(57)【要約】  本明細書には、リジン特異的デメチラーゼ−１阻害剤である４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］２−フルオロベンゾニトリルの薬学的に許容可能な塩の非晶質及び結晶の形態が記載される。また、リジン特異的デメチラーゼ−１阻害剤を含む、哺乳動物への投与に適した医薬組成物、及び、リジン特異的デメチラーゼ−１活性に関連する疾患又は疾病を処置するためのリジン特異的デメチラーゼ−１阻害剤の使用方法も、記載される。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルの薬学的に許容可能な塩であって、薬学的に許容可能な塩は結晶形態である、薬学的に許容可能な塩。
【請求項２】
薬学的に許容可能な塩は、ｐ−トルエンスルホン酸塩、硫酸塩、メタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、リン酸塩、又は安息香酸塩である、ことを特徴とする請求項１に記載の薬学的に許容可能な塩。
【請求項３】
薬学的に許容可能な塩はベンゼンスルホン酸塩である、ことを特徴とする請求項１に記載の薬学的に許容可能な塩。
【請求項４】
４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルベシル酸塩の結晶形態１であって、
（ａ）図１に示されるものと実質的に同じＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターン；
（ｂ）４．９°２−シータ、９．７°２−シータ、１３．４°２−シータ、１８．０°２−シータ、１８．５°２−シータでの特徴的なピークを持つＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターン；
（ｃ）約３１７℃の開始温度を持つ吸熱を伴うＤＳＣサーモグラム；
（ｄ）図２に示されるものと実質的に同様のＤＳＣサーモグラム；又は
（ｅ）それらの組み合わせ
を持つ、結晶形態１。
【請求項５】
結晶形態１は、図１に示されるものと実質的に同じ、Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターンを有する、ことを特徴とする請求項４に記載の結晶形態１。
【請求項６】
結晶形態１は、４．９°２−シータ、９．７°２−シータ、１３．４°２−シータ、１８．０°２−シータ、１８．５°２−シータでの特徴的なピークを備えた、Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターンを有する、ことを特徴とする請求項４に記載の結晶形態１。
【請求項７】
結晶形態１は、少なくとも１週間、４０℃及び７５％ＲＨで保管した後に、実質的に同じＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターンを有する、ことを特徴とする請求項４に記載の結晶形態１。
【請求項８】
結晶形態１は、少なくとも１週間、２５℃及び９６％ＲＨで保管した後に、実質的に同じＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターンを有する、ことを特徴とする請求項４に記載の結晶形態１。
【請求項９】
結晶形態１は、約３１７℃での開始温度を持つ吸熱を備えるＤＳＣサーモグラムを有する、ことを特徴とする請求項４に記載の結晶形態１。
【請求項１０】
請求項１乃至９の何れか１つの結晶形態と、薬学的に許容可能な担体、希釈剤、及び賦形剤から選択される少なくとも１つの追加の成分とを含む、医薬組成物。
【請求項１１】
医薬組成物は、哺乳動物への経口投与に適切な形態である、ことを特徴とする請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
医薬組成物は経口固形剤形である、ことを特徴とする請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
医薬組成物は、錠剤、カプセル、又は丸剤の形態である、ことを特徴とする請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
非晶質形態である、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルベシル酸塩。
【請求項１５】
非晶質の４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルベシル酸塩と、薬学的に許容可能な担体、希釈剤、及び賦形剤から選択される少なくとも１つの追加の成分とを含む、医薬組成物。
【請求項１６】
医薬組成物は、哺乳動物への経口投与に適切な形態である、ことを特徴とする請求項１５に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
医薬組成物は経口固形剤形である、ことを特徴とする請求項１５に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
医薬組成物は、錠剤、カプセル、又は丸剤の形態である、ことを特徴とする請求項１５に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願
本出願は、２０１５年１１月５日に出願された米国仮特許出願第６２／２５１，５０７号の優先権の利益を主張するものであり、これは全ての目的のために引用により完全に本明細書に組み込まれるものとする。
【０００２】
技術分野
本明細書には、リジン特異的デメチラーゼ−１阻害剤である４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリル、及びその薬学的に許容可能な塩、溶媒和物、並びに結晶形態が記載される。
【背景技術】
【０００３】
癌と腫瘍性疾患の効果的な処置に対するニーズが、医療分野に存在する。リジン特異的デメチラーゼ−１は、乳癌、肺癌、前立腺癌、膠芽腫、及び白血病に加え、他の疾患又は疾病などの多数の疾患又は疾病に関係してきた。
【発明の概要】
【０００４】
本明細書には、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリル、及びその薬学的に許容可能な塩、薬学的に許容可能な溶媒和物、並びに非晶相、及びそれらの使用方法が記載される。
【０００５】
１つの態様において、本明細書には、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルの薬学的に許容可能な塩が提供され、薬学的に許容可能な塩は結晶形態である。幾つかの実施形態において、薬学的に許容可能な塩はベシル酸塩であり、薬学的に許容可能な塩は結晶形態である。
【０００６】
１つの態様において、本明細書には、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルベシル酸塩の結晶形態１が提供され、結晶形態１は、
（ａ）図１に示されるものと実質的に同じＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターン；
（ｂ）４．９°２−シータ、９．７°２−シータ、１３．４°２−シータ、１８．０°２−シータ、１８．５°２−シータでの特徴的なピークを持つＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターン；
（ｃ）約３１７℃の開始温度を持つ吸熱を伴うＤＳＣサーモグラム；
（ｄ）図２に示されるものと実質的に同様のＤＳＣサーモグラム；又は
（ｅ）それらの組み合わせ
を有することを特徴とする。
【０００７】
また本明細書には、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルの結晶形態と、薬学的に許容可能な担体、希釈剤、及び賦形剤から選択される少なくとも１つの追加の成分とを含む、医薬組成物が記載される。幾つかの実施形態において、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルの薬学的に許容可能な塩はベシル酸塩である。幾つかの実施形態において、医薬組成物は、哺乳動物への経口投与に適した形態である。幾つかの実施形態において、医薬組成物は経口固形剤形である。幾つかの実施形態において、医薬組成物は、約０．５ｍｇ〜約２００ｍｇの４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルベシル酸塩の結晶を含む。
【０００８】
幾つかの実施形態において、本明細書には、本明細書に記載されるような４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルベシル酸塩の結晶形態と、薬学的に許容可能な担体、希釈剤、及び賦形剤から選択される少なくとも１つの追加の成分とを含む、医薬組成物が記載される。幾つかの実施形態において、医薬組成物は、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルベシル酸塩の形態１を含む。幾つかの実施形態において、医薬組成物は、哺乳動物への経口投与に適した形態である。幾つかの実施において、医薬組成物は経口剤形である。幾つかの実施形態において、医薬組成物は経口固形剤形である。幾つかの実施形態において、医薬組成物は、錠剤、丸剤、又はカプセルの形態である。幾つかの実施形態において、医薬組成物はカプセルの形態である。幾つかの実施形態において、医薬組成物は錠剤の形態である。幾つかの実施形態において、医薬組成物は、防湿コーティング錠剤の形態である。幾つかの実施形態において、医薬組成物は、約０．５ｍｇ〜約２００ｍｇの４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルベシル酸塩の結晶を含む。幾つかの実施形態において、医薬組成物は、約０．５ｍｇ〜約２００ｍｇの４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルベシル酸塩の結晶を含む。
【０００９】
また、高密度ポリエチレン（ＨＤＰＥ）キャップを備えた高密度ポリエチレン（ＨＤＰＥ）ボトル中に、本明細書に記載される経口固形剤形の医薬組成物の複数の単位投与量を含む製品も、提供される。幾つかの実施形態において、高密度ポリエチレン（ＨＤＰＥ）ボトルはアルミニウム箔導入シール及びシリカゲル乾燥剤を含む。
【００１０】
また本明細書には、非晶質形態である４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルベシル酸塩も記載される。また本明細書には、非晶質の４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルベシル酸塩と、薬学的に許容可能な担体、希釈剤、及び賦形剤から選択される少なくとも１つの追加の成分とを含む、医薬組成物も記載される。幾つかの実施形態において、医薬組成物は、哺乳動物への経口投与に適した形態である。幾つかの実施形態において、医薬組成物は経口固形剤形である。
【００１１】
１つの態様において、本明細書には、哺乳動物の癌の処置における、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルの結晶形態の使用が記載される。別の態様において、本明細書には、哺乳動物の癌の処置における、結晶の４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルベシル酸塩の使用が記載される。別の態様において、本明細書には、哺乳動物の癌の処置における、非晶質の４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルベシル酸塩の使用が記載される。幾つかの実施形態において、癌は、リジン特異的デメチラーゼ−１阻害剤での処置に反応しやすい。幾つかの実施形態において、癌は、乳癌、肺癌、前立腺癌、膠芽腫、又は白血病である。
【００１２】
本明細書に記載される特定の実施形態において、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルの薬学的に許容可能な塩の結晶形態は、リジン特異的デメチラーゼ１活性に関連する疾患、障害、又は疾病の処置又は予防のための薬の製造に使用される。
【００１３】
また本明細書には、哺乳動物の癌を処置する方法も提供され、該方法は４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルの薬学的に許容可能な塩の結晶を哺乳動物に投与する工程を含む。幾つかの実施形態において、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルの薬学的に許容可能な塩の結晶はベシル酸塩である。幾つかの実施形態において、癌は、乳癌、肺癌、前立腺癌、膠芽腫、又は白血病である。
【００１４】
また、ヒトの癌の処置又は予防のための薬の製造のための、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルベシル酸塩の使用も提供される。更に、ヒトの癌の処置又は予防のための薬の製造のための、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルベシル酸塩の使用も提供され、癌は、乳癌、肺癌、前立腺癌、膠芽腫、又は白血病である。幾つかの実施形態において、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルベシル酸塩は結晶である。
【００１５】
また本明細書には、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］２−フルオロベンゾニトリルの薬学的に許容可能な塩の結晶形態の調製プロセスも記載される。
【００１６】
また本明細書には、結晶の４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］２−フルオロベンゾニトリルベシル酸塩の調製プロセスも記載される。開示されたプロセスは、優れた収量及び高純度での、結晶の４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルベシル酸塩の調製を提供する。
【００１７】
本明細書に記載されている方法及び組成物の他の目的、特徴、利点は、後述する詳細な説明から明らかになるだろう。しかし、詳細な説明及び具体的な例は、具体的な実施形態を示しているが、本発明の趣旨及び範囲内での様々な変更及び修正は、この詳細な説明から当業者に明白となるため、例示目的としてのみ与えられることを理解されたい。
【図面の簡単な説明】
【００１８】
【図１】結晶の４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］２−フルオロベンゾニトリルベシル酸塩の形態１のＸＲＰＤを例示する。
【図２】結晶の４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］２−フルオロベンゾニトリルベシル酸塩の形態１のＤＳＣサーモグラムを例示する。
【図３】非晶質の４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］２−フルオロベンゾニトリルベシル酸塩のＸＲＰＤを例示する。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
エピジェネティックスは、根本的なＤＮＡ配列以外の機構により引き起こされた遺伝子発現における遺伝性の変化に関する研究である。エピジェネティック制御において役割を果たす分子機構は、ＤＮＡのメチル化及びクロマチン／ヒストンの修飾を含む。
【００２０】
真核生物のゲノムは、細胞の核内で高度に組織化される。ヒトゲノムの３０億のヌクレオチドを細胞の核へ包括するために、莫大な圧縮が必要とされる。クロマチンは、染色体を作り上げるＤＮＡとタンパク質の複合体である。ヒストンは、ＤＮＡが周囲に巻き付くスプールとして作用する、クロマチンの主要タンパク質成分である。クロマチン構造の変化は、ヒストンタンパク質の共有結合修飾、及び非ヒストン結合タンパク質により影響を受ける。様々な部位でヒストンを修飾する複数の種類の酵素が知られている。
【００２１】
合計６種類のヒストン（ＨＩ、Ｈ２Ａ、Ｈ２Ｂ、Ｈ３、Ｈ４、及びＨ５）が存在し、これらは２つの群：コアヒストン（Ｈ２Ａ、Ｈ２Ｂ、Ｈ３、及びＨ４）及びリンカーヒストン（ＨＩとＨ５）へと組織化される。クロマチンの基本ユニットはヌクレオソームであり、これは、コアヒストンであるＨ２Ａ、Ｈ２Ｂ、Ｈ３、及びＨ４のそれぞれの２つのコピーから成る、コアヒストン八量体の周囲に巻き付いたＤＮＡの約１４７の塩基対から成る。
【００２２】
その後、このような基本のヌクレオソームユニットは、ヌクレオソームの凝集及びフォールディングにより更に組織化され且つ凝縮されて、高度に凝縮されたクロマチン構造を形成する。凝縮の様々な異なる状態が可能であり、クロマチン構造の密集度は、細胞周期中に変動し、細胞分裂のプロセスの間は大抵コンパクトである。
【００２３】
クロマチン構造は、遺伝子転写を調節する際に重大な役割を果たし、これは高度に凝縮されたクロマチンからは効率的に生じることができない。クロマチン構造は、ヒストンタンパク質、特にヒストンＨ３とＨ４への一連の翻訳後の修飾、及び最も一般的にはコアのヌクレオソーム構造を越えて伸長するヒストンの尾部内で、制御される。これらの修飾は、アセチル化、メチル化、リン酸化、リボシル化、スモイル化、ユビキチン化、シトルリン化、脱イミノ化、及びビオチン化（ｂｉｏｔｉｎｙｌａｔｉｏｎ）である。ヒストンＨ２ＡとＨ３の核も修飾され得る。ヒストン修飾は、遺伝子調節、ＤＮＡ修複、及び染色体凝縮などの多様な生物プロセスに必須である。
【００２４】
ヒストンメチル化は、最も重要なクロマチンマークの１つであり；これらは、転写の調節、ＤＮＡの損傷反応、ヘテロクロマチンの形成及び維持、並びにＸ染色体不活性化において重要な役割を果たす。近年の発見はまた、スプライシング調節因子の動員に影響を及ぼすことにより、ヒストンメチル化がプレｍＲＮＡのスプライシングの結果に影響を及ぼすことを明らかにした。ヒストンメチル化は、リジンのモノメチル化、ジメチル化、並びにトリメチル化、及び、アルギニンのモノ−メチル化、対称的なジメチル化、並びに非対称的なジメチル化を含む。これらの修飾は、メチル化の部位及び程度に依存して、活性化又は抑圧の何れかを行うマークであり得る。
【００２５】
ヒストンデメチラーゼ
本明細書で言及されるような「デメチラーゼ」又は「タンパク質デメチラーゼ」は、ポリペプチドから少なくとも１つのメチル基を取り除く酵素を指す。デメチラーゼはＪｍｊＣドメインを含み、メチル−リジン又はメチル−アルギニンのデメチラーゼであり得る。デメチラーゼの中にはヒストンに作用するものもあり、例えば、ヒストンＨ３又はＨ４デメチラーゼとして作用する。例えば、Ｈ３デメチラーゼは、Ｈ３Ｋ４、Ｈ３Ｋ９、Ｈ３Ｋ２７、Ｈ３Ｋ３６、及び／又はＨ３Ｋ７９の１つ以上を脱メチル化することもある。代替的に、Ｈ４デメチラーゼはヒストンＨ４Ｋ２０を脱メチル化することもある。デメチラーゼは、モノメチル化した基質、ジメチル化した基質、及び／又はトリメチル化した基質を脱メチル化することができると知られている。更に、ヒストンデメチラーゼは、（例えば細胞ベースのアッセイにおいて）メチル化されたコアヒストン基質、モノヌクレオソーム基質、ジヌクレオソーム基質、及び／又は、オリゴヌクレオソーム基質、ペプチド基質、及び／又はクロマチンに作用することができる。
【００２６】
発見された第１のリジンデメチラーゼは、補助因子としてフラビンを使用してモノメチル化且つジメチル化したＨ３Ｋ４又はＨ３Ｋ９を脱メチル化する、リジン特異的デメチラーゼ１（ＬＳＤ１／ＫＤＭ１）であった。Ｊｕｍｏｎｊｉ  Ｃ（ＪｍｊＣ）ドメイン含有ヒストンデメチラーゼの第２の分類が予測され、そして、ホルムアルデヒド放出アッセイを使用してＨ３Ｋ３６デメチラーゼを見出した際に確認され、これは、ＪｍｊＣドメイン含有ヒストンデメチラーゼ１（ＪＨＤＭ１／ＫＤＭ２Ａ）と命名された。
【００２７】
より多くのＪｍｊＣドメイン含有タンパク質が後に同定され、それらは、系統発生的に７つのサブファミリー：ＪＨＤＭ１、ＪＨＤＭ２、ＪＨＤＭ３、ＪＭＪＤ２、ＪＡＲＩＤ、ＰＨＦ２／ＰＨＦ８、ＵＴＸ／ＵＴＹ、及びＪｍｊＣのドメインのみにクラスター化され得る。
【００２８】
ＬＳＤ−１
リジン特異的デメチラーゼ１（ＬＳＤ１）は、Ｋ４にてモノメチル化及びジメチル化されたヒストンＨ３を特異的に脱メチル化し、加えてＫ９にてジメチル化されたヒストンＨ３を脱メチル化する、ヒストンリジンデメチラーゼである。ＬＳＤ１１の主要な標的は、モノメチル化及びジメチル化されたヒストンリジン、具体的にＨ３Ｋ４とＨ３Ｋ９であると思われるが、ＬＳＤ１が、ｐ５３、Ｅ２Ｆ１、Ｄｎｍｔｌ、及びＳＴＡＴ３のような非ヒストンタンパク質上でメチル化されたリジンを脱メチル化することができるという証拠が文献中に存在する。
【００２９】
ＬＳＤ１は、ポリアミンオキシダーゼとモノアミンオキシダーゼに対して、かなりの程度の構造類似性、並びにアミノ酸同一性／同族性を有しており、それら全て（即ち、ＭＡＯ−Ａ、ＭＡＯ−Ｂ、及びとＬＳＤ１）は、窒素−水素結合及び／又は窒素−炭素結合の酸化を触媒する、フラビン依存性のアミンオキシダーゼである。ＬＳＤ１はまた、Ｎ末端ＳＷＲＩＭドメインを含む。代替的なスプライシングにより生成されるＬＳＤ１の２つの転写物変異体が存在する。
【００３０】
幾つかの実施形態において、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルは、生体サンプルを４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルと接触させることにより、生体サンプル中のＬＳＤ１活性を阻害することができる。幾つかの実施形態において、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルは、生体サンプル中のヒストン３リジン４メチル化のレベルを調節することができる。幾つかの実施形態において、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルは、生体サンプル中のヒストン−３リジン−９メチル化のレベルを調節することができる。
【００３１】
１つの実施形態は、必要とする患者の癌を処置する方法を提供し、該方法は、化合物として４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリル、又はその薬学的に許容可能な塩を患者に投与する工程を含む。１つの実施形態は、必要とする患者の癌を処置する方法を提供し、該方法は、化合物として４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリル、又はその薬学的に許容可能な塩を患者に投与する工程を含む。１つの実施形態は、必要とする患者の癌を処置する方法を提供し、該方法は、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリル、又はその薬学的に許容可能な塩を含む組成物を、患者に投与する工程を含む。別の実施形態は、必要とする患者の癌を処置する方法を提供し、該方法は、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルベシル酸塩を含む組成物を、患者に投与する工程を含む。更なる実施形態において、被験体の癌を処置する方法であって、癌は、乳癌、肺癌、前立腺癌、膠芽腫、及び白血病から選択される。更なる実施形態において、被験体の眼を処置する方法であって、癌は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、神経芽腫、小円形青色細胞腫瘍（ｓｍａｌｌ  ｒｏｕｎｄ  ｂｌｕｅ  ｃｅｌｌ  ｔｕｍｏｒ）、膠芽腫、又はＥＲ（−）乳癌から選択される。
【００３２】
４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロ−ベンゾニトリル
用語「４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロ−ベンゾニトリル」は、以下の構造を持つ化合物を指す。
【００３３】
【化１】
2019500323.tif 000003
【００３４】
４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロ−ベンゾニトリルは、米国特許出願第１４／７０１，３０４号に記載されている。
【００３５】
４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロ−ベンゾニトリルの薬学的に許容可能な塩は、限定されないが、化合物を、例えば塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、メタリン酸などの薬学的に許容可能な無機酸と；或いは、例えば酢酸、プロピオン酸、ヘキサン酸、シクロペンタンプロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、乳酸、マロン酸、コハク酸、リンゴ酸、マレイン酸、フマル酸、トリフルオロ酢酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、桂皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、１，２−エタンジスルホン酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、トルエンスルホン酸、２−ナフタレンスルホン酸、３−フェニルプルピオン酸、トリメチル酢酸、ターシャリブチル酢酸、ラウリル硫酸、グルコン酸、グルタミン酸、ヒドロキシナフトエ酸、サリチル酸、ステアリン酸、ムコン酸、酪酸、フェニル酢酸、フェニル酪酸、バルプロ酸などの有機酸と反応させることにより形成される、酸付加塩を含む。
【００３６】
幾つかの実施形態において、本明細書には、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルの薬学的に許容可能な塩が記載される。幾つかの実施形態において、本明細書には、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルの薬学的に許容可能な塩が記載され、薬学的に許容可能な塩はｐ−トルエンスルホン酸塩（トシラートとしても知られる）、硫酸塩、メタンスルホン酸塩（メシレートとしても知られる）、ベンゼンスルホン酸塩（ベシレートとしても知られる）、リン酸塩、又は安息香酸塩である。幾つかの実施形態において、本明細書には、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルの薬学的に許容可能な塩が記載され、薬学的に許容可能な塩はｐ−トルエンスルホン酸塩である。幾つかの実施形態において、本明細書には、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルの薬学的に許容可能な塩が記載され、薬学的に許容可能な塩は硫酸塩である。幾つかの実施形態において、本明細書には、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルの薬学的に許容可能な塩が記載され、薬学的に許容可能な塩はメタンスルホン酸塩である。幾つかの実施形態において、本明細書には、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルの薬学的に許容可能な塩が記載され、薬学的に許容可能な塩はベンゼンスルホン酸塩である。幾つかの実施形態において、本明細書には、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルの薬学的に許容可能な塩が記載され、薬学的に許容可能な塩はリン酸塩である。幾つかの実施形態において、本明細書には、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルの薬学的に許容可能な塩が記載され、薬学的に許容可能な塩は安息香酸塩である。
【００３７】
非晶質層
幾つかの実施形態において、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルベシル酸塩は非晶質である。幾つかの実施形態において、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルベシル酸塩の非晶質相は、結晶度の不足を示すＸＲＰＤパターンを持つ。
【００３８】
形態１
幾つかの実施形態において、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルベシル酸塩は、結晶である。
幾つかの実施形態において、本明細書には、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルベシル酸塩の結晶形態１が記載される。幾つかの実施形態において、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルベシル酸塩の形態１は、
（ａ）図１に示されるものと実質的に同じＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターン；
（ｂ）４．９°２−シータ、９．７°２−シータ、１３．４°２−シータ、１８．０°２−シータ、１８．５°２−シータでの特徴的なピークを持つＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターン；
（ｃ）約３１７℃の開始温度を持つ吸熱を伴うＤＳＣサーモグラム；
（ｄ）図２に示されるものと実質的に同様のＤＳＣサーモグラム；又は
（ｅ）それらの組み合わせ
を有することを特徴とする。
【００３９】
幾つかの実施形態において、形態Ａは、図１に示されるものと実質的に同じ、Ｘ線粉末回折法（ＸＲＰＤ）パターンを有する。
【００４０】
幾つかの実施形態において、形態１は、４．９°２−シータ、９．７°２−シータ、１３．４°２−シータ、１８．０°２−シータ、１８．５°２−シータでの特徴的なピークを備えた、Ｘ線粉末回折法（ＸＲＰＤ）パターンを有する。
【００４１】
幾つかの実施形態において、形態１は、少なくとも１週間、４０℃及び７５％のＲＨで保管した後に、実質的に同じＸ線粉末回折法（ＸＲＰＤ）パターンを有する。
【００４２】
幾つかの実施形態において、形態１は、少なくとも１週間、２５℃及び９６％のＲＨで保管した後に、実質的に同じＸ線粉末回折法（ＸＲＰＤ）パターンを有する。
【００４３】
幾つかの実施形態において、形態１は、約３１７℃の開始温度を持つ吸熱を伴うＤＳＣサーモグラムを有する。
【００４４】
幾つかの実施形態において、形態１は、図２に示されるものに実質的に類似するＤＳＣサーモグラムを有する。
【００４５】
幾つかの実施形態において、形態１は、特性（ａ）、（ｂ）、（ｃ）、及び（ｄ）、又はそれらの任意の組み合わせをもつことを特徴とする。
【００４６】
結晶形態の調製
幾つかの実施形態において、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルベシル酸塩などの、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルの薬学的に許容可能な塩の結晶形態は、実施例に概説されるように調製される。本明細書に提示される溶媒、温度、及びその他の反応条件は変動し得ることに注意する。
【００４７】
適切な溶媒
ヒトなどの哺乳動物に投与可能な治療薬は、規制ガイドラインに従うことにより調製されなければならない。そのような政府に規制されたガイドラインは、製造及び品質管理に関する基準（ＧＭＰ）と呼ばれる。ＧＭＰガイドラインは、例えば、最終生産物中の残留溶媒の量などの、活性な治療薬の許容可能な汚染レベルを述べている。好ましい溶媒は、ＧＭＰ施設での使用に適しており、且つ産業上の安全の懸念と一致したものである。溶媒のカテゴリーは、例えば、Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ  ｏｎ  Ｈａｒｍｏｎｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ  Ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓ  ｆｏｒ  Ｒｅｇｉｓｔｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ  ｆｏｒ  Ｈｕｍａｎ  Ｕｓｅ）  （ＩＣＨ）  、“Ｉｍｐｕｒｉｔｉｅｓ：  Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ  ｆｏｒ  Ｒｅｓｉｄｕａｌ  Ｓｏｌｖｅｎｔｓ，  Ｑ３Ｃ（Ｒ３），（Ｎｏｖｅｍｂｅｒ  ２００５）において定められている。
【００４８】
溶媒は３つのクラスへと分類される。クラス１の溶媒は、有毒であり且つ回避されるものである。クラス２の溶媒は、治療薬の製造中の使用に限定される溶媒である。クラス３の溶媒は、低毒性と考えられ且つヒトの健康に対する危険性が低い溶媒である。クラス３の溶媒に関するデータは、それらが、急性又は短期の研究においてあまり毒性でなく、且つ遺伝毒性試験において陰性であることを示す。
【００４９】
回避されるクラス１の溶媒は、ベンゼン；四塩化炭素；１，２−ジクロロエタン；１，１−ジクロロエテン；及び１，１，１−トリクロロエタンを含む。
【００５０】
クラス２の溶媒の例は、次のとおりである：アセトニトリル、クロロベンゼン、クロロホルム、シクロヘキサン、１，２−ジクロロエタン（ｄｉｃｈｌｏｒｏｅｔｈｅｎｅ）、ジクロロメタン、１，２−ジメトキシエタン、Ｎ，Ｎ−ジメチル−アセトアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、１，４−ジオキサン、２−エトキシエタノール、エチレングリコール、ホルムアミド、ヘキサン、メタノール、２−メトキシエタノール、メチルブチルケトン、メチルシクロヘキサン、Ｎ−メチルピロリジン、ニトロメタン、ピリジン、スルホラン、テトラリン、トルエン、１，１，２−トリクロロエテン、及びキシレン。
【００５１】
低毒性を持つクラス３の溶媒は、次のものを含む：酢酸、アセトン、アニソール、１−ブタノール、２−ブタノール、酢酸ブチル、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル（ＭＴＢＥ）、クメン、ジメチルスルホキシド、エタノール、酢酸エチル、エチルエーテル、ギ酸エチル、ギ酸、ヘプタン、酢酸イソブチル、酢酸イソプロピル、酢酸メチル、３−メチル−１−ブタノール、メチルエチルケトン、メチルイソブチルケトン、２−メチル−１−１−プロパノール、ペンタン、１−ペンタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、酢酸プロピル、及びテトラヒドロフラン。
【００５２】
幾つかの実施形態において、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルベシル酸塩などの、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルの薬学的に許容可能な塩の結晶形態を含む組成物は、残存量の有機溶媒を含む。幾つかの実施形態において、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルベシル酸塩などの、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルの薬学的に許容可能な塩の結晶形態を含む組成物は、検出可能な量の有機溶媒を含む。幾つかの実施形態において、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルベシル酸塩などの、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルの薬学的に許容可能な塩の結晶形態を含む組成物は、残存量のクラス３の溶媒を含む。幾つかの実施形態において、有機溶媒はクラス３の溶媒である。幾つかの実施形態において、クラス３の溶媒は、酢酸、アセトン、アニソール、１−ブタノール、２−ブタノール、酢酸ブチル、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテル、クメン、ジメチルスルホキシド、エタノール、酢酸エチル、エチルエーテル、ギ酸エチル、ギ酸、ヘプタン、酢酸イソブチル、酢酸イソプロピル、酢酸メチル、３−メチル−１−ブタノール、メチルエチルケトン、メチルイソブチルケトン、２−メチル−１−プロパノール、ペンタン、１−ペンタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、酢酸プロピル、及びテトラヒドロフランから成る群から選択される。幾つかの実施形態において、クラス３の溶媒はエタノールである。
【００５３】
本明細書に記載される方法及び組成物は、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルベシル酸塩などの、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルの薬学的に許容可能な塩の結晶形態の使用を含む。加えて、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルベシル酸塩などの、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルの薬学的に許容可能な塩の結晶形態は、非溶媒和形態で、更には水やエタノールなどの薬学的に許容可能な溶媒を有する溶媒和形態でも存在することができる。
【００５４】
特定の用語
用語「癌」は、本明細書で使用されるように、制御されない方法で増殖し、且つ場合によっては転移（拡大）する傾向がある細胞の異常成長を表す。
【００５５】
用語「処置する（ｔｒｅａｔ）」、「処置すること（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」、又は「処置（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」は、本明細書で使用されるように、予防的に及び／又は治療的に、疾患又は疾病の少なくとも１つの症状を緩和、軽減、或いは改善すること、追加の症状を予防すること、疾患又は疾病を阻害すること、例えば、疾患又は疾病の進行を阻止すること、疾患又は疾病を軽減すること、疾患又は疾病の退行を引き起こすこと、疾病の進行を遅らせること、疾患又は疾病によって引き起こされた状態を軽減すること、或いは疾患又は疾病の症状を止めることを含む。幾つかの実施形態において、処置は、無増悪生存率を延ばすことを含む。幾つかの実施形態において、処置は、他の処置の選択肢に比べて疾患進行の相対危険度を減らすことを含む。
【００５６】
用語「無増悪生存率」は、患者と共生しているが更には悪化しない癌などの疾患の処置の間及びその後の時間の量である。臨床試験において、無増悪生存率の測定は、処置の効能を判定する１つの技術である。
【００５７】
用語「薬学的に許容可能な賦形剤」は、本明細書で使用されるように、哺乳動物への投与に適している形態へと医薬品活性成分（ＡＰＩ）を処理することが可能な、担体、希釈剤、安定剤、分散剤、懸濁化剤、増粘剤などを指す。１つの態様において、哺乳動物はヒトである。薬学的に許容可能な賦形剤は、化合物（即ちＡＰＩ）の所望の生物活性又は所望の特性を実質的に抑制せず且つ比較的無毒である物質を指し、即ちこの物質は、望ましくない生物学的効果を引き起こすことなく、又はこの物質が含まれる組成物のいかなる成分とも有害な方法で相互作用することなく、個体に投与される。
【００５８】
「医薬品活性成分」又はＡＰＩは、所望の生物活性又は所望の特性を持つ化合物を指す。幾つかの実施形態において、ＡＰＩは、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルベシル酸塩などの、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルの薬学的に許容可能な塩の結晶形態である。幾つかの実施形態において、ＡＰＩは、結晶の４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−４−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルベシル酸塩である。幾つかの実施形態において、ＡＰＩは、９０％より高い、９５％より高い、９６％より高い、９７％より高い、９８％より高い、９８％より高い、又は９９％より高い純度を持つ。
【００５９】
用語「医薬組成物」は、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルベシル酸塩などの、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルの薬学的に許容可能な塩の結晶形態の、担体、安定剤、賦形剤、分散剤、懸濁化剤、増粘剤、賦形剤などの他の化学成分との混合物を指す。医薬組成物は、哺乳動物への化合物の投与を促進する。
【００６０】
「検出可能な量」は、標準の分析方法（例えば、イオンクロマトグラフィー、質量分析法、ＮＭＲ、ＨＰＬＣ、ガスクロマトグラフィー、元素分析、ＩＲ分光法、誘導結合プラズマ原子発光分析、ＵＳＰ〈２３１〉方法ＩＩなど）を使用して測定可能な量を指す（ＩＣＨ  ｇｕｉｄａｎｃｅｓ，  Ｑ２Ａ  Ｔｅｘｔ  ｏｎ  Ｖａｌｉｄａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ  Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ  （Ｍａｒｃｈ  １９９５）  ａｎｄ  Ｑ２Ｂ  Ｖａｌｉｄａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ  Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ：  Ｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙ  （Ｎｏｖｅｍｂｅｒ  １９９６））。
【００６１】
本明細書で使用されるように、製剤、組成物、又は成分に関して、用語「許容可能な」は、処置を受ける被験体の全般的な健康に対し、持続的な有害な効果を及ぼさないことを意味する。
【００６２】
用語「有効な量」又は「治療上有効な量」は、本明細書で使用されるように、処置される疾患又は疾病の１以上の症状をある程度和らげる、投与される薬剤の十分な量を表す。その結果、疾患の兆候、症状、又は原因を減少及び／又は軽減し、或いは生物系の他の所望の変化をもたらすことができる。例えば、治療用途に「有効な量」は、疾患症状の臨床的に有意な減少をもたらすのに必要とされる、本明細書に開示されるような化合物を含む組成物の量である。用語「治療上有効な量」は、例えば、予防に有効な量を含む。有効な量は特定の患者及び疾患レベルに基づいて選択される。「有効な量」又は「治療上有効な量」は、薬物の代謝における変動、被験体の年齢、体重、全身状態、処置される疾病、処置される疾病の重篤度、及び主治医の判断により、被験体ごとに変動し得ることが理解される。１つの実施形態において、個々の事例での適切な「有効な」量は、用量漸増試験などの技術を使用して決定される。
【００６３】
用語「キット」及び「製品」は、同義語として用いられる。
【００６４】
用語「調節する」は、本明細書で使用されるように、標的の活性を改質するように標的と直接的又は間接的に相互作用することを意味し、標的の活性の改質には、ほんの一例ではあるが、標的の活性の増強、標的の活性の阻害、標的の活性の制限、又は標的の活性の拡大が含まれる。用語「被験体」又は「患者」は、哺乳動物を包含する。１つの態様において、哺乳動物はヒトである。
【００６５】
医薬組成物／製剤
医薬組成物は、活性化合物を医薬的に使用される調製物へと処理するのを促進する賦形剤及び助剤を含む、１以上の生理学的に許容可能な担体を使用して、製剤され得る。適切な技術、担体、及び賦形剤は、限定されないが、例えば、引用によりその全体が本明細書に組み込まれる、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：  Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，  Ｎｉｎｅｔｅｅｎｔｈ  Ｅｄ  （Ｅａｓｔｏｎ，  Ｐａ．：  Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，  １９９５）；  Ｈｏｏｖｅｒ，  Ｊｏｈｎ  Ｅ．，  Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  （Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，  Ｅａｓｔｏｎ，  Ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａ  １９７５）；  Ｌｉｂｅｒｍａｎ，  Ｈ．Ａ．  ａｎｄ  Ｌａｃｈｍａｎ，  Ｌ．，  Ｅｄｓ．，  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ  （Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｃｋｅｒ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  Ｎ．Ｙ．，  １９８０）；及びＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，  Ｓｅｖｅｎｔｈ  Ｅｄ．  （Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ１９９９）内で見出されるものを含む。
【００６６】
幾つかの実施形態において、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルベシル酸塩などの、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルの薬学的に許容可能な塩の結晶形態は、哺乳動物への経口投与のために製剤される。幾つかの実施形態において、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルベシル酸塩などの、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルの薬学的に許容可能な塩の結晶形態は、経口投薬形態へと製剤される。幾つかの実施形態において、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルベシル酸塩などの、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルの薬学的に許容可能な塩の結晶形態は、固体の経口投薬形態へと製剤される。幾つかの実施形態において、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルベシル酸塩などの、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルの薬学的に許容可能な塩の結晶形態は、哺乳動物による経口摂取のための錠剤、丸剤、カプセルなどに製剤される。
【００６７】
考慮される医薬組成物は、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルベシル酸塩などの、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルの薬学的に許容可能な塩の結晶形態の治療上有効な量を提供し、例えば、１日１回、１日２回、１日３回などの投与を可能にする。１つの態様において、医薬組成物は、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルベシル酸塩などの、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルの薬学的に許容可能な塩の結晶形態の有効な量を提供し、１日１回の投薬を可能にする。
【００６８】
投薬量
１つの実施形態において、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルベシル酸塩などの、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルの薬学的に許容可能な塩の結晶形態に適切な毎日の用量は、体重当たり約１乃至約３０ｍｇ／ｋｇである。
【００６９】
キット／製品
本明細書に記載される使用の治療方法に使用するために、キット及び製品も本明細書中に記載される。そのようなキットは、本明細書き記載される方法での使用のために、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルベシル酸塩などの、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルの薬学的に許容可能な塩の結晶形態の医薬組成物の１以上の用量を受けるように随意に区分化された、キャリヤー、パッケージ、又は容器を含む。本明細書で提供されるキットは包装材料を含む。医薬製品の包装に使用される包装材料は、例えば米国特許第５，３２３，９０７号に記載されるものを含むが、これに限定されない。医薬の包装材料の例は、ブリスターパック、ボトル、チューブ、バッグ、容器、瓶、及び、選択された製剤並びに意図された投与と処置の様式に適切な任意の包装材料を含むが、これらに限定されない。４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルベシル酸塩などの、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルの薬学的に許容可能な塩の結晶形態の幅広い製剤、及びそれらの組成物は、ＬＳＤ−１阻害剤での処置から利益を得る任意の疾患、障害、又は疾病のための様々な処置であると考慮される。
【００７０】
キットは典型的に、内容物を列挙するラベル及び／又は使用説明書、及び、使用説明書を備えた添付文書を含む。１セットの説明書も典型的に含まれる。
【００７１】
１つの実施形態において、ラベルは包装容器の上にあるか、又は包装容器に付随する。１つの実施形態において、ラベルを形成する文字、数字、又は他の表示が、容器自体に貼り付けられ、成形され、又は刻まれる場合、ラベルは容器の上に取り付けられる。例えば添付文書として、容器を同様に保持するレセプタクル又はキャリヤー内に存在する場合、ラベルは容器に付随する。１つの実施形態において、ラベルは、内容物が特定の治療用途に用いられるべきであることを示すために用いられる。ラベルはまた、本明細書に記載される方法などで、内容物の使用のための指示を示す。
【００７２】
特定の実施形態において、医薬組成物は、本明細書で提供される化合物を含む１以上の単位剤形を含む、パック又はディスペンサーデバイスにおいて提供される。パックは、例えば、ブリスターパックなどの金属又はプラスチック箔を含む。１つの実施形態において、パック又はディスペンサーデバイスには、投与の説明書が添付される。１つの実施形態において、パック又はディスペンサーデバイスには、医薬品の製造、使用、又は販売を規制する政府機関によって規定された形態で容器に付随される通知書が添付され、この通知書は、ヒト又は動物の投与のための薬物の形態についての、政府機関の承認を反映するものである。このような通知書は、例えば、処方薬又は承認された生成物の挿入物に関する、米国食品医薬品局により承認されたラベルである。幾つかの実施形態において、適合可能な医薬担体の中で製剤される、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルベシル酸塩などの、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルの薬学的に許容可能な塩の結晶形態を含む組成物も、製剤され、適切な容器に入れられ、且つ、示された疾病の処置に関するラベルが付けられる。
【実施例】
【００７３】
方法
Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）
Ｂｒｕｋｅｒ  Ａｘ  Ｃ２  ＧＡＤＤＳ
Ｃｕ  Ｋα放射（４０ｋＶ、４０ｍＡ）、自動化ＸＹＺ段階、自動サンプルポジショニングのためのレーザービデオ顕微鏡、及びＨｉＳｔａｒ  ２次元領域検出器を使用して、Ｘ線粉末回折パターンを、Ｂｒｕｋｅｒ  ＡＸＳ  Ｃ２  ＧＡＤＤＳ回折計上で収集した。Ｘ線光学部品（Ｘ−ｒａｙ  ｏｐｔｉｃｓ）は、０．３ｍｍのピンホール型コリメータと連結された単一のＧｏｂｅｌ多層ミラーから成る。
【００７４】
ビーム広がり、即ちサンプル上のＸ線ビームの有効径は、およそ４ｍｍであった。θ―θの連続走査様式を、３．２°−２９．７°の効果的な２θ範囲を与える２０ｃｍのサンプル−検出器の距離で利用した。典型的に、サンプルは１２０秒間、Ｘ線ビームに暴露された。データ収集に使用したソフトウェアは、ＸＰ／２０００  ４．１．４３用のＧＡＤＤＳであり、データは、Ｄｉｆｆｒａｃ  Ｐｌｕｓ  ＥＶＡ  ｖ１５．０．０．０を使用して分析且つ提供された。
周囲条件
全てのサンプル（湿っている又は乾燥している）を、平らな検体として周囲条件下で実行した。およそ１−２ｍｇのサンプルをスライドガラス上で軽く押し、平面を得た。
非周囲条件（可変的な温度実験）
非周囲条件下で実行したサンプルを、熱伝導化合物を含むシリコンウェーファー上に取り付けた。その後、サンプルを１０℃／分で適切な温度に加熱し、その後で１分間等温で保持して、データ収集を開始した。
【００７５】
Ｂｒｕｋｅｒ  ＡＸＳ  Ｄ８  Ａｄｖａｎｃｅ
Ｃｕ  Ｋα放射（４０ｋＶ、４０ｍＡ）、θ−２θゴニオメーター、及びＶ４の発散、受け取りスリット（ｒｅｃｅｉｖｉｎｇ  ｓｌｉｔｓ）、Ｇｅモノクロメーター、及びＬｙｎｘｅｙｅ検出器を使用して、高分解能のＸ線粉末回折パターンを、Ｂｒｕｋｅｒ  Ｄ８回折計上で収集した。認証されたＣｏｒｕｎｄｕｍ標準（ＮＩＳＴ  １９７６）を使用して、機器の性能を確認する。データ収集に使用されたソフトウェアはＤｉｆｆｒａｃ  Ｐｌｕｓ  ＸＲＤ  Ｃｏｍｍａｎｄｅｒ  ｖ２．６．１であり、Ｄｉｆｆｒａｃ  Ｐｌｕｓ  ＥＶＡ  ｖ１５．０．０．０を使用してデータを分析且つ提供した。
【００７６】
受け取られるように粉末を使用して、サンプルを周囲条件下で平板試料として実行した。サンプルを優しく腔に詰めて、清潔なゼロバックグラウンド（５１０）シリコンウェーハへと切断した。分析中、サンプルをそれ自体の平面において回転させた。データ収集の詳細は次のとおりである：
角度範囲：２乃至４２°２θ
ステップサイズ：０．０５°２θ
収集時間：０．５ｓ／ステップ
【００７７】
核磁気共鳴（ＮＭＲ）
ＮＭＲスペクトルを、オートサンプラーを備え且つＤＲＸ４００コンソールにより制御される、Ｂｒｕｋｅｒ  ４００ＭＨｚの機器の上で収集した。自動実験を、標準のＢｒｕｋｅｒ荷重実験（Ｂｕｒｋｅｒ  ｌｏａｄｅｄ  ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ）を使用するＴｏｐｓｐｉｎ  ｖ１．３で実行するＩＣＯＮ  ＮＭＲ  ｖ４．０．７を使用して獲得した。サンプルをＤＭＳＯ−ｄ６の中で調製し、ＡＣＤ  Ｓｐｅｃｔｒｕｓ  Ｐｒｏｃｅｓｓｏｒ  ２０１２を使用してオフライン解析を行った。
【００７８】
示差走査熱量測定（ＤＳＣ）
ＤＳＣデータを、３４の位置のオートサンプラーを備えたＭｅｔｔｌｅｒ  ＤＳＣ  ８２３Ｅ上で収集した。認証されたインジウムを使用して、エネルギーと温度について機器を較正した。典型的に、小さな穴が開いたアルミニウムパンにおける、０．９−６ｍｇの各サンプルを、２５℃乃至３５０℃まで、１０℃／分で加熱した。５０ｍｌ／分での窒素パージをサンプル上で維持した。機器の制御とデータ解析のソフトウェアはＳＴＡＲｅ  ｖ１２．１であった。
【００７９】
熱重量分析（ＴＧＡ）
１６の位置のオートサンプラーを備えたＴＡ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  Ｑ５００  ＴＧＡ上で、ＴＧＡデータを収集した。認証されたＡｌｕｍｅｌ及びＮｉｃｋｅｌを使用して、機器を温度較正した。典型的に、８ｍｇ−１１ｍｇの各サンプルを、予めタールを塗ったアルミニウムＤＳＣパンに充填し、周囲温度から３５０℃まで、１０℃／分で加熱した。６０ｍｌ／分での窒素パージをサンプル上で維持した。機器の制御のソフトウェアは、Ａｄｖａｎｔａｇｅ  ｆｏｒ  Ｑ  Ｓｅｒｉｅｓ  ｖ２．５．０．２５６及びＴｈｅｒｍａｌ  Ａｄｖａｎｔａｇｅ  ｖ５．５．３であり、Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  ｖ４．５Ａを使用してデータを分析した。
【００８０】
カールフィッシャー滴定（ＫＦ）による水分測定法
各サンプルの含水量を、Ｈｙｄｒａｎａｌ  Ｃｏｕｌｏｍａｔ  ＡＧオーブンの試薬及び窒素のパージを使用して、８５１  Ｔｉｔｒａｎｏ  Ｃｏｕｌｏｍｅｔｅｒを含むＭｅｔｒｏｈｍ  ８７４  Ｏｖｅｎ  Ｓａｍｐｌｅ  Ｐｒｏｃｅｓｓｏｒ上で１５０℃で測定した。重さを量った固体サンプルを、密封したサンプルバイアルに導入した。およそ１０ｍｇのサンプルを滴定ごとに使用し、二重の測定を行った。Ｔｉａｍｏ  ｖ２．２を使用して情報の収集と分析を行った。
【００８１】
滴定分析による塩化物含有量の測定
塩化物の分析方法を、サンプルの酸素フラスコ燃焼により行う。一旦燃焼及び溶液への吸収が生じると、較正された硝酸第二水銀溶液を使用してサンプルを滴定した。サンプルをブランク試薬及び有機分析標準試薬と共に分析して、正確性を確保する。この方法での正確性は、０．１０％の検出限界を持つ±０．３％の絶対値（ａｂｓｏｌｕｔｅ）である。
【００８２】
ＨＰＬＣによる化学的純度の測定
ダイオードアレイ検出器を備え且つＣｈｅｍＳｔａｔｉｏｎソフトウェアｖＢ．０４．０３を使用するＡｇｉｌｅｎｔ  ＨＰ１１００シリーズのシステム上で、純度の解析を以下に詳述する方法を使用して実行した：
【００８３】
【表１】
2019500323.tif 000004
【００８４】
重量測定蒸気吸着（Ｇｒａｖｉｍｅｔｒｉｃ  Ｖａｐｏｕｒ  Ｓｏｒｐｔｉｏｎ）（ＧＶＳ）
ＤＶＳ  Ｉｎｔｒｉｎｓｉｃ  Ｃｏｎｔｒｏｌソフトウェアｖ１．０．１．２（又はｖ１．０．１．３）により制御される、ＳＭＳ  ＤＶＳ  Ｉｎｔｒｉｎｓｉｃ水分吸着アナライザーを使用して、収着等温線を得た。サンプルの温度を、機器の制御によって２５℃で維持した。湿度を、乾燥及び湿った窒素の気流を２００ｍｌ／分の合計流量と混合することにより制御した。相対湿度を、サンプルの近くに位置ある、較正されたＲｏｔｒｏｎｉｃプローブ（１．０−１００％ＲＨのダイナミックレンジ）によって測定した。％ＲＨに応じたサンプルの重量変化（質量緩和）を、微量天秤（精度±０．００５ｍｇ）で絶えずモニタリングした。
【００８５】
およそ１３ｍｇのサンプルを、周囲条件下で、タールを塗ったメッシュステンレス鋼バスケットに入れた。サンプルを充填し、４０％ＲＨ及び２５℃（典型的な室内条件）で降ろした（ｕｎｌｏａｄｅｄ）。以下に概説されるように、吸湿等温線を実行した（１つの完全なサイクルをもたらす２つのスキャン）。標準等温線を、０−９０％ＲＨの範囲にわたり、１０％ＲＨの間隔で、２５℃で実行した。ＤＶＳ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  Ｓｕｉｔｅ  ｖ６．２（或いは、６．１又は６．０）を使用するマイクロソフトを使用して、データ解析を行った。サンプルを等温線の完了後に回収し、ＸＲＰＤによって再分析した。
【００８６】
【表２】
2019500323.tif 000005
【００８７】
ｐＫａの測定及び予測
Ｄ−ＰＡＳアタッチメントを備えたＳｉｒｉｕｓ  ＧＬｐＫａ機器の上でデータを集めた。電位差測定法により、メタノール／水の混合物中、２５℃で測定を行った。滴定培地のイオン強度を０．１５ＭのＫＣｌ（ａｑ）で調整した（ＩＳＡ）。メタノール／水の混合物に見られる値を、Ｙａｓｕｄａ−Ｓｈｅｄｌｏｖｓｋｙ外挿法を介して０％の共溶媒に補正した。Ｒｅｆｉｎｅｍｅｎｔ  Ｐｒｏソフトウェアｖ２．２．３を使用してデータを洗練させた。ＡＣＤ／Ｌａｂｓ  Ｐｅｒｃｅｐｔａ  ２０１２を使用してｐＫａ値の予測を行った。
【００８８】
対数ｐの測定及び予測
３つの比率のオクタノール：イオン強度を調整した（ＩＳＡ）水を使用して、Ｓｉｒｉｕｓ  ＧＬｐＫａ機器上での電位差滴定によりデータを集めて、対数Ｐ、対数Ｐｉｏｎ、及び対数Ｄの値を生成した。Ｒｅｆｉｎｅｍｅｎｔ  Ｐｒｏソフトウェアｖ２．２．３を使用してデータを精査させた。ＡＣＤ／Ｌａｂｓ  Ｐｅｒｃｅｐｔａ  ２０１２を使用して対数Ｐの値の予測を行った。
【００８９】
ＦｅＳＳｉＦにおける熱力学的溶解度
溶解度を、供給状態で刺激した胃腸液（ｆｅｄ  ｓｔａｔｅ  ｓｉｍｕｌａｔｅｄ  ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  ｆｌｕｉｄ）（ＦｅＳＳＩＦ）中で十分な化合物を懸濁することにより判定して、化合物の親の遊離形態の＞３ｍｇ／ｍｌの最大終末濃度を得た。懸濁液を２４時間、２５℃で平衡に保ち、その後ｐＨを測定した。その後、懸濁液をガラス繊維Ｃフィルタに通して濾過した。残留物を、湿っている固体としてＸＲＰＤにより解析した。ＨＰＬＣによる解析の前に、濾液を適切な因子により希釈した。ＤＭＳＯ中でおよそ０．２ｍｇ／ｍｌの標準溶液に関して、ＨＰＬＣによる定量化を行った。標準の希釈された及び希釈されていないサンプル溶液の異なる容量を、注入した。標準の注入における主要なピークと同じ保持時間で見出されるピークを統合することによって判定されるピーク面積を使用して、溶解度を計算した。ダイオードアレイ検出器を備えたＡｇｉｌｅｎｔ  ＨＰ１１００シリーズのシステム上で、ＣｈｅｍＳｔａｔｉｏｎソフトウェアｖＢ．０４．０３を使用して、解析を実行した。
【００９０】
【表３】
2019500323.tif 000006
【００９１】
イオンクロマトグラフィー（ＩＣ）
ＩＣ  Ｎｅｔソフトウェアｖ２．３を使用して、Ｍｅｔｒｏｈｍ  ８６１  Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｃｏｍｐａｃｔ  ＩＣ上で、データを集めた。正確に重量を量ったサンプルを、適切な溶解溶液中で保存溶液として調製し、試験前に適切に希釈した。分析されているイオンの既知の濃度の標準溶液との比較により定量化を達成した。
【００９２】
【表４】
2019500323.tif 000007
【００９３】
実施例１：４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルの塩の研究
塩形態の調査を行い、医薬品としての使用に適切な４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］２−フルオロベンゾニトリルの、結晶状の非吸湿性塩形態を発見した。
【００９４】
遊離塩基及び一塩酸塩の特徴化
４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルの遊離塩基は結晶であり、ＨＰＬＣ純度＞９６％を有しており、２０３．５℃でＤＳＣ吸熱（ΔＨ＝−８９Ｊ／ｇ）及び０．２８ｍｇ／ｍｌのＦｅＳＳＩＦ中の溶解度を示した。ＤＳＣ、ＴＧＡ、及びＫＦの解析は、この物質が吸着水を大まかに含むことを示唆している。
【００９５】
４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリル塩酸塩は、もろい結晶状の一塩酸塩（ＨＣｌ形態１）であった。サンプル中の非晶質の内容物の存在を、ＸＲＰＤディフラクトグラムにおけるハロの存在、及びＤＳＣサーモグラムにおける起こり得る再結晶事象から推測した。物質、ＧＶＳによる９０％ＲＨでの１４％の取り込みで吸湿性であった。ＧＶＳによる６０％−９０％ＲＨの可逆的な履歴現象は、新たな水和物形態の形成に関連した。４０℃／７５％ＲＨでの１４日間の保管後の新しい形態の部分的な結晶化を、ＸＲＰＤにより確認した。２９０．６℃（ΔＨ＝−８４Ｊ／ｇ）でのＤＳＣ吸熱は、分解の開始と一致し、故に吸熱は純粋なサンプルの溶解を示さない。塩酸塩の９７．６％のＨＰＬＣ純度は遊離塩基に匹敵したが、ＦｅＳＳＩＦ溶解度は０．７５ｍｇ／ｍｌよりも高かった。
【００９６】
材料
商用の化学物質及び溶媒をＡｌｄｒｉｃｈ又はＦｌｕｋａから購入した。表５に記載されるように、スクリーンに使用される酸保存溶液を作成した：
【００９７】
【表５】
2019500323.tif 000008
【００９８】
塩の実現性の評価
物質の溶解度の評価を以下のように行った：４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリル遊離塩基（１０ｍｇ）を、物質が完全に溶解し又は最大７０ｖｏｌが使用されるまで、溶媒の容量を増大させることで処理した。溶媒の各追加の後、システムを５０℃にゆっくり加熱し、次いで室温で５分間静置して、新しいアリコートの溶媒を加えた。
【００９９】
異なる溶媒中の塩形成の実現可能性を評価するために、溶解度の評価からのサンプルを、５０℃で１．１当量のｐ−トルエンスルホン酸（ＴＨＦ中で２５μｌの１Ｍ  酸性溶液）により処理し、３０分間保持し、その後０．１℃／分で５℃に冷却した。サンプルを５℃で１２時間撹拌し、濾過し、蒸発して乾燥させて、ＸＲＰＤにより解析した。
【０１００】
ＩＰＡのスクリーニング手順
４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリル遊離塩基（３０ｍｇ）を、５０℃で１．２ｍｌのＩＰＡ中で懸濁し、１．１当量の対イオン溶液を加えた。サンプルをこの温度で３０分間撹拌し、その後０．１℃／分で５℃に冷却した。４００の毎分回転数（ｒｐｍ）の撹拌速度を、実験の全体にわたって使用した。５℃で最大４８時間残存させた後、サンプルを５０℃にまで急速に加熱し、２時間保持し、その後、室温に冷却した。対イオンを加えない対照実験も行った。固体を室温で濾過し、最大２４時間にわたり真空下（３０℃）で乾燥し、ＸＲＰＤにより解析した。
【０１０１】
１，４−ジオキサンのスクリーニング手順
４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリル遊離塩基（３０ｍｇ）を、５０℃で１．５ｍｌの１，４−ジオキサン中に溶解し、飽和溶液を得て、１．１当量の対イオン溶液を加えた。サンプルをこの温度で３０分間撹拌し、その後０．１℃／分で５℃に冷却した。４００ｒｐｍの撹拌速度を実験の全体にわたって使用した。５℃で１８時間残存させた後、サンプルを５０℃にまで急速に加熱し、２時間保持し、その後、室温に冷却した。対イオンを加えない対照実験を行った。固体を室温で濾過し、１８時間にわたり真空下（３０℃）で乾燥し、ＸＲＰＤにより最初に解析した。
【０１０２】
ジクロロメタンのスクリーニング手順
４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリル遊離塩基（３０ｍｇ）を、３５℃で０．３ｍｌのジクロロメタン中に溶解し、１．１当量の対イオン溶液を加えた。サンプルをこの温度で３０分間撹拌し、その後０．１℃／分で５℃に冷却した。４００ｒｐｍの撹拌速度を実験の全体にわたって使用した。５℃で１８時間残存させた後、固体を室温で濾過し、７２時間にわたり真空下（３０℃）で乾燥させ又は空気乾燥させて、ＸＲＰＤにより分析した。対イオンを加えない対照実験を行った。
【０１０３】
結果の要約
上述の手順を用いた塩のスクリーンからのＸＲＰＤの結果を、表６−１０に要約する。全ての新たなパターンを、対イオンと数を用いて、例えば、メタンスルホン酸、即ちＭＳＡ（ＭＳＡ１やＭＳＡ２など）を用いて標識化した。
【０１０４】
【表６】
2019500323.tif 000009
【０１０５】
【表７−１】
2019500323.tif 000010
【０１０６】
【表７−２】
2019500323.tif 000011
【０１０７】
【表８−１】
2019500323.tif 000012
【０１０８】
【表８−２】
2019500323.tif 000013
【０１０９】
【表９−１】
2019500323.tif 000014
【０１１０】
【表９−２】
2019500323.tif 000015
【０１１１】
【表１０】
2019500323.tif 000016
【０１１２】
３つの溶媒（ＩＰＡ、１，４−ジオキサン、及びＤＣＭ）と１２の対イオンを使用したスクリーニング実験により、２６の新たな固体形態を得た。
【０１１３】
１つの固体形態（ＳＯ４−１）を、３つの溶媒全てにおいて硫酸を使用するスクリーニングから切り離した。酒石酸を使用する実験だけが、ＩＰＡでは結晶形態（ＴＡＲ１）を、及び１，４−ジオキサンとＤＣＭのスクリーンからは非晶質の固体をもたらした。少なくとも２つの固体形態を、残り１０の対イオンの各々に対して得た。
【０１１４】
２６の形態の典型的なサンプルを、ＮＭＲ／ＩＣ及びＤＳＣにより更に分析した。４０℃／７５％ＲＨでの保管後のサンプルの安定性も、ＸＲＰＤにより評価した。ＦｅＳＳＩＦ培地中の溶解度を、選択されたサンプルについて判定した。表６−１０は、新たな形態の予備的な特徴化の要約を示す。全ての形態に関するＮＭＲデータは塩の形成と一致するピークシフトを示し、適用可能な場合、対イオンと溶媒の等価を得た。ＩＣを使用して、無機の対イオン、硫酸塩、及びリン酸塩のモル当量を判定した。
【０１１５】
ＤＳＣ事象の開始温度は、形態の熱安定性の効果をもたらす。ｐＴＳＡ  １、ＳＯ４  １、ＭＳＡ  １、ＢＳＡ  １、ＰＨＯＡ  １、及びＢＡ  １のサンプルは、優れた熱安定性を示す。ＤＳＣ事象の開始は２００℃よりも高く；このデータは、非溶媒和の結晶性固体と一致している。２０の残りの形態は、〜３０℃までの低さから生じる熱的事象を伴う。これらは、溶媒和／水和形態であり得る。
【０１１６】
非溶媒和形態は、４０℃／７５％ＲＨでの保管後のＸＲＰＤにより変化しなかったが、他の形態はパターンの変化を示した。これら６つの形態のＦｅＳＳｉＦ溶解度（０．７２−１．０１ｍｇ／ｍｌ）は、０．７４ｍｇ／ｍｌのＨＣｌ塩の値に匹敵する。
【０１１７】
以下は、ＨＣｌ塩と比較した時の改善された安定性と溶解度を備えていると同定された：ｐＴＳＡ  １、ＳＯ４−１、ＭＳＡ  １、ＢＳＡ１、ＰＨＯＡ  １、及びＢＡ  １。
【０１１８】
実施例２：４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルベシル酸塩の調製
【０１１９】
【化２】
2019500323.tif 000017
【０１２０】
工程１：２，５，６−トリクロロピリミジン−４−オールの調製
【０１２１】
【化３】
2019500323.tif 000018
【０１２２】
ＴＨＦ（６Ｌ）中の２，４，５，６−テトラクロロピリミジン（１ｋｇ、４．６３ｍｏｌ）の溶液に、１Ｎ  ＮａＯＨ（６Ｌ、６．０ｍｏｌ）を滴下で加え、混合物を室温で一晩撹拌した。溶液を１Ｎ  ＨＣｌで酸性化し、ＤＣＭ（３×）で抽出した。組み合わせた有機物を乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、真空内で濃縮した。固体を３０分間、Ｅｔ２Ｏ中でスラリー状にし（ｓｌｕｒｒｉｅｄ）、濾過し、Ｅｔ２Ｏで洗浄し、乾燥して、６３５ｇ（６９％）の表題化合物を得た。ＬＣＭＳ（Ｃ１８カラム、カラムのサイズ：４．６＊５０ｍｍ；移動相：２０％−４０％、アセトニトリル−水−０．０２％  ＮＨ４ＯＡｃ）：Ｒｔ＝２．７８５ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］  Ｃａｌｃ’ｄ  ｆｏｒ  Ｃ４ＨＣｌ３Ｎ２Ｏ，  １９９；Ｆｏｕｎｄ，１９９。
【０１２３】
工程２：２，５，６−トリクロロ−３−メチル−３−ヒドロピリミジン−４−オンの調製
【０１２４】
【化４】
2019500323.tif 000019
【０１２５】
ＤＭＦ（５Ｌ）中の２，５，６−トリクロロピリミジン−４−オール（６７０ｇ、３．３８ｍｏｌ）及びＫ２ＣＯ３（５６０ｇ、４．０６ｍｏｌ）の溶液を１５分間室温で撹拌し、次いで０℃に冷却した。ヨードメタン（５２８ｇ、３．７２ｍｏｌ）を滴下で加え、混合物を室温で１７時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、ブラインで洗浄し、乾燥して（Ｎａ２ＳＯ４）、真空内で濃縮した。残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥＡ、１０：１）によって精製して、４４７ｇ（６２％）の表題化合物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ３．７４（ｓ，３Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ｃ１８カラム；カラムのサイズ：４．６＊５０ｍｍ；移動相：２０％−９５％、アセトニトリル−水−０．０２％  ＮＨ４ＯＡｃ）：Ｒｔ＝２．９８６ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］  Ｃａｌｃ’ｄ  ｆｏｒ  Ｃ５Ｈ３Ｃｌ３Ｎ２Ｏ，  ２１３；Ｆｏｕｎｄ，２１３。
【０１２６】
工程３：Ｎ−［１−（５，６−ジクロロ−３−メチル−４−オキソ（３−ヒドロピリミジン−２−イル））（４−ピペリジル）］（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボキサミドの調製
【０１２７】
【化５】
2019500323.tif 000020
【０１２８】
ＤＭＦ（８００ｍＬ）中の２，５，６−トリクロロ−３−メチル−３−ヒドロピリミジン−４−オン（５３２ｇ、２．５１ｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（６４８ｇ、５．０２ｍｏｌ）、及び（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−Ｎ−（４−ピペリジル）カルボキサミド（５０２ｇ、２．５１ｍｏｌ）の溶液を、１時間にわたり１２０℃に加熱した。溶媒を真空内で取り除き、残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥＡ、１：１）により精製して、７５１ｇ（８０％）の表題化合物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ１．４５  （ｓ，  ９Ｈ），  １．５０−１．５８  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．０６−２．１０  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．９８−３．０５  （ｍ，  ２Ｈ），  ３．４８  （ｓ，  ３  Ｈ），  ３．５３−３．５６  （ｍ，  ２Ｈ），  ３．７０  （ｓ，  １Ｈ），  ４．５２  （ｓ，  １Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ｃ１８カラム；カラムのサイズ：４．６＊５０ｍｍ；移動相：２０％−９５％、アセトニトリル−水−０．０２％  ＮＨ４ＯＡｃ）：Ｒｔ＝４．００６ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］  Ｃａｌｃ’ｄ  ｆｏｒ  Ｃ１５Ｈ２２Ｃｌ２Ｎ４Ｏ３，  ３７７；Ｆｏｕｎｄ，３２１（ＭＷ−ｔＢｕ）。
【０１２９】
工程４：ｔｅｒｔ−ブチル１−（５−クロロ−４−（３−フルオロ−４−シアノフェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロピリミジン−２−イル）ピペリジン−４−イルカルバマートの調製
【０１３０】
【化６】
2019500323.tif 000021
【０１３１】
Ｎ２雰囲気の下で、ＡＣＮ（４Ｌ）中のＮ−［１−（５，６−ジクロロ−３−メチル−４−オキソ（３−ヒドロピリミジン−２−イル））（４−ピペリジル）］（ｔｅｒｔ−ブトキシ）カルボキサミド（１５０ｇ、０．４０ｍｏｌ）の溶液に、３−フルオロ−４−シアノフェニルボロン酸（６５．８ｇ、０．４０ｍｏｌ）、Ｐｄ（Ｐｈ３Ｐ）４（９．３ｇ、８ｍｍｏｌ）、及び０．４Ｎ  Ｎａ２ＣＯ３（２Ｌ、０．８０ｍｏｌ）を加えた。混合物を８５℃２時間撹拌し、室温に冷却した。水（２Ｌ）を加え、水性混合物を酢酸エチル（３×）で抽出した。有機物を組み合わせ、水で洗浄し、ブラインで洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮した。残留物をシリカゲルクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥＡ、３：１）によって精製して、９５ｇ（５７％）の表題化合物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ１．４５  （ｓ，  ９  Ｈ），  １．５４−１．６１  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．０５−２．１３  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．９９−３．０８  （ｍ，  ２Ｈ），  ３．５３−３．５８  （ｓ，  ５Ｈ），  ３．７０  （ｓ，  １Ｈ），  ４．５４  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．０  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．６８−７．８０  （ｍ，  ３  Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ｃ１８カラム；カラムのサイズ：４．６＊５０ｍｍ；移動相：５％−９５％、アセトニトリル−水−０．１％  ＴＦＡ）：Ｒｔ＝４．４４３ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］  Ｃａｌｃ’ｄ  ｆｏｒ  Ｃ２２Ｈ２５ＣｌＦＮ５Ｏ３，  ４６２；Ｆｏｕｎｄ，４６２。
【０１３２】
工程５：ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［１−［４−（４−シアノ−３−フルオロフェニル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシフェニル）−１−メチル−６−オキソピリミジン−２−イル］ピペリジン−４−イル］カルバミン酸塩の調製
【０１３３】
【化７】
2019500323.tif 000022
【０１３４】
脱気したジオキサン：Ｈ２Ｏ（３：１、３５５０ｍＬ：８８７ｍＬ）の中の（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−Ｎ−｛１−［５−クロロ−６−（４−シアノ−３−フルオロフェニル）−３−メチル−４−オキソ（３−ヒドロピリミジン−２−イル）］（４−ピペリジル｝カルボキサミド（２９５．８ｇ、６４０ｍｍｏｌ）、３−フルオロ−４−メトキシベンゼンボロン酸（２１７．７ｇ、１２８１ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（Ｐｈ３Ｐ）４（１８．５ｇ、１６．０ｍｍｏｌ）、及びＫ２ＣＯ３（２６５．５ｇ、１９２１ｍｍｏｌ）の混合物を、反応が完了するまで（少なくとも２時間）、８０℃でＮ２雰囲気の下、撹拌した。反応混合物を、室温にまで冷却した。水（１１Ｌ）を加え、スラリーを１時間撹拌した。スラリーを濾過し、固体を水（４Ｌ）で洗浄し、ＭｅＯＨ：水（１：１、４Ｌ）で洗浄した。ケーキを１０分間、ＭｅＯＨ（４Ｌ）中で撹拌した。スラリーを濾過し、固体をＭｅＯＨ（４Ｌ）ですすぎ、ＭＴＢＥ（４Ｌ）で洗浄した。固体をＤＣＭ（１６Ｌ）の中で得て、反応混合物を１５分間撹拌した。その後、２−メルカプトエチル・硫化エチル・シリカ（４００ｇ）を加え、反応混合物を少なくとも１時間、Ｎ２雰囲気の下、室温で撹拌した。反応混合物をフリットフィルタ中でセライトに通して濾過し、固体をＤＣＭ（１Ｌ）ですすいだ。ＤＣＭ濾液の容量を減らし、乾燥状態に近づけた。ＭｅＯＨ（４Ｌ）を加え、溶媒を減らして乾燥させた。固体をＭｅＯＨ（４Ｌ）の中で得て、スラリーを１５℃に冷却した。スラリーを濾過し、ケーキをＭｅＯＨ（０．７Ｌ）で洗浄し、ＭＴＢＥ（０．７Ｌ）で洗浄し、４５℃で真空下において恒量にまで乾燥させて、３２４．６ｇ（９１．９％）の表題化合物を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ１．４６  （ｓ，  ９  Ｈ），  １．６０  （ｄ，  Ｊ＝１０．１１  Ｈｚ，  ２  Ｈ），  ２．１１  （ｄ，  Ｊ＝１１．６２  Ｈｚ，  ２  Ｈ），  ３．０６  （ｔ，  Ｊ＝１２．００  Ｈｚ，  ２  Ｈ），  ３．５４  （ｓ，  ３  Ｈ），  ３．６０  （ｄ，  Ｊ＝１３．６４  Ｈｚ，  ２  Ｈ），  ３．７２  （ｂｒ．ｓ．，  １  Ｈ），  ３．８８  （ｓ，  ３  Ｈ），  ４．５２  （ｂｒ．  ｓ．，  １  Ｈ），  ６．７９  −  ６．８９  （ｍ，  ２  Ｈ），  ６．９７  （ｄ，  Ｊ＝１２．３８  Ｈｚ，  １  Ｈ），  ７．１３  （ｄ，  Ｊ＝８．３４  Ｈｚ，  １  Ｈ），  ７．３１  （ｄ，  Ｊ＝９．８５  Ｈｚ，  １  Ｈ），  ７．４２  （ｂｒ．  ｓ．，  １  Ｈ）。ＬＣＭＳ（Ｃ１８カラム；カラムのサイズ：４．６＊５０ｍｍ；移動相：５％−９５％、アセトニトリル−水−０．１％  ＴＦＡ）：Ｒｔ＝６．９７９ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］  Ｃａｌｃ’ｄ  ｆｏｒ  Ｃ２９Ｈ３１Ｆ２Ｎ５Ｏ４，  ５５２；Ｆｏｕｎｄ，  ５５２。
【０１３５】
工程６：４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロ−ベンゾニトリル、ベシル酸塩の調製
【０１３６】
【化８】
2019500323.tif 000023
【０１３７】
ギ酸（４１．５ｍＬ）中の、ｔｅｒｔ−ブチルＮ−［１−［４−（４−シアノ−３−フルオロフェニル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシフェニル）−１−メチル−６−オキソピリミジン−２−イル］ピペリジン−４−イル］カルバミン酸塩（５．０ｇ、９．０６ｍｍｏｌ）及びベンゼンスルホン酸一水和物（１．９ｇ、１０．９ｍｍｏｌ）の溶液を、反応が完了するまで室温で撹拌した。溶液を０．４５μｍのフィルタに通して濾過した。水（２５ｍＬ）をギ酸溶液に加えた。４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロ−ベンゾニトリル、ベシル酸塩（０．０５ｇ）の種（Ｓｅｅｄｓ）を導入し、溶液を３０分間熟成させた。水（最大５０ｍＬ）を６時間にわたり混合物に加えた。その後、バッチを少なくとも１２時間にわたり熟成させた。バッチを濾過し、ケーキを８０／２０の水／ギ酸（ｖ／ｖ）で洗浄し、窒素ブリードを用いて真空オーブン中で４０−５０℃で乾燥し、表題化合物（５．２５ｇ、９５％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ１．６９  （ｑ，  ２Ｈ，  Ｊ＝  １１．４  Ｈｚ），  ２．００  （ｄ，  ２Ｈ，  Ｊ＝  １０．２  Ｈｚ），  ２．９９  （ｔ，  ２Ｈ，  Ｊ＝  １２．３  Ｈｚ），  ３．３１  （ｂｓ，  １Ｈ），  ３．４２  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．７２  （ｄ，  ２Ｈ，  Ｊ＝１３．２  Ｈｚ），  ３．８１  （ｓ，  ３Ｈ），  ６．７８  （ｄ，  １Ｈ，  Ｊ＝  ８．４  Ｈｚ），７．０１−７．０６  （ｍ，  １Ｈ），  ７．０４−７．０６  （ｍ，  １Ｈ），  ７．１９  （ｄｄ，  １Ｈ，  １．２  Ｈｚ），  ７．３２  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．３２  （ｍ，  １Ｈ），  ７．４６  （ｄｄ，  １Ｈ，  Ｊ＝１０．５，  １．２  Ｈｚ），  ７．６１  （ｍ，  ２Ｈ），  ７．８２  （ｄｄ，  １Ｈ，  Ｊ＝８．１，  ７．２  Ｈｚ），  ７．９２  （ｂｓ，  １Ｈ），  ７．９２  （ｂｓ，  ２Ｈ）。ＬＣＭＳ（カラム：Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｚｏｒｂａｘ  ＳＢ−Ｃ８、４．６×５０ｍｍ、３．５μｍの粒径；移動相：５％−９５％、アセトニトリル−水−０．１％  ＴＦＡ：）Ｒｔ＝３．８５４ｍｉｎ；［Ｍ＋Ｈ］  Ｃａｌｃ’ｄ  ｆｏｒ  Ｃ２４Ｈ２３Ｆ２Ｎ５Ｏ２，  ４５２；Ｆｏｕｎｄ，４５２。上述のように、８０／２０の水／ギ酸からの第２の再結晶化を行い、ＬＣ解析により判定されるように９９％より多くの純粋な物質を得た。
【０１３８】
表題化合物のＤＳＣサーモグラムを図２で提供する。
【０１３９】
表題化合物の形態１のＸＲＰＤパターンを図１に提供する。特徴的な回折ピークは、４．９°２−シータ、９．７°２−シータ、１３．４°２−シータ、１８．０°２−シータ、及び１８．５°２−シータを含む。
【０１４０】
実施例３：非晶質の４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルベシル酸塩の調製
【０１４１】
非晶質の４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルベシル酸塩を、３０Ｈｚで９９分間、４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルベシル酸塩の結晶形態１をボールミル粉砕することにより調製した。結果として生じる物質は、図３に示されるようなＸＲＰＤ解析により非晶質であると観察された。
【０１４２】
実施例４：医薬組成物−カプセル製剤
１つの実施形態において、ヒトへの投与のための結晶の４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルベシル酸塩のカプセル製剤を、以下の成分を用いて調製する：
【０１４３】
【表１１】
2019500323.tif 000024
【０１４４】
カプセル中で結晶の４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルベシル酸塩を調製するプロセスは、以下の通りである：４−［２−（４−アミノ−ピペリジン−１−イル）−５−（３−フルオロ−４−メトキシ−フェニル）−１−メチル−６−オキソ−，６−ジヒドロ−ピリミジン−４−イル］−２−フルオロベンゾニトリルベシル酸塩の必要な量の重さを量り、適切なサイズのカプセルに加えて、カプセルを閉じる。
【０１４５】
本明細書に記載される実施例及び実施形態は、実例的なものであり、当業者に示唆される様々な修正又は変更は、本開示内に含まれるべきである。当業者によって認識されるように、上記実施例に列挙される特定の構成成分は、他の機能的に同等な構成成分、例えば、賦形剤、結合剤、潤滑剤、充填剤などと取り替えられてもよい。
【図１】
2019500323.tif 000025
【図２】
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【図３】
2019500323.tif 000027
【国際調査報告】
2019500323.tif 000028