(57)【要約】  本発明は、一般式Ｉで示される化合物又はその薬学的に許容される塩、その製造方法、及びそれがＧＰＲ８４アゴニストとしてのツール低分子における応用、並びにそれが敗血症を治療する医薬品における応用に関する。2019500322.tif 000098【選択図】なし
2019500322.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式Ｉで示される化合物又はその薬学的に許容される塩：
【化１】
2019500322.tif 000075
Ｒ１は、Ｒ１ａ、Ｒ１ｂ又はＲ１ｃであり、
【化２】
2019500322.tif 000076
Ｒ５ａ、Ｒ５ｂ及びＲ５ｃはそれぞれ独立に、メチル、イソプロピル、Ｃ２〜Ｃ９アルケニル、Ｃ２〜Ｃ４アルキニル、３〜６員環のシクロアルキル、シアノ、ヒドロキシ、未置換フェニル、Ｃ１〜Ｃ４アルキルで置換されたフェニル、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシで置換されたフェニル、又はフルオロで置換されたフェニルであり、
ｎは、０〜１６の整数であり、
Ｔ、Ｗ及びＹはそれぞれ独立に、酸素、窒素又は炭素であり、
Ｒ２は、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル又はＣ１〜Ｃ３アルキルであり、
Ｒ３は存在しないか、又は水素、ベンジル若しくはＣ１〜Ｃ６アルキルであり、
Ｒ４は存在しないか、又は水素若しくはＣ１〜Ｃ３アルキルであり、
Ｚは、−ＯＨ、−ＮＨ２、＝Ｏ、＝Ｓ又はＣ１〜Ｃ６アルキルカルボニルである。
【請求項２】
Ｒ１は、Ｒ１ａ、Ｒ１ｂ又はＲ１ｃであり、
【化３】
2019500322.tif 000077
Ｒ５ａ、Ｒ５ｂ及びＲ５ｃはそれぞれ独立に、メチル、イソプロピル、Ｃ２〜Ｃ９アルケニル、エチニル、３〜４員環のシクロアルキル、シアノ、ヒドロキシ、未置換フェニル、Ｃ１〜Ｃ４アルキルで置換されたフェニル、メトキシで置換されたフェニル、又はフルオロで置換されたフェニルであり、
ｎは、０〜９の整数であり、
Ｔ、Ｗ及びＹはそれぞれ独立に、窒素又は炭素であり、
Ｒ２は、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル又はメチルであり、
Ｒ３は存在しないか、又は水素若しくはベンジルであり、
Ｒ４は存在しないか、又は水素若しくはメチルであり、
Ｚは、−ＯＨ、−ＮＨ２、＝Ｏ、＝Ｓ又はＣ１〜Ｃ６アルキルカルボニルである、請求項１に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩。
【請求項３】
Ｒ１は前記Ｒ１ａであり、
Ｒ５ａは、メチル、イソプロピル、３〜４員環のシクロアルキル、未置換フェニル、シアノ、ヒドロキシ、Ｃ１〜Ｃ４アルキルで置換されたフェニル、メトキシで置換されたフェニル、又はフルオロで置換されたフェニルであり、
Ｒ２は、ヒドロキシであり、
ｎは、０〜１４の整数であり、
Ｔ、Ｗ及びＹはそれぞれ独立に、酸素、窒素又は炭素であり、
Ｒ３は存在しないか、又は水素、ベンジル、若しくはＣ１〜Ｃ３アルキルであり、
Ｒ４は存在しないか、又は水素若しくはＣ１〜Ｃ３アルキルであり、
Ｚは、−ＯＨ、−ＮＨ２、＝Ｏ、＝Ｓ又はＣ１〜Ｃ６アルキルカルボニルである、請求項１に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩。
【請求項４】
一般式Ｉで示される化合物は、下記一般式ＩＩで示される化合物であり、
【化４】
2019500322.tif 000078
Ｒ１は、前記Ｒ１ａ、Ｒ１ｂ又はＲ１ｃであり、
Ｒ２は、ヒドロキシ、メチル、アミノ又はトリフルオロメチルであり、
Ｗ及びＹは、窒素であり、
Ｒ４は、水素又はＣ１〜Ｃ３アルキルであり、
Ｚは、ヒドロキシ又はアミノである、請求項１に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩。
【請求項５】
一般式Ｉで示される化合物は、下記一般式ＩＩＩで示される化合物であり、
【化５】
2019500322.tif 000079
Ｒ１は、前記Ｒ１ａ、Ｒ１ｂ又はＲ１ｃであり、
Ｗは、窒素又は炭素である、請求項１に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩。
【請求項６】
一般式Ｉで示される化合物は、下記の化合物である、請求項１に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩。
【化６】
2019500322.tif 000080
【化７】
2019500322.tif 000081
【化８】
2019500322.tif 000082
【化９】
2019500322.tif 000083
【化１０】
2019500322.tif 000084
【化１１】
2019500322.tif 000085
【化１２】
2019500322.tif 000086
【化１３】
2019500322.tif 000087
【化１４】
2019500322.tif 000088
【化１５】
2019500322.tif 000089
【化１６】
2019500322.tif 000090
【化１７】
2019500322.tif 000091
【化１８】
2019500322.tif 000092
【化１９】
2019500322.tif 000093
【化２０】
2019500322.tif 000094
【化２１】
2019500322.tif 000095
【化２２】
2019500322.tif 000096
【化２３】
2019500322.tif 000097
【請求項７】
治療有効量の請求項１〜請求項６のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩と、
薬学的に許容される担体と、
を含む、医薬品組成物。
【請求項８】
請求項１〜請求項６のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩の、敗血症を治療する医薬品の製造における使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、一般式Ｉで示される、ＧＰＲ８４に対してアゴニスト作用を有する化合物及びその製造方法、並びにそれが敗血症を治療する医薬品の製造における使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
Ｇタンパク質共役型受容体は、膜タンパク質受容体の一つの大きなクラスであり、ほぼ全ての細胞生理学的機能の調節に関与する、３６７個のヒト遺伝子コード関連タンパク質を有する。現在、ガス、ホルモン、神経伝達物質、走化性因子等の多くの既知のＧＰＣＲｓリガンドが存在する。また、研究によると、多くの遊離脂肪酸（ｆｒｅｅ  ｆａｔｔｙ  ａｃｉｄｓ：ＦＦＡ）はＧＰＣＲの内在性リガンドであり、主に遊離脂肪酸受容体（Ｆｒｅｅ  ｆａｔｔｙ  ａｃｉｄ  Ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ：ＦＦＡＲｓ）と結合することによって、下流の一連の細胞経路をアゴニストして、生理作用を調節している。研究によると、ＦＦＡｓは、グルコース安定状態、脂質形成、免疫応答において重要な役割を果たす（Ｔｏｍｏ  Ｙｏｎｅｚａｗａら、Ｆｒｅｅ  Ｆａｔｔｙ  Ａｃｉｄｓ−Ｓｅｎｓｉｎｇ  Ｇ  Ｐｒｏｔｅｉｎ−Ｃｏｕｐｌｅｄ  Ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ  ｉｎ  Ｄｒｕｇ  Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ａｎｄ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ．Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ２０１３，２０（３０），３８５５−３８７１）。
【０００３】
ＧＰＲ８４（Ｇタンパク質共役型受容体８４）も一種類の膜タンパク質受容体であって、２５〜３５個の連続したアミノ酸で７個の膜貫通αヘリックスが構成され、最近報告された一種類のロドプシン様受容体である。ｇｐｒ８４は、最初にＷｉｔｔｅｎｂｅｒｇｅｒがＥＳＴ（Ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  Ｔａｇ）方法でクローニングして取得したものである。ヒトｇｐｒ８４は第１２染色体上に位置し、マウスｇｐｒ８４は第１５染色体上に位置し、ＧＰＲ８４は、主に骨髄、末梢血白血球（好中球、好酸球、好塩基球を含む）で発現し（Ｔｉｍｏ  Ｗｉｔｔｅｎｂｅｒｇｅｒ＊，Ｈ．Ｃ．Ｓ．ａ．Ｓ．Ｈ．，Ａｎ  Ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  Ｔａｇ（ＥＳＴ）Ｄａｔａ  Ｍｉｎｉｎｇ  Ｓｔｒａｔｅｇｙ  Ｓｕｃｃｅｅｄｉｎｇ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ｏｆ  Ｎｅｗ  Ｇ−Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｃｏｕｐｌｅｄ  Ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ．ＪＯＵＲＮＡＬ  ＯＦ  ＭＯＬＥＣＵＬＡＲ  ＢＩＯＬＯＧＹ  ２００１，３０３（３），７９９−８１３）、ＬＰＳの存在下で、中鎖脂肪酸は、ＧＰＲ８４によって、マクロファージ系ＲＡＷ２６４．７細胞におけるＩＬ−１２  ｐ４０サブユニットを有意にアップレギュレートすることができ、ＩＬ１２  ｐ４０は、細胞性免疫において重要な役割を果たし、Ｔｈ１を保護しながら、Ｔｈ２を阻害することができ（Ｗａｎｇ，Ｊら，Ｍｅｄｉｕｍ−ｃｈａｉｎ  ｆａｔｔｙ  ａｃｉｄｓ  ａｓ  ｌｉｇａｎｄｓ  ｆｏｒ  ｏｒｐｈａｎ  Ｇ  ｐｒｏｔｅｉｎ−ｃｏｕｐｌｅｄ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ＧＰＲ８４．Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ２００６，２８１（４５），３４４５７−６４．）、これにより、ＧＰＲ８４は、Ｔｈ１及びＴｈ２のバランスを維持する機能を有し、多発性硬化症、炎症性腸疾患及び関節炎等の自己免疫及び炎症性疾にとって重要であることが示された。また、肥満や糖尿病等の代謝性疾患の発生は、慢性炎症と緊密に関連し、マクロファージが脂肪組織に浸潤すると、細胞因子を分泌することによって炎症反応の発生を促進することができ、同時に、脂肪細胞においてＧＰＲ８４の発現が増加し、これにより、ＧＰＲ８４が脂肪酸代謝及び免疫系間の交差調節にも関与していることが示された（Ｐｅｒｓｅｇｈｉｎ，Ｇ．；Ｐｅｔｅｒｓｅｎ，Ｋ．；Ｓｈｕｌｍａｎ，Ｇ．Ｉ．，Ｃｅｌｌｕｌａｒ  ｍｅｃｈａｎｉｓｍ  ｏｆ  ｉｎｓｕｌｉｎ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ：ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  ｌｉｎｋｓ  ｗｉｔｈ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ．Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｏｂｅｓｉｔｙ  ａｎｄ  ｒｅｌａｔｅｄ  ｍｅｔａｂｏｌｉｃ  ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ：ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｓｔｕｄｙ  ｏｆ  Ｏｂｅｓｉｔｙ  ２００３，２７Ｓｕｐｐｌ  ３，Ｓ６−１１．）。
【０００４】
２００６年に、Ｌｉｎｇチームは、ＧＰＲ８４が中鎖遊離脂肪酸（ＭＣＦＡ）によってアゴニストされ、長鎖遊離脂肪酸（ＬＣＦＡ）及び短鎖遊離脂肪酸（ＳＣＦＡ）によってはアゴニストされず、その中で、カプリン酸（Ｃ１０：０）、リシノール酸（Ｃ１１：０）、ラウリン酸（Ｃ１２：０）のアゴニスト活性が最も良く、その活性はそれぞれ４μＭ、８μＭ及び９μＭである（ＣＨＯ−ＧＰＲ８４細胞、ｃＡＭＰ試験）ことを見出した。また、彼らは更に比較的良好なアゴニスト活性の化合物ジインドリルメタン（ｄｉｉｎｄｏｌｙｌｍｅｔｈａｎｅ，ＤＩＭ）を報告し、ＤＩＭ  ＥＣ５０＝０．５μＭ（［３５Ｓ］−ＧＴＰγＳ結合試験）、０．７μＭ（ｃＡＭＰ試験）である。Ｓｕｚｕｋｉらは研究によって、２−又は３−ヒドロキシＭＣＦＡ（２−ＯＨ−Ｃ１０、３−ＯＨ−Ｃ１０、２−ＯＨ−Ｃ１２、３−ＯＨ−Ｃ１２）もＧＰＲ８４のアゴニスト活性を有することを見出し、またスクリーニングによって、６−ＯＡＵがＧＰＲ８４に対して良好な活性を有することを見出した（ＥＣ５０＝０．６６１μＭ）（Ｓｕｚｕｋｉ，Ｍ．ら、Ｏｄａ，Ｔ．，Ｍｅｄｉｕｍ−ｃｈａｉｎ  ｆａｔｔｙ  ａｃｉｄ−ｓｅｎｓｉｎｇ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＧＰＲ８４，ｉｓ  ａ  ｐｒｏｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ．Ｔｈｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ２０１３，２８８（１５），１０６８４−９１）。
【０００５】
【化１】
2019500322.tif 000003
【０００６】
ＧＰＲ８４は、正常な生理学的発現量が低いため、一定の刺激下のみで高い発現が誘導され、その発現量の大きさは炎症と大きな関係があり、炎症関連疾患の治療のために非常に良い標的であるが、現在、その具体的な作用メカニズムは依然として不明であり、現在、良好なＧＰＲ８４アゴニストが存在せず、ＧＰＲ８４の作用メカニズムの研究を障害するため、一連の良好なアゴニスト活性を有する化合物の設計及び合成が急務である。
【０００７】
本発明は、一連の低分子化合物の合成に関するものであって、ＧＰＲ８４に対して良好なアゴニスト活性を有し、これまでに報告されたＧＰＲ８４アゴニスト活性を大きく改善するため、ＧＰＲ８４の作用メカニズムの研究に良好なツール低分子を提供でき、抗敗血症薬発見のための新しい手段を作ることができる。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明の目的は、ＧＰＲ８４のアゴニストとして利用され、ＧＰＲ８４の作用メカニズム研究のために良好なツール低分子を提供し、抗敗血症医薬品発見のための新しい手段を提供できる一種類の新規化合物を設計・合成することにある。
【０００９】
本発明の他の目的は、上記化合物の製造方法を提供することにある。
【００１０】
本発明のさらに別の目的は、上記化合物又はその薬学的に許容される塩と、薬学的に許容される担体とを含む医薬品組成物を提供することにある。
【００１１】
本発明の更に別の目的とは、上記化合物の使用を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明に記載の一般式Ｉで示される化合物又はその薬学的に許容される塩であって、
【００１３】
【化２】
2019500322.tif 000004
【００１４】
Ｒ１は、Ｒ１ａ、Ｒ１ｂ又はＲ１ｃであり、
【００１５】
【化３】
2019500322.tif 000005
【００１６】
Ｒ５ａ、Ｒ５ｂ及びＲ５ｃはそれぞれ独立に、メチル、イソプロピル、Ｃ２〜Ｃ９アルケニル、Ｃ２〜Ｃ４アルキニル、３〜６員環のシクロアルキル、シアノ、ヒドロキシ、未置換フェニル、Ｃ１〜Ｃ４アルキルで置換されたフェニル、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシで置換されたフェニル、又はフルオロで置換されたフェニルであり、好ましくは、Ｒ５ａ、Ｒ５ｂ及びＲ５ｃはそれぞれ独立に、メチル、イソプロピル、Ｃ２〜Ｃ９アルケニル、エチニル、３〜４員環のシクロアルキル、シアノ、ヒドロキシ、未置換フェニル、Ｃ１〜Ｃ４アルキルで置換されたフェニル、メトキシで置換されたフェニル、又はフルオロで置換されたフェニルであり、
ｎは、０〜１６の整数であって、０〜９の整数であることが好ましく、
Ｔ、Ｗ及びＹはそれぞれ独立に、酸素、窒素又は炭素であって、窒素又は炭素であることが好ましく、
Ｒ２は、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル又はＣ１〜Ｃ３アルキルであって、ヒドロキシ、アミノ、トリフルオロメチル又はメチルであることが好ましく、
Ｒ３は存在しないか、又は水素、ベンジル若しくはＣ１〜Ｃ６アルキルであり、Ｒ３は存在しないか、又は水素若しくはベンジルであることが好ましく、
Ｒ４は存在しないか、又は水素若しくはＣ１−Ｃ３アルキルであり、Ｒ４は存在しないか、又は水素もしくははメチルであることが好ましく、
Ｚは、−ＯＨ、−ＮＨ２、＝Ｏ、＝Ｓ又はＣ１〜Ｃ６アルキルカルボニルである。
【００１７】
本発明の更なる実施形態において、一般式Ｉにおいて、
Ｒ１はＲ１ａであり、Ｒ５ａは、メチル、イソプロピル、３〜４員環のシクロアルキル、未置換フェニル、シアノ、ヒドロキシ、Ｃ１−Ｃ４アルキルで置換されたフェニル、メトキシで置換されたフェニル、又はフルオロで置換されたフェニルであり、
Ｒ２は、ヒドロキシであり、
ｎは、０〜１４であり、
Ｔ、Ｗ及びＹはそれぞれ独立に、酸素、窒素又は炭素であり、
Ｒ３は存在しないか、又は水素、ベンジル、若しくはＣ１〜Ｃ３アルキルであり、
Ｒ４は存在しないか、又は水素若しくはＣ１〜Ｃ３アルキルであり、
Ｚは、−ＯＨ、−ＮＨ２、＝Ｏ、＝Ｓ又はＣ１〜Ｃ６アルキルカルボニルである。
【００１８】
本発明の更なる実施形態において、一般式Ｉにおいて、一般式Ｉは下記一般式ＩＩである。
【００１９】
【化４】
2019500322.tif 000006
【００２０】
Ｒ１は、Ｒ１ａ、Ｒ１ｂ又はＲ１ｃであり、Ｒ２は、ヒドロキシ、メチル、アミノ又はトリフルオロメチルであり、Ｗ及びＹは、窒素であり、
Ｒ４は、水素又はＣ１〜Ｃ３アルキルであり、
Ｚは、ヒドロキシ又はアミノである。
【００２１】
本発明の更なる実施形態において、一般式Ｉは下記一般式ＩＩＩである。
【００２２】
【化５】
2019500322.tif 000007
【００２３】
Ｒ１は、上記Ｒ１ａ、Ｒ１ｂ又はＲ１ｃであり、
Ｗは、窒素又は炭素である。
【００２４】
本発明の一般式Ｉは、下記構造の化合物が好ましい。
【００２５】
【化６】
2019500322.tif 000008
【００２６】
【化７】
2019500322.tif 000009
【００２７】
【化８】
2019500322.tif 000010
【００２８】
【化９】
2019500322.tif 000011
【００２９】
【化１０】
2019500322.tif 000012
【００３０】
【化１１】
2019500322.tif 000013
【００３１】
【化１２】
2019500322.tif 000014
【００３２】
【化１３】
2019500322.tif 000015
【００３３】
【化１４】
2019500322.tif 000016
【００３４】
【化１５】
2019500322.tif 000017
【００３５】
【化１６】
2019500322.tif 000018
【００３６】
【化１７】
2019500322.tif 000019
【００３７】
【化１８】
2019500322.tif 000020
【００３８】
【化１９】
2019500322.tif 000021
【００３９】
【化２０】
2019500322.tif 000022
【００４０】
【化２１】
2019500322.tif 000023
【００４１】
【化２２】
2019500322.tif 000024
【００４２】
【化２３】
2019500322.tif 000025
【発明を実施するための形態】
【００４３】
本願に記載の一般式Ｉの化合物は、本分野の常用の方法で製造でき、例えば、下記の方法を含む。
【００４４】
ルート１：
【化２４】
2019500322.tif 000026
【００４５】
Ｒ６ａは、メチル、イソプロピル、Ｃ２〜Ｃ４アルキニル、３〜６員環のシクロアルキル、シアノ、ヒドロキシ、未置換フェニル、Ｃ１〜Ｃ３アルキルで置換されたフェニル、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシで置換されたフェニル、又はフルオロで置換されたフェニルであり、
ｎは、１〜１６であり、
化合物１をＥｔＯＨ／Ｈ２Ｏ（２：１）中に溶解させ、ＫＯＨ及びＫＩを添加した後に、臭化物２をゆっくり滴下し、８０℃で６ｈ反応させ、反応後にカラムクロマトグラフィー分離で生成物ＩＶａを取得する。
【００４６】
ルート２：
【化２５】
2019500322.tif 000027
【００４７】
Ｒ６ｂは、Ｃ２〜Ｃ９アルケニル、Ｃ２〜Ｃ４アルキニル、３〜６員環のシクロアルキル、又はＣ１〜Ｃ３アルキルで置換されたフェニルであり、
ｎは、１〜１６であり、
化合物３及びＴｓＣｌを無水ＤＣＭ中に溶解させ、ピリジンを添加し、２５℃で３ｈ反応させ、カラムクロマトグラフィー分離によって化合物４を取得し、また化合物１と同じくＥｔＯＨ／Ｈ２Ｏ（２：１）中に溶解させ、６ｈ加熱回流を行い、反応後にカラム分離によって生成物ＩＶｂを取得する。
【００４８】
ルート３：
【化２６】
2019500322.tif 000028
【００４９】
Ｒ７ａは、メチル、イソプロピル、Ｃ１〜Ｃ３アルキルで置換されたフェニル、メトキシで置換されたフェニル、又はフルオロで置換されたフェニルであり、
ｎは、１〜１５であり、
Ｎａをエタノール中に溶解させ、化合物５及び化合物６を添加し、８０℃で６ｈ反応させ、反応液を濃縮させ、少量の水を添加し、ｐＨを酸性まで調整すると、白色固体が析出され、濾過させると、所望の生成物である白色固体が取得される。
【００５０】
ルート４：
【化２７】
2019500322.tif 000029
【００５１】
Ｒ７ｂは、メチル、エチル又はイソプロピルであり、
化合物７をＤＣＭ中に溶解させ、ＣＢｒ４、ＰＰｈ３を添加し、２５℃で１４ｈ反応させ、反応後にカラムクロマトグラフィー分離で化合物８を取得する。化合物８をＴＨＦ中に溶解させ、−７８℃でＮａＨを添加し、５分間攪拌した後、マロン酸ジエチルを添加し、徐々に２５℃まで昇温させ、２５℃で６ｈ反応させ、カラムクロマトグラフィー分離で化合物９を取得する。化合物９及びＮａＣｌをＤＭＳＯ中に溶解させ、１８０℃で３ｈ反応させ、反応後にカラムクロマトグラフィー分離で化合物１０を取得する。Ｎａをエタノール中に溶解させ、化合物
【化２８】
2019500322.tif 000030
【００５２】
及び化合物１０を添加し、８０℃で６ｈ反応させ、反応液を濃縮させ、少量の水を添加し、ｐＨを酸性まで調整すると、白色固体が析出され、濾過させると、所望の生成物Ｖｂである白色固体が取得される。
【００５３】
ルート５：
【化２９】
2019500322.tif 000031
【００５４】
Ｒ７ｃは、メチル又はイソプロピルであり、
ｎは、７〜１２であり、
化合物１１をＴＨＦ中に溶解させ、０℃でＮａＨを添加し、１０分間攪拌した後にｎ−ＢｕＬｉを添加し、１０分間攪拌した後に、また臭化物を添加し、０℃で１４ｈ反応させ、カラムクロマトグラフィー分離で化合物１２を取得する。また、化合物１２をＥｔＯＨ／Ｈ２Ｏ（２：１）中に溶解させ、ＮａＯＨを添加し、２５℃で１４ｈ反応させ、塩酸を添加してｐＨを４〜５までに調整すると、白色固体が析出され、濾過させると、化合物１３である白色固体が取得される。化合物１３をＴＨＦ中に溶解させ、カルボニルジイミダゾールを添加し、２５℃で１４ｈ反応させ、カラムクロマトグラフィー分離で化合物１４を取得する。化合物１４を９０％Ｈ２ＳＯ４中で溶解させ、１３０℃下で１ｈ反応させ、カラムクロマトグラフィー分離で化合物１５を取得する。化合物１５を２８％アンモニア水中に溶解させ、１００℃で１４ｈ反応させ、塩酸を添加してｐＨを４〜５までに調整すると、白色固体が析出され、濾過させると、ＶＩａである白色固体が取得される。
【００５５】
ルート６：
【化３０】
2019500322.tif 000032
【００５６】
ｎは、４〜１０であり、
マグネシウム屑をエチルエーテル中に添加し、臭化物を滴下し、１ｈ反応させた後に、化合物１６を添加し、カラム分離で化合物１７を取得する。化合物１７をＤＣＭ中に溶解させ、ＰＣＣを添加し、カラムクロマトグラフィー分離で化合物１８を取得する。化合物１８をＤＣＭ中に添加し、−７８℃でＢＢｒ３を添加し、徐々に２５℃まで昇温させ、２５℃で１４ｈ反応させ、カラムクロマトグラフィー分離でＶＩｂを取得する。
【００５７】
ルート７：
【化３１】
2019500322.tif 000033
【００５８】
ｎは、５〜１０であり、
臭化物をトルエン中に溶解させ、トリフェニルホスフィンを添加し、１２０℃で１４ｈ反応させて化合物１９を取得する。化合物１９をＤＭＳＯ／Ｈ２Ｏ（１０：１）中に溶解させ、１３０℃で３ｈ反応させ、カラムクロマトグラフィー分離で化合物２０（Ｚ及びＥ二種類の構造の混合物である）を取得する。化合物２０をＤＣＭ中に溶解させ、−７８℃でＢＢｒ３を添加し、徐々に２５℃まで昇温させ、２５℃で１４ｈ反応させ、カラムクロマトグラフィー分離でＶＩｃ（Ｚ及びＥ二種類の構造の混合物である）を取得する。
【００５９】
ルート８：
【化３２】
2019500322.tif 000034
【００６０】
ｎは、５〜１０であり、
化合物２０の製造は、ルート７と同じであり、化合物２０（Ｚ及びＥの二種類の構造の混合物である）をエタノール中に溶解させ、Ｐｄ／Ｃを添加し、Ｈ２雰囲気で１６ｈ反応させ、カラムクロマトグラフィー分離で化合物２１を取得する。化合物２１をＤＣＭ中に溶解させ、−７８℃でＢＢｒ３を添加し、徐々に２５℃まで昇温させ、２５℃で１４ｈ反応させ、カラムクロマトグラフィー分離でＶＩｄを取得する。
【００６１】
ルート９：
【化３３】
2019500322.tif 000035
【００６２】
Ｒ４は、水素又はＣ１−Ｃ３アルキルであり、
ｎは、１〜４であり、
Ｎａをエタノール中に溶解させ、化合物２２及び化合物２３を添加し、８０℃で１６ｈ反応させ、反応液を濃縮させ、少量の水を添加し、ｐＨを酸性まで調整すると、白色固体が析出され、濾過させると、化合物２４である白色固体が取得される。また化合物２４をＥｔＯＨ／Ｈ２Ｏ中に溶解させ、ＫＩ、ＫＯＨ及び臭化物を添加し、８０℃で６ｈ反応させ、濃縮させて、カラムクロマトグラフィー分離でＩＶｃを取得する。
【００６３】
ルート１０：
【化３４】
2019500322.tif 000036
【００６４】
Ｒ２は、アミノ、ヒドロキシ又はメチルであり、
ｎは、１〜４であり、
Ｚは、−ＯＨ、−ＮＨ２、＝Ｏ、＝Ｓ又はＣ１−Ｃ６アルキルカルボニルであり、
Ｎａをエタノール中に溶解させ、化合物２６及び化合物２５を添加し、８０℃で１６ｈ反応させ、反応液を濃縮させ、少量の水を添加し、ｐＨを酸性まで調整すると、白色固体が析出され、濾過させると、ＩＶｄである白色固体が取得される。
【００６５】
ルート１１：
【化３５】
2019500322.tif 000037
【００６６】
ｎは、１〜４であり、
Ｒ４は、水素又はメチルであり、
Ｎａをエタノール中に溶解させ、化合物２７及び化合物２３を添加し、８０℃で１６ｈ反応させ、反応液を濃縮させ、少量の水を添加し、ｐＨを酸性まで調整すると、白色固体が析出され、濾過させると、化合物２６−１である白色固体が取得される。また化合物２６−１をＥｔＯＨ／Ｈ２Ｏ中に溶解させ、ＫＩ、ＫＯＨ及び臭化物を添加し、８０℃で６ｈ反応させ、濃縮させて、カラムクロマトグラフィー分離でＩＶｄ−１を取得する。
【００６７】
ルート１２：
【化３６】
2019500322.tif 000038
【００６８】
Ｒ６ｃは、Ｃ１〜Ｃ６アルキル又はベンジルであり、
Ｘは、Ｉ又はＢｒであり、
化合物ＬＹ２２８−６ａをトルエン中に溶解させ、Ｋ２ＣＯ３を添加し、０℃でＲ６ｃＸを添加し、１１０℃で１２ｈ回流させ、濃縮とカラムクロマトグラフィーでＩＶｅを取得する。
【００６９】
ルート１３：
【化３７】
2019500322.tif 000039
【００７０】
ｎは、１〜９であり、
化合物２６をアセトニトリル中に溶解させ、０℃で塩酸グアニジン、トリエチルアミンを添加し、室温に移動して３０ｍｉｎ攪拌し、無水フタル酸を添加して、１６ｈ加熱回流させ、反応液を濃縮させ、ＤＣＭを添加し、濾過して濾過残渣を除去し、濾過液は５％アンモニア水で洗浄され、有機相を濃縮し、乾燥させて、化合物２７を取得する。化合物２７をＴＨＦ中に溶解させ、０℃でゆっくりＫＨＭＤＳを滴下し、５分間攪拌し、ヨードメタンを添加し、ＴＬＣで反応が完了したことが監視された後に、反応を終了させ、濃縮とカラム分離で化合物２８を抽出する。ＮＨ４Ｃｌを無水トルエン中に添加し、Ｎ２保護下で、０℃下でゆっくりトリメチルアルミニウムを滴下し、メタンガスが放出しない時にゆっくりトルエンで溶解された化合物２８を滴下し、８０℃で１５ｈ攪拌した後に、室温まで冷却し、少量のシリカゲルを添加し、１０分間攪拌した後、濾過し、濾過液を濃縮し、メタノール塩酸塩を添加して、１２ｈ攪拌し、濃縮すると粗生成物２９が取得される。Ｎａをメタノール中に溶解させ、粗生成物２９及び化合物２２−１を添加して、１２ｈ加熱回流させ、濃縮し、固体が溶解されるまで少量の水を添加し、またｐＨを酸性まで調節して白色固体を析出させ、濾過させ、濾過残渣をカラム分離するとＩＶｆが取得される。
【００７１】
ルート１４：
【化３８】
2019500322.tif 000040
【００７２】
ｎは、１〜９であり、
マグネシウム屑をエチルエーテル中に添加し、臭化物を滴下し、１ｈ反応させた後、化合物３０を添加し、カラム分離で化合物３１を取得する。また、それをＮａＯＣＨ３／ＭｅＯＨ中に溶解させ、１６ｈ加熱回流させると、化合物３２が取得される。３２をＤＣＭ中に溶解させ、−７８℃でＢＢｒ３を滴下し、ゆっくり２５℃まで昇温させ、１２ｈ反応させ、ＴＬＣで反応が完了したことが監視された後に、反応を終了させ、カラムで分離するとＶＩＩが取得される。
【００７３】
ルート１５：
【化３９】
2019500322.tif 000041
【００７４】
Ｒ７ｃは、メチル又はイソプロピルであり、
ｎは、６〜１２であり、
化合物１１をＴＨＦ中に溶解させ、０℃でＮａＨを添加し、１０分間攪拌した後にｎ−ＢｕＬｉを添加し、１０分間攪拌した後に、また臭化物を添加し、０℃で１４ｈ反応させ、カラムクロマトグラフィーで分離すると化合物１２が取得される。化合物２３を水中に添加し、７０℃で攪拌して化合物２３が全部溶解された後に、Ｋ２ＣＯ３及び化合物１２を添加し、１０５℃でオープン状態で反応させて、溶媒が完全に蒸発した後に、加熱を停止し、室温まで冷却させ、水を入れて固体を溶解させると、溶液は白色ミルキーを呈し、塩酸（１Ｎ）を添加してｐＨを酸性まで調整すると、白色粘着性固体が析出され、上清液を排出し、固体を水（５ｍｌ）で三回洗い、またカラムクロマトグラフィーで分離するとＶＩＩＩａが取得される。化合物３３を少量の水中に溶解させ、またＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（５：２）で溶解されたＶＩＩＩａをゆっくり滴下し、６ｈ加熱回流させた後、塩酸を添加して、１２ｈ回流させ、濃縮及びカラム分離を行うとＶＩＩＩｂが取得される。
【００７５】
ルート１６：
【化４０】
2019500322.tif 000042
【００７６】
ｎは、１〜４であり、
化合物３４をＴＨＦ中に溶解させ、ジカルボニルイミダゾールと反応して化合物３５を生成する。ヘキサメチルシランをＴＨＦ中に溶解させ、−７８℃でＮ−ブチルリチウムを滴下してヘキサメチルシリルリチウムを製造した後、またジエチル亜鉛及び化合物３５、３６を添加して、反応させ、カラムクロマトグラフィー分離で化合物３７が取得される。また、化合物３７をエタノール中に溶解させ、酢酸アンモニウムを添加し、２５℃で３ｈ反応させた後に、濃縮しトルエンを添加して３ｈ回流させ、カラムクロマトグラフィー分離で黄色固体ＶＩＩＩが取得される。
【００７７】
ルート１７：
【化４１】
2019500322.tif 000043
【００７８】
化合物３８をエタノール中に溶解させ、アミンを添加し、１００℃で１６ｈ回流させて、化合物３９が取得される。Ｎａをメタノール中に溶解させ、粗生成物化合物３９及びマロン酸ジエチルを添加して、１２ｈ加熱回流させ、濃縮し、固体が溶解されるまで少量の水を添加し、またｐＨを酸性まで調節して白色固体を析出させ、濾過させ、濾過残渣をカラム分離するとＩＸが取得される。
【００７９】
以下、具体的な実施例を参照して、本発明についてさらなる説明を行うが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
【００８０】
＜化合物製造実施例＞
下記製造実施例において、ＮＭＲはＶａｒｉａｎで生産されたＭｅｒｃｕｒｙ−Ｖｘ  ３００Ｍ機器で測定され、ＮＭＲキャリブレーション：δＨ７．２６ｐｐｍ（ＣＤＣｌ３）、２．５０ｐｐｍ（ＤＭＳＯ−ｄ６）、３．１５ｐｐｍ（ＣＤ３ＯＤ）である。試薬は主に上海化学試薬会社から提供された。ＴＬＣ薄層クロマトグラフィーシリカゲルプレートは、山東煙台会友シリカゲル開発有限会社で生産されたものであって、モデル番号はＨＳＧＦ  ２５４である。化合物の精製に使用された順相カラムクロマトグラフィーシリカゲルは、山東青島海洋化学工場支店で生産されたものであって、モデル番号はｚｃｘ−１１であり、２００−３００メッシュである。
【００８１】
製造実施例１（化合物番号ＬＹ２１４−５）
【化４２】
2019500322.tif 000044
【００８２】
化合物１（１００ｍｇ，０．６９ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）をＥｔＯＨ／Ｈ２Ｏ（１０ｍｌ／５ｍｌ）中に溶解させ、ＫＩ（１１．３ｍｇ，０．０６９ｍｍｏｌ，０．１ｅｑ）を添加し、またゆっくり２−１（３１０ｍｇ，０．２６ｍｌ，３．０ｅｑ）を添加して、８０℃で６ｈ反応させ、ＴＬＣで反応を監視し、反応が終了した後に、希塩酸（１Ｍ，１０ｍｌ）を添加し、またＥＡ（１５ｍｌ）を添加して、三回抽出し、有機相を組み合わせて、飽和食塩水で洗浄され、乾燥、濾過、濃縮及びカラムクロマトグラフィー分離（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝３０：１）を経て、ＬＹ２１４−５（白色固体，１２ｍｇ，８％）が取得される。（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１２．１（ｓ，２Ｈ），５．１１（ｓ，１Ｈ），３．０８（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ），１．６１（ｍ，２Ｈ），１．３６（ｍ，２Ｈ），１．２８（ｍ，２Ｈ），０．８７（ｔ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ）。
【００８３】
同じ方法で、以下の化合物を合成する。
【００８４】
【表１】
2019500322.tif 000045
【００８５】
【表２】
2019500322.tif 000046
【００８６】
【表３】
2019500322.tif 000047
【００８７】
製造実施例２（化合物番号ＬＹ２２４−ａ）
【化４３】
2019500322.tif 000048
【００８８】
３−１（０．１ｍｌ，１．０２ｍｍｏｌ，１ｅｑ）を無水ＤＣＭ（５ｍｌ）中に溶解させ、ピリジン（１０４ｍｇ，１．３ｍｍｏｌ，１．３ｅｑ）を添加した後０℃まで冷却させ、無水ＤＣＭ（５ｍｌ）で溶解されたＴｓＣｌ（２１４ｍｇ，１．１２ｍｍｏｌ，１．１ｅｑ）をゆっくり滴下し、２０℃まで昇温させ、１２ｈ攪拌した後、ＴＬＣで反応を監視し、反応が終了した後、濃縮とカラムクロマトグラフィー分離（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝３０：１）を経て４−１（無色油状液体，１４５ｍｇ，５６％）が取得される。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．８０（ｄ，Ｊ＝５．１Ｈｚ，２Ｈ），７．３４（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，２Ｈ），４．０５（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），２．５０（ｍ，２Ｈ），２．４５（ｓ，３Ｈ），２．０８（ｍ，２Ｈ），１．０６（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ）。
【００８９】
化合物１（６７ｍｇ，０．４７ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）をＥｔＯＨ／Ｈ２Ｏ（１０ｍｌ／５ｍｌ）中に溶解させ、４−１（１４５ｍｇ，０．５２ｍｍｏｌ，１．１ｅｑ）をゆっくり添加し、８０℃で６ｈ反応させ、ＴＬＣで反応を監視し、反応が終了した後、希塩酸（１Ｍ，１０ｍｌ）を添加し、またＥＡ（１５ｍｌ）を添加して、三回抽出し、有機相を組み合わせて、飽和食塩水で洗浄し、乾燥、濾過、濃縮及びカラムクロマトグラフィー分離（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝３０：１）を経て、ＬＹ２２４−ａ（白色固体，４４ｍｇ，４２％）が取得される。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ１１．３６（ｓ，１Ｈ），５．１２（ｓ，１Ｈ），３．１８（ｔ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，２Ｈ），２．５２−２．５５（ｍ，２Ｈ），２．２１−２．０３（ｍ，２Ｈ），１．０３（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ）。
【００９０】
製造実施例３（化合物番号ＬＹ２２４−ｂ）
【化４４】
2019500322.tif 000049
【００９１】
Ｎａ（２５０ｍｇ）をエタノール（８ｍｌ）中に溶解させ、５（５００ｍｇ，４．９ｍｍｏｌ，１ｅｑ）を添加し、固体が溶解された後、ゆっくりエタノール（５ｍｌ）で溶解された６−１（１．１ｇ，５．８９ｍｍｏｌ，１．２ｅｑ）を滴下すると、白色固体が析出され、３ｈ加熱回流させて、冷却、濾過を行い、濾過液を取って、濾過液を濃縮させ、３ｍｌのＨ２Ｏを入れて固体を溶解させ、ＰＨが３〜５になるまでゆっきり希塩酸（２Ｍ）を滴下すると、白色固体が析出され、濾過させて、濾過残渣を取り、５ｍｌメタノールを添加して、１ｈ攪拌し、濾過させて、濾過残渣を取って、乾燥させるとＬＹ２２４−ｂ（白色固体，１．０ｇ，９１％）が取得される。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ１１．６４（ｓ，２Ｈ），５．０２（ｓ，１Ｈ），２．５２（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），１．６２（ｑ，Ｊ＝６．６Ｈｚ  ２Ｈ），１．２５（ｍ，１０Ｈ），０．８４（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ）。
【００９２】
同じ方法で、以下の化合物を合成する。
【００９３】
【表４】
2019500322.tif 000050
【００９４】
【表５】
2019500322.tif 000051
【００９５】
製造実施例４（化合物番号ＬＹ２４４）
【化４５】
2019500322.tif 000052
【００９６】
【化４６】
2019500322.tif 000053
【００９７】
７−１（０．５ｍｌ，３．６８ｍｍｏｌ，１ｅｑ）を無水ＤＣＭ（２０ｍｌ）中に溶解させ、トリフェニルホスフィン（１．２ｇ，４．４１ｍｍｏｌ，１．２ｅｑ）、四臭化炭素（１．４ｇ，４．４１ｍｍｏｌ，１．２ｅｑ）を添加し、２０℃で１２ｈ攪拌し、ＴＬＣで反応が完了したことを監視した後に、反応液を濃縮させ、カラムクロマトグラフィー分離（純粋なＰＥ）を経て８−１（無色油状液体，３１０ｍｇ，５９％）が取得される。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．８０（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，２Ｈ），７．３４（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，２Ｈ），４．０５（ｓ，２Ｈ），２．５０（ｍ，２Ｈ），２．４５（ｑ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，３Ｈ），２．０８（ｍ，２Ｈ），１．０６（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ）。
【００９８】
マロン酸ジエチル（９１ｍｇ，０．６３ｍｍｏｌ，１ｅｑ）をＴＨＦ（１０ｍｌ）中に溶解させ、−７８℃まで冷却させ、ＮａＨ（１９．７ｍｇ，０．８２ｍｍｏｌ，１．１ｅｑ）を添加して、１０分間攪拌した後、ゆっくり８−１（１００ｍｇ，０．６９ｍｍｏｌ，１．１ｅｑ）を滴下し、徐々に２０℃まで昇温させ、１２ｈ攪拌し、ＴＬＣで反応が完了したことを監視した後に、水（５ｍｌ）を添加して反応を終了させ、ＥＡ（１０ｍｌ）で三回抽出し、また水（５ｍｌ）を添加して二回逆抽出し、有機相を組み合わせて、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過及びカラムクロマトグラフィーで分離すると９−１（無色油状液体，５２ｍｇ，４１％）が取得される。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．１０（ｍ，４Ｈ），４．２５−４．１０（ｍ，４Ｈ），３．６７（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，１Ｈ），３．１７（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，２Ｈ），２．６０（ｑ，Ｊ＝１３．８Ｈｚ，２Ｈ），１．２７（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ），１．２０（ｔ，Ｊ＝７．２，６Ｈ）．
【００９９】
９−１（１３０ｍｇ，０．６３ｍｍｏｌ，１ｅｑ）をＤＭＳＯ（２ｍｌ）中に溶解させ、ＮａＣｌ（７４ｍｇ，１．２６ｍｍｏｌ，２ｅｑ）を添加して、１６０℃で３ｈ加熱させ、水（５ｍｌ）を添加しＥＡ（５ｍｌ）を添加して三回抽出し、また水（５ｍｌ）を添加して三回逆抽出し、有機相を組み合わせて，飽和食塩水で洗浄し，無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過及びカラムクロマトグラフィー分離を経て１０−１（無色油状液体，５６ｍｇ，４３％）が取得される。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．１２（ｍ，４Ｈ），４．１４（ｑ，Ｊ＝１４．４Ｈｚ，２Ｈ），２．９１（ｔ，Ｊ＝８．４  Ｈｚ，２Ｈ），２．５９（ｔ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），２．５４（ｑ，Ｊ＝１３．８Ｈｚ，２Ｈ），１．２８（（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ），１．２２（（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ）。
【０１００】
Ｎａ（２５０ｍｇ）をエタノール（８ｍｌ）中に溶解させ、２（２１２ｍｇ，２．０８ｍｍｏｌ，１．１ｅｑ）を添加し、固体が溶解された後、エタノール（５ｍｌ）で溶解された１０−１（３９０ｍｇ，１．８９ｍｍｏｌ，１ｅｑ）をゆっくり滴下すると、白色固体が析出され、３ｈ加熱回流させて、冷却、濾過を行い、濾過液を取って、濾過液を濃縮させ、３ｍｌのＨ２Ｏを入れて固体を溶解させ、ＰＨが３〜５になるまでゆっきり希塩酸（２Ｍ）を滴下すると、白色固体が析出され、濾過させて、濾過残渣を取り、５ｍｌメタノールを添加して、１ｈ攪拌し、濾過させて、濾過残渣を取って、乾燥させるとＬＹ２４４（白色固体，１４７ｍｇ，３５％）が取得される。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ１１．５０（ｓ，２Ｈ），７．１２（ｍ，４Ｈ），５．０６（ｓ，１Ｈ），２．９５−２．８８（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），２．７８−２．６９（ｔ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，２Ｈ），２．６０−２．５３（ｑ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），１．１５（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ）。
【０１０１】
製造実施例５（化合物番号ＬＹ２３７、ＬＹ２３８−ｄ）
【化４７】
2019500322.tif 000054
【０１０２】
１１（１ｍｌ，７．７ｍｍｏｌ，１ｅｑ）を無水ＴＨＦ（２０ｍｌ）中に溶解させ、０℃まで冷却させ、ＮａＨ（２０３ｍｇ，８．５ｍｍｏｌ，１．１ｅｑ）を添加して、５分間攪拌し、またＮ−ブチルリチウム（５．３ｍｌ，８．５ｍｍｏｌ，１．６Ｍ，１．１ｅｑ）を添加して、五分間攪拌し、また臭化物（１．３ｍｌ，７．７ｍｍｏｌ，１ｅｑ）を添加して、０℃で１２ｈ攪拌すると、溶液が黄色ミルキー液体になり、ＴＬＣで反応が完了したことを監視した後に、水（１０ｍｌ）を添加して反応を終了させ、ＥＡ（１０ｍｌ）で三回抽出し、有機相を組み合わせて、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過及びカラムクロマトグラフィー分離を経て１２−１（黄色油状液体，６４７ｍｇ，３４％）が取得される。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ４．１９（ｑ，Ｊ＝１５Ｈｚ，２Ｈ），３．４２（ｓ，２Ｈ），２．５３（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），１．２８（ｍ，１４Ｈ），０．８７（ｔ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ）．１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ１２．５３（ｓ，１Ｈ），３．４３（ｓ，２Ｈ），２．３９（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），１．２３（ｍ，１４Ｈ），０．８５（ｔ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ）。
【０１０３】
１２−１（６４７ｍｇ，２．６７ｍｍｏｌ，１ｅｑ）をＥｔＯＨ／Ｈ２Ｏ（１０／１０ｍｌ）に溶解させ、ＮａＯＨ（１３９ｍｇ，３．４７ｍｍｏｌ，１．３ｅｑ）を添加して、２０℃で１２ｈ攪拌し、ＥＡ（１０ｍｌ）を添加して二回洗浄し、水相を取って、希塩酸（１Ｍ）を添加してＰＨを３〜５に調整すると、白色固体が析出され、濾過し、真空乾燥すると、１３−１（白色固体，４１０ｍｇ，７２％）が取得される。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ１２．５３（ｓ，１Ｈ），３．４３（ｓ，２Ｈ），２．３９（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），１．２３（ｍ，１４Ｈ），０．８５（ｔ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ）。
【０１０４】
１３−１（１００ｍｇ，０．４７ｍｍｏｌ，１ｅｑ）を無水ＴＨＦ（１０ｍｌ）中に溶解させ、カルボニルジイミダゾール（１０６ｍｇ，０．６５ｍｍｏｌ，１．４ｅｑ）を添加して、２０℃で１２ｈ攪拌し、Ｈ２Ｏ（１０ｍｌ）及びＥＡ（１０ｍｌ）を添加して三回抽出し、有機相を組み合わせて濃縮させ、メタノール（３ｍｌ）を添加して、静置させると、白色針状結晶体が析出され、濾過すると１４−１（白色針状結晶，２８ｍｇ，１６％）が取得される。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１２．３０（ｓ，１Ｈ），５．９１（ｓ，１Ｈ），３．０７（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），２．４７ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，２Ｈ），１．６５（ｍ，４Ｈ），１．２６（ｍ，２４Ｈ），０．８８（ｔ，Ｊ＝６．７，５．７Ｈｚ，６Ｈ）。
【０１０５】
１４−１（１４ｍｇ，０．０３７ｍｍｏｌ，１ｅｑ）を９０％のＨ２ＳＯ４（５ｍｌ）中に溶解させ、１３０℃で１ｈ攪拌し、ＥＡ（５ｍｌ）を添加して抽出し、濃縮及びクロマトグラフィー分離を経てＬＹ２３８−ｄ（白色固体，６ｍｇ，６７％）が取得される。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ５．９６（ｓ，１Ｈ），５．５７（ｓ，１Ｈ），５．３０（ｓ，１Ｈ），２．４６（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），１．６２（ｍ，２Ｈ），１．２６（ｍ，１２Ｈ），０．８７（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ）。
【０１０６】
ＬＹ２３８−ｄ（２６ｍｇ，０．１ｍｍｏｌ，１ｅｑ）を３０％アンモニア水（５ｍｌ）中に溶解させ、１００℃で１４ｈ回流させ、希塩酸（１Ｍ）を添加してＰＨを３〜４に調整すると、白色固体が析出され、濾過、乾燥すると、ＬＹ２３７（白色固体，２０ｍｇ，８３％）が取得される。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ１０．８５（ｓ，１Ｈ），１０．２７（ｓ，１Ｈ），５．５８（ｓ，１Ｈ），５．３３（ｓ，１Ｈ），２．３３（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），１．５１（ｑ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ），１．２４（ｍ，１２Ｈ），０．８５（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，３Ｈ）。
【０１０７】
同じ方法で、以下の化合物製造する。
【０１０８】
【表６】
2019500322.tif 000055
【０１０９】
製造実施例６（化合物番号ＬＹ２５０）
【化４８】
2019500322.tif 000056
【０１１０】
マグネシウム屑（５８ｍｇ，２．４ｍｍｏｌ，２ｅｑ）を無水エチルエーテル（５ｍｌ）中に添加し、窒素雰囲気でブロモヘプタン（２３１ｍｇ，１．２ｍｍｏｌ，１ｅｑ）をゆっくり滴下し、５０℃で４５分間回流反応させ、また無水エチルエーテル（１０ｍｌ）で溶解された１６（２００ｍｇ，１．２ｍｍｏｌ，１ｅｑ）を添加し、滴下が完了した後、５０℃で３ｈ回流させ、ＴＬＣで反応が完了したことを監視した後に、ゆっくり水（５ｍｌ）を滴下して反応を終了させ、ＥＡ（１０ｍｌ）を添加して三回抽出し、有機相を組み合わせて、飽和食塩水で洗浄し、乾燥、濃縮を行い、カラムクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥＡ＝１０：１）で分離すると１７−１（無色油状液体，２００ｍｇ，６０％）が取得される。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ６．５１（ｄ，Ｊ＝２．１Ｈｚ，２Ｈ），６．３７（ｔ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），４．６４−４．５４（ｍ，１Ｈ），３．７８（ｓ，６Ｈ），１．５７（ｍ，２Ｈ），１．２６（ｍ，１２Ｈ），０．８５（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ）。
【０１１１】
１７−１（２２０ｍｇ，０．７９ｍｍｏｌ，１ｅｑ）を無水ＤＣＭ（１０ｍｌ）中に添加し、ＰＣＣ（５０７ｍｇ，２．３６ｍｍｏｌ，３ｅｑ）及びシリカゲル（８８０ｍｇ）を添加して、２０℃で１４ｈ反応させ、ＴＬＣ反応が完了したことを監視した後に、濾過、濃縮を行い、カラムクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥＡ＝１０：１）で分離すると１８−１（白色固体，１６１ｍｇ，７３％）が取得される。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．０９（ｄ，Ｊ＝２．１Ｈｚ，２Ｈ），６．６３（ｔ，Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ），３．８３（ｓ，６Ｈ），２．８７（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），１．７７−１．６２（ｍ，２Ｈ），１．３０（ｍ，１２Ｈ），０．８８（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ）。
【０１１２】
１８−１（１５７ｍｇ，０．５６ｍｍｏｌ，１ｅｑ）を無水ＤＣＭ（５ｍｌ）中に添加し、−７８℃まで冷却し、ゆっくり三臭化ホウ素（２Ｍ  ０．８５ｍｌ，１．６８ｍｍｏｌ，３ｅｑ）を滴下し、徐々に２０℃まで昇温させ、１４ｈ攪拌し、ＴＬＣで反応が完了したことを監視した後に、ゆっくり水（５ｍｌ）を滴下して反応を終了させ、ＥＡ（１０ｍｌ）を添加して三回抽出し、有機相を組み合わせて、飽和食塩水で洗浄し、乾燥、濃縮を行い、カラムクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥＡ＝３：１）で分離するとＬＹ２５０（無色油状液体，１００ｍｇ，７１％）が取得される。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ｃｄ３ｏｄ）δ６．８７（ｄ，Ｊ＝２．１Ｈｚ，２Ｈ），６．４７（ｍ，１Ｈ），２．９０（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），１．６６（ｍ，２Ｈ），１．３２（ｍ，１０Ｈ），０．８９（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ）。
【０１１３】
製造実施例７（化合物番号ＬＹ２３４）
【化４９】
2019500322.tif 000057
【０１１４】
ブロモオクタン（１ｍｌ，５ｍｍｏｌ，１ｅｑ）をトルエン（２０ｍｌ）中に溶解させ、トリフェニルホスフィン（１．６ｇ，６ｍｍｏｌ，１．２ｅｑ）を添加して、１２０℃で１２ｈ回流させ、反応液を濃縮させ、Ｎ−ヘキサン（２０ｍｌ）を添加すると、白色粘着性固体が析出され、液体を除去し、ＰＥ／ＥＡ（２０ｍｌ／１０ｍｌ）を添加して三回洗浄し、液体を除去し、真空で乾燥すると、１９−１粗生成物が取得され、これは後のステップで直接に投入できる。
【０１１５】
１９−１（４６０ｍｇ，１．０１ｍｍｏｌ，１．２ｅｑ）をＤＭＳＯ／Ｈ２Ｏ（５ｍｌ／０．５ｍｌ）中に溶解させ、１８（１３９ｍｇ，０．８４ｍｍｏｌ，１ｅｑ）、炭酸カリウム（２３２ｍｇ，１．６８ｍｍｏｌ，２ｅｑ）を添加して、１３０℃で１２ｈ回流させ、ＴＬＣで反応が完了したことを監視した後に、ＥＡ（５ｍｌ）を添加して三回抽出し、有机相はＨ２Ｏ（５ｍｌ）で三回逆抽出し、有機相を組み合わせて、飽和食塩水で洗浄し、乾燥、濃縮を行い、カラムクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥＡ＝５０：１）で分離すると２０−１（無色油状液体，２３０ｍｇ，８９％）が取得される。（Ｅ／Ｚ＝１．２）Ｅ  １Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ６．５０（ｄ，Ｊ＝２．１Ｈｚ，２Ｈ），６．３４（ｔ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），６．３１（ｄ，Ｊ＝１５．６Ｈｚ，１Ｈ），６．２８（ｍ，１Ｈ），３．７９（ｓ，３Ｈ），２．１９（ｑ，Ｊ＝１３．２Ｈｚ，２Ｈ），１．４４（ｍ，２Ｈ），１．２８（ｍ，８Ｈ），０．８８（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，４Ｈ）。Ｚ  １Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ６．４３（ｄ，Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ），６．２３（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，１Ｈ），６．３４（ｄ，Ｊ＝１１．４Ｈｚ，１Ｈ），５．６７（ｍ，１Ｈ），３．７９（ｓ，３Ｈ），２．３３（ｑ，Ｊ＝１４．１Ｈｚ，２Ｈ），１．４４（ｍ，２Ｈ），１．４４（ｍ，２Ｈ），１．２８（ｍ，８Ｈ），０．８８（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，４Ｈ）。
【０１１６】
２０−１（４７６ｍｇ，１．８ｍｍｏｌ，１ｅｑ）を無水ＤＣＭ（１０ｍｌ）中に溶解させ、−７８℃まで冷却し、ゆっくり三臭化ホウ素（２Ｍ  ２．７ｍｌ，５．４ｍｍｏｌ，３ｅｑ）を滴下し、徐々に２０℃まで昇温させ、１４ｈ攪拌し、ＴＬＣで反応が完了したことを監視した後に、ゆっくり水（１０ｍｌ）を滴下して反応を終了させ、ＥＡ（１５ｍｌ）を添加して三回抽出し、有機相を組み合わせて、飽和食塩水で洗浄し、乾燥、濃縮を行い、カラムクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥＡ＝３：１）で分離するとＬＹ２３４（黄色油状液体，３２０ｍｇ，７６％）が取得される。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）Ｅδ６．４８−６．３０（ｍ，３Ｈ），６．３０−６．０９（ｍ，２Ｈ），２．１６（ｍ，２Ｈ），１．４２（ｍ，１０Ｈ），０．９３（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ）。Ｚδ６．４８−６．３０（ｍ，３Ｈ），６．３５（ｍ，１Ｈ），５．６３（ｍ，１Ｈ），２．２９（ｍ，２Ｈ），１．４２（ｍ，１０Ｈ），０．９３（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ）。
【０１１７】
製造実施例８（化合物番号ＬＹ２３６）
【化５０】
2019500322.tif 000058
【０１１８】
１９−１、２０−１の製造は、製造実施例７と同じである。
【０１１９】
２０−１（１００ｍｇ，０．３８ｍｍｏｌ）をＥｔＯＨ（１０ｍｌ）中に添加し、Ｐｄ／Ｃ（１０ｍｇ）を添加して、水素ガス雰囲気で２０℃で１４ｈ反応させ、ＴＬＣで反応が完了したことが監視された後に、窒素で置換し、濾過させ、濾過液を濃縮し、カラムクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥＡ＝５０：１）で分離すると２１（無色油状液体，５４ｍｇ，５４％）が取得される。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ６．３５（ｄ，Ｊ＝２．１Ｈｚ，２Ｈ），６．３１−６．２８（ｔ，Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ），３．７８（ｓ，６Ｈ），２．５４（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），１．５８（ｍ，４Ｈ），１．２８（ｍ，６Ｈ），０．８８（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ）。
【０１２０】
２１（２６４ｍｇ，０．１９ｍｍｏｌ，１ｅｑ）を無水ＤＣＭ（５ｍｌ）中に溶解させ、−７８℃まで冷却し、ゆっくり三臭化ホウ素（２Ｍ  ０．２７ｍｌ，０．５４ｍｍｏｌ，３ｅｑ）を滴下し、徐々に２０℃まで昇温させ、１４ｈ攪拌し、ＴＬＣで反応が完了したことが監視された後に、ゆっくり水（５ｍｌ）を滴下して反応を終了させ、ＥＡ（１０ｍｌ）を添加して三回抽出し、有機相を組み合わせて、飽和食塩水で洗浄し、乾燥、濃縮を行い、カラムクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥＡ＝３：１）で分離するとＬＹ２３６（黄色固体，１６ｍｇ，７０％）が取得される。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ６．２４（ｄ，Ｊ＝２．１Ｈｚ，２Ｈ），６．２２−６．１３（ｍ，１Ｈ），４．７３（ｓ，２Ｈ），２．４８（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，２Ｈ），１．５６（ｍ，２Ｈ），１．２６（ｍ，１２Ｈ），０．８８（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ）。
【０１２１】
製造実施例９（化合物番号ＬＹ２９０−ｂ）
【化５１】
2019500322.tif 000059
【０１２２】
１．２ｇ  Ｎａをゆっくり１７ｍｌメタノール中に溶解させ、Ｎａ反応が終了した後、メタノール（１７ｍｌ）で溶解された２３（３．８ｇ，０．０５ｍｏｌ，１ｅｑ）を添加し、また２２−２（８．７ｇ，０．０５ｍｏｌ，１ｅｑ）を添加すると、白色固体が析出され、１６ｈ加熱回流させ、５０℃まで冷却させ、塩酸（１Ｍ，２５ｍｌ）を添加してＰＨを酸性に調整すると、白色固体は徐々に溶解され、濾過して不溶解固体を除去し、０℃まで冷却して、１２ｈ静置すると、結晶体が析出され、濾過し、固体を氷水で洗浄し、乾燥すると、２４−１（２．０８ｇ，白色固体，２６．３％）が取得される。
【０１２３】
化合物２４−１（１００ｍｇ，０．６０ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）をＥｔＯＨ／Ｈ２Ｏ（１０ｍｌ／５ｍｌ）中に溶解させ、ＫＩ（１１．３ｍｇ，０．０６９ｍｍｏｌ，０．１ｅｑ）を添加し、またゆっくり２５−１（３８１ｍｇ，１．８０ｍｍｏｌ，３．０ｅｑ）を添加して、８０℃で６ｈ反応させ、ＴＬＣで反応を監視し、反応が終了した後、希塩酸（１Ｍ，１０ｍｌ）を添加し、またＥＡ（１５ｍｌ）を添加して三回抽出し、有機相を組み合わせて、飽和食塩水で洗浄し、乾燥、濾過、濃縮及びカラムクロマトグラフィー分離（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝３０：１）を経てＬＹ２９０−ｂ（白色固体，１７ｍｇ，９．８％）を取得する。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ１１．３１（ｓ，２Ｈ），７．２６（ｍ，Ｊ＝７．２，２Ｈ），７．２１−７．１１（ｍ，３Ｈ），３．１３（ｔ，Ｊ＝６．６，２Ｈ），２．５９（ｍ，２Ｈ），１．７１（ｓ，３Ｈ），１．６９−１．６０（ｍ，４Ｈ）。
【０１２４】
製造実施例１０（化合物番号ＬＹ２７４−ａ）
【化５２】
2019500322.tif 000060
【０１２５】
化合物２６−２（１００ｍｇ，０．７０ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）をＥｔＯＨ／Ｈ２Ｏ（１０ｍｌ／５ｍｌ）中に溶解させ、ＫＩ（１１．６ｍｇ，０．０７ｍｍｏｌ，０．１ｅｑ）を添加し、またゆっくり２５−１（４４５ｍｇ，２．１ｍｍｏｌ，３．０ｅｑ）を添加して、８０℃で６ｈ反応させ、ＴＬＣで反応を監視、反応完了後に希塩酸（１Ｍ，１０ｍｌ）を添加し、またＥＡ（１５ｍｌ）を添加して三回抽出し、有機相を組み合わせて、飽和食塩水で洗浄し、乾燥、濾過、濃縮及びカラムクロマトグラフィー分離（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝３０：１）を経てＬＹ２７４−ａ（白色固体，１０ｍｇ，５．２％）を取得する。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ７．２６（ｍ，２Ｈ），７．１９（ｍ，３Ｈ），６．０２（ｓ，４Ｈ），５．１２（ｓ，１Ｈ），３．００（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ），２．５９（ｑ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ），１．６２（ｍ，４Ｈ）。
【０１２６】
同じ方法で、下記の化合物を取得する。
【０１２７】
【表７】
2019500322.tif 000061
【０１２８】
製造実施例１１（化合物番号ＬＹ３２８）
【化５３】
2019500322.tif 000062
【０１２９】
６００ｍｇ  Ｎａをゆっくり５ｍｌメタノール中に溶解させ、Ｎａ反応が終了した後、メタノール（５ｍｌ）で溶解された２３（７６０ｍｇ，０．０１ｍｏｌ，１ｅｑ）を添加し、また２７（２．００ｇ，０．０１ｍｏｌ，１ｅｑ）を添加すると、ブラウン色固体が析出され、１６ｈ加熱回流させ、５０℃まで冷却させ、塩酸（１Ｍ，２５ｍｌ）を添加してＰＨを酸性に調整すると、白色固体は徐々に溶解され、濾過して不溶解固体を除去し、０℃まで冷却して、１２静置すると、結晶体が析出され、濾過し、固体を氷水で洗浄し、乾燥すると、２６−１（１．００ｇ，白色固体，５１．０％）が取得される。
【０１３０】
化合物２６−１（１００ｍｇ，０．５０ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）をＥｔＯＨ／Ｈ２Ｏ（１０ｍｌ／５ｍｌ）中に溶解させ，ＫＩ（１１．３ｍｇ，０．０６９ｍｍｏｌ，０．１ｅｑ）を添加し、またゆっくり２５−１（３１８ｍｇ，１．５０ｍｍｏｌ，３．０ｅｑ）を添加して、８０℃で６ｈ反応させ、ＴＬＣで反応を監視し、反応が終了した後、希塩酸（１Ｍ，１０ｍｌ）を添加し、またＥＡ（１５ｍｌ）を添加して三回抽出し、有機相を組み合わせて、飽和食塩水で洗浄し、乾燥、濾過、濃縮及びカラムクロマトグラフィー分離（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝３０：１）を経てＬＹ３２８（白色固体，８０ｍｇ，６７．２％）を取得する。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ１３．５０（ｓ，１Ｈ），７．３２−７．２２（ｍ，２Ｈ），７．１７（ｍ，３Ｈ），６．５８（ｓ，１Ｈ），３．１６（ｔ，Ｊ＝９．６Ｈｚ，２Ｈ），２．６０（ｑ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ），１．６７（ｍ，４Ｈ）。
【０１３１】
製造実施例１２（化合物番号ＬＹ２４２）
【化５４】
2019500322.tif 000063
【０１３２】
ＬＹ２２８−６ａ（１００ｍｇ，０．４４ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）をトルエン中に溶解させ、Ｋ２ＣＯ３（１２０ｍｇ，０．８８ｍｍｏｌ，２．０ｅｑ）を添加し、０℃でゆっくりヨードメタン（６２．０４ｍｇ，０．４４ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）を滴下し、３ｈ回流させ、ＴＬＣで反応を監視し、反応完了後、反応液を濃縮させ、カラムクロマトグラフィー分離（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝３０：１）でＬＹ２４２（白色固体，２１ｍｇ，１９．８％）を取得する。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ１２．２４（ｓ，１Ｈ），３．３０（ｓ，３Ｈ），３．０９（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ），１．７８−１．５４（ｍ，２Ｈ），１．４４−１．３０（ｍ，２Ｈ），１．２５−１．２８（ｍ，４Ｈ），１．０１−０．７１（ｔ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，３Ｈ）。
【０１３３】
同じ方法で、下記の物質を製造する。
【０１３４】
【表８】
2019500322.tif 000064
【０１３５】
【表９】
2019500322.tif 000065
【０１３６】
製造実施例１３（化合物番号ＬＹ２３８−ｃ）
【化５５】
2019500322.tif 000066
【０１３７】
２６−１（２ｍｌ，１０ｍｍｏｌ，１ｅｑ）をアセトニトリル（２０ｍｌ）中に溶解させ、０℃で塩酸グアニジン（７６０ｍｇ，１１ｍｍｏｌ，１．１ｅｑ）、トリエチルアミン（１．６ｍｌ，１１ｍｍｏｌ，１．１ｅｑ）を添加し、室温に移動して３０ｍｉｎ攪拌し、無水フタル酸（１．５ｇ，１０．１ｅｑ，１．０１ｅｑ）を添加して、１６ｈ加熱回流させ、室温まで冷却して、反応液を濃縮させ、ＤＣＭ（１０ｍｌ）を添加し、攪拌して十分に溶解させ、濾過して濾過残渣を除去し、濾過液は５％アンモニア水（１０ｍｌ）で三回洗浄し、飽和食塩水（１０ｍｌ）で有機相を洗浄し、有機相を組み合わせて，濃縮、乾燥を行うと、２７−１（黄色油状液体，１．３５ｇ，９６％）が取得される。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ２．３３（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），１．７２−１．５９（ｍ，２Ｈ），１．４５（ｍ，２Ｈ），１．２９（ｓ，１０Ｈ），０．８７（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ）。
【０１３８】
２７−１（４８０ｍｇ，３．４６ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）をＴＨＦ（１０ｍｌ）中に溶解させ、０℃でゆっくりＫＨＭＤＳ（１０ｍｌ，１０ｍｍｏｌ，３ｅｑ）を滴下し、５分間攪拌した後、ヨードメタン（０．４２ｍｌ，３．４６ｍｍｏｌ，２ｅｑ）を添加し、ＴＬＣで反応が完了したことを監視した後に、水（５ｍｌ）を入れて反応を終了させ、ＥＡ（５ｍｌ）を添加して三回抽出し、有機相を組み合わせて，飽和食塩水で洗浄し，乾燥，濃縮及びカラムクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥＡ＝３０：１）分離を経て２８−１（黄色油状液体，１５０ｍｇ，２８．４％）を取得する。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１．６６−１．５５（ｍ，２Ｈ），１．３９（ｍ，１Ｈ），１．３１（ｄ，Ｊ＝４．５Ｈｚ，３Ｈ），１．２９（ｓ，１０Ｈ），０．８７（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ）。
【０１３９】
ＮＨ４Ｃｌ（９４．４ｍｇ，１．７６ｍｍｏｌ，１．８ｅｑ）を無水トルエン（１０ｍｌ）中に添加し、Ｎ２保護下で、０℃でゆっくりトリメチルアルミニウム（０．９ｍｌ，１．６７ｍｍｏｌ，１．７ｅｑ）を滴下し、室温に移動して攪拌し、メタンガスが放出しない時にゆっくりトルエンで溶解された２８−１（１５０ｍｇ，０．９８ｍｍｏｌ，１ｅｑ）を滴下し、８０℃で１５ｈ攪拌した後に、室温まで冷却し、少量のシリカゲル（３００ｍｇ）を添加し、１０分間攪拌した後、濾過し、濾過液を濃縮し、メタノール塩酸塩（２ｍｌ，２Ｎ）を添加して、１２ｈ攪拌し、濃縮すると粗生成物２９−１（１１８ｍｇ，黄色固体）が取得される。
【０１４０】
Ｎａ（２００ｍｇ）をメタノール（１０ｍｌ）中に添加し、２９−１（１１８ｍｇ，０．６９ｍｍｏｌ，１ｅｑ）及び２２−１（７０．４ｍｇ，０．４１４ｍｍｏｌ，０．６ｅｑ）を添加し、１２ｈ加熱回流させ、室温まで冷却させ、反応液を濃縮させ、固体が溶解されるまで少量の水を添加し、また塩酸（１Ｎ）を添加してＰＨを酸性に調整すると、白色固体が析出され、濾過させて、濾過残渣を取り、濾過残渣をカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝２０：１）で分離すると、ＬＹ２３８−ｃ；（白色固体，４１ｍｇ，２６．８％）が取得される。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ１１．５８（ｓ，２Ｈ），５．０６（ｓ，１Ｈ），２．６２（ｍ，１Ｈ），１．６３（ｍ，２Ｈ），１．３２（ｍ，２Ｈ），１．１９（ｍ，８Ｈ），１．１５（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ），０．８４（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ）。
【０１４１】
製造実施例１４（化合物番号ＬＹ２２５−ｂ）
【化５６】
2019500322.tif 000067
【０１４２】
マグネシウム屑（１１８ｍｇ，４．９２ｍｍｏｌ，３ｅｑ）をエチルエーテル（１０ｍｌ）中に添加し、少量のヨウ素（１０ｍｇ）を添加し、ブロモオクタン（３ｍｌ，１．６４ｍｍｏｌ，１ｅｑ）を滴下し、５０℃で１ｈ反応させた後に、ＤＣＭ（５ｍｌ）で溶解された３０（３００ｍｇ，１．６４ｍｍｏｌ，１ｅｑ）を添加し、室温で２ｈ攪拌すると、溶液はオレンジ色に変化し、ＴＬＣで反応が完了したことが監視された後に、水（５ｍｌ）を入れて反応を終了させ、ＤＣＭ（５ｍｌ）を添加して、三回抽出し、有機相を組み合わせて、飽和食塩水で洗浄し、乾燥させて、カラムクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥＡ＝３０：１）で分離すると３１−１が取得される。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ２．９３−２．８１（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，２Ｈ），１．８８−１．７０（ｍ，２Ｈ），１．４３−１．１５（ｍ，１０Ｈ），０．８８（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ）。
【０１４３】
Ｎａ（６００ｍｇ）をメタノール（１５ｍｌ）中に添加し、Ｎａが溶解された後に３１−１（３００ｍｇ，１．１５ｍｍｏｌ，１ｅｑ）を添加し、１６ｈ加熱回流させ、ＴＬＣで反応を監視し、反応が終了した後、室温まで冷却させて、反応液を濃縮させ、また水（５ｍｌ）を添加し、ＥＡ（５ｍｌ）を添加して三回抽出し、有機相を組み合わせて、飽和食塩水で洗浄し、乾燥させて、カラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝５０：１）で分離すると３２−１（白色固体，２０４ｍｇ，７４．７％）が取得される。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ４．８３（ｓ，６Ｈ），２．５５（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），１．８１−１．６５（ｍ，２Ｈ），１．３３（ｍ，１０Ｈ），０．８８（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ）。
【０１４４】
３２−１（１００ｍｇ，０．３９５ｍｍｏｌ，１ｅｑ）をＤＣＭ（５ｍｌ）中に溶解させ、−７８℃でゆっくりＢＢｒ３（２９６ｍｇ，１．１８ｍｍｏｌ，３ｅｑ）を滴下し、徐々に２５℃まで昇温させ、１２ｈ反応させ、ＴＬＣで反応が完了したことが監視された後に、メタノール（３ｍｌ）を添加して反応を終了させ、反応液を濃縮させ、カラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝２０：１）で分離すると、ＬＹ２２５−ｂ；（白色固体，１８ｍｇ，２０．２％）が取得される。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ１１．１９（ｓ，２Ｈ），２．３８（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），１．５９（ｍ，２Ｈ），１．２５（ｍ，１０Ｈ），０．８４（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ）。
【０１４５】
製造実施例１５（化合物番号ＬＹ２４０、ＬＹ２２４−ｃ）
【化５７】
2019500322.tif 000068
【０１４６】
１２−２製造は、１２−１と同じである。
【０１４７】
２３（３５０ｍｇ，１．５４ｍｍｏｌ，１．５ｅｑ）を水（０．５ｍｌ）中に添加し、７０℃で２３が全部溶解されるまで攪拌し、Ｋ２ＣＯ３（２１３ｍｇ，１．５４ｍｍｏｌ，１．５ｅｑ）、１２−２（７６ｍｇ，１．０ｍｍｏｌ，１ｅｑ）を添加し、１０５℃でオープン状態で反応させて、溶媒が完全に蒸発した後に、加熱を停止し、室温まで冷却させ、水（５ｍｌ）を入れて固体を溶解させると、溶液は白色ミルキーを呈し、塩酸（１Ｎ）を添加してｐＨを酸性まで調整すると、白色粘着性固体が析出され、清液を排出し、固体を水（５ｍｌ）で三回洗い、またカラムクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥＡ＝１０：１）で分離するとＬＹ２４０（白色固体，５６ｍｇ，２３．３％）が取得される。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ１２．３０（ｓ，１Ｈ），１２．１９（ｓ，１Ｈ），５．６７（ｓ，１Ｈ），２．３３（ｔ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，２Ｈ），１．５１（ｍ，２Ｈ），１．２６（ｍ，１０Ｈ），０．８６（ｔ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，３Ｈ）。
【０１４８】
３３（３１ｍｇ，０．４２ｍｍｏｌ，２ｅｑ）を水（１ｍｌ）中に溶解させ、ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（５／２ｍｌ）で溶解されたＬＹ２４０（５０ｍｇ，０．２１ｍｍｏｌ，１ｅｑ）をゆっくり滴下し、７０℃で６ｈ反応させ、また濃塩酸（０．１ｍｌ）を滴下し、７０℃で１６ｈ反応させ、室温まで冷却させ、ＥＡ（５ｍｌ）を添加して三回抽出し、有機相を組み合わせて、飽和食塩水で洗浄し、乾燥させ、濃縮及びカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝２０：１）で分離するとＬＹ２２４−ｃ（白色固体，５ｍｇ，１０．６％）が取得される。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ１０．８７（ｓ，１Ｈ），１０．７７（ｓ，１Ｈ），５．３１（ｓ，１Ｈ），２．２６（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），１．５１（ｍ，２Ｈ），１．２５（ｍ，１０Ｈ），０．８６（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ）。
【０１４９】
製造実施例１６（化合物番号ＬＹ２４３）
【化５８】
2019500322.tif 000069
【化５９】
2019500322.tif 000070
【０１５０】
３４−１（１ｇ，５．６ｍｍｏｌ，１ｅｑ）をＴＨＦ（１５ｍｌ）中に溶解させ、０℃まで冷却させ、ＴＨＦ（５ｍｌ）で溶解されたジカルボニルイミダゾール（９９８ｍｇ，６．１６ｍｍｏｌ，１．１ｅｑ）をゆっくり滴下して、０℃で２ｈ反応させ、２５℃に移動させて１ｈ反応させ、水（５ｍｌ）、ＥＡ（１０ｍｌ）を添加して三回抽出し、有機相を組み合わせて、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過と濃縮を経て粗生成物３５−１が取得され、次の段階において直接に使用される。
【０１５１】
ヘキサメチルシラン（７４２ｍｇ，４．６１ｍｍｏｌ，１．４ｅｑ）を取って、−７８℃でｎ−ＢｕＬｉ（２．９ｍｌ，４．６１ｍｍｏｌ，１．４ｅｑ）を添加し、−７８℃で２０ｍｉｎ攪拌した後、また３６（４６７ｍｇ，３．２９ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）を添加し、−７８℃で続いて下１ｈ攪拌し、またジエチル亜鉛（４．６ｍｌ，４．６１ｍｍｏｌ，１．４ｅｑ）を添加して、２０ｍｉｎ攪拌した後に、−２０℃まで昇温させ、ＴＨＦ（５ｍｌ）で溶解された３５−１（９００ｍｇ，３．９５ｍｍｏｌ）を添加し、−１０℃まで昇温させ、３ｈ攪拌した後に、飽和ＮＨ４Ｃｌ（１０ｍｌ）を添加して反応を終了させ、またＥＡ（１０ｍｌ）を添加して三回抽出し、有機相を組み合わせて、乾燥、濾過、濃縮、カラムクロマトグラフィー分離を経て３７−１（白色固体，３２１ｍｇ，２７％）を取得する。
【０１５２】
３７−１（１００ｍｇ，０．３３ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）を取って、エタノール（１０ｍｌ）中に溶解させ、酢酸アンモニウム（７６ｍｇ，０．９９ｍｍｏｌ，３．０ｅｑ）を添加して、２５℃で３ｈ反応させ、反応液を濃縮させ、またトルエン（５ｍｌ）を添加して１２０℃で水で３ｈ回流させ、反応液を濃縮させ、カラムクロマトグラフィー分離（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝２０：１）を経てＬＹ２４３（黄色固体，３８ｍｇ，４８．７％）を取得する。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ１１．６７（ｓ，２Ｈ），７．６０（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，２Ｈ），７．１８（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，２Ｈ），６．５４（ｓ，１Ｈ），５．２１（ｓ，１Ｈ），２．５（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），１．４６−１．３８（ｍ，２Ｈ），１．３２−１．００（ｍ，２Ｈ），０．７５（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ）。
【０１５３】
製造実施例１７（化合物番号ＬＹ２３９）
【化６０】
2019500322.tif 000071
【化６１】
2019500322.tif 000072
【０１５４】
３８（５００ｍｇ，１．８ｍｍｏｌ，１．０ｅｑ）を取って、エタノール（１０ｍｌ）中に溶解させ、Ｎ−オクチルアミン（３８７ｍｇ，３ｍｍｏｌ，１．６ｅｑ）を添加し、１００℃で１６ｈ反応させ、反応液を濃縮した後水（５ｍｌ）及びエタノール（５ｍｌ）を添加して氷浴に配置すると、白色固体が析出され、濾過すると、生成物３９−１（白色固体，３２１ｍｇ）が取得される。
【０１５５】
Ｎａ（２００ｍｇ）をメタノール（２０ｍｌ）中に添加し、Ｎａが溶解された後に３９−１（７００ｍｇ，４．１ｍｍｏｌ，１ｅｑ）を添加し、１６ｈ加熱回流させ、ＴＬＣで反応を監視し、その反応が完了した後、室温まで冷却して反応液を濃縮させ、また水（５ｍｌ）を添加し、１Ｍ塩酸を添加してＰＨを３〜４に調整し、ＥＡ（５ｍｌ）を添加して三回抽出し、有機相を組み合わせて、飽和食塩水で洗浄し、乾燥させて、カラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝５０：１）で分離するとＬＹ２３９（白色固体，１３２ｍｇ，１３．５％）が取得される。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ１０．２９（ｓ，２Ｈ），６．４８（ｓ，１Ｈ），４．５８（ｓ，１Ｈ），３．２０（ｄｄ，Ｊ＝１２．９，６．９Ｈｚ，２Ｈ），１．４６（ｍ，２Ｈ），１．２６（ｍ，１０Ｈ），０．８５（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３Ｈ）。
【０１５６】
生物試験実施例
Ｆｌｕｏ−４蛍光色素トレーサーによる細胞質カルシウムイオン濃度の検出
【０１５７】
１．試験目的：
本発明の化合物のＧＰＲ８４アゴニスト活性を測定する。
【０１５８】
２．材料ソース
ヒトＧＰＲ８４細胞系は、ＨＥＫ２９３細胞系にＧＰＲ８４及びＧ１６タンパク質をトランスコードしたプラスミドによって、取得される。蛍光色素Ｆｌｕｏ−４ＡＭは、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社から購入された。
【０１５９】
３．測定原理：
細胞内Ｃａ２＋イオンは、非常に重要なＧタンパク質共役受容体信号伝達経路のセカンドメッセンジャーであり、Ｇα１６にタンパク質カップリングされたＧＰＲ８４とリガンドとが結合されると、細胞内Ｃａ２＋イオン濃度が著しく上昇する。Ｆｌｕｏ−４は、Ｃａ２＋イオン特異的蛍光プローブであって、Ｃａ２＋イオンと定量的に結合して、蛍光を発光する。従って、蛍光検出方法を採用して、９６ウェル又は３８４ウェル平底マイクロプレートで化合物のアゴニスト活性を検出する。ＧＰＲ８４細胞は蛍光色素Ｆｌｕｏ−４のインキュベートを経た後、異なる濃度の化合物が添加されてアゴニストされ、同時に波長が４８５ｎｍである光源で励起させ、５２５ｎｍ波長で細胞内カルシウムイオン濃度の変化によって色素蛍光強度を変化させ、これによって化合物の半数効果濃度（ＥＣ５０）を計算する。
【０１６０】
４．試験過程：
１．ＨＢＳＳの調製：０．４ｇ／Ｌ  ＫＣｌ（５．４ｍＭ）、０．１２ｇ／Ｌ  Ｎａ２ＨＰＯ４・１２Ｈ２Ｏ（０．３ｍＭ）、０．０６ｇ／Ｌ  ＫＨ２ＰＯ４（０．４ｍＭ）、０．３５ｇ／Ｌ  ＮａＨＣＯ３（４．２ｍＭ）、０．１４ｇ／Ｌ  ＣａＣｌ２（１．３ｍＭ）、０．１０ｇ／Ｌ  ＭｇＣｌ２・６Ｈ２Ｏ（０．５ｍＭ）、０．０５ｇ／Ｌ  ＭｇＳＯ４（０．６ｍＭ）、８．０ｇ／Ｌ  ＮａＣｌ（１３７ｍＭ）、上記各成分を取り、超純水で溶解させ、塩酸又はＮａＯＨ溶液でＰＨが７．４になるまで調整し、濾過させ、４℃で一ヶ月保存する。
【０１６１】
２．Ｃａバッファーの調製：まず、５６０ｍＭ  Ｄ−グルコース（１００Ｘ）水溶性、２５０ｍＭ  １，２−ジフェニル−４−（２−フェニルチオニレン）エチル−３，５−フェニルチオニレン（１０００Ｘ）ストレージソリューションを調製する。続いて、１００ｍｌ  ＨＢＳＳ中にＢＳＡ（０．５ｇ）、５６０ｍＭ  Ｄ−グルコースストレージソリューション（１ｍｌ）及び２５０ｍＭ  １，２−ジフェニル−４−（２−フェニルチオニレン）エチル−３，５−フェニルチオニレンストレージソリューション（１００μｌ）を添加して、最終濃度がそれぞれ０．５％ＢＳＡ、５．６ｍＭ  Ｄ−グルコース、２５０μＭ  １，２−ジフェニル−４−（２−フェニルチオニレン）エチル−３，５−フェニルチオニレンになるようにし、均一に混合して、必要である時に使用する。
【０１６２】
３．染料の調製：まず、３％のＣｒｅｍｏｐｈｏｒ  ＥＬ（１００Ｘ）ＰＢＳで溶解されたストレージソリューション及び２ｍＭ  Ｆｌｕｏ−４（１０００Ｘ）ＤＭＳＯで溶解されたストレージソリューションを調製し、続いて、毎ミリリットルの染料は、先に１μｌの２ｍＭ  Ｆｌｕｏ−４ＡＭ及び１０μｌの３％のＣｒｅｍｏｐｈｏｒ  ＥＬを均一に混合した後に、１ｍｌのカルシウムバッファーで希釈し均一に混合することによって調製されている。
【０１６３】
４．４万個／ウェルの密度で、細胞を９６ウェル細胞培養プレートに接種し、続いて２４時間以上培養した後、細胞密度が８０〜９０％になって試験検出に用いられる。
【０１６４】
５．被検出細胞ウェル内の培養液を吸引し、新たに調製した色素４０μｌ／ウェルを添加し、３７度のインキュベーターで４０ｍｉｎ〜５０ｍｉｎインキュベートする。
【０１６５】
６．細胞インキュベーション過程での化合物の調製（このステップは、予め準備することもできる）：試験前に新しく調整したカルシウムバッファーによって、アゴニストとして用いられる化合物を最終作業濃度の３倍までに希釈される（ＤＭＳＯで溶解された化合物である場合、最終作業時のＤＭＳＯ濃度が１％未満になる）。
【０１６６】
７．インキュベーションステップが完了した後、色素を吸い取って廃棄し、カルシウムバッファーで一回洗った後に５０μｌのカルシウムバッファーで再度５〜１０ｍｉｎインキュベートする。
【０１６７】
８．ＦｌｅｘＳｔａｔｉｏｎ  ＩＩＩマイクロプレートリーダーを用いて２５μｌ／ウェルの異なる濃度の化合物を含有するカルシウムバッファーを加入して刺激し、同時に波長が４８５ｎｍである光源で励起して、５２５ｎｍ波長で検出された細胞内カルシウムイオン濃度の変化によって、色素蛍光強度が変化される。
【０１６８】
ＧＰＲ８４受容体を例とすると、アゴニスト６−ＯＡＵサンプルの状況は以下の通りである。
【０１６９】
【表１０】
2019500322.tif 000073
【０１７０】
５．試験結果：
【０１７１】
【表１１】
2019500322.tif 000074
【０１７２】
本願は、一連のＧＰＲ８４に対して優れたアゴニスト活性を有する化合物が取得され、特に化合物ＬＹ２３７が取得され、その活性は現在報告されたアゴニスト活性が一番良い化合物６−ＯＡＵよりも、４５００倍高くなった。
【国際調査報告】
2019500322.tif 000099
2019500322.tif 000100
2019500322.tif 000101
2019500322.tif 000102
2019500322.tif 000103
2019500322.tif 000104
2019500322.tif 000105
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