(57)【要約】  本発明は、Ｐ−セレクチン媒介性疾患の治療または予防と、このような疾患の治療または予防に使用するための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメントとに関する。特に、本発明は、鎌状赤血球症に関連する疼痛発作の治療または予防と、鎌状赤血球症に関連する疼痛発作の治療または予防に使用するための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメントとに関する。
2019534287.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｐ−セレクチン媒介性疾患および／または症状の治療または予防に使用するための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメントであって、最初に、負荷段階であって、その間に対象が所定の期間にわたって第１の量の前記抗体またはその結合フラグメントを受ける、負荷段階において提供され、かつ次に、さらなる量の前記抗体またはその結合フラグメントは、維持段階であって、その間に前記対象が所定の期間にわたってより少ない量の前記抗体またはその結合フラグメントを受ける、維持段階において提供される、抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【請求項２】
それぞれ配列番号６、配列番号７および配列番号８を含むかまたはそれからなる３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域と、それぞれ配列番号２、配列番号３および配列番号４を含むかまたはそれからなる３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域とを含む、請求項１に記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【請求項３】
配列番号５を含むかまたはそれからなる軽鎖可変領域と、配列番号９を含むかまたはそれからなる重鎖可変領域とを含む、請求項１または２に記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【請求項４】
クリザンリズマブまたはその結合フラグメントである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【請求項５】
前記Ｐ−セレクチン媒介性疾患および／または症状は、鎌状赤血球症疼痛発作である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【請求項６】
請求項５に記載の、鎌状赤血球症疼痛発作の予防に使用するための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【請求項７】
請求項５または６に記載の、鎌状赤血球症疼痛発作の年間発生率の低減に使用するための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【請求項８】
１回以上の負荷投与、続いて複数回の維持投与において１ｍｇ／ｋｇ〜２０ｍｇ／ｋｇの量で対象に提供され、前記維持投与間の平均時間間隔は、前記１回以上の負荷投与後の平均時間間隔より長く、または前記負荷投与の濃度は、前記維持投与の濃度より高い、請求項５〜７のいずれか一項に記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【請求項９】
静脈内経路によって前記対象に提供される、請求項１〜８のいずれか一項に記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【請求項１０】
２．５ｍｇ／ｋｇ〜７．５ｍｇ／ｋｇまたは好ましくは２．５ｍｇ／ｋｇ〜５ｍｇ／ｋｇの負荷投与において前記対象に提供される、請求項１〜９のいずれか一項に記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【請求項１１】
前記負荷投与は、５ｍｇ／ｋｇまたは７．５ｍｇ／ｋｇである、請求項１０に記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【請求項１２】
２．５ｍｇ／ｋｇ〜７．５ｍｇ／ｋｇまたは好ましくは２．５ｍｇ／ｋｇ〜５ｍｇ／ｋｇの維持投与において前記対象に提供される、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【請求項１３】
前記維持投与は、５ｍｇ／ｋｇまたは７．５ｍｇ／ｋｇである、請求項１２に記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【請求項１４】
前記負荷投与および維持投与は、等しく、前記維持投与間の時間間隔は、前記負荷投与間の時間間隔より長い、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【請求項１５】
前記負荷投与は、前記維持投与より多く、前記維持投与間の時間間隔は、前記負荷投与間の時間間隔と等しい、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【請求項１６】
２回の負荷投与で前記対象に提供される、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【請求項１７】
前記負荷投与間の前記時間間隔は、２週間（＋／−３日）である、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【請求項１８】
前記維持投与間の前記時間間隔は、４週間（＋／−３日）である、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【請求項１９】
鎌状赤血球症疼痛発作の予防に使用するためのクリザンリズマブまたはその結合フラグメントであって、前記抗体は、最初に、負荷段階であって、その間に対象が２．５ｍｇ／ｋｇ〜５ｍｇ／ｋｇの量で前記抗体の２回の負荷投与を受け、前記２回の負荷投与間の時間間隔が２週間（＋／−３日）である、負荷段階において提供され、かつ次に、維持段階であって、その間に前記対象が２．５ｍｇ／ｋｇ〜５ｍｇ／ｋｇの量で前記抗体の複数回の維持投与を受け、前記複数回の維持投与間の時間間隔が４週間（＋／−３日）である、維持段階においてさらに提供される、クリザンリズマブまたはその結合フラグメント。
【請求項２０】
前記抗体は、最初に、負荷段階であって、その間に前記対象が５ｍｇ／ｋｇの量で前記抗体の２回の負荷投与を受け、前記２回の負荷投与間の時間間隔が２週間（＋／−３日）である、負荷段階において提供され、かつ次に、維持段階であって、その間に前記対象が５ｍｇ／ｋｇの量で前記抗体の複数回の維持投与を受け、前記複数回の維持投与間の時間間隔が４週間（＋／−３日）である、維持段階においてさらに提供される、請求項１９に記載の鎌状赤血球症疼痛発作の予防に使用するためのクリザンリズマブまたはその結合フラグメント。
【請求項２１】
前記抗体は、最初に、負荷段階であって、その間に前記対象が７．５ｍｇ／ｋｇの量で前記抗体の２回の負荷投与を受け、前記２回の負荷投与間の時間間隔が２週間（＋／−３日）である、負荷段階において提供され、かつ次に、維持段階であって、その間に前記対象が７．５ｍｇ／ｋｇの量で前記抗体の複数回の維持投与を受け、前記複数回の維持投与間の時間間隔が４週間（＋／−３日）である、維持段階においてさらに提供される、請求項１９に記載の鎌状赤血球症疼痛発作の予防に使用するためのクリザンリズマブまたはその結合フラグメント。
【請求項２２】
ヒドロキシウレアとさらに組み合わされる、請求項１〜２１のいずれか一項に記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【請求項２３】
静脈内経路によって前記対象に提供される、請求項１９〜２２のいずれか一項に記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、Ｐ−セレクチン媒介性疾患の治療または予防と、このような疾患の治療または予防に使用するための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメントとに関する。特に、本発明は、鎌状赤血球症に関連する疼痛発作の治療または予防と、鎌状赤血球症に関連する疼痛発作の治療または予防に使用するための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメントとに関する。
【背景技術】
【０００２】
鎌状赤血球症（ＳＣＤ）は、ヘモグロビンをコードするＨＢＢ遺伝子中のホモ接合または複合ヘテロ接合突然変異によって世界中で引き起こされている最も一般的な単一遺伝子疾患の１つである。突然変異は、ＨｂＳとして知られているヘモグロビンの改変形態の産生をもたらす。脱酸素化ＨｂＳの重合がＳＣＤの発症の起因事象であると考えられているが、この疾患の罹患率および死亡率は、主に血管閉塞によって引き起こされることが確認されている。血管閉塞は、血管閉塞および組織虚血をもたらす、内皮への鎌状赤血球および白血球の接着によって引き起こされるという説が提示されている。鎌状赤血球接着の程度は、血管閉塞および疾患の重症度の増加と相関すると報告されている。活性化および接着白血球は、集合細静脈における血管閉塞を引き起こす可能性が高い一方、鎌状赤血球は、小血管の閉塞または強い炎症トリガーがない状況における閉塞を促進し得る。さらに、血小板が赤血球、単球および好中球に結合して凝集を形成することがあり、この凝集がＳＣＤにおける血流の異常に関与する。
【０００３】
鎌状赤血球症関連疼痛発作としても知られている鎌状赤血球症疼痛発作（ＳＣＰＣ）または血管閉塞発作は、ＳＣＤにおけるヘルスケアエンカウンタ（ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  ｅｎｃｏｕｎｔｅｒ）の最も一般的な原因であり、クオリティオブライフの低下および死亡リスクの増加をもたらす。ＳＣＰＣの病態生理学的起源は、血管閉塞、炎症および痛覚の結末であると考えられる。初期段階でＳＣＰＣを阻止することにより、その後の組織および臓器障害、多臓器機能不全および死亡が最小限に抑えられ得るという説が提示されている。
【０００４】
炎症中の白血球の接着は、複数の接着分子に関与し得るが、このプロセスは、Ｐ−セレクチンによって引き起こされる。Ｐ−セレクチンは、静止内皮細胞および血小板の貯蔵顆粒中に見られ、炎症などのプロセス中に細胞が活性化すると細胞膜に急速に移送される。内皮の表面上で発現されるＰ−セレクチンは、インビトロで血管表面への鎌状赤血球の異常なローリングおよび静的接着（ｓｔａｔｉｃ  ａｄｈｅｓｉｏｎ）を媒介する。さらに、細胞表面への内皮Ｐ−セレクチンの転位は、トランスジェニック鎌状赤血球症マウスにおいて、血管への鎌状赤血球の急速な接着および血管閉塞の発生をもたらす。さらに、活性化された血小板は、好中球に結合してＰ−セレクチン依存的に凝集を形成する。
【０００５】
内皮へのＰ−セレクチン媒介性接着は、Ｐ−セレクチン−遮断剤を用いてインビトロで防止され得る。内皮への鎌状赤血球および白血球の接着は、Ｐ−セレクチンが、ヒト鎌状ヘモグロビンを発現するトランスジェニックマウスにおいて遮断されるとき、かなり減少される。Ｐ−セレクチンを遮断するのに十分なヘパリンの用量は、ＳＣＤの患者において微小血管の血流を改善する。これらのデータは、内皮および血小板Ｐ−セレクチンがＳＣＤにおける複数の異常な細胞間接着相互作用の中心的役割を果たすという考えを裏付け、Ｐ−セレクチンの遮断が血管閉塞、炎症および関連するＳＣＰＣを減少させるかまたはなくし得ることを示唆する。
【０００６】
ＳｅｌＧ１（クリザンリズマブ）は、全体が参照により本明細書に援用される国際公開第２００８／０６９９９９号パンフレットに記載されている。ＳｅｌＧ１（クリザンリズマブ）は、Ｐ−セレクチンに対するヒト化モノクローナル抗体である。この抗体は、高い親和性および特異性でＰ−セレクチンのアミノ末端に位置するレクチン−結合ドメインに結合し、その受容体Ｐ−セレクチン糖タンパク質リガンド−１（ＰＳＧＬ−１）とのＰ−セレクチンの相互作用を遮断する。本発明は、鎌状赤血球症疼痛発作などのＰ−セレクチン媒介性疾患の治療または予防におけるＰ−セレクチンの使用に関する。特に、本発明は、本発明者らが特に良好な有効性を有することを見出した投薬計画に関する。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００７】
第１の態様において、本発明は、Ｐ−セレクチン媒介性疾患の治療または予防に使用するための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント、好ましくはクリザンリズマブまたはその結合フラグメントであって、最初に、負荷段階であって、その間に対象が所定の期間にわたって第１の量の抗体またはその結合フラグメントを受ける、負荷段階において提供され、かつ次に、さらなる量は、維持段階であって、その間に対象が所定の期間にわたってより少ない量の抗体またはその結合フラグメントを受ける、維持段階において提供される、抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメントに関する。
【０００８】
第２の態様において、本発明は、鎌状赤血球症疼痛発作の予防に使用するための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント、好ましくはクリザンリズマブまたはその結合フラグメントであって、１回以上の負荷投与、続いて複数回の維持投与において１ｍｇ／ｋｇ〜２０ｍｇ／ｋｇの量で対象に提供され、維持投与間の平均時間間隔は、１回以上の負荷投与後の平均時間間隔より長く、または負荷投与の濃度は、維持投与の濃度より高い、抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメントに関する。
【０００９】
第３の態様において、本発明は、抗Ｐ−セレクチン媒介性疾患を治療または予防する方法であって、抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント、好ましくはクリザンリズマブまたはその結合フラグメントを対象に提供する工程を含み、抗体またはその結合フラグメントは、最初に、負荷段階であって、その間に対象が所定の期間にわたって第１の量の抗体またはその結合フラグメントを受ける、負荷段階において提供され、かつ次に、維持段階であって、その間に対象が所定の期間にわたってより少ない量の抗体またはその結合フラグメントを受ける、維持段階においてさらに提供される、方法に関する。
【００１０】
第４の態様において、本発明は、鎌状赤血球症疼痛発作を予防する方法であって、抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント、好ましくはクリザンリズマブまたはその結合フラグメントを１回以上の負荷投与、続いて複数回の維持投与において１ｍｇ／ｋｇ〜２０ｍｇ／ｋｇの量で対象に提供する工程を含み、維持投与間の平均時間間隔は、１回以上の負荷投与後の平均時間間隔より長く、または負荷投与の濃度は、維持投与の濃度より高い、方法に関する。
【００１１】
第５の態様において、本発明は、鎌状赤血球症疼痛発作の予防に使用するための抗Ｐ−セレクチン抗体、好ましくはクリザンリズマブまたはその結合フラグメントであって、抗体は、最初に、負荷段階であって、その間に対象が２．５ｍｇ／ｋｇ〜５ｍｇ／ｋｇまたは２．５ｍｇ／ｋｇ〜７．５ｍｇ／ｋｇの量で抗体の２回の負荷投与を受け、２回の負荷投与間の時間間隔が２週間（＋／−３日）である、負荷段階において提供され、かつ次に、維持段階であって、その間に対象が２．５ｍｇ／ｋｇ〜５ｍｇ／ｋｇまたは２．５ｍｇ／ｋｇ〜７．５ｍｇ／ｋｇの量で抗体の複数回の維持投与を受け、複数回の維持投与間の時間間隔が４週間（＋／−３日）である、維持段階においてさらに提供される、抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメントに関する。本明細書全体を通して、「＋／−３日」と一緒に定義される時間間隔は、「＋／−２日」および「＋／−１日」も含む。
【００１２】
第６の態様において、本発明は、鎌状赤血球症疼痛発作の予防のための薬剤の製造に使用するためのクリザンリズマブまたはその結合フラグメントであって、抗体は、最初に、負荷段階であって、その間に対象が２．５〜７．５ｍｇ／ｋｇ、好ましくは５ｍｇ／ｋｇの量で抗体の２回の負荷投与を受け、２回の負荷投与間の時間間隔が２週間（＋／−３日）である、負荷段階において提供され、かつ次に、維持段階であって、その間に対象が２．５ｍｇ／ｋｇ〜７．５ｍｇ／ｋｇ、好ましくは５ｍｇ／ｋｇの量で抗体の複数回の維持投与を受け、複数回の維持投与間の時間間隔が４週間（＋／−３日）である、維持段階においてさらに提供される、クリザンリズマブまたはその結合フラグメントに関する。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】治療群による第１の鎌状赤血球症疼痛発作までの平均時間（図１Ａ）および第２の鎌状赤血球症疼痛発作までの平均時間（図１Ｂ）についてのカプランマイヤー曲線を示す。Ｐ値は、ログランク検定の使用による各積極的治療群とプラセボとの比較のためのものである。
【図２】鎌状赤血球症の患者におけるＳｅｌＧ１の薬物動態および薬力学的分析を示す。図２Ａは、捕捉ＥＬＩＳＡアッセイにおいて評価した際の５２週間の治療段階中のＳｅｌＧ１の平均トラフ血清中レベルを示す。図２Ｂは、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）アッセイにおいて評価した際の５２週間の治療段階中における血清中のＰ−セレクチン阻害（％）の平均トラフレベルを示す。
【図３】可溶性Ｐ−セレクチンの血清中レベルに対する抗Ｐ−セレクチン抗体ＳｅｌＧ１の影響を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
本発明は、抗Ｐ−セレクチン抗体が、特定の濃度および／または特定の時間間隔で提供されるとき、鎌状赤血球症の患者における鎌状赤血球症疼痛発作を減少させるかまたは予防する非常に優れた能力を有するという本発明者らの意外な知見に基づくものである。
【００１５】
鎌状赤血球症疼痛発作は、多くの場合数週間も続き得る激しい疼痛を伴う。繰り返し起こる鎌状赤血球症疼痛発作は、組織および／または臓器障害につながることがあり、場合により早死にをもたらす。
【００１６】
本発明者らは、本明細書に記載されるように、負荷投与において１ｍｇ／ｋｇ〜２０ｍｇ／ｋｇの濃度で抗Ｐ−セレクチン抗体クリザンリズマブを、続いて１ｍｇ／ｋｇ〜２０ｍｇ／ｋｇの維持投与を鎌状赤血球症の患者に提供することにより（特に一実施形態（本明細書において以後「試験実施形態」と呼ばれる）において、クリザンリズマブは、最初の２回の投与について２週間空けて５ｍｇ／ｋｇの濃度で（負荷投与）、続いて４週間毎に５ｍｇ／ｋｇで（維持投与）静脈内投与された）、発作イベントをなくすかまたは鎌状赤血球症疼痛発作の年間発生率を減少させることによって鎌状赤血球症疼痛発作を有効に予防することを示した。試験実施形態において、鎌状赤血球症疼痛発作の年間発生率は、（クリザンリズマブ治療を受ける前の同じ患者における鎌状赤血球症疼痛発作の年間発生率と比較して）平均で少なくとも３０％〜最大で７０％だけ有意に減少される。試験実施形態を１２か月間にわたって臨床試験（維持（ＳＵＳＴＡＩＮ）第ＩＩ相試験ＮＣＴ０１８９５３６１）において試験したが、このような効果は、特に患者が維持投与を受け続ける場合に維持され得るものと考えられる。
【００１７】
本発明者らは、２．５ｍｇ／ｋｇ〜５ｍｇ／ｋｇの用量範囲および２〜４週間（＋／−３日）の投与間隔でのＳｅｌＧ１抗体による鎌状赤血球症患者の治療が特に有効であることを見出した。
【００１８】
さらに、鎌状赤血球症の重症度および状態を示すさらなる要因は、本発明に記載されるように、抗Ｐ−セレクチン抗体クリザンリズマブで処置された患者において改善される。本発明者らは、本発明に記載される治療、特に試験実施形態に記載される治療が以下のさらなる利点を提供することを意外にも見出した：
・第１の鎌状赤血球症疼痛発作までの平均時間を平均で２〜４カ月増加させて、通常の時間長さの３倍である第１の鎌状赤血球症疼痛発作までの平均時間を提供し；
・第２の鎌状赤血球症疼痛発作までの平均時間を平均で１〜３カ月増加させて、通常の時間長さの２倍である第２の鎌状赤血球症疼痛発作までの平均時間を提供し；
・患者が入院する日数を平均で少なくとも４０％減少させる。
【００１９】
さらに、本発明者らは、本明細書に記載される、特に試験実施形態において実証される抗Ｐ−セレクチン抗体クリザンリズマブが長期の治療計画の過程でも免疫原性応答を誘発しないことを予想外にも見出した。抗体による治療には、通常、中和抗体の発生などの免疫原性応答が伴う。このような抗体は、治療用抗体と反応し、その活性を妨げ得るとともに、患者にかなりの安全性リスクをもたらし得る。中和抗体の発生は、長期の治療が必要とされる慢性疾患（鎌状赤血球症など）に関して特に懸念されている。しかしながら、意外にも、この場合、本発明者らは、抗Ｐ−セレクチン抗体クリザンリズマブが患者における免疫原性応答を発生せず、それにより鎌状赤血球症などの慢性疾患の長期の治療に特に適していることを見出した。
【００２０】
ヒドロキシウレアは、最近の２０年間にわたり、鎌状赤血球症のための唯一の市販の治療薬であった。しかしながら、ヒドロキシウレアの投与を受けた多くの患者は、鎌状赤血球症疼痛発作を起こし続け、末端器官障害を発生し、減少した平均余命を有する。さらに、ヒドロキシウレアへの接着は、依然として課題であり、一部の患者は、安全性への懸念からこの薬剤の投与を受けたがらない。さらに、ヒドロキシウレアによる治療は、ＨｂＳＳ遺伝子型を有する患者の血管閉塞の治療のみに認められ、ＨｂＳＣ、ＨｂＳβ０−サラセミアおよびＨｂＳβ０＋サラセミアなどの他の遺伝子型について認められていない。これらの他の遺伝子型を有する鎌状赤血球症患者には適切な治療がない状態が続いている。
【００２１】
したがって、本明細書に記載される治療は、長い間必要とされていた鎌状赤血球症の患者の治療の改善を提供する。さらに、本明細書において実証されるように、それは、必要に応じて同時のヒドロキシウレア治療と併用することができ、利益を示す。
【００２２】
したがって、本発明は、好ましくない免疫原性応答を伴わずに、鎌状赤血球症疼痛発作を意外にも有効に減少させることが本明細書に示される抗Ｐ−セレクチン抗体の特異的な投薬計画により、全てのタイプの鎌状赤血球症患者のための必要な治療を提供する。
【００２３】
抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント
本明細書において使用される際の「抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント」という用語は、Ｐ−セレクチン結合ドメインを含む抗体またはその結合フラグメントを指す。Ｐ−セレクチンへの抗体（またはその結合フラグメント）の結合は、ＰＳＧＬ−１へのＰ−セレクチンの結合を阻害し、それによりＰ−セレクチン／ＰＳＧＬ−１複合体の形成を減少させる。好適には、抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメントは、Ｐ−セレクチン／ＰＳＧＬ−１複合体の形成を、好適な対照（例えば、抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメントの存在なしの試料）と比較して少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％またはそれを超えて減少させ得る。
【００２４】
加えてまたは代わりに、抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合は、予め形成されたＰ−セレクチン／ＰＳＧＬ−１複合体を解離させ得る。好適な実施形態において、抗体またはその結合フラグメントは、予め形成されたＰ−セレクチン／ＰＳＧＬ−１複合体を、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％またはそれを超えて解離させ得る。前述のように、この特性は、好適な対照（例えば、抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメントの存在なしの試料）と比較され得る。
【００２５】
加えてまたは代わりに、抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合は、Ｐ−セレクチンに特異的に結合可能な抗体またはその結合を指すことができ、すなわち、それは、Ｐ−セレクチンに特異的に結合しないことが周知である抗体より高い親和性でＰ−セレクチンに結合する。親和性は、例えば、表面プラズモン共鳴（ＢＩＡｃｏｒｅ（商標））アッセイによって好適に決定され得る。理想的には、Ｐ−セレクチン抗体またはそのフラグメントのＫｄは、≦１０００ｎＭ、もしくは≦５００ｎＭ、もしくは≦１００ｎＭ、もしくは≦５０ｎＭ、またはより好ましくはＫｄ≦２５ｎＭ、さらにより好ましくはＫｄ≦１０ｎＭ、さらにより好ましくはＫｄ≦５ｎＭ、もしくは≦１ｎＭ、もしくは≦０．１ｎＭである。
【００２６】
一実施形態において、抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメントは、クリザンリズマブまたはその結合フラグメントである。
【００２７】
一実施形態において、抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメントは、任意の好適なエピトープにおいてＰ−セレクチンに結合し得る。好適には、抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメントは、Ｐ−セレクチンレクチン様ドメインにおいて見られるエピトープに結合し得る。
【００２８】
一実施形態において、その結合フラグメントの抗Ｐ−セレクチン抗体は、配列番号１のアミノ酸位置１〜３５においてＰ−セレクチンに結合する。好適には、抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメントは、配列番号１のアミノ酸位置４〜２３においてＰ−セレクチンに結合する。より好適には、抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメントは、配列番号１のアミノ酸位置４、１４、１７、２１および２２においてＰ−セレクチンに結合する。
【００２９】
一実施形態において、抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメントは、ＫＡＳＱＳＶＤＹＤＧＨＳＹＭＮ（配列番号２）、ＡＡＳＮＬＥＳ（配列番号３）およびＱＱＳＤＥＮＰＬＴ（配列番号４）からなる群から選択されるＣＤＲ配列を有する軽鎖可変領域を含む。
【００３０】
本発明の方法および医学的使用に用いられる好適な抗体であるヒト化抗体ＳｅｌＧ１の特定の特徴が以下に示される。
【００３１】
好適な実施形態において、抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメントは、４つ以下のアミノ酸残基だけ、３つ以下のアミノ酸残基だけ、２つ以下のアミノ酸残基だけ、または１つ以下のアミノ酸残基だけ、ＫＡＳＱＳＶＤＹＤＧＨＳＹＭＮ（配列番号２）、ＡＡＳＮＬＥＳ（配列番号３）およびＱＱＳＤＥＮＰＬＴ（配列番号４）からなる群から選択される配列と異なるアミノ酸配列を有する軽鎖可変ＣＤＲを含み得る。
【００３２】
一実施形態において、抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメントは、配列番号５を含む軽鎖可変領域を含む。好適には、抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメントは、配列番号５からなる軽鎖可変領域を含む。
【００３３】
好適な実施形態において、抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメントは、配列番号５と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％同一であるポリペプチドを含むかまたはそれからなる軽鎖可変領域を含む。
【００３４】
一実施形態において、抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメントは、ＳＹＤＩＮ（配列番号６）、ＷＩＹＰＧＤＧＳＩＫＹＮＥＫＦＫＧ（配列番号７）およびＲＧＥＹＧＮＹＥＧＡＭＤＹ（配列番号８）からなる群から選択されるＣＤＲ配列を有する重鎖可変領域を含む。
【００３５】
好適な実施形態において、抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメントは、４つ以下のアミノ酸残基だけ、３つ以下のアミノ酸残基だけ、２つ以下のアミノ酸残基だけ、または１つ以下のアミノ酸残基だけ、ＳＹＤＩＮ（配列番号６）、ＷＩＹＰＧＤＧＳＩＫＹＮＥＫＦＫＧ（配列番号７）およびＲＧＥＹＧＮＹＥＧＡＭＤＹ（配列番号８）からなる群から選択される配列と異なるアミノ酸配列を有する重鎖可変ＣＤＲを含み得る。
【００３６】
一実施形態において、抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメントは、配列番号９を含む重鎖可変領域を含む。好適には、抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメントは、配列番号９からなる重鎖可変領域を含む。
【００３７】
好適な実施形態において、抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメントは、配列番号９と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％同一であるポリペプチドを含むかまたはそれからなる重鎖可変領域を含む。
【００３８】
一実施形態において、抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメントは、それぞれ配列番号６、配列番号７および配列番号８を含むか、それから本質的になるか、またはそれからなる３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域と、それぞれ配列番号２、配列番号３および配列番号４を含むか、それから本質的になるか、またはそれからなる３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域とを含む。
【００３９】
一実施形態において、抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメントは、配列番号５を含むか、それから本質的になるか、またはそれからなる軽鎖可変領域および配列番号９を含むか、それから本質的になるか、またはそれからなる重鎖可変領域を含む。
【００４０】
好適な実施形態において、抗体またはその結合フラグメントは、定常領域をさらに含み得る。定常領域は、軽鎖定常領域および／または重鎖定常領域を含み得る。
【００４１】
軽鎖定常領域は、ヒトκ鎖またはヒトλ鎖を含み得る。あるいは、軽鎖定常領域は、ヒトκ鎖からなるかまたはヒトλ鎖からなり得る。好適には、ヒトκ鎖は、配列番号１０で表され得る。あるいは、ヒトκ鎖は、配列番号１０と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％同一であり得る。
【００４２】
重鎖定常領域は、ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥおよびＩｇＭからなる群から選択され得る。免疫グロブリン定常領域は、アイソタイプにさらに分類され得る。したがって、重鎖定常領域は、ＩｇＧ２、ＩｇＧ１、ＩｇＧ３およびＩｇＧ４からなる群から選択され得る。
【００４３】
一実施形態において、重鎖定常領域は、ＩｇＧを含み得る。より好適には、重鎖定常領域は、ＩｇＧ２を含み得る。
【００４４】
あるいは、重鎖定常領域は、ＩｇＧからなり得る。より好適には、定常領域の重鎖は、ＩｇＧ２からなり得る。好適には、ＩｇＧ２は、配列番号１１で表され得る。あるいは、ＩｇＧ２は、配列番号１１と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％または少なくとも９９％同一であり得る。例えば、本発明で用いられるＩｇＧ２配列は、配列番号１１で表されるＩｇＧ２配列中に５つ以下、４つ以下、３つ以下、２つ以下または１つ以下の突然変異を含み得る。好適には、本発明で用いられるＩｇＧ２配列は、配列番号１１で表される配列中に１つの突然変異を含み得る。このような実施形態において、本発明で用いられるＩｇＧ２は、好適には、配列番号２３で表される配列を有する。配列番号２３で表されるＩｇＧ２は、補体活性化をさらに低減するために望ましいことがある。
【００４５】
一実施形態において、抗Ｐ−セレクチン抗体は、配列番号１２と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％同一である軽鎖を含む。好適には、抗Ｐ−セレクチン抗体は、配列番号１２で表される軽鎖を含む。
【００４６】
一実施形態において、抗Ｐ−セレクチン抗体は、配列番号１３と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％同一である重鎖を含む。好適には、抗Ｐ−セレクチン抗体は、配列番号１３で表される重鎖を含む。
【００４７】
好適な実施形態において、抗Ｐ−セレクチン抗体は、配列番号１２と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％同一である軽鎖と、配列番号１３と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％同一である重鎖とを含む。好適には、抗Ｐ−セレクチン抗体は、配列番号１２で表される軽鎖および配列番号１３で表される重鎖を含む。
【００４８】
他の好適な抗Ｐ−セレクチン抗体は、全体が参照により本明細書に援用される国際公開第２００５／１００４０２号パンフレット、国際公開第１９９３／０２１９５６号パンフレットおよび国際公開第１９９４／０２５０６７号パンフレットに開示されている。一実施形態において、好適な抗Ｐ−セレクチン抗体またはそのフラグメントは、インクラクマブまたはその結合フラグメントである。
【００４９】
本発明に関して、本明細書において使用される際の「結合フラグメント」という用語は、Ｐ−セレクチンエピトープに結合することが可能な抗体の一部を指す。
【００５０】
一実施形態において、結合フラグメントは、抗原結合および／または可変領域を含み得る。単なる例として、好適な結合フラグメントは、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、ＦｖおよびｓｃＦｖからなる群から選択され得る。好適な結合フラグメントは、当該技術分野において公知の様々な方法によって産生され得る。Ｆａｂ’フラグメントは、例えば、抗体のパパイン消化によって産生され得る。Ｆ（ａｂ’）２フラグメントは、例えば、抗体のペプシン消化によって産生され得る。
【００５１】
一実施形態において、抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント、好ましくはクリザンリズマブまたはその結合フラグメントは、非常に低い免疫原性を有する。より好適には、抗Ｐ−セレクチン抗体、好ましくはクリザンリズマブは、免疫原性を有さないかまたは低い免疫原性を有する。本明細書において使用される際の免疫原性という用語は、対象において抗体またはその結合フラグメントに対する中和抗体の産生を誘発する抗体またはその結合フラグメントの能力を指す。
【００５２】
本明細書の他の箇所で言及されるように、中和抗体の生成は、治療用抗体（またはその結合フラグメント）を中和して、それを効果のないものにするため、非常に望ましくない。中和抗体の産生は、対象における治療用抗体のレベルの低下をもたらし得る。したがって、対象中（例えば、対象からの血清試料中）の治療用抗体の一貫したレベルまたは量は、このような中和抗体が産生されていないこと、したがって治療用抗体がほとんどまたは全く免疫原性を有さないことを示し得ることが理解されるであろう。一貫したという用語は、治療用抗体のレベルが維持段階中に５％超、１０％超、１５％超、２０％超、２５％超、３０％超、３５％超、４５％超または５０％超だけ対象中で変動しないことを意味する。
【００５３】
Ｐ−セレクチン媒介性疾患の治療および／または予防
本発明に関して、「Ｐ−セレクチン媒介性疾患および／または症状」という用語は、増加したレベルのＰ−セレクチン／ＰＳＧＬ−１複合体に関連する疾患および／または症状を指す。本明細書の他の箇所で触れられるように、抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメントは、Ｐ−セレクチン／ＰＳＧＬ−１複合体の形成を減少させる能力を有する。それは、予め形成されたＰ−セレクチン／ＰＳＧＬ−１複合体を解離させる能力も有し得る。したがって、抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメントの使用は、新たなＰ−セレクチン／ＰＳＧＬ−１複合体の形成を阻害することにより、Ｐ−セレクチン媒介性疾患および／または症状の予防を可能にすることが理解されるであろう。抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメントの使用は、予め形成されたＰ−セレクチン／ＰＳＧＬ−１複合体を解離させることにより、既存のＰ−セレクチン媒介性疾患および／または症状の治療を可能にすることも理解されるであろう。好適には、Ｐ−セレクチン／ＰＳＧＬ−１複合体の形成の低減およびこのような複合体の解離は、細胞間相互作用中に行われる。したがって、本明細書に記載される抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメントによって予防される好適な疾患および／または症状は、細胞間相互作用中の増加したレベルのＰ−セレクチン／ＰＳＧＬ−１複合体に関連する疾患である。
【００５４】
増加したレベルのＰ−セレクチン／ＰＳＧＬ−１複合体が広範囲の疾患および／または症状において観察され得る。特に、それらは、炎症性および／または血栓性疾患および／または症状を有する対象または対象からの試料において観察される。したがって、抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメントは、鎌状赤血球症、鎌状赤血球症疼痛発作、関節炎（例えば、関節リウマチ、変形性関節症および乾癬性関節炎）、移植片拒絶、移植片対宿主病、喘息、慢性閉塞性肺疾患、乾癬、皮膚炎、敗血症、腎炎、エリテマトーデス、強皮症、鼻炎、アナフィラキシー、糖尿病、多発性硬化症、アテローム性動脈硬化症、血栓症、腫瘍転移、アレルギー反応、甲状腺炎、虚血再かん流傷害（例えば、心筋梗塞、脳卒中または臓器移植による）、癌（例えば、多発性骨髄腫）および外傷に関連する病態または例えば結核菌（Ｔｕｂｅｒｃｌｅ  ｂａｃｉｌｌｉ）による感染に関連する例えばＩＶ型遅延型過敏症などの慢性炎症、または全身性炎症反応症候群、または多臓器不全からなる群から選択される炎症性および／または血栓性疾患などの疾患を治療するのに使用され得る。
【００５５】
鎌状赤血球症疼痛発作は、鎌状赤血球症の対象に起こり得る。抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメントは、このような対象における鎌状赤血球症疼痛発作を治療および予防するのに特に有用性を有し得る。好適には、抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメントは、ＨｂＳＳ、ＨｂＳＣ、ＨｂＳβ０−サラセミアおよびＨｂＳβ０＋サラセミアからなる群から選択される遺伝子型を有する鎌状赤血球症の対象における鎌状赤血球症疼痛発作を治療および／または予防するのに使用され得る。
【００５６】
鎌状赤血球症に関連する疼痛発作などのＰ−セレクチン媒介性疾患および／または症状の成功した治療および／または予防は、本発明の方法または医学的使用によってそれぞれ達成され得る以下のパラメータの１つ以上によって実証され得る。鎌状赤血球症に関連する疼痛発作の成功した治療および／または予防は、２〜４カ月まで、好適には３カ月までまたはそれを超えて、第１の鎌状赤血球症疼痛発作までの平均時間の増加を達成する能力によって実証され得る。鎌状赤血球症に関連する疼痛発作の成功した治療および／または予防は、適切な対照群における時間長さの３倍である第１の鎌状赤血球症疼痛発作までの平均時間の増加を達成する能力によって実証され得る。鎌状赤血球症に関連する疼痛発作の成功した治療および／または予防は、１〜３カ月まで、好適には２カ月までまたはそれを超えて、第２の鎌状赤血球症疼痛発作までの平均時間の増加を達成する能力によって実証され得る。鎌状赤血球症に関連する疼痛発作の成功した治療および／または予防は、適切な対照群における時間長さの２倍である第２の鎌状赤血球症疼痛発作までの平均時間の増加を達成する能力によって実証され得る。鎌状赤血球症に関連する疼痛発作の成功した治療および／または予防は、患者が入院する日数の４０％以上の減少を達成する能力によって実証され得る。
【００５７】
対象
「対象」という用語は、Ｐ−セレクチン媒介性疾患および／または症状に罹患しているヒトを指す。好適には、対象は、鎌状赤血球症を有し得る。
【００５８】
一実施形態において、対象は、Ｐ−セレクチン媒介性疾患のための一次治療として抗Ｐ−セレクチン抗体または結合フラグメントを提供され得る。このような実施形態において、対象は、本発明に係る治療の開始前にＰ−セレクチン媒介性疾患のためのいかなる他の治療も提供されていないであろう。
【００５９】
別の実施形態において、対象は、本発明に係る治療の開始前にＰ−セレクチン媒介性疾患および／または症状のための別の治療を受けていることがある。
【００６０】
別の実施形態において、対象は、治療の開始前の過去１２カ月以内に少なくとも２回、少なくとも３回、少なくとも４回、少なくとも５回、少なくとも６回、少なくとも７回、少なくとも８回、少なくとも９回または少なくとも１０回のＳＣＰＣイベントを起こしたことがあり得る。
【００６１】
提供
本明細書において使用される際の「提供」という用語は、対象が治療有効量の抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメントを受ける任意の技術を包含する。例えば、提供は、抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメントを対象に投与することを包含し得る。
【００６２】
対象が抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメントを提供され得る様々な経路があることが理解されるべきである。このような好適な経路は、静脈内、経口、非経口、腹腔内、筋肉内、血管内、鼻腔内、腹腔内、直腸、皮下、経皮（ｔｒａｎｓｄｅｒｍａｌ）および経皮（ｐｅｒｃｕｔａｎｅｏｕｓ）からなる群から選択され得る。より好適には、対象は、静脈内経路により、抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメントを提供され得る。一実施形態において、静脈内経路は、注射による。
【００６３】
抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメントは、任意の妥当な送達時間にわたって対象に提供され得る。好適な送達時間は、例えば、１分〜２時間、５分〜９０分、１５分〜７０分、２０分〜１時間または３０分〜５０分のいずれかから選択され得る。一実施形態において、対象は、３０分の送達時間にわたって抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメントを提供され得る。
【００６４】
送達時間は、注射、好ましくは静脈内注射により、抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメントを提供するのに好適に適用可能である。
【００６５】
一実施形態において、抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメントは、３０分間にわたって静脈注射によって対象に提供され得る。
【００６６】
一実施形態において、抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメントは、第２の治療と組み合わせて対象に提供され得る。第２の治療は、Ｐ−セレクチン媒介性疾患のための任意の他の公知の治療薬、例えばヒドロキシウレアおよび／またはエリスロポエチンから選択され得る。併用治療は、Ｐ−セレクチン媒介性疾患の治療に対して相乗効果を有する。
【００６７】
一実施形態において、抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメントは、ヒドロキシウレアと組み合わせて提供される。
【００６８】
抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメントは、任意の形態で対象に提供され得る。好適には、それは、医薬組成物の形態で提供され得る。抗Ｐ−セレクチン抗体または結合フラグメントの医薬組成物を製剤化するための好適な薬学的に許容できる担体、希釈剤および賦形剤が本明細書の他の箇所で定義される。
【００６９】
負荷段階および維持段階
本発明の特定の態様は、負荷段階における対象への抗体または結合フラグメント、好ましくはクリザンリズマブまたはその結合フラグメントの提供、続いて維持段階における抗体または結合フラグメント、好ましくはクリザンリズマブまたはその結合フラグメントのさらなる提供を指す。このような実施形態において、対象は、負荷段階中、所定の期間にわたって第１の量の抗体または結合フラグメントを受け、かつ次に、維持段階中、所定の期間、好適には同じ所定の期間にわたってより少ない量の抗体または結合フラグメントを受ける。負荷段階および維持段階によって必要とされる異なる量の抗体は、異なる用量の抗体を提供することにより、および／または抗体の投与間の異なる時間間隔を用いることにより提供され得る。例えば、維持段階中、抗体は、負荷段階中に使用されるのと本質的に同じ用量であるが、投与の各発生間により長い時間間隔を空けて提供され得る。あるいは、投与の間隔間の時間は、負荷および維持段階のそれぞれにおいて同じであり得るが、維持段階中の投与の各発生時に提供される抗体の用量は、より少ないことができる。
【００７０】
単なる例として、好適な負荷段階は、負荷段階の１週当たり約２．５ｍｇ／ｋｇの量の好適な抗体またはその結合フラグメント（これが週１回、隔週または他に提供されるかにかかわらず）の対象への提供を含み得る。本発明のこのような実施形態において、好適な維持段階は、維持段階の１週当たり約１．２５ｍｇ／ｋｇの量の抗体またはその結合フラグメントの対象への提供（例えば、隔週または４週間毎の提供による）を含み得る。一般に、負荷段階の１週当たりで提供される抗体またはその結合フラグメントの量は、維持段階の１週当たりで提供される量の約２倍であり得る。
【００７１】
別の例として、好適な負荷段階は、負荷段階の１週当たり約３．７５ｍｇ／ｋｇの量の好適な抗体またはその結合フラグメント（これが週１回、隔週または他に提供されるかにかかわらず）の対象への提供を含み得る。本発明のこのような実施形態において、好適な維持段階は、維持段階の１週当たり約１．８７５ｍｇ／ｋｇの量の抗体またはその結合フラグメントの対象への提供（例えば、隔週または４週間毎の提供による）を含み得る。一般に、負荷段階の１週当たりで提供される抗体またはその結合フラグメントの量は、維持段階の１週当たりで提供される量の約２倍であり得る。
【００７２】
維持段階の長さは、負荷段階よりはるかに長くなり得るため、維持段階にわたって対象が受ける抗体または結合フラグメントの総量は、比較的短い負荷段階中に提供される総量よりはるかに多くなり得ることが理解されるであろう。しかしながら、対象が維持段階の設定期間にわたって受ける抗体の量は、負荷段階の同じ期間にわたって受けるであろう量より少ない。
【００７３】
本発明のこのような実施形態によって必要とされる負荷および維持段階は、負荷および維持投与ならびに下記で考えられる関連する投与計画の使用によって実施され得る。
【００７４】
本発明の様々な態様は、維持投与間の平均時間間隔および１回以上の負荷投与後の平均時間間隔に言及している。好適な平均時間間隔は、投与の回数および維持投与間または負荷投与後の個々の間隔（該当する負荷投与後にさらなる負荷投与または維持投与が続くかどうかにかかわらず）を変更することによって達成され得ることが認識されるであろう。以下の段落は、所望の平均時間間隔を達成するのに使用され得る好適な個々の時間間隔の例を提供する。
【００７５】
負荷投与
本発明に関して、負荷投与という用語は、治療の初期段階中に対象に提供される抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント、好ましくはクリザンリズマブまたはその結合フラグメントの量を指す。負荷投与の目的は、維持投与のみで達するより迅速に対象における抗体またはその結合フラグメントの治療レベルを達成することである。さらに、負荷投与は、維持投与への切り替えがなされた後に治療レベルが維持されることを可能にする抗体の十分なレベルも達成し得る。さらに、負荷投与は、抗体または結合フラグメントの比較的一定の治療レベルが達成されることを可能にし、ここで、抗体または結合フラグメントは、定常状態にある。抗体または結合フラグメントの定常状態は、抗体またはその結合フラグメントの全取り込み量がその排出量と動的平衡状態にある状態と考えられ得る。抗体またはその結合フラグメントの治療レベルに達したら、負荷投与後に複数回の維持投与を行い得る。
【００７６】
確立された抗体またはその結合フラグメントの治療レベルは、対象の血液循環中の治療剤の濃度を直接評価することによって決定され得る。
【００７７】
抗体またはその結合フラグメントの治療レベルは、１回以上の負荷投与を対象に提供することによってより迅速に達成され、維持され得る。これらは、対象の体重を参照して計算され得る。好適には、対象は、１回、２回、３回、４回またはそれを超える負荷投与を提供され得る。より好適には、対象は、２回の負荷投与を提供され得る。負荷投与の濃度は、１ｍｇ／ｋｇ〜２０ｍｇ／ｋｇ、または１ｍｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ、または２．５ｍｇ／ｋｇ〜７．５ｍｇ／ｋｇ、または２．５ｍｇ／ｋｇ〜５ｍｇ／ｋｇであり得る。より好適には、負荷投与の濃度は、２．５ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、３．５ｍｇ／ｋｇ、４ｍｇ／ｋｇ、４．５ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇまたは７．５ｍｇ／ｋｇであり得る。より好適には、負荷投与の濃度は、２．５ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、７．５ｍｇ／ｋｇまたは１０ｍｇ／ｋｇであり得る。より好適には、負荷投与の濃度は、７．５ｍｇ／ｋｇである。最も好適には、負荷投与の濃度は、５ｍｇ／ｋｇである。
【００７８】
当業者は、負荷投与の回数が負荷投与の濃度に応じて決まることを理解するであろう。したがって、負荷投与の濃度がより低い場合、より多い回数の負荷投与が抗体またはその結合フラグメントの治療レベルを達成するために必要とされ得る。
【００７９】
同様に、負荷投与の濃度が増加される場合、より少ない負荷投与が抗体またはその結合フラグメントの治療レベルを達成するために必要とされ得る。ある実施形態において、１回のみの負荷投与が必要とされ得る。一実施形態において、負荷投与間の時間間隔は、１〜４週間（＋／−３日）、より好適には１〜３週間（＋／−３日）であり得る。より好適には、負荷投与間の時間間隔は、２週間（＋／−３日）であり得る。より好適には、負荷投与間の時間間隔は、１週間（＋／−１日）であり得る。好適には、負荷投与は、負荷段階中に一定の間隔で分配される。
【００８０】
負荷投与濃度を増加させると、負荷投与間の時間間隔を延長することが可能になり得る。例として、負荷投与間の時間間隔は、２週間（＋／−３日）、３週間（＋／−３日）、４週間（＋／−３日）、５週間（＋／−３日）、６週間（＋／−３日）であり得る。好適には、負荷投与間の時間間隔は、４週間（＋／−３日）または２週間（＋／−３日）であり得る。
【００８１】
維持投与
本発明に関して、維持投与という用語は、抗体またはその結合フラグメントの治療レベルを維持するために対象に提供される抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント、好ましくはクリザンリズマブまたはその結合フラグメントの量を指す。抗体またはその結合フラグメントのこのような治療レベルは、維持投与を提供する前に、上述されるように１回以上の負荷投与を患者に提供することによってより迅速に達成され、維持される。
【００８２】
好適には、維持投与は、維持段階により、対象における抗体または結合フラグメントの比較的一定の治療レベルを維持する。好適には、抗体または結合フラグメントの維持投与は、維持段階を通して対象において抗体または結合フラグメントを定常状態に維持する。
【００８３】
維持投与が提供される期間は、抗体またはその結合フラグメントの治療レベルを維持するのに必要とされる時間の長さに応じて決まる。これは、同様に、治療または予防されるＰ−セレクチン媒介性疾患に応じて決まる。例として、維持投与は、少なくとも３カ月、少なくとも６カ月、少なくとも９カ月、少なくとも１２カ月、少なくとも１６カ月、少なくとも２０カ月、少なくとも２４カ月またはそれを超える期間にわたって提供され得る。ある場合（例えば、治療される疾患が生涯にわたる病態である場合）、維持投与は、対象の生涯にわたって提供され得る。
【００８４】
好適な実施形態において、予防される疾患が鎌状赤血球症疼痛発作である場合、維持投与は、少なくとも３カ月、少なくとも６カ月、少なくとも１２カ月またはそれを超えて提供され得る。より好適には、維持投与は、少なくとも１２カ月にわたって提供され得る。鎌状赤血球症が生涯にわたる病態である場合、維持投与は、対象の生涯にわたって提供され得る。
【００８５】
提供される維持投与の総回数は、治療期間に応じて決まる。これは、同様に、治療または予防されるＰ−セレクチン媒介性疾患に応じて決まる。維持投与の総回数は、少なくとも３回、少なくとも６回、少なくとも１２回またはそれを超え得る。好適には、維持投与の総回数は、３〜２４回、６〜１８回または９〜１５回である。一実施形態において、維持投与の総回数は、１２回である。
【００８６】
好適には、維持投与は、治療期間にわたって一定の間隔で分配される。
【００８７】
好適には、維持投与間の時間間隔は、６週間（＋／−３日）、５週間（＋／−３日）、４週間（＋／−３日）、３週間（＋／−３日）、２週間（＋／−３日）または１週間（＋／−３日）であり得る。好適には、維持投与間の時間間隔は、４週間（＋／−３日）である。
【００８８】
好適な実施形態において、維持投与間の時間間隔は、負荷投与間の時間間隔より長いことができる。
【００８９】
より好適には、負荷投与間の時間間隔は、４週間（＋／−３日）であり得る。好適には、維持投与間の時間間隔が４週間（＋／−３日）である場合、負荷投与間の時間間隔は、２週間（＋／−３日）であり得る。
【００９０】
一実施形態において、負荷投与間の時間間隔は、維持投与間の時間間隔と同じであり得る。
【００９１】
好適な維持投与は、対象の体重を参照して決定され得る。好適な実施形態において、維持投与の濃度は、１ｍｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ、または２．５ｍｇ／ｋｇ〜５ｍｇ／ｋｇ、または２．５ｍｇ／ｋｇ〜７．５ｍｇ／ｋｇであり得る。より好適には、維持投与の濃度は、２．５ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、３．５ｍｇ／ｋｇ、４ｍｇ／ｋｇ、４．５ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇまたは７．５ｍｇ／ｋｇであり得る。より好適には、維持投与の濃度は、２．５ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇまたは７．５ｍｇ／ｋｇであり得る。より好適には、維持投与の濃度は、７．５ｍｇ／ｋｇである。最も好適には、維持投与の濃度は、５ｍｇ／ｋｇである。
【００９２】
一実施形態において、維持投与は、２．５ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇまたは７．５ｍｇ／ｋｇの濃度で４週間毎に提供され得る。
【００９３】
好適な実施形態において、維持投与の濃度は、１ｍｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ、または２．５ｍｇ／ｋｇ〜５ｍｇ／ｋｇ、または２．５ｍｇ／ｋｇ〜７．５ｍｇ／ｋｇであり、維持投与間の時間間隔は、４週間（＋／−３日）である。より好適には、維持投与の濃度は、２．５ｍｇ／ｋｇまたは５ｍｇ／ｋｇであり、維持投与間の時間間隔は、４週間（３＋／−日）である。しかしながら、維持投与間の時間間隔は、投与に含まれる抗体またはその結合フラグメントの濃度に応じて決まることが理解されるであろう。したがって、維持投与の濃度が増加される場合、投与間の時間間隔は、増加され得る。同様に、維持投与の濃度が低下される場合、投与間の時間間隔は、減少され得る。
【００９４】
一実施形態において、負荷投与の濃度は、維持投与の濃度より高いことができる。
【００９５】
最後の負荷投与と最初の維持投与との間の時間間隔は、常に維持投与間の時間間隔に等しい。好ましい実施形態において、このような間隔は、４週間（＋／−３日）である。
【００９６】
有効性の決定
別の態様において、本発明者らは、抗Ｐ−セレクチン抗体または結合フラグメント、好ましくはクリザンリズマブまたはその結合フラグメントを、Ｐ−セレクチン媒介性疾患に罹患した対象に提供することが対象からの試料中の可溶性Ｐ−セレクチンのレベルを低下させ得ることを意外にも見出した。本発明者らは、この知見が、Ｐ−セレクチン媒介性疾患および／または症状、例えば鎌状赤血球症疼痛発作に罹患した対象における抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント治療の有効性を決定および／または監視する際に有用であり得ると考える。
【００９７】
上記の態様の方法が適用され得る好適なＰ−セレクチン媒介性疾患は、可溶性Ｐ−セレクチンが存在する任意のＰ−セレクチン媒介性疾患である。好適には、本方法は、可溶性Ｐ−セレクチンが増加される任意のＰ−セレクチン媒介性疾患において、例えば血小板および／または内皮細胞が活性化される病態において適用され得る。このような疾患は、鎌状赤血球症、高脂血症、高血圧症、虚血性心疾患、アテローム性動脈硬化症、末梢動脈閉塞性疾患、血管形成術後の再狭窄および虚血／再かん流傷害からなる群から選択され得る。
【００９８】
したがって、本発明は、抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント、好ましくはクリザンリズマブまたはその結合フラグメントによる治療の有効性を決定する方法であって、
・抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント、好ましくはクリザンリズマブまたはその結合フラグメントが提供された対象からの試料中の可溶性Ｐ−セレクチンのレベルを測定する工程と、
・対象の可溶性Ｐ−セレクチンレベルを基準値と比較する工程と、
・それにより治療の有効性を決定する工程と
を含む方法に関する。
【００９９】
一実施形態において、本方法は、鎌状赤血球症の対象における抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメントによる治療の有効性を決定するためのものである。
【０１００】
基準値は、対照個体からの１つ以上の試料、またはＰ−セレクチン媒介性疾患と診断され、治療を受けていない対象からの１つ以上の試料のいずれかにおいて測定された可溶性Ｐ−セレクチンのレベルに基づき得ることが理解されるであろう。
【０１０１】
一実施形態において、基準値は、正常なレベルの可溶性Ｐ−セレクチンを有する健康な人である対照個体からの１つ以上の試料中で測定された可溶性Ｐ−セレクチンレベルに基づいている。このような実施形態において、Ｐ−セレクチン媒介性疾患に対して治療された対象からの試料中の可溶性Ｐ−セレクチンのレベルが、対照個体からの試料中で測定された可溶性Ｐ−セレクチンレベルに近似している場合、それは、治療が有効であることの指標となる。
【０１０２】
同様に、Ｐ−セレクチン媒介性疾患に対して治療された対象からの試料中で測定された可溶性Ｐ−セレクチンレベルが、対照個体からの試料中で測定された可溶性Ｐ−セレクチンレベルと近似していなかった場合、それは、治療が有効でないことの指標となり得る。本開示に関して、「近似する」という用語は、基準値から少なくとも３０％、少なくとも２５％、少なくとも２０％、少なくとも１５％、少なくとも１０％、少なくとも５％またはそれ未満以内の可溶性Ｐ−セレクチンレベルを指すものと理解され得る。
【０１０３】
別の実施形態において、基準値は、治療を受けていない、Ｐ−セレクチン媒介性疾患に罹患した個体からの試料中で測定された可溶性Ｐ−セレクチンのレベルに基づいている。好適には、Ｐ−セレクチン媒介性疾患に罹患した個体は、治療を受ける前のそのままの対象であり得る。このような実施形態において、Ｐ−セレクチン媒介性疾患に対して治療された対象からの試料中で測定された可溶性Ｐ−セレクチンレベルが、治療を受ける前の、Ｐ−セレクチン媒介性疾患に罹患した個体からの試料中で測定された可溶性Ｐ−セレクチンレベルに近似する場合、それは、治療が有効でないことの指標となり得る。
【０１０４】
同様に、Ｐ−セレクチン媒介性疾患に対して治療された対象からの試料中で測定された可溶性Ｐ−セレクチンのレベルが、治療を受ける前の、Ｐ−セレクチン媒介性疾患に罹患した個体からの試料中で測定されたレベルより低い場合、それは、治療が有効であることの指標となり得る。治療を受ける前の、Ｐ−セレクチン媒介性疾患に罹患した個体からの試料中の可溶性Ｐ−セレクチンレベルに基づいた基準値と比較した可溶性Ｐ−セレクチンレベルの低下は、治療が有効であることの指標となり得ることが理解されるであろう。好適には、基準値より少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％またはそれを超えて低い可溶性Ｐ−セレクチンレベルは、治療が有効であることの指標となり得る。
【０１０５】
本開示に関して、試料という用語は、可溶性Ｐ−セレクチンレベルが検出され得る任意の好適な試料を指す。好適には、試料は、血液試料（例えば、全血試料、血漿試料または血清試料）および尿試料からなる群から選択される体液試料である。より好適には、試料は、血清試料である。
【０１０６】
本明細書の説明および特許請求の範囲を通して、文脈上他の意味に解すべき場合を除き、単数形は、複数形を包含する。特に不定冠詞が使用される場合、本明細書は、文脈上他の意味に解すべき場合を除き、単数だけでなく複数を想定しているものと理解されるべきである。
【０１０７】
本発明の特定の態様、実施形態または実施例とともに記載される特徴、整数、特性、化合物、化学部分または基は、不適合でない限り、本明細書に記載される任意の他の態様、実施形態または実施例に適用可能であることが理解されるべきである。本明細書（添付の特許請求の範囲、要約書および図面を含む）に開示される特徴の全ておよび／またはそのように開示される任意の方法もしくはプロセスの工程の全ては、このような特徴および／または工程の少なくとも一部が相互に排他的である組合せを除いて、任意の組合せで組み合わされ得る。
【０１０８】
本発明は、任意の上記の実施形態の詳細に限定されない。本発明は、本明細書（添付の特許請求の範囲、要約および図面を含む）に開示される特徴の任意の新規な１つもしくは任意の新規な組合せ、またはそのように開示される任意の方法もしくはプロセスの工程の任意の新規な１つもしくは任意の新規な組合せに及ぶ。読者の注意は、本出願に関連して本明細書と同時にまたは本明細書の前に提出され、本明細書とともに公開された全ての論文および文献に向けられ、全てのこのような論文および文献の内容は、参照により本明細書に援用される。
【０１０９】
一態様において、本発明は、対象におけるＰ−セレクチン媒介性疾患の治療または予防に使用するための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメントであって、前記抗体またはその結合フラグメントの最初の２回の投与は、２週間（＋／−３日）間隔を空けて提供され、続いて、さらなる投与は、４週間（＋／−３日）毎に提供され、各用量は、体重１ｋｇ当たり２．５ｍｇ（２．５ｍｇ／ｋｇ）〜２０ｍｇ／ｋｇ、好ましくは２．５ｍｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ、好ましくは２．５ｍｇ／ｋｇ〜７．５ｍｇ／ｋｇであり、好ましくは、最後の負荷投与と最初の維持投与との間の間隔は、４週間（＋／−３日）である、抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメントを提供する。好ましい一実施形態において、負荷投与は、５ｍｇ／ｋｇであり、維持投与は、５ｍｇ／ｋｇであり、最後の負荷投与と最初の維持投与との間の時間間隔は、４週間（＋／−３日）である。
【０１１０】
別の態様において、本発明は、治療有効量の抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメントを、それを必要とする対象に投与する工程を含む、ＳＣＰＣの頻度を減少させる方法であって、前記抗体またはその結合フラグメントの最初の２回の投与は、２週間（＋／−３日）間隔を空けて提供され、続いて、さらなる投与は、４週間（＋／−３日）毎に提供され、各用量は、２．５ｍｇ／ｋｇ〜２０ｍｇ／ｋｇ、または２．５ｍｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ、または２．５ｍｇ／ｋｇ〜７．５ｍｇ／ｋｇである、方法を提供する。
【０１１１】
一実施形態において、前記用量のそれぞれは、２．５ｍｇ／ｋｇである。別の実施形態において、前記用量のそれぞれは、５ｍｇ／ｋｇである。別の実施形態において、前記用量のそれぞれは、７．５ｍｇ／ｋｇである。用量が最初に７．５ｍｇ／ｋｇである場合、用量は、負荷投与後の任意の時点において、通常、最後の負荷投与の１カ月、２カ月、３カ月、４カ月、５カ月、６カ月、７カ月、８カ月、９カ月、１０カ月または１１カ月後に安全上の理由から５ｍｇ／ｋｇに減少されることが許容される。安全性パラメータは、治療中、医療従事者によって監視される。その際、基準は、表７に示されるものを含み得るが、必ずしもこれらに限定されない。
【０１１２】
本発明の実施形態
実施形態（ａ）
１ａ．Ｐ−セレクチン媒介性疾患の治療または予防に使用するための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメントであって、最初に、負荷段階であって、その間に対象が所定の期間にわたって第１の量の抗体またはその結合フラグメントを受ける、負荷段階において提供され、かつ次に、さらなる量の抗体またはその結合フラグメントは、維持段階であって、その間に対象が所定の期間にわたってより少ない量の抗体またはその結合フラグメントを受ける、維持段階において提供される、抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０１１３】
２ａ．配列番号１のアミノ酸１〜３５に対応するエピトープにおいてＰ−セレクチンに結合する、実施形態１ａに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０１１４】
３ａ．配列番号１３と少なくとも９０％同一である重鎖配列を含む、実施形態１ａまたは２ａに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０１１５】
４ａ．配列番号１２と少なくとも９０％同一である軽鎖配列を含む、実施形態１ａ〜３ａに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０１１６】
５ａ．抗体は、配列番号１３と少なくとも９０％同一である重鎖配列と、配列番号１２と少なくとも９０％同一である軽鎖配列とを含む、実施形態１ａ〜４ａに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０１１７】
６ａ．Ｐ−セレクチン媒介性疾患は、鎌状赤血球症疼痛発作である、実施形態１ａ〜５ａに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０１１８】
７ａ．静脈内経路によって対象に提供される、実施形態１ａ〜６ａに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０１１９】
８ａ．２．５ｍｇ／ｋｇ〜５ｍｇ／ｋｇの量で対象に提供される、実施形態１ａ〜７ａに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０１２０】
９ａ．５ｍｇ／ｋｇの量で対象に提供される、実施形態８ａに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０１２１】
１０ａ．２回の負荷投与で対象に提供される、実施形態１ａ〜９ａに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０１２２】
１１ａ．負荷投与間の時間間隔は、２週間（＋／−３日）である、実施形態１ａ〜１０ａに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０１２３】
１２ａ．維持投与間の時間間隔は、４週間（＋／−３日）である、実施形態１ａ〜１１ａに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０１２４】
１３ａ．ヒドロキシウレアとさらに組み合わされる、実施形態１ａ〜１２ａに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０１２５】
１４ａ．低い免疫原性を有する、実施形態１ａ〜１３ａに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０１２６】
１５ａ．前記抗体は、クリザンリズマブである、実施形態１ａ〜１４ａに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０１２７】
実施形態（ｂ）
１ｂ．鎌状赤血球症疼痛発作の予防に使用するための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメントであって、１回以上の負荷投与、続いて複数回の維持投与において１ｍｇ／ｋｇ〜２０ｍｇ／ｋｇの量で対象に提供され、維持投与間の平均時間間隔は、１回以上の負荷投与後の平均時間間隔より長く、または負荷投与の濃度は、維持投与の濃度より高い、抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０１２８】
２ｂ．配列番号１のアミノ酸１〜３５に対応するエピトープにおいてＰ−セレクチンに結合する、実施形態１ｂに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０１２９】
３ｂ．配列番号１３と少なくとも９０％同一である重鎖配列を含む、実施形態１ｂまたは２ｂに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０１３０】
４ｂ．配列番号１２と少なくとも９０％同一である軽鎖配列を含む、実施形態１ｂ〜３ｂに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０１３１】
５ｂ．抗体は、配列番号１３と少なくとも９０％同一である重鎖配列と、配列番号１２と少なくとも９０％同一である軽鎖配列とを含む、実施形態１ｂ〜４ｂに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０１３２】
６ｂ．静脈内経路によって対象に提供される、実施形態１ｂ〜５ｂに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０１３３】
７ｂ．２．５ｍｇ／ｋｇ〜５ｍｇ／ｋｇの量で対象に提供される、実施形態１ｂ〜６ｂに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０１３４】
８ｂ．５ｍｇ／ｋｇの量で対象に提供される、実施形態７ｂに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０１３５】
９ｂ．２回の負荷投与で対象に提供される、実施形態１ｂ〜８ｂに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０１３６】
１０ｂ．負荷投与間の時間間隔は、２週間（＋／−３日）である、実施形態１ｂ〜９ｂに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０１３７】
１１ｂ．維持投与間の時間間隔は、４週間（＋／−３日）である、実施形態１ｂ〜１０ｂに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０１３８】
１２ｂ．鎌状赤血球症疼痛発作の予防は、遺伝子型：ＨｂＳＳ、ＨｂＳＣ、ＨｂＳβ０−サラセミアおよびＨｂＳβ０＋サラセミアから選択される鎌状赤血球症に罹患している対象におけるものである、実施形態１ｂ〜１１ｂに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０１３９】
１３ｂ．ヒドロキシウレアとさらに組み合わされる、実施形態１ｂ〜１２ｂに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０１４０】
１４ｂ．低い免疫原性を有する、実施形態１ｂ〜１３ｂに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０１４１】
１５ｂ．前記抗体は、クリザンリズマブである、実施形態１ｂ〜１４ｂに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０１４２】
実施形態（ｃ）
１ｃ．Ｐ−セレクチン媒介性疾患を治療または予防する方法であって、抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメントを対象に提供する工程を含み、抗体またはその結合フラグメントは、最初に、負荷段階であって、その間に対象が所定の期間にわたって第１の量の抗体またはその結合フラグメントを受ける、負荷段階において提供され、かつ次に、維持段階であって、その間に対象が所定の期間にわたってより少ない量の抗体またはその結合フラグメントを受ける、維持段階においてさらに提供される、方法。
【０１４３】
２ｃ．抗体またはその結合フラグメントは、配列番号１のアミノ酸１〜３５に対応するエピトープにおいてＰ−セレクチンに結合する、実施形態１ｃに記載の方法。
【０１４４】
３ｃ．抗体またはその結合フラグメントは、配列番号１３と少なくとも９０％同一である重鎖配列を含む、実施形態１ｃまたは２ｃに記載の方法。
【０１４５】
４ｃ．抗体またはその結合フラグメントは、配列番号１２と少なくとも９０％同一である軽鎖配列を含む、実施形態１ｃ〜３ｃに記載の方法。
【０１４６】
５ｃ．抗体は、配列番号１３と少なくとも９０％同一である重鎖配列と、配列番号１２と少なくとも９０％同一である軽鎖配列とを含む、実施形態１ｃ〜４ｃに記載の方法。
【０１４７】
６ｃ．Ｐ−セレクチン媒介性疾患は、鎌状赤血球症疼痛発作である、実施形態１ｃ〜５ｃに記載の方法。
【０１４８】
７ｃ．抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメントは、静脈内経路によって対象に提供される、実施形態１ｃ〜６ｃに記載の方法。
【０１４９】
８ｃ．抗体またはその結合フラグメントは、２．５ｍｇ／ｋｇ〜５ｍｇ／ｋｇの量で対象に提供される、実施形態１ｃ〜７ｃに記載の方法。
【０１５０】
９ｃ．抗体またはその結合フラグメントは、５ｍｇ／ｋｇの量で対象に提供される、実施形態８ｃに記載の方法。
【０１５１】
１０ｃ．抗体またはその結合フラグメントは、２回の負荷投与で対象に提供される、実施形態１ｃ〜９ｃに記載の方法。
【０１５２】
１１ｃ．負荷投与間の時間間隔は、２週間（＋／−３日）である、実施形態１ｃ〜１０ｃに記載の方法。
【０１５３】
１２ｃ．維持投与間の時間間隔は、４週間（＋／−３日）である、実施形態１ｃ〜１１ｃに記載の方法。
【０１５４】
１３ｃ．ヒドロキシウレアとさらに組み合わされる、実施形態１ｃ〜１２ｃに記載の方法。
【０１５５】
１４ｃ．鎌状赤血球症疼痛発作の予防は、遺伝子型：ＨｂＳＳ、ＨｂＳＣ、ＨｂＳβ０−サラセミアおよびＨｂＳβ０＋サラセミアから選択される鎌状赤血球症に罹患している対象におけるものである、実施形態１ｃ〜１３ｃに記載の方法。
【０１５６】
１５ｃ．抗体またはその結合フラグメントは、低い免疫原性を有する、実施形態１ｃ〜１４ｃに記載の方法。
【０１５７】
１６ｃ．前記抗体は、クリザンリズマブである、実施形態１ｃ〜１５ｃに記載の方法。
【０１５８】
実施形態（ｄ）
１ｄ．鎌状赤血球症疼痛発作を予防する方法であって、抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメントを１回以上の負荷投与、続いて複数回の維持投与において１ｍｇ／ｋｇ〜２０ｍｇ／ｋｇの量で対象に提供する工程を含み、維持投与間の平均時間間隔は、１回以上の負荷投与後の平均時間間隔より長く、または負荷投与の濃度は、維持投与の濃度より高い、方法。
【０１５９】
２ｄ．配列番号１のアミノ酸１〜３５に対応するエピトープにおいてＰ−セレクチンに結合する、実施形態１ｄに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０１６０】
３ｄ．配列番号１３と少なくとも９０％同一である重鎖配列を含む、実施形態１ｄまたは２ｄに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０１６１】
４ｄ．配列番号１２と少なくとも９０％同一である軽鎖配列を含む、実施形態１ｄ〜３ｄに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０１６２】
５ｄ．抗体は、配列番号１３と少なくとも９０％同一である重鎖配列と、配列番号１２と少なくとも９０％同一である軽鎖配列とを含む、実施形態１ｄ〜４ｄに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０１６３】
６ｄ．静脈内経路によって対象に提供される、実施形態１ｄ〜５ｄに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０１６４】
７ｄ．２．５ｍｇ／ｋｇ〜５ｍｇ／ｋｇの量で対象に提供される、実施形態１ｄ〜６ｄに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０１６５】
８ｄ．５ｍｇ／ｋｇの量で対象に提供される、実施形態７ｄに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０１６６】
９ｄ．２回の負荷投与で対象に提供される、実施形態１ｄ〜８ｄに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０１６７】
１０ｄ．負荷投与間の時間間隔は、２週間（＋／−３日）である、実施形態１ｄ〜９ｄに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０１６８】
１１ｄ．維持投与間の時間間隔は、４週間（＋／−３日）である、実施形態１ｄ〜１０ｄに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０１６９】
１２ｄ．ヒドロキシウレアとさらに組み合わされる、実施形態１ｄ〜１１ｄに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０１７０】
１３ｄ．鎌状赤血球症疼痛発作の予防は、遺伝子型：ＨｂＳＳ、ＨｂＳＣ、ＨｂＳβ０−サラセミアおよびＨｂＳβ０＋サラセミアから選択される鎌状赤血球症に罹患している対象におけるものである、実施形態１ｄ〜１２ｄに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０１７１】
１４ｄ．低い免疫原性を有する、実施形態１ｄ〜１３ｄに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０１７２】
１５ｄ．前記抗体は、クリザンリズマブである、実施形態１ｄ〜１４ｄに記載の方法。
【０１７３】
実施形態（ｅ）
１ｅ．鎌状赤血球症疼痛発作の予防に使用するための抗Ｐ−セレクチン抗体であって、最初に、負荷段階であって、その間に対象が２．５ｍｇ／ｋｇ〜５ｍｇ／ｋｇの量で抗体の２回の負荷投与を受け、２回の負荷投与間の時間間隔が２週間（＋／−３日）である、負荷段階において提供され、かつ次に、維持段階であって、その間に対象が２．５ｍｇ／ｋｇ〜５ｍｇ／ｋｇの抗体の複数回の維持投与を受け、複数回の維持投与間の時間間隔が４週間（＋／−３日）である、維持段階においてさらに提供される、抗Ｐ−セレクチン抗体。
【０１７４】
２ｅ．配列番号１のアミノ酸１〜３５に対応するエピトープにおいてＰ−セレクチンに結合する、実施形態１ｅに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体。
【０１７５】
３ｅ．配列番号１３と少なくとも９０％同一である重鎖配列を含む、実施形態１ｅまたは２ｅに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体。
【０１７６】
４ｅ．配列番号１２と少なくとも９０％同一である軽鎖配列を含む、実施形態１ｅ〜３ｅに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体。
【０１７７】
５ｅ．配列番号１３と少なくとも９０％同一である重鎖配列と、配列番号１２と少なくとも９０％同一である軽鎖配列とを含む、実施形態１ｅ〜４ｅに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン。
【０１７８】
６ｅ．配列番号１３と少なくとも９０％同一である重鎖配列と、配列番号１２と少なくとも９０％同一である軽鎖配列とからなる、実施形態１ｅ〜５ｅに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン。
【０１７９】
７ｅ．静脈内経路によって対象に提供される、実施形態１ｅ〜６ｅに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体。
【０１８０】
８ｅ．ヒドロキシウレアとさらに組み合わされる、実施形態１ｅ〜７ｅに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体。
【０１８１】
９ｅ．鎌状赤血球症疼痛発作の予防は、遺伝子型：ＨｂＳＳ、ＨｂＳＣ、ＨｂＳβ０−サラセミアおよびＨｂＳβ０＋サラセミアから選択される鎌状赤血球症に罹患している対象におけるものである、実施形態１ｅ〜８ｅに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体。
【０１８２】
１０ｅ．抗体またはその結合フラグメントは、低い免疫原性を有する、実施形態１ｅ〜９ｅに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体。
【０１８３】
１１ｅ．クリザンリズマブである、実施形態１ｅ〜１０ｅに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体。
【０１８４】
実施形態（ｆ）
１ｆ．対象におけるＰ−セレクチン媒介性疾患の治療または予防に使用するための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメントであって、前記抗体またはその結合フラグメントの最初の２回の投与は、２週間（＋／−３日）間隔を空けて提供され、続いて、さらなる投与は、４週間（＋／−３日）毎に提供され、各用量は、体重１ｋｇ当たり２．５ｍｇ（２．５ｍｇ／ｋｇ）〜２０ｍｇ／ｋｇである、抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０１８５】
２ｆ．治療有効量の抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメントを、それを必要とする対象に投与する工程を含む、ＳＣＰＣの頻度を減少させる方法であって、前記抗体またはその結合フラグメントの最初の２回の投与は、２週間（＋／−３日）間隔を空けて提供され、続いて、さらなる投与は、４週間（＋／−３日）毎に提供され、各用量は、２．５ｍｇ／ｋｇ〜２０ｍｇ／ｋｇである、方法。
【０１８６】
３ｆ．前記用量のそれぞれは、２．５ｍｇ／ｋｇである、実施形態１ｆまたは２ｆに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０１８７】
４ｆ．前記用量のそれぞれは、５ｍｇ／ｋｇである、実施形態１ｆまたは２ｆに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０１８８】
５ｆ．前記用量のそれぞれは、７．５ｍｇ／ｋｇである、実施形態１ｆまたは２ｆに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０１８９】
６ｆ．用量は、安全上の理由から治療過程において５ｍｇ／ｋｇに減少される、実施形態５ｆに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０１９０】
７ｆ．対象に静脈内で提供される、実施形態１ｆ〜６ｆのいずれか１つに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０１９１】
８ｆ．Ｐ−セレクチン媒介性疾患は、鎌状赤血球症である、実施形態１ｆ〜７ｆのいずれか１つに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０１９２】
９ｆ．Ｐ−セレクチン媒介性疾患は、鎌状赤血球症疼痛発作である、実施形態１ｆ〜８ｆのいずれか１つに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０１９３】
１０ｆ．対象は、ＨｂＳＳ遺伝子型を有する、実施形態８ｆまたは９ｆに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０１９４】
１１ｆ．前記対象は、ヒドロキシウレアを受けたか、受けているか、または受けることになる、実施形態１ｆ〜１０ｆのいずれか１つに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０１９５】
１２ｆ．配列番号１のアミノ酸１〜３５に対応するエピトープにおいてＰ−セレクチンに結合する、実施形態１ｆ〜１１ｆのいずれか１つに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０１９６】
１３ｆ．抗体は、ヒト化されている、実施形態１ｆ〜１２ｆのいずれか１つに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０１９７】
１４ｆ．それぞれ配列番号６、配列番号７および配列番号８から本質的になるかまたはそれからなる３つのＣＤＲを含む重鎖可変領域と、それぞれ配列番号２、配列番号３および配列番号４から本質的になるかまたはそれからなる３つのＣＤＲを含む軽鎖可変領域とを含む、実施形態１ｆ〜１３ｆのいずれか１つに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０１９８】
１５ｆ．配列番号５を含むか、それから本質的になるか、またはそれからなる軽鎖可変領域および配列番号９を含むか、それから本質的になるか、またはそれからなる重鎖可変領域を含む、実施形態１ｆ〜１４ｆのいずれか１つに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０１９９】
１６ｆ．前記抗体は、クリザンリズマブである、実施形態１ｆ〜１５ｆのいずれか１つに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０２００】
１７ｆ．少なくとも１年間にわたってＳＣＤ患者のＳＣＰＣイベントをなくすのに使用するための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０２０１】
１８ｆ．治療中の第１のＳＣＰＣまでの時間を少なくとも１カ月延長するのに使用するための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【０２０２】
１９ｆ．前記抗体は、クリザンリズマブである、実施形態１７ｆ〜１８ｆに記載の使用のための抗Ｐ−セレクチン抗体またはその結合フラグメント。
【実施例】
【０２０３】
１  方法
１．１  患者
試験に登録する前の１２カ月間に２〜１０回の鎌状赤血球症疼痛発作（ＳＣＰＣ）を起こした１６〜６５歳の、鎌状赤血球症（ＳＣＤ）（ＨｂＳＳ、ＨｂＳＣ、ＨｂＳβ０−サラセミア、ＨｂＳβ＋−サラセミアまたは他の遺伝子型）の確定された医療診断を有する男性または女性患者が適格であった。ヒドロキシウレア投与患者は、少なくとも６カ月間にわたってこの薬剤を投与され、少なくとも３カ月間の維持投与を受け、用量は、安全上の理由を除いて、５２週間の治療段階中に変更してはならなかった。スクリーニング検査時のヒドロキシウレア非投与患者において、ヒドロキシウレア治療は、５２週間の治療段階にわたって開始されてはならなかった。患者は、長期の赤血球輸血治療を受けることができなかった。選択基準および除外基準の詳細な一覧が表１に示される。
【０２０４】
１．２  試験設計
試験は、３０日間のスクリーニング段階、５２週間の治療段階および６週間の経過観察評価段階からなっていた。前年における過去のＳＣＰＣの回数（２〜４または５〜１０）および試験の治療段階中の同時のヒドロキシウレア使用（の有無）に従った層別化により、主として１：１：１の比率でランダム化を行い、インタラクティブウェブ／ボイスレスポンス（ｉｎｔｅｒａｃｔｉｖｅ  ｗｅｂ／ｖｏｉｃｅ−ｒｅｓｐｏｎｓｅ）システムを用いて、プラセボ、２．５ｍｇ／ｋｇのＳｅｌＧ１（低用量）または５．０ｍｇ／ｋｇのＳｅｌＧ１（高用量）のいずれかの投与を受けるように患者を割り当てた。患者は、１日目および１５日目±３日（負荷投与）にプラセボまたはＳｅｌＧ１の注入を受け、次に５０週にわたって４週間毎（維持投与）に合計で１４回の投与を受けた。
【０２０５】
治療段階の最後の来院が第５２週に行われた。治療段階中、有効性、免疫原性、安全性および薬物動態／薬力学的評価を、初回投与（１日目）前、初回投与の２週間後（１５日目、第２週）、５０週にわたって４週間毎および第５２週に各患者に対して完了した。１日目の投与から開始して、患者は、試験薬の投与を受けながら、５２週間の期間にわたって合計で１５回の来院を行うように予定を立てられた。経過観察評価段階のために、患者は、第５８週（最後の治療投与の８週間後）に評価のために来院した。
【０２０６】
１．３  臨床的有効性の決定
主要臨床的有効性エンドポイントは、ＳＣＰＣの年間発生率であった。ＳＣＰＣは、医療施設通院および経口もしくは非経口麻酔薬または非経口非ステロイド性抗炎症薬による治療を必要とする、血管閉塞イベント以外の医学的に決定される原因を有さない疼痛の急性発作として定義された。急性胸部症候群、肝臓血球貯留（ｈｅｐａｔｉｃ  ｓｅｑｕｅｓｔｒａｔｉｏｎ）、脾臓血球貯留（ｓｐｌｅｎｉｃ  ｓｅｑｕｅｓｔｒａｔｉｏｎ）および持続勃起症（医療施設への通院を必要とする）もＳＣＰＣであると見なされた。全ての場所にわたる一貫性を確保するために、試験調査者によって認識される全ての発作イベントが、ＳＣＤの治療を専門とする３人の独立した血液専門医を含む独立した盲検化された発作審査委員会（ＣＲＣ）（この委員会のメンバーの完全な一覧が補足用の付録に示される）によって判定された。階層としてヒドロキシウレア治療および分類された発作（ＳＣＰＣ）病歴のランダム化因子を用いて、判定されたデータに対して主要有効性分析を行った。
【０２０７】
二次有効性評価は、入院日数の年間発生率（入院日数に３６５を乗算し、それを最終日−ランダム化の日＋１で除算した値として定義される）、第１および第２のＳＣＰＣまでの時間および合併症のないＳＣＰＣの年間発生率を含んでいた。全ての有効性分析を、５２週間の治療段階中に収集されたデータに対して行った。ベースラインならびに第６、１０、１４、１８、２２、２６、３０、３４、３８、４２、４６、５０、５２および５８週で測定されたトラフＳｅｌＧ１血清濃度（薬物動態）および同じ時点で測定されたＰ−セレクチン／ＰＳＧＬ−１結合（薬力学）の阻害パーセントも評価した。
【０２０８】
１．４  安全性評価
スクリーニング段階中、５２週間の治療段階中の試験薬の投与前および後の所定の時点および最後の第５８週の通院による経過観察評価段階中に安全性評価を行った。安全性評価は、身体検査；バイタルサイン（血圧、脈拍数、呼吸数、酸素飽和度および口腔体温）；免疫原性、臨床検査（化学パネル、網状赤血球数による完全血球算定、尿検査、プロトロンビン時間／国際標準化比、活性化部分トロンボプラスチン時間、妊娠検査およびハプトグロビン）；１２誘導心電図；ならびに報告または観察されたＡＥを含んでいた。有害事象を、医薬品規制用語集（ＭｅｄＤＲＡ）（ｗｗｗ．ｍｓｓｏ．ｏｒｇ／ＭＳＳＯＷｅｂ／ｉｎｄｅｘ．ｈｔｍ）からの好ましい用語を用いてコード化し、３つの治療群における発生率として一覧にした。
【０２０９】
１．５  統計的分析
１群当たり少なくとも５０人の患者のサンプルサイズは、ＳＣＰＣの平均年間発生率がプラセボ群において３．０＋１．７の標準偏差であると仮定して、ＳＣＰＣの年間発生率の４０％の減少（すなわち３．０から１．８への変化）を検出するために、０．０５のα水準において９０％超の統計的検出力を試験に与えた。
【０２１０】
主要エンドポイントについて、ランダム化を行った全ての１９８人の患者に関するデータを用いて、治療企図の原則に従って分析を行い、高用量群におけるＳＣＰＣの年間発生率の減少を、ウィルコクソンの順位和検定を用いて分析した。階層的試験手順を用いて（高用量対プラセボの場合にはα＝０．０５、有意である場合には低用量対プラセボ）、ランダム化を前年における過去のＳＣＰＣ（２〜４または５〜１０）および同時のヒドロキシウレア使用（の有無）によって層別化した。合併症のないＳＣＰＣの年間発生率および入院日数に対する治療の効果を評価するために、ウィルコクソンの順位和検定を使用した。ログランク検定を用いて、３つの治療群における第１および第２のＳＣＰＣまでの時間を比較した。
【０２１１】
１．６  免疫原性の決定
免疫原性を、ＡｌｐｈａＬＩＳＡプラットフォームを用いて評価し、ここで、ＳｅｌＧ１をドナーおよびアクセプタービーズの両方に直接結合させる。患者血清をドナーおよびアクセプタービーズと混合する。血清中のＳｅｌＧ１に対する抗体の存在は、ドナーおよびアクセプタービーズを架橋して、測定可能な蛍光出力を生じさせる。
【０２１２】
１．７  可溶性Ｐ−セレクチンの測定
可溶性Ｐ−セレクチン（ｓＰ−セレクチン）のレベルを、１．２５時間の固相ＥＬＩＳＡにおいてヒトｓＰ−セレクチン免疫学的検定を用いて評価した。このアッセイは、定量的サンドイッチ免疫学的検定技術を用いる。ｓＰ−セレクチンに特異的なモノクローナル抗体をマイクロプレート上に予めコーティングした。標準、患者血清試料および対照を、西洋ワサビペルオキシダーゼに共役したｓＰ−セレクチンに特異的なポリクローナル抗体と一緒にウェルにピペット注入する。非結合共役抗体の除去後、基質を加え、色を発色させ、これは、被分析物濃度に比例する。
【０２１３】
２  結果
２．１  患者
米国、ブラジルおよびジャマイカの６０の場所における１９８人の患者（８９人の男性および１０９人の女性）が適格性基準を満たし、これらの患者を、２０１３年８月〜２０１５年１月まで、高用量ＳｅｌＧ１（６７人の患者）、低用量ＳｅｌＧ１（６６人の患者）またはプラセボ（６５人の患者）を受けるようにランダムに割り当てた。ランダム化を行った患者のうちの１２９人が試験を完了した。試験を早期に中断した患者は、３つの治療群間でバランスが取れていた。全ての１９８人のランダム化された患者は、治療企図解析に含まれていた。３つの治療群における患者のベースライン特徴および検査値は、同様であった（表２）。
【０２１４】
２．２  ＳｅｌＧ１の薬物動態、薬力学および免疫原性
高用量ＳｅｌＧ１は、隔週で２回の負荷投与後、４週間（±３日）毎に１回投与し、試験の治療段階を通してＰ−セレクチン／ＰＳＧＬ−１結合を有効に遮断した一方、低用量ＳｅｌＧ１は、部分的遮断を示した（図２）。ＳｅｌＧ１に対する抗体は、いずれの処置された患者でも検出されなかった。
【０２１５】
２．３  臨床的有効性
２．３．１  主要エンドポイント
治療段階の終了時、ＳＣＰＣの平均年間発生率は、プラセボ群において２．９８であったのに対し、高用量群において１．６３であった（４５．３％の減少、Ｐ＝０．０１）（表３）。低用量群におけるＳＣＰＣの平均発生率が２．０１であったため（プラセボ群と比べて３２．６％の減少、Ｐ＝０．１８）、薬剤効果は、用量依存的であるようであった。試験の終了時にゼロのＳＣＰＣ発生率を有する患者の数は、高用量群において６７人中２４人（３５．８％）、低用量群において６６人中１２人（１８．２％）、プラセボ群において６５人中１１人（１６．９％）であった。表４は、ＳＣＰＣイベントを起こさない患者部分集団の事後解析を示す。ＳｅｌＧ１  ５．０ｍｇ／ｋｇによる治療は、高リスク部分集団においても、ＳＣＤの成人患者が治療中にＳＣＰＣイベントを起こさない可能性を高めるようである。ＳｅｌＧ１  ５．０ｍｇ／ｋｇは、ＨＵを投与されているにもかかわらず前年に少なくとも２回のＳＣＰＣを起こした患者でも有効であり、これは、この用量が、依然として満たされていない医学的ニーズを満たす疾患修飾薬として有効であることを示唆している。
【０２１６】
主要エンドポイント結果のロバスト性を、プロトコルに適合した集団におけるＳＣＰＣの年間発生率の分析において評価した。ＳＣＰＣの平均年間発生率は、プラセボ群において２．１８であったのに対し、高用量群において１．０４であった（５２．３％の減少、Ｐ＝０．０１８）。プロトコルに適合した集団において５２週間の治療段階を通してＳＣＰＣを起こさなかった患者の数は、高用量群において４０人中１５人（３７．５％）であり、プラセボ群において４１人中５人（１２．２％）であった。
【０２１７】
ＳＣＰＣの年間発生率を同時のヒドロキシウレアの投与およびＳＣＤ遺伝子型（ＨｂＳＳまたは他の遺伝子型）に基づいて評価した。同時のヒドロキシウレアの投与を受けた患者におけるＳＣＰＣの平均年間発生率は、プラセボ群において３．５８であったのに対し、高用量群において２．４３であった（３２．１％の減少、Ｐ＝０．０８４）一方、同時のヒドロキシウレアの投与を受けなかった患者におけるＳＣＰＣの発生率は、プラセボ群において２．００であったのに対し、高用量群において１．００であった（５０．０％の減少、Ｐ＝０．０４６）。ＨｂＳＳ遺伝子型を有する患者におけるＳＣＰＣの平均年間発生率は、プラセボ群において３．０１であったのに対し、高用量群において１．９７であり（３４．６％の減少、Ｐ＝０．０６０）、他の遺伝子型（ＨｂＳＣ、ＨｂＳβ０−サラセミア、ＨｂＳβ＋−サラセミアおよび他の遺伝子型）を有する患者におけるＳＣＰＣの発生率は、プラセボ群において２．００であったのに対し、高用量群において０．９９であった（５０．５％の減少、Ｐ＝０．２２）。異なる部分群における高用量群とプラセボ群との間の差の大きさは、一次解析について観察されたものと同様であったが、これらの部分群の分析は、それを行うほどの統計的検出力を有さなかったため、概して統計的有意性に達しなかった。
【０２１８】
２．３．２  二次エンドポイント
高用量群およびプラセボ群についての入院日数の平均年間発生率は、それぞれ４．００および６．８７であり、ＳｅｌＧ１治療により４１．８％減少したが、治療差は、データの変動（表５）のために有意でなかった（Ｐ＝０．４５０）。
【０２１９】
第１のＳＣＰＣまでの平均時間は、プラセボで処置された患者と比べて、高用量ＳｅｌＧ１で処置された患者において有意に長く（１．３８カ月に対して４．０７カ月、Ｐ＝０．００１）、第２のＳＣＰＣまでの平均時間も同様であった（５．０９カ月に対して１０．３２カ月、Ｐ＝０．０２２）（表５）。５．０ｍｇ／ｋｇのＳｅｌＧ１治療によるＳＣＰＣの頻度の減少は、治療の２週間以内に明らかになり、効果は、５２週間の治療段階を通して維持された（図１Ａ）。
【０２２０】
評価されるほぼ全ての部分集団において、ＳｅｌＧ１  ５．０ｍｇ／ｋｇは、プラセボと比べて第１のＳＣＰＣまでの時間を２倍以上増加させた（表６）。効果は、両方のＳＣＰＣ部分群において存在していた（前年に２〜４および５〜１０回のＳＣＰＣ）。最大の治療差は、ＨｂＳＳ遺伝子型を有する患者において観察され、プラセボと比べてＳｅｌＧ１  ５．０ｍｇ／ｋｇについて観察された第１のＳＣＰＣまでの時間が３．７倍増加した（１．１カ月に対して４．１カ月；危険率：０．５０）。前年に２〜１０回のＳＣＰＣを起こした、ＨＵの投与を受けている患者において、試験中の（ｏｎ−ｓｔｕｄｙ）第１のＳＣＰＣまでの時間がプラセボと比べてＳｅｌＧ１  ５．０ｍｇ／ｋｇでより長かった（１．２カ月に対して２．４カ月；危険率：０．５８）ことも注目に値する。
【０２２１】
要するに、ＳｅｌＧ１  ５．０ｍｇ／ｋｇによる治療は、ＨｂＳＳ遺伝子型を有する患者を含む調査される部分集団のほとんどにおいて、プラセボと比較して、ＳＣＤに罹患した成人における治療中の第１のＳＣＰＣまでの時間を有意に遅らせ、これは、疾患修飾の可能性を示唆している。ＳｅｌＧ１  ５．０ｍｇ／ｋｇは、前年に２〜１０回のＳＣＰＣを依然として起こした、ＨＵの投与を受けている個体においても有効であり、これは、Ｐ−セレクチン阻害の相乗的治療効果を示している。
【０２２２】
第１および第２のＳＣＰＣまでの平均時間はまた、プラセボと比べて、２．５ｍｇ／ｋｇのＳｅｌＧ１で処置された患者においてより長かったが、これらの差は、有意でなかった（図１Ａおよび１Ｂ、表５）。プラセボ群と比べた高用量群における合併症のないＳＣＰＣの年間発生率は、６２．９％減少された（２．９１に対して１．０８の中央値、Ｐ＝０．０１５）。
【０２２３】
２．３．３  可溶性Ｐ−セレクチンレベル
Ｐ−セレクチンの可溶性形態は、膜貫通領域を欠いたアイソフォームを生成する選択的ｍＲＮＡスプライシングおよび／またはＰ−セレクチンの膜結合形態のタンパク分解的切断のいずれかから得られる。可溶性Ｐ−セレクチンは、血小板および／または内皮細胞の活性化に関与する様々な病理的状態のための有用なバイオマーカーとして提案されている。ＳｅｌＧ１による治療は、鎌状赤血球症に罹患した患者における可溶性Ｐ−セレクチンレベルを有意に減少させることが分かった。可溶性Ｐ−セレクチンの減少は、処置される患者において示される臨床的改善と一致している（図３）。
【０２２４】
２．４  安全性
重篤な有害事象が５５人の患者：高用量群で１７人、低用量群で２１人およびプラセボ群で１７人において報告された（表７）。積極的治療を受けた少なくとも２人の患者において起こる重篤な有害事象は、発熱、心内膜炎、インフルエンザ、肺炎および尿路感染症であった。いずれかの積極的投与群の患者の１０％以上で起こった有害事象は、関節痛、掻痒、嘔吐、胸痛、下痢、道路交通事故、疲労、筋肉痛、筋骨格胸痛、腹痛、インフルエンザおよび口腔咽頭痛であった。ＳｅｌＧ１治療による感染症の明らかな増加はなかった。５人の患者が試験中に死亡し、高用量群で２人、低用量群で１人およびプラセボ群で２人であり、死亡は、試験薬に関連しないものと見なされた。重篤かつ生命を脅かすものと考えられるが、死亡につながらない３つのさらなる単発の有害事象は、敗血症（プラセボ群）、貧血（低用量群）および頭蓋内出血（低用量群）を含む。
【０２２５】
３  結論
ＳＣＤの病態生理の理解が深まっているにもかかわらず、疾病に関連する合併症のための治療選択肢は、依然として限られている。１９９８年に米国食品医薬品局（ＦＤＡ）によって認可されたヒドロキシウレアは、依然として、同業者による審査を受けた研究においてＳＣＤの自然な経過を調節することが示された唯一の薬剤である（Ｃｈａｒａｃｈｅ  Ｓ  ｅｔ  ａｌ，ＮＥＪＭ，１９９５）。しかしながら、ヒドロキシウレアの投与を受けた多くの患者は、急性疼痛発作を起こし続け、末端器官障害を発生し、減少した平均余命を有する（Ｓｔｅｉｎｂｅｒｇ  ＭＨ  ｅｔ  ａｌ，ＪＡＭＡ，２００３）。さらに、ヒドロキシウレア治療薬への接着は、依然として課題であり（Ｃａｎｄｒｉｌｌｉ  ＳＤ  ｅｔ  ａｌ，Ａｍ  Ｊ  ｈｅｍａｔｏｌ，２０１１）、一部の患者は、安全性への懸念からこの薬剤の投与を受けたがらない。最近の治験は、統計的に有意なかつ臨床的に重要な結果を示すことができておらず（Ｈｅｅｎｅｙ  ＭＭ  ｅｔ  ａｌ，Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ，２０１６；Ｍａｃｈａｄｏ，ＲＦ  Ｂｌｏｏｄ，２０１１；Ａｔａｇａ，ＫＩ  Ｂｒ．Ｊ．Ｈａｅｍａｔｏｌ，２０１１．）、疾患の病態生理の複雑さおよびＳＣＤにおいて成功した治療的介入を行うことの困難さを証明している。
【０２２６】
この第２相の多国籍、プラセボ対照試験において、本発明者らは、高用量ＳｅｌＧ１による治療がプラセボ治療と比べてＳＣＰＣの年間発生率の４６％の減少をもたらしたことを観察した。さらに、第１および第２のＳＣＰＣまでの平均時間は、プラセボと比較した際、高用量で処置された患者において２〜３倍長かった。これらの治療効果は、臨床的有意性を示す効果量を有し、統計的に有意であった。ＳＣＰＣの年間発生率ならびに第１および第２のＳＣＰＣまでの時間のより小さく有意でない差が、プラセボで処置された患者と比較して、低用量ＳｅｌＧ１で処置された患者において観察され、これは、用量依存的な効果を示し、Ｐ−セレクチン遮断がＳＣＤにおける血管閉塞を減少させることのさらなる確証を与える。
【０２２７】
この試験におけるＳｅｌＧ１の臨床的有効性は、ヒドロキシウレアの使用にもかかわらず頻繁な急性疼痛発作を起こすＳＣＤの患者ならびにヒドロキシウレア治療に失敗したかまたはそれを受けることを拒絶した患者に治療選択肢を与えるため、特に注目に値する。この試験は、登録された集団の部分群内の統計学的差異を検出するほどの統計的検出力を有さないが、プラセボで処置された患者と比べた、高用量ＳｅｌＧ１で処置された患者におけるＳＣＰＣの年間発生率の減少の大きさは、試験中のヒドロキシウレア使用を問わず、臨床的に重要であるようであった。したがって、ＳｅｌＧ１は、単一の薬剤として治療効果を提供し得るだけでなく、ＳＣＤの患者における疼痛発作の頻度を減少させる場合、ヒドロキシウレアと組み合わせて相加的またはおそらく相乗的な効果を提供し得る。
【０２２８】
ヒドロキシウレアは、ＨｂＳＳ患者における血管閉塞の合併症の治療用に認可されており、他の遺伝子型では十分に試験されていない。全ての一般的なＳＣＤ遺伝子型を有する患者を登録し、維持（ＳＵＳＴＡＩＮ）試験において処置し、ＨｂＳＳ以外の遺伝子型がＩＴＴ集団の２９％で観察された。プラセボ治療と比べて、ＳｅｌＧ１治療を用いた場合のＳＣＰＣの年間発生率の減少の大きさは、ＨｂＳＳ患者において３４．６％であり、ＨｂＳＳ以外の遺伝子型において５０．５％であり、これは、ＳＥＬＧ１が、ＨｂＳＳおよび他のＳＣＤ遺伝子型を有する患者に有益であることを示す。
【０２２９】
ＳｅｌＧ１は、試験中に良好な忍容性を示し、プラセボと比較して、積極的治療群において重篤な有害事象の発生率の増加はなかった。積極的投与群の患者の１０％以上で発生し、プラセボ群より少なくとも２倍増加した有害事象は、関節痛、掻痒、嘔吐、胸痛および下痢であった。感染症の明らかな増加はなかった。試験中に５人の死亡が起こったが、いずれも試験薬に関連しないものと見なされた。有害作用の低い発生率に加えて、いずれの患者も、試験中にＳｅｌＧ１に対する検出可能な免疫応答を発生しなかった。ＳｅｌＧ１のこの特徴は、この疾患設定において長期治療としてそれを投与する能力のために重要である。
【０２３０】
結論として、Ｐ−セレクチン阻害剤、ＳｅｌＧ１は、ＳＣＤの患者における鎌状赤血球症疼痛発作の頻度を用量依存的に有意に減少させ、安全でかつ忍容性良好であるようであった。ＳｅｌＧ１によるＳＣＰＣの臨床的に有意な減少が同時のヒドロキシウレア使用またはＳＣＤ遺伝子型にかかわらず観察された。ＳｅｌＧ１の月１回の静脈内（ＩＶ）投与によるＰ−セレクチンの慢性的阻害は、ＳＣＤの患者に対する潜在的に新たな疾患修飾治療選択肢を示し、この奇病に対する非常に限られた治療手段を広げるものである。
【０２３１】
４  さらなる臨床試験
４．１  目的
この第ＩＩ相オープンラベル、単一群、多施設共同試験を米国内の１０〜１５の場所で行う。評価可能なＰＫ／ＰＤデータを有する少なくとも２７人の患者を特定するために、最大で４５人の患者を登録し、クリザンリズマブ５．０ｍｇ／ｋｇを投与し、その後、探索的目的として、１０人の追加の患者を登録してクリザンリズマブ７．５ｍｇ／ｋｇを投与する。試験参加の前年に少なくとも１回の血管閉塞（ＶＯＣ）を起こした、任意の遺伝子型のＳＣＤの１８〜７０歳の患者が選択基準に適格である。ヒドロキシウレアの併用は、患者がそれを６カ月以下使用しており、試験期間にわたって安定した用量およびスケジュールで継続する予定である場合のみ許容される。クリザンリズマブは、最初の２週間後の追加の負荷投与とともに、４週間毎に少なくとも２年間にわたってまたは中止まで静脈内注射によって診療所内で投与される。投与中断および用量減少（わずかに７．５ｍｇ／ｋｇから５．０ｍｇ／ｋｇまで）は、安全上の理由から必要である場合に許容される。全ての患者は、第１の投与（第１週、１日目：投与前から投与の２４時間後まで、ならびに４、８および１５日目）および第５の投与（第１５週、１日目：投与前から投与の２４時間後まで、ならびにその後、４、８、１５、２２および２９日目）を受けたとき、完全なＰＫ／ＰＤおよび免疫原性サンプリングを受ける。投与前のＰＫ、ＰＤおよび免疫原性評価が第５１週まで各追加の治験来院時に行われ、第５１週から免疫原性評価が２４週間毎に行われる。最後の安全性経過観察のための来院が試験治療薬の最後の投与の１０５日後に行われる。クリザンリズマブ５．０ｍｇ／ｋｇ群中、単回投与の評価可能なＰＫプロファイルを有する少なくとも２７人の患者が存在し、そのうちの少なくとも５人が単回投与および複数回投与の評価可能なＰＫプロファイルを有する場合、中間解析が行われる。
【０２３２】
４．３  結果
主な目的は、１５日目までの曲線下面積［ＡＵＣ］、投与間隔の最後まで計算される定常状態ＡＵＣおよびＰＫパラメータとしての最大観察薬剤濃度（Ｃｍａｘ）；ならびにＰＤパラメータとしての１５日目までのおよび定常状態でのＡＵＣを用いて、クリザンリズマブ５．０ｍｇ／ｋｇのＰＫ／ＰＤプロファイルを特性評価することである。他のＰＫ（例えば、Ｃｍａｘまでの時間、薬剤消失速度および半減期）およびＰＤ（例えば、各時点でのＰ−セレクチン阻害およびＰ−セレクチン阻害時間プロファイル）パラメータが副次的変数として分析される。副次的目的は、クリザンリズマブの有効性、安全性および忍容性を評価することである。
【０２３３】
【表１】
2019534287.tif 000003
【０２３４】
【表２】
2019534287.tif 000004
【０２３５】
【表３】
2019534287.tif 000005
【０２３６】
【表４】
2019534287.tif 000006
【０２３７】
【表５】
2019534287.tif 000007
【０２３８】
【表６】
2019534287.tif 000008
【０２３９】
【表７】
2019534287.tif 000009
【０２４０】
【表８】
2019534287.tif 000010
【０２４１】
【表９】
2019534287.tif 000011
【０２４２】
【表１０】
2019534287.tif 000012
【０２４３】
配列
配列番号１  Ｐ−セレクチンアミノ酸配列
【化１】
2019534287.tif 000013
配列番号２  ＣＤＲ軽鎖アミノ酸配列
ＫＡＳＱＳＶＤＹＤＧＨＳＹＭＮ
配列番号３  ＣＤＲ軽鎖アミノ酸配列
ＡＡＳＮＬＥＳ
配列番号４  ＣＤＲ軽鎖アミノ酸配列
ＱＱＳＤＥＮＰＬＴ
配列番号５  成熟軽鎖可変領域アミノ酸配列
【化２】
2019534287.tif 000014
配列番号６  ＣＤＲ重鎖アミノ酸配列
ＳＹＤＩＮ
配列番号７  ＣＤＲ重鎖アミノ酸配列
ＷＩＹＰＧＤＧＳＩＫＹＮＥＫＦＫＧ
配列番号８  ＣＤＲ重鎖アミノ酸配列
ＲＧＥＹＧＮＹＥＧＡＭＤＹ
配列番号９  成熟重鎖可変領域アミノ酸配列
【化３】
2019534287.tif 000015
配列番号１０  ヒトκ定常領域アミノ酸配列
【化４】
2019534287.tif 000016
配列番号１１  ＩｇＧ２定常領域アミノ酸配列
【化５】
2019534287.tif 000017
配列番号１２  軽鎖成熟アミノ酸配列
【化６】
2019534287.tif 000018
配列番号１３  重鎖成熟アミノ酸配列
【化７】
2019534287.tif 000019
配列番号１４  軽鎖完全アミノ酸配列
【化８】
2019534287.tif 000020
配列番号１５  重鎖完全アミノ酸配列
【化９】
2019534287.tif 000021
配列番号１８  完全軽鎖可変領域アミノ酸配列
【化１０】
2019534287.tif 000022
配列番号１９  完全重鎖可変領域アミノ酸配列
【化１１】
2019534287.tif 000023
配列番号２３  補体活性化を低下させる１つのアミノ酸残基変異を有するＩｇＧ２定常領域アミノ酸配列
【化１２】
2019534287.tif 000024
【図１】
2019534287.tif 000025
【図２】
2019534287.tif 000026
【図３】
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【国際調査報告】
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