(57)【要約】  本発明は、自己免疫疾患の予防または治療における、一般式（Ｉ）［式中、Ｒ１およびＲ２は、互いに独立して、場合により置換されていてもよいフェニル環、または場合により置換されていてもよい５員複素芳香環を表し、Ｒ３およびＲ４のうちの一方はＨであり、他方は基（Ａ）基（ここで、Ｗは、ＯＨまたはオルト−アニリン基である）を表し、各Ａは、互いに独立して、−ＣＨ２−基を表すかまたは存在せず、＝Ｙ−Ｙ＝は、＝ＨＣ−ＣＨ＝、＝Ｎ−ＣＨ＝、または＝ＨＣ−Ｎ＝である］を有する、三置換１Ｈ−ピロール環および芳香環から誘導された化合物またはその塩もしくは溶媒和物の使用に関する。【化１】2019534333.tif 000020
2019534333.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
多発性硬化症、急性播種性脳脊髄炎または自己免疫性肝炎の予防または治療における使用のための、下記一般式（Ｉ）の化合物またはその塩もしくは溶媒和物：
【化１】
2019534333.tif 000013
［式中、
Ｒ１およびＲ２は、互いに独立して、
場合により置換されていてもよいフェニル環、または
場合により置換されていてもよい５員複素芳香環を表し、
Ｒ３およびＲ４のうちの一方はＨであり、他方は下記基：
【化２】
2019534333.tif 000014
（ここで、Ｗは、ＯＨまたはオルト−アニリン基である）を表し、
各Ａは、互いに独立して、−ＣＨ２−基を表すかまたは存在せず、
＝Ｙ−Ｙ＝は、＝ＨＣ−ＣＨ＝、＝Ｎ−ＣＨ＝、または＝ＨＣ−Ｎ＝である］。
【請求項２】
下記一般式（ＩＩ）：
【化３】
2019534333.tif 000015
［式中、
Ｒ１およびＲ２は、請求項１において定義したとおりであり、
＝Ｙ−は、＝ＣＨ−または＝Ｎ−である］
の化合物またはその塩もしくは溶媒和物である、請求項１に記載の使用のための化合物。
【請求項３】
前記場合により置換されていてもよいフェニル環が、非置換フェニル環またはＯＨ、ＯＲ５（ここで、Ｒ５は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル基である）もしくはハロゲンで置換されているフェニル環である、請求項１または２に記載の使用のための化合物。
【請求項４】
前記場合により置換されていてもよい５員複素芳香環が、非置換フラン、非置換チオフェンまたは非置換ピロール環である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項５】
以下のリストされた化合物：
【化４】
2019534333.tif 000016
から選択される、請求項１に記載の使用のための化合物またはその塩もしくは溶媒和物。
【請求項６】
以下のリストされた化合物：
【化５】
2019534333.tif 000017
から選択される、請求項１に記載の使用のための化合物またはその塩もしくは溶媒和物。
【請求項７】
下記式で表される化合物：
【化６】
2019534333.tif 000018
である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の使用のための化合物またはその塩もしくは溶媒和物。
【請求項８】
下記式で表される化合物：
【化７】
2019534333.tif 000019
である、請求項１〜７のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項９】
多発性硬化症の予防または治療における使用のための、請求項１〜８のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項１０】
急性播種性脳脊髄炎の予防または治療における使用のための、請求項１〜８のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項１１】
自己免疫性肝炎の予防または治療における使用のための、請求項１〜８のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、三置換ピロールおよび立体配座的に固定された中間体の芳香環から誘導された化合物および自己免疫疾患の予防または治療のための前記化合物の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
自己免疫疾患は、身体自身の組織に対して反応させる免疫システムの障害によって引き起こされる病気のグループを形成する。
【０００３】
身体が「自己」と「非自己」とを区別すること、すなわち身体に属する要素とそれとは異質である要素とを区別することを通常可能にする細胞認識メカニズムの改変は、抗体の産生を起こし、これは、単一の臓器（臓器特異性疾患）を標的としたり、または全身障害を誘発したりして、個々の機能全体を損なう可能性がある。
【０００４】
自己免疫疾患の治療は、症状の種類および重症度に応じて異なる。非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、ステロイドおよび免疫抑制薬がしばしば使用される。静脈内免疫グロブリンも時には使用されることがある。例えば、多発性硬化症の場合、インターフェロン（ＩＦＮ）ベータ、グラチラマー酢酸塩、シクロホスファミドまたはミトキサントロンが典型的に用いられる。自己免疫疾患に対する新たな治療法を提供する試みとしては、免疫調節剤としてタンパク質または小さな有機化合物の使用が含まれる。例えば、国際公開第２０１１／０９８９９０号には、自己免疫疾患を治療するためのアポトランスフェリンの使用が開示されている。
【０００５】
しかしながら、報告された治療は症状を改善はするが、それらは典型的には疾患を治癒せず、場合によっては治療の副作用が疾患自体と同じ程度に有害となる可能性がある。特に、エピジェネティックな調節を妨げる治療に伴う典型的な染色体異常誘発能または異数性誘発能などの遺伝毒性の副作用は、それらの深刻さおよび潜在的な致死性のために特に重要である。
【０００６】
既存の多くの治療法を強化し、好ましくは既存の治療法に伴う欠点を克服する、自己免疫疾患に対する新しい治療法を開発することが絶えずかつ緊急に必要とされている。
【発明の概要】
【０００７】
本発明者らは、一連の小分子量の有機化合物を同定し、これは異なる自己免疫疾患の予防または治療に意外にも有用であることが明かにされた。
【０００８】
したがって、一つの態様において、本発明は、自己免疫疾患の予防または治療における使用のための、一般式（Ｉ）：
【化１】
2019534333.tif 000003
［式中、
Ｒ１およびＲ２は、互いに独立して、
場合により置換されていてもよいフェニル環、または
場合により置換されていてもよい５員複素芳香環を表し、
Ｒ３およびＲ４のうちの一方はＨであり、他方は
【化２】
2019534333.tif 000004
基（ここで、Ｗは、ＯＨまたはオルト−アニリン基である）を表し、
各Ａは、互いに独立して、−ＣＨ２−基を表すかまたは存在せず（あるいは、Ａは（ＣＨ２）０〜１と表すこともできる）、
＝Ｙ−Ｙ＝は、＝ＨＣ−ＣＨ＝、＝Ｎ−ＣＨ＝、または＝ＨＣ−Ｎ＝である］の化合物またはその塩もしくは溶媒和物に関する。
【０００９】
本発明の別の態様は、自己免疫疾患の予防または治療のための医薬の調製における、一般式（Ｉ）の化合物またはその塩もしくは溶媒和物の使用に関する。
【００１０】
別の態様によれば、本発明は、自己免疫疾患を予防または治療する方法であって、そのような治療を必要とする患者に治療有効量の一般式（Ｉ）の化合物またはその塩もしくは溶媒和物を投与することを含む方法に関する。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】第一の動物モデルにおける本発明による化合物のインビボ有効性の結果（本願の実施例１）を示す図である。Ｙ軸：単位発光量／Ｌ。Ｘ軸（試験組成物）：賦形剤（本発明による化合物なし）；ＱＴＸ  ２５−２５ｍｇ／ｋｇの本発明による化合物（ＱＴＸ  １２５）；ＱＴＸ  ５０−５０ｍｇ／ｋｇの本発明による化合物（ＱＴＸ  １２５）。
【図２】第二の動物モデルにおける本発明による化合物のインビボ有効性の結果（本願の実施例２）を示す図である。Ｙ軸：ＥＡＥ臨床評価。Ｘ軸：免疫後の日数。Ｄｅｘ：デキサメタゾン。賦形剤：本発明による化合物なし；Ｑｕｉｍａｔｒｙｘ：本発明による化合物（ＱＴＸ２５）；Ｓｈａｍ：ネガティブコントロール。
【図３】第三の動物モデルにおける本発明による化合物のインビボ有効性の結果（本願の実施例３）を示す図である。Ｙ軸：ＥＡＥ臨床評価。Ｘ軸：免疫後の日数。Ｄｅｘ：デキサメタゾン。賦形剤：本発明による化合物なし；Ｑｕｉｍａｔｒｙｘ：本発明による化合物（ＱＴＸ１２５）；Ｓｈａｍ：ネガティブコントロール。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
好ましい実施形態において、一般式（Ｉ）の化合物は、一般式（ＩＩ）
【化３】
2019534333.tif 000005
［式中、
Ｒ１およびＲ２は、式（Ｉ）において定義したとおりであり、
＝Ｙ−は、＝ＣＨ−または＝Ｎ−、好ましくはＣＨ−である］
の化合物またはその塩もしくは溶媒和物である。
【００１３】
上記の実施形態のいずれにおいても、Ｒ１またはＲ２が表すことができる場合により置換されていてもよいフェニル環は、好ましくは：
−  非置換フェニル環、または
−  以下のもので置換されたフェニル環、
・  Ｃ１〜Ｃ６アルキル基、ハロゲン、ニトロ、シアノ、トリフルオロメチル、ＯＲ’、ＳＲ’、ＳＯＲ’、ＳＯ２Ｒ’、ＮＲ’Ｒ’’、Ｃ（Ｏ）Ｒ’、Ｃ（Ｏ）ＯＲ’、Ｃ（Ｏ）ＮＲ’Ｒ’’もしくはＯＣ（Ｏ）Ｒ’（ここで、Ｒ’およびＲ’’は、独立して、水素原子およびＣ１〜Ｃ６アルキル基、好ましくはメチルから選択される）、
またはより好ましくは、
・  ＯＨ、ＯＲ５（ここで、Ｒ５は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル基、好ましくはメチルである）、もしくはハロゲン、好ましくはＦ、
またはさらにより好ましくは、
・  ＯＨ
である。
【００１４】
好ましい実施形態において、置換は一置換である。好ましい実施形態において、置換はパラ置換である。特に、それはパラ一置換であってもよい。さらにより好ましくは、置換はパラＯＨ一置換である。好ましい実施形態において、Ｒ１は、上記の場合により置換されていてもよいフェニル環である。
【００１５】
上記の実施形態のいずれにおいても、Ｒ１またはＲ２が表すことができる場合により置換されていてもよい５員複素芳香環は、フラン環、チオフェン環またはピロール環、好ましくはフラン環またはチオフェン環、最も好ましくはフラン環である。置換されている場合、置換基は以下のリストから選択される、
・  Ｃ１〜Ｃ６アルキル基、ハロゲン、ニトロ、シアノ、トリフルオロメチル、ＯＲ’、ＳＲ’、ＳＯＲ’、ＳＯ２Ｒ’、ＮＲ’Ｒ’’、Ｃ（Ｏ）Ｒ’、Ｃ（Ｏ）ＯＲ’、Ｃ（Ｏ）ＮＲ’Ｒ’’もしくはＯＣ（Ｏ）Ｒ’（ここで、Ｒ’およびＲ’’は、独立して、水素原子およびＣ１〜Ｃ６アルキル基、好ましくはメチルから選択される）、
またはより好ましくは、
・  ＯＨ、ＯＲ５（ここで、Ｒ５は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル基、好ましくはメチルである）、もしくはハロゲン、好ましくはＦ、
またはさらにより好ましくは、
・  ＯＨ
である。
【００１６】
好ましくは、複素芳香環は置換されていない。好ましくは、フラン、チオフェンまたはピロール環は、前記フラン、チオフェンまたはピロールの２位または３位、さらにより好ましくは３位（以下に示す番号付け）で分子の残りの部分に結合している。最も好ましくは、複素芳香環は、前記フラン環の３位で分子の残りの部分に結合しているフラン環である。好ましい実施態様において、Ｒ２は、上記の場合により置換されていてもよい５員複素芳香環である。
【化４】
2019534333.tif 000006
【００１７】
最も好ましい実施形態において、Ｒ１は、パラＯＨ一置換フェニル環であり、Ｒ２は、前記フラン環の３位で分子の残りの部分に結合したフラン環である。
【００１８】
特定の実施形態において、式（Ｉ）の化合物は以下から選択される：
【化５】
2019534333.tif 000007
またはその塩もしくは溶媒和物。
【００１９】
好ましい特定の実施形態において、式（Ｉ）の化合物は以下から選択される：
【化６】
2019534333.tif 000008
またはその塩もしくは溶媒和物。
【００２０】
より好ましくは、式（Ｉ）の化合物は、
【化７】
2019534333.tif 000009
（以下、ＱＴＸ１２５と呼ぶ）またはその塩もしくは溶媒和物である。最も好ましくは、式（Ｉ）の化合物はＱＴＸ  １２５である。
【００２１】
本発明の文脈において、以下の用語は以下に詳述される意味を有する。
【００２２】
用語「Ｃ１〜Ｃ６アルキル」は、１〜６個の炭素原子を有し、かつ単結合を介して分子の残りの部分に結合している、不飽和を含まない、炭素原子と水素原子とからなる線状または分枝状炭化水素鎖を指し、例えば、非限定的な意味で、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル、またはｎ−ペンチルを含む。
【００２３】
「複素芳香環」は、炭素原子と、窒素、酸素および硫黄から選択される１〜４個のヘテロ原子とからなる安定な芳香環を指す。
【００２４】
「ハロゲン」という用語は、臭素（Ｂｒ）、塩素（Ｃｌ）、ヨウ素（Ｉ）またはフッ素（Ｆ）を指す。
【００２５】
「オルト−アニリン」基は、以下の部分を指す：
【化８】
2019534333.tif 000010
【００２６】
式（Ｉ）の化合物は、塩の形態、好ましくは薬学的に許容される塩として、または溶媒和物として存在していてもよい。
【００２７】
「薬学的に許容される塩」という用語は、レシピエントに投与されたときに、本明細書に記載の化合物を（直接的または間接的に）提供することができる塩を指す。「薬学的に許容される」とは、好ましくは、生理学的に許容され、かつヒトまたは動物に投与されたときに胃障害、めまいなどのアレルギー反応または同様の好ましくない反応を通常生まない組成物および分子実体を指す。好ましくは、「薬学的に許容される」という用語は、それが州または連邦政府の規制当局によって承認されているか、または動物、より詳細にはヒトにおける使用のために米国薬局方または他の一般的に認められている薬局方に含まれることを意味する。
【００２８】
塩の調製は、当該技術分野において公知の方法によって達成することができる。例えば、本明細書に提供される化合物の薬学的に許容される塩は、従来の化学的方法によって、塩基性残基を含有する元の化合物から合成される。一般に、そのような塩は、例えば水中または有機溶媒中または両者の混合物中でこれらの化合物の遊離塩基形態を適切な塩基または酸と反応させることによって製造される。一般に、エーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノールまたはアセトニトリルのような非水性媒体が好ましい。酸付加塩の例には、鉱酸付加塩、例えば塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩、ならびに有機酸付加塩、例えば酢酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、クエン酸塩、シュウ酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、リンゴ酸塩、マンデル酸塩、メタンスルホン酸塩およびｐ−トルエンスルホン酸塩が含まれる。塩基付加塩の例には、無機塩、例えばナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、アンモニウム塩、マグネシウム塩、アルミニウム塩およびリチウム塩、ならびに有機塩、例えばエチレンジアミン、エタノールアミン、Ｎ，Ｎ−ジアルキルエタノールアミン、トリエタノールアミン、グルカミンおよびアミノ酸の塩基性塩が含まれる。
【００２９】
本発明による「溶媒和物」という用語は、非共有結合を介して別の分子（極性溶媒の可能性が最も高い）が結合している本発明の活性化合物の任意の形態として理解されるべきである。溶媒和物の例には、水和物およびアルコラート、例えばメタノラートが含まれる。本発明の化合物は、遊離化合物または溶媒和物のいずれかの結晶形態をとり得る。溶媒和の方法は当該技術分野で知られている。特定の実施形態において、溶媒和物は水和物である。
【００３０】
本発明の化合物は、国際公開第２０１１／０３９３５３号に記載されているように調製することができ、その教示は参照することによって本明細書の開示の一部とされる。
【００３１】
本発明によれば、式（Ｉ）の化合物（またはその塩もしくは溶媒和物）は自己免疫疾患の予防または治療に使用される。
【００３２】
一実施形態において、自己免疫疾患は、自己免疫性肝炎；中枢神経系の炎症性脱髄性疾患；全身性エリテマトーデス；急性前部ブドウ膜炎；シェーグレン症候群；関節リウマチ；１型糖尿病；グレーブス病；および炎症性腸疾患から選択される。
【００３３】
中枢神経系の炎症性脱髄性疾患は、希突起膠細胞などの中枢神経系のミエリン支持細胞および／またはミエリンラメラが破壊される疾患である。脱髄性は、脳と身体の他の部分との間の神経信号の混乱を招き、最終的には身体的、心的、時として精神的な問題を含む一連の徴候および症状をもたらす。
【００３４】
炎症性脱髄性疾患の具体的で非限定的な例は、再発性発症型ＭＳ、進行性発症型ＭＳ、視神経脊髄型ＭＳを含む多発性硬化症（ＭＳ）；視神経脊髄炎；急性播種性脳脊髄炎；急性出血性白質脳炎；バロ同心性硬化症；シルダー病；マールブルクＭＳ；腫瘤形成性ＭＳ；孤立性硬化症；視神経炎；横脊性脊髄炎；スザック症候群；白質病変；筋痛性脳脊髄炎；ギランバレー症候群；進行性炎症性ニューロパチー；副腎白質ジストロフィーおよび副腎骨髄ニューロパチーを含む白質ジストロフィーである。好ましくは、自己免疫疾患は多発性硬化症または急性播種性脳脊髄炎である。より具体的には、それは急性播種性脳脊髄炎、またはより具体的には最も好ましくは多発性硬化症である。
【００３５】
好ましい態様において、自己免疫疾患は自己免疫性肝炎および中枢神経系の炎症性脱髄性疾患から選択される。
【００３６】
特に好ましい実施形態において、自己免疫疾患は上記の中枢神経系の炎症性脱髄性疾患である。
【００３７】
別の特に好ましい実施形態において、自己免疫疾患は自己免疫性肝炎である。
【００３８】
本発明者らは、他のヒストンデアセチラーゼ阻害剤とは異なり、本発明で使用される化合物が遺伝毒性、特に染色体異常誘発能または異数性誘発能のエビデンスを有利には示さないことを見出した。同様に、本発明において使用される化合物は、他のヒストンデアセチラーゼ阻害剤よりも改善された薬物動態学的特性、特により高い半減期および分布容積を有することが意外にも観察された。
【００３９】
本明細書の文脈における「治療」または「治療する」という用語は、疾患または疾患に伴う１つ以上の症状を改善または排除するために本発明の化合物または医薬組成物を投与することを意味する。「予防」または「予防する」という用語は、疾患が出現または発症するリスクを減らすことを含む。
【００４０】
本発明の化合物は医薬組成物の形態で投与される。医薬組成物は、本発明による１種以上の化合物を含み得る。したがって、本発明はまた、前述の自己免疫疾患の治療または予防における使用のための、一般式（Ｉ）の少なくとも１種の化合物またはその塩もしくは溶媒和物と、少なくとも１種の薬学的に許容される賦形剤とを含む医薬組成物に関する。
【００４１】
「賦形剤」という用語は、活性成分と共に投与される賦形剤、希釈剤またはアジュバントを指す。そのような薬学的賦形剤は、水、および落花生油、ダイズ油、鉱油、ゴマ油などの石油、動物、植物または合成起源のものを含む油などの滅菌液体であり得る。特に注射用溶液のために、水または生理食塩水溶液ならびに水性デキストロースおよびグリセロールが好ましくは賦形剤として使用される。適切な薬学的賦形剤は、Ｅ．Ｗ．Ｍａｒｔｉｎ著「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ」，１９９５に記載されている。
【００４２】
医薬組成物の例には、任意の固体組成物（錠剤、丸剤、カプセル剤、顆粒剤など）または液体組成物（溶液剤、懸濁剤または乳剤）が含まれる。本発明の治療に有用な投与経路には、静脈内（ｉｖ）、腹腔内（ｉｐ）、直腸内、局所、経眼、径鼻、および経皮などの経口ならびに非経口経路が含まれるが、これらに限定されない。
【００４３】
好ましい実施形態において、医薬組成物は経口送達形態であるかまたは経口投与される。経口投与に適した医薬形態は、錠剤およびカプセル剤であってもよく、かつ結合剤、例えばシロップ、アラビアゴム、ゼラチン、ソルビトール、トラガカントもしくはポリビニルピロリドン；充填剤、例えば乳糖、砂糖、コーンスターチ、リン酸カルシウム、ソルビトールまたはグリシン；錠剤を調製するための潤滑剤、例えばステアリン酸マグネシウム；崩壊剤、例えばデンプン、ポリビニルピロリドン、デンプングリコール酸ナトリウムもしくは微結晶セルロース；またはラウリル硫酸ナトリウムなどの薬学的に許容される湿潤剤などの当該技術分野で公知の慣用の賦形剤を含有していてもよい。
【００４４】
固体経口組成物は、錠剤の調合、充填または調製の従来の方法によって調製することができる。大量の充填剤を使用する全ての組成物中に活性成分を分配するために反復調合操作を使用することができる。そのような操作は当該技術分野において慣例的である。錠剤は、例えば乾式または湿式造粒によって調製することができ、場合により通常の製薬実務における周知の方法、特に腸溶コーティングを使用することによってコーティングすることができる。
【００４５】
医薬組成物はまた、適切な単位剤形の無菌溶液、懸濁液または凍結乾燥製品などの非経口投与に適合させることができる。充填剤、緩衝剤または界面活性剤などの適切な賦形剤を使用することができる。
【００４６】
好ましい実施形態において、組成物は非経口送達形態であるかまたは非経口投与される。好ましくは、組成物は静脈内送達形態であるかまたは静脈内投与される。好ましくは、静脈内送達形態には、ボーラス注射および点滴注射が含まれるが、これらに限定されない。静脈内剤形の例には、水、好ましくは注射用滅菌水（ＵＳＰ）；塩化ナトリウム注射液、リンゲル注射液、デキストロース注射液、デキストロースおよび塩化ナトリウム注射液、ならびに乳酸加リンゲル注射液を含むがこれらに限定されない水性賦形剤；エチルアルコール、ポリエチレングリコールおよびポリプロピレングリコールを含むがこれらに限定されない水混和性賦形剤；コーン油、綿実油、落花生油、ゴマ油、オレイン酸エチル、ミリスチン酸イソプロピルおよび安息香酸ベンジルを含むがこれらに限定されない非水性賦形剤が含まれるが、これらに限定されない。好ましい実施形態において、静脈内剤形は、典型的には汚染物質に対する被験体の自然免疫能を回避するので、滅菌されているかまたは被験体への投与前に滅菌することができる。
【００４７】
上述の製剤は、スペインおよび米国薬局方および同様の参考テキストに記載または言及されているものなどの標準的な方法を使用して調製されるであろう。
【００４８】
一般に、投与すべき本発明の化合物の有効量は、選択された化合物の相対的有効性、治療される障害の性質および重症度ならびに被験体の体重、または投与方法に依存するであろう。しかしながら、活性化合物は、通常、１日に１回以上、例えば１日に１、２、３または４回投与され、典型的な１日の総投与量は０．０１〜１，０００ｍｇ／ｋｇ／日までの範囲である。好ましい実施形態において、１日量は１〜１００ｍｇ／ｋｇ／日、より好ましくは７０〜１０ｍｇ／ｋｇ／日の範囲である。特定の実施形態において、１日量は３０〜２０ｍｇ／ｋｇ／日の範囲である。異なる特定の実施形態において、１日量は７０〜５０ｍｇ／ｋｇ／日の範囲である。
【００４９】
本発明の化合物は、ヒトまたは獣医学における使用のために処方することができる。
【００５０】
本発明の化合物は、併用療法を提供するために、自己免疫疾患に対して有用であることが知られている少なくとも別の治療または薬物と共に使用することができる。他の治療または薬物は、本発明による化合物の投与時と同時にまたは異なる時に投与することができる。他の薬物が使用される場合、本発明の化合物および他の薬物は同じ組成物の一部であってもよいか、または別々の組成物として提供してもよい。
【実施例】
【００５１】
前述の概念の理解を容易にするために、本発明の実施形態のいくつかの例を以下に記載する。これらの例は単なる例示である。
【００５２】
実施例１：自己免疫性肝炎の動物モデルにおける式（Ｉ）の化合物の効果
コンカナバリンＡ（ＣｏｎＡ）誘発性肝炎は、ＣｏｎＡの単回静脈内注射によってマウスにおいて誘発され得る細胞媒介性免疫炎症状態である。それは自己免疫性肝炎のモデルとして典型的に用いられる。この疾患は、ＣｏｎＡ攻撃の直後（８〜２４時間）のトランスアミナーゼ（ＧＰＴ）の血漿レベルの顕著な増加、ならびに好中球、マクロファージおよびＴ細胞による肝臓の同時浸潤、続いて肝細胞のアポトーシスおよびネクローシスを特徴とする。本実施例の目的は、ＣｏｎＡにより誘発された自己免疫性肝炎のモデルにおける組織学的および臨床的パラメータに対する式（Ｉ）の化合物（ＱＴＸ１２５）の効果を評価することであった。
【００５３】
７〜８週齢の雄のＢａｌｂ／Ｃマウス（Ｅｎｖｉｇｏ社、ウーディネ県サン・ピエトロ・アル・ナティゾーネ在，イタリア国）を、標準的な実験室条件下（非特異的病原体なし）で食物および水を自由に摂取させながら飼育し、研究を始める前にそれらの環境に少なくとも１週間適応させた。
【００５４】
イタリアの法律に従い、マウスの病原体を排除してポリカーボネートケージ（Ｔｅｃｎｉｐｌａｓｔ社、ヴァレーゼ在、イタリア国）内で最大５匹のマウスの群に保持した微生物条件制御下のアクセス制限付きげっ歯類施設内で動物を収容した。この管理形態はヘリコバクターの様々な種を除外しない。ケージを滅菌し、動物に寝床を与える材料としてかんな屑を詰めた。自動制御された環境条件は３０〜７０％の相対湿度（ＲＨ）、１０〜３０回の換気／時および自然の暗：明サイクルで温度を２０〜２４℃に維持するように設定した。
【００５５】
実験に使用した動物の保護は指令２０１０／６３／ＵＥに従った。動物の収容および飼育のための物理的設備および機器はＥＥＣ評議会指令８６／６０９の規定に従った。
【００５６】
ＣｏｎＡ（Ｓｉｇｍａ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ社、ミズーリ州セントルイス在）を滅菌リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）に溶解し、２０ｍｇ／Ｋｇの用量で動物の尾静脈に注射した。以下の表に記載されているように、１０匹のマウスの３つの群を、ＣｏｎＡ注射の−２４時間および−１時間前に処置した。
【表１】
2019534333.tif 000011
【００５７】
ＣｏｎＡ注射の８時間後に、マウスを、二色分析器を使用した標準的な光度アッセイによるトランスアミナーゼ（具体的にはＧＰＴ）の検出のための採血のためにＣＯ２吸入によって屠殺した。全血をＧＰＴパラメータのためにストリップに追加する。ストリップを機器に挿入し、約２〜３分で、反射率、すなわち試薬ストリップに向けられ、その色の濃さに従って全反射された光の強度を測定する。色の濃さはそれ自体、サンプル中の分析物の濃度によって決まる。
【００５８】
結果を図１に示す。予想どおり、大量の発光、具体的には１３３８Ｕ／Ｌから推定されるように、賦形剤（ＱＴＸ１２５なし）による処理はトランスアミナーゼ血漿レベルの上昇をもたらした。しかしながら、驚くべきことに、ＱＴＸ１２５を投与したマウスは有意に低いレベルのトランスアミナーゼを産生することが見出され、これはＣｏｎＡ注射に対する有害な免疫応答が効果的に弱められたことを示している。特に、２５ｍｇ／ＫｇでのＱＴＸ１２５投与は６０６Ｕ／Ｌまでの発光の実質的な減少をもたらす一方で、５０ｍｇ／Ｋｇでの投与は５４３Ｕ／Ｌへのさらに一層の減少をもたらした。
【００５９】
実施例２：実験的自己免疫性脳脊髄炎動物モデルにおける式（Ｉ）の化合物の効果
実験的自己免疫性脳脊髄炎（ＥＡＥ）は、中枢神経系（ＣＮＳ）の免疫炎症性および脱髄性疾患であり、それは多発性硬化症（ＭＳ）、急性播種性脳脊髄炎（ＡＤＥＭ）および他の炎症性脱髄性疾患の前臨床モデルとして広く用いられている。
【００６０】
ＥＡＥは、完全フロイントアジュバント（ＣＦＡ）中の全脊髄、またはミエリンタンパク質、例えばミエリン塩基性タンパク質（ＭＢＰ）もしくはプロテオリピドタンパク質（ＰＬＰ）の注射によって遺伝的に感受性のあるマウスにおいて誘発することができる。ＣＮＳ損傷に関与する抗原特異的エフェクター細胞はクラスＩＩ主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＯ）拘束性ＣＤ４＋Ｔリンパ球である。抗原によって活性化されると、Ｔ細胞は、ＩＬ−２、ＩＦＮ−γおよびＴＮＦ−αなどのいくつかのサイトカインを産生し、これらはＣＮＳ損傷の直接的または間接的原因となり得る。ＩＬ−２はＴ細胞の活性化および増殖において重要な役割を果たす一方で、ＩＦＮ−γはマクロファージ活性化の強力なメディエーターである。さらに、ＩＦＮ−γは、ＩＬ−１、ＴＮＦなどの炎症性サイトカインの産生を誘発し、とりわけＣＮＳ内の血管の内皮細胞および星状細胞（これは脳炎誘発性Ｔ細胞への抗原提示において重要な役割を果たすと考えられている）に対するクラスＩＩ  ＭＨＣ分子の発現も誘発する。
【００６１】
臨床的観点から、ＳＪＬマウスにおけるＥＡＥは、通常、弛緩性の尾部（スコア１）から全後肢麻痺および中程度の前肢衰弱（スコア４）、さらには四肢麻痺および／または死亡（スコア５）まで進行する急性発症を特徴とする。しかしながら、過去のデータは、平均最大臨床スコアが２．５のスコアを超えることはめったになく、前肢麻痺は１０％未満の動物に見られることを示している。組織病理学的観点から、ＳＪＬ−ＥＡＥは血管周囲の炎症性浸潤物および中枢神経系（ＣＮＳ）における脱髄を特徴とする。
【００６２】
本実施例の目的は、ＰＬＰ誘発性ＥＡＥの臨床経過に対するＱＴＸ１２５化合物の効果を評価することであった。
【００６３】
雌のＳＪＬマウス（Ｅｎｖｉｇｏ社、ウーディネ県サン・ピエトロ・アル・ナティゾーネ在，イタリア国）を、標準的な実験室条件下（非特異的病原体なし）食物および水を自由に摂取させながらで飼育し、研究を始める前にそれらの環境に少なくとも１週間適応させた。
【００６４】
イタリアの法律に従い、マウスの病原体を排除してポリカーボネートケージ（Ｔｅｃｎｉｐｌａｓｔ社、ヴァレーゼ在、イタリア国）内で最大５匹のマウスの群に保持した微生物条件制御下のアクセス制限付きげっ歯類施設内で動物を収容した。この管理形態はヘリコバクターの様々な種を除外しない。ケージを滅菌し、動物に寝床を与える材料としてかんな屑を詰めた。自動制御された環境条件は３０〜７０％の相対湿度（ＲＨ）、１０〜３０回の換気／時および自然の暗：明サイクルで温度を２０〜２４℃に維持するように設定した。
【００６５】
実験に使用した動物の保護は指令２０１０／６３／ＵＥに従った。動物の収容および飼育のための物理的設備および機器はＥＥＣ評議会指令８６／６０９の規定に従った。
【００６６】
以下の表に記載されているように、マウスを免疫後７日目から免疫後４２日目まで後期予防的レジメンで治療した：
【表２】
2019534333.tif 000012
【００６７】
試験化合物を治療直前に調製し、毎日腹腔内投与した。
【００６８】
デキサメタゾン（Ｓｏｌｄｅｓａｍ、現地の薬局から入手）：原液４ｍｇ／ｍｌを注射用水で必要な濃度に希釈した。
【００６９】
賦形剤：注射用の１０％ＤＭＳＯ、３５％ＰＥＧ４００および５５％水。
【００７０】
ＳＨＡＭ群は治療を受けていなかった。この群は、参照健康群のマウスを表す。
【００７１】
ＰＬＰは、カリフォルニア州サンフランシスコのＧｅｎｅｍｅｄ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ社から入手した。ＥＡＥは、Ｊ．Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ  ｅｔ  ａｌ（Ｊ．Ｎｅｕｒｏｉｍｍｕｎｏｌ．，２００１，１１５（１−２）：７９−９０）によって記載されているように誘発した。マウスを、６ｍｇ／ｍＬの結核菌Ｈ３７ＲＡ（Ｄｉｆｃｏ社、ミシガン州デトロイト在、米国）を含むＣＦＡ中に乳化した７５μｇのＰＬＰで免疫して、１：１のエマルジョンを作製した。Ｓｈａｍ群を除いて、各マウスは、腋窩リンパ節および鼠径リンパ節に流れ込む４つの部位に分けられた２００μＬのエマルジョンの皮下注射を受けた。百日咳毒素（Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍ社、ノッティンガム在、イギリス国）を補助アジュバントとして使用し、免疫後０日目および２日目に２００ｎｇ／マウスの用量で腹腔内投与した。
【００７２】
免疫後４２日までマウスの体重およびＥＡＥの臨床徴候を測定することによってマウスを観察した。このＥＡＥ臨床評価は、治療について知らない観察者によって、以下の尺度に従って行われた：０＝病気ではない、１＝弛緩性の尾部、２＝中程度の不全対麻痺、３＝重度の不全対麻痺、４＝前肢不全対麻痺または瀕死状態、５＝死。
【００７３】
結果を図２に示す。予想したとおり、ＰＬＰ免疫プロトコールもいかなる処置も受けなかったマウスは、研究を通して無症状のままであった（ＳＨＡＭ登録）。ＰＬＰ免疫を受けて賦形剤でのみ治療された動物は不全対麻痺になった。しかしながら、抗炎症性免疫抑制剤デキサメタゾンでの治療はマウス状態のかなりの改善をもたらした。意外にも、式（Ｉ）の化合物（ＱＴＸ１２５）での治療はまた、賦形剤で治療されたマウスに関してマウス状態の実質的な改善をもたらし、より驚くべきことに、治療の大部分について、特に治療の終わりにマウス状態はデキサメタゾンに関してさらに改善された。これらの結果は、多発性硬化症などの中枢神経系の炎症性脱髄性疾患の治療における本発明の化合物の有用性を実証している。
【００７４】
実施例３：実験的自己免疫性脳脊髄炎動物モデルにおける式（Ｉ）の化合物の効果
実施例２の動物モデルの変形を試験した。特に、実験的自己免疫性脳脊髄炎は、ＰＬＰの代わりにミエリン乏突起膠細胞糖タンパク質（ＭＯＧ）の皮下注射によって誘発した。実施例２と同様に、式（Ｉ）の化合物（ＱＴＸ１２５）のマウスへの投与は、麻痺スコアの低下をもたらし、したがって、多発性硬化症などの中枢神経系の炎症性脱髄性疾患の治療における本発明の化合物の有用性が確認される。結果を図３に示す。
【図１】
2019534333.tif 000021
【図２】
2019534333.tif 000022
【図３】
2019534333.tif 000023
【国際調査報告】
2019534333.tif 000024
2019534333.tif 000025
2019534333.tif 000026