２５ｍｍｏｌ）を加え、次いで反応物を室温で２時間撹拌した。第２のフラスコに４Åモレキュラーシーブを入れ、真空下で火炎乾燥させた。４ｂ（３０５ｍｇ、１ｍｍｏｌ）を入れ、フラスコを密閉し、排気し、そしてアルゴンを流した。４ｍＬの脱水ＴＨＦを添加して脱気した。アリールマグネシウム溶液を−７８℃に冷却し、次いで４ｂ溶液を、カニューレを介して滴下して添加し、反応物を−７８℃で１時間攪拌した。反応を１Ｎ  ＨＣｌ水溶液５ｍＬで停止させた。水層を５ｍＬのＥｔＯＡｃで３回抽出した。有機画分を合わせ、５ｍＬのブラインで２回洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４で脱水させ、濾過し、濃縮して粗生成物を得、これをフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ２〜２０％）で精製して２６０ｍｇの８ｂ（収率５４％）を得た。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨＺ， ＣＤＣｌ３） δ ７．２６ （ｄ， １Ｈ）， ６．９９ （ｄｄ， １Ｈ）， ６．９４ （ｄ， １Ｈ）， ６．９３ （ｓ， ２Ｈ）， ６．５０ （ｄ， １Ｈ）， ５．２１ （ｓ， ２Ｈ）， ４．５３ （ｓ， ２Ｈ）， ３．５０ （ｓ， ３Ｈ）， ３．３３ （ｍ， １Ｈ）， ３．２３ （ｄ， １Ｈ）， １．５２ （ｓ， ９Ｈ）， １．２１ （ｔ， ６Ｈ）。
【０１２３】
実施例１３．２−（３，５−ジクロロ−４−（（３−イソプロピル−４−ヒドロキシフェニル）メチル）−フェノキシ）酢酸（９ｂ）の調製
８ｂ（２６０ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ）を５．４ｍＬのＤＣＭに０．３４５ｍＬのトリエチルシラン（２．１６ｍｍｏｌ）と共に溶解させた。溶液を０℃に冷却してから１．２４ｍＬのトリフルオロ酢酸（１６．２ｍｍｏｌ）を加え、反応物を０℃で３０分間、次いで室温で２時間撹拌した。溶媒を真空下で除去し、次いで生成物をヘキサンの添加により沈殿させ、そして濾過により回収した。固形物を真空乾燥させて１３７ｍｇのＪＤ−２１（９ｂ）を得た（収率６９％）。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ７．１２ （ｄ， １Ｈ）， ６．９５ （ｓ， ２Ｈ）， ６．８６ （ｄｄ， １Ｈ）， ６．６４ （ｄ， １Ｈ）， ４．６８ （ｓ， ２Ｈ）， ４．１８ （ｓ， ２Ｈ）， ３．１７ （ｍ， １Ｈ）， １．２４ （ｄ， ６Ｈ）。
【０１２４】
実施例１４．ハロゲン化化合物の生物活性
細胞をベースにしたｉｎ  ｖｉｔｒｏトランス活性化アッセイは、ＪＤ−２０及びＪＤ−２１が親ＧＣ−１と比較して改善された力価を有することを示す（図１）。ＴＲαの力価の増加は中程度であったが、ＴＲβではＴ３のＥＣ５０にほぼ一致する、さらなる改善が見られた（表１）。
【０１２５】
（表１）ＴＲＥ駆動デュアルルシフェラーゼトランス活性化アッセイからのＥＣ５０値から測定されたサブタイプ選択性
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【０１２６】
分布試験はＣ５７ＢＬ／６Ｊマウスで行い、腹腔内（ｉｐ）投与後の脳及び血清中の濃度を決定した。マウスに、９．１４μｍｏｌ／ｋｇ用量のＧＣ−１、ＪＤ−２０またはＪＤ−２１を単回投与した。組織及び血液を注射の１時間後に収集し、薬物の濃度をＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析で測定した（図２）。ＪＤ−２１はＧＣ−１と比較してほぼ同等の脳取り込みを示したが、ＪＤ−２０は幾分低かった。ＪＤ−２０及びＪＤ−２１の血清濃度はいずれもＧＣ−１より有意に低く、これらを組み合わせると、ＪＤ−２１はＧＣ−１より高い脳：血清比率であるが、ＪＤ−２０はＧＣ−１と同等の脳：血清比率を有した。
【０１２７】
脳におけるＴＲ標的遺伝子のＨａｉｒｌｅｓｓ（Ｈｒ）の誘導によるｍＲＮＡ発現を、ｑＰＣＲにより決定し、グリセルアルデヒド３−リン酸デヒドロゲナーゼ（ＧＡＰＤＨ）ｍＲＮＡに対して標準化した（図３）。陰性対照としてビヒクル（１：１の食塩水／ＤＭＳＯ）を用い、飽和用量のＴ３（０．３０５μｍｏｌ／ｋｇ）及びＧＣ−１（９．１４μｍｏｌ／ｋｇ）を陽性対照として使用した。９．１４μｍｏｌ／ｋｇのＪＤ−２１（２．４倍）は、９．１４μｍｏｌ／ｋｇのＧＣ−１（１．６倍）と比較して有意（ｐ＜０．０５）に高いＨｒ発現の誘導を有していた。０．９１４μｍｏｌ／ｋｇのＪＤ−２０及びＪＤ−２１は、同一の用量でＧＣ−１と同等のＨｒ誘導を有することから、ＧＣ−１より約１０倍高い力価が示唆される。
【０１２８】
ＧＣ−１、ＪＤ−２０及びＪＤ−２１による、ＧＡＰＤＨ  ｍＲＮＡ発現に対して標準化した脳におけるＨｒ  ｍＲＮＡ誘導のＥＣ５０値（図４）を、同じ実験プロトコルを用いて決定した。ＧＣ−１のＥＣ５０は８．２０±１２．６５μｍｏｌ／ｋｇであり、ＪＤ−２０のＥＣ５０は１．４９±１．０８μｍｏｌ／ｋｇであり、そしてＪＤ−２１のＥＣ５０は１．２１±１．７５μｍｏｌ／ｋｇであり、ハロゲン化類似体は、脳でＨｒ  ｍＲＮＡ発現を誘導することにおいて、ＧＣ−１より約６倍強力である。
【０１２９】
ＧＣ−１は当分野で標準的なＴＲβ選択的甲状腺ホルモン様物質の１つとなっているが、本試験では内環メチル基をハロゲンで置換することにより、親化合物の重要な特性を保持し、著しく改善された化合物を生成することを明らかにする。ＧＣ−１のＴＲβ選択性及びＣＮＳ浸透は、ＪＤ−２０及びＪＤ−２１で保存されており、それらがＣＮＳ適応症において有効であることを示唆している。
【０１３０】
ＪＤ−２０及びＪＤ−２１の改善された力価は、３，５位のハロゲンを有する類似体が、その位置にメチル基を有する類似の類似体と比較して、優れた活性を有することを発見した、多数の甲状腺ホルモン様物質のＳＡＲ研究と一致する。この場合、ほとんどの測定値で驚くべきことは、ＪＤ−２０とＪＤ−２１が非常に似た特性を有しているように思われることである。以前の甲状腺ホルモン様物質のＳＡＲ研究では、ハロゲンの変化により、多くの場合、力価と選択性の両方において劇的な変化が生じた。この骨格における唯一の主な違いは、ＪＤ−２０がＧＣ−１及びＪＤ−２１と比較して減少した取り込みを有する、脳の取り込みにおいて見出される。
【０１３１】
実施例１５．２−（３，５−ジブロモ−４−（４−ヒドロキシ−３−イソプロピルベンジル）フェノキシ）−Ｎ−メチルアセトアミド（ＭＡ−ＪＤ２０、１０ａ）の調製
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密閉管の中で２−（３，５−ジブロモ−４−（４−ヒドロキシ−３−イソプロピルベンジル）フェノキシ）酢酸（１００ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）をメタノール（４ｍＬ）に溶解させ、濃硫酸１滴をこれに加えた。密閉した反応混合物を１時間攪拌しながら６５℃まで加熱した。次いでこれを室温まで冷却し、そしてＴＬＣ（酢酸エチル：ヘキサンは１：１）により対応するメチルエステルへの完全な変換が示された。この溶液に、水中４０％メチルアミン（２８５μｌ、３．３ｍｍｏｌ、１５当量）を添加し、再び密閉状態で１時間６５℃まで加熱した。これを冷却し、生成物への完全な変換をＴＬＣによって観察した。水酸化ナトリウム（０．５Ｎ、１０ｍｌ）をこれに加え、生成物をジクロロメタン（３×５０ｍｌ）で抽出した。有機層を合わせ、無水Ｍｇ２ＳＯ４で脱水させ、濾過し、濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（５０％ヘキサン／酢酸エチル）で精製した。ヘキサンとジクロロメタンの混合物からの再結晶で、最終化合物を得た（７０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ、６８％）。１ＨＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＭｅＯＨ−ｄ４）： δ＝７．３５ （ｓ， ２Ｈ）， ６．９８ （ｄ， １Ｈ， Ｊ＝２．３Ｈｚ）， ６．７４ （ｄｄ， １Ｈ， Ｊ＝８．３ Ｈｚ， ２．３Ｈｚ）， ６．６２ （ｄ， １Ｈ， Ｊ＝８．２Ｈｚ）， ４．５５ （ｓ， ２Ｈ）， ４．２６ （ｓ， ２Ｈ）， ３．２４ （ｓｅｐｔｅｔ， １Ｈ， Ｊ＝６．９ Ｈｚ）， ２．８４ （ｓ， ３Ｈ）， １．１７ （ｄ， ６Ｈ， Ｊ＝６．９８Ｈｚ）。Ｃ１９Ｈ２１Ｂｒ２ＮＯ３［Ｍ＋Ｈ］＋：ｍ／ｚ４７１．９９４１６に対するＨＲＭＳの計算精密質量は、ｍ／ｚ４７１．９９４４６であった。
【０１３２】
実施例１６．２−（３，５−ジクロロ−４−（４−ヒドロキシ−３−イソプロピルベンジル）フェノキシ）−Ｎ−メチルアセトアミド（ＭＡ−ＪＤ２１、１０ｂ）の調製
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密閉管の中で２−（３，５−ジクロロ−４−（４−ヒドロキシ−３−イソプロピルベンジル）フェノキシ）酢酸（１００ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ、１当量）をメタノール（５ｍＬ）に溶解させた。硫酸（１滴）をこれに加え、反応物を密閉し、攪拌しながら１時間６５℃まで加熱した。それを室温まで冷却し、ＴＬＣ分析（酢酸エチル：ヘキサン１：１）により、中間体メチルエステルへの完全な変換が示された。次に、これに水中４０％メチルアミン（３２０μｌ、４ｍｍｏｌ、１５当量）を添加した。反応物は、再密閉して、６５℃まで１時間加熱した。反応フラスコを室温まで冷却し、水酸化ナトリウム（０．５Ｎ、１０ｍＬ）をそれに加えた。反応生成物をジクロロメタン（３×５０ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせ、無水Ｍｇ２ＳＯ４で脱水させ、濾過し、濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（５０％ヘキサン／酢酸エチル）で精製して、白色固体として生成物を得た（６５ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ、６３％）。１Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＭｅＯＨ−ｄ４）： δ＝７．１２ （ｓ， ２Ｈ）， ７．０１ （ｄ， １Ｈ， Ｊ＝１．９８Ｈｚ）， ６．７７ （ｄｄ， １Ｈ， Ｊ＝８．２１Ｈｚ， ２．２６Ｈｚ）， ６．６２ （ｄ， １Ｈ， Ｊ＝８．２１Ｈｚ）， ４．５６ （ｓ， ２Ｈ）， ４．１５ （ｓ， ２Ｈ）， ３．２３ （ｓｅｐｔｅｔ， １Ｈ， Ｊ＝７．１４Ｈｚ）， ２．８５ （ｓ， ３Ｈ）， １．１７ （ｄ， ６Ｈ， Ｊ＝ ６．９３Ｈｚ）。Ｃ１９Ｈ２１Ｃｌ２ＮＯ３［Ｍ＋Ｈ］＋：ｍ／ｚ３８４．０９４５５についてのＨＲＭＳの計算精密質量は、ｍ／ｚ３８４．０９４７３であった。
【０１３３】
実施例１７．ハロゲン化アミドの生物活性
動物試験。８〜１０週齢の野生型雄Ｃ５７Ｂｌ／６マウスを、気温湿度が制御された部屋にて１２時間の明暗サイクルで飼育し、食物及び水を自由に摂取させた。アミドＭＡ−ＪＤ２０から生成したＪＤ−２０に対するＪＤ−２０、及びアミドＭＡ−ＪＤ−２１から生成されたＪＤ−２１に対するＪＤ−２１の単一時点の薬物分布を比較するために、ＪＤ−２０、ＪＤ−２１、ＭＡ−ＪＤ２０及びＭＡ−ＪＤ２１を腹腔内及び経口の両方で３．０５μｍｏｌ／ｋｇ（１用量につき３匹のマウス）の用量を投与することによって親薬物の濃度をマウスの脳及び血清で分析した。化合物を５０：５０のＤＭＳＯ及び０．９％の塩化ナトリウム静菌溶液の混合物に溶解させた。５００μｌインスリン注射器（Ｃｏｖｉｄｉｅｎ  ＬＬＣ  ＭＡ、ＵＳＡ）に接続したプラスチック供給管（２０ｇａ×３８ｍｍ、Ｉｎｓｔｅｃｈ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ  Ｉｎｃ．、ＰＡ、ＵＳＡ）を用いて経口投与を行った。両方の実験において、薬物投与１時間後にマウスを安楽死させた。
【０１３４】
単一時点の試験の追跡調査として、アミドであるＭＡ−ＪＤ２０及びＭＡ−ＪＤ２１について、経口投与による２４時間の経時変化試験を実施し、対応するＪＤ−２０またはＪＤ−２１濃度をマウスの脳及び血液で測定した。これらの分析から薬物動態の経時変化曲線を作成し、脳及び血液の曲線下面積（ＡＵＣ）値を得た。
【０１３５】
組織は、以下のように処理した。脳は、３つのＧｏｌｄ  Ｓｐｅｃ１／８クロム鋼球（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）の入った、予め秤量したホモジナイザーチューブに回収し、直ちに−８０℃で凍結させた。血液サンプルは、氷上で３０分間保持し、次いで４℃で１５分間、５４００×Ｇで遠心沈殿させた。血清（１００μｌ）を上部から回収し、試料が処理されるまで−８０℃で保存した。
【０１３６】
血清の処理：血清試料は、室温まで温めた。アセトニトリル（５００μｌ）及び内部標準ｄ６−ソベチロム（２．９９μＭ、１０μｌ）を各試料に添加し、２０秒間ボルテックスした。次にそれらを４℃で１５分間、１０，０００×Ｇで遠心分離した。ラベルした１３×１００ｍｍホウケイ酸ガラス管のセットに上清を移し、ｓｐｅｅｄｖａｃ濃縮装置において４５℃で２時間濃縮させた。次いで、乾燥試料をアセトニトリルと水が５０：５０の混合物４００μｌに溶解させて、２０秒間ボルテックスした。得られた混合物をエッペンドルフチューブに移し、４℃で１０，０００×Ｇで１５分間遠心分離した。このように調製した血清サンプルをＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析に供して、遊離のＪＤ−２０またはＪＤ−２１の量を定量した。
【０１３７】
標準曲線は、ビヒクルのみ（ＤＭＳＯ及び０．９％の塩化ナトリウム静菌溶液の５０：５０の混合物）を注射された８〜１０週齢のＣ５７Ｂｌ／６マウスから採取した１００μｌの血清で作成した。血清サンプルは、最後の遠心分離の後にサンプルを６つのバイアルに分けたことを除き、全く同じ方法で処理した。これらの６つのバイアルのうち５つにＪＤ−２０及びＪＤ−２１の混合物を添加して、媒体中各化合物の濃度を（０．１ｐｇ／μｌ、１．０ｐｇ／μｌ、１０ｐｇ／μｌ、／１００ｐｇ／μｌ及び１０００ｐｇ／μｌ）にした。
【０１３８】
脳の処理：脳試料は、室温まで温め、秤量した。水（１ｍｌ）及び内部標準ｄ６−ソベチロム（２．９９μＭ、１０μｌ）を各試料に添加し、２０秒間ボルテックスした。それらをＯｍｎｉ  Ｂｅａｄ  ｒｕｐｔｏｒ２４で１分間ホモジナイズし、次いでそれぞれ３ｍｌのアセトニトリルを含むラベルした１５ｍｌのＦａｌｃｏｎチューブに移した。１ｍｌ容量のアセトニトリルを用いてホモジナイザーチューブを洗浄し、その洗浄液をファルコンチューブに添加した。チューブを２０秒間ボルテックスし、４℃で１０，０００×Ｇの速度で遠心分離した。これらのチューブの上清を、ラベルした１３×１００ｍｍホウケイ酸ガラス管のセットに注意深くデカントし、４５℃にて４時間、ｓｐｅｅｄｖａｃで濃縮した。次に、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析のための血清処理法を用いて試料を処理した。
【０１３９】
結果。アミドのＭＡ−ＪＤ２０及びＭＡ−ＪＤ２１は、どちらも図５Ａに示すように、等モルの腹腔内用量の３．０５μｍｏｌ／ｋｇの非修飾ＪＤ−２０またはＪＤ−２１と比較して、より多くの親薬物をＣＮＳに送達する。
【０１４０】
両アミドは、どちらも図５Ｂに示すように、対応する親薬物の末梢曝露を減少させることも観察された。この減少した血清濃度から、これらのアミドによって対応する親薬物のＣＮＳ分布がかなり改善されたという事実も支持される。非修飾化合物に対するアミドの血清に対する脳の比率を比較することにより、アミドが血清中の親薬物の末梢曝露を４倍以上減少させることが観察された（図５Ｃ）。同じ用量、すなわち３．０５μｍｏｌ／ｋｇを用いた経口投与でも同様の結果が観察された（図６）。
【０１４１】
単一時点の薬物分布評価の後、アミドの薬物動態特性をさらに理解するために、マウスに９．１４μｍｏｌ／ｋｇのＭＡ−ＪＤ２０の経口用量を投与することによって２４時間の経時変化試験を行った。脳及び血液において生成されたＪＤ−２０濃度を解析して脳及び血清の曲線下面積（ＡＵＣ）値を得た（図７）。アミドＭＡ−ＪＤ−２０に対するＡＵＣ脳／ＡＵＣ血清比率は、０．８９と認められた。Ｃ最大値及びＴ最大値は、脳組織では約２時間であるようだが、血液では、Ｃ最大値及びＴ最大値は、最初の３０〜４５分の時点の間に生じた。この事実から、アミドの加水分解速度は一旦ＣＮＳに達すると、加水分解速度が緩やかであることが示唆される。単一時点の薬物分布から得られた結果は、ＡＵＣ解析によって確証された。
【０１４２】
アミドのＭＡ−ＪＤ２０及びＭＡ−ＪＤ２１は、腹腔内投与及び経口投与により、どちらもより多くの親薬物をＣＮＳに送達することが示されたので、本発明者らは次に、アミドが対応する未修飾化合物よりも高い程度まで甲状腺反応性Ｈａｉｒｌｅｓｓ（Ｈｒ）遺伝子を上方制御させるかどうかを評価した。マウスに３．０５μｍｏｌ／ｋｇ（１用量あたり３匹のマウス）の用量のＪＤ−２０、ＪＤ−２１、ＭＡ−ＪＤ２０及びＭＡ−ＪＤ２１ならびにビヒクル（１：１の生理食塩水／ＤＭＳＯ）を経口投与した。回収した脳組織を、Ｔｒｉｚｏｌ試薬及びＰｕｒｅＬｉｎｋ  ＲＮＡミニキットを用いたＲＮＡ抽出プロトコルに従って処理し、Ｑｉａｇｅｎ  ＱｕａｎｔｉＴｅｃｔ  Ｒｅｖｅｒｓｅ  Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎキットを使用してｃＤＮＡを作製し、そして前述のようにＱｉａｇｅｎのＱｕａｎｔｉＴｅｃｔ  ＳＹＢＲ  ｇｒｅｅｎ  ＰＣＲキットを用いてＨａｉｒｌｅｓｓ（Ｈｒ）遺伝子の発現をｑＰＣＲで測定した。グリセルアルデヒド−３−リン酸脱水素酵素（ＧＡＰＤＨ）は、試料間の標準化に使用されるハウスキーピング遺伝子であった。データ解析は、比較ＣＴ法を用いてＨｒ遺伝子発現の相対差をモニターすることによって行った。結果は図８に示される。このデータは、薬物分布試験から得られた結果と一致する。
【０１４３】
実施例１８．ハロゲン化アミドは、脂肪酸アミド加水分解酵素（ＦＡＡＨ）の基質である
材料。ソベチロム及びｄ６−ソベチロムは、上述したように合成した。（Ｐｌａｃｚｅｋ  ａｎｄ  Ｓｃａｎｌａｎ．Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ２０１５，７１（３５），５９４６−５９５１）。  アナンダミドはＣａｙｍａｎから購入した（９００５０）。アラキドン酸はＳｉｇｎｍａから購入した（２３４０１）。ｄ１１−アラキドン酸は、Ａｖａｎｔｉから購入した（８６１８１０Ｅ）。溶媒は、ＦｉｓｈｅｒのＨＰＬＣグレードである。ｐｃＤＮＡ４バックボーンのヒトＦＡＡＨ  ｃＤＮＡは、Ｍａｒｔｉｎ  Ｋａｃｚｏｃｈａ教授（Ｓｔｏｎｙ  Ｂｒｏｏｋ）により、快く提供して頂いた。Ｃ末端ＦＬＡＧ配列は、プライマー
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を用いてＰＣＲにより挿入された。Ｋｐｎ１／Ｘｈｏ１消化断片はｐｃＤＮＡ４に再挿入された。得られたｐｃＤＮＡ４−ＦＡＡＨ−ＦＬＡＧ構築物を配列決定により確認した。
【０１４４】
ＬＣ／ＭＳ−ＭＳ。化合物の定量化は、上述したように変更を伴ったＬＣ−ＭＳ／ＭＳにより行われた（Ｆｅｒｒａｒａ，ａｎｄ  Ｓｃａｎｌａｎ，  ｅｔ  ａｌ．Ｂｉｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２０１７，２５（１０）２７４３−２７５３）。クロマトグラフィーは、Ｂｅｔａｂａｓｉｃプレカラム（Ｔｈｅｒｍｏ）を装着したＨａｍｉｌｉｔｏｎのＰＲＰ−Ｃ１８カラム（５μｍ、２．１ｘ５０ｍｍ、１００Å）で行った。勾配移動相は０．５ｍＬ／分の流速で送達し、２つの溶媒のＡ：１０ｍＭの蟻酸アンモニウム／水及びＢ：１０ｍＭの蟻酸アンモニウム／９０％のアセトニトリルと１０％の水から成る。勾配は以下のように、０〜０．５分は１０％Ｂを保持、０．５〜５．１分は１０〜９８％Ｂ、５．１〜７分は９８％Ｂを保持、７〜７．１分は９８〜１０％Ｂ、７．１〜８分は１０％を保持、とした。分析物は、親イオンｍ／ｚ及び遷移に最適化したエネルギーで第２の転移を生じる最も強いピークを主に用いた多重反応モニタリング（ＭＲＭ）でのｎｅｇａｔｉｖｅモードで同定された。
【０１４５】
細胞ホモジネートにおけるＦＡＡＨ活性。ＣＯＳ−７細胞（ＡＴＣＣ  ＣＲＬ−１６５１）を、１０％ＦＢＳ、ペニシリン（１００単位／Ｌ）、及びストレプトマイシン（１００μｇ／Ｌ）を添加したダルベッコ改変イーグル培地で培養した。細胞（８００，０００／ウェル）を６ウェルプレート（Ｆａｌｃｏｎ３５３０４６）に播種し、一晩接着させた。細胞を、製造元のプロトコルに従って、Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ  ２０００（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を用いてｐｃＤＮＡ４−ＦＡＡＨ−ＦＬＡＧでトランスフェクションした。模擬トランスフェクション対照は、ＤＮＡなしのトランスフェクション試薬で行った。細胞は、トランスフェクションの４日後に冷ＰＢＳで洗浄し、ＴＥ緩衝液（１２５ｍＭトリス、１ｍＭ  ＥＤＴＡ、ｐＨ９）に掻き取り、超音波処理（１０秒、６０Ｓｏｎｉｃ  Ｄｉｓｍｅｍｂｒａｔｏｒ、Ｆｉｓｈｅｒ）した。細胞ホモジネートは、−８０℃で保存し、タンパク質濃度はＢＣＡ（Ｐｉｅｒｃｅ）で測定した。細胞ホモジネートは０．１％ＢＳＡ（脂肪酸不含）（Ａｌｆａ  Ａｅｓａｒ）を含むＴＥ緩衝液に希釈した。基質はＤＭＳＯ中５０ｘストックとして、ホモジネートのアリコート５０μＬに、１００μＭの最終濃度まで添加した。反応は、３１．２５μｇ／ｍＬのホモジネートタンパク質を用いて３７℃で１５分間行った。１００μＬのアセトニトリルで反応を停止させ、２０秒間ボルテックスした。遠心分離（１０，０００ｒｐｍ、１５分間、４℃）により試料を清澄化した。上清は、３００ｎＭのｄ１１−アラキドン酸及び３０ｎＭのｄ６−ソベチロムを含有する２：１のＭｅＣＮ：Ｈ２Ｏに５０倍希釈した。試料を、再度遠心分離した（１３，２００ｒｐｍ、１５分、４℃）。生成物は、模擬試料で作成した標準曲線を用いてＬＣ／ＭＳ−ＭＳによって定量化した。実測速度は、生成物（ｎｍｏｌ）／タンパク質ホモジネート（ｍｇ）／分として表される。
【０１４６】
図９は、アミドＭＡ−ＪＤ２０及びＭＡ−ＪＤ２１が脂肪酸アミド加水分解酵素（ＦＡＡＨ）の基質であることを示す。上記のようにＦＡＡＨをＣＯＳ−７細胞で過剰発現させ、細胞ホモジネートを使用して基質切断の実測速度を測定し、典型的な内因性ＦＡＡＨの基質アナンダミド（ＡＥＡ）と比較した。基質はすべて１００μＭで試験した。ＡＥＡと比較して、甲状腺ホルモン様アミドのＭＡ−ＧＣ１（９倍），ＭＡ−ＪＤ２０（３１倍）、及びＭＡ−ＪＤ２１（２０倍）は、低減した速度を示す。しかし、これらの低減した実測速度は、ＦＡＡＨの他の既知の内在性基質に匹敵し（Ｂｏｇｅｒ，ｅｔ  ａｌ．Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．２０００，１０（２３），２６１３−２６１６、Ｃｒａｖａｔｔ，ｅｔａｌ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．２００１，９８（１６），９３７１−６）、そしてハロゲン化誘導体はソベチロムアミドの活性に近い。実測速度は、産物（ｎｍｏｌ）／ホモジネートタンパク質（ｍｇ）／分として表される。
【０１４７】
前述のことは、明瞭さと理解のために例示及び実施例によって幾分詳細に記載されているが、当業者は、添付の特許請求の範囲内で特定の変更及び改変が実施可能であることを理解するであろう。さらに、本明細書で提供される各参照は、各参照がそれぞれ参照により組み込まれるように、その全体が同程度に参照により本明細書に組み込まれる。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図５Ｃ】
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【図６Ａ】
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【図６Ｂ】
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【図６Ｃ】
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【図７Ａ】
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【図７Ｂ】
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【図８】
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【図９】
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【手続補正書】
【提出日】平成31年1月22日(2019.1.22)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】配列表
【補正方法】追加
【補正の内容】
【配列表】
2019516739000001.app
【国際調査報告】
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