(57)【要約】  血清安定性及びαｖβ６インテグリンに対する親和性を有するインテグリンリガンドが記載される。血清安定性及びαｖβ６インテグリンに対する親和性を有するαｖβ６インテグリンリガンドを含有する組成物、及びそれらの使用方法も記載される。
2019535685.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
αｖβ６インテグリンリガンドであって、以下：
Ｚ−ＲＧ1ＤＬＸａａ1Ｘａａ2Ｌ（配列番号８５）（式Ｉ）；又は
Ｚ−ＲＧ1ＤＬＸａａ1Ｘａａ2Ｌ−Ｊ−Ｒ1（配列番号８６）（式ＩＩ）；又は
Ｚ−ＲＧ1ＤＬＸａａ1Ｘａａ2Ｌ−Ｊ−Ｒ1−Ｒ2（配列番号８７）（式ＩＩＩ）；又は
（Ｚ−ＲＧ1ＤＬＸａａ1Ｘａａ2Ｌ−Ｊ−Ｒ1）n−Ｒ3（配列番号８８）（式ＩＶ）；又は
（Ｚ−ＲＧ1ＤＬＸａａ1Ｘａａ2Ｌ−Ｊ−Ｒ1）n−Ｒ4−（Ｒ3）p（配列番号８９）（式Ｖ）；又は
Ｚ−ＲＧ1ＤＬＸａａ1Ｘａａ2Ｌ−Ｘａａ3Ｘａａ4Ｌ−Ｒ1（配列番号９２）（式ＶＩ）；又は
（Ｚ−ＲＧ1ＤＬＸａａ1Ｘａａ2Ｌ−Ｊ−Ｒ1）n−Ｒ4−（Ｒ2）p（配列番号１０５）（式ＶＩＩ）；
を含み、式中、
Ｚはアミン末端キャップであり；
ＲはＬ−アルギニンであり；
Ｇ1はＬ−グリシン又はＮ−メチルグリシンであり；
ＤはＬ−アスパラギン酸（Ｌ−アスパルテート）であり；
ＬはＬ−ロイシンであり；
Ｘａａ1は、Ｌ−αアミノ酸、Ｌ−βアミノ酸、又はα，α−二置換アミノ酸であり；
Ｘａａ2は、Ｌ−αアミノ酸、Ｌ−βアミノ酸、又はα，α−二置換アミノ酸であり；
Ｘａａ3は、Ｌ−αアミノ酸、Ｌ−βアミノ酸、又はα，α−二置換アミノ酸であり；
Ｘａａ4は、Ｌ−αアミノ酸、Ｌ−βアミノ酸、又はα，α−二置換アミノ酸であり；
Ｒ1は、任意であって、存在する場合には、ＰＥＧ及び／又は連結基を含み；
Ｊは、任意であって、存在する場合には、１つ又は複数のＬ−αアミノ酸、Ｌ−βアミノ酸、α，α−二置換アミノ酸、あるいはそれらの組み合わせを含み；
Ｒ2は、反応基又は保護された反応基を含み；
Ｒ3は、カーゴ分子を含み；
ｎは、０を超える整数であり；
ｐは、０を超える整数であり；かつ
Ｒ4は、任意であって、存在する場合には、足場及び／又は連結基を含み、斯かる足場及び／又は連結基は、存在する各リガンドのための少なくとも１つの結合点、及び存在する各カーゴ分子のための少なくとも１つの結合点を含む、αｖβ６インテグリンリガンド。
【請求項２】
以下：
Ｚ−ＲＧ1ＤＬＸａａ1Ｘａａ2Ｌ（配列番号８５）（式Ｉ）、
を含み、式中、
Ｘａａ1は天然アミノ酸であり、かつＸａａ2は非標準アミノ酸（non-standard amino acid）である、請求項１に記載のαｖβ６インテグリンリガンド。
【請求項３】
以下：
Ｚ−ＲＧ1ＤＬＸａａ1Ｘａａ2Ｌ−Ｊ−Ｒ1（配列番号８６）（式ＩＩ）、
を含み、式中、
Ｘａａ1は天然アミノ酸であり、かつＸａａ2は非標準アミノ酸である、請求項１に記載のαｖβ６インテグリンリガンド。
【請求項４】
以下：
Ｚ−ＲＧ1ＤＬＸａａ1Ｘａａ2Ｌ−Ｊ−Ｒ1−Ｒ2（配列番号８７）（式ＩＩＩ）、
を含み、式中、
Ｘａａ1は天然アミノ酸であり、かつＸａａ2は非標準アミノ酸である、請求項１に記載のαｖβ６インテグリンリガンド。
【請求項５】
以下：
（Ｚ−ＲＧ1ＤＬＸａａ1Ｘａａ2Ｌ−Ｊ−Ｒ1）n−Ｒ3(配列番号８８）（式ＩＶ）、
を含み、式中、
Ｘａａ1は天然アミノ酸であり、かつＸａａ2は非標準アミノ酸である、請求項１に記載のαｖβ６インテグリンリガンド。
【請求項６】
以下：
（Ｚ−ＲＧ1ＤＬＸａａ1Ｘａａ2Ｌ−Ｊ−Ｒ1）n−Ｒ4−（Ｒ3）p(配列番号８９）（式Ｖ）、
を含み、式中、
Ｘａａ1は天然アミノ酸であり、かつＸａａ2は非標準アミノ酸である、請求項１に記載のαｖβ６インテグリンリガンド。
【請求項７】
以下：
Ｚ−ＲＧ1ＤＬＸａａ1Ｘａａ2Ｌ−Ｘａａ3Ｘａａ4Ｌ−Ｒ1（配列番号９２）（式ＶＩ）、
を含み、式中、
Ｘａａ1は天然アミノ酸であり、かつＸａａ2は非標準アミノ酸である、請求項１に記載のαｖβ６インテグリンリガンド。
【請求項８】
以下：
（Ｚ−ＲＧ1ＤＬＸａａ1Ｘａａ2Ｌ−Ｊ−Ｒ1）n−Ｒ4−（Ｒ2）p（配列番号１０５）（式ＶＩＩ）、
を含み、式中、
Ｘａａ1は天然アミノ酸であり、かつＸａａ2は非標準アミノ酸である、請求項１に記載のαｖβ６インテグリンリガンド。
【請求項９】
Ｚが、以下：ＣＨ3ＣＯ、ＣＨ3ＣＨ2ＣＯ、ＣＨ3（ＣＨ2）2ＣＯ、（ＣＨ3）2ＣＨＣＯ、ＣＨ3（ＣＨ2）3ＣＯ、（ＣＨ3）2ＣＨＣＨ2ＣＯ、ＣＨ3ＣＨ2ＣＨ（ＣＨ3）ＣＯ、（ＣＨ3）3ＣＣＯ、ＣＨ3（ＣＨ2）4ＣＯ、ＣＨ3ＳＯ2、ＣＨ3ＣＨ2ＳＯ2、ＣＨ3（ＣＨ2）2ＳＯ2、（ＣＨ3）2ＣＨＳＯ2、ＣＨ3（ＣＨ2）3ＳＯ2、（ＣＨ3）2ＣＨＣＨ2ＳＯ2、ＣＨ3ＣＨ2ＣＨ（ＣＨ3）ＳＯ2、（ＣＨ3）3ＣＳＯ2、ＰｈＣＯ、ＰｈＳＯ2、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０個の炭素原子を有するアルキル基、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ＮＨ2ＮＨ、ＰＥＧ、グアニジル、ＣＨ3ＯＣＨ2ＣＨ2ＯＣＨ2ＣＨ2ＣＯ、ＣＨ3Ｏ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）2ＣＨ2ＣＨ2ＣＯ、ＣＨ3Ｏ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）3ＣＨ2ＣＨ2ＣＯ、ＣＨ3Ｏ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）4ＣＨ2ＣＨ2ＣＯ、ＣＨ3Ｏ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）5ＣＨ2ＣＨ2ＣＯ、ＣＨ3ＯＣＨ2ＣＨ2ＯＣＨ2ＣＯ、ＣＨ3Ｏ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）2ＣＨ2ＣＯ、ＣＨ3Ｏ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）3ＣＨ2ＣＯ、ＣＨ3Ｏ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）4ＣＨ2ＣＯ、ＣＨ3Ｏ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）5ＣＨ2ＣＯ、ＣＨ3ＯＣＨ2ＣＨ2ＯＣＯ、ＣＨ3Ｏ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）2ＣＯ、ＣＨ3Ｏ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）3ＣＯ、ＣＨ3Ｏ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）4ＣＯ、ＣＨ3Ｏ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）5ＣＯ、ＨＯＣＨ2ＣＨ2ＯＣＨ2ＣＨ2ＣＯ、ＨＯ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）2ＣＨ2ＣＨ2ＣＯ、ＨＯ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）3ＣＨ2ＣＨ2ＣＯ、ＨＯ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）4ＣＨ2ＣＨ2ＣＯ、ＨＯ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）5ＣＨ2ＣＨ2ＣＯ、ＨＯＣＨ2ＣＨ2ＯＣＨ2ＣＯ、ＨＯ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）2ＣＨ2ＣＯ、ＨＯ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）3ＣＨ2ＣＯ、ＨＯ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）4ＣＨ2ＣＯ、ＨＯ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）5ＣＨ2ＣＯ、ＨＯＣＨ2ＣＨ2ＯＣＯ、ＨＯ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）2ＣＯ、ＨＯ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）3ＣＯ、ＨＯ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）4ＣＯ、ＨＯ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）5ＣＯ、ＣＨ3ＣＨ2ＯＣＨ2ＣＨ2ＯＣＨ2ＣＨ2ＣＯ、ＣＨ3ＣＨ2Ｏ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）2ＣＨ2ＣＨ2ＣＯ、ＣＨ3ＣＨ2Ｏ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）3ＣＨ2ＣＨ2ＣＯ、ＣＨ3ＣＨ2Ｏ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）4ＣＨ2ＣＨ2ＣＯ、ＣＨ3ＣＨ2Ｏ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）5ＣＨ2ＣＨ2ＣＯ、ＣＨ3ＣＨ2ＯＣＨ2ＣＨ2ＯＣＨ2ＣＯ、ＣＨ3ＣＨ2Ｏ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）2ＣＨ2ＣＯ、ＣＨ3ＣＨ2Ｏ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）3ＣＨ2ＣＯ、ＣＨ3ＣＨ2Ｏ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）4ＣＨ2ＣＯ、ＣＨ3ＣＨ2Ｏ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）5ＣＨ2ＣＯ、ＣＨ3ＣＨ2ＯＣＨ2ＣＨ2ＯＣＯ、ＣＨ3ＣＨ2Ｏ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）2ＣＯ、ＣＨ3ＣＨ2Ｏ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）3ＣＯ、ＣＨ3ＣＨ2Ｏ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）4ＣＯ、ＣＨ3ＣＨ2Ｏ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）5ＣＯ、ＣＨ3ＯＣＨ2ＣＨ2ＣＯ、ＨＯＣＨ2ＣＨ2ＣＯ、あるいはＣＨ3ＣＨ2ＯＣＨ2ＣＨ2ＣＯ、からなる群から選択される、請求項１から８のいずれか一項に記載のαｖβ６インテグリンリガンド。
【請求項１０】
Ｚが、ＣＨ3ＣＯである、請求項９に記載のαｖβ６インテグリンリガンド。
【請求項１１】
Ｘａａ1が、以下：アラニン、システイン、アスパラギン酸、グルタミン酸、フェニルアラニン、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、リシン、ロイシン、メチオニン、アスパラギン、プロリン、グルタミン、アルギニン、セリン、トレオニン、バリン、トリプトファン、チロシン、セレノシステイン、ピロリジン、Ｎ−ホルミルメチオニン、ヒドロキシプロリン、セレノメチオニン、α−アミノ−イソ酪酸、α−アミノ酪酸、α，γ−ジアミノ酪酸、デヒドロアラニン、ノルロイシン、アロイソロイシン、ｔ−ロイシン、α−アミノ−ｎ−ヘプタン酸、α，β−ジアミノプロピオン酸、β−Ν−オキサリル−α，β−ジアミノプロピオン酸、アロトレオニン、ホモシステイン、ホモセリン、β−ホモ−アラニン、イソバリン、ノルバリン、シトルリン、オルニチン、α−メチルアスパルテート、α−メチルロイシン、Ｎ−メチルアラニン、Ｎ−メチルグリシン、Ｎ−メチルロイシン、β−シクロヘキシル−アラニン、Ｎ−エチルアラニン、Ｎ，Ｎ−ε−ジメチルリシン、ジメチルアルギニン、Ｄａｐ（Ａｃ）、及びｎ−アルキル化Ｌ−αアミノ酸、からなる群から選択される、請求項１から８のいずれか一項に記載のαｖβ６インテグリンリガンド。
【請求項１２】
Ｘａａ1が、アラニン（Ａ）である、請求項１１に記載のαｖβ６インテグリンリガンド。
【請求項１３】
Ｘａａ2が、以下：アラニン、システイン、アスパラギン酸、グルタミン酸、フェニルアラニン、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、リシン、ロイシン、メチオニン、アスパラギン、プロリン、グルタミン、アルギニン、セリン、トレオニン、バリン、トリプトファン、チロシン、セレノシステイン、ピロリジン、Ｎ−ホルミルメチオニン、ヒドロキシプロリン、セレノメチオニン、α−アミノ−イソ酪酸、α−アミノ酪酸、α，γ−ジアミノ酪酸、デヒドロアラニン、ノルロイシン、アロイソロイシン、ｔ−ロイシン、α−アミノ−ｎ−ヘプタン酸、α，β−ジアミノプロピオン酸、β−Ν−オキサリル−α，β−ジアミノプロピオン酸、アロトレオニン、ホモシステイン、ホモセリン、β−ホモ−アラニン、イソバリン、ノルバリン、シトルリン、オルニチン、α−メチルアスパルテート（aspartate）、α−メチルロイシン、Ｎ−メチルアラニン、Ｎ−メチルグリシン、Ｎ−メチルロイシン、β−シクロヘキシル−アラニン、Ｎ−エチルアラニン、Ｎ，Ｎ−ε−ジメチルリシン、ジメチルアルギニン、Ｄａｐ（Ａｃ）、及びｎ−アルキル化Ｌ−αアミノ酸、からなる群から選択される、請求項１から８のいずれか一項に記載のαｖβ６インテグリンリガンド。
【請求項１４】
Ｘａａ2が、Ｌ−α−アミノ−酪酸である、請求項１３に記載のαｖβ６インテグリンリガンド。
【請求項１５】
前記αｖβ６インテグリンリガンドが、カーゴ分子にコンジュゲートされ、前記カーゴ分子が、薬学的に活性な成分又は化合物、医薬品、プロドラッグ、あるいは治療上価値のある物質を含む、請求項２、３、５、６、又は７のいずれか一項に記載のαｖβ６インテグリンリガンド。
【請求項１６】
前記αｖβ６インテグリンリガンドが、カーゴ分子にコンジュゲートされ、前記カーゴ分子が、小分子、抗体、抗体フラグメント、免疫グロブリン、モノクローナル抗体、標識若しくはマーカー、脂質、天然若しくは修飾核酸又はポリヌクレオチド、ペプチド、アプタマー、ポリマー、ポリアミン、タンパク質、毒素、ビタミン、ポリエチレングリコール、ハプテン、ジゴキシゲニン、ビオチン、放射性原子若しくは分子、又はフルオロフォアを含む、請求項２、３、５、６、又は７のいずれか一項に記載のαｖβ６インテグリンリガンド。
【請求項１７】
前記αｖβ６インテグリンリガンドが、カーゴ分子にコンジュゲートされ、前記カーゴ分子が、活性医薬成分を含む、請求項２、３、５、６、又は７のいずれか一項に記載のαｖβ６インテグリンリガンド。
【請求項１８】
前記αｖβ６インテグリンリガンドが、カーゴ分子にコンジュゲートされ、前記カーゴ分子が、オリゴマー化合物を含む、請求項２、３、５、６、又は７のいずれか一項に記載のαｖβ６インテグリンリガンド。
【請求項１９】
前記αｖβ６インテグリンリガンドが、カーゴ分子にコンジュゲートされ、前記カーゴ分子が、ＲＮＡｉ剤を含む、請求項２、３、５、６、又は７のいずれか一項に記載のαｖβ６インテグリンリガンド。
【請求項２０】
Ｊが、１、２、３つの、又は３つを超えるＬ−αアミノ酸、Ｌ−βアミノ酸、又はα，α−二置換アミノ酸、あるいはそれらの組み合わせを含み、前記アミノ酸が、以下：アラニン、システイン、アスパラギン酸、グルタミン酸、フェニルアラニン、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、リシン、ロイシン、メチオニン、アスパラギン、プロリン、グルタミン、アルギニン、セリン、トレオニン、バリン、トリプトファン、チロシン、セレノシステイン、ピロリジン、Ｎ−ホルミルメチオニン、ヒドロキシプロリン、セレノメチオニン、α−アミノ−イソ酪酸、α−アミノ酪酸、α，γ−ジアミノ酪酸、デヒドロアラニン、ノルロイシン、アロイソロイシン、ｔ−ロイシン、α−アミノ−ｎ−ヘプタン酸、α，β−ジアミノプロピオン酸、β−Ν−オキサリル−α，β−ジアミノプロピオン酸、アロトレオニン、ホモシステイン、ホモセリン、β−ホモ−アラニン、イソバリン、ノルバリン、シトルリン、オルニチン、α−メチルアスパルテート、α−メチルロイシン、Ｎ−メチルアラニン、Ｎ−メチルグリシン、Ｎ−メチルロイシン、β−シクロヘキシルアラニン、Ｎ−エチルアラニン、Ｎ，Ｎ−ε−ジメチルリシン、ジメチルアルギニン、Ｄａｐ（Ａｃ）、及びｎ−アルキル化Ｌ−αアミノ酸、からなる群から選択される、請求項３、４、５、６、又は８のいずれか一項に記載のαｖβ６インテグリンリガンド。
【請求項２１】
Ｊが、１、２、又は３つのＬ−αアミノ酸、Ｌ−βアミノ酸、又はα，α−二置換アミノ酸、あるいはそれらの組み合わせを含む、請求項３、４、５、６、又は８のいずれか一項に記載のαｖβ６インテグリンリガンド。
【請求項２２】
Ｊが、１つ又は複数の非標準アミノ酸を含む、請求項２１に記載のαｖβ６インテグリンリガンド。
【請求項２３】
Ｊが、シトルリンを含む、請求項２１に記載のαｖβ６インテグリンリガンド。
【請求項２４】
Ｊが、α−アミノ−イソ酪酸を含む、請求項２１に記載のαｖβ６インテグリンリガンド。
【請求項２５】
Ｒ1が、ポリエチレングリコールを含み、前記ポリエチレングリコールが、２〜２０個のエチレンオキシド単位を有する、請求項３から８のいずれか一項に記載のαｖβ６インテグリンリガンド。
【請求項２６】
前記リガンドが、単座（monodentate）リガンドである、請求項１から８のいずれか一項に記載のαｖβ６インテグリンリガンド。
【請求項２７】
前記リガンドが、三座（tridentate）リガンドである、請求項１から８のいずれか一項に記載のαｖβ６インテグリンリガンド。
【請求項２８】
Ｚ−Ｒが、以下：
【化１】
2019535685.tif 000049
Ｄａｐ（グアニジノ）
で置き換えられている、請求項１から８のいずれか一項に記載のαｖβ６インテグリンリガンド。
【請求項２９】
以下：
Ｚ−ＲＧ1ＤＬＡＡｂｕＬ（配列番号９１）（式Ｉｄ）
を含み、式中、
ＡがＬ−アラニンであり、かつＡｂｕがＬ−α−アミノ−酪酸である、請求項１から８のいずれか一項に記載のαｖβ６インテグリンリガンド。
【請求項３０】
Ｇ1が、Ｌ−グリシンである、請求項２９に記載のαｖβ６インテグリンリガンド。
【請求項３１】
以下：
Ｚ−Ｚ−ＲＧ1ＤＬＸａａ1Ｘａａ2Ｌ−Ｘａａ3Ｘａａ4Ｌ−Ｒ1（配列番号９２）
を含み、式中、
Ｘａａ1、Ｘａａ2、Ｘａａ3及びＸａａ4の少なくとも１つ又は複数が、非標準アミノ酸である、
請求項１から８のいずれか一項に記載のαｖβ６インテグリンリガンド。
【請求項３２】
Ｘａａ2、Ｘａａ3及びＸａａ4がそれぞれ、独立して選択された非標準アミノ酸である、請求項３１に記載のαｖβ６インテグリンリガンド。
【請求項３３】
αｖβ６インテグリンリガンドであって、以下：
ＲＧ1ＤＬＸａａ1Ｘａａ2Ｌ−Ｘａａ3Ｘａａ4Ｌ−Ｒ1(配列番号９６）（式ＶＩＩＩ）
を含み、式中、
ＲはＬ−アルギニンであり；
Ｇ1はＬ−グリシン又はＮ−メチルグリシンであり；
ＤはＬ−アスパラギン酸（Ｌ−アスパルテート）であり；
ＬはＬ−ロイシンであり；
Ｘａａ1は、Ｌ−αアミノ酸、Ｌ−βアミノ酸、又はα，α−二置換アミノ酸であり；
Ｘａａ2は、Ｌ−αアミノ酸、Ｌ−βアミノ酸、又はα，α−二置換アミノ酸であり；
Ｘａａ3は、Ｌ−αアミノ酸、Ｌ−βアミノ酸、又はα，α−二置換アミノ酸であり；
Ｘａａ4は、Ｌ−αアミノ酸、Ｌ−βアミノ酸、又はα，α−二置換アミノ酸であり；
Ｒ1は、任意であって、存在する場合には、ＰＥＧ及び／又は連結基を含み；かつ
Ｘａａ1、Ｘａａ2、Ｘａａ3、及びＸａａ4の少なくとも１つが、非標準アミノ酸である、αｖβ６インテグリンリガンド。
【請求項３４】
Ｘａａ1、Ｘａａ2、Ｘａａ3、及びＸａａ4の少なくとも２つが、非標準アミノ酸である、請求項３３に記載のαｖβ６インテグリンリガンド。
【請求項３５】
Ｘａａ2、Ｘａａ3、及びＸａａ4がそれぞれ、独立して選択された非標準アミノ酸である、請求項３３に記載のαｖβ６インテグリンリガンド。
【請求項３６】
前記αｖβ６インテグリンリガンドがさらに、カーゴ分子にコンジュゲートされる、請求項３３から３５のいずれか一項に記載のαｖβ６インテグリンリガンド。
【請求項３７】
図１から１１のいずれか一つに表された構造を有する、請求項１に記載のαｖβ６インテグリンリガンド。
【請求項３８】
請求項１から８又は３３のいずれか一項に記載のαｖβ６インテグリンリガンド、及び薬学的に許容される賦形剤を含有する組成物。
【請求項３９】
請求項１８又は請求項３６に記載のαｖβ６インテグリンリガンドを含有する組成物であって、前記αｖβ６インテグリンリガンドが、オリゴマー化合物にコンジュゲートされ、前記オリゴマー化合物が、上皮細胞における標的遺伝子の発現を阻害することができる、組成物。
【請求項４０】
前記αｖβ６インテグリンリガンドが、ＲＮＡｉ剤にコンジュゲートされ、前記ＲＮＡｉ剤が、上皮細胞における標的遺伝子の発現を阻害することができる、請求項３９に記載の組成物。
【請求項４１】
前記αｖβ６インテグリンリガンドが、ＲＮＡｉ剤にコンジュゲートされ、前記ＲＮＡｉ剤が、気管支上皮細胞における標的遺伝子の発現を阻害することができる、請求項３９に記載の組成物。
【請求項４２】
インビボで細胞に１つ又は複数のカーゴ分子を送達する方法であって、前記方法は、１つ又は複数のカーゴ分子にコンジュゲートしたαｖβ６インテグリンに対する親和性を有するリガンドを、対象に投与することを含み、ここで、前記αｖβ６インテグリンリガンドは、αｖβ６インテグリンリガンドである、方法。
【請求項４３】
前記細胞が、以下：Ｉ型及びＩＩ型肺胞上皮細胞、杯細胞、分泌上皮細胞、繊毛上皮細胞、角膜及び結膜上皮細胞、真皮上皮細胞、胆管細胞、腸細胞、乳管上皮細胞、腺上皮細胞、尿細管、並びに上皮腫瘍（癌）、からなる群から選択される、請求項４２に記載の方法。
【請求項４４】
前記１つ又は複数のカーゴ分子が、オリゴマー化合物を含む、請求項４２又は４３に記載の方法。
【請求項４５】
前記オリゴマー化合物が、ＲＮＡｉ剤である、請求項４４に記載の方法。
【請求項４６】
前記αｖβ６インテグリンに対する親和性を有するリガンドが、請求項１から８又は３３のいずれか一項に記載のαｖβ６インテグリンリガンドである、請求項４２に記載の方法。
【請求項４７】
インビボで細胞における標的遺伝子の発現を阻害する方法であって、αｖβ６インテグリンに対する親和性を有する１つ又は複数のリガンドにコンジュゲートしたオリゴマー化合物を、対象に投与することを含む、方法。
【請求項４８】
前記細胞が、以下：Ｉ型及びＩＩ型肺胞上皮細胞、杯細胞、分泌上皮細胞、繊毛上皮細胞、角膜及び結膜上皮細胞、真皮上皮細胞、胆管細胞、腸細胞、乳管上皮細胞、腺上皮細胞、尿細管、並びに上皮腫瘍（癌）、からなる群から選択される、請求項４７に記載の方法。
【請求項４９】
前記オリゴマー化合物が、ＲＮＡｉ剤である、請求項４７又は４８に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願への相互参照
本願は、２０１６年１１月１日に出願された米国仮特許出願第６２／４１５，７５２号明細書の優先権を主張し、その内容は参照により本明細書に組み込まれる。
【０００２】
発明の分野
αｖβ６インテグリンを標的とすること及び／又はαｖβ６インテグリンを発現する細胞を標的とすることにおいて有用なペプチドベースのアルファ−ｖベータ−６（αｖβ６）インテグリンリガンドを開示する。αｖβ６インテグリンリガンドは、１つ又は複数のカーゴ分子にコンジュゲートして、αｖβ６インテグリンを発現する細胞、例えば上皮細胞へのカーゴ分子の送達を促進することができる。
【背景技術】
【０００３】
背景
様々な上皮細胞で発現されるインテグリンアルファ−ｖベータ−６（αｖβ６）は、ＴＧＦ−βの潜在関連ペプチド（ＬＡＰ）に対する、並びに（ＥＣＭ）タンパク質フィブロネクチン、ビトロネクチン、及びテネイシンに対する受容体である。
【０００４】
正常な健常成人上皮ではほとんど検出されないが、αｖβ６インテグリンは、創傷治癒中並びに様々な癌（例えば、結腸癌、卵巣癌、子宮内膜癌、及び胃癌）において上方制御され、しばしば、癌の予後不良に関連する。αｖβ６インテグリンは転移における細胞浸潤及び遊走を促進し、かつアポトーシスを阻害し得ることが示されている。αｖβ６インテグリンはまた、マトリックスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰ）の発現を制御し、ＴＧＦ−β１を活性化し得る。主にインビトロ研究から、αｖβ６インテグリンが癌の進行を促進し得ることを示唆する証拠が増えている。したがって、インテグリンαｖβ６は、腫瘍バイオマーカー及び潜在的な治療標的として魅力的であり、かつそのマトリックスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰ）の発現及びＴＧＦ−β１の活性化における役割のために魅力的である。
【発明の概要】
【０００５】
概要
本明細書に記載されるのは、新規な、操作された、天然に存在しないペプチドベースのαｖβ６インテグリンリガンド（αｖβ６リガンドとも称される）である。本明細書に開示のαｖβ６インテグリンリガンドは、血清中で安定であり、かつαｖβ６インテグリンに親和性を有し、並びにαｖβ６インテグリンに特異的に結合することができる。本明細書にさらに記載されるのは、αｖβ６インテグリンリガンドを含有する組成物、並びに本明細書に記載のαｖβ６インテグリンリガンド及び組成物の使用方法である。
【０００６】
本明細書に記載のαｖβ６インテグリンリガンドは、他の既知のαｖβ６インテグリン結合ペプチド、例えば天然ペプチドＲＧＤＬＡＴＬＲＱＬ（配列番号１）と比較して改善された安定性を有する。血清安定性が増大しているが、新規な本明細書に記載のαｖβ６リガンドは、αｖβ６インテグリンへの結合（αｖβ６インテグリンに対する親和性）を保持している。
【０００７】
第１の態様では、本開示は、操作された、天然に存在しないαｖβ６インテグリンリガンドを提供する。いくつかの実施形態では、αｖβ６インテグリンリガンドは、一般式：Ｚ−ＲＧ1ＤＬＸａａ1Ｘａａ2Ｌ（配列番号８５）（式Ｉ）を含み、式中、Ｚはアミン末端キャップ（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のアミン末端キャップのいずれか）であり；ＲはＬ−アルギニンであり；Ｇ1はＬ−グリシン又はＮ−メチルグリシンであり；ＤはＬ−アスパラギン酸（Ｌ−アスパルテート（aspartate））であり；ＬはＬ−ロイシンであり；Ｘａａ1は、Ｌ−αアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−αアミノ酸のいずれか）、Ｌ−βアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−βアミノ酸のいずれか）、又はα，α−二置換アミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のα，α−二置換アミノ酸のいずれか）であり；かつ、Ｘａａ2は、Ｌ−αアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−αアミノ酸のいずれか）、Ｌ−βアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−βアミノ酸のいずれか）、又はα，α−二置換アミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のα，α−二置換アミノ酸のいずれか）である。
【０００８】
いくつかの実施形態では、αｖβ６インテグリンリガンドは、一般式：Ｚ−ＲＧ1ＤＬＸａａ1Ｘａａ2Ｌ−Ｊ−Ｒ1（配列番号８６）（式ＩＩ）を含み、式中、Ｚはアミン末端キャップ（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のアミン末端キャップのいずれか）であり；ＲはＬ−アルギニンであり；Ｇ1はＬ−グリシン又はＮ−メチルグリシンであり；ＤはＬ−アスパラギン酸（Ｌ−アスパルテート）であり；ＬはＬ−ロイシンであり；Ｘａａ1は、Ｌ−αアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−αアミノ酸のいずれか）、Ｌ−βアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−βアミノ酸のいずれか）、又はα，α−二置換アミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のα，α−二置換アミノ酸のいずれか）であり；Ｘａａ2は、Ｌ−αアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−αアミノ酸のいずれか）、Ｌ−βアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−βアミノ酸のいずれか）、又はα，α−二置換アミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のα，α−二置換アミノ酸のいずれか）であり；Ｊは、任意であって、存在する場合には、１つ又は複数（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、又は３０；又は１〜３０、１〜２５、１〜２０、１〜１５、１〜１０、１〜５、５〜３０、５〜２５、５〜２０、５〜１５、５〜１０、１０〜３０、１０〜２５、１０〜２０、１０〜１５、１５〜３０、１５〜２５、１５〜２０、２０〜３０、２０〜２５、又は２５〜３０）の、Ｌ−αアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−αアミノ酸のいずれか）、Ｌ−βアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−βアミノ酸のいずれか）、又はα，α−二置換アミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のα，α−二置換アミノ酸のいずれか）、あるいはそれらの組み合わせを含み；かつ、Ｒ1は、任意であって、存在する場合には、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）及び／又は連結基を含む。
【０００９】
いくつかの実施形態では、本明細書に開示のαｖβ６インテグリンリガンドは、反応基又は保護された反応基を含むことができ、並びに、一般式：Ｚ−ＲＧ1ＤＬＸａａ1Ｘａａ2Ｌ−Ｊ−Ｒ1−Ｒ2（配列番号８７）（式ＩＩＩ）を含むことができ、式中、Ｚはアミン末端キャップ（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のアミン末端キャップのいずれか）であり；ＲはＬ−アルギニンであり；Ｇ1はＬ−グリシン又はＮ−メチルグリシンであり；ＤはＬ−アスパラギン酸（Ｌ−アスパルテート）であり；ＬはＬ−ロイシンであり；Ｘａａ1は、Ｌ−αアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−αアミノ酸のいずれか）、Ｌ−βアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−βアミノ酸のいずれか）、又はα，α−二置換アミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のα，α−二置換アミノ酸のいずれか）であり；Ｘａａ2は、Ｌ−αアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−αアミノ酸のいずれか）、Ｌ−βアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−βアミノ酸のいずれか）、又はα，α−二置換アミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のα，α−二置換アミノ酸のいずれか）であり；Ｊは、任意であって、存在する場合には、１つ又は複数（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、又は３０；又は１〜３０、１〜２５、１〜２０、１〜１５、１〜１０、１〜５、５〜３０、５〜２５、５〜２０、５〜１５、５〜１０、１０〜３０、１０〜２５、１０〜２０、１０〜１５、１５〜３０、１５〜２５、１５〜２０、２０〜３０、２０〜２５、又は２５〜３０）の、Ｌ−αアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−αアミノ酸のいずれか）、Ｌ−βアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−βアミノ酸のいずれか）、又はα，α−二置換アミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のα，α−二置換アミノ酸のいずれか）、あるいはそれらの組み合わせを含み；Ｒ1は、任意であって、存在する場合には、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）及び／又は連結基を含み；かつ、Ｒ2は、反応基又は保護された反応基を含む。
【００１０】
いくつかの実施形態では、αｖβ６インテグリンリガンドは、１つ又は複数（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、又は３０；又は１〜３０、１〜２５、１〜２０、１〜１５、１〜１０、１〜５、５〜３０、５〜２５、５〜２０、５〜１５、５〜１０、１０〜３０、１０〜２５、１０〜２０、１０〜１５、１５〜３０、１５〜２５、１５〜２０、２０〜３０、２０〜２５、又は２５〜３０）のカーゴ分子（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のカーゴ分子のいずれか）にコンジュゲートすることができ、ここで、αｖβ６インテグリンリガンドは、一般式：（Ｚ−ＲＧ1ＤＬＸａａ1Ｘａａ2Ｌ−Ｊ−Ｒ1）n−Ｒ3（配列番号８８）（式ＩＶ）を含み、式中、Ｚはアミン末端キャップ（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のアミン末端キャップのいずれか）であり；ＲはＬ−アルギニンであり；Ｇ1はＬ−グリシン又はＮ−メチルグリシンであり；ＤはＬ−アスパラギン酸（Ｌ−アスパルテート）であり；ＬはＬ−ロイシンであり；Ｘａａ1は、Ｌ−αアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−αアミノ酸のいずれか）、Ｌ−βアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−βアミノ酸のいずれか）、又はα，α−二置換アミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のα，α−二置換アミノ酸のいずれか）であり；Ｘａａ2は、Ｌ−αアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−αアミノ酸のいずれか）、Ｌ−βアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−βアミノ酸のいずれか）、又はα，α−二置換アミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のα，α−二置換アミノ酸のいずれか）であり；Ｊは、任意であって、存在する場合には、１つ又は複数（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、又は３０；又は１〜３０、１〜２５、１〜２０、１〜１５、１〜１０、１〜５、５〜３０、５〜２５、５〜２０、５〜１５、５〜１０、１０〜３０、１０〜２５、１０〜２０、１０〜１５、１５〜３０、１５〜２５、１５〜２０、２０〜３０、２０〜２５、又は２５〜３０）の、Ｌ−αアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−αアミノ酸のいずれか）、Ｌ−βアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−βアミノ酸のいずれか）、又はα，α−二置換アミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のα，α−二置換アミノ酸のいずれか）、あるいはそれらの組み合わせを含み；Ｒ1は、任意であって、存在する場合には、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）及び／又は連結基を含み；ｎは、０を超える整数（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、又は３０；又は１〜３０、１〜２５、１〜２０、１〜１５、１〜１０、１〜５、５〜３０、５〜２５、５〜２０、５〜１５、５〜１０、１０〜３０、１０〜２５、１０〜２０、１０〜１５、１５〜３０、１５〜２５、１５〜２０、２０〜３０、２０〜２５、又は２５〜３０）であり；かつ、Ｒ3は１つ又は複数のカーゴ分子を含む。いくつかの実施形態では、Ｒ3は１つのカーゴ分子を含む。いくつかの実施形態では、Ｒ3は１つを超えるカーゴ分子を含む。
【００１１】
いくつかの実施形態では、αｖβ６インテグリンリガンドは、１つ又は複数（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、又は３０；又は１〜３０、１〜２５、１〜２０、１〜１５、１〜１０、１〜５、５〜３０、５〜２５、５〜２０、５〜１５、５〜１０、１０〜３０、１０〜２５、１０〜２０、１０〜１５、１５〜３０、１５〜２５、１５〜２０、２０〜３０、２０〜２５、又は２５〜３０）のカーゴ分子（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のカーゴ分子のいずれか）にコンジュゲートすることができ、ここで、αｖβ６インテグリンリガンドは、一般式：（Ｚ−ＲＧ1ＤＬＸａａ1Ｘａａ2Ｌ−Ｊ−Ｒ1）n−Ｒ4−（Ｒ3）p（配列番号８９）（式Ｖ）を含み、式中、Ｚはアミン末端キャップ（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のアミン末端キャップのいずれか）であり；ＲはＬ−アルギニンであり；Ｇ1はＬ−グリシン又はＮ−メチルグリシンであり；ＤはＬ−アスパラギン酸（Ｌ−アスパルテート）であり；ＬはＬ−ロイシンであり；Ｘａａ1は、Ｌ−αアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−αアミノ酸のいずれか）、Ｌ−βアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−βアミノ酸のいずれか）、又はα，α−二置換アミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のα，α−二置換アミノ酸のいずれか）であり；Ｘａａ2は、Ｌ−αアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−αアミノ酸のいずれか）、Ｌ−βアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−βアミノ酸のいずれか）、又はα，α−二置換アミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のα，α−二置換アミノ酸のいずれか）であり；Ｊは、任意であって、存在する場合には、１つ又は複数（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、又は３０；又は１〜３０、１〜２５、１〜２０、１〜１５、１〜１０、１〜５、５〜３０、５〜２５、５〜２０、５〜１５、５〜１０、１０〜３０、１０〜２５、１０〜２０、１０〜１５、１５〜３０、１５〜２５、１５〜２０、２０〜３０、２０〜２５、又は２５〜３０）の、Ｌ−αアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−αアミノ酸のいずれか）、Ｌ−βアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−βアミノ酸のいずれか）、又はα，α−二置換アミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のα，α−二置換アミノ酸のいずれか）、あるいはそれらの組み合わせを含み；Ｒ1は、任意であって、存在する場合には、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）及び／又は連結基を含み；ｎは、０を超える整数（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８���２９、又は３０；又は１〜３０、１〜２５、１〜２０、１〜１５、１〜１０、１〜５、５〜３０、５〜２５、５〜２０、５〜１５、５〜１０、１０〜３０、１０〜２５、１０〜２０、１０〜１５、１５〜３０、１５〜２５、１５〜２０、２０〜３０、２０〜２５、又は２５〜３０）であり；Ｒ3は１つ又は複数のカーゴ分子を含み；ｐは、０を超える整数（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、又は３０；又は１〜３０、１〜２５、１〜２０、１〜１５、１〜１０、１〜５、５〜３０、５〜２５、５〜２０、５〜１５、５〜１０、１０〜３０、１０〜２５、１０〜２０、１０〜１５、１５〜３０、１５〜２５、１５〜２０、２０〜３０、２０〜２５、又は２５〜３０）であり；かつ、Ｒ4は、任意であって、存在する場合には、足場及び／又は連結基を含み、斯かる足場及び／又は連結基は、各リガンドのための少なくとも１つの結合点（attachment point）及び各カーゴ分子のための少なくとも１つの結合点を含む。いくつかの実施形態では、Ｒ3は１つのカーゴ分子を含む。いくつかの実施形態では、Ｒ3は１つを超えるカーゴ分子を含む。
【００１２】
本明細書で使用される場合、「アミン末端キャップ」（本明細書の式において「Ｚ」として示される）は、ＲＧＤＬＡＴＬ天然ペプチドのプロテアーゼ耐性及び／又は血清安定性特性を増大し及び／又は他の方法で改善することができる化学部分を含む。そのような改善は、例えば当該技術分野で一般的に知られている方法を用いて決定することができ、斯かる方法は、例えば、インビボ及び／又はインビトロで、αｖβ６インテグリンリガンド、αｖβ６インテグリンリガンド−カーゴ分子コンジュゲート、又はαｖβ６インテグリンリガンド含有組成物の半減期を決定することによるものを含むが、これに限定されない。いくつかの実施形態では、Ｚは、本明細書に開示のαｖβ６インテグリンリガンドのＮ−末端アミンのプロテアーゼ耐性アシル化、スルホニル化、又はアルキル化を含む。いくつかの実施形態では、アミン末端キャップＺは、アルキル−ＣＯ、ＡｒＣＯ、アルキル−ＳＯ2、ＡｒＳＯ2、アルキル又はアリール基であり得る。いくつかの実施形態では、アルキル基は、直鎖又は分岐鎖いずれかの脂肪族アルキル基であり得、並びにアリール基は、芳香族又はヘテロ芳香族基のいずれかであり得る。いくつかの実施形態では、アミン末端キャップＺは、これらに限定されるものではないが、ＣＨ3ＣＯ、ＣＨ3ＣＨ2ＣＯ、ＣＨ3（ＣＨ2）2ＣＯ、（ＣＨ3）2ＣＨＣＯ、ＣＨ3（ＣＨ2）3ＣＯ、（ＣＨ3）2ＣＨＣＨ2ＣＯ、ＣＨ3ＣＨ2ＣＨ（ＣＨ3）ＣＯ、（ＣＨ3）3ＣＣＯ、ＣＨ3（ＣＨ2）4ＣＯ、ＣＨ3ＳＯ2、ＣＨ3ＣＨ2ＳＯ2、ＣＨ3（ＣＨ2）2ＳＯ2、（ＣＨ3）2ＣＨＳＯ2、ＣＨ3（ＣＨ2）3ＳＯ2、（ＣＨ3）2ＣＨＣＨ2ＳＯ2、ＣＨ3ＣＨ2ＣＨ（ＣＨ3）ＳＯ2、（ＣＨ3）3ＣＳＯ2、ＰｈＣＯ、ＰｈＳＯ2、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０個の炭素原子を有するアルキル基、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ＮＨ2ＮＨ、ＰＥＧ、グアニジル、ＣＨ3ＯＣＨ2ＣＨ2ＯＣＨ2ＣＨ2ＣＯ、ＣＨ3Ｏ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）2ＣＨ2ＣＨ2ＣＯ、ＣＨ3Ｏ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）3ＣＨ2ＣＨ2ＣＯ、ＣＨ3Ｏ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）4ＣＨ2ＣＨ2ＣＯ、ＣＨ3Ｏ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）5ＣＨ2ＣＨ2ＣＯ、ＣＨ3ＯＣＨ2ＣＨ2ＯＣＨ2ＣＯ、ＣＨ3Ｏ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）2ＣＨ2ＣＯ、ＣＨ3Ｏ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）3ＣＨ2ＣＯ、ＣＨ3Ｏ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）4ＣＨ2ＣＯ、ＣＨ3Ｏ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）5ＣＨ2ＣＯ、ＣＨ3ＯＣＨ2ＣＨ2ＯＣＯ、ＣＨ3Ｏ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）2ＣＯ、ＣＨ3Ｏ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）3ＣＯ、ＣＨ3Ｏ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）4ＣＯ、ＣＨ3Ｏ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）5ＣＯ、ＨＯＣＨ2ＣＨ2ＯＣＨ2ＣＨ2ＣＯ、ＨＯ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）2ＣＨ2ＣＨ2ＣＯ、ＨＯ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）3ＣＨ2ＣＨ2ＣＯ、ＨＯ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）4ＣＨ2ＣＨ2ＣＯ、ＨＯ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）5ＣＨ2ＣＨ2ＣＯ、ＨＯＣＨ2ＣＨ2ＯＣＨ2ＣＯ、ＨＯ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）2ＣＨ2ＣＯ、ＨＯ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）3ＣＨ2ＣＯ、ＨＯ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）4ＣＨ2ＣＯ、ＨＯ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）5ＣＨ2ＣＯ、ＨＯＣＨ2ＣＨ2ＯＣＯ、ＨＯ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）2ＣＯ、ＨＯ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）3ＣＯ、ＨＯ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）4ＣＯ、ＨＯ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）5ＣＯ、ＣＨ3ＣＨ2ＯＣＨ2ＣＨ2ＯＣＨ2ＣＨ2ＣＯ、ＣＨ3ＣＨ2Ｏ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）2ＣＨ2ＣＨ2ＣＯ、ＣＨ3ＣＨ2Ｏ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）3ＣＨ2ＣＨ2ＣＯ、ＣＨ3ＣＨ2Ｏ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）4ＣＨ2ＣＨ2ＣＯ、ＣＨ3ＣＨ2Ｏ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）5ＣＨ2ＣＨ2ＣＯ、��Ｈ3ＣＨ2ＯＣＨ2ＣＨ2ＯＣＨ2ＣＯ、ＣＨ3ＣＨ2Ｏ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）2ＣＨ2ＣＯ、ＣＨ3ＣＨ2Ｏ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）3ＣＨ2ＣＯ、ＣＨ3ＣＨ2Ｏ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）4ＣＨ2ＣＯ、ＣＨ3ＣＨ2Ｏ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）5ＣＨ2ＣＯ、ＣＨ3ＣＨ2ＯＣＨ2ＣＨ2ＯＣＯ、ＣＨ3ＣＨ2Ｏ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）2ＣＯ、ＣＨ3ＣＨ2Ｏ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）3ＣＯ、ＣＨ3ＣＨ2Ｏ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）4ＣＯ、ＣＨ3ＣＨ2Ｏ（ＣＨ2ＣＨ2Ｏ）5ＣＯ、ＣＨ3ＯＣＨ2ＣＨ2ＣＯ、ＨＯＣＨ2ＣＨ2ＣＯ、又はＣＨ3ＣＨ2ＯＣＨ2ＣＨ2ＣＯであり得る。
【００１３】
いくつかの実施形態では、アミン末端キャップＺは、ＣＨ3ＣＯである。いくつかの実施形態では、アミン末端キャップＺは、ＣＨ3ＣＨ2ＣＯである。いくつかの実施形態では、アミン末端キャップＺは、ＣＨ3（ＣＨ2）2ＣＯである。いくつかの実施形態では、アミン末端キャップＺは、ＣＨ3（ＣＨ2）3ＣＯである。いくつかの実施形態では、アミン末端キャップＺは、ＣＨ3（ＣＨ2）4ＣＯである。
【００１４】
いくつかの実施形態では、αｖβ６インテグリンリガンドは、一般式：
Ｚ−ＲＧ1ＤＬＡＸａａuＬ（配列番号９０）（式Ｉｃ）を含み、式中、Ｚ、Ｒ、Ｇ1、Ｄ、及びＬはそれぞれ、本明細書の式Ｉについて定義した通りであり；ＡはＬ−アラニンであり；かつ、Ｘａａuは非標準アミノ酸（non-standard amino acid）である。
【００１５】
いくつかの実施形態では、αｖβ６インテグリンリガンドは、一般式：
Ｚ−ＲＧ1ＤＬＡＡｂｕＬ（配列番号９１）（式Ｉｄ）を含み、式中、Ｚ、Ｒ、Ｇ1、Ｄ、及びＬはそれぞれ、本明細書の式Ｉについて定義した通りであり；ＡはＬ−アラニンであり；かつ、ＡｂｕはＬ−α−アミノ−酪酸（２−アミノ酪酸）である。
【００１６】
いくつかの実施形態では、αｖβ６インテグリンリガンドは、一般式：
Ｚ−ＲＧ1ＤＬＸａａ1Ｘａａ2Ｌ−Ｘａａ3Ｘａａ4Ｌ−Ｒ1（配列番号９２）（式ＶＩ）を含み、式中、Ｚはアミン末端キャップ（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のアミン末端キャップのいずれか）であり；ＲはＬ−アルギニンであり；Ｇ1はＬ−グリシン又はＮ−メチルグリシンであり；ＤはＬ−アスパラギン酸（Ｌ−アスパルテート）であり；ＬはＬ−ロイシンであり；Ｘａａ1は、Ｌ−αアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−αアミノ酸のいずれか）、Ｌ−βアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−βアミノ酸のいずれか）、又はα，α−二置換アミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のα，α−二置換アミノ酸のいずれか）であり；Ｘａａ2は、Ｌ−αアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−αアミノ酸のいずれか）、Ｌ−βアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−βアミノ酸のいずれか）、又はα，α−二置換アミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のα，α−二置換アミノ酸のいずれか）であり；Ｘａａ3は、Ｌ−αアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−αアミノ酸のいずれか）、Ｌ−βアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−βアミノ酸のいずれか）、又はα，α−二置換アミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のα，α−二置換アミノ酸のいずれか）であり；Ｘａａ4は、Ｌ−αアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−αアミノ酸のいずれか）、Ｌ−βアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−βアミノ酸のいずれか）、又はα，α−二置換アミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のα，α−二置換アミノ酸のいずれか）であり；かつ、Ｒ1は、任意であって、存在する場合には、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）及び／又は連結基を含む。
【００１７】
いくつかの実施形態では、αｖβ６インテグリンリガンドは、一般式：
Ｚ−ＲＧ1ＤＬＡＸａａuＬ−Ｘａａ3Ｘａａ4Ｌ−Ｒ1（配列番号９３）（式ＶＩｂ）を含み、式中、Ｚ、Ｒ、Ｇ1、Ｄ、Ｌ、及びＲ1はそれぞれ、本明細書の式ＶＩについて定義した通りであり；ＡはＬ−アラニンであり；Ｘａａuは非標準アミノ酸であり；Ｘａａ3は、Ｌ−αアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−αアミノ酸のいずれか）、Ｌ−βアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−βアミノ酸のいずれか）、又はα，α−二置換アミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のα，α−二置換アミノ酸のいずれか）であり；かつ、Ｘａａ4は、Ｌ−αアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−αアミノ酸のいずれか）、Ｌ−βアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−βアミノ酸のいずれか）、又はα，α−二置換アミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のα，α−二置換アミノ酸のいずれか）である。
【００１８】
いくつかの実施形態では、αｖβ６インテグリンリガンドは、一般式：
Ｚ−ＲＧ1ＤＬＡＡｂｕＬ−Ｘａａ3Ｘａａ4Ｌ−Ｒ1（配列番号９４）（式ＶＩｃ）を含み、式中、Ｚ、Ｒ、Ｇ1、Ｄ、Ｌ、及びＲ1はそれぞれ、本明細書の式ＶＩについて定義した通りであり；ＡはＬ−アラニンであり；ＡｂｕはＬ−α−アミノ酪酸（２−アミノ酪酸）であり；Ｘａａ3は、Ｌ−αアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−αアミノ酸のいずれか）、Ｌ−βアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−βアミノ酸のいずれか）、又はα，α−二置換アミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のα，α−二置換アミノ酸のいずれか）であり；かつ、Ｘａａ4は、Ｌ−αアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−αアミノ酸のいずれか）、Ｌ−βアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−βアミノ酸のいずれか）、又はα，α−二置換アミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のα，α−二置換アミノ酸のいずれか）である。
【００１９】
いくつかの実施形態では、αｖβ６インテグリンリガンドは、一般式：
Ｚ−ＲＧ1ＤＬＡＸａａuＬ−ＸａａuＸａａuＬ−Ｒ1（配列番号９５）（式ＶＩｄ）を含み、式中、Ｚ、Ｒ、Ｇ1、Ｄ、Ｌ、及びＲ1はそれぞれ、本明細書の式ＶＩについて定義した通りであり；ＡはＬ−アラニンであり；かつ、Ｘａａuは非標準アミノ酸である。
【００２０】
いくつかの実施形態では、本明細書中の式又はリガンドのいずれかにおけるＺ−Ｒは、Ｒ´で置き換えられ、ここで、Ｒ´はＤａｐ（グアニジノ）である：
【００２１】
【化１】
2019535685.tif 000003
【００２２】
いくつかの実施形態では、αｖβ６インテグリンリガンドは、一般式：
ＲＧ1ＤＬＸａａ1Ｘａａ2Ｌ−Ｘａａ3Ｘａａ4Ｌ−Ｒ1（配列番号９６）（式ＶＩＩＩ）を含み、式中、ＲはＬ−アルギニンであり；Ｇ1はＬ−グリシン又はＮ−メチルグリシンであり；ＤはＬ−アスパラギン酸（Ｌ−アスパルテート）であり；ＬはＬ−ロイシンであり；Ｘａａ1は、Ｌ−αアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−αアミノ酸のいずれか）、Ｌ−βアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−βアミノ酸のいずれか）、又はα，α−二置換アミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のα，α−二置換アミノ酸のいずれか）であり；Ｘａａ2は、Ｌ−αアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−αアミノ酸のいずれか）、Ｌ−βアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−βアミノ酸のいずれか）、又はα，α−二置換アミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のα，α−二置換アミノ酸のいずれか）であり；Ｘａａ3は、Ｌ−αアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−αアミノ酸のいずれか）、Ｌ−βアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−βアミノ酸のいずれか）、又はα，α−二置換アミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のα，α−二置換アミノ酸のいずれか）であり；Ｘａａ4は、Ｌ−αアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−αアミノ酸のいずれか）、Ｌ−βアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−βアミノ酸のいずれか）、又はα，α−二置換アミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のα，α−二置換アミノ酸のいずれか）であり；Ｒ1は、任意であって、存在する場合には、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）及び／又は連結基を含み；かつ、Ｘａａ1、Ｘａａ2、Ｘａａ3、及びＸａａ4の少なくとも１つは非標準アミノ酸である。
【００２３】
いくつかの実施形態では、αｖβ６インテグリンリガンドは、一般式：ＲＧ1ＤＬＸａａ1Ｘａａ2Ｌ−Ｘａａ3Ｘａａ4Ｌ−Ｒ1（配列番号９６）（式ＶＩＩＩ）を含み、式中、Ｘａａ1、Ｘａａ2、Ｘａａ3、及びＸａａ4の少なくとも２つは非標準アミノ酸である。いくつかの実施形態では、αｖβ６インテグリンリガンドは、一般式：ＲＧ1ＤＬＸａａ1Ｘａａ2Ｌ−Ｘａａ3Ｘａａ4Ｌ−Ｒ1（配列番号９６）（式ＶＩＩＩ）を含み、式中、Ｘａａ1、Ｘａａ2、Ｘａａ3、及びＸａａ4の少なくとも３つは非標準アミノ酸である。
【００２４】
いくつかの実施形態では、αｖβ６インテグリンリガンドは、一般式：
ＲＧ1ＤＬＡＡｂｕＬ−ＣｉｔＡｉｂＬ−Ｒ1（配列番号９７）（式ＶＩＩＩａ）を含み、式中、Ｒ、Ｇ1、Ｄ、Ｌ及びＲ1はそれぞれ、本明細書の式ＶＩＩＩについて定義した通りであり；ＡはＬ−アラニンであり；ＡｂｕはＬ−α−アミノ酪酸（２−アミノ酪酸）であり；Ｃｉｔはシトルリンであり、かつ、Ａｉｂはα−アミノ−イソ酪酸（２−アミノイソ酪酸）である。
【００２５】
いくつかの実施形態では、αｖβ６インテグリンリガンドは、図１の構造を含むか、それからなるか、又は本質的にそれからなる。
【００２６】
いくつかの実施形態では、αｖβ６インテグリンリガンドは、図２の構造を含むか、それからなるか、又は本質的にそれからなる。
【００２７】
いくつかの実施形態では、αｖβ６インテグリンリガンドは、図３の構造を含むか、それからなるか、又は本質的にそれからなる。
【００２８】
いくつかの実施形態では、αｖβ６インテグリンリガンドは、図４の構造を含むか、それからなるか、又は本質的にそれからなる。
【００２９】
いくつかの実施形態では、αｖβ６インテグリンリガンドは、図５の構造を含むか、それからなるか、又は本質的にそれからなる。
【００３０】
いくつかの実施形態では、αｖβ６インテグリンリガンドは、図６の構造を含むか、それからなるか、又は本質的にそれからなる。
【００３１】
いくつかの実施形態では、αｖβ６インテグリンリガンドは、図７の構造を含むか、それからなるか、又は本質的にそれからなる。
【００３２】
いくつかの実施形態では、αｖβ６インテグリンリガンドは、図８の構造を含むか、それからなるか、又は本質的にそれからなる。
【００３３】
いくつかの実施形態では、αｖβ６インテグリンリガンドは、図９の構造を含むか、それからなるか、又は本質的にそれからなる。
【００３４】
いくつかの実施形態では、αｖβ６インテグリンリガンドは、図１０の構造を含むか、それからなるか、又は本質的にそれからなる。
【００３５】
いくつかの実施形態では、αｖβ６インテグリンリガンドは、図１１の構造を含むか、それからなるか、又は本質的にそれからなる。
【００３６】
いくつかの実施形態では、本明細書に開示のαｖβ６インテグリンリガンドのいずれかは、カーゴ分子、反応基、及び／又は保護された反応基に連結され得る。反応基は、分子、例えば１つ又は複数のカーゴ分子（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のカーゴ分子のいずれか）へのαｖβ６インテグリンリガンドのコンジュゲーションを促進するために使用され得る。本明細書に開示のαｖβ６インテグリンリガンドは、αｖβ６インテグリン又はαｖβ６インテグリンを発現する細胞へのカーゴ分子の標的化を増大することができる。カーゴ分子は、これらに限定されるものではないが、薬学的に活性な成分又は化合物、医薬品、プロドラッグ、あるいは治療上有効な物質であり得る。いくつかの実施形態では、カーゴ分子は、これらに限定されるものではないが、小分子、抗体、抗体断片、免疫グロブリン、モノクローナル抗体、標識若しくはマーカー、脂質、天然若しくは修飾核酸又はポリヌクレオチド（例えば、オリゴマー化合物、例えばアンチセンスオリゴヌクレオチド又はＲＮＡｉ剤）、ペプチド、アプタマー、ポリマー、ポリアミン、タンパク質、毒素、ビタミン、ポリエチレングリコール、ハプテン、ジゴキシゲニン、ビオチン、放射性原子若しくは分子、又はフルオロフォアであり得る。いくつかの実施形態では、カーゴ分子は、薬学的に活性な成分、医薬品、又はプロドラッグを含む。いくつかの実施形態では、カーゴ分子は、薬学的に活性な成分としてオリゴマー化合物を含む。いくつかの実施形態では、カーゴ分子は、薬学的に活性な成分としてＲＮＡｉ剤を含む。
【００３７】
本明細書に記載されるのは、αｖβ６発現細胞へとカーゴ分子を標的化するための記載されたαｖβ６リガンドの使用である。細胞は、インビトロ、インサイチュ、エクスビボ、又はインビボであり得る。
【００３８】
別の態様では、本開示は、操作された、天然に存在しない本明細書に記載のαｖβ６リガンドの１つ又は複数を含有する組成物を提供する。例えば、いくつかの実施形態では、１つ又は複数の本明細書に開示のαｖβ６インテグリンリガンドを含有する組成物は、インビボで細胞に送達されることになる１つ又は複数のＲＮＡｉ剤のような１つ又は複数のオリゴマー化合物を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるのは、インビボで細胞にＲＮＡｉ剤を送達するための組成物であり、ここで、ＲＮＡｉ剤は、１つ又は複数のαｖβ６リガンドにコンジュゲートされている。
【００３９】
１つ又は複数のαｖβ６リガンドを含有する組成物が記載される。いくつかの実施形態では、組成物は薬学的に許容される賦形剤を含有する。いくつかの実施形態では、１つ又は複数のαｖβ６リガンドを含有する組成物は、１つ又は複数の他の医薬物質あるいは薬学的に活性な成分又は化合物を含有する。
【００４０】
他の実施形態では、組成物は、本明細書に記載された１つ又は複数のαｖβ６リガンドを含む医薬を含有する。いくつかの実施形態では、医薬はさらに薬学的に許容される賦形剤を含む。
【００４１】
１つ又は複数の本明細書に開示のαｖβ６インテグリンリガンドを含有する組成物は、例えば、Ｉ型及びＩＩ型肺胞上皮細胞、杯細胞、分泌上皮細胞、繊毛上皮細胞、角膜及び結膜上皮細胞、真皮上皮細胞、胆管細胞、腸細胞、乳管（ductal）上皮細胞、腺上皮細胞、尿細管、並びに上皮腫瘍（癌）に、インビボ又はインビトロで送達され得る。
【００４２】
別の態様では、本開示は、本明細書に記載された１つ又は複数のαｖβ６リガンド及び／又は組成物の使用を含む方法を提供し、所望であれば、開示されたαｖβ６リガンド及び／又は組成物を医薬品としての投与に適した形態にする方法を提供する。他の実施形態では、本開示は、本明細書に記載のリガンド及び組成物、例えば医薬の製造方法を提供する。
【００４３】
１つ又は複数のαｖβ６インテグリンリガンドを含有する組成物は、投与されることが求められるカーゴ分子を考慮して、そのような投与に適していることが当該技術分野で知られている投与経路を用いてインビボで対象に投与することができ、斯かる投与経路は、例えば、静脈内、皮下、腹腔内、皮内、経皮的、経口、舌下、局所、腫瘍内、鼻腔内、又は吸入（エアロゾル又は乾燥粉末製剤）投与を含む。いくつかの実施形態では、１つ又は複数のαｖβ６インテグリンリガンドを含有する組成物は、例えば静脈内又は皮下投与によって、全身送達のために投与され得る。いくつかの実施形態では、１つ又は複数のαｖβ６インテグリンリガンドを含有する組成物は、例えば乾燥粉末吸入器又はネブライザーによる吸入送達によって、局所送達のために投与され得る。いくつかの実施形態では、１つ又は複数のαｖβ６インテグリンリガンドを含有する組成物は、局所投与によって、局所送達のために投与され得る。
【００４４】
いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるのは、インビボでＩ型肺胞上皮細胞に１つ又は複数の所望のカーゴ分子を送達するための方法であって、１つ又は複数のカーゴ分子にコンジュゲートした１つ又は複数のαｖβ６インテグリンリガンドを対象に投与することを含む、方法である。
【００４５】
いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるのは、インビボでＩＩ型肺胞上皮細胞に１つ又は複数の所望のカーゴ分子を送達するための方法であって、１つ又は複数のカーゴ分子にコンジュゲートした１つ又は複数のαｖβ６インテグリンリガンドを対象に投与することを含む、方法である。
【００４６】
いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるのは、インビボで杯細胞に１つ又は複数の所望のカーゴ分子を送達するための方法であって、１つ又は複数のカーゴ分子にコンジュゲートした１つ又は複数のαｖβ６インテグリンリガンドを対象に投与することを含む、方法である。
【００４７】
いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるのは、インビボで分泌上皮細胞に１つ又は複数の所望のカーゴ分子を送達するための方法であって、１つ又は複数のカーゴ分子にコンジュゲートした１つ又は複数のαｖβ６インテグリンリガンドを対象に投与することを含む、方法である。
【００４８】
いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるのは、インビボで繊毛上皮細胞に１つ又は複数の所望のカーゴ分子を送達するための方法であって、１つ又は複数のカーゴ分子にコンジュゲートした１つ又は複数のαｖβ６インテグリンリガンドを対象に投与することを含む、方法である。
【００４９】
いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるのは、インビボで角膜上皮細胞に１つ又は複数の所望のカーゴ分子を送達するための方法であって、１つ又は複数のカーゴ分子にコンジュゲートした１つ又は複数のαｖβ６インテグリンリガンドを対象に投与することを含む、方法である。
【００５０】
いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるのは、インビボで結膜上皮細胞に１つ又は複数の所望のカーゴ分子を送達するための方法であって、１つ又は複数のカーゴ分子にコンジュゲートした１つ又は複数のαｖβ６インテグリンリガンドを対象に投与することを含む、方法である。
【００５１】
いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるのは、インビボで真皮上皮細胞に１つ又は複数の所望のカーゴ分子を送達するための方法であって、１つ又は複数のカーゴ分子にコンジュゲートした１つ又は複数のαｖβ６インテグリンリガンドを対象に投与することを含む、方法である。
【００５２】
いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるのは、インビボで胆管細胞に１つ又は複数の所望のカーゴ分子を送達するための方法であって、１つ又は複数のカーゴ分子にコンジュゲートした１つ又は複数のαｖβ６インテグリンリガンドを対象に投与することを含む、方法である。
【００５３】
いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるのは、インビボで腸細胞に１つ又は複数の所望のカーゴ分子を送達するための方法であって、１つ又は複数のカーゴ分子にコンジュゲートした１つ又は複数のαｖβ６インテグリンリガンドを対象に投与することを含む、方法である。
【００５４】
いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるのは、インビボで乳管上皮細胞に１つ又は複数の所望のカーゴ分子を送達するための方法であって、１つ又は複数のカーゴ分子にコンジュゲートした１つ又は複数のαｖβ６インテグリンリガンドを対象に投与することを含む、方法である。
【００５５】
いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるのは、インビボで腺上皮細胞に１つ又は複数の所望のカーゴ分子を送達するための方法であって、１つ又は複数のカーゴ分子にコンジュゲートした１つ又は複数のαｖβ６インテグリンリガンドを対象に投与することを含む、方法である。
【００５６】
いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるのは、インビボで尿細管に１つ又は複数の所望のカーゴ分子を送達するための方法であって、１つ又は複数のカーゴ分子にコンジュゲートした１つ又は複数のαｖβ６インテグリンリガンドを対象に投与することを含む、方法である。
【００５７】
いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるのは、インビボで上皮腫瘍（癌）に１つ又は複数の所望のカーゴ分子を送達するための方法であって、１つ又は複数のカーゴ分子にコンジュゲートした１つ又は複数のαｖβ６インテグリンリガンドを対象に投与することを含む、方法である。
【００５８】
いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるのは、インビボでＩ型肺胞上皮細胞にオリゴマー化合物を送達する方法であって、１つ又は複数のオリゴマー化合物にコンジュゲートした１つ又は複数のαｖβ６インテグリンリガンドを対象に投与することを含む、方法である。いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるのは、インビボでＩ型肺胞上皮細胞にＲＮＡｉ剤を送達する方法であって、１つ又は複数のＲＮＡｉ剤にコンジュゲートした１つ又は複数のαｖβ６インテグリンリガンドを対象に投与することを含む、方法である。いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるのは、インビボでＩ型肺胞上皮細胞における標的遺伝子の発現を阻害する方法であって、αｖβ６インテグリンに対する親和性を有する１つ又は複数のリガンドにコンジュゲートしたＲＮＡｉ剤を、対象に投与することを含む、方法である。
【００５９】
いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるのは、インビボでＩＩ型肺胞上皮細胞にオリゴマー化合物を送達する方法であって、１つ又は複数のオリゴマー化合物にコンジュゲートした１つ又は複数のαｖβ６インテグリンリガンドを対象に投与することを含む、方法である。いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるのは、インビボでＩＩ型肺胞上皮細胞にＲＮＡｉ剤を送達する方法であって、１つ又は複数のＲＮＡｉ剤にコンジュゲートした１つ又は複数のαｖβ６インテグリンリガンドを対象に投与することを含む、方法である。いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるのは、インビボでＩＩ型肺胞上皮細胞における標的遺伝子の発現を阻害する方法であって、αｖβ６インテグリンに対する親和性を有する１つ又は複数のリガンドにコンジュゲートしたＲＮＡｉ剤を、対象に投与することを含む、方法である。
【００６０】
いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるのは、インビボで杯細胞にオリゴマー化合物を送達する方法であって、１つ又は複数のオリゴマー化合物にコンジュゲートした１つ又は複数のαｖβ６インテグリンリガンドを対象に投与することを含む、方法である。いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるのは、インビボで杯細胞にＲＮＡｉ剤を送達する方法であって、１つ又は複数のＲＮＡｉ剤にコンジュゲートした１つ又は複数のαｖβ６インテグリンリガンドを対象に投与することを含む、方法である。いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるのは、インビボで杯細胞における標的遺伝子の発現を阻害する方法であって、αｖβ６インテグリンに対する親和性を有する１つ又は複数のリガンドにコンジュゲートしたＲＮＡｉ剤を、対象に投与することを含む、方法である。
【００６１】
いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるのは、インビボで分泌上皮細胞にオリゴマー化合物を送達する方法であって、１つ又は複数のオリゴマー化合物にコンジュゲートした１つ又は複数のαｖβ６インテグリンリガンドを対象に投与することを含む、方法である。いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるのは、インビボで分泌上皮細胞にＲＮＡｉ剤を送達する方法であって、１つ又は複数のＲＮＡｉ剤にコンジュゲートした１つ又は複数のαｖβ６インテグリンリガンドを対象に投与することを含む、方法である。いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるのは、インビボで分泌上皮細胞における標的遺伝子の発現を阻害する方法であって、αｖβ６インテグリンに対する親和性を有する１つ又は複数のリガンドにコンジュゲートしたＲＮＡｉ剤を、対象に投与することを含む、方法である。
【００６２】
いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるのは、インビボで繊毛上皮細胞にオリゴマー化合物を送達する方法であって、１つ又は複数のオリゴマー化合物にコンジュゲートした１つ又は複数のαｖβ６インテグリンリガンドを対象に投与することを含む、方法である。いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるのは、インビボで繊毛上皮細胞にＲＮＡｉ剤を送達する方法であって、１つ又は複数のＲＮＡｉ剤にコンジュゲートした１つ又は複数のαｖβ６インテグリンリガンドを対象に投与することを含む、方法である。いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるのは、インビボで繊毛上皮細胞における標的遺伝子の発現を阻害する方法であって、αｖβ６インテグリンに対する親和性を有する１つ又は複数のリガンドにコンジュゲートしたＲＮＡｉ剤を、対象に投与することを含む、方法である。
【００６３】
いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるのは、インビボで角膜上皮細胞にオリゴマー化合物を送達する方法であって、１つ又は複数のオリゴマー化合物にコンジュゲートした１つ又は複数のαｖβ６インテグリンリガンドを対象に投与することを含む、方法である。いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるのは、インビボで角膜上皮細胞にＲＮＡｉ剤を送達する方法であって、１つ又は複数のＲＮＡｉ剤にコンジュゲートした１つ又は複数のαｖβ６インテグリンリガンドを対象に投与することを含む、方法である。いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるのは、インビボで角膜上皮細胞における標的遺伝子の発現を阻害する方法であって、αｖβ６インテグリンに対する親和性を有する１つ又は複数のリガンドにコンジュゲートしたＲＮＡｉ剤を、対象に投与することを含む、方法である。
【００６４】
いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるのは、インビボで結膜上皮細胞にオリゴマー化合物を送達する方法であって、１つ又は複数のオリゴマー化合物にコンジュゲートした１つ又は複数のαｖβ６インテグリンリガンドを対象に投与することを含む、方法である。いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるのは、インビボで結膜上皮細胞にＲＮＡｉ剤を送達する方法であって、１つ又は複数のＲＮＡｉ剤にコンジュゲートした１つ又は複数のαｖβ６インテグリンリガンドを対象に投与することを含む、方法である。いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるのは、インビボで結膜上皮細胞における標的遺伝子の発現を阻害する方法であって、αｖβ６インテグリンに対する親和性を有する１つ又は複数のリガンドにコンジュゲートしたＲＮＡｉ剤を、対象に投与することを含む、方法である。
【００６５】
いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるのは、インビボで真皮上皮細胞にオリゴマー化合物を送達する方法であって、１つ又は複数のオリゴマー化合物にコンジュゲートした１つ又は複数のαｖβ６インテグリンリガンドを対象に投与することを含む、方法である。いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるのは、インビボで真皮上皮細胞にＲＮＡｉ剤を送達する方法であって、１つ又は複数のＲＮＡｉ剤にコンジュゲートした１つ又は複数のαｖβ６インテグリンリガンドを対象に投与することを含む、方法である。いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるのは、インビボで真皮上皮細胞における標的遺伝子の発現を阻害する方法であって、αｖβ６インテグリンに対する親和性を有する１つ又は複数のリガンドにコンジュゲートしたＲＮＡｉ剤を、対象に投与することを含む、方法である。
【００６６】
いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるのは、インビボで胆管細胞にオリゴマー化合物を送達する方法であって、１つ又は複数のオリゴマー化合物にコンジュゲートした１つ又は複数のαｖβ６インテグリンリガンドを対象に投与することを含む、方法である。いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるのは、インビボで胆管細胞にＲＮＡｉ剤を送達する方法であって、１つ又は複数のＲＮＡｉ剤にコンジュゲートした１つ又は複数のαｖβ６インテグリンリガンドを対象に投与することを含む、方法である。いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるのは、インビボで胆管細胞における標的遺伝子の発現を阻害する方法であって、αｖβ６インテグリンに対する親和性を有する１つ又は複数のリガンドにコンジュゲートしたＲＮＡｉ剤を、対象に投与することを含む、方法である。
【００６７】
いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるのは、インビボで腸細胞にオリゴマー化合物を送達する方法であって、１つ又は複数のオリゴマー化合物にコンジュゲートした１つ又は複数のαｖβ６インテグリンリガンドを対象に投与することを含む、方法である。いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるのは、インビボで腸細胞にＲＮＡｉ剤を送達する方法であって、１つ又は複数のＲＮＡｉ剤にコンジュゲートした１つ又は複数のαｖβ６インテグリンリガンドを対象に投与することを含む、方法である。いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるのは、インビボで腸細胞における標的遺伝子の発現を阻害する方法であって、αｖβ６インテグリンに対する親和性を有する１つ又は複数のリガンドにコンジュゲートしたＲＮＡｉ剤を、対象に投与することを含む、方法である。
【００６８】
いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるのは、インビボで乳管上皮細胞にオリゴマー化合物を送達する方法であって、１つ又は複数のオリゴマー化合物にコンジュゲートした１つ又は複数のαｖβ６インテグリンリガンドを対象に投与することを含む、方法である。いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるのは、インビボで乳管上皮細胞にＲＮＡｉ剤を送達する方法であって、１つ又は複数のＲＮＡｉ剤にコンジュゲートした１つ又は複数のαｖβ６インテグリンリガンドを対象に投与することを含む、方法である。いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるのは、インビボで乳管上皮細胞における標的遺伝子の発現を阻害する方法であって、αｖβ６インテグリンに対する親和性を有する１つ又は複数のリガンドにコンジュゲートしたＲＮＡｉ剤を、対象に投与することを含む、方法である。
【００６９】
いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるのは、インビボで腺上皮細胞にオリゴマー化合物を送達する方法であって、１つ又は複数のオリゴマー化合物にコンジュゲートした１つ又は複数のαｖβ６インテグリンリガンドを対象に投与することを含む、方法である。いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるのは、インビボで腺上皮細胞にＲＮＡｉ剤を送達する方法であって、１つ又は複数のＲＮＡｉ剤にコンジュゲートした１つ又は複数のαｖβ６インテグリンリガンドを対象に投与することを含む、方法である。いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるのは、インビボで腺上皮細胞における標的遺伝子の発現を阻害する方法であって、αｖβ６インテグリンに対する親和性を有する１つ又は複数のリガンドにコンジュゲートしたＲＮＡｉ剤を、対象に投与することを含む、方法である。
【００７０】
いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるのは、インビボで尿細管にオリゴマー化合物を送達する方法であって、１つ又は複数のオリゴマー化合物にコンジュゲートした１つ又は複数のαｖβ６インテグリンリガンドを対象に投与することを含む、方法である。いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるのは、インビボで尿細管にＲＮＡｉ剤を送達する方法であって、１つ又は複数のＲＮＡｉ剤にコンジュゲートした１つ又は複数のαｖβ６インテグリンリガンドを対象に投与することを含む、方法である。いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるのは、インビボで尿細管における標的遺伝子の発現を阻害する方法であって、αｖβ６インテグリンに対する親和性を有する１つ又は複数のリガンドにコンジュゲートしたＲＮＡｉ剤を、対象に投与することを含む、方法である。
【００７１】
いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるのは、インビボで上皮腫瘍（癌）にオリゴマー化合物を送達する方法であって、１つ又は複数のオリゴマー化合物にコンジュゲートした１つ又は複数のαｖβ６インテグリンリガンドを対象に投与することを含む、方法である。いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるのは、インビボで上皮腫瘍（癌）にＲＮＡｉ剤を送達する方法であって、１つ又は複数のＲＮＡｉ剤にコンジュゲートした１つ又は複数のαｖβ６インテグリンリガンドを対象に投与することを含む、方法である。いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるのは、インビボで上皮腫瘍（癌）における標的遺伝子の発現を阻害する方法であって、αｖβ６インテグリンに対する親和性を有する１つ又は複数のリガンドにコンジュゲートしたＲＮＡｉ剤を、対象に投与することを含む、方法である。
【００７２】
本明細書で使用される場合、用語「アルキル」は、特に指定されない限り、１〜１０個の炭素原子を有する直鎖又は分岐鎖の飽和脂肪族炭化水素基を指す。例えば、「Ｃ1−Ｃ6アルキル」は、直鎖又は分岐鎖配置で１、２、３、４、５、又は６個の炭素を有するアルキル基を含む。アルキル基の非限定的な例としては、メチル、エチル、イソプロピル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ヘキシルが挙げられる。本明細書で使用される場合、用語「アミノアルキル」は、通常の原子価によって許容されるように１つ又は複数のアミノ基で任意の位置で置換された、上記で定義したアルキル基を指す。アミノ基は非置換、一置換、又は二置換であってもよい。アミノアルキル基の非限定的な例としては、アミノメチル、ジメチルアミノメチル、及び２−アミノプロプ−１−イルが挙げられる。
【００７３】
本明細書で使用される場合、用語「シクロアルキル」は、特に指定されない限り、３〜１４個の炭素原子を有する飽和又は不飽和非芳香族炭化水素環基を意味する。シクロアルキル基の非限定的な例としては、これらに限定されるものではないが、シクロプロピル、メチル−シクロプロピル、２，２−ジメチル−シクロブチル、２−エチル−シクロペンチル、及びシクロヘキシルが挙げられる。シクロアルキルは、複数のスピロ−又は縮合環を含んでもよい。シクロアルキル基は任意により、通常の原子価によって許容されるように任意の位置で、一置換、二置換、三置換、四置換、又は五置換されている。
【００７４】
本明細書で使用される場合、用語「アルケニル」は、特に指定されない限り、少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を含み、かつ２〜１０個の炭素原子を有する、直鎖又は分岐鎖の非芳香族炭化水素基を指す。最大で５個の炭素−炭素二重結合がそのような基に存在し得る。例えば、「Ｃ2−Ｃ6」アルケニルは、２〜６個の炭素原子を有するアルケニル基として定義される。アルケニル基の例としては、これらに限定されるものではないが、エテニル、プロペニル、ブテニル、及びシクロヘキセニルが挙げられる。アルケニル基の直鎖、分岐鎖、又は環状部分は、二重結合を含んでもよく、かつ任意により、通常の原子価によって許容されるように任意の位置で、一置換、二置換、三置換、四置換、又は五置換されている。用語「シクロアルケニル」は、炭素原子の特定数及び少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を有する単環式炭化水素基を意味する。
【００７５】
本明細書で使用される場合、用語「アルキニル」は、特に指定されない限り、２〜１０個の炭素原子を含み、かつ少なくとも１つの炭素−炭素三重結合を含む、直鎖又は分岐鎖の炭化水素基を指す。最大で５個の炭素−炭素三重結合が含まれ得る。したがって、「Ｃ2−Ｃ6アルキニル」は、２〜６個の炭素原子を有するアルキニル基を意味する。アルキニル基の例としては、これらに限定されるものではないが、エチニル、２−プロピニル、及び２−ブチニルが挙げられる。アルキニル基の直鎖又は分岐鎖部分は、任意により、通常の原子価によって許容されるように任意の位置で、一置換、二置換、三置換、四置換、又は五置換されていてもよい。
【００７６】
本明細書で使用される場合、「アルコキシル」又は「アルコキシ」は、炭素原子の示された数を有する−Ｏ−アルキル基を指す。例えば、Ｃ1−Ｃ6アルコキシは、Ｃ1、Ｃ2、Ｃ3、Ｃ4、Ｃ5、及びＣ6アルコキシ基を含むことを意図している。例えば、Ｃ1−Ｃ8アルコキシは、Ｃ1、Ｃ2、Ｃ3、Ｃ4、Ｃ5、Ｃ6、Ｃ7、及びＣ8アルコキシ基を含むことを意図している。アルコキシの例としては、これらに限定されるものではないが、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、ｉ−プロポキシ、ｎ−ブトキシ、ｓ−ブトキシ、ｔ−ブトキシ、ｎ−ペントキシ、ｓ−ペントキシ、ｎ−ヘプトキシ、及びｎ−オクトキシが挙げられる。
【００７７】
本明細書で使用される場合、「ケト」は、カルボニル架橋（carbonyl bridge）を介して結合した本明細書に定義の、任意のアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロシクリル、ヘテロアリール、又はアリール基を指す。ケト基の例としては、これらに限定されるものではないが、アルカノイル（例えばアセチル、プロピオニル、ブタノイル、ペンタノイル、又はヘキサノイル）、アルケノイル（例えば、アクリロイル）、アルキノイル（例えばエチノイル（ethynoyl）、プロピノイル、ブチノイル、ペンチノイル、又はヘキシノイル（hexynoyl））、アリーロイル（例えばベンゾイル）、ヘテロアリーロイル（heteroaryloyl）（例えば、ピローロリル（pyrroloyl）、イミダゾロイル（imidazoloyl）、キノリノイル（quinolinoyl）、又はピリジノイル）が挙げられる。
【００７８】
本明細書で使用される場合、「アルコキシカルボニル」は、カルボニル架橋を介して結合した上記で定義の任意のアルコキシ基を指す（すなわち−Ｃ（Ｏ）Ｏ−アルキル）。アルコキシカルボニル基の例としては、これらに限定されるものではないが、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、イソプロポキシカルボニル、ｎ−プロポキシカルボニル、ｔ−ブトキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニル、又はｎ−ペントキシカルボニルが挙げられる。
【００７９】
本明細書で使用される場合、「アリールオキシカルボニル」は、オキシカルボニル架橋を介して結合した本明細書に定義のアリール基を指す（すなわち、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−アリール）。アリールオキシカルボニル基の例としては、これらに限定されるものではないが、フェノキシカルボニル及びナフチルオキシカルボニルが挙げられる。
【００８０】
本明細書で使用される場合、「ヘテロアリールオキシカルボニル」は、オキシカルボニル架橋を介して結合した本明細書に定義の任意のヘテロアリール基を指す（すなわち、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−ヘテロアリール）。ヘテロアリールオキシカルボニル基の例としては、これらに限定されるものではないが、２−ピリジルオキシカルボニル、２−オキサゾリルオキシカルボニル、４−チアゾリルオキシカルボニル、又はピリミジニルオキシカルボニルが挙げられる。
【００８１】
本明細書で使用される場合、「アリール」又は「芳香族」は、各環中に最大６個の原子の任意の安定な単環式又は多環式炭素環であって、少なくとも１つの環が芳香族である、炭素環を意味する。アリール基の例としては、これらに限定されるものではないが、フェニル、ナフチル。アントラセニル、テトラヒドロナフチル、インダニル、及びビフェニルが挙げられる。アリール置換が二環式であり、かつ１つの環が非芳香族である場合、結合は芳香環を介すると理解される。アリール基は任意により、通常の原子価によって許容されるように任意の位置で、一置換、二置換、三置換、四置換、又は五置換されている。
【００８２】
本明細書で使用される場合、用語「ヘテロアリール」は、各環中に最大７個の原子の安定な単環式又は多環式環を表し、ここで、少なくとも１つの環は芳香族であり、かつＯ、Ｎ、及びＳからなる群から選択される１〜４個のヘテロ原子を含む。ヘテロアリール基の例としては、これらに限定されるものではないが、アクリジニル、カルバゾリル、シンノリニル、キノキサリニル、ピラゾリル、インドリル、ベンゾトリアゾリル、フラニル、チエニル、ベンゾチエニル、ベンゾフラニル、ベンズイミダゾロニル、ベンゾオキサゾロニル、キノリニル、イソキノリニル、ジヒドロイソインドロニル、イミダゾピリジニル、イソインドロニル、インダゾリル、オキサゾリル、オキサジアゾリル、イソオキサゾリル、インドリル、ピラジニル、ピリダジニル、ピリジニル、ピリミジニル、ピロリル、及びテトラヒドロキノリンが挙げられる。「ヘテロアリール」はまた、任意の窒素含有ヘテロアリールのＮ−オキシド誘導体を含むと理解される。ヘテロアリール置換が二環式であり、かつ１つの環が非芳香族であるか又はヘテロ原子を含まない場合、結合は、芳香環を介するか又はヘテロ原子含有環を介すると理解される。ヘテロアリール基は任意により、通常の原子価によって許容されるように任意の位置で、一置換、二置換、三置換、四置換、又は五置換されている。
【００８３】
本明細書で使用される場合、用語「複素環」「複素環式」又は「ヘテロシクリル」は、多環式基を含む、Ｏ、Ｎ、及びＳからなる群から選択される１〜４個のヘテロ原子を含む３−〜１４−員の芳香族又は非芳香族複素環を意味する。本明細書で使用される場合、用語「複素環式」はまた、用語「複素環」及び「ヘテロシクリル」と同義であると考えられ、本明細書に記載された同じ定義を有するとも理解される。「ヘテロシクリル」は、上述のヘテロアリール、並びにそのジヒドロ及びテトラヒドロアナログを含む。ヘテロシクリル基の例としては、これらに限定されるものではないが、アゼチジニル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾフラザニル、ベンゾピラゾリル、ベンゾトリアゾリル、ベンゾチオフェニル、ベンゾオキサゾリル、カルバゾリル、カルボリニル、シンノリニル、フラニル、イミダゾリル、インドリニル、インドリル、インドラジニル、インダゾリル、イソベンゾフラニル、イソインドリル、イソキノリル、イソチアゾリル、イソオキサゾリル、ナフトピリジニル、オキサジアゾリル、オキソオキサゾリジニル（oxooxazolidinyl）、オキサゾリル、オキサゾリン、オキソピペラジニル、オキソピロリジニル、オキソモルホリニル（oxomorpholinyl）、イソキサゾリン、オキセタニル、ピラニル、ピラジニル、ピラゾリル、ピリダジニル、ピリドピリジニル、ピリダジニル、ピリジル、ピリジノニル、ピリミジル、ピリミジノニル、ピロリル、キナゾリニル、キノリル、キノキサリニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロチオピラニル、テトラヒドロイソキノリニル、テトラゾリル、テトラゾロピリジル（tetrazolopyridyl）、チアジアゾリル、チアゾリル、チエニル、トリアゾリル、１，４−ジオキサニル、ヘキサヒドロアゼピニル、ピペラジニル、ピペリジニル、ピリジン−２−オニル、ピロリジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、ジヒドロベンゾイミダゾリル、ジヒドロベンゾフラニル、ジヒドロベンゾチオフェニル、ジヒドロベンゾオキサゾリル、ジヒドロフラニル、ジヒドロイミダゾリル、ジヒドロインドリル、ジヒドロイソオキサゾリル、ジヒドロイソチアゾリル、ジヒドロオキサジアゾリル、ジヒドロオキサゾリル、ジヒドロピラジニル、ジヒドロピラゾリル、ジヒドロピリジニル、ジヒドロピリミジニル、ジヒドロピロリル、ジヒドロキノリニル、ジヒドロテトラゾリル、ジヒドロチアジアゾリル、ジヒドロチアゾリル、ジヒドロチエニル、ジヒドロトリアゾリル、ジヒドロアゼチジニル、ジオキシドチオモルホリニル（dioxidothiomorpholinyl）、メチレンジオキシベンゾイル、テトラヒドロフラニル、及びテトラヒドロチエニル、並びにそれらのＮ−オキシドが挙げられる。ヘテロシクリル置換の結合は、炭素原子を介して又はヘテロ原子を介して起こり得る。ヘテロシクリル基は任意により、通常の原子価によって許容されるように任意の位置で、一置換、二置換、三置換、四置換、又は五置換されている。
【００８４】
本明細書で使用される場合、「治療する」「治療」などの用語は、対象の疾患又は状態の１つ又は複数の症状の数、重症度、及び／又は頻度の軽減又は緩和を提供するためにとられる方法又はステップを意味する。
【００８５】
特に明記しない限り、本明細書で使用される場合、以下の記号の使用は、任意の基又は基（複数）が本明細書に記載の発明の範囲によるものに連結され得ることを意味する。
【化２】
2019535685.tif 000004
【００８６】
本明細書で使用される場合、用語「異性体」は、同一の分子式を有するが、それらの原子の結合の性質又は順序が異なるか、あるいはそれらの原子の空間配置が異なる化合物を指す。それらの原子の空間配置が異なる異性体は、「立体異性体」と呼ばれる。互いに鏡像ではない立体異性体は、「ジアステレオ異性体」と呼ばれ、重ね合わせることができない鏡像である立体異性体は、「エナンチオマー」又は時には光学異性体を呼ばれる。４つの非同一置換基に結合した炭素原子は、「キラル中心」と呼ばれる。本明細書で使用される場合、連結基は１つ又は複数の原子であり、斯かる１つ又は複数の原子は、１つの分子又は分子の一部分を、別の第２の分子又は分子の第２の一部分に接続する。当該技術分野において、連結基及びスペーサーという用語は、時には互換的に使用される。同様に、当該技術分野において使用される場合、足場という用語は、時には、連結基と互換的に使用される。いくつかの実施形態では、連結基は、ペプチド切断可能連結基を含み得る。いくつかの実施形態では、連結基は、ペプチドＦＣｉｔＦＰ（配列番号１３１）を含むか又はそれからなり得る。
【００８７】
本明細書で使用される場合、２つの分子間の接続に関して言及する際の用語「連結された」とは、２つの分子が共有結合によって結合されること、又は２つの分子が非共有結合（例えば、水素結合又はイオン結合）を介して会合されることを意味する。用語「連結された」が、非共有結合を介した２つの分子間の会合を指すいくつかの例では、２つの異なる分子間の会合が、生理学的に許容される緩衝液（例えば、リン酸緩衝生理食塩水）中で１ｘ１０-4Ｍ未満（例えば、１ｘ１０-5Ｍ未満、１ｘ１０-6Ｍ未満、又は１ｘ１０-7Ｍ未満）のＫＤを有する。記述されない限り、本明細書で使用される場合、連結されたという用語は、任意の介在原子又は原子団の有無に関わらず、第１の化合物と第２の化合物との間の接続を指し得る。
【００８８】
本明細書で使用される場合、「標準アミノ酸（standard amino acids）」又は「天然アミノ酸」は、アラニン、システイン、アスパラギン酸（アスパルテート）、グルタミン酸（グルタメート）、フェニルアラニン、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、リシン、ロイシン、メチオニン、アスパラギン、プロリン、グルタミン、アルギニン、セリン、トレオニン、バリン、トリプトファン、チロシンを含む。
【００８９】
本明細書で使用される場合、「非標準アミノ酸（non-standard amino acids）」は、これらに限定されるものではないが、セレノシステイン、ピロリジン、Ｎ−ホルミルメチオニン、ヒドロキシプロリン、セレノメチオニン、α−アミノ−イソ酪酸（Ａｉｂ）、Ｌ−α−アミノ酪酸（Ａｂｕ）、α，γ−ジアミノ酪酸、デヒドロアラニン、ノルロイシン、アロイソロイシン、ｔ−ロイシン、α−アミノ−ｎ−ヘプタン酸、α，β−ジアミノプロピオン酸、β−Ｎ−オキサリル−α，β−ジアミノプロピオン酸、アロトレオニン、ホモシステイン、ホモセリン、β−ホモ−アラニン（β３−ｈΑ）、イソバリン、ノルバリン（Ｎｖａ）、シトルリン（Ｃｉｔ）、オルニチン、α−メチル−アスパルテート（αＭｅＤ）、α−メチル−ロイシン（αＭｅＬ）、Ｎ−メチルアラニン、Ｎ−メチル−グリシン（ＮMeＧ）、Ｎ−メチルロイシン（ＮMeＬ）、β−シクロヘキシル−アラニン（Ｃｈａ）、Ｎ−エチルアラニン、Ν，Ν−ε−ジメチルリシン（Ｋ（Me）2）、ジメチルアルギニン（Ｒ（Ｍｅ）2）、Ｄａｐ（Ａｃ）、ｎ−アルキル化Ｌ−αアミノ酸、及び天然に存在するアミノ酸と同様に機能する他のアミノ酸アナログ又はアミノ酸模倣物を含む。
【００９０】
本明細書で使用される場合、特定の立体構造を有する構造において具体的に同定されない限り、各構造について不斉中心が存在し、したがってエナンチオマー、ジアステレオマー、又は他の立体異性体の構成が生じ、本明細書に開示される各構造は、そのような全ての可能な異性体（それらの光学的に純粋な形態及びラセミ体を含む）を表すことを意図する。例えば、本明細書に開示される構造は、ジアステレオマーの混合物並びに単一の立体異性体を包含することを意図している。
【００９１】
本明細書に開示される化合物及び組成物は、化合物又は組成物が置かれる環境に応じて、プロトン化又は脱プロトン化状態で特定の原子（例えばＮ、Ｏ又はＳ原子）を含み得ることを当業者は容易に理解及び認識するであろう。従って、本明細書で使用される場合、本明細書に開示される構造は、例えばＯＨ、ＳＨ、又はＮＨのような、特定の官能基が、プロトン化又は脱プロトン化され得ることを想定する。本明細書の開示は、当業者によって容易に理解されるように、環境のｐＨに基づくプロトン化のそれらの状態に関わらず、開示された化合物及び組成物を網羅することを意図する。
【００９２】
本願の請求項で使用される場合、「からなる」という語句は、請求項に特定されていない任意の要素、ステップ、又は成分を排除する。本願の請求項で使用される場合、「から本質的になる」という語句は、特定の材料又はステップ、並びに請求項に記載の発明の基本的かつ新規な特徴（複数）に物質的に影響を及ぼさないものに、請求項の範囲を限定する。
【００９３】
別段定義されない限り、本明細書で使用される全ての技術用語及び化学用語は、本発明が属する技術分野の当業者によって一般に理解されるものと同じ意味を有する。本明細書に記載のものと類似又は等価な方法及び材料を、本発明の実施又は試験に使用することができるが、好適な方法及び材料を以下に記載する。本明細書に記述した全ての刊行物、特許出願、特許、及び他の参考文献は、その全体が参照により組み込まれる。矛盾がある場合には、定義を含む本明細書が優先することになる。さらに、材料、方法、及び例は、単なる例示であり、限定することを意図するものではない。
【００９４】
薬物動態は、ペプチドベースの医薬品及びペプチドを含有する医薬組成物に対する一般的な関心事である。多くのペプチドは、例えば、酵素分解のために数分以上血中を循環しない。これはしばしば、治療剤として又は医薬品の成分としてのそれらの有用性を有意に減少させるか又は妨げさえする。
【００９５】
様々な血清調製物における安定性試験（例えば、血清及び／又は血漿中のペプチドのインビトロ分解の測定）は、ペプチドベースの薬物開発における重要なスクリーニングアッセイとなっている。とりわけそのような試験によって示されるように、本明細書に開示のαｖβ６インテグリンリガンドは、血清中で安定であり、かつαｖβ６インテグリンに対する親和性を有するか、又はαｖβ６インテグリンに結合することができる。
【００９６】
本発明の他の特徴及び利点が、以下の詳細な説明及び特許請求の範囲から明らかになるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００９７】
【図１】図１は、テトラフルオロフェニル（ＴＦＰ）エステルとして合成された、本明細書に開示のαｖβ６インテグリンリガンドの一例の化学構造を表す。αｖβ６インテグリンリガンドは、ＰＥＧ20（２０個のエチレンオキシド（ＣＨ2−ＣＨ2−Ｏ）単位）及びＦＣｉｔＦＰ連結基を含む。
【図２】図２は、テトラフルオロフェニル（ＴＦＰ）エステルとして合成された、本明細書に開示のαｖβ６インテグリンリガンドの一例の化学構造を表す。αｖβ６インテグリンリガンドは、ＰＥＧ5（５個のエチレンオキシド（ＣＨ2−ＣＨ2−Ｏ）単位）を含む。
【図３】図３は、アミン末端キャップとしてのＣＨ3ＣＯ、ＰＥＧ20、及びＦＣｉｔＦＰ連結基を含む、本明細書に開示のαｖβ６インテグリンリガンドの一例の化学構造を表す。
【図４】図４は、アミン末端キャップとしてのＣＨ3ＣＯ、及びＰＥＧ5を含む、本明細書に開示のαｖβ６インテグリンリガンドの一例の化学構造を表す。
【図５】図５は、アミン末端キャップを含まない、本明細書に開示のαｖβ６インテグリンリガンドの一例の化学構造を表す。αｖβ６インテグリンリガンドは、ＰＥＧ20及びＦＣｉｔＦＰ連結基を含む。
【図６】図６は、アミン末端キャップを含まない、本明細書に開示のαｖβ６インテグリンリガンドの一例の化学構造を表す。αｖβ６インテグリンリガンドは、ＰＥＧ5を含む。
【図７】図７は、アミン末端キャップとしてのＣＨ3ＣＯを含む、本明細書に開示のαｖβ６インテグリンリガンドの一例の化学構造を表す。
【図８】図８は、アミン末端キャップとしてのＣＨ3ＣＯ、ＰＥＧ20、及びＦＣｉｔＦＰ連結基を含む、本明細書に開示のαｖβ６インテグリンリガンドの一例の化学構造を表す。構造中にさらに示されているのは、２０キロダルトン（ｋＤａ）のＰＥＧ部分である。
【図９】図９は、アミン末端キャップとしてのＣＨ3ＣＯ、ＰＥＧ20、及びＦＣｉｔＦＰ連結基を含む、本明細書に開示のαｖβ６インテグリンリガンドの一例の化学構造を表す。構造中にさらに示されているのは、２０キロダルトン（ｋＤａ）ＰＥＧ部分であり、構造は、オリゴマー化合物、例えばＲＮＡｉ剤に連結して示されている。
【図１０】図１０は、ビス−グルタミン酸足場及びＰＥＧ−アジド反応基に連結された、アミン末端キャップとしてのＣＨ3ＣＯ及びＰＥＧ5を含む、本明細書に開示の三座配位αｖβ６インテグリンリガンドの一例の化学構造を表す。
【図１１】図１１は、ビス−グルタミン酸足場に連結された、ＣＨ3ＣＯとしてのアミン末端キャップ及びＰＥＧ5を含む、本明細書に開示の三座配位αｖβ６インテグリンリガンドの一例の化学構造を表す。
【図１２】図１２は、標的化リガンドのない裸の（naked）アルファ−ＥＮａＣ ＲＮＡｉ剤、及びポリ−Ｌ−リシン足場と図４の構造によって表されたαｖβ６インテグリンリガンドとにコンジュゲートした同じアルファ−ＥＮａＣ ＲＮＡｉ剤の、Sprague-DawleyラットにおけるＲａｔ全肺アルファＥＮａＣ発現を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００９８】
詳細な説明
本明細書に記載されるのは、血清安定性及びαｖβ６インテグリンに対する親和性を有する、新規な、操作された、天然に存在しないペプチドベースのαｖβ６インテグリンリガンドである。αｖβ６インテグリンリガンドは、インビトロ、インサイチュ、エクスビボ、及び／又はインビボで、αｖβ６インテグリン発現細胞を標的化するために使用することができる。いくつかの実施形態では、αｖβ６インテグリンリガンドは、１つ又は複数のカーゴ分子にコンジュゲートされて、インビトロ、インサイチュ、エクスビボ、及び／又はインビボでαｖβ６インテグリン発現細胞にカーゴ分子を指向することができる。いくつかの実施形態では、カーゴ分子は、薬学的に活性な化合物を含むか又はそれからなる。いくつかの実施形態では、本明細書に開示のαｖβ６インテグリンリガンドはカーゴ分子にコンジュゲートされて、インビボで上皮細胞にカーゴ分子を指向する。
【００９９】
いくつかの実施形態では、αｖβ６インテグリンリガンドは、以下：
Ｚ−ＲＧ1ＤＬＸａａ1Ｘａａ2Ｌ（配列番号８５）（式Ｉ）
を含み、式中、
Ｚはアミン末端キャップ（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のアミン末端キャップのいずれか）であり；
ＲはＬ−アルギニンであり；
Ｇ1はＬ−グリシン又はＮ−メチルグリシンであり；
ＤはＬ−アスパラギン酸（Ｌ−アスパルテート）であり；
ＬはＬ−ロイシンであり；
Ｘａａ1は、Ｌ−αアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−αアミノ酸のいずれか）、Ｌ−βアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−βアミノ酸のいずれか）、又はα，α−二置換アミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のα，α−二置換アミノ酸のいずれか）であり；かつ、
Ｘａａ2は、Ｌ−αアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−αアミノ酸のいずれか）、Ｌ−βアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−βアミノ酸のいずれか）、又はα，α−二置換アミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のα，α−二置換アミノ酸のいずれか）である。
【０１００】
いくつかの実施形態では、式Ｉ中のアミン末端キャップ（Ｚ）は、ＣＨ3ＣＯ（本明細書において「Ａｃ」とも称される）を含む。いくつかの実施形態では、式Ｉ中のアミン末端キャップ（Ｚ）は、ＣＨ3ＣＯである。
【０１０１】
いくつかの実施形態では、αｖβ６インテグリンリガンドは、以下：
Ｒ´Ｇ1ＤＬＸａａ1Ｘａａ2Ｌ（配列番号９８）（式Ｉａ）
を含み、式中、
Ｒ´はＤａｐ（グアニジノ）であり；かつ、
Ｇ1、Ｄ、Ｌ、Ｘａａ1、及びＸａａ2はそれぞれ、本明細書の式Ｉについて定義した通りである。
【０１０２】
いくつかの実施形態では、αｖβ６インテグリンリガンドは、一般式：
Ｚ−ＲＧ1ＤＬＸａａ1ＸａａuＬ（配列番号９９）（式Ｉｂ）
を含み、式中、
Ｚ、Ｒ、Ｇ1、Ｄ、Ｌ、及びＸａａ1はそれぞれ、本明細書の式Ｉについて定義した通りであり；かつ、
Ｘａａuは非標準アミノ酸である。
【０１０３】
いくつかの実施形態では、αｖβ６インテグリンリガンドは、一般式：
Ｚ−ＲＧ1ＤＬＡＸａａuＬ（配列番号９０）（式Ｉｃ）
を含み、式中、
Ｚ、Ｒ、Ｇ1、Ｄ、及びＬはそれぞれ、本明細書の式Ｉについて定義した通りであり；
ＡはＬ−アラニンであり；かつ、
Ｘａａuは非標準アミノ酸である。
【０１０４】
いくつかの実施形態では、αｖβ６インテグリンリガンドが記載され、以下：
Ｚ−ＲＧ1ＤＬＸａａ1Ｘａａ2Ｌ−Ｊ−Ｒ1（配列番号８６）（式ＩＩ）
を含み、式中、
Ｚは、アミン末端キャップ（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のアミン末端キャップのいずれか）であり；
ＲはＬ−アルギニンであり；
Ｇ1はＬ−グリシン又はＮ−メチルグリシンであり；
ＤはＬ−アスパラギン酸（Ｌ−アスパルテート）であり；
ＬはＬ−ロイシンであり；
Ｘａａ1は、Ｌ−αアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−αアミノ酸のいずれか）、Ｌ−βアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−βアミノ酸のいずれか）、又はα，α−二置換アミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のα，α−二置換アミノ酸のいずれか）であり；
Ｘａａ2は、Ｌ−αアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−αアミノ酸のいずれか）、Ｌ−βアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−βアミノ酸のいずれか）、又はα，α−二置換アミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のα，α−二置換アミノ酸のいずれか）であり；
Ｊは、任意であって、存在する場合には、１つ又は複数（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、又は３０；又は１〜３０、１〜２５、１〜２０、１〜１５、１〜１０、１〜５、５〜３０、５〜２５、５〜２０、５〜１５、５〜１０、１０〜３０、１０〜２５、１０〜２０、１０〜１５、１５〜３０、１５〜２５、１５〜２０、２０〜３０、２０〜２５、又は２５〜３０）の、Ｌ−αアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−αアミノ酸のいずれか）、Ｌ−  βアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−βアミノ酸のいずれか）、又はα，α−二置換アミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のα，α−二置換アミノ酸のいずれか）、あるいはそれらの組み合わせを含み；かつ、
Ｒ1は、任意であって、存在する場合には、ＰＥＧ及び／又は連結基を含む。
【０１０５】
いくつかの実施形態では、Ｌは、アミド結合を介してＪに連結される。
【０１０６】
いくつかの実施形態では、αｖβ６インテグリンリガンドが記載され、以下：
Ｒ´Ｇ1ＤＬＸａａ1Ｘａａ2Ｌ−Ｊ−Ｒ1（配列番号１００）（式ＩＩａ）
を含み、式中、
Ｒ´はＤａｐ（グアニジノ）であり；かつ、
Ｇ1、Ｄ、Ｌ、Ｘａａ1、Ｘａａ2、Ｊ、及びＲ1はそれぞれ、本明細書の式ＩＩについて定義した通りである。
【０１０７】
いくつかの実施形態では、Ｌは、アミド結合を介してＪに連結される。
【０１０８】
いくつかの実施形態では、αｖβ６インテグリンリガンドは、反応基又は保護された反応基を含むことができ、以下：
Ｚ−ＲＧ1ＤＬＸａａ1Ｘａａ2Ｌ−Ｊ−Ｒ1−Ｒ2（配列番号８７）（式ＩＩＩ）
を含み、式中、
Ｚは、アミン末端キャップ（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のアミン末端キャップのいずれか）であり；
ＲはＬ−アルギニンであり；
Ｇ1はＬ−グリシン又はＮ−メチルグリシンであり；
ＤはＬ−アスパラギン酸（Ｌ−アスパルテート）であり；
ＬはＬ−ロイシンであり；
Ｘａａ1は、Ｌ−αアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−αアミノ酸のいずれか）、Ｌ−βアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−βアミノ酸のいずれか）、又はα，α−二置換アミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のα，α−二置換アミノ酸のいずれか）であり；
Ｘａａ2は、Ｌ−αアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−αアミノ酸のいずれか）、Ｌ−βアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−βアミノ酸のいずれか）、又はα，α−二置換アミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のα，α−二置換アミノ酸のいずれか）であり；
Ｊは、任意であって、存在する場合には、１つ又は複数（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、又は３０；又は１〜３０、１〜２５、１〜２０、１〜１５、１〜１０、１〜５、５〜３０、５〜２５、５〜２０、５〜１５、５〜１０、１０〜３０、１０〜２５、１０〜２０、１０〜１５、１５〜３０、１５〜２５、１５〜２０、２０〜３０、２０〜２５、又は２５〜３０）の、Ｌ−αアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−αアミノ酸のいずれか）、Ｌ−βアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−βアミノ酸のいずれか）、又はα，α−二置換アミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のα，α−二置換アミノ酸のいずれか）、あるいはそれらの組み合わせを含み；
Ｒ1は、任意であって、存在する場合には、ＰＥＧ及び／又は連結基を含み、かつ
Ｒ2は、反応基又は保護された反応基を含む。
【０１０９】
反応基又は保護された反応基は、αｖβ６インテグリンリガンドを目的の分子に、すなわちカーゴ分子に結合させるために使用することができる。いくつかの実施形態では、Ｌは、アミド結合を介してＪに連結される。
【０１１０】
いくつかの実施形態では、αｖβ６インテグリンリガンドは、反応基又は保護された反応基を有するように合成され、以下の式：
Ｒ´Ｇ1ＤＬＸａａ1Ｘａａ2Ｌ−Ｊ−Ｒ1−Ｒ2（配列番号１０１）（式ＩＩＩａ）
を含み、式中、
Ｒ´はＤａｐ（グアニジノ）であり；かつ、
Ｇ1、Ｄ、Ｌ、Ｘａａ1、Ｘａａ2、Ｊ、Ｒ1、及びＲ2はそれぞれ、本明細書の式ＩＩＩについて定義した通りである。
【０１１１】
いくつかの実施形態では、１つ又は複数のαｖβ６インテグリンリガンドは、１つ又は複数のカーゴ分子にコンジュゲートすることができ、以下：
（Ｚ−ＲＧ1ＤＬＸａａ1Ｘａａ2Ｌ−Ｊ−Ｒ1）n−Ｒ3（配列番号８８）（式ＩＶ）
を含み、式中、
Ｚは、アミン末端キャップ（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のアミン末端キャップのいずれか）であり；
ＲはＬ−アルギニンであり；
Ｇ1はＬ−グリシン又はＮ−メチルグリシンであり；
ＤはＬ−アスパラギン酸（Ｌ−アスパルテート）であり；
ＬはＬ−ロイシンであり；
Ｘａａ1は、Ｌ−αアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−αアミノ酸のいずれか）、Ｌ−βアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−βアミノ酸のいずれか）、又はα，α−二置換アミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のα，α−二置換アミノ酸のいずれか）であり；
Ｘａａ2は、Ｌ−αアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−αアミノ酸のいずれか）、Ｌ−βアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−βアミノ酸のいずれか）、又はα，α−二置換アミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のα，α−二置換アミノ酸のいずれか）であり；
Ｊは、任意であって、存在する場合には、１つ又は複数（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、又は３０；又は１〜３０、１〜２５、１〜２０、１〜１５、１〜１０、１〜５、５〜３０、５〜２５、５〜２０、５〜１５、５〜１０、１０〜３０、１０〜２５、１０〜２０、１０〜１５、１５〜３０、１５〜２５、１５〜２０、２０〜３０、２０〜２５、又は２５〜３０）の、Ｌ−αアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−αアミノ酸のいずれか）、Ｌ−βアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−βアミノ酸のいずれか）、又はα，α−二置換アミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のα，α−二置換アミノ酸のいずれか）、あるいはそれらの組み合わせを含み；
Ｒ1は、任意であって、存在する場合には、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）及び／又は連結基を含み；
ｎは、０を超える整数（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、又は３０；又は１〜３０、１〜２５、１〜２０、１〜１５、１〜１０、１〜５、５〜３０、５〜２５、５〜２０、５〜１５、５〜１０、１０〜３０、１０〜２５、１０〜２０、１０〜１５、１５〜３０、１５〜２５、１５〜２０、２０〜３０、２０〜２５、又は２５〜３０）であり；かつ、
Ｒ3は、カーゴ分子を含む。
【０１１２】
いくつかの実施形態では、Ｌは、アミド結合を介してＪに連結される。いくつかの実施形態では、カーゴ分子は、αｖβ６インテグリン発現細胞に対して標的化されることが望ましい任意の分子であり得る。いくつかの実施形態では、ｎは、１〜４の整数である。いくつかの実施形態では、ｎは１である。いくつかの実施形態では、ｎは３である。ｎが１である場合、αｖβ６インテグリンリガンドは、本明細書において「単座（monodentate）」αｖβ６インテグリンリガンドと称され得る。ｎが３である場合、αｖβ６インテグリンリガンドは、本明細書において「三座（tridentate）」αｖβ６インテグリンリガンドと称され得る。ｎが２である場合、αｖβ６インテグリンリガンドは、本明細書において「二座」αｖβ６インテグリンリガンドと称され得る。ｎが４である場合、αｖβ６インテグリンリガンドは、本明細書において「四座」αｖβ６インテグリンリガンドと称され得る。
【０１１３】
いくつかの実施形態では、１つ又は複数のαｖβ６インテグリンリガンドは、１つ又は複数のカーゴ分子にコンジュゲートすることができ、以下：
（Ｒ´Ｇ1ＤＬＸａａ1Ｘａａ2Ｌ−Ｊ−Ｒ1）n−Ｒ3（配列番号１０２）（式ＩＶａ）
を含み、式中、
Ｒ´はＤａｐ（グアニジノ）であり；かつ、
Ｇ1、Ｄ、Ｌ、Ｘａａ1、Ｘａａ2、Ｊ、Ｒ1、ｎ、及びＲ3はそれぞれ、本明細書の式ＩＶについて定義した通りである。
【０１１４】
いくつかの実施形態では、Ｌは、アミド結合を介してＪに連結される。いくつかの実施形態では、ｎは、１〜４の整数である。いくつかの実施形態では、ｎは３である。いくつかの実施形態では、カーゴ分子は、αｖβ６インテグリン発現細胞に対して標的化されることが望ましい任意の分子であり得る。
【０１１５】
いくつかの実施形態では、１つ又は複数のαｖβ６インテグリンリガンドは、１つ又は複数のカーゴ分子にコンジュゲートすることができ、以下：
（Ｚ−ＲＧ1ＤＬＸａａ1Ｘａａ2Ｌ−Ｊ−Ｒ1）n−Ｒ4−（Ｒ3）p（配列番号８９）（式Ｖ）
を含み、式中、
Ｚは、アミン末端キャップ（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のアミン末端キャップのいずれか）であり；
ＲはＬ−アルギニンであり；
Ｇ1はＬ−グリシン又はＮ−メチルグリシンであり；
ＤはＬ−アスパラギン酸（Ｌ−アスパルテート）であり；
ＬはＬ−ロイシンであり；
Ｘａａ1は、Ｌ−αアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−αアミノ酸のいずれか）、Ｌ−βアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−βアミノ酸のいずれか）、又はα，α−二置換アミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のα，α−二置換アミノ酸のいずれか）であり；
Ｘａａ2は、Ｌ−αアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−αアミノ酸のいずれか）、Ｌ−βアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−βアミノ酸のいずれか）、又はα，α−二置換アミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のα，α−二置換アミノ酸のいずれか）であり；
Ｊは、任意であって、存在する場合には、１つ又は複数（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、又は３０；又は１〜３０、１〜２５、１〜２０、１〜１５、１〜１０、１〜５、５〜３０、５〜２５、５〜２０、５〜１５、５〜１０、１０〜３０、１０〜２５、１０〜２０、１０〜１５、１５〜３０、１５〜２５、１５〜２０、２０〜３０、２０〜２５、又は２５〜３０）の、Ｌ−αアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−αアミノ酸のいずれか）、Ｌ−βアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−βアミノ酸のいずれか）、又はα，α−二置換アミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のα，α−二置換アミノ酸のいずれか）、あるいはそれらの組み合わせを含み；
Ｒ1は、任意であって、存在する場合には、ＰＥＧ及び／又は連結基を含み；
ｎは、０を超える整数（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、又は３０；又は１〜３０、１〜２５、１〜２０、１〜１５、１〜１０、１〜５、５〜３０、５〜２５、５〜２０、５〜１５、５〜１０、１０〜３０、１０〜２５、１０〜２０、１０〜１５、１５〜３０、１５〜２５、１５〜２０、２０〜３０、２０〜２５、又は２５〜３０）であり；
Ｒ4は、任意であって、存在する場合には、足場及び／又は連結基を含み、斯かる足場及び／又は連結基は、存在する各リガンドのための少なくとも１つの結合点（すなわち、少なくともｎに等しい結合点の数）及び存在する各カーゴ分子のための少なくとも１つの結合点（すなわち、少なくともｐに等しい結合点の数）を含み；
ｐは、０を超える整数（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、又は３０；又は１〜３０、１〜２５、１〜２０、１〜１５、１〜１０、１〜５、５〜３０、５〜２５、５〜２０、５〜１５、５〜１０、１０〜３０、１０〜２５、１０〜２０、１０〜１５、１５〜３０、１５〜２５、１５〜２０、２０〜３０、２０〜２５、又は２５〜３０）であり；かつ、
Ｒ3は、１つ又は複数のカーゴ分子を含む。
【０１１６】
いくつかの実施形態では、Ｌは、アミド結合を介してＪに連結される。いくつかの実施形態では、カーゴ分子は、αｖβ６インテグリン発現細胞に対して標的化されることが望ましい任意の分子であり得る。
【０１１７】
本明細書に開示のαｖβ６インテグリンリガンドは、１つ又は複数の足場を含み得る。足場は、時には当該技術分野において、連結基又はリンカーとも称され、１つ又は複数の本明細書に開示のαｖβ６インテグリンリガンドへの、１つ又は複数のカーゴ分子の結合を促進するために使用することができる。本明細書に開示されるリガンドと適合可能な有用な足場は、当該技術分野で一般的に知られている。本明細書に開示のαｖβ６インテグリンリガンドで使用することができる足場の非限定的な例としては、これらに限定されるものではないが、ポリマー（例えば、ポリアクリレートポリマー、ポリビニルエステルポリマー等）、アミノ酸ポリマー（例えば、ビス−グルタミン酸、ビス−リシン、ポリ−Ｌ−リシン（ＰＬＬ）等）、及びシステインが挙げられる。いくつかの実施形態では、足場は、例えば薬物動態（ＰＫ）特性を増強するなど、単にリンカーとして機能することに加えて、付加的な所望の特性を提供し得る。
【０１１８】
いくつかの実施形態では、１つ又は複数のαｖβ６インテグリンリガンドは、１つ又は複数のカーゴ分子にコンジュゲートすることができ、以下：
（Ｒ´Ｇ1ＤＬＸａａ1Ｘａａ2Ｌ−Ｊ−Ｒ1）n−Ｒ4−（Ｒ3）p（配列番号１０３）（式Ｖａ）
を含み、式中、
Ｒ´はＤａｐ（グアニジノ）であり；かつ、
Ｇ1、Ｄ、Ｌ、Ｘａａ1、Ｘａａ2、Ｊ、Ｒ1、ｎ、Ｒ4、ｐ、及びＲ3はそれぞれ、本明細書の式Ｖについて定義した通りである。
【０１１９】
いくつかの実施形態では、Ｌは、アミド結合を介してＪに連結される。カーゴ分子は、αｖβ６インテグリン発現細胞に対して標的化されることが望ましい任意の分子であり得る。
【０１２０】
いくつかの実施形態では、本明細書中の式のいずれかにおけるＪは、１、２、３つの、又は３つを超えるＬ−αアミノ酸、Ｌ−βアミノ酸、又はα，α−二置換アミノ酸を含む。１、２、３つの、又は３つを超えるアミノ酸は、独立して、天然に存在するＬ−αアミノ酸、天然に存在するタンパク質構成アミノ酸（proteinogenic amino acids）、天然に存在する標準アミノ酸（すなわち、普遍遺伝暗号表（universal genetic code）のコドンによって直接コードされている２０個のアミノ酸、基準アミノ酸（canonical amino acids）のコード化アミノ酸とも称される）、又は非標準アミノ酸（非天然、非コード化、又は非基準アミノ酸とも称される）である。
【０１２１】
標準又は天然アミノ酸は、アラニン、システイン、アスパラギン酸（アスパルテート）、グルタミン酸（グルタメート）、フェニルアラニン、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、リシン、ロイシン、メチオニン、アスパラギン、プロリン、グルタミン、アルギニン、セリン、トレオニン、バリン、トリプトファン、及びチロシンを含む。
【０１２２】
非標準アミノ酸としては、これらに限定されるものではないが、セレノシステイン、ピロリジン、Ｎ−ホルミルメチオニン、ヒドロキシプロリン、セレノメチオニン、α−アミノ−イソ酪酸（Ａｉｂ）、Ｌ−α−アミノ酪酸（Ａｂｕ）、α，γ−ジアミノ酪酸、デヒドロアラニン、ノルロイシン、アロイソロイシン、ｔ−ロイシン、α−アミノ−ｎ−ヘプタン酸、α，β−ジアミノプロピオン酸、β−Ν−オキサリル−α，β−ジアミノプロピオン酸、アロトレオニン、ホモシステイン、ホモセリン、β−ホモ−アラニン（β３−ｈΑ）、イソバリン、ノルバリン（Ｎｖａ）、シトルリン（Ｃｉｔ）、オルニチン、α−メチル−アスパルテート（αＭｅＤ）、α−メチル−ロイシン（αＭｅＬ）、Ｎ−メチルアラニン、Ｎ−メチル−グリシン（ＮMeＧ）、Ｎ−メチルロイシン（ＮMeＬ）、β−シクロヘキシル−アラニン（Ｃｈａ）、Ｎ−エチルアラニン、Ν，Ν−ε−ジメチルリシン（Ｋ（Me）2）、ジメチルアルギニン（Ｒ（Ｍｅ）2）、Ｄａｐ（Ａｃ）、ｎ−アルキル化Ｌ−αアミノ酸、及び天然に存在するアミノ酸と同様に機能する他のアミノ酸アナログ又はアミノ酸模倣物が挙げられる。
【０１２３】
いくつかの実施形態では、Ｊは、少なくとも１つの非標準アミノ酸を含む。いくつかの実施形態では、Ｊは、Ａｉｂ、Ｃｉｔ、ＣｉｔＡｉｂ、ＣｉｔＡｉｂＬ、ＣｉｔＥ、ＣｉｔＦ、ＣｉｔＧ、ＣｉｔＫ、ＣｉｔＰ、ＣｉｔＱ、ＣｉｔＱＬ、ＥＡｉｂ、ＦＡｉｂ、ＫＡｉｂ、ＰＡｉｂ、ＱＡｉｂ、ＲａｂｕＬ、ＲＡｉｂＬ、ＲＣｉｔＬ、ＲＤａｐ（Ａｃ）Ｌ、ＲＬＱ、又はＲＮｖａＬであるか又はこれらを含む。
【０１２４】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の式のいずれかにおけるＪは、Ｘａａ3Ｘａａ4Ｌを含むか又はそれからなり、式中、ＬはＬ−ロイシンであり；Ｘａａ3は、Ｌ−αアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−αアミノ酸のいずれか）、Ｌ−βアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−βアミノ酸のいずれか）、又はα，α−二置換アミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のα，α−二置換アミノ酸のいずれか）であり；かつ、Ｘａａ4は、Ｌ−αアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−αアミノ酸のいずれか）、Ｌ−βアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−βアミノ酸のいずれか）、又はα，α−二置換アミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のα，α−二置換アミノ酸のいずれか）である。
【０１２５】
いくつかの実施形態では、Ｊは、Ｘａａ3Ｘａａ4であるか又はそれを含み、式中、Ｘａａ3は、Ｌ−αアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−αアミノ酸のいずれか）、Ｌ−βアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−βアミノ酸のいずれか）、又はα，α−二置換アミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のα，α−二置換アミノ酸のいずれか）であり；かつ、Ｘａａ4は、Ｌ−αアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−αアミノ酸のいずれか）、Ｌ−βアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−βアミノ酸のいずれか）、又はα，α−二置換アミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のα，α−二置換アミノ酸のいずれか）である。
【０１２６】
いくつかの実施形態では、αｖβ６インテグリンリガンドは、以下：
Ｚ−ＲＧ1ＤＬＸａａ1Ｘａａ2ＬＸａａ3Ｘａａ4Ｌ−Ｒ1（配列番号９２）（式ＶＩ）
を含み、式中、
Ｚは、アミン末端キャップ（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のアミン末端キャップのいずれか）であり；
ＲはＬ−アルギニンであり；
Ｇ1はＬ−グリシン又はＮ−メチルグリシンであり；
ＤはＬ−アスパラギン酸（Ｌ−アスパルテート）であり；
ＬはＬ−ロイシンであり；
Ｘａａ1は、Ｌ−αアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−αアミノ酸のいずれか）、Ｌ−βアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−βアミノ酸のいずれか）、又はα，α−二置換アミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のα，α−二置換アミノ酸のいずれか）であり；
Ｘａａ2は、Ｌ−αアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−αアミノ酸のいずれか）、Ｌ−βアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−βアミノ酸のいずれか）、又はα，α−二置換アミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のα，α−二置換アミノ酸のいずれか）であり；
Ｘａａ3は、Ｌ−αアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−αアミノ酸のいずれか）、Ｌ−βアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−βアミノ酸のいずれか）、又はα，α−二置換アミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のα，α−二置換アミノ酸のいずれか）であり；
Ｘａａ4は、Ｌ−αアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−αアミノ酸のいずれか）、Ｌ−βアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−βアミノ酸のいずれか）、又はα，α−二置換アミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のα，α−二置換アミノ酸のいずれか）であり；かつ、
Ｒ1は、任意であって、存在する場合には、ＰＥＧ及び／又は連結基を含む。
【０１２７】
いくつかの実施形態では、Ｘａａ1は、Ｌ−αアミノ酸、Ｌ−βアミノ酸、又はα，α−二置換アミノ酸である。Ｘａａ1は、これらに限定されるものではないが、天然に存在するＬ−αアミノ酸、天然に存在するタンパク質構成アミノ酸、天然に存在する標準（すなわち、普遍遺伝暗号表のコドンによって直接コードされている２０個のアミノ酸、基準アミノ酸のコード化アミノ酸とも称される）アミノ酸、又は非標準（非天然、非コード化、又は非基準とも称される）アミノ酸であり得る。
【０１２８】
いくつかの実施形態では、Ｘａａ2は、Ｌ−αアミノ酸、Ｌ−βアミノ酸、又はα，α−二置換アミノ酸である。Ｘａａ2は、これらに限定されるものではないが、天然に存在するＬ−αアミノ酸、天然に存在するタンパク質構成アミノ酸、天然に存在する標準（すなわち、普遍遺伝暗号表のコドンによって直接コードされている２０個のアミノ酸、基準アミノ酸のコード化アミノ酸とも称される）アミノ酸、又は非標準（非天然、非コード化、又は非基準とも称される）アミノ酸であり得る。
【０１２９】
いくつかの実施形態では、Ｘａａ3は、Ｌ−αアミノ酸、Ｌ−βアミノ酸、又はα，α−二置換アミノ酸である。Ｘａａ3は、これらに限定されるものではないが、天然に存在するＬ−αアミノ酸、天然に存在するタンパク質構成アミノ酸、天然に存在する標準（すなわち、普遍遺伝暗号表のコドンによって直接コードされている２０個のアミノ酸、基準アミノ酸のコード化アミノ酸とも称される）アミノ酸、又は非標準（非天然、非コード化、又は非基準とも称される）アミノ酸であり得る。
【０１３０】
いくつかの実施形態では、Ｘａａ4は、Ｌ−αアミノ酸、Ｌ−βアミノ酸、又はα，α−二置換アミノ酸である。Ｘａａ4は、これらに限定されるものではないが、天然に存在するＬ−αアミノ酸、天然に存在するタンパク質構成アミノ酸、天然に存在する標準（すなわち、普遍遺伝暗号表のコドンによって直接コードされている２０個のアミノ酸、基準アミノ酸のコード化アミノ酸とも称される）アミノ酸、又は非標準（非天然、非コード化、又は非基準とも称される）アミノ酸であり得る。
【０１３１】
いくつかの実施形態では、Ｘａａ1又はＸａａ2は非標準アミノ酸である。いくつかの実施形態では、Ｘａａ1は非標準アミノ酸である。いくつかの実施形態では、Ｘａａ2は非標準アミノ酸である。いくつかの実施形態では、Ｘａａ1及びＸａａ2の両方が、非標準アミノ酸である。
【０１３２】
いくつかの実施形態では、Ｘａａ1及び／又はＸａａ2はＡｂｕである。いくつかの実施形態では、Ｘａａ1はＡｂｕである。いくつかの実施形態では、Ｘａａ2はＡｂｕである。
【０１３３】
いくつかの実施形態では、Ｘａａ1又はＸａａ2は非荷電である。いくつかの実施形態では、Ｘａａ1は非荷電である。いくつかの実施形態では、Ｘａａ2は非荷電である。いくつかの実施形態では、Ｘａａ1及びＸａａ2は非荷電である。
【０１３４】
いくつかの実施形態では、Ｘａａ1は非荷電であり、かつＸａａ2は非標準アミノ酸である。いくつかの実施形態では、Ｘａａ2は非荷電であり、かつＸａａ1は非標準アミノ酸である。いくつかの実施形態では、Ｘａａ1は非荷電であり、かつＸａａ2はＡｂｕである。いくつかの実施形態では、Ｘａａ2は非荷電であり、かつＸａａ1はＡｂｕである。
【０１３５】
いくつかの実施形態では、Ｘａａ1Ｘａａ2は、ＡＡｂｕ、ＫＡｂｕ、ＥＡｂｕ、ＦＡｂｕ、ＱＡｂｕ、ＧＡｂｕ、ＰＡｂｕ、ＡＫ、ＡＥ、ＡＦ、ＡＱ、ＡＧ、及びＡＰであり、ここで、ＡはＬ−アラニンであり、ＡｂｕはＬ−α−アミノ酪酸であり、ＫはＬ−リシンであり、ＥはＬ−グルタミン酸（グルタメート）であり、ＦはＬ−フェニルアラニンであり、ＱはＬ−グルタミンであり、ＧはＬ−グリシンであり、かつＰはＬ−プロリンである。
【０１３６】
いくつかの実施形態では、ＲＧ1ＤＬＸａａ1Ｘａａ2Ｌ（配列番号１１７）は、以下：ＲＧＤＬＡＡｂｕＬ（配列番号１１８）、ＲＧＤＬＫＡｂｕＬ（配列番号１１９）、ＲＧＤＬＥＡｂｕＬ（配列番号１２０）、ＲＧＤＬＦＡｂｕＬ（配列番号１２１）、ＲＧＤＬＱＡｂｕＬ（配列番号１２２）、ＲＧＤＬＧＡｂｕＬ（配列番号１２３）、ＲＧＤＬＰＡｂｕＬ（配列番号１２４）、ＲＧＤＬＡＫＬ（配列番号１２５）、ＲＧＤＬＡＥＬ（配列番号１２６）、ＲＧＤＬＡＦＬ（配列番号１２７）、ＲＧＤＬＡＱＬ（配列番号１２８）、ＲＧＤＬＡＧＬ（配列番号１２９）、及びＲＧＤＬＡＰＬ（配列番号１３０）；からなる群から選択され、ここで、ＲはＬ−アルギニンであり；ＧはＬ−グリシンであり；ＤはＬ−アスパラギン酸（アスパルテート）であり；ＬはＬ−ロイシンであり；ＡはＬ−アラニンであり；ＡｂｕはＬ−α−アミノ酪酸であり；ＫはＬ−リシンであり；ＥはＬ−グルタミン酸（グルタメート）であり；ＦはＬ−フェニルアラニンであり；ＱはＬ−グルタミンであり；かつ、ＰはＬ−プロリンである。いくつかの実施形態では、前記式のいずれかにおけるＧ（Ｌ−グリシン）は、ＭｅＧｌｙ（Ｎ−メチルグリシン）で置換されている。
【０１３７】
いくつかの実施形態では、Ｘａａ3又はＸａａ4は非標準アミノ酸である。いくつかの実施形態では、Ｘａａ3は非標準アミノ酸である。いくつかの実施形態では、Ｘａａ4は非標準アミノ酸である。いくつかの実施形態では、Ｘａａ3及びＸａａ4の両方が非標準アミノ酸である。
【０１３８】
いくつかの実施形態では、Ｘａａ3及び／又はＸａａ4はＣｉｔである。いくつかの実施形態では、Ｘａａ3はＣｉｔである。いくつかの実施形態では、Ｘａａ4はＣｉｔである。
【０１３９】
いくつかの実施形態では、Ｘａａ3又はＸａａ4は非荷電である。いくつかの実施形態では、Ｘａａ3は非荷電である。いくつかの実施形態では、Ｘａａ4は非荷電である。いくつかの実施形態では、Ｘａａ3及びＸａａ4は非荷電である。
【０１４０】
いくつかの実施形態では、Ｘａａ3は非荷電であり、かつＸａａ4は非標準アミノ酸である。いくつかの実施形態では、Ｘａａ3は非荷電であり、かつＸａａ4は非標準アミノ酸である。いくつかの実施形態では、Ｘａａ3はＡｉｂである。いくつかの実施形態では、Ｘａａ4はＡｉｂである。
【０１４１】
いくつかの実施形態では、Ｘａａ3Ｘａａ4は、ＣｉｔＡｉｂ、ＣｉｔＥ、ＣｉｔＦ、ＣｉｔＧ、ＣｉｔＫ、ＣｉｔＰ、ＣｉｔＱ、ＥＡｉｂ、ＦＡｉｂ、ＫＡｉｂ、ＰＡｉｂ、又はＱＡｉｂであり、ここで、Ｃｉｔはシトルリンであり、Ａｉｂはアミノイソ酪酸（α−メチルアラニン）であり、ＫはＬ−リシンであり、ＥはＬ−グルタミン酸（グルタメート）であり、ＦはＬ−フェニルアラニンであり、ＱはＬ−グルタミンであり、ＧはＬ−グリシンであり、かつＰはＬ−プロリンである。
【０１４２】
いくつかの実施形態では、αｖβ６インテグリンリガンドは、以下：
Ｒ´Ｇ1ＤＬＸａａ1Ｘａａ2ＬＸａａ3Ｘａａ4Ｌ−Ｒ1（配列番号１０４）（式ＶＩａ）
を含み、式中、
Ｒ´はＤａｐ（グアニジノ）であり；かつ、
Ｇ1、Ｄ、Ｌ、Ｘａａ1、Ｘａａ2、Ｘａａ3、Ｘａａ4、及びＲ1はそれぞれ、本明細書の式ＶＩについて定義した通りである。
【０１４３】
いくつかの実施形態では、αｖβ６インテグリンリガンドは、反応基又は保護された反応基を含み、かつ、以下：
（Ｚ−ＲＧ1ＤＬＸａａ1Ｘａａ2Ｌ−Ｊ−Ｒ1）n−Ｒ4−（Ｒ2）p（配列番号１０５）（式ＶＩＩ）
を含み、式中、
Ｚは、アミン末端キャップ（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のアミン末端キャップのいずれか）であり；
ＲはＬ−アルギニンであり；
Ｇ1はＬ−グリシン又はＮ−メチルグリシンであり；
ＤはＬ−アスパラギン酸（Ｌ−アスパルテート）であり；
ＬはＬ−ロイシンであり；
Ｘａａ1は、Ｌ−αアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−αアミノ酸のいずれか）、Ｌ−βアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−βアミノ酸のいずれか）、又はα，α−二置換アミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のα，α−二置換アミノ酸のいずれか）であり；
Ｘａａ2は、Ｌ−αアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−αアミノ酸のいずれか）、Ｌ−βアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−βアミノ酸のいずれか）、又はα，α−二置換アミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のα，α−二置換アミノ酸のいずれか）であり；
Ｊは、任意であって、存在する場合には、１つ又は複数（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、又は３０；又は１〜３０、１〜２５、１〜２０、１〜１５、１〜１０、１〜５、５〜３０、５〜２５、５〜２０、５〜１５、５〜１０、１０〜３０、１０〜２５、１０〜２０、１０〜１５、１５〜３０、１５〜２５、１５〜２０、２０〜３０、２０〜２５、又は２５〜３０）の、Ｌ−αアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−αアミノ酸のいずれか）、Ｌ−βアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−βアミノ酸のいずれか）、又はα，α−二置換アミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のα，α−二置換アミノ酸のいずれか）、あるいはそれらの組み合わせを含み；
Ｒ1は、任意であって、存在する場合には、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）及び／又は連結基を含み；ｎは、０を超える整数（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、又は３０；又は１〜３０、１〜２５、１〜２０、１〜１５、１〜１０、１〜５、５〜３０、５〜２５、５〜２０、５〜１５、５〜１０、１０〜３０、１０〜２５、１０〜２０、１０〜１５、１５〜３０、１５〜２５、１５〜２０、２０〜３０、２０〜２５、又は２５〜３０）であり；
Ｒ4は、任意であって、存在する場合には、足場及び／又は連結基を含み、斯かる足場及び／又は連結基は、各リガンドのための少なくとも１つの結合点及び各カーゴ分子のための少なくとも１つの結合点を含み；
ｐは、０を超える整数（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、又は３０；又は１〜３０、１〜２５、１〜２０、１〜１５、１〜１０、１〜５、５〜３０、５〜２５、５〜２０、５〜１５、５〜１０、１０〜３０、１０〜２５、１０〜２０、１０〜１５、１５〜３０、１５〜２５、１５〜２０、２０〜３０、２０〜２５、又は２５〜３０）であり；かつ、
Ｒ2は、反応基又は保護された反応基を含む。
【０１４４】
いくつかの実施形態では、Ｌは、アミド結合を介してＪに連結される。いくつかの実施形態では、１つ又は複数の反応基又は保護された反応基を含むαｖβ６インテグリンリガンドは、カーゴ分子と反応して、αｖβ６インテグリンリガンド−カーゴ分子コンジュゲートを形成することができる。
【０１４５】
いくつかの実施形態では、αｖβ６インテグリンリガンドは、反応基又は保護された反応基を含み、かつ、以下：
（Ｒ´Ｇ1ＤＬＸａａ1Ｘａａ2Ｌ−Ｊ−Ｒ1）n−Ｒ4−（Ｒ2）p（配列番号１０６）（式ＶＩＩａ）
を含み、式中、
Ｒ´はＤａｐ（グアニジノ）であり；かつ、
Ｇ1、Ｄ、Ｌ、Ｘａａ1、Ｘａａ2、Ｊ、Ｒ1、ｎ、Ｒ4、ｐ、及びＲ2はそれぞれ、本明細書の式ＶＩＩについて定義した通りである。
【０１４６】
いくつかの実施形態では、Ｌは、アミド結合を介してＪに連結される。カーゴ分子は、αｖβ６インテグリン発現細胞に対して標的化されることが望ましい任意の分子であり得る。
【０１４７】
いくつかの実施形態では、特に局所送達（例えば、ネブライザー、気管内、鼻腔内投与によるものを含む粉末若しくはエアロゾルの吸入又は通気（insufflation）による、あるいは局所投与による）のみが望ましい場合、αｖβ６インテグリンリガンドは、少なくとも１つ又は複数のアミノ酸が非標準アミノ酸であることを条件に、アミン末端キャップの存在なしに合成される。
【０１４８】
いくつかの実施形態では、αｖβ６インテグリンリガンドは、以下：
ＲＧ1ＤＬＸａａ1Ｘａａ2Ｌ−Ｘａａ3Ｘａａ4Ｌ−Ｒ1（配列番号９６）（式ＶＩＩＩ）
を含み、式中、
ＲはＬ−アルギニンであり；
Ｇ1はＬ−グリシン又はＮ−メチルグリシンであり；
ＤはＬ−アスパラギン酸（Ｌ−アスパルテート）であり；
ＬはＬ−ロイシンであり；
Ｘａａ1は、Ｌ−αアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−αアミノ酸のいずれか）、Ｌ−βアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−βアミノ酸のいずれか）、又はα，α−二置換アミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のα，α−二置換アミノ酸のいずれか）であり；
Ｘａａ2は、Ｌ−αアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−αアミノ酸のいずれか）、Ｌ−βアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−βアミノ酸のいずれか）、又はα，α−二置換アミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のα，α−二置換アミノ酸のいずれか）であり；
Ｘａａ3は、Ｌ−αアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−αアミノ酸のいずれか）、Ｌ−βアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−βアミノ酸のいずれか）、又はα，α−二置換アミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のα，α−二置換アミノ酸のいずれか）であり；
Ｘａａ4は、Ｌ−αアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−αアミノ酸のいずれか）、Ｌ−βアミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のＬ−βアミノ酸のいずれか）、又はα，α−二置換アミノ酸（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のα，α−二置換アミノ酸のいずれか）であり；
Ｒ1は、任意であって、存在する場合には、ＰＥＧ及び／又は連結基を含み；かつ、
Ｘａａ1、Ｘａａ2、Ｘａａ3、及びＸａａ4の少なくとも１つは非標準アミノ酸である。
【０１４９】
いくつかの実施形態では、αｖβ６インテグリンリガンドは、以下：
ＲＧ1ＤＬＸａａ1Ｘａａ2Ｌ−Ｘａａ3Ｘａａ4Ｌ−Ｒ1（配列番号９６）（式ＶＩＩＩ）
を含み、各変数は式ＶＩＩＩについて上記で定義され、式中、Ｘａａ1、Ｘａａ2、Ｘａａ3、及びＸａａ4の少なくとも２つは非標準アミノ酸である。
【０１５０】
いくつかの実施形態では、αｖβ６インテグリンリガンドは、以下：
ＲＧ1ＤＬＸａａ1Ｘａａ2Ｌ−Ｘａａ3Ｘａａ4Ｌ−Ｒ1（配列番号９６）（式ＶＩＩＩ）
を含み、各変数は式ＶＩＩＩについて上記で定義され、式中、Ｘａａ1、Ｘａａ2、Ｘａａ3、及びＸａａ4の少なくとも３つは非標準アミノ酸である。
【０１５１】
いくつかの実施形態では、αｖβ６インテグリンリガンドは、以下：
ＲＧ1ＤＬＸａａ1Ｘａａ2Ｌ−Ｘａａ3Ｘａａ4Ｌ−Ｒ1（配列番号９６）（式ＶＩＩＩ）
を含み、各変数は式ＶＩＩＩについて上記で定義され、式中、Ｘａａ2、Ｘａａ3、及びＸａａ4は非標準アミノ酸である。
【０１５２】
いくつかの実施形態では、αｖβ６インテグリンリガンドは、以下：
ＲＧ1ＤＬＡＡｂｕＬＣｉｔＡｉｂＬ−Ｒ1（配列番号９７）（式ＶＩＩＩａ）
を含み、式中、
ＲはＬ−アルギニンであり；
Ｇ1はＬ−グリシン又はＮ−メチルグリシンであり；
ＤはＬ−アスパラギン酸（Ｌ−アスパルテート）であり；
ＬはＬ−ロイシンであり；
ＡはＬ−アラニンであり；
ＡｂｕはＬ−α−アミノ酪酸であり；
Ｃｉｔはシトルリンであり；
Ａｉｂはα−アミノ−イソ酪酸であり；かつ、
Ｒ1は、任意であって、存在する場合には、ＰＥＧ及び／又は連結基を含む。
【０１５３】
いくつかの実施形態では、αｖβ６インテグリンリガンドは、反応基又は保護された反応基を含み、かつ、以下：
（ＲＧ1ＤＬＡＡｂｕＬＣｉｔＡｉｂＬ−Ｒ1）n−Ｒ4−（Ｒ2）p（配列番号１０７）（式ＶＩＩＩｂ）
を含み、式中、
ＲはＬ−アルギニンであり；
Ｇ1はＬ−グリシン又はＮ−メチルグリシンであり；
ＤはＬ−アスパラギン酸（Ｌ−アスパルテート）であり；
ＬはＬ−ロイシンであり；
ＡはＬ−アラニンであり；
ＡｂｕはＬ−α−アミノ酪酸であり；
Ｃｉｔはシトルリンであり；
Ａｉｂはα−アミノ−イソ酪酸であり；
Ｒ1は、任意であって、存在する場合には、ＰＥＧ及び／又は連結基を含み；
ｎは、０を超える整数（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、又は３０；又は１〜３０、１〜２５、１〜２０、１〜１５、１〜１０、１〜５、５〜３０、５〜２５、５〜２０、５〜１５、５〜１０、１０〜３０、１０〜２５、１０〜２０、１０〜１５、１５〜３０、１５〜２５、１５〜２０、２０〜３０、２０〜２５、又は２５〜３０）であり；
Ｒ4は、任意であって、存在する場合には、足場又は連結基を含み、斯かる足場又は連結基は、各リガンドのための少なくとも１つの結合点、及び各カーゴ分子のための少なくとも結合点を含み；
ｐは、０を超える整数（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、又は３０；又は１〜３０、１〜２５、１〜２０、１〜１５、１〜１０、１〜５、５〜３０、５〜２５、５〜２０、５〜１５、５〜１０、１０〜３０、１０〜２５、１０〜２０、１０〜１５、１５〜３０、１５〜２５、１５〜２０、２０〜３０、２０〜２５、又は２５〜３０）であり；かつ、
Ｒ2は、反応基又は保護された反応基を含む。
【０１５４】
いくつかの実施形態では、１つ又は複数のカーゴ分子は、１つ又は複数のαｖβ６インテグリンリガンドにコンジュゲートされ、かつ、以下：
（ＲＧ1ＤＬＡＡｂｕＬＣｉｔＡｉｂＬ−Ｒ1）n−Ｒ4−（Ｒ3）p（配列番号１０８）（式ＶＩＩＩｃ）
を含み、式中、
ＲはＬ−アルギニンであり；
Ｇ1はＬ−グリシン又はＮ−メチルグリシンであり；
ＤはＬ−アスパラギン酸（Ｌ−アスパルテート）であり；
ＬはＬ−ロイシンであり；
Ｒ1は、任意であって、存在する場合には、ＰＥＧ及び／又は連結基を含み；
ｎは、０を超える整数（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、又は３０；又は１〜３０、１〜２５、１〜２０、１〜１５、１〜１０、１〜５、５〜３０、５〜２５、５〜２０、５〜１５、５〜１０、１０〜３０、１０〜２５、１０〜２０、１０〜１５、１５〜３０、１５〜２５、１５〜２０、２０〜３０、２０〜２５、又は２５〜３０）であり；
Ｒ4は、任意であって、存在する場合には、足場又は連結基を含み、斯かる足場又は連結基は、各リガンドのための少なくとも１つの結合点、及び各カーゴ分子のための少なくとも結合点を含み；
ｐは、０を超える整数（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、又は３０；又は１〜３０、１〜２５、１〜２０、１〜１５、１〜１０、１〜５、５〜３０、５〜２５、５〜２０、５〜１５、５〜１０、１０〜３０、１０〜２５、１０〜２０、１０〜１５、１５〜３０、１５〜２５、１５〜２０、２０〜３０、２０〜２５、又は２５〜３０）であり；かつ、
Ｒ3は、１つ又は複数のカーゴ分子を含む。
【０１５５】
１つ又は複数のカーゴ分子は、αｖβ６インテグリン発現細胞に対して標的化されることが望ましい任意の分子であり得る。
【０１５６】
本明細書で使用される場合、いくつかの実施形態では、Ｒ1は存在し、かつＰＥＧ基を含み、斯かるＰＥＧ基は、１〜１００個のエチレンオキシド（ＣＨ2−ＣＨ2−Ｏ）単位（例えば、１〜９０、１〜８０、１〜７０、１〜６０、１〜５０、１〜４０、１〜３０、１〜２０、１〜１０、１〜５、２〜１００、２〜９０、２〜８０、２〜７０、２〜６０、２〜５０、２〜４０、２〜３０、２〜２０、２〜１０、２〜５、５〜１００、５〜９０、５〜８０、５〜７０、５〜６０、５〜５０、５〜４０、５〜３０、５〜２０、５〜１０、１０〜１００、１０〜９０、１０〜８０、１０〜７０、１０〜６０、１０〜５０、１０〜４０、１０〜３０、１０〜２０、２０〜１００、２０〜９０、２０〜８０、２０〜７０、２０〜６０、２０〜５０、２０〜４０、２０〜３０、３０〜１００、３０〜９０、３０〜８０、３０〜７０、３０〜６０、３０〜５０、３０〜４０、４０〜１００、４０〜９０、４０〜８０、４０〜７０、４０〜６０、４０〜５０、５０〜１００、５０〜９０、５０〜８０、５０〜７０、５０〜６０、６０〜１００、６０〜９０、６０〜８０、６０〜７０、７０〜１００、７０〜９０、７０〜８０、８０〜１００、８０〜９０、又は９０〜１００個のエチレンオキシド単位）を含む。いくつかの実施形態では、Ｒ1は存在し、かつ、２〜３０個のエチレンオキシド単位を有するＰＥＧ基を含む。いくつかの実施形態では、Ｒ1は存在し、かつ、２〜２０個のエチレンオキシド単位を有するＰＥＧ基を含む。いくつかの実施形態では、Ｒ1は存在し、かつ、２〜１０個のエチレンオキシド単位を有するＰＥＧ基を含む。いくつかの実施形態では、Ｒ1は存在し、かつ、５〜２０個のエチレンオキシド単位を有するＰＥＧ基を含む。いくつかの実施形態では、Ｒ1は存在し、かつ、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、又は２０個のエチレンオキシド単位を有するＰＥＧ基を含む。
【０１５７】
反応性基は、当該技術分野で良く知られており、２つの分子間又は反応物間の共有結合の形成を提供する。本明細書の発明の範囲における使用に適した反応基としては、これらに限定されるものではないが：アミノ基、アミド基、カルボン酸基、アジド、アルキン、プロパルギル基、ＢＣＮ（ビシクロ［６．１．０］ノニン、ＤＢＣＯ（ジベンゾシクロオクチン）チオール、マレイミド基、アミノオキシ基、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ）又は他の活性化エステル（例えば、ＰＮＰ、ＴＦＰ、ＰＦＰ）、ブロモ基、アルデヒド、カーボネート、トシレート、テトラジン、トランス−シクロオクテン（ＴＣＯ）、ヒドラジド、ヒドロキシル基、ジスルフィド、及びオルトピリジルジスルフィド基が挙げられる。
【０１５８】
反応基の組み込みは、カーゴ分子への本明細書に開示のαｖβ６インテグリンリガンドのコンジュゲーションを促進し得る。コンジュゲーション反応は、当該技術分野で良く知られており、２つの分子間又は反応物間の共有結合の形成を提供する。本明細書の発明の範囲における使用に適したコンジュゲーション反応としては、これらに限定されるものではないが、アミドカップリング反応、マイケル付加反応、ヒドラゾン形成反応、及びクリックケミストリー付加環化反応が挙げられる。
【０１５９】
いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるαｖβ６インテグリン標的化リガンドは、テトラフルオロフェニル（ＴＦＰ）エステルとして合成され、これは反応性アミノ基によって置換されて、カーゴ分子に結合し得る。
【０１６０】
保護された反応基も当該技術分野において一般的に使用される。保護基は、非保護基が反応する条件下では反応しない基への、反応基の一時的な化学変換を提供し、例えば、その後の化学反応における化学選択性を提供する。本明細書の発明の範囲における使用に適した保護された反応基としては、これらに限定されるものではないが、ＢＯＣ基（ｔ−ブトキシカルボニル）、Ｆｍｏｃ（９−フルオレニルメトキシカルボニル）、カルボキシベンジル（ＣＢＺ）基、ベンジルエステル、及びＰＢＦ（２，２，４，６，７−ペンタメチルペンタメチルジヒドロベンゾフラン−５−スルホニル）が挙げられる。
【０１６１】
カーゴ分子は、αｖβ６インテグリン又はαｖβ６インテグリンを発現する細胞に対する標的化が望まれ得る任意の分子である。カーゴ分子は、これらに限定されるものではないが、医薬成分、医薬品、プロドラッグ、治療上価値のある物質、小分子、抗体、抗体フラグメント、免疫グロブリン、モノクローナル抗体、ラベル又はマーカー、脂質、天然若しくは修飾核酸又はポリヌクレオチド、ペプチド、ポリマー、ポリアミン、タンパク質、アプタマー、毒素、ビタミン、ＰＥＧ、ハプテン、ジゴキシゲニン、ビオチン、放射性原子若しくは分子、又はフルオロフォアであり得る。いくつかの実施形態では、１つ又は複数のカーゴ分子（例えば、同じ又は異なるカーゴ分子）は、１つ又は複数のαｖβ６インテグリンリガンドに連結されて、αｖβ６インテグリンを発現する細胞に対してカーゴ分子を標的化する。
【０１６２】
いくつかの実施形態では、１つ又は複数のカーゴ分子は、医薬成分又は医薬組成物である。いくつかの実施形態では、１つ又は複数のカーゴ分子はオリゴマー化合物である。本明細書で使用される場合、「オリゴマー化合物」は、約１０〜５０（例えば、１０〜４８、１０〜４６、１０〜４４、１０〜４２、１０〜４０、１０〜３８、１０〜３６、１０〜３４、１０〜３２、１０〜３０、１０〜２８、１０〜２６、１０〜２４、１０〜２２、１０〜２０、１０〜１８、１０〜１６、１０〜１４、１０〜１２、１２〜５０、１２〜４８、１２〜４６、１２〜４４、１２〜４２、１２〜４０、１２〜３８、１２〜３６、１２〜３４、１２〜３２、１２〜３０、１２〜２８、１２〜２６、１２〜２４、１２〜２２、１２〜２０、１２〜１８、１２〜１６、１２〜１４、１４〜５０、１４〜４８、１４〜４６、１４〜４４、１４〜４２、１４〜４０、１４〜３８、１４〜３６、１４〜３４、１４〜３２、１４〜３０、１４〜２８、１４〜２６、１４〜２４、１４〜２２、１４〜２０、１４〜１８、１４〜１６、１６〜５０、１６〜４８、１６〜４６、１６〜４４、１６〜４２、１６〜４０、１６〜３８、１６〜３６、１６〜３４、１６〜３２、１６〜３０、１６〜２８、１６〜２６、１６〜２４、１６〜２２、１６〜２０、１６〜１８、１８〜５０、１８〜４８、１８〜４６、１８〜４４、１８〜４２、１８〜４０、１８〜３８、１８〜３６、１８〜３４、１８〜３２、１８〜３０、１８〜２８、１８〜２６、１８〜２４、１８〜２２、１８〜２０、２０〜５０、２０〜４８、２０〜４６、２０〜４４、２０〜４２、２０〜４０、２０〜３８、２０〜３６、２０〜３４、２０〜３２、２０〜３０、２０〜２８、２０〜２６、２０〜２４、２０〜２２、２２〜５０、２２〜４８、２２〜４６、２２〜４４、２２〜４２、２２〜４０、２２〜３８、２２〜３６、２２〜３４、２２〜３２、２２〜３０、２２〜２８、２２〜２６、２２〜２４、２４〜５０、２４〜４８、２４〜４６、２４〜４４、２４〜４２、２４〜４０、２４〜３８、２４〜３６、２４〜３４、２４〜３２、２４〜３０、２４〜２８、２４〜２６、２６〜５０、２６〜４８、２６〜４６、２６〜４４、２６〜４２、２６〜４０、２６〜３８、２６〜３６、２６〜３４、２６〜３２、２６〜３０、２６〜２８、２８〜５０、２８〜４８、２８〜４６、２８〜４４、２８〜４２、２８〜４０、２８〜３８、２８〜３６、２８〜３４、２８〜３２、２８〜３０、３０〜５０、３０〜４８、３０〜４６、３０〜４４、３０〜４２、３０〜４０、３０〜３８、３０〜３６、３０〜３４、３０〜３２、３２〜５０、３２〜４８、３２〜４６、３２〜４４、３２〜４２、３２〜４０、３２〜３８、３２〜３６、３２〜３４、３４〜５０、３４〜４８、３４〜４６、３４〜４４、３４〜４２、３４〜４０、３４〜３８、３４〜３６、３６〜５０、３６〜４８、３６〜４６、３６〜４４、３６〜４２、３６〜４０、３６〜３８、３８〜５０、３８〜４８、３８〜４６、３８〜４４、３８〜４２、３８〜４０、４０〜５０、４０〜４８、４０〜４６、４０〜４４、４０〜４２、４２〜５０、４２〜４８、４２〜４６、４２〜４４、４４〜５０、４４〜４８、４４〜４６、４６〜５０、４６〜４８、又は４８〜５０）個のヌクレオチド又はヌクレオチド塩基対を含むヌクレオチド配列である。いくつかの実施形態では、オリゴマー化合物は、細胞内の発現された標的核酸又は標的遺伝子におけるコード配列に少なくとも部分的に相補的である核酸塩基配列を有する。いくつかの実施形態では、オリゴマー化合物は、遺伝子を発現する細胞への送達の際に、基礎的（underlying）遺伝子の発現を阻害することができ、本明細書では「発現阻害オリゴマー化合物」と呼ばれる。遺伝子発現はインビトロ又はインビボで阻害され得る。
【０１６３】
「オリゴマー化合物」は、これらに限定されるものではないが：オリゴヌクレオチド、一本鎖オリゴヌクレオチド、一本鎖アンチセンスオリゴヌクレオチド、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、二本鎖ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）、マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）、短ヘアピン型ＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）、リボザイム、干渉ＲＮＡ分子、及びダイサー基質が挙げられる。いくつかの実施形態では、オリゴマー化合物は、一本鎖オリゴマー化合物である。いくつかの実施形態では、オリゴマー化合物は、二本鎖オリゴマー化合物である。
【０１６４】
いくつかの実施形態では、１つ又は複数のカーゴ分子は「ＲＮＡｉ剤」であり、本明細書に定義されるＲＮＡｉ剤は、ＲＮＡ又はＲＮＡ様（例えば、化学修飾されたＲＮＡ）オリゴヌクレオチド分子を含む薬剤であり、斯かる分子は、配列特異的に標的ｍＲＮＡのメッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）転写産物の分解又はその翻訳を阻害することができる。本明細書で使用される場合、ＲＮＡｉ剤は、ＲＮＡ干渉メカニズム（すなわち、哺乳動物細胞のＲＮＡ干渉経路機構（ＲＮＡ誘導サイレンシング複合体又はＲＩＳＣ）との相互作用を介してＲＮＡ干渉を誘導する）を介して、あるいは任意の代替メカニズム又は経路によって、動作することができる。その用語が本明細書で使用される場合、ＲＮＡｉ剤は、主にＲＮＡ干渉メカニズムを介して動作すると考えられるが、開示されたＲＮＡｉ剤は、任意の特定の経路又は作用メカニズムに拘束又は限定されない。ＲＮＡｉ剤としては、これらに限定されるものではないが：一本鎖オリゴヌクレオチド、一本鎖アンチセンスオリゴヌクレオチド、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、二本鎖ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）、マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）、短ヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）、及びダイサー基質が挙げられる。
【０１６５】
典型的には、ＲＮＡｉ剤は、少なくとも、第１の配列を含むセンス鎖（パッセンジャー鎖とも呼ばれる）、及び第２の配列を含むアンチセンス鎖（ガイド鎖とも呼ばれる）から構成され得る。ＲＮＡｉ剤のセンス鎖及びアンチセンス鎖の長さはそれぞれ、１６〜４９ヌクレオチド長であり得る。いくつかの実施形態では、ＲＮＡｉ剤のセンス鎖及びアンチセンス鎖は、独立して、１７〜２６ヌクレオチド長である。いくつかの実施形態では、センス鎖及びアンチセンス鎖は、独立して、１９〜２６ヌクレオチド長である。いくつかの実施形態では、センス鎖及びアンチセンス鎖は、独立して、２１〜２６ヌクレオチド長である。いくつかの実施形態では、センス鎖及びアンチセンス鎖は、独立して、２１〜２４ヌクレオチド長である。センス鎖及びアンチセンス鎖は、同じ長さであっても又は異なる長さであってもよい。ＲＮＡｉ剤は、標的遺伝子中の配列に少なくとも部分的に相補的であるアンチセンス鎖配列を含み、標的を発現する細胞への送達の際に、ＲＮＡｉ剤は、インビボ又はインビトロで１つ又は複数の標的遺伝子の発現を阻害し得る。
【０１６６】
オリゴマー化合物は一般に、そしてＲＮＡｉ剤は特に、修飾ヌクレオチド及び／又は１つ又は複数の非ホスホジエステル結合から構成され得る。本明細書で使用される場合、「修飾ヌクレオチド」は、リボヌクレオチド（２’−ヒドロキシルヌクレオチド）以外のヌクレオチドである。いくつかの実施形態では、ヌクレオチドの少なくとも５０％（例えば、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％）が修飾ヌクレオチドである。本明細書で使用される場合、修飾ヌクレオチドとしては、これらに限定されるものではないが、デオキシリボヌクレオチド、ヌクレオチド模倣物、脱塩基ヌクレオチド、２’−修飾ヌクレオチド、３’から３’への結合（逆位）ヌクレオチド、非天然塩基含有ヌクレオチド、架橋ヌクレオチド、ペプチド核酸、２’，３’−セコヌクレオチド模倣物（非ロックド核酸塩基（unlocked nucleobase）類似体、ロックドヌクレオチド（locked nucleotides）、３’−Ｏ−メトキシ（２’ヌクレオシド間結合）ヌクレオチド）、２’−Ｆ−アラビノヌクレオチド、５’−Ｍｅ，２’−フルオロヌクレオチド、モルホリノヌクレオチド、ビニルホスホネートデオキシリボヌクレオチド、ビニルホスホネート含有ヌクレオチド、及びシクロプロピルホスホネート含有ヌクレオチドが挙げられる。２’−修飾ヌクレオチド（すなわち、５員糖環の２’位にヒドロキシル基以外の基を有するヌクレオチド）としては、これらに限定されるものではないが、２’−Ｏ−メチルヌクレオチド、２’−デオキシ−２’−フルオロヌクレオチド、２’−デオキシヌクレオチド、２’−メトキシエチル（２’−Ｏ−２−メトキシルエチル（methoxylethyl））ヌクレオチド、２’−アミノヌクレオチド、及び２’−アルキルヌクレオチドが挙げられる。
【０１６７】
また、オリゴマー化合物、例えばＲＮＡｉ剤の１つ又は複数のヌクレオチドは、非標準結合又は骨格（すなわち、修飾されたヌクレオチド間結合又は修飾骨格）によって連結され得る。修飾されたヌクレオチド間結合は、非リン酸含有共有ヌクレオチド間結合であり得る。修飾されたヌクレオチド間結合又は骨格としては、これらに限定されるものではないが、５’−ホスホロチオエート基、キラルホスホロチオエート、チオホスフェート、ホスホロジチオエート、ホスホトリエステル、アミノアルキル−ホスホトリエステル、アルキルホスホネート（例えば、メチルホスホネート又は３’−アルキレンホスホネート）、キラルホスホネート、ホスフィネート、ホスホルアミデート（例えば、３’−アミノホスホルアミデート、アミノアルキルホスホルアミデート、又はチオノホスホルアミデート（thionophosphoramidate））、チオノアルキル−ホスホネート、チオノアルキルホスホトリエステル、モルホリノ結合、通常の３’−５’結合を有するボラノホスフェート、ボラノホスフェートの２’−５’結合アナログ、あるいは、ヌクレオシド単位の隣接する対が３’−５’から５’−３’に又は２’−５’から５’−２’に連結されている反転した極性を有するボラノホスフェートが挙げられる。
【０１６８】
所与の化合物の全ての位置が均一に修飾されている必要はない。逆に、２つ以上の修飾を、単一のオリゴマー化合物に又はさらにその単一のヌクレオチドに組み込むことができる。
【０１６９】
ＲＮＡｉ剤のセンス鎖及びアンチセンス鎖は、当該技術分野で知られている方法によって合成及び／又は修飾され得る。例えば、アルファ−ＥＮａＣ発現の阻害に関するＲＮＡｉ剤の開示は、例えば国際公開第２００８／１５２１３１号（その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に見出すことができる。ＲＮＡｉ剤に関する追加の開示は、例えば修飾の開示に見出すことができ、例えば、Arrowhead Pharmaceuticals,Inc.の国際特許出願番号ＰＣＴ／ＵＳ２０１７／０４５５４４６（また、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に見出すことができる。
【０１７０】
いくつかの実施形態では、１つ又は複数のカーゴ分子は、薬物動態（ＰＫ）モジュレーターとして作用することができるＰＥＧ部分を含むか、それからなり得る。いくつかの実施形態では、１つ又は複数のカーゴ分子は、ＰＥＧ部分を含むことができ、斯かるＰＥＧ部分は約２０〜９００個のエチレンオキシド（ＣＨ2−ＣＨ2−Ｏ）単位（例えば、２０〜８５０、２０〜８００、２０〜７５０、２０〜７００、２０〜６５０、２０〜６００、２０〜５５０、２０〜５００、２０〜４５０、２０〜４００、２０〜３５０、２０〜３００、２０〜２５０、２０〜２００、２０〜１５０、２０〜１００、２０〜７５、２０〜５０、１００〜８５０、１００〜８００、１００〜７５０、１００〜７００、１００〜６５０、１００〜６００、１００〜５５０、１００〜５００、１００〜４５０、１００〜４００、１００〜３５０、１００〜３００、１００〜２５０、１００〜２００、１００〜１５０、２００〜８５０、２００〜８００、２００〜７５０、２００〜７００、２００〜６５０、２００〜６００、２００〜５５０、２００〜５００、２００〜４５０、２００〜４００、２００〜３５０、２００〜３００、２００〜２５０、２５０〜９００、２５０〜８５０、２５０〜８００、２５０〜７５０、２５０〜７００、２５０〜６５０、２５０〜６００、２５０〜５５０、２５０〜５００、２５０〜４５０、２５０〜４００、２５０〜３５０、２５０〜３００、３００〜９００、３００〜８５０、３００〜８００、３００〜７５０、３００〜７００、３００〜６５０、３００〜６００、３００〜５５０、３００〜５００、３００〜４５０、３００〜４００、３００〜３５０、３５０〜９００、３５０〜８５０、３５０〜８００、３５０〜７５０、３５０〜７００、３５０〜６５０、３５０〜６００、３５０〜５５０、３５０〜５００、３５０〜４５０、３５０〜４００、４００〜９００、４００〜８５０、４００〜８００、４００〜７５０、４００〜７００、４００〜６５０、４００〜６００、４００〜５５０、４００〜５００、４００〜４５０、４５０〜９００、４５０〜８５０、４５０〜８００、４５０〜７５０、４５０〜７００、４５０〜６５０、４５０〜６００、４５０〜５５０、４５０〜５００、５００〜９００、５００〜８５０、５００〜８００、５００〜７５０、５００〜７００、５００〜６５０、５００〜６００、５００〜５５０、５５０〜９００、５５０〜８５０、５５０〜８００、５５０〜７５０、５５０〜７００、５５０〜６５０、５５０〜６００、６００〜９００、６００〜８５０、６００〜８００、６００〜７５０、６００〜７００、６００〜６５０、６５０〜９００、６５０〜８５０、６５０〜８００、６５０〜７５０、６５０〜７００、７００〜９００、７００〜８５０、７００〜８００、７００〜７５０、７５０〜９００、７５０〜８５０、７５０〜８００、８００〜９００、８５０〜９００、又は８５０〜９００個のエチレンオキシド単位）を有する。いくつかの実施形態では、１つ又は複数のカーゴ分子は、約４５５個のエチレンオキシド単位（約２０キロダルトン（ｋＤａ）の分子量）を有するＰＥＧ部分からなる。いくつかの実施形態では、ＰＥＧ部分は、約２キロダルトンの分子量を有する。いく���かの実施形態では、ＰＥＧ部分は、約２０キロダルトンの分子量を有する。いくつかの実施形態では、ＰＥＧ部分は、約４０キロダルトンの分子量を有する。本明細書に記載のＰＥＧ部分は、直鎖又は分岐鎖であり得る。ＰＥＧ部分は、離散的（単分散）又は非離散的（多分散）であり得る。ＰＫ増強カーゴ分子としての使用のためのＰＥＧ部分は、商業的に購入することができる。いくつかの実施形態では、１つ又は複数のカーゴ分子は、ＰＫモジュレーター又はエンハンサーとして作用し得るＰＥＧ部分、並びに異なるカーゴ分子、例えば薬学的に活性な成分又は化合物を含む。
【０１７１】
記載されたαｖβ６インテグリンリガンドは、塩又は溶媒和物を含む。αｖβ６リガンドの溶媒和物は、それらの相互の引力により形成するαｖβ６インテグリンリガンドへの不活性な溶媒分子の添加を意味すると解釈される。溶媒和物は、例えば、一水和物又は二水和物、あるいは例えばメタノール又はエタノールなどのアルコールとの付加化合物である。
【０１７２】
遊離アミノ基又は遊離ヒドロキシル基は、対応する保護基を有するαｖβ６インテグリンリガンドの置換基として提供され得る。
【０１７３】
αｖβ６インテグリンリガンドはまた、例えば誘導体、すなわち、インビトロ又は生物内のいずれかで切断される、例えばアルキル若しくはアシル基、糖又はオリゴペプチドで修飾されたαｖβ６インテグリンリガンドを含む。
【０１７４】
いくつかの実施形態では、本明細書に開示のαｖβ６インテグリンリガンドは、リガンド媒介エンドサイトーシス、飲作用を介して、又は他の手段のいずれかによって、その表面にαｖβ６インテグリンを提示する細胞のサイトゾルへのカーゴ分子の送達を促進する。いくつかの実施形態では、本明細書に開示のαｖβ６インテグリンリガンドは、αｖβ６インテグリンを提示する細胞の原形質膜へのカーゴ分子の送達を促進する。
【０１７５】
いくつかの実施形態では、αｖβ６インテグリンリガンドは、以下によって表される構造を含む：
【０１７６】
【化３】
2019535685.tif 000005
（配列番号１０９）  （式ＩＸ）
【０１７７】
式中、Ｚは、アミン末端キャップ（例えば、本明細書に記載の又は当該技術分野において既知のアミン末端キャップのいずれか）を含み、かつ、Ｒ5及びＲ6は、それぞれアミノ酸Ｘａａ1及びＸａａ2の側鎖である。
【０１７８】
いくつかの実施形態では、αｖβ６インテグリンリガンドは、以下の構造を有し、式中、Ｚ及びＲ1は、本明細書中で式ＩＩＩ及び式ＩＶについて定義した通りであり、かつ、Ｒ7は、ＯＨ、Ｊ、Ｊ−Ｒ1、Ｊ−Ｒｘ−Ｒ2、又はＹ−Ｒｘ−Ｒ3（これらはそれぞれ、本明細書中で式ＩＩＩ及び式ＩＶについて定義した通り）であり得る：
【０１７９】
【化４】
2019535685.tif 000006
（配列番号１１０）  （式Ｘ）
【化５】
2019535685.tif 000007
（配列番号１１１）  （式ＸＩ）
【化６】
2019535685.tif 000008
（配列番号１１２）  （式ＸＩＩ）
【化７】
2019535685.tif 000009
（配列番号１１３）  （式ＸＩＩＩ）
【化８】
2019535685.tif 000010
（配列番号１１４）  （式ＸＩＶ）
【化９】
2019535685.tif 000011
（配列番号１１５）  （式ＸＶ）
【化１０】
2019535685.tif 000012
（配列番号１１６）  （式ＸＶＩ）
【０１８０】
いくつかの実施形態では、記載されたαｖβ６リガンドは、天然に存在するαｖβ６インテグリン結合ペプチドＲＧＤＬＡＴＬＲＱＬ（配列番号１）と比較して増大した血清安定性を示した。本明細書の実施例に示されるように、天然に存在するペプチドＲＧＤＬＡＴＬＲＱＬ（配列番号１）の約５％のみが、マウス血漿中、３７℃で４時間のインキュベーション後に検出可能である。ペプチドＲＧＤＬＡＴＬＲＱＬ（配列番号１）は、マウス血漿中、３７℃で８時間後には検出できなかった。いくつかの実施形態では、本明細書に開示のαｖβ６インテグリンリガンドは、２０％超のリガンドが、マウス血漿中、３７℃で１２時間のインキュベーション後にＨＬＰＣによって検出されるままであることを示している。天然ペプチドから増大した血清安定性を有しているが、記載されたαｖβ６インテグリンリガンドは、αｖβ６インテグリンへの結合（αｖβ６インテグリンに対する親和性）を保持していた。
【０１８１】
医薬組成物
いくつかの実施形態では、本開示は、本明細書に開示のαｖβ６インテグリンリガンドの１つ又は複数を含むか、又はそれからなるか、又はそれから本質的になる医薬組成物を提供する。
【０１８２】
本明細書で使用される場合、「医薬組成物」は、薬理学的有効量の活性医薬成分（ＡＰＩ）、及び任意により１つ又は複数の薬学的に許容される賦形剤を含有する。薬学的に許容される賦形剤（賦形剤）は、薬物送達システムに意図的に含まれる活性医薬成分（ＡＰＩ、治療用製品）以外の物質である。賦形剤は、意図された用量で治療効果を発揮しないか、又は発揮することを意図しない。賦形剤は、ａ）製造中の薬物送達システムの処理を補助し、ｂ）ＡＰＩの安定性、生物学的利用能又は患者の許容性を保護、支持、又は増強し、ｃ）製品同定を補助し、及び／又は、ｄ）保管又は使用中のＡＰＩの送達の全体的な安全性、有効性の任意の他の属性を増強するように作用し得る。薬学的に許容される賦形剤は、不活性物質であってもなくてもよい。
【０１８３】
賦形剤としては、これらに限定されるものではないが：吸収促進剤、粘着防止剤、消泡剤、酸化防止剤、結合剤、緩衝剤、担体、コーティング剤、着色剤、送達促進剤、送達ポリマー、デキストラン、デキストロース、希釈剤、崩壊剤、乳化剤、増量剤、充填剤、香味剤、流動促進剤、保湿剤、潤滑剤、油、ポリマー、保存剤、食塩水、塩、溶媒、糖、懸濁化剤、徐放性マトリックス、甘味料、増粘剤、等張化剤、ビヒクル、撥水剤、及び湿潤剤が挙げられる。
【０１８４】
本明細書に記載の医薬組成物は、医薬組成物に一般的にみられる他の付加的な成分を含むことができる。いくつかの実施形態では、付加的な成分は、薬学的に活性な物質である。薬学的に活性な物質としては、これらに限定されるものではないが：抗掻痒剤、収斂剤、局所麻酔剤、又は抗炎症剤（例えば、抗ヒスタミン薬、ジフェンヒドラミン等）、小分子薬、抗体、抗体フラグメント、アプタマー、及び／又はワクチンが挙げられる。
【０１８５】
医薬組成物はまた、保存剤、可溶化剤、安定化剤、湿潤剤、乳化剤、甘味剤、着色剤、着臭剤、浸透圧を変化させるための塩、緩衝剤、コーティング剤、又は抗酸化剤も含み得る。それらはまた、他の治療上価値のある薬剤を含み得る。
【０１８６】
医薬組成物は、局所治療又は全身治療が望ましいのかに応じて、及び治療されることなる領域に応じて、多くの方法で投与することができる。投与は、当該技術分野で一般的に知られている任意の方法、例えば、これらに限定されるものではないが、局所（例えば、経皮パッチにより）、肺内（例えば、ネブライザー、気管内、鼻腔内によるものを含む粉末又はエアロゾルの吸入又は通気により）、表皮、経皮的、経口又は非経口によって行われ得る。非経口投与としては、これらに限定されるものではないが、静脈内、動脈内、皮下、腹腔内又は筋肉内注射又は注入；皮下（例えば、埋め込み型装置を介して）、頭蓋内、実質内、くも膜下腔内、及び脳室内投与が挙げられる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の医薬組成物は、皮下注射によって投与される。医薬組成物は、例えば錠剤、コーティング錠、糖衣錠、硬又は軟ゼラチンカプセル剤、液剤、乳剤あるいは懸濁剤の形態で、経口投与することができる。投与はまた、直腸に、例えば坐剤を用いて；局所的又は経皮的に、例えば軟膏、クリーム、ゲル、又は溶液を用いて；あるいは非経口的に、例えば注射可能な溶液を用いて行うことができる。
【０１８７】
注射可能な使用に適した医薬組成物は、滅菌水溶液（水溶性の場合）又は分散液、及び滅菌注射用溶液又は分散液の即時調製のための滅菌粉末を含む。静脈内投与の場合、適切な担体は、生理食塩水、静菌水、Cremophor ELTM（BASF、Parsippany、NJ）又はリン酸緩衝食塩水を含む。それは、製造及び保管の条件下で安定であるべきであり、かつ殺菌及び真菌のような微生物の汚染作用から保護されるべきである。担体は、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、及び液体ポリエチレングリコール）を含む溶媒又は分散媒体、及びそれらの好適な混合物であり得る。適切な流動性は、例えば、レシチンのようなコーティングの使用により、分散液の場合必要とされる粒子サイズの維持により、及び界面活性剤の使用によって維持され得る。多くの場合、組成物中に等張剤、例えば、糖、ポリアルコール、例えばマンニトール、ソルビトール、及び塩化ナトリウムを含むことが好ましいであろう。注射用組成物の長期吸収は、組成物中に吸収を遅延させる薬剤、例えば、モノステアリン酸アルミニウム及びゼラチンを含めることによってもたらされる。
【０１８８】
滅菌注射用溶液は、上記に列挙した成分の１つ又は組み合わせと共に、適切な溶媒中に必要量の活性化合物を組み入れることによって、必要に応じて、続く濾過滅菌によって、調製され得る。一般に、分散液は、塩基性分散媒体及び上記に列挙したものからの必要な他の成分を含む滅菌ビヒクル中に活性化合物を組み入れることによって調製される。滅菌注射用溶液の調製のための滅菌粉末の場合、調製方法は、真空乾燥及び凍結乾燥を含み、これにより、先に滅菌濾過したその溶液から、活性成分に加えて任意のさらなる所望の成分の粉末を得る。
【０１８９】
関節内投与に適した製剤は、本明細書に記載のリガンドのいずれかの滅菌水性調製物の形態であり得、これは、微結晶形態、例えば水性微結晶懸濁液の形態であり得る。リポソーム製剤又は生分解性ポリマー系はまた、関節内及び眼科（ophthalmic）投与の両方のための本明細書に記載のリガンドのいずれかを提示するために使用することができる。
【０１９０】
活性化合物は、例えば、インプラント及びマイクロカプセル化送達システムを含む制御放出製剤のように、身体からの急速な排泄から化合物を保護することになる担体と共に調製され得る。生分解性、成体適合性ポリマー、例えばエチレンビニルアセテート、ポリ無水物、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオルトエステル、及びポリ乳酸を使用することができる。そのような製剤の調製方法は、当業者に明らかであろう。リポソーム懸濁液も薬学的に許容される担体として使用することができる。これらは、例えば米国特許第４，５２２，８１１号に記載されているように、当業者に知られている方法に従って調製することができる。
【０１９１】
医薬組成物は、医薬組成物に一般的に見られる他の付加的な成分を含み得る。そのような付加的な成分としては、これらに限定されるものではないが：鎮痒剤、収斂剤、局所麻酔剤、又は抗炎症剤（例えば、抗ヒスタミン薬、ジフェンヒドラミン等）が挙げられる。本明細書で使用される場合、「薬理学的有効量」「治療上有効量」又は単に「有効量」とは、薬理学的、治療的又は予防的結果をもたらすための薬学的に活性な薬剤の量を指す。
【０１９２】
αｖβ６リガンドを含有する医薬もまた、そのような医薬の製造方法と同様に、本発明の目的であり、斯かる方法は、αｖβ６リガンドを含む１つ又は複数の化合物、及び所望であれば１つ又は複数の他の治療上価値のある物質を、ヒト対象への投与に適した剤形にすることを含む。
【０１９３】
細胞、組織、及び非ヒト生物
本明細書に記載のαｖβ６リガンドの少なくとも１つを含む細胞、組織、及び非ヒト生物が企図される。細胞、組織、又は非ヒト生物は、当該技術分野で利用可能な任意の手段によって、細胞、組織、又は非ヒト生物にαｖβ６リガンドを送達することによって作製される。いくつかの実施形態では、細胞は、ヒト細胞を含むが、これに限定されない哺乳動物細胞である。
【０１９４】
本明細書に記載されたαｖβ６リガンド、及び開示されたαｖβ６リガンドを含有する医薬組成物は、キット、容器、パック、又はディスペンサーに包装され又は含まれ得る。αｖβ６リガンド及びαｖβ６リガンドを含有する医薬組成物は、予め充填されたシリンジ又はバイアルに包装されてもよい。
【０１９５】
上記で提供された実施形態及び項目は、これより、以下の比限定的な例によって説明される。
【実施例】
【０１９６】
実施例
実施例１．血清安定性試験のためのαｖβ６リガンドの合成
Chem-Matrix Rink Amide樹脂をフリット（fritted）ポリプロピレンシリンジに入れ、使用前に３０分間ＤＣＭ中で攪拌した。以下の標準的な固相ペプチド合成条件を使用した。１ミリモルの樹脂当たり４０ｍｌのピペリジン：ＤＭＦ溶液（２０：８０ｖ／ｖ）を２０分間浸漬することによって、Ｆｍｏｃ脱保護を行った。樹脂を、４モル当量のＦｍｏｃ−アミノ酸、４モル当量のＨＢＴＵ、及び１０モル当量のＤＭＦ中のＦｍｏｃ−アミノ酸の０．１Ｍ濃度でのＤＭＦ中のジイソプロピルエチルアミンで、４０分間浸漬することによって、アミドカップリングを行った。Ｆｍｏｃ−Ｄａｐ（ＤＮＰ）−ＯＨを使用して、ＤＮＰ発色団を樹脂に結合させ、ペプチドをＤａｐ  α−アミンから合成した。樹脂からの切断は、トリフルオロ酢酸溶液中で２時間行った。溶媒を、加圧空気（pressurized air）を介して元の体積の１０％に減らし、Ｅｔ2Ｏを用いて沈殿させた。ＴＦＡを介した微小切断及び分析用ＨＰＬＣ−ＭＳにより生成物の同一性を確認した。次に、約１ｍｌ／分の直線勾配で溶出するSupelco「Discovery BIO」ワイドポアＣ１８カラム（２５ｃｍ×２１ｍｍ、１０μｍ粒子）を用いて分取スケールShimadzu HPLCで、ペプチドを＞９５％の純度に精製した。１０〜９０％のＢ溶媒を用いてWaters XBridge BEH130 C18カラム（２５０ｍｍ×６．６ｍｍ、５μｍ粒子）を備えた分析用Shimadzu HPLCを用いて、５０分かけて純度を評価した。Ａ溶媒は、Ｈ2Ｏ：Ｆ3ＣＣＯ2Ｈ  １００：０．１ｖ／ｖを表し、Ｂ溶媒は、ＣＨ3ＣＮ：Ｆ3ＣＣＯ2Ｈ  １００：０．１ｖ／ｖを表す。
【０１９７】
【化１１】
2019535685.tif 000013
Ｆｍｏｃ−Ｄａｐ（ＤＮＰ）−ＯＨ
【０１９８】
実施例２．αｖβ６リガンドの血清安定性
マウス血清中でαｖβ６リガンドをインキュベートし、様々な時点で未消化ペプチドのパーセンテージを分析することによって、αｖβ６リガンドの血清安定性を試験した。未消化αｖβ６リガンドを分析用ＨＰＬＣによって決定した。αｖβ６リガンドの個々のストック溶液を、＞１０ｍｇ／ｍｌ濃度でＨ2Ｏにペプチドを溶解させることによって調製した。αｖβ６リガンドの濃度を、ＵＶ／Ｖｉｓ吸収を用いて評価した（ＤＮＰ：λ＝３６５，ε＝１７３００Ｍ-1Ｃｍ-1）。αｖβ６リガンドを、９０％マウス血漿中で１ｍｇ／ｍｌリガンドに希釈し、３７℃のインキュベーターに入れた。所与の時点（４、８、１２、及び２４時間）で、試料を、５０分かけて１０〜９０％のＢ溶媒を用いるWaters XBridge BEH130 C18カラム（２５０ｍｍ×６．６ｍｍ、５μｍ粒子）を備えた分析用ＨＰＬＣ（Shimadzu HPLC）に注入した。Ａ溶媒は、Ｈ2Ｏ：Ｆ3ＣＣＯ2Ｈ  １００：０．１ｖ／ｖを表し；Ｂ溶媒は、ＣＨ3ＣＮ：Ｆ3ＣＣＯ2Ｈ  １００：０．１ｖ／ｖを表す。
【０１９９】
血清インキュベーション後に残存するリガンドのパーセントを、以下の式を用いて計算した：
【０２００】
【数１】
2019535685.tif 000014
【０２０１】
式中、ｔ＝０における面積は、血漿でリガンドを希釈した直後のリガンドのピーク下面積であり、ｔ＝ｘにおける面積は、時間＝ｘにおけるペプチドのピーク下面積であった。
【０２０２】
各ペプチドは、カーゴ分子ＰＥＧ8−Ｄａｐ（ＤＮＰ）に共有結合していた。次に、ＰＥＧ8−Ｄａｐ（ＤＮＰ）を使用して、分析を容易にした。
【０２０３】
【化１２】
2019535685.tif 000015
【０２０４】
ペプチド誘導体は、カーゴ分子ＰＥＧ8−Ｄａｐ（ＤＮＰ）に連結され、３７℃で４、８、１２、又は２４時間、マウス血清中でインキュベートされた。ペプチド誘導体の安定性をＨＰＬＣによって測定した。データを以下の表１に示す（アミン末端キャップ及びＸａａ1Ｘａａ2は下線が引かれている）：
【０２０５】
【表１】
2019535685.tif 000016
【０２０６】
ここで示されるように、アミン末端キャップ（Ｚ）の存在は、増大した血清安定性を提供することができる。さらに、ここで示されるように、本明細書に開示される式中のＸａａ1、Ｘａａ2及び／又はＪ（例えば、Ｘａａ3及びＸａａ4）における非標準アミノ酸の存在はまた、配列番号１の天然ペプチドと比較して増大した血清安定性を提供する。
【０２０７】
実施例３．αｖβ６リガンドのインテグリン結合
Ａ．αｖβ６リガンド−カーゴ分子コンジュゲーション
各αｖβ６リガンドは、可逆的に修飾された１１７０−１００Ｂポリマーカーゴ分子に結合された。１１７０−１００Ｂポリマーカーゴ分子（約４５０００のＭＷを有する５６：４４エトキシエチルアミンアクリレート：プロピルアクリレートコポリマー）をＣｙ５（ＮＨＳリンカー）で標識し、５０ｍＭのＨＥＰＥＳ  ｐＨ９．０緩衝液中で１時間室温で、アルデヒド−ＰＥＧ24−ＡＣｉｔと、２：１（ポリマー：アルデヒド−ＰＥＧ24−ＡＣｉｔ）の重量比で合わせて、（アルデヒド−ＰＥＧ24−ＡＣｉｔ）n−１１７０−１００Ｂ（式中、ｎは、０を超える整数である）を形成した。典型的には、ｎは約１０であった。
【０２０８】
【化１３】
2019535685.tif 000017
アルデヒド−ＰＥＧ24−ＡＣｉｔ（ｎ＝２４）
【０２０９】
次に、アルデヒド−ＰＥＧ24−ＡＣｉｔ−修飾ポリマーを、５０ｍＭのＨＥＰＥＳ、ｐＨ  ９．０緩衝液中で１時間室温で、ＰＥＧ12−ＡＣｉｔと１：８（ポリマー：ＰＥＧ12−ＡＣｉｔ）の重量比で反応させて、（アルデヒド−ＰＥＧ24−ＡＣｉｔ）n−１１７０−１００Ｂ−（ＣｉｔＡ−ＰＥＧ12）m（式中、ｍは、０を超える整数である）を形成した。
【０２１０】
【化１４】
2019535685.tif 000018
ＰＥＧ１２−ＡＣｉｔ（ｎ＝１１）
【０２１１】
次に、修飾ポリマーをsephadex G-50スピンカラムを用いて精製し、濃度を決定した：
【０２１２】
【数２】
2019535685.tif 000019
【０２１３】
各αｖβ６リガンドは、ＨｙＮｉｃで修飾されて、カーゴ分子へのコンジュゲーションを促進した。精製ポリマーを、５０ｍＭのＮａＯＡＣ−ＨＯＡｃ、ｐＨ５．０緩衝液中で、室温で一晩、αｖβ６リガンド−（ＰＥＧ）８−Ｋ−ＨｙＮｉｃと、１：１．９（ポリマー：αｖβ６リガンド）の重量比で合わせて、αｖβ６リガンド−ポリマーコンジュゲートを形成した。αｖβ６リガンド−ポリマーコンジュゲートを、sephadex G-50スピンカラムを用いて精製した。
【０２１４】
【化１５】
2019535685.tif 000020
（ＰＥＧ）8−Ｋ−ＨｙＮｉｃ
【化１６】
2019535685.tif 000021
Αｖβ６リガンド−（ＰＥＧ）8−Ｋ−ＨｙＮｉｃ
【０２１５】
ビス−アリールヒドラゾン結合について２．９×１０1Ｍ-1ｃｍ-1の吸光係数（extinction coefficient）を用いて３５４ｎｍでのαｖβ６−ポリマーコンジュゲートの吸光度を測定することによって、コンジュゲーション効率を定量した。
【０２１６】
【数３】
2019535685.tif 000022
【０２１７】
αｖβ６−ポリマーコンジュゲートをさらなる分析のために所望の濃度に等張グルコース溶液で希釈した。
【０２１８】
Ｂ．αｖβ６リガンド結合（フローサイトメトリー分析）
αｖβ６リガンドのαｖβ６インテグリンへの結合の特異性を評価するために、各αｖβ６リガンド又は陰性対照ペプチドを、Ｃｙ５−標識ポリマーに（上記のように）コンジュゲートし、細胞への結合について評価した。ＨＵＨ７（ヒト幹細胞）及びＳＫＯＶ３（ヒト卵巣癌）細胞は、非常に低いαｖβ６細胞表面発現を示すと決定され、陰性対照細胞株として用いた。Ｈ２００９（ヒト肺上皮腺癌）及びＣＡＰＡＮ−２（ヒト膵臓腺癌）細胞は、αｖβ６陽性対照細胞株として機能した。細胞を、Accutaseを用いて培養フラスコから分離し、ＰＢＳで洗浄し、５ｍｌのポリスチレン丸底チューブ内の２００μｌの完全培地（添加物及びウシ胎児血清を含む培養培地）中に２００，０００細胞で播種した。αｖβ６リガンド−ポリマーコンジュゲート又はリガンドなしのポリマーコンジュゲートを、５μｇ／ｍｌ（ポリマー−Ｃｙ５濃度）で細胞に添加し、混合し、３７℃で３時間インキュベートした。３７℃でのインキュベーションは、リガンド／受容体相互作用を促進し、斯かる相互作用は、細胞外細胞表面への静的結合、及び／又は内在化されたリガンド／受容体複合体をもたらし得る。混合物を、１時間間隔で再懸濁した。３時間のインキュベーション後に、細胞を、４ｍｌの冷却緩衝液（ＰＢＳ−２％ＦＣＳ）で２回洗浄し、生細胞／死細胞ゲーティングのための１０μΜのＳＹＴＯＸ青色染色を含む２００μｌの緩衝液で再懸濁した。試料を、紫色（４０５ｎｍ）、青色（４８８ｎｍ）及び赤色（６３３ｎｍ）レーザーを備えたBD Biosciences Canto IIサイトメーターで分析した。
【０２１９】
生細胞が最初に、紫色レーザーを用いてＣ検出器でＳＹＴＯＸ青色陰性集団としてゲートされた。これら生細胞を、次に、Ｃｙ５フルオロフォアの平均蛍光強度（Mean Fluorescence Intensity）（ＭＦＩ）として赤色レーザーを用いてコンジュゲート結合／取り込みについて評価した。データ解析はFlowJo v10.1ソフトウェアを用いて行った。各αｖβ６リガンドについての特定のMFI Ratio（ｓＭＦＩｒ）を、以下の式によって決定した：
【０２２０】
【数４】
2019535685.tif 000023
【０２２１】
以下の表２に示されるように、ペプチドＡｃ−ＲＧＤＬＡＡｂｕＬＣｉｔＡｉｂＬのみが、ＳＫＯＶ３細胞への適度な結合を示した。このペプチドは、ＨＵＨ７細胞への有意な結合を示さなかった。したがって、試験されたペプチドのいずれも特異的結合を示さなかった。ＲＧＤを含まない陰性対照ペプチドＡｃＲＧαＭｅＤＬＡＡｂｕＬＣｉｔＡｉｂ、ＡｃＲＧＤαＭｅＬＡＡｂｕＬＣｉｔＡｉｂ、ＲＧＥＬＡＴＬＲＱＬ、ＡｃＣｉｔＧＤＬＡＴＬＣｉｔＱＬ、ＡｃＫ（Ｍｅ）2ＧＤＬＡＴＬＲＱＬ、及びＡｃＲ（Ｍｅ）2ＧＤＬＡＴＬＲＱＬは、Ｈ２００９又はＣＡＰＡＮ−２のαｖβ６インテグリン陽性対照細胞への有意な結合を示さず、αｖβ６インテグリンに対する親和性の欠如を示した。他のペプチドのほとんどが、Ｈ２００９又はＣＡＰＡＮ−２細胞への結合を示し、斯かる結合は、天然ペプチドＲＧＤＬＡＴＬＲＱＬ及びＲＧＤＬＡＴＬと同等又はそれ以上であり、αｖβ６インテグリンへの良好な親和性を示した。
【０２２２】
【表２−１】
2019535685.tif 000024
【表２−２】
2019535685.tif 000025
【表２−３】
2019535685.tif 000026
【０２２３】
前記表において同定された非標準アミノ酸及び他の化学基の特定の略称は、以下の化学構造を有する：
【０２２４】
【化１７】
2019535685.tif 000027
Ａｉｂは、α−アミノ−イソ酪酸である
【化１８】
2019535685.tif 000028
Ｃｉｔは、シトルリンである
【化１９】
2019535685.tif 000029
Ａｂｕは、Ｌ−α−アミノ−酪酸である
【化２０】
2019535685.tif 000030
αＭｅＤは、α−メチルアスパルテートである
【化２１】
2019535685.tif 000031
αＭｅＬは、α−メチルロイシンである
【化２２】
2019535685.tif 000032
Ｃｈａは、β−シクロヘキシルアラニンである
【化２３】
2019535685.tif 000033
Ｎｖａは、ノルバリンである
【化２４】
2019535685.tif 000034
Ｋ（Ｍｅ）2は、Ｎ，Ｎ−ε−ジメチルリシンである
【化２５】
2019535685.tif 000035
Ｒ（Ｍｅ）2は、ジメチルアルギニンである
【化２６】
2019535685.tif 000036
Ｄａｐ（Ａｃ）
【化２７】
2019535685.tif 000037
Ｄａｐ（グアニジノ）
【化２８】
2019535685.tif 000038
ＮMeＧは、Ｎ−メチルグリシンである
【化２９】
2019535685.tif 000039
ＮMeＬは、Ｎ−メチルロイシンである
【化３０】
2019535685.tif 000040
デス−アミノ−Ｒは、デス−アミノ−アルギニンである
【化３１】
2019535685.tif 000041
β３−ｈＡは、β−ホモ−アラニンである
【化３２】
2019535685.tif 000042
メタ−グアニジノ−安息香酸（benzoic）
【化３３】
2019535685.tif 000043
グアニジニル−Ｒは、グアニジニル−アルギニンである
【化３４】
2019535685.tif 000044
ＭｅＯ−ＰＥＧ８
【０２２５】
実施例４．ラットにおけるαｖβ６インテグリンリガンドにコンジュゲートしたアルファ−ＥＮａＣを標的とするＲＮＡｉ剤のインビボ気管内投与
それぞれ２６ヌクレオチド未満のセンス鎖及びアンチセンス鎖を含んだ二本鎖オリゴヌクレオチド組成物（すなわち、一種のＲＮＡｉ剤）を、当該技術分野で知られており、オリゴヌクレオチド合成で一般に使用されている一般的な手順に従って、固相上でのホスホロアミダイト技術によって合成した。本明細書におけるＲＮＡｉ剤の合成は、市販の制御細孔ガラス製の固体支持体（ＣＰＧ、５００Å又は６００Å、Prime Synthesis、アストン、ＰＡ、ＵＳＡから入手）上で、合成のためにスケールに応じてMerMade96E（登録商標）（Bioautomation）、MerMadel2（登録商標）（Bioautomation）、又はOP Pilot 100（GE Healthcare）のいずれかを用いて行った。全てのＲＮＡ及び２’−修飾ＲＮＡホスホロアミダイトを商業的に購入した（Thermo Fisher Scientific（ミルウォーキー、ＷＩ、ＵＳＡ）。切断及び脱保護のために、固相合成の終了後、乾燥した固体支持体を、水中の４０重量％のメチルアミンと２８％水酸化アンモニウム溶液（Aldrich）との１：１容量溶液で１．５時間３０℃で処理した。溶液を蒸発させ、固体残渣を水で再構成した。精製のために、粗オリゴマーを、TSKgel SuperQ-5PW 13μmカラム及びShimadzu LC-8システムを用いて陰イオン交換ＨＰＬＣによって精製した。緩衝液Ａは、２０ｍＭのＴｒｉｓ、５ｍＭのＥＤＴＡ、ｐＨ９．０であり、かつ２０％のアセトニトリルを含んだ。緩衝液Ｂは、１．５Ｍの塩化ナトリウムの添加を有する緩衝液Ａと同じであった。２６０ｎｍでのＵＶトレースを記録した。適切な画分をプールし、次に、１００ｍＭの重炭素アンモニウム、ｐＨ６．７及び２０％アセトニトリルのランニングバッファーで、Sephadex G-25 fineを充填したGE Healthcare XK 26/40カラムを用いてサイズ排除ＨＰＬＣにかけた。アニーリングのために、１×ＰＢＳ（リン酸緩衝生理食塩水、ｌ×、Corning, Cellgro）中で等モルＲＮＡ溶液（センス及びアンチセンス）を合わせることによって相補鎖を混合して、ＲＮＡｉ剤を形成した。いくつかのＲＮＡｉ剤を凍結乾燥し、−１５〜−２５℃で保管した。１×ＰＢＳ中でＵＶ−Ｖｉｓ分光計で溶液の吸光度を測定することによって、二本鎖濃度を測定した。次に、２６０ｎｍでの溶液吸光度に、変換係数及び希釈係数を掛けて、二本鎖濃度を決定した。特に明記しない限り、全ての変換係数は、０．０３７ｍｇ／（ｍＬ・ｃｍ）であった。いくつかの実験について、変換係数は、実験的に決定された吸光係数から計算された。
【０２２６】
実施例４のために合成されたＲＮＡｉ剤はアンチセンス鎖を含み、斯かるアンチセンス鎖は、アミロライド感受性上皮ナトリウムチャネルのアルファサブユニット（一般にアルファ−ＥＮａＣ又はＳＣＮＮ１Ａと呼ばれる）を発現する遺伝子に少なくとも部分的に相補的な核酸塩基配列を有する。アルファ−ＥＮａＣのＲＮＡｉ剤は、配列特異的にアルファ−ＥＮａＣのメッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）転写産物の翻訳を分解又は阻害し、それによってアルファ−ＥＮａＣ遺伝子の発現を阻害することができるように設計された。ＲＮＡｉ剤は、修飾ヌクレオチド及び２つ以上の非ホスホジエステル結合から構成された。
【０２２７】
試験１日目及び２日目に、雄のSprague-Dawleyラットに、マイクロスプレー装置（Perm Century、フィラデルフィア、ＰＡ）を介して２００マイクロリットルの用量を気管内投与し、これは以下の投与群を含んだ：（１）水ビヒクル中の５％デキストロース（Ｄ５Ｗ）；（２）５％デキストロース中に配合した、１．５ｍｇ／ｋｇのリガンドを含まないアルファ−ＥＮａＣ ＲＮＡｉ剤（「裸の（ｎａｋｅｄ）ＲＮＡｉ剤」）；（３）５％デキストロース中に配合した、１．５ｍｇ／ｋｇの図３のαｖβ６インテグリンリガンドにコンジュゲートしたアルファ−ＥＮａＣ ＲＮＡｉ剤（センス鎖の５´末端でコンジュゲートしたαｖβ６インテグリンリガンドを有する）；あるいは（４）陰性対照リガンドとして機能するための、１．５ｍｇ／ｋｇの構造Ａｃ−ＲＧＥＬＡＡｂｕＬ−ＣｉｔＡｉｂＬ（配列番号１３２）を有する不活性化αｖβ６インテグリンリガンドにコンジュゲートしたアルファ−ＥＮａＣ ＲＮＡｉ剤。「ＲＧＤ」モチーフ中のアスパラギン酸（Ｄ）は、リガンドがアルファ−ｖインテグリン受容体に結合するために必要であると考えられており、グルタミン酸（Ｅ）の置換を有するリガンドは、有意に減少したａｖインテグリン結合親和性を有する。同じアルファ−ＥＮａＣ ＲＮＡｉ剤を群２、３、及び４で使用した。
【０２２８】
使用されたαｖβ６インテグリンリガンドは、樹脂切断が、ＴＦＡ切断に代えて、３０分〜１時間ＤＣＭ（ジクロロメタン）中の２０％ＨＦＩＰ（ヘキサフルオロイソプロパノール）を用いて達成されたことを除いて、当該技術分野で良く知られいる本明細書の実施例１に記載されたものと同様の一般的なペプチド合成技術を用いて、ＴＦＰエステル（図１に示されるように）として合成された。ＲＮＡｉ剤のセンス鎖の５´末端を、Ｃ6アミン（−ＮＨ２）で修飾した。次に、室温で、ＤＭＳＯ：水が９：１中の３当量のＴＦＰ−エステルαｖβ６インテグリンリガンド、及び塩基として過剰料のトリエチルアミンを用いて、ＴＦＰ−エステルαｖβ６インテグリンリガンドを、ＲＮＡｉ剤の修飾センス鎖の５´末端に位置するアミノ基にコンジュゲートした。溶液中にＡＣＮを添加し、生成物を沈殿させ、高真空下で乾燥させることによって、精製を行った。
【０２２９】
１群当たり４匹のラットに投薬した。ラットを試験５日目に安楽死させ、全ＲＮＡを、両肺から収集及びホモジナイゼーション後に単離した。アルファ−ＥＮａＣのｍＲＮＡ存在量を、プローブベースの定量的ＰＣＲによって定量化し、ＧＡＰＤＨ発現に対して正規化し、ビヒクル対照群の割合として表した（幾何平均、＋／−９５％信頼区間）。
【０２３０】
【表３】
2019535685.tif 000045
【０２３１】
上記表３に示されるように、アルファ−ＥＮａＣ ＲＮＡｉ剤にコンジュゲートした図３のαｖβ６リガンドは、インビボで、裸のＲＮＡｉ剤（４６％のノックダウン）及びアルファ−ＥＮａＣ肺標的のＲＧＥ−対照リガンドにコンジュゲートしたＲＮＡｉ剤（５７％のノックダウン）と比較して、アルファ−ＥＮａＣ  ｍＲＮＡの増大した相対的ノックダウン（約７８％のノックダウン）を示した。
【０２３２】
実施例５．ラットにおける、Αｖβ６インテグリンリガンドにコンジュゲートしたアルファ−ＥＮａＣを標的とするＲＮＡｉ剤のインビボ気管内投与
実施例４に記載したものと同様のアルファ−ＥＮａＣ ＲＮＡｉ剤を、同じ合成手順に従って合成した。試験１日目及び２日目に、雄のSprague-Dawleyラットに、マイクロスプレー装置（Penn Century、フィラデルフィア、ＰＡ）を介して２００マイクロリットルの用量を投与し、これは以下の投与群を含んだ：（１）Ｄ５Ｗビヒクル；（２）Ｄ５Ｗ中に配合した、１．５ｍｇ／ｋｇのリガンドを含まないＲＮＡｉ剤（「裸のＲＮＡｉ剤」）；（３）Ｄ５Ｗ中に配合した、１．５ｍｇ／ｋｇの図３のαｖβ６インテグリンリガンドにコンジュゲートしたアルファ−ＥＮａＣ ＲＮＡｉ剤；あるいは（４）１．５ｍｇ／ｋｇの、図１１に示された構造を有する三座αｖβ６インテグリンリガンドにコンジュゲートしたアルファ−ＥＮａＣ ＲＮＡｉ剤。ＲＮＡｉ剤は、アルファ−ＥＮａＣ遺伝子の発現を阻害するように設計された。同じアルファ−ＥＮａＣ ＲＮＡｉ剤を、群２、３、及び４で使用した。ＲＮＡｉ剤のセンス鎖の５´末端を、実施例４におけるようにＣ6アミン（−ＮＨ２）で修飾した。図３のαｖβ６インテグリンリガンドを、実施例４の同じ手順に従って合成し、アルファ−ＥＮａＣ ＲＮＡｉ剤にコンジュゲートした。図１１に示されたａｖｂ６リガンドにコンジュゲートする場合、塩基としてトリエチルアミンを用いてセンス鎖の５’アミン官能化末端にコンジュゲートすることによって、アルファ−ＥＮａＣ−ＲＮＡｉ剤を最初にＤＢＣＯ−ＰＥＧ５−ＮＨＳエステルで官能化した。三座ａｖｂ６インテグリンリガンドを、図１０に示されるようにＰＥＧ−アジド反応基を有するように合成した。リン酸緩衝生理食塩水／アセトニトリル溶媒系での沈殿後に、三座ａｖｂ６インテグリンリガンドを、銅を含まない環状付加を用いてＲＮＡｉ剤にコンジュゲートした。
【０２３３】
１群当たり５匹のラットに投薬した。ラットを試験５日目に安楽死させ、全ＲＮＡを、両肺から収集及びホモジナイゼーション後に単離した。標的のｍＲＮＡ存在量を、プローブベースの定量的ＰＣＲによって定量化し、ＧＡＰＤＨ発現に対して正規化し、ビヒクル対照群の割合として表した（幾何平均、＋／−９５％信頼区間）。
【０２３４】
【表４】
2019535685.tif 000046
【０２３５】
上記表４に示されるように、図１１に示されるように３つのαｖβ６リガンド（「三座」リガンドを形成する）を、アルファ−ＥＮａＣ ＲＮＡｉ剤にコンジュゲートすることにより、インビボで、１つのαｖβ６リガンドにコンジュゲートしたＲＮＡｉ剤（図３）（７１％））及び裸のＲＮＡｉ剤（６６％＞）と比較して、増大した相対的ノックダウン（約７９％）を示した。
【０２３６】
実施例６．ラットにおける、Αｖβ６インテグリンリガンドにコンジュゲートしたアルファ−ＥＮａＣを標的とするＲＮＡｉ剤のインビボ気管内投与
実施例４に記載したものと同様のアルファ−ＥＮａＣ ＲＮＡｉ剤を、同じ合成手順に従って合成した。試験１日目及び２日目に、雄のSprague-Dawleyラットに、マイクロスプレー装置（Perm Century、フィラデルフィア、ＰＡ）を介して２００マイクロリットルの用量を投与し、これは以下の投与群を含んだ：（１）Ｄ５Ｗビヒクル；（２）Ｄ５Ｗ中に配合した、３ｍｇ／ｋｇのリガンドを含まないＲＮＡｉ剤（「裸のＲＮＡｉ剤」）；あるいは（３）Ｄ５Ｗ中に配合した、３．０ｍｇ／ｋｇの図３のαｖβ６インテグリンリガンドにコンジュゲートしたアルファ−ＥＮａＣ ＲＮＡｉ剤。アルファ−ＥＮａＣ ＲＮＡｉ剤及びαｖβ６インテグリンリガンドを、実施例４に記載した同じ手順に従って合成及びコンジュゲートした。
【０２３７】
１群当たり５匹のラットに投薬した。ラットを試験５日目に安楽死させ、全ＲＮＡを、両肺から収集及びホモジナイゼーション後に単離した。標的のｍＲＮＡ存在量を、プローブベースの定量的ＰＣＲによって定量化し、ＧＡＰＤＨ発現に対して正規化し、ビヒクル対照群の割合として表した（幾何平均、＋／−９５％信頼区間）。
【０２３８】
【表５】
2019535685.tif 000047
【０２３９】
上記表５に示されるように、ＲＮＡｉ剤にコンジュゲートした図３のαｖβ６リガンドは、インビボで、肺標的の裸のＲＮＡｉ剤（約５１％のノックダウン）と比較して、増大した相対的ノックダウン（約８３％のノックダウン）を示した。
【０２４０】
実施例７．ラットにおける、αｖβ６インテグリンリガンドにコンジュゲートした肺で発現される遺伝子を標的とするＲＮＡｉ剤のインビボ口腔咽頭吸引
実施例４に記載したものと同様のアルファ−ＥＮａＣ ＲＮＡｉ剤を、同じ合成手順に従って合成した。試験１日目に、雄のSprague-Dawleyラットに、２００マイクロリットルの用量を口腔咽頭吸引により投与し、これは以下の投与群を含んだ：（１）等張生理食塩水；（２）等張生理食塩水中に配合した、０．５ｍｇ／ｋｇの図３のαｖβ６インテグリンリガンドにコンジュゲートしたアルファ−ＥＮａＣを標的とするＲＮＡｉ剤；あるいは（３）等張生理食塩水中に配合した、０．５ｍｇ／ｋｇの図５のαｖβ６インテグリンリガンドにコンジュゲートしたアルファ−ＥＮａＣを標的とするＲＮＡｉ剤。同じアルファ−ＥＮａＣ ＲＮＡｉ剤を、群２及び３に使用した。ＲＮＡｉ剤のセンス鎖の５´末端を、実施例４に記載のようにＣ6アミン（−ＮＨ２）で修飾した。図３のアルファ−ＥＮａＣ ＲＮＡｉ剤及びαｖβ６インテグリンリガンドを、実施例４に記載された同じ手順に従って合成及びコンジュゲートした。図５のαｖβ６インテグリンリガンドのためにＴＦＰ−エステルとして合成し、さらにαｖβ６インテグリンリガンドのＮ−末端をｆｍｏｃ基によって保護した。次に、実施例４に記載したものと同じ方法で、ＲＮＡｉ剤へのコンジュゲーションを行い、塩基としてトリエチルアミンを用いるｆｍｏｃ脱保護に続いた。
【０２４１】
１群当たり５匹のラットに投薬した。ラットを試験９日目に安楽死させ、全ＲＮＡを、両肺から収集及びホモジナイゼーション後に単離した。標的のｍＲＮＡ存在量を、プローブベースの定量的ＰＣＲによって定量化し、ＧＡＰＤＨ発現に対して正規化し、ビヒクル  対照群の割合として表した（幾何平均、＋／−９５％信頼区間）。
【０２４２】
【表６】
2019535685.tif 000048
【０２４３】
上記表６に示されるように、ＲＮＡｉ剤にコンジュゲートした図３及び図５のαｖβ６リガンドのいずれも、インビボで、アルファ−ＥＮａＣ肺標的のノックダウンを示した。
【０２４４】
実施例８．ラットにおける、αｖβ６インテグリンリガンドとポリ−Ｌ−リシン足場とにコンジュゲートしたアルファ−ＥＮａＣを標的とするＲＮＡｉ剤のインビボ気管内投与
実施例４に記載したものと同様のアルファ−ＥＮａＣ ＲＮＡｉ剤を、同じ合成手順に従って合成した。試験１日目及び２日目に、雄のSprague-Dawleyラットに、マイクロスプレー装置（Penn Century、フィラデルフィア、ＰＡ）を介して、以下のいずれかの２００マイクロリットルの用量を投与した：（１）Ｄ５Ｗ（水中の５％デキストロース）；（２）Ｄ５Ｗ中に配合した０．５ｍｇ／ｋｇのリガンドを含まないＲＮＡｉ剤（「裸のＲＮＡｉ剤」）；（３）Ｄ５Ｗ中に配合した１．５ｍｇ／ｋｇの裸のＲＮＡｉ剤；（４）Ｄ５Ｗ中に配合した５ｍｇ／ｋｇの裸のＲＮＡｉ剤；（５）Ｄ５Ｗ中に配合した、０．５ｍｇ／ｋｇの図４のαｖβ６インテグリンリガンドにポリ−Ｌ−リシン（ＰＬＬ）足場を介してコンジュゲートしたアルファ−ＥＮａＣ ＲＮＡｉ剤；（６）Ｄ５Ｗ中に配合した、１．５ｍｇ／ｋｇの図４のαｖβ６インテグリンリガンドに、ＰＬＬ足場を介してコンジュゲートしたアルファ−ＥＮａＣ ＲＮＡｉ剤；あるいは（７）Ｄ５Ｗ中に配合した、５ｍｇ／ｋｇの図４のαｖβ６インテグリンリガンドにＰＬＬ足場を介してコンジュゲートしたアルファ−ＥＮａＣ ＲＮＡｉ剤。ＲＮＡｉ剤は、アルファ−ＥＮａＣ遺伝子の発現を阻害するように設計された。同じアルファ−ＥＮａＣ ＲＮＡｉ剤を、群２から７に使用した。αｖβ６インテグリンリガンドを最初に、ＴＦＰ−エステル（図２に示す）として合成した。実施例８の群５、６及び７で使用されたＰＬＬ足場は、約１００個のＬ−リシンモノマー単位（約１２キロダルトン）であった。ポリ−Ｌ−リシンポリマーを、３当量のＳＭＰＴ（４−スクシンイミジルオキシカルボニル−アルファ−メチル−α（２−ピリジルジチオ）トルエン）で修飾し、ＲＮＡｉ剤のセンス鎖の５’アミン（Ｃ6アミン修飾）を、ＳＡＴＡ（Ｎ−スクシンイミジル  Ｓ−アセチルチオアセテート）で修飾した。次に、図２のαｖβ６インテグリンリガンド（１５当量）を固体として添加し、１時間攪拌した。次に、プロテアーゼ切断可能な官能化アラニン−シトルリン−ＰＥＧ12（１０当量；パラ−ニトロフェニルカーボネートによる官能化）を添加した。１５分後、ＳＡＴＡ−修飾ＲＮＡｉ剤（１当量）を滴下し、ｐＨを８．６に維持した。残りのリシン基を、プロテアーゼ切断可能な官能化アラニン−シトルリン−ＰＥＧ12で官能化した。生成物を接線流濾過により精製した。
【０２４５】
１群当たり５匹のラットに投薬した。ラットを試験５日目に安楽死させ、全ＲＮＡを、両肺から収集及びホモジナイゼーション後に単離した。標的のｍＲＮＡ存在量を、プローブベースの定量的ＰＣＲによって定量化し、ＧＡＰＤＨ発現に対して正規化し、ビヒクル対照群の割合として表した（幾何平均、＋／−９５％信頼区間）。データを図１２のグラフに報告する。
【０２４６】
図１２に示されているように、ポリ−Ｌ−リシン足場とＲＮＡｉ剤とにコンジュゲートした図４のαｖβ６リガンドは、裸のＲＮＡｉ剤と比較して、３つ全ての用量レベルにおいて増大した相対的ノックダウンを示した（０．５ｍｇ／ｋｇ用量で６８％のノックダウン対４７％のノックダウン、１．５ｍｇ／ｋｇ用量で７８％のノックダウン対４７％のノックダウン、及び５ｍｇ／ｋｇ用量で８６％のノックダウン対７５％のノックダウン）。
【０２４７】
実施例９．インビトロでの初代上皮細胞による標識αｖβ６リガンドコンジュゲートの選択的取り込み
初代ヒト肺上皮細胞、内皮細胞及び平滑筋細胞を培養し、２４時間、以下に曝露した：（１）リガンドを含まないＣｙ３−標識（赤色）ポリアクリレートポリマー足場（リガンドなし−コンジュゲート）；あるいは（２）図７のαｖβ６インテグリンリガンドにコンジュゲートしたＣｙ３−標識（赤色）ポリアクリレートポリマー足場（αｖβ６リガンド−コンジュゲート）。細胞を、ＦＩＴＣ−ファロイジン（Ｆ−アクチン、緑色）及びHoechst染色（ＤＮＡ、青色）で染色し、蛍光顕微鏡によって画像化した。
【０２４８】
蛍光顕微鏡画像を、当該技術分野で知られている標準的な方法を用いて調製した。蛍光画像は、αｖβ６インテグリンリガンドを含まないＣｙ３標識−コンジュゲートが、いずれの細胞型によっても内在化されていないことを示した。しかしながら、図７のαｖβ６リガンドを有するＣｙ３コンジュゲートは、初代肺上皮細胞によって内在化されたが（画像中の初代肺上皮細胞のエンドソーム区画内の赤色シグナルの蓄積によって示されるように）、初代内皮及び平滑筋細胞によって内在化されなかった。これは、本明細書に開示のαｖβ６インテグリンリガンドが、αｖβ６インテグリンを発現する上皮細胞によって選択的に内在化され得ることを示している。
【０２４９】
実施例１０．インビボでの上皮組織による標識αｖβ６リガンドコンジュゲートの選択的取り込み
Ｃ５７ｂｌ／６マウスに、以下を１２０マイクログラムの静脈内用量で注射した：（１）リガンドを含まないＣｙ３−標識（赤色）ポリアクリレートポリマー足場（リガンドなし−コンジュゲート）又は（２）図７αｖβ６インテグリンリガンドにコンジュゲートしたＣｙ３−標識（赤色）ポリアクリレートポリマー足場（αｖβ６リガンド−コンジュゲート）あるいは（３）構造Ａｃ−ＲＧＥＬＡＡｂｕＬ−ＣｉｔＡｉｂＬ（配列番号１３２）を有する不活性化αｖβ６インテグリンリガンドにコンジュゲートしたＣｙ３−標識（赤色）ポリアクリレートポリマー足場、斯かる不活性化αｖβ６インテグリンリガンドは、実施例４で先に記載したように陰性対照リガンドとして使用されている。注射から２４時間後、マウスを屠殺し、及び組織を採取、固定、処理及び切片化した。組織切片を、ＦＩＴＣ−ファロイジン（Ｆ−アクチン、緑色）及びHoechst染色（ＤＮＡ、青色）で染色し、蛍光顕微鏡によって画像化した。
【０２５０】
Ａ．肺気管支上皮細胞
実施例１０のマウスからの肺気管支上皮細胞の蛍光顕微鏡画像を、標準的な方法を用いて調製した。これらの画像から、図７のαｖβ６リガンドを有するＣｙ３−標識コンジュゲート（画像中赤色のマークによって示される）は、インビボで肺気管支上皮細胞によってエンドソーム区画に選択的に内在化されたが、リガンドなし又はＲＧＥ−リガンド対照コンジュゲートを含むコンストラクトでは、上皮内在化は本質的に観察されなかった（すなわち、これら画像中に赤色は見られなかった）。
【０２５１】
Ｂ．腎臓上皮組織
実施例１０のマウスからの尿細管（rental tubular）上皮組織の蛍光顕微鏡画像を、標準的な方法を用いて調製した。これらの画像から、図７のαｖβ６リガンドを有するＣｙ３−標識コンジュゲートは、インビボで尿細管上皮細胞によってエンドソーム区画に選択的に内在化されたが（画像中に赤色のマークによって示される）、リガンドなし対照コンジュゲートでは上皮内在化は本質的に観察されなかった。
【０２５２】
Ｃ．胃腸管上皮細胞
実施例１０のマウスからのレンタル（rental）上皮組織の蛍光顕微鏡画像を、標準的な方法を用いて調製した。図７のαｖβ６リガンドを有するＣｙ３−標識コンジュゲートは、小腸及び胆嚢の両方においてインビボでＧＩ管上皮細胞によってエンドソーム区画に選択的に内在化されたが（画像中に赤色のマークによって示される）、リガンドなし対照コンジュゲートでは上皮内在化は本質的に観察されなかった。
【０２５３】
他の実施形態
本発明をその詳細な説明と併せて説明してきたが、前述の説明は例示を意図するものであり、添付の特許請求の範囲によって定義される発明の範囲を限定するものではないことを理解されたい。他の態様、利点、及び改変は以下の特許請求の範囲内にある。
【図１】
2019535685.tif 000050
【図２】
2019535685.tif 000051
【図３】
2019535685.tif 000052
【図４】
2019535685.tif 000053
【図５】
2019535685.tif 000054
【図６】
2019535685.tif 000055
【図７】
2019535685.tif 000056
【図８】
2019535685.tif 000057
【図９】
2019535685.tif 000058
【図１０】
2019535685.tif 000059
【図１１】
2019535685.tif 000060
【図１２】
2019535685.tif 000061
【配列表】
2019535685000001.app
【国際調査報告】
2019535685.tif 000062
2019535685.tif 000063
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