(57)【要約】  本発明は、ステロイド系化合物、当該化合物を含む組成物及びその使用を提供する。具体的に、本発明は、式（Ｉ）で示されるステロイド系化合物、並びに当該化合物又はその結晶形、薬学的に許容される塩、水和物あるいは溶媒和物、立体異性体、プロドラッグ、代謝物質又は同位体異性体を含む医薬組成物を開示する。本発明に記載の化合物は、ＣＹＰ１７酵素阻害剤として用いられ、且つより良い薬物動態パラメーター特性を有し、化合物の動物体内における薬物濃度を向上させることができ、これにより薬物の有効性と安全性を改善し、さらにＣＹＰ１７酵素と関連する疾患（例えば、前立腺癌等）を治療する薬物の調製に用いられる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）で示される置換ステロイド系化合物、ならびにその生理学的に許容される塩、プロドラッグ、代謝物質、溶媒和物、互変異性体及び立体異性体であって、すべての割合のこれらの化合物で形成した混合物を含む、ステロイド系化合物。
【化１】
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ただし、
Ｒ１ａ、Ｒ１ｂ、Ｒ１ｃ、Ｒ１ｄ、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１及びＲ１２は、それぞれ独立して、水素、重水素、ハロゲン又はトリフルオロメチル基であり；
Ｘ１、Ｘ２は、それぞれ独立して「水素（Ｈ）、重水素（Ｄ）、メチル基、ＣＨ２Ｄ、ＣＨＤ２、ＣＤ３、ＣＨ２ＣＨ３、ＣＨＤＣＨ３、ＣＨＤＣＨ２Ｄ、ＣＨＤＣＨＤ２、ＣＨＤＣＤ３、ＣＤ２ＣＨ３、ＣＤ２ＣＨ２Ｄ、ＣＤ２ＣＨＤ２、ＣＤ２ＣＤ３」からなる群から選択され；
Ｙは、「水素（Ｈ）、重水素（Ｄ）、アセチル基，１つ又は複数の重水素で置換されたアセチル基」からなる群から選択される。
【請求項２】
Ｒ１ａ、Ｒ１ｂ、Ｒ１ｃ及びＲ１ｄは、それぞれ独立して重水素又は水素であることを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２は、それぞれ独立して重水素又は水素であることを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｘ１、Ｘ２は、１つ又は複数の重水素で置換されたメチル基あるいはエチル基から独立して選択されることを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
Ｙは、水素、重水素、１つ又は複数の重水素で置換されたアセチル基から選択されることを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
Ｘ１、Ｘ２は３つの重水素で置換されたメチル基であることを特徴とする、請求項１〜請求項５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７】
Ｙは３つの重水素で置換されたアセチル基であることを特徴とする、請求項１〜請求項５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項８】
前記化合物は、以下の重水素化されたステロイド系化合物又はその薬学的に許容される塩からなる群から選択されるが、以下の化合物に限定されないことを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【化２】
2019507799.tif 000029
【化３】
2019507799.tif 000030
【化４】
2019507799.tif 000031
【化５】
2019507799.tif 000032
【化６】
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【請求項９】
請求項１に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩及び薬学的に許容される担体を含む医薬組成物であって、請求項１に記載の重水素化されたステロイド系化合物又はその薬学的に許容される塩を有効成分として含み、且つ通常の薬学的に許容される担体を含むことを特徴とする、医薬組成物。
【請求項１０】
前記医薬組成物は、種々のＣＹＰ１７酵素と関連する病状の治療、予防又は解消に用いられること；これらの化合物を含む医薬組成物は、癌などの様々な治療分野において、疾患や障害を治療、予防すること、又は前記疾患や障害の進行度を遅延することに用いられることを特徴とする、請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
ＣＹＰ１７酵素と関連する病状を予防及び治療する薬物の調製に用いることへの、請求項１〜請求項８のいずれか一項に記載の化合物、又はそのプロドラッグ、代謝物質及びその結晶形、薬学的に許容される塩、水和物あるいは溶媒和物の使用。
【請求項１２】
前記ＣＹＰ１７酵素と関連する病状は前立腺癌又は乳癌であることを特徴とする、請求項１１に記載の使用。
【請求項１３】
被験者に、請求項１〜請求項８のいずれか一項に記載の式（Ｉ）の化合物又はその多形、薬学的に許容される塩、プロドラッグ、立体異性体、同位体異性体、水和物あるいは溶媒和物、もしくは請求項９又は請求項１０に記載の医薬組成物を投与することを特徴とする、被験者におけるＣＹＰ１７酵素と関連する疾患を治療及び／又は予防する方法。
【請求項１４】
ＣＹＰ１７酵素と関連する疾患を治療及び／又は予防するために用いられる、請求項１〜請求項８のいずれか一項に記載の式（Ｉ）の化合物又はその多形、薬学的に許容される塩、プロドラッグ、立体異性体、同位体異性体、水和物又は溶媒和物、もしくは請求項９又は請求項１０に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、医薬分野に属する。具体的に、本発明は、ステロイド系化合物及びその使用に関し、より詳しくは、ステロイド系化合物、及びそのＣＹＰ１７酵素不可逆阻害剤としての使用、又はＣＹＰ１７酵素と関連する疾患の治療及び予防としての使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
前立腺癌（ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｃａｎｃｅｒ、英語でＰＣａと略記する）は、男性生殖器系の一般的な悪性腫瘍である。２００８年に、世界で９０３５００症例の前立腺癌の新規症例及び２５８４００症例の前立腺癌の死亡症例が発見した。その中、前立腺癌の新規症例は、男性のすべての新規腫瘍症例の１４％を占め、男性の新規腫瘍症例では２番目の症例であり；前立腺癌の死亡症例は、男性の癌死亡症例の６％を占め、男性の癌死亡症例では６番目の症例であった。前立腺癌の死亡症例は、男性の癌死亡症例の９％を占め、肺癌に次いで男性の癌死亡症例では２番目の症例である。近年、環境汚染の悪化、人口の急速な高齢化、及び人々生活や食習慣の変化等の原因により、前立腺癌の罹患率及び死亡率が急速に上昇し、現在、中国人男性の健康に影響を及ぼす重要な疾患の一つとなっている。
【０００３】
前立腺癌細胞の増殖に対するアンドロゲンの影響は、アンドロゲン受容体（ａｎｄｒｏｇｅｎ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ、ＡＲ）シグナル経路によって媒介される。臨床では、ＡＲシグナルの変化によって、患者の体内における前立腺特異抗原（Ｐｒｏｓｔａｔｅ  Ｓｐｅｃｉｆｉｃ  Ａｎｔｉｇｅｎ、ＰＳＡ）のレベルを観察し、これにより患者の前立腺癌の進行状況を診療する。従来の去勢治療は、アンドロゲンの生成又はアンドロゲン受容体の標的遺伝子の発現を徹底的に阻害することができなく、アンドロゲンを合成する生物酵素が過剰に発現される場合に、腫瘍におけるアンドロゲンのレベルが向上させる。
【０００４】
細胞色素酸化酵素Ｐ４５０  ｃ１７（ＣＹＰ１７）は、精巣、副腎及び正常な前立腺組織のいずれでも発現され、また、それが前立腺癌細胞でも発現される。ＣＹＰ１７における１７α−ヒドロキシラーゼ及びＣ１７，２０−リアーゼは、アンドロゲン生合成における肝要な酵素であり、ステロイドであるプロゲステロン及びプレグネノロンがそれぞれＣ１９アンドロステンジオン及びデヒドロエピアンドロステロンに変換し、両者がさらにテストステロン及びジヒドロテストステロン（ＤＨＴ）に再変換することを促進する。
【０００５】
以上の研究に基づき、前立腺癌の予防や治療は緊急の課題となっており、ＣＹＰ１７酵素阻害剤の研究開発は、前立腺癌の薬物治療の重要方向である。新規なＣＹＰ１７酵素阻害剤として、酢酸アビラテロンがＣｅｎｔｏｃｏｒ  Ｏｒｔｈｏ社によって、前立腺癌の治療のために開発された。酢酸アビラテロンは、２０１１年４月２８日に、米国ＦＤＡによって承認され、プレドニゾンと併用して去勢抵抗性前立腺癌の治療に用いられ、その商品名がＺｙｔｉｇａである。２０１１年７月２８日に、Ｚｙｔｉｇａがカナダ保健省によって承認された。前立腺癌患者にとって、ホルモンテストステロンが腫瘍の増殖を刺激し、薬物又は手術治療を含む去勢治療は、テストステロンの生成を減少したり、テストステロンの作用を遮断したりすることができるが、このような治療は、体の他の部位でのアンドロゲンの生成を阻害できなく、前立腺癌が引き続き増殖する可能性がある。アビラテロンは、アンドロゲンの生成を調節するＣＹＰ１７酵素の活性を標的に阻害し、アンドロゲンの生成を減少させることにより、腫瘍の増殖を遅らせる。プラセボとプレドニゾンとの併用に比べて、酢酸アビラテロンとプレドニゾンとの併用治療を受けた患者の生存期間中央値が３．９ヶ月延長され（それぞれは１４．８と１０．９ヶ月であり、ｐ＜０．０００１）、即ち死亡リスクが３５％減少した。一般的な副作用は、尿閉、低カリウム血症、高血圧などを含むミネラルコルチコイドに関連するリスク事件である。
【０００６】
しかしながら、現在、前立腺癌の治療においても、アビラテロンに対する薬剤耐性という問題が生じた。そのため、より活性の高い前立腺癌治療薬を多く開発することは必要である。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、以上の課題に鑑み、ＣＹＰ１７酵素に対して優れた阻害性を有し、且つより良好な薬力学的／薬物動態学的特性を有する、ＣＹＰ１７不可逆阻害剤の作用を有する新規化合物を提供する。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
これに関して、本発明の技術案は以下の通りである。
式（Ｉ）で示される置換ステロイド系化合物、ならびにその生理学的に許容される塩、プロドラッグ、代謝物質、溶媒和物、互変異性体及び立体異性体であって、すべての割合のこれらの化合物で形成した混合物を含む置換ステロイド系化合物。
【０００９】
【化１】
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【００１０】
式中、
Ｒ１ａ、Ｒ１ｂ、Ｒ１ｃ、Ｒ１ｄ、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１及びＲ１２は、それぞれ独立して、水素、重水素、ハロゲン又はトリフルオロメチル基であり；
Ｘ１、Ｘ２は、それぞれ独立して「水素（Ｈ）、重水素（Ｄ）、メチル基、ＣＨ２Ｄ、ＣＨＤ２、ＣＤ３、ＣＨ２ＣＨ３、ＣＨＤＣＨ３、ＣＨＤＣＨ２Ｄ、ＣＨＤＣＨＤ２、ＣＨＤＣＤ３、ＣＤ２ＣＨ３、ＣＤ２ＣＨ２Ｄ、ＣＤ２ＣＨＤ２、ＣＤ２ＣＤ３」からなる群から選択され；
Ｙは、「水素（Ｈ）、重水素（Ｄ）、アセチル基、１つ又は複数の重水素で置換されたアセチル基」からなる群から選択される。
別の実施形態において、重水素は、重水素化位置における重水素同位体の含有量が少なくとも天然重水素同位体の含有量（０．０１５％）より多く、好ましくは３０％超、より好ましくは５０％超、さらにより好ましくは７５％超、さらにより好ましくは９５％超、さらにより好ましくは９９％超である。
別の実施形態において、Ｒ１ａ、Ｒ１ｂ、Ｒ１ｃ及びＲ１ｄは、それぞれ独立して重水素または水素である。
別の実施形態において、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２は、それぞれ独立して重水素または水素である。
別の実施形態において、Ｘ１、Ｘ２は、１つ又は複数の重水素で置換されたアルキルから独立して選択される。
別の実施形態において、Ｙは、水素、重水素、１つ又は複数の重水素で置換されたアセチル基から選択される。
別の実施形態において、Ｒ１ａ、Ｒ１ｂ、Ｒ１ｃ、Ｒ１ｄは重水素であることを特徴とする。
別の実施形態において、Ｒ２は重水素であることを特徴とする。
別の実施形態において、Ｒ３は重水素であることを特徴とする。
別の実施形態において、Ｒ４は重水素であることを特徴とする。
別の実施形態において、Ｒ５は重水素であることを特徴とする。
別の実施形態において、Ｒ６は重水素であることを特徴とする。
別の実施形態において、Ｒ７は重水素であることを特徴とする。
別の実施形態において、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０は重水素であることを特徴とする。
別の実施形態において、Ｒ１１、Ｒ１２は重水素であることを特徴とする。
別の実施形態において、Ｘ１、Ｘ２は３つの重水素で置換されたメチル基であることを特徴とする。
別の実施形態において、Ｙは重水素であることを特徴とする。
別の実施形態において、Ｙは３つの重水素で置換されたアセチル基であることを特徴とする。
別の実施形態において、前記化合物は、以下の化合物又はその薬学的に許容される塩からなる群から選択されるが、以下の化合物に限定されない。
【００１１】
【化２】
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【００１２】
【化３】
2019507799.tif 000004
【００１３】
【化４】
2019507799.tif 000005
【００１４】
【化５】
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【００１５】
【化６】
2019507799.tif 000007
【００１６】
上述の化合物において、式（１２）、式（１３）、式（１４）、式（４８）、式（５２）、式（５６）、式（６０）、式（６４）及び式（６８）は、式（Ｉ）の化合物の活性代謝産物である。
別の実施形態において、前記化合物は、非重水素化化合物を含まない。
【００１７】
本発明は、また、薬学的に許容される担体と、式（Ｉ）のいずれかの化合物、又はその結晶形、薬学的に許容される塩、水和物もしくは溶媒和物とを含む医薬組成物を提供する。
【００１８】
本発明は、また、式（Ｉ）の化合物、又はその薬学的に許容される塩、又は前記化合物の薬学的に許容される塩、及び薬学的に許容される担体を含む医薬組成物を提供する。前記担体は、製剤における他の成分と相容性がある場合、及び薬学的に許容される担体である場合に、薬物に使用されている量では、レシピエントにとって有害ではないという意味で「許容される」ものである。
【００１９】
本発明は、また、哺乳動物である患者に式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグを投与することを含む、ＣＹＰ１７酵素活性と関連する疾患または障害を治療する方法を提供する。
【００２０】
本発明は、また、ＣＹＰ１７酵素と関連する病状の治療に用いられる式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩もしくはプロドラッグを提供する。
【発明の効果】
【００２１】
式（Ｉ）化合物と、前記化合物を含む組成物とは、ＣＹＰ１７酵素阻害剤であり、且つ種々のＣＹＰ１７酵素と関連する病状の治療、予防又は解消に用いられる。これらの化合物を含む医薬組成物は、例えば癌などの様々治療分野において、疾患や障害を治療、予防すること、又は前記疾患や障害の進行度を遅延することに用いられる。
【発明を実施するための形態】
【００２２】
本発明の範囲において、上述の各技術特徴および以下（例えば、実施例）に具体的に記載される各技術特徴を互いに組み合わせて新しいまたは好ましい技術案を構成できる。
当業者にとって、本発明に記載の化学反応は、本発明の他の多くの化合物を適切に調製するために用いられること、また、本発明の化合物を調製するためのその他の方法も本発明の範囲に含まれることが明らかである。例えば、本発明に開示された非典型的な化合物の合成は、当業者が、例えば、活性基を適宜保護する修飾方法、本発明に記載の試薬以外の既知のものを使用すること、又は反応条件に通常の改変を行うことにより、達成することができる。さらに、本発明に開示された反応或いは既知の反応条件も、本発明の他の化合物の調製に適用することが明らかである。
【００２３】
本発明者らは鋭意検討した結果、本発明に係る重水素化されたステロイド系化合物及びその薬学的に許容される塩は、重水素化されていない化合物に比べて、同等又はより優れた薬物動態学的及び／又は薬力学的特性を有するため、ＣＹＰ１７酵素を阻害する化合物として好適であり、さらに癌及びＣＹＰ１７酵素関連疾患の治療薬の調製に適用することを見出した。これに基づいて、本発明を完成するに至った。
【００２４】
本明細書で使用する「重水素化」とは、化合物または官能基における水素の１個以上が重水素に置換されていることを意味する、重水素化は一置換、二置換、多置換または完全置換であっても良い。「１つ又は複数の重水素で置換された」および「一回又は複数回重水素化された」という用語は、同じ意味で使用される。
本明細書で使用する「非重水素化された化合物」とは、重水素原子の割合が天然重水素同位体の含有量（０．０１５％）より多くない化合物を指す。
【００２５】
別の好ましい実施形態では、重水素は、重水素に置換された位置における重水素同位体の含有量が、天然重水素同位体の含有量（０．０１５％）より多く、より好ましくは５０％超、より好ましくは７５％超、より好ましくは９５％超、より好ましくは９７％超、より好ましくは９９％超、より好ましくは９９．５％超である。
具体的には、本発明において、Ｒ１ａ、Ｒ１ｂ、Ｒ１ｃ、Ｒ１ｄ、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１及びＲ１２の重水素に置換された各位置における重水素同位体の含有量は、少なくとも５％であり、好ましくは１０％超、より好ましくは１５％超、より好ましくは２０％超、より好ましくは２５％超、より好ましくは３０％超、より好ましくは３５％超、より好ましくは４０％超、より好ましくは４５％超、より好ましくは５０％超、より好ましくは５５％超、より好ましくは６０％超、より好ましくは６５％超、より好ましくは７０％超、より好ましくは７５％超、より好ましくは８０％超、より好ましくは８５％超、より好ましくは９０％超、より好ましくは９５％超、より好ましくは９９％超である。
【００２６】
本明細書で使用する「本発明に係る化合物」という用語とは、式（Ｉ）で示される化合物を指す。当該用語は、さらに式（Ｉ）の化合物の種々の結晶形態、薬学的に許容される塩、プロドラッグ、代謝物質、溶媒和物、互変異性体及び立体異性体を含み、すべての割合のこれらの化合物で形成した混合物を含む。
本明細書で使用する「薬学的に許容される」という用語とは、以下の化合物、物質、組成物及び／又は剤形を指し、それらは、合理な医薬判断の範囲において、過剰な毒性、刺激性、アレルギー反応又はその他の問題或いは合併症を引き起こさなく、ヒト及び動物の組織と接触して使用するのに適し、これは合理的な利益／リスク比に相応しい。
【００２７】
本明細書で使用する「薬学的に許容される塩」とは、前記化合物の誘導体を指し、その中、親化合物は、その酸又は塩基の塩を調製することにより修飾する。薬学的に許容される塩の例は、例えばアミンのような塩基性残基の無機酸の塩又は有機酸の塩；及び、例えばカルボン酸のような酸性残基の塩基の塩又は有機塩を含むが、これらに限定されない。薬学的に許容される塩は、例えば無毒性の無機酸又は有機酸からなる親化合物の慣用の無毒性の塩又は第四級アンモニウム塩を含む。本発明に係る薬学的に許容される塩は、塩基性又は酸性部分を含む親化合物から、慣用の化学方法によって合成することができる。通常、前記の塩は、遊離酸又は塩基の形態を呈すこれらの化合物と、化学量論量の適当な塩基又は酸とを、水または有機溶媒または両者の混合物の中に反応させることにより、調製することができ；通常、非水媒体は、例えばジエチルエーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノール又はアセトニトリルであることが好ましい。適当な塩について、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、１７ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ，ｐ．１４１８（１９８５）を参照し、その開示内容を本願に参照として引用する。
【００２８】
例えば、式（Ｉ）の化合物の塩は、新たに形成した塩が例えば沈殿、析出、又は冷凍乾燥によって分離されることを可能にする媒体中で、式（Ｉ）の化合物と、例えば同量の酸又は塩基とを反応させることにより、形成することができる。式（Ｉ）の化合物と無機酸及び／又は有機酸で形成できる例示的な酸塩は、例えば酢酸塩、アスコルビン酸塩、安息香酸塩、ベンゼスルホン酸塩、硫酸水素塩、酒石酸水素塩、酸性クエン酸塩、クエン酸塩、エタンスルホン酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、ゲンチシン酸塩、グルコン酸塩、グルカル酸塩、グルタミン酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、イソニコチン酸塩、マレイン酸塩、メタンスルホン酸塩、メタンスルホン酸塩、硝酸塩、パントテン酸塩、リン酸塩、酸性リン酸塩、糖酸塩、サリチル酸塩、コハク酸塩、酸塩、酒石酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、トリフルオロ酢酸塩、乳酸塩及びパモ酸塩（即ち、１，１’−メチレン−ビス（２−ヒドロキシル−ナフタレン−３−カルボン酸塩））が挙げられるが、これらに限定されない。上記の塩は、当業者に公知の方法に従って形成することができる。
【００２９】
式（Ｉ）の化合物と無機塩基及び／又は有機塩基で形成できる例示的な塩基塩は、例えばアンモニウム塩；例えばナトリウム塩、リチウム塩及びカリウム塩のようなアルカリ金属塩；例えばカルシウム塩及びマグネシウム塩のようなアルカリ土類金属塩；例えばベンザチン（ｂｅｎｚａｔｈｉｎｅ）、ジシクロヘキシルアミン、２−アミノ−２−（ヒドロキシルメチル）プロパン−１，３−ジオール（トリメチロールアミノメタン、ヒドラバミン（ｈｙｄｒａｂａｍｉｎｅｓ）（例えばＮ，Ｎ−ジ（デヒドロロジニル（ｒｏｓｉｎｙｌ））エチレンジアミン）、Ｎ−メチル−Ｄ−グルコサミン、Ｎ−メチル−Ｄ−イミダゾールジアミド及びｔ−ブチルアミンのような有機塩基と形成した塩；アミノ酸（例えばアルギニン及びリジン）と形成した塩；及び例えば低級アルキルハライド（例えば塩化メチル、臭化メチル、ヨウ化メチル、塩化エチル、臭化エチル、ヨウ化エチル、塩化プロピル、臭化プロピル、ヨウ化プロピル、塩化ブチル、臭化ブチル及びヨウ化ブチル）、硫酸ジアルキル（例えば硫酸ジメチル、硫酸ジエチル、硫酸ジブチル及び硫酸ジペンチル）、長鎖ハロゲン化物（例えば塩化デシル、臭化デシル、ヨウ化デシル、塩化ラウリル、臭化ラウリル、ヨウ化ラウリル、塩化ミリスチル、臭化ミリスチル、ヨウ化ミリスチル、塩化ステアリル、臭化ステアリル及びヨウ化ステアリル）及びアラルキルハライド（例えば臭化ベンジル及び臭化フェネチル）のような試薬で、塩基性窒素含有基を四級化して形成した塩；が挙げられるが、これらに限定されない。上記の塩は、当業者に公知の方法に従って形成することができる。
【００３０】
「溶媒和物」という用語とは、本発明に係る化合物が溶媒分子と配位して特定の比率で形成した錯体を指す。「水和物」とは、本発明に係る化合物が水が配位して形成した錯体を指す。
【００３１】
また、本発明に係る化合物は、式（Ｉ）で示されるステロイド系化合物のプロドラッグをさらに含む。「プロドラッグ」という用語は、その自体が生物活性を有するものであっても非活性であってもよく、適切な方法で服用した後、人体内で代謝又は化学反応を行って式（Ｉ）に変換する化合物、或いは式（Ｉ）で示される一つの化合物からなる塩又は溶液を含む。前記プロドラッグは、前記化合物のカルボン酸エステル、炭酸エステル、リン酸エステル、硝酸エステル、硫酸エステル、スルホンエステル、スルホキシドエステル、アミノ化合物、カルバメート、アゾ化合物、ホスホラミド、グルコシド、エーテル、アセタール等の形態を含むが、これらに限定されない。
好ましいプロドラッグ化合物は、前記化合物の酢酸エステルである。
【００３２】
「治療有効量」は、本発明に係る化合物の単独投与量、又は保護を請求する化合物の組み合わせ量、又は本発明に係る化合物と、ＣＹＰ１７酵素拮抗剤として有効、或いは癌治療に有効なその他の活性成分との組み合わせ量を含む。
【００３３】
本願で使用される「治療（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」又は「治療（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」は、哺乳動物、特にヒトにおける疾患状態の治療を含み、さらに、（ａ）哺乳動物における前記疾患状態の発生を予防すること、特に前記哺乳動物が前記疾患状態に罹りやすいが、まだ前記疾患状態と診断されていない場合に、前記疾患状態の発生を予防すること；（ｂ）前記疾患状態を抑制すること、即ち、その進行を阻止すること；及び／又は（ｃ）前記疾患状態を緩和すること、即ち、前記疾患状態を消失させること、を含む。
【００３４】
本発明に係る化合物は、１つの又は複数の追加の不斉炭素原子を含んでも良く、従って二種類の又は多種類の立体異性体の形態で存在し得る。本発明は、すべての可能な単一の立体異性体、それらの単一の互変異性体の形態、及それらの混合物を含む。ジアステレオマーは、例えば、本発明に係る化合物又はその適切な塩或いは誘導体の立体異性体の混合物に対して分別晶析、クロマトグラフィー又はＨＰＬＣを行うことなどの通常の技術により分離することができる。前記化合物の単一のエナンチオマーは、対応する光学純度の中間体から調製してもよく、又は、適切なキラル担体を用いて（例えばＨＰＬＣによって）対応するラセミ体を分割すること、或いは、適切な時に、対応するラセミ体と適切な光学活性の酸又は塩基とを反応させて得られたジアステレオマー塩を分別晶析することにより調製してもよい。本発明に係る化合物のすべての立体異性体（混合物または純粋あるいは実質的に純粋な形態）は、本発明に含まれる。
【００３５】
本発明に係る化合物は、本発明に係る化合物に存在する原子のすべての同位体を含む。同位体は、原子数が同一であるが質量数が異なる原子を含む。一般例として、水素の同位体は、重水素及びトリチウムを含むが、これらに限定されない。炭素の同位体は、１３Ｃ及び１４Ｃを含む。同位体で標識された本発明に係る化合物は、通常、当業者が既知した一般的な技術又は本願の記載と類似した方法で、その他の場合で使用する標識されていない試薬の代わりに同位体で標識された適切な試薬を用いて調製することができる。本発明に係る化合物の同位体の例として、２Ｈ、３Ｈ、１３Ｃ、１４Ｃ、１５Ｎ、１７Ｏ、１８Ｏ、３１Ｐ、３２Ｐ、３５Ｓ、１８Ｆ及び３６Ｃｌなどの水素、炭素、窒素、酸素、リン、硫黄、フッ素及び塩素の同位体が挙げられる。上述の化合物の同位体や他の同位体原子を含む本発明に係る化合物、又はエナンチオマー、ジアステレオマー、異性体、または薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物は、すべて本発明の範囲にある。例えば、放射性同位体である３Ｈおよび１４Ｃも本発明の特定の同位体標識化合物の中に含み、それは薬物および基質の組織分布実験に有用である。トリチウム（即ち３Ｈ）と炭素１４（即ち１４Ｃ）は、調製および検出が比較的に容易であるため、同位体の第１候補である。同位体で標識された化合物は、通常の方法で非同位体試薬の代わりに容易に入手可能な同位体標識試薬を使用することにより、例示したプロトコルに従って調製される。
【００３６】
また、本発明は、前記医薬組成物は、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩、及び一種以上の無毒性の薬学的に許容される担体、及び／又は希釈剤、及び／又は添加剤（本願では「担体」材料と総称する）、及び任意のその他の活性成分を含有する医薬組成物を含む。式（Ｉ）の化合物は、任意の適切な経路、好ましくは上記の経路に適する医薬組成物の形態で、且つ所望の治療に有効な用量で投与することができる。例えば、本発明に係る化合物及び組成物は、慣用の薬学的に許容される担体、添加剤及び媒体を含む投与量単位の製剤として、経口投与、粘膜投与又は非経口（血管内、静脈内、腹腔内、皮下、筋肉内、胸骨内及び注入技術を含む）投与することができる。例えば、前記薬剤担体は、マンニトール又は乳糖及び微結晶セルロースの混合物を含んでも良い。前記混合物は、例えば滑剤（例えばステアリン酸マグネシウム）及び崩壊剤（例えばクロスポビドン）のようなその他の成分を含んでも良い。前記担体混合物をゼラチンカプセルに充填するか、または錠剤に打錠することができる。
【００３７】
本発明に係る薬剤活性化合物は、一般的な薬学的方法によって加工して患者（ヒト及びその他の哺乳動物を含む）に投与するための薬剤を調製することができる。
【００３８】
経口投与について、前記医薬組成物は、例えば錠剤、カプセル剤、懸濁剤又は液状製剤の形態であってもよい。前記医薬組成物は、特定量の活性成分を有する投与量単位の形態として調製することが好ましい。前記投与量単位の例としては、錠剤又はカプセル剤である。
【００３９】
投与される化合物量、及び本発明に係る化合物および／または組成物を用いて症状を治療する投薬レジメンは、被験者の年齢、体重、性別及び病状、疾患の種類、疾患の重症度、投与経路と頻度、及び使用される具体的な化合物を含む様々な因子に依存する。従って、前記投薬レジメンが大幅に変化することができるが、標準的な方法で決定することができる。
【００４０】
治療目的の点で、通常、本発明に係る活性化合物は所定の投与経路に適する一種以上の添加剤と組み合わされる。経口投与の場合、前記化合物は、乳糖、ショ糖、デンプン粉末、セルロースアルカノエート、セルロースアルキルエステル、タルク、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム、酸化マグネシウム、リン酸と硫酸のナトリウム塩とカルシウム塩、ゼラチン、アラビアガム、アルギン酸ソーダ、ポリビニルアルコール及び／又はポリビニルピロリドンと混合した後、投与の便利のために錠剤化又はカプセル化される。上記のカプセル剤又は錠剤は、ヒドロキシプロピルメチルセルロース中の活性化合物の分散体の形態で提供される放出制御製剤を含んでも良い。
【００４１】
式（Ｉ）の化合物を含むエマルジョンの油相は、既知の成分から公知の方法で構成することができる。前記の相は、乳化剤のみを含んでも良いが、少なくとも一種類の乳化剤と脂肪又は油、或いは脂肪と油との混合物を含んでも良い。好ましくは、親水性乳化剤が、安定剤としての親油性乳化剤とともに含まれる。油も脂肪も含むことが好ましい。また、乳化剤（安定剤を含む又は含まない）は、いわゆる乳化ワックスを構成し、且つ前記のワックスが油及び脂肪とともに、クリーム剤の油分散相を形成するいわゆる乳化軟膏ベースを構成する。本発明の製剤に適用する乳化剤及びエマルジョン安定剤は、Ｔｗｅｅｎ  ６０、Ｓｐａｎ  ８０、セテアリルアルコール、ミリスチルアルコール、モノステアリン酸グリセリド、ラウリル硫酸ナトリウム、またはジステアリン酸グリセリルが挙げられる。これらのものは、単独で、又はワックス或いは当分野で公知のその他の材料とともに使用される。
【００４２】
前記医薬組成物は、通常の製薬操作（例えば滅菌）を受けてもよく、及び／又は通常の添加剤（例えば保存料、安定剤、湿潤剤、乳化剤及び緩衝剤など）を含んでも良い。錠剤及び丸剤は、さらに腸溶性コーティングで調製される。前記組成物は、例えば湿潤剤、甘味剤、矯味剤及び芳香剤のような添加剤をさらに含んでも良い。
【００４３】
本発明に係る医薬組成物は、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩と、任意の薬学的に許容される担体、添加剤及び媒体から選択される任意のその他のものとを含む。選択できる本発明組成物は、本願に係る前記式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩、及び薬学的に許容される担体、添加剤或いは媒体を含む。
【００４４】
式（Ｉ）の化合物は、例えばアンドロゲン受容体シグナル伝達による癌を治療するために用いられる。これらの化合物は、アンドロゲン生合成に関与するＣＹＰ１７酵素の活性を阻害する。当該酵素の遮断は、性腺、副腎及び腫瘍におけるアンドロゲンの生成を阻害することができ、且つアンドロゲン受容体シグナル伝達による癌（例えば、前立腺癌及びエストロゲン受容体陽性乳癌）の患者を治療する新しい選択肢を提供する。従って、前記治療は、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩を前記患者に投与することを含む。
【００４５】
一つの実施態様において、必要とする哺乳動物に式（Ｉ）の化合物を投与することを含む癌を治療するための方法を提供する。この実施態様に係る方法は、膀胱癌、乳癌、結腸直腸癌、胃癌、頭頚部癌、腎癌、肝臓癌、肺癌、卵巣癌、膵臓／胆嚢癌、前立腺癌、甲状腺癌、骨肉腫、横紋筋肉腫、悪性繊維組織球腫（ＭＦＨ）、繊維肉腫、神経膠芽細胞腫／星状細胞腫、メラノーマ及び中皮腫を含む様々な癌を治療するために用いられるが、これらに限定されない。
好ましくは、この実施態様に係る方法は、様々な前立腺癌を治療するために用いられる。
【００４６】
特定の癌を治療するために投与される式（Ｉ）の化合物の量及び投薬レジメンは、被験者の年齢、体重、性別及び病状、疾患の種類、疾患の重症度、投与経路と頻度、及び使用される具体的な化合物を含む様々な因子に依存する。従って、前記投薬レジメンが大幅に変化することができるが、標準的な方法で決定することができる。約０．０１〜１５００ｍｇ／ｋｇ体重、好ましくは約０．５〜約５０ｍｇ／ｋｇ体重、最も好ましくは約０．１〜２０ｍｇ／ｋｇ体重の１日投与量は適切である。前記１日投与量は、１−４回／日で投与することができる。
【００４７】
癌を治療する際に、通常、化学療法剤及び／又はその他の治療（例えば放射線治療）の組み合わせが有利である。第２の（又は第３の）製剤は、主要治療剤と同一又は異なる作用機構を有してもよい。細胞傷害性薬剤の組み合わせの使用では、異なる方式或いは異なる細胞周期で作用する２種以上の薬剤を投与する場合、及び／又は、２種以上の薬剤が重なる毒性または副作用を有する場合、及び／又は、患者によって示される特定の疾患状態を治療する時に組み合わせる薬剤はそれぞれ顕著な治療効果を奏する場合、特に有用であり得る。
【００４８】
従って、式（Ｉ）の化合物は、癌又は他の増殖性疾患を治療するその他の抗癌治療と組み合わせて投与することができる。本発明は、癌を治療する薬剤の調製における式（Ｉ）の化合物の使用を含み、及び／又は本願に係る式（Ｉ）の化合物及び説明書のパッケージをさらに含み、その中、前記化合物は、その他の抗癌剤又は細胞毒性剤と併用して、癌の治療に用いられる。さらに、本発明は、式（Ｉ）の化合物及1つ以上の他の薬剤の組み合わせをキットとして含み、例えば、それらが一緒にパッケージに入れられ、又は別個のパッケージに入れられてキットとして販売され、或いは一緒に配合されるように包装される。
【００４９】
その他の抗癌剤は、アルキル化剤（ナイトロジェンマスタード、アルキルスルホン酸エステル、ニトロソウレア、アジリジン誘導体及びトリアゼンを含む）；血管新生阻害剤（マトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤を含む）；代謝拮抗物質（アデノシンデアミナーゼ阻害剤、葉酸拮抗剤、プリン類似体及びピリミジン類似体を含む）；抗生物質又は抗体（モノクローナル抗体、ＣＴＬＡ−４抗体、アントラサイクリン系抗生物質を含む）；アロマターゼ阻害剤；細胞周期応答調節因子；酵素；ファルネシルタンパク質（ｆａｒｎｅｓｙｌ−ｐｒｏｔｅｉｎ）トランスフェラーゼ阻害剤；ホルモン及び抗ホルモン剤及びステロイド（合成類似体、グルココルチコイド、エストロゲン／抗エストロゲン（例えばＳＥＲＭｓ）、アンドロゲン／抗アンドロゲン、プロゲストゲン、プロゲステロン受容体作動薬及び黄体形成ホルモン放出作動薬及び拮抗薬を含む）；インスリン様成長因子／インスリン様成長因子受容体系モジュレーター；インテグリンシグナル伝達阻害剤；キナーゼ阻害剤（マルチキナーゼ阻害剤及び／又はＳｒｃキナーゼ或いはＳｒｃ／ａｂｌ阻害剤を含む）、サイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫ）阻害剤、ｐａｎＨｅｒ、Ｈｅｒ−１及びＨｅｒ−２抗体、ＶＥＧＦ阻害剤（抗ＶＥＧＦ抗体を含む）、ＥＧＦＲ阻害剤、分裂促進因子活性化タンパク質［ＭＡＰ］阻害剤、ＭＥＫ阻害剤、Ａｕｒｏｒａキナーゼ阻害剤、ＰＤＧＦ阻害剤及びその他のチロシンキナーゼ阻害剤又はセリン／スレオニンキナーゼ阻害剤）；例えばエクテイナシジン系化合物又はそれらの類縁体及び誘導体のような微小管阻害剤；例えばタキサン系、天然のエポチロン及びそれらの合成や半合成の類縁体のような微小管安定剤；微小管結合及び不安定化剤（ビンカアルカロイドを含む）；トポイソメラーゼ阻害剤；プレニルタンパク質トランスフェラーゼ阻害剤；白金配位錯体；シグナル伝達阻害剤；ならびに、例えば生物学的応答調節剤、成長因子及び免疫調節剤のような抗癌及び細胞毒性剤として使用されるその他の製剤からなる群から１つ以上を選択することができる。
【００５０】
調製方法
以下、本発明に係る式（Ｉ）の構造を有する化合物の調製方法をより詳しく説明するが、これらの具体的な方法は本発明を限定するものではない。また、本発明の化合物は、本明細書に記載された、又は当技術分野で公知された様々な合成方法を組み合わせることによって順調に調製することができ、そのような組み合わせは、当業者にとって明らかである。
【００５１】
以下の共通の調製経路を用いて本発明に係る式（Ｉ）の化合物を合成することができる。
合成経路
【００５２】
【化７】
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【００５３】
式中、Ａ、Ｂ、Ｒ１ａ’、Ｒ１ｂ’、Ｒ１ｃ’、Ｒ１ｄ’はＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉからなる群から選択され、ただし、Ａは、Ｂｒであることが好ましく、Ｂ、Ｒ１ａ’、Ｒ１ｂ’、Ｒ１ｃ’、Ｒ１ｄ’はＩであることが好ましく、Ｒ１ａ、Ｒ１ｂ、Ｒ１ｃ、Ｒ１ｄ、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２、Ｘ１、Ｘ２、Ｙの定義は上記の通りである。
【００５４】
上述の反応に使用される溶媒は、ジクロロメタン、ジクロロエタン、酢酸エチル、酢酸メチル、酢酸イソプロピル、ｎ−ヘキサン、ｎ−ヘプタン、石油エーテル、ｎ−ブタノール、エタノール、イソブタノール、ｔｅｒｔ−ブタノール、イソプロパノール、ｎ−プロパノール、ｎ−ペンタノール、イソアミルアルコール、アセトン、アセトニトリル、ｎ−ヘキサン、トルエン、テトラヒドロフラン、２−メチルテトラヒドロフラン、１，４−ジオキサン、エチレングリコールモノメチルエーテル、エチレングリコールジメチルエーテル、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、ジメチルスルホキシドなどからなる群から選択される。
【００５５】
上述の反応に使用される塩基は、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸セシウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化リチウム、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、４−Ｎ，Ｎ−ジメチルピリジン、ピリジンなどからなる群から選択される。
【００５６】
上述の反応温度が−３０℃〜２００℃であり、より好ましくは−１０℃〜１００℃である。
【００５７】
上述の反応時間が０〜４８ｈであり、より好ましくは０〜２４ｈであり、さらに好ましくは０〜６ｈである。
【００５８】
医薬組成物及び投与方法
本発明の化合物は、従来技術で既知の非重水素化化合物に比べて、一連の利点を有する。
本発明の主な利点は、以下の通りである。
（１）本発明に係る化合物は、ＣＹＰ１７酵素に優れた阻害性を有する。（２）重水素化という技術により、生体内の化合物の代謝を変化させて、化合物がより良い薬物動態パラメーター特性を有することを可能にする。この場合、投与量を変更し、長時間作用型製剤として、適用性を改善することができる。（３）重水素による化合物中の水素原子の置換では、重水素の同位体効果によって、動物体内の化合物の薬物濃度を増加させ、薬物の有効性を向上させることができる。（４）重水素による化合物中の水素原子の置換では、特定の代謝産物が阻害されることにより、化合物の安全性を増加させる可能性がある。
【実施例】
【００５９】
以下、具体的な実施例を組み合わせて、本発明をさらに説明する。なお、これらの実施例は本発明を説明するためのものに過ぎず、本発明の範囲を限定するものではないことを理解すべきである。以下の実施例における具体的な条件を明記しない実験方法は、通常、慣用の条件または製造業者の推奨条件に従う。特に断らない限り、部および百分率は重量部および重量百分率である。
【００６０】
実施例１．（３β）−１７−（３−ピリジル−６−ｄ）アンドロスタ−５，１６−ジエノール（化合物１２）の合成
【００６１】
【化８】
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【００６２】
ステップ１：３−ブロモ−６−ｄ−ピリジン（化合物８）の合成。
氷浴で、イソプロピルマグネシウムクロリド（２Ｍ／ＴＨＦ，６．１６ｍＬ，１２．３１ｍｍｏｌ）を５−ブロモ−２−ヨードピリジン（３．４ｇ，１１．７２ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液（１２ｍＬ）にゆっくり滴下し、滴下終了後、０℃で１ｈ反応した。その後、重水素化メタノール−ｄ４（２．０ｍＬ）を反応液にゆっくり滴下した。反応系を室温まで昇温して０．５ｈ攪拌して反応させた。３０ｍＬの飽和塩化アンモニウム水溶液で反応をクエンチし、ジクロロメタン（３０ｍＬ×３）で抽出し、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、有機層を減圧濃縮して、濃縮液をカラムクロマトグラフィーにより精製し（溶出液：ＰＥ／ＥｔＯＡｃ（ｖ／ｖ）＝１５／１）、６００ｍｇの淡黄色液体を得た。収率は３７．７％であった。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）（δ／ｐｐｍ）８．７０（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），７．８３（ｄｄ，Ｊ＝８．２，２．４Ｈｚ，１Ｈ），７．２１（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）。
【００６３】
ステップ２：３−（ジエチルボリル）−６−ｄ−ピリジン（化合物１０）の合成。
氷浴で、イソプロピルマグネシウムクロリド（２Ｍ／ＴＨＦ，２．１ｍＬ，４．２０ｍｍｏｌ）を３−ブロモ−６−ｄ−ピリジン（５５６ｍｇ，３．５ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液（５ｍＬ）にゆっくり滴下し、滴下終了後、０℃で１．５ｈ反応した後、ジエチルメトキシボラン（１Ｍ／ＴＨＦ，４．２ｍＬ，４．２ｍｍｏｌ）を反応液にゆっくり滴下した。反応系を室温まで昇温して１ｈ攪拌して反応させた。３０ｍＬの飽和塩化アンモニウム水溶液で反応をクエンチし、ジクロロメタン（３０ｍＬ×３）で抽出し、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、有機層を減圧濃縮し、濃縮液をカラムクロマトグラフィーにより精製し（溶出液：ＰＥ／ＥｔＯＡｃ（ｖ／ｖ）＝１／０）、３００ｍｇの白色固体を得た。収率は４８．３％であった。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）（δ／ｐｐｍ）７．７４（ｄｄ，Ｊ＝７．５，１．３Ｈｚ，１Ｈ），７．５９（ｓ，１Ｈ），７．２６（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），０．７６-０．６１（ｍ，４Ｈ），０．４８（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，６Ｈ）。
【００６４】
ステップ３：（３β）−１７−（３−ピリジル−６−ｄ）アンドロスタ−５，１６−ジエノールの合成。
室温下、窒素保護下でテトラヒドロフラン（６ｍＬ）と水（２ｍＬ）との混合溶液を、（３β）−１７−ヨードアンドロスタ−５，１６−ジエン−オール（２００ｍｇ，０．５０ｍｍｏｌ）、３−（ジエチルボリル）−６−ｄ−ピリジン（８８ｍｇ，０．６０ｍｍｏｌ）、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウムジクロリド（ＰｄＣｌ２（ＰＰｈ３）２）（２０ｍｇ，０．０４ｍｍｏｌ）および炭酸ナトリウム（２１０ｍｇ，２．００ｍｍｏｌ）の混合物に加え、反応液を８０℃で一晩（１６ｈｒｓ）保持した。室温まで冷却し、水（２５ｍＬ）を加えて反応をクエンチし、セライトで濾過し、ろ液を酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で抽出し、有機層を合わせて飽和食塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、有機層を減圧濃縮し、濃縮液をカラムクロマトグラフィーにより精製し（溶出液：ＰＥ／ＥｔＯＡｃ（ｖ／ｖ）＝１．５／１）、１００ｍｇの白色固体を得た。収率は５７．１％であり、純度は９７．２１％であった。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝３５１．１０（Ｍ＋１）。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ−ｄ）（δ／ｐｐｍ）８．５４（ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ，１Ｈ），７．８６（ｄｄ，Ｊ＝８．０，２．３Ｈｚ，１Ｈ），７．３９（ｄｄ，Ｊ＝８．０，０．７Ｈｚ，１Ｈ），６．１１（ｄｄ，Ｊ＝３．２，１．８Ｈｚ，１Ｈ），５．４１（ｄ，Ｊ＝５．１Ｈｚ，１Ｈ），３．４８-３．３７（ｍ，１Ｈ），２．３６-２．２３（ｍ，３Ｈ），２．１６-２．０４（ｍ，３Ｈ），１．９５-１．７９（ｍ，３Ｈ），１．７７-１．６１（ｍ，４Ｈ），１．５８-１．４５（ｍ，２Ｈ），１．１４-１．０５（ｍ，８Ｈ）。
【００６５】
実施例２．（３β）−１７−（３−ピリジル−５−ｄ）アンドロスタ−５，１６−ジエノール（化合物１８）の合成
【００６６】
【化９】
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【００６７】
ステップ１：３−ブロモ−５−ｄ−ピリジン（化合物１４）の合成。
氷浴で、イソプロピルマグネシウムクロリド（２Ｍ／ＴＨＦ，７．５ｍＬ，１５．００ｍｍｏｌ）を、３，５−ジブロモピリジン（３．５５ｇ，１５．００ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液（１５ｍＬ）にゆっくり滴下し、滴下終了後、０℃で１．５ｈ反応した後、重水（２．０ｍＬ）を反応液にゆっくり滴下した。反応系を室温まで昇温して一晩攪拌して反応させた。３０ｍＬの飽和塩化アンモニウム水溶液で反応をクエンチし、ジクロロメタン（６０ｍＬ×３）で抽出し、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、有機層を減圧濃縮し、濃縮液をカラムクロマトグラフィーにより精製し（溶出液：ＰＥ／ＥｔＯＡｃ（ｖ／ｖ）＝１５／１）、１．３０ｇの淡黄色液体を得た。収率は５４．８％であった。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）（δ／ｐｐｍ）８．７０（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），８．５４（ｓ，１Ｈ），７．８３（ｄｄ，Ｊ＝２．２，１．０Ｈｚ，１Ｈ）。
【００６８】
ステップ２：３−（ジエチルボリル）−５−ｄ−ピリジン（化合物１６）の合成。
氷浴で、イソプロピルマグネシウムクロリド（２Ｍ／ＴＨＦ，４．８３ｍＬ，９．６６ｍｍｏｌ）を、３−ブロモ−５−ｄ−ピリジン（１．２８ｇ，８．０５ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液（１５ｍＬ）にゆっくり滴下し、滴下終了後、０℃で１．５ｈ反応した後、ジエチルメトキシボラン（１Ｍ／ＴＨＦ，９．７ｍＬ，９．６６ｍｍｏｌ）を反応液にゆっくり滴下した。反応系を室温まで昇温して１ｈ攪拌して反応させた。３０ｍＬの飽和塩化アンモニウム水溶液で反応をクエンチし、ジクロロメタン（３０ｍＬ×３）で抽出し、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、有機層を減圧濃縮し、濃縮液をカラムクロマトグラフィーにより精製し（溶出液：ＰＥ／ＥｔＯＡｃ（ｖ／ｖ）＝１／０）、４００ｍｇの白色固体を得た。収率は３３．７％であった。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）（δ／ｐｐｍ）８．０３（ｓ，１Ｈ），７．７４（ｓ，１Ｈ），７．５９（ｓ，１Ｈ），０．７０（ｍ，４Ｈ），０．４８（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，６Ｈ）。
【００６９】
ステップ３：（３β）−１７−（３−ピリジル−５−ｄ）アンドロスタ−５，１６−ジエノール（化合物１８）の合成。
室温下、窒素保護下でテトラヒドロフラン（６ｍＬ）と水（２ｍＬ）との混合溶液を、（３β）−１７−ヨードアンドロスタ−５，１６−ジエノール（２００ｍｇ，０．５０ｍｍｏｌ）、３−（ジエチルボリル）−５−ｄ−ピリジン（８８ｍｇ，０．６０ｍｍｏｌ）、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウムジクロリド（ＰｄＣｌ２（ＰＰｈ３）２）（２０ｍｇ，０．０４ｍｍｏｌ）および炭酸ナトリウム（２１０ｍｇ，２．００ｍｍｏｌ）の混合物に加え、反応液を８０℃で一晩（１６ｈｒｓ）保持した。室温まで冷却し、水（２５ｍＬ）を加えて反応をクエンチし、セライトで濾過し、ろ液を酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で抽出し、有機層を合わせて飽和食塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、有機層を減圧濃縮し、濃縮液をカラムクロマトグラフィーにより精製し（溶出液：ＰＥ／ＥｔＯＡｃ（ｖ／ｖ）＝１．５／１）、９０ｍｇの白色固体を得た。収率は５７．３９％であり、純度は９６．０３％であった。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝３５１．１（Ｍ＋１），１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ−ｄ）（δ／ｐｐｍ）８．５５（ｄ，Ｊ＝２．２Ｈｚ，１Ｈ），８．４０（ｄ，Ｊ＝１．４Ｈｚ，１Ｈ），７．８６（ｓ，１Ｈ），６．１１（ｄｄ，Ｊ＝３．１，１．８Ｈｚ，１Ｈ），５．４１（ｄ，Ｊ＝５．１Ｈｚ，１Ｈ），３．５０-３．３６（ｍ，１Ｈ），２．３７-２．２２（ｍ，３Ｈ），２．１５-２．０５（ｍ，３Ｈ），１．９４-１．７９（ｍ，３Ｈ），１．７６-１．６０（ｍ，４Ｈ），１．５８-１．４４（ｍ，２Ｈ），１．１８-１．０３（ｍ，８Ｈ）。
【００７０】
実施例３．（３β）−１７−（３−ピリジル−５−ｄ）アンドロスタ−５，１６−ジエニルアセテート（化合物２０）の合成
【００７１】
【化１０】
2019507799.tif 000011
【００７２】
室温下、ＤＭＡＰ（４−ジメチルアミノピリジン）（４．００ｍｇ，０．０２ｍｍｏｌ）を、（３β）−１７−（３−ピリジル−５−ｄ）アンドロスタ−５，１６−ジエノール（４５ｍｇ，０．１３ｍｍｏｌ）及び無水酢酸（４０ｍｇ，０．４０ｍｍｏｌ）のアセトン（３ｍＬ）溶液に加え、反応液を５５℃〜６５℃で２ｈ攪拌して反応させた。アセトンを減圧除去し、１５ｍＬの水を加えて反応をクエンチし、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。有機相を合わせ、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、有機層を減圧濃縮し、濃縮液をカラムクロマトグラフィーにより精製し（溶出液：ＰＥ／ＥｔＯＡｃ（ｖ／ｖ）＝３／１）、３０ｍｇクリーム色固体を得た。収率は７４．５％であり、純度は９６．３１％であった。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝３９３．３（Ｍ＋１），１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）（δ／ｐｐｍ）８．５９（ｓ，１Ｈ），８．４３（ｓ，１Ｈ），７．７６（ｓ，１Ｈ），６．１２（ｓ，１Ｈ），５．３９（ｄ，Ｊ＝４．３Ｈｚ，１Ｈ），４．５５-４．３４（ｍ，１Ｈ），２．３３-２．２５（ｍ，２Ｈ），２．２５-２．１５（ｍ，１Ｈ），２．１１-２．００（ｍ，３Ｈ），１．９９（ｓ，３Ｈ），１．８７-１．７５（ｍ，２Ｈ），１．７１-１．４７（ｍ，６Ｈ），１．４３-１．３４（ｍ，１Ｈ），１．１３-１．０６（ｍ，１Ｈ），１．０６-０．９７（ｍ，７Ｈ）。
【００７３】
実施例４．（３β）−１７−（３−ピリジル）アンドロスタ−５，１６−ジエニル−ｄ３−アセテート（化合物２３）の合成
【００７４】
【化１１】
2019507799.tif 000012
【００７５】
ステップ１：（３β）−１７−（３−ピリジル）アンドロスタ−５，１６−ジエノール（化合物２２）の合成。
室温下、窒素保護下でテトラヒドロフラン（３０ｍＬ）と水（１０ｍＬ）との混合溶液を、１７−ヨードアンドロスタ−５，１６−ジエン−３β−アルコール（２．００ｇ，５．０２ｍｍｏｌ）、３−ジエチルボリルピリジン（９００ｍｇ，６．０２ｍｍｏｌ）、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウムジクロリド（１８０ｍｇ，０．２６ｍｍｏｌ）および炭酸ナトリウム（２．１２ｇ，２０．０８ｍｍｏｌ）の混合物に加え、反応液を８０℃で一晩（１６ｈｒｓ）保持した。室温まで冷却し、水（２５ｍＬ）を加えて反応をクエンチし、セライトで濾過し、ろ液を酢酸エチル（６０ｍＬ×３）で抽出し、有機層を合わせて飽和食塩水（６０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、有機層を減圧濃縮し、濃縮液をカラムクロマトグラフィーにより精製し（溶出液：ＰＥ／ＥｔＯＡｃ（ｖ／ｖ）＝１／１）、１．２５ｇの淡黄色固体を得た。収率は７１．２％であり、純度は９６．２５％であった。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝３５０．１（Ｍ＋１）＋。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ−ｄ４）（δ／ｐｐｍ）８．５４（ｓ，１Ｈ），８．４０（ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ，１Ｈ），７．８６（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，１Ｈ），７．３９（ｄｄ，Ｊ＝７．８，４．９Ｈｚ，１Ｈ），６．１０（ｓ，１Ｈ），５．４１（ｄ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，１Ｈ），３．４９−３．３７（ｍ，１Ｈ），２．３６−２．２１（ｍ，３Ｈ），２．１７−２．００（ｍ，３Ｈ），１．９５−１．７８（ｍ，３Ｈ），１．７６−１．６２（ｍ，４Ｈ），１．５６−１．４４（ｍ，２Ｈ），１．１５−１．０６（ｍ，８Ｈ）。
【００７６】
ステップ２：（３β）−１７−（３−ピリジル）アンドロスタ−５，１６−ジエニル−ｄ３−アセテート（化合物２３）の合成。
室温下、ＤＭＡＰ（４−ジメチルアミノピリジン）（５．００ｍｇ，０．０４ｍｍｏｌ）を、３β−１７−（３−ピリジル）アンドロスタ−５，１６−ジエノール（７０ｍｇ，０．２０ｍｍｏｌ）及び重水素化無水酢酸−ｄ６（６１ｍｇ，０．６０ｍｍｏｌ）のアセトン（５ｍＬ）溶液に加え、反応液を５５℃〜６５℃で２時間攪拌して反応させた。アセトンを減圧除去し、１５ｍＬの水を加えて反応をクエンチし、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。有機相を合わせ、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、有機層を減圧濃縮し、濃縮液をカラムクロマトグラフィーにより精製し（溶出液：ＰＥ／ＥｔＯＡｃ（ｖ／ｖ）＝３／１）、６５ｍｇのクリーム色固体を得た。収率は８２．４％であり、純度は９７．４６％であった。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝３９５．３（Ｍ＋１）。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）（δ／ｐｐｍ）８．５９（ｄ，Ｊ＝１．７Ｈｚ，１Ｈ），８．４４（ｄｄ，Ｊ＝４．７，１．５Ｈｚ，１Ｈ），７．８１−７．７２（ｍ，１Ｈ），７．３４（ｄｄ，Ｊ＝７．９，４．８Ｈｚ，１Ｈ），６．１２（ｄ，Ｊ＝１．３Ｈｚ，１Ｈ），５．３９（ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ，１Ｈ），４．５７−４．３６（ｍ，１Ｈ），２．３４−２．２６（ｍ，２Ｈ），２．２６−２．１６（ｍ，１Ｈ），２．１０−１．９７（ｍ，３Ｈ），１．８８−１．７４（ｍ，２Ｈ），１．７２−１．４６（ｍ，６Ｈ），１．４６−１．３２（ｍ，１Ｈ），１．１５−１．００（ｍ，８Ｈ）。
【００７７】
実施例５．（３β）−１７−（３−ピリジル−６−ｄ）アンドロスタ−５，１６−ジエニルアセテート（化合物２５）の合成
【００７８】
【化１２】
2019507799.tif 000013
【００７９】
ステップ１：（３β）−１７−ヨードアンドロスタ−５，１６−ジエニルアセテート（化合物２４）の合成。
室温下、ＤＭＡＰ（４−ジメチルアミノピリジン）（１０７ｍｇ，０．８８ｍｍｏｌ）を、（３β）−１７−ヨードアンドロスタ−５，１６−ジエノール（３．５ｇ，８．７８ｍｍｏｌ）及び無水酢酸（２．６９ｇ，２６．３４ｍｍｏｌ）のアセトン（１５ｍＬ）溶液に加え、反応液を５５℃〜６５℃で２時間攪拌して反応させた。アセトンを減圧除去し、３０ｍＬの水を加えて反応をクエンチし、酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で抽出した。有機相を合わせ、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、有機層を減圧濃縮し、濃縮液をカラムクロマトグラフィーにより精製し（溶出液：ＰＥ／ＥｔＯＡｃ（ｖ／ｖ）＝３／１）、１．５０ｇのクリーム色固体を得た。収率は３８．８％であった。
【００８０】
ステップ２：（３β）−１７−（３−ピリジル−６−ｄ）アンドロスタ−５，１６−ジエニルアセテート（化合物２５）の合成。
室温下、窒素保護下でテトラヒドロフラン（６ｍＬ）と水（２ｍＬ）との混合溶液を、１７−ヨードアンドロスタ−５，１６−ジエン−３β−イルアセテート（１６０ｍｇ，０．３６ｍｍｏｌ）、３−ジエチルボリルピリジン−６−ｄ（５４ｍｇ，０．３６ｍｍｏｌ）、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウムジクロリドＰｄＣｌ２（ＰＰｈ３）２（１５ｍｇ，０．０２ｍｍｏｌ）および炭酸ナトリウム（１４０ｍｇ，１．３０ｍｍｏｌ）の混合物に加え、反応液を８０℃で２時間反応した。室温まで冷却し、水（１５ｍＬ）を加えて反応をクエンチし、セライトで濾過し、ろ液を酢酸エチルで抽出し（２５ｍＬ×３）、有機層を合わせて飽和食塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、有機層を減圧濃縮し、濃縮液をカラムクロマトグラフィーにより精製し（溶出液：ＰＥ／ＥｔＯＡｃ（ｖ／ｖ）＝４／１）、３６ｍｇの白色固体を得た。収率は２５．５％であり、純度は９８．８９％であった。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝３９３．３（Ｍ＋１）＋。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）（δ／ｐｐｍ）８．６３（ｓ，１Ｈ），７．８９（ｄｄ，Ｊ＝８．０，１．９Ｈｚ，１Ｈ），７．４４（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），６．１８（ｓ，１Ｈ），５．３９（ｄ，Ｊ＝４．１Ｈｚ，１Ｈ），４．５７−４．３４（ｍ，１Ｈ），２．２９（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，２Ｈ），２．２５−２．１５（ｍ，１Ｈ），２．１１−２．００（ｍ，３Ｈ），１．９８（ｓ，３Ｈ），１．８７−１．７３（ｍ，２Ｈ），１．７２−１．４８（ｍ，６Ｈ），１．４５−１．３４（ｍ，１Ｈ），１．１４−１．０６（ｍ，１Ｈ），１．０６−０．９８（ｍ，７Ｈ）。
【００８１】
実施例６．（３β）−１７−（３−ピリジル−６−ｄ）アンドロスタ−５，１６−ジエニル−ｄ３−アセテート（化合物２７）の合成
【００８２】
【化１３】
2019507799.tif 000014
【００８３】
ステップ１：（３β）−１７−ヨードアンドロスタ−５，１６−ジエニル−ｄ３−アセテート（化合物２６）の合成。
室温下、ＤＭＡＰ（４−ジメチルアミノピリジン）（６１ｍｇ，０．５０ｍｍｏｌ）を、（３β）−１７−ヨードアンドロスタ−５，１６−ジエノール（２．００ｇ，５．００ｍｍｏｌ）及び重水素化無水酢酸−ｄ６（１．５０ｇ，１５．００ｍｍｏｌ）のアセトン（１５ｍＬ）溶液に加え、反応液を５５℃〜６５℃で２時間攪拌して反応させた。アセトンを減圧除去し、３０ｍＬの水を加えて反応をクエンチし、酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で抽出した。有機相を合わせ、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、有機層を減圧濃縮し、濃縮液をカラムクロマトグラフィーにより精製し（溶出液：ＰＥ／ＥｔＯＡｃ（ｖ／ｖ）＝３／１）、１．８０ｇの白色固体を得た。収率は８１．２３％であった。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）（δ／ｐｐｍ）６．１４（ｄｄ，Ｊ＝３．１，１．６Ｈｚ，１Ｈ），５．３９（ｄ，Ｊ＝５．１Ｈｚ，１Ｈ），４．６１（ｍ，１Ｈ），２．３４（ｍ，２Ｈ），２．１６（ｍ，１Ｈ），１．７４（ｍ，１２Ｈ），１．２１（ｍ，２Ｈ），１．０６（ｓ，３Ｈ），０．７６（ｓ，３Ｈ）。
【００８４】
ステップ２：（３β）−１７−（３−ピリジル−６−ｄ）アンドロスタ−５，１６−ジエニル−ｄ３−アセテート（化合物２７）の合成。
室温下、窒素保護下でテトラヒドロフラン（６ｍＬ）と水（２ｍＬ）との混合溶液を、（３β）−１７−ヨードアンドロスタ−５，１６−ジエニル−ｄ３−アセテート（１６０ｍｇ，０．３６ｍｍｏｌ）、３−ジエチルボリル−６−ｄ−ピリジン（５４ｍｇ，０．３６ｍｍｏｌ）、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウムジクロリドＰｄＣｌ２（ＰＰｈ３）２（１５ｍｇ，０．０２ｍｍｏｌ）および炭酸ナトリウム（１４０ｍｇ，１．３０ｍｍｏｌ）の混合物に加え、反応液を８０℃で２ｈ反応した。室温まで冷却し、水（１５ｍＬ）を加えて反応をクエンチし、セライトで濾過し、ろ液を酢酸エチル（２５ｍＬ×３）で抽出し、有機層を合わせて飽和食塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、有機層を減圧濃縮し、濃縮液をカラムクロマトグラフィーにより精製し（溶出液：ＰＥ／ＥｔＯＡｃ（ｖ／ｖ）＝４／１）、６５ｍｇの白色固体を得た。収率は４６．０％であり、純度は９９．８２％であった。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝３９６．３（Ｍ＋１）＋。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）（δ／ｐｐｍ）８．６０（ｄ，Ｊ＝１．４Ｈｚ，１Ｈ），７．８０（ｄｄ，Ｊ＝８．０，２．０Ｈｚ，１Ｈ），７．３６（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），６．１３（ｓ，１Ｈ），５．３８（ｄ，Ｊ＝４．１Ｈｚ，１Ｈ），４．５５−４．３４（ｍ，１Ｈ），２．２８（ｄ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，２Ｈ），２．２４−２．１３（ｍ，１Ｈ），２．０９−１．９４（ｍ，３Ｈ），１．８６−１．７３（ｍ，２Ｈ），１．７０−１．４６（ｍ，６Ｈ），１．４４−１．３２（ｍ，１Ｈ），１．２２−１．０７（ｍ，１Ｈ），１．０６−０．９８（ｍ，７Ｈ）。  
【００８５】
実施例７．（３β）−１７−（３−ピリジル−５−ｄ）アンドロスタ−５，１６−ジエニル−ｄ３−アセテート（化合物２８）の合成
【００８６】
【化１４】
2019507799.tif 000015
【００８７】
室温下、窒素保護下でテトラヒドロフラン（２．２ｍＬ）と水（０．７ｍＬ）との混合溶液を、（３β）−１７−ヨードアンドロスタ−５，１６−ジエニル−ｄ３−アセテート（化合物２６）（１５０ｍｇ，０．３４ｍｍｏｌ）、３−ジエチルボリル−５−ｄ−ピリジン（６０ｍｇ，０．４１ｍｍｏｌ）、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウムジクロリド（２４ｍｇ，０．０３ｍｍｏｌ）および炭酸ナトリウム（１３２ｍｇ，１．２２ｍｍｏｌ）の混合物に加え、反応液を８０℃で２時間反応した。室温まで冷却し、水（１５ｍＬ）を加えて反応をクエンチし、セライトで濾過し、ろ液を酢酸エチルで抽出し（２５ｍＬ×３）、有機層を合わせて飽和食塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、有機層を減圧濃縮し、濃縮液をカラムクロマトグラフィーにより精製し（溶出液：ＰＥ／ＥｔＯＡｃ（ｖ／ｖ）＝４／１）、８１ｍｇの白色固体を得た。収率は６０．２％であり、純度は９９．３２％であった。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝３９６．４（Ｍ＋１）＋。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）（δ／ｐｐｍ）８．５９（ｓ，１Ｈ），８．４４（ｓ，１Ｈ），７．７６（ｓ，１Ｈ），６．１２（ｓ，１Ｈ），５．３９（ｄ，Ｊ＝３．６Ｈｚ，１Ｈ），４．６０−４．３０（ｍ，１Ｈ），２．３５−２．２４（ｍ，２Ｈ），２．２４−２．１４（ｍ，１Ｈ），２．１２−１．９６（ｍ，３Ｈ），１．８７−１．７４（ｍ，２Ｈ），１．７２−１．４５（ｍ，６Ｈ），１．４４−１．３４（ｍ，１Ｈ），１．２６−１．１１（ｍ，１Ｈ），１．０９−０．９７（ｍ，７Ｈ）。
【００８８】
実施例８．（３β）−１７−（３−ピリジル）アンドロスタ−５，１６−ジエノール−１６−ｄ（化合物３４）の合成
【００８９】
【化１５】
2019507799.tif 000016
【００９０】
ステップ１：デヒドロエピアンドロステロン（化合物３０）の合成。
室温下、水酸化カリウム（５０８ｍｇ，９．１０ｍｍｏｌ）を、デヒドロエピアンドロステロンアセテート（２．５０ｇ，７．６０ｍｍｏｌ）のメタノール（１５ｍＬ）とテトラヒドロフラン（５ｍＬ）との混合溶媒に加え、室温で１ｈｒ反応した。反応液を減圧濃縮し、残渣に酢酸エチル（３０ｍＬ）及び水（３０ｍＬ）を加えて溶解し層分離させ、水層を酢酸エチル（３０ｍＬ×２）で抽出し、有機層を合わせ、飽和食塩水で洗浄した。無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧濃縮して２．３９ｇの白色固体を得た。そのまま次の反応に用いた。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝２８７．３（Ｍ−１）。
【００９１】
ステップ２：デヒドロエピアンドロステロン−１６−ｄ２（化合物３１）の合成。
室温下、１，５，７−トリアザビシクロ（４，４，０）デカ−５−エン（ＴＢＵ）（１５０ｍｇ，１．０８ｍｍｏｌ）を、デヒドロエピフラボン（１．００ｇ，３．５ｍｍｏｌ）の重水素化クロロホルム（１５ｍＬ）溶液に加え、反応液を室温で一晩攪拌した。水（３０ｍＬ）を加えて反応をクエンチし、ジクロロメタン（３０ｍＬ×３）で抽出し、有機層を合わせ、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧濃縮して１．００ｇの淡黄色固体を得た。そのまま次の反応に用いた。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝２８９．３（Ｍ−１）。
【００９２】
ステップ３：デヒドロエピアンドロステロン１７−ヒドラゾン−１６−ｄ２（化合物３２）の合成。
室温下でデヒドロエピフラボン−１６−ｄ２（１．００ｇ，３．５０ｍｍｏｌ）のエタノール（１４ｍＬ）溶液にヒドラジン水和物（３．００ｍＬ，６０ｍｍｏｌ）を加え、加熱還流しながら１時間攪拌して反応させた。室温まで冷却し、水（１５ｍＬ）を加え、系外に大量の白色固体が析出した。吸引濾過し、濾過ケーキを水（３ｍＬ×２）及びジエチルエーテル（３ｍＬ×２）で順に洗浄し、乾燥して８５０ｍｇの白色固体を得た。収率は７９．９％であった。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝３０５．３［Ｍ＋１］＋。
【００９３】
ステップ４：（３β）−１７−ヨード−アンドロスタ−５，１６−ジエノール−１６−ｄ（化合物３３）の合成。
氷浴で、デヒドロエピアンドロステロン１７−ヒドラゾン−１６−ｄ２（８５０ｍｇ，２．８０ｍｇ）の無水テトラヒドロフラン（２３ｍＬ）溶液を、窒素保護下で１，１，３，３−テトラメチルグアニジン（１．８０ｇ，１５．３０ｍｍｏｌ）及びヨウ素（１．４２ｇ，５．６ｍｍｏｌ）のジエチルエーテル（２０ｍＬ）とテトラヒドロフラン（４１ｍＬ）との混合溶媒にゆっくり滴下した（２ｈｒ）。滴下終了後、反応液を減圧濃縮し、残渣に酢酸エチル（５０ｍＬ）を加えて溶解させ、それぞれ水（５０ｍＬ）及び飽和チオ硫酸ナトリウム溶液（５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧濃縮し、１．２０ｇの黄褐色固体を得た。収率は１００％であり、そのまま次の反応に用いた。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝３９８．２（Ｍ−１）。
【００９４】
ステップ５：（３β）−１７−（３−ピリジル）アンドロスタ−５，１６−ジエノール−１６−ｄ（化合物３４）の合成。
室温下、窒素保護下でテトラヒドロフラン（６ｍＬ）と水（２ｍＬ）との混合溶液を、１７−ヨードアンドロスタ−５，１６−ジエン−３β−オール−１６−ｄ（２００ｍｇ，０．５０ｍｍｏｌ）、３−（ジエチルボリル）ピリジン（８８ｍｇ，０．６０ｍｍｏｌ）、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウムジクロリド（２０ｍｇ，０．０４ｍｍｏｌ）および炭酸ナトリウム（２４８ｍｇ，１．８０ｍｍｏｌ）の混合物に加え、反応液を８０℃で２ｈｒ反応した。室温まで冷却し、水（２５ｍＬ）を加えて反応をクエンチし、セライトで濾過し、ろ液を酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で抽出し、有機層を合わせて飽和食塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、有機層を減圧濃縮し、濃縮液をカラムクロマトグラフィーにより精製し（溶出液：ＰＥ／ＥｔＯＡｃ（ｖ／ｖ）＝１．５／１）、１２８ｍｇの白色固体を得た。収率は７３．０％であり、純度は９９．５４％であった。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝３５１．３（Ｍ＋１）。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ−ｄ４）（δ／ｐｐｍ）８．５６（ｓ，１Ｈ），８．４１（ｓ，１Ｈ），７．９２（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．４４（ｄｄ，Ｊ＝７．９，４．９Ｈｚ，１Ｈ），５．４０（ｄ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，１Ｈ），３．４２（ｍ，１Ｈ），２．２９（ｍ，３Ｈ），２．１０（ｍ，３Ｈ），１．７５（ｍ，７Ｈ），１．５０（ｍ，２Ｈ），１．１２（ｍ，８Ｈ）。
【００９５】
実施例９．（３β）−１７−（３−ピリジル）アンドロスタ−５，１６−ジエニル−１６−ｄ−ｄ３−アセテート（化合物３５）の合成
【００９６】
【化１６】
2019507799.tif 000017
【００９７】
室温下、ＤＭＡＰ（４−ジメチルアミノピリジン）（２．８０ｍｇ，０．０２ｍｍｏｌ）を、（３β）−１７−（３−ピリジル）アンドロスタ−５，１６−ジエノール−１６−ｄ（８０ｍｇ，０．２２ｍｍｏｌ）及び重水素化無水酢酸−ｄ６（５８ｍｇ，０．５７ｍｍｏｌ）のアセトン（３ｍＬ）溶液に加え、反応液を５５℃〜６５℃で２時間攪拌して反応させた。アセトンを減圧除去し、１５ｍＬの水を加えて反応をクエンチし、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。有機相を合わせ、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、有機層を減圧濃縮し、濃縮液をカラムクロマトグラフィーにより精製し（溶出液：ＰＥ／ＥｔＯＡｃ（ｖ／ｖ）＝３／１）、５０ｍｇの淡黄色固体を得た。収率は５６．０％であり、純度は９９．４２％であった。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝３９６．３（Ｍ＋１）＋。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）（δ／ｐｐｍ）８．５９（ｓ，１Ｈ），８．４３（ｄ，Ｊ＝３．６Ｈｚ，１Ｈ），７．７６（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），７．３３（ｄｄ，Ｊ＝７．７，４．８Ｈｚ，１Ｈ），５．３９（ｄ，Ｊ＝４．１Ｈｚ，１Ｈ），４．５７−４．３０（ｍ，１Ｈ），２．３４−２．２４（ｍ，２Ｈ），２．２４−２．１４（ｍ，１Ｈ），２．０９−１．９７（ｍ，３Ｈ），１．８６−１．７３（ｍ，２Ｈ），１．７１−１．４５（ｍ，６Ｈ），１．４４−１．３２（ｍ，１Ｈ），１．１３−１．０７（ｍ，１Ｈ），１．０７−０．９６（ｍ，７Ｈ）。
【００９８】
実施例１０．（３β）−１７−（３−ピリジル−５−ｄ）アンドロスタ−５，１６−ジエニル−１６−ｄ−ｄ３−アセテート（化合物３７）の合成
【００９９】
【化１７】
2019507799.tif 000018
【０１００】
ステップ１：（３β）−１７−ヨードアンドロスタ−５，１６−ジエニル−１６−ｄ−ｄ３−アセテート（化合物３６）の合成。
室温下、ＤＭＡＰ（４−ジメチルアミノピリジン）（７．００ｍｇ，０．０６ｍｍｏｌ）を、（３β）−１７−（３−ピリジル）アンドロスタ−５，１６−ジエノール−１６−ｄ（２３０ｍｇ，０．５８ｍｍｏｌ）及び重水素化無水酢酸−ｄ６（１７６ｍｇ，０．７２ｍｍｏｌ）のアセトン（５ｍＬ）溶液に加え、反応液を５５℃〜６５℃で２時間攪拌して反応させた。アセトンを減圧除去し、１５ｍＬの水を加えて反応をクエンチし、酢酸エチル（２０ｍＬ×３）で抽出した。有機相を合わせ、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、有機層を減圧濃縮し、濃縮液をカラムクロマトグラフィーにより精製し（溶出液：ＰＥ／ＥｔＯＡｃ（ｖ／ｖ）＝８／１）、１７０ｍｇの白色固体を得た。収率は６６．０％であった。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝４４５．２（Ｍ＋１）＋。
【０１０１】
ステップ２：（３β）−１７−（３−ピリジル−５−ｄ）アンドロスタ−５，１６−ジエニル−１６−ｄ−ｄ３−アセテート（化合物３７）の合成。
室温下、窒素保護下でテトラヒドロフラン（３ｍＬ）及び水（１ｍＬ）の混合溶液を、（３β）−１７−ヨードアンドロスタ−５，１６−ジエニル−１６−ｄアセテート−ｄ３（８０ｍｇ，０．１８ｍｍｏｌ）、３−ジエチルボリルピリジン−５−ｄ（３２ｍｇ，０．２２ｍｍｏｌ）、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウムジクロリド（８．００ｍｇ，０．０３ｍｍｏｌ）および炭酸ナトリウム（６９ｍｇ，０．６５ｍｍｏｌ）の混合物に加え、反応液を８０℃で２時間反応した。室温まで冷却し、水（１５ｍＬ）を加えて反応をクエンチし、セライトで濾過し、ろ液を酢酸エチル（２５ｍＬ×３）で抽出し、有機層を合わせて飽和食塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、有機層を減圧濃縮し、濃縮液をカラムクロマトグラフィーにより精製し（溶出液：ＰＥ／ＥｔＯＡｃ（ｖ／ｖ）＝４／１）、６０ｍｇの白色固体を得た。収率は８４．０％であり、純度は９９．３６％であった。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝３９７．３（Ｍ＋１）＋。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）（δ／ｐｐｍ）８．５８（ｓ，１Ｈ），８．４２（ｓ，１Ｈ），７．７５（ｓ，１Ｈ），５．３８（ｄ，Ｊ＝３．８Ｈｚ，１Ｈ），４．５５−４．３３（ｍ，１Ｈ），２．２８（ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，２Ｈ），２．２４−２．１４（ｍ，１Ｈ），２．０８−１．９５（ｍ，３Ｈ），１．８６−１．７２（ｍ，２Ｈ），１．７１−１．４５（ｍ，６Ｈ），１．４４−１．３１（ｍ，１Ｈ），１．１４−１．０６（ｍ，１Ｈ），１．０６−０．９５（ｍ，７Ｈ）。
【０１０２】
実施例１１．（３β）−１７−（３−ピリジル−５−ｄ）アンドロスタ−４，１６−ジエン−３−オン（化合物３９）の合成
【０１０３】
【化１８】
2019507799.tif 000019
【０１０４】
ステップ１：１７−ヨードアンドロスタ−４，１６−ジエン−３−オン（化合物３８）の合成。
室温下、アルミニウムイソプロポキシド（Ａｌ（ｉ−ＯＰｒ）３）（４．６１ｇ，２２．６０ｍｍｏｌ）を、窒素保護下で（３β）−１７−ヨードアンドロスタ−５，１６−ジエノール（２．２５ｇ，５．６５ｍｍｏｌ）の２−ブタノン（２０ｍＬ）とトルエン（５ｍＬ）との混合溶媒に加え、反応液を還流しながら８時間攪拌して反応させた。室温まで冷却し、４０ｍＬの水及び４０ｍＬの酢酸エチルを加えて反応をクエンチし、濾過し、ろ液を酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出した。有機相を合わせ、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、有機層を減圧濃縮し、濃縮液をカラムクロマトグラフィーにより精製し（溶出液：ＰＥ／ＥｔＯＡｃ（ｖ／ｖ）＝１５／１）、２．０ｇの白色固体を得た。収率は９１．０％であった。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝３９６．６（Ｍ＋１）。
【０１０５】
ステップ２：（３β）−１７−（３−ピリジル−５−ｄ）アンドロスタ−４，１６−ジエン−３−オン（化合物３９）の合成。
室温下、窒素保護下でテトラヒドロフラン（６ｍＬ）と水（２ｍＬ）との混合溶液を、１７−ヨードアンドロスタ−４，１６−ジエン−３−オン（１２０ｍｇ，０．３０ｍｍｏｌ）、３−ジエチルボリルピリジン−５−ｄ（５５ｍｇ，０．３６ｍｍｏｌ）、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウムジクロリド（１８ｍｇ，０．０２ｍｍｏｌ）および炭酸ナトリウム（１００ｍｇ，０．９０ｍｍｏｌ）の混合物に加え、反応液を８０℃で一晩（１６ｈｒ）保持した。室温まで冷却し、水（２５ｍＬ）を加えて反応をクエンチし、セライトで濾過し、ろ液を酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で抽出し、有機層を合わせて飽和食塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、有機層を減圧濃縮し、濃縮液をカラムクロマトグラフィーにより精製し（溶出液：ＰＥ／ＥｔＯＡｃ（ｖ／ｖ）＝２／１）、７０ｍｇの淡黄色固体を得た。収率は６７％であり、純度は９６．４０％であり、ＭＳ（ＥＳＩ，ｐｏｓ．ｉｏｎ）ｍ／ｚ：３４９．３（Ｍ＋１）＋。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）（δ／ｐｐｍ）８．５６（ｄ，Ｊ＝４４．６Ｈｚ，２Ｈ），７．６６（ｓ，１Ｈ），６．０１（ｓ，１Ｈ），５．７７（ｓ，１Ｈ），２．５４−２．２１（ｍ，５Ｈ），２．１３−１．９９（ｍ，３Ｈ），１．９０−１．５２（ｍ，８Ｈ），１．２５（ｓ，３Ｈ），１．２０−１．１３（ｍ，１Ｈ），１．０８（ｓ，３Ｈ）。
【０１０６】
実施例１２．（３β）−１７−（３−ピリジル−６−ｄ）アンドロスタ−４，１６−ジエン−３−オン（化合物４０）の合成
【０１０７】
【化１９】
2019507799.tif 000020
【０１０８】
室温下、窒素保護下でテトラヒドロフラン（６ｍＬ）と水（２ｍＬ）との混合溶液を、１７−ヨードアンドロスタ−４，１６−ジエン−３−オン（１２０ｍｇ，０．３０ｍｍｏｌ）、３−ジエチルボリルピリジン−６−ｄ（５５ｍｇ，０．３６ｍｍｏｌ）、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウムジクロリド（１８ｍｇ，０．０２ｍｍｏｌ）および炭酸ナトリウム（１００ｍｇ，０．９０ｍｍｏｌ）の混合物に加え、反応液を８０℃で一晩保持した。室温まで冷却し、水（２５ｍＬ）を加えて反応をクエンチし、セライトで濾過し、ろ液を酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で抽出し、有機層を合わせて飽和食塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、有機層を減圧濃縮し、濃縮液をカラムクロマトグラフィーにより精製し（溶出液：ＰＥ／ＥｔＯＡｃ（ｖ／ｖ）＝２／１）、６５ｍｇの淡黄色固体を得た。収率は６４％であり、純度は９４．７０％であった。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝３４９．１（Ｍ＋１）＋。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）（δ／ｐｐｍ）８．５３（ｄ，Ｊ＝４４．２Ｈｚ，２Ｈ），７．２２（ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ，１Ｈ），５．９８（ｓ，１Ｈ），５．７４（ｓ，１Ｈ），２．４６−２．２３（ｍ，５Ｈ），２．０９−２．００（ｍ，３Ｈ），１．８５−１．３９（ｍ，８Ｈ），１．２３（ｓ，３Ｈ），１．１８−１．１１（ｍ，１Ｈ），１．０５（ｓ，３Ｈ）。
【０１０９】
実施例１３．（３β）−１７−（３−ピリジル）−１６−ｄ−アンドロスタ−４，１６−ジエン−３−オン（化合物４１）の合成
【０１１０】
【化２０】
2019507799.tif 000021
【０１１１】
（３β）−１７−（３−ピリジル）アンドロスタ−５，１６−ジエノール−１６−ｄ及びＮ−メチルー４−ピペリドンを１４ｍＬのトルエンに溶解させ、水分離器で約４ｍＬのトルエンを蒸留した。室温まで冷却し、窒素保護下でアルミニウムイソプロポキシド（２２８ｍｇ，２．６５ｍｍｏｌ）を反応液に加え、反応液を一晩還流した。室温まで冷却し、水（２５ｍＬ）を加えて反応をクエンチし、酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で抽出し、有機層を合わせて５％の炭酸水素ナトリウム水溶液（３０ｍＬ）及び飽和食塩水（３０ｍＬ）でそれぞれ洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、有機層を減圧濃縮し、濃縮液をカラムクロマトグラフィーにより精製し（溶出液：ＰＥ／ＥｔＯＡｃ（ｖ／ｖ）＝１．５／１）、７６ｍｇの白色固体を得た。収率は５９．７％であり、純度は９６．８２％であった。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝３４９．３（Ｍ＋１）＋。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ−ｄ４）（δ／ｐｐｍ）８．５４（ｓ，１Ｈ），８．３９（ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ，１Ｈ），７．８４（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．３８（ｄｄ，Ｊ＝７．９，４．９Ｈｚ，１Ｈ），５．７４（ｓ，１Ｈ），２．４４（ｍ，５Ｈ），２．０５（ｍ，５Ｈ），１．６１（ｍ，５Ｈ），１．２９（ｓ，３Ｈ），１．１３（ｍ，５Ｈ）。
【０１１２】
実施例１４．（１７−（３−ピリジル−６−ｄ）−２，２−ｄ２−アンドロスタ−４，１６−ジエン−３−オン（化合物４３）の合成
【０１１３】
【化２１】
2019507799.tif 000022
【０１１４】
ステップ１：１７−ヨード−２，２−ｄ２−アンドロスタ−４，１６−ジエン−３−オン（化合物４２）の合成。
室温下、１，５，７−トリアザビシクロ（４，４，０）デカ−５−エン（ＴＢＵ）（２０ｍｇ，０．１４ｍｍｏｌ）を、１７−ヨードアンドロスタ−４，１６−ジエン−３−オン（２００ｍｇ，０．５０ｍｍｏｌ）の重水素化クロロホルム（３０ｍＬ）溶液に加え、反応液を室温で一晩攪拌した。水（３０ｍＬ）を加えて反応をクエンチし、ジクロロメタン（３０ｍＬ×３）で抽出し、有機層を合わせ、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧濃縮し、２００ｍｇの淡黄色固体を得、そのまま次の反応に用いた。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝２９７．１（Ｍ−１）。
【０１１５】
ステップ２：（１７−（３−ピリジル−６−ｄ）−２，２−ｄ２−アンドロスタ−４，１６−ジエン−３−オンの合成。
室温下、窒素保護下でテトラヒドロフラン（６ｍＬ）と水（２ｍＬ）との混合溶液を、１７−ヨードアンドロスタ−４，１６−ジエン−３−オン−２，２−ｄ２（２００ｍｇ，０．５０ｍｍｏｌ）、３−ジエチルボリルピリジン−６−ｄ（９０ｍｇ，０．６０ｍｍｏｌ）、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウムジクロリド（ＰｄＣｌ２（ＰＰｈ３）２）（３０ｍｇ，０．０３ｍｍｏｌ）および炭酸ナトリウム（１７０ｍｇ，１．５０ｍｍｏｌ）の混合物に加え、反応液を８０℃で一晩（１６ｈｒ）保持した。室温まで冷却し、水（２５ｍＬ）を加えて反応をクエンチし、セライトで濾過し、ろ液を酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で抽出し、有機層を合わせて飽和食塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、有機層を減圧濃縮し、濃縮液をカラムクロマトグラフィーにより精製し（溶出液：ＰＥ／ＥｔＯＡｃ（ｖ／ｖ）＝２／１）、１００ｍｇの淡黄色固体を得た。収率は５８．９％であった。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝３５０．３（Ｍ＋１）＋；１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ）（δ／ｐｐｍ）８．６０−８．４７（ｍ，１Ｈ），８．４７−８．３０（ｍ，１Ｈ），７．９１−７．７８（ｍ，１Ｈ），７．４５−７．３１（ｍ，１Ｈ），６．１７−６．０１（ｍ，１Ｈ），５．７５−５．７１（ｍ，１Ｈ），２．６３−２．２６（ｍ，３Ｈ），２．２３−２．０８（ｍ，２Ｈ），２．０７−１．８６（ｍ，３Ｈ），１．７５−１．４４（ｍ，５Ｈ），１．２９（ｓ，３Ｈ），１．２０−１．０３（ｍ，５Ｈ）。
【０１１６】
実施例１４  ＣＹＰ１７酵素の阻害作用
ＣＹＰ１７リアーゼアッセイ
ヒトＣＹＰ１７をＨＥＫ２９３細胞中で発現させ、ミクロソームを調製してリアーゼアッセイの酵素源として使用した。この反応は、ＤＭＳＯまたは試験化合物の存在下、室温で２０分間インキュベートされた、２００ｎＭの［３Ｈ］−ヒドロキシルプレグネノロン（ＡＲＣ）、２００ｎＭの１７−ヒドロキシルプレグネノロン（Ｓｉｇｍａ）、２ｍＭのＮＡＤＰＨ（Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍ）及びＣＹＰ１７−ＨＥＫ２９３ミクロソームを含む。化合物をＤＭＳＯに溶解し、連続希釈した。０．２ＮのＨＣｌを加えて反応を停止させ、抗マウスＹＳｉ  ＳＰＡビーズ（ＧＥ）−抗ＤＨＥＡモノクローナル抗体（Ａｂｃａｍ）複合体で生成物を捕捉した。Ｐａｃｋａｒｄ  Ｔｏｐ  Ｃｏｕｎｔによって決定されたシグナル強度から、阻害百分率及びＩＣ５０値を算出した。
【０１１７】
ＣＹＰ１７ヒドロキシラーゼアッセイ
大腸菌を形質転換して活性ヒトＣＹＰ１７を発現させ、形質転換された大腸菌によって調製された膜を酵素源として使用した。反応は、２００ｎＭのｈＣＹＰ１７膜、２５μＭのプレグネノロン（Ｓｉｇｍａ）、７ｍＭのＮＡＤＰＨ（Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍ）、１μＭのシトクロムＰ４５０還元酵素（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）及び５０ｍＭのｐＨ値７．３のリン酸ナトリウム緩衝液を含む５０ｕＬの最終容量の溶液中で行った。０．２％のＤＭＳＯの最終濃度までのアッセイ緩衝液の連続希釈によって、１００％のＤＭＳＯに溶解した化合物のＩＣ５０を測定した。反応混合物を３７℃で１２０分間インキュベートし、アセトニトリルに０．０２ＮのＨＣｌを２００μＬ加えて反応を停止させた。その後、サンプルを７５００００ｇで回転させ、２００μＬの上清を清潔な試験管に移し、測定に用いられる。反応生成物である１７−αプレグネノロンは、ＬＣ／ＭＳにより測定した。
ＣＹＰ１７に対する本発明の実施例の阻害作用を以下の表１に示す。
【０１１８】
【表１】
2019507799.tif 000023
【０１１９】
上記の表から、本発明に係る化合物は、ＣＹＰ１７酵素に対して高い阻害活性（活性がアビラテロンに相当する）を有するため、ＣＹＰ１７酵素と関連する疾患（例えば前立腺癌）を治療する薬物として利用できることが分かった。
【０１２０】
実施例１５  細胞ＰＳＡタンパク質分泌の阻害作用
実験ステップ：１．元の培地を１０％  Ｃｈａｒｃｏａｌ  Ｓｔｒｉｐｐｅｄ  ＦＢＳを含む培地に交換し、細胞を培養フラスコで２４時間飢餓させた。２．細胞を消化して計数し、ＬＮｃａＰ細胞を１０，０００／ウェルで９６ウェルプレートに接種し、一晩インキュベートした。３．ＤＨＴ及び化合物を所定の濃度で既存の培地に加え、ＤＨＴの最終濃度は１ｎＭ、化合物の初期濃度は５００００ｎＭとし、５倍希釈を行い、８つの濃度勾配とし、４８時間培養した。４．細胞培養上清を回収し、ＥＬＩＳＡキットの説明書に従ってＰＳＡタンパク質レベルを測定した。各濃度の阻害率から、ＧｒａｐｈＰａｄ  ＰｒｉｓｍでＩＣ５０を算出し、その結果を表２に示す。
【０１２１】
【表２】
2019507799.tif 000024
【０１２２】
上記の表から、本発明に係る化合物は、細胞ＰＳＡタンパク質に対して高い抑制活性を有するため、前立腺癌を治療する薬物として利用できることが分かった。
【０１２３】
実施例１６  ラットにおける薬物動態学的評価
雄性のＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット８匹（７−８周齡、体重約２１０ｇ）を各群４匹で２群に分け、（ａ）対照群では（３β）−１７−（３−ピリジル）アンドロスタ−５，１６−ジエノールを、（ｂ）試験群では実施例１−１３を、５ｍｇ／ｋｇ投与量で一回経口投与し、それらの薬物動態学的差異を比較する。
標準飼料でラットを飼育し、水を与えた。試験の１６時間前から絶食させた。薬物をＰＥＧ４００およびジメチルスルホキシドで溶解した。投与した後の０．０８３時間、０．２５時間、０．５時間、１時間、２時間、４時間、６時間、８時間、１２時間および２４時間の時点で眼窩採血を行った。
ラットにジエチルエーテルを吸入させて一時麻酔を行い、眼窩から３００μＬの血液サンプルを採取して試験管に入れた。試験管中には１％のヘパリン塩溶液３０μＬがある。使用前に、試験管を６０℃で一晩乾燥させた。後の時点の血液サンプルの採取が完了した後、ジエチルエーテルで麻酔した後にラットを殺処分した。
血液サンプルを採取した直後に、穏やかに試験管を少なくとも５回転倒させ、十分に混合し、氷上に置いた。血液サンプルを４℃、５０００ｒｐｍで５分間遠心分離して、赤血球と血漿を分離した。１００μＬの血漿をピペットで清潔なプラスチック遠心管に入れ、化合物の名称と時点を記録した。分析まで血漿を−８０℃で保存した。血漿中の本発明に係る化合物濃度をＬＣ−ＭＳ／ＭＳにより測定した。薬物動態パラメーターは、異なる時点における各動物の血中濃度に基づいて算出した。
【０１２４】
【表３】
2019507799.tif 000025
【０１２５】
実験結果を表３に示す。アビラテロン酢酸エステルに比べて、本発明に係る化合物は、経口及び腹腔内投与の両方において、より優れた薬物動態（Ｃｍａｘの顕著な増加、ＡＵＣデータの顕著な増加）を示し、したがって、本発明に係る化合物は、動物体内でより優れた薬力学および治療効果を奏する。
【０１２６】
実施例１７  代謝安定性評価
ミクロソーム実験：ヒト肝ミクロソーム：０．５ｍｇ／ｍＬ、Ｘｅｎｏｔｅｃｈ；補酵素（ＮＡＤＰＨ／ＮＡＤＨ）：１ｍＭ、Ｓｉｇｍａ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ；塩化マグネシウム：５ｍＭ、１００ｍＭのリン酸塩緩衝液（ｐＨ７．４）。
ストック溶液の調製：一定量の実施例の化合物の粉末を正確に秤量し、ＤＭＳＯでそれぞれ５ｍＭに溶解した。
リン酸塩緩衝液（１００ｍＭ，ｐＨ７．４）の調製：予め用意した０．５Ｍのリン酸二水素カリウム１５０ｍＬと０．５Ｍのリン酸水素二カリウム溶液７００ｍＬとを混合し、さらに、０．５Ｍのリン酸水素二カリウム溶液で混合液のｐＨを７．４に調整し、使用前に超純水で５倍希釈し、塩化マグネシウムを加えて、１００ｍＭのリン酸カリウム、３．３ｍＭの塩化マグネシウムを含む、ｐＨが７．４であるリン酸塩緩衝液（１００ｍＭ）を得た。
ＮＡＤＰＨ再生系溶液（６．５ｍＭのＮＡＤＰ、１６．５ｍＭのＧ−６−Ｐ、３Ｕ／ｍＬのＧ−６−Ｐ  Ｄ、３．３ｍＭの塩化マグネシウムを含む）を調製し、使用前に湿った氷上に置いた。
停止液の調製：５０ｎｇ／ｍＬの塩酸プロプラノロールと２００ｎｇ／ｍＬのトルブタミド（内部標準）を含むアセトニトリル溶液。２５０５７．５μＬのリン酸塩緩衝液（ｐＨ７．４）を５０ｍＬ遠心管に入れ、ヒト肝臓ミクロソーム８１２．５μＬをそれぞれ添加し、均一に混合して、タンパク質濃度が０．６２５ｍｇ／ｍＬである肝臓ミクロソーム希釈液を得た。２５０５７．５μＬのリン酸塩緩衝液（ｐＨ７．４）を５０ｍＬ遠心管に入れ、ＳＤラット肝臓ミクロソーム８１２．５μＬをそれぞれ添加し、均一に混合して、タンパク質濃度が０．６２５ｍｇ／ｍＬの肝臓ミクロソーム希釈液を得た。
サンプルのインキュベーション：対応する化合物のストック溶液を、７０％アセトニトリルを含む水溶液でそれぞれ０．２５ｍＭに希釈し、作業溶液として用意した。３９８μＬのヒト肝臓ミクロソーム或いはラット肝臓ミクロソームの希釈液を９６ウェルインキュベーションプレート（Ｎ＝２）にそれぞれ加え、０．２５ｍＭの作業溶液２μＬをそれぞれ添加して均一に混合した。
代謝安定性アッセイ：予め冷却した停止液３００μＬを９６ウェルディープウェルプレートの各ウェルに添加し、氷上に置いて停止プレートとした。９６ウェルインキュベーションプレートおよびＮＡＤＰＨ再生系を３７℃の水浴に置いて、１００ｒｐｍで振とうし、５分間プレインキュベートした。インキュベーションプレートの各ウェルから８０μＬのインキュベーション溶液を取出し、停止プレートに加え、均一に混合し、ＮＡＤＰＨ再生系溶液２０μＬを補充して０分間サンプルとした。インキュベーションプレートの各ウェルに８０μＬのＮＡＤＰＨ再生系溶液を更に添加し、反応を開始させ、時間を計り始めた。対応する化合物の反応濃度は１μＭで、タンパク濃度は０．５ｍｇ／ｍＬである。反応の１０分間、３０分間、９０分間に、それぞれ１００μＬの反応液を採取し、停止プレートに加え、３分間ボルテックス操作を行い、反応を停止させた。５０００×ｇ、４℃の条件下で停止プレートを１０分間遠心分離した。予め１００μＬの蒸留水を入れた９６ウェルプレートに、１００μＬの上清を加え、均一に混合し、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳを用いてサンプルを分析した。
データ分析：ＬＣ−ＭＳ／ＭＳシステムによって対応する化合物および内部標準のピーク面積を検出し、化合物と内部標準のピーク面積の比を算出した。時間に対する化合物残存量の百分率の自然対数をプロットすることによって、傾きを測定して、公式でｔ１／２及びＣＬｉｎｔを計算し、ただし、Ｖ／Ｍは１／タンパク濃度に等しい。
【０１２７】
実施例の化合物を上述の手順で分析した。その結果を表２に示す。
【０１２８】
【表４】
2019507799.tif 000026
【０１２９】
表３に示されるように、本発明に係る化合物である重水素化されたアビラテロン（実施例１、２、８）及び重水素化されたアビラテロン代謝物質（実施例１２）は、重水素化されていない化合物に比べて、半減期が長くなり、クリアランスが低くなり、本発明に係る化合物が代謝安定性を顕著に改善できることを示している。
【０１３０】
【表５】
2019507799.tif 000027
【０１３１】
アビラテロンのプロドラッグであるアビラテロン酢酸エステルは、速やかにアビラテロンに代謝されるので、ここでプロドラッグが代謝されたアビラテロンの肝臓ミクロソームの代謝作用を測定した。上記の表４に示されるように、重水素化されたプロドラッグ（実施例３、４、７及び９）は、半減期が顕著に長くなり、本発明に係る化合物のプロドラッグも代謝安定性を改善できることを示した。
【０１３２】
上記の内容は、特定の好ましい実施形態を参照して本発明に対するさらなる詳細な説明であるが、本発明の実施形態がこれらの記載に限定されない。当業者にとって明らかであるように、本発明の精神から逸脱することなく様々な変更や修正を加えることができることは、すべてが本発明の保護範囲内にあるとみなされるべきである。
【手続補正書】
【提出日】平成30年9月26日(2018.9.26)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）で示される置換ステロイド系化合物、ならびにその生理学的に許容される塩、プロドラッグ、代謝物質、溶媒和物、互変異性体及び立体異性体であって、すべての割合のこれらの化合物で形成した混合物を含むが、重水素化されていない化合物を含まない、ステロイド系化合物。
【化１】
2019507799.tif 000034
ただし、
Ｒ１ａ、Ｒ１ｂ、Ｒ１ｃ、Ｒ１ｄ、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１及びＲ１２は、それぞれ独立して、水素、重水素、ハロゲン又はトリフルオロメチル基であり；
Ｘ１、Ｘ２は、それぞれ独立して「水素（Ｈ）、重水素（Ｄ）、メチル基、ＣＨ２Ｄ、ＣＨＤ２、ＣＤ３、ＣＨ２ＣＨ３、ＣＨＤＣＨ３、ＣＨＤＣＨ２Ｄ、ＣＨＤＣＨＤ２、ＣＨＤＣＤ３、ＣＤ２ＣＨ３、ＣＤ２ＣＨ２Ｄ、ＣＤ２ＣＨＤ２、ＣＤ２ＣＤ３」からなる群から選択され；
Ｙは、「水素（Ｈ）、重水素（Ｄ）、アセチル基，１つ又は複数の重水素で置換されたアセチル基」からなる群から選択される。
【請求項２】
Ｒ１ａ、Ｒ１ｂ、Ｒ１ｃ及びＲ１ｄは、それぞれ独立して重水素又は水素であることを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ１ａ、Ｒ１ｂ、Ｒ１ｃ及びＲ１ｄの少なくとも１つが重水素であることを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２は、それぞれ独立して重水素又は水素であることを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ２は重水素であることを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
Ｙは３つの重水素で置換されたアセチル基であることを特徴とする、請求項５に記載の化合物。
【請求項７】
Ｘ１、Ｘ２は、１つ又は複数の重水素で置換されたメチル基あるいはエチル基から独立して選択されることを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項８】
Ｙは、水素、重水素、１つ又は複数の重水素で置換されたアセチル基から選択されることを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項９】
Ｘ１、Ｘ２は３つの重水素で置換されたメチル基であることを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｙは３つの重水素で置換されたアセチル基であることを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【請求項１１】
前記化合物は、以下の重水素化されたステロイド系化合物又はその薬学的に許容される塩からなる群から選択されるが、以下の化合物に限定されないことを特徴とする、請求項１に記載の化合物。
【化２】
2019507799.tif 000035
【化３】
2019507799.tif 000036
【化４】
2019507799.tif 000037
【化５】
2019507799.tif 000038
【化６】
2019507799.tif 000039
【請求項１２】
以下の化合物又はその薬学的に許容される塩。
【化７】
2019507799.tif 000040
【請求項１３】
以下の化合物又はその薬学的に許容される塩。
【化８】
2019507799.tif 000041
【請求項１４】
請求項１に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩及び薬学的に許容される担体を含む医薬組成物であって、請求項１に記載の重水素化されたステロイド系化合物又はその薬学的に許容される塩を有効成分として含み、且つ通常の薬学的に許容される担体を含むことを特徴とする、医薬組成物。
【請求項１５】
ＣＹＰ１７酵素と関連する疾患の治療及び／又は予防のための、請求項１〜請求項１３のいずれか一項に記載の式（Ｉ）の化合物又はその多形、薬学的に許容される塩、プロドラッグ、立体異性体、同位体異性体、水和物又は溶媒和物、もしくは請求項１４に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
前記ＣＹＰ１７酵素と関連する病状は前立腺癌又は乳癌であることを特徴とする、請求項１５に記載の使用。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００１】
本発明は、医薬分野に属する。具体的に、本発明は、ステロイド系化合物及びその使用に関し、より詳しくは、ステロイド系化合物、及びそのＣＹＰ１７酵素不可逆阻害剤としての使用、又はＣＹＰ１７酵素と関連する疾患の治療及び予防としての使用に関する。
本願は、２０１６年１２月２９日に出願されたＰＣＴ／ＣＮ２０１６／１１２９４５の国内段階出願である。本願は、２０１６年２月２日に出願された中国特許出願第２０１６１００９２３７８．８号に基づき優先権を主張し、その内容をここに援用する。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１１】
【化２】
2019507799.tif 000042
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１３】
【化４】
2019507799.tif 000043
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１４】
【化５】
2019507799.tif 000044
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１５】
【化６】
2019507799.tif 000045
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００９１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００９１】
ステップ２：デヒドロエピアンドロステロン−１６−ｄ２（化合物３１）の合成。
室温下、１，５，７−トリアザビシクロ（４，４，０）デカ−５−エン（ＴＢＵ）（１５０ｍｇ，１．０８ｍｍｏｌ）を、デヒドロエピアンドロステロン（１．００ｇ，３．５ｍｍｏｌ）の重水素化クロロホルム（１５ｍＬ）溶液に加え、反応液を室温で一晩攪拌した。水（３０ｍＬ）を加えて反応をクエンチし、ジクロロメタン（３０ｍＬ×３）で抽出し、有機層を合わせ、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧濃縮して１．００ｇの淡黄色固体を得た。そのまま次の反応に用いた。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝２８９．３（Ｍ−１）。
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００９２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００９２】
ステップ３：デヒドロエピアンドロステロン１７−ヒドラゾン−１６−ｄ２（化合物３２）の合成。
室温下でデヒドロエピアンドロステロン−１６−ｄ２（１．００ｇ，３．５０ｍｍｏｌ）のエタノール（１４ｍＬ）溶液にヒドラジン水和物（３．００ｍＬ，６０ｍｍｏｌ）を加え、加熱還流しながら１時間攪拌して反応させた。室温まで冷却し、水（１５ｍＬ）を加え、系外に大量の白色固体が析出した。吸引濾過し、濾過ケーキを水（３ｍＬ×２）及びジエチルエーテル（３ｍＬ×２）で順に洗浄し、乾燥して８５０ｍｇの白色固体を得た。収率は７９．９％であった。ＬＣ−ＭＳ（ＡＰＣＩ）：ｍ／ｚ＝３０５．３［Ｍ＋１］＋。
【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１０３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１０３】
【化１８】
2019507799.tif 000046
【手続補正１０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１２７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１２７】
実施例の化合物を上述の手順で分析した。その結果を表４及び５に示す。
【手続補正１１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１２９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１２９】
表４に示されるように、本発明に係る化合物である重水素化されたアビラテロン（実施例１、２、８）及び重水素化されたアビラテロン代謝物質（実施例１２）は、重水素化されていない化合物に比べて、半減期が長くなり、クリアランスが低くなり、本発明に係る化合物が代謝安定性を顕著に改善できることを示している。
【手続補正１２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１３１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１３１】
アビラテロンのプロドラッグであるアビラテロン酢酸エステルは、速やかにアビラテロンに代謝されるので、ここでプロドラッグが代謝されたアビラテロンの肝臓ミクロソームの代謝作用を測定した。上記の表５に示されるように、重水素化されたプロドラッグ（実施例３、４、７及び９）は、半減期が顕著に長くなり、本発明に係る化合物のプロドラッグも代謝安定性を改善できることを示した。
【国際調査報告】
2019507799.tif 000047
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2019507799.tif 000049
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