(57)【要約】  本発明は、TLR7及びTLR8アゴニストとしての式(I)のリン脂質修飾した新規イミダゾキノリン、医薬組成物、治療的使用並びにそれらを調製する方法を提供する。2019500360.tif 000035【選択図】なし
2019500360.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式(I)の化合物、又はその医薬的に許容される塩
【化１】
2019500360.tif 000025
[式中、
R1は、H、C1〜6アルキル、C1〜6アルキルアミノ、C1〜6アルコキシ、C3〜6シクロアルキルC1〜6アルキル、C3〜6シクロアルキルC1〜6アルキルアミノ、C3〜6シクロアルキルC1〜6アルコキシ、C1〜6アルコキシC1〜6アルキル、C1〜6アルコキシC1〜6アルキルアミノ及びC1〜6アルコキシC1〜6アルコキシから選択され、ここで、C1〜6アルキル、C1〜6アルキルアミノ、C1〜6アルコキシ、C3〜6シクロアルキルC1〜6アルキル、C3〜6シクロアルキルC1〜6アルキルアミノ、C3〜6シクロアルキルC1〜6アルコキシ、C1〜6アルコキシC1〜6アルキル、C1〜6アルコキシC1〜6アルキルアミノ又はC1〜6アルコキシC1〜6アルコキシは分枝状又は非分枝状であり、ヒドロキシル、アミノ、チオ、ヒドラジノ、ヒドラジド、アジド、アセチレニル、カルボキシル、又はマレイミド基で場合により末端が置換されており、
Zは、C2〜C6アルキル及びC2〜C6アルケニルから選択され、ここで、C2〜C6アルキル若しくはC2〜C6アルケニルは非置換であるか、又は-(O-C2〜C6アルキル)1〜6-で末端が置換されており、
XはO又はSであり、
nは、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19又は20であり、
R2は、H、あるいは直鎖状若しくは分枝状の、場合により不飽和のC4〜C24アルキル、又は直鎖状若しくは分枝状の、場合により不飽和のC4〜C24アシルであり、
R3は、直鎖状若しくは分枝状の、場合により不飽和のC4〜C24アルキル、又は直鎖状若しくは分枝状の、場合により不飽和のC4〜C24アシルである]。
【請求項２】
R1が、H、C1〜6アルキル、C1〜6アルキルアミノ及びC1〜6アルコキシから選択され、ここで、C1〜6アルキル、C1〜6アルキルアミノ又はC1〜6アルコキシは分枝状又は非分枝状であり、ヒドロキシル、アミノ、チオ、ヒドラジノ、ヒドラジド、アジド、アセチレニル、カルボキシル、又はマレイミド基で場合により末端が置換されている、請求項1に記載の化合物又は医薬的に許容される塩。
【請求項３】
R1がn-ブチルである、請求項1に記載の化合物又は医薬的に許容される塩。
【請求項４】
Zが(CH2)2である、請求項1〜3のいずれか一項に記載の化合物又は医薬的に許容される塩。
【請求項５】
XがOである、請求項1〜4のいずれか一項に記載の化合物又は医薬的に許容される塩。
【請求項６】
nが3又は6から選択される、請求項1〜5のいずれか一項に記載の化合物又は医薬的に許容される塩。
【請求項７】
R2が、直鎖状若しくは分枝状の、場合により不飽和のC4〜C24アシルである、請求項1〜6のいずれか一項に記載の化合物又は医薬的に許容される塩。
【請求項８】
R3が、直鎖状若しくは分枝状の、場合により不飽和のC4〜C24アシルである、請求項1〜7のいずれか一項に記載の化合物又は医薬的に許容される塩。
【請求項９】
R2が非分枝状C16アシル(パルミトイル、COC15H31)である、請求項1〜8のいずれか一項に記載の化合物又は医薬的に許容される塩。
【請求項１０】
R3が非分枝状C16アシル(パルミトイル、COC15H31)である、請求項1〜9のいずれか一項に記載の化合物又は医薬的に許容される塩。
【請求項１１】
R1=n-ブチルであり、Zが(CH2)2であり、nが、3、6及び9から選択され、R2が非分枝状C16アシル(パルミトイル、COC15H31)であり、R3が非分枝状C16アシル(パルミトイル、COC15H31)である、請求項1に記載の化合物。
【請求項１２】
4-アミノ-1-[2-(1,2-ジパルミトイル-sn-グリセロ-3-エチレングリコール-ホスホ)エチル]-2-n-ブチル-1H-イミダゾ[4,5-c]キノリン、
4-アミノ-1-[2-(1,2-ジパルミトイル-sn-グリセロ-3-トリエチレングリコール-ホスホ)エチル]-2-n-ブチル-1H-イミダゾ[4,5-c]キノリン、
4-アミノ-1-[2-(1,2-ジパルミトイル-sn-グリセロ-3-ヘキサエチレングリコール-ホスホ)エチル]-2-n-ブチル-1H-イミダゾ[4,5-c]キノリン、
4-アミノ-1-[2-(1,2-ジパルミトイル-sn-グリセロ-3-ノナエチレングリコール-ホスホ)エチル]-2-n-ブチル-1H-イミダゾ[4,5-c]キノリン、
及びそれらの医薬的に許容される塩からなる群から選択される化合物。
【請求項１３】
4-アミノ-1-[2-(1,2-ジパルミトイル-sn-グリセロ-3-トリエチレングリコール-ホスホ)エチル]-2-n-ブチル-1H-イミダゾ[4,5-c]キノリン又はその医薬的に許容される塩。
【請求項１４】
4-アミノ-1-[2-(1,2-ジパルミトイル-sn-グリセロ-3-ヘキサエチレングリコール-ホスホ)エチル]-2-n-ブチル-1H-イミダゾ[4,5-c]キノリン又はその医薬的に許容される塩。
【請求項１５】
請求項1から14のいずれか一項に記載の化合物、及び医薬的に許容される担体又は希釈剤を含む医薬組成物。
【請求項１６】
それを必要とする哺乳動物におけるC型肝炎ウイルス感染症の処置方法であって、治療上有効量の請求項1から14のいずれか一項に記載の化合物を前記対象に投与するステップを含む、方法。
【請求項１７】
それを必要とする哺乳動物における基底細胞癌の処置方法であって、治療上有効量の請求項1から14のいずれか一項に記載の化合物を前記対象に投与するステップを含む、方法。
【請求項１８】
それを必要とする哺乳動物における光線角化症の処置方法であって、治療上有効量の請求項1から14のいずれか一項に記載の化合物を前記対象に投与するステップを含む、方法。
【請求項１９】
それを必要とする哺乳動物における生殖器パピローマウイルス感染症の処置方法であって、治療上有効量の請求項1から14のいずれか一項に記載の化合物を前記対象に投与するステップを含む、方法。
【請求項２０】
それを必要とする哺乳動物におけるC型肝炎ウイルス感染症の処置方法であって、治療上有効量の4-アミノ-1-[2-(1,2-ジパルミトイル-sn-グリセロ-3-ヘキサエチレングリコール-ホスホ)エチル]-2-n-ブチル-1H-イミダゾ[4,5-c]キノリン又はその医薬的に許容される塩を前記対象に投与するステップを含む、方法。
【請求項２１】
それを必要とする哺乳動物におけるC型肝炎ウイルス感染症の処置方法であって、治療上有効量の4-アミノ-1-[2-(1,2-ジパルミトイル-sn-グリセロ-3-トリエチレングリコール-ホスホ)エチル]-2-n-ブチル-1H-イミダゾ[4,5-c]キノリン又はその医薬的に許容される塩を前記対象に投与するステップを含む、方法。
【請求項２２】
請求項1から14のいずれか一項に記載の化合物を調製する方法であって、
a)式(III)の化合物
【化２】
2019500360.tif 000026
[式中、
nは、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19又は20であり、
R2は、H、あるいは直鎖状若しくは分枝状の、場合により不飽和のC4〜C24アルキル、又は直鎖状若しくは分枝状の、場合により不飽和のC4〜C24アシルであり、
R3は、直鎖状若しくは分枝状の、場合により不飽和のC4〜C24アルキル、又は直鎖状若しくは分枝状の、場合により不飽和のC4〜C24アシルである]
を式(V)の化合物
【化３】
2019500360.tif 000027
[式中、
PGはヒドロキシル保護に適した保護基であり、シアノエチル、メチル、エチル、ベンジル及びアリル基を含むがこれらに限定されない]
と反応させて、式(VI)の化合物
【化４】
2019500360.tif 000028
[式中、
Rは
【化５】
2019500360.tif 000029
である]
を調製するステップ、
b)式(VI)の化合物を式(VII)の化合物
【化６】
2019500360.tif 000030
[式中、
R1は、H、C1〜6アルキル、C1〜6アルキルアミノ、C1〜6アルコキシ、C3〜6シクロアルキルC1〜6アルキル、C3〜6シクロアルキルC1〜6アルキルアミノ、C3〜6シクロアルキルC1〜6アルコキシ、C1〜6アルコキシC1〜6アルキル、C1〜6アルコキシC1〜6アルキルアミノ及びC1〜6アルコキシC1〜6アルコキシから選択され、ここで、C1〜6アルキル、C1〜6アルキルアミノ、C1〜6アルコキシ、C3〜6シクロアルキルC1〜6アルキル、C3〜6シクロアルキルC1〜6アルキルアミノ、C3〜6シクロアルキルC1〜6アルコキシ、C1〜6アルコキシC1〜6アルキル、C1〜6アルコキシC1〜6アルキルアミノ又はC1〜6アルコキシC1〜6アルコキシは分枝状又は非分枝状であり、ヒドロキシル、アミノ、チオ、ヒドラジノ、ヒドラジド、アジド、アセチレニル、カルボキシル、又はマレイミド基で場合により末端が置換されており、
Zは、C2〜C6アルキル及びC2〜C6アルケニルから選択され、ここで、C2〜C6アルキル若しくはC2〜C6アルケニルは非置換であるか、又は-(O-C2〜C6アルキル)1〜6-で末端が置換されている]
と反応させて、式(IX)の化合物
【化７】
2019500360.tif 000031
[式中、
Rは、
【化８】
2019500360.tif 000032
であり、
R'は、
【化９】
2019500360.tif 000033
であり、
PGはヒドロキシル保護に適した保護基であり、シアノエチル、メチル、エチル、ベンジル及びアリル基を含むがこれらに限定されない]
を調製するステップ、及び
c)式(IX)の化合物を酸化し、ヒドロキシル保護基を除去して、式(I)の化合物
【化１０】
2019500360.tif 000034
を得るステップ
を含む、方法。
【請求項２３】
ワクチンアジュバントとして用いるための請求項1から14のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２４】
治療に用いるための請求項1から14のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２５】
それを必要とする対象におけるC型肝炎ウイルス感染症の処置に用いるための請求項1から14のいずれか一項に記載の化合物又は医薬的に許容される塩。
【請求項２６】
それを必要とする対象における基底細胞癌の処置に用いるための請求項1から14のいずれか一項に記載の化合物又は医薬的に許容される塩。
【請求項２７】
それを必要とする対象における光線角化症の処置に用いるための請求項1から14のいずれか一項に記載の化合物又は医薬的に許容される塩。
【請求項２８】
それを必要とする対象における生殖器パピローマウイルス感染症の処置に用いるための請求項1から14のいずれか一項に記載の化合物又は医薬的に許容される塩。
【請求項２９】
ワクチンアジュバントを調製するための請求項1から14のいずれか一項に記載の化合物又は医薬的に許容される塩の使用。
【請求項３０】
対象におけるC型肝炎ウイルス感染症のための医薬を調製するための請求項1から14のいずれか一項に記載の化合物又は医薬的に許容される塩の使用。
【請求項３１】
対象における基底細胞癌を処置するための医薬を調製するための請求項1から14のいずれか一項に記載の化合物又は医薬的に許容される塩の使用。
【請求項３２】
対象における光線角化症を処置するための医薬を調製するための請求項1から14のいずれか一項に記載の化合物又は医薬的に許容される塩の使用。
【請求項３３】
対象における生殖器パピローマウイルス感染症を処置するための医薬を調製するための請求項1から14のいずれか一項に記載の化合物又は医薬的に許容される塩の使用。
【請求項３４】
アジュバントとして用いるための請求項1から14のいずれか一項に記載の化合物又は医薬的に許容される塩を含む医薬組成物。
【請求項３５】
C型肝炎ウイルス感染症、基底細胞癌、光線角化症及び生殖器パピローマウイルス感染症から選択される状態の処置に用いるための、請求項1から14のいずれか一項に記載の化合物又は医薬的に許容される塩を含む医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
米国連邦政府の助成による研究に関する陳述
本研究は、米国国立アレルギー感染症研究所(NIAID)により(Corixa Corporation d/b/a GlaxoSmithKline Biologicals SAとの)契約HHSN272200900036Cのもとで一部支援された。
【０００２】
本発明は、Toll様受容体7(TLR7)及びToll様受容体8(TLR8)アゴニストに関する。さらに詳細には、本発明は、TLR7及び/又はTLR8のアゴニストとして有用である化合物、アジュバントとして有用である化合物、そのような化合物を作製する方法、そのような化合物を含む医薬製剤、並びにそれらの治療的使用に関する。
【背景技術】
【０００３】
ワクチン製造可能性及び安全性を改善するための微生物性ワクチンの精製及び単純化並びに合成及び組換えサブユニット抗原の使用によって、ワクチン効力が低下してきた。これは、ワクチン活性並びに合成及び組換えエピトープの弱い免疫原性を増強させる、アジュバントと抗原との共投与に関する研究につながった。アジュバントは、ワクチン抗原に対する体液性及び/又は細胞性媒介免疫応答を増強させる添加剤である。しかし、ワクチンアジュバントの設計は、免疫系機能に関与する分子機構の複雑さのため従来困難であった。微生物成分の添加によって、適応免疫応答が増強することは長く知られてきたが、免疫監視機構に関与する細胞、例えば上皮及び樹状細胞上のtoll様受容体(TLR)が、いわゆる「病原体関連パターン」又はPAMPによりこれらの微生物産物の多くを関与させることは最近になってやっと示された。多くのワクチンアジュバント及び独立型免疫調節物質は、TLRファミリーのメンバーと相互に作用するようにみえる。
【０００４】
ヒトにおいて同定された10個の公知TLRのうち、5個(TLR1、2、4、5、6)は細菌成分の認識と関連し、他の4個(TLR3、7、8、9)は細胞質コンパートメントに制限されるようにみえ、ウイルスRNA(TLR3、7、8)及び非メチル化DNA(TLR9)の検出に関与する(Iwasaki, A.、Nat Immunol、2004年、5巻、987頁)。TLRの活性化は、細胞内シグナル伝達経路を制御し、細胞内アダプター分子、例えばMyD88、TRIF、TIRAP、及びTRAMとの相互作用により遺伝子発現につながる(Akira, S.、Nat Rev Immunol、2004年、4巻、499頁;Takeda, K.、Semin Immunol、2004年、16巻、3頁)。これらのアダプター分子は、炎症性サイトカイン/ケモカイン及びI型インターフェロン(IFN-α/β)の発現を別個に制御することができ、抗原特異的な体液性及び細胞性媒介免疫応答の優先的な増強を引き起こすことができる。(Zughaier, S.、Infect Immun、2005年、73巻、2940頁)。体液性免疫は、病原性細菌に対する主要な防御線であるが、一方細胞傷害性Tリンパ球(CTL)の誘導は、ウイルス性疾患及びがんの場合の防御免疫にとって重大であるようにみえる。
【０００５】
現在、ミョウバン(alum)として知られているアルミニウム塩の一群は、ヒトワクチンで使用される有力なアジュバントである。しかし、ミョウバンは、典型的には体液性(Th2)免疫を増強するにすぎず、一般的には他の経路による局所毒性のために、筋肉内で使用される(例えば、皮下又は皮内接種が肉芽腫を引き起こす)(Aguilar, J.、Vaccine、2007年、25巻、3752頁)。ミョウバンの他の潜在的な副作用には、IgE産生の増加、アレルギー源性及び神経毒性が含まれる。したがって、抗体とTh1型の両免疫応答を刺激することができ、様々な投与経路及び抗原製剤と適合性がある、安全で有効な新規ワクチンアジュバントが求められている。
【０００６】
TLR7及びTLR8活性化の場合には、天然(U及び/又はGに富む)ウイルスssRNAリガンドの低分子模倣物の異なる数種が同定されている。これらには、主にTLR7と相互作用するいくつかの酸化グアノシン代謝産物(オキソグアノシン)関連抗ウイルス性化合物(Heil, F.、Eur J Immunol、2003年、33巻、2987頁;Hemmi、2002年)、並びにTLR7及び/又はTLR8を関与させるアデニンの誘導体が含まれる。これらの化合物の免疫刺激能は、IL-6、I型(特にインターフェロン-α)及びII型インターフェロンを含めてサイトカインのTLR/MyD88依存性シグナル伝達経路並びに産生に起因すると考えられてきた。TLR7又はTLR8活性化は、樹状細胞(DC)上の共刺激分子(例えば、CD-40、CD-80、CD-86)並びにMHCクラスI及びII分子の上方制御を引き起こす。DCは、抗原の取り込み及びTリンパ球への提示に関与する免疫系の主細胞である。TLR7を優先的に発現する形質細胞様樹状細胞(pDC)は、専門のインターフェロン-α産生細胞であり、一方骨髄系樹状細胞(mDC)はTLR8を発現する。mDC上のTLR8活性化は、炎症誘発性サイトカイン、例えばIL-12、TNF-α、及びIFN-γの優先的な産生、並びに細胞媒介性免疫(CMI)につながる。
【０００７】
かなりの注目を受けてきたアデニン誘導体の一種は、1H-イミダゾ[4,5-c]キノリン(IQ)である。この種のイミキモド(imiquimod)の原型的メンバー(R847、S-26398)は、クリームの形で局所的に適用されると生殖器パピローマウイルス感染症(genital papilloma virus infections)、光線角化症(actinic keratosis)、及び基底細胞癌(basal cell carcinoma)に有効であることがわかった。しかし、イミキモドはインターフェロン誘導活性が比較的低く、経口用調合剤にも局所用調合剤にも副作用がないわけではない。実際には、イミキモドを用いたC型肝炎ウイルス(HCV)臨床試験において重篤な副作用が報告された。TLR7アゴニスト全般の大きな免疫学的「フットプリント」は毒性に対する懸念を導いた。別のTLR7アゴニストであるオキソグアノシン誘導体ANA-975を用いた臨床試験は、最近毒性問題のため一時停止された。
【０００８】
C型肝炎ウイルス(HCV)疾患の第一選択治療として、インターフェロン組合せが、ウイルス量を低減し、一部の対象においてはウイルス複製をなくすのに極めて有効であり得る。しかし、多くの患者は持続的ウイルス学的著効を示すことができず、これらの患者において、ウイルス量は調節されない。さらに、インターフェロン注射による治療は、コンプライアンスに影響を及ぼすことを示す望ましくない有害作用をいくつか伴うおそれがある(Dudley T、O'Donnell K、Haydon G、Mutimer D.、Gut.、2006年、55巻(9号):1362〜1363頁)。I型インターフェロン及び他のサイトカインの活性化を含めて自然免疫応答を刺激することができる低分子化合物の投与であれば、ウイルス感染症を含めてヒト疾患を治療又は予防する重要な戦略になり得る。このタイプの免疫調節戦略には、感染症だけでなくがん(Krieg.、Curr. Oncol. Rep.、2004年;6巻(2号):88〜95頁)、アレルギー性疾患(Moisanら、Am. J. Physiol. Lung Cell Mol. Physiol.、2005年;290巻(5号):L987〜995頁)、他の炎症状態、例えば過敏性腸疾患(Rakoff-Nahoum S.、Cell.、2004年、23;118巻(2号):229〜41頁)においても、またワクチンアジュバントとしても有用であり得る化合物を同定する可能性がある(Persingら、Trends Microbiol.、2002年;10巻(10号補遺):S32〜37頁)。
【０００９】
TLR7/8リガンドのIQ種及びイミキモドの代謝産物の誘導体の別メンバーは、レシキモド(resiquimod)である。レシキモド(R-848、S-28609)も、マクロファージ及びDCにおけるTLR7を直接的に又はアクセサリー分子を介して間接的にMyD88依存的に活性化し、DCにおける共刺激分子及びMHCI/IIを上方制御する。しかし、イミキモドとは対照的に、より強力で毒性があるレシキモドは、TLR8シグナル伝達用のリガンドでもあり、CD4+制御性(Treg)細胞機能の逆転を引き起こす。最近、トランスフェクトHEK293細胞を使用して、TLR7アゴニストは、IFN-α及びIFN制御サイトカインを産生するのに有効であり、TLR8アゴニストは、炎症誘発性サイトカイン、例えばTNF-αやIL-12を誘導するのに有効であることが明らかになり、TLR7活性化は抗体応答(Th2型応答)にとってより重要になることもあり、TLR8活性化はCMI又はTh1型免疫応答を推進することができるということが示唆された。しかし、前述のように、多くのTLR7/8アゴニストはしばしば、毒性を示し、不安定であり、かつ/又は免疫賦活作用が実質的でない。したがって、TLR7及び/又はTLR8を活性化する有効で安全なアジュバントの発見及び開発が、抗原に対する免疫応答の大きさ、方向性、及び持続時間を調節する助けとなることによって既存及び新規ワクチンの有効性及び安全性を改善するのに不可欠である。
【００１０】
細胞表面上のPAMPを認識するTLR2及びTLR4とは異なって、TLR7/8 PAMPは、エンドソーム/リソソームコンパートメントにおいて感知され、エンドソームの成熟化を要する。細胞取り込みは、天然及びゼノビオティックTLR7/8リガンド、例えばイミキモドやレシキモドの場合には細胞活性化に必須である。したがって、TLR7/8リガンドのDC及び他の免疫細胞への浸透を増加させることになる戦略であれば、TLR活性化及びワクチン有効性を増強し、かつ毒性作用を緩和することができる。
【００１１】
いくつかの抗ウイルス性/抗腫瘍性1H-イミダゾ[4,5-c]キノリン(Gerster, J. Fら、J. Med. Chem.、2005年、48巻、3481〜3491頁)、例えばイミキモドの免疫刺激能は、主に、形質細胞様樹状細胞及びB細胞におけるTLR7の活性化、並びにI型インターフェロン(IFNα/β)及びIFN制御サイトカインの誘導に起因すると考えられてきた(Miller, R. L.;Meng, T.-C.;Tomai, M. A.、Drug News Perspect.、2008年、21巻、69〜87頁)。
【００１２】
イミダゾキノリンがリン脂質又はホスホノ脂質(phosphonolipid)とコンジュゲートしているTLR7/8アゴニストは、免疫応答を増強してきた。これらのアゴニストであれば、これらの化合物とエンドソームのTLR7及び/若しくはTLR7/8との直接的相互作用並びに/又は酵素作用後の活性代謝産物の相互作用のために、免疫応答を改善することができるということが示唆されてきた(国際公開第2010/04850号)。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１３】
【特許文献１】国際公開第2010/04850号
【非特許文献】
【００１４】
【非特許文献１】Iwasaki, A.、Nat Immunol、2004年、5巻、987頁
【非特許文献２】Akira, S.、Nat Rev Immunol、2004年、4巻、499頁
【非特許文献３】Takeda, K.、Semin Immunol、2004年、16巻、3頁
【非特許文献４】Zughaier, S.、Infect Immun、2005年、73巻、2940頁
【非特許文献５】Aguilar, J.、Vaccine、2007年、25巻、3752頁
【非特許文献６】Heil, F.、Eur J Immunol、2003年、33巻、2987頁
【非特許文献７】Hemmi、2002年
【非特許文献８】Dudley T、O'Donnell K、Haydon G、Mutimer D.、Gut.、2006年、55巻(9号):1362〜1363頁
【非特許文献９】Krieg.、Curr. Oncol. Rep.、2004年;6巻(2号):88〜95頁
【非特許文献１０】Moisanら、Am. J. Physiol. Lung Cell Mol. Physiol.、2005年;290巻(5号):L987〜995頁
【非特許文献１１】Rakoff-Nahoum S.、Cell.、2004年、23;118巻(2号):229〜41頁
【非特許文献１２】Persingら、Trends Microbiol.、2002年;10巻(10号補遺):S32〜37頁
【非特許文献１３】Gerster, J. Fら、J. Med. Chem.、2005年、48巻、3481〜3491頁
【非特許文献１４】Miller, R. L.;Meng, T.-C.;Tomai, M. A.、Drug News Perspect.、2008年、21巻、69〜87頁
【発明の概要】
【００１５】
第1の態様として、本発明は式(I)の化合物を提供し、
【００１６】
【化１】
2019500360.tif 000003
式中、
R1は、H、C1〜6アルキル、C1〜6アルキルアミノ、C1〜6アルコキシ、C3〜6シクロアルキルC1〜6アルキル、C3〜6シクロアルキルC1〜6アルキルアミノ、C3〜6シクロアルキルC1〜6アルコキシ、C1〜6アルコキシC1〜6アルキル、C1〜6アルコキシC1〜6アルキルアミノ及びC1〜6アルコキシC1〜6アルコキシから選択され、ここで、C1〜6アルキル、C1〜6アルキルアミノ、C1〜6アルコキシ、C3〜6シクロアルキルC1〜6アルキル、C3〜6シクロアルキルC1〜6アルキルアミノ、C3〜6シクロアルキルC1〜6アルコキシ、C1〜6アルコキシC1〜6アルキル、C1〜6アルコキシC1〜6アルキルアミノ又はC1〜6アルコキシC1〜6アルコキシは分枝状又は非分枝状であり、ヒドロキシル、アミノ、チオ、ヒドラジノ、ヒドラジド、アジド、アセチレニル、カルボキシル、又はマレイミド基で場合により末端が置換されており、
Zは、C2〜C6アルキル及びC2〜C6アルケニルから選択され、ここで、C2〜C6アルキル若しくはC2〜C6アルケニルは非置換であるか、又は-(O-C2〜C6アルキル)1〜6-で末端が置換されており、
XはO又はSであり、
nは、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19又は20であり、
R2は、H、あるいは直鎖状若しくは分枝状の、場合により不飽和のC4〜C24アルキル、又は直鎖状若しくは分枝状の、場合により不飽和のC4〜C24アシルであり、
R3は、直鎖状若しくは分枝状の、場合により不飽和のC4〜C24アルキル、又は直鎖状若しくは分枝状の、場合により不飽和のC4〜C24アシルである。
【００１７】
第2の態様において、本発明は、式(I)の化合物を含む医薬組成物を提供する。組成物は、医薬的に許容される担体又は希釈剤をさらに含んでもよい。
【００１８】
第3の態様において、本発明は、それを必要とする対象におけるTLR7及び/又はTLR8活性によって媒介される状態の処置方法を提供する。方法は、対象に治療上有効量の式(I)の化合物を投与するステップを含む。
【００１９】
第4の態様において、本発明は、それを必要とする対象におけるC型肝炎ウイルス感染症の処置方法を提供する。方法は、対象に治療上有効量の式(I)の化合物を投与するステップを含む。
【００２０】
第5の態様において、本発明は、それを必要とする対象における基底細胞癌の処置方法を提供する。方法は、対象に治療上有効量の式(I)の化合物を投与するステップを含む。
【００２１】
第6の態様において、本発明は、それを必要とする対象における光線角化症の処置方法を提供する。方法は、対象に治療上有効量の式(I)の化合物を投与するステップを含む。
【００２２】
第7の態様において、本発明は、それを必要とする対象における生殖器パピローマウイルス感染症の処置方法を提供する。方法は、対象に治療上有効量の式(I)の化合物を投与するステップを含む。
【００２３】
第8の態様において、本発明は、式(I)の化合物のワクチンアジュバントとしての使用方法を提供する。
【００２４】
第9の態様において、本発明は、式(I)の化合物を調製する方法を提供する。本方法は、
a)式(III)の化合物
【００２５】
【化２】
2019500360.tif 000004
を式(V)の化合物
【００２６】
【化３】
2019500360.tif 000005
[式中、PGはヒドロキシル保護に適した保護基であり、シアノエチル、メチル、エチル、ベンジル及びアリル基を含むがこれらに限定されない]
と反応させて、式(VI)の化合物
【００２７】
【化４】
2019500360.tif 000006
[式中、
Rは、
【００２８】
【化５】
2019500360.tif 000007
であり、
他の変数はすべて、式(I)について上記に定義した通りである]
を調製するステップ、
b)式(VI)の化合物を式(VII)の化合物
【００２９】
【化６】
2019500360.tif 000008
と反応させて、式(IX)の化合物
【００３０】
【化７】
2019500360.tif 000009
[式中、
Rは、
【００３１】
【化８】
2019500360.tif 000010
であり、
R'は、
【００３２】
【化９】
2019500360.tif 000011
であり、
PGはヒドロキシル保護に適した保護基であり、シアノエチル、メチル、エチル、ベンジル及びアリル基を含むがこれらに限定されず、
他の変数はすべて、式(I)について上記に定義した通りである]
を調製するステップ、
c)式(IX)の化合物を酸化し、ヒドロキシル保護基を除去して、式(I)の化合物を得るステップ、
d)式(I)の化合物をその医薬的に許容される塩に場合により変換するステップ、
e)式(I)の化合物を別の式(I)の化合物に場合により変換するステップ
を含む。
【００３３】
第10の態様において、本発明は、式(I)の化合物を調製する別の方法を提供する。本方法は、
a)式(VII)の化合物
【００３４】
【化１０】
2019500360.tif 000012
を式(X)のH-ホスホナート化合物
【００３５】
【化１１】
2019500360.tif 000013
[式中、変数はすべて、式(I)について上記の通りである]
と反応させて、式(I)の化合物を調製するステップ、
b)式(I)の化合物をその医薬的に許容される塩に場合により変換するステップ、
c)式(I)の化合物を別の式(I)の化合物に場合により変換するステップ
を含む。
【００３６】
別の態様において、本発明は、治療に用いるための式(I)の化合物を提供する。本発明は、対象におけるTLR7及び/又はTLR8活性によって媒介される状態の処置に用いるための式(I)の化合物、対象におけるC型肝炎ウイルス感染症の処置に用いるための式(I)の化合物、対象における基底細胞癌の処置に用いるための式(I)の化合物、対象における光線角化症の処置に用いるための式(I)の化合物、対象における生殖器パピローマウイルス感染症の処置に用いるための式(I)の化合物、並びにワクチンアジュバントとして用いるための式(I)の化合物も提供する。
【００３７】
別の態様において、本発明は、対象におけるTLR7及び/又はTLR8活性によって媒介される状態を処置するための医薬を調製するための式(I)の化合物の使用、C型肝炎ウイルス感染症を処置するための医薬を調製するための式(I)の化合物の使用、基底細胞癌を処置するための医薬を調製するための式(I)の化合物の使用、対象における光線角化症を処置するための医薬を調製するための式(I)の化合物の使用、対象における生殖器パピローマウイルス感染症を処置するための医薬を調製するための式(I)の化合物の使用、並びにアジュバントワクチンを調製するための式(I)の化合物のワクチンアジュバントとしての使用を提供する。
【００３８】
別の態様において、本発明は、TLR7及び/又はTLR8活性によって媒介される状態の処置に用いるための式(I)の化合物を含む医薬組成物を提供する。
【００３９】
本発明の別の態様については、以下に続く特定の実施形態の説明、実施例、及び特許請求の範囲に記載されている。
【図面の簡単な説明】
【００４０】
【図１Ａ】PEG化された類似体で24時間処置された(A)HEK293-hTLR7細胞のNFкB応答を示す図である。hTLR7/8受容体の下流シグナル伝達をNFкB媒介SEAP分泌によりモニターした。各化合物の活性プロファイルを、HEK293細胞培養上清のSEAP活性の測定により定量化した。
【図１Ｂ】PEG化された類似体で24時間処置された(B)HEK293-hTLR8細胞のNFкB応答を示す図である。hTLR7/8受容体の下流シグナル伝達をNFкB媒介SEAP分泌によりモニターした。各化合物の活性プロファイルを、HEK293細胞培養上清のSEAP活性の測定により定量化した。
【図２】PEG化されたイミダゾキノリンによるhPBMCからのTNF-α誘導を示す図である。
【図３】PEG化されたイミダゾキノリンによるhPBMCからのIFN-α誘導を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００４１】
本明細書において「本発明の化合物」又は「式(I)の化合物」とは、式(I)の化合物又はその医薬的に許容される塩若しくは溶媒和物を意味する。
【００４２】
本発明は式(I)の化合物を提供し、
【００４３】
【化１２】
2019500360.tif 000014
式中、
R1は、H、C1〜6アルキル、C1〜6アルキルアミノ、C1〜6アルコキシ、C3〜6シクロアルキルC1〜6アルキル、C3〜6シクロアルキルC1〜6アルキルアミノ、C3〜6シクロアルキルC1〜6アルコキシ、C1〜6アルコキシC1〜6アルキル、C1〜6アルコキシC1〜6アルキルアミノ及びC1〜6アルコキシC1〜6アルコキシから選択され、ここで、C1〜6アルキル、C1〜6アルキルアミノ、C1〜6アルコキシ、C3〜6シクロアルキルC1〜6アルキル、C3〜6シクロアルキルC1〜6アルキルアミノ、C3〜6シクロアルキルC1〜6アルコキシ、C1〜6アルコキシC1〜6アルキル、C1〜6アルコキシC1〜6アルキルアミノ又はC1〜6アルコキシC1〜6アルコキシは分枝状又は非分枝状であり、ヒドロキシル、アミノ、チオ、ヒドラジノ、ヒドラジド、アジド、アセチレニル、カルボキシル、又はマレイミド基で場合により末端が置換されており、
Zは、C2〜C6アルキル及びC2〜C6アルケニルから選択され、ここで、C2〜C6アルキル若しくはC2〜C6アルケニルは非置換であるか、又は-(O-C2〜C6アルキル)1〜6-で末端が置換されており、
XはO又はSであり、
nは、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19又は20であり、
R2は、H、あるいは直鎖状若しくは分枝状の、場合により不飽和のC4〜C24アルキル、又は直鎖状若しくは分枝状の、場合により不飽和のC4〜C24アシルであり、
R3は、直鎖状若しくは分枝状の、場合により不飽和のC4〜C24アルキル、又は直鎖状若しくは分枝状の、場合により不飽和のC4〜C24アシルである。
【００４４】
本発明の一実施形態において、R1は、H、C1〜6アルキル、C1〜6アルキルアミノ及びC1〜6アルコキシから選択され、ここで、C1〜6アルキル、C1〜6アルキルアミノ又はC1〜6アルコキシは分枝状又は非分枝状であり、ヒドロキシル、アミノ、チオ、ヒドラジノ、ヒドラジド、アジド、アセチレニル、カルボキシル、又はマレイミド基で場合により末端が置換されている。
【００４５】
好ましい一実施形態において、R1はC1〜6アルキル、例えばC1〜4アルキル、例えばブチル、特にn-ブチルである。
【００４６】
別の好ましい実施形態において、ZはC2〜C6アルキルであり、ここで、C2〜C6アルキルは非置換であるか、又は-(O-C2〜C6アルキル)1〜6-で末端が置換されている。このような一実施形態において、Zは非置換C2〜C6アルキルである。好ましい実施形態において、Zは(CH2)2である。
【００４７】
別の好ましい実施形態において、XはOである。
【００４８】
本発明の別の実施形態において、nは、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11又は12である。
【００４９】
本発明の別の実施形態において、nは、3、4、5、6、7、8、9、10、11又は12である。
【００５０】
本発明の別の実施形態において、nは、3、4、5、6、7、8、又は9である。
【００５１】
別の好ましい実施形態において、nは、3、6及び9から選択される。
【００５２】
別の好ましい実施形態において、nは、3及び6から選択される。
【００５３】
本発明の別の好ましい実施形態において、nは3である。
【００５４】
本発明の別の好ましい実施形態において、nは6である。
【００５５】
本発明の別の好ましい実施形態において、nは9である。
【００５６】
本発明の別の実施形態において、R2は、直鎖状若しくは分枝状の、場合により不飽和のC4〜C24アシル、例えば直鎖状飽和C4〜C24アシル、特にC10〜C20、例えばC16アシルである。
【００５７】
本発明の別の実施形態において、R3は、直鎖状若しくは分枝状の、場合により不飽和のC4〜C24アシル、例えば直鎖状飽和C4〜C24アシル、特にC10〜C20、例えばC16アシルである。
【００５８】
一実施形態において、R2及びR3は同じである。代替実施形態において、R2及びR3は異なる。
【００５９】
本発明の別の好ましい実施形態において、R2は非分枝状C16アシル(パルミトイル、COC15H31)である。
【００６０】
本発明の別の好ましい実施形態において、R3は非分枝状C16アシル(パルミトイル、COC15H31)である。
【００６１】
本発明の別の好ましい実施形態において、R2はHであり、R3はn-C15H31COである。
【００６２】
本発明の好ましい実施形態において、R1はC1〜6アルキルであり、ZはC2〜C6アルキルであり、ここで、C2〜C6アルキルは非置換であるか、又は-(O-C2〜C6アルキル)1〜6-で末端が置換されており、XはOであり、nは、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11又は12であり、R2は、直鎖状若しくは分枝状の、場合により不飽和のC4〜C24アシルであり、R3は、直鎖状若しくは分枝状の、場合により不飽和のC4〜C24アシルである。
【００６３】
本発明の別の好ましい実施形態において、R1はC1〜6アルキルであり、Zは非置換C2〜C6アルケニルであり、XはOであり、nは、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11又は12であり、R2は、直鎖状不飽和C4〜C24アシルであり、R3は、直鎖状不飽和C4〜C24アシルである。
【００６４】
本発明の別の好ましい実施形態において、R1=n-ブチルであり、Zは(CH2)2であり、nは、3、6及び9から選択され、R2はC16アシルであり、R3はC16アシルである。
【００６５】
本発明の特定の化合物の具体例は、
4-アミノ-1-[2-(1,2-ジパルミトイル-sn-グリセロ-3-エチレングリコール-ホスホ)エチル]-2-n-ブチル-1H-イミダゾ[4,5-c]キノリン、
4-アミノ-1-[2-(1,2-ジパルミトイル-sn-グリセロ-3-トリエチレングリコール-ホスホ)エチル]-2-n-ブチル-1H-イミダゾ[4,5-c]キノリン、
4-アミノ-1-[2-(1,2-ジパルミトイル-sn-グリセロ-3-ヘキサエチレングリコール-ホスホ)エチル]-2-n-ブチル-1H-イミダゾ[4,5-c]キノリン、
4-アミノ-1-[2-(1,2-ジパルミトイル-sn-グリセロ-3-ノナエチレングリコール-ホスホ)エチル]-2-n-ブチル-1H-イミダゾ[4,5-c]キノリン、
及びそれらの医薬的に許容される塩からなる群から選択される。
【００６６】
本発明の好ましい一化合物は、4-アミノ-1-[2-(1,2-ジパルミトイル-sn-グリセロ-3-トリエチレングリコール-ホスホ)エチル]-2-n-ブチル-1H-イミダゾ[4,5-c]キノリン又はその医薬的に許容される塩である。特定の一実施形態において、4-アミノ-1-[2-(1,2-ジパルミトイル-sn-グリセロ-3-トリエチレングリコール-ホスホ)エチル]-2-n-ブチル-1H-イミダゾ[4,5-c]キノリン又はその医薬的に許容される塩は結晶形態をとる。別の実施形態において、4-アミノ-1-[2-(1,2-ジパルミトイル-sn-グリセロ-3-トリエチレングリコール-ホスホ)エチル]-2-n-ブチル-1H-イミダゾ[4,5-c]キノリンはコリン塩の形をとる。
【００６７】
本発明の別の好ましい化合物は、4-アミノ-1-[2-(1,2-ジパルミトイル-sn-グリセロ-3-ヘキサエチレングリコール-ホスホ)エチル]-2-n-ブチル-1H-イミダゾ[4,5-c]キノリン又はその医薬的に許容される塩である。特定の一実施形態において、4-アミノ-1-[2-(1,2-ジパルミトイル-sn-グリセロ-3-ヘキサエチレングリコール-ホスホ)エチル]-2-n-ブチル-1H-イミダゾ[4,5-c]キノリン又はその医薬的に許容される塩は結晶形態をとる。別の実施形態において、4-アミノ-1-[2-(1,2-ジパルミトイル-sn-グリセロ-3-ヘキサエチレングリコール-ホスホ)エチル]-2-n-ブチル-1H-イミダゾ[4,5-c]キノリンはコリン塩の形をとる。
【００６８】
いくつかの式(I)の化合物は、立体異性体として存在することもある(例えば、1個以上の不斉炭素原子を含むことがある)。個々の立体異性体(エナンチオマー及びジアステレオマー)及びこれらの混合物は本発明の範囲内に含まれる。本発明は、式(I)で表わされる化合物の個々の異性体を、1個以上のキラル中心が反転しているそれらの異性体との混合物としても包含する。
【００６９】
本発明による適当な医薬的に許容される塩は、当業者が容易に判断し、例えば有機又は無機塩基、例えば水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸リチウム、炭酸水素リチウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸水素カリウム、及びカリウムtert-ブトキシド、並びに有機塩基、例えばジエチルアミン、リシン、アルギニン、コリン、トリス(ヒドロキシメチル)アミノメタン(トロメタミン)、トリエタノールアミン、ジエタノールアミン、及びエタノールアミンから調製された塩が含まれる。
【００７０】
医薬で使用されるとき、式(I)の化合物の塩は医薬的に許容されるべきであるが、好都合なことには医薬的に許容できない塩を使用して、それらの対応する遊離塩基又は医薬的に許容される塩を調製してもよい。
【００７１】
本明細書において、用語「溶媒和物」は、式(I)の化合物又はその医薬的に許容される塩及び化学量論量又は非化学量論量の溶媒を含む結晶形態を指す。溶媒には、例として水(したがって水和物を生成)、メタノール、エタノール、又は酢酸が含まれる。以下において、式(I)の化合物への言及は、その化合物の特定の形、塩又は溶媒和物が指定されていなければ化合物の任意の物理的形への言及である。
【００７２】
式(I)の化合物の医薬的に許容される塩を調製する方法は、当技術分野において一般に行われている。例えば、Burger's Medicinal Chemistry And Drug Discovery、第5版、1巻:Principles And Practiceを参照のこと。
【００７３】
式(I)の本発明の化合物は結晶形態でも、非晶質形態でもよい。
【００７４】
さらに、本発明の化合物の結晶形態の一部は、多形体として存在することもあり、それらのすべては、本発明の範囲内に含まれる。本発明の化合物の熱力学的に最も安定な多形形態(複数可)が特に重要である。
【００７５】
本発明の化合物の多形形態は、いくつかの通常の分析技法を用いて特徴づけ及び区別することができる。通常の分析技法には、粉末X線回折(XRPD)、赤外分光法(IR)、ラマン分光法、示差走査熱量測定(DSC)、熱重量分析(TGA)及び固体核磁気共鳴(ssNMR)が含まれるが、これらに限定されない。
【００７６】
前述のことから、本発明の範囲内に含まれるのは、式(I)の化合物及びそれらの塩の水和物、異性体及び多形形態であるということが認識される。
【００７７】
当業者に明らかなように、式(I)の化合物の調製について以下に説明する方法において、いくつかの中間体は、化合物の医薬的に許容される塩の形をしていてもよい。式(I)の化合物を調製する方法において使用されるいずれの中間体にも適用されるそれらの用語は、式(I)の化合物に関して上記に指摘したのと同じ意味を有する。そのような中間体の医薬的に許容される塩を調製する方法は当技術分野において公知であり、式(I)の化合物の医薬的に許容される塩を調製する方法と類似している。
【００７８】
一実施形態において、式(I)の化合物はTLR7及び/又はTLR8アゴニストである。本明細書において、用語「アゴニスト」は、以下に説明するHEK293アッセイにおいてTLR7及び/若しくはTLR8活性を示し、かつ/又は以下に説明するサイトカイン誘導アッセイ(Cytokine Induction Assay)においてIFN-α及び/若しくはTNF-αを誘導する化合物を指す。
【００７９】
式(I)の化合物は、対象、例えば哺乳動物、特にヒトにおける治療で有用となる。特に、式(I)の化合物は、対象、例えば哺乳動物、特にヒトにおけるTLR7及び/又はTLR8活性によって媒介される状態の処置において有用である。本明細書において、用語「処置」は、対象における状態又は疾患の症状の発生予防、対象における状態又は疾患の症状の再発予防、対象における状態又は疾患の症状の再発遅延、対象における状態又は疾患の外に現れた症状(outward symptom)の重症度又は頻度の低下、対象における状態の進行の緩徐化又は消失及び疾患又は状態の症状の部分又は完全消失を包含する。
【００８０】
本発明の化合物は、インターフェロン-α、TNF-α、IL-12及び他の免疫賦活性サイトカインを誘導する。サイトカイン誘導の振幅は、PEG化された部分の長さによって調節される。これらの化合物は、感染症及びがんの治療的又は予防的処置においてワクチン抗原に対するアジュバントとして使用されると、公知のサイトカイン誘導物質と比べて改善された活性-毒性プロファイルを有することもある。
【００８１】
TLR7及び/若しくはTLR8活性並びに/又はIFN-αによって媒介されることもある状態としては、炎症性又はアレルギー性疾患を含むがこれらに限定されない炎症、例えば喘息、アレルギー性鼻炎、過敏性肺疾患、好酸球性肺臓炎、遅延型過敏症、アテローム性動脈硬化症、膵炎、胃炎、変形性関節症、乾癬、サルコイドーシス、肺線維症、呼吸窮迫症候群、細気管支炎、慢性閉塞性肺疾患、副鼻腔炎、嚢胞性線維症、及び皮膚炎;関節リウマチ、乾癬性関節炎、全身性エリテマトーデス、シェーグレン病、強直性脊椎炎、強皮症、糖尿病、移植片対宿主病を含めて移植片拒絶反応、クローン病及び潰瘍性大腸炎を含むがこれらに限定されない炎症性腸疾患を含むがこれらに限定されない自己免疫疾患;肝炎ウイルス(例えば、B型肝炎ウイルス、C型肝炎ウイルス)、ヒト免疫不全ウイルス、パピローマウイルス、ヘルペスウイルス、呼吸器系ウイルス(例えば、インフルエンザウイルス、呼吸器多核体ウイルス、ライノウイルス、メタニューモウイルス、パラインフルエンザウイルス、SARS)、及びウエストナイルウイルスによって起こるものを含むがこれらに限定されない感染症;結核、細菌性肺炎、アスペルギルス症、ヒストプラスマ症、カンジダ症、ニューモシスチス症、ハンセン病、クラミジア、クリプトコックス症、クリプトスポリジウム症(cryptosporidosis)、トキソプラズマ症、リーシュマニア(leishmania)、マラリア、及びトリパノソーマ症を含むがこれらに限定されない、例えば細菌、真菌、又は原生動物によって起こる微生物感染症;様々ながん、特に腎細胞癌、肺がん、乳がん、結腸直腸がん、膀胱がん、メラノーマ、白血病、リンパ腫及び卵巣がんを含むがこれらに限定されない、免疫療法に応答することが知られているがんの処置;基底細胞癌;光線角化症;生殖器パピローマウイルス感染症;並びに肝再生が挙げられるが、これらに限定されない。
【００８２】
様々ながん、特に腎細胞癌、肺がん、乳がん、結腸直腸がん、膀胱がん、メラノーマ、白血病、リンパ腫及び卵巣がんを含むがこれらに限定されない、免疫療法に応答することが知られているがんの処置、基底細胞癌、光線角化症、生殖器パピローマウイルス感染症、並びに肝再生。
【００８３】
本明細書において、処置又は治療への言及が、確立した状態の予防及び処置まで広がることは当業者によって認識される。
【００８４】
本明細書に記載されているように、本発明の化合物は治療剤として有用であり得る。
【００８５】
式(I)の化合物は、対象、例えば哺乳動物、特にヒトにおけるC型肝炎ウイルス感染症の処置に有用であると考えられる。
【００８６】
式(I)の化合物は、対象、例えば哺乳動物、特にヒトにおける基底細胞癌の処置に有用であると考えられる。
【００８７】
脂質異常を処置することによって、式(I)の化合物は現在、対象、例えば哺乳動物、特にヒトにおける光線角化症の処置において有用であると考えられている。
【００８８】
式(I)の化合物は、対象、例えば哺乳動物、特にヒトにおける生殖器パピローマウイルス感染症の処置に有用である。
【００８９】
式(I)の化合物は、対象、例えば哺乳動物、特にヒトにおけるワクチンアジュバントとして有用である。
【００９０】
本発明は、C型肝炎ウイルス感染症の処置を必要とする対象、例えば哺乳動物、特にヒトにおけるその処置方法を提供する。本発明は、対象におけるC型肝炎ウイルス感染症を処置するための医薬を調製するための式(I)の化合物の使用も提供する。一実施形態において、式(I)の化合物は、4-アミノ-1-[2-(1,2-ジパルミトイル-sn-グリセロ-3-トリエチレングリコール-ホスホ)エチル]-2-n-ブチル-1H-イミダゾ[4,5-c]キノリン又はその医薬的に許容される塩である。別の実施形態において、式(I)の化合物は、4-アミノ-1-[2-(1,2-ジパルミトイル-sn-グリセロ-3-ヘキサエチレングリコール-ホスホ)エチル]-2-n-ブチル-1H-イミダゾ[4,5-c]キノリン又はその医薬的に許容される塩である。
【００９１】
本発明は、基底細胞癌の処置を必要とする対象、例えば哺乳動物、特にヒトにおけるその処置方法を提供する。本発明は、対象における基底細胞癌を処置するための医薬を調製するための式(I)の化合物の使用も提供する。一実施形態において、式(I)の化合物は、4-アミノ-1-[2-(1,2-ジパルミトイル-sn-グリセロ-3-トリエチレングリコール-ホスホ)エチル]-2-n-ブチル-1H-イミダゾ[4,5-c]キノリン又はその医薬的に許容される塩である。別の実施形態において、式(I)の化合物は、4-アミノ-1-[2-(1,2-ジパルミトイル-sn-グリセロ-3-ヘキサエチレングリコール-ホスホ)エチル]-2-n-ブチル-1H-イミダゾ[4,5-c]キノリン又はその医薬的に許容される塩である。
【００９２】
本発明は、光線角化症の処置を必要とする対象、例えば哺乳動物、特にヒトにおけるその処置方法を提供する。本発明は、対象における光線角化症を処置するための医薬を調製するための式(I)の化合物の使用も提供する。一実施形態において、式(I)の化合物は、4-アミノ-1-[2-(1,2-ジパルミトイル-sn-グリセロ-3-トリエチレングリコール-ホスホ)エチル]-2-n-ブチル-1H-イミダゾ[4,5-c]キノリン又はその医薬的に許容される塩である。別の実施形態において、式(I)の化合物は、4-アミノ-1-[2-(1,2-ジパルミトイル-sn-グリセロ-3-ヘキサエチレングリコール-ホスホ)エチル]-2-n-ブチル-1H-イミダゾ[4,5-c]キノリン又はその医薬的に許容される塩である。
【００９３】
本発明は、生殖器パピローマウイルス感染症の処置を必要とする対象、例えば哺乳動物、特にヒトにおけるその処置方法を提供する。本発明は、対象における生殖器パピローマウイルス感染症を処置するための医薬を調製するための式(I)の化合物の使用も提供する。一実施形態において、式(I)の化合物は、4-アミノ-1-[2-(1,2-ジパルミトイル-sn-グリセロ-3-トリエチレングリコール-ホスホ)エチル]-2-n-ブチル-1H-イミダゾ[4,5-c]キノリン又はその医薬的に許容される塩である。別の実施形態において、式(I)の化合物は、4-アミノ-1-[2-(1,2-ジパルミトイル-sn-グリセロ-3-ヘキサエチレングリコール-ホスホ)エチル]-2-n-ブチル-1H-イミダゾ[4,5-c]キノリン又はその医薬的に許容される塩である。
【００９４】
本発明は、式(I)の化合物をワクチンアジュバントとして必要とする対象、例えば哺乳動物、特にヒトにおけるその使用も提供する。一実施形態において、式(I)の化合物は、4-アミノ-1-[2-(1,2-ジパルミトイル-sn-グリセロ-3-トリエチレングリコール-ホスホ)エチル]-2-n-ブチル-1H-イミダゾ[4,5-c]キノリン又はその医薬的に許容される塩である。別の実施形態において、式(I)の化合物は、4-アミノ-1-[2-(1,2-ジパルミトイル-sn-グリセロ-3-ヘキサエチレングリコール-ホスホ)エチル]-2-n-ブチル-1H-イミダゾ[4,5-c]キノリン又はその医薬的に許容される塩である。
【００９５】
本発明の方法はすべて、治療上有効量の式(I)の化合物を投与するステップを含む。本明細書において、用語「治療上有効量」は、式(I)の化合物が投与される対象において記載の効果を実現するのに十分なその化合物の量を指す。したがって、ヒトにおけるTLR7及び/又はTLR8活性によって媒介される状態の処置方法で使用される式(I)の化合物の治療上有効量は、ヒトにおけるTLR7及び/又はTLR8活性によって媒介される状態の処置に十分な量である。ヒトにおけるC型肝炎ウイルス感染症の処置に用いるための式(I)の化合物の治療上有効量は、ヒトにおけるC型肝炎ウイルス感染症の処置に十分な量である。ヒトにおける基底細胞癌の処置に用いるための式(I)の化合物の治療上有効量は、ヒトにおける基底細胞癌の処置に十分な量である。ヒトにおける光線角化症の処置に用いるための式(I)の化合物の治療上有効量は、ヒトにおける光線角化症の処置に十分な量である。ヒトにおける生殖器パピローマウイルス感染症の処置に用いるための式(I)の化合物の治療上有効量は、ヒトにおける生殖器パピローマウイルス感染症の処置に十分な量である。
【００９６】
所望の治療効果又は生物学的効果を実現する必要がある式(I)の化合物の量は、いくつかの因子、例えば所期の使用、投与手段、レシピエント並びに処置中の状態又は疾患のタイプ及び重症度に依存し、最終的に担当医又は獣医の裁量である。この用量を、単一の単位用量、若しくはいくつかの独立した単位用量、又は持続注入として投与することができる。同様の投与量は、ヒトにおける他の疾患、状態の処置及び治療に適用可能になる。
【００９７】
治療に用いるには、治療上有効量の式(I)の化合物を未加工の化学物質として投与することもあり得るが、典型的には医薬組成物又は製剤の活性成分として提供する。したがって、本発明は、式(I)の化合物を含む医薬組成物をさらに提供する。医薬組成物は、1種以上の医薬的に許容される担体又は希釈剤をさらに含んでもよい。担体(複数可)及び/又は希釈剤(複数可)は、製剤の他の成分と適合性があり、それらのレシピエントに有害でないという意味で許容されるものでなければならない。特定の一実施形態において、化合物は結晶形態をとる。本発明の別の態様によれば、医薬製剤の調製方法であって、式(I)の化合物を1種以上の医薬的に許容される担体及び/又は希釈剤と混和させるステップを含む方法も提供される。
【００９８】
医薬製剤を、単位用量当たり所定量の活性成分を含有する単位用量の形で提供することができる。そのような単位は、式(I)の化合物の治療上有効量、又は複数の単位剤形を所与の時間に投与して、所望の治療上有効量が達成されるような治療上有効量の一部分を含有することができる。好ましい単位投与量製剤は、活性成分を本明細書の以上に記載する1日用量若しくはサブ用量、又はその適切な一部分を含有する製剤である。さらに、そのような医薬製剤は、製薬技術において周知の方法のいずれによっても調製することができる。
【００９９】
医薬製剤は、任意の適切な経路、例えば経口(口内頬側又は舌下を含む)、直腸内、経鼻、局所(口内頬側、舌下又は経皮を含む)、腟内又は非経口(皮下、筋肉内、静脈内又は皮内を含む)経路による投与向けに適合させることができる。そのような製剤は、製薬技術において公知の任意の方法、例えば活性成分を担体(複数可)又は賦形剤(複数可)と結合させることによって調製することができる。
【０１００】
経口投与向けに適合させた医薬製剤は、別々の単位、例えばカプセル剤若しくは錠剤、散剤若しくは顆粒剤、水性若しくは非水性液体中の溶液剤若しくは懸濁剤、食用フォーム剤若しくはホイップ剤;又は水中油型液体乳剤若しくは油中水型液体乳剤として提供することができる。
【０１０１】
例えば、錠剤又はカプセル剤の形で経口投与する場合、活性薬物成分を、医薬的に許容される経口用で無毒性の不活性担体、例えばエタノール、グリセロール、水などと組み合わせることができる。散剤は、化合物を適当な微細サイズに粉砕し、同様に粉砕した医薬用担体、例えば食用炭水化物、例えばデンプン又はマンニトールと混合することによって調製される。矯味矯臭剤、保存剤、分散剤及び着色剤も存在することができる。
【０１０２】
カプセル剤は、上記のような粉末混合物を調製し、形成されたゼラチンシースに充填することによって作製される。流動化剤及び滑沢剤、例えばコロイダルシリカ、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム又は固体ポリエチレングリコールを、充填操作の前に粉末混合物に添加することができる。カプセル剤が摂取されたときの医薬品の利用能を改善するために、崩壊剤又は可溶化剤、例えば寒天、炭酸カルシウム又は炭酸ナトリウムを添加することもできる。
【０１０３】
さらに、所望又は必要ならば、適当な結合剤、滑沢剤、崩壊剤及び着色剤も混合物に組み込むことができる。適当な結合剤には、デンプン、ゼラチン、天然糖、例えばグルコース又はβ-ラクトース、コーン甘味料、天然及び合成ゴム、例えばアカシア、トラガカント又はアルギン酸ナトリウム、カルボキシメチル-セルロース、ポリエチレングリコール、ロウなどが含まれる。これらの剤形で使用される滑沢剤には、オレイン酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、安息香酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナトリウムなどが含まれる。崩壊剤には、制限なしにデンプン、メチルセルロース、寒天、ベントナイト、キサンタンガムなどが含まれる。錠剤は、例えば粉末混合物を調製し、顆粒化又はスラッギングし、滑沢剤及び崩壊剤を添加し、プレスして錠剤にすることによって製剤化される。粉末混合物は、化合物を適当に粉砕し、上記のような希釈剤又は塩基と、場合により結合剤、例えばカルボキシメチルセルロース、アルギナート、ゼラチン、若しくはポリビニルピロリドン、溶解遅延剤、例えばパラフィン、再吸収促進剤、例えば第四級塩、及び/又は吸収剤、例えばベントナイト、カオリン若しくはリン酸二カルシウムと混合することによって調製される。粉末混合物は、結合剤、例えばシロップ、デンプンのり、アラビアゴム漿、又はセルロース系若しくはポリマー系材料の溶液で湿らせ、スクリーンを通過させることによって顆粒化することができる。顆粒化する代替策として、粉末混合物を錠剤機に通すことができ、その結果は形成不完全なスラッグであり、顆粒に分解される。ステアリン酸、ステアリン酸塩、タルク又は鉱油を添加することによって、顆粒を滑沢して、錠剤形成金型に固着するのを防止することができる。次いで、滑沢した混合物を圧縮して、錠剤にする。また、本発明の化合物を自由流動性の不活性担体と組み合わせて、顆粒化又はスラッギングステップを経ることなく直接圧縮して、錠剤にすることもできる。シェラックのシーリングコート、糖又はポリマー系材料のコーティング、及びロウのポリッシュコーティングからなる透明又は不透明な保護コーティングを形成することができる。染料をこれらのコーティングに添加して、異なる単位投与量を区別することができる。
【０１０４】
経口用流体、例えば溶液剤、シロップ剤及びエリキシル剤は、所与の量に所定量の活性成分が含まれているように投与単位の形で調製することができる。シロップ剤は、化合物を適当に矯味矯臭した水性溶液に溶解することによって調製することができ、エリキシル剤は、無毒性のアルコール性媒体の使用により調製される。懸濁剤は、化合物を無毒性媒体に分散させることによって製剤化することができる。可溶化剤及び乳化剤、例えばエトキシ化イソステアリルアルコールやポリオキシエチレンソルビトールエーテル、保存剤、フレーバー添加剤、例えばハッカ油、あるいは天然甘味料又はサッカリン若しくは他の人工甘味料なども添加することができる。
【０１０５】
適切な場合に、経口投与用の投与単位製剤をマイクロカプセル化することができる。製剤は、例えば微粒子材料をポリマー、ロウなどで被覆又は包埋することによって放出を延長又は持続するように調製することができる。
【０１０６】
式(I)の化合物は、リポソーム送達システム、例えば小単層小胞、大単層小胞及び多層小胞の形で投与することもできる。リポソームは、様々な脂質、例えばコレステロール、ステアリルアミン又はリン脂質、例えばホスファチジルコリンから形成することができる。
【０１０７】
式(I)の化合物は、ナノ粒子送達システム、例えば固体脂質ナノ粒子又はマイクロスフェアの形で投与することもできる。
【０１０８】
式(I)の化合物は、エマルション送達システム、例えば水中油型エマルションとして投与することもできる。
【０１０９】
式(I)の化合物は、モノクローナル抗体を個々の担体として使用し、化合物分子をカップリングさせることによって送達することもできる。化合物を、標的指向性薬物担体としての可溶性ポリマーとカップリングさせてもよい。そのようなポリマーとしては、ポリビニルピロリドン、ピランコポリマー、ポリヒドロキシプロピルメタクリルアミドフェノール、ポリヒドロキシエチルアスパルトアミドフェノール、又はパルミトイル残基で置換されているポリエチレンオキシドポリリシンを含むことができる。さらに、薬物の調節放出を達成する際に有用となる生分解性ポリマーの一群、例えばポリ乳酸、ポリε-カプロラクトン、ポリヒドロキシ酪酸、ポリオルトエステル、ポリアセタール、ポリジヒドロピラン、ポリシアノアクリラート及びヒドロゲルの架橋又は両親媒性ブロックコポリマーに化合物をカップリングさせてもよい。
【０１１０】
経皮投与向けに適合させた医薬組成物は、レシピエントの表皮との密接な接触を長時間保つように意図した別々の貼付剤として提供することができる。例えば、1986 Pharmaceutical Research 3:318に概説されているイオントフォレシスにより、活性成分を貼付剤から送達することができる。
【０１１１】
局所投与向けに適合させた医薬組成物は、軟膏剤、クリーム剤、懸濁剤、ローション剤、粉末剤、溶液剤、ペースト剤、ゲル剤、スプレー剤、エアゾール剤又は油剤として製剤化することができる。
【０１１２】
眼又は他の外部組織、例えば口や皮膚の処置には、組成物が好ましくは局所軟膏剤又はクリーム剤として適用される。軟膏剤の形で製剤化するとき、活性成分をパラフィン性又は水混和性軟膏基剤と使用することができる。あるいは、活性成分を水中油型クリーム基剤又は油中水型基剤と共に、クリーム剤の形で製剤化することができる。
【０１１３】
眼局所投与向けに適合させた医薬組成物には、活性成分が適当な担体、特に水性溶媒に溶解又は懸濁している点眼剤が含まれる。
【０１１４】
口の局所投与向けに適合させた医薬組成物には、ロゼンジ剤、香錠及び洗口剤が含まれる。
【０１１５】
直腸投与向けに適合させた医薬組成物は、坐剤又は浣腸剤として提供することができる。
【０１１６】
担体が固体である、経鼻投与向けに適合させた医薬組成物には、例えば約20ミクロン〜約500ミクロンの範囲の粒径を有する粗粉末が含まれ、鼻でかぐ形で、すなわち鼻に接近して保持された粉末剤の容器から鼻道を経由した急速吸入によって投与される。担体が液体である、鼻スプレー剤又は点鼻剤として投与するのに適した製剤には、活性成分の水性又は油溶液が含まれる。
【０１１７】
吸入投与向けに適合させた医薬組成物には、様々なタイプの定量加圧式エアゾール装置、ネブライザー又はインサフレーターによって発生させることができる微粒子ダスト又はミストが含まれる。
【０１１８】
腟内投与向けに適合させた医薬組成物は、ペッサリー剤、タンポン剤、クリーム剤、ゲル剤、ペースト剤、フォーム剤又はスプレー製剤として提供することができる。
【０１１９】
非経口投与向けに適合させた医薬組成物には、抗酸化剤、緩衝剤、静菌剤、及び製剤を所期のレシピエントの血液と等張にする溶質を含有することができる水性及び非水性無菌注射液、並びに懸濁化剤及び粘稠化剤を含むことができる水性及び非水性無菌懸濁剤が含まれる。製剤は、単位用量又は複数用量容器、例えばシールアンプル及びバイアルで提供することができ、使用直前に無菌液体担体、例えば注射用水を添加するだけですむフリーズドライ(凍結乾燥)状態で貯蔵することができる。即時注射液及び懸濁液は、無菌粉末剤、顆粒剤及び錠剤から調製することができる。
【０１２０】
特に以上に記載の成分以外に、組成物は、該当する製剤のタイプを考慮して、当技術分野において通常の他の物質を含むことができ、例えば経口投与に適したものは、矯味矯臭剤を含むことができると理解されたい。
【０１２１】
上記の処置方法及び使用において、式(I)の化合物を単独で、1個以上の他の式(I)の化合物と組み合わせて、又は他の治療剤と組み合わせて使用することができる。したがって、本発明は、1種以上の治療剤をさらに含む医薬組成物も包含する。一実施形態において、医薬組成物はワクチンをさらに含む。他の治療剤の例としては、TLR3アゴニスト、TLR4アゴニスト、又は他の先天性免疫受容体アゴニスト、例えばヌクレオチドオリゴマー化領域(NOD)アゴニスト、レチノイン酸誘導型遺伝子(RIG)アゴニスト及びインターフェロン遺伝子刺激因子(STING)アゴニストが挙げられるが、これらに限定されない。式(I)の化合物は、さらに金属塩、例えばアルミニウム塩と共に使用することができる。
【０１２２】
これらの組合せを使用する方法及び使用は、独立した又は組み合わせた医薬組成物において、式(I)の化合物及び別の治療剤の同時投与を含んでもよい。同じ組成物において組み合わせるとき、各化合物は安定であり、互いに対してまた組成物の他の成分に対して適合性でなければならず、投与するために製剤化することができることを理解されたい。別々に製剤化するとき、それらを、当技術分野においてそのような化合物で公知のように、好都合な任意の製剤で提供することができる。
【０１２３】
式(I)の化合物を別の治療剤と組み合わせて使用するとき、各化合物の用量は、化合物を単独で使用するときの用量と異なることがある。適切な用量は、当業者によって容易に理解される。式(I)の化合物(複数可)及び他の治療上活性な物質(複数可)の適切な用量、並びに相対的な投与時期は、所望の組合せによる治療効果を実現するために選択され、担当臨床医の専門知識及び裁量の範囲内である。
【０１２４】
本発明の化合物は、有機化学の適当な任意の方法に従って作製することができる。
【０１２５】
さらに、保護基を導入した後に、反応を行い、その後除去することによって、いくつかの反応ステップを最も効率的に行うことができることは、当業者に明らかとなる。保護基の選択及びそれらの導入及び除去の一般技法は、当業者の技術の範囲内である。包括的な環構造で表されているいくつかの環系は、保護基を使用して、望ましくない副反応が起こる可能性を最小限にする必要があるということが当業者によって理解される。保護基は、文献に記載されている方法によって容易に導入することができ、必要でなくなれば同様に除去することができる。
【０１２６】
一方法に従って、以下のスキーム1に示す方法を使用して、式(I)の化合物を調製することができる。
【０１２７】
【化１３】
2019500360.tif 000015
式中、
PGはヒドロキシル保護に適した保護基であり、シアノエチル、メチル、エチル、ベンジル及びアリル基を含むがこれらに限定されず、
Rは、
【０１２８】
【化１４】
2019500360.tif 000016
であり、
R'は、
【０１２９】
【化１５】
2019500360.tif 000017
であり、
他の変数はすべて、式(I)について上記に定義した通りである。
【０１３０】
一般に、スキーム1に示す式(I)の化合物を調製する方法は、
a)式(III)の化合物を式(V)の化合物と反応させて、式(VI)の化合物を調製するステップ、
b)式(VI)の化合物を式(VII)の化合物と反応させて、式(IX)の化合物を調製するステップ、
c)式(IX)の化合物を酸化し、ヒドロキシル保護基を除去して、式(I)の化合物を得るステップ、
d)式(I)の化合物をその医薬的に許容される塩に場合により変換するステップ、
e)式(I)の化合物を別の式(I)の化合物に場合により変換するステップ
を含む。
【０１３１】
【化１６】
2019500360.tif 000018
式中、
R1は、H、C1〜6アルキル、C1〜6アルキルアミノ、C1〜6アルコキシ、C3〜6シクロアルキルC1〜6アルキル、C3〜6シクロアルキルC1〜6アルキルアミノ、C3〜6シクロアルキルC1〜6アルコキシ、C1〜6アルコキシC1〜6アルキル、C1〜6アルコキシC1〜6アルキルアミノ及びC1〜6アルコキシC1〜6アルコキシから選択され、ここで、C1〜6アルキル、C1〜6アルキルアミノ、C1〜6アルコキシ、C3〜6シクロアルキルC1〜6アルキル、C3〜6シクロアルキルC1〜6アルキルアミノ、C3〜6シクロアルキルC1〜6アルコキシ、C1〜6アルコキシC1〜6アルキル、C1〜6アルコキシC1〜6アルキルアミノ又はC1〜6アルコキシC1〜6アルコキシは分枝状又は非分枝状であり、ヒドロキシル、アミノ、チオ、ヒドラジノ、ヒドラジド、アジド、アセチレニル、カルボキシル、又はマレイミド基で場合により末端が置換されており、
Zは、C2〜C6アルキル及びC2〜C6アルケニルから選択され、ここで、C2〜C6アルキル若しくはC2〜C6アルケニルは非置換であるか、又は-(O-C2〜C6アルキル)1〜6-で末端が置換されており、
XはO又はSであり、
R2は、H、あるいは直鎖状若しくは分枝状の、場合により不飽和のC4〜C24アルキル、又は直鎖状若しくは分枝状の、場合により不飽和のC4〜C24アシルであり、
R3は、直鎖状若しくは分枝状の、場合により不飽和のC4〜C24アルキル、又は直鎖状若しくは分枝状の、場合により不飽和のC4〜C24アシルであり、
nは、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19又は20である。
【０１３２】
別の態様において、本発明は、式(I)の化合物を調製する別の方法を提供する。本方法は、
a)式(VII)の化合物を式(X)のH-ホスホナート化合物と反応させて、式(I)の化合物を形成するステップ、
b)式(I)の化合物をその医薬的に許容される塩に場合により変換するステップ、
c)式(I)の化合物を別の式(I)の化合物に場合により変換するステップ
を含む。
【０１３３】
一実施形態において、式(I)の化合物は、スキーム2に従って調製することができるが、ステップa)は、Crossmanら、J Chem Soc, Perkin Trans I、1997年、2769頁、Westerduinら、Tet Lett、1986年、15巻、6271頁;又はNikolaevら、Carbohydr Res、1990年、204巻、65頁に記載されている方法を利用する。
【０１３４】
本明細書に含まれているこれらの実施例及び開示内容に基づいて、当業者は、式(I)の化合物を他の式(I)の化合物又はそれらの塩に容易に変換することができる。
【０１３５】
以下の実施例は、説明するためのものにすぎず、決して本発明の範囲を限定しようとするものではなく、本発明は、特許請求の範囲によって画定される。
【実施例】
【０１３６】
実施例において、以下の用語は指定された意味を有する。
eq=当量
ES TOF-MS=エレクトロスプレー飛行時間型質量分析
h=時間
H=水素原子
Hz=ヘルツ;mHz=メガヘルツ
LC-MS:液体クロマトグラフィー-質量分析
min=分
ml=ミリリットル
M=モル
NMR=核磁気共鳴
rt=室温
TEA=トリエチルアミン
μg=マイクログラム
μl=マイクロリットル
v=体積
【０１３７】
[実施例1]
式(I)の化合物の一般合成手順
【０１３８】
【化１７】
2019500360.tif 000019
イミダゾキノリンモノホスファートグリセリド(I)は、
a)当技術分野において公知である方法に従って、式(III)の化合物(当技術分野において公知である方法に従って調製、Bioorg Med Chem、2013年、21巻、3066頁;ChemBioChem、2012年、13巻、2331頁;Chem Eur J、2006年、6巻、111頁)を式(II)のホスホルジアミダイト試薬(市販品)と反応させ、
b)当技術分野において公知である方法に従って、式(IV)の化合物(単離していない)を式(VII)のイミダゾキノリン(Gersterら、J. Med. Chem.、2005年、48巻、3481頁;Izumiら、Bioorg Med Chem、2003年、11巻、2541頁)とin-situで反応させ、
c)当技術分野において公知である方法に従って、式(VIII)の化合物を酸化し、保護基を除去して、式(I)の化合物を生成する
ことによって調製した。
【０１３９】
式(III)の化合物(2.0当量)及び式(II)の2-シアノエチルN,N,N',N'-テトライソプロピルホスホルジアミダイト(2.1当量)を室温で無水塩化メチレン(0.4M)に溶解した。1H-テトラゾール(2.1当量)を4回に分け、20分かけて添加し、反応混合物を室温で1時間撹拌した。反応混合物を0℃に冷却し、式(VII)のイミダゾキノリン(1.0当量)及びイミダゾリウムトリフラート(1.5当量)を添加し、反応混合物を室温まで温まらせた。反応は、通常室温で1時間後に完了した。得られた式(VIII)のホスファイトを(真空下で濃縮することによって体積を低減した後)この段階で精製し、又は続いてt-ブチルヒドロペルオキシド(1.5当量)を反応混合物に添加し、室温で30分間撹拌することによって酸化することができる。酸化が完了した後、反応混合物を真空下で濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィーで精製した。得られた保護ホスホトリエステルをアセトニトリルに溶解した(0.06M)。トリエチルアミン(アセトニトリル:TEA 1:0.35(体積:体積))を添加し、反応混合物を室温で6〜18時間撹拌した。脱保反応が完了すると、反応混合物をブフナーフィルターでろ過し、単離した固体をアセトニトリルですすぎ、高真空下で乾燥し、又はシリカゲルクロマトグラフィーで精製した。
【０１４０】
[実施例2]
4-アミノ-1-[2-(1,2-ジパルミトイル-sn-グリセロ-3-エチレングリコール-ホスホ)エチル]-2-n-ブチル-1H-イミダゾ[4,5-c]キノリンの合成。HEK293の結果の指定化合物2。
【０１４１】
【化１８】
2019500360.tif 000020
実施例1に記載されている一般手順に従って、4-アミノ-1-[2-(1,2-ジパルミトイル-sn-グリセロ-3-エチレングリコール-ホスホ)エチル]-2-n-ブチル-1H-イミダゾ[4,5-c]キノリンを収率66%で調製した。1H NMR (400 MHz, CDCl3/CD3OD) δ 8.19 (bs, 1H), 7.38(s, 1H), 7.13 (bs, 1H), 6.93 (bs, 1H), 5.24 (s, 1H), 4.83 (bs, 2H), 4.58 (bs, 2H), 4.39 (dd, 1H), 4.17 (m, 1H), 4.02 (dd, 2H), 3.68 (m, 4H), 2.98 (bs, 2H), 2.31 (dd, 4H), 1.93 (bs, 2H), 1.58 (m, 2H), 1.25 (m, 48H), 1.03 (t, 3H), 0.86 (t, 6H); 陰イオンES TOF-MS [M-H]-の計算値957.6445, 実測値957.6414.
【０１４２】
[実施例3]
4-アミノ-1-[2-(1,2-ジパルミトイル-sn-グリセロ-3-トリエチレングリコール-ホスホ)エチル]-2-n-ブチル-1H-イミダゾ[4,5-c]キノリンの合成。HEK293の結果の指定化合物3。
【０１４３】
【化１９】
2019500360.tif 000021
実施例1に記載されている一般手順に従って、4-アミノ-1-[2-(1,2-ジパルミトイル-sn-グリセロ-3-トリエチレングリコール-ホスホ)エチル]-2-n-ブチル-1H-イミダゾ[4,5-c]キノリンを収率62%で調製した。1H NMR (400 MHz, CDCl3/CD3OD) δ8.23 (d, 1H), 7.42 (t, 1H), 7.20 (t, 1H), 6.97 (t, 1H), 5.23 (m, 1H), 4.74 (bd, 2H), 4.63 (bd, 2H), 4.34 (dd, 1H), 4.15 (dd, 1H), 4.05 (m, 2H), 3.58-3.71 (m, 12H), 3.04 (bt, 2H), 2.31 (dd, 4H), 1.92 (m, 2H), 1.52-1.59 (m, 6H), 1.26 (m, 48H), 1.04 (t, 3H), 0.88 (t, 6H); 陰イオンES TOF-MS [M-H]-の計算値1045.6970, 実測値1045.6855.
【０１４４】
[実施例4]
4-アミノ-1-[2-(1,2-ジパルミトイル-sn-グリセロ-3-ヘキサエチレングリコール-ホスホ)エチル]-2-n-ブチル-1H-イミダゾ[4,5-c]キノリンの合成。HEK293の結果の指定化合物4。
【０１４５】
【化２０】
2019500360.tif 000022
実施例1に記載されている一般手順に従って、4-アミノ-1-[2-(1,2-ジパルミトイル-sn-グリセロ-3-ヘキサエチレングリコール-ホスホ)エチル]-2-n-ブチル-1H-イミダゾ[4,5-c]キノリンを収率76%で調製した。1H NMR (400 MHz, CDCl3/CD3OD) δ8.18 (bs, 1H), 7.36 (t, 1H), 7.18 (bs, 1H), 6.97 (bs, 1H), 5.20 (m, 1H), 4.67 (bs, 2H), 4.33 (dd, 1H), 4.15 (dd, 1H), 4.06 (m, 2H), 3.57-3.71 (m, 26H), 3.01 (bs, 2H), 2.31 (dd, 4H), 1.93 (m, 2H), 1.52-1.61 (m, 6H), 1.25 (m, 48 H), 1.04 (t, 3H), 0.87 (t, 6H); 陰イオンES TOF-MS [M-H]-の計算値1177.7756, 実測値1177.9063.
【０１４６】
[実施例5]
4-アミノ-1-[2-(1,2-ジパルミトイル-sn-グリセロ-3-ノナエチレングリコール-ホスホ)エチル]-2-n-ブチル-1H-イミダゾ[4,5-c]キノリンの合成。HEK293の結果の指定化合物5。
【０１４７】
【化２１】
2019500360.tif 000023
実施例1に記載されている一般手順に従って、4-アミノ-1-[2-(1,2-ジパルミトイル-sn-グリセロ-3-ノナエチレングリコール-ホスホ)エチル]-2-n-ブチル-1H-イミダゾ[4,5-c]キノリンを収率53%で調製した。1H NMR (400 MHz, CDCl3/CD3OD) δ8.19 (bs, 1H), 7.40 (t, 1H), 7.19 (bs, 1H), 6.96 (bs, 1H), 5.23 (m, 1H), 4.50-4.80 (bm, 4H), 4.35(dd, 1H), 4.16 (dd, 1H), 4.03 (bs, 2H), 3.58-3.71 (m, 33H), 3.03 (bs, 2H), 2.84 (m, 2H), 2.30 (dd, 4H), 1.93 (m, 2H), 1.52-1.63 (m, 6H), 1.25 (m, 48H), 1.04 (t, 3H), 0.88 (t, 6H); 陰イオンES TOF-MS [M-H]-の計算値1309.8543, 実測値1310.0106.
【０１４８】
[実施例6]
HEK293結合アッセイ
HEK293結合アッセイを使用して、TLRアゴニスト活性の決定を行った。このアッセイにより、試験化合物のTLR7及びTLR8選択性及び有効性を測定する。ヒトTLR7又はTLR8及びNFκB応答性分泌型胚性アルカリホスファターゼ(SEAP)レポーター遺伝子を発現するHEK293細胞は、InvivoGen(San Diego、CA)から入手した。これらの細胞を、ダルベッコ変法イーグル培地(DMEM)(Invitrogen、Grand Island、NY)、10%ウシ胎仔血清(FBS)(Sigma、St. Louis、Missouri)及び選択抗生物質(Invitrogen、及びInvivogen)の培養培地中に維持した。ヒトTLR7(hTLR7)又はヒトTLR8(hTLR8)を安定的にトランスフェクトされたHEK293を化合物の水性製剤で24時間刺激し、比色SEAP検出キットQuantBlue(InvivoGen)を使用して、培養上清のNFκB活性化を分析した。
【０１４９】
化合物2、3、4及び5は上記の通りである。化合物1は4-アミノ-1-[2-(1,2-ジパルミトイル-sn-グリセロ-3-ホスホ)エチル]-2-n-ブチル-1H-イミダゾ[4,5-c]キノリンである。PEG化された部分を化合物1に導入したとき、それはTLR7/8活性及びサイトカイン誘導の増加を示すPEG化された誘導体ではないが含める。HEK293結合アッセイの結果を図1に示し、表1にまとめる。
【０１５０】
【表１】
2019500360.tif 000024
【０１５１】
[実施例7]
サイトカイン誘導を測定するアッセイ
PEG化された類似体を、ヒト末梢血単核細胞(hPBMC)におけるサイトカイン誘導について評価した。
【０１５２】
hPBMCの調製
健常ドナー由来の新鮮な血液から、Ficoll勾配分離によりヒト初代PBMCを単離し、96ウェル組織培養プレート(RPMI-1640+10%FBS)に0.5×106細胞/ウェルで播種した。hPBMCを、RPMI-1640培養培地(Invitrogen、Grand Island、NY)、抗生物質(Invitrogen)及び10%FBS(Sigma)で維持した。
【０１５３】
インターフェロン-α及びTNF-αのインキュベーション及びアッセイ
hPBMCを化合物1〜5の水性製剤で24時間刺激した。培養上清について、マルチプレックスキット(R&D Systems、Minneapolis、MNのFluoroKineマルチプレックスキット)を使用してTNF-α誘導を分析し、ヒトIFN-α  VeriKine ELISAキット(Pestka Biomedical Laboratories, Inc.、Piscataway、NJ)を使用してIFN-α誘導を分析した。hPBMCのTNF-α誘導を図2に示す。hPBMCのIFN-α誘導を図3に示す。
【図１Ａ】
2019500360.tif 000036
【図１Ｂ】
2019500360.tif 000037
【図２】
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【図３】
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【国際調査報告】
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