(57)【要約】本発明は、遠心分離器に用いられる容器、それを用いた遠心分離方法、及びそれを用いてＳＶＦ（stromal vascular fraction）を分離する方法を提供する。具体的には、本発明による遠心分離器用容器の回転可能な本体部３００には、側面の外側に少なくとも放射状の一部が延びた側部収容部３１０が提供され、そこに放射状の末端が位置するプレート１５０を有する。こうすることにより、攪拌効果が実質的に除去され、分離効率が高くなり、優れたＳＶＦ収率が得られる。
2019514676.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
回転可能な本体部３００と、
前記本体部３００をカバーする覆蓋部２００と、
前記覆蓋部２００に備えられ、前記本体部３００の内側に流体疎通する複数の連結管１１１、１１２を含む連結部１００とを含む遠心分離器用容器であって、
前記本体部３００は、
前記本体部３００の側面の外側に少なくとも放射状の一部が延びた側部収容部３１０と、
前記側部収容部３１０上に放射状の末端が位置するプレート１５０とを含む、
遠心分離器用容器。
【請求項２】
前記側部収容部３１０は、放射状の全方向に延びた、
請求項１に記載の遠心分離器用容器。
【請求項３】
前記プレート１５０は回転体であるので、前記本体部３００の回転時に前記プレート１５０が回転しないにもかかわらず攪拌効果（stirring effect）が発生しない、
請求項２に記載の遠心分離器用容器。
【請求項４】
前記プレート１５０の内側には、前記複数の連結管１１１、１１２のいずれか一方の連結管１１２に流体疎通する側面流路１５２が備えられた、
請求項３に記載の遠心分離器用容器。
【請求項５】
前記連結管１１１、１１２の他方の連結管１１１の末端が前記本体部３００の本体下部３０３に達する、
請求項４に記載の遠心分離器用容器。
【請求項６】
前記連結部１００は、連結管ハウジング１１５をさらに含み、
前記複数の連結管１１１、１１２の前記他方の連結管１１１は、中央流路１２０を介して前記本体部３００の前記本体下部３０３に達し、
前記中央流路１２０の一部が前記連結管ハウジング１１５の内側に備えられ、
前記いずれか一方の連結管１１２は、前記連結管ハウジング１１５と前記中央流路１２０との間の空間を介して前記側面流路１５２に流体疎通し、
また、前記プレート１５０の中央には、前記連結管ハウジング１１５と前記中央流路１２０との間の空間を前記側面流路１５２に連結する側面流路開口１５１が位置する、
請求項５に記載の遠心分離器用容器。
【請求項７】
前記いずれか一方の連結管１１２と前記側面流路１５２を介して、前記遠心分離器用容器の外部と前記側部収容部３１０の内部が流体疎通する、
請求項６に記載の遠心分離器用容器。
【請求項８】
前記いずれか一方の連結管１１２と前記側面流路１５２を介して、前記側部収容部３１０に収容された物質が前記遠心分離器用容器の外部に排出され、前記遠心分離器用容器の外部の物質が前記側部収容部３１０に注入される、
請求項７に記載の遠心分離器用容器。
【請求項９】
前記連結管ハウジング１１５の上部の直径は前記連結管ハウジング１１５の下部の直径より小さく、
前記中央流路１２０は前記連結管ハウジング１１５の上部の内側に挿入結合され、
また、前記側面流路開口１５１は前記連結管ハウジング１１５の下部の内側に挿入結合される、
請求項８に記載の遠心分離器用容器。
【請求項１０】
前記側部収容部３１０は、前記本体部３００の上部、中間部又は下部から放射状外側に延びた、
請求項１に記載の遠心分離器用容器。
【請求項１１】
前記本体部３００は、本体上部３０１、本体中間部３０２及び本体下部３０３からなり、
前記本体上部３０１の直径が上側に行くにつれて徐々に増加し、
前記側部収容部３１０は、前記本体上部３０１において直径が増加した放射状外側部分である、
請求項１０に記載の遠心分離器用容器。
【請求項１２】
前記本体下部３０３の直径が下側に行くにつれて徐々に減少し、
前記本体下部３０３の内側面に複数の攪拌部材３６０が位置し、
前記複数の攪拌部材３６０は、前記本体部３００の回転軸中心に向かう複数の列をなすように配列される、
請求項１１に記載の遠心分離器用容器。
【請求項１３】
請求項３による遠心分離器用容器を用いた遠心分離方法であって、
前記遠心分離器用容器の回転に伴って前記本体部３００が回転することにより、前記遠心分離器用容器の内側の物質が分離されて前記側部収容部３１０に蓄積されるステップを含み、その間、前記本体部３００の回転時に前記プレート１５０が回転しないことにより、前記側部収容部３１０に分離されて蓄積される物質の攪拌効果が生じない、
遠心分離方法。
【請求項１４】
請求項１３による遠心分離方法を用いたＳＶＦ（stromal vascular fraction）分離方法であって、
（ａ）前記複数の連結管１１１、１１２のうち第１連結管１１１を介して脂肪組織が前記本体部３００の内側に注入されるステップと、
（ｂ）前記第１連結管１１１を介して洗浄液が供給され、前記遠心分離方法で遠心分離されることにより、前記脂肪組織が洗浄された脂肪組織と汚染物に分離されるステップと、
（ｃ）前記第１連結管１１１を介して前記本体部３００から汚染物が除去されるステップと、
（ｄ）前記第１連結管１１１を介して酵素が供給され、前記遠心分離方法で遠心分離されることにより、前記洗浄された脂肪組織が消化された脂肪組織と１次水溶液に分離されるステップと、
（ｅ）前記複数の連結管１１１、１１２のうち第２連結管１１２を介して前記本体部３００から消化された脂肪組織が除去されるステップと、
（ｆ）前記第１連結管１１１を介して洗浄液が供給されて攪拌され、前記遠心分離方法で遠心分離されることにより、前記１次水溶液がＳＶＦと２次水溶液に分離され、ここで、前記ＳＶＦが前記側部収容部３１０に粘着するステップと、
（ｇ）前記第２連結管１１２を介して前記本体部３００から２次水溶液が除去されるステップと、
（ｈ）前記第１連結管１１１を介して洗浄液を微量供給し、その後前記遠心分離器用容器の回転と停止を繰り返し、慣性により前記側部収容部３１０に粘着したＳＶＦを本体下部３０３に沈殿させるステップと、
（ｉ）前記第１連結管１１１を介して前記本体下部３０３に沈殿したＳＶＦが抽出されるステップとを含む、
ＳＶＦ分離方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、遠心分離器に用いられる容器、それを用いた遠心分離方法、及びそれを用いてＳＶＦ（stromal vascular fraction）を分離する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
脂肪組織からＳＶＦ（間質血管画分，stromal vascular fraction）を分離すると、美容用途又は治療用途に用いることができる。脂肪組織からＳＶＦを分離するためには、遠心分離器を用いて、洗浄液、酵素などを状況に合わせて注入し、数回の遠心分離ステップを経なければならない。
【０００３】
一般の遠心分離器を用いてＳＶＦを分離する場合、次の問題が生じる。
【０００４】
第一に、側面流路を採用した遠心分離器用容器のＳＶＦ分離効率が低い。
【０００５】
これは、遠心分離器用容器が回転する際に側面流路が回転しないことに起因する。ＳＶＦ分離過程について説明すると、脂肪、酵素、生理食塩水が混合された液体は遠心分離器の回転による遠心力でＳＶＦと他の物質がそれぞれの層（layer）をなして分離されて側壁に多層（multi layer）構造を形成するが、遠心分離器用容器とその側面に積層された層は遠心分離中に続けて回転するのに対して、中央流路に連結された側面流路は回転しない（図９の（ａ）参照）。分離された複数の層の立場では、分離された複数の層が固定されているので、側面流路が回転することになる（図１０の（ａ）参照）。よって、分離された物質層を側面流路が掻き回すいわゆる攪拌効果（stirring effect）が発生し、分離されたＳＶＦの一部が他の物質と再び混合されるので、結果としてＳＶＦ分離効率が低下する。
【０００６】
要するに、遠心分離によりＳＶＦを脂肪組織から分離し、その後残った脂肪組織を外部に排出するために側面流路が必要であるが、側面流路がＳＶＦの分離を妨害することになる。
【０００７】
第二に、ＳＶＦの収率（yield rate）が低い。
【０００８】
特許文献２及び３のように、一般的な遠心分離器用容器の側壁又は底面には外側に突出した区画（robe）が存在し、分離された物質が当該突出区画に蓄積される。ここで、側壁から外側に突出した区画は、遠心分離器用容器の全側壁の一部からのみ突出したものである。しかし、遠心分離器の回転により分離される物質は放射状の全角度で生成されるので、突出した区画が位置しない角度で生成された物質は突出した区画に取り込まれにくく、収率が低くなる。
【０００９】
第三に、粘着性のＳＶＦを容器の側壁から剥がすことが困難である。
【００１０】
ＳＶＦは粘着性を有する。遠心分離器でＳＶＦが分離されると、遠心力により、遠心分離器用容器の底ではなく側壁にＳＶＦが粘着する。側壁に粘着したＳＶＦを効果的に剥がすには特別な構造が必要である。
【００１１】
前記問題を解決するために、本出願人は、特許文献１において、放射状の全角度に突出した形態の遠心分離用容器を提案した。これは、内部の物質に一定の断面を有する流路を提供し、容器の回転、停止の繰り返しにより、一定の断面を有する形態の流路に沈殿したＳＶＦに急流を繰り返し加えて取り出すものである。
【００１２】
第四に、容器の繰り返し使用、交換及び廃棄が難しい。
【００１３】
医療技術分野における遠心分離器用容器は、１回使用後に廃棄しなければならない。よって、頻繁な容器の交換が必須であるので、脱着が容易でなければならず、製造が簡単でコストが低いことが好ましい。複雑な容器の外形は、装着や除去を不便にし、組立の際に部品間の漏水の原因となるという問題がある。当然ながら、それと同時に、遠心分離器の特徴上、優れた密封力は維持しなければならない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１４】
【特許文献１】韓国公開特許第１０−２０１６−０００６０７６号公報
【特許文献２】韓国登録特許第１０−１３１６５７３号公報
【特許文献３】国際公開第２００８-１３３８７４号
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１５】
本発明は、前記問題を解決するためになされたものである。
【００１６】
具体的には、遠心分離容器の回転により遠心分離を行い、遠心分離実行中に特定部分の除去、外部物質の注入の工程を行うと共に、ＳＶＦの分離効率を低下させない遠心分離器用容器を提案する。特に、攪拌効果が実質的に除去された遠心分離器用容器を提案する。
【００１７】
また、最終的に得られるＳＶＦの収率を高めることができる遠心分離器用容器を提供する。
【００１８】
さらに、１回使用後の除去及び新しい容器の装着が容易であると同時に、密封力に優れ、製造難易度が低く、製造コストが低い遠心分離器用容器を提供する。
【課題を解決するための手段】
【００１９】
前記課題を解決するための本発明の一実施例は、回転可能な本体部３００と、本体部３００をカバーする覆蓋部２００と、覆蓋部２００に備えられ、本体部３００の内側に流体疎通する複数の連結管１１１、１１２を含む連結部１００とを含む遠心分離器用容器であって、本体部３００は、本体部３００の側面の外側に少なくとも放射状の一部が延びた側部収容部３１０と、側部収容部３１０上に放射状の末端が位置するプレート１５０とを含む、遠心分離器用容器を提供する。
【００２０】
また、側部収容部３１０は、放射状の全方向に延びることが好ましい。
【００２１】
さらに、プレート１５０は回転体であるので、本体部３００の回転時にプレート１５０が回転しないにもかかわらず攪拌効果（stirring effect）が発生しないことが好ましい。
【００２２】
さらに、プレート１５０の内側には、複数の連結管１１１、１１２のいずれか一方の連結管１１２に流体疎通する側面流路１５２が備えられることが好ましい。
【００２３】
さらに、連結管１１１、１１２の他方の連結管１１１の末端が本体部３００の本体下部３０３に達することが好ましい。
【００２４】
さらに、連結部１００は、連結管ハウジング１１５をさらに含み、複数の連結管１１１、１１２の他方の連結管１１１は、中央流路１２０を介して本体部３００の本体下部３０３に達し、中央流路１２０の一部が連結管ハウジング１１５の内側に備えられ、いずれか一方の連結管１１２は、連結管ハウジング１１５と中央流路１２０間の空間を介して側面流路１５２に流体疎通し、また、プレート１５０の中央には、連結管ハウジング１１５と中央流路１２０間の空間を側面流路１５２に連結する側面流路開口１５１が位置することが好ましい。
【００２５】
さらに、いずれか一方の連結管１１２と側面流路１５２を介して、前記遠心分離器用容器の外部と側部収容部３１０の内部が流体疎通することが好ましい。
【００２６】
さらに、いずれか一方の連結管１１２と側面流路１５２を介して、側部収容部３１０に収容された物質が前記遠心分離器用容器の外部に排出され、前記遠心分離器用容器の外部の物質が側部収容部３１０に注入されることが好ましい。
【００２７】
さらに、連結管ハウジング１１５の上部の直径は連結管ハウジング１１５の下部の直径より小さく、中央流路１２０は連結管ハウジング１１５の上部の内側に挿入結合され、また、側面流路開口１５１は連結管ハウジング１１５の下部の内側に挿入結合されることが好ましい。
【００２８】
さらに、側部収容部３１０は、本体部３００の上部、中間部又は下部から放射状外側に延びることが好ましい。
【００２９】
さらに、本体部３００は、本体上部３０１、本体中間部３０２及び本体下部３０３からなり、本体上部３０１の直径が上側に行くにつれて徐々に増加し、側部収容部３１０は、本体上部３０１において直径が増加した放射状外側部分であることが好ましい。
【００３０】
さらに、本体下部３０３の直径が下側に行くにつれて徐々に減少し、本体下部３０３の内側面に複数の攪拌部材３６０が位置し、複数の攪拌部材３６０は、本体部３００の回転軸中心に向かう複数の列をなすように配列されることが好ましい。
【００３１】
前記課題を解決するための本発明の他の実施例は、前述した遠心分離器用容器を用いた遠心分離方法であって、前記遠心分離器用容器の回転に伴って本体部３００が回転することにより、前記遠心分離器用容器の内側の物質が分離されて側部収容部３１０に蓄積されるステップを含み、その間、本体部３００の回転時にプレート１５０が回転しないことにより、側部収容部３１０に分離されて蓄積される物質の攪拌効果が生じない、遠心分離方法を提供する。
【００３２】
前記課題を解決するための本発明のさらに他の実施例は、前述した遠心分離方法を用いたＳＶＦ分離方法であって、（ａ）複数の連結管１１１、１１２のうち第１連結管１１１を介して脂肪組織が本体部３００の内側に注入されるステップと、（ｂ）第１連結管１１１を介して洗浄液が供給され、前記遠心分離方法で遠心分離されることにより、前記脂肪組織が洗浄された脂肪組織と汚染物に分離されるステップと、（ｃ）第１連結管１１１を介して本体部３００から汚染物が除去されるステップと、（ｄ）第１連結管１１１を介して酵素が供給され、攪拌され、前記遠心分離方法で遠心分離されることにより、前記洗浄された脂肪組織が消化された脂肪組織と１次水溶液に分離されるステップと、（ｅ）複数の連結管１１１、１１２のうち第２連結管１１２を介して本体部３００から消化された脂肪組織が除去されるステップと、（ｆ）第１連結管１１１を介して洗浄液が供給され、前記遠心分離方法で遠心分離されることにより、前記１次水溶液がＳＶＦと２次水溶液に分離され、ここで、前記ＳＶＦが側部収容部３１０に粘着するステップと、（ｇ）第２連結管１１２を介して本体部３００から２次水溶液が除去されるステップと、（ｈ）第１連結管１１１を介して洗浄液を微量供給し、その後前記遠心分離器用容器の回転と停止を繰り返し、慣性により側部収容部３１０に粘着したＳＶＦを本体下部３０３に沈殿させるステップと、（ｉ）第１連結管１１１を介して本体下部３０３からＳＶＦが抽出されるステップとを含む、ＳＶＦ分離方法を提供する。
【発明の効果】
【００３３】
本発明は、側面流路が含まれるプレートを備えた遠心分離器用容器を提案する。
【００３４】
よって、遠心分離中に遠心分離器用容器の側壁に備えられる多層構造を掻き回さないので、攪拌効果を実質的に除去できると共に、側壁に沈殿した成分の一部を選択的に排出できるという利点を有する。
【００３５】
また、放射状の全方向に位置する側部収容部にＳＶＦが分離されて収集されるので、ＳＶＦ収率が高い。
【００３６】
さらに、係止片などにより脱着が便利であり、製造が簡単であると共に、密封力に優れ、製造コストが低い。
【００３７】
さらに、検証実験の結果、図１３〜図１５に示すように、本発明による遠心分離器用容器を用いた収率及び安定性は従来機器に比べて優れていることが確認された。
【図面の簡単な説明】
【００３８】
【図１】本発明による遠心分離器用容器の斜視図である。
【図２】本発明による遠心分離器用容器の分解斜視図である。
【図３】本発明による遠心分離器用容器の断面図であり、図１のＡ−Ａ’断面図である。
【図４】本発明による遠心分離器用容器の連結部１００の斜視図である。
【図５】本発明による遠心分離器用容器の連結部１００の部分斜視図である。
【図６】本発明による遠心分離器用容器の連結部１００の部分断面斜視図である。
【図７】本発明の他の実施例の遠心分離器用容器の斜視図である。
【図８】本発明のさらに他の実施例の遠心分離器用容器の斜視図である。
【図９】本発明による遠心分離器用容器の攪拌効果除去の特徴について説明するための概念図である。
【図１０】本発明による遠心分離器用容器の攪拌効果除去の特徴について説明するための概念図である。
【図１１】本発明による遠心分離器用容器を用いてＳＶＦを分離する方法について説明するフローチャートである。
【図１２】本発明による遠心分離器用容器を用いてＳＶＦを分離する方法について説明する概略図である。
【図１３】本発明による遠心分離器用容器を用いてＳＶＦを分離した場合と従来機器を用いた場合を比較した検証実験の結果である。
【図１４】本発明による遠心分離器用容器を用いてＳＶＦを分離した場合と従来機器を用いた場合を比較した検証実験の結果である。
【図１５】本発明による遠心分離器用容器を用いてＳＶＦを分離した場合と従来機器を用いた場合を比較した検証実験の結果である。
【発明を実施するための形態】
【００３９】
以下、図面を参照して本発明による遠心分離器用容器について説明する。
【００４０】
１．  遠心分離器用容器の説明
本発明による遠心分離器用容器は、遠心分離器に装着されるものである。遠心分離器は、回転のための動力を供給する動力部材、分離対象物質と添加物、分離された物質又は汚染物を収容できるように遠心分離器用容器に連結される複数のバッグ（bag）、動作を制御する制御部、動作状況を出力するディスプレイ装置などを含むのが一般的である。本発明による遠心分離器用容器は、いかなる種類の遠心分離器にも適用できるが、ここでの詳細な説明は省略する。
【００４１】
以下、図１〜図６を参照して、本発明による遠心分離器用容器について詳細に説明する。
【００４２】
１．１  連結部１００
本発明による遠心分離器用容器は、連結部１００と、覆蓋部２００と、本体部３００とを含む。
【００４３】
連結部１００の上部には、第１連結管１１１、第２連結管１１２、密封部材ハウジング１１３、連結管ハウジング１１５及び係止片１１９が位置する。同図には連結部１００が２つの連結管１１１、１１２を含むものを示すが、それより多くてもよい。
【００４４】
連結部１００に備えられる複数の連結管１１１、１１２は、別途のチューブなどで遠心分離器のバッグに連結される。よって、ユーザは、分析対象物質又は添加物を遠心分離器用容器の内部に注入することもでき、分離完了した物質又は汚染物を遠心分離器用容器の外部に抽出することもできる。
【００４５】
複数の連結管１１１、１１２は、本体部３００の内側の空間に流体疎通するが、具体的な流路構成については後述する。
【００４６】
密封部材ハウジング１１３は、内側に密封部材１３０が位置するようにして密封部材１３０を外部から保護する。密封部材１３０は、第１密封部材１３１と、第２密封部材１３２と、第３密封部材１３３とから構成されてもよく（図２参照）、それぞれ弾性部材、セラミック部材、磁力部材で構成することにより密封力を増大させることができる。
【００４７】
連結管ハウジング１１５は、複数の連結管１１１、１１２が本体部３００の内側の空間に流体疎通する流路を形成し、外部から流路を保護する。
【００４８】
連結管ハウジング１１５は、上部と下部が段差をなすように構成され、前記上部には第１連結管１１１が連結され、前記下部には第２連結管１１２が連結される。段差をなすように構成されるとは、連結管ハウジング１１５の上部内側の直径と下部内側の直径が異なるように構成されることを意味するが、こうすることにより上部内側には中央流路１２０を簡便に挿入でき、下部内側には側面流路開口１５１が位置する上部プレート１５０の突出部分を挿入できるので、密封力が維持されると共に組立が簡便である（図３参照）。
【００４９】
係止片１１９は、遠心分離器用容器を遠心分離器に装着する際に遠心分離器に係止される部分であり、遠心分離器用容器が遠心分離器内で定位置に配置されるように助ける機能を有する。ユーザは、使用のために遠心分離器用容器を装着する際に遠心分離器に係止片１１９を係止することにより容易に装着することができ、係止片１１９を解除することにより容易に分離することができる。
【００５０】
連結部１００の下部は、本体部３００の内側の空間に挿入される部分であり、覆蓋部２００及び密封部材１３０により外部から密封される。
【００５１】
連結部１００の下部には円形のプレート１５０が位置する。プレート１５０の放射状の末端は側部収容部３１０に位置する。同図においてはプレート１５０の平面が円形のもの、すなわちプレート１５０自体を薄い円筒形に示しているが、回転体であればいかなるものであってもよい。これについては詳細に後述する。
【００５２】
プレート１５０の内側に側面流路１５２が備えられ、第２連結管１１２を介した流体疎通機能を果たす。
【００５３】
本発明によるプレート１５０の利点の１つは、プレート１５０内に備えられた側面流路１５２が側部収容部３１０に直接連結されることである。また、こうすることにより、遠心分離過程により側部収容部３１０に順次沈殿した物質の一部が第２連結管１１２を介して排出され、排出過程及び遠心分離工程で回転体型のプレート１５０が側部収容部３１０に集められた溶液に対して攪拌効果を生じさせないので、排出口が当接しない最外郭沈殿層を瓦解させないという利点も得られる。
【００５４】
これについては図９及び図１０を参照して詳細に後述する。
【００５５】
１．２  覆蓋部２００
覆蓋部２００は、本体部３００の上部に装着される部分である。
【００５６】
覆蓋部２００の上部中央には開口部２１０が位置する。開口部２１０には、側面流路開口１５１が位置する上部プレート１５０の突出部分が挿入結合され、中央流路１２０が開口部２１０を貫通するように構成される。
【００５７】
開口部２１０の放射状外側に密封部材装着部２３０が位置し、ここに密封部材１３０が装着される。
【００５８】
覆蓋部２００の放射状外側には、上部に突出した本体連結部２４０が位置する。本体連結部２４０の下方に溝が備えられ、本体部３００の覆蓋連結部３４０がここに挿入されることにより、遠心分離器用容器の耐久性を向上させ、回転時に覆蓋部２００が分離される現象を防止する。
【００５９】
１．３  本体部３００
本体部３００は、本体上部３０１、本体中間部３０２及び本体下部３０３に区分される（図３参照）。
【００６０】
本体上部３０１には、放射状外側に延びた側部収容部３１０が位置する。
【００６１】
側部収容部３１０は、本体部３００から少なくとも放射状外側に突出した部分である。遠心分離器が動作すると、遠心分離器用容器内で分離された物質は遠心力により側部収容部３１０に自然に蓄積され始める。遠心分離器の回転が終了すると、粘着性が低い物質は重力により下降して本体下部３０３の下部収容部３３０に流動し、粘着性が高い物質（例えば、ＳＶＦ）は側部収容部３１０に残る。
【００６２】
側部収容部３１０の壁面は放射状外側に突出するが、本体部３００の壁面となだらかに連結されることが好ましい。すなわち、本体上部３０１と本体中間部３０２がなだらかに連結されることが好ましい。そうすることにより、本体中間部３０２又は本体下部３０３で分離された物質も本体上部３０１の側部収容部３１０に自然に送られる。図３においては本体中間部３０２の直径が一定であるように示しているが、本体上部３０１と自然に連結されるのであれば直径が異なってもよい。
【００６３】
また、側部収容部３１０は、放射状外側の全方向（すなわち、３６０度）に延びることが好ましい。一部のみ延びた場合は従来技術のローブと同じ形態となり、その場合でもある程度はそこにＳＶＦが収容されるが、放射状外側の全方向に延びた場合は遠心分離によりどの方向にＳＶＦが分離されても収容されるので、より優れた収率が得られる。
【００６４】
本体下部３０３の末端には下部収容部３３０が位置し、中央流路１２０は下部収容部３３０の内側に連結される。よって、下部収容部３３０に蓄積された物質が遠心分離器用容器の外部に排出される（図１２の（ｃ）、（ｊ）参照）。
【００６５】
本体下部３０３の内面、すなわち底面には複数の攪拌部材３６０が位置する。複数の攪拌部材３６０は、本体部３００の回転軸中心に向かう複数の列をなすように配列されることが好ましい。図２においては、攪拌部材３６０がそれぞれ５つずつの３列をなすものを示しているが、その数や配列を変更することもできる。
【００６６】
一方、同図に示す実施例においては、放射状外側に延びる側部収容部３１０が本体上部３０１に位置するが、側部収容部が本体中間部又は本体下部に位置する実施例も可能である。その場合は、プレートも側部収容部が位置する本体中間部又は本体下部に位置しなければならない。
【００６７】
１．４  流路
図３をさらに参照して、本発明による遠心分離器用容器の流路について説明する。ここで、「流路」とは、遠心分離器用容器の外側と本体部３００の内側の流体疎通経路を意味する。
【００６８】
本発明は、互いに独立した２つの流路を採用する。
【００６９】
第１の流路は、第１連結管１１１と、中央流路１２０とからなるものであり、その末端が下部収容部３３０に位置する。第２の流路は、第２連結管１１２と、連結管ハウジング１１５の放射状外側領域（すなわち、中央流路１２０の外側領域）と、側面流路開口１５１と、側面流路１５２とからなるものであり、その末端が側部収容部３１０に位置する。ここで、側面流路開口１５１は、第２連結管１１２と側面流路１５２を連結するように、９０度曲がった形状である（図５及び図６参照）。
【００７０】
第１の流路と第２の流路とは互いに独立している。すなわち、連結管ハウジング１１５の内側の最も中心に中央流路１２０が位置して第１の流路が構成され、中央流路１２０の壁体を境界としてその外側に第２の流路が構成されるので、互いに独立している。
【００７１】
２．  遠心分離器用容器の組立方法の説明
本発明による遠心分離器用容器は、優れた密封力を有しながらも組立が容易にできるように設計されており、製造難易度が低く、製造コストが低いという利点がある。
【００７２】
図２を参照して、組立方法について説明する。
【００７３】
複数の連結管１１１、１１２と、連結管ハウジング１１５と、係止片１１９と、密封部材ハウジング１１３とを含む連結部１００の上部は、一体に成形される。
【００７４】
第１密封部材１３１、第２密封部材１３２及び第３密封部材１３３が異なる材質で別体に成形され、その後第２密封部材１３２の上部面が第１密封部材１３１の下部面に挿入され、第３密封部材１３３の上部面が第２密封部材１３２の下部面に挿入されることにより、一体化した密封部材１３０を形成する。
【００７５】
密封部材１３０の上部面（すなわち、第１密封部材１３１の上部面）が密封部材ハウジング１１３の内側面に挿入され、密封部材１３０の下部面（すなわち、第３密封部材１３３の下部面）が覆蓋部２００の密封部材装着部２３０に装着される。ここで、密封部材１３０の上部面は密封部材ハウジング１１３の内側面に対応した大きさ及び形状であり、密封部材１３０の下部面は密封部材装着部２３０に対応した大きさ及び形状であるので、密封が維持される。
【００７６】
次に、中央流路１２０とプレート１５０とを含む連結部１００の下部が、連結部１００の上部、密封部材１３０及び覆蓋部２００が結合された部品に下から挿入されて結合される。具体的には、中央流路１２０が連結管ハウジング１１５の上部内側に挿入され、側面流路開口１５１が位置する上部プレート１５０の突出部分が連結管ハウジング１１５の下部内側に挿入される（図３参照）。
【００７７】
次に、本体部３００が覆蓋部２００に装着される。すなわち、本体部３００の覆蓋連結部３４０が覆蓋部２００の本体連結部２４０の下方に挿入されて固定される。挿入固定の際に別途の接着又は融着がさらに行われてもよい。
【００７８】
３．  他の実施例の説明
以上説明した図１〜図６に示す本発明の一実施例による遠心分離器用容器は、側部収容部３１０が本体上部３０１に位置する。
【００７９】
図７に示す本発明の他の実施例による遠心分離器用容器は、側部収容部３１０が本体中間部３０２に位置する。
【００８０】
図８に示す本発明のさらに他の実施例による遠心分離器用容器は、側部収容部３１０が本体下部３０３に位置する。
【００８１】
図１、図７及び図８に示す３つの実施形態は、全て側部収容部３１０が放射状外側の少なくとも一部に、好ましくは放射状外側の全方向に延びる。また、３つの実施形態は、全て側部収容部３１０にプレート１５０の末端が位置する。
【００８２】
４．  攪拌効果を実質的に除去
図９及び図１０を参照して、本発明による遠心分離器用容器において攪拌効果が除去される特徴について説明する。図９及び図１０において、（ａ）は従来技術（特に、特許文献１）により発生する攪拌効果について説明するための図であり、（ｂ）は本発明について説明するための図である。
【００８３】
本発明による遠心分離器用容器において、遠心分離器の作動時に、覆蓋部２００、本体部３００及び本体部３００内の分離対象物質は回転する。ただし、連結部１００に含まれる構成要素は回転しない。すなわち、連結部１００に含まれる中央流路１２０、プレート１５０及びプレート１５０の内側の側面流路１５２は回転しない。連結部１００はチューブ（図示せず）などにより物質を供給する遠心分離器の物質収容バッグなどに連結されているからである。
【００８４】
プレート１５０がない従来技術においても同様であり、図９の（ａ）のように、遠心分離器の作動時に、本体部３００とそれに含まれる分離対象物質は回転するが、側面流路１５２は回転しない。ある程度工程が進むと分離対象物質中のＳＶＦなどは分離されて層をなすので多層構造を形成するが、多層構造を形成した物質は回転するものの、側面流路１５２は回転しない。
【００８５】
分離された複数の層の立場で相対的に観察すると、図１０の（ａ）のように、複数の層が固定された状態で側面流路１５２のみ回転することになる。そうすると、側面流路１５２は、分離された複数の層に浸かったり抜け出したりを繰り返し、複数の層を攪拌（stirring）して掻き回す。よって、ＳＶＦを含む分離された物質の一部はさらに混合されて分離効率が低くなる。
【００８６】
円形のプレート１５０を有する本発明においては異なる様相を呈する。
【００８７】
分離された複数の層の立場で相対的に観察すると、図１０の（ｂ）のように、複数の層が固定された状態でプレート１５０のみ回転するのは同一である。しかし、プレート１５０は円形状であるので、３次元上の同じ位置で自己回転のみ行う。新たに浸かったり抜け出したりしない。よって、複数の層を攪拌したり掻き回したりせず、ＳＶＦを含む分離された物質が再び混合される攪拌効果が実質的に除去される。
【００８８】
一方、攪拌効果を発生させないためのプレート１５０は、必ずしも円形である必要はなく、回転体形状であればいかなる形状であってもよい。ここで、「回転体（body of revolution）」とは、回転軸を含む断面線上で常にその形状が一定の図形を意味する。
【００８９】
例えば、図１０の（ｂ）のプレート１５０は円形であるが、複数の層の立場では断面が四角形で一定である。
【００９０】
プレート１５０は、四角形でない三角形の断面を有する回転体であってもよい。その場合、プレート１５０自体は薄い円錐形であり、そのようにしても同様に攪拌効果は発生しないので好ましい。
【００９１】
プレート１５０は、平行四辺形の断面を有する回転体であってもよい。その場合、プレート１５０自体は傘型であり、そのようにしてもやはり攪拌効果は発生しないので好ましい。
【００９２】
５．  遠心分離器用容器を用いたＳＶＦ分離方法の説明
図１１及び図１２を参照して、本発明による遠心分離器用容器を用いてＳＶＦを分離する方法について説明する。
【００９３】
図１２の各図の下には、図１１で説明される各ステップの符号Ｓ１００〜Ｓ８００が共に記載されている。
【００９４】
脂肪組織が第１連結管１１１を介して本体部３００の内側に供給される（Ｓ１００）。
【００９５】
次に、洗浄液が第１連結管１１１を介して本体部３００の内側に供給され、遠心分離器が作動して回転及び攪拌が所定時間行われる（Ｓ２００）。回転及び攪拌が完了すると、洗浄された脂肪組織と、血液などを含む汚染物がそれぞれ上部と下部に分離される。下部の分離された汚染物は、下部収容部３３０にその末端が位置する中央流路１２０を介して外部に排出されて除去される（Ｓ３００）。
【００９６】
次に、例えばコラゲナーゼなどの酵素が供給され、遠心分離器が作動して回転及び攪拌が所定時間行われる（Ｓ４００）。回転及び攪拌が完了すると、酵素により消化された脂肪組織と、１次水溶液がそれぞれ放射状内側及び外側に分離される。放射状内側の消化された脂肪組織は、側部収容部３１０にその末端が位置する側面流路１５２を介して外部に排出されて除去される（Ｓ５００）。
【００９７】
残った１次水溶液に洗浄液がさらに供給され、その後回転及び攪拌が所定時間行われる（Ｓ６００）。よって、２次水溶液とＳＶＦがそれぞれ放射状内側及び外側に分離される。放射状内側の２次水溶液は、側部収容部３１０にその末端が位置する側面流路１５２を介して外部に排出されて除去される（Ｓ７００）。
【００９８】
よって、ＳＶＦのみ側部収容部３１０に残っている状態であるが、ＳＶＦの粘着性により側部収容部３１０に位置し、自重により下部に降下していない状態である。よって、第１連結管１１１を介して洗浄液を微量供給し、その後前記遠心分離器用容器の回転と停止を繰り返す。洗浄液は回転に伴う遠心力により側部収容部３１０に広がるが、回転と停止を繰り返すと、洗浄液に加えられた慣性により粘着したＳＶＦを本体下部３０３に沈殿させる。次に、第１連結管１１１を介して本体下部３０３に沈殿したＳＶＦが抽出されて収集される（Ｓ８００）。
【００９９】
６．  検証実験
本発明による遠心分離器用容器の性能を検証するための実験を行った。
【０１００】
２０〜４０代の成人男女１０人の腹部及び大腿部から脂肪を吸引し、それを本発明による遠心分離器用容器に注入し、その後図１１及び図１２を参照して説明した方法によりＳＶＦを分離した。５０ｍｌ注入した第１グループと１００ｍｌ注入した第２グループに分けて実験を行った。酵素として、５０ｍｌの脂肪に対して５０ｍｇのコラゲナーゼを５０ｍｌのハルトマン液に希釈して用いた。
【０１０１】
図１１及び図１２を参照して説明した方法の最終取得物において、注入脂肪１ｇ当たりの取得細胞数（Ｃｅｌｌｓ／ｇ）及び細胞生存率（％）とコラゲナーゼ活性度（ＰＺＵ／ｍｌ）、すなわちコラゲナーゼの残留量を計算した。得られた細胞数及び生存率の演算のための細胞数計算（Cell counting）は、自動セルカウンター（Automated Cell Counter）を用いて行った。
【０１０２】
現在市販されている従来機器としてＭｕｌｔｉ Ｓｔａｔｉｏｎ（Ｃ）、Ｃｈａ−Ｓｔａｔｉｏｎ（Ｃ）、Ｌｉｐｏｋｉｔ（Ｃ）及びＣｅｌｕｔｉｏｎ（Ｃ）を選定した。それぞれの機器における注入脂肪１ｇ当たりの取得細胞数（Ｃｅｌｌｓ／ｇ）及び細胞の生存率（％）とコラゲナーゼ活性度（ＰＺＵ／ｍｌ）は周知であるので、当該情報と本発明による結果値を比較した。
【０１０３】
（１）取得細胞数
図１３に示すように、Ｍｕｌｔｉ Ｓｔａｔｉｏｎ（Ｃ）、Ｃｈａ−Ｓｔａｔｉｏｎ（Ｃ）及びＬｉｐｏｋｉｔ（Ｃ）における結果値と比較して、本発明による遠心分離器用容器を用いると２〜５０倍以上の細胞が得られることが確認された。ただし、Ｃｅｌｕｔｉｏｎ（Ｃ）における結果値と比較すると、取得細胞数は同程度であった。
【０１０４】
（２）細胞生存率
図１４に示すように、Ｌｉｐｏｋｉｔ（Ｃ）及びＣｅｌｕｔｉｏｎ（Ｃ）における結果値と比較して、本発明による遠心分離器用容器を用いると細胞生存率が非常に優れていた。ただし、Ｍｕｌｔｉ Ｓｔａｔｉｏｎ（Ｃ）及びＣｈａ−Ｓｔａｔｉｏｎ（Ｃ）における結果値と比較して、本発明による遠心分離器用容器を用いると細胞生存率が同程度であるか、多少低くなった。
【０１０５】
以下、取得細胞数と共に比較する。
【０１０６】
従来技術のうちＭｕｌｔｉ Ｓｔａｔｉｏｎ（Ｃ）を本発明と比較すると、取得細胞数は半分以下であったが、細胞生存率は多少高かった。Ｌｉｐｏｋｉｔ（Ｃ）及びＣｅｌｕｔｉｏｎ（Ｃ）を本発明と比較すると、取得細胞数は同程度であったが、細胞生存率は低かった。すなわち、従来技術は、細胞が多く得られれば生存率が低く、生存率が高ければ得られる細胞数が少なかった。
【０１０７】
よって、本発明は、取得細胞数はもとより、細胞生存率にも優れるので、従来技術と比較して最終収率が非常に優れることが確認された。
【０１０８】
（３）酵素残留量
図１５に示すように、コラゲナーゼ活性度の結果値において、本発明による遠心分離器用容器を用いると、コラゲナーゼ残留量は、Ｍｕｌｔｉ Ｓｔａｔｉｏｎ（Ｃ）、Ｃｈａ−Ｓｔａｔｉｏｎ（Ｃ）、Ｌｉｐｏｋｉｔ（Ｃ）及びＣｅｌｕｔｉｏｎ（Ｃ）における平均値に比べて、約２０％以下のレベルであるので、より安定していることが確認された。
【０１０９】
以上、本発明を当業者が容易に理解して再現できるように、図面に示す実施例を参照して説明したが、これらは例示的なものにすぎず、当業者であれば本発明の実施例から様々な変形及び均等な他の実施例が可能であることを理解するであろう。よって、本発明の保護範囲は請求の範囲により定められるべきである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
2019514676.tif 000009
【図８】
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【図９（ａ）】
2019514676.tif 000011
【図９（ｂ）】
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【図１０（ａ）】
2019514676.tif 000013
【図１０（ｂ）】
2019514676.tif 000014
【図１０（ｃ）】
2019514676.tif 000015
【図１１】
2019514676.tif 000016
【図１２】
2019514676.tif 000017
【図１３】
2019514676.tif 000018
【図１４】
2019514676.tif 000019
【図１５】
2019514676.tif 000020
【国際調査報告】
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2019514676.tif 000023
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