(57)【要約】  本出願は、測定用セル（１０８）を用いて液体試料中の分析物を検出する電気化学発光方法であって、測定用セル（１０８）は、電気化学発光測定サイクルを用いて分析物を検出するための作用電極（１２０）を備え、  ａ．  分析物のない液体試料を用いて較正プロセス中に測定サイクルを実行するとともに、第１の電気化学的インピーダンス分光法（ＥＩＳ）を測定サイクルの所与のポイントで実行するステップであって、第１のＥＩＳは作用電極（１２０）を用いて実行される、ステップと、  ｂ．  分析物を含有する液体試料を用いて分析プロセス中に測定サイクルを実行するとともに、第２のＥＩＳを測定サイクルの所与のポイントで実行するステップであって、第２のＥＩＳは作用電極（１２０）を用いて実行される、ステップと、  ｃ．  第１のＥＩＳおよび第２のＥＩＳの結果を比較するステップと、比較が第１のＥＩＳと第２のＥＩＳとの間の偏差が所定の閾値を超えているという結果になったかどうかを示す測定状態の指標を与えるステップと、を含む方法に関する。【選択図】図１
2019512665.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
測定用セル（１０８）を用いて液体試料中の分析物を検出する電気化学発光方法であって、前記測定用セル（１０８）は、電気化学発光測定サイクルを用いて前記分析物を検出するための作用電極（１２０）を備え、前記方法が
ａ．  前記分析物のない液体試料を用いて較正プロセス中に前記測定サイクルを実行ぃ、第１の電気化学的インピーダンス分光法（ＥＩＳ）を前記測定サイクルの所与のポイントで実行し、前記第１のＥＩＳは前記作用電極（１２０）を用いて実行される、ステップと、
ｂ．  前記分析物を含有する前記液体試料を用いて分析プロセス中に前記測定サイクルを実行し、第２のＥＩＳを前記測定サイクルの前記所与のポイントで実行し、前記第２のＥＩＳは前記作用電極（１２０）を用いて実行される、ステップと、
ｃ．  前記第１のＥＩＳおよび前記第２のＥＩＳの結果を比較するステップと、
ｄ．  前記第１のＥＩＳと前記第２のＥＩＳとの間の偏差が所定の閾値を超えているという結果に前記比較がなったかどうかを示す測定状態の指標を与えるステップと
を含む方法。
【請求項２】
前記測定用セル（１０８）は、制御ユニット（１３２）をさらに備える測定装置（１００）の一部であり、前記指標は前記制御ユニット（１３２）に供給され、前記第１のＥＩＳと前記第２のＥＩＳとの間の偏差が前記所定の閾値を超えているという結果に前記比較がなったことを前記指標が示す場合、前記制御ユニット（１３２）によって、
−  前記測定失敗に関する対応策を選択し、
−  前記対応策を開始し、
−  ステップｂ、ｃ、およびｄを繰り返す
ように前記装置を制御するステップをさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記測定装置（１００）は、表示ユニット（１５２）をさらに備え、前記対応策は、前記測定状態を前記表示ユニット（１５２）に表示することを含む、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
請求項１から３のいずれか一項に記載の方法であって、
前記測定サイクルは、以下に記載のいずれか１つを含む：
−  前記液体試料なしで前記作用電極（１２０）をコンディショニングするための第１のフェーズ、
−  前記測定用セル（１０８）に前記液体試料を供給し、磁性微粒子を捕獲するための第２のフェーズであって、前記液体試料は、前記電気化学発光測定で測定される電気化学発光反応を引き起こすことができるマーキング物質を含有し、前記複合体が前記磁性微粒子にさらに結合されており、前記液体試料が前記分析物を含有する場合、前記分析物は複合体として前記液体試料内に含有されており、前記複合体は前記マーキング物質を含み、前記捕獲は磁場によって前記微粒子を引き付けることを含み、それによって前記作用電極（１２０）の表面に前記微粒子を堆積させる第２のフェーズ、
−  前記捕獲後および前記電気化学発光測定前に前記測定用セル（１０８）を洗浄するための第３のフェーズであって、未結合の複合体と堆積していない微粒子とを前記測定用セル（１０８）から取り除くように適合されている、第３のフェーズ、
−  前記試料に対する前記電気化学発光測定を実行するための第４のフェーズ、
−  クリーニング溶液を用いて前記作用電極（１２０）を有する前記測定用セル（１０８）をクリーニングするための第５のフェーズ、
そして、前記所与のポイントは、以下のいずれか１つである：
−  前記第１のフェーズ中の第１のポイント、
−  第２のフェーズ中の第２のポイント、
−  前記第３のフェーズ中の第３のポイント、
−  前記第４のフェーズ中の第４のポイント、
−  前記第５のフェーズの後かつ前記測定サイクルの後続の実行における前記第１のフェーズの前の第５のポイント。
【請求項５】
前記コンディショニング、前記捕獲、任意選択の前記洗浄、前記電気化学発光測定、および前記クリーニングは、前記作用電極（１２０）に電位パルスを加えることを含み、前記パルスは、前記測定用セル（１０８）の参照電極に対して測定されるＤＣ分極電位に対して加えられ、前記ＥＩＳを実行する前記ステップは、前記ＤＣ電位に対してＡＣ電位を加えることを含む、請求項３に記載の方法。
【請求項６】
前記ＥＩＳを実行するための前記ＡＣ電位は、周波数応答解析（ＦＲＡ）モジュールを有するポテンショスタットを用いて加えられる、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記ＡＣ電位は、最低で１ｍＶおよび最高で１００ｍＶのピークトゥピーク、好ましくは最低で３ｍＶおよび最高で８０ｍＶのピークトゥピーク、より好ましくは最低で５ｍＶおよび最高で５０ｍＶのピークトゥピークの振幅を有する、請求項５または６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
前記ＡＣ電位は、最低で１０Ｈｚおよび最高で１００ｋＨｚ、好ましくは最低で２０Ｈｚおよび最高で５０ｋＨｚ、より好ましくは最低で３０Ｈｚおよび最高で１０ｋＨｚの周波数を有する、請求項５から７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
前記第１のＥＩＳおよび前記第２のＥＩＳの前記結果はアドミタンスおよび位相を示すそれぞれの応答信号を含み、前記所定の閾値は前記アドミタンスおよび前記位相についてそれぞれ定められ、前記第１のＥＩＳおよび第２のＥＩＳの前記結果の前記比較はそれぞれの前記アドミタンスの比較とそれぞれの前記位相の比較とを含み、前記測定状態は、前記第１のＥＩＳと前記第２のＥＩＳとの間の偏差が前記アドミタンスおよび前記位相についてそれぞれ予め定められた閾値を超えているという結果に両比較がなったかどうかを示す、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
前記比較されたＥＩＳ間の偏差が前記所定の閾値を越えていないという結果に前記比較がなった場合、測定状態の前記指標はポジティブであり、比較されたＥＩＳ間の偏差が前記所定の閾値外であるという結果に前記比較がなった場合、測定状態の前記指標はネガティブであり、前記それぞれの第１のＥＩＳおよび第２のＥＩＳは、前記所与のポイントのうち少なくとも２つの異なるポイントについて少なくとも２回実行され、各測定状態のそれぞれのアッセイ実行表示という結果になり、前記対応策の前記選択は、前記各測定状態の前記それぞれのアッセイ実行表示の組み合わせに基づいて実行される、請求項１から９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
前記少なくとも２つの所与のポイントは第５のポイントを含み、前記方法は、
−  何ら分析物のない液体試料を用いて準備実行プロセス内で前記測定サイクルを実行し、前記測定サイクルの前記第５のポイントで第３のＥＩＳを実行するステップであって、前記第３のＥＩＳが前記作用電極（１２０）を用いて実行される、ステップと、
−  前記第５のポイントについて得られる前記第１のＥＩＳと前記第３のＥＩＳの結果を比較するステップと、
−  前記第５のポイントで得られる前記第１のＥＩＳと前記第３のＥＩＳとの間の偏差が所定の閾値を超えているという結果に前記比較がなったかどうかを示す前記測定状態の準備実行指標を与えるステップであって、前記対応策の前記選択は、前記各測定状態の前記それぞれのアッセイ実行表示と前記準備実行指標との組み合わせに基づいてさらに実行されるステップ、
をさらに含む、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
−  前記第１、第２、または第３のポイントについて得られる前記アッセイ実行表示がポジティブであり、
−  前記第５のポイントについて得られる前記アッセイ実行表示がネガティブであり、かつ
−  前記第５のポイントについて得られる前記準備実行指標がネガティブである
場合に、
選択される前記対応策は、現在のクリーニング溶液を異なるロットユニットのクリーニング溶液と取り替える指示を、前記測定用セル（１０８）の一部である測定装置の一部である表示ユニットを介して表示することを含むか、または
選択される前記対応策は、前記測定用セル（１０８）および前記作用電極（１２０）のクリーニングを実行するために使用される前記装置の構成要素の自動クリーニングを含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
−  前記第１、第２、または第３のポイントについて得られる前記アッセイ実行表示がポジティブであり、
−  前記第５のポイントについて得られる前記アッセイ実行表示がネガティブであり、かつ
−  前記第５のｈポイントについて得られる前記準備実行指標がポジティブである
場合に、
選択される前記対応策は、前記分析物を含有する現在の前記液体試料を、前記分析物を含有する新しい液体試料と取り替える指示を、前記表示ユニットを介して表示すること、または
前記分析物を含有するさらなる液体試料の自動供給のリクエストを含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項１４】
前記測定用セル（１０８）に共反応体溶液を供給するステップをさらに含み、これによって前記複合体との組み合わせで電気化学発光反応を可能にし、
−  前記第１または第３のポイントについて得られる前記アッセイ実行表示がネガティブであるか、または
−  前記第２のポイントについて得られる前記アッセイ実行表示がネガティブであるとともに、前記第１、第３、または第５のポイントについて得られる少なくともさらなるアッセイ実行表示もネガティブである
という点で基準が満たされる場合、第１の決定がなされ、
前記基準が満たされていることが前記第１の決定によって決定される場合、選択される前記対応策は、前記測定用セル（１０８）に前記共反応体溶液を供給するために使用される前記装置の前記構成要素をクリーン化する指示を、前記測定用セル（１０８）の一部である測定装置の一部である表示ユニットを介して表示することを含むか、あるいは
選択される前記対応策は、前記測定用セル（１０８）に前記共反応体溶液を供給するために使用される前記装置の構成要素の自動クリーニングを含み、
前記対応策の完了後、ステップｂ、ｃ、およびｄの後続の繰り返しがすぐにあり、
−  前記第１または第３のポイントについて得られる前記アッセイ実行表示がいまだにネガティブであるか、または
−  前記第２のポイントについて得られる前記アッセイ実行表示がネガティブであるとともに、前記第１、第３、または第５のポイントについて得られる少なくともさらなるアッセイ実行表示もネガティブである
という点で前記基準が満たされる場合、第２の決定がなされ、
前記基準が満たされることが前記第２の決定によって決定される場合、選択される前記対応策は、アルカリ溶液を用いて前記測定用セル（１０８）をクリーン化する指示を、前記測定用セル（１０８）の一部である前記測定装置の一部である前記表示ユニットを介して表示することを含む、または、選択される前記対応策が、アルカリ溶液を用いた前記測定用セル（１０８）の自動液体流クリーニングを含む、請求項９に記載の方法。
【請求項１５】
−  前記第１、第３、または第５のポイントについて得られる前記アッセイ実行表示がポジティブであり、
−  前記第２のポイントについて得られる前記アッセイ実行表示がネガティブである
場合に、
選択される前記対応策は、前記測定用セル（１０８）への前記分析物を含有する前記液体試料の供給のために使用される前記装置の前記構成要素をクリーン化する指示を、前記表示ユニットを介して表示することを含み、前記測定装置は前記測定用セル（１０８）の一部である、あるいは、選択される前記対応策は、前記測定用セル（１０８）への前記分析物を含有する前記液体試料の前記供給のために使用される前記装置の構成要素の自動クリーニングおよび／または前記装置の機械的較正を含む、請求項９に記載の方法。
【請求項１６】
ｎ（ｎは１から１０００の間の変数）から直近までの前記電気化学発光測定サイクルの連続した実行において、前記所与のポイントにおける前記第２のＥＩＳを同じ所与のポイントについて得られるそれぞれの第２のＥＩＳと比較するステップをさらに含み、選択される前記対応策は、現在の前記電気化学発光測定サイクルと前記ｎから直近までの前記電気化学発光測定サイクルの連続した実行とについて得られる前記第２のＥＩＳの結果の比較が所定の経年変化閾値を超える偏差という結果になった場合にのみ実行される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１７】
測定用セル（１０８）を用いて液体試料中の分析物を検出する電気化学発光方法を実行するための装置（１００）であって、前記装置は前記測定用セル（１０８）を備え、前記測定用セル（１０８）は電気化学発光測定サイクルを用いて前記分析物を検出するための作用電極（１２０）を備え、前記装置はプロセッサ（１４４）とメモリ（１４０）とを備え、前記メモリはコンピュータ実行可能命令を含み、前記プロセッサによる前記命令の実行が、前記装置に、
ａ．  前記分析物のない液体試料を用いて較正プロセス中に前記測定サイクルを実行し、第１の電気化学的インピーダンス分光法（ＥＩＳ）を前記測定サイクルの所与のポイントで実行し、前記第１のＥＩＳは前記作用電極（１２０）を用いて実行される、ということ、
ｂ．  前記分析物を含有する前記液体試料を用いて分析プロセス中に前記測定サイクルを実行し、第２のＥＩＳを前記測定サイクルの前記所与のポイントで実行し、前記第２のＥＩＳは前記作用電極（１２０）を用いて実行される、ということ、
ｃ．  前記第１のＥＩＳおよび前記第２のＥＩＳの結果を比較すること、
ｄ．  前記第１のＥＩＳと前記第２のＥＩＳとの間の偏差が所定の閾値を超えているという結果に前記比較がなったかどうかを示す測定状態の指標を与えること、
をさせる、
装置（１００）。
【請求項１８】
請求項１に記載の方法を実行するためのコンピュータ実行可能命令を含むコンピュータプログラム製品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、液体試料中の分析物を検出する電気化学発光方法、および液体試料中の分析物を検出する装置、ならびにコンピュータプログラム製品に関する。
【背景技術】
【０００２】
生化学的および生物学的な物質中の対象とする分析物の検出および定量については、電気化学発光（electrochemiluminescent:ＥＣＬ）アッセイ技法がよく知られている。一般に、微量の微生物、製薬、ホルモン、ウイルス、抗体、核酸、および他のタンパク質を測定することができる方法およびシステムは、研究者および臨床家にとって大きな価値がある。
【０００３】
ＥＣＬアッセイ技法は、対象とする分析物の存在および濃度の高感度かつ正確な測定をもたらす。そのような技法では、発光をトリガするために、培養された試料が、定電位的または定電流的に制御された作用電極に曝される。適切な化学的環境において、そのような電気化学発光は、特定の時間におよび特定のやり方で作用電極に印加された電圧または電流によってトリガされる。ラベルによって生成される光は測定され、分析物の存在または量を指し示す。そのようなＥＣＬ技法のより完全な説明に関しては、例えば、米国特許第５，２３８，８０８号、および国際公開第８６／０２７３４号の参照がなされる。
【０００４】
磁性微粒子が底に堆積したり互いに凝集したりするのを防ぐために、タンパク質がコーティングされた磁性微粒子が入れ物内で攪拌される、液体試料中の分析物を検出する電気化学発光方法は、適切な分析システムとともに、国際公開第２０１４／２０２２９８Ａ１号に記載されている。国際公開第９０／１１５１１号は、測定の精度および正確度を改善するために、ボルタンメトリー作用電極に加えられた減少する走査速度を有する電圧波形を用いて電気化学発光測定を行う方法および装置を開示する。国際公開第９９／３９２０６号には、電気化学発光結合反応テストによって検査試料を分析する方法が記載されており、分析のための特徴である化学発光マーカを含有する複合体が、生化学的結合反応によって形成され、反応順序のあいだに磁性微粒子に結合される。『Ｔｒｉｓ（２，２’−ｂｉｐｙｒｉｄｙｌ）ｒｕｔｈｅｎｉｕｍ（ＩＩ）  Ｅｌｅｃｔｒｏｇｅｎｅｒａｔｅｄ  Ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ  ｉｎ  Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ』、Ｍｉｃｒｏｃｈｉｍ．Ａｃｔａ  １２７、１９〜３９において、Ｗ．−Ｙ．Ｌｅｅは、フローイングストリーム（フローインジェクションおよびＨＰＬＣなど）の誘導体化なしでシュウ酸塩および様々なアミン含有分析物を決定するために、トリス（２，２’−ビピリジル）ルテニウム（ＩＩ）の電気化学発光が、検出方法としてどのように使用できるのかを記載している。米国特許第６，５９９，４７３Ｂ１号は、電気化学発光結合反応分析（electrochemiluminescence binding reaction analysis:ＥＣＬ−ＢＢＡ）を開示する。
【０００５】
ＥＣＬ−ＢＢＡによれば、検出可能な複合体が生成され、複合体の濃度は、求められる分析結果の尺度を構成する。ＥＣＬ反応を引き起こすことができるマーキング物質（ラベル）は、分析物、例えば抗体に特有の結合試薬に結合される。この種はマーキング物質を含有し、結合試薬は、ラベル配合体と呼ばれる。
【０００６】
そのような物質が、ボルタンメトリー作用電極上の適切な電位を受けるとき、物質は、測光法で測定することができる光を発する。共反応体と呼ばれる第２の電気化学的に活性な物質は、通常この反応をもたらす。実際には、主として、ＥＣＬラベルとしてルテニウム複合体（ルテニウム−トリス［ビピリジル］）が、共反応体としてのトリプロピルアミン（tripropylamine:ＴＰＡ）との組み合わせで、使用される。２つの電気化学的に活性な物質は、電極に電圧が加えられるとともに酸化させられる。続く陽子の損失は、ＴＰＡを強い還元種に変える。続く酸化還元反応によってＥＣＬラベルに励起状態がもたらされ、ＥＣＬラベルは励起状態から光子の放出を伴って基底状態に戻る。ＥＣＬラベル反応は、電極に電圧を加えた後に単一のラベル分子が複数の光子を放出するように、循環反応であることが好ましい。
【０００７】
ＥＣＬ標識複合体分子の分析用の特徴は、磁性微粒子（ビーズ）に固定される。実際には、典型的には２から３マイクロメートルの直径を有する磁化ポリスチレンビーズが使用される。固定は、一対の特定の生化学的結合パートナーによって引き起こされる。ストレプトアビジン―ビオチンのペアは、特に有利であることが分かっている。ビーズは、ストレプトアビジンでコートされ、そこにビオチン化抗体が結合される。
【０００８】
結合された標識複合体を有するビーズは、測定用装置の測定用セルに導入される。セルは、ＥＣＬ反応をトリガするのに必要な電場を発生させるのに必要である電極を装備する。ビーズは、作用電極の下方に配設された磁石の磁場内で作用電極の表面へ引っ張られる。典型的には、これは試料流体が連続的に流れるフロースルーセル内で生じるので、ビーズの磁気堆積は、『捕獲（capturing）』と呼ばれる。次いで、ＥＣＬ反応をトリガするのに必要な電位が作用電極に加えられ、結果として得られる発光光が、適切な光検出器を用いて測定される。発光光の強度は、作用電極の表面上でビーズに結合された標識抗体の個数の濃度についての尺度であり、これは同様に、試料中の分析物の濃度の尺度である。較正が、測定発光信号から求められる濃度の計算を可能にする。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明の各実施形態によれば、測定用セルを用いて液体試料中の分析物を検出する電気化学発光方法が提供される。測定用セルは、電気化学発光測定サイクルを用いて分析物を検出するための作用電極を備える。方法は、
ａ．  分析物のない液体試料を用いて較正プロセス中に測定サイクルを実行し、第１の電気化学的インピーダンス分光法（electrochemical impedance spectroscopy:ＥＩＳ）を測定サイクルの所与のポイントで実行し、第１のＥＩＳは作用電極を用いて実行される、ステップと、
ｂ．  分析物を含有する液体試料を用いて分析プロセス中に測定サイクルを実行し、第２のＥＩＳを測定サイクルの所与のポイントで実行し、第２のＥＩＳは作用電極を用いて実行される、ステップと、
ｃ．  第１のＥＩＳおよび第２のＥＩＳの結果を比較するステップと、
ｄ．  第１のＥＩＳと第２のＥＩＳとの間の偏差が所定の閾値を超えているという結果に比較がなったかどうかを示す測定状態の指標を与えるステップと、
を含む。
【００１０】
「分析物(analyte)」は、本明細書中で理解されるとき、分析される液体試料の成分、例えば、様々なサイズの分子、タンパク質、代謝産物などである。
「液体試料(liquid sample)」は、本明細書中で理解されるとき、人間または任意の他の生物から抽出された任意の種類の組織または体液などの生物学的試料を包含する。特に、生物学的試料は、血液の、血清の、血漿の、尿の、脳脊髄液の、もしくは唾液の試料、またはそれらの任意の派生物であり得る。
【００１１】
用語「発光(luminescence)」は、本明細書中で理解されるとき、照射誘起発光、化学発光、および電気化学発光、特にＥＣＬ−ＢＢＡなどの任意の種類の発光を包含する。
用語「発光免疫測定法(luminescence immunoassay)」は、本明細書中で理解されるとき、液体試料中の特定の分析物の存在を示す光信号、すなわち発光信号を生成する任意の免疫測定法を包含する。
【００１２】
「測定サイクル(measurement cycle)」は、本明細書中で理解されるとき、液体試料中の分析物の電気化学発光検出を実行するために必要とされる個々のステップを包含する。
「測定サイクルの所与のポイント(given point of the measurement cycle)」は、所与の時間的ポイント、例えば測定サイクルを開始した後の、であり得る。この場合には、所与のポイントは、サイクルの開始ポイントからすぐ測定されるある継続時間期間、または測定サイクルのあるステップの開始後もしくは完了後のある継続時間期間であり得る。測定サイクルのステップは、例えば、液体試料の供給、微粒子の捕獲、測定用セルの洗浄、ＥＣＬ測定の実行、または測定用セルのクリーニングの実行である。所与のポイントは、例えば前述のステップのうちのひとつの開始のような、測定サイクルのよく定められたある段階でもあり得る。
【００１３】
作用電極のみが述べられているが、当業者は、これは対電極の存在も包含することを理解されよう。さらに、当業者は、これが、４番目の電極が補償の目的で使用される四電極測定も包含することを理解されよう。
【００１４】
電気化学的インピーダンス分光法（ＥＩＳ）の結果は、互いに転換可能であるアドミタンス、インピーダンス、実数部、虚数部、または位相からなる群から選択することができる。
【００１５】
電気化学的インピーダンス分光法（ＥＩＳ）は、周波数の関数としてインピーダンスによって表される媒体の誘電特性を測定する方法である。任意の回路のインピーダンスＺは、電圧時間関数Ｖ（ｔ）＝Ｖ０ｓｉｎ（ωｔ）と、結果として得られる電流時間応答関数Ｉ（ｔ）＝Ｉ０ｓｉｎ（ωｔ＋φ）との比、
【００１６】
【数１】
2019512665.tif 000003
【００１７】
である。
ここで、Ｖ０およびＩ０は最大電圧信号および最大電流信号であり、ωはラジアル周波数であり、ｔは時間であり、φ（訳注：フォントの関係上、本翻訳文の本文では「一筆書きの」ファイを用い、数式のイメージ中では「二筆書きの」ファイを用いる。これはあくまでフォントの問題に過ぎず、原文の内容を変更する意図はない。）は位相シフトである。一般に、インピーダンスは、インピーダンススペクトルＺ（ω）を与えるように異なる周波数で決定される。関数Ｚは、絶対値（modulus）｜Ｚ｜、位相シフトφ、実数部Ｚ’、および虚数部Ｚ’’を用いた複素数によって表すことができる。
【００１８】
【数２】
2019512665.tif 000004
【００１９】
を用いて、それは、
【００２０】
【数３】
2019512665.tif 000005
【００２１】
のように記述することができる。
インピーダンスの実数部は、試料の全てのオーミック特性に関連している。虚数部は、主に、電極表面にとても近いヘルムホルツ層に形成される二重層の静電容量の容量性挙動を説明する。セルの幾何学的形状、および電極の幾何学的形状は、インピーダンスにかなり大きい影響を及ぼす。電極表面の何らかの変化は、電極の二重層の静電容量に影響を及ぼす。したがって、電気化学的インピーダンス分光法は、電気化学反応、吸着作用、粗さ、または電極付着物の依存性における電極表面を評価するために強力なツールである。したがって、ＥＩＳは、プロセス内の品質管理のために強力なツールである。
【００２２】
しばしばアドミタンスは、インピーダンスの代わりに使用される。回路のアドミタンスは、単純な式
【００２３】
【数４】
2019512665.tif 000006
【００２４】
によってインピーダンスに関連している。それは、以下の式
【００２５】
【数５】
2019512665.tif 000007
【００２６】
によって表される。
ＺまたはＹのスペクトルを分析するとき、ボード線図およびナイキスト線図が、表示のために最も一般的に使用される。ボード線図において、ｌｏｇ｜Ｚ｜およびφは、ｌｏｇ  ω／２πの関数としてプロットされ、ナイキスト線図において、−Ｚ’は、Ｚ’’に対してプロットされる。
【００２７】
本発明の各実施形態は、ＥＣＬ測定が信頼できるか否かを決定することが、ｉｎ  ｓｉｔｕで、すなわち測定サイクルを中断することなく測定サイクル中に可能であるという利点を有し得る。例えば、測定状態は、測定サイクルの失敗または測定サイクルの成功を指し示し得る。失敗は、ＥＣＬ測定結果が信頼できないことを意味するとともに、成功は、ＥＣＬ測定結果が信頼できることを意味する。したがって、各実施形態は、測定を中断または邪魔することなく、ＥＣＬ測定の判断のためのツールを提供することができる。例えば、これは、システム試薬内の、または共反応体溶液、クリーニング溶液、および測定用セルなどの構成要素の正規でない状態を特定することを可能にすることができる。
【００２８】
本明細書中、用語「共反応体溶液(co-reactant solution)」（＝ＣｏＳ）は、ＥＣＬ共反応体として必要とされる試薬についての同義語としてみなされることになる。例えば、「共反応体溶液」は、トリプロピルアミン（ＴＰＡ）を含有し得る。共反応体溶液（ＣｏＳ）として適切な組成は、例えば、１８０ｍＭ  ＴＰＡ、３００ｍＭリン酸塩、０．１％デタージェント（例えばポリドカノール）、ｐＨ６．８を含み得る。
【００２９】
さらに、用語「クリーニング溶液(cleaning solution)」（＝ＣｌＳ）は、ＥＣＬ測定を実行した後のセルをクリーン化するために使用される測定用セルクリーニング溶液についての同義語とみなされることになる。例えば、「クリーニング溶液」は、水酸化カリウムを含有し得る。クリーニング溶液（ＣｌＳ）として適切な組成は、例えば、１７６ｍＭ  ＫＯＨ、および１％デタージェント（例えばポリドカノール）を含む。
本発明の一実施形態によれば、測定用セルは制御ユニットを備える測定装置の一部であり、指標は制御ユニットに供給され、第１のＥＩＳと第２のＥＩＳとの間の偏差が所定の閾値を超えているという結果に比較がなったことを指標が示す場合、方法は、制御ユニットによって、
−  測定失敗に関する対応策を選択し、
−  対応策を開始し、
−  ステップｂ、ｃ、およびｄを繰り返す
ように装置を制御するステップをさらに含む。
【００３０】
「対応策(countermeasure)」は、測定サイクルの失敗を訂正するために装置を制御する、または測定失敗またはＥＩＳ測定について装置の使用者に情報を与える任意の動作として理解されたい。
【００３１】
例えば、対応策は、測定失敗を訂正する。訂正の完了後、前記ステップｂ、ｃ、およびｄの繰り返しは、自動実行され得る。
さらなる例では、測定装置は、表示ユニットをさらに備え、対応策は、測定状態を表示ユニットに表示することを含む。一実施形態によれば、表示は、第１のＥＩＳと第２のＥＩＳとの間の偏差が所定の閾値を超えているという結果に比較がなった場合にのみ実行されてもよい。
【００３２】
本発明の一実施形態によれば、測定サイクルは、以下に記載のいずれか１つを含む：
−  液体試料なしで作用電極をコンディショニングするための第１のフェーズ、
−  測定用セルに液体試料を供給し、磁性微粒子を捕獲するための第２のフェーズであって、前記液体試料は、電気化学発光測定で測定される電気化学発光反応を引き起こすことができるマーキング物質を含有し、前記複合体が磁性微粒子にさらに結合されており、液体試料が分析物を含有する場合、分析物は複合体として液体試料内に含有されており、前記複合体はマーキング物質を含み、前記捕獲は磁場によって微粒子を引き付けることを含み、それによって前記作用電極の表面に微粒子を堆積させる、第２のフェーズ、
−  捕獲後および電気化学発光測定前に測定用セルを洗浄するための第３のフェーズであって、前記第３のフェーズは、未結合の複合体と堆積していない微粒子とを測定用セルから取り除くように適合されている、第３のフェーズ、
−  試料に対する電気化学発光測定を実行するための第４のフェーズ、
−  クリーニング溶液を用いて作用電極を有する測定用セルをクリーニングするための第５のフェーズ、
そして、所与のポイントは、以下のいずれか１つである：
−  第１のフェーズ中の第１のポイント、
−  第２のフェーズ中の第２のポイント、ここで、第３のフェーズが存在しない場合、この第２のポイントは、第４のフェーズの開始直前、第２のフェーズの最終時点であり得る、
−  第３のフェーズ中の第３のポイント、好ましくは第３のフェーズの最終時点、
−  第４のフェーズ中の第４のポイント、
−  第５のフェーズの後かつ測定サイクルの後続の実行における第１のフェーズの前の第５のポイント。
【００３３】
好ましくは、所与のポイントのいずれか１つにおける任意のＥＩＳ測定は、測定用セル内に収容される液体の移動がない状態の段階で実行され得る。これによって、この方法の正確度を増大させることができる。
【００３４】
第３のポイントに関しては、好ましくは、この第３のポイントは、微粒子の引き付けが完了されるように選択され得ることが留意されなければならない。これは、ＥＩＳ測定が実行される再現可能な状態をもたらすことができる。
【００３５】
上述したポイントのうち１つまたは複数のポイントの適切な選択は、上述した間違ったシステム試薬または成分が高い選択性で特定され得るという利益を有し売る。したがって、エラーは、あるシステム試薬または成分の欠点に直接的にあいまいさなく割り当てられ得る。上述したポイントは、離散的な個々のポイントであってもよく、または上述したポイントは、連続的なＥＩＳ測定から得られるポイントの一部を形成し得る。ＥＩＳ測定は、あるフェーズについて連続的であることもでき、一方、別のフェーズについて、ＥＩＳ測定は、離散的な所与のポイントについて実行されるのみであり得る。
【００３６】
本発明の一実施形態によれば、コンディショニング、捕獲、任意選択の洗浄、電気化学発光測定、およびクリーニングは、作用電極に電位パルスを加えることを含み、パルスは、測定用セルの参照電極に対して測定されるＤＣ分極電位に対して加えられ、ＥＩＳを実行するステップは、ＤＣ電位に対してＡＣ電位を加えることを含む。
【００３７】
したがって、ＥＣＬ測定を実行するのに必要とされる標準的なＤＣ電位は、ＥＣＬ測定結果が高い精度および品質で得られるように基本電位として使用され得る。このＤＣ電位の上に、ＥＩＳに必要とされるＡＣ電位が、それがＥＣＬ測定に悪影響を与えないように変調され得る。例えば、ＥＣＬ測定サイクル中のＤＣ電位は、−１．５Ｖと＋３．０Ｖの間、好ましくは−１．２Ｖと＋１．２Ｖの間、より好ましくは０Ｖであり得る。
【００３８】
例えば、ＥＩＳを実行するためのＡＣ電位は、周波数応答解析（frequency response analysis:ＦＲＡ）モジュールを有するポテンショスタットを用いて加えられる。次いで、ＥＩＳは、ポテンショスタット単極電位測定を用いて実行することができる。
【００３９】
ＦＲＡハードウェアは、デジタル信号発生器（digital signal generator:ＤＳＧ）と、信号処理ユニット（signal conditioning unit:ＳＣＵ）と、２チャンネルを有する高速アナログ・デジタル変換器（analog to digital converter:ＡＤＣ）とを備え得る。ＤＳＧは、加えられた信号のデジタル表現が搭載されているデジタルメモリと、デジタル・アナログ変換器とを備えることができる。複式デジタル・アナログ変換器は、信号振幅を制御することができる。このアーキテクチャは、正確な信号生成を確実にすることができる。ポテンショスタットからの時間依存性の電位および電流信号は、ＳＣＵによってフィルタ処理され、増幅され、ＡＤＣによって記録される。取得した信号は、ＡＤＣ基板上のデジタルメモリに記憶される。このデジタルメモリは、同じ所与の測定点での反復測定の時間領域平均化を可能にする。
【００４０】
例えば、ＡＣ電位は、最低で１ｍＶおよび最大で１００ｍＶのピークトゥピーク、好ましくは最低で３ｍＶおよび最大で８０ｍＶのピークトゥピーク、より好ましくは最低で５ｍＶおよび最大で５０ｍＶのピークトゥピークの振幅を有する。さらに、ＡＣ電位は、最低で１０Ｈｚおよび最大で１００ｋＨｚ、好ましくは最低で２０Ｈｚおよび最大で５０ｋＨｚ、より好ましくは最低で３０Ｈｚおよび最大で１０ｋＨｚの周波数を有し得る。
【００４１】
一実施形態において、ＥＩＳ測定は、所与のポイントについて２回以上実行され得ることに留意されたい。前記所与のポイントについて行われたＥＩＳ測定から、平均値が計算され得る。これによって、この方法の正確度をさらに改善することができる。もちろん、ある時点について、たった１つのＥＩＳ測定だけが実行され得ることが当業者によって理解される。したがって、『同じ(the same)』所与のポイントについてのさらなるＥＩＳ測定は、時間が連続しているかつ所与の時点の直前、所与の時点まさにその点、および所与の時点直後の測定として理解されるはずである。したがって、複数のＥＩＳ測定は、所与の時点を含む、限られたおよび所定の時間枠内で実行され得る。
【００４２】
作用電極は、金、白金、ガラス状炭素、イリジウム、およびホウ素ドープダイヤモンドからなる群から選択することができる。参照電極は、銀／塩化銀、飽和カロメル、水銀／酸化第二水銀（第一水銀）、水銀／硫酸水銀、銅／硫酸銅の電極からなる群から選択することができる。ＥＩＳ測定のための参照電極の代替として、『疑似参照電極(pseudo reference electrode)』が使用されてもよく、好ましくは、これは銀、白金、金、およびステンレス鋼を含む群から選択される。
【００４３】
本発明によるさらなる実施形態では、ＥＩＳ測定は、４線式センシング法で実施される。４線式センシング法は、ＥＩＳ測定（ｉＲ補償）のための２つの追加電極（検知電線１および検知電線２）により、作用電極および対電極におけるｉＲ降下を補償する。好ましくは、４線式センシング法におけるＥＩＳ測定のためのこれらの２つの追加電極は、それぞれ、銀、白金、金、およびステンレス鋼を含む群から選択される。さらなる実施形態では、ＥＩＳを実行するためのＡＣ電位は、４線式センシング法にて周波数応答解析（ＦＲＡ）モジュールを有するポテンショスタットを用いて加えられる。
【００４４】
本発明の一実施形態によれば、第１のＥＩＳおよび第２のＥＩＳの結果は、アドミタンスおよび位相を示すそれぞれの応答信号をそれぞれ含んでおり、所定の閾値はアドミタンスおよび位相についてそれぞれ定められ、第１のＥＩＳおよび第２のＥＩＳの結果の比較はそれぞれのアドミタンスの比較とそれぞれの位相の比較とを含み、測定状態は、第１のＥＩＳと第２のＥＩＳとの間の偏差がアドミタンスおよび位相についてそれぞれ予め定められた閾値を超えているという結果に両比較がなったかどうかを示す。
【００４５】
単一の測定内で、ＥＩＳの結果は、２タイプの情報、すなわち位相およびアドミタンスを常に含むので、測定状態を決定するための基準として組み合わせて両情報を使用すると、方法の信頼性を向上させることができる。
【００４６】
本発明の一実施形態によれば、比較されたＥＩＳ間の偏差が所定の閾値を越えていないという結果に比較がなった場合、測定状態の指標はポジティブであり、比較されたＥＩＳ間の偏差が所定の閾値外であるという結果に比較がなった場合、測定状態の指標はネガティブであり、それぞれの第１のＥＩＳおよび第２のＥＩＳは、所与のポイントのうち少なくとも２つの異なるポイントについて少なくとも２回実行され、各測定状態のそれぞれのアッセイ実行表示という結果になり、対応策の選択は、各測定状態のそれぞれのアッセイ実行表示の組み合わせに基づいて実行される。
【００４７】
したがって、アッセイ実行表示は、少なくとも２つの異なるＥＩＳの評価に基づいている測定状態に関する指標である。これは、正規でない状態にあるシステム試薬または成分を特定する際の可能性をさらに絞るのを助けることができる。
【００４８】
例えば、少なくとも２つの所与のポイントは第５のポイントを含み、方法は、
−  何ら分析物のない液体試料を用いて準備実行プロセス内で測定サイクルを実行し、測定サイクルの第５のポイントで第３のＥＩＳを実行するステップであって、第３のＥＩＳが作用電極を用いて実行される、ステップと、
−  第５のポイントについて得られる第１のＥＩＳと第３のＥＩＳの結果を比較するステップと、
−  第５のポイントで得られる第１のＥＩＳと第３のＥＩＳとの間の偏差が所定の閾値を超えているという結果に比較がなったかどうかことを示す測定状態の準備実行指標を与えるステップであって、対応策の選択は、各測定状態のそれぞれのアッセイ実行表示と準備実行指標との組み合わせに基づいてさらに実行される、ステップ、をさらに含む。
【００４９】
したがって、第５のポイントおよびさらなるポイントから得られるＥＩＳの組み合わせは、失敗の可能性があるＥＣＬ測定の理由を区別することを可能にし得る。例えば、
−  第１、第２、または第３のポイントについて得られるアッセイ実行表示がポジティブであり、
−  第５のポイントについて得られるアッセイ実行表示がネガティブであり、かつ
−  第５のポイントについて得られる準備実行指標がネガティブである
場合に、
選択される対応策は、現在のクリーニング溶液を異なるロットユニットのクリーニング溶液と取り替える指示を、測定用セルの一部である測定装置の一部である表示ユニットを介して表示することを含むか、または
選択される対応策は、測定用セルおよび作用電極のクリーニングを実行するために使用される装置の構成要素の自動クリーニングを含む。
【００５０】
したがって、本実施形態は、かくして、ＥＣＬ測定の失敗または問題についての可能性のある原因としてクリーニング溶液内の不正規を特定することを可能にし得る。本開示において、これは、クリーニング溶液の正規でない状態によって引き起こされる問題とも呼ばれる。
【００５１】
さらなる例では、
−  第１、第２、または第３のポイントについて得られるアッセイ実行表示がポジティブであり、
−  第５のポイントについて得られるアッセイ実行表示がネガティブであり、かつ
−  第５のｈポイントについて得られる準備実行指標がポジティブである
場合に、
選択される対応策は、分析物を含有する現在の液体試料を、分析物を含有する新しい液体試料と取り替える指示を表示ユニットを介して表示すること、または
分析物を含有するさらなる液体試料の自動供給のリクエストを含む。
【００５２】
したがって、これは、「悪い」培養を有する試料を特定することを可能にすることができる。試料の品質は、例えば、試料または分析物内の汚れにより、悪くなり得る。
本発明の一実施形態によれば、方法は、測定用セルに共反応体溶液を供給するステップをさらに含み、これによって複合体との組み合わせで電気化学発光反応を可能にし、
−  第１または第３のポイントについて得られるアッセイ実行表示がネガティブであるか、または
−  第２のポイントについて得られるアッセイ実行表示がネガティブであるとともに、第１、第３、または第５のポイントについて得られる少なくともさらなるアッセイ実行表示もネガティブである
という点で基準が満たされる場合、第１の決定がなされ、
基準が満たされていることが第１の決定によって決定される場合、選択される対応策は、測定用セルに共反応体溶液を供給するために使用される装置の構成要素をクリーン化する指示を、測定用セルの一部である測定装置の一部である表示ユニットを介して表示することを含むか、あるいは
選択される対応策は、測定用セルに共反応体溶液を供給するために使用される装置の構成要素の自動クリーニングのいずれかを含む。
【００５３】
したがって、汚れたまたは「悪い」共反応体溶液は、このやり方で特定することができる。これは、共反応体溶液の正規でない状態によって引き起こされる問題とも呼ばれる。
一実施形態によれば、対応策の完了後、ステップｂ、ｃ、およびｄの後続の繰り返しがすぐに実行される。次いで、
−  第１または第３のポイントについて得られるアッセイ実行表示がいまだにネガティブであるか、または
−  第２のポイントについて得られるアッセイ実行表示がネガティブであるとともに、第１、第３、または第５のポイントについて得られる少なくともさらなるアッセイ実行表示もネガティブである
という点で基準が満たされる場合、第２の決定がなされ、
基準が満たされることが第２の決定によって決定される場合、選択される対応策は、アルカリ溶液を用いて測定用セルをクリーン化する指示を、測定用セルの一部である測定装置の一部である表示ユニットを介して表示することを含む、または
選択される対応策は、アルカリ溶液を用いた測定用セルの自動液体流クリーニングを含む。
【００５４】
一実施形態によれば、
−  第１、第３、または第５のポイントについて得られるアッセイ実行表示がポジティブであり、
−  第２のポイントについて得られるアッセイ実行表示がネガティブである
場合に、
選択される対応策は、測定用セルへの分析物を含有する液体試料の供給のために使用される装置の構成要素をクリーン化する指示を、表示ユニットを介して表示することを含み、測定装置は測定用セルの一部であり、あるいは
選択される対応策は、測定用セルへの分析物を含有する液体試料の供給のために使用される装置の構成要素の自動クリーニングおよび／または装置の機械的較正を含む。
【００５５】
一実施形態によれば、方法は、ｎ（ｎは１から１０００の間の変数）から直近(last：「最後」とも)までの電気化学発光測定サイクルの連続した実行において、例えば第１または第２の決定に使用される所与のポイントにおける前記第２のＥＩＳを同じ所与のポイントについて得られるそれぞれの第２のＥＩＳと比較するステップをさらに含み、選択される対応策は、現在の電気化学発光測定サイクルとｎから直近までの電気化学発光測定サイクルの連続した実行とについて得られる第２のＥＩＳの結果の比較が所定の第１の経年変化閾値を超える偏差という結果になった場合にのみ実行される。
【００５６】
これは、一般に、得られたアッセイ実行表示を異なる理由に割り当てることを可能にし得るものである：その理由の１つは、装置のそれぞれの構成要素の汚れによる、エラーの自然発生であり得る。別の理由は、ネガティブなアッセイ実行表示が測定用セルの経年変化の結果であり得るという場合がある。この経年変化は、較正プロセス中に得られたそれぞれのＥＩＳからの実際に得られたＥＩＳの連続的な偏差という結果に行き着く。測定用セルが古いほど、偏差は大きくなり得る。
【００５７】
しかしながら、経年変化によるＥＩＳの偏差はまだ許容でき得るが、自然偏差は、経年変化とは異なる原因に起因しなければならない問題の指標である。このため、（較正プロセス中の少し前に時間に得られた）前記所与のポイントにおける第１のＥＩＳからの所与のポイントにおける第２のＥＩＳの絶対偏差は、考慮に入れられなくてもよい。逆に、それらの中の第２のＥＩＳの相対偏差は、ここではより高い関連性を有し得る。
【００５８】
それにもかかわらず、可能性のある経年変化の限度も考慮に入れると、選択される対応策は、第１または第２の決定のために使用される所与のポイントにおける前記第２のＥＩＳと所与のポイントについて得られるそれぞれの第１のＥＩＳとの結果の比較が、所定の第２の経年変化閾値未満の偏差という結果になった場合にのみ実行され得る。したがって、第２の経年変化閾値は、ＥＩＳの元の較正に対しての閾値であり得る。このようにして、測定用セルがとても古くなった場合には、これは、この方法によって検出することもできる。したがって、それぞれの代替の対応策は、セルの容認できない経年変化を検出すると、開始し得る。対応策は、経年変化に敏感である測定用セルのある構成要素を取り換える（renew:「更新」「回復」とも）指示を、表示ユニットを介して表示することであり得る。そのような構成要素は、まずまっ先には対電極および作用電極を含み得る。
【００５９】
測定用セルの経年変化は、上述した測定サイクルにおける任意の所与のポイントを用いて決定することができる。
別の態様では、本発明は、測定用セルを用いて液体試料中の分析物を検出する電気化学発光方法を実行するための装置であって、装置は測定用セルを備え、測定用セルは電気化学発光測定サイクルを用いて分析物を検出するための作用電極を備え、装置はプロセッサとメモリとを備え、メモリはコンピュータ実行可能命令を含み、プロセッサによる命令の実行が、装置に、    ａ．  分析物のない液体試料を用いて較正プロセス中に測定サイクルを実行し、第１の電気化学的インピーダンス分光法（ＥＩＳ）を測定サイクルの所与のポイントで実行し、第１のＥＩＳは作用電極を用いて実行される、ということ、
ｂ．  分析物を含有する液体試料を用いて分析プロセス中に測定サイクルを実行し、第２のＥＩＳを測定サイクルの所与のポイントで実行し、第２のＥＩＳは作用電極を用いて実行される、ということ、
ｃ．  第１のＥＩＳおよび第２のＥＩＳの結果を比較すること、
ｄ．  第１のＥＩＳと第２のＥＩＳとの間の偏差が所定の閾値を超えているという結果に比較がなったかどうかを示す測定状態の指標を与えること、
をさせる、装置に関する。
【００６０】
別の態様では、本発明は、上記方法を実行するためのコンピュータ実行可能命令を含むコンピュータプログラム製品に関する。
本発明の各実施形態は、化学発光および電気化学発光を含む様々な種類の発光技法、特にＥＣＬ−ＢＢＡに適用可能であり得る。
【００６１】
したがって、本発明の各実施形態は、化学発光測定サイクルに関連したいくつかの重要な問題をｉｎ  ｓｉｔｕで検出することを可能にすることができる：それは、システム試薬の状態の不正規、培養成分の不要な電極結合、培養輸送の異常、および年数を経た測定用セルを検出することを可能にし得る。一般に、１０ｋＨｚにおける単一周波数測定が、システムを特徴付けるのに十分であり得る。そのような測定は、サブ秒の時間スケールで実行することができる。加えられる交流電圧がとても小さいので、ＥＩＳはシステムを乱さない。さらに、必要とされる計測装置が単純で安価であり得、低コストのＦＲＡは、既存のＥＣＬシステムのポテンショスタットに組み込まれてもよい。
【００６２】
以下の本発明の各実施形態では、例示というのみの手法である以下の図面を参照してより詳細に説明される。
【図面の簡単な説明】
【００６３】
【図１】本発明の分析システムの一実施形態のブロック図である。
【図２】ＥＣＬ−ＢＢＡ技法を示すタイミング図である。
【図３】ＥＣＬ−ＢＢＡ技法を説明する流れ図である。
【図４】図４は、ＥＣＬ測定を実行するために使用される異なる電極構成を示す。図４ａ）は２線式構成を示し、図４ｂ）は３線式構成を示し、図４ｃ）は２線式構成（２線式構成）（訳注：原文は「a two wire configuration (2 wire configuration)」である。）および４線式構成（４線式センシング法）を示す。
【図５】測定状態（クリーニング溶液（ＣｌＳ）、共反応体溶液（ＣｏＳ）、測定セル（ＭＣ））の組み合わせに基づいて対応策を与える決定表である。
【図６】ＥＩＳ制御（ＰＣ＝共反応体溶液（ＣｏＳ）、ＣＣ＝クリーニング溶液（ＣｌＳ））を用いてＥＣＬ方法を実行する方法を示す流れ図である。
【図７】汚れたクリーニング溶液およびきれいなクリーニング溶液の影響を示すためのアドミタンスおよび位相に関するＥＩＳ測定結果を示す図である。
【図８】汚れた共反応体溶液およびきれいな共反応体溶液の影響を示すためのアドミタンスおよび位相に関するＥＩＳ測定結果を示す図である。
【図９】分析される試料のピペット操作エラーの影響を示すためのアドミタンスに関するＥＩＳ測定結果を示す図である。
【図１０】図１０および図１１は、クリーニング溶液（図１０）、共反応体溶液（共反応物）（図１１）および測定用セル（ＭＣ）などの試薬／成分の正規でない状態を特定することが可能であることを証明しているＥＩＳ測定結果を示す。
【図１１】図１０および図１１は、クリーニング溶液（図１０）、共反応体溶液（共反応物）（図１１）および測定用セル（ＭＣ）などの試薬／成分の正規でない状態を特定することが可能であることを証明しているＥＩＳ測定結果を示す。
【図１２】ビーズを含有する培養とビーズを含有しない培養との間の差を示すＥＩＳ測定結果を示す図である。
【図１３】フェーズｉにおける測定用セルの経年変化を例示するＥＩＳアドミタンスデータを示す図である。
【図１４】フェーズｉｖにおける測定用セルの経年変化を例示するＥＩＳアドミタンスデータを示す図である。
【図１５】フェーズｖにおける測定用セルの経年変化を例示するＥＩＳアドミタンスデータを示す図である。
【図１６】フェーズｉにおける測定用セルの経年変化を例示するＥＩＳ位相データを示す図である。
【図１７】フェーズｉｖにおける測定用セルの経年変化を例示するＥＩＳ位相データを示す図である。
【図１８】フェーズｖにおける測定用セルの経年変化を例示するＥＩＳ位相データを示す図である。
【図１９】フェーズｉｖにおける、予洗（PreWash）が適用されていない、培養を含まないシッピングと培養を含むシッピングからもたらされる差を例示するＥＩＳ測定結果を示す図である。
【図２０】フェーズｖにおける、予洗が適用されていない、培養を含まないシッピングと培養を含むシッピングからもたらされる差を例示するＥＩＳ測定結果を示す図である。
【図２１】フェーズｉｖにおける、予洗が適用されている、培養を含まないシッピングと培養を含むシッピングからもたらされる差を例示するＥＩＳ測定結果を示す図である。
【図２２】フェーズｖにおける、予洗が適用されている、培養を含まないシッピングと培養を含むシッピングからもたらされる差を例示するＥＩＳ測定結果を示す図である。
【図２３】連続的なＥＩＳ測定を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００６４】
本発明の各実施形態の以下の説明全体を通じて、同様または同一の要素は、同一の参照数字によって示される。
図１は、液体試料中の分析物を検出するための分析システム１００を示す。分析システム(analysis system)は、「測定装置(measurement apparatus)」としても示される。分析システム１００は、発光免疫測定法等に係る、液体試料のアリコートと分析物をマークするためのマーカとの混合物である液体１０４を受け入れるための培養器１０２を備える。
【００６５】
分析システム１００は、発光を引き起こす電気化学反応の共反応体を収容する貯蔵槽１０６を備える。培養器１０２および貯蔵槽１０６は、液体１０４および共反応体の一部が内部を通じて測定用セル１０８に流入することができる配管系１１０によって分析システムの測定用セル１０８に結合されている。
【００６６】
測定用セル１０８は、配管系１１０を介して液体１０４および共反応体の一部を受け入れるための導管１１４を有するセル本体１１２を備える。測定用セル１０８は、測定用セル内に磁場を与えるために、永久磁石などの磁気コンポーネント１１６を有する。導管内の磁場をオンまたはオフするために、磁気コンポーネント１１６は、導管１１４へおよび導管１１４から磁気コンポーネント１１６を回転させるためのアクチュエータ１１８に結合され得る。
【００６７】
磁気コンポーネント１１６は、電圧源１２２に結合されている作用電極１２０の下方に配置される。励起領域１２４は、作用電極１２０の上の磁気コンポーネント１１６によって引き起こされる磁場内で導管１１４内に形成される。
【００６８】
作用電極１２０に対する励起エネルギーの印加、すなわち起電トリガパルスの印加によって励起領域１２４内で引き起こされる発光は、光電子増倍管１２６などの光センサによって測定される。光センサは、発光がセンサの周波数範囲内であるならば、測定信号、測定用セル内に存在し得る自家発光分子によって引き起こされる発光信号のような干渉信号が寄与する可能性があるが、を供給するように、ある周波数範囲内で感知可能である。
【００６９】
光電子増倍管１２６は、作用電極１２０の対電極１２８によって形成される窓の上に、励起領域１２４の向かい側に配置され、この窓を通じて、励起エネルギーによって引き起こされた発光光子および何らかの干渉光子は、光電子増倍管１２６に衝突する。結果として得られる時間分解測定信号１３０は、光電子増倍管１２６から分析システム１００の制御ユニット１３２へ供給される。
【００７０】
測定が実行された後、導管１１４内に収容された液体は液体廃棄物容器１３４の中に取り除かれ、測定用セル１０８は続く測定信号の取得のために再生される。
制御ユニット１３２は、作用電極１２０にトリガ信号を加えるように電圧源１２２を制御するために、電圧源１２２に結合されている。制御ユニット１３２は、永久磁石を動かすことによってそれに応じて磁場をオンオフに切り換えるようにアクチュエータ１１８を制御するために、アクチュエータ１１８にも結合されている。
【００７１】
さらに、制御ユニット１３２は、培養器１０２から液体１０４の一部および貯蔵槽１０６から共反応体の一部を抽出するとともに、測定用セル１０８から液体を取り除き、測定用セルを再生するために、「シッパーユニット(sipper unit)」すなわちポンプ１３６に結合されてよい。加えて、制御ユニット１３２は、ピペットステーションなどのさらなるロボット構成要素に結合されてよい。
【００７２】
測定用セル１０８は、様々な発光免疫測定法を用いてＥＣＬ−ＢＢＡを実行するように適合され得る。
ＥＣＬ−ＢＢＡが以下に説明されるが、これは一例に過ぎず、この例は当業者によって他のＥＣＬ技法に拡張されてもよい。
【００７３】
例えば、液体１０４は、いわゆる「サンドウィッチ(sandwich)」を形成するように、液体試料のアリコート、ストレプトアビジンをコートした磁性粒子、ビオチン化抗体、およびルテニル化抗体の混合物を含有することができる、対して貯蔵槽１０６内に収容された共反応体はトリプロピルアミン（ＴＰＡ）である。したがって、結合標識を有する磁性粒子１３８は、導管１１４に流れ込む。磁性粒子１３８は、磁場がオンに切り換えられるときに作用電極１２０上に不動化される。次に、ＥＣＬ−ＢＢＡ技法に従って電気化学発光させるように、トリガパルスが作用電極１２０に加えられる。
【００７４】
制御ユニット１３２は、重畳干渉信号のない有効な測定信号の発光減衰を説明する参照データを記憶するための電子メモリ１４０を有する。この参照データは、分析物の検出に利用される発光免疫測定法に特有である。
【００７５】
ここで検討される実施形態では、参照データは、ルックアップテーブルまたはデータベーステーブルに記憶される。参照データは、分析システム１００によってサポートされる発光免疫測定法ごとに設定された参照データを含む。例えば、サポートされる免疫測定法ごとに、２つの係数ａおよびｂならびに時間ｔは、メモリ内に記憶される。係数ａおよびｂは、発光信号の最大振幅を減衰時間ｔ後に到達する発光レベルに関係付ける線形則を説明する。参照データの一部として減衰時間ｔを記憶することは、検討される減衰時間ｔが常に同じである場合、余分であり得る。
【００７６】
制御ユニット１３２は、プログラムモジュール１４６、１４８、および１６２を実行するために少なくとも１つの電子プロセッサ１４４を有する。プログラムモジュール１４６は、測定信号１３２の取得のためにプロセッサ１４４によって実行される一方、プログラムモジュール１４８は、取得した測定信号１３２の評価のためにプロセッサ１４４によって実行される。プログラムモジュール１６２は、ＥＩＳデータの取得のためにプロセッサ１４４によって実行される。
【００７７】
制御ユニット１３２は、表示ユニット（もしくはディスプレイ）１５２、またはそれとは別の、人間―機械間インタフェースを制御ユニット１３２に結合するためのインタフェース１５０を有する。インタフェース１５０は、分析システム１００によってサポートされる発光免疫測定法のうち１つの使用者の選択のための窓１５４、ならびに分析の結果を表示するための窓１５６を表示するためにグラフィカルユーザインタフェースとして実施することができる。
【００７８】
分析システム１００によって実行される分析の結果は、ある列が検出される分析物を示すとともに、別の列が検出された分析物の濃度を示す表形式データとして出力され得る。さらなる列が、フラグまたは他の警告信号もしくはシンボル、赤い疑問符または感嘆符など、を表示することなどによって、検出された濃度が間違ったものであり得るかを指し示すように働くことができる。
【００７９】
以下には、ＥＣＬ−ＢＢＡ技法が、図１、図２、および図３と組み合わせて説明される。図２はＥＣＬ−ＢＢＡの様々なフェーズを示すタイミング図であり、図３はそれぞれの流れ図である。
【００８０】
この方法は、ＤＣ電位がとある電圧パルスで加えられるコンディショニングフェーズであるブロック３００（フェーズｉ）で開始する。図２の実線２００は、参照電極（Reference electrode:ＲＥ、１２８）に対して作用電極（Working electrode:ＷＥ、１２０）に加えられる電位プロファイルである。コンディショニングは、続く測定のために作用電極を準備する目的を有している―コンディショニングは、続く測定の開始時に知られている表面状態を電極が有することを保証するために使用される。
【００８１】
動作時、使用者は、それぞれの選択を窓１５４に入力することによって、分析システム１００によってサポートされる発光免疫測定法のうち１つを選択する。液体試料の分析は、ポンプ１３６が液体１０４および共反応体の一部を導管１１４の中に輸送するように制御されるようにプログラムモジュール１４６の実行によって開始される。図２の線２０２は、ポンプ１３６によって測定用セル１０８に出し入れされるように輸送される任意の液体の移動を示す。実際には、破線２０２は、セルを通じて液体を移動させるポンプ１３６のダイリュータピストンの移動である。
【００８２】
次に、アクチュエータ１１８は、磁性粒子の結合標識が作用電極１２０上にある状態で不動化、すなわち磁性粒子を捕獲するために、永久磁石の磁場が導管１１４に加えられるように、永久磁石を所定位置に動かすように制御される。液体の輸送および磁性粒子の捕獲のプロセスは、ブロック３０２で示され、図２のフェーズｉｉに対応する。
【００８３】
次に、ブロック３０６（フェーズｉｖ）において、電圧源１２２は、測定信号１３０が生じるように発光を実行するためにトリガパルスを作用電極上に加えるように制御される。
【００８４】
測定信号１３０は、発光の時間分解測定のために、電圧源１２２によるトリガパルスの印加後２秒など所与の期間にわたって光電子増倍管１２６の出力をサンプリングすることによって取得される。
【００８５】
測定信号１３０を構成するデータサンプルは、制御ユニット１３２のメモリ１４０内に記憶され、プログラムモジュール１４８は、取得した測定信号１３０の評価のために開始される。プログラムモジュール１４８の実行によって、測定信号１３０の振幅が決定される。次に、プログラムモジュール１４８は、使用者が選択した免疫測定法の係数ａおよびｂ、ならびに時間ｔを読み込むことによって参照データ１４２の読み取りアクセスを実行する。
【００８６】
ａおよびｂによって記載される線形則によって、時間ｔ後の測定信号１３０が到達する予期される信号レベルが計算され、時間ｔ後の測定信号１３０の実際の信号レベルと比較される。ミスマッチの場合、すなわち、測定信号１３０の実際の信号レベルが予期される信号レベルよりも下または上の所定のマージンである場合、ミスマッチ、したがって重畳干渉信号の存在が検出される。
【００８７】
次に、もしあれば、液体内の分析物の濃度が、測定信号１３０によりプログラムモジュール１４８によって決定される、ミスマッチが検出された場合には決定された濃度はエラー信号によってフラグが立てられる。
【００８８】
次に、ブロック３０８（フェーズｖ）において、ポンプ１３６は、導管１１４から液体を取り除き、測定用セル１０８を再生するために、制御ユニット１３２によって制御される。
【００８９】
捕獲（ブロック３０２）と測定（ブロック３０６）の中間の任意選択の洗浄ステップ（ブロック３０４およびフェーズｉｉｉ）は、磁石にまだ結びついていない磁性微粒子に結合されるマーキング物質がブロック３０６におけるＥＣＬ測定を実行する前に取り除かれることを確実にするために実行され得る。
【００９０】
ｉｎ  ｓｉｔｕ、すなわち、上記（ＥＣＬ）分析物濃度検出の中断または邪魔なしで分析物検出の信頼性を決定する可能性を与えるために、測定装置１００は、電気化学的インピーダンス分光法（ＥＩＳ）を実行するようにさらに適合されている。ＥＩＳは、電圧源１２２および対電極１２０を用いて実行される。したがって、電子プロセッサ１４４は、ＥＩＳ信号の取得のためにプログラムモジュール１６２を実行するようにさらに適合されている。そのため、電圧源１２２は、上述したようにＥＣＬ測定を実行するために使用されるＤＣ信号上へＡＣ電流信号を重ね合わせるように制御される。
【００９１】
ＥＩＳスペクトルは、上述したおよび図２に示した測定サイクルの所与のポイントで取得することができる。そのために、まず、測定サイクルは、分析物のない液体試料を用いる較正プロセス中に実行される。この較正プロセスでは、第１のＥＩＳは、作用電極を用いて測定サイクルの所与のポイントで実行される。前記所与のポイントの例は、図２に矢印で示される。次いで、第１のＥＩＳは、第１のＥＩＳデータ１６０としてメモリ１４０内に記憶される。
【００９２】
分析物を含有する液体試料を用いた分析プロセスにおける測定サイクル中に、さらなる第２のＥＩＳが、前記所与のポイントで実行される。これは、メモリ内に記憶される第２のＥＩＳデータ１６４という結果になる。次いで、第１のＥＩＳおよび第２のＥＩＳ結果が比較され、第１のＥＩＳと第２のＥＩＳとの間の偏差が所定の閾値を超えているという結果に比較がなったかどうかを示す測定状態の指標が与えられる。
【００９３】
例えば、測定状態は、ディスプレイ１５２上にグラフィカル出力として与えられる。制御ユニット１３２は、分析システム１００の失敗を訂正するように対応策をそれに応じて自動的に選択するようにさらに適合され得る。対応策の開始後、測定サイクルは、分析プロセス中に繰り返され、別の第２のＥＩＳが、対応策が成功であったか、およびＥＣＬ測定結果が信頼できるか否かをチェックするために所与のポイントで実行される。
【００９４】
図４は、ＥＣＬ測定を実行するために使用される２つの異なる電極構成を示す。作用電極（ＷＥ１２０）は、対象とする電気化学反応およびＥＣＬ反応が行われる電極についての呼称である。対電極または補助電極（ＣＥ１２８）は、電流経路を終了するセル内の電極である。両電極は、このために有効である金、白金、ガラス状炭素、イリジウム、ホウ素ドープダイヤモンド、または任意の他の材料などの不活性導電性材料によって一般に作製される。
【００９５】
任意の電気化学セルは、動作のために少なくともＷＥ−ＣＥのペアを有さなければならない。この最小の２電極構成、ＷＥおよびＣＥの端子が電位制御ユニットに接続される。２電極構成（図４ｃに示される２線式構成）において、セル電圧は、刺激電圧Ｕｓｔｉｍとはかなり異なり得るものであり、それはセル電流およびケーブル抵抗の少なくとも関数であり、これは必要とされていないことが当業者に知られている。２つの電極構成についての計算が以下の表に示される。
【００９６】
【表１】
2019512665.tif 000008
【００９７】
高精度測定のために、４線式センシング法が使用される。ここで、電流を流す電極と電圧を感知する電極の別々のペアが図４ａに示されるように使用される：Ｓ１およびＳ２は、ＷＥおよびＣＥの電位の制御および測定にそれぞれ使用される。Ｐ１およびＰ２は、それぞれの電極を通じて流れる電流の制御および測定のために使用される。電流電極と電圧電極の分離によって、測定からリード線および接点の抵抗をなくし、したがってより高い正確度を可能にする。
【００９８】
より一般的には、参照電極（ＲＥ）として働く追加の第３の電極が導入される。この３つの電極構成が図４ｂに示されている：ＲＥは、作用電極の印加電圧Ｖ０が参照される参照電位を与える。３つの電極構成において、ＲＥを通じて流れている電流がとても低い、または理想的には電流が無い。ＲＥは、安定な電位を維持する。典型的には、ＲＥは、銀／塩化銀、飽和カロメル、水銀／酸化第二水銀（第一水銀）、水銀／硫酸水銀、または銅／硫酸銅電極である。その上、白金、金、ステンレス鋼、または他の材料製の疑似参照電極が使用され得る。しかしながら、これらは、あまり安定しない参照電位をもたらし得る。
【００９９】
上記開示の通り、高精度測定については、４線式センシング法がＥＩＳ測定のために使用される。ＥＩＳ測定（ｉＲ補償）のために、４線式センシング法は、２つの追加電極（図４ｃの検知電線１および検知電線２を有する４線式構成）によって作用電極および対電極でｉＲ降下を補償する。４線式センシング法は、測定用ケーブル内の電位ｉＲ降下（＝ｉＲｃａｂｌｅ）を無くす。セル電圧Ｕｃｅｌｌとして、とても低い正弦振幅約１０ｍＶｐｐを加えるとても低いＡＣ応答が、４線式センシング法で予期される。測定用ケーブル内の抵抗Ｒｃａｂｌｅは、かなり大きくセル電圧を減少させ得る。４線式センシング法では、加えられる正弦波電位は、任意の電位降下が検知電線によって無くされるので、セル電位に等しい。
【０１００】
図５は、測定状態の組み合わせに基づいて対応策を与える決定表を示す。図６の流れ図は、図５の決定をもたらす方法を示す。図６の流れ図および図５の決定表は、上述したフェーズｉ〜ｖのうち少なくとも２つについてＥＩＳ測定が実行されたという仮定に基づく。
【０１０１】
例えば、測定サイクルを実行するときに、図２の矢印によって指し示される、任意のフェーズにおける任意の所与のポイントについて、第１のＥＩＳが較正プロセスにおいて実行された。較正プロセスは、一般に、それぞれの第１のＥＩＳの結果が、望むように振る舞っているシステムの代表であると仮定する。その後、分析物を含有する液体試料を用いる分析プロセスにおける続く「実際の(real)」測定サイクルにおいて、第２のＥＩＳは、同じ所与のポイントで実行される。次いで、第１の（較正）ＥＩＳおよび第２の（実際の試料）ＥＩＳは比較され、第１のＥＩＳと第２のＥＩＳとの間の偏差が所定の閾値を超えているという結果に比較がなったかどうかを指し示す測定状態が決定される。
【０１０２】
そこで、好ましくは、２つ以上の所与のポイントからもたらされる測定状態、したがって３つ以上の第２のＥＩＳは、分析プロセスの測定サイクル中に実行されるＥＣＬ測定の信頼性を決定するために使用される。
【０１０３】
例えばフェーズｖ．（測定用セルのクリーニング）内の所与のポイントについて、方法をさらに微調整するために、準備実行指標とアッセイ実行表示を区別することが可能である。用語を簡単にするために、アッセイ実行表示は、実際の液体試料を用いてＥＩＳ測定において上述したように得られる測定状態と同一である。比較されたＥＩＳ間の偏差が所定の閾値を越えていないという結果に比較がなった場合にポジティブとして、および比較されたＥＩＳ間の偏差が所定の閾値外であるという結果に比較がなった場合にネガティブとして、アッセイ実行表示を定め得る。
【０１０４】
逆に、準備実行指標は、ＥＩＳ測定において上述したように得られる測定状態と同一であるが、何ら分析物のない液体試料を用いる。したがって、所与のポイントについての準備実行指標を得るために、何らの分析物のない液体試料を用いて測定サイクルを実行している間に、第３のＥＩＳが実行される。次いで、この第３のＥＩＳが、同じ所与のポイントについて得られる第１のＥＩＳと比較され、測定状態が決定され、これは、第１のＥＩＳと第３のＥＩＳとの間の偏差が所定の閾値を超えているという結果に比較がなったかどうかを指し示す。やはり、比較された第１のＥＩＳと第３のＥＩＳの間の偏差が所定の閾値を越えていないという結果に比較がなった場合にポジティブとして、比較される第１のＥＩＳと第３のＥＩＳの間の偏差が所定の閾値外であるという結果に比較がなった場合にネガティブとして、準備実行指標を定め得る。
【０１０５】
図６の流れ図の変数「Ｙ」は、それによって測定状態である。添え字ａ、ｂ、およびｄは、それぞれフェーズｉ、ｉｉ、ｖについて図２に矢印によって指し示される所与のポイントを表す。添え字ｃは、図２のフェーズｉｉｉの矢印によってまたはフェーズｉｖの矢印によって指し示される所与のポイントを表す。
【０１０６】
方法は、ＥＩＳの取得に関するブロック５００で開始する。図５および図６において、４つのフェーズにおける第２のＥＩＳの取得、およびフェーズｖにおける第３のＥＩＳの取得が使用されることに留意されるべきである。しかしながら、使用される第２および第３のＥＩＳの個数を減少させる、問題となるまたはエラーが発生しやすい傾向にあるＥＣＬ測定がとある理由に正確に割り当てることができないものであり得るという欠点を有し得るものの、ことも可能である。
【０１０７】
ブロック５００におけるＥＩＳの取得後、第１のポイント（フェーズｉの矢印）について得られるアッセイ実行表示Ｙａがポジティブであるか、ブロック５０２においてチェックされる。これは、前記ポイントについて得られる第１の較正ＥＩＳと前記ポイントについて得られる第２のＥＩＳとの比較は、所定の閾値を超える値によって互いから逸脱しないことを指し示す。
【０１０８】
ポイント１についてのアッセイ実行表示がネガティブである場合、これは、異なる理由に起因し得る。理由の１つは、測定用セルの経年変化あるいは測定用セルまたは共反応体溶液、クリーニング溶液、および測定用セルなどの関係のあるシステム試薬もしくは成分の汚れであり得る。測定用セルの経年変化は、ＥＣＬアッセイの性能を継続的に劣化させ、一方、典型的には、汚れは、ＥＣＬアッセイの挙動の自然変化という結果になる。
【０１０９】
測定用セルの経年変化と汚れを区別するために、この方法は、同じ所与のポイントについて、どの程度、現在の第２のＥＩＳが前の測定から得られた第２のＥＩＳから逸脱しているかについてブロック５２２およびその決定を続ける。したがって、所与のポイントにおける第２のＥＩＳは、ｎ（ｎは１から１０００の間の変数）から直近までの電気化学発光測定サイクルの後続の実行において同じ所与のポイントについて得られたそれぞれの第２のＥＩＳと比較される。現在のＥＩＳと前のＥＩＳの偏差Δｙａが所定の経年変化閾値「ｘ」を超えている場合、これは、システムの汚れに起因し得る。これは、前の測定の実行と比べて現在の測定の実行について得られるＥＩＳ曲線の「突然のジャンプ(sudden jump)」として理解され得る。
【０１１０】
逆に、偏差Δｙａが経年変化閾値未満の場合、これは測定用セルの連続的な経年変化に起因し得る。後者の場合には、ブロック５３０において、前記ポイントについての第１のＥＩＳと第２のＥＩＳとの間の差の絶対値ｙａが経年変化絶対値ａｂｓを超えているか判定され得る。これがそのケースの場合、ブロック５３０において、測定用セルが経年変化の理由により交換されなければならないという情報が、例えばディスプレイ１５２を用いてシステムによって供給され得る。より簡略化されると、メッセージ「サービスを呼ぶ(call service)」が出力され得る。
【０１１１】
しかしながら、ブロック５３０において、前記ポイントについての第１のＥＩＳと第２のＥＩＳの間の差の絶対値ｙａが経年変化絶対値ａｂｓを超えていないことが決定される場合、方法は、以下に説明されるブロック５０４を続ける。
【０１１２】
ブロック５２２において、前のＥＩＳからの現在のＥＩＳの偏差Δｙａが所定の経年変化閾値「ｘ」を超えていると決定される場合、この方法は、ブロック５２４、５２６、または５２８のいずれかを続ける。前記偏差がはじめて生じた場合、ブロック５２４が選ばれ、前記偏差が２回目に生じた場合、ブロック５２６が選ばれ、前記偏差が３回目に生じた場合、ブロック５２８が選ばれる。このため、フラグの存在がチェックされる：フラグが所与のポイントについての第２のＥＩＳに関連付けられていない（またはフラグが１である）場合、ブロック５２４が選ばれる。フラグが設定されている（またはフラグが２である）場合、ブロック５２６が選ばれる、等である。
【０１１３】
ブロック５２４、５２６、および５２８の選択は、対応策の好ましい自動開始に対応する。例えば、ブロック５２４において、フラグが設定され（または１から２へ増加し）、共反応体溶液を収容するカップ、およびその貯蔵槽から共反応体溶液を得るために使用されるシッパーノズルが、クリーン化されなければならないというメッセージが、ディスプレイを介して出力され得る。さらに、メッセージは、現在の共反応体溶液ロットを変更するように推奨することができる。さらなる例では、前記クリーニングおよび前記変更は、システムによって自動的に開始され実行され得る。ブロック５２４は、図５の決定表における第３の線に対応する。ブロック５２４の完了後、方法は、ブロック５００を再開する。
【０１１４】
ブロック５２６において、フラグが１から２へ、または２から３へ増加させられ、システムの液体流クリーニング（liquid flow cleaning:ＬＦＣ）が実行されなければならないというメッセージがディスプレイを介して出力され得る。液体流クリーニングは、この機能が器具のサービス画面から始められるときに、生じる。ＬＦＣ中、次亜塩素酸ナトリウム溶液は、測定用セルのクリーニングおよび流れ経路のために吸い込まれる。さらなる例では、前記ＬＦＣは、システムによって自動的に開始され実行され得る。さらに、測定用セル（ＭＣ）の好ましい自動交換が開始され得る。ブロック５２４は、図５の決定表における第４の線に対応する。ブロック５２４の完了後、方法は、ブロック５００を再開する。
【０１１５】
フラグは、Δｙａ＞ｘが連続して生じている１回目、２回目または３回目を区別することを可能にする任意の知られた方法によって実現され得ることが留意されなければならない。
【０１１６】
ブロック５２８において、システムが未定義の動作不良を有するという情報が提供され得る。より簡単には、メッセージ「サービスを呼ぶ」が出力され得る。ここで、システムは停止し、この方法は終わる。
【０１１７】
ブロック５０２において、Ｙａがｏｋであることが決定された場合、すなわち、アッセイ実行表示がポジティブであった場合、方法は、ブロック５０４、およびＹｂについてのアッセイ実行表示がポジティブであるか否かの決定を続ける。Ｙｂは、測定用セルへの液体試料の供給、および磁性微粒子の捕獲の間またはその終わりに得られるＥＩＳの結果である。したがって、任意選択のフェーズｉｉｉ．が存在するかどうかに応じて、Ｙｂは、フェーズｉｉまたはフェーズｉｖにおける矢印によって指し示される所与のポイントで得ることができる。アッセイ実行表示がネガティブである場合、この方法は、この問題が初めて生じた場合と２回目に生じた場合を区別した。このために、アッセイ実行表示は、Ｙａに関して説明されたように、それぞれのフラグを再び用いる。
【０１１８】
問題がはじめて生じる場合、ブロック５１８において、これは、分析物に関する問題に起因し得る。例えば、分析物は気泡を含み得る、または分析物は汚染されている可能性がある。対応策として、試料の品質がチェックされなければならないというメッセージが、ディスプレイによって出力され得る。さらに、フラグが設定される（または数が増加する）。さらなる例では、システムは、同じ分析物を有する新しい液体試料を自動的に得ることができる。ブロック５１８は、図５の決定表の最後のラインに対応する。ブロック５１８の完了後、方法は、ブロック５００を再開する。
【０１１９】
前記問題が２回目に生じる場合、ブロック５０４の後に直ちにブロック５１２が続き、ブロック５１２はブロック５２８に対応する。
ブロック５０４において、Ｙｂがｏｋであると分かった場合、方法は、任意選択のブロック５０６を続ける。ブロック５０６において、（フェーズｉｉｉの矢印で指し示される所与のポイントで得られる）Ｙｃについてのアッセイ実行表示がポジティブか否か決定される。Ｙｃは、捕獲後かつ電気化学発光測定前の測定用セルの洗浄についてのフェーズ中に得られるＥＩＳの結果である。Ｙｃがネガティブである場合、これは、直ちにブロック５１２の実行という結果になり得る。Ｙｃに関する決断は、フェーズｉｉｉにおけるクリーニングステップが任意選択であるので、図５の決定表に反映されていない。
【０１２０】
Ｙｃがポジティブである、またはブロック５０４（Ｙｂ  ｏｋ）の直後である場合、方法は、ブロック５０８、およびＹｄについてのアッセイ実行表示がポジティブであるか否か決定を続ける。Ｙｄは、フェーズｖ中、すなわちクリーニング溶液を用いて作用電極を有する測定用セルのクリーニング中に得られるＥＩＳの結果である。Ｙｄがｏｋである場合、方法はブロック５２０、およびＥＣＬ測定が信頼できるという決定で終わる。
【０１２１】
しかしながら、Ｙｄがｏｋでない場合、ブロック５０８の後のブロック５１０は、現在のＹｄがアッセイ実行または測定サイクルの準備実行の結果であるのか決定する。それが測定実行の結果である場合、そのメッセージによれば試料の品質がチェックされるべきであるというメッセージが出力される。システムは、準備実行の続くブロック５００を、すなわち何らの分析物のない液体試料に関する測定サイクルの実行において、自動的に続けることができる。
【０１２２】
方法が再びブロック５１０に到着する場合、方法は、準備実行がはじめて実行される場合、ブロック５１４を続け、または準備実行が２回目に実行される場合、ブロック５１２を続ける。はじめて（１回目）および２回目は、上述したようにそれに応じてフラグによってチェックされ得る。
【０１２３】
図５の決定表の第１のラインに対応するブロック５１４は、そのメッセージによれば、クリーニング溶液カップ、クリーニング溶液が供給される器具の貯蔵槽、およびクリーニング溶液を測定用セルの中に輸送するのに使用されるノズルは、クリーン化されるべきであり、現在使用されているクリーニング溶液ロットを新しいものに交換するというメッセージを出力し得る。代替として、または加えて、クリーニングおよび交換は、自動的に実行することができる。ブロック５１４の後、方法は、ブロック５００を続ける。
【０１２４】
図６を参照した説明において、フェーズｉに関する経年変化だけが検討されたが、当業者は、したがって、この原理が測定サイクル中の所与のポイントのいずれかに適用されてもよいことを理解する。
【０１２５】
図７は、汚れたクリーニング溶液およびきれいなクリーニング溶液の影響を示すためのアドミタンスおよび位相に関するＥＩＳ測定結果を示す。正規でない状態におけるクリーニング溶液の影響を研究するために、ストレプトアビジン粒子（Streptavidin particles:ＳＡＰ）アッセイが、汚れたクリーニング溶液で測定され（ｎ＝５）、欠陥のないクリーニング溶液を用いたＳＡＰアッセイの結果と比較された。ＥＩＳ測定は、フェーズｉ、ｉｖ、およびｖについての図２に指し示されるポイントで実行された。本明細書中、フェーズｉは「Ｃｏｎ  Ｉ」と呼ばれ、フェーズｉｖは「Ｃｏｎ  ＩＩ＆Ｃ」と呼ばれ、フェーズｖは「Clean」と呼ばれる。さらに、（＋）は、クリーニング溶液がクリーン化されたことを意味し、一方、（−）は、クリーニング溶液が汚れていたことを意味する。ＥＩＳ測定は、０Ｈｚ、１００Ｈｚ、３００Ｈｚ、および１０００Ｈｚで実行された。
【０１２６】
フェーズｖにおいて、汚れたクリーニング溶液を容易に特定することができることがはっきりと理解できる。ここで、較正データとして得られるＥＩＳ（直線）と汚れたクリーニング溶液に対する測定について得られるＥＩＳ（破線）との間の大きい偏差（＞＞１ＳＤ）は、１００Ｈｚでアドミタンスにすでに見られる。さらに、フェーズｖにおける測定点について得られる標準偏差は、汚れたクリーニング溶液について得られる較正曲線と測定曲線の間の偏差よりもずっと下である。これは、不適切なクリーニング溶液が容易に検出でき、そのようなものとして特定され得ることを示す。
【０１２７】
図８は、汚れた共反応体溶液およびきれいな共反応体溶液の影響を示すためのアドミタンスおよび位相に関するＥＩＳ測定結果を示す。正規でない状態における共反応体溶液の影響を研究するために、ストレプトアビジン粒子（ＳＡＰ）アッセイが、欠陥のある共反応体溶液で測定され（ｎ＝５）、欠陥のない共反応体溶液を用いたＳＡＰアッセイの結果と比較された。ＥＩＳ測定は、フェーズｉ、ｉｖ、およびｖについての図２に指し示されるポイントで再び実行された。本明細書中、フェーズｉは「Ｃｏｎ  Ｉ」と呼ばれ、フェーズｉｖは「Ｃｏｎ  ＩＩ＆Ｃ」と呼ばれ、フェーズｖは「Clean」と呼ばれる。さらに、（＋）は、共反応体溶液がクリーン化されたことを意味し、一方、（−）は、共反応体溶液が汚れていたことを意味する。ＥＩＳ測定は、０Ｈｚ、１００Ｈｚ、３００Ｈｚ、および１０００Ｈｚで実行された。破線は較正データに対応し、直線は汚れた共反応体溶液に関する測定データに対応する。
【０１２８】
全ての３つのフェーズにおいて、汚れた共反応体溶液を容易に特定することができることがはっきりと理解できる。全てのステップにおけるアドミタンスおよび位相のかなり大きい変化（＞＞１ＳＤ）が観察され、欠陥のある共反応体溶液と欠陥のない共反応体溶液との間の明確な区別を可能にする。アドミタンスを検討すると、全ての周波数において変化はかなり大きい。位相を検討すると、より良い区別が、約１００Ｈｚよりも高い周波数について観察される。一般に偏差は、Ｃｏｎ  Ｉ（フェーズｉ）において最も強いが、クリーニング（フェーズｖ）でもまだ見ることができる。
【０１２９】
図９は、分析される試料のピペット操作エラーの影響を示すためのアドミタンスに関するＥＩＳ測定結果を示す。ピペット操作エラーにより、空気がピペット操作されて測定用セルの中に移送される。フェーズｉｉにおいて、これは、ＥＩＳ較正（ＩｎｃＴｒａｎｓ）について得られるアドミタンスとピペット操作エラーを有する試料に関して得られるＥＩＳ（ＩｎｃＴｒａｎｓエア）との間にかなり大きい偏差があるという結果になった。この結果は、空気の存在により、アドミタンスの７００％の変化、および位相の６０％の変化である。したがって、動作不良のピペット操作または培養シッピングが検出され得る。
【０１３０】
以下において、ＥＩＳ測定の詳細な説明が与えられる。全ての実験は、Ｒｏｃｈｅ  Ｅｌｅｃｓｙｓ（登録商標（訳注：日本国における登録商標であるとは限らない。以下同様。））のブレッドボードを用いて実行された。これは、開発目的用の非常に柔軟な、Ｅｌｅｃｓｙｓ（登録商標）１０１０または２０１０に匹敵するＥｌｅｃｓｙｓシステムである。この研究のために、このブレッドボードは、Ｂｉｏ−Ｌｏｇｉｃ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  ＳＡＳ，フランスからのＳＰ−３００ポテンショスタットを装備した。ＳＰ−３００は、内蔵の周波数応答アナライザ（ＦＲＡ）を有する最新式のモジュール式の研究用グレードのポテンショスタットである。実験は、概して、作用電極、対電極、および参照電極を用いる従来の３電極構成において、標準的なＥｌｅｃｓｙｓ測定用セルで実行された。全ての電位プロファイルおよび準ずるＥＩＳ測定は、ＥＣラボソフトウェアパッケージを用いてプログラムされた。ポテンショスタットとＥｌｅｃｓｙｓアナライザとの間の通信は、ポテンショスタットの内蔵式『トリガイン(trigger in)』チャンネルを用いて確立された。次いで、Ｅｌｅｃｓｙｓアナライザは、所望の時点でＴＴＬパルスを送信することによってポテンショスタットを制御することができた。
【０１３１】
測定は、人工的な免疫測定法（ＳＡＰ）（高い特定のＥＣＬ信号についてＲｕＢｐｙ標識微粒子を含むアッセイ）を用いて実行された。後述のアッセイのためのプロトコルは、体積についてのわずかな調節とともに、Ｒｏｃｈｅ  Ｅｌｅｃｓｙｓ（登録商標）２０１０のための推奨として得られる。ビード懸濁液の体積は３５μｌであり、自由ＲｕＢｐｙ結合体の体積は１５μｌであり、ビードバッファの体積は１５０μｌであり、試料の体積は０μｌであった。
【０１３２】
図１０および図１１は、共反応体溶液、クリーニング溶液、および測定用セルなどの欠陥のあるシステム試薬／成分を特定することが可能であることを証明しているＥＩＳ測定結果を示す。これは、汚されていないシステムの測定についてのＥＩＳ結果の高い再現性を必要とする。それをするために、アナライザは、無傷の測定用セル、およびクリーニング溶液および共反応体溶液の欠陥のないロットを装備した。
【０１３３】
共反応体溶液およびクリーニング溶液の異なるロットから生じ得るかもしれない変動も考慮に入れるために、この実験は、それぞれ３ロットのクリーニング溶液および共反応体溶液で、およびそれぞれストレプトアビジン粒子（ＳＡＰ）のｎ＝５のアッセイの決定で繰り返された。言い換えれば、所与のポイントについて、ＥＩＳは、ロットごとに５回取得され、これは異なるロットについて３回繰り返された。精度は、全ての異なる実行および決定にわたってＣＶ（パーセントの単位の標準偏差と平均値の比）を計算することによって決定された。この結果は、図１０および図１１に報告されている。図１０は、クリーニング溶液のロットの変形例を示し、図１１は、共反応体溶液のロットの変形例を示す。これらの図から理解できるように、ＣＶは、通常１％を大きく下回り、この方法の高い再現性を証明する。
【０１３４】
上述したように、やはり、『Ｃｌｅａｎ』はフェーズｖにおいて得られるＥＩＳを表し、『Ｃｏｎ  Ｉ』はフェーズｉについて得られるＥＩＳを表し、『Ｃｏｎ  ＩＩ＆Ｃ』はフェーズｉｖを表す。
【０１３５】
磁性ナノ粒子『ビーズ(beads)』の影響を求めるために、ストレプトアビジン粒子（ＳＡＰ）アッセイが測定され（ｎ＝５）、ＳＡＰ内の全試薬が共反応体溶液（ＣｏＳ）によって置き換えられたアッセイと比較された。基本的に、２つの状況は、ここで比較される：第１の場合では、培養が、電極上に捕獲および堆積される磁性ビーズを含む。第２の場合では、培養はビーズを含まず、捕獲プロセス後、電極は自由なままである。したがって、アドミタンスの変化だけがＣｏｎｄ  ＩＩ＆Ｃａｐｔステップの後に予期される。
【０１３６】
実際のところ、図１２に報告されるように、標準偏差のかなり大きい変化（＞＞１ＳＤ）が、周波数＞１００ＨｚでＣｏｎ  ＩＩ＆Ｃａｐｔステップ（フェーズｉｖ）のアドミタンスに見られる。同様の変化は、（より高いエラーによるより低い重要性で）位相でも観察される。それにもかかわらず、したがって、この測定は、ビーズを含有する培養とビーズを含有しない培養との間で見分ける手段を提供する。
【０１３７】
測定用セルの経年変化は、Ｅｌｅｃｓｙｓアッセイの性能損失を引き起こす可能性があり、したがって、アッセイ性能チェックを用いて点検修理技師によって注意深く監視される。しかしながら、セルの寿命も、図１３の例に示されるように、ＥＩＳを用いて監視することができる。より良く見えるように、結果は、（前の図で示される曲線プロットとは対照的に）ここで棒グラフにプロットされる。ここで、２つの新しい測定用セル『new 1』および『new 2』のＥＩＳスペクトルは、２つのかなり年数を経た測定用セル『old 1』および『old 2』と比較される。明らかに、新しいセルおよび古いセルは、アドミタンスにおいてはっきりと区別することができる。この変化は、周波数≧３００Ｈｚについて最も大きい。図１３において、フェーズｉについてのＥＩＳの結果が示される。図１４では、フェーズｉｖについての結果が示され、および図１５では、フェーズｖについての結果が示される。
【０１３８】
また、位相は、古い測定用セルと新しい測定用セルの間で明確な区別を示す。変化は、フェーズｉおよびフェーズｖの場合≦１０００Ｈｚ、およびフェーズｉｖの場合１０ｋＨｚの周波数について最も大きい、図１６、図１７、および図１８０を比較すること。セルの経年変化による変化は徐々であり、したがって短時間スケールでの変化を引き起こす非経年変化に関連したプロセスと区別され得ることに留意すべきである。
【０１３９】
以下において、試料成分の影響が研究される。測定の邪魔となり得る培養からどのような自由なビオチン化抗体または血清成分をも取り除くために、予洗(prewash)の手続き『ＰＷ』が使用される。予洗中、ストレプトアビジンのビーズは、磁性微粒子セパレータを用いバッファから分離される。続いて、ビーズは緩衝液で洗浄され（予備クリーン(PreClean)）、その元の体積に再構成される。ＥＩＳスペクトルに関する（培養の一部を形成する）試料タイプの影響が調査された。これをするために、ストレプトアビジン粒子（ＳＡＰ）アッセイが使用され、５０μｌの試料が含まれた。ビード懸濁液の体積は３５μｌであり、自由ＲｕＢｐｙ結合体の体積は１５μｌであり、ビードバッファの体積は１５０μｌであり、試料の体積は５０μｌであった。
【０１４０】
４つの異なる血清が異なる試料タイプをモデル化するために使用され、ＥＩＳスペクトルに対するその影響が調査された。ｅ４１１またはｅ２０１０などの一般的な低スループットＥｌｅｃｓｙアナライザでは、試料成分は、培養輸送中に、電極と接触し得る。これは、通常、電極表面へのタンパク質の血清特有の吸収をもたらす。血清フリーな培養（そこでは試料がバッファに置き換えられる）が、血清を含有する培養と比較される場合、明確な差が、図１９および図２０で分析されるＥＩＳスペクトルに見られる。ここでは予洗が適用されなかった。血清を含有する培養は、血清フリーな培養に対して周波数＞１３０Ｈｚで、Ｃｏｎｄ  ＩＩ＆Ｃａｐｔステップ（フェーズｉｖ）においてアドミタンスの減少をもたらす。他方、大きいアドミタンスの増加が、クリーニングステップ（フェーズｖ）における血清を含有する培養について見られる。
【０１４１】
したがって、ＥＩＳは、試料のピペット操作を監視するために使用することができる。試料がピペット操作された培養でない場合、血清成分は無く、電極における吸着が予期されない。そのような事象は、ＥＩＳ方法によって『特異な培養(anomalous incubate)』として容易に突き止めることができ、警告が操作者に送られ得、かつ／またはそれぞれの対応策が自動的に開始され得る。
【０１４２】
ｅ１７０、ｅ６０１、ｅ６０２、およびｅ８０１のような高スループットアナライザは、他方で、いわゆる予洗機能を利用する。予洗中、磁性ビーズは、容器壁に磁気的に捕獲される。続いて、アッセイ試薬および血清を含有する培養が取り除かれ、緩衝液に代えられる。この『予洗された培養(prewashed incubate)』は、血清成分がない。したがって、Ｃｏｎｄ  ＩＩ＆Ｃａｐｔステップ（フェーズｉｖ）またはクリーニングステップ（フェーズｖ）の後にＥＩＳスペクトルが検討されるとき、異なる試料タイプの間の差が予期されない。これは、予洗された血清が、ａ〜ｄが比較されている図２１および図２２から容易に見ることができる。
【０１４３】
図２３は、単一周波数１０００Ｈｚで図２の測定サイクル全体にわたって連続的な測定の結果として予期されるＥＩＳスペクトルである。そのような連続的なＥＩＳのアドミタンスの測定結果は、図２６に示されている。下の線は、欠陥のない共反応体溶液が使用される測定サイクルに対応するのに対し、上の線は、正規でない状態の共反応体溶液が使用される測定サイクルに対応する。より高い値へのアドミタンスシフト全体は、その場合に容易に観察され得る。
【０１４４】
当業者によって理解されるように、本発明の各態様は、装置、方法、またはコンピュータプログラム製品として具体化され得る。したがって、本発明の各態様は、完全なハードウェアの実施形態、（ファームウェア、常駐ソフトウェア、マイクロコードなどを含む）完全なソフトウェアの実施形態、あるいは本明細書中において『回路』、『モジュール』、または『システム』と一般に全て呼ばれ得るソフトウェアとハードウェアの態様を組み合わせた一実施形態の形態をとることができる。さらに、本発明の各態様は、そこに具体化されたコンピュータ実行可能コードを有する１つまたは複数のコンピュータ可読媒体に具体化されたコンピュータプログラム製品の形態をとることができる。
【０１４５】
１つまたは複数のコンピュータ可読媒体の任意の組み合わせが、利用され得る。コンピュータ可読媒体は、コンピュータ可読信号媒体、またはコンピュータ可読記憶媒体であり得る。本明細書中で使用される「コンピュータ可読記憶媒体」は、命令を記憶することができる任意の有形の記憶媒体を包含し、この命令はコンピューティングデバイスのプロセッサにより実行可能である。コンピュータ可読記憶媒体は、コンピュータ可読非一時的記憶媒体と呼ばれ得る。コンピュータ可読記憶媒体は、有形のコンピュータ可読媒体とも呼ばれ得る。
【０１４６】
いくつかの実施形態では、コンピュータ可読記憶媒体は、コンピューティングデバイスのプロセッサによりアクセスできるデータを記憶することもでき得る。コンピュータ可読記憶媒体の例は、限定されるわけではないが、以下を含む：フロッピーディスク、磁気ハードディスクドライブ、ソリッドステートハードディスク、フラッシュメモリ、ＵＳＢサムドライブ、ランダムアクセスメモリ（ＲＡＭ）、リードオンリメモリ（ＲＯＭ）、光ディスク、磁気光ディスク、およびプロセッサのレジスタファイル。光ディスクの例は、コンパクトディスク（ＣＤ）およびデジタル多用途ディスク（ＤＶＤ）を含み、例えば、ＣＤ−ＲＯＭ、ＣＤ−ＲＷ、ＣＤ−Ｒ、ＤＶＤ−ＲＯＭ、ＤＶＤ−ＲＷまたはＤＶＤ−Ｒディスクを含む。コンピュータ可読記憶媒体という用語は、ネットワークまたは通信リンクを介してコンピュータデバイスによりアクセスできる様々なタイプの記録媒体も指す。例えば、データは、モデム、インターネットまたはローカルエリアネットワークを介して取り出されてもよい。コンピュータ可読媒体に組み込まれるコンピュータ実行可能コードは、適切な任意の媒体を用いて伝送されてよく、その媒体は、例えば、無線、有線回線、光ファイバケーブル、ＲＦ等、または、それらの任意の適切な組み合わせを含むが、これらの例に限定されない。
【０１４７】
コンピュータ可読信号媒体は、例えば、ベースバンドにおいてまたは搬送波の一部として内部に組み込まれるコンピュータ実行可能コードとともに伝搬されるデータ信号を含むことができる。そのような伝搬される信号は、電磁波、光または任意の適切なそれらの組み合わせを含む任意の様々な形式をとってもよいが、これらに限定されない。コンピュータ可読信号媒体は、コンピュータ可読記憶媒体ではない任意のコンピュータ可読媒体であって、命令実行システム、装置またはデバイスにより又はそれに関連して使用するプログラムを通信、伝搬または転送することができるコンピュータ可読媒体であってもよい。
【０１４８】
「コンピュータメモリ」または「メモリ」は、コンピュータ可読記憶媒体の一例である。コンピュータメモリは、プロセッサに直接アクセスできる任意のメモリである。「コンピュータ記憶(computer storage)」、または「記憶(storage)」は、コンピュータ可読記憶媒体のさらなる例である。コンピュータ記憶は、任意の不揮発性のコンピュータ可読記憶媒体である。いくつかの実施形態では、コンピュータ記憶は、コンピュータメモリとすることもでき、またはその逆もできる。
【０１４９】
本明細書中で使用される「プロセッサ」は、プログラムまたは機械実行可能命令またはコンピュータ実行可能コードを実行することができる電子部品を包含する。『プロセッサ』を有するコンピューティングデバイスという言及は、２つ以上のプロセッサまたはプロセシングコアを含む可能性があるように解釈されるべきである。プロセッサは、例えば、マルチコアプロセッサであり得る。プロセッサは、単一のコンピュータシステムの中にある、または複数のコンピュータシステムに分散されたプロセッサの集まりを指すこともできる。コンピューティングデバイスという用語は、それぞれがプロセッサまたはプロセッサ群を備えるコンピューティングデバイスの集まりまたはネットワークを指す可能性があるようにも解釈されるべきである。コンピュータ実行可能コードは、同じコンピューティングデバイス内にあり得る複数のプロセッサによって実行されてもよく、または複数のコンピューティングデバイスにわたって分散され得る複数のプロセッサによって実行されてもよい。
【０１５０】
コンピュータ実行可能コードは、本発明の一態様をプロセッサに実行させる機械実行可能命令またはプログラムを含むことができる。本発明の各態様についての動作を実行するためのコンピュータ実行可能コードは、１つまたは複数のプログラミング言語の任意の組み合わせで書かれていてもよく、その言語は、Ｊａｖａ（登録商標）、Ｓｍａｌｌｔａｌｋ、Ｃ＋＋等などのオブジェクト指向プログラミング言語、『Ｃ』プログラミング言語、または類似するプログラミング言語などの従来の手続プログラミング言語を含み、機械実行可能命令にコンパイルされる。いくつかの例では、コンピュータ実行可能コードは、ハイレベル言語の形式またはプレコンパイル形式であってもよく、オンザフライ方式で機械実行可能命令を生成するインタープリタに関連して使用されてもよい。
【０１５１】
コンピュータ実行可能コードは、独立型のソフトウェアパッケージとして、使用者のコンピュータ上で全部が実行されてもよく、使用者のコンピュータ上で一部が実行されてもよく、使用者のコンピュータ上で一部が実行されてもよく、遠隔のコンピュータで一部が実行されてもよく、あるいは遠隔のコンピュータまたはサーバ上で全部が実行されてもよい。後者の状況では、遠隔のコンピュータは、ローカルエリアネットワーク（ＬＡＮ）または広域ネットワーク（ＷＡＮ）などの何らかのタイプのネットワークを介して使用者のコンピュータに接続することができ、あるいは接続は、（例えば、インターネットサービスプロバイダを利用してインターネットを通じて）外部コンピュータに対してなされてもよい。
【０１５２】
本発明の各態様は、本発明の各実施形態による方法、装置（システム）、およびコンピュータプログラム製品の流れ図、説明図および／またはブロック図を参照して説明される。流れ図、説明図および／またはブロック図の各ブロックまたはブロックの一部は、適用可能なとき、コンピュータ実行可能コードの形態でコンピュータプログラム命令によって実施することができることが理解されよう。相互に排他的でないとき、異なる流れ図、説明図、および／またはブロック図内のブロックの組み合わせが、組み合わされてよいことがさらに理解される。これらのコンピュータプログラム命令は、汎用コンピュータ、専用コンピュータ、または他のプログラム可能データ処理装置のプロセッサに送られて、コンピュータのプロセッサ、または他のプログラム可能データ処理装置を介して実行される命令が、流れ図および／またはブロック図のブロックまたはブロック群において特定される機能／作用を実施する手段を生成するように機械を生成することができる。
【０１５３】
これらのコンピュータプログラム命令は、コンピュータ可読媒体内に記憶することもでき、このコンピュータプログラム命令は、コンピュータ、他のプログラム可能データ処理装置、または他のデバイスを特定のやり方で機能するように指図することができ、それによって流れ図および／またはブロック図のブロックまたはブロック群に特有の機能／作用を実現する命令を含む、コンピュータ可読媒体内に記憶された命令が、製品を生産するようになっている。
【０１５４】
コンピュータプログラム命令は、コンピュータ、他のプログラム可能データ処理装置、または他のデバイス上に読み込むこともでき、それによって一連の動作ステップをこのコンピュータ、他のプログラム可能装置、または他のデバイス上で実行させて、コンピュータまたは他のプログラム可能装置上で実行する命令がコンピュータ実施プロセスをもたらし、それによって流れ図および／またはブロック図のブロックまたはブロック群内で特定される機能／作用を実現するためのプロセスを提供する。
【符号の説明】
【０１５５】
１００  分析システム
１０２  培養器
１０４  液体
１０６  貯蔵槽
１０８  測定用セル
１１０  配管系
１１２  セル本体
１１４  導管
１１６  磁気コンポーネント
１１８  アクチュエータ
１２０  作用電極
１２２  電圧源
１２４  励起領域
１２６  光電子増倍管
１２８  対電極
１３０  測定信号
１３２  制御ユニット
１３４  容器
１３６  ポンプ
１３８  粒子
１４０  メモリ
１４２  参照データ
１４４  プロセッサ
１４６  プログラムモジュール
１４８  プログラムモジュール
１５０  インタフェース
１５２  ディスプレイ
１５４  窓
１５６  窓
１６０  ＥＩＳデータ
１６２  プログラムモジュール
１６４  ＥＩＳデータ
２００  電位プロファイル
２０２  ダイリュータピストンの移動
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【国際調査報告】
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2019512665.tif 000033
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