(57)【要約】高溶解性繊維源及び低溶解性繊維源を含む繊維成分と、ポリフェノール源とを含むものである基材を含む、放出制御ペットフード組成物であって、この基材はポリフェノール源を哺乳動物によって摂取された後に哺乳動物の下部消化器（ＧＩ）管へ送達するように構成される、放出制御ペットフード組成物が、本明細書に記載されている。これらの組成物を製造する方法、および使用する方法もまた、記載されている。
2019500047.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
高溶解性繊維源および低溶解性繊維源を含む繊維成分と、
ポリフェノール源とを含む基材を含む、放出制御ペットフード組成物であって、
前記基材は、哺乳動物による摂取後に、前記ポリフェノール源を哺乳動物の下部消化器（ＧＩ）管に送達するように構成される、放出制御ペットフード組成物。
【請求項２】
高溶解性繊維源についての低溶解性繊維源に対する重量比が、約１：２０〜約１：１である、請求項１のペットフード組成物。
【請求項３】
高溶解性繊維源についての低溶解性繊維源に対する重量比が、約１：１５〜約１：２である、請求項１または２のペットフード組成物。
【請求項４】
高溶解性繊維源についての低溶解性繊維源に対する重量比が、約１：１０〜約１：３である、請求項１〜３のいずれかのペットフード組成物。
【請求項５】
高溶解性繊維源についての低溶解性繊維源に対する重量比が、約１：５〜約１：３である、請求項１〜４のいずれかのペットフード組成物。
【請求項６】
高溶解性繊維源についての低溶解性繊維源に対する重量比が、約１：４である、請求項１〜５のいずれかのペットフード組成物。
【請求項７】
前記高溶解性繊維源が、オート麦ふすま、ソバ挽き割り、エンドウ豆ふすま、大麦、トマトかす、柑橘類パルプ、ビートパルプ、及びそれらの２つ以上の組み合わせを含む、請求項１〜６のいずれかのペットフード組成物。
【請求項８】
前記低溶解性繊維源が、セルロース系材料、ピーカン繊維、又はそれらの組み合わせを含む、請求項１〜７のいずれかのペットフード組成物。
【請求項９】
前記ポリフェノール源は、食品又は植物由来である、請求項１〜８のいずれかに記載のペットフード組成物。
【請求項１０】
食品由来の前記ポリフェノール源が、果物または野菜由来のポリフェノールを含む、請求項９のペットフード組成物。
【請求項１１】
前記ポリフェノール源が、フラボノイドまたはフェノール酸を含む、請求項１〜１０のいずれかのペットフード組成物。
【請求項１２】
前記ポリフェノール源は、デヒドロキシロスマリン酸、クマロイルネピトリン、ユーパフォリン、カルノソール、スクテラリン、ケンフェロール、ロスマリン酸、ロスマノール、シルシマリチン、ルテオリン、６−メトキシ−ルテオリン、７−エピロスマンノール、ケルセチン、カテキン、ヘスペリジン、シアニジン、及びこれらの２つ以上の組み合わせから選択されるポリフェノールを提供する、請求項１〜１１のいずれかに記載のペットフード組成物。
【請求項１３】
アミノ酸プロファイルを含む加水分解された動物性または植物性タンパク質の源をさらに含む、請求項１〜１２のいずれかのペットフード組成物。
【請求項１４】
加水分解された動物性または植物性タンパク質の前記源が、鶏の肝臓を含む、請求項１３のペットフード組成物。
【請求項１５】
加水分解された動物性または植物性タンパク質の前記源が、約２５〜約４５重量％の有効な含有量で存在する、請求項１３または１４のペットフード組成物。
【請求項１６】
高ドコサヘキサエン酸の魚油をさらに含む、請求項１〜１５のいずれかのペットフード組成物。
【請求項１７】
前記高ドコサヘキサエン酸の魚油の有効な含有量が、約０．５〜約２．５重量％である、請求項１６のペットフード組成物。
【請求項１８】
前記繊維成分が、ピーカン殻；亜麻仁；柑橘類パルプ；ビートパルプ；クランベリーかす；またはその２つ以上の組み合わせを含む、請求項１〜６および９〜１７のいずれか１項に記載のペットフード組成物。
【請求項１９】
約１〜約１０重量％ピーカン殻；
約１〜約５重量％亜麻仁；
約１〜約５重量％柑橘類パルプ；
約１〜約５重量％ビートパルプ；および
約０．１〜約２重量％クランベリーかす、を含む、請求項１８に記載のペットフード組成物。
【請求項２０】
約２．５〜約８重量％ピーカン殻；
約２〜約４重量％亜麻仁；
約２〜約３重量％柑橘類パルプ；
約２〜約３重量％ビートパルプ；および  
約０．５〜約１．５重量％クランベリーかす  を含む、請求項１８または１９に記載のペットフード組成物。
【請求項２１】
約７重量％ピーカン殻；
約３重量％亜麻仁；
約２．５重量％柑橘類パルプ；
約２．５重量％ビートパルプ；および
約１重量％クランベリーかす、を含む、請求項１８〜２０のいずれか１項に記載のペットフード組成物。
【請求項２２】
約３．５重量％ピーカン殻；
約１．５重量％亜麻仁；
約１．２５重量％柑橘類パルプ；
約１．２５重量％ビートパルプ；および
約０．５重量％クランベリーかす、を含む、請求項１８〜２０のいずれか１項に記載のペットフード組成物。
【請求項２３】
炎症性の疾患、状態若しくは障害の症状について、例えば哺乳動物の炎症性腸疾患について、治療、予防、又は改善する方法であって、請求項１〜２２のいずれかに記載の組成物の有効量を、それを必要とする哺乳動物に投与することを含む、方法。
【請求項２４】
哺乳動物の腸内ミクロフローラを有益に操作する方法であって、請求項１〜２２のいずれか一項に記載の組成物の有効量を、それを必要とする哺乳動物に投与することを含む、方法。
【請求項２５】
ペットフード組成物を作製する方法であって、
基材を押し出す工程であって、前記基材が、
高溶解性繊維源及び低溶解性繊維源を含む繊維成分と、
ポリフェノール源と、を含むものである、押し出す工程と、
キブルに表面コーティングを施す工程と、を含み、
前記基材は、前記ポリフェノール源を、哺乳動物によって摂取された後に前記哺乳動物の下部消化器（ＧＩ）管へ送達するように構成される、方法。
【請求項２６】
前記表面コーティングは美味剤を含む、請求項２５に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１５年１２月３０日に出願したＰＣＴ／ＵＳ２０１５／０６８１９３の優先権を主張し、その全体が、参照により本明細書に取り込まれる。
【背景技術】
【０００２】
ペットは、継続的な成長および普段の健康のため健康的な食餌ならびに適切な消化を必要とする。しかしながら、胃腸障害が、一般的なペットフード組成物の普段の消化を一般に妨げる。これらの問題の幾つか、例えば、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）および他の慢性的な消化状態は、非常に深刻であり得る。ＩＢＤは、下痢を一般に伴い、特に、長期的であるなら、この状態を有するペットにとって、またはペットが汚した場所をきれいにしなければならないペットの飼い主にとって、極めて不快であり得る。
【０００３】
ペットにおいてＩＢＤを処置する、および炎症状態を改善する１つの機序は、医薬(medicament)、プレバイオティクス(prebiotics)、プロバイオティクス(probiotics)などといった有益な薬剤(beneficial agent)を、従来のペットフード組成物を通じて投与することである。しかしながら、有益な薬剤が標的部位に送達されることを確実にすることが、課題であった。したがって、有益な薬剤の放出を制御し、有益な薬剤が標的部位に送達されることを確実にすることができるペットフード組成物が必要である。本発明の実施形態は、これらの要求に合うように設計される。
【発明の概要】
【０００４】
幾つかの実施形態において、本発明は、高溶解性繊維源および低溶解性繊維源を含む繊維成分と、ポリフェノール源とを含むものである基材を含む、放出制御ペットフード組成物であって、ここで、基材は、哺乳動物による摂取後に、ポリフェノール源を哺乳動物の下部消化器（ＧＩ）管に送達するように構成されている、放出制御ペットフード組成物を提供する。
【０００５】
他の実施形態は、(i)高溶解性繊維源および低溶解性繊維源を含む繊維成分と、ポリフェノール源とを含む基材組成物を押し出して、放出制御キブルを形成する工程であって、ここでの基材は、哺乳動物によって摂取されたとき、ポリフェノール源が哺乳動物の上部消化（ＧＩ）管における消化または吸収に利用可能でないことを確実にするように構成されている工程、ならびに(ii)表面コーティングをキブルに適用する工程を含む、ペットフード組成物を形成する方法を提供する。
【０００６】
さらに他の実施形態は、本明細書において記載される組成物のいずれか１つを、それを必要とする哺乳動物、例えば、コンパニオンアニマルに投与することを含む、哺乳動物において、炎症性疾患、状態もしくは障害、例えば、炎症性腸疾患の症状を処置、予防、または改善する方法を提供する。
【０００７】
幾つかの実施形態は、本明細書において記載される組成物のいずれか１つを、それを必要とする哺乳動物、例えば、コンパニオンアニマルに投与することを含む、哺乳動物の腸内ミクロフローラを有益に操作する方法を提供する。
【図面の簡単な説明】
【０００８】
【図１Ａ】本発明の典型的な組成物が、結腸に、ここで常在性腸内細菌叢（マイクロバイオータ）により代謝されるポリフェノールをうまくもたらすことを説明するデータを示す（１）。
【図１Ｂ】本発明の典型的な組成物が、結腸に、ここで常在性腸内細菌叢（マイクロバイオータ）により代謝されるポリフェノールをうまくもたらすことを説明するデータを示す（２）。
【図１Ｃ】本発明の典型的な組成物が、結腸に、ここで常在性腸内細菌叢（マイクロバイオータ）により代謝されるポリフェノールをうまくもたらすことを説明するデータを示す（３）。
【図２Ａ】本発明の典型的な組成物が、微生物のポストバイオティクス(Postbiotics)についての上昇した血清レベルをもたらすことを説明するデータを示す（１）。
【図２Ｂ】本発明の典型的な組成物が、微生物のポストバイオティクス(Postbiotics)についての上昇した血清レベルをもたらすことを説明するデータを示す（２）。
【図２Ｃ】本発明の典型的な組成物が、微生物のポストバイオティクス(Postbiotics)についての上昇した血清レベルをもたらすことを説明するデータを示す（３）。
【図３】本発明の組成物と比較組成物の間でのイヌ便スコア比較の結果を描くヒストグラムを提供する。
【図４】健常なイヌと炎症性腸疾患（ＩＢＤ）のイヌとの両方を含む臨床介入試験による、大便の質の結果を描く。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
幾つかの実施形態において、本明細書において説明されるペットフード組成物は、以下のことを行う、栄養的食餌因子に基づく多元的な療法を提供する。すなわち、（１）加水分解されたタンパク質の使用に起因するアレルゲン性を低下させること；（２）容易に消化可能な多量栄養素(主要栄養素；macronutrient)をもたらすこと；（３）代謝中間体を腸細胞にもたらすグルタミニルアミノ酸をもたらすこと；（４）炎症反応を低下させる免疫モジュレーターをもたらすこと；および（５）耐性、または後腸共生生物相を、促進・助長する微生物の細胞壁分画をもたらすことを行う、栄養素食餌性因子に基づく多機能療法を提供する。他の実施形態において、ペットフード組成物は、食餌性ポリフェノールの代謝最終産物についての腸内細菌叢の産生を増加し、および／またはこれらの食餌性ポリフェノールについての全身循環への吸収を増強する。
【００１０】
幾つかの実施形態において、本発明のペットフード組成物は、免疫最適化の所望の効果をもたらす能力がある食餌成分を含むものである基材(matrix)を含む。具体的には、組成物は、上部消化（ＧＩ）管における消化もしくは吸収に利用可能でないような様式で化学的または物理的に結合したポリフェノールを有する不活性な非発酵性繊維源を含む(matrix)基材を、含んでもよい。幾つかの実施形態において、これらの繊維結合ポリフェノールは、上部ＧＩ管を通り抜け、動物の結腸にそのまま到達する。腸内細菌叢は、食物繊維を代謝し、その過程で、繊維結合ポリフェノールを遊離させると考えられている。これらの新たに遊離されたポリフェノールはまた、微生物代謝の対象であって、「ポストバイオティクス」と呼ばれる小さな生体分子を産生する。ポストバイオティクスは、結腸全体で吸収され、全身に分布し、そこで、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）を処置し、炎症反応を改善するのを助ける免疫調整を含む、多面発現効果を有する。哺乳動物の下部ＧＩ管において難溶性である、低溶解性繊維源（例えば、リグニン）の使用の１つの恩恵は、大便の嵩高さをもたらすことである。
【００１１】
幾つかの実施形態において、基材は、繊維性ネットワークを含む。幾つかの実施形態において、繊維性ネットワークは、様々な溶解速度を有する繊維を含む。幾つかの実施形態において、繊維の溶解速度は、ｐＨ依存性である。幾つかの実施形態において、溶解速度は、温度依存性である。幾つかの実施形態において、繊維性ネットワークは、繊維間空隙を含む。幾つかの実施形態において、繊維間空隙は、溶解剤の繊維性ネットワークへの侵入を許可するのに十分な寸法のものである。
【００１２】
本明細書において使用される「溶解剤」(dissolution agent)は、基材の溶解の速度を増強し、それにより、有益な薬剤（例えば、ポリフェノール源）の放出を促進する、流体、物質などを含むことが意図される。
【００１３】
幾つかの実施形態において、基材は、繊維源に結合された有益な薬剤を含む。幾つかの実施形態において、有益な薬剤は、本開示に従った標的指向化送達を行うのが望ましいであろう、任意の成分であり得る。
【００１４】
幾つかの実施形態において、有益な薬剤は、ポリフェノール源である。幾つかの実施形態において、放出制御基材の溶解特性の結果として、ポリフェノール源は、上部ＧＩ管では実質的に利用できない。
【００１５】
幾つかの実施形態は、高溶解性繊維源および低溶解性繊維源を含む繊維成分と、ポリフェノール源とを含むものである基材を含む放出制御ペットフード組成物であって、この基材が、哺乳動物による摂取後に、ポリフェノール源を哺乳動物の下部消化器（ＧＩ）管に送達するように構成される、放出制御ペットフード組成物を提供する。幾つかの実施形態において、高溶解性繊維源についての低溶解性繊維源に対する重量比は、約１：２０〜約１：１である。他の実施形態において、高溶解性繊維源についての低溶解性繊維源に対する重量比は、約１：１５〜約１：２である。いっそうさらなる実施形態は、高溶解性繊維源についての低溶解性繊維源に対する重量比が、約１：１０〜約１：３である組成物を提供する。他の実施形態は、高溶解性繊維源についての低溶解性繊維源に対する重量比が、約１：５〜約１：３である組成物を提供する。一方、他の実施形態は、高溶解性繊維源についての低溶解性繊維源に対する重量比が約１：４である組成物を提供する。幾つかの実施形態において、高溶解性繊維源についての低溶解性繊維源に対する重量比は、約１：４．３である。
【００１６】
幾つかの実施形態において、用語「高溶解度の繊維」および「溶解性繊維」は、互換的に使用されてもよい。幾つかの実施形態において、用語「低溶解度の繊維」および「不溶性繊維」は、互換的に使用されてもよい。
【００１７】
いくつかの実施形態では、高溶解性繊維源は、オート麦ふすま、ソバ挽き割り、エンドウ豆ふすま、大麦、トマトかす、柑橘類パルプ、ビートパルプ、及びそれらの２つ以上の組み合わせを含む。幾つかの実施形態において、低溶解性繊維源は、セルロース系材料、ピーカン（ペカン；pecan）繊維、又はそれらの組み合わせを含む。
【００１８】
幾つかの実施形態において、ポリフェノール源は、食品又は植物由来のものである。幾つかの実施形態において、食品由来のポリフェノール源は、果物または野菜由来のポリフェノールを含む。幾つかの実施形態において、ポリフェノール源は、フラボノイドまたはフェノール酸（フェノールカルボン酸）を含む。
【００１９】
幾つかの実施形態において、ポリフェノール源は、デヒドロキシロスマリン酸、クマロイルネピトリン、ユーパフォリン、カルノソール、スクテラリン、ケンフェロール、ロスマリン酸、ロスマノール、シルシマリチン、ルテオリン、６−メトキシ−ルテオリン、７−エピロスマンノール、ケルセチン、カテキン、ヘスペリジン、シアニジン、およびその２つ以上の組み合わせから選択されるポリフェノールをもたらす。
【００２０】
幾つかの実施形態は、アミノ酸プロファイルを含む加水分解された動物性または植物性タンパク質の源をさらに含む。幾つかの実施形態において、加水分解された動物性または植物性タンパク質の源は、鶏の肝臓を含む。幾つかの実施形態において、加水分解された動物性または植物性タンパク質の源は、約２５〜約４５重量％の有効な含有量で存在する。
【００２１】
他の実施形態において、組成物は、オメガ−３、オメガ−６またはオメガ−９脂肪酸の源を含む。幾つかの実施形態は、高ドコサヘキサエン酸の魚油を含む。幾つかの実施形態において、高ドコサヘキサエン酸の魚油の有効な含有量は、約０．５〜約２．５重量％である。
【００２２】
いっそうさらなる実施形態は、有効量の本明細書において記載される組成物のいずれか１つを投与することを含む、哺乳動物において、炎症性の疾患、状態もしくは障害を、例えば炎症性腸疾患の症状を、処置、予防、または改善する方法を提供する。
【００２３】
幾つかの実施形態は、有効量の本明細書において記載される組成物のいずれか１つを、それを必要とする動物に投与することを含む、哺乳動物の腸内ミクロフローラを有益に操作する方法を提供する。
【００２４】
なお他の実施形態は、高溶解性繊維源および低溶解性繊維源を含む繊維成分と、ポリフェノール源とを含む基材を押し出す工程；及び、表面コーティングをキブルに適用する工程を含み、ここで、基材は、哺乳動物による摂取後に、ポリフェノール源を哺乳動物の下部消化器（ＧＩ）管に送達するように構成されるのである、ペットフード組成物を形成する方法を提供する。幾つかの実施形態において、表面コーティングは、美味剤を含む。
【００２５】
幾つかの実施形態において、本発明は、獣医、ペットの飼い主または他のケアギバー(caregiver)により経口投与され得る、コンパニオンアニマルのための放出制御組成物を対象にする。本発明の組成物は、放出制御特性を有意に失うことなく、チュアブルである。特に、放出制御機能性に付随する恩恵は、動物による咀嚼後でさえ実質的に維持される。従って、本文脈におけるチュアブルということは、投薬形態の放出制御性能が、咀嚼に対して有効に抵抗性であることを意味することにつき理解されるだろう。
【００２６】
本発明の組成物は一般的に咀嚼されるが、本開示は、嚥下後に有益な薬剤の制御放出をもたらす組成物を包含することが意図される。
【００２７】
本明細書において使用される、「制御放出」は、投薬形態の幾つかの特性に応じた医薬的に有効な薬剤の放出の割合を指す。例えば、１）標的化放出（有益な薬剤が、体内の特定の場所にて放出されるように構成される）；２）遅延放出（組成物の摂取後と、有益な薬剤の放出が始まる前とでタイムラグが存在する）；および３）パルス放出（有益な薬剤が、即時放出または調節された放出様式で放出される）。パルス放出は、例えば、標的化放出もしくは遅延放出に続いて、放出が極めて少ないか、もしくは放出が存在しない期間があり、さらにこれに続いて、即時もしくは調節された放出の期間がある。このようにして、放出の、１回または複数回のパルスが得られ得る。
【００２８】
当業者により十分理解されるように、他の送達プロファイルがあり得、全てが、本発明の目的上放出制御の範囲内であると考えられる。
【００２９】
幾つかの実施形態において、本発明の放出制御組成物は、特定の形態の有益な薬剤（例えば、ポリフェノール）をもたらす。幾つかの実施形態において、有益な薬剤は、組成物が動物によって咀嚼される際、有益な薬剤（粒子）が、任意の有意な程度までさらに粉末化されないようなサイズを有する粒子の形態で提供される。
【００３０】
本明細書において記載される具体的な方法に加えて、本発明の組成物は、当業者に公知の様々な技術により調製され得る。
【００３１】
幾つかの実施形態において、微粒子は、平均粒子サイズ最大約５０００μｍを有し；より好ましくは、平均粒子サイズ約１０μｍ〜約５０００μｍであり；いっそうより好ましくは、平均粒子サイズ約５０μｍ〜約２０００μｍであり；なおいっそうより好ましくは、平均粒子サイズ約１００μｍ〜約１０００μｍである。当業者が理解するであろうように、粒子は、それらが本明細書において記載される標的化送達をもたらす限り、任意のサイズの形のものであってよい。
【００３２】
本明細書において記載される高溶解度および低溶解性繊維源に加えて、さらなる成分、例えば、ポリマーを使用して、有益な薬剤の放出が制御されてもよい。例えば、低ｐＨ、例えば、胃において一般的に見られるようなｐＨ１〜約５にて典型的には不溶性であるが、より高いｐＨ、例えば、小腸において典型的に出くわすｐＨ５．５より高いｐＨにて溶解性である、ｐＨ感受性ポリマー。特に、適当なポリマーは、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、エチルセルロース、Ｅｕｄｒａｇｉｔ  ＲＬ１００、Ｅｕｄｒａｇｉｔ  ＲＳ１００、Ｅｕｄｒａｇｉｔ  ＲＬ１００／ＲＳ１００の混合物、Ｅｕｄｒａｇｉｔ  Ｓ１００、Ｅｕｄｒａｇｉｔ  ＮＥ３０Ｄ、酢酸セルロース、酢酸酪酸セルロース、シリコーン、エチルセルロース分散液（Ａｑｕａｃｏａｔ（登録商標）ＦＭＣおよびＳｕｒｒｅｌｅａｓｅ（登録商標）（ｃｏｌｏｒｏｎ）として市販）を含むが、これらに限定されない。
【００３３】
本明細書において使用される、用語「コンパニオンアニマル」は、飼いならされた動物を指す。コンパニオンアニマルはヒトを除く。好ましくは、動物は哺乳動物である。コンパニオンアニマルの例は、イヌ、ネコおよびウマを含むが、これらに限定されない。好ましいコンパニオンアニマルは、イヌおよびネコである。
【００３４】
本発明の幾つかの実施形態は、「美味剤」または「嗜好性改善剤」を含む。本明細書において使用される、用語「嗜好性改善剤」または「美味剤」は、それが加えられる組成物の嗜好性を変更する任意の組成物を含む。本発明の嗜好性改善剤は、食肉ベース、または食肉に由来する非食肉ベースであり得る。
【００３５】
幾つかの実施形態において、ペットフード組成物は、一般に、栄養学的に完全なアミノ酸プロファイル（例えば、乾燥された鶏の肝臓）を含む加水分解された動物性または植物性タンパク質、ペプチジルグルタミン（例えば、Ｈｙｖｉｔａｌ（登録商標）小麦グルタミンＰＮ）、本明細書において説明される不溶性、不活性繊維（ピーカン繊維、オート麦、およびセルロース）、本明細書において説明されるプロバイオティクス溶解性繊維（例えば、ビートパルプ）、本明細書において説明される繊維結合ポリフェノール（例えば、クランベリーかす、ザクロ抽出物、緑茶抽出物）、中鎖トリグリセリド、高ドコサヘキサエン酸の魚油、根生姜粉末、ボスウェリア・セラータ（ｂｏｓｗｅｌｌｉａ  ｓｅｒｒａｔａ）抽出物、ならびに酵母ベータグルカンを含む。
【００３６】
別の実施形態において、ペットフード組成物は、ペットフード組成物の総重量に基づき、以下の表１に示される成分を指定された量で含む。
【表１】
2019500047.tif 000003
【００３７】
本明細書において説明されるペットフード組成物は、押出成形により、キブルタイプのペットフード組成物が形成されるようにしてもよい。幾つかの実施形態において、組成物の粉砕された原料成分が押し出され、次に、美味剤および／または栄養油を含む表面コーティングが適用される。幾つかの実施形態において、キブルは、転動式ミキサー内で、美味剤および／または栄養油を含む組成物でスプレーコーティングされる。他の実施形態において、キブルは、真空エンロービング(vacuum enrobing)技術を使用してコーティングされるのであり、ここで、キブルは、減圧状態（真空）に置かれ、次に、コーティング材が浴びせられ、この後、真空の解除により、コーティング材をキブル内部に押し込む。
【００３８】
以下、本発明は、以下の非限定的な実施例と併せて記載される。
【実施例】
【００３９】
実施例１
表２（以下）に示す通り、例示的なペットフード組成物（実施例１）を調製する。全ての量を、ペットフード組成物の総重量に基づく、重量パーセントで示す。米国飼料検査官協会（ＡＡＦＣＯ）および米国学術研究会議（ＮＲＣ）が規定する栄養基準に従い、組成物を処方する。組成物を押出により製造し、乾燥させ、次に、美味剤でコーティングする。
【表２】
2019500047.tif 000004
【００４０】
組成物の有効性を試験するために、ＩＡＣＵＣ（機関動物管理使用委員会）が承認したプロトコルについて、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）を有する１３匹のイヌを、年齢、体重および性別が一致した１３匹の健康な対照と共に参加させて実行する。イヌの評価は、生化学的及び臨床的な健康について、血液及び糞便のマーカーを分析することにより行う。試験は、それぞれの食餌（実施例１および対照の食餌）を受け取る健康なイヌと炎症性腸疾患（ＩＢＤ）を有するイヌとの両方を用いた縦断的クロスオーバー試験（longitudinal cross-over design）である。対照の食餌ペットフード組成物は、Ｈｉｌｌ’ｓ（登録商標）ｉ／ｄ（登録商標）のブランドで、ヒルズペットニュートリションから市販されている。全てのイヌには、試験に参加させられる前に摂取していた食餌をどんなものであれ、１週間、事前給餌として与えた後に、食餌（実施例１及び対照食餌）を４週間与える。次に、ベースラインの時点（０週とみなす；１週間の事前給餌の直後）、ならびに４週目（第１相）および８週目（第２相）にて、試験を行う。
【００４１】
５が最も健康的な（最も堅い）便である、５段階評価に基づき、糞便スコアを評価する。糞便を、さらに、水分および灰分分析の対象にし、灰分を鉱物分析の対象にする。メタボローム解析検査(metabolomics screening)を通じて、血清中の全身性慢性炎症の生物活性マーカーも評価する。血中好塩基球の循環レベルも、臨床計測器により解析する。最後に、糞便の質も、主観的（目視による硬度スコア）および客観的（オスモライト、有機乾燥物）により調べる。
【００４２】
以下の表３において示す通り、試験食餌は、ベースラインおよび対照の食餌と比べ、便スコア５を有する便の数を増加させた。
【表３】
2019500047.tif 000005
【００４３】
以下の表４において示す通り、水分および灰分分析に関して、試験食餌は、一貫して、糞便中の水分を低減させ、有機乾燥物を増大させたのであり、また、糞便の質の改善および下痢の発生率の低減と関連することが示されている、糞便中のナトリウムおよびカリウムのレベルをも概ね低下させた。
【表４】
2019500047.tif 000006
【００４４】
以下の表５において示す通り、炎症の生物活性マーカーの評価に関して、試験食餌は、炎症促進性プロスタグランジンの前駆体である、様々なホスファチジルアラキドン酸塩のレベルを低下し、故に、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）を有するイヌにおける炎症状態を改善したことを示した。
【表５】
2019500047.tif 000007
＊PA1＝1-アラキドノイル-GPI（20:4）
＊PA2＝パルミトイル-アラキドノイル-グリセロホスホコリン（2）
＊PA3＝ステアロイル-アラキドノイル-グリセロホスホコリン（2）
＊PA4＝ステアロイル-アラキドノイル-グリセロホスホエタノールアミン（1）
＊Pa5＝ステアロイル-アラキドノイル-グリセロホスホイノシトール（2）
【００４５】
本明細書において使用する、「相対倍率レベル」は、各試料の値を、全試料の平均と関連付ける正規化された濃度レベルを指す。
【００４６】
表６（以下）において示す通り、好塩基球レベルに関して、試験食餌は、ＩＢＤを有するイヌにおける好塩基球存在量を増大し、それは、これらの動物において免疫の正常化をもたらすことができる。
【表６】
2019500047.tif 000008
【００４７】
以下の表７において説明する通り、腸の健康状態の糞便マーカーの分析に関して、糞便のポリアミンが、特に、食餌を通じて投与されるよりむしろ、腸内細菌叢により腸においてその場で生成される場合、腸の健康状態に恩恵をもたらすことが知られている。試験食餌は、糞便のポリアミンのレベルをベースラインより上に増大させることを示した。
【表７】
2019500047.tif 000009
【００４８】
表３〜７において記載したデータは、本発明の例示的な組成物（実施例１）が、糞便の質、糞便の生化学的特性、生化学的状態および細胞免疫状態の循環マーカー、ならびに腸の健康状態と関連する糞便代謝産物を改善することにより、ＩＢＤ症状を改善することができる。
【００４９】
実施例２
第２の典型的なペットフード組成物の免疫最適化を決定するために、給餌試験を行う。以下の表８に示す通りに、例示的なペットフード組成物（実施例２）を調製する。全ての量を、ペットフード組成物の総重量に基づく、重量パーセントで提供する。米国飼料検査官協会（ＡＡＦＣＯ）および米国学術研究会議（ＮＲＣ）により規定される栄養基準に従い、組成物を処方する。組成物を押出により製造し、乾燥させ、次に、美味剤でコーティングする。表８（以下）に記載する組成物を製造するために使用するプロセスが、本発明の基材を作り出すことを確実にする。
【表８】
2019500047.tif 000010
【００５０】
ＩＡＣＵＣのプロトコルに従い、２４匹のイヌで、給餌試験を行う。６週間にわたって本発明の例示的な組成物（実施例２）を摂取する前と後に採血し、生体外全血刺激を行う。具体的には、実施例２を摂取したイヌから全血を引き出し、２つの試料に分け、１つは、細菌エンドトキシンで刺激して、急性炎症反応を誘導したのであり、２つ目は、刺激なしの同様のインキュベーションにて維持する。２４時間のインキュベーションの後、培養した血液（刺激ありおよび刺激なし）を、炎症性サイトカインについての解析の対象にする。刺激していない状態は、基礎炎症のプロキシ評価(proxy assessment)をもたらし、一方、刺激した試料は、免疫誘発に対する応答の能力を示す。実施例２の摂取が、刺激していない（基礎）試料における炎症性サイトカインのレベルを増大させる場合に、最適化が達成される。酵素結合免疫吸着測定（ＥＬＩＳＡ）により、サイトカインを測定する。
【００５１】
表９および１０（以下）において示す通り、実施例２の摂取は、コンパニオンアニマル（例えば、イヌ）におけるサイトカインの産生を刺激し増大させた。分析するサイトカインは以下の通りである：ＩＬ−１２（インターロイキン１２）、ＩＬ−６（インターロイキン６）、ＶＥＧＦ−Ａ（血管内皮増殖因子）、ＮＧＦ（神経成長因子）、ＳＣＦ（幹細胞因子）、ＴＮＦ−α（腫瘍壊死因子アルファ）、ＭＣＰ−１（単球走化性タンパク質１）、ＩＮＦ−γ（インターフェロンガンマ）、およびＩＬ−１０（インターロイキン１０）。１０種のうち６種の測定したサイトカインが、ベースラインと比べ、６週間にわたって実施例２を摂取したイヌ由来の刺激した全血において、統計的に増大した。対照的に、実施例２の食餌の摂取は、刺激していない全血由来のものについて、サイトカイン産生をほとんど変化させないままとした。これは、実施例２が、急性免疫刺激に対するイヌの応答を増大させるにもかかわらず、基礎炎症を増大させないことを示す。
【表９】
2019500047.tif 000011
【表１０】
2019500047.tif 000012
【００５２】
実施例３
２つのさらなる実験を行い、本発明の例示的な組成物（実施例２および３）を摂取した後のポストバイオティクスについて測定する。実施例２についての成分リストは、上記表８に示され、実施例３についての成分リストは、表１１（以下）に示される。全ての量を、ペットフード組成物の総重量に基づく、重量パーセントで提供する。米国飼料検査官協会（ＡＡＦＣＯ）および米国学術研究会議（ＮＲＣ）が規定する栄養基準に従い、組成物を処方する。組成物を押し出し、乾燥させ、次に、美味剤を含む組成物でコーティングしてもよい。実施例２と同様に、表１１に記載する組成物を製造するために使用するプロセスが、本発明の基材を作り出すことを確実にする。
【表１１】
2019500047.tif 000013
【００５３】
以下に記載する実験下で、ＩＡＣＵＣプロトコルに従い、イヌに食事を与える。
【００５４】
実験Ａ−糞便評価
クロスオーバー試験（cross-over design）にて、６週間、対照の食餌または実施例２からなる食餌を、イヌに与える。対象は、本発明の例示的な組成物（実施例２）のを摂取する前の３週間、維持食餌（ヒルズペットニュートリションから市販されている、Ｈｉｌｌ’ｓ（登録商標）Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｄｉｅｔ（登録商標））を摂取する予備給餌期(pre-feed phase)に参加した。予備給餌期の終了時に、ベースライン測定を行う。対照の食餌は、より低いレベルの、繊維結合ポリフェノールおよび総繊維含有量の食餌源を含有し、繊維は、主に不溶性形態である。
【００５５】
ポリフェノールを結腸への標的化送達をもたらす実施例２の能力を評価するために、ポリフェノールおよびポリフェノール代謝産物のレベルの差について、対照の食餌を与えたイヌ、および実施例２を与えたイヌに由来する糞便試料を分析する。ポリフェノールおよび代謝産物の多変量プロファイリング解析の結果を、図１Ａおよび１Ｂに示し、ここで、Ｘ軸は、一連のポリフェノールおよびそれらの代謝産物を示し、Ｙ軸は、ベースラインにて（図１Ａ）、および実施例２の組成物からなる試験食餌の摂取後（図１Ｂ）に、糞便において見られる、これらのうちそれぞれの相対的レベルを、目盛を用いて示す。ポリフェノール及び代謝産物の相対濃度について経路濃縮分析(パスウェイエンリッチメント解析; pathway enrichment analysis)を行ったのであり（図１Ｃ）、食品／植物成分クラスターは、試験食餌を摂取させたイヌにおける、ベースラインに対しての統計的増加を示す。データが示す通り、糞便ポリフェノールおよびポストバイオティクスの相対的レベルの比較は、実施例２からなる食餌が、これらの生物活性薬剤の結腸へのターゲティングを、本発明の組み合わせの特徴を含まない、市販の高品質なイヌ用維持食餌からなる食餌より、有効に増大させることを示す。
【００５６】
実験Ｂ−血清評価
クロスオーバーなしに１３週間連続して、対照の食餌または実施例３からなる食餌を、イヌに与える。予備給餌期間は存在しなかった。対照の食餌は、試験食餌より低いレベルの、繊維食物ポリフェノールの食物繊維源を含有し、総繊維含有量について一致するが、繊維は、大部分が不溶性の形態である。
【００５７】
糞便採取と一致する時点での同じ対象由来の血清も、同じメタボロミック構造について解析する。具体的には、微生物のポリフェノール代謝産物およびそれらの第ＩＩ相解毒結合型のレベルの差について、血清試料を分析する。ポリフェノールおよび代謝産物の多変量プロファイリング解析の結果を、図２Ａおよび２Ｂに示し、ここで、Ｘ軸は、一連の、ポリフェノールの血清由来の（非）結合微生物の代謝産物を示し、Ｙ軸は、ベースラインにて（図２Ａ）および実施例３の組成物を含む試験食餌の消費後（図２Ｂ）に、血清中に見られるこれらのうちそれぞれの相対的レベルを、目盛りを用いて示す。経路濃縮分析はまた、血清由来ポリフェノールの（非）共役微生物代謝産物の相対濃度についても行われ（図２Ｃ参照）、食品／植物成分クラスターは、試験食餌を摂取させたイヌにおける、ベースラインに対しての統計的に有意な増加を示す。。データが示す通り、血清ポリフェノールおよびポストバイオティクスの相対的レベルの比較は、実施例３からなる食餌が、これらの生物活性薬剤の結腸へのターゲティングを、本発明の組み合わせの特徴を含まない、市販の高品質なイヌ用維持食餌からなる食餌より有効に、増大させたことを示す。
【００５８】
実験Ｃ−微生物由来のポストバイオティクス
本発明の放出制御基材を含む、本発明の典型的な組成物（実施例３）を与えたイヌ、および本発明の放出制御基材を含む、比較組成物を与えたイヌにて、微生物由来のポストバイオティクスの血清レベルを評価する。微生物のポリフェノール代謝産物およびそれらの第ＩＩ相解毒結合型のレベルの差について、１３週間にわたって比較組成物および実施例３を与えたイヌに由来する血清試料を分析する。ポリフェノールの（非）結合微生物の代謝産物の相対的血清レベルについて、経路濃縮解析を行う。結果は、次のことを示す。すなわち、ある種の食物成分の細菌の代謝産物が、比較組成物を与えたイヌに比べて、実施例３を与えたイヌの血清において、より顕著に現れることを示す。これらの結果は、本発明の組成物が、有益な薬剤、例えば、ポリフェノールの標的指向化送達をもたらす能力をさらに示す。
【００５９】
実施例４
表１２（以下）に示す通り、例示的なペットフード組成物（実施例４）を調製する。全ての量を、ペットフード組成物の総重量に基づく、重量パーセントで提供する。ＡＡＦＣＯおよびＮＲＣが規定する栄養基準に従い、組成物を処方する。
【表１２】
2019500047.tif 000014
【００６０】
健康なイヌおよび炎症性腸疾患（ＩＢＤ）に罹患しているイヌの両方で、臨床介入試験を行った。対照（比較例Ｉ）または試験食餌（実施例４）のいずれかを４）週間摂取した後に、糞便を集めた。糞便を、視覚的に、ヒルズペット栄養尺度（Hill’s Pet Nutrition Scale）１〜５の対象にし、ここで、１は水様の下痢を示し、５は、十分に形作られた堅い便を示す。図３に示すヒストグラムは、比較例Ｉによる組成物を摂取する（ヒストグラムバーの、べた塗りした灰色の部分）場合、または実施例４による組成物を摂取する（ヒストグラムバーの斜線部分）場合の、それぞれのイヌについての、２種の糞便スコアの平均を示す。実施例４による組成物を与えたイヌに由来する便は、より高いスコアのヒストグラムのバーの部分を占めるのであり、一方、より低い便スコアが、比較例Ｉによる組成物を消費するイヌにおいて、より頻繁に観察された。特に、数値的に、より少ないが、低いスコアは、胃腸障害の可能性を示し、ケアギバー（caregiver）に不安を生じさせ得る。糞便スコア３およびそれより下のスコアの全てを、比較例１による組成物を消費するイヌにおいてのみ観察したという事実は、実施例４による組成物が、低い便スコアを軽減するか、または修正する可能性、およびイヌのケアギバー（caregiver）に対して保証をもたらす可能性を示す。
【００６１】
実施例５
表１３（以下）に示す通り、例示的なペットフード組成物（実施例５）を調製する。全ての量を、ペットフード組成物の総重量に基づく、重量パーセントで提供する。ＡＡＦＣＯおよびＮＲＣが規定する栄養基準に従い、組成物を処方する。
【表１３】
2019500047.tif 000015
【００６２】
健康なイヌおよび炎症性腸疾患（ＩＢＤ）に罹患しているイヌの両方で、臨床介入試験を行った。対照（比較例ＩＩ）または試験食餌（実施例５）のいずれかを４）週間摂取した後に、糞便を集めた。糞便を、視覚的に、ヒルズペット栄養尺度１〜５の対象にし、ここで、１は水様の下痢を示し、５は、十分に形作られた堅い便を示す。図４に記載するデータが証拠となる通り、本発明の成分の組み合わせを含む食餌（実施例５）は、本発明の成分の組み合わせを含まない食餌（比較例ＩＩ）からもたらされる便の質に比べて、便の質の臨床上有意な改善を示す。
【００６３】
具体的には、図４は、スタック図の形式で、健康（左からバー１および２）ならびにＩＢＤのイヌ（左からバー３および４）が、比較例ＩＩ（バー１および３）または実施例５（バー２および４）を摂取する間に生じた糞便スコアの割合を示す。塗り潰されたたバーの視覚部分が大きいほど、その食餌における、その健康状態にあると判定された、関連する便スコアの割合が大きい。
【００６４】
図４において説明する結果を、以下の表形式（表１４）でも提供する。
【表１４】
2019500047.tif 000016
【００６５】
本発明の幾つかの実施形態は、前述の説明において開示されているが、本発明の多くの修飾および他の実施形態が、本発明が関係するものが、前述の説明および関連する図面において提示される教示の恩恵を有することを念頭に置くことは、当業者により理解される。従って、本発明は、本明細書において上で開示された具体的な実施形態に制限されないこと、ならびに多くの修飾および他の実施形態は、添付の請求項の範囲内に含まれることが意図されることが、理解される。さらに、具体的な用語が、本明細書において、ならびに以下の請求項において使用されるが、それらは、一般的かつ記述的意味でのみ使用され、記載される発明を制限する目的でも、以下の請求項を制限する目的でも使用されない。
【図１Ａ−Ｂ】
2019500047.tif 000017
【図１Ｃ】
2019500047.tif 000018
【図２Ａ−Ｂ】
2019500047.tif 000019
【図２Ｃ】
2019500047.tif 000020
【図３】
2019500047.tif 000021
【図４】
2019500047.tif 000022
【手続補正書】
【提出日】平成30年7月26日(2018.7.26)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
高溶解性繊維源および低溶解性繊維源を含む繊維成分と、
ポリフェノール源とを含む基材を含む、放出制御ペットフード組成物であって、
前記基材は、哺乳動物による摂取後に、前記ポリフェノール源を哺乳動物の下部消化器（ＧＩ）管に送達するように構成される、放出制御ペットフード組成物。
【請求項２】
高溶解性繊維源についての低溶解性繊維源に対する重量比が、約１：２０〜約１：１であるか、または、約１：１５〜約１：２であるが、約１：１０〜約１：３であるか、約１：５〜約１：３であるか、もしくは、約１：４である、ペットフード組成物。
【請求項３】
前記高溶解性繊維源が、オート麦ふすま、ソバ挽き割り、エンドウ豆ふすま、大麦、トマトかす、柑橘類パルプ、ビートパルプ、及びそれらの２つ以上の組み合わせを含むか、または、これらとともに、セルロース系材料、ピーカン繊維、又はそれらの組み合わせを含む、請求項１または２のペットフード組成物。
【請求項４】
前記ポリフェノール源は、食品又は植物由来であるか、
食品由来であって、果物または野菜由来のポリフェノールを含むか、または、
食品由来であって、果物または野菜由来のポリフェノールを含み、フラボノイドまたはフェノール酸を含む、請求項１〜３のいずれかのペットフード組成物。
【請求項５】
前記ポリフェノール源は、デヒドロキシロスマリン酸、クマロイルネピトリン、ユーパフォリン、カルノソール、スクテラリン、ケンフェロール、ロスマリン酸、ロスマノール、シルシマリチン、ルテオリン、６−メトキシ−ルテオリン、７−エピロスマンノール、ケルセチン、カテキン、ヘスペリジン、シアニジン、及びこれらの２つ以上の組み合わせから選択されるポリフェノールを提供する、請求項１〜４のいずれかに記載のペットフード組成物。
【請求項６】
アミノ酸プロファイルを含む加水分解された動物性または植物性タンパク質の源をさらに含む、
アミノ酸プロファイルを含む加水分解された動物性または植物性タンパク質の源として、鶏の肝臓を含む、及び／または
アミノ酸プロファイルを含む加水分解された動物性または植物性タンパク質の源が、約２５〜約４５重量％の有効な含有量で存在する、請求項１〜５のいずれかのペットフード組成物。
【請求項７】
高ドコサヘキサエン酸の魚油をさらに含むか、または、
高ドコサヘキサエン酸の魚油をさらに含み、前記高ドコサヘキサエン酸の魚油の有効な含有量が、約０．５〜約２．５重量％である、請求項１〜６のいずれかのペットフード組成物。
【請求項８】
前記繊維成分が、ピーカン殻；亜麻仁；柑橘類パルプ；ビートパルプ；クランベリーかす；またはその２つ以上の組み合わせを含む、請求項１〜２および４〜７のいずれか１項に記載のペットフード組成物。
【請求項９】
約１〜約１０重量％ピーカン殻、または約２．５〜約８重量％ピーカン殻；
約１〜約５重量％亜麻仁、または約２〜約４重量％亜麻仁；
約１〜約５重量％柑橘類パルプ、または約２〜約３重量％柑橘類パルプ；
約１〜約５重量％ビートパルプ、または約２〜約３重量％ビートパルプ；および
約０．１〜約２重量％クランベリーかす、または約０．５〜約１．５重量％クランベリーかす、を含む、請求項８に記載のペットフード組成物。
【請求項１０】
約７重量％ピーカン殻；
約３重量％亜麻仁；
約２．５重量％柑橘類パルプ；
約２．５重量％ビートパルプ；および
約１重量％クランベリーかす、を含む、請求項８または９に記載のペットフード組成物。
【請求項１１】
約３．５重量％ピーカン殻；
約１．５重量％亜麻仁；
約１．２５重量％柑橘類パルプ；
約１．２５重量％ビートパルプ；および
約０．５重量％クランベリーかす、を含む、請求項８または９に記載のペットフード組成物。
【請求項１２】
ヒト以外の哺乳動物における炎症性の疾患、状態若しくは障害の症状について、治療、予防、又は改善する方法であって、請求項１〜１１のいずれかに記載の組成物の有効量を、それを必要とするヒト以外の哺乳動物に投与することを含む、方法。
【請求項１３】
ヒト以外の哺乳動物の腸内ミクロフローラを有益に操作する方法であって、請求項１〜１１のいずれかに記載の組成物の有効量を、それを必要とする哺乳動物に投与することを含む、方法。
【請求項１４】
ペットフード組成物を作製する方法であって、
基材を押し出す工程であって、前記基材が、
高溶解性繊維源及び低溶解性繊維源を含む繊維成分と、
ポリフェノール源と、を含むものである、押し出す工程と、
キブルに表面コーティングを施す工程と、を含み、
前記基材は、前記ポリフェノール源を、哺乳動物によって摂取された後に前記哺乳動物の下部消化器（ＧＩ）管へ送達するように構成される、方法。
【請求項１５】
前記表面コーティングは美味剤を含む、請求項１４に記載の方法。
【国際調査報告】
2019500047.tif 000023
2019500047.tif 000024
2019500047.tif 000025