(57)【要約】  本発明は、ペプチドの化学、薬理学、および薬に関し、具体的には、性機能および生殖器機能を刺激する特性を有し、高い保存安定性を有する新規のペプチド群に関する。この目的に対して、一般式（Ｉ）：Ａ−Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｈｙｐ−Ｂ−Ｃ−Ｄ−Ｘのペプチド（式中、Ａは、０、Меｔ、Меｔ（０）、Тｈｒ、Аｌａ、Ｈｉｓ、Ｐｈｅ、Ｌｙｓ、Ｇｌｙであり；Ｂは、０、Ｇｌｙ、Ａｓｐ、Ｔｒｐ、Ｇｌｎ、Ａｓｎ、Ｔｙｒ、Ｈｙｐ、Ａｒｇであり；Ｃは、０、Аｒｇ、Рｈе、Тｙｒ、Ｇｌｙ、Нｉｓ、Ｈｙｐ、Ｌｙｓであり；Ｄは、０、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Тｙｒ、Тｒｐ、Рｈｅ、Нｉｓであり；Ｘは、ОН、ОСН３、ＮＨ２であり；ここで、０はアミノ酸残基の非存在であり、ただし、Ａ≠０の場合、Ｂおよび／またはＣおよび／またはＤ≠０であり、Ｂ≠０の場合、Ｃおよび／またはＤ≠０である）であって、テトラペプチド、ならびにРｈｅ−Тｈｒ−Ｌｙｓ−Ｈｙｐ−Ｇｌｙ、Тｈｒ−Ｌｙｓ−Ｈｙｐ−Ｈｙｐ−АｒｇおよびТｈｒ−Ｌｙｓ−Ｈｙｐ−Аｒｇ−Ｇｌｙの各ペプチドを除くペプチドが提案されている。本発明はまた、示されたペプチドを含有する医薬組成物に、ならびに重度の性欲減退を有するかまたは性欲の完全欠如、オルガスム機能障害、器質性障害または疾患に起因しない性機能障害、ＨＳＤＤ、ＦＳＡＤまたはＦＳＩＡＤを有する婦女の治療のための上に示す組成物の使用に、ならびに女性の性機能障害を治療および／または予防する方法に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（Ｉ）：
Ａ−Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｈｙｐ−Ｂ−Ｃ−Ｄ−Ｘ      式（Ｉ）
を有する性機能および生殖器機能の刺激に活性であるペプチドまたは薬学的に許容されるその塩
（式中、
Ａは、０、Меｔ、Меｔ（０）、Тｈｒ、Аｌａ、Ｈｉｓ、Ｐｈｅ、Ｌｙｓ、Ｇｌｙであり；
Ｂは、０、Ｇｌｙ、Ａｓｐ、Ｔｒｐ、Ｇｌｎ、Ａｓｎ、Ｔｙｒ、Ｈｙｐ、Ａｒｇであり；
Ｃは、０、Аｒｇ、Рｈе、Тｙｒ、Ｇｌｙ、Нｉｓ、Ｈｙｐ、Ｌｙｓであり；
Ｄは、０、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Тｙｒ、Тｒｐ、Рｈｅ、Нｉｓであり；
Ｘは、ОН、ОСН３、ＮＨ２であり；
ここで、０はアミノ酸残基の非存在であり、ただし、
Ａ≠０の場合、Ｂおよび／またはＣおよび／またはＤ≠０、
Ｂ≠０の場合、Ｃおよび／またはＤ≠０である）であって、
テトラペプチド、ならびにРｈｅ−Тｈｒ−Ｌｙｓ−Ｈｙｐ−Ｇｌｙ、Тｈｒ−Ｌｙｓ−Ｈｙｐ−Ｈｙｐ−АｒｇおよびТｈｒ−Ｌｙｓ−Ｈｙｐ−Аｒｇ−Ｇｌｙの各ペプチドを除く、ペプチド。
【請求項２】
治療有効量の請求項１に記載の前記ペプチドと少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤とを含む、女性の性機能障害、ＨＳＤＤ、ＦＳＡＤまたはＦＳＩＡＤの治療のための、性機能および生殖器機能の刺激に活性である医薬組成物。
【請求項３】
前記薬学的に許容される賦形剤は、ビヒクル、保存剤、および／または溶媒である、請求項２に記載の医薬組成物。
【請求項４】
液体剤形である請求項２に記載の医薬組成物。
【請求項５】
前記液体剤形は鼻腔内投与用の液剤である、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項６】
次の成分を、下記の濃度、ｇ／ｌ：
前記ペプチド  −  ２〜２０；
塩化ベンザルコニウム  −  ０．０９５〜０．１０５
で含む水溶液を含む、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項７】
前記性機能障害は性欲減退または性欲の完全欠如を特徴とする、請求項２に記載の医薬組成物。
【請求項８】
前記性機能障害はオルガスム機能障害である、請求項２に記載の医薬組成物。
【請求項９】
前記性機能障害は性交への嫌悪感および性的満足感の欠如を特徴とする、請求項２に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
前記性機能障害は腟痙、排尿障害またはヒポリビデミアである、請求項２に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
請求項２に記載の医薬組成物を患者に投与することを含む、女性の性機能障害、ＨＳＤＤ、ＦＳＡＤまたはＦＳＩＡＤの治療および／または予防方法。
【請求項１２】
前記医薬組成物は鼻腔内に投与される、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記医薬組成物はスプレー剤の形態で鼻腔内に投与される、請求項１２に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
本発明は、ペプチドの化学、薬理学、および薬に関し、具体的には、性機能および生殖器機能を刺激する特性を有し、かつ高い保存安定性を有する新規のペプチド群、医薬組成物を得る上でのそれらの使用、ならびにこれらのペプチドを含有する医薬組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
先行技術
女性の性機能障害（ＦＳＤ）とは、性的活動への関心の喪失、性的興奮を得るまたは持続することの反復性の不能、および適切な興奮後にオルガスムに達することができないことを招く性機能の種々の障害に関するものである。
【０００３】
女性の性機能障害の治療のために多くの異なる治療方法が提案され、使用されてきているが、成功の程度は多様である。これらの治療方法は完全に成功であったというわけではなく、またはそれらの副作用を忍容するのが困難でもあった。診療で使用される最も効果的な薬物はフリバンセリンである。それにもかかわらず、女性の性機能障害の治療のための新しい薬物の開発が必要である。
【０００４】
治療用ペプチドは医療現場で広く使用されている。かかる治療用ペプチドを含有する医薬組成物は、実用化に適するためには数年間の有効期間を有する必要がある。しかし、ペプチド組成物は、化学的または物理的な分解を受けやすいために、まさにその本質により不安定である。化学的分解には、酸化、加水分解、ラセミ化または架橋結合などの共有結合の変化が含まれる。物理的分解には、ペプチドの天然構造に関して、表面への凝集、沈澱または吸着にいたる可能性のある立体構造の変化が含まれる。
【０００５】
内因性ペプチドタフトシンの合成類似体である一般式Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏのヘプタペプチド（ｈｅｐｔｏｐｅｐｔｉｄｅ）「Ｓｅｌａｎｋ」は、生殖器機能障害および性機能障害の予防および治療のための薬物として使用できることは既に確立されている（ＲＵ２４０４７９３）。
【０００６】
文献ＲＵ２５０７２１２により、生殖器機能および性機能を刺激する特性を有するペプチド群：
Ａ−Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｂ−Ｃ−Ｄ−Ｘ
（式中、Ａは、０、Меｔ、Меｔ（０）、Тｈｒ、Аｌａ、Ｈｉｓ、Ｐｈｅ、Ｌｙｓ、Ｇｌｙであり；
Ｂは、０、Ｇｌｙ、Ａｓｐ、Ｔｒｐ、Ｇｌｎ、Ａｓｎ、Ｔｙｒ、Ｐｒｏ、Ａｒｇであり；
Ｃは、０、Аｒｇ、Рｈе、Тｙｒ、Ｇｌｙ、Нｉｓ、Ｐｒｏ、Ｌｙｓであり；
Ｄは、０、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Тｙｒ、Тｒｐ、Рｈｅ、Нｉｓであり；
Ｘは、ОН、ОСН３、ＮＨ２であり；ここで、０はアミノ酸残基の非存在であり、ただし、Ａ≠０の場合、Ｂおよび／またはＣおよび／またはＤ≠０であり、Ｂ≠０の場合、Ｃおよび／またはＤ≠０である）であって、テトラペプチド、ならびにРｈｅ−Тｈｒ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ、Тｈｒ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−АｒｇおよびТｈｒ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Аｒｇ−Ｇｌｙの各ペプチドを除くペプチド群が知られている。
【０００７】
一般式Ａ−Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｂ−Ｃ−Ｄ−Ｘに対応する合成ペプチド、特にトリペプチドＴｈｒ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ、ペンタペプチドＴｈｒ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ、およびヘキサペプチドＴｈｒ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ、は、生殖器機能および性機能の刺激剤として推奨し得ることが確立されている。
【０００８】
生殖器機能および性機能の刺激剤として推奨されている、一般式А−Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｂ−Ｃ−Ｄ−Ｘに関する文献ＲＵ２５０７２１２のすべてのペプチド（テトラペプチド、ならびにまたＰｈｅ−Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ、Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−ＡｒｇおよびＴｈｒ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｇｌｙの各ペプチドを除く）は、共通の特徴、すなわち、ペプチド分子の構造中のトリペプチドＴｈｒ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏの存在を有する。しかし、これらすべてのペプチドをベースとする剤形は、＋１０℃までの温度でのみ保たれた場合に許容される安定性を有し、このことが、それらの商業的可能性を減少させ、薬物の保存、使用、流通および販売において不都合を招く。
【０００９】
上記のペプチドはそれらの保存条件および有効期間に制限があるので、保存条件に関するこれらの制限を軽減し、薬物の服薬遵守の程度（患者の行動および医師によって与えられた推奨の遵守の程度）を高めることが必要である。
【００１０】
したがって、生殖器機能および性機能を刺激する特性を有し、良好な有効性および保存中の改善された安定性を有する新しいペプチドを創製する必要が存在する。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
発明の開示
本発明が解決する問題とは、生殖器機能および性機能を刺激する特性を有し、高い有効性および保存中の安定性を有し、かつ診療での使用に対して期待される新しいペプチドの開発および創製である。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明によって達成される技術的結果とは、生殖器機能および性機能を刺激する特性を有し、高い有効性および保存中の高い安定性を有する、新しいペプチドの開発および製造であり、これにより、本発明によるペプチドをベースとした薬物の保存条件に関する制限を軽減することが可能となる。さらに、さらなる技術的結果とは、それらのペプチド類似体と比較して、本発明によるペプチドの作用により、好ましい（治療）効果が発現する速度がより速いことである。
【００１３】
この技術的結果は、一般式（Ｉ）：
Ａ−Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｈｙｐ−Ｂ−Ｃ−Ｄ−Ｘ      式（Ｉ）
の化合物または薬学的に許容されるそれらの塩
（式中、Ａは、０、Меｔ、Меｔ（０）、Тｈｒ、Аｌａ、Ｈｉｓ、Ｐｈｅ、Ｌｙｓ、Ｇｌｙであり；
Ｂは、０、Ｇｌｙ、Ａｓｐ、Ｔｒｐ、Ｇｌｎ、Ａｓｎ、Ｔｙｒ、Ｈｙｐ、Ａｒｇであり；
Ｃは、０、Аｒｇ、Рｈе、Тｙｒ、Ｇｌｙ、Нｉｓ、Ｈｙｐ、Ｌｙｓであり；
Ｄは、０、Ｖａｌ、Ｇｌｙ、Тｙｒ、Тｒｐ、Рｈｅ、Нｉｓであり；
Ｘは、ОН、ОСН３、ＮＨ２であり；
ここで、０はアミノ酸残基の非存在であり、ただし、Ａ≠０の場合、Ｂおよび／またはＣおよび／またはＤ≠０であり、Ｂ≠０の場合、Ｃおよび／またはＤ≠０である）であって、テトラペプチド、ならびにРｈｅ−Тｈｒ−Ｌｙｓ−Ｈｙｐ−Ｇｌｙ、Тｈｒ−Ｌｙｓ−Ｈｙｐ−Ｈｙｐ−АｒｇおよびТｈｒ−Ｌｙｓ−Ｈｙｐ−Аｒｇ−Ｇｌｙの各ペプチドを除く化合物の開発および製造によって達成される。
【００１４】
驚くべきことに、本発明によるペプチド中にＰｒｏの代わりにヒドロキシプロリン（Ｈｙｐ）が存在することによって、ペプチドの酸化および分解のレベルが顕著に低下し、それによってこれらのペプチドをベースとする薬物を室温に保つことが可能になることを発見した。さらに、ペプチド中でＰｒｏの代わりにНурを使用してもそれらの安全性には影響を及ぼさない。さらに、驚くべきことに、これらのペプチドの作用による効果が文献ＲＵ２５０７２１２に記載のペプチド類似体と比較して２倍の速さで達成されるので、本発明によるペプチドの使用によって、患者の治療過程を著明に短縮できることが確立された。
【００１５】
本発明はまた、女性の性機能障害の治療のための性機能および生殖器機能を刺激する特性を特徴とする医薬組成物を得るための本発明によるペプチドの使用に関する。
【００１６】
本発明はまた、女性の性機能障害、ＨＳＤＤ、ＦＳＡＤまたはＦＳＩＡＤを治療するための性機能および生殖器機能を刺激する特性を有し、本発明の主題である少なくとも１つの治療有効量と少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤とを含有する医薬組成物を含む。特に、賦形剤はビヒクル、保存剤、および／または溶媒とすることができる。
【００１７】
本発明のある特定の変形実施形態では、本発明による医薬組成物は液体剤形である。本発明の一部の変形実施形態では、液体剤形は鼻腔内投与用の液剤である。本発明のある特定の好ましい変形実施形態では、医薬組成物は、次の成分を、濃度、ｇ／ｌ
一般式（Ｉ）のペプチド  −  ２〜２０；
塩化ベンザルコニウム  −  ０．０９５〜０．１０５
で含む水溶液である。
【００１８】
本発明のある特定の変形実施形態では、性機能障害は性欲減退または性欲の完全欠如を特徴とする。本発明のいくつかの特定の変形実施形態では、性機能障害は性的欲望または性的魅力の減退または欠如を特徴とする。本発明の好ましい変形実施形態では、性機能障害はヒポリビデミア（ｈｙｐｏｌｉｂｉｄｅｍｉａ）である。本発明の他の変形実施形態では、性機能障害はオルガスム機能障害である。
【００１９】
本発明のある特定の変形実施形態では、女性の性機能障害は、性的嫌悪感および性的満足感の欠如、生殖器反応の不十分または欠如、非器質性の原因による腟痙、非器質性の原因による排尿障害である。
【００２０】
本発明はまた、器質性障害または疾患（身体的または心理的）に起因しない他の種類の性機能障害も含む。
【００２１】
本発明のまた別の態様は、組成物を鼻腔内に与えることを特徴とする、本発明による組成物を投与する方法であり、ある特定の変形形態では、組成物をスプレー剤の形態で鼻腔内に与える。
【００２２】
本発明はまた、本発明による医薬組成物を患者に投与することを含む、女性の性機能障害の治療および／または予防方法に関する。
【００２３】
本発明はまた、一般式（Ｉ）の化合物の製造を含む。
【図面の簡単な説明】
【００２４】
【図１】トリペプチドＴｈｒ−Ｌｙｓ−Ｈｙｐの合成のダイアグラムである。
【図２】ペンタペプチドＴｈｒ−Ｌｙｓ−Ｈｙｐ−Ａｒｇ−Ｈｙｐの合成のダイアグラムである。
【図３】ヘキサペプチドＴｈｒ−Ｌｙｓ−Ｈｙｐ−Ａｒｇ−Ｈｙｐ−Ｐｈｅの合成のダイアグラムである。
【図４】ラットの求交尾的行動に対するペプチドＴｈｒ−Ｌｙｓ−Ｈｙｐの影響をペプチドＴｈｒ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏと比較した図である。
【図５】ラットの求交尾的行動に対するペプチドＴｈｒ−Ｌｙｓ−Ｈｙｐ−Ａｒｇ−Ｈｙｐの影響をペプチドＴｈｒ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｐｒｏと比較した図である。
【図６】ラットの求交尾的行動に対するペプチドＴｈｒ−Ｌｙｓ−Ｈｙｐ−Ａｒｇ−Ｈｙｐ−Ｐｈｅの影響をペプチドＴｈｒ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅと比較した図である。
【発明を実施するための形態】
【００２５】
発明の詳細な開示
定義と用語
本発明をよりよく理解するために、本発明で使用するいくつかの用語を下に提示する。
【００２６】
女性の性機能障害は、第一相での興奮段階、オルガスムまたは解放の段階での性的反応の過程における障害、および性交痛である。主観的要因および客観的要因を含め、障害は、満足感の獲得を妨げる。さらに、これは、不妊にいたることもあり、または不妊と多少とも関連している。
【００２７】
性欲（ラテン語に由来：「魅力、欲望、情熱」）とは、性的欲望または性的本能を意味する。これは性的魅力の心理的要素である。
【００２８】
ヒポリビデミア、性無欲症は、性的魅力の欠如または喪失である。ヒポリビデミアは、器質性障害または疾患に起因しない性機能障害のうちの１つである（ＭＫＢ−１０のコードＦ５２．０）。
【００２９】
ＨＳＤＤとは性的欲求低下障害である。
ＦＳＡＤとは女性の性的興奮障害である。
【００３０】
ＦＳＩＡＤとは女性の性的関心／興奮障害である。
服薬遵守とは、治療へのアドヒアランス、患者の行動と医師によって与えられた推奨との間の一致の程度である。
【００３１】
本文書におけるＭｅｔ（０）は、メチオニンスルホキシドを意味する。
本発明の実施
本発明を使用する場合の技術的結果の客観的な顕現の可能性については、実験性質の情報を含む、実施例に提示される信頼性のあるデータによって確認される。本出願の資料に提示されたこれらおよびすべての実施例は限定するものではなく、本発明の例示としてのみ与えられることを理解されたい。
【実施例】
【００３２】
本発明によるペプチドを得る方法の調査
実施例１．トリペプチドＴｈｒ−Ｌｙｓ−Ｈｙｐの合成。
【００３３】
トリペプチドＴｈｒ−Ｌｙｓ−Ｈｙｐの合成は、図１に提示のダイアグラムに従って行う。トリペプチドＴｈｒ−Ｌｙｓ−Ｈｙｐの合成は、最新の保護基および先行技術から既知の溶液中でペプチド結合を創製する方法を使用して行う。ペプチド結合を創製するために、活性化エステルの方法およびＴＢＡ（テトラブチルアンモニウム）塩の方法を使用する。ペプチド鎖は段階的に成長させる。
【００３４】
実施例２．ペンタペプチドＴｈｒ−Ｌｙｓ−Ｈｙｐ−Ａｒｇ−Ｈｙｐの合成。
ペンタペプチドＴｈｒ−Ｌｙｓ−Ｈｙｐ−Ａｒｇ−Ｈｙｐの合成は、図２に提示のダイアグラムに従って行う。ペンタペプチドＴｈｒ−Ｌｙｓ−Ｈｙｐ−Ａｒｇ−Ｈｙｐの合成は、最新の保護基および先行技術から既知の溶液中でペプチド結合を創製する方法を使用して行う。ペプチド結合を創製するために、活性化エステルの方法およびカルボジイミドの方法を使用する。ペプチド鎖の段階的成長およびブロック法の両方を使用する。
【００３５】
実施例３．ヘキサペプチドＴｈｒ−Ｌｙｓ−Ｈｙｐ−Ａｒｇ−Ｈｙｐ−Ｐｈｅの合成。
ヘキサペプチドＴｈｒ−Ｌｙｓ−Ｈｙｐ−Ａｒｇ−Ｈｙｐ−Ｐｈｅの合成は、図３に提示のダイアグラムに従って行う。ヘキサペプチドＴｈｒ−Ｌｙｓ−Ｈｙｐ−Ａｒｇ−Ｈｙｐ−Ｐｈｅの合成は、最新の保護基および先行技術から既知の溶液中でペプチド結合を創製する方法を使用して行う。ペプチド結合を創製するために、ＴＢＡ塩の方法、活性化エステルの方法、カルボジイミドの方法および混合無水物の方法を使用する。ペプチド鎖の段階的成長およびブロック法の両方を使用する。
【００３６】
実施例１〜３に提示のペプチドの合成のために、保護されたおよび遊離の両方のＬ−アミノ酸の誘導体を使用する。ペプチドの合成中に使用される溶媒を対応する方法で脱水する。溶液の煮詰めを、４０℃で真空蒸発器で行う。得られた中間体化合物および合成したペプチドを、Ｓｉｌｕｆｏｌ社（チェコ共和国）製のシリカゲルプレート上でＴＬＣ分析を用いてチェックする。ニンヒドリンおよび（または）ｏ−トリジンの溶液をプレートに噴霧することによって、得られた化合物を検出する。得られたペプチドの均一性の確認を、液体マイクロカラムクロマトグラフＭｉｌｌｉｃｈｒｏｍ  Ａ−０２での高速液体クロマトグラフィー（ＨＥＬＣ）を用いて行う。合成ペプチドの構造を、ＴｈｅｒｍｏＥｌｅｃｔｒｏｎ社製のＬＣＱ  Ａｄｖａｎｔａｇｅ  ＭＡＸ質量分析計での質量分析を用いて特徴付ける。
【００３７】
実施例１〜３に提示の本発明によるペプチドのクロマトグラフィー分析および質量分析の結果を表１に示す。ＨＥＬＣ法により合成ペプチドを分離するためのグラジエントのフォームを表２に示す。
【００３８】
【表１】
2019534279.tif 000002
【００３９】
表１に、液体マイクロカラムクロマトグラフＭｉｌｌｉｃｈｒｏｍ  Ａ−０２で得られたデータ（ＨＥＬＣ）および質量分析計ＴｈｅｒｍｏＥｌｅｃｔｒｏｎ  ＬＣＱ  Ａｄｖａｎｔａｇｅ  ＭＡＸを用いて得られた合成ペプチドの質量分析の特徴を示す。
【００４０】
展開したクロマトグラフィー条件により、クロマトグラフィー的に純粋な生成物を容易に得ることが可能になる。
【００４１】
ペプチド分析用のクロマトグラフィー条件：
Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈ  Ｍｉｌｌｉｃｈｒｏｍ  Ａ−０２
カラム：Ｐｒｏｎｔｏｓｉｌ  １２０−５С１８аｑ、２＊７５ｍｍ
溶離液А：０．２Ｍ  ＬｉＣｌＯ４＋５ｍＭ  НＣｌＯ４
溶離液Ｂ：メタノール
【００４２】
【表２】
2019534279.tif 000003
【００４３】
流速：  １５０ｍｃｌ／分
検出器波長設定：２１０、２２０、２３０、２４０ｎｍ
質量分析の分析条件：
機器：ＴｈｅｒｍｏＥｌｅｃｔｒｏｎ  ＬＣＱ  Ａｄｖａｎｔａｇｅ  ＭＡＸ；
イオン源：エレクトロスプレー；５ｍｃｌ／分の速度で０．１％酢酸中の１０ｍｃｇ／ｍｌの濃度のペプチド溶液のソースに直接供給する；
イオン衝突法（Не）による３５ｅＶでの分子イオンのフラグメント化。ソースの温度  ２５０℃、イオン化ポテンシャル  ＋３．５ｋＶ。
【００４４】
化合物の治療的使用方法
本発明の主題には、治療有効量の一般式（Ｉ）のペプチドを、相応する治療が必要な対象に投与することも含まれる。
【００４５】
用語「治療有効量」とは、単剤療法または併用療法として投与された場合に、女性の性機能障害の治療に十分な治療効果を引き出すペプチドの量であると理解される。本発明のペプチドを併用療法で使用する場合、用語「治療有効量」とは、連続してまたは同時に摂取した場合にその摂取が予防効果または治療効果をもたらす有効成分の量の組み合わせを指す。必要とされる正確な量は、患者の年齢および全身状態、病気の重症度、薬物を投与する技法、他の薬物との併用治療等に応じて、対象毎に異なってもよい。
【００４６】
本発明はまた、本発明によるペプチドと少なくとも１種の薬学的に許容される賦形剤、特にビヒクル、保存剤、および／または溶媒とを含有する医薬組成物にも関する。このような賦形剤は、本発明の本質を構成するペプチドと一緒に患者に与えることができ、有効量のペプチドを送達する適切な用量で与えた場合、前記ペプチドの生物学的活性を乱さず、かつ無毒である。
【００４７】
薬学的に許容されるペプチド誘導体
本発明の化合物は、それらの加工の過程で遊離形態で存在してもよく、またはかかる必要のある場合、薬学的に許容される塩または他の誘導体の形態で存在してもよい。本明細書で使用する用語「薬学的に許容される塩」とは、医学的評価の文脈において、過度の毒性、刺激、アレルギー反応等を示さずにヒトのおよび動物の組織と接触して使用するのに適しているとともに、合理的なリスク／ベネフィット比を有する、そうした塩に関連する。塩は、本発明による化合物の合成、分離または精製の過程で得ることができ、また、本発明の化合物の遊離酸または遊離塩基をそれぞれ適切な塩基または酸と反応させることによって別個に得ることもできる。薬学的に許容される、酸の非毒性塩の例は、特に、酢酸塩、塩酸塩、クエン酸塩等である。
【００４８】
医薬組成物
本発明はまた、本明細書に記載の化合物（またはプロドラッグ形態、薬学的に許容される塩もしくは他の薬学的に許容される誘導体）のうちの少なくとも１つと１つまたは複数の薬学的に許容されるビヒクル、溶媒および／または充填剤とを含有する医薬組成物に関する。前記組成物はまた、１つまたは複数のさらなる治療剤を含有してもよい。一方、本発明の化合物を、１つまたは複数の他の治療レジメンと組み合わせて相応する療法を必要とする患者に与えてもよい。
【００４９】
本発明において提案された医薬組成物は薬学的に許容されるビヒクルと一緒に本発明の化合物を含有し、ビヒクルとしては、特定の剤形に適する、所与の任意の溶媒、希釈剤、分散剤または懸濁液、界面活性剤、等張剤、保存剤等を挙げることができる。通常のビヒクルの媒体が本発明の化合物と非相溶性であるかかる場合、例えば望ましくない生物学的効果または医薬組成物の他の任意の成分との他の望ましくない相互作用が出現した場合を除いて、かかる組成物の使用は本発明の範囲内である。
【００５０】
生殖器機能および性機能を刺激する特性を有するペプチドを含有する剤形の安定性の調査
本実験により、本発明によるペプチドを含有する組成物の安定性を調査した。調査の結果を、ヒドロキシプロリンを含有する本発明によるいくつかのペプチドの例、特にＴｈｒ−Ｌｙｓ−Ｈｙｐ、Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｈｙｐ−Ａｒｇ−Ｈｙｐ、Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｈｙｐ−Ａｒｇ−Ｈｙｐ−ＰｈｅおよびＴｈｒ−Ｌｙｓ−Ｈｙｐ−Ａｒｇ−Ｈｙｐ−Ｇｌｙ−Ｈｙｐによって例示する。
【００５１】
ＲＵ２５０７２１２に記載のペプチド、特にＴｈｒ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ、Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ、Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−ＰｈｅおよびＴｈｒ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏも入手した。
【００５２】
得られた化合物から、次の成分比：それぞれ０．２と０．０１質量％とであるペプチドと保存剤塩化ベンザルコニウムとを含み、残りは水である、液体剤形（液剤）を調製した。試料を２つの温度レジメ、すなわち＋４℃および＋２５℃で保存した。ペプチドの安定性の調査は、１、３、６、１２、および２４カ月の保存後に行った。安定性用試料の調査において、単一の不純物の量および不純物の総量を評価し、ペプチドの分解を証明した。不純物について当社の薬学的要件は次のとおりである：任意の単一の不純物、１．５％以下；不純物総含有量、３．０％以下。不純物含有量が上記の値を超えた場合、剤形は安定性試験に不合格であったと見なした。調査結果を表３に提示する。
【００５３】
【表３−１】
2019534279.tif 000004
【表３−２】
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【００５４】
表３から、プロリンの代わりにヒドロキシプロリンを含有するペプチドが、保存安定性試験に合格することにおいてはるかに好成績であったことが明らかであり（ヒドロキシプロリン含有ペプチドを有する試料中の不純物含有量はプロリン含有ペプチドを有する試料中の不純物含有量より数分の１である）、これはいずれの温度でも明らかである。したがって、ヒドロキシプロリン含有ペプチドはそれらのペプチド類似体（ＲＵ２５０７２１２）よりも分解に対して安定であり、このことによって、本発明のペプチドをベースとする最終剤形を＋２５℃までの温度で少なくとも２４カ月間に保つことが可能となる。
【００５５】
生殖器機能および性機能を刺激する手段としての本発明のペプチドの有効性の調査
生殖器機能および性機能を刺激する手段としての有効性を確認するために、本発明によるペプチド、特にトリペプチドＴｈｒ−Ｌｙｓ−Ｈｙｐ、ペンタペプチドＴｈｒ−Ｌｙｓ−Ｈｙｐ−Ａｒｇ−Ｈｙｐ、およびヘキサペプチドＴｈｒ−Ｌｙｓ−Ｈｙｐ−Ａｒｇ−Ｈｙｐ−Ｐｈｅを合成し、適正な前臨床モデルでのインビボでの有効性に関して試験を行った（Ｌｏｒｄｏｚテスト）。さらに、ペプチドＴｈｒ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ、Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ、およびＴｈｒ−Ｌｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅの群の有効性も調べた。
【００５６】
前述のペプチド群の有効性を、雌性ラットの性行動に関して１００ｍｃｇ／ラットの用量で調べた。性的に活発な雄と直接接触した場合およびかかる接触が不可能であった場合の、卵巣摘出ホルモン刺激雌において、０〜１６日の過程にわたって性行動を記録した。Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｈｙｐ、Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｈｙｐ−Ａｒｇ−Ｈｙｐ、およびＴｈｒ−Ｌｙｓ−Ｈｙｐ−Ａｒｇ−Ｈｙｐ−Ｐｈｅ群のペプチドによって、雌の求交尾的行動の強度が、記録期間中に行為１２±４回から２４±４〜３６±６回までに高まることがわかった（ｐ＝０．０２８、ウィルキンソンの基準）。本結果は、ペプチドＴｈｒ−Ｌｙｓ−Ｈｙｐ、Ｔｈｒ−Ｌｙｓ−Ｈｙｐ−Ａｒｇ−Ｈｙｐ、およびＴｈｒ−Ｌｙｓ−Ｈｙｐ−Ａｒｇ−Ｈｙｐ−Ｐｈｅの作用下での性的動機の高まりを証明する。試験結果を表４に提示する。
【００５７】
【表４】
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【００５８】
さらに、動的方法で得られたデータ（ペプチドを投与して５、１１および１６日目の雌性ラットの求交尾的行動の比較）を比較すると、本発明のペプチドの作用からの効果が、ＲＵ２５０７２１２に記載のペプチドの作用からの効果の２倍の速さで生じることは明白である（図１〜図３）。
【００５９】
したがって、得られたデータが証明することは、ヒドロキシプロリンを含有する本発明のペプチドがＲＵ２５０７２１２からのペプチド類似体と比較して、より大きな安定性を有するばかりではなく、好ましい（治療）効果を達成するのもより速く、このことによって、本発明のペプチドをベースとする医薬を使用すれば患者の治療過程を短縮することが可能となるということである。さらに、その効果は特異的であり、適切な行動状況で発現する。
【００６０】
本発明を開示された変形実施態様を参照することで特定してきたが、詳細に記載された特定の実験は単に本発明を例示する目的のために与えられており、本発明の範囲をいかようにも限定するものとしてみなされるべきではないことは当業者であれば明らかである。本発明の本質から逸脱することなく、様々な修正を施すことができることを理解されたい。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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