(57)【要約】  本発明によれば、分子に結合することができる第１のリガンド（４）を含む第１のフローセル（２）と、第１のフローセルを収集リザーバ（３９）に選択的に流体接続することができるコンジットとを含む、アセンブリを使用して、分子を回収する方法であって；（ａ）試料流体を、コンジットに沿って前記第１のフローセル（２）内に流すステップ；（ｂ）試料流体が第１のフローセル（２）内に維持されるように、しかしコンジットの前記少なくとも一部はバッファー流体によって清浄化されるように、第１のフローセル（２）内にいかなるバッファー流体も流すことなく、バッファー流体をコンジットの少なくとも一部に流通させるステップ；（ｃ）バッファー流体を第１のフローセル（２）内に流して、試料流体を第１のフローセル（２）の外に流出させるステップ；（ｄ）流体を、コンジットに沿って第１のフローセル（２）内に流し、収集リザーバ（３９）に流入させて、第１のリガンド（４）に結合しており、そしてリガンド（４）から解離するようになった試料流体の分子が、第１のフローセル（２）内を流れ収集リザーバに運ばれる流体中に収集されるようにするステップを含む方法が提供される。第１のリガンド（４）から受動的に解離する分子を回収するための、対応する方法と、第１のリガンド（４）から能動的に解離する分子を回収するための、対応する方法とが提供される。上述の方法を実施するのに使用することができる、対応するアセンブリがさらに提供される。
2019514356.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
試料中の分子を回収するために使用することができるアセンブリであって、
分子に結合することができる第１のリガンド（４）を含む第１のフローセル（２）；
第１のコンジット（５）を介して前記第１のフローセル（２）の第１の流体ポート（２ａ）に接続された少なくとも１つの廃棄物リザーバ（７、２７）、および前記廃棄物リザーバ（７、２７）を前記第１のフローセル（２）の第２の流体ポート（２ｂ）に接続する第２のコンジット（１５）；ならびに
前記第１のコンジット（５）と前記廃棄物リザーバ（７、２７）との間の流体連絡を制御するように配置構成された第１の弁（８）、および前記第２のコンジット（１５）と前記廃棄物リザーバ（７、２７）との間の流体連絡を制御するための第２の弁（２８）；
第１の副コンジット（１０）を介して前記第１のコンジット（５）に流体接続された、バッファー流体を保持することができる少なくとも１つのバッファーリザーバ（９、１９）であって、前記第１の副コンジット（１０）が、前記第１のフローセル（２）の前記第１の流体ポート（２ａ）と前記第１の弁（８）との間に位置付けられた第１の接合部（１１）で前記第１のコンジット（５）に接続され、バッファー流体を、前記バッファーリザーバ（９、１９）から前記第１の副コンジット（１０）内に選択的に供給することができる、少なくとも１つのバッファーリザーバ（９、１９）；
少なくとも収集リザーバ（３９）と、試料流体を保持することができる試料リザーバ（２９）とを含むユニット（７１、７２）であって、前記ユニット（７１、７２）が、第２の副コンジット（２０）を介して前記第２のコンジット（１５）に流体接続され、前記第２の副コンジット（２０）が、前記第１のフローセル（２）の前記第２の流体ポート（２ｂ）と前記第２の弁（２８）との間に位置付けられた第２の接合部（２１）で前記第２のコンジット（１５）に接続され、前記ユニット（７１、７２）が、前記収集リザーバ（３９）、バッファーリザーバ（９、１９）または試料リザーバ（２９）を前記第２の副コンジット（２０）に選択的に流体接続するように動作可能であるユニット（７１、７２）、
を含む、アセンブリ。
【請求項２】
前記第１の副コンジット（１０）を介して前記第１のコンジット（５）に流体接続することができる第１のバッファーリザーバ（９）と、前記第２の副コンジット（２０）を介して前記第２のコンジット（１５）に流体接続することができる第２のバッファーリザーバ（１９）とを含む、請求項１に記載のアセンブリ。
【請求項３】
前記第１のバッファーリザーバ（９）が、第１のシリンジ・ポンプ（９）を含み、前記第２のバッファーリザーバ（１９）が、第２のシリンジ・ポンプ（１９）を含み、前記ユニット（７１、７１）が、前記第２の副コンジット（２０）に流体接続する第３の弁（１８）と、前記シリンジ・ポンプ（１９）を前記第３の弁（１８）に流体接続する貯蔵コンジット（３０）とを含み、前記第３の弁（１８）は、選択的に、前記貯蔵コンジット（３０）を前記第２の副コンジット（２０）に流体接続するように、または前記収集リザーバ（３９）を前記第２の副コンジット（２０）に流体接続するように、または前記試料リザーバ（２９）を前記第２の副コンジット（２０）に流体接続するように動作可能である、請求項２に記載のアセンブリ。
【請求項４】
前記第２の接合部（２１）が、前記第２の弁（２８）によりも、前記第１のフローセル（２）の前記第２の流体ポート（２ｂ）に近付けて位置付けられる、請求項１〜３のいずれか一つに記載のアセンブリ。
【請求項５】
前記第１の接合部（１１）が、前記第１の弁（８）によりも、前記第１のフローセル（２）の前記第１の流体ポート（２ａ）に近付けて位置付けられる、請求項１〜４のいずれか一つに記載のアセンブリ。
【請求項６】
第２のフローセル（２’）、前記第２のフローセル（２’）の第１のポート（２ａ）と第１の廃棄物リザーバ（７）との間のさらに別の選択弁（８’）、前記第１のバッファーリザーバ（９）と前記第１の接合部（１１）との間のさらに別の選択弁（３８）、および接合部（３１）とさらに別の接合部（１１’）の間の第７の選択弁（３８’）をさらに含み、前記接合部（３１）は、前記第１のバッファーリザーバ（９）と、前記第１のバッファーリザーバ（９）および前記第１の接合部（１１）の間にある前記選択弁（３８）との間にあり、前記のさらに別の接合部（１１’）は、前記第２のフローセル（２’）の前記第１のポート（２ａ）と、前記第２のフローセル（２’）の第１のポート（２ａ）および第１の廃棄物リザーバ（７）の間にある前記選択弁（８’）との間にある、請求項１〜５のいずれか一つに記載のアセンブリ。
【請求項７】
フローセル（２、２’、２’’、２’’’）がカートリッジ内に設けられ、前記カートリッジは、当該カートリッジが選択的に、前記アセンブリの固定部分に接続されまたは前記固定部分から接続解除されるように、前記アセンブリの前記固定部分に設けられた接続手段と協働するように選択的に配置構成することができる接続手段を含む、請求項１〜６のいずれか一つに記載のアセンブリ。
【請求項８】
分子に結合することができる第１のリガンド（４）を含む第１のフローセル（２）と前記第１のフローセルを収集リザーバ（３９）に選択的に流体接続することができるコンジット（２０、１５ａ）とを含むアセンブリを使用する、分子を回収する方法であって、
（ａ）  試料流体を、前記コンジットに沿って前記第１のフローセル（２）中に流通させるステップ、
（ｂ）  バッファー流体を前記コンジットの少なくとも一部を通して流通させるステップであって、試料流体は前記第１のフローセル（２）内に維持されるが前記のコンジットの少なくとも一部はバッファー流体によって洗浄されるように、前記バッファー流体を前記第１のフローセル（２）を通しては流通させないステップ、
（ｃ）  バッファー流体を前記第１のフローセル（２）を通して流通させて、前記試料流体を前記第１のフローセル（２）から外へ流出させるステップ、
（ｄ）  流体を、前記第１のフローセル（２）を通して、前記コンジットに沿って、および前記収集リザーバ（３９）中に流入させることにより、第１のリガンド（４）に結合し、そして前記リガンド（４）から解離するようになった前記試料流体の分子が、前記第１のフローセル（２）を通して流通して前記収集リザーバ（３９）に運ばれる流体中に収集されるようにするステップ、
を含む、方法。
【請求項９】
流体を、前記第１のフローセルを通して、前記コンジットに沿って、および前記収集リザーバ中に流通させることにより、第１のリガンドに結合し、そして前記第１のリガンド（４）から解離するようになった前記試料流体の分子が、前記第１のフローセルを通して流通して前記収集リザーバに運ばれる前記流体中に収集されるようにする前記ステップ（ｄ）が、
バッファー流体を、前記第１のフローセルを通して、前記コンジットに沿って、および前記収集リザーバ中に流通させることにより、第１のリガンドに結合し、そして前記第１のリガンドから解離した前記試料流体の分子が、前記第１のフローセルを通して流通して前記収集リザーバに運ばれるバッファー流体中に収集されるようにするステップ、
を含む、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
バッファー流体を前記第１のフローセルを通して流通させて、前記試料流体を前記第１のフローセルから外へ流出させる前記ステップ（ｃ）が、バッファー流体を、１０ミリ秒〜１０秒の間の期間にわたって前記第１のフローセルを通して流通させるステップを含む、請求項８または９に記載の方法。
【請求項１１】
請求項１〜９のいずれか一つに記載の前記アセンブリを、少なくともステップ（ａ）〜（ｄ）を行うために使用することを含む、請求項８〜１０のいずれか一つに記載の方法。
【請求項１２】
（ａ）  試料流体を、前記第２の副コンジット（２０）に沿って、前記第１のフローセル（２）を通して、前記第１のコンジット（５）に沿って、および前記廃棄物リザーバ（７、２７）中に流通させるステップ、
（ｂ）  バッファー流体を、前記第２のバッファーリザーバ（１９）から外へ、前記第２の副コンジット（２０）に沿って、および前記廃棄物リザーバ（７、２７）中に流通させるステップ、
（ｃ）  バッファー流体を前記第１の試料リザーバ（９）から外へ、前記第１の副コンジット（１０）に沿って、および前記廃棄物リザーバ（７、２７）中に流通させるステップ、
（ｄ）  バッファー流体を前記第１のバッファーリザーバ（９）から外へ、前記第１の副コンジット（１０）に沿って、前記第１のフローセル（２）を通して、前記第２のコンジット（１５）に沿って、および前記廃棄物リザーバ（７、２７）中に流通させることにより、前記試料流体が前記第１のフローセル（２）から外へ流出させるようにするステップ、
（ｅ）  前記第１のフローセル（２）内を流れるバッファー流体中に、前記第１のフローセル（２）内で第１のリガンド（４）から受動的に解離した分子を収集するステップ、
（ｆ）  前記分子を含有する前記バッファー流体を、前記第２の副コンジット（２０）を介して、前記収集リザーバ（３９）中に収集するステップ
を含む、請求項１に記載のアセンブリを使用する請求項８に記載の方法。
【請求項１３】
（ａ）  試料流体を、前記第２の副コンジット（２０）に沿って、前記第１のフローセル（２）を通して、前記第１のコンジット（５）に沿って、および前記廃棄物リザーバ（７、２７）中を流通させるステップ、
（ｂ）  バッファー流体を前記第１の試料リザーバ（９）から外へ、前記第１の副コンジット（１０）に沿って、前記第１のフローセル（２）を通して、および前記第２のコンジット（１５）に沿って、および前記廃棄物リザーバ（７、２７）中に流通させるステップ、
（ｃ）  バッファー流体を前記第２の最初の試料リザーバ（１９）から外へ、前記第２の副コンジット（２０）に沿って、および前記廃棄物リザーバ（７、２７）中に流通させるステップ、
（ｄ）  再生流体を、前記第２の副コンジット（２０）に沿って、および前記第１のフローセル（２）中に流通させるステップであって、前記再生流体が、前記第１のフローセル（２）内の第１のリガンドに結合した分子を前記第１のリガンドから解離させるステップ、
（ｅ）  前記再生流体中に、前記第１のリガンドから解離した分子を収集するステップ、
（ｆ）  バッファー流体を、前記第２の最初の試料リザーバ（１９）から外へ、前記第２の副コンジット（２０）に沿って、および前記廃棄物リザーバ（７、２７）中に流通させるステップ、
（ｇ）  前記第２の副コンジット（２０）を介して、前記分子を含有する再生流体を、前記収集リザーバ（３９）中に収集するステップ、
を含む、請求項１に記載のアセンブリを使用する請求項８に記載の方法。
【請求項１４】
複数の異なる流体を試料リザーバもしくはレセプタクルに溜めることにより、前記試料流体を調製するステップをさらに含む、請求項８〜１３のいずれか一つに記載の方法。
【請求項１５】
１つまたは複数のフローセル（２、２’、２’’、２’’’）と、ミクロ流体アセンブリの固定部分に設けられた接続手段に対して協働するよう選択的に配置構成することができる接続手段とを含み、従って選択的に前記固定部分に接続しまたは前記固定部分から接続解除することができるカートリッジであって、
前記カートリッジが、分子に結合することができる第１のリガンド（４）を備えかつ第１の流体ポート（２ａ）および第２の流体ポート（２ｂ）を有する、少なくとも第１のフローセル（２）を含み、
前記固定部分が、少なくとも、第１のコンジット（５）を介して前記第１のフローセル（２）の前記第１の流体ポート（２ａ）に接続可能な１つの廃棄物リザーバ（７、２７）、および前記廃棄物リザーバ（７、２７）を前記第１のフローセル（２）の第２の流体ポート（２ｂ）に接続できる第２のコンジット（１５）と；前記第１のコンジット（５）および前記廃棄物リザーバ（７、２７）の間の流体連絡を制御するように配置構成された第１の弁（８）と、前記第２のコンジット（１５）および前記廃棄物リザーバ（７、２７）の間の流体連絡を制御する第２の弁（２８）と；バッファー流体を保持することができ、前記第１の副コンジット（１０）を介して前記第１のコンジット（５）に流体接続する少なくとも１つのバッファーリザーバ（９、１９）であって、前記第１の副コンジット（１０）が、前記第１のフローセル（２）の前記第１の流体ポート（２ａ）と前記第１の弁（８）との間に位置付けられた第１の接合部（１１）で前記第１のコンジット（５）に接続され、バッファー流体を、前記バッファーリザーバ（９、１９）から前記第１の副コンジット（１０）に選択的に供給することができる、バッファーリザーバ（９、１９）と；少なくとも収集リザーバ（３９）、および試料流体を保持することができる試料リザーバ（２９）を含むユニット（７１、７２）であって、前記ユニット（７１、７２）が、第２の副コンジット（２０）を介して前記第２のコンジット（１５）に流体接続され、前記第２の副コンジット（２０）が、前記第１のフローセル（２）の前記第２の流体ポート（２ｂ）と前記第２の弁（２８）との間に位置付けられた第２の接合部（２１）で前記第２のコンジット（１５）に接続され、前記ユニット（７１、７２）が、選択的に、前記収集リザーバ（３９）、バッファーリザーバ（９、１９）または試料リザーバ（２９）を前記第２の副コンジット（２０）に流体接続するように動作可能であるユニット（７１、７２）とを含み、
したがって、前記カートリッジが前記固定部分に接続されたときに、請求項１に記載のミクロ流体アセンブリが形成される、
カートリッジ。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、分子を回収するための方法およびアセンブリに関し；詳細には、汚染が低減された、リガンドに結合した分子を回収するための方法およびアセンブリに関する。
【背景技術】
【０００２】
既存の方法では、試験中の試料流体は、センサのフローセルなどのフローセル、またはリガンドを含む親和性精製カラムを通過する。リガンドは、事前に定義された特徴を有する、例えばリガンドに対して高い親和性または誘引力を有する分子に結合する。このように、どの分子がリガンドに結合するようになるのかを明らかにすることによって、試料流体中のどの分子が、リガンドに対して高い親和性または誘引力を有するという前記事前に定義された特徴を有するのかを決定することができる。
【０００３】
どの分子がリガンドに結合するようになるのかを明らかにするために、リガンドに結合する分子は、バッファー流体を使用して収集される。バッファー流体はフローセル内に流れて、リガンドに結合した分子を収集し；次いで収集された分子を含有するバッファー流体は、フローセルから質量分光計まで、コンジットに沿って流れ；質量分光計では、収集された分子を含有するバッファー流体を分析して、バッファー流体に含有される分子を同定する。バッファー流体に含有される分子の同定は、リガンドに結合した分子を同定し、前記事前に定義された特徴を有する試料流体中の分子を最終的には同定する。
【０００４】
不都合なことに、バッファー流体がコンジットに沿ってフローセルから質量分光計に流れるにつれ、収集された分子を含有するバッファー流体は、コンジット内に存在する外来分子によって汚染される。コンジット内に存在する外来分子は、バッファー流体がコンジットに沿ってフローセルから質量分光計に流れるにつれ、バッファー流体に収集されることになり；質量分光計での分析は、バッファー流体が外来分子を含有することを示すことになり、したがって、外来分子がリガンドに結合しかつ前記事前に定義された特徴を有すると、誤って示すことになる。
【０００５】
一例において、フローセルと質量分光計との間のコンジットは、残存試料流体を含有していてもよく；バッファー流体がコンジットに沿ってフローセルから質量分光計まで流れるにつれ、コンジット内に存在する残存試料流体は、バッファー流体に収集されることになり；その結果、次に、バッファー流体は、リガンドに結合した分子だけではなく試料流体中に存在する異なるタイプの分子の全てを含有することになる。その結果、当初の試料流体が前記事前に定義された特徴を有する分子を含有した場合、質量分光計で正確に同定することが可能ではなくなる。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明の目的は、上述の欠点のいくつかを少なくとも緩和することである。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明によれば、試料中の分子を回収するのに使用することができるアセンブリが提供され、このアセンブリは、分子に結合することができる第１のリガンドを含む第１のフローセル；第１のコンジットを介して第１のフローセルの第１の流体ポートに接続される少なくとも１つの廃棄物リザーバ、および前記廃棄物リザーバを第１のフローセルの第２の流体ポートに接続する第２のコンジット；ならびに第１のコンジットと廃棄物リザーバとの間の流体連絡を制御するように配置構成された第１の弁、および第２のコンジットと廃棄物リザーバとの間の流体連絡を制御する手段、第１の副コンジットを介して第１のコンジットに流体接続された、バッファー流体を保持することができる少なくとも１つのバッファーリザーバであって、第１の副コンジットが、第１のフローセルの第１の流体ポートと第１の弁との間に位置付けられた第１の接合部で第１のコンジットに接続され、バッファー流体を、バッファーリザーバから第１の副コンジット内に選択的に供給することができる、少なくとも１つのバッファーリザーバ；少なくとも収集リザーバと、試料流体を保持することができる試料リザーバとを含むユニットであって、前記ユニットが、第２の副コンジットを介して第２のコンジットに流体接続され、第２の副コンジットが、第１のフローセルの第２の流体ポートと第２の弁との間に位置付けられた第２の接合部で第２のコンジットに接続され、ユニットが、収集リザーバ、バッファーリザーバ、または試料リザーバを第２の副コンジットに選択的に流体接続するよう動作可能であるユニットを含む。
【０００８】
第２のコンジットと廃棄物リザーバとの間の流体連絡を制御する手段は、第２の弁および／または流動制限器を含んでいてもよい。
【０００９】
アセンブリは、第２のフローセルをさらに含んでいてもよい。
【００１０】
アセンブリは、第２のフローセルの第１のポートと第１の廃棄物リザーバとの間のその他の選択弁、第１のバッファーリザーバと前記第１の接合部との間のその他の選択弁；および接合部とその他の接合部との間の第７の選択弁をさらに含んでいてもよく、前記接合部は、第１のバッファーリザーバと、第１のバッファーリザーバおよび第１の接合部の間にある前記選択弁との間にあり、前記その他の接合部は、前記第２のフローセルの前記第１のポートと、第２のフローセルの第１のポートおよび第１の廃棄物リザーバの間にある前記選択弁との間にある。
【００１１】
アセンブリは、第２のフローセルの第２のポートと第２の廃棄物リザーバとの間に、他の選択弁をさらに含んでいてもよい。
【００１２】
アセンブリは、第３のフローセルおよび第４のフローセルをさらに含んでいてもよい。
【００１３】
一実施形態では、フローセルはカートリッジ内に設けられ、カートリッジは、アセンブリの固定部分に設けられた接続手段と協働するよう選択的に配置構成される接続手段を含み、したがってカートリッジは、アセンブリの固定部分に選択的に接続されまたは接続解除されるようになる。
【００１４】
アセンブリは、第１の廃棄物リザーバおよび第２の廃棄物リザーバを含んでいてもよく、第１の廃棄物リザーバは、第１のコンジットを介して第１のフローセルの第１の流体ポートに流体接続することができ、第２の廃棄物リザーバは、第２のコンジットを介して第１のフローセルの第２の流体ポートに流体接続することができる。
【００１５】
実施形態では、第１のフローセルは、１ｍｍ２よりも大きい面積を占有する複数の第１のリガンドを含む。
【００１６】
アセンブリは、第１の副コンジットを介して第１のコンジットに流体接続することができる、第１のバッファーリザーバと、第２の副コンジットを介して第２のコンジットに流体接続することができる、第２のバッファーリザーバとを含んでいてもよい。
【００１７】
第１のバッファーリザーバは、第１のシリンジ・ポンプを含んでいてもよい。
【００１８】
第２のバッファーリザーバは、第２のシリンジ・ポンプを含んでいてもよい。
【００１９】
ユニットは、第２の副コンジットに流体接続された第３の弁；およびシリンジ・ポンプを第３の弁に流体接続する貯蔵コンジットを含んでいてもよく；第３の弁は、選択的に、貯蔵コンジットを第２の副コンジットに流体接続するように、または収集リザーバを第２の副コンジットに流体接続するように、または試料リザーバを第２の副コンジットに流体接続するように、動作可能であってもよい。
【００２０】
ユニットは、収集リザーバおよび試料リザーバが表面に支持されるＸ−Ｙテーブルをさらに含んでいてもよく；Ｘ−Ｙテーブルは、選択的に、収集リザーバを第３の弁に流体接続するように、または試料リザーバを第３の弁に流体接続するように、可動である。
【００２１】
ユニットは、第３の廃棄物リザーバと、再生流体を保持することができる溶出試薬リザーバとをさらに含んでいてもよい。
【００２２】
第３の廃棄物リザーバおよび／または溶出試薬リザーバは、Ｘ−Ｙテーブル上に支持されてもよい。Ｘ−Ｙテーブルは、選択的に、収集リザーバを第３の弁に流体接続するように、または試料リザーバを第３の弁に流体接続するように、または第３の廃棄物リザーバを第３の弁に流体接続するように、または溶出試薬リザーバを第３の弁に流体接続するように、可動であってもよい。
【００２３】
ユニットは、オートサンプラを含んでいてもよい。
【００２４】
第２の接合部は、第２の弁に対してよりも、第１のフローセルの第２の流体ポートに対して、より近く位置付けられてもよい。
【００２５】
第１の接合部は、第１の弁に対してよりも、第１のフローセルの第１の流体ポートに対して、より近く位置付けられていてもよい。
【００２６】
第１のフローセルは、１ｍｍ２よりも大きい面積を占有する複数のリガンドを含んでいてもよい。
【００２７】
本発明のその他の態様によれば、分子に結合することができるリガンドを含む第１のフローセルと、第１のフローセルを収集リザーバに選択的に流体接続することができるコンジットとを含むアセンブリを使用して、分子を回収する方法が提供され；この方法は、
（ａ）  試料流体を、コンジットに沿って第１のフローセル内に流すステップ；
（ｂ）  試料流体が第１のフローセル内に維持されるように、しかし前記コンジットの少なくとも一部はバッファー流体により清浄化されるように、第１のフローセル内にいかなるバッファー流体も流すことなく、バッファー流体をコンジットの少なくとも一部に流すステップ；
（ｃ）  バッファー流体を第１のフローセル内に流して、試料流体を第１のフローセルの外に流出させるステップ；
（ｄ）  流体を、コンジットに沿って第１のフローセル内に流し、収集リザーバ内に流して、リガンドに結合しており、そしてリガンドから解離するようになった試料流体の分子が、第１のフローセル内を流れ収集リザーバに運ばれる流体に収集されるようにするステップ
を含む。
【００２８】
流体を、コンジットに沿って第１のフローセル内に流し、収集リザーバ内に流して、リガンドに結合しており、そしてリガンドから解離するようになった試料流体の分子が、第１のフローセル内を流れ収集リザーバに運ばれる流体に収集されるようにするステップ（ｄ）は、バッファー流体を、コンジットに沿って第１のフローセル内に流し、収集リザーバ内に流して、リガンドに結合しており、そしてリガンドから解離した試料流体の分子が、第１のフローセル内を流れ収集リザーバに運ばれるバッファー流体に収集されるようにするステップを、含んでいてもよい。
【００２９】
バッファー流体を第１のフローセル内に流して、試料流体を第１のフローセルの外に流出させるステップ（ｃ）は、バッファー流体を、１０ミリ秒〜１０秒の間の期間にわたり第１のフローセル内に流すステップを含んでいてもよい。
【００３０】
流体を、コンジットに沿って第１のフローセル内に流し、収集リザーバ内に流して、リガンドに結合しており、そしてリガンドから解離するようになった試料流体の分子が、第１のフローセル内を流れ収集リザーバに運ばれる流体に収集されるようにするステップ（ｄ）は、再生流体を、コンジットに沿って第１のフローセル内に流し、収集リザーバ内に流すことを含み、再生流体は、リガンドに結合した分子を、それらが結合しているリガンドから解離させ、解離した分子は、第１のフローセル内を流れ収集リザーバに運ばれる再生流体に収集される。
【００３１】
バッファー流体を、コンジットの少なくとも一部に流すステップ（ｂ）は、前記コンジットの少なくとも一部の体積の３〜５倍の間に等しい体積のバッファー流体を、前記コンジットの少なくとも一部に沿って流すステップを含んでいてもよい。
【００３２】
方法は、リガンドを含む第１のフローセルの代わりに、異なるタイプのリガンドを含む第１のフローセルを用いるステップと、ステップ（ａ）〜（ｄ）を繰り返すステップとを、さらに含んでいてもよい。
【００３３】
方法は、少なくともステップ（ａ）〜（ｄ）を行うのに上述のアセンブリのいずれかを使用するステップを、含んでいてもよい。
【００３４】
方法は、上述のアセンブリのいずれかを使用して、
（ａ）  試料流体を、第２の副コンジットに沿って第１のフローセル内に流し、第１のコンジットに沿って、廃棄物リザーバ内に流すステップ；
（ｂ）  バッファー流体を第２のバッファーリザーバの外に流し、第２の副コンジットに沿って、廃棄物リザーバ内に流すステップ；
（ｃ）  バッファー流体を第１の試料リザーバの外に流し、第１の副コンジットに沿って、廃棄物リザーバ内に流すステップ；
（ｄ）  バッファー流体を第１のバッファーリザーバの外に流し、第１の副コンジットに沿って、第１のフローセル内に流し、第２のコンジットに沿って、廃棄物リザーバ内に流し、試料流体を第１のフローセルの外に流出させるようにするステップ；
（ｅ）  第１のフローセル内を流れるバッファー流体中に、第１のフローセル内でリガンドから受動的に解離した分子を収集するステップ；
（ｆ）  前記分子を含有するバッファー流体を、第２の副コンジットを介して、収集リザーバに収集するステップ
を含む。
【００３５】
方法は、バッファー流体を第１の試料リザーバの外に流し、第１の副コンジットに沿って、第１のフローセル内に流し、第２のコンジットに沿って、廃棄物リザーバ内に流すステップを、さらに含んでいてもよい。
【００３６】
方法は、第２の副コンジットに沿って試料流体を流し、廃棄物リザーバ内に流すステップを、さらに含んでいてもよい。
【００３７】
バッファー流体を第１のバッファーリザーバの外に流し、第１の副コンジットに沿って、第１のフローセル内に流し、第２のコンジットに沿って、廃棄物リザーバ内に流し、試料流体が第１のフローセルの外に一掃されるようにする前記ステップ（ｄ）は、
前記バッファー流体を、１０ミリ秒〜１０秒の間の期間にわたり第１のフローセル内に流すステップ
を含んでいてもよい。
【００３８】
方法は、上述のアセンブリのいずれかを使用して、
（ａ）  試料流体を、第２の副コンジットに沿って第１のフローセル内に流し、第１のコンジットに沿って、廃棄物リザーバ内に流すステップ；
（ｂ）  バッファー流体を第１の試料リザーバの外に流し、第１の副コンジットに沿って、第１のフローセル内に流し、第２のコンジットに沿って、廃棄物リザーバ内に流すステップ；
（ｃ）  バッファー流体を第２の最初の試料リザーバの外に流し、第２の副コンジットに沿って、廃棄物リザーバ内に流すステップ；
（ｄ）  再生流体を、第２の副コンジットに沿って、第１のフローセル内に流すステップであって、再生流体が、第１のフローセル内のリガンドに結合する分子をリガンドから解離させるステップ；
（ｅ）  再生流体中に、リガンドから解離した分子を収集するステップ；
（ｆ）  バッファー流体を、第２の最初の試料リザーバの外に流し、第２の副コンジットに沿って、廃棄物リザーバ内に流すステップ；
（ｇ）  第２の副コンジットを介して、前記分子を含有する再生流体を、収集リザーバ内に収集するステップ
を含む。
【００３９】
方法は、バッファー流体を第１の試料リザーバの外に流し、第１の副コンジットに沿って、廃棄物リザーバ内に流すステップを、さらに含んでいてもよい。
【００４０】
ステップ（ｄ）は、再生流体を、第２の副コンジットに沿って、第１のフローセル内を経て、第１の副コンジットの少なくとも一部に沿って、流すステップを含んでいてもよい。
【００４１】
方法は、収集リザーバに収集された流体を分析デバイスに通すステップと；分析デバイスを使用して、第１のフローセル内でリガンドに結合した流体中の分子を同定するステップとを、さらに含んでいてもよい。
【００４２】
分析デバイスは、質量分光計を含んでいてもよい。
【００４３】
方法は、分子が第１のフローセル内でリガンドに結合したことを検出するためにモニタするステップを、さらに含んでいてもよい。
【００４４】
方法は、分子が第１のフローセル内でリガンドに結合したことを検出するためにモニタするステップと、
モニタするステップによって、分子が第１のフローセル内でリガンドに結合したことを検出する場合のみ、収集リザーバに収集された流体を、第１のフローセル内でリガンドに結合した流体中の分子を同定するために使用することができる分析デバイスに通すステップと
を、さらに含んでいてもよい。
【００４５】
方法は、複数の異なる流体を試料リザーバまたはレセプタクルに貯めることにより、試料流体を調製するステップを、さらに含んでいてもよい。
【００４６】
本発明のその他の態様によれば、カートリッジが提供され、このカートリッジは、１つまたは複数のフローセルと、ミクロ流体アセンブリの固定部分に設けられた接続手段に対して協働するよう選択的に配置構成することができる接続手段とを含むことにより、カートリッジが、選択的に固定部分と接続しまたは固定部分から接続解除することができるようになされており、カートリッジは、分子に結合することができる第１のリガンドを含みかつ第１の流体ポートおよび第２の流体ポートを有する少なくとも第１のフローセルを含み、固定部分は、廃棄物リザーバを第１のフローセルの第２の流体ポートに接続することができる第１のコンジットおよび第２のコンジットを介して第１のフローセルの第１の流体ポートに接続可能な少なくとも１つの廃棄物リザーバと、第１のコンジットと廃棄物リザーバとの間の流体連絡を制御するように配置構成された第１の弁と、第２のコンジットと廃棄物リザーバとの間の流体連絡を制御する第２の弁とを含む、フローセルおよび接続手段と；第１の副コンジットを介して第１のコンジットに流体接続する、バッファー流体を保持することができる少なくとも１つのバッファーリザーバであって、第１の副コンジットが、第１のフローセルの第１の流体ポートと第１の弁との間に位置付けられた第１の接合部で第１のコンジットに接続され、バッファー流体を、バッファーリザーバから第１の副コンジットに選択的に供給することができる、バッファーリザーバと；少なくとも収集リザーバと、試料流体を保持することができる試料リザーバとを含むユニットであって、前記ユニットが、第２の副コンジットを介して第２のコンジットに流体接続され、第２の副コンジットが、第１のフローセルの第２の流体ポートと第２の弁との間に位置付けられた第２の接続部で第２のコンジットに接続され、ユニットが、選択的に、収集リザーバ、バッファーリザーバ、または試料リザーバを第２の副コンジットに流体接続するよう動作可能であるユニットとを含み、その結果、上述のミクロ流体アセンブリのいずれか１つによるミクロ流体アセンブリは、カートリッジが固定部分に接続されたときに形成されるようになる。
【００４７】
本発明は、単なる例として与えられかつ図により例示される、実施形態の記述の助けを借りて、より良く理解されることになる。
【図面の簡単な説明】
【００４８】
【図１】本発明の好ましい実施形態による、ミクロ流体アセンブリの概略図を提示する。
【図２】本発明の別の実施形態による、ミクロ流体アセンブリの概略図を提示する。
【図３】本発明の別の実施形態による、ミクロ流体アセンブリの概略図を提示する。
【図４】本発明の別の実施形態による、ミクロ流体アセンブリの概略図を提示する。
【図５】本発明の別の実施形態による、ミクロ流体アセンブリの概略図を提示する。
【図６ａ】使い捨てカートリッジの一部の斜視図を提示する。
【図６ｂ】使い捨てカートリッジおよびプランジャを、互いに機械的に協働させて、本発明によるミクロ流体アセンブリを形成することができる、プランジャの斜視図を提示する。
【図７】図６ａに示される使い捨てカートリッジの一部の底面図である。
【発明を実施するための形態】
【００４９】
図１は、生化学的感知に適切な、例えばリガンドに対して高い親和性を有する未知の分子のスクリーニング、またはリガンドに結合する試料流体中の未知の濃度での公知の分子の検出もしくは定量に適切な、本発明の一実施形態によるミクロ流体アセンブリ１の概略図を提示する。例は、小分子薬およびそれらの薬物標的、例えばシクロオキシゲナーゼに結合するアセチルサリチル酸（アスピリンとしても公知である。）；または、体液中の、ヒト上皮成長因子受容体２型などの癌バイオマーカーを検出するのに使用することができる、ファージディスプレイ・ライブラリから親和性選択された組換え抗体を含む。
【００５０】
ミクロ流体アセンブリ１は、第１のリガンド４を含む第１の表面３を含む、第１のフローセル２を含む。第１のリガンド４は、第１の表面３に共有結合したデキストラン層などの薄いヒドロゲル層内でのアミンカップリングを使用して、好ましくは固定化され；別の好ましい実施形態では、第１のリガンド４は、第１のフローセル容積内で、アガロースなどのゲルマトリックス内でヘキサヒスチジンまたはグルタチオン−５−トランスフェラーゼなどの適切なタグによって捕獲される。好ましくは、第１の表面３は、例えばヒドロゲル層の厚さおよび／またはリガンドのサイズによって限定され得る、所与の（事前に定義された）リガンド表面密度（例えば、第１の表面３上のリガンドの密度は、事前に定義された密度であり；したがって、第１の表面３の面積を増大させ、事前に定義された密度に等しい密度を維持することにより、第１のフローセル内のリガンドの数が増加することになる。）に関するリガンドの総量を増加させるために、１平方ミリメートルよりも大きい、または２平方ミリメートルよりも大きい、または５平方ミリメートルよりも大きい面積を有する。面積は、平らな表面の面積であってもよく、表面に存在するミクロ細孔の内面を含んでいてもよい。好ましい実施形態では、ミクロ流体アセンブリ１はさらに、分子が第１のフローセル２内の第１のリガンド４に結合したか否かを測定するように構成された、好ましくは第１のフローセル２内の第１のリガンド４に結合した分子の数を測定するように構成された、センサ（表面プラズモン共鳴センサまたは導波路干渉センサまたは表面音響センサなど）を含み；前記センサは、そのような測定を行うことができるように、好ましくは第１のフローセル２に動作可能に接続される。第１のリガンド４は、分子がリガンドの結合ポケットに適合する単純な鍵と鍵穴のメカニズムを介して、または立体構造変化などのより複雑な分子プロセスによる支援を介して、リガンドに対して高い親和性を有するような事前に定義された特徴を有する分子に結合することができる。このように、試料流体を第１のフローセル２の第１の表面３上に通し、次いでどの分子が第１のリガンド４に結合するようになったかを決定することによって、試料流体中のどの分子が、リガンドに対して高い親和性を有するという前記事前に定義された特徴を有するかを決定することができる。
【００５１】
リガンド４に結合した分子は、解離する時間まで結合したままである。分子は、結合しているリガンドから、介入なしに自動的に解離することができ、即ち受動的解離であり；その他の場合には、分子が結合しているリガンドから分子を解離させるのに介入を必要とし、即ち能動的解離である。例えば、能動的解離では、低ｐＨであるグリシンなどの再生溶液を、第１の表面３上に流すことができ、その結果、結合している分子をリガンド４から解離させる。
【００５２】
ミクロ流体アセンブリ１はさらに、第１のコンジット５を含み、このコンジットの一端は、第１のフローセル２の第１の流体ポート２ａに流体接続しており、このコンジットの他端は、第１の選択弁８に流体接続している。第１の選択弁８は、選択的に、第１のコンジット５を第１の廃棄物リザーバ７に流体接続する。第１の廃棄物リザーバ７は、洗浄排液などの望ましくない流体を受容し貯蔵することができる。
【００５３】
第１の選択弁８は、第１の位置と第２の位置との間で可動であり；第１の選択弁８がその第１の位置にあるとき、第１の選択弁８は、流体を第１のコンジット５から第１の廃棄物リザーバ７に通すことが可能であり；第１の選択弁８がその第２の位置にあるとき、第１の選択弁８は閉じ、したがって流体が、第１の選択弁８を介して第１のコンジット５の外に流れるのを防止する。
【００５４】
ミクロ流体アセンブリ１は、ミクロ流体アセンブリ１の部品を清浄化するのに使用することができるバッファー流体を含有する第１のバッファーリザーバ９を、さらに含む。この例では、第１のバッファーリザーバ９は第１のシリンジ・ポンプ９を含み；第１のシリンジ・ポンプ９は、バッファー流体を含有するレセプタクル９ｂと、レセプタクル９ｂに選択的に押し込まれてバッファー流体を第１のシリンジ・ポンプ９の外に放出することができるプランジャ９ａとを含む。さらに、プランジャを、レセプタクル９ｂから外に出る方向に移動させることにより負圧が創出されて、バッファー流体を第１のシリンジ・ポンプ９内に吸引する。好ましくはバッファー流体は、リン酸緩衝生理食塩液（ＰＢＳ）などの生理的バッファーを含む。
【００５５】
第１のバッファーリザーバ９は、第１の副コンジット１０を用いて第１のコンジット５に流体接続される。第１の副コンジット１０は、第１の接合部１１で第１のコンジット５に接続する。図１に示されるように、この例では、第１の副コンジット１０が第１のコンジット５に垂直に配置構成されて、第１の接合部１１がＴ字形接合部１１であるようになされており；しかし第１の接合部１１は、任意の形状または構成をとってもよいことが理解されよう。さらに第１の接合部１１は、無弁接合部である（即ち、第１の接合部１１には弁が存在していない）。本実施形態の変形例では、弁は第１の接合部１１に設けられ；弁は、第１の開放位置と第２の閉鎖位置との間で可動であり；第１の開放位置では、弁は開放して、流体を第１の副コンジット１０と第１のコンジット５との間に流し、第２の閉鎖位置では、弁は閉鎖して、第１の副コンジット１０と第１のコンジット５との間の流体流を遮断する。
【００５６】
第１のフローセル２の第１の流体ポート２ａと第１の接合部１１との間に位置付けられた、第１のコンジット５の一部を、第１のコンジット５の第１の部分５ａと呼ぶことにし、第１の接合部１１と第１の選択弁８との間に位置付けられた第１のコンジット５の部分を、第１のコンジット５の第２の部分５ｂと呼ぶことにする。好ましい実施形態では、第１のコンジット５の第１の部分５ａは、第１のコンジットの第２の部分５ｂの容積よりも低い容積を有するように構成され；例えば、第１のコンジット５の第１の部分５ａと第１のコンジット５の第２の部分５ｂとの両方は、等しい内径を有し、第１のコンジット５の第１の部分５ａは、第１のコンジット５の第１の部分５ａが第１のコンジット５の第２の部分５ｂの容積よりも低い容積を有するように、第１のコンジット５の第２の部分５ｂの長さよりも短くなるように構成され；別の例では、第１のコンジット５の第１の部分５ａと第１のコンジット５の第２の部分５ｂとの両方が、等しい長さを有し、第１のコンジット５の第１の部分５ａは、第１のコンジット５の第１の部分５ａが第１のコンジット５の第２の部分５ｂの容積よりも低い容積を有するように、第１のコンジット５の第２の部分５ｂの内径よりも短い内径を有するように構成される。好ましくは、第１のコンジット５の第１の部分５ａは、１ナノリットルから１０マイクロリットルの間の容積を有し、第１のコンジット５の第２の部分５ｂは、第１のコンジット５の第１の部分５ａの少なくとも２倍の容積を有し；最も好ましくは、第１のコンジット５の第１の部分５ａは、１ナノリットルから１マイクロリットルの間の体積を有し、第１のコンジット５の第２の部分５ｂは、第１のコンジット５の第１の部分５ａの少なくとも３倍の容積を有する。
【００５７】
ミクロ流体アセンブリ１はさらに、第２のコンジット１５を含み、その一端は、第１のフローセル２の第２の流体ポート２ｂに流体接続し、その他端は、第２の選択弁２８に流体接続しており；第２の選択弁２８は、第２のコンジット５を第２の廃棄物リザーバ２７に、選択的に流体接続することができる。第２の廃棄物リザーバ２７は、洗浄排液などの望ましくない流体を、受容し貯蔵することができる。
【００５８】
本実施形態の変形例では、アセンブリ１は、単一の廃棄物リザーバのみ含む。例えば、本実施形態の変形例では、アセンブリ１は第２の廃棄物リザーバ２７を含まず；代わりに第２の選択弁２８が第１の廃棄物リザーバに流体接続され、したがって第２の選択弁は、第２のコンジット１５を、第１の廃棄物リザーバ７に選択的に流体接続することができるようになる。都合の良いことに、実施形態のこの変形例では、ミクロ流体アセンブリ１は、より少ない数の廃棄物リザーバを含む。
【００５９】
図１に示される実施形態に関して続けると、第２の選択弁２８は、第１の位置と第２の位置との間で可動であり；第２の選択弁２８がその第１の位置にあるとき、第２の選択弁２８は、流体を第２のコンジット１５から第２の廃棄物リザーバ２７内に流し；第２の選択弁２８がその第２の位置にあるとき、第２の選択弁２８は閉鎖され、したがって流体が、第２のコンジット１５の外から第２の廃棄物リザーバ２７に流れるのを防止する。
【００６０】
ミクロ流体アセンブリ１はさらに、ミクロ流体アセンブリ１の部品を清浄化するのに使用することができるバッファー流体を含有する、第２のバッファーリザーバ１９を含む。この例では、第２のバッファーリザーバ１９は、第２のシリンジ・ポンプ１９を含み；第２のシリンジ・ポンプ１９は、バッファー流体を含有するレセプタクル１９ｂと、第２のシリンジ・ポンプ１９の外にバッファー流体を選択的に放出するようレセプタクル１９ｂ内に選択的に押し込むことができるプランジャ１９ａとを含む。さらに、プランジャ１９ａを、レセプタクル１９ｂから外に出る方向に移動させることにより、負圧が創出されて、第２のシリンジ・ポンプ１９内にバッファー流体が吸引される。好ましくはバッファー流体は、リン酸緩衝生理食塩液（ＰＢＳ）などの生理学的バッファーを含む。
【００６１】
ミクロ流体アセンブリ１は、第１のリガンド４との結合に関して試験がなされる分子を含有する試料流体を含有する、試料リザーバ２９と、結合した分子を内部に計量分配することができる収集リザーバ３９とをさらに含む。この例示的な実施形態では、試料リザーバ２９および収集リザーバ３９は、ｘ−ｙテーブル５０上に位置付けられる。ｘ−ｙテーブルは、選択的に試料リザーバ２９または収集リザーバ３９のいずれかを中間コンジット５１に流体接続するように、選択的に移動させることができる（ｘまたはｙ軸に沿って−両矢印により示されるように）。図１は、試料リザーバ２９が中間コンジット５１に流体接続される位置にあり、それによってｘ−ｙテーブル５０は、試料リザーバ２９が中間コンジット５１の自由端の下に位置決めされるように位置決めされている、ｘ−ｙテーブルを示し；しかしｘ−テーブル５１は、中間コンジット５１の自由端の下に収集リザーバ３９が位置決めされて、収集リザーバ３９が中間コンジット５１に流体接続されるように移動させるため、選択的に動作可能にできることが理解されよう。
【００６２】
ミクロ流体アセンブリ１は、第３の選択弁１８をさらに含む。第３の選択弁１８は中間コンジット５１に流体接続され、したがって試料リザーバ２９および収集リザーバ３９は、第３の選択弁１８に選択的に流体接続することができる。第３の選択弁は、貯蔵コンジット３０を介して第２のシリンジ・ポンプ１９に、さらに流体接続される。この例では、貯蔵コンジット３０は、貯蔵コンジット３０に貯蔵することができる流体の体積が増加するように、コイル状コンジットである。この例では、貯蔵コンジット３０は、１００マイクロリットルよりも大きい内部容積を有する。貯蔵コンジット３０の一端は、第２のシリンジ・ポンプ１９に流体接続され、貯蔵コンジット３０の反対側の端部は第３の選択弁１８に流体接続される。
【００６３】
貯蔵コンジット３０、ｘ−ｙテーブル５０、第３の選択弁１８、第２のバッファーリザーバ１９（例えば、第２のシリンジ・ポンプ１９）、中間コンジット１、試料リザーバ２９、および収集リザーバ３９を、まとめてユニット７１と定義すると見なすことができる。
【００６４】
実施形態の変形例では、ユニット７１の代わりに（即ち、貯蔵コンジット３０、ｘ−ｙテーブル５０、第２のバッファーリザーバ１９、第３の選択弁１８、中間コンジット１、試料リザーバ２９、および収集リザーバ３９を含む、構成部品の群の代わりに）、例えばオートサンプラなどの、試料流体を投入し貯蔵するための任意のその他の適切な手段を設けてもよく；例えば、Ｓｐａｒｋ  Ｈｏｌｌａｎｄ、ＮＬ．製「Ａｌｉａｓ」などのオートサンプラ・モデルを、前記上述の構成部品の群の代わりにアセンブリ１に設けることができる。好ましくは、実施形態のこの変形例では、アセンブリはさらに、オートサンプラに動作可能に接続されたポンプを含むことになる。
【００６５】
図１に示されるアセンブリに関して続けると、第３の選択弁１８は、第２の副コンジット２０を用いて、第２のコンジット１５に流体接続される。第２の副コンジット２０は、第２の接合部２１で第２のコンジット１５に接続される。図１に示されるように、この例では、第２の副コンジット２０が第２のコンジット１５に垂直に配置構成されて、第２の接合部２１がＴ字形接合部２１となるようにし；しかし第２の接合部２１は、任意の形状または構成をとってもよいことが理解されよう。この実施形態において、第２の接合部２１は無弁である（即ち、第２の接合部２１には弁が存在しない）。この実施形態の変形例では、弁が第２の接合部２１に設けられ；弁は、第１の開放位置と第２の閉鎖位置との間で可動であり；第１の開放位置では、弁は開放して、第２の副コンジット２０と第２のコンジット１５との間での流体流を可能にし、第２の閉鎖位置では、弁は閉鎖して、第２の副コンジット２０と第２のコンジット１５との間の流体流を遮断する。
【００６６】
第１のフローセル２の第２の流体ポート２ｂと第２の接合部２１との間に位置付けられた、第２のコンジット１５の部分は、第２のコンジット１５の第１の部分１５ａと呼ぶことになり、第２の接合部２１と第２の選択弁２８との間に位置付けられた第２のコンジット１５の部分は、第２のコンジット１５の第２の部分１５ｂと呼ばれることになる。好ましい実施形態では、第２のコンジット１５の第１の部分１５ａは、第２のコンジット１５の第２の部分１５ｂよりも非常に少ない容積を有する。例えば、第２のコンジット１５の第１の部分１５ａと第２のコンジット１５の第２の部分１５ｂとは共に、等しい内径を有していてもよく、第２のコンジット１５の第１の部分１５ａは、第２のコンジット１５の第１の部分１５ａが第２のコンジット１５の第２の部分１５ｂの容積よりも少ない容積を有するように、第２のコンジット１５の第２の部分１５ｂの長さよりも短く構成され；別の例では、第２のコンジット１５の第１の部分１５ａと第２のコンジット１５の第２の部分１５ｂとが共に、等しい長さを有し、第２のコンジット１５の第１の部分１５ａは、第２のコンジット１５の第２の部分１５ｂの内径よりも短い内径を有するように構成され、したがって第２のコンジット１５の第１の部分１５ａは、第２のコンジット１５の第２の部分１５ｂの容積よりも少ない容積を有するようになされている。好ましくは、第２のコンジット１５の第１の部分１５ａは、１０ナノリットルから１０マイクロリットルの間の容積を有し、第１のコンジットの第２の部分１５ｂは、第２のコンジット１５の第１の部分１５ａの少なくとも２倍の容積を有し；最も好ましくは、第２のコンジット１５の第１の部分５ａは、１０ナノリットルから１マイクロリットルの間の容積を有し、第２のコンジット１５の第２の部分１５ｂは、第２のコンジット１５の第１の部分１５ａの少なくとも３倍の容積を有する。
【００６７】
第３の弁１８は、第１の位置と第２の位置との間で可動である。第３の選択弁１８が、その第１の位置にあるとき、第３の選択弁１８は、中間コンジット５１を貯蔵コンジット３０に流体接続する。このように、第３の選択弁１８がその第１の位置にある場合、および中間コンジット５１が試料リザーバ２９に流体接続するようにｘ−ｙテーブルが位置決めされる場合、試料リザーバ中の試料流体は、コンジット５１を通過し、第３の選択弁１８を介して貯蔵コンジット３０に入ることができる。同様に、第３の選択弁１８がその第１の位置にあり、中間コンジット５１が収集リザーバ３９に流体接続するようにｘ−ｙテーブルが位置決めされる場合、貯蔵コンジット３０内の流体は、第３の選択弁１８を介して中間コンジット５１に入り、中間コンジット５１から収集リザーバ３９に入ることができる。
【００６８】
第３の選択弁１８が、その第２の位置にあるとき、第３の選択弁１８は、貯蔵コンジット３０を第２の副コンジット２０に流体接続し；したがって第３の選択弁１８がその第２の位置にあるとき、流体は、貯蔵コンジット３０から第３の選択弁１８を介して第２の副コンジット２０に流れることができ、または第２の副コンジット２０から第３の選択弁１８を介して貯蔵コンジット３０に流れることができる。
【００６９】
図１に示される実施形態の変形例では、第２の選択弁２８がミクロ流体アセンブリ１内に設けられておらず、代わりに第２のコンジット１５の第２の部分１５ｂが流動制限器を含む。流動制限器は、第２のコンジット１５の残りの内径よりも小さい内径を有する、第２のコンジット１５の第２の部分１５ｂの一部であると定義されてもよく、例えば、第２のコンジット１５の第２の部分１５ｂの一部は、１０マイクロメートルから２００マイクロメートルの間の内径を有していてもよく、第２のコンジット１５の残りは、２００マイクロメートルから１ミリメートルの間の内径を有していてもよく；かつ／または流動制限器は、第２のコンジット１５の第１の部分１５ａよりも実質的に長い長さを有する第２のコンジット１５の第２の部分１５ｂによって定められてもよく、例えば、第２のコンジット１５の第２の部分１５ｂは、１００ミリメートルから１０メートルの間の長さを有していてもよく、第２のコンジット１５の第１の部分１５ａは、１０マイクロメートルから１０ミリメートルの間の長さを有していてもよい。ミクロ流体アセンブリ１は、第１のフローセル５内に提供された第１のリガンド４に対して高い親和性を持つ分子に関し、試料リザーバ２９内に提供された試料流体を試験するのに使用することができる。
【００７０】
ミクロ流体アセンブリ１は、本発明の方法の実施形態による例示的な方法を実施するのに使用することができる。ミクロ流体アセンブリ１の使用中、試験がなされる試料流体は、試料リザーバ２９内に提供される。
【００７１】
次いで任意選択で、第１の選択弁８はその第２の位置に移動して、第１の選択弁８が閉鎖するようになされ、第２の選択弁２８はその第１の位置に移動して、第２の選択弁２８が開放するようになされる。任意選択で、プランジャ９ａはレセプタクル９ａ内に押し込まれて、バッファー流体が第１のシリンジ・ポンプ９から放出されるようにする。バッファー流体は、第１のシリンジ・ポンプ９から流出し、第１の副コンジット１０を経て第１のコンジット５の第１の部分５ａに入り、第１のフローセル２に入り、第２のコンジット１５に入り、第２の廃棄物リザーバ２７に入る。
【００７２】
次いでｘ−ｙテーブル５０を移動させ、試料リザーバ２９が中間コンジット５１に流体接続するようにする。
【００７３】
次いで第３の選択弁１８を、その第１の位置に移動させ、中間コンジット５１が、第３の選択弁を介して貯蔵コンジット３０に流体接続するようにする。その第１の位置にある第３の選択弁１８では、第２のシリンジ・ポンプ１９のプランジャ１９ａを、レセプタクル１９ｂから外に出る方向に移動させて、負圧が貯蔵コンジット３０内に創出されるようにする。その結果、試料流体は試料リザーバ２９から中間コンジット５１に吸引され、第３の選択弁１８を介して貯蔵コンジット３０に吸引される。
【００７４】
好ましくは、試料リザーバ２９から中間コンジット５１に、さらに貯蔵コンジット３０に、第３の選択弁１８を介して吸引される試料流体の体積は、第２の副コンジット２０の内部容積の３倍から貯蔵コンジット３０の内部容積の間であり；最も好ましくは、第２の副コンジット２０の内部容積の５倍から貯蔵コンジット３０の内部容積の間である。
【００７５】
任意選択で、次に第３の選択弁１８をその第２の位置に移動させて、第３の選択弁１８が貯蔵コンジット３０および第２の副コンジット２０を流体接続するようにする。次いで任意選択で、プランジャ１９ａを第２のシリンジ・ポンプ１９のレセプタクル１９ｂ内に押し込んで、バッファー流体を第２のシリンジ・ポンプ１９の外に押し遣るようにする。第２のシリンジ・ポンプ１９から放出されるバッファー流体は、試料流体の一部を貯蔵コンジット３０の外に、さらに第２の副コンジット２０内に押し出す。第１の選択ポンプ８は閉鎖されているので、第２のコンジット１５の第１の部分１５ａに存在するバッファー流体によって得られる圧力は、試料流体が第２のコンジット１５の第１の部分１５ａに沿って第１のフローセル２に向かって流れるのを防止することになり；さらに、第２の選択弁２８は、第２の選択弁２８が開放されるようにその第１の位置にあるので、試料流体は、第２の副コンジットから第２のコンジット１５の第２の部分１５ｂに、さらに第２の廃棄物リザーバ２７に、第２の選択弁２８を介して流れるようになる。
【００７６】
好ましくは、第２のコンジット１５の第１の部分１５ａに存在するバッファー流体によって与えられる圧力は、試料流体が第２のコンジット１５の第１の部分１５ａに沿って第１のフローセル２に流れるのを防止する。ある場合には、無視できるほどの量の試料流体が、拡散によって、第２のコンジット１５の第１の部分１５ａの一部に沿って移動し得る。一実施形態では、第２のコンジット１５の第１の部分１５ａの一部に沿って試料流体の拡散を防止しまたは少なくとも最小限に抑えるために、好ましくは、第１のバッファーリザーバ９から第１のフローセル２を通って第２の廃棄物リザーバ２７に入るバッファー流体の流れは、試料流体が貯蔵コンジット３０から第２の副コンジット２０に沿って第２の廃棄物リザーバ２７に流れるときに維持される。
【００７７】
好ましくは、貯蔵コンジット３０から第２の副コンジット２０に沿って第２の廃棄物リザーバ２７内に流れることが可能な試料流体の体積は、第２の副コンジット２０の容積の２倍よりも大きいが、試料リザーバ２９から中間コンジット５１に入りさらに第３の選択弁１８を介して貯蔵コンジット３０内に既に吸引された試料流体の体積よりも小さい。したがって、貯蔵コンジット３０にはいくらかの試料流体が残る。
【００７８】
したがって、この段階では、好ましくは第２の副コンジット２０は、試料流体によって効果的に濯ぎがなされる。したがって、この段階では、好ましくは第１の副コンジット１０、第１のコンジット５の第１の部分５ａ、第１のフローセル２、および第２のコンジット１５の第１の部分１５ａは、全て、バッファー流体のみ含有し；好ましくは第２の副コンジット２０は試料流体のみ含有し、第２のコンジット１５の第２の部分１５ｂは、いくらかの試料流体を少なくとも含有する。段落６８〜７１に記述されるステップは任意選択であり、好ましいが、前記ステップは本発明に必須ではないことが強調される。
【００７９】
次に、第１の選択弁８をその第２の位置に移動させて（即ち、第１の選択弁８は開放される）、流体が、第１のコンジット５から第１の廃棄物リザーバ７へと通過できるようにし、好ましくは第２の選択弁２８をその第２の位置に移動させて、閉鎖するようにする。第３の選択弁１８がその第２の位置にまだある状態では、プランジャ１９ａは第２のシリンジ・ポンプ１９のレセプタクル１９ｂ内に押し込まれて、より多くのバッファー流体を第２のシリンジ・ポンプ１９の外に押し遣るようになる。第２のシリンジ・ポンプ１９から放出されたバッファー流体は、貯蔵コンジット内に残る試料流体の一部または全てを、貯蔵コンジット３０の外から第２の副コンジット２０内に押し出す。第１の選択弁８は、その第２の位置にあるので（即ち、第１の選択弁８は開放している。）、第２のコンジット１５の第１の部分１５ａに存在するバッファー流体は、試料流体が第２のコンジット１５の第１の部分１５ａに沿って第１のフローセル２に流れるのを防止する圧力をもはや与えない。したがって、次に第２の副コンジット２０内を通る試料流体は、第２のコンジット１５の第１の部分１５ａに流入し、第１のフローセル２に流入し、第１のコンジット５に沿って、第１の選択弁８を介して第１の廃棄物リザーバ７に流れる。流れるにつれ、試料流体は、第２のコンジット１５の第１の部分１５ａ、第１のフローセル２、および第１のコンジット５の第１の部分５ａに存在するいかなるバッファー流体も、第１の廃棄物リザーバ７内に一掃する。
【００８０】
したがって、この段階で、第２の副コンジット２０、第２のコンジット１５の第１の部分１５ａ、第１のフローセル２、および第１のコンジット５は、全て、試料流体のみ含有する。有利なことに、第１の選択弁８をその第２の位置に移動させる前に、試料流体は既に第２の副コンジット２０に存在するので、第１のフローセル２内の試料流体の濃度は、第１の選択弁８がその第２の位置に移動すると素早く上昇することが可能になる。試料流体が第１のフローセル２の第１の表面３上を通るとき、表面上で第１のリガンド４に結合させるのに必要な事前に定義された特徴を有する分子は、第１のリガンド４と結合することになる。
【００８１】
次に、第１の選択弁８をその第２の位置に移動させて、第１の選択弁８が閉鎖するようにし、第２の選択弁２８をその第１の位置に移動させて、第２の選択弁を開放するようにする。第３の選択弁１８が貯蔵コンジット３０および第２の副コンジット２０を流体接続するように、まだその第２の位置にある第３の選択弁１８では、より多くのバッファー流体を第２のシリンジ・ポンプ１９の外に押し遣るように、プランジャ１９ａが第２のシリンジ・ポンプ１９のレセプタクル１９ｂ内に押し込まれる。第２のシリンジ・ポンプ１９から放出されるバッファー流体は、貯蔵コンジット３０内のバッファー流体と、貯蔵コンジット３０に残された試料溶液の全てを貯蔵コンジット３０の外に押し出し、第２の副コンジット２０内に押し込む。バッファー流体および試料流体は、貯蔵コンジット３０から第２の副コンジット２０内、第２のコンジット１５の第２の部分１５ｂ内に流れ、その後、第２の廃棄物リザーバ２７内に流れる。したがって、このステップの最中に、第２のシリンジ・ポンプ１９から放出されるバッファー流体は、貯蔵コンジット３０、第２の副コンジット２０、および／または第２のコンジット１５の第２の部分１５ｂ内に存在する全ての試料流体を、第２の廃棄物リザーバ２７内に流出させる。第１の選択弁８は閉鎖されているので、第２のコンジット１５の第１の部分１５ａ内に存在する試料流体は、バッファー流体に圧力を加えることになり、バッファー流体が第２のコンジット１５の第１の部分１５ａに沿って第１のフローセル２に向かって流れるのを防止する。
【００８２】
したがって、この段階で、第２の副コンジット２０および第２のコンジット１５の第２の部分１５ｂ、および貯蔵コンジット３０は全て、バッファー流体のみ含有し；第２のコンジット１５の第１の部分１５ａ、第１のフローセル２、および第１のコンジット５は全て、試料流体のみ含有する。この段階で重要なことは、第２の副コンジット２０および第２のコンジット１５の第２の部分１５ｂが、バッファー流体によって清浄化されていることであり；試料流体は第１のフローセル２内に存在し、したがって結合した分子がそのそれぞれの第１のリガンド４から受動的に解離する場合には、利用可能なその他の類似の分子が第１のフローセル２内に存在して、利用可能な第１のリガンド４に結合することになる。
【００８３】
次に第１の選択弁８をその第１の位置に移動させて、第１の選択弁８により流体を第１のコンジット５から第１の廃棄物リザーバ７内に通すことができるようにし、第２の選択弁２８をその第２の位置に移動させて、第２の選択弁２８が閉鎖するようにする。好ましくは、第３の選択弁１８は、その第２の位置にあるままであり、プランジャ１９ａの位置は、流体が第２のシリンジ・ポンプ１９のレセプタクル１９ｂの中または外に流れるのを防止するように、固定される。
【００８４】
次いで第１のシリンジ・ポンプ９のプランジャ９ａは、バッファー流体が第１のシリンジ・ポンプ９から放出されるように、レセプタクル９ｂ内に押し込まれる。第１のシリンジ・ポンプ９から放出されるバッファー流体は、第１の副コンジット１０内を流れ、第１のコンジット５の第２の部分５ｂに入り、第１の選択弁８を介して第１の廃棄物リザーバ７に入る。第１のコンジット５の第１の部分５ａに存在する試料流体は、圧力を提供することになり、バッファー流体が第１のコンジット５の第１の部分５ａに流れて第１のフローセル２に向かうのを防止することになる。
【００８５】
したがって、この段階では、第２のコンジット１５の第１の部分１５ａ、第１のフローセル２、および第１のコンジットの第１の部分５ａはそれぞれ、試料流体のみ含有し；一方、貯蔵コンジット３０、第１の副コンジット１０、および第１のコンジット５の第２の部分５ｂと、第２の副コンジット２０、および第２のコンジット１５の第２の部分１５ｂは、それぞれ、バッファー流体のみ含有する。重要なことは、この段階で、第２の副コンジット２０、第２のコンジット１５の第２の部分１５ｂ、第１の副コンジット１０、および第１のコンジット５の第２の部分５ｂが全て、バッファー流体で清浄化していることであり；試料流体は第１のフローセル２内に存在するままであり、したがって結合した分子がそのそれぞれの第１のリガンド４から受動的に解離する場合には、利用可能なその他類似の分子が第１のフローセル２内に存在して、利用可能な第１のリガンド４に結合することになる。
【００８６】
次に第１の選択弁８は、その第２の位置に移動して、第１の選択弁８が閉鎖するようにし、第２の選択弁２８はその第１の位置に移動して、第２の選択弁により流体を第２のコンジット１５から第２の廃棄物リザーバ２７内に流すことができるようにする。好ましくは、第３の選択弁１８は、その第２の位置にあるままであり、プランジャ１９ａの位置は、流体が第２のシリンジ・ポンプ１９のレセプタクル１９ｂの中または外に流れるのを防止するように、固定される。次いで第１のシリンジ・ポンプ９のプランジャ９ａは、バッファー流体が第１のシリンジ・ポンプ９から放出されるように、レセプタクル９ｂ内に押し込まれる。第１のシリンジ・ポンプ９から放出されたバッファー流体は、第１のコンジット５の第１の部分５ａ、第１のフローセル２、第２のコンジット１５の第１および第２の部分１５ａ、１５ｂを通って第２の廃棄物リザーバ２７に流入して、アセンブリのこれらの部分を清浄化することになる。このように、バッファー流体は、第１のフローセル２内に存在した試料流体を流出させ；リガンドに結合した分子は、それらの結合特性に起因して、バッファー流体によって第１のフローセル２から直ぐには一掃されない（即ち、リガンドに結合した分子である大部分の分子は、第１のフローセル２内に残される。）。有利には、第２のコンジット１５の第２の部分１５ｂ、第１の副コンジット１０、および第１のコンジット５の第１の部分５ａは、全て、第１および第２の選択弁８、１８を閉鎖する前にバッファー流体を含有し、第１のフローセル２内に存在する試料流体は、バッファー流体によって、より素早く流出させることができる。
【００８７】
好ましい実施形態では、バッファー流体は、１０ミリ秒から１０秒の間の期間にわたって第１のフローセル内を流れることが可能になり；好ましくは、バッファー流体は、０．１〜２秒の間の期間にわたって第１のフローセル内を流れることが可能になり；最も好ましくは、バッファー流体は、０．５秒の期間にわたって第１のフローセル内を流れることが可能になる。
【００８８】
この例において、このことは、第２のシリンジ・ポンプ１９のプランジャ１９ａを用いて実現される。特に、依然としてその第２の位置にある第３の選択弁１８では、プランジャ１９ａの位置は、０．１〜１０秒の間の期間にわたり固定されて（流体が第２のシリンジ・ポンプ１９のレセプタクル１９ｂの中または外に流れるのを防止するように）、第１のシリンジ・ポンプ９から放出されるバッファー流体が、０．１〜１０秒の間の期間にわたり、第１のフローセル２を通って第２の廃棄物リザーバ２７に流れるよう押し遣られることになり；好ましくは、依然としてその第２の位置にある第３の選択弁１８では、プランジャ１９ａの位置は、０．１〜２秒の間の期間にわたって固定され（流体が第２のシリンジ・ポンプ１９のレセプタクル１９ｂの中または外に流れるのを防止するように）、その結果、第１のシリンジ・ポンプ９から放出されるバッファー流体は、０．１〜２秒の間の期間にわたり、第１のフローセル２を通って第２の廃棄物リザーバ２７内に流れるように押し遣られることになる。
【００８９】
第１のリガンド４が試料流体中に浸漬されるとき、第１のリガンド４は、試料流体中に存在する分子に容易に結合することができ；言い換えれば、分子がリガンド４から受動的に解離する場合、第１のフローセル内には利用可能な同じタイプの別の分子が存在して、利用可能なリガンド４に結合することになる。時間と共に、第１のリガンド４に結合した分子はそのそれぞれの第１のリガンド４から解離するようになり；したがって、第１のリガンド４に結合した分子を単離するために、結合した分子がそのそれぞれの第１のリガンド４から受動的に解離し始めるよりも前に（または少なくとも、結合した分子の大部分がそのそれぞれの第１のリガンド４から受動的に解離するようになる前に）、試料流体を第１のフローセル５から十分素早く流出させるべきである。０．１〜１０秒の間の期間にわたり、第３の選択弁１８をその第２の位置に有しかつプランジャ１９ａの位置を固定することによって、バッファー流体が第２の副コンジット２０内に流れるのを防止することにより、バッファー流体は確実に、１０秒未満にわたり第１のフローセル２に存在する試料流体を第２の廃棄物リザーバ２７に流出させ；この例では、結合した分子の大部分がそのそれぞれの第１のリガンド４から解離するのに１０秒またはそれよりも長い期間を要し；したがって、バッファー流体が、試料流体を第１のフローセル２から第２の廃棄物リザーバ２７に流出させた後であっても、結合した分子の大部分は、そのそれぞれの第１のリガンド４に結合した状態で第１のフローセル２内に残される。したがって、このステップは、第１のフローセル２内に存在する試料流体からの、第１のリガンド４に結合した分子の単離を実現する。
【００９０】
第３の選択弁１８がその第２の位置にあるままの、この特定の例では、プランジャ１９ａの位置は０．５秒にわたり固定され（流体が第２のシリンジ・ポンプ１９のレセプタクル１９ｂの中または外に流れるのを防止するように）、したがって第１のシリンジ・ポンプ９から放出されるバッファー流体は、０．５秒にわたり、第１のフローセル２を経て第２の廃棄物リザーバ２７内に強制的に流される。
【００９１】
バッファー流体が最初に第１のフローセル２内を流れた０．５秒後に、第２のシリンジ・ポンプ１９のプランジャ１９ａは、レセプタクル１９ｂから外に出る方向に移動して、貯蔵コンジット３０内に負圧を創出するようになる。第３の選択弁１８は、まだその第２の位置にあるので、貯蔵コンジット３０内の負圧により、第１のフローセル２から出て行くバッファー流体は、第２の副コンジット２０に沿って、第３の選択弁１８を介して貯蔵コンジット３０内に向かうように吸引されることになる。また引き続き第１のシリンジ弁９から放出されるバッファー流体は、次に、第１の副コンジット１０、第１のコンジット５の第１の部分５ａ、第１のフローセル２、第２のコンジット１５の第１の部分１５ａを経て、さらに第２の副コンジット２０に沿って、第３の選択弁１８を介して貯蔵コンジット３０内へと流れることになる。時間と共に、第１のフローセル２内のリガンドに結合した分子は、受動的に解離することになる。バッファーが第１のフローセル２を通過するにつれ、そのそれぞれの第１のリガンド４から受動的に解離するようになった分子を収集することになる。したがって、ある期間の後に、好ましくは１０秒から１時間の間の後に、貯蔵コンジットは、第１のフローセル５内の第１のリガンド４に結合した分子の全て（またはその少なくとも大部分）を有するバッファー流体を含有することになる。
【００９２】
次に、ｘ−ｙテーブル５０を、収集リザーバ３９が中間コンジット５１に流体接続するように移動させる。
【００９３】
次いで第３の選択弁１８は、その第１の位置に移動して、中間コンジット５１が第３の選択弁を介して貯蔵コンジット３０に流体接続するようになる。
【００９４】
第３の選択弁１８がその第１の位置にある状態で、第２のシリンジ・ポンプ１９のプランジャ１９ａはレセプタクル１９ｂ内に押し込まれて、バッファー流体は第２のシリンジ・ポンプ１９から貯蔵コンジット３０内に放出されるようになる。第２のシリンジ・ポンプ１９から放出されるバッファー流体は、前記分子（即ち、そのそれぞれの第１のリガンド４から受動的に解離するようになった分子）を有するバッファー流体を、貯蔵コンジット３０の外に、および収集リザーバ３９内に押し遣る。したがって、この段階で、第１のリガンド４に結合した分子（または、第１のリガンド４に結合した分子の少なくとも大部分）は、試料溶液の残りから単離されている。
【００９５】
バッファー流体（前記分子を有する。）は、収集リザーバ３９から得ることができ、バッファー流体中に存在する分子を決定／同定するように構成された分析デバイスに提供することができ；したがって最終的には、第１のフローセル２内の第１のリガンド４に結合した分子を決定／同定し；例えば、分析デバイスは質量分光計であってもよく、質量分光計は、どの分子がバッファー流体に含有されるのかを明らかにするのに使用され、したがって第１のフローセル２内で第１のリガンド４に結合した分子が同定される。
【００９６】
有利には、バッファー流体を貯蔵コンジット３０内に吸引する前に（即ち、貯蔵コンジット３０内に負圧が創出されるよう、レセプタクル１９ｂから外に出る方向に第２のシリンジ・ポンプ１９のプランジャ１９ａを移動させる前に）、第１の副コンジット１０、第２の副コンジット２０、第１のコンジット５の第２の部分５ｂ、および第２のコンジット１５の第２の部分５ｂは、それぞれが既にバッファー流体で清浄化されているので、貯蔵コンジット３０に収集されたバッファー流体（解離した分子を含有する。）（最終的には、収集リザーバ３９に入る前記バッファー流体（解離した分子を含有する。））は、通常なら第１の副コンジット１０、第２の副コンジット２０、第１のコンジット５の第２の部分５ｂ、および第２のコンジット１５の第２の部分５ｂ内に存在し得る試料流体によって汚染されなくなる。特に、貯蔵コンジット３０に収集されたバッファー流体（解離した分子を含有する。）（最終的に、収集リザーバ３９に収集されることになる前記バッファー流体（解離した分子を含有する。））は、通常なら第２の副コンジット２０に存在し得る試料流体によって汚染されなくなる。好ましくは、貯蔵コンジット３０に収集されたバッファー流体（解離した分子を含有する。）（最終的には、収集リザーバ３９に収集されることになる前記バッファー流体（解離した分子を含有する。））中に残された試料流体の体積パーセンテージは、１％よりも低くまたは０．５％よりも低くまたは０．１％よりも低い。したがって、リガンドに結合している試料流体中に存在する分子のみが、収集リザーバ３９内に吸引されるバッファー流体中に存在することになる。収集リザーバ３９に吸引されるバッファー流体は、好ましくは分析デバイスを通り、そこでバッファー流体中の分子が同定される。有利には、第１の表面３の広い面積を設け、かつ流路を清浄化して、例えばバッファー流体（解離した分子を含有する。）中に残された試料体積のパーセンテージが低くなるようにすると、収集リザーバ３９内での解離した分子と試料流体との高い比が得られる。例として、いくつかの分子タイプの混合物が、それぞれミリリットル当たり１マイクログラムの濃度で注入され、その結果、１つの分子タイプと、表面密度が平方ミリメートル当たり０．１ナノグラムである第１の表面３との結合がもたらされ、かつ第１の表面３が５平方ミリメートルの面積を有し試料が２０マイクロリットルの体積で収集される場合、回収される結合済みの分子の最大濃度は、ミリリットル当たり２５ナノグラムになる。本発明による流路が清浄化されて、全ての分子タイプを持つ残された当初の試料のパーセンテージが０．１％になるようにした場合、その他の分子タイプの濃度はミリリットル当たり１ナノグラムになる。したがって、回収された結合済み分子と結合していない分子タイプとの分子比は、２５倍である。
【００９７】
上記の例において、第１のフローセル２は、異なるタイプのリガンド（即ち、異なった、事前に定義された特徴を有する分子に、結合することができるリガンド）を含む別の第１のフローセルで置き換えてもよい。例えば、問題となっている結合部位の失活をもたらす特定の変異を有する陰性対照リガンドでは、上記ステップを繰り返して試験流体を試験する。このテキストの結果を、先の試験の結果と比較して、非特異的結合剤を決定してもよく；例えば、第１の試験でリガンドに結合するが第２の試験で陰性対照リガンドにも結合するように、分子を同定できる場合、これらの分子は非特異的に結合すると見なすことができる。
【００９８】
上記の例は、第１のフローセル２内で第１のリガンド４から受動的に解離する分子を含有する試料流体を試験するのに、ミクロ流体アセンブリ１を使用することについて、記述する。図２は、第１のフローセル内でリガンドから能動的に解離するだけの分子を含有する試料流体を試験するのに使用することもできる、即ち、再生溶液（低ｐＨのグリシンなど）が第１のフローセル２内を流れて、結合した分子をそのそれぞれのリガンドから強制的解離させるようにするときに、リガンドから能動的に解離するだけの分子を含有する試料流体を試験するのに使用することもできる、本発明の他の実施形態によるミクロ流体アセンブリ１００を示す。
【００９９】
ミクロ流体アセンブリ１００は、図１に示されるミクロ流体アセンブリ１と同じ特徴の多くを含み、同様の特徴には同じ参照符号が与えられる。
【０１００】
しかしミクロ流体アセンブリ１００は、さらに、第３の廃棄物リザーバ４９、および溶出試薬リザーバ５９を、ｘ−ｙテーブル５０上に含む。第３の廃棄物リザーバ４９は、洗浄排液などの望ましくない流体を受容し貯蔵することができる。溶出試薬リザーバ５９は、第１のフローセル２の第１のリガンド４上を流れるときに、リガンドに結合した分子を第１のリガンド４から解離させることができる再生流体を含有する。
【０１０１】
ｘ−ｙテーブルは、選択的に、試料リザーバ２９または収集リザーバ３９または第３の廃棄物リザーバ４９または溶出試薬リザーバ５９のいずれかを中間コンジット５１に流体接続させるように、選択的に移動させることができる（ｘまたはｙ軸に沿って−両矢印によって示されるように）。図２は、試料リザーバ２９が中間コンジット５１に流体接続している位置にあるｘ−ｙテーブルを示し、それによってｘ−ｙテーブル５０は、試料リザーバ２９が中間コンジット５１の自由端の下に位置決めされるように、位置決めされており；しかし、ｘ−テーブル５１は、収集リザーバ３９または第３の廃棄物リザーバ４９または溶出試薬リザーバ５９が中間コンジット５１の自由端の下に位置決めされて、収集リザーバ３９または第３の廃棄物リザーバ４９または溶出試薬リザーバ５９を中間コンジット５１に流体接続するように移動させるため（左に、即ちｘ軸に沿って）、選択的に動作できることが理解されよう。
【０１０２】
貯蔵コンジット３０、ｘ−ｙテーブル５０、第２のバッファーリザーバ１９（例えば、第２のシリンジ・ポンプ１９）、第３の選択弁１８、中間コンジット５１、試料リザーバ２９、収集リザーバ３９、第３の廃棄物リザーバ４９、および溶出試薬リザーバ５９は、ユニット７２をまとめて定義すると見なすことができる。
【０１０３】
実施形態の変形例では、ユニット７２の代わりに（即ち、貯蔵コンジット３０、ｘ−ｙテーブル５０、第３の選択弁１８、第２のバッファーリザーバ１９、中間コンジット５１、試料リザーバ２９、収集リザーバ３９、第３の廃棄物リザーバ４９、および溶出試薬リザーバ５９を含む、構成要素の群の代わりに）、例えばオートサンプラなどの、試料流体を投入し貯蔵するための任意のその他の適切な手段を設けてもよく；例えば、Ｓｐａｒｋ  Ｈｏｌｌａｎｄ、ＮＬ．製の「Ａｌｉａｓ」などのオートサンプラ・モデルを、前記構成要素の上述の群の代わりにアセンブリ１に設けることができる。好ましくは、実施形態の変形例において、アセンブリはさらに、オートサンプラに動作可能に接続されるポンプを含むことになる。
【０１０４】
ミクロ流体アセンブリ１００は、第１のフローセル２内で第１のリガンド４から能動的に解離する分子を含有する試料流体を試験するのに使用することができ、したがってミクロ流体アセンブリ１は、本発明の他の方法の実施形態による、他の例示的な方法を実施するのに使用することができる：
【０１０５】
ミクロ流体アセンブリ１００の使用中、能動的に解離する分子を含有する試料流体を試験するのに、能動的に解離する分子を含有する前記試料流体を試料リザーバ２９内に提供する。
【０１０６】
次いで第１の選択弁８をその第２の位置に移動させて、第１の選択弁８が閉鎖するようにし、第２の選択弁２８をその第１の位置に移動させて、第２の選択弁２８が開放されるようにする。プランジャ９ａは、バッファー流体が第１のシリンジ・ポンプ９から放出されるように、レセプタクル９ａに押し込まれる。バッファー流体は、第１のシリンジ・ポンプ９から流出して、第１の副コンジット１０を通り、第１のコンジット５の第１の部分５ａに入り、第１のフローセル２に入り、第２のコンジット１５に入り、さらに第２の廃棄物リザーバ２７に流入する。
【０１０７】
次いでｘ−ｙテーブル５０は、試料リザーバ２９が中間コンジット５１に流体接続するように移動する。
【０１０８】
次いで第３の選択弁１８をその第１の位置に移動させて、中間コンジット５１が第３の選択弁を介して貯蔵コンジット３０に流体接続するようにする。第３の選択弁１８がその第１の位置にある状態では、第２のシリンジ・ポンプ１９のプランジャ１９ａは、レセプタクル１９ｂの外に向かう方向に移動して、貯蔵コンジット３０内に負圧を創出するようになる。その結果、試料流体は、試料リザーバ２９から中間コンジット５１に入り、第３の選択弁１８を介して貯蔵コンジット３０に吸引される。
【０１０９】
好ましくは、試料リザーバ２９から吸引され、中間コンジット５１に入り、第３の選択弁１８を介して貯蔵コンジット３０に入る試料流体の体積は、第２の副コンジット２０の内部容積の３倍から、貯蔵コンジット３０の内部容積の間であり；最も好ましくは、第２の副コンジット２０の内部容積の５倍から貯蔵コンジット３０の内部容積の間である。
【０１１０】
任意選択で、次に第３の選択弁１８をその第２の位置に移動させて、第３の選択弁１８が貯蔵コンジット３０と第２の副コンジット２０とを流体接続するようにする。任意選択で、プランジャ１９ａは、バッファー流体が第２のシリンジ・ポンプ１９の外に押し遣られるように、第２のシリンジ・ポンプ１９のレセプタクル１９ｂに押し込まれる。第２のシリンジ・ポンプ１９から放出されるバッファー流体は、試料流体の一部を貯蔵コンジット３０から押し出し、第２の副コンジット２０に流入させる。第１の選択ポンプ８は閉鎖しているので、第２のコンジット１５の第１の部分１５ａに存在するバッファー流体によって与えられる圧力は、試料流体が第２のコンジット１５の第１の部分１５ａに沿って第１のフローセル２に向かって流れるのを防止することになり；さらに第２の選択弁２８はその第１の位置にあって第２の選択弁１８を開放するので、試料流体は、第２の副コンジットから第２のコンジット１５の第２の部分１５ｂに、さらに第２の選択弁２８を介して第２の廃棄物リザーバ２７に流れることになる。
【０１１１】
好ましくは、第２のコンジット１５の第１の部分１５ａに存在するバッファー流体により与えられた圧力は、試料流体が第２のコンジット１５の第１の部分１５ａに沿って第１のフローセル２内に流れるのを防止する。ある場合には、無視できるほどの量の試料流体を、第２のコンジット１５の第１の部分１５ａの一部に沿って拡散させることによって移動させてもよい。一実施形態では、第２のコンジット１５の第１の部分１５ａの一部に沿って試料流体の拡散を防止しまたは少なくとも最小限に抑えるために、好ましくは、第１のバッファーリザーバ９から第１のフローセル２を通って第２の廃棄物リザーバ２７に入るバッファー流体の流れは、試料流体が貯蔵コンジット３０から第２の副コンジット２０に沿って第２の廃棄物リザーバ２７内に流れるときに維持される。
【０１１２】
好ましくは、貯蔵コンジット３０から第２の副コンジット２０に沿って第２の廃棄物リザーバ２７内に流入することが可能な試料流体の体積は、第２の副コンジット２０の容積の２倍よりも大きいが、先に試料リザーバ２９から中間コンジット５１に、さらに第３の選択弁１８を介して貯蔵コンジット３０に吸引された試料流体の体積未満である。このように、好ましくは、いくらかの試料流体が貯蔵コンジット３０内に残される。
【０１１３】
したがって、好ましくはこの段階で、第２の副コンジット２０は試料流体によって効果的に濯ぎがなされる。したがって、好ましくは、この段階で、第１の副コンジット１０、第１のコンジット５の第１の部分５ａ、第１のフローセル２、および第２のコンジット１５の第１の部分１５ａは全て、バッファー流体のみを含有し；一方、好ましくは、第２の副コンジット２０は試料流体のみ含有し、第２のコンジット１５の第２の部分１５ｂは、少なくともいくらかの試料流体を含有する。段落１０３〜１０６に記述されたステップは任意選択であり、好ましいが、前記ステップが本発明に必須ではないことが強調される。
【０１１４】
次に第１の選択弁８をその第１の位置に移動させて（即ち、第１の選択弁は開放される。）、流体が第１のコンジット５から第１の廃棄物リザーバ７を通過できるようにし、好ましくは第２の選択弁２８をその第２の位置に移動させて、閉鎖されるようにする。第３の選択弁１８が依然としてその第２の位置にある状態では、プランジャ１９ａが第２のシリンジ・ポンプ１９のレセプタクル１９ｂ内に押し込まれて、より多くのバッファー流体を第２のシリンジ・ポンプ１９の外に押し遣るようにする。第２のシリンジ・ポンプ１９から放出されるバッファー流体は、貯蔵コンジット内に残された試料流体の一部または全てを、貯蔵コンジット３０の外から第２の副コンジット２０に押し遣る。第１の選択弁８はその第２の位置にあるので（即ち、第１の選択弁８は開放される。）、第２のコンジット１５の第１の部分１５ａに存在するバッファー流体は、試料流体が第２のコンジット１５の第１の部分１５ａに沿って第１のフローセル２に流入することを防ぐ圧力を、もはや提供しない。したがって、次に第２の副コンジット２０に入る試料流体は、第２のコンジット１５の第１の部分１５ａに流入し、第１のフローセル２に入り、第１のコンジット５に沿って、第１の選択弁８を介して第１の廃棄物リザーバ７に流入する。流体が流れるにつれ、試料流体は、第２のコンジット１５の第１の部分１５ａ、第１のフローセル２、および第１のコンジット５の第１の部分５ａに存在する全てのバッファー流体を、第１の廃棄物リザーバ７内にも流出させる。
【０１１５】
したがって、この段階では、第２の副コンジット２０、第２のコンジット１５の第１の部分１５ａ、第１のフローセル２、および第１のコンジット５は全て、試料流体のみ含有する。有利には、第１の選択弁８をその第２の位置に移動させる前に、試料流体は既に第２の副コンジット２０内に存在するので、第１の選択弁８がその第２の位置に移動したときに、第１のフローセル２内の試料流体の濃度を素早く上昇させることが可能になる。試料流体が第１のフローセル２の第１の表面３上を通るとき、表面の第１のリガンド４に結合させるのに必要な、事前に定義された特徴を有する分子が、第１のリガンド４に結合することになる。
【０１１６】
次に第１の選択弁８をその第２の位置に移動させて、第１の選択弁８が閉鎖するようにし、第２の選択弁２８をその第１の位置に移動させて、第２の選択弁が開放するようにする。好ましくは、第３の選択弁１８は、第３の選択弁１８が貯蔵コンジット３０および第２の副コンジット２０を流体接続するように依然としてその第２の位置にあるが、プランジャ１９ａの位置は、流体が第２のシリンジ・ポンプ１９のレセプタクル１９ｂの中または外に流れないように固定される。
【０１１７】
次に第１のシリンジ・ポンプ９のプランジャ９ａは、その後、レセプタクル９ｂ内に押し込まれて、バッファー流体が第１のシリンジ・ポンプ９から放出されるようにする。第１のシリンジ・ポンプ９から放出されるバッファー流体は、第１の副コンジット１０を通して第１のコンジット５の第１の部分５ａに入り、第１のフローセル２を通り、第２のコンジット１５を通り、第２の選択弁２８を介して第２の廃棄物リザーバ２７内に流れる。
【０１１８】
したがって、この段階で、貯蔵コンジット３０は、第２のシリンジ・ポンプ１９によって提供されたバッファー流体を含有し、いくらかの残留試料流体を含有していてもよく；第１の副コンジット１０、第１のコンジット５の第１の部分５ｂ、第１のフローセル２、および第２のコンジット１５は全て、第１のシリンジ・ポンプ９によって提供されたバッファー流体のみ含有し；第２の副コンジット２０および第１のコンジット５の第２の部分５ｂは、試料流体のみ含有する。
【０１１９】
次に、第１の選択弁８をその第１の位置に移動させて、第１の選択弁８が開放されるようにし、第２の選択弁２８をその第２の位置に移動させて、第２の選択弁が閉鎖されるようにする。好ましくは、第３の選択弁１８は、第３の選択弁１８が貯蔵コンジット３０および第２の副コンジット２０を流体接続するように、依然としてその第２の位置にあるが、プランジャ１９ａの位置は、流体が第２のシリンジ・ポンプ１９のレセプタクル１９ｂの中または外に流れないように、固定される。
【０１２０】
次に、第１のシリンジ・ポンプ９のプランジャ９ａは、その後、バッファー流体が第１のシリンジ・ポンプ９から放出されるようにレセプタクル９ｂに押し込まれる。第１のシリンジ・ポンプ９から放出されるバッファー流体は、第１の副コンジット１０を経て第１のコンジット５の第２の部分５ｂに入り、第１の選択弁８を介して第１の廃棄物リザーバ７に流入する。
【０１２１】
したがって、この段階では、貯蔵コンジット３０は、第２のシリンジ・ポンプ１９によって提供されたバッファー流体を含有し、いくらかの残留試料流体を含有していてもよく；第１の副コンジット１０、第１のコンジット５の第１の部分５ｂ、第１のコンジット５の第２の部分５ｂ、第１のフローセル２、および第２のコンジット１５は全て、第１のシリンジ・ポンプ９によって提供されたバッファー流体のみを含有し；第２の副コンジット２０は、試料流体のみを含有する。
【０１２２】
次に、ｘ−ｙテーブル５０を移動させて、第３の廃棄物リザーバ４９が中間コンジット５１に流体接続されるようにする。次いで第３の選択弁１８をその第１の位置に移動させて、中間コンジット５１が第３の選択弁１８を介して貯蔵コンジット３０に流体接続するようにする。プランジャ１９ａは、より多くのバッファー流体が第２のシリンジ・ポンプ１９の外に押し遣られるように、第２のシリンジ・ポンプ１９のレセプタクル１９ｂ内に押し込まれる。第２のシリンジ・ポンプ１９から放出されるバッファー流体は、貯蔵コンジット３０内のバッファー流体と、貯蔵コンジット３０内に残された全ての試料溶液とを、貯蔵コンジット３０から押し出し、第３の選択弁１８および中間コンジット５１を介して第３の廃棄物リザーバ４９内に押し遣る。したがって、このステップ中に、第２のシリンジ・ポンプ１９から放出されるバッファー流体は、貯蔵コンジット３０および中間コンジット５１に存在する全ての試料流体を流出させる。したがって、このステップの後、貯蔵コンジット３０および中間コンジット５１は共に、試料流体を含有しない（好ましくは、バッファー流体のみ含有する。）。
【０１２３】
次に、第１の選択弁８をその第２の位置に移動させて、第１の選択弁８が閉鎖されるようにし、第２の選択弁２８をその第１の位置に移動させて、第２の選択弁が開放されるようにする。第３の選択弁１８が貯蔵コンジット３０および第２の副コンジット２０を流体接続するように、選択弁１８が依然としてその第２の位置にある状態では、プランジャ１９ａを第２のシリンジ・ポンプ１９のレセプタクル１９ｂ内に押し込んで、より多くのバッファー流体が第２のシリンジ・ポンプ１９の外に押し遣られるようにする。第２のシリンジ・ポンプ１９から放出されるバッファー流体は、貯蔵コンジット３０内のバッファー流体を、貯蔵コンジット３０の外に押し出し、第２の副コンジット２０内に押し遣る。バッファー流体は、貯蔵コンジット３０から、第２の副コンジット２０、第２のコンジット１５の第２の部分１５ｂに、その後、第２の廃棄物リザーバ２７内に流れる。
【０１２４】
したがって、このステップ中、バッファー流体は、第２の副コンジット２０内に存在する全ての試料流体を、第２の廃棄物リザーバ２７へと流出させる。したがって、この段階で、貯蔵コンジット３０、第２の副コンジット２０、第２のコンジット１５、第１のフローセル２、第１のコンジット５、および第１の副コンジット１０は全て、バッファー流体で一掃される。第１のフローセル内で第１のリガンド４と結合するようになった分子の全てまたは少なくとも大部分は、結合した分子の大部分が受動的に解離しないので、結合したままになる。
【０１２５】
次いでｘ−ｙテーブル５０を移動させて、溶出試薬リザーバ５９が中間コンジット５１に流体接続されるようにする。
【０１２６】
第３の選択弁１８をその第１の位置に移動させて、中間コンジット５１が、第３の選択弁１８を介して貯蔵コンジット３０と流体接続するようにする。第３の選択弁１８がその第１の位置にある状態では、第２のシリンジ・ポンプ１９のプランジャ１９ａは、レセプタクル１９ｂの外に出る方向に移動して、貯蔵コンジット３０内に負圧が創出されるようにする。その結果、再生流体は、溶出試薬リザーバ５９から中間コンジット５１に、さらに第３の選択弁１８を介して貯蔵コンジット３０に吸引される。
【０１２７】
次に、第２の選択弁１８を閉鎖して（第１の選択弁８は既に、先のステップから閉じている。）、第１および第２の両方の選択弁８、１８が共に閉鎖されるようにする。第３の選択弁１８はその第２の位置に移動して、第３の選択弁１８が貯蔵コンジット３０および第２の副コンジット２０を流体接続するようにする。その後、プランジャ１９ａを第２のシリンジ・ポンプ１９のレセプタクル１９ｂ内に押し込んで、より多くのバッファー流体が第２のシリンジ・ポンプの外に押し遣られるようにし、同時に、第１のシリンジ・ポンプ９のプランジャ９ａを、レセプタクル９ｂの外に出る方向に移動させて、第１の副コンジット１０内に負圧が創出されるようにする。第２のシリンジ・ポンプから放出されたバッファー流体は、貯蔵コンジット３０内にある再生流体を、貯蔵コンジット３０から押し出し、第３の選択弁１８を介して第２の副コンジット２０に押し遣る。
【０１２８】
第２のシリンジ・ポンプ１９から放出されるバッファー流体により、再生流体に加えられた力に起因して、および第１のシリンジ・ポンプ９によって第１の副コンジット１０内に創出される負圧に起因して、再生流体は、第２の副コンジット２０に沿って、第２のコンジット１５の第１の部分１５ａを通り、第１のフローセル２を通り、第１のコンジット５の第１の部分５ａを通り、第１の副コンジット１０に沿って、第１のシリンジ・ポンプ９に向かって流れる。最も好ましい実施形態において、再生流体は、第１のシリンジ・ポンプ９まで流れるが、第１のシリンジ・ポンプのレセプタクル９ｂには流れない。
【０１２９】
重要なことは、再生流体が第１のフローセル２を経て流れるにつれ、第１のリガンド４に結合した分子は、そのそれぞれの第１のリガンド４から解離するようになる。解離した分子は、第１のフローセル２を経て流れる再生流体中に収集されることになる。したがって、このステップの後、第１のフローセル２、第１のコンジット５の第１の部分５ａ、および第１の副コンジット１０内に存在する再生流体は、第１のフローセル２の第１のリガンド４に結合しており、そしてこのリガンド４から能動的に解離された、分子を含有することになる。
【０１３０】
次に、第２の選択弁２８をその第１の位置に移動させて、第２の選択弁が開放されるようにする（第１の選択弁８は、既にその第２の位置にあって、第１の選択弁８が閉鎖されるようになされる。）。好ましくは、第１のシリンジ・ポンプ９のプランジャ９ａの位置は、流体が第１のシリンジ・ポンプ９のレセプタクル９ｂの中または外に流れないように固定される。第３の選択弁１８が依然としてその第２の位置にあって、第３の選択弁１８が貯蔵コンジット３０および第２の副コンジット２０を流体接続するようになされる状態では、プランジャ１９ａは、バッファー流体が第２のシリンジ・ポンプ１９の外に押し遣られるように第２のシリンジ・ポンプ１９のレセプタクル１９ｂ内に押し込まれる。第２のシリンジ・ポンプ１９から放出されるバッファー流体は、貯蔵コンジット３０を通り、第２の副コンジット２０を通り、第２のコンジット１５の第２の部分１５ｂを通り、さらに第２の選択弁２８を介して第２の廃棄物リザーバ２７に流入する。このように、バッファー流体は、貯蔵コンジット３０および第２の副コンジット２０内に在る全ての再生流体を、第２の廃棄物リザーバ２７に流出させる。
【０１３１】
したがって、好ましくはこの段階で、貯蔵コンジット３０、第２の副コンジット２０、および第２のコンジット１５の第２の部分１５ｂは、バッファー流体のみ含有し；一方、第２のコンジット１５の第１の部分１５ａ、第１のフローセル２、第１のコンジット５の第１の部分５ａ、および第１の副コンジット１０は全て、再生流体を含有する。特に、第１のフローセル２、第１のコンジット５の第１の部分５ａ、および第１の副コンジット１０は全て、第１のフローセル２内で第１のリガンド４に結合した分子を含有する再生流体を含有する。
【０１３２】
次にｘ−ｙテーブル５０を移動させて、第３の廃棄物リザーバ４９を中間コンジット５１に流体接続する。次いで第３の選択弁１８をその第１の位置に移動させて、中間コンジット５１が、第３の選択弁１８を介して貯蔵コンジット３０に流体接続されるようにする。プランジャ１９ａは、バッファー流体が第２のシリンジ・ポンプ１９の外に押し遣られるように、第２のシリンジ・ポンプ１９のレセプタクル１９ｂに押し込まれる。第２のシリンジ・ポンプ１９から放出されるバッファー流体は、貯蔵コンジット３０を通り、第３の選択弁１８を介して第３の廃棄物リザーバ４９に流入する。バッファー流体は、貯蔵コンジット３０および中間コンジット５１内の全ての残留再生流体を、第３の廃棄物リザーバ４９内に流出させることになる。したがって、このステップの後、貯蔵コンジット３０および中間コンジット５１は、再生流体を含有しない（好ましくは、バッファー流体のみ含有する。）。
【０１３３】
次に、第１のフローセル２で第１のリガンド４に結合した分子を含有する、第１のフローセル２、第１のコンジット５の第１の部分５ａ、および第１の副コンジット１０に存在する再生流体を、収集する。これを行うために、第２の選択弁２８をその第２の位置に移動させて、第１および第２の選択弁８、２８が共に閉鎖されるようにし（第１の選択弁８は、既に、先のステップから閉鎖されている。）、それと共に、第３の選択弁１８をその第２の位置に移動させて、第３の選択弁１８が貯蔵コンジット３０および第２の副コンジット２０を流体接続するようにする。その後、プランジャ９ａを第１のシリンジ・ポンプ９のレセプタクル９ｂに押し込んで、より多くのバッファー流体が第１のシリンジ・ポンプ９の外に押し遣られるようにし、同時に、第２のシリンジ・ポンプ１９のプランジャ１９ａを、レセプタクル１９ｂの外に出る方向に移動させて、負圧が貯蔵コンジット３０内に創出されるようにする。
【０１３４】
第１のシリンジ・ポンプ９から放出されるバッファー流体によって、再生流体に力が加えられることに起因して、および第２のシリンジ・ポンプ１９により貯蔵コンジット３０内に負圧が創出されることに起因して、第１のシリンジ・ポンプ９から放出されるバッファー流体は、第１の副コンジット１０、第１のコンジット５の第１の部分５ａ、および第１のフローセル２内にある再生流体を、貯蔵コンジット３０内に押し遣る。
【０１３５】
次に、ｘ−ｙテーブル５０を移動させて、収集リザーバ３９が中間コンジット５１に流体接続するようにする。
【０１３６】
次いで第３の選択弁１８をその第１の位置に移動させて、中間コンジット５１が、第３の選択弁を介して貯蔵コンジット３０に流体接続するようにする。
【０１３７】
第３の選択弁１８がその第１の位置にある状態では、第２のシリンジ・ポンプ１９のプランジャ１９ａは、バッファー流体が第２のシリンジ・ポンプ１９から貯蔵コンジット３０に放出されるように、レセプタクル１９ｂ内に押し込まれる。第２のシリンジ・ポンプ１９から放出されたバッファー流体は、前記分子（即ち、そのそれぞれの第１のリガンド４から能動的に解離した分子）を有する再生流体を、貯蔵コンジット３０の外から収集リザーバ３９内に押し遣る。したがって、この段階で、第１のリガンド４に結合した分子（または第１のリガンド４に結合した分子の少なくとも大部分）は、試料溶液の残りから単離されている。
【０１３８】
（前記解離した分子を含有する）再生流体は、収集リザーバ３９から得ることができ、再生流体中に存在する分子を決定／同定するように構成された分析デバイスに提供することができ；したがって、第１のフローセル２内で第１のリガンド４に結合していた、再生流体によってそれぞれの第１のリガンド４から解離されるようになった分子を、最終的に決定／同定し；例えば、分析デバイスは、質量分光計であってもよく、質量分光計は、どの分子が再生流体に含有されるのかを同定するのに使用され、したがって、第１のフローセル２内で第１のリガンド４に結合していた、再生流体によってそれぞれの第１のリガンド４から解離するようになった分子が同定される。
【０１３９】
有利には、再生流体（前記解離した分子）を貯蔵３０内に吸引する前に、貯蔵コンジット３０、第２の副コンジット２０、第２のコンジット１５の第１の部分１５ａ、第１のフローセル２、および第１のコンジット５内に存在する試料流体は、緩衝溶液を使用して流出させたので、収集リザーバ３９）に入った再生流体（前記解離した分子を含有する。）は、通常ならミクロ流体アセンブリ１００のこれらの部分に存在し得る残留試料流体によって、汚染されなくなる。このように、第１のリガンド４に結合した、試料流体中に存在する分子のみが、収集リザーバ３９に吸引された再生流体中に存在することになる。収集リザーバ３９に吸引された再生流体は、好ましくは分析デバイスに入り、そこで再生流体中の分子が同定される。
【０１４０】
アセンブリ１００を使用して実施された上述の例示的な方法の変形例では、第１のフローセル２を、異なるタイプのリガンド（即ち、異なった、事前に定義された特徴を有する分子に、結合することができるリガンド）を含む別のフローセルに置き換えてもよい。例えば、問題となっている結合部位の失活をもたらす、特定の変異を有する陰性対照リガンドでは、上記ステップを繰り返して試料流体を試験する。このテキストの結果を、先の試験の結果と比較して、非特異的結合剤を決定してもよく；例えば、第１の試験ではリガンドに結合するが、第２の試験では陰性対照リガンドにも結合する分子を同定できる場合、これらの分子は、非特異的に結合すると見なすことができる。
【０１４１】
図３は、本発明の他の実施形態によるミクロ流体アセンブリ２００であって、第２のリガンド４’を持つ第２の表面３’を含んだ第２のフローセル２’を含むアセンブリを示す。第２のリガンド４’は、陰性対照リガンド、または第１のリガンド４と同じもしくは類似のリガンドとすることができる。有利には、ミクロ流体アセンブリ２００は、以下に記述されるように、第１のフローセル２からまたは第２のフローセル２’からまたは両方のフローセルから一緒に、結合した分子の選択的回収を可能にする。
【０１４２】
ミクロ流体アセンブリ２００はさらに、第３のコンジット５’を含み、その一端は第２のフローセル２’の第１の流体ポート２ａ’に流体接続され、その他端は第４の選択弁８’に流体接続される。第４の選択弁８’は、選択的に第３のコンジット５’を第１の廃棄物リザーバ７に流体接続させることができる。第４の選択弁８’は、第１の位置と第２の位置との間で可動であり；第４の選択弁８’がその第１の位置にあるときは、第４の選択弁８’は、流体を第３のコンジット５’から第１の廃棄物リザーバ７に通すことが可能になり；第４の選択弁８’がその第２の位置にあるときは、第４の選択弁８’は閉鎖され、したがって流体が第４の選択弁８’を介して第３のコンジット５’の外に流れるのを防止する。
【０１４３】
ミクロ流体アセンブリ２００はさらに、第４のコンジット１５’を含み、その一端は、第２のフローセル２’の第２の流体ポート２ｂ’に流体接続され、その他端は、第５の選択弁２８’に流体接続され；第５の選択弁２８’は、第３のコンジット５’を第２の廃棄物リザーバ２７に選択的に流体接続することができる。第５の選択弁２８’は、第１の位置と第２の位置との間で可動であり；第５の選択弁２８’がその第１の位置にあるとき、第５の選択弁２８’によって、流体を第３のコンジット５’から第２の廃棄物リザーバ２７に通すことが可能になり；第５の選択弁２８’がその第２の位置にあるとき、第５の選択弁２８’は閉鎖され、したがって流体が第３のコンジット５’から第２の廃棄物リザーバ２７に流れるのを防止する。
【０１４４】
ミクロ流体アセンブリ２００はさらに、第１のバッファーリザーバ９と第１の接合部１１との間で第１の副コンジット１０に沿って位置付けられた、第６の選択弁３８を含む。第６の選択弁３８は、第１の位置と第２の位置との間で可動であり；第６の選択弁３８がその第１の位置にあるとき、第６の選択弁３８によって、流体は第１のバッファーリザーバ９から第１の接合部１１に、したがって第１のコンジット５に入ることが可能になり；第６の選択弁３８がその第２の位置にあるとき、第６の選択弁３８は閉鎖され、したがって流体が第１のバッファーリザーバ９から第１の接合部１１に流れるのを、およびその逆を流れるのを防止する。
【０１４５】
ミクロ流体アセンブリ２００はさらに、第１の副コンジット１０（したがって、第１のバッファーリザーバ９）を第３の副コンジット１０’に選択的に流体接続することができる、第７の選択弁３８’を含み；第３の副コンジット１０’は、第３の接合部１１’で第３のコンジット５’に接続する。この例において、第３の副コンジット１０’は、第３の接合部１１’がＴ字形接合部１１’になるように、第３のコンジット５’に垂直に配置構成され；しかし、第３の接合部１１’は、任意の形状または構成をとってもよいことが理解されよう。
【０１４６】
第７の選択弁３８’は、第１の位置と第２の位置との間で可動であり；第７の選択弁３８’がその第１の位置にあるとき、第７の選択弁３８’によって、流体をバッファーリザーバ９から第１の副コンジット１０に、および第１の副コンジット１０から第３の副コンジット１０’に、したがって第３のコンジット５’に通すことが可能になり；第７の選択弁３８’がその第２の位置にあるとき、第７の選択弁３８’は、第７の選択弁３８’は閉鎖され、したがって流体が第１の副コンジット１０から（したがって、バッファーリザーバ９から）第３の副コンジット１０’に流れるのを、およびその逆に流れるのを防止する。
【０１４７】
第２のフローセル２’の第１の流体ポート２ａ’と、第３の接合部１１’との間に位置付けられた、第３のコンジット５’の部分を、第３のコンジット５’の第１の部分５ａ’と呼ぶことにし、第３の接合部１１’と第４の選択弁８’との間に位置付けられた第３のコンジット５’の部分を、第３のコンジット５’の第２の部分５ｂ’と呼ぶことにする。好ましい実施形態では、第３のコンジット５’の第１の部分５ａ’は、第３のコンジット５’の第２の部分５ｂ’の容積よりも低い容積を有するように構成される。
【０１４８】
図１および２に示されるアセンブリ１、１００の場合と同様に、アセンブリ２００はユニット７２を含み；ユニット７２は、試料流体（図１および２に示される実施形態に関して記述される。）を投入し貯蔵するための適切な手段を含む。ユニット７２は、図１および２のアセンブリ１、１００と同じ構成を有する。ユニット７２は、第２の副コンジット２０を介して第２の接合部２１に流体接続される。アセンブリ２００はさらに、第２の副コンジット２０に接続され第４のコンジット１５’に接続される、第４のコンジット１５’を含み、したがって第４のコンジット１５’は、第２の副コンジット２０を第４のコンジット１５’に流体接続する。第４の副コンジット２０’は、第４の接合部２１’で第４のコンジット１５’に接続される。この例で、第４の副コンジット２０’は、第４の接合部２１’がＴ字形接合部２１’になるように、第４のコンジット１５’に垂直に配置構成され；しかし、第４の接合部２１’は任意の形状または構成をとってもよいことが理解されよう。
【０１４９】
図３に示されるように、第４の副コンジット２０’は、第６の接続部４１で第２の副コンジット２０に接続される。この例で、第４の副コンジット２０’は、第６の接合部４１がＴ字形接合部４１になるように、第２の副コンジット２０に垂直に配置構成され；しかし第６の接合部４１は、任意の形状または構成をとってもよいことが理解されよう。この実施形態では、第６の接合部４１は無弁である（即ち、第６の接合部に弁が存在しない。）。
【０１５０】
第７の選択弁３８’は、中間コンジット１０８を介して第１の副コンジット１０に接続される。中間コンジット１０８は、第５の接合部３１で第１の副コンジット１０に接続される。この例において、中間コンジット１０８は、第５の接合部３１がＴ字形接合部３１になるように、第１の副コンジット１０に垂直に配置構成され；しかし第５の接合部３１は、任意の形状または構成をとってもよいことが理解されよう。
【０１５１】
第２のフローセル２’の第２の流体ポート２ｂ’と第４の接合部２１’との間に位置付けられた第４のコンジット１５’の部分を、第４のコンジット１５’の第１の部分１５ａ’と呼ぶことにし、第４の接合部２１’と第５の選択弁２８’との間に位置付けられた第４のコンジット１５’の部分を、第４のコンジット１５’の第２の部分１５ｂ’と呼ぶことにする。好ましい実施形態では、第４のコンジット１５’の第１の部分１５ａ’は、第４のコンジット１５’の第２の部分１５ｂ’よりも非常に低い容積を有する。
【０１５２】
有利には、図３に示される実施形態では、流体は、いかなる弁も通過することなく、ユニット７２から第１のフローセル２または第２のフローセル２’のいずれかを通ることができ；したがって、通常なら、分析物流体を交換するときにそのような弁に存在する可能性のある、任意のデッドボリュームを濯ぐ必要がない。その後の利点とは、いかなる弁も通過することなく、流体はユニット７２から第１のフローセル２または第２のフローセル２’のいずれかまで通ることができるので、ミクロ流体アセンブリ２００内に存在する弁の全てを濯ぐ必要がなく、したがって市販の標準弁から構成することができ、低減した内部容積でマイクロ弁を小型化する必要性がなくなることである。
【０１５３】
アセンブリ２００の上述の例示的な実施形態の変形例では、弁の総数を低減させるために、ある特定の弁を省略してもよい。図４は、本発明の他の実施形態によるミクロ流体アセンブリ３００を示す。ミクロ流体アセンブリ３００は、図３に示されるミクロ流体アセンブリ２００と同じ特徴の多くを有し、同様の特徴には同じ参照符号が与えられる。しかし、ミクロ流体アセンブリ２００に比べ、ミクロ流体アセンブリ３００は、第５の選択弁２８’を含まず、第４のコンジット１５’を含まない。
【０１５４】
ミクロ流体アセンブリ３００では、第２のコンジット１５におよび第２のフローセル２’の第２の流体ポート２ｂ’に接続される第５のコンジット１６が設けられて、第２のコンジット１５および第２のフローセル２’が流体接続するようになされている。第５のコンジット１６は、第７の接合部５１で第２のコンジット１５に接続され、一方、第５のコンジット１６の他端は、第２のフローセル２’の第２の流体ポート２ｂ’に接続される。この例において、第７の接合部５１は、第２の接合部２１と第１のフローセル２の第２の流体ポート２ａとの間に位置付けられる（しかし、第７の接合部５１は、第２のコンジット１５に沿った任意のその他の位置に位置付けることができることが理解されよう。）。第７の接合部５１を第２の接合部２１と第１のフローセル２の第２の流体ポート２ａとの間に位置付けることにより（即ち、第７の接合部５１を第２のコンジット１５の第１の部分１５ａに沿って位置付けることにより）、ユニット７２が第２の廃棄物リザーバ２７に流体接続したときに、均質な試料の調製が容易になる。この例では、第５のコンジット１６は、第７の接合部５１がＴ字形接合部５１になるように、第２のコンジット１５に垂直に配置構成され；しかし第７の接合部５１は、任意の形状または構成をとってもよいことが理解されよう。
【０１５５】
代替の実施形態では、第７の接合部５１は、第２のコンジット１５に沿って、第２の接合部２１と同じ点に位置付けられ；したがって、四方接合部（または十字形の、即ち「＋」接合部）が形成される。
【０１５６】
図３および４に示されるミクロ流体アセンブリ２００および３００の動作について、次に記述する。
【０１５７】
この記述を簡潔にするために、図３に示されるミクロ流体アセンブリ２００では、第１の選択弁８、第２の選択弁２８、第４の選択弁８’、第５の選択弁２８’、第６の選択弁３８、および第７の選択弁３８’がまとまって、流動ステアリング弁ユニット１３８を画定し；図４に示されるミクロ流体アセンブリ３００では、第１の選択弁８、第２の選択弁２８、第４の選択弁８’、第６の選択弁３８、および第７の選択弁３８’がまとまって、流動ステアリング弁ユニット１３８を画定すると見なされることになる。
【０１５８】
図４に示されるミクロ流体アセンブリ３００では、流動ステアリング弁ユニット１３８を、第１の状態、第２の状態、第３の状態、第４の状態、第５の状態、または第６の状態のいずれかになるように選択的に構成することができる。図４に示されるミクロ流体アセンブリ３００では、流動ステアリング弁ユニットがその第１の状態になるように構成されるとき、第２の選択弁２８および第６の選択弁３８はそれらの第１の位置（即ち、「開放」）にあり、一方、流動ステアリング弁ユニット１３８のその他全ての弁はそれらの第２の位置（即ち、「閉鎖」）にあり、したがって流体を第２の副コンジット２０から第２の廃棄物リザーバ２７に流すことが可能になり、第１のバッファーリザーバ９から第１のフローセル２を経て第２の廃棄物受容器２７にまで流れることが可能になるが、流体が第２のフローセル２’を経て流れまたは第１の廃棄物受容器７へ流れることは防止される。流動ステアリング弁ユニット１３８がその第２の状態になるように構成されるとき、第１の選択弁８および第６の選択弁３８はそれらの第１の位置（即ち、「開放」）にあり、一方、流動ステアリング弁ユニット１３８のその他全ての弁はそれらの第２の位置（即ち、「閉鎖」）にあり、したがって第２の副コンジット２０から第１のフローセル２を経て第１の廃棄物受容器７に至る流動が可能になり、第１のバッファーリザーバ９から第１の廃棄物受容器７への流動が可能になるが、流体が第２のフローセル２’を経て流れまたは第２の廃棄物受容器２７に流れることは防止される。流動ステアリング弁ユニット１３８が、その第３の状態になるように構成されるとき、第７の選択弁３８’および第２の選択弁２８は、それらの第１の位置（即ち、「開放」）にあり、一方、流動ステアリング弁ユニット１３８のその他全ての弁は、それらの第２の位置（即ち、「閉鎖」）にあり、したがって流体が、第４の副コンジット２０’から第２の廃棄物受容器２７に流れることが可能になり、第１のバッファーリザーバ９から第２のフローセル２’を経て第２の廃棄物受容器２７に流れることが可能になるが、流体が第１のフローセル２に流れることまたは第１の廃棄物受容器７に流れることは防止される。流動ステアリング弁ユニット１３８が、前記第４の状態になるよう構成されるとき、第４の選択弁８’および第７の選択弁３８’はそれらの第１の位置（即ち、「開放」）にあり、一方、流動ステアリング弁ユニット１３８のその他全ての弁は、それらの第２の位置（即ち、「閉鎖」）にあり、したがって第４の副コンジット２０’から第２のフローセル２’を経て第１の廃棄物受容器７に至る流れが可能になり、第１のバッファーリザーバ９から第１の廃棄物受容器７への流れが可能になるが、流体が第１のフローセル２を経て流れることまたは第２の廃棄物受容器２７に流れることは防止される。流動ステアリング弁ユニット１３８が、その第５の状態になるように構成されるとき、第１の選択弁８および第４の選択弁８’は、それらの第２の位置（即ち、「閉鎖」）にあり、一方、流動ステアリング弁ユニット１３８のその他全ての弁は、それらの第１の位置（即ち、「開放」）にあり、したがって第２の副コンジット２０および第４の副コンジット２０’から第２の廃棄物受容器２７への流れが可能になり、第１のバッファーリザーバ９から第１のフローセル２および第２のフローセル２’を経て第２の廃棄物受容器２７に至る流れが可能になるが、流体が第１の廃棄物受容器７に流れることは防止される。流動ステアリング弁ユニット１３８がその第６の状態になるように構成されるとき、第２の選択弁２８はその第２の位置（即ち、「閉鎖」）にあり、一方、流動ステアリング弁ユニット１３８のその他全ての弁は、それらの第１の位置（即ち、「開放」）にあり、したがって、第２の副コンジット２０から第１のフローセル２を経て第１の廃棄物受容器７に至る、および第４の副コンジット２０’から第２のフローセル２’を経て第１の廃棄物受容器７に至る流れが可能になり、第１のバッファーリザーバ９から第１の廃棄物受容器７への流れが可能になるが、流体が第２の廃棄物受容器２７に流れることは防止される。
【０１５９】
図３に示されるミクロ流体アセンブリ２００において、流動ステアリング弁ユニット１３８は、第１の状態、第２の状態、第３の状態、第４の状態、第５の状態、または第６の状態のいずれかになるように選択的に構成することができる。図３に示されるミクロ流体アセンブリ２００では、流動ステアリング弁ユニットがその第１の状態になるように構成されるとき、第２の選択弁２８および第６の選択弁３８はそれらの第１の位置（即ち、「開放」）にあり、一方、流動ステアリング弁ユニット１３８のその他全ての弁は、それらの第２の位置（即ち、閉鎖）にあり、したがって流体は第２の副コンジット２０から第２の廃棄物受容器２７に流れることが可能になり、第１のバッファーリザーバ９から第１のフローセル２を経て第２の廃棄物受容器２７に流れることが可能になるが、流体が第２のフローセル２’を経て流れることまたは第１の廃棄物受容器７に流れることは防止される。流動ステアリング弁ユニット１３８が、その第２の状態にあるように構成されるとき、第１の選択弁８および第６の選択弁３８は、それらの第１の位置（即ち、「開放」）にあり、一方、流動ステアリング弁ユニット１３８のその他全ての弁は、それらの第２の位置（即ち、「閉鎖」）にあり、したがって第２の副コンジット２０から第１のフローセル２を経て第１の廃棄物受容器７に流れることが可能になり、第１のバッファーリザーバ９から第１の廃棄物受容器７に流れることが可能になるが、流体が第２のフローセル２’を経て流れること、または第２の廃棄物受容器２７に流れることは防止される。流動ステアリング弁ユニット１３８が、その第３の状態になるように構成されるとき、第７の選択弁３８’および第５の選択弁２８’はそれらの第１の位置（即ち、「開放」）にあり、一方、流動ステアリング弁ユニット１３８のその他全ての弁は、それらの第２の位置（即ち、「閉鎖」）にあり、したがって第４の副コンジット２０’から第２の廃棄物受容器２７に流れることが可能になり、第１のバッファーリザーバ９から第２のフローセル２’を経て第２の廃棄物受容器２７に流れることが可能になるが、流体が第１のフローセル２内を流れまたは第１の廃棄物受容器７に流れることは防止される。流動ステアリング弁ユニット１３８が、前記第４の状態になるように構成されるとき、第４の選択弁８’および第７の選択弁３８’は、それらの第１の位置（即ち、「閉鎖」）にあり、一方、流動ステアリング弁ユニット１３８のその他全ての弁は、それらの第２の位置（即ち、「閉鎖」）にあり、したがって第４の副コンジット２０’から第２のフローセル２’を経て第１の廃棄物受容器７に流れることが可能であり、第１のバッファーリザーバ９から第１の廃棄物受容器７に流れることが可能になるが、流体が第１のフローセル２内を流れまたは第２の廃棄物受容器２７に流れることは防止される。流動ステアリング弁ユニット１３８が、その第５の状態になるよう構成されるとき、第１の選択弁８および第４の選択弁８’は、それらの第２の位置（即ち、「閉鎖」）にあり、一方、流動ステアリング弁ユニット１３８のその他全ての弁は、それらの第１の位置（即ち、「開放」）にあり、したがって第２の副コンジット２０および第４の副コンジット２０’から第２の廃棄物受容器２７に流れることが可能になり、第１のバッファーリザーバ９から第１のフローセル２および第２のフローセル２’を経て第２の廃棄物受容器２７に流れることが可能になるが、流体が第１の廃棄物受容器７に流れることは防止される。流動ステアリング弁ユニット１３８が、その第６の状態になるよう構成されるとき、第２の選択弁２８および第５の選択弁２８’は、それらの第２の位置（即ち、「閉鎖」）にあり、一方、流動ステアリング弁ユニット１３８のその他全ての弁は、それらの第１の位置（即ち、「開放」）にあり、したがって、第２の副コンジット２０から第１のフローセル２を経て第１の廃棄物受容器７に、および第４の副コンジット２０’から第２のフローセル２’を経て第１の廃棄物受容器７に流れることが可能になり、第１のバッファーリザーバ９から第１の廃棄物受容器７に流れることが可能になるが、流体が第２の廃棄物受容器２７に流れることは防止される。ミクロ流体アセンブリ２００および３００は、第１のフローセル２内の第１のリガンド４および／または第２のフローセル２’内の第２のリガンド４’のいずれかまたは両方から受動的にまたは能動的に解離する分子を含有する試料流体を試験するために、本発明の方法の実施形態による例示的な方法を実施するのに使用することができる。
【０１６０】
一例では、流動ステアリング弁ユニット１３８は、試料流体が第１のフローセル２のみを経て（第２のフローセル２’を通らない。）流れるように構成される。前記試料流体は、最も好ましくは、第１のフローセル２内で第１のリガンド４から受動的にまたは能動的に解離する分子を含有する。この例では、流動ステアリング弁ユニット１３８は、その第１の状態にあるように最初に構成される。次いでユニット７２は、試料流体を放出するように構成され（図１および２の実施形態に関して記述されるように）；放出された試料流体は、第２の副コンジット２０、第２のコンジット１５の第２の部分１５ｂ、および第２の選択弁２８を経て、第２の廃棄物リザーバ２７に流入する。任意選択で、次にプランジャ９ａは、バッファー流体が第１のシリンジ・ポンプ９から放出されるように、レセプタクル９ａに押し込まれる。バッファー流体は、第１のシリンジ・ポンプ９から流出し、第１の副コンジット１０、第６の選択弁３８、および第１のコンジット５の第１の部分５ａを経て、第１のフローセル２に流入し、そこから第２のコンジット１５および第２の選択弁２８を経て第２の廃棄物リザーバ２７に流入する。
【０１６１】
このように、図３のアセンブリ２００および図４のアセンブリ３００に関し、上述のステップ中に、第２の副コンジット２０は試料流体によって効果的に濯ぎがなされる。
【０１６２】
次に、流動ステアリング弁ユニット１３８を、その第２の状態になるように構成する。次いでユニット７２は、試料流体を放出するように構成され（図１および２の実施形態に関して記述されるように）；放出された試料流体は、第２の副コンジット２０および第２のコンジット１５の第１の部分１５ａを経て第１のフローセル２内へと流通し、そこから第１のコンジット５および第１の選択弁８を経て第１の廃棄物リザーバ７に流入する。
【０１６３】
したがって、この段階では、第１のフローセル２は試料流体を含有し；第１のフローセル２内に含有される試料流体中の分子を、第１のフローセル２内の第１のリガンド４に結合することができる。
【０１６４】
次に、流動ステアリング弁ユニット１３８を、その第１の状態にあるように構成する。次いでユニット７２を、バッファー流体が放出されるように構成する（図１および２の実施形態で記述されるように）。放出されたバッファー流体は、第２の副コンジット２０、第２のコンジット１５の第２の部分１５ｂ、および第２の選択弁２８を通して第２の廃棄物リザーバ２７に流れることにより、第２の副コンジット２０内に存在する試料流体を流出させる。したがってこの段階で、図３のアセンブリ２００に関しておよび図４のアセンブリ３００に関して、第１のフローセル２は試料流体を含有し；上述のステップ中、第２の副コンジット２０は、バッファー流体によって効果的に濯ぎがなされる。
【０１６５】
次に、任意選択で、流動ステアリング弁ユニット１３８は、その第２の状態にあるように構成され、プランジャ９ａは、バッファー流体が第１のシリンジ・ポンプ９から放出されるように、レセプタクル９ａに押し込まれてもよく；放出バッファー流体は、第１の副コンジット１０および第６の選択弁３８、第１のコンジット５の第２の部分５ｂ、および第１の選択弁８を経て、第１の廃棄物受容器７に流入する。
【０１６６】
したがって、この段階で、第１のフローセル２は試料流体を含有し、残りの流路は、第１のコンジット５の第１の部分５ａと第２のコンジット１５の第１の部分１５ａ以外、バッファー流体によって効果的に濯ぎがなされる。
【０１６７】
次に流動ステアリング弁ユニット１３８は、その後、その第１の状態に構成される。次いでバッファー流体は、第１のシリンジ・ポンプ９から放出される（図１および２の実施形態で記述されるように）。放出されたバッファー流体は、第１の副コンジット１０、第１のコンジット５の第１の部分５ａ、第１のフローセル２、第２のコンジット１５、および第２の選択弁２８を経て、第２の廃棄物受容器２７に流入する。好ましい実施形態では、特に、受動的に解離する分子の回収の場合、バッファー流体は、１０ミリ秒から１０秒の間の期間、第１のフローセル２を経て流れることが可能であり；好ましくはバッファー流体は、０．１〜２秒の間の期間、第１のフローセル２を経て流れることが可能になり；最も好ましくは、バッファー流体は、０．５秒間、第１のフローセル２を経て流れることが可能になる。
【０１６８】
次に第６の選択弁３８をその第１の位置（「開放」）に移動させ、第７の選択弁３８’をその第２の位置（「閉鎖」）に移動させて、流体を、第１のシリンジ・ポンプ９からまたはそこに向かって、第６の選択弁３８を介して第１のフローセル２内に流すことができるようにし、したがって第７の弁３８’は、流体が第２のフローセル２’を経て第１のシリンジ・ポンプ９からまたはそこに向かって流れるのを防止する。
【０１６９】
次に、能動的に解離する分子を回収するために、ユニット７２は、再生流体（即ち、例えば低ｐＨのグリシンなどの再生溶液）を放出するよう構成され（図２の実施形態で記述されるように）；第１のシリンジ・ポンプ９は、ユニット７２から、第２の副コンジット２０、第２のコンジット１５の第１の部分１５ａを経て、第１のフローセル２内に再生流体を吸引するように構成される。再生流体は、第１のフローセル２内で第１のリガンド４に結合している分子を押し遣って、第１のリガンド４から解離させる。再生流体は、第１のフローセル２から、第１のコンジット５の第１の部分５ａ、第１の副コンジット１０、および第６の選択弁３８を経て、第１のシリンジ・ポンプ９に到達するまで流れる。重要なことは、再生流体が第１のフローセル２内を流れるにつれ、第１のフローセル２内のそれぞれの第１のリガンド４に結合した分子を、それらの第１のリガンド４から解離させるようになることである。解離した分子は、第１のフローセル２内を流れる再生流体中に収集されることになる。したがって、このステップの後、第１のフローセル２、第１のコンジット５の第１の部分５ａ、および第１の副コンジット１０内に存在する再生流体は、第１のフローセル２内で第１のリガンド４に結合しており、そしてこのリガンド４から能動的に解離された分子を含有することになる。
【０１７０】
次に、第１のシリンジ・ポンプ９は、バッファー流体を計量分配するように構成され、ユニット７２は吸引するように構成され、その結果、再生流体は、第１のシリンジ・ポンプ９の前から第１の副コンジット１０および第１のコンジット５の第１の部分５ａを経て第１のフローセル２に流れ、そこから、第２のコンジット１５の第１の部分１５ａおよび第２の副コンジット２０を経てユニット７２に流れる。このように、解離した分子を含有する再生流体は、ユニット７２の収集リザーバ３９に取集されてもよい。
【０１７１】
受動的に解離する分子の場合、分子は、再生流体によって能動的に解離される必要なしに、第１のフローセル２内で第１のリガンド４’から受動的に解離することになるので、再生流体はアセンブリ２００、３００で使用されない。したがって、受動的に解離する分子を回収するために、第６の選択弁３８がその第１の位置（「開放」）にありかつ第７の選択弁３８’がその第２の位置（「閉鎖」）にあるとき、第１のシリンジ・ポンプ９はバッファー流体を計量分配するように構成され、ユニット７２は吸引するように構成され、その結果、バッファー流体は、第１のシリンジ・ポンプ９から第１の副コンジット１０、第１のコンジットの第１の部分５ａを経て第１のフローセル２に流れ、そこから、第２のコンジット１５の第１の部分１５ａおよび第２の副コンジット２０を経てユニット７２に流れる。このように、第１のシリンジ・ポンプ９によって第１のフローセル２内に放出されたバッファー流体は、第１のフローセル２内に、第２のリガンド４から解離するようになった（即ち、受動的に解離した）分子を収集することになり；収集された、解離された分子を含有するバッファー流体は、第１のフローセル２からユニット７２の収集リザーバ３９内に流れることになる。
【０１７２】
ユニット７２の収集リザーバ３９に収集された、前記解離した分子を含有する流体（受動的に解離する分子の場合はバッファー流体、または能動的に解離する分子の場合は再生流体）は、流体中に存在する分子を決定／同定するように構成された分析デバイスに提供することができ；したがって最終的には、対処されたフローセル内でリガンドに結合した、およびそれぞれのリガンドから解離されるようになった、分子を決定／同定する。
【０１７３】
一例では、流動ステアリング弁ユニット１３８は、試料流体が第２のフローセル２’のみを経て（第１のフローセル２は通らない。）流れるように構成される。前記試料流体は、最も好ましくは、第２のフローセル２’内で第２のリガンド４’から受動的にまたは能動的に解離する分子を含有する。この例では、流動ステアリング弁ユニット１３８は、その第３の状態になるように最初に構成される。次いでユニット７２は、試料流体を第２の廃棄物リザーバ２７に放出するように構成される。図３のアセンブリ２００に関し、試料流体は、第２の副コンジット２０、第４の副コンジット２０’、第４のコンジット１５’の第２の部分１５ｂ’、および第５の選択弁２８’を経て、第２の廃棄物リザーバ２７内に流れる。図４のアセンブリ３００に関し、試料流体は、第２の副コンジット２０、第２のコンジット１５の第２の部分１５ｂ、および第２の選択弁２８を経て、第２の廃棄物リザーバ２７内に流れる。任意選択で、次にプランジャ９ａは、バッファー流体が第１のシリンジ・ポンプ９から放出されるように、レセプタクル９ａ内に押し込まれる。バッファー流体は、第１のシリンジ・ポンプ９から、第３の副コンジット１０’、第７の選択弁３８’、および第３のコンジット５’の第１の部分５ａ’を経て、第２のフローセル２’内に流出する。図３のアセンブリ２００に関し、流体は、第２のフローセル２’から、第４のコンジット１５’および第５の選択弁２８’を経て、第２の廃棄物リザーバ２７内に流れる。図４のアセンブリ３００に関し、流体は、第２のフローセル２’から、第５のコンジット１６および第４のコンジット１５’の一部、および第２の選択弁２８を経て、第２の廃棄物リザーバ内に流れる。
【０１７４】
このように、上述のステップ中の図３のアセンブリ２００に関し、第４の副コンジット２０’、およびユニット７２と第６の接合部４１との間の第２の副コンジット２０の部分は、試料流体によって効果的に濯ぎがなされ；図４のアセンブリ３００に関し、第２の副コンジット２０は、試料流体によって効果的に濯ぎがなされる。
【０１７５】
次に、流動ステアリング弁ユニット１３８は、その第４の状態になるように構成される。次いでユニット７２は、試料を第２のフローセル２’内に放出するように構成される。図３のアセンブリ２００に関し、試料流体は、ユニット７２から、第２の副コンジット２０、第４の副コンジット２０’、および第４のコンジット１５’の第１の部分１５ａ’を経て、第２のフローセル２’内に流れる。図４のアセンブリ３００に関し、試料流体は、ユニット７２から、第２の副コンジット２０および第５のコンジット１６を経て、第２のフローセル２’内に流れる。図３のアセンブリ２００に関し、および図４のアセンブリ３００に関し、そこから試料流体は、第３のコンジット５’および第４の選択弁８’を経て、第１の廃棄物リザーバ７に流れる。
【０１７６】
したがって、この段階で、第２のフローセル２’は試料流体を含有し；第２のフローセル２’内に含有される試料流体中の分子は、第２のフローセル２’内の第２のリガンド４’に結合することができる。
【０１７７】
次に、流動ステアリング弁ユニット１３８は、その後、その第３の状態に構成される。次いでユニット７２は、バッファー流体を第２の廃棄物リザーバ２７に放出するように構成される。図３のアセンブリ２００に関し、バッファー流体は、第２の副コンジット２０、第４の副コンジット２０’、第４のコンジット１５’の第２の部分１５ｂ’、および第５の選択弁２８’を経て、第２の廃棄物リザーバ２７内に流れる。図４のアセンブリ３００に関し、バッファー流体は、第２の副コンジット２０、第２のコンジット１５の第２の部分１５ｂ、および第２の選択弁２８を経て第２の廃棄物リザーバ２７に流入する。したがって、この段階で、図３のアセンブリ２００および図４のアセンブリ３００に関し、第２のフローセル２’は試料流体を含有し；上述のステップ中、第２の副コンジット２０はバッファー流体によって効果的に濯ぎがなされる。図４のアセンブリ３００に関し、第４の副コンジット２０’もバッファー流体によって効果的に濯ぎがなされる。
【０１７８】
次に任意選択で、流動ステアリング弁ユニット１３８は、その第４の状態にあるように構成され、プランジャ９ａは、バッファー流体が第１のシリンジ・ポンプ９から、第３の副コンジット１０’および第７の選択弁３８’、第３のコンジット５’の第２の部分５ｂ’、および第４の選択弁８’を経て第１の廃棄物受容器７に放出されるように、レセプタクル９ａに押し込まれてもよい。
【０１７９】
したがって、この段階で、第２のフローセル２’は試料流体を含有し、残りの流路は、第３のコンジット５’の第１の部分５ａ’および第４のコンジット１５’の第１の部分１５ａ’を除いて、バッファー流体によって効果的に濯ぎがなされる。
【０１８０】
次に流動ステアリング弁ユニット１３８は、その後、その第３の状態を有するように構成され、次いでバッファー流体が、第１のシリンジ・ポンプ９から、第３の副コンジット１０’、第７の選択弁３８’、および第３のコンジット５’の第１の部分５ａ’を経て、第２のフローセル２に放出される。図３のアセンブリ２００に関し、流体は、第２のフローセル２’から、第４のコンジット１５’および第５の選択弁２８’を経て、第２の廃棄物リザーバ２７に流入する。図４のアセンブリ３００に関し、流体は、第２のフローセル２’から、第５のコンジット１６および第４のコンジット１５’の一部、および第２の選択弁２８を経て、第２の廃棄物リザーバ２７に流入する。好ましい実施形態では、特に受動的に解離する分子を回収する場合、バッファー流体は、１０ミリ秒から１０秒の間の期間、第２のフローセル２’内を流れることが可能になり；好ましくはバッファー流体は、０．１〜２秒の間の期間、第２のフローセル２’を経て流れることが可能になり；最も好ましくは、バッファー流体は、０．５秒間にわたり第２のフローセル２’内を流れることが可能になる。
【０１８１】
次に、第６の選択弁３８をその第２の位置（「閉鎖」）に移動させ、第７の選択弁３８’をその第１の位置（「開放」）に移動させて、第１のフローセル２を経た第１のシリンジ・ポンプ９からのまたはこのポンプ９への流れが第６の選択弁３８によって制限されるようにし、かつ第２のフローセル２’を経た第１のシリンジ・ポンプ９からのまたはこのポンプ９への流れが、第７の選択弁３８’によって制限されないようにする。
【０１８２】
次に、能動的に解離する分子を回収するために、ユニット７２は、再生流体を放出するように構成され、第１のシリンジ・ポンプ９は、ユニット７２から再生流体を吸引するように構成する。図３のアセンブリ２００に関し、流体は、第２の副コンジット２０、第４の副コンジット２０’を経て、第４のコンジット１５’の第１の部分１５ａ’に、および第２のフローセル２’に流入する。図４のアセンブリ３００に関し、流体は、第２の副コンジット２０および第５のコンジット１６を経て、第２のフローセル２’に流入する。再生流体は、第２のフローセル２’内でリガンド４’に結合している分子を、第２のリガンド４’から強制的に解離させる。再生流体は、第２のフローセル２’から第３のコンジット５’の第１の部分５ａ’、第３の副コンジット１０’、および第７の選択弁３８’に、さらに第１のシリンジ・ポンプ９まで流れる。重要なことは、再生流体が第２のフローセル２内を流れるにつれ、第２のフローセル２’内でそれぞれの第２のリガンド４’に結合した分子が、それらの第２のリガンド４’から解離されるようになることである。解離した分子は、第２のフローセル２’内を流れる再生流体中に収集されることになる。したがってこのステップの後、第２のフローセル２’、第３のコンジット５’の第１の部分５ａ’、および第３の副コンジット１０’内に存在する再生流体は、第２のフローセル２’内で第２のリガンド４’に結合しており、そしてこのリガンド４’から能動的に解離した分子を含有することになる。
【０１８３】
次に、第１のシリンジ・ポンプ９は、バッファー流体を計量分配するように構成され、ユニット７２は、吸引するように構成され、その結果、再生流体は第１のシリンジ・ポンプ９の前から第７の選択弁３８’および第３の副コンジット１０’を経て第２のフローセル２’内に流れる。図３のアセンブリ２００に関し、バッファーは、第２のフローセル２’から第３のコンジット５’の第１の部分５ａ’、第４の副コンジット２０’、第２の副コンジット２０を経てユニット７２内に流れる。図４のアセンブリ３００に関し、バッファーは、第２のフローセル２’から第５のコンジット１６、第２の副コンジット２０を経て、ユニット７２に流入する。このように、解離した分子を含有する再生流体は、ユニット７２の収集リザーバ３９内に収集されてもよい。
【０１８４】
受動的に解離する分子の場合、再生流体によって能動的に解離する必要なしに、分子は第２のフローセル２’内で第２のリガンド４’から受動的に解離することになるので、再生流体はアセンブリ２００、３００で使用されない。したがって、受動的に解離する分子を回収するために、第６の選択弁３８がその第２の位置（「閉鎖」）にありかつ第７の選択弁３８’がその第１の位置（「開放」）にあるとき、第１のシリンジ・ポンプ９はバッファー流体を計量分配するように構成され、ユニット７２は吸引するように構成され、その結果、バッファー流体は、第１のシリンジ・ポンプ９から第３の副コンジット１０’および第７の選択弁３８’、および第３のコンジット５’の第１の部分５ａ’を経て、第２のフローセル２’に流入する。図３のアセンブリ２００に関し、バッファー流体は、第２のフローセル２’から、第４のコンジット１５’の第１の部分１５ａ’、第４の副コンジット２０’、および第２の副コンジット２０を経て、ユニット７２に流入する。図４のアセンブリ３００に関し、バッファー流体は、第２のフローセル２’から、第５のコンジット１６および第２の副コンジット２０を経て、ユニット７２に流入する。このように、第１のシリンジ・ポンプ９によって第２のフローセル２’内に放出された緩衝液は、第２のフローセル２’内に収集され、分子は第２のリガンド４’から解離する（即ち、受動的に解離する）ようになり；収集された、解離した分子を含有するバッファー流体は、第２のフローセル２’からユニット７２の収集リザーバ３９内に流入することになる。
【０１８５】
ユニット７２の収集リザーバ３９に収集された流体（受動的解離する分子の場合はバッファー流体、または能動的に解離する分子の場合は再生流体）は、流体中に存在する分子を決定／同定するよう構成された分析デバイスに提供することができ；したがって最終的には、対処するフローセル内のリガンドに結合していた、それぞれのリガンドから解離するようになった分子を決定／同定する。
【０１８６】
一例では、流動ステアリング弁ユニット１３８は、試料流体が第１のフローセル２および第２のフローセル２’の両方を経て流れるように構成される。前記試料流体は、好ましくは、第１のフローセル２内の第１のリガンド４と、第２のフローセル２’内の第２のリガンド４’との両方から能動的にまたは受動的に解離する分子を含有する。この例では、流動ステアリング弁ユニット１３８は、その第５の状態にあるように、最初に構成される。次いでユニット７２は、試料流体を第２の廃棄物リザーバ２７内に放出するよう構成される。図３のアセンブリ２００に関し、試料流体は、２つの試料調製経路に従い；第１の試料調製経路では、試料流体は、第２の副コンジット２０、第２のコンジット１５の第２の部分１５ｂ、および第２の選択弁２８を経て、第２の廃棄物リザーバ２７に流入し；第２の試料調製経路では、試料流体は、第２の副コンジット２０、第４の副コンジット２０’、第４のコンジット１５’の第２の部分１５ｂ’、および第５の選択弁２８’を経て、第２の廃棄物リザーバ２７に流入する。図４のアセンブリ３００に関し、試料流体は、第１および第２の試料調製経路上の両方を流れ、第２の副コンジット２０、第２のコンジット１５の第２の部分１５ｂ、および第２の選択弁２８を経て、第２の廃棄物リザーバ２７を流れる。
【０１８７】
任意選択で、次にプランジャ９ａは、バッファー流体が第１のシリンジ・ポンプ９から放出されるように、レセプタクル９ａ内に押し込まれる。図３のアセンブリ２００および図４のアセンブリ３００の両方に関し、放出されたバッファー流体は、２つの試料調製濯ぎ経路；第１の試料調製濯ぎ経路および第２の調製濯ぎ経路に沿って続く。図３のアセンブリ２００および図４のアセンブリ３００の両方に関し、第１の試料調製濯ぎ経路上では、バッファー流体が、第１のシリンジ・ポンプ９から流出し、第１の副コンジット１０、第６の選択弁３８、および第１のコンジット５の第１の部分５ａを経て、第１のフローセル２に流入し、第１のフローセル２から、第２のコンジット１５および第２の選択弁２８を経て、第２の廃棄物リザーバ２７に流入する。図３のアセンブリ２００に関し、第２の試料調製濯ぎ経路上では、第２の試料調製濯ぎ経路上のバッファー流体が、第１のシリンジ・ポンプ９から出て第３の副コンジット１０’、第７の選択弁３８’、および第３のコンジット５’の第１の部分５ａ’を経て、第２のフローセル２’に、および第２のフローセル２’から、第４のコンジット１５’および第５の選択弁２８’を経て、第２の廃棄物リザーバ２７に流入する。図４のアセンブリ３００に関し、第２の試料調製濯ぎ経路では、第２の試料調製濯ぎ経路上でバッファー流体が、第１のシリンジ・ポンプ９から流出して、第３の副コンジット１０’、第７の選択弁３８’、および第３のコンジット５’の第１の部分５ａ’を経て第２のフローセル２’に流入し、第２のフローセル２’から、第５のコンジット１６および第４のコンジット１５’の一部、および第２の選択弁２８を経て、第２の廃棄物リザーバ２７に流入する。
【０１８８】
このように、図３のアセンブリ２００に関し、上述のステップ中に、第２の副コンジット２０および第４の副コンジット２０’は、試料流体によって効果的に濯ぎがなされ；図４のアセンブリ３００に関し、第２の副コンジット２０は試料流体によって効果的に濯ぎがなされる。
【０１８９】
次に、流動ステアリング弁ユニット１３８は、その第６の状態になるように構成される。次いでユニット７２は、試料を、第１の試料注入流路に沿って第１のフローセル２内に放出するように構成され；放出された試料が第２の試料注入流路に沿って第２のフローセル２’に流入するようにも構成される。図３のアセンブリ２００および図４のアセンブリ３００に関し、第１の試料注入流路では、試料がユニット７２から、第２の副コンジット２０および第２のコンジット１５の第１の部分１５ａを経て第１のフローセル２に流入し、そこから、第１のコンジット５および第１の選択弁８を経て第１の廃棄物リザーバ７に流入する。図３のアセンブリ２００に関し、第２の試料注入流路では、試料流体がユニット７２から、第２の副コンジット２０、第４の副コンジット２０’、および第４のコンジット１５’の第１の部分１５ａ’を経て、第２のフローセル２’に流入し、第２のフローセル２’から、第３のコンジット５’および第４の選択弁８’を経て、第１の廃棄物リザーバ７に流入する。図４のアセンブリ３００に関し、第２の試料注入流路では、試料流体が、ユニット７２から、第２の副コンジット２０および第５のコンジット１６を経て、第２のフローセル２’に流入し、第２のフローセルから、第３のコンジット５’および第４の選択弁８’を経て第１の廃棄物リザーバ７に流入する。
【０１９０】
したがって、この段階で、第１のフローセル２と第２のフローセル２’とは共に、試料流体を含有し；第１および第２のフローセル２、２’内に含有される試料流体中の分子は、第１および第２のフローセル２、２’内の第１および第２のリガンド４、４’に結合することができる。
【０１９１】
次に、流動ステアリング弁ユニット１３８は、その後、その第５の状態に構成される。次いでユニット７２は、バッファー流体を放出するように構成され；放出バッファー流体は、第１の試料濯ぎ流路および第２の試料濯ぎ流路に沿って、第２の廃棄物リザーバ２７に流れる。図３のアセンブリ２００および図４のアセンブリ３００に関し、第１の試料濯ぎ流路上では、バッファー流体がユニット７２から第２の廃棄物リザーバ２７に、第２の副コンジット２０、第２のコンジット１５の第２の部分１５ｂ、および第２の選択弁２８を経て流れることにより、第２の副コンジット２０内に存在する試料流体を流出させる。図３のアセンブリ２００に関し、第２の試料濯ぎ流路上では、バッファー流体は、第２の副コンジット２０、第４の副コンジット２０’、第４のコンジット１５’の第２の部分１５ｂ’、および第５の選択弁２８’を経て、第２の廃棄物リザーバ２７に流入する。図４のアセンブリ３００に関し、第２の試料濯ぎ流路上では、バッファー流体は、第２の副コンジット２０、第２のコンジット１５の第２の部分１５ｂ、および第２の選択弁２８を経て、第２の廃棄物リザーバ２７に流入する。したがって、この段階で、図３のアセンブリ２００に関し、および図４のアセンブリ３００に関し、第１および第２のフローセル２、２’は試料流体を含有し；上述のステップ中、第２の副コンジット２０は、バッファー流体によって効果的に濯ぎがなされる。図４のアセンブリ３００に関し、第４の副コンジット２０’も、バッファー流体によって効果的に濯ぎがなされる。
【０１９２】
次に、任意選択で、流動ステアリング弁ユニット１３８はその第６の状態に構成され、プランジャ９ａは、バッファー流体が第１のシリンジ・ポンプ９から、第１の出口清浄化流路および第２の出口清浄化流路に沿って流れて第１の廃棄物受容器７に放出されるように、レセプタクル９ａに押し込まれてもよい。図３のアセンブリ２００と図４のアセンブリ３００との両方に関し、第１の出口清浄化流路上では、バッファー流体が、第１のシリンジ・ポンプ９から第１の副コンジット１０および第６の選択弁３８、第１のコンジット５の第２の部分５ｂおよび第１の選択弁８を経て、第１の廃棄物受容器７に流入し；第２の出口清浄化流路上では、バッファー流体が、第１のシリンジ・ポンプ９から第３の副コンジット１０’および第７の選択弁３８’、第３のコンジット５’の第２の部分５ｂ’および第４の選択弁８’を経て、第１の廃棄物受容器７に流入する。
【０１９３】
したがって、この段階で、第１および第２のフローセル２、２’は共に試料流体を含有し、残りの流路は、第１のコンジット５の第１の部分５ａ、第２のコンジット１５の第１の部分１５ａ、第３のコンジット５’の第１の部分５ａ’、および第４のコンジット１５’の第１の部分１５ａ’を除き、バッファー流体によって効果的に濯ぎがなされる。
【０１９４】
次に、流動ステアリング弁ユニット１３８は、その後、その第５の状態に構成され、次いでバッファー流体が第１のシリンジ・ポンプ９から放出され；図３のアセンブリ２００と図４のアセンブリ３００との両方に関し、放出されたバッファー流体は、第１のシリンジ・ポンプ９から、第１の急速濯ぎ流路に沿って第１のフローセル２に流入し；放出されたバッファー流体は、第１のシリンジ・ポンプ９から、第２の急速濯ぎ流路に沿って、第２のフローセル２’に流入する。図３のアセンブリ２００と図４のアセンブリ３００との両方に関し、第１の急速濯ぎ流路上では、バッファー流体が第１のシリンジ・ポンプ９から、第１の副コンジット１０、第１のコンジット５の第１の部分５ａ、第１のフローセル２、第２のコンジット１５、および第２の選択弁２８を経て、第２の廃棄物受容器２７に流入する。図３のアセンブリ２００に関し、第２の急速濯ぎ流路上では、バッファー流体は、第１のシリンジ・ポンプ９から、第３の副コンジット１０’、第７の選択弁３８’、および第３のコンジット５’の第１の部分５ａ’を経て、第２のフローセル２に流入し、第２のフローセル２’から、第４のコンジット１５’および第５の選択弁２８’を経て、第２の廃棄物リザーバ２７に流入する。図４のアセンブリ３００に関し、第２の急速濯ぎ流路上では、放出されたバッファー流体が、第１のシリンジ・ポンプ９から、第３の副コンジット１０’、第７の選択弁３８’、および第３のコンジット５’の第１の部分５ａ’を経て、第２のフローセル２に流入し、第２のフローセル２’から、第２の急速濯ぎ流路上で、第５のコンジット１６および第４のコンジット１５’の一部、および第２の選択弁２８を経て、第２の廃棄物リザーバ２７に流入する。好ましい実施形態では、特に受動的に解離する分子を回収するために、バッファー流体は、１０ミリ秒から１０秒の間の期間にわたり第１および第２のフローセル２、２’内を流れることが可能であり；好ましくは、バッファー流体は、０．１〜２秒の間の期間、第１および第２のフローセル２、２’内を流れることが可能になり；最も好ましくは、バッファー流体は、０．５秒間、第１および第２のフローセル２、２’内を流れることが可能になる。
【０１９５】
次に、第６の選択弁３８はその第１の位置（「開放」）に移動し、第７の選択弁３８’は、その第１の位置（「開放」）に移行し、したがって流体は、第１のシリンジ・ポンプ９からまたはこのポンプ９に、第６の選択弁３８および第７の選択弁３８’をそれぞれ介して第１および第２のフローセル２、２’内を流れることができる。
【０１９６】
次に、能動的に解離する分子を回収するために、ユニット７２は、再生流体を放出するように構成され、第１のシリンジ・ポンプ９は、再生流体を、ユニット７２から、第１の再生流路上の第１のフローセル２を通して、および第２の再生流路上の第２のフローセル２’を通して吸引するよう構成される。図３のアセンブリ２００と図４のアセンブリ３００との両方に関し、第１の再生流路上では、再生流体がユニット７２から第２の副コンジット２０、第２のコンジット１５の第１の部分１５ａを経て、第１のフローセル２に流入する。図３のアセンブリ２００に関し、第２の再生流路上では、再生流体は、ユニット７２から第２の副コンジット２０、第４の副コンジット２０’を経て、第４のコンジット１５’の第１の部分１５ａ’に、および第２のフローセル２’に流入する。図４のアセンブリ３００に関し、第２の再生流路上では、再生流体が、ユニット７２から第２の副コンジット２０および第５のコンジット１６を経て、第２のフローセル２’に流入する。再生流体は、第１および第２のフローセル２、２’内でリガンド４、４’に結合している分子を、第２のリガンド４’から強制的に解離させる。再生流体は、第１の再生流路上を、第１のフローセル２から、第１のコンジット５の第１の部分５ａ、第１の副コンジット１０、および第６の選択弁３８を経て、第１のシリンジ・ポンプ９に到達するまで流れ；第２の再生流路上では、再生流体が、第２のフローセル２’から第３のコンジット５’の第１の部分５ａ’、第３の副コンジット１０’、および第７の選択弁３８’に、第１のシリンジ・ポンプ９まで流れる。重要なことは、再生流体が第１および第２のフローセル２、２’内を流れるにつれ、第１および第２のフローセル２、２’内で第１および第２のそれぞれのリガンド４、４’に結合した分子を、解離させるようになることである。解離した分子は、第１および第２のフローセル２、２’を経て流れる再生流体中に収集されることになる。したがって、このステップの後、第１のフローセル２、第１のコンジット５の第１の部分５ａ、および第１の副コンジット１０内に存在する再生流体は、第１のフローセル２内の第１のリガンド４に結合しており、そしてリガンド４から能動的に解離した分子を含有することになり、第２のフローセル２’、第３のコンジット５’の第１の部分５ａ’、および第３の副コンジット１０’に存在する再生流体は、第２のフローセル２’内の第２のリガンド４’に結合しており、そしてこのリガンド４’から能動的に解離した分子を含有することになる。
【０１９７】
次に、第１のシリンジ・ポンプ９はバッファー流体を計量分配するように構成され、ユニット７２は、吸引するように構成され、その結果、再生流体は、第１のシリンジ・ポンプ９の前から、第１のフローセル２を通して第１の回収流路上でユニット７２に流入し、第２の回収流路上では第２のフローセル２’を通して流れる。図３のアセンブリ２００と図４のアセンブリ３００との両方に関し、第１の回収流路上では、再生流体が、第１のシリンジ・ポンプ９の前から第１の副コンジット１０および第１のコンジット５の第１の部分５ａを経て第１のフローセル２に流入し、そこから、第２のコンジット１５の第１の部分１５ａおよび第２の副コンジット２０を通してユニット７２に流入する。図３のアセンブリ２００に関し、第２の回収流路上では、再生流体が第１のシリンジ・ポンプ９から第７の選択弁３８’および第３の副コンジット１０’を経て第２のフローセル２’に流入し、第２のフローセル２’から第３のコンジット５’の第１の部分５ａ’、第４の副コンジット２０’、第２の副コンジット２０を経てユニット７２に流入する。図４のアセンブリ３００に関し、計量分配されたバッファー流体は、第２の回収流路上で、第１のシリンジ・ポンプ９の前から第７の選択弁３８’および第３の副コンジット１０’を経て第２のフローセル２’に流入し、第２のフローセル２’から第５のコンジット１６、第２の副コンジット２０を経て、ユニット７２に流入する。このように、第１および第２のフローセル２、２’の両方からの、解離した分子を含有する再生流体は、ユニット７２の収集リザーバ３９に収集されてもよい。
【０１９８】
受動的に解離する分子の場合、分子は、再生流体によって能動的に解離させる必要なく第１および第２のフローセル２，２’内でそれぞれ第１および第２のリガンド４、４’から受動的に解離することになるので、再生流体は、アセンブリ２００、３００で使用されない。したがって、受動的に解離する分子を回収するために、第６の選択弁３８がその第１の位置（「開放」）にありかつ第７の選択弁３８’がその第１の位置（「開放」）にあるとき、第１のシリンジ・ポンプ９は、バッファー流体を計量分配するように構成され、ユニット７２は吸引するように構成され、その結果、第１および第２の回収流路上ではバッファー流体が流れる。このように、第１のシリンジ・ポンプ９によって第１のフローセル２内に放出された緩衝液は、第１のフローセル２内に、第１のリガンド４から解離するようになった（即ち、受動的に解離した）分子を収集することになり、第１のシリンジ・ポンプ９によって第２のフローセル２’内に放出された緩衝液は、第２のフローセル２’内に、第２のリガンド４’から解離するようになった（即ち、受動的に解離した）分子を収集することになり；収集された、解離した分子を含有するバッファー流体は、第１および第２のフローセル２、２’からユニット７２の収集リザーバ３９に流入することになる。
【０１９９】
ユニット７２の収集リザーバ３８に収集されてきた流体（受動的に解離する分子の場合はバッファー流体、または能動的に解離する分子の場合は再生流体）は、流体中に存在する分子を決定／同定するように；したがって最終的に、対処されるフローセル内でリガンドに結合しかつそれぞれのリガンドから解離するようになった分子を決定／同定するように構成された、分析デバイスに提供することができる。
【０２００】
好ましい実施形態では、ミクロ流体アセンブリ１００、２００、３００はさらに、分子が第１のフローセル２および第２のフローセル２’内のリガンドに結合したか否かを測定するように構成された、好ましくは前記リガンドに結合した分子の数を測定するように構成された、センサ（表面プラズモン共鳴センサまたは導波路干渉センサまたは表面音響センサなど）を含み；前記センサは、そのような測定を行うことができるように、第１のフローセル２および第２のフローセル２’に動作可能に接続される。
【０２０１】
上記アセンブリ２００または３００の変形例では、試験用にリガンドのより広い表面を得るために、アセンブリ２００、３００内に追加のフローセルを設けてもよい（即ち、第１および第２のフローセル２、２’に加えて）。好ましくは、複数のフローセルのそれぞれで得ることができるリガンドのタイプは、フローセル同士で異なっていてもよい。また、前記フローセルは、使用済みの、詰まった、または汚れたフローセルを素早く交換できるようにするために、取外し可能なカートリッジに一体化されてもよい。
【０２０２】
図５は、本発明の他の実施形態による、ミクロ流体アセンブリ４００を示し；ミクロ流体アセンブリ４００は、図３に示されるミクロ流体アセンブリ２００と同じ特徴の多くを有し、同様の特徴には同じ参照符号を与える。ミクロ流体アセンブリ４００はさらに、第３のフローセル２’’および第４のフローセル’’’を含む。しかし、ミクロ流体アセンブリ４００は、２個よりも大きい任意の数のフローセルを含んでいてもよいことが理解されよう。好ましくは、フローセル２、２’、２’’、２’’’のそれぞれで得られたリガンドのタイプは、フローセル２、２’、２’’、２’’’の間で異なり；したがって各フローセルは、異なるタイプの分子を検出するのに適している。第３のフローセル２’’の一端は、第８のコンジット１５’’および第１０の選択弁２８’’を経て第２の廃棄物リザーバ２７に接続され、第８の接合部２１’’を用いて第７の副コンジット２０’’および第２の副コンジット２０を経てユニット７２に接続される。第３のフローセル２’’の他端は、第６のコンジット５’’および第８の選択弁８’’を経て第１の廃棄物リザーバ７に接続され、第１０の接合部１１’’を用いて、第５の副コンジット１０’’および第１２の選択弁３８’’を経て第１のシリンジ９に接続される。第４のフローセル２’’’の一端は、第９のコンジット１５’’’および第１１の選択弁２８’’’を経て第２の廃棄物リザーバ２７に接続され、第９の接合部２１’’’を用いて、第８の副コンジット２０’’’および第２の副コンジット２０を経てユニット７２に接続される。第４のフローセル２’’’の他端は、第７のコンジット５’’’および第９の選択弁８’’’を経て第１の廃棄物リザーバ７に接続され、第１１の接合部１１’’’を用いて、第６の副コンジット１０’’’および第１３の選択弁３８’’’を経て第１のシリンジ９に接続される。第８の副コンジット２０’’’は、一端が、接合部２１’’’で第９のコンジット１５’’’に接続され、他端は、接合部４１’で第２の副コンジット２０に接続される。第７の副コンジット２０’’は、その一端が、接合部２１’’で第８のコンジット１５’’に接続され、他端は、接合部４１’’で第８の副コンジット２０’’’に接続される。
【０２０３】
有利には、ミクロ流体アセンブリ２００、３００、４００によって、ユニット７２から流れる試料流体または第１のシリンジ・ポンプ９から流れるバッファー流体は、フローセルに注入されたときに同時に全てのフローセルに到達することが可能になる。このことは、既存のミクロ流体アセンブリ、即ちフローセルが直列に配置構成されており、ユニット７２から第１および第２のフローセル２、２’に流れる任意の試料が最初にフローセル２を通過してその後に第２のフローセル２’に通過する、既存のミクロ流体アセンブリよりも、有利である。フローセルへの同時注入は、１秒−１から１０秒−１程度の急速解離速度など、短時定数で相互作用を測定するときに、特に重要である。例として図５を参照すると、標的分子との結合について試験がなされる問題となっている第１のリガンドは、第１のフローセル２内に捕獲され、陰性対照リガンドは、第２のフローセル２’、第３のフローセル２’’、および第４のフローセル２’’’に捕獲される。第４の選択弁８’、第８の選択弁８’’、および第９の選択弁８’’’を第１の位置に移動させて、流体をユニット７２から全てのフローセルに通して第１の廃棄物リザーバ７に至らせるとき、前記試料は、ほぼ同時にフローセルに到達する。それによって、フローセルに取着された、かつ試料流体中に存在する分子とフローセル内の種々のリガンドとの結合を測定するよう適合されたセンサから得られたシグナルは、結合シグナルの有意な時間差を示さなくなり、結合シグナルの分析に著しい影響を及ぼす可能性のある種々のシグナルにおけるスパイクなどのアーチファクトがなくなる。
【０２０４】
引き続き図５に示される実施形態によれば、ミクロ流体アセンブリ４００はさらに、カートリッジ１３９を含む。好ましい実施形態では、カートリッジ１３９は、取外し可能な、使い捨て可能なカートリッジ１３９である。以下において、カートリッジ１３９の外側にあるミクロ流体アセンブリ４００の部分を、アセンブリの固定部分と呼ぶことにする。カートリッジ１３９は、好ましくは使い捨て可能なカートリッジであり；一実施形態では、カートリッジは、１回使用した後ではもはや有用ではなく、処分して新しいカートリッジと交換すべきであることを意味する、単回使用カートリッジである。好ましくはカートリッジは、カートリッジをアセンブリの固定部分に選択的に接続しまたは接続解除させることが可能な接続手段を含み；好ましくはアセンブリの固定部分は、第１の接続手段（例えば、雌部材）を含み、カートリッジは、第２の接続手段（例えば、固定部分の雌部材と機械的に協働できるように構成された雄部材）であって、固定部分と接続してカートリッジを保持するように第１の接続手段と協働できる手段を含む。カートリッジは、第１のフローセル２、第２のフローセル２’、および第３のフローセル２’’’を含む。カートリッジは、第４のフローセル２’’’、第２の接合部２１、第４の接合部２１’、第８の接合部２１’’、第９の接合部２１’’’、第１の接合部１１、第３の接合部１１’、第１０の接合部１１’’、および第１１の接合部１１’’’をさらに含む。カートリッジは、複数の流体インターフェース１５０〜１６５を含み、固定部分は、対応する数の複数の一致する流体インターフェース１６６〜１８１を含む。流体インターフェースは、フローセルにおよびフローセルから繋がるコンジット内に設けられ、コンジットを、カートリッジ内に位置付けられた部分と、固定部分に位置付けられた部分とに、有効に分割する。第１のコンジット５内で、第１の流体インターフェース１５０はカートリッジ上に設けられ、第１７の流体インターフェース１６６は固定部分に設けられ；第３のコンジット５’内では、第２の流体インターフェース１５１がカートリッジ上に設けられ、第１８の流体インターフェース１６７が固定部分に設けられ；第６のコンジット５’’内では、第３の流体インターフェース１５２がカートリッジ上に設けられ、第１９の流体インターフェース１６８が固定部分に設けられ；第７のコンジット５’’’内では、第４の流体インターフェース１５３がカートリッジ上に設けられ、第２０の流体インターフェース１６９が固定部分に設けられ；第１の副コンジット１０内では、第５の流体インターフェース１５４がカートリッジ上に設けられ、第２１の流体インターフェース１７０が固定部分に設けられ；第３の副コンジット１０’内では、第６の流体インターフェース１５５がカートリッジ上に設けられ、第２２の流体インターフェース１７１が固定部分に設けられ；第５の副コンジット１０’’内では、第７の流体インターフェース１５６がカートリッジ上に設けられ、第２３の流体インターフェース１７２が固定部分に設けられ；第６の副コンジット１０’’’内では、第８の流体インターフェース１５７がカートリッジ上に設けられ、第２４の流体インターフェース１７３が固定部分に設けられ；第２のコンジット１５内では、第９の流体インターフェース１５８がカートリッジ上に設けられ、第２５の流体インターフェース１７４が固定部分に設けられ；第４のコンジット１５’内では、第１０の流体インターフェース１５９がカートリッジ上に設けられ、第２６の流体インターフェース１７５が固定部分に設けられ；第８のコンジット１５’’内では、第１１の流体インターフェース１６０がカートリッジ上に設けられ、第２７の流体インターフェース１７２が固定部分に設けられ；第９のコンジット１５’’’内では、第１２の流体インターフェース１６１がカートリッジ上に設けられ、第２８の流体インターフェース１７７が固定部分に設けられ；第２の副コンジット２０内では、第１３の流体インターフェース１６２がカートリッジ上に設けられ、第２９の流体インターフェース１７８が固定部分に設けられ；第４の副コンジット２０’内では、第１４の流体インターフェース１６３がカートリッジ上に設けられ、第３０の流体インターフェース１７９が固定部分に設けられ；第７の副コンジット２０’’内では、第１５の流体インターフェース１６４がカートリッジ上に設けられ、第３１の流体インターフェース１８０が固定部分に設けられ；第８の副コンジット２０’’’内では、第１６の流体インターフェース１６５がカートリッジ上に設けられ、第３２の流体インターフェース１８１が固定部分に設けられる。カートリッジが固定部分に接続されるとき、カートリッジ上の流体インターフェース１５０〜１６５は、固定部分の対応する流体インターフェース１６６〜１８１と協働して、カートリッジが固定部分と流体接続するように、かつ漏れのない状態で圧力駆動流を可能にするために、対応するコンジットが封止されるようになされる。好ましい実施形態では、取外し可能なカートリッジとアセンブリの固定部分との間の流体インターフェースは、望みに応じて固定部分からカートリッジが容易に結合解除可能になるようにしつつ、インターフェースが協働するときに依然として流体不透過性封止材が得られるように、酸、塩基、および溶媒、例えばＥＰＤＭまたはＦＦＫ、あるいはシリコーンに対する高い耐薬品性を備えたエラストマー化合物で作製された１つまたは複数の封止材を含む。
【０２０５】
図６ａは、流体インターフェース１５０〜１６５を含む、図５のミクロ流体アセンブリ４００で使用されるカートリッジ１３９の部分斜視上面図を示す。各流体インターフェース１５０〜１６５は、ＥＰＤＭ、ＦＫＭ、またはシリコーンなどのエラストマー化合物で作製されたリング部材を含む。図６ｂは、図５のミクロ流体アセンブリ４００の固定部分の一部を形成する、プランジャ・アセンブリ１４０の斜視底面図を示す。プランジャ・アセンブリ１４０は、カートリッジ１３９と協働するのに適している。プランジャ・アセンブリ１４０はさらに、カートリッジ１３９内に設けられた流体インターフェース１５０〜１６５の位置に対応した位置を有する流体チャネル１９０を含み；各流体チャネル１９０の開放端にあるそれぞれのリムは、対応するインターフェース１６６〜１８１を画定する。流体チャネルの数は、好ましくは、カートリッジ上に設けられた流体インターフェース１５０〜１６５の数に対応する。
【０２０６】
カートリッジ１３９は本体１４１を含み、本体１４１は射出成型されてもよく、好ましくはポリカーボネートまたは環状オレフィンコポリマーなどの熱可塑性材料を含む。好ましくは、プランジャ・アセンブリは、化学物質に対して高い耐性を備えた硬質の不活性材料、例えば精密機械加工されたまたは研磨されたステンレス鋼またはＰＥＥＫを含む。
【０２０７】
プランジャ・アセンブリ１４０は、カートリッジの流体インターフェース１５０〜１６５の平面に垂直な方向で移動可能するリニア軸受１４３を含み；特にプランジャ・アセンブリ１４０は、対応するインターフェース１６６〜１８１を画定する各流体チャネル１９０の開放端のそれぞれのリムが、カートリッジ上のそれぞれの流体インターフェース１５０〜１６５を画定する対応するリング部材に隣接するように、カートリッジに接するよう移動させることができる。プランジャ・アセンブリ１４０およびカートリッジ１３９は、ピニオン、例えばステンレス鋼ボルト、またはバネを用いて、そのような位置（即ち、インターフェースが位置合わせされ隣接する位置）に維持されてもよい。
【０２０８】
好ましくは、プランジャ・アセンブリ１４０は、対応するインターフェース１６６〜１８１を画定する各流体チャネル１９０の開放端のそれぞれのリムが、それぞれの流体インターフェース１５０〜１６５を画定するカートリッジ１３９上のそれぞれのリング部材に接して、カートリッジ１３９上の流体インターフェース１５０〜１６５とプランジャ・アセンブリ１４０上の流体インターフェース１６６〜１８１との間に流体不透過性封止材が形成されるように、位置決めされる。好ましくはプランジャ・アセンブリ１４０は、対応するインターフェース１６６〜１８１を画定する各流体チャネル１９０の開放端のそれぞれのリムが、それぞれの流体インターフェース１５０〜１６５を画定するカートリッジ１３９上のそれぞれのリング部材を圧縮して、カートリッジ上の流体インターフェース１５０〜１６５とプランジャ・アセンブリ１４０上の流体インターフェース１６６〜１８１との間に流体不透過性封止材を形成するように、位置決めされる。例として、第２５の流体インターフェース１７４を画定する流体チャネル１９０の開放端のそれぞれのリムは、小さいリング上に押圧されて第９の流体インターフェース１５８を形成し、それによって、第２のコンジット１５のカートリッジ部分と第２のコンジット１５の固定部分とを組み合わせ、封止する。プランジャ・アセンブリ１４０をカートリッジから離して移動させるとき、流体インターフェースは分離して、カートリッジ１３９を容易に取り外し、使い捨てにし、置き換えることが可能になる。
【０２０９】
図示される実施形態では、カートリッジ１３９上の流体インターフェース１５０〜１６５は、エラストマー材料のリングを含み；好ましくはリングは、単一基板として提供され、その単一基板は、カートリッジ１３９の本体１４１に取着され；各リングの中心は、本体１４１内に画定されるそれぞれの穴と位置合わせされる。他の好ましい実施形態では、流体インターフェース１５０〜１６５は、カートリッジ１３９の本体１４１に一体化して形成され；そのような実施形態では、本体１４１および流体インターフェース１５０〜１６５は共に、単一射出成型部品から形成されてもよく；単一射出成型部品は、２種材料、および一体化したエラストマー・リング封止材を含んでいてもよい。
【０２１０】
図７は、図６ａに示されるカートリッジ１３９の部分底面図を示す。コンジット５、５’、５’’、５’’’、１５、１５’、１５’’、１５’’’は、カートリッジ１３９内に長方形チャネルとして形成され、接合部１１、１１’、１１’’、１１’’’、２１、２１’、２１’’、２１’’’は、カートリッジ１３９の上面でそれぞれの流体インターフェースにそれぞれのチャネルを接続する、円形の穴により形成されたＴ字形接合部である。
【０２１１】
有利には、ミクロ流体アセンブリ４００は、取外し可能なカートリッジ内にいかなる弁も含有せず、新しいリガンドを捕獲するためにフローセルを新しい表面に供給するようしばしば交換することが必要な、取外し可能なカートリッジのコストが削減される。
【０２１２】
有利には、ミクロ流体アセンブリ４００は、細胞残屑などの大きな粒子を含有する試料流体に起因し、または大量のタンパク質を含有する血清などの試料流体に起因するなど、フローセルのいずれかが詰まった可能性がある場合に容易に置き換えることができ、したがって、ミクロ流体アセンブリ４００を含有する測定デバイスの、維持コストおよび休止時間が削減される。
【０２１３】
有利には、ミクロ流体アセンブリ２００、３００、４００は、ユニット７２とフローセルとの間の流路にいかなる弁も含有しない。したがって、内部弁容積を濯ぐ必要がなく、試料の消費が低減される。
【０２１４】
図２から図５までに示される実施形態の変形例では、ミクロ流体アセンブリ１００、２００、３００、または４００は、単一の廃棄物リザーバのみ含む。例えば、前記実施形態の変形例において、アセンブリ１は、第２の廃棄物リザーバ２７を含まず；代わりに、図の第２の廃棄物リザーバに繋がるコンジットは、第１の廃棄物リザーバ７に繋がる。有利には、実施形態のこの変形例において、ミクロ流体アセンブリ１は、より少ない数の廃棄物リザーバを含む。
【０２１５】
本発明の、記述される実施形態に対する様々な修正例および変形例は、添付される特許請求の範囲に定義される本発明の範囲から逸脱することなく、当業者に明らかにされよう。本発明について、特定の好ましい実施形態に関連して記述してきたが、特許請求の範囲に記載される本発明は、そのような特定の実施形態に過度に限定すべきでないことを、理解するべきである。
【０２１６】
例えば、アセンブリ１、１００、２００、３００、４００に設けられた、より多くのフローセルの１つは、カートリッジ内に設けられてもよい。言い換えれば、アセンブリ１、１００、２００、３００、４００は、フローセル（複数可）２、２’、２’’、２’’’を含むカートリッジを含んでいてもよい。好ましくは、カートリッジは使い捨てカートリッジである。好ましくはカートリッジは、カートリッジを選択的に、アセンブリに接続させまたはアセンブリから取り外すことを可能にする、接続手段を含む。
【０２１７】
例えば、上記図１、２、３、または４に関して記述された例示的な方法のいずれかの変形例において、方法は、試験がなされかつ試料リザーバ２９に提供されることになる試料流体を調製する、追加の先行ステップを含む。試験がなされる試料流体を調製するステップは、試料リザーバ２９内に直接、複数の異なる流体を溜めること；またはレセプタクルに複数の異なる流体を溜め、次いでレセプタクルの内容物を試料リザーバ２９内に移すことを含んでいてもよい。したがって、この実施形態では、試料流体は、試験がなされる試料流体を定めるように一緒に混合される、複数の異なる流体で構成される。好ましくは、試料流体が形成されるよう一緒に溜められる、異なる流体の１種または複数は、第１のフローセル２内で第１のリガンド４に結合することが予測される化合物を含む。
【０２１８】
別の例では、上記図１、２、３、または４に関して記述された例示的な方法のいずれかの変形例では、方法はさらに、分子が第１のフローセル２内で第１のリガンド４に結合したか否かをモニタするステップを含んでいてもよい。この場合、収集リザーバ３９（図１のアセンブリ１）に送達される前記バッファー流体、または収集リザーバ３９（図２のアセンブリ１００）に送達される前記再生流体は、分子が第１のフローセル２内で第１のリガンド４に結合したことをモニタリングが示した場合に限り、分析のための分析デバイスに提供され、そうでない場合には、収集リザーバ３９に送達されるバッファー流体または前記再生流体は、分析デバイスを通らない。有利には、この実施形態において、分析デバイスでの資源は、分子が第１のリガンド４に結合するようになったときにだけ使用されるので、資源は最適に使用される。
【０２１９】
別の例では、図１、２、３、または４に示されるアセンブリ１、１００、２００、３００のいずれかにおいて、アセンブリ１、１００、２００、３００のコンジットの一部または全ては、長方形の断面を持つ（典型的には、第１のフローセルまたはセンサにおいて）ミクロ流体チャネルまたは円形の断面を持つミクロ流体チャネルとすることができる。アセンブリ１、１００、２００、３００のコンジットは、ＰＥＥＫまたはＰＴＦＥまたは鋼などの材料を含む管材または毛管によって画定される。
【０２２０】
第１および第２の選択弁８、２８は、任意の適切な形をとってもよいことを理解すべきである。別の例では、アセンブリの選択弁（例えば、第１および第２の選択弁８、２８）は、ソレノイド弁またはロータリ・バルブを含んでいてもよい。
【０２２１】
任意の適切なポンプを、シリンジ・ポンプの代わりに（第１および第２のシリンジ・ポンプ９、１９の代わりに）アセンブリ１、１００、２００、３００で使用できることを理解すべきであり；例えば蠕動ポンプ、圧電ポンプ、または空気圧を使用して動作するポンプが、シリンジ・ポンプの代わりにアセンブリ内に設けられてもよい。
【０２２２】
アセンブリ１、１００、２００、３００で使用されるリザーバ（例えば、試料リザーバ２９、収集リザーバ３９、廃棄物リザーバ７、２７、４９、溶出試薬リザーバ５９など）は、任意の適切な形をとってもよく、例えばリザーバの１つまたは複数は、１つまたは複数のバイアルまたはマイクロタイタープレートによって定められてもよいことを、理解すべきである。
【図１】
2019514356.tif 000003
【図２】
2019514356.tif 000004
【図３】
2019514356.tif 000005
【図４】
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【図５】
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【図６ａ】
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【図６ｂ】
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【図７】
2019514356.tif 000010
【手続補正書】
【提出日】平成30年10月30日(2018.10.30)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２２２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２２２】
アセンブリ１、１００、２００、３００で使用されるリザーバ（例えば、試料リザーバ２９、収集リザーバ３９、廃棄物リザーバ７、２７、４９、溶出試薬リザーバ５９など）は、任意の適切な形をとってもよく、例えばリザーバの１つまたは複数は、１つまたは複数のバイアルまたはマイクロタイタープレートによって定められてもよいことを、理解すべきである。
なお、本願は特許請求の範囲に記載の発明に関するものであるが、他の態様として以下も包含し得る。
１．試料中の分子を回収するために使用することができるアセンブリであって、
分子に結合することができる第１のリガンド（４）を含む第１のフローセル（２）；
第１のコンジット（５）を介して前記第１のフローセル（２）の第１の流体ポート（２ａ）に接続された少なくとも１つの廃棄物リザーバ（７、２７）、および前記廃棄物リザーバ（７、２７）を前記第１のフローセル（２）の第２の流体ポート（２ｂ）に接続する第２のコンジット（１５）；ならびに
前記第１のコンジット（５）と前記廃棄物リザーバ（７、２７）との間の流体連絡を制御するように配置構成された第１の弁（８）、および前記第２のコンジット（１５）と前記廃棄物リザーバ（７、２７）との間の流体連絡を制御するための第２の弁（２８）；
第１の副コンジット（１０）を介して前記第１のコンジット（５）に流体接続された、バッファー流体を保持することができる少なくとも１つのバッファーリザーバ（９、１９）であって、前記第１の副コンジット（１０）が、前記第１のフローセル（２）の前記第１の流体ポート（２ａ）と前記第１の弁（８）との間に位置付けられた第１の接合部（１１）で前記第１のコンジット（５）に接続され、バッファー流体を、前記バッファーリザーバ（９、１９）から前記第１の副コンジット（１０）内に選択的に供給することができる、少なくとも１つのバッファーリザーバ（９、１９）；
少なくとも収集リザーバ（３９）と、試料流体を保持することができる試料リザーバ（２９）とを含むユニット（７１、７２）であって、前記ユニット（７１、７２）が、第２の副コンジット（２０）を介して前記第２のコンジット（１５）に流体接続され、前記第２の副コンジット（２０）が、前記第１のフローセル（２）の前記第２の流体ポート（２ｂ）と前記第２の弁（２８）との間に位置付けられた第２の接合部（２１）で前記第２のコンジット（１５）に接続され、前記ユニット（７１、７２）が、前記収集リザーバ（３９）、バッファーリザーバ（９、１９）または試料リザーバ（２９）を前記第２の副コンジット（２０）に選択的に流体接続するように動作可能であるユニット（７１、７２）、
を含む、アセンブリ。
２．前記第１の副コンジット（１０）を介して前記第１のコンジット（５）に流体接続することができる第１のバッファーリザーバ（９）と、前記第２の副コンジット（２０）を介して前記第２のコンジット（１５）に流体接続することができる第２のバッファーリザーバ（１９）とを含む、上記１に記載のアセンブリ。
３．前記第１のバッファーリザーバ（９）が、第１のシリンジ・ポンプ（９）を含み、前記第２のバッファーリザーバ（１９）が、第２のシリンジ・ポンプ（１９）を含み、前記ユニット（７１、７１）が、前記第２の副コンジット（２０）に流体接続する第３の弁（１８）と、前記シリンジ・ポンプ（１９）を前記第３の弁（１８）に流体接続する貯蔵コンジット（３０）とを含み、前記第３の弁（１８）は、選択的に、前記貯蔵コンジット（３０）を前記第２の副コンジット（２０）に流体接続するように、または前記収集リザーバ（３９）を前記第２の副コンジット（２０）に流体接続するように、または前記試料リザーバ（２９）を前記第２の副コンジット（２０）に流体接続するように動作可能である、上記２に記載のアセンブリ。
４．前記第２の接合部（２１）が、前記第２の弁（２８）によりも、前記第１のフローセル（２）の前記第２の流体ポート（２ｂ）に近付けて位置付けられる、上記１〜３のいずれか一つに記載のアセンブリ。
５．前記第１の接合部（１１）が、前記第１の弁（８）によりも、前記第１のフローセル（２）の前記第１の流体ポート（２ａ）に近付けて位置付けられる、上記１〜４のいずれか一つに記載のアセンブリ。
６．第２のフローセル（２’）、前記第２のフローセル（２’）の第１のポート（２ａ）と第１の廃棄物リザーバ（７）との間のさらに別の選択弁（８’）、前記第１のバッファーリザーバ（９）と前記第１の接合部（１１）との間のさらに別の選択弁（３８）、および接合部（３１）とさらに別の接合部（１１’）の間の第７の選択弁（３８’）をさらに含み、前記接合部（３１）は、前記第１のバッファーリザーバ（９）と、前記第１のバッファーリザーバ（９）および前記第１の接合部（１１）の間にある前記選択弁（３８）との間にあり、前記のさらに別の接合部（１１’）は、前記第２のフローセル（２’）の前記第１のポート（２ａ）と、前記第２のフローセル（２’）の第１のポート（２ａ）および第１の廃棄物リザーバ（７）の間にある前記選択弁（８’）との間にある、上記１〜５のいずれか一つに記載のアセンブリ。
７．フローセル（２、２’、２’’、２’’’）がカートリッジ内に設けられ、前記カートリッジは、当該カートリッジが選択的に、前記アセンブリの固定部分に接続されまたは前記固定部分から接続解除されるように、前記アセンブリの前記固定部分に設けられた接続手段と協働するように選択的に配置構成することができる接続手段を含む、上記１〜６のいずれか一つに記載のアセンブリ。
８．分子に結合することができる第１のリガンド（４）を含む第１のフローセル（２）と前記第１のフローセルを収集リザーバ（３９）に選択的に流体接続することができるコンジット（２０、１５ａ）とを含むアセンブリを使用する、分子を回収する方法であって、
（ａ）  試料流体を、前記コンジットに沿って前記第１のフローセル（２）中に流通させるステップ、
（ｂ）  バッファー流体を前記コンジットの少なくとも一部を通して流通させるステップであって、試料流体は前記第１のフローセル（２）内に維持されるが前記のコンジットの少なくとも一部はバッファー流体によって洗浄されるように、前記バッファー流体を前記第１のフローセル（２）を通しては流通させないステップ、
（ｃ）  バッファー流体を前記第１のフローセル（２）を通して流通させて、前記試料流体を前記第１のフローセル（２）から外へ流出させるステップ、
（ｄ）  流体を、前記第１のフローセル（２）を通して、前記コンジットに沿って、および前記収集リザーバ（３９）中に流入させることにより、第１のリガンド（４）に結合し、そして前記リガンド（４）から解離するようになった前記試料流体の分子が、前記第１のフローセル（２）を通して流通して前記収集リザーバ（３９）に運ばれる流体中に収集されるようにするステップ、
を含む、方法。
９．流体を、前記第１のフローセルを通して、前記コンジットに沿って、および前記収集リザーバ中に流通させることにより、第１のリガンドに結合し、そして前記第１のリガンド（４）から解離するようになった前記試料流体の分子が、前記第１のフローセルを通して流通して前記収集リザーバに運ばれる前記流体中に収集されるようにする前記ステップ（ｄ）が、
バッファー流体を、前記第１のフローセルを通して、前記コンジットに沿って、および前記収集リザーバ中に流通させることにより、第１のリガンドに結合し、そして前記第１のリガンドから解離した前記試料流体の分子が、前記第１のフローセルを通して流通して前記収集リザーバに運ばれるバッファー流体中に収集されるようにするステップ、
を含む、上記８に記載の方法。
１０．バッファー流体を前記第１のフローセルを通して流通させて、前記試料流体を前記第１のフローセルから外へ流出させる前記ステップ（ｃ）が、バッファー流体を、１０ミリ秒〜１０秒の間の期間にわたって前記第１のフローセルを通して流通させるステップを含む、上記８または９に記載の方法。
１１．上記１〜９のいずれか一つに記載の前記アセンブリを、少なくともステップ（ａ）〜（ｄ）を行うために使用することを含む、上記８〜１０のいずれか一つに記載の方法。
１２．（ａ）  試料流体を、前記第２の副コンジット（２０）に沿って、前記第１のフローセル（２）を通して、前記第１のコンジット（５）に沿って、および前記廃棄物リザーバ（７、２７）中に流通させるステップ、
（ｂ）  バッファー流体を、前記第２のバッファーリザーバ（１９）から外へ、前記第２の副コンジット（２０）に沿って、および前記廃棄物リザーバ（７、２７）中に流通させるステップ、
（ｃ）  バッファー流体を前記第１の試料リザーバ（９）から外へ、前記第１の副コンジット（１０）に沿って、および前記廃棄物リザーバ（７、２７）中に流通させるステップ、
（ｄ）  バッファー流体を前記第１のバッファーリザーバ（９）から外へ、前記第１の副コンジット（１０）に沿って、前記第１のフローセル（２）を通して、前記第２のコンジット（１５）に沿って、および前記廃棄物リザーバ（７、２７）中に流通させることにより、前記試料流体が前記第１のフローセル（２）から外へ流出させるようにするステップ、
（ｅ）  前記第１のフローセル（２）内を流れるバッファー流体中に、前記第１のフローセル（２）内で第１のリガンド（４）から受動的に解離した分子を収集するステップ、
（ｆ）  前記分子を含有する前記バッファー流体を、前記第２の副コンジット（２０）を介して、前記収集リザーバ（３９）中に収集するステップ
を含む、上記１に記載のアセンブリを使用する上記８に記載の方法。
１３．（ａ）  試料流体を、前記第２の副コンジット（２０）に沿って、前記第１のフローセル（２）を通して、前記第１のコンジット（５）に沿って、および前記廃棄物リザーバ（７、２７）中を流通させるステップ、
（ｂ）  バッファー流体を前記第１の試料リザーバ（９）から外へ、前記第１の副コンジット（１０）に沿って、前記第１のフローセル（２）を通して、および前記第２のコンジット（１５）に沿って、および前記廃棄物リザーバ（７、２７）中に流通させるステップ、
（ｃ）  バッファー流体を前記第２の最初の試料リザーバ（１９）から外へ、前記第２の副コンジット（２０）に沿って、および前記廃棄物リザーバ（７、２７）中に流通させるステップ、
（ｄ）  再生流体を、前記第２の副コンジット（２０）に沿って、および前記第１のフローセル（２）中に流通させるステップであって、前記再生流体が、前記第１のフローセル（２）内の第１のリガンドに結合した分子を前記第１のリガンドから解離させるステップ、
（ｅ）  前記再生流体中に、前記第１のリガンドから解離した分子を収集するステップ、
（ｆ）  バッファー流体を、前記第２の最初の試料リザーバ（１９）から外へ、前記第２の副コンジット（２０）に沿って、および前記廃棄物リザーバ（７、２７）中に流通させるステップ、
（ｇ）  前記第２の副コンジット（２０）を介して、前記分子を含有する再生流体を、前記収集リザーバ（３９）中に収集するステップ、
を含む、上記１に記載のアセンブリを使用する上記８に記載の方法。
１４．複数の異なる流体を試料リザーバもしくはレセプタクルに溜めることにより、前記試料流体を調製するステップをさらに含む、上記８〜１３のいずれか一つに記載の方法。
１５．１つまたは複数のフローセル（２、２’、２’’、２’’’）と、ミクロ流体アセンブリの固定部分に設けられた接続手段に対して協働するよう選択的に配置構成することができる接続手段とを含み、従って選択的に前記固定部分に接続しまたは前記固定部分から接続解除することができるカートリッジであって、
前記カートリッジが、分子に結合することができる第１のリガンド（４）を備えかつ第１の流体ポート（２ａ）および第２の流体ポート（２ｂ）を有する、少なくとも第１のフローセル（２）を含み、
前記固定部分が、少なくとも、第１のコンジット（５）を介して前記第１のフローセル（２）の前記第１の流体ポート（２ａ）に接続可能な１つの廃棄物リザーバ（７、２７）、および前記廃棄物リザーバ（７、２７）を前記第１のフローセル（２）の第２の流体ポート（２ｂ）に接続できる第２のコンジット（１５）と；前記第１のコンジット（５）および前記廃棄物リザーバ（７、２７）の間の流体連絡を制御するように配置構成された第１の弁（８）と、前記第２のコンジット（１５）および前記廃棄物リザーバ（７、２７）の間の流体連絡を制御する第２の弁（２８）と；バッファー流体を保持することができ、前記第１の副コンジット（１０）を介して前記第１のコンジット（５）に流体接続する少なくとも１つのバッファーリザーバ（９、１９）であって、前記第１の副コンジット（１０）が、前記第１のフローセル（２）の前記第１の流体ポート（２ａ）と前記第１の弁（８）との間に位置付けられた第１の接合部（１１）で前記第１のコンジット（５）に接続され、バッファー流体を、前記バッファーリザーバ（９、１９）から前記第１の副コンジット（１０）に選択的に供給することができる、バッファーリザーバ（９、１９）と；少なくとも収集リザーバ（３９）、および試料流体を保持することができる試料リザーバ（２９）を含むユニット（７１、７２）であって、前記ユニット（７１、７２）が、第２の副コンジット（２０）を介して前記第２のコンジット（１５）に流体接続され、前記第２の副コンジット（２０）が、前記第１のフローセル（２）の前記第２の流体ポート（２ｂ）と前記第２の弁（２８）との間に位置付けられた第２の接合部（２１）で前記第２のコンジット（１５）に接続され、前記ユニット（７１、７２）が、選択的に、前記収集リザーバ（３９）、バッファーリザーバ（９、１９）または試料リザーバ（２９）を前記第２の副コンジット（２０）に流体接続するように動作可能であるユニット（７１、７２）とを含み、
したがって、前記カートリッジが前記固定部分に接続されたときに、上記１に記載のミクロ流体アセンブリが形成される、
カートリッジ。
【手続補正２】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
試料中の分子を回収するために使用することができるアセンブリであって、
分子に結合することができる第１のリガンド（４）を含む第１のフローセル（２）；
第１のコンジット（５）を介して前記第１のフローセル（２）の第１の流体ポート（２ａ）に接続された少なくとも１つの廃棄物リザーバ（７、２７）、および前記廃棄物リザーバ（７、２７）を前記第１のフローセル（２）の第２の流体ポート（２ｂ）に接続する第２のコンジット（１５）；ならびに
前記第１のコンジット（５）と前記廃棄物リザーバ（７、２７）との間の流体連絡を制御するように配置構成された第１の弁（８）、および前記第２のコンジット（１５）と前記廃棄物リザーバ（７、２７）との間の流体連絡を制御するための第２の弁（２８）；
第１の副コンジット（１０）を介して前記第１のコンジット（５）に流体接続された、バッファー流体を保持することができる第１のバッファーリザーバ（９）であって、前記第１の副コンジット（１０）が、前記第１のフローセル（２）の前記第１の流体ポート（２ａ）と前記第１の弁（８）との間に位置付けられた第１の接合部（１１）で前記第１のコンジット（５）に接続され、バッファー流体を、前記第１のバッファーリザーバ（９）から前記第１の副コンジット（１０）内に選択的に供給することができる、第１のバッファーリザーバ（９）；
少なくとも収集リザーバ（３９）と、試料流体を保持することができる試料リザーバ（２９）と、バッファー流体を保持することができる第２のバッファーリザーバー（１９）とを含むユニット（７１、７２）であって、前記ユニット（７１、７２）が、第２の副コンジット（２０）を介して前記第２のコンジット（１５）に流体接続され、前記第２の副コンジット（２０）が、前記第１のフローセル（２）の前記第２の流体ポート（２ｂ）と前記第２の弁（２８）との間に位置付けられた第２の接合部（２１）で前記第２のコンジット（１５）に接続され、前記ユニット（７１、７２）が、前記収集リザーバ（３９）、第２のバッファーリザーバ（１９）または試料リザーバ（２９）を前記第２の副コンジット（２０）に選択的に流体接続するように動作可能であり、そして前記ユニット（７１、７１）が、前記第２の副コンジット（２０）に流体接続する第３の弁（１８）と、前記第２のバッファーリザーバー（１９）を前記第３の弁（１８）に流体接続する貯蔵コンジット（３０）とをさらに含み、前記第３の弁（１８）は、選択的に、前記貯蔵コンジット（３０）を前記第２の副コンジット（２０）に流体接続するように、または前記収集リザーバ（３９）を前記第２の副コンジット（２０）に流体接続するように、または前記試料リザーバ（２９）を前記第２の副コンジット（２０）に流体接続するように動作可能であるユニット（７１、７２）、
を含む、アセンブリ。
【請求項２】
前記第１のバッファーリザーバ（９）が、第１のシリンジ・ポンプ（９）を含み、前記第２のバッファーリザーバ（１９）が、第２のシリンジ・ポンプ（１９）を含む、請求項１に記載のアセンブリ。
【請求項３】
前記第２の接合部（２１）が、前記第２の弁（２８）によりも、前記第１のフローセル（２）の前記第２の流体ポート（２ｂ）に近付けて位置付けられる、請求項１〜２のいずれか一つに記載のアセンブリ。
【請求項４】
前記第１の接合部（１１）が、前記第１の弁（８）によりも、前記第１のフローセル（２）の前記第１の流体ポート（２ａ）に近付けて位置付けられる、請求項１〜３のいずれか一つに記載のアセンブリ。
【請求項５】
第２のフローセル（２’）、前記第２のフローセル（２’）の第１のポート（２ａ）と第１の廃棄物リザーバ（７）との間のさらに別の選択弁（８’）、前記第１のバッファーリザーバ（９）と前記第１の接合部（１１）との間のさらに別の選択弁（３８）、および接合部（３１）とさらに別の接合部（１１’）の間の第７の選択弁（３８’）をさらに含み、前記接合部（３１）は、前記第１のバッファーリザーバ（９）と、前記第１のバッファーリザーバ（９）および前記第１の接合部（１１）の間にある前記選択弁（３８）との間にあり、前記のさらに別の接合部（１１’）は、前記第２のフローセル（２’）の前記第１のポート（２ａ）と、前記第２のフローセル（２’）の第１のポート（２ａ）および第１の廃棄物リザーバ（７）の間にある前記選択弁（８’）との間にある、請求項１〜４のいずれか一つに記載のアセンブリ。
【請求項６】
フローセル（２、２’、２’’、２’’’）がカートリッジ内に設けられ、前記カートリッジは、当該カートリッジが選択的に、前記アセンブリの固定部分に接続されまたは前記固定部分から接続解除されるように、前記アセンブリの前記固定部分に設けられた接続手段と協働するように選択的に配置構成することができる接続手段を含む、請求項１〜５のいずれか一つに記載のアセンブリ。
【請求項７】
分子に結合することができる第１のリガンド（４）を含む第１のフローセル（２）と前記第１のフローセルを収集リザーバ（３９）に選択的に流体接続することができるコンジット（２０、１５ａ）とを含むアセンブリを使用する、分子を回収する方法であって、
（ａ）  試料流体を、前記コンジットに沿って前記第１のフローセル（２）中に流通させるステップ、
（ｂ）  バッファー流体を前記コンジットの少なくとも一部を通して流通させるステップであって、試料流体は前記第１のフローセル（２）内に維持されるが前記のコンジットの少なくとも一部はバッファー流体によって洗浄されるように、前記バッファー流体を前記第１のフローセル（２）を通しては流通させないステップ、
（ｃ）  バッファー流体を前記第１のフローセル（２）を通して流通させて、前記試料流体を前記第１のフローセル（２）から外へ流出させるステップ、
（ｄ）  流体を、前記第１のフローセル（２）を通して、前記コンジットに沿って、および前記収集リザーバ（３９）中に流入させることにより、第１のリガンド（４）に結合し、そして前記リガンド（４）から解離するようになった前記試料流体の分子が、前記第１のフローセル（２）を通して流通して前記収集リザーバ（３９）に運ばれる流体中に収集されるようにするステップ、
を含む、方法。
【請求項８】
流体を、前記第１のフローセルを通して、前記コンジットに沿って、および前記収集リザーバ中に流通させることにより、第１のリガンドに結合し、そして前記第１のリガンド（４）から解離するようになった前記試料流体の分子が、前記第１のフローセルを通して流通して前記収集リザーバに運ばれる前記流体中に収集されるようにする前記ステップ（ｄ）が、
バッファー流体を、前記第１のフローセルを通して、前記コンジットに沿って、および前記収集リザーバ中に流通させることにより、第１のリガンドに結合し、そして前記第１のリガンドから解離した前記試料流体の分子が、前記第１のフローセルを通して流通して前記収集リザーバに運ばれるバッファー流体中に収集されるようにするステップ、
を含む、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
バッファー流体を前記第１のフローセルを通して流通させて、前記試料流体を前記第１のフローセルから外へ流出させる前記ステップ（ｃ）が、バッファー流体を、１０ミリ秒〜１０秒の間の期間にわたって前記第１のフローセルを通して流通させるステップを含む、請求項７または８に記載の方法。
【請求項１０】
請求項１〜６のいずれか一つに記載の前記アセンブリを、少なくともステップ（ａ）〜（ｄ）を行うために使用することを含む、請求項７〜９のいずれか一つに記載の方法。
【請求項１１】
（ａ）  試料流体を、前記第２の副コンジット（２０）に沿って、前記第１のフローセル（２）を通して、前記第１のコンジット（５）に沿って、および前記廃棄物リザーバ（７、２７）中に流通させるステップ、
（ｂ）  バッファー流体を、前記第２のバッファーリザーバ（１９）から外へ、前記第２の副コンジット（２０）に沿って、および前記廃棄物リザーバ（７、２７）中に流通させるステップ、
（ｃ）  バッファー流体を前記第１のバッファーリザーバ（９）から外へ、前記第１の副コンジット（１０）に沿って、および前記廃棄物リザーバ（７、２７）中に流通させるステップ、
（ｄ）  バッファー流体を前記第１のバッファーリザーバ（９）から外へ、前記第１の副コンジット（１０）に沿って、前記第１のフローセル（２）を通して、前記第２のコンジット（１５）に沿って、および前記廃棄物リザーバ（７、２７）中に流通させることにより、前記試料流体が前記第１のフローセル（２）から外へ流出させるようにするステップ、
（ｅ）  前記第１のフローセル（２）内を流れるバッファー流体中に、前記第１のフローセル（２）内で第１のリガンド（４）から受動的に解離した分子を収集するステップ、
（ｆ）  前記分子を含有する前記バッファー流体を、前記第２の副コンジット（２０）を介して、前記収集リザーバ（３９）中に収集するステップ
を含む、請求項１に記載のアセンブリを使用する請求項７に記載の方法。
【請求項１２】
（ａ）  試料流体を、前記第２の副コンジット（２０）に沿って、前記第１のフローセル（２）を通して、前記第１のコンジット（５）に沿って、および前記廃棄物リザーバ（７、２７）中を流通させるステップ、
（ｂ）  バッファー流体を前記第１のバッファーリザーバ（９）から外へ、前記第１の副コンジット（１０）に沿って、前記第１のフローセル（２）を通して、および前記第２のコンジット（１５）に沿って、および前記廃棄物リザーバ（７、２７）中に流通させるステップ、
（ｃ）  バッファー流体を前記第２のバッファーリザーバ（１９）から外へ、前記第２の副コンジット（２０）に沿って、および前記廃棄物リザーバ（７、２７）中に流通させるステップ、
（ｄ）  再生流体を、前記第２の副コンジット（２０）に沿って、および前記第１のフローセル（２）中に流通させるステップであって、前記再生流体が、前記第１のフローセル（２）内の第１のリガンドに結合した分子を前記第１のリガンドから解離させるステップ、
（ｅ）  前記再生流体中に、前記第１のリガンドから解離した分子を収集するステップ、
（ｆ）  バッファー流体を、前記第２のバッファーリザーバ（１９）から外へ、前記第２の副コンジット（２０）に沿って、および前記廃棄物リザーバ（７、２７）中に流通させるステップ、
（ｇ）  前記第２の副コンジット（２０）を介して、前記分子を含有する再生流体を、前記収集リザーバ（３９）中に収集するステップ、
を含む、請求項１に記載のアセンブリを使用する請求項７に記載の方法。
【請求項１３】
複数の異なる流体を試料リザーバもしくはレセプタクルに溜めることにより、前記試料流体を調製するステップをさらに含む、請求項７〜１２のいずれか一つに記載の方法。
【請求項１４】
１つまたは複数のフローセル（２、２’、２’’、２’’’）と、ミクロ流体アセンブリの固定部分に設けられた接続手段に対して協働するよう選択的に配置構成することができる接続手段とを含み、従って選択的に前記固定部分に接続しまたは前記固定部分から接続解除することができるカートリッジであって、
前記カートリッジが、分子に結合することができる第１のリガンド（４）を備えかつ第１の流体ポート（２ａ）および第２の流体ポート（２ｂ）を有する、少なくとも第１のフローセル（２）を含み、
前記固定部分が、少なくとも、第１のコンジット（５）を介して前記第１のフローセル（２）の前記第１の流体ポート（２ａ）に接続可能な１つの廃棄物リザーバ（７、２７）、および前記廃棄物リザーバ（７、２７）を前記第１のフローセル（２）の第２の流体ポート（２ｂ）に接続できる第２のコンジット（１５）と；前記第１のコンジット（５）および前記廃棄物リザーバ（７、２７）の間の流体連絡を制御するように配置構成された第１の弁（８）と、前記第２のコンジット（１５）および前記廃棄物リザーバ（７、２７）の間の流体連絡を制御する第２の弁（２８）と；バッファー流体を保持することができ、第１の副コンジット（１０）を介して前記第１のコンジット（５）に流体接続できる第１のバッファーリザーバ（９）であって、前記第１のバッファーリザーバ（９）が第１の副コンジット（１０）を介して前記第１のコンジット（５）に流体接続され、前記第１の副コンジット（１０）が、前記第１のフローセル（２）の前記第１の流体ポート（２ａ）と前記第１の弁（８）との間に位置付けられた第１の接合部（１１）で前記第１のコンジット（５）に接続され、バッファー流体を、前記第１のバッファーリザーバ（９）から前記第１の副コンジット（１０）に選択的に供給することができる、バッファーリザーバ（９）と；少なくとも収集リザーバ（３９）、および試料流体を保持することができる試料リザーバ（２９）、およびバッファー流体を保持することができる第２のバッファーリザーバ（１９）を含むユニット（７１、７２）であって、前記ユニット（７１、７２）が、第２の副コンジット（２０）を介して前記第２のコンジット（１５）に流体接続され、前記第２の副コンジット（２０）が、前記第１のフローセル（２）の前記第２の流体ポート（２ｂ）と前記第２の弁（２８）との間に位置付けられた第２の接合部（２１）で前記第２のコンジット（１５）に接続され、前記ユニット（７１、７２）が、選択的に、前記収集リザーバ（３９）、第２のバッファーリザーバ（１９）または試料リザーバ（２９）を前記第２の副コンジット（２０）に流体接続するように動作可能であり、前記ユニット（７１、７１）が、前記第２の副コンジット（２０）に流体接続する第３の弁（１８）と；前記第２のバッファーリザーバー（１９）を前記第３の弁（１８）に流体接続する貯蔵コンジット（３０）とを含み、前記第３の弁（１８）が、選択的に、前記貯蔵コンジット（３０）を前記第２の副コンジット（２０）に流体接続するように、または前記収集リザーバ（３９）を前記第２の副コンジット（２０）に流体接続するように、または前記試料リザーバ（２９）を前記第２の副コンジット（２０）に流体接続するように動作可能であるユニット（７１、７２）とを含み、
したがって、前記カートリッジが前記固定部分に接続されたときに、請求項１に記載のミクロ流体アセンブリが形成される、
カートリッジ。
【国際調査報告】
2019514356.tif 000011
2019514356.tif 000012
2019514356.tif 000013