(57)【要約】  本発明は、滅菌プロセスにおいて無菌性保証水準が達成される、アイテムの滅菌プロセスのバリデーション方法に関する。本発明による方法は、最初に、アイテムを受容した容器を１０５超の生きた微生物細胞で汚染させるステップと、次いで、選択されたプロセスを用いて１回目の滅菌サイクルを実施するステップと、次いで、容器を開封して、該容器を１０５超の生きた微生物細胞で再汚染させるステップと、次いで、同じプロセスを用いて２回目の滅菌サイクルを実施するステップと、最後に、１回目の滅菌サイクルの後および２回目の滅菌サイクルの後に、容器の無菌性を検証するステップと、を含むことを特徴とする。本発明による方法は、具体的には、医療製品および装置に適用することができる。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
滅菌プロセスにおいて無菌性保証水準が達成される、アイテム、具体的には、医療製品または装置の前記滅菌プロセスのバリデーション方法であって、
最初に、アイテムを受容した容器（１２）を１０５超の生きた微生物細胞で汚染させるステップと、
次いで、選択されたプロセスを用いて１回目の滅菌サイクルを実施するステップと、
次いで、前記容器（１２）を開封して、前記容器を１０５超の生きた微生物細胞で再汚染させるステップと、
次いで、前記プロセスと同じプロセスを用いて２回目の滅菌サイクルを実施するステップと、
最後に、前記１回目の滅菌サイクルの後および前記２回目の滅菌サイクルの後に、前記容器（１２）の無菌性を検証するステップと、
を含むことを特徴とする、
方法。
【請求項２】
前記汚染ステップは、少なくとも１０６の生きた微生物細胞を用いてそれぞれ実施されることを特徴とする、
請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記汚染ステップは、前記選択された滅菌プロセスにおいて最も破壊し難いと証明された生きた微生物細胞を用いることを特徴とする、
請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記容器（１２）の無菌性を検証するステップは、生物学的インジケータがいずれも成長を達成していないことを示す、前記インジケータの検出ステップを含むことを特徴とする、
請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５】
前記２回の汚染ステップは、同じ条件下で実施されることを特徴とする、
請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
前記２回の滅菌サイクルは、同じ条件下で実施されることを特徴とする、
請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
ルーチンサイクルが、１回目の滅菌サイクルと、保持時間と、２回目の滅菌サイクルとからなることを特徴とする、
請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
前記２回の滅菌サイクルの間にある前記ルーチンサイクルの前記保持時間は、前記バリデーション中の前記１回目のサイクルと前記２回目のサイクルとの間で滅菌物を汚染させるために必要な時間に等しいことを特徴とする、
請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記ルーチンサイクルの環境条件（具体的には時間、温度および圧力）は、前記１回目のサイクルと前記２回目のサイクルとの間で前記滅菌物が汚染されている間の環境条件と同一であるか可能な限り近いことを特徴とする、
請求項７または８に記載の方法。
【請求項１０】
請求項１〜９のいずれか１項に記載のバリデーション方法を実施するための装置であって、
前記装置は、前記容器（１２）のための少なくとも１つの開封システム（１８）、注入手段および少なくとも１つの閉鎖システム（２４）を含むワークステーション（３０）上に前記容器（１２）を連続して配置する手段を備えることを特徴とする、
装置。
【請求項１１】
前記少なくとも１つの開封システム（１８）、前記注入手段および前記少なくとも１つの閉鎖システム（２４）は、前記容器（１２）の位置に対して同じ位置に配置されることを特徴とする、
請求項１０に記載の装置。
【請求項１２】
前記少なくとも１つの開封システム（１８）、前記注入手段および前記少なくとも１つの閉鎖システム（２４）は、前記容器（１２）の位置に対して離間して配置されることを特徴とする、
請求項１０に記載の装置。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、製品の滅菌プロセスのバリデーション方法に関し、より詳細には、開封された後に再び封止され得る容器内に封入された医療製品（医薬品、医療機器、化粧品、バイオテクノロジー製品等）の滅菌プロセスのバリデーション方法およびそのようなバリデーションプロセスを実施する装置に関する。
【背景技術】
【０００２】
特定のアイテムの無菌状態、より詳細には注射剤および注射剤の容器のような医療アイテムの無菌状態は、当業者や医療関係者にとって常に懸念される事項である。無菌状態は、製品または容器である滅菌されたアイテムのそれぞれの非無菌性の確率の指標を示す「ＳＡＬ」と略される無菌性保証水準（Sterility Assurance Level）の形式で、様々な規格および規定書で定義されている。
【０００３】
選択された無菌性保証水準ＳＡＬは、一般に、「ＣＦＵ」（コロニー形成単位）で示される、生きたコロニーを形成する１０−６の単位の閾値を下回る統計的濃度を要件としている。これは、１００万アイテムあたり１の生きた微生物細胞に相当し、滅菌されたアイテムにおいて非無菌性が生じる確率が１００万分の１であることを意味する。
【０００４】
滅菌プロセスは、得られた曲線に応じて２つのカテゴリに分けることができる：
（ａ）滅菌プロセスの第１のカテゴリでは、複数の研究者および特定の規定書によれば、曝露時間または照射線量のようなパラメータに応じて、生きた微生物細胞の数の指数関数的減衰曲線を推定することができる。具体的には、これらのプロセスは、湿熱、乾熱、酸化エチレン、ならびにベータ線またはガンマ線照射による滅菌を含む。
（ｂ）滅菌プロセスの第２のカテゴリでは、曝露時間または照射線量のようなパラメータの関数として、生きた微生物細胞の数の指数関数的減衰曲線を推定することができない。具体的には、第２のカテゴリは、過酸化水素、過酢酸、または静水過圧による滅菌を含む。
【０００５】
第１のカテゴリにおける滅菌プロセスの無菌性保証水準ＳＡＬの第１の評価方法は、規定の微生物、または（可能であれば）選択された滅菌プロセスにおいて最も破壊し難いと証明された微生物で調製された生物学的インジケータを用いる。これらの生物学的インジケータは、滅菌される製品または容器であるアイテムのサンプルに注入される。アイテムと本プロセスとの間の相互作用を評価できるように、滅菌後に、主に滅菌時間または線量である滅菌プロセスの特定のパラメータを変更して、生きた微生物細胞の残存数が測定される。
【０００６】
この方法により、いくつかの滅菌パラメータに応じて、生きた微生物細胞の数の減衰曲線が得られる。滅菌パラメータは、一般には、湿熱、乾熱、または酸化エチレンによる滅菌を用いた滅菌プロセスにおける曝露時間と、ベータ線またはガンマ線照射による滅菌を用いた滅菌プロセスにおいて受けた線量とを含む。
【０００７】
統計的に生存微生物細胞が１より少ない非常に低いレベルの汚染に対して、この第１の評価方法における曲線は全体的に長くなっており、これにより、滅菌プロセスの特性を推定して所定の無菌性保証水準ＳＡＬを達成することができる。
【０００８】
しかしながら、非常に低いレベルの汚染に対する曲線の外挿は、経験では必ずしも証明できない仮設に基づいているため、この方法には問題がある。基準のなかには、実際には実施が困難な手段によって、高い汚染値に対して最小の相関係数が達成されることを求めるものがある。
【０００９】
第２のカテゴリにおける滅菌プロセスの無菌性保証水準ＳＡＬの第２の評価方法は、滅菌されるアイテムに、主に１０３〜１０６の範囲にある所望の数の生きた微生物細胞を含む生物学的インジケータを注入するステップと、次いで、滅菌処理後に、これらのインジケータのすべての生きた細胞の破壊を制御するステップとを含む。
【００１０】
この方法において、曝露時間または滅菌線量または注入された細胞の数のようなパラメータの関数としての生きた微生物細胞の数の減衰曲線を計算することはできない。したがって、非無菌性が生じる確率も評価することができず、ＳＡＬの確保に問題が生じる。規定および当業者が、無菌状態を達成する必要がない除染であると考える場合もある。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
本発明の目的は、特に、上述した従来技術のすべての問題を回避することである。
【００１２】
そのため、本発明は、例えば本滅菌プロセスに適合した容器または容器に収容された製品のような任意選択のアイテムの滅菌プロセスのバリデーション方法を提供する。本方法は、すべての滅菌プロセスに適用することができ、医療製品および装置に主に適用されるが、これに限定されるものではない。
【００１３】
２００２年８月６日に公開された米国特許第６，４２８，７４６号には、アイテム、具体的には医療製品の滅菌手順のバリデーション方法が開示されている。これにより、滅菌手順で達成される無菌性保証水準のバリデーションを実施することができる。本手順は、最初に、アイテムを１０５超の生きた微生物細胞で汚染させるステップと、次いで、選択された手順を用いて滅菌サイクルを実施するステップと、最後に、滅菌サイクル後のアイテムの無菌性を検証するステップとを含む。
【課題を解決するための手段】
【００１４】
本発明によれば、滅菌プロセスにおいて無菌性保証水準が達成される、任意選択のアイテムの滅菌プロセスのバリデーション方法は、最初に、アイテムを受容した容器を、１０５超の生きた微生物細胞で汚染させるステップと、次いで、選択された滅菌プロセスを用いて１回目の滅菌サイクルを実施するステップと、次いで、容器を開封して、該容器を１０５超の生きた微生物細胞で再汚染させるステップと、次いで、同じプロセスを用いて２回目の滅菌サイクルを実施するステップと、最後に、１回目の滅菌サイクルの後および２回目の滅菌サイクルの後に、容器の無菌性を検証するステップと、を含むことを特徴とする。
【００１５】
さらに、本発明によるバリデーション方法は、以下の特徴を１つまたは互いに組み合わせて２つ以上含むことができる。
【００１６】
有利には、汚染ステップは、少なくとも１０６の生きた微生物細胞を用いてそれぞれ実施される。
【００１７】
有利には、汚染ステップは、選択された滅菌プロセスにおいて最も破壊し難いと証明された生きた微生物細胞を用いる。
【００１８】
有利には、容器の無菌性を検証するステップは、生物学的インジケータがいずれも成長を達成していないことを示す、インジケータの検出ステップを含む。
【００１９】
有利には、２回の汚染ステップは同じ条件下で実施され、２回の滅菌サイクルも同じ条件下で実施される。ただし、これは、本プロセスにおいて必要性がない場合、特に、本滅菌プロセスにおいて最も破壊し難い生きた微生物細胞が、２回目のサイクルで少なくとも５ｌｏｇ破壊されない場合を除く。
【００２０】
有利には、本発明によるバリデーション方法によって、２回目の滅菌サイクルを補正して、本滅菌プロセスにおいて最も破壊し難い生きた微生物細胞の少なくとも５ｌｏｇの破壊が実際に達成されることを確実にすることができる。
【００２１】
有利には、本発明によって、容器の開封、再汚染および閉鎖作業を迅速に実施して、ルーチンサイクルの実行時間を最適化することができる。ルーチンサイクルは、１回目のサイクルと、容器の開封、再汚染および閉鎖作業の時間に等しい、同じ環境条件下での保持時間と、２回目のサイクルと、からなる。
【００２２】
本方法の目的は、本滅菌プロセスにおいて最も破壊し難いと証明された１０５の生きた微生物細胞による初期汚染に対して少なくとも１０−５の無菌性保証水準（ＳＡＬ）を実証することである。本方法は、特に滅菌プロセスが上述した第１のカテゴリまたは第２のカテゴリのいずれかに属していたとしても、滅菌プロセスの作業モードから完全に独立している。
【００２３】
このようなＳＡＬを達成することは、少なくとも１０ｌｏｇの汚染減少が達成されることに基づいている。
【００２４】
本発明の方法は、１０ｌｏｇの汚染減少が実際に証明されているという点で注目に値する。これは、現在、他の方法で実現することはできない。本方法は、滅菌されるアイテムに、本滅菌プロセスにおいて最も破壊し難いと有利に証明された少なくとも１０５の生きた微生物細胞を注入するステップと、１回目の滅菌サイクルを実施して少なくとも１０５の生きた微生物を破壊するステップと、容器を開封して、本滅菌プロセスにおいて最も破壊し難いと証明された少なくとも１０５の生きた微生物細胞を再注入して、容器を閉鎖するステップと、１回目の滅菌サイクルと同一の２回目の滅菌サイクルを実施して、滅菌プロセスにおいて最も破壊し難い少なくとも１０５の生きた微生物細胞を破壊するステップと、を含む。
【００２５】
容器の開封、再注入および再閉鎖の作業は、本発明による一装置よって実施される。
【００２６】
１回目の滅菌サイクルの終了時に、本滅菌プロセスにおいて最も破壊し難い１０５ＣＦＵの微生物で汚染されたサンプルが採取され、該サンプルは当業者に公知のおよび／または規定書に記載された試験にかけられて、少なくとも１０５の生きた微生物細胞が破壊されたことが証明される。このようにして、１回目のサイクルの終了時に、後者において５ｌｏｇの汚染を破壊することができることが証明される。
【００２７】
２回目の滅菌サイクルの終了時に、本滅菌プロセスにおいて最も破壊し難い１０５の生きた微生物細胞で汚染されたサンプルが採取され、該サンプルは当業者に公知のおよび／または規定書に記載された同じ試験にかけられて、本滅菌プロセスにおいて最も破壊しにくい少なくとも１０５の生きた微生物細胞が破壊されたことが証明される。
【００２８】
このようにして、２回目のサイクルの終了時に、後者において少なくとも５ｌｏｇの上述した生きた微生物細胞を追加で破壊することができることが証明される。
【００２９】
容器および容器に収容された製品またはアイテムは、滅菌サイクルを経ており、別の滅菌サイクルにおいてその特性や挙動に影響を及ぼす場合があるため、２回目のサイクルは完了している必要がある。試験を実施しない場合、本滅菌プロセスにおいて最も破壊し難い少なくとも５ｌｏｇの生きた微生物細胞が、１回目と同一の２回目のサイクルにおいて追加で実際に破壊されたと言うことはできない。
【００３０】
上述した理由により、２回目のサイクルにおいて生きた微生物を少なくとも５ｌｏｇ減少できない場合、当業者は、少なくとも５ｌｏｇの減少を達成できるように２回目のサイクルの特徴を補正することができる。
【００３１】
本方法は、１回目のサイクルにおいて少なくとも５ｌｏｇの破壊と、２回目のサイクルにおいて少なくとも５ｌｏｇの追加的破壊とができるという点で注目に値する。これは、現在、他の方法で実現できない。
【００３２】
本方法は、１回目のサイクルと、本発明による容器の開封、再注入および閉鎖作業と同じ条件下での保持時間と、２回目のサイクルとからなるルーチンサイクルによって、本滅菌プロセスにおいて最も破壊し難い微生物を少なくとも１０ｌｏｇ破壊することができることが実証できるという点で注目に値する。
【００３３】
上述したように、滅菌される容器の滅菌前の初期汚染に関して、本滅菌プロセスにおいて最も破壊し難い微生物が１０５ＣＦＵ以下である場合、および滅菌プロセスによって少なくとも１０ｌｏｇの微生物が破壊される場合、少なくとも１０−５のＳＡＬが達成される。
【００３４】
本方法は、初期汚染に関して、本滅菌プロセスにおいて最も破壊し難い微生物細胞が１０５未満である場合、少なくとも１０−５のＳＡＬを実証できるという点で注目に値する。
【００３５】
また、本発明は、バリデーション方法を実施するための装置に関する。装置は、上述した任意選択の特徴を含み、容器のための少なくとも１つの開封システム、注入手段および少なくとも１つの閉鎖システムを含むワークステーション上に容器を連続して配置するための手段を備える。
【００３６】
本装置の第１の実施形態によれば、少なくとも１つの開封システム、注入手段および少なくとも１つの閉鎖システムは、容器の位置に対して同じ位置に配置される。
【００３７】
本発明の装置の別の実施形態によれば、少なくとも１つの開封システム、注入手段および少なくとも１つの閉鎖システムは、容器の位置に対して離間して配置される。
【図面の簡単な説明】
【００３８】
以下、本発明の他の特徴および利点をより明確に理解するために、添付の図面を参照しながら、非限定的な一例として本発明を説明する。
【図１】指数関数的減衰曲線を確立することができる滅菌プロセスにおいて、曝露時間または滅菌線量の関数として生きた微生物細胞の数を測定した曲線を示すグラフである。
【図２】上記減衰曲線の対数変換を示すグラフである。
【図３】指数関数的減衰曲線を生じない滅菌プロセスにおいて、曝露時間または滅菌線量の関数として生きた微生物細胞の数を測定した曲線を示すグラフである。
【図４】本発明による滅菌バリデーションプロセスを実施する装置において、移動方向に対して垂直な垂直面におけるワークステーションの断面図である。
【図５】本発明による装置の上面図である。
【図６】本発明の一実施形態による装置の変形例の上面図である。
【発明を実施するための形態】
【００３９】
図１は、第１のカテゴリの滅菌プロセスにおいて、アイテムが収容された密閉容器内に１０６に等しい量Ｎ０の生きた微生物細胞を含む生物学的インジケータを導入して、本プロセスの曝露時間Ｔの後に測定されたまたは放射線照射による処理において線量Ｄを照射した後に測定された生きた微生物細胞の数Ｎに対する曲線２を示す。
【００４０】
かなり長い時間Ｔの間、または比較的高い線量Ｄを照射している間、ゼロに向かう傾向を有する指数関数的曲線が得られた。
【００４１】
代替的に、密閉容器内に１０６未満の数Ｎの生きた微生物細胞を注入する滅菌プロセスによって、同様の曲線を得ることができ、製品内に初期注入された量に応じて、同様の指数関数的減衰曲線を得ることができる。
【００４２】
図２は、曝露時間Ｔまたは線量Ｄの関数として、図１に示す生きた微生物細胞の数Ｎの対数変換値ｌｏｇ（Ｎ）によって正のｌｏｇ（Ｎ）値が計算された直線４を示す。直線４は、時間Ｔ＝０において、１０６の細胞数による汚染に相当する対数値ｌｏｇ（Ｎ）＝６から開始する。
【００４３】
なお、ｌｏｇ（１）＝０において、指数関数的曲線の対数変換によって、測定された単一の生きた微生物細胞を示す数Ｎ＝１に相当する時間Ｔ１（または線量Ｄ１）で０を通過する直線が得られることに留意されたい。
【００４４】
これらの滅菌プロセスのための公知のバリデーション方法において、負のｌｏｇ（Ｎ）値における直線を０未満に維持させて外挿することが、様々な研究によって提案されている。これら負の値は、１未満の数Ｎ、すなわち処理された容器あたりの生残微生物細胞が１未満である確率に相当する。
【００４５】
特に、医療機器の滅菌に関する欧州規格「ＮＦ  ＥＮ５５６」では、１０−６未満の微生物細胞が存在する確率、すなわち、滅菌されたアイテムに最大１００万分の１の確率で依然として微生物が生存している確率があるとされている。これは、複数の研究者によって、滅菌されたアイテム１００万個あたり生きた微生物細胞が１存在する確率と同等であると解釈されている。したがって、汚染対数値ｌｏｇ（Ｎ）＝６から１２ｌｏｇ減少させて、対数値ｌｏｇ（Ｎ）＝−６を得る必要がある。この値は、原則として、必要とされる処理時間Ｔ２または線量Ｄ２において達成される。
【００４６】
初期に、より多いまたはより少ない数の生きた微生物細胞を含むアイテムの場合、滅菌プロセスにおいて得られる直線は同じ傾きを有する。対数値ｌｏｇ（Ｎ）＝−６を達成するためには、比較的長いまたは比較的短い曝露時間（またはより高いまたはより低い線量）が必要とされる。
【００４７】
一般に、従来から使用されている生物学的インジケータが含む生きた微生物細胞の数は、１０６〜１０７の範囲にある。
【００４８】
負のｌｏｇ（Ｎ）値になることを避けるために、例えば１２に等しい非常に高いレベルの汚染を示す生物学的インジケータから開始して、最終的に０に等しい値に達することができる。しかしながら、このような生物学的インジケータは、少なくとも滅菌プロセスに用いられる基準微生物に関しては、現時点では市場で入手することはできない。
【００４９】
なお、滅菌のために準備される多くの医療機器または注射剤の平均的な初期汚染は、一般には低く、多くの場合、１０未満の生きた微生物細胞であることに留意されたい。しかしながら、この汚染レベルにはバラツキが生じる場合があり、例えば１０６に等しい最大レベルに近づく等の例外的な初期汚染を除外することはできない。
【００５０】
最小の相関係数が特定の基準によって達成されることが経験によって示されているため、このバリデーション方法に関する問題は、対数減衰の直線４が確立できない場合があることである。この場合、負の対数値を確立することができず、必要な曝露時間Ｔ２または線量Ｄ２を計算することができない。
【００５１】
上記バリデーション方法に関する別の問題は、直線４の著しい負の値への拡張を実験として検証することができず、誤差の範囲が未知であることである。
【００５２】
特に、ｌｏｇ（Ｎ）＝−６の場合、１００万個のユニットと同一の条件下で試験が実施される必要があるが、これは物理的に不可能である。特に、生物学的インジケータの安定性の問題がある。生物学的インジケータが変化して試験結果が歪められることを避けるために、インジケータはすべてのアイテム上に非常に短期間で配置される必要がある。
【００５３】
さらに、負のｌｏｇ（Ｎ）値に対して、生きた微生物細胞の量の増加の法則はそれほど複雑ではないが、微生物の破壊のメカニズムは現時点では完全に解明されていないことを考慮する必要がある。これらのメカニズムは、特に微生物の特性、滅菌プロセス、および滅菌される製品と微生物の種類と間の重要な相互作用に依存する。
【００５４】
図３は、第２のカテゴリの滅菌プロセスにおいて、アイテムが収容された密閉容器内に１０６に等しい量の生きた微生物細胞を含む生物学的インジケータを導入して、本プロセスの曝露時間Ｔの後に測定された生きた微生物細胞の数Ｎに対する曲線６を示す。
【００５５】
特定の形状を有さない、連続的に下降する曲線６が得られた。
【００５６】
第２のカテゴリの滅菌プロセスは、アイテムに主に１０３〜１０６の範囲にある規定数の生きた微生物細胞を含む生物学的インジケータを注入するステップと、次いで、滅菌処理後に、すべてのインジケータが破壊されたことを検証するステップとを提供する。
【００５７】
細胞数を測定するための正規曲線を１つのパラメータから確立することは不可能であるため、これらのプロセスに対して非無菌性が生じる確率を計算することができない。さらに、規定書および当業者が無菌状態を達成する必要がない除染であると考える場合がある。
【００５８】
また、非常に高い静水圧を用いた具体的な方法を除いた、上述した一連のバリデーション方法に関する別の問題は、滅菌物を均一に処理することができないことである。特に、乾熱、湿熱および酸化エチレンを用いた滅菌方法では、滅菌物に系統温度差が生じ、照射を実施するプロセスでは、滅菌物の異なる箇所において線量の差が生じる。
【００５９】
この場合、無菌性の保証は著しく変動して、数ｌｏｇの汚染減少があると頻繁に推定される。
【００６０】
図４および図５は、第１のカテゴリまたは第２のカテゴリに属する場合がある任意選択の滅菌プロセスにおける本発明によるバリデーション方法を実施するよう構成された装置を示す。
【００６１】
装置は、長手方向に整列された一連の容器１２を受容する細長いプレート１０を備える。各容器１２には、滅菌される製品が収容される。容器は、異なる形状および異なる寸法を有してよい。具体的には、容器は、パウチ、サシェ（小袋）、硬質または軟質のフラスコ、シリンジ、硬質または軟質のアンプル、熱成形トレイ、または滅菌される任意選択の製品を収容するよう構成された任意選択の他の容器であってもよい。滅菌される製品として、具体的には医療製品、より具体的には、医薬品（化学薬品またはバイオ医薬品）、医療機器、化粧品、遺伝子治療用製品、先進治療薬、移植組織および臓器、食品等を挙げることができるが、これらに限定されるものではない。
【００６２】
以下では、説明を簡潔にするために、液体製品を収容する一種の従来の容器、すなわち可撓性パウチを一例として用いる。
【００６３】
これらのパウチ１２の長手方向への進行は、手動でまたは自動的なシステムの手段よって段階的に実施される。
【００６４】
本滅菌プロセスにおいて最も滅菌し難いと証明された１０６ＣＦＵの生きた微生物細胞を用いて、滅菌されるアイテムの１つまたは２つ以上のサンプルに対して１回目の汚染ステップが実施された後に、パウチ１２は、１回目の滅菌サイクルを事前に受ける。
【００６５】
平らに置かれ、必要に応じて機械的なクランプ装置によってプレート１０上に保持されるパウチ１２は、横方向に平行に配置される首部１４をそれぞれ有する。首部は、プラグ１６によって閉鎖される。プレート１０は、パウチ１２を進行方向および長手方向に並進移動させるためのコンベアのような手段を備える。
【００６６】
プレート１０は、処理される上流のパウチ３２と処理された下流のパウチ３４との間に配置される中央ワークステーション３０を備える。ワークステーション３０は、パウチ１２の開封、１回目または２回目の汚染ステップ、およびその後の閉鎖の連続した作業の間、処理されているパウチを同じ位置に保つ。
【００６７】
特に、パウチ１２を同じ位置に保持する単一のワークステーションで、同一の開封時間で２回の汚染ステップを類似の条件下で実施することで、パラメータを変えずにこれらの注入ステップにおいて同等の効果を得ることができることは興味深いことである。
【００６８】
機器に固定されたプレート１０は、水平に配置されるか、首部１４の位置を高くしてパウチ１２が開封されたときに製品が漏れ出すのを防ぐために、特に垂直面内で横方向に傾斜して配置され得る。
【００６９】
プレート１０は、垂直ガイド２０上に固定された切断刃１８を支持する。切断刃１８は、容器の内容積を可能な限り小さくするために、プラグ１６の近傍において首部１４を横方向に切断する。切断刃１８は、上部支持体２２を押すことによって手動で、または例えば電磁石を有する電気アクチュエータを用いて自動的に作動させることができる。
【００７０】
本方法は、首部１４を切断してパウチ１２を開封した後に、手動でまたは自動的に実施され得る汚染ステップを含む。これは、例えばシリンジ、または単一のピペット、または複数のパウチが同時に開封された場合には複数のピペットを用いて実施される。
【００７１】
プレート１０は、首部１４の切断後のパウチ１２の各タイプに適合する封止装置を支持する。このような装置は、降下システム２６の下に取り付けられる凸部２４を備える。凸部２４は、内容積の変化とその中の微生物の損失を制限するために、可能な限り切断部の近傍で首部を封止する。
【００７２】
特に、連続的または不連続的な加熱を伴う抵抗、高周波による封止、高インダクタンスの電磁石、またはパウチを閉鎖するのに適した任意選択の他のシステムによって、封止作業が実施されてもよい。
【００７３】
降下システム２６は、手動、または例えば電磁石を有する電気アクチュエータを用いて自動的に操作することができる。降下システム２６は、封止後に上昇されてパウチ１２が解放され、次いで、パウチ１２は長手方向に移動され得る。
【００７４】
プレート１０上のパウチ１２のための機械的なクランプ装置を必要に応じて開いた後に、一連のパウチは長手方向に移動され、新しいパウチがワークステーション３０上に置かれ、下流のパウチは手動または自動的な手段によって滅菌器に向けて排出される。有利には、１回目の滅菌プロセスと同一の滅菌条件を得るために、２回目の滅菌プロセスにおいて同じパウチが１回目の滅菌プロセスと同じ位置で滅菌器に置かれる。
【００７５】
滅菌器内のすべてのパウチ１２が（１回目のサイクルのために）配置された後、または（２回目のサイクルのために）交換された後に、滅菌サイクルが開始される。１回目のサイクルの後に、生物学的インジケータが成長していないことを検証するために、インジケータは取り出される。同じ手順が２回目のサイクルの後にも実施される。
【００７６】
１回目のサイクルの後に成長が見られないことは、このサイクルでは、本滅菌プロセスにおいて最も破壊し難い微生物胞子が少なくとも１０６破壊されたこと、すなわち、微生物の汚染が少なくとも６ｌｏｇ減少されたことを証明している。
【００７７】
また、２回目のサイクルの後に成長が見られないことは、このサイクルでは、同じ微生物の汚染が少なくとも６ｌｏｇ減少されたことを証明している。
【００７８】
有利には、２回目のサイクルにおいて注入された生物学的インジケータが完全に破壊されず、汚染が少なくとも６ｌｏｇ減少されない場合、当業者は、１回目のサイクルとは異なる２回目のサイクルを実施してもよい。これは、１回目の滅菌サイクルでの製品または容器の変化によって具体的に設定することができる。
【００７９】
２回のサイクルの連続実行と２回のサイクルの効果によって、上述した図２のグラフに示すように、微生物の汚染が６＋６＝１２ｌｏｇ減少されたことが証明することができる。図２に示すように、滅菌されるアイテムの初期汚染の胞子が１０６以下の場合、汚染対数値が１２減少された後に、１０−６の無菌性保証水準ＳＡＬが達成される。
【００８０】
生物学的インジケータは、本滅菌プロセスにおいて最も破壊し難い微生物から構成されており、１０６の胞子数に等しいこの微生物による初期汚染は、非常に好ましくない事例である。１０６の胞子数の生物学的インジケータによる初期汚染に対して１０−６の無菌性保証水準ＳＡＬを達成することは、過剰破壊の条件として参考文献に記載されている状況に相当する。したがって、生物学的インジケータの胞子よりも耐性が低い微生物の混合物に対して、滅菌されるアイテムの微生物汚染が参考文献や規定書の記載に準拠する妥当なレベル、すなわち１０６を著しく下回る生きた微生物細胞のレベルまで制御されるすべての事例において、本発明による方法におけるバリデーション試験は、１０−６のＳＡＬが達成されることを保証することができる。
【００８１】
通常、１回目の滅菌サイクルと、上述した条件下（時間、温度、圧力等）でのバリデーション試験中の保持時間と、バリデーション試験中に実施されたサイクルと同一の２回目の滅菌サイクルとからなるバリデーション条件を再現することで事足りる。初期汚染の胞子数が１０６以下である場合、このシーケンス全体によって、１０−６のＳＡＬが達成されることを確実且つ証明された方法で保証することができる。したがって、胞子よりも滅菌プロセスに対する耐性が低いため、微生物の種類に関わらず、滅菌される製品の初期汚染での生きた微生物細胞が１０６未満である場合、このシーケンス全体によって、１０−６のＳＡＬが達成されることを確実且つ証明された方法で保証することができる。
【００８２】
通常、医療的安全性の観点から、パウチは汚染されない。その場合、１回目の滅菌と、パウチの開封、２回目の注入および閉鎖に必要な時間に相当する、バリデーションにおいて用いられた条件（時間、温度、圧力等）と同一の条件下での保持時間と、２回目の滅菌とを含むサイクルが用いられる。
【００８３】
図６は、長手方向に離間して配置された３つのパウチ１２ａ，１２ｂ，１２ｃを受容する中央ワークステーション３０を有するプレート１０を示す。切断刃１８を用いた第１のパウチ１２ａの切断作業と、第２のパウチ１２ｂへの注入と、第３のパウチ１２ｃの首部の封止とが、同時に実施される。
【００８４】
この一連の同時作業の後に、すべてのパウチ１２が長手方向に１段階進行して、後続のパウチに対して同じ作業が繰り返される。このようにして、３つの作業が同時に実施されるので、特に自動的な切断および封止作業によって、装置の生産性を向上させることができる。
【００８５】
言うまでもなく本発明は、上述した好適な実施形態に限定されない。
【００８６】
寧ろ、本発明は、その要旨を定義する添付の特許請求の範囲が画定する枠組を逸脱しない範囲で、実施形態のすべての変形例を包含する。
【００８７】
したがって、滅菌処理されることが推奨される場合、滅菌される製品またはアイテムは、医療製品または医療アイテム以外のものであってもよい。同様に、短時間で切断システムによって開封されて直後に再封止されるものであれば、容器はパウチ以外のものであってもよい。
【００８８】
いずれにしても、本発明による装置は、滅菌物のすべての容器の迅速な注入および閉鎖を可能にして、バリデーションにおいて実施される２回の滅菌サイクルの間の全体的な経過時間を最小限に抑えることができることは言うまでもない。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【手続補正書】
【提出日】令和1年7月16日(2019.7.16)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００１】
本発明は、製品の滅菌プロセスのバリデーション方法に関し、より詳細には、開封された後に再び封止され得る容器内に封入された医療製品（医薬品、医療機器、化粧品、バイオテクノロジー製品等）の滅菌プロセスのバリデーション方法に関する。
【手続補正２】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
滅菌プロセスにおいて無菌性保証水準が達成される、アイテム、具体的には、医療製品または装置の前記滅菌プロセスのバリデーション方法であって、
最初に、アイテムを受容した容器（１２）を１０５超の生きた微生物細胞で汚染させるステップと、
次いで、選択されたプロセスを用いて１回目の滅菌サイクルを実施するステップと、
次いで、前記容器（１２）を開封して、前記容器を１０５超の生きた微生物細胞で再汚染させるステップと、
次いで、前記プロセスと同じプロセスを用いて２回目の滅菌サイクルを実施するステップと、
最後に、前記１回目の滅菌サイクルの後および前記２回目の滅菌サイクルの後に、前記容器（１２）の無菌性を検証するステップと、
を含むことを特徴とする、
方法。
【請求項２】
前記汚染ステップは、少なくとも１０６の生きた微生物細胞を用いてそれぞれ実施されることを特徴とする、
請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記汚染ステップは、前記選択された滅菌プロセスにおいて最も破壊し難いと証明された生きた微生物細胞を用いることを特徴とする、
請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記容器（１２）の無菌性を検証するステップは、生物学的インジケータがいずれも成長を達成していないことを示す、前記インジケータの検出ステップを含むことを特徴とする、
請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５】
前記２回の汚染ステップは、同じ条件下で実施されることを特徴とする、
請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
前記２回の滅菌サイクルは、同じ条件下で実施されることを特徴とする、
請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
ルーチンサイクルが、１回目の滅菌サイクルと、保持時間と、２回目の滅菌サイクルとからなることを特徴とする、
請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
前記２回の滅菌サイクルの間にある前記ルーチンサイクルの前記保持時間は、前記バリデーション中の前記１回目のサイクルと前記２回目のサイクルとの間で滅菌物を汚染させるために必要な時間に等しいことを特徴とする、
請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記ルーチンサイクルの環境条件（具体的には時間、温度および圧力）は、前記１回目のサイクルと前記２回目のサイクルとの間で前記滅菌物が汚染されている間の環境条件と同一であるか可能な限り近いことを特徴とする、
請求項７または８に記載の方法。
【国際調査報告】
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