(57)【要約】  本実施形態は、ＧＬＰ−１受容体を発現している細胞を標的化するための化合物および方法を提供する。
2019516686.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
修飾オリゴヌクレオチド、コンジュゲートリンカー、およびＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分を含む化合物。
【請求項２】
前記コンジュゲートリンカーは、前記修飾オリゴヌクレオチドを前記ＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分に結合する、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
前記修飾オリゴヌクレオチドは、８〜８０個の結合ヌクレオシドの長さである、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項４】
前記修飾オリゴヌクレオチドは、１０〜３０個の結合ヌクレオシドの長さである、請求項３に記載の化合物。
【請求項５】
前記修飾オリゴヌクレオチドは、１２〜３０個の結合ヌクレオシドの長さである、請求項３に記載の化合物。
【請求項６】
前記修飾オリゴヌクレオチドは、１５〜３０個の結合ヌクレオシドの長さである、請求項３に記載の化合物。
【請求項７】
前記修飾オリゴヌクレオチドは、少なくとも１つの修飾ヌクレオシド間結合、少なくとも１つの修飾糖、または少なくとも１つの修飾核酸塩基を含む、請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項８】
前記修飾ヌクレオシド間結合は、ホスホロチオエートヌクレオシド間結合である、請求項７に記載の化合物。
【請求項９】
前記修飾オリゴヌクレオチドの各修飾ヌクレオシド間結合は、ホスホロチオエートヌクレオシド間結合である、請求項８に記載の化合物。
【請求項１０】
前記修飾糖は、二環式糖である、請求項７〜９のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１１】
前記二環式糖は、４’−（ＣＨ２）−Ｏ−２’（ＬＮＡ）；４’−（ＣＨ２）２−Ｏ−２’（ＥＮＡ）；および４’−ＣＨ（ＣＨ３）−Ｏ−２’（ｃＥｔ）からなる群から選択される、請求項１０に記載の化合物。
【請求項１２】
前記修飾糖は、２’−Ｏ−メトキシエチル、２’−Ｆ、または２’−ＯＭｅである、請求項７〜９のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１３】
前記修飾核酸塩基は、５−メチルシトシンである、請求項７〜１２のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１４】
前記修飾オリゴヌクレオチドは、
結合デオキシヌクレオシドからなるギャップセグメント；
結合ヌクレオシドからなる５’ウイングセグメント；および
結合ヌクレオシドからなる３’ウイングセグメント
を含み、前記ギャップセグメントは、前記５’ウイングセグメントおよび前記３’ウイングセグメントに直接隣接してかつそれらの間に位置し、それぞれのウイングセグメントのそれぞれのヌクレオシドは、修飾糖を含む、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１５】
前記修飾オリゴヌクレオチドは、一本鎖である、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１６】
前記修飾オリゴヌクレオチドは、アンチセンスオリゴヌクレオチドである、請求項１５に記載の化合物。
【請求項１７】
前記修飾オリゴヌクレオチドは、ｍｉＲＮＡ拮抗薬またはｍｉＲＮＡ模倣物である、請求項１５に記載の化合物。
【請求項１８】
二重鎖を含む、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１９】
前記二重鎖は、
前記修飾オリゴヌクレオチドを含む第１の鎖；および
前記第１の鎖に相補的な第２の鎖
を含む、請求項１８に記載の化合物。
【請求項２０】
前記修飾オリゴヌクレオチドを含む前記第１の鎖は、ＲＮＡ転写産物に相補的である、請求項１９に記載の化合物。
【請求項２１】
前記第２の鎖は、ＲＮＡ転写産物に相補的である、請求項１９に記載の化合物。
【請求項２２】
ｍｉＲＮＡ模倣物である、請求項１８に記載の化合物。
【請求項２３】
リボヌクレオチドを含む、請求項１〜２２のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２４】
デオキシリボヌクレオチドを含む、請求項１〜２２のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２５】
前記修飾オリゴヌクレオチドは、細胞内のＲＮＡ転写産物に相補的である、請求項１〜２４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２６】
前記細胞は、膵臓細胞である、請求項２５に記載の化合物。
【請求項２７】
前記膵臓細胞は、β膵島細胞である、請求項２６に記載の化合物。
【請求項２８】
前記ＲＮＡ転写産物は、プレｍＲＮＡ、ｍＲＮＡ、非コードＲＮＡ、またはｍｉＲＮＡである、請求項２５〜２７のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２９】
前記ＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分は、ＧＬＰ−１受容体を標的とするペプチドコンジュゲート部分、小分子コンジュゲート部分、アプタマーコンジュゲート部分、または抗体コンジュゲート部分である、請求項１〜２８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項３０】
前記ペプチドコンジュゲート部分は、ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分である、請求項２９に記載の化合物。
【請求項３１】
前記ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分は、配列番号１〜５７のいずれかのアミノ酸配列の等長部分に対して少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％相同である少なくとも８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、または３１連続アミノ酸部分を含む、請求項３０に記載の化合物。
【請求項３２】
前記ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分は、保存的アミノ酸置換、アミノ酸類似体、またはアミノ酸誘導体を含み、前記保存的アミノ酸置換は、他の脂肪族アミノ酸による脂肪族アミノ酸の置き換え；スレオニンによるセリンの置き換えもしくはその逆；他の酸性残基による酸性残基の置き換え；アミド基を支持する他の残基による、アミド基を支持する残基の置き換え；塩基性残基の他の塩基性残基との交換；または他の芳香族残基による芳香族残基の置き換え、あるいはそれらの組み合わせを含み、および前記脂肪族残基は、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシンもしくはそれらの合成均等物を含み、前記酸性残基は、アスパラギン酸、グルタミン酸もしくはそれらの合成均等物を含み、前記アミド基を含む残基は、アスパラギン酸、グルタミン酸もしくはそれらの合成均等物を含み、前記塩基性残基は、リシン、アルギニンもしくはそれらの合成均等物を含み、または前記芳香族残基は、フェニルアラニン、チロシンもしくはそれらの合成均等物を含む、請求項３１に記載の化合物。
【請求項３３】
前記ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分は、配列番号１〜５７のいずれかのアミノ酸配列の等長部分に対して少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％同一である少なくとも８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、または３１連続アミノ酸部分を含む、請求項３１に記載の化合物。
【請求項３４】
前記ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分は、８〜５０アミノ酸長であり、かつその全長にわたって配列番号１〜５７のいずれかのアミノ酸配列に対して少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％相同である、請求項３０に記載の化合物。
【請求項３５】
前記ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分は、保存的アミノ酸置換、アミノ酸類似体、またはアミノ酸誘導体を含む、請求項３４に記載の化合物。
【請求項３６】
前記ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分は、その全長にわたって配列番号１〜５７のいずれかのアミノ酸配列に対して少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％同一である、請求項３４に記載の化合物。
【請求項３７】
前記ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分は、配列番号１〜５７のいずれかのアミノ酸配列を含む、請求項３０〜３６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項３８】
前記ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分は、配列番号１〜５７のいずれかのアミノ酸配列からなる、請求項３７に記載の化合物。
【請求項３９】
前記ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分は、アミノ酸配列：Ｈｉｓ−Ａｉｂ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ（配列番号２２）を含み、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸である、請求項３０〜３６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項４０】
前記ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分は、前記アミノ酸配列：Ｈｉｓ−Ａｉｂ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ（配列番号２２）からなり、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸である、請求項３９に記載の化合物。
【請求項４１】
前記ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分は、アミノ酸配列：Ｈｉｓ−Ａｉｂ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｐｅｎ（配列番号２３）を含み、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸であり、およびＰｅｎは、ペニシラミンである、請求項３０〜３６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項４２】
前記ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分は、前記アミノ酸配列：Ｈｉｓ−Ａｉｂ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｐｅｎ（配列番号２３）からなり、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸であり、およびＰｅｎは、ペニシラミンである、請求項４１に記載の化合物。
【請求項４３】
前記ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分は、アミノ酸配列：Ｈｉｓ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ（配列番号１）を含む、請求項３０〜３６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項４４】
前記ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分は、前記アミノ酸配列：Ｈｉｓ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ（配列番号１）からなる、請求項４３に記載の化合物。
【請求項４５】
前記ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分は、ＧＬＰ−１受容体に結合することができる、請求項３０〜４４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項４６】
前記ＧＬＰ−１受容体は、細胞の表面上に発現される、請求項４５に記載の化合物。
【請求項４７】
前記細胞は、膵臓細胞である、請求項４６に記載の化合物。
【請求項４８】
前記膵臓細胞は、β膵島細胞である、請求項４７に記載の化合物。
【請求項４９】
前記細胞は、動物内にある、請求項４６〜４８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５０】
少なくとも１つ、少なくとも２つ、少なくとも３つ、少なくとも４つ、または少なくとも５つのＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分を含む、請求項１〜４９のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５１】
前記コンジュゲートリンカーは、前記ＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分を前記修飾オリゴヌクレオチドの５’末端に結合する、請求項１〜５０のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５２】
前記コンジュゲートリンカーは、前記ＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分を前記修飾オリゴヌクレオチドの３’末端に結合する、請求項１〜５０のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５３】
前記コンジュゲートリンカーは、開裂可能である、請求項１〜５２のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５４】
前記コンジュゲートリンカーは、ジスルフィド結合を含む、請求項１〜５３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５５】
前記ジスルフィド結合は、ペニシラミンを含む、請求項５４に記載の化合物。
【請求項５６】
前記ＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分は、請求項３０〜４４のいずれか一項に記載のＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分であり、および前記ジスルフィド結合は、前記ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を前記修飾オリゴヌクレオチドに結合する、請求項５５に記載の化合物。
【請求項５７】
前記ジスルフィド結合は、前記ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分のＣ−末端を前記修飾オリゴヌクレオチドの前記５’末端または３’末端に結合する、請求項５６に記載の化合物。
【請求項５８】
前記コンジュゲートリンカーは、１〜５個のリンカー−ヌクレオシドを含む、請求項１〜５７のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５９】
前記コンジュゲートリンカーは、３個のリンカー−ヌクレオシドを含む、請求項５８に記載の化合物。
【請求項６０】
前記３個のリンカー−ヌクレオシドは、ＴＣＡモチーフを有する、請求項５９に記載の化合物。
【請求項６１】
１〜５個のリンカー−ヌクレオシドは、ＴＣＡモチーフを含まない、請求項５８に記載の化合物。
【請求項６２】
前記コンジュゲートリンカーは、ヘキシルアミノ基を含む、請求項１〜６１のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６３】
前記コンジュゲートリンカーは、ポリエチレングリコール基を含む、請求項１〜６２のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６４】
前記コンジュゲートリンカーは、トリエチレングリコール基を含む、請求項１〜６３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６５】
前記コンジュゲートリンカーは、ホスフェート基を含む、請求項１〜６４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６６】
前記コンジュゲートリンカーは、
【化１】
2019516686.tif 000098
（式中、
Ｘは、直接または間接的に前記ＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分に付着し；および
Ｙは、直接または間接的に前記修飾オリゴヌクレオチドに付着する）
を含む、請求項１〜６５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６７】
Ｘは、Ｏを含む、請求項６６に記載の化合物。
【請求項６８】
Ｙは、ホスフェート基を含む、請求項６６または６７に記載の化合物。
【請求項６９】
Ｘは、請求項５４〜５７のいずれか一項に記載のジスルフィド結合によって前記ＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分に付着する、請求項６６〜６８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７０】
前記コンジュゲートリンカーは、
【化２】
2019516686.tif 000099
（式中、Ｘは、直接または間接的に前記ＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分に付着し；および
Ｔ１は、前記修飾オリゴヌクレオチドを含み；かつＢｘは、修飾または非修飾核酸塩基である）
を含む、請求項１〜６９のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７１】
Ｘは、請求項５４〜５７のいずれか一項に記載のジスルフィド結合を含む、請求項７０に記載の化合物。
【請求項７２】
前記コンジュゲートリンカーは、
【化３】
2019516686.tif 000100
（式中、
前記ホスフェート基は、前記修飾オリゴヌクレオチドに連結され、かつＹは、コンジュゲート基に連結され；
Ｙは、ホスホジエステルまたはアミノ（−ＮＨ−）基であり；
Ｚは、式：
【化４】
2019516686.tif 000101
を有するピロリジニル基であり；
ｊは、０または１であり；
ｎは、約１〜約１０であり；
ｐは、１〜約１０であり；
ｍは、０または１〜４であり；および
Ｙがアミノである場合、ｍは、１である）
を含む、請求項１〜７１のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７３】
Ｙは、アミノ（−ＮＨ−）である、請求項７２に記載の化合物。
【請求項７４】
Ｙは、ホスホジエステル基である、請求項７２に記載の化合物。
【請求項７５】
ｎは、３であり、およびｐは、３である、請求項７２〜７４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７６】
ｎは、６であり、およびｐは、６である、請求項７２〜７４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７７】
ｎは、２〜１０であり、およびｐは、２〜１０である、請求項７２〜７４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７８】
ｎおよびｐは、異なる、請求項７２〜７４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７９】
ｎおよびｐは、同じである、請求項７２〜７４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項８０】
ｍは、０である、請求項７２または７４〜７４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項８１】
ｍは、１である、請求項７２〜７９のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項８２】
ｊは、０である、請求項７２〜８１のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項８３】
ｊは、１であり、およびＺは、式：
【化５】
2019516686.tif 000102
を有する、請求項７２〜８１のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項８４】
ｎは、２であり、およびｐは、３である、請求項８３に記載の化合物。
【請求項８５】
ｎは、５であり、およびｐは、６である、請求項８３に記載の化合物。
【請求項８６】
前記コンジュゲートリンカーは、
【化６】
2019516686.tif 000103
を含む、請求項１〜８５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項８７】
前記コンジュゲートリンカーは、
【化７】
2019516686.tif 000104
を含む、請求項１〜８５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項８８】
前記コンジュゲートリンカーを含む前記化合物は、
【化８】
2019516686.tif 000105
（式中、
Ｎ−Ｎ＝Ｎは、前記ＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分のアジド基を表し、かつＸは、直接または間接的に前記ＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分の残りの部分に付着し；および
Ｙは、直接または間接的に前記オリゴヌクレオチドに付着する）
を含む、請求項１〜８５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項８９】
前記コンジュゲートリンカーを含む前記化合物は、
【化９】
2019516686.tif 000106
（式中、
Ｎ−Ｎ＝Ｎは、前記ＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分のアジド基を表し、かつＸは、直接または間接的に前記ＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分の残りの部分に付着し；および
Ｙは、直接または間接的に前記オリゴヌクレオチドに付着する）
を含む、請求項１〜８５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項９０】
前記コンジュゲートリンカーを含む前記化合物は、
【化１０】
2019516686.tif 000107
（式中
Ｎ−Ｎ＝Ｎは、前記ＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分のアジド基を表し、かつＸは、直接または間接的に前記ＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分の残りの部分に付着し；および
Ｙは、直接または間接的に前記オリゴヌクレオチドに付着する）
を含む、請求項１〜８５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項９１】
細胞内の核酸標的の発現をモジュレートする方法であって、前記細胞を請求項１〜９０のいずれか一項に記載の化合物と接触させ、それにより前記細胞内の前記核酸標的の発現をモジュレートすることを含む方法。
【請求項９２】
前記細胞は、膵臓細胞である、請求項９１に記載の方法。
【請求項９３】
前記膵臓細胞は、β膵島細胞である、請求項９２に記載の方法。
【請求項９４】
前記細胞は、前記細胞の表面上にＧＬＰ−１受容体を発現する、請求項９１〜９３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９５】
前記細胞を前記化合物と接触させることは、前記核酸標的の発現を阻害する、請求項９１〜９４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９６】
前記核酸標的は、プレｍＲＮＡ、ｍＲＮＡ、非コードＲＮＡ、またはｍｉＲＮＡである、請求項９１〜９５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９７】
前記細胞は、動物内にある、請求項９１〜９６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９８】
化合物を調製する方法であって、
【化１１】
2019516686.tif 000108
（式中、Ｘ１は、オリゴヌクレオチドであり、および前記化合物は、ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化オリゴヌクレオチドである）
をＧＬＰ−１ペプチドと反応させることを含む方法。
【請求項９９】
ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化オリゴヌクレオチドを調製する方法であって、
オリゴヌクレオチドであって、前記オリゴヌクレオチドの５’末端にヘキサメチルリンカーおよび末端アミンを含むオリゴヌクレオチドを、式：
【化１２】
2019516686.tif 000109
を有する３−（２−ピリジルジチオプロピオン酸Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル）と反応させ、それにより、式：
【化１３】
2019516686.tif 000110
（式中、Ｘ１は、前記オリゴヌクレオチドである）
を有する化合物２を得ることと、
化合物２をＧＬＰ−１ペプチドと反応させ、それにより、式：
【化１４】
2019516686.tif 000111
（式中、Ｘ１は、前記オリゴヌクレオチドであり、およびＸ２は、前記ＧＬＰ−１ペプチドである）
を有する前記ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化オリゴヌクレオチドを得ることと
を含む方法。
【請求項１００】
ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化オリゴヌクレオチドを調製する方法であって、
オリゴヌクレオチドであって、前記オリゴヌクレオチドの５’末端にヘキサメチルリンカーおよび末端アミンを含むオリゴヌクレオチドを含む溶液を、式：
【化１５】
2019516686.tif 000112
を有する３−（２−ピリジルジチオプロピオン酸Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル）を含む溶液と混合し、それにより、式：
【化１６】
2019516686.tif 000113
（式中、Ｘ１は、前記オリゴヌクレオチドである）
を有する化合物２を得ることと、
化合物２を含む溶液を、ＧＬＰ−１ペプチドを含む溶液と混合し、それにより、式：
【化１７】
2019516686.tif 000114
（式中、Ｘ１は、前記オリゴヌクレオチドであり、およびＸ２は、前記ＧＬＰ−１ペプチドである）
を有する前記ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化オリゴヌクレオチドを得ることと
を含む方法。
【請求項１０１】
前記オリゴヌクレオチドを含む前記溶液は、リン酸ナトリウム緩衝液を含み、および３−（２−ピリジルジチオプロピオン酸Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル）を含む前記溶液は、ジメチルホルムアミドを含む、請求項１００に記載の方法。
【請求項１０２】
前記溶液は、室温で混合される、請求項１００または１０１に記載の方法。
【請求項１０３】
化合物２を含む前記溶液は、アセトニトリルおよびＮａＨＣＯ３をさらに含み、かつ約８．０のｐＨを有する、請求項１００〜１０２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０４】
ＧＬＰ−１ペプチドを含む前記溶液は、ジメチルホルムアミドをさらに含む、請求項１００〜１０３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０５】
前記ＧＬＰ−１ペプチドは、配列番号１〜５７のいずれかのアミノ酸配列の等長部分に対して少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％相同である少なくとも８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、または３１連続アミノ酸部分を含む、請求項９８〜１０４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０６】
前記ＧＬＰ−１ペプチドは、配列番号１〜５７のいずれかのアミノ酸配列の等長部分に対して少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％同一である少なくとも８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、または３１連続アミノ酸部分を含む、請求項１０５に記載の方法。
【請求項１０７】
前記ＧＬＰ−１ペプチドは、８〜５０アミノ酸長であり、かつその全長にわたって配列番号１〜５７のいずれかのアミノ酸配列に対して少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％相同である、請求項９８〜１０４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０８】
前記ＧＬＰ−１ペプチドは、その全長にわたって配列番号１〜５７のいずれかのアミノ酸配列に対して少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％同一である、請求項１０７に記載の方法。
【請求項１０９】
前記ＧＬＰ−１ペプチドは、ＧＬＰ−１（７−３７）（配列番号１）のアミノ酸配列を含む、請求項１０５〜１０８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１０】
前記ＧＬＰ−１ペプチドは、前記ＧＬＰ−１（７−３７）（配列番号１）のアミノ酸配列からなる、請求項１０９に記載の方法。
【請求項１１１】
前記ＧＬＰ−１ペプチドは、アミノ酸配列：Ｈｉｓ−Ａｉｂ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ（配列番号２２）を含み、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸である、請求項１０５〜１０８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１２】
前記ＧＬＰ−１ペプチドは、前記アミノ酸配列：Ｈｉｓ−Ａｉｂ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ（配列番号２２）からなり、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸である、請求項１１１に記載の方法。
【請求項１１３】
前記ＧＬＰ−１ペプチドは、アミノ酸配列：Ｈｉｓ−Ａｉｂ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｐｅｎ（配列番号２３）を含み、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸であり、およびＰｅｎは、ペニシラミンである、請求項１０５〜１０８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１４】
前記ＧＬＰ−１ペプチドは、前記アミノ酸配列：Ｈｉｓ−Ａｉｂ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｐｅｎ（配列番号２３）からなり、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸であり、およびＰｅｎは、ペニシラミンである、請求項１１３に記載の方法。
【請求項１１５】
前記ＧＬＰ−１ペプチドは、アミノ酸配列：Ｈｉｓ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ（配列番号１）を含む、請求項１０５〜１０８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１６】
前記ＧＬＰ−１ペプチドは、前記アミノ酸配列：Ｈｉｓ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ（配列番号１）からなる、請求項１１５に記載の方法。
【請求項１１７】
前記ＧＬＰ−１ペプチド部分は、反応性硫黄部分を含む、請求項１０５〜１１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１８】
前記ＧＬＰ−１ペプチドは、ペニシラミンを含む、請求項１０５〜１１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１９】
前記ペニシラミンは、前記ＧＬＰ−１ペプチドのＣ−末端に結合される、請求項１１８に記載の方法。
【請求項１２０】
請求項１〜９０のいずれか一項に記載の少なくとも１つの化合物と、薬学的に許容可能な賦形剤とを含む医薬組成物。
【請求項１２１】
前記ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分は、アミノ酸配列：Ｈｉｓ−Ａｉｂ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｚａａ（配列番号５６）を含む、請求項３０〜３６のいずれか一項に記載の化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
配列表
本出願は、電子形式の配列表と共に出願されている。配列表は、２０１７年４月２７日に作成された、２９ｋｂサイズのＢＩＯＬ０３０３ＷＯＳＥＱ＿ＳＴ２５．ｔｘｔという名称のファイルとして提供される。配列表の電子形式の情報は、参照により全体として本明細書に組み込まれる。
【０００２】
本実施形態は、ＧＬＰ−１受容体を発現している細胞を標的化するための化合物および方法を提供する。
【背景技術】
【０００３】
ＧＬＰ−１受容体は、刺激性Ｇタンパク質受容体を介してアデニル酸シクラーゼに結合するクラス２のＧタンパク質共役受容体である。腸栄養刺激により、グルカゴン様ペプチド−１が循環中に放出される。循環するＧＬＰ−１は、膵臓のβ膵島細胞上のＧＬＰ−１受容体に結合する。これは、ＧＬＰ−１受容体を活性化し、β膵島細胞からのインスリン開口分泌をもたらすシグナル伝達事象を誘導する。ＧＬＰ−１およびＧＬＰ−１受容体の結合によって受容体が細胞質中へ内部移行し、最終的にリソソーム中へ選別される（非特許文献１）。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】Ｋｕｎａ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３  Ａｍ  Ｊ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  Ｅｎｄｏ  Ｍｅｔａｂ  ３０５：Ｅ１６１−Ｅ１７０
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本明細書に提供される実施形態は、ＧＬＰ−１受容体を発現している細胞内の核酸標的の発現をモジュレートするための化合物および方法に関する。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチドおよびＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分を含む。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、コンジュゲートリンカー、およびＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分を含む。特定の実施形態において、ＧＬＰ−１受容体を発現している細胞、例えば膵臓β膵島細胞を、本明細書に提供される化合物と接触させることは、細胞内の核酸標的の発現をモジュレートする。特定の実施形態において、ＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分を含む化合物は、ＧＬＰ−１受容体を発現していない細胞と比較して、ＧＬＰ−１受容体を発現している細胞を選択的または優先的に標的化する。特定の実施形態において、ＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分を含む化合物は、ＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分を含まない化合物と比較して、ＧＬＰ−１受容体を発現している細胞を選択的または優先的に標的化する。
【図面の簡単な説明】
【０００６】
【図１】非コンジュゲート化親ＡＳＯ（ＩＳＩＳ  ７７６１０２もしくはＩＳＩＳ  ５５６０８９）またはＧＬＰ１−コンジュゲート化ＡＳＯ（ＩＳＩＳ  ９１３１９３もしくはＩＳＩＳ  ８１６３８５）で処理したＨＥＫ２９３細胞内のアンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）濃度に対するパーセントＦＯＸＯ１  ｍＲＮＡ（図１Ａ）およびＭＡＬＡＴ１  ｍＲＮＡ（図１Ｂ）を示すグラフである。
【図２】非コンジュゲート化親ＭＡＬＡＴ１  ＡＳＯ（ＩＳＩＳ  ５５６０８９）またはＧＬＰ１−コンジュゲート化ＭＡＬＡＴ１  ＡＳＯ（ＩＳＩＳ  ８１６３８５）で処理したＧＬＰ１受容体過剰発現ＨＥＫ２９３細胞（図２Ａ）、野生型ＨＥＫ２９３細胞（図２Ｂ）、またはＧＲＰ４０過剰発現ＨＥＫ２９３細胞（図２Ｃ）におけるアンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）濃度に対するＭＡＬＡＴ１  ｍＲＮＡレベルを示すグラフである。
【図３】ＡＳＯなし、非コンジュゲート化親ＭＡＬＡＴ１  ＡＳＯ（ＩＳＩＳ  ５５６０８９）、またはＧＬＰ１−コンジュゲート化ＭＡＬＡＴ１  ＡＳＯ（ＩＳＩＳ  ８１６３８５）で処理した分散マウス膵島細胞におけるＭＡＬＡＴ１  ｍＲＮＡレベル（図３Ａ）；ＡＳＯなし、非コンジュゲート化親ＭＡＬＡＴ１  ＡＳＯ（ＩＳＩＳ  ５５６０８９）、またはＧＬＰ１−コンジュゲート化ＭＡＬＡＴ１  ＡＳＯ（ＩＳＩＳ  ８１６３８５）で処理したインタクトマウス膵島におけるＭＡＬＡＴ１  ｍＲＮＡレベル（図３Ｂ）；およびＡＳＯなし、非コンジュゲート化親ＦＯＸＯ１  ＡＳＯ（ＩＳＩＳ  ７７６１０２）、ＧＬＰ１−コンジュゲート化スクランブルＦＯＸＯ１  ＡＳＯ（ＩＯＮ  ９１３１９５）、またはＧＬＰ１−コンジュゲート化ＦＯＸＯ１  ＡＳＯ（ＩＯＮ  ９１３１９３）で処理したインタクトマウス膵島細胞におけるＦＯＸＯ１  ｍＲＮＡレベル（図３Ｃ）を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【０００７】
前述した概要および以下の詳細な説明の両方は、単なる例示および説明であり、特許請求される実施形態を限定するものではないことを理解するべきである。本明細書において、単数の使用は、別途記述されない限り複数を含む。本明細書において使用される「または」の使用は、別途記述されない限り「および／または」を意味する。さらに、用語「含んでいる」ならびに「含む」および「含まれる」等の他の形態の使用は、限定するものではない。
【０００８】
本明細書において使用されるセクションの見出しは、構成目的のものにすぎず、記載される主題を限定するものと解釈すべきではない。本出願において引用される全ての文献または文献の一部、例として、限定されるものではないが、特許、特許出願、論説、書籍、論文、ならびにＧｅｎＢａｎｋおよびＮＣＢＩリファレンス配列記録は、参照により、本明細書において考察される文献の一部についておよび全体として本明細書に明示的に組み込まれる。
【０００９】
本明細書に含まれる例のオリゴヌクレオチドの各配列番号に示す配列は、糖部分、ヌクレオシド間結合、または核酸塩基に対する任意の修飾とは独立していることが理解される。従って、配列番号により規定されるオリゴヌクレオチドは、独立して、糖部分、ヌクレオシド間結合、または核酸塩基に対する１つ以上の修飾を含み得る。ＩＳＩＳまたはＩＯＮ番号（ＩＳＩＳ＃またはＩＯＮ＃）により記述されるオリゴヌクレオチドは、核酸塩基配列、化学修飾、およびモチーフの組み合わせを示す。
【００１０】
本明細書全体を通して、ペプチド配列の最初の文字は、別途示されない限り、Ｎ−末端におけるペプチドの最初のアミノ酸であり、ペプチド配列の最後の文字は、Ｃ−末端におけるペプチドの最後のアミノ酸であることが理解される。
【００１１】
別途示されない限り、以下の用語は、以下の意味を有する。
【００１２】
「２’−デオキシヌクレオシド」は、天然存在デオキシリボ核酸（ＤＮＡ）中に見出される２’−Ｈ（Ｈ）フラノシル糖部分を含むヌクレオシドを意味する。特定の実施形態において、２’−デオキシヌクレオシドは、修飾核酸塩基を含み得、またはＲＮＡ核酸塩基（ウラシル）を含み得る。
【００１３】
「２’−Ｏ−メトキシエチル」（２’−ＭＯＥおよび２’−Ｏ（ＣＨ２）２−ＯＣＨ３とも称される）は、フラノシル環の２’位におけるＯ−メトキシ−エチル修飾を指す。２’−Ｏ−メトキシエチル修飾糖は、修飾糖である。
【００１４】
「２’−ＭＯＥヌクレオシド」（２’−Ｏ−メトキシエチルヌクレオシドとも称される）は、２’−ＭＯＥ修飾糖部分を含むヌクレオシドを意味する。
【００１５】
「２’−置換ヌクレオシド」または「２−修飾ヌクレオシド」は、２’−置換または２’−修飾糖部分を含むヌクレオシドを意味する。本明細書において使用される糖部分に関する「２’−置換」または「２−修飾」は、ＨまたはＯＨ以外の少なくとも１つの２’−置換基を含む糖部分を意味する。
【００１６】
「５−メチルシトシン」は、５位に付着しているメチル基を有するシトシンを意味する。
【００１７】
「約」は、値の±１０％以内を意味する。例えば、「化合物が標的核酸の７０％の阻害をもたらした」と記述される場合、標的核酸レベルが６０％および８０％の範囲内で阻害されることが意味される。
【００１８】
「投与」または「投与すること」は、本明細書に提供される化合物または組成物を個体に導入してその目的の機能を実施する経路を指す。使用することができる投与経路の一例としては、限定されるものではないが、非経口投与、例えば皮下、静脈内、または筋肉内注射または注入が挙げられる。
【００１９】
「アミノイソ酪酸」または「Ａｉｂ」は、別途記述されない限り、式：
【化１】
2019516686.tif 000003
を有する２−アミノイソ酪酸を意味する。
【００２０】
「動物」は、ヒトまたは非ヒト動物、例として、限定されるものではないが、マウス、ラット、ウサギ、イヌ、ネコ、ブタ、および非ヒト霊長類、例として、限定されるものではないが、サルおよびチンパンジーを指す。
【００２１】
「アンチセンス活性」は、アンチセンス化合物のその標的核酸へのハイブリダイゼーションに起因する任意の検出可能および／または計測可能な活性を意味する。特定の実施形態において、アンチセンス活性は、標的に対するアンチセンス化合物の不存在下の標的核酸レベルまたは標的タンパク質レベルと比較した、標的核酸またはそのような標的核酸によりコードされるタンパク質の量または発現の減少である。
【００２２】
「アンチセンス化合物」は、オリゴヌクレオチドおよび場合により、１つ以上の追加の特徴部、例えばコンジュゲート基または末端基を含む化合物を意味する。アンチセンス化合物の例としては、一本鎖および二本鎖化合物、例えばオリゴヌクレオチド、リボザイム、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、ｓｓＲＮＡ、および占有を基礎とする（ｏｃｃｕｐａｎｃｙ−ｂａｓｅｄ）化合物が挙げられる。
【００２３】
「アンチセンス阻害」は、アンチセンス化合物の不存在下の標的核酸レベルと比較した、標的核酸に相補的なアンチセンス化合物の存在下での標的核酸レベルの低減を意味する。
【００２４】
「アンチセンス機序」は、ハイブリダイゼーションのアウトカムまたは効果が、例えば、転写またはスプライシングを含む細胞機構が付随的に失速する標的分解または標的占有のいずれかである、化合物と標的核酸とのハイブリダイゼーションを含む全ての機序である。
【００２５】
「アンチセンスオリゴヌクレオチド」は、標的核酸またはその領域もしくはセグメントに相補的な核酸塩基配列を有するオリゴヌクレオチドを意味する。特定の実施形態において、アンチセンスオリゴヌクレオチドは、標的核酸またはその領域もしくはセグメントに特異的にハイブリダイズ可能である。
【００２６】
「二環式ヌクレオシド」または「ＢＮＡ」は、二環式糖部分を含むヌクレオシドを意味する。「二環式糖」または「二環式糖部分」は、２つの環を含む修飾糖部分（第２の環が、第１の環中の原子の２つを連結する架橋を介して形成されており、それにより、二環構造を形成している）を意味する。特定の実施形態において、二環式糖部分の第１の環は、フラノシル部分である。特定の実施形態において、二環式糖部分は、フラノシル部分を含まない。
【００２７】
「分枝鎖基」は、少なくとも３つの基への共有結合を形成し得る少なくとも３つの位置を有する原子団を意味する。特定の実施形態において、分枝鎖基は、コンジュゲートリンカーおよび／または開裂可能部分を介してテザー化リガンドをオリゴヌクレオチドに連結するための複数の反応性部位を提供する。
【００２８】
「細胞標的化部分」は、１つまたは複数の特定の細胞タイプに結合し得るコンジュゲート基またはコンジュゲート基の一部を意味する。
【００２９】
「ｃＥｔ」または「拘束エチル」は、４’−炭素および２’−炭素を連結する架橋を含む二環式フラノシル糖部分（架橋は、式：４’−ＣＨ（ＣＨ３）−Ｏ−２’を有する）を意味する。
【００３０】
化合物中の「化学修飾」は、その化合物中の単位のいずれかの、化学反応を介する置換または変化を説明する。「修飾ヌクレオシド」は、修飾糖部分および／または修飾核酸塩基を独立して有するヌクレオシドを意味する。「修飾オリゴヌクレオチド」は、少なくとも１つの修飾ヌクレオシド間結合、修飾糖、および／または修飾核酸塩基を含むオリゴヌクレオチドを意味する。
【００３１】
「化学的に区別される領域」は、ある意味で同一の化合物の別の領域と化学的に異なる化合物の領域を指す。例えば、２’−Ｏ−メトキシエチルヌクレオチドを有する領域は、２’−Ｏ−メトキシエチル修飾を有さないヌクレオチドを有する領域と化学的に区別される。
【００３２】
「キメラアンチセンス化合物」は、それぞれの位置が複数の下位単位を有する少なくとも２つの化学的に区別される領域を有するアンチセンス化合物を意味する。
【００３３】
「開裂可能結合」は、分割され得る任意の化学結合を意味する。特定の実施形態において、開裂可能結合は、アミド、ポリアミド、エステル、エーテル、ホスホジエステルの一方または両方のエステル、リン酸エステル、カルバメート、ジスルフィド、またはペプチドの中から選択される。
【００３４】
「開裂可能部分」は、生理学的条件下で、例えば、細胞、動物、またはヒト内部で開裂される結合または原子団を意味する。
【００３５】
オリゴヌクレオチドに関する「相補的」は、そのようなオリゴヌクレオチドまたはその１つ以上の領域の核酸塩基配列が、別のオリゴヌクレオチドまたは核酸またはその１つ以上の領域の核酸塩基配列に、これら２つの核酸塩基配列を逆方向にアラインした場合にマッチすることを意味する。本明細書に記載の核酸塩基マッチまたは相補的核酸塩基は、別途規定されない限り、以下の対：アデニン（Ａ）およびチミン（Ｔ）、アデニン（Ａ）およびウラシル（Ｕ）、シトシン（Ｃ）およびグアニン（Ｇ）、ならびに５−メチルシトシン（ｍＣ）およびグアニン（Ｇ）に限定される。相補的オリゴヌクレオチドおよび／または核酸は、それぞれのヌクレオシドにおける核酸塩基相補性を有することを必要とせず、１つ以上の核酸塩基ミスマッチを含み得る。対照的に、オリゴヌクレオチドに関する「完全に相補的」または「１００％相補的」は、そのようなオリゴヌクレオチドがいかなる核酸塩基ミスマッチも有さずにそれぞれのヌクレオシドにおける核酸塩基マッチを有することを意味する。
【００３６】
「コンジュゲート基」は、オリゴヌクレオチドに付着している原子団を意味する。コンジュゲート基は、コンジュゲート部分と、コンジュゲート部分をオリゴヌクレオチドに付着させるコンジュゲートリンカーとを含む。
【００３７】
「コンジュゲートリンカー」は、コンジュゲート部分をオリゴヌクレオチドに連結する少なくとも１つの結合を含む原子団を意味する。
【００３８】
「コンジュゲート部分」は、コンジュゲートリンカーを介してオリゴヌクレオチドに付着した原子団を意味する。
【００３９】
「設計すること」または「〜するように設計される」は、選択核酸分子と特異的にハイブリダイズする化合物を設計するプロセスを指す。
【００４０】
「示差的に修飾されている」は、修飾の不存在を含む、互いに異なる化学修飾または化学置換基を意味する。従って、例えば、ＭＯＥヌクレオシドおよび非修飾ＤＮＡヌクレオシドは、ＤＮＡヌクレオシドが非修飾であっても、「示差的に修飾されている」。同様に、ＤＮＡおよびＲＮＡは、両方が天然存在の非修飾ヌクレオシドであっても、「示差的に修飾されている」。異なる核酸塩基を含むことを除いて同一であるヌクレオシドは、示差的に修飾されていない。例えば、２’−ＯＭｅ修飾糖および非修飾アデニン核酸塩基を含むヌクレオシドと、２’−ＯＭｅ修飾糖および非修飾チミン核酸塩基を含むヌクレオシドとは、示差的に修飾されていない。
【００４１】
「二本鎖アンチセンス化合物」は、互いに相補的であり、二本鎖を形成する２つのオリゴマー化合物を含むアンチセンス化合物であって、前記２つのオリゴマー化合物の一方は、オリゴヌクレオチドを含むアンチセンス化合物を意味する。
【００４２】
「発現」は、遺伝子のコード情報が、細胞中に存在し、細胞中で作動する構造に変換される全ての機能を含む。このような構造としては、限定されるものではないが、転写および翻訳の産物が挙げられる。
【００４３】
「ギャップマー」は、１つ以上のヌクレオシドを有する外部領域間に位置する、ＲＮアーゼＨ開裂を支持する複数のヌクレオシドを有する内部領域を含むオリゴヌクレオチドを意味し、内部領域を含むヌクレオシドは、外部領域を含むヌクレオシドまたはヌクレオチドと化学的に区別される。内部領域は、「ギャップ」と称することができ、外部領域は、「ウイング」と称することができる。
【００４４】
「ハイブリダイゼーション」は、オリゴヌクレオチドおよび／または核酸のアニーリングを意味する。特定の機構に限定するものではないが、ハイブリダイゼーションの最も一般的な機構は、相補的な核酸塩基間のワトソン・クリック、フーグスティーンまたは逆フーグスティーン水素結合であり得る水素結合を含む。特定の実施形態において、相補的核酸分子としては、限定されるものではないが、アンチセンス化合物および核酸標的が挙げられる。特定の実施形態において、相補的核酸分子としては、限定されるものではないが、オリゴヌクレオチドおよび核酸標的が挙げられる。
【００４５】
「発現または活性を阻害すること」は、未処理または対照サンプルにおける活性の発現に対する発現または活性の低下または妨害を指し、必ずしも発現または活性の完全な排除を示すものではない。
【００４６】
「ヌクレオチド間結合」は、オリゴヌクレオチド中の隣接するヌクレオシド間の共有結合を形成する基または結合を意味する。「修飾ヌクレオシド間結合」は、天然存在のホスフェートヌクレオシド間結合以外の任意のヌクレオシド間結合を意味する。非ホスフェート結合は、本明細書では修飾ヌクレオシド間結合と称される。
【００４７】
「結合ヌクレオシド」は、ヌクレオシド間結合により一緒に結合している隣接ヌクレオシドを意味する。
【００４８】
「リンカー−ヌクレオシド」は、オリゴヌクレオチドをコンジュゲート部分に結合するヌクレオシドを意味する。リンカー−ヌクレオシドは、化合物のコンジュゲートリンカー内に位置する。リンカー−ヌクレオシドは、オリゴヌクレオチドと連続していても、化合物のオリゴヌクレオチド部分の一部と見なされない。
【００４９】
「ミスマッチ」または「非相補的」は、第１および第２のオリゴヌクレオチドをアラインした場合、第２のオリゴヌクレオチドまたは標的核酸の対応する核酸塩基に相補的でない第１のオリゴヌクレオチドの核酸塩基を意味する。例えば、核酸塩基、例として、限定されるものではないが、ユニバーサル核酸塩基、イノシン、およびヒポキサンチンは、少なくとも１つの核酸塩基とハイブリダイズし得るが、それがハイブリダイズした核酸塩基に対して依然としてミスマッチまたは非相補的である。別の例として、第１および第２のオリゴヌクレオチドをアラインした場合、第２のオリゴヌクレオチドまたは標的核酸の対応する核酸塩基にハイブリダイズし得ない第１のオリゴヌクレオチドの核酸塩基は、ミスマッチまたは非相補的核酸塩基である。
【００５０】
「モジュレートすること」は、細胞、組織、臓器、または生物中の特徴を変化させるかまたは調整することを指す。例えば、標的核酸をモジュレートすることは、細胞、組織、臓器、または生物中の標的核酸のレベルを増加または減少させることを意味し得る。「モジュレーター」は、細胞、組織、臓器、または生物中の変化をもたらす。例えば、化合物は、細胞、組織、臓器、または生物中の標的核酸の量を減少させるモジュレーターであり得る。
【００５１】
「ＭＯＥ」は、メトキシエチルを意味する。
【００５２】
「モノマー」は、オリゴマーの単一単位を指す。モノマーとしては、限定されるものではないが、ヌクレオシドおよびヌクレオチドが挙げられる。
【００５３】
「モチーフ」は、オリゴヌクレオチド中の非修飾および／もしくは修飾糖部分、核酸塩基、ならびに／またはヌクレオシド間結合のパターンを意味する。
【００５４】
「天然」または「天然存在」は、天然で見出されるものを意味する。
【００５５】
「非二環式修飾糖」または「非二環式修飾糖部分」は、糖の２つの原子を架橋して第２の環を形成しない、置換基等の修飾を含む修飾糖部分を意味する。「核酸」は、モノマーヌクレオチドから構成される分子を指す。核酸としては、限定されるものではないが、リボ核酸（ＲＮＡ）、デオキシリボ核酸（ＤＮＡ）、一本鎖核酸、および二本鎖核酸が挙げられる。
【００５６】
「核酸塩基」は、別の核酸の塩基と対合し得る複素環式部分を意味する。本明細書において使用される「天然存在の核酸塩基」は、アデニン（Ａ）、チミン（Ｔ）、シトシン（Ｃ）、ウラシル（Ｕ）、およびグアニン（Ｇ）である。「修飾核酸塩基」は、化学的に修飾された天然存在の核酸塩基である。「ユニバーサル塩基」または「ユニバーサル核酸塩基」は、天然存在の核酸塩基および修飾核酸塩基以外の核酸塩基であり、任意の核酸塩基と対合することができる。
【００５７】
「核酸塩基配列」は、いかなる糖またはヌクレオシド間結合からも独立した核酸またはオリゴヌクレオチドにおける連続核酸塩基の順序を意味する。
【００５８】
「ヌクレオシド」は、核酸塩基および糖部分を含む化合物を意味する。核酸塩基および糖部分は、それぞれ独立して、非修飾であるかまたは修飾されている。「修飾ヌクレオシド」は、修飾核酸塩基および／または修飾糖部分を含むヌクレオシドを意味する。修飾ヌクレオシドは、核酸塩基を欠く脱塩基ヌクレオシドを含む。
【００５９】
「オリゴマー化合物」は、単一オリゴヌクレオチドおよび場合により１つ以上の追加の特徴部、例えばコンジュゲート基または末端基を含む化合物を意味する。
【００６０】
「オリゴヌクレオチド」は、互いに独立してそれぞれ修飾または非修飾であり得る結合ヌクレオシドのポリマーを意味する。別途示されない限り、オリゴヌクレオチドは、８〜８０個の結合ヌクレオシドからなる。「修飾オリゴヌクレオチド」は、少なくとも１つの糖、核酸塩基、またはヌクレオシド間結合が修飾されているオリゴヌクレオチドを意味する。「非修飾オリゴヌクレオチド」は、いずれの糖、核酸塩基、またはヌクレオシド間修飾も含まないオリゴヌクレオチドを意味する。
【００６１】
「親オリゴヌクレオチド」は、配列が、異なる長さ、モチーフ、および／または化学構造を除いて類似する配列のより多くのオリゴヌクレオチドのための設計の基礎として使用されるオリゴヌクレオチドを意味する。新たに設計されるオリゴヌクレオチドは、親オリゴヌクレオチドと同一のまたは重複する配列を有し得る。
【００６２】
「ホスホロチオエート結合」は、非架橋酸素原子の１つが硫黄原子で置き換えられた修飾ホスフェート結合を意味する。ホスホロチオエートヌクレオシド間結合は、修飾ヌクレオシド間結合である。
【００６３】
「リン部分」は、リン原子を含む原子団を意味する。特定の実施形態において、リン部分は、モノ、ジ、もしくはトリホスフェート、またはホスホロチオエートを含む。
【００６４】
「部分」は、規定数の核酸の連続（すなわち結合）核酸塩基を意味する。特定の実施形態において、部分は、規定数の標的核酸の連続核酸塩基である。特定の実施形態において、部分は、規定数のオリゴマー化合物の連続核酸塩基である。
【００６５】
「低減する」は、より小さい範囲、サイズ、量、または数にすることを意味する。
【００６６】
「ＲＮＡｉ化合物」は、少なくとも部分的に、ＲＩＳＣまたはＡｇｏ２を介するが、ＲＮアーゼＨを介さずに作用して標的核酸および／または標的核酸によりコードされるタンパク質をモジュレートするアンチセンス化合物を意味する。ＲＮＡｉ化合物としては、限定されるものではないが、二本鎖ｓｉＲＮＡ、一本鎖ＲＮＡ（ｓｓＲＮＡ）、およびマイクロＲＮＡ、例として、マイクロＲＮＡ模倣体が挙げられる。
【００６７】
「セグメント」は、核酸内の領域のより小さいまたは下位の一部として定義される。
【００６８】
効果に関する「選択的な」は、任意の量的範囲または倍差だけ１つに対する効果が他よりも大きいことを指す。例えば、ＧＬＰ−１受容体を発現している細胞に対して「選択的な」ＧＬＰ−１受容体コンジュゲートリガンド部分を含むか、またはＧＬＰ−１受容体を発現している細胞を「選択的に」標的化する化合物は、ＧＬＰ−１受容体コンジュゲートリガンド部分を含まない化合物よりも高い度合いで、ＧＬＰ−１受容体を発現している細胞を標的化する。別の例として、ＧＬＰ−１受容体を発現している細胞に対して「選択的な」ＧＬＰ−１受容体コンジュゲートリガンド部分を含むか、またはＧＬＰ−１受容体を発現している細胞を「選択的に」標的化する化合物は、ＧＬＰ−１受容体を発現していないかまたは比較的低いレベルで発現している細胞よりも高い度合いで、ＧＬＰ−１受容体を発現している細胞を標的化する。「選択的な」という用語は、絶対的な全か無かの選択性を必要としないことが理解されるであろう。
【００６９】
化合物に関する「一本鎖」は、化合物が１本のオリゴヌクレオチドのみを有することを意味する。「自己相補的」は、少なくとも部分的にそれ自体にハイブリダイズするオリゴヌクレオチドを意味する。１つのオリゴヌクレオチドからなり、オリゴヌクレオチドが自己相補的である化合物は、一本鎖化合物である。一本鎖化合物は、相補的化合物に結合して二本鎖を形成し得る。
【００７０】
「部位」は、標的核酸内のユニークな核酸塩基位置と定義される。
【００７１】
「特異的にハイブリダイズ可能」は、非標的核酸に対して最小限の効果を示すかまたは全く示さずに、所望の効果を誘導するのに十分なオリゴヌクレオチドと標的核酸との間の相補性の程度を有するオリゴヌクレオチドを指す。特定の実施形態において、特異的ハイブリダイゼーションは、生理学的条件下で生じる。
【００７２】
標的核酸を参照した「特異的に阻害する」は、非標的核酸に対してより少ないまたは最小限の効果を示すかまたは全く示さずに、標的核酸の発現を低減または遮断することを意味する。低減は、必ずしも標的核酸の発現の完全な排除を示すわけではない。
【００７３】
「標準的な細胞アッセイ」は、実施例に記載されるアッセイおよびその妥当なバリエーションを意味する。
【００７４】
「標準的なインビボ実験」は、実施例に記載される手順およびその妥当なバリエーションを意味する。
【００７５】
「糖部分」は、非修飾糖部分または修飾糖部分を意味する。「非修飾糖部分」または「非修飾糖」は、ＲＮＡに見られる２’−ＯＨ（Ｈ）フラノシル部分（「非修飾ＲＮＡ糖部分」）、またはＤＮＡに見られる２’−Ｈ（Ｈ）部分（「非修飾ＤＮＡ糖部分」）を意味する。非修飾糖部分は、１’、３’、および４’位のそれぞれに１つの水素、３’位に酸素、ならびに５’位に２つの水素を有する。「修飾糖部分」または「修飾糖」は、修飾フラノシル糖部分または糖代替物を意味する。「修飾されたフラノシル糖部分」は、非修飾糖部分の少なくとも１つの水素の代わりに非水素置換基を含むフラノシル糖を意味する。特定の実施形態において、修飾フラノシル糖部分は、２’−置換糖部分である。このような修飾フラノシル糖部分としては、二環式糖および非二環式糖が挙げられる。
【００７６】
「糖代替物」は、核酸塩基をオリゴヌクレオチド内の別の基、例えばヌクレオシド間結合、コンジュゲート基、または末端基に結合させ得るフラノシル部分以外のものを有する修飾糖部分を意味する。糖代替物を含む修飾ヌクレオシドは、オリゴヌクレオチド内の１つ以上の位置に取り込むことができ、そのようなオリゴヌクレオチドは、相補的な化合物または核酸にハイブリダイズし得る。
【００７７】
「標的遺伝子」は、標的をコードする遺伝子を指す。
【００７８】
標的核酸に関連した「標的化すること」は、所望の効果を誘導する、前記標的核酸に対するオリゴヌクレオチドの特異的ハイブリダイゼーションを意味する。ＧＬＰ−１受容体に関連した「標的化すること」は、ＧＬＰ−１受容体に対するＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分の結合を意味する。
【００７９】
「標的核酸」、「標的ＲＮＡ」、「標的ＲＮＡ転写産物」および「核酸標的」は、全て本明細書に記載される化合物が標的とし得る核酸を意味する。
【００８０】
「標的領域」は、１つ以上の化合物が標的とする標的核酸の部分を意味する。
【００８１】
「標的セグメント」は、化合物が標的化される標的核酸のヌクレオチドの配列を意味する。「５’標的部位」は、標的セグメントの最も５’側のヌクレオチドを指す。「３’標的部位」は、標的セグメントの最も３’側のヌクレオチドを指す。
【００８２】
「末端基」は、オリゴヌクレオチドの末端に共有結合している化学基または原子団を意味する。
【００８３】
特定の実施形態
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチドおよびＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分を含む。特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドは、修飾オリゴヌクレオチドである。特定の実施形態において、化合物はさらに、コンジュゲートリンカーを含む。特定の実施形態において、コンジュゲートリンカーは、オリゴヌクレオチドをＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分に結合する。
【００８４】
特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドは、８〜８０個の結合ヌクレオシドの長さ、１０〜３０個の結合ヌクレオシドの長さ、１２〜３０個の結合ヌクレオシドの長さ、または１５〜３０個の結合ヌクレオシドの長さである。
【００８５】
特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドは、少なくとも１つの修飾ヌクレオシド間結合、少なくとも１つの修飾糖、または少なくとも１つの修飾核酸塩基を含む修飾オリゴヌクレオチドである。特定の実施形態において、修飾ヌクレオシド間結合は、ホスホロチオエートヌクレオシド間結合である。特定の実施形態において、修飾オリゴヌクレオチドの各修飾ヌクレオシド間結合は、ホスホロチオエートヌクレオシド間結合である。
【００８６】
特定の実施形態において、修飾糖は、４’−（ＣＨ２）−Ｏ−２’（ＬＮＡ）；４’−（ＣＨ２）２−Ｏ−２’（ＥＮＡ）；または４’−ＣＨ（ＣＨ３）−Ｏ−２’（ｃＥｔ）等の二環式糖である。特定の実施形態において、修飾糖は、２’−Ｏ−メトキシエチル、２’−Ｆ、または２’−ＯＭｅである。
【００８７】
特定の実施形態において、修飾核酸塩基は、５−メチルシトシンである。
【００８８】
特定の実施形態において、修飾オリゴヌクレオチドは、
結合デオキシヌクレオシドからなるギャップセグメント；
結合ヌクレオシドからなる５’ウイングセグメント；および
結合ヌクレオシドからなる３’ウイングセグメント；
を含み、ギャップセグメントは、５’ウイングセグメントおよび３’ウイングセグメントに直接隣接しかつそれらの間に位置し、それぞれのウイングセグメントのそれぞれのヌクレオシドは、修飾糖を含む。
【００８９】
特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドは、一本鎖である。
【００９０】
特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドは、アンチセンスオリゴヌクレオチド、ｍｉＲＮＡ拮抗薬またはｍｉＲＮＡ模倣物である。
【００９１】
特定の実施形態において、化合物は、二重鎖を含む。特定の実施形態において、二重鎖は、修飾オリゴヌクレオチドを含む第１の鎖、および第１の鎖に相補的な第２の鎖を含む。特定の実施形態において、修飾オリゴヌクレオチドを含む第１の鎖は、ＲＮＡ転写産物に相補的である。特定の実施形態において、第２の鎖は、ＲＮＡ転写産物に相補的である。特定の実施形態において、化合物は、（ｉ）修飾オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分を含む第１の鎖と、（ｉｉ）第１の鎖に相補的な第２の鎖とを含む二重鎖を含む。特定の実施形態において、化合物は、（ｉ）修飾オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分を含む第１の鎖と、（ｉｉ）第１の鎖に相補的な第２の鎖とを含む二重鎖を含み、第１の鎖は、ＲＮＡ転写産物に相補的である。特定の実施形態において、化合物は、（ｉ）修飾オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分を含む第１の鎖と、（ｉｉ）第１の鎖に相補的な第２の鎖とを含む二重鎖を含み、第２の鎖は、ＲＮＡ転写産物に相補的である。
【００９２】
特定の実施形態において、化合物は、ｍｉＲＮＡ模倣物である。
【００９３】
特定の実施形態において、化合物は、リボヌクレオチドを含む。特定の実施形態において、化合物は、デオキシリボヌクレオチドを含む。
【００９４】
特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドは、膵臓細胞または膵臓のβ膵島細胞等の細胞内のＲＮＡ転写産物に相補的である。
【００９５】
特定の実施形態において、ＲＮＡ転写産物は、プレｍＲＮＡ、ｍＲＮＡ、非コードＲＮＡ、またはｍｉＲＮＡである。
【００９６】
特定の実施形態において、ＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分は、ＧＬＰ−１受容体を標的とするペプチドコンジュゲート部分、小分子コンジュゲート部分、アプタマーコンジュゲート部分、または抗体コンジュゲート部分である。
【００９７】
特定の実施形態において、ペプチドコンジュゲート部分は、ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分である。
【００９８】
特定の実施形態において、ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分は、配列番号１〜５７のいずれかのアミノ酸配列の等長部分に対して少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％相同である少なくとも８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、または３１連続アミノ酸部分を含む。
【００９９】
特定の実施形態において、ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分は、配列番号１〜５７のいずれかのアミノ酸配列の等長部分に対して少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一である少なくとも８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、または３１連続アミノ酸部分を含む。
【０１００】
特定の実施形態において、ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分は、８〜５０アミノ酸長であり、かつその全長にわたって配列番号１〜５７のいずれかのアミノ酸配列に対して少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％相同である。
【０１０１】
特定の実施形態において、ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分は、その全長にわたって配列番号１〜５７のいずれかのアミノ酸配列に対して少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一である。
【０１０２】
特定の実施形態において、ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分は、ＧＬＰ−１（７−３７）：ＨＡＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＧＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧＲＧ（これは、従来の３文字表記では、Ｈｉｓ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ（配列番号１）である）のアミノ酸配列の等長部分に対して少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％相同である少なくとも８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、または３１連続アミノ酸部分を含む。
【０１０３】
特定の実施形態において、ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分は、ＧＬＰ−１（７−３７）のアミノ酸配列の等長部分に対して少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一である少なくとも８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、または３１連続アミノ酸部分を含む。
【０１０４】
特定の実施形態において、ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分は、８〜５０アミノ酸長であり、かつその全長にわたってＧＬＰ−１（７−３７）（配列番号１）のアミノ酸配列に対して少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％相同である。
【０１０５】
特定の実施形態において、ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分は、保存的アミノ酸置換、アミノ酸類似体、またはアミノ酸誘導体を含む。
【０１０６】
特定の実施形態において、ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分は、その全長にわたってＧＬＰ−１（７−３７）（配列番号１）のアミノ酸配列に対して少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一である。
【０１０７】
特定の実施形態において、ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分は、ＧＬＰ−１（７−３７）（配列番号１）のアミノ酸配列を含む。
【０１０８】
特定の実施形態において、ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分は、ＧＬＰ−１（７−３７）（配列番号１）のアミノ酸配列からなる。
【０１０９】
特定の実施形態において、ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分は、ＧＬＰ−１（７−３６）アミド：ＨＡＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＧＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧＲ−ＮＨ２（これは、従来の３文字表記では、Ｈｉｓ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−ＮＨ２（配列番号２）である）のアミノ酸配列を含む。
【０１１０】
特定の実施形態において、ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分は、ＧＬＰ−１（７−３６）アミド：（これは、従来の３文字表記では、Ｈｉｓ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−ＮＨ２（配列番号２）である）のアミノ酸配列からなる。
【０１１１】
特定の実施形態において、ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分は、ＧＬＰ−１（７−３６）：ＨＡＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＧＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧＲ（これは、従来の３文字表記では、Ｈｉｓ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ（配列番号２）である）のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる。
【０１１２】
特定の実施形態において、ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分は、アミノ酸配列：ＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＧＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧ（これは、従来の３文字表記では、Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ（配列番号３）である）を含む。
【０１１３】
特定の実施形態において、ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分は、アミノ酸配列：ＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＧＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧ（これは、従来の３文字表記では、Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ（配列番号３）である）からなる。
【０１１４】
特定の実施形態において、ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分は、アミノ酸配列：ＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＥＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧ（これは、従来の３文字表記では、Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ（配列番号４）である）を含む。
【０１１５】
特定の実施形態において、ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分は、アミノ酸配列：ＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＥＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧ（これは、従来の３文字表記では、Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ（配列番号４）である）からなる。
【０１１６】
特定の実施形態において、ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分は、配列番号１〜５７のいずれかのアミノ酸配列を含む。
【０１１７】
特定の実施形態において、ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分は、配列番号１〜５７のいずれかのアミノ酸配列からなる。
【０１１８】
特定の実施形態において、ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分は、配列番号１〜５７のいずれかのＣ−末端アミドまたは酸であり得る。
【０１１９】
特定の実施形態において、ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分は、アミノ酸配列：Ｈｉｓ−Ａｉｂ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ（配列番号２２）を含み、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸である。
【０１２０】
特定の実施形態において、ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分は、アミノ酸配列：Ｈｉｓ−Ａｉｂ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ（配列番号２２）からなり、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸である。
【０１２１】
特定の実施形態において、ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分は、アミノ酸配列：Ｈｉｓ−Ａｉｂ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｐｅｎ（配列番号２３）を含み、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸であり、およびＰｅｎは、ペニシラミンである。
【０１２２】
特定の実施形態において、ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分は、アミノ酸配列：Ｈｉｓ−Ａｉｂ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｐｅｎ（配列番号２３）からなり、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸であり、およびＰｅｎは、ペニシラミンである。
【０１２３】
特定の実施形態において、ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分は、ＧＬＰ−１受容体に結合することができる。
【０１２４】
特定の実施形態において、ＧＬＰ−１受容体は、細胞の表面上に発現される。
【０１２５】
特定の実施形態において、細胞は、β膵島細胞等の膵臓細胞である。
【０１２６】
特定の実施形態において、細胞は、動物内にある。
【０１２７】
特定の実施形態において、化合物は、少なくとも１つ、少なくとも２つ、少なくとも３つ、少なくとも４つ、または少なくとも５つのＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分を含む。
【０１２８】
特定の実施形態において、コンジュゲートリンカーは、ＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分をオリゴヌクレオチドの５’末端に結合する。
【０１２９】
特定の実施形態において、コンジュゲートリンカーは、ＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分をオリゴヌクレオチドの３’末端に結合する。
【０１３０】
特定の実施形態において、コンジュゲートリンカーは、開裂可能である。
【０１３１】
特定の実施形態において、コンジュゲートリンカーは、ジスルフィド結合を含む。
【０１３２】
特定の実施形態において、ジスルフィド結合は、ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分をオリゴヌクレオチドに結合する。
【０１３３】
特定の実施形態において、ジスルフィド結合は、ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分のＣ−末端をオリゴヌクレオチドの５’末端に結合する。
【０１３４】
特定の実施形態において、コンジュゲートリンカーは、１〜５個のリンカー−ヌクレオシドを含む。
【０１３５】
特定の実施形態において、コンジュゲートリンカーは、３個のリンカー−ヌクレオシドを含む。
【０１３６】
特定の実施形態において、３個のリンカー−ヌクレオシドは、ＴＣＡモチーフを有する。
【０１３７】
特定の実施形態において、１〜５個のリンカー−ヌクレオシドは、ＴＣＡモチーフを含まない。
【０１３８】
特定の実施形態において、コンジュゲートリンカーは、ヘキシルアミノ基を含む。
【０１３９】
特定の実施形態において、コンジュゲートリンカーは、ポリエチレングリコール基を含む。
【０１４０】
特定の実施形態において、コンジュゲートリンカーは、トリエチレングリコール基を含む。
【０１４１】
特定の実施形態において、コンジュゲートリンカーは、ホスフェート基を含む。
【０１４２】
特定の実施形態において、コンジュゲートリンカーは、
【化２】
2019516686.tif 000004
（式中、Ｘは、直接または間接的にＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分に付着し；および
Ｙは、直接または間接的に修飾オリゴヌクレオチドに付着する）
を含む。特定の実施形態において、Ｘは、Ｏを含む。特定の実施形態において、Ｙは、ホスフェート基を含む。特定の実施形態において、Ｘは、ジスルフィド結合によってＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分に付着する。
【０１４３】
特定の実施形態において、コンジュゲートリンカーは、
【化３】
2019516686.tif 000005
（式中、Ｘは、直接または間接的にＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分に付着し；および
Ｔ１は修飾オリゴヌクレオチドを含み；かつＢｘは、修飾または非修飾核酸塩基である）
を含む。特定の実施形態において、Ｘは、ジスルフィド結合を含む。
【０１４４】
特定の実施形態において、コンジュゲートリンカーは、
【化４】
2019516686.tif 000006
（式中、
ホスフェート基は、修飾オリゴヌクレオチドに連結され、かつＹは、コンジュゲート基に連結され；
Ｙは、ホスホジエステルまたはアミノ（−ＮＨ−）基であり；
Ｚは、式：
【化５】
2019516686.tif 000007
を有するピロリジニル基であり；
ｊは、０または１であり；
ｎは、約１〜約１０であり；
ｐは、１〜約１０であり；
ｍは、０または１〜４であり；および
Ｙがアミノである場合、ｍは、１である）
を含む。
【０１４５】
特定の実施形態において、Ｙは、アミノ（−ＮＨ−）またはホスホジエステル基である。特定の実施形態において、ｎは、３であり、およびｐは、３である。特定の実施形態において、ｎは、６であり、およびｐは、６である。特定の実施形態において、ｎは、２〜１０であり、およびｐは、２〜１０である。特定の実施形態において、ｎおよびｐは、異なる。特定の実施形態において、ｎおよびｐは、同じである。特定の実施形態において、ｍは、０または１である。特定の実施形態において、ｊは、０である。特定の実施形態において、ｊは、１であり、およびＺは、式：
【化６】
2019516686.tif 000008
を有する。
【０１４６】
特定の実施形態において、ｎは、２であり、およびｐは、３である。特定の実施形態において、ｎは、５であり、およびｐは、６である。
【０１４７】
特定の実施形態において、コンジュゲートリンカーは、
【化７】
2019516686.tif 000009
を含む。
【０１４８】
特定の実施形態において、コンジュゲートリンカーは、
【化８】
2019516686.tif 000010
を含む。
【０１４９】
特定の実施形態において、コンジュゲートリンカーを含む化合物は、
【化９】
2019516686.tif 000011
（式中
Ｎ−Ｎ＝Ｎは、ＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分のアジド基を表し、かつＸは、直接または間接的にＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分の残りの部分に付着し；および
Ｙは、直接または間接的にオリゴヌクレオチドに付着する）
を含む。
【０１５０】
特定の実施形態において、コンジュゲートリンカーを含む化合物は、
【化１０】
2019516686.tif 000012
（式中
Ｎ−Ｎ＝Ｎは、ＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分のアジド基を表し、かつＸは、直接または間接的にＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分の残りの部分に付着し；および
Ｙは、直接または間接的にオリゴヌクレオチドに付着する）
を含む。
【０１５１】
特定の実施形態において、コンジュゲートリンカーを含む化合物は、
【化１１】
2019516686.tif 000013
（式中
Ｎ−Ｎ＝Ｎは、ＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分のアジド基を表し、かつＸは、直接または間接的にＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分の残りの部分に付着し；および
Ｙは、直接または間接的にオリゴヌクレオチドに付着する）
を含む。
【０１５２】
特定の実施形態において、組成物は、本明細書に記載される少なくとも１つの化合物を含む。特定の実施形態において、医薬組成物は、本明細書に記載される少なくとも１つの化合物と、薬学的に許容可能な賦形剤とを含む。
【０１５３】
特定の実施形態において、細胞内の標的核酸の発現をモジュレートする方法は、細胞を前述の実施形態のいずれかの化合物と接触させ、それにより細胞内の核酸標的の発現をモジュレートすることを含む。特定の実施形態において、細胞は、細胞の表面上にＧＬＰ−１受容体を発現する。特定の実施形態において、細胞は、β膵島細胞等の膵臓細胞である。特定の実施形態において、細胞は、下垂体細胞、軟膜細胞、中枢神経系（ＣＮＳ）細胞、胃細胞、腸細胞、十二指腸細胞、回腸細胞、結腸細胞、乳房細胞、肺細胞、心臓細胞、甲状腺細胞、または腎臓細胞である。特定の実施形態において、表面上にＧＬＰ−１受容体を発現している細胞は、癌細胞である。特定の実施形態において、癌は、限定されるものではないが、褐色細胞腫、傍神経節腫、髄質甲状腺癌腫、副腎皮質腺腫、副甲状腺癌腫、および下垂体腺腫を含む内分泌癌である。特定の実施形態において、癌は、限定されるものではないが、髄膜腫、星状細胞腫、神経膠芽腫、上衣腫、およびシュワン腫を含む神経系癌である。特定の実施形態において、癌は、限定されるものではないが、髄芽腫、腎芽腫、および神経芽腫を含む胚性癌である。特定の実施形態において、癌は、限定されるものではないが、卵巣癌、前立腺癌、乳癌、結腸直腸癌、胃癌、膵臓癌、胆管細胞癌、肝癌、肺癌、およびリンパ腫を含む。特定の実施形態において、細胞を前述の実施形態のいずれかの化合物と接触させることは、核酸標的の発現を阻害する。特定の実施形態において、核酸標的は、プレｍＲＮＡ、ｍＲＮＡ、非コードＲＮＡ、またはｍｉＲＮＡである。特定の実施形態において、細胞は、動物内にある。
【０１５４】
特定の実施形態において、動物内の標的核酸の発現をモジュレートする方法は、前述の実施形態のいずれかの化合物を動物に投与することにより、動物内の標的核酸の発現をモジュレートすることを含む。特定の実施形態において、核酸標的の発現は、細胞の表面上にＧＬＰ−１受容体を発現している動物の細胞内でモジュレートされる。特定の実施形態において、核酸標的の発現は、動物のβ膵島細胞等の膵臓細胞内でモジュレートされる。特定の実施形態において、細胞は、β膵島細胞等の膵臓細胞である。特定の実施形態において、細胞は、下垂体細胞、軟膜細胞、十二指腸細胞、回腸細胞、結腸細胞、乳房細胞、肺細胞、または腎臓細胞である。特定の実施形態において、表面上にＧＬＰ−１受容体を発現している細胞は、癌細胞である。特定の実施形態において、癌は、限定されるものではないが、褐色細胞腫、傍神経節腫、髄質甲状腺癌腫、副腎皮質腺腫、副甲状腺癌腫、および下垂体腺腫を含む内分泌癌である。特定の実施形態において、癌は、限定されるものではないが、髄膜腫、星状細胞腫、神経膠芽腫、上衣腫、およびシュワン腫を含む神経系癌である。特定の実施形態において、癌は、限定されるものではないが、髄芽腫、腎芽腫、および神経芽腫を含む胚性癌である。特定の実施形態において、癌は、限定されるものではないが、卵巣癌、前立腺癌、乳癌、結腸直腸癌、胃癌、膵臓癌、胆管細胞癌、肝癌、肺癌、およびリンパ腫を含む。特定の実施形態において、化合物を投与することは、動物における核酸標的の発現を阻害する。特定の実施形態において、核酸標的は、プレｍＲＮＡ、ｍＲＮＡ、非コードＲＮＡ、またはｍｉＲＮＡである。
【０１５５】
本明細書では、癌の処置における医薬の製造のための、本明細書に記載される化合物の使用も提供される。本明細書では、癌の処置における使用のための、本明細書に記載される化合物も提供される。
【０１５６】
特定の実施形態において、化合物を調製する方法は、
【化１２】
2019516686.tif 000014
（式中、Ｘ１は、オリゴヌクレオチドであり、および化合物は、ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化オリゴヌクレオチドである）
をＧＬＰ−１ペプチドと反応させることを含む。
【０１５７】
特定の実施形態において、化合物を調製する方法は、
オリゴヌクレオチドであって、オリゴヌクレオチドの５’末端にヘキサメチルリンカーおよび末端アミンを含むオリゴヌクレオチドを、式：
【化１３】
2019516686.tif 000015
を有する３−（２−ピリジルジチオプロピオン酸Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル）と反応させ、それにより、式：
【化１４】
2019516686.tif 000016
（式中、Ｘ１は、オリゴヌクレオチドである）；
を有する化合物２を得ることと、
化合物２をＧＬＰ−１ペプチドと反応させ、それにより、式：
【化１５】
2019516686.tif 000017
（式中、Ｘ１は、オリゴヌクレオチドであり、およびＸ２は、ＧＬＰ−１ペプチドである）
を有するＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化オリゴヌクレオチドを得ることと
を含む。
【０１５８】
特定の実施形態において、ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化オリゴヌクレオチドを調製する方法は、
オリゴヌクレオチドであって、オリゴヌクレオチドの５’末端にヘキサメチルリンカーおよび末端アミンを含むオリゴヌクレオチドを含む溶液を、式：
【化１６】
2019516686.tif 000018
を有する３−（２−ピリジルジチオプロピオン酸Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル）を含む溶液と混合し、それにより、式：
【化１７】
2019516686.tif 000019
（式中、Ｘ１は、オリゴヌクレオチドである）
を有する化合物２を得ることと、
化合物２を含む溶液を、ＧＬＰ−１ペプチドを含む溶液と混合し、それにより、式：
【化１８】
2019516686.tif 000020
（式中、Ｘ１は、オリゴヌクレオチドであり、およびＸ２は、ＧＬＰ−１ペプチドである）
を有するＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化オリゴヌクレオチドを得ることと
を含む。
【０１５９】
特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドを含む溶液は、リン酸ナトリウム緩衝液を含み、および３−（２−ピリジルジチオプロピオン酸Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル）を含む溶液は、ジメチルホルムアミドを含む。
【０１６０】
特定の実施形態において、溶液は、室温で混合される。
【０１６１】
特定の実施形態において、化合物２を含む溶液は、アセトニトリルおよびＮａＨＣＯ３をさらに含み、かつ約８．０のｐＨを有する。
【０１６２】
特定の実施形態において、ＧＬＰ−１ペプチド含む溶液は、ジメチルホルムアミドをさらに含む。
【０１６３】
化合物またはＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化オリゴヌクレオチドを調製する前述の方法のいずれかにおいて、ＧＬＰ−１ペプチドは、配列番号１〜５７のいずれかのアミノ酸配列の等長部分に対して少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％相同である少なくとも８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、または３１連続アミノ酸部分を含むことができる。
【０１６４】
化合物またはＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化オリゴヌクレオチドを調製する前述の方法のいずれかにおいて、ＧＬＰ−１ペプチドは、配列番号１〜５７のいずれかのアミノ酸配列の等長部分に対して少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％同一である少なくとも８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、または３１連続アミノ酸部分を含むことができる。
【０１６５】
化合物またはＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化オリゴヌクレオチドを調製する前述の方法のいずれかにおいて、ＧＬＰ−１ペプチドは、８〜５０アミノ酸長であり得、かつその全長にわたって配列番号１〜５７のいずれかのアミノ酸配列に対して少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％相同である。
【０１６６】
化合物またはＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化オリゴヌクレオチドを調製する前述の方法のいずれかにおいて、ＧＬＰ−１ペプチドは、その全長にわたって配列番号１〜５７のいずれかのアミノ酸配列に対して少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％同一であり得る。
【０１６７】
化合物またはＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化オリゴヌクレオチドを調製する前述の方法のいずれかにおいて、ＧＬＰ−１ペプチドは、ＧＬＰ−１（７−３７）：ＨＡＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＧＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧＲＧ（これは、従来の３文字表記では、Ｈｉｓ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ（配列番号１）である）のアミノ酸配列の等長部分に対して少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％相同である少なくとも８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、または３１連続アミノ酸部分を含むことができる。
【０１６８】
化合物またはＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化オリゴヌクレオチドを調製する前述の方法のいずれかにおいて、ＧＬＰ−１ペプチドは、ＧＬＰ−１（７−３７）のアミノ酸配列の等長部分に対して少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％同一である少なくとも８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、または３１連続アミノ酸部分を含むことができる。
【０１６９】
化合物またはＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化オリゴヌクレオチドを調製する前述の方法のいずれかにおいて、ＧＬＰ−１ペプチドは、８〜５０アミノ酸長であり得、かつその全長にわたってＧＬＰ−１（７−３７）（配列番号１）のアミノ酸配列に対して少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％相同である。
【０１７０】
化合物またはＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化オリゴヌクレオチドを調製する前述の方法のいずれかにおいて、ＧＬＰ−１ペプチドは、その全長にわたってＧＬＰ−１（７−３７）（配列番号１）のアミノ酸配列に対して少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％同一であり得る。
【０１７１】
化合物またはＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化オリゴヌクレオチドを調製する前述の方法のいずれかにおいて、ＧＬＰ−１ペプチドは、ＧＬＰ−１（７−３７）（配列番号１）のアミノ酸配列を含むことができる。
【０１７２】
化合物またはＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化オリゴヌクレオチドを調製する前述の方法のいずれかにおいて、ＧＬＰ−１ペプチドは、ＧＬＰ−１（７−３７）（配列番号１）のアミノ酸配列からなることができる。
【０１７３】
化合物またはＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化オリゴヌクレオチドを調製する前述の方法のいずれかにおいて、ＧＬＰ−１ペプチドは、ＧＬＰ−１（７−３６）アミド：ＨＡＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＧＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧＲ−ＮＨ２（これは、従来の３文字表記では、Ｈｉｓ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−ＮＨ２（配列番号２）である）のアミノ酸配列を含むことができる。
【０１７４】
化合物またはＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化オリゴヌクレオチドを調製する前述の方法のいずれかにおいて、ＧＬＰ−１ペプチドは、ＧＬＰ−１（７−３６）アミド（配列番号２）のアミノ酸配列からなることができる。
【０１７５】
化合物またはＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化オリゴヌクレオチドを調製する前述の方法のいずれかにおいて、ＧＬＰ−１ペプチドは、ＧＬＰ−１（７−３６）：ＨＡＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＧＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧＲ（これは、従来の３文字表記では、Ｈｉｓ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ（配列番号２）である）のアミノ酸配列を含むことができる。
【０１７６】
化合物またはＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化オリゴヌクレオチドを調製する前述の方法のいずれかにおいて、ＧＬＰ−１ペプチドは、アミノ酸配列：ＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＧＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧ（これは、従来の３文字表記では、Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ（配列番号３）である）を含むことができる。
【０１７７】
化合物またはＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化オリゴヌクレオチドを調製する前述の方法のいずれかにおいて、ＧＬＰ−１ペプチドは、アミノ酸配列：ＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＧＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧ（これは、従来の３文字表記では、Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ（配列番号３）である）からなることができる。
【０１７８】
化合物またはＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化オリゴヌクレオチドを調製する前述の方法のいずれかにおいて、ＧＬＰ−１ペプチドは、アミノ酸配列：ＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＥＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧ、Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ（配列番号４）を含むことができる。
【０１７９】
化合物またはＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化オリゴヌクレオチドを調製する前述の方法のいずれかにおいて、ＧＬＰ−１ペプチドは、アミノ酸配列：ＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＥＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧ、Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ（配列番号４）からなることができる。
【０１８０】
化合物またはＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化オリゴヌクレオチドを調製する前述の方法のいずれかにおいて、ＧＬＰ−１ペプチドは、配列番号１〜５７のいずれかのアミノ酸配列を含むことができる。
【０１８１】
化合物またはＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化オリゴヌクレオチドを調製する前述の方法のいずれかにおいて、ＧＬＰ−１ペプチドは、配列番号１〜５７のいずれかのアミノ酸配列からなることができる。
【０１８２】
化合物またはＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化オリゴヌクレオチドを調製する前述の方法のいずれかにおいて、ＧＬＰ−１ペプチドは、アミノ酸配列：Ｈｉｓ−Ａｉｂ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ（配列番号２２）を含むことができ、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸である。
【０１８３】
化合物またはＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化オリゴヌクレオチドを調製する前述の方法のいずれかにおいて、ＧＬＰ−１ペプチドは、アミノ酸配列：Ｈｉｓ−Ａｉｂ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ（配列番号２２）からなることができ、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸である。
【０１８４】
化合物またはＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化オリゴヌクレオチドを調製する前述の方法のいずれかにおいて、ＧＬＰ−１ペプチドは、アミノ酸配列：Ｈｉｓ−Ａｉｂ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｐｅｎ（配列番号２３）を含むことができ、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸であり、およびＰｅｎは、ペニシラミンである。
【０１８５】
化合物またはＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化オリゴヌクレオチドを調製する前述の方法のいずれかにおいて、ＧＬＰ−１ペプチドは、アミノ酸配列：Ｈｉｓ−Ａｉｂ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｐｅｎ（配列番号２３）からなることができ、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸であり、およびＰｅｎは、ペニシラミンである。
【０１８６】
化合物またはＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化オリゴヌクレオチドを調製する前述の方法のいずれかにおいて、ＧＬＰ−１ペプチドは、反応性硫黄部分を含むことができる。
【０１８７】
化合物またはＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化オリゴヌクレオチドを調製する前述の方法のいずれかにおいて、ＧＬＰ−１ペプチドは、ペニシラミンを含むことができる。
【０１８８】
化合物またはＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化オリゴヌクレオチドを調製する前述の方法のいずれかにおいて、ペニシラミンは、ＧＬＰ−１ペプチドのＣ−末端に結合され得る。
【０１８９】
オリゴヌクレオチドを含む特定の化合物
特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物は、アンチセンス化合物であり得る。特定の実施形態において、アンチセンス化合物は、オリゴマー化合物を含むかまたはそれらからなる。特定の実施形態において、オリゴマー化合物は、修飾オリゴヌクレオチド等のオリゴヌクレオチドを含む。特定の実施形態において、修飾オリゴヌクレオチドは、標的核酸の核酸塩基配列に相補的な核酸塩基配列を有する。
【０１９０】
特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物は、修飾オリゴヌクレオチドを含むかまたはそれらからなる。特定の実施形態において、修飾オリゴヌクレオチドは、標的核酸の核酸塩基配列に相補的な核酸塩基配列を有する。
【０１９１】
特定の実施形態において、化合物またはアンチセンス化合物は、一本鎖である。そのような一本鎖化合物またはアンチセンス化合物は、オリゴマー化合物を含むかまたはそれらからなる。特定の実施形態において、そのようなオリゴマー化合物は、オリゴヌクレオチドおよび場合によりコンジュゲート基を含むかまたはそれらからなる。特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドは、アンチセンスオリゴヌクレオチドである。特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドは、修飾されている。特定の実施形態において、一本鎖アンチセンス化合物またはオリゴマー化合物のオリゴヌクレオチドは、自己相補的な核酸塩基配列を含む。
【０１９２】
特定の実施形態において、化合物は、二本鎖である。そのような二本鎖化合物は、標的核酸に相補的な領域を有する第１の修飾オリゴヌクレオチドと、第１の修飾オリゴヌクレオチドに相補的な領域を有する第２の修飾オリゴヌクレオチドとを含む。特定の実施形態において、修飾オリゴヌクレオチドは、ＲＮＡオリゴヌクレオチドである。そのような実施形態では、修飾オリゴヌクレオチド中のチミン核酸塩基は、ウラシル核酸塩基で置き換えられている。特定の実施形態において、化合物は、コンジュゲート基を含む。特定の実施形態において、修飾オリゴヌクレオチドの１つは、コンジュゲートされている。特定の実施形態において、修飾オリゴヌクレオチドの両方は、コンジュゲートされている。特定の実施形態において、第１の修飾オリゴヌクレオチドは、コンジュゲートされている。特定の実施形態において、第２の修飾オリゴヌクレオチドは、コンジュゲートされている。特定の実施形態において、第１の修飾オリゴヌクレオチドは、１２〜３０個の結合ヌクレオシドの長さであり、第２の修飾オリゴヌクレオチドは、１２〜３０個の結合ヌクレオシドの長さである。特定の実施形態において、アンチセンス化合物は、二本鎖である。そのような二本鎖アンチセンス化合物は、標的核酸に相補的な領域を有する第１のオリゴマー化合物と、第１のオリゴマー化合物に相補的な領域を有する第２のオリゴマー化合物とを含む。そのような二本鎖アンチセンス化合物の第１のオリゴマー化合物は、一般に修飾オリゴヌクレオチドおよび場合によりコンジュゲート基を含むかまたはそれらからなる。そのような二本鎖アンチセンス化合物の第２のオリゴマー化合物のオリゴヌクレオチドは、修飾または非修飾であり得る。二本鎖アンチセンス化合物のいずれかまたは両方のオリゴマー化合物は、コンジュゲート基を含むことができる。二本鎖アンチセンス化合物のオリゴマー化合物は、非相補的なオーバーハンギングヌクレオシドを含むことができる。
【０１９３】
特定の実施形態において、化合物は、（ｉ）修飾オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分を含む第１の鎖と、（ｉｉ）第１の鎖に相補的な第２の鎖とを含む二重鎖を含む。特定の実施形態において、化合物は、（ｉ）修飾オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分を含む第１の鎖と、（ｉｉ）第１の鎖に相補的な第２の鎖とを含む二重鎖を含み、第１の鎖は、ＲＮＡ転写産物に相補的である。特定の実施形態において、化合物は、（ｉ）修飾オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分を含む第１の鎖と、（ｉｉ）第１の鎖に相補的な第２の鎖とを含む二重鎖を含み、第２の鎖は、ＲＮＡ転写産物に相補的である。
【０１９４】
一本鎖および二本鎖化合物の例としては、限定されるものではないが、オリゴヌクレオチド、ｓｉＲＮＡｓ、オリゴヌクレオチドを標的化するマイクロＲＮＡ、および一本鎖ＲＮＡｉ化合物、例えば小ヘアピンＲＮＡｓ（ｓｈＲＮＡｓ）、一本鎖ｓｉＲＮＡｓ（ｓｓＲＮＡｓ）、およびマイクロＲＮＡ模倣物が挙げられる。
【０１９５】
特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物は、５’から３’の方向に記述された場合、標的化される標的核酸の標的セグメントの逆相補配列を含む核酸塩基配列を有する。
【０１９６】
特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物は、１０〜３０結合サブユニット長のオリゴヌクレオチドを含む。特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物は、１２〜３０結合サブユニット長のオリゴヌクレオチドを含む。特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物は、１２〜２２結合サブユニット長のオリゴヌクレオチドを含む。特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物は、１４〜３０結合サブユニット長のオリゴヌクレオチドを含む。特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物は、１４〜２０結合サブユニット長のオリゴヌクレオチドを含む。特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物は、１５〜３０結合サブユニット長のオリゴヌクレオチドを含む。特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物は、１５〜２０結合サブユニット長のオリゴヌクレオチドを含む。特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物は、１６〜３０結合サブユニット長のオリゴヌクレオチドを含む。特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物は、１６〜２０結合サブユニット長のオリゴヌクレオチドを含む。特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物は、１７〜３０結合サブユニット長のオリゴヌクレオチドを含む。特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物は、１７〜２０結合サブユニット長のオリゴヌクレオチドを含む。特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物は、１８〜３０結合サブユニット長のオリゴヌクレオチドを含む。特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物は、１８〜２１結合サブユニット長のオリゴヌクレオチドを含む。特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物は、１８〜２０結合サブユニット長のオリゴヌクレオチドを含む。特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物は、２０〜３０結合サブユニット長のオリゴヌクレオチドを含む。換言すれば、そのようなオリゴヌクレオチドは、それぞれ１２〜３０結合サブユニット、１４〜３０結合サブユニット、１４〜２０サブユニット、１５〜３０サブユニット、１５〜２０サブユニット、１６〜３０サブユニット、１６〜２０サブユニット、１７〜３０サブユニット、１７〜２０サブユニット、１８〜３０サブユニット、１８〜２０サブユニット、１８〜２１サブユニット、２０〜３０サブユニット、または１２〜２２結合サブユニット長である。特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物は、１４結合サブユニット長のオリゴヌクレオチドを含む。特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物は、１６結合サブユニット長のオリゴヌクレオチドを含む。特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物は、１７結合サブユニット長のオリゴヌクレオチドを含む。特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物は、１８結合サブユニット長のオリゴヌクレオチドを含む。特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物は、１９結合サブユニット長のオリゴヌクレオチドを含む。特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物は、２０結合サブユニット長のオリゴヌクレオチドを含む。別の実施形態では、本明細書に記載される化合物は、８〜８０、１２〜５０、１３〜３０、１３〜５０、１４〜３０、１４〜５０、１５〜３０、１５〜５０、１６〜３０、１６〜５０、１７〜３０、１７〜５０、１８〜２２、１８〜２４、１８〜３０、１８〜５０、１９〜２２、１９〜３０、１９〜５０、または２０〜３０結合サブユニットのオリゴヌクレオチドを含む。特定のこのような実施形態において、本明細書に記載される化合物は、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９もしくは８０、または上記の値の任意の２つにより規定される範囲の結合サブユニット長のオリゴヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態において、結合サブユニットは、ヌクレオチド、ヌクレオシド、または核酸塩基である。
【０１９７】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチドに付着した、コンジュゲート基等の追加の特徴部または要素をさらに含むことができる。特定の実施形態において、そのような化合物は、アンチセンス化合物である。特定の実施形態において、そのような化合物は、オリゴマー化合物である。コンジュゲート基がヌクレオシド（すなわちコンジュゲート基をオリゴヌクレオチドに結合するヌクレオシド）を含む実施形態では、コンジュゲート基のヌクレオシドは、オリゴヌクレオチドの長さに数えられない。
【０１９８】
特定の実施形態において、化合物は、短縮またはトランケートされていてよい。例えば、単一サブユニットは、５’末端から（５’トランケーション）、または代替的に３’末端から（３’トランケーション）欠失していてよい。核酸を標的とする短縮またはトランケート化合物は、化合物の５’末端から２つのサブユニットが欠失していてよく、または代替的に３’末端から２つのサブユニットが欠失していてよい。代替的に、欠失されるヌクレオシドは、化合物全体にわたり分散していてよい。
【０１９９】
単一の追加のサブユニットが延長化合物中に存在する場合、追加のサブユニットは、化合物の５’または３’末端に位置することができる。２つ以上の追加のサブユニットが存在する場合、追加されたサブユニットは、互いに隣接し、例えば化合物中で２つのサブユニットが化合物の５’末端に加えられ（５’付加）、または代替的に３’末端に加えられ得る（３’付加）。代替的に、追加されたサブユニットは、化合物全体に分散されてもよい。
【０２００】
活性を排除せずに、オリゴヌクレオチド等の化合物の長さを増加もしくは減少させ、および／またはミスマッチ塩基を導入することが可能である（Ｗｏｏｌｆ  ｅｔ  ａｌ．（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８９：７３０５−７３０９，１９９２；Ｇａｕｔｓｃｈｉ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｎａｔｌ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔ．９３：４６３−４７１，Ｍａｒｃｈ  ２００１；Ｍａｈｅｒ  ａｎｄ  Ｄｏｌｎｉｃｋ  Ｎｕｃ．Ａｃｉｄ．Ｒｅｓ．１６：３３４１−３３５８，１９８８）。しかしながら、オリゴヌクレオチド配列、化学構造およびモチーフの一見小さい変化が、臨床開発に要求される多くの特性の１つ以上の大きい差異をもたらし得る（Ｓｅｔｈ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００９，５２，１０；Ｅｇｌｉ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．２０１１，１３３，１６６４２）。
【０２０１】
特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物は、干渉ＲＮＡ化合物（ＲＮＡｉ）であり、それとしては二本鎖ＲＮＡ化合物（短鎖干渉ＲＮＡまたはｓｉＲＮＡとも称される）および一本鎖ＲＮＡｉ化合物（またはｓｓＲＮＡ）が挙げられる。このような化合物は、少なくとも部分的にＲＩＳＣ経路を介して機能して標的核酸を分解および／または封鎖する（従って、マイクロＲＮＡ／マイクロＲＮＡ模倣化合物が挙げられる）。本明細書において使用されるｓｉＲＮＡという用語は、配列特異的ＲＮＡｉを媒介し得る核酸分子、例えば短鎖干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、二本鎖ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）、マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）、短鎖ヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）、短鎖干渉オリゴヌクレオチド、短鎖干渉核酸、短鎖干渉修飾オリゴヌクレオチド、化学修飾ｓｉＲＮＡ、転写後遺伝子サイレンシングＲＮＡ（ｐｔｇｓＲＮＡ）などを説明するために使用される他の用語と均等であることを意味する。さらに、本明細書において使用される「ＲＮＡｉ」という用語は、配列特異的ＲＮＡ干渉、例えば転写後遺伝子サイレンシング、翻訳阻害、またはエピジェネティクスを説明するために使用される他の用語と均等であることを意味する。
【０２０２】
特定の実施形態において、化合物の第１の鎖は、ｓｉＲＮＡガイド鎖であり、化合物の第２の鎖は、ｓｉＲＮＡパッセンジャー鎖である。特定の実施形態において、化合物の第２の鎖は、第１の鎖に相補的である。特定の実施形態において、化合物の各鎖は、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、または２３個の結合ヌクレオシドの長さである。特定の実施形態において、化合物の第１または第２の鎖は、コンジュゲート基を含むことができる。
【０２０３】
特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物は、修飾オリゴヌクレオチドを含む。特定の修飾オリゴヌクレオチドは、１つ以上の不斉中心を有し、従ってエナンチオマー、ジアステレオマー、および他の立体異性体構造を生じ、その立体異性体構造は、絶対立体化学の観点から（Ｒ）または（Ｓ）、例えば糖アノマーに関するαもしくはβ、またはアミノ酸に関する（Ｄ）もしくは（Ｌ）等と規定され得る。本明細書に提供される修飾オリゴヌクレオチドには、別途明記しない限り、それらのラセミおよび光学的に純粋な形態を含む全てのそのような可能な異性体が含まれる。同様に、全てのシス−およびトランス−異性体ならびに互変異性型も含まれる。
【０２０４】
本明細書に記載される化合物は、１つ以上の原子が、示される元素の非放射性同位体または放射性同位体で置き換えられたバリエーションを含む。例えば、水素原子を含む本明細書の化合物は、各１Ｈ水素原子の全ての可能な重水素置換を包含する。本明細書の化合物により包含される同位体置換としては、限定されるものではないが、１Ｈの代わりに２Ｈまたは３Ｈ、１２Ｃの代わりに１３Ｃまたは１４Ｃ、１４Ｎの代わりに１５Ｎ、１６Ｏの代わりに１７Ｏまたは１８Ｏ、および３２Ｓの代わりに３３Ｓ、３４Ｓ、３５Ｓ、または３６Ｓが挙げられる。特定の実施形態において、非放射性同位体置換は、治療または研究ツールとして使用するための有益な新たな特性を化合物に付与し得る。特定の実施形態において、放射性同位体置換は、画像化アッセイ等の研究または診断目的に好適な化合物を作製し得る。
【０２０５】
特定の機構
特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物は、修飾オリゴヌクレオチドを含むかまたはそれからなる。特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物は、アンチセンス化合物である。特定の実施形態において、化合物は、オリゴマー化合物を含む。特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物は、標的核酸にハイブリダイズして、少なくとも１つのアンチセンス活性をもたらすことが可能である。特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物は、１つ以上の標的核酸に選択的に影響する。そのような化合物は、１つ以上の標的核酸にハイブリダイズして、１つ以上の所望のアンチセンス活性をもたらし、かつ１つ以上の非標的核酸にハイブリダイズせず、または望ましくない有意なアンチセンス活性をもたらすような方法で１つ以上の非標的核酸にハイブリダイズしない、核酸塩基配列を含む。
【０２０６】
特定のアンチセンス活性において、本明細書に記載される化合物の標的核酸へのハイブリダイゼーションは、標的核酸を開裂させるタンパク質のリクルートメントをもたらす。例えば、特定の本明細書に記載される化合物は、標的核酸のＲＮアーゼＨ媒介開裂をもたらす。ＲＮアーゼＨは、ＲＮＡ：ＤＮＡ二重鎖のＲＮＡ鎖を開裂させる細胞エンドヌクレアーゼである。このようなＲＮＡ：ＤＮＡ二重鎖におけるＤＮＡは、非修飾ＤＮＡである必要はない。特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物は、ＲＮアーゼＨ活性を誘発するために十分に「ＤＮＡ様」である。さらに、特定の実施形態において、ギャップマーのギャップ中１つ以上の非ＤＮＡ様ヌクレオシドは、忍容される。
【０２０７】
特定のアンチセンス活性において、本明細書に記載される化合物または化合物の一部は、ＲＮＡ誘導サイレンシング複合体（ＲＩＳＣ）中に積まれ、最終的に標的核酸の開裂をもたらす。例えば、特定の本明細書に記載される化合物は、Ａｒｇｏｎａｕｔｅによる標的核酸の開裂をもたらす。ＲＩＳＣ中に積まれる化合物は、ＲＮＡｉ化合物である。ＲＮＡｉ化合物は、二本鎖（ｓｉＲＮＡ）または一本鎖（ｓｓＲＮＡ）であり得る。
【０２０８】
特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物の標的核酸へのハイブリダイゼーションは、標的核酸を開裂するタンパク質のリクルートメントをもたらさない。特定のこのような実施形態において、標的核酸への化合物のハイブリダイゼーションは、標的核酸のスプライシングの変動をもたらす。特定の実施形態において、標的核酸への化合物のハイブリダイゼーションは、標的核酸とタンパク質または他の核酸との間の結合相互作用の阻害をもたらす。特定のこのような実施形態において、標的核酸への化合物のハイブリダイゼーションは、標的核酸の翻訳の変動をもたらす。
【０２０９】
アンチセンス活性は、直接または間接的に観察することができる。特定の実施形態において、アンチセンス活性の観察または検出は、標的核酸もしくはそのような標的核酸によりコードされるタンパク質の量の変化、核酸もしくはタンパク質のスプライスバリアントの比の変化、および／または細胞もしくは動物における表現型変化の観察または検出を含む。
【０２１０】
標的核酸、標的領域およびヌクレオチド配列
特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物は、標的核酸に相補的な領域を含むオリゴヌクレオチドを含むかまたはそれからなる。特定の実施形態において、標的核酸は、内因性ＲＮＡ分子である。特定の実施形態において、標的核酸は、非コードＲＮＡである。特定の実施形態において、標的核酸は、タンパク質をコードする。特定のこのような実施形態において、標的核酸は、イントロン、エクソンおよび未翻訳領域を含むｍＲＮＡおよびプレｍＲＮＡから選択される。特定の実施形態において、標的ＲＮＡは、ｍＲＮＡである。特定の実施形態において、標的核酸は、プレｍＲＮＡである。特定のこのような実施形態において、標的領域は、完全にイントロン内に存在する。特定の実施形態において、標的領域は、イントロン／エクソンジャンクションに跨る。特定の実施形態において、標的領域は、イントロン内に少なくとも５０％存在する。特定の実施形態において、標的核酸は、ＧＬＰ−１受容体を発現している細胞内に存在する。特定の実施形態において、ＧＬＰ−１受容体発現細胞は、β膵島細胞等の膵臓細胞である。
【０２１１】
ハイブリダイゼーション
一部の実施形態において、ハイブリダイゼーションは、本明細書に開示の化合物と、標的核酸との間で生じる。ハイブリダイゼーションの最も一般的な機序は、核酸分子の相補的核酸塩基間の水素結合（例えば、ワトソン・クリック、フーグスティーンまたは逆フーグスティーン型水素結合）を含む。
【０２１２】
ハイブリダイゼーションは、変動条件下で生じ得る。ハイブリダイゼーション条件は、配列依存的であり、ハイブリダイズされる核酸分子の性質および組成により決定される。
【０２１３】
配列が標的核酸に特異的にハイブリダイズするか否かを決定する方法は、当技術分野において周知である。特定の実施形態において、本明細書に提供される化合物は、標的核酸と特異的にハイブリダイズ可能である。
【０２１４】
相補性
オリゴヌクレオチドは、そのようなオリゴヌクレオチドまたはその１つ以上の領域の核酸塩基配列が別のオリゴヌクレオチドまたは核酸またはその１つ以上の領域の核酸塩基配列に、この２つの核酸塩基配列を逆方向にアラインした場合にマッチする場合、別の核酸に相補的であると記載される。本明細書に記載の核酸塩基マッチまたは相補的核酸塩基は、別途規定されない限り、以下の対：アデニン（Ａ）およびチミン（Ｔ）、アデニン（Ａ）およびウラシル（Ｕ）、シトシン（Ｃ）およびグアニン（Ｇ）、ならびに５−メチルシトシン（ｍＣ）およびグアニン（Ｇ）に限定される。相補的オリゴヌクレオチドおよび／または核酸は、それぞれのヌクレオシドにおける核酸塩基相補性を有する必要はなく、１つ以上の核酸塩基ミスマッチを含み得る。オリゴヌクレオチドは、そのようなオリゴヌクレオチドがいかなる核酸塩基ミスマッチも有さずにそれぞれのヌクレオシドにおける核酸塩基マッチを有する場合、完全相補的または１００％相補的である。
【０２１５】
特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物は、修飾オリゴヌクレオチドを含むかまたはそれらからなる。特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物は、アンチセンス化合物である。特定の実施形態において、化合物は、オリゴマー化合物を含む。化合物と標的核酸との間の非相補的核酸塩基は、標的核酸に特異的にハイブリダイズできる状態のままである場合、忍容され得る。さらに、化合物は、標的核酸の１つ以上のセグメントにわたってハイブリダイズし得るため、介在または隣接セグメントは、ハイブリダイゼーション事象に関与しない（例えば、ループ構造、ミスマッチまたはヘアピン構造）。
【０２１６】
特定の実施形態において、本明細書に提供される化合物またはその特定の部分は、少なくとも７０％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％、またはこれらまで、標的核酸、標的領域、標的セグメント、またはその特定の部分に相補的である。特定の実施形態において、本明細書に提供される化合物またはその特定の部分は、７０％〜７５％、７５％〜８０％、８０％〜８５％、８５％〜９０％、９０％〜９５％、９５％〜１００％、またはこれらの範囲の任意の数、標的核酸、標的領域、標的セグメント、またはその特定の部分に相補的である。標的核酸との化合物の相補性のパーセントは、日常的な方法を用いて決定することができる。
【０２１７】
例えば、化合物の２０核酸塩基のうちの１８が標的領域に相補的であり、従って特異的にハイブリダイズする化合物は、９０パーセント相補性を表すであろう。この例では、残りの非相補的核酸塩基は、相補的な核酸塩基間にクラスター化または散在し得、互いにまたは相補的な核酸塩基に連続する必要はない。従って、標的核酸と完全に相補的な２つの領域に隣接する４つの非相補的核酸塩基を有する１８核酸塩基長の化合物は、標的核酸と７７．８％の全体的な相補性を有するであろう。標的核酸の領域との化合物のパーセント相補性は、当技術分野で既知のＢＬＡＳＴプログラム（ベーシックローカルアラインメント検索ツール）およびＰｏｗｅｒＢＬＡＳＴプログラム（Ａｌｔｓｃｈｕｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，１９９０，２１５，４０３  ４１０；Ｚｈａｎｇ  ａｎｄ  Ｍａｄｄｅｎ，Ｇｅｎｏｍｅ  Ｒｅｓ．，１９９７，７，６４９  ６５６）を使用して定型的に決定することができる。相同性パーセント、配列同一性パーセントまたは相補性パーセントは、例えば、ＳｍｉｔｈおよびＷａｔｅｒｍａｎのアルゴリズム（Ａｄｖ．Ａｐｐｌ．Ｍａｔｈ．，１９８１，２，４８２  ４８９）を使用するＧａｐプログラム（Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  Ｐａｃｋａｇｅ，Ｖｅｒｓｉｏｎ  ８  ｆｏｒ  Ｕｎｉｘ，Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  Ｃｏｍｐｕｔｅｒ  Ｇｒｏｕｐ，Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｐａｒｋ，Ｍａｄｉｓｏｎ  Ｗｉｓ．）のデフォルト設定を使用して決定することができる。
【０２１８】
特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物またはその特定の部分は、標的核酸またはその特定の部分に完全に相補的（すなわち１００％相補的）である。例えば、化合物は、標的核酸、またはその標的領域、もしくは標的セグメント、もしくは標的配列に完全に相補的であり得る。本明細書において使用される「完全に相補的」は、化合物の各核酸塩基が標的核酸の対応する核酸塩基に相補的であることを意味する。例えば、２０核酸塩基化合物は、その化合物に完全に相補的である、標的核酸の２０核酸塩基部分が存在する限り、４００核酸塩基長である標的配列に完全に相補的である。完全に相補的は、第１および／または第２の核酸の特定の部分に関連して使用することもできる。例えば、３０核酸塩基化合物の２０核酸塩基部分は、４００核酸塩基長である標的配列に「完全に相補的」であり得る。３０核酸塩基化合物の２０核酸塩基部分は、標的配列が、各核酸塩基が化合物の２０核酸塩基部分に相補的な対応する２０核酸塩基部分を有する場合、標的配列に完全に相補的である。同時に、３０核酸塩基化合物の全体は、化合物の残りの１０核酸塩基が標的配列に相補的であるか否かに応じて、標的配列に完全に相補的であってもなくてもよい。
【０２１９】
特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物は、標的核酸に対してミスマッチされた１つ以上の核酸塩基を含む。特定のこのような実施形態において、標的に対するアンチセンス活性は、そのようなミスマッチにより低減されるが、非標的に対する活性の方がより低減される。従って、特定のこのような実施形態において、化合物の選択性が改善される。特定の実施形態において、ミスマッチは、ギャップマーモチーフを有するオリゴヌクレオチド内に特異的に位置する。特定のこのような実施形態において、ミスマッチは、ギャップ領域の５’末端から１、２、３、４、５、６、７、または８位に存在する。特定のこのような実施形態において、ミスマッチは、ギャップ領域の３’末端から９、８、７、６、５、４、３、２、１位に存在する。特定のこのような実施形態において、ミスマッチは、ウイング領域の５’末端から１、２、３、または４位に存在する。特定のこのような実施形態において、ミスマッチは、ウイング領域の３’末端から４、３、２、または１位に存在する。特定の実施形態において、ミスマッチは、ギャップマーモチーフを有さないオリゴヌクレオチド内に特異的に位置する。特定のこのような実施形態において、ミスマッチは、オリゴヌクレオチドの５’末端から１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２位に存在する。特定のこのような実施形態において、ミスマッチは、オリゴヌクレオチドの３’末端から１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２位に存在する。
【０２２０】
非相補的核酸塩基の局在は、化合物の５’末端または３’末端におけるものであり得る。代替的に、１つまたは複数の非相補的核酸塩基は、化合物の内部位置に存在し得る。２つ以上の非相補的核酸塩基が存在する場合、それらは連続的（すなわち結合している）または非連続的であり得る。一実施形態において、非相補的核酸塩基は、ギャップマーオリゴヌクレオチドのウイングセグメント中に局在する。
【０２２１】
特定の実施形態において、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、もしくは２０個の核酸塩基長であり、または最大１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、もしくは２０個の核酸塩基長である、本明細書に記載される化合物は、標的核酸、例えば標的核酸、またはその規定の一部に対して４つ以下、３つ以下、２つ以下、または１つ以下の非相補的核酸塩基を含む。
【０２２２】
特定の実施形態において、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、もしくは３０個の核酸塩基長であり、または最大１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、もしくは３０個の核酸塩基長である、本明細書に記載される化合物は、標的核酸、例えば標的核酸、またはその規定の一部に対して６つ以下、５つ以下、４つ以下、３つ以下、２つ以下、または１つ以下の非相補的核酸塩基を含む。
【０２２３】
特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物としては、標的核酸の一部に相補的なものも挙げられる。本明細書において使用される「一部」は、標的核酸の領域またはセグメント内の定義された数の連続（すなわち結合している）核酸塩基を指す。「一部」は、化合物の定義された数の連続核酸塩基も指し得る。特定の実施形態において、化合物は、標的セグメントの少なくとも８個の核酸塩基の一部に相補的である。特定の実施形態において、化合物は、標的セグメントの少なくとも９個の核酸塩基の一部に相補的である。特定の実施形態において、化合物は、標的セグメントの少なくとも１０個の核酸塩基の一部に相補的である。特定の実施形態において、化合物は、標的セグメントの少なくとも１１個の核酸塩基の一部に相補的である。特定の実施形態において、化合物は、標的セグメントの少なくとも１２個の核酸塩基の一部に相補的である。特定の実施形態において、化合物は、標的セグメントの少なくとも１３個の核酸塩基の一部に相補的である。特定の実施形態において、化合物は、標的セグメントの少なくとも１４個の核酸塩基の一部に相補的である。特定の実施形態において、化合物は、標的セグメントの少なくとも１５個の核酸塩基の一部に相補的である。特定の実施形態において、化合物は、標的セグメントの少なくとも１６個の核酸塩基の一部に相補的である。標的セグメントの少なくとも９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０個もしくはそれより多い核酸塩基の一部、またはそれらの値の任意の２つにより定義される範囲に相補的な化合物も企図される。
【０２２４】
同一性
本明細書に提供される化合物はまた、特定のヌクレオチド配列、配列番号、または特定のＩＳＩＳもしくはＩＯＮ番号で表される化合物、またはその一部に対して、規定されたパーセント同一性を有し得る。特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物は、アンチセンス化合物またはオリゴマー化合物である。特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物は、修飾オリゴヌクレオチドである。本明細書において使用される化合物は、同一の核酸塩基対合能力を有する場合、本明細書に開示した配列と同一である。例えば、開示されたＤＮＡ配列においてチミジンの代わりにウラシルを含むＲＮＡは、ウラシルおよびチミジンが両方ともアデニンと対合するため、ＤＮＡ配列と同一であると見なされるであろう。本明細書に記載される化合物のより短いおよび長い型、ならびに本明細書に提供される化合物に対して非同一の塩基を有する化合物も想定される。非同一塩基は、互いに隣接するか、または化合物全体に分散され得る。化合物のパーセント同一性は、それが比較される配列と同一の塩基対を有する塩基の数に従って計算される。
【０２２５】
特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物またはその部分は、本明細書に開示した化合物もしくは配列番号またはその部分の１つ以上に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％もしくは１００％、またはこれらまで同一である。特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物は、特定のヌクレオチド配列、配列番号、または特定のＩＳＩＳもしくはＩＯＮ番号で表される化合物、あるいはその部分に対して約７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％、またはそれらの値間の任意の百分率だけ同一であり、化合物は、１つ以上のミスマッチ核酸塩基を有するオリゴヌクレオチドを含む。特定のこのような実施形態において、ミスマッチは、オリゴヌクレオチドの５’末端から１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２位に存在する。特定のこのような実施形態において、ミスマッチは、オリゴヌクレオチドの３’末端から１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２位に存在する。
【０２２６】
特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物は、アンチセンス化合物を含むかまたはそれからなる。特定の実施形態において、アンチセンス化合物の部分は、標的核酸の等長部分と比較される。特定の実施形態において、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、または２５核酸塩基部分は、標的核酸の等長部分と比較される。
【０２２７】
特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物は、オリゴヌクレオチドを含むかまたはそれからなる。特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドの部分は、標的核酸の等長部分と比較される。特定の実施形態において、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、または２５核酸塩基部分は、標的核酸の等長部分と比較される。
【０２２８】
特定の修飾化合物
特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物は、結合ヌクレオシドからなるオリゴヌクレオチドを含むかまたはそれからなる。オリゴヌクレオチドは、非修飾オリゴヌクレオチド（ＲＮＡまたはＤＮＡ）であり得、または修飾オリゴヌクレオチドであり得る。修飾オリゴヌクレオチドは、非修飾ＲＮＡまたはＤＮＡに対して少なくとも１つの修飾（すなわち少なくとも１つの修飾ヌクレオシド（修飾糖部分および／または修飾核酸塩基を含む）および／または少なくとも１つの修飾ヌクレオシド間結合）を含む。
【０２２９】
Ａ．修飾ヌクレオシド
修飾ヌクレオシドは、修飾糖部分もしくは修飾核酸塩基、または修飾糖部分および修飾核酸塩基の両方を含む。
【０２３０】
１．修飾糖部分
特定の実施形態において、糖部分は、非二環式の修飾糖部分である。特定の実施形態において、修飾糖部分は、二環式または三環式糖部分である。特定の実施形態において、修飾糖部分は、糖代替物である。そのような糖代替物は、他のタイプの修飾糖部分の置換に対応する１つ以上の置換を含み得る。
【０２３１】
特定の実施形態において、修飾糖部分は、１つ以上の非環式置換基を有するフラノシル環を含む非二環式修飾糖部分を含み、その非環式置換基は、限定されるものではないが、２’、４’、および／または５’位における置換基を含む。特定の実施形態において、非二環式修飾糖部分の１つ以上の非環式置換基は、分枝状である。非二環式修飾糖部分に好適な２’−置換基の例としては、限定されるものではないが、２’−Ｆ、２’−ＯＣＨ３（「ＯＭｅ」または「Ｏ−メチル」）、および２’−Ｏ（ＣＨ２）２ＯＣＨ３（「ＭＯＥ」）が挙げられる。特定の実施形態において、２’−置換基は、ハロ、アリル、アミノ、アジド、ＳＨ、ＣＮ、ＯＣＮ、ＣＦ３、ＯＣＦ３、Ｏ−Ｃ１〜Ｃ１０アルコキシ、Ｏ−Ｃ１〜Ｃ１０置換アルコキシ、Ｏ−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、Ｏ−Ｃ１〜Ｃ１０置換アルキル、Ｓ−アルキル、Ｎ（Ｒｍ）−アルキル、Ｏ−アルケニル、Ｓ−アルケニル、Ｎ（Ｒｍ）−アルケニル、Ｏ−アルキニル、Ｓ−アルキニル、Ｎ（Ｒｍ）−アルキニル、Ｏ−アルキレニル−Ｏ−アルキル、アルキニル、アルカリール、アラルキル、Ｏ−アルカリール、Ｏ−アラルキル、Ｏ（ＣＨ２）２ＳＣＨ３、Ｏ（ＣＨ２）２ＯＮ（Ｒｍ）（Ｒｎ）またはＯＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（Ｒｍ）（Ｒｎ）の中から選択され、式中、各ＲｍおよびＲｎは、独立して、Ｈ、アミノ保護基、または置換もしくは非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、およびＣｏｏｋらの米国特許第６，５３１，５８４号明細書；Ｃｏｏｋらの米国特許第５，８５９，２２１号明細書；およびＣｏｏｋらの米国特許第６，００５，０８７号明細書に記載されている２’−置換基である。これらの２’−置換基の特定の実施形態は、ヒドロキシル、アミノ、アルコキシ、カルボキシ、ベンジル、フェニル、ニトロ（ＮＯ２）、チオール、チオアルコキシ、チオアルキル、ハロゲン、アルキル、アリール、アルケニルおよびアルキニルの中から独立して選択される１つ以上の置換基でさらに置換されてもよい。直鎖非二環式修飾糖部分に好適な４’−置換基の例としては、限定されるものではないが、アルコキシ（例えば、メトキシ）、アルキル、およびＭａｎｏｈａｒａｎらの国際公開第２０１５／１０６１２８号パンフレットに記載されているものが挙げられる。非二環式修飾糖部分に好適な５’−置換基の例としては、限定されるものではないが、５’−メチル（ＲまたはＳ）、５’−ビニル、および５’−メトキシが挙げられる。特定の実施形態において、非二環式修飾糖は、２つ以上の非架橋糖置換基、例えば２’−Ｆ−５’−メチル糖部分ならびにＭｉｇａｗａらの国際公開第２００８／１０１１５７号パンフレットおよびＲａｊｅｅｖらの米国特許出願公開第２０１３／０２０３８３６号明細書に記載されている修飾糖部分および修飾ヌクレオシドを含む。
【０２３２】
特定の実施形態において、２’−置換ヌクレオシドまたは２’−非二環式修飾ヌクレオシドは、Ｆ、ＮＨ２、Ｎ３、ＯＣＦ３、ＯＣＨ３、Ｏ（ＣＨ２）３ＮＨ２、ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２、ＯＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２、ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３、Ｏ（ＣＨ２）２ＳＣＨ３、Ｏ（ＣＨ２）２ＯＮ（Ｒｍ）（Ｒｎ）、Ｏ（ＣＨ２）２Ｏ（ＣＨ２）２Ｎ（ＣＨ３）２、およびＮ−置換アセトアミド（ＯＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（Ｒｍ）（Ｒｎ））から選択される直鎖２’−置換基を含む糖部分を含み、それぞれのＲｍおよびＲｎは、独立して、Ｈ、アミノ保護基、または置換もしくは非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキルである。
【０２３３】
特定の実施形態において、２’−置換ヌクレオシドまたは２’−非二環式修飾ヌクレオシドは、Ｆ、ＯＣＦ３、ＯＣＨ３、ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３、Ｏ（ＣＨ２）２ＳＣＨ３、Ｏ（ＣＨ２）２ＯＮ（ＣＨ３）２、Ｏ（ＣＨ２）２Ｏ（ＣＨ２）２Ｎ−（ＣＨ３）２、およびＯＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（Ｈ）ＣＨ３（「ＮＭＡ」）から選択される直鎖２’−置換基を含む糖部分を含む。
【０２３４】
特定の実施形態において、２’−置換ヌクレオシドまたは２’−非二環式修飾ヌクレオシドは、Ｆ、ＯＣＨ３、およびＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３から選択される直鎖２’−置換基を含む糖部分を含む。
【０２３５】
修飾糖部分、例えば非二環式修飾糖部分を含むヌクレオシドは、ヌクレオシドの糖部分上の置換の位置により称される。例えば、２’−置換または２−修飾糖部分を含むヌクレオシドは、２’−置換ヌクレオシドまたは２−修飾ヌクレオシドと称される。
【０２３６】
特定の修飾糖部分は、第２の環を形成して二環式糖部分をもたらす架橋糖置換基を含む。特定のこのような実施形態において、二環式糖部分は、４’および２’フラノース環原子間の架橋を含む。そのような４’から２’の架橋糖置換基の例としては、限定されるものではないが、４’−ＣＨ２−２’、４’−（ＣＨ２）２−２’、４’−（ＣＨ２）３−２’、４’−ＣＨ２−Ｏ−２’（「ＬＮＡ」）、４’−ＣＨ２−Ｓ−２’、４’−（ＣＨ２）２−Ｏ−２’（「ＥＮＡ」）、４’−ＣＨ（ＣＨ３）−Ｏ−２’（Ｓ配置の場合、「束縛エチル」または「ｃＥｔ」と称される）、４’−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−２’、４’−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ）−２’、４’−ＣＨ（ＣＨ２ＯＣＨ３）−Ｏ−２’（「束縛ＭＯＥ」または「ｃＭＯＥ」）およびその類似体（例えば、Ｓｅｔｈらの米国特許第７，３９９，８４５号明細書、Ｂｈａｔらの米国特許第７，５６９，６８６号明細書、Ｓｗａｙｚｅらの米国特許第７，７４１，４５７号明細書、およびＳｗａｙｚｅらの米国特許第８，０２２，１９３号明細書を参照されたい）、４’−Ｃ（ＣＨ３）（ＣＨ３）−Ｏ−２’およびその類似体（例えば、Ｓｅｔｈらの米国特許第８，２７８，２８３号明細書を参照されたい）、４’−ＣＨ２−Ｎ（ＯＣＨ３）−２’およびその類似体（例えば、Ｐｒａｋａｓｈらの米国特許第８，２７８，４２５号明細書を参照されたい）、４’−ＣＨ２−Ｏ−Ｎ（ＣＨ３）−２’（例えば、Ａｌｌｅｒｓｏｎらの米国特許第７，６９６，３４５号明細書およびＡｌｌｅｒｓｏｎらの米国特許第８，１２４，７４５号明細書を参照されたい）、４’−ＣＨ２−Ｃ（Ｈ）（ＣＨ３）−２’（例えば、Ｚｈｏｕ，ｅｔ  ａｌ．、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，２００９、７４、１１８−１３４を参照されたい）、４’−ＣＨ２−Ｃ（＝ＣＨ２）−２’およびその類似体（例えば、Ｓｅｔｈらの米国特許第８，２７８，４２６号明細書を参照されたい）、４’−Ｃ（ＲａＲｂ）−Ｎ（Ｒ）−Ｏ−２’、４’−Ｃ（ＲａＲｂ）−Ｏ−Ｎ（Ｒ）−２’、４’−ＣＨ２−Ｏ−Ｎ（Ｒ）−２’、および４’−ＣＨ２−Ｎ（Ｒ）−Ｏ−２’（式中、各Ｒ、Ｒａ、およびＲｂは、独立して、Ｈ、保護基、またはＣ１〜Ｃ１２アルキルである）（例えば、Ｉｍａｎｉｓｈｉらの米国特許第７，４２７，６７２号明細書を参照されたい）が挙げられる。
【０２３７】
特定の実施形態において、このような４’から２’への架橋は、独立して、−［Ｃ（Ｒａ）（Ｒｂ）］ｎ−、−［Ｃ（Ｒａ）（Ｒｂ）］ｎ−Ｏ−、−Ｃ（Ｒａ）＝Ｃ（Ｒｂ）−、−Ｃ（Ｒａ）＝Ｎ−、−Ｃ（＝ＮＲａ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｏ−、−Ｓｉ（Ｒａ）２−、−Ｓ（＝Ｏ）ｘ−、および−Ｎ（Ｒａ）−から独立して選択される１〜４つの結合基を含み、式中、
ｘは、０、１、または２であり；
ｎは、１、２、３、または４であり；
それぞれのＲａおよびＲｂは、独立して、Ｈ、保護基、ヒドロキシル、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル、置換Ｃ１〜Ｃ１２アルキル、Ｃ２〜Ｃ１２アルケニル、置換Ｃ２〜Ｃ１２アルケニル、Ｃ２〜Ｃ１２アルキニル、置換Ｃ２〜Ｃ１２アルキニル、Ｃ５〜Ｃ２０アリール、置換Ｃ５〜Ｃ２０アリール、複素環基、置換複素環基、ヘテロアリール、置換ヘテロアリール、Ｃ５〜Ｃ７脂環式基、置換Ｃ５〜Ｃ７脂環式基、ハロゲン、ＯＪ１、ＮＪ１Ｊ２、ＳＪ１、Ｎ３、ＣＯＯＪ１、アシル（Ｃ（＝Ｏ）−Ｈ）、置換アシル、ＣＮ、スルホニル（Ｓ（＝Ｏ）２−Ｊ１）、またはスルホキシル（Ｓ（＝Ｏ）−Ｊ１）であり；
それぞれのＪ１およびＪ２は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ１２アルキル、置換Ｃ１〜Ｃ１２アルキル、Ｃ２〜Ｃ１２アルケニル、置換Ｃ２〜Ｃ１２アルケニル、Ｃ２〜Ｃ１２アルキニル、置換Ｃ２〜Ｃ１２アルキニル、Ｃ５〜Ｃ２０アリール、置換Ｃ５〜Ｃ２０アリール、アシル（Ｃ（＝Ｏ）−Ｈ）、置換アシル、複素環基、置換複素環基、Ｃ１〜Ｃ１２アミノアルキル、置換Ｃ１〜Ｃ１２アミノアルキル、または保護基である。
【０２３８】
さらなる二環式糖部分は、当技術分野で既知であり、例えば、Ｆｒｅｉｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，１９９７，２５（２２），４４２９−４４４３、Ａｌｂａｅｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，２００６，７１，７７３１−７７４０、Ｓｉｎｇｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍｕｎ．，１９９８，４，４５５−４５６；Ｋｏｓｈｋｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ，１９９８，５４，３６０７−３６３０；Ｗａｈｌｅｓｔｅｄｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．，２０００，９７，５６３３−５６３８；Ｋｕｍａｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．，１９９８，８，２２１９−２２２２；Ｓｉｎｇｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，１９９８，６３，１００３５−１００３９；Ｓｒｉｖａｓｔａｖａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，２００１７，１２９，８３６２−８３７９；Ｅｌａｙａｄｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎｉｏｎ  Ｉｎｖｅｎｓ．Ｄｒｕｇｓ，２００１，２，５５８−５６１；Ｂｒａａｓｃｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．，２００１，８，１−７；Ｏｒｕｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎｉｏｎ  Ｍｏｌ．Ｔｈｅｒ．，２００１，３，２３９−２４３；Ｗｅｎｇｅｌらの米国特許第７，０５３，２０７号明細書、Ｉｍａｎｉｓｈｉらの米国特許第６，２６８，４９０号明細書、Ｉｍａｎｉｓｈｉらの米国特許第６，７７０，７４８号明細書、Ｉｍａｎｉｓｈｉらの米国再発行特許第４４，７７９号明細書；Ｗｅｎｇｅｌらの米国特許第６，７９４，４９９号明細書、Ｗｅｎｇｅｌらの米国特許第６，６７０，４６１号明細書；Ｗｅｎｇｅｌらの米国特許第７，０３４，１３３号明細書、Ｗｅｎｇｅｌらの米国特許第８，０８０，６４４号明細書；Ｗｅｎｇｅｌらの米国特許第８，０３４，９０９号明細書；Ｗｅｎｇｅｌらの米国特許第８，１５３，３６５号明細書；Ｗｅｎｇｅｌらの米国特許第７，５７２，５８２号明細書；およびＲａｍａｓａｍｙらの米国特許第６，５２５，１９１号明細書、Ｔｏｒｓｔｅｎらの国際公開第２００４／１０６３５６号パンフレット、Ｗｅｎｇｅｌらの国際公開第９１９９９／０１４２２６号パンフレット；Ｓｅｔｈらの国際公開第２００７／１３４１８１号パンフレット；Ｓｅｔｈらの米国特許第７，５４７，６８４号明細書；Ｓｅｔｈらの米国特許第７，６６６，８５４号明細書；Ｓｅｔｈらの米国特許第８，０８８，７４６号明細書；Ｓｅｔｈらの米国特許第７，７５０，１３１号明細書；Ｓｅｔｈらの米国特許第８，０３０，４６７号明細書；Ｓｅｔｈらの米国特許第８，２６８，９８０号明細書；Ｓｅｔｈらの米国特許第８，５４６，５５６号明細書；Ｓｅｔｈらの米国特許第８，５３０，６４０号明細書；Ｍｉｇａｗａらの米国特許第９，０１２，４２１号明細書；Ｓｅｔｈらの米国特許第８，５０１，８０５号明細書；および米国特許出願公開であるＡｌｌｅｒｓｏｎらの米国特許出願公開第２００８／００３９６１８号明細書およびＭｉｇａｗａらの米国特許出願公開第２０１５／０１９１７２７号明細書を参照されたい。
【０２３９】
特定の実施形態において、二環式糖部分およびそのような二環式糖部分を取り込むヌクレオシドは、異性体立体配置によりさらに定義される。例えば、（本明細書に記載される）ＬＮＡヌクレオシドは、α−Ｌ立体配置またはβ−Ｄ立体配置であり得る。
【化１９】
2019516686.tif 000021
α−Ｌ−メチレンオキシ（４’−ＣＨ２−Ｏ−２’）またはα−Ｌ−ＬＮＡ二環式ヌクレオシドは、アンチセンス活性を示したオリゴヌクレオチドに組み込まれている（Ｆｒｉｅｄｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，２００３，２１，６３６５−６３７２）。本明細書において、二環式ヌクレオシドの一般的な記載には、両方の異性体立体配置が含まれる。本明細書の例示的な実施形態において、特定の二環式ヌクレオシド（例えば、ＬＮＡまたはｃＥｔ）の位置が特定される場合、それらは、別途明記しない限りβ−Ｄ立体配置にある。
【０２４０】
特定の実施形態において、修飾糖部分は、１つ以上の非架橋糖置換基および１つ以上の架橋糖置換基（例えば、５’−置換および４’−２’架橋糖）を含む。
【０２４１】
特定の実施形態において、修飾糖部分は、糖代替物である。特定のこのような実施形態において、糖部分の酸素原子は、例えば、硫黄、炭素または窒素原子で置き換えられている。特定のこのような実施形態において、そのような修飾糖部分は、本明細書に記載された架橋および／または非架橋置換基も含む。例えば、特定の糖代替物は、４’−硫黄原子および２’−位（例えば、Ｂｈａｔらの米国特許第７，８７５，７３３号明細書およびＢｈａｔらの米国特許第７，９３９，６７７号明細書を参照されたい）および／または５’位の置換を含む。
【０２４２】
特定の実施形態において、糖代替物は、５つ以外の原子を有する環を含む。例えば、特定の実施形態において、糖代替物は、６員テトラヒドロピラン（「ＴＨＰ」）を含む。このようなテトラヒドロピランは、さらに修飾または置換されていてよい。このような修飾テトラヒドロピランを含むヌクレオシドとしては、限定されるものではないが、ヘキシトール核酸（「ＨＮＡ」）、アニトール核酸（「ＡＮＡ」）、マニトール核酸（「ＭＮＡ」）（例えば、Ｌｅｕｍａｎｎ，ＣＪ．Ｂｉｏｏｒｇ．＆Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００２，１０，８４１−８５４を参照されたい）、フルオロＨＮＡ：
【化２０】
2019516686.tif 000022
（「Ｆ−ＨＮＡ」、例えばＳｗａｙｚｅらの米国特許第８，０８８，９０４号明細書；Ｓｗａｙｚｅらの米国特許第８，４４０，８０３号明細書；Ｓｗａｙｚｅらの米国特許；およびＳｗａｙｚｅらの米国特許第９，００５，９０６号明細書を参照されたい。Ｆ−ＨＮＡは、Ｆ−ＴＨＰまたは３’−フルオロテトラヒドロピランとも称され得る）、および式：
【化２１】
2019516686.tif 000023
（式中、前記修飾ＴＨＰヌクレオシドのそれぞれに関して独立して、
Ｂｘは、核酸塩基部分であり；
Ｔ３およびＴ４は、それぞれ独立して、修飾ＴＨＰヌクレオシドをオリゴヌクレオチドの残部に結合するヌクレオシド間結合基であり、またはＴ３およびＴ４の一方は、修飾ＴＨＰヌクレオシドをオリゴヌクレオチドの残部を結合するヌクレオシド間結合基であり、Ｔ３およびＴ４の他方は、Ｈ、ヒドロキシル保護基、結合コンジュゲート基、または５’もしくは３’−末端基であり；
ｑ１、ｑ２、ｑ３、ｑ４、ｑ５、ｑ６およびｑ７は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、置換Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、置換Ｃ２〜Ｃ６アルケニル、Ｃ２〜Ｃ６アルキニル、または置換Ｃ２〜Ｃ６アルキニルであり；
Ｒ１およびＲ２のそれぞれは、水素、ハロゲン、置換または非置換アルコキシ、ＮＪ１Ｊ２、ＳＪ１、Ｎ３、ＯＣ（＝Ｘ）Ｊ１、ＯＣ（＝Ｘ）ＮＪ１Ｊ２、ＮＪ３Ｃ（＝Ｘ）ＮＪ１Ｊ２、およびＣＮの中から独立して選択され、Ｘは、Ｏ、ＳまたはＮＪ１であり、それぞれのＪ１、Ｊ２、およびＪ３は、独立して、ＨまたはＣ１〜Ｃ６アルキルである）
を有する追加の修飾ＴＨＰ化合物を含むヌクレオシドが挙げられる。
【０２４３】
特定の実施形態において、ｑ１、ｑ２、ｑ３、ｑ４、ｑ５、ｑ６およびｑ７がそれぞれＨである、修飾ＴＨＰヌクレオシドが提供される。特定の実施形態において、ｑ１、ｑ２、ｑ３、ｑ４、ｑ５、ｑ６およびｑ７の少なくとも１つは、Ｈ以外である。特定の実施形態において、ｑ１、ｑ２、ｑ３、ｑ４、ｑ５、ｑ６およびｑ７の少なくとも１つは、メチルである。特定の実施形態において、Ｒ１およびＲ２の一方がＦである修飾ＴＨＰヌクレオシドが提供される。特定の実施形態において、Ｒ１はＦであり、Ｒ２はＨであり、特定の実施形態において、Ｒ１は、メトキシであり、Ｒ２は、Ｈであり、特定の実施形態において、Ｒ１は、メトキシエトキシであり、Ｒ２は、Ｈである。
【０２４４】
特定の実施形態において、糖代替物は、６つ以上の原子および２つ以上のヘテロ原子を有する環を含む。例えば、モルホリノ糖部分を含むヌクレオシドおよびオリゴヌクレオチド中でのその使用が報告されている（例えば、Ｂｒａａｓｃｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００２，４１，４５０３−４５１０ならびにＳｕｍｍｅｒｔｏｎらの米国特許第５，６９８，６８５号明細書；Ｓｕｍｍｅｒｔｏｎらの米国特許第５，１６６，３１５号明細書；Ｓｕｍｍｅｒｔｏｎらの米国特許第５，１８５，４４４号明細書；およびＳｕｍｍｅｒｔｏｎらの米国特許第５，０３４，５０６号明細書を参照されたい）。本明細書において使用される用語「モルホリノ」は、以下の構造：
【化２２】
2019516686.tif 000024
を有する糖代替物を意味する。特定の実施形態において、モルホリノは、例えば、上記モルホリノ構造から置換基を付加するか、または変動させることにより修飾することができる。このような糖代替物は、本明細書において「修飾モルホリノ」と称される。
【０２４５】
特定の実施形態において、糖代替物は、非環式部分を含む。そのような非環式糖代替物を含むヌクレオシドおよびオリゴヌクレオチドの例としては、限定されるものではないが、ペプチド核酸（「ＰＮＡ」）、非環式ブチル核酸（例えば、Ｋｕｍａｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｏｒｇ．Ｂｉｏｍｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２０１３，１１，５８５３−５８６５を参照されたい）、ならびにＭａｎｏｈａｒａｎらの国際公開第２０１１／１３３８７６号パンフレットに記載されているヌクレオシドおよびオリゴヌクレオチドが挙げられる。
【０２４６】
修飾ヌクレオシド中に使用され得る、多数の他の二環式および三環式の糖および糖代替物環系が当技術分野で既知である。
【０２４７】
修飾核酸塩基
核酸塩基（または塩基）の修飾または置換は、天然存在のまたは合成非修飾核酸塩基と構造的に区別可能であるが、機能的には天然存在のまたは合成非修飾核酸塩基と交換可能である。天然核酸塩基および修飾核酸塩基は、両方とも水素結合に関与し得る。このような核酸塩基修飾は、ヌクレアーゼ安定性、結合親和性または他の何らかの有益な生物学的特性をアンチセンス化合物に付与し得る。
【０２４８】
特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物は、修飾オリゴヌクレオチドを含む。特定の実施形態において、修飾オリゴヌクレオチドは、非修飾核酸塩基を含む１つ以上のヌクレオシドを含む。特定の実施形態において、修飾オリゴヌクレオチドは、修飾核酸塩基を含む１つ以上のヌクレオシドを含む。特定の実施形態において、修飾オリゴヌクレオチドは、脱塩基ヌクレオシドと称される、核酸塩基を含まない１つ以上のヌクレオシドを含む。
【０２４９】
特定の実施形態において、修飾核酸塩基は、５−置換ピリミジン、６−アザピリミジン、アルキルまたはアルキニル置換ピリミジン、アルキル置換プリン、ならびにＮ−２、Ｎ−６およびＯ−６置換プリンから選択される。特定の実施形態において、修飾核酸塩基は、２−アミノプロピルアデニン、５−ヒドロキシメチルシトシン、５−メチルシトシン、キサンチン、ヒポキサンチン、２−アミノアデニン、６−Ｎ−メチルグアニン、６−Ｎ−メチルアデニン、２−プロピルアデニン、２−チオウラシル、２−チオチミンおよび２−チオシトシン、５−プロピニル（Ｃ≡Ｃ−ＣＨ３）ウラシル、５−プロピニルシトシン、６−アゾウラシル、６−アゾシトシン、６−アゾチミン、５−リボシルウラシル（シュードウラシル）、４−チオウラシル、８−ハロ、８−アミノ、８−チオール、８−チオールアルキル、８−ヒドロキシル、８−アザならびに他の８−置換プリン、５−ハロ、特に５−ブロモ、５−トリフルオロメチル、５−ハロウラシル、および５−ハロシトシン、７−メチルグアニン、７−メチルアデニン、２−Ｆ−アデニン、２−アミノアデニン、７−デアザグアニン、７−デアザアデニン、３−デアザグアニン、３−デアザアデニン、６−Ｎ−ベンゾイルアデニン、２−Ｎ−イソブチリルグアニン、４−Ｎ−ベンゾイルシトシン、４−Ｎ−ベンゾイルウラシル、５−メチル４−Ｎ−ベンゾイルシトシン、５−メチル４−Ｎ−ベンゾイルウラシル、ユニバーサル塩基、疎水性塩基、広域塩基（ｐｒｏｍｉｓｃｕｏｕｓ  ｂａｓｅ）、サイズ拡張塩基（ｓｉｚｅ−ｅｘｐａｎｄｅｄ  ｂａｓｅ）、およびフッ素化塩基から選択される。さらなる修飾核酸塩基としては、三環式ピリミジン、例えば１，３−ジアザフェノキサジン−２−オン、１，３−ジアザフェノチアジン−２−オンおよび９−（２−アミノエトキシ）−１，３−ジアザフェノキサジン−２−オン（Ｇ−クランプ）が挙げられる。修飾核酸塩基としては、プリンまたはピリミジン塩基が他の複素環により置き換えられているもの、例えば７−デアザ−アデニン、７−デアザグアノシン、２−アミノピリジンおよび２−ピリドンを挙げることもできる。さらなる核酸塩基としては、Ｍｅｒｉｇａｎらの米国特許第３，６８７，８０８号明細書に開示されているもの、Ｔｈｅ  Ｃｏｎｃｉｓｅ  Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ  Ｏｆ  Ｐｏｌｙｍｅｒ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ａｎｄ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｋｒｏｓｃｈｗｉｔｚ，Ｊ．Ｉ．，Ｅｄ．，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，１９９０，８５８−８５９；Ｅｎｇｌｉｓｃｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｇｅｗａｎｄｔｅ  Ｃｈｅｍｉｅ，Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，１９９１，３０，６１３；Ｓａｎｇｈｖｉ，Ｙ．Ｓ．，Ｃｈａｐｔｅｒ  １５，Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，Ｃｒｏｏｋｅ，Ｓ．Ｔ．ａｎｄ  Ｌｅｂｌｅｕ，Ｂ．，Ｅｄｓ．，ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ，１９９３，２７３−２８８に開示されているもの；およびＣｈａｐｔｅｒｓ  ６  ａｎｄ  １５，Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ  Ｄｒｕｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｃｒｏｏｋｅ  Ｓ．Ｔ．，Ｅｄ．，ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ，２００８，１６３−１６６  ａｎｄ  ４４２−４４３に開示されているものが挙げられる��
【０２５０】
上記の修飾核酸塩基の特定のものおよび他の修飾核酸塩基の調製を教示する刊行物としては、限定されるものではないが、Ｍａｎｏｈａｒａｎらの米国特許出願公開第２００３／０１５８４０３号明細書、Ｍａｎｏｈａｒａｎらの米国特許出願公開第２００３／０１７５９０６号明細書；Ｄｉｎｈらの米国特許第４，８４５，２０５号明細書；Ｓｐｉｅｌｖｏｇｅｌらの米国特許第５，１３０，３０２号明細書；Ｒｏｇｅｒｓらの米国特許第５，１３４，０６６号明細書；Ｂｉｓｃｈｏｆｂｅｒｇｅｒらの米国特許第５，１７５，２７３号明細書；Ｕｒｄｅａらの米国特許第５，３６７，０６６号明細書；Ｂｅｎｎｅｒらの米国特許第５，４３２，２７２号明細書；Ｍａｔｔｅｕｃｃｉらの米国特許第５，４３４，２５７号明細書；Ｇｍｅｉｎｅｒらの米国特許第５，４５７，１８７号明細書；Ｃｏｏｋらの米国特許第５，４５９，２５５号明細書；Ｆｒｏｅｈｌｅｒらの米国特許第５，４８４，９０８号明細書；Ｍａｔｔｅｕｃｃｉらの米国特許第５，５０２，１７７号明細書；Ｈａｗｋｉｎｓらの米国特許第５，５２５，７１１号明細書；Ｈａｒａｌａｍｂｉｄｉｓらの米国特許第５，５５２，５４０号明細書；Ｃｏｏｋらの米国特許第５，５８７，４６９号明細書；Ｆｒｏｅｈｌｅｒらの米国特許第５，５９４，１２１号明細書；Ｓｗｉｔｚｅｒらの米国特許第５，５９６，０９１号明細書；Ｃｏｏｋらの米国特許第５，６１４，６１７号明細書；Ｆｒｏｅｈｌｅｒらの米国特許第５，６４５，９８５号明細書；Ｃｏｏｋらの米国特許第５，６８１，９４１号明細書；Ｃｏｏｋらの米国特許第５，８１１，５３４号明細書；Ｃｏｏｋらの米国特許第５，７５０，６９２号明細書；Ｃｏｏｋらの米国特許第５，９４８，９０３号明細書；Ｃｏｏｋらの米国特許第５，５８７，４７０号明細書；Ｃｏｏｋらの米国特許第５，４５７，１９１号明細書；Ｍａｔｔｅｕｃｃｉらの米国特許第５，７６３，５８８号明細書；Ｆｒｏｅｈｌｅｒらの米国特許第５，８３０，６５３号明細書；Ｃｏｏｋらの米国特許第５，８０８，０２７号明細書；Ｃｏｏｋらの米国特許第６，１６６，１９９号明細書；およびＭａｔｔｅｕｃｃｉらの米国特許第６，００５，０９６号明細書が挙げられる。
【０２５１】
特定の実施形態において、標的核酸を標的とする化合物は、１つ以上の修飾核酸塩基を含む。特定の実施形態において、修飾核酸塩基は、５−メチルシトシンである。特定の実施形態において、それぞれのシトシンは、５−メチルシトシンである。
【０２５２】
３．修飾ヌクレオチド間結合
ＲＮＡおよびＤＮＡの天然存在ヌクレオシド間結合は、３’から５’へのホスホジエステル結合である。特定の実施形態において、１つ以上の修飾（すなわち非天然存在）ヌクレオシド間結合を有する本明細書に記載される化合物は、例えば、向上された細胞取り込み、標的核酸に対する向上された親和性、およびヌクレアーゼ存在下での増大された安定性等の所望の特性に起因して、多くの場合に天然存在ヌクレオシド間結合を有する化合物に優先して選択される。
【０２５３】
特定の実施形態において、標的核酸を標的化する化合物は、１つ以上の修飾ヌクレオシド間結合を含む。特定の実施形態において、修飾ヌクレオシド間結合は、ホスホロチオエート結合である。特定の実施形態において、アンチセンス化合物の各ヌクレオシド間結合は、ホスホロチオエートヌクレオシド間結合である。
【０２５４】
特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物は、オリゴヌクレオチドを含む。修飾ヌクレオシド間結合を有するオリゴヌクレオチドは、リン原子、およびリン原子を有さないヌクレオシド間結合を保持するヌクレオシド間結合を含む。代表的なリン含有ヌクレオシド間結合としては、限定されるものではないが、ホスホジエステル、ホスホトリエステル、メチルホスホネート、ホスホラミデートおよびホスホロチオエートが挙げられる。リン含有および非リン含有結合の調製方法は周知である。
【０２５５】
特定の実施形態において、修飾オリゴヌクレオチドのヌクレオシドは、任意のヌクレオシド間結合を使用して互いに結合され得る。ヌクレオシド間結合基の２つの主なクラスは、リン原子の存在または非存在により規定される。代表的なリン含有ヌクレオシド間結合としては、限定されるものではないが、ホスホジエステル結合（「Ｐ＝Ｏ」）を含有するホスフェート（非修飾または天然存在結合とも称される）、ホスホトリエステル、メチルホスホネート、ホスホラミデート、およびホスホロチオエート（「Ｐ＝Ｓ」）、およびホスホロジチオエート（「ＨＳ−Ｐ＝Ｓ」）が挙げられる。代表的な非リン含有ヌクレオシド間結合基としては、限定されるものではないが、メチレンメチルイミノ（−ＣＨ２−Ｎ（ＣＨ３）−Ｏ−ＣＨ２−）、チオジエステル、チオノカルバメート（−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）（ＮＨ）−Ｓ−）；シロキサン（−Ｏ−ＳｉＨ２−Ｏ−）；およびＮ，Ｎ’−ジメチルヒドラジン（−ＣＨ２−Ｎ（ＣＨ３）−Ｎ（ＣＨ３）−）が挙げられる。天然存在ホスフェート結合と比較して、修飾ヌクレオシド間結合は、オリゴヌクレオチドのヌクレアーゼ耐性を変動させ、一般に増大させるために使用することができる。特定の実施形態において、キラル原子を有するヌクレオシド間結合は、ラセミ混合物としてまたは別個のエナンチオマーとして調製することができる。代表的なキラルヌクレオシド間結合としては、限定されるものではないが、アルキルホスホネートおよびホスホロチオエートが挙げられる。リン含有および非リン含有ヌクレオシド間結合の調製方法は、当業者に周知である。
【０２５６】
中性ヌクレオシド間結合としては、限定されるものではないが、ホスホトリエステル、メチルホスホネート、ＭＭＩ（３’−ＣＨ２−Ｎ（ＣＨ３）−Ｏ−５’）、アミド−３（３’−ＣＨ２−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（Ｈ）−５’）、アミド−４（３’−ＣＨ２−Ｎ（Ｈ）−Ｃ（＝Ｏ）−５’）、ホルムアセタール（３’−Ｏ−ＣＨ２−Ｏ−５’）、メトキシプロピル、およびチオホルムアセタール（３’−Ｓ−ＣＨ２−Ｏ−５’）が挙げられる。さらなる中性ヌクレオシド間結合としては、シロキサン（ジアルキルシロキサン）、カルボキシレートエステル、カルボキサミド、スルフィド、スルホネートエステルおよびアミドを含む非イオン性結合が挙げられる（例えば、Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ  Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｓ  ｉｎ  Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ；Ｙ．Ｓ．Ｓａｎｇｈｖｉ  ａｎｄ  Ｐ．Ｄ．Ｃｏｏｋ，Ｅｄｓ．，ＡＣＳ  Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ  Ｓｅｒｉｅｓ  ５８０；Ｃｈａｐｔｅｒｓ  ３  ａｎｄ  ４，４０−６５を参照されたい）。さらなる中性ヌクレオシド間結合としては、混合Ｎ、Ｏ、ＳおよびＣＨ２構成成分部分を含む非イオン性結合が挙げられる。
【０２５７】
特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドは、規定されたパターンまたは修飾ヌクレオシド間結合モチーフでオリゴヌクレオチドまたはその領域に沿って配置された修飾ヌクレオシド間結合を含む。特定の実施形態において、ヌクレオシド間結合は、ギャップ化モチーフで配置される。そのような実施形態では、２つのウイング領域のそれぞれのヌクレオシド間結合は、ギャップ領域中のヌクレオシド間結合と異なる。特定の実施形態において、ウイング中のヌクレオシド間結合は、ホスホジエステルであり、ギャップ中のヌクレオシド間結合は、ホスホロチオエートである。ヌクレオシドモチーフは独立して選択されるため、ギャップヌクレオシド間結合モチーフを有するそのようなオリゴヌクレオチドは、ギャップヌクレオシドモチーフを有しても有さなくてもよく、ギャップヌクレオシドモチーフを有する場合、ウイング長およびギャップ長は、同一あっても同一でなくてもよい。
【０２５８】
特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドは、交互のヌクレオシド間結合モチーフを有する領域を含む。特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドは、均一修飾ヌクレオシド間結合の領域を含む。特定のこのような実施形態において、オリゴヌクレオチドは、ホスホロチオエートヌクレオシド間結合により均一に結合している領域を含む。特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドは、ホスホロチオエートにより均一に結合している。特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドの各ヌクレオシド間結合は、ホスホジエステルおよびホスホロチオエートから選択される。特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドの各ヌクレオシド間結合は、ホスホジエステルおよびホスホロチオエートから選択され、少なくとも１つのヌクレオシド間結合は、ホスホロチオエートである。
【０２５９】
特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドは、少なくとも６つのホスホロチオエートヌクレオシド間結合を含む。特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドは、少なくとも８つのホスホロチオエートヌクレオシド間結合を含む。特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドは、少なくとも１０個のホスホロチオエートヌクレオシド間結合を含む。特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドは、少なくとも６つ連続のホスホロチオエートヌクレオシド間結合の少なくとも１つのブロックを含む。特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドは、少なくとも８つ連続のホスホロチオエートヌクレオシド間結合の少なくとも１つのブロックを含む。特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドは、少なくとも１０個連続のホスホロチオエートヌクレオシド間結合の少なくとも１つのブロックを含む。特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドは、少なくとも１つの１２個連続のホスホロチオエートヌクレオシド間結合の少なくともブロックを含む。特定のこのような実施形態において、少なくとも１つのそのようなブロックは、オリゴヌクレオチドの３’末端に位置する。特定のこのような実施形態において、少なくとも１つのそのようなブロックは、オリゴヌクレオチドの３’末端から３ヌクレオチド以内に位置する。
【０２６０】
特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドは、１つ以上のメチルホスポネート結合を含む。特定の実施形態において、ギャップマーヌクレオシドモチーフを有するオリゴヌクレオチドは、１つまたは２つのメチルホスポネート結合を除く全てのホスホロチオエート結合を含む結合モチーフを含む。特定の実施形態において、１つのメチルホスポネートは、ギャップマーヌクレオシドモチーフを有するオリゴヌクレオチドの中央のギャップ中に存在する。
【０２６１】
特定の実施形態において、ホスホロチオエートヌクレオシド間結合およびホスホジエステルヌクレオシド間結合の数は、ヌクレアーゼ耐性を維持するように配置することが望ましい。特定の実施形態において、ホスホロチオエートヌクレオシド間結合の数および位置ならびにホスホジエステルヌクレオシド間結合の数および位置は、ヌクレアーゼ耐性を維持するように配置することが望ましい。特定の実施形態において、ホスホロチオエートヌクレオシド間結合の数を減少させ得、ホスホジエステルヌクレオシド間結合の数を増加させ得る。特定の実施形態において、ヌクレアーゼ耐性を依然として維持したまま、ホスホロチオエートヌクレオシド間結合の数を減少させることができ、ホスホジエステルヌクレオシド間結合の数を増加させることができる。特定の実施形態において、ヌクレアーゼ耐性を保持したまま、ホスホロチオエートヌクレオシド間結合の数を減少させることが望ましい。特定の実施形態において、ヌクレアーゼ活性を保持したまま、ホスホジエステルヌクレオシド間結合の数を増加させることが望ましい。
【０２６２】
４．特定のモチーフ
特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物は、オリゴヌクレオチドを含む。オリゴヌクレオチドは、モチーフ、例えば非修飾および／もしくは修飾糖部分、核酸塩基、ならびに／またはヌクレオシド間結合のパターンを有し得る。特定の実施形態において、修飾オリゴヌクレオチドは、修飾糖を含む１つ以上の修飾ヌクレオシドを含む。特定の実施形態において、修飾オリゴヌクレオチドは、修飾核酸塩基を含む１つ以上の修飾ヌクレオシドを含む。特定の実施形態において、修飾オリゴヌクレオチドは、１つ以上の修飾ヌクレオシド間結合を含む。そのような実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの修飾、非修飾、および示差的修飾糖部分、核酸塩基、ならびに／またはヌクレオシド間結合がパターンまたはモチーフを規定する。特定の実施形態において、糖部分、核酸塩基、およびヌクレオシド間結合のパターンは、それぞれ互いに独立している。従って、修飾オリゴヌクレオチドは、その糖モチーフ、核酸塩基モチーフおよび／またはヌクレオシド間結合モチーフにより説明することができる（本明細書において使用される核酸塩基モチーフは、核酸塩基の配列とは独立した核酸塩基の修飾を説明する）。
【０２６３】
１．特定の糖モチーフ
特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物は、オリゴヌクレオチドを含む。特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドは、規定されたパターンまたは糖モチーフでオリゴヌクレオチドまたはその領域に沿って配置された１つ以上のタイプの修飾糖および／または非修飾糖部分を含む。特定の例において、このような糖モチーフとしては、限定されるものではないが、本明細書において考察される糖修飾のいずれかが挙げられる。
【０２６４】
特定の実施形態において、修飾オリゴヌクレオチドは、２つの外部領域または「ウイング」および中央または内部領域または「ギャップ」を含むギャップマーモチーフを有する領域を含むかまたはそれからなる。ギャップマーモチーフの３つの領域（５’−ウイング、ギャップ、および３’−ウイング）は、ヌクレオシドの連続配列を形成し、ウイングのそれぞれのヌクレオシドの糖部分の少なくとも一部は、ギャップのヌクレオシドの糖部分の少なくとも一部と異なる。具体的には、ギャップに最も近いそれぞれのウイングのヌクレオシドの少なくとも糖部分（５’−ウイングの最も３’側のヌクレオシドおよび３’−ウイングの最も５’側のヌクレオシド）は、隣接するギャップヌクレオシドの糖部分と異なり、従ってウイングとギャップとの間の境界（すなわちウイング／ギャップジャンクション）を定義する。特定の実施形態において、ギャップ内の糖部分は、互いに同一である。特定の実施形態において、ギャップは、ギャップの１つ以上の他のヌクレオシドの糖部分と異なる糖部分を有する１つ以上のヌクレオシドを含む。特定の実施形態において、２つのウイングの糖モチーフは、互いに同一である（対称ギャップマー）。特定の実施形態において、５’−ウイングの糖モチーフは、３’−ウイングの糖モチーフと異なる（非対称ギャップマー）。
【０２６５】
特定の実施形態において、ギャップマーのウイングは、１〜５つのヌクレオシドを含む。特定の実施形態において、ギャップマーのウイングは、２〜５つのヌクレオシドを含む。特定の実施形態において、ギャップマーのウイングは、３〜５つのヌクレオシドを含む。特定の実施形態において、ギャップマーのヌクレオシドは、全て修飾ヌクレオシドである。
【０２６６】
特定の実施形態において、ギャップマーのギャップは、７〜１２個のヌクレオシドを含む。特定の実施形態において、ギャップマーのギャップは、７〜１０個のヌクレオシドを含む。特定の実施形態において、ギャップマーのギャップは、８〜１０個のヌクレオシドを含む。特定の実施形態において、ギャップマーのギャップは、１０個のヌクレオシドを含む。特定の実施形態において、ギャップマーのギャップのそれぞれのヌクレオシドは、非修飾２’−デオキシヌクレオシドである。
【０２６７】
特定の実施形態において、ギャップマーは、デオキシギャップマーである。このような実施形態において、それぞれのウイング／ギャップジャンクションのギャップ側上のヌクレオシドは非修飾２’−デオキシヌクレオシドであり、それぞれのウイング／ギャップジャンクションのウイング側上のヌクレオシドは修飾ヌクレオシドである。特定のこのような実施形態において、ギャップのそれぞれのヌクレオシドは、非修飾２’−デオキシヌクレオシドである。特定のこのような実施形態において、それぞれのウイングのそれぞれのヌクレオシドは、修飾ヌクレオシドである。
【０２６８】
特定の実施形態において、修飾オリゴヌクレオチドは、完全修飾糖モチーフを有し、修飾オリゴヌクレオチドの各ヌクレオシドは、修飾糖部分を含む。特定の実施形態において、修飾オリゴヌクレオチドは、完全修飾糖モチーフを有する領域を含むかまたはそれからなり、領域の各ヌクレオシドは、修飾糖部分を含む。特定の実施形態において、修飾オリゴヌクレオチドは、完全修飾糖モチーフを有する領域を含むかまたはそれからなり、完全修飾領域内の各ヌクレオシドは、本明細書において均一修飾糖モチーフと称される同一の修飾糖部分を含む。特定の実施形態において、完全修飾オリゴヌクレオチドは、均一修飾オリゴヌクレオチドである。特定の実施形態において、均一修飾の各ヌクレオシドは、同一の２’−修飾を含む。
【０２６９】
２．特定の核酸塩基モチーフ
特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物は、オリゴヌクレオチドを含む。特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドは、規定されたパターンまたはモチーフでオリゴヌクレオチドまたはその領域に沿って配置された修飾および／または非修飾核酸塩基を含む。特定の実施形態において、各核酸塩基は、修飾されている。特定の実施形態において、核酸塩基はいずれも修飾されていない。特定の実施形態において、各プリンまたは各ピリミジンは、修飾されている。特定の実施形態において、各アデニンは、修飾されている。特定の実施形態において、各グアニンは、修飾されている。特定の実施形態において、各チミンは、修飾されている。特定の実施形態において、各ウラシルは、修飾されている。特定の実施形態において、各シトシンは、修飾されている。特定の実施形態において、修飾オリゴヌクレオチド中のシトシン核酸塩基のいくつかまたは全部は、５−メチルシトシンである。
【０２７０】
特定の実施形態において、修飾オリゴヌクレオチドは、修飾核酸塩基のブロックを含む。特定のこのような実施形態において、ブロックは、オリゴヌクレオチドの３’末端に存在する。特定の実施形態において、ブロックは、オリゴヌクレオチドの３’末端の３ヌクレオシド以内に存在する。特定の実施形態において、ブロックは、オリゴヌクレオチドの５’末端に存在する。特定の実施形態において、ブロックは、オリゴヌクレオチドの５’末端の３ヌクレオシド以内に存在する。
【０２７１】
特定の実施形態において、ギャップマーモチーフを有するオリゴヌクレオチドは、修飾核酸塩基を含むヌクレオシドを含む。特定のこのような実施形態において、修飾核酸塩基を含む１つのヌクレオシドは、ギャップマーモチーフを有するオリゴヌクレオチドの中央ギャップに存在する。特定のこのような実施形態において、前記ヌクレオシドの糖部分は、２’−デオキシリボシル部分である。特定の実施形態において、修飾核酸塩基は、２−チオピリミジンおよび５−プロピンピリミジンから選択される。
【０２７２】
３．特定のヌクレオシド間結合モチーフ
特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物は、オリゴヌクレオチドを含む。特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドは、規定されたパターンまたはモチーフでオリゴヌクレオチドまたはその領域に沿って配置された修飾および／または非修飾ヌクレオシド間結合を含む。特定の実施形態において、本質的には、各ヌクレオシド間結合基は、ホスフェートヌクレオシド間結合（Ｐ＝Ｏ）である。特定の実施形態において、修飾オリゴヌクレオチドの各ヌクレオシド間結合基は、ホスホロチオエート（Ｐ＝Ｓ）である。特定の実施形態において、修飾オリゴヌクレオチドの各ヌクレオシド間結合基は、ホスホロチオエートおよびホスフェートヌクレオシド間結合から独立して選択される。特定の実施形態において、修飾オリゴヌクレオチドの糖モチーフは、ギャップマーであり、ギャップ内のヌクレオシド間結合は、全て修飾されている。特定のこのような実施形態において、ウイング中のヌクレオシド間結合のいくつかまたは全部は、非修飾ホスフェート結合である。特定の実施形態において、末端ヌクレオシド間結合は、修飾されている。
【０２７３】
５．特定の修飾オリゴヌクレオチド
特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物は、修飾オリゴヌクレオチドを含む。特定の実施形態において、上記の修飾（糖、核酸塩基、ヌクレオシド間結合）は、修飾オリゴヌクレオチドに組み込まれる。特定の実施形態において、修飾オリゴヌクレオチドは、その修飾、モチーフ、および全長によって特徴付けられる。特定の実施形態において、そのようなパラメーターは、それぞれ互いに独立している。従って、別途示されない限り、ギャップマー糖モチーフを有するオリゴヌクレオチドの各ヌクレオシド間結合は、修飾でも非修飾でもよく、糖修飾のギャップマー修飾パターンに従っても従わなくてもよい。例えば、糖ギャップマーのウイング領域内のヌクレオシド間結合は、互いに同一であっても異なっていてもよく、糖モチーフのギャップ領域のヌクレオシド間結合と同一であっても異なっていてもよい。同様に、そのようなギャップマーオリゴヌクレオチドは、糖修飾のギャップマーパターンから独立した１つ以上の修飾核酸塩基を含み得る。さらに、特定の例において、オリゴヌクレオチドは、全長または範囲によりおよび２つ以上の領域（例えば、特定の糖修飾を有するヌクレオシドの領域）の長さまたは長さ範囲により説明され、そのような場合、特定の範囲に含まれない全長を有するオリゴヌクレオチドをもたらす各範囲の数を選択することが可能であり得る。そのような場合、両方の要素を満たす必要がある。例えば、特定の実施形態において、修飾オリゴヌクレオチドは、１５〜２０個の結合ヌクレオシドからなり、３つの領域Ａ、Ｂ、およびＣからなる糖モチーフを有し、領域Ａは、特定の糖モチーフを有する２〜６個の結合ヌクレオシドからなり、領域Ｂは、特定の糖モチーフを有する６〜１０個の結合ヌクレオシドからなり、領域Ｃは、特定の糖モチーフを有する２〜６個の結合ヌクレオシドからなる。そのような実施形態は、ＡおよびＣがそれぞれ６個の結合ヌクレオシドからなり、Ｂが１０個の結合ヌクレオシドからなる修飾オリゴヌクレオチドを含まない（ヌクレオシドのこれらの数字は、Ａ、Ｂ、およびＣに関する必要条件の範囲で可能ではあるが）。これは、そのようなオリゴヌクレオチドの全長が２２であり、修飾オリゴヌクレオチドの全長の上限（２０）を超えるからである。本明細書では、オリゴヌクレオチドの説明が１つ以上のパラメーターに関して記載されない場合、それらのパラメーターは限定されない。従って、さらなる記載を有さずにギャップマー糖モチーフを有するとのみ記載される修飾オリゴヌクレオチドは、任意の長さ、ヌクレオシド間結合モチーフ、および核酸塩基モチーフを有し得る。別途示されない限り、全ての修飾は、核酸塩基配列とは独立している。
【０２７４】
特定のコンジュゲート化化合物
特定の実施形態において、本明細書に記載される化合物は、オリゴヌクレオチド（修飾または非修飾）および場合により１つ以上のコンジュゲート基および／または末端基を含むかまたはそれらからなる。コンジュゲート基は、１つ以上のコンジュゲート部分と、コンジュゲート部分をオリゴヌクレオチドに結合するコンジュゲートリンカーとからなる。コンジュゲート基は、オリゴヌクレオチドのいずれかまたは両方の末端および／または任意の内部位置に付着し得る。特定の実施形態において、コンジュゲート基は、修飾オリゴヌクレオチドのヌクレオシドの２’位に付着している。特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドのいずれかまたは両方の末端に付着しているコンジュゲート基は、末端基である。特定のこのような実施形態において、コンジュゲート基または末端基は、オリゴヌクレオチドの３’および／または５’末端に付着している。特定のこのような実施形態において、コンジュゲート基（または末端基）は、オリゴヌクレオチドの３’末端に付着している。特定の実施形態において、コンジュゲート基は、オリゴヌクレオチドの３’末端付近に付着している。特定の実施形態において、コンジュゲート基（または末端基）は、オリゴヌクレオチドの５’末端に付着している。特定の実施形態において、コンジュゲート基は、オリゴヌクレオチドの５’末端付近に付着している。
【０２７５】
末端基の例としては、限定されるものではないが、コンジュゲート基、キャッピング基、ホスフェート部分、保護基、修飾または非修飾ヌクレオシド、および独立して修飾されたまたは非修飾の２つ以上のヌクレオシドが挙げられる。
【０２７６】
ＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチドおよびＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分を含む。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、コンジュゲートリンカー、およびＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分を含む。特定の実施形態において、コンジュゲートリンカーは、ＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分をオリゴヌクレオチドに結合する。特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドは、修飾オリゴヌクレオチドである。特定の実施形態において、ＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分は、小分子、アプタマー、抗体、またはペプチドを含む。
【０２７７】
１．特定のＧＬＰ−１受容体小分子コンジュゲート部分
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチドと、ＧＬＰ−１受容体に結合することが可能な小分子コンジュゲート部分とを含む。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチドと、コンジュゲートリンカーと、ＧＬＰ−１受容体に結合することが可能な小分子コンジュゲート部分とを含む。特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドは、修飾オリゴヌクレオチドである。
【０２７８】
当技術分野で既知である、ＧＬＰ−１受容体に結合することが可能な任意の小分子コンジュゲート部分をいくつかの実施形態で使用することができる。例えば、特定の実施形態では、ＧＬＰ−１受容体に結合することが可能な小分子コンジュゲート部分は、Ｗｉｌｌａｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｓｍａｌｌ  Ｍｏｌｅｃｕｌｅ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ａｔ  ｔｈｅ  Ｇｌｕｃａｇｏｎ−ｌｉｋｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅ−１  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ，”Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ｄｉａｂｅｔｅｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｖｏｌ．２０１２  ｐｇｓ．１−９；Ｓｌｏｏｐ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｎｏｖｅｌ  Ｓｍａｌｌ  Ｍｏｌｅｃｕｌｅ  Ｇｌｕｃａｇｏｎ−Ｌｉｋｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅ−１  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ  Ａｇｏｎｉｓｔ  Ｓｔｉｍｕｌａｔｅｓ  Ｉｎｓｕｌｉｎ  Ｓｅｃｒｅｔｉｏｎ  ｉｎ  Ｒｏｄｅｎｔｓ  ａｎｄ  Ｆｒｏｍ  Ｈｕｍａｎ  Ｉｓｌｅｔｓ，”Ｄｉａｂｅｔｅｓ  Ｖｏｌ，５９，２０１０  ｐｇｓ．３０９９−３１０７；Ｋｎｕｄｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｓｍａｌｌ−ｍｏｌｅｃｕｌｅ  ａｇｏｎｉｓｔｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｇｌｕｃａｇｏｎ−ｌｉｋｅ  ｐｅｐｔｉｄｅ  １  ｒｅｃｅｐｔｏｒ，”ＰＮＡＳ  ２００７  Ｊａｎ  １６；１０４（３）：９３７−４２；またはＷａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｎｏｎ−ｐｅｐｔｉｄｉｃ  ｇｌｕｃｏｓｅ−ｌｉｋｅ  ｐｅｐｔｉｄｅ−１  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ａｇｏｎｉｓｔｓ：ａｆｔｅｒｍａｔｈ  ｏｆ  ａ  ｓｅｒｅｎｄｉｐｉｔｏｕｓ  ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ，”Ａｃｔａ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａ  Ｓｉｎｉｃａ  （２０１０）３１：１０２６−１０３０（これらは、参照により全体として本明細書に組み込まれる）に記載されている小分子ＧＬＰ−１受容体拮抗薬である。
【０２７９】
特定の実施形態において、ＧＬＰ−１受容体に結合することが可能な小分子コンジュゲート部分は、以下の式：
【化２３】
2019516686.tif 000025
【化２４】
2019516686.tif 000026
【化２５】
2019516686.tif 000027
のいずれかを有する。
【０２８０】
２．特定のＧＬＰ−１受容体抗体コンジュゲート部分
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチドと、ＧＬＰ−１受容体に結合することが可能な抗体またはその断片とを含む。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、コンジュゲートリンカー、およびＧＬＰ−１受容体に結合することが可能な抗体またはその断片を含む。特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドは、修飾オリゴヌクレオチドである。当技術分野で既知である、ＧＬＰ−１受容体に結合することが可能な任意の抗体またはその断片をいくつかの実施形態で使用することができる。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチドおよび国際公開第２００５０１８５３６号パンフレット、米国特許出願公開第２００６０２７５２８８号明細書、米国特許第８，３８９，６８９号明細書、または国際公開第２０１１０５６６４４号パンフレット（これらは、参照により全体として本明細書に組み込まれる）に記載されているＧＬＰ−１受容体に結合することが可能な抗体またはその断片を含む。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、コンジュゲートリンカー、および国際公開第２００５０１８５３６号パンフレット、米国特許出願公開第２００６０２７５２８８号明細書、米国特許第８，３８９，６８９号明細書、または国際公開第２０１１０５６６４４号パンフレット（これらは、参照により全体として本明細書に組み込まれる）に記載されているＧＬＰ−１受容体に結合することが可能な抗体またはその断片を含む。
【０２８１】
３．特定のＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチドおよびＧＬＰ−１ペプチドまたはその断片もしくは変異体を含む。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、コンジュゲートリンカー、およびＧＬＰ−１ペプチドまたはその断片もしくは変異体を含む。特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドは、修飾オリゴヌクレオチドである。当技術分野で既知の任意のＧＬＰ−１ペプチドまたはその断片もしくは変異体をいくつかの実施形態で使用することができる。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチドおよび米国特許出願公開第２０１４０２０６６０７号明細書；米国特許第９，１８７，５２２号明細書；米国特許第８，３２９，４１９号明細書；または国際公開第２００７／１２４４６１号パンフレット（これらは、参照により全体として本明細書に組み込まれる）に記載されているＧＬＰ−１ペプチドを含む。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、コンジュゲートリンカー、および米国特許出願公開第２０１４０２０６６０７号明細書；米国特許第９，１８７，５２２号明細書；米国特許第８，３２９，４１９号明細書；または国際公開第２００７／１２４４６１号パンフレット（これらは、参照により全体として本明細書に組み込まれる）に記載されているＧＬＰ−１ペプチドを含む。
【０２８２】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、およびＧＬＰ−１（７−３７）：ＨＡＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＧＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧＲＧ（これは、従来の３文字表記では、Ｈｉｓ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ（配列番号１）である）のアミノ酸配列の等長部分に対して少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％相同である少なくとも８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、または３１連続アミノ酸部分を含むＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含む。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、およびＧＬＰ−１（７−３７）：ＨＡＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＧＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧＲＧ−ＮＨ２（配列番号１）のアミノ酸配列の等長部分に対して少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％相同である少なくとも８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、または３１連続アミノ酸部分を含むＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、ＮＨ２は、Ｃ−末端アミドを示す。
【０２８３】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、コンジュゲートリンカー、およびＧＬＰ−１（７−３７）：ＨＡＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＧＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧＲＧ（これは、従来の３文字表記では、Ｈｉｓ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ（配列番号１）である）のアミノ酸配列の等長部分に対して少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％相同である少なくとも８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、または３１連続アミノ酸部分を含むＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含む。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、コンジュゲートリンカー、およびＧＬＰ−１（７−３７）：ＨＡＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＧＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧＲＧ−ＮＨ２（配列番号１）のアミノ酸配列の等長部分に対して少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％相同である少なくとも８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、または３１連続アミノ酸部分を含むＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、ＮＨ２は、Ｃ−末端アミドを示す。
【０２８４】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、およびＧＬＰ−１（７−３７）のアミノ酸配列の等長部分に対して少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％同一である少なくとも８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、または３１連続アミノ酸部分を含むＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含む。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、コンジュゲートリンカー、およびＧＬＰ−１（７−３７）のアミノ酸配列の等長部分に対して少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％同一である少なくとも８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、または３１連続アミノ酸部分を含むＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含む。
【０２８５】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、およびその全長にわたってＧＬＰ−１（７−３７）（配列番号１）のアミノ酸配列に対して少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％相同である、８〜５０アミノ酸長のＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含む。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、コンジュゲートリンカー、およびその全長にわたってＧＬＰ−１（７−３７）（配列番号１）のアミノ酸配列に対して少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％相同である、８〜５０アミノ酸長のＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含む。
【０２８６】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、およびその全長にわたってＧＬＰ−１（７−３７）（配列番号１）のアミノ酸配列に対して少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％同一である、８〜５０アミノ酸長のＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含む。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、コンジュゲートリンカー、およびその全長にわたってＧＬＰ−１（７−３７）（配列番号１）のアミノ酸配列に対して少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％同一である、８〜５０アミノ酸長のＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含む。
【０２８７】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、およびＧＬＰ−１（７−３７）（配列番号１）のアミノ酸配列を含むＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含む。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、コンジュゲートリンカー、およびＧＬＰ−１（７−３７）（配列番号１）のアミノ酸配列を含むＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含む。
【０２８８】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、およびＧＬＰ−１（７−３７）（配列番号１）のアミノ酸配列からなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含む。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、コンジュゲートリンカー、およびＧＬＰ−１（７−３７）（配列番号１）のアミノ酸配列からなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含む。
【０２８９】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、およびＧＬＰ−１（７−３６）アミド：ＨＡＥＧＴＦＴＳＤＶ  ＳＳＹＬＥＧＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧＲ−ＮＨ２（これは、従来の３文字表記では、Ｈｉｓ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−ＮＨ２（配列番号２）である）のアミノ酸配列を含むＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含む。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、コンジュゲートリンカー、およびＧＬＰ−１（７−３６）アミド：ＨＡＥＧＴＦＴＳＤＶ  ＳＳＹＬＥＧＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧＲ−ＮＨ２（これは、従来の３文字表記では、Ｈｉｓ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−ＮＨ２（配列番号２）である）のアミノ酸配列を含むＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含む。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、およびＧＬＰ−１（７−３６）：ＨＡＥＧＴＦＴＳＤＶ  ＳＳＹＬＥＧＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧＲ（これは、従来の３文字表記では、Ｈｉｓ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ（配列番号２）である）のアミノ酸配列を含むＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含む。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、コンジュゲートリンカー、およびＧＬＰ−１（７−３６）：ＨＡＥＧＴＦＴＳＤＶ  ＳＳＹＬＥＧＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧＲ（これは、従来の３文字表記では、Ｈｉｓ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ（配列番号２）である）のアミノ酸配列を含むＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含む。
【０２９０】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、およびＧＬＰ−１（７−３６）アミド（配列番号２）のアミノ酸配列からなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含む。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、コンジュゲートリンカー、およびＧＬＰ−１（７−３６）アミド（配列番号２）のアミノ酸配列からなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含む。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、およびＧＬＰ−１（７−３６）（配列番号２）のアミノ酸配列からなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含む。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、コンジュゲートリンカー、およびＧＬＰ−１（７−３６）（配列番号２）のアミノ酸配列からなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含む。
【０２９１】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、およびアミノ酸配列：ＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＧＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧ（これは、従来の３文字表記では、Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ（配列番号３）である）を含むＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含む。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、およびアミノ酸配列：ＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＧＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧ−ＮＨ２（配列番号３）を含むＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、ＮＨ２は、Ｃ−末端アミドを示す。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、コンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＧＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧ（これは、従来の３文字表記では、Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ（配列番号３）である）を含むＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含む。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、コンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＧＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧ−ＮＨ２（配列番号３）を含むＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、ＮＨ２は、Ｃ−末端アミドを示す。
【０２９２】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、およびアミノ酸配列：ＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＧＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧ（これは、従来の３文字表記では、Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ（配列番号３）である）からなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含む。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、およびアミノ酸配列：ＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＧＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧ−ＮＨ２（配列番号３）からなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、ＮＨ２は、Ｃ−末端アミドを示す。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、コンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＧＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧ（これは、従来の３文字表記では、Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ（配列番号３）である）からなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含む。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、コンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＧＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧ−ＮＨ２（配列番号３）からなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、ＮＨ２は、Ｃ−末端アミドを示す。
【０２９３】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、およびアミノ酸配列：ＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＥＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧ（これは、従来の３文字表記では、Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ（配列番号４）である）を含むＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含む。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、およびアミノ酸配列：ＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＥＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧ−ＮＨ２（配列番号４）を含むＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、ＮＨ２は、Ｃ−末端アミドを示す。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、コンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＥＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧ（これは、従来の３文字表記では、Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ（配列番号４）である）を含むＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含む。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、コンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＥＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧ−ＮＨ２（配列番号４）を含むＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、ＮＨ２は、Ｃ−末端アミドを示す。
【０２９４】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、およびアミノ酸配列：ＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＥＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧ（これは、従来の３文字表記では、Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ（配列番号４）である）からなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含む。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、およびアミノ酸配列：ＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＥＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧ−ＮＨ２（配列番号４）からなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、ＮＨ２は、Ｃ−末端アミドを示す。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、コンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＥＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧ（これは、従来の３文字表記では、Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ（配列番号４）である）からなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含む。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、コンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＥＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧ−ＮＨ２（配列番号４）からなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、ＮＨ２は、Ｃ−末端アミドを示す。
【０２９５】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、および限定されるものではないが、リラグルチド（Ｎｏｖｏ  ＮｏｒｄｉｓｋのＶＩＣＴＯＺＡ（登録商標））；アルビグルチド（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅのＳＹＮＣＲＩＡ（登録商標））；タスポグルチド（Ｈｏｆｆｍａｎ  Ｌａ−Ｒｏｃｈｅ）；ＬＹ２１８９２６５（Ｅｌｉ  Ｌｉｌｌｙ  ａｎｄ  Ｃｏｍｐａｎｙ）；ＬＹ２４２８７５７（Ｅｌｉ  Ｌｉｌｌｙ  ａｎｄ  Ｃｏｍｐａｎｙ）；デスアミノ−Ｈｉｓ７，Ａｒｇ２６，Ｌｙｓ３４−（（ｎε（γ−Ｇｌｕ（Ｎ−α−ヘキサデカノイル）））−ＧＬＰ−１（７−３７）；デスアミノ−Ｈｉｓ７，Ａｒｇ２６，Ｌｙｓ３４（ｎε−オクタノイル）−ＧＬＰ−１（７−３７）；Ａｒｇ２６，３４，Ｌｙｓ３８（Ｎε−（Ω−カルボキシペンタデカノイル））−ＧＬＰ−１（７−３８）；Ａｒｇ２６，３４，Ｌｙｓ３６（Ｎε−（γ−Ｇｌｕ（Ｎ−α−ヘキサデカノイル）））−ＧＬＰ−１（７−３６）；Ａｉｂ８．３５，Ａｒｇ２６，３４、Ｐｈｅ３１−ＧＬＰ−１（７−３６））（配列番号５）；ＨＸａａ８ＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＸａａ２２Ｘａａ２３ＡＡＫＥＦＩＸａａ３０ＷＬＸａａ３３Ｘａａ３４Ｇ  Ｘａａ３６Ｘａａ３７（式中、Ｘａａ８は、Ａ、Ｖ、またはＧであり；Ｘａａ２２は、Ｇ、Ｋ、またはＥであり；Ｘａａ２３は、ＱまたはＫであり；Ｘａａ３０は、ＡまたはＥであり；Ｘａａ３３は、ＶまたはＫであり；Ｘａａ３４は、Ｋ、Ｎ、またはＲであり；Ｘａａ３６は、ＲまたはＧであり；およびＸａａ３７は、Ｇ、Ｈ、Ｐ、または非存在である）（配列番号６）；Ａｒｇ３４−ＧＬＰ−１（７−３７）（配列番号７）；Ｇｌｕ３０−ＧＬＰ−１（７−３７）（配列番号８）；Ｌｙｓ２２−ＧＬＰ−１（７−３７）（配列番号９）；Ｇｌｙ８．３６，Ｇｌｕ２２−ＧＬＰ−１（７−３７）（配列番号１０）；Ｖａｌ８，Ｇｌｕ２２，Ｇｌｙ３６−ＧＬＰ−１（７−３７）（配列番号１１）；Ｇｌｙ８．３６，Ｇｌｕ２２，Ｌｙｓ３３，Ａｓｎ３４−ＧＬＰ−１（７−３７）（配列番号１２）；Ｖａｌ８，Ｇｌｕ２２，Ｌｙｓ３３，Ａｓｎ３４，Ｇｌｙ３６−ＧＬＰ−１（７−３７）（配列番号１３）；Ｇｌｙ８．３６，Ｇｌｕ２２，Ｐｒｏ３７−ＧＬＰ−１（７−３７）（配列番号１４）；Ｖａｌ８，Ｇｌｕ２２，Ｇｌｙ３６Ｐｒｏ３７−ＧＬＰ−１（７−３７）（配列番号１５）；Ｇｌｙ８．３６，Ｇｌｕ２２，Ｌｙｓ３３、Ａｓｎ３４，Ｐｒｏ３７−ＧＬＰ−１（７−３７）（配列番号１６）；Ｖａｌ８，Ｇｌｕ２２，Ｌｙｓ３３，Ａｓｎ３４，Ｇｌｙ３６Ｐｒｏ３７−ＧＬＰ−１（７−３７）（配列番号１７）；Ｇｌｙ８．３６，Ｇｌｕ２２−ＧＬＰ−１（７−３６）（配列番号１８）；Ｖａｌ８，Ｇｌｕ２２，Ｇｌｙ３６−ＧＬＰ−１（７−３６）（配列番号１９）；Ｖａｌ８，Ｇｌｕ２２，Ａｓｎ３４，Ｇｌｙ３６−ＧＬＰ−１（７−３６）（配列番号２０）；Ｇｌｙ８．３６，Ｇｌｕ２２，Ａｓｎ３４−ＧＬＰ−１（７−３６）（配列番号２１）を含むＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分の類似体を含む。前述した類似体のいずれも場合によりアミド化され得る。
【０２９６】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、および限定されるものではないが、イラグルチド、タスポグルチド、エキセナチド、リキシセナチド、セマグルチドを含むＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分の類似体を含む。これらの類似体は、Ｌｏｒｅｎｚ  Ｍ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｒｅｃｅｎｔ  ｐｒｏｇｒｅｓｓ  ａｎｄ  ｆｕｔｕｒｅ  ｏｐｔｉｏｎｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｏｆ  ＧＬＰ−１  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ａｇｏｎｉｓｔｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｄｉａｂｅｓｉｔｙ，”Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  Ｌｅｔｔ．２０１３  Ｊｕｌ  １５；２３（１４）：４０１１−８（これは、参照により全体として本明細書に組み込まれる）に記載されている。
【０２９７】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：Ｈ−ＡｉｂＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＥＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳＣ−ＮＨ２（配列番号２２）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸であり、およびＮＨ２は、Ｃ−末端アミドを示す。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：Ｈｉｓ−Ａｉｂ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ（配列番号２２）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸である。
【０２９８】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：Ｈ−ＡｉｂＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＥＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳＸ−ＮＨ２（配列番号２３）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸であり、Ｘは、ペニシラミンであり、およびＮＨ２は、Ｃ−末端アミドを示す。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：Ｈｉｓ−Ａｉｂ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｐｅｎ（配列番号２３）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸であり、およびＰｅｎは、ペニシラミンである。
【０２９９】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＡＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＧＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧＲＣ（これは、従来の３文字表記では、Ｈｉｓ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ（配列番号２４）である）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含む。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＡＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＧＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧＲＣ−ＮＨ２（配列番号２４）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、ＮＨ２は、Ｃ−末端アミドを示す。
【０３００】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＧＥＧＴＦＴＳＤＬＳＫＱＭＥＥＥＡＶＲＬＦＩＥＷＬＫＮＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ（配列番号２５）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含む。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：Ｈ−Ｈｉｓ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ−Ｌｙｓ−Ｇｌｎ−Ｍｅｔ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ｇｌｕ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−ＮＨ２（配列番号２５）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、Ｈは、Ｎ−末端を示し、およびＮＨ２は、Ｃ−末端アミドを示す。
【０３０１】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＡＧＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＧＱＡＡＫＥＡＩＡＷＬＶＫＧＧＰＳＳＧＡＰＰＳＣ（これは、従来の３文字表記では、Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ（配列番号２６）である）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含む。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＡＧＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＧＱＡＡＫＥＡＩＡＷＬＶＫＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳＣ−ＮＨ２（配列番号２６）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、ＮＨ２は、Ｃ−末端アミドを示す。
【０３０２】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＡＧＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＧＱＡＡＫＥＡＩＡＷＬＶＫＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳＸ（ここで、Ｘは、ペニシラミンである）（これは、従来の３文字表記では、Ａｌａ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｐｅｎ（配列番号２７）である）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、Ｐｅｎは、ペナシラミンである。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＡＧＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＧＱＡＡＫＥＡＩＡＷＬＶＫＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳＸ−ＮＨ２（配列番号２７）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、Ｘは、ペニシラミンであり、およびＮＨ２は、Ｃ−末端アミドを示す。
【０３０３】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＡｉｂＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＥＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶ（これは、従来の３文字表記では、Ｈｉｓ−Ａｉｂ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ（配列番号２８）である）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸である。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＡｉｂＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＥＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶ−ＮＨ２（配列番号２８）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸であり、およびＮＨ２は、Ｃ−末端アミドを示す。
【０３０４】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＡｉｂＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＥＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫ（これは、従来の３文字表記では、Ｈｉｓ−Ａｉｂ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ（配列番号２９）である）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸である。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＡｉｂＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＥＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫ−ＮＨ２（配列番号２９）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸であり、およびＮＨ２は、Ｃ−末端アミドを示す。
【０３０５】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＡｉｂＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＥＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧ（これは、従来の３文字表記では、Ｈｉｓ−Ａｉｂ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ（配列番号３０）である）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸である。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＡｉｂＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＥＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧ−ＮＨ２（配列番号３０）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸であり、およびＮＨ２は、Ｃ−末端アミドを示す。
【０３０６】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＡｉｂＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＥＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧＧ（これは、従来の３文字表記では、Ｈｉｓ−Ａｉｂ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ（配列番号３１）である）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸である。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＡｉｂＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＥＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧＧ−ＮＨ２（配列番号３１）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸であり、およびＮＨ２は、Ｃ−末端アミドを示す。
【０３０７】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＡｉｂＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＥＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧＧＰ（これは、従来の３文字表記では、Ｈｉｓ−Ａｉｂ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ（配列番号３２）である）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸である。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＡｉｂＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＥＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧＧＰ−ＮＨ２、（配列番号３２）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、Ａｉｂ、はアミノイソ酪酸であり、およびＮＨ２は、Ｃ−末端アミドを示す。
【０３０８】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＡｉｂＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＥＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧＧＰＳ（これは、従来の３文字表記では、Ｈｉｓ−Ａｉｂ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ（配列番号３３）である）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸である。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＡｉｂＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＥＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧＧＰＳ−ＮＨ２（配列番号３３）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸であり、およびＮＨ２は、Ｃ−末端アミドを示す。
【０３０９】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＡｉｂＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＥＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧＧＰＳＳ（これは、従来の３文字表記では、Ｈｉｓ−Ａｉｂ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ（配列番号３４）である）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸である。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＡｉｂＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＥＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧＧＰＳＳ−ＮＨ２（配列番号３４）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸であり、およびＮＨ２は、Ｃ−末端アミドを示す。
【０３１０】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＡｉｂＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＥＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧＧＰＳＳＧ（これは、従来の３文字表記では、Ｈｉｓ−Ａｉｂ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ（配列番号３５）である）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸である。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＡｉｂＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＥＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧＧＰＳＳＧ−ＮＨ２（配列番号３５）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸であり、およびＮＨ２は、Ｃ−末端アミドを示す。
【０３１１】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＡｉｂＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＥＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧＧＰＳＳＧＡ（これは、従来の３文字表記では、Ｈｉｓ−Ａｉｂ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ａｌａ（配列番号３６）である）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸である。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＡｉｂＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＥＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧＧＰＳＳＧＡ−ＮＨ２（配列番号３６）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸であり、およびＮＨ２は、Ｃ−末端アミドを示す。
【０３１２】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＡｉｂＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＥＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧＧＰＳＳＧＡＰ（これは、従来の３文字表記では、Ｈｉｓ−Ａｉｂ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｐｒｏ（配列番号３７）である）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸である。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＡｉｂＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＥＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧＧＰＳＳＧＡＰ−ＮＨ２（配列番号３７）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸であり、およびＮＨ２は、Ｃ−末端アミドを示す。
【０３１３】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＧＥＧＴＦＴＳＤＬＳＫＱＭＥＥＥＡＶＲＬＦＩＥＷＬＫＮＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳＺ（これは、従来の３文字表記では、Ｈｉｓ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ−Ｌｙｓ−Ｇｌｎ−Ｍｅｔ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ｇｌｕ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｚａａ（配列番号３８）である）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、ＺまたはＺａａは、
【化２６】
2019516686.tif 000028
を含む４−アジドノルロイシンである。
【０３１４】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＧＥＧＴＦＴＳＤＬＳＫＱＭＥＥＥＡＶＲＬＦＩＥＷＬＫＮＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳＺ−ＮＨ２（配列番号３８）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、ＮＨ２は、Ｃ−末端アミドを示し、およびＺまたはＺａａは、
【化２７】
2019516686.tif 000029
を含む４−アジドノルロイシンである。
【０３１５】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＡｉｂＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＧＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＲＧＲＧＺ（これは、従来の３文字表記では、Ｈｉｓ−Ａｉｂ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｚａａ（配列番号３９）である）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸であり、およびＺまたはＺａａは、
【化２８】
2019516686.tif 000030
を含む４−アジドノルロイシンである。
【０３１６】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＡｉｂＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＧＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＲＧＲＧＺ−ＮＨ２（配列番号３９）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸であり、ＮＨ２は、Ｃ−末端アミドを示し、およびＺまたはＺａａは、
【化２９】
2019516686.tif 000031
を含む４−アジドノルロイシンである。
【０３１７】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＡｉｂＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＧＱＡＡＮＸＥＦＩＡＷＬＶＲＧＲＧ（これは、従来の３文字表記では、Ｈｉｓ−Ａｉｂ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ａｓｎ−Ｘａａ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ（配列番号４０）である）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸であり、およびＸまたはＸａａは、式：
【化３０】
2019516686.tif 000032
を有するリシン（５アジドペンタン酸アミド）である。
【０３１８】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＡｉｂＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＧＱＡＡＮＸＥＦＩＡＷＬＶＲＧＲＧ−ＮＨ２（配列番号４０）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸であり、ＮＨ２は、Ｃ−末端アミドを示し、およびＸまたはＸａａは、式：
【化３１】
2019516686.tif 000033
を有するリシン（５アジドペンタン酸アミド）である。
【０３１９】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＡｉｂＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＧＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫ−ＡｉｂＲＺ（これは、従来の３文字表記では、Ｈｉｓ−Ａｉｂ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ａｉｂ−Ａｒｇ−Ｚａａ（配列番号４１）である）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸であり、およびＺまたはＺａａは、
【化３２】
2019516686.tif 000034
を含む４−アジドノルロイシンである。
【０３２０】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＡｉｂＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＧＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫ−ＡｉｂＲＺ−ＮＨ２（配列番号４１）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸であり、ＮＨ２は、Ｃ−末端アミドを示し、およびＺまたはＺａａは、
【化３３】
2019516686.tif 000035
を含む４−アジドノルロイシンである。
【０３２１】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＳＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＧＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧＲＺ（これは、従来の３文字表記では、Ｈｉｓ−Ｓｅｒ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｚａａ（配列番号４２）である）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、ＺまたはＺａａは、
【化３４】
2019516686.tif 000036
を含む４−アジドノルロイシンである。
【０３２２】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＳＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＧＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧＲＺ−ＮＨ２（配列番号４２）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、ＮＨ２は、Ｃ−末端アミドを示し、およびＺまたはＺａａは、
【化３５】
2019516686.tif 000037
を含む４−アジドノルロイシンである。
【０３２３】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＡｉｂＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＥＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧＧＰＳＳＧＡＰＰＺ（これは、従来の３文字表記では、Ｈｉｓ−Ａｉｂ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｚａａ（配列番号４３）である）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸であり、およびＺまたはＺａａは、
【化３６】
2019516686.tif 000038
を含む４−アジドノルロイシンである。
【０３２４】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＡｉｂＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＥＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧＧＰＳＳＧＡＰＰＺ−ＮＨ２（配列番号４３）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸であり、ＮＨ２は、Ｃ−末端アミドを示し、およびＺまたはＺａａは、
【化３７】
2019516686.tif 000039
を含む４−アジドノルロイシンである。
【０３２５】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＡｉｂＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＥＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧＧＰＳＳＺ（これは、従来の３文字表記では、Ｈｉｓ−Ａｉｂ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｚａａ（配列番号４４）である）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸であり、およびＺまたはＺａａは、
【化３８】
2019516686.tif 000040
を含む４−アジドノルロイシンである。
【０３２６】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＡｉｂＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＥＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧＧＰＳＳＺ−ＮＨ２（配列番号４４）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸であり、ＮＨ２は、Ｃ−末端アミドを示し、およびＺまたはＺａａは、
【化３９】
2019516686.tif 000041
を含む４−アジドノルロイシンである。
【０３２７】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＡｉｂＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＥＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＺ（これは、従来の３文字表記では、Ｈｉｓ−Ａｉｂ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｚａａ（配列番号４５）である）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸であり、およびＺまたはＺａａは、
【化４０】
2019516686.tif 000042
を含む４−アジドノルロイシンである。
【０３２８】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＡｉｂＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＥＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＺ−ＮＨ２（配列番号４５）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸であり、ＮＨ２は、Ｃ−末端アミドを示し、およびＺまたはＺａａは、
【化４１】
2019516686.tif 000043
を含む４−アジドノルロイシンである。
【０３２９】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＡｉｂＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＥＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＺ（これは、従来の３文字表記では、Ｈｉｓ−Ａｉｂ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｚａａ（配列番号４６）である）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸であり、およびＺまたはＺａａは、
【化４２】
2019516686.tif 000044
を含む４−アジドノルロイシンである。
【０３３０】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＡｉｂＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＥＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＺ−ＮＨ２（配列番号４６）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸であり、ＮＨ２は、Ｃ−末端アミドを示し、およびＺまたはＺａａは、
【化４３】
2019516686.tif 000045
を含む４−アジドノルロイシンである。
【０３３１】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＡｉｂＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＥＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＣ（これは、従来の３文字表記では、Ｈｉｓ−Ａｉｂ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｃｙｓ（配列番号４７）である）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸である。
【０３３２】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＡｉｂＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＥＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＣ−ＮＨ２（配列番号４７）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸であり、およびＮＨ２は、Ｃ−末端アミドを示す。
【０３３３】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＡｉｂＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＥＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＺ（これは、従来の３文字表記では、Ｈｉｓ−Ａｉｂ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｚａａ（配列番号４８）である）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸であり、およびＺまたはＺａａは、
【化４４】
2019516686.tif 000046
を含む４−アジドノルロイシンである。
【０３３４】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＡｉｂＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＥＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＺ−ＮＨ２（配列番号４８）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸であり、ＮＨ２は、Ｃ−末端アミドを示し、およびＺまたはＺａａは、
【化４５】
2019516686.tif 000047
を含む４−アジドノルロイシンである。
【０３３５】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＡｉｂＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＥＱＡＡＫＥＦＩＡＷＺ（これは、従来の３文字表記では、Ｈｉｓ−Ａｉｂ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｚａａ（配列番号４９）である）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸であり、およびＺまたはＺａａは、
【化４６】
2019516686.tif 000048
を含む４−アジドノルロイシンである。
【０３３６】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＡｉｂＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＥＱＡＡＫＥＦＩＡＷＺ−ＮＨ２（配列番号４９）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸であり、ＮＨ２は、Ｃ−末端アミドを示し、およびＺまたはＺａａは、
【化４７】
2019516686.tif 000049
を含む４−アジドノルロイシンである。
【０３３７】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＡｉｂＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＥＱＡＡＺ（これは、従来の３文字表記では、Ｈｉｓ−Ａｉｂ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｚａａ（配列番号５０）である）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸であり、およびＺまたはＺａａは、
【化４８】
2019516686.tif 000050
を含む４−アジドノルロイシンである。
【０３３８】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＡｉｂＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＥＱＡＡＺ−ＮＨ２（配列番号５０）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸であり、ＮＨ２は、Ｃ−末端アミドを示し、およびＺまたはＺａａは、
【化４９】
2019516686.tif 000051
を含む４−アジドノルロイシンである。
【０３３９】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＧＥＧＴＦＴＳＤＬＳＫＱＭＥＥＥＡＶＲＬＦＩＥＷＬＫＮＧＺ（これは、従来の３文字表記では、Ｈｉｓ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ−Ｌｙｓ−Ｇｌｎ−Ｍｅｔ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ｇｌｕ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ｚａａ（配列番号５１）である）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、ＺまたはＺａａは、
【化５０】
2019516686.tif 000052
を含む４−アジドノルロイシンである。
【０３４０】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＧＥＧＴＦＴＳＤＬＳＫＱＭＥＥＥＡＶＲＬＦＩＥＷＬＫＮＧＺ−ＮＨ２（配列番号５１）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、ＮＨ２は、Ｃ−末端アミドを示し、およびＺまたはＺａａは、
【化５１】
2019516686.tif 000053
を含む４−アジドノルロイシンである。
【０３４１】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＧＥＧＴＦＴＳＤＬＳＫＱＭＥＥＥＡＶＲＬＦＩＥＷＬＫＮＺ（これは、従来の３文字表記では、Ｈｉｓ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ−Ｌｙｓ−Ｇｌｎ−Ｍｅｔ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ｇｌｕ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｚａａ（配列番号５２）である）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、ＺまたはＺａａは、
【化５２】
2019516686.tif 000054
を含む４−アジドノルロイシンである。
【０３４２】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＧＥＧＴＦＴＳＤＬＳＫＱＭＥＥＥＡＶＲＬＦＩＥＷＬＫＮＺ−ＮＨ２（配列番号５２）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、ＮＨ２は、Ｃ−末端アミドを示し、およびＺまたはＺａａは、
【化５３】
2019516686.tif 000055
を含む４−アジドノルロイシンである。
【０３４３】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＧＥＧＴＦＴＳＤＬＳＫＱＭＥＥＥＡＶＲＬＦＩＥＷＬＫＺ（これは、従来の３文字表記では、Ｈｉｓ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ−Ｌｙｓ−Ｇｌｎ−Ｍｅｔ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ｇｌｕ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ｚａａ（配列番号５３）である）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、ＺまたはＺａａは、
【化５４】
2019516686.tif 000056
を含む４−アジドノルロイシンである。
【０３４４】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＧＥＧＴＦＴＳＤＬＳＫＱＭＥＥＥＡＶＲＬＦＩＥＷＬＫＺ−ＮＨ２（配列番号５３）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、ＮＨ２は、Ｃ−末端アミドを示し、およびＺまたはＺａａは、
【化５５】
2019516686.tif 000057
を含む４−アジドノルロイシンである。
【０３４５】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＧＥＧＴＦＴＳＤＬＳＫＱＭＥＥＥＡＶＲＬＦＩＥＷＬＺ（これは、従来の３文字表記では、Ｈｉｓ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ−Ｌｙｓ−Ｇｌｎ−Ｍｅｔ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ｇｌｕ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｚａａ（配列番号５４）である）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、ＺまたはＺａａは、
【化５６】
2019516686.tif 000058
を含む４−アジドノルロイシンである。
【０３４６】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＧＥＧＴＦＴＳＤＬＳＫＱＭＥＥＥＡＶＲＬＦＩＥＷＬＺ−ＮＨ２（配列番号５４）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、ＮＨ２は、Ｃ−末端アミドを示し、およびＺまたはＺａａは、
【化５７】
2019516686.tif 000059
を含む４−アジドノルロイシンである。
【０３４７】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、およびアミノ酸配列：ＨＧＥＧＴＦＴＳＤＬＳＫＱＭＥＥＥＡＶＲＬＦＩＥＷＺ（これは、従来の３文字表記では、Ｈｉｓ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ−Ｌｙｓ−Ｇｌｎ−Ｍｅｔ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ｇｌｕ−Ｔｒｐ−Ｚａａ（配列番号５５）である）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、ＺまたはＺａａは、
【化５８】
2019516686.tif 000060
を含む４−アジドノルロイシンである。
【０３４８】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、およびアミノ酸配列：ＨＧＥＧＴＦＴＳＤＬＳＫＱＭＥＥＥＡＶＲＬＦＩＥＷＺ−ＮＨ２（配列番号５５）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、ＮＨ２は、Ｃ−末端アミドを示し、およびＺまたはＺａａは、
【化５９】
2019516686.tif 000061
を含む４−アジドノルロイシンである。
【０３４９】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＡｉｂＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＥＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳＺ（これは、従来の３文字表記では、Ｈｉｓ−Ａｉｂ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｚａａ（配列番号５６）である）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸であり、およびＺまたはＺａａは、
【化６０】
2019516686.tif 000062
を含む４−アジドノルロイシンである。
【０３５０】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＡｉｂＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＥＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳＺ−ＮＨ２（配列番号５６）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、Ａｉｂは、アミノイソ酪酸であり、ＮＨ２は、Ｃ−末端アミドを示し、およびＺまたはＺａａは、
【化６１】
2019516686.tif 000063
を含む４−アジドノルロイシンである。
【０３５１】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＧＥＧＴＦＴＳＤＬＳＫＱＭＥＥＥＡＶＲＬＦＩＥＷＬＫＮＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳＣ（これは、従来の３文字表記では、Ｈｉｓ−Ｇｌｙ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ−Ｌｙｓ−Ｇｌｎ−Ｍｅｔ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ｇｌｕ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ（配列番号５７）である）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含む。
【０３５２】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、およびアミノ酸配列：ＨＧＥＧＴＦＴＳＤＬＳＫＱＭＥＥＥＡＶＲＬＦＩＥＷＬＫＮＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳＣ−ＮＨ２（配列番号５７）を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、ＮＨ２は、Ｃ−末端アミドを示す。
【０３５３】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、および配列番号１〜５７のいずれか１つのアミノ酸配列の等長部分に対して少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％同一である少なくとも８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、または３１連続アミノ酸部分を含むＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含む。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、コンジュゲートリンカー、および配列番号１〜５７のいずれか１つのアミノ酸配列の等長部分に対して少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％同一である少なくとも８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、または３１連続アミノ酸部分を含むＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含む。
【０３５４】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、およびその全長にわたって配列番号１〜５７のいずれか１つのアミノ酸配列に対して少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％相同である、８〜５０アミノ酸長のＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含む。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、コンジュゲートリンカー、およびその全長にわたって配列番号１〜５７のいずれか１つのアミノ酸配列に対して少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％相同である、８〜５０アミノ酸長のＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含む。
【０３５５】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、およびその全長にわたって配列番号１〜５７のいずれか１つのアミノ酸配列に対して少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％同一である８〜５０アミノ酸長のＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含む。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、コンジュゲートリンカー、およびその全長にわたって配列番号１〜５７のいずれか１つのアミノ酸配列に対して少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または１００％同一である８〜５０アミノ酸長のＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含む。
【０３５６】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、およびＧＬＰ−１（７−３７）（配列番号１）のアミノ酸配列と比較した場合に１、２、３、４、５、６、７または８アミノ酸置換、挿入、欠失、またはそれらの２つ以上の組み合わせを有するアミノ酸配列を含むＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含む。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、コンジュゲートリンカー、およびＧＬＰ−１（７−３７）（配列番号１）のアミノ酸配列と比較した場合に１、２、３、４、５、６、７または８アミノ酸置換、挿入、欠失、またはそれらの２つ以上の組み合わせを有するアミノ酸配列を含むＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含む。
【０３５７】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、場合によりコンジュゲートリンカー、および配列番号１〜５７のいずれかのアミノ酸配列を含むかまたはそれからなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含む。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、および配列番号１〜５７のいずれかのアミノ酸配列と比較した場合に１、２、３、４、５、６、７または８アミノ酸置換、挿入、欠失、またはそれらの２つ以上の組み合わせを有するアミノ酸配列を含むＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含む。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、コンジュゲートリンカー、および配列番号１〜５７のいずれかのアミノ酸配列と比較した場合に１、２、３、４、５、６、７または８アミノ酸置換、挿入、欠失、またはそれらの２つ以上の組み合わせを有するアミノ酸配列を含むＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含む。
【０３５８】
上記の実施形態のいずれかにおいて、ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分は、保存的アミノ酸置換、アミノ酸類似体、またはアミノ酸誘導体を含むことができる。特定の実施形態において、保存的アミノ酸置換は、他の脂肪族アミノ酸による脂肪族アミノ酸の置き換え；スレオニンによるセリンの置き換えもしくはその逆；他の酸性残基による酸性残基の置き換え；アミド基を支持する他の残基による、アミド基を支持する残基の置き換え；塩基性残基の他の塩基性残基との交換；または他の芳香族残基による芳香族残基の置き換え、あるいはそれらの組み合わせを含み、および脂肪族残基は、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシンもしくはそれらの合成均等物を含み、酸性残基は、アスパラギン酸、グルタミン酸もしくはそれらの合成均等物を含み、アミド基を含む残基は、アスパラギン酸、グルタミン酸もしくはそれらの合成均等物を含み、塩基性残基は、リシン、アルギニンもしくはそれらの合成均等物を含み、または芳香族残基は、フェニルアラニン、チロシンもしくはそれらの合成均等物を含む。
【０３５９】
本明細書に提供する実施形態に使用できるさらなるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分または類似体は、米国特許出願公開第２０１４０２０６６０７号明細書；米国特許第９，１８７，５２２号明細書；国際公開第２００７／１２４４６１号パンフレット；国際公開第２０１４／０９６１７９号パンフレット；国際公開第２００９／０３０７３８号パンフレット；国際公開第２０１６／０５５６１０号パンフレット；および米国特許第８，３２９，４１９号明細書（これらは、全て参照により全体として本明細書に組み込まれる）に記載されている。
【０３６０】
コンジュゲートリンカー
特定の実施形態において、コンジュゲートリンカーは、ＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分をオリゴヌクレオチドに結合する。特定の化合物において、ＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分は、単結合によってコンジュゲートリンカーを介してオリゴヌクレオチドに付着している。特定の実施形態において、コンジュゲートリンカーは、ヒドロカルビル鎖等の鎖構造、またはエチレングリコール、ヌクレオシドもしくはアミノ酸単位等の反復単位のオリゴマーを含む。
【０３６１】
特定の実施形態において、コンジュゲートリンカーは、アルキル、アミノ、オキソ、アミド、ジスルフィド、ポリエチレングリコール、エーテル、チオエーテル、およびヒドロキシルアミノから選択される１つ以上の基を含む。特定のこのような実施形態において、コンジュゲートリンカーは、アルキル、アミノ、オキソ、アミドおよびエーテル基から選択される基を含む。特定の実施形態において、コンジュゲートリンカーは、アルキルおよびアミド基から選択される基を含む。特定の実施形態において、コンジュゲートリンカーは、アルキルおよびエーテル基から選択される基を含む。特定の実施形態において、コンジュゲートリンカーは、少なくとも１つのリン部分を含む。特定の実施形態において、コンジュゲートリンカーは、少なくとも１つのホスフェート基を含む。特定の実施形態において、コンジュゲートリンカーは、少なくとも１つの中性結合基を含む。
【０３６２】
特定の実施形態において、コンジュゲートリンカー、例として、上記コンジュゲートリンカーは、二官能性結合部分、例えば親化合物、例えば本明細書に提供されるオリゴヌクレオチドへのコンジュゲート基の付着に有用であることが当技術分野において公知のものである。一般に、二官能性結合部分は、少なくとも２つの官能基を含む。官能基のあるものは、化合物の特定の部位に結合するように選択され、他方は、コンジュゲート基に結合するように選択される。二官能性結合部分中に使用される官能基の例としては、限定されるものではないが、求核基と反応するための求電子剤および求電子基と反応するための求核剤が挙げられる。特定の実施形態において、二官能性結合部分は、アミノ、ヒドロキシル、カルボン酸、チオール、アルキル、アルケニル、およびアルキニルから選択される１つ以上の基を含む。
【０３６３】
コンジュゲートリンカーの例としては、限定されるものではないが、ピロリジン、８−アミノ−３，６−ジオキサオクタン酸（ＡＤＯ）、スクシンイミジル４−（Ｎ−メレイミドメチル）シクロヘキサン−１−カルボキシレート（ＳＭＣＣ）および６−アミノヘキサン酸（ＡＨＥＸまたはＡＨＡ）が挙げられる。他のコンジュゲートリンカーとしては、限定されるものではないが、置換もしくは非置換Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、置換もしくは非置換Ｃ２〜Ｃ１０アルケニルまたは置換もしくは非置換Ｃ２〜Ｃ１０アルキニルが挙げられ、好ましい置換基の非限定的列記としては、ヒドロキシル、アミノ、アルコキシ、カルボキシ、ベンジル、フェニル、ニトロ、チオール、チオアルコキシ、ハロゲン、アルキル、アリール、アルケニルおよびアルキニルが挙げられる。
【０３６４】
特定の実施形態において、コンジュゲートリンカーは、１〜１０個のリンカー−ヌクレオシドを含む。特定の実施形態において、そのようなリンカー−ヌクレオシドは、修飾ヌクレオシドである。特定の実施形態において、そのようなリンカー−ヌクレオシドは、修飾糖部分を含む。特定の実施形態において、リンカー−ヌクレオシドは、非修飾である。特定の実施形態において、リンカー−ヌクレオシドは、場合により、プリン、置換プリン、ピリミジンまたは置換ピリミジンから選択される保護された複素環式塩基を含む。特定の実施形態において、開裂可能部分は、ウラシル、チミン、シトシン、４−Ｎ−ベンゾイルシトシン、５−メチルシトシン、４−Ｎ−ベンゾイル−５−メチルシトシン、アデニン、６−Ｎ−ベンゾイルアデニン、グアニンおよび２−Ｎ−イソブチリルグアニンから選択されるヌクレオシドである。一般に、リンカー−ヌクレオシドは、標的組織に到達した後、化合物から開裂されることが望ましい。従って、リンカー−ヌクレオシドは、一般に開裂可能結合を介して互いに結合し、かつ化合物の残りの部分に結合する。特定の実施形態において、そのような開裂可能結合は、ホスホジエステル結合である。
【０３６５】
本明細書において、リンカー−ヌクレオシドは、オリゴヌクレオチドの一部として見なされない。従って、化合物が特定の数もしくは範囲の結合ヌクレオシドからなり、および／または参照核酸に対する特定のパーセント相補性のオリゴヌクレオチドを含み、かつ化合物がリンカー−ヌクレオシドを含むコンジュゲートリンカーを含むコンジュゲート基も含む実施形態では、そのリンカー−ヌクレオシドは、オリゴヌクレオチドの長さに向かって計数されず、参照核酸に対するオリゴヌクレオチドのパーセント相補性の決定に使用されない。例えば、化合物は、（１）８〜３０個のヌクレオシドからなる修飾オリゴヌクレオチドと、（２）修飾オリゴヌクレオチドのヌクレオシドと連続する１〜１０個のリンカー−ヌクレオシドを含むコンジュゲート基とを含み得る。このような化合物の連続的な結合ヌクレオシドの総数は、３０個を超える。代替的に、化合物は、８〜３０個のヌクレオシドからなる修飾オリゴヌクレオチドを含み、コンジュゲート基を含まない場合がある。このような化合物の連続的な結合ヌクレオシドの総数は、３０個以下である。別途示されない限り、コンジュゲートリンカーは、１０個以下のリンカー−ヌクレオシドを含む。特定の実施形態において、コンジュゲートリンカーは、５個以下のリンカー−ヌクレオシドを含む。特定の実施形態において、コンジュゲートリンカーは、３個以下のリンカー−ヌクレオシドを含む。特定の実施形態において、コンジュゲートリンカーは、２個以下のリンカー−ヌクレオシドを含む。特定の実施形態において、コンジュゲートリンカーは、１個以下のリンカー−ヌクレオシドを含む。
【０３６６】
特定の実施形態において、コンジュゲート基がオリゴヌクレオチドから開裂されることが望ましい。例えば、特定の状況において、特定のコンジュゲート部分を含む化合物は、特定の細胞タイプにより吸収される方がよいが、化合物が吸収されると、コンジュゲート基が開裂されて非コンジュゲート化または親オリゴヌクレオチドを解放することが望ましい。従って、特定のコンジュゲートは、一般にコンジュゲートリンカー内に１つ以上の開裂可能部分を含み得る。特定の実施形態において、開裂可能部分は、開裂可能結合である。特定の実施形態において、開裂可能部分は、少なくとも１つの開裂可能結合を含む原子団である。特定の実施形態において、開裂可能部分は、１つ、２つ、３つ、４つ、または５つ以上の開裂可能結合を有する原子団を含む。特定の実施形態において、開裂可能部分は、細胞内またはリソソーム等の細胞内コンパートメント内で選択的に開裂される。特定の実施形態において、開裂可能部分は、ヌクレアーゼ等の内因性酵素によって選択的に開裂される。
【０３６７】
特定の実施形態において、開裂可能結合は、アミド、エステル、エーテル、ホスホジエステルの一方または両方のエステル、リン酸エステル、カルバメート、またはジスルフィドの中から選択される。特定の実施形態において、開裂可能結合は、ホスホジエステルのエステルの一方または両方である。特定の実施形態において、開裂可能部分は、ホスフェートまたはホスホジエステルを含む。特定の実施形態において、開裂可能部分は、オリゴヌクレオチドとコンジュゲート部分またはコンジュゲート基との間のホスフェート結合である。
【０３６８】
特定の実施形態において、開裂可能部分は、１つ以上のリンカー−ヌクレオシドを含むかまたはそれからなる。特定のこのような実施形態において、１つ以上のリンカー−ヌクレオシドは、互いに結合し、および／または開裂可能結合を介して化合物の残りの部分に結合している。特定の実施形態において、そのような開裂可能結合は、非修飾ホスホジエステル結合である。特定の実施形態において、開裂可能部分は、ホスフェートヌクレオシド間結合によってオリゴヌクレオチドの３’または５’−末端ヌクレオシドのいずれかに付着し、かつホスフェートまたはホスホロチオエート結合によってコンジュゲートリンカーまたはコンジュゲート部分の残りの部分に共有結合した２’−デオキシヌクレオシドである。特定のこのような実施形態において、開裂可能部分は、２’−デオキシアデノシンである。
【０３６９】
１．特定のヘキシルアミノリンカー
特定の実施形態において、化合物は、以下の構造：
【化６２】
2019516686.tif 000064
（式中、各ｎは、独立して０、１、２、３、４、５、６、または７から選択される）
から選択されるコンジュゲートリンカーによってＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分に結合されたオリゴヌクレオチドを含む。
【０３７０】
特定の実施形態において、化合物は、以下の構造：
【化６３】
2019516686.tif 000065
（式中、各ｎは、独立して１〜２０であり；およびｐは、１〜６である）
から選択されるコンジュゲートリンカーによってＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分に結合されたオリゴヌクレオチドを含む。
【０３７１】
特定の実施形態において、化合物は、以下の構造：
【化６４】
2019516686.tif 000066
（式中、各ｎは、独立して、１〜２０である）
から選択されるコンジュゲートリンカーによってＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分に結合されたオリゴヌクレオチドを含む。
【０３７２】
特定の実施形態において、化合物は、以下の構造：
【化６５】
2019516686.tif 000067
（式中、各ｎは、独立して、１〜２０である）
から選択されるコンジュゲートリンカーによってＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分に結合されたオリゴヌクレオチドを含む。
【０３７３】
特定の実施形態において、化合物は、以下の構造：
【化６６】
2019516686.tif 000068
から選択されるコンジュゲートリンカーによってＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分に結合されたオリゴヌクレオチドを含む。
【０３７４】
特定の実施形態において、化合物は、以下の構造：
【化６７】
2019516686.tif 000069
から選択されるコンジュゲートリンカーによってＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分に結合されたオリゴヌクレオチドを含む。
【０３７５】
特定の実施形態において、化合物は、以下の構造：
【化６８】
2019516686.tif 000070
から選択されるコンジュゲートリンカーによってＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分に結合されたオリゴヌクレオチドを含む。
【０３７６】
特定の実施形態において、化合物は、以下の構造：
【化６９】
2019516686.tif 000071
を有するコンジュゲートリンカーによってＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分に結合されたオリゴヌクレオチドを含む。
【０３７７】
特定の実施形態において、化合物は、以下の構造：
【化７０】
2019516686.tif 000072
（式中
Ｘは、直接または間接的にＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分に結合し；および
Ｙは、直接または間接的に修飾オリゴヌクレオチドに結合する）
を有するコンジュゲートリンカーによってＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分に結合されたオリゴヌクレオチドを含む。
【０３７８】
特定の実施形態において、化合物は、国際公開第２０１４／１７９６２０号パンフレット（これは、参照により全体として本明細書に組み込まれる）に記載されている任意のコンジュゲートリンカーによってＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分に結合されたオリゴヌクレオチドを含む。
【０３７９】
２．特定のアルキルホスフェートリンカー
特定の実施形態において、化合物は、以下の構造：
【化７１】
2019516686.tif 000073
（式中：
ホスフェート基は、修飾オリゴヌクレオチドに連結され、かつＹは、コンジュゲート基に連結され；
Ｙは、ホスホジエステルまたはアミノ（−ＮＨ−）基であり；
Ｚは、式：
【化７２】
2019516686.tif 000074
を有するピロリジニル基であり；
ｊは、０または１であり；
ｎは、約１〜約１０であり；
ｐは、１〜約１０であり；
ｍは、０または１〜４であり；および
Ｙがアミノである場合、ｍは、１である）
を有するコンジュゲートリンカーによってＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分に結合されたオリゴヌクレオチドを含む。
【０３８０】
特定の実施形態において、Ｙは、アミノ（−ＮＨ−）である。特定の実施形態において、Ｙは、ホスホジエステル基である。特定の実施形態において、ｎは、３であり、およびｐは、３である。特定の実施形態において、ｎは、６であり、およびｐは、６である。特定の実施形態において、ｎは、２〜１０であり、およびｐは、２〜１０である。特定の実施形態において、ｎおよびｐは、異なる。特定の実施形態において、ｎおよびｐは、同じである。特定の実施形態において、ｍは、０である。特定の実施形態において、ｍは、１である。特定の実施形態において、ｊは、０である。特定の実施形態において、ｊは、１であり、およびＺは、式：
【化７３】
2019516686.tif 000075
を有する。
【０３８１】
特定の実施形態において、ｎは、２であり、およびｐは、３である。特定の実施形態において、ｎは、５であり、およびｐは、６である。
【０３８２】
特定の実施形態において、化合物は、以下の構造：
【化７４】
2019516686.tif 000076
（式中、Ｘは、直接または間接的にＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分に付着し；および
Ｔ１は、修飾オリゴヌクレオチドを含み；かつＢｘは、修飾または非修飾核酸塩基である）
を有するコンジュゲートリンカーによってＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分に結合されたオリゴヌクレオチドを含む。
【０３８３】
３．特定のクリックケミストリーリンカー
特定の実施形態において、化合物は、コンジュゲートリンカーによってＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分に結合されたオリゴヌクレオチドを含み、コンジュゲートリンカーは、当技術分野で既知のクリックケミストリーを用いて調製される。化合物は、クリックケミストリーを用いて調製されており、固体担体に付着したオリゴマー化合物上のアルキニルホスホネートヌクレオシド間結合が、１，２，３−トリアゾリルホスホネートヌクレオシド間結合に変換された後、固体担体から開裂される（Ｋｒｉｓｈｎａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．２０１２，１３４（２８），１１６１８−１１６３１）（これは、参照により全体として本明細書に組み込まれる）。いくつかの実施形態で使用するのに好適なさらなるリンカーは、“Ｃｌｉｃｋ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｆｏｒ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｍａｔｅｒｉａｌｓ  Ｓｃｉｅｎｃｅ”Ｅｄ．Ｊｏｅｒｇ  Ｌａｈａｍ，Ｗｉｌｅｙ  ２００９（これは、参照により全体として本明細書に組み込まれる）に記載されているクリックケミストリーによって調製することができる。
【０３８４】
特定の実施形態において、クリック反応を用いて、
【化７５】
2019516686.tif 000077
を、限定されるものではないが、以下の化合物：
【化７６】
2019516686.tif 000078
（式中、Ｙは、直接または間接的にオリゴヌクレオチドに付着する）
を含む、末端アミンを有するオリゴヌクレオチドと反応させて、
【化７７】
2019516686.tif 000079
を得、これを、アジドを有するＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分と反応させて、
【化７８】
2019516686.tif 000080
（式中、Ｎ−Ｎ＝Ｎは、ＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分のアジド基を表し、およびＸは、直接または間接的にＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分の残りの部分に付着する）
を得ることにより、ＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分とオリゴヌクレオチドとを結合することができる。
【０３８５】
特定の実施形態において、化合物は、コンジュゲートリンカーによってＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分に結合されたオリゴヌクレオチドを含み、コンジュゲートリンカーは、以下の化合物：
【化７９】
2019516686.tif 000081
から調製される。
【０３８６】
特定の実施形態において、化合物は、コンジュゲートリンカーによってＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分に結合されたオリゴヌクレオチドを含み、コンジュゲートリンカーは、
【化８０】
2019516686.tif 000082
を含む。
【０３８７】
特定の実施形態において、化合物は、コンジュゲートリンカーによってＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分に結合されたオリゴヌクレオチドを含み、コンジュゲートリンカーは、
【化８１】
2019516686.tif 000083
を含む。
【０３８８】
特定の実施形態において、化合物は、コンジュゲートリンカーによってＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分に結合されたオリゴヌクレオチドを含み、化合物は、
【化８２】
2019516686.tif 000084
（式中、Ｎ−Ｎ＝Ｎは、ＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分のアジド基を表し、かつＸは、直接または間接的にＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分の残りの部分に付着し；および
Ｙは、直接または間接的にオリゴヌクレオチドに付着する）
を含む。
【０３８９】
特定の実施形態において、化合物は、コンジュゲートリンカーによってＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分に結合されたオリゴヌクレオチドを含み、化合物は、
【化８３】
2019516686.tif 000085
（式中、Ｎ−Ｎ＝Ｎは、ＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分のアジド基を表し、かつＸは、直接または間接的にＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分の残りの部分に付着し；および
Ｙは、直接または間接的にオリゴヌクレオチドに付着する）
を含む。
【０３９０】
特定の実施形態において、化合物は、コンジュゲートリンカーによってＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分に結合されたオリゴヌクレオチドを含み、化合物は、
【化８４】
2019516686.tif 000086
（式中、Ｎ−Ｎ＝Ｎは、ＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分のアジド基を表し、かつＸは、直接または間接的にＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分の残りの部分に付着し；および
Ｙは、直接または間接的にオリゴヌクレオチドに付着する）
を含む。
【０３９１】
４．特定のマレイミドリンカー
特定の実施形態において、化合物は、コンジュゲートリンカーによってＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分に結合されたオリゴヌクレオチドを含み、コンジュゲートリンカーは、
【化８５】
2019516686.tif 000087
を含み、
Ｘは、直接または間接的にＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分に付着し；および
Ｙは、直接または間接的にオリゴヌクレオチドに付着する。
【０３９２】
特定の実施形態において、上記のコンジュゲートリンカーは、ペプチドをオリゴヌクレオチドに結合することができる。特定の実施形態において、化合物は、コンジュゲートリンカーによってペプチドに結合されたオリゴヌクレオチドを含み、コンジュゲートリンカーは、
【化８６】
2019516686.tif 000088
を含み、
Ｘは、直接または間接的にペプチドに付着し；および
Ｙは、直接または間接的にオリゴヌクレオチドに付着する。
【０３９３】
５．特定のジスルフィド結合
特定の実施形態において、化合物は、コンジュゲートリンカーによってＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分に結合されたオリゴヌクレオチドを含み、コンジュゲートリンカーは、ジスルフィド結合を含む。特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドは、ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分とジスルフィド結合を形成する活性化ジスルフィドを含む。特定の実施形態において、化合物は、ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分と開裂可能または可逆的な結合を形成することが可能な活性化ジスルフィド部分を含むオリゴヌクレオチドを含む。特定の実施形態において、化合物は、コンジュゲートリンカーを有することなく、ジスルフィド結合によってＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分に直接付着するオリゴヌクレオチドを含む。
【０３９４】
特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチドと活性化ジスルフィド部分との間のリンカーを含む。別の実施形態では、活性化ジスルフィド部分は、式−Ｓ−Ｓ（Ｏ）２−置換もしくは非置換Ｃ１〜Ｃ１２アルキルまたは−Ｓ−Ｓ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−置換もしくは非置換Ｃ１〜Ｃ１２アルキルを有する。好ましい活性化ジスルフィド部分は、メタンチオスルホネートおよびジチオカルボメトキシである。さらなる実施形態において、活性化ジスルフィドは、置換もしくは非置換ジチオピリジル、置換もしくは非置換ジチオベンゾチアゾリル、または置換もしくは非置換ジチオテトラゾリルである。好ましい活性化ジスルフィドは、２−ジチオピリジル、２−ジチオ−３−ニトロピリジル、２−ジチオ−５−ニトロピリジル、２−ジチオベンゾチアゾリル、Ｎ−（Ｃ１〜Ｃ１２アルキル）−２−ジチオピリジル、２−ジチオピリジル−Ｎ−オキシド、または２−ジチオ−１−メチル−１Ｈ−テトラゾリルである。
【０３９５】
いくつかの実施形態では、活性化ジスルフィド部分は、式−Ｓ−Ｓ（Ｏ）ｎ−Ｒ１を有し、式中、
ｎは、０、１、または２であり；および
Ｒ１は、置換もしくは非置換複素環式、置換もしくは非置換脂肪族、または−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｒ２から選択され、Ｒ２−は、置換または非置換脂肪族である。
【０３９６】
別の実施形態では、活性化ジスルフィド部分は、式−Ｓ−Ｓ（Ｏ）２−置換もしくは非置換Ｃ１〜Ｃ１２アルキルまたは−Ｓ−Ｓ−Ｃ（Ｏ）Ｏ−置換もしくは非置換Ｃ１〜Ｃ１２アルキルを有する。特定の実施形態において、活性化ジスルフィド部分は、メタンチオスルホネートおよびジチオカルボメトキシを含む。さらなる実施形態において、活性化ジスルフィドは、置換もしくは非置換ジチオピリジル、置換もしくは非置換ジチオベンゾチアゾリル、または置換もしくは非置換ジチオテトラゾリルであり得る。活性化ジスルフィドのさらなる例としては、限定されるものではないが、２−ジチオピリジル、２−ジチオ−３−ニトロピリジル、２−ジチオ−５−ニトロピリジル、２−ジチオベンゾチアゾリル、Ｎ−（Ｃ１〜Ｃ１２アルキル）−２−ジチオピリジル、２−ジチオピリジル−Ｎ−オキシド、および２−ジチオ−１−メチル−１Ｈ−テトラゾリルが挙げられる。
【０３９７】
いくつかの実施形態では、二価結合基は、二価置換または非置換脂肪族基である。別の実施形態では、二価結合基は、式−Ｑ１−Ｇ−Ｑ２−を有し、式中、
Ｑ１およびＱ２は、独立して非存在または置換もしくは非置換Ｃ１〜Ｃ１２アルキレン、置換もしくは非置換アルカリーレンまたは−（ＣＨ２）ｍ−Ｏ−（ＣＨ２）ｐ−から選択され、
各ｍおよびｐは、独立して、１〜約１０の整数であり；
Ｇは、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−ＮＨ−Ｃ（Ｓ）−ＮＨ−、−ＮＨ−Ｏ−、ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−、または−Ｏ−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−である。
【０３９８】
二価結合基の例としては、限定されるものではないが、
【化８７】
2019516686.tif 000089
が挙げられる。
【０３９９】
特定の実施形態において、化合物は、米国特許第７，７１３，９４４号明細書（これは、参照により全体として本明細書に組み込まれる）に記載されているジスルフィド結合によってＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分に結合されたオリゴヌクレオチドを含む。特定の実施形態において、化合物は、ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分に結合されたオリゴヌクレオチドを含み、オリゴヌクレオチドは、米国特許第７，７１３，９４４号明細書（これは、参照により全体として本明細書に組み込まれる）に記載されている活性化ジスルフィドを含む。
【０４００】
特定の実施形態において、直接または本明細書に記載されるコンジュゲートリンカーにより、ジスルフィド結合によってＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分に結合されたオリゴヌクレオチドを含む上記の化合物のいずれかは、ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分のシステイン、ペニシラミン、ホモシステイン、メルカプトプロピオン酸、またはβ−メルカプト−β，β，−シクロペンタメチレンプロピオン酸部分と、オリゴヌクレオチドまたはコンジュゲートリンカーとの間のジスルフィド結合を含むことができる。特定の実施形態において、化合物は、ジスルフィド結合によってＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分に直接結合したオリゴヌクレオチドを含む。特定の実施形態において、化合物は、ジスルフィド結合によってＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分に直接結合したオリゴヌクレオチドを含み、ジスルフィド結合は、オリゴヌクレオチドと、ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分のシステイン、ペニシラミン、ホモシステイン、メルカプトプロピオン酸、またはβ−メルカプト−β，β，−シクロペンタメチレンプロピオン酸部分との間である。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、コンジュゲートリンカー、およびＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、ジスルフィド結合は、コンジュゲートリンカーとＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分とを結合し、オリゴヌクレオチドは、コンジュゲートリンカーに付着している。特定の実施形態において、化合物は、オリゴヌクレオチド、コンジュゲートリンカー、およびＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分を含み、ジスルフィド結合は、コンジュゲートリンカーをＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分のシステイン、ペニシラミン、ホモシステイン、メルカプトプロピオン酸、またはβ−メルカプト−β，β，−シクロペンタメチレンプロピオン酸部分に結合し、オリゴヌクレオチドは、コンジュゲートリンカーに付着している。特定の実施形態において、システイン、ペニシラミン、ホモシステイン、メルカプトプロピオン酸、またはβ−メルカプト−β，β，−シクロペンタメチレンプロピオン酸部分は、ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分のＮ−末端、Ｃ−末端、側鎖、または内部アミノ酸位置に存在する。
【０４０１】
６．特定の酵素開裂可能結合
特定の実施形態において、化合物は、コンジュゲートリンカーによってＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分に結合されたオリゴヌクレオチドを含み、コンジュゲートリンカーは、酵素開裂可能部分を含む。特定の実施形態において、ＧＬＰ−１受容体リガンドコンジュゲート部分は、ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート部分である。特定の実施形態において、酵素開裂可能部分は、ジペプチド等のペプチドである。
【０４０２】
プロドラッグの活性化に使用される当技術分野で既知の酵素は、特定の実施形態に提供される酵素開裂可能部分を開裂するのに使用することができる。特定の実施形態において、酵素開裂可能部分は、ＤＴジアホラーゼ、プラスミン、カルボキシペプチダーゼＧ２、チミジンキナーゼ（ウイルス）、シトシンデアミナーゼ、ブドウ糖オキシダーゼ、キサンチンオキシダーゼ、カルボキシペプチダーゼＡ、α−ガラクトシダーゼ、β−グルコシダーゼ、アゾレダクターゼ、γ−グルタミルトランスフェラーゼ、β−グルクロニダーゼ、β−ラクタマーゼ、アルカリホスファターゼ、アミノペプチダーゼ，ペニシリンアミダーゼまたはニトロレダクターゼにより開裂され得る。
【０４０３】
特定の実施形態において、酵素開裂可能部分は、プロテアーゼまたはペプチダーゼにより開裂可能である。特定の実施形態において、酵素開裂可能部分は、ガストリクシン、メマプシン−２、キモシン、レニン、レニン−２、カテプシンＤ、カテプシンＥ、ペニシロペプシン、リゾプスペプシン、ムコルペプシン、バリアペプシン、アスペルギロペプシンＩ、エンドチアペプシン、サッカロペプシン、フィテプシン（ｐｈｙｔｅｐｓｉｎ）、プラスメプシン−１、プラスメプシン−２、ヤプシン−１、ヤプシン−２、ネペンテシン、メマプシン−１、ナプシンＡ、ＨＩＶ−１レトロペプシン、ＨＩＶ−２レトロペプシン、サル免疫不全ウイルスレトロペプシン、ウマ感染性貧血ウイルスレトロペプシン、ネコ免疫不全ウイルスレトロペプシン、ハツカネズミ白血病ウイルスタイプレトロペプシン、マソン・ファイザー白血病ウイルスレトロペプシン、ヒト内因性レトロウイルスＫレトロペプシン、レトロペプシン（ヒトＴ細胞白血病ウイルス）、ウシ白血病ウイルスレトロペプシン、ラウス肉腫ウイルスレトロペプシン、スキタリド（ｓｃｙｔａｌｉｄｏ）グルタミン酸ペプチダーゼ、アスペルギログルタミン酸ペプチダーゼ、サーモプシン、シグナルペプチダーゼＩＩ、スプマペプシン（ｓｐｕｍａｐｅｐｓｉｎ）、タイプ４プレピリンペプチダーゼ１、オンプチン（ｏｍｐｔｉｎ）、プラスミノーゲン活性化因子Ｐｌａ、パパイン、キモパパイン、カリカイン、グリシルエンドペプチダーゼ、茎ブロメライン、フィカイン、アクチニダイン、カテプシンＶ、ビグナイン（ｖｉｇｎａｉｎ）、カテプシンＸ、ジンギパイン、カテプシンＦ、アナナイン、果実ブロメライン、カテプシンＬ、カテプシンＬ１（肝蛭（Ｆａｓｃｉｏｌａ  ｓｐ．））、カテプシンＳ、カテプシンＫ、カテプシンＨ、アリューレイン、ヒストリサイン、カテプシンＢ、ジペプチジル−ペプチダーゼＩ、ペプチダーゼ１（ダニ）、ＣＰＢペプチダーゼ、クルジパイン、Ｖ−カス（ｃａｔｈ）ペプチダーゼ、ブレオマイシンヒドロラーゼ（動物）、ブレオマイシンヒドロラーゼ（酵母）、アミノペプチダーゼＣ、ＣＰＣペプチダーゼ、カルパイン−１、カルパイン−２、カルパイン−３、Ｔｐｒペプチダーゼ（ポルフィロモナス・ジンジバリス（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ  ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ））、ポリオウイルスタイプピコルナイン３Ｃ、肝炎Ａウイルスタイプピコルナイン３Ｃ、ヒトライノウイルス２タイプピコルナイン３Ｃ、口蹄疫ウイルスピコルナイン３Ｃ、エンテロウイルスピコルナイン２Ａ、ライノウイルスピコルナイン２Ａ、核封入−ａペプチダーゼ（プラムポックスウイルス）、タバコエッチウイルスＮＩａペプチダーゼ、アデナイン、ジャガイモウイルスＹタイプヘルパー構成成分ペプチダーゼ、シンドビスウイルスタイプｎｓＰ２ペプチダーゼ、ストレプトパイン、クロストリパイン、ユビキチニルヒドロラーゼ−Ｌ１、ユビキチニルヒドロラーゼ−Ｌ３、レグマイン（植物β型）、レグマイン、動物タイプ、カスパーゼ−１、カスパーゼ−３、カスパーゼ−７、カスパーゼ−６、カスパーゼ−８、カスパーゼ−９、ピログルタミル−ペプチダーゼＩ（原核生物）、ピログルタミル−ペプチダーゼＩ（脊索動物）、ハツカネズミ肝炎コロナウイルスパパイン様ペプチダーゼ１、ユビキチン特異的ペプチダーゼ５、ティモウイルスペプチダーゼ、ウサギ出血性疾病ウイルス３Ｃ様ペプチダーゼ、ジンジパインＲｇｐＡ、ジンジパインＫｇｐ、γ−グルタミルヒドラーゼ、口蹄疫ウイルスＬ−ペプチダーゼ、ブタ感染性胃腸炎ウイルスタイプメインペプチダーゼ、カリシビリン（ｃａｌｉｃｉｖｉｒｉｎ）、スタフォパインＡ、Ｕｌｐ１ペプチダーゼ、セパラーゼ（酵母タイプ）、ＹｏｐＪタンパク質、ＰｆｐＩペプチダーゼ、ソルターゼＡ（ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ）タイプ）、アミノペプチダーゼＮ、リジルアミノペプチダーゼ（細菌）、アミノペプチダーゼＡ、ロイコトリエンＡ４ヒドロラーゼ、ピログルタミル−ペプチダーゼＩＩ、サイトゾルアラニルアミノペプチダーゼ、シスチニルアミノペプチダーゼ、アミノペプチダーゼＢ、アミノペプチダーゼＥｙ、アンジオテンシン変換酵素ペプチダーゼユニット１、ペプチジル−ジペプチダーゼ・カエデ属（Ａｃｅｒ）、アンジオテンシン変換酵素ペプチダーゼユニット２、アンジオテンシン変換酵素−２、チメットオリゴペプチダーゼ、ニューロリシン、サッカロリシン、オリゴペプチダーゼＡ、ペプチジル−ジペプチダーゼＤｃｐ、ミトコンドリア中間体ペプチダーゼ、オリゴペプチダーゼＦ、サーモリシン、ビブリオリシン、シュードリシン、コッコリシン、オーレオリシン、ステアロリシン（ｓｔｅａｒｏｌｙｓｉｎ）、ミコリシン、スナパリシン、レイシマノリシン、細菌コラゲナーゼＶ、細菌コラゲナーゼＧ／Ａ、マトリックスメタロペプチダーゼ−１、マトリックスメタロペプチダーゼ−８、マトリックスメタロペプチダーゼ−２、マトリックスメタロペプチダーゼ−９、マトリックスメタロペプチダーゼ−３、マトリックスメタロペプチダーゼ−１０（ヒト（Ｈｏｍｏ  ｓａｐｉｅｎｓ）タイプ）、マトリックスメタロペプチダーゼ−１１、マトリックスメタロペプチダーゼ−７、マトリックスメタロペプチダーゼ−１２、エンベリシン、マトリックスメタロペプチダーゼ−１３、膜タイプマトリックスメタロペプチダーゼ−１、膜タイプマトリックスメタロペプチダーゼ−２、マトリックスメタロペプチダーゼ−２０、フラギリシン、マトリックスメタロペプチダーゼ−２６、セラリシン、アエルギノリシン、ガメトリシン（ｇａｍｅｔｏｌｙｓｉｎ）、アスタシン、メプリンαサブユニット、プロコラーゲンＣ−ペプチダーゼ、コリオリシンＬ、コリオリシンＨ、フラバスタシン、フィブロラーゼ、ジャララギン、アダマリシン、アトロリシンＡ、アトロリシンＢ、アトロリシンＣ、アトロリシンＥ、アトロキサーゼ、ルセリシン（ｒｕｓｓｅｌｌｙｓｉｎ）、ＡＤＡＭ１ペプチダーゼ、ＡＤＡＭ９ペプチダーゼ、ＡＤＡＭ１０ペプチダーゼ、クズバニアン（Ｋｕｚｂａｎｉａｎ）ペプチダーゼ（非哺乳動物）、ＡＤＡＭ１２ペプチダーゼ、ＡＤＡＭ１７ペプチダーゼ、ＡＤＡＭＴＳ４ペプチダーゼ、ＡＤＡＭＴＳ１ペプチダーゼ、ＡＤＡＭＴＳ５ペプチダーゼ、ＡＤＡＭＴＳ１３ペプチダーゼ、プロコラーゲンＩ  Ｎ−ペプチダーゼ、ネプリライシン、エンドセリン−変換酵素１、オリゴペプチダーゼＯ１、ネプリライシン−２、ＰＨＥＸペプチダーゼ、カルボキシペプチダ���ゼＡ１、カルボキシペプチダーゼＡ２、カルボキシペプチダーゼＢ、カルボキシペプチダーゼＮ、カルボキシペプチダーゼＥ、カルボキシペプチダーゼＭ、カルボキシペプチダーゼＴ、カルボキシペプチダーゼＢ２、カルボキシペプチダーゼＡ３、メタロカルボキシペプチダーゼＤペプチダーゼユニット１、メタロカルボキシペプチダーゼＤペプチダーゼユニット２、亜鉛Ｄ−Ａｌａ−Ｄ−Ａｌａカルボキシペプチダーゼ（ストレプトマイセス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）タイプ）、ｖａｎＹ  Ｄ−Ａｌａ−Ｄ−Ａｌａカルボキシペプチダーゼ、ｖａｎＸ  Ｄ−Ａｌａ−Ｄ−Ａｌａジペプチダーゼ、ピトリライシン、インスライシン、ミトコンドリアプロセシングペプチダーゼβ−サブユニット、ナルジリシン（ｎａｒｄｉｌｙｓｉｎ）、ロイシンアミノペプチダーゼ３、ロイシルアミノペプチダーゼ（植物タイプ）、アミノペプチダーゼＩ、アスパルチルアミノペプチダーゼ、膜ジペプチダーゼ、グルタミン酸カルボキシペプチダーゼ、ペプチダーゼＴ、カルボキシペプチダーゼＳｓ１、β−溶解性メタロペプチダーゼ、スタフィロリシン、リソスタフィン、メチオニルアミノペプチダーゼ１（大腸菌類（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ）タイプ）、メチオニルアミノペプチダーゼ２、Ｘａａ−Ｐｒｏジペプチダーゼ（細菌タイプ）、アミノペプチダーゼＰ（細菌）、アミノペプチダーゼＰ２、Ｘａａ−Ｐｒｏジペプチダーゼ（真核生物）、ＩｇＡ１特異的メタロペプチダーゼ、テントキシリシン、ボントキシリシン、アミノペプチダーゼＹ、アミノペプチダーゼＡｐ１、アミノペプチダーゼＳ（ストレプトマイセス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）タイプ）、グルタミン酸カルボキシペプチダーゼＩＩ、カルボキシペプチダーゼＴａｑ、炭疽菌致死因子、デューテロリシン、ペプチジル−Ｌｙｓメタロペプチダーゼ、ＦｔｓＨペプチダーゼ、ｍ−ＡＡＡペプチダーゼ、ｉ−ＡＡＡペプチダーゼ、ＡｔＦｔｓＨ２ペプチダーゼ、パパリシン−１、Ｓｔｅ２４ペプチダーゼ、ジペプチジル−ペプチダーゼＩＩＩ、部位２ペプチダーゼ、胞子形成因子ＳｐｏＩＶＦＢ、ＨｙｂＤペプチダーゼ、ｇｐｒペプチダーゼ、キモトリプシンＡ（畜牛タイプ）、グランザイムＢ（ヒト（Ｈｏｍｏ  ｓａｐｉｅｎｓ）タイプ）、因子ＶＩＩ−活性化ペプチダーゼ、トリプシン（ストレプトマイセス・グリセウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｇｒｉｓｅｕｓ）タイプ）、ヒポデルミンＣ、エラスターゼ−２、カテプシンＧ、ミエロブラスチン、グランザイムＡ、グランザイムＭ、キマーゼ（ヒト（Ｈｏｍｏ  ｓａｐｉｅｎｓ）タイプ）、マスト細胞ペプチダーゼ１（クマネズミ属（Ｒａｔｔｕｓ）タイプ）、デュオデナーゼ、トリプターゼα、グランザイムＫ、マスト細胞ペプチダーゼ５（マウスナンバリング）、トリプシン１、キモトリプシンＢ、エラスターゼ−１、膵臓エンドペプチダーゼＥ、膵臓エラスターゼＩＩ、エンテロペプチダーゼ、キモトリプシンＣ、プロスタシン、カリクレイン１、カリクレイン関連ペプチダーゼ２、カリクレイン関連ペプチダーゼ３、カリクレイン１（ハツカネズミ（Ｍｕｓ  ｍｕｓｃｕｌｕｓ））、カリクレイン１関連ペプチダーゼｂ３、カリクレイン１関連ペプチダーゼｃ２（ドブネズミ（Ｒａｔｔｕｓ  ｎｏｒｖｅｇ��ｃｕｓ））、カリクレイン１３（ハツカネズミ（Ｍｕｓ  ｍｕｓｃｕｌｕｓ））、アンクロッド、ボトロンビン、補体因子Ｄ、補体構成成分活性化Ｃ１ｒ、補体構成成分活性化Ｃ１ｓ、補体因子Ｂｂ、マンナン結合レクチン関連セリンペプチダーゼ１、補体因子Ｉ、凝固因子ＸＩＩａ、血漿カリクレイン、凝固因子ＸＩａ、凝固因子ＩＸａ、凝固因子ＶＩＩａ、凝固因子Ｘａ、トロンビン、タンパク質Ｃ（活性化）、凝固因子Ｃ（カブトガニ（Ｌｉｍｕｌｕｓ）、カブトガニ（Ｔａｃｈｙｐｌｅｕｓ））、活性化、凝固因子Ｂ（カブトガニ（Ｌｉｍｕｌｕｓ）、カブトガニ（Ｔａｃｈｙｐｌｅｕｓ））、活性化、凝血酵素（カブトガニ（Ｔａｃｈｙｐｌｅｕｓ）タイプ）、アクロシン、ヘプシン、マンナン結合レクチン関連セリンペプチダーゼ２、ウロキナーゼタイププラスミノーゲン活性化因子、ｔ−プラスミノーゲン活性化因子、プラスミン、カリクレイン関連ペプチダーゼ６、プラスミノーゲン活性化因子（チスイコウモリ属（Ｄｅｓｍｏｄｕｓ）タイプ）、カリクレイン関連ペプチダーゼ８、カリクレイン関連ペプチダーゼ４、ストレプトグリシンＡ、ストレプトグリシンＢ、ストレプトグリシンＥ、α−溶解性エンドペプチダーゼ、グルタミルペプチダーゼＩ、ＤｅｇＰペプチダーゼ、ＨｔｒＡ２ペプチダーゼ、リジルエンドペプチダーゼ（細菌）、カリクレイン関連ペプチダーゼ７、マトリプターゼ、トガビリン、ＩｇＡ１−特異的セリンペプチダーゼ（ナイセリアタイプ）、フラビビリン、スブチリシンカールスバーグ、スブチリシンレンツス（ｌｅｎｔｕｓ）、テルミターゼ、スブチリシンＡｋ１、ラクトセピンＩ、Ｃ５ａペプチダーゼ、デンチリシン、スブチリシンＢＰＮ’、スブチリシンＥ、アクアリシン１、セレビシン、オリジン、エンドペプチダーゼＫ、テルモミコリン、部位−１ペプチダーゼ、ケキシン、フューリン、ＰＣＳＫ１ペプチダーゼ、ＰＣＳＫ２ペプチダーゼ、ＰＣＳＫ４ペプチダーゼ、ＰＣＳＫ６ペプチダーゼ、ＰＣＳＫ５ペプチダーゼ、ＰＣＳＫ７ペプチダーゼ、トリペプチジル−ペプチダーゼＩＩ、ククミシン、プロリルオリゴペプチダーゼ、ジペプチジル−ペプチダーゼＩＶ（真核生物）、アシルアミノアシル−ペプチダーゼ、線維芽細胞活性化タンパク質αサブユニット、オリゴペプチダーゼＢ、カルボキシペプチダーゼＹ、セリンカルボキシペプチダーゼＡ、セリンカルボキシペプチダーゼＣ、セリンカルボキシ
ペプチダーゼＤ、ｋｅｘカルボキシペプチダーゼ、Ｄ−Ａｌａ−Ｄ−ＡｌａカルボキシペプチダーゼＡ、Ｋ１５タイプＤＤ−トランスペプチダーゼ、Ｄ−Ａｌａ−Ｄ−ＡｌａカルボキシペプチダーゼＢ、アミノペプチダーゼＤｍｐＢ、Ｄ−Ａｌａ−Ｄ−ＡｌａペプチダーゼＣ、ペプチダーゼＣｌｐ（タイプ１）、Ｘａａ−Ｐｒｏジペプチジル−ペプチダーゼ、Ｌｏｎ−Ａペプチダーゼ、ＰＩＭ１ペプチダーゼ、アッセンブリン、サイトメガロウイルスアッセンブリン、ヘルペスウイルス８タイプアッセンブリン、リプレッサーＬｅｘＡ、ＵｍｕＤタンパク質、シグナルペプチダーゼＩ、ミトコンドリア内膜ペプチダーゼ１、シグナルペプチダーゼＳｉｐＳ、シグナラーゼ（動物）２１ｋＤａ構成成分、リソソームＰｒｏ−Ｘａａカルボキシペプチダーゼ、ジペプチジル−ペプチダーゼＩＩ、ヘパシビリン、ポティウイルスＰ１ペプチダーゼ、ペスチウイルスＮＳ３ポリタンパク質ペプチダーゼ、ウマ動脈炎ウイルスセリンペプチダーゼ、プロリルアミノペプチダーゼ、Ｃ−末端プロセシングペプチダーゼ−１、Ｃ−末端プロセシングペプチダーゼ−２、トリコーンコアペプチダーゼ（古細菌）、シグナルペプチドペプチダーゼＡ、感染性膵臓壊死ビルナウイルスＶｐ４ペプチダーゼ、ジペプチダーゼＥ、セドリシン、セドリシン−Ｂ、トリペプチジル−ペプチダーゼＩ、クマモリシン、フィサロリシン、ＳｐｏＩＶＢペプチダーゼ、アーケアン（ａｒｃｈａｅａｎ）プロテアソーム、β構成成分、細菌プロテアソーム、β構成成分、ＨｓｌＵＶペプチダーゼのＨｓｌＶ構成成分、恒常的プロテアソーム触媒サブユニット１、恒常的プロテアソーム触媒サブユニット２、恒常的プロテアソーム触媒サブユニット３、γ−グルタミルトランスフェラーゼ１（細菌タイプ）、ムレインテトラペプチダーゼＬＤ−カルボキシペプチダーゼ（大腸菌類（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ）タイプ）、ＰｅｐＡアミノペプチダーゼ、プレセニリン１、ポリポロペプシン、カンジトロペプシン（ｃａｎｄｉｔｒｏｐｓｉｎ）、カンジダペプシンＳＡＰ２、カスパーゼ−２、カスパーゼＤＲＯＮＣ（ショウジョウバエメラノガスター）タイプペプチダーゼ、ユビキチン特異的ペプチダーゼ７、ヒトコロナウイルス２２９Ｅメインペプチダーゼ、ＳＡＲＳコロナウイルスピコルナイン３Ｃ様ペプチダーゼ、ＡｖｒＰｐｈＢペプチダーゼ、ソルターゼＢ、好冷性アルカリ性メタロペプチダーゼ（シュードモナス属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｓｐ．）、アクトリシン（ａｃｕｔｏｌｙｓｉｎ）Ａ、アミノペプチダーゼＳ（ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ）タイプ）、カルボキシペプチダーゼＰｆｕ、イソアスパルチルジペプチダーゼ（メタロタイプ）、Ｄ−アミノペプチダーゼＤｐｐＡ、およびムレインエンドペプチダーゼから選択されるプロテアーゼまたはペプチダーゼにより開裂可能である。特定の実施形態において、酵素開裂可能部分は、カテプシンプロテアーゼまたはペプチダーゼにより開裂可能である。
【０４０４】
組成物および医薬組成物を配合する方法
本明細書に記載される化合物は、医薬組成物または配合物の調製のための薬学的に許容可能な活性または不活性物質と混合することができる。組成物および医薬組成物を配合する方法は、多数の基準、例として、限定されるものではないが、投与経路、疾患の程度、または投与される用量に依存的である。
【０４０５】
特定の実施形態は、１つ以上の化合物またはその塩を含む医薬組成物を提供する。特定の実施形態において、医薬組成物は、本明細書に記載される化合物と、薬学的に許容可能な希釈剤または担体とを含む。特定の実施形態において、医薬組成物は、無菌生理食塩水溶液と、本明細書に記載される１つ以上の化合物とを含む。特定の実施形態において、そのような医薬組成物は、無菌生理食塩水溶液と、１つ以上の化合物とからなる。特定の実施形態において、無菌生理食塩水は、医薬等級生理食塩水である。特定の実施形態において、医薬組成物は、本明細書に記載される１つ以上の化合物と、無菌水とを含む。特定の実施形態において、医薬組成物は、本明細書に記載される１つの化合物と、無菌水とからなる。特定の実施形態において、無菌水は、医薬等級水である。特定の実施形態において、医薬組成物は、本明細書に記載される１つ以上の化合物と、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）とを含む。特定の実施形態において、医薬組成物は、本明細書に記載される１つ以上の化合物と、無菌ＰＢＳとからなる。特定の実施形態において、無菌ＰＢＳは、医薬等級ＰＢＳである。
【０４０６】
本明細書に記載される化合物を含む医薬組成物は、ヒトを含む動物に投与された際、（直接または間接的に）生物活性代謝産物またはその残基を提供することができる任意の薬学的に許容可能な塩、エステルもしくはそのようなエステルの塩、または任意の他のオリゴヌクレオチドを包含する。特定の実施形態は、薬学的に許容可能な化合物の塩、プロドラッグ、そのようなプロドラッグの薬学的に許容可能な塩、および他の生物学的均等物を示している。好適な薬学的に許容可能な塩としては、限定されるものではないが、ナトリウムおよびカリウム塩が挙げられる。
【０４０７】
非限定的な開示および参照による組み込み
本明細書に記載される特定の化合物、組成物および方法は、特定の実施形態に従った特異性により記載されているが、以下の実施例は、本明細書に記載される化合物を単に説明する役割を有し、その化合物を限定することを意図するものではない。
【０４０８】
限定されるものではないが、科学文献、特許出願公開、ジェンバンクアクセッションナンバー等を含む本明細書に引用した各参考文献は、その全体が参照により組み込まれる。
【０４０９】
本出願に不随する配列リストは、必要に応じて「ＲＮＡ」または「ＤＮＡ」のいずれかとして各配列を特定するが、実際には、これらの配列は、化学修飾の任意の組み合わせで修飾され得る。当業者は、修飾オリゴヌクレオチドを記述する「ＲＮＡ」または「ＤＮＡ」のような指定が特定の場合に任意であることを容易に認識するであろう。例えば、２’−ＯＨ糖部分およびチミン塩基を含むヌクレオチドを含むオリゴヌクレオチドは、修飾糖を有するＤＮＡ（ＤＮＡの１つの２’−Ｈの代わりに２’−ＯＨ）または修飾塩基を有するＲＮＡ（ＲＮＡのウラシルの代わりにチミン（メチル化ウラシル））として記述され得る。従って、限定されるものではないが、配列リストに含まれるものを含む、本明細書に提供される核酸配列は、限定されるものではないが、そのような修飾核酸塩基を有する核酸を含む、天然または修飾されたＲＮＡおよび／またはＤＮＡの任意の組み合わせを含む核酸を包含することが意図される。さらなる実施例として、また限定されるものではないが、核酸塩基配列「ＡＴＣＧＡＴＣＧ」を有するオリゴマー化合物は、修飾または非修飾であるかに関わらず、そのような核酸塩基配列を有する任意のオリゴマー化合物を包含し、そのオリゴマー化合物としては、限定されるものではないが、配列「ＡＵＣＧＡＵＣＧ」を有するもの等のＲＮＡ塩基を含む化合物、ならびに「ＡＵＣＧＡＴＣＧ」等のいくつかのＤＮＡ塩基およびいくつかのＲＮＡ塩基を含む化合物、ならびに「ＡＴｍＣＧＡＵＣＧ」（ここで、ｍＣは、５位にメチル基を含むシトシン塩基を示す）等の他の修飾核酸塩基を有するオリゴマー化合物が挙げられる。
【０４１０】
本明細書に記載される化合物は、糖アノマーの場合のようなαもしくはβまたはアミノ酸の場合のような（Ｄ）もしくは（Ｌ）等、（Ｒ）または（Ｓ）を含む。本明細書に提供される化合物には、別途明記しない限り、それらのラセミおよび光学的に純粋な形態を含むそのような可能な異性体の全てが含まれる。同様に、全てのシス−およびトランス−異性体ならびに互変異性型も含まれる。本明細書に記載される化合物には、キラル的に純粋なまたは富んだ混合物、およびラセミ混合物が含まれる。例えば、複数のホスホロチオエートヌクレオシド間結合を有するオリゴヌクレオチドは、ホスホロチオエートヌクレオシド間結合のキラリティーが調節されまたはランダムなそのような化合物を含む。
【０４１１】
別途示されない限り、本明細書に記載されるオリゴマー化合物を含む任意の化合物は、その薬学的に許容可能な塩を含む。
【０４１２】
本明細書に記載される化合物は、１つ以上の原子が、示される元素の非放射性同位体または放射性同位体で置き換えられたバリエーションを含む。例えば、水素原子を含む本明細書の化合物は、各１Ｈ水素原子の全ての可能な重水素置換を包含する。本明細書の化合物により包含される同位体置換としては、限定されるものではないが、１Ｈの代わりに２Ｈまたは３Ｈ、１２Ｃの代わりに１３Ｃまたは１４Ｃ、１４Ｎの代わりに１５Ｎ、１６Ｏの代わりに１７Ｏまたは１８Ｏ、および３２Ｓの代わりに３３Ｓ、３４Ｓ、３５Ｓ、または３６Ｓが挙げられる。
【実施例】
【０４１３】
実施例１：ＧＬＰ−１ペプチドとコンジュゲートされた、ＭＡＬＡＴ１を標的とするアンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）の調製
３−メルカプトプロピオネートリンカーを介して５’位でコンジュゲートされたＧＬＰ−１を含むコンジュゲート化修飾オリゴヌクレオチドの調製方法。
【０４１４】
別途記述されない限り、オリゴマー化合物の合成に使用する全ての試薬および溶液は、商業源から購入する。標準的なホスホロアミダイト構築ブロックおよび固体担体を、例えばＴ、Ａ、Ｇ、およびｍＣ残基を含むヌクレオシド残基の組み込みに使用する。ホスホロアミダイトの無水アセトニトリル中の０．１Ｍ溶液を、２’−デオキシリボヌクレオシド、ｃＥｔ  ＢＮＡヌクレオシド、および好適に保護された６−アミノ−ヘキサノールのために使用した。
【化８８】
2019516686.tif 000090
【０４１５】
５’−ヘキシルアミノ修飾オリゴヌクレオチド（ＩＳＩＳ  ７８６４３４）（核酸塩基配列：ＴＣＡＧＣＡＴＴＣＴＡＡＴＡＧＣＡＧＣ（配列番号３８）を、標準的な固相オリゴヌクレオチド手順を用いて合成および精製した。修飾オリゴヌクレオチドの５’末端は、ヘキサメチレンリンカーおよび末端アミンを含む。化合物１（３−（２−ピリジルジチオプロピオン酸Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル）をＣｈｅｍ−Ｉｍｐｅｘ（ｃａｔ＃１１５６６）から得た。修飾オリゴヌクレオチド（約６μｍｏｌ）を１２５μＬリン酸ナトリウム緩衝液、ｐＨ８に溶解し、１２μｍｏｌの化合物１をＤＭＦに溶解した。化合物１の溶液を修飾オリゴヌクレオチド溶液に滴加し、室温で反応させた。反応は２〜３時間後に完了し、生成物２をソース３０Ｑ樹脂上のＨＰＬＣにより緩衝液Ａ  １００ｍＭ  ＮＨ４ＯＡｃ／３０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏおよび緩衝液Ｂ  １００ｍＭ  ＮＨ４ＯＡｃ／３０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ＋１．５Ｍ  ＮａＢｒを用いて精製し、逆相カラム上のＨＰＬＣにより単離した。生成物画分を濃縮し、−２０℃で保管した。
【０４１６】
化合物２を、標準的な固相ペプチド合成により合成したＧＬＰ−１ペプチドＨｉｓＡｉｂＧｌｕＧｌｙＴｈｒＰｈｅＴｈｒＳｅｒＡｓｐＶａｌＳｅｒＳｅｒＴｙｒＬｅｕＧｌｕＧｌｕＧｌｎＡｌａＡｌａＬｙｓＧｌｕＰｈｅＩｌｅＡｌａＴｒｐＬｅｕＶａｌＬｙｓＧｌｙＧｌｙＰｒｏＳｅｒＳｅｒＡｌａＰｒｏＰｒｏＰｒｏＳｅｒＣｙｓ−ＮＨ２（配列番号２２）との反応のための出発物質として使用した。Ａｉｂは２−アミノイソ酪酸である。化合物２を脱気水に溶解し、０．１Ｍ  ＮａＨＣＯ３を加えてｐＨを約８．０に調整した。ＧＬＰ−１ペプチドを５０／５０  ０．１Ｍ  ＮａＨＣＯ３（ｐＨ８）：ＤＭＦ（ジメチルホルムアミド）に溶解した。ペプチド溶液を５分間隔で少量ずつ（毎回、全体積の３０％）化合物２に加えた。約１時間後、反応混合物を水（反応溶液の体積の５倍Ｖ／Ｖ）で希釈し、生成物をソース３０Ｑ樹脂上のＨＰＬＣにより緩衝液Ａ  １００ｍＭ  ＮＨ４ＯＡｃ／３０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏおよび緩衝液Ｂ  １００ｍＭ  ＮＨ４ＯＡｃ／３０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ＋１．５Ｍ  ＮａＢｒを用いて精製した。生成物画分を逆相カラム上のＨＰＬＣにより単離してＩＳＩＳ  ８１６３８５を得た。
【０４１７】
実施例２：ＧＬＰ−１ペプチドとコンジュゲートされた、ＭＡＬＡＴ１を標的とするアンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）の調製
３−メルカプトプロピオネートリンカーを介してＣ−末端ペニシラミンに５’位でコンジュゲートされたＧＬＰ−１を含むコンジュゲート化修飾オリゴヌクレオチドの調製方法。
【化８９】
2019516686.tif 000091
【０４１８】
化合物２を実施例１のように合成し、標準的な固相ペプチド合成により合成したＧＬＰ−１ペプチド：ＨｉｓＡｉｂＧｌｕＧｌｙＴｈｒＰｈｅＴｈｒＳｅｒＡｓｐＶａｌＳｅｒＳｅｒＴｙｒＬｅｕＧｌｕＧｌｕＧｌｎＡｌａＡｌａＬｙｓＧｌｕＰｈｅＩｌｅＡｌａＴｒｐＬｅｕＶａｌＬｙｓＧｌｙＧｌｙＰｒｏＳｅｒＳｅｒＡｌａＰｒｏＰｒｏＰｒｏＳｅｒＰｅｎ−ＮＨ２（配列番号２３）との反応のための出発物質として使用した。Ａｉｂは２−アミノイソ酪酸であり、Ｐｅｎはペニシラミンである。化合物２を脱気水に溶解し、０．１Ｍ  ＮａＨＣＯ３を加えてｐＨを約８．０に調整した。ＧＬＰ−１ペプチドを脱気水に溶解した。化合物２の溶液とペプチド溶液とを穏やかなボルテックスで混合し、ｐＨを調べた。０．１Ｍ  ＮａＨＣＯ３を加えてｐＨを約７．５に調整した。約２時間後、追加のペプチドを加え、ＮａＨＣＯ３を加えてｐＨを上方に調整した。反応を約６５時間で４℃とし、生成物を実施例１に記載したようにＨＰＬＣにより精製した。
【０４１９】
実施例３：ＧＬＰ−１ペプチドとコンジュゲートされた、ＦＯＸＯ１を標的とするアンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）の調製
３−メルカプトプロピオネートリンカーを介して５’位でコンジュゲートされたＧＬＰ−１を含むコンジュゲート化修飾オリゴヌクレオチドの調製方法。
【０４２０】
ＩＯＮ  ９１３１９３、ＦＯＸＯ１を標的とする５’−ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化ＡＳＯを、化学修飾：Ｔｄｏ  ｍＣｄｏ  Ａｄｏ  Ｔｋｓ  ｍＣｋｓ  Ｔｄｓ  Ｔｄｓ  ｍＣｄｓ  Ｔｄｓ  Ｔｄｓ  Ａｄｓ  Ａｄｓ  Ａｄｓ  Ａｋｓ  Ｔｅｓ  Ａｋｓ  ｍＣｅｓ  ｍＣｋｓ  ｍＣｋ（ｋ＝ｃＥｔ；ｄ＝２’−デオキシ；ｅ＝２’−ＭＯＥ；ｍＣ＝５−メチルシトシン；ｏ＝ホスホジエステル；およびｓ＝ホスホロチオエート）を有する５’−ヘキシルアミノ修飾オリゴヌクレオチド（ＩＯＮ  ９１３１９２）（核酸塩基配列：ＴＣＡＴＣＴＴＣＴＴＡＡＡＡＴＡＣＣＣ（配列番号５９）から出発して、実施例１の手順に従って調製した。
【０４２１】
ＩＯＮ  ９１３１９５、ＦＯＸＯ１にミスマッチされた核酸塩基配列を有する対照５’−ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化ＡＳＯを、化学修飾：Ｔｄｏ  ｍＣｄｏ  Ａｄｏ  Ｇｋｓ  Ｇｋｓ  ｍＣｋｓ  ｍＣｄｓ  Ａｄｓ  Ａｄｓ  Ｔｄｓ  Ａｄｓ  ｍＣｄｓ  Ｇｄｓ  ｍＣｄｓ  ｍＣｄｓ  Ｇｄｓ  Ｔｋｓ  ｍＣｋｓ  Ａｋ（ｋ＝ｃＥｔ；ｄ＝２’−デオキシ；ｅ＝２’−ＭＯＥ；ｍＣ＝５−メチルシトシン；ｏ＝ホスホジエステル；およびｓ＝ホスホロチオエート）を有する５’−ヘキシルアミノ修飾オリゴヌクレオチド（ＩＯＮ  ９１３１９４）（核酸塩基配列：ＴＣＡＧＧＣＣＡＡＴＡＣＧＣＣＧＴＣＡ（配列番号６０）から出発して、実施例１の手順に従って調製した。
【０４２２】
実施例４：ＧＬＰ−１ペプチドとコンジュゲートされた、インスリンを標的とするアンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）の調製
メルカプトプロピオネートリンカーを介して５’位でコンジュゲートされたＧＬＰ−１を含むコンジュゲート化修飾オリゴヌクレオチドの調製方法。
【０４２３】
ＩＯＮ  ９１９５５３、インスリンを標的とする５’−ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化ＡＳＯを、化学修飾：Ｔｄｏ  ｍＣｄｏ  Ａｄｏ  Ｇｅｓ  ｍＣｅｓ  ｍＣｅｓ  Ａｅｓ  Ａｅｓ  Ｇｄｓ  Ｇｄｓ  Ｔｄｓ  ｍＣｄｓ  Ｔｄｓ  Ｇｄｓ  Ａｄｓ  Ａｄｓ  Ｇｄｓ  Ｇｄｓ  Ｔｅｓ  ｍＣｅｓ  Ａｅｓ  ｍＣｅｓ  ｍＣｅ（ｋ＝ｃＥｔ；ｄ＝２’−デオキシ；ｅ＝２’−ＭＯＥ；ｍＣ＝５−メチルシトシン；ｏ＝ホスホジエステル；およびｓ＝ホスホロチオエート）を有する５’−ヘキシルアミノ修飾オリゴヌクレオチド（ＩＯＮ  ９１９５５３）（核酸塩基配列：ＴＣＡＧＣＣＡＡＧＧＴＣＴＧＡＡＧＧＴＣＡＣＣ（配列番号６１）から出発して、実施例１の手順に従って調製した。
【０４２４】
実施例５：ＧＬＰ−１ペプチドとコンジュゲートされた、ＭＡＬＡＴ１を標的とするアンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）の調製
化学修飾：Ｇｅｓ  ｍＣｅｏ  Ｔｄｏ  Ｇｄｏ  ｍＣｄｏ  Ｔｄｏ  Ａｄｏ  Ｔｄｏ  Ｔｄｏ  Ａｄｏ  Ｇｄｏ  Ａｄｏ  Ａｄｏ  Ｔｄｓ  Ｇｅｓ  ｍＣｅ（ｄ＝２’−デオキシ；ｅ＝２’−ＭＯＥ；ｍＣ＝５−メチルシトシン；ｏ＝ホスホジエステル；およびｓ＝ホスホロチオエート）を有するＩＯＮ  ９５１９７６（核酸塩基配列：ＧＣＴＧＣＴＡＴＴＡＧＡＡＴＧＣ（配列番号６２）を、標準的な固相オリゴヌクレオチド手順を使用して合成および精製した。実施例１に記載したＩＳＩＳ  ８１６３８５をＩＯＮ  ９５１９７６とハイブリダイズし、２つのオリゴヌクレオチドの二重鎖を生成した。
【０４２５】
実施例６：ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化ＡＳＯによるインビボでの膵臓β膵島細胞の特異的標的化
研究１
ＡＳＯに対するＧＬＰ−１ペプチドのコンジュゲーションが膵臓へのＡＳＯ送達を増大させるか否かを決定するために、固形飼料を給餌された雄Ｃ５７ＢＬ／６マウスは、ハツカネズミＭＡＬＡＴ１を標的化する３−１０−３  ｃＥｔ  ＡＳＯ（ＩＳＩＳ  ５５６０８９）（核酸塩基配列：ＧＣＡＴＴＣＴＡＡＴＡＧＣＡＧＣ）（配列番号６３）または実施例１に記載したＧＬＰ−１コンジュゲート化ＭＡＬＡＴ１  ＡＳＯ（ＩＳＩＳ  ８１６３８５）のいずれかの２種の静脈内注射を濃度１．８．０．６、または０．２μｍｏｌ／ｋｇで受容した。組織を最終注射から７２時間後に収集して、化合物の送達および効力を評価した。
【０４２６】
ＱｕａｎｔｉＧｅｎｅ  ＶｉｅｗＲＮＡ組織アッセイ（Ａｆｆｙｍｅｔｒｉｘ、ｃａｔ．Ｎｏ．ＱＶＴ００１１）を用いてＭＡＬＡＴ１発現を検出した。種特異的なＭＡＬＡＴ１プローブをＡｆｆｙｍｅｔｒｉｘ（ｃａｔ．Ｎｏ．ＶＢ−１１１１０−０１／マウス；ＶＦ１−１３９６３／猿）から購入した。手短には、マウス組織を１０％中性緩衝ホルマリン中に固定し、パラフィン中に包埋し、４ｍｍ切片に切断した。脱パラフィン後、組織スライドをＡｆｆｙｍｅｔｒｉｘ前処理溶液中で１０〜３０分間煮沸した後、プロテアーゼを用いて４０℃で組織に応じて１０〜４０分間処理した。ＭＡＬＡＴ１  ＲＮＡプローブを１：４０希釈で使用し、サンプルと共に４０℃で１２０分間インキュベートした。洗浄後、ＭＡＬＡＴ１  ＲＮＡ／プローブ複合体をプレアンプリファイア、アンプリファイア、およびＡＰ−オリゴヌクレオチドと４０℃でそれぞれ２５、１５、および１５分間ハイブリダイズした。ＰＢＳ中で洗浄して遊離ＡＰオリゴヌクレオチドを除去した後、スライドをＦａｓｔ  Ｒｅｄ基質と共に室温で３０分間インキュベートした。Ａｐｅｒｉｏスキャナを使用して組織画像を得た。Ｈｕｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３  Ｎｕｃ  Ａｃｉｄ  Ｔｈｅｒ．３６９−７８。
【０４２７】
インサイチュハイブリダイゼーション分析は、ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲーションがβ膵島細胞内でＭＡＬＡＴ１染色を低下させたが、膵臓の腺房細胞で低下させなかったことを示す。膵臓切片のＡＳＯ染色は、ＧＬＰ−１コンジュゲートが組織へのＡＳＯ送達を増大させることにより効力を改善することを示した。ＧＬＰ−１コンジュゲート化ＭＡＬＡＴ１  ＡＳＯ（ＩＳＩＳ  ８１６３８５）で処理したマウスは、膵臓β膵島細胞内でのＭＡＬＡＴ１発現の低下を示したが、非コンジュゲート化ＭＡＬＡＴ１  ＡＳＯ（ＩＳＩＳ  ５５６０８９）で処理したマウスでは示さなかった。様々な用量のＩＳＩＳ  ８１６３８５で処理したマウスは、膵臓β膵島細胞内でのＭＡＬＡＴ１発現の低下を示した。ＧＬＰ−１コンジュゲート化ＭＡＬＡＴ１  ＡＳＯ（ＩＳＩＳ  ８１６３８５）で処理したマウスは、膵臓β膵島細胞内でのＡＳＯ蓄積を示したが、非コンジュゲート化ＭＡＬＡＴ１  ＡＳＯ（ＩＳＩＳ  ５５６０８９）で処理したマウスでは示さなかった。ＧＬＰ−１コンジュゲート化ＭＡＬＡＴ１  ＡＳＯ（ＩＳＩＳ  ８１６３８５）は、処理マウスの膵臓β膵島細胞内で用量依存的に蓄積した。
【０４２８】
研究２
実施例１に記載したＧＬＰ−１コンジュゲート化ＭＡＬＡＴ１  ＡＳＯ（ＩＳＩＳ  ８１６３８５）の膵臓ＭＡＬＡＴ１発現に関する用量応答を決定するために、固形飼料を給餌した雄Ｃ５７ＢＬ／６マウスは、上記に記載したＩＳＩＳ  ８１６３８５または非コンジュゲート化ＭＡＬＡＴ１  ＡＳＯ（ＩＳＩＳ  ５５６０８９）の単回静脈内注射を濃度０．２、０．０６、および０．０２μｍｏｌ／ｋｇで受容した。
【０４２９】
上記に記載したＱｕａｎｔｉＧｅｎｅ  ＶｉｅｗＲＮＡ組織アッセイを用いてＭＡＬＡＴ１発現を検出した。
【０４３０】
インサイチュハイブリダイゼーション分析は、ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲーションが膵臓のβ膵島細胞内でＭＡＬＡＴ１染色を０．２μｍｏｌ／ｋｇ用量および０．０６μｍｏｌ／ｋｇ用量で低下させたことを示した。肝臓におけるＩＳＩＳ  ８１６３８５またはＩＳＩＳ  ５５６０８９の観察可能な効果は、いずれの用量でも観察されなかった。
【０４３１】
実施例７：ヒトＧＬＰ−１受容体を過剰発現しているＨＥＫ２９３細胞におけるＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化アンチセンスオリゴヌクレオチドを用いたＭＡＬＡＴ１およびＦＯＸＯ１のアンチセンス阻害
標的ＭＡＬＡＴ１およびＦＯＸＯ１を標的化するように設計されたアンチセンスオリゴヌクレオチドをグルカゴン様ペプチド１受容体ペプチド作動薬（ＧＬＰ−１ペプチド）にコンジュゲートし、ヒトＧＬＰ−１受容体の安定した恒常的発現を有するＨＥＫ２９３細胞株（ｈＧＬＰ１Ｒ−ＨＥＫ）を使用して、ヒト標的遺伝子発現に対するそれらの効果に関して試験した。
【０４３２】
Ｆｌｐ−ＩＮ（商標）２９３細胞内でｈＧＬＰ１Ｒを発現させることにより、ｈＧＬＰ１Ｒ−ＨＥＫ細胞株を生成した。培養したｈＧＬＰ１Ｒ−ＨＥＫ細胞を３０，０００細胞／ウェルの密度で９６ウェルプレートに播種し、およそ２４時間にわたり、生理食塩水、１００ｎＭまたは１０μＭの、上記に記載したＭＡＬＡＴ１を標的とする非コンジュゲート化親アンチセンスオリゴヌクレオチドＩＳＩＳ  ５５６０８９、またはＦＯＸＯ１を標的とするＩＳＩＳ  ７７６１０２（核酸塩基配列：ＴＣＴＴＣＴＴＡＡＡＡＴＡＣＣＣ）（配列番号６４）、または対応するＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化アンチセンスオリゴヌクレオチド（上記に記載したＭＡＬＡＴ１を標的とするＩＳＩＳ  ８１６３８５、または上記に記載したＦＯＸＯ１を標的とするＩＯＮ  ９１３１９３）である。処理期間後、細胞を回収し、ｍＲＮＡを単離し、ｎａｎａｄｒｏｐＵＶ−Ｖｉｓ分光光度計により測定して、総ＲＮＡ含有量に対して調整した。ＭＡＬＡＴ１またはＦＯＸＯ１  ｍＲＮＡレベルを定量的リアルタイムＰＣＲにより測定し、同一のサンプル中のハウスキーピング遺伝子（ＲＰＬＰ０）のｍＲＮＡレベルに対して正規化した。ヒトＭＡＬＡＴ１  ｍＲＮＡレベルを、遺伝子発現アッセイＨＳ００２７３９０７を用いて測定し、ＦＯＸＯ１  ｍＲＮＡレベルを、アッセイＨｓ０１０５４５７６（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を用いて測定した。ハウスキーピング遺伝子ＲＰＬＰ０のｍＲＮＡレベルは、フォワード配列ＣＣＡＴＴＣＴＡＴＣＡＴＣＡＡＣＧＧＧＴＡＣＡＡ（配列番号６６）、リバース配列ＡＧＣＡＡＧＴＧＧＧＡＡＧＧＴＧＴＡＡＴＣＣ（配列番号６７）を有するプライマープローブセットを使用して測定した。
【０４３３】
データは、未処理対照細胞に対するＭＡＬＡＴ１またはＦＯＸＯ１  ｍＲＮＡのパーセント阻害として示される。白色記号は、親アンチセンスオリゴヌクレオチドによる処理を表す一方、黒色記号は、ＧＬＰ−１ペプチドにコンジュゲートされたアンチセンスヌクレオチドによる処理を表す。図１に示すように、ｈＧＬＰ１Ｒ−ＨＥＫ細胞株では、アンチセンスオリゴヌクレオチドは、ＧＬＰ−１ペプチドにコンジュゲートされた際、親アンチセンスオリゴヌクレオチドと比較してより強力にＭＡＬＡＴ１またはＦＯＸＯ１  ｍＲＮＡを阻害した。
【０４３４】
実施例８：野生型、およびヒトＧＰＲ４０またはＧＬＰ−１受容体を過剰発現しているＨＥＫ２９３細胞における非コンジュゲート化親またはＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化アンチセンスオリゴヌクレオチドによる処理後のＭＡＬＡＴ１の用量依存的アンチセンス阻害
実施例７のＭＡＬＡＴ１アンチセンスオリゴヌクレオチドを様々な濃度で野生型、ｈＧＰＲ４０およびｈＧＬＰ１Ｒ−ＨＥＫ細胞内でさらに試験した。
【０４３５】
培養したｈＧＬＰ１Ｒ−ＨＥＫ、野生型ＨＥＫ２９３（ＷＴ  ＨＥＫ２９３）細胞、またはｈＧＰＲ４０受容体を発現している細胞を３０，０００細胞／ウェルの密度で９６ウェルプレートに播種し、およそ２４時間にわたり、０．００１、０．００３、０．０１、０．０３、０．１、０．３、１、３、１０または３０μＭのアンチセンスオリゴヌクレオチドで処理した（濃度は図２に示す）。処理期間後、細胞を回収し、ｍＲＮＡを単離し、本明細書に記載した（実施例７）プライマープローブセットを使用した定量的リアルタイムＰＣＲによりＭＡＬＡＴ１  ｍＲＮＡレベルを測定した。データをハウスキーピング遺伝子（ＲＰＬＰ０）に対して正規化したＭＡＬＡＴ１  ｍＲＮＡレベルとして示す。白色記号は、ＭＡＬＡＴ１を標的化する親アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＩＳＩＳ  ５５６０８９）による処理を表す一方、黒色記号は、ＧＬＰ−１ペプチドにコンジュゲートされた同一のアンチセンスヌクレオチド（ＩＳＩＳ  ８１６３８５）による処理を表す。
【０４３６】
各オリゴヌクレオチドの半数阻害濃度（ＩＣ５０）を下記の表に示す。
【０４３７】
【表１】
2019516686.tif 000092
【０４３８】
アンチセンスオリゴヌクレオチドは、ＧＬＰ−１ペプチド作動薬にコンジュゲートされた際、ｈＧＬＰ１Ｒ−ＨＥＫ細胞株（図２Ａ）では４０倍強力にＭＡＬＡＴ１遺伝子発現を阻害し、ＷＴ  ＨＥＫ２９３（図２Ｂ）またはｈＧＰＲ４０−ＨＥＫ細胞株（図２Ｃ）ではそのように阻害しなかった。
【０４３９】
実施例９：非コンジュゲート化親またはＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化アンチセンスオリゴヌクレオチドによる処理後のマウス１次ランゲルハンス島におけるＭＡＬＡＴ１およびＦＯＸＯ１のアンチセンス阻害
ＭＡＬＡＴ１およびＦＯＸＯ１を標的化するアンチセンスオリゴヌクレオチドを、遺伝子発現を低下させる能力に関してマウス１次ランゲルハンス島においてさらに試験した。
【０４４０】
膵島を、失血させた１２〜１５週齢の雌Ｃ５７ＢＬ／６Ｃｒｌマウスから収集した膵臓のコラゲナーゼ消化により単離した。膵島を使用時まで組織培養物中に維持した。膵島を、低い細胞外カルシウム濃度を含む培地中で振とうすることにより単一細胞に分離した。１０〜２０のインタクトまたは分離した膵島をプラスチックペトリ皿に播種し、およそ２４時間にわたり、１０μＭのアンチセンスオリゴヌクレオチドで処理した。処理期間後、細胞を回収し、ＲＮＡを単離し、ＲＩＢＯＧＲＥＥＮ（登録商標）により測定して総ＲＮＡ含有量に対して調整した。ＭＡＬＡＴ１またはＦＯＸＯ１  ｍＲＮＡレベルを定量的リアルタイムＰＣＲにより測定した。マウスＭａｌａｔ１  ｍＲＮＡレベルを、Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓの遺伝子発現アッセイＭｍ０１２２７９１２＿ｓ１を用いて測定した一方、マウスＦＯＸＯ１  ｍＲＮＡレベルを、フォワード配列ＣＡＧＴＣＡＣＡＴＡＣＧＧＣＣＡＡＴＣＣ（配列番号６８）、リバース配列ＣＧＴＡＡＣＴＴＧＡＴＴＴＧＣＴＧＴＣＣＴＧＡＡ（配列番号６９）およびプローブ配列ＴＧＡＧＣＣＣＴＴＴＧＣＣＣＣＡＧＡＴＧＣＣＴＡＴ（配列番号７０）を有するプライマープローブセットを使用して測定した。全データは、フォワード配列ＧＡＧＧＡＡＴＣＡＧＡＴＧＡＧＧＡＴＡＴＧＧＧＡ（配列番号７１）、リバース配列ＡＡＧＣＡＧＧＣＴＧＡＣＴＴＧＧＴＴＧＣ（配列番号７２）およびプローブ配列ＴＣＧＧＴＣＴＣＴＴＣＧＡＣＴＡＡＴＣＣＣＧＣＣＡＡ（配列番号７３）を有するプライマープローブセットを使用して測定した、同一のサンプル中のハウスキーピング遺伝子（ＲＰＬＰ０）のｍＲＮＡレベルに対して正規化した。
【０４４１】
ハウスキーピング遺伝子（ＲＰＬＰ０）に対するＭＡＬＡＴ１またはＦＯＸＯ１  ｍＲＮＡのレベルとしてのデータを図３に示す。星形記号は、ＭＡＬＡＴ１（ＩＳＩＳ  ８１６３８５）またはＦＯＸＯ１（ＩＳＩＳ  ９１９１９３）に対する処理なしを表し、白丸は、親非コンジュゲート化アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＭＡＬＡＴ１を標的とするＩＳＩＳ  ５５６０８９またはＦＯＸＯ１を標的とするＩＳＩＳ  ７７６１０２）による処理を表し、白色正方形は、ＧＬＰ１ペプチドにコンジュゲートされたスクランブルＦＯＸＯ１アンチセンスオリゴヌクレオチド配列（ＩＯＮ  ９１３１９５）による処理を表す一方、黒色記号は、ＧＬＰ１ペプチドコンジュゲート化アンチセンスオリゴヌクレオチドによる処理を表す。
【０４４２】
実施例１０：非コンジュゲート化親およびＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化アンチセンスオリゴヌクレオチドによる処理後のマウス１次ランゲルハンス島におけるＦＯＸＯ１のアンチセンス阻害およびＦｏｘｏ１タンパク質低下
ＦＯＸＯ１を標的化するアンチセンスオリゴヌクレオチドを、マウス１次ランゲルハンス島においてタンパク質レベルを低下させる能力に関して試験した。
【０４４３】
安楽死させた１２〜１５週齢の雌Ｂ６．Ｃｇ−Ｌｅｐｏｂ／Ｊマウスから収集した膵臓のコラゲナーゼ消化により膵島を単離し、使用時まで組織培養物中で維持した。１５０のインタクト膵島をプラスチックペトリ皿内に配置し、１μＭのアンチセンスオリゴヌクレオチドで２４時間毎に３時間処理し、それぞれおよそ２４時間、４８時間または９６時間の総処理時間後に回収した。処理期間後、膵島を回収し、膵島の半分を使用して、本明細書に記載したように（実施例９）ＦＯＸＯ１  ｍＲＮＡレベルを測定した。膵島の半分を、プロテアーゼ阻害剤カクテル（Ｃｏｍｐｌｅｔｅ  ＭｉｎｉおよびｐｈｏｓｐｈｏＳＴＯＰ、Ｒｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ）を含むＭ−ＰＥＲタンパク質抽出試薬（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）中でホモジナイズした。溶解物のタンパク質含有量を、ＢＣＡアッセイ試薬（Ｐｉｅｒｃｅ）を使用して定量化した。ＦｏｘＯ１タンパク質を、ＦｏｘＯ１に対する１次抗体Ｃ２９Ｈ４（Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｌｉｎｇ、＃２８８０）を使用して、ウェスタンブロット分析により検出した。Ｓｉｇｍａの一次抗体（＃Ｔ６０７４）を使用して、ゲル上に負荷するサンプルの対照としてα−チューブリンを測定した。抗−ＦｏｘＯ１抗体の場合、二次抗体はＨＲＰ−コンジュゲート化ポリクローナルヤギ抗−ウサギＰ０４４８（ＤＡＫＯ）であり、抗−α−チューブリン抗体の場合、二次抗体はＨＲＰ−コンジュゲート化ポリクローナルヤギ抗−マウスＰ０４４７（ＤＡＫＯ）であった。増強化学発光試薬（Ｐｉｅｒｃｅ）を検出に使用した。
【０４４４】
ＦＯＸＯ１  ｍＲＮＡの阻害を、ハウスキーピング遺伝子に対するＦＯＸＯ１  ｍＲＮＡとして示し、下記の表に未処理細胞のパーセントとして表し、非コンジュゲート化アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＩＳＩＳ  ７７６１０２）によるｍＲＮＡの僅かな低下、およびＧＬＰ−１コンジュゲート化アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＩＯＮ  ９１３１９３）による７０％を超える低下を示す。
【０４４５】
【表２】
2019516686.tif 000093
【０４４６】
ウェスタンブロットは、ビヒクルまたはアンチセンスオリゴヌクレオチドで９６時間処理した膵臓内で測定したＦｏｘＯ１タンパク質レベルの低下を示した。タンパク質レベルを、ゲル上のバンドの強度を測定することにより定量化し、α−チューブリンの強度に対して正規化し、ビヒクル処理膵島のパーセントとして表した。ＦｏｘＯ１タンパク質レベルをビヒクル処理膵島内で１００％に設定した。対照的に、ＦｏｘＯ１タンパク質レベルは、ＧＬＰ−１−ＦＯＸＯ１  ＡＳＯ処理膵島内で５％であった。
【０４４７】
実施例１１：ＭＡＬＡＴ１を標的化する非コンジュゲート化親またはＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化アンチセンスオリゴヌクレオチドのＣ５７ＢＬ／６Ｃｒｌマウスへの投与後の、膵臓におけるインサイチュのランゲルハンス島内のアンチセンスオリゴヌクレオチドの取り込み
ＭＡＬＡＴ１を標的とする非コンジュゲート化親およびＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化アンチセンスオリゴヌクレオチドをインビボでさらに試験して、処理の静脈内または皮下投与後の膵島内へのアンチセンスオリゴヌクレオチドの取り込みを評価した。
【０４４８】
雌Ｃ５７ＢＬ／６Ｃｒｌマウスを５つの処理グループに割り当てた。２つのグループは、ビヒクル（生理食塩水）または２μｍｏｌ／ｋｇ  ＧＬＰ−１コンジュゲート化アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＩＳＩＳ  ８１６３８５）のいずれかを尾静脈注射により受容した。３つのグループは、生理食塩水、２μｍｏｌ／ｋｇ非コンジュゲート化親アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＩＳＩＳ  ５５６０８９）または２μｍｏｌ／ｋｇ  ＧＬＰ−１コンジュゲート化アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＩＳＩＳ  ８１６３８５）のいずれかを皮下投与により週２回、２週間受容した。全動物を最終用量からおよそ７２時間後に犠牲にし、アンチセンスオリゴヌクレオチド取り込みの免疫組織化学的検査によるエクスビボ分析のために膵臓を回収した。
【０４４９】
全組織を１０％中性緩衝ホルマリン中に室温で３２時間固定した。固定後、サンプルを標準的な一連のエタノール、次いでキシレンを使用して脱水し、パラフィン中に包埋した。組織切片を厚さ４μｍに切断し、ｓｕｐｅｒｆｒｏｓｔ（登録商標）Ｐｌｕｓスライド上に載せた後、乾燥炉内において６０℃で１時間焼いた。アンチセンスオリゴヌクレオチド検出のための免疫組織化学的検査をＶｅｎｔａｎａ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ＸＴ免疫染色機（Ｖｅｎｔａｎａ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｓｙｓｔｅｍ、Ｉｎｃ）内で製造業者の推奨に従って行い、全試薬はＶｅｎｔａｎａ製品（Ｒｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ、Ｂａｓｅｌ、Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）であった。プロテアーゼ１を酵素抗原回収物（ｒｅｔｒｉｅｖａｌ）として使用し、インキュベーションは８分間であった。バックグラウンドの低減のために抗体ブロッカーを４分間加えた後、ウサギ抗−ＡＳＯ  ２．５を３７℃で１時間加えた（希釈１：５０００、Ｉｏｎｉｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）。２次検出のために、ＯｍｉＭａｐ抗−ウサギＨＲＰを１６分間インキュベートした後、ＤＩＳＣＯＶＥＲＹ  ＣｈｒｏｍｏＭａｐ  ＤＡＢキット（ＲＵＯ）を用いて発色検出を行った。スライドをヘマトキシリンで４分間対比染色し、その後、４分間にわたって青味付けした。染色したスライドを標準的な明視野顕微鏡下で分析した。
【０４５０】
皮下または静脈内投与のいずれかで投与したＩＳＩＳ  ８１６３８５で処理した動物の膵臓ランゲルハンス島内でアンチセンスオリゴヌクレオチドを検出した。オリゴヌクレオチドは、ＩＳＩＳ  ５５６０８９で皮下処理した動物のランゲルハンス島では検出されなかった。
【０４５１】
実施例１２：Ｃ５７ＢＬ／６Ｃｒｌマウスにおける非コンジュゲート化親またはＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化アンチセンスオリゴヌクレオチドの投与後の膵臓におけるインサイチュのランゲルハンス島内でのＭＡＬＡＴ１のアンチセンス阻害
ＭＡＬＡＴ１に対する非コンジュゲート化親およびＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化アンチセンスオリゴヌクレオチドをインビボでさらに試験して、処理の静脈内または皮下投与後の膵臓におけるＭＡＬＡＴ１のアンチセンス阻害を評価した。
【０４５２】
雌Ｃ５７ＢＬ／６Ｃｒｌマウスを本明細書に記載したように（実施例１１）５つの処理グループに割り当てた。動物を最終用量からおよそ７２時間後に犠牲にし、インサイチュハイブリダイゼーションによるＭＡＬＡＴ１発現のエクスビボ分析のために膵臓を回収した。
【０４５３】
組織を本明細書に記載したように（実施例１１）調製した。インサイチュｍＲＮＡ増幅および標識化プロセスを、Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｃｅｌｌ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ（ＡＣＤ）に基づくＲＮＡｓｃｏｐｅ（登録商標）ＶＳアッセイを用いて、Ｖｅｎｔａｎａ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ＵＬＴＲＡ、Ａｕｔｏｍａｔｅｄ  ＩＳＨプラットフォーム（Ｖｅｎｔａｎａ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｓｙｓｔｅｍ、Ｉｎｃ）上で行った。特別注文によるプローブをＭＡＬＡＴ１  ｍＲＮＡの検出のためにＡＣＤから取得し、様々なパラメーターを試験して、ＩＳＨ用の新規なＲＮＡｓｃｏｐｅ方法を最適化した。複数のステップを用いてシグナルを増幅し、次いでプローブを標識化し、ＲＮＡｓｃｏｐｅ（登録商標）２．５  ＶＳＲｅａｇｅｎｔ  Ｋｉｔ−ＲＥＤを使用して検出した。染色スライドを標準的な明視野顕微鏡下で分析した。
【０４５４】
ＭＡＬＡＴ１発現は、ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＩＳＩＳ  ８１６３８５）で皮下または静脈内処理された動物の膵臓ランゲルハンス島内で低下したが、外分泌組織内で低下しなかった。ＭＡＬＡＴ１発現は、非コンジュゲート化親アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＩＳＩＳ  ５５６０８９）で皮下処理された動物では低下しなかった。
【０４５５】
実施例１３：ＭＡＬＡＴ１を標的化する非コンジュゲート化親またはＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化アンチセンスオリゴヌクレオチドのＣ５７ＢＬ／６Ｃｒｌマウスへの投与から７２時間後の、肝臓内へのアンチセンスオリゴヌクレオチドの取り込み
ＭＡＬＡＴ１に対する非コンジュゲート化親およびＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化アンチセンスオリゴヌクレオチドをインビボでさらに試験して、静脈内または皮下投与経路のいずれかによるアンチセンスオリゴヌクレオチドの肝臓内への取り込みを評価した。
【０４５６】
動物を本明細書に記載したように（実施例１１）処理に割り当てた。全動物を最終用量からおよそ７２時間後に犠牲にし、アンチセンスオリゴヌクレオチド取り込みの免疫組織化学的検査によるエクスビボ分析のために膵臓を回収した。
【０４５７】
組織を調製し、免疫組織化学的検査を本明細書に記載したように（実施例１２）行った。
【０４５８】
アンチセンスオリゴヌクレオチドは、示されるように皮下または静脈内投与のいずれかで投与されたＩＳＩＳ  ８１６３８５およびＩＳＩＳ  ５５６０８９の両方で処理された動物の肝臓の肝実質細胞およびクッパー細胞内で検出された。
【０４５９】
実施例１４：Ｃ５７ＢＬ／６Ｃｒｌマウスにおける非コンジュゲート化親またはＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化アンチセンスオリゴヌクレオチドの投与後の肝臓におけるＭＡＬＡＴ１のアンチセンス阻害
ＭＡＬＡＴ１に対する非コンジュゲート化親（ＩＳＩＳ  ５５６０８９）およびＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化アンチセンスオリゴヌクレオチドをインビボでさらに試験して、静脈内および皮下投与経路による肝臓におけるＭＡＬＡＴ１のアンチセンス阻害を評価した。
【０４６０】
雌Ｃ５７ＢＬ／６Ｃｒｌマウスを本明細書に記載したように（実施例１３）５つの処理グループに割り当てた。全動物を最終からおよそ７２時間後に犠牲にし、インサイチュハイブリダイゼーションによるＭＡＬＡＴ１発現のエクスビボ分析のために肝臓を回収した。
【０４６１】
組織を調製し、インサイチュハイブリダイゼーションを本明細書に記載したように（実施例１２）行った。
【０４６２】
肝臓ＭＡＬＡＴ１発現は、皮下投与により投与された、ＩＳＩＳ  ５５６０８９で処理した動物の肝実質細胞内よりも高い程度において、ＩＳＩＳ  ８１６３８５で処理した動物の肝実質細胞内で低下した。肝臓ＭＡＬＡＴ１はまた、静脈内投与によりＩＳＩＳ  ８１６３８５を投与された動物におけるビヒクル対照と比較して低下した。
【０４６３】
実施例１５：Ｃ５７ＢＬ／６Ｃｒｌマウスにおける非コンジュゲート化親およびＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化アンチセンスオリゴヌクレオチドの単一用量の投与から７２時間後の単離されたランゲルハンス島および肝臓内のＭＡＬＡＴ１の用量依存的アンチセンス阻害
非コンジュゲート化親およびＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化アンチセンスオリゴヌクレオチドをインビボでさらに試験して、単回皮下投与から７２時間後の肝臓に対する単離された膵臓ランゲルハンス島におけるＭＡＬＡＴ１のアンチセンス阻害の効力を評価した。
【０４６４】
雌Ｃ５７ＢＬ／６Ｃｒｌマウスを８つの処理グループに割り当て、ビヒクル、０．０１μｍｏｌ／ｋｇ、０．０３μｍｏｌ／ｋｇ、０．１μｍｏｌ／ｋｇまたは１μｍｏｌ／ｋｇ  ＩＳＩＳ  ８１６３８５のいずれかの単一皮下注射を受容し、他の３つの処理グループは、０．０１μｍｏｌ／ｋｇ、０．１μｍｏｌ／ｋｇまたは１μｍｏｌ／ｋｇ  ＩＳＩＳ  ５５６０８９を受容した。全動物を最終用量から７２時間後に犠牲にした。ｍＲＮＡ分析のために、本明細書に記載したように（実施例９）肝臓サンプルを収集し、膵島を単離した。ＭＡＬＡＴ１  ｍＲＮＡレベルを本明細書に記載したように（実施例９）定量化し、ビヒクル処理動物（対照）の百分率として表した。
【０４６５】
いずれの処理グループにおける肝臓内でも、または親アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＩＳＩＳ  ５５６０８９）で処理した動物からのランゲルハンス島内でも、ＭＡＬＡＴ１の有意なアンチセンス阻害は観察されなかった。ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化アンチセンスオリゴヌクレオチドは、０．０７μｍｏｌ／ｋｇの推定ＥＤ５０でＭＡＬＡＴ１  ｍＲＮＡレベルを用量依存的に阻害した。
【０４６６】
実施例１６：Ｃ５７ＢＬ／６Ｃｒｌマウスにおける非コンジュゲート化親およびＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化アンチセンスオリゴヌクレオチドの単一用量の投与から７２時間後の単離されたランゲルハンス島および肝臓におけるＦＯＸＯ１の用量依存的アンチセンス阻害
非コンジュゲート化親およびＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化アンチセンスオリゴヌクレオチドをインビボでさらに試験して、単一用量の皮下投与から７２時間後の肝臓に対する単離された膵臓ランゲルハンス島におけるＦＯＸＯ１のアンチセンス阻害の効力を評価した。
【０４６７】
雌Ｃ５７ＢＬ／６Ｃｒｌマウスを７つの処理グループに割り当て、ビヒクル、０．０１μｍｏｌ／ｋｇ、０．０３μｍｏｌ／ｋｇ、０．１μｍｏｌ／ｋｇまたは１μｍｏｌ／ｋｇ  ＩＯＮ  ９１３１９３のいずれかの単一皮下注射を受容し、２つの処理グループは、０．０１μｍｏｌ／ｋｇまたは１μｍｏｌ／ｋｇ  ＩＳＩＳ  ７７６１０２を受容した。全動物を最終用量から７２時間後に犠牲にした。ｍＲＮＡ分析のために、本明細書に記載したように（実施例９）肝臓サンプルを収集し、膵島を単離した。ＦＯＸＯ１  ｍＲＮＡレベルを本明細書に記載したように（実施例９）定量化し、ビヒクル処理動物（対照）の百分率として表した。
【０４６８】
親アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＩＳＩＳ  ７７６１０２）で処理したいずれの処理グループでも、肝臓またはランゲルハンス島内のＦＯＸＯ１の有意なアンチセンス阻害は観察されなかった。ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化アンチセンスオリゴヌクレオチドは、０．０４μｍｏｌ／ｋｇの推定ＥＤ５０でＦＯＸＯ１  ｍＲＮＡレベルを用量依存的に阻害した。
【０４６９】
実施例１７：ｏｂ／ｏｂマウスへの非コンジュゲート化親またはＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化アンチセンスオリゴヌクレオチドの反復投与から６週間後の単離されたランゲルハンス島および肝臓におけるＦＯＸＯ１のアンチセンス阻害
非コンジュゲート化親およびＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化アンチセンスオリゴヌクレオチドをインビボでさらに試験して、処理から６週間後の肝臓に対する単離された膵臓ランゲルハンス島におけるＦＯＸＯ１のアンチセンス阻害の効力を評価した。
【０４７０】
雄ｏｂ／ｏｂマウス（Ｂ６．Ｖ−Ｌｅｐｏｂ／ＯｌａＨｓｄ、Ｈａｒｌａｎ）を５つの処理グループに割り当て、ビヒクル、０．１μｍｏｌ／ｋｇ  ＩＳＩＳ  ７７６１０２、０．１μｍｏｌ／ｋｇ  ＩＯＮ  ９１３１９５、０．０３  ＩＯＮ  ９１３１９３または１μｍｏｌ／ｋｇ  ＩＯＮ  ９１３１９３のいずれかを受容した。全動物を週１回、６週間処理した。最終用量からおよそ１２０時間後、全動物を犠牲にし、ｍＲＮＡ分析のために、本明細書に記載したように（実施例９）肝臓サンプルを収集し、膵島を単離した。ＦＯＸＯ１  ｍＲＮＡレベルを本明細書に記載したように（実施例９）定量化し、ｍＲＮＡレベルを各サンプルにおけるハウスキーピング遺伝子（ＲＰＬＰ０）に対して正規化した。
【０４７１】
処理グループのいずれの肝臓内でも、または親アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＩＳＩＳ  ７７６１０２）もしくはＧＬＰ−１ペプチドにコンジュゲートされたスクランブルＦＯＸＯ１アンチセンスオリゴヌクレオチド配列で処理したランゲルハンス島内でも、ＦＯＸＯ１の有意なアンチセンス阻害は観察されなかった（ＩＯＮ  ９１３１９５）。ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＩＯＮ  ９１３１９３）処理動物は、試験した両方の用量レベルにおいて、単離されたランゲルハンス島においてＦＯＸＯ１  ｍＲＮＡレベルが低下し（０．０３μｍｏｌ／ｋｇで４２％平均ＦＯＸＯ１  ｍＲＮＡ低下、および０．１μｍｏｌ／ｋｇで７２％平均ＦＯＸＯ１  ｍＲＮＡ低下）、ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲーションは、インビボで膵臓ランゲルハンス島におけるアンチセンス阻害を向上させることを示した。
【０４７２】
実施例１８：非コンジュゲート化親またはＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化アンチセンスオリゴヌクレオチドで６週間処理したｏｂ／ｏｂマウスから単離されたランゲルハンス島におけるＦｏｘＯ１タンパク質レベルの低下
非コンジュゲート化親およびＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化アンチセンスオリゴヌクレオチドを、６週間処理したｏｂ／ｏｂマウスから単離されたマウス膵臓ランゲルハンス島におけるＦｏｘＯ１タンパク質レベルの低下の能力に関してさらに試験した。
【０４７３】
雄ｏｂ／ｏｂマウスを本明細書に記載したように（実施例１７）５つの処理グループに割り当てた。最終用量からおよそ１２０時間後、全動物を犠牲にし、膵島をＦｏｘＯ１タンパク質分析のために本明細書に記載したように（実施例１０）単離した。各処理グループから無作為サンプルを選択し、各処理グループから少なくとも１つのサンプルが同一のゲル上で分析されるように、各ゲル上に負荷した。強度を定量化することによりＦｏｘＯ１タンパク質レベルを測定し、同一のサンプルにおけるα−チューブリンレベルに対して正規化した。個々のゲル中の全サンプルを、ＩＯＮ  ９１３１９５を受容した動物の膵島において測定したレベルの百分率として表した。
【０４７４】
Ｆｏｘｏ１タンパク質レベルは、ＩＯＮ  ９１３１９３で処理した動物では、ＩＯＮ  ９１３１９５に対して、それぞれ０．０３μｍｏｌ／ｋｇおよび０．１μｍｏｌ／ｋｇを受容した動物において５７％および８１％低下し、０．１μｍｏｌ／ｋｇ  ＩＳＩＳ  ７７６１０２で処理した動物に対して６４％および３６％低下した。
【０４７５】
実施例１９：ＭＡＬＡＴ１を標的とするＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化アンチセンスオリゴヌクレオチドの調製
ＩＯＮ  ９６２９６３、ＭＡＬＡＴ１を標的とする５’−ＧＬＰ−１ペプチドコンジュゲート化ＡＳＯを、化学修飾Ｇｋｓ  ｍＣｋｓ  Ａｋｓ  Ｔｄｓ  Ｔｄｓ  ｍＣｄｓ  Ｔｄｓ  Ａｄｓ  Ａｄｓ  Ｔｄｓ  Ａｄｓ  Ｇｄｓ  ｍＣｄｓ  Ａｋｓ  Ｇｋｓ  ｍＣｋ（ｋ＝ｃＥｔ；ｄ＝２’−デオキシ；ｅ＝２’−ＭＯＥ；ｍＣ＝５−メチルシトシン；ｏ＝ホスホジエステル；およびｓ＝ホスホロチオエート）を有する５’−ヘキシルアミノ修飾オリゴヌクレオチド（ＩＳＩＳ  ７２２０６１）（核酸塩基配列：ＧＣＡＴＴＣＴＡＡＴＡＧＣＡＧＣ（配列番号６５）から出発して、実施例１の手順に従って調製した。
【０４７６】
実施例２０：クリックリンカーを介してＧＬＰ−１ペプチドにコンジュゲートされた、ＭＡＬＡＴ１を標的とするアンチセンスオリゴヌクレオチドの調製
クリックリンカーを介して５’位でコンジュゲートされたＧＬＰ−１を含むコンジュゲート化修飾オリゴヌクレオチドの調製方法。
【０４７７】
５’−ＢＣＮ  ＭＡＬＡＴ−１標的化オリゴヌクレオチドＩＳＩＳ  ７９１１７３の調製：
５’−ヘキシルアミノ修飾オリゴヌクレオチド（ＩＳＩＳ  ７８６４３４）（核酸塩基配列：ＴＣＡＧＣＡＴＴＣＴＡＡＴＡＧＣＡＧＣ（配列番号５８）を、標準的な固相オリゴヌクレオチド手順を用いて合成および精製した。修飾オリゴヌクレオチドの５’末端は、ヘキサメチレンリンカーおよび末端アミンを含む。ＢＣＮ−ＮＨＳ  エステル（Ｍｏｌ．Ｗｔ  ２９１．１１ｇ／ｍｏｌ、７４４１Ｒ，８Ｓ，９ｓ）−ビシクロ（６．１．０）ノナ４−イン−９−イルメチルＮ−スクシンイミジルカーボネート）をＡｌｄｒｉｃｈから得た。修飾オリゴヌクレオチド（約１ｇ）を５ｍＬ四ホウ酸ナトリウム緩衝液、ｐＨ８．５に溶解した。１３．４ｍｇのＢＣＮ−ＮＨＳエステルを１０ｍＬ  ＤＭＳＯに溶解し、ＡＳＯ溶液に加え、室温で４時間撹拌した。反応混合物を１Ｍ  ＮａＣｌ溶液で希釈し、逆相カラム上のＨＰＬＣにより脱塩した。
【０４７８】
ＧＬＰ−１クリック−コンジュゲート化ＡＳＯ（ＩＯＮ  １０７１９９６）の調製
１２ｍｇの修飾オリゴヌクレオチドＩＳＩＳ  ７９１１７３を１ｍＬの０．１Ｍ四ホウ酸ナトリウム、ｐＨ８．５に溶解し（ＡＳＯ溶液）、１２ｍｇのＮ−末端アジド−ＧＬＰ−１ペプチドを４００μＬ  ＤＭＦに溶解した（ペプチド溶液）。ペプチド溶液をＡＳＯ溶液に加え、室温で１８時間撹拌した。１８時間の時点で沈殿が観察され、１ｍＬの追加のＤＭＦを加えた。反応をさらに５時間継続させた。生成物を、ＳＡＸカラム上のＨＰＬＣにより緩衝液Ａ  １００ｍＭ  ＮＨ４ＯＡｃ／３０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏおよび緩衝液Ｂ  １．５Ｍ  ＮａＢｒ／  ＮＨ４ＯＡｃ／３０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏを用いて精製し、逆相カラム上のＨＰＬＣにより脱塩した。生成物画分を収集し、凍結乾燥して予想コンジュゲート化ＡＳＯ、ＩＯＮ  １０７１９９６を得た。
【化９０】
2019516686.tif 000094
【０４７９】
実施例２１：様々なリンカーを有する非コンジュゲート化親またはＧＬＰ−１ペプチド−コンジュゲート化ＡＳＯによる処理後のマウス１次ランゲルハンス島におけるＭＡＬＡＴ１のアンチセンス阻害
ＡＳＯに対するＧＬＰ−１ペプチドのコンジュゲーションの化学構造が膵臓内へのＡＳＯ送達に影響するか否かを決定するために、雄Ｃ５７ＢＬ／６マウスは、０．６μｍｏｌ／ｋｇ／週の週１回のビヒクル（生理食塩水）、ＩＳＩＳ  ５５６０８９（親非コンジュゲート化ＡＳＯ）、ＩＳＩＳ  ８１６３９５（ジスルフィドリンカーおよび５’ＴＣＡリンカーを有するＧＬＰ−１コンジュゲート化ＡＳＯ）、ＩＯＮ  ９６２９６３（ジスルフィドリンカーを有し、５’ヌクレオチドスペーサーを有さないＧＬＰ−１コンジュゲート化ＡＳＯ）、またはＩＯＮ  １０７１９９６（クリックリンカーを介してコンジュゲートされたＧＬＰ−１コンジュゲート化ＡＳＯ）の静脈内注射を３週間受容した。最終注射から７２時間後に組織を収集して、化合物の送達および効力を評価した。
【０４８０】
ＭＡＬＡＴ１発現を実施例６のように検出した。インサイチュハイブリダイゼーション分析は、β膵島細胞内のＭＡＬＡＴ１発現が、生理食塩水対照と比較して、ＧＬＰ−１コンジュゲート化ＡＳＯ（ＩＳＩＳ  ８１６３８５、ＩＯＮ  ９６２９６３、およびＩＯＮ  １０７１９９６）で処理したマウスで低下するが、非コンジュゲート化親ＡＳＯ（ＩＳＩＳ  ５５６０８９）で処理したマウスで低下しないことを示した。
【０４８１】
実施例２２：ＬＶＸ−ＧＬＰ１Ｒ細胞におけるＭＡＬＡＴ−１発現の用量依存的低下
ＦＬＡＧタグ化ＧＬＰ１Ｒを安定して発現しているＨＥＫ細胞を、ＦＬＡＧ−ＧＬＰ１Ｒインサートを有するｐＬＶＸ−ＩＲＥＳ−Ｐｕｒｏ（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ  Ｉｎｃ．、Ｍｏｕｎｔａｉｎｖｉｅｗ、ＣＡ）を用いた２９３Ｔ細胞のトランスフェクションにより生成されたＦＬＡＧタグ化ＧＬＰ１Ｒ含有レンチウイルスで感染させることにより生成した。感染細胞をピューロマイシン（２μｇ／ｍｌ）で選択し、次いでウェスタンブロットおよび免疫蛍光法により受容体発現に関して分析した。培養したＧＬＰ１Ｒ細胞を１０，０００細胞／ウェルの密度で播種し、およそ２４時間にわたり、０．３、１、３、９、２７、８２、２４７、７４１、２，２２２、６，６６７、および２０，０００ｎＭ修飾オリゴヌクレオチドで処理した。処理期間後、ＲＮｅａｓｙミニキット（Ｑｉａｇｅｎ、Ｖａｌｅｎｃｉａ、ＣＡ、ＵＳＡ）を使用して総ＲＮＡを調製し、プライマープローブセットＲＴＳ２７３９（フォワード配列：ＡＧＧＣＧＴＴＧＴＧＣＧＴＡＧＡＧＧＡＴ（配列番号７４）、リバース配列：ＡＡＡＧＧＴＴＡＣＣＡＴＡＡＧＴＡＡＧＴＴＣＣＡＧＡＡＡＡ（配列番号７５）、プローブ配列：ＡＧＴＧＧＴＴＧＧＴＡＡＡＡＡＴＣＣＧＴＧＡＧＧＴＣＧＧＸ（配列番号７６）を使用してｑＲＴ−ＰＣＲを行った。手短には、５μＬ水中の約５０ｎｇ総ＲＮＡを、フォワードおよびリバースプライマー（各１０μＭ）を含む０．３μＬプライマープローブセット、蛍光で標識したプローブ（３μＭ）、０．３μＬ室温酵素ミックス（Ｑｉａｇｅｎ）、４．４μＬ  ＲＮａｓｅフリー水、および１０μＬの２×ＰＣＲ反応緩衝液と２０μＬ反応物中で混合した。ＳｔｅｐＯｎｅ  Ｐｌｕｓ  ＲＴ−ＰＣＲシステム（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ、Ｐｈｏｅｎｉｘ、ＡＺ、ＵＳＡ）を使用して、逆転写を４８℃で１０分間行い、４０サイクルのＰＣＲを各サイクル中に９４℃において２０秒間および６０℃において２０秒間で行った。ｍＲＮＡレベルを、Ｒｉｂｏｇｒｅｅｎアッセイ（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）により決定した各反応に存在する総ＲＮＡ量に対して正規化し、生理食塩水対照（１００％発現）に対して正規化した。結果を下記の表に示し、ＴＣＡリンカーを有する（８１６３８５）または有さない（９６２９６３）ＧＬＰ−１複合体化ＡＳＯによるＭＡＬＡＴ−１の用量依存的阻害の増大を示す。
【０４８２】
【表３】
2019516686.tif 000095
【０４８３】
実施例２３：ＭＡＬＡＴ１を標的化するＧＬＰ−１コンジュゲート化ＡＳＯのインビトロでの活性に対するペプチド長およびコンジュゲーション位置の効果
ＭＡＬＡＴ１に相補的なＧＬＰ−１コンジュゲート化ＡＳＯのインビトロでの活性に対する正確なペプチド配列、ペプチド長、およびコンジュゲーション位置の効果を評価するために、ペプチド配列におけるバリエーションを有する一連の修飾オリゴヌクレオチドをクリックケミストリーにより合成した。全ペプチドは、Ｃ−末端アミドを有する。ＩＯＮ  １０８３５８２は、下記に示すように、５−アジドペンタン酸−修飾リシン残基（Ｘ）とのクリック反応によりＩＯＮ  ７９１１７３から合成した。他の化合物は、上記の実施例２０に示すように、Ｃ−末端アジドノルロイシン（Ｚ）とのクリック反応によりＩＯＮ  ７９１１７３から合成した。
【化９１】
2019516686.tif 000096
【０４８４】
ＬＶＸ−ＧＬＰ１Ｒ細胞（実施例２２に記載した）を１０，０００細胞／ウェルの密度で播種し、４倍希釈シリーズの７用量のペプチド−コンジュゲート化ＡＳＯと共にインキュベートした。処理期間後、総ＲＮＡを上記の実施例２２のように調製および分析した。ＩＣ５０は、下記の表に示す。
【０４８５】
【表４】
2019516686.tif 000097
【０４８６】
実施例２４：ＰＴＥＮを標的とするＧＬＰ−１コンジュゲート化ｓｉＲＮＡの調製
ＰＴＥＮを標的とするｓｉＲＮＡヌクレオチド二重鎖の調製方法
化学修飾Ｔｘｓ  Ｕｆｓ  Ａｍｏ  Ｕｆｓ  Ｃｍｏ  Ｕｆｓ  Ａｍｏ  Ｕｆｓ  Ａｍｏ  Ａｆｓ  Ｕｍｏ  Ｇｆｓ  Ａｍｏ  Ｕｆｓ  Ｃｍｓ  Ａｆｓ  Ｇｍｓ  Ｇｆｓ  Ｕｍｓ  Ａｅｓ  Ａｅ（Ｔｘ＝５’−（Ｅ）−ビニルＰ−２’−Ｏ−メトキシエチル−チミン、ｆ＝２’−α−フルオロ−２’デオキシリボース、ｍ＝２’−Ｏ−メチルリボース、ｅ＝２’Ｏ−メトキシエチルリボース、ｏ＝ホスホジエステル；およびｓ＝ホスホロチオエート）を有するＩＳＩＳ  ５２２２４７（核酸塩基配列ＴＴＡＴＣＴＡＴＡＡＴＧＡＴＣＡＧＧＴＡＡ（配列番号７７）および化学修飾Ａｆｓ  Ｃｍｓ  Ｃｆｏ  Ｕｍｏ  Ｇｆｏ  Ａｍｏ  Ｕｆｏ  Ｃｍｏ  Ａｆｏ  Ｕｍｏ  Ｕｆｏ  Ａｍｏ  Ｕｆｏ  Ａｍｏ  Ｇｆｏ  Ａｍｏ  Ｕｆｓ  Ａｍｓ  Ａｆ（上記と同様））を有するＩＳＩＳ  ７９０９７３（核酸塩基配列ＡＣＣＴＧＡＴＣＡＴＴＡＴＡＧＡＴＡＡ（配列番号７８）を、標準的な固相オリゴヌクレオチド手順を使用して合成および精製した。
【０４８７】
ＧＬＰ−１コンジュゲート化ＩＯＮ  １０５５３９４を、遊離Ｎ−末端アミンおよびＣ−末端アミドを含む配列ＨｉｓＡｉｂＧｌｕＧｌｙＴｈｒＰｈｅＴｈｒＳｅｒＡｓｐＶａｌＳｅｒＳｅｒＴｙｒＬｅｕＧｌｕＧｌｕＧｌｎＡｌａＡｌａＬｙｓＧｌｕＰｈｅＩｌｅＡｌａＴｒｐＬｅｕＶａｌＬｙｓＧｌｙＧｌｙＰｒｏＳｅｒＳｅｒＧｌｙＡｌａＰｒｏＰｒｏＰｒｏＳｅｒＣｙｓを有するＧＬＰ−１ペプチドにコンジュゲートされた５’−ヘキシルアミノ修飾オリゴヌクレオチド（ＩＯＮ  １０５５３９５）（化学修飾Ａｆｓ  Ｃｍｓ  Ｃｆｏ  Ｕｍｏ  Ｇｆｏ  Ａｍｏ  Ｕｆｏ  Ｃｍｏ  Ａｆｏ  Ｕｍｏ  Ｕｆｏ  Ａｍｏ  Ｕｆｏ  Ａｍｏ  Ｇｆｏ  Ａｍｏ  Ｕｆｓ  Ａｍｓ  Ａｆ（上記と同様）を有する核酸塩基配列ＡＣＣＴＧＡＴＣＡＴＴＡＴＡＧＡＴＡＡ（配列番号７８））から出発して、実施例１の手順に従って調製した。
【０４８８】
ＩＳＩＳ  ５２２２４７を７９０９７３とハイブリダイズし、２つのオリゴヌクレオチドの二重鎖を生成した。ＩＳＩＳ  ５２２２４７を１０５５３９４とハイブリダイズし、２つのオリゴヌクレオチドの二重鎖を生成した。
【０４８９】
実施例２５：ＧＬＰ−１拮抗薬コンジュゲート化オリゴヌクレオチドの調製
ＧＬＰ−１拮抗薬コンジュゲート化オリゴヌクレオチド、ＤＬＳＫＱＭＥＥＥＡＶＲＬＦＩＥＷＬＫＮＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳＣ−Ｓ−Ｓ−プロピオニル−ＨＡ−ｏ−ＴｄｏｍＣｄｏＡｄｏＧｋｓｍＣｋｓＡｋｓ  ＴｄｓＴｄｓｍＣｄｓＴｄｓＡｄｓＡｄｓＴｄｓＡｄｓＧｄｓｍＣｄｓＡｋｓＧｋｓｍＣｋ（ＩＯＮ  ９９８９７５）の合成方法。
【０４９０】
３８ｍｇの実施例１に記載したリンカー−ＩＳＩＳ  ７８６４３４（化合物２）を１．５ｍＬ  Ｈ２Ｏに溶解し、０．５ｍＬの０．１Ｍ  ＮａＨＣＯ３／Ｈ２Ｏを加えてｐＨを約７．５〜８．０に調整した（ＡＳＯ溶液）。
【０４９１】
２７．７ｍｇのペプチドＤＬＳＫＱＭＥＥＥＡＶＲＬＦＩＥＷＬＫＮＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳＣ−ＮＨ２（配列番号７９）を２ｍＬのＤＭＦ：０．１Ｍ  ＮａＨＣＯ３（１：１）に溶解した（ペプチド溶液）。ペプチド溶液をＡＳＯ溶液にゆっくり加え、室温で３０分間撹拌した。反応をＬＣＭＳにより監視し、撹拌をさらに１時間継続した。主要な画分は、予想された生成物であることが見出された。生成物を水で希釈し、強アニオン交換カラム上のＨＰＬＣ（緩衝液Ａ＝３０％アセトニトリル水溶液中１００ｍＭ酢酸アンモニウム；緩衝液Ｂ：Ａ中１．５Ｍ  ＮａＢｒ、２８カラム容積中、０〜６０％Ｂ）により精製するまで４℃で保った。完全長ＡＳＯを含む画分を一緒にプールし、アセトニトリルの１０％濃度を得るまで希釈し、逆相カラム上のＨＰＬＣ（緩衝液Ａ  ０．１Ｍ塩化ナトリウム、Ｂ＝水、Ｃ＝水中５０％アセトニトリル）により脱塩した。画分を一緒にプールし、蒸発させて、ＬＣＭＳにより確認された予想生成物を得た。
【０４９２】
実施例２６：マレイミドリンカーを介して５’位でコンジュゲートされたＧＬＰ−１を含むコンジュゲート化修飾オリゴヌクレオチドの調製方法。
ＭＡＬＡＴ１を標的化する５’ヘキシルアミノ修飾オリゴヌクレオチド（ＩＳＩＳ  ７８６４３４）を本明細書で以前に記載したように合成および精製した。ＩＳＩＳ  ７８６４３４を四ホウ酸ナトリウム緩衝液中、ｐＨ７、室温で５ｅｑ．のＮ−スクシンイミジル３−マレイミドプロピオネート（ＭＷ  ２６６．２１ｇ／ｍｏｌ）と反応させて、５’−（３−マレイジミル）プロピオニル−Ｃ６  ＭＡＬＡＴ１  ＡＳＯを得た。Ｃ−末端システインアミド（「ＧＬＰ−１ペプチド−システインアミド」、ＨＡｉｂＥＧＴＦＴＳＤＶＳＳＹＬＥＥＱＡＡＫＥＦＩＡＷＬＶＫＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳＣ−ＮＨ２）を含有するＧＬＰ−１ペプチドを０．１Ｍリン酸ナトリウム、ｐＨ８．５／ＤＭＦに溶解し、室温で撹拌しながら５’−（３−マレイジミル）プロピオニル−Ｃ６  ＭＡＬＡＴ１  ＡＳＯに加えた。生成物（ＩＯＮ１０８６６９９）が形成された。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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