(57)【要約】  本発明は、エキスの総質量に対して、少なくとも約50質量%のポリフェノール、及び約10質量%未満のテルペンを含む枝エキス部分、好ましくは少なくとも1種の樹脂質の木からの枝エキス部分を含む舌下用組成物に関する。更に、本発明は、呼吸器のウェルネスを改善するための、関節痛及び/若しくは筋肉痛及び痙攣を緩和するための、並びに/又は持久力を改善するための、並びに性欲及び/若しくは生殖能力を改善するための、このような舌下用組成物の非治療的使用に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
組成物の総質量に対して少なくとも約10質量%の枝エキス部分、好ましくは少なくとも1種の樹脂質の木からの枝エキス部分を含む舌下用組成物であって、前記枝エキス部分が、エキスの総質量に対して少なくとも約50質量%、好ましくは少なくとも70質量%、より好ましくは少なくとも90質量%のポリフェノール及び約10質量%未満のテルペンを含み、ポリフェノールが、エキスの総質量に対して、
-  約25質量%から約50質量%のヒドロキシマタイレシノール、
-  約5質量%から約15質量%のラリシレシノール、及び
-  約5質量%から約15質量%のセコイソラリシレシノール
を含む、舌下用組成物。
【請求項２】
枝エキス部分が、アビエス・アルバ、ピケア・アビエス、ベトゥラ・ペンドゥラ、ピヌス・シルウェストリス、アビエス・シビリカ、ピヌス・シビリカ、アビエス・バルサメア、ツヤ・オッキデンタリス、ノーザン・ホワイトシダー、ピヌス・ケンブラ、プセウドツガ・メンジエシイ、ラリクス・デキデュア、ピケア・グラウカ、ピケア・マリアナ、ピケア・プンゲンス、アビエス・ペクチナタ、アビエス・ラシオカルパ、ピヌス・バンクシアナ、ピヌス・ニグラ、ピヌス・ピナステル、ピヌス・レシノサ、ラリクス・ラリキアナ、ラリクス・シビリカ、ツヤ・プリカタ、ファグス・シルウァティカ、ポプルス・アルバ、ポプルス・ニグラ、ポプルス・トレムラ、ポプルス・トレムルス、ツガ・ヘテロフィラ、ピヌス・コントルタ、ユニペルス・ウィルジニアナ及びこれらの混合物の中から、好ましくはアビエス・アルバ及び/又はピケア・アビエスから選択される、請求項1に記載の舌下用組成物。
【請求項３】
組成物の総質量に対して約10質量%から約50質量%の前記エキスを含む、請求項1又は2に記載の舌下用組成物。
【請求項４】
増粘剤、甘味剤、崩壊剤、分散化剤、滑沢剤及び/又は流動化剤を更に含む、請求項1から3のいずれか一項に記載の舌下用組成物。
【請求項５】
組成物の総質量に対して、
-  約10質量%から約50質量%、好ましくは約10質量%から約40質量%、より好ましくは約10質量%から約20質量%の前記エキス、
-  約40質量%から約90質量%、好ましくは約50質量%から約80質量%の微結晶セルロース、
-  約0.01質量%から約2質量%、好ましくは約0.50質量%から約1.50質量%の網目状のカルボキシメチルセルロースナトリウム、及び
-  約0.01質量%から約2質量%、好ましくは約0.50質量%から約1.50質量%のステアリン酸マグネシウム
を含む、請求項1から4のいずれか一項に記載の舌下用組成物。
【請求項６】
呼吸器のウェルネスのための少なくとも1種の有効成分及び/又は少なくとも1種のダイエタリーサプリメントを更に含む、請求項1から5のいずれか一項に記載の舌下用組成物。
【請求項７】
呼吸器のウェルネスのための少なくとも1種の有効成分が、アビエス属、アビエス・シビリカ、アセロラ、アキレア・ミレフォリウム、アリウム・ウルシヌム、アルタエア・オフィキナリス、アンドログラフィス・パニクラタ、アニス、リンゴ、アルテミシア・キナ、アルム・コロルコウィイ、アスペルラ・フミフサ、アストラガルス属、アヴェンカ、バルサム・ペルー、ビーベルステイニア・マルチフィダ、ビショップボーフウ、ブラックスプルース、ブラックシード、ブルーベリー、ボリジ、ブラジリアン・ペッパーツリー、バターバー、カメリア・シネンシス、カラピア、キャットニップ、キャラウェイ、シナモムム・ウェルム、シナモムム・ゼイラニクム、柑橘類、キトルス・パラディシ、キトルス・シネンシスカモミール、シャパラル、クロレラ、コレウス・フォルスコリイ、フキタンポポ、コパイバ、クルクマ・ロンガ、キンボポゴン・キトラトゥス、キコリウム・インチブス、タンポポ、タンジン、ドロセラ属、エキナケア属、エンバウバ、イングリッシュ・アイビー、ユーカリ、エウカリプトゥス・ラディアタ、エスピンヘイラ、イブニング・プリムローズ、フィリペンドゥラ・ウルマリア、モミ、フォルシチア、フクス・ウェシクロスス、ニンニク、ゲルセミウム、ゲニパ・アメリカナ、ゴツ・コラ、イチョウ、チョウセンニンジン、グレート・プランテイン、グリンデリア、グアコ、ミカニア・グロメラタ・スプレング、キマメ、サンザシ、ヘデラ・ヘリクス、セイヨウワサビ、ツクシ、インディアン・フランキンセンス、ジュアゼイロ、ユニペルス・セラウスカニカ、ユスティキア・パニクラタ、カランコエ、ケラ、キウイ、カラマツ、ラベンダー、ラウァンドゥラ属、ロベリア、マルピギア・グラブラ、メラレウカ・クィンクエネルウィア、マルウァ・ネグレクタ、オリガヌム・マイヨラナ、マルビウム・ウルガレ、モリンガ、ミルトス、ネトル、ニゲラ・サティウァ、オリガヌム・ウルガレ、パナクス・ジンセン、パウダルコ、ペラルゴニウム、メラレウカ、メンタ、メンタ・ピペリタ、オリガヌム・マイヨラナ、ペラルゴニウム・シドイデス、ペパーミント、シソ属、ピクロリザ、マツ、コショウ属、フィランサス・エンブリカ、プランタゴ・マイヨル、プランテイン、プレクトラントゥス・バルバトゥス、プリムラ・ウェリス、キラヤ、レッドクローバー、ローズマリー、ロスマリヌス、サルウィア・オフィキナリス、サマンバイア、スキサンドラ、シライティア・グロスウェノリイイ、ソイア・イソフラボニ、ソフォラ・ヤポニカ、ソレル、ダイズ、スピルリナ・プラテンシス、スイートオレンジ、シジギウム・アロマティクム、タラクサクム・オフィキナレ、テルミナリア・ケブラ、テルミナリア・ベレリカ、チムス・セルピルム、チムス・ウルガリス、トマト、ツシラゴ・ファルファラ、ヴァソウリーニャ、ウェルバスクム・タプスス、ウィブルヌム・ランタナ、ホワイト・ホアハウンド及びイエルバ・サンタからのエキスの中から選択され、並びに/又はα-リノレン酸、α-リポ酸、アラビノガラクタン、アルギニン、バルサムトルー、β-グルカン、ビフィズス菌、ビール酵母、ブロメライン、カフェイン、コリン、コエンザイムQ-10、コルディセプス、エイコサペンタエン酸(EPA)、ホルスコリン、���油、γ-アミノ酪酸(GABA)、グルタチオン、アオカビ、緑イ貝、イノシトール、乳酸菌、リノール酸、ルテイン、リコペン、マティコ、N-アセチルシステイン(NAC)、ピリドキシン、プロポリス、ピクノジェノール、ウズラの卵、ケルセチン、レスベラトロール、サフラン、セレン、セラペプターゼ、サメの肝臓、ウンカロアボ、ホエイプロテイン、ヨーグルト及びゼアキサンチンの中から選択される、請求項6に記載の舌下用組成物。
【請求項８】
少なくとも1種のダイエタリーサプリメントが、銅、カルシウム、マグネシウム、亜鉛、ビタミンA、ビタミンB1、ビタミンB2、ビタミンB3、ビタミンB5、ビタミンB6、ビタミンB8、ビタミンB9、ビタミンB12、ビタミンC、ビタミンD、ビタミンE、ビタミンK、鉄、ヨウ素、マンガン及びモリブデンの中から選択されるアスコルビン酸、ビタミン又はミネラルである、請求項6に記載の舌下用組成物。
【請求項９】
食品サプリメントとしての、請求項1から8のいずれか一項に記載の舌下用組成物の非治療的使用。
【請求項１０】
呼吸器のウェルネスを改善するための、請求項9に記載の非治療的使用。
【請求項１１】
スポーツ用食品サプリメントとしての、特に関節痛及び/若しくは筋肉痛及び痙攣を緩和するための、並びに/又は持久力を改善するための、請求項9に記載の非治療的使用。
【請求項１２】
性欲及び/又は生殖能力を改善するための、請求項9に記載の非治療的使用。
【請求項１３】
請求項1から8までのいずれか一項に記載の舌下用組成物と、前記組成物を、呼吸器のウェルネスのために、並びに/又は関節痛及び/若しくは筋肉痛及び痙攣及び/若しくは持久力及び/若しくは性欲及び/若しくは生殖能力のために使用すべきであるという情報を含む添付書類又は使用説明書とを含むキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、天然エキス及び前記エキスを含む組成物の分野に関する。特に、本発明は、食品サプリメントとしての、このような組成物の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
産業革命以降、我々が吸う空気は、非常に悪くなっており、強い酸化物質により著しく汚染されており、一般的に「大気汚染」と呼ばれる大気中のこの変化は、人類及び環境にとって恐ろしい結果、例えば世界中の多くの人々に影響を与える呼吸器の問題を引き起こす。さらなる環境要因が呼吸器の不調の一因となり、これには例えば、アレルゲン(例えば、チリダニ、ゴキブリ、動物の鱗屑及びかび)への曝露、タバコの煙への曝露、交通公害又は高いオゾン水準を原因とする低い空気品質、屋内の揮発性化合物(例えばホルムアルデヒド)への曝露、PVC中に存在するフタレートへの曝露及び高水準のエンドトキシンへの曝露、農作業、土木工学、鉱業セクター等の専門的な要因からの環境リスクがある。
【０００３】
この空気汚染がますます顕著になっていくことを考慮すると、呼吸器のウェルネスを改善するために、新規の物質及び新規の製剤を開発する必要がある。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】Rena及びTorresb(Brain Res. Reb.、2009、60(1)、57〜64頁)
【非特許文献２】Samad等(Nature、2001、410、471〜475頁)
【非特許文献３】Martin等(American Journal of Physiology、2006、291、1344〜1348頁)
【非特許文献４】Eggert-Kruse(Fertil Steril.、2007、87、810〜823頁)
【非特許文献５】Dousset等(Human Reproduction、1997、12、1476〜1479頁)
【非特許文献６】Burda及びOleszek:「Antioxidant and anti-radical activities of flavonoids」、J. Agric. Food Chem.、2001、49、2774〜2779頁
【非特許文献７】Re R.、Pellegrini N.、Proteggente A.、Pannala A.、Yang M.、Rice-Evans C.:「Antioxidant activity applying an improved ABTS radical cation decolorization assay」、Free Radical Biology & Medicine、1999、26(9)、1231〜1237頁
【非特許文献８】Ou B.、Hampsch-Woodill M.及びPrior R. L.:「Development and Validation of an Improved Oxygen Radical Absorbance Capacity Assay Using Fluorescein as the Fluorescent Probe」、J. Agric. Food Chem.、2001、49(10)、4619〜4626頁
【非特許文献９】www.ie-antioxydants.com
【非特許文献１０】Kuemmerle等(J Med Chem. 2012、55、7525〜7545頁)
【非特許文献１１】Glaser, K.、Sung, M.L., O'neill, K.、Belfast, M.、Hartman, D.、Carlson, R.、Kreft, A.、Kubrak, D.、Hsiao, C.L.及びWeichman, B.(1995)、Etodolac selectively human prostaglandin G/H synthase 2(PGHS-2) versus human PGHS-1、Eur.J.Pharmacol.、281:107〜111頁
【非特許文献１２】Pufahl, R.A.、Kasten, T.P.、Hills, R.、Gierse, J.K.、Reitz, B.A.、Weinberg, R.A.及びMasferrer, J.L.(2007)、Development of a fluorescence-based enzyme assay of human 5-lipoxygenase、Anal.Biochem.、364:204頁
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００５】
この文脈において、発明者等は、ポリフェノールに富み、且つ抗酸化特性及び/又は抗炎症特性を示す枝エキス部分、好ましくは樹脂質の木からの枝エキス部分を含む新規の組成物を発見した。より具体的には、発明者等は、驚くべきことに、舌下用組成物中に配合されたこのようなエキスが、抗炎症作用を維持しながら改善された抗酸化効果を有し、並びに呼吸器のウェルネスの改善、関節痛及び/若しくは筋肉痛及び痙攣の緩和、並びに/又は持久力の改善、並びに性欲及び/若しくは生殖能力の改善に適していることを証明した。
【０００６】
よって、本発明は、組成物の総質量に対して少なくとも約10質量%の枝エキス部分、好ましくは少なくとも1種の樹脂質の木からの枝エキス部分を含む舌下用組成物であって、前記枝エキス部分が、エキスの総質量に対して少なくとも約50質量%、好ましくは少なくとも70質量%、より好ましくは少なくとも90質量%のポリフェノール及び約10質量%未満のテルペンを含む、舌下用組成物に関する。
【０００７】
特に、枝エキス部分のポリフェノールは、エキスの総質量に対して、
-  約25質量%から約50質量%のヒドロキシマタイレシノール、
-  約5質量%から約15質量%のラリシレシノール、及び
-  約5質量%から約15質量%のセコイソラリシレシノール
を含む。
【０００８】
特定の実施形態において、舌下用組成物の枝エキス部分は、アビエス・アルバ(Abies alba)、ピケア・アビエス(Picea abies)、ベトゥラ・ペンドゥラ(Betula pendula)、ピヌス・シルウェストリス(Pinus sylvestris)、アビエス・シビリカ(Abies sibirica)、ピヌス・シビリカ(Pinus sibirica)、アビエス・バルサメア(Abies balsamea)、ツヤ・オッキデンタリス(Thuja occidentalis)、ノーザン・ホワイトシダー、ピヌス・ケンブラ(Pinus cembra)、プセウドツガ・メンジエシイ(Pseudotsuga menziesii)、ラリクス・デキデュア(Larix decidua)、ピケア・グラウカ(Picea glauca)、ピケア・マリアナ(Picea mariana)、ピケア・プンゲンス(Picea pingens)、アビエス・ペクチナタ(Abies pectinata)、アビエス・ラシオカルパ(Abies lasiocarpa)、ピヌス・バンクシアナ(Pinus banksiana)、ピヌス・ニグラ(Pinus nigra)、ピヌス・ピナステル(Pinus pinaster)、ピヌス・レシノサ(Pinus resinosa)、ラリクス・ラリキアナ(Larix lariciana)、ラリクス・シビリカ(Larix sibirica)、ツヤ・プリカタ(Thuja plicata)、ファグス・シルウァティカ(Fagus Sylvatica)、ポプルス・アルバ(Populus alba)、ポプルス・ニグラ(Populus nigra)、ポプルス・トレムラ(Populus tremula)、ポプルス・トレムルス(Populus tremulus)、ツガ・ヘテロフィラ(Tsuga hetewphylla)、ピヌス・コントルタ(Pinus contorta)、ユニペルス・ウィルジニアナ(Juniperus virginiana)及びこれらの混合物の中から選ばれる。好ましい実施形態において、樹脂質の木は、アビエス・アルバ及び/又はピケア・アビエスから選択される。
【０００９】
さらなる特定の実施形態において、前記エキスのポリフェノールは、ヒドロキシマタイレシノール、ラリシレシノール、セコイソラリシレシノール及びそれらの任意のエピマーから成る群より選択される。
【００１０】
好ましい実施形態において、本発明の舌下用組成物は、組成物の総質量に対して約10質量%から約50質量%の本明細書に開示されている枝エキス部分を含む。
【００１１】
特定の実施形態において、舌下用組成物は、増粘剤、甘味剤、崩壊剤、分散化剤、滑沢剤及び/又は流動化剤を更に含む。
【００１２】
より好ましい実施形態において、本発明の舌下用組成物は、組成物の総質量に対して、
-  約10質量%から約50質量%、好ましくは約10質量%から約40質量%、より好ましくは約10質量%から約20質量%の前記エキス、
-  約40質量%から約90質量%、好ましくは約50質量%から約80質量%の微結晶セルロース、
-  約0.01質量%から約2質量%、好ましくは約0.50質量%から約1.50質量%の網目状のカルボキシメチルセルロースナトリウム、及び
-  約0.01質量%から約2質量%、好ましくは約0.50質量%から約1.50質量%のステアリン酸マグネシウム
を含む。
【００１３】
さらなる特定の実施形態において、本明細書に記載の舌下用組成物は、呼吸器のウェルネスのための少なくとも1種の有効成分及び/又は少なくとも1種のダイエタリーサプリメントを更に含む。
【００１４】
好ましくは、呼吸器のウェルネスのための少なくとも1種の有効成分は、アビエス属(Abies)、アビエス・シビリカ(Abies siribica)、アセロラ、アキレア・ミレフォリウム(Achellea millefolium)、アリウム・ウルシヌム(Allium ursinum)、アルタエア・オフィキナリス(Althaea officinalis)、アンドログラフィス・パニクラタ(Andrographis paniculata)、アニス、リンゴ、アルテミシア・キナ(Artemisia cina)、アルム・コロルコウィイ(Arum korolkowii)、アスペルラ・フミフサ(Asperula humifusa)、アストラガルス属(Astragalus)、アヴェンカ(Avenca)、バルサム・ペルー(Aalsam peru)、ビーベルステイニア・マルチフィダ(Aiebersteinia multifidi)、ビショップボーフウ、ブラックスプルース、ブラックシード、ブルーベリー、ボリジ、ブラジリアン・ペッパーツリー、バターバー、カメリア・シネンシス(Camellia sinensis)、カラピア(カラピア)、キャットニップ、キャラウェイ、シナモムム・ウェルム(Cinnamomum verum)、シナモムム・ゼイラニクム(Cinnamomum zeylanicum)、柑橘類、キトルス・パラディシ(Citrus paradisi)、キトルス・シネンシスカモミール(Citrus sinenseschamomile)、シャパラル、クロレラ、コレウス・フォルスコリイ、フキタンポポ、コパイバ、クルクマ・ロンガ(Curcuma longa)、キンボポゴン・キトラトゥス(Cymbopognon citratus)、キコリウム・インチブス(Cychopelarrium intybus)、タンポポ、タンジン、ドロセラ属(Drosera)、エキナケア属(echinacea)、エンバウバ、イングリッシュ・アイビー(English ivy)、ユーカリ、エウカリプトゥス・ラディアタ(Cucapyptus radiate)、エスピンヘイラ(Espinheira)、イブニング・プリムローズ、フィリペンドゥラ・ウルマリア(Filipendula ulmaria)、モミ、フォルシチア(forsythia)、フクス・ウェシクロスス(Fucus vesiculosus)、ニンニク、ゲルセミウム、ゲニパ・アメリカナ(Genipa americana)、ゴツ・コラ(Gotu kola)、イチョウ、チョウセンニンジン、グレート・プランテイン(great plantain)、グリンデリア(grindelia)、グアコ(Guaco)、ミカニア・グロメラタ・スプレング(mikania glomerata spreng)、キマメ、サンザシ、ヘデラ・ヘリクス(Hedera helix)、セイヨウワサビ、ツクシ、インディアン・フランキンセンス、ジュアゼイロ、ユニペルス・セラウスカニカ(Juniperus seravschanica)、ユティキア・パニクラタ(Justicia paniculata)、カランコエ(kalanchoe)、ケラ(khella)、キウイ、カラマツ、ラベンダー、ラウァンドゥラ属(lavandula)、ロベリア(lobelia)、マルピギア・グラブラ(Malpighia glabra)、メラレウカ・クィンクエネルウィア(Melaleuca quinquenervia)、マルウァ・ネグレクタ(Malva neglecta)、オリガヌム・マイヨラナ(Origanum majorana)、マルビウム・ウルガレ(Marrubium vulgare)、モリンガ(moringa)、ミルトス(myrtus)、ネトル、ニゲラ・サティウァ(Nigella sativa)、オリガヌム・ウルガレ(Origanum vulgare)、パナクス・ジンセン(Panaxginseng)、パウダルコ、ペラルゴニウム(Pelargonium)、メラレウカ(melaleuca)、メンタ(mentha)、メンタ・ピペリタ(Mentha piperita)、オリガヌム・マイヨラナ、ペラルゴニウム・シドイデス(Pelargonium sidoides)、ペパーミント、シソ属(Perilla)、ピクロリザ(picrorhiza)、マツ、コショウ属、フィランサス・エンブリカ(Phyllanthus emblica)、プランタゴ・マイヨル(Plantago major)、プランテイン、プレクトラントゥス・バルバトゥス(Plectranthus barbatus)、プリムラ・ウェリス(Primula veris)、キラヤ(quillaja)、レッドクローバー、ローズマリー、ロスマリヌス(rosmarinus)、サルウィア・オフィキナ��ス(Salvia officinalis)、サマンバイア、スキサンドラ(schisandra)、シライティア・グロスウェノリイイ(Siraitia grosvenorii)、ソイア・イソフラボニ(Soia isoflavoni)、ソフォラ・ヤャポニカ(Sophora japonica)、ソレル、ダイズ、スピルリナ・プラテンシス(Spirulina platensis)、スイートオレンジ、シジギウム・アロマティクム(Syzygium aromaticum)、タラクサクム・オフィキナレ(Taraxacum officinale)、テルミナリア・ケブラ(Terminalia chebula)、テルミナリア・ベレリカ(Terminalia belerica)、チムス・セルピルム(Thymus serpyllum)、チムス・ウルガリス(Thymus vulgaris)、トマト、ツシラゴ・ファルファラ(Tussilago farfara)、ヴァソウリーニャ、ウェバスクム・タプスス(Verbascum thapsus)、ウィブルヌム・ランタナ(Viburnum lantana)、ホワイト・ホアハウンド及びイエルバ・サンタ(Yerba santa)からのエキスの中から選択され、並びに/又はα-リノレン酸、α-リポ酸、アラビノガラクタン、アルギニン、バルサムトルー、β-グルカン、ビフィズス菌、ビール酵母、ブロメライン、カフェイン、コリン、コエンザイムQ-10、コルディセプス(cordyceps)、エイコサペンタエン酸(EPA)、ホルスコリン、魚油、γ-アミノ酪酸(GABA)、グルタチオン、アオカビ、緑イ貝、イノシトール、乳酸菌、リノール酸、ルテイン、リコペン、マティコ、N-アセチルシステイン(NAC)、ピリドキシン、プロポリス、ピクノジェノール、ウズラの卵、ケルセチン、レスベラトロール、サフラン、セレン、セラペプターゼ、サメの肝臓、ウンカロアボ、ホエイプロテイン、ヨーグルト及びゼアキサンチンの中から選択される。
【００１５】
好ましくは、少なくとも1種のダイエタリーサプリメントは、銅、カルシウム、マグネシウム、亜鉛、ビタミンA、ビタミンB1、ビタミンB2、ビタミンB3、ビタミンB5、ビタミンB6、ビタミンB8、ビタミンB9、ビタミンB12、ビタミンC、ビタミンD、ビタミンE、ビタミンK、鉄、ヨウ素、マンガン及びモリブデンの中から選択されるアスコルビン酸、ビタミン又はミネラルである。
【００１６】
本発明の別の対象は、食品サプリメントとしての、好ましくは呼吸器のウェルネスを改善するための、並びに/又は性欲及び/若しくは生殖能力を改善するための、本明細書に記載の舌下用組成物の非治療的使用である。本発明のさらなる対象は、食品サプリメントとしての、好ましくはスポーツ用食品サプリメントとしての、特に関節痛及び/若しくは筋肉痛及び痙攣を緩和するための、並びに/又は持久力を改善するための、本明細書に記載の舌下用組成物の非治療的使用である。
【００１７】
また、本発明は、本明細書に記載の舌下用組成物(例えば食品サプリメント組成物)と、前記組成物を呼吸器のウェルネスのために、並びに/又は関節痛及び/若しくは筋肉痛及び痙攣及び/若しくは持久力及び/若しくは性欲及び/若しくは生殖能力のために使用すべきであるという情報を含む添付文書又は使用説明書とを含むキットに関する。
【００１８】
発明の詳細な説明
発明者等は、ポリフェノールに富む枝エキス部分、好ましくは樹脂質の木からの枝エキス部分を含む新規の舌下用組成物を発見し、幾つかの方法により、このようなエキスが、参照抗酸化化合物、例えばピクノジェノール、α-トコフェロール(ビタミンE)及びトロロックス(ビタミンE等)に比べて、またその主な代謝物質、例えばエンテロラクトン及びエンテロジオールにも比べて改善された抗酸化活性及び抗ラジカル活性を示すことを証明した。本発明の枝エキス部分は、アラキドン酸5-リポキシゲナーゼ(5-リポキシゲナーゼ又は5-LOX又は5-LO)及びプロスタグランジン-エンドペルオキシドシンターゼ2(シクロオキシゲナーゼ-2又はCOX-2)に対する前記エキスの阻害作用により、且つインターロイキン-1β(IL-1β)、腫瘍壊死因子-α(TNF-α)、5-リポキシゲナーゼ及びプロスタグランジン-エンドペルオキシドシンターゼ2に対するヒドロキシマタイレシノール(HMR)の阻害作用により説明される抗炎症特性を更に示す。
【００１９】
本発明は、本明細書に開示されているように、エキスの総質量に対して少なくとも約50質量%、好ましくは少なくとも70質量%、より好ましくは少なくとも90質量%のポリフェノール、及び約10質量%未満のテルペンを含む枝エキス部分、好ましくは少なくとも1種の樹脂質の木からの枝エキス部分を含む舌下用組成物に関する。
【００２０】
枝エキス部分
一般的に、本発明のエキスは、以下の工程を含む標準的な抽出方法により、樹脂質の木の枝部分から得られる:(a)抽出、(b)液体/固体の分離(濾過)、(c)濃縮及び(d)乾燥。好ましくは、枝エキス部分は乾燥エキスである。
【００２１】
特定の実施形態において、本発明の舌下用組成物の枝エキス部分は、アビエス・アルバ、ピケア・アビエス、ベトゥラ・ペンドゥラ、ピヌス・シルウェストリス、アビエス・シビリカ、ピヌス・シビリカ、アビエス・バルサメア、ツヤ・オッキデンタリス、ノーザン・ホワイトシダー、ピヌス・ケンブラ、プセウドツガ・メンジエシイ、ラリクス・デキデュア、ピケア・グラウカ、ピケア・マリアナ、ピケア・プンゲンス、アビエス・ペクチナタ、アビエス・ラシオカルパ、ピヌス・バンクシアナ、ピヌス・ニグラ、ピヌス・ピナステル、ピヌス・レシノサ、ラリクス・ラリキアナ、ラリクス・シビリカ、ツヤ・プリカタ、ファグス・シルウァティカ、ポプルス・アルバ、ポプルス・ニグラ、ポプルス・トレムラ、ポプルス・トレムルス、ツガ・ヘテロフィラ、ピヌス・コントルタ、ユニペルス・ウィルジニアナ及びこれらの混合物の中から選択される。
【００２２】
好ましい実施形態において、枝エキス部分は、少なくとも1種の樹脂質の木からの枝エキス部分であり、好ましくは、アビエス・アルバ、ピケア・アビエス、ピヌス・シルウェストリス、アビエス・シビリカ、ピヌス・シビリカ、アビエス・バルサメア、ツヤ・オッキデンタリス、ノーザン・ホワイトシダー、ピヌス・ケンブラ、プセウドツガ・メンジエシイ、ラリクス・デキデュア、ピケア・グラウカ、ピケア・マリアナ、ピケア・プンゲンス、アビエス・ペクチナタ、アビエス・ラシオカルパ、ピヌス・バンクシアナ、ピヌス・ニグラ、ピヌス・ピナステル、ピヌス・レシノサ、ラリクス・ラリキアナ、ラリクス・シビリカ、ツヤ・プリカタ、ツガ・ヘテロフィラ、ピヌス・コントルタ、ユニペルス・ウィルジニアナ及びこれらの混合物の中から選択される。より好ましくは、枝エキス部分は、アビエス・アルバ及び/又はピケア・アビエスからの枝部分である。
【００２３】
本明細書で使用されているように、「枝部分」とは、幹を除く木の部分を含む。枝部分は、例えば、葉、小枝、樹皮、茎、芽及び節を含む。特定の実施形態において、＜＜枝部分＞＞は節を除外する。さらなる特定の実施形態において、「枝部分」は、葉、小枝、樹皮、茎及び芽を含み、特に節を含まない。
【００２４】
本発明の舌下用組成物の枝エキス部分は、エキスの総質量に対して少なくとも約50質量%、約60質量%、約70質量%、好ましくは約80質量%、より好ましくは少なくとも約90質量%のポリフェノール、及び約10質量%未満、約8質量%未満、約6質量%未満、好ましくは約5質量%未満のテルペンを含む。
【００２５】
ポリフェノールは、多数のフェノール構造単位が存在することを特徴とする化学物質の構造分類である。ポリフェノールは、植物中にある場合は、「リグナン」とも呼ばれ得る。樹脂質の木の中にあるポリフェノール又はリグナンの例として、以下のものを挙げることができる:
-  以下の式:
【００２６】
【化１】
2019512234.tif 000002
【００２７】
を有するヒドロキシマタイレシノール(HMR)、
-  以下の式:
【００２８】
【化２】
2019512234.tif 000003
【００２９】
を有するラリシレシノール、
-  以下の式:
【００３０】
【化３】
2019512234.tif 000004
【００３１】
を有するセコイソラリシレシノール、及び
-  以下の式:
【００３２】
【化４】
2019512234.tif 000005
【００３３】
を有するリオビル。
【００３４】
テルペンは、有機化合物における総称的な分類であり、様々な植物、特に樹脂質の木により生成される。テルペンは、分子式C5H8を有するイソプレン単位から生合成的に誘導され、以下の式:
【００３５】
【化５】
2019512234.tif 000006
【００３６】
により表される。
【００３７】
樹脂質の木の中にある主なテルペンとしては、o-グアヤコール(Guaicol)、テルピン-水和物、バニリン、2,5-ジメチルベンゼンブタン酸、コニフェリルアルコール、トゥメロン、ジュバビオン、デヒドロジュバビオン、マノオール及びユーカリプトール(1,8-シネオール)を挙げることができる。
【００３８】
改善された抗酸化作用を有する本発明の舌下用組成物の枝エキス部分は、テルペンに比べてポリフェノールに富み、特に、エキスの総質量に対して約10質量%未満のテルペンを含む。
【００３９】
本明細書で使用されているように、「約」という用語は、当業者により理解され、それが使用される文脈に応じてある程度変わる。当業者にとって明瞭ではない用語が使用されている場合、その用語が使用されている文脈を考慮して、「約」は、特定の用語のプラス又はマイナス10%、好ましくは5%までを意味する。
【００４０】
好ましくは、本発明の枝エキス部分のポリフェノールは、ヒドロキシマタイレシノール(HMR)、ラリシレシノール、セコイソラリシレシノール及びそれらの任意のエピマーから成る群より選択される。
【００４１】
本明細書で使用されているように、「エピマー」という用語は、1カ所の立体中心のみ構成が異なるジアステレオ異性体を指す。「ジアステレオ異性体」という用語は、重ね合わせることができない互いに非鏡像の立体異性体の分類である。例えば、「ヒドロキシマタイレシノールのエピマー」とは、以下の式:
【００４２】
【化６】
2019512234.tif 000007
【００４３】
に図示されているように、ジアステレオ異性体7S、8R、8'R及び7R、8R、8'Rを指す。
【００４４】
好ましい実施形態において、本発明の枝エキス部分は、エキスの総質量に対して、
-  約25質量%から約50質量%のヒドロキシマタイレシノール、
-  約5質量%から約15質量%のラリシレシノール、及び
-  約5質量%から約15質量%のセコイソラリシレシノール
を含む。
【００４５】
本発明の舌下用組成物の枝エキス部分は、樹脂質の木の中に少量あるその他の化合物、例えば先に言及したテルペン、一般的にユーカリプトール(1,8-シネオール)を更に含むことができる。しかしながら、ユーカリプトールはその毒性が知られているため、エキスの総質量に対して少量、好ましくは約10質量%未満、より好ましくは約2質量%未満、更により好ましくは約1質量%未満で存在することが好ましい。
【００４６】
好ましい実施形態において、枝エキス部分は、エキスの総質量に対して1質量%未満のユーカリプトールを含む。
【００４７】
例により示されるように、ポリフェノールに富む、すなわち少なくとも約90質量%のポリフェノールを含む本発明の舌下用組成物の枝エキス部分は、その抗炎症活性に加えて、改善された抗酸化活性を有し、よって、呼吸器のウェルネスの用途に適している。このような枝エキス部分は、抗酸化活性が改善されているために、スポーツの練習、例えばジョギング及びランニングにも適しており、関節痛の緩和若しくは防止を可能にし、並びに/又は持久力を改善する。
【００４８】
舌下用組成物
本発明は、本明細書に規定の枝エキス部分を含む舌下用組成物に関する。特に、本発明の組成物は、希釈剤及び/又は担体を含む任意の賦形剤を更に含むことができる。このような賦形剤は、動物、好ましくはヒトに投与された場合に、不利なアレルギー性又はその他の不都合な反応を起こさない。ヒトへの投与の場合、組成物は、例えばFDA(米国食品医薬品局:Food and Drug Administration)の生物製剤局(Office of Biologics)の基準により求められる、無菌性、発熱作用、一般的な安全性及び純度の基準に即するものとする。
【００４９】
本発明の文脈において、組成物は舌下投与に適している。このような投与に適合した形態の例は、錠剤、カプセル、丸剤、粉末、顆粒、軟膏、ペースト、クリーム、スプレー、ゲル、リポソームの形態、パッチ、例えば経皮パッチ又は粘膜付着性パッチを含むが、これらに制限されることはない。
【００５０】
本発明の組成物は、舌下経路で投与され、これにより、例えば消化管によるエキスのポリフェノールの代謝が回避され、効率的且つ最適な抗酸化作用を維持することができる。本願の例により示されるように、本発明の枝エキス部分は、その主な代謝物質、すなわちエンテロジオール及びエンテロラクトンに比べてより大きな抗酸化作用及び抗ラジカル作用を有する。この舌下投与により、枝エキス部分のポリフェノールは、消化管で代謝されず、抗炎症活性を有しつつ、改善された抗酸化活性又は抗ラジカル活性を示す。
【００５１】
舌下投与に適した賦形剤である希釈剤及び/又は担体の例は、限定されることなく、水、リン酸緩衝生理食塩水(PBS)、嫌気性リン酸緩衝生理食塩水、重炭酸ナトリウム、着色剤、増粘剤、甘味剤、コーティング剤、希釈剤、結合剤、崩壊剤、分散化剤、滑沢剤、流動化剤等を含む。
【００５２】
着色剤は、例えば、二酸化チタン(E171)、二酸化鉄(E172)及びブリリアントブラックBN(E151)を含む。増粘剤は、限定されることなく、例えば、モノステアリン酸グリセロール及びデンプン、例えば、トウモロコシデンプン(corn starch)、トウモロコシデンプン(maize starch)、ジャガイモデンプン及びコメデンプンを含む。甘味剤は、限定されることなく、例えば、アスパルテーム、アガベシロップ、ステビアエキス、マンニトール、ソルビトール、キシリトール、ラクチトール、エリトリトール、イソマルト、マルチトール、サッカリン、スクラロース、スクロース、フルクトース、ネオテーム、アセスルファムカリウム、アドバンテーム、チクロを含む。コーティング剤は、限定されることなく、例えば、精製されたナタネ油、ダイズ油、落花生油、ダイズレシチン及びフィッシュゼラチンを含む。希釈剤は、限定されることなく、例えば、ラクトース、ラクトース一水和物及びデンプンを含む。結合剤は、限定されることなく、例えば、ポビドン、アルファー化デンプン、ゴム、サッカロース、ポリエチレングリコール(PEG)4000及びPEG6000を含む。崩壊剤は、限定されることなく、例えば、微結晶セルロース、カルボキシメチルデンプンナトリウム、例えばカルボキシメチルデンプンナトリウム タイプA及び網目状のカルボキシメチルセルロースナトリウムを含む。分散化剤は、限定されることなく、例えば、ジステアリン酸ポリオキシエチレングリコールを含む。滑沢剤は、限定されることなく、例えば、ステアリン酸マグネシウム及び滑石を含む。流動化剤は、限定されることなく、例えば、コロイド状無水シリカ及びコロイド状二酸化ケイ素含む。
【００５３】
特に、本発明の舌下用組成物は、増粘剤、甘味剤、崩壊剤、分散化剤、滑沢剤及び/又は流動化剤を更に含む。
【００５４】
好ましい実施形態において、増粘剤はトウモロコシデンプンである。
【００５５】
さらなる好ましい実施形態において、甘味剤はフルクトースである。
【００５６】
さらなる好ましい実施形態において、崩壊剤は微結晶セルロース及び/又は網目状のカルボキシメチルセルロースナトリウムである。
【００５７】
さらなる好ましい実施形態において、滑沢剤は、ステアリン酸マグネシウム及び/又は滑石、より好ましくはステアリン酸マグネシウムである。
【００５８】
さらなる好ましい実施形態において、分散化剤はジステアリン酸ポリオキシエチレングリコールである。
【００５９】
特定の実施形態において、本発明の組成物は、組成物の総質量に対して少なくとも約10質量%、好ましくは約10質量%から50質量%、より好ましくは約10質量%から約40質量%、更により好ましくは約10質量%から約35質量%の本願に規定の枝エキス部分を含む。
【００６０】
本発明の好ましい組成物は、組成物の総質量に対して、
-  約10質量%から約50質量%、好ましくは約10質量%から約40質量%、より好ましくは約10質量%から約35質量%の先に規定の枝エキス部分、
-  約40質量%から約90質量%、好ましくは約50質量%から約80質量%、より好ましくは約60質量%から約70質量%の微結晶セルロース、
-  約0.01質量%から約5質量%、好ましくは約0.50質量%から約2質量%、より好ましくは約0.50質量%から約1.50質量%、更により好ましくは約0.80質量%から約1.30質量%の網目状のカルボキシメチルセルロースナトリウム、及び
-  約0.01質量%から約5質量%、好ましくは約0.50質量%から約2質量%、より好ましくは約0.60質量%から約1.80質量%のステアリン酸マグネシウム
を含む。
【００６１】
本発明のより好ましい組成物は、
-  50〜150mgの本明細書に規定の枝エキス部分、
-  200〜250mg、好ましくは約230mgの微結晶セルロース、
-  1〜10mg、好ましくは約4mgの網目状のカルボキシメチルセルロースナトリウム、
-  30〜70mg、好ましくは約50mgのジステアリン酸ポリオキシエチレングリコール、
-  1〜10mg、好ましくは約3mgのステアリン酸マグネシウム、及び
-  1〜10mg、好ましくは約3mgの滑石
を含む。
【００６２】
本発明の更に好ましい組成物は、
-  30〜100mg、好ましくは40〜60mg、より好ましくは約50mgの本明細書に規定の枝エキス部分、
-  150〜200mg、好ましくは約165mgの微結晶セルロース、
-  1〜10mg、好ましくは約3mgの網目状のカルボキシメチルセルロースナトリウム、
-  30〜70mg、好ましくは約50mgのジステアリン酸ポリオキシエチレングリコール、
-  1〜10mg、好ましくは約4mgのステアリン酸マグネシウム、
-  1〜5mg、好ましくは約3mgのコロイド状二酸化ケイ素、
-  10〜50mg、好ましくは約20mgのフルクトース、及び
-  5〜30mg、好ましくは約10〜20mg、より好ましくは約17mgのトウモロコシデンプン
を含む。
【００６３】
本発明の舌下用組成物は、図5に図示されているように、先に規定の成分を混合し、引き続き、直接圧縮による錠剤化工程によって調製される。
【００６４】
用途
本明細書に開示されている枝エキス部分の改善された抗酸化活性及び抗炎症活性により、前記エキスを含む舌下用組成物は、食品サプリメントとして使用可能である。
【００６５】
さらなる特定の実施形態において、本発明の舌下用組成物は、少なくとも1種のダイエタリーサプリメント又は食品サプリメントを更に含む。
【００６６】
本明細書で使用されているように、「食品サプリメント」又は「ダイエタリーサプリメント」は、他のやり方では十分な量で消費できない栄養素を供給することを意図している。FDAによると、食品サプリメントは、医薬品ではない製品であり、1994年のダイエタリーサプリメント健康教育法(Dietary Supplement Health and Education Act)に規定された基準に即する必要がある。一般的に、食品サプリメントは、経口投与及び/又は舌下投与により投与される。食品サプリメントは、限定されることなく、例えば、ビタミン、ミネラル、脂肪酸、アミノ酸、生薬等を含む。
【００６７】
さらなる特定の実施形態において、本発明の舌下用組成物は、少なくとも1種のダイエタリーサプリメント、例えば、ミネラル、ビタミン及びアスコルビン酸を更に含む。
【００６８】
好ましい実施形態において、少なくとも1種のダイエタリーサプリメントは、銅、カルシウム、マグネシウム、亜鉛、ビタミンA、ビタミンB1、ビタミンB2、ビタミンB3、ビタミンB5、ビタミンB6、ビタミンB8、ビタミンB9、ビタミンB12、ビタミンC、ビタミンD、ビタミンE、ビタミンK、鉄、ヨウ素、マンガン、モリブデン及びアスコルビン酸の中から選択される。
【００６９】
第一の用途は、好ましくは食品サプリメントとしての、呼吸器のウェルネスを改善するための、本発明の舌下用組成物の非治療的使用である。
【００７０】
本明細書で使用されているように、「呼吸器のウェルネス」という表現は、最適な肺機能を促進すること及び肺系の機能の変質を防止することも意味する。
【００７１】
よって、本発明は、呼吸器のウェルネスを改善するための本発明の舌下用組成物の使用、好ましくはその非治療的使用に関する。実際に、この文脈において、治療すべき対象は健康であり、すなわち、いかなる呼吸器又は肺の病気、例えば、ぜんそく、COPD(慢性閉塞性肺疾患)、慢性気管支炎、気腫、肺炎、肺がんを有しない。
【００７２】
本発明は更に、対象、好ましくはヒトにおける呼吸器のウェルネスを改善するための方法に関し、この方法は、舌下経路で前記対象に有効量の本明細書に記載の舌下用組成物を投与することを含む。
【００７３】
本明細書で使用されているように、「有効量」という表現は、対象における呼吸器のウェルネスを改善する十分な抗炎症活性及び抗酸化活性を得るための最低限度量の本発明の組成物を意味する。より具体的には、本発明の枝エキス部分又は組成物の有効量は、体重1kgあたり約1ngから約10gの範囲にある。好ましくは、本発明の枝エキス部分又は組成物の有効量は、体重1kgあたり、約10ngから約1g、より好ましくは約100ngから約100mg、更により好ましくは約500ngから約50mgの範囲にある。
【００７４】
また、本発明は、呼吸器のウェルネスを改善するための本発明の舌下用組成物を製造するための、本明細書に規定の枝エキス部分の使用に関する。
【００７５】
本発明は更に、呼吸器のウェルネスを改善するために使用する本発明の舌下用組成物に関し得る。この文脈において、治療すべき対象は、呼吸器又は肺の病気を有するか、又はこれらを発症し易い。
【００７６】
特定の実施形態において、本発明の舌下用組成物は、呼吸器のウェルネスに対する少なくとも1種の有効成分を更に含む。より具体的には、呼吸器のウェルネスに対する有効成分は、植物、例えば、アビエス属、アビエス・シビリカ、アセロラ、アキレア・ミレフォリウム、アリウム・ウルシヌム、アルタエア・オフィキナリス、アンドログラフィス・パニクラタ、アニス、リンゴ、アルテミシア・キナ、アルム・コロルコウィイ、アスペルラ・フミフサ、アストラガルス属、アヴェンカ、バルサム・ペルー、ビーベルステイニア・マルチフィダ、ビショップボーフウ、ブラックスプルース、ブラックシード、ブルーベリー、ボリジ、ブラジリアン・ペッパーツリー、バターバー、カメリア・シネンシス、カラピア、キャットニップ、キャラウェイ、シナモムム・ウェルム、シナモムム・ゼイラニクム、柑橘類、キトルス・パラディシ、キトルス・シネンシスカモミール、シャパラル、クロレラ、コレウス・フォルスコリイ、フキタンポポ、コパイバ、クルクマ・ロンガ、キンボポゴン・キトラトゥス、キコリウム・インチブス、タンポポ、タンジン、ドロセラ属、エキナケア属、エンバウバ、イングリッシュ・アイビー、ユーカリ、エウカリプトゥス・ラディアタ、エスピンヘイラ、イブニング・プリムローズ、フィリペンドゥラ・ウルマリア、モミ、フォルシチア、フクス・ウェシクロスス、ニンニク、ゲルセミウム、ゲニパ・アメリカナ、ゴツ・コラ、イチョウ、チョウセンニンジン、グレート・プランテイン、グリンデリア、グアコ、ミカニア・グロメラタ・スプレング、キマメ、サンザシ、ヘデラ・ヘリクス、セイヨウワサビ、ツクシ、インディアン・フランキンセンス、ジュアゼイロ、ユニペルス・セラウスカニカ、ユスティキア・パニクラタ、カランコエ、ケラ、キウイ、カラマツ、ラベンダー、ラウァンドゥラ属、ロベリア、マルピギア・グラブラ、メラレウカ・クィンクエネルウィア、マルウァ・ネグレクタ、オリガヌム・マイヨラナ、マルビウム・ウルガレ、モリンガ、ミルトス、ネトル、ニゲラ・サティウァ、オリガヌム・ウルガレ、パナクス・ジンセン、パウダルコ、ペラルゴニウム、メラレウカ、メンタ、メンタ・ピペリタ、オリガヌム・マイヨラナ、ペラルゴニウム・シドイデス、ペパーミント、シソ属、ピクロリザ、マツ、コショウ属、フィランサス・エンブリカ、プランタゴ・マイヨル、プランテイン、プレクトラントゥス・バルバトゥス、プリムラ・ウェリス、キラヤ、レッドクローバー、ローズマリー、ロスマリヌス、サルウィィア・オフィキナリス、サマンバイア、スキサンドラ、シライティア・グロスウェノリイイ、ソイア・イソフラボニ、ソフォラ・ヤポニカ、ソレル、ダイズ、スピルリナ・プラテンシス、スイートオレンジ、シジギウム・アロマティクム、タラクサクム・オフィキナレ、テルミナリア・チェブラ、テルミナリア・ベレリカ、チムス・セルピルム、チムス・ウルガリス、トマト、ツシラゴ・ファルファラ、ヴァソウリーニャ、ウェルバスクム・タプスス、ウィブルヌム・ランタナ、ホワイト・ホアハウンド及びイエルバ・サンタのエキスの中から選択される。
【００７７】
呼吸器のウェルネスに対する有効成分は、α-リノレン酸、α-リポ酸、アラビノガラクタン、アルギニン、バルサムトルー、β-グルカン、ビフィズス菌、ビール酵母、ブロメライン、カフェイン、コリン、コエンザイムQ-10、コルディセプス、エイコサペンタエン酸(EPA)、ホルスコリン、魚油、γ-アミノ酪酸(GABA)、グルタチオン、アオカビ、緑イ貝、イノシトール、乳酸菌、リノール酸、ルテイン、リコペン、マティコ、N-アセチルシステイン(NAC)、ピリドキシン、プロポリス、ピクノジェノール、ウズラの卵、ケルセチン、レスベラトロール、サフラン、セレン、セラペプターゼ、サメの肝臓、ウンカロアボ、ホエイプロテイン、ヨーグルト及びゼアキサンチンの中からも選択可能である。
【００７８】
好ましい実施形態において、本発明の舌下用組成物は、呼吸器のウェルネスに対する少なくとも1種の有効成分及び少なくとも1種のダイエタリーサプリメントを含む。
【００７９】
第二の用途は、好ましくは食品サプリメントとしての、より好ましくはスポーツ用食品サプリメントとしての、本発明の舌下用組成物の非治療的使用である。より具体的には、スポーツ用食品サプリメントとは、痛み、特に関節痛及び/若しくは筋肉痛を緩和及び/若しくは防止するための、痙攣を防止するための、並びに/又は持久力を改善するための、並びに/又はドーピング挙動を防止するためのものである。
【００８０】
身体の運動には、栄養素の酸化を著しく高めて必要エネルギーを満たすことが伴う。多くの生理系及び複数の生化学的な相互作用が運動の間に働く。しかしながら、最も重要な相互作用、及びパフォーマンスを制限する相互作用は、心肺系と骨格筋の間にある。実際に、その他の箇所と比較すると、酸素消費が10倍又は20倍増えている。
【００８１】
持久力は、長期の激しい労力を維持する能力と定義することができる。持久力がスポーツ選手に不可欠であることは明らかである。持久力なしでは、能力が制限されてしまう。持久力の改善は、スポーツ選手、更にはアマチュア選手の主な目的の1つである。実際に、スポーツとは、技術、力及び持久力に関連する全てが一体となったものである。持久力を改善することにより、労力をより長く維持することができるだけでなく、スポーツ活動における快適さ及び楽しさも増やすことができる。良好な持久力により、サイクリストは峠の登りを楽しむことができ、長距離ランナーは、数時間にわたり走ることができる。競争において、持久力は、類似したスキルのスポーツ選手の間で違いを生み出す。非常に大きな疲労に耐えるアスリートは、競技の終盤でより上手く対処するであろうし、より勝利を掴み易い。また、持久力を鍛えることは、健康にとっても特定の利益がある。身体の運動は、定期的に行われると、動脈の詰まり(よって、心血管疾患)に関与する3つの要因である、高血圧、糖分過剰及び脂肪から守る働きをする。更に、運動は、その他の病気、例えば骨粗しょう症、2型糖尿病及び幾つかのガンとの闘いを手助けする。また、スポーツが免疫システムを強化し、心臓容積(よって、その効率)を増加させ、呼吸器の機能を力付けることが知られている。最終的に、運動により、筋肉量が維持され、筋萎縮が回避される。
【００８２】
競技と同様に、トレーニングにおいても、持久力の必要なスポーツの選手は、エネルギー損失及びフリーラジカルの生成に直面しており、これにより、パフォーマンスが低下し、回復が衰え、且つ痙攣又は疲労が引き起こされ得る。一般的に、このフリーラジカルの生成は、抗酸化防御の向上に伴って起こるが、酸化ストレスが適応能力を超えることがある。よって、抗酸化剤で体を補助してパフォーマンスを改善することは理にかなっている。また、Rena及びTorresb(Brain Res. Reb.、2009、60(1)、57〜64頁)は、痛み及び炎症の間のIL-1βの働きを示し、且つIL-1βの遮断が関節痛を緩和するための戦略的アプローチになり得ることを提示した。更に、Samad等(Nature、2001、410、471〜475頁)は、IL-1βを阻害することにより、中枢で生じた炎症性痛覚過敏が低減されることを証明し、またMartin等(American Journal of Physiology、2006、291、1344〜1348頁)は、脳の増加したIL-1βが、筋損傷を起こす運動後の疲労において重大な働きをすることを提示した。
【００８３】
特定の実施形態において、本発明の舌下用組成物は、少なくとも1種の有効成分、例えばスポーツ用食品サプリメントとして有用な有効成分を更に含む。より具体的には、有効成分は、ビタミンB1、ビタミンB2、ビタミンB3、ビタミンB5、ビタミンB6、ビタミンB8、ビタミンB9、ビタミンB12、ビタミンC、ビタミンD、ビタミンD3、ビタミンE、ビタミンH、ビタミンK、ビタミンPP、ブロメライン、カルニチン、カゼインプロテイン、重酒石酸コリン、コンドロイチン、銅、クレアチン、クロム、ジメチルグリシン(DMG)、グルコサミン、イデベノン、鉄、ヨウ素、イソロイシン、L-グリシン、ロイシン、マグネシウム、マルトデキストリン、マンガン、オルニチン、Q10、セレン、スピルリン(spiruline)、タウリン、バニリン、ホエイプロテイン、亜鉛、アリウム・サチウム(Allium sativum)、アルニカ、アーティチョーク、アルスロスピラ、アストラガルス属(アストラガルス・メンブラナケウス(Astragalus membranaceus)、バナナ、ビール酵母、β-カロテン、カバノキ属、ブルーベリー、カフェイン、ケンテラ・アジアチカ(Centella asiatica)、キンコナ・オフィキナリス(Cinchona officinalis)、クロレラ、コルディセプス、コルディセプス・シネンシス(Cordyceps sinensis)、シノルホドン、エキナケア・プルプレア(Echinacea purpurea)、エキナケア・アングティフォリア(Echinacea angutifolia)、エキナケア・パリダ(Echinacea pallid)、エレウテロコックス(eleutherococcus)、フマリア(fumaria)、フラクシヌス(fraxinus)、ハルパゴフィツム(harpagophytum)、ハルパゴフィツム・プロクムベンス(harpagophytum procumbens)、ヒッポファエ・ラムノイデス(Hippophae rhamnoides)、ヒドロコチレ・アジアチカ(Hycdrocotyle asiatica)、ショウガ、ギンコ・ビロバ(Ginko biloba)、チョウセンニンジン、ゴジベリー、緑茶、ガラナ(パウリニア・クパナ(Paullinia cupana))、ナツメ、レピジウム・メイエニイ(Lepidium meyenii)、リコペン、マルピギア・グラブラ、ネトル、オリーブ葉、オルトシフォン(orthosiphon)、パナクス・ジンセン、フェニックス・ダクティリフェラ(Phoenix dactylifera)、花粉、ロディオラ・ロゼア(Rhodiola rosea)、ロスマリヌス・オフィキナリス(Rosmarinus officinalis)、サリックス・アルバ(Salix alba)、サンブクス・ニグラ(Sambucus nigra)、セイボリー、スキサンドラ・キネンシス(Schisandra chinensis)、スファエリア・シネンシス(Sphaeria sinenses)、スピルリナ、シスル、チムス、トリゴネレ・フェヌグレク(trigonelle fenugrec)、トリビュラス・テレストリス(Tribulus terrestris)、ウルティカ(Urtica)、バレリアン(ウァレリアナ・オフィキナリス(Valeriana officinalis)、ウァレリアネ・ラディックス(Valeriane radix))及びウィサニア・ソムニフェラ(Withania somnifera)から成る群より選択され得る。好ましい実施形態において、本発明の舌下用組成物は、セレンを更に含む。
【００８４】
また、本発明の舌下用組成物は、スポーツの練習の前及び/又は後に、特に関節の健康、関節の補助を見込んで、一般的に、関節痛を緩和及び/若しくは防止するために、並びに/又は筋肉痛及び痙攣を防止するために、並びに/又は持久力を改善するために、対象により摂取され得る。
【００８５】
本発明の舌下用組成物は、1回(即時作用の場合)又は一定時間の間(長期作用の場合)、例えば、1週間、数週間、1ヶ月又は数ヶ月の間で投与され得る。治癒時間は、トレーニングサイクルに基づいて決定され得る。
【００８６】
よって、本発明の目的は、好ましくはスポーツ用食品サプリメントとしての、特に、関節痛を緩和するための、並びに/又は筋肉痛及び痙攣を防止するための、並びに/又は持久力を改善するための、本発明の舌下用組成物の非治療的使用である。
【００８７】
さらなる目的は、対象、好ましくはヒト、より好ましくはアスリートにおける、関節痛を緩和及び/若しくは防止するための、並びに/又は筋肉痛及び痙攣を防止するための、並びに/又は持久力を改善するための方法に関し、この方法は、舌下経路で前記対象に有効量の本明細書に記載の舌下用組成物を投与すること含む。
【００８８】
本明細書で言及されているように、「アスリート」とは、スポーツ、例えば、ランニング、ジョギング及び身体活動を必要とするあらゆるスポーツを行う人物である。この文脈において、プロのアスリートと、身体活動を趣味として行っているアスリートとの違いは存在しない。本発明の舌下用組成物は、プロのアスリート又はスポーツを趣味として行う一般的なアスリートに適している。
【００８９】
本発明のさらなる目的は、スポーツ用食品サプリメントとして、特に関節痛を緩和及び/若しくは防止するために、並びに/又は筋肉痛及び痙攣を防止するために、並びに/又は持久力を改善するために使用する本発明の舌下用組成物を製造するための、本明細書に規定の枝エキス部分の使用である。
【００９０】
本発明のさらなる目的は、関節痛を緩和及び/又は防止するために使用する本発明の舌下用組成物である。この文脈において、治療すべき対象又はアスリートは、関節痛から、より深刻な病気、例えば関節の癒合、関節の感染症、変形性関節症及び関節リウマチ等に至るまでを有するか、又はこれらを発症し易い。
【００９１】
スポーツの用途について、本発明の舌下用組成物は、先に規定の少なくとも1種のダイエタリーサプリメント若しくは食品サプリメント、及び/又は呼吸器のウェルネスのための先に規定の少なくとも1種の有効成分を更に含み得る。
【００９２】
第三の用途は、好ましくは食品サプリメントとしての、性欲を改善するための本発明の舌下用組成物の非治療的使用である。
【００９３】
さらなる対象は、対象、好ましくはヒトにおける性欲を改善するための方法に関し、この方法は、舌下経路で前記対象に有効量の本明細書に記載の舌下用組成物を投与することを含む。
【００９４】
実際に、酸化ストレスが性欲に不利な影響を与えることはよく知られている。酸化ストレスは抗酸化剤により緩和可能であることが知られているため、これらは、血管の拡張、血液循環の改善及び勃起不全との闘いを助ける。実際に、個体の陰部における血管の弛緩による陰部の性細胞の刺激部は、海綿体と呼ばれている。海綿体は、ペニス及びクリトリス内に位置する血管により囲まれたスポンジボール状の小神経である。男性の場合、勃起及び最も良好な感覚は、海綿体が適切に機能することにより与えられる。女性においては、性的快感及びオーガスムへの到達は、しばしばクリトリスの海綿体の活動に依存する。海綿体は、性的興奮の期間の間に、充血して活性化し、その刺激は、生殖器の筋肉の弛緩に依存する。一酸化窒素及びその代謝物質である環式GMPは、2つの優勢な生化学物質であり、これらは、生殖器の筋肉の弛緩を起こし、その結果、海綿体の血流を増加させる。
【００９５】
特に、近年の研究により、抗酸化剤が内皮機能不全に反対作用を及ぼし、従ってペニスへの血流を改善できることが示された。抗酸化剤は、関連する血管において酸化ストレス及び内皮障害を引き起こすフリーラジカルを中和することにより、この反対作用をもたらす。研究者等は、抗酸化サプリメントが勃起機能を改善し得ることを示した。
【００９６】
また、Eggert-Kruse(Fertil Steril.、2007、87、810〜823頁)は、性欲減退のためによく知られるうつ病を患っている患者におけるIL-1βの働きを論じた。
【００９７】
特定の実施形態において、本発明の舌下用組成物は、少なくとも1種の有効成分、例えば性欲を改善するものとして有用な有効成分を更に含む。より具体的には、有効成分は、ビタミンA、ビタミンB、ビタミンB3、ビタミンB6、ビタミンB9、ビタミンC、ビタミンD、ビタミンE、アルギニン、CDPコリン、CFMニトロ、ジメチルグリシン(DMG)、ジオスシン、ジオスゲニン、エレウテロコックス、グルタミン、グラシリン、イソロイシン、L-アルギニン、ロイシン、リノール酸、L-リジン、L-ノルバリン、マグネシウム、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド(NADH)、パントテン酸、プロトグラシリン、セレン、シリビニン、バニリン、亜鉛、アエスクルス・ヒッポカスタヌム(Aesculus hippocastanum)、アキランテス属(achyranthe)、アグヌス・カストュス(Agnuscastus)、アンジェリカ・シネンシス(Angelicasinensis)、アルスロスピラ、アシュワガンダ(ウィサニア・ソムニフェラ)、アストラガルス属、アストラガルス・メンブラナケウス、アウェナ・サティウァ(Avena sativa)、ベルベリス・ウルガリス(Berberis vulgaris)、バイオペリン、カフェイン、カツアバ(エリスロキシルム・カツアバ(Erythroxylum catuaba))、カプサイシン、カイエンペッパー、センテラ・アジアチカ、チリペッパー、シナモン、シナモムム・カンフォラ(Cinnamomum camphora)、シナノムム・カシア(Cinnanomum cassia)、シスタンチェス、柑橘類、シトルリン、クニジウム、クニクス・ベネディクトゥス(Cnicus benedictus)、クニジウム・モニエリ(Cnidium monnieri)、コルディセプス、コルヌス・マス(Cornus mas)、コルヌス・オフィキナリス(Cornus officinalis)、クルクマ、クスクタ、クスクタ・キネンシス(Cuscuta chinensis)、シノモリウム茎、ダミアナ(トゥルネラ・アフロジシアカ(Turnera aphrodisiaca))、ディプサクス・フロヌム(Dipsacus fullonum)、エレッタリア・カルダモムム(Elettaria cardamomum)、エピメジウム(エピメジウムサギッタタム(Epimediumsagittatum))、エピメデ(epimede)(ホーニーゴートウィード、グランディフロルム)、ユーコミア、エウコミア・ウルモイデス(Eucommia ulmoides)、エウゲニア・カリオフィルラタ(Eugenia caryophyllata)、エウリコマ・ロンギフォリア(Eurycoma longifolia)(ロングジャックの根)、エリトロキシルム・ウァクシニフォリウム(Erythroxylum vaccinifolium)、ダミアナ(トゥルネラ・ディフサ(Turnera diffusa))、フェヌグレク(トリゴネラ・フェヌム・グラエクム(Trigonella foenum graecum))、フロス・カルタミ(Flos carthami)、ガリウム・オドラツム(Galium odoratum)、ニンニク、ショウガ、ギンコ・ビロバ、チョウセンニンジン、ゴジベリー、緑茶、サンザシ(フルクトゥス・クラタエギ(Fructus crataegi))、エルバ・キスタンケス(Herba cistanches)、ヘラクレウム、ヒッポカンプス、ヒッポファエ・ラムノイデス、ヒスチジン、イカリイン、イグナチア・アマラ(Ignatia Amara)、ナツメ、キウイ、ラクツカ・ウィロサ(Lactuca virosa)、レピジウム・メイエニイ、リグスチクム・ワリキイ(Ligusticum wallichii)、マンドラゴラ・オフィキナルム(Mandragora officinarum)、マカ(レピジウム・メイエニイ)、モモルディカ・カランティカ(Momordica charantia)、ムクナ・プルリエンス(Mucuna pruriens)、ムイラ・プアマ(Muira puama)(アカンテア・ウィリリス(Acanthea virilis)、プティコペタルム・オラコイデス(Ptychopetalum olacoides))、ミルシアリア・ドゥビア(Myrciaria dubia)、ナイアシン、オリガヌム・ディクタムヌス(Origanum dictamnus)、パエオニア・ラクティフロラ(Paeonia lactiflora)、パナクス・ジンセン、パウリニア・クパナ、ペッパー、ピペリン、フェニルエチルアミン、ポリガラ・テヌイフォリア(Polygala tenuifolia)、プロトジオスシン、ラディックス・リグスチキ・ワリキイ(Radix Ligustici wallichii)、レッドベリー、リゾマ・ククルマエ(Rhizoma cucurmae)、ロドリア・ロゼア(Rhodolia rosea)、リケリア・グランディス(Richeria grandis)、バラ、ロサ・ダマスケナ(Rosa damascena)、ローズマリー、サバル、サフラン、サチュレジャ、ソーパルメットベリー(フルクトゥス・セレノエ(Fructus serenoae))、シザンドラ、シサンドラ・シネンシス、スクロフラリア、シクアン・アコナイト(Sichuan aconite)、シリブム・マリアヌム(Silybum marianum)、スミラックス・アスペラ(Smilax aspera)、スピルリナ、タウリン、テレストリス、トンカットアリ(エウリコマ・ロンギフォリア)、トリビュラス・テレストリス、トリゴネレ・フェヌグレク、ウルティカ、バニラ、ビテックス・アグヌス・カストュス(vitex agnus-castus)、小麦胚芽、ウォルフィポリア・エクステンサ(Wolfiporia extensa)及びヨヒンベから成る群より選択され得る。
【００９８】
本発明のさらなる目的は、性欲を改善するための本発明の舌下用組成物を製造するための、本発明に規定した枝エキス部分の使用である。
【００９９】
本発明のさらなる目的は、性欲を改善するために使用する本発明の舌下用組成物である。
【０１００】
第四の用途は、好ましくは食品サプリメントとしての、特に男性における生殖能力を改善するための、本発明の舌下用組成物の非治療的使用である。
【０１０１】
精子は、不飽和脂肪酸から形成される膜により保護されており、この膜は、酸化ストレスにより生成するフリーラジカルにより破壊され得る。この酸化ストレスが、不妊症男性のほぼ3分の1の不妊症の原因となっているのである。更に、過剰なフリーラジカルは一酸化窒素の合成を妨害し、これにより、勃起不全が引き起こされ得る。更に、2005年に実施された実験により、より多くの抗酸化剤を消費する男性が極めて多い量の精液及び極めて強い精子を生み出すことが示された。
【０１０２】
また、Dousset等(Human Reproduction、1997、12、1476〜1479頁)は、不妊症の男性における血中のホルモン状態を研究し、不妊症を有する患者におけるIL-1βの上昇を観察した。
【０１０３】
特定の実施形態において、本発明の舌下用組成物は、少なくとも1種の有効成分、例えば生殖能力を改善するものとして有用な有効成分を更に含む。より具体的には、有効成分は、ビタミンB1、ビタミンB2、ビタミンB3、ビタミンB6、ビタミンB8、ビタミンB12、ビタミンD、ビタミンD3、ビタミンE、ビタミンC、ビタミンK、アスタキサンチン、β-カロテン、ブロメライン、カルシウム、コリン、クロム、銅、CoQ10、DHEA、葉酸塩、葉酸、ヨウ素、イノシトール、L-アセチルシステイン、L-アルギニン、L-カルニチン、L-グルタチオン、リポ酸、マンガン、マグネシウム、メラトニン、N-アセチルシステイン、オクタコサノール、ω-3脂肪酸、パントテン酸、パラアミノ安息香酸、プロゲステロン、レッドクローバーの花、セレン、亜鉛、アキレア・ミレフォリウム、アンジェリカ・シネンシス、アクタエア・ラケモサ(Actaea racemosa)、アルクチウム・ラッパ(Arctium lappa)、アグヌス・カストュス(ビテックス・アグヌス・カストュス)、アロエ・ウェラ(Aloe vera)、アンジェリカ・シネンシス、アルテミシア・ウルガリス(Artemisia vulgaris)、アシュワガンダ、アスパラグス・ラケモスス(Asparagus racemosus)、アウェナ・サティウァ、ブラック・コホシュ(Black Cohosh)、キミキフガ・ラケモサ(Cimicifuga racemosa)(アクタエア・ラセモサ)、柑橘類、タンポポ、ドンクアイ、エウリコマ・ロンギフォリア、フォルスユニコーン、チョウセンニンジン、パナックス、グリキルリザ・グラブラ(Glycyrrhiza glabra)、ハチミツ、セイヨウトチノキ、シリブム・マリアヌム(Ilybum marianum)、レオヌルス・カルディアカ(Leonurus cardiaca)、レピジウム・メイエニイ(MACA)、リヌム・ウシタチシムム(Linum usitatissimum)、リコペン、ミルクシスル、オエノテラ・ビエニス(Oenothera biennis)、ペトロセリヌム・クリスプム(Petroselinum crispum)、ポリゴヌム・マルチフロルム(Polygonum multiflorum)、プロポリス、プティコペタルム・オラコイデス、ラズベリー葉、レッドクローバー、レッドラズベリー、ローヤルゼリー、サフラン、セサムム・インディクム(Sesamum indicum)、スキサンドラ・キネンシス、シベリアンジンセン、スティンギング・ネトル、タラクサクム・オフィキナレ、トリホリウム・プラテンセ(Trifolium pratense)、トリビュラス・テレストリス、ウルティカ・ディオイカ(Urtica dioica)、ビテックス・アグヌス・カストュス及びウィサニア・ソムニフェラから成る群より選択され得る。
【０１０４】
本発明のさらなる目的は、生殖能力を改善するための本発明の舌下用組成物を製造するための、本明細書に規定の枝エキス部分の使用である。
【０１０５】
本発明のさらなる目的は、生殖能力を改善するために使用する本発明の舌下用組成物である。
【０１０６】
本発明の別の目的は、本明細書に記載の舌下用組成物と、前記組成物を、呼吸器のウェルネスのために、並びに/又は関節痛及び/若しくは筋肉痛及び痙攣及び/若しくは持久力及び/若しくは性欲及び/若しくは生殖能力のために使用すべきであるという情報を含む添付書類又は使用説明書とを含むキットである。
【図面の簡単な説明】
【０１０７】
【図１】DPPH法による本発明のエキス(天然エキス)、ヒドロキシマタイレシノール(HMR)、エンテロジオール、エンテロラクトン及びピクノジェノールの抗ラジカル活性の評価。
【図２】本発明のエキス(天然エキス)及びその主な代謝物質(エンテロジオール及びエンテロラクトン)の抗酸化活性の評価を、トロロックス(碁盤目状)及びビタミンE(点線)の換算量として表す。
【図３】Technology PAOT/POT(登録商標)による本発明のエキス(天然エキス)、ピクノジェノール及びヒドロキシマタイレシノール(HMR)の合計抗酸化力の評価を、生成物1グラムあたりの汎用抗酸化剤(global antioxidant)のミリモルとして表す。
【図４】technology PAOT/POT(登録商標)による本発明のエキス(天然エキス)及びその主な代謝物質(エンテロジオール及びエンテロラクトン)の総抗酸化効果の評価を、生成物1グラムあたりの汎用抗酸化剤のミリモルとして表す。
【図５】野菜粉末を含有する錠剤の製造方法の図表。
【図６Ａ】TNF-α及びIL-1βサイトカインに対する10、30及び100μMでのHMR(本発明のエキスの代表的なポリフェノール化合物)の阻害作用を測定することによる、本発明のエキスの抗炎症活性の評価。
【図６Ｂ】5μg/mLでのLPS誘導後に、TNF-αサイトカインに対する10、30及び100μMでのHMR(本発明のエキスの代表的なポリフェノール化合物)の阻害作用を測定することによる、本発明のエキスの抗炎症活性の評価。
【図６Ｃ】5μg/mLでのLPS誘導後に、IL-1βサイトカインに対する10、30及び100μMでのHMR(本発明のエキスの代表的なポリフェノール化合物)の阻害作用を測定することによる、本発明のエキスの抗炎症活性の評価。
【図７】5-LO及びCOX-2に対する、10μMでのエキスの阻害作用及び10μMでのHMRの阻害作用を測定することによる、抗炎症活性の評価。
【発明を実施するための形態】
【０１０８】
本発明のさらなる態様及び利点を以下の実験項に開示する。
【実施例】
【０１０９】
(実施例1)
舌下用組成物
1.枝エキス部分の抽出方法
ピケア・アビエス及びアビエス・アルバの枝部分から製造された54kgの天然原料を、抽出器(例えば、ナイロン膜を備えるタイプのLavergne社の底面濾過式抽出器(filtering bottom extractor))内に置き、15質量%のエタノールを使用して、溶媒としての水(v/v)中にて、1/10の材料/溶媒比で、24時間にわたり40℃で抽出した。脱水機を使用して、液体/固体の分離を行った。固体エキスを、前記抽出器内に置き、15質量%のエタノールを使用して、溶媒としての水(v/v)中にて、1/10の材料/溶媒比で、1時間にわたり40℃で抽出した。脱水機を使用して、液体/固体の分離を行った。2つの液体エキスを合せて、蒸発器(例えば、Wiegand社の流下式タイプ)により、液体エキスの濃縮を真空下60℃で実施した。ステンレス鋼製スプレードライヤー(例えば、噴霧塔APV PSD 52型)を使用して噴霧することによりエキスを乾燥させて、3.88kgの乾燥エキスを得た。
【０１１０】
2.本発明の組成物の製造方法
錠剤の製造に使用した設備は、ターブラーミキサー、直径1mmの凸型パンチを備えるFrogerais社の打錠機、Ohaus社の精密天秤を備えることができる。錠剤化は、様々な賦形剤と植物エキスとの混合物を直接圧縮することにより行われる。
【０１１１】
図5に示されるように、組成物Bの製造の図表には、成分の秤量段階、第一段階の混合、引き続く2回の連続する混合、これに引き続くステアリン酸マグネシウム及びコロイド状シリカの添加が含まれる。実施される様々な管理は、粉末混合物の均質性、得られる錠剤の質量、野菜粉末なしの粉末の錠剤化、及びハウスナー角(angle of Haussner)に関連する。
【０１１２】
より詳細には、第一の混合には、30分の時間がかかる。第二及び第三の混合には、それぞれ3分の時間かかる。工業的には、混合の様々な段階の最後にふるい分けする段階を想定する必要があり得る。
【０１１３】
組成物Aは、組成物Aの特定の成分を使用して、図5に図示されている方法に従って得られる。
【０１１４】
3.舌下用製剤
3.1舌下用組成物A
【０１１５】
【表１】
2019512234.tif 000008
【０１１６】
3.2舌下用組成物B
【０１１７】
【表２】
2019512234.tif 000009
【０１１８】
(実施例2)
本発明の枝エキス部分の抗酸化活性及び抗ラジカル活性の評価
2.1.DPPH(2,2-ジフェニル-1-ピクリルヒドラジル)アッセイ
(Burda及びOleszek:「Antioxidant and anti-radical activities of flavonoids」、J. Agric. Food Chem.、2001、49、2774〜2779頁)。
エキスの抗ラジカル活性を調べるために、DPPH試験を使用した。DPPHフリーラジカルはスミレ色を有しており、これは、フリーラジカル化合物の存在下で還元されると黄色になる。分光光度計で測定すると、色彩強度は、試験化合物の抗ラジカル活性に対して反比例する。メタノールに溶解したミツバチ試料の様々な希釈液を3.9mlの6.1×10-5M DPPH●メタノール溶液に添加した。反応媒体における正確なDPPH●初期濃度(C DPPH●)を較正曲線により計算した。DPPH●の脱色を、DPPH●を除く全ての試薬を含有する試料により構成されるブランクと比較して、517nm(分光光度計)で30分にわたりモニタリングした。DPPH●における試料の捕捉活性を、IC50(mg/ml)として表し、用量-反応曲線から外挿した。本発明のエキス、ヒドロキシマタイレシノール(HMR)、エンテロジオール、エンテロラクトン及びピクノジェノール(登録商標)(フランス海岸松樹皮エキス、参照抗酸化化合物)を用いて、アッセイを4連(n=4)で実施した。抗ラジカル活性をEC50の値として表す(より小さなEC50値ほど、より強い抗酸化活性に相応する)。
【０１１９】
図1に示されるように、本発明の枝エキス部分の抗酸化活性は、HMR、エンテロジオール、エンテロラクトン及びピクノジェノールより良好である。実際に、本発明の枝エキス部分は、驚くべきことに、0.13mg/mlのEC50(50%のDPPHラジカルを低減するのに効果的な濃度)を示し、これは、HMR(EC50=0.20mg/ml)及びピクノジェノール(EC50=0.21mg/ml)のEC50より小さい。
【０１２０】
加えて、本発明のエキスは、0.13mg/mlのEC50を示し、これは、その代謝物質、すなわちエンテロジオール(EC50=0.28mg/ml)及びエンテロラクトン(EC50=0.30mg/ml)のEC50より小さい。
【０１２１】
2.2.トロロックス換算抗酸化能(TEAC)アッセイ
(Re R.、Pellegrini N.、Proteggente A.、Pannala A.、Yang M.、Rice-Evans C.:「Antioxidant activity applying an improved ABTS radical cation decolorization assay」、Free Radical Biology & Medicine、1999、26(9)、1231〜1237頁)。
本発明のエキスの総抗酸化活性は、ABTS(2,2'-アジノビス(3-エチルベンゾチアゾリン-6-スルホン酸)のアンモニウム塩)から得られるABTS●+ラジカルを阻害する能力がもとになっており、参照抗酸化化合物(ピクノジェノール(登録商標)、α-トコフェロール、トロロックス)及びその代謝物質(エンテロジオール及びエンテロラクトン)と比較する。7mMのABTS原液と2.45mMのペルオキソ二硫酸カリウムとを反応させて、使用前に混合物を暗所にて室温で12〜16時間にわたり静置することにより、ABTSラジカルカチオン(ABTS●+)を生成した。次に、ABTS●+溶液をPBS(リン酸緩衝生理食塩水)(pH7.4)で希釈して、734nmで吸光度を0.5にし、30℃で平衡させた。200μlのABTS●+及び(10、20、35、50、70、80μl)の生成物溶液(0.5mg/L)を混合し、緩衝溶液で300μlに調整した。15分のインキュベート後、光学密度を測定した。アッセイを4連(n=4)で実施した。効果をEC50の値として表す(より小さなEC50値ほど、より強い抗酸化活性に相応する)。驚くべきことに、本発明の天然エキスは、Table 1(表3)に示されるように、本アッセイにおいて、0.020mg/mLの値を有する最小のEC50(平衡状態で50%のDPPHラジカルを除去するのに効果的な濃度)を示した。
【０１２２】
【表３】
2019512234.tif 000010
【０１２３】
加えて、図2では、枝エキス部分とその主な代謝物質との間の抗酸化効果において著しい差異が目立つ。実際に、1gの天然エキスの抗酸化活性が、1.07gのトロロックス(碁盤目状)及び1.53gのビタミンE(点線)に相当する一方で、1gのエンテロラクトンの抗酸化活性は、0.13gのトロロックス(碁盤目状)及び0.19gのビタミンE(点線)に相当し、1gのエンテロジオールの抗酸化活性は、0.15gのトロロックス(碁盤目状)及び0.22gのビタミンE(点線)に相当する。
【０１２４】
2.3.酸素ラジカル吸収能(ORAC)アッセイ
(Ou B.、Hampsch-Woodill M.及びPrior R. L.:「Development and Validation of an Improved Oxygen Radical Absorbance Capacity Assay Using Fluorescein as the Fluorescent Probe」、J. Agric. Food Chem.、2001、49(10)、4619〜4626頁)
ORAC法による抗酸化能の測定は、抗酸化化合物含有食品マトリックスにおけるフルオレセインとROO*ペルオキシラジカルとの反応によるフルオレセイン(FL)の蛍光低下を検知することに基づく。蛍光は、485nmの励起波長及び528nmの吸収フィルター(emission filter)により読み取った。AAPH溶液及びFLを、75mM、pH7.4のリン酸緩衝溶液中で調製した。この反応の対照はトロロックスであり、これも同じ緩衝液中で調製する。0.5mg/Lの濃度を有する6つの異なる量(10、20、35、50、70、80μl)の生成物をFLと一緒にマイクロプレートのウェル内に置き、同量で緩衝溶液により調整した(80μl)。混合物を30分にわたり37℃で事前にインキュベートし、それから、マルチチャンネルピペットを使用して、迅速にAAPH溶液(220μl)を添加した。マイクロプレートをすぐに読取機内に置き、240分にわたり、6分毎に蛍光を記録した。抗酸化溶液の代わりにリン酸ナトリウム緩衝液を使用した、FL及びAAPHを有するブランクを使用した。阻害能を、参照化合物の換算(μM)として表し、フルオレセインの曲線の下部の面積(AUC)を積分することにより定量化した。アッセイを4連(n=4)で実施した。試験した試料の効果を生成物1グラムあたりの参照ORAC単位として表す(より小さな値ほど、より強い抗酸化活性に相応する)。結果をTable 2(表4)に図示する。
【０１２５】
【表４】
2019512234.tif 000011
【０１２６】
これらの結果は、1グラムの枝エキス部分の抗酸化活性が、2400μmolのトロロックス、1300μmolのビタミンC、1200μmolのビタミンE(トコフェロール)及び310μMolのβ-カロテンの総抗酸化力にそれぞれ相当することを示す。驚くべきことに、枝エキス部分の抗酸化活性は、1gのピクノジェノール、1gのヒドロキシマタイレシノール(HMR)及び1gの天然エキス代謝物質(エンテロジオール及びエンテロラクトン)の抗酸化活性より非常に大きい。
【０１２７】
2.4.総抗酸化力(PAOT(登録商標))アッセイ(酸化ストレス)
Technology PAOT/POT(登録商標)(総抗酸化力/総酸化力)は、レドックス反応の電気化学的性質に基づく:抗酸化剤と酸化剤の間のバランス[www.ie-antioxydants.com]。アッセイを4連(n=4)で実施した(より高い値ほど、最も良好な抗酸化効果に相応する)。
【０１２８】
図3に示されるように、本発明の天然エキス(10.31mmol/g換算の抗酸化剤)の全体的な抗酸化効果が、ピクノジェノール(8.82mmol/g換算の抗酸化剤)及びHMR(4.99mmol/g換算の抗酸化剤)より良好であることは驚くべきことであった。
【０１２９】
以下のTable 3(表5)は、参照抗酸化化合物、すなわち、ビタミン(トコフェロール)、トロロックス及びβ-カロテンに対する、天然エキス、ピクノジェノール及びHMRの抗酸化活性の値を要約している。驚くべきことに、枝エキス部分は、試験生成物の中でも、最も良好な抗酸化活性を示す。実際に、1グラムの本発明の枝エキス部分は、2.2gのビタミンE、1.29gのトロロックス及び5.53gのβ-カロテンの抗酸化効果に相当する。
【０１３０】
【表５】
2019512234.tif 000012
【０１３１】
図4に図示されているように、アッセイにおける、本発明の枝エキス部分の効果とその主な代謝物質の効果との間の差異は、生成物1グラムあたりの汎用抗酸化剤のミリモルとして表される(試験生成物の汎用抗酸化剤の特徴の尺度;より高い値ほど、最も良好な抗酸化効果に相応する)。
【０１３２】
実際に、発明者等は、驚くべきことに、枝エキス部分(10.31mmol/g換算の抗酸化剤)の総抗酸化効果が、その代謝物質(エンテロジオール(1.07mmol/g換算の抗酸化剤)及びエンテロラクトン(1.06mmol/g換算の抗酸化剤))の抗酸化効果より少なくとも10倍大きいことを示した。
【０１３３】
2.5.結論
驚くべきことに、発明者等は、本発明による天然枝エキス部分が、参照化合物、例えばピクノジェノール、α-トコフェロール(ビタミンE)及びトロロックス(ビタミンE等)に比べてより大きな抗酸化活性を有することを示し、これにより、呼吸器のウェルネスのための、関節痛及び/若しくは筋肉痛及び痙攣を緩和するための、並びに/又は持久力を改善するための、並びに性欲及び/若しくは生殖能力を改善するための改善された効果が証明された。
【０１３４】
また驚くべきことに、発明者等は、本発明による天然枝エキス部分が、その主な代謝物質(エンテロラクトン及びエンテロジオール)に比べてより大きな抗酸化活性を有することを示し、これにより、組成物を代謝回避経路、例えば舌下経路で投与する際の改善された効果が証明された。
【０１３５】
(実施例3)
HMR(本発明の枝エキス部分の代表的なポリフェノール化合物)の抗炎症活性の評価
インターロイキン-1β-(IL-1β-)及び腫瘍壊死因子-α(TNF-α)は、様々な炎症性の病気の発症に介在する。よって、IL-1β-及びTNF-αは、本発明の枝エキス部分の化合物の抗炎症特性を特徴付ける適切なバイオマーカーを構成する。
【０１３６】
Kuemmerle等(J Med Chem. 2012、55、7525〜7545頁)によると、少し変更を加えて、末梢血単核細胞(PBMC)を健康なドナー(Etablissement Francais du Sang)の末梢血から調製した。Histopaque勾配(Sigma社)を使用してPBMCを単離し、ハンクス平衡塩溶液(Sigma社)中で洗浄し、その後、10%(v/v)のウシ胎児血清(FBS)(PAA)と、100U/mLのペニシリンと、100μg/mLのストレプトマイシン(PAA)とを付け足したRPMI-1640媒体(Sigma社)中で培養した。PBMCを96ウェルプレート(8×104細胞/ウェル)に播種し、5μg/mLのLPS(リポ多糖、Sigma社)で刺激し、ウェル1つあたり120μLの総体積にした。HMRをDMSO内で再懸濁し、10、30及び100μM(DMSO1%)にて2連で試験した。LPS刺激なしの細胞を、生物活性ではない対照(基礎レベルのサイトカイン)と見なした。細胞のインキュベーションを37℃で実現した(5%のCO2)。
【０１３７】
24時間後、PBMC上澄液を384ウェルプレートに移した。サプライヤーの推奨に従って、TNF-α(62TNFPEC)、IL-1β(62IL1PEC)に対してHTRF技術(Cisbio社のバイオアッセイ)を使用して、サイトカインの検知を実施した。Envisionマルチラベルリーダー(PerkinElmer社)を使用し、サプライヤー推奨のパラメーターを使用して、3時間のインキュベーション後に読み取りを実施した。
【０１３８】
これらの結果を、以下のTable 4(表6)及び図6A、図6B及び図6Cに示す。
【０１３９】
【表６】
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【０１４０】
これらの結果は、IL-1β及びTNF-αに対するHMRの阻害作用を示し、これにより、天然枝エキス部分及びこのようなエキスを含む舌下用組成物の抗炎症作用が証明される。また、図6B及び図6Cは特に、それぞれTNF-α及びIL-1βに対するHMRの、用量に応じた阻害作用を示す。
【０１４１】
(実施例4)
HMR及び本発明の枝エキス部分の抗炎症活性の評価
プロスタグランジン-エンドペルオキシドシンターゼ2(シクロオキシゲナーゼ-2;COX-2)及びアラキドン酸-5-リポキシゲナーゼ(5-リポキシゲナーゼ;5-LOX;5-LO)は、炎症に関与するよく知られた酵素である。
【０１４２】
ヒトのCOX-2阻害アッセイ:
試験化合物、参照化合物又は水(対照)を、90mMのトリスHCl(pH8.0)、1.98mMのフェノール及び1.02μMのヘマチンを含有する緩衝液中で酵素(≒0.2μg)を用いて、20分にわたり室温で事前にインキュベートした。その後、2μMのアラキドン酸を添加することにより反応を開始し、混合物を5分にわたり室温でインキュベートした。基礎対照の測定のために、アラキドン酸を反応混合物から除去した。インキュベーションに引き続き、1MのHCl、その後1Mのトリス/HCl(pH8.0)を添加することにより反応を停止させ、引き続き、4℃に冷却した。その後、蛍光アクセプター(d2とラベル付けされたPGE2)及び蛍光ドナー(ユーロピウムクリプテートとラベル付けされた抗PGE2抗体)を添加した。120分後、マイクロプレートリーダー(Envision、Perkin Elmer社)を使用して、残留PGE2量に相応する蛍光移動を、λex=337nm、λem=620nm及びλem=665nmで測定した。665nmで測定されたシグナルを620nmで測定されたシグナルで割ることにより、酵素活性を決定した(比率)。
【０１４３】
これらの結果を、対照酵素活性のパーセント阻害として表す。標準的な参照阻害化合物はNS398であり、これを各実験において幾つかの濃度で試験して、阻害曲線を得て、この阻害曲線から、そのIC50値を計算した。
参照:Glaser, K.、Sung, M.L., O'neill, K.、Belfast, M.、Hartman, D.、Carlson, R.、Kreft, A.、Kubrak, D.、Hsiao, C.L.及びWeichman, B.(1995)、Etodolac selectively human prostaglandin G/H synthase 2(PGHS-2) versus human PGHS-1、Eur.J.Pharmacol.、281:107〜111頁。
【０１４４】
ヒトの5-LO阻害アッセイ:
試験化合物、参照化合物又は水(対照)を、50mMのトリスHCl(pH7.4)、5mMのCaCl2、2mMのEDTA、1μMのATP及び50nMの蛍光プローブジヒドロローダミン123を含有する緩衝液中で、ウェル1つあたり104個の溶解した細胞を用いて、5分にわたり室温で事前にインキュベートした。その後、マイクロプレートリーダー(Envision、Perkin Elmer社)を使用して、蛍光強度をλex=485nm及びλem=535nmで測定した。蛍光検出法を用いると、t=0でのこの測定により、これらの波長において任意の化合物の干渉を検知することができた。その後、25μMのアラキドン酸基質を添加することにより反応を開始し、混合物を20分にわたり室温でインキュベートした。67%のアセトニトリル及び0.2%の酢酸を含有する緩衝液を添加することにより反応を停止させ、反応生成物のローダミン123により放出された蛍光強度を同じ波長(t=20)で測定した。t=20で測定されたシグナルからt=0で測定されたシグナルを引くことにより、酵素活性を決定した。
【０１４５】
これらの結果を、対照活性のパーセント阻害として表す。標準的な参照阻害化合物はNDGAであり、これを各実験において幾つかの濃度で試験して、阻害曲線を得て、この阻害曲線から、そのIC50値を計算した。
参照:Pufahl, R.A.、Kasten, T.P.、Hills, R.、Gierse, J.K.、Reitz, B.A.、Weinberg, R.A.及びMasferrer, J.L.(2007)、Development of a fluorescence-based enzyme assay of human 5-lipoxygenase、Anal.Biochem.、364:204頁。
【０１４６】
これらの結果を、以下のTable 5(表7)及び図7に示す。
【０１４７】
【表７】
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【０１４８】
これらの結果は、5-LO及びCOX-2に対するHMR及び枝エキス部分の阻害作用を示し、これにより、天然枝エキス部分及びこのようなエキスを含む舌下用組成物の抗炎症作用が証明される。
【０１４９】
結論
驚くべきことに、発明者等は、ポリフェノールが代謝されない本発明による舌下用組成物が、より大きな抗酸化活性を有する一方で、抗炎症活性を維持することを示した。従って、このような二重活性を示すこのような舌下用組成物は、呼吸器のウェルネスを改善すること、関節痛及び/若しくは筋肉痛及び痙攣を緩和すること、並びに/又は持久力を改善すること、並びに性欲及び/若しくは生殖能力を改善することに適している。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６Ａ】
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【図６Ｂ】
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【図６Ｃ】
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【図７】
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【国際調査報告】
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