(57)【要約】本発明は、チェックポイントインヒビターおよびグルココルチコイドレセプターモジュレーターを組み合わせて癌、例えばチェックポイントインヒビター感受性癌を処置する方法を提供する。糖質コルチコイドグルココルチコイドレセプターモジュレーターは、チェックポイントインヒビターの活性を強化するために有効な量で、腫瘍負荷を患っている患者に投与される。チェックポイントインヒビターおよびＳＧＲＭの併用療法は、チェックポイントインヒビターのみによる処置と比較して優れた腫瘍負荷減少を提供する。
2019507159.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
腫瘍負荷を持つ患者を処置するための方法であって、治療量のチェックポイントインヒビターおよび選択的なグルココルチコイドレセプターモジュレーター（ＳＧＲＭ）を前記患者に投与することを含み、前記チェックポイントインヒビターの活性を強化して前記患者の前記腫瘍負荷を減少させるために有効な量で、前記ＳＧＲＭを投与する、方法。
【請求項２】
前記腫瘍負荷が、チェックポイントインヒビター感受性腫瘍の存在によるものである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記チェックポイントインヒビターが、ＰＤ−１に対して有効な抗体である、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記チェックポイントインヒビターが、ＣＴＬＡ−４に対して有効な抗体である、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記チェックポイントインヒビターが、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２に対して有効な抗体である、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記チェックポイントインヒビターが小分子非タンパク質化合物である、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記ＳＧＲＭがミフェプリストンである、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記ＳＧＲＭが、非ステロイド骨格を有する化合物である、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
前記ＳＧＲＭが縮合アザデカリンである、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
前記ＳＧＲＭがＣＯＲＴ１２５１３４
【化１３】
2019507159.tif 000015
である、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
前記ＳＧＲＭがＣＯＲＴ１２５２８１
【化１４】
2019507159.tif 000016
である、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
前記癌がグルココルチコイドレセプター（ＧＲ＋）を発現する、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
前記癌がＧＲ＋癌であり、前記癌が、乳癌、前立腺癌、黒色腫、肉腫、腎細胞癌、頭頸部癌、肝細胞癌、神経膠芽細胞腫、子宮頸癌、神経内分泌癌、膀胱癌、前立腺癌、食道癌、中皮腫、肺癌、卵巣癌、膵臓癌、胆嚢癌、胃癌、子宮内膜癌および結腸癌からなる群より選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
前記ＳＧＲＭがＣＯＲＴ１２５２８１であり、前記チェックポイントインヒビターが、ＰＤ−１に対して有効な抗体である、請求項１に記載の方法。
【請求項１５】
前記ＳＧＲＭがＣＯＲＴ１２５１３４であり、前記チェックポイントインヒビターが、ＰＤ−１に対して有効な抗体である、請求項１に記載の方法。
【請求項１６】
前記ＳＧＲＭがミフェプリストンであり、前記チェックポイントインヒビターが、ＰＤ−１に対して有効な抗体である、請求項１に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願への相互参照
本出願は、２０１６年３月１日に出願された米国仮特許出願番号第６２／３０２，１０６号に基づく利益および優先権を主張し、そして２０１６年４月８日に出願された米国仮特許出願番号第６２／３２０，２７６号に基づく利益および優先権を主張しており、この両方の仮特許出願は、それらの全体が本明細書によって本明細書中に援用される。
【背景技術】
【０００２】
背景
癌は、異常細胞の制御されない成長および拡散を特徴とする一群の様々な疾患である。癌細胞では、細胞成長の制御および制限におけるこれらの調節機構の効果が機能しないかまたは回避されるように、細胞分裂およびまたは細胞コミュニケーションを制御する経路が変化している。連続的な一連の変異および自然選択を介して、一般には単一の変異細胞に由来する一群の異常細胞は、他の細胞に対する選択的な成長優位性を提供するさらなる変異を蓄積して、細胞塊において優勢な細胞型に進化する。癌細胞がさらに進化するにつれて、一部は局所侵襲性になり、次いで、転移して元の癌細胞組織以外の組織に定着する。この特性および腫瘍細胞集団の不均一性により、癌は、処置および根絶することが特に困難な疾患になる。
【０００３】
伝統的な癌治療は、癌細胞の高い増殖能力およびＤＮＡ損傷に対するそれらの高い感受性を利用する：電離放射線（γ線、Ｘ線を含む）および細胞毒性剤、例えばブレオマイシン、シスプラチン、ビンブラスチン、シクロホスファミド、５’−フルオロウラシルおよびメトトレキセートは、ＤＮＡの一般損傷および染色体構造の不安定化（これらは、最終的には、癌細胞の破壊につながる）に依拠する。これらの処置は、細胞周期チェックポイントの欠陥を有する癌型に特に有効であり、細胞分裂を行う前に損傷ＤＮＡを修復するこれらの細胞の能力を制限する。しかしながら、これらの処置の非選択的性質は、多くの場合、重度の消耗性副作用をもたらす。これらの薬物の全身使用は、通常、健常器官および組織の損傷をもたらし得、患者の長期的な健康を損ない得る。
【０００４】
最近、免疫チェックポイントシグナル伝達経路をターゲティングする免疫療法が癌の処置に有効であることが示されている。これらの経路は免疫応答を抑制し、自己寛容の維持、末梢組織における生理学的免疫応答の持続時間および振幅のモジュレート、ならびに側副組織損傷の最小化に重要である。腫瘍細胞は、免疫チェックポイントシグナル伝達経路を活性化して、腫瘍組織に対する免疫応答の有効性を減少させ得ると考えられている。これらの免疫チェックポイントシグナル伝達経路の多くは、免疫応答に関与する細胞（例えば、Ｔ細胞）の表面上に存在するチェックポイントタンパク質とそれらのリガンドとの間の相互作用によって開始され、それにより、それらは、薬剤によって容易に遮断され得るか、または組換え型のチェックポイントタンパク質もしくはリガンドもしくはレセプターによってモジュレートされ得る。チェックポイントタンパク質によって誘導される免疫抑制経路を遮断する薬剤は、一般に、チェックポイントインヒビターと称され、いくつかが市販されている。チェックポイントタンパク質ＣＴＬＡ４による免疫抑制経路を遮断する細胞傷害性Ｔリンパ球関連抗原４（ＣＴＬＡ４）抗体は、米国食品医薬品局（ＦＤＡ）の承認を得るためのこのクラスの最初の免疫療法薬であった。プログラム細胞死タンパク質１（ＰＤ−１）などのさらなる免疫チェックポイントタンパク質の遮断薬を用いた臨床所見は、永続的な臨床応答を生成する可能性を伴う抗腫瘍免疫を増強する広範かつ多様な機会を示している。
【０００５】
グルココルチコイドレセプター（ＧＲ）媒介性シグナル伝達経路は、免疫系の異なる成分が関与する動的な生物学的効果を有し、それらのインビボ効果は予測不可能である。例えば、グルココルチコイドは、免疫抑制効果（例えば、炎症促進性サイトカインの抑制、抗炎症性サイトカインの促進、樹状細胞の阻害、ナチュラルキラー細胞の抑制、Ｔ制御性細胞の促進およびＴ細胞アポトーシスの誘導）および免疫増強効果の両方を有することが報告されている。Ｈｉｎｒｉｃｈｓ  Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．２００５：２８（６）：５１７−５２４を参照のこと。同様に、癌細胞に対するＧＲ媒介性シグナル伝達経路の効果も理解しづらい。一方、ＧＲシグナル伝達経路の活性化は、特定の種類の癌細胞、例えば悪性リンパ性癌におけるアポトーシスを誘導すると考えられている。Ｓｃｈｌｏｓｓｍａｃｈｅｒ，Ｊ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏ．（２０１１）を参照のこと。他方、ＧＲのシグナル伝達経路を遮断する薬剤は、癌細胞の殺傷に関して化学療法を強化し得ることも報告されている。米国特許第９１４９４８５号を参照のこと。本発明は、チェックポイントシグナル伝達経路およびＧＲシグナル伝達経路の両方をターゲティングする新規併用療法を使用して、腫瘍負荷を患っている患者を処置する。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】米国特許第９１４９４８５号明細書
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Ｈｉｎｒｉｃｈｓ  Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．２００５：２８（６）：５１７−５２４
【非特許文献２】Ｓｃｈｌｏｓｓｍａｃｈｅｒ，Ｊ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏ．（２０１１）
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００８】
概要
本明細書中に開示される癌処置方法は、チェックポイントインヒビターの活性を強化するために有効な量で、治療量のチェックポイントインヒビターおよび選択的なグルココルチコイドレセプターモジュレーター（ＳＧＲＭ）を、腫瘍負荷を患っている患者に投与することを含む。チェックポイントインヒビターおよびＳＧＲＭの併用療法は、チェックポイントインヒビターのみによる処置と比較して優れた腫瘍負荷減少を提供する。
【０００９】
いくつかの場合において、チェックポイントインヒビターは、少なくとも１つのチェックポイントタンパク質、例えばＰＤ−１、ＣＴＬＡ−４、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２に対する抗体である。いくつかの場合において、チェックポイントインヒビターは、ＰＤ−１、ＣＴＬＡ−４、ＰＤ−Ｌ１およびＰＤ−Ｌ２の群から選択されるチェックポイントタンパク質の２つまたはそれよりも多くに対して有効な抗体である。
【００１０】
いくつかの場合において、チェックポイントインヒビターは、少なくとも１つのチェックポイントタンパク質を阻害する小分子非タンパク質化合物である。１つの実施形態において、チェックポイントインヒビターは、ＰＤ−１、ＣＴＬＡ−４、ＰＤ−Ｌ１およびＰＤ−Ｌ２からなる群より選択されるチェックポイントタンパク質を阻害する小分子非タンパク質化合物である。
【００１１】
１つの実施形態において、ＳＧＲＭは、ミフェプリストンである。いくつかの場合において、ＳＧＲＭは、非ステロイド骨格を有する化合物である。いくつかの場合において、ＳＧＲＭは、縮合アザデカリンである。
【００１２】
いくつかの場合において、ＳＧＲＭは、以下の構造：
【化１】
2019507159.tif 000003
を有するＣＯＲＴ１２５１３４、すなわち（Ｒ）−（１−（４−フルオロフェニル）−６−（（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）スルホニル）−４，４ａ，５，６，７，８−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｇ］イソキノリン−４ａ−イル）（４−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）メタノンである。
【００１３】
いくつかの場合において、ＳＧＲＭは、ミフェプリストンである。
【００１４】
いくつかの場合において、ＳＧＲＭは、以下の構造：
【化２】
2019507159.tif 000004
を有するＣＯＲＴ１２５２８１、すなわち（（４ａＲ，８ａＳ）−１−（４−フルオロフェニル）−６−（（２−メチル−２Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）スルホニル）−４，４ａ，５，６，７，８，８ａ，９−オクタヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｇ］イソキノリン−４ａ−イル）（４−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）メタノンである。
【００１５】
１つの実施形態において、癌は、グルココルチコイドレセプター（ＧＲ＋）を発現する。
【００１６】
いくつかの場合において、癌はＧＲ＋癌であり、癌は、乳癌、前立腺癌、黒色腫、肉腫、腎細胞癌、頭頸部癌、肝細胞癌、神経膠芽細胞腫、子宮頸癌、神経内分泌癌、膀胱癌、前立腺癌、食道癌、中皮腫、肺癌、卵巣癌、膵臓癌、胆嚢癌、胃癌、子宮内膜癌および結腸癌からなる群より選択される。
【００１７】
１つの実施形態において、チェックポイントインヒビターおよびＳＧＲＭは、共投与される。好ましい実施形態において、ＳＧＲＭはＣＯＲＴ１２５１３４であり、チェックポイントインヒビターは、ＰＤ−１に対する抗体である。
【００１８】
いくつかの実施形態において、腫瘍負荷を持つ患者を処置する方法であって、チェックポイントインヒビターの活性を強化するために有効な量で、治療量のチェックポイントインヒビターおよび選択的なグルココルチコイドレセプターモジュレーター（ＳＧＲＭ）を、腫瘍負荷を患っている患者に投与することを含む方法においてチェックポイントインヒビターと組み合わせて使用するためのＳＧＲＭが本明細書中に提供される。加えて、すべての上記関連実施形態はまた、本開示のこれらの実施形態に含まれる。
【図面の簡単な説明】
【００１９】
【図１】図１は、それぞれ１）抗ＰＤ−１ビヒクル（ＰＢＳ、１０ｍｌ／ｋｇ）週２回腹腔内（ｉ．ｐ．）で処置し、ＣＯＲＴ１２５１３４ビヒクル（１０％ＤＭＳＯ、０．１％Ｔｗｅｅｎ  ８０および８９．９％ＨＰＭＣ（０．５％）、１０ｍｌ／ｋｇ）で毎日経口（ｐ．ｏ．）処置した；２）マウス抗ＰＤ−１抗体（クローンＲＰＭ１−１４、１０ｍｇ／ｋｇ）で週２回腹腔内（ｉ．ｐ．）処置した；ならびに３）マウス抗ＰＤ−１抗体（クローンＲＰＭ１−１４、１０ｍｇ／ｋｇ）で週２回腹腔内（ｉ．ｐ．）処置し、ＣＯＲＴ１２５１３４（ＳＧＲＭ）（３０ｍｇ／ｋｇ）で毎日経口処置した３つの（３）マウス群からの腫瘍成長データを示す。結果は、抗ＰＤ−１とＣＯＲＴ１２５１３４との組み合わせが、腫瘍成長の減少において、抗ＰＤ−１群およびビヒクル群の両方よりも優れていることを示している。
【図２】図２は、処置開始以来の腫瘍成長日数に対してプロットした各群マウス１０匹の平均腫瘍体積を示す。抗ＰＤ−１ビヒクルおよびＣＯＲＴ１２５２８１ビヒクルを群Ｉのマウスに投与し；マウス抗ＰＤ−１抗体を群ＩＩのマウスに投与し；マウス抗ＰＤ−１抗体およびＣＯＲＴ１２５２８１を群ＩＩＩのマウスに投与した。抗ＰＤ−１とＣＯＲＴ１２５２８１との組み合わせは、腫瘍成長の減少において、抗ＰＤ−１群およびビヒクル群の両方よりも優れている。
【図３】図３は、処置開始以来の腫瘍成長日数に対してプロットした各群マウス１０匹の平均腫瘍体積を示す。抗ＣＴＬＡ４ビヒクルおよびＣＯＲＴ１２５１３４ビヒクルを群Ｉのマウスに投与し；マウス抗ＣＴＬＡ４抗体を群ＩＩのマウスに投与し；マウス抗ＣＴＬＡ４抗体およびＣＯＲＴ１２５１３４を群ＩＩＩのマウスに投与し；マウス抗ＣＴＬＡ４抗体およびＣＯＲＴ１２５２８１を群ＩＶのマウスに投与した。抗ＣＴＬＡ４とＣＯＲＴ１２５１３４との組み合わせおよび抗ＣＴＬＡ４とＣＯＲＴ１２５２８１との組み合わせはそれぞれ、腫瘍成長の減少において、抗ＣＴＬＡ４群およびビヒクル群の両方よりも優れていた。
【発明を実施するための形態】
【００２０】
詳細な説明
Ａ．緒言
本明細書中に開示されるこの方法は、少なくとも１つのＳＧＲＭおよび少なくとも１つのチェックポイントインヒビターを投与することによって、腫瘍負荷を持つ患者を処置するために使用され得る。チェックポイントインヒビターは、単独でまたはＳＧＲＭと組み合わせて投与される場合、癌を処置するために有効な量で投与される。ＳＧＲＭは、チェックポイントシグナル伝達経路を遮断するチェックポイントインヒビターの活性を強化するために有効な量で投与される。いくつかの場合において、腫瘍負荷は、チェックポイントインヒビター感受性癌によって引き起こされる。
Ｂ．定義
【００２１】
本明細書中で使用されるとき、用語「被験体」または「患者」とは、ヒトまたは非ヒト生物のことを指す。したがって、本明細書中に記載される方法および組成物は、ヒト疾患および獣医学的疾患の両方に適用可能である。特定の実施形態において、被験体は、「患者」（すなわち、疾患または症状の医療を受けている生きたヒト）である。これは、規定の病気を有しない者であって、病状の徴候について調査されている者を含む。本発明の組成物および方法によってターゲティングされる特定の癌の既存の診断を受けた被験体が好ましい。いくつかの場合において、被験体は、１つまたはそれを超える種類の癌を同時に患っていてもよく、これらの少なくとも１つは、本発明の組成物および方法によってターゲティングされる。本明細書中に記載される組成物による処置のための好ましい癌としては、前立腺癌、腎癌腫、黒色腫、膵臓癌、子宮頸癌、卵巣癌、結腸癌、頭頸部癌、肺癌、肉腫、乳癌、肝細胞腫瘍、神経膠芽細胞腫、神経内分泌腫瘍、膀胱癌、胆嚢癌、胃癌、子宮内膜癌および中皮腫が挙げられるが、これらに限定されない。
【００２２】
本明細書中で使用されるとき、用語「腫瘍負荷」または「腫瘍量」とは、一般に、任意の所定時点における被験体の体内の癌細胞の数、腫瘍のサイズまたは癌の量のことを指す。腫瘍負荷は、例えば、腫瘍特異的遺伝子マーカーの発現を計測し、本明細書の以下に開示されるいくつかの周知の生化学的方法またはイメージング方法によって腫瘍サイズを計測することによって検出され得る。
【００２３】
用語「免疫応答」とは、例えば、リンパ球、抗原提示細胞、貪食細胞、顆粒球、および上記細胞または肝臓によって産生される可溶性高分子（抗体、サイトカインおよび補体を含む）の作用であって、侵入病原体、病原体に感染した細胞もしくは組織、癌性細胞、または自己免疫もしくは病理学的炎症の場合には正常なヒト細胞もしくは組織への選択的な損傷、それらの破壊、または人体からのそれらの排除をもたらす作用のことを指す。
【００２４】
本明細書中で使用されるとき、用語「チェックポイントインヒビター感受性癌」とは、チェックポイントインヒビターに対して反応性の癌のことを指す。そのような腫瘍を有する患者への１つまたはそれを超えるチェックポイントインヒビターの投与は、腫瘍負荷の減少または癌改善に関連する他の所望の有益な臨床転帰を引き起こすであろう。
【００２５】
本明細書中で使用されるとき、用語「有効量」または「治療量」とは、処置される疾患の少なくとも１つの症候を処置、排除または緩和するために有効な薬理学的薬剤の量のことを指す。いくつかの場合において、「治療有効量」または「有効量」とは、検出可能な治療効果または阻害効果を示すために有用な機能的薬剤または薬学的組成物の量のことを指し得る。この効果は、当該分野で公知の任意のアッセイ方法によって検出され得る。有効量は、抗腫瘍応答を引き起こすために有効な量であり得る。有効量は、レシピエント被験体において体液性免疫応答および／または細胞性免疫応答を誘発して、標的細胞の成長阻害または死をもたらすために有効な量であり得る。本開示の目的のために、チェックポイントインヒビターの治療量は、腫瘍負荷を減少させるか、または癌改善に関連する他の所望の有益な臨床転帰をもたらすであろう量である。
【００２６】
本明細書中で使用されるとき、用語「強化するために有効な量」とは、処置される疾患の少なくとも１つの症候の処置、排除または緩和において、別の治療剤の活性を増強するために有効な薬理学的薬剤の量のことを指す。別のものの活性を強化するために使用される薬剤は、疾患それ自体の症候の処置、排除または緩和において有効または非有効であり得る。いくつかの場合において、強化剤は有効ではなく、強化の効果は、治療剤のみによる処置と比較した、２つの薬剤の組み合わせによる処置に起因する症候の緩和程度の増加によって示され得る。いくつかの場合において、強化剤それ自体が症候の処置において有効であり、強化効果は、強化剤と治療剤との間の相乗効果によって示され得る。本開示の目的のために、ＳＧＲＭが、単独で投与された場合に癌の処置において有効であるかにかかわらず、ＳＧＲＭは、癌の処置においてチェックポイントインヒビターの活性を強化するための強化剤として作用する。いくつかの実施形態において、１０％〜１０００％の強化効果が達成され得る。いくつかの実施形態において、ＳＧＲＭは、腫瘍をチェックポイントインヒビターに対して感受性にする（すなわち、腫瘍負荷の減少を示すか、または別様にＳＧＲＭの非存在下においてチェックポイントインヒビターで腫瘍を処置した場合には現れないであろう他の関連臨床的利益を示す）量で投与される。
【００２７】
本明細書中で使用されるとき、用語「併用療法」とは、疾患を処置するために少なくとも２つの医薬品を被験体に投与することを指す。２つの薬剤は、処置期間の全体または一部において、同時投与され得るか、または任意の順序で逐次投与され得る。２つの薬剤は、同じまたは異なる投与レジメンにしたがって投与され得る。いくつかの場合において、一方の薬剤は、計画的レジメンにしたがって投与され、他方の薬剤は断続的に投与される。いくつかの場合において、両薬剤は断続的に投与される。いくつかの実施形態において、一方の医薬品、例えばＳＧＲＭは毎日投与され、他方の医薬品、例えばチェックポイントインヒビターは毎週または隔週投与される。
【００２８】
本明細書中で使用されるとき、用語「投与する（ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒ）」、「投与すること（ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｉｎｇ）」、「投与される（ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｅｄ）」または「投与（ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）」とは、化合物または組成物（例えば、本明細書中に記載されるもの）を被験体または患者に提供することを指す。
【００２９】
本明細書中で使用されるとき、用語「共投与」とは、２つの組成物を同時にまたは互いに短時間内に、例えば互いに約０．５、１、２、４、６、８、１０、１２、１６、２０または２４時間以内に投与することを指す。
【００３０】
本明細書中で使用されるとき、用語「化合物」とは、ユニークで特定可能な化学構造の分子部分を表すために使用される。分子部分（「化合物」）は、他の分子と会合していない遊離種形態で存在し得る。化合物はまた、それが他の分子と会合しているより大きな凝集体の一部として存在し得るが、それにもかかわらず、その化学的同一性を保持する。規定の化学構造（「化合物」）の分子部分が溶媒の分子と会合している溶媒和物は、そのような会合形態の例である。水和物は、会合溶媒が水である溶媒和物である。「化合物」の記述は、それが遊離形態または会合形態で存在するかにかかわらず、（記述されている構造の）分子部分それ自体のことを指す。
【００３１】
本明細書中で使用されるとき、用語「小分子非タンパク質化合物」とは、代表的には９００ダルトン未満の分子量を有する低分子量有機化合物のことを指す
【００３２】
本明細書中で使用されるとき、用語「薬学的に許容され得るキャリア」とは、薬学的投与に適合する任意のすべての溶媒、分散媒、コーティング剤、抗菌剤および抗真菌剤、等張剤ならびに吸収遅延剤などを含むことを意図する。薬学的に活性な物質のためのそのような媒体および薬剤の使用は、当該分野で周知である。任意の従来の媒体または薬剤が活性化合物と不適合である場合を除いて、組成物におけるそれらの使用が企図される。補助活性化合物も組成物に組み込まれ得る。
【００３３】
本明細書中で使用されるとき、用語「チェックポイントタンパク質」とは、特定の種類の細胞、例えばＴ細胞および特定の腫瘍細胞の表面上に存在するタンパク質であって、チェックポイントシグナル伝達経路を誘導し、免疫応答の抑制をもたらし得るタンパク質のことを指す。一般的に公知のチェックポイントタンパク質としては、ＣＴＬＡ４、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＬＡＧ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＴＩＭ３、ＣＤ１６０、ＣＤ２４４、ＶＩＳＴＡ、ＴＩＧＩＴおよびＢＴＬＡが挙げられる。（Ｐａｒｄｏｌｌ，２０１２，Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  Ｃａｎｃｅｒ  １２：２５２−２６４；Ｂａｋｓｈ，２０１５，Ｓｅｍｉｎ  Ｏｎｃｏｌ．２０１５  Ｊｕｎ；４２（３）：３６３−７７）。これらの中で、ＣＴＬＡ４、ＰＤ−１およびＰＤ−Ｌ１が最もよく研究されており、これらのタンパク質をターゲティングする治療は、他のチェックポイントタンパク質をターゲティングする治療よりも臨床的に進歩している。
【００３４】
本明細書中で使用されるとき、用語「ＰＤ−１」とは、免疫グロブリンスーパーファミリーの細胞表面膜タンパク質であるプログラム細胞死タンパク質１（ＣＤ２７９としても公知である）のことを指す。ＰＤ−１は、Ｂ細胞、Ｔ細胞およびＮＫ細胞によって発現される。ＰＤ−１の主な役割は、感染に応じた炎症中に末梢組織のＴ細胞の活性を制限すること、および自己免疫を制限することである。活性化Ｔ細胞上では、ＰＤ−１発現が誘導され、その内因性リガンドの１つへのＰＤ−１の結合は、刺激性キナーゼを阻害することによってＴ細胞活性化を阻害するように作用する。ＰＤ−１はまた、ＴＣＲ「停止シグナル」を阻害するように作用する。ＰＤ−１は、Ｔｒｅｇ細胞（制御性Ｔ細胞）上で高発現され、リガンドの存在下ではそれらの増殖を増加させ得る（Ｐａｒｄｏｌｌ，２０１２，Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  Ｃａｎｃｅｒ  １２：２５２−２６４）。
【００３５】
本明細書中で使用されるとき、用語「ＰＤ−Ｌ１」とは、ＰＤ−１のリガンドであるプログラム細胞死１リガンド１（ＣＤ２７４およびＢ７−Ｈ１としても公知である）のことを指す。ＰＤ−Ｌ１は、活性化Ｔ細胞、Ｂ細胞、骨髄細胞、マクロファージおよび腫瘍細胞上に見られる。ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１およびＰＤ−Ｌ２の２つの内因性リガンドがあるが、抗腫瘍療法は抗ＰＤ−Ｌ１に着目している。ＰＤ−１とＰＤ−Ｌ１との複合体は、ＣＤ８＋Ｔ細胞の増殖を阻害し、免疫応答を減少させる（Ｔｏｐａｌｉａｎら、２０１２，Ｎ．Ｅｎｇｌ  Ｊ．Ｍｅｄ．３６６：２４４３−５４；Ｂｒａｈｍｅｒら、２０１２，Ｎ．Ｅｎｇｌ  Ｊ．Ｍｅｄ．３６６：２４５５−６５）。
【００３６】
本明細書中で使用されるとき、用語「ＣＴＬＡ４」とは、Ｔ細胞上で専ら発現される免疫グロブリンスーパーファミリーのメンバーである細胞傷害性Ｔリンパ球抗原４（ＣＤ１５２としても公知である）のことを指す。ＣＴＬＡ４はＴ細胞活性化を阻害するように作用し、ヘルパーＴ細胞活性を阻害して制御性Ｔ細胞免疫抑制活性を増強すると報告されている。ＣＴＬ４−Ａの正確な作用機序は依然として調査中であるが、それは、抗原提示細胞上のＣＤ８０およびＣＤ８６への結合においてＣＤ２８を打ち負かし、インヒビターシグナルをＴ細胞に能動的に送達することによって、Ｔ細胞活性化を阻害することが示唆されている（Ｐａｒｄｏｌｌ，２０１２，Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  Ｃａｎｃｅｒ  １２：２５２−２６４）。
【００３７】
本明細書中で使用されるとき、用語「チェックポイントインヒビター」とは、１つまたはそれを超えるチェックポイントタンパク質によって誘導される免疫抑制経路を遮断する任意の分子（抗体および小分子を含む）のことを指す。
【００３８】
本明細書中で使用されるとき、本明細書中で使用される用語「抗体」とはまた、全長抗体および抗体の「抗原結合部分」を含む。本明細書中で使用されるとき、用語「抗原結合部分」とは、抗原（例えば、ＰＤ−１）に特異的に結合する能力を保持する抗体の１つまたはそれを超える断片のことを指す。抗体の「抗原結合部分」という用語に包含される結合断片の例としては、（ｉ）ＶＬ、ＶＨ、ＣＬおよびＣＨ１ドメインからなる一価断片であるＦａｂ断片；（ｉｉ）ヒンジ領域でジスルフィド架橋によって連結された２つのＦａｂ断片を含む二価断片であるＦ（ａｂ’）２断片；（ｉｉｉ）ＶＨおよびＣＨ１ドメインからなるＦｄ断片；（ｉｖ）抗体の単一アームのＶＬおよびＶＨドメインからなるＦｖ断片、（ｖ）ＶＨドメインからなるｄＡｂ断片（Ｗａｒｄら、（１９８９）Ｎａｔｕｒｅ  ３４１：５４４−５４６）；ならびに（ｖｉ）単離された相補性決定領域（ＣＤＲ）が挙げられる。さらに、Ｆｖ断片の２つのドメインであるＶＬおよびＶＨは、別個の遺伝子によってコードされるが、それらは、組換え法を使用して、ＶＬおよびＶＨ領域が対合して一価分子を形成した単一タンパク質鎖（一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）としても公知；例えば、Ｂｉｒｄら、（１９８８）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４２：４２３−４２６；およびＨｕｓｔｏｎら、（１９８８）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８５：５８７９−５８８３；およびＯｓｂｏｕｒｎら、１９９８，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  １６：７７８を参照のこと）としてそれらを作製することを可能にする合成リンカーによって接続され得る。そのような一本鎖抗体はまた、抗体の「抗原結合部分」という用語に包含されることを意図する。完全ＩｇＧ分子または他のアイソタイプをコードする発現ベクターを生成するために、特定のｓｃＦｖの任意のＶＨおよびＶＬ配列は、ヒト免疫グロブリン定常領域ｃＤＮＡまたはゲノム配列に連結され得る。ＶＨおよびＶＩはまた、タンパク質化学または組換えＤＮＡ手法のいずれかを使用して、Ｆａｂ、Ｆｖまたは免疫グロブリンの他の断片の生成において使用され得る。一本鎖抗体の他の形態、例えばダイアボディも包含される。ダイアボディは、ＶＨおよびＶＬドメインが単一ポリペプチド鎖上に発現される二価二重特異性抗体であるが、同じ鎖上の２つのドメイン間の対合を可能にするには過度に短いリンカーを使用するので、前記ドメインと別の鎖上の相補的ドメインとが強制的に対合されて、２つの抗原結合部位が作り出される（例えば、Ｈｏｌｌｉｇｅｒ，Ｐら、（１９９３）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ９０：６４４４−６４４８；Ｐｏｌｊａｋ，Ｒ．Ｊら、（１９９４）Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ２：１１２１−１１２３を参照のこと）。
【００３９】
抗体は、ポリクローナルもしくはモノクローナル；異種、同種もしくは同系；またはそれらの改変形態、例えばヒト化、キメラなどであり得る。本発明の抗体は、１つまたはそれを超えるチェックポイントタンパク質に特異的にまたは実質的に特異的に結合する。用語「モノクローナル抗体」とは、抗原の特定のエピトープと免疫応答することができる抗原結合部位の１つの種のみを含む抗体分子の集団のことを指すのに対して、用語「ポリクローナル抗体」および「ポリクローナル抗体組成物」とは、特定の抗原と相互作用することができる抗原結合部位の複数の種を含む抗体分子の集団のことを指す。モノクローナル抗体組成物は、代表的には、それが免疫応答する特定の抗原に対して単一の結合親和性を示す。
【００４０】
本明細書中で使用されるとき、用語「チェックポイントタンパク質に対して有効な抗体」とは、チェックポイントタンパク質に結合し、免疫応答の抑制においてチェックポイントタンパク質の機能をアンタゴナイズし得る抗体のことを指す。例えば、ＰＤ−１に対する抗体は、ＰＤ−１に結合し、例えば、ＰＤ−１とＰＤ−Ｌ１との間の相互作用の遮断を介して、免疫応答に対するＰＤ−１の阻害機能を遮断し得る抗体のことを指す。いくつかの場合において、抗体は、２つのチェックポイントタンパク質に対するもの（すなわち、２つのチェックポイントタンパク質に結合し、それらの機能を阻害する能力を有するもの）であり得る。
【００４１】
本明細書中で使用されるとき、用語「グルココルチコイドレセプター」（「ＧＲ」）は、コルチゾールおよび／またはコルチゾールアナログに特異的に結合する細胞内レセプターのファミリーのことを指す。グルココルチコイドレセプターはまた、コルチゾールレセプターとも称される。この用語は、ＧＲのアイソフォーム、組換えＧＲおよび変異型ＧＲを含む。「グルココルチコイドレセプター」（「ＧＲ」）は、コルチゾールおよび／またはコルチゾールアナログ、例えばデキサメタゾンに特異的に結合するＩＩ型ＧＲのことを指す（例えば、Ｔｕｒｎｅｒ＆Ｍｕｌｌｅｒ，Ｊ  Ｍｏｌ  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ  Ｏｃｔｏｂｅｒ  １，２００５  ３５  ２８３−２９２を参照のこと）。
【００４２】
グルココルチコイドレセプターアンタゴニストとしても公知であり科学文献および特許文献に記載されている「グルココルチコイドレセプターモジュレーター」（「ＧＲＭ」）は、アゴニストへのＧＲの結合に関連する任意の生物学的応答を阻害する任意の化合物のことを指す。例えば、デキサメタゾンなどのＧＲアゴニストは、ＨｅｐＧ２細胞（ヒト肝臓肝細胞癌腫細胞株；ＥＣＡＣＣ，ＵＫ）におけるチロシンアミノトランスフェラーゼ（ＴＡＴ）の活性を増加させる。したがって、本発明のＧＲモジュレーターは、デキサメタゾンの効果を阻害する化合物の能力を計測することによって同定され得る。ＴＡＴ活性は、文献Ａ．Ａｌｉら、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，２００４，４７，２４４１−２４５２に概説されているように計測され得る。モジュレーターは、１０マイクロモル未満のＩＣ５０（半最大阻害濃度）を有する化合物である。以下の実施例１を参照のこと。
【００４３】
本明細書中で使用されるとき、用語「選択的なグルココルチコイドレセプターモジュレーター」とは、アゴニストへのＧＲの結合に関連する任意の生物学的応答を阻害する任意の組成物または化合物のことを指す。「選択的な」とは、他の核レセプター（例えば、プロゲステロンレセプター（ＰＲ）、鉱質コルチコイドレセプター（ＭＲ）またはアンドロゲンレセプター（ＡＲ））ではなくＧＲに優先的に結合する薬物である。選択的なグルココルチコイドレセプターアンタゴニストは、ＭＲ、ＡＲもしくはＰＲ、ＭＲとＰＲの両方、ＭＲとＡＲの両方、ＡＲとＰＲの両方またはＭＲ、ＡＲおよびＰＲに対する親和性より１０倍高い親和性（Ｋｄ値の１／１０）でＧＲに結合することが好ましい。より好ましい実施形態では、選択的なグルココルチコイドレセプターアンタゴニストは、ＭＲ、ＡＲもしくはＰＲ、ＭＲとＰＲの両方、ＭＲとＡＲの両方、ＡＲとＰＲの両方またはＭＲ、ＡＲおよびＰＲに対する親和性よりも１００倍高い親和性（Ｋｄ値の１／１００）でＧＲに結合する。別の実施形態において、選択的なグルココルチコイドレセプターアンタゴニストは、ＭＲ、ＡＲもしくはＰＲ、ＭＲとＰＲの両方、ＭＲとＡＲの両方、ＡＲとＰＲの両方またはＭＲ、ＡＲおよびＰＲに対する親和性よりも１０００倍高い親和性（Ｋｄ値の１／１０００）でＧＲに結合する。
【００４４】
本明細書中で使用されるとき、用語「組成物」とは、指定量の指定成分、例えば前記化合物、それらの互変異性体形態、それらの誘導体、それらのアナログ、それらの立体異性体、それらの多形体、それらの薬学的に許容され得る塩、エステル、エーテル、代謝産物、異性体の混合物、それらの薬学的に許容され得る溶媒和物および薬学的に許容され得る組成物、を含む生成物、ならびに指定量の指定成分の組み合わせから直接的または間接的に生じる任意の生成物を包含することを意図する。薬学的組成物に関するそのような用語は、活性な成分と、キャリアを構成する不活性な成分とを含む生成物、ならびに直接的または間接的に、前記成分のいずれか２つもしくはそれよりも多くの組み合わせ、錯体形成もしくは凝集をもたらすか、または前記成分の１つもしくはそれよりも多くの解離から、もしくは前記成分の１つもしくはそれよりも多くの他の種類の反応もしくは相互作用から生じる任意の生成物を包含することを意図する。したがって、本発明の薬学的組成物は、本発明の化合物とそれらの薬学的に許容され得るキャリアとを混合することによって作製される任意の組成物を包含することを意味する。
【００４５】
本明細書中で使用されるとき、語句「グルココルチコイドレセプターモジュレーターによる処置について別様に示されていない」は、肝臓脂肪症を除いて、グルココルチコイドレセプターアンタゴニストで有効に処置可能であると医学界によって認識されているいかなる症状も患っていない患者のことを指す。グルココルチコイドレセプターアンタゴニストで有効に処置可能であると医学界によって認められている当該分野で公知の症状としては、インターフェロン−α療法に関連する精神病、精神病性大鬱病、認知症、ストレス障害、自己免疫疾患、神経傷害およびクッシング症候群が挙げられる。
【００４６】
いくつかの実施形態において、用語「から本質的になる」とは、その唯一の活性な成分が、示されている活性な成分であるが、しかしながら、安定化、貯蔵などのためのものである他の化合物が含まれ得る製剤の組成物のことを指すが、前記製剤は、示されている活性な成分の治療効果に直接関与しない。いくつかの実施形態において、用語「から本質的になる」とは、活性な成分と、活性な成分の放出を容易にする成分とを含む組成物のことを指し得る。例えば、組成物は、被験体への活性な成分の経時的な持続放出を提供する１つまたはそれを超える成分を含み得る。いくつかの実施形態において、用語「からなる」とは、活性な成分と、薬学的に許容され得るキャリアまたは賦形剤とを含む組成物のことを指す。
【００４７】
ステロイド骨格を含む糖質コルチコイドレセプターアンタゴニストの文脈における用語「ステロイド骨格」とは、内因性ステロイド糖質コルチコイドレセプターリガンドであるコルチゾールの基本構造の改変を含む糖質コルチコイドレセプターアンタゴニストのことを指す。ステロイド骨格の基本構造は、式Ｉ：
【化３】
2019507159.tif 000005
として提供される。糖質コルチコイドアンタゴニストを生成するためのコルチゾールステロイド骨格の構造改変の最もよく知られている２つのクラスとしては、１１−βヒドロキシ基の改変および１７−β側鎖の改変が挙げられる（例えば、Ｌｅｆｅｂｖｒｅ（１９８９）Ｊ．Ｓｔｅｒｏｉｄ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．３３：５５７−５６３を参照のこと）。
【００４８】
本明細書中で使用されるとき、ＳＧＲＭの文脈における語句「非ステロイド骨格」は、４つの縮合環に結合した１７個の炭素原子を含むステロイド骨格を有するコルチゾールと構造的相同性を共有せず、または前記コルチゾールの改変ではないＳＧＲＭのことを指す。そのような化合物には、部分的にペプチド性、偽ペプチド性および非ペプチド性の分子実体を含む、タンパク質の合成模倣物およびアナログが含まれる。
【００４９】
非ステロイド性ＳＧＲＭ化合物には、縮合アザデカリン骨格、ヘテロアリールケトン縮合アザデカリン骨格またはオクタヒドロ縮合アザデカリン骨格を有するＳＧＲＭが含まれる。縮合アザデカリン骨格を有する例示的なグルココルチコイドレセプターモジュレーターとしては、米国特許第７，９２８，２３７号および同第８，４６１，１７２号に記載されているものが挙げられる。ヘテロアリールケトン縮合アザデカリン骨格を有する例示的なグルココルチコイドレセプターモジュレーターとしては、米国特許出願公開２０１４／００３８９２６に記載されているものが挙げられる。オクタヒドロ（ｏｃｔｏｈｙｄｒｏ）縮合アザデカリン骨格を有する例示的なグルココルチコイドレセプターモジュレーターとしては、２０１３年１１月２５日に出願されたＯｃｔａｈｙｄｒｏ  Ｆｕｓｅｄ  Ａｚａｄｅｃａｌｉｎ  Ｇｌｕｃｏｃｏｒｔｉｃｏｉｄ  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ  Ｍｏｄｕｌａｔｏｒｓと題されるＡｔｔｏｒｎｅｙ  Ｄｏｃｋｅｔ  Ｎｏ．８５１７８−８８７８８４（００７８００ＵＳ）の米国特許仮出願第６１／９０８，３３３号に記載されているものが挙げられる。
【００５０】
置換基が、左から右に向かって記述されるそれらの従来の化学式によって明記される場合、それらは、右から左に向かって構造を記述することによってもたらされ得る化学的に同一の置換基を等しく包含し、例えば、−ＣＨ２Ｏ−は、−ＯＣＨ２−と等価である。
【００５１】
「アルキル」とは、示される数の炭素原子を有する直鎖状または分枝鎖状の飽和脂肪族ラジカルのことを指す。アルキルは、任意の数の炭素（例えば、Ｃ１−２、Ｃ１−３、Ｃ１−４、Ｃ１−５、Ｃ１−６、Ｃ１−７、Ｃ１−８、Ｃ１−９、Ｃ１−１０、Ｃ２−３、Ｃ２−４、Ｃ２−５、Ｃ２−６、Ｃ３−４、Ｃ３−５、Ｃ３−６、Ｃ４−５、Ｃ４−６およびＣ５−６）を含み得る。例えば、Ｃ１−６アルキルとしては、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、イソペンチルおよびヘキシルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００５２】
「アルコキシ」とは、アルキル基を結合点に連結する酸素原子を有するアルキル基：アルキル−Ｏ−のことを指す。アルキル基と同様に、アルコキシ基は、Ｃ１−６などの任意の好適な数の炭素原子を有し得る。アルコキシ基は、例えば、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ｉｓｏ−プロポキシ、ブトキシ、２−ブトキシ、ｉｓｏ−ブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ、ペントキシ、ヘキソキシなどを含む。
【００５３】
「ハロゲン」とは、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素のことを指す。
【００５４】
「ハロアルキル」とは、水素原子のいくつかまたはすべてが、ハロゲン原子で置き換えられている、上で定義されたようなアルキルのことを指す。アルキル基と同様に、ハロアルキル基は、Ｃ１−６などの任意の好適な数の炭素原子を有し得、ハロアルキル基としては、トリフルオロメチル、フルオロメチルなどが挙げられる。
【００５５】
用語「ペルフルオロ」は、すべての水素がフッ素で置き換えられている化合物またはラジカルを定義するために使用され得る。例えば、ペルフルオロメタンとしては、１，１，１−トリフルオロメチルが挙げられる。
【００５６】
「ハロアルコキシ」とは、水素原子のいくつかまたはすべてがハロゲン原子で置換されているアルコキシ基のことを指す。アルキル基と同様に、ハロアルコキシ基は、Ｃ１−６などの任意の好適な数の炭素原子を有し得る。アルコキシ基は、１、２、３個またはそれを超えるハロゲンで置換され得る。すべての水素が、ハロゲン、例えば、フッ素で置き換えられるとき、その化合物は、全置換（ｐｅｒ−ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ）、例えば、全フッ素置換（ｐｅｒｆｌｕｏｒｉｎａｔｅｄ）される。ハロアルコキシとしては、トリフルオロメトキシ、２，２，２，−トリフルオロエトキシおよびペルフルオロエトキシが挙げられるが、これらに限定されない。
【００５７】
「シクロアルキル」とは、３〜１２個の環原子または示されている数の原子を含む、飽和または部分不飽和の、単環式、縮合二環式または架橋多環式の環アセンブリ（ｒｉｎｇ  ａｓｓｅｍｂｌｙ）のことを指す。シクロアルキルは、任意の数の炭素（例えば、Ｃ３−６、Ｃ４−６、Ｃ５−６、Ｃ３−８、Ｃ４−８、Ｃ５−８、Ｃ６−８、Ｃ３−９、Ｃ３−１０、Ｃ３−１１およびＣ３−１２）を含み得る。飽和単環式シクロアルキル環としては、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルおよびシクロオクチルが挙げられる。飽和二環式および多環式シクロアルキル環としては、例えば、ノルボルナン、［２．２．２］ビシクロオクタン、デカヒドロナフタレンおよびアダマンタンが挙げられる。シクロアルキル基は、その環内に１つまたはそれを超える二重結合または三重結合を有する部分不飽和でもあり得る。部分不飽和である代表的なシクロアルキル基としては、シクロブテン、シクロペンテン、シクロヘキセン、シクロヘキサジエン（１，３−および１，４−異性体）、シクロヘプテン、シクロヘプタジエン、シクロオクテン、シクロオクタジエン（１，３−、１，４−および１，５−異性体）、ノルボルネンおよびノルボルナジエンが挙げられるが、これらに限定されない。シクロアルキルが、飽和単環式Ｃ３−８シクロアルキルであるとき、例示的な基としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチルおよびシクロオクチルが挙げられるが、これらに限定されない。シクロアルキルが、飽和単環式Ｃ３−６シクロアルキルであるとき、例示的な基としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルおよびシクロヘキシルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００５８】
「ヘテロシクロアルキル」とは、３〜１２個の環員、ならびにＮ、ＯおよびＳのうちの１〜４個のヘテロ原子を有する飽和環系のことを指す。Ｂ、Ａｌ、ＳｉおよびＰを含むがこれらに限定されないさらなるヘテロ原子もまた有用であり得る。それらのヘテロ原子はまた、酸化され得、例えば、−Ｓ（Ｏ）−および−Ｓ（Ｏ）２−であるがこれらに限定されない。ヘテロシクロアルキル基は、任意の数の環原子（例えば、３〜６、４〜６、５〜６、３〜８、４〜８、５〜８、６〜８、３〜９、３〜１０、３〜１１または３〜１２個の環員）を含み得る。任意の好適な数（例えば、１、２、３もしくは４、または１〜２、１〜３、１〜４、２〜３、２〜４もしくは３〜４）のヘテロ原子が、ヘテロシクロアルキル基に含まれ得る。そのヘテロシクロアルキル基には、アジリジン、アゼチジン、ピロリジン、ピペリジン、アゼパン、アゾカン、キヌクリジン、ピラゾリジン、イミダゾリジン、ピペラジン（１，２−、１，３−および１，４−異性体）、オキシラン、オキセタン、テトラヒドロフラン、オキサン（テトラヒドロピラン）、オキセパン、チイラン、チエタン、チオラン（テトラヒドロチオフェン）、チアン（テトラヒドロチオピラン）、オキサゾリジン、イソオキサリジン（ｉｓｏｘａｌｉｄｉｎｅ）、チアゾリジン、イソチアゾリジン、ジオキソラン、ジチオラン、モルホリン、チオモルホリン、ジオキサンまたはジチアンなどの基が含まれ得る。ヘテロシクロアルキル基はまた、芳香環系または非芳香環系と縮合して、インドリンを含むがこれに限定されないメンバーを形成し得る。
【００５９】
ヘテロシクロアルキルが、３〜８個の環員および１〜３個のヘテロ原子を含むとき、代表的なメンバーとしては、ピロリジン、ピペリジン、テトラヒドロフラン、オキサン、テトラヒドロチオフェン、チアン、ピラゾリジン、イミダゾリジン、ピペラジン、オキサゾリジン、イソオキサゾリジン、チアゾリジン、イソチアゾリジン、モルホリン、チオモルホリン、ジオキサンおよびジチアンが挙げられるが、これらに限定されない。ヘテロシクロアルキルは、５〜６個の環員および１〜２個のヘテロ原子を有する環も形成し得、代表的なメンバーとしては、ピロリジン、ピペリジン、テトラヒドロフラン、テトラヒドロチオフェン、ピラゾリジン、イミダゾリジン、ピペラジン、オキサゾリジン、イソオキサゾリジン、チアゾリジン、イソチアゾリジンおよびモルホリンが挙げられるが、これらに限定されない。
【００６０】
「アリール」とは、任意の好適な数の環原子および任意の好適な数の環を有する芳香環系のことを指す。アリール基は、任意の好適な数の環原子（例えば、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５または１６個の環原子）ならびに６〜１０、６〜１２または６〜１４個の環員を含み得る。アリール基は、単環式であり得るか、縮合して二環式基もしくは三環式基を形成し得るか、または結合によって連結されてビアリール基を形成し得る。代表的なアリール基としては、フェニル、ナフチルおよびビフェニルが挙げられる。他のアリール基としては、メチレン連結基を有するベンジルが挙げられる。いくつかのアリール基は、６〜１２個の環員を有する（例えば、フェニル、ナフチルまたはビフェニル）。他のアリール基は、６〜１０個の環員を有する（例えば、フェニルまたはナフチル）。いくつかの他のアリール基は、６個の環員を有する（例えば、フェニル）。アリール基は、置換され得るか、または非置換であり得る。
【００６１】
「ヘテロアリール」とは、５〜１６個の環原子（ここで、それらの環原子の１〜５個は、Ｎ、ＯまたはＳなどのヘテロ原子である）を含む、単環式または縮合二環式もしくは三環式の芳香環アセンブリのことを指す。Ｂ、Ａｌ、ＳｉおよびＰを含むがこれらに限定されないさらなるヘテロ原子もまた有用であり得る。それらのヘテロ原子はまた、酸化され得、例えば、Ｎ−オキシド、−Ｓ（Ｏ）−および−Ｓ（Ｏ）２−であるがこれらに限定されない。ヘテロアリール基は、任意の数の環原子（例えば、３〜６、４〜６、５〜６、３〜８、４〜８、５〜８、６〜８、３〜９、３〜１０、３〜１１または３〜１２個の環員）を含み得る。任意の好適な数（例えば、１、２、３、４もしくは５；または１〜２、１〜３、１〜４、１〜５、２〜３、２〜４、２〜５、３〜４もしくは３〜５）のヘテロ原子が、ヘテロアリール基に含まれ得る。ヘテロアリール基は、５〜８個の環員および１〜４個のヘテロ原子、または５〜８個の環員および１〜３個のヘテロ原子、または５〜６個の環員および１〜４個のヘテロ原子、または５〜６個の環員および１〜３個のヘテロ原子を有し得る。ヘテロアリール基には、ピロール、ピリジン、イミダゾール、ピラゾール、トリアゾール、テトラゾール、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、トリアジン（１，２，３−、１，２，４−および１，３，５−異性体）、チオフェン、フラン、チアゾール、イソチアゾール、オキサゾールおよびイソオキサゾールなどの基が含まれ得る。ヘテロアリール基はまた、フェニル環などの芳香環系に縮合されて、ベンゾピロール（例えば、インドールおよびイソインドール）、ベンゾピリジン（例えば、キノリンおよびイソキノリン）、ベンゾピラジン（キノキサリン）、ベンゾピリミジン（キナゾリン）、ベンゾピリダジン（例えば、フタラジンおよびシンノリン）、ベンゾチオフェンおよびベンゾフランを含むがこれらに限定されないメンバーを形成し得る。他のヘテロアリール基としては、結合によって連結されたヘテロアリール環、例えば、ビピリジンが挙げられる。ヘテロアリール基は、置換され得るか、または非置換であり得る。
【００６２】
ヘテロアリール基は、環上の任意の位置を介して連結され得る。例えば、ピロールには、１−、２−および３−ピロールが含まれ；ピリジンには、２−、３−および４−ピリジンが含まれ；イミダゾールには、１−、２−、４−および５−イミダゾールが含まれ；ピラゾールには、１−、３−、４−および５−ピラゾールが含まれ；トリアゾールには、１−、４−および５−トリアゾールが含まれ；テトラゾールには、１−および５−テトラゾールが含まれ；ピリミジンには、２−、４−、５−および６−ピリミジンが含まれ；ピリダジンには、３−および４−ピリダジンが含まれ；１，２，３−トリアジンには、４−および５−トリアジンが含まれ；１，２，４−トリアジンには、３−、５−および６−トリアジンが含まれ；１，３，５−トリアジンには、２−トリアジンが含まれ；チオフェンには、２−および３−チオフェンが含まれ；フランには、２−および３−フランが含まれ；チアゾールには、２−、４−および５−チアゾールが含まれ；イソチアゾールには、３−、４−および５−イソチアゾールが含まれ；オキサゾールには、２−、４−および５−オキサゾールが含まれ；イソオキサゾールには、３−、４−および５−イソオキサゾールが含まれ；インドールには、１−、２−および３−インドールが含まれ；イソインドールには、１−および２−イソインドールが含まれ；キノリンには、２−、３−および４−キノリンが含まれ；イソキノリンには、１−、３−および４−イソキノリンが含まれ；キナゾリンには、２−および４−キノアゾリンが含まれ；シンノリンには、３−および４−シンノリンが含まれ；ベンゾチオフェンには、２−および３−ベンゾチオフェンが含まれ；ベンゾフランには、２−および３−ベンゾフランが含まれる。
【００６３】
いくつかのヘテロアリール基は、５〜１０個の環員、およびＮ、ＯまたはＳを含む１〜３個の環原子を有するヘテロアリール基（例えば、ピロール、ピリジン、イミダゾール、ピラゾール、トリアゾール、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、トリアジン（１，２，３−、１，２，４−および１，３，５−異性体）、チオフェン、フラン、チアゾール、イソチアゾール、オキサゾール、イソオキサゾール、インドール、イソインドール、キノリン、イソキノリン、キノキサリン、キナゾリン、フタラジン、シンノリン、ベンゾチオフェンおよびベンゾフラン）を含む。他のヘテロアリール基は、５〜８個の環員および１〜３個のヘテロ原子を有するヘテロアリール基（例えば、ピロール、ピリジン、イミダゾール、ピラゾール、トリアゾール、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、トリアジン（１，２，３−、１，２，４−および１，３，５−異性体）、チオフェン、フラン、チアゾール、イソチアゾール、オキサゾールおよびイソオキサゾール）を含む。いくつかの他のヘテロアリール基は、９〜１２個の環員および１〜３個のヘテロ原子を有するヘテロアリール基（例えば、インドール、イソインドール、キノリン、イソキノリン、キノキサリン、キナゾリン、フタラジン、シンノリン、ベンゾチオフェン、ベンゾフランおよびビピリジン）を含む。なおも他のヘテロアリール基は、５〜６個の環員、およびＮ、ＯまたはＳを含む１〜２個の環ヘテロ原子を有するヘテロアリール基（例えば、ピロール、ピリジン、イミダゾール、ピラゾール、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、チオフェン、フラン、チアゾール、イソチアゾール、オキサゾールおよびイソオキサゾール）を含む。
【００６４】
いくつかのヘテロアリール基は、５〜１０個の環員および窒素だけのヘテロ原子を含む（例えば、ピロール、ピリジン、イミダゾール、ピラゾール、トリアゾール、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、トリアジン（１，２，３−、１，２，４−および１，３，５−異性体）、インドール、イソインドール、キノリン、イソキノリン、キノキサリン、キナゾリン、フタラジンおよびシンノリン）。他のヘテロアリール基は、５〜１０個の環員および酸素だけのヘテロ原子を含む（例えば、フランおよびベンゾフラン）。いくつかの他のヘテロアリール基は、５〜１０個の環員および硫黄だけのヘテロ原子を含む（例えば、チオフェンおよびベンゾチオフェン）。なおも他のヘテロアリール基は、５〜１０個の環員および少なくとも２個のヘテロ原子を含む（例えば、イミダゾール、ピラゾール、トリアゾール、ピラジン、ピリミジン、ピリダジン、トリアジン（１，２，３−、１，２，４−および１，３，５−異性体）、チアゾール、イソチアゾール、オキサゾール、イソオキサゾール、キノキサリン、キナゾリン、フタラジンおよびシンノリン）。
【００６５】
「ヘテロ原子」とは、Ｏ、ＳまたはＮのことを指す。
【００６６】
「塩」とは、本発明の方法において使用される化合物の酸塩または塩基塩のことを指す。薬学的に許容され得る塩の例証的な例は、鉱酸（塩酸、臭化水素酸、リン酸など）の塩、有機酸（酢酸、プロピオン酸、グルタミン酸、クエン酸など）の塩、四級アンモニウム（ヨウ化メチル、ヨウ化エチルなど）の塩である。薬学的に許容され得る塩は無毒性であると理解される。好適な薬学的に許容され得る塩に関するさらなる情報は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１７ｔｈ  ｅｄ．，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．，１９８５（参照により本明細書中に援用される）に見られ得る。
【００６７】
「異性体」とは、同じ化学式を有するが構造的に識別可能な化合物のことを指す。
【００６８】
「互変異性体」とは、平衡状態で存在し、一方の形態からもう一方の形態に容易に変換される、２つまたはそれを超える構造異性体のうちの１つのことを指す。
【００６９】
本発明の化合物の説明は、当業者に公知の化学結合の原理によって限定される。したがって、ある基が、いくつかの置換基のうちの１つまたはそれを超える置換基によって置換され得る場合、そのような置換は、化学結合の原理に適合するように、ならびに本質的に不安定でない化合物および／または周囲条件（例えば、水性、中性または生理学的条件）下で不安定である可能性があると当業者に公知であり得る化合物を生成するように、選択される。
【００７０】
「薬学的に許容され得る賦形剤」および「薬学的に許容され得るキャリア」とは、活性な作用物質を被験体に投与することおよびその活性な作用物質が被験体によって吸収されることを助ける物質のことを指し、患者に毒物学的な有意な悪影響を及ぼさずに本発明の組成物中に含められ得る。薬学的に許容され得る賦形剤の非限定的な例としては、水、ＮａＣｌ、通常の食塩水溶液、乳酸加リンガー液、通常のスクロース、通常のグルコース、結合剤、充填剤、崩壊剤、潤滑剤、コーティング剤、甘味料、香料および着色料などが挙げられる。当業者は、他の薬学的賦形剤が本発明において有用であることを認識するだろう。
【００７１】
本明細書中で使用されるとき、用語「ＧＲ＋癌」とは、ＧＲを発現する癌のことを指す。ＧＲ発現は、当該分野における日常的な分子生化学的方法、例えば免疫組織化学染色によって決定され得る。１つの実施形態において、ＧＲ＋癌は、任意の強度でＧＲの核染色を示す少なくとも１０％の腫瘍細胞を有する癌である。別の実施形態において、ＧＲ＋癌は、「ＧＲ発現の同定」というセクションに開示されている方法を使用して、所定の閾値（例えば、１５０）に等しいかまたはそれを超えるＨスコアを有するものである。
Ｃ．患者集団の選択
ｉ．癌の診断
【００７２】
癌は、異常細胞の無秩序な成長および／または拡散を特徴とする。代表的には、生検を採取し、疑わしい症状を確認するために、顕微鏡下で生検由来の細胞または組織を調べる。いくつかの場合において、診断を検証するために、細胞のタンパク質、ＤＮＡおよびＲＮＡに対して、さらなる検査を実施する必要がある。
ｉｉ．チェックポイントインヒビター感受性癌の同定
【００７３】
本発明のいくつかの実施形態において、方法は、少なくとも１つのチェックポイントインヒビター感受性癌を有する患者を処置するために使用される。チェックポイントインヒビター感受性癌は、チェックポイントインヒビターに対して反応性のものである（すなわち、１つまたはそれを超えるチェックポイントインヒビターの投与は、腫瘍負荷を減少させ得るか、または癌改善に関連する有益なもしくは所望の臨床結果を達成し得る）。例えば、チェックポイントインヒビターの投与は、以下の１つまたはそれよりも多くをもたらし得る：癌細胞の数の減少；腫瘍サイズの減少；末梢器官への癌細胞浸潤の阻害（すなわち、ある程度の減速および／または停止）；腫瘍転移の阻害（すなわち、ある程度の減速および／または停止）；腫瘍成長のある程度の阻害；および／または障害に関連する症候の１つもしくはそれよりも多くのある程度の軽減；腫瘍のサイズの縮小；疾患に起因する症候の減少；疾患を患っている者の生活の質の増加、疾患の処置に必要な他の医薬の用量の減少；疾患の進行の遅延；および／または患者の生存の延長。
【００７４】
チェックポイントインヒビター感受性腫瘍は、多くの場合、チェックポイントタンパク質であるそれぞれＰＤ−１またはＣＴＬＡ−４に結合するリガンド（例えば、ＰＤ−Ｌ１またはＢ７）の高発現を有する。これらの相互作用は、腫瘍細胞に対する免疫応答を抑制する。チェックポイントインヒビター感受性腫瘍の非限定的な例としては、肺癌、肝臓癌、卵巣癌、子宮頸癌、皮膚癌、膀胱癌、結腸癌、乳癌、神経膠腫、腎癌腫、胃癌（ｓｔｏｍａｃｈ  ｃａｎｃｅｒ）、食道癌、口腔扁平上皮癌、頭頸部癌、黒色腫、肉腫、腎細胞腫瘍、肝細胞腫瘍、神経膠芽細胞腫、神経内分泌腫瘍、膀胱癌、膵臓癌、胆嚢癌、胃癌（ｇａｓｔｒｉｃ  ｃａｎｃｅｒ）、前立腺癌、子宮内膜癌、甲状腺癌および中皮腫が挙げられる。
ｉｉｉ．ＧＲ発現の同定
【００７５】
いくつかの実施形態において、チェックポイントインヒビター感受性癌はまた、ＧＲ＋癌でもある。癌細胞におけるＧＲ発現は、日常的な生化学的解析の１つまたはそれよりも多くを使用して調べられ得る。いくつかの実施形態において、ＧＲ発現は、マイクロアレイおよびＲＴ−ＰＣＲなどの方法を使用して、ＧＲ転写産物発現を検出することによって決定される。他の実施形態において、ＧＲ発現は、ウエスタンブロット解析および免疫組織化学染色などの方法を使用して、タンパク質発現を検出することによって決定される。さらに他の実施形態において、ＧＲ発現は、これらの方法の組み合わせを使用して決定される。
【００７６】
好ましい実施形態において、免疫組織化学染色を実施し、Ｈスコア法を使用して、癌組織におけるＧＲの発現を定量する。１つの例示的アッセイでは、ホルマリン固定パラフィン包埋腫瘍組織切片を脱パラフィン処理し、抗原回復溶液で処理して、グルココルチコイドレセプターを抗ＧＲ抗体に容易にアクセス可能にする。次いで、抗ＧＲ抗体を組織切片とともにインキュベートし、抗ＧＲ抗体を認識するウマペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）コンジュゲート二次抗体の添加によって、組織切片上のＧＲに結合した抗体を検出する。二次抗体コンジュゲート上のＨＲＰは比色反応を触媒し、好適な基質と接触すると、ＧＲが存在する場所において染色を生じさせる。１つのアプローチでは、ＧＲ染色の強度レベルは、陰性染色では０、弱染色では１＋、中等度染色では２＋、および強染色では３＋によって表される。ｗｗｗ．ｉｈｃｗｏｒｌｄ．ｃｏｍ／ｉｈｃ＿ｓｃｏｒｉｎｇ．ｈｔｍを参照のこと。各強度レベルのＧＲ＋細胞のパーセンテージに強度レベルを掛け、すべての強度レベルの結果を合計して、０〜３００のＨスコアを生成する。１つの実施形態において、所定の閾値に等しいかまたはそれを超えるＨスコアを有する癌型は、ＧＲ＋癌とみなされる。好ましい実施形態において、閾値は、１５０である。別の実施形態において、ＧＲ＋癌は、任意の強度でＧＲ染色を示す少なくとも１０％の腫瘍細胞を有するものである。１５０のＨスコア閾値を使用すると、多くの癌型がＧＲ＋である。以下の表１を参照のこと。公表されている臨床試験の結果によって示されているように、これらの癌型の大部分はまた、チェックポイントインヒビター感受性癌である。ｗｗｗ．ｃｌｉｎｉｃａｌｔｒｉａｌ．ｇｏｖを参照のこと。
Ｄ．チェックポイントインヒビター
【００７７】
本明細書中に開示される方法は、少なくとも１つのチェックポイントインヒビターと組み合わせて少なくとも１つのＳＧＲＭを使用して、癌を処置する。いくつかの実施形態において、チェックポイントインヒビターは、少なくとも１つのチェックポイントタンパク質に対する抗体（「ＣＩＡ」）である。いくつかの実施形態において、チェックポイントインヒビターは、１つまたはそれを超えるチェックポイントタンパク質によって誘導される免疫抑制経路を遮断する小分子非タンパク質化合物（「ＣＩＣ」）である。
ｉ．チェックポイントインヒビター抗体（「ＣＩＡ」）
【００７８】
１つの実施形態において、癌を処置するための方法は、チェックポイントインヒビター抗体と組み合わせてＳＧＲＭを投与することを含む。そのような抗体は、チェックポイントタンパク質の免疫抑制活性を遮断し得る。多くのそのような抗体は、癌の処置において有効であることが既に示されている（例えば、ＰＤ−１、ＣＴＬＡ４およびＰＤ−Ｌ１に対する抗体）。
【００７９】
抗ＰＤ１抗体は、黒色腫、非小細胞肺癌、膀胱癌、前立腺癌、結腸直腸癌、頭頸部癌、トリプルネガティブ乳癌、白血病、リンパ腫および腎細胞癌の処置に使用されている。例示的な抗ＰＤ−１抗体としては、ランブロリズマブ（ＭＫ−３４７５，ＭＥＲＣＫ）、ニボルマブ（ＢＭＳ−９３６５５８，ＢＲＩＳＴＯＬ−ＭＹＥＲＳ  ＳＱＵＩＢＢ）、ＡＭＰ−２２４（ＭＥＲＣＫ）およびピディリズマブ（ＣＴ−０１１，ＣＵＲＥＴＥＣＨ  ＬＴＤ．）が挙げられる。
【００８０】
抗ＰＤ−Ｌ１抗体は、非小細胞肺癌、黒色腫、結腸直腸癌、腎細胞癌、膵臓癌、胃癌、卵巣癌、乳癌および血液悪性腫瘍の処置に使用されている。例示的な抗ＰＤ−Ｌ１抗体としては、ＭＤＸ−１１０５（ＭＥＤＡＲＥＸ）、ＭＥＤＩ４７３６（ＭＥＤＩＭＭＵＮＥ）、ＭＰＤＬ３２８０Ａ（ＧＥＮＥＮＴＥＣＨ）およびＢＭＳ−９３６５５９（ＢＲＩＳＴＯＬ−ＭＹＥＲＳ  ＳＱＵＩＢＢ）が挙げられる。
【００８１】
抗ＣＴＬＡ４抗体は、黒色腫、前立腺癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌の処置のための臨床試験において使用されている。抗ＣＴＬ４Ａの重要な特徴は抗腫瘍効果の動態であり、遅延期は、生理学的応答に必要な初期処置後最大６ヶ月間である。いくつかの場合において、処置開始後において、縮小が見られる前に、腫瘍はサイズが実際に増加し得る（Ｐａｒｄｏｌｌ，２０１２，Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  Ｃａｎｃｅｒ  １２：２５２−２６４）。例示的な抗ＣＴＬＡ４  ＣＩＡとしては、イピリムマブ（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）およびトレメリムマブ（ＰＦＩＺＥＲ）が挙げられる。
【００８２】
癌を処置するために、ＬＡＧ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４およびＴＩＭ３などの他のチェックポイントタンパク質に対するＣＩＡもまた、本明細書中に開示されるＳＧＲＭと組み合わせて使用され得る。
【００８３】
特に、標的チェックポイントタンパク質、例えばＰＤ−１およびＣＴＬＡ４が、異なるシグナル伝達経路を介して免疫応答を抑制する場合、本開示で使用されるＣＩＡは、異なるＣＩＡの組み合わせであり得る。したがって、チェックポイントタンパク質のいずれかに対するＣＩＡの組み合わせ、または両チェックポイントタンパク質に対する単一のＣＩＡは、増強された免疫応答を提供し得る。
ＣＩＡの生成
【００８４】
ＣＩＡは、当該分野で周知の方法を使用して開発され得る。例えば、Ｋｏｈｌｅｒ  ａｎｄ  Ｍｉｌｓｔｅｉｎ，Ｎａｔｕｒｅ  ２５６：４９５（１９７５）およびＣｏｌｉｇａｎら、（ｅｄｓ．），ＣＵＲＲＥＮＴ  ＰＲＯＴＯＣＯＬＳ  ＩＮ  ＩＭＭＵＮＯＬＯＧＹ，ＶＯＬ．１，ｐａｇｅｓ  ２．５．１−２．６．７（Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ  １９９１）を参照のこと。モノクローナル抗体は、抗原、例えばチェックポイントタンパク質またはそのエピトープを含む組成物をマウスに注射し、脾臓を摘出してＢリンパ球を得、Ｂリンパ球を骨髄腫細胞と融合させてハイブリドーマを生産し、ハイブリドーマをクローニングし、抗原に対する抗体を産生する陽性クローンを選択し、抗原に対する抗体を産生するクローンを培養し、ハイブリドーマ培養物から抗体を単離することによって得られ得る。
【００８５】
産生されたモノクローナル抗体は、様々な十分に確立された手法によって、ハイブリドーマ培養物から単離および精製され得る。そのような単離手法としては、プロテインＡセファロースを用いたアフィニティークロマトグラフィー、サイズ排除クロマトグラフィー、およびイオン交換クロマトグラフィーが挙げられる。例えば、Ｃｏｌｉｇａｎ  ａｔ  ｐａｇｅｓ  ２．７．１−２．７．１２  ａｎｄ  ｐａｇｅｓ  ２．９．１−２．９．３を参照のこと。Ｂａｉｎｅｓら、“Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎ  Ｇ（ＩｇＧ），”ｉｎ  ＭＥＴＨＯＤＳ  ＩＮ  ＭＯＬＥＣＵＬＡＲ  ＢＩＯＬＯＧＹ，ＶＯＬ．１０，ｐａｇｅｓ  ７９−１０４（Ｔｈｅ  Ｈｕｍａｎａ  Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．１９９２）も参照のこと。チェックポイントタンパク質に対する抗体の初回生成後、抗体を配列決定し、続いて、組換え手法によって調製し得る。マウス抗体および抗体断片のヒト化およびキメラ化は、当業者に周知である。例えば、Ｌｅｕｎｇら、Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ  １３：４６９（１９９４）；米国特許出願公開第２０１４００９９２５４Ａ１号を参照のこと。
【００８６】
ヒト抗体は、チェックポイントタンパク質を使用した抗原チャレンジに応じて特異的ヒト抗体を産生するように遺伝子操作されたトランスジェニックマウスを使用して生産され得る。Ｇｒｅｅｎら、Ｎａｔｕｒｅ  Ｇｅｎｅｔ．７：１３（１９９４）、Ｌｏｎｂｅｒｇら、Ｎａｔｕｒｅ  ３６８：８５６（１９９４）を参照のこと。チェックポイントタンパク質に対するヒト抗体はまた、遺伝子もしくは染色体トランジェクション（ｔｒａｎｄｆｅｃｔｉｏｎ）法、ファージディスプレイ手法、またはインビトロ活性化Ｂ細胞によって構築され得る。例えば、ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙら、１９９０，Ｎａｔｕｒｅ  ３４８：５５２−５５３；米国特許第５，５６７，６１０号および同第５，２２９，２７５号を参照のこと。
ＣＩＡの改変
【００８７】
ＣＩＡはまた、既存のＣＩＡと比べて保存的改変を導入することによって生産され得る。例えば、改変ＣＩＡは、生産された上記抗体のカウンターパートに相同な重鎖および軽鎖の可変領域ならびに／またはＦｃ領域を含み得る。本明細書中に開示される方法に使用され得る改変ＣＩＡは、チェックポイントシグナル伝達経路を遮断することができる所望の機能的特性を保持しなければならない。
【００８８】
ＣＩＡはまた、タンパク質改変部位を変化させることによって生産され得る。例えば、抗体のグリコシル化部位は、グリコシル化を欠く抗体を生産するように変化させ得、そのように改変されたＣＩＡは、代表的には、抗原に対する抗体の増加した親和性を有する。抗体はまた、１つまたはそれを超えるＰＥＧ基が抗体に結合する条件下でポリエチレングリコール（ＰＥＧ）と反応させることによってペグ化され得る。ペグ化は、抗体の生物学的半減期を増加させ得る。そのような改変を有する抗体はまた、チェックポイント経路を遮断する所望の機能的特性を保持する限り、本明細書中に開示される選択的ＧＲモジュレーターと組み合わせて使用され得る。
ｉｉ．小分子非タンパク質チェックポイントインヒビター化合物（「ＣＩＣ」）
【００８９】
別の実施形態において、癌、例えばチェックポイントインヒビター感受性癌を処置するための方法は、ＣＩＣと組み合わせてＳＧＲＭを使用する。ＣＩＣは、チェックポイントタンパク質の免疫抑制機能をアンタゴナイズする小分子非タンパク質化合物である。多くのＣＩＣが当該分野で公知であり、例えば、ＰＣＴ刊行物、国際公開第２０１５０３４８２０号、国際公開第２０１３０１４４７０４号および国際公開第２０１１０８２４００号に開示されているものがある。
【００９０】
ＣＩＣはまた、例えば、欧州特許出願公開第２３６０２５４号に開示されている当該分野で公知のコンビナトリアルライブラリー法における多数のアプローチのいずれかを使用して同定され得る。コンビナトリアルライブラリー（ｃｏｍｉｎａｔｏｒｉａｌ  ｌｉｂｒａｒｉｅｓ）としては、生物学的ライブラリー；空間的にアドレス可能なパラレル固相または溶液相ライブラリー；デコンボリューションを必要とする合成ライブラリー法；「１ビーズ１化合物」ライブラリー法；およびアフィニティークロマトグラフィー選択を使用した合成ライブラリー法が挙げられる。生物学的ライブラリーアプローチはペプチドライブラリーに限定されるが、他の４つのアプローチは、化合物のペプチド、非ペプチドオリゴマーまたは小分子ライブラリーに適用可能である（Ｌａｍ，Ｋ．Ｓ．（１９９７）Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓ．１２：１４５）。
ｉｉｉ．候補チェックポイントインヒビターの機能的特性の評価
【００９１】
候補（すなわち、上記に開示されているように、チェックポイントタンパク質を含む抗原、チェックポイントタンパク質のエピトープで動物を免疫することによって生成された抗体、またはコンビナトリアルライブラリーからの検査化合物）がチェックポイントインヒビターであるかを評価するために、多くの周知のアッセイが使用され得る。非限定的な例示的アッセイとしては、結合アッセイ、例えば酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）、蛍光活性化細胞選別（ＦＡＣＳ）解析、細胞ベースのアッセイおよびインビボアッセイが挙げられる。
結合アッセイ
【００９２】
１つの実施形態において、アッセイは、直接結合アッセイである。複合体中の標識チェックポイントタンパク質を検出することによって、チェックポイントタンパク質と候補との結合が決定され得るように、チェックポイントタンパク質は、放射性同位体または酵素標識とカップリングされ得る。例えば、チェックポイントタンパク質は、１２５Ｉ、３５Ｓ、１４Ｃまたは３Ｈで直接的または間接的に標識され得、放射性同位体は、放射性放出の直接計数によって、またはシンチレーション計数によって検出される。それらの同種チェックポイントタンパク質に結合する候補の能力の決定は、例えば、直接結合を計測することによって達成され得る。あるいは、チェックポイントタンパク質分子は、例えば、西洋ワサビペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼまたはルシフェラーゼで酵素的に標識され得、標的チェックポイントタンパク質に対する候補の結合は、生成物への好適な基質の変換によって決定される。
【００９３】
酵素結合免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）は、一般的に、標的チェックポイントタンパク質に対するＣＩＡ候補の結合特異性を評価するために使用される。代表的なアッセイでは、５μｇ／ｍｌチェックポイントタンパク質とともに３７℃で一晩コーティングすることによって、チェックポイントタンパク質でマイクロタイタープレートをコーティングする。候補ＣＩＡを含む血清サンプルをＰＢＳ、５％血清、０．５％Ｔｗｅｅｎ−２０で希釈し、ウェル中、室温で１時間インキュベートし、続いて、同じ希釈剤中の抗ヒトＩｇＧ  ＦｃおよびＩｇＧ  Ｆ（ａｂ’）−西洋ワサビペルオキシダーゼを添加する。室温で１時間後、ＡＢＴＳ基質（Ｓｉｇｍａ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ  Ｍｏ．）の添加によって酵素活性を評価し、３０分後、４１５〜４９０ｎｍで読み取る。
【００９４】
候補の結合動態（例えば、結合親和性）はまた、当該分野で公知の標準的なアッセイ、例えばＢｉａｃｏｒｅ解析（Ｂｉａｃｏｒｅ  ＡＢ，Ｕｐｐｓａｌａ，Ｓｗｅｄｅｎ）によって評価され得る。１つの例示的なアッセイでは、標準的なアミンカップリング化学と、Ｂｉａｃｏｒｅによって提供されるキットとを使用して、一級アミンを介して、精製組換えヒトチェックポイントタンパク質をＣＭ５チップ（カルボキシメチルデキストランコーティングチップ）に共有結合させる。５０μＬ／分の流速、２６７ｎＭの濃度で（Ｂｉａｃｏｒｅ  ＡＢによって提供される）ＨＢＳ  ＥＰ緩衝液中の候補を流すことによって、結合を計測する。チェックポイントタンパク質−候補結合動態を３分間追跡し、解離動態を７分間追跡する。ＢＩＡ評価ソフトウェア（Ｂｉａｃｏｒｅ  ＡＢ）を使用して、１：１ラングミュア結合モデルに対して、結合曲線および解離曲線をフィッティングする。結合定数の推定におけるアビディティの影響を最小化にするために、結合相および解離相に対応するデータの初期セグメントのみをフィッティングに使用する。相互作用のＫＤ、ＫｏｎおよびＫｏｆｆ値を計測し得る。好ましいチェックポイントインヒビターは、１×１０−７Ｍまたはそれ未満のＫｄで、それらの標的チェックポイントタンパク質に結合し得る。
【００９５】
リガンドへの結合を介して免疫応答を遮断するチェックポイントタンパク質の場合、チェックポイントタンパク質へのリガンドの結合を遮断する候補の能力を検査するために、さらなる結合アッセイが用いられ得る。１つの例示的なアッセイでは、フローサイトメトリーを使用して、トランスフェクトＣＨＯ細胞上で発現されたチェックポイントタンパク質（例えば、ＰＤ−１）へのリガンド（例えば、ＰＤ−Ｌ１）の結合の遮断を検査する。チェックポイントタンパク質を発現する細胞の懸濁液に様々な濃度の候補を添加し、４℃で３０分間インキュベートする。未結合インヒビターを洗い流し、ＦＩＴＣ標識リガンドタンパク質をチューブに添加し、４℃で３０分間インキュベートする。ＦＡＣＳｃａｎフローサイトメーター（Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ，Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ，Ｃａｌｉｆ．）を使用して、ＦＡＣＳ解析を実施する。細胞の染色の平均蛍光強度（ＭＦＩ）は、チェックポイントタンパク質に結合したリガンドの量を示す。候補を添加したサンプル中のＭＦＩの減少は、標的チェックポイントタンパク質へのリガンドの結合の遮断において、候補が有効であることを示す。
【００９６】
例えば、ＰＣＴ刊行物、国際公開第２０１５０３４８２０号に記載されている均一時間分解蛍光（ＨＴＲＦ）結合アッセイもまた、チェックポイントタンパク質−リガンド相互作用を遮断する候補の能力をアッセイするために使用され得る。１つの実施形態において、前記方法において使用されるＣＩＣは、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１均一時間分解蛍光（ＨＴＲＦ）結合アッセイによって計測した場合、１０ｐＭまたはそれ未満、例えば０．０１〜１０ｐＭ、好ましくは１ｐＭまたはそれ未満、例えば０．０１〜１ｐＭのＩＣ５０値で、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１相互作用を阻害し得る。
細胞ベースのアッセイ
【００９７】
別の実施形態において、候補がチェックポイントインヒビターであるかを評価するためのアッセイは、細胞ベースのアッセイである。米国特許第８，００８，４４９号に記載されている混合リンパ球反応（ＭＬＲ）アッセイは、Ｔ細胞増殖、ＩＬ−２および／またはＩＦＮ−γの産生を計測するために日常的に使用される。１つの例示的なアッセイでは、ヒトＣＤ４＋Ｔ細胞濃縮カラム（Ｒ＆Ｄ  ｓｙｓｔｅｍｓ）を使用して、ＰＢＭＣからヒトＴ細胞を精製する。異なる濃度の多くのＴ細胞培養物に候補を添加する。細胞を３７℃で５日間培養し、サイトカイン計測のために、各培養物から１００μｌの培地を採取する。ＯｐｔＥＩＡ  ＥＬＩＳＡ  ｋｉｔｓ（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を使用して、ＩＦＮ−γおよび他のサイトカインのレベルを計測する。３Ｈ−チミジンで細胞を標識し、さらに１８時間培養し、細胞増殖について解析する。コントロールと比較して、候補を含む培養物が、Ｔ細胞増殖の増加、ＩＬ−２および／またはＩＦＮ−γの産生の増加を示す結果は、Ｔ細胞免疫応答のチェックポイントタンパク質の阻害の遮断において、候補が有効であることを示す。
インビボアッセイ
【００９８】
別の実施形態において、候補がチェックポイントインヒビターであるかを評価するために使用されるアッセイは、インビボアッセイである。１つの例示的なアッセイでは、６〜８週齢の雌性ＡＪマウス（Ｈａｒｌａｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）を重量で６群に無作為に分ける。０日目に、２００μｌのＤＭＥＭ培地に溶解した２×１０６個のＳＡ１／Ｎ線維肉腫細胞をマウスの右脇腹に皮下移植する。ＰＢＳビヒクルまたは所定投与量の候補でマウスを処置する。１日目、４日目、８日目および１１日目に、候補またはビヒクルを含む約２００μｌのＰＢＳの腹腔内注射によって、動物に投薬する。腫瘍成長について、マウスを約６週間にわたって週２回モニタリングする。電子キャリパーを使用して、腫瘍を三次元計測し（高さ×幅×長さ）、腫瘍体積を算出する。腫瘍が腫瘍エンドポイント（１５００ｍｍ３）に達するか、またはマウスが１５％超の体重減少を示したら、マウスを安楽死させる。コントロール群と比較した候補処置群の腫瘍成長の遅延、または腫瘍エンドポイント体積（１５００ｍｍ３）に達するまでの平均時間の延長を示す結果は、候補が癌成長の阻害活性を有することを示すものである。
Ｅ．グルココルチコイドレセプターモジュレーター（ＧＲＭ）
【００９９】
本明細書中に開示される癌を処置するための併用療法はまた、癌、例えばチェックポイントインヒビター感受性癌を処置するための少なくとも１つのチェックポイントインヒビターと組み合わせて少なくとも１つの選択的なグルココルチコイドレセプターモジュレーターを伴う。例示的なＧＲＭのクラスおよびそのようなクラスの特定のメンバーが本明細書中に提供される。しかしながら、当業者は、本明細書中に記載される処置方法において使用され得る他の関連するまたは無関係のＳＧＲＭを容易に認識するだろう。
１．ステロイド骨格を有するＧＲＭ
【０１００】
いくつかの実施形態において、ステロイド骨格を有する有効量のＳＧＲＭが、癌処置のために被験体に投与される。ステロイド性ＧＲＭは、糖質コルチコイドアゴニストの基本構造の改変、すなわち、ステロイド骨格の形態の変更によって得ることができる。コルチゾールの構造は、種々の方法で改変され得る。ＧＲＡを作製するためのコルチゾールステロイド骨格の構造的改変の最もよく知られている２つのクラスとしては、１１−βヒドロキシ基の改変および１７−β側鎖の改変が挙げられる（例えば、Ｌｅｆｅｂｖｒｅ，Ｊ．Ｓｔｅｒｏｉｄ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．３３：５５７−５６３，１９８９を参照のこと）。
【０１０１】
ステロイド性ＧＲアンタゴニストの例としては、米国特許第５，９２９，０５８号に記載されているようなアンドロゲン型ステロイド化合物、ならびに米国特許第４，２９６，２０６号；同第４，３８６，０８５号；同第４，４４７，４２４号；同第４，４７７，４４５号；同第４，５１９，９４６号；同第４，５４０，６８６号；同第４，５４７，４９３号；同第４，６３４，６９５号；同第４，６３４，６９６号；同第４，７５３，９３２号；同第４，７７４，２３６号；同第４，８０８，７１０号；同第４，８１４，３２７号；同第４，８２９，０６０号；同第４，８６１，７６３号；同第４，９１２，０９７号；同第４，９２１，６３８号；同第４，９４３，５６６号；同第４，９５４，４９０号；同第４，９７８，６５７号；同第５，００６，５１８号；同第５，０４３，３３２号；同第５，０６４，８２２号；同第５，０７３，５４８号；同第５，０８９，４８８号；同第５，０８９，６３５号；同第５，０９３，５０７号；同第５，０９５，０１０号；同第５，０９５，１２９号；同第５，１３２，２９９号；同第５，１６６，１４６号；同第５，１６６，１９９号；同第５，１７３，４０５号；同第５，２７６，０２３号；同第５，３８０，８３９号；同第５，３４８，７２９号；同第５，４２６，１０２号；同第５，４３９，９１３号；同第５，６１６，４５８号、同第５，６９６，１２７号および同第６，３０３，５９１号に開示されている化合物が挙げられる。そのようなステロイド性ＧＲアンタゴニストには、コルテキソロン、デキサメタゾン−オキセタノン、１９−ノルデオキシコルチコステロン、１９−ノルプロゲステロン、コルチゾール−２１−メシレート；デキサメタゾン−２１−メシレート、１１β−（４−ジメチルアミノエトキシフェニル）−１７α−プロピニル−１７β−ヒドロキシ−４，９−エストラジエン−３−オン（ＲＵ００９）および（１７α）−１７−ヒドロキシ−１９−（４−メチルフェニル）アンドロスタ−４，９（１１）−ジエン−３−オン（ＲＵ０４４）が含まれる。
【０１０２】
ステロイド性抗糖質コルチコイドの他の例は、Ｖａｎ  Ｋａｍｐｅｎら（２００２）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．４５７（２−３）：２０７、ＷＯ  ０３／０４３６４０、ＥＰ  ０６８３１７２Ｂ１およびＥＰ  ０７６３５４１Ｂ１（これらの各々が参照により本明細書中に援用される）に開示されている。ＥＰ  ０７６３５４１Ｂ１およびＨｏｙｂｅｒｇら、Ｉｎｔ’ｌ  Ｊ．ｏｆ  Ｎｅｕｒｏ−ｐｓｙｃｈｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，５：Ｓｕｐｐ．１，Ｓ１４８（２００２）には、化合物（１１β，１７β）−１１−（１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）−１７−ヒドロキシ−１７−（１−プロピニル）エストラ−４，９−ジエン−３−オン（ＯＲＧ３４５１７）が開示されており、これは、１つの実施形態において、被験体におけるＡＣＴＨ分泌腫瘍を処置するのに有効な量で投与される。
２．１１−βヒドロキシ基の除去または置換
【０１０３】
１１−βヒドロキシ基の除去または置換を含む改変されたステロイド骨格を有する糖質コルチコイドアンタゴニストが、本発明の１つの実施形態において投与される。このクラスには、コルテキソロン、プロゲステロンおよびテストステロン誘導体を含む天然のＧＲＭならびに合成組成物（例えば、ミフェプリストン（Ｌｅｆｅｂｖｒｅら、前出））が含まれる。本発明の好ましい実施形態は、すべての１１−βアリールステロイド骨格誘導体を含む。なぜなら、いくつかの場合において、これらの化合物は、プロゲステロンレセプター（ＰＲ）結合活性を欠き得るからである（Ａｇａｒｗａｌ，ＦＥＢＳ  ２１７：２２１−２２６，１９８７）。別の実施形態において、有効な抗糖質コルチコイド剤かつ抗プロゲステロン剤である１１−βフェニル−アミノジメチルステロイド骨格誘導体が、投与される。これらの組成物は、可逆的に結合するステロイドレセプターアンタゴニストとして作用し得る。例えば、ステロイドレセプターが、１１−βフェニル−アミノジメチルステロイドに結合したとき、そのステロイドレセプターは、その天然のリガンド（例えば、ＧＲの場合、コルチゾール）に結合できない立体配座で維持され得る（Ｃａｄｅｐｏｎｄ，１９９７，前出）。
【０１０４】
合成１１−ベータフェニル−アミノジメチルステロイドには、ＲＵ４８６としても知られるミフェプリストン、すなわち１７−β−ヒドロキシ（ｈｙｄｒｏｘ）−１１−β−（４−ジメチル−アミノフェニル）１７−α−（１−プロピニル）エストラ−４，９−ジエン−３−オン）が含まれる。ミフェプリストンは、プロゲステロンレセプターと糖質コルチコイド（ＧＲ）レセプターの両方の強力なアンタゴニストであると示されている。したがって、いくつかの実施形態において、ＡＣＴＨ分泌腫瘍を処置するために投与されるＧＲＭは、ミフェプリストンまたはその塩、互変異性体もしくは誘導体である。しかしながら、他の実施形態において、ミフェプリストンの投与は、ＡＣＴＨ分泌腫瘍の処置のためのＧＲＭとして明確に除外される。
【０１０５】
ＧＲアンタゴニスト作用を有すると示された別の１１−βフェニル−アミノジメチルステロイドとしては、ジメチルアミノエトキシフェニル誘導体ＲＵ００９（ＲＵ３９．００９）である１１−β−（４−ジメチル−アミノエトキシフェニル）−１７−α−（プロピニル−１７−β−ヒドロキシ−４，９−エストラジエン−３−オン）（Ｂｏｃｑｕｅｌ，Ｊ．Ｓｔｅｒｏｉｄ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｍｏｌｅｃ．Ｂｉｏｌ．４５：２０５−２１５，１９９３を参照のこと）が挙げられる。ＲＵ４８６に関連する別のＧＲアンタゴニストは、ＲＵ０４４（ＲＵ４３．０４４）１７−β−ヒドロキシ−１７−α−１９−（４−メチル−フェニル）−アンドロスタ−４，９（１１）−ジエン−３−オン）（Ｂｏｃｑｕｅｌ，１９９３，前出）である。Ｔｅｕｔｓｃｈ，Ｓｔｅｒｏｉｄｓ  ３８：６５１−６６５，１９８１；米国特許第４，３８６，０８５号および同第４，９１２，０９７号も参照のこと。
【０１０６】
１つの実施形態は、不可逆的な抗糖質コルチコイドである組成物を含む。そのような化合物には、コルチゾール−２１−メシレート（４−プレグネン−１１−β，１７−α，２１−トリオール−３，２０−ジオン−２１−メタン−スルホネートおよびデキサメタゾン−２１−メシレート（１６−メチル−９−α−フルオロ−１，４−プレグナジエン−１１β，１７−α，２１−トリオール−３，２０−ジオン−２１−メタン−スルホネート（ｓｕｌｆｏｎｔｅ））を含む、コルチゾールのα−ケト−メタンスルホネート誘導体が含まれる。Ｓｉｍｏｎｓ，Ｊ．Ｓｔｅｒｏｉｄ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．２４：２５−３２，１９８６；Ｍｅｒｃｉｅｒ，Ｊ．Ｓｔｅｒｏｉｄ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．２５：１１−２０，１９８６；米国特許第４，２９６，２０６号を参照のこと。
３．１７−ベータ側鎖基の改変
【０１０７】
１７−β側鎖の様々な構造的改変によって得ることができるステロイド性抗糖質コルチコイドも、本発明の方法において使用される。このクラスには、合成抗糖質コルチコイド（例えば、デキサメタゾン−オキセタノン、デキサメタゾンの様々な１７，２１−アセトニド誘導体および１７−ベータ−カルボキサミド誘導体（Ｌｅｆｅｂｖｒｅ，１９８９，前出；Ｒｏｕｓｓｅａｕ，Ｎａｔｕｒｅ  ２７９：１５８−１６０，１９７９））が含まれる。
４．他のステロイド骨格改変
【０１０８】
本発明の様々な実施形態において使用されるＧＲＭは、ＧＲ−アゴニスト相互作用に起因する生物学的応答を阻害する任意のステロイド骨格改変を含む。ステロイド骨格アンタゴニストは、コルチゾールの任意の天然のまたは合成のバリエーション（例えば、Ｃ−１９メチル基を欠く副腎ステロイド、例えば、１９−ノルデオキシコルチコステロンおよび１９−ノルプロゲステロン（Ｗｙｎｎｅ，Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ  １０７：１２７８−１２８０，１９８０））であり得る。
【０１０９】
通常、１１−β側鎖置換基および特にその置換基のサイズは、ステロイドの抗糖質コルチコイド活性の程度を決定する際に重要な役割を果たし得る。ステロイド骨格のＡ環における置換も重要であり得る。例えば、１７−ヒドロキシプロペニル側鎖は、いくつかの場合において、１７−プロピニル側鎖含有化合物と比べて抗糖質コルチコイド活性を減少させ得る。
【０１１０】
当該分野で公知であり、かつ本発明の実施に適したさらなる糖質コルチコイドレセプターアンタゴニストとしては、２１−ヒドロキシ−６，１９−オキシドプロゲステロン（Ｖｉｃｅｎｔ，Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍ．５２：７４９−７５３，１９９７を参照のこと）、Ｏｒｇ３１７１０（Ｍｉｚｕｔａｎｉ，Ｊ  Ｓｔｅｒｏｉｄ  Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ．４２（７）：６９５−７０４，１９９２を参照のこと）、ＲＵ４３０４４、ＲＵ４０５５５（Ｋｉｍ，Ｊ  Ｓｔｅｒｏｉｄ  Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．６７（３）：２１３−２２，１９９８を参照のこと）およびＲＵ２８３６２が挙げられる。
５．非ステロイド性抗グルココルチコイドレセプターモジュレーター
【０１１１】
本明細書中に開示される方法に使用され得る例示的な非ステロイド性グルココルチコイドレセプターモジュレーター（ＧＲＭ）のクラスおよびそのようなクラスの特定のメンバーが本明細書中に提供される。しかしながら、当業者は、本明細書中に記載される処置方法において使用され得る他の関連するまたは無関係のグルココルチコイドレセプターモジュレーターを容易に認識するだろう。これらには、部分的にペプチド性、偽ペプチド性および非ペプチド性の分子実体を含む、タンパク質の合成模倣物およびアナログが含まれる。例えば、本発明において有用なオリゴマーペプチド模倣物としては、（α−β−不飽和）ペプチドスルホンアミド、Ｎ置換グリシン誘導体、オリゴカルバメート、オリゴ尿素ペプチド模倣物、ヒドラジノペプチド、オリゴスルホンなどが挙げられる（例えば、Ａｍｏｕｒ，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｅｐｔ．Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｒｅｓ．４３：２９７−３０４，１９９４；ｄｅ  Ｂｏｎｔ，Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ＆Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍ．４：６６７−６７２，１９９６を参照のこと）。
【０１１２】
非ステロイド性ＧＲモジュレーターの例には、米国特許第５，６９６，１２７号；同第６，５７０，０２０号；および同第６，０５１，５７３号に開示されているＧＲアンタゴニスト化合物；米国特許出願２００２００７７３５６に開示されているＧＲアンタゴニスト化合物、Ｂｒａｄｌｅｙら、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．４５，２４１７−２４２４（２００２）に開示されているグルココルチコイドレセプターアンタゴニスト、例えば、４α（Ｓ）−ベンジル−２（Ｒ）−クロロエチニル−１，２，３，４，４α，９，１０，１０α（Ｒ）−オクタヒドロ−フェナントレン−２，７−ジオール（「ＣＰ３９４５３１」）および４α（Ｓ）−ベンジル−２（Ｒ）−プロプ−１−イニル−１，２，３，４，４α，９，１０，１０α（Ｒ）−オクタヒドロ−フェナントレン−２，７−ジオール（「ＣＰ４０９０６９」）；ならびにステロイドレセプターに対して高親和性で高度に選択的なアンタゴニストである非ステロイド性化合物を記載しているＰＣＴ国際出願番号ＷＯ  ９６／１９４５８に開示されている化合物（例えば、６置換−１，２−ジヒドロ−Ｎ−保護−キノリン）が挙げられる。
【０１１３】
本発明の方法において利用され得るさらなる化合物、ならびにそのような化合物を同定および作製する方法については、米国特許第４，２９６，２０６号（上記を参照のこと）；同第４，３８６，０８５号（上記を参照のこと）；同第４，４４７，４２４号；同第４，４７７，４４５号；同第４，５１９，９４６号；同第４，５４０，６８６号；同第４，５４７，４９３号；同第４，６３４，６９５号；同第４，６３４，６９６号；同第４，７５３，９３２号；同第４，７７４，２３６号；同第４，８０８，７１０号；同第４，８１４，３２７号；同第４，８２９，０６０号；同第４，８６１，７６３号；同第４，９１２，０９７号；同第４，９２１，６３８号；同第４，９４３，５６６号；同第４，９５４，４９０号；同第４，９７８，６５７号；同第５，００６，５１８号；同第５，０４３，３３２号；同第５，０６４，８２２号；同第５，０７３，５４８号；同第５，０８９，４８８号；同第５，０８９，６３５号；同第５，０９３，５０７号；同第５，０９５，０１０号；同第５，０９５，１２９号；同第５，１３２，２９９号；同第５，１６６，１４６号；同第５，１６６，１９９号；同第５，１７３，４０５号；同第５，２７６，０２３号；同第５，３８０，８３９号；同第５，３４８，７２９号；同第５，４２６，１０２号；同第５，４３９，９１３号；および同第５，６１６，４５８号；ならびに国際公開第９６／１９４５８号（ステロイドレセプターの高親和性高選択的モジュレーター（アンタゴニスト）である非ステロイド性化合物、例えば６置換−１，２−ジヒドロＮ−１保護キノリンが記載されている）を参照のこと。
【０１１４】
いくつかの実施形態において、癌を処置するための併用療法は、縮合アザデカリン骨格、ヘテロアリールケトン縮合アザデカリン骨格またはオクタヒドロ縮合アザデカリン骨格を有する非ステロイド性ＧＲＭを伴う。
【０１１５】
縮合アザデカリン骨格を有する例示的なＧＲＭとしては、米国特許第７，９２８，２３７号；および同第８，４６１，１７２号（全体が本明明細書に援用される）に記載されているものが挙げられる。いくつかの場合において、縮合アザデカリン骨格を有するＧＲＭは、以下の構造：
【化４】
2019507159.tif 000006
（式中、
Ｌ１およびＬ２は、結合および非置換アルキレンから独立して選択されるメンバーであり；
Ｒ１は、非置換アルキル、非置換ヘテロアルキル、非置換ヘテロシクロアルキル、−ＯＲ１Ａ、−ＮＲ１ＣＲ１Ｄ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ１ＣＲ１Ｄおよび−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１Ａから選択されるメンバーであり、ここで、
Ｒ１Ａは、水素、非置換アルキルおよび非置換ヘテロアルキルから選択されるメンバーであり、
Ｒ１ＣおよびＲ１Ｄは、非置換アルキルおよび非置換ヘテロアルキルから独立して選択されるメンバーであり、
ここで、Ｒ１ＣとＲ１Ｄは、必要に応じて連結して、それらが結合している窒素とともに非置換環を形成し、ここで、前記環は、必要に応じてさらなる環窒素を含み；
Ｒ２は、式：
【化５】
2019507159.tif 000007
（式中、
Ｒ２Ｇは、水素、ハロゲン、非置換アルキル、非置換ヘテロアルキル、非置換シクロアルキル、非置換ヘテロシクロアルキル、−ＣＮおよび−ＣＦ３から選択されるメンバーであり；
Ｊは、フェニルであり；
ｔは、０〜５の整数であり；
Ｘは、−Ｓ（Ｏ２）−である）
を有し；
Ｒ５は、１〜５個のＲ５Ａ基で必要に応じて置換されるフェニルであり、ここで、
Ｒ５Ａは、水素、ハロゲン、−ＯＲ５Ａ１、−Ｓ（Ｏ２）ＮＲ５Ａ２Ｒ５Ａ３、−ＣＮおよび非置換アルキルから選択されるメンバーであり、ここで、
Ｒ５Ａ１は、水素および非置換アルキルから選択されるメンバーであり、
Ｒ５Ａ２およびＲ５Ａ３は、水素および非置換アルキルから独立して選択されるメンバーである）
またはその塩および異性体を有する。
【０１１６】
縮合アザデカリン骨格を含む化合物は、米国特許第７，９２８，２３７号に記載されているように調製され得る。例えば、縮合アザデカリン骨格は、スキーム１に記載されているように調製され得、式中、Ｒ５、Ｒ１Ａ、Ｒ１Ｃ、Ｒ１Ｄ、Ｌ２およびＲ２は、本発明の化合物において上記で定義されるとおりである。スキーム１では、合成を容易にするために、Ｌ２−Ｒ２は、ＢＯＣまたはベンジルなどの好適な保護基で置換され得る。アルコール溶媒（例えば、メタノール、エタノールまたはｔｅｒｔ−ブタノール）中、塩基（例えば、カリウムまたはナトリウムアルコキシド）で１を処理し、続いて、メチルビニルケトン（ＭＶＫ）を添加することを伴うロビンソンアネレーション反応によって、ケト−エステル１をエノン３に直接変換する。代表的には、反応を０〜２５０℃で行う。
【化６】
2019507159.tif 000008
【０１１７】
ヘテロアリールケトン縮合アザデカリン骨格を有する例示的なＧＲＭとしては、米国特許出願公開第２０１４／００３８９２６号（全体が本明細書に援用される）に記載されているものが挙げられる。いくつかの場合において、ヘテロアリールケトン縮合アザデカリン骨格を有するＧＲＭは、以下の構造：
【化７】
2019507159.tif 000009
（式中、
Ｒ１は、Ｒ１ａから各々独立して選択される１〜４個の基で必要に応じて置換される、５〜６個の環メンバーならびにＮ、ＯおよびＳからなる群より各々独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を有するヘテロアリール環であり；
各Ｒ１ａは、独立して、水素、Ｃ１−６アルキル、ハロゲン、Ｃ１−６ハロアルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６ハロアルコキシ、−ＣＮ、Ｎ−オキシド、Ｃ３−８シクロアルキルおよびＣ３−８ヘテロシクロアルキルからなる群より選択され；
環Ｊは、シクロアルキル環、ヘテロシクロアルキル環、アリール環およびヘテロアリール環からなる群より選択され、ここで、そのヘテロシクロアルキル環およびヘテロアリール環は、５〜６個の環メンバーならびにＮ、ＯおよびＳからなる群より各々独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を有し；
各Ｒ２は、独立して、水素、Ｃ１−６アルキル、ハロゲン、Ｃ１−６ハロアルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６ハロアルコキシ、Ｃ１−６アルキル−Ｃ１−６アルコキシ、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＲ２ａＲ２ｂ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ２ａ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２ａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２ａＲ２ｂ、−ＳＲ２ａ、−Ｓ（Ｏ）Ｒ２ａ、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ２ａ、Ｃ３−８シクロアルキルおよびＣ３−８ヘテロシクロアルキルからなる群より選択され、ここで、そのヘテロシクロアルキル基は、１〜４個のＲ２ｃ基で必要に応じて置換されるか；
あるいは、同じ炭素に連結している２つのＲ２基は、一体となって、オキソ基（＝Ｏ）を形成するか；
あるいは、２つのＲ２基は、一体となって、５〜６個の環メンバーならびにＮ、ＯおよびＳからなる群より各々独立して選択される１〜３個のヘテロ原子を有するヘテロシクロアルキル環を形成し、ここで、そのヘテロシクロアルキル環は、１〜３個のＲ２ｄ基で必要に応じて置換され；
Ｒ２ａおよびＲ２ｂは、各々独立して、水素およびＣ１−６アルキルからなる群より選択され；
各Ｒ２ｃは、独立して、水素、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６ハロアルコキシ、−ＣＮおよび−ＮＲ２ａＲ２ｂからなる群より選択され；
各Ｒ２ｄは、独立して、水素およびＣ１−６アルキルからなる群より選択されるか、または同じ環原子に結合している２つのＲ２ｄ基は、一体となって、（＝Ｏ）を形成し；
Ｒ３は、１〜４個のＲ３ａ基で各々必要に応じて置換される、フェニルおよびピリジルからなる群より選択され；
各Ｒ３ａは、独立して、水素、ハロゲンおよびＣ１−６ハロアルキルからなる群より選択され；
下付き文字ｎは、０〜３の整数である）
またはその塩および異性体を有する。
【０１１８】
縮合アザデカリン骨格を含む化合物は、スキーム２に記載されているように調製され得る。
スキーム２
【化８】
2019507159.tif 000010
【０１１９】
オクタヒドロ縮合アザデカリン骨格を有する例示的なＧＲＭとしては、２０１３年１１月２５日に出願されたＯｃｔａｈｙｄｒｏ  Ｆｕｓｅｄ  Ａｚａｄｅｃａｌｉｎ  Ｇｌｕｃｏｃｏｒｔｉｃｏｉｄ  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ  Ｍｏｄｕｌａｔｏｒｓと題されるＡｔｔｏｒｎｅｙ  Ｄｏｃｋｅｔ  Ｎｏ．８５１７８−８８７８８４（００７８００ＵＳ）の米国特許仮出願第６１／９０８，３３３号（全体が本明細書に援用される）に記載されているものが挙げられる。いくつかの場合において、オクタヒドロ縮合アザデカリン骨格を有するＧＲＭは、以下の構造：
【化９】
2019507159.tif 000011
（式中、
Ｒ１は、Ｒ１ａから各々独立して選択される１〜４個の基で必要に応じて置換される、５〜６個の環メンバーならびにＮ、ＯおよびＳからなる群より各々独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を有するヘテロアリール環であり；
各Ｒ１ａは、独立して、水素、Ｃ１−６アルキル、ハロゲン、Ｃ１−６ハロアルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６ハロアルコキシ、Ｎ−オキシドおよびＣ３−８シクロアルキルからなる群より選択され；
環Ｊは、５〜６個の環メンバーならびにＮ、ＯおよびＳからなる群より各々独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を有するアリール環およびヘテロアリール環からなる群より選択され；
各Ｒ２は、独立して、水素、Ｃ１−６アルキル、ハロゲン、Ｃ１−６ハロアルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６ハロアルコキシ、Ｃ１−６アルキル−Ｃ１−６アルコキシ、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＮＲ２ａＲ２ｂ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ２ａ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ２ａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ２ａＲ２ｂ、−ＳＲ２ａ、−Ｓ（Ｏ）Ｒ２ａ、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ２ａ、Ｃ３−８シクロアルキル、ならびにＮ、ＯおよびＳからなる群より各々独立して選択される１〜３個のヘテロ原子を有するＣ３−８ヘテロシクロアルキルからなる群より選択されるか；
あるいは、隣接する環原子上の２つのＲ２基は、一体となって、５〜６個の環メンバーならびにＮ、ＯおよびＳからなる群より各々独立して選択される１〜３個のヘテロ原子を有するヘテロシクロアルキル環を形成し、ここで、そのヘテロシクロアルキル環は、１〜３個のＲ２ｃ基で必要に応じて置換され；
Ｒ２ａ、Ｒ２ｂおよびＲ２ｃは、各々独立して、水素およびＣ１−６アルキルからなる群より選択され；
各Ｒ３ａは、独立してハロゲンであり；
下付き文字ｎは、０〜３の整数である）
またはその塩および異性体を有する。
【０１２０】
オクタヒドロ縮合アザデカリン骨格を含む化合物は、スキーム３に記載されているように調製され得る。
スキーム３
【化１０】
2019507159.tif 000012
Ｆ．選択的なグルココルチコイドレセプターモジュレーター（ＳＧＲＭ）の同定
【０１２１】
検査化合物がＳＧＲＭであるかを判定するために、最初に、化合物をアッセイに供して、ＧＲに結合してＧＲ媒介性活性を阻害するその能力を計測し、それにより、化合物がグルココルチコイドレセプターモジュレーターであるかを判定する。化合物がグルココルチコイドレセプターモジュレーターであることが確認された場合、化合物を特異性検査に供して、化合物が、非ＧＲタンパク質、例えばエストロゲンレセプター、プロゲステロンレセプター、アンドロゲンレセプターまたはミネラルコルチコイドレセプターと比較してＧＲに特異的に結合し得るかを判定する。１つの実施形態において、ＳＧＲＭは、非ＧＲタンパク質よりも実質的に高い親和性、例えば少なくとも１０倍高い親和性でＧＲに結合する。ＳＧＲＭは、非ＧＲタンパク質への結合と比べて、ＧＲへの結合について１００倍、１０００倍またはそれを超える選択性を示し得る。
ｉ．結合アッセイ
【０１２２】
グルココルチコイドレセプターに結合する検査化合物の能力は、様々なアッセイを使用して、例えば、グルココルチコイドレセプターへの結合についてデキサメタゾンなどのグルココルチコイドレセプターリガンドと競合する検査化合物の能力についてスクリーニングすることによって計測され得る。当業者は、そのような競合結合アッセイを実施するための多くの方法があることを認識するであろう。いくつかの実施形態において、グルココルチコイドレセプターを標識グルココルチコイドレセプターリガンドとともにプレインキュベートし、次いで、検査化合物と接触させる。この種類の競合結合アッセイはまた、本明細書中では結合置換アッセイとも称され得る。グルココルチコイドレセプターに結合した標識リガンドの量の減少は、検査化合物がグルココルチコイドレセプターに結合することを示す。いくつかの場合において、標識リガンドは、蛍光標識化合物（例えば、蛍光標識ステロイドまたはステロイドアナログ）である。あるいは、グルココルチコイドレセプターへの検査化合物の結合は、標識検査化合物を用いて直接計測され得る。この後者の種類のアッセイは、直接結合アッセイと称される。
【０１２３】
直接結合アッセイおよび競合結合アッセイは両方とも、様々な異なるフォーマットで使用され得る。フォーマットは、イムノアッセイおよびレセプター結合アッセイにおいて使用されるフォーマットと同様のものであり得る。競合結合アッセイおよび直接結合アッセイを含む結合アッセイのための様々なフォーマットの説明については、Ｂａｓｉｃ  ａｎｄ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  ７ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ（Ｄ．Ｓｔｉｔｅｓ  ａｎｄ  Ａ．Ｔｅｒｒ  ｅｄ．）１９９１；Ｅｎｚｙｍｅ  Ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ，Ｅ．Ｔ．Ｍａｇｇｉｏ，ｅｄ．，ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ，Ｂｏｃａ  Ｒａｔｏｎ，Ｆｌｏｒｉｄａ（１９８０）；および“Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ａｎｄ  Ｔｈｅｏｒｙ  ｏｆ  Ｅｎｚｙｍｅ  Ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙｓ，”Ｐ．Ｔｉｊｓｓｅｎ，Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  ｉｎ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｅｌｓｅｖｉｅｒ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ  Ｂ．Ｖ．Ａｍｓｔｅｒｄａｍ（１９８５）（これらの各々が、参照により本明細書中に援用される）を参照のこと。
【０１２４】
固相競合結合アッセイでは、例えば、サンプル化合物は、固体表面に結合した結合剤上の特定の結合部位について、標識分析物と競合し得る。このタイプのフォーマットでは、標識分析物は、グルココルチコイドレセプターリガンドであり得、結合剤は、固相に結合したグルココルチコイドレセプターであり得る。あるいは、標識分析物は、標識グルココルチコイドレセプターであり得、結合剤は、固相グルココルチコイドレセプターリガンドであり得る。結合アッセイでは、捕捉剤に結合した標識分析物の濃度は、検査化合物の競合能力に反比例する。
【０１２５】
あるいは、競合結合アッセイは、液相において行われ得、未結合標識タンパク質から結合標識タンパク質を分離するために、当該分野で公知の様々な手法のいずれかが使用され得る。例えば、結合リガンドと過剰な結合リガンドとを、または結合検査化合物と過剰な未結合検査化合物とを区別するために、いくつかの手順が開発されている。これらは、スクロース勾配における沈降、ゲル電気泳動またはゲル等電点電気泳動による結合複合体の同定；硫酸プロタミンを用いたレセプター−リガンド複合体の沈殿またはヒドロキシルアパタイト上への吸着；およびデキストランコーティング木炭（ＤＣＣ）上への吸着または固定化抗体への結合による未結合化合物またはリガンドの除去を含む。分離後、結合リガンドまたは検査化合物の量が決定される。
【０１２６】
あるいは、分離工程が不要な均一結合アッセイが実施され得る。例えば、グルココルチコイドレセプター上の標識は、そのリガンドまたは検査化合物へのグルココルチコイドレセプターの結合によって変化され得る。結合アッセイの終了時における標識の計測が、結合状態のグルココルチコイドレセプターの検出または定量を可能にするように、標識グルココルチコイドレセプターにおけるこの変化は、標識によって放出されるシグナルの減少または増加をもたらす。多種多様の標識が使用され得る。構成要素は、いくつかの方法のうちのいずれか１つによって標識され得る。有用な放射性標識としては、３Ｈ、１２５Ｉ、３５Ｓ、１４Ｃまたは３２Ｐが組み込まれたものが挙げられる。有用な非放射性標識としては、フルオロフォア、化学発光剤、リン光性剤、電気化学発光剤などが組み込まれたものが挙げられる。蛍光剤は、タンパク質構造のシフトを検出するために使用される解析手法、例えば蛍光異方性および／または蛍光偏光において特に有用である。標識の選択は、必要な感度、化合物とのコンジュゲーションの容易性、安定性要件および利用可能な計測に依存する。使用され得る様々な標識またはシグナル生成システムの総説については、米国特許第４，３９１，９０４号（これは、すべての目的のためにその全体が参照により本明細書中に援用される）を参照のこと。標識は、当該分野で周知の方法にしたがって、アッセイの所望の成分に直接的または間接的にカップリングされ得る。いくつかの場合において、ＧＲに対する既知の親和性を有する蛍光標識リガンド（例えば、ステロイドまたはステロイドアナログ）の存在下で、検査化合物とＧＲとを接触させ、標識リガンドの蛍光偏光を計測することによって、結合および遊離標識リガンドの量を推定する。
ｉｉ．ＨｅｐＧ２チロシンアミノトランスフェラーゼ（ＴＡＴ）アッセイ
【０１２７】
ＧＲに対する所望の結合親和性を示した化合物は、ＧＲ媒介性活性の阻害におけるそれらの活性について検査される。１つのアプローチでは、化合物をチロシンアミノトランスフェラーゼアッセイ（ＴＡＴ）に供し、デキサメタゾンによるチロシンアミノトランスフェラーゼ活性の誘導を阻害する検査化合物の能力を評価する。実施例１を参照のこと。本明細書中に開示される方法に好適なＧＲモジュレーターは、１０マイクロモル未満のＩＣ５０（半最大阻害濃度）を有する。
ｉｉｉ．細胞ベースのアッセイ
【０１２８】
グルココルチコイドレセプターを含む全細胞または細胞画分を伴う細胞ベースのアッセイもまた、検査化合物の結合またはグルココルチコイドレセプターの活性のモジュレーションについてアッセイするために使用され得る。本発明の方法にしたがって使用され得る例示的な細胞型としては、例えば、任意の哺乳動物細胞、例えば白血球、例えば好中球、単球、マクロファージ、好酸球、好塩基球、肥満細胞およびリンパ球、例えばＴ細胞およびＢ細胞、白血病細胞、バーキットリンパ腫細胞、腫瘍細胞（マウス乳房腫瘍ウイルス細胞を含む）、内皮細胞、線維芽細胞、心臓細胞、筋肉細胞、乳房腫瘍細胞、卵巣癌腫、子宮頸癌腫、神経膠芽細胞腫、肝臓細胞、腎臓細胞、神経細胞ならびに真菌細胞（酵母を含む）が挙げられる。細胞は、初代細胞または腫瘍細胞または他の種類の不死細胞株であり得る。当然のことながら、グルココルチコイドレセプターは、内因性型のグルココルチコイドレセプターを発現しない細胞において発現され得る。
【０１２９】
いくつかの場合において、グルココルチコイドレセプターの断片およびタンパク質融合物がスクリーニングに使用され得る。グルココルチコイドレセプターリガンドとの結合について競合する分子が望まれる場合、使用されるＧＲ断片は、リガンド（例えば、デキサメタゾン）に結合することができる断片である。あるいは、ＧＲの任意の断片を標的として使用して、グルココルチコイドレセプターに結合する分子を同定し得る。グルココルチコイドレセプター断片は、例えば、グルココルチコイドレセプターの少なくとも２０個、３０個、４０個、５０個のアミノ酸から、１個を除くすべてのアミノ酸を含むタンパク質までの任意の断片を含み得る。
【０１３０】
いくつかの実施形態において、グルココルチコイドレセプター活性化によってトリガーされるシグナル伝達の減少は、グルココルチコイドレセプターモジュレーターを同定するために使用される。グルココルチコイドレセプターのシグナル伝達活性は、多くの方法で決定され得る。例えば、下流分子事象は、シグナル伝達活性を決定するためにモニタリングされ得る。下流事象は、グルココルチコイドレセプターの刺激の結果として生じる活性または発現を含む。非変化細胞における転写活性化および拮抗作用の機能評価において有用な例示的な下流事象としては、いくつかのグルココルチコイド応答エレメント（ＧＲＥ）依存性遺伝子（ＰＥＰＣＫ、チロシンアミノトランスフェラーゼ、アロマターゼ）のアップレギュレーションが挙げられる。さらに、ＧＲ活性化に対して感受性の特定の細胞型が使用され得、例えば骨芽細胞におけるオステオカルシン発現（これは、グルココルチコイドによってダウンレギュレートされる）；ＰＥＰＣＫおよびグルコース−６−リン酸（Ｇ−６−Ｐａｓｅ）のグルココルチコイド媒介性アップレギュレーションを示す初代肝細胞である。ＧＲＥ媒介性遺伝子発現はまた、周知のＧＲＥ制御性配列（例えば、レポーター遺伝子構築物の上流にトランスフェクトされたマウス乳腺腫瘍ウイルスプロモーター（ＭＭＴＶ））を使用して、トランスフェクト細胞株において実証されている。有用なレポーター遺伝子構築物の例としては、ルシフェラーゼ（ｌｕｃ）、アルカリホスファターゼ（ＡＬＰ）およびクロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ（ＣＡＴ）が挙げられる。転写抑制の機能評価は、単球またはヒト皮膚線維芽細胞などの細胞株において行われ得る。有用な機能的アッセイとしては、ＩＬ−１ベータ刺激性ＩＬ−６発現；コラゲナーゼ、シクロオキシゲナーゼ−２および様々なケモカイン（ＭＣＰ−１、ＲＡＮＴＥＳ）のダウンレギュレーション；ＬＰＳ刺激性サイトカイン放出、例えばＴＮＦα；またはトランスフェクト細胞株においてＮＦｋＢもしくはＡＰ−１転写因子によって制御される遺伝子の発現を計測するものが挙げられる。
【０１３１】
全細胞アッセイにおいて検査された化合物はまた、細胞傷害アッセイにおいて検査され得る。細胞傷害アッセイは、感知効果が、非グルココルチコイドレセプター結合細胞効果に起因する程度を決定するために使用される。例示的な実施形態において、細胞傷害アッセイは、構成的に活性な細胞と検査化合物とを接触させることを含む。細胞活性の任意の減少は、細胞傷害効果を示す。
ｉｖ．さらなるアッセイ
【０１３２】
本発明の方法において利用される組成物を同定するために使用され得る多くのアッセイのさらなる例示は、インビボにおけるグルココルチコイド活性に基づくアッセイである。例えば、グルココルチコイドによって刺激された細胞におけるＤＮＡへの３Ｈ−チミジンの取り込みを阻害する推定ＧＲモジュレーターの能力を評価するアッセイが使用され得る。あるいは、推定ＧＲモジュレーターは、肝癌組織培養ＧＲへの結合について３Ｈ−デキサメタゾンと競合（ｃｏｍｐｌｅｔｅ）し得る（例えば、Ｃｈｏｉら、Ｓｔｅｒｏｉｄｓ  ５７：３１３−３１８，１９９２を参照のこと）。別の例として、３Ｈ−デキサメタゾン−ＧＲ複合体の核結合を遮断する推定ＧＲモジュレーターの能力が使用され得る（Ａｌｅｘａｎｄｒｏｖａら、Ｊ．Ｓｔｅｒｏｉｄ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．４１：７２３−７２５，１９９２）。（Ｊｏｎｅｓ，Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｊ．２０４：７２１−７２９，１９８２に記載されているように）推定ＧＲモジュレーターをさらに同定するために、レセプター結合動態によってグルココルチコイドアゴニストとモジュレーターとを区別することができる動態アッセイも使用され得る。
【０１３３】
別の実例では、抗グルココルチコイド活性を同定するために、Ｄａｕｎｅ，Ｍｏｌｅｃ．Ｐｈａｒｍ．１３：９４８−９５５，１９７７；および米国特許第４，３８６，０８５号に記載されているアッセイが使用され得る。簡潔に言えば、デキサメタゾンを含む栄養培地中で、副腎切除ラットの胸腺細胞を様々な濃度の検査化合物（推定ＧＲモジュレーター）とともにインキュベートする。３Ｈ−ウリジンを細胞培養物に添加し、これをさらにインキュベートし、ポリヌクレオチドへの放射性標識の組み込みの程度を計測する。グルココルチコイドアゴニストは、組み込まれる３Ｈ−ウリジンの量を減少させる。したがって、ＧＲモジュレーターは、この効果に拮抗するであろう。
ｖ．選択性
【０１３４】
次いで、上記で選択されたＧＲモジュレーターを選択性アッセイに供して、それらがＳＧＲＭであるかを判定する。代表的には、選択性アッセイは、非グルココルチコイドレセプタータンパク質への結合の程度について、インビトロでグルココルチコイドレセプターに結合する化合物を検査することを含む。選択性アッセイは、上記のように、インビトロでまたは細胞ベースのシステムで実施され得る。結合は、抗体、レセプター、酵素などを含む任意の好適な非グルココルチコイドレセプタータンパク質に対して検査され得る。例示的な実施形態において、非グルココルチコイドレセプター結合タンパク質は、細胞表面レセプターまたは核内レセプターである。別の例示的な実施形態において、非グルココルチコイドレセプタータンパク質は、ステロイドレセプター、例えばエストロゲンレセプター、プロゲステロンレセプター、アンドロゲンレセプターまたはミネラロコルチコイドレセプターである。
【０１３５】
ＭＲと比べたＧＲに対するアンタゴニストの選択性は、当業者に公知の様々なアッセイを使用して計測され得る。例えば、特定のアンタゴニストは、ＭＲと比較してＧＲに結合するアンタゴニストの能力を計測することによって同定され得る（例えば、米国特許第５，６０６，０２１号；同５，６９６，１２７号；同５，２１５，９１６号；同５，０７１，７７３号を参照のこと）。そのような解析は、直接結合アッセイを使用して、または公知のリガンドの存在下における精製ＧＲもしくはＭＲへの競合結合を評価することによって実施され得る。例示的なアッセイでは、高レベルでグルココルチコイドレセプターまたはミネラコルチコイドレセプターを安定発現する細胞（例えば、米国特許第５，６０６，０２１号を参照のこと）を精製レセプターの供給源として使用する。次いで、レセプターに対するリガンドの親和性を直接計測する。次いで、本発明の方法において使用するために、ＭＲと比べてＧＲに対して少なくとも１０倍、１００倍、多くの場合には１０００倍高い親和性を示すＧＲモジュレーターを選択する。
【０１３６】
選択性アッセイはまた、ＧＲ媒介性活性を阻害するがＭＲ媒介性活性を阻害しない能力をアッセイすることを含み得る。そのような選択的ＧＲモジュレーターを同定する１つの方法は、トランスフェクションアッセイを使用して、レポーター構築物の活性化を防止するアンタゴニストの能力を評価することである（例えば、Ｂｏｃｑｕｅｌら、Ｊ．Ｓｔｅｒｏｉｄ  Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｍｏｌｅｃ．Ｂｉｏｌ．４５：２０５−２１５，１９９３；米国特許第５，６０６，０２１号、同第５，９２９，０５８号を参照のこと）。例示的なトランスフェクションアッセイでは、レセプターをコードする発現プラスミドと、レセプター特異的制御エレメントに連結されたレポーター遺伝子を含むレポータープラスミドとを、好適なレセプター陰性宿主細胞にコトランスフェクトする。次いで、レポータープラスミドのホルモン応答性プロモーター／エンハンサーエレメントを活性化することができるホルモン（例えば、コルチゾールまたはそのアナログ）の存在下および非存在下で、トランスフェクト宿主細胞を培養する。次に、レポーター遺伝子配列の産物の誘導（すなわち、存在）について、トランスフェクト培養宿主細胞をモニタリングする。最後に、アンタゴニストの存在下および非存在下でレポーター遺伝子の活性を決定することによって、（発現プラスミド上のレセプターＤＮＡ配列によってコードされ、トランスフェクト培養宿主細胞において産生される）ホルモンレセプタータンパク質の発現および／またはステロイド結合能力を計測する。ＧＲおよびＭＲレセプターの公知のアンタゴニストと比較して、化合物のアンタゴニスト活性を決定し得る（例えば、米国特許第５，６９６，１２７号を参照のこと）。次いで、参照アンタゴニスト化合物と比べた各化合物について観察された最大応答率として、有効性を報告する。次いで、本明細書中に開示される方法において使用するために、ＭＲ、ＰＲまたはＡＲと比べてＧＲに対して少なくとも１００倍、多くの場合には１０００倍またはそれを超える活性を示すＧＲモジュレーターを選択する。
【０１３７】
本明細書中に開示される方法において使用され得る例示的なＳＧＲＭは、以下の構造：
【化１１】
2019507159.tif 000013
を有するＣＯＲＴ１２５１３４、すなわち（Ｒ）−（１−（４−フルオロフェニル）−６−（（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）スルホニル）−４，４ａ，５，６，７，８−ヘキサヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｇ］イソキノリン−４ａ−イル）（４−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）メタノンである。
【０１３８】
本明細書中に開示される方法において使用され得る別の例示的なＳＧＲＭは、以下の構造：
【化１２】
2019507159.tif 000014
を有するＣＯＲＴ１２５２８１、すなわち（（４ａＲ，８ａＳ）−１−（４−フルオロフェニル）−６−（（２−メチル−２Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）スルホニル）−４，４ａ，５，６，７，８，８ａ，９−オクタヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［３，４−ｇ］イソキノリン−４ａ−イル）（４−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）メタノンである。
ｇ．薬学的組成物および投与
ｉ．製剤
【０１３９】
いくつかの実施形態において、本発明は、薬学的に許容され得る賦形剤と、ＳＧＲＭと、薬学的に許容され得る賦形剤と、ＣＩＣまたはＣＩＡとを含む薬学的組成物を提供する。
【０１４０】
本明細書中に開示されるＳＧＲＭ、ＣＩＣまたはＣＩＡのいずれかは、薬学的に許容され得るキャリアと一緒に製剤化され、投与され得る。そのような組成物は、（例えば、２つまたはそれを超える異なる）本発明の抗体またはイムノコンジュゲートまたは二重特異性分子の１つまたは組み合わせを含み得る。例えば、本発明の薬学的組成物は、標的抗原上の異なるエピトープに結合するかまたは相補的活性を有する抗体（またはイムノコンジュゲートまたは二重特異性物）の組み合わせを含み得る。
【０１４１】
本発明の薬学的組成物は、多種多様の経口、非経口および局所的剤形で調製され得る。好ましくはＳＧＲＭおよびＣＩＣのための経口調製物としては、患者による経口摂取に適した、錠剤、丸剤、散剤、糖衣錠、カプセル剤、液剤、舐剤、ゲル、シロップ、スラリー、懸濁液などが挙げられる。薬学的組成物はまた、注射によって、すなわち、静脈内に、筋肉内に、皮内に、皮下に、十二指腸内に、または腹腔内に、投与され得る。また、薬学的組成物は、吸入によって、例えば、鼻腔内に投与され得る。さらに、非ステロイド性ＳＧＲＭは、経皮的に投与され得る。したがって、本発明はまた、薬学的に許容され得るキャリアまたは賦形剤と、ＳＧＲＭまたはチェックポイントインヒビターとを含む薬学的組成物を提供する。投与経路に応じて、活性化合物を材料内にコーティングして、酵素、酸、および化合物を不活性化し得る他の天然条件の作用から化合物を保護し得る。
【０１４２】
本発明の薬学的組成物は塩として提供され得、塩酸、硫酸、酢酸、乳酸、酒石酸、リンゴ酸、コハク酸などを含むがこれらに限定されない多くの酸で形成され得る。塩は、水性溶媒または他の極性溶媒中で、対応する遊離塩基形態よりも可溶性である傾向がある。他の場合では、調製物は、４．５〜５．５のｐＨ範囲の１ｍＭ〜５０ｍＭヒスチジン、０．１％〜２％スクロース、２％〜７％マンニトール中の凍結乾燥散剤であり得、使用前に緩衝液と混ぜ合わされる。
【０１４３】
ＳＧＲＭまたはＣＩＣまたはＣＩＡから薬学的組成物を調製する場合、薬学的に許容され得るキャリアは、固体または液体であり得る。固体の形態の調製物としては、散剤、錠剤、丸剤、カプセル剤、カシェ剤、坐剤および分散性顆粒剤が挙げられる。固体のキャリアは、希釈剤、香味料、結合剤、保存剤、錠剤崩壊剤または封入材料としても作用し得る１つまたはそれを超える物質であり得る。製剤化および投与のための手法に関する詳細は、科学文献および特許文献に十分に記載されており、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｍａａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ，Ｅａｓｔｏｎ  ＰＡ（「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ」）の最新版を参照のこと。
【０１４４】
散剤において、キャリアは、微粉化された固体であり、それは、微粉化された活性な成分とともに混合物中に存在する。錠剤において、活性な成分は、必要な結合特性を有するキャリアと好適な比率で混合され、所望の形状およびサイズに圧縮される。
【０１４５】
散剤および錠剤は、好ましくは５％または１０％〜７０％の活性化合物を含む。好適なキャリアは、炭酸マグネシウム、ステアリン酸マグネシウム、タルク、糖、ラクトース、ペクチン、デキストリン、デンプン、ゼラチン、トラガント、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、低融点ろう、カカオバターなどである。用語「調製物」は、他のキャリアの有無にかかわらず活性な成分がキャリアに取り囲まれてそれに結合しているカプセルを提供するキャリアとして封入材料を用いた活性化合物の製剤化を含むことを意図する。同様に、カシェおよびロゼンジも含まれる。錠剤、散剤、カプセル、丸剤、カシェおよびロゼンジは、経口投与に好適な固体剤形として使用され得る。
【０１４６】
好適な固体賦形剤は、炭水化物またはタンパク質充填剤であり、糖（ラクトース、スクロース、マンニトールまたはソルビトールを含む）；トウモロコシ、コムギ、イネ、ジャガイモまたは他の植物由来のデンプン；セルロース（例えば、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチル−セルロースまたはカルボキシメチルセルロースナトリウム）；およびゴム（アラビアおよびトラガントを含む）；ならびにタンパク質（例えば、ゼラチンおよびコラーゲン）が挙げられるが、これらに限定されない。所望であれば、崩壊剤または可溶化剤（例えば、架橋ポリビニルピロリドン、寒天、アルギン酸またはその塩（例えば、アルギン酸ナトリウム））を加えてもよい。
【０１４７】
糖衣錠コアには、アラビアゴム、タルク、ポリビニルピロリドン、カーボポールゲル、ポリエチレングリコールおよび／もしくは二酸化チタン、ラッカー溶液ならびに好適な有機溶媒または溶媒混合物も含み得る好適なコーティング剤（例えば、濃縮された糖の溶液）が提供される。生成物の識別のため、または活性な化合物の量（すなわち、投与量）を特徴付けるために、染料または色素が、錠剤または糖衣錠コーティングに加えられてもよい。本発明の薬学的調製物はまた、例えば、ゼラチンからできた押し込み型カプセル、ならびにゼラチンおよびコーティング剤（例えば、グリセロールまたはソルビトール）からできた密封された軟カプセルを使用して、経口的に使用され得る。押し込み型カプセルは、充填剤または結合剤（例えば、ラクトースまたはデンプン）、潤滑剤（例えば、タルクまたはステアリン酸マグネシウム）および必要に応じて安定剤と混合されたＧＲモジュレーターを含み得る。軟カプセルでは、ＧＲモジュレーター化合物は、安定剤を含むまたは含まない好適な液体（例えば、脂肪油、流動パラフィンまたは液体ポリエチレングリコール）に溶解または懸濁され得る。
【０１４８】
液体形態調製物としては、溶液、懸濁液およびエマルジョン、例えば水または水／プロピレングリコール溶液が挙げられる。非経口注射では、液体調製物は、ポリエチレングリコール水溶液の溶液中で製剤化され得る。注射用途に好適な薬学的組成物としては、滅菌水溶液（水溶性の場合）または分散液、および滅菌注射用溶液または分散液の即時調製のための滅菌散剤が挙げられる。すべての場合において、組成物は滅菌されなければならず、それが容易にシリンジによって送達され得る程度に流動性でなければならない。それは、製造および貯蔵の条件下で安定でなければならず、細菌および真菌などの微生物の汚染作用から保護されなければならない。キャリアは、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコールおよび液体ポリエチレングリコールなど）およびそれらの好適な混合物を含む溶媒または分散媒であり得る。好適な流動性は、例えば、レシチンなどのコーティングの使用によって、分散液の場合には必要な粒径の維持によって、および界面活性剤の使用によって維持され得る。微生物の作用の保護は、様々な抗菌剤および抗真菌剤、例えばパラベン、クロロブタノール、フェノール、アスコルビン酸、チメロサールなどによって達成され得る。多くの場合、等張剤、例えば糖、ポリアルコール、例えばマンニトール、ソルビトール、塩化ナトリウムを組成物に含めることが好ましい。注射用組成物の持続吸収は、吸収を遅延させる薬剤、例えばモノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンを組成物に含めることによってもたらされ得る。
【０１４９】
滅菌注射溶液は、必要に応じて、上記に列挙されている成分の１つまたは組み合わせを含む好適な溶媒に必要量のチェックポイントインヒビター、例えばＣＩＡを組み込み、続いて、ろ過滅菌することによって調製され得る。一般に、分散液は、基本分散媒と、上記に列挙されているものからの必要な他の成分とを含む滅菌ビヒクルに活性化合物を組み込むことによって調製される。滅菌注射溶液の調製のための滅菌散剤の場合、好ましい調製方法は、予め滅菌ろ過されたその溶液から活性な成分＋任意のさらなる所望の成分の散剤を生じさせる真空乾燥および凍結乾燥である。
【０１５０】
経口用途に好適な水溶液は、活性な成分を水に溶解し、所望により好適な着色料、香味料、安定剤および増粘剤を添加することによって調製され得る。経口使用に適した水性懸濁液は、微粉化された活性な成分を、粘稠性材料（例えば、天然ゴムまたは合成ゴム、樹脂、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、トラガントゴムおよびアラビアゴム）および分散剤または湿潤剤（例えば、天然に存在するホスファチド（例えば、レシチン）、アルキレンオキシドと脂肪酸との縮合物（例えば、ステアリン酸ポリオキシエチレン）、エチレンオキシドと長鎖脂肪族アルコールとの縮合物（例えば、ヘプタデカエチレンオキシセタノール）、エチレンオキシドと脂肪酸およびヘキシトールに由来する部分エステルとの縮合物（例えば、ポリオキシエチレンソルビトールモノ−オレエート）またはエチレンオキシドと脂肪酸およびヘキシトール無水物に由来する部分エステルとの縮合物（例えば、ポリオキシエチレンソルビタンモノ−オレエート）とともに水に分散させることによって、生成され得る。その水性懸濁液は、１つまたはそれを超える保存剤（例えば、ｐ−ヒドロキシ安息香酸エチルまたはｐ−ヒドロキシ安息香酸ｎ−プロピル）、１つまたはそれを超える着色剤、１つまたはそれを超える香味料および１つまたはそれを超える甘味剤（例えば、スクロース、アスパルテームまたはサッカリン）も含み得る。製剤は、オスモル濃度について調整され得る。
【０１５１】
使用する直前に経口投与用の液体の形態の調製物に変換されることが意図された固体の形態の調製物も含められる。そのような液体の形態としては、溶液、懸濁液およびエマルジョンが挙げられる。これらの調製物は、活性な成分に加えて、着色剤、香料、安定剤、緩衝剤、人工および天然の甘味料、分散剤、増粘剤、可溶化剤などを含み得る。
【０１５２】
ＳＧＲＭまたはチェックポイントインヒビターを植物油（例えば、落花生油、オリーブ油、ゴマ油またはやし油）または鉱油（例えば、流動パラフィン）；またはこれらの混合物に懸濁することによって、油性懸濁液が製剤化され得る。その油性懸濁液は、増粘剤（例えば、蜜ろう、固形パラフィンまたはセチルアルコール）を含み得る。甘味剤（例えば、グリセロール、ソルビトールまたはスクロース）は、美味な経口調製物を提供するために加えられ得る。これらの製剤は、アスコルビン酸などの酸化防止剤を加えることによって、保存することができる。注射可能な油性ビヒクルの例として、Ｍｉｎｔｏ，Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．２８１：９３−１０２，１９９７を参照のこと。本発明の薬学的製剤は、水中油型エマルジョンの形態でもあり得る。油相は、上に記載された植物油もしくは鉱油またはこれらの混合物であり得る。好適な乳化剤としては、天然に存在するゴム（例えば、アラビアゴムおよびトラガントゴム）、天然に存在するホスファチド（例えば、ダイズレシチン）、脂肪酸およびヘキシトール無水物に由来するエステルまたは部分エステル（例えば、ソルビタンモノ−オレエート）およびこれらの部分エステルとエチレンオキシドとの縮合物（例えば、ポリオキシエチレンソルビタンモノ−オレエート）が挙げられる。エマルジョンは、シロップ剤およびエリキシル剤の製剤におけるように、甘味剤および香味料も含み得る。そのような製剤は、粘滑剤、保存剤または着色剤も含み得る。
【０１５３】
本発明の薬学的組成物は、アプリケータスティック、溶液、懸濁液、エマルジョン、ゲル、クリーム、軟膏、ペースト、ゼリー、ペイント、散剤およびエアロゾルとして製剤化された局所経路によって経皮的に送達され得る。
【０１５４】
脂質ベースの薬物送達系には、脂質溶液、脂質エマルジョン、脂質分散液、自己乳化薬物送達系（ＳＥＤＤＳ）および自己微小乳化薬物送達系（ＳＭＥＤＤＳ）が含まれる。特に、ＳＥＤＤＳおよびＳＭＥＤＤＳは、自発的に水性媒質に分散し得、微細なエマルジョン（ＳＥＤＤＳ）またはマイクロエマルジョン（ＳＭＥＤＤＳ）を形成し得る、脂質の等方性混合物、界面活性剤および共界面活性剤である。本発明の製剤化において有用な脂質としては、任意の天然または合成の脂質（ゴマ種子油、オリーブ油、ひまし油、落花生油、脂肪酸エステル、グリセロールエステル、Ｌａｂｒａｆｉｌ（登録商標）、Ｌａｂｒａｓｏｌ（登録商標）、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ（登録商標）、Ｓｏｌｕｔｏｌ（登録商標）、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）、Ｃａｐｒｙｏｌ（登録商標）、Ｃａｐｍｕｌ（登録商標）、Ｃａｐｔｅｘ（登録商標）およびＰｅｃｅｏｌ（登録商標）を含むがこれらに限定されない）が挙げられる。
【０１５５】
本発明の薬学的組成物は、身体内での緩徐な放出のためにミクロスフェアとしても送達され得る。例えば、ミクロスフェアは、皮下にゆっくり放出する薬物含有ミクロスフェアの皮内注射を介して投与され得る（Ｒａｏ，Ｊ．Ｂｉｏｍａｔｅｒ  Ｓｃｉ．Ｐｏｌｙｍ．Ｅｄ．７：６２３−６４５，１９９５を参照のこと；生分解性で注射可能なゲル製剤として（例えば、Ｇａｏ，Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．１２：８５７−８６３，１９９５を参照のこと）；または経口投与用のミクロスフェアとして（例えば、Ｅｙｌｅｓ，Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．４９：６６９−６７４，１９９７を参照のこと）。経皮的経路と皮内経路の両方が、数週間または数ヶ月間にわたって一定の送達をもたらす。
【０１５６】
本発明の薬学的組成物は塩として提供され得、塩酸、硫酸、酢酸、乳酸、酒石酸、リンゴ酸、コハク酸などを含むがこれらに限定されない多くの酸で形成され得る。塩は、水性溶媒または他のプロトン性溶媒中で、対応する遊離塩基形態よりも可溶性である傾向がある。他の場合では、調製物は、４．５〜５．５のｐＨ範囲の１ｍＭ〜５０ｍＭヒスチジン、０．１％〜２％スクロース、２％〜７％マンニトール中の凍結乾燥散剤であり得、使用前に緩衝液と混ぜ合わされる。
【０１５７】
別の実施形態において、本発明の薬学的組成物は、リポソームを使用することによって送達され得、そのリポソームは、細胞膜と融合するか、またはエンドサイトーシスされ、すなわち、そのリポソームに付着されたリガンド、または細胞の表面膜タンパク質レセプターに結合するオリゴヌクレオチドに直接付着されたリガンドを使用することによってエンドサイトーシスがもたらされる。特に、リポソーム表面が、標的細胞に特異的なリガンドを有するか、または別途、特定の器官に優先的に方向づけられている場合に、リポソームを使用することによって、インビボにおいてＧＲモジュレーターを標的細胞に送達することに焦点を合わせることができる（例えば、Ａｌ−Ｍｕｈａｍｍｅｄ，Ｊ．Ｍｉｃｒｏｅｎｃａｐｓｕｌ．１３：２９３−３０６，１９９６；Ｃｈｏｎｎ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．６：６９８−７０８，１９９５；Ｏｓｔｒｏ，Ａｍ．Ｊ．Ｈｏｓｐ．Ｐｈａｒｍ．４６：１５７６−１５８７，１９８９を参照のこと）。
【０１５８】
本開示の薬学的組成物はまた、示されている投与経路に好適な１つまたはそれを超えるアジュバントを含み得る。経口投与される場合、本明細書中に開示される方法において使用される化合物、例えばＣＩＣまたはＳＧＲＭをラクトース、スクロース、デンプン散剤、アルカン酸のセルロースエステル、セルロースアルキルエステル、タルク、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム、酸化マグネシウム、リン酸および硫酸のナトリウム塩およびカルシウム塩、ゼラチン、アカシアガム、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドンおよび／またはポリビニルアルコールと混合し、次いで、便利な投与のために錠剤化またはカプセル化し得る。そのようなカプセルまたは錠剤は、ヒドロキシプロピルメチルセルロース中の活性化合物の分散液で提供され得るので、放出制御製剤を含み得る。
ｉｉ．投与量
【０１５９】
投与に好適な薬学的組成物としては、意図される目的を達成するために有効な量で活性な成分（例えば、チェックポイントインヒビターおよびＳＧＲＭ）が含まれる組成物が挙げられる。投与レジメンは、最適な所望の応答（例えば、治療応答）を提供するように調整される。例えば、単回ボーラスを投与し得、複数回分割用量を経時的に投与し得るか、または治療状況の緊急性によって示されるように用量を比例的に減少もしくは増加させ得る。投与の容易性および投与量の均一性のために、単位剤形で非経口組成物を製剤化することが特に有利である。本明細書中で使用される単位剤形は、処置すべき被験体のための単位投与量として好適な物理的に別個の単位のことを指す；各単位は、必要な薬学的キャリアと共同して所望の治療効果を生じさせるように算出された所定量の活性化合物を含む。本発明の単位剤形の仕様は、（ａ）活性化合物のユニークな特徴および達成すべき特定の治療効果、ならびに（ｂ）個体における感受性の処置のためにそのような化合物を配合する手法に固有の制限によって決定され、それらに依存する。
【０１６０】
特定の患者、組成物および投与様式について所望の治療応答を達成するために有効であり、患者に毒性ではない活性な成分の量を得るために、本発明の薬学的組成物中の活性な成分の実際の投与量レベルは変更され得る。選択される投与量レベルは、使用される本発明の特定の組成物またはそのエステル、塩もしくはアミドの活性、組成物の薬物動態、投与経路、投与時間、使用される特定の化合物の排出速度、処置の継続時間、使用される特定の組成物と組み合わせて使用される他の薬物、化合物および／または材料、処置される患者の年齢、性別、体重、症状、一般的健康および過去の病歴、ならびに医学分野で周知の同様の因子を含む様々な因子に直接依存するであろう。
【０１６１】
本発明の薬学的組成物は、好ましくは単位剤形である。そのような形態では、調製物は、好適な量の活性な成分ＳＧＲＭまたはチェックポイントインヒビターを含む単位用量に細分される。単位剤形は、別個の量の調製物を含む包装された調製物、例えばバイアルまたはアンプル中のパック詰めされた錠剤、カプセルおよび散剤であり得る。また、単位剤形は、カプセル、錠剤、カシェもしくはロゼンジそれ自体であり得るか、またはそれは、包装形態のこれらのいずれかの好適な数であり得る。
【０１６２】
チェックポイントインヒビターまたはＳＧＲＭの投与レジメンはまた、当該分野で周知の薬物動態パラメータ、すなわち吸収速度、バイオアベイラビリティ、代謝、クリアランスなどを考慮する（例えば、Ｈｉｄａｌｇｏ−Ａｒａｇｏｎｅｓ（１９９６）Ｊ．Ｓｔｅｒｏｉｄ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．５８：６１１−６１７；Ｇｒｏｎｉｎｇ（１９９６）Ｐｈａｒｍａｚｉｅ  ５１：３３７−３４１；Ｆｏｔｈｅｒｂｙ（１９９６）Ｃｏｎｔｒａｃｅｐｔｉｏｎ  ５４：５９−６９；Ｊｏｈｎｓｏｎ（１９９５）Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．８４：１１４４−１１４６；Ｒｏｈａｔａｇｉ（１９９５）Ｐｈａｒｍａｚｉｅ  ５０：６１０−６１３；Ｂｒｏｐｈｙ（１９８３）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２４：１０３−１０８；Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ、前掲の最新版を参照のこと）。最新技術は、臨床医が、処置される疾患または症状に基づいて、個々の各患者、ＳＧＲＭおよびチェックポイントインヒビターのための投与レジメンを決定することを可能にする。
【０１６３】
単位用量調製物中の活性な成分の量は、０．１ｍｇ〜６０００ｍｇ、より代表的には１．０ｍｇ〜３０００ｍｇ、最も代表的には１０ｍｇ〜３００ｍｇで変更または調整され得る。好適な投与量としては、特定の用途および活性な成分の効力に応じて、約１ｍｇ、５、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、２００、３００、４００、５００、６００、７００、８００、９００、１０００、１１００、１２００、１３００、１４００、１５００、１６００、１７００、１８００、１９００または２０００ｍｇも挙げられる。組成物はまた、所望により、他の適合治療剤を含み得る。患者が要求および忍容する投与量および頻度に応じて、組成物の単回投与または複数回投与が施され得る。
【０１６４】
チェックポイントインヒビターを含む組成物は、単独でまたはＳＧＲＭと組み合わせて投与される場合、癌を有効に処置するために十分な量の活性な成分（すなわち、チェックポイントインヒビター）を提供すべきであり、例えば、腫瘍負荷を減少させるか、または癌改善に関連する他の有益なもしくは所望の臨床結果を達成することができる量である。セクションｈ「腫瘍負荷の減少における改善の評価」を参照のこと。したがって、投与レジメンは広く変更され得るが、標準的な方法を使用して日常的に決定され得る。いくつかの場合において、薬学的組成物はＣＩＣを含み、約１〜２０００ｍｇ、好ましくは約１０〜約１０００ｍｇ、最も好ましくは約２５０〜５００ｍｇの活性な成分の１日用量の投与が好適であり得る。１日用量は、１日当たり１〜４つの用量で投与され得る。他の投与スケジュールは、１週間に１回の投与および２日に１回の投与のサイクルを含む。
【０１６５】
いくつかの場合において、薬学的組成物はＣＩＡを含み、（活性な成分の）投与量は、約０．０００１〜１００ｍｇ／ｋｇ宿主体重、より通常には０．０１〜２０ｍｇ／ｋｇ宿主体重の範囲である。例えば、投与量は、０．３ｍｇ／ｋｇ体重、１ｍｇ／ｋｇ体重、３ｍｇ／ｋｇ体重、５ｍｇ／ｋｇ体重、１０ｍｇ／ｋｇ体重または０．１〜２０ｍｇ／ｋｇの範囲内であり得る。例示的な処置レジームは、１日に１回、１週間に１回、１週間に２回、２週間に１回、３週間に１回、４週間に１回、１ヶ月に１回、３ヶ月に１回または３〜６ヶ月に１回の投与を伴う。いくつかの場合において、処置は、第１の期間のための上記投与レジメンの１つと、第２の期間のための上記投与レジメンの別のものとにしたがって、ＣＩＡを投与することを含む。いくつかの場合において、同じまたは異なる投与レジメンが再開される前に、処置は、一定期間中断する。例えば、患者は、ＣＩＡ投与レジメンを２週間行い、１週間休止し、さらに２週間行い得る、など。本発明のＣＩＡの好ましい投与レジメンは、静脈内投与による０．１ｍｇ／ｋｇ体重、０．３ｍｇ／ｋｇ体重、２ｍｇ／ｋｇ体重、３ｍｇ／ｋｇ体重または１０ｍｇ／ｋｇを含み、以下の投与スケジュールの１つを使用して、抗体を投与する：（ｉ）６回の投与を４週間ごと、次いで３ヶ月ごと；（ｉｉ）３週間ごと；（ｉｉｉ）３ｍｇ／ｋｇ体重を１回、続いて１ｍｇ／ｋｇ体重を３週間ごと
【０１６６】
いくつかの方法では、異なる結合特異性を有する２つまたはそれを超えるＣＩＡが同時投与され、この場合、投与される各抗体の投与量は、示されている範囲内である。ＣＩＡは、通常、複数回投与される。単回投与間の間隔は、例えば、毎週、毎月、３ヶ月ごとまたは毎年であり得る。患者における標的抗原に対する抗体の血中レベルを計測することによって示されるように、間隔はまた、不規則であり得る。いくつかの方法では、投与量は、約１〜１０００μｇ／ｍｌ、いくつかの方法では約２５〜３００μｇ／ｍｌの血漿抗体濃度を達成するように調整される。
【０１６７】
併用療法において使用されるＳＧＲＭを含む組成物は、例えば、治療量のチェックポイントインヒビターと組み合わせた場合に、ＳＧＲＭを伴わない同じ治療量のチェックポイントインヒビターの投与と比較して、腫瘍負荷を減少させ得るか、または他の方法で関連癌症候を大幅に緩和し得るか、またはより優れた有益なもしくは所望の臨床結果を達成し得る量で、癌の処置においてチェックポイントインヒビターの活性を有効に強化するために十分な量の活性剤を提供すべきである。いくつかの場合において、組成物は、腫瘍をチェックポイントインヒビターに対して感受性にする（すなわち、腫瘍負荷の減少を示すか、または別様にチェックポイントインヒビターのみで腫瘍を処置した場合には現れないであろう他の関連臨床的利益を示す）量で、ＳＧＲＭを提供する。腫瘍負荷の減少および他の有益な結果を評価するための方法は、以下のセクションｈ「腫瘍負荷の減少における改善の評価」に開示されている。したがって、投与レジメンは、投与経路および処置すべき癌の種類に応じて広く変更され得るが、標準的な方法を使用して日常的に決定され得る。いくつかの実施形態において、ＳＧＲＭは、１ヶ月に１回、１ヶ月に２回、１ヶ月に３回、１週おき、１週間に１回、１週間に２回、１週間に３回、１週間に４回、１週間に５回、１週間に６回、１日おき、１日に１回、１日に２回、１日に３回またはそれを超えて頻繁に投与される。いくつかの場合において、ＳＧＲＭを含む薬学的組成物の１日経口投与量は、本明細書中に開示される方法に使用され得、約１〜約２０００ｍｇ／日（ｍｇ／日）の範囲である。いくつかの実施形態において、１日量は、約１０〜１０００ｍｇ／日、５０〜５００ｍｇ／日、１００〜３００ｍｇ／日である。特に、解剖学的に離れた部位、例えば脳脊髄液（ＣＳＦ）空間に薬物を投与する場合、経口投与、血流、体腔または器官の内腔への投与とは対照的に、より低投与量が使用され得る。局所投与では、実質的により高投与量が使用され得る。非経口投与用組成物を調製するための実際の方法は、当業者に周知であるかまたは明らかであり、前掲のＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓなどの刊行物により詳細に記載されている。Ｎｉｅｍａｎ，Ｉｎ“Ｒｅｃｅｐｔｏｒ  Ｍｅｄｉａｔｅｄ  Ａｎｔｉｓｔｅｒｏｉｄ  Ａｃｔｉｏｎ，”Ａｇａｒｗａｌら、ｅｄｓ．，Ｄｅ  Ｇｒｕｙｔｅｒ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９８７）も参照のこと。いくつかの実施形態において、ＳＧＲＭは、ＣＯＲＴ１２５２８１である。いくつかの実施形態において、ＳＧＲＭは、ＣＯＲＴ１２５１３４である。
【０１６８】
本発明のＳＧＲＭまたはチェックポイントインヒビターを含む薬学的組成物を許容され得るキャリア中に製剤化した後、それを好適な容器に入れ、示されている症状の処置についてラベルを付し得る。ＳＧＲＭまたはチェックポイントインヒビターの投与について、そのようなラベルは、例えば、投与の量、頻度および方法に関する説明書を含むであろう。
ｉｉｉ．併用療法
【０１６９】
本明細書中に開示される方法は、ＳＧＲＭおよびチェックポイントインヒビターの両方を、腫瘍負荷（これは、いくつかの場合において、チェックポイントインヒビター感受性癌の存在に起因する）を患っている被験体に投与する併用療法を伴う。いくつかの実施形態において、併用療法は、処置期間の全体または一部において、任意の順序でチェックポイントインヒビターおよびＳＧＲＭを逐次投与することを伴う。
【０１７０】
いくつかの場合において、ＳＧＲＭおよびチェックポイントインヒビターは、同じまたは異なる投与レジメンにしたがって投与される。いくつかの場合において、ＳＧＲＭは、計画的レジメンにしたがって投与され、チェックポイントインヒビターは断続的に投与される。いくつかの場合において、チェックポイントインヒビターは、計画的レジメンにしたがって投与され、ＳＧＲＭは断続的に投与される。いくつかの場合において、ＳＧＲＭおよびチェックポイントインヒビターは両方とも、断続的に投与される。いくつかの実施形態において、ＳＧＲＭは毎日投与され、チェックポイントインヒビター、例えばチェックポイントインヒビターは毎週または隔週投与される。
【０１７１】
いくつかの場合において、ＳＧＲＭおよびチェックポイントインヒビターは、約１日〜約１週間、約２週間〜約４週間、約１ヶ月〜約２ヶ月、約２ヶ月〜約４ヶ月、約４ヶ月〜約６ヶ月、約６ヶ月〜約８ヶ月、約８ヶ月〜約１年、約１年〜約２年または約２年〜約４年の範囲またはそれを超える期間にわたって継続的に、１ヶ月に１回もしくは２回、１ヶ月に３回、１週おき、１週間に１回、１週間に２回、１週間に３回、１週間に４回、１週間に５回、１週間に６回、１日おき、１日に１回、１日に２回、１日に３回またはそれを超えて頻繁に逐次投与または同時投与される。
【０１７２】
いくつかの実施形態において、併用療法は、ＳＧＲＭおよびチェックポイントインヒビターを共投与することを含む。いくつかの実施形態において、チェックポイントインヒビターおよびＳＧＲＭの共投与は、２つの薬剤を同時にまたはほぼ同時に（例えば、互いに約１、５、１０、１５、２０または３０分以内に）投与することを伴う。
ｉｖ．継続期間
【０１７３】
腫瘍負荷を減少させるためのＳＧＲＭおよびチェックポイントインヒビターによる処置の継続期間は、被験体における症状の重症度および併用療法に対する被験体の応答によって変動し得る。いくつかの実施形態において、ＳＧＲＭおよび／またはチェックポイントインヒビターは、約１週間〜１０４週間（２年間）、より代表的には約６週間〜８０週間、最も代表的には約９〜６０週間投与され得る。好適な投与期間としては、５〜９週間、５〜１６週間、９〜１６週間、１６〜２４週間、１６〜３２週間、２４〜３２週間、２４〜４８週間、３２〜４８週間、３２〜５２週間、４８〜５２週間、４８〜６４週間、５２〜６４週間、５２〜７２週間、６４〜７２週間、６４〜８０週間、７２〜８０週間、７２〜８８週間、８０〜８８週間、８０〜９６週間、８８〜９６週間および９６〜１０４週間も挙げられる。好適な投与期間としては、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２４、２５、３０、３２、３５、４０、４５、４８、５０、５２、５５、６０、６４、６５、６８、７０、７２、７５、８０、８５、８８、９０、９５、９６、１００および１０４週間も挙げられる。一般に、ＳＧＲＭおよび／またはチェックポイントインヒビターの投与は、所望の臨床的に有意な減少または改善が観察されるまで継続されるべきである。本発明に従ったＳＧＲＭおよびチェックポイントインヒビターによる処置は、２年間またはそれを超える間継続し得る。いくつかの実施形態において、ＳＧＲＭ投与の継続期間は、チェックポイントインヒビターの継続期間と同じである。いくつかの実施形態において、ＳＧＲＭ投与の継続期間は、チェックポイントインヒビターのものよりも短いかまたは長い。
【０１７４】
いくつかの実施形態において、ＳＧＲＭまたはチェックポイントインヒビターの投与は連続的ではなく、１つまたはそれを超える期間にわたって中断され得、続いて、１つまたはそれを超える期間で投与が再開される。投与が中断する好適な期間としては、５〜９週間、５〜１６週間、９〜１６週間、１６〜２４週間、１６〜３２週間、２４〜３２週間、２４〜４８週間、３２〜４８週間、３２〜５２週間、４８〜５２週間、４８〜６４週間、５２〜６４週間、５２〜７２週間、６４〜７２週間、６４〜８０週間、７２〜８０週間、７２〜８８週間、８０〜８８週間、８０〜９６週間、８８〜９６週間および９６〜１００週間が挙げられる。投与が中断する好適な期間としては、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２４、２５、３０、３２、３５、４０、４５、４８、５０、５２、５５、６０、６４、６５、６８、７０、７２、７５、８０、８５、８８、９０、９５、９６および１００週間も挙げられる。
ｈ．腫瘍負荷の減少における改善の評価
【０１７５】
本明細書中に開示される併用療法は、腫瘍負荷を減少させ得る。これらの応答を計測するための方法は、例えば、ｈｔｔｐ：／／ｃｔｅｐ．ｃａｎｃｅｒ．ｇｏｖ／ｐｒｏｔｏｃｏｌＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ／ｄｏｃｓ／ｒｅｃｉｓｔ＿ｇｕｉｄｅｌｉｎｅ．ｐｄｆにおいて入手可能なＲｅｓｐｏｎｓｅ  Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  Ｃｒｉｔｅｒｉａ  ｉｎ  Ｓｏｌｉｄ  Ｔｕｍｏｒｓ（“ＲＥＣＩＳＴ”）ガイドラインに記載されているように、癌治療の分野における当業者に周知である。
【０１７６】
１つのアプローチでは、腫瘍負荷は、腫瘍特異的遺伝子マーカーの発現をアッセイすることによって計測される。このアプローチは、転移性腫瘍または容易に計測可能ではない腫瘍、例えば骨髄癌に特に有用である。腫瘍特異的遺伝子マーカーは、癌細胞にユニークであるか、または非癌細胞と比較してそれらにかなり豊富なタンパク質または他の分子である。例えば、国際公開第２００６１０４４７４号を参照のこと。腫瘍特異的遺伝子マーカーの非限定的な例としては、肝臓癌についてはα−フェトプロテイン（ＡＦＰ）、多発性骨髄腫についてはβ−２−ミクログロブリン（Ｂ２Ｍ）；絨毛癌および胚細胞腫瘍についてはβ−ヒト絨毛ゴナドトロピン（β−ｈＣＧ）；膵臓癌、胆嚢癌、胆管癌および胃癌についてはＣＡ１９−９；卵巣癌についてはＣＡ−１２５およびＨＥ４；結腸直腸癌については癌胎児性抗原（ＣＥＡ）；神経内分泌腫瘍についてはクロモグラニンＡ（ＣｇＡ）；膀胱癌についてはフィブリン／フィブリノーゲン；前立腺癌については前立腺特異抗原（ＰＳＡ）；ならびに甲状腺癌についてはサイログロブリンが挙げられる。ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃａｎｃｅｒ．ｇｏｖ／ａｂｏｕｔ−ｃａｎｃｅｒ／ｄｉａｇｎｏｓｉｓ−ｓｔａｇｉｎｇ／ｄｉａｇｎｏｓｉｓ／ｔｕｍｏｒ−ｍａｒｋｅｒｓ−ｆａｃｔ−ｓｈｅｅｔを参照のこと。
【０１７７】
腫瘍特異的遺伝子マーカーの発現レベルを計測する方法は、周知である。いくつかの実施形態において、血液サンプルまたは腫瘍組織から遺伝子マーカーのｍＲＮＡを単離し、リアルタイム逆転写酵素−ポリメラーゼ連鎖反応（ＲＴ−ＰＣＲ）を実施して、遺伝子マーカーの発現を定量する。いくつかの実施形態において、ウエスタンブロットまたは免疫組織化学解析を実施して、腫瘍特異的遺伝子マーカーのタンパク質発現を評価する。代表的には、本発明の併用療法の経時的に採取された複数のサンプルにおいて、腫瘍特異的遺伝子マーカーのレベルを計測し、レベルの減少は、腫瘍負荷の減少と相関する。
【０１７８】
別のアプローチでは、本明細書中に開示される併用療法による腫瘍負荷の減少は、腫瘍サイズの減少または体内の癌の量の減少によって示される。腫瘍サイズの計測は、代表的には、イメージングベースの手法によって達成される。例えば、コンピュータ断層撮影（ＣＴ）スキャンは、既存の病変の成長または新たな病変もしくは腫瘍転移の発生のいずれかを特定することによって、腫瘍の縮小または成長だけではなく疾患の進行についての正確な信頼できる解剖学的情報を提供し得る。
【０１７９】
別のアプローチでは、腫瘍負荷の減少は、機能的および代謝的イメージング手法によって評価され得る。これらの手法は、灌流、酸素化および代謝の変化を観察することによって、治療応答の早期評価を提供し得る。例えば、１８Ｆ−ＦＤＧ  ＰＥＴは、放射性標識グルコースアナログ分子を使用して、組織代謝を評価する。腫瘍は、代表的には、グルコースの取り込みの上昇を有し、腫瘍組織代謝の減少に対応する値の変化は、腫瘍負荷の減少を示す。同様のイメージング手法は、Ｋａｎｇら、Ｋｏｒｅａｎ  Ｊ．Ｒａｄｉｏｌ．（２０１２）１３（４）３７１−３９０に開示されている。
【０１８０】
本明細書中に開示される併用療法を受けている患者は、様々な程度の腫瘍負荷減少を示し得る。いくつかの場合において、患者は、「無病生存状態（ＮＥＤ）」とも称される完全寛解（ＣＲ）を示し得る。ＣＲは、検査、身体検査およびスキャンによって示されるように、すべての検出可能な腫瘍が消失したことを意味する。いくつかの場合において、本明細書中に開示される併用療法を受けている患者は、総腫瘍体積の少なくとも５０％の減少にほぼ対応する部分寛解（ＰＲ）を経験し得るが、一部の残存疾患が依然として残っている証拠がある。いくつかの場合において、ＰＲを有すると分類された少数の患者が、実際にはＣＲを有し得るように、深い部分寛解における残存疾患は、実際には、死腫瘍または瘢痕であり得る。また、処置中に縮小を示す多くの患者は、継続的な処置によってさらなる縮小を示し、ＣＲを達成し得る。いくつかの場合において、併用療法を受けている患者は、軽度寛解（ＭＲ）（これは、総腫瘍体積の２５％超かつ５０％未満（５０％はＰＲになる）の少量の縮小を概ね意味する）を経験し得る。いくつかの場合において、併用療法を受けている患者は、安定疾患（ＳＤ）（これは、腫瘍がほぼ同じサイズであり続けることを意味するが、少量の成長（代表的には、２０または２５％未満）または少量の縮小（軽度寛解が起らない限り、ＰＲ未満のあらゆるもの。そうなれば、ＳＤは、代表的には２５％未満と定義される）を含み得る）を示し得る。
【０１８１】
併用療法からの所望の有益な結果または所望の臨床結果としては、例えば、末梢器官への癌細胞浸潤の減少（すなわち、ある程度の減速および／または停止）；腫瘍転移の阻害（すなわち、ある程度の減速および／または停止）；寛解率（ＲＲ）の増加；応答期間の増加；癌に関連する１つもしくはそれを超える症候のある程度の軽減；疾患の処置に必要な他の医薬の用量の減少；疾患の進行の遅延；ならびに／または患者の生存の延長および／もしくは生活の質の改善も挙げられ得る。これらの効果を評価するための方法は周知であり、ならびに／または例えばｈｔｔｐ：／／ｃａｎｃｅｒｇｕｉｄｅ．ｏｒｇ／ｅｎｄｐｏｉｎｔｓ．ｈｔｍｌおよび前掲のＲＥＣＩＳＴガイドラインに開示されている。
【０１８２】
本明細書中で議論されるすべての特許、特許出願および刊行物は、その全体が参照により本明細書中に援用される。
【実施例】
【０１８３】
実施例１．ＨｅｐＧ２チロシンアミノトランスフェラーゼ（ＴＡＴ）アッセイ
以下のプロトコルでは、ＨｅｐＧ２細胞（ヒト肝臓肝細胞癌細胞株；ＥＣＡＣＣ，ＵＫ）におけるデキサメタゾンによるＴＡＴの誘導を計測するためのアッセイが記載されている。１０％（ｖ／ｖ）ウシ胎仔血清；２ｍＭ  Ｌ−グルタミンおよび１％（ｖ／ｖ）ＮＥＡＡを補充したＭＥＭＥ培地を使用して、ＨｅｐＧ２細胞を３７℃、５％／９５％（ｖ／ｖ）ＣＯ２／空気で培養する。次いで、ＨｅｐＧ２細胞を計数し、フェノールレッド、１０％（ｖ／ｖ）炭ストリップＦＢＳ、２ｍＭ  Ｌ−グルタミンを含まないＲＰＭＩ１６４０中で細胞０．１２５×１０６個／ｍｌの密度が得られるように調整し、細胞２５，０００個／ウェルで２００μｌを９６ウェル滅菌組織培養マイクロタイタープレートに播種し、３７℃、５％ＣＯ２で２４時間インキュベートする。
【０１８４】
次いで、成長培地を除去し、アッセイ培地｛フェノールレッド、２ｍＭ  Ｌ−グルタミン＋１０μＭフォルスコリンを含まないＲＰＭＩ１６４０｝と交換する。次いで、１００ｎＭデキサメタゾンのチャレンジに対して、検査化合物をスクリーニングする。次いで、１０ｍＭストックから１００％（ｖ／ｖ）ジメチルスルホキシド（ｄｉｍｅｔｈｙｌｓｕｐｆｏｘｉｄｅ）で化合物を連続半対数希釈する。次いで、８点半対数希釈曲線を作成し、続いて、アッセイ培地を１：１００希釈して１０×最終アッセイの化合物濃度を求め、この結果、最終アッセイの化合物濃度は、０．１％（ｖ／ｖ）ジメチルスルホキシド中１０〜０．００３μＭの範囲となった。
【０１８５】
マイクロタイタープレート中で、検査化合物を細胞とともに３７℃、５／９５（ｖ／ｖ）ＣＯ２／空気で３０分間プレインキュベートした後、１００ｎＭデキサメタゾンを添加し、続いて２０時間経過させて最適なＴＡＴ誘導を可能にした。
【０１８６】
次いで、プロテアーゼインヒビターカクテルを含む３０μｌの細胞溶解緩衝液で、ＨｅｐＧ２細胞を４℃で１５分間溶解する。次いで、０．１Ｍリン酸カリウム緩衝液（ｐＨ７．４）中の５．４ｍＭチロシンナトリウム塩、１０．８ｍＭ  α−ケトグルタル酸塩および０．０６ｍＭピリドキサール５’リン酸塩を含む１５５μｌの基質混合物を添加し得る。３７℃で２時間インキュベートした後、１５μｌの１０Ｍ水酸化カリウム水溶液の添加によって反応を停止させ、プレートを３７℃でさらに３０分間インキュベートし得る。λ３４０ｎｍの吸光度によって、ＴＡＴ活性生成物を計測し得る。
【０１８７】
化合物濃度に対する（１００ｎＭデキサメタゾンＴＡＴ刺激に対して正規化した）％阻害をプロットし、データを４パラメータロジスティック方程式にフィッティングすることによって、ＩＣ５０値を算出し得る。アンタゴニストが、デキサメタゾンに関する競合インヒビターであると仮定し、ＣｈｅｎｇおよびＰｒｕｓｏｆｆ方程式を使用して、ＩＣ５０値をＫｉ（平衡解離定数）に変換し得る。
実施例２．癌型におけるＧＲ発現の定量
【０１８８】
厚さ４〜５μｍのホルマリン固定パラフィン包埋（ＦＦＰＥ）腫瘍組織切片を正荷電スライド（Ｆｉｓｈｅｒ  ＰｒｏｂｅＯｎ  Ｐｌｕｓ（商標），Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）上に切断し、使用前１週間以内に６５℃（乾熱）で１時間ベイクし、４回交換の１００％キシレンで脱パラフィン処理し、段階的エタノール系（１００％、７０％、３０％）から蒸留水で再水和する。
【０１８９】
熱源として市販のスチーマー（Ｂｌａｃｋ  ａｎｄ  Ｄｅｃｋｅｒ  ＨＳ１０００  ｍｏｄｅｌ  ｓｔｅａｍｅｒ；Ｂｌａｃｋ  ａｎｄ  Ｄｅｃｋｅｒ，Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ，ＭＤ，ＵＳＡ）を使用して、Ｃｉｔｒａ  Ｐｌｕｓ  Ｔａｒｇｅｔ  Ｒｅｔｒｉｅｖａｌ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ（ＢｉｏＧｅｎｅｘ［Ｃａｔ  ＃：ＨＫ０８０−９Ｋ］，Ｆｒｅｍｏｎｔ，ＣＡ，ＵＳＡ）中で、調製スライドを９８℃で２０分間インキュベートする。５分間冷却した後、ＴｅｃｈＭａｔｅ（商標）５００または１０００  ａｕｔｏｍａｔｅｄ  ＩＨＣ  ｓｔａｉｎｉｎｇ  ｐｌａｔｆｏｒｍ（Ｒｏｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ，Ｏｒｏ  Ｖａｌｌｅｙ，ＡＺ，ＵＳＡ）およびＷｏｒｋＭａｔｅ（商標）ソフトウェア、バージョン３．９６を使用して、自動染色を実施する。抗体インキュベーション、対比染色までの検出工程および途中の洗浄を含むすべての試薬交換のために、この自動プラットフォームは、キャピラリーギャッププロセス２９を使用する。すべての手順を室温（２５℃）で行う。タンパク質血清ブロック（ＱｕａｌＴｅｋ  Ｐｒｏｐｒｉｅｔａｒｙ）とともに１５分間インキュベートした後、一次抗体希釈剤（ＱｕａｌＴｅｋ  Ｐｒｏｐｒｉｅｔａｒｙ）中で、スライドを、抗ＧＲ抗体クローンＤ８Ｈ２（Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ［＃３６６０Ｓ］）とともに１：１，７５０の濃度で１時間インキュベートする。
【０１９０】
ウサギＰｏｌｉｎｋ２＋ＨＲＰ（西洋ワサビペルオキシダーゼ）試薬キット（Ｇｏｌｄｅｎ  Ｂｒｉｄｇｅ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ［ＧＢＩ］，Ｃａｔ  ＃：Ｄ３９−１１０，Ｌｏｓ  Ａｎｇｅｌｅｓ，ＣＡ，ＵＳＡ）（これはビオチン非依存性であり、内因性ビオチンからのバックグラウンドまたは非特異的染色の可能性を減少させる）を一次抗体検出に使用する。含まれる工程は、ウサギＰｏｌｉｎｋ２＋二次とともに２５分間のインキュベーション、７．５分間のペルオキシダーゼブロッキング工程（約０．０２％ｖ／ｖ  Ｔｗｅｅｎ−２０を含む３％ＵＳＰ  Ｈ２Ｏ２を添加）、ウサギＰｏｌｉｎｋ２＋ＨＲＰコンジュゲートポリマーとともに２５分間のインキュベーションおよびＧＢＩ（Ｃａｔ  ＃：Ｃ０９−１００）３，３’−ｄｉａｍｉｎｏｂｅｎｚｉｄｉｎｅ（ＤＡＢ）色原体とともに１５分間のインキュベーションである。すべてのインキュベーション工程の間に、０．０２％ｖ／ｖ  Ｔｗｅｅｎ（登録商標）−２０界面活性剤（ＴＢＳＴ）（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を含むトリス緩衝生理食塩水でスライドを十分に洗浄する。ヘマトキシリンでスライドを１分間対比染色し、蒸留水でリンスし、エタノール系（９５％、１００％）および４回交換の１００％キシレンでプラットフォームから脱水し、カバースリップ（ＣｙｔｏｓｅａｌＴＭ  ＸＹＬ  ｍｏｕｎｔｉｎｇ  ｍｅｄｉａ，Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）で永久密封する。
【０１９１】
パーセントスコアを使用して、少なくとも１００個の生存浸潤癌腫細胞を有するサンプルにおける腫瘍ＧＲ発現を半定量的に評価する。陰性染色では０、弱染色では１＋、中等度染色では２＋、および強染色では３＋を使用してＨ−スコア法に基づいて、核染色の強度を報告する。染色強度にその強度を有する細胞の割合を掛けることによって、Ｈ−スコアを算出する。例えば、弱染色を有する細胞の２０％および中等度染色を有する２％の細胞を有するサンプルは、２４［（２０×１）＋（２×２）＝２４］のＨスコアを有するであろう。このアッセイでは、ＧＲ陽性は、任意の強度における腫瘍細胞の１０％核染色として定義される。認定病理学者が、利用可能な生存組織切片の総面積における核腫瘍染色をスコア化する；細胞質もしくは間質染色、インサイチュー癌腫、壊死の面積、または組織の明らかに固定不良の面積は評価されない。
実施例３．ＣＯＲＴ１２５１３４と抗ＰＤ−１との併用療法を使用した腫瘍成長の減少
【０１９２】
マウスＭＣ３８癌細胞の懸濁液を、５〜６週齢の免疫正常雌性マウス（Ｃ５７ＢＬ／６）の左脇腹に、細胞１００万個／マウスで皮下注射した。１００ｍｍ３の体積に達するまで、腫瘍を成長させた。次いで、マウスを１群当たり１０匹で３つの群に分けた。群Ｉには、抗ＰＤ−１ビヒクル（ＰＢＳ、１０ｍｌ／ｋｇ）を週２回腹腔内（ｉ．ｐ．）投与し、ＣＯＲＴ１２５１３４ビヒクル（１０％ＤＭＳＯ、０．１％Ｔｗｅｅｎ  ８０および８９．９％ＨＰＭＣ（０．５％）、１０ｍｌ／ｋｇ）を毎日経口（ｐ．ｏ．）投与した。群ＩＩには、マウス抗ＰＤ−１抗体（クローンＲＰＭ１−１４、１０ｍｇ／ｋｇ）を週２回腹腔内（ｉ．ｐ．）投与した。群ＩＩＩには、マウス抗ＰＤ−１抗体（クローンＲＰＭ１−１４、１０ｍｇ／ｋｇ）を週２回腹腔内（ｉ．ｐ．）投与し、ＣＯＲＴ１２５１３４（ａ  ＳＧＲＭ）（３０ｍｇ／ｋｇ）を毎日経口（ｏｒａｌｌｙ）投与した。
【０１９３】
電子キャリパーを用いて、腫瘍の最長（Ｌ）および最短（Ｓ）直径を週３回計測し、楕円球体の式：Ｓ２×Ｌ×（０．５）を使用して、腫瘍体積を算出した。腫瘍成長データは図１に示されており、各マウス群の平均投与前腫瘍体積と比較した平均腫瘍体積が、処置開始以来の腫瘍成長の日数に対してプロットされている。結果は、抗ＰＤ−１とＣＯＲＴ１２５１３４との組み合わせが、腫瘍成長の減少において、抗ＰＤ−１群およびビヒクル群の両方よりも優れていることを示している。
実施例４．ＣＯＲＴ１２５２８１と抗ＰＤ−１との併用療法を使用した腫瘍成長の減少
【０１９４】
マウスＡ２０癌細胞の懸濁液を、５〜６週齢の免疫正常雌性マウス（Ｃ５７ＢＬ／６）の左脇腹に、細胞５０万個／マウスで皮下注射した。１００ｍｍ３の体積に達するまで、腫瘍を成長させた。次いで、マウスを１群当たり１０匹で３つの群に分けた。群Ｉには、抗ＰＤ−１ビヒクル（ＰＢＳ、１０ｍｌ／ｋｇ）を週２回腹腔内（ｉ．ｐ．）投与し、ＣＯＲＴ１２５２８１ビヒクル（１０％ＤＭＳＯ、０．１％Ｔｗｅｅｎ  ８０および８９．９％ＨＰＭＣ（０．５％）、１０ｍｌ／ｋｇ）を毎日経口（ｐ．ｏ．）投与した。群ＩＩには、マウス抗ＰＤ−１抗体（クローンＲＰＭ１−１４、１０ｍｇ／ｋｇ）を週２回腹腔内（ｉ．ｐ．）投与した。群ＩＩＩには、マウス抗ＰＤ−１抗体（クローンＲＰＭ１−１４、１０ｍｇ／ｋｇ）を週２回腹腔内（ｉ．ｐ．）投与し、ＣＯＲＴ１２５２８１（ａ  ＳＧＲＭ）（３０ｍｇ／ｋｇ）を毎日経口（ｏｒａｌｌｙ）投与した。
【０１９５】
電子キャリパーを用いて、腫瘍の最長（Ｌ）および最短（Ｓ）直径を週３回計測し、楕円球体の式：Ｓ２×Ｌ×（０．５）を使用して、腫瘍体積を算出した。腫瘍成長データは図２に示されており、各マウス群の平均腫瘍体積が、処置開始以来の腫瘍成長の日数に対してプロットされている。結果は、抗ＰＤ−１とＣＯＲＴ１２５２８１との組み合わせが、腫瘍成長の減少において、抗ＰＤ−１群およびビヒクル群の両方よりも優れていることを示している。
実施例５．ＣＯＲＴ１２５１３４またはＣＯＲＴ１２５２８１と抗ＣＴＬＡ４との併用療法を使用した腫瘍成長の減少
【０１９６】
マウスＣＴ２６癌細胞の懸濁液を、６〜７週齢の免疫正常雌性マウス（Ｃ５７ＢＬ／６）の左脇腹に、細胞５０万個／マウスで皮下注射した。５０〜１００ｍｍ３の体積に達するまで、腫瘍を成長させた。次いで、マウスを１群当たり１０匹で３つの群に分けた。群Ｉには、抗ＣＴＬＡ４ビヒクル（ＰＢＳ、１０ｍｌ／ｋｇ）を週２回腹腔内（ｉ．ｐ．）投与し、ＣＯＲＴ１２５１３４ビヒクル（１０％ＤＭＳＯ、０．１％Ｔｗｅｅｎ  ８０および８９．９％ＨＰＭＣ（０．５％）、１０ｍｌ／ｋｇ）を毎日経口（ｐ．ｏ．）投与した。群ＩＩには、マウス抗ＣＴＬＡ４抗体（クローン９Ｄ９、１０ｍｇ／ｋｇ）を週２回腹腔内（ｉ．ｐ．）投与した。群ＩＩＩには、マウス抗ＣＴＬＡ４抗体（クローン９Ｄ９、１０ｍｇ／ｋｇ）を週２回腹腔内（ｉ．ｐ．）投与し、ＣＯＲＴ１２５１３４（ａ  ＳＧＲＭ）（３０ｍｇ／ｋｇ）を毎日経口（ｏｒａｌｌｙ）投与した。群ＩＶには、マウス抗ＣＴＬＡ４抗体（クローン９Ｄ９、１０ｍｇ／ｋｇ）を週２回腹腔内（ｉ．ｐ．）投与し、ＣＯＲＴ１２５２８１（ａ  ＳＧＲＭ）（３０ｍｇ／ｋｇ）を毎日経口（ｏｒａｌｌｙ）投与した。
【０１９７】
電子キャリパーを用いて、腫瘍の最長（Ｌ）および最短（Ｓ）直径を週３回計測し、楕円球体の式：Ｓ２×Ｌ×（０．５）を使用して、腫瘍体積を算出した。腫瘍成長データは図３に示されており、各群の平均腫瘍体積が、処置開始以来の腫瘍成長の日数に対してプロットされている。結果は、抗ＣＴＬＡ４とＣＯＲＴ１２５１３４との組み合わせおよび抗ＣＴＬＡ４とＣＯＲＴ１２５２８１との組み合わせが、腫瘍成長の減少において、抗ＣＴＬＡ４群およびビヒクル群の両方よりも優れていることを示している。
実施例６．併用療法による乳癌患者の処置
【０１９８】
乳癌を患っている患者を、３ｍｇ／ｋｇの用量のペムブロリズマブ（ｐｒｅｍｂｒｏｌｉｚｕｍａｂ）で２週間ごとに処置し、２００ｍｇの用量のＣＯＲＴ１２５１３４で８週間にわたって１日１回処置する。処置前、処置中および処置後に、強化磁気共鳴画像法を使用して、彼女の腫瘍負荷をモニタリングする。イメージング結果は、腫瘍のサイズが段階的に減少しており、処置期間の終了時において、減少は２０％超であることを示している。
【図１】
2019507159.tif 000017
【図２】
2019507159.tif 000018
【図３】
2019507159.tif 000019
【手続補正書】
【提出日】平成30年10月30日(2018.10.30)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
腫瘍負荷を持つ患者を処置するための組み合わせ物であって、チェックポイントインヒビターおよび選択的なグルココルチコイドレセプターモジュレーター（ＳＧＲＭ）を含み、ＳＧＲＭの量は、前記チェックポイントインヒビターの活性を強化して前記患者の前記腫瘍負荷を減少させるために有効であることを特徴とする、組み合わせ物。
【請求項２】
前記腫瘍負荷が、チェックポイントインヒビター感受性腫瘍の存在によるものである、請求項１に記載の組み合わせ物。
【請求項３】
前記チェックポイントインヒビターが、ＰＤ−１に対して有効な抗体である、請求項１に記載の組み合わせ物。
【請求項４】
前記チェックポイントインヒビターが、ＣＴＬＡ−４に対して有効な抗体である、請求項１に記載の組み合わせ物。
【請求項５】
前記チェックポイントインヒビターが、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２に対して有効な抗体である、請求項１に記載の組み合わせ物。
【請求項６】
前記チェックポイントインヒビターが小分子非タンパク質化合物である、請求項１に記載の組み合わせ物。
【請求項７】
前記ＳＧＲＭがミフェプリストンである、請求項１に記載の組み合わせ物。
【請求項８】
前記ＳＧＲＭが、非ステロイド骨格を有する化合物である、請求項１に記載の組み合わせ物。
【請求項９】
前記ＳＧＲＭが縮合アザデカリンである、請求項１に記載の組み合わせ物。
【請求項１０】
前記ＳＧＲＭがＣＯＲＴ１２５１３４
【化１３】
2019507159.tif 000020
である、請求項１に記載の組み合わせ物。
【請求項１１】
前記ＳＧＲＭがＣＯＲＴ１２５２８１
【化１４】
2019507159.tif 000021
である、請求項１に記載の組み合わせ物。
【請求項１２】
前記腫瘍がグルココルチコイドレセプター（ＧＲ＋）を発現する、請求項１に記載の組み合わせ物。
【請求項１３】
前記腫瘍がＧＲ＋癌であり、前記腫瘍が、乳癌、前立腺癌、黒色腫、肉腫、腎細胞癌、頭頸部癌、肝細胞癌、神経膠芽細胞腫、子宮頸癌、神経内分泌癌、膀胱癌、前立腺癌、食道癌、中皮腫、肺癌、卵巣癌、膵臓癌、胆嚢癌、胃癌、子宮内膜癌および結腸癌からなる群より選択される、請求項１に記載の組み合わせ物。
【請求項１４】
前記ＳＧＲＭがＣＯＲＴ１２５２８１であり、前記チェックポイントインヒビターが、ＰＤ−１に対して有効な抗体である、請求項１に記載の組み合わせ物。
【請求項１５】
前記ＳＧＲＭがＣＯＲＴ１２５１３４であり、前記チェックポイントインヒビターが、ＰＤ−１に対して有効な抗体である、請求項１に記載の組み合わせ物。
【請求項１６】
前記ＳＧＲＭがミフェプリストンであり、前記チェックポイントインヒビターが、ＰＤ−１に対して有効な抗体である、請求項１に記載の組み合わせ物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１８】
いくつかの実施形態において、腫瘍負荷を持つ患者を処置する方法であって、チェックポイントインヒビターの活性を強化するために有効な量で、治療量のチェックポイントインヒビターおよび選択的なグルココルチコイドレセプターモジュレーター（ＳＧＲＭ）を、腫瘍負荷を患っている患者に投与することを含む方法においてチェックポイントインヒビターと組み合わせて使用するためのＳＧＲＭが本明細書中に提供される。加えて、すべての上記関連実施形態はまた、本開示のこれらの実施形態に含まれる。
特定の実施形態では、例えば以下の項目が提供される。
（項目１）
腫瘍負荷を持つ患者を処置するための方法であって、治療量のチェックポイントインヒビターおよび選択的なグルココルチコイドレセプターモジュレーター（ＳＧＲＭ）を前記患者に投与することを含み、前記チェックポイントインヒビターの活性を強化して前記患者の前記腫瘍負荷を減少させるために有効な量で、前記ＳＧＲＭを投与する、方法。
（項目２）
前記腫瘍負荷が、チェックポイントインヒビター感受性腫瘍の存在によるものである、項目１に記載の方法。
（項目３）
前記チェックポイントインヒビターが、ＰＤ−１に対して有効な抗体である、項目１に記載の方法。
（項目４）
前記チェックポイントインヒビターが、ＣＴＬＡ−４に対して有効な抗体である、項目１に記載の方法。
（項目５）
前記チェックポイントインヒビターが、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２に対して有効な抗体である、項目１に記載の方法。
（項目６）
前記チェックポイントインヒビターが小分子非タンパク質化合物である、項目１に記載の方法。
（項目７）
前記ＳＧＲＭがミフェプリストンである、項目１に記載の方法。
（項目８）
前記ＳＧＲＭが、非ステロイド骨格を有する化合物である、項目１に記載の方法。
（項目９）
前記ＳＧＲＭが縮合アザデカリンである、項目１に記載の方法。
（項目１０）
前記ＳＧＲＭがＣＯＲＴ１２５１３４
【化１３】
2019507159.tif 000022
である、項目１に記載の方法。
（項目１１）
前記ＳＧＲＭがＣＯＲＴ１２５２８１
【化１４】
2019507159.tif 000023
である、項目１に記載の方法。
（項目１２）
前記癌がグルココルチコイドレセプター（ＧＲ＋）を発現する、項目１に記載の方法。
（項目１３）
前記癌がＧＲ＋癌であり、前記癌が、乳癌、前立腺癌、黒色腫、肉腫、腎細胞癌、頭頸部癌、肝細胞癌、神経膠芽細胞腫、子宮頸癌、神経内分泌癌、膀胱癌、前立腺癌、食道癌、中皮腫、肺癌、卵巣癌、膵臓癌、胆嚢癌、胃癌、子宮内膜癌および結腸癌からなる群より選択される、項目１に記載の方法。
（項目１４）
前記ＳＧＲＭがＣＯＲＴ１２５２８１であり、前記チェックポイントインヒビターが、ＰＤ−１に対して有効な抗体である、項目１に記載の方法。
（項目１５）
前記ＳＧＲＭがＣＯＲＴ１２５１３４であり、前記チェックポイントインヒビターが、ＰＤ−１に対して有効な抗体である、項目１に記載の方法。
（項目１６）
前記ＳＧＲＭがミフェプリストンであり、前記チェックポイントインヒビターが、ＰＤ−１に対して有効な抗体である、項目１に記載の方法。
【国際調査報告】
2019507159.tif 000024