(57)【要約】本発明は、デンタルケア、例えば、齲蝕病変などの歯の病変の予防および／もしくは処置、歯の表面の再石灰化、滑らかさもしくは輝きの増加、あるいは歯の表面の硬度の増加における使用のため、特定のｐＨにおいて自己集合を起こすことができる自己集合ペプチド（ＳＡＰ）を含む新規のデンタルケア製品を提供する。本デンタルケア製品は、例えば、超音波歯ブラシなどの音波歯ブラシを用いた歯のブラッシング、および／または口腔洗浄器の使用を含む、多工程を含む単純なプロトコルに従って適用されてもよく、それにより、活動性齲蝕、すなわち、以前にうまく処置されていない齲蝕の診断とは無関係に対象における複数の歯の非標的処置を可能にする。また、本発明は、前記方法並びにそれに適したキットおよび装置に関する。
2019522637.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
歯の病変を処置もしくは予防するおよび／または歯の表面を再石灰化する方法における使用のためのデンタルケア製品であって、前記デンタルケア製品は、自己集合ペプチドを含み、前記自己集合ペプチドは、工程（Ｖ）における適用後に少なくとも１分間、単量体型を維持し、７．５未満のｐＨにおいて自己集合を起こすことができ、前記方法は、
（ｉ）歯のブラッシング、歯のフロスによる掃除、口腔洗浄の使用、および塩および界面活性剤の溶液を用いたすすぎを含む群から選択される方法によって複数の歯から歯のバイオフィルムを除去すること；
（ｉｉ）歯のブラッシング、歯のフロスによる掃除、口腔洗浄の使用、および塩および界面活性剤の溶液を用いたすすぎを含む群から選択される方法によって、複数の歯から歯の薄膜を除去すること；
（ｉｉｉ）所望により、歯のブラッシング、酸性溶液を用いたすすぎまたは塩および界面活性剤の溶液を用いたすすぎ、所望により口腔洗浄の使用を含む群から選択される方法によって、複数の歯から無機沈着物を除去すること；
（ｉｖ）所望により、工程（ｖ）の前の７以上のｐＨを有する溶液を用いた歯のすすぎ；および
（ｖ）デンタルケア製品を複数の歯に適用すること、ここで、好ましくは、前記デンタルケア製品は、口腔洗浄器を使用して適用される；
を含み、工程（ｉ）、（ｉｉ）および、所望により（ｉｉｉ）は、任意の順序でまたは同時に実施されてもよく、工程（ｖ）は他の工程の後に実施される、デンタルケア製品。
【請求項２】
工程（ｉ）、（ｉｉ）および（ｉｉｉ）は、音波歯ブラシを用いた歯のブラッシングにより行われる、請求項１に記載の使用のためのデンタルケア製品。
【請求項３】
工程（ｉ）、（ｉｉ）および（ｉｉｉ）は、超音波歯ブラシを用いた歯のブラッシングにより行われる、請求項１または２のいずれか１項に記載の使用のためのデンタルケア製品。
【請求項４】
工程（ｉ）、（ｉｉ）および（ｖ）、および、所望により（ｉｉｉ）および／または（ｉｖ）は、口腔洗浄を用いて行われる、請求項１〜３のいずれか１項に記載の使用のためのデンタルケア製品。
【請求項５】
前記方法は、歯のブラッシング、それに続いて口腔洗浄の使用を含み、前記口腔洗浄は、少なくとも工程（ｖ）のために使用され、好ましくは、前記口腔洗浄は、工程（ｉ）、（ｉｉ）、および所望により、（ｉｉｉ）および／または（ｉｖ）のためにも使用される、先行する請求項のいずれか１項に記載の使用のためのデンタルケア製品。
【請求項６】
工程（ｉ）、（ｉｉ）および、所望により、（ｉｉｉ）における口腔洗浄の使用は、水、塩および界面活性剤を含む溶液を用いた口腔洗浄を含む、先行する請求項のいずれか１項に記載の使用のためのデンタルケア製品。
【請求項７】
齲蝕、好ましくは活動性齲蝕の事前の診断と無関係な使用のためである、先行する請求項のいずれか１項に記載の使用のためのデンタルケア製品。
【請求項８】
家での適用に適し、事前のエッチングまたはＮａＯＣｌ処置無く使用される、先行する請求項のいずれか１項に記載の使用のためのデンタルケア製品。
【請求項９】
歯の病変、好ましくは、齲蝕病変の処置における使用のための、先行する請求項のいずれか１項に記載の使用のためのデンタルケア製品。
【請求項１０】
歯の表面の再石灰化における使用のための、先行する請求項のいずれか１項に記載の使用のためのデンタルケア製品。
【請求項１１】
前記デンタルケア製品のｐＨは、７．５〜９．０、好ましくは、７．８〜８．５、より好ましくは、８．０〜８．２である、先行する請求項のいずれか１項に記載の使用のためのデンタルケア製品。
【請求項１２】
前記溶液のｐＨは、前記ペプチドが自己集合を起こし始めるｐＨよりも０．５ｐＨ単位を超えて高い、先行する請求項のいずれか１項に記載の使用のためのデンタルケア製品。
【請求項１３】
自己集合ペプチドの濃度は、１〜５００００ｍｇ／ｋｇである、先行する請求項のいずれか１項に記載の使用のためのデンタルケア製品。
【請求項１４】
前記自己集合ペプチドは、配列番号３の配列を含み、前記ペプチドは、好ましくは、配列番号４または５のいずれか１つの配列を含む、先行する請求項のいずれか１項に記載の使用のためのデンタルケア製品。
【請求項１５】
前記自己集合ペプチドは、配列番号１または２の配列の１つと少なくとも８０％の配列同一性を有する配列を含み、前記ペプチドは、好ましくは配列番号１の配列を含む、先行する請求項のいずれか１項に記載の使用のためのデンタルケア製品。
【請求項１６】
少なくとも６ヶ月に１回、好ましくは、少なくとも２ヶ月に１回または少なくとも１ヶ月に１回適用される、先行する請求項のいずれか１項に記載の使用のためのデンタルケア製品。
【請求項１７】
自己集合ペプチドを含むデンタルケア製品を複数の歯に適用することを含む、歯を処置するための非治療的な方法であり、前記自己集合ペプチドは、工程（ｖ）における適用後に少なくとも１分間、単量体状態を維持し、前記自己集合ペプチドは、７．５未満のｐＨにおいて自己集合を起こすことができ、前記方法は、
（ｉ）好ましくは、超音波歯ブラシ等の音波歯ブラシを用いた、歯のブラッシング、歯のフロスによる掃除、口腔洗浄の使用、および塩および界面活性剤の溶液を用いたすすぎを含む群から選択される方法によって複数の歯から歯のバイオフィルムを除去すること；
（ｉｉ）好ましくは、超音波歯ブラシ等の音波歯ブラシを用いた、歯のブラッシング、歯のフロスによる掃除、口腔洗浄の使用、および塩および界面活性剤の溶液を用いたすすぎを含む群から選択される方法によって、複数の歯から歯の薄膜を除去すること；
（ｉｉｉ）所望により、好ましくは、超音波歯ブラシ等の音波歯ブラシを用いた、歯のブラッシング、酸性溶液を用いたすすぎまたは塩および界面活性剤の溶液を用いたすすぎ、所望により口腔洗浄の使用を含む群から選択される方法によって、複数の歯から無機沈着物を除去すること；
（ｉｖ）所望により、工程（ｖ）の前の７以上のｐＨを有する溶液を用いた歯のすすぎ；および
（ｖ）デンタルケア製品を複数の歯に適用することであって、ここで、好ましくは、前記デンタルケア製品は、口腔洗浄器を使用して適用される；
を含み、工程（ｉ）、（ｉｉ）および、所望により（ｉｉｉ）は、任意の順序でまたは同時に実施されてもよく、工程（ｖ）は他の工程の後に実施される、歯を処置するための非治療的な方法。
【請求項１８】
工程（ｉ）（ｉｉ）および（ｉｉｉ）は、音波歯ブラシを用いた歯のブラッシングにより行われる、請求項１７に記載の非治療的な方法。
【請求項１９】
工程（ｉ）（ｉｉ）および（ｉｉｉ）は、超音波歯ブラシを用いた歯のブラッシングにより行われる、請求項１７または１８のいずれか１項に記載の非治療的な方法。
【請求項２０】
自己集合ペプチドを含むデンタルケア製品、ここで、前記自己集合ペプチドは、先行する請求項のいずれか１項に記載の工程（ｖ）における適用後に少なくとも１分間、単量体状態を維持し、前記自己集合ペプチドは、工程（ｖ）における使用に適した７．５未満のｐＨにおいて自己集合を起こすことができる、および、
（ａ）超音波歯ブラシなどの音波歯ブラシ、または
（ｂ１）先行する請求項のいずれか１項に記載の工程（ｉ）および（ｉｉ）における使用に適した溶液、および
（ｂ２）所望により、先行する請求項のいずれか１項に記載の工程（ｉｉｉ）における使用に適した溶液および／または
（ｂ３）所望により、先行する請求項のいずれか１項に記載の工程（ｉｖ）における使用に適した溶液
を含むキット。
【請求項２１】
前記口腔洗浄は、請求項２０に記載のキットの溶液の保管に適した少なくとも２つのタンク、または前記溶液の順次輸送に適した少なくとも２つの区画を含む１つのタンクを含み、所望により、前記タンクは、前記溶液を含む、請求項１〜１６のいずれか１項に記載の方法を行うために適した口腔洗浄。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、デンタルケア、例えば、齲蝕病変などの歯の病変の予防および／もしくは処置、歯の表面の再石灰化または滑らかさもしくは輝きの増加における使用のため、あるいは歯の表面の硬度を増加させるための、特定のｐＨにおいて自己集合を起こすことができる自己集合ペプチドを含む新規のデンタルケア製品を提供する。前記デンタルケア製品は、例えば、音波歯ブラシ、好ましくは超音波歯ブラシを用いた歯のブラッシング、および／または口腔洗浄器の使用を含む、多工程を含む単純なプロトコルに従って適用されてもよく、それにより、活動性齲蝕（すなわち、以前にうまく処置されていない齲蝕）の診断とは無関係に対象における複数の歯の非標的処置を可能にする。また、本発明は、前記方法並びにそれに適したキットおよび装置に関する。
【背景技術】
【０００２】
今まで、歯の再石灰化は、主に歯の病変または空洞にカルシウムおよびリン酸イオンをデリバリーすることによって実現されている。カルシウムおよびリン酸イオンは、一般に、例えば、研磨剤、フッ化物、界面活性剤およびその他の再石灰化薬剤も含む、練り歯磨きに含まれる。カルシウムおよびリン酸イオンは、さまざまな結晶形態、例えば、ヒドロキシアパタイトベースの材料として、または一部のカゼインホスホペプチドベースの材料中などの非晶質リン酸カルシウムとして使用することができる。例えば、ＷＯ２０１３／０５０４３２は、そのような再石灰化薬剤およびこれらの薬剤と歯肉を接触させるための選択肢について記載している。ＷＯ２００９／１００２７６は、例えば、再石灰化を促進するための遊離型または塩形態の塩基性アミノ酸と関連するデンタルフロスについて教示している。
【０００３】
さらに最近、歯の再石灰化に対する代替的なアプローチが示され、これは、合理的に設計された短い自己集合ペプチドに基づくものである。ＷＯ２００４／００７５３２は、三次元の足場を形成し、それにより新規のリン酸カルシウムの核生成を促進することができるペプチドを開示している。こうした人工のペプチドは、集合して、ベータ−シート型テープ様アセンブリー（ａｓｓｅｍｂｌｙ）を形成する。ペプチドアセンブリーは、化学的または物理的トリガーに反応して流体からネマチックのより硬いゲル状態へ変わることが可能である。このペプチドは、特定のｐＨ、イオン強度および／または温度条件に反応して、テープ、リボン、微小繊維および繊維の階層的順序でアセンブリーを形成するよう設計されていた。Ａｇｇｅｌｉらは（２００３，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１２５，９６１９−９６２８）は、ペプチドベータ−シート自己集合のトリガーとしてｐＨについて分析している。
【０００４】
いくつかのその他の自己集合ペプチドが先行技術に示されてきた。例えば、ＷＯ２０１０／０４１６３６Ａ１は、生理的なｐＨにおいてベータ構造に自己集合する、交互に結合した親水性アミノ酸および疎水性（ｈｙｄｒｏｐｈｏｐｂｉｃ）アミノ酸を有する８〜２００アミノ酸残基を有する人工ペプチドを含む生体吸着性（ｂｉｏａｄｓｏｒｂａｂｌｅ）ペプチド組織閉塞剤（ｏｃｃｌｕｄｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）について記載している。細胞外基質と相互作用する、交互の疎水性および親水性残基または範囲を有する自己集合ペプチドも、ＷＯ２００８／１１３０３０Ａ２に開示されている。ＷＯ２０１０／１０３８８７Ａ１は、特定の一次配列の塩基性、疎水性および酸性アミノ酸を含む自己集合ペプチド、ならびに高強度のそのペプチドゲルを開示している。
【０００５】
別の出願、ＷＯ２００７／０００９７９Ａ１は、極性および非極性アミノ酸を有する自己集合ペプチドについて記載している。このペプチドは、ベータ−シート構造を形成することができ、この中で、非極性アミノ酸残基は集合型の構造の一方の側に配置される。ゆっくりとした拡散薬物デリバリーなどの生体材料用途に使用される安定した巨視的膜として使用するための両親媒性の自己集合ペプチドがＵＳ６，５４８，６３０に記載されている。
【０００６】
ＥＰ２３２７４２８Ａ２は、互いに相補的な自己集合ペプチドナノファイバーを含み、さらに、心筋梗塞後の組織などの損傷した組織を修復するための少なくとも１つの細胞を含む医薬組成物について言及している。
【０００７】
ＥＰ２８５３２５６Ａ１およびＷＯ２０１５／０４４２６８Ａ１は、特定のサイズの鉱物粒子およびフルオロフォアをさらに含む自己集合ペプチドハイドロゲルが歯のホワイトニングに有用であることについて教示している。
【０００８】
例えば、ＵＳ２００８／１９９４３１Ａ１およびＷＯ２００９／０２６７２９Ａ１には生理活性薬剤のデリバリーのための自己集合ペプチドの使用について記載されている。ＷＯ２００６／０７３８８９Ａ２は、インビボ（ｉｎ  ｖｉｖｏ）においてＰＤＧＦをゆっくりと放出するゲルに集合するペプチドにヒトＰＤＧＦが直接結合した組成物に関する。ＷＯ２００６／０４７３１５Ａ２は、ビオチン／ストレプトアビジン結合を使用した自己集合ペプチドへの治療薬の結合を提示している。
【０００９】
ＫｉｒｋｈａｍらおよびＫｉｎｄらは、エナメル質の再石灰化を促進する自己集合ペプチド足場に関する（Ｋｉｒｋｈａｍら．２００７，Ｄｅｎｔ．Ｒｅｓ．８６（５），４２６−４３０；Ｋｉｎｄら．２０１７，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｄｅｎｔａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  １−８，ｄｏｉ１０．１１７７／００２２０３４５１７６９８４１９）。
【００１０】
歯の病変、特に、表面下の病変（すなわち、初期の齲蝕病変または白斑）を効果的に処置するために、自己集合ペプチドは、病変への拡散を可能にするために歯の病変の外側では単量体型／状態である必要があり、歯の病変の内側に入ると集合型に変わる必要がある。ペプチドが病変の外側で集合すると、形成された三次元構造が孔を通って拡散するには大き過ぎるため、ペプチドは低いｐＨおよび高いイオン強度を有する病変内の再石灰化を促進することができない。したがって、ペプチドの集合は、作用部位に到達するまで妨げられなければならない。
【００１１】
ＷＯ２０１４／０２７０１２Ａ１およびＥＰ２６９８１６２Ａ１は、歯の病変の標的処置のための自己集合ペプチドを含む凍結乾燥溶液を提供する。ペプチドを含む溶液が初期の齲蝕病変の表面に直接塗布されなければならないため、適用は専門家のユーザー、例えば、歯科医に限定される。さらに、プラーク、食べ物のかすおよびステインを除去するための歯の専門家によるクリーニングならびに次亜塩素酸ナトリウムおよびリン酸などの潜在的に危険な化学物質による処置、それに続く水によるすすぎおよび歯の表面の乾燥を含む、処置対象の歯の前処置が非常に複雑である。Ｂｒｕｎｔｏｎら，２０１３，Ｂｒ．Ｄｅｎｔ．Ｊ．２１５（４）：Ｅ６，ｄｏｉ：１０．１０３８／ｓｊ．ｂｄｊ．２０１３．７４１）は、処置前に、病変が歯の掃除用ペーストでクリーニングされ、表面下の病変の孔を開けるためにエッチ液により３０秒間処置された後、洗浄および乾燥されたことを確認している。単量体型の凍結乾燥された自己集合ペプチドは、滅菌水を用いて再水和され、得られた溶液の１滴がすぐに病変の表面に直接塗布された。Ｐ１１−４溶液がもはや目で見えなくなるまで（およそ２分間）確実に水分の制御がなされた。対象は、処置後４日目まで処置された四分円の歯をブラシでこすらないよう言われた。Ｓｃｈｌｅｅら，２０１４，Ｓｔｏｍａｔｏｌｏｇｉｅ  １１１：１７５−１８１は、前処理および水分の制御の必要性を裏付ける。
【００１２】
しかしながら、複雑な処置手順のために、これらの溶液は、家での適用には適さず、したがって、前記使用は、歯科の専門家に限定される。さらに、吸入後の気道粘膜の刺激および偶発的な皮膚接触後の皮膚の刺激、服の漂白を引き起こす可能性があり、乱用の可能性を示す、ヒトの健康に対する潜在的な危険性を有する化学物質、例えば次亜塩素酸ナトリウムおよびリン酸を含む、これらの溶液の適用のために、歯の前処置が必要とされる。
【００１３】
精神的な理由から、歯科医が自己集合ペプチドを使用する処置アプローチよりも穴を開け、填塞することを好む可能性のある程、齲蝕病変が広範囲に進行するまで歯科開業医に行くのを避けるか、または遅くする対象がいるため、患者および／または関係のある医療制度に相当な負担がかかる。
【００１４】
したがって、最新の技術を考慮して、本発明者らは、好ましくはカウンター販売または小売りにわたって、単純な手順に従って適用するのが安全および容易で、齲蝕を処置もしくは予防するためおよび／または歯の表面を再石灰化するための患者または消費者による家での適用に適した、齲蝕病変を処置することが可能なデンタルケア製品を提供するという課題を解決した。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１５】
この課題は、本発明によって、特に、特許請求される主題によって解決される。
【課題を解決するための手段】
【００１６】
第１の態様において、本発明は、歯の病変を処置もしくは予防するおよび／または歯の表面を再石灰化する方法における使用のためのデンタルケア製品を提供し、ここで、前記デンタルケア製品は、自己集合ペプチドを含み、前記自己集合ペプチドは、工程（Ｖ）における適用後、少なくとも１分間単量体型を維持し、７．５未満のｐＨにおいて自己集合を起こすことができ、前記方法は、
（ｉ）好ましくは音波歯ブラシ（超音波歯ブラシなど）を用いた歯のブラッシング、歯のフロスによる掃除、口腔洗浄器の使用、および塩および界面活性剤の溶液を用いたすすぎを含む群から選択される方法によって複数の歯から歯のバイオフィルムを除去すること；
（ｉｉ）好ましくは音波歯ブラシ（超音波歯ブラシなど）を用いた歯のブラッシング、歯のフロスによる掃除、口腔洗浄器の使用、および塩および界面活性剤の溶液を用いたすすぎを含む群から選択される方法によって複数の歯から歯の薄膜を除去すること；
（ｉｉｉ）所望により、好ましくは音波歯ブラシ（超音波歯ブラシなど）を用いた歯のブラッシング、酸性溶液を用いたすすぎまたは塩および界面活性剤の溶液を用いたすすぎ、所望により、口腔洗浄器の使用を含む群から選択される方法によって複数の歯から無機沈着物を除去すること；
（ｉｖ）所望により、工程（ｖ）の前の７以上のｐＨを有する溶液を用いた歯のすすぎ；および
（ｖ）デンタルケア製品を複数の歯に適用すること、ここで、前記デンタルケア製品は、口腔洗浄器を使用して適用されてもよい；
を含み、ここで、工程（ｉ）（ｉｉ）および、所望により（ｉｉｉ）は、任意の順序でまたは同時に行われてもよく、工程（ｖ）は他の工程の後に行われる。
【００１７】
好ましくは、前記デンタルケア製品は、液体、例えば、自己集合ペプチドを含む溶液である。液体は、口腔洗浄器における使用に適する。また、固体または半固体のデンタルケア製品が、使用されてもよい。
【００１８】
本発明の方法において、好ましくは、歯のブラッシングは、重炭酸ナトリウム練り歯磨きまたは歯磨きジェル、および研磨性練り歯磨きまたは研磨性歯磨きジェルから選択される練り歯磨きまたは歯磨きジェルを用いて行われる。成分は、例えば、炭酸塩、リン酸塩、特にリン酸二カルシウム、ケイ酸塩、アクリレート、アルミナ、および／または、例えば炭酸ナトリウム、ＳＤＳなどの界面活性剤のようなバイオフィルム除去剤および／またはリン酸バッファーを含んでもよい。このような研磨性練り歯磨きまたは研磨性歯磨きジェルを用いた歯のブラッシングは、歯の薄膜およびバイオフィルムを除去するだけでなく、無機沈着物の除去にも寄与し得る。歯のブラッシングは、好ましくは２〜３分間行われる。音波歯ブラシを使用してもよい。歯のブラッシングは、歯間の空間を掃除するために歯間ブラシの使用と組み合わせてもよい。もちろん、手による歯のブラッシングも可能である。
【００１９】
発明者らは、音波処理が、表面下の病変への自己集合ペプチドの取り込みを驚くほど向上させることを示すことができたから、好ましくは、工程（ｉ）、（ｉｉ）および（ｉｉｉ）は音波処理を含み、特に、音波歯ブラシを用いた歯のブラッシングによって行われてもよい。
【００２０】
音波歯ブラシは、音波の範囲またはそれを超えるブラシヘッド速度を生じる。すなわち、それは、少なくともヒトが聞こえる周波数の範囲にある速度、すなわち、約７０から２０，０００ｈｚ、好ましくは、約１００から約１０００Ｈｚで振動する。一般的な音波歯ブラシは、約２００から約４００Ｈｚの周波数で振動する。本出願の文脈において「音波歯ブラシ」という用語は、別の指定がなければ、超音波歯ブラシを含む。超音波歯ブラシは、２０，０００Ｈｚを超える、好ましくは約１〜２ＭＨｚまたは約１．６ＭＨｚの周波数で振動し、これは１分当たり１９２，０００，０００回の動きに換算される。例えば、Ｓｏｎｉｃａｒｅ（登録商標）歯ブラシは、一分当たりブラシ３１，０００振りを行うことができ、これは約２５８Ｈｚに相当する。比較のために、非音波音波歯ブラシは、１分当たり２，５００〜７，５００振り程度を生じるブラッシングメカニズムを有する。音波ブラシの毛の強烈な振動速度は、ユーザーの歯を取り囲む流体を、その流体がブラシの毛が実際に接触した場所を越えた場所でも歯のプラークを破壊することができる程に激しく動かす（ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ａｎｉｍａｔｅｄ−ｔｅｅｔｈ．ｃｏｍ／ｅｌｅｃｔｒｉｃ＿ｔｏｏｔｈｂｒｕｓｈｅｓ／ｔ３＿ｓｏｎｉｃ＿ｔｏｏｔｈｂｒｕｓｈｅｓ．ｈｔｍ）。例となる音波歯ブラシは、Ｐｈｉｌｉｐｓ（例えば、Ｓｏｎｉｃａｒｅ（登録商標）歯ブラシ）またはＯｒａｌ  Ｂから入手可能である。
【００２１】
本明細書中において使用される場合、「歯のすすぎ」は、必要とされる時間、口腔内にそれぞれの溶液の１口を維持することを含んでもよい。所望により、その上、「歯のすすぎ」は、適した装置、例えば口腔洗浄器を用いて口腔内へ前記溶液を適用することを示してもよい。
【００２２】
歯のフロスによる掃除は、歯のバイオフィルムおよび／または薄膜から歯間の空間を洗浄するための標準的なフロスまたは研磨ストリップの使用を含む。研磨ストリップ（仕上げストリップまたは艶出しストリップとも呼ばれる）は、歯のバイオフィルムおよび／または薄膜を除去することができ、その上、無機沈着物を除去することができる。
【００２３】
例えば、一価、二価および／または三価イオンおよびイオン性および／または非イオン性界面活性剤を含む塩および界面活性剤の溶液を用いたすすぎは、バイオフィルム並びに薄膜を除去してもよい。それは、また、特に、前記溶液が酸性（例えば、３〜６のｐＨ、好ましくはｐＨ４〜６またはｐＨ４〜５）である場合、無機沈着物の除去に貢献してもよい。適した塩は、例えば、ＮａＣｌ、ＫＣｌ、Ｎａ２ＨＰＯ４およびＫＨ２ＰＯ４である。例えば、０．８％ＮａＣｌ、０．０２％ＫＣｌ、０．１４２％Ｎａ２ＨＰＯ４および０．０２７％ＫＨ２ＰＯ４は、ＳＤＳ（例えば、０．１〜５％）などの界面活性剤と組み合わせて使用されてもよい。適した界面活性剤は、例えば、０．１〜５％の濃度におけるＳＤＳ、または、例えば、０．１〜５％におけるＣｏｃｏａｍｉｄｏｐｒｏｐｙｌ  Ｂｅｔａｉｎ、または、例えば、０．１〜５％におけるＳｕｌｆｏｐｏｎ  Ｇ１２１６Ｇである。
【００２４】
緩衝された酸性溶液を用いた、例えば、１０〜３０秒間または約２０〜３０秒間のすすぎは、無機沈着物を除去してもよい。工程（ｉｉｉ）における有機沈着物の除去に適した酸性溶液は、３〜６のｐＨ、好ましくは、ｐＨ４〜６またはｐＨ４〜５を有してもよい。好ましい酸性溶液は、ｐＨ５を有する。例えば、クエン酸バッファーまたはリン酸−クエン酸バッファーが使用されてもよい。
【００２５】
すすぎは、口一杯の前記溶液を口腔に導入し、それを口内であちこち動かすことによって行われることができる。一般に、すすぎのための溶液は、その後吐き出される。前記プロセスは、繰り返されてもよい。また、すすぎは、歯間の空間への到達を改善する口腔洗浄器の使用によって行われてもよい。すすぎは、例えば、約１０秒〜５分間、好ましくは、２０秒から１．５分間または３０秒から１分間行われてもよい。
【００２６】
また、口腔洗浄器（口腔洗浄装置または水フロッシング装置とも呼ばれる）は、水を用いた口腔洗浄による、例えば、マイクロドロップレット技術および／または高圧洗浄および／または脈動洗浄を用いた、薄膜および／またはバイオフィルムの除去のために使用されてもよい。口腔洗浄器は、歯間の空間などの到達するのが難しい空間を含み、したがって齲蝕にかなり敏感な歯および歯肉の効果的なクリーニングを扱い、可能にするのが容易であるので、口内洗浄器の使用は、とりわけ有利である。
【００２７】
口腔洗浄器を使用して純粋な水／水道水が適用されることは可能だが必須とはされない。例えば、Ｐｈｉｌｉｐｓ  Ｓｏｎｉｃａｒｅ  ＡｉｒＦｌｏｓｓ  Ｕｌｔｒａ（登録商標）、Ｗａｔｅｒｐｉｋ  Ａｑｕａｒｉｕｓ  Ｗａｔｅｒ  Ｆｌｏｓｓｅｒ（登録商標）、または他の標準的な口腔洗浄器、ならびに本明細書に記載の特別な洗浄器が使用されてもよい。口腔洗浄は、約２０秒から５分間、好ましくは３０秒から３分間または４０秒から２分間または１秒から１．５分間であってもよい。口腔洗浄器は、本明細書に記載されるような塩および界面活性剤の溶液および／または本明細書に記載されるような酸性溶液を適用するために使用されてもよい。ＵＳ  ２０１１／０２７７４６  Ａ１、ＥＰ  ２  ７２７  ５５６  Ａ１およびＵＳ  ２０１６／１２８８１５  Ａ１は、本発明において使用されることができる口腔洗浄器を記載している。
【００２８】
工程（ｉｉｉ）における無機沈着物（特に、歯石）の除去は、一般には歯石で覆われていない活動性齲蝕病変の処置に必須ではない（Ｋｅｙｅｓら、Ｊ  Ｏｒａｌ  Ｂｉｏｌ  ３（１）：４−７）。しかしながら、そうでなく、例えば歯の表面を再石灰化するためにそれは有益であり得る。
【００２９】
所望により、工程（ｉ）および（ｉｉ）、およびもしあれば（ｉｉｉ）の後、工程（ｉｖ）において、７以上、所望により７．５以上のｐＨを有する溶液を用いて歯はすすがれる。水道水などの水が使用されてもよい。工程（ｉｖ）は、自己集合ペプチドの集合状態は例えば酸性条件によって影響されるのを防止するために、工程（ｉ）から（ｉｉｉ）のいずれかが酸、塩および／または界面活性剤に関係する場合に特に有利である。それがなくても、例えば工程（ｉ）および（ｉｉ）が、例えば音波歯ブラシ（超音波歯ブラシなど）を用いた歯のブラッシング、および／またはフロスによる掃除によって行われる場合、すすぎは、緩んだバイオフィルムまたは薄膜を歯から除去するのに役立ち得る。また可能である、本発明のデンタルケア製品のより長期間の直接的な使用と比較して、この工程は自己集合ペプチドを節約し得る。しかしながら、ペプチド含有溶液の直接的な使用は、上記方法の複雑さを軽減し、したがってコンプライアンスを向上させ得る。
【００３０】
一実施形態において、工程（ｉ）、（ｉｉ）および（ｖ）、およびもしあれば工程（ｉｉｉ）および／または（ｉｖ）は、口腔洗浄器を使用して行なわれてもよい。本方法の全工程における口腔洗浄器の使用が好ましい。
【００３１】
本発明の文脈において、「単数」は「１つ以上」であると理解される。したがって、バイオフィルム、薄膜および／または無機沈着物からの歯のクリーニングのための本明細書に記載の２つ以上の方法は組み合わせて使用されてもよく、これが好ましい。クリーニング方法の少なくとも１つは、特にフロスによる掃除または口腔洗浄によって歯間の空間を掃除する場合それは有利である。
【００３２】
例えば、本発明の方法は、例えば超音波歯ブラシなどの音波歯ブラシを用いた歯のブラッシング、それに続く口腔洗浄器を使用することを含んでもよく、ここで上記口腔洗浄器は少なくとも工程（ｖ）に使用され、ここで好ましくは、上記口腔洗浄器はまた、工程（ｉ）、（ｉｉ）、および所望により（ｉｉｉ）および／または（ｉｖ）、最も好ましくは全ての工程（ｉ）から（ｖ）に使用される。本発明の方法は、歯のブラッシングおよびフロスによる掃除の後に口腔洗浄器を使用することを含み、ここで上記口腔洗浄器は少なくとも工程（ｖ）に使用され、ここで好ましくは上記口腔洗浄器はまた、工程（ｉ）、（ｉｉ）、および所望により（ｉｉｉ）および／または（ｉｖ）、最も好ましくは、全ての工程（ｉ）〜（ｖ）に使用される。所望により、工程（ｉ）、（ｉｉ）、および所望により（ｉｉｉ）における口腔洗浄器の使用は、水、塩および界面活性剤を含む溶液を用いた口腔洗浄を含む。前記溶液は酸性であってもよい。
【００３３】
好ましい実施形態において、上記方法は、例えば研磨性練り歯磨きを用いた歯のブラッシング、それに続く、例えば塩および界面活性剤の溶液を用いた口腔洗浄のための口腔洗浄器の使用、および最後の工程として、本発明のデンタルケア製品を用いた口腔洗浄を含む。
【００３４】
本発明のデンタルケア製品は、家での適用に適していてもよく、ここで、それらは事前のエッチングまたはＮａＯＣｌ処置無く使用される。それにもかかわらず、本発明者らは、齲蝕病変の処置および／または再石灰化が本発明の処置計画により可能であることを見出した。
【００３５】
特に、本発明のデンタルケア製品は、歯の病変、好ましくは、齲蝕病変、例えば、表面下の齲蝕病変の処置に使用することができる。本明細書中において使用される場合、齲蝕「病変」は、歯または歯の表面にある表面下の病変または表面下の微小病変であり、これは、通常、口腔のバイオフィルムに存在する細菌の酸形成が原因である（ＩＣＤＡＳ−ＩＩスケール１〜４）。本明細書中において使用される場合、歯の「空洞」は、歯の表面にある穴である（ＩＣＤＡＳ−ＩＩスケール≧５）。
【００３６】
あるいはまたは加えて、前記デンタルケア製品は、歯の表面、例えば、歯の空洞、白斑病変または露出した象牙質の再石灰化に使用されてもよい。好ましくは、本発明の製品は、初期の齲蝕病変の空洞が形成された齲蝕病変への進行を予防するために使用することができる。
【００３７】
特にストレプトコッカス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）、ラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）およびアクチノミセス（Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ）属の細菌は、食物に由来する炭水化物の発酵により酸を産生する。発酵時に形成される酸は、硬い歯の組織、すなわち、エナメル質、象牙質およびセメント質の脱灰をもたらす。歯の病変および空洞は、物理的な外傷の結果である場合もある。未処置のままだと、齲蝕病変または空洞は、血管および神経を含む髄腔の感染症に至ることもあり、これは、最終的に歯の喪失をもたらす可能性もある。
【００３８】
一般に、病変または空洞は、あらゆる歯、例えば、切歯、門歯（ｉｎｃｉｓｏｒ）（Ｄｅｎｔｅｓ  ｉｎｃｉｓｉｖｉ）、犬歯（ｃａｎｉｎｅ  ｔｅｅｔｈ）（Ｄｅｎｔｅｓ  ｃａｎｉｎｉ）、前臼歯（ｐｒｅｍｏｌａｒ  ｔｅｅｔｈ）（Ｄｅｎｔｅｓ  ｐｒａｅｍｏｌａｒｅｓ）および／または臼歯（ｍｏｌａｒ  ｔｅｅｔｈ）（Ｄｅｎｔｅｓ  ｍｏｌａｒｅｓ）にある場合がある。同様に、病変または空洞は、歯のあらゆる表面、すなわち、唇側表面、近心側表面、頬側表面、口蓋側表面、隣接表面、咬合表面および／または遠心側表面を冒す場合がある。例えば、「１つの病変（ａ  ｌｅｓｉｏｎ）」という言及は、２つ以上の病変、特に、対象のすべての病変の言及を含む。
【００３９】
本発明の製品は、齲蝕、好ましくは活動性齲蝕の事前の診断と無関係に、好ましくは、齲蝕、とりわけ活動性齲蝕の事前の診断がない場合、より好ましくは、脱灰または酸蝕の診断がない場合の日常的なデンタルケアでの使用を対象とする。活動性齲蝕、例えば、齲蝕の第１ステージと考えられる白斑またはさらに進行したステージの診断は、一般に歯科専門家によって行われる。本発明は、有利にも専門家の歯科開業医による診断および処置の必要性を避け、対象が自身の歯の病変を効果的に処置および予防することを可能にする。あるいは、もちろん、本発明の製品はまた、活動性齲蝕の診断の後に適用されてもよい。
【００４０】
好ましくは、対象は、デンタルケア製品を定期的に適用し、その結果、初期の齲蝕、例えば、白斑または脱灰は本発明の製品によって再石灰化することができ、最近発症した齲蝕病変は、早いステージで効果的に処置される。したがって、本発明のデンタルケア製品は、少なくとも６ヶ月に１回、好ましくは少なくとも２ヶ月に１回、少なくとも毎月、少なくとも毎週または毎日適用されてもよい。前記製品は残りの生涯、例えば１日に１回から６ヶ月に１回適用されることができる。
【００４１】
本明細書中において使用される場合、「齲蝕の事前の診断」または「活動性齲蝕の事前の診断」は、専門家、例えば、歯科医によって診断されたが、まだ処置されていない齲蝕病変を指す。反対に、（活動性）齲蝕の事前の診断は、本発明の製品の適用の前に首尾よく処置された齲蝕病変は指さない。
【００４２】
進行が止められた齲蝕の処置は必要がないことが当該技術分野において知られている。反対に、進行が止められた齲蝕は、健康なエナメル質または象牙質よりも齲蝕の再発に対して抵抗性であると考えられる。したがって、当業者は、当該技術分野において従来法で処置されたあらゆる齲蝕病変が活動性齲蝕病変であることがわかるであろう。いかなる場合も、進行が止められた齲蝕病変の存在は、本発明のデンタルケア製品の適用の妨げにはならない。デンタルケア製品はまた、進行が止められた齲蝕病変のさらなる再石灰化にも寄与することができる。したがって、本発明の製品が、進行が止められた齲蝕病変の診断と無関係にまたは事前の診断なしに使用することもできることは当業者に明らかである。
【００４３】
以前の処置は、一般に歯科専門家によって適用される、少なくとも齲蝕の進行を止めることができる標的処置に関し、すなわち、これは、自己集合ペプチドを用いた標的処置または標的フッ化物適用ならびに穴を開け、填塞するアプローチを含む。
【００４４】
口腔への適用時に、本ペプチドは、製品の複数の歯への分散を確実にするため、および存在するのであれば表面下の病変への侵入を可能にさせるために、ある一定期間、単量体型の集合していない状態のままである。特に、本発明のデンタルケア製品は、歯の病変および／または空洞を例えば、唾液中に存在するカルシウムおよびリン酸イオンの沈着によって病変の再石灰化を促進する相互接続したペプチドのネットワークにより填塞するために使用することができる。
【００４５】
本発明は、とりわけ、少ない工程を含み、エッチング剤またはＮａＯＣｌなどの潜在的に危険な薬剤を含まない特定の方法を、続く処置のための歯の洗浄および前処理に適用することによって、自己集合ペプチドを含む溶液は、例えば、歯科医または歯科の専門家による専門家の支援なく、患者または消費者（ｃｏｓｔｕｍｅｒ）による家での適用に適しているという見識に基づく。
【００４６】
さらに、前記方法のすべての工程は、口腔洗浄器などの適切で扱いやすい適用装置を使用して行われてもよい。
【００４７】
本発明のデンタルケア製品において、前記自己集合ペプチドは、工程（ｖ）において影響される適用後、少なくとも１分間、好ましくは少なくとも２分間、より好ましくは少なくとも３分間、単量体状態で存在することが可能である。好ましくは、自己集合ペプチドは、デンタルケア製品が、歯に適用される時間範囲の間、単量体状態で存在する。具体的には、前記デンタルケア製品は、少なくとも２０秒間、少なくとも３０秒間、少なくとも１分間、少なくとも３分間、または少なくとも５分間適用されてもよい。
【００４８】
適用とは、対象の複数の歯、または好ましくはすべての歯が、このそれぞれの種類の製品が一般に使用される方法でデンタルケア製品と接触させられることを意味する。例えば、口内洗浄剤は、一般に、２０秒から５分、特に約３０秒から１分の時間にわたって歯をすすぐために使用される。口腔洗浄器は、一般に、２０秒〜５分間、好ましくは３０〜９０秒間、特に約１分間使用される。前記デンタルケア製品は、通常のデンタルケア後、例えば、歯のブラッシング、および所望によりフロスによる掃除の後、夜に使用されてもよい。
【００４９】
本明細書中において使用される場合、「対象」とは、歯を有するあらゆる対象、例えば、歯を有する哺乳動物、例えば、ヒト、イヌ、ネコなどのネコ科動物、マウス、ラット、ハムスター、テンジクネズミなどのげっ歯類、ウサギ、雌ウシ、ウマ、ラクダ、ヒツジ、ヤギまたは別のペット、家畜、もしくは動物園の動物を指す。
【００５０】
本発明はまた、歯の病変、好ましくは齲蝕病変を処置するため、および／または歯の表面を再石灰化するための方法であり、本方法は、自己集合ペプチドを含むデンタルケア製品を適用することを含み、前記集合ペプチドは、工程（ｖ）における適用後、少なくとも１分間単量体型を維持し、７．５未満のｐＨにおいて自己集合を起こすことができ、前記方法は、
（ｉ）好ましくは音波歯ブラシ（超音波歯ブラシなど）を用いた歯のブラッシング、歯のフロスによる掃除、口腔洗浄器の使用、および塩および界面活性剤の溶液を用いたすすぎを含む群から選択される方法によって複数の歯から歯のバイオフィルムを除去すること；
（ｉｉ）好ましくは音波歯ブラシ（超音波歯ブラシなど）を用いた歯のブラッシング、歯のフロスによる掃除、口腔洗浄器の使用、および塩および界面活性剤の溶液を用いたすすぎを含む群から選択される方法によって、複数の歯から歯の薄膜を除去すること；
（ｉｉｉ）所望により、好ましくは音波歯ブラシ（超音波歯ブラシなど）を用いた歯のブラッシング、酸性溶液を用いたすすぎまたは塩および界面活性剤の溶液を用いたすすぎ、所望により口腔洗浄器の使用を含む群から選択される方法によって、複数の歯から無機沈着物を除去すること；
（ｉｖ）所望により、工程（ｖ）の前の７以上のｐＨを有する溶液を用いた歯のすすぎ；および
（ｖ）デンタルケア製品を複数の歯に適用すること、ここで、好ましくは、前記デンタルケア製品は、口腔洗浄器を使用して適用される；
を含み、ここで、工程（ｉ）（ｉｉ）および、所望により（ｉｉｉ）は、任意の順序でまたは同時に行われてもよく、工程（ｖ）は他の工程の後に行われる。
【００５１】
別の態様において、本発明は、歯の表面を再石灰化するためあるいは歯の表面の硬度、例えば、微小硬度を増加させるための方法であって、齲蝕、特に、活動性齲蝕または脱灰または酸蝕の診断と無関係に、前記デンタルケア製品を対象の複数の歯に適用することを含む方法を提供する。
【００５２】
７．５未満のｐＨにおいて自己集合を起こすことができる自己集合ペプチドはまた、歯の病変、好ましくは齲蝕病変の処置のためおよび／または歯の表面を再石灰化するためおよび／または歯の硬度を増加させるためのデンタルケア製品の調製のために使用することができる。
【００５３】
別の態様において、本発明はまた、歯を処置するための非治療的な方法であって、本発明の製品を対象の複数の歯に適用することを含む方法に関する。具体的には、本発明はまた、歯を処置するため、例えば、歯の表面の硬度を増加させるための非治療的、例えば、美容的、方法であって、本発明のデンタルケア製品を複数の歯に適用することを含む方法を提供する。本発明のデンタルケア製品は、歯の表面の滑らかさを増すためおよび／または歯の輝きを増加させるために適用されてもよい。
【００５４】
また、本発明は、本発明のデンタルケア製品を含むキットを開示する。具体的には、本発明のキットは以下を含んでもよい。
（ａ）好ましくは、溶液の形態で、自己集合ペプチドを含むデンタルケア製品、ここで、前記自己集合ペプチドは、７．５未満のｐＨにおいて自己集合を起こすことができ、ここで、前記自己集合ペプチドは、工程（ｖ）における適用後、少なくとも１分間単量体型を維持するために適用され、ここで、前記製品は、先行する請求項のいずれか１項に記載の工程（ｖ）における使用に適している；および
（ｂ）工程（ｉ）および（ｉｉ）、およびに所望により（ｉｉｉ）における使用に適した溶液、
（ｃ）所望により、工程（ｉｉｉ）における使用に適した溶液および／または
（ｄ）所望により、工程（ｉｖ）における使用に適した溶液、例えば水。
【００５５】
好ましい実施形態において、本発明のキットは、口腔洗浄装置内への設置に適した１つ以上の容器中に溶液（ａ）および（ｂ）、および所望により（ｃ）および／または（ｄ）を含む。
【００５６】
あるいは、本発明のキットは、好ましくは自己集合ペプチドを含む溶液の形態のデンタルケア製品、ここで、前記自己集合ペプチドは、７．５未満のｐＨにおいて自己集合を起こすことができ、ここで、前記自己集合ペプチドは、工程（ｖ）における適用後、少なくとも１分間単量体型を維持するために適用され、ここで、前記製品は、本発明の方法の工程（ｖ）における使用に適している；および音波歯ブラシ（超音波歯ブラシなど）を含んでもよい。さらに、もちろん、前記キットは、上に詳述された溶液のうちの１つ以上を含んでもよい。
【００５７】
また、本発明は、前記キットの溶液の設置に適した少なくとも２つの容器（またはタンク）を含む口腔洗浄器を提供し、ここで、所望により、前記タンクは前記溶液を含む。所望により、前記口腔洗浄器は少なくとも３つまたは少なくとも４つの容器を含む。好ましくは、本発明のキットの容器は前記口腔洗浄器に適合する。
【００５８】
一実施形態において、本発明における使用のための様々な溶液は、口腔洗浄装置内への設置に適した１つの容器（またはタンク）に入れられ、これにより、対象が容器を交換する必要性なしに、前記溶液を順番（ｂ）、所望により（ｃ）、所望により（ｄ）および次に（ａ）において前記溶液の順次投与ができる。また、本発明は、そのようなタンクを含む口腔洗浄器を提供する。
【００５９】
例えば、口腔洗浄装置への送達のための容器の出口が前記容器の底部側にある場合、溶液は、例えば、底部溶液が（本質的にまたは完全に）使い果たされた場合、その後、次の溶液が該口腔洗浄器へ送達されるように、容器の底部に１つ以上のとげ、例えば、２つのとげを含む適した装置によって穴が開けられる膜により分けられた分離された別々の区画における一つの容器内にあってもよい。適した弁またはシールの使用によって同様の結果は達成されることができる。例えば、ＵＳ７０５５６８３Ｂ２の柔軟な多区画飲料パウチ、またはＵＳ４２５６１０４Ａの液体の順次投与のためのセットは、本発明における使用に適合されてもよい。
【００６０】
例えば、口腔洗浄装置内への設置に適しており、最初に塩および界面活性剤の溶液、次いで自己集合ペプチドを含む本発明の溶液の、前記口腔洗浄器への順次輸送に適したいくつかの区画を含む容器が提供される。あるいは、口腔洗浄装置内への設置に適しており、最初に塩および界面活性剤の溶液、次いで酸性溶液、および次いで、自己集合ペプチドを含む本発明の溶液の、前記口腔洗浄器への順次輸送に適したいくつかの区画を含む容器が提供される。あるいは、口腔洗浄装置内への設置に適しており、最初に塩および界面活性剤の溶液、次いで酸性溶液、次いで、中性ｐＨを有する溶液、および次いで、自己集合ペプチドを含む本発明の溶液の、前記口腔洗浄器への順次輸送に適したいくつかの区画を含む容器が提供される。
【００６１】
そのような容器は、それぞれの区画に適した溶液を含んでもよい。好ましくは、そのような容器は使い捨てである。それらは、本発明の方法における使用のための口腔洗浄器内に設置されてもよい。
【００６２】
本発明の製品に使用される自己集合ペプチドは、特定のｐＨおよびイオン強度に応じて自己集合が起こる。
【００６３】
本発明による使用のための特定の自己集合ペプチドは、例えば、生理的なイオン強度において、それらの環境のｐＨが特定のｐＨ未満、例えば、ｐＨ７．５未満である場合、自己集合型であるように選択される。本発明の好ましい自己集合ペプチドが自己集合を起こすｐＨは、７．５未満、好ましくは７．２未満、より好ましくは７．０未満である。例えば、自己集合ペプチドＰ１１−４（配列番号１）および末端が改変されたＰ１１−４（配列番号２）が自己集合を起こし始めるｐＨは約７．５である。これは、自己集合ペプチドが、ｐＨが７．５未満に低下したときに顕著な程度まで自己集合し始めることを意味する。
【００６４】
本明細書中において使用される場合、自己集合ペプチドが自己集合を起こし始めるｐＨは、溶液中のペプチドの顕著な程度の自己集合が観察されるよりも低いｐＨを指し、これは、デンタルケア製品中に見出されるペプチドのうちの少なくとも約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはさらに約１００％が集合していることを意味する。好適な実施形態において、デンタルケア製品中に見出されるペプチドの少なくとも約２５％は、ペプチドが自己集合を起こし始めるｐＨ未満において集合する。
【００６５】
好ましくは、自己集合を開始するｐＨ、例えば、Ｐ１１−４および改変されたＰ１１−４に関する約ｐＨ７．５において、ペプチドのうちのわずか約２０％以下、好ましくはわずか約１５％以下、より好ましくは１０％以下、さらにより好ましくは５％以下が重合（または凝集）型の状態である。
【００６６】
反対に、自己集合を開始するｐＨ未満、例えば、Ｐ１１−４（配列番号１）および改変されたＰ１１−４（配列番号２）に関するｐＨ７．５未満において、溶液中のペプチドの顕著な程度の自己集合が観察され、これは、溶液中に見出されるペプチドのうちの少なくとも約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９９％またはさらに約１００％が集合していることを意味する。
【００６７】
本明細書中において使用される場合、ペプチドの「自己集合」とは、それ自体の種類の他のペプチド（または類似の構造を有するペプチド）とのペプチドの、多量体型アセンブリーへの非共有結合性相互作用による自然発生的で可逆性の組織化を指す。多量体型アセンブリーの形成の原因となる非共有結合性相互作用としては、ペプチドのアミノ酸骨格および／またはアミノ酸側鎖の間のファンデルワールス、ｐｉ−スタッキング、水素結合、極性およびイオン性相互作用が挙げられる。
【００６８】
本発明の製品に使用される自己集合ペプチドは、好ましくは、ベータ−プリーツシートに集合する。ベータ−プリーツシートにおいて、シート様構造は、異なるポリペプチド鎖にある残基間または折り畳まれたポリペプチドの異なる区画にある残基間の一連の水素結合によって作り出される。一般に、ベータ−プリーツシート中の隣接するポリペプチド鎖は逆平行であり、これは、それらのペプチド鎖が反対方向に伸びていることを意味する。ただし、隣接する鎖は平行に伸びている場合もある。いくつかのポリペプチド鎖がシート形成に関与する場合、シートは硬質の壁様構造である。複数のプリーツシートは、必要な靭性および剛性をもたらす。本発明の製品に使用することができるペプチドは、自己集合時に安定した二次構造を形成する。好ましくは、本発明に使用されるペプチドは、１分子の厚さのベータ−プリーツ構造を含む長い「ベータ−テープ」を形成することになる。ペプチドは、集合の間にらせん状のテープ（１分子の厚さ）、ねじれたリボン（二重のテープ）、微小繊維（ねじれたリボンの積み重ね）および繊維（絡み合った微小繊維）などの複雑な構造を形成する場合がある。ｐＨの低下に伴い、らせん状のテープ、ねじれたリボン、微小繊維および最後に繊維が生じることもある。
【００６９】
当業者に知られているとおり、ペプチドの集合状態はまた、イオン強度に影響される。溶液のイオン強度は、その溶液中に存在するすべてのイオンの濃度の関数である。したがって、ペプチドが自己集合を起こし始めるｐＨを超えるｐＨであっても、すなわち、ペプチドが溶液中で実質的に単量体であるとき、特に高いイオン強度がペプチドの集合を引き起こす可能性もあろう。
【００７０】
しかしながら、ｐＨが７．５を超えており、イオン強度が生理的な範囲、すなわち、１５０ｍＭ  ＮａＣｌに相当するイオン強度に対応するか、またはそれ未満にあるときに、本発明のペプチドの集合は有利にも引き起こされない。当業者は、どのように溶液のイオン強度を求め、測定するかわかるであろう。イオン強度Ｉは、式Ｉ＝１／２Σｚｉ２ｂｉに従って一般に算出され、この場合、ｚは価数係数であり、ｂｉはｉ番目のイオン濃度のモル濃度［ｍｏｌ／ｋｇ｛Ｈ２Ｏ｝］である。総和、Σは、溶液中のすべてのイオンが含まれる。例えば、１５０ｍＭのＮａＣｌ溶液のイオン強度は、およそ０．１５である。これはまた、ほぼ血液のイオン強度である。口腔に存在する唾液のイオン強度は、一般にはるかに低く、例えば、およそ０．０４である。したがって、好適な実施形態において、本発明のデンタルケア製品のイオン強度は、０．１５未満、０．１未満、０．０５未満、または０．０２５未満である。好適な実施形態において、デンタルケア製品のイオン強度は、０．１５未満である。別の好適な実施形態において、イオン強度は０．１未満である。
【００７１】
当業者は、調製物のイオン強度を求めるための数々の方法を知っている。例えば、イオン強度は、以下のとおりのＲｕｓｓｅｌｌの係数による溶液の電気伝導度（Ｓ＝１／Ω＝Ａ／Ｖ）の測定値から推定することができる：Ｉ＝１．６×１０−５×固有の伝導度［μＳ／ｃｍ］。１５０ｍＭのＮａＣｌ溶液は、およそ８０〜１００ｍＳ／ｃｍの伝導度を有する。したがって、上の示された電気伝導度の概算によると、デンタルケア製品は、１００ｍＳ／ｃｍ未満、好ましくは８０ｍＳ／ｃｍ未満の電気伝導度を有することになる。
【００７２】
さらに、当業者は、所与のイオン強度において本発明のペプチドが自己集合を始めることになるｐＨを求めるための数々の方法を知っている。適した方法は、例えば、Ａｇｇｅｌｉらによる刊行物（２００３，Ｊ  Ａｍ  Ｃｈｅｍ  Ｓｏｃ，１２５，９６１９−９６２８）に示されている。
【００７３】
本発明の製品に使用される自己集合ペプチドのサイズは、特に限定されない。本発明のペプチドは、ｐＨ依存的な様式で自己集合を可能にする任意の長さであってよい。好ましくは、ペプチドは、約４〜２００アミノ酸、より好ましくは、６〜５０アミノ酸、８〜３０アミノ酸、９〜２０アミノ酸または１０〜１１アミノ酸のサイズを有することになる。特に好適な実施形態において、自己集合ペプチドは、１１アミノ酸長を有する。
【００７４】
本自己集合ペプチドは、ペプチド合成の分野において一般的に知られている任意の適した方法によって調製することができる。例えば、５０超のアミノ酸長を有するペプチドは、組み換え法によって調製することができる。一実施形態において、自己集合ペプチドは、融合ペプチドとして生成される。本明細書中において使用される場合、融合ペプチドとは、ＣまたはＮ末端で第２のアミノ酸配列と連結されている、目的とする自己集合ペプチドを含む第１のアミノ酸配列の融合を指す。第２のアミノ酸配列は、アフィニティタグ、すなわち、自己集合ペプチドのＮ末端またはＣ末端と融合し、別の化合物との高いアフィニティを示すことにより、融合ペプチドの精製を可能にするアミノ酸配列であってもよい。好ましくは、このタグ配列は、例えば、自己集合ペプチドとアフィニティタグとの間にタンパク質分解切断部位をもたらすことによって精製後に目的とする自己集合ペプチドから除去される。一実施形態において、自己集合ペプチドは、Ｋｙｌｅら，２０１０，Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ  ３１，９３９５−９４０５およびＫｙｌｅら．２００９，Ｔｒｅｎｄｓ  ｉｎ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２７（７），４２３−４３３に開示されているとおりに調製される。
【００７５】
それより小さな自己集合ペプチドは、一般に化学合成によって調製される。例えば、ペプチドは、固相または液相法によって化学合成することができる。ペプチドの溶液相化学合成に関するプロトコルが示されてきた（例えば、Ａｎｄｅｒｓｓｏｎら，Ｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒｓ  ５５：２２７−２５０，２０００参照）。Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄによって示された固相合成に関する技術（Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１９６４，８５，２１４９−２１５４）が使用されてもよい。このアプローチにおいて、成長させるペプチドが不溶性樹脂に固定され、未反応の可溶性試薬がろ過または洗浄工程によって、操作による損失なく除去される。固相ペプチド合成は、自動装置の使用により容易に行うことができる。
【００７６】
本発明の製品に使用されるペプチドは、天然のタンパク質を構成する任意のアミノ酸を含んでもよい。さらに、このペプチドはまた、カルニチン、ガンマ−アミノ酪酸（ＧＡＢＡ）、ヒドロキシプロリン、セレノメチオニン、ハイプシン、ランチオニン、２−アミノイソ酪酸、デヒドロアラニン、オルニチン（Ｏｒｎ、Ｏ）、シトルリン、ベータアラニン（３−アミノプロパン酸）、および同種のものなどの普通ではない、タンパク質を構成しないアミノ酸を含んでもよい。タンパク質を構成しないアミノ酸は、翻訳後修飾によって、またはペプチドの化学合成中の直接的な組み込みによってペプチドに組み込むことができる。
【００７７】
本ペプチドは、好ましくは−ＣＯＯＨ基を含むアミノ酸側鎖を含む。−ＣＯＯＨを有するアミノ酸側鎖は、その公称ｐＫ値よりも高いｐＨ値において脱プロトン化されることになる。例えば、アスパラギン酸（Ａｓｐ、Ｄ）およびグルタミン酸（Ｇｌｕ、Ｅ）などの側鎖に−ＣＯＯＨ基を含むアミノ酸は、低いｐＫａ（Ａｓｐ：３．７１；Ｇｌｕ：４．１５）を示すため、中性、すなわち、ｐＨ７を超えるｐＨにおいて本質的に脱プロトン化される。本発明の製品に使用される自己集合ペプチドにおいて、−ＣＯＯＨ基を含むアミノ酸側鎖は、結果として、−ＣＯＯＨ基が−ＣＯＯ−に脱プロトン化されたときに、隣接する同一の自己集合ペプチドが静電気的相互作用によりはね返されることになる、隣接するペプチド間の静電気的相互作用を抑制し、ペプチド間の結合における結合自由エネルギーより勝るよう特にペプチド鎖中に配置される。特定の閾値、すなわち、Ｐ１１−４（配列番号１）および改変されたＰ１１−４（配列番号２）に関する約ｐＨ７．５などペプチドが自己集合を起こし始めるｐＨ未満にｐＨを低下させることは、本発明の自己集合ペプチドにおける−ＣＯＯＨ基のプロトン化につながり、これが、ペプチド間の反発する静電気的相互作用を低減し、ペプチドの自己集合を可能にする。
【００７８】
本発明の製品に使用されるペプチドは、好ましくは式Ｘ１−Ｘ２−Ｘ１−Ｘ２−Ｘ１の配列を含み、この場合、Ｘ１は酸性側鎖を有するアミノ酸であり、Ｘ２はアラニン、バリン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、チロシン、およびトリプトファンから成る群から選択される疎水性側鎖を有するアミノ酸である（配列番号３）。
【００７９】
さらに好適な実施形態において、本発明の製品に使用される自己集合ペプチドは、配列Ｇｌｕ−Ｘ２−Ｇｌｕ−Ｘ２−Ｇｌｕを含み、この場合、Ｘ２はアラニン、バリン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、チロシン、およびトリプトファンから成る群から選択される疎水性側鎖を有するアミノ酸であり（配列番号４）、またはＡｓｐ−Ｘ２−Ａｓｐ−Ｘ２−Ａｓｐを含み、この場合、Ｘ２はアラニン、バリン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、チロシン、およびトリプトファンから成る群から選択される疎水性側鎖を有するアミノ酸である（配列番号５）。
【００８０】
好適な別の実施形態において、本発明の製品に使用される自己集合ペプチドは、配列Ｇｌｎ−Ｇｌｎ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ｇｌｕ−Ｔｒｐ−Ｇｌｕ−Ｐｈｅ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ｇｌｎ（Ｐ１１−４、配列番号１）、もしくはそれと少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも８０％、または、少なくとも９０％の配列同一性を有する配列を含むかまたはから成る。また、配列番号２に示される改変されたＰ１１−４を、使用してもよい。
【００８１】
本明細書においてＰ１１−４と言及されるペプチドに関して、単量体型からの集合した多量体型への転換は、本発明の使用におけるｐＨによって主に制御される。ｐＨがｐＨ７．５未満の場合、このペプチドは集合する。ｐＨがそれより高い場合、ペプチドの状態は
、本質的に単量体型である。
【００８２】
配列番号１または２と少なくとも４０％、好ましくは、少なくとも８０％以上の配列同一性を有するペプチドは、好ましくは、配列番号１または２のアミノ酸の５、７および９に対応する位置にグルタミン酸、またはアスパラギン酸を含む。特に、配列番号１と少なくとも８０％以上の配列同一性を有するペプチド配列は、好ましくは、配列番号１のアミノ酸の５、７および９に対応する位置にグルタミン酸を含む。残りのアミノ酸位置は、アラニン、バリン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、チロシン、およびトリプトファンから成る群から選択される疎水性側鎖を有するアミノ酸であるのが好ましい。残りのアミノ酸位置は、塩基性側鎖を有するアミノ酸、すなわち、中性あたりのｐＨにおいて正の電荷を持つことになろうアミノ酸ではないのが好ましい。
【００８３】
一実施形態において、本発明の製品に使用されるペプチドは、１、２または３個のアミノ酸の置換によって配列番号１および２に示される配列とは異なる配列を含むかまたはから成る。一般に、配列番号１および２のペプチド配列内のそれぞれのアミノ酸残基は、得られるペプチドがそれでも７．５未満のｐＨ値において自己集合を起こすことができる限り、別の残基によって置換されてもよい。置換は、保存的置換、すなわち、機能的な同等物として働く類似の極性のアミノ酸による１つ以上のアミノ酸残基の置換であるのが好ましい。代替物として使用されるアミノ酸残基は、置換されるアミノ酸残基と同じアミノ酸のグループから選択されるのが好ましい。例えば、疎水性残基は、別の疎水性残基で置換することができ、または極性残基は同じ電荷を有する別の極性残基で置換することができる。保存的置換に使用することができる機能的に一致するアミノ酸は、例えば、グリシン、バリン、アラニン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、プロリン、フェニルアラニン、およびトリプトファンなどの非極性アミノ酸を含む。非電荷極性アミノ酸の例は、セリン、トレオニン、グルタミン、アスパラギン、チロシンおよびシステインを含む。電荷極性（塩基性）アミノ酸の例は、ヒスチジン、アルギニンおよびリジンを含む。電荷極性（酸性）アミノ酸の例は、アスパラギン酸およびグルタミン酸を含む。
【００８４】
さらに、本発明の製品に使用されるペプチドは、例えば、１つ以上の改変されたアミノ酸の導入によって、１つ以上のアミノ酸位置において構造的に改変されていてもよい。本発明によると、これらの改変されたアミノ酸は、例えば、ビオチン化、リン酸化、グリコシル化、アセチル化、分岐および／または環化によって変えられたアミノ酸であってもよい。さらに、本発明のペプチドは、さらにまたは代わりに、末端ブロッキング基、ホルミル基、ガンマ−カルボキシグリタミン酸ヒドロキシル基、メチル基、ホスホリル基、ピロリドンカルボン酸基、および／または硫酸基などの他の改変を含む。好適な実施形態において、本発明のペプチドは、Ｎ末端においてアセチル化され、および／または例えば、ＮＨ２基によりＣ末端においてアミド化される。特に好適な実施形態は、Ｎ末端がアセチル化され、Ｃ末端がＮＨ２基によりアミド化されたペプチドＰ１１−４であり、以下の配列として示される：ＣＨ３ＣＯ−ＱＱＲＦＥＷＥＦＥＱＱ−ＮＨ２（配列番号２）。
【００８５】
本発明のデンタルケア製品において、自己集合ペプチドは、再石灰化が実現される歯の病変に拡散することができる単量体状態として歯の表面に適用される。
【００８６】
健康なヒト対象の唾液の平均ｐＨは、約７．０６±０．０４、慢性歯肉炎を有する対象に関しては７．２４±０．１０であることが見出された一方で、広汎型慢性歯周炎を有する対象の平均ｐＨは６．８５±０．１１であり（Ｂａｌｉｇａら，２０１３．Ｊ  Ｉｎｄｉａｎ  Ｓｏｃ  Ｐｅｒｉｏｄｏｎｔｏｌ．１７：４６１−４６５）、この場合、ｐＨは、十分に緩衝され、例えば、酸性の食物または飲料による酸蝕を最小限に抑える。
【００８７】
歯の病変において、ｐＨは、通常、口腔のミクロフローラを形成する乳酸菌による乳酸の連続的な産生の結果として５．０から６．５の間またはそれより低い（Ｍｕｒａｋａｍｉら，２００６．Ｄｅｎｔ  Ｍａｔｅｒ  Ｊ  ２５（３）：４２３−４２９）。初期の齲蝕病変、例えば、表面下の齲蝕病変は酸条件および高いイオン強度を有するため、自己集合ペプチドは、その場で集合し始め、三次元ネットワークを形成する。したがって、ｐＨにより引き起こされた単量体型ペプチドの集合が病変内で始まり、それにより、続くリン酸カルシウムの沈着のための足場として働くことができる多量体型アセンブリーを形成する。このプロセスは、本発明の文脈において重合とも呼ばれる。ネットワーク形成後に、カルシウムが唾液から引き寄せられ、初期の齲蝕病変におけるリン酸カルシウム結晶（ヒドロキシアパタイト）の形成のための核生成の島状のもの（ｎｕｃｌｅａｔｉｏｎ  ｉｓｌａｎｄ）を生じる。さらに、空洞が形成された齲蝕の表面領域は、深いくぼみおよび溝を含み非常に高い。
【００８８】
形成された足場は孔を通って拡散するには大き過ぎるため、単量体型で集合していない状態の自己集合ペプチドの適用が表面下の齲蝕病変の処置に特に重要である。ペプチドの病変への十分なデリバリーを確保するために、ペプチドの集合は、ペプチドが作用部位に到達するまで妨げられなければならない。
【００８９】
したがって、好ましくは、十分な量のペプチド単量体が作用部位、例えば、歯の病変にデリバリーされるまで（例えば、拡散により）、ペプチドが自己集合を起こし始めるｐＨを超えるｐＨに維持される必要がある。本発明のデンタルケア製品において、効果的な単量体化は、ペプチドが自己集合を起こし始めるｐＨよりも０．５ｐＨ単位を超えて高いｐＨを有する製品を使用することによって達成することができる。本発明の製品のｐＨは、ペプチドが自己集合を起こし始めるｐＨよりも０．６ｐＨ単位を超えて高いのが好ましい。ｐＨは、ペプチドが自己集合を起こし始めるｐＨよりも０．７ｐＨ単位を超えて高いのがさらにより好ましい。
【００９０】
例えば、本明細書において配列番号１または配列番号２と呼ばれるペプチドを使用するとき、本製品は、これらのペプチドの自己集合がｐＨ７．５において始まるため、８．０以上のｐＨを有してもよい。したがって、本発明の製品において、ｐＨは７．５〜９．０であってもよい。好ましい実施形態において、製品中のｐＨは７．８〜８．５、より好ましくは８．０〜８．２である。
【００９１】
一般に、デンタルケア製品は、それぞれのデンタルケア製品の１つ以上の一般的な成分、例えば、必要とされるｐＨを有する一般的な薬学的に許容される基剤を含み、ここで、上記自己集合ペプチドは、例えば本明細書に記載されるように、例えば水または緩衝溶液中に組み込まれてもよい。
【００９２】
本発明のデンタルケア製品のｐＨは、自己集合ペプチドのかなりの割合が、確実にペプチドが潜在的な病変の部位に到達するのに十分な時間、単量体型にとどまることを確実にするために緩衝されてもよい。
【００９３】
適したバッファーとしては、ＴＡＰＳ（｛［トリス（ヒドロキシメチル）メチル］アミノ｝プロパンスルホン酸）、ビシン（Ｎ，Ｎ−ビス（２−ヒドロキシエチル）グリシン）、トリス（トリス（ヒドロキシメチル）−アミノメタン）、トリシン（Ｎ−トリス（ヒドロキシメチル）メチルグリシン）、ＴＡＰＳＯ（３−［Ｎ−トリス（ヒドロキシル−メチル）メチルアミノ］−２−ヒドロキシプロパンスルホン酸）、ＨＥＰＥＳ（４−２−ヒドロキシ−エチル−１−ピペラジンエタンスルホン酸）、ＴＥＳ（２−｛［トリス（ヒドロキシ−メチル）メチル］アミノ｝エタンスルホン酸）、および同様のｐＨ範囲を維持するその他のバッファーが挙げられる。クエン酸、リン酸、およびその他などの酸バッファーはまた、ペプチドが自己集合を起こし始めるｐＨよりも０．５ｐＨ単位を超えて高い所望のｐＨを得るため、および緩衝能をもたらすために上のバッファーのいずれかおよび／またはアルカリ性溶液、例えば、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化アンモニウム、二および三塩基性リン酸ナトリウム、二および三塩基性リン酸カリウム、トリポリリン酸ナトリウム、トリス、トリエタノールアミン、ポリエチレンイミンと併せて使用されてもよい。好適な実施形態において、ｐＨ７．５などのペプチドが自己集合を起こし始めるｐＨよりも０．５ｐＨ単位を超えて高い特定のｐＨをもたらすためのバッファーはトリスである。
【００９４】
製品の味および受け入れを改善するために、本発明のデンタルケア製品は、糖および／または糖代替物を含んでもよく、これは、好ましくは、歯の壊変を助長しない、例えば、ポリオールあるいは糖アルコール、例えば、ソルビトール、マンニトール、マルチトール、ラクチトール、イソマルト、キシリトールおよび／またはエリトリトール、あるいはＤ−タガトースおよび／またはトレハロースなどである。一実施形態において、本製品は、糖を含まない製品であり、すなわち、これらは、スクロースまたはグルコースを顕著な量で含まないか、またはまったく含まない。
【００９５】
デンタルケア製品が、自己集合ペプチドに加えて、抗齲蝕性であり、歯の再石灰化の助けになることが示されたキシリトール（Ｄ−キシリトール）を含む場合、特に有利である。これは、バイオフィルムおよびプラークも低減するため、本発明の自己集合ペプチドの歯の表面および潜在的な病変への到達を容易にする。当然、キシリトールは、その物質が有毒であるイヌ、雌ウシ、ヤギ、ウサギまたは他の動物に適用するためには使用されない。キシリトールは、ヒト対象または例えば、ネコ、好ましくは、ヒト対象における使用のための本発明の製品に使用することができる。
【００９６】
自己集合ペプチドを含む適した溶液は、例えば、１〜１０％のＰＶＰ、０〜３０％のグリセロール、好ましくは１〜１０％のグリセロール、１〜１０％の代用糖、例えばスクロース（ｓｕｃａｒｏｓｅ）またはキシリトール、０．０１〜１％のＴＲＩＳ、０．１〜１％のＮａＯＨ、０．１〜１％の自己集合ペプチド（例えば、配列番号１を有するＰ１１−４）、および１００まで水を含んでもよい。％はｗ／ｗである。好ましくは、前記溶液は口腔洗浄器との使用に適した粘度を有する。
【００９７】
ＷＯ２０１４／０２７０１２は、ペプチドが自己集合を起こし始めるｐＨより０．１から０．５ｐＨ単位高いｐＨを有する自己集合ペプチドを含む組成物の生成について記載している。前記組成物は、齲蝕病変への専門家の直接適用が意図される。ＷＯ２０１４／０２７０１２に開示されている方法は本発明に使用または適合されてもよいが、本発明のデンタルケア製品は、好ましくは、ｐＨを増加させる揮発性化合物を含むＷＯ２０１４／０２７０１２に従って作製された製品、およびそこで開示されているプロセスの中間生成物とは異なる。
【００９８】
一実施形態において、本発明のデンタルケア製品は、鉱物粒子を含まない。
【００９９】
本発明のデンタルケア製品の高いｐＨにおいて、工程（ｖ）における前記製品の適用前に、自己集合ペプチドのうちの少なくとも７０％、好ましくは少なくとも８０％、より好ましくは少なくとも９０％または少なくとも９５％または少なくとも９９％が、製品中で単量体型の集合していない状態で存在する。
【０１００】
工程（ｖ）における口腔内の複数の歯への適用時、ペプチドのうちの少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、好ましくは、少なくとも７０％は、少なくとも１分間、単量体型のままである。ペプチドの前記割合は、適用後少なくとも２分間、少なくとも３分間、少なくとも５分間または少なくとも１０分間、単量体状態のままであるのが好ましい。
【０１０１】
このように、本発明の方法は、単量体状態で存在する単量体型ペプチドの複数の歯、好ましくは、すべての歯への効果的な非標的デリバリーを可能にする。本ペプチドは、作用部位でのみ再石灰化のためのアセンブリー、および足場を形成し、この場合、最も好適な作用部位は、齲蝕病変などの病変である。歯の表面への分散後、自己集合ペプチドの高分子型または集合した膜も生じ、石灰化、したがって、歯の表面の硬度を増すことができる。
【０１０２】
特に好適な実施形態において、本デンタルケア製品は、ペプチドＰ１１−４（配列番号１）または配列番号２に示される改変されたＰ１１−４を含み、この製品のｐＨは約８．０以上であり、好ましくは、ｐＨは約８．０以上に緩衝される。
【０１０３】
一実施形態において、ペプチドのうちの少なくとも７０％は、工程（ｖ）における複数の歯への適用前に、製品中で単量体状態で存在し、ペプチドのうちの少なくとも５０％、好ましくは少なくとも６０％、より好ましくは少なくとも７０％は、口腔への適用後、少なくとも１分間、好ましくは少なくとも２分間、より好ましくは少なくとも３分間または少なくとも５分間、単量体状態で存在する。
【０１０４】
別の実施形態において、ペプチドのうちの少なくとも８０％は、工程（ｖ）における複数の歯への適用前に、製品中で単量体状態で存在し、ペプチドのうちの少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％または少なくとも８０％は、適用後、少なくとも１分間、好ましくは少なくとも２分間、より好ましくは少なくとも３分間または少なくとも５分間、単量体状態で存在する。
【０１０５】
特に好適な実施形態において、ペプチドのうちの少なくとも９０％は、工程（ｖ）における複数の歯への適用前に、製品中で単量体状態で存在し、ペプチドのうちの少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％または少なくとも９０％は、口腔への適用後、少なくとも１分間、好ましくは少なくとも２分間、より好ましくは少なくとも３分間、単量体状態で存在する。
【０１０６】
自己集合ペプチドのうちの少なくとも９０％は、適用前にデンタルケア製品中において単量体状態で存在するのが好ましい。
【０１０７】
自己集合ペプチドのうちの少なくとも６０％は、工程（ｖ）における複数の歯への適用後、少なくとも１分間、好ましくは少なくとも２分間、より好ましくは少なくとも３分間、単量体状態で存在するのが好ましい。
【０１０８】
当業者は、本質的にすべての自己集合ペプチドが、通常の実験によって単量体型であるかどうかを判断することができるであろう。例えば、溶液中のペプチドの集合状態は、１Ｈ−ＮＭＲなどの核磁気共鳴（ＮＭＲ）によって、円偏光二色性分析によって、動的光散乱（ＤＬＳ）分析によって、拡散波分光法、ネイティブ電気泳動法、粘度測定（レオロジー）、消散監視機能付き水晶振動子マイクロバランス（ＱＣＭＤ）および同種のもの、好ましくは、ネイティブ電気泳動法によって判断することができる。
【０１０９】
本発明の製品は、作用部位の外側におけるペプチドの自己集合による顕著な量のペプチドの損失が避けられるため、特に有利である。同時に、本発明の製品は、必要な濃度の単量体型自己集合ペプチドの歯および当てはまる場合は、病変の内側への分散を容易にして、自己集合を可能にする。
【０１１０】
溶液中のペプチドの分解および／または析出を防ぐために、ｐＨは、通常１０．５より高い値には増加させない。ペプチドの化学的特性がアミノ酸配列によって決まることは一般的に知られている。例えば、システイン残基およびメチオニン残基の可逆的酸化は、より高いｐＨにおいて促進されることもあり、チオールはより容易に脱プロトン化され、容易に鎖内または鎖間のジスルフィド結合を形成する。当業者は、塩基性のｐＨによって悪影響を受けるアミノ酸側鎖がわかるであろうし、通常の実験によって自己集合ペプチドの完全性を完全な状態のまま維持する最高のｐＨを求めることができるであろう。例えば、この最高のｐＨは、ペプチド中に存在する各アミノ酸の既知の特性に基づいて予測することができる。あるいは、ペプチドの完全性を判断するために、電気泳動法などの生化学的な方法が利用されてもよい。
【０１１１】
ペプチド濃度がペプチドの集合に影響を与える可能性がある、すなわち、特に高いペプチド濃度がより早く集合を引き起こす場合があることが当業者に知られている。さらに、並外れて低いペプチド濃度は、すなわち、歯の病変および口腔にある低いｐＨ条件下であっても本発明のペプチドの集合を妨げることがある。
【０１１２】
本発明のデンタルケア製品中のペプチド濃度は、１から５００００ｍｇペプチド／ｋｇバルク製品の間、１００から３００００ｍｇペプチド／ｋｇバルク製品、２００から１００００ｍｇペプチド／ｋｇバルク製品、５００〜５０００または１０００から２０００ｍｇペプチド／ｋｇバルク製品、好ましくは２００〜１０００ｍｇ／ｋｇであってもよい。濃度はまた、約１００〜３００ｍｇ／ｋｇバルク製品または約２００ｍｇ／ｋｇであってもよい。下の例は、そのような濃度が表面下の病変において自己集合ペプチドを侵入および濃縮を可能にさせることを示す。
【０１１３】
一実施形態において、デンタルケア製品は、自己集合ペプチドを含むカプセルを含む。これは、特に、そうでなければ保存中に自己集合ペプチドの凝集を引き起こし得る溶液中での、ペプチドの保存安定性を向上させる。そのようなカプセルは、口腔洗浄器を用いた適用などの機械的ストレスの後にペプチドを解放してもよい。
【０１１４】
カプセル化の適した方法は、例えば、Ｎｅｄｏｖｉｃら，Ｐｒｏｃｅｄｉａ  Ｆｏｏｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  １，２０１１，１８０６−１８１５において提供されている。好ましくは、本発明の自己集合ペプチドは、噴霧乾燥、押出成形法、例えば、シェル材料としてアルギナートに対する、乳化、またはリン酸カルシウム粒子に対する流動層コーティングによってカプセル化されてもよい。例えば、自己集合ペプチドＰ１１−４を含むアルギナートカプセルを、使用してもよい。
【０１１５】
自己集合ペプチドに適したカプセル化シェルは、デンプンおよび誘導体、例えば、アミロース、アミロペクチン、デキストリン、マルトデキストリン、ポリデキストロース、シロップ、セルロースおよび誘導体、植物滲出物および抽出物、例えば、アラビアゴム、トラガカントゴム、カラヤゴム、メスキートゴム、ガラクトマンナン、ペクチンおよび可溶性大豆多糖、海洋性抽出物、例えば、カラゲナンおよびアルギナート、微生物および動物多糖、例えば、デキストラン、キトサン、キサンタンおよびゲラン、タンパク質、例えば、ミルクおよびホエータンパク質、例えば、カゼイン、ゼラチンおよびグルテン、食用に適した脂質材料、例えば、脂肪酸および脂肪族アルコール、ワックス、例えば、蜜蝋、カルナウバワックスおよびキャンデリラワックス、グリセリドおよびリン脂質、または他の材料、例えば、ＰＶＰ、パラフィン、セラック、無機材料を含んでもよい。
【０１１６】
口内洗浄剤、マウススプレーまたは例えば口腔洗浄器での使用に適した溶液などの歯科衛生のために一般に使用される液体デンタルケア製品は、本発明において特に有用である。
【０１１７】
本発明のデンタルケア製品は、定期的に適用された後に、歯の病変を処置もしくは予防すること、および／または歯の表面を再石灰化することおよび／または対象の歯の表面の硬度、例えば、微小硬度を増加させることにおいて効果的である。この文脈において、定期的な適用は、２から６ヶ月に１回、少なくとも２ヶ月に１回、少なくとも毎月、少なくとも毎週または毎日の適用を含む。例えば、微小硬度、例えば、脱灰した歯の微小硬度は、１年間で２ヶ月に１回の定期的な適用時に少なくとも１０％、好ましくは、少なくとも２０％増加され得る。微小硬度、例えば、ヴィッカース硬度またはヌープ硬度、好ましくは、ヌープ硬度は、例えば、Ｃｈｕｅｎａｒｒｏｎら（２００９，Ｍａｔｅｒｉａｌｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  １２（４），４７３−４７６）に記載されている方法によって測定することができ、ここで、押し込み荷重は、好ましくは１００ｇである。
【０１１８】
以下の例は、本発明を説明することが意図され、限定することは意図しない。本明細書中で引用されるすべての参考文献は、これにより完全に組み込まれる。
【図面の簡単な説明】
【０１１９】
【図１】図１は、本発明の例示的な処理のフロースキームを示す。
【図２】図２は、本発明において使用するための例示的な容器を示す。Ａ、Ｂは、口腔洗浄器用の使い捨てカートリッジ（容器）のセットを示す。Ｃは、２つの区画を含む単一のカートリッジを示す。（１）容器；（２）２Ａにおいて、酸性薄膜除去溶液；２Ｂにおいて、自己集合ペプチドを含む本発明の溶液；（３）口腔洗浄ユニットへのアダプター；（４）流れの方向；（５）酸性薄膜除去溶液を含む区画；（６）膜；（７）自己集合ペプチドを含む本発明の溶液を含む区画；（８）とげ。
【図３】図３は、弾性係数Ｇ’の測定によって評価されたＰ１１−４の自己集合反応速度を示す。異なるバッファー組成（以下参照）を用いて１５ｍｇ／ｍｌでＰ１１−４を調製し、０．１％変形度、３７℃および１ラジアン／秒の周波数において測定した。ペプチド単量体の重合体への自己集合は、使用された中性のｐＨにおけるイオン強度と無関係に５分超かかっている。四角（記号の最上の線）−ＮａＣｌ：トリス（０．０５５Ｍ）＋ＮａＣｌ、最終的なイオン強度１４２ｍＭ；人工唾液（記号の上から２番目の線）：トリス、Ｃａ（ＮＯ３）２、ＫＨ２ＰＯ４（比率０．７７：０．１４：０．０８）、イオン強度１４２ｍＭ；ダルベッコ変法イーグル培地（ＤＭＥＭ）：ＮａＣｌ、ＮａＨＣＯ３、ＫＣｌ、ＣａＣｌ２、ＭｇＳＯ４（比率０．６６：０．４：０．０５：０．０２：０．００７）、イオン強度１６５ｍＭ；ＭｇＳＯ４：０．０５５Ｍ  トリス＋０．１９２Ｍ  ＭｇＳＯ４  ０．１４Ｍイオン強度
【図４】図４Ａは、取り出したヒト臼歯における人工病変の形成を示す。図４Ｂ、Ｃ、ＤおよびＥは、ｐＨ８．４〜８．５においてペプチドとともにインキュベーションした後の蛍光標識ペプチドＰ１１−４の人工病変への侵入を示す。図４ＦおよびＧは、ｐＨ６．３〜６．８においてペプチドとともにインキュベーションした後の蛍光標識ペプチドＰ１１−４を示す。共焦点写真は、インキュベーション前（ａ）、１分間のインキュベーション後（ｂ）、２分間のインキュベーション後（ｃ）、５分間のインキュベーション後（ｄ）および再石灰化バッファー中での４日間の洗浄後（ｅ）の４×の倍率における標識ペプチドの検出を示す。図４Ｃ、Ｄ、ＥおよびＧは、蛍光標識ペプチドＰ１１−４を示し、この場合、ペプチドとのインキュベーションは歯のヒトの唾液とのプレインキュベーション後であった。図４ＤおよびＥでは、唾液によって形成された薄膜を、ＮａＣｌＯ（図４Ｄ）および超音波処理（図４Ｅ）によってＰ１１−４とのインキュベーション前に除去した。これらの実験は、実施例３に詳細に記載している。
【発明を実施するための形態】
【実施例１】
【０１２０】
実施例１：本発明における使用のための例となる溶液
【０１２１】
基剤処方溶液Ｉ
成分 ％（ｗ／ｗ）
グリセロール                      １−３０％
香味料                            ０．１−２
クエン酸                          ０．０５−１
ソルビン酸カリウム                ０．０５−０．２
Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ  ４０７        ０．１−１
フッ化ナトリウム                  ０．１−１
塩化ナトリウム                    ０．５−１．０
リン酸水素二ナトリウム            ０．１−１
塩化カリウム                      ０．００１−０．１
リン酸二水素カリウム              ０．０１−０．１
界面活性剤                        ０．１−２
水                                １００まで
【０１２２】
溶液ＩＩのための設計
成分 ％（ｗ／ｗ）
ＰＶＰ                            １−１０
グリセロール                      １−３０
スクロース                        １−１０％
ＴＲＩＳ                          ０．０１−１
水酸化ナトリウム                  ０．０１−１
Ｐ１１−４                        ０．００１−１
水                                １００まで
【実施例２】
【０１２３】
実施例２：本発明の例となる処置方法
口腔洗浄
工程Ａ：バイオフィルムの除去
−対象は、練り歯磨き、例えば研磨性練り歯磨きで歯を掃除する
−練り歯磨きの残りを吐き出す
工程Ｂ：薄膜の除去
−対象は、水、グリセロール、香味料、クエン酸、ソルビン酸カリウム、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ  ４０７、フッ化ナトリウム、塩化ナトリウム、リン酸水素二ナトリウム、塩化カリウム、リン酸二水素カリウム、ＥＤＴＡ（濃度、実施例Ｉ参照）を含む５ｍｌの口内洗浄液ＩＡを取る；
−または、あるいは、対象は、水、グリセロール、香味料、クエン酸、ソルビン酸カリウム、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ  ４０７、フッ化ナトリウム、塩化ナトリウム、リン酸水素二ナトリウム、塩化カリウム、リン酸二水素カリウム、ラウリル硫酸ナトリウム  ＳＤＳ（濃度、実施例Ｉ参照）を含む５ｍｌの口内洗浄液ＩＢを取る；
−または、あるいは、対象は、水、グリセロール、香味料、クエン酸、ソルビン酸カリウム、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ  ４０７、フッ化ナトリウム、塩化ナトリウム、リン酸水素二ナトリウム、塩化カリウム、リン酸二水素カリウム、コカミドプロピルベタイン（Ｃｏｃｏａｍｉｄｏｐｒｏｐｙｌｂｅｔａｉｎｅ）（濃度、実施例Ｉ参照）を含む５ｍｌの口内洗浄液ＩＣを取る
および口腔内で約５分間、口内洗浄液を旋回させる
−対象は、口内洗浄液を吐き出す
工程Ｃ：再生成
−対象は、ＰＶＰ／グリセロール、水、エタノール、スクロース、Ｐ１１−４、水酸化ナトリウム、ＴＲＩＳ（濃度、実施例Ｉ参照）を含む５ｍｌの口内洗浄液ＩＩを取り、口腔内で約５分間、該溶液を旋回させる
−対象は、５分後、口内洗浄液を吐き出す。
【０１２４】
口腔洗浄
工程Ａ：バイオフィルムの除去
−対象は、練り歯磨き、例えば研磨性練り歯磨きで歯を掃除する
−練り歯磨きの残りを吐き出す
工程Ｂ：薄膜の除去
−対象は、カートリッジＩを口腔洗浄器に置く。カートリッジＩは、以下のものを含む３００ｍｌ−６００ｍｌの酸性溶液（ｐＨ４−７）を含む：
−溶液ＩＡ：水、グリセロール、香味料、クエン酸、ソルビン酸カリウム、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ  ４０７、フッ化ナトリウム、塩化ナトリウム、リン酸水素二ナトリウム、塩化カリウム、リン酸二水素カリウム、ＥＤＴＡ（濃度、実施例Ｉ参照）；
−または、あるいは水、グリセロール、香味料、クエン酸、ソルビン酸カリウム、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ  ４０７、フッ化ナトリウム、塩化ナトリウム、リン酸水素二ナトリウム、塩化カリウム、リン酸二水素カリウム、ラウリル硫酸ナトリウム  ＳＤＳ（濃度、実施例Ｉ参照）を含む溶液ＩＢ；
−または、あるいは、水、グリセロール、香味料、クエン酸、ソルビン酸カリウム、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ  ４０７、フッ化ナトリウム、塩化ナトリウム、リン酸水素二ナトリウム、塩化カリウム、リン酸二水素カリウム、コカミドプロピルベタイン（濃度、実施例Ｉ参照）を含む溶液ＩＣ
−対象は、カートリッジＩが終了するまで、口腔洗浄器での歯のクリーニングを開始する。処理中、対象は、余分な液体を吐き出す。
工程Ｃ：再生成
−対象は、カートリッジＩを取り外し、カートリッジＩＩを口腔洗浄器に置く。カートリッジＩＩは、ＰＶＰ／グリセロール、水、エタノール、スクロース、Ｐ１１−４、水酸化ナトリウム、ＴＲＩＳ溶液（濃度、実施例Ｉ参照）を含む１００ｍｌのわずかに塩基性の（ｐＨ＞７．５）溶液を含む。
−対象は、カートリッジＩＩが終了するまで、口腔洗浄器での歯のクリーニングを開始する。処理中、対象は、余分な液体を吐き出す。
【実施例３】
【０１２５】
実施例３−単量体型自己集合ペプチドの表面下の病変への侵入
ａ）人工齲蝕病変の作製
取り出したヒト臼歯に対する人工病変の作製を、Ｌｏ  ｅｔ  ａｌ．  ２０１０  （Ｊ  Ｄｅｎｔ．  ３８（４）：３５２−３５９）に記載されるとおりに実施した。脱灰した表面下の領域（すなわち、人工齲蝕病変または白斑）の位置を明確にするために、歯を無色のマニキュア液で覆い、およそ４×４ｍｍの領域を残しておいた。その歯を脱灰バッファー（２．２ｍＭ  ＣａＣｌ２、２．２ｍＭ  ＮａＨ２ＰＯ４、５０ｍＭ  酢酸；１ＭのＫＯＨによりｐＨを４．４に調節した）中に３７℃で３日間置いた。一般的な活動性齲蝕病変においてのように、確実にすべての孔を開いた状態にするために、生じた表面下の病変を１０μＬの２％ＮａＣｌＯ（１分間のインキュベーション）により処置し、すすぎ、室温で風乾した。
プラセボ処置サンプルも同一の前処理を行った。
一般的な人工病変を図４Ａに示す。
【０１２６】
ｂ）処置
−  ２５ｍＭトリスバッファー中の、１０ｐｐｍのＡＴＴＯ６４７−Ｐ１１−４（蛍光標識Ｐ１１−４（配列番号６）：Ａｃ−ＱＱＲＦＥＷＥＦＥＱＱＳＧＳＧＣ−（ＡＴＴＯ６４７）−ＮＨ２）を添加した、Ｐ１１−４（配列番号２）の２００ｐｐｍ（すなわち、２００μｇ／ｍｌ）溶液、すなわち、１：２０の溶液をさまざまなｐＨ、特に、８．４または８．５または６．３、６．５または６．８）において調製した。
−  下記表に明記されるとおり、例えば、ヒト唾液中における１日（約２４時間）のインキュベーションによって、適宜、それに続いて５分間の超音波処理（音波歯ブラシ、Ｓｏｎｉｃａｒｅ  Ｄｉａｍｏｎｄ  Ｃｌｅａｎ（登録商標）（Ｐｈｉｌｉｐｓ）による２５８ｈｚ）または２％ＮａＣｌＯに１分間漬けることによって歯を適宜、前処理した。
−  歯をＰ１１−４溶液に規定した期間、１、２または５分間浸した後、取り出し、水中において１０分間または再石灰化バッファー（２ｍＭ  Ｃａ（ＮＯ３）、１．２ｍＭ  ＫＨＰＯ４、および６０ｍＭ  トリス／ＨＣｌ、１Ｍ  ＫＯＨによりｐＨを７．４に調節した）中において４日間および／もしくは６日間洗浄した。
−  １、２または５分間のインキュベーション後の共焦点評価は、歯がＰ１１−４溶液中にある間に行い、水中の１０分後または再石灰化バッファー中の４もしくは６日後の洗浄後に行ってもよい。
【０１２７】
ｃ）共焦点顕微鏡法
サンプルをμ−スライドＩ（ｉｂｉｄｉ、Ｍａｒｔｉｎｓｒｉｅｄ）において蒸留水に入れ、共焦点レーザー顕微鏡（Ｏｌｙｍｐｕｓ  ＩＸ８１）によって解析した。記録された重ねた４つの二次元イメージのそれぞれは、５１．４μｍ厚の病変容量を投影し、２０５μｍの合計評価深さを得た（対物レンズ：ＵＰＬＳＡＰＯ  ２０×／ＮＡ  ０．７５；ヘリウムネオンガスレーザー；励起：６３３ｎｍおよび蛍光：６６８ｎｍ）。イメージをＯｌｙｍｐｕｓソフトウェア（ＦｌｕｏＶｉｅｗ  ＦＶ１０００）によって解析した。
【０１２８】
ｄ）結論
視覚的解析は正確な量的結論は与えないが、繰り返される実験において検出される傾向がインキュベーションおよび前処理の異なる条件間の比較を可能にする。
【０１２９】
表１：処置の条件および例となる病変における蛍光Ｐ１１−４の存在の評価を示す（１＝蛍光Ｐ１１−４がまったく存在しないか、または少し存在するから４＝多く存在するまで）
【０１３０】
【表１】
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【０１３１】
ｐＨ８．５における病変のＰ１１−４とのインキュベーション後（歯１０および１、図４Ｂの歯１０）、ペプチドは、インキュベーションの１分後に既に検出可能であった（図４Ｂｂ）が、大半のペプチドは、病変において２分間のインキュベーション後（図４Ｂｃ）または５分間のインキュベーション後（図４Ｂｄ）に検出された。それより少ないが顕著な量のペプチドが、再石灰化バッファー中での４日間のインキュベーション後に、病変において再現性よく依然として検出できた（図４Ｂｅ）。
【０１３２】
洗浄が水中で行われた範囲のみ異なった比較実験（歯２、写真は示していない）は、水の代わりに再石灰化バッファーが病変における自己集合ペプチドの存在を安定させる傾向を示している。
【０１３３】
これらの実験は、やや塩基性のバッファー中で２００ｐｐｍの濃度の単量体型蛍光標識Ｐ１１−４が人工齲蝕病変に拡散し、そこで安定したネットワークを形成することができることを示している。従来技術は、これが病変の再石灰化につながることを実証している。病変の外側では顕著な量のペプチドは検出されていない。病変におけるペプチドの集合により、濃度勾配がシフトし、溶液から病変へのペプチドのさらなる拡散が可能になり、それが、病変における自己集合ペプチドの濃縮につながると考えられる。Ｐ１１−４含有溶液と接触させた後に、ヒトの唾液を模倣した再石灰化バッファー中でインキュベーションすると、おそらく、複合体の形成および再石灰化によって、病変における自己集合ペプチドの維持が向上する。
【０１３４】
非標識Ｐ１１−４は検出された標識ペプチドと同じように挙動するため、これは、この濃度または同様の低濃度で本発明による表面下の齲蝕病変などの初期の齲蝕病変の非標的処置に使用することができるという結論を得ることができる。
【０１３５】
Ｐ１１−４とのインキュベーションの前の前処理としての音波処理は、病変におけるペプチドの存在を増加させた（歯ＺＲ１、写真は示していない）。
【０１３６】
歯上における薄膜の形成につながることが知られている、人工病変を有する歯のヒト唾液とのプレインキュベーション後の（歯１１、５およびＺＲ４、図４Ｃにおける歯１０）、ｐＨ８．５における１、２、または５分間の蛍光標識ペプチドＰ１１−４とのインキュベーションは、そのようなプレインキュベーションを行わない場合よりも歯上または病変における蛍光ペプチドの存在が著しく少なくなる傾向があった（図４Ｂ）。
【０１３７】
ヒトの唾液とのインキュベーション後の薄膜のこの悪影響は、超音波処理（歯ＺＲ３、図４Ｄに示す）またはＮａＣｌＯによる処理（歯ＺＲ２、図４Ｅに示す）のいずれかにより歯をクリーニングすることによって打ち消すことができたことを示すことができた。
【０１３８】
このように、薄膜の形成および音波処理によるクリーニング後に、驚くべきことに、自己集合ペプチドが唾液とのプレインキュベーションを行わない場合よりもさらに多い量で検出できた。
【０１３９】
ｐＨ６．３〜６．８におけるインキュベーション後（歯４、１２（ともに唾液を含まない）、３、１３（ともに唾液を含む）、それぞれ図４Ｆおよび４Ｇに示される歯１２および１３）、すなわち、ペプチドが重合型であったとき、ｐＨ８．４または８．５におけるインキュベーション後よりも少ない量のペプチドが、病変において一般に検出できた。唾液とのインキュベーションによる薄膜形成（歯３、１３）はペプチドの侵入をさらに低減させた。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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