(57)【要約】  テモゾロミド、塩形態の高置換リン酸化多糖、及び酸形態の高置換リン酸化多糖を、特に、５から２０％のテモゾロミド、３０から８０％の塩形態の多糖、及び１００％までの残部の酸形態の多糖の重量比で含む安定な抗腫瘍医薬組成物。５−アミノイミダゾール（ａｍｉｎｏｍｉｄａｚｏｌｅ）−４−カルボキサミド（ＡＩＣ）のレベルが、開示した組成物及び製剤の両方中で、テモゾロミドの０．５重量％未満である。更に、前記組成物と殺菌水とを接触させることによって得ることができる髄腔内投与のためのヒドロゲル、前記組成物の製造方法並びに前記組成物及び前記ゲルの使用も開示する。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
抗腫瘍活性を有する医薬組成物であって、
５から２０重量％の重量比のテモゾロミド、３０から８０重量％の重量比の塩形態の高置換リン酸化多糖、及び１００重量％までの残部の酸形態の高置換リン酸化多糖を含み、
テモゾロミドの重量に対して、０．５重量％未満の５−アミノイミダゾール（ａｍｉｎｏｍｉｄａｚｏｌｅ）−４−カルボキサミド（ＡＩＣ）を含む、
医薬組成物。
【請求項２】
前記リン酸化多糖がデキストラン、デンプン、セルロース、及びそれらの混合物から選択される、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記多糖がデキストランである、請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
前記デキストランが、４０から１００ｋＤａの分子質量を有し、好ましくは６０から７０ｋＤａの分子質量を有する、請求項３に記載の組成物。
【請求項５】
前記塩がナトリウム、アンモニウム、カリウム、マグネシウム又はカルシウムの塩、及び／又はそれらの混合物である、請求項１から４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６】
前記塩がナトリウム塩である、請求項５に記載の組成物。
【請求項７】
テモゾロミド対全リン酸化多糖の重量比が１：４から１：１９である、請求項１から６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項８】
前記重量比が約１：９である、請求項７に記載の組成物。
【請求項９】
前記塩形態のリン酸化多糖対前記酸形態のリン酸化多糖の重量比が３０：６５から８０：１５である、請求項１から８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１０】
前記塩形態のリン酸化多糖対前記酸形態のリン酸化多糖の前記重量比が約５５：３５である、請求項９に記載の組成物。
【請求項１１】
請求項１〜１０のいずれか一項に記載の医薬組成物を調製する方法であって、
・塩形態の高置換リン酸化多糖及び酸形態の高置換リン酸化多糖を混合する工程；
ａ）粉末形態のテモゾロミドを、前記工程で得られた前記混合物に添加する工程；
ｂ）前記多糖−テモゾロミドの混合物を混合する工程；
ｃ）上で得られた前記混合物を殺菌する工程、
を含む、方法。
【請求項１２】
請求項１〜１０のいずれか一項に記載の前記組成物の製剤を調製する方法であって、
ｉ）水を添加することによって、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の組成物、又は請求項１１によって得ることができる組成物からヒドロゲルを形成する工程；
ｉｉ）前記ゲルを凍結乾燥させて、凍結乾燥物を形成する工程；
ｉｉｉ）前記粉末製剤を殺菌する工程、
を含む、方法。
【請求項１３】
前記ヒドロゲルが、１重量部の請求項１〜１０のいずれか一項に記載の組成物と１０〜３０重量部の水性溶媒とを−好ましくは１重量部の前記組成物と１５重量部の殺菌水とを−混合することによって得られる、請求項１２に記載の医薬製剤を調製する方法。
【請求項１４】
局所、髄腔内、留置（ｉｍｐｌａｎｔａｔｉｏｎ）、又は経口の投与のために使用される投与形態の、請求項１２又は１３に記載の方法によって得ることができる医薬製剤。
【請求項１５】
ゲルを調製するためのシート／ウェハー（ｗａｆｅｒｓ）、粉末、顆粒、懸濁液、エマルジョン、カプセル、マイクロペレット、丸薬、ヒドロゲル、即時使用可能な（ｒｅａｄｙ  ｔｏ  ｕｓｅ）ゲル又は経皮パッチの形態の、請求項１４に記載の医薬製剤。
【請求項１６】
癌の治療に使用するための、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の組成物又は請求項１４〜１５のいずれか一項に記載の製剤。
【請求項１７】
前記癌が脳癌である、請求項１６に記載の使用。
【請求項１８】
癌の治療で髄腔内投与に使用するための、請求項１１から１２のいずれか一項に記載のヒドロゲル。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、抗腫瘍剤テモゾロミドを含む安定な医薬組成物、その調製及びその使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
テモゾロミド（ＴＭＺ）である、式１によって表される４−メチル−５−オキソ−２，３，４，６，８−ペンタザビシクロ［４．３．０］ノナ−２，７，９−トリエン−９−カルボキサミドは、
【化１】
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脳悪性神経膠腫黒色腫及び他の腫瘍疾患の治療に使用するための抗腫瘍アルキル化剤である。ＴＭＺは、血液脳関門を通過し、ＣＮＳにおける活性な化合物に自然に加水分解される。
【０００３】
ダカルバジン（Ｄａｃａｒｂａｚｉｄｅ）（ＤＴＩＣ）は、類似の薬物であり、それは、肝臓でのみ代謝され、テモゾロミド（ＴＭＺ）よりも毒性がある。ＴＭＺ及びＤＴＩＣの両方共、プロドラッグであり、同じ薬理学的に活性な化合物５−（３−ジメチル−１−トリアゼニル）イミダゾール−４−カルボキサミド（ＭＴＩＣ）を形成する。５−アミノイミダゾール−４−カルボキサミド（ＡＩＣ）は、ＴＭＺ及びＤＴＩＣの両組成物中で形成される望ましくない副代謝産物（ｓｉｄｅ  ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅ）である。ＴＭＺは、薬理学的に活性な化合物ＭＴＩＣを形成するのに、代謝を必要としないが、ＤＴＩＣは、代謝を必要とする。
【０００４】
ＴＭＺの組成物には、ＴＭＺ及びリン酸化デキストラン（ｄｅｘｔｒａｎ  ｐｈｏｓｐｈａｔｅ）のナトリウム塩の混合物が含まれ、ＴＭＺに関連するＡＩＣの不純物含量は、製造時には、最大０．３％であるが、２年間の貯蔵の間に、その含量は、約０．５％にまで増加する。
【０００５】
経口投与に加えて、ＴＭＺは、髄腔内にも投与することができ、このことは、例えば、国際公開パンフレットＷＯ  ２００６／０６０４６４  Ａ１に開示されている。
【０００６】
ＴＭＺは、血液脳関門を良好に貫通するが、半減期が非常に短い。経口投与の場合、ＴＭＺは、素早く吸収されて、０．７時間後には、血漿中の濃度がピークに到達し、しかも、その半減期は、１．８時間である。例えば、脳において、ＴＭＺの有効な濃度を維持するためには、該薬剤を繰り返し投与することが必要であり、このことは、患者に不快感を生じさせ、毒作用が現れるリスクをもたらす。
【０００７】
ベラルーシ特許ＢＹ  １１８３８  Ｃ１には、悪性脳腫瘍に対する併用治療方法が開示されている。この方法には、腫瘍組織を外科的に切除すること、続いて、ｐＨ７．２〜７．４の高置換リン酸化デキストランゲルに含まれたＴＭＺを塗布することが含まれる。調製物中のＴＭＺ／高置換リン酸化デキストランの乾燥重量比は、０．０３：１．０である。凍結乾燥ゲルは、使用前に、殺菌水が添加され、ｐＨ調整することによって再構成され、次に、創傷表面に塗布される。ｐＨ調節は手術室で行われるので、十分な精度が得られず、且つ時間を消費する。更に、高置換リン酸化デキストランは、多数の二置換及び三置換リン酸基を含有する構造をしており、追加的な架橋により巨大分子となり、水を吸収する能力が低下し、高置換リン酸化デキストランのゲル中でのＴＭＺの量を、３０ｍｇ／ｇにまで制限する。該組成物中のＴＭＺの濃度が低いということは、より高い投与量の該物質（即ち、プロドラッグＴＭＺ）を投与するためには、その体積を増加させなければならないことを意味し、これにより、投与される高置換リン酸化デキストランの量も増加することになる。高置換リン酸化デキストランの量が２倍又は３倍に増加すると、生分解プロセスの持続期間に関連する望ましくない反応が生じ得る。更に、該著者らにより立証されたように、ＴＭＺは、ｐＨ７．２〜７．４で分解し、部分的に加水分解されて、許容レベルを超える量で、ＴＭＺに関連する５−アミノイミダゾール−４−カルボキサミド（ＡＩＣ）が形成される。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
発明の目的
既知の組成物の問題は、５−アミノイミダゾール−４−カルボキサミド（ＡＩＣ）の含量が、該薬剤を貯蔵する際に、０．５重量％の限定値を超えて増加することである。
【化２】
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【０００９】
本発明は、この問題を改善することを目的とし、テモゾロミドを含む安定な且つ再現可能な医薬組成物及び該組成物を調製する方法を提供する。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
発明の概要
従って、本発明は、テモゾロミド（ＴＭＺ）、並びに塩形態及び酸形態のリン酸化多糖（ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ  ｐｈｏｓｐｈａｔｅｓ）の混合物を含むか、又は実質的にそれらからなる安定な抗腫瘍医薬組成物を提供する。本発明の組成物は、ｐＨを必要な範囲、即ち、４．５〜７．０に維持することによって、製剤を作製する際には、従来技術で記載した他の組成物のように、ｐＨを調整する必要がない。別の非常に重要な利点は、該組成物が非常に安定であり、且つ望ましくない代謝産物である５−アミノイミダゾール−４−カルボキサミド（ＡＩＣ）の量が、今日使用されている組成物に比べて非常に少なく、更に、その量が、貯蔵の際に増加しないことである。
【００１１】
好ましい形態の製剤には、５から２０重量％のＴＭＺ、並びに９５から８０重量％の塩形態及び酸形態のリン酸化多糖の混合物が含まれる。
【００１２】
本発明は、水性ゲルの形態の髄腔内投与のための安定な抗腫瘍医薬製剤を更に提供する。該組成物は、ＴＭＺ、並びに塩形態及び酸形態のリン酸化多糖の混合物を含むか、又は実質的にそれからなる。塩形態のリン酸化多糖：酸形態のリン酸化多糖の重量比は、約１：０．４から５：１である。別の実施形態では、塩形態のリン酸化多糖：酸形態のリン酸化多糖の重量比は、１：１から１：３である。
【００１３】
該多糖は、デキストラン、デンプン、ヘミセルロース、セルロース、及びそれらの混合物からなる群から選択されるのが好ましい。
【００１４】
最も好ましいのは、デキストランである。特に、デキストランは、約４０ｋＤａから約１００ｋＤａの分子質量を有する。より好ましくは、６０ｋＤａから７０ｋＤａの分子質量のデキストランである。
【００１５】
塩形態のリン酸化多糖は、ナトリウム、カリウム、アンモニウム、マグネシウム及びカルシウムの塩、又はそれらの混合物からなる群から選択される。ナトリウムが最も好ましい。
【００１６】
本発明の好ましい態様に従って、組成物中のＴＭＺ対全リン酸化多糖の重量比は、１：４から１：１９である。特に、組成物中のＴＭＺ対全リン酸化多糖の重量比は、約１：９である。
【００１７】
本発明の別の目的は、本発明の組成物を調製する第１の方法を更に提供することであり、該方法には、
ａ）ＴＭＺの水溶液を提供する工程；
ｂ）塩形態の高置換リン酸化多糖及び酸形態の高置換リン酸化多糖の乾燥混合物を、該ＴＭＺ溶液に入れる工程；
ｃ）工程ｂ）にて得られた溶液を凍結乾燥して、析出物を得る工程；及び
ｄ）該組成物を殺菌する工程、
が含まれる。
【００１８】
ＴＭＺの量は、好ましくは、５〜２０重量％の範囲である。
【００１９】
塩形態のリン酸化多糖と酸形態のリン酸化多糖との乾燥混合物の量については、塩形態が好ましくは３０から８０重量％の範囲であり、１００％までの残部が酸形態である。
【００２０】
凍結乾燥は、寒冷沈降又は凍結乾燥を使用することによって行うことができる。
【００２１】
殺菌は、任意の適切な方法を使用することによって行うことができる。好ましくは、放射線による。
【００２２】
本発明は、本発明の組成物を調製するための第２の方法を更に提供し、該方法には、
ａ）塩形態の高置換リン酸化多糖と酸形態の高置換リン酸化多糖との混合物を提供する工程；
ｂ）水性溶媒の添加によって、該混合物からヒドロゲルを形成する工程；
ｃ）該ゲルを凍結乾燥する工程；
ｄ）工程ｃ）にて得られた析出物に、粉末ＴＭＺを添加する工程；
ｅ）ＴＭＺ粉末と析出物とを混合する工程；
ｆ）任意選択的に、析出物とＴＭＺとの混合物を粉砕して、粉末組成物を形成する工程；
ｇ）任意選択的に、該粉末組成物を殺菌する工程、
が含まれる。
【００２３】
ＴＭＺの量は、好ましくは、５〜２０重量％の範囲である。
【００２４】
塩形態のリン酸化多糖と酸形態のリン酸化多糖との乾燥混合物の量については、塩形態が好ましくは３０から８０重量％の範囲であり、１００％までの残部が酸形態である。
【００２５】
凍結乾燥は、寒冷沈降又は凍結乾燥を使用することによって行うことができる。
【００２６】
殺菌は、任意の適切な方法を使用することによって行うことができる。好ましくは、放射線による。
【００２７】
実施例にて使用した水性溶媒は、水であるが、生理食塩水又はリン酸緩衝液等の別の薬理学的に許容可能な液体であってもよい。
【００２８】
本発明の別の目的は、髄腔内投与のためのヒドロゲルの形態の医薬製剤を提供することである。ヒドロゲルは、本発明の組成物を水性溶媒と接触させることによって形成される。水性溶媒は、水であってもよいが、生理食塩水又はリン酸緩衝液等の他の薬理学的に許容可能な溶媒を使用することもできる。
【００２９】
ヒドロゲルは、１重量部の上記組成物と１０〜３０重量部の水性溶媒とを混合することによって得られる。
【００３０】
ヒドロゲルの好ましい実施形態は、１重量部の上記組成物と１０〜１５重量部の殺菌水とを混合することによって得られる。最も好ましいのは、１部の組成物と１５部の殺菌水である。
【００３１】
上記製剤のＡＩＣ含量は、０．５重量％未満、特に、０．３重量％又は０．１重量％未満である。
【００３２】
本発明の更に好ましい態様に従って、ヒドロゲルは実質的に、塩形態の高置換リン酸化多糖、酸形態の高置換リン酸化多糖、ＴＭＺ、及び水からなる。ＡＩＣ含量は、ＴＭＺの約０．０１重量％以下である。最も好ましいのは、ＨＰＬＣでは検出不可能な量のＡＩＣを含む製剤である。
【００３３】
製剤（複数可）は、水性溶媒を、第１の方法によって得ることができる組成物に添加することによって、又は水性溶媒を、第２の方法によって得ることができる組成物に添加することによって調製することができる。
【００３４】
更に、該医薬組成物／製剤の使用、及び癌の治療における該組成物と水性溶媒とを接触させることによって形成されるヒドロゲル（即ち、製剤）の使用を開示する。特に、該癌は、脳腫瘍；即ち、乏突起星細胞腫、退形成性星細胞腫、膠芽腫等のグレードＩＩ〜ＩＶの悪性腫瘍等、脳に局在しているものである。
【００３５】
本発明は、０．５〜５ｍｇ／ｍｌの範囲のＴＭＺを含むヒドロゲルを提供する。
【００３６】
最後に、本発明は、癌を治療する方法を提供するが、該方法では、本発明の請求項１に規定する組成物を含む製剤を、任意の適切な投与経路で対象に投与する。
【００３７】
該方法を、第１の選択治療又は第２の選択治療として、又は他の方法との組み合わせで使用することができる。更に、製剤を、腫瘍を除去することによってできた腔に入れてもよい。
【００３８】
次に、本発明を、多くの好ましい実施形態を参照することによって、より詳細に説明する。
【図面の簡単な説明】
【００３９】
【図１】図１ａ及び１ｂは、ＴＭＺ−ポリマー組成物（ａ）及び本発明のＴＭＺ−組成物（ｂ）のＡＩＣ含量についての不純物レベルの分析のＨＰＬＣ−クロマトグラムを示す。
【図２】図２は、グレードＩＩ−ＩＶの脳腫瘍を完全に除去した後の、本発明の組成物／製剤を用いて治療した患者とコントロール群との術後生存率を示す。
【図３】図３は、脳腫瘍を有する、本発明の組成物／製剤を用いて治療した患者とコントロール群との無再発期間の持続期間を示す。
【発明を実施するための形態】
【００４０】
詳細な説明
本発明は、本明細書に開示した、特定の構成、方法の工程、及び材料は、幾分変化させることができるので、このような構成、方法の工程、及び材料に限定されないことを理解すべきである。更に、本発明の範囲は、添付の特許請求の範囲及びその均等物によってのみ限定されるので、本明細書で使用される用語は、特定の実施形態を説明する目的でのみ使用されており、限定することを意図するのもではないことを理解すべきである。
【００４１】
本明細書に引用された全ての参考文献は、個々の刊行物又は特許又は特許出願の各々が、全ての目的のためにその全体を参照により援用されるために、具体的かつ個別に示されている場合と同じ程度に、全ての目的のためにその全体を参照により援用される。
【００４２】
本発明は、本明細書にて示される以下の定義、図面及び例示的開示を参照することによって最もよく理解される。
【００４３】
示された医薬製剤中のＴＭＺ含量の最大値（２０質量％）は、ゲル形態の留置物（ｉｍｐｌａｎｔ）を調製するために添加される水又は他の薬理学的に許容可能な溶媒中のＴＭＺ溶解性に基づいて特定した。ＴＭＺ含量の最小値（５質量％）は、示された医薬製剤の最小有効性に基づく。
【００４４】
示された医薬製剤中の、塩形態のリン酸化多糖含量の示された限定値（３０から８０質量％）及び酸形態のリン酸化多糖含量の示された限定値（１００質量％まで）は、認可された薬物（ＴＭＺ）について０．５質量％の限定値内に標準化された、５−アミノイミダゾール−４−カルボキサミド塩酸塩（ＵＳＰ  ダカルバジン関連化合物Ａ（ＵＳＰ  Ｄｅｃａｒｂａｚｉｎｅ  Ｒｅｌａｔｅｄ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄ  Ａ）含量の増加量によって決定される。本発明の医薬製剤では、ダカルバジン（Ｄｅｃａｒｂａｚｉｎｅ）関連化合物Ａの含量は、０．５質量％未満であり、０．０１重量％、又は、更にＨＰＬＣを使用して検出不能な量にまでも下がる。
【００４５】
示された医薬製剤の成分の質量比は、実験的に、主に抗腫瘍有効性及び貯蔵安定性に従って、以下の「ＴＭＺの定量的含量」「ダデカルバジン（Ｄｅｃａｒｂａｚｉｎｅ）関連化合物Ａ」「吸水率」、「無菌性」の指標を使用して選択された。
【００４６】
例１〜５  テモゾロミドを含む高置換リン酸化デキストラン組成物の製造。
【００４７】
例１．  任意の既知の方法を使用して得られた１００ｇのリン酸化デキストランを、反応容器に入れ、５Ｌの蒸留水を添加し、該混合物を、均質な懸濁液が形成されるまで攪拌する。１０％の水酸化ナトリウム溶液を、得られたリン酸化デキストランの水懸濁液に少しずつ添加し、各部分の添加後に、５分間攪拌し、ｐＨを測定する。１０％の水酸化ナトリウム溶液の添加を、反応媒体のｐＨが６．０〜７．０になったときに停止する。次に、反応混合物を、室温で３０分間維持し、凍結乾燥する。凍結乾燥生成物中のナトリウム形態のリン酸化デキストラン含量及び酸形態のリン酸化デキストラン含量は、それぞれ６０重量％及び４０重量％である。
【００４８】
１０ｇのテモゾロミドを、９０ｇの得られた、塩形態及び酸形態のリン酸化デキストランの混合物からなる凍結乾燥粉末に添加し、乾燥混合物を十分に撹拌し、１ｇずつに分けて適切な密封パッケージに詰め、０．５Ｍｒａｄの線量のガンマ線照射を使用して殺菌する。得られた組成物には、１０重量％のテモゾロマイド、５４重量％の塩形態のリン酸化デキストラン及び３６重量％の酸形態のリン酸化デキストランが含まれる。
【００４９】
例２．  任意の既知の方法を使用して得られた８０ｇのリン酸化セルロース（ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ  ｐｈｏｓｐｈａｔｅ）を、反応容器に入れ、５Ｌの蒸留水を添加し、該混合物を均質な懸濁液が形成されるまで撹拌する。１０％の水酸化ナトリウム溶液を、得られたリン酸化セルロースの水懸濁液に、少しずつ添加し、各部分の添加後に、５分間撹拌し、ｐＨを測定する。１０％の水酸化ナトリウム溶液の添加を、反応媒体のｐＨが６．０〜７．０になったときに停止する。次に、反応混合物を、室温で３０分間維持し、凍結乾燥する。凍結乾燥生成物中のナトリウム形態のリン酸化セルロース含量及び酸形態のリン酸化セルロース含量は、それぞれ７０重量％及び３０重量％である。
【００５０】
２０ｇのテモゾロミドを、８０ｇの得られた、塩形態及び酸形態のリン酸化セルロースの混合物からなる凍結乾燥粉末に添加し、乾燥混合物を十分に撹拌し、成形型に入れ、加圧し、得られたシートをプラスチックバッグに入れ、密封し、０．５Ｍｒａｄの線量のガンマ線照射を使用して殺菌する。得られた製剤には、２０重量％のテモゾロミド、５６重量％の塩形態のリン酸化セルロース、及び２４重量％の酸形態のリン酸化デキストランが含まれる。
【００５１】
例３．  任意の既知の方法を使用して得られた１００ｇのリン酸化デキストランを、反応容器に入れ、５Ｌの蒸留水を添加し、混合物を、均質な懸濁液が形成されるまで撹拌する。１０％の水酸化マグネシウム溶液を、得られたリン酸化デキストランの水懸濁液に少しずつ添加し、各部分の添加後、５分間撹拌し、ｐＨを測定する。１０％の水酸化マグネシウム溶液の添加を、反応媒体のｐＨが６．０〜７．０になったときに停止する。次に、反応混合物を室温で３０分間維持し、凍結乾燥する。凍結乾燥生成物中のマグネシウム形態のリン酸化デキストラン含量及び酸形態のリン酸化デキストラン含量は、それぞれ８０重量％及び２０重量％である。
【００５２】
５ｇのテモゾロミドを、９０ｇの得られた、塩形態及び酸形態のリン酸化デキストランの混合物からなる凍結乾燥粉末に添加し、乾燥混合物を十分に撹拌し、１ｇずつに分けて、任意の適切な密封パッケージに詰め、０．５Ｍｒａｄの線量のガンマ線照射を使用して殺菌する。得られた製剤には、５重量％のテモゾロミド、７６重量％の塩形態のリン酸化デキストラン、及び１９重量％の酸形態のリン酸化デキストランが含まれる。
【００５３】
例４．  １０ｇのテモゾロミドを、３Ｌの殺菌蒸留水及び９０ｇの、６０重量％の塩形態のリン酸化デキストランと４０重量％の酸形態のリン酸化デキストランとを含む混合物に溶解する。該混合物を、均質な混合物に到達するまで撹拌し、その後、凍結乾燥させ、乾燥混合物を十分に撹拌し、１ｇずつに分け、任意の適切な密封パッケージに詰め、０．５Ｍｒａｄの線量のガンマ線照射を使用して殺菌する。得られた製剤には、１０重量％のテモゾロミド、５４重量％の塩形態の（ｍａｓｓ）リン酸化デキストラン及び３６重量％の酸形態のリン酸化デキストランが含まれる。
【００５４】
例５．医薬製剤の調製
【００５５】
医薬製剤は、塩形態のリン酸化デンプン（ｓｔａｒｃｈ  ｐｈｏｓｐｈａｔｅ）と酸形態のリン酸化デンプンとの混合物を使用した他は、例１と同様にして得られる。示された医薬製剤の組成を表１に示す。
【００５６】
テモゾロマイド含量及びＡＩＣ含量は、ＨＰＬＣを使用して測定される（図１ａ及び１ｂをそれぞれ参照）。溶液を実験のために以下の方法で調製する：実験用医薬製剤０．２５００ｇを、２５ｍＬのメスフラスコに入れ、２０ｍＬのジメチルスルホキシドを添加し、該混合物を超音波で１５分間処理し、体積をマークまで、同じ溶媒を用いて調整する。
【００５７】
得られた溶液を、孔径０．４５μｍの膜フィルターで濾過する。該溶液を使用し、新たに調製する。
【００５８】
クロマトグラフィーの条件：２５４ｎｍに設定した分光光度検出器を備えた液体クロマトグラフ、
−粒径５μｍのクロマトグラフィー用のオクタデシルシリカゲルを充填したステンレス鋼製の２５０ｘ４．６ｍｍカラム、例えば、Ｎｕｃｌｅｏｄｕｒ  Ｃ１８  Ｇｒａｖｉｔｙ。
【００５９】
移動相の速度−１ｍＬ／分。注入されたサンプルの体積−１０μＬ。
【００６０】
移動相：８９５．５：１００：４．５の比の、ヘキサンスルホン酸ナトリウム：メタノール：氷酢酸の水溶液０．８４６ｇ／Ｌ。
【００６１】
示された医薬製剤の無菌性は、標準的な薬学的方法を使用して測定した。
【００６２】
吸収を測定するために、本発明の医薬製剤の０．２ｇのサンプルを、５０ｍＬの蒸留水に入れ、１時間保持した。次に、ヒドロゲルを、ガラスフィルター上で余分な液体から分離し、予め秤量した秤量瓶に入れ、秤量し、真空オーブン中、酸化リンで３２３°Ｋにて、質量が一定になるまで乾燥させた。本発明の医薬製剤の吸水能力は、膨潤したサンプルと乾燥したサンプルとの間の質量差に基づいて計算した。
【００６３】
上記の方法のいずれかを使用して得られた医薬製剤は、髄腔内注入、局所投与のために、又は経口投与を意図する他の薬剤製剤の製造のために使用することができる。
【００６４】
例６〜８  経口投与剤形の製造
例６  例１〜５に記載した方法のいずれかを使用して得られた医薬製剤を、約５０ｍｇ（テモゾロミド含量５ｍｇについて計算）の量で、助剤（ラクトース９０ｍｇ、カルボキシルメチルデンプンナトリウム７．５ｍｇ、コロイド状二酸化ケイ素（ｓｉｌｉｃｏｎｅ）０．２ｍｇ、ワイン酸（ｗｉｎｅ  ａｃｉｄ）３．０ｍｇ）と混合する。得られた混合物を、湿式造粒又は乾式造粒にかける。得られた顆粒を、硬ゼラチンカプセルに充填する。該薬剤は、５ｍｇのテモゾロミドの投与量で経口使用することを意図している。
【００６５】
例７．  記載の例１〜５のいずれかを使用して得られた医薬製剤を、約５００ｍｇ（テモゾロミド含量５０ｍｇについて計算）の量で、助剤（ラクトース５５ｍｇ、カルボキシルメチルデンプンナトリウム１５ｍｇ、ワイン酸１０．０ｍｇ、ステアリン酸１４ｍｇ）と混合する。得られた混合物を湿式造粒又は乾式造粒にかけて、得られた顆粒を移送して、加圧する。テモゾロミド５０ｍｇの投与量で経口使用することを意図した丸薬を得る。
【００６６】
例８．  記載の例１〜５のいずれかを使用して得られたゲル形態の医薬製剤を、約２５００ｍｇ（テモゾロミド含量２５０ｍｇについて計算）の量で、助剤（ラクトース１８０ｍｇ、グリコール酸デンプンナトリウム２８ｍｇ、ワイン酸２０ｍｇ）と混合して、湿式造粒にかける。顆粒にステアリン酸カルシウム（又はステアリン酸マグネシウム）を振りかけ（ｄｕｓｔｅｄ）、使い捨てのパッケージに詰める。この薬剤は、テモゾロミド２５０ｍｇの投与量で１回の経口使用を意図する。
【００６７】
示された抗腫瘍医薬製剤の有効性評価は、悪性（グレードＩＩ−ＩＶ）脳腫瘍を有する４１人の患者（実験群）の臨床状況において行われた。手術室では、１５ｍｌの殺菌水を、１ｇの示された、テモゾロミド１０重量％、ナトリウム形態のリン酸化デキストラン５４重量％及び酸形態のリン酸化デキストラン３６重量％を含有する医薬製剤に添加し、均質な稠密な練薬（ｍａｓｓ）が形成されるまで２０〜３０分間保持した。得られた練薬を、腫瘍切除腔に入れた。
【００６８】
図２及び３に、研究の結果を示す。ここで開示した抗腫瘍医薬製剤の使用により、悪性脳腫瘍を有する患者の平均寿命が実質的に延び、再発のリスクが低下する。
【００６９】
表１から、本発明の組成物が、少なくとも２．５年間の貯蔵中に安定であり、且つＡＩＣの量が貯蔵中に増加しないことがわかる。ＴＭＸ、及びＡＩＣの含量、吸水量及び無菌性を測定し、その結果を以下の表１に示す。
【表１】
2019514946.tif 000005
【図１】
2019514946.tif 000006
【図２】
2019514946.tif 000007
【図３】
2019514946.tif 000008
【手続補正書】
【提出日】平成31年1月7日(2019.1.7)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
抗腫瘍活性を有する医薬組成物であって、
５から２０重量％の重量比のテモゾロミド、３０から８０重量％の重量比の塩形態の高置換リン酸化多糖（ａ）、及び１００重量％までの残部の酸形態の高置換リン酸化多糖（ｂ）を含み、
テモゾロミドの重量に対して、０．５重量％未満の５−アミノイミダゾール（ａｍｉｎｏｍｉｄａｚｏｌｅ）−４−カルボキサミド（ＡＩＣ）を含む、
医薬組成物。
【請求項２】
前記リン酸化多糖（ａ）及び／又は（ｂ）がデキストラン、デンプン、セルロース、及びそれらの混合物から選択される、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記多糖（ａ）及び／又は（ｂ）がデキストランである、請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
前記デキストランが、４０から１００ｋＤａの分子質量を有し、好ましくは６０から７０ｋＤａの分子質量を有する、請求項３に記載の組成物。
【請求項５】
前記塩がナトリウム、アンモニウム、カリウム、マグネシウム又はカルシウムの塩、及び／又はそれらの混合物である、請求項１から４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６】
前記塩がナトリウム塩である、請求項５に記載の組成物。
【請求項７】
テモゾロミド対全リン酸化多糖の重量比が１：４から１：１９である、請求項１から６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項８】
前記重量比が約１：９である、請求項７に記載の組成物。
【請求項９】
前記塩形態のリン酸化多糖対前記酸形態のリン酸化多糖の重量比が３０：６５から８０：１５である、請求項１から８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１０】
前記塩形態のリン酸化多糖対前記酸形態のリン酸化多糖の前記重量比が約５５：３５である、請求項９に記載の組成物。
【請求項１１】
請求項１〜１０のいずれか一項に記載の医薬組成物を調製する方法であって、
ａ）ＴＭＺの水溶液を提供する工程；
ｂ）塩形態の高置換リン酸化多糖及び酸形態の高置換リン酸化多糖の乾燥混合物を、前記ＴＭＺ溶液に導入する工程；
ｃ）工程ｂ）にて得られた溶液を凍結乾燥して、析出物を得る工程；及び
ｄ）前記析出物を殺菌する工程、
を含む方法。
【請求項１２】
請求項１〜１０のいずれか一項に記載の医薬組成物を調製する方法であって、
ａ）塩形態の高置換リン酸化多糖及び酸形態の高置換リン酸化多糖の混合物を提供する工程であって、前記塩形態は前記混合物の３０〜８０重量％の範囲にあり、１００％までの残部が酸形態である、工程；
ｂ）前記混合物に水性溶媒を添加することにより、前記混合物を含むヒドロゲルを形成する工程；
ｃ）前記ヒドロゲルを凍結乾燥して、析出物を得る工程；
ｄ）粉末テモゾロミドを、前記工程で得られた前記析出物に添加する工程；
ｅ）前記テモゾロミド及び析出物を混合して、粉末組成物を得る工程；
ｆ）任意選択的に、前記粉末組成物を殺菌する工程、
を含む、方法。
【請求項１３】
局所、髄腔内、留置（ｉｍｐｌａｎｔａｔｉｏｎ）、又は経口投与のための投与形態の医薬製剤であって、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の組成物、及び任意選択的に助剤を含む、医薬製剤。
【請求項１４】
ゲルを調製するためのシート／ウェハー（ｗａｆｅｒｓ）、粉末、顆粒、懸濁液、エマルジョン、カプセル、マイクロペレット、丸薬、ヒドロゲル、即時使用可能な（ｒｅａｄｙ  ｔｏ  ｕｓｅ）ゲル又は経皮パッチの形態の、請求項１３に記載の製剤を含む、医薬製剤。
【請求項１５】
テモゾロミドの量が０．５〜５ｍｇ／ｍｌである、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の組成物を含むヒドロゲル。
【請求項１６】
請求項１５に記載のヒドロゲルであって、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の組成物１重量部に対して１０〜３０重量部の水性溶媒を含む、ヒドロゲル。
【請求項１７】
癌の治療に使用するための、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の組成物、請求項１３に記載の製剤、又は請求項１５若しくは１６に記載のヒドロゲル。
【請求項１８】
前記癌が脳癌である、請求項１７に記載の組成物、製剤、又はヒドロゲル。
【請求項１９】
局所、髄腔内、留置（ｉｍｐｌａｎｔａｔｉｏｎ）、又は経口投与により投与される、請求項１７又は１８に記載の組成物。
【請求項２０】
癌の治療で髄腔内投与に使用するための、請求項１５又は１６に記載のヒドロゲル。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３８】
次に、本発明を、多くの好ましい実施形態を参照することによって、より詳細に説明する。
他の記載と重複するが、本発明を以下に示す。
［発明１］
抗腫瘍活性を有する医薬組成物であって、
５から２０重量％の重量比のテモゾロミド、３０から８０重量％の重量比の塩形態の高置換リン酸化多糖、及び１００重量％までの残部の酸形態の高置換リン酸化多糖を含み、
テモゾロミドの重量に対して、０．５重量％未満の５−アミノイミダゾール（ａｍｉｎｏｍｉｄａｚｏｌｅ）−４−カルボキサミド（ＡＩＣ）を含む、
医薬組成物。
［発明２］
前記リン酸化多糖がデキストラン、デンプン、セルロース、及びそれらの混合物から選択される、発明１に記載の組成物。
［発明３］
前記多糖がデキストランである、発明２に記載の組成物。
［発明４］
前記デキストランが、４０から１００ｋＤａの分子質量を有し、好ましくは６０から７０ｋＤａの分子質量を有する、発明３に記載の組成物。
［発明５］
前記塩がナトリウム、アンモニウム、カリウム、マグネシウム又はカルシウムの塩、及び／又はそれらの混合物である、発明１から４のいずれか一項に記載の組成物。
［発明６］
前記塩がナトリウム塩である、発明５に記載の組成物。
［発明７］
テモゾロミド対全リン酸化多糖の重量比が１：４から１：１９である、発明１から６のいずれか一項に記載の組成物。
［発明８］
前記重量比が約１：９である、発明７に記載の組成物。
［発明９］
前記塩形態のリン酸化多糖対前記酸形態のリン酸化多糖の重量比が３０：６５から８０：１５である、発明１から８のいずれか一項に記載の組成物。
［発明１０］
前記塩形態のリン酸化多糖対前記酸形態のリン酸化多糖の前記重量比が約５５：３５である、発明９に記載の組成物。
［発明１１］
発明１〜１０のいずれか一項に記載の医薬組成物を調製する方法であって、
・塩形態の高置換リン酸化多糖及び酸形態の高置換リン酸化多糖を混合する工程；
ａ）粉末形態のテモゾロミドを、前記工程で得られた前記混合物に添加する工程；
ｂ）前記多糖−テモゾロミドの混合物を混合する工程；
ｃ）上で得られた前記混合物を殺菌する工程、
を含む、方法。
［発明１２］
発明１〜１０のいずれか一項に記載の前記組成物の製剤を調製する方法であって、
ｉ）水を添加することによって、発明１〜１０のいずれか一項に記載の組成物、又は発明１１によって得ることができる組成物からヒドロゲルを形成する工程；
ｉｉ）前記ゲルを凍結乾燥させて、凍結乾燥物を形成する工程；
ｉｉｉ）前記粉末製剤を殺菌する工程、
を含む、方法。
［発明１３］
前記ヒドロゲルが、１重量部の発明１〜１０のいずれか一項に記載の組成物と１０〜３０重量部の水性溶媒とを−好ましくは１重量部の前記組成物と１５重量部の殺菌水とを−混合することによって得られる、発明１２に記載の医薬製剤を調製する方法。
［発明１４］
局所、髄腔内、留置（ｉｍｐｌａｎｔａｔｉｏｎ）、又は経口の投与のために使用される投与形態の、発明１２又は１３に記載の方法によって得ることができる医薬製剤。
［発明１５］
ゲルを調製するためのシート／ウェハー（ｗａｆｅｒｓ）、粉末、顆粒、懸濁液、エマルジョン、カプセル、マイクロペレット、丸薬、ヒドロゲル、即時使用可能な（ｒｅａｄｙ  ｔｏ  ｕｓｅ）ゲル又は経皮パッチの形態の、発明１４に記載の医薬製剤。
［発明１６］
癌の治療に使用するための、発明１〜１０のいずれか一項に記載の組成物又は発明１４〜１５のいずれか一項に記載の製剤。
［発明１７］
前記癌が脳癌である、発明１６に記載の使用。
［発明１８］
癌の治療で髄腔内投与に使用するための、発明１１から１２のいずれか一項に記載のヒドロゲル。
【国際調査報告】
2019514946.tif 000009
2019514946.tif 000010
2019514946.tif 000011