(57)【要約】植物薬品の微生物の発酵方法であって、細胞壁破壊真菌により発酵をすることと、プロバイオティクスにより発酵をすることとを含む。【特許請求の範囲】
【請求項１】
先に細胞壁破壊真菌により発酵をすることと、さらにプロバイオティクスにより発酵をすることとを含む植物薬品の微生物の発酵方法。
【請求項２】
前記細胞壁破壊真菌は木質真菌と／或いはノムシタケ菌であることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記細胞壁破壊真菌は、霊芝、マツホド、チョレイマイタケ、冬虫夏草と／或いはサナギタケから選択されることを特徴とする請求項１〜２のうちいずれか一項に記載の方法。
【請求項４】
前記プロバイオティクスは、サッカロミケス、ピキア酵母、ハンゼヌラ酵母、乳酸桿菌、ビフィドバクテリウム桿菌、リューコノストック菌、レンサ球菌、ラクトコッカス、酢酸桿菌から選択される一種または多種であることを特徴とする請求項１〜３のうちいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
プロバイオティクスは、出芽酵母、出芽酵母、ピキア酵母、ピヒア・オウメリ(Pichia ohmeri)、ピヒア・メンブラネファシエンス（Pichia membranaefaciens）、ハンセヌラ・アノマラ(Hansenula anomala)、ブーフナー乳酸桿菌、パニス乳酸桿菌(Lactobacilluspanis)、アシドフィル乳酸桿菌、植物乳酸桿菌、発酵乳酸桿菌、唾液乳酸桿菌、乳酸短桿菌、ラクトバチルス‐ヴィリデセンス、ブルガリア乳酸桿菌、ラムノサス乳酸桿菌、ヘルベティカス乳酸桿菌、ラクトバチルス・カゼイ・亜種・カゼイ、ラクトバチルス・ヘルベティカス・サブスピーシーズ・ユーグルティ、イエンセン乳酸桿菌、ペントーサス乳酸桿菌、アセトバクター属酢酸桿菌、ランセンス・酢酸桿菌、アドレサンス・ビフィドバクテリウム桿菌、ビフィドゥム・ビフィドバクテリウム桿菌、インファンティス・ビフィドバクテリウム桿菌、ロンガム・ビフィドバクテリウム桿菌、リューコノストック・メゼンテロイデス、唾液連鎖球菌亜種サーモフィルス、ラクトコッカス・ラクティス・亜種・クレモリス桿菌桿菌桿菌桿菌桿菌桿菌桿菌桿菌桿菌桿菌桿菌桿菌桿菌桿菌桿菌桿菌桿菌桿菌桿菌から選択される一種または多種であることを特徴とする請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記プロバイオティクスは、酵母菌、乳酸桿菌および酢酸桿菌であることを特徴とする請求項５に記載の方法。
【請求項７】
酵母菌と乳酸桿菌を混合して発酵させた後、酢酸桿菌により再び発酵させることを特徴とする請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記植物薬品はオタネニンジンであることを特徴とする請求項１〜７のうちいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
前記植物薬品は葛根であることを特徴とする請求項１〜７のうちいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
請求項１〜９のうちいずれか一項に記載の方法により製作される製品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、植物薬品の発酵の分野に属し、より具体的には、微生物により所定の方向に発酵した植物薬品に関するものである。すなわち、植物薬品の有効成分の放出を促進することと／或いは植物薬品の薬効を増加させることを実現させることができる方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
天然の植物薬品、特に中薬（漢方薬）は、保健と治療の分野において化学方法によって製作された薬品が有していない利点を有しているので、幅広く応用されているが、有効成分の利用率がよくない問題を有している。従来の方法により植物薬品をせんじ出すとき、植物薬品の堅硬な細胞壁により植物薬品の有効成分を有効に煮出することができない。かつ、従来の中薬用植物の栽培方法による植物薬品は、有効成分の含有量が低く、重金属汚染物が含まれ、農薬の残留が多い欠点等を有しているので、その薬効は野生の植物薬品とはまだ大きな隔たりがある。したがって、植物薬品の有効成分の放出を安全に、有効に促進することができる方法を提供する必要がある。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
本発明において、植物薬品の有効成分の放出を安全に、有効に促進することができる方法を提供する。前記方法は、細胞壁破壊真菌により植物薬品を発酵させた後、プロバイオティクス（Probiotics）により植物薬品を一回または複数回再び発酵させる。本発明の方法により、植物薬品の細胞壁を有効に破壊し、植物薬品の有効成分の放出を促進し、植物薬品の利用率を増加させることができる。
【課題を解決するための手段】
【０００４】
本文の「植物薬品」とは、主として、植物の茎、葉、根と／或いは果実等を指し、それらを中医の薬剤の材料とすることができる。好ましくは、本文の植物薬品は中国の葯典またはその他国の葯典に記載される植物薬品であることができる。本発明の具体的実施形態において、本文の植物薬品はオタネニンジンまたは葛根である。オタネニンジンは、双子葉植物綱、セリ目（Apiales）、ウコギ科（Araliaceae）、人参属（Panax）に属し、葛根は、モクレン綱（Magnoliopsida）、バラ目(Rosales)、マメ科、クズ属（Pueraria）に属する。以上のとおり、オタネニンジンと葛根は違っている二種の植物である。本発明の方法はオタネニンジンと葛根に応用されることができる。それは本発明の方法の適用の範囲が広く、色々な植物薬品に適用できることを意味する。
【０００５】
本文の「細胞壁破壊真菌」とは、植物の細胞壁または昆虫の体壁等の堅硬な壁面を破壊することができる食用真菌を指す。壁面が破壊されるということは、壁面が完全に破裂することではなく、壁面に孔が形成されてその内部のものが放出することができることを意味する。前記細胞壁破壊真菌の範囲として、薬用真菌、例えば各国の葯典に記載されている多細胞真菌を含むことができる。具体的な実施形態において、前記細胞壁破壊真菌は肉眼で見ることができる子実体を形成することができる大型真菌である。
【０００６】
既知の植物の細胞壁の主な成分は、繊維素、ヘミ繊維素およびペクチン（Pectin）である。それらによりセルラーゼ、ヘミセルラーゼと／或いはペクチナーゼ（pectinase）の食用真菌を形成することができ、それらは植物の細胞壁を破壊することができるので、いずれも本文において説明した細胞壁破壊真菌に属する。
【０００７】
多数の食用真菌はいずれも、木質例えば木の上で育つことができ、堅硬な木質表面を破壊するとともに木質表面に付着していることができ、それらにより植物の細胞壁を破壊することができる。そのため、木質材料上で育つ多細胞真菌（「木質真菌」と略称）はいずれも、本文において説明した細胞壁破壊真菌に属する。具体的な例として、霊芝（Ganoderma）、マツホド（Poria  cocos）、チョレイマイタケ（Grifola umbellata）等がある。
【０００８】
木等の植物細胞は堅硬な表面を有しており、昆虫およびその幼虫の体壁にも堅硬な繊維素、キチン質のような成分が含まれている。前記真菌は昆虫（例えば鱗翅目）の幼虫または蛹に影響を与えるので、昆虫は幼虫→蛹→成虫の成長の過程を経ずに、幼虫または蛹の階段までしか育つことができない。そのような真菌は昆虫の幼虫または蛹の体の栄養により育つ。ノムシタケ菌はそのような真菌である。本中の「ノムシタケ菌」は広義にノムシタケ属（Cordyceps）の真菌を指す。そのような真菌は昆虫の体で寄生をし、虫体を菌糸（mycelium）が充満された?蚕に変換させることにより、僵蚕の前端に柄状または棒状の子座（Stroma）が形成される。現在、報道されているノムシタケ属真菌の種類は５００種以上があり、よく知っているノムシタケ属真菌は、冬虫夏草（Cordyceps  sinensis）、サナギタケ（Cordyceps  militaris）等がある。ノムシタケ菌は昆虫の体壁を破壊することができ、それにより体壁を破壊する成分、例えばセルラーゼ、キチン質等が形成されるので、前記真菌も本文の細胞壁破壊真菌に属する。
【０００９】
具体的な実施形態において、本文の細胞壁破壊真菌は木質真菌とノムシタケ菌を含む。好ましい実施形態において、本文の細胞壁破壊真菌は、霊芝、マツホド、チョレイマイタケ、冬虫夏草と／或いはサナギタケから選択することができる。
【００１０】
本文の「発酵（fermentation）」とは、植物またはその果実、茎、葉等の材料に微生物を入れて育てる過程を指す。微生物の生命の変化により炭水化物（carbohydrate）はアルコールと有機酸などに変換され、植物に含まれる成分（例えば栄養成分）は変化する。例えば、容易に放出し、活性が増加し、人体に容易に吸収される形式に変化することができる。
【００１１】
本文の「酵素（ferment  nutrients）」とは、植物がプロバイオティクスにより発酵することにより色々な生物の活性物の混合体を獲得し、その混合体は、発酵に参加する菌、発酵する食材、発酵に参加する菌と食材の活性物質、例えば多種の酵素（enzyme）を含み、かつ発酵により改良された成分、例えば活性が増加するか或いは人体に容易に吸収される形式に変化した成分等を更に含むことができる。
【００１２】
本中の「プロバイオティクス（Probiotics）」は人体の健康に良い影響を与える微生物を指す。プロバイオティクスによりヨーグルト、酵素等の食品を製作する。常用のプロバイオティクスとして、酵母菌（yeast）、乳酸桿菌（Lactobacillus）、ビフィドバクテリウム桿菌（Bifidobacterium）、リューコノストック菌（Leuconostoc）、レンサ球菌（Streptococcus）、ラクトコッカス（Lactococcus）、酢酸桿菌（Acetobacterium）等がある。前記酵母菌は、例えば、出芽酵母（Saccharomyces  cerevisiae）と清酒酵母（Saccharomyes  eerevisiae）等のサッカロミケス属（Saccharomyces）の酵母、ピキア酵母（Pichia  pastoris）、ピキアohmeri（Pichia  ohmeri）、ピキアmembranaefaciens（Pichia  membranaefaciens）等のピキア属（Pichia）の酵母、ハンゼヌラanomala（Hansenula  anomala）等のハンゼヌラ属（Hansenula）の酵母である。前記乳酸桿菌は、例えば、ブーフナー乳酸桿菌（Lactobacillus  buchneri）、ラクトバシラス乳酸桿菌(Lactobacillus  panis)、アシドフィル乳酸桿菌（Lactobacillus  acidophilus）、植物乳酸桿菌（Lactobacillus  plantarum）、フェルメンティ乳酸桿菌（Lactobacillus  fermenti）、唾液乳酸桿菌（Lactobacillus  salivarius）、ブレビス乳酸桿菌（Lactobacillus  brevis）、veridescens乳酸桿菌（Lactobacillus  veridescens）、デルブリュック・ブルガリクス乳酸桿菌（Lactobacillus  delbrueckii  bulgaricus）、ラムノサス乳酸桿菌（Lactobacillus  rhamnosus）、cellobiosus乳酸桿菌（Lactobacillus  cellobiosus）、ラクトバチルス・カゼイ・亜種・カゼイ（Lactobacillus  casei  subsp  casei）、ラクトバチルス・ヘルベティカス・サブスピーシーズ・ユーグルティ（Lactobacillus  helveticus  subsp.jugurti）、ジャンセン乳酸桿菌（Lacticum  Jansen）、ペントーサス乳酸桿菌（Lactobacillus  pentosus）等がある。前記ビフィドバクテリウム桿菌は、例えば、アドレサンス・ビフィドバクテリウム桿菌（Bifidobacterium  adolescents）、ビフィドゥム・ビフィドバクテリウム桿菌（Bifidobacterium  bifidum）、インファンティス・ビフィドバクテリウム桿菌（Bifidobacterium  infantis）、ロンガム・ビフィドバクテリウム桿菌（Bifidobacterium  longum）等がある。前記酢酸桿菌は、例えば、アセトバクター属酢酸桿菌（Acetobacter  pasteuranus）、ランセンス・酢酸桿菌（Acetobacter  rancens）等がある。他のプロバイオティクスは、ラクトコッカス・メセンテロイデス・球菌（Leuconostoc  mesenteroides  aureus）、唾液連鎖球菌亜種サーモフィルス（Streptococcus  salivarius  subsp.thermophilus）、ラクトコッカス・ラクティス・亜種・クレモリス（Lactococcus  lactis  subsp.Cremoris）等がある。
【００１３】
本発明において、違う植物薬品は細胞壁破壊真菌とプロバイオティクスにより発酵させると、従来の方法により得られた煎じ薬と比較してみると、本発明は煎じ薬中の植物薬品の有効成分の含有量を大幅に向上させ、従来の中薬の服用の方法を改善し、従来の中薬の栽培の方法によって薬効が低下する問題を防止することができる。本発明の方法により製作された植物薬品の発酵製品は、植物薬品の有効成分と、プ細胞壁破壊真菌およびロバイオティクスにより形成された色々な活性アルコールまたは活性物とを含む。それは栄養が豊富な製剤であり、そのような製剤により使用者の健康を調理することができる。
【００１４】
本発明において発酵方法を更に提供し、その方法により細胞壁破壊真菌の発酵とプロバイオティクスの発酵を結合させる。前記発酵方法は植物薬品の発酵方法であることができる。本発明の具体的な実施形態において、細胞壁破壊真菌の発酵をした後、プロバイオティクスの発酵をすることができる。本発明の具体的な実施形態において、プロバイオティクスの発酵は、酵母菌、乳酸桿菌および酢酸桿菌によりされることができる。本発明の具体的な実施形態において、プロバイオティクスの発酵は複数のステップによってされることができる。例えば、酵母菌と乳酸桿菌を混合して発酵させた後、酢酸桿菌の発酵をすることができる。細胞壁破壊真菌の発酵とプロバイオティクスの発酵をするとき、各細菌に適合する温度とｐＨ等を選択して栽培をしなければならない。具体的な条件はこの技術分野の技術者が常用の経験により確定することができる。
【００１５】
細胞壁破壊真菌、例えば霊芝、ノムシタケ菌などのカルチャーミディアム（culture  medium）として常用の事項を採用することができる。一例において、カルチャーミディアムの構成（重要％）は、グルコース（glucose）１〜６％、酵母エキス（Yeast  extract）０．１％〜０．４％、ペプトン（Peptone）０．１％〜０．８％、リン酸二水素カリウム０．０５％〜０．３％、硫酸マグネシウム０．０５％〜０．３％を含み、余量は水で調整することができる。炭素の源になるグルコースの代わりにポテト液体を採用し、他の成分を適当に調整することができる。そのような調整はこの技術分野の技術者が容易に実施することができる。本発明の実施例において、テストのシステムを一様性を確保するため、下記の構成（重要％）、すなわちグルコース２．４％、酵母エキス０．２％、ペプトン０．４％、リン酸二水素カリウム０．１％、硫酸マグネシウム０．１％、蒸留水９６．８％を採用することができる。
【００１６】
好ましい実施形態において、栽培の条件が一致するか或いは類似する細胞壁破壊真菌を同一のカルチャーミディアムに送入して栽培をすることができる。プロバイオティクスの発酵を更に実施するため、最終の製品には一種以上の細胞壁破壊真菌と／或いは活性成分が含まれることができる。
【００１７】
細胞壁破壊真菌の発酵の条件は、５０〜２５０ｒｐｍ、７〜３０℃であり、攪拌発酵を３〜４５日間実施することができる。この技術分野の技術者は各細菌の成長の条件によりそのような条件を容易に確定することができる。
【００１８】
プロバイオティクスの発酵をするとき、密閉させた後、１０〜４０℃の温度下において４８時間以上の発酵をすることができる。具体的な実施形態において、プロバイオティクスとして百万レベルの活性菌が含まれる細菌液体を採用し、総重量に相対する重量％1〜3‰である量により接種をすることができる。この技術分野の技術者はプロバイオティクスの成長の条件によりそのような条件を容易に確定することができる。
【００１９】
好ましくは、本発明の発酵方法は細胞壁破壊真菌の活性成分を取り出すステップを含まない。すなわち、本発明の発酵方法は、細胞壁破壊真菌を発酵させる前または発酵させた後、大型真菌を取り出す必要がなく、細胞壁破壊真菌の発酵とプロバイオティクスの発酵を同一の栽培システムにおいて同時に実施するか或いは発酵装置において順次に実施することができる。
【００２０】
本発明の具体的な実施形態において、本発明の発酵方法は次のステップを含む。
１、所定の植物薬品の新鮮な材料と植物薬品の製品を１０〜３０目の程度に粉砕し、それらを発酵容器に入れた後、５〜２０倍（重量％）の培養液を入れ、均等に攪拌して混合させる。
２、食用酢または食用水酸化ナトリウム溶液によりｐＨ値を５．０〜８．０に調整した後、蒸気を注入して３０〜６０min滅菌する。
３、室温まで冷却させた後、薬用菌を入れ、発酵容器の攪拌速度を５０〜２５０rpmにし、温度を７〜３０℃にし、３〜４５日間発酵させることにより、一回目の発酵をする。
４、一回目の発酵を完了した後、プロバイオティクスを入れ、密閉させた後、１０〜４０℃の温度において４８時間以上発酵させることにより、二回目の発酵をする。
５、滓を濾過することにより発酵液体を収集する。
【発明の効果】
【００２１】
本発明の効果は次のとおりである。細胞壁破壊真菌により植物薬品に対して一回目の発酵をした後、プロバイオティクスを入れ、植物薬品に対して二回目の発酵をする（二回以上の発酵をしてもよい）ことにより植物薬品の有効成分の放出を促進し、植物薬品の利用率を向上させることができる。また、細胞壁破壊真菌を使用することにより植物薬品の液体には細胞壁破壊真菌の有効成分が含まれ、植物薬品の薬効を増加させることができる。
【００２２】
具体的に、本発明は次の事項に関するものであり、さらに以下の付記を開示する。
【００２３】
（付記１）植物薬品の微生物の発酵方法であって、先に細胞壁破壊真菌により発酵をすることと、プロバイオティクスにより再び発酵をすることとを含む。
【００２４】
（付記２）項１に記載の方法であって、前記細胞壁破壊真菌は木質真菌と／或いはノムシタケ菌である。
【００２５】
（付記３）項１〜２のうちいずれか一項に記載の方法であって、前記細胞壁破壊真菌は、霊芝、マツホド、チョレイマイタケ、冬虫夏草と／或いはサナギタケから選択される。
【００２６】
（付記４）項１〜３のうちいずれか一項に記載の方法であって、前記プロバイオティクスは、サッカロミケス、ピキア酵母、ハンゼヌラ酵母、乳酸桿菌、ビフィドバクテリウム桿菌、リューコノストック菌、レンサ球菌属、ラクトコッカス、酢酸桿菌から選択される一種または多種である。
【００２７】
（付記５）項４に記載の方法であって、プロバイオティクスは、出芽酵母、出芽酵母、ピキア酵母、ピヒア・オウメリ(Pichia ohmeri)、ピヒア・メンブラネファシエンス（Pichia membranaefaciens）、ハンセヌラ・アノマラ(Hansenula anomala)、ブーフナー乳酸桿菌、パニス乳酸桿菌(Lactobacilluspanis)、アシドフィル乳酸桿菌、植物乳酸桿菌、発酵乳酸桿菌、唾液乳酸桿菌、乳酸短桿菌、ラクトバチルス‐ヴィリデセンス、ブルガリア乳酸桿菌、ラムノサス乳酸桿菌、ヘルベティカス乳酸桿菌、ラクトバチルス・カゼイ・亜種・カゼイ、ラクトバチルス・ヘルベティカス・サブスピーシーズ・ユーグルティ、イエンセン乳酸桿菌、ペントーサス乳酸桿菌、アセトバクター属酢酸桿菌、ランセンス・酢酸桿菌、アドレサンス・ビフィドバクテリウム桿菌、ビフィドゥム・ビフィドバクテリウム桿菌、インファンティス・ビフィドバクテリウム桿菌、ロンガム・ビフィドバクテリウム桿菌、リューコノストック・メゼンテロイデス、唾液連鎖球菌亜種サーモフィルス、ラクトコッカス・ラクティス・亜種・クレモリス桿菌桿菌桿菌桿菌桿菌桿菌桿菌桿菌桿菌桿菌桿菌桿菌桿菌桿菌桿菌桿菌桿菌桿菌桿菌から選択される一種または多種である。
【００２８】
（付記６）項５に記載の方法であって、前記プロバイオティクスは、酵母菌、乳酸桿菌および酢酸桿菌である。
【００２９】
（付記７）項６に記載の方法であって、酵母菌と乳酸桿菌を混合して発酵させた後、酢酸桿菌により再び発酵させる。
【００３０】
（付記８）項１〜７のうちいずれか一項に記載の方法であって、前記植物薬品はオタネニンジンである。
【００３１】
（付記９）項１〜７のうちいずれか一項に記載の方法であって、前記植物薬品は葛根である。
【００３２】
（付記１０）項１〜９のうちいずれか一項に記載の方法により製作される製品。
【発明を実施するための形態】
【００３３】
以下、実施例により本発明の事項を具体的に説明する。以下説明する実施例は、本発明の事項をより詳細に説明するためのものであるが、本発明の特許請求の範囲を限定するものでない。この技術分野の技術者は本発明の要旨を逸脱しない範囲において設計の改良、変更等をすることができ、それらがあっても本発明に含まれることは勿論である。
【００３４】
実施例１
オタネニンジンを１０Ｋｇを取って３０目の程度に粉砕して発酵容器に入れた後、８０Ｋｇの培養液（単位は重量％であり、グルコース２．４％、酵母エキス０．２％、ペプトン０．４％、リン酸二水素カリウム０．１％、硫酸マグネシウム０．１％、蒸留水９６．８％を含む）を入れて、充分に攪拌して混合させる。酸化ナトリウム溶液によりｐＨ値を６．８に調整した後、蒸気を注入して３０min滅菌する。室温まで冷却させた後、霊芝菌（湘赤芝１号、湖南省非重要農産物品種登記証明番号XPD010-2013、国家中医葯管理局の亜健康干渉技術実験室から獲得）を入れ、発酵容器の攪拌の速度を１２０rpmにし、温度を２０℃にし、１５日間発酵させる。次に、1‰（原料の総重量に対する重量％）の酵母菌（Pichia  ohmeri、ＣＧＭＣＣ番号２．１８０３、百万レベルの生菌数）と1‰（原料の総重量に対する重量％）の乳酸菌（植物乳酸桿菌(Lactobacillus  plantarum)、ＣＧＭＣＣ番号１．６９７１、百万レベルの生菌数）とを入れ、２８℃の温度下において７日間発酵させる。最後に、1‰（原料の総重量に対する重量％）の酢酸桿菌（Acetobacter  rancens  ＡＳ．１．４１、上海醸造第一工場から購入、百万レベルの生菌数）を入れ、３０℃の温度下において７日間培養する。その後、濾過により液体薬品を収集する。
【００３５】
測定によると、本発明の方法により処理されたオタネニンジン液体において、ジンセノサイド（Ginsenosides）の総含有量は１．０６ｍｇ／ｍＬ（測定方法はジンセノサイド含有量測定方法を参照、編集者は高麗萍など、浙江工程学院の校内新聞の2012,31(3):382-388を参照）に達し、従来の水薬（オタネニンジンと水の重量％比は１：８である）よりその濃度が７．０１倍増加したことを発見した。また、前記オタネニンジン液体中のトリテルペン（Triterpene）の含有量が０．７５ｍｇ／ｍＬ（測定方法は中華人民共和国薬典２０１５年版を参照することができる）であることも発見した。前記数値は三回以上のテストの数値の平均値である。
【００３６】
実施例２
オタネニンジンを１０Ｋｇを取って３０目の程度に粉砕して発酵容器に入れた後、実施例１において獲得した前記培養液を８０Ｋｇ入れて、充分に攪拌して混合させる。酸化ナトリウム溶液によりｐＨ値を６．８に調整した後、蒸気を注入して殺菌を３０minする。室温まで冷却させた後、霊芝菌（紫色霊芝、ＣＧＭＣＣ  ５．７７２、紫色霊芝に属する）を入れ、発酵容器の攪拌の速度を１００rpmにし、温度を２３℃にし、発酵を１５日する。次に、1‰（原料の総重量に対する重量％）の酵母菌（出芽酵母(Saccharomyces  cerevisiae)、ＣＧＭＣＣ番号２．３８８８、百万レベルの生菌数）と1‰（原料の総重量に対する重量％）の乳酸菌（ラクトバシラス乳酸桿菌(Lactobacillus  panis)、ＣＧＭＣＣ番号１．３９２５、百万レベルの生菌数）とを入れ、２８℃の温度下において発酵を７日する。最後に、1‰（原料の総重量に対する重量％）の酢酸桿菌（Acetobacter  rancens  ＡＳ．１．４１、百万レベルの生菌数）を入れ、３０℃の温度下において栽培を７日する。その後、濾過により液体薬品を収集する。
【００３７】
測定によると、本発明の方法により処理されたオタネニンジン液体において、ジンセノサイドの総含有量は１．０３ｍｇ／ｍＬ（測定方法は実施例１と同様）に達し、従来の水薬（オタネニンジンと水の重量％比は１：８である）よりその濃度が６．８１倍増加したことを発見した。また、前記オタネニンジン液体中のトリテルペンの含有量が０．６４ｍｇ／ｍＬ（測定方法は実施例１と同様）であることも発見した。前記数値は三回以上のテストの数値の平均値である。
【００３８】
実施例３
葛根を１０Ｋｇを取って２０目の程度に粉砕して発酵容器に入れた後、実施例１において獲得した前記培養液を１００Ｋｇ入れて、充分に攪拌して混合させる。酸化ナトリウム溶液によりｐＨ値を６．５に調整した後、１２１℃の高温により殺菌を３０minする。室温まで冷却させた後、ノムシタケ菌（湘北ノムシタケ１号、湖南省非重要農産物品種登記証明番号XPD009-2013、国家中医葯管理局の亜健康干渉技術実験室から獲得）を入れ、発酵容器の攪拌速度を１５０rpmにし、温度を２５℃にし、１０日間発酵させる。次に、３‰（原料の総重量に対する重量％）の酵母菌（出芽酵母、ＣＧＭＣＣ番号２．３９７３、百万レベルの生菌数）と1‰（原料の総重量に対する重量％）の乳酸菌（ブーフナー乳酸桿菌(Lactobacillus  buchneri)、ＣＧＭＣＣ番号１．３１１４、百万レベルの生菌数）とを入れ、２８℃の温度下において発酵を８日する。最後に、1‰（原料の総重量に対する重量％）の酢酸桿菌（アセトバクター属酢酸菌亜種(Acetobacter  pasteurianus  subspecies)１．０１、百万レベルの生菌数）を入れ、３０℃の温度下において栽培を７日する。その後、濾過により液体薬品を収集する。
【００３９】
測定によると、本発明の方法により処理された葛根液体において、プエラリン（puerarin）の含有量は０．１１９ｍｇ／ｍＬ（測定方法は中国国家標準GB/T 22251-2008の保健食品であるプエラリンの測定方法を参照）に達し、従来の水薬（葛根と水の重量％比は１：１０である）よりその濃度が１．２５倍増加したことを発見した。また、前記葛根液体中のコルジセピン（cordycepin）の含有量が１１．３ｍｇ／ｍＬ（測定方法はコルジセピン多産菌株の選別および色々な添加剤がコルジセピンの産量に与える影響の研究を参照、編集者は王蕾などであり、菌物学報の2012,31(3):382-388を参照）であることも発見した。前記数値は三回以上テストした数値の平均値である。
【００４０】
実施例４
葛根を１０Ｋｇを取って２０目の程度に粉砕して発酵容器に入れた後、実施例１において獲得した前記培養液を１００Ｋｇ入れて、充分に攪拌して混合させる。酸化ナトリウム溶液によりｐＨ値を６．５に調整した後、１２１℃の高温により３０min滅菌する。室温まで冷却させた後、ノムシタケ菌（サナギタケ(Cordyceps  militaris)、ＣＧＭＣＣ  ５．８５６）を入れ、発酵容器の攪拌の速度を１３０rpmにし、温度を２８℃にし、１０日間発酵させる。次に、３‰（原料の総重量に対する重量％）の酵母菌（Pichia membranifaciens、ＣＧＭＣＣ  ２．６６１、百万レベルの生菌数）と1‰（原料の総重量に対する重量％）の乳酸菌（ラクトバシラス乳酸桿菌、ＣＧＭＣＣ  １．３９２５、百万レベルの生菌数）とを入れ、２８℃の温度下において８日間発酵させる。最後に、1‰（原料の総重量に対する重量％）の酢酸桿菌（酢酸桿菌上海醸造１．０１、百万レベルの生菌数）を入れ、３０℃の温度下において栽培を７日する。その後、濾過により液体薬品を収集する。
【００４１】
測定によると、本発明の方法により処理された葛根液体において、プエラリンの含有量は０．１１３ｍｇ／ｍＬに達し、従来の水薬（葛根と水の重量％比は１：１０である）よりその濃度が１．１９倍増加した（測定方法は実施例３と同様）ことを発見した。また、前記葛根液体中のコルジセピンの含有量が１３．７ｍｇ／ｍＬ（測定方法は実施例３と同様）であることも発見した。前記数値は三回以上テストした数値の平均値である。
【国際調査報告】
2019514424.tif 000002
2019514424.tif 000003
2019514424.tif 000004
2019514424.tif 000005