(57)【要約】  本開示は、一般に、復元されると、０ミクロンより大きいサイズの粒子を低レベルで有するポリマーナノ粒子を含む凍結乾燥医薬組成物に関する。本発明の他の態様は、そのようなナノ粒子を作製する方法を含む。【図１】2019512516.tif 000016
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ポリ（乳）酸−ブロック−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーまたはポリ（乳）酸−ｃｏ−ポリ（グリコール）酸−ブロック−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーおよび治療剤を含むポリマーナノ粒子と、
糖アルコールと、
シクロデキストリンと
を含む凍結乾燥医薬組成物。
【請求項２】
水性媒体中に復元されると、復元された組成物が、約２〜約１２重量パーセントの糖アルコール、および約２〜約１２重量パーセントのシクロデキストリンを含む、請求項１に記載の凍結乾燥医薬組成物。
【請求項３】
復元された組成物が、約６〜約１０重量パーセントの糖アルコール、および約６〜約９重量パーセントのシクロデキストリンを含む、請求項１または２に記載の凍結乾燥医薬組成物。
【請求項４】
復元された組成物が、約１０〜約１００ｍｇ／ｍＬ、約２０〜約８０ｍｇ／ｍＬ、約３０〜約８０ｍｇ／ｍＬ、約４０〜約８０ｍｇ／ｍＬ、約４０〜約７０ｍｇ／ｍＬ、約４０〜約６０ｍｇ／ｍＬ、または約４０〜約５０ｍｇ／ｍＬの濃度のポリマーナノ粒子を含む、請求項１から３のいずれか一項に記載の凍結乾燥医薬組成物。
【請求項５】
復元された組成物が、約７．５重量パーセントのシクロデキストリンおよび約７．５重量パーセントの糖アルコールを含む、請求項１から４のいずれか一項に記載の凍結乾燥医薬組成物。
【請求項６】
糖アルコールが、グリセロール、エリトリトール、トレイトール、アラビトール、キシリトール、リビトール、マンニトール、ソルビトール、ガラクチトール、フシトール、イジトール、イノシトール、ボレミトール、イソマルトール、マルチトール、ラクチトール、およびこれらの混合物からなる群から選択される、請求項１から５のいずれか一項に記載の凍結乾燥医薬組成物。
【請求項７】
糖アルコールがマンニトールである、請求項１から６のいずれか一項に記載の凍結乾燥医薬組成物。
【請求項８】
シクロデキストリンが、α−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、γ−シクロデキストリン、およびこれらの混合物からなる群から選択される、請求項１から６のいずれか一項に記載の凍結乾燥医薬組成物。
【請求項９】
シクロデキストリンがヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリンである、請求項１から８のいずれか一項に記載の凍結乾燥医薬組成物。
【請求項１０】
復元された組成物が、約７．５重量パーセントのヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリンおよび約７．５重量パーセントのマンニトールを含む、請求項１から９のいずれか一項に記載の凍結乾燥医薬組成物。
【請求項１１】
ポリ（乳）酸−ブロック−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーのポリ（乳）酸部分が、約１０ｋＤａ〜約２５ｋＤａの重量平均分子量を有し、ポリ（乳）酸−ブロック−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーのポリ（エチレン）グリコール部分が、約４〜約６ｋＤａの重量平均分子量を有する、請求項１から１０のいずれか一項に記載の凍結乾燥医薬組成物。
【請求項１２】
ポリ（乳）酸−ブロック−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーのポリ（乳）酸部分が、約１６ｋＤａの重量平均分子量を有し、ポリ（乳）酸−ブロック−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーのポリ（エチレン）グリコール部分が、約５ｋＤａの重量平均分子量を有する、請求項１から１１のいずれか一項に記載の凍結乾燥医薬組成物。
【請求項１３】
ポリマーナノ粒子が、約６０ｎｍ〜約１４０ｎｍの直径を有する、請求項１から１２のいずれか一項に記載の凍結乾燥医薬組成物。
【請求項１４】
ポリマーナノ粒子が、約８０ｎｍ〜約１２０ｎｍの直径を有する、請求項１から１３のいずれか一項に記載の凍結乾燥医薬組成物。
【請求項１５】
ポリマーナノ粒子が、約３〜約４０重量パーセントの治療剤を含む、請求項１から１４のいずれか一項に記載の凍結乾燥医薬組成物。
【請求項１６】
ポリマーナノ粒子が、リガンドにコンジュゲートしているポリマーをさらに含む、請求項１から１５のいずれか一項に記載の凍結乾燥医薬組成物。
【請求項１７】
治療剤が、タキサン、エポチロン、ｍＴＯＲ阻害剤、ビンカアルカロイド、ジテルペン誘導体、およびアルキル化剤からなる群から選択される、請求項１から１６のいずれか一項に記載の凍結乾燥医薬組成物。
【請求項１８】
約３０〜約１２０秒で復元することができる、請求項１から１７のいずれか一項に記載の凍結乾燥医薬組成物。
【請求項１９】
約４０〜約９０秒で復元することができる、請求項１から１８のいずれか一項に記載の凍結乾燥医薬組成物。
【請求項２０】
約１００ｍＬ以下の水性媒体中に復元されると、復元された凍結乾燥医薬組成物が、１０ミクロン以上のサイズを有する粒子を３０００個未満含む、請求項１から１９のいずれか一項に記載の凍結乾燥医薬組成物。
【請求項２１】
約１００ｍＬ以下の水性媒体中に復元されると、復元された凍結乾燥医薬組成物が、２５ミクロン以上のサイズを有する粒子を３００個未満含む、請求項１から１９のいずれか一項に記載の凍結乾燥医薬組成物。
【請求項２２】
約１００ｍＬ以下の水性媒体中に復元されると、復元された凍結乾燥医薬組成物が、２５ミクロン以上のサイズを有する粒子を６００個未満および／または１０ミクロン以上のサイズを有する粒子を６０００個未満含む、請求項１から１９のいずれか一項に記載の凍結乾燥医薬組成物。
【請求項２３】
約１００ｍＬ以下の水性媒体中に復元されると、復元された凍結乾燥医薬組成物が、５ミクロン〜５０ミクロンの間のサイズを有する粒子を０．０５重量パーセント未満含む、請求項１から２２のいずれか一項に記載の凍結乾燥医薬組成物。
【請求項２４】
約１０ｍＬ以下の水性媒体中に復元されると、復元された凍結乾燥医薬組成物が、
ポリ（乳）酸−ブロック−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーおよび治療剤を含む４０ｍｇ／ｍＬ以上の濃度のポリマーナノ粒子と、
約６〜約９重量パーセントのマンニトールと、
約６〜約９重量パーセントのシクロデキストリンと
を含み、復元された凍結乾燥医薬組成物は、１０ミクロン以上のサイズを有する粒子を６００個未満含む、請求項１から２３のいずれか一項に記載の凍結乾燥医薬組成物。
【請求項２５】
マンニトールを含有しない凍結乾燥組成物に比べて、２．５日以下で凍結乾燥される、請求項１から２４のいずれか一項に記載の凍結乾燥医薬組成物。
【請求項２６】
ポリ（乳）酸−ブロック−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーまたはポリ（乳）酸−ｃｏ−ポリ（グリコール）酸−ブロック−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーおよびドセタキセルを含む凍結乾燥医薬用量であって、当該用量が、ドセタキセル約３０〜３７ｍｇ、または約３３ｍｇを含むポリマーナノ粒子と、マンニトールと、ヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリンとを含む、凍結乾燥医薬用量。
【請求項２７】
約６ｍＬ〜約７ｍＬ、または約６．６ｍＬの請求項２６に記載の凍結乾燥医薬用量を含む容器。
【請求項２８】
凍結乾燥医薬用量が１３．２ｍＬの復元用量に復元されるとき、１０ミクロン以上のサイズを有する粒子を、復元用量１ｍＬあたり約４５４個未満、および／または１０ミクロン以上のサイズを有する粒子を、復元用量１ｍＬあたり約４５個未満有する、請求項２７に記載の容器。
【請求項２９】
水性媒体中に１０〜１００ｍｇ／ｍＬの濃度の、ポリ（乳）酸−ブロック−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーまたはポリ（乳）酸−ｃｏ−ポリ（グリコール）酸−ブロック−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーおよび治療剤を含むポリマーナノ粒子と、
約６〜約１０重量パーセントのマンニトールと、
約６〜約９重量パーセントのヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリンと
を含む、非経口投与に適する復元された凍結乾燥医薬組成物。
【請求項３０】
約１００ｍＬ以下の組成物を有する試料容器あたり、１０ミクロン以上の微粒子を６０００個未満、および２５ミクロン以上の微粒子を６００個未満含む、請求項２９に記載の復元された凍結乾燥医薬組成物。
【請求項３１】
１０ミクロン以上の微粒子を１ｍＬあたり６００個未満、および２５ミクロン以上の微粒子を１ｍＬあたり６０個未満含む、請求項２９に記載の復元された凍結乾燥医薬組成物。
【請求項３２】
約１００ｍＬ以下の組成物を有する試料容器あたり、１０ミクロン以上の微粒子を６００個未満、および２５ミクロン以上の微粒子を６０個未満含む、請求項２９に記載の復元された凍結乾燥医薬組成物。
【請求項３３】
コポリマーのポリ（乳）酸部分が、約１６ｋＤａの重量平均分子量を有し、コポリマーのポリ（エチレン）グリコール部分が、約５ｋＤａの重量平均分子量を有する、請求項２９から３２のいずれか一項に記載の復元された凍結乾燥医薬組成物。
【請求項３４】
治療剤、ならびにポリ（乳）酸−ブロック−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーおよびポリ（乳）酸−ｃｏ−ポリ（グリコール）酸−ブロック−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーからなる群から選択されるポリマーを含むポリマーナノ粒子を含む製剤を用意することと、
製剤にヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリンおよびマンニトールを加えて、凍結乾燥前の水性製剤を形成することと、
凍結乾燥前の水性製剤を凍結乾燥して、凍結乾燥医薬製剤を形成することと
を含む、復元されると非経口投与に適する凍結乾燥医薬組成物を調製する方法。
【請求項３５】
凍結乾燥前の水性製剤を凍結乾燥することが、約４．５日以下、約４日以下、約３．５日以下、約３日以下、約２．５日、または約６０時間の凍結乾燥サイクルを含む、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
凍結乾燥前の水性製剤を凍結乾燥することが、
凍結乾燥前の水性製剤を約４℃の凍結乾燥器に装入することと、
約−４５℃まで凍結乾燥器温度の１回目の降下を行い、約２時間約−４５℃に保つことと、
凍結乾燥器を約−１２℃に温め、約３時間約−１２℃に保つことと、
約−４５℃まで凍結乾燥器温度の２回目の降下を行い、約２時間約−４５℃に保つことと
を含む、請求項３４または３５に記載の方法。
【請求項３７】
凍結乾燥前の水性製剤を凍結乾燥することが、２回目の降下ステップの後、凍結乾燥器温度を約３５℃に上昇させることをさらに含む、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
凍結乾燥器圧力が、約２５０ミリトルである、請求項３４から３８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３９】
凍結乾燥前の水性製剤を凍結乾燥することが、
凍結乾燥前の水性製剤を約４℃の凍結乾燥器に装入することと、
マンニトールのガラス転移温度より少なくとも約１０℃低くまで、凍結乾燥器温度の１回目の降下を行うことと、
凍結乾燥器を、マンニトールのガラス転移温度より少なくとも約１０℃高くまで温めることと、
マンニトールのガラス転移温度より少なくとも約１０℃低くまで、凍結乾燥器温度の２回目の降下を行うことと
を含む、請求項３４または３５に記載の方法。
【請求項４０】
凍結乾燥前の水性製剤を凍結乾燥することが、凍結乾燥器温度を、凍結乾燥医薬組成物の凍結乾燥ケーク崩壊温度より約１℃高くまで上昇させることをさらに含む、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
凍結乾燥前の水性製剤が、約６〜約１０（例えば、約６〜約９、約６〜約８、または約７〜約８）重量パーセントのマンニトールと、約６〜約９（例えば、約６〜約８、または約７〜約８）重量パーセントのヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリンと、約１０〜約１００ｍｇ／ｍＬ（例えば、約２０〜約９０ｍｇ／ｍＬ、２０〜約８０ｍｇ／ｍＬ、約３０〜約８０ｍｇ／ｍＬ、約４０〜約８０ｍｇ／ｍＬ、約４０〜約７０ｍｇ／ｍＬ、約４０〜約６０ｍｇ／ｍＬ、約４０〜約５０ｍｇ／ｍＬ、約５０〜約６０ｍｇ／ｍＬ、約４０ｍｇ／ｍＬ、約４５ｍｇ／ｍＬ、約５０ｍｇ／ｍＬ、または約５５ｍｇ／ｍＬ）の濃度のポリマーナノ粒子とを含む、請求項３４から４０のいずれか一項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
【背景技術】
【０００２】
患者へのある種の薬物を送達する（例えば、特定の組織もしくは細胞型を標的とするか、または正常組織ではなく特定の患部組織を標的とする）か、または薬物の放出を制御する系は、有益であると長い間認識されてきた。
【０００３】
例えば、活性薬物を含み、例えば特定の組織もしくは細胞型を標的とする、または特定の患部組織を標的とするが、正常組織は標的としない治療法では、処置を必要としない体組織における薬物の量を減らすことができる。周囲の非がん組織を死滅させることなしに細胞毒性用量の薬物ががん細胞に送達されることが望ましい状態、例えば、がんを処置するときに、これは特に重要である。さらに、このような治療法では、抗がん療法においてありがちな、望ましくなく、時に生命を脅かす副作用を減らすこともできる。加えて、このような治療法では、別な方法では薬物が到達できないであろう、ある特定の組織への薬物の到達を可能にすることもできる。
【０００４】
治療用ナノ粒子の送達は、ナノ粒子が復元された懸濁液を非経口注射することにより実現することができる。元のナノ粒子懸濁液は、復元前の貯蔵のために、凍結乾燥、すなわちフリーズドライされる。ナノ粒子懸濁液をフリーズドライすることで、その凍結懸濁液対応物よりはるかに優れた貯蔵安定性を有する復元用製品が創出される可能性がある。さらに、フリーズドライすることで、非常に低い一定温度を必要としなくてもよい、より簡単な貯蔵を実現することができる。しかし、復元された凍結乾燥物は、元の懸濁液と互角であるか、またはそれよりも優れた物理化学的および性能属性を備えていなければならない。ミクロ凝集による僅少なパーティキュレートまたは分散していない粒子を伴わずに同じサイズの粒子へと再分散することは、ナノ粒子懸濁液凍結乾燥の最も困難な側面である。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
したがって、ナノ粒子治療法、および治療レベルの薬物を送達し、がんなどの疾患を処置し、優れた貯蔵能を備えることができるようなナノ粒子を作製する方法が求められている。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
一態様では、凍結乾燥医薬組成物を提供する。凍結乾燥医薬組成物は、ポリ（乳）酸−ブロック−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーまたはポリ（乳）酸−ｃｏ−ポリ（グリコール）酸−ブロック−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーおよび治療剤を含むポリマーナノ粒子と、糖アルコールと、シクロデキストリンとを含む。
【０００７】
ある特定の実施形態では、ポリマーナノ粒子：糖アルコール：シクロデキストリンの重量比は、０．２〜１．０：１．０：０．５〜１．８、０．３〜０．９：１．０：０．６〜１．６、０．４〜０．９：１．０：０．６〜１．４、０．４〜０．９：１．０：０．８〜１．２、０．５〜０．８：１．０：０．８〜１．２、０．５〜０．７：１．０：０．８〜１．２、または０．５〜０．７：１．０：０．９〜１．１である。一部のさらなる実施形態では、糖アルコールは、マンニトールを含み、シクロデキストリンは、ヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリンを含み、ポリマーナノ粒子は、約５〜２０重量％の治療剤を含む。
【０００８】
ある特定の実施形態では、企図される凍結乾燥医薬組成物が水性媒体中に復元されると、組成物は、約２〜約１２重量パーセントの糖アルコール（例えば、マンニトール）、および約２〜約１２重量パーセントのシクロデキストリン（例えば、ヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリン）を含む。ある特定の実施形態では、復元された組成物は、約６〜約１０重量パーセントの糖アルコールを含む。ある特定の実施形態では、復元された組成物は、約６〜約９重量パーセントのシクロデキストリンを含む。ある特定の実施形態では、復元された組成物は、約６〜約１０（例えば、約６〜約９、または約７〜約８）重量パーセントの糖アルコール（例えば、マンニトール）と、約６〜約９（例えば、約６〜約８、または約７〜約８）重量パーセントのシクロデキストリン（例えば、ヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリン）と、約１０〜約１００ｍｇ／ｍＬの濃度のポリマーナノ粒子（例えば、約２０〜約９０ｍｇ／ｍＬ、２０〜約８０ｍｇ／ｍＬ、約３０〜約８０ｍｇ／ｍＬ、約４０〜約８０ｍｇ／ｍＬ、約４０〜約７０ｍｇ／ｍＬ、約４０〜約６０ｍｇ／ｍＬ、約４０〜約５０ｍｇ／ｍＬ、約５０〜約６０ｍｇ／ｍＬ、約４０ｍｇ／ｍＬ、約４５ｍｇ／ｍＬ、約５０ｍｇ／ｍＬ、または約５５ｍｇ／ｍＬ）とを含む。ある特定の実施形態では、組成物は、約７．５重量パーセントのシクロデキストリンおよび約７．５重量パーセントの糖アルコールを含む。
【０００９】
ある特定の実施形態では、糖アルコールは、グリセロール、エリトリトール、トレイトール、アラビトール、キシリトール、リビトール、マンニトール、ソルビトール、ガラクチトール、フシトール、イジトール、イノシトール、ボレミトール、イソマルトール、マルチトール、ラクチトール、およびこれらの混合物からなる群から選択される。ある特定の実施形態では、糖アルコールは、マンニトールである。
【００１０】
ある特定の実施形態では、シクロデキストリンは、α−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、γ−シクロデキストリン、およびこれらの混合物からなる群から選択される。ある特定の実施形態では、シクロデキストリンは、ヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリンである。
【００１１】
ある特定の実施形態では、復元された組成物は、約７．５重量パーセントのヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリンおよび約７．５重量パーセントのマンニトールを含む。
【００１２】
ある特定の実施形態では、ポリ（乳）酸−ブロック−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーのポリ（乳）酸部分は、約１０ｋＤａ〜約２５ｋＤａの重量平均分子量を有し、ポリ（乳）酸−ブロック−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーのポリ（エチレン）グリコール部分は、約４〜約６ｋＤａの重量平均分子量を有する。ある特定の実施形態では、ポリ（乳）酸−ブロック−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーのポリ（乳）酸部分は、約１６ｋＤａの重量平均分子量を有し、ポリ（乳）酸−ブロック−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーのポリ（エチレン）グリコール部分は、約５ｋＤａの重量平均分子量を有する。
【００１３】
ある特定の実施形態では、企図されるポリマーナノ粒子は、約６０ｎｍ〜約１４０ｎｍ、または約８０ｎｍ〜約１２０ｎｍの直径を有する。
【００１４】
ある特定の実施形態では、企図されるポリマーナノ粒子は、約３〜約４０重量パーセントの治療剤を含む。
【００１５】
ある特定の実施形態では、企図されるポリマーナノ粒子は、リガンドにコンジュゲートしているポリマーをさらに含む。
【００１６】
ある特定の実施形態では、治療剤は、タキサン、エポチロン、ｍＴＯＲ阻害剤、ビンカアルカロイド、ジテルペン誘導体、およびアルキル化剤からなる群から選択される。
【００１７】
ある特定の実施形態では、企図される組成物は、約３０〜約１２０秒、または約４０〜約９０秒で復元することができる。
【００１８】
ある特定の実施形態では、企図される凍結乾燥医薬組成物が約１００ｍＬ以下の水性媒体中に復元されると、復元された凍結乾燥医薬組成物は、１０ミクロン以上のサイズを有する粒子を３０００個未満含む。
【００１９】
ある特定の実施形態では、企図される凍結乾燥医薬組成物が約１００ｍＬ以下の水性媒体中に復元されると、復元された凍結乾燥医薬組成物は、２５ミクロン以上のサイズを有する粒子を３００個未満含む。
【００２０】
ある特定の実施形態では、企図される凍結乾燥医薬組成物が約１００ｍＬ以下の水性媒体中に復元されると、復元された凍結乾燥医薬組成物は、２５ミクロン以上のサイズを有する粒子を６００個未満および／または１０ミクロン以上のサイズを有する粒子を６０００個未満含む。
【００２１】
ある特定の実施形態では、企図される凍結乾燥医薬組成物が約１００ｍＬ以下の水性媒体中に復元されると、復元された凍結乾燥医薬組成物は、５ミクロン〜５０ミクロンの間のサイズを有する粒子を０．０５重量パーセント未満含む。
【００２２】
ある特定の実施形態では、企図される凍結乾燥医薬組成物が約１０ｍＬ以下の水性媒体中に復元されると、復元された凍結乾燥医薬組成物は、ポリ（乳）酸−ブロック−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーおよび治療剤を含む４０ｍｇ／ｍＬ以上の濃度のポリマーナノ粒子と、約６〜約９重量パーセントのマンニトールと、約６〜約９重量パーセントのシクロデキストリンとを含み、復元された凍結乾燥医薬組成物は、１０ミクロン以上のサイズを有する粒子を６００個未満含む。
【００２３】
ある特定の実施形態では、企図される凍結乾燥医薬組成物は、マンニトールを含有しない凍結乾燥組成物に比べて、２．５日以下で凍結乾燥される。ある特定の実施形態では、本発明の凍結乾燥医薬組成物は、マンニトールを含有しない別の凍結乾燥組成物（例えば、スクロースおよびＨＰｂＣＤを含む凍結乾燥組成物）に比べて、はるかに短いサイクル時間で凍結乾燥される。
【００２４】
別の態様では、凍結乾燥医薬用量を提供する。凍結乾燥医薬用量は、ポリ（乳）酸−ブロック−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーまたはポリ（乳）酸−ｃｏ−ポリ（グリコール）酸−ブロック−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーおよびドセタキセルを含み、当該用量は、ドセタキセル約３０〜３７ｍｇ、または約３３ｍｇを含む、ポリマーナノ粒子と、マンニトールと、ヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリンとを含む。
【００２５】
ある特定の実施形態では、約６ｍＬ〜約７ｍＬ、または約６．６ｍＬの企図される凍結乾燥医薬用量を含む容器を提供する。ある特定の実施形態では、凍結乾燥医薬用量が１３．２ｍＬの復元用量に復元されるとき、容器は、１０ミクロン以上のサイズを有する粒子を、復元用量１ｍＬあたり約４５４個未満、および／または１０ミクロン以上のサイズを有する粒子を、復元用量１ｍＬあたり約４５個未満有する。
【００２６】
さらに別の態様では、非経口投与に適する復元された凍結乾燥医薬組成物が提供される。復元された凍結乾燥医薬組成物は、水性媒体中に、１０〜１００ｍｇ／ｍＬの濃度の、ポリ（乳）酸−ブロック−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーまたはポリ（乳）酸−ｃｏ−ポリ（グリコール）酸−ブロック−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーおよび治療剤を含むポリマーナノ粒子と、約６〜約１０重量パーセントのマンニトールと、約６〜約９重量パーセントのヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリンとを含む。
【００２７】
ある特定の実施形態では、企図される復元された凍結乾燥医薬組成物は、約１００ｍＬ以下の組成物を有する試料容器あたり、１０ミクロン以上の微粒子を６０００個未満、および２５ミクロン以上の微粒子を６００個未満含む。
【００２８】
ある特定の実施形態では、企図される復元された凍結乾燥医薬組成物は、１０ミクロン以上の微粒子を１ｍＬあたり６００個未満、および２５ミクロン以上の微粒子を１ｍＬあたり６０個未満含む。
【００２９】
ある特定の実施形態では、企図される復元された凍結乾燥医薬組成物は、約１００ｍＬ以下の組成物を有する試料容器あたり、１０ミクロン以上の微粒子を６００個未満、および２５ミクロン以上の微粒子を６０個未満含む。
【００３０】
ある特定の実施形態では、コポリマーのポリ（乳）酸部分は、約１６ｋＤａの重量平均分子量を有し、コポリマーのポリ（エチレン）グリコール部分は、約５ｋＤａの重量平均分子量を有する。
【００３１】
また別の態様では、復元されると非経口投与に適する凍結乾燥医薬組成物を調製する方法を提供する。本方法は、治療剤、ならびにポリ（乳）酸−ブロック−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーおよびポリ（乳）酸−ｃｏ−ポリ（グリコール）酸−ブロック−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーからなる群から選択されるポリマーを含むポリマーナノ粒子を含む製剤を用意することと、製剤にヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリンおよびマンニトールを加えて、凍結乾燥前の水性製剤を形成することと、凍結乾燥前の水性製剤を凍結乾燥して、凍結乾燥医薬製剤を形成することとを含む。ある特定の実施形態では、凍結乾燥前の水性製剤は、約６〜約１０（例えば、約６〜約９、約６〜約８、または約７〜約８）重量パーセントのマンニトールと、約６〜約９（例えば、約６〜約８、または約７〜約８）重量パーセントのヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリンと、約１０〜約１００ｍｇ／ｍＬ（例えば、約２０〜約９０ｍｇ／ｍＬ、２０〜約８０ｍｇ／ｍＬ、約３０〜約８０ｍｇ／ｍＬ、約４０〜約８０ｍｇ／ｍＬ、約４０〜約７０ｍｇ／ｍＬ、約４０〜約６０ｍｇ／ｍＬ、約４０〜約５０ｍｇ／ｍＬ、約５０〜約６０ｍｇ／ｍＬ、約４０ｍｇ／ｍＬ、約４５ｍｇ／ｍＬ、約５０ｍｇ／ｍＬ、または約５５ｍｇ／ｍＬ）の濃度のポリマーナノ粒子とを含む。ある特定の実施形態では、凍結乾燥前の水性製剤は、約６〜約９重量パーセントのマンニトールと、約６〜約９重量パーセントのヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリンと、約１０〜約１００ｍｇ／ｍＬ（例えば、約２０〜約９０ｍｇ／ｍＬ、２０〜約８０ｍｇ／ｍＬ、約３０〜約８０ｍｇ／ｍＬ、約４０〜約８０ｍｇ／ｍＬ、約４０〜約７０ｍｇ／ｍＬ、約４０〜約６０ｍｇ／ｍＬ、約４０〜約５０ｍｇ／ｍＬ、約５０〜約６０ｍｇ／ｍＬ、約４０ｍｇ／ｍＬ、約４５ｍｇ／ｍＬ、約５０ｍｇ／ｍＬ、または約５５ｍｇ／ｍＬ）の濃度のポリマーナノ粒子とを含む。ある特定の実施形態では、凍結乾燥前の水性製剤は、約６〜約９重量パーセントのマンニトール、約６〜約９重量パーセントのヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリン、および約３０〜約８０ｍｇ／ｍＬの濃度のポリマーナノ粒子［例えば、約６〜約９重量パーセントのマンニトール、約６〜約８重量パーセントのヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリン、約４０〜約７０ｍｇ／ｍＬの濃度のポリマーナノ粒子；約６〜約８重量パーセントのマンニトール、約６〜約８重量パーセントのヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリン、および約４０〜約７０ｍｇ／ｍＬの濃度のポリマーナノ粒子；または約７〜約８重量パーセントのマンニトール、約７〜約８重量パーセントのヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリン、および約４０〜約６０ｍｇ／ｍＬの濃度のポリマーナノ粒子；または約７．５重量パーセントのマンニトール、約７．５重量パーセントのヒドロキシプロピルβ−シクロデキストリン、および約４０〜約６０ｍｇ／ｍＬの濃度のポリマーナノ粒子］を含む。
【００３２】
ある特定の実施形態では、企図される凍結乾燥前の水性製剤を凍結乾燥することは、約４．５日以下、または約４日以下、または約３日以下、または約２．５日、または約６０時間の凍結乾燥サイクルを含む。
【００３３】
ある特定の実施形態では、企図される凍結乾燥前の水性製剤を凍結乾燥することは、製剤を約４℃の凍結乾燥器に装入することと、約−４５℃まで凍結乾燥器温度の１回目の降下を行い、約２時間約−４５℃に保つことと、凍結乾燥器を約−１２℃に温め、約３時間約−１２℃に保つことと、約−４５℃まで凍結乾燥器温度の２回目の降下を行い、約２時間約−４５℃に保つこととを含む。
【００３４】
ある特定の実施形態では、企図される凍結乾燥前の水性製剤を凍結乾燥することは、２回目の降下ステップの後、凍結乾燥器温度を約３５℃に上昇させることをさらに含む。
【００３５】
ある特定の実施形態では、凍結乾燥器圧力は、約２５０ミリトルである。
【００３６】
ある特定の実施形態では、企図される凍結乾燥前の水性製剤を凍結乾燥することは、製剤を約４℃の凍結乾燥器に装入することと、糖アルコールのガラス転移温度より少なくとも約１０℃低くまで、凍結乾燥器温度の１回目の降下を行うことと、凍結乾燥器を、糖アルコールのガラス転移温度より少なくとも約１０℃高くまで温めることと、糖アルコールのガラス転移温度より少なくとも約１０℃低くまで、凍結乾燥器温度の２回目の降下を行うこととを含む。
【００３７】
ある特定の実施形態では、企図される凍結乾燥前の水性製剤を凍結乾燥することは、凍結乾燥器温度を、企図される凍結乾燥医薬組成物の凍結乾燥ケーク崩壊温度より約１℃高くまで上昇させることをさらに含む。
【図面の簡単な説明】
【００３８】
【図１】開示されるナノ粒子を形成するためのエマルジョンプロセスについてのフローチャートである。
【図２Ａ】開示されるエマルジョンプロセスについての流れ図である。
【図２Ｂ】開示されるエマルジョンプロセスについての流れ図である。
【図３】本明細書において開示されている種々の復元されたナノ粒子懸濁液の（ＤＬＳを使用して測定した）ナノ粒子サイズを示すグラフである。
【図４】本明細書において開示されている種々の復元されたナノ粒子懸濁液のパーティキュレートカウントを示すグラフである。
【図５】本明細書において開示されている種々の復元されたナノ粒子懸濁液のパーティキュレートカウントを示すグラフである。
【図６】本明細書において開示されている種々の復元されたナノ粒子懸濁液の（ＤＬＳを使用して測定した）ナノ粒子サイズを示すグラフである。
【図７】本明細書において開示されている種々の復元されたナノ粒子懸濁液のパーティキュレートカウントを示すグラフである。
【図８】本明細書において開示されている種々の復元されたナノ粒子懸濁液のパーティキュレートカウントを示すグラフである。
【図９】本明細書において開示されている種々のナノ粒子懸濁液のドセタキセルのｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出を示すグラフである。
【図１０】７．５％のマンニトールおよび７．５％のヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンを有するナノ粒子懸濁液のアニーリングしない場合の示差走査熱量測定（ＤＳＣ）特性を示すグラフである。
【図１１】７．５％のマンニトールおよび７．５％のヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンを有するナノ粒子懸濁液のアニーリングした場合の示差走査熱量測定（ＤＳＣ）特性を示すグラフである。
【図１２】一実施形態に従う凍結乾燥サイクルについての棚温度および減圧を時間に応じて示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００３９】
本明細書では、凍結乾燥ポリマーナノ粒子組成物、ならびにそのような治療用組成物を作製および使用する方法を記載する。このような組成物は、凍結乾燥組成物から復元することができ、ナノ粒子および／または他の材料の大きな凝集を最小限しか含むことがない。したがって、開示される組成物は、非経口での使用に適するものとなり得る。
【００４０】
ある特定の実施形態では、糖アルコールおよびシクロデキストリンを含有する企図される製剤は、有利なことに、品質属性を実質的に保持しながら、先行技術製剤に比べてかなり急速に凍結乾燥することができる。一部の実施形態では、復元された凍結乾燥製剤は、例えば、最小限のナノ粒子のミクロ凝集、および／または糖アルコールおよびシクロデキストリンなしで調製された製剤に比べて実質的に同様の放出特性などの、有利な特性を示し得る。
【００４１】
凍結乾燥医薬組成物
一部の実施形態では、本明細書において開示されているナノ粒子と、凍結させるのに適する溶液とを含んでもよい、凍結させるのに適する組成物が企図される。例えば、一部の実施形態では、溶液は、水、糖アルコール、およびシクロデキストリンを含む場合がある。理論に束縛されるものではないが、糖アルコールは、例えば、凍結保護剤として働き得、シクロデキストリンは、例えば、凍結乾燥保護剤として働き得ると考えられる。
【００４２】
ある特定の実施形態では、糖アルコールは、単糖、二糖、または多糖から、例えば、糖を還元することにより、得ることができる。一部の実施形態では、糖アルコールは、グリセロール、エリトリトール、トレイトール、アラビトール、キシリトール、リビトール、マンニトール、ソルビトール、ガラクチトール、フシトール、イジトール、イノシトール、ボレミトール、イソマルトール、マルチトール、ラクチトール、およびこれらの混合物からなる群から選択することができる。
【００４３】
一部の実施形態では、糖アルコールは、ナノ粒子の懸濁液に、凍結乾燥組成物を調製するのに適するいかなる濃度で加えてもよい。例えば、一部の例では、ナノ粒子の懸濁液中の糖アルコール濃度は、約１〜約１５重量パーセントの間、約１〜約１２重量パーセントの間、約１〜約１０重量パーセントの間、約１〜約８重量パーセントの間、約１〜約６重量パーセントの間、約１〜約４重量パーセントの間、約２〜約１２重量パーセントの間、約２〜約１０重量パーセントの間、約２〜約８重量パーセントの間、約２〜約６重量パーセントの間、約３〜約１２重量パーセントの間、約３〜約１０重量パーセントの間、約３〜約８重量パーセントの間、約３〜約６重量パーセントの間、約４〜約１２重量パーセントの間、約４〜約１０重量パーセントの間、約４〜約８重量パーセントの間、約４〜約６重量パーセントの間、約５〜約１５重量パーセントの間、約５〜約１２重量パーセントの間、約５〜約１０重量パーセントの間、約５〜約８重量パーセントの間、約６〜約１５重量パーセントの間、約６〜約１２重量パーセントの間、約６〜約１０重量パーセントの間、約６〜約９重量パーセントの間、約７〜約１５重量パーセントの間、約７〜約１２重量パーセントの間、約７〜約１０重量パーセントの間、約７〜約９重量パーセントの間、約８〜約１５重量パーセントの間、約８〜約１２重量パーセントの間、約８〜約１０重量パーセントの間、約９〜約１５重量パーセントの間、約９〜約１２重量パーセントの間、約１０〜約１５重量パーセントの間、または約１０〜約１２重量パーセントの間になる場合がある。ある特定の実施形態では、ナノ粒子の懸濁液中の糖アルコール濃度は、約７．５重量パーセントでよい。
【００４４】
一部の実施形態では、シクロデキストリンは、α−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、γ−シクロデキストリン、またはこれらの混合物を含み得る。本明細書において開示されている組成物における使用が企図される、非限定的な例となるシクロデキストリンとしては、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（ＨＰｂＣＤ）、ヒドロキシエチル−β−シクロデキストリン、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン、メチル−β−シクロデキストリン、ジメチル−β−シクロデキストリン、カルボキシメチル−β−シクロデキストリン、カルボキシメチルエチル−β−シクロデキストリン、ジエチル−β−シクロデキストリン、トリ−Ｏ−アルキル−β−シクロデキストリン、グリコシル−β−シクロデキストリン、およびマルトシル−β−シクロデキストリンが挙げられる。
【００４５】
ある特定の実施形態では、シクロデキストリンは、ナノ粒子の懸濁液に、凍結乾燥組成物を調製するのに適するいかなる濃度で加えてもよい。例えば、一部の例では、ナノ粒子の懸濁液中のシクロデキストリン濃度は、約１〜約１５重量パーセントの間、約１〜約１２重量パーセントの間、約１〜約１０重量パーセントの間、約１〜約８重量パーセントの間、約１〜約６重量パーセントの間、約１〜約４重量パーセントの間、約２〜約１２重量パーセントの間、約２〜約１０重量パーセントの間、約２〜約８重量パーセントの間、約２〜約６重量パーセントの間、約３〜約１２重量パーセントの間、約３〜約１０重量パーセントの間、約３〜約８重量パーセントの間、約３〜約６重量パーセントの間、約４〜約１２重量パーセントの間、約４〜約１０重量パーセントの間、約４〜約８重量パーセントの間、約４〜約６重量パーセントの間、約５〜約１５重量パーセントの間、約５〜約１２重量パーセントの間、約５〜約１０重量パーセントの間、約５〜約８重量パーセントの間、約６〜約１５重量パーセントの間、約６〜約１２重量パーセントの間、約６〜約１０重量パーセントの間、約６〜約９重量パーセントの間、約７〜約１５重量パーセントの間、約７〜約１２重量パーセントの間、約７〜約１０重量パーセントの間、約７〜約９重量パーセントの間、約８〜約１５重量パーセントの間、約８〜約１２重量パーセントの間、約８〜約１０重量パーセントの間、約９〜約１５重量パーセントの間、約９〜約１２重量パーセントの間、約１０〜約１５重量パーセントの間、または約１０〜約１２重量パーセントの間になる場合がある。ある特定の実施形態では、ナノ粒子の懸濁液中のシクロデキストリン濃度は、約７．５重量パーセントでよい。
【００４６】
本開示は、復元されたとき、最小量の大きな凝集体を有する凍結乾燥した医薬組成物に部分的に関する。このような大きな凝集体は、約０．５μｍ超、約１μｍ超、または約１０μｍ超のサイズを有することがあり、復元された溶液中において望ましくない可能性がある。凝集体サイズは、参照により本明細書に組み込まれている米国薬局方の３２＜７８８＞において示されるものを含めた種々の技術を使用して測定することができる。ＵＳＰ３２＜７８８＞において概略が述べられている試験は、光遮蔽粒子計数試験、顕微鏡粒子計数試験、レーザー回折、および単一粒子光学検知を含む。一実施形態では、所与の試料中の粒径は、レーザー回折および／または単一粒子光学検知を使用して測定される。
【００４７】
光遮蔽粒子計数試験によるＵＳＰ３２＜７８８＞は、懸濁液中の粒径のサンプリングのためのガイドラインを規定する。１００ｍＬと等しい、またはこれ未満を有する溶液について、存在する粒子の平均数が、容器毎に≧１０μｍである６０００個および容器毎に≧２５μｍである６００個を超えない場合、調製は試験に準拠する。
【００４８】
ＵＳＰ３２＜７８８＞において概略が述べられているように、顕微鏡粒子計数試験は、接眼マイクロメーターを有する１００±１０×の拡大率に調節した双眼顕微鏡を使用して粒子量を決定するためのガイドラインを規定する。接眼マイクロメーターは、１００×の拡大率で見たとき、１０μｍおよび２５μｍを表す黒の基準円を有する象限に分割された円からなる円形直径グラティキュールである。直線状スケールは、グラティキュールの下に提供される。１０μｍおよび２５μｍに関する粒子の数を視覚的に符合させる。１００ｍＬと等しい、またはこれ未満を有する溶液について、存在する粒子の平均数が、容器毎に≧１０μｍである３０００個、および容器毎に≧２５μｍである３００個を超えない場合、調製は試験に準拠する。
【００４９】
動的光散乱（ＤＬＳ）を使用して、粒径を測定し得るが、これはブラウン運動に依存し、そのためこの技術は、いくつかのより大きな粒子を検出し得ない。レーザー回折は、粒子および懸濁培地の間の屈折率における差異に依存する。この技術は、サブミクロンからミリメートル範囲にて粒子を検出することができる。相対的に少（例えば、約１〜５重量％）量のより大きな粒子を、ナノ粒子懸濁液中で決定することができる。単一粒子光学検知（ＳＰＯＳ）は、約０．５μｍの個々の粒子を計数する希薄な懸濁液の光遮蔽を使用する。測定した試料の粒子濃度を知ることによって、凝集体の重量パーセントまたは凝集体濃度（粒子／ｍＬ）を計算することができる。
【００５０】
復元は、開始懸濁液と比較したときの等しいＤＬＳサイズ分布を示す。しかし、レーザー回折は、いくらかの復元された溶液中でサイズが＞１０μｍの粒子を検出することができる。さらに、ＳＰＯＳはまた、ＦＤＡガイドラインの濃度超の濃度（＞１０μｍの粒子について１０４〜１０５個の粒子／ｍＬ）で＞１０μｍサイズの粒子を検出し得る。
【００５１】
一部の実施形態では、復元されると、開示される組成物の水性試料１０ｍＬは、１０ミクロン以上のサイズを有する粒子を１ｍＬあたり６００個未満、および／または２５ミクロン以上のサイズを有する粒子を１ｍＬあたり６０個未満含む。一部の実施形態では、復元されると、開示される組成物の水性試料１０ｍＬは、１０ミクロン以上のサイズを有する粒子を、１ｍＬあたり５００個未満、１ｍＬあたり４００個未満、１ｍＬあたり３００個未満、１ｍＬあたり２００個未満、１ｍＬあたり１００個未満、１ｍＬあたり８０個未満、１ｍＬあたり６０個未満、または１ｍＬあたり４０個未満含む。ある特定の実施形態では、復元されると、開示される組成物の水性試料１０ｍＬは、２５ミクロン以上のサイズを有する粒子を、１ｍＬあたり５０個未満、１ｍＬあたり４０個未満、１ｍＬあたり３０個未満、１ｍＬあたり２０個未満、１ｍＬあたり１０個未満、または１ｍＬあたり５個未満含む。
【００５２】
一態様では、本発明は、ポリマーナノ粒子を含む凍結乾燥医薬組成物を提供し、凍結乾燥医薬組成物が約１３．２ｍＬ以下の水性媒体中に約５０ｍｇ／ｍＬまたは約４０ｍｇ／ｍＬのナノ粒子濃度で復元されると、非経口投与に適する復元された組成物は、１０ミクロン以上の微粒子を６０００個未満、５０００個未満、４０００個未満、３０００個未満、２０００個未満、１５００個未満、もしくは１０００個未満、および／または２５ミクロン以上の微粒子を６００個未満、５００個未満、４００個未満、３００個未満、もしくは２５０個未満含む。
【００５３】
復元された組成物は、糖アルコールおよび／またはシクロデキストリンを含有しない復元された組成物に比べて、最小限の凝集しか伴うことがない。一部の実施形態では、復元された組成物は、０．２未満の多分散性指数を有する場合がある。
【００５４】
一部の実施形態では、凍結乾燥医薬組成物が約１００ｍＬ以下の水性媒体中に復元される結果、５〜５０ミクロンの間のサイズを有する粒子を０．０５重量パーセント未満含む、復元された凍結乾燥医薬組成物がもたらされる。
【００５５】
一部の実施形態では、企図される凍結乾燥組成物は、迅速に復元することができるが、例えば、これは、例えば臨床の場において、投与に向けて組成物を調製する際に有利となり得る。例えば、一部の実施形態では、企図される凍結乾燥組成物は、約３０〜約３６０秒、約３０〜約３００秒、約３０〜約１５０秒、約３０〜約１２０秒、約４０〜約９０秒、または約６０〜約１５０秒で復元することができる。
【００５６】
別の態様では、本発明は、ａ）疎水性のポリマーセグメントおよび親水性のポリマーセグメントを有するコポリマーと活性薬剤とをそれぞれが含む複数の治療用粒子を含む組成物を用意することと、ｂ）前記組成物に糖アルコールおよびシクロデキストリンを加えることと、ｃ）組成物を凍結乾燥して凍結乾燥組成物を形成することと、ｄ）凍結乾燥組成物を復元して、非経口投与に適する製剤を形成することとを含むプロセスによって調製される、薬学的に許容できる非経口投与用製剤を提供する。一部の実施形態では、そのような復元は、有利なことに、数分間の手作業による簡単な混合によってこなすことができる。復元された製品の属性（例えば、薬物純度および／または放出プロファイル）は、凍結乾燥前の組成物（例えば懸濁液）から実質的に変化していないこともあり得る。
【００５７】
一部の実施形態では、企図される凍結乾燥プロセスは、糖アルコール（例えばマンニトール）および／またはシクロデキストリンを含有しない凍結乾燥プロセスに比べて、より迅速に完遂することができる。例えば、ある特定の実施形態では、企図される凍結乾燥プロセスは、７２時間未満しか継続しないサイクルを含む場合がある。例えば、企図される凍結乾燥プロセスサイクルは、約１２〜約７２時間の長さ、約２４〜約７２時間の長さ、約３６〜約７２時間の長さ、または約４８〜約７２時間の長さになる場合がある。ある特定の実施形態では、企図される凍結乾燥プロセスサイクルは、約６０時間の長さでよい。
【００５８】
一部の実施形態では、企図される凍結乾燥サイクルは、例えば、時間の長さ、温度、および／または圧力が異なってよい一連の段階を含む場合がある。ある特定の実施形態では、企図される凍結乾燥サイクルは、（１）棚への積載および凍結、（２）一次乾燥、ならびに（３）二次乾燥および貯蔵という段階を含む場合がある。
【００５９】
一部の実施形態では、棚への積載および凍結の段階を使用して、アニーリング手順を行う場合がある。理論に束縛されるものではないが、温度を循環させることにより行われるアニーリング手順によって、材料の物理的および／または化学的特性が変化すると考えられる。企図される製剤について、一部の実施形態では、アニーリングを使用すると、実質的に結晶質の糖アルコールを含む凍結したナノ粒子懸濁液を調製することができる。理論に束縛されるものではないが、実質的に結晶質の糖アルコールによって、凍結したナノ粒子懸濁液を乾燥させる間により多くの開水路が創出されることにより、水分除去が促進されると考えられる。さらに、一部の実施形態では、アニーリング手順を使用して、材料（例えば糖アルコール）が凍結乾燥の間に特定の温度範囲でガラス転移を経ないように、材料の臨界温度を変更することができる。
【００６０】
ガラス転移は、例えば、示差走査熱量測定を使用して観察することができる。次いで、材料（例えば糖アルコール）を特定の固体状態に移行させるように、アニーリングプロセスを設計することができる。例えば、液体状態のナノ粒子懸濁液を、糖アルコールのガラス転移温度より低い第１の温度で凍結させ、次いで、凍結したナノ粒子懸濁液の温度を、凍結したナノ粒子懸濁液のガラス転移温度と固体／液体転移温度の間である第２の温度に上昇させることによりアニーリングすることができる。例えば、第１の温度は、糖アルコールのガラス転移温度より少なくとも約５℃、少なくとも約１０℃、少なくとも約１５℃、または少なくとも約２０℃低い場合がある。ある特定の実施形態では、第２の温度は、糖アルコールのガラス転移温度より少なくとも約５℃、少なくとも約１０℃、少なくとも約１５℃、または少なくとも約２０℃高い場合がある。一部の実施形態では、第２の上昇した温度に続いて、凍結したナノ粒子懸濁液の温度を、例えば、元の第１の温度または他のいずれかの適切な温度に降下させる場合もある。凍結したナノ粒子懸濁液は、第１および／もしくは第２の温度、および／または第３の温度で、独立に、ある期間、例えば、約１時間〜約１０時間の間、１時間〜約５時間の間、約１時間〜約４時間の間、または約２時間〜約５時間の間の期間保たれる場合がある。一実施形態では、凍結したナノ粒子懸濁液は、第１の温度で約２時間保たれ、第２の温度で約３時間保たれ、第３の温度で約２時間保たれる場合がある。
【００６１】
凍結段階に続いて、凍結乾燥サイクルは、一次乾燥段階に進み、ここで、凍結したナノ粒子懸濁液は、減圧にさらされて、昇華が促進される。凍結したナノ粒子懸濁液が保たれる棚の温度および減圧は、凍結したナノ粒子懸濁液が、一次乾燥段階の初期昇華相の間所望の温度を維持するように選択することができる。例えば、一部の実施形態では、凍結したナノ粒子懸濁液の温度が、崩壊温度（すなわち、例えばフリーズドライ顕微鏡法によって求められる、凍結乾燥ケークの構造が損なわれ始める温度）を下回るように、棚温度および減圧を選択することが望ましい場合がある。一部の実施形態では、乾燥段階の間の凍結したナノ粒子懸濁液の温度は、崩壊温度より少なくとも約１℃、少なくとも約２℃、少なくとも約３℃、少なくとも約４℃、または少なくとも約５℃低い場合がある。一部の実施形態では、一次乾燥段階の間の減圧は、約１００ミリトル〜約５００ミリトルの間、約１５０ミリトル〜約４００ミリトルの間、または約２００ミリトル〜約３００ミリトルの間にすることができる。一実施形態では、一次乾燥段階の間の減圧は、約２５０ミリトルでよい。一部の実施形態では、一次乾燥段階の長さは、約１２時間〜約９６時間の間、約１２時間〜約７２時間の間、または約２４時間〜約４８時間の間にすることができる。一実施形態では、乾燥時間は、約１．５日でよい。
【００６２】
一部の実施形態では、二次乾燥および貯蔵段階が凍結段階の後に続き、凍結乾燥組成物の形成がもたらされる。ある特定の実施形態では、二次乾燥段階の開始前に、凍結したナノ粒子懸濁液中の約７０重量％〜約９０重量％の水が除去されている。一部の実施形態では、二次乾燥は、一次乾燥より高い温度で実施される場合がある。例えば、一部の実施形態では、二次乾燥温度は、約０℃〜約４０℃の間、約１０℃〜約４０℃の間、約２０℃〜約４０℃の間、または約３０℃〜約４０℃の間になる場合がある。一実施形態では、二次乾燥温度は、約３５℃でよい。ある特定の実施形態では、二次乾燥は、減圧下、例えば、一次乾燥とほぼ同じ圧力で実施することができる。
【００６３】
二次乾燥が完了すると、凍結乾燥組成物は、凍結乾燥器から取り出されるまで、減圧下で貯蔵することができる。一部の実施形態では、凍結乾燥組成物は、二次乾燥より低い温度で貯蔵される場合がある。一部の実施形態では、凍結乾燥組成物は、約０℃〜約３０℃の間または約１０℃〜約３０℃の間で貯蔵される場合がある。一実施形態では、凍結乾燥組成物は、約２５０ミリトルの減圧下、約２０℃で貯蔵される場合がある。
【００６４】
さらに別の態様では、本発明は、ａ）疎水性のポリマーセグメントおよび親水性のポリマーセグメントを有するコポリマーと活性薬剤とをそれぞれが含む複数の治療用粒子を含む組成物を用意することと、ｂ）前記組成物に二糖およびシクロデキストリンを加えることと、ｃ）組成物を凍結乾燥して凍結乾燥組成物を形成することと、ｄ）凍結乾燥組成物を復元して、非経口投与に適する製剤を形成することとを含むプロセスによって調製される、薬学的に許容できる非経口投与用製剤を提供する。一部の実施形態では、そのような復元は、有利なことに、数分間の手作業による簡単な混合によってこなすことができる。復元された製品の属性（例えば、薬物純度および／または放出プロファイル）は、凍結乾燥前の組成物（例えば懸濁液）から実質的に変化していないこともあり得る。
【００６５】
凍結乾燥するステップは、組成物を約−４０℃より高い温度、または例えば、約−３０℃未満の温度で凍結させることと、凍結した組成物を形成することと、凍結した組成物を乾燥させて、凍結乾燥組成物を形成することとを含む場合がある。乾燥させるステップは、約−２５〜約−３４℃または約−３０〜約−３４℃の温度において、約５０ミリトルで実施することができる。
【００６６】
別の態様では、本発明は、凍結乾燥製剤に糖アルコールおよび塩を加えて、復元後のナノ粒子の凝集を防ぐことを含む、医薬ナノ粒子組成物における粒子の実質的な凝集を防止する方法を提供する。一実施形態では、凍結乾燥製剤にシクロデキストリンも加えられる。さらに別の態様では、本発明は、凍結乾燥製剤に糖アルコールおよびシクロデキストリンを加えて、復元後のナノ粒子の凝集を防ぐことを含む、医薬ナノ粒子組成物における粒子の実質的な凝集を防止する方法を提供する。
【００６７】
本明細書において開示されているナノ粒子は、一態様によれば、薬学的に許容できる担体と合わさり、医薬組成物を形成し得る。当業者が理解するように、担体は、下記のような投与経路、標的組織の場所、送達される薬物、薬物の送達の時間経過などに基づいて選択し得る。
【００６８】
本発明の医薬組成物は、経口および非経口経路を含めた当技術分野において公知の任意の手段によって患者に投与することができる。用語「患者」は、本明細書において使用する場合、ヒト、ならびに例えば、哺乳動物、鳥、爬虫類、両生類、および魚を含めた非ヒトを指す。例えば、非ヒトは、哺乳動物（例えば、げっ歯類、マウス、ラット、ウサギ、サル、イヌ、ネコ、霊長類、またはブタ）であり得る。ある特定の実施形態では、非経口経路が、消化管において見出される消化酵素との接触を回避するために望ましい。このような実施形態によると、本発明の組成物は、注射（例えば、静脈内、皮下または筋内、腹腔内注射）、直腸、経膣的、局所的（散剤、クリーム剤、軟膏剤、もしくは点眼剤によるなど）によって、または吸入（スプレーによるなど）によって投与し得る。
【００６９】
特定の実施形態では、本発明のナノ粒子は、それを必要とする対象に、全身的に、例えば、非経口的に、または静脈内注入もしくは注射によって投与される。
【００７０】
一部の実施形態では、企図される凍結乾燥医薬組成物は、容器において、約６ｍＬ〜約７ｍＬまたは約６．６ｍＬの溶液を使用して懸濁させることができる。一部の実施形態では、企図される凍結乾燥医薬組成物の用量は、約２５ｍｇ〜約５０ｍｇの活性薬剤、約２５ｍｇ〜約４０ｍｇの活性薬剤、約３０ｍｇ〜約４０ｍｇの活性薬剤、約３０ｍｇ〜約３７ｍｇの活性薬剤、または約３３ｍｇの活性薬剤を含む場合がある。
【００７１】
ナノ粒子
一般に、「ナノ粒子」とは、１０００ｎｍ未満、例えば、約１０ｎｍ〜約２００ｎｍの直径を有するいずれかの粒子を指す。開示される治療用ナノ粒子は、約６０〜約２００ｎｍ、約６０〜約１９０ｎｍ、または約７０〜約１９０ｎｍ、または約６０〜約１８０ｎｍ、または約７０ｎｍ〜約１８０ｎｍ、または約５０ｎｍ〜約２００ｎｍ、または約６０〜約１２０ｎｍ、または約７０〜約１２０ｎｍ、または約８０〜約１２０ｎｍ、または約９０〜約１２０ｎｍ、または約１００〜約１２０ｎｍ、または約６０〜約１３０ｎｍ、または約７０〜約１３０ｎｍ、または約８０〜約１３０ｎｍ、または約９０〜約１３０ｎｍ、または約１００〜約１３０ｎｍ、または約１１０〜約１３０ｎｍ、または約６０〜約１４０ｎｍ、または約７０〜約１４０ｎｍ、または約８０〜約１４０ｎｍ、または約９０〜約１４０ｎｍ、または約１００〜約１４０ｎｍ、または約１１０〜約１４０ｎｍ、または約６０〜約１５０ｎｍ、または約７０〜約１５０ｎｍ、または約８０〜約１５０ｎｍ、または約９０〜約１５０ｎｍ、または約１００〜約１５０ｎｍ、または約１１０〜約１５０ｎｍ、または約１２０〜約１５０ｎｍの直径を有するナノ粒子を含む場合がある。
【００７２】
本明細書において開示されているナノ粒子は、１種、２種、３種またはそれ超の生体適合性および／または生分解性ポリマーを含み得る。例えば、企図されるナノ粒子は、約３５〜約９９．６重量パーセント、一部の実施形態では、約５０〜約９９．６重量パーセント、一部の実施形態では、約５０〜約９９．５重量パーセント、一部の実施形態では、約５０〜約９９重量パーセント、一部の実施形態では、約５０〜約９８重量パーセント、一部の実施形態では、約５０〜約９７重量パーセント、一部の実施形態では、約５０〜約９６重量パーセント、一部の実施形態では、約５０〜約９５重量パーセント、一部の実施形態では、約５０〜約９４重量パーセント、一部の実施形態では、約５０〜約９３重量パーセント、一部の実施形態では、約５０〜約９２重量パーセント、一部の実施形態では、約５０〜約９１重量パーセント、一部の実施形態では、約５０〜約９０重量パーセント、一部の実施形態では、約５０〜約８５重量パーセント、および一部の実施形態では、約５０〜約８０重量パーセントの生分解性ポリマーおよびポリ（エチレングリコール）（ＰＥＧ）を含む１種または複数のブロックコポリマー、ならびに約０〜約５０重量パーセントの生分解性ホモポリマーを含み得る。
【００７３】
一部の実施形態では、開示されているナノ粒子は、約０．２〜約３５重量パーセント、約０．２〜約３０重量パーセント、約０．２〜約２０重量パーセント、約０．２〜約１０重量パーセント、約０．２〜約５重量パーセント、約０．５〜約５重量パーセント、約０．７５〜約５重量パーセント、約１〜約５重量パーセント、約２〜約５重量パーセント、約３〜約５重量パーセント、約１〜約３０重量パーセント、約１〜約２０重量パーセント、約２〜約２０重量パーセント、約５〜約２０重量パーセント、約１〜約１５重量パーセント、約２〜約１５重量パーセント、約３〜約１５重量パーセント、約４〜約１５重量パーセント、約５〜約１５重量パーセント、約１〜約１０重量パーセント、約２〜約１０重量パーセント、約３〜約１０重量パーセント、約４〜約１０重量パーセント、約５〜約１０重量パーセント、約１０〜約３０重量パーセント、または約１５〜約２５重量パーセントの活性薬剤を含み得る。
【００７４】
一式の実施形態において、ナノ粒子は、表面が、内部と異なる組成を有する、すなわち、内部に存在するが表面には存在しない（または逆も同様）少なくとも１種の化合物が存在し得る、かつ／または少なくとも１種の化合物が内部および表面に異なる濃度で存在する、内部と表面とを有する場合がある。例えば、一実施形態では、標的化部分などの化合物が、粒子の内部と表面の両方に存在するが、粒子の表面には内部より高い濃度で存在する場合がある。一部の場合ではあるが、粒子の内部の濃度は、本質的にゼロでない場合もある、すなわち、粒子の内部には検出可能な量の化合物が存在する。
【００７５】
場合によって、粒子の内部は、粒子の表面より疎水性である。例えば、粒子の内部は、粒子の表面に比べ相対的に疎水性である場合があり、薬物または他のペイロードも疎水性である場合があり、粒子の相対的に疎水性の中心と容易に会合する。したがって、薬物または他のペイロードは粒子の内部に含有され得、粒子の内部は、薬物または他のペイロードを、粒子を取り巻く外部環境から保護することができる（または逆も同様）。例えば、対象に投与される粒子内に収容された薬物または他のペイロードは、対象の身体から保護され、身体も、少なくとも一定期間は薬物から実質的に隔離される場合がある。
【００７６】
例えば、本明細書では、第１の非官能化ポリマーと、任意選択の第２の非官能化ポリマーと、標的化部分を含む任意選択の官能化ポリマーと、治療剤とを含む治療用ポリマーナノ粒子が開示される。特定の実施形態では、第１の非官能化ポリマーは、ＰＬＡ、ＰＬＧＡ、もしくはＰＥＧ、またはそのコポリマー、例えば、ジブロックコポリマーＰＬＡ−ＰＥＧである。例えば、例示的なナノ粒子は、約０．０６５ｇ／ｃｍ３、または約０．０１〜約０．１０ｇ／ｃｍ３の密度で、ＰＥＧコロナを有する場合がある。
【００７７】
開示されるナノ粒子は、例えば、糖アルコールおよびシクロデキストリンを含有する場合のある溶液中において、室温で、または２５℃で、少なくとも約３日間、約４日間、または少なくとも約５日間安定し得る（例えば、実質的にすべての活性薬剤を保持する）。
【００７８】
一部の実施形態では、企図されるナノ粒子は、シクロデキストリンを含む場合がある。適切なシクロデキストリンは、α−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、γ−シクロデキストリン、またはこれらの混合物を含み得る。本明細書において開示されているナノ粒子における使用のために企図される例示的なシクロデキストリンには、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（ＨＰｂＣＤ）、ヒドロキシエチル−β−シクロデキストリン、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン、メチル−β−シクロデキストリン、ジメチル−β−シクロデキストリン、カルボキシメチル−β−シクロデキストリン、カルボキシメチルエチル−β−シクロデキストリン、ジエチル−β−シクロデキストリン、トリ−Ｏ−アルキル−β−シクロデキストリン、グリコシル−β−シクロデキストリン、およびマルトシル−β−シクロデキストリンが含まれる。一部の実施形態では、シクロデキストリンは、ポリマーに共有結合していてよい。例えば、一部の実施形態では、シクロデキストリンは、キトサンに共有結合していてよい。
【００７９】
例えば、一部の実施形態では、企図されるナノ粒子は、約０．０５〜約３５重量パーセントのシクロデキストリン、一部の実施形態では、約０．０５〜約３０重量パーセントのシクロデキストリン、一部の実施形態では、約０．１〜約３０重量パーセントのシクロデキストリン、一部の実施形態では、約０．５〜約３０重量パーセントのシクロデキストリン、一部の実施形態では、約１〜約３０重量パーセントのシクロデキストリン、一部の実施形態では、約２〜約３０重量パーセントのシクロデキストリン、一部の実施形態では、約５〜約３０重量パーセントのシクロデキストリン、一部の実施形態では、約１０〜約３０重量パーセントのシクロデキストリン、一部の実施形態では、約１５〜約３０重量パーセントのシクロデキストリン、一部の実施形態では、約２０〜約３０重量パーセントのシクロデキストリン、一部の実施形態では、約１５〜約２５重量パーセントのシクロデキストリン、一部の実施形態では、約５〜約２５重量パーセントのシクロデキストリン、一部の実施形態では、約５〜約２０重量パーセントのシクロデキストリン、または一部の実施形態では、約５〜約１５重量パーセントのシクロデキストリンを含む場合がある。
【００８０】
一部の実施形態では、開示されるナノ粒子は、脂肪アルコールも含む場合があり、これによって、薬物放出の速度は増大し得る。例えば、開示されるナノ粒子は、セチルアルコール、オクタノール、ステアリルアルコール、アラキジルアルコール、ドコソナール（ｄｏｃｏｓｏｎａｌ）、オクタソナール（ｏｃｔａｓｏｎａｌ）などのＣ８〜Ｃ３０アルコールを含む場合がある。
【００８１】
ナノ粒子は、制御放出特性を備える場合もあり、例えば、一定量の治療剤を、長期間かけて、例えば、１日、１週間、またはより長時間かけて、患者、例えば患者の特定の部位に送達し得る場合がある。
【００８２】
一部の実施形態では、開示されるナノ粒子は、例えば、室温および／または３７℃のリン酸緩衝液に入れたとき、実質的に、約２％未満、約４％未満、約５％未満、または約１０％未満の活性薬剤しか直ちに（例えば、約１分から約３０分にかけて）放出しない。
【００８３】
別の実施形態では、開示されるナノ粒子は、例えば、室温または３７℃のリン酸緩衝液に入れたとき、約４０％未満、５０％未満、または６０％未満、７０％未満の活性薬剤を０．５時間以上かけて放出する場合がある。一実施形態では、開示されるナノ粒子は、３７℃のリン酸緩衝溶液に入れたとき、約７０％未満の治療剤を０．５時間かけて放出する場合がある。
【００８４】
別の実施形態では、開示されるナノ粒子は、例えば、室温または３７℃のリン酸緩衝液に入れたとき、約２０％未満、約３０％未満、約４０％未満、５０％未満、またはさらに６０％（またはより高い率）未満を１日以上かけて放出する場合がある。一実施形態では、開示されるナノ粒子は、室温のリン酸緩衝溶液に入れたとき、約６０％未満の治療剤を２時間かけて放出する場合がある。
【００８５】
一部の実施形態では、開示されるナノ粒子または開示されるナノ粒子を含む組成物が対象または患者に投与された後、患者における治療剤のピーク血漿濃度（Ｃｍａｘ）は、（例えば、ナノ粒子の一部としてではなく）単独で投与した場合の治療剤のＣｍａｘに比べて、実質的により高い。
【００８６】
別の実施形態では、治療剤を含む開示されるナノ粒子は、対象に投与されたとき、治療剤のｔｍａｘが、単独で投与された治療剤のｔｍａｘに比べて、実質的により長くなり得る。
【００８７】
このような粒子のライブラリーも形成することができる。例えば、粒子内の２種（またはより多種）のポリマーの比を様々にすることにより、そうしたライブラリーは、スクリーニング試験、ハイスループットアッセイなどに有用となり得る。ライブラリー内の実体は、上述のものなどの特性により様々にすることができ、場合によって、粒子の２つ以上の特性を、ライブラリー内で様々にすることもできる。したがって、一実施形態は、違った特性を備えるポリマーを異なる比率で有するナノ粒子のライブラリーを対象とする。ライブラリーは、それらポリマーを適切ないずれの比率で含んでもよい。
【００８８】
一部の実施形態では、生体適合性ポリマーは、疎水性ポリマーである。生体適合性ポリマーの非限定的な例としては、ポリラクチド、ポリグリコリド、および／またはポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）が挙げられる。
【００８９】
ポリマー
一部の実施形態では、本発明のナノ粒子は、ポリマーのマトリックスと治療剤とを含む。一部の実施形態では、治療剤および／または標的化部分（すなわち、低分子量ＰＳＭＡリガンド）を、ポリマーマトリックスの少なくとも一部と会合させることができる。例えば、一部の実施形態では、標的化部分（例えばリガンド）を、ポリマーマトリックスの表面と、共有結合によって会合させることができる。一部の実施形態では、共有結合による会合は、リンカーを介する。治療剤は、ポリマーマトリックスの表面と会合する、ポリマーマトリックス内にカプセル化される、ポリマーマトリックスに取り囲まれる、かつ／またはポリマーマトリックス全域に分散する場合がある。
【００９０】
多種多様なポリマー、およびそれから粒子を形成する方法が、薬物送達の分野において公知である。一部の実施形態では、本開示は、少なくとも２種の巨大分子を有するナノ粒子を対象とし、第１の巨大分子は、低分子量リガンド（例えば、標的化部分）に結合した第１のポリマーを含み、第２の巨大分子は、標的化部分に結合していない第２のポリマーを含む。ナノ粒子は、１種または複数の追加の非官能化ポリマーを場合により含んでもよい。
【００９１】
用語「ポリマー」は、本明細書において使用する場合、当技術分野で使用されるようなその通常の意味を与えられ、すなわち、分子構造は、共有結合によって連結した１つまたは複数の繰り返し単位（モノマー）を含む。繰り返し単位は、全て同一であり得るか、または場合によって、ポリマー内に存在する２種以上のタイプの繰り返し単位があり得る。場合によって、ポリマーは、生物学的に由来するもの、すなわち、生体ポリマーでよい。非限定的な例には、ペプチドまたはタンパク質が含まれる。場合によって、さらなる部分、例えば、生物学的部分、例えば、下記に記載したものがまた、ポリマー中に存在し得る。２種以上のタイプの繰り返し単位がポリマー内に存在する場合、ポリマーは、「コポリマー」と言われる。ポリマーを用いる任意の実施形態では、用いられるポリマーは、場合によって、コポリマーであり得ることを理解すべきである。コポリマーを形成する繰り返し単位は、任意の様式で配置し得る。例えば、繰り返し単位は、ランダムな順序で、交互の順序で、またはブロックコポリマーとして配置してもよく、すなわち、それぞれが第１の繰り返し単位（例えば、第１のブロック）を含む１つまたは複数の領域、およびそれぞれが第２の繰り返し単位（例えば、第２のブロック）を含む１つまたは複数の領域などを含む。ブロックコポリマーは、２つ（ジブロックコポリマー）、３つ（トリブロックコポリマー）、またはそれ超の数の別個のブロックを有し得る。
【００９２】
開示されている粒子は、コポリマーを含むことができ、これは一部の実施形態では、通常、２種またはそれ超のポリマーが一緒の共有結合によって互いに会合している、２種またはそれ超のポリマー（例えば、本明細書に記載されているもの）を説明する。このように、コポリマーは、第１のポリマーおよび第２のポリマーを含んでいてもよく、これらは一緒にコンジュゲートされて、ブロックコポリマーを形成し、第１のポリマーは、ブロックコポリマーの第１のブロックでよく、第２のポリマーは、ブロックコポリマーの第２のブロックでよい。当然ながら、ブロックコポリマーは、場合によって、ポリマーの複数のブロックを含有してもよく、「ブロックコポリマー」は、本明細書において使用する場合、単一の第１のブロックおよび単一の第２のブロックのみを有するブロックコポリマーのみに限定されないことを当業者は理解する。例えば、ブロックコポリマーは、第１のポリマーを含む第１のブロック、第２のポリマーを含む第２のブロック、および第３のポリマーまたは第１のポリマーなどを含む第３のブロックを含み得る。場合によって、ブロックコポリマーは、任意の数の第１のポリマーの第１のブロック、および第２のポリマーの第２のブロック（およびある特定の場合では、第３のブロック、第４のブロックなど）を含有することができる。さらに、ブロックコポリマーはまた、場合によって、他のブロックコポリマーから形成することができることに留意すべきである。例えば、第１のブロックコポリマーは、別のポリマー（ホモポリマー、生体ポリマー、別のブロックコポリマーなどでよい）にコンジュゲートして複数のタイプのブロックを含有する新規なブロックコポリマーを形成し、かつ／または他の部分（例えば、非ポリマー部分）にコンジュゲートし得る。
【００９３】
一部の実施形態では、ポリマーは、本明細書において「ＰＬＧＡ」と集団的に称される、乳酸およびグリコール酸単位を含むコポリマー、例えば、ポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）およびポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）；ならびに本明細書において「ＰＧＡ」と称される、グリコール酸単位、ならびに本明細書において「ＰＬＡ」と集団的に称される、乳酸単位、例えば、ポリ−Ｌ−乳酸、ポリ−Ｄ−乳酸、ポリ−Ｄ，Ｌ−乳酸、ポリ−Ｌ−ラクチド、ポリ−Ｄ−ラクチド、およびポリ−Ｄ，Ｌ−ラクチドを含むホモポリマーを含めた、ポリエステルであり得る。一部の実施形態では、例示的なポリエステルには、例えば、ポリヒドロキシ酸；ラクチドおよびグリコリドのペグ化ポリマーおよびコポリマー（例えば、ペグ化ＰＬＡ、ペグ化ＰＧＡ、ペグ化ＰＬＧＡ、およびその誘導体）が含まれる。一部の実施形態では、ポリエステルは、例えば、ポリ無水物、ポリ（オルトエステル）、ペグ化ポリ（オルトエステル）、ポリ（カプロラクトン）、ペグ化ポリ（カプロラクトン）、ポリリシン、ペグ化ポリリシン、ポリ（エチレンイミン）、ペグ化ポリ（エチレンイミン）、ポリ（Ｌ−ラクチド−ｃｏ−Ｌ−リシン）、ポリ（セリンエステル）、ポリ（４−ヒドロキシ−Ｌ−プロリンエステル）、ポリ［α−（４−アミノブチル）−Ｌ−グリコール酸］、およびその誘導体を含む。
【００９４】
一部の実施形態では、ポリマーは、ＰＬＧＡであり得る。ＰＬＧＡは、乳酸およびグリコール酸の生体適合性および生分解性コポリマーであり、様々な形態のＰＬＧＡは、乳酸：グリコール酸の比によって特性決定することができる。乳酸は、Ｌ−乳酸、Ｄ−乳酸、またはＤ，Ｌ−乳酸でよい。ＰＬＧＡの分解速度は、乳酸−グリコール酸の比を変化させることによって調節することができる。一部の実施形態では、本発明に従って使用されるＰＬＧＡは、概ね８５：１５、概ね７５：２５、概ね６０：４０、概ね５０：５０、概ね４０：６０、概ね２５：７５、または概ね１５：８５の乳酸：グリコール酸比を特徴とする場合がある。一部の実施形態では、粒子のポリマー（例えば、ＰＬＧＡブロックコポリマーまたはＰＬＧＡ−ＰＥＧブロックコポリマー）中の乳酸のグリコール酸モノマーに対する比を選択して、様々なパラメータ、例えば、水の取込み、治療剤の放出および／またはポリマー分解の反応速度について最適化し得る。
【００９５】
本明細書において開示されている粒子は、ＰＥＧを含有してもよいか、またはしなくてもよい。さらに、ある特定の実施形態は、ポリ（エステル−エーテル）を含有するコポリマー、例えば、エステル結合（例えば、Ｒ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ’結合）およびエーテル結合（例えば、Ｒ−Ｏ−Ｒ’結合）によって結合した繰り返し単位を有するポリマーを対象とすることができる。本発明の一部の実施形態では、生分解性ポリマー、例えば、カルボン酸基を含有する加水分解性ポリマーは、ポリ（エチレングリコール）繰り返し単位とコンジュゲートして、ポリ（エステル−エーテル）を形成し得る。ポリ（エチレングリコール）繰り返し単位を含有するポリマー（例えば、コポリマー、例えば、ブロックコポリマー）はまた、「ペグ化」ポリマーと称することができる。
【００９６】
ＰＥＧは、例えば、リガンドにコンジュゲートしていないとき、終端し、末端基を含む場合もあることが企図される。例えば、ＰＥＧは、ヒドロキシル、メトキシもしくは他のアルコキシル基、メチルもしくは他のアルキル基、アリール基、カルボン酸、アミン、アミド、アセチル基、グアニジノ基、またはイミダゾールで終端し得る。他の企図される末端基には、アジド、アルキン、マレイミド、アルデヒド、ヒドラジド、ヒドロキシルアミン、アルコキシアミン、またはチオール部分が含まれる。
【００９７】
当業者は、例えば、開環重合技術（ＲＯＭＰ）などによって、ポリマーをアミンで終端しているＰＥＧ基に反応させるＥＤＣ（１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩）およびＮＨＳ（Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド）を使用することによって、ポリマーをペグ化するための方法および技術について知っている。
【００９８】
開示されている粒子は、例えば、ＰＥＧおよびＰＬ（Ｇ）Ａのジブロックコポリマーを含むことができ、例えば、ＰＥＧ部分は、約１，０００〜２０，０００、例えば、約２，０００〜２０，０００、例えば、約２〜約１０，０００の数平均分子量を有してもよく、ＰＬ（Ｇ）Ａ部分は、約５，０００〜約２０，０００、または約５，０００〜１００，０００、例えば、約２０，０００〜７０，０００、例えば、約１５，０００〜５０，０００の数平均分子量を有してもよい。
【００９９】
例えば、約１０〜約９９重量パーセントのポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーまたはポリ（乳）酸−ｃｏ−ポリ（グリコール）酸−ポリ（エチレン）グリコールコポリマー、または約２０〜約８０重量パーセント、約４０〜約８０重量パーセント、もしくは約３０〜約５０重量パーセント、もしくは約７０〜約９０重量パーセントのポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーまたはポリ（乳）酸−ｃｏ−ポリ（グリコール）酸−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーを含む例示的な治療用ナノ粒子が本明細書において開示される。例示的なポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーは、約１５〜約２０ｋＤａ、または約１０〜約２５ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳）酸および約４〜約６、または約２ｋＤａ〜約１０ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールを含むことができる。
【０１００】
開示されているナノ粒子は、約１〜約５０重量パーセントのポリ（乳）酸またはポリ（乳）酸−ｃｏ−ポリ（グリコール）酸（ＰＥＧを含まない）を場合により含んでいてもよいか、または約１〜約５０重量パーセント、もしくは約１０〜約５０重量パーセントもしくは約３０〜約５０重量パーセントのポリ（乳）酸もしくはポリ（乳）酸−ｃｏ−ポリ（グリコール）酸を場合により含んでいてもよい。例えば、ポリ（乳）酸またはポリ（乳）酸−ｃｏ−ポリ（グリコール）酸は、約５〜約１５ｋＤａ、または約５〜約１２ｋＤａの数平均分子量を有し得る。例示的なＰＬＡは、約５〜約１０ｋＤａの数平均分子量を有し得る。例示的なＰＬＧＡは、約８〜約１２ｋＤａの数平均分子量を有し得る。
【０１０１】
標的化部分
本明細書では、任意選択の標的化部分、すなわち、生物学的実体、例えば、膜成分、細胞表面受容体、前立腺特異的膜抗原などに結合、または別な形で会合し得る部分を含み得るナノ粒子が提供される。標的化部分が粒子の表面に存在すると、粒子は、特定の標的化部位、例えば、腫瘍、疾患部位、組織、器官、ある型の細胞などにおいて局在化することが可能となり得る。そのため、ナノ粒子は、「標的特異的」になるといえる。さらに、薬物または他のペイロードが、場合によって、粒子から放出され、特定の標的化部位と局所的に相互作用することが可能となり得る。
【０１０２】
特定の実施形態では、薬物または他のペイロードは、粒子から制御放出方式で放出され、特定の標的化部位（例えば、腫瘍）と局所的に相互作用することが可能となり得る。本明細書で（例えば「制御放出系」の文脈において）使用する用語「制御放出」（およびこの用語の変形）は、一般に、選択された部位での、またはそうでなく速度、間隔、および／もしくは量が制御可能である、物質（例えば、薬物）の放出を包含するものとする。制御放出は、必ずしもこれらに限定されないが、実質的に継続的な送達、パターン化された送達（例えば、規則的または不規則な時間間隔で中断される一定期間にかけての断続的な送達）、および選択された物質の（例えば、予め決められた別個の量の物質として、比較的短時間（例えば、数秒または数分）での）ボーラスの送達を包含する。
【０１０３】
一実施形態では、開示されるナノ粒子は、低分子量リガンド、例えば、低分子量ＰＳＭＡリガンドである標的化部分を含む。
【０１０４】
例えば、低分子量ＰＳＭＡリガンドは、
【０１０５】
【化１】
2019512516.tif 000003
およびそのエナンチオマー、立体異性体、回転異性体、互変異性体、ジアステレオマー、またはラセミ化合物である場合がある。とりわけ、ブチル−アミン化合物は、特にベンゼン環をもたないことから、合成しやすいという利点を有する。
【０１０６】
例えば、開示されるナノ粒子は、
【０１０７】
【化２】
2019512516.tif 000004
［ｙは、約２２２であり、ｚは、約１１４である］で表されるコンジュゲートを含む場合がある。
【０１０８】
例えば、開示されるナノ粒子は、
【０１０９】
【化３】
2019512516.tif 000005
［式中、Ｒ１は、Ｈ、およびハロゲンで置換されていてもよいＣ１〜Ｃ２０アルキル基からなる群から選択され、
Ｒ２は、結合、エステル結合、またはアミド結合であり、
Ｒ３は、Ｃ１〜Ｃ１０アルキレンまたは結合であり、
ｘは、５０〜約１５００、例えば、約１７０〜約２６０であり、
ｙは、０〜約５０である、例えば、ｙは、０であり、
ｚは、約３０〜約４５６または約３０〜約２００である、例えば、ｚは、約８０〜約１３０である］
から選択されるポリマー化合物を含む。
【０１１０】
治療剤
一実施形態では、活性薬剤または治療剤は、例えば、開示されるナノ粒子の一部を形成する、開示されるポリマーにコンジュゲートしていても（またはしていなくても）よく、例えば、活性薬剤は、ＰＬＡもしくはＰＧＬＡ、またはＰＬＡ−ＰＥＧもしくはＰＬＧＡ−ＰＥＧなどのコポリマーのＰＬＡもしくはＰＬＧＡ部分にコンジュゲート（例えば、直接または連結部分を介して、例えば共有結合）している場合がある。
【０１１１】
一態様では、例えば、治療剤（例えば、抗がん剤または抗炎症薬）、診断薬（例えば、造影剤、放射性核種、ならびに蛍光、発光、および磁気部分）、予防薬（例えば、ワクチン）、および／または栄養剤（例えば、ビタミン、無機質など）を始めとするいかなる薬剤も、開示されるナノ粒子によって送達することができる。本発明に従って送達される例示的な薬剤には、これらに限定されないが、低分子（例えば、細胞傷害性薬剤または抗炎症薬）、核酸（例えば、ｓｉＲＮＡ、ＲＮＡｉ、およびｍｉｒｃｏＲＮＡ剤）、タンパク質（例えば、抗体）、ペプチド、脂質、炭水化物、ホルモン、金属、放射性元素および化合物、薬物、ワクチン、免疫薬など、および／またはこれらの組合せが含まれる。一部の実施形態では、送達される薬剤は、がんの処置において有用な薬剤である。
【０１１２】
特定の実施形態では、薬物または他のペイロードは、粒子から制御放出方式で放出され、特定の標的化部位（例えば、腫瘍または炎症組織）と局所的に相互作用することが可能となり得る。本明細書で（例えば「制御放出系」の文脈において）使用する用語「制御放出」（およびこの用語の変形）は、一般に、選択された部位での、またはそうでなく速度、間隔、および／もしくは量が制御可能である、物質（例えば、薬物）の放出を包含するものとする。制御放出は、必ずしもこれらに限定されないが、実質的に継続的な送達、パターン化された送達（例えば、規則的または不規則な時間間隔で中断される一定期間にかけての断続的な送達）、および選択された物質の（例えば、予め決められた独立した量の物質として、比較的短時間（例えば、数秒または数分）での）ボーラスの送達を包含する。
【０１１３】
活性薬剤もしくは薬物は、治療剤（例えば、化学療法剤）、例えば、ｍＴｏｒ阻害剤（例えば、シロリムス、テムシロリムス、またはエベロリムス）、ビンカアルカロイド（例えば、ビノレルビンまたはビンクリスチン）、ジテルペン誘導体、タキサン（例えば、パクリタキセルもしくはその誘導体、例えば、ＤＨＡ−パクリタキセルもしくはＰＧ−パクリタキセル、またはドセタキセル）、心血管薬（例えば、利尿薬、血管拡張薬、アンジオテンシン変換酵素、ベータ遮断薬、アルドステロンアンタゴニスト、または抗血栓薬）、副腎皮質ステロイド、代謝拮抗薬もしくは葉酸代謝拮抗薬（例えば、メトトレキセート）、化学療法剤（例えば、エポチロンＢ）、アルキル化剤（例えば、ベンダムスチン）である場合があり、または活性薬剤もしくは薬物は、ｓｉＲＮＡである場合もある。
【０１１４】
一式の実施形態において、ペイロードは、薬物、または１種を越える薬物の組合せである。このような粒子は、例えば、薬物を含有する粒子を対象内の特定の局限された場所に向かわせるのに標的化部分を使用して、例えば、薬物の局所的な送達がなされるのを可能にし得る実施形態において有用となり得る。例示的な治療剤としては、化学療法剤、例えば、ドキソルビシン（アドリアマイシン）、ゲムシタビン（Ｇｅｍｚａｒ）、ダウノルビシン、プロカルバジン、マイトマイシン、シタラビン、エトポシド、メトトレキセート、ベノレルビン（ｖｅｎｏｒｅｌｂｉｎｅ）、５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）、ビンブラスチンもしくはビンクリスチンなどのビンカアルカロイド、ブレオマイシン、パクリタキセル（ｔａｘｏｌ）、ドセタキセル（ｔａｘｏｔｅｒｅ）、カバジタキセル、アルデスロイキン、アスパラギナーゼ、ブスルファン、カルボプラチン、クラドリビン、カンプトテシン、ＣＰＴ−１１、１０−ヒドロキシ−７−エチルカンプトテシン（ＳＮ３８）、ダカルバジン、Ｓ−Ｉカペシタビン、ｆｔｏｒａｆｕｒ、５’デオキシフルオロウリジン、ＵＦＴ、エニルウラシル、デオキシシチジン、５−アザシトシン、５−アザデオキシシトシン、アロプリノール、２−クロロアデノシン、トリメトレキセート、アミノプテリン、メチレン−１０−デアザアミノプテリン（ＭＤＡＭ）、オキサプラチン（ｏｘａｐｌａｔｉｎ）、ピコプラチン、テトラプラチン（ｔｅｔｒａｐｌａｔｉｎ）、サトラプラチン、白金−ＤＡＣＨ、オルマプラチン（ｏｒｍａｐｌａｔｉｎ）、ＣＩ−９７３、ＪＭ−２１６、およびこれらの類似体、エピルビシン、リン酸エトポシド、９−アミノカンプトテシン、１０，１１−メチレンジオキシカンプトテシン、カレニテシン（ｋａｒｅｎｉｔｅｃｉｎ）、９−ニトロカンプトテシン、ＴＡＳ１０３、ビンデシン、Ｌ−フェニルアラニンマスタード、イホスファミドメホスファミド（ｉｆｏｓｐｈａｍｉｄｅｍｅｆｏｓｐｈａｍｉｄｅ）、ペルホスファミド（ｐｅｒｆｏｓｆａｍｉｄｅ）、トロホスファミド（ｔｒｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ）  カルムスチン、セムスチン、エポチロンＡ〜Ｅ、ｔｏｍｕｄｅｘ、６−メルカプトプリン、６−チオグアニン、アムサクリン、リン酸エトポシド、カレニテシン、アシクロビル、バラシクロビル、ガンシクロビル、アマンタジン、リマンタジン、ラミブジン、ジドブジン、ベバシズマブ、トラスツズマブ、リツキシマブ、５−フルオロウラシル、ならびにこれらの組合せが挙げられる。
【０１１５】
潜在的に適切な薬物の非限定的な例としては、例えば、カバジタキセル、ミトキサントロン、およびミトキサントロン塩酸塩を含めた抗がん剤が挙げられる。別の実施形態では、ペイロードは、２０−ｅｐｉ−１、２５ジヒドロキシビタミンＤ３、４−イポメアノール（４−ｉｐｏｍｅａｎｏｌ）、５−エチニルウラシル、９−ジヒドロタキソール、アビラテロン、アシビシン、アクラルビシン、アコダゾール塩酸塩（ａｃｏｄａｚｏｌｅ  ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、アクロニン、アシルフィイルベン（ａｃｙｌｆｉｉｌｖｅｎｅ）、アデシペノール（ａｄｅｃｙｐｅｎｏｌ）、アドゼレシン、アルデスロイキン、全ｔｋアンタゴニスト、アルトレタミン、アンバムスチン（ａｍｂａｍｕｓｔｉｎｅ）、アンボマイシン（ａｍｂｏｍｙｃｉｎ）、酢酸アメタントロン（ａｍｅｔａｎｔｒｏｎｅ  ａｃｅｔａｔｅ）、アミドクス（ａｍｉｄｏｘ）、アミフォスチン、アミノグルテチミド、アミノレブリン酸、アムルビシン、アムサクリン、アナグレリド、アナストロゾール、アンドログラホリド（ａｎｄｒｏｇｒａｐｈｏｌｉｄｅ）、血管新生阻害剤、アンタゴニストＤ、アンタゴニストＧ、アンタレリクス、アントラマイシン、抗背方化形態形成タンパク質１、抗エストロゲン薬、抗新生物薬、アンチセンスオリゴヌクレオチド、グリシン酸アフィディコリン、アポトーシス遺伝子モジュレーター、アポトーシスレギュレーター、アプリン酸、ＡＲＡ−ＣＤＰ−ＤＬ−ＰＴＢＡ、アルギニンデアミナーゼ、アスパラギナーゼ、アスペルリン（ａｓｐｅｒｌｉｎ）、アスラクリン（ａｓｕｌａｃｒｉｎｅ）、アタメスタン、アトリムスチン（ａｔｒｉｍｕｓｔｉｎｅ）、アキシナスタチン１（ａｘｉｎａｓｔａｔｉｎ  １）、アキシナスタチン２、アキシナスタチン３、アザシチジン、アザセトロン、アザトキシン、アザチロシン（ａｚａｔｙｒｏｓｉｎｅ）、アゼテパ、アゾトマイシン（ａｚｏｔｏｍｙｃｉｎ）、バッカチンＩＩＩ誘導体、バラノール、バチマスタット、ベンゾクロリン、ベンゾデパ（ｂｅｎｚｏｄｅｐａ）、ベンゾイルスタウロスポリン（ｂｅｎｚｏｙｌｓｔａｕｒｏｓｐｏｒｉｎｅ）、ベータラクタム誘導体、ベータ−アレチン（ｂｅｔａ−ａｌｅｔｈｉｎｅ）、ベタクラマイシンＢ（ｂｅｔａｃｌａｍｙｃｉｎ  Ｂ）、ベツリン酸、ＢＦＧＦ阻害剤、ビカルタミド、ビサントレン、ビサントレン塩酸塩、ビスアズイジニルスペルミン（ｂｉｓａｚｕｉｄｉｎｙｌｓｐｅｒｍｉｎｅ）、ビスナフィド（ｂｉｓｎａｆｉｄｅ）、ジメシル酸ビスナフィド（ｂｉｓｎａｆｉｄｅ  ｄｉｍｅｓｙｌａｔｅ）、ビストラテンＡ（ｂｉｓｔｒａｔｅｎｅ  Ａ）、ビセレシン、ブレオマイシン、硫酸ブレオマイシン、ＢＲＣ／ＡＢＬアンタゴニスト、ブレフレート（ｂｒｅｆｌａｔｅ）、ブレキナルナトリウム、ブロピリミン、ブドチタン（ｂｕｄｏｔｉｔａｎｅ）、ブスルファン、ブチオニンスルホキシミン、カクチノマイシン（ｃａｃｔｉｎｏｍｙｃｉｎ）、カルシポトリオール、カルホスチンＣ、カルステロン（ｃａｌｕｓｔｅｒｏｎｅ）、カンプトテシン誘導体、カナリア痘ＩＬ−２、カペシタビン、カラセライド（ｃａｒａｃｅｒａｉｄｅ）、カバジタキセル、カルベチマー（ｃａｒｂｅｔｉｍｅｒ）、カルボプラチン、カルボキサミド−アミノ−トリアゾール、カルボキシアミドトリアゾール（ｃａｒｂｏｘｙａｍｉｄｏｔｒｉａｚｏｌｅ）、カレストＭ３（ｃａｒｅｓｔ  Ｍ３）、カルムスチン、ｅａｒｎ  ７００、軟骨由来阻害剤、カルビシン塩酸塩、カルゼレシン（ｃａｒｚｅｌｅｓｉｎ）、カゼインキナーゼ阻害剤、カスタノスペルニン（ｃａｓｔａｎｏｓｐｅｒｒｎｉｎｅ）、セクロピンＢ、セデフィンゴール（ｃｅｄｅｆｉｎｇｏｌ）、セトロレリクス、クロラムブシル、クロリン、クロロキノキサリンスルホンアミド（ｃｈｌｏｒｏｑｕｉｎｏｘａｌｉｎｅ  ｓｕｌｆｏｎａｍｉｄｅ）、シカプロスト（ｃｉｃａｐｒｏｓｔ）、シロレマイシン（ｃｉｒｏｌｅｍｙｃｉｎ）、シスプラチン、ｃｉｓ−ポルフィリン、クラドリビン、クロミフェン類似体、クロトリマゾール、コリスマイシンＡ（ｃｏｌｌｉｓｍｙｃｉｎ  Ａ）、コリスマイシンＢ、コンブレタスタチンＡ４、コンブレタスタチン類似体、コナゲニン（ｃｏｎａｇｅｎｉｎ）、クランベシジン８１６（ｃｒａｍｂｅｓｃｉｄｉｎ  ８１６）、クリスナトール（ｃｒｉｓｎａｔｏｌ）、メシル酸クリスナトール、クリプトフィシン８、クリプトフィシンＡ誘導体、キュラシンＡ（ｃｕｒａｃｉｎ  Ａ）、シクロペンタントラキノン、シクロホスファミド、シクロプラタム（ｃｙｃｌｏｐｌａｔａｍ）、シペマイシン（ｃｙｐｅｍｙｃｉｎ）、シタラビン、シタラビンオクホスフェート（ｃｙｔａｒａｂｉｎｅ  ｏｃｆｏｓｆａｔｅ）、細胞溶解因子、シトスタチン（ｃｙｔｏｓｔａｔｉｎ）、ダカルバジン、ダクリキシマブ（ｄａｃｌｉｘｉｍａｂ）、ダクチノマイシン、ダウノルビシン塩酸塩、デシタビン、デヒドロジデムニンＢ（ｄｅｈｙｄｒｏｄｉｄｅｍｎｉｎ  Ｂ）、デスロレリン、デキシホスフアミド（ｄｅｘｉｆｏｓｆａｍｉｄｅ）、デキソルマプラチン（ｄｅｘｏｒｍａｐｌａｔｉｎ）、デクスラゾキサン、デクスベラパミル、デザグアニン（ｄｅｚａｇｕａｎｉｎｅ）、メシル酸デザグアニン（ｄｅｚａｇｕａｎｉｎｅ  ｍｅｓｙｌａｔｅ）、ジアジクォン（ｄｉａｚｉｑｕｏｎｅ）、ジデムニンＢ、ジドキス（ｄｉｄｏｘ）、ジエチヒオルスペルミン（ｄｉｅｔｈｙｈｉｏｒｓｐｅｒｍｉｎｅ）、ジヒドロ−５−アザシチジン、ジオキサマイシン（ｄｉｏｘａｍｙｃｉｎ）、ジフェニルスピロムスチン（ｄｉｐｈｅｎｙｌ  ｓｐｉｒｏｍｕｓｔｉｎｅ）、ドセタキセル、ドコサノール、ドラセトロン、ドキシフルリジン、ドキソルビシン、ドキソルビシン塩酸塩、ドロロキシフェン（ｄｒｏｌｏｘｉｆｅｎｅ）、クエン酸ドロロキシフェン（ｄｒｏｌｏｘｉｆｅｎｅ  ｃｉｔｒａｔｅ）、プロピオン酸ドロモスタノロン、ドロナビノール、デュアゾマイシン（ｄｕａｚｏｍｙｃｉｎ）、デュオカンニシンＳＡ（ｄｕｏｃａｎｎｙｃｉｎ  Ｓａ）、エブセレン、エコムスチン（ｅｃｏｍｕｓｔｉｎｅ）、エダトレキセート、エデルホシン（ｅｄｅｌｆｏｓｉｎｅ）、エドレコロマブ、エフロミチン（ｅｆｌｏｍｉｔｈｉｎｅ）、エフロミチン塩酸塩、エレメン（ｅｌｅｍｅｎｅ）、エルサルニトルシン（ｅｌｓａｒｎｉｔｒｕｃｉｎ）、エミテフール（ｅｍｉｔｅｆｕｒ）、エンロプラチン（ｅｎｌｏｐｌａｔｉｎ）、エンプロメート（ｅｎｐｒｏｍａｔｅ）、エピプロピジン（ｅｐｉｐｒｏｐｉｄｉｎｅ）、エピルビシン、エピルビシン塩酸塩、エプリステリド、エルブロゾール（ｅｒｂｕｌｏｚｏｌｅ）、赤血球遺伝子治療ベクター系、エソルビシン塩酸塩、エストラムスチン、エストラムスチン類似体、リン酸エストラムチンナトリウム、エストロゲンアゴニスト、エストロゲンアンタゴニスト、エタニダゾール、エトポシド、リン酸エトポシド、エトプリン（ｅｔｏｐｒｉｎｅ）、エキセメスタン、ファドロゾール、ファドロゾール塩酸塩、ファザラビン（ｆａｚａｒａｂｉｎｅ）、フェンレチニド、フィルグラスチム、フィナステリド、フラボピリドール、フレゼラスチン（ｆｌｅｚｅｌａｓｔｉｎｅ）、フロクスウリジン、フルアステロン（ｆｌｕａｓｔｅｒｏｎｅ）、フルダラビン、リン酸フルダラビン、フルオロダウノルニシン塩酸塩（ｆｌｕｏｒｏｄａｕｎｏｒｕｎｉｃｉｎ  ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、フルオロウラシル、フルロシタビン（ｆｌｕｒｏｃｉｔａｂｉｎｅ）、ホルフェニメキス（ｆｏｒｆｅｎｉｍｅｘ）、ホルメスタン、ホスキドン（ｆｏｓｑｕｉｄｏｎｅ）、フォストリエシン、フォストリエシンナトリウム、ホテムスチン、ガドリニウムテキサフィリン、硝酸ガリウム、ガロシタビン（ｇａｌｏｃｉｔａｂｉｎｅ）、ガニレリクス、ゼラチナーゼ阻害剤、ゲムシタビン、ゲムシタビン塩酸塩、グルタチオン阻害剤、ヘプスルファム（ｈｅｐｓｕｌｆａｍ）、ヘレグリン、ヘキサメチレンビスアセトアミド、ヒドロキシ尿素、ヒペリシン、イバンドロン酸、イダルビシン、イダルビシン塩酸塩、イドキシフェン、イドラマントン（ｉｄｒａｍａｎｔｏｎｅ）、イホスファミド、イーノホシン（ｉｈｎｏｆｏｓｉｎｅ）、イロマスタット、イミダゾアクリドン、イミキモド、免疫賦活ペプチド、インスリン様成長因子１受容体阻害剤、インターフェロンアゴニスト、インターフェロンアルファ−２Ａ、インターフェロンアルファ−２Ｂ、インターフェロンアルファ−Ｎｌ、インターフェロンアルファ−Ｎ３、インターフェロンベータ−ＩＡ、インターフェロンガンマ−ＩＢ、インターフェロン、インターロイキン、イオベングアン（ｉｏｂｅｎｇｕａｎｅ）、ヨードドキソルビシン（ｉｏｄｏｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ）、イプロプラトム（ｉｐｒｏｐｌａｔｍ）、イリノテカン、イリノテカン塩酸塩、イロプラクト（ｉｒｏｐｌａｃｔ）、イルソグラジン、イソベンガゾール（ｉｓｏｂｅｎｇａｚｏｌｅ）、イソホモハリコンドリンＢ（ｉｓｏｈｏｍｏｈａｌｉｃｏｎｄｒｉｎ  Ｂ）、イタセトロン、ジャスプラキノリド、カハラリドＦ（ｋａｈａｌａｌｉｄｅ  Ｆ）、ラメラリン−Ｎトリアセテート（ｌａｍｅｌｌａｒｉｎ−Ｎ  ｔｒｉａｃｅｔａｔｅ）、ランレオチド、酢酸ランレオチド、レイナマイシン（ｌｅｉｎａｍｙｃｉｎ）、レノグラスチム、硫酸レンチナン、レプトルスタチン（ｌｅｐｔｏｌｓｔａｔｉｎ）、レトロゾール、白血病阻害因子、白血球アルファインターフェロン、酢酸リュープロリド、リュープロリド／エストロゲン／プロゲステロン、リュープロレリン、レバミゾール、リアロゾール、リアロゾール塩酸塩、線状ポリアミン類似体、親油性二糖ペプチド、親油性白金化合物、リソクリンアミド（ｌｉｓｓｏｃｌｉｎａｍ���ｄｅ）、ロバプラチン、ロンブリシン（ｌｏｍｂｒｉｃｉｎｅ）、ロメトレキソール（ｌｏｍｅｔｒｅｘｏｌ）、ロメトレキソールナトリウム、ロムスチン、ロニダミン、ロソキサントロン（ｌｏｓｏｘａｎｔｒｏｎｅ）、ロソキサントロン塩酸塩、ロバスタチン、ロキソリビン、ルルトテカン（ｌｕｒｔｏｔｅｃａｎ）、ルテチウムテキサフィリンリソフィリン（ｌｕｔｅｔｉｕｍ  ｔｅｘａｐｈｙｒｉｎ  ｌｙｓｏｆｙｌｌｉｎｅ）、溶解性ペプチド、マイタンシン（ｍａｉｔａｎｓｉｎｅ）、マンノスタチンＡ（ｍａｎｎｏｓｔａｔｉｎ  Ａ）、マリマスタット、マソプロコール、マスピン、マトリライシン阻害剤、マトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤、メイタンシン、メクロレタミン塩酸塩、酢酸メゲストロール、酢酸メレンゲストロール、メルファラン、メノガリル、メルバロン、メルカプトプリン、メテレリン（ｍｅｔｅｒｅｌｉｎ）、メチオニナーゼ（ｍｅｔｈｉｏｎｉｎａｓｅ）、メトトレキセート、メトトレキセートナトリウム、メトクロプラミド、メトプリン（ｍｅｔｏｐｒｉｎｅ）、メツレデパ（ｍｅｔｕｒｅｄｅｐａ）、微細藻類タンパク質キナーゼＣ阻害剤、ＭＩＦ阻害剤、ミフェプリストン、ミルテホシン、ミリモスチム、不適正二本鎖ＲＮＡ、ミチンドミド（ｍｉｔｉｎｄｏｍｉｄｅ）、ミトカルシン（ｍｉｔｏｃａｒｃｉｎ）、ミトクロミン（ｍｉｔｏｃｒｏｍｉｎ）、ミトギリン（ｍｉｔｏｇｉｌｌｉｎ）、ミトグアゾン、ミトラクトール、ミトマルシン（ｍｉｔｏｍａｌｃｉｎ）、マイトマイシン、マイトマイシン類似体、ミトナフィド（ｍｉｔｏｎａｆｉｄｅ）、ミトスペル（ｍｉｔｏｓｐｅｒ）、ミトタン、ミトトキシン線維芽細胞成長因子−サポリン、ミトキサントロン、ミトキサントロン塩酸塩、モファロテン（ｍｏｆａｒｏｔｅｎｅ）、モルグラモスチム、モノクローナル抗体、ヒト絨毛性ゴナドトロピン、モノホスホリルリピドａ／マイコバクテリウム細胞壁ＳＫ、モピダモール、多剤耐性遺伝子阻害剤、多重腫瘍抑制因子１に基づく治療、マスタード抗がん剤、ミカペルオキシドＢ（ｍｙｃａｐｅｒｏｘｉｄｅ  Ｂ）、マイコバクテリア細胞壁抽出物、ミコフェノール酸、ミリアポロン（ｍｙｒｉａｐｏｒｏｎｅ）、ｎ−アセチルジナリン、ナファレリン、ナグレスチプ（ｎａｇｒｅｓｔｉｐ）、ナロキソン／ペンタゾシン、ナパビン（ｎａｐａｖｉｎ）、ナフテルピン（ｎａｐｈｔｅｒｐｉｎ）、
ナルトグラスチム、ネダプラチン、ネモルビシン（ｎｅｍｏｒｕｂｉｃｉｎ）、ネリドロン酸（ｎｅｒｉｄｒｏｎｉｃ  ａｃｉｄ）、中性エンドペプチダーゼ、ニルタミド、ニサマイシン（ｎｉｓａｍｙｃｉｎ）、一酸化窒素モジュレーター、窒素酸化物抗酸化剤、ニトルリン（ｎｉｔｒｕｌｌｙｎ）、ノコダゾール、ノガラマイシン、ｎ−置換ベンズアミド、Ｏ６−ベンジルグアニン、オクトレオチド、オキセノン（ｏｋｉｃｅｎｏｎｅ）、オリゴヌクレオチド、オナプリストン、オンダンセトロン、オラシン（ｏｒａｃｉｎ）、経口サイトカイン誘導因子、オルマプラチン、オサテロン、オキサリプラチン、オキサウノマイシン（ｏｘａｕｎｏｍｙｃｉｎ）、オキシスラン（ｏｘｉｓｕｒａｎ）、パクリタキセル、パクリタキセル類似体、パクリタキセル誘導体、パラウアミン（ｐａｌａｕａｍｉｎｅ）、パルミトイルリゾキシン（ｐａｌｍｉｔｏｙｌｒｈｉｚｏｘｉｎ）、パミドロン酸、パナキシトリオール（ｐａｎａｘｙｔｒｉｏｌ）、パノミフェン（ｐａｎｏｍｉｆｅｎｅ）、パラバクチン（ｐａｒａｂａｃｔｉｎ）、パゼリプチン（ｐａｚｅｌｌｉｐｔｉｎｅ）、ペグアスパラガーゼ、ペルデシン（ｐｅｌｄｅｓｉｎｅ）、ペリオマイシン（ｐｅｌｉｏｍｙｃｉｎ）、ペンタムスチン（ｐｅｎｔａｍｕｓｔｉｎｅ）、ペントサンポリ硫酸ナトリウム、ペントスタチン、ペントロゾール（ｐｅｎｔｒｏｚｏｌｅ）、硫酸ペプロマイシン、ペルフルブロン、ペルホスファミド（ｐｅｒｆｏｓｆａｍｉｄｅ）、ペリリルアルコール、フェナジノマイシン（ｐｈｅｎａｚｉｎｏｍｙｃｉｎ）、フェニルアセテート、ホスファターゼ阻害剤、ｐｉｃｉｂａｎｉｌ、ピロカルピン塩酸塩、ピポブロマン、ピポスルファン（ｐｉｐｏｓｕｌｆａｎ）、ピラルビシン、ピリトレキシム、ピロキサントロン塩酸塩（ｐｉｒｏｘａｎｔｒｏｎｅ  ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、プルアセチンＡ（ｐｌａｃｅｔｉｎ  Ａ）、プルアセチンＢ、プラスミノーゲン活性化因子阻害因子、白金錯体、白金化合物、白金−トリアミン錯体、プリカマイシン、プロメスタン（ｐｌｏｍｅｓｔａｎｅ）、ポルフィマーナトリウム、ポルフィロマイシン、プレドニムスチン、プロカルバジン塩酸塩、プロピルビス−アクリドン、プロスタグランジンＪ２、前立腺癌抗アンドロゲン薬、プロテアソーム阻害剤、タンパク質Ａに基づく免疫モジュレーター、タンパク質キナーゼＣ阻害剤、タンパク質チロシンホスファターゼ阻害剤、プリンヌクレオシドホスホリラーゼ阻害剤、ピューロマイシン、ピューロマイシン塩酸塩、プルプリン、ピラゾルリン（ｐｙｒａｚｏｒｕｒｉｎ）、ピラゾロアクリジン（ｐｙｒａｚｏｌｏａｃｒｉｄｉｎｅ）、ピリドキシル化ヘモグロビンポリオキシエチレンコンジュゲート、ＲＡＦアンタゴニスト、ラルチトレキセド、ラモセトロン、ＲＡＳファルネシルタンパク質トランスフェラーゼ阻害剤、ＲＡＳ阻害剤、ＲＡＳ−ＧＡＰ阻害剤、脱メチル化レテリプチン（ｒｅｔｅｌｌｉｐｔｉｎｅ  ｄｅｍｅｔｈｙｌａｔｅｄ）、エチドロン酸レニウムＲＥ１８６、リゾキシン（ｒｈｉｚｏｘｉｎ）、リボプリン（ｒｉｂｏｐｒｉｎｅ）、リボザイム、ＲＨレチナルニド（ＲＨ  ｒｅｔｉｎａｒｎｉｄｅ）、ＲＮＡｉ、ログレチミド（ｒｏ��ｌｅｔｉｍｉｄｅ）、ロヒツキン（ｒｏｈｉｔｕｋｉｎｅ）、ロムルチド、ロキニメックス、ルビギノンＢｌ（ｒｕｂｉｇｉｎｏｎｅ  Ｂｌ）、ルボキシル（ｒｕｂｏｘｙｌ）、サフィンゴール、サフィンゴール塩酸塩、サイントピン（ｓａｉｎｔｏｐｉｎ）、サルクヌ（ｓａｒｃｎｕ）、サルコフィトールＡ（ｓａｒｃｏｐｈｙｔｏｌ  Ａ）、サルグラモスチム、ＳＤＩ１模倣物、セムスチン、老化由来阻害因子１（ｓｅｎｅｓｃｅｎｃｅ  ｄｅｒｉｖｅｄ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  １）、センスオリゴヌクレオチド、シグナル伝達阻害剤、シグナル伝達モジュレーター、シムトラゼン（ｓｉｍｔｒａｚｅｎｅ）、単鎖抗原結合タンパク質、シゾフィラン、ソブゾキサン、ボロカプト酸ナトリウム（ｓｏｄｉｕｍ  ｂｏｒｏｃａｐｔａｔｅ）、フェニル酢酸ナトリウム、ソルベロール（ｓｏｌｖｅｒｏｌ）、ソマトメジン結合タンパク質、ソネルミン（ｓｏｎｅｒｍｉｎ）、スパルホサフナトリウム（ｓｐａｒｆｏｓａｆｅ  ｓｏｄｉｕｍ）、スパルホス酸（ｓｐａｒｆｏｓｉｃ  ａｃｉｄ）、スパルソマイシン、スピカマイシンＤ（ｓｐｉｃａｍｙｃｉｎ  Ｄ）、スピロゲルマニウム塩酸塩、スピロムスチン（ｓｐｉｒｏｍｕｓｔｉｎｅ）、スピロプラチン（ｓｐｉｒｏｐｌａｔｉｎ）、スプレノペンチン（ｓｐｌｅｎｏｐｅｎｔｉｎ）、スポンギスタチン１（ｓｐｏｎｇｉｓｔａｔｉｎ  １）、スクアラミン、幹細胞阻害剤、幹細胞分裂阻害剤、スチピアミド（ｓｔｉｐｉａｍｉｄｅ）、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ストロメライシン阻害剤、スルフィノシン（ｓｕｌｆｉｎｏｓｉｎｅ）、スロフェヌル（ｓｕｌｏｆｅｎｕｒ）、超活性血管作動性腸ペプチドアンタゴニスト、スラジスタ（ｓｕｒａｄｉｓｔａ）、スラミン、スウェインソニン、合成グリコサミノグリカン、タリソマイシン（ｔａｌｉｓｏｍｙｃｉｎ）、タリムスチン（ｔａｌｌｉｍｕｓｔｉｎｅ）、タモキシフェンメチオジド（ｔａｍｏｘｉｆｅｎ  ｍｅｔｈｉｏｄｉｄｅ）、タウロムスチン（ｔａｕｒｏｍｕｓｔｉｎｅ）、タザロテン、テコガランナトリウム（ｔｅｃｏｇａｌａｎ  ｓｏｄｉｕｍ）、テガフール、テルラピリリウム（ｔｅｌｌｕｒａｐｙｒｙｌｉｕｍ）、テロメラーゼ阻害剤、テロキサントロン塩酸塩（ｔｅｌｏｘａｎｔｒｏｎｅ  ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、テモポルフィン、テモゾロミド、テニポシド、テロキシロン（ｔｅｒｏｘｉｒｏｎｅ）、テストラクトン、テトラクロロデカオキシド（ｔｅｔｒａｃｈｌｏｒｏｄｅｃａｏｘｉｄｅ）、テトラゾミン（ｔｅｔｒａｚｏｍｉｎｅ）、タリブラスチン（ｔｈａｌｉｂｌａｓｔｉｎｅ）、サリドマイド、チアミプリン（ｔｈｉａｍｉｐｒｉｎｅ）、チオコラリン（ｔｈｉｏｃｏｒａｌｉｎｅ）、チオグアニン、チオテパ、トロンボポエチン、トロンボポエチン模倣物、サイマルファシン、サイモポエチン受容体アゴニスト、チモトリナン（ｔｈｙｍｏｔｒｉｎａｎ）、甲状腺刺激ホルモン、チアゾフリン、スズエチルエチオプルプリン（ｔｉｎ  ｅｔｈｙｌ  ｅｔｉｏｐｕｒｐｕｒｉｎ）、チラパザミン、チタノセンジクロリド（ｔｉｔａｎｏｃｅｎｅ  ｄｉｃｈｌｏｒｉｄｅ）、トポテカン塩酸塩、トプセンチン（ｔｏｐｓｅｎｔｉｎ）、トレミフェン、クエン酸トレミフェン、全能性幹細胞因子、翻訳阻害剤、酢酸トレストロン（ｔｒｅｓｔｏｌｏｎｅ  ａｃｅｔａｔｅ）、トレチノイン、トリアセチルウリジン、トリシリビン（ｔｒｉｃｉｒｉｂｉｎｅ）、リン酸トリシリビン（ｔｒｉｃｉｒｉｂｉｎｅ  ｐｈｏｓｐｈａｔｅ）、トリメトレキセート、グルクロン酸トリメトレキセート（ｔｒｉｍｅｔｒｅｘａｔｅ  ｇｌｕｃｕｒｏｎａｔｅ）、トリプトレリン、トロピセトロン、ツブロゾール塩酸塩（ｔｕｂｕｌｏｚｏｌｅ  ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、ツロステリド（ｔｕｒｏｓｔｅｒｉｄｅ）、チロシンキナーゼ阻害剤、チルホスチン、ＵＢＣ阻害剤、ウベニメクス、ウラシルマスタード、ウレデパ（ｕｒｅｄｅｐａ）、尿生殖洞由来成長阻害因子、ウロキナーゼ受容体アンタゴニスト、バプレオチド（ｖａｐｒｅｏｔｉｄｅ）、バリオリンＢ（ｖａｒｉｏｌｉｎ  Ｂ）、ベラレソール（ｖｅｌａｒｅｓｏｌ）、ベラミン（ｖｅｒａｍｉｎｅ）、ベルジン（ｖｅｒｄｉｎ）、ベルテポルフィン、硫酸ビンブラスチン、硫酸ビンクリスチン、ビンデシン、硫酸ビンデシン、硫酸ビネピジン（ｖｉｎｅｐｉｄｉｎｅ  ｓｕｌｆａｔｅ）、硫酸ビングリシネート（ｖｉｎｇｌｙｃｉｎａｔｅ  ｓｕｌｆａｔｅ）、硫酸ビンロイロシン（ｖｉｎｌｅｕｒｏｓｉｎｅ  ｓｕｌｆａｔｅ）、ビノレルビンもしくは酒石酸ビノレルビン、硫酸ビンロシジン（ｖｉｎｒｏｓｉｄｉｎｅ  ｓｕｌｆａｔｅ）、ビンキサルチン（ｖｉｎｘａｌｔｉｎｅ）、硫酸ビンゾリジン（ｖｉｎｚｏｌｉｄｉｎｅ  ｓｕｌｆａｔｅ）、ビタキシン（ｖｉｔａｘｉｎ）、ボロゾール、ザノテロン（ｚａｎｏｔｅｒｏｎｅ）、ゼニプラチン（ｚｅｎｉｐｌａｔｉｎ）、ジラスコルブ（ｚｉｌａｓｃｏｒｂ）、ジノスタチン、ジノスタチンスチマラマー、またはゾルビシン塩酸塩などの抗がん薬でよい。
【０１１６】
潜在的に適切な薬物の非限定的な例として、例えば、抗炎症性ステロイドおよび非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）を始めとする抗炎症薬も挙げられる。抗炎症薬の非限定的な例としては、メトトレキセート、シクロスポリン、アルクロメタゾン、アザチオプリン、ジプロピオン酸ベクロメタゾン、ジプロピオン酸ベタメタゾン、ブデソニド、セレコキシブ、クロロプレドニゾン（ｃｈｌｏｒｏｐｒｅｄｎｉｓｏｎｅ）、シクレソニド、コルチゾール、コルチスポリン（ｃｏｒｔｉｓｐｏｒｉｎ）、コルチバゾール、デフラザコート、デキサメタゾン、フルドロキシコルチド、フルニソリド、フルオシノニド、フルオコルトロン、フルオロメトロン、フルチカゾン、フロ酸フルチカゾン、プロピオン酸フルチカゾン、糖質コルチコイド、ヒドロコルタメート、酢酸メゲストロール、メサラジン、メプレドニゾン、６−メルカプトプリン、メチルプレドニゾロン、フロ酸モメタゾン、パラメタゾン、プレドニゾロン、プレドニゾン、プレドニリデン、プレグナジエン、プレグナトリエン、プレグネン、プロクトセディル、リメキソロン、テトラヒドロコルチコステロン、トブラマイシン／デキサメタゾン、トリアムシノロン、およびウロベタゾールが挙げられる。
【実施例】
【０１１７】
本発明について、ここまでは広く述べており、以下の実施例を参照することで、これについてより容易に理解されるところとなるが、実施例は、本発明のある特定の態様および実施形態を説明する目的で含めているにすぎず、本発明を一切限定するものでない。
【０１１８】
（実施例１）
例示的なナノ粒子調製−エマルジョンプロセス
企図されるナノ粒子の例示的な調製プロセスを、図１、図２Ａ、および図２Ｂに示す。
【０１１９】
ドセタキセル（ＤＴＸＬ）とポリマー（ホモポリマー、コポリマー、およびリガンドを有するコポリマー）の混合物で構成された有機層を形成する。この有機相を、界面活性剤（０．２５％のコール酸ナトリウム）およびいくらかの溶解した溶媒（４％の酢酸エチル、２％のベンジルアルコール）から構成される水相と、概ね１：２の比（油相：水相）で混合する。高い薬物添加量を実現するために、有機相中に約３０％の固体を使用する。
【０１２０】
２つの相を、単純に混合しながら、またはローターステーターホモジナイザーを使用して合わせることにより、一次粗エマルジョンを形成する。ローター／ステーターでは、均質な乳状の溶液が得られ、撹拌棒を用いると、目に見えてより大きい粗エマルジョンが生成される。撹拌棒による方法では、供給槽の側面にかなりの油相液滴が接着する結果となることが観察され、粗エマルジョンサイズは、質にとって不可欠なプロセスパラメータではないものの、収率減少または相分離を防ぐために、適切に微細にすべきであることが示唆される。したがって、より大規模なスケールでは高速ミキサーが適する場合もあるとはいえ、ローターステーターを、粗エマルジョン形成の標準法として使用する。
【０１２１】
次いで、高圧ホモジナイザーを使用して、一次エマルジョンから微細エマルジョンを形成する。粗エマルジョンのサイズは、ホモジナイザーに連続的に通過させた後（１０３）の粒径に有意な影響を及ぼさない。
【０１２２】
２〜３回通過させた後、粒径は、有意に縮小せず、連続的に通すことで、粒径の増大が引き起こされることさえある。有機相を、標準水相で５：１のＯ：Ｗに乳化し、何回もの慎重に通過を、各通過後に少量のエマルジョンをクエンチしながら、実施する。指摘するスケールは、製剤の総固体を表す。
【０１２３】
スケールが粒径に及ぼす影響は、スケール依存性を示す。２〜１０ｇのバッチサイズ範囲では、より大きいバッチの方が、より小さい粒子を生じる傾向があるようである。このスケール依存性は、１０ｇより大きいスケールのバッチを検討するとき、なくなることが示されている。油相中に使用される固体の量は、約３０％である。
【０１２４】
表Ａに、乳化プロセスパラメータを要約する。
【０１２５】
【表１】
2019512516.tif 000006
【０１２６】
次いで、微細エマルジョンを、所与の温度の脱イオン水に、混合しながら加えることによりクエンチする。クエンチ単位の操作で、冷えた水性クエンチに、撹拌しながらエマルジョンを加える。この操作は、油相溶媒のかなりの部分を抽出して、下流の濾過に向けてナノ粒子を有効に硬化させる役割を担う。クエンチを冷やすことで、薬物のカプセル化は有意に改善される。クエンチ：エマルジョン比は、概ね５：１である。
【０１２７】
クエンチにＴｗｅｅｎ８０の３５％（ｗｔ％）溶液を加えて、Ｔｗｅｅｎ８０を全体で概ね４％とする。エマルジョンがクエンチされた後、薬物可溶化剤として働くＴｗｅｅｎ−８０の溶液を加えて、カプセル化されていない薬物が濾過の際に有効に除去されるのを可能にする。表Ｂに、クエンチプロセスパラメータのそれぞれを示す。
【０１２８】
【表２】
2019512516.tif 000007
【０１２９】
温度は、粒子のＴｇより低く保つのに十分に冷えたままでなければならず、懸濁液は十分に希薄（溶媒の濃度は十分に低く）なければならない。Ｑ：Ｅ比が十分に高くない場合、より高い濃度の溶媒によって、粒子が可塑化し、薬物漏出の余地を残す。逆に、より低い温度では、（約３：１までの）低いＱ：Ｅ比で高い薬物カプセル化が可能になり、プロセスをより効率よく進めることが可能になる。
【０１３０】
次いで、ナノ粒子をタンジェンシャルフロー濾過プロセスによって単離して、ナノ粒子懸濁液を濃縮し、溶媒、遊離薬物、および薬物可溶化剤を、クエンチ溶液から水へと緩衝液交換する。分子量カットオフ（ＭＷＣＯ）が３００である再生セルロース膜を使用する。
【０１３１】
定容積ダイアフィルトレーション（ＤＦ）を行って、クエンチ溶媒、遊離薬物、およびＴｗｅｅｎ−８０を除去する。定容積ＤＦを行うために、濾液が除去されるのと同じ速度で、濃縮水槽に緩衝液を加える。ＴＦＦ操作のためのプロセスパラメータを、表Ｃに要約する。クロスフロー速度とは、供給路を通って膜の向こう側へ向かう溶液流の速度を指す。この流れは、膜を塞ぎ、濾液の流れを制限しかねない分子を押し流す力となる。膜貫通圧力は、透過性分子を膜に押し通す力である。
【０１３２】
【表３】
2019512516.tif 000008
【０１３３】
次いで、濾過されたナノ粒子スラリーは、ワークアップの間、温度上昇への熱サイクルにかけられる。少量（通常は５〜１０％）のカプセル化された薬物が、最初に２５℃にさらされた後、非常に急速にナノ粒子から放出される。この現象のために、ワークアップの間終始低温に保たれるバッチは、送達、または非凍結貯蔵の任意の部分の間に形成される遊離薬物もしくは薬物結晶に影響されやすい。ワークアップの間ナノ粒子スラリーを温度上昇にさらすことにより、この「緩くカプセル化された」薬物は、除去され、薬物添加量のわずかな減少を犠牲にして、製品安定性を向上させることができる。表Ｄに、２５℃処理の２つの例を要約する。他の実験において、製品は、約２〜４ダイア容積以降、カプセル化された薬物の大半を失うことなく２５℃にさらすのに十分に安定することが示されている。２５℃処理の前の低温処理の量として、５ダイア容積を使用する。
【０１３４】
【表４】
2019512516.tif 000009
【０１３５】
濾過プロセスの後、ナノ粒子懸濁液を滅菌グレードフィルター（０．２μｍ絶対）に通す。プロセスにとって妥当な濾過面積／時間が使用されるように、プレフィルターを使用して、滅菌グレードフィルターを保護する。値は、表Ｅに要約するとおりである。
【０１３６】
【表５】
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【０１３７】
プレフィルターは、Ｐａｌｌ  ＳＵＰＲＡｃａｐまたはＳｔａｘフィルターカートリッジの中にＳｅｉｔｚ  ＰＤＤ１デプスフィルターメディアを備える。デプスフィルターについては、ナノ粒子１ｋｇあたりの０．２ｍ２の濾過表面積、滅菌グレードフィルターについては、ナノ粒子１ｋｇあたり１．３ｍ２の濾過表面積が使用され得る。
【０１３８】
（実施例２）
マンニトールおよびヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（ＨＰｂＣＤ）を用いた凍結乾燥組成物
すべての製剤についてのＨＰｂＣＤ濃度を一定に７．５％に保ち、マンニトールを、（表１に示す）２．５％〜１０％の間の濃度で試験した。ケーク外観および復元時間を表２に示す。ＤＬＳ結果を図３に示す。１ミクロンより大きいナノ粒子（ＮＰ）の数についての結果を図４に示す。１０ミクロンおよび２５ミクロンより大きい粒子の数についての結果を図５に示す。出発材料（すなわち、ＮＰ懸濁液）は、糖アルコールを含まず、凍結させずに冷蔵した、ナノ粒子の脱イオン水懸濁液とした（ＮＰ懸濁液の濃度は、約５０ｍｇ／ｍＬである）。７．５％のマンニトールが好ましい濃度であった。
【０１３９】
【表６】
2019512516.tif 000011
【０１４０】
【表７】
2019512516.tif 000012
【０１４１】
ＨＰｂＣＤの最適な濃度を評価するための実験を行った。すべての製剤についてのマンニトール濃度を一定に７．５％に保ち、ＨＰｂＣＤを、（表３に示す）０％〜１０％の濃度で試験した。ケーク外観および復元時間を表４に示す。ＤＬＳ結果を図６に示す。１ミクロンより大きい粒子の数についての結果を図７に示す。１０ミクロンおよび２５ミクロンより大きい粒子の数についての結果を図８に示す。ｉｎ  ｖｉｔｒｏ放出（ＩＶＲ）データを図９に示す。７．５％のＨＰｂＣＤが最良の濃度である。
【０１４２】
【表８】
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【０１４３】
【表９】
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【０１４４】
凍結乾燥サイクル／レシピ開発の指針とするために、製剤に関する熱による特徴付け実験を行った。凍結した状態にある賦形剤の物理的状態（すなわち、非晶質、結晶質、混合型）および物理的状態と関連する臨界温度（すなわち、ガラス転移、共晶融解、崩壊温度）を、製剤に対して示差走査熱量測定（ＤＳＣ）およびフリーズドライ顕微鏡法（ＦＤＭ）を実施することにより評価した。
【０１４５】
示差走査熱量測定（ＤＳＣ）。ＴＡ機器Ｑ２０００ＤＳＣを使用して、製剤（７．５％のマンニトール＋７．５％のＨＰｂＣＤ）に対してＤＳＣを行った。液体試料（２０μＬ）をＴｚｅｒｏパンに等分した。Ｔｚｅｒｏ密閉蓋をパンに被せ、次いでそれをクリンプした。クリンプした後、パンをＤＳＣにかけた。アニーリングしないもの（通常の温度傾斜）とアニーリングするものの２種の測定を試料に対して行った。
【０１４６】
アニーリングしない場合：アニーリングしない測定については、試料を−４５℃に凍結させ、次いで、温度を１０℃／分で２５℃へと上昇させた。ＤＳＣサーモグラムを図１０に示す。試料がアニーリングされなかったため、製剤中のマンニトールは、非晶質のままとなり、−３１℃で（わずかな吸熱として認められる）ガラス転移を示し、次いで、−２０℃で、発熱を示しながら結晶し始め、次いで、共晶融解を示した（−２℃での開始、大きい吸熱として認められる）。
【０１４７】
アニーリングする場合：試料をまず−４５℃で凍結させた。次いで、試料を−１２℃に温め、１０分間保持した。試料を再び−４５℃に戻し、次いで、温度を１０℃／分で２５℃へと上昇させた。この測定についてのＤＳＣサーモグラムを図１１に示す。アニーリングステップがあるために、マンニトールが完全に結晶し、したがって、−３１℃でガラス転移を示さなかった。−１７℃のプロットにおいて、ＨＰｂＣＤに属する１つだけのガラス転移が認められた。マンニトールの共晶融解を表す、２番目のより大きな吸熱（−３℃で開始）が認められた。したがって、マンニトールの固体状態を非晶質から結晶質に変えることにより、マンニトールの臨界温度が変化し、したがって、マンニトールはより高い温度までより安定する。
【０１４８】
フリーズドライ顕微鏡法（ＦＤＭ）：ＦＤＭを実施して、凍結乾燥（Ｌｙｏ）ケークの崩壊温度を求める。ＦＤＭは、基本的には、クライオステージ（凍結および加熱用）、真空ポンプ（乾燥用）、およびカメラを備えた、凍結乾燥サイクルの種々の段階を進んでいく試料を視覚的に見ることができる顕微鏡である。カメラを使用して、サイクル全体にわたる試料の異なる相への移行として、写真を撮影することができる。ＢＴＬ  Ｌｙｏｓｔａｔ４を使用して、製剤（７．５％のマンニトール＋７．５％のＨＰｂＣＤ）に対してＦＤＭを行った。試料（５μＬ）を顕微鏡のクライオステージに載せた。試料をまず−４５℃に凍結させ、５分間保持した。次いで、試料を（アニーリングのために）−１２℃に温め、そこで１０分間保持し、次いで再び−４５℃に冷却した。次いで、真空ポンプをオンにして、クライオステージの内部に減圧を導入した。次いで、ステージの温度を、２５℃に達するまで、１℃／分でゆっくりと上昇させた。系内部に減圧が存在する状態では、試料が乾燥し始めるであろう。ある特定の温度で、ケークの構造が損なわれ始めるが、これは、崩壊温度として公知である。サイクルを通して、試料が異なる段階を進んでいく際、カメラによって継続的に写真が撮影される。写真を観察することにより、試料についての崩壊温度を求めることができる。本製剤（７．５％のマンニトール＋７．５％のＨＰｂＣＤ）についての崩壊の開始は、−１０℃においてであり、完全な崩壊は、約−７℃においてである。
【０１４９】
凍結乾燥：Ｌｙｏサイクルの合計時間は、約２．５日（６０時間）である。一例を図１２に示す。凍結乾燥の種々の段階は、棚への積載、凍結、一次乾燥、二次乾燥、および貯蔵であり、これらについて、以下で説明する。
【０１５０】
１）棚への積載／凍結：一般に、マンニトールに施される熱処理に応じて、マンニトールは、非晶質の状態または結晶質の状態のいずれかになり得る。この場合では、マンニトールを結晶質の状態にしておくことで、凍結乾燥物からガラス転移事象が取り去られ、また乾燥および水分除去のためのより多くの開水路が創出された。マンニトールが完全に結晶するのを確実にするために、凍結段階の際にアニーリングプロセスを実施した。アニーリングする間、製剤（すなわち、ナノ粒子懸濁液）が所望の温度（熱による特徴付け研究から一般に求められる）に達するまで、Ｌｙｏ棚を温めた。棚を２〜３時間その温度に保つ。次いで、棚を最初の凍結温度に戻す。この実施例に記載するＬｙｏサイクルでは、ナノ粒子懸濁液を含有するバイアルを、４℃の棚に載せた。次いで、棚温度を−４５℃に下げることにより、バイアルを凍結させ、その温度で２時間保った。アニーリングする目的で、棚を−１２℃に温め、その温度で３時間保った。引き続いて、バイアルを最初の凍結温度（−４５℃）に戻し、その温度で２時間保った。
【０１５１】
２）一次乾燥：凍結ステップが完了したなら、サイクルは、真空ポンプが関与する一次乾燥へと移り、氷昇華が始まる。Ｌｙｏサイクルのこの相は、間隙空間を取り囲む本質的に純粋な氷が実質的に全部除去されてしまうまで続く。熱による特徴付け研究（ＤＳＣおよびＦＤＭ）ならびに他の実験を行った後、一次乾燥のための棚温度は、０℃であり、減圧レベルは、２５０ミリトルである。これらのパラメータによって、一次乾燥の初期昇華相の間の製品温度は、フリーズドライ顕微鏡法を使用して確立された崩壊温度を十分に下回った約−１５℃となった。一次乾燥が完了すると、製品温度の上昇が認められており、ピラニ真空計は、キャパシタンスマノメーターに合致する。本製剤についての一次乾燥の長さは、約１．５日であった。
【０１５２】
３）二次乾燥および貯蔵：サイクルがこの段階に到達する頃までに、水の大部分（７０〜９０％）が除去されている。製剤の熱特性がわかった後、二次乾燥温度は、３５℃になるように選択した（約８時間）。二次乾燥が完了したなら、バイアルは、凍結乾燥器から手作業で取り出されるまで、減圧下、２０℃で貯蔵した。二次乾燥および貯蔵のための減圧レベルは、２５０ミリトルに保った。
【０１５３】
（実施例３）
糖（スクロース）およびヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（ＨＰｂＣＤ）を用いた凍結乾燥プロセスとマンニトールおよびＨＰｂＣＤを用いた凍結乾燥プロセスの比較
凍結乾燥プロセスにおいて、マンニトールを糖（スクロース）と比較するために、５重量％のスクロースおよび７．５重量％のＨＰｂＣＤが使用された製剤（出発ナノ粒子懸濁液の濃度は、約５０ｍｇ／ＭＬであった）。フリーズドライ顕微鏡法によって、一次フリーズドライの間に、この製剤について−２３℃での崩壊の開始が示されたため、棚温度は、崩壊を回避するために−２７℃に保った。温度傾斜後、この製剤についての一次乾燥の長さは、約９〜１２日間であり、二次乾燥の長さは、約８時間であった。別の凍結乾燥プロセス（出発ナノ粒子懸濁液の濃縮は、約５０ｍｇ／ＭＬであり、スクロースが５重量％、ＨＰｂＣＤが７．５重量％であった）も実施した。
【０１５４】
２つのプロセス（一方は、７  ５重量％のスクロースおよび５重量％のＨＰｂＣＤ、他方は、７．５％のマンニトール＋７．５％のＨＰｂＣＤ、アニーリングした場合）の比較の概略を、以下の表５に示す。
【０１５５】
【表１０】
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【０１５６】
均等物
当業者は、単に通例の実験法を使用して、本明細書に記載されている本発明の特定の実施形態に対する多くの均等物を認識するか、確認することができる。このような均等物は、下記の特許請求の範囲によって包含されるものとする。
【０１５７】
参照による組込み
本明細書において引用した全ての特許、公開された特許出願、ウェブサイト、および他の参照文献の全内容は、参照によりその全体が明確に本明細書において組み込まれている。
【図１】
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【図２−１】
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【図２−２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【国際調査報告】
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