(57)【要約】本開示は、変異体免疫調節ポリペプチド、及び変異体免疫調節ペプチドを含む融合ポリペプチドを提供する。本開示は、Ｔ細胞調節多量体ポリペプチド、及びＴ細胞調節多量体ポリペプチドを含む組成物を提供し、Ｔ細胞調節多量体ポリペプチドは、本開示の変異体免疫調節ポリペプチドを含む。本開示は、Ｔ細胞調節多量体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸、及び核酸を含む宿主細胞を提供する。本開示は、Ｔ細胞の活性を調節する方法を提供し、この方法は、Ｔ細胞を本開示のＴ細胞調節多量体ポリペプチドと接触させることを含む。【特許請求の範囲】
【請求項１】
図２Ａに示されるＣＤ８０アミノ酸配列または配列番号１に示されるＣＤ８０アミノ酸配列と少なくとも８５％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む変異体ＣＤ８０免疫調節ポリペプチドであって、
前記変異体ＣＤ８０免疫調節ポリペプチドは、図２Ａに示されるＣＤ８０アミノ酸配列または配列番号１に示されるＣＤ８０アミノ酸配列に対して、１つ以上のアミノ酸置換を有し、
前記変異体ＣＤ８０免疫調節ポリペプチドは、図３Ａ〜Ｃのうちの１つに示されるアミノ酸配列を有するＣＤ２８ポリペプチドに対する、図２Ａに示されるＣＤ８０アミノ酸配列の結合親和性または配列番号１に示されるＣＤ８０アミノ酸配列の結合親和性と比較して、ＣＤ２８ポリペプチドへの結合親和性の低減を示す、
変異体ＣＤ８０免疫調節ポリペプチド。
【請求項２】
前記ポリペプチドが、アミノ酸Ｎ１９、Ｎ６３、Ｉ６７、Ｋ８６、Ｑ１５７、Ｄ１５８、Ｌ２５、Ｙ３１、Ｑ３３、Ｍ３８、Ｖ３９、Ｉ４９、Ｙ５３、Ｄ６０、Ｆ１０８、またはＳ１５６の置換を含む、請求項１に記載の変異体免疫調節ポリペプチド。
【請求項３】
前記変異体免疫調節ポリペプチドが、図２Ａに示されるか、または配列番号１に記載のＣＤ８０アミノ酸配列の、ＣＤ２８ポリペプチドに対する結合親和性の１０％未満〜５０％未満を示す、請求項１に記載の変異体免疫調節ポリペプチド。
【請求項４】
ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）エピトープ、及び
ｉｉ）第１の主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）ポリペプチド、
を含む第１のポリペプチド、ならびに、
ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）第２のＭＨＣポリペプチド、及び
ｉｉ）任意に、免疫グロブリン（Ｉｇ）Ｆｃポリペプチドまたは非Ｉｇ骨格、
を含む第２のポリペプチド、
を含み、
前記多量体ポリペプチドが、１つ以上の免疫調節ドメインを含み、前記１つ以上の免疫調節ドメインが、
Ａ）前記第１のポリペプチドのＣ末端、
Ｂ）前記第２のポリペプチドのＮ末端、
Ｃ）前記第２のポリペプチドのＣ末端、または
Ｄ）前記第１のポリペプチドのＣ末端及び前記第２のポリペプチドのＮ末端
に位置し、
前記免疫調節ドメインが、請求項１〜３のいずれか１項に記載の変異体免疫調節ポリペプチドであり、
前記多量体ポリペプチドが、図２Ａに示されるＣＤ８０アミノ酸配列を含む免疫調節ドメインを含む対照多量体ポリペプチドのＣＤ２８ポリペプチドに対する結合親和性と比較して、または配列番号１に示されるＣＤ８０アミノ酸配列を含む免疫調節ドメインを含む対照多量体ポリペプチドのＣＤ２８ポリペプチドに対する結合親和性と比較して、図３Ａ〜３Ｃのうちの１つに示されるアミノ酸配列を有するＣＤ２８ポリペプチドへの結合親和性の低減を示す、
多量体ポリペプチド。
【請求項５】
前記多量体ポリペプチドが、
ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）エピトープ、
ｉｉ）第１のＭＨＣポリペプチド、及び
ｉｉｉ）免疫調節ドメイン、
を含む第１のポリペプチド、ならびに
ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）第２のＭＨＣポリペプチド、及び
ｉｉ）ＩｇＦｃポリペプチド、
を含む第２のポリペプチド、
を含む、請求項４に記載の多量体ポリペプチド。
【請求項６】
前記多量体ポリペプチドが、
ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）エピトープ、及び
ｉｉ）第１のＭＨＣポリペプチド、
を含む第１のポリペプチド、ならびに
ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）免疫調節ドメイン、
ｉｉｉ）第２のＭＨＣポリペプチド、及び
ｉｉ）免疫グロブリン（Ｉｇ）Ｆｃポリペプチド、
を含む第２のポリペプチド、
を含む、請求項４に記載の多量体ポリペプチド。
【請求項７】
前記多量体ポリペプチドが、
ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）エピトープ、及び
ｉｉ）第１のＭＨＣポリペプチド、
を含む第１のポリペプチド、ならびに
ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）第２のＭＨＣポリペプチド、
ｉｉ）ＩｇＦｃポリペプチド、及び
ｉｉｉ）免疫調節ドメイン、
を含む第２のポリペプチド、
を含む、請求項４に記載の多量体ポリペプチド。
【請求項８】
前記多量体ポリペプチドが、
ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）エピトープ、及び
ｉｉ）第１のＭＨＣポリペプチド、
を含む第１のポリペプチド、ならびに
ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）第２のＭＨＣポリペプチド、及び
ｉｉ）免疫調節ドメイン、
を含む第２のポリペプチド、
を含む、請求項４に記載の多量体ポリペプチド。
【請求項９】
前記多量体ポリペプチドが、
ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）エピトープ、及び
ｉｉ）第１のＭＨＣポリペプチド、
を含む第１のポリペプチド、ならびに
ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）免疫調節ドメイン、及び
ｉｉ）第２のＭＨＣポリペプチド、
を含む第２のポリペプチド、
を含む、請求項４に記載の多量体ポリペプチド。
【請求項１０】
前記多量体ポリペプチドが、
ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）エピトープ、
ｉｉ）第１のＭＨＣポリペプチド、及び
ｉｉｉ）免疫調節ドメイン、
を含む第１のポリペプチド、ならびに
ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）第２のＭＨＣポリペプチド、
を含む第２のポリペプチド、
を含む、請求項４に記載の多量体ポリペプチド。
【請求項１１】
前記非Ｉｇ骨格が、ＸＴＥＮポリペプチド、トランスフェリンポリペプチド、エラスチン様ポリペプチド、絹様ポリペプチド、または絹−エラスチン様ポリペプチドである、請求項４に記載の多量体ポリペプチド。
【請求項１２】
前記第１のＭＨＣポリペプチドが、β２ミクログロブリンポリペプチドであり、前記第２のＭＨＣポリペプチドが、ＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドである、請求項４〜１１のいずれか１項に記載の多量体ポリペプチド。
【請求項１３】
前記β２ミクログロブリンポリペプチドが、図６に示されるアミノ酸配列のうちの１つと少なくとも８５％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項１２に記載の多量体ポリペプチド。
【請求項１４】
前記ＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドが、ＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−Ｂ、またはＨＬＡ−Ｃ重鎖である、請求項１１に記載の多量体ポリペプチド。
【請求項１５】
前記ＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドが、図５Ａ〜５Ｃのうちの１つに示されるアミノ酸配列と少なくとも８５％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項１２に記載の多量体ポリペプチド。
【請求項１６】
前記第１のＭＨＣポリペプチドが、ＭＨＣクラスＩＩα鎖ポリペプチドであり、前記第２のＭＨＣポリペプチドが、ＭＨＣクラスＩＩβ鎖ポリペプチドである、請求項４〜１１のいずれか１項に記載の多量体ポリペプチド。
【請求項１７】
前記エピトープが、Ｔ細胞エピトープである、請求項４〜１６のいずれか１項に記載の多量体ポリペプチド。
【請求項１８】
多量体ポリペプチドが、Ｆｃポリペプチドを含み、前記Ｆｃポリペプチドが、ＩｇＧ１Ｆｃポリペプチド、ＩｇＧ２Ｆｃポリペプチド、ＩｇＧ３Ｆｃポリペプチド、ＩｇＧ４Ｆｃポリペプチド、ＩｇＡＦｃポリペプチド、またはＩｇＭＦｃポリペプチドである、請求項４〜１０及び１２〜１７のいずれか１項に記載の多量体ポリペプチド。
【請求項１９】
前記Ｆｃポリペプチドが、図４Ａ〜４Ｃに示されるアミノ酸配列と少なくとも８５％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項１８に記載の多量体ポリペプチド。
【請求項２０】
前記第１のポリペプチド及び前記第２のポリペプチドが、非共有結合的に結合されている、請求項４〜１９のいずれか１項に記載の多量体ポリペプチド。
【請求項２１】
前記第１のポリペプチド及び前記第２のポリペプチドが、共有結合で連結されてている、請求項４〜１９のいずれか１項に記載の多量体ポリペプチド。
【請求項２２】
前記共有結合が、ジスルフィド結合を介する、請求項２１に記載の多量体ポリペプチド。
【請求項２３】
前記第１のＭＨＣポリペプチド、または、前記エピトープ及び前記第１のＭＨＣポリペプチドの間のリンカーが、第１のＣｙｓ残基を提供するためのアミノ酸置換を含み、前記第２のＭＨＣポリペプチドが、第２のＣｙｓ残基を提供するためのアミノ酸置換を含み、前記ジスルフィド結合が、前記第１のＣｙｓ残基及び前記第２のＣｙｓ残基の間にある、請求項２２に記載の多量体ポリペプチド。
【請求項２４】
前記エピトープ及び前記第１のＭＨＣポリペプチドの間に挿入された第１のリンカーを含む、請求項４〜１１のいずれか１項に記載の多量体ポリペプチド。
【請求項２５】
前記変異体ＣＤ８０免疫調節ポリペプチドが、アミノ酸Ｎ１９、Ｎ６３、Ｉ６７、Ｋ８６、Ｑ１５７、Ｄ１５８、Ｌ２５、Ｙ３１、Ｑ３３、Ｍ３８、Ｖ３９、Ｉ４９、Ｙ５３、Ｄ６０、Ｆ１０８、またはＳ１５６の置換を含む、請求項４〜１１のいずれか１項に記載の多量体ポリペプチド。
【請求項２６】
２つ以上の免疫調節ポリペプチドを含む、請求項４〜２５のいずれか１項に記載の多量体ポリペプチド。
【請求項２７】
前記２つ以上の免疫調節ポリペプチドが縦一列に並んでいる、請求項２６に記載の多量体ポリペプチド。
【請求項２８】
前記多量体ポリペプチドが、第３のポリペプチドを含み、前記第３のポリペプチドが、前記第１のポリペプチドまたは前記第２のポリペプチドの前記免疫調節ポリペプチドと少なくとも９０％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む免疫調節ポリペプチドを含む、請求項２６及び２７のいずれか１項に記載の多量体ポリペプチド。
【請求項２９】
前記第３のポリペプチドが、前記第１のポリペプチドに共有結合で連結されている、請求項２８に記載の多量体ポリペプチド。
【請求項３０】
前記第２のポリペプチドが、Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）前記第２のＭＨＣポリペプチド、
ｉｉ）前記ＩｇＦｃポリペプチド、及び
ｉｉｉ）親和性タグ、
を含む、請求項４〜１０及び１２〜２９のいずれか１項に記載の多量体ポリペプチド。
【請求項３１】
組換えポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含み、
ｉ）前記組換えポリペプチドが、Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ａ）エピトープ、
ｂ）第１の主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）ポリペプチド、
ｃ）免疫調節ポリペプチド、
ｄ）タンパク質分解的に切断可能なリンカーもしくはリボソームスキッピングシグナル、
ｅ）第２のＭＨＣポリペプチド、及び
ｆ）免疫グロブリン（Ｉｇ）Ｆｃポリペプチド、
を含み、
前記免疫調節ポリペプチドが、請求項１〜３のいずれか１項に記載の変異体免疫調節ポリペプチドであるか、または
ｉｉ）前記組換えポリペプチドが、Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ａ）エピトープ、
ｂ）第１のＭＨＣポリペプチド、
ｃ）タンパク質分解的に切断可能なリンカーもしくはリボソームスキッピングシグナル、
ｄ）免疫調節ポリペプチド、
ｅ）第２のＭＨＣポリペプチド、及び
ｆ）ＩｇＦｃポリペプチド、
を含み、
前記免疫調節ポリペプチドが、請求項１〜３のいずれか１項に記載の変異体免疫調節ポリペプチドである、
核酸。
【請求項３２】
前記第１のＭＨＣポリペプチドが、β２ミクログロブリンポリペプチドであり、前記第２のＭＨＣポリペプチドが、ＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドである、請求項３１に記載の核酸。
【請求項３３】
前記β２ミクログロブリンポリペプチドが、図６に示されるアミノ酸配列のうちの１つと少なくとも８５％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項３２に記載の核酸。
【請求項３４】
前記ＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドが、ＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−Ｂ、またはＨＬＡ−Ｃの重鎖である、請求項３１に記載の核酸。
【請求項３５】
前記ＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドが、図５Ａ〜５Ｃのいずれかに示されるアミノ酸配列と少なくとも８５％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項３４に記載の核酸。
【請求項３６】
前記第１のＭＨＣポリペプチドが、ＭＨＣクラスＩＩα鎖ポリペプチドであり、前記第２のＭＨＣポリペプチドが、ＭＨＣクラスＩＩβ鎖ポリペプチドである、請求項３１に記載の核酸。
【請求項３７】
前記エピトープが、Ｔ細胞エピトープである、請求項３１に記載の核酸。
【請求項３８】
前記ＩｇＦｃポリペプチドが、ＩｇＧ１Ｆｃポリペプチド、ＩｇＧ２Ｆｃポリペプチド、ＩｇＧ３Ｆｃポリペプチド、ＩｇＧ４Ｆｃポリペプチド、ＩｇＡＦｃポリペプチド、またはＩｇＭＦｃポリペプチドである、請求項３１に記載の核酸。
【請求項３９】
前記ＩｇＦｃポリペプチドが、図４Ａ〜４Ｃに示されるアミノ酸配列と少なくとも８５％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項３８に記載の核酸。
【請求項４０】
前記変異体ＣＤ８０免疫調節ポリペプチドが、アミノ酸Ｎ１９、Ｎ６３、Ｉ６７、Ｋ８６、Ｑ１５７、Ｄ１５８、Ｌ２５、Ｙ３１、Ｑ３３、Ｍ３８、Ｖ３９、Ｉ４９、Ｙ５３、Ｄ６０、Ｆ１０８、またはＳ１５６の置換を含む、請求項３１に記載の核酸。
【請求項４１】
前記多量体ポリペプチドが、ＣＤ７、ＣＤ３０Ｌ、ＣＤ４０、ＣＤ７０、ＣＤ８３、ＨＬＡ−Ｇ、ＭＩＣＡ、ＭＩＣＢ、ＨＶＥＭ、リンホトキシンβ受容体、３／ＴＲ６、ＩＬＴ３、ＩＬＴ４、及びＨＶＥＭから選択される第２の免疫調節ポリペプチドを含む、請求項３１に記載の核酸。
【請求項４２】
前記タンパク質分解的に切断可能なリンカーまたはリボソームスキッピングシグナルが、
ａ）ＬＥＶＬＦＱＧＰ（配列番号７８）、
ｂ）ＥＮＬＹＴＱＳ（配列番号７９）、
ｃ）フリン切断部位、
ｄ）ＬＶＰＲ（配列番号８０）、
ｅ）ＧＳＧＡＴＮＦＳＬＬＫＱＡＧＤＶＥＥＮＰＧＰ（配列番号８１）、
ｆ）ＧＳＧＥＧＲＧＳＬＬＴＣＧＤＶＥＥＮＰＧＰ（配列番号８２）、
ｇ）ＧＳＧＱＣＴＮＹＡＬＬＫＬＡＧＤＶＥＳＮＰＧＰ（配列番号８３）、及び
ｈ）ＧＳＧＶＫＱＴＬＮＦＤＬＬＫＬＡＧＤＶＥＳＮＰＧＰ（配列番号８４）、
から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項３１に記載の核酸。
【請求項４３】
前記組換えポリペプチドが、Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ａ）第１のリーダーペプチド、
ｂ）前記エピトープ、
ｃ）前記第１のＭＨＣポリペプチド、
ｄ）前記免疫調節ポリペプチド、
ｅ）前記タンパク質分解的に切断可能なリンカーまたはリボソームスキッピングシグナル、
ｆ）第２のリーダーペプチド、
ｇ）前記第２のＭＨＣポリペプチド、及び
ｈ）前記免疫グロブリン（Ｉｇ）Ｆｃポリペプチド、
を含む、請求項３１に記載の核酸。
【請求項４４】
前記第１のリーダーペプチド及び前記第２のリーダーペプチドが、β２Ｍリーダーペプチドである、請求項４３に記載の核酸。
【請求項４５】
前記ヌクレオチド配列が、転写制御エレメントに作動可能に連結されている、請求項３１に記載の核酸。
【請求項４６】
前記転写制御エレメントが、真核細胞において機能的なプロモーターである、請求項４５に記載の核酸。
【請求項４７】
前記第１のＭＨＣポリペプチド、または、前記エピトープ及び前記第１のＭＨＣポリペプチドの間のリンカーが、第１のＣｙｓ残基を提供するためのアミノ酸置換を含み、前記第２のＭＨＣポリペプチドが、第２のＣｙｓ残基を提供するためのアミノ酸置換を含み、前記第１のＣｙｓ残基及び前記第２のＣｙｓ残基が、ジスルフィド結合を、前記第１のＭＨＣポリペプチド及び前記第２のＭＨＣポリペプチドの間にもたらす、請求項３１に記載の核酸。
【請求項４８】
請求項３１〜４７のいずれか１項に記載の核酸を含む、組換え発現ベクター。
【請求項４９】
前記ベクターが、ウイルスベクターまたは非ウイルスベクターである、請求項４８に記載の組換え発現ベクター。
【請求項５０】
請求項４８に記載の組換え発現ベクターで遺伝子改変した、宿主細胞。
【請求項５１】
前記宿主細胞が、インビトロのものである、請求項５０に記載の宿主細胞。
【請求項５２】
前記宿主細胞が、内因性ＭＨＣβ２ミクログロブリンポリペプチドを産生しないように、遺伝子改変される、請求項５０に記載の宿主細胞。
【請求項５３】
前記宿主細胞が、Ｔリンパ球である、請求項５０に記載の宿主細胞。
【請求項５４】
ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）エピトープ、
ｉｉ）第１のＭＨＣポリペプチド、及び
ｉｉｉ）免疫調節ドメイン、
を含む第１のポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む第１の核酸、を含み、
前記免疫調節ドメインが、請求項１〜３のいずれか１項に記載の変異体免疫調節ポリペプチドであり、
ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）第２のＭＨＣポリペプチド、及び
ｉｉ）ＩｇＦｃポリペプチド、
を含む第２のポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む第２の核酸、
を含む、
組成物。
【請求項５５】
ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）エピトープ、及び
ｉｉ）第１のＭＨＣポリペプチド、
を含む第１のポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む第１の核酸、ならびに
ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、
ｉ）請求項１〜３のいずれか１項に記載の変異体免疫調節ポリペプチドである免疫調節ドメイン、
ｉｉ）第２のＭＨＣポリペプチド、及び
ｉｉｉ）ＩｇＦｃポリペプチド、
を含む第２のポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む第２の核酸、
を含む、
組成物。
【請求項５６】
前記第１の核酸及び／または前記第２の核酸が、組換え発現ベクターに存在する、請求項５４または５５に記載の組成物。
【請求項５７】
請求項５４〜５６のいずれか１項に記載の組成物で遺伝子改変された、宿主細胞。
【請求項５８】
請求項４〜３０のいずれか１項に記載の多量体ポリペプチドを産生する方法であって、
ａ）請求項５０〜５３、及び５７のいずれか１項に記載の宿主細胞を、前記宿主細胞が前記多量体ポリペプチドを合成するような条件下で、培地中、インビトロで、培養すること、ならびに
ｂ）前記多量体ポリペプチドを、前記宿主細胞及び／または前記培地から単離すること、
を含む、
方法。
【請求項５９】
前記第２のポリペプチドが、親和性タグを含み、前記単離が、前記細胞により産生された前記多量体ポリペプチドを、前記親和性タグに対する結合パートナーと接触させることを含み、前記結合パートナーを固定し、それにより、前記多量体ポリペプチドを固定化する、請求項５８に記載の方法。
【請求項６０】
前記固定化された多量体ポリペプチドを溶出させることを含む、請求項５８に記載の方法。
【請求項６１】
エピトープ特異的Ｔ細胞の活性を選択的に調節する方法であって、
前記Ｔ細胞を、請求項４〜３０のいずれか１項に記載の多量体ポリペプチドと接触させることを含み、前記接触させることが、前記エピトープ特異的Ｔ細胞の活性を選択的に調節する、
方法。
【請求項６２】
前記免疫調節ポリペプチドが、活性化ポリペプチドであり、前記多量体ポリペプチドが、前記エピトープ特異的Ｔ細胞を活性化する、請求項６１に記載の方法。
【請求項６３】
前記免疫調節ポリペプチドが、阻害ポリペプチドであり、前記多量体ポリペプチドが、前記エピトープ特異的Ｔ細胞を阻害する、請求項６１に記載の方法。
【請求項６４】
前記接触させることが、インビトロである、請求項６１に記載の方法。
【請求項６５】
前記接触させることが、インビボである、請求項６１に記載の方法。
【請求項６６】
個体のエピトープ特異的Ｔ細胞の活性を選択的に調節する方法であって、
個体のエピトープ特異的Ｔ細胞の前記活性を選択的に調節するために有効である、請求項４〜３０のいずれか１項に記載の有効量の多量体ポリペプチドを、前記個体に投与することを含む、
方法。
【請求項６７】
前記免疫調節ポリペプチドが、活性化ポリペプチドであり、前記多量体ポリペプチドが、前記エピトープ特異的Ｔ細胞を活性化する、請求項６６に記載の方法。
【請求項６８】
前記エピトープが、がん関連エピトープであり、前記投与することが、前記がん関連エピトープに特異的なＴ細胞の活性を選択的に増加させる、請求項６７に記載の方法。
【請求項６９】
前記免疫調節ポリペプチドが、阻害ポリペプチドであり、前記多量体ポリペプチドが、前記エピトープ特異的Ｔ細胞の活性を阻害する、請求項６６に記載の方法。
【請求項７０】
前記エピトープが、自己エピトープであり、前記投与することが、前記自己エピトープに特異的なＴ細胞の前記活性を選択的に阻害する、請求項６９に記載の方法。
【請求項７１】
個体の感染症を処置する方法であって、
ａ）請求項４〜３０のいずれか１項に記載の多量体ポリペプチド、または
ｂ）請求項４〜３０のいずれか１項に記載の多量体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む１つ以上の組換え発現ベクター、または
ｃ）請求項４〜３０のいずれか１項に記載の多量体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む１つ以上のｍＲＮＡ、
を有効量だけ前記個体に投与することを含み、
前記エピトープが、病原体関連エピトープであり、前記免疫調節ポリペプチドが、活性化ポリペプチドであり、前記投与することが、個体の病原体関連エピトープ特異的Ｔ細胞の前記活性を選択的に調節するために有効である、
方法。
【請求項７２】
前記病原体が、ウイルス、細菌、または原生動物である、請求項７１に記載の方法。
【請求項７３】
前記投与することが、皮下である、請求項６６〜７１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７４】
前記投与することが、静脈内である、請求項６６〜７１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７５】
前記投与することが、筋肉内である、請求項６６〜７１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７６】
前記投与することが、全身性である、請求項６６〜７１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７７】
前記投与することが、処置部位の遠位である、請求項６６〜７１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７８】
前記投与することが、局所的である、請求項６６〜７１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７９】
前記投与することが、処置部位またはその近傍
である、請求項６６〜７１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８０】
ａ）請求項４〜３０のいずれか１項に記載の多量体ポリペプチド、及び
ｂ）薬学的に許容される賦形剤、
を含む組成物。
【請求項８１】
ａ）請求項３１〜４７のいずれか１項に記載の核酸または請求項４８または４９に記載の組換え発現ベクター、及び
ｂ）薬学的に許容される賦形剤、
を含む組成物。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
適応免疫応答は、Ｔ細胞の表面上に存在するＴ細胞受容体（ＴＣＲ）の、主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ；ヒトにおいては、ヒト白血球抗原（ＨＬＡ）複合体とも称される）により抗原提示細胞（ＡＰＣ）の表面上に非共有結合的に存在する小さなペプチド抗原との結合（ｅｎｇａｇｅｍｅｎｔ）を含む。この結合（ｅｎｇａｇｅｍｅｎｔ）は、免疫系の標的機序を表し、Ｔ細胞調節（活性化または阻害）及びエフェクター機能のための必要な分子相互作用である。エピトープ特異的細胞標的化の後、標的化Ｔ細胞は、ＡＰＣ上に見られる共刺激タンパク質の、Ｔ細胞上の共刺激タンパク質の対応物との結合（ｅｎｇａｇｅｍｅｎｔ）を介して活性化される。
【０００２】
双方のシグナル−エピトープ／ＴＣＲ結合及びＡＰＣ共刺激タンパク質のＴ細胞の共刺激タンパク質との結合（ｅｎｇａｇｅｍｅｎｔ）は、Ｔ細胞特異性及び活性化または阻害を駆動するために必要とされる。ＴＣＲは、所与のエピトープに特異的であるが、共刺激タンパク質は、エピトープ特異的ではなく、その代わりに、一般には、全てのＴ細胞または大きなＴ細胞サブセット上に発現される。
【発明の概要】
【０００３】
本開示は、変異体免疫調節ポリペプチド、及び変異体免疫調節ペプチドを含む融合ポリペプチドを提供する。本開示は、Ｔ細胞調節多量体ポリペプチド、及びＴ細胞調節多量体ポリペプチドを含む組成物を提供し、Ｔ細胞調節多量体ポリペプチドは、本開示の変異体免疫調節ポリペプチドを含む。本開示は、Ｔ細胞調節多量体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸、及び核酸を含む宿主細胞を提供する。本開示は、Ｔ細胞の活性を調節する方法を提供し、方法は、Ｔ細胞を本開示のＴ細胞調節多量体ポリペプチドと接触させることを含む。
【０００４】
本開示は、図２Ａに示されるＣＤ８０アミノ酸配列、または配列番号１に示されるＣＤ８０アミノ酸配列と、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む変異体ＣＤ８０免疫調節ポリペプチドを提供し、変異体ＣＤ８０免疫調節ポリペプチドは、図２Ａに示されるＣＤ８０アミノ酸配列、または配列番号１に示されるＣＤ８０アミノ酸配列に対して、１つ以上のアミノ酸置換を有し；変異体ＣＤ８０免疫調節ポリペプチドは、図３Ａ〜Ｃのうちの１つに示されるアミノ酸配列を有するＣＤ２８ポリペプチドに対する、図２Ａに示されるＣＤ８０アミノ酸配列の結合親和性または配列番号１に示されるＣＤ８０アミノ酸配列の結合親和性と比較して、上記ＣＤ２８ポリペプチドへの結合親和性の低減を示す。一部の場合では、ポリペプチドは、アミノ酸Ｎ１９、Ｎ６３、Ｉ６７、Ｋ８６、Ｑ１５７、Ｄ１５８、Ｌ２５、Ｙ３１、Ｑ３３、Ｍ３８、Ｖ３９、Ｉ４９、Ｙ５３、Ｄ６０、Ｆ１０８、またはＳ１５６の置換を含む。一部の場合では、ポリペプチドは、アミノ酸Ｎ１９の置換を含む。一部の場合では、ポリペプチドは、アミノ酸Ｉ６７の置換を含む。一部の場合では、ポリペプチドは、アミノ酸Ｋ８６の置換を含む。一部の場合では、ポリペプチドは、アミノ酸Ｑ１５７の置換を含む。一部の場合では、ポリペプチドは、アミノ酸Ｄ１５８の置換を含む。一部の場合では、ポリペプチドは、アミノ酸Ｌ２５の置換を含む。一部の場合では、ポリペプチドは、アミノ酸Ｙ３１の置換を含む。一部の場合では、ポリペプチドは、アミノ酸Ｑ３３の置換を含む。一部の場合では、ポリペプチドは、アミノ酸Ｍ３８の置換を含む。一部の場合では、ポリペプチドは、アミノ酸Ｖ３９の置換を含む。一部の場合では、ポリペプチドは、アミノ酸Ｉ４９の置換を含む。一部の場合では、ポリペプチドは、アミノ酸Ｙ５３の置換を含む。一部の場合では、ポリペプチドは、アミノ酸Ｄ６０の置換を含む。一部の場合では、ポリペプチドは、アミノ酸Ｆ１０８の置換を含む。一部の場合では、ポリペプチドは、アミノ酸Ｓ１５６の置換を含む。一部の場合では、変異体免疫調節ポリペプチドは、図２Ａに示されるか、または配列番号１に示されるＣＤ８０アミノ酸配列のＣＤ２８ポリペプチドに対する結合親和性の１０％未満〜５０％未満を示す。
【０００５】
本開示は、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）第１の主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）ポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）第２のＭＨＣポリペプチド、及び、ｉｉ）任意に、免疫グロブリン（Ｉｇ）Ｆｃポリペプチドまたは非Ｉｇ骨格、を含む第２のポリペプチド、を含む多量体ポリペプチドを提供し、多量体ポリペプチドは、１つ以上の免疫調節ドメインを含み、１つ以上の免疫調節ドメインは、Ａ）第１のポリペプチドのＣ末端に、Ｂ）第２のポリペプチドのＮ末端に、Ｃ）第２のポリペプチドのＣ末端に、またはＤ）第１のポリペプチドのＣ末端及び第２のポリペプチドのＮ末端にあり、免疫調節ドメインは、上述したような、または本明細書の他の箇所に記載したような変異体免疫調節ポリペプチドであり、多量体ポリペプチドは、図２Ａに示されるＣＤ８０アミノ酸配列を含む免疫調節ドメインを含む対照多量体ポリペプチドのＣＤ２８ポリペプチドに対する結合親和性と比較して、または配列番号１に示されるＣＤ８０アミノ酸配列を含む免疫調節ドメインを含む対照多量体ポリペプチドのＣＤ２８ポリペプチドに対する結合親和性と比較して、図３Ａ〜３Ｃのうちの１つに示されるアミノ酸配列を有するＣＤ２８ポリペプチドへの結合親和性の低減を示す。一部の場合では、多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）第１のＭＨＣポリペプチド、及び、ｉｉｉ）免疫調節ドメイン、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）第２のＭＨＣポリペプチド、及び、ｉｉ）ＩｇＦｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）第１のＭＨＣポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）免疫調節ドメイン、ｉｉｉ）第２のＭＨＣポリペプチド、及び、ｉｖ）免疫グロブリン（Ｉｇ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）第１のＭＨＣポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）第２のＭＨＣポリペプチド、及び、ｉｉ）ＩｇＦｃポリペプチド、及び、ｉｉｉ）免疫調節ドメイン、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）第１のＭＨＣポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）第２のＭＨＣポリペプチド、及び、ｉｉ）免疫調節ドメイン、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）第１のＭＨＣポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）免疫調節ドメイン、及び、ｉｉ）第２のＭＨＣポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）第１のＭＨＣポリペプチド、及び、ｉｉｉ）免疫調節ドメイン、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）第２のＭＨＣポリペプチドを含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、非Ｉｇ骨格は、ＸＴＥＮポリペプチド、トランスフェリンポリペプチド、エラスチン様ポリペプチド、絹様ポリペプチド、または絹−エラスチン様ポリペプチドである。一部の場合では、第１のＭＨＣポリペプチドは、β２ミクログロブリンポリペプチドであり、第２のＭＨＣポリペプチドは、ＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドである。一部の場合では、β２ミクログロブリンポリペプチドは、図６に示されるアミノ酸配列のうちの１つと少なくとも８５％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、ＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドは、ＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−Ｂ、またはＨＬＡ−Ｃ重鎖である。一部の場合では、ＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドは、図５Ａ〜５Ｃのうちの１つに示されるアミノ酸配列と少なくとも８５％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、第１のＭＨＣポリペプチドは、ＭＨＣクラスＩＩα鎖ポリペプチドであり、第２のＭＨＣポリペプチドは、ＭＨＣクラスＩＩβ鎖ポリペプチドである。一部の場合では、エピトープは、Ｔ細胞エピトープである。一部の場合では、多量体ポリペプチドは、Ｆｃポリペプチドを含み、ＩｇＦｃポリペプチドは、ＩｇＧ１Ｆｃポリペプチド、ＩｇＧ２Ｆｃポリペプチド、ＩｇＧ３Ｆｃポリペプチド、ＩｇＧ４Ｆｃポリペプチド、ＩｇＡＦｃポリペプチド、またはＩｇＭＦｃポリペプチドである。一部の場合では、ＩｇＦｃポリペプチドは、図４Ａ〜４Ｃに示されるアミノ酸配列と少なくとも８５％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、第１のポリペプチド及び第２のポリペプチドは、非共有結合的に会合している。一部の場合では、第１のポリペプチド及び第２のポリペプチドは、共有結合している。一部の場合では、共有結合は、ジスルフィド結合を介する。一部の場合では、第１のＭＨＣポリペプチド、または、エピトープ及び第１のＭＨＣポリペプチドの間のリンカーは、第１のＣｙｓ残基を提供するためのアミノ酸置換を含み、第２のＭＨＣポリペプチドは、第２のＣｙｓ残基を提供するためのアミノ酸置換を含み、ジスルフィド結合は、第１のＣｙｓ残基及び第２のＣｙｓ残基の間にある。一部の場合では、多量体ポリペプチドは、エピトープ及び第１のＭＨＣポリペプチドの間に挿入された第１のリンカーを含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０免疫調節ポリペプチドは、アミノ酸Ｎ１９、Ｎ６３、Ｉ６７、Ｋ８６、Ｑ１５７、Ｄ１５８、Ｌ２５、Ｙ３１、Ｑ３３、Ｍ３８、Ｖ３９、Ｉ４９、Ｙ５３、Ｄ６０、Ｆ１０８、またはＳ１５６の置換を含む。一部の場合では、多量体ポリペプチドは、２つ以上の免疫調節ポリペプチドを含む。一部の場合では、多量体ポリペプチドは、３つの免疫調節ポリペプチドを含む。一部の場合では、２つ以上（例えば、３つ）の免疫調節ポリペプチドは、縦一列に並んでいる。一部の場合では、多量体ポリペプチドは、第３のポリペプチドを含み、第３のポリペプチ���は、第１のポリペプチドまたは第２のポリペプチドの免疫調節ポリペプチドと少なくとも９０％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む免疫調節ポリペプチドを含む。一部の場合では、第３のポリペプチドは、第１のポリペプチドに共有結合している。一部の場合では、第２のポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）第２のＭＨＣポリペプチド、ｉｉ）ＩｇＦｃポリペプチド、及び、ｉｉｉ）アフィニティータグを含む。
【０００６】
本開示は、組換えポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸を提供し、ｉ）組換えポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端への順序で、ａ）エピトープ、ｂ）第１の主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）ポリペプチド、ｃ）免疫調節ポリペプチド、ｄ）タンパク質分解的に切断可能なリンカーもしくはリボソームスキッピングシグナル、ｅ）第２のＭＨＣポリペプチド、及び、ｆ）免疫グロブリン（Ｉｇ）Ｆｃポリペプチド、を含み、免疫調節ポリペプチドは、上述したような、もしくは本明細書の他の箇所に記載したような変異体免疫調節ポリペプチドであり、または、ｉｉ）組換えポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端への順序で、ａ）エピトープ、ｂ）第１のＭＨＣポリペプチド、ｃ）タンパク質分解的に切断可能なリンカーもしくはリボソームスキッピングシグナル、ｄ）免疫調節ポリペプチド、ｅ）第２のＭＨＣポリペプチド、及び、ｆ）ＩｇＦｃポリペプチド、を含み、免疫調節ポリペプチドは、上述したような、もしくは本明細書の他の箇所に記載したような変異体免疫調節ポリペプチドである。一部の場合では、第１のＭＨＣポリペプチドは、β２ミクログロブリンポリペプチドであり、第２のＭＨＣポリペプチドは、ＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドである。一部の場合では、β２ミクログロブリンポリペプチドは、図６に示されるアミノ酸配列のうちの１つと少なくとも８５％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、ＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドは、ＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−Ｂ、またはＨＬＡ−Ｃ重鎖である。一部の場合では、ＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドは、図５Ａ〜５Ｃのうちの任意の１つに示されるアミノ酸配列と少なくとも８５％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、第１のＭＨＣポリペプチドは、ＭＨＣクラスＩＩα鎖ポリペプチドであり、第２のＭＨＣポリペプチドは、ＭＨＣクラスＩＩβ鎖ポリペプチドである。一部の場合では、エピトープは、Ｔ細胞エピトープである。一部の場合では、ＩｇＦｃポリペプチドは、ＩｇＧ１Ｆｃポリペプチド、ＩｇＧ２Ｆｃポリペプチド、ＩｇＧ３Ｆｃポリペプチド、ＩｇＧ４Ｆｃポリペプチド、ＩｇＡＦｃポリペプチド、またはＩｇＭＦｃポリペプチドである。一部の場合では、ＩｇＦｃポリペプチドは、図４Ａ〜４Ｃに示されるアミノ酸配列と少なくとも８５％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０免疫調節ポリペプチドは、アミノ酸Ｎ１９、Ｎ６３、Ｉ６７、Ｋ８６、Ｑ１５７、Ｄ１５８、Ｌ２５、Ｙ３１、Ｑ３３、Ｍ３８、Ｖ３９、Ｉ４９、Ｙ５３、Ｄ６０、Ｆ１０８、またはＳ１５６の置換を含む。一部の場合では、多量体ポリペプチドは、ＣＤ７、ＣＤ３０Ｌ、ＣＤ４０、ＣＤ７０、ＣＤ８３、ＨＬＡ−Ｇ、ＭＩＣＡ、ＭＩＣＢ、ＨＶＥＭ、リンホトキシンβ受容体、３／ＴＲ６、ＩＬＴ３、ＩＬＴ４、及びＨＶＥＭから選択される第２の免疫調節ポリペプチドを含む。一部の場合では、タンパク質分解的に切断可能なリンカーまたはリボソームスキッピングシグナルは、ａ）ＬＥＶＬＦＱＧＰ（配列番号７８）、ｂ）ＥＮＬＹＴＱＳ（配列番号７９）、ｃ）フリン切断部位、ｄ）ＬＶＰＲ（配列番号８０）、ｅ）ＧＳＧＡ��ＮＦＳＬＬＫＱＡＧＤＶＥＥＮＰＧＰ（配列番号８１）、ｆ）ＧＳＧＥＧＲＧＳＬＬＴＣＧＤＶＥＥＮＰＧＰ（配列番号８２）、ｇ）ＧＳＧＱＣＴＮＹＡＬＬＫＬＡＧＤＶＥＳＮＰＧＰ（配列番号８３）、及び、ｈ）ＧＳＧＶＫＱＴＬＮＦＤＬＬＫＬＡＧＤＶＥＳＮＰＧＰ（配列番号８４）から選択されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、組換えポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端への順序で、ａ）第１のリーダーペプチド、ｂ）エピトープ、ｃ）第１のＭＨＣポリペプチド、ｄ）免疫調節ポリペプチド、ｅ）タンパク質分解的に切断可能なリンカーまたはリボソームスキッピングシグナル、ｆ）第２のリーダーペプチド、ｇ）第２のＭＨＣポリペプチド、及び、ｈ）免疫グロブリン（Ｉｇ）Ｆｃポリペプチドを含む。一部の場合では、第１のリーダーペプチド及び第２のリーダーペプチドは、β２Ｍリーダーペプチドである。一部の場合では、ヌクレオチド配列は、転写制御エレメントに作動可能に連結されている。一部の場合では、転写制御エレメントは、真核細胞において機能的なプロモーターである。一部の場合では、第１のＭＨＣポリペプチド、または、エピトープ及び第１のＭＨＣポリペプチドの間のリンカーは、第１のＣｙｓ残基を提供するためのアミノ酸置換を含み、第２のＭＨＣポリペプチドは、第２のＣｙｓ残基を提供するためのアミノ酸置換を含み、第１のＣｙｓ残基及び第２のＣｙｓ残基は、ジスルフィド結合を、第１のＭＨＣポリペプチド及び第２のＭＨＣポリペプチドの間にもたらす。本開示は、上述したような、または本明細書の他の箇所に記載したようなの核酸を含む組換え発現ベクターを提供する。一部の場合では、ベクターは、ウイルスベクターまたは非ウイルスベクターである。本開示は、上述したような、または本明細書の他の箇所に記載したような組換え発現ベクターで遺伝子改変された宿主細胞を提供する。一部の場合では、宿主細胞は、インビトロである。一部の場合では、宿主細胞は、細胞が内因性ＭＨＣβ２ミクログロブリンポリペプチドを産生しないように遺伝子改変される。一部の場合では、宿主細胞は、Ｔリンパ球である。
【０００７】
本開示は、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）第１のＭＨＣポリペプチド、及び、ｉｉｉ）免疫調節ドメインが、上述したような、または本明細書の他の箇所に記載したような変異体免疫調節ポリペプチドである免疫調節ドメイン、を含む第１のポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む第１の核酸、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）第２のＭＨＣポリペプチド、及び、ｉｉ）ＩｇＦｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む第１の核酸、を含む組成物を提供する。一部の場合では、第１及び／または第２の核酸は、組換え発現ベクターに存在する。本開示は、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）第１のＭＨＣポリペプチド、を含む第１のポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む第１の核酸、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）免疫調節ドメインが、上述したような、または本明細書の他の箇所に記載したような変異体免疫調節ポリペプチドである免疫調節ドメイン、ｉｉ）第２のＭＨＣポリペプチド、及び、ｉｉｉ）ＩｇＦｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む第１の核酸、を含む組成物を提供する。一部の場合では、第１及び／または第２の核酸は、組換え発現ベクターに存在する。本開示は、上に、または本明細書の他の箇所に記載の核酸組成物で遺伝子改変された宿主細胞を提供する。
【０００８】
本開示は、上述したような、または本明細書の他の箇所に記載したような多量体ポリペプチドを産生する方法を提供し、方法は、ａ）宿主細胞が多量体ポリペプチドを合成するような条件下で、培地中、インビトロで、上述したように、または本明細書の他の箇所に記載されるように、遺伝子改変された宿主細胞を培養すること、ならびに、ｂ）多量体ポリペプチドを、宿主細胞及び／または培地から単離すること、を含む。一部の場合では、第２のポリペプチドは、親和性タグを含み、該単離することは、細胞により産生された多量体ポリペプチドを、親和性タグに対する結合パートナーと接触させることを含み、結合パートナーを固定し、それにより、多量体ポリペプチドを固定化する。一部の場合では、方法は、固定化された多量体ポリペプチドを溶出させることを含む。
【０００９】
本開示は、エピトープ特異的Ｔ細胞の活性を選択的に調節する方法を提供し、方法は、Ｔ細胞を、上述したような、または本明細書の他の箇所に記載したような多量体ポリペプチドと接触させることを含み、該接触させることは、エピトープ特異的Ｔ細胞の活性を選択的に調節する。一部の場合では、免疫調節ポリペプチドは、活性化ポリペプチドであり、多量体ポリペプチドは、エピトープ特異的Ｔ細胞を活性化する。一部の場合では、免疫調節ポリペプチドは、阻害性ポリペプチドであり、多量体ポリペプチドは、エピトープ特異的Ｔ細胞を阻害する。一部の場合では、接触は、インビトロで行われる。一部の場合では、接触は、インビボで行われる。
【００１０】
本開示は、個体のエピトープ特異的Ｔ細胞の活性を選択的に調節する方法を提供し、方法は、個体のエピトープ特異的Ｔ細胞の活性を選択的に調節するために有効である、上述したような、または本明細書の他の箇所に記載したような多量体ポリペプチドを有効量、個体に投与することを含む。一部の場合では、免疫調節ポリペプチドは、活性化ポリペプチドであり、多量体ポリペプチドは、エピトープ特異的Ｔ細胞を活性化する。一部の場合では、エピトープは、がん関連エピトープであり、該投与することは、がん関連エピトープに特異的なＴ細胞の活性を選択的に増加させる。一部の場合では、免疫調節ポリペプチドは、阻害性ポリペプチドであり、多量体ポリペプチドは、エピトープ特異的Ｔ細胞の活性を阻害する。一部の場合では、エピトープは、自己エピトープであり、該投与することは、自己エピトープに特異的なＴ細胞の活性を選択的に阻害する。
【００１１】
本開示は、個体の感染症を処置する方法を提供し、方法は、有効量のａ）上述したような、もしくは本明細書の他の箇所に記載したような多量体ポリペプチド、またはｂ）上述したような、もしくは本明細書の他の箇所に記載したような多量体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む１つ以上の組換え発現ベクター、またはｃ）上述したような、もしくは本明細書の他の箇所に記載したような多量体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む１つ以上のｍＲＮＡ、を個体に投与することを含み、エピトープは、病原体関連エピトープであり、免疫調節ポリペプチドは、活性化ポリペプチドであり、該投与することは、個体の病原体関連エピトープ特異的Ｔ細胞の活性を選択的に調節するために有効である。一部の場合では、病原体は、ウイルス、細菌、または原生動物である。一部の場合では、該投与することは、皮下である。一部の場合では、該投与することは、静脈内ある。一部の場合では、該投与することは、筋肉内である。一部の場合では、該投与することは、全身性である。一部の場合では、該投与することは、処置部位の遠位である。一部の場合では、該投与することは、局所的である。一部の場合では、該投与することは、処置部位またはその付近である。
【００１２】
本開示は、ａ）上述したような、または本明細書の他の箇所に記載したような多量体ポリペプチド、及び、ｂ）薬学的に許容される賦形剤、を含む組成物を提供する。
【００１３】
本開示は、ａ）上述したような、もしくは本明細書の他の箇所に記載したような核酸、または、上述したような、もしくは本明細書の他の箇所に記載したような組換え発現ベクター、及び、ｂ）薬学的に許容される賦形剤、を含む組成物を提供する。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】Ａ−Ｄは、本開示のＴ細胞調節多量体ポリペプチドの種々の実施形態を概略的に示す。これらの実施形態では、ジスルフィド結合は、別々のポリペプチドに存在するＭＨＣ（例えば、ＨＬＡ）ポリペプチド間で形成される。
【図２−１】ＣＤ８０のアミノ酸配列を示す。
【図２−２】種々の変異体ＣＤ８０ポリペプチドの例（Ｂ，Ｃ）を示す。
【図２−３】種々の変異体ＣＤ８０ポリペプチドの例（Ｄ，Ｅ）を示す。
【図２−４】種々の変異体ＣＤ８０ポリペプチドの例（Ｆ，Ｇ）を示す。
【図２−５】種々の変異体ＣＤ８０ポリペプチドの例（Ｈ，Ｉ）を示す。
【図２−６】種々の変異体ＣＤ８０ポリペプチドの例（Ｊ，Ｋ）を示す。
【図２−７】種々の変異体ＣＤ８０ポリペプチドの例（Ｌ，Ｍ）を示す。
【図２−８】種々の変異体ＣＤ８０ポリペプチドの例（Ｎ，Ｏ）を示す。
【図２−９】種々の変異体ＣＤ８０ポリペプチドの例（Ｐ，Ｑ）を示す。
【図２−１０】種々の変異体ＣＤ８０ポリペプチドの例（Ｒ，Ｓ）を示す。
【図２−１１】種々の変異体ＣＤ８０ポリペプチドの例（Ｔ，Ｕ）を示す。
【図２−１２】種々の変異体ＣＤ８０ポリペプチドの例（Ｖ，Ｗ）を示す。
【図２−１３】種々の変異体ＣＤ８０ポリペプチドの例（Ｘ，Ｙ）を示す。
【図２−１４】種々の変異体ＣＤ８０ポリペプチドの例（Ｚ，ＡＡ）を示す。
【図２−１５】種々の変異体ＣＤ８０ポリペプチドの例（ＢＢ，ＣＣ）を示す。
【図２−１６】種々の変異体ＣＤ８０ポリペプチドの例（ＤＤ，ＥＥ）を示す。
【図２−１７】種々の変異体ＣＤ８０ポリペプチドの例（ＦＦ，ＧＧ）を示す。
【図２−１８】種々の変異体ＣＤ８０ポリペプチドの例（ＨＨ，ＩＩ）を示す。
【図３−１】ＣＤ２８のアミノ酸配列（Ａ〜Ｃ）を示す。
【図３−２】ＣＴＬＡ４のアミノ酸配列（Ｄ）を示す。
【図４−１】免疫グロブリンＦｃポリペプチドのアミノ酸配列（Ａ）を示す。
【図４−２】免疫グロブリンＦｃポリペプチドのアミノ酸配列（Ｂ）を示す。
【図４−３】免疫グロブリンＦｃポリペプチドのアミノ酸配列（Ｃ）を示す。
【図５−１】ヒト白血球抗原（ＨＬＡ）クラスＩ重鎖ポリペプチドのアミノ酸配列（Ａ，Ｂ）を示す。シグナル配列は、下線が引かれている。
【図５−２】ヒト白血球抗原（ＨＬＡ）クラスＩ重鎖ポリペプチドのアミノ酸配列（Ｃ）を示す。シグナル配列は、下線が引かれている。
【図６】Ｈｏｍｏ  ｓａｐｉｅｎｓ（ＮＰ＿００４０３９．１；配列番号５２）、Ｐａｎ  ｔｒｏｇｌｏｄｙｔｅｓ（ＮＰ＿００１００９０６６．１；配列番号５３）、Ｍａｃａｃａ  ｍｕｌａｔｔａ（ＮＰ＿００１０４０６０２．１；配列番号５４）、Ｂｏｓ  Ｔａｕｒｕｓ（ＮＰ＿７７６３１８．１；配列番号５５）、及びＭｕｓ  ｍｕｓｃｕｌｕｓ（ＮＰ＿０３３８６５．２；配列番号５６）由来のβ２ミクログロブリン（β２Ｍ）前駆体（すなわち、リーダー配列を含む）の複数のアミノ酸配列アラインメントを提供する。アミノ酸１〜２０は、シグナルペプチドである。
【図７】ＰＤ−Ｌ１ポリペプチドのアミノ酸配列（Ａ，Ｂ）を示す。
【図８】４−１ＢＢＬポリペプチドのアミノ酸配列を示す。
【図９】ＩＣＯＳ−Ｌポリペプチドのアミノ酸配列を示す。
【図１０】ＯＸ４０Ｌポリペプチドのアミノ酸配列を示す。
【図１１】ＰＤ−Ｌ２ポリペプチドのアミノ酸配列を示す。
【図１２】ＣＤ８６（Ｂ７−２）ポリペプチドのアミノ酸配列を示す。
【図１３】Ｆａｓリガンド（ＦＡＳ−Ｌ）ポリペプチドのアミノ酸配列を示す。
【図１４】本開示の一実施形態によるｓｙｎＴａｃポリペプチドと接触させた標的細胞によるインターフェロン−γ（ＩＦＮ−γ）分泌を示す。
【図１５】本開示の一実施形態によるｓｙｎＴａｃポリペプチドと接触させた標的細胞によるインターロイキン−２（ＩＬ−２）分泌を示す。
【図１６】本開示の一実施形態によるｓｙｎＴａｃポリペプチドと接触させた標的細胞によるインターロイキン−６（ＩＬ−６）分泌を示す。
【図１７】本開示の一実施形態によるｓｙｎＴａｃポリペプチドと接触させた標的細胞による腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）分泌を示す。
【図１８】本開示の一実施形態によるｓｙｎＴａｃポリペプチドと接触させた標的細胞の増殖を示す。
【図１９】本開示の一実施形態によるｓｙｎＴａｃポリペプチドと接触させた標的細胞の生存率を示す。
【図２０】本開示のｓｙｎＴａｃポリペプチドの腫瘍体積へのインビボ効果を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
本明細書では互換可能に使用される「ポリヌクレオチド」及び「核酸」という用語は、任意の長さのヌクレオチドのポリマー形態であるリボヌクレオチドまたはデオキシリボヌクレオチドのいずれかを指す。従って、この用語は、一本鎖、二本鎖、または多本鎖のＤＮＡまたはＲＮＡ、ゲノムＤＮＡ、ｃＤＮＡ、ＤＮＡ−ＲＮＡハイブリッド、あるいは、プリン及びピリミジン塩基、または他の天然の、化学的にもしくは生化学的に修飾された、非天然の、もしくは誘導体化されたヌクレオチド塩基、を含むポリマー、を含むが、これらに限定されない。
【００１６】
「ペプチド」、「ポリペプチド」、及び「タンパク質」という用語は、本明細書では互換可能に使用され、任意の長さのアミノ酸のポリマー形態を指し、これは、コードされたアミノ及びコードされていないアミノ酸、化学的もしくは生化学的に修飾された、または誘導体化されたアミノ酸、ならびに修飾ペプチド骨格を有するポリペプチドを含むことができる。
【００１７】
ポリヌクレオチドまたはポリペプチドは、別のポリヌクレオチドまたはポリペプチドと、特定のパーセントの「配列同一性」を有し、これは、アラインされた時、塩基またはアミノ酸の割合が、同じであり、かつ２つの配列を比較した時、同じ相対位置であることを意味する。配列同一性は、多数の異なる手段で決定することができる。配列同一性を決定するために、配列は、ワールドワイドウェブ上、ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｌｉ．ｇｏｖ／ＢＬＡＳＴ、ｅｂｉ．ａｃ．ｕｋ／Ｔｏｏｌｓ／ｍｓａ／ｔｃｏｆｆｅｅ／、ｅｂｉ．ａｃ．ｕｋ／Ｔｏｏｌｓ／ｍｓａ／ｍｕｓｃｌｅ／、ｍａｆｆｔ．ｃｂｒｃ．ｊｐ／ａｌｉｇｎｍｅｎｔ／ｓｏｆｔｗａｒｅ／を含むサイトで入手可能な種々の便利な方法及びコンピュータプログラム（例えば、ＢＬＡＳＴ、Ｔ−ＣＯＦＦＥＥ、ＭＵＳＣＬＥ、ＭＡＦＦＴなど）を使用してアラインすることができる。例えば、Ａｌｔｓｃｈｕｌ  ｅｔ  ａｌ．（１９９０），Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｉ．２１５：４０３−１０を参照のこと。
【００１８】
「保存的アミノ酸置換」という用語は、類似の側鎖を有するアミノ酸残基のタンパク質における互換性を指す。例えば、脂肪族側鎖を有するアミノ酸の群は、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、及びイソロイシンからなり、脂肪族−ヒドロキシル側鎖を有するアミノ酸の群は、セリン及びスレオニンからなり、アミド含有側鎖を有するアミノ酸の群は、アスパラギン及びグルタミンからなり、芳香族側鎖を有するアミノ酸の群は、フェニルアラニン、チロシン、及びトリプトファンからなり、塩基性側鎖を有するアミノ酸の群は、リシン、アルギニン、及びヒスチジンからなり、酸性側鎖を有するアミノ酸の群は、グルタメート及びアスパルテートからなり、硫黄含有側鎖を有するアミノ酸の群は、システイン及びメチオニンからなる。例示的な保存的アミノ酸置換基は、バリン−ロイシン−イソロイシン、フェニルアラニン−チロシン、リシン−アルギニン、アラニン−バリン−グリシン、及びアスパラギン−グルタミンである。
【００１９】
本明細書で（例えば、本開示のＴ細胞調節多量体ポリペプチドの、Ｔ細胞上のポリペプチド（例えば、Ｔ細胞受容体）との結合に関連して）使用される「結合」は、間の非共有結合性の相互作用を指す。結合相互作用は一般に、１０Ｍ-6未満、１０Ｍ-7未満、１０Ｍ-8未満、１０-9Ｍ未満、１０-10 Ｍ未満、１０Ｍ-11 未満、１０Ｍ-12 未満、１０Ｍ-13 未満、１０-14 Ｍ未満、または１０-15 Ｍ未満の解離定数（ＫＤ）を特徴とする。「親和性」は、結合の強さを指し、結合親和性の増加は、より低いＫＤと相関する。
【００２０】
本明細書で使用される「免疫学的シナプス」または「免疫シナプス」という用語は一般に、例えば、抗原提示細胞（ＡＰＣ）または標的細胞及びエフェクター細胞、例えば、リンパ球、エフェクターＴ細胞、ナチュラルキラー細胞などの間の天然のインターフェースを含む、適応免疫応答の相互作用する２つの免疫細胞間の天然のインターフェースを指す。ＡＰＣ及びＴ細胞の間の免疫学的シナプスは一般に、例えば、Ｂｒｏｍｌｅｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｎｕ  Ｒｅｖ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．２００１；１９：３７５−９６に記載されるように、Ｔ細胞抗原受容体及び主要組織適合遺伝子複合体分子の相互作用により開始され、この開示は、全体として参照により本明細書に組み込まれる。
【００２１】
「Ｔ細胞」は、Ｔヘルパー細胞（ＣＤ４+ 細胞）、細胞傷害性Ｔ細胞（ＣＤ８+ 細胞）Ｔ制御細胞（Ｔｒｅｇ）、及びＮＫ−Ｔ細胞を含む、ＣＤ３を発現する全ての種類の免疫細胞を含む。
【００２２】
「共刺激ポリペプチド」は、用語が本明細書で使用される時、抗原提示細胞（ＡＰＣ）（例えば、樹状細胞、Ｂ細胞など）上のポリペプチドを含み、これは、Ｔ細胞上の同種の共刺激ポリペプチドに特異的に結合して、それにより、例えば、ペプチドが搭載されたＴＣＲ／ＣＤ３複合体の主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）ポリペプチドとの結合により提供される１次シグナルに加えて、限定されないが、増殖、活性化、分化などを含むＴ細胞応答を媒介するシグナルを提供する。共刺激リガンドは、ＣＤ７、Ｂ７−１（ＣＤ８０）、Ｂ７−２（ＣＤ８６）、ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２、４−１ＢＢＬ、ＯＸ４０Ｌ、Ｆａｓリガンド（ＦａｓＬ）、誘導性共刺激リガンド（ＩＣＯＳ−Ｌ）、細胞間接着分子（ＩＣＡＭ）、ＣＤ３０Ｌ、ＣＤ４０、ＣＤ７０、ＣＤ８３、ＨＬＡ−Ｇ、ＭＩＣＡ、ＭＩＣＢ、ＨＶＥＭ、リンホトキシンβ受容体、３／ＴＲ６、ＩＬＴ３、ＩＬＴ４、ＨＶＥＭ、Ｔｏｌｌ様受容体に結合するアゴニストまたは抗体、及びＢ７−Ｈ３と特異的に結合するリガンドを含むことができるが、これらに限定されない。共刺激リガンドは、とりわけ、限定されないが、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４−１ＢＢ、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＰＤ−１、ＩＣＯＳ、リンパ球機能関連抗原−１（ＬＦＡ−１）、ＣＤ２、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７−Ｈ３、及びＣＤ８３に特異的に結合するリガンドなどのＴ細胞上に存在する共刺激分子と特異的に結合する抗体も包含する。
【００２３】
本開示のＴ細胞調節多量体ポリペプチドの「調節ドメイン」は、共刺激ポリペプチドを含む。
【００２４】
本明細書で使用される「異種」は、天然の核酸またはタンパク質にそれぞれ見出されないヌクレオチドまたはポリペプチドを意味する。
【００２５】
本明細書で使用される「組換え」は、特定の核酸（ＤＮＡまたはＲＮＡ）が、天然系に見出される内因性核酸と区別可能な構造的コードまたは非コード配列を有する構築物をもたらすクローニング、制限、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）、及び／またはライゲーションステップの種々の組み合わせの結果であることを意味する。ポリペプチドをコードするＤＮＡ配列は、細胞または無細胞転写及び翻訳系に含有される組換え転写ユニットから発現されることが可能な合成核酸を得るために、ｃＤＮＡフラグメントまたは一連の合成オリゴヌクレオチドから組み立てることができる。
【００２６】
「組換え発現ベクター」または「ＤＮＡ構築物」という用語は、ベクター及び１つのインサートを含むＤＮＡ分子を指すために、本明細書では互換可能に使用される組換え発現ベクターは通常、インサート（複数可）を発現及び／もしくは増殖させるために、または他の組換えヌクレオチド配列の構築のために、生成される。インサート（複数可）は、プロモーター配列に作動可能に連結されていても連結されていなくてもよく、ＤＮＡ制御配列に作動可能に連結されていても連結されていなくてもよい。
【００２７】
細胞は、外来ＤＮＡ、例えば、組換え発現ベクターが細胞内に導入されている時に、このようなＤＮＡで、「遺伝子改変」または「形質転換」または「トランスフェクト」されている。外来ＤＮＡの存在は、永続的または一時的な遺伝的変化をもたらす。形質転換ＤＮＡは、細胞のゲノムに組み込まれ（共有結合され）ても、組み込まれ（共有結合され）なくてもよい。原核生物、酵母、及び哺乳動物細胞では、例えば、形質転換ＤＮＡは、プラスミドなどのエピソームエレメント上に維持されてもよい。真核細胞については、安定的に形質転換された細胞は、染色体が染色体複製により娘細胞に遺伝するように、形質転換ＤＮＡが染色体に組み込まれるようになっているものである。
【００２８】
本明細書で使用される「宿主細胞」は、インビボもしくはインビトロの真核細胞、または単細胞エンティティとして培養された多細胞生体（例えば、細胞株）由来の細胞を表し、これらの真核細胞は、核酸のレシピエント（例えば、本開示の多量体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む発現ベクター）として使用することができ、または使用されており、核酸により遺伝子改変されている元の細胞の子孫を含む。単細胞の子孫は、天然の、偶発的な、または意図的な変異のために、モルホロジー、またはゲノムもしくは全ＤＮＡ補体において、元の親と必ずしも完全に同一でないことがあると理解される。「組換え宿主細胞」（「遺伝子改変宿主細胞」とも称される）は、異種核酸、例えば、発現ベクター、が導入されている宿主細胞である。例えば、遺伝子改変真核生物宿主細胞は、異種核酸、例えば、真核生物宿主細胞に対して外来性の外来核酸、または通常真核宿主細胞に見られない組換え核酸を、好適な真核生物宿主細胞に導入することにより、遺伝子改変される。
【００２９】
「処置」、「処置する」などの用語は、本明細書では、一般に、所望の薬理学的及び／または生理学的効果を得ることを意味するために使用される。効果は、疾患もしくはその症状を完全にもしくは部分的に予防するという点で予防的であってよく、かつ／または疾患及び／もしくは疾患に起因する悪影響の部分的もしくは完全な治癒という点で治療的であってよい。本明細書で使用される「処置」は、哺乳動物における疾患または症状の任意の治癒を包含し、（ａ）疾患または症状を発症する体質であり得るが、それを有すると未だ診断されていない対象に、疾患または症状が生じることを予防すること、（ｂ）疾患または症状を阻害すること、すなわち、その発症を阻止すること、または（ｃ）疾患を緩和させること、すなわち、疾患の退行を引き起こすこと、を含む。治療薬は、疾患または損傷の発症前、発症中、または発症後に投与されてもよい。特に注目すべきは、進行中の疾患の処置であって、患者の望ましくない臨床症状を安定化または低減させる処置である。このような処置は、望ましくは、罹患した組織における機能が完全に消失する前に、実施される。主題の治療法は、望ましくは、疾患の症状出現期中に、一部の場合では、疾患の症状出現期の後に、投与されることになる。
【００３０】
「個体」、「対象」、「宿主」、及び「患者」という用語は、本明細書では互換可能に使用され、診断、処置、または治療法が所望される任意の哺乳動物対象を指す。哺乳動物は、例えば、ヒト、非ヒト霊長類、齧歯動物（例えば、ラット；マウス）、ウサギ目（例えば、ウサギ）、有蹄動物（例えば、ウシ、ヒツジ、ブタ、ウマ、ヤギなど）などを含む。
【００３１】
本発明をさらに説明する前に、本発明は記載された特定の実施形態に限定されず、そのようなものであるから、当然変化し得ることを理解すべきである。本明細書で使用される用語は、特定の実施形態のみを説明するためのものであり、本発明の範囲が添付の特許請求の範囲によってのみ限定されるので、限定することを意図するものではないことも理解すべきである。
【００３２】
値の範囲が提示される場合、その範囲の上限及び下限の間の、文脈に別途明示のない限り下限の単位の１０分の１までの各介在値（ｉｎｔｅｒｖｅｎｉｎｇ  ｖａｌｕｅ）、ならびに他の任意の記載値またはその記載された範囲内の介在値が、本発明に包含されると理解される。これらのより小さい範囲の上限及び下限は独立して、より小さい範囲に含まれていてもよく、さらに、記載された範囲内に任意の具体的に除外された限界を条件として、本発明に包含されてもよい。記載された範囲が境界の一方または双方を含む場合、それらの含まれる境界のいずれかまたは双方を除く範囲も本発明に含まれる。
【００３３】
別途定義しない限り、本明細書で使用される全ての技術用語及び科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者により一般に理解されるのと同じ意味を有する。本明細書に記載のものと類似または等価な任意の方法及び材料が、本発明の実施または試験において使用することもできるが、好ましい方法及び材料は、ここで説明される。本明細書で言及される全ての刊行物は、刊行物が引用される関連において、方法及び／または材料を開示及び記載するために、参照により本明細書に組み込まれる。
【００３４】
本明細書及び添付の特許請求の範囲で使用されるように、単数形「ａ」、「ａｎ」、及び「ｔｈｅ」は、文脈に別途明示のない限り、複数の指示対象を含むことに留意しなければならない。従って、例えば、「調節ドメイン」への言及は、複数のこのような調節ドメインを含み、「ＨＬＡポリペプチド」への言及は、当業者らに既知の１つ以上のＨＬＡポリペプチド及びその均等物などへの言及を含む。特許請求の範囲が、あらゆる任意の要素を排除するように作成され得ることが、さらに留意される。従って、この記述は、特許請求の範囲の要素の列挙または「否定的」限定の使用に関連して、「だけ」、「のみ」などのような排他的な用語を使用するための前提として役立つことが意図される。
【００３５】
明確にするために、別々の実施形態の文脈で説明される本発明の特定の特徴はまた、単一の実施形態において、組み合わせて提示され得ると理解される。逆に、簡潔にするために、単一の実施形態の文脈で説明される本発明の種々の特徴は、別々にまたは任意の好適な副組み合わせ（ｓｕｂ−ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ）でも提供されてもよい。本発明に関する実施形態の全ての組み合わせは、具体的には、本発明により包含され、いずれの組み合わせも、まるで個別に明示的に開示されるかのように、本明細書に開示される。加えて、種々の実施形態及びそれらの要素の全ての副組み合わせはまた、本発明により具体的に包含され、いずれのサブコンビネーションも、まるで個別に明示的に開示されるかのように、本明細書に開示される。
【００３６】
本明細書で検討される刊行物は、本出願の出願日前の、それらの開示のためだけに提示される。本明細書のいかなるものも、本発明が、先行発明により、このような刊行物に先行する権利を有さないことを認めるものとして解釈されるべきでない。さらに、提示された公開日は、実際に公開された日付とは異なることがあり、これはそれぞれに確認する必要があり得る。
【００３７】
本開示は、変異体免疫調節ポリペプチド、及び変異体免疫調節ペプチドを含む融合ポリペプチドを提供する。本開示は、Ｔ細胞調節多量体ポリペプチド、及びＴ細胞調節多量体ポリペプチドを含む組成物を提供し、Ｔ細胞調節多量体ポリペプチドは、本開示の変異体免疫調節ポリペプチドを含む。本開示は、Ｔ細胞調節多量体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸、及び核酸を含む宿主細胞を提供する。本開示は、Ｔ細胞の活性を調節する方法を提供し、方法は、Ｔ細胞を本開示のＴ細胞調節多量体ポリペプチドと接触させることを含む。
【００３８】
本開示のＴ細胞調節多量体ポリペプチドは、「ｓｙｎＴａｃポリペプチド」とも称される。本開示のｓｙｎＴａｃポリペプチドは、変異体調節ドメインを含み、変異体調節ドメインは、野生型調節ドメインの免疫調節ポリペプチドに対する親和性と比較して、免疫調節ポリペプチドへの結合親和性の低減を示す。本開示のｓｙｎＴａｃポリペプチドは、標的Ｔ細胞の活性を調節することができる。本開示のｓｙｎＴａｃポリペプチドは、増強された標的細胞特異性を提供する。
【００３９】
変異体免疫調節ポリペプチド
本開示は、変異体ＣＤ８０調節ポリペプチドを提供する。ヒトＣＤ８０の野生型アミノ酸配列は、図２Ａに提示される。ヒトＣＤ８０の細胞外ドメインは、図２Ａに示されるアミノ酸配列のアミノ酸１〜２０８を含む。従って、ヒトＣＤ８０の細胞外ドメインの野生型アミノ酸配列は、以下の通りである可能性がある。
ＶＩＨＶＴＫ  ＥＶＫＥＶＡＴＬＳＣ  ＧＨＮＶＳＶＥＥＬＡ  ＱＴＲＩＹＷＱＫＥＫ  ＫＭＶＬＴＭＭＳＧＤ  ＭＮＩＷＰＥＹＫＮＲ  ＴＩＦＤＩＴＮＮＬＳ  ＩＶＩＬＡＬＲＰＳＤ  ＥＧＴＹＥＣＶＶＬＫ  ＹＥＫＤＡＦＫＲＥＨ  ＬＡＥＶＴＬＳＶＫＡ  ＤＦＰＴＰＳＩＳＤＦ  ＥＩＰＴＳＮＩＲＲＩ  ＩＣＳＴＳＧＧＦＰＥ  ＰＨＬＳＷＬＥＮＧＥ  ＥＬＮＡＩＮＴＴＶＳ  ＱＤＰＥＴＥＬＹＡＶ  ＳＳＫＬＤＦＮＭＴＴ  ＮＨＳＦＭＣＬＩＫＹ  ＧＨＬＲＶＮＱＴＦＮ  ＷＮＴＴＫＱＥＨＦＰ  ＤＮ（配列番号１）
【００４０】
野生型ＣＤ８０は、ＣＤ２８及びＣＴＬＡ４に結合する。ＣＤ２８のアミノ酸配列は、図３Ａ〜図３Ｃに提示される。ＣＴＬＡ４のアミノ酸配列は、図３Ｄに提示される。本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、野生型ＣＤ８０のＣＤ２８またはＣＴＬＡ４との結合と比較して低減した親和性で、ＣＤ８０及び／またはＣＴＬＡ４に結合する。
【００４１】
一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ａに示されるアミノ酸配列を含むＣＤ８０ポリペプチドのＣＤ２８に対する結合親和性と比較して、ＣＤ２８への結合親和性の低減を示す。例えば、一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ａに示されるアミノ酸配列を含むＣＤ８０ポリペプチドの、図３Ａ〜３Ｃのうちの１つに示されるアミノ酸配列を含むＣＤ２８ポリペプチドに対する結合親和性よりも小さい結合親和性で、ＣＤ２８に結合する。例えば、一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ａに示されるアミノ酸配列を含むＣＤ８０ポリペプチドの、ＣＤ２８（例えば、図３Ａ〜３Ｃのうちの１つに示されるアミノ酸配列を含むＣＤ２８ポリペプチド）に対する結合親和性よりも、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％低い、少なくとも５５％低い、少なくとも６０％低い、少なくとも６５％低い、少なくとも７０％低い、少なくとも７５％低い、少なくとも８０％低い、少なくとも８５％低い、少なくとも９０％低い、少なくとも９５％低い、または９５％を超えて低い結合親和性で、ＣＤ２８に結合する。
【００４２】
一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、配列番号１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤ８０ポリペプチドのＣＤ２８に対する結合親和性と比較して、ＣＤ２８への結合親和性の低減を示す。例えば、一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、配列番号１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤ８０ポリペプチドの、図３Ａ〜３Ｃのうちの１つに示されるアミノ酸配列を含むＣＤ２８ポリペプチドに対する結合親和性よりも小さい結合親和性で、ＣＤ２８に結合する。例えば、一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、配列番号１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤ８０ポリペプチドの、ＣＤ２８（例えば、図３Ａ〜３Ｃのうちの１つに示されるアミノ酸配列を含むＣＤ２８ポリペプチド）に対する結合親和性よりも、少なくとも１０％低い、少なくとも１５％低い、少なくとも２０％低い、少なくとも２５％、少なくとも３０％低い、少なくとも３５％低い、少なくとも４０％低い、少なくとも４５％低い、少なくとも５０％低い、少なくとも５５％低い、少なくとも６０％低い、少なくとも６５％低い、少なくとも７０％低い、少なくとも７５％低い、少なくとも８０％低い、少なくとも８５％低い、少なくとも９０％低い、少なくとも９５％低い、または９５％を超えて低い結合親和性で、ＣＤ２８に結合する。
【００４３】
一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、１００ｎＭ〜１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。別の例として、一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８（例えば、図３Ａ〜３Ｃのうちの１つに示されるアミノ酸配列を含むＣＤ２８ポリペプチド）に対する結合親和性を有する。
【００４４】
一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ａに示されるアミノ酸配列を含むＣＤ８０ポリペプチドの結合親和性と比較して、ＣＴＬＡ４への結合親和性の低減を示す。例えば、一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ａに示されるアミノ酸配列を含むＣＤ８０ポリペプチドの、図３Ｄに示されるアミノ酸配列を含むＣＴＬＡ４ポリペプチドに対する結合親和性よりも小さい結合親和性で、ＣＴＬＡ４に結合する。例えば、一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ａに示されるアミノ酸配列を含むＣＤ８０ポリペプチドの、ＣＴＬＡ４（例えば、図３Ｄに示されるアミノ酸配列を含むＣＤ２８ポリペプチド）に対する結合親和性よりも、少なくとも１０％低い、少なくとも１５％低い、少なくとも２０％低い、少なくとも２５％、少なくとも３０％低い、少なくとも３５％低い、少なくとも４０％低い、少なくとも４５％低い、少なくとも５０％低い、少なくとも５５％低い、少なくとも６０％低い、少なくとも６５％低い、少なくとも７０％低い、少なくとも７５％低い、少なくとも８０％低い、少なくとも８５％低い、少なくとも９０％低い、少なくとも９５％低い、または９５％を超えて低い結合親和性で、ＣＴＬＡ４に結合する。
【００４５】
本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、野生型ＣＤ８０ポリペプチド（例えば、図２Ａに示されるか、または配列番号１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤ８０ポリペプチド）に対して、単一のアミノ酸置換を有することができる。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、野生型ＣＤ８０ポリペプチド（例えば、図２Ａに示されるか、または配列番号１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤ８０ポリペプチド）に対して、２〜１０のアミノ酸置換を有する。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、野生型ＣＤ８０ポリペプチド（例えば、図２Ａに示されるか、または配列番号１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤ８０ポリペプチド）に対して、２つのアミノ酸置換を有する。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、野生型ＣＤ８０ポリペプチド（例えば、図２Ａに示されるか、または配列番号１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤ８０ポリペプチド）に対して、３つのアミノ酸置換を有する。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、野生型ＣＤ８０ポリペプチド（例えば、図２Ａに示されるか、または配列番号１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤ８０ポリペプチド）に対して、４つのアミノ酸置換を有する。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、野生型ＣＤ８０ポリペプチド（例えば、図２Ａに示されるか、または配列番号１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤ８０ポリペプチド）に対して、５つのアミノ酸置換を有する。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、野生型ＣＤ８０ポリペプチド（例えば、図２Ａに示されるか、または配列番号１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤ８０ポリペプチド）に対して、６つのアミノ酸置換を有する。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、野生型ＣＤ８０ポリペプチド（例えば、図２Ａに示されるか、または配列番号１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤ８０ポリペプチド）に対して、７つのアミノ酸置換を有する。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、野生型ＣＤ８０ポリペプチド（例えば、図２Ａに示されるか、または配列番号１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤ８０ポリペプチド）に対して、８つのアミノ酸置換を有する。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、野生型ＣＤ８０ポリペプチド（例えば、図２Ａに示されるか、または配列番号１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤ８０ポリペプチド）に対して、９つのアミノ酸置換を有する。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、野生型ＣＤ８０ポリペプチド（例えば、図２Ａに示されるか、または配列番号１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤ８０ポリペプチド）に対して、１０のアミノ酸置換を有する。
【００４６】
一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、野生型ＣＤ８０ポリペプチド（例えば、図２Ａに示されるか、または配列番号１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤ８０ポリペプチド）に対して、１１〜５０のアミノ酸置換を有する。例えば、一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、野生型ＣＤ８０ポリペプチド（例えば、図２Ａに示されるか、または配列番号１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤ８０ポリペプチド）に対して、１１〜１５、１５〜２０、２０〜２５、２５〜３０、３０〜３５、３５〜４０、４０〜４５、または４５〜５０のアミノ酸置換を有する。
【００４７】
本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、１５０〜２５４アミノ酸の長さを有することができる。例えば、一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、１５０アミノ酸〜１７５アミノ酸、１７５アミノ酸〜２００アミノ酸、２００アミノ酸〜２２５アミノ酸、または２２５アミノ酸〜２５４アミノ酸の長さを有する。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、２００アミノ酸〜２２５アミノ酸の長さを有する。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、２００アミノ酸〜２１０アミノ酸の長さを有する。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、２０５アミノ酸〜２１０アミノ酸の長さを有する。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、２０８アミノ酸の長さを有する。
【００４８】
Ｎ１９置換
一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｂに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１９は、アスパラギン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１９は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｂに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１９は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｂに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１９は、Ａｌａである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｂに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１９は、Ｇｌｙである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｂに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１９は、Ｖａｌである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｂに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１９は、Ｌｅｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｂに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１９は、Ｉｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【００４９】
一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｎ１９にアミノ酸置換を有する、図２Ａに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｎ１９にアミノ酸置換を有する、配列番号１に示されるアミノ酸配列を含む。例えば、一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｂに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、アスパラギン以外の任意のアミノ酸であり、例えば、「ｘ」は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕとすることができる）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｂに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｂに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｂに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｖａｌである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｂに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｌｅｕである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｂに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｇｌｙである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｂに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｉｌｅである）を含む。例えば、一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｃに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【００５０】
Ｎ６３置換
一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｄに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸６３は、アスパラギン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸６３は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｄに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸６３は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｄに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸６３は、Ａｌａである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｄに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸６３は、Ｇｌｙである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｄに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸６３は、Ｖａｌである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｄに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸６３は、Ｌｅｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｄに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸６３は、Ｉｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【００５１】
一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｎ６３にアミノ酸置換を有する、図２Ａに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｎ６３にアミノ酸置換を有する、配列番号１に示されるアミノ酸配列を含む。例えば、一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｄに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、アスパラギン以外の任意のアミノ酸であり、例えば、「ｘ」は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕとすることができる）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｄに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｄに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｄに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｖａｌである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｄに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｌｅｕである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｄに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｇｌｙである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｄに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｉｌｅである）を含む。例えば、一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｅに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【００５２】
Ｉ６７置換
一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｆに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸６７は、イソロイシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸６７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｆに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸６７は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、またはＬｅｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｆに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸６７は、Ａｌａである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｆに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸６７は、Ｇｌｙである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｆに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸６７は、Ｖａｌである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｆに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸６７は、Ｌｅｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【００５３】
一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｉ６７にアミノ酸置換を有する、図２Ａに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｉ６７にアミノ酸置換を有する、配列番号１に示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｉ６７にアミノ酸置換を有する、配列番号１に示されるアミノ酸配列を含む。例えば、一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｆに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、アスパラギン以外の任意のアミノ酸であり、例えば、「ｘ」は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕとすることができる）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｆに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、またはＬｅｕである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｆに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｆに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｖａｌである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｆに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｌｅｕである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｆに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｇｌｙである）を含む。例えば、一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｇに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【００５４】
Ｋ８６置換
一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｈに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸８６は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸８６は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｈに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸８６は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｈに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸８６は、Ａｌａである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｈに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸８６は、Ｇｌｙである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｈに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸８６は、Ｖａｌである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｈに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸８６は、Ｌｅｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｈに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸８６は、Ｉｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【００５５】
一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｋ８６にアミノ酸置換を有する、図２Ａに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｋ８６にアミノ酸置換を有する、配列番号１に示されるアミノ酸配列を含む。例えば、一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｈに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、リシン以外の任意のアミノ酸であり、例えば、「ｘ」は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕとすることができる）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｈに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｈに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｈに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｖａｌである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｈに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｌｅｕである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｈに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｇｌｙである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｈに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｉｌｅである）を含む。例えば、一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｉに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【００５６】
Ｑ１５７置換
一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｊに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１５７は、グルタミン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１５７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｊに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１５７は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｊに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１５７は、Ａｌａである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｊに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１５７は、Ｇｌｙである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｊに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１５７は、Ｖａｌである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｊに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１５７は、Ｌｅｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｊに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１５７は、Ｉｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【００５７】
一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｑ１５７にアミノ酸置換を有する、図２Ａに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｑ１５７にアミノ酸置換を有する、配列番号１に示されるアミノ酸配列を含む。例えば、一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｊに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、グルタミン以外の任意のアミノ酸であり、例えば、「ｘ」は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕとすることができる）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｊに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｊに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｊに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｖａｌである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｊに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｌｅｕである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｊに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｇｌｙである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｊに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｉｌｅである）を含む。例えば、一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｋに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【００５８】
Ｄ１５８置換
一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｌに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１５８は、アスパラギン酸以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１５８は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、またはＧｌｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｌに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１５８は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｌに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１５８は、Ａｌａである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｌに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１５８は、Ｇｌｙである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｌに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１５８は、Ｖａｌである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｌに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１５８は、Ｌｅｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｌに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１５８は、Ｉｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【００５９】
一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｄ１５８にアミノ酸置換を有する、図２Ａに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｄ１５８にアミノ酸置換を有する、配列番号１に示されるアミノ酸配列を含む。例えば、一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｌに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、アスパラギン酸以外の任意のアミノ酸であり、例えば、「ｘ」は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、またはＧｌｕとすることができる）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｌに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｌに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｌに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｖａｌである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｌに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｌｅｕである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｌに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｇｌｙである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｌに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｉｌｅである）を含む。例えば、一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｍに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【００６０】
Ｌ２５置換
一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｎに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸２５は、ロイシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸２５は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｎに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸２５は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｎに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸２５は、Ａｌａである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｎに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸２５は、Ｇｌｙである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｎに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸２５は、Ｖａｌである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｎに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸２５は、Ｉｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【００６１】
一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｌ２５にアミノ酸置換を有する、図２Ａに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｌ２５にアミノ酸置換を有する、配列番号１に示されるアミノ酸配列を含む。例えば、一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｎに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、ロイシン以外の任意のアミノ酸であり、例えば、「ｘ」は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕとすることができる）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｎに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、またはＩｌｅである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｎに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｎに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｖａｌである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｎに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｌｅｕである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｎに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｇｌｙである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｎに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｉｌｅである）を含む。例えば、一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｏに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【００６２】
Ｙ３１置換
一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｐに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３１は、チロシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸３１は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｐに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３１は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｐに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３１は、Ａｌａである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｐに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３１は、Ｇｌｙである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｐに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３１は、Ｖａｌである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｐに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３１は、Ｌｅｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｐに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３１は、Ｉｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【００６３】
一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｙ３１にアミノ酸置換を有する、図２Ａに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｙ３１にアミノ酸置換を有する、配列番号１に示されるアミノ酸配列を含む。例えば、一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｐに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、チロシン以外の任意のアミノ酸であり、例えば、「ｘ」は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕとすることができる）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｐに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｐに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｐに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｖａｌである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｐに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｌｅｕである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｐに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｇｌｙである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｐに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｉｌｅである）を含む。例えば、一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｐに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【００６４】
Ｑ３３置換
一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｒに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３３は、グルタミン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸３３は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｒに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３３は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｒに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３３は、Ａｌａである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｒに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３３は、Ｇｌｙである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｒに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３３は、Ｖａｌである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｒに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３３は、Ｌｅｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｒに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３３は、Ｉｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【００６５】
一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｑ３３にアミノ酸置換を有する、図２Ａに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｑ３３にアミノ酸置換を有する、配列番号１に示されるアミノ酸配列を含む。例えば、一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｒに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、グルタミン以外の任意のアミノ酸であり、例えば、「ｘ」は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕとすることができる）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｒに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｒに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｒに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｖａｌである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｒに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｌｅｕである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｒに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｇｌｙである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｒに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｉｌｅである）を含む。例えば、一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｓに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【００６６】
Ｍ３８置換
一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｔに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３８は、メチオニン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸３８は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｔに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３８は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｔに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３８は、Ａｌａである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｔに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３８は、Ｇｌｙである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｔに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３８は、Ｖａｌである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｔに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３８は、Ｌｅｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｔに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３８は、Ｉｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【００６７】
一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｍ３８にアミノ酸置換を有する、図２Ａに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｍ３８にアミノ酸置換を有する、配列番号１に示されるアミノ酸配列を含む。例えば、一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｔに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、メチオニン以外の任意のアミノ酸であり、例えば、「ｘ」は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕとすることができる）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｔに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｔに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｔに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｖａｌである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｔに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｌｅｕである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｔに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｇｌｙである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｔに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｉｌｅである）を含む。例えば、一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｕに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【００６８】
Ｖ３９置換
一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｖに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３９は、バリン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸３９は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｖに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３９は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｖに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３９は、Ａｌａである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｖに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３９は、Ｇｌｙである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｖに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３９は、Ｌｅｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｖに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３９は、Ｉｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【００６９】
一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｖ３９にアミノ酸置換を有する、図２Ａに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｖ３９にアミノ酸置換を有する、配列番号１に示されるアミノ酸配列を含む。例えば、一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｖに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、バリン以外の任意のアミノ酸であり、例えば、「ｘ」は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕとすることができる）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｖに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｖに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｖに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｖａｌである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｖに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｌｅｕである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｖに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｇｌｙである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｖに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｉｌｅである）を含む。例えば、一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｗに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【００７０】
Ｉ４９置換
一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｘに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸４９は、イソロイシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸４９は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｘに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸４９は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、またはＬｅｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｘに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸４９は、Ａｌａである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｘに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸４９は、Ｇｌｙである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｘに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸４９は、Ｖａｌである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｘに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸４９は、Ｌｅｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【００７１】
一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｉ４９にアミノ酸置換を有する、図２Ａに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｉ４９にアミノ酸置換を有する、配列番号１に示されるアミノ酸配列を含む。例えば、一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｘに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、イソロイシン以外の任意のアミノ酸であり、例えば、「ｘ」は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕとすることができる）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｘに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、またはＬｅｕである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｘに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｘに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｖａｌである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｘに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｌｅｕである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｘに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｇｌｙである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｘに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｉｌｅである）を含む。例えば、一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｙに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【００７２】
Ｙ５３置換
一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｚに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸５３は、チロシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸５３は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｚに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸５３は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｚに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸５３は、Ａｌａである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｚに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸５３は、Ｇｌｙである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｚに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸５３は、Ｖａｌである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｚに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸５３は、Ｌｅｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｚに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸５３は、Ｉｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【００７３】
一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｙ５３にアミノ酸置換を有する、図２Ａに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｙ５３にアミノ酸置換を有する、配列番号１に示されるアミノ酸配列を含む。例えば、一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｚに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、チロシン以外の任意のアミノ酸であり、例えば、「ｘ」は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕとすることができる）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｚに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｚに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｚに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｖａｌである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｚに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｌｅｕである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｚに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｇｌｙである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｚに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｉｌｅである）を含む。例えば、一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＡＡに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【００７４】
Ｄ６０置換
一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＢＢに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸６０は、アスパラギン酸以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸６０は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、またはＧｌｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＢＢに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸６０は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＢＢに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸６０は、Ａｌａである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＢＢに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸６０は、Ｇｌｙである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＢＢに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸６０は、Ｖａｌである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＢＢに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸６０は、Ｌｅｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＢＢに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸６０は、Ｉｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【００７５】
一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｄ６０にアミノ酸置換を有する、図２Ａに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｄ６０にアミノ酸置換を有する、配列番号１に示されるアミノ酸配列を含む。例えば、一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＢＢに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、アスパラギン酸以外の任意のアミノ酸であり、例えば、「ｘ」は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、またはＧｌｕとすることができる）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＢＢに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＢＢに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＢＢに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｖａｌである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＢＢに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｌｅｕである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＢＢに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｇｌｙである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＢＢに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｉｌｅである）を含む。例えば、一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＣＣに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【００７６】
Ｆ１０８置換
一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＤＤに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１０８は、フェニルアラニン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１０８は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＤＤに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１０８は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＤＤに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１０８は、Ａｌａである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＤＤに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１０８は、Ｇｌｙである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＤＤに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１０８は、Ｖａｌである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＤＤに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１０８は、Ｌｅｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＤＤに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１０８は、Ｉｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【００７７】
一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｆ１０８にアミノ酸置換を有する、図２Ａに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｆ１０８にアミノ酸置換を有する、配列番号１に示されるアミノ酸配列を含む。例えば、一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＤＤに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、フェニルアラニン以外の任意のアミノ酸であり、例えば、「ｘ」は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕとすることができる）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＤＤに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＤＤに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＤＤに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｖａｌである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＤＤに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｌｅｕである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＤＤに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｇｌｙである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＤＤに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｉｌｅである）を含む。例えば、一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＥＥに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【００７８】
Ｓ１５６置換
一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＦＦに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１５６は、セリン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１５６は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＦＦに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１５６は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＦＦに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１５６は、Ａｌａである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＦＦに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１５６は、Ｇｌｙである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＦＦに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１５６は、Ｖａｌである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＦＦに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１５６は、Ｌｅｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＦＦに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１５６は、Ｉｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【００７９】
一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｓ１５６にアミノ酸置換を有する、図２Ａに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｓ１５６にアミノ酸置換を有する、配列番号１に示されるアミノ酸配列を含む。例えば、一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＦＦに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、セリン以外の任意のアミノ酸であり、例えば、「ｘ」は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕとすることができる）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＦＦに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＦＦに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＦＦに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｖａｌである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＦＦに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｌｅｕである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＦＦに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｇｌｙである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＦＦに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｉｌｅである）を含む。例えば、一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＧＧに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【００８０】
Ｐ１１１置換
一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＨＨに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１１１は、プロリン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１１１は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＨＨに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１１１は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＨＨに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１１１は、Ａｌａである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＨＨに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１１１は、Ｇｌｙである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＨＨに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１１１は、Ｖａｌである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＨＨに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１１１は、Ｌｅｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＨＨに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１１１は、Ｉｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【００８１】
一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｐ１１１にアミノ酸置換を有する、図２Ａに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｐ１１１にアミノ酸置換を有する、配列番号１に示されるアミノ酸配列を含む。例えば、一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＨＨに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、プロリン以外の任意のアミノ酸であり、例えば、「ｘ」は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕとすることができる）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＨＨに示される記載のアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＨＨに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＨＨに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｖａｌである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＨＨに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｌｅｕである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＨＨに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｇｌｙである）を含む。一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＨＨに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｉｌｅである）を含む。例えば、一部の場合では、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＩＩに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【００８２】
融合ポリペプチド
本開示は、ＣＤ８０融合ポリペプチドを提供する。本開示の融合ポリペプチドは、ａ）本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、及び、ｂ）異種融合パートナーを含む。一部の場合では、異種融合パートナーは、変異体ＣＤ８０ポリペプチドのＮ末端に融合される。一部の場合では、異種融合パートナーは、変異体ＣＤ８０ポリペプチドのＣ末端に融合される。一部の場合では、本開示のＣＤ８０融合ポリペプチドは、変異体ＣＤ８０ポリペプチドのＮ末端に融合された第１の異種融合パートナー、及び変異体ＣＤ８０ポリペプチドのＣ末端に融合された第２の異種融合パートナーを含む。
【００８３】
本開示のＣＤ８０融合ポリペプチドの全長は、２１５アミノ酸〜２０００アミノ酸の範囲とすることができる。例えば、本開示のＣＤ８０融合ポリペプチドは、２１５アミノ酸〜２２５アミノ酸、２２５アミノ酸〜２５０アミノ酸、２５０アミノ酸〜２７５アミノ酸、２７５アミノ酸〜３００アミノ酸、３００アミノ酸〜３５０アミノ酸、３５０アミノ酸、３５０アミノ酸〜４００アミノ酸、４００アミノ酸、４００アミノ酸〜４５０アミノ酸、４５０アミノ酸〜５００アミノ酸、５００アミノ酸〜６００アミノ酸、６００アミノ酸〜７００アミノ酸、７００アミノ酸〜８００アミノ酸、８００アミノ酸〜９００アミノ酸、９００アミノ酸〜１０００アミノ酸、１０００アミノ酸〜１２５０アミノ酸、１２５０アミノ酸〜１５００アミノ酸、１５００アミノ酸〜１７５０アミノ酸、または１７５０アミノ酸〜２０００アミノ酸の範囲とすることができる。
【００８４】
好適な融合パートナーは、膜貫通ドメイン、抗体Ｆｃ領域、抗体の抗原結合領域、サイトカイン、免疫調節ドメイン、細胞内シグナル伝達ドメインなどが挙げられるが、これらに限定されない。
【００８５】
Ｔ細胞調節多量体ポリペプチド
本開示は、多量体（例えば、ヘテロ二量体、ヘテロ三量体）ポリペプチドを提供する。多量体ポリペプチドは、Ｔ細胞調節ポリペプチドであり、本明細書では、「Ｔ細胞調節多量体ポリペプチド」、または「ｓｙｎＴａｃ」（「Ｔ細胞活性化のための免疫学的シナプス」の場合）とも称される。図１Ａ〜１Ｄは、本開示のＴ細胞調節多量体ポリペプチドの概略図を提供する。本開示のＴ細胞調節多量体ポリペプチドは、「ｓｙｎＴａｃポリペプチド」または「多量体ポリペプチド」とも称される。
【００８６】
本開示のｓｙｎＴａｃポリペプチドは、本開示の変異体免疫調節ポリペプチドを含む。上記のように、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、野生型ＣＤ８０のＣＤ２８に対する結合親和性と比較して、ＣＤ２８への結合親和性の低減を示す。本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドを含む本開示の多量体ポリペプチドは、野生型ＣＤ８０を含む対照多量体ポリペプチド（例えば、図２Ａに示されるアミノ酸配列を含むＣＤ８０ポリペプチド）と比較しても、ＣＤ２８への結合親和性の低減を示す。
【００８７】
一部の場合では、本開示のｓｙｎＴａｃポリペプチドは、図２Ａに示されるアミノ酸配列を含むＣＤ８０ポリペプチドのＣＤ２８に対する結合親和性と比較して、ＣＤ２８への結合親和性の低減を示す。例えば、一部の場合では、本開示のｓｙｎＴａｃポリペプチドは、図２Ａに示されるアミノ酸配列を含むＣＤ８０ポリペプチドを含む対照ｓｙｎＴａｃポリペプチドの、図３Ａ〜３Ｃのうちの１つに示されるアミノ酸配列を含むＣＤ２８ポリペプチドに対する結合親和性よりも小さい結合親和性で、ＣＤ２８に結合する。例えば、一部の場合では、本開示のｓｙｎＴａｃポリペプチドは、図２Ａに示されるアミノ酸配列を含むＣＤ８０ポリペプチドを含む対照ｓｙｎＴａｃポリペプチドの、ＣＤ２８（例えば、図３Ａ〜３Ｃのうちの１つに示されるアミノ酸配列を含むＣＤ２８ポリペプチド）に対する結合親和性よりも、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％低い、少なくとも５５％低い、少なくとも６０％低い、少なくとも６５％低い、少なくとも７０％低い、少なくとも７５％低い、少なくとも８０％低い、少なくとも８５％低い、少なくとも９０％低い、少なくとも９５％低い、または９５％を超えて低い結合親和性で、ＣＤ２８に結合する。
【００８８】
一部の場合では、本開示のｓｙｎＴａｃポリペプチドは、配列番号１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤ８０ポリペプチドを含む対照ｓｙｎＴａｃポリペプチドのＣＤ２８に対する結合親和性と比較して、ＣＤ２８への結合親和性の低減を示す。例えば、一部の場合では、本開示のｓｙｎＴａｃポリペプチドは、配列番号１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤ８０ポリペプチドを含む対照ｓｙｎＴａｃポリペプチドの、図３Ａ〜３Ｃのうちの１つに示されるアミノ酸配列を含むＣＤ２８ポリペプチドに対する結合親和性よりも小さい結合親和性で、ＣＤ２８に結合する。例えば、一部の場合では、本開示のｓｙｎＴａｃポリペプチドは、配列番号１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤ８０ポリペプチドを含む対照ｓｙｎＴａｃポリペプチドの、ＣＤ２８（例えば、図３Ａ〜３Ｃのうちの１つに示されるアミノ酸配列を含むＣＤ２８ポリペプチド）に対する結合親和性よりも、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％低い、少なくとも５５％低い、少なくとも６０％低い、少なくとも６５％低い、少なくとも７０％低い、少なくとも７５％低い、少なくとも８０％低い、少なくとも８５％低い、少なくとも９０％低い、少なくとも９５％低い、または９５％を超えて低い結合親和性で、ＣＤ２８に結合する。
【００８９】
一部の場合では、本開示のｓｙｎＴａｃポリペプチドは、１００ｎｍ〜約１００μＭであるＣＤ２８に対する結合親和性を有する。一部の場合では、本開示のｓｙｎＴａｃポリペプチドは、約１００ｎＭ〜５００ｎＭであるＣＤ２８に対する結合親和性を有する。例えば、一部の場合では、本開示のｓｙｎＴａｃポリペプチドは、約１００ｎＭ〜約１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約４５０ｎＭ、または約４５０ｎＭ〜約５００ｎＭである、ＣＤ２８（例えば、図３Ａ〜３Ｃのうちの１つに示されるアミノ酸配列を含むＣＤ２８ポリペプチド）に対する結合親和性を有する。一部の場合では、本開示のｓｙｎＴａｃポリペプチドは、約５００ｎＭ〜１μＭである、ＣＤ２８（例えば、図３Ａ〜３Ｃのうちの１つに示されるアミノ酸配列を含むＣＤ２８ポリペプチド）に対する結合親和性を有する。例えば、一部の場合では、本開示のｓｙｎＴａｃポリペプチドは、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、または約９００ｎＭ〜約１μＭである、ＣＤ２８（例えば、図３Ａ〜３Ｃのうちの１つに示されるアミノ酸配列を含むＣＤ２８ポリペプチド）に対する結合親和性を有する。一部の場合では、本開示のｓｙｎＴａｃポリペプチドは、約１μＭ〜１０μＭである、ＣＤ２８（例えば、図３Ａ〜３Ｃのうちの１つに示されるアミノ酸配列を含むＣＤ２８ポリペプチド）に対する結合親和性を有する。例えば、一部の場合では、本開示のｓｙｎＴａｃポリペプチドは、約１μＭ〜２μＭ、約２μＭ〜約３μＭ、約３μＭ〜約４μＭ、約４μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約６μＭ、約６μＭ〜約７μＭ、約７μＭ〜約８μＭ、約８μＭ〜約９μＭ、または約９μＭ〜約１０μＭである、ＣＤ２８（例えば、図３Ａ〜３Ｃのうちの１つに示されるアミノ酸配列を含むＣＤ２８ポリペプチド）に対する結合親和性を有する。一部の場合では、本開示のｓｙｎＴａｃポリペプチドは、約１０μＭ〜１００μＭである、ＣＤ２８（例えば、図３Ａ〜３Ｃのうちの１つに示されるアミノ酸配列を含むＣＤ２８ポリペプチド）に対する結合親和性を有する。例えば、一部の場合では、本開示のｓｙｎＴａｃポリペプチドは、約１０μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約３０μＭ、約３０μＭ〜約４０μＭ、約４０μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約６０μＭ、約６０μＭ〜約７０μＭ、約７０μＭ〜約８０μＭ、約８０μＭ〜約９０μＭ、または約９０μＭ〜約１００μＭである、ＣＤ２８（例えば、図３Ａ〜３Ｃのうちの１つに示されるアミノ酸配列を含むＣＤ２８ポリペプチド）に対する結合親和性を有する。
【００９０】
本開示のｓｙｎＴａｃポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、野生型ＣＤ８０ポリペプチド（例えば、図２Ａに示されるか、または配列番号１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤ８０ポリペプチド）に対して、単一のアミノ酸置換を有することができる。一部の場合では、本開示のｓｙｎＴａｃポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、野生型ＣＤ８０ポリペプチド（例えば、図２Ａに示されるか、または配列番号１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤ８０ポリペプチド）に対して、２〜１０のアミノ酸置換を有する。一部の場合では、本開示のｓｙｎＴａｃポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、野生型ＣＤ８０ポリペプチド（例えば、図２Ａに示されるか、または配列番号１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤ８０ポリペプチド）に対して、２つのアミノ酸置換を有する。一部の場合では、本開示のｓｙｎＴａｃポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、野生型ＣＤ８０ポリペプチド（例えば、図２Ａに示されるか、または配列番号１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤ８０ポリペプチド）に対して、３つのアミノ酸置換を有する。一部の場合では、本開示のｓｙｎＴａｃポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、野生型ＣＤ８０ポリペプチド（例えば、図２Ａに示されるか、または配列番号１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤ８０ポリペプチド）に対して、４つのアミノ酸置換を有する。一部の場合では、本開示のｓｙｎＴａｃポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、野生型ＣＤ８０ポリペプチド（例えば、図２Ａに示されるか、または配列番号１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤ８０ポリペプチド）に対して、５つのアミノ酸置換を有する。一部の場合では、本開示のｓｙｎＴａｃポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、野生型ＣＤ８０ポリペプチド（例えば、図２Ａに示されるか、または配列番号１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤ８０ポリペプチド）に対して、６つのアミノ酸置換を有する。一部の場合では、本開示のｓｙｎＴａｃポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、野生型ＣＤ８０ポリペプチド（例えば、図２Ａに示されるか、または配列番号１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤ８０ポリペプチド）に対して、７つのアミノ酸置換を有する。一部の場合では、本開示のｓｙｎＴａｃポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、野生型ＣＤ８０ポリペプチド（例えば、図２Ａに示されるか、または配列番号１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤ８０ポリペプチド）に対して、８つのアミノ酸置換を有する。一部の場合では、本開示のｓｙｎＴａｃポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、野生型ＣＤ８０ポリペプチド（例えば、図２Ａに示されるか、または配列番号１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤ８０ポリペプチド）に対して、９つのアミノ酸置換を有する。一部の場合では、本開示のｓｙｎＴａｃポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、野生型ＣＤ８０ポリペプチド（例えば、図２Ａに示されるか、または配列番号１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤ８０ポリペプチド）に対して、１０のアミノ酸置換を有する。
【００９１】
一部の場合では、本開示のｓｙｎＴａｃポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、野生型ＣＤ８０ポリペプチド（例えば、図２Ａに示されるか、または配列番号１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤ８０ポリペプチド）に対して、１１〜５０のアミノ酸置換を有する。例えば、一部の場合では、本開示のｓｙｎＴａｃポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、野生型ＣＤ８０ポリペプチド（例えば、図２Ａに示されるか、または配列番号１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤ８０ポリペプチド）に対して、１１〜１５、１５〜２０、２０〜２５、２５〜３０、３０〜３５、３５〜４０、４０〜４５、または４５〜５０のアミノ酸置換を有する。
【００９２】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、第１のポリペプチド及び第２のポリペプチドを含み、第１のポリペプチドは、アミノ末端（Ｎ末端）からカルボキシル末端（Ｃ末端）への順序で、ａ）エピトープ（例えば、Ｔ細胞エピトープ）、ｂ）第１の主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）ポリペプチド、及び、ｃ）免疫調節ポリペプチド（例えば、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチド）、を含み、第２のポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端への順序で、ａ）第２のＭＨＣポリペプチド、及び、ｂ）免疫グロブリン（Ｉｇ）Ｆｃポリペプチド、を含む。他の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、第１のポリペプチド及び第２のポリペプチドを含み、第１のポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端への順序で、ａ）エピトープ（例えば、Ｔ細胞エピトープ）、及び、ｂ）第１のＭＨＣポリペプチド、を含み、第２のポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端への順序で、ａ）免疫調節ポリペプチド（例えば、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチド）、ｂ）第２のＭＨＣポリペプチド、及び、ｃ）ＩｇＦｃポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１及び第２のＭＨＣポリペプチドは、クラスＩ  ＭＨＣポリペプチドであり、例えば、一部の場合では、第１のＭＨＣポリペプチドは、ＭＨＣクラスＩ  β２ミクログロブリン（Ｂ２Ｍもしくはβ２Ｍ）ポリペプチドであり、第２のＭＨＣポリペプチドは、ＭＨＣクラスＩ重鎖（Ｈ鎖）であり、または第１のＭＨＣポリペプチドは、ＭＨＣクラスＩ  Ｈ鎖であり、第２のＭＨＣポリペプチドは、ＭＨＣクラスＩ  β２Ｍポリペプチドである。他の場合では、第１及び第２のＭＨＣポリペプチドは、クラスＩＩ  ＭＨＣポリペプチドであり、例えば、一部の場合では、第１のＭＨＣポリペプチドは、ＭＨＣクラスＩＩα鎖ポリペプチドであり、第２のＭＨＣポリペプチドは、ＭＨＣクラスＩＩβ鎖ポリペプチドである。他の場合では、第１のポリペプチドは、ＭＨＣクラスＩＩβ鎖ポリペプチドであり、第２のＭＨＣポリペプチドは、ＭＨＣクラスＩＩα鎖ポリペプチドである。一部の場合では、多量体ポリペプチドは、２つ以上の免疫調節ポリペプチドを含み、免疫調節ポリペプチドの少なくとも１つは、本開示の変異体ＣＤ８０免疫調節ポリペプチドである。本開示の多量体ポリペプチドが、２つ以上の免疫調節ポリペプチドを含む場合、一部の場合では、２つ以上の免疫調節ポリペプチドは、同じポリペプチド鎖に存在し、縦一列に並んでいてもよい。本開示の多量体ポリペプチドが、２つ以上の免疫調節ポリペプチドを含む場合、一部の場合では、２つ以上の免疫調節ポリペプチドは、別々のポリペプチドに存在する。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ヘテロ二量体である。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、三量体ポリペプチドである。
【００９３】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）第１のＭＨＣポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）第２のＭＨＣポリペプチド、及び、ｉｉ）ＩｇＦｃポリペプチド、及び、ｉｉｉ）免疫調節ドメイン（例えば、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチド）、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）第１のＭＨＣポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）第２のＭＨＣポリペプチド、及び、ｉｉ）免疫調節ドメイン（例えば、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチド）、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）第１のＭＨＣポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）免疫調節ドメイン（例えば、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチド）、及び、ｉｉ）第２のＭＨＣポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）第１のＭＨＣポリペプチド、及び、ｉｉｉ）免疫調節ドメイン（例えば、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチド）、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）第２のＭＨＣポリペプチドを含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドが非Ｉｇ骨格を含む場合、非Ｉｇ骨格は、ＸＴＥＮペプチド、トランスフェリンポリペプチド、Ｆｃ受容体ポリペプチド、エラスチン様ポリペプチド、絹様ポリペプチド、または絹−エラスチン様ポリペプチドである。
【００９４】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、一価である。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、多価である。一部の場合では、本開示の多価多量体ポリペプチドは、第１のポリペプチドまたは第２のポリペプチドのうちの１つに免疫グロブリンＦｃポリペプチドを含む。例えば、本開示の多量体ポリペプチドに存在するＦｃポリペプチドに応じて、多量体ポリペプチドは、ホモ二量体であることができ、２分子の多量体ポリペプチドは、ホモ二量体に存在し、２分子の多量体ポリペプチドは、例えば、２分子内に存在するＦｃポリペプチドを介して、互いにジスルフィド結合することができる。別の例として、本開示の多量体ポリペプチドは、３、４、または５分子の多量体ポリペプチドを含むことができ、多量体ポリペプチドの分子は、例えば、分子内に存在するＦｃポリペプチドを介して、互いにジスルフィド結合することができる。
【００９５】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、及び、ｉｉｉ）本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、ｉｉｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、及び、ｖ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、同じアミノ酸配列を有する。一部の場合では、第１、第２及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、アミノ酸配列が互いに異なる。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｉ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、及び、ｉｉｉ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、ならびにｖ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、同じアミノ酸配列を有する。一部の場合では、第１、第２及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、アミノ酸配列が互いに異なる。
【００９６】
リンカー
本開示の多量体ポリペプチドは、例えば、エピトープ及びＭＨＣポリペプチドの間に、ＭＨＣポリペプチド及び免疫調節ポリペプチドの間に、ＭＨＣポリペプチド及びＩｇＦｃポリペプチドの間に、第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド及び第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチドの間に、または第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドの間に、挿入されるリンカーペプチドを含むことができる。
【００９７】
好適なリンカー（「スペーサー」とも称される）は、容易に選択することができ、多数の好適な長さ、例えば、４アミノ酸〜１０アミノ酸、３アミノ酸〜１２アミノ酸、５アミノ酸〜９アミノ酸、６アミノ酸〜８アミノ酸、または７アミノ酸〜８アミノ酸を含む、１アミノ酸〜２５アミノ酸、３アミノ酸〜２０アミノ酸、２アミノ酸〜１５アミノ酸のいずれかのものとすることができる。好適なリンカーは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、または２５アミノ酸の長さであることができる。
【００９８】
例示的なリンカーとしては、グリシンポリマー（Ｇ）ｎ、グリシン−セリンポリマー（例えば、（ＧＳ）ｎ、（ＧＳＧＧＳ）ｎ（配列番号６５）及び（ＧＧＧＳ）ｎ（配列番号６６）（式中、ｎは、少なくとも１の整数である）を含む）、グリシン−アラニンポリマー、アラニン−セリンポリマー、ならびに当該技術分野で既知の他のフレキシブルなリンカーが挙げられる。グリシン及びグリシン−セリンポリマーを使用することができ、Ｇｌｙ及びＳｅｒの双方は、比較的構造化されず、従って、構成成分間の中間のテザーとして機能できる。グリシンポリマーを使用することができ、グリシンは、アラニンよりさえも、著しく多くのφ−ψ空間にアクセスし、より長い側鎖を有する残基よりも、極めて制限されていない（Ｓｃｈｅｒａｇａ，Ｒｅｖ．Ｃｏｍｐｕｔａｔｉｏｎａｌ  Ｃｈｅｍ．１１１７３−１４２（１９９２）を参照のこと）。例示的なリンカーは、限定されないが、ＧＧＳＧ（配列番号６７）、ＧＧＳＧＧ（配列番号６８）、ＧＳＧＳＧ（配列番号６９）、ＧＳＧＧＧ（配列番号７０）、ＧＧＧＳＧ（配列番号７１）、ＧＳＳＳＧ（配列番号７２）などを含むアミノ酸配列を含むことができる。例示的なリンカーは、例えば、Ｇｌｙ（Ｓｅｒ４）ｎ（式中、ｎは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０である）を含むことができる。一部の場合では、リンカーは、アミノ酸配列（ＧＳＳＳＳ）ｎ（配列番号７３）（式中、ｎは、４である）を含む。一部の場合では、リンカーは、アミノ酸配列（ＧＳＳＳＳ）ｎ（配列番号７３）（式中、ｎは、５である）を含む。一部の場合では、リンカーは、アミノ酸配列（ＧＧＧＧＳ）ｎ（配列番号７４）（式中、ｎは、４である）を含む。一部の場合では、リンカーは、アミノ酸配列（ＧＧＧＧＳ）ｎ（配列番号７４）（式中、ｎは、５である）を含む。
【００９９】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドの第１のポリペプチドに存在するリンカーポリペプチドは、本開示の多量体ポリペプチドの第２のポリペプチドに存在するシステイン残基と共にジスルフィド結合を形成することができるシステイン残基を含む。一部の場合では、例えば、好適なリンカーは、アミノ酸配列ＧＣＧＡＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号７５）を含む。
【０１００】
エピトープ
本開示の多量体ポリペプチドに存在するエピトープは、約４アミノ酸〜約２５アミノ酸の長さを有することができ、例えば、エピトープは、４アミノ酸（ａａ）〜１０ａａ、１０ａａ〜１５ａａ、１５ａａ〜２０ａａ、または２０ａａ〜２５ａａの長さを有することができる。例えば、本開示の多量体ポリペプチドに存在するエピトープは、４アミノ酸（ａａ）、５ａａ、６ａａ、７ａａ、８ａａ、９ａａ、１０ａａ、１１ａａ、１２ａａ、１３ａａ、１４ａａ、１５ａａ、１６ａａ、１７ａａ、１８ａａ、１９ａａ、２０ａａ、２１ａａ、２２ａａ、２３ａａ、２４ａａ、または２５ａａの長さを有することができる。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在するエピトープは、５アミノ酸〜１０アミノ酸、例えば、５ａａ、６ａａ、７ａａ、８ａａ、９ａａ、または１０ａａの長さを有する。
【０１０１】
本開示の多量体ポリペプチドに存在するエピトープは、Ｔ細胞により特異的に結合される、すなわち、エピトープは、エピトープ特異的Ｔ細胞により特異的に結合される。エピトープ特異的Ｔ細胞は、参照アミノ酸配列を有するエピトープに結合するが、参照アミノ酸配列とは異なるエピトープに実質的に結合しない。例えば、エピトープ特異的Ｔ細胞は、参照アミノ酸配列を有するエピトープに結合し、もしあれば、１０Ｍ-6未満、１０Ｍ-5未満、または１０-4Ｍ未満の親和性で、参照アミノ酸配列とは異なるエピトープに結合するエピトープ特異的Ｔ細胞は、少なくとも１０-7Ｍ、少なくとも１０-8Ｍ、少なくとも１０-9Ｍ、または少なくとも１０-10 Ｍの親和性で、それが特異的であるエピトープに結合することができる。
【０１０２】
好適なエピトープとしては、がん関連抗原に存在するエピトープが挙げられるが、これらに限定されない。がん関連抗原は、α−葉酸受容体、炭酸脱水酵素ＩＸ（ＣＡＩＸ）、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ４４ｖ７／８、がん胎児性抗原（ＣＥＡ）、上皮糖タンパク質２（ＥＧＰ−２）、上皮糖タンパク質４０（ＥＧＰ−４０）、葉酸結合タンパク質（ＦＢＰ）、胎児性アセチルコリン受容体、ガングリオシド抗原ＧＤ２、Ｈｅｒ２／ｎｅｕ、ＩＬ−１３Ｒ−ａ２、κ軽鎖、ＬｅＹ、Ｌ１細胞接着分子、メラノーマ関連抗原（ＭＡＧＥ）、ＭＡＧＥ−Ａ１、メソテリン、ＭＵＣ１、ＮＫＧ２Ｄリガンド、がん胎児性抗原（ｈ５Ｔ４）、前立腺幹細胞抗原（ＰＳＣＡ）、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）、腫瘍関連糖タンパク質７２（ＴＡＧ−７２）、及び、血管内皮成長因子受容体２（ＶＥＧＦ−Ｒ２）を含むが、これらに限定されない。例えば、Ｖｉｇｎｅｒｏｎ  ｅｔ  ａｌ．（２０１３）Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  １３：１５；ａｎｄＶｉｇｎｅｒｏｎ（２０１５）ＢｉｏＭｅｄ  Ｒｅｓ．Ｉｎｔ’ｌ  Ａｒｔｉｃｌｅ  ＩＤ  ９４８５０１を参照のこと。
【０１０３】
ＭＨＣポリペプチド
上述したように、本開示の多量体ポリペプチドは、ＭＨＣポリペプチドを含む。本開示の目的のために、「主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）ポリペプチド」という用語は、ヒトＭＨＣ（ヒト白血球抗原（ＨＬＡ）とも称される）ポリペプチド、齧歯動物（例えば、マウス、ラットなど）、ＭＨＣポリペプチド、及び他の哺乳動物種（例えば、ウサギ、非ヒト霊長動物、イヌ、ネコ、有蹄動物（例えば、ウマ、ウシ、ヒツジ、カプリンなど）など）のＭＨＣポリペプチドを含む種々の種のＭＨＣポリペプチドを含むことを意味する。「ＭＨＣポリペプチド」という用語は、クラスＩ  ＭＨＣポリペプチド（例えば、β２ミクログロブリン及びＭＨＣクラスＩ重鎖）ならびにＭＨＣクラスＩＩポリペプチド（例えば、ＭＨＣクラスＩＩαポリペプチド及びＭＨＣクラスＩＩβポリペプチド）を含むことを意味する。
【０１０４】
上述したように、本開示の多量体ポリペプチドの一部の実施形態では、第１及び第２のＭＨＣポリペプチドは、クラスＩ  ＭＨＣポリペプチドであり、例えば、一部の実施形態では、第１のＭＨＣポリペプチドは、ＭＨＣクラスＩβ２ミクログロブリン（β２Ｍ）ポリペプチドであり、第２のＭＨＣポリペプチドは、ＭＨＣクラスＩ重鎖（Ｈ鎖）である。他の場合では、第１及び第２のＭＨＣポリペプチドは、クラスＩＩ  ＭＨＣポリペプチドであり、例えば、一部の場合では、第１のＭＨＣポリペプチドは、ＭＨＣクラスＩＩα鎖ポリペプチドであり、第２のＭＨＣポリペプチドは、ＭＨＣクラスＩＩβ鎖ポリペプチドである。他の場合では、第１のポリペプチドは、ＭＨＣクラスＩＩβ鎖ポリペプチドであり、第２のＭＨＣポリペプチドは、ＭＨＣクラスＩＩα鎖ポリペプチドである。
【０１０５】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドのＭＨＣポリペプチドは、ヒトＭＨＣポリペプチドであり、ヒトＭＨＣポリペプチドは、「ヒト白血球抗原」（「ＨＬＡ」）ポリペプチドとも称される。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドのＭＨＣポリペプチドは、クラスＩ  ＨＬＡポリペプチド、例えば、β２ミクログロブリンポリペプチド、またはクラスＩ  ＨＬＡ重鎖ポリペプチドである。クラスＩ  ＨＬＡ重鎖ポリペプチドは、ＨＬＡ−Ａ重鎖ポリペプチド、ＨＬＡ−Ｂ重鎖ポリペプチド、ＨＬＡ−Ｃ重鎖ポリペプチド、ＨＬＡ−Ｅ重鎖ポリペプチド、ＨＬＡ−Ｆ重鎖ポリペプチド、及びＨＬＡ−Ｇ重鎖ポリペプチドを含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドのＭＨＣポリペプチドは、クラスＩＩ  ＨＬＡポリペプチド、例えば、クラスＩＩ  ＨＬＡα鎖またはクラスＩＩ  ＨＬＡβ鎖である。ＭＨＣクラスＩＩポリペプチドは、ＭＣＨクラスＩＩ  ＤＰα及びβポリペプチド、ＤＭα及びβポリペプチド、ＤＯＡα及びβポリペプチド、ＤＯＢα及びβポリペプチド、ＤＱα及びβポリペプチド、ならびにＤＲα及びβポリペプチドを含む。
【０１０６】
一例として、本開示の多量体ポリペプチドのＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドは、図５Ａに示されるヒトＨＬＡ−Ａ重鎖ポリペプチドのアミノ酸配列のアミノ酸２５〜３６５と、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含むことができる。
【０１０７】
一例として、本開示の多量体ポリペプチドのＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドは、以下に示すＨＬＡ−Ａ重鎖アミノ酸配列のアミノ酸配列のアミノ酸２５〜３６５と、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含むことができる。
ＧＳＨＳＭＲＹＦＦＴＳＶＳＲＰＧＲＧＥＰＲＦＩＡＶＧＹＶＤＤＴＱＦＶＲＦＤＳＤＡＡＳＱＲＭＥＰＲＡＰＷＩＥＱＥＧＰＥＹＷＤＧＥＴＲＫＶＫＡＨＳＱＴＨＲＶＤＬＧＴＬＲＧＹＹＮＱＳＥＡＧＳＨＴＶＱＲＭＹＧＣＤＶＧＳＤＷＲＦＬＲＧＹＨＱＹＡＹＤＧＫＤＹＩＡＬＫＥＤＬＲＳＷＴＡＡＤＭＡＡＱＴＴＫＨＫＷＥＡＡＨＶＡＥＱＬＲＡＹＬＥＧＴＣＶＥＷＬＲＲＹＬＥＮＧＫＥＴＬＱＲＴＤＡＰＫＴＨＭＴＨＨＡＶＳＤＨＥＡＴＬＲＣＷＡＬＳＦＹＰＡＥＩＴＬＴＷＱＲＤＧＥＤＱＴＱＤＴＥＬＶＥＴＲＰＡＧＤＧＴＦＱＫＷＡＡＶＶＶＰＳＧＱＥＱＲＹＴＣＨＶＱＨＥＧＬＰＫＰＬＴＬＲＷＥＰ（配列番号７６）
【０１０８】
別の例として、本開示の多量体ポリペプチドのＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドは、図５Ｂに示されるヒトＨＬＡ−Ｂ重鎖ポリペプチドのアミノ酸配列のアミノ酸２５〜３６２と、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含むことができる。
【０１０９】
別の例として、本開示の多量体ポリペプチドのＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドは、図５Ｃに示されるヒトＨＬＡ−Ｃ重鎖ポリペプチドのアミノ酸配列のアミノ酸２５〜３６２と、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含むことができる。
【０１１０】
別の例として、本開示の多量体ポリペプチドのＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドは、以下に示すアミノ酸配列と、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含むことができる。
ＧＰＨＳＬＲＹＦＶＴＡＶＳＲＰＧＬＧＥＰＲＦＩＡＶＧＹＶＤＤＴＱＦＶＲＦＤＳＤＡＤＮＰＲＦＥＰＲＡＰＷＭＥＱＥＧＰＥＹＷＥＥＱＴＱＲＡＫＳＤＥＱＷＦＲＶＳＬＲＴＡＱＲＹＹＮＱＳＫＧＧＳＨＴＦＱＲＭＦＧＣＤＶＧＳＤＷＲＬＬＲＧＹＱＱＦＡＹＤＧＲＤＹＩＡＬＮＥＤＬＫＴＷＴＡＡＤＴＡＡＬＩＴＲＲＫＷＥＱＡＧＤＡＥＹＹＲＡＹＬＥＧＥＣＶＥＷＬＲＲＹＬＥＬＧＮＥＴＬＬＲＴＤＳＰＫＡＨＶＴＹＨＰＲＳＱＶＤＶＴＬＲＣＷＡＬＧＦＹＰＡＤＩＴＬＴＷＱＬＮＧＥＤＬＴＱＤＭＥＬＶＥＴＲＰＡＧＤＧＴＦＱＫＷＡＡＶＶＶＰＬＧＫＥＱＮＹＴＣＨＶＨＨＫＧＬＰＥＰＬＴＬＲＷ（配列番号７７）
【０１１１】
本開示の多量体ポリペプチドのβ２ミクログロブリン（β２Ｍ）ポリペプチドは、ヒトβ２Ｍポリペプチド、非ヒト霊長類β２Ｍポリペプチド、マウスβ２Ｍポリペプチドなどとすることができる。一部の場合では、β２Ｍポリペプチドは、図６に示されるβ２Ｍアミノ酸配列と、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、β２Ｍポリペプチドは、図６に示されるβ２Ｍアミノ酸配列のアミノ酸２１〜１１９と、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１１２】
一部の場合では、ＭＨＣポリペプチドは、（参照ＭＨＣポリペプチドが野生型ＭＨＣポリペプチドである可能性がある）参照ＭＨＣポリペプチドに対して、単一のアミノ酸置換を含み、単一のアミノ酸置換は、アミノ酸をシステイン（Ｃｙｓ）残基で置換する。このようなシステイン残基は、本開示の多量体ポリペプチドの第１のポリペプチドのＭＨＣポリペプチドに存在する場合、本開示の多量体ポリペプチドの第２のポリペプチド鎖に存在するシステイン残基と共にジスルフィド結合を形成することができる。
【０１１３】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドの第１のポリペプチド内の第１のＭＨＣポリペプチド、及び／または本開示の多量体ポリペプチドの第２のポリペプチド内の第２のＭＨＣポリペプチドは、アミノ酸をシステインで置換するアミノ酸置換を含み、第１のＭＨＣポリペプチド内の置換されたシステインは、第２のＭＨＣポリペプチド内のシステインと共にジスルフィド結合を形成し、第１のＭＨＣポリペプチド内のシステインは、第２のＭＨＣポリペプチド内の置換されたシステインと共にジスルフィド結合を形成し、または第１のＭＨＣポリペプチド内の置換されたシステインは、第２のＭＨＣポリペプチド内の置換されたシステインと共にジスルフィド結合を形成する。
【０１１４】
例えば、一部の場合では、ＨＬＡβ２ミクログロブリン及びＨＬＡクラスＩ重鎖の残基の次の対（残基番号は、成熟ポリペプチドのものである）：１）β２Ｍ残基１２、ＨＬＡクラスＩ重鎖残基２３６；２）β２Ｍ残基１２、ＨＬＡクラスＩ重鎖残基２３７；３）β２Ｍ残基８、ＨＬＡクラスＩ重鎖残基２３４；４）β２Ｍ残基１０、ＨＬＡクラスＩ重鎖残基２３５；５）β２Ｍ残基２４、ＨＬＡクラスＩ重鎖残基２３６；６）β２Ｍ残基２８、ＨＬＡクラスＩ重鎖残基２３２；７）β２Ｍ残基９８、ＨＬＡクラスＩ重鎖残基１９２；８）β２Ｍ残基９９、ＨＬＡクラスＩ重鎖残基２３４；９）β２Ｍ残基３、ＨＬＡクラスＩ重鎖残基１２０；１０）β２Ｍ残基３１、ＨＬＡクラスＩ重鎖残基９６；１１）β２Ｍ残基５３、ＨＬＡクラスＩ重鎖残基３５；１２）β２Ｍ残基６０、ＨＬＡクラスＩ重鎖残基９６；１３）β２Ｍ残基６０、ＨＬＡクラスＩ重鎖残基１２２；１４）β２Ｍ残基６３、ＨＬＡクラスＩ重鎖残基２７；１５）β２Ｍ残基Ａｒｇ３、ＨＬＡクラスＩ重鎖残基Ｇｌｙ１２０；１６）β２Ｍ残基Ｈｉｓ３１、ＨＬＡクラスＩ重鎖残基Ｇｌｎ９６；１７）β２Ｍ残基Ａｓｐ５３、ＨＬＡクラスＩ重鎖残基Ａｒｇ３５；１８）β２Ｍ残基Ｔｒｐ６０、ＨＬＡクラスＩ重鎖残基Ｇｌｎ９６；１９）β２Ｍ残基Ｔｒｐ６０、ＨＬＡクラスＩ重鎖残基Ａｓｐ１２２；２０）β２Ｍ残基Ｔｙｒ６３、ＨＬＡクラスＩ重鎖残基Ｔｙｒ２７；２１）β２Ｍ残基Ｌｙｓ６、ＨＬＡクラスＩ重鎖残基Ｇｌｕ２３２；２２）β２Ｍ残基Ｇｌｎ８、ＨＬＡクラスＩ重鎖残基Ａｒｇ２３４；２３）β２Ｍ残基Ｔｙｒ１０、ＨＬＡクラスＩ重鎖残基Ｐｒｏ２３５；２４）β２Ｍ残基Ｓｅｒ１１、ＨＬＡクラスＩ重鎖残基Ｇｌｎ２４２；２５）β２Ｍ残基Ａｓｎ２４、ＨＬＡクラスＩ重鎖残基Ａｌａ２３６；２６）β２Ｍ残基Ｓｅｒ２８、ＨＬＡクラスＩ重鎖残基Ｇｌｕ２３２；２７）β２Ｍ残基Ａｓｐ９８、ＨＬＡクラスＩ重鎖残基Ｈｉｓ１９２、及び、２８）β２Ｍ残基Ｍｅｔ９９、ＨＬＡクラスＩ重鎖残基Ａｒｇ２３４、のうちの１つがシステインで置換される。ＭＨＣ／ＨＬＡクラスＩ重鎖のアミノ酸番号付けは、シグナルペプチドを含まない成熟ＭＨＣ／ＨＬＡクラスＩ重鎖を基準にする。例えば、シグナルペプチドを含む図５Ａに示されるアミノ酸配列では、Ｇｌｙ１２０は、Ｇｌｙ１４４であり、Ｇｌｎ９６は、Ｇｌｎ１２０である等である。一部の場合では、β２Ｍポリペプチドは、Ｒ１２Ｃ置換を含み、ＨＬＡクラスＩ重鎖は、Ａ２３６Ｃ置換を含み、このような場合では、ジスルフィド結合は、β２ＭポリペプチドのＣｙｓ−１２及びＨＬＡクラスＩ重鎖のＣｙｓ−２３６の間に形成される。例えば、一部の場合では、成熟ＨＬＡ−Ａアミノ酸配列の残基２３６（すなわち、図５Ａに示されるアミノ酸配列の残基２６０）は、Ｃｙｓで置換される。一部の場合では、成熟ＨＬＡ−Ｂアミノ酸配列の残基２３６（すなわち、図５Ｂに示されるアミノ酸配列の残基２６０）は、Ｃｙｓで置換される。一部の場合では、成熟ＨＬＡ−Ｃアミノ酸配列の残基２３６（すなわち、図５Ｃに示されるアミノ酸配列の残基２６０）は、Ｃｙｓで置換される。一部の場合では、図６に示されるアミノ酸配列の（成熟β２ＭのＡｒｇ−１２に対応する）残基３２は、Ｃｙｓ��置換される。
【０１１５】
一部の場合では、β２Ｍポリペプチドは、以下に示すアミノ酸配列を含む。
ＩＱＲＴＰＫＩＱＶＹ  ＳＲＨＰＡＥＮＧＫＳ  ＮＦＬＮＣＹＶＳＧＦ  ＨＰＳＤＩＥＶＤＬＬＫＮＧＥＲＩＥＫＶＥ  ＨＳＤＬＳＦＳＫＤＷ  ＳＦＹＬＬＹＹＴＥＦ  ＴＰＴＥＫＤＥＹＡＣ  ＲＶＮＨＶＴＬＳＱＰ  ＫＩＶＫＷＤＲＤＭ（配列番号１０１）
一部の場合では、β２Ｍポリペプチドは、以下に示すアミノ酸配列を含む。
ＩＱＲＴＰＫＩＱＶＹ  ＳＣＨＰＡＥＮＧＫＳ  ＮＦＬＮＣＹＶＳＧＦ  ＨＰＳＤＩＥＶＤＬＬＫＮＧＥＲＩＥＫＶＥ  ＨＳＤＬＳＦＳＫＤＷ  ＳＦＹＬＬＹＹＴＥＦ  ＴＰＴＥＫＤＥＹＡＣ  ＲＶＮＨＶＴＬＳＱＰ  ＫＩＶＫＷＤＲＤＭ（配列番号８７）
【０１１６】
一部の場合では、ＨＬＡクラスＩ重鎖ポリペプチドは、以下に示すアミノ酸配列を含む。
ＧＳＨＳＭＲＹＦＦＴＳＶＳＲＰＧＲＧＥＰＲＦＩＡＶＧＹＶＤＤＴＱＦＶＲＦＤＳＤＡＡＳＱＲＭＥＰＲＡＰＷＩＥＱＥＧＰＥＹＷＤＧＥＴＲＫＶＫＡＨＳＱＴＨＲＶＤＬＧＴＬＲＧＹＹＮＱＳＥＡＧＳＨＴＶＱＲＭＹＧＣＤＶＧＳＤＷＲＦＬＲＧＹＨＱＹＡＹＤＧＫＤＹＩＡＬＫＥＤＬＲＳＷＴＡＡＤＭＡＡＱＴＴＫＨＫＷＥＡＡＨＶＡＥＱＬＲＡＹＬＥＧＴＣＶＥＷＬＲＲＹＬＥＮＧＫＥＴＬＱＲＴＤＡＰＫＴＨＭＴＨＨＡＶＳＤＨＥＡＴＬＲＣＷＡＬＳＦＹＰＡＥＩＴＬＴＷＱＲＤＧＥＤＱＴＱＤＴＥＬＶＥＴＲＰＡＧＤＧＴＦＱＫＷＡＡＶＶＶＰＳＧＱＥＱＲＹＴＣＨＶＱＨＥＧＬＰＫＰＬＴＬＲＷＥＰ（配列番号８５）
【０１１７】
一部の場合では、ＨＬＡクラスＩ重鎖ポリペプチドは、以下に示すアミノ酸配列を含む。
ＧＳＨＳＭＲＹＦＦＴＳＶＳＲＰＧＲＧＥＰＲＦＩＡＶＧＹＶＤＤＴＱＦＶＲＦＤＳＤＡＡＳＱＲＭＥＰＲＡＰＷＩＥＱＥＧＰＥＹＷＤＧＥＴＲＫＶＫＡＨＳＱＴＨＲＶＤＬＧＴＬＲＧＹＹＮＱＳＥＡＧＳＨＴＶＱＲＭＹＧＣＤＶＧＳＤＷＲＦＬＲＧＹＨＱＹＡＹＤＧＫＤＹＩＡＬＫＥＤＬＲＳＷＴＡＡＤＭＡＡＱＴＴＫＨＫＷＥＡＡＨＶＡＥＱＬＲＡＹＬＥＧＴＣＶＥＷＬＲＲＹＬＥＮＧＫＥＴＬＱＲＴＤＡＰＫＴＨＭＴＨＨＡＶＳＤＨＥＡＴＬＲＣＷＡＬＳＦＹＰＡＥＩＴＬＴＷＱＲＤＧＥＤＱＴＱＤＴＥＬＶＥＴＲＰＣＧＤＧＴＦＱＫＷＡＡＶＶＶＰＳＧＱＥＱＲＹＴＣＨＶＱＨＥＧＬＰＫＰＬＴＬＲＷＥＰ（配列番号８６）
【０１１８】
一部の場合では、β２Ｍポリペプチドは、以下に示すアミノ酸配列を含む。
ＩＱＲＴＰＫＩＱＶＹ  ＳＣＨＰＡＥＮＧＫＳ  ＮＦＬＮＣＹＶＳＧＦ  ＨＰＳＤＩＥＶＤＬＬＫＮＧＥＲＩＥＫＶＥ  ＨＳＤＬＳＦＳＫＤＷ  ＳＦＹＬＬＹＹＴＥＦ  ＴＰＴＥＫＤＥＹＡＣ  ＲＶＮＨＶＴＬＳＱＰ  ＫＩＶＫＷＤＲＤＭ（配列番号８７）。
本開示の多量体ポリペプチドのＨＬＡクラスＩ重鎖ポリペプチドは、以下に示すアミノ酸配列を含み、下線太字のＣｙｓ残基は、多量体ポリペプチド内で互いにジスルフィド結合を形成する。
ＧＳＨＳＭＲＹＦＦＴＳＶＳＲＰＧＲＧＥＰＲＦＩＡＶＧＹＶＤＤＴＱＦＶＲＦＤＳＤＡＡＳＱＲＭＥＰＲＡＰＷＩＥＱＥＧＰＥＹＷＤＧＥＴＲＫＶＫＡＨＳＱＴＨＲＶＤＬＧＴＬＲＧＹＹＮＱＳＥＡＧＳＨＴＶＱＲＭＹＧＣＤＶＧＳＤＷＲＦＬＲＧＹＨＱＹＡＹＤＧＫＤＹＩＡＬＫＥＤＬＲＳＷＴＡＡＤＭＡＡＱＴＴＫＨＫＷＥＡＡＨＶＡＥＱＬＲＡＹＬＥＧＴＣＶＥＷＬＲＲＹＬＥＮＧＫＥＴＬＱＲＴＤＡＰＫＴＨＭＴＨＨＡＶＳＤＨＥＡＴＬＲＣＷＡＬＳＦＹＰＡＥＩＴＬＴＷＱＲＤＧＥＤＱＴＱＤＴＥＬＶＥＴＲＰＣＧＤＧＴＦＱＫＷＡＡＶＶＶＰＳＧＱＥＱＲＹＴＣＨＶＱＨＥＧＬＰＫＰＬＴＬＲＷＥＰ（配列番号８８）
【０１１９】
免疫調節ポリペプチド
本開示の多量体ポリペプチドは、上記のような変異体免疫調節ポリペプチドを含む。従って、本開示の多量体ポリペプチドは、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドを含む。
【０１２０】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ａに示されるアミノ酸配列を含むＣＤ８０ポリペプチドのＣＤ２８に対する結合親和性と比較して、ＣＤ２８への結合親和性の低減を示す。例えば、一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ａに示されるアミノ酸配列を含むＣＤ８０ポリペプチドの、図３Ａ〜３Ｃのうちの１つに示されるアミノ酸配列を含むＣＤ２８ポリペプチドに対する結合親和性よりも小さい結合親和性で、ＣＤ２８に結合する。例えば、一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ａに示されるアミノ酸配列を含むＣＤ８０ポリペプチドの、ＣＤ２８（例えば、図３Ａ〜３Ｃのうちの１つに示されるアミノ酸配列を含むＣＤ２８ポリペプチド）に対する結合親和性よりも、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％低い、少なくとも５５％低い、少なくとも６０％低い、少なくとも６５％低い、少なくとも７０％低い、少なくとも７５％低い、少なくとも８０％低い、少なくとも８５％低い、少なくとも９０％低い、少なくとも９５％低い、または９５％を超えて低い結合親和性で、ＣＤ２８に結合する。
【０１２１】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、配列番号１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤ８０ポリペプチドのＣＤ２８に対する結合親和性と比較して、ＣＤ２８への結合親和性の低減を示す。例えば、一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、配列番号１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤ８０ポリペプチドの、図３Ａ〜３Ｃのうちの１つに示されるアミノ酸配列を含むＣＤ２８ポリペプチドに対する結合親和性よりも小さい結合親和性で、ＣＤ２８に結合する。例えば、一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、配列番号１に示されるアミノ酸配列を含むＣＤ８０ポリペプチドの、ＣＤ２８（例えば、図３Ａ〜３Ｃのうちの１つに示されるアミノ酸配列を含むＣＤ２８ポリペプチド）に対する結合親和性よりも、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％低い、少なくとも５５％低い、少なくとも６０％低い、少なくとも６５％低い、少なくとも７０％低い、少なくとも７５％低い、少なくとも８０％低い、少なくとも８５％低い、少なくとも９０％低い、少なくとも９５％低い、または９５％を超えて低い結合親和性で、ＣＤ２８に結合する。
【０１２２】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、１００ｎＭ〜１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。別の例として、一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８（例えば、図３Ａ〜３Ｃのうちの１つに示されるアミノ酸配列を含むＣＤ２８ポリペプチド）に対する結合親和性を有する。
【０１２３】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ａに示されるアミノ酸配列を含むＣＤ８０ポリペプチドの結合親和性と比較して、ＣＴＬＡ４への結合親和性の低減を示す。例えば、一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ａに示されるアミノ酸配列を含むＣＤ８０ポリペプチドの、図３Ｄに示されるアミノ酸配列を含むＣＴＬＡ４ポリペプチドに対する結合親和性よりも小さい結合親和性で、ＣＴＬＡ４に結合する。例えば、一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ａに示されるアミノ酸配列を含むＣＤ８０ポリペプチドの、ＣＴＬＡ４（例えば、図３Ｄ示されるアミノ酸配列を含むＣＤ２８ポリペプチド）に対する結合親和性よりも、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、５０％低い、少なくとも５５％低い、少なくとも６０％低い、少なくとも６５％低い、少なくとも７０％低い、少なくとも７５％低い、少なくとも８０％低い、少なくとも８５％低い、少なくとも９０％低い、少なくとも９５％低い、または９５％を超えて低い結合親和性で、ＣＴＬＡ４に結合する。
【０１２４】
Ｎ１９置換
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｂに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１９は、アスパラギン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１９は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｂに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１９は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｂに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１９は、Ａｌａである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｂに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１９は、Ｇｌｙである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｂに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１９は、Ｖａｌである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｂに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１９は、Ｌｅｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｂに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１９は、Ｉｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１０���μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【０１２５】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｎ１９にアミノ酸置換を有する、図２Ａに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｎ１９にアミノ酸置換を有する、配列番号１に示されるアミノ酸配列を含む。例えば、一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｂに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、アスパラギン以外の任意のアミノ酸であり、例えば、「ｘ」は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕとすることができる）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｂに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｂに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｂに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｖａｌである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｂに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｌｅｕである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｂに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｇｌｙである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｂに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｉｌｅである）を含む。例えば、一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｃに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【０１２６】
Ｎ６３置換
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｄに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸６３は、アスパラギン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸６３は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｄに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸６３は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｄに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸６３は、Ａｌａである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｄに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸６３は、Ｇｌｙである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｄに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸６３は、Ｖａｌである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｄに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸６３は、Ｌｅｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｄに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸６３は、Ｉｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１０���μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【０１２７】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｎ６３にアミノ酸置換を有する、図２Ａに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｎ６３にアミノ酸置換を有する、配列番号１に示されるアミノ酸配列を含む。例えば、一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｄに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、アスパラギン以外の任意のアミノ酸であり、例えば、「ｘ」は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕとすることができる）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｄに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｄに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｄに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｖａｌである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｄに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｌｅｕである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｄに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｇｌｙである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｄに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｉｌｅである）を含む。例えば、一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｅに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【０１２８】
Ｉ６７置換
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｆに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸６７は、イソロイシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸６７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｆに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸６７は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、またはＬｅｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｆに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸６７は、Ａｌａである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｆに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸６７は、Ｇｌｙである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｆに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸６７は、Ｖａｌである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｆに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸６７は、Ｌｅｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【０１２９】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｉ６７にアミノ酸置換を有する、図２Ａに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｉ６７にアミノ酸置換を有する、配列番号１に示されるアミノ酸配列を含む。例えば、一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｆに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、アスパラギン以外の任意のアミノ酸であり、例えば、「ｘ」は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕとすることができる）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｆに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、またはＬｅｕである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｆに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｆに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｖａｌである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｆに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｌｅｕである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｆに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｇｌｙである）を含む。例えば、一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｇに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【０１３０】
Ｋ８６置換
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｈに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸８６は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸８６は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｈに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸８６は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｈに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸８６は、Ａｌａである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｈに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸８６は、Ｇｌｙである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｈに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸８６は、Ｖａｌである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｈに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸８６は、Ｌｅｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｈに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸８６は、Ｉｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭ��あるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【０１３１】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｋ８６にアミノ酸置換を有する、図２Ａに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｋ８６にアミノ酸置換を有する、配列番号１に示されるアミノ酸配列を含む。例えば、一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｈに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、リシン以外の任意のアミノ酸であり、例えば、「ｘ」は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕとすることができる）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｈに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｈに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｈに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｖａｌである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｈに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｌｅｕである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｈに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｇｌｙである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｈに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｉｌｅである）を含む。例えば、一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｉに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【０１３２】
Ｑ１５７置換
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｊに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１５７は、グルタミン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１５７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｊに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１５７は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｊに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１５７は、Ａｌａである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｊに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１５７は、Ｇｌｙである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｊに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１５７は、Ｖａｌである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｊに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１５７は、Ｌｅｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｊに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１５７は、Ｉｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【０１３３】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｑ１５７にアミノ酸置換を有する、図２Ａに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｑ１５７にアミノ酸置換を有する、配列番号１に示されるアミノ酸配列を含む。例えば、一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｊに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、グルタミン以外の任意のアミノ酸であり、例えば、「ｘ」は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕとすることができる）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｊに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｊに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｊに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｖａｌである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｊに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｌｅｕである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｊに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｇｌｙである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｊに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｉｌｅである）を含む。例えば、一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｋに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【０１３４】
Ｄ１５８置換
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｌに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１５８は、アスパラギン酸以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１５８は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、またはＧｌｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｌに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１５８は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｌに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１５８は、Ａｌａである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｌに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１５８は、Ｇｌｙである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｌに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１５８は、Ｖａｌである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｌに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１５８は、Ｌｅｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｌに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１５８は、Ｉｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【０１３５】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｄ１５８にアミノ酸置換を有する、図２Ａに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｄ１５８にアミノ酸置換を有する、配列番号１に示されるアミノ酸配列を含む。例えば、一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｌに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、アスパラギン酸以外の任意のアミノ酸であり、例えば、「ｘ」は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、またはＧｌｕとすることができる）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｌに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｌに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｌに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｖａｌである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｌに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｌｅｕである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｌに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｇｌｙである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｌに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｉｌｅである）を含む。例えば、一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｍに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【０１３６】
Ｌ２５置換
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｎに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸２５は、ロイシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸２５は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｎに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸２５は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｎに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸２５は、Ａｌａである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｎに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸２５は、Ｇｌｙである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｎに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸２５は、Ｖａｌである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｎに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸２５は、Ｉｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【０１３７】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｌ２５にアミノ酸置換を有する、図２Ａに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｌ２５にアミノ酸置換を有する、配列番号１に示されるアミノ酸配列を含む。例えば、一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｎに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、ロイシン以外の任意のアミノ酸であり、例えば、「ｘ」は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕとすることができる）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｎに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、またはＩｌｅである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｎに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｎに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｖａｌである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｎに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｌｅｕである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｎに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｇｌｙである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｎに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｉｌｅである）を含む。例えば、一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｏに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【０１３８】
Ｙ３１置換
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｐに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３１は、チロシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸３１は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｐに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３１は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｐに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３１は、Ａｌａである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｐに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３１は、Ｇｌｙである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｐに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３１は、Ｖａｌである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｐに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３１は、Ｌｅｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｐに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３１は、Ｉｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μ��であるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【０１３９】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｙ３１にアミノ酸置換を有する、図２Ａに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｙ３１にアミノ酸置換を有する、配列番号１に示されるアミノ酸配列を含む。例えば、一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｐに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、チロシン以外の任意のアミノ酸であり、例えば、「ｘ」は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕとすることができる）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｐに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｐに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｐに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｖａｌである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｐに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｌｅｕである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｐに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｇｌｙである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｐに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｉｌｅである）を含む。例えば、一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｐに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【０１４０】
Ｑ３３置換
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｒに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３３は、グルタミン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸３３は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｒに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３３は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｒに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３３は、Ａｌａである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｒに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３３は、Ｇｌｙである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｒに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３３は、Ｖａｌである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｒに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３３は、Ｌｅｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｒに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３３は、Ｉｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００��ＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【０１４１】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｑ３３にアミノ酸置換を有する、図２Ａに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｑ３３にアミノ酸置換を有する、配列番号１に示されるアミノ酸配列を含む。例えば、一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｒに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、グルタミン以外の任意のアミノ酸であり、例えば、「ｘ」は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕとすることができる）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｒに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｒに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｒに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｖａｌである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｒに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｌｅｕである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｒに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｇｌｙである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｒに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｉｌｅである）を含む。例えば、一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｓに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【０１４２】
Ｍ３８置換
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｔに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３８は、メチオニン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸３８は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｔに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３８は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｔに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３８は、Ａｌａである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｔに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３８は、Ｇｌｙである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｔに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３８は、Ｖａｌである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｔに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３８は、Ｌｅｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｔに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３８は、Ｉｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００��ＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【０１４３】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｍ３８にアミノ酸置換を有する、図２Ａに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｍ３８にアミノ酸置換を有する、配列番号１に示されるアミノ酸配列を含む。例えば、一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｔに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、メチオニン以外の任意のアミノ酸であり、例えば、「ｘ」は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕとすることができる）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｔに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｔに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｔに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｖａｌである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｔに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｌｅｕである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｔに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｇｌｙである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｔに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｉｌｅである）を含む。例えば、一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｕに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【０１４４】
Ｖ３９置換
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｖに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３９は、バリン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸３９は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｖに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３９は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｖに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３９は、Ａｌａである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｖに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３９は、Ｇｌｙである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｖに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３９は、Ｌｅｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｖに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３９は、Ｉｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【０１４５】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｖ３９にアミノ酸置換を有する、図２Ａに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｖ３９にアミノ酸置換を有する、配列番号１に示されるアミノ酸配列を含む。例えば、一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｖに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、バリン以外の任意のアミノ酸であり、例えば、「ｘ」は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕとすることができる）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｖに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｖに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｖに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｖａｌである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｖに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｌｅｕである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｖに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｇｌｙである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｖに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｉｌｅである）を含む。例えば、一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｗに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【０１４６】
Ｉ４９置換
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｘに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸４９は、イソロイシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸４９は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｘに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸４９は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、またはＬｅｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｘに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸４９は、Ａｌａである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｘに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸４９は、Ｇｌｙである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｘに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸４９は、Ｖａｌである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｘに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸４９は、Ｌｅｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【０１４７】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｉ４９にアミノ酸置換を有する、図２Ａに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｉ４９にアミノ酸置換を有する、配列番号１に示されるアミノ酸配列を含む。例えば、一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｘに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、イソロイシン以外の任意のアミノ酸であり、例えば、「ｘ」は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕとすることができる）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｘに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、またはＬｅｕである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｘに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｘに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｖａｌである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｘに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｌｅｕである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｘに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｇｌｙである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｘに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｉｌｅである）を含む。例えば、一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｙに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【０１４８】
Ｙ５３置換
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｚに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸５３は、チロシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸５３は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｚに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸５３は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｚに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸５３は、Ａｌａである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｚに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸５３は、Ｇｌｙである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｚに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸５３は、Ｖａｌである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｚに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸５３は、Ｌｅｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｚに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸５３は、Ｉｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μ��であるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【０１４９】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｙ５３にアミノ酸置換を有する、図２Ａに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｙ５３にアミノ酸置換を有する、配列番号１に示されるアミノ酸配列を含む。例えば、一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｚに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、チロシン以外の任意のアミノ酸であり、例えば、「ｘ」は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕとすることができる）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｚに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｚに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｚに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｖａｌである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｚに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｌｅｕである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｚに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｇｌｙである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２Ｚに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｉｌｅである）を含む。例えば、一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＡＡに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【０１５０】
Ｄ６０置換
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＢＢに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸６０は、アスパラギン酸以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸６０は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、またはＧｌｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＢＢに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸６０は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＢＢに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸６０は、Ａｌａである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＢＢに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸６０は、Ｇｌｙである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＢＢに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸６０は、Ｖａｌである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＢＢに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸６０は、Ｌｅｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＢＢに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸６０は、Ｉｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【０１５１】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｄ６０にアミノ酸置換を有する、図２Ａに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｄ６０にアミノ酸置換を有する、配列番号１に示されるアミノ酸配列を含む。例えば、一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＢＢに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、アスパラギン酸以外の任意のアミノ酸であり、例えば、「ｘ」は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、またはＧｌｕとすることができる）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＢＢに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＢＢに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＢＢに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｖａｌである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＢＢに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｌｅｕである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＢＢに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｇｌｙである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＢＢに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｉｌｅである）を含む。例えば、一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＣＣに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【０１５２】
Ｆ１０８置換
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＤＤに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１０８は、フェニルアラニン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１０８は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＤＤに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１０８は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＤＤに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１０８は、Ａｌａである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＤＤに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１０８は、Ｇｌｙである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＤＤに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１０８は、Ｖａｌである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＤＤに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１０８は、Ｌｅｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＤＤに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１０８は、Ｉｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜��７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【０１５３】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｆ１０８にアミノ酸置換を有する、図２Ａに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｆ１０８にアミノ酸置換を有する、配列番号１に示されるアミノ酸配列を含む。例えば、一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＤＤに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、フェニルアラニン以外の任意のアミノ酸であり、例えば、「ｘ」は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕとすることができる）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＤＤに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＤＤに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＤＤに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｖａｌである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＤＤに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｌｅｕである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＤＤに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｇｌｙである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＤＤに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｉｌｅである）を含む。例えば、一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＥＥに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【０１５４】
Ｓ１５６置換
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＦＦに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１５６は、セリン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１０８は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＦＦに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１５６は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＦＦに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１５６は、Ａｌａである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＦＦに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１５６は、Ｇｌｙである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＦＦに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１５６は、Ｖａｌである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＦＦに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１５６は、Ｌｅｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＦＦに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１５６は、Ｉｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【０１５５】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｓ１５６にアミノ酸置換を有する、図２Ａに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｓ１５６にアミノ酸置換を有する、配列番号１に示されるアミノ酸配列を含む。例えば、一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＦＦに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、セリン以外の任意のアミノ酸であり、例えば、「ｘ」は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕとすることができる）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＦＦに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＦＦに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＦＦに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｖａｌである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＦＦに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｌｅｕである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＦＦに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｇｌｙである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＦＦに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｉｌｅである）を含む。例えば、一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＧＧに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【０１５６】
Ｐ１１１置換
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＨＨに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１１１は、プロリン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１１１は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＨＨに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１１１は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＨＨに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１１１は、Ａｌａである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＨＨに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１１１は、Ｇｌｙである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＨＨに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１１１は、Ｖａｌである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＨＨに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１１１は、Ｌｅｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＨＨに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１１１は、Ｉｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【０１５７】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｐ１１１にアミノ酸置換を有する、図２Ａに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、Ｐ１１１にアミノ酸置換を有する、配列番号１に示されるアミノ酸配列を含む。例えば、一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＨＨに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、プロリン以外の任意のアミノ酸であり、例えば、「ｘ」は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕとすることができる）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＨＨに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＨＨに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ａｌａである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＨＨに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｖａｌである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＨＨに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｌｅｕである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＨＨに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｇｌｙである）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＨＨに示されるアミノ酸配列（式中、「ｘ」は、Ｉｌｅである）を含む。例えば、一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドに存在する変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、図２ＩＩに示されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、約１００ｎＭ〜１５０ｎＭ、約１５０ｎＭ〜約２００ｎＭ、約２００ｎＭ〜約２５０ｎＭ、約２５０ｎＭ〜約３００ｎＭ、約３００ｎＭ〜約３５０ｎＭ、約３５０ｎＭ〜約４００ｎＭ、約４００ｎＭ〜約５００ｎＭ、約５００ｎＭ〜約６００ｎＭ、約６００ｎＭ〜約７００ｎＭ、約７００ｎＭ〜約８００ｎＭ、約８００ｎＭ〜約９００ｎＭ、約９００ｎＭ〜約１μＭ、約１μＭ〜約５μＭ、約５μＭ〜約１０μＭ、約１０μＭ〜約１５μＭ、約１５μＭ〜約２０μＭ、約２０μＭ〜約２５μＭ、約２５μＭ〜約５０μＭ、約５０μＭ〜約７５μＭ、または約７５μＭ〜約１００μＭであるＣＤ２８への結合親和性を有する。
【０１５８】
さらなる免疫調節ポリペプチド
本開示の多量体ポリペプチドの免疫調節ポリペプチドは、活性化免疫調節ポリペプチドまたは阻害性免疫調節ポリペプチドとすることができる。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、単一の免疫調節ポリペプチドを含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、２つの免疫調節ポリペプチドを含む。一部の場合では、２つの免疫調節ポリペプチドは、ポリペプチド鎖内に縦一列に並んでいる。一部の場合では、２つの免疫調節ポリペプチドは、別々のポリペプチド鎖にある。一部の場合では、２つの免疫調節ポリペプチドは、別々のポリペプチド鎖にあり、互いにジスルフィド結合される。
【０１５９】
本開示の多量体ポリペプチドの免疫調節ポリペプチドは、一部の場合では、Ｔ細胞調節ポリペプチドである。一部の場合では、Ｔ細胞調節ポリペプチドは、刺激性（活性化）Ｔ細胞調節ポリペプチドである。一部の場合では、Ｔ細胞調節ポリペプチドは、阻害性Ｔ細胞調節ポリペプチドである。Ｔ細胞調節ポリペプチドは、抗体、ペプチドリガンド、Ｔ細胞共刺激ポリペプチド、サイトカイン、または毒素とすることができる。
【０１６０】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドの免疫調節ポリペプチドは、エピトープ特異的Ｔ細胞の表面上に発現される共刺激ポリペプチドに特異的に結合する抗体ベースまたは非抗体ベースの認識の部分である。抗体ベースの認識部分は、例えば、抗体、限定されないが、Ｆａｂ、Ｆｖ、一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、及びＦｄフラグメントを含む抗原への特異的結合を保持する抗体のフラグメント、キメラ抗体、ヒト化抗体、一本鎖抗体（ｓｃＡｂ）、単一ドメイン抗体（ｄＡｂ）、単一ドメイン重鎖抗体、単一ドメイン軽鎖抗体など、を含む。好適な非抗体ベースの認識部分としては、例えば、アフィボディ、操作されたＫｕｎｉｔｚドメイン、モノボディ（アドネクチン）、アンチカリン、アプタマー、操作されたアンキリンリピートドメイン（ＤＡＲＰｉｎ）、システインリッチポリペプチド（例えば、システインリッチノッティンペプチド）の結合部位、アビマー（ａｖｉｍｅｒｓ）、アフリン（ａｆｆｌｉｎｓ）などが挙げられる。抗体ベースまたは非抗体ベースの認識部分は、エピトープ特異的Ｔ細胞の表面上に発現される共刺激ポリペプチドに特異的に結合し、このような共刺激ポリペプチドとしては、ＣＴＬＡ４、ＰＤ１、ＩＣＯＳ、ＯＸ４０、ＣＤ２０、及び４−１ＢＢが挙げられるが、これらに限定されない。エピトープ特異的Ｔ細胞の表面上に発現される共刺激ポリペプチドは、当該技術分野で既知である。
【０１６１】
複数の免疫調節ドメイン
上述したように、一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、２つ以上の免疫調節ポリペプチドを含み、２つ以上の免疫調節ポリペプチドのうちの少なくとも１つは、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドである。
【０１６２】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのうちの２つ以上のコピーを含む。一部の場合では、２つ以上の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、本開示の多量体ポリペプチドと同じポリペプチド鎖上にある。一部の場合では、２つ以上の変異体ＣＤ８０ポリペプチドは、本開示の多量体ポリペプチドの別々のポリペプチド鎖上にある。
【０１６３】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、第１の免疫調節ポリペプチド、及び少なくとも第２の免疫調節ポリペプチドを含み、第１の免疫調節ポリペプチドは、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドであり、第２の免疫調節ポリペプチドは、ＣＤ８０ポリペプチドではない。例えば、一部の場合では、第２の免疫調節ポリペプチドは、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）スーパーファミリーのメンバーであり、例えば、ＦａｓＬポリペプチド、４−１ＢＢＬポリペプチド、ＣＤ４０ポリペプチド、ＯＸ４０Ｌポリペプチド、ＣＤ３０Ｌポリペプチド、ＣＤ７０ポリペプチドなどである。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドの第２の免疫調節ポリペプチドは、Ｔ細胞共刺激ポリペプチドであり、免疫グロブリン（Ｉｇ）スーパーファミリーのメンバー、例えば、ＣＤ７ポリペプチド、ＣＤ８６ポリペプチド、ＩＣＡＭポリペプチドなど、である。一部の場合では、第２の免疫調節ポリペプチドは、４−１ＢＢＬ、ＯＸ４０Ｌ、ＩＣＯＳ−Ｌ、ＩＣＡＭ、ＰＤ−Ｌ１、ＦａｓＬ、及びＰＤ−Ｌ２である。本開示の多量体ポリペプチドの好適な免疫調節ポリペプチドは、例えば、ＣＤ７、ＣＤ３０Ｌ、ＣＤ４０、ＣＤ７０、ＣＤ８３、ＨＬＡ−Ｇ、ＭＩＣＡ、ＭＩＣＢ、ＨＶＥＭ、リンホトキシンβ受容体、３／ＴＲ６、ＩＬＴ３、ＩＬＴ４、またはＨＶＥＭを含む。
【０１６４】
本開示の多量体ポリペプチドに含まれる可能性があるさらなるＴ細胞調節ドメイン（ＭＯＤ）は、天然に存在するまたは合成されたヒト遺伝子産物（タンパク質）、限定されないが、古典的及び非古典的（例えば、ＦＧＦ２、ＩＬ１、Ｓ１００Ａ４）分泌機序から生じる分泌タンパク質を全て含むヒト遺伝子産物を標的とする親和性試薬（例えば、抗体、抗体フラグメント、一本鎖Ｆｖ、アプタマー、ナノボディ）、ならびに天然に存在する遺伝的にコードされたタンパク質セグメント（１回もしくはマルチ膜スパン）または翻訳後修飾（例えば、ＧＰＩ結合）がアンカーされた全ての細胞表面タンパク質の細胞外ドメイン、を含む。細胞表面グリカンまたは他の翻訳後修飾（例えば、硫酸化）を標的とする、任意の天然に存在するまたは合成の親和性試薬（例えば、抗体、抗体フラグメント、一本鎖Ｆｖ、アプタマー、ナノボディ、レクチンなど）。例としては、ＴＮＦ／ＴＮＦＲファミリーのメンバー（ＯＸ４０Ｌ、ＩＣＯＳＬ、ＦＡＳＬ、ＬＴＡ、ＬＴＢＴＲＡＩＬ、ＣＤ１５３、ＴＮＦＳＦ９、ＲＡＮＫＬ、ＴＷＥＡＫ、ＴＮＦＳＦ１３、ＴＮＦＳＦ１３ｂ、ＴＮＦＳＦ１４、ＴＮＦＳＦ１５、ＴＮＦＳＦ１８、ＣＤ４０ＬＧ、ＣＤ７０）またはＴＮＦ／ＴＮＦＲファミリーメンバー、免疫グロブリンスーパーファミリーのメンバー（ＶＩＳＴＡ、ＰＤ１、ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２、Ｂ７１、Ｂ７２、ＣＴＬＡ４、ＣＤ２８、ＴＩＭ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ１９、Ｔ細胞受容体鎖、ＩＣＯＳ、ＩＣＯＳリガンド、ＨＨＬＡ２、ブチロフィリン、ＢＴＬＡ、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＣＤ３、ＣＤ７９ａ、ＣＤ７９ｂ、ＩｇＳＦ  ＣＡＭＳ（ＣＤ２、ＣＤ５８、ＣＤ４８、ＣＤ１５０、ＣＤ２２９、ＣＤ２４４、ＩＣＡＭ−１を含む）、白血球免疫グロブリン様受容体（ＬＩＬＲ）、キラー細胞免疫グロブリン様受容体（ＫＩＲ））、レクチンスーパーファミリーメンバー、セレクチン、サイトカイン／ケモカイン及びサイトカイン／ケモカイン受容体、成長因子及び成長因子受容体）、接着分子（インテグリン、フィブロネクチン、カドヘリン）、もしくはマルチスパン内在性膜タンパク質の細胞外ドメインに向けられた親和性試薬、または免疫グロブリンスーパーファミリー及び記載された遺伝子産物に向けられた親和性試薬、が挙げられるが、これらに限定されない。加えて、限定されないが、ウイルス配列（例えば、ＣＭＶ、ＥＢＶ）、細菌配列、真菌配列、真核生物病原体（例えば、Ｓｃｈｉｓｔｏｓｏｍａ、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ、Ｂａｂｅｓｉａ、Ｅｉｍｅｒｉａ、Ｔｈｅｉｌｅｒｉａ、Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ、Ｅｎｔａｍｏｅｂａ、Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａ、及びＴｒｙｐａｎｏｓｏｍａ）、ならびに哺乳動物由来のコード領域を含むこれらの遺伝子産物の活性なホモログ／オーソログ。加えて、ＭＯＤは、ヒト遺伝子産物を標的とする小分子薬物を含んでもよい。
【０１６５】
骨格ポリペプチド
本開示のＴ細胞調節多量体ポリペプチドは、Ｆｃポリペプチドまたは別の好適な骨格ポリペプチドを含む。
【０１６６】
好適な骨格ポリペプチドは、抗体ベースの骨格ポリペプチド及び非抗体ベースの骨格を含む。非抗体ベースの骨格は、例えば、アルブミン、ＸＴＥＮ（拡張組換え）ポリペプチド、トランスフェリン、Ｆｃ受容体ポリペプチド、エラスチン様ポリペプチド（例えば、Ｈａｓｓｏｕｎｅｈ  ｅｔ  ａｌ．（２０１２）Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍｏｌ．５０２：２１５を参照のこと、例えば、（Ｖａｌ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｘ−Ｇｌｙ）（式中、Ｘは、プロリン以外の任意のアミノ酸である）のペンタペプチド繰り返し単位を含むポリペプチド）、アルブミン結合ポリペプチド、絹様ポリペプチド（例えば、Ｖａｌｌｕｚｚｉ  ｅｔ  ａｌ．（２００２）Ｐｈｉｌｏｓ  Ｔｒａｎｓ  Ｒ  Ｓｏｃ  Ｌｏｎｄ  Ｂ  Ｂｉｏｌ  Ｓｃｉ．３５７：１６５を参照のこと）、絹−エラスチン様ポリペプチド（ＳＥＬＰ、例えば、Ｍｅｇｅｅｄ  ｅｔ  ａｌ．（２００２）Ａｄｖ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ  Ｒｅｖ．５４：１０７５を参照のこと）などを含む。好適なＸＴＥＮポリペプチドとしては、例えば、ＷＯ２００９／０２３２７０、ＷＯ２０１０／０９１１２２、ＷＯ２００７／１０３５１５、ＵＳ２０１０／０１８９６８２、及びＵＳ２００９／００９２５８２に開示されるものが挙げられ、Ｓｃｈｅｌｌｅｎｂｅｒｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（２００９）Ｎａｔ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２７：１１８６）も参照のこと。好適なアルブミンポリペプチドとしては、例えば、ヒト血清アルブミンが挙げられる。
【０１６７】
好適な骨格ポリペプチドは、一部の場合では、半減期が延長するポリペプチドであるであろう。従って、一部の場合では、好適な骨格ポリペプチドは、骨格ポリペプチドを欠く対照多量体ポリペプチドと比較して、多量体ポリペプチドのインビボ半減期（例えば、血清半減期）を増加させる。例えば、一部の場合では、骨格ポリペプチドは、骨格ポリペプチドを欠く対照多量体ポリペプチドと比較して、多量体ポリペプチドのインビボ半減期（例えば、血清半減期）を、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約５０％、少なくとも約２倍、少なくとも約２．５倍、少なくとも約５倍、少なくとも約１０倍、少なくとも約２５倍、少なくとも約５０倍、少なくとも約１００倍、または１００倍を超えて増加させる。一例として、一部の場合では、Ｆｃポリペプチドは、Ｆｃポリペプチドを欠く対照多量体ポリペプチドと比較して、多量体ポリペプチドのインビボ半減期（例えば、血清半減期）を、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約５０％、少なくとも約２倍、少なくとも約２．５倍、少なくとも約５倍、少なくとも約１０倍、少なくとも約２５倍、少なくとも約５０倍、少なくとも約１００倍、または１００倍を超えて増加させる。
【０１６８】
Ｆｃポリペプチド
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドの第１及び／または第２のポリペプチド鎖は、Ｆｃポリペプチドを含む。本開示の多量体ポリペプチドのＦｃポリペプチドは、ヒトＩｇＧ１  Ｆｃ、ヒトＩｇＧ２  Ｆｃ、ヒトＩｇＧ３  Ｆｃ、ヒトＩｇＧ４  Ｆｃなどとすることができる。一部の場合では、Ｆｃポリペプチドは、図４Ａ〜Ｃに示されるＦｃ領域のアミノ酸配列と、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、Ｆｃ領域は、図４Ａに示されるヒトＩｇＧ１Ｆｃポリペプチドと、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、Ｆｃ領域は、図４Ａに示されるヒトＩｇＧ１Ｆｃポリペプチドと、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、Ｎ７７の置換を含み、例えば、Ｆｃポリペプチドは、Ｎ７７Ａ置換を含む。一部の場合では、Ｆｃポリペプチドは、図４Ａに示されるヒトＩｇＧ２  Ｆｃポリペプチドと、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、例えば、Ｆｃポリペプチドは、図４Ａに示されるヒトＩｇＧ２Ｆｃポリペプチドのアミノ酸９９〜３２５と、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、Ｆｃポリペプチドは、図４Ａに示されるヒトＩｇＧ３Ｆｃポリペプチドと、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、例えば、Ｆｃポリペプチドは、図４Ａに示されるヒトＩｇＧ３Ｆｃポリペプチドのアミノ酸１９〜２４６と、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、Ｆｃポリペプチドは、図４Ｂに示されるヒトＩｇＭＦｃポリペプチドと、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または１０��％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、例えば、Ｆｃポリペプチドは、図４Ｂに示されるヒトＩｇＭＦｃポリペプチドのアミノ酸１〜２７６と、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、Ｆｃポリペプチドは、図４Ｃに示されるヒトＩｇＡＦｃポリペプチドと、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、例えば、Ｆｃポリペプチドは、図４Ｃに示されるヒトＩｇＡＦｃポリペプチドのアミノ酸１〜２３４と、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または１００％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１６９】
追加のポリペプチド
本開示の多量体ポリペプチドのポリペプチド鎖は、上記のようなものに加えて、１つ以上のポリペプチドを含むことができる。好適な追加のポリペプチドには、エピトープタグ及び親和性ドメインを含む。１つ以上の追加のポリペプチドは、本開示の多量体ポリペプチドのポリペプチド鎖のＮ末端に、本開示の多量体ポリペプチドのポリペプチド鎖のＣ末端に、または本開示の多量体ポリペプチドのポリペプチド鎖の内部に、含まれる可能性がある。
【０１７０】
エピトープタグ
好適なエピトープタグとしては、赤血球凝集素（ＨＡ；例えば、ＹＰＹＤＶＰＤＹＡ（配列番号８９）、ＦＬＡＧ（例えば、ＤＹＫＤＤＤＤＫ（配列番号９０）、ｃ−ｍｙｃ（例えば、ＥＱＫＬＩＳＥＥＤＬ：配列番号９１）などが挙げられる。
【０１７１】
親和性ドメイン
親和性ドメインには、例えば、固体支持体上に固定されたものなどの結合パートナーと相互作用することができるペプチド配列を含み、同定または精製に有用である。発現されたタンパク質に融合される時、ヒスチジンなどの複数の連続した単一アミノ酸をコードするＤＮＡ配列は、ニッケルセファロースなどの樹脂カラムへの高親和性結合により組換えタンパク質のワンステップ精製に使用されてもよい。例示的な親和性ドメインとしては、Ｈｉｓ５（ＨＨＨＨＨ）（配列番号９２）、ＨｉｓＸ６（ＨＨＨＨＨＨ）（配列番号９３）、Ｃ−ｍｙｃ（ＥＱＫＬＩＳＥＥＤＬ）（配列番号９４）、Ｆｌａｇ（ＤＹＫＤＤＤＤＫ）（配列番号９５）、ＳｔｒｅｐＴａｇ（ＷＳＨＰＱＦＥＫ）（配列番号９６）、赤血球凝集素、例えば、ＨＡタグ（ＹＰＹＤＶＰＤＹＡ）（配列番号９７）、グルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼ（ＧＳＴ）、チオレドキシン、セルロース結合ドメイン、ＲＹＩＲＳ（配列番号９８）、Ｐｈｅ−Ｈｉｓ−Ｈｉｓ−Ｔｈｒ（配列番号９９）、キチン結合ドメイン、Ｓ−ペプチド、Ｔ７ペプチド、ＳＨ２ドメイン、Ｃ末端ＲＮＡタグ、ＷＥＡＡＡＲＥＡＣＣＲＥＣＣＡＲＡ（配列番号１００）、金属結合ドメイン、例えば、亜鉛結合ドメインまたはカルシウム結合ドメイン、例えば、カルシウム結合タンパク質由来のもの、例えば、カルモジュリン、トロポニンＣ、カルシニューリンＢ、ミオシン軽鎖、リカバリン、Ｓ−モジュリン、ビシニン、ＶＩＬＩＰ、ニューロカルシン、ヒポカイン、フレクエニン、カルトラクチン、カルパイン大サブユニット、Ｓ１００タンパク質、パルブアルブミン、カルビンジンＤ９Ｋ、カルビンジンＤ２８Ｋ、及びカルレチニン、インテイン、ビオチン、ストレプトアビジン、ＭｙｏＤ、Ｉｄ、ロイシンジッパー配列、ならびにマルトース結合タンパク質が挙げられる。
【０１７２】
例示的な多量体ポリペプチド
本開示の例示的な多量体ポリペプチドを以下に記載する。
【０１７３】
Ｎ１９
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、及び、ｉｉｉ）図２Ｂに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１９は、アスパラギン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１９は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸１９は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む変異体ＣＤ８０ポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）図２Ｂに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１９は、アスパラギン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１９は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸１９は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、ｉｉｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、及び、ｖ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２Ｂに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１９は、アスパラギン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１９は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸１９は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならび���、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｉ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、及び、ｉｉｉ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、ならびにｖ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２Ｂに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１９は、アスパラギン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１９は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸１９は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１７４】
Ｎ６３
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、及び、ｉｉｉ）図２Ｄに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸６３は、アスパラギン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸６３は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸６３は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む変異体ＣＤ８０ポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）図２Ｄに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸６３は、アスパラギン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸６３は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸６３は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。
【０１７５】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、ｉｉｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、及び、ｖ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドはそれぞれ、図２Ｄに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸６３は、アスパラギン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸６３は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸６３は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１７６】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、ｉｉｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）リンカー、ｖ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｖｉ）リンカー、及び、ｖｉｉ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドはそれぞれ、図２Ｄに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸６３は、アスパラギン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸６３は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸６３は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、リンカーは、（ＧＳＳＳＳ）ｎ（配列番号７３）配列（式中、ｎは、１、２、３、４、または５である）を含む。一部の場合では、ｎは、４である。一部の場合では、ｎは、５である。
【０１７７】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｉ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、及び、ｉｉｉ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、ならびにｖ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドはそれぞれ、図２Ｄに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸６３は、アスパラギン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸６３は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸６３は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１７８】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｉ）リンカー、ｉｉｉ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）リンカー、ｉｖ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｖ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｖｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドはそれぞれ、図２Ｄに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸６３は、アスパラギン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸６３は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸６３は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、リンカーは、（ＧＳＳＳＳ）ｎ（配列番号７３）配列（式中、ｎは、１、２、３、４、または５である）を含む。一部の場合では、ｎは、４である。一部の場合では、ｎは、５である。
【０１７９】
Ｉ６７
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、及び、ｉｉｉ）図２Ｆに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸６７は、イソロイシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸６７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸６７は、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、またはＬｅｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む変異体ＣＤ８０ポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）図２Ｆに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸６７は、イソロイシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸６７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸６７は、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、またはＬｅｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。
【０１８０】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、ｉｉｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、及び、ｖ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２Ｆに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸６７は、イソロイシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸６７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸６７は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、またはＬｅｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１８１】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、ｉｉｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）リンカー、ｖ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｖｉ）リンカー、及び、ｖｉ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２Ｆに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸６７は、イソロイシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸６７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸６７は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、またはＬｅｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、リンカーは、（ＧＳＳＳＳ）ｎ（配列番号７３）配列（式中、ｎは、１、２、３、４、または５である）を含む。一部の場合では、ｎは、４である。一部の場合では、ｎは、５である。
【０１８２】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｉ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、及び、ｉｉｉ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、ならびにｖ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２Ｆに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸６７は、イソロイシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸６７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸６７は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、またはＬｅｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１８３】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｉ）リンカー、ｉｉｉ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）リンカー、ｖ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｖｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｖｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２Ｆに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸６７は、イソロイシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸６７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸６７は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、またはＬｅｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、リンカーは、（ＧＳＳＳＳ）ｎ（配列番号７３）配列（式中、ｎは、１、２、３、４、または５である）を含む。一部の場合では、ｎは、４である。一部の場合では、ｎは、５である。
【０１８４】
Ｋ８６
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、及び、ｉｉｉ）図２Ｈに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸８６は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸８６は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸８６は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む変異体ＣＤ８０ポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）図２Ｈに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸８６は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸８６は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸８６は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。
【０１８５】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、ｉｉｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、及び、ｖ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２Ｈに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸８６は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸８６は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸８６は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１８６】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、ｉｉｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）リンカー、ｖ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｖｉ）リンカー、及び、ｖｉｉ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２Ｈに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸８６は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸８６は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸８６は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、リンカーは、（ＧＳＳＳＳ）ｎ（配列番号７３）配列（式中、ｎは、１、２、３、４、または５である）を含む。一部の場合では、ｎは、４である。一部の場合では、ｎは、５である。
【０１８７】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｉ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、及び、ｉｉｉ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、ならびにｖ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２Ｈに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸８６は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸８６は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸８６は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１８８】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｉ）リンカー、ｉｉｉ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）リンカー、ｖ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｖｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｖｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２Ｈに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸８６は、リシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸８６は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸８６は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、リンカーは、（ＧＳＳＳＳ）ｎ（配列番号７３）配列（式中、ｎは、１、２、３、４、または５である）を含む。一部の場合では、ｎは、４である。一部の場合では、ｎは、５である。
【０１８９】
Ｑ１５７
図２Ｊに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１５７は、グルタミン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１５７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１９０】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、及び、ｉｉｉ）図２Ｊに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１５７は、グルタミン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１５７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸１５７は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む変異体ＣＤ８０ポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）図２Ｊに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１５７は、グルタミン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１５７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸１５７は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。
【０１９１】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、ｉｉｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、及び、ｖ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２Ｊに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１５７は、グルタミン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１５７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸１５７は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１９２】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、ｉｉｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）リンカー、ｖ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｖｉ）リンカー、及び、ｖｉｉ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２Ｊに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１５７は、グルタミン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１５７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸１５７は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、リンカーは、（ＧＳＳＳＳ）ｎ（配列番号７３）配列（式中、ｎは、１、２、３、４、または５である）を含む。一部の場合では、ｎは、４である。一部の場合では、ｎは、５である。
【０１９３】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｉ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、及び、ｉｉｉ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、ならびにｖ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２Ｊに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１５７は、グルタミン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１５７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸１５７は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１９４】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｉ）リンカー、ｉｉｉ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）リンカー、ｖ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｖｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｖｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２Ｊに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１５７は、グルタミン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１５７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸１５７は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、リンカーは、（ＧＳＳＳＳ）ｎ（配列番号７３）配列（式中、ｎは、１、２、３、４、または５である）を含む。一部の場合では、ｎは、４である。一部の場合では、ｎは、５である。
【０１９５】
Ｄ１５８
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、及び、ｉｉｉ）図２Ｌに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１５８は、アスパラギン酸以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１５８は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸１５８は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む変異体ＣＤ８０ポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）図２Ｌに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１５８は、アスパラギン酸以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１５８は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸１５８は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。
【０１９６】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、ｉｉｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、及び、ｖ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２Ｌに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１５８は、アスパラギン酸以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１５８は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸１５８は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１９７】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、ｉｉｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）リンカー、ｖ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、及び、ｖｉｉ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２Ｌに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１５８は、アスパラギン酸以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１５８は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸１５８は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、リンカーは、（ＧＳＳＳＳ）ｎ（配列番号７３）配列（式中、ｎは、１、２、３、４、または５である）を含む。一部の場合では、ｎは、４である。一部の場合では、ｎは、５である。
【０１９８】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｉ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、及び、ｉｉｉ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、ならびにｖ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２Ｌに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１５８は、アスパラギン酸以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１５８は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸１５８は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０１９９】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｉ）リンカー、ｉｉｉ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）リンカー、ｖ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｖｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｖｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２Ｌに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１５８は、アスパラギン酸以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１５８は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸１５８は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、リンカーは、（ＧＳＳＳＳ）ｎ（配列番号７３）配列（式中、ｎは、１、２、３、４、または５である）を含む。一部の場合では、ｎは、４である。一部の場合では、ｎは、５である。
【０２００】
Ｌ２５
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、及び、ｉｉｉ）図２Ｎに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸２５は、ロイシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸２５は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸２５は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む変異体ＣＤ８０ポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）図２Ｎに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸２５は、ロイシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸２５は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸２５は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。
【０２０１】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、ｉｉｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、及び、ｖ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２Ｎに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸２５は、ロイシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸２５は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸２５は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０２０２】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、ｉｉｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）リンカー、ｖ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｖｉ）リンカー、及び、ｖｉｉ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２Ｎに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸２５は、ロイシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸２５は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸２５は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、リンカーは、（ＧＳＳＳＳ）ｎ（配列番号７３）配列（式中、ｎは、１、２、３、４、または５である）を含む。一部の場合では、ｎは、４である。一部の場合では、ｎは、５である。
【０２０３】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｉ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、及び、ｉｉｉ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、ならびにｖ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２Ｎに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸２５は、ロイシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸２５は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸２５は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０２０４】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｉ）リンカー、ｉｉｉ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）リンカー、ｖ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｖｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｖｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２Ｎに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸２５は、ロイシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸２５は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸２５は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、リンカーは、（ＧＳＳＳＳ）ｎ（配列番号７３）配列（式中、ｎは、１、２、３、４、または５である）を含む。一部の場合では、ｎは、４である。一部の場合では、ｎは、５である。
【０２０５】
Ｙ３１
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、及び、ｉｉｉ）図２Ｐに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３１は、チロシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸３１は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸３１は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む変異体ＣＤ８０ポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）図２Ｐに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３１は、チロシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸３１は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸３１は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。
【０２０６】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、ｉｉｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、及び、ｖ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２Ｐに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３１は、チロシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸３１は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸３１は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０２０７】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、ｉｉｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）リンカー、ｖ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｖｉ）リンカー、及び、ｖｉｉ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２Ｐに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３１は、チロシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸３１は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸３１は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、リンカーは、（ＧＳＳＳＳ）ｎ（配列番号７３）配列（式中、ｎは、１、２、３、４、または５である）を含む。一部の場合では、ｎは、４である。一部の場合では、ｎは、５である。
【０２０８】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｉ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、及び、ｉｉｉ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、ならびにｖ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２Ｐに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３１は、チロシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸３１は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸３１は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０２０９】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｉ）リンカー、ｉｉｉ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）リンカー、ｖ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｖｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｖｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２Ｐに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３１は、チロシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸３１は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸３１は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、リンカーは、（ＧＳＳＳＳ）ｎ（配列番号７３）配列（式中、ｎは、１、２、３、４、または５である）を含む。一部の場合では、ｎは、４である。一部の場合では、ｎは、５である。
【０２１０】
Ｑ３３
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、及び、ｉｉｉ）図２Ｒに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３３は、グルタミン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸３３は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸３３は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む変異体ＣＤ８０ポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）図２Ｒに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３３は、グルタミン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸３３は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸３３は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。
【０２１１】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、ｉｉｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、及び、ｖ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２Ｒに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３３は、グルタミン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸３３は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸３３は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０２１２】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、ｉｉｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）リンカー、ｖ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｖｉ）リンカー、及び、ｖｉｉ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２Ｒに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３３は、グルタミン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸３３は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸３３は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、リンカーは、（ＧＳＳＳＳ）ｎ（配列番号７３）配列（式中、ｎは、１、２、３、４、または５である）を含む。一部の場合では、ｎは、４である。一部の場合では、ｎは、５である。
【０２１３】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｉ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、及び、ｉｉｉ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、ならびにｖ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２Ｒに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３３は、グルタミン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸３３は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸３３は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０２１４】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｉ）リンカー、ｉｉｉ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）リンカー、ｖ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｖｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｖｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２Ｒに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３３は、グルタミン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸３３は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸３３は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、リンカーは、（ＧＳＳＳＳ）ｎ（配列番号７３）配列（式中、ｎは、１、２、３、４、または５である）を含む。一部の場合では、ｎは、４である。一部の場合では、ｎは、５である。
【０２１５】
Ｍ３８
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、及び、ｉｉｉ）図２Ｔに示されるアミノ酸配列と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む変異体ＣＤ８０ポリペプチド、を含む第１のポリペプチド（式中、アミノ酸３８は、メチオニン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸３８は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸３８は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）図２Ｔに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３８は、メチオニン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸３８は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸３８は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。
【０２１６】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、ｉｉｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、及び、ｖ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２Ｔに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３８は、メチオニン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸３８は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸３８は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０２１７】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、ｉｉｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）リンカー、ｖ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｖｉ）リンカー、及び、ｖｉｉ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２Ｔに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３８は、メチオニン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸３８は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸３８は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、リンカーは、（ＧＳＳＳＳ）ｎ（配列番号７３）配列（式中、ｎは、１、２、３、４、または５である）を含む。一部の場合では、ｎは、４である。一部の場合では、ｎは、５である。
【０２１８】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｉ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、及び、ｉｉｉ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、ならびにｖ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２Ｔに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３８は、メチオニン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸３８は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸３８は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０２１９】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｉ）リンカー、ｉｉｉ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）リンカー、ｖ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｖｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｖｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２Ｔに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３８は、メチオニン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸３８は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸３８は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、リンカーは、（ＧＳＳＳＳ）ｎ（配列番号７３）配列（式中、ｎは、１、２、３、４、または５である）を含む。一部の場合では、ｎは、４である。一部の場合では、ｎは、５である。
【０２２０】
Ｖ３９
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、及び、ｉｉｉ）図２Ｖに示されるアミノ酸配列と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む変異体ＣＤ８０ポリペプチド、を含む第１のポリペプチド（式中、アミノ酸３９は、バリン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸３９は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸３９は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）図２Ｖに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３９は、バリン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸３９は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸３９は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。
【０２２１】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、ｉｉｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、及び、ｖ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２Ｖに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３９は、バリン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸３９は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸３９は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０２２２】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、ｉｉｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）リンカー、ｖ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｖｉ）リンカー、及び、ｖｉｉ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２Ｖに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３９は、バリン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸３９は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸３９は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、リンカーは、（ＧＳＳＳＳ）ｎ（配列番号７３）配列（式中、ｎは、１、２、３、４、または５である）を含む。一部の場合では、ｎは、４である。一部の場合では、ｎは、５である。
【０２２３】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｉ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、及び、ｉｉｉ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、ならびにｖ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２Ｖに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３９は、バリン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸３９は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸３９は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０２２４】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｉ）リンカー、ｉｉｉ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）リンカー、ｖ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｖｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｖｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２Ｖに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸３９は、バリン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸３９は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸３９は、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、リンカーは、（ＧＳＳＳＳ）ｎ（配列番号７３）配列（式中、ｎは、１、２、３、４、または５である）を含む。一部の場合では、ｎは、４である。一部の場合では、ｎは、５である。
【０２２５】
Ｉ４９
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、及び、ｉｉｉ）図２Ｘに示されるアミノ酸配列と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む変異体ＣＤ８０ポリペプチド、を含む第１のポリペプチド（式中、アミノ酸４９は、イソロイシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸４９は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸４９は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、またはＬｅｕである）、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）図２Ｘに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸４９は、イソロイシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸４９は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸４９は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、またはＬｅｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。
【０２２６】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、ｉｉｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、及び、ｖ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２Ｘに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸４９は、イソロイシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸４９は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸４９は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、またはＬｅｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０２２７】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、ｉｉｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）リンカー、ｖ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｖｉ）リンカー、及び、ｖｉｉ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２Ｘに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸４９は、イソロイシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸４９は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸４９は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、またはＬｅｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、リンカーは、（ＧＳＳＳＳ）ｎ（配列番号７３）配列（式中、ｎは、１、２、３、４、または５である）を含む。一部の場合では、ｎは、４である。一部の場合では、ｎは、５である。
【０２２８】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｉ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、及び、ｉｉｉ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、ならびにｖ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２Ｘに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸４９は、イソロイシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸４９は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸４９は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、またはＬｅｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０２２９】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｉ）リンカー、ｉｉｉ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）リンカー、ｖ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｖｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｖｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２Ｘに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸４９は、イソロイシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸４９は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸４９は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、またはＬｅｕである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、リンカーは、（ＧＳＳＳＳ）ｎ（配列番号７３）配列（式中、ｎは、１、２、３、４、または５である）を含む。一部の場合では、ｎは、４である。一部の場合では、ｎは、５である。
【０２３０】
Ｙ５３
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、及び、ｉｉｉ）図２Ｚに示されるアミノ酸配列と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む変異体ＣＤ８０ポリペプチド、を含む第１のポリペプチド（式中、アミノ酸５３は、チロシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸５３は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸５３は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）図２Ｚに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸５３は、チロシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸５３は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸５３は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。
【０２３１】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、ｉｉｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、及び、ｖ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２Ｚに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸５３は、チロシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸５３は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸５３は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０２３２】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、ｉｉｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）リンカー、ｖ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｖｉ）リンカー、及び、ｖｉｉ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２Ｚに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸５３は、チロシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸５３は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸５３は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、リンカーは、（ＧＳＳＳＳ）ｎ（配列番号７３）配列（式中、ｎは、１、２、３、４、または５である）を含む。一部の場合では、ｎは、４である。一部の場合では、ｎは、５である。
【０２３３】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｉ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、及び、ｉｉｉ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、ならびにｖ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２Ｚに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸５３は、チロシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸５３は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸５３は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０２３４】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｉ）リンカー、ｉｉｉ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）リンカー、ｖ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｖｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｖｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２Ｚに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸５３は、チロシン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸５３は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸５３は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、リンカーは、（ＧＳＳＳＳ）ｎ（配列番号７３）配列（式中、ｎは、１、２、３、４、または５である）を含む。一部の場合では、ｎは、４である。一部の場合では、ｎは、５である。
【０２３５】
Ｄ６０
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、及び、ｉｉｉ）図２ＢＢに示されるアミノ酸配列と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む変異体ＣＤ８０ポリペプチド、を含む第１のポリペプチド（式中、アミノ酸６０は、アスパラギン酸以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸６０は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸６０は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）図２ＢＢに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸６０は、アスパラギン酸以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸６０は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸６０は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。
【０２３６】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、ｉｉｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、及び、ｖ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２ＢＢに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸６０は、アスパラギン酸以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸６０は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸６０は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０２３７】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、ｉｉｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）リンカー、ｖ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｖｉ）リンカー、及び、ｖｉｉ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２ＢＢに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸６０は、アスパラギン酸以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸６０は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸６０は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、リンカーは、（ＧＳＳＳＳ）ｎ（配列番号７３）配列（式中、ｎは、１、２、３、４、または５である）を含む。一部の場合では、ｎは、４である。一部の場合では、ｎは、５である。
【０２３８】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｉ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、及び、ｉｉｉ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、ならびにｖ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２ＢＢに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸６０は、アスパラギン酸以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸６０は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸６０は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０２３９】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｉ）リンカー、ｉｉｉ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）リンカー、ｖ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｖｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｖｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２ＢＢに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸６０は、アスパラギン酸以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸６０は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸６０は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、リンカーは、（ＧＳＳＳＳ）ｎ（配列番号７３）配列（式中、ｎは、１、２、３、４、または５である）を含む。一部の場合では、ｎは、４である。一部の場合では、ｎは、５である。
【０２４０】
Ｆ１０８
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、及び、ｉｉｉ）図２ＤＤに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１０８は、フェニルアラニン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１０８は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸１０８は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む変異体ＣＤ８０ポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）図２ＤＤに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１０８は、フェニルアラニン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１０８は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸１０８は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。
【０２４１】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、ｉｉｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、及び、ｖ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２ＤＤに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１０８は、フェニルアラニン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１０８は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸１０８は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０２４２】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、ｉｉｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）リンカー、ｖ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｖｉ）リンカー、及び、ｖｉｉ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２ＤＤに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１０８は、フェニルアラニン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１０８は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸１０８は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、リンカーは、（ＧＳＳＳＳ）ｎ（配列番号７３）配列（式中、ｎは、１、２、３、４、または５である）を含む。一部の場合では、ｎは、４である。一部の場合では、ｎは、５である。
【０２４３】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｉ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、及び、ｉｉｉ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、ならびにｖ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２ＤＤに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１０８は、フェニルアラニン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１０８は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸１０８は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０２４４】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｉ）リンカー、ｉｉｉ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）リンカー、ｖ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｖｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｖｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２ＤＤに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１０８は、フェニルアラニン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１０８は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸１０８は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、リンカーは、（ＧＳＳＳＳ）ｎ（配列番号７３）配列（式中、ｎは、１、２、３、４、または５である）を含む。一部の場合では、ｎは、４である。一部の場合では、ｎは、５である。
【０２４５】
Ｄ１１１
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、及び、ｉｉｉ）図２ＨＨに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１１１は、プロリン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１１１は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸１１１は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む変異体ＣＤ８０ポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）図２ＨＨに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１１１は、プロリン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１１１は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸１１１は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。
【０２４６】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、ｉｉｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、及び、ｖ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２ＨＨに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１１１は、プロリン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１１１は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸１１１は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０２４７】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、ｉｉｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）リンカー、ｖ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｖｉ）リンカー、及び、ｖｉｉ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２ＨＨに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１１１は、プロリン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１１１は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸１１１は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、リンカーは、（ＧＳＳＳＳ）ｎ（配列番号７３）配列（式中、ｎは、１、２、３、４、または５である）を含む。一部の場合では、ｎは、４である。一部の場合では、ｎは、５である。
【０２４８】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｉ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、及び、ｉｉｉ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、ならびにｖ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２ＨＨに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１１１は、プロリン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１１１は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸１１１は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０２４９】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｉ）リンカー、ｉｉｉ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）リンカー、ｖ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｖｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｖｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２ＨＨに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１１１は、プロリン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１１１は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸１１１は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、リンカーは、（ＧＳＳＳＳ）ｎ（配列番号７３）配列（式中、ｎは、１、２、３、４、または５である）を含む。一部の場合では、ｎは、４である。一部の場合では、ｎは、５である。
【０２５０】
Ｓ１５６
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、及び、ｉｉｉ）図２ＦＦに示されるアミノ酸配列と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む変異体ＣＤ８０ポリペプチド、を含む第１のポリペプチド（式中、アミノ酸１５６は、セリン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１５６は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸１５６は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）図２ＨＨに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１１１は、プロリン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１１１は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸１１１は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。
【０２５１】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、ｉｉｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、及び、ｖ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２ＨＨに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１１１は、プロリン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１１１は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸１１１は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０２５２】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、ｉｉｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）リンカー、ｖ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｖｉ）リンカー、及び、ｖｉｉ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２ＨＨに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１１１は、プロリン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１１１は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸１１１は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、リンカーは、（ＧＳＳＳＳ）ｎ（配列番号７３）配列（式中、ｎは、１、２、３、４、または５である）を含む。一部の場合では、ｎは、４である。一部の場合では、ｎは、５である。
【０２５３】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｉ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、及び、ｉｉｉ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、ならびにｖ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２ＨＨに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１１１は、プロリン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１１１は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸１１１は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０２５４】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドは、ａ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）エピトープ、及び、ｉｉ）β２Ｍポリペプチド、を含む第１のポリペプチド、ならびに、ｂ）Ｎ末端からＣ末端への順序で、ｉ）本開示の第１の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｉ）リンカー、ｉｉｉ）本開示の第２の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｉｖ）リンカー、ｖ）本開示の第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、ｖｉ）クラスＩ  ＭＨＣ重鎖、及び、ｖｉｉ）Ｆｃポリペプチド、を含む第２のポリペプチド、を含む。一部の場合では、第１、第２、及び第３の変異体ＣＤ８０ポリペプチドのそれぞれは、図２ＨＨに示されるアミノ酸配列（式中、アミノ酸１１１は、プロリン以外のアミノ酸であり、例えば、アミノ酸１１１は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｍｅｔ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、例えば、アミノ酸１１１は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Ｌｅｕ、またはＩｌｅである）と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、リンカーは、（ＧＳＳＳＳ）ｎ（配列番号７３）配列（式中、ｎは、１、２、３、４、または５である）を含む。一部の場合では、ｎは、４である。一部の場合では、ｎは、５である。
【０２５５】
核酸
本開示は、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸を提供する。本開示は、本開示のＣＤ８０融合ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸を提供する。
【０２５６】
本開示は、本開示の多量体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸を提供する。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドの個々のポリペプチド鎖は、別々の核酸にコードされる。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドの全てのポリペプチド鎖は、単一の核酸にコードされる。一部の場合では、第１の核酸は、本開示の多量体ポリペプチドの第１のポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含み、第２の核酸は、本開示の多量体ポリペプチドの第２のポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む。一部の場合では、単一の核酸は、本開示の多量体ポリペプチドの第１のポリペプチド及び本開示の多量体ポリペプチドの第２のポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む。
【０２５７】
多量体ポリペプチドの個々のポリペプチド鎖をコードする別々の核酸
本開示は、本開示の多量体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸を提供する。上述したように、一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドの個々のポリペプチド鎖は、別々の核酸にコードされる。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドの別々のポリペプチド鎖をコードするヌクレオチド配列は、転写制御エレメント、例えば、プロモーター、例えば、真核細胞において機能的であるプロモーター、に作動可能に連結され、プロモーターは、構成的プロモーターまたは誘導性プロモーターとすることができる。
【０２５８】
本開示は、第１の核酸及び第２の核酸を提供し、第１の核酸は、本開示の多量体ポリペプチドの第１のポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含み、第１のポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端への順序で、ａ）エピトープ（例えば、Ｔ細胞エピトープ）、ｂ）第１のＭＨＣポリペプチド、及び、ｃ）免疫調節ポリペプチド（例えば、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチド）を含み、第２の核酸は、本開示の多量体ポリペプチドの第２のポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含み、第２のポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端への順序で、ａ）第２のＭＨＣポリペプチド、及び、ｂ）ＩｇＦｃポリペプチド、を含む。好適なＴ細胞エピトープ、ＭＨＣポリペプチド、免疫調節ポリペプチド、及びＩｇＦｃポリペプチドは、上述されている。一部の場合では、第１及び第２のポリペプチドをコードするヌクレオチド配列は、転写制御エレメントに作動可能に連結される。一部の場合では、転写制御エレメントは、真核細胞において機能的なプロモーターである。一部の場合では、核酸は、別々の発現ベクターに存在する。
【０２５９】
本開示は、第１の核酸及び第２の核酸を提供し、第１の核酸は、本開示の多量体ポリペプチドの第１のポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含み、第１のポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端への順序で、ａ）エピトープ（例えば、Ｔ細胞エピトープ）、及び、ｂ）第１のＭＨＣポリペプチド、を含み、第２の核酸は、本開示の多量体ポリペプチドの第２のポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含み、第２のポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端への順序で、ａ）免疫調節ポリペプチド（例えば、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチド）、ｂ）第２のＭＨＣポリペプチド、及び、ｃ）ＩｇＦｃポリペプチド、を含む。好適なＴ細胞エピトープ、ＭＨＣポリペプチド、免疫調節ポリペプチド、及びＩｇＦｃポリペプチドは、上述されている。一部の場合では、第１及び第２のポリペプチドをコードするヌクレオチド配列は、転写制御エレメントに作動可能に連結される。一部の場合では、転写制御エレメントは、真核細胞において機能的なプロモーターである。一部の場合では、核酸は、別々の発現ベクターに存在する。
【０２６０】
多量体ポリペプチドに存在する２つ以上のポリペプチドをコードする核酸
本開示は、本開示の多量体ポリペプチドの少なくとも第１のポリペプチド及び第２のポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸を提供する。本開示の多量体ポリペプチドが第１、第２及び第３のポリペプチドを含む場合、核酸は、第１、第２、及び第３のポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドの第１のポリペプチド及び第２のポリペプチドをコードするヌクレオチド配列は、第１のポリペプチドをコードするヌクレオチド配列及び第２のポリペプチドをコードするヌクレオチド配列の間に挿入されたタンパク質分解的に切断可能なリンカーを含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドの第１のポリペプチド及び第２のポリペプチドをコードするヌクレオチド配列は、第１のポリペプチドをコードするヌクレオチド配列及び第２のポリペプチドをコードするヌクレオチド配列の間に挿入された内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）を含む。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドの第１のポリペプチド及び第２のポリペプチドをコードするヌクレオチド配列は、第１のポリペプチドをコードするヌクレオチド配列及び第２のポリペプチドをコードするヌクレオチド配列の間に挿入されたリボソームスキッピングシグナル（またはシス作用性加水分解酵素エレメント、ＣＨＹＳＥＬ）を含む。核酸の例は、以下に記載され、タンパク質分解的に切断可能なリンカーは、本開示の多量体ポリペプチドの第１のポリペプチド及び第２のポリペプチドをコードするヌクレオチド配列の間に提供され、これらの実施形態のいずれかでは、ＩＲＥＳまたはリボソームスキッピングシグナルは、タンパク質分解的に切断可能なリンカーをコードするヌクレオチド配列の代わりに使用することができる。
【０２６１】
一部の場合では、第１の核酸（例えば、組換え発現ベクター、ｍＲＮＡ、ウイルスＲＮＡなど）は、本開示の多量体ポリペプチドの第１のポリペプチド鎖をコードするヌクレオチド配列を含み、第２の核酸（例えば、組換え発現ベクター、ｍＲＮＡ、ウイルスＲＮＡなど）は、本開示の多量体ポリペプチドの第２のポリペプチド鎖をコードするヌクレオチド配列を含む。一部の場合では、第１のポリペプチドをコードするヌクレオチド配列、及び第２のポリペプチドをコードする第２のヌクレオチド配列はそれぞれ、転写制御エレメント、例えば、プロモーター、例えば、真核細胞で機能するプロモーター、に作動可能に連結され、プロモーターは、構成性プロモーターまたは誘導性プロモーターとすることができる。
【０２６２】
本開示は、組換えポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸を提供し、組換えポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端への順序で、ａ）エピトープ（例えば、Ｔ細胞エピトープ）、ｂ）第１のＭＨＣポリペプチド、ｃ）免疫調節ポリペプチド（例えば、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチド）、ｄ）タンパク質分解的に切断可能なリンカー、ｅ）第２のＭＨＣポリペプチド、及び、ｆ）免疫グロブリン（Ｉｇ）Ｆｃポリペプチドを含む。本開示は、組換えポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸を提供し、組換えポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端への順序で、ａ）第１のリーダーペプチド、ｂ）エピトープ、ｃ）第１のＭＨＣポリペプチド、ｄ）免疫調節ポリペプチド（例えば、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチド）、ｅ）タンパク質分解的に切断可能なリンカー、ｆ）第２のリーダーペプチド、ｇ）第２のＭＨＣポリペプチド、及び、ｈ）のＩｇＦｃポリペプチドを含む。本開示は、組換えポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸を提供し、組換えポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端への順序で、ａ）エピトープ、ｂ）第１のＭＨＣポリペプチド、ｃ）タンパク質分解的に切断可能なリンカー、ｄ）免疫調節ポリペプチド（例えば、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチド）、ｅ）第２のＭＨＣポリペプチド、及び、ｆ）ＩｇＦｃポリペプチドを含む。一部の場合では、第１のリーダーペプチド及び第２のリーダーペプチドは、β２Ｍリーダーペプチドである。一部の場合では、ヌクレオチド配列は、転写制御エレメントに作動可能に連結されている。一部の場合では、転写制御エレメントは、真核細胞において機能的なプロモーターである。
【０２６３】
好適なＭＨＣポリペプチドは、上述されている。一部の場合では、第１のＭＨＣポリペプチドは、β２ミクログロブリンポリペプチドであり、第２のＭＨＣポリペプチドは、ＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドである。一部の場合では、β２ミクログロブリンポリペプチドは、配列番号５２に示されるアミノ酸配列と少なくとも８５％のアミノ酸配列同一性を有するか、または配列番号８７に示されるアミノ酸配列と少なくとも８５％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、ＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドは、ＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−Ｂ、ＨＬＡ−Ｃ、ＨＬＡ−Ｅ、ＨＬＡ−Ｆ、ＨＬＡ−Ｇ、ＨＬＡ−Ｋ、またはＨＬＡ−Ｌ重鎖である。一部の場合では、ＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドは、配列番号４９に示されるアミノ酸配列のアミノ酸２５〜３６５と少なくとも８５％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、ＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドは、配列番号５０に示されるアミノ酸配列のアミノ酸２５〜３６２と少なくとも８５％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、ＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドは、配列番号５１に示されるアミノ酸配列のアミノ酸２５〜３６６と少なくとも８５％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の場合では、第１のＭＨＣポリペプチドは、ＭＨＣクラスＩＩα鎖ポリペプチドであり、第２のＭＨＣポリペプチドは、ＭＨＣクラスＩＩβ鎖ポリペプチドである。
【０２６４】
好適なＦｃポリペプチドは、上述されている。一部の場合では、ＩｇＦｃポリペプチドは、ＩｇＧ１Ｆｃポリペプチド、ＩｇＧ２Ｆｃポリペプチド、ＩｇＧ３Ｆｃポリペプチド、ＩｇＧ４Ｆｃポリペプチド、ＩｇＡＦｃポリペプチド、またはＩｇＭＦｃポリペプチドである。一部の場合では、ＩｇＦｃポリペプチドは、図４Ａ〜４Ｃに示されるアミノ酸配列と少なくとも８５％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。
【０２６５】
好適な免疫調節ポリペプチドは、上述されている。
【０２６６】
好適なタンパク質分解的に切断可能なリンカーは、上述されている。一部の場合では、タンパク質分解的に切断可能なリンカーは、ａ）ＬＥＶＬＦＱＧＰ（配列番号７８）、ｂ）ＥＮＬＹＴＱＳ（配列番号７９）、ｃ）ＤＤＤＤＫ（配列番号１０１）、ｄ）ＬＶＰＲ（配列番号８０）、及び、ｅ）ＧＳＧＡＴＮＦＳＬＬＫＱＡＧＤＶＥＥＮＰＧＰ（配列番号８１）、から選択されるアミノ酸配列を含む。一部の場合では、タンパク質分解的に切断可能なリンカーは、ａ）ＬＥＶＬＦＱＧＰ（配列番号７８）、ｂ）ＥＮＬＹＴＱＳ（配列番号７９）、ｃ）フリン切断部位、ｄ）ＬＶＰＲ（配列番号８０）、ｅ）ＧＳＧＡＴＮＦＳＬＬＫＱＡＧＤＶＥＥＮＰＧＰ（配列番号８１）、ｆ）ＧＳＧＥＧＲＧＳＬＬＴＣＧＤＶＥＥＮＰＧＰ（配列番号８２）、ｇ）ＧＳＧＱＣＴＮＹＡＬＬＫＬＡＧＤＶＥＳＮＰＧＰ（配列番号８３）、及び、ｈ）ＧＳＧＶＫＱＴＬＮＦＤＬＬＫＬＡＧＤＶＥＳＮＰＧＰ（配列番号８４）から選択されるアミノ酸配列を含む。
【０２６７】
一部の場合では、エピトープ及び第１のＭＨＣポリペプチドの間のリンカーは、第１のＣｙｓ残基を含み、第２のＭＨＣポリペプチドは、第２のＣｙｓ残基を提供するためのアミノ酸置換を含み、その結果、第１及び第２のＣｙｓ残基は、ジスルフィド結合を、リンカー及び第２のＭＨＣポリペプチドの間にもたらす。一部の場合では、第１のＭＨＣポリペプチドは、第１のＣｙｓ残基を提供するためのアミノ酸置換を含み、第２のＭＨＣポリペプチドは、第２のＣｙｓ残基を提供するためのアミノ酸置換を含み、その結果、第１のＣｙｓ残基及び第２のＣｙｓ残基は、ジスルフィド結合を、第１のＭＨＣポリペプチド及び第２のＭＨＣポリペプチドの間にもたらす。
【０２６８】
組換え発現ベクター
本開示は、本開示の核酸を含む組換え発現ベクターを提供する。一部の場合では、組換え発現ベクターは、非ウイルスベクターである。一部の実施形態では、組換え発現ベクターは、ウイルス構築物、例えば、組換えアデノ随伴ウイルス構築物（例えば、米国特許第７，０７８，３８７号を参照のこと）、組換えアデノウイルス構築物、組換えレンチウイルス構築物、組換えレトロウイルス構築物、非組み込みウイルスベクターなどである。
【０２６９】
好適な発現ベクターとしては、ウイルスベクター（例えば、ｖａｃｃｉｎｉａ  ｖｉｒｕｓをベースとするウイルスベクター；ポリオウイルス；アデノウイルス（例えば、Ｌｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｖｅｓｔ  Ｏｐｔｈａｌｍｏｌ  Ｖｉｓ  Ｓｃｉ  ３５：２５４３  ２５４９，１９９４；Ｂｏｒｒａｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒ  ６：５１５  ５２４，１９９９；Ｌｉ  ａｎｄ  Ｄａｖｉｄｓｏｎ，ＰＮＡＳ  ９２：７７００  ７７０４，１９９５；Ｓａｋａｍｏｔｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｈ  Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒ  ５：１０８８  １０９７，１９９９；ＷＯ９４／１２６４９、ＷＯ９３／０３７６９；ＷＯ９３／１９１９１；ＷＯ９４／２８９３８；ＷＯ９５／１１９８４、及びＷＯ９５／００６５５を参照のこと）；アデノ随伴ウイルス（例えば、Ａｌｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｈｕｍ  Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒ  ９：８１  ８６，１９９８，Ｆｌａｎｎｅｒｙ  ｅｔ  ａｌ．，ＰＮＡＳ  ９４：６９１６  ６９２１，１９９７；Ｂｅｎｎｅｔｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｖｅｓｔ  Ｏｐｔｈａｌｍｏｌ  Ｖｉｓ  Ｓｃｉ  ３８：２８５７  ２８６３，１９９７；Ｊｏｍａｒｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒ  ４：６８３  ６９０，１９９７，Ｒｏｌｌｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｈｕｍ  Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒ  １０：６４１  ６４８，１９９９；Ａｌｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｈｕｍ  Ｍｏｌ  Ｇｅｎｅｔ  ５：５９１  ５９４，１９９６；Ｓｒｉｖａｓｔａｖａ  ｉｎ  ＷＯ９３／０９２３９、Ｓａｍｕｌｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｖｉｒ．（１９８９）６３：３８２２−３８２８；Ｍｅｎｄｅｌｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｖｉｒｏｌ．（１９８８）１６６：１５４−１６５；及びＦｌｏｔｔｅ  ｅｔ  ａｌ．，ＰＮＡＳ（１９９３）９０：１０６１３−１０６１７を参照のこと）；ＳＶ４０；単純ヘルペスウイルス；ヒト免疫不全ウイルス（例えば、Ｍｉｙｏｓｈｉ  ｅｔ  ａｌ．，ＰＮＡＳ  ９４：１０３１９  ２３，１９９７；Ｔａｋａｈａｓｈｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｖｉｒｏｌ  ７３：７８１２  ７８１６，１９９９を参照のこと）；レトロウイルスベクター（例えば、Ｍｕｒｉｎｅ  Ｌｅｕｋｅｍｉａ  Ｖｉｒｕｓ、脾臓壊死ウイルス、ならびに、レトロウイルス由来のベクター、例えば、Ｒｏｕｓ  Ｓａｒｃｏｍａ  Ｖｉｒｕｓ、ハーベイ肉腫ウイルス、Ａｖｉａｎ  ｌｅｕｋｏｓｉｓ  ｖｉｒｕｓ、Ｌｅｎｔｉｖｉｒｕｓ、ヒト免疫不全ウイルス、骨髄増殖性肉腫ウイルス、及び乳がんウイルス）などが挙げられるが、これらに限定されない。
【０２７０】
多数の好適な発現ベクターは、当業者らに既知であり、多くは、市販されている。例として、真核生物宿主細胞：ｐＸＴ１、ｐＳＧ５（Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ）、ｐＳＶＫ３、ｐＢＰＶ、ｐＭＳＧ、及びｐＳＶＬＳＶ４０（Ｐｈａｒｍａｃｉａ）に対する次のベクターが提供される。しかし、他の任意のベクターは、宿主細胞と適合性のある限りにおいて、使用されてもよい。
【０２７１】
利用される宿主／ベクター系に応じて、構成的プロモーター及び誘導性プロモーター、転写エンハンサーエレメント、転写ターミネーターなどを含む、多数の好適な転写及び翻訳制御エレメントのいずれかは、発現ベクターに使用されてもよい（例えば、Ｂｉｔｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（１９８７）Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，１５３：５１６−５４４を参照のこと）。
【０２７２】
一部の実施形態では、ＤＮＡ標的化ＲＮＡ及び／または部位特異的修飾ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列は、制御エレメント、例えば、プロモーターなどの転写制御エレメント、に作動可能に連結される。転写制御エレメントは、真核細胞、例えば、哺乳動物細胞、または原核細胞（例えば、細菌及び古細菌細胞）のいずれかにおいて、機能的であり得る。一部の実施形態では、ＤＮＡ標的化ＲＮＡ及び／または部位特異的修飾ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列は、原核細胞及び真核細胞の双方において、ＤＮＡ標的化ＲＮＡ及び／または部位特異的修飾ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列の発現を可能にする複数の制御エレメントに作動可能に連結される。
【０２７３】
好適な真核生物プロモーター（真核細胞で機能するプロモーター）の非限定例としては、レトロウイルス由来のサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）前初期（ｉｍｍｅｄｉａｔｅ  ｅａｒｌｙ）、単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）チミジンキナーゼ、初期及び後期ＳＶ４０、レトロウイルス由来の長い末端反復（ＬＴＲ）、ならびにマウスメタロチオネイン−Ｉが挙げられる。好適なベクター及びプロモーターの選択は、十分に当業者のレベルの範囲内である。発現ベクターは、翻訳開始のためのリボソーム結合部位及び転写ターミネーターも含有してもよい。発現ベクターは、発現を増幅するための適切な配列も含んでもよい。
【０２７４】
遺伝子改変された宿主細胞
本開示は、遺伝子改変された宿主細胞を提供し、宿主細胞は、本開示の核酸で遺伝子改変される。
【０２７５】
好適な宿主細胞としては、真核細胞、例えば、酵母細胞、昆虫細胞、及び哺乳動物細胞、を含む。一部の場合では、宿主細胞は、哺乳動物細胞株の細胞である。好適な哺乳動物細胞株は、ヒト細胞株、非ヒト霊長類細胞株、齧歯動物（例えば、マウス、ラット）細胞株などを含む。好適な哺乳動物細胞株としては、ＨｅＬａ細胞（例えば、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）番号ＣＣＬ−２）、ＣＨＯ細胞（例えば、ＡＴＣＣ  Ｎｏ．ＣＲＬ９６１８、ＣＣＬ６１、ＣＲＬ９０９６）、２９３細胞（例えば、ＡＴＣＣ  Ｎｏ．ＣＲＬ−１５７３）、Ｖｅｒｏ細胞、ＮＩＨ  ３Ｔ３細胞（例えば、ＡＴＣＣ  Ｎｏ．ＣＲＬ−１６５８）、Ｈｕｈ−７細胞、ＢＨＫ細胞（例えば、ＡＴＣＣ  Ｎｏ．ＣＣＬ１０）、ＰＣ１２細胞（ＡＴＣＣ  Ｎｏ．ＣＲＬ１７２１）、ＣＯＳ細胞、ＣＯＳ−７細胞（ＡＴＣＣ  Ｎｏ．ＣＲＬ１６５１）、ＲＡＴ１細胞、マウスＬ細胞（ＡＴＣＣ  Ｎｏ．ＣＣＬＩ．３）、ヒト胎児腎臓（ＨＥＫ）細胞（ＡＴＣＣ  Ｎｏ．ＣＲＬ１５７３）、ＨＬＨｅｐＧ２細胞などが挙げられるが、これらに限定されない。
【０２７６】
一部の場合では、宿主細胞は、内因性ＭＨＣβ２Ｍを合成しないように遺伝子改変されている哺乳動物細胞である。
【０２７７】
多量体ポリペプチドの製造方法
本開示は、本開示の多量体ポリペプチドを産生する方法を提供する。方法は一般に、培地中で、多量体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む組換え発現ベクターで遺伝子改変される宿主細胞を培養すること、ならびに、遺伝子改変された宿主細胞及び／または培地から多量体ポリペプチドを単離すること、を含む。多量体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む組換え発現ベクターで遺伝子改変される宿主細胞は、「発現宿主」とも称される。上述したように、一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドの個々のポリペプチド鎖は、別々の組換え発現ベクターでコードされる。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドの全てのポリペプチド鎖は、単一の組換え発現ベクターにコードされる。
【０２７８】
発現宿主細胞（例えば、発現宿主細胞の溶解物）及び／または宿主細胞が培養される培地からの多量体ポリペプチドの単離は、タンパク質精製の標準的な方法を使用して実施することができる。
【０２７９】
例えば、発現宿主の溶解物は、調製されてもよく、溶解物は、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、排除クロマトグラフィー、ゲル電気泳動、アフィニティークロマトグラフィー、または他の精製技術を使用して精製されてもよい。あるいは、多量体ポリペプチドが発現宿主細胞から培地に分泌される場合、多量体ポリペプチドは、ＨＰＬＣ、排除クロマトグラフィー、ゲル電気泳動、アフィニティークロマトグラフィー、または他の精製技術を使用して培養培地から精製することができる。一部の場合では、使用される組成物は、生成物の調製方法及びその精製に関連する汚染物質に関連して、所望の生成物の少なくとも８０重量％、少なくとも約８５重量％、少なくとも約９５重量％、または少なくとも約９９．５重量％を占めるであろう。割合は、全タンパク質を基準にすることができる。
【０２８０】
一部の場合では、例えば、多量体ポリペプチドが親和性タグを含む場合、多量体ポリペプチドは、親和性タグの固定された結合パートナーを使用して精製することができる。
【０２８１】
組成物
本開示は、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドを含有する、医薬組成物を含む組成物を提供する。本開示は、本開示の多量体ポリペプチドを含有する、医薬組成物を含む組成物を提供する。本開示は、本開示の核酸または組換え発現ベクターを含有する、医薬組成物を含む組成物を提供する。
【０２８２】
多量体ポリペプチドを含む組成物
本開示の組成物は、本開示の多量体ポリペプチドに加えて、塩、例えば、ＮａＣｌ、ＭｇＣｌ2 、ＫＣｌ、ＭｇＳＯ4 など、緩衝剤、例えば、トリス緩衝液、Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−Ｎ′−（２−エタンスルホン酸）（ＨＥＰＥＳ）、２−（Ｎ−モルホリノ）エタンスルホン酸（ＭＥＳ）、２−（Ｎ−モルホリノ）エタンスルホン酸ナトリウム塩（ＭＥＳ）、３−（Ｎ−モルホリノ）プロパンスルホン酸（ＭＯＰＳ）、Ｎ−トリス［ヒドロキシメチル］メチル−３−アミノプロパンスルホン酸（ＴＡＰＳ）など；可溶化剤；界面活性剤、例えば、非イオン性界面活性剤、例えば、Ｔｗｅｅｎ−２０など；プロテアーゼ阻害剤；グリセロールなどのうちの１つ以上を含むことができる。
【０２８３】
組成物は、薬学的に許容される賦形剤を含んでもよく、様々な薬学的に許容される賦形剤は、当該技術分野で知られており、本明細書では詳細に検討する必要はない。薬学的に許容される賦形剤は、例えば、“Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ”，１９ｔｈ  Ｅｄ．（１９９５）、またはｌａｔｅｓｔ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ；Ａ．Ｇｅｎｎａｒｏ  （２０００）“Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ”，２０ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ，＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ；Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ（１９９９）Ｈ．Ｃ．Ａｎｓｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，ｅｄｓ  ７ｔｈ  ｅｄ．，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ，＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ；及びＨａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ（２０００）Ａ．Ｈ．Ｋｉｂｂｅ  ｅｔ  ａｌ．，ｅｄｓ．，３ｒｄ  ｅｄ．Ａｍｅｒ．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ａｓｓｏｃを含む様々な刊行物に詳しく記載されている。
【０２８４】
医薬組成物は、本開示の多量体ポリペプチド、及び薬学的に許容される賦形剤を含むことができる。一部の場合では、主題の医薬組成物は、対象への投与に適しており、例えば、無菌であろう。例えば、一部の実施形態では、主題の医薬組成物は、例えば、組成物が滅菌であり、かつ、検出可能な発熱物質及び／または他の毒素を含まない場合、ヒト対象への投与に適するであろう。
【０２８５】
タンパク質組成物は、他の構成成分、例えば、医薬グレードのマンニトール、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、サッカリンナトリウム、タルカム、セルロース、グルコース、スクロース、マグネシウム、カーボナートなどを含んでもよい。組成物は、おおよその生理的条件に必要とされるような薬学的に許容される補助物質、例えば、ｐＨ調整剤及び緩衝剤、毒性調整剤など、例えば、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化カルシウム、乳酸ナトリウム、ヒドロクロリド、硫酸塩、溶媒和物（例えば、混合イオン塩、水、有機物）、水和物（例えば、水）など、を含有してもよい。
【０２８６】
例えば、組成物は、水性液剤、粉末形態、顆粒剤、錠剤、丸剤、坐剤、カプセル剤、懸濁剤、スプレー剤などを含んでもよい。組成物は、以下に記載される種々の投与経路に応じて製剤化されてもよい。
【０２８７】
本開示の多量体ポリペプチドが、組織に直接（例えば、皮下、腹腔内、筋肉内、及び／または静脈内）注射可能薬物として投与される場合、製剤は、すぐに使用できる剤形、または非水性形態（例えば、再構成可能な貯蔵安定な散剤）、もしくは水性形態、例えば、薬学的に許容される担体及び賦形剤からなる液体、として提供することができる。タンパク質含有製剤はまた、投与後の主題のタンパク質の血清半減期を増加させるように提供されてもよい。例えば、タンパク質は、コロイドとして調製されたリポソーム製剤で、または血清半減期を延長するための他の従来技術で、提供されてもよい。例えば、Ｓｚｏｋａ  ｅｔ  ａｌ．１９８０  Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｂｉｏｅｎｇ．９：４６７、米国特許第４，２３５，８７１号、同第４，５０１，７２８号、及び同第４，８３７，０２８号に記載されるように、リポソームを調製するための様々な方法が利用可能である。調製物はまた、制御放出または徐放形態で提供されてもよい。
【０２８８】
非経口投与に適する製剤の他の例としては、製剤を意図されるレシピエントの血液と等張にする等張滅菌注射液剤、抗酸化剤、静菌剤、及び溶質、懸濁化剤、可溶化剤、増粘剤、安定剤、ならびに防腐剤が挙げられる。例えば、主題の医薬組成物は、容器、例えば、注射器などの滅菌容器、に存在することができる。製剤は、単位用量または多回用量密封容器、例えば、アンプル及びバイアル、で提供することができ、使用の直前に、注射のための滅菌液体賦形剤、例えば、水、を添加することのみを必要とするフリーズドライ（凍結乾燥）状態で保存することができる。即時注射液剤及び懸濁剤は、滅菌散剤、顆粒剤、及び錠剤から調製することができる。
【０２８９】
製剤中の本開示の多量体ポリペプチドの濃度は、広い範囲で（例えば、約０．１重量％未満、通常は、約２重量％または少なくとも約２重量％から、２０重量％〜５０重量％以上と同じ程度まで）変えることができ、通常、主に、選択された特定の投与様式及び患者のニーズに応じた液量、粘度、及び患者ベースの要因に基づいて選択されるであろう。
【０２９０】
本開示は、本開示の組成物、例えば、液体組成物、を含む容器を提供する。容器は、例えば、注射器、アンプルとすることができる。一部の場合では、容器は、滅菌である。一部の場合では、容器及び組成物の双方は、滅菌である。
【０２９１】
本開示は、本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチドを含有する、医薬組成物を含む組成物を提供する。組成物は、多量体ポリペプチドについて上記のような、ａ）本開示の変異体ＣＤ８０ポリペプチド、及びｂ）賦形剤、を含むことができる。一部の場合では、賦形剤は、薬学的に許容される賦形剤である。
【０２９２】
核酸または組換え発現ベクターを含む組成物
本開示は、本開示の核酸または組換え発現ベクターを含む組成物、例えば、医薬組成物、を提供する。多種多様な薬学的に許容される賦形剤は、当該技術分野で既知であり、本明細書で詳細に検討される必要はない。薬学的に許容される賦形剤は、例えば、Ａ．Ｇｅｎｎａｒｏ（２０００）“Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ”，２０ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ，＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ；Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ（１９９９）Ｈ．Ｃ．Ａｎｓｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，ｅｄｓ  ７ｔｈ  ｅｄ．，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ，＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ；及びＨａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ（２０００）Ａ．Ｈ．Ｋｉｂｂｅ  ｅｔ  ａｌ．，ｅｄｓ．，３ｒｄ  ｅｄ．Ａｍｅｒ．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ａｓｓｏｃを含む様々な刊行物に詳しく記載されている。
【０２９３】
本開示の組成物は、ａ）主題の核酸または組換え発現ベクター、ならびに、ｂ）緩衝液、界面活性剤、酸化防止剤、親水性ポリマー、デキストリン、キレート剤、懸濁化剤、可溶化剤、増粘剤、安定剤、静菌剤、湿潤剤、及び防腐剤のうちの１つ以上、を含むことができる。好適な緩衝液としては、（例えば、Ｎ，Ｎ−ビス（２−ヒドロキシエチル）−２−アミノエタンスルホン酸（ＢＥＳ）、ビス（２−ヒドロキシエチル）アミノ−トリス（ヒドロキシメチル）メタン（ＢＩＳ−Ｔｒｉｓ）、Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−Ｎ′３−プロパンスルホン酸（ＥＰＰＳまたはＨＥＰＰＳ）、グリシルグリシン、Ｎ−２−ヒドロキシエチルピペラジン−Ｎ′−２−エタンスルホン酸（ＨＥＰＥＳ）、３−（Ｎ−モルホリノ）プロパンスルホン酸（ＭＯＰＳ）、ピペラジン−Ｎ，Ｎ′−ビス（２−エタン−スルホン酸）（ＰＩＰＥＳ）、重炭酸ナトリウム、３−（Ｎ−トリス（ヒドロキシメチル）−メチル−アミノ）−２−ヒドロキシ−プロパンスルホン酸）ＴＡＰＳＯ、（Ｎ−トリス（ヒドロキシメチル）メチル−２−アミノエタンスルホン酸（ＴＥＳ）、Ｎ−トリス（ヒドロキシメチル）メチル−グリシン（トリシン）、トリス（ヒドロキシメチル）−アミノメタン（トリス）など）が挙げられるが、これらに限定されない。好適な塩としては、例えば、ＮａＣｌ、ＭｇＣｌ2 、ＫＣｌ、ＭｇＳＯ4 などが挙げられる。
【０２９４】
本開示の医薬製剤は、約０．００１％〜約９０％（ｗ／ｗ）の量で、本開示の核酸または組換え発現ベクターを含むことができる。以下の製剤の記載では、「主題の核酸または組換え発現ベクター」は、本開示の核酸または組換え発現ベクターを含むと理解されるであろう。例えば、一部の実施形態では、主題の製剤は、本開示の核酸または組換え発現ベクターを含む。
【０２９５】
主題の核酸または組換え発現ベクターは、他の化合物または化合物の混合物と混合し、カプセル化し、コンジュゲートし、または別の方法で会合させることができ、このような化合物は、例えば、リポソームまたは受容体標的分子、を含むことができる。主題の核酸または組換え発現ベクターは、配合物中で、取り込み、分布、及び／または吸収を助ける１つ以上の構成成分と組み合わせることができる。
【０２９６】
主題の核酸または組換え発現ベクター組成物は、限定されないが、錠剤、カプセル剤、ゲルカプセル剤、液体シロップ剤、軟質ゲル剤、坐剤、及び浣腸剤などの多くの可能な剤形のいずれかに製剤化することができる。主題の核酸または組換え発現ベクター組成物は、水性、非水性、または混合培地中の懸濁剤として製剤化することもできる。水性懸濁剤は、例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ソルビトール、及び／またはデキストランを含む、懸濁液の粘度を増加させる物質をさらに含有してもよい。懸濁剤は、安定剤も含有してもよい。
【０２９７】
主題の核酸または組換え発現ベクターを含む製剤は、リポソーム製剤とすることができる。本明細書で使用される場合、「リポソーム」という用語は、球状の二重層（複数可）に整列した両親媒性脂質からなる小胞を意味する。リポソームは、親油性材料から形成された膜及び送達されるべき組成物を含有する水性内部を有する単層または多層小胞である。カチオン性リポソームは、負電荷を持つＤＮＡ分子と相互作用して安定な複合体を形成することができる正電荷を持つリポソームである。ｐＨ感受性または負電荷を持つリポソームは、ＤＮＡと複合体を形成するのではなく、ＤＮＡを捕捉すると考えられる。カチオン性リポソーム及び非カチオン性リポソームの双方は、主題の核酸または組換え発現ベクターを送達するために使用することができる。
【０２９８】
リポソームは、「立体的に安定化された」リポソームも含み、この用語は、本明細書で使用される場合、リポソームに取り込まれる時に、このような特殊脂質を欠くリポソームに対して、循環寿命の延長をもたらす１つ以上の特殊脂質を含むリポソームを指す。立体的に安定化されたリポソームの例は、リポソームの小胞形成脂質部分の一部が１つ以上の糖脂質を含むか、またはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）部分などの１つ以上の親水性ポリマーで誘導体化されるものである。リポソーム及びその使用は、全体として参照により本明細書に組み込まれる米国特許第６，２８７，８６０号にさらに記載されている。
【０２９９】
本開示の製剤及び組成物は、界面活性剤も含んでもよい。薬物製品、製剤、及びエマルション中での界面活性剤の使用は、当該技術分野で周知である。界面活性剤及びその使用は、米国特許第６，２８７，８６０号にさらに記載されている。
【０３００】
一実施形態では、核酸の効率的な送達を達成するために、種々の浸透促進剤が含まれる。非親油性薬物が細胞膜を越えて拡散することを助けることに加えて、浸透増強剤は、親油性薬物の透過性も高める。浸透促進剤は、５つのおおまかなカテゴリー、すなわち、界面活性剤、脂肪酸、胆汁酸塩、キレート剤、及び非キレート化非界面活性剤、のうちの１つに属するものとして分類されてもよい。浸透促進剤及びその使用は、全体として参照により本明細書に組み込まれる米国特許第６，２８７，８６０号にさらに記載されている。
【０３０１】
経口投与のための組成物及び製剤は、水もしくは非水性媒体中の散剤もしくは顆粒剤、微粒子、ナノ粒子、懸濁剤もしくは液剤、カプセル剤、ゲルカプセル剤、サシェ、錠剤、またはミニ錠剤を含む。増粘剤、着香剤、希釈剤、乳化剤、分散助剤、または結合剤が望ましいことがある。好適な経口製剤としては、主題のアンチセンス核酸が、１つ以上の浸透促進剤界面活性剤及びキレート剤と共に投与されるものが挙げられる。好適な界面活性剤としては、脂肪酸及び／またはそのエステルもしくは塩、胆汁酸及び／またはその塩が含まれるが挙げられるが、これらに限定されない。好適な胆汁酸／塩及び脂肪酸ならびにそれらの使用は、米国特許第６，２８７，８６０号にさらに記載されている。浸透促進剤、例えば、胆汁酸／塩と組み合わせた脂肪酸／塩、の組み合わせも適する。例示的な好適な組み合わせは、ラウリン酸、カプリン酸、及びＵＤＣＡのナトリウム塩である。さらなる浸透促進剤は、ポリオキシエチレン−９−ラウリルエーテル及びポリオキシエチレン−２０−セチルエーテルを含むが、これらに限定されない。好適な浸透促進剤としては、プロピレングリコール、ジメチルスルホキシド、トリエタノイミン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、２−ピロリドン、及びその誘導体、テトラヒドロフルフリルアルコール、ならびにＡＺＯＮＥ（登録商標）も挙げられる。
【０３０２】
Ｔ細胞活性を調節する方法
本開示は、エピトープ特異的Ｔ細胞の活性を選択的に調節する方法を提供し、方法は、Ｔ細胞を本開示の多量体ポリペプチドと接触させることを含み、Ｔ細胞を本開示の多量体ポリペプチドと接触させることは、エピトープ特異的Ｔ細胞の活性を選択的に調節する。一部の場合では、接触は、インビトロで生じる。一部の場合では、接触は、インビボで生じる。一部の場合では、接触は、エクスビボで生じる。
【０３０３】
一部の場合では、例えば、標的Ｔ細胞がＣＤ８+ Ｔ細胞である場合、多量体ポリペプチドは、クラスＩ  ＭＨＣポリペプチド（例えば、β２ミクログロブリン及びクラスＩ  ＭＨＣ重鎖）を含む。一部の場合では、例えば、標的Ｔ細胞がＣＤ４+ Ｔ細胞である場合、多量体ポリペプチドは、クラスＩＩ  ＭＨＣポリペプチド（例えば、クラスＩＩ  ＭＨＣα鎖；クラスＩＩ  ＭＨＣβ鎖）を含む。
【０３０４】
本開示の多量体ポリペプチドが活性化ポリペプチドである免疫調節ポリペプチドを含む場合、Ｔ細胞を多量体ポリペプチドと接触させることは、エピトープ特異的Ｔ細胞を活性化する。一部の場合では、エピトープ特異的Ｔ細胞は、がん細胞上に存在するエピトープに特異的なＴ細胞であり、エピトープ特異的Ｔ細胞を多量体ポリペプチドと接触させることにより、Ｔ細胞のがん細胞に対する細胞傷害活性を増加させる。一部の場合では、エピトープ特異的Ｔ細胞は、がん細胞上に存在するエピトープに特異的なＴ細胞であり、エピトープ特異的Ｔ細胞を多量体ポリペプチドと接触させることにより、エピトープ特異的Ｔ細胞の数を増加させる。
【０３０５】
一部の場合では、エピトープ特異的Ｔ細胞は、ウイルス感染細胞上に存在するエピトープに特異的なＴ細胞であり、エピトープ特異的Ｔ細胞を多量体ポリペプチドと接触させることにより、Ｔ細胞のウイルス感染細胞に対する細胞傷害活性を増加させる。一部の場合では、エピトープ特異的Ｔ細胞は、ウイルス感染細胞上に存在するエピトープに特異的なＴ細胞であり、エピトープ特異的Ｔ細胞を多量体ポリペプチドと接触させることにより、エピトープ特異的Ｔ細胞の数を増加させる。
【０３０６】
本開示の多量体ポリペプチドが阻害ポリペプチドである免疫調節ポリペプチドを含む場合、Ｔ細胞を多量体と接触させることにより、エピトープ特異的Ｔ細胞を阻害する。一部の場合では、エピトープ特異的Ｔ細胞は、自己抗原に存在するエピトープに特異的な自己反応性Ｔ細胞であり、接触により、自己反応性Ｔ細胞の数を低減させる。
【０３０７】
処置法
本発明は、個体のエピトープ特異的Ｔ細胞の活性を選択的に調節する方法を提供し、方法は、個体のエピトープ特異的Ｔ細胞の活性を選択的に調節するために有効である、有効量の本開示の多量体ポリペプチドまたは多量体ポリペプチドをコードする１つ以上の核酸を、個体に投与することを含む。一部の場合では、本開示の処置方法は、本開示の多量体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む１つ以上の組換え発現ベクターを、それを必要とする個体に投与することを含む。一部の場合では、本開示の処置方法は、本開示の多量体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む１つ以上のｍＲＮＡ分子を、それを必要とする個体に投与することを含む。一部の場合では、本開示の処置方法は、本開示の多量体ポリペプチドを、それを必要とする個体に投与することを含む。
【０３０８】
本開示は、個体のエピトープ特異的Ｔ細胞の活性を選択的に調節する方法を提供し、方法は、有効量の本開示の多量体ポリペプチドまたは多量体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む１つ以上の核酸（例えば、発現ベクター：ｍＲＮＡなど）を個体に投与することを含み、多量体ポリペプチドは、個体のエピトープ特異的Ｔ細胞の活性を選択的に調節する。エピトープ特異的Ｔ細胞の活性を選択的に調節することにより、個体の疾患または障害を処置することができる。従って、本開示は、それを必要とする個体に、有効量の本開示の多量体ポリペプチドを投与することを含む処置方法を提供する。
【０３０９】
一部の場合では、免疫調節ポリペプチドは、活性化ポリペプチドであり、多量体ポリペプチドは、エピトープ特異的Ｔ細胞を活性化する。一部の場合では、エピトープは、がん関連エピトープであり、多量体ポリペプチドは、がん関連エピトープに特異的なＴ細胞の活性を増加させる。
【０３１０】
本開示は、個体のがんを処置する方法を提供し、方法は、有効量の本開示の多量体ポリペプチドまたは多量体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む１つ以上の核酸（例えば、発現ベクター：ｍＲＮＡなど）を個体に投与することを含み、多量体ポリペプチドは、がんエピトープであるＴ細胞エピトープを含み、多量体ポリペプチドは、刺激性免疫調節ポリペプチドを含む。一部の場合では、多量体ポリペプチドの「有効量」は、それを必要とする個体に１回以上の用量で投与される時に、個体のがん細胞の数を低減させる量である。例えば、一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドの「有効量」は、それを必要とする個体に１回以上の用量で投与される時に、多量体ポリペプチドの投与前の個体または多量体ポリペプチドの投与のない個体のがん細胞の数と比較して、個体のがん細胞の数を、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％低減させる量である。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドの「有効量」は、それを必要とする個体に１回以上の用量で投与される時に、個体のがん細胞の数を検出不可能なレベルに低減させる量である。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドの「有効量」は、それを必要とする個体に１回以上の用量で投与される時に、個体の腫瘍量を低減させる量である。例えば、一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドの「有効量」は、それを必要とする個体に１回以上の用量で投与される時に、多量体ポリペプチドの投与前の個体または多量体ポリペプチドの投与のない個体の腫瘍量（または腫瘍体積）と比較して、個体の腫瘍量（または腫瘍体積）を、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％低減させる量である。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドの「有効量」は、それを必要とする個体に１回以上の用量で投与される時に、個体の生存時間を増加させる量である。例えば、一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドの「有効量」は、それを必要とする個体に１回以上の用量で投与される時に、多量体ポリペプチドの投与のない個体の期待生存期間と比較して、個体の生存時間を、少なくとも１ヶ月、少なくとも２ヶ月、少なくとも３ヶ月、３ヶ月〜６ヶ月、６ヶ月〜１年、１年〜２年、２年〜５年、５年〜１０年、または１０年以上増加させる量である。
【０３１１】
一部の場合では、エピトープ特異的Ｔ細胞は、ウイルス感染細胞上に存在するエピトープに特異的なＴ細胞であり、エピトープ特異的Ｔ細胞を多量体ポリペプチドと接触させることにより、Ｔ細胞のウイルス感染細胞に対する細胞傷害活性を増加させる。一部の場合では、エピトープ特異的Ｔ細胞は、ウイルス感染細胞上に存在するエピトープに特異的なＴ細胞であり、エピトープ特異的Ｔ細胞を多量体ポリペプチドと接触させることにより、エピトープ特異的Ｔ細胞の数を増加させる。
【０３１２】
従って、本開示は、個体のウイルス感染症を処置する方法を提供し、方法は、有効量の本開示の多量体ポリペプチドまたは多量体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む１つ以上の核酸を個体に投与することを含み、多量体ポリペプチドは、ウイルスエピトープであるＴ細胞エピトープを含み、多量体ポリペプチドは、刺激性免疫調節ポリペプチドを含む。一部の場合では、多量体ポリペプチドの「有効量」は、それを必要とする個体に１回以上の用量で投与される時に、個体のウイルス感染細胞の数を低減させる量である。例えば、一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドの「有効量」は、それを必要とする個体に１回以上の用量で投与される時に、多量体ポリペプチドの投与前の個体または多量体ポリペプチドの投与のない個体のウイルス感染細胞の数と比較して、個体のウイルス感染細胞の数を、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％低減させる量である。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドの「有効量」は、それを必要とする個体に１回以上の用量で投与される時に、個体のウイルス感染細胞の数を検出不可能なレベルに低減させる量である。
【０３１３】
従って、本開示は、個体の感染症を処置する方法を提供し、方法は、有効量の本開示の多量体ポリペプチドまたは多量体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む１つ以上の核酸を個体に投与することを含み、多量体ポリペプチドは、病原体関連エピトープであるＴ細胞エピトープを含み、多量体ポリペプチドは、刺激性免疫調節ポリペプチドを含む。一部の場合では、多量体ポリペプチドの「有効量」は、それを必要とする個体に１回以上の用量で投与される時に、個体の病原体の数を低減させる量である。例えば、一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドの「有効量」は、それを必要とする個体に１回以上の用量で投与される時に、多量体ポリペプチドの投与前の個体または多量体ポリペプチドの投与のない個体の病原体の数と比較して、個体の病原体の数を、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％低減させる量である。一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドの「有効量」は、それを必要とする個体に１回以上の用量で投与される時に、個体の病原体の数を検出不可能なレベルに低減させる量である。病原体は、ウイルス、細菌、原生動物などを含む。
【０３１４】
一部の場合では、免疫調節ポリペプチドは、阻害性ポリペプチドであり、多量体ポリペプチドは、エピトープ特異的Ｔ細胞の活性を阻害する。一部の場合では、エピトープは、自己エピトープであり、多量体ポリペプチドは、自己エピトープに特異的なＴ細胞の活性を選択的に阻害する。
【０３１５】
本開示は、個体の自己免疫障害を処置する方法を提供し、方法は、有効量の本開示の多量体ポリペプチドまたは多量体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む１つ以上の核酸を個体に投与することを含み、多量体ポリペプチドは、自己エピトープであるＴ細胞エピトープを含み、多量体ポリペプチドは、阻害性免疫調節ポリペプチドを含む。一部の場合では、多量体ポリペプチドの「有効量」は、それを必要とする個体に１回以上の用量で投与される時に、多量体ポリペプチドの投与前の個体または多量体ポリペプチドの投与のない個体の自己反応性Ｔ細胞の数と比較して、個体の自己反応性Ｔ細胞の数を、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％低減させる量である。一部の場合では、多量体ポリペプチドの「有効量」は、それを必要とする個体に１回以上の用量で投与される時に、個体のＴｈ２サイトカインの産生を低減させる量である。一部の場合では、多量体ポリペプチドの「有効量」は、それを必要とする個体に１回以上の用量で投与される時に、個体の自己免疫疾患に関連する１つ以上の症状を改善する量である。
【０３１６】
上述したように、一部の場合では、主題の処置方法の実施では、本開示の多量体ポリペプチドは、それを必要とする個体に、それ自体ポリペプチドとして投与される。他の場合、主題の処置方法の実施では、本開示の多量体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む１つ以上の核酸は、それを必要とする個体に投与される。従って、他の場合、本開示の１つ以上の核酸、例えば、本開示の１つ以上の組換え発現ベクターは、それを必要とする個体に投与される。
【０３１７】
製剤
好適な製剤は、上述されており、好適な製剤は、薬学的に許容される賦形剤を含む。一部の場合では、好適な製剤は、ａ）本開示の多量体ポリペプチド、及び、ｂ）薬学的に許容される賦形剤、を含む。一部の場合では、好適な製剤は、ａ）本開示の多量体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む核酸、及び、ｂ）薬学的に許容される賦形剤、を含み、一部の場合では、核酸は、ｍＲＮＡである。一部の場合では、好適な製剤は、ａ）本開示の多量体ポリペプチドの第１のポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む第１の核酸、ｂ）本開示の多量体ポリペプチドの第２のポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む第２の核酸、及び、ｃ）薬学的に許容される賦形剤、を含む。一部の場合では、好適な製剤は、ａ）本開示の多量体ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む組換え発現ベクター、及び、ｂ）薬学的に許容される賦形剤、を含む。一部の場合では、好適な製剤は、ａ）本開示の多量体ポリペプチドの第１のポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む第１の組換え発現ベクター、ｂ）本開示の多量体ポリペプチドの第２のポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む第２の組換え発現ベクター、及び、ｃ）薬学的に許容される賦形剤、を含む。
【０３１８】
好適な薬学的に許容される賦形剤は、上述されている。
【０３１９】
投薬量
好適な投薬量は、種々の臨床的要因に基づいて、主治医または他の資格のある医療関係者が決定することができる。医療技術分野で周知であるように、任意の１人の患者のための投薬量は、患者のサイズ、体表面積、年齢、投与されるべき特定のポリペプチドまたは核酸、患者の性別、投与の時間及び経路、一般的な健康状態、ならびに同時投与される他の薬物を含む多くの因子に依存する。本開示の多量体ポリペプチドは、１投与当たり１ｎｇ／ｋｇ体重〜２０ｍｇ／ｋｇ体重、例えば、０．１ｍｇ／ｋｇ体重〜１０ｍｇ／ｋｇ体重、例えば、０．５ｍｇ／ｋｇ体重〜５ｍｇ／ｋｇ体重の量で投与されてもよいが、この例示的な範囲未満またはこれを超える用量が、特に上述の因子を考慮して想定される。レジメンが連続注入である場合、１分当たり体重１キログラム当たり１μｇ〜１０ｍｇの範囲内とすることもできる。
【０３２０】
一部の場合では、本開示の多量体ポリペプチドの好適な用量は、体重１ｋｇ当たり０．０１μｇ〜１００ｇ、体重１ｋｇ当たり０．１μｇ〜１０ｇ、体重１ｋｇ当たり１μｇ〜１ｇ、体重１ｋｇ当たり１０μｇ〜１００ｍｇ、体重１ｋｇ当たり１００μｇ〜１０ｍｇ、または体重１ｋｇ当たり１００μｇ〜１ｍｇである。当業者らは、体液または組織中の投与された薬剤の、測定された滞留時間及び濃度に基づいて、投与の反復率を容易に推定することができる。処置が成功した後、病状の再発を予防するために、患者に維持療法を受けさせることが望ましいことがあり、本開示の多量体ポリペプチドは、体重１ｋｇ当たり０．０１μｇ〜１００ｇ、体重１ｋｇ当たり０．１μｇ〜１０ｇ、体重１ｋｇ当たり１μｇ〜１ｇ、体重１ｋｇ当たり１０μｇ〜１００ｍｇ、体重１ｋｇ当たり１００μｇ〜１０ｍｇ、または体重１ｋｇ当たり１００μｇ〜１ｍｇの範囲の維持用量で投与される。
【０３２１】
用量レベルが、具体的な多量体ポリペプチド、症状の重篤度、及び対象の副作用に対する感受性の関数として変動する可能性があることを、当業者らは容易に理解するであろう。所与の化合物の好ましい投薬量は、様々な手段により当業者らが容易に決定可能である。
【０３２２】
一部の実施形態では、複数回用量の本開示の多量体ポリペプチド、本開示の核酸、または本開示の組換え発現ベクターが投与される。本開示の多量体ポリペプチド、本開示の核酸、または本開示の組換え発現ベクターの投与頻度は、様々な因子、例えば、症状の重症度など、のいずれかに応じて変動する可能性がある。例えば、一部の実施形態では、本開示の多量体ポリペプチド、本開示の核酸、または本開示の組換え発現ベクターは、月１回、月２回、月３回、隔週（ｑｏｗ）、週１回（ｑｗ）、週２回（ｂｉｗ）、週３回（ｔｉｗ）、週４回、週５回、週６回、隔日（ｑｏｄ）、毎日（ｑｄ）、１日２回（ｑｉｄ）、または１日３回（ｔｉｄ）で投与される。
【０３２３】
本開示の多量体ポリペプチド、本開示の核酸、または本開示の組換え発現ベクターの投与期間、例えば、本開示の多量体ポリペプチド、本開示の核酸、または本開示の組換え発現ベクターが投与される期間は、様々な因子、例えば、患者の奏効など、のいずれかに応じて変動する可能性がある。例えば、本開示の多量体ポリペプチド、本開示の核酸、または本開示の組換え発現ベクターは、約１日〜約１週間、約２週間〜約４週間、約１ヶ月〜約２ヶ月、約２ヶ月〜約４ヶ月、約４ヶ月〜約６ヶ月、約６ヶ月〜約８ヶ月、約８ヶ月〜約１年、約１年〜約２年、または約２年〜約４年以上の範囲の期間にわたって投与することができる。
【０３２４】
投与経路
活性薬剤（本開示の多量体ポリペプチド、本開示の核酸、または本開示の組換え発現ベクター）は、インビボ及びエクスビボの方法を含む薬物送達に適する任意の利用可能な方法及び経路、ならびに、全身及び局所投与経路を使用して個体に投与される。
【０３２５】
従来の薬学的に許容される投与経路は、腫瘍内、腫瘍周囲、筋肉内、気管内、頭蓋内、皮下、皮内、局所適用、静脈内、動脈内、経直腸、経鼻、経口、ならびに他の経腸及び非経口の投与経路を含む。投与経路は、必要に応じて、組み合わされても、多量体ポリペプチド及び／または所望の効果に応じて調整されてもよい。本開示の多量体ポリペプチド、または本開示の核酸もしくは組換え発現ベクターは、単回用量または複数回用量で投与することができる。
【０３２６】
一部の実施形態では、本開示の多量体ポリペプチド、本開示の核酸、または本開示の組換え発現ベクターは、静脈内投与される。一部の実施形態では、本開示の多量体ポリペプチド、本開示の核酸、または本開示の組換え発現ベクターは、筋肉内投与される。一部の実施形態では、本開示の多量体ポリペプチド、本開示の核酸、または本開示の組換え発現ベクターは、局所投与される。一部の実施形態では、本開示の多量体ポリペプチド、本開示の核酸、または本開示の組換え発現ベクターは、腫瘍内投与される。一部の実施形態では、本開示の多量体ポリペプチド、本開示の核酸、または本開示の組換え発現ベクターは、腫瘍周囲に投与される。一部の実施形態では、本開示の多量体ポリペプチド、本開示の核酸、または本開示の組換え発現ベクターは、頭蓋内投与される。一部の実施形態では、本開示の多量体ポリペプチド、本開示の核酸、または本開示の組換え発現ベクターは、皮下投与される。
【０３２７】
一部の実施形態では、本開示の多量体ポリペプチドは、静脈内投与される。一部の実施形態では、本開示の多量体ポリペプチドは、筋肉内投与される。一部の実施形態では、本開示の多量体ポリペプチドは、局所投与される。一部の実施形態では、本開示の多量体ポリペプチドは、腫瘍内投与される。一部の実施形態では、本開示の多量体ポリペプチドは、腫瘍周囲に投与される。一部の実施形態では、本開示の多量体ポリペプチドは、頭蓋内投与される。一部の実施形態では、多量体ポリペプチドは、皮下投与される。
【０３２８】
本開示の多量体ポリペプチド、本開示の核酸、または本開示の組換え発現ベクターは、全身または局所経路を含む従来の薬物の送達に適する任意の利用可能な従来の方法及び経路を使用して宿主に投与することができる。一般に、本発明により考察される投与経路は、腸内経路、非経口経路、または吸入経路を含むが、必ずしもこれらに限定されない。
【０３２９】
吸入投与以外の非経口の投与経路は、局所、経皮、皮下、筋肉内、眼窩内、嚢内、脊髄内、胸骨内、腫瘍内、腫瘍周囲、及び静脈内経路、すなわち、消化管を介する以外の任意の投与経路を含むが、必ずしもこれらに限定されない。非経口投与は、本開示の多量体ポリペプチド、本開示の核酸、または本開示の組換え発現ベクターの全身送達または局所送達を達成するために実施することができる。全身送達が望まれる場合、投与は通常、医薬調製物の浸潤性または全身で吸収される局所または粘膜投与を含む。
【０３３０】
処置に適する対象
本開示の方法を用いる処置に適する対象は、がんを有すると診断されている個体、がんが処置されているが、処置が奏効していない個体、及びがんが処置されて、最初は処置が奏効しているが、その後、不応になっている個体、を含むがんを有する個体を含む。本開示の方法を用いる処置に適する対象は、感染症を有すると診断された個体、及び感染症が処置されているが、処置が奏効していない個体、を含む感染症（例えば、病原体、例えば、細菌、ウイルス、原生動物など、による感染症）を有する個体を含む。本開示の方法を用いる処置に適する対象は、細菌感染症を有すると診断された個体、及び細菌感染症が処置されているが、処置が奏効していない個体、を含む細菌感染症を有する個体を含む。本開示の方法を用いる処置に適する対象は、ウイルス感染症を有すると診断された個体、及びウイルス感染症が処置されているが、処置が奏効していない個体、を含むウイルス感染症を有する個体を含む。本開示の方法を用いる処置に適する対象は、自己免疫疾患を有すると診断された個体、及び自己免疫疾患が処置されているが、処置が奏効していない個体、を含む自己免疫疾患を有する個体を含む。
【実施例】
【０３３１】
次の実施例は、本発明の作成及び使用方法の完全な開示及び説明を当業者らに提供するように記載されており、本発明者らが本発明と見なすものの範囲を限定することを意図するものではなく、以下の実験が、実施された全てまたは唯一の実験であることを表すことを意図するものでもない。使用される数値（例えば、量、温度など）に関して正確性を確保するための取り組みがなされているが、一部の実験誤差及び偏差が考慮されるべきである。別途指示のない限り、部は、重量部であり、分子量は、重量平均分子量であり、温度は、摂氏であり、圧力は、大気圧または大気圧付近である。標準的な略語、例えば、ｂｐ、塩基対（複数可）；ｋｂ、キロベース（複数可）；ｐｌ、ピコリットル（複数可）；ｓまたはｓｅｃ、秒（複数可）；ｍｉｎ、分（複数可）；ｈまたはｈｒ、時間（複数可）、ａａ、アミノ酸（複数可）；ｋｂ、キロベース（複数可）；ｂｐ、塩基対（複数可）；ｎｔ、ヌクレオチド（複数可）；ｉ．ｍ．、筋肉内の（筋肉内に）；ｉ．ｐ．、腹腔内の（腹腔内に）；ｓ．ｃ．、皮下の（皮下に）などが使用されてもよい。
【０３３２】
実施例１：変異体ＣＤ８０を有するｓｙｎＴａｃポリペプチドの生成及び特性決定
第１のポリペプチド（「Ｓｙｎ２８９」）が第２のポリペプチド（「Ｓｙｎ２９０」、「Ｓｙｎ２９１」、「Ｓｙｎ２９２」、「Ｓｙｎ２９３」、「Ｓｙｎ２９４」、「Ｓｙｎ２９５」、または「Ｓｙｎ２９６」）とヘテロ二量体化されたｓｙｎＴａｃ多量体ポリペプチドを生成した。
【０３３３】
Ｓｙｎ２８９は、Ｎ末端からＣ末端への順序で、ａ）オボアルブミン（ＯＶＡ）Ｔ細胞エピトープ、及び、ｂ）β２Ｍポリペプチド、を含む。
【０３３４】
ｓｙｎＴａｃの第２のポリペプチドは、ＭＨＣクラスＩ重鎖を含んでいた。従って、第２のポリペプチドを、ｓｙｎＴａｃの「重鎖」（Ｈ鎖）と称した。第２のポリペプチドは、Ｎ末端からＣ末端への順序で、ａ）ＣＤ８０細胞外ドメイン、ｂ）ＭＨＣクラスＩ重鎖、及び、ｃ）ＩｇＧ２ａＦｃポリペプチド、を含んでいた。Ｓｙｎ２９０に存在するＣＤ８０細胞外ドメインポリペプチドは、野生型ＣＤ８０外部ドメイン（配列番号１）であった。Ｓｙｎ２９１、Ｓｙｎ２９２、Ｓｙｎ２９３、Ｓｙｎ２９４、Ｓｙｎ２９５、及びＳｙｎ２９６に存在するＣＤ８０細胞外ドメインポリペプチドは、野生型ＣＤ８０細胞外ドメインと比較して、単一のアミノ酸置換を含んでいた。単一のアミノ酸置換を表１に提示する。
【０３３５】
【表１】
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【０３３６】
第１のポリペプチドのβ２Ｍポリペプチド内のＣｙｓ−１２及び第２のポリペプチドのＭＨＣクラスＩ重鎖のＣｙｓ−２３６を介して、第１及び第２のポリペプチド鎖を、互いにジスルフィド結合させた。
【０３３７】
得られたｓｙｎＴａｃヘテロ二量体を、０、１、３．１７、１０．０１、３１．６５、及び１００ｎＭのｓｙｎＴａｃの濃度で、３日間、オボアルブミン特異的Ｔ細胞と共にインビトロで培養した。対照は、ａ）培地単独、ｂ）ホルボール１２−ミリスタート１３−アセタート（ＰＭＡ）及びイオノフォアＡ２３１８７、ならびに、ｃ）抗ＣＤ３抗体及び抗ＣＤ２８抗体、を含む。
【０３３８】
３日後、培地中のＩＦＮ−γ、ＩＬ−２、ＩＬ−６、及びＴＮＦの濃度を測定した。加えて、オボアルブミン特異的Ｔ細胞の生存率、及びオボアルブミン特異的Ｔ細胞の増殖を測定した。
【０３３９】
データを図１４〜図１９を示す。
【０３４０】
図１４〜図１９に示される、変異体ＣＤ８０ポリペプチドを含むｓｙｎＴａｃポリペプチドは、ＩＬ−２（細胞適合性サイトカイン）の産生を誘導し、細胞傷害性サイトカインＴＮＦα及びＩＦＮ−γの産生を誘導し、増殖も誘導してエピトープ特異的Ｔ細胞の生存率を増加させる。
【０３４１】
実施例２：ＣＤ８０／ｓｙｎＴａｃのインビボ効果
ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）Ｅ７抗原性ペプチド及び本開示のＣＤ８０Ｋ８６Ａ変異体を含むｓｙｎＴａｃ（図２０中で「ＣＵＥ：ＣＤ８０（Ｋ８６Ａ）」と称される）を、脇腹に移植したＨＰＶ+ ＴＣ−１肺がんを有するマウスに、腹腔内（ＩＰ）注射により、２．５ｍｇ／ｋｇで投与した。対照として、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）を、同じ腫瘍を有するマウスに投与した。図２０に示されるように、ＰＢＳで処置したマウスと比較して、ＣＵＥ：ＣＤ８０（Ｋ８６Ａ）で処置したマウスでは、腫瘍体積が減少した。
【０３４２】
本発明は、その具体的な実施形態を参照して説明されているが、種々の変更がなされ得ること、ならびに等価物が本発明の真の趣旨及び範囲から逸脱することなく置換され得ることは、当業者らに理解されるべきである。加えて、特定の状況、材料、物質の組成、プロセス、プロセスステップ（複数可）を、本発明の目的、趣旨、及び範囲に適合させるための多くの修正がなされ得る。このような修正は全て、本明細書に添付の特許請求の範囲内であることが意図される。
【０３４３】
相互参照
本出願は、２０１６年３月２日に出願された米国仮特許出願第６２／３０２，６５４号の利益を主張し、これは、全体として参照により本明細書に組み込まれる。
【図１】
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【図２−１】
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【図２−２】
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【図２−３】
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【図２−４】
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【図２−５】
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【図２−６】
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【図２−７】
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【図２−８】
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【図２−９】
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【図２−１０】
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【図２−１１】
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【図２−１２】
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【図２−１３】
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【図２−１４】
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【図２−１５】
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【図２−１６】
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【図２−１７】
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【図２−１８】
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【図３−１】
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【図３−２】
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【図４−１】
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【図４−２】
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【図４−３】
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【図５−１】
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【図５−２】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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