(57)【要約】  本発明は、式Ｉの化合物を含む。    【化１】2019534283.tif 000241  式中、Ｚ４、Ｚ７、Ｚ９、Ｚ１１、Ｚ２２、Ｚ２３、Ｚ２６、Ｚ３０、Ｚ３４、Ｚ３５、ｐ、ｍ、ｎ、ｑ、及びＢＲＩＤＧＥは、本明細書において定義される。本発明はまた、医薬組成物及びその使用方法に関する。新規化合物は、とりわけ、肥満、２型糖尿病、メタボリックシンドローム、インスリン抵抗性、及び脂質異常症などの疾患及び障害を予防、治療、又は寛解させるのに有用である。
2019534283.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
【化１】
2019534283.tif 000220
（式中、
ｐは、０又は１であり、
ｍは、０、１、２、３、４、又は５であり、
ｎは、１、２、３、又は４であり、
ｑは、０又は１であるが、但し、ｑは、Ｚ３０が不在の場合にのみ１であることを条件とし、
ＢＲＩＤＧＥは、−Ｐｈ−ＣＨ２−Ｓ−、−トリアゾリル−、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２Ｓ−、−ＳＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、
−（ＯＣＨ２ＣＨ２）２ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２Ｓ、−ＮＨＣ（Ｏ）−、又は−ＣＨ２Ｓ−であり、
Ｚ４は、Ｋ、Ａ、Ｅ、Ｓ、又はＲであり、
Ｚ７は、Ａ又はＫであり、
Ｚ９は、Ｇ又はＫであり、
Ｚ１１は、Ｄ又はＫであり、
Ｚ２２は、Ａ又はＫであり、
Ｚ２３は、Ｓ又はＫであり、
Ｚ２６は、Ａ又はＨであり、
Ｚ３０は、Ｌ、Ｗ、不在、又はＫであり（但し、Ｚ３０は、ｑが１である場合にのみ不在である。）、
Ｚ３４は、
【化２】
2019534283.tif 000221
であり、
Ｚ３５は、
【化３】
2019534283.tif 000222
あるいはその誘導体であって、前記誘導体は、アミド化、グリコシル化、カルバミル化、硫酸化、リン酸化、環化、脂質化、又はＰＥＧ化を含む１つ以上のプロセスによって修飾されている。）
の化合物、又はその薬学的に許容される塩。
【請求項２】
前記化合物が、式Ｉの化合物、又はアミド化、脂質化、若しくはＰＥＧ化を含む１つ以上のプロセスによって修飾された式Ｉの化合物、あるいはその薬学的に許容される塩である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
ＢＲＩＤＧＥが、−Ｐｈ−ＣＨ２−Ｓ−、−トリアゾリル−、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２Ｓ−、−ＳＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、−（ＯＣＨ２ＣＨ２）２ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２Ｓ、−ＮＨＣ（Ｏ）−、又は−ＣＨ２Ｓ−であり、
Ｚ７が、Ａ又はＫであり、前記Ｋのアミノ側鎖は、任意に、
【化４】
2019534283.tif 000223
（式中、ｉは、０〜２４の整数であり、Ｘ＝Ｂｒ、Ｉ、又はＣｌである。）、
−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２Ｂｒ、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２Ｉ、又は−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２Ｃｌで置換され、
Ｚ９は、Ｇ又はＫであり、該Ｋのアミノ側鎖は、任意に、
【化５】
2019534283.tif 000224
（式中、ｔは、０、１、又は２であり、
ｕは、０又は１であり、
ｖは、１４、１６、又は１８である。）、
【化６】
2019534283.tif 000225
（式中、ｉは、０〜２４の整数であり、Ｘ＝Ｂｒ、Ｉ、又はＣｌである。）、
−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２Ｂｒ、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２Ｉ、又は−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２Ｃｌで置換され、
Ｚ１１が、Ｄ又はＫであり、前記Ｋのアミノ側鎖は、任意に、
【化７】
2019534283.tif 000226
（式中、ｗは、０、１、２、又は４であり、
ｘは、０又は１であり、
ｙは、１４、１６、又は１８である。）、
【化８】
2019534283.tif 000227
（式中、ｉは、０〜２４の整数であり、Ｘ＝Ｂｒ、Ｉ、又はＣｌである。）、
【化９】
2019534283.tif 000228
−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２Ｂｒ、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２Ｉ、又は−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２Ｃｌで置換され、
Ｚ２２が、Ａ又はＫであり、前記Ｋのアミノ側鎖は、任意に、
【化１０】
2019534283.tif 000229
（式中、ｉは、０〜２４の整数であり、Ｘ＝Ｂｒ、Ｉ、又はＣｌである。）、
−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２Ｂｒ、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２Ｉ、又は−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２Ｃｌで置換され、
Ｚ２３が、Ｓ又はＫであり、前記Ｋのアミノ側鎖は、任意に、
【化１１】
2019534283.tif 000230
（式中、ｉは、０〜２４の整数であり、Ｘ＝Ｂｒ、Ｉ、又はＣｌである。）、
−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２Ｂｒ、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２Ｉ、又は−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２Ｃｌで置換され、
Ｚ３０が、Ｌ、Ｗ、不在、又はＫであり（但し、Ｚ３０は、ｑが１である場合にのみ不在である。）、前記Ｋのアミノ側鎖は、任意に、
【化１２】
2019534283.tif 000231
（式中、ｒは、０、１、又は２であり、
ｓは、０又は１であり、
ｑは、１４、１６、又は１８である。）、又は
【化１３】
2019534283.tif 000232
で置換されている、
請求項２に記載の化合物、又はその薬学的に許容される塩。
【請求項４】
ｍが、０、１、２、３、又は５であり、
ｎが、１、２、又は４であり、
Ｚ７が、Ａ又はＫであり、前記Ｋのアミノ側鎖が、
【化１４】
2019534283.tif 000233
で置換され、
Ｚ９が、Ｇ又はＫであり、前記Ｋのアミノ側鎖が、
【化１５】
2019534283.tif 000234
（式中、ｔは、０であり、
ｕは１であり、
ｖは１４である。）
で置換され、
Ｚ１１は、Ｄ又はＫであり、該Ｋのアミノ側鎖は、任意に、
【化１６】
2019534283.tif 000235
（式中、ｗは、０又は４であり、
ｘは１であり、
ｙは１４である。）、
【化１７】
2019534283.tif 000236
で置換され、
Ｚ２２が、Ａ又はＫであり、前記Ｋのアミノ側鎖は、
【化１８】
2019534283.tif 000237
で置換され、
Ｚ２３が、Ｓ又はＫであり、前記Ｋのアミノ側鎖は、
【化１９】
2019534283.tif 000238
で置換され、
Ｚ３０が、Ｌ、Ｗ、不在、又はＫであり（但し、Ｚ３０は、ｑが１である場合にのみ不在である。）、前記Ｋのアミノ側鎖は、
【化２０】
2019534283.tif 000239
（式中、ｒは、０又は２であり、
ｓは、１であり、
ｑは、１４、１６、又は１８である。）、あるいは
【化２１】
2019534283.tif 000240
で置換されている、
請求項３に記載の化合物、又はその薬学的に許容される塩。
【請求項５】
配列番号１〜配列番号１１０、又はそれらの薬学的に許容される塩からなる群から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物と、それに複合体化された半減期延長部分とを含む、複合体。
【請求項７】
請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物又は請求項６に記載の複合体と、薬学的に許容される担体とを含む、医薬組成物。
【請求項８】
肥満を予防、治療、又は寛解させるための方法であって、それを必要とする対象に、有効量の、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物、請求項６に記載の複合体、又はその一形態、組成物、若しくは薬剤を投与することを含む、前記方法。
【請求項９】
症候群、障害、又は疾患を予防、治療、又は寛解させる方法であって、前記症候群、障害、又は疾患が、肥満、２型糖尿病、メタボリックシンドローム、インスリン抵抗性、及び脂質異常症からなる群から選択され、予防、治療、又は寛解を必要とする対象に、有効量の、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物、請求項６に記載の複合体、又はその一形態、組成物、若しくは薬剤を投与することを含む、前記方法。
【請求項１０】
前記症候群、障害、又は疾患が、２型糖尿病である、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
食物摂取を低減する方法であって、それを必要とする対象に、有効量の、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物、請求項６に記載の複合体、又はその一形態、組成物、若しくは薬剤を投与することを含む、前記方法。
【請求項１２】
Ｙ２受容体活性を調節する方法であって、それを必要とする対象に、有効量の、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物、請求項６に記載の複合体、又はその一形態、組成物、若しくは薬剤を投与することを含む、前記方法。
【請求項１３】
肥満、２型糖尿病、メタボリックシンドローム、インスリン抵抗性、及び脂質異常症からなる群から選択される、疾患、障害、又は症候群を治療する方法であって、それを必要とする対象に、有効量の、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物、請求項６に記載の複合体、又はその一形態、組成物、若しくは薬剤を、少なくとも１つの抗糖尿病薬と組み合わせて投与することを含む、前記方法。
【請求項１４】
前記抗糖尿病薬が、グルカゴン様ペプチド−１受容体調節因子である、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
医薬組成物を調製する方法であって、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物又は請求項６に記載の複合体を、薬学的に許容される担体と組み合わせることを含む、前記方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、概ね、神経ペプチドＹ２受容体の調節因子である新規環状ペプチドチロシンチロシン（ＰＹＹ）化合物を目的とする。本発明はまた、医薬組成物及びその使用方法に関する。新規化合物は、とりわけ、肥満、２型糖尿病、メタボリックシンドローム、インスリン抵抗性、及び脂質異常症などの疾患及び障害を予防、治療、又は寛解させるのに有用である。
【０００２】
（関連出願の相互参照）
本出願は、２０１６年１０月２７日に出願された米国仮特許出願第６２／４１３，６１３号、及び２０１６年１０月２７日に出願された米国仮特許出願第６２／４１３，５８６号に基づく優先権を主張するものである。各開示はその全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【０００３】
（電子的に提出された配列表の参照）
本出願は、ファイル名「ＰＲＤ３４１１配列表」及び２０１７年１０月２３日の作成日で、ＡＳＣＩＩ形式の配列表としてＥＦＳ−Ｗｅｂを介して電子的に提出され、９６ｋｂのサイズを有する配列表を含む。ＥＦＳ−Ｗｅｂを介して提出された配列表は、本明細書の一部であり、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。本明細書に記載される情報と、ファイル名「ＰＲＤ３４１１配列表」でＥＦＳ−Ｗｅｂを介して電子的に提出された配列表との間の配列番号１〜１１１の構造に関して一貫性がない場合は、本明細書の情報を優先するものとする。
【背景技術】
【０００４】
神経ペプチドＹ（ＮＰＹ）受容体は、各受容体サブタイプに対して異なる親和性を有する「ＮＰＹファミリー」と呼ばれる、密接に関連するペプチドアゴニスト群によって活性化される。ＮＰＹ、ペプチドチロシン−チロシン（ＰＹＹ）、及び膵臓ポリペプチド（ＰＰ）の、長さ３６個全てのアミノ酸は、ＮＰＹ受容体ファミリーのアゴニストである。ＮＰＹは、神経伝達物質であり、合成され、共貯蔵（co-stored）され、ノルエピネフリン及びエピネフリンと共に放出される。ＮＰＹは、ヒト及びげっ歯類の中枢神経系（ＣＮＳ）中の最も豊富かつ広範に分布したペプチドのうちの１つであり、摂食及びストレスに関連する脳の領域で発現される。末梢神経系では、ＮＰＹ含有ニューロンは主に交感神経性である。ＰＹＹは、腸内分泌細胞によって主に合成され、放出される。内皮セリン−プロテアーゼ、ジ−ペプチジルペプチダーゼＩＶ（ＤＰＰ−ＩＶ）によるＮＰＹ及びＰＹＹの切断は、ＮＰＹ受容体ファミリーのＹ２及びＹ５サブタイプの選択的リガンドであるＮＰＹ３〜３６及びＰＹＹ３〜３６を生成する。ＰＰは、主に、インスリン、グルカゴン、又はソマトスタチンを貯蔵するものとは異なる膵島細胞に見られる。
【０００５】
５つの異なるＮＰＹ受容体がこれまでに特定されており、そのうちの４つは、ヒトの生理学に関連するものとして理解されている。受容体Ｙ１、Ｙ２、及びＹ５は、ＮＰＹ及びＰＹＹに優先的に結合するが、Ｙ４受容体はＰＰに優先的に結合する。Ｙ２及びＹ５受容体はまた、ＮＰＹ３〜３６及びＰＹＹ３〜３６によって強力に活性化される。一般に、ＮＰＹファミリーのリガンドは、ＮＰＹ受容体イソ型のそれぞれに対して可変選択性を有し、ＰＹＹ３〜３６は、Ｙ２イソ型に対して中程度から安定した選択性を有することが以前に報告されている。これらの受容体のそれぞれは、百日咳毒素感受性Ｇαｉを介してアデニル酸シクラーゼの阻害に連結している。
【０００６】
ＰＹＹは、食物に応答して内分泌腺Ｌ−細胞から分泌され、特に脂肪摂取後に分泌される。ＰＹＹ１〜３６は空腹状態で優勢であり、ＰＹＹ３〜３６は、ヒトにおいて食後に見られる主要形態であり、血漿濃度は消費されるカロリー数と負の相関関係にある。ＰＹＹ３〜３６は、ヒト、サル、ラット、ウサギ、及びマウスにおける食物摂取を低減することが実証されている（Ｂａｔｔｅｒｈａｍ  ＲＬ  ｅｔ  ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ  ２００２  Ａｕｇ  ８；４１８（６８９８）：６５０〜４、Ｂａｔｔｅｒｈａｍ  ＲＬ  ｅｔ  ａｌ．Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ  ２００３  Ｓｅｐ  ４；３４９（１０）：９４１〜８、Ｃｈａｌｌｉｓ  ＢＧ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ｒｅｓ  Ｃｏｍｍｕｎ  ２００３  Ｎｏｖ  ２８；３１１（４）：９１５〜９）。ＰＹＹ３〜３６の食欲減退効果は、この受容体における優先的結合、及びＹ２欠損マウスにおける供給有効性の喪失に基づいて、Ｙ２媒介であると考えられる（Ｂａｔｔｅｒｈａｍ  ＲＬ，ｅｔ  ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ  ２００２  Ａｕｇ  ８；４１８（６８９８）：６５０〜４）。ＰＹＹ３〜３６の弓状核内注射は、ラット及びマウスにおける食物摂取を低減し（Ｂａｔｔｅｒｈａｍ  ｅｔ  ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ  ２００２  Ａｕｇ  ８；４１８（６８９８）：６５０〜４）、視床下部Ｙ２受容体の関与がこれらの効果を媒介し得ることを示唆している。供給に対する急性効果は、ｏｂ／ｏｂマウス、ＤＩＯマウス、及びＺｕｃｋｅｒ  ｆａ／ｆａマウスの体重に対する用量依存的効果に変換されることも示されている（Ｐｉｔｔｎｅｒ  ＲＡ  ｅｔ  ａｌ．Ｉｎｔ  Ｊ  Ｏｂｅｓ  ｒｅｌａｔ  Ｍｅｔａｂ  Ｄｉｓｏｒｄ  ２００４  Ａｕｇ；２８（８）：９６３〜７１）。加えて、ＰＹＹ３〜３６は、ＤＩＯげっ歯類におけるインスリン媒介グルコース処理及びインスリン感受性を改善することも示されている（Ｖｒａｎｇ  Ｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ  Ｊ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  Ｒｅｇｕｌ  Ｉｎｔｅｇｒ  Ｃｏｍｐ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  Ａｕｇ；２９１（２）：Ｒ３６７〜７５）。肥満外科手術は、循環ＰＹＹ免疫反応性の増大をもたらし（ｌｅ  Ｒｏｕｘ  ＣＷ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎｎ  Ｓｕｒｇ  ２００６  Ｊａｎ；２４３（１）；１０８〜１４）、術後の体重減少において役割を果たすように思える。
【０００７】
食欲及び食物摂取の制御におけるその役割、並びに哺乳動物の胃腸管におけるその抗分泌及び吸収促進効果を考慮すると、ＰＹＹ３〜３６は、肥満及び関連状態、並びに多くの胃腸障害の治療に有効であり得る。しかしながら、治療剤としてのＰＹＹ３〜３６自体の治療的有用性は、その迅速な代謝及び結果として生じる短い循環半減期によって制限される（Ｔｏｒａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｒｅｇｕｌ．Ｉｎｔｅｇｒ．Ｃｏｍｐ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．３１０：Ｒ８６６〜Ｒ８７４（２０１６））。
【０００８】
したがって、ＰＹＹ３〜３６に対して、改善された代謝安定性及び薬物動態プロファイルを有するＰＹＹ類似体又はその誘導体を得ることが望ましい。インビボでの半減期の遅延性を有するこのような誘導体は、より長い作用持続時間を有するＹ２受容体の調節を提供し、そのような調節を必要とする対象の治療薬として好適であろう。
【０００９】
前述の議論は、単に当該技術分野に直面する問題の性質のより良い理解を提供するために提示されており、先行技術の容認として決して解釈されるべきではなく、また本明細書における任意の参考文献の引用は、そのような参考文献が本出願の「先行技術」を構成することを容認するものとして解釈されるべきではない。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明の一般的な一態様は、式Ｉ：
【００１１】
【化１】
2019534283.tif 000003
（式中、
ｐは、０又は１であり、
ｍは、０、１、２、３、４、又は５であり、
ｎは、１、２、３、又は４であり、
ｑは、０又は１であるが、但し、ｑは、Ｚ３０が不在の場合にのみ１であることを条件とし、
ＢＲＩＤＧＥは、−Ｐｈ−ＣＨ２−Ｓ−、−トリアゾリル−、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２Ｓ−、−ＳＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、−（ＯＣＨ２ＣＨ２）２ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２Ｓ、−ＮＨＣ（Ｏ）−、又は−ＣＨ２Ｓ−であり、
Ｚ４は、Ｋ、Ａ、Ｅ、Ｓ、又はＲであり、
Ｚ７は、Ａ又はＫであり、
Ｚ９は、Ｇ又はＫであり、
Ｚ１１は、Ｄ又はＫであり、
Ｚ２２は、Ａ又はＫであり、
Ｚ２３は、Ｓ又はＫであり、
Ｚ２６は、Ａ又はＨであり、
Ｚ３０は、Ｌ、Ｗ、不在、又はＫであり（但し、Ｚ３０は、ｑが１である場合にのみ不在である。）、
Ｚ３４は、
【００１２】
【化２】
2019534283.tif 000004
であり、
Ｚ３５は、
【００１３】
【化３】
2019534283.tif 000005
あるいはその誘導体であって、誘導体が、アミド化、グリコシル化、カルバミル化、硫酸化、リン酸化、環化、脂質化、又はＰＥＧ化を含む１つ以上のプロセスによって修飾されている。）の化合物、又はその薬学的に許容される塩に関する。
【００１４】
本発明はまた、症候群、障害、若しくは疾患、又は当該症候群、障害、若しくは疾患のうちのいずれか１つ以上の症状を予防する、治療する、その発症を遅延させる、又は寛解させる方法であって、当該症候群、障害、又は疾患が、肥満、２型糖尿病、メタボリックシンドローム（すなわち、シンドロームＸ）、インスリン抵抗性、耐糖能異常（例えば、耐糖能）、高血糖症、高インスリン血症、高トリグリセリド血症、脂質異常症、アテローム性動脈硬化症、糖尿病性腎症、並びに管理されていないコレステロール及び／又は脂質レベルに関連する高血圧及び心血管危険因子などその他の心血管危険因子、骨粗鬆症、炎症、及び湿疹からなる群から選択される、方法を提供し、それを必要とする対象に、有効量の式Ｉの化合物、その誘導体若しくは薬学的に許容される塩、又はその一形態、組成物、若しくは薬剤、又は本明細書に記載の組み合わせのいずれかを投与することを含む。
【００１５】
本発明はまた、併用療法を用いて、本明細書に記載の疾患、障害、症候群、又は症状のいずれかを予防する、治療する、その発症を遅延させる、又は寛解させることを企図し、併用療法は、それを必要とする対象に、有効量の式Ｉの化合物、その誘導体、若しくは薬学的に許容される塩、又はその一形態、組成物、若しくは薬剤を、以下の追加の化合物のうちのいずれか１つ以上と組み合わせて投与することを含む：ジペプチジルペプチダーゼ−４（ＤＰＰ−４）阻害剤（例えば、シタグリプチン、サクサグリプチン、リナグリプチン、アログリプチンなど）；ＧＬＰ−１受容体アゴニスト（例えば、エキセナチド及びリキシセナチドなどの、短時間作用型ＧＬＰ−１受容体アゴニスト；中間作用型ＧＬＰ−１受容体アゴニスト（例えば、リラグルチド；長期放出型エキセナチド、アルビグルチド、デュラグルチドなどの長時間作用型ＧＬＰ−１受容体アゴニスト；ナトリウム−グルコース共輸送体−２（ＳＧＬＴ−２）阻害剤（例えば、カナグリフォジン、ダパグリフォジン、エンパグリフォジンなど）；胆汁酸封鎖剤（例えば、コレセベラムなど）；及びドーパミン受容体アゴニスト（例えば、ブロモクリプチン急速放出）。いくつかの実施形態では、追加の化合物の用量は、式Ｉの化合物、その誘導体、又は薬学的に許容される塩と組み合わせて与えられるときに低減される。いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物と組み合わせて使用される場合、追加の化合物は、それぞれが単独で使用される場合よりも低い用量で使用され得る。
【００１６】
本発明は、併用療法を用いて、本明細書に記載の疾患、障害、症候群、又は症状のいずれかを予防する、治療する、その発症を遅延させる、又は寛解させることを企図し、併用療法は、それを必要とする対象に、有効量の式Ｉの化合物、その誘導体、若しくは薬学的に許容される塩、又はその一形態、組成物、若しくは薬剤を、以下の追加の化合物のうちのいずれか１つ以上と組み合わせて投与することを含む：ビグアニド（例えば、メトホルミンなど）；インスリン；オキシントモジュリン；スルホニル尿素（例えば、クロルプロパミド、グリメピリド、グリピジド、グリブリド、グリベンクラミド、グリボルヌリド、グリソキセピド、グリクロピラミド、トラザミド、トルブタミド、アセトヘキサミド、カルブタミドなど）；及びチアゾリジンジオン（例えば、ピオグリタゾン、ロシグリタゾン、ロベグリタゾン、シグリタゾン、ダルグリタゾン、エングリタゾン、ネトグリタゾン、リボグリタゾン、トログリタゾンなど）。いくつかの実施形態では、式Ｉの化合物、その誘導体、又は薬学的に許容される塩と組み合わせて使用される場合、追加の化合物は、それぞれが単独で使用される場合よりも低い用量で使用され得る。
【００１７】
更に他の実施形態では、本発明は、併用療法を用いて、本明細書に記載の疾患、障害、症候群、又は症状のいずれかを予防する、治療する、その発症を遅延させる、又は寛解させることを企図し、併用療法は、それを必要とする対象に、有効量の式Ｉの化合物、その誘導体、若しくは薬学的に許容される塩、又はその一形態、組成物、若しくは薬剤を、肥満手術（例えば、Ｒｏｕｘ−ｅｎ−Ｙ胃バイパス手術などの胃バイパス手術；スリーブ胃切除術；調節可能な胃バンド手術；十二指腸スイッチを伴う胆すい消化回避術；胃内バルーン；胃縫縮術、及びこれらの組み合わせ）などの外科療法と組み合わせて投与することを含む。
【００１８】
本発明の更なる態様、特徴、及び利点は、以下の「発明を実施するための形態」及び「特許請求の範囲」を読むことにより、より良く理解されるであろう。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
発明の背景において、また明細書全体を通じて、各種刊行物、論文及び特許を引用又は記載する。これら参照文献のそれぞれをその全容において参照により本明細書に援用するものである。本明細書に含まれる文書、操作、材料、装置、物品などの考察は、本発明の背景を提供するためのものである。かかる考察は、これらの事物のいずれか又は全てが、開示又は特許請求されるいずれかの発明に対する先行技術の一部を構成することを容認するものではない。
【００２０】
特に規定のない限り、本明細書で使用される全ての技術用語及び科学用語は、本発明が属する分野の当業者に一般的に理解されるのと同じ意味を有する。そうでない場合、本明細書で使用される特定の用語は、本明細書に記載される意味を有するものである。
【００２１】
本明細書及び添付の特許請求の範囲で使用される単数形「ａ」、「ａｎ」及び「ｔｈｅ」は、特に文脈上明らかに述べられていない限り、複数の指示対象物を含むことに留意しなければならない。
【００２２】
特に明記しない限り、本明細書に記載される濃度又は濃度範囲などの任意の数値は、全ての場合において、「約」という用語によって修飾されているものとして理解されるべきである。したがって、数値は一般的に、記載される値の±１０％を含む。例えば、１ｍｇ／ｍＬの濃度は０．９ｍｇ／ｍＬ〜１．１ｍｇ／ｍＬを含む。同様に、１％〜１０％（ｗ／ｖ）の濃度範囲は０．９％（ｗ／ｖ）〜１１％（ｗ／ｖ）を含む。本明細書で使用する場合、数値範囲の使用は、文脈上そうでない旨が明確に示されていない限り、全ての可能な部分範囲、その範囲内の整数及び値の分数を含むその範囲内の全ての個々の数値を明示的に含む。
【００２３】
別途記載のない限り、一連の要素に先行する「少なくとも」という用語は、その一連の全ての要素を指すと理解されるべきである。当業者であれば、単なる通常の実験を利用するだけで、本明細書に記載した特定の実施形態に対する多くの等価物を認識するか、又は確認できるであろう。このような等価物は、本発明によって包含されることが意図される。
【００２４】
本明細書で使用する場合、用語「含む（comprises）」、「含む（comprising）」、「含む（includes）」、「含む（including）」、「有する（has）」、「有する（having）」、「含有する（contains）」、若しくは「含有する（containing）」、又はそれらの任意の他の変形形態は、明記される整数又は整数群を含むが、任意のその他の整数又は整数群を除外することは示唆していないと理解され、包括的又は無制限であることが意図される。例えば、一連の要素を含む組成物、混合物、プロセス、方法、物品、又は装置は、必ずしもそれらの要素のみに限定されるものではなく、明示的に列挙されない、又はそのような組成物、混合物、プロセス、方法、物品、又は装置に本来存在しないその他の要素を含み得る。更に、明示的にそうではないことが明記されない限り、「又は」は包括的な又はを指すものであり、排他的な又はを指すものではない。例えば、条件Ａ又はＢは、Ａが真であり（又は存在し）かつＢが偽である（又は存在しない）場合、Ａが偽であり（又は存在せず）かつＢが真である（又は存在する）場合、並びにＡ及びＢの両方が真である（又は存在する）場合、のいずれか一つによって充足される。
【００２５】
好ましい発明の構成要素の寸法又は特徴を指すときに本明細書で使用される用語「約」、「およそ」、「概ね」、「実質的に」などの用語は、当業者には理解されるように、記載の寸法／特徴が厳密な境界又はパラメータではなく、また機能的に同じ又は類似する、それらからのわずかな変動を除外しないことを示すことも理解されたい。最小値では、数値パラメータを含むこのような参照は、当該技術分野において受け入れられている数学的及び工業的原理（例えば、四捨五入、測定、又はその他の系統的誤差、製造公差など）を使用すると、最下位の数字は変化しない変動を含むであろう。
【００２６】
「同一の」又は「同一性」パーセントという用語は、２つ以上の核酸又はポリペプチド配列（例えば、環状ＰＹＹ３〜３６ポリペプチド配列）との関連において、以下の配列比較アルゴリズムのうちの１つを使用して、又は本開示を考慮して当該技術分野において既知の方法を使用した目視検査によって測定されるとき、最大一致について比較され、整列される場合、同一であるか、又は同一であるアミノ酸残基若しくはヌクレオチドの指定された割合を有する２つ以上の配列又はサブ配列を指す。
【００２７】
配列比較のために、典型的には、１つの配列は、試験配列が比較される参照配列として機能する。配列比較アルゴリズムを使用する場合、試験及び参照配列がコンピュータに入力され、必要に応じて、サブ配列座標が指定され、配列アルゴリズムプログラムパラメータが指定される。次いで、配列比較アルゴリズムは、指定されたプログラムパラメータに基づいて、参照配列に対する試験配列（複数可）の配列同一性パーセントを計算する。
【００２８】
比較のための配列の最適な整列は、例えば、Ｓｍｉｔｈ  ＆  Ｗａｔｅｒｍａｎ，Ａｄｖ．Ａｐｐｌ．Ｍａｔｈ．２：４８２（１９８１）の局所相同性アルゴリズム、Ｎｅｅｄｌｅｍａｎ  ＆  Ｗｕｎｓｃｈ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．４８：４４３（１９７０）の相同性整列アルゴリズム、Ｐｅａｒｓｏｎ  ＆  Ｌｉｐｍａｎ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８５：２４４４（１９８８）の類似検索方法、これらのアルゴリズムのコンピュータ化された実装（Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  Ｐａｃｋａｇｅ，Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  Ｃｏｍｐｕｔｅｒ  Ｇｒｏｕｐ，５７５  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｄｒ．，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩにおけるＧＡＰ、ＢＥＳＴＦＩＴ、ＦＡＳＴＡ、及びＴＦＡＳＴＡ）、又は目視検査（概して、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｆ．Ｍ．Ａｕｓｕｂｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，ｅｄｓ．，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ，ａ  ｊｏｉｎｔ  ｖｅｎｔｕｒｅ  ｂｅｔｗｅｅｎ  Ｇｒｅｅｎｅ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ，Ｉｎｃ．ａｎｄ  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，（１９９５  Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ）（Ａｕｓｕｂｅｌ）を参照されたい）によって行うことができる。
【００２９】
配列同一性パーセント及び配列類似性を決定するのに好適なアルゴリズムの例は、それぞれ、Ａｌｔｓｃｈｕｌら（１９９０）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１５：４０３〜４１０及びＡｌｔｓｃｈｕｌら（１９９７）Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．２５：３３８９〜３４０２に記載されているＢＬＡＳＴ及びＢＬＡＳＴ  ２．０アルゴリズムである。ＢＬＡＳＴ分析を行うためのソフトウェアは、国立生物工学情報センター（National Center for Biotechnology Information）を通じて公的に入手可能である。
【００３０】
２つの核酸配列又はポリペプチドが実質的に同一であることの更なる指標は、以下に記載されるように、第１の核酸によりコード化されるポリペプチドが、第２の核酸によりコード化されるポリペプチドと免疫学的に交差反応性であることである。したがって、ポリペプチドは、典型的には、例えば２つのペプチドが同類置換によってのみ異なる場合に、第２のポリペプチドと実質的に同一である。２つの核酸配列が実質的に同一であることの別の指標は、以下に記載されるように、２つの分子が厳しい条件下で互いにハイブリダイズすることである。
【００３１】
本明細書で使用される場合、「対象」は、任意の動物、好ましくは哺乳動物、最も好ましくはヒトを意味する。本明細書で使用するところの「哺乳動物」なる用語は、あらゆる哺乳動物を包含する。哺乳動物の例としては、これらに限定されるものではないが、ウシ、ウマ、ヒツジ、ブタ、ネコ、イヌ、マウス、ラット、ウサギ、モルモット、サル、ヒトなどが挙げられ、より好ましくはヒトである。
【００３２】
本発明の方法に関する用語「投与」は、任意に、半減期延長部分に複合される、本発明の化合物若しくはその薬学的に許容される塩、又はその一形態、組成物、若しくは薬剤を使用することにより、本明細書に記載の症候群、障害、又は疾患を、治療学的又は予防学的に予防する、治療する、又は寛解させるための方法を意味する。このような方法は、有効量の上記化合物、化合物形態、組成物又は薬剤を、治療過程中の異なる時点で、又は併用形式で同時に、投与することを含む。本発明の方法は、既知の治療的処置レジメンを全て包含するものとして理解されるものである。
【００３３】
「有効量」という用語は、研究者、獣医、医師、又はその他の臨床医が探求している組織系、動物、又はヒトにおいて生物学的又は医学的反応（治療される症候群、障害、若しくは疾患、又は治療される症候群、障害、若しくは疾患の症状を予防する、治療する、又は寛解させることを含む）を引き出す活性化合物又は医薬用薬剤の量を意味する。
【００３４】
本明細書で使用するとき、用語「組成物」は、特定の成分を特定の量で含む生成物、並びに直接的又は間接的に特定の成分の特定の量での組み合わせから生じる任意の生成物を包含するものとする。
【００３５】
化合物
一般的な一態様では、本発明は、式Ｉ：
【００３６】
【化４】
2019534283.tif 000006
（式中、
ｐは、０又は１であり、
ｍは、０、１、２、３、４、又は５であり、
ｎは、１、２、３、又は４であり、
ｑは、０又は１であるが、但し、ｑは、Ｚ３０が不在の場合にのみ１であることを条件とし、
ＢＲＩＤＧＥは、−Ｐｈ−ＣＨ２−Ｓ−、−トリアゾリル−、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２Ｓ−、−ＳＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、（ＯＣＨ２ＣＨ２）２ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２Ｓ、−ＮＨＣ（Ｏ）−、又は−ＣＨ２Ｓ−であり、
Ｚ４は、Ｋ、Ａ、Ｅ、Ｓ、又はＲであり、
Ｚ７は、Ａ又はＫであり、
Ｚ９は、Ｇ又はＫであり、
Ｚ１１は、Ｄ又はＫであり、
Ｚ２２は、Ａ又はＫであり、
Ｚ２３は、Ｓ又はＫであり、
Ｚ２６は、Ａ又はＨであり、
Ｚ３０は、Ｌ、Ｗ、不在、又はＫであり（但し、Ｚ３０は、ｑが１である場合にのみ不在である。）、
Ｚ３４は、
【００３７】
【化５】
2019534283.tif 000007
であり、
Ｚ３５は、
【００３８】
【化６】
2019534283.tif 000008
あるいはその誘導体であって、誘導体は、アミド化、グリコシル化、カルバミル化、硫酸化、リン酸化、環化、脂質化、又はＰＥＧ化を含む１つ以上のプロセスによって修飾されている。）の化合物、又はその薬学的に許容される塩を含む。
【００３９】
一実施形態において、本発明は、請求項１に記載の化合物若しくはその誘導体（この誘導体は、アミド化、脂質化、又はＰＥＧ化を含む１つ以上のプロセスによって修飾されている式Ｉの化合物である。）、又はその薬学的に許容される塩を含む。
【００４０】
別の実施形態では、本発明は、式Ｉの化合物又はその誘導体（式中、
ｐは、０又は１であり、
ｍは、０、１、２、３、４、又は５であり、
ｎは、１、２、３、又は４であり、
ｑは、０又は１であるが、但し、ｑは、Ｚ３０が不在の場合にのみ１であることを条件とし、
ＢＲＩＤＧＥは、−Ｐｈ−ＣＨ２−Ｓ−、−トリアゾリル−、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２Ｓ−、−ＳＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、
−（ＯＣＨ２ＣＨ２）２ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２Ｓ、−ＮＨＣ（Ｏ）−、又は−ＣＨ２Ｓ−であり、
Ｚ４は、Ｋ、Ａ、Ｅ、Ｓ、又はＲであり、
Ｚ７は、Ａ又はＫであり、当該Ｋのアミノ側鎖は、任意に、
【００４１】
【化７】
2019534283.tif 000009
（式中、ｉは、０〜２４の整数であり、Ｘ＝Ｂｒ、Ｉ、又はＣｌである。）、
−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２Ｂｒ、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２Ｉ、又は−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２Ｃｌで置換され、
Ｚ９は、Ｇ又はＫであり、当該Ｋのアミノ側鎖は、任意に、
【００４２】
【化８】
2019534283.tif 000010
（式中、ｔは、０、１、又は２であり、
ｕは、０又は１であり、
ｖは、１４、１６、又は１８である。）、
【００４３】
【化９】
2019534283.tif 000011
（式中、ｉは、０〜２４の整数であり、Ｘ＝Ｂｒ、Ｉ、又はＣｌである。）、
−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２Ｂｒ、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２Ｉ、又は−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２Ｃｌで置換され、
Ｚ１１は、Ｄ又はＫであり、当該Ｋのアミノ側鎖は、任意に、
【００４４】
【化１０】
2019534283.tif 000012
（式中、ｗは、０、１、２、又は４であり、
ｘは、０又は１であり、
ｙは、１４、１６、又は１８である。）、
【００４５】
【化１１】
2019534283.tif 000013
（式中、ｉは、０〜２４の整数であり、Ｘ＝Ｂｒ、Ｉ、又はＣｌである）、
【００４６】
【化１２】
2019534283.tif 000014
−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２Ｂｒ、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２Ｉ、又は−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２Ｃｌで置換され、
Ｚ２２は、Ａ又はＫであり、当該Ｋのアミノ側鎖は、任意に、
【００４７】
【化１３】
2019534283.tif 000015
（式中、ｉは、０〜２４の整数であり、Ｘ＝Ｂｒ、Ｉ、又はＣｌである。）、
−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２Ｂｒ、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２Ｉ、又は−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２Ｃｌで置換され、
Ｚ２３は、Ｓ又はＫであり、当該Ｋのアミノ側鎖は、任意に、
【００４８】
【化１４】
2019534283.tif 000016
（式中、ｉは、０〜２４の整数であり、Ｘ＝Ｂｒ、Ｉ、又はＣｌである。）、Ｃ（Ｏ）ＣＨ２Ｂｒ、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２Ｉ、又は−Ｃ（Ｏ）ＣＨ２Ｃｌで置換され、
Ｚ２６は、Ａ又はＨであり、
Ｚ３０は、Ｌ、Ｗ、不在、又はＫであり（但し、Ｚ３０は、ｑが１である場合にのみ不在である。）、当該Ｋのアミノ側鎖は、任意に、
【００４９】
【化１５】
2019534283.tif 000017
（式中、ｒは、０、１、又は２であり、
ｓは、０又は１であり、
ｑは、１４、１６、又は１８である。）、又は
【００５０】
【化１６】
2019534283.tif 000018
で置換され、
Ｚ３４は、
【００５１】
【化１７】
2019534283.tif 000019
であり、
Ｚ３５は、
【００５２】
【化１８】
2019534283.tif 000020
である。）、
又はその薬学的に許容される塩を含む。
【００５３】
別の実施形態では、本発明は、式Ｉの化合物又はその誘導体（式中、
ｐは、０又は１であり、
ｍは、０、１、２、３、又は５であり、
ｎは、１、２、又は４であり、
ｑは、０又は１であるが、但し、ｑは、Ｚ３０が不在の場合にのみ１であることを条件とし、
ＢＲＩＤＧＥは、−Ｐｈ−ＣＨ２−Ｓ−、−トリアゾリル−、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２Ｓ−、−（ＯＣＨ２ＣＨ２）２ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２Ｓ、−ＮＨＣ（Ｏ）−、又は−ＣＨ２Ｓ−であり、
Ｚ４は、Ｋ、Ａ、Ｅ、Ｓ、又はＲであり、
Ｚ７は、Ａ又はＫであり、当該Ｋのアミノ側鎖は、
【００５４】
【化１９】
2019534283.tif 000021
で置換され、
Ｚ９は、Ｇ又はＫであり、当該Ｋのアミノ側鎖は、
【００５５】
【化２０】
2019534283.tif 000022
（式中、ｔは、０であり、
ｕは１であり、
ｖは１４である。）で置換され、
Ｚ１１は、Ｄ又はＫであり、当該Ｋのアミノ側鎖は、任意に、
【００５６】
【化２１】
2019534283.tif 000023
（式中、ｗは、０又は４であり、
ｘは１であり、
ｙは１４である。）、
【００５７】
【化２２】
2019534283.tif 000024
で置換され、
Ｚ２２は、Ａ又はＫであり、当該Ｋのアミノ側鎖は、
【００５８】
【化２３】
2019534283.tif 000025
で置換され、
Ｚ２３は、Ｓ又はＫであり、当該Ｋのアミノ側鎖は、
【００５９】
【化２４】
2019534283.tif 000026
で置換され、
Ｚ２６は、Ａ又はＨであり、
Ｚ３０は、Ｌ、Ｗ、不在、又はＫであり（但し、Ｚ３０は、ｑが１である場合にのみ不在である。）、当該Ｋのアミノ側鎖は、
【００６０】
【化２５】
2019534283.tif 000027
（式中、ｒは、０又は２であり、
ｓは１であり、
ｑは、１４、１６、又は１８である。）、又は
【００６１】
【化２６】
2019534283.tif 000028
で置換され、
Ｚ３４は、
【００６２】
【化２７】
2019534283.tif 000029
であり、
Ｚ３５は、
【００６３】
【化２８】
2019534283.tif 000030
である。）、
又はその薬学的に許容される塩を含む。
【００６４】
別の実施形態では、本発明は、式Ｉの化合物又はその誘導体（式中、
ｐは、０又は１であり、
ｍは、０、１、２、３、又は５であり、
ｎは、１、２、又は４であり、
ｑは、０又は１であるが、但し、ｑは、Ｚ３０が不在の場合にのみ１であることを条件とし、
ＢＲＩＤＧＥは、−Ｐｈ−ＣＨ２−Ｓ−、−トリアゾリル−、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２Ｓ−、−（ＯＣＨ２ＣＨ２）２ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２Ｓ、−ＮＨＣ（Ｏ）−、又は−ＣＨ２Ｓ−であり、
Ｚ４は、Ｋ、Ａ、Ｅ、Ｓ、又はＲであり、
Ｚ７は、Ａ又はＫであり、当該Ｋのアミノ側鎖は、
【００６５】
【化２９】
2019534283.tif 000031
で置換され、
Ｚ９は、Ｇ又はＫであり、当該Ｋのアミノ側鎖は、
【００６６】
【化３０】
2019534283.tif 000032
（式中、ｔは、０であり、
ｕは１であり、
ｖは１４である。）で置換され、
Ｚ１１は、Ｄ又はＫであり、当該Ｋのアミノ側鎖は、任意に、
【００６７】
【化３１】
2019534283.tif 000033
（式中、ｗは、０又は４であり、
ｘは１であり、
ｙは１４である。）、
【００６８】
【化３２】
2019534283.tif 000034
で置換され、
Ｚ２２は、Ａ又はＫであり、当該Ｋのアミノ側鎖は、
【００６９】
【化３３】
2019534283.tif 000035
で置換され、
Ｚ２３は、Ｓ又はＫであり、当該Ｋのアミノ側鎖は、
【００７０】
【化３４】
2019534283.tif 000036
で置換され、
Ｚ２６は、Ａ又はＨであり、
Ｚ３０は、Ｌ、Ｗ、不在、又はＫであり（但し、Ｚ３０は、ｑが１である場合にのみ不在である。）、当該Ｋのアミノ側鎖は、
【００７１】
【化３５】
2019534283.tif 000037
（式中、ｒは、０又は２であり、
ｓは１であり、
ｑは、１４、１６、又は１８である。）、又は
【００７２】
【化３６】
2019534283.tif 000038
で置換され、
Ｚ３４は、
【００７３】
【化３７】
2019534283.tif 000039
であり、
Ｚ３５は、
【００７４】
【化３８】
2019534283.tif 000040
である）、
又はその薬学的に許容される塩を含む。
【００７５】
本発明の別の実施形態は、配列番号１〜配列番号１１０、又はそれらの薬学的に許容される塩からなる群から選択される、式Ｉの化合物又はその誘導体である。
【００７６】
本発明の別の実施形態は、配列番号２〜配列番号７２、又はそれらの薬学的に許容される塩からなる群から選択される、式Ｉの化合物又はその誘導体である。
【００７７】
本発明の別の一般的な態様は、式Ｉの化合物、その誘導体又はその薬学的に許容される塩を含む複合体、及びそれに複合された半減期延長部分に関する。本明細書で使用される場合、「複合された」という用語は、直接又はリンカーを介して半減期延長部分に共有結合により連結された又は共有結合により接続された、本発明の化合物を指す。本開示において、式Ｉの化合物、その誘導体、又はその薬学的に許容される塩に関して、「化合物を含む複合体及びそれに複合された半減期延長部分」という語句は、「半減期延長部分に複合された化合物」という語句と互換的に使用される。
【００７８】
本明細書で使用される場合、「リンカー」という用語は、本発明の化合物を半減期延長部分に共有結合により接続する共有結合体又は原子鎖を含む化学モジュールを指す。リンカーとしては、例えば、ペプチドリンカー、炭化水素リンカー、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）リンカー、ポリプロピレングリコール（ＰＰＧ）リンカー、多糖類リンカー、ポリエステルリンカー、ＰＥＧ及び埋め込まれた複素環からなるハイブリッドリンカー、並びに炭化水素鎖を挙げることができるが、これらに限定されない。リンカーは、例えば、本発明の化合物に最初に共有結合により接続され、次いで半減期延長部分に共有結合により接続され得る。
【００７９】
本明細書で使用される場合、「半減期延長部分（half-life extension moiety）」は、「半減期延長部分（half-life extending moiety）」という用語と互換的に使用される。例示的な半減期延長部分としては、モノクローナル抗体又はその断片、アルブミン、アルブミン変異体、アルブミン結合タンパク質及び／又はドメイン、トランスフェリン、並びにそれらの断片及び類似体が挙げられるが、これらに限定されない。所望の特性のために、本発明の複合体に組み込むことができる追加の半減期延長部分としては、例えば、ＰＥＧ５０００又はＰＥＧ２０，０００などのポリエチレングリコール（ＰＥＧ）分子、α−トコフェロリル、脂肪酸、及び異なる鎖長の脂肪酸エステル、例えば、ラウリン酸塩、ミリスチン酸塩、ステアリン酸塩、アラキジン酸塩、ベヘン酸塩、オレイン酸塩、アラキドン酸塩、オクタン二酸、テトラデカン二酸、オクタデカン二酸、ドコサン二酸など、ポリリジン、オクタン、炭水化物（デキストラン、セルロース、オリゴ糖又は多糖類）が挙げられる。
【００８０】
本発明の化合物は、本開示を考慮して当該技術分野において既知の方法を使用して、半減期延長部分のうちの１つ以上に共有結合により連結され得る。例えば、以下の実施例によって示されるように、ＰＥＧ部分又は親油性部分などの半減期延長部分は、例えば、周知の方法を使用して、システイン又はリジン残基を分子に組み込み、半減期延長部分をシステイン又はリジンに付着させることによって、本発明のペプチド分子に付加することができる。半減期延長部分としてモノクローナル抗体に複合された本発明の化合物の例は、２０１６年１０月２７日に出願された米国特許仮出願第６２／４１３，５８６号、及び代理人整理番号ＰＲＤ３４３６で本出願と同日に出願された「Ａｎｔｉｂｏｄｙ−ｃｏｕｐｌｅｄ  ｃｙｃｌｉｃ  ｐｅｐｔｉｄｅ  ｔｙｒｏｓｉｎｅ  ｔｙｒｏｓｉｎｅ  ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ  ａｓ  ｍｏｄｕｌａｔｏｒｓ  ｏｆ  ｎｅｕｒｏｐｅｐｔｉｄｅ  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ」と題した米国特許出願第＿＿＿＿＿＿号にも記載されており、両出願の内容は、参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる。
【００８１】
本発明の実施形態によると、求電子物質は、モノクローナル抗体又はその断片などの半減期延長部分内に操作されたＣｙｓ残基のスルフヒドリル基と部位特異的に反応し、それにより、環状ＰＹＹペプチドと半減期延長部分との間に共有結合を作り出す、ブロモアセトアミド又はマレイミドなどの本発明の環状ＰＹＹの側鎖上に導入される。本発明の化合物は、直接又はリンカーを介して、半減期延長部分のうちの１つ以上に共有結合により連結され得る。本発明に有用なリンカーとしては、ペプチドリンカー、炭化水素リンカー、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）リンカー、ポリプロピレングリコール（ＰＰＧ）リンカー、多糖類リンカー、ポリエステルリンカー、又はＰＥＧ及び埋め込まれた複素環からなるハイブリッドリンカーが挙げられるが、これらに限定されない。ある特定の実施形態では、リンカーを有する半減期延長部分は、当該技術分野において既知の方法を使用して、ＰＹＹのアミノ酸残基４、７、９、１０、１１、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２６、３０、又は３１などの、環状ＰＹＹの１つ以上のアミノ酸位置で本発明の化合物に複合され得る。ある特定の実施形態では、リンカーを有さない半減期延長部分は、当該技術分野において既知の方法を使用して、ＰＹＹのアミノ酸残基４、７、９、１０、１１、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２６、３０、又は３１などの、環状ＰＹＹの１つ以上のアミノ酸位置で本発明の化合物に複合され得る。アミノ酸残基の番号付けは、ｈＰＹＹ３〜３６のものに従う。配列番号１〜配列番号１１０を含むがこれらに限定されない本発明の化合物のいずれかを、直接又はリンカーを介して間接的に半減期延長部分に複合させることができる。本発明の実施形態によると、配列番号７４、９５、９８、９９、１００、１０１、１０２、１０３、１０４、１０５、１０６、１０７、１０８、１０９、及び１１０からなる群から選択される化合物又はその薬学的に許容される塩は、リンカーを介して、モノクローナル抗体又はその断片などの半減期延長部分に共有結合により連結され得る。
【００８２】
本発明のペプチド分子、又は１つ以上の半減期延長部分に共有結合により連結されたペプチド分子を含む複合体は、本開示を考慮して既知のアッセイによって機能性についてアッセイすることができる。例えば、本発明のペプチド分子の生物学的又は薬物動態学活性は、単独で又は本発明による複合体において、既知のインビトロ又はインビボアッセイを使用してアッセイし、比較することができる。
【００８３】
一実施形態において、本発明は、式ＩＩ：
【００８４】
【化３９】
2019534283.tif 000041
（式中、
ｐは、０又は１であり、
ｍは、０、１、２、３、４、又は５であり、
ｎは、１、２、３、又は４であり、
ＢＲＩＤＧＥは、−Ｐｈ−ＣＨ２−Ｓ−、−トリアゾリル−、又は−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２Ｓ−であり、
Ｚ４は、Ｋ、Ａ、Ｅ、又はＳであり、
Ｚ９は、Ｇ又はＫであり、当該Ｋのアミノ側鎖は、
【００８５】
【化４０】
2019534283.tif 000042
（式中、ｔは、０、１、又は２であり、
ｕは、０又は１であり、
ｖは、１４、１６、又は１８である。）、
【００８６】
【化４１】
2019534283.tif 000043
で置換され、
Ｚ１１は、Ｄ又はＫであり、当該Ｋのアミノ側鎖は、
【００８７】
【化４２】
2019534283.tif 000044
（式中、ｗは、０、１、又は２であり、
ｘは、０又は１であり、
ｙは、１４、１６、又は１８である。）、
【００８８】
【化４３】
2019534283.tif 000045
で置換され、
Ｚ２６は、Ａ又はＨであり、
Ｚ３０は、Ｌ又はＫであり、当該Ｋのアミノ側鎖は、
【００８９】
【化４４】
2019534283.tif 000046
（式中、ｒは、０、１、又は２であり、
ｓは、０又は１であり、
ｑは、１４、１６、又は１８である。）、又は
【００９０】
【化４５】
2019534283.tif 000047
で置換され、
Ｚ３４は、
【００９１】
【化４６】
2019534283.tif 000048
であり、
Ｚ３５は、
【００９２】
【化４７】
2019534283.tif 000049
である。）の化合物、
又はその薬学的に許容される塩を含む。
【００９３】
別の実施形態では、本発明は、式ＩＩ（式中、
ｐは、０又は１であり、
ｍは、０、２、３、又は５であり、
ｎは、１、２、又は４であり、
ＢＲＩＤＧＥは、−Ｐｈ−ＣＨ２−Ｓ−、−トリアゾリル−、又は−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２Ｓ−であり、
Ｚ４は、Ｋ、Ａ、Ｅ、又はＳであり、
Ｚ９は、Ｇ又はＫであり、当該Ｋのアミノ側鎖は、で置換され、
【００９４】
【化４８】
2019534283.tif 000050
Ｚ１１は、Ｄ又はＫであり、当該Ｋのアミノ側鎖は、
【００９５】
【化４９】
2019534283.tif 000051
で置換され、
Ｚ２６は、Ａ又はＨであり、
Ｚ３０は、Ｌ又はＫであり、当該Ｋのアミノ側鎖は
【００９６】
【化５０】
2019534283.tif 000052
（式中、ｒは、０又は２であり、
ｓは、０又は１であり、
ｑは、１４、１６、又は１８である。）で置換され、
Ｚ３４は、
【００９７】
【化５１】
2019534283.tif 000053
であり、
Ｚ３５は、
【００９８】
【化５２】
2019534283.tif 000054
である）の化合物、
又はその薬学的に許容される塩を含む。
【００９９】
別の実施形態では、本発明は、式ＩＩ（式中、
ｐは、０又は１であり、
ｍは、０、２、３、又は５であり、
ｎは、１、２、又は４であり、
ＢＲＩＤＧＥは、−Ｐｈ−ＣＨ２−Ｓ−、−トリアゾリル−、又は−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２Ｓ−であり、
Ｚ４は、Ｋ、Ａ、Ｅ、又はＳであり、
Ｚ９は、Ｇ又はＫであり、当該Ｋのアミノ側鎖は、
【０１００】
【化５３】
2019534283.tif 000055
で置換され、
Ｚ１１は、Ｄ又はＫであり、当該Ｋのアミノ側鎖は、
【０１０１】
【化５４】
2019534283.tif 000056
又は
【０１０２】
【化５５】
2019534283.tif 000057
で置換され、
Ｚ２６は、Ａ又はＨであり、
Ｚ３０は、Ｌ又はＫであり、当該Ｋのアミノ側鎖は、
【０１０３】
【化５６】
2019534283.tif 000058
【０１０４】
【化５７】
2019534283.tif 000059
（式中、ｒは、０又は２であり、
ｓは、０又は１であり、
ｑは、１４、１６、又は１８である。）で置換され、
Ｚ３４は、
【０１０５】
【化５８】
2019534283.tif 000060
であり、
Ｚ３５は、
【０１０６】
【化５９】
2019534283.tif 000061
である）の化合物、
又はその薬学的に許容される塩を含む。
【０１０７】
別の実施形態では、本発明は、式ＩＩ（式中、
ｐは、０又は１であり、
ｍは、０、２、３、又は５であり、
ｎは、１、２、又は４であり、
ＢＲＩＤＧＥは、−Ｐｈ−ＣＨ２−Ｓ−、−トリアゾリル−、又は−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２Ｓ−であり、
Ｚ４は、Ｋ、Ａ、Ｅ、又はＳであり、
Ｚ９は、Ｇ又はＫであり、当該Ｋのアミノ側鎖は、
【０１０８】
【化６０】
2019534283.tif 000062
で置換され、
Ｚ１１は、Ｄ又はＫであり、当該Ｋのアミノ側鎖は、
【０１０９】
【化６１】
2019534283.tif 000063
又は
【０１１０】
【化６２】
2019534283.tif 000064
で置換され、
Ｚ２６は、Ａ又はＨであり、
Ｚ３０は、Ｌ又はＫであり、当該Ｋのアミノ側鎖は、
【０１１１】
【化６３】
2019534283.tif 000065
（式中、ｑは、１４、１６、又は１８である。）で置換され、
Ｚ３４は、
【０１１２】
【化６４】
2019534283.tif 000066
であり、
Ｚ３５は、
【０１１３】
【化６５】
2019534283.tif 000067
である、）の化合物、
又はその薬学的に許容される塩を含む。
【０１１４】
別の実施形態では、本発明は、式ＩＩ（式中、
ｐは、０又は１であり、
ｍは、０、２、３、又は５であり、
ｎは、１、２、又は４であり、
ＢＲＩＤＧＥは、−Ｐｈ−ＣＨ２−Ｓ−、−トリアゾリル−、又は−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２Ｓ−であり、
Ｚ４は、Ｋ、Ａ、Ｅ、又はＳであり、
Ｚ９は、Ｇ又はＫであり、当該Ｋのアミノ側鎖は、
【０１１５】
【化６６】
2019534283.tif 000068
で置換され、
Ｚ１１は、Ｄ又はＫであり、当該Ｋのアミノ側鎖は、
【０１１６】
【化６７】
2019534283.tif 000069
【０１１７】
【化６８】
2019534283.tif 000070
で置換され、
Ｚ２６は、Ａ又はＨであり、
Ｚ３０は、Ｌ又はＫであり、当該Ｋのアミノ側鎖は、
【０１１８】
【化６９】
2019534283.tif 000071
（式中、ｑは、１４、１６、又は１８である。）で置換され、
Ｚ３４は、
【０１１９】
【化７０】
2019534283.tif 000072
であり、
Ｚ３５は、
【０１２０】
【化７１】
2019534283.tif 000073
である。）の化合物、
又はその薬学的に許容される塩を含む。
【０１２１】
別の実施形態では、本発明は、式ＩＩ（式中、
ｐは、０又は１であり、
ｍは、０、２、３、又は５であり、
ｎは、１、２、又は４であり、
ＢＲＩＤＧＥは、−Ｐｈ−ＣＨ２−Ｓ−、−トリアゾリル−、又は−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２Ｓ−であり、
Ｚ４は、Ｋ、Ａ、Ｅ、又はＳであり、
Ｚ９は、Ｇであり、
Ｚ１１は、Ｄであり、
Ｚ２６は、Ａ又はＨであり、
Ｚ３０は、Ｌ又はＫであり、当該Ｋのアミノ側鎖は、
【０１２２】
【化７２】
2019534283.tif 000074
（式中、ｑは、１４、１６、又は１８である。）で置換され、
Ｚ３４は、
【０１２３】
【化７３】
2019534283.tif 000075
であり、
Ｚ３５は、
【０１２４】
【化７４】
2019534283.tif 000076
である。）の化合物、
又はその薬学的に許容される塩を含む。
【０１２５】
別の実施形態では、本発明は、配列番号２〜配列番号４６からなる群から選択される式ＩＩの化合物を含む。
【０１２６】
本発明の別の実施形態は、ｈＰＹＹ（３〜３６）に対して少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、又は９９％の配列同一性を示す、Ｎ末端〜ＰＹＹの側鎖環状類似体を含む。２つの類似体間の配列同一性を決定するための方法の一例として、２つのペプチド
【０１２７】
【化７５】
2019534283.tif 000077
（配列番号１１１）を整列させる。ｈＰＹＹ（３〜３６）に対する類似体の配列同一性は、整列させた残基の総数から異なる残基の数（すなわち、整列させた同一残基の数）を引いたものを、ｈＰＹＹ３〜３６の残基の総数で除算したものである。この例では、異なる残基は、置換Ｋ１１と交換されたＤ１１であり、その後ｈＣ３１と交換されたＶ３１、そして最後に脱カルボニル化されたＲ３５が続く。したがって、この例では、配列同一性は、（３４−３）／３４×１００である。
【０１２８】
環状ＰＹＹペプチド
ＰＹＹ３〜３６は、食物摂取を阻害するためにＹ２受容体のアゴニストとして作用する、遠位腸内のＬ細胞によって分泌される内因性ホルモンである。食欲及び食物摂取の制御におけるその役割、並びに哺乳動物の胃腸管におけるその抗分泌及び吸収促進効果を考慮すると、ＰＹＹ３〜３６は、肥満及び関連状態、並びに多くの胃腸障害の治療に有効であり得る。しかしながら、治療剤としてのＰＹＹ３〜３６自体の治療的有用性は、その迅速な代謝及び短い循環半減期によって制限される。したがって、本発明は、広義には、ＰＹＹ３〜３６ペプチドの半減期を延長しインビボでのペプチドの代謝を低減する、修飾されたＰＹＹ３〜３６複合体に関する。
【０１２９】
本発明の特定の実施形態では、修飾されたＰＹＹ３〜３６ペプチドは、環状ＰＹＹペプチドである。「環状ＰＹＹペプチド」、「環状ＰＹＹ３〜３６類似体」、及び「環状ＰＹＹ３〜３６ペプチド類似体」という用語は、互換的に使用され得る。
【０１３０】
本明細書で使用される場合、「ＮＴＳＣ−ＰＹＹ」という用語は、ＰＹＹのＮ末端〜側鎖環状類似体を説明することを意図している。
【０１３１】
本明細書に記載のペプチド配列は、通常の慣習に従って記載され、ペプチドのＮ末端領域は左側にあり、Ｃ末端領域は右側にある。異性体形態のアミノ酸が知られているが、別途に明示的に示されない限り、示されるのはＬ型のアミノ酸である。本発明の分子を説明する際の便宜上、様々なアミノ酸の従来の及び非従来の略語（単一及び３文字コードの両方）及び機能部分が使用される。これらの略語は当業者にはよく知られているが、明確にするために、以下に列記する：Ａ＝Ａｌａ＝アラニン；Ｒ＝Ａｒｇ＝アルギニン；Ｎ＝Ａｓｎ＝アスパラギン；Ｄ＝Ａｓｐ＝アスパラギン酸；βＡ＝βＡｌａ＝β−アラニン；Ｃ＝Ｃｙｓ＝システイン；ｈＣ＝ｈＣｙｓ＝ホモシステイン；Ｅ＝Ｇｌｕ＝グルタミン酸；Ｑ＝Ｇｌｎ＝グルタミン；Ｇ＝Ｇｌｙ＝グリシン；Ｈ＝Ｈｉｓ＝ヒスチジン；Ｉ＝Ｉｌｅ＝イソロイシン；Ｌ＝Ｌｅｕ＝ロイシン；Ｋ＝Ｌｙｓ＝リジン；Ｎｌｅ＝ノルロイシン；Ｆ＝Ｐｈｅ＝フェニルアラニン；Ｐ＝Ｐｒｏ＝プロリン；Ｓ＝Ｓｅｒ＝セリン；Ｔ＝Ｔｈｒ＝スレオニン；Ｗ＝Ｔｒｐ＝トリプトファン；Ｙ＝Ｔｙｒ＝チロシン、及びＶ＝Ｖａｌ＝バリン。
【０１３２】
便宜上、本発明のＮＴＳＣ−ＰＹＹペプチドを命名する際に使用されるアミノ酸残基の番号付け規則は、ｈＰＹＹ３〜３６のものに従う。ｈＰＹＹ３〜３６の対応する位置における天然残基に対する、ＮＴＳＣ−ＰＹＹペプチドに導入された特定のアミノ酸置換は、適切なアミノ酸コード、続いて置換の位置によって示される。したがって、ＮＴＳＣ−ＰＹＹペプチド内の「Ｓ４」は、ｈＰＹＹ３〜３６の対応する天然のｌｙｓ４残基がセリンに置換されたペプチドを指す。同様に、ＮＴＳＣ−ＰＹＹペプチド内の「ｈＣ３１」は、ｈＰＹＹ３〜３６の対応する天然のｖａｌ３１残基がホモシステインに置換されたペプチドを指す。ＮＴＳＣ−ＰＹＹペプチド内で生じる更なるアミノ酸置換は、この規則に従って記載され、当業者によってこのようなものとして認識されるであろう。
【０１３３】
また便宜上、本発明のＮＴＳＣ−ＰＹＹペプチドに使用される命名規則は、サイクルに関与するＮ末端残基から出発して左から右方向に、それらの間で連結基（複数可）と共にサイクルに関与するアミノ残基を組み込む。全ての場合において、サイクルのＮ末端アミノ酸残基は、そのα−アミノ官能基を介して連結基に連結し、これは次に、ＮＴＳＣ−ＰＹＹペプチドの３１位のアミノ酸の側鎖残基に接続する。したがって、「シクロ−（Ｉ３−ｍ−ＣＯＰｈＣＨ２−ｈＣ３１）」は、Ｉｌｅ３のα−アミノ官能基がメタ−トルイル酸残基でアシル化されるＮＴＳＣ−ＰＹＹペプチドのサイクルを記載するために使用され、そのメチル基は、チオエーテル結合によってｈＣｙｓ３１残基の側鎖に更に連結される。同様に、「シクロ−（Ｋ４−ＣＯ（ＣＨ２）２ＮＨＣＯＣＨ２−ｈＣ３１）」は、天然のＩｌｅ３残基が欠失しており、ｌｙｓ４のその（ここでＮ末端）α−アミノ官能基が３−アセトアミドプロパノイル基によりアシル化され、そのアセトアミドメチレン炭素は、チオエーテル結合によってｈＣｙｓ３１残基の側鎖に接続されている、ＮＴＳＣ−ＰＹＹペプチドのサイクルを説明するために使用される。
【０１３４】
リジン残基は、更なる誘導体化のために便利な機能性ハンドルを提供するために、ｈＰＹＹ３〜３６配列の様々な位置に組み込まれ得る。リジン残基は、直接的又は間接的のいずれかでモノクローナル抗体に結合されるように修飾され得る。モノクローナル抗体への間接的結合において、リジン残基は、環状ＰＹＹペプチドがモノクローナル抗体に結合されることを可能にするリンカーを含むように修飾され得る。当業者であれば、関連するオルソログもそのように効果的に使用することができ、本明細書において企図されることを認識するであろう。
【０１３５】
ペプチド配列に現れる「Ｋ（γ−Ｇｌｕ）」という用語は、その側鎖ε−アミノ基がグルタミン酸のγ−カルボキシル基によってアシル化されているリシニル残基を表す。
【０１３６】
「Ｋ（γ−Ｇｌｕ−Ｐａｌ（パルミトイル））」という用語は、その側鎖ε−アミノ基がＮ−ヘキサデカン−１−オイルグルタミン酸のγ−カルボキシル基によってアシル化されているリシニル残基を表す。
【０１３７】
「Ｋ（γ−Ｇｌｕ−Ｓｔｅａｒ（ステアロイル））」という用語は、その側鎖ε−アミノ基がＮ−オクタデカン−１−オイルグルタミン酸のγ−カルボキシル基によってアシル化されているリシニル残基を表す。
【０１３８】
「Ｋ（γ−Ｇｌｕ−Ａｒａｃｈ（アラキドイル））」という用語は、その側鎖ε−アミノ基がＮ−ドデカン−１−オイルグルタミン酸のγ−カルボキシル基によってアシル化されているリシニル残基を表す。
【０１３９】
「Ｋ（ＯＥＧ）（８−アミノ−３，６−ジオキサオクタノイル）」という用語は、その側鎖ε−アミノ基が８−アミノ−３，６−ジオキサオクタン酸によってアシル化されているリシニル残基を表す。
【０１４０】
「（ＯＥＧ）２」という用語は、アミド連結（すなわち、１７−アミノ−１０−オキソ−３，６，１２，１５−テトラオキサ−９−アザヘプタデカン酸）を介して連続して一緒に連結された２つのＯＥＧ単位を表す。
【０１４１】
「Ｋ（ＯＥＧ）２」という用語は、その側鎖ε−アミノ基が１７−アミノ−１０−オキソ−３，６，１２，１５−テトラオキサ−９−アザヘプタデカン酸によってアシル化されているリシニル残基を表す。
【０１４２】
「Ｋ（（ＯＥＧ）２−γ−Ｇｌｕ」という用語は、その側鎖ε−アミノ基がその１−カルボン酸官能基を介して（２２Ｓ）−２２−アミノ−１０，１９−ジオキソ−３，６，１２，１５−テトラオキサ−９，１８−ジアザトリコサン二酸によってアシル化されているリシニル残基を表す。
【０１４３】
「Ｋ（（ＯＥＧ）２−γ−Ｇｌｕ−Ｓｔｅａｒ）」という用語は、その側鎖ε−アミノ基がその１−カルボン酸官能基を介して（２２Ｓ）−１０，１９−ジオキソ−２２−ステアルアミド−３，６，１２，１５−テトラオキサ−９，１８−ジアザトリコサン二酸によってアシル化されているリシニル残基を表す。
【０１４４】
「Ｋ（（ＯＥＧ）２−γ−Ｇｌｕ−ＣＯＣ１６ＣＯ２Ｈ）」という用語は、その側鎖ε−アミノ基がその１−カルボン酸官能基を介して（２１Ｓ）−９，１８，２３−トリオキソ−２，５，１１，１４−テトラオキサ−８，１７，２２−トリアザノナトリアコンタン−１，２１，３９−トリカルボン酸によってアシル化されているリシニル残基を表す。
【０１４５】
同様に、「Ｋ（（ＯＥＧ）２−γ−Ｇｌｕ−ＣＯＣ１８ＣＯ２Ｈ）」という用語は、その側鎖ε−アミノ基がその１−カルボン酸官能基を介して（２１Ｓ）−９，１８，２３−トリオキソ−２，５，１１，１４−テトラオキサ−８，１７，２２−トリアザヘンテトラコンタン−１，２１，４１−トリカルボン酸によってアシル化されているリシニル残基を表す。
【０１４６】
「Ｋ（（ＯＥＧ）２−ＣＯＣ１６ＣＯ２Ｈ）」という用語は、その側鎖ε−アミノ基がその１−カルボン酸官能基を介して１０，１９−ジオキソ−３，６，１２，１５−テトラオキサ−９，１８−ジアザヘキサトリアコンタン二酸によってアシル化されているリシニル残基を表す。
【０１４７】
「Ｋ（ＰＥＧ２４−ＡｃＢｒ）」という用語は、その側鎖ε−アミノ基がその１−カルボン酸官能基を介してＮ−ブロモアセチル−７５−アミノ−４，７，１０，１３，１６，１９，２２，２５，２８，３１，３４，３７，４０，４３，４６，４９，５２，５５，５８，６１，６４，６７，７０，７３−テトラコサオキサペンタヘプタコンタン酸によってアシル化されているリシニル残基を表す。
【０１４８】
「Ｋ（ＰＥＧ１２−ＡｃＢｒ）」という用語は、その側鎖ε−アミノ基がその１−カルボン酸官能基を介してＮ−ブロモアセチル−３９−アミノ−４，７，１０，１３，１６，１９，２２，２５，２８，３１，３４，３７−ドデカオキサノナトリアコンタン酸によってアシル化されているリシニル残基を表す。
【０１４９】
「Ｋ（ＰＥＧ６−ＡｃＢｒ）」という用語は、その側鎖ε−アミノ基がその１−カルボン酸官能基を介してＮ−ブロモアセチル−３−［（１７−アミノ−３，６，９，１２，１５−ペンタオキサヘプタデカ−１−イル）オキシ］−プロパン酸によってアシル化されているリシニル残基を表す。
【０１５０】
「Ｋ（ＰＥＧ８−トリアゾリル−ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ−ＰＥＧ４−ＡｃＢｒ）」という用語は、その側鎖ε−アミノ基がその１−カルボン酸官能基を介して２７−［４−［２−［３−［２−［２−［３−（Ｎ−ブロモアセチルアミノ）プロポキシ］エトキシ］エトキシ］プロピルアミノカルボニル］エチル］テトラゾール−１−イル］−４，７，１０，１３，１６，１９，２２，２５−オクタオキサヘプタコサン酸によってアシル化されているリシニル残基を表す。
【０１５１】
「Ｋ（ｍＰＥＧ１６）という用語は、その側鎖ε−アミノ基がその１−カルボン酸官能基を介して４，７，１０，１３，１６，１９，２２，２５，２８，３１，３４，３７，４０，４３，４６，４９−ヘキサデカオキサペンタコンタン酸によってアシル化されているリシニル残基を表す。
【０１５２】
「Ｋ（ｍＰＥＧ１２）」という用語は、その側鎖ε−アミノ基がその１−カルボン酸官能基を介して４，７，１０，１３，１６，１９，２２，２５，２８，３１，３４，３７−ドデカオキサオクタトリアコンタン酸によってアシル化されているリシニル残基を表す。
【０１５３】
「ＶｉｔＥ」という用語は、分子中のα−トコフェロリル単位を表す。
【０１５４】
「ＡｃＶｉｔＥ」という用語は、そのフェノール基がエーテル連結されたメチレニルカルボキシ官能基を有するα−トコフェロリル単位を表す。
【０１５５】
「Ｋ−γ−Ｇｌｕ−ＡｃＶｉｔＥ」という用語は、その側鎖ε−アミノ基がそのγ−カルボン酸官能基を介して（２−（（（２Ｒ）−２，５，７，８テトラメチル−２−（（４Ｒ，８Ｒ）−４，８，１２−トリメチルトリデシル）クロマン−６−イル）オキシ）アセチル）−Ｌ−グルタミン酸によってアシル化されているリシニル残基を表す。
【０１５６】
本発明の化合物の多くは、配列のＣ末端残基Ｙ３６と、その隣接する残基Ｒ３５との間に還元アミド結合を組み込む。この還元アミド連結は、「ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）」という用語により表される。
【０１５７】
本発明の特定の配列を含む様々なアミノ酸残基は、メチル化されているα−アミノ基を含む。したがって、「Ｎ−Ｍｅ−Ｑ３４」又は「Ｎ−Ｍｅ−Ｒ３５」という用語は、それぞれ、配列の３４位においてα−Ｎ−メチル化グルタミン、及び配列の３５位においてα−Ｎ−メチル化アルギニンを表す。
【０１５８】
配列の説明において「Ｎ−Ｍｅ−Ｑ３４、ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）」という用語は、３４位においてα−メチルグルタミン残基、並びに残基Ｒ３５とＹ３６との間に還元アミド結合の両方を含む配列を指す。
【０１５９】
同様に、配列の説明において「Ｎ−Ｍｅ−Ｒ３５、ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）」という用語は、３５位においてα−メチルアルギニン残基、並びにこの残基とＹ３６との間に還元アミド結合の両方を含む配列を指す。
【０１６０】
本明細書で使用される場合、「ＰＥＧ化」という用語は、１つ以上のポリエチレングリコール（ＰＥＧ）分子と１つ以上のＮＴＳＣ−ＰＹＹペプチドとの共有結合複合体を指す。当該複合体は、これに限定されないが、１〜２４個のＰＥＧ分子を１つのＮＴＳＣ−ＰＹＹペプチド上に含むことができる。当該複合体は、ＰＥＧ分子とＮＴＳＣ−ＰＹＹ分子との間に、γ−グルタメート、−ＮＨＣ（Ｏ）、Ｃ（Ｏ）、及びＣ（１〜４）アルキルが挙げられるがこれらに限定されない、好適なリンカーを更に含んでもよい。
【０１６１】
本明細書で使用される場合、「脂質化」という語句は、ＮＴＳＣ−ＰＹＹペプチドと１つ以上の親油性基との共有結合複合体を指す。好ましい親油性基としては、長鎖炭化水素基が挙げられる。他の親油性基としては、ステロイド、テルペン、脂溶性ビタミン、フィトステロール、テルペノイド、リン脂質、グリセロール、及び天然又は合成脂肪酸が挙げられる。親油性基の例としては、α−トコフェロリル、ステアリン酸、パルミチン酸、及びアラキジン酸が挙げられるが、これらに限定されない。当該複合体は、親油性分子とＮＴＳＣ−ＰＹＹ分子との間に、γ−グルタメート、−ＮＨＣ（Ｏ）、Ｃ（Ｏ）、及びＣ（１〜４）アルキルが挙げられるがこれらに限定されない、好適なリンカーを更に含んでもよい。
【０１６２】
「ＰＹＹ３〜３６」という用語は、以下の化合物（配列番号１１１）を指すものとする。
【０１６３】
【化７６】
2019534283.tif 000078
【０１６４】
医薬組成物
別の一般的な態様では、本発明は、本発明の複合体及び化合物、並びに薬学的に許容される担体を含む医薬組成物に関する。本明細書で使用される場合、「医薬組成物」という用語は、薬学的に許容される担体と一緒に本発明の複合体を含む生成物を意味する。本発明の複合体及び化合物、並びにそれらを含む組成物は、本明細書で言及される治療用途のための薬剤の製造にも有用である。
【０１６５】
本明細書で使用するところの「担体」なる用語は、あらゆる賦形剤、希釈剤、充填剤、塩、緩衝剤、安定化剤、可溶化剤、油、脂質、脂質含有小胞、ミクロスフェア、リポソーム封入体、又は医薬製剤で使用するための当該技術分野では周知のその他の材料を指す。担体、賦形剤又は希釈剤の特性は、特定の用途の投与経路によって決まる点が理解されよう。本明細書で使用するころの「薬学的に許容される担体」なる用語は、本発明に基づく組成物の効果又は本発明に基づく組成物の生物活性を妨げない無毒性材料を指す。特定の実施形態によると、本開示を考慮して、抗体の医薬組成物での使用に好適ないずれの薬学的に許容される担体も本発明において使用することができる。
【０１６６】
本発明において使用するための薬学的に許容される酸性／アニオン性の塩としては、酢酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、重炭酸塩、酒石酸水素塩、臭化物、エデト酸カルシウム、カンシル酸塩、炭酸塩、塩化物、クエン酸塩、二塩酸塩、エデト酸塩、エジシル酸塩、エストル酸塩、エシル酸塩、フマル酸塩、グリセプト酸塩、グルコン酸塩、グルタミン酸塩、グリコリルアルサニル酸塩、ヘキシルレソルシン酸塩、ヒドラバミン、臭化水素酸塩、塩酸塩、ヒドロキシナフトエ酸塩、ヨウ化物、イセチオン酸塩、乳酸塩、ラクトビオン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マンデル酸塩、メシル酸塩、メチル臭化物、メチル硝酸塩、メチル硫酸塩、ムコ酸塩、ナプシル酸塩、硝酸塩、パモ酸塩、パントテン酸塩、リン酸塩／二リン酸塩、ポリガラクツロン酸塩、サリチル酸塩、ステアリン酸塩、塩基性酢酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、タンニン酸塩、酒石酸塩、テオクル酸塩、トシル酸塩、及びトリエチオジドが挙げられるが、これらに限定されない。また、有機酸又は無機酸としては、ヨウ化水素酸、過塩素酸、硫酸、リン酸、プロピオン酸、グリコール酸、メタンスルホン酸、ヒドロキシエタンスルホン酸、シュウ酸、２−ナフタレンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、シクロヘキサンスルファミン酸、サッカリン酸又はトリフルオロ酢酸が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１６７】
薬学的に許容され得る塩基性／カチオン性の塩としては、アルミニウム、２−アミノ−２−ヒドロキシメチル−プロパン−１，３−ジオール（トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン、トロメタン、又は「ＴＲＩＳ」としても知られる）、アンモニア、ベンザチン、ｔ−ブチルアミン、カルシウム、クロロプロカイン、コリン、シクロへキシルアミン、ジエタノールアミン、エチレンジアミン、リチウム、Ｌ−リジン、マグネシウム、メグルミン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、ピペリジン、カリウム、プロカイン、キニーネ、ナトリウム、トリエタノールアミン、又は亜鉛が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１６８】
本発明のいくつかの実施形態では、約０．００１ｍｇ／ｍｌ〜約１００ｍｇ／ｍｌ、約０．０１ｍｇ／ｍｌ〜約５０ｍｇ／ｍｌ、又は約０．１ｍｇ／ｍｌ〜約２５ｍｇ／ｍｌの量で本発明の化合物を含む医薬製剤が提供される。医薬製剤は、約３．０〜約１０、例えば、約３〜約７、又は約５〜約９のｐＨを有し得る。製剤は更に、緩衝系、防腐剤（複数可）、等張化剤（複数可）、キレート剤（複数可）、安定化剤、及び界面活性剤（複数可）からなる群から選択される、少なくとも１つの成分を含み得る。
【０１６９】
薬学的に許容される担体を有する薬学的に活性な成分の処方は、当該技術分野において既知であり、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ（例えば、２１ｓｔ  ｅｄｉｔｉｏｎ（２００５）、及び任意の後編）である。追加成分の非限定的な例としては、緩衝剤、希釈剤、溶媒、張度調節剤、防腐剤、安定化剤、及びキレート剤が挙げられる。１つ以上の薬学的に許容される担体は、本発明の医薬組成物を処方する際に使用され得る。
【０１７０】
本発明の一実施形態では、医薬組成物は液体製剤である。液体製剤の好ましい例は、水性製剤、すなわち、水を含む製剤である。液体製剤は、溶液、懸濁液、エマルション、マイクロエマルション、ゲルなどを含み得る。水性製剤は、典型的には、少なくとも５０％ｗ／ｗの水、又は少なくとも６０％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、若しくは少なくとも９５％ｗ／ｗの水を含む。
【０１７１】
一実施形態において、医薬組成物は、例えば注射デバイス（例えば注射器又は注入ポンプ）を介して注射することができる注射剤として処方され得る。注射は、例えば、皮下、筋肉内、腹腔内、又は静脈内に送達され得る。
【０１７２】
別の実施形態では、医薬組成物は、固体製剤、例えば、そのまま使用することができるか、又は医師若しくは患者が使用前に溶媒及び／若しくは希釈剤を添加する、凍結乾燥又は噴霧乾燥組成物である。固体剤形としては、圧縮錠剤などの錠剤、及び／又はコーティングされた錠剤、及びカプセル（例えば、硬又は軟ゼラチンカプセル）を挙げることができる。医薬組成物はまた、例えば、小袋、糖衣錠、粉末、顆粒、トローチ剤、又は再構成用の粉末の形態であってもよい。
【０１７３】
剤形は即時放出であってもよく、その場合、それらは水溶性若しくは分散性担体を含んでもよく、又は剤形は遅延放出、持続放出、又は変性放出であってもよく、その場合、それらは、胃腸管における剤形の溶解速度を調節する非水溶性ポリマーを含んでもよい。
【０１７４】
他の実施形態では、医薬組成物は、鼻腔内、口内、又は舌下に送達され得る。
【０１７５】
水性製剤のｐＨは、ｐＨ３〜ｐＨ１０であり得る。本発明の一実施形態では、製剤のｐＨは約７．０〜約９．５である。本発明の別の実施形態では、製剤のｐＨは約３．０〜約７．０である。
【０１７６】
本発明の別の実施形態では、医薬組成物は緩衝剤を含む。緩衝剤の非限定的な例としては、アルギニン、アスパラギン酸、ビシン、クエン酸塩、リン酸水素二ナトリウム、フマル酸、グリシン、グリシルグリシン、ヒスチジン、リジン、マレイン酸、リンゴ酸、酢酸ナトリウム、炭酸ナトリウム、リン酸二水素ナトリウム、リン酸ナトリウム、コハク酸塩、酒石酸、トリシン、及びトリス（ヒドロキシメチル）−アミノメタン、及びこれらの混合物が挙げられる。緩衝剤は、個々に又は集合体中に、約０．０１ｍｇ／ｍｌ〜約５０ｍｇ／ｍｌ、例えば約０．１ｍｇ／ｍｌ〜約２０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在してよい。これらの具体的な緩衝剤のそれぞれ１つを含む医薬組成物は、本発明の代替実施形態を構成する。
【０１７７】
本発明の別の実施形態では、医薬組成物は防腐剤を含む。緩衝剤の非限定的な例としては、塩化ベンゼトニウム、安息香酸、ベンジルアルコール、ブロノポール、ブチル４−ヒドロキシベンゾエート、クロロブタノール、クロロクレゾール、クロロヘキシジン、クロルフェネシン、ｏ−クレゾール、ｍ−クレゾール、ｐ−クレゾール、エチル４−ヒドロキシベンゾエート、イミド尿素、メチル４−ヒドロキシベンゾエート、フェノール、２−フェノキシエタノール、２−フェニルエタノール、プロピル４−ヒドロキシベンゾエート、デヒドロ酢酸ナトリウム、チオメロサール、及びこれらの混合物が挙げられる。防腐剤は、個々に又は集合体中に、約０．０１ｍｇ／ｍｌ〜約５０ｍｇ／ｍｌ、例えば約０．１ｍｇ／ｍｌ〜約２０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在してよい。これらの具体的な防腐剤のそれぞれ１つを含む医薬組成物は、本発明の代替実施形態を構成する。
【０１７８】
本発明の別の実施形態では、医薬組成物は、等張剤を含む。本実施形態の非限定的な例としては、塩（塩化ナトリウムなど）、アミノ酸（グリシン、ヒスチジン、アルギニン、リジン、イソロイシン、アスパラギン酸、トリプトファン、及びスレオニンなど）、アルジトール（グリセロール、１，２−プロパンジオールプロピレングリコールなど）、１，３−プロパンジオール、及び１，３−ブタンジオールなど）、ポリエチレングリコール（例えば、ＰＥＧ４００）、並びにこれらの混合物が挙げられる。等張剤の別の例としては、糖が挙げられる。糖の非限定的な例は、例えば、フルクトース、グルコース、マンノース、ソルボース、キシロース、マルトース、ラクトース、スクロース、トレハロース、デキストラン、プルラン、デキストリン、シクロデキストリン、α及びβ−ＨＰＣＤ、可溶性澱粉、ヒドロキシエチル澱粉、及びカルボキシメチルセルロースナトリウムを含む、単糖類、二糖類、又は多糖類、あるいは水溶性グルカンであり得る。等張剤の別の例は糖アルコールであり、「糖アルコール」という用語は、少なくとも１つの−ＯＨ基を有するＣ（４〜８）炭化水素として定義される。糖アルコールの非限定的な例としては、マンニトール、ソルビトール、イノシトール、ガラクチトール、ズルシトール、キシリトール、及びアラビトールが挙げられる。本段落に列記される各等張剤を含む医薬組成物は、本発明の代替実施形態を構成する。等張剤は、個々に又は集合体中に、約０．０１ｍｇ／ｍｌ〜約５０ｍｇ／ｍｌ、例えば約０．１ｍｇ／ｍｌ〜約２０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在してよい。これらの具体的な等張剤のそれぞれ１つを含む医薬組成物は、本発明の代替実施形態を構成する。
【０１７９】
本発明の別の実施形態では、医薬組成物はキレート剤を含む。キレート剤の非限定的な例としては、クエン酸、アスパラギン酸、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）の塩、及びこれらの混合物が挙げられる。キレート剤は、個々に又は集合体中に、約０．０１ｍｇ／ｍｌ〜約５０ｍｇ／ｍｌ、例えば約０．１ｍｇ／ｍｌ〜約２０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在してよい。これらの具体的なキレート剤のそれぞれ１つを含む医薬組成物は、本発明の代替実施形態を構成する。
【０１８０】
本発明の別の実施形態では、医薬組成物は安定化剤を含む。安定化剤の非限定的な例としては、１つ以上の凝集阻害剤、１つ以上の酸化阻害剤、１つ以上の界面活性剤、及び／又は１つ以上のプロテアーゼ阻害剤が挙げられる。
【０１８１】
本発明の別の実施形態では、医薬組成物は安定化剤を含み、当該安定化剤は、カルボキシ−／ヒドロキシセルロース及びそれらの誘導体（ＨＰＣ、ＨＰＣ−ＳＬ、ＨＰＣ−Ｌ、及びＨＰＭＣなど）、シクロデキストリン、２−メチルチオエタノール、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ  ３３５０など）、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、ポリビニルピロリドン、塩（塩化ナトリウムなど）、硫黄含有物質、例えばモノチオグリセロール）、又はチオグリコール酸である。安定化剤は、個々に又は集合体中に、約０．０１ｍｇ／ｍｌ〜約５０ｍｇ／ｍｌ、例えば約０．１ｍｇ／ｍｌ〜約２０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在してよい。これらの具体的な安定化剤のそれぞれ１つを含む医薬組成物は、本発明の代替実施形態を構成する。
【０１８２】
本発明の更なる実施形態では、医薬組成物は、１つ以上の界面活性剤、好ましくは１つの界面活性剤、少なくとも１つの界面活性剤、又は２つの異なる界面活性剤を含む。「界面活性剤」という用語は、水溶性（親水性）部分及び脂溶性（親油性）部分からなる任意の分子又はイオンを指す。界面活性剤は、例えば、アニオン性界面活性剤、カチオン性界面活性剤、非イオン性界面活性剤、及び／又は双極性界面活性剤からなる群から選択され得る。界面活性剤は、個々に又は集合体中に、約０．１ｍｇ／ｍｌ〜約２０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在してよい。これらの具体的な界面活性剤のそれぞれ１つを含む医薬組成物は、本発明の代替実施形態を構成する。
【０１８３】
本発明の更なる実施形態では、医薬組成物は、１つ以上のプロテアーゼ阻害剤、例えば、ＥＤＴＡ、及び／又はベンズアミジン塩酸（ＨＣｌ）を含む。プロテアーゼ阻害剤は、個々に又は集合体中に、約０．１ｍｇ／ｍｌ〜約２０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在してよい。これらの具体的なプロテアーゼ阻害剤のそれぞれ１つを含む医薬組成物は、本発明の代替実施形態を構成する。
【０１８４】
本発明の医薬組成物は、組成物の保管中にポリペプチド凝集体形成を減少させるのに十分な量のアミノ酸塩基を含み得る。「アミノ酸塩基」という用語は、１つ以上のアミノ酸（メチオニン、ヒスチジン、イミダゾール、アルギニン、リジン、イソロイシン、アスパラギン酸、トリプトファン、スレオニンなど）、又はこれらの類似体を指す。任意のアミノ酸は、その遊離塩基形態又はその塩形態のいずれかで存在し得る。アミノ酸塩基の任意の立体異性体（すなわち、Ｌ、Ｄ、又はこれらの混合物）が存在し得る。アミノ酸塩基は、個々に又は他のアミノ酸塩基と組み合わせて、約０．０１ｍｇ／ｍｌ〜約５０ｍｇ／ｍｌ、例えば約０．１ｍｇ／ｍｌ〜約２０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在してよい。これらの具体的なアミノ酸塩基のそれぞれ１つを含む医薬組成物は、本発明の代替実施形態を構成する。
【０１８５】
また、本発明の化合物又はその医薬組成物の治療的有効量が、所望の効果に応じて変動することも当業者に自明である。したがって、最適投与量は、当業者によって容易に決定することができ、使用される具体的な化合物、投与方法、調製物の力価、及び病状の進行度に応じて変動する。加えて、対象の年齢、体重、食事、及び投与時間を含む、治療される具体的な対象に関連する要因は、投与量を適切な治療的濃度に調節する必要性を生じさせるものである。
【０１８６】
全ての適応症に関して、本発明の化合物は、好ましくは、単一又は分割用量で（例えば、単一用量を２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０の部分用量（subdose）に分割することができる）、１日当たり約１μｇ〜約５ｍｇの用量で、又は１用量当たり約０．０１μｇ／ｋｇ〜約５００μｇ／ｋｇ、より好ましくは約０．０５μｇ／ｋｇ〜約２５０μｇ／ｋｇ、最も好ましくは約５０μｇ／ｋｇ未満で末梢的に投与される。これらの範囲内の投与量は、当然ながら各アゴニストの効力によって変化し、当業者によって容易に決定される。したがって、上記の投与量は平均的な場合の例である。当然ながら、これよりも多いか又は少ない投与量範囲が有効である個々の例もあり得、かかる例も本発明の範囲内である。
【０１８７】
ある特定の実施形態では、本発明の化合物は、約１μｇ〜約５ｍｇの用量で、又は約０．０１μｇ／ｋｇ〜約５００μｇ／ｋｇの用量で、より好ましくは約０．０５μｇ／ｋｇ〜約２５０μｇ／ｋｇの用量で、最も好ましくは約５０μｇ／ｋｇ未満の用量で、約１μｇ〜約５ｍｇの用量、又は約０．０１μｇ／ｋｇ〜約５００μｇ／ｋｇの用量で、より好ましくは約０．０５μｇ／ｋｇ〜約２５０μｇ／ｋｇの用量、最も好ましくは約５０μｇ／ｋｇ未満の用量の第２の治療薬（例えば、リラグルチド）の用量と共に投与される。
【０１８８】
本発明の化合物の薬学的に許容される塩としては、無機又は有機の酸又は塩基から形成される、従来の非毒性の塩又は第四級アンモニウム塩が挙げられる。かかる酸付加塩の例としては、酢酸塩、アジピン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、クエン酸塩、樟脳酸塩、ドデシル硫酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、メタンスルホン酸塩、硝酸塩、シュウ酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩及び酒石酸塩が挙げられる。塩基性塩としては、アンモニウム塩、ナトリウム塩及びカリウム塩などのアルカリ金属塩、カルシウム塩及びマグネシウム塩などのアルカリ土類金属塩、ジシクロヘキシルアミノ塩などの有機塩基との塩、並びにアルギニンなどのアミノ酸との塩が挙げられる。更に、塩基性の窒素含有基は、例えばハロゲン化アルキルによって四級化してもよい。
【０１８９】
本発明の医薬組成物は、その意図する目的を実現する任意の手段によって投与することができる。例としては、非経口、皮下、静脈内、筋肉内、腹腔内、経皮的、口内又は眼内投与が挙げられる。経口経路により投与してもよい。非経口投与に適する製剤としては、例えば、水溶性の塩、酸性溶液、アルカリ性溶液、デキストロース水溶液、等張炭水化物溶液、及びシクロデキストリン包接錯体などの水溶性形態の活性複合体の水溶液が挙げられる。
【０１９０】
本発明はまた、医薬的に許容される担体を本発明の化合物のいずれかと混合することを含む、医薬組成物の製造方法も包含する。加えて、本発明は、１つ以上の薬学的に許容される担体を本発明の化合物のいずれかと混合することによって製造される医薬組成物を包含する。
【０１９１】
更に、本発明の化合物は、１種以上の結晶多形又は非晶質結晶形を有してよく、したがって、これらの形態も本発明の範囲に包含されるものとする。加えて、化合物は、例えば水（すなわち水和物）又は一般的な有機溶媒と溶媒和物を形成してよい。本明細書で使用される場合、「溶媒和物」という用語は、本発明の化合物と１つ以上の溶媒分子との物理的会合を意味する。この物理的会合は、水素結合など、様々な度合いのイオン結合及び共有結合を伴う。特定の場合において、例えば１つ以上の溶媒分子が結晶質固体の結晶格子に組み込まれているとき、この溶媒和物は分離することができるようになる。用語「溶媒和物」は、溶液相溶媒和物及び分離可能な溶媒和物の両方を包含するものとする。適切な溶媒和物の非限定的な例としては、エタノレート、メタノレートなどが挙げられる。
【０１９２】
本発明は、本発明の複合体の多形体及び溶媒和物をその範囲内に包含することを意図する。ゆえに、本発明の治療方法における「投与」という用語には、本発明の複合体、あるいは具体的に開示されていなくとも、明らかに本発明の範囲内に含まれるであろう多形体又はその溶媒和物を用いて、本明細書に記載の症候群、障害、又は疾患を治療する、寛解させる、又は予防する手段が含まれる。
【０１９３】
別の実施形態では、本発明は、薬剤として使用するための本発明の化合物に関する。
【０１９４】
本発明の範囲内には、本発明の化合物のプロドラッグが含まれる。一般に、かかるプロドラッグは、インビボで目的の化合物に容易に変換可能な、当該化合物の機能的誘導体である。したがって、本発明の治療方法における用語「投与」には、本明細書に記載される様々な障害の、具体的に開示された化合物による治療か、又は具体的に開示されていなくとも、患者への投与後にインビボで特定の化合物に変換される化合物による治療が含まれるものとする。好適なプロドラッグ誘導体の選択及び調製に関する従来の手順は、例えば、「Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ」（Ｅｄ．Ｈ．Ｂｕｎｄｇａａｒｄ、Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，１９８５）に記載されている。
【０１９５】
更に、本発明の範囲内で、任意の元素が、特に本発明の化合物に関して言及される場合、自然発生であるか合成的に生成されたものであるか、また自然存在度であるか同位体濃縮形態であるかを問わず、その元素の全ての同位体及び同位体混合物を含むものとすることが意図される。例えば、水素に関しては、その範囲内に１Ｈ、２Ｈ（Ｄ）、及び３Ｈ（Ｔ）が含まれる。同様に、炭素及び酸素に関しては、それらの範囲内に１２Ｃ、１３Ｃ及び１４Ｃ、並びに１６Ｏ及び１８Ｏがそれぞれ含まれる。かかる同位体は、放射性であっても非放射性であってもよい。本発明の放射性標識化合物は、３Ｈ、１１Ｃ、１８Ｆ、１２２Ｉ、１２３Ｉ、１２５Ｉ、１３１Ｉ、７５Ｂｒ、７６Ｂｒ、７７Ｂｒ、及び８２Ｂｒの群から選択される放射性同位体を含み得る。好ましくは、放射性同位体は、３Ｈ、１１Ｃ、及び１８Ｆの群から選択される。
【０１９６】
本発明のいくつかの化合物は、アトロプ異性体として存在してもよい。アトロプ異性体は、一重結合周りの回転が障害されることにより生じる立体異性体であり、回転に対する立体歪み障害が、配座異性体の単離を可能にする程度に十分高いものである。かかる配座異性体及びその混合物は全て、本発明の範囲内に包含されると理解されるべきである。
【０１９７】
本発明による化合物が少なくとも１つの立体中心を有する場合、結果としてそれらはエナンチオマー又はジアステレオマーとして存在し得る。かかる異性体及びその混合物は全て、本発明の範囲内に包含されると理解されるべきである。
【０１９８】
本発明による化合物の調製プロセスにより立体異性体の混合物が生じる場合、これらの異性体は、分取クロマトグラフィーなどの従来法により分離することができる。化合物はラセミ体で調製されてもよく、又は個々のエナンチオマーをエナンチオ選択的合成若しくは分解のいずれかにより調製することもできる。化合物は、例えば（−）−ジ−ｐ−トルオイル−Ｄ−酒石酸及び／又は（＋）−ジ−ｐ−トルオイル−Ｌ−酒石酸のような光学的に活性な酸で塩を形成させることでジアステレオマー対を形成した後、分別結晶化及び遊離塩基の再生などの標準的方法により、その成分であるエナンチオマーに分解することができる。化合物はまた、ジアステレオマーのエステル又はアミドを形成した後、クロマトグラフィー分離を行い、キラル補助基を除去することにより、分解することもできる。あるいは、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）又はＳＦＣを介したキラルカラムを使用して、化合物を分解してもよい。場合によっては、１Ｈ  ＮＭＲスペクトルにおいて、複雑なマルチプレット及びピークの一体化をもたらす、１Ｈ  ＮＭＲにより観察可能な、化合物の回転異性体が存在し得る。
【０１９９】
本発明の化合物を調製するためのプロセスのいずれかにおいて、関連する分子のいずれかにおける感受性基又は反応性基を保護することが必要及び／又は望ましい場合がある。これは、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，ｅｄ．Ｊ．Ｆ．Ｗ．ＭｃＯｍｉｅ，Ｐｌｅｎｕｍ  Ｐｒｅｓｓ，１９７３、及びＴ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ  ＆  Ｐ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，１９９１（それらのそれぞれは、全ての目的のために参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）に記載されるものなど、従来の保護基の手段によって達成され得る。保護基は、その後の利便な段階において、当該技術分野で周知の方法を用いて除去することができる。
【０２００】
使用方法
本発明は、Ｙ２受容体媒介症候群、障害、又は疾患を予防する、治療する、又は寛解させることを必要とする対象に、それを行うための方法を目的とし、それを必要とする対象に、任意に半減期延長部分に複合された、有効量の本発明の化合物、その誘導体、又は薬学的に許容される塩、あるいは医薬組成物を投与することを含む。
【０２０１】
本発明は、障害、疾患、若しくは病態、又は当該障害、疾患、若しくは病態の任意の１つ以上の症状を予防する、治療する、その発症を遅延させる、又は寛解させることを必要とする対象に、それを行うための方法も提供し、それを必要とする対象に、有効量の、任意に半減期延長部分に複合された本発明の化合物、その誘導体、若しくは薬学的に許容される塩、又は医薬組成物を投与することを含む。
【０２０２】
特定の実施形態によると、疾患障害、又は病態は、肥満、Ｉ型又はＩＩ型糖尿病、メタボリックシンドローム（すなわち、シンドロームＸ）、インスリン抵抗性、耐糖能異常（例えば、耐糖能）、高血糖症、高インスリン血症、高トリグリセリド血症、先天性高インスリン症（ＣＨＩ）による低血糖、脂質異常症、アテローム性動脈硬化症、糖尿病性腎症、並びに管理されていないコレステロール及び／若しくは脂質レベルに関連する高血圧及び心血管危険因子など、その他の心血管危険因子、骨粗鬆症、炎症、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、腎疾患、並びに／又は湿疹からなる群から選択される。
【０２０３】
特定の実施形態によれば、治療有効量は、以下の効果のうちの１つ、２つ、３つ、４つ、又はそれ以上を実現するのに十分である治療量を指す：（ｉ）治療される疾患、障害、若しくは病態、又はそれに関連する症状の重症度を低減する、又は寛解させること、（ｉｉ）治療される疾患、障害若しくは病態、又はそれに関連する症状の期間を短縮すること、（ｉｉｉ）治療される疾患、障害若しくは病態、又はそれに関連する症状の進行を防止すること、（ｉｖ）治療される疾患、障害若しくは状態、又はそれに関連する症状の退縮を生じさせること、（ｖ）治療される疾患、障害若しくは病態、又はそれに関連する症状の進展若しくは発症を予防すること、（ｖｉ）治療される疾患、障害若しくは病態、又はそれに関連する症状の再発を防止すること、（ｖｉｉ）治療される疾患、障害、若しくは病態、又はそれに関連する症状を有する対象の入院を減少させること、（ｖｉｉｉ）治療される疾患、障害若しくは病態、又はそれに関連する症状を有する対象の入院期間を短縮させること、（ｉｘ）治療される疾患、障害若しくは病態、又はそれに関連する症状を有する対象の生存率を高めること、（ｘｉ）治療される対象の疾患、障害若しくは病態、又はそれに関連する症状を阻害若しくは軽減すること、及び／又は（ｘｉｉ）別の治療の予防又は治療効果を強化又は改善すること。
【０２０４】
治療有効量又は用量は、治療される疾患、障害又は病態、投与手段、標的部位、対象の生理学的状態（例えば、年齢、体重、健康状態など）、対象がヒトであるか動物であるか、投与される他の薬剤、及び治療が予防的なものであるか治療的なものであるか、などの様々な因子によって異なり得る。治療用量は、安全性及び有効性を最適化するために最適に滴定される。
【０２０５】
本明細書で使用される場合、「治療する（treat）」、「治療する（treating）」、及び「治療（treatment）」という用語は全て、疾患、障害、又は病態に関連する少なくとも１つの測定可能な物理的パラメータの改善又は逆転を指すことを意味し、これは対象において必ずしも認識されるとは限らないが、対象において認識可能な場合もある。「治療する（treat）」、「治療する（treating）」、及び「治療（treatment）」なる用語は更に、疾患、障害、若しくは病態の退縮を生じさせる、その進行を防止する、又は少なくともその進行を遅らせることを指す場合もある。特定の実施形態では、「治療する（treat）」、「治療する（treating）」、及び「治療（treatment）」は、疾患、障害、若しくは病態に関連する１つ以上の症状の緩和、進展若しくは発症の予防、又はその期間の短縮を指す。特定の実施形態では、「治療する（treat）」、「治療する（treating）」、及び「治療（treatment）」は、疾患、障害、又は病態の再発の防止を指す。特定の実施形態では、「治療する（treat）」、「治療する（treating）」、及び「治療（treatment）」は、疾患、障害、又は病態を有する対象の生存率の向上を指す。特定の実施形態では、「治療する（treat）」、「治療する（treating）」、及び「治療（treatment）」は、対象における疾患、障害、又は病態の消失を指す。
【０２０６】
一実施形態において、本発明は、肥満、又は肥満の任意の１つ以上の症状を予防する、治療する、その発症を遅延させる、又は寛解させることを必要とする対象に、それを行うための方法を提供し、本方法は、それを必要とする対象に、有効量の、任意に半減期延長部分に複合された本発明の化合物、その誘導体若しくは薬学的に許容される塩、又は医薬組成物を投与することを含む。いくつかの実施形態では、対象の体重は、本明細書に記載の本発明の複合体、化合物、医薬組成物、形態、若しくは薬剤のいずれかの投与前の対象の体重に対して、又は本明細書に記載の本発明の複合体、組成物、形態、薬剤、若しくは組み合わせのいずれも受けていない対照対象と比較して、例えば、約０．０１％〜約０．１％、約０．１％〜約０．５％、約０．５％〜約１％、約１％〜約５％、約２％〜約３％、約５％〜約１０％、約１０％〜約１５％、約１５％〜約２０％、約２０％〜約２５％、約２５％〜約３０％、約３０％〜約３５％、約３５％〜約４０％、約４０％〜約４５％、又は約４５％〜約５０％低減される。
【０２０７】
いくつかの実施形態では、体重の低減は、例えば、約１週間、約２週間、約３週間、約１ヶ月間、約２ヶ月間、約３ヶ月間、約４ヶ月間、約５ヶ月間、約６ヶ月間、約７ヶ月間、約８ヶ月間、約９ヶ月間、約１０ヶ月間、約１１ヶ月間、約１年間、約１．５年間、約２年間、約２．５年間、約３年間、約３．５年間、約４年間、約４．５年間、約５年間、約６年間、約７年間、約８年間、約９年間、約１０年間、約１５年間、又は約２０年間維持される。
【０２０８】
本発明は、症候群、障害、若しくは疾患、又は当該症候群、障害、若しくは疾患のうちのいずれか１つ以上の症状を予防する、治療する、その発症を遅延させる、又は寛解させることを必要とする対象に、それを行う方法であって、当該症候群、障害、又は疾患が、肥満、Ｉ型若しくはＩＩ型糖尿病、メタボリックシンドローム（すなわち、シンドロームＸ）、インスリン抵抗性、耐糖能異常（例えば、耐糖能）、高血糖症、高インスリン血症、高トリグリセリド血症、先天性高インスリン症（ＣＨＩ）による低血糖、脂質異常症、アテローム性動脈硬化症、糖尿病性腎症、並びに管理されていないコレステロール及び／又は脂質レベルに関連する高血圧及び心血管危険因子などその他の心血管危険因子、骨粗鬆症、炎症、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、腎疾患、並びに湿疹からなる群から選択される、方法を提供し、それを必要とする対象に、有効量の、任意に半減期延長部分に複合された本発明の化合物、その誘導体若しくは薬学的に許容される塩、又は医薬組成物を投与することを含む。
【０２０９】
本明細書で使用される場合、メタボリックシンドロームは、高血糖（例えば、空腹時高血糖）、高血圧、異常コレステロールレベル（例えば、低ＨＤＬレベル）、異常トリグリセリドレベル（例えば、高トリグリセリド）、大腰線（すなわち、腰部周囲）、腹部領域の脂肪の増加、インスリン抵抗性、耐糖能、高いＣ反応性タンパク質レベル（すなわち、前炎症状態）、並びに血漿プラスミノゲン活性化因子阻害剤−１及びフィブリノーゲンレベル（すなわち、血栓状態）のいずれか１つ以上を有する対象を指す。
【０２１０】
本発明は、食物摂取を低減することを必要とする対象に、それを行う方法を提供し、本方法は、それを必要とする対象に、有効量の、任意に半減期延長部分に複合された本発明の化合物、その誘導体若しくは薬学的に許容される塩、又は医薬組成物を投与することを含む。いくつかの実施形態では、対象の食物摂取は、本明細書に記載の本発明の複合体、化合物、組成物、形態、薬剤、若しくは組み合わせのいずれかの投与前の対象の食物摂取に対して、又は本明細書に記載の本発明の複合体、化合物、組成物、形態、薬剤、若しくは組み合わせのいずれも受けていない対照対象と比較して、例えば、約０．０１％〜約０．１％、約０．１％〜約０．５％、約０．５％〜約１％、約１％〜約５％、約２％〜約３％、約５％〜約１０％、約１０％〜約１５％、約１５％〜約２０％、約２０％〜約２５％、約２５％〜約３０％、約３０％〜約３５％、約３５％〜約４０％、約４０％〜約４５％、又は約４５％〜約５０％低減される。
【０２１１】
いくつかの実施形態では、食物摂取の低減は、例えば、約１週間、約２週間、約３週間、約１ヶ月間、約２ヶ月間、約３ヶ月間、約４ヶ月間、約５ヶ月間、約６ヶ月間、約７ヶ月間、約８ヶ月間、約９ヶ月間、約１０ヶ月間、約１１ヶ月間、約１年間、約１．５年間、約２年間、約２．５年間、約３年間、約３．５年間、約４年間、約４．５年間、約５年間、約６年間、約７年間、約８年間、約９年間、約１０年間、約１５年間、又は約２０年間維持される。
【０２１２】
本発明は、糖化ヘモグロビン（Ａ１Ｃ）を低減することを必要とする対象に、それを行う方法を提供し、本方法は、それを必要とする対象に、有効量の、任意に半減期延長部分に複合された本発明の化合物、その誘導体若しくは薬学的に許容される塩、又は医薬組成物を投与することを含む。いくつかの実施形態では、対象のＡ１Ｃは、本明細書に記載の本発明の複合体、化合物、組成物、形態、薬剤、若しくは組み合わせのいずれかの投与前の対象のＡ１Ｃに対して、又は本明細書に記載の本発明の複合体、化合物、組成物、形態、薬剤、若しくは組み合わせのいずれも受けていない対照対象と比較して、例えば、約０．００１％〜約０．０１％、約０．０１％〜約０．１％、約０．１％〜約０．２％、約０．２％〜約０．３％、約０．３％〜約０．４％、約０．４％〜約０．５％、約０．５％〜約１％、約１％〜約１．５％、約１．５％〜約２％、約２％〜約２．５％、約２．５％〜約３％、約３％〜約４％、約４％〜約５％、約５％〜約６％、約６％〜約７％、約７％〜約８％、約８％〜約９％、又は約９％〜約１０％低減される。
【０２１３】
他の実施形態では、本方法は、空腹時血糖レベルを低減することを必要とする対象に、それを提供し、本方法は、それを必要とする対象に、有効量の、任意に半減期延長部分に複合された本発明の化合物、その誘導体若しくは薬学的に許容される塩、又は医薬組成物を投与することを含む。空腹時血糖レベルは、本明細書に記載の本発明の複合体、化合物、組成物、形態、薬剤、若しくは組み合わせのいずれかの投与前の対象の空腹時血糖レベルに対して、又は本明細書に記載の本発明の複合体、化合物、組成物、形態、薬剤、若しくは組み合わせのいずれかを受けていない対照対象と比較して、約１４０〜約１５０ｍｇ／ｄＬ未満、約１４０〜約１３０ｍｇ／ｄＬ未満、約１３０〜約１２０ｍｇ／ｄＬ未満、約１２０〜約１１０ｍｇ／ｄＬ未満、約１１０〜約１００ｍｇ／ｄＬ未満、約１００〜約９０ｍｇ／ｄＬ未満、又は約９０〜約８０ｍｇ／ｄＬ未満まで低減され得る。
【０２１４】
本発明は、Ｙ２受容体活性を調節することを必要とする対象に、それを行う方法を提供し、本方法は、それを必要とする対象に、有効量の、任意に半減期延長部分に複合された本発明の化合物、その誘導体若しくは薬学的に許容される塩、又は医薬組成物を投与することを含む。本明細書で使用される場合、「調節する」とは、受容体活性を増加又は減少させることを指す。
【０２１５】
いくつかの実施形態では、有効量の、任意に半減期延長部分に複合された本発明の化合物、その誘導体若しくは薬学的に許容される塩、又は医薬組成物は、それを必要とする対象に、１日１回、１日２回、１日３回、１日４回、１日５回、１日６回、１日７回、又は１日８回投与される。いくつかの実施形態では、有効量の、任意に半減期延長部分に複合された本発明の化合物、その誘導体若しくは薬学的に許容される塩、又は医薬組成物は、それを必要とする対象に、２日に１回、週に１回、週に２回、週に３回、週に４回、週に５回、週に６回、１ヶ月に２回、１ヶ月に３回、又は１ヶ月に４回投与される。
【０２１６】
本発明の別の実施形態は、疾患、障害、若しくは症候群、又は当該疾患、障害、若しくは症候群のいずれかの１つ以上の症状を予防する、治療する、その発症を遅延させる、又は寛解させることを必要とする対象に、それを行うための方法を含み、本方法は、それを必要とする対象に、併用療法で、有効量の、任意に半減期延長部分に複合された本発明の化合物、その誘導体若しくは薬学的に許容される塩、又は医薬組成物を投与することを含む。ある特定の実施形態では、併用療法は、第２の治療薬である。ある特定の実施形態では、併用療法は、外科療法である。
【０２１７】
本明細書で使用するところの「併用される」なる用語は、対象への２種以上の治療薬の投与との関連において、複数の治療の使用を指す。
【０２１８】
本明細書で使用される場合、併用療法は、それを必要とする対象に、有効量の、任意に半減期延長部分に複合された化合物、その誘導体若しくは薬学的に許容される塩、又は医薬組成物と同時に、１つ以上の追加の治療薬、又は１つ以上の外科療法を施すことを指す。いくつかの実施形態では、１つ以上の追加の治療薬又は外科療法は、有効量の、任意に半減期延長部分に複合された本発明の化合物、その誘導体若しくは薬学的に許容される塩、又は医薬組成物と同日に投与され得、他の実施形態では、１つ以上の追加の治療薬又は外科療法は、有効量の、任意に半減期延長部分に複合された本発明の化合物、その誘導体若しくは薬学的に許容される塩、又は医薬組成物と同じ週又は同じ月に投与され得る。
【０２１９】
ある特定の実施形態では、疾患又は障害は、肥満、ＩＩ型糖尿病、メタボリックシンドローム、インスリン抵抗性、及び脂質異常症からなる群から選択され、第２の治療薬は抗糖尿病薬であり得る。ある特定の実施形態では、抗糖尿病薬は、グルカゴン様ペプチド−１（ＧＬＰ−１）受容体調節因子であり得る。
【０２２０】
本発明はまた、併用療法を用いて、本明細書に記載の疾患、障害、症候群、又は症状のいずれかを予防する、治療する、その発症を遅延させる、又は寛解させることを必要とする対象において、それを行うことを企図し、併用療法は、それを必要とする対象に、有効量の、任意に半減期延長部分に複合された本発明の化合物、その誘導体若しくは薬学的に許容される塩、又は医薬組成物を、以下の治療薬のうちのいずれか１つ以上と組み合わせて投与することを含む：ジペプチジルペプチダーゼ−４（ＤＰＰ−４）阻害剤（例えば、シタグリプチン、サクサグリプチン、リナグリプチン、アログリプチンなど）；ＧＬＰ−１受容体アゴニスト（例えば、エキセナチド及びリキシセナチドなどの、短時間作用型ＧＬＰ−１受容体アゴニスト；中間作用型ＧＬＰ−１受容体アゴニスト（例えば、リラグルチド）；長期放出型エキセナチド、アルビグルチド、デュラグルチドなどの長時間作用型ＧＬＰ−１受容体アゴニスト；ナトリウム−グルコース共輸送体−２（ＳＧＬＴ−２）阻害剤（例えば、カナグリフォジン、ダパグリフォジン、エンパグリフォジンなど）；胆汁酸封鎖剤（例えば、コレセベラムなど）；ドーパミン受容体アゴニスト（例えば、ブロモクリプチン急速放出）；ビグアニド（例えば、メトホルミンなど）；インスリン；オキシントモジュリン；スルホニル尿素（例えば、クロルプロパミド、グリメピリド、グリピジド、グリブリド、グリベンクラミド、グリボルヌリド、グリソキセピド、グリクロピラミド、トラザミド、トルブタミド、アセトヘキサミド、カルブタミドなど）；及びチアゾリジンジオン（例えば、ピオグリタゾン、ロシグリタゾン、ロベグリタゾン、シグリタゾン、ダルグリタゾン、エングリタゾン、ネトグリタゾン、リボグリタゾン、トログリタゾンなど）。いくつかの実施形態では、追加の治療薬（複数可）の用量は、任意に半減期延長部分に複合された本発明の化合物、その誘導体若しくはその薬学的に許容される塩、又は医薬組成物と組み合わせて与えられる場合に低減される。いくつかの実施形態では、本発明の複合体又は化合物と組み合わせて使用される場合、追加の治療薬（複数可）は、それぞれが単独で使用される場合よりも低い用量で使用され得る。
【０２２１】
疾患又は障害が、肥満、Ｉ型又はＩＩ型糖尿病、メタボリックシンドローム（すなわち、シンドロームＸ）、インスリン抵抗性、耐糖能異常（例えば、耐糖能）、高血糖症、高インスリン血症、高トリグリセリド血症、先天性高インスリン症（ＣＨＩ）による低血糖、脂質異常症、アテローム性動脈硬化症、糖尿病性腎症、並びに管理されていないコレステロール及び／若しくは脂質レベルに関連する高血圧及び心血管危険因子などその他の心血管危険因子、骨粗鬆症、炎症、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、腎疾患、並びに湿疹からなる群から選択される、ある特定の実施形態では、第２の治療薬はリラグルチドであり得る。
【０２２２】
本発明は、併用療法を用いて、本明細書に記載の疾患、障害、症候群、又は症状のいずれかを予防する、治療する、その発症を遅延させる、又は寛解させることを必要とする対象において、それを行うことを企図し、併用療法は、それを必要とする対象に、有効量の、任意に半減期延長部分に複合された本発明の化合物、その誘導体若しくは薬学的に許容される塩、又は医薬組成物を、外科療法と組み合わせて投与することを含む。ある特定の実施形態では、外科治療は、肥満手術（例えば、Ｒｏｕｘ−ｅｎ−Ｙ胃バイパス手術などの胃バイパス手術；スリーブ胃切除術；調節可能な胃バンド手術；十二指腸スイッチを伴う胆すい消化回避術；胃内バルーン；胃縫縮術、及びこれらの組み合わせ）であり得る。
【０２２３】
１つ以上の追加の治療薬又は外科療法が、有効量の本発明の複合体又は化合物と同日に投与される実施形態では、本発明の複合体又は化合物は、追加の治療薬又は外科療法の前、後、又は同時に投与され得る。「併用される」なる用語の使用は、治療が対象に投与される順序を限定しない。例えば、第１の治療（例えば、本明細書に記載される組成物）を、対象への第２の治療の投与の前（例えば、５分、１５分、３０分、４５分、１時間、２時間、４時間、６時間、１２時間、１６時間、２４時間、４８時間、７２時間、９６時間、１週間、２週間、３週間、４週間、５週間、６週間、８週間、又は１２週間前）、同時に、又はその後（例えば、５分、１５分、３０分、４５分、１時間、２時間、４時間、６時間、１２時間、１６時間、２４時間、４８時間、７２時間、９６時間、１週間、２週間、３週間、４週間、５週間、６週間、８週間、又は１２週間後）に投与することができる。
【０２２４】
略語
本明細書及び本願を通して、以下の略語が使用され得る。Ａｂｕ：４−アミノ酪酸；Ａｃ２Ｏ：酢酸無水物；ａｑ：水性；ａｌｌｏｃ：アリルオキシカルボニル；ａｒａｃｈ：アラキドイル；Ｂｏｃ：ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル；ＢＳＡ：ウシ血清アルブミン；ＣＤＩ：１，１’−カルボニルジイミダゾール；ＤＣＭ：：ジクロロメタン；Ｄｄｅ：１−（４，４−ジメチル−２，６−ジオキソシクロヘキサ−１−イリデン）エチル；ＤＩＢＡＬ−Ｈ：水素化ジイソブチルアルミニウム；ＤＩＣ：ジイソプロピルカルボジイミド；ＤＩＥＡ：ジイソプロピルエチルアミン；ＤＭＡ：Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド；ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド；ＤＭＳＯ：メチルスルホキシド；ＤＯＤＴ：２，２’−（エチレンジオキシ）ジエタンチオール；ＥＤＣ：Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミド；ＥＤＣＩ：１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩；Ｅｔ：エチル；ＥｔＯＡｃ：酢酸エチル；ＥｔＯＨ：エチルアルコール；ＦＢＳ：ウシ胎児血清；Ｆｍｏｃ：９−フルオレニルメチルオキシカルボニル；ｇ：グラム；ｈ：時間；ＨＡＴＵ：２−（１Ｈ−７−アザベンズトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルアミニウムヘキサフルオロホスフェート；ＨＢＳＳ：ハンクス平衡塩溶液；ＨＢＴＵ  ２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート）；ＨＣＴＵ：２−（６−クロロ−１Ｈ−ベンズトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルアミニウムヘキサフルオロホスフェート；ＨＣｌ：塩酸；ＨＥＰＥＳ：４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジンエタンスルホン酸；ＨＯＢＴ：１−ヒドロキシベンズトリアゾール；ＨＰＬＣ：高速液体クロマトグラフィー；ｉｖＤｄｅ：１−（４，４−ジメチル−２，６−ジオキソシクロヘキサ−１−イリデン）−３−メチルブチル；ＬＡＨ：リチウムアルミニウム水素化物；ＬＣＭＳ：質量分析計を有する高圧液体クロマトグラフィー；Ｍｅ：メチル；ＭｅＣＮ：アセトニトリル；ＭｅＯＨ：メチルアルコール；ｍｇ：ミリグラム；ｍｉｎ：分；Ｍｍｔ：４−メトキシトリチル；ｍｐｍ：ｍＬ／分；Ｍｔｔ：４−メチルトリチル；ＮＨＳ：Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド；ＮＭＰ：１−メチル−２−ピロリドン；ＯＥＧ：８−アミノ−３，６−ジオキサオクタノイル；Ｏｘｙｍａ：エチルシアノ（ヒドロキシイミノ）アセテート；Ｐａｌ：パルミトイル；Ｐｂｆ：２，２，４，６，７−ペンタメチルジヒドロベンゾフラン−５−スルホニル；Ｐｄ（ＰＰｈ３）４：テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）；ＰｈＳｉＨ３：フェニルシラン；ｐｓｉ：低減したアミド結合（隣接するアミノ酸間）；ＰｙＢｒｏＰ：ブロモ−トリス−ピロリジノ−ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート；Ｐｙｏｘｉｍ：１−シアノ−２−エトキシ−２−オキソエチリデンアミノオキシ−トリス−ピロリジノ−ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート；ｒｔ：室温；ＲＴ：保持時間；ｓａｔｄ．：飽和；ＳＰＰＳ：固相ペプチド合成；Ｓｔｅａｒ：ステアロイル；ｔ−Ｂｕ：ｔｅｒｔ−ブチル；ＴＢＴＵ：２���（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルアミニウムテトラフルオロボレート；ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸；ＴＨＦ：テトラヒドロフラン；ＴＨＰ：テトラヒドロピラニル；ＴＩＰＳ：トリイソプロピルシラン；Ｔｒｉｓ：トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン；Ｔｒｔ：トリフェニルメチル
【０２２５】
合成
本発明における式Ｉの化合物は、当業者に知られる一般的な合成法に従って合成することができる。以下の合成の説明は、例示目的のためのものであり、決して本発明の限定を意図するものではない。
【０２２６】
本発明のＮＴＳＣ環状ＰＹＹ（ＮＴＳＣ−ＰＹＹ）類似体又は誘導体は、アミノ酸間の連続するペプチド連結を形成するための様々な既知の従来の処置によって合成することができ、自動ペプチド合成装置、従来のベンチ合成、又は両方のアプローチの組み合わせを使用して、Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ（Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１９６３，８５，２１４９〜２１５４）により概して記載されるように、優先的に固相ペプチド合成（ＳＰＰＳ）により行われる。ペプチド合成のための従来の処置は、１つのアミノ酸残基の遊離アミノ基（その他の反応性官能基は好適に保護されている）と別のアミノ酸の遊離カルボキシル基（その反応性官能基も好適に保護されている）との間の縮合を伴う。ペプチド結合形成に通常利用される縮合剤の例としては、１−ヒドロキシベンズトリアゾール（ＨＯＢＴ）又はエチルシアノ（ヒドロキシイミノ）アセテート（Ｏｘｙｍａ  Ｐｕｒｅ）を有する又は有しないジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）、２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルアミニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＢＴＵ）、２−（１Ｈ−７−アザベンズトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルアミニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ）、２−（６−クロロ−１Ｈ−ベンズトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルアミニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＣＴＵ）、１−シアノ−２−エトキシ−２−オキソエチリデンアミノオキシ−トリス−ピロリジノ−ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＰｙＯｘｉｍ）、２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルアミニウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）ブロモ−トリス−ピロリジノ−ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＰｙＢｒｏＰ）などが挙げられる。
【０２２７】
自動ペプチド合成方法論は、Ｙｕ（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，１９９２，５７，４７８１〜４７８４）により説明され、Ｐａｌａｓｅｋ（Ｊ．Ｐｅｐｔ．Ｓｃｉ．，２００７，１３，１４３〜１４８）により近年改良されたように、好ましくはマイクロ波加熱を適用することにより、室温又は高温で行われ得る。
【０２２８】
本発明の化合物（Ｃ末端アミド）は、好適に保護されたＮ−α−Ｆｍｏｃ保護されたアミノ酸のカルボキシ末端が、好適な結合剤を使用して従来の固相樹脂上に結合される、Ｎ−α−Ｆｍｏｃ保護されたアミノ酸方法論を用いて、便利に調製することができる。好適な従来の市販の固相樹脂としては、ＲｉｎｋアミドＭＢＨＡ樹脂、ＲｉｎｋアミドＡＭ樹脂、Ｔｅｎｔａｇｅｌ  Ｓ  ＲＡＭ  Ｒｅｓｉｎ、Ｆｍｏｃ−ＰＡＬ−ＰＥＧ  ＰＳ樹脂、ＳｐｈｅｒｉＴｉｄｅ  Ｒｉｎｋアミド樹脂、ＣｈｅｍＭａｔｒｉｘ  Ｒｉｎｋ樹脂、Ｓｉｅｂｅｒアミド樹脂、ＴＧ  Ｓｉｅｂｅｒ樹脂などが挙げられる。次いで、樹脂結合されたＦｍｏｃ−アミノ酸は、ＤＭＦ又はＮＭＰのいずれか中２０％ピペリジンへの曝露によって脱保護されてもよく、その処理は、Ｆｍｏｃ保護基を選択的に除去する役割を果たす。次いで、追加のＦｍｏｃ保護されたアミノ酸は、続いて順次結合及び脱保護され、それによって所望の樹脂結合された、保護されたペプチドを生成する。ある特定の場合において、Ｆｍｏｃ脱保護条件に耐えるであろうペプチド配列中の別のアミンに対して直交反応性保護基を利用することが必要であり得る。４−メチルトリチル（Ｍｔｔ）又は４−メトキシトリチル（Ｍｍｔ）などの保護基は、いずれも１％ＴＦＡ／ＤＣＭ処理によって除去可能であるか、又は好ましくはアリルオキシカルボニル（ａｌｌｏｃ；Ｐｄ（ＰＰｈ３）４／ＰｈＳｉＨ３処理により除去可能）、１−（４，４−ジメチル−２，６−ジオキソシクロへキス−１−イリデン）エチル（Ｄｄｅ；２〜３％ヒドラジン／ＤＭＦで処理することによって除去可能）、及び１−（４，４−ジメチル−２，６−ジオキソシクロへキス−１−イリデン）−３−メチルブチル（ｉｖＤｄｅ；２〜３％ヒドラジン／ＤＭＦで処理することによって除去可能）が、そのような場合に効果的に使用され得る。
【０２２９】
従来のペプチド合成方法論では、αアミノ酸の反応性側鎖は、一般的に、結合及び脱保護プロトコルに対してそれらを不活性にするために、好適な保護基で合成を通して保護される。アミノ酸側鎖のための複数の保護基が当該技術分野において既知であるが、本明細書では、以下の保護基が最も好ましい：セリン、スレオニン、グルタミン酸、アスパラギン酸、及びチロシンにはｔｅｒｔ−ブチル（ｔ−Ｂｕ）；アスパラギン、グルタミン、システイン、ホモシステイン、及びヒスチジンにはトリチル（Ｔｒｔ）；トリプトファン及びリジンのε−アミノ基にはｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）；並びにアルギニンには２，２，４，６，７−ペンタメチルジヒドロベンゾフラン−５−スルホニル（Ｐｂｆ）。これらの保護基は、高濃度のトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）などの強酸処理により除去される。
【０２３０】
ＳＰＰＳが完了すると、樹脂結合され側鎖保護されたペプチドは脱保護され、トリイソプロピルシラン（ＴＩＰＳ）、水、フェノール、及びアニソールなどのカルボカチオンスカベンジャーの様々な組み合わせと共に主に（ＴＦＡ）からなる切断カクテルを使用して、樹脂から同時に切断される。次いで、ペプチド／カクテル濾液を冷エーテルで沈殿させることにより、粗固体ペプチドを単離する。Ｓｉｅｂｅｒ樹脂結合された保護されたペプチドの特別な場合では、樹脂からの保護されたペプチドの切断は、側鎖脱保護を引き起こすことなく、ＤＣＭ中１〜２％ＴＦＡで繰り返し処理すると有利にもたらされ得る。単離されたら、保護されたペプチドの更なる操作を、溶液相反応において行うことができる。最後に、保護されたペプチドは、切断カクテルを用いた別個の処理を使用して全体的に脱保護され、上記のように沈殿され得る。次いで、このようにして得られた粗ペプチドを、アセトニトリル又はエタノールなどの有機共溶媒を含む主に水性の溶媒系中に低濃度（約＜４ｍｇ／ｍＬ）で溶解する。溶液のｐＨを＞５に上昇させると、次にペプチドは分子内環化反応を経て、本発明の対応する粗ＮＴＳＣ  ＰＹＹ類似体を形成する。このように形成されたＮＴＳＣ  ＰＹＹ類似体は、当該技術分野において一般的に既知の精製技術を使用して精製することができる。本明細書で使用されるペプチド精製の好ましい方法は、逆相高圧液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）である。次いで、精製されたペプチドは、液体クロマトグラフィー／質量分析（ＬＣ／ＭＳ）によって特徴付けられる。
【０２３１】
一般的スキーム
ＢＲＩＤＧＥが−Ｐｈ−ＣＨ２−Ｓ−であるＣ末端アミドＮＴＳＣ−ＰＹＹペプチドの合成のための一般的な合成手順をスキーム１に示す。
【０２３２】
【化７７】
2019534283.tif 000079
【０２３３】
スキーム１：トルオイルチオエーテル連結ＮＴＳＣ−ＰＹＹペプチドの合成：Ｃ末端アミド。
Ａ）樹脂結合されたＣ末端アミドペプチドの合成
保護されたペプチジル樹脂は、スキーム１に示すように、上述のＦｍｏｃ戦略を使用して、低充填Ｒｉｎｋアミド樹脂、好ましくは、Ｆｍｏｃ−ＰＡＬ−ＰＥＧ  ＰＳ樹脂（約０．１６〜０．２ｍｅｑ／ｇ、Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓにより供給）を使用するＣＥＭ  Ｌｉｂｅｒｔｙ  Ｂｌｕｅ  Ｍｉｃｒｏｗａｖｅペプチド合成装置で、０．１ｍｍｏｌスケールで合成することができる。標準的なＦｍｏｃ保護されたアミノ酸（Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ（ＥＭＤ  Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）、Ｂａｃｈｅｍ、Ｐｅｐｔｉｄｅｓ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ、又はＣｈｅｍ−Ｉｍｐｅｘにより供給）は、結合剤としてＤＩＣ／Ｏｘｙｍａ、及び４分間約９０℃の反応温度を使用する樹脂充填に対して５倍過剰で結合され得る。Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＨを、それぞれ９０℃で４分間二重結合し、Ｆｍｏｃ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨを、室温で４分間、続いて５０℃で８分間の２段階プロトコルを用いて結合することができる。単一のＦｍｏｃ脱保護は、ＤＭＦ（脱保護溶液）中２０％ピペリジンを使用して、９０℃で１．５分間行うことができる。
【０２３４】
Ｂ）ハロメチル安息香酸の結合手順
Ｆｍｏｃ脱保護されたペプチド樹脂（０．１ｍｍｏｌ）を、マイクロ波反応器内で、７５℃で１５分間、ＤＭＦ（４ｍＬ）中のクロロ−又はブロモメチル安息香酸（２０当量）のいずれかの所望の異性体（メタ又はパラ）及びＤＩＣ（１０当量）の溶液で処理することができる。反応完全性は、Ｋａｉｓｅｒニンヒドリン試験（Ｋａｉｓｅｒ，ｅｔ  ａｌ．，Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１９７０，３４，５９５〜５９８）により判定することができる。結合が不完全であると判定された場合、結合は、新しい試薬で繰り返されてよい。
【０２３５】
Ｃ）樹脂からのペプチド切断手順
ＳＰＰＳが完了したら、樹脂をＤＭＦで、次いでＤＣＭで十分に洗浄し、乾燥させることができる。次いで、樹脂を、ＴＦＡ／水／ＴＩＰＳ（９５：２．５：２．５）（Ｃｌｅａｖａｇｅ  Ｃｏｃｋｔａｉｌ  Ａ）、又はより好ましくはＴＦＡ／水／フェノール／ＴＩＰＳ（８８：５：５：２）（Ｃｌｅａｖａｇｅ  Ｃｏｃｋｔａｉｌ  Ｂ）のいずれかからなる切断カクテル（１０ｍＬ／０．１ｍｍｏｌスケール）で処理し、マイクロ波反応器内で、３８℃で４０分間加熱した後、濾過することができる。樹脂をＴＦＡで洗浄し、合わせた濾液を窒素流下で約２．５ｍＬの体積に濃縮することができ、次いで、ペプチドを、冷ジエチルエーテル（４０ｍＬ）を添加することによって沈殿させることができる。ペプチド／エーテル懸濁液を遠心分離してよく、エーテル層をデカントした。ペプチドペレットをエーテルに再懸濁し、遠心分離し、デカントしてよく、このプロセスは３回繰り返され得る。次いで、このようにして得られた粗ペプチドを、穏やかな窒素流下で乾燥させることができる。
【０２３６】
Ｄ）ペプチド環化（チオエーテル形成）手順
粗システイン−又はホモシステイン含有ペプチドを、＜４ｍｇ／ｍＬ．の濃度で脱酸素化ＭｅＣＮ／水（５０〜６０％ＭｅＣＮ）又はＥｔＯＨ／水（６０％ＥｔＯＨ）に溶解してよい。次いで、ペプチド溶液のｐＨを、固体ＮａＨＣＯ３、飽和水性ＮａＨＣＯ３又は１Ｍ水性トリス緩衝剤（ｐＨ７．５）のいずれかを添加することにより、約７〜９に上昇させてよく、得られた溶液を室温で３〜１６時間撹拌することができる。典型的には、環化は、分析ＬＣ／ＭＳによって判定されるように、３〜４時間以内に完了する。
【０２３７】
Ｅ）ペプチド精製手順
環化反応混合物は、ＴＦＡの添加によってｐＨ１．５〜３に酸性化されてもよく、溶液を濃縮して、有機共溶媒（ＭｅＣＮ又はＥｔＯＨ）の大部分をわずかに濁りが生じる点まで除去してもよい。混合物を均質にするために必要に応じて最小限の量の共溶媒を添加し戻してもよく、次いで、得られた溶液を、複数回の注入で分取ＨＰＬＣによって直接精製してもよい。精製は、以下から選択される逆相Ｃ１８又はＣ８カラムを使用して、Ａｇｉｌｅｎｔ  ＰｒｅｐＳｔａｒ  ＨＰＬＣシステム又はＧｉｌｓｏｎ  ＨＰＬＣ  ２０２０  Ｐｅｒｓｏｎａｌ  Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ  Ｓｙｓｔｅｍのいずれかで実行され得る：Ｖａｒｉａｎ  Ｐｕｒｓｕｉｔ  ＸＲ  Ｃ１８（２１×２５０ｍｍ、１００Å、５μｍ）；Ｖａｒｉａｎ  Ｐｕｒｓｕｉｔ  ＸＲジフェニル（３０×１００ｍｍ、１００Å、５μｍ）；Ｚｏｒｂａｘ  ３００  ＳＢ−Ｃ８（２１×２５０ｍｍ、３００Å、５μｍ）；Ｗａｔｅｒｓ  Ａｔｌａｎｔｉｓ  Ｔ３  Ｃ１８（１９×２５０ｍｍ、１００Å、５μｍ）；Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｐｏｌａｒｉｓ  ５  Ｃ１８−Ａ（３０×２５０ｍｍ、１８０Å、５μｍ）。移動相は、緩衝剤Ａ（水中０．１％ＴＦＡ）、及び初期濃度１０〜２０％Ｂから最終濃度４０〜９０％Ｂの範囲の緩衝剤Ｂ（ＭｅＣＮ中０．１％ＴＦＡ）の勾配溶出からなり、実行時間は３６〜８０分間の範囲であり得る。ＵＶ検出は、２２０及び２５４ｎｍで監視することができる。生成物含有画分は、上記からの適切なカラムタイプ（４．６×２５０ｍｍ、５μｍ）を使用して、Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００  ＨＰＬＣシステムで分析ＨＰＬＣによって分析することができる。純粋な画分を合わせ、濃縮して有機相の大部分を除去した後、凍結乾燥してもよい。ＴＦＡ／ＨＣｌ塩交換は、Ａｎｄｒｕｓｈｃｈｅｎｋｏら（Ｊ．Ｐｅｐｔ．Ｓｃｉ．，２００６，１３，３７〜４３）により説明される手順に従い、２ｍＭ  ＨＣｌからの３回の凍結乾燥により後に行うことができる。
【０２３８】
ＢＲＩＤＧＥが−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ２Ｓ−であるＣ末端アミドＮＴＳＣ−ＰＹＹペプチドの合成のための一般的な合成手順をスキーム２に示す。
【０２３９】
【化７８】
2019534283.tif 000080
【０２４０】
スキーム２：アセトアミドイルチオエーテル連結ＮＴＳＣ−ＰＹＹペプチドの合成：Ｃ末端アミド
工程Ａ、Ｃ、Ｄ、及び精製（Ｅ）は、スキーム１に記載されるものと本質的に同じである。しかしながら、以下に記載されるように、代替的なＢＲＩＤＧＥが工程Ｂで導入されてもよい。
【０２４１】
Ｆｍｏｃ脱保護されたペプチド樹脂（０．１ｍｍｏｌ）を、５０℃で５分間マイクロ波反応器内で、ＤＭＦ（５ｍＬ）中のブロモ酢酸無水物（６〜２０当量）の溶液で処理してもよく、その時点までに、反応は、Ｋａｉｓｅｒニンヒドリン試験により完了であると概ね判定され得る。結合が不完全であると判定された場合、結合は、新しい試薬で繰り返されてよい。
【０２４２】
Ｚ３５が又はであるＣ末端アミドＮＴＳＣ−ＰＹＹペプチドの合成のための一般的な合成手順をスキーム３に示す。
【０２４３】
【化７９】
2019534283.tif 000081
【０２４４】
【化８０】
2019534283.tif 000082
【０２４５】
スキーム３：Ｓｉｅｂｅｒ樹脂上へのｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）構成要素の充填
Ａ）ＨＡＴＵ媒介結合：
フリット化されたマイクロ波反応槽（ＣＥＭ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎにより供給）中で、ＮｏｖａＳｙｎ  ＴＧ  Ｓｉｅｂｅｒ樹脂（Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍにより供給）（０．１ｍｍｏｌ）を脱保護溶液（５ｍＬ）で処理し、５０℃で２．５分間加熱してよい。反応物を排出し、ＤＭＦで洗浄し、５０℃で５分間脱保護溶液で再度処理する。樹脂を排出し、ＤＭＦで洗浄した後、３回目の脱保護処理を５０℃で５分間行う。樹脂を排出し、ＤＭＦで、次いでＤＣＭで十分に洗浄する。次いで、樹脂を、ＤＭＦ（４ｍＬ）中のスキーム１４からのＦｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ｐｓｉ−（Ｎ−Ｂｏｃ）Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ（３〜５当量）、ＨＡＴＵ（２．７５〜４．５当量）、及びＤＩＥＡ（６〜１０当量）の溶液で処理し、室温で２４時間混合する。混合物を排出し、樹脂をＤＭＦで十分に洗浄した。次いで、マイクロ波条件下で、５０℃で５分間、ＤＭＦ（５ｍＬ）中２０％Ａｃ２Ｏで処理することによって、樹脂を末端保護する。反応物を排出し、樹脂をＤＭＦで、次いでＤＣＭで十分に洗浄する。
【０２４６】
Ａ）（代替的な）ＤＩＣ／Ｏｘｙｍａ媒介結合：
フリット化されたマイクロ波反応槽中で、ＮｏｖａＳｙｎ  ＴＧ  Ｓｉｅｂｅｒ樹脂（０．１ｍｍｏｌ）を上記工程Ａに記載されるように脱保護し、次いで、ＭｅＣＮ（４ｍＬ）中のｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ｐｓｉ−（Ｎ−Ｂｏｃ）Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ（２．７５当量）、ＤＩＣ（２．７５当量）、Ｏｘｙｍａ（２．７５当量）、及びＤＩＥＡ（０．２７５当量）の溶液で処理し、室温で２４時間混合してよい。反応物を排出し、樹脂をＤＭＦで、次いでＤＣＭで十分に洗浄し、末端保護せずに直接使用することができる。
【０２４７】
Ｂ）事前充填されたＳｉｅｂｅｒ樹脂上での還元アミド（ｐｓｉ−Ｒ３５，Ｙ３６）ペプチドの精練
事前充填された（ｐｓｉ−Ｒ３５，Ｙ３６）−Ｓｉｅｂｅｒ樹脂上への更なるアミノ酸延長は、ＣＥＭ  Ｌｉｂｅｒｔｙ  Ｂｌｕｅ  Ｍｉｃｒｏｗａｖｅペプチド合成装置で実行され得る。標準的なＦｍｏｃ保護されたアミノ酸は、結合剤としてＨＢＴＵ／ＤＩＥＡ、及び１５分間約５０℃の反応温度を使用する初期樹脂充填に対して５倍過剰で結合された。Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＨは、各結合に対して、室温で２５分間、続いて５０℃で１５分間の２段階プロトコルを用いて二重結合してもよく、Ｆｍｏｃ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨは、各結合に対して、室温で４分間、続いて５０℃で８分間の２段階プロトコルを用いて二重結合してもよい。Ｆｍｏｃ脱保護は、各段階に対して、新しい脱保護溶液を使用して１）５０℃で２．５分、及び２）５０℃で５分間の２段階で実施することができる。場合によっては、単離された粗ペプチドの質を改善するために、二重結合を終始有利に使用することができる。
【０２４８】
チオエーテルＢＲＩＤＧＥ部分の配置は、スキーム１の工程Ｂに示されるブロモメチル安息香酸結合のいずれかによって、５０℃の反応温度で進行させてよい。あるいは、チオエーテルＢＲＩＤＧＥ部分は、スキーム２の工程Ｂに示されるブロモアセチル化結合を使用して導入されてもよい。
【０２４９】
ＳＰＰＳが完了したら、樹脂をＤＭＦで、次いでＤＣＭで十分に洗浄し、乾燥させる。次いで、Ｓｉｅｂｅｒ樹脂からの保護されたペプチドの切断は、ＤＣＭ（１０ｍＬ／０．１ｍｍｏｌスケール）中１〜２％ＴＦＡの溶液で達成され、約１０分間混合された後、濾過され得る。この処理は、各処理で新しいカクテルを使用して、更に９回繰り返すことができる。次いで、合わせた濾液を濃縮して、黄色のシロップ／固体としての保護された粗ペプチドを得、これを後の全体的な脱保護のために直接使用することができる。上記で得られた保護されたペプチドを、室温で２．５時間、Ｃｌｅａｖａｇｅ  Ｃｏｃｋｔａｉｌ  Ｂ（１０ｍＬ）で処理し、次いで窒素流下で約２．５ｍＬの体積に濃縮する。粗ペプチドは、冷ジエチルエーテル（４０ｍＬ）を添加することによって沈殿させることができる。ペプチド／エーテル懸濁液を遠心分離してよく、エーテル層をデカントする。ペプチドペレットをエーテルに再懸濁し、遠心分離し、デカントしてよく、このプロセスは３回繰り返すことができる。このようにして得られた粗ペプチドを、穏やかな窒素流下で乾燥させてよい。還元アミド（ｐｓｉ−Ｒ３５，Ｙ３６）ペプチドの環化及び精製は、スキーム１の工程Ｄ及び工程Ｅに記載の手順に従って達成することができる。
【０２５０】
脂質化したｃ末端アミドＮＴＳＣ−ＰＹＹペプチドの合成は、スキーム４に従って達成することができる。
【０２５１】
【化８１】
2019534283.tif 000083
【０２５２】
スキーム４：ＰＡＬ−ＰＥＧ  ＰＳ  Ｒｉｎｋアミド樹脂上で合成されたペプチド配列に脂質化したリジン残基を導入するための手順
Ａ）標準的なＲｉｎｋアミド樹脂上に構築されたペプチド配列に誘導体化されたリジン残基を導入するための手順
所望の誘導体化時点に先行する時点まで精練され、スキーム１、工程Ａに記載されるように調製された樹脂結合されたＣ末端アミドペプチドに、Ｄｄｅ−Ｌｙｓ（Ｆｍｏｃ）−ＯＨ又はｉｖＤｄｅ−Ｌｙｓ（Ｆｍｏｃ）−ＯＨのいずれか、次いでＦｍｏｃ−Ｇｌｕ−ＯｔＢｕ（全てＮｏｖａｂｉｏｃｈｅｍにより供給）を、スキーム１、工程Ａに記載されるようにＤＩＣ／Ｏｘｙｍａ結合方法を用いて、マイクロ波条件下で（手動で又はＬｉｂｅｒｔｙ  Ｂｌｕｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｚｅｒで）順次結合させ精練ることができる。Ｆｍｏｃ脱保護の後、樹脂を、９０℃で１０分間、マイクロ波条件下で、ＤＭＦ中親油性酸［パルミチン酸又はα−トコフェリルオキシ酢酸（ＡｃＶｉｔＥ）］（５〜１０当量）、ＤＩＣ（５〜１０当量）、及びＨＯＢＴ又はＯｘｙｍａ（５〜１０当量）のいずれかの溶液で処理することができる。次いで、反応物を排出し、樹脂をＤＭＦで洗浄する。
【０２５３】
Ｂ）Ｄｄｅ−又はｉｖＤｄｅ保護されたリシニルペプチドを脱保護するための手順
誘導体化されたリシニルペプチド樹脂は、９０℃で３．５分間、マイクロ波条件下でＤＭＦ（６ｍＬ／０．１ｍｍｏｌ樹脂）中３％ヒドラジンの溶液で処理することができる。反応物を排出し、この手順を更に２回繰り返すことができる。反応物を排出し、樹脂をＤＭＦで、次いでＤＣＭで十分に洗浄する。
【０２５４】
Ｃ）Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｐａｌ−Ｇｌｕ−ＯｔＢｕ）−ＯＨ残基を直接組み込むための手順
パルミトイル化−γ−Ｇｌｕ−リシニル残基が配列に組み込まれる場合、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｐａｌ−Ｇｌｕ−ＯｔＢｕ）−ＯＨ（Ｐｅｐｔｉｄｅｓ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ又はＡｃｔｉｖｅＰｅｐｔｉｄｅから入手可能）は、スキーム１、工程Ａに記載される手順で直接使用することができる。
【０２５５】
脂質化したリジン残基を有する本発明の化合物は、スキーム１、工程Ｂ、Ｃ、Ｄ、及びＥの手順に従って完了させることができる。
【０２５６】
脂質化した還元アミド（ｐｓｉ−Ｒ３５，Ｙ３６）、Ｃ末端アミド、ＮＴＳＣ−ＰＹＹペプチドの合成は、スキーム５に従って達成することができる。
【０２５７】
【化８２】
2019534283.tif 000084
【０２５８】
スキーム５：（ｐｓｉ−Ｒ３５，Ｙ３６）事前充填されたＳｉｅｂｅｒ樹脂上で合成されたペプチド配列に誘導体化されたリジン残基を導入するための手順
Ａ）（ｐｓｉ−Ｒ３５，Ｙ３６）事前充填されたＳｉｅｂｅｒ樹脂上で構築されたペプチド配列に誘導体化されたリジン残基を導入するための手順
スキーム３、工程Ａに記載されるように調製された、部分的に精練された還元アミド（ｐｓｉ−Ｒ３５，Ｙ３６）ペプチドに、５０℃で１５分間、ＨＡＴＵ／ＤＩＥＡ又はＨＢＴＵ／ＤＩＥＡ結合方法のいずれかを使用して、Ａｌｌｏｃ−Ｌｙｓ（Ｆｍｏｃ）−ＯＨ（Ｃｈｅｍ−Ｉｍｐｅｘ又はＡＡＰＰＴｅｃ，ＬＬＣから入手可能）、続いてＦｍｏｃ−Ｇｌｕ−ＯｔＢｕ、及び次いでパルミチン酸（それぞれ５当量）を順次結合させることができる。結合される親油性酸がステアリン酸、アラキジン酸、オクタデカン二酸、モノ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル（ＡｓｔａＴｅｃｈ，Ｉｎｃ．から入手可能）、又は２０−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−２０−オキソイコサン酸（Ｋｅｙ  Ｏｒｇａｎｉｃｓ，Ｉｎｃ．から入手可能）である場合、ＮＭＰは、試薬可溶化の改善の理由で溶媒として使用され得、結合反応は、５０℃で３０分間、ＨＡＴＵ／ＤＩＥＡによって媒介され得る。あるいは、アラキジン酸に関しては、結合は、スキーム１、工程Ａに記載されるＤＩＣ／Ｏｘｙｍａ媒介手順を使用するが、５当量の試薬及び反応溶媒としてＴＨＦを用いて行うことができる。
【０２５９】
Ｂ）Ａｌｌｏｃ脱保護手順
上記の樹脂（０．１ｍｍｏｌ）を脱酸素化ＤＣＭで洗浄し、次いで脱酸素化ＤＣＭ（５ｍＬ）中のＰｈＳｉＨ３（１２．５当量）で処理する。２分後、脱酸素化ＤＣＭ（５ｍＬ）中のＰｄ（ＰＰｈ３）４（０．２５当量）の溶液を添加してよく、反応物を窒素雰囲気下で０．５時間混合する。反応物を排出し、樹脂を脱酸素化ＤＣＭで１回洗浄する。樹脂を上記のようにＰｈＳｉＨ３（１２．５当量）及びＰｄ（ＰＰｈ３）４（０．２５当量）で再度処理し、更に０．５時間反応させる。反応物を排出し、樹脂をＤＣＭ、ＤＭＦ、及びＤＣＭで連続的に十分に洗浄する。
【０２６０】
ペプチドの更なる精練及び完了は、スキーム３、工程Ｂで始めて、本明細書で上述したように実行することができる。
【０２６１】
ＢＲＩＤＧＥがトリアゾリルであるＣ末端アミドＮＴＳＣ−ＰＹＹ類似体の合成をスキーム６に示す。
【０２６２】
【化８３】
2019534283.tif 000085
【０２６３】
スキーム６：トリアゾロ連結ＮＴＳＣ−ＰＹＹ類似体の合成：Ｃ末端アミドペプチド
Ａ）アジド−及びアキニルを含む樹脂結合されたＣ末端アミドペプチドの合成
Ｎ−末端が４−ペンチン酸で末端保護された樹脂結合されたε−アジドノルロイシンを含む保護されたペプチドを、スキーム１、工程Ａに従って調製することができる。４−ペンチン酸の組み込みのために二重結合プロトコルを用いることができる。
【０２６４】
Ｂ）アジド及びアキニルを含む樹脂結合されたＣ末端アミドペプチドに誘導体化されたリジン残基を導入するための手順
スキーム１、工程Ａに記載の手順に従い、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｄｄｅ）−ＯＨを、誘導体化される配列位置でＳＰＰＳに組み込むことができる。直鎖状配列が完了したら（４−ペンチン酸の組み込み後）、樹脂を、ＤＭＦ（８ｍＬ／０．１ｍｍｏｌスケール）中３％ヒドラジンで、室温で５分間処理し、次いで混合物を排出する。この手順は、約６回繰り返すことができる。その後、樹脂をＤＭＦで、次いでＤＣＭで十分に洗浄する。次いで、実施例６Ａに記載の手順に従い、Ｄｄｅ脱保護された樹脂上に、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ−ＯｔＢｕ及び親油性酸を順次結合する。
【０２６５】
Ｃ）樹脂からのアジド−及びアルキニル含有ペプチド切断手順
ＳＰＰＳが完了したら、樹脂をＤＭＦで、次いでＤＣＭで十分に洗浄し、乾燥させることができる。次いで、樹脂を、ＴＦＡ／水／ＤＯＤＴ／ＴＩＰＳ（９２．５：２．５：２．５：２．５）（切断カクテルＣ）からなる切断カクテル（１０ｍＬ／０．１ｍｍｏｌスケール）で処理し、マイクロ波反応器内で３８℃で４０分間加熱した後、濾過する。樹脂をＴＦＡで洗浄し、合わせた濾液を窒素流下で約２．５ｍＬの体積に濃縮し、ペプチドを、冷ジエチルエーテル（４０ｍＬ）を添加することによって沈殿させることができる。ペプチド／エーテル懸濁液を遠心分離してよく、エーテル層をデカントする。ペプチドペレットをエーテルに再懸濁し、遠心分離し、デカントしてもよく、このプロセスは３回繰り返すことができる。このようにして得られた粗ペプチドを、穏やかな窒素流下で乾燥させてよい。
【０２６６】
Ｄ）ペプチド環化（トリアゾール形成）手順
【０２６７】
以下の溶液は、脱酸素化水を使用して調製することができる。
１）ＣｕＳＯ４（２ｍＬの水中７ｍｇ）
２）５．４ｍＬのＥｔＯＨ及び０．６ｍＬのＭｅＣＮ中３０ｍｇのＴＢＴＡ
３）プレミックス溶液１（９４３μＬ）及び溶液２（４．８ｍＬ）
４）アスコルビン酸ナトリウム（３ｍＬの水中３０ｍｇ）
【０２６８】
脱酸素化水又はＨＥＰＥＳ緩衝剤（ｐＨ７．４）（２０ｍＬ）のいずれかの中の工程Ｃからの粗ペプチドの溶液（０．０２１ｍｍｏｌ）に、溶液３、続いて溶液４（２．４ｍＬ）を添加し、得られた乳白色の溶液を、ＬＣＭＳ分析によって環化が完了したと判定されるまで（約１〜５時間）３５〜４０℃に温める。反応溶液を、水（０．１％ＴＦＡ）又は６０％ＭｅＣＮ／水（０．１％ＴＦＡ）のいずれかで４０ｍＬに希釈し、濾過し、スキーム１、工程Ｅに記載されるように複数回の注入を用いて分取ＨＰＬＣにより直接精製することができる。
【０２６９】
ＢＲＩＤＧＥがラクタムであるＣ末端アミドＮＴＳＣ−ＰＹＹ類似体の合成をスキーム７に示す。
【０２７０】
【化８４】
2019534283.tif 000086
【０２７１】
スキーム７：ラクタム架橋された環状ペプチドの合成。
Ａ）樹脂結合されたＣ末端アミドペプチドの合成
保護されたペプチジル樹脂は、Ｐｒｏｔｅｉｎ  ＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓのＳｙｍｐｈｏｎｙ  Ｘペプチド合成装置でＦｍｏｃ戦略を使用して合成することができる。結合は、室温で１０分間、ＤＭＦ中のＨＡＴＵ及びＮＭＭを使用して、Ｒｉｎｋアミド樹脂又はＳｉｅｂｅｒ樹脂のいずれかで実行することができる。Ｆｍｏｃアミノ酸は、６倍過剰で使用され、二重結合され得る。ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）修飾を含むペプチドに関して、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）Ψ［ＣＨ２Ｎ（Ｂｏｃ）］Ｔｙｒ（ｔ−Ｂｕ）−ＯＨは、室温で１時間、ＤＭＦ中のＨＡＴＵ及びＮＭＭを使用して３倍過剰で結合された。直鎖状配列の末端残基のα−アミノはＢｏｃ保護されてもよく、ラクタム架橋を形成するグルタミン酸残基のγ−カルボキシル基はアリル保護されてもよい。ペプチド中のリジン（複数可）は、直交Ｄｄｅ保護されてもよい。
【０２７２】
Ｂ）γ−グルタメート−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステルの合成
直鎖状配列の完了後、ＤＣＭ中のＰｄ（ＰＰｈ３）４及びＰｈＳｉＨ３を使用して、グルタメート側鎖アリル保護基を除去することができる。次いで、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（ＮＨＳ）エステルを、室温で１０分間、ＨＡＴＵ及びＤＩＥＡを使用してＮＨＳを二重結合することにより合成することができる。
【０２７３】
Ｃ）ラクタム環化手順
ペプチドを、室温で２時間、ＴＦＡ／ＴＩＰＳ／水（９５：２．５：２．５）で処理することにより、樹脂から切断し、全体的に脱保護した後、エーテル中に沈殿させ、遠心分離により回収し、乾燥させてよい。粗生成物をＤＭＳＯに溶解させてよい。ＴＥＡ（１０当量）を添加し、環化を室温で１時間進行させる。粗生成物を水で希釈し、分取ＲＰ−ＨＰＬＣにより精製することができる。２％ヒドラジン／ＤＭＦ（濃度５ｍＭ）にペプチドを溶解させ、室温で１時間撹拌することによって、直交ｄｄｅ保護されたリジンを脱保護することができる。反応混合物を水で希釈し、１０％ＴＦＡ／水を添加してｐＨを２に調整し、溶液を、スキーム１、工程Ｅに記載されるように分取ＲＰ−ＨＰＬＣにより直接精製することができる。ＢＲＩＤＧＥがラクタムである、脂質化したＣ末端アミドＮＴＳＣ−ＰＹＹ類似体の溶液相合成をスキーム８に示す。
【０２７４】
ＢＲＩＤＧＥがラクタムである、脂質化したＣ末端アミドＮＴＳＣ−ＰＹＹ類似体の溶液相合成をスキーム８に示す。
【０２７５】
【化８５】
2019534283.tif 000087
【０２７６】
スキーム８：Ｚ１１リジンについて示される、ラクタム架橋されたＣ末端アミド環状ペプチドの溶液相脂質化。
Ｚ４、Ｚ７、Ｚ９、Ｚ１１、Ｚ２２、Ｚ２３、又はＺ３０のうちの１つのみがリジンであり得る、上記のスキーム７で得られたペプチドを、ＤＭＦ（５ｍＭの濃度）に溶解し、ＴＥＡ（５当量）、続いて、保護された脂質のＮ−ヒドロキシエステル（２当量）を添加する。反応物を室温で一晩進行させ、次いで分取ＨＰＬＣにより精製することができる。ｔ−ブチルエステルを、室温で３０分間、ＴＦＡ／ＴＩＰＳ／水（９５：２．５：２．５）において脱保護し、反応物を濃縮し、スキーム１、工程Ｅに記載されるように分取ＲＰ−ＨＰＬＣにより精製することができる。
【０２７７】
ブロモアセチル化環状チオエーテルペプチドを合成するための一般手順
スキーム９、１０、及び１１は全て、本発明のブロモアセチル化環状チオエーテルペプチドへの様々な経路を示す。スキーム９では、チオエーテル架橋が、ペプチド配列中のチオール含有アミノ酸側鎖と、ペプチドのアミノ末端のブロモアセチル基と、の反応によって形成される。スキーム１０は、スキーム９と同様のアプローチを図示するが、リシン側鎖とブロモアセチル基との間に別個のＰＥＧスペーサーが挿入される。スキーム１１は、ペプチドのアミノ末端のチオール求核剤とペプチド配列内のリジン側鎖に共有結合したブロモアセチル基との反応によって架橋が形成される、別のクラスのブロモアセチル化環状チオエーテルペプチドの合成のための戦略を図示する。
【０２７８】
Ａ．樹脂結合されたＣ末端アミドペプチドの合成
樹脂上の保護されたペプチドは、ＦＭＯＣ戦略を使用して、Ｓｉｅｂｅｒアミド又はＲｉｎｋアミド樹脂上で合成され得る。標準的なＦＭＯＣ保護されたアミノ酸（Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ（ＥＭＤ  Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）、Ｂａｃｈｅｍ、Ｐｅｐｔｉｄｅｓ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ、又はＣｈｅｍ−Ｉｍｐｅｘにより供給）は、室温又は高温で、結合剤としてＤＩＣ／Ｏｘｙｍａ、ＨＢＴＵ／ＤＩＰＥＡ、又はＨＡＴＵ／ＮＭＭを使用して、樹脂充填に対して３〜６倍過剰で結合することができる。二重結合は、高純度のために、及び特にα−Ｎ−アルキル化アミノ酸上に結合されたアミノ酸に行うことができる。ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）修飾を含むペプチドに関して、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）Ψ［ＣＨ２Ｎ（Ｂｏｃ）］Ｔｙｒ（ｔ−Ｂｕ）−ＯＨは、室温で１時間、ＤＭＦ中のＨＡＴＵ及びＮＭＭを使用して３倍過剰で結合することができる。
【０２７９】
Ｂ．樹脂結合されたペプチドのブロモアセチル化手順
ブロモアセチル化されるリジンは、ａｌｌｏｃ、ｉｖＤＤＥ、又はＤＤＥ保護基のいずれかで直交保護され得る。樹脂上の直鎖状配列の完了後、直交保護されたリジンは脱保護されてもよく（ａｌｌｏｃに関しては、ＤＣＭ中のＰｄ（Ｐｈ３）４及びフェニルシラン；ＤＤＥ又はｉｖＤＤＥに関しては、ＤＭＦ中２％ヒドラジン）、アミノ基は、１）５０℃で５分間、マイクロ波反応器内でＤＭＦ中の大量過剰のブロモ酢酸無水物と反応させること（その時点までに、反応は、Ｋａｉｓｅｒニンヒドリン試験により完了であると概ね決定され得る）、２）室温で、ＴＥＡ又はＤＩＰＥＡなどの塩基の存在下で、ＤＭＦ又はＤＣＭ中の大量過剰のブロモ酢酸無水物と反応させること、あるいは３）ＤＩＣ又はＤＩＣ／Ｏｘｙｍａを使用してブロモ酢酸と結合させること、などの様々な条件下でブロモアセチル化されてもよい。
【０２８０】
Ｃ．樹脂からのペプチド切断手順
ＳＰＰＳが完了したら、樹脂を、ＤＭＦで、次いでＤＣＭで十分に洗浄し、乾燥させることができる。Ｓｉｅｂｅｒアミド樹脂結合されたペプチドを用いて、乾燥樹脂をＤＣＭ（１０ｍＬ）中１〜２％ＴＦＡの溶液で５〜１０分間処理した後、濾過してよい。この処理は、各処理に新しいカクテルを使用して、更に数回繰り返すことができる。次いで、濾液を合わせ、濃縮して、黄色の発泡体としての保護された粗ペプチドを得る。次いで、この発泡体を、切断カクテルＴＦＡ／フェノール／Ｈ２Ｏ／ＴＩＰＳ（８８／５／５／２）、又はＴＦＡ／水／ＴＩＰＳ（９５：２．５：２．５）、又はＴＦＡ／フェノール／Ｈ２Ｏ／ＴＩＰＳ／ＤＴＴ（８４／１０／２．５／２．５／１）で処理し、マイクロ波反応器内で３８℃で３０〜４５分間、又は室温で２〜３．５時間加熱してもよい。粗ペプチドは、冷ジエチルエーテル中で沈殿させてよい。ペプチド／エーテル懸濁液を遠心分離してよく、エーテル層をデカントする。ペプチドペレットをエーテルに再懸濁し、遠心分離し、デカントしてもよく、このプロセスは３回繰り返すことができる。このようにして得られた粗ペプチドを、穏やかな窒素流下で乾燥させてよい。
【０２８１】
あるいは、Ｓｉｅｂｅｒアミド又はＲｉｎｋアミド樹脂結合されたペプチドを、ＤＣＭ中１〜２％ＴＦＡで前処理することなく、上記のように切断カクテルで処理して、完全に脱保護されたペプチドを得ることができる。
【０２８２】
Ｄ．ペプチド環化（チオエーテル形成）手順
粗遊離チオール及びブロモアセトアミド含有ペプチドは、任意にＥＤＴＡを添加して、４〜１０ｍｇ／ｍＬの濃度で、脱酸素化ＭｅＣＮ／水又はＥｔＯＨ／水に溶解してもよい。次いで、ペプチド溶液のｐＨを、ＮａＨＣＯ３、ＮａＯＨ、ＤＩＰＥＡ、又はＴＥＡなどの塩基を添加することにより約７〜９に上昇させることができ、得られた溶液を室温で０．２５〜２．５時間撹拌する。
【０２８３】
あるいは、粗ペプチドをＨＰＬＣにより精製し、ペプチド分画を合わせ、約ｐＨ  ７〜９に塩基性化し、任意にＥＤＴＡの存在下で、室温で０．２５〜２．５時間撹拌してもよい。酸性化後、反応溶液を室温で濃縮して有機溶媒を除去し、次いで、ＨＰＬＣ精製を行ってもよい。
【０２８４】
Ｅ．ペプチド精製手順
環化反応混合物をＴＦＡで酸性化し、溶液を濃縮して有機共溶媒（ＭｅＣＮ又はＥｔＯＨ）の大部分を除去し、次いで得られた溶液を逆相カラム上で分取ＨＰＬＣによって直接精製することができる。移動相は、緩衝剤Ａ（水中０．１％ＴＦＡ）、及び初期濃度０〜２０％Ｂから最終濃度４０〜９０％Ｂの範囲の緩衝剤Ｂ（ＭｅＣＮ中０．１％ＴＦＡ）の勾配溶出からなり、実行時間は２０〜６０分間の範囲であり得る。ＵＶ検出は、２２０及び２５４ｎｍで監視することができる。生成物含有画分は、Ｗａｔｅｒｓ  Ｔ３  Ａｔｌａｎｔｉｓ  Ｃ１８カラム（４．６×２５０ｍｍ、５μｍ）を使用して、Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００  ＨＰＬＣシステムでＨＰＬＣによって分析することができる。純粋な画分を合わせ、濃縮して有機相の大部分を除去した後、凍結乾燥してもよい。
【０２８５】
【化８６】
2019534283.tif 000088
【０２８６】
スキーム９．チオエーテル架橋が、ペプチド配列中のチオール含有アミノ酸側鎖と、ペプチドのアミノ末端のブロモアセチル基と、の反応によって形成される、ブロモアセチル化環状チオエーテルＣ末端アミドペプチドの合成。このスキームでは、ｄｄｅ保護基を用いてリジン側鎖を保護し、ＤＭＦ中２％ヒドラジンでの処理によって除去する。
【０２８７】
【化８７】
2019534283.tif 000089
【０２８８】
スキーム１０．チオエーテル架橋が、ペプチド配列中のチオール含有アミノ酸側鎖と、ペプチドのアミノ末端のブロモアセチル基と、の反応によって形成され、別個のＰＥＧスペーサーがブロモアセチル基とリジン側鎖との間に導入される、ブロモアセチル化環状チオエーテルペプチドの合成。このスキームでは、ａｌｌｏｃ保護基を用いてリジン側鎖を保護し、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４及びフェニルシランでの処理によって除去する。
【０２８９】
【化８８】
2019534283.tif 000090
【０２９０】
スキーム１１．チオエーテル架橋が、ペプチドのアミノ末端のチオール基と、ペプチド配列中のブロモアセチル化リジン側鎖と、の反応によって形成され、別個のＰＥＧスペーサーがブロモアセチル基と別のリジン側鎖との間に導入される、ブロモアセチル化環状チオエーテルペプチドの合成。
【０２９１】
ブロモアセチル化環状ラクタムペプチドの合成のための一般手順
環状ラクタムペプチドは、スキーム１２．に示される手順に従って合成することができる。環状ラクタムペプチドは、最初に、Ｚ４、Ｚ７、Ｚ９、Ｚ１１、Ｚ２２、Ｚ２３、又はＺ３０のうちの１つのみがリジンであるスキーム７に従って合成される。次いで、リジンを、ｐＨ１０の１０％ＡＣＮ／水中のブロモ酢酸Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル（３〜７当量）を使用して、室温で２０分間ブロモアセチル化する。最終的なブロモアセチル化ペプチドは、環状チオエーテルペプチドについて概説したように、ＲＰ−ＨＰＬＣにより精製することができる。
【０２９２】
【化８９】
2019534283.tif 000091
【０２９３】
スキーム１２．ブロモアセチル化環状ラクタムＣ末端アミドペプチドの合成
【０２９４】
ブロモアセチル化環状トリアゾール連結ペプチドの合成のための一般手順
ブロモアセチル化環状トリアゾール連結ペプチドは、スキーム１３に示す手順に従って合成することができる。樹脂上の直鎖状保護ペプチドは、Ｌ−アジド−リジンがトリアゾール形成に組み込まれてもよく、Ｎ末端残基が４−ペンチン酸であってもよいことを除いて、スキーム１０の環状チオエーテルペプチドについて記載したのと同様の方法で合成することができる。ＦｍｏｃをＤＭＦ中２０％ピペリジンで除去し、次いで、ブロモ酢酸無水物と反応させることができる。直鎖状配列は、全体的に脱保護されてもよく（ＴＦＡ／ＴＩＰＳ／水：９５％／２．５％／２．５％）、粗ペプチドは、冷エーテル中に沈殿させ、遠心分離によって回収され、分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製されてもよい。精製された直鎖状ペプチドを、緩衝溶液（ＨＥＰＥＳ、ＭＯＰＳなど）中のＣｕＳＯ４／ＴＢＴＡ及びＮａＡＳｒｂの存在下で環化して環状トリアゾール連結ペプチドを得ることができ、これは、スキーム１、工程Ｅに記載されるように、分取ＲＰ−ＨＰＬＣによって精製することができる。
【０２９５】
当業者は、Ｎ−末端残基がアジドカルボン酸（例えば、５−アジドペンタン酸）であり、３０位又は３１位の残基が、アルキニルアミノ酸（例えば、２−アミノ−７−オクチン酸）である、直鎖状配列で始まる、代替的なクラスの環状トリアゾール連結ペプチドを上述したものと同様の様式で合成することができる。
【０２９６】
【化９０】
2019534283.tif 000092
【０２９７】
スキーム１３．ブロモアセチル化環状トリアゾール連結Ｃ末端アミドペプチドの合成。
【０２９８】
ペプチド分析及び特徴付け
精製したペプチドを、ＷＡＴＥＲＳ  Ａｔｌａｎｔｉｓ  Ｔ３  Ｃ１８（４．６×２５０ｍｍ、３００Å、５μｍ）カラムを使用して、ＨＰ１１００シリーズＨＰＬＣで構成されたＨｅｗｌｅｔｔ  Ｐａｃｋａｒｄ  Ｓｅｒｉｅｓ  １１００  ＭＳＤシステムでＬＣ／ＭＳにより分析した。ペプチドの極性／非極性性質に応じて、１ｍＬ／分の流速及び３５℃のカラム温度で、方法１）２２分かけて１５〜６０％Ｂ、方法２）２２分かけて３０〜６０％Ｂ、方法３）２２分かけて４０〜９０％Ｂの３つの勾配のうちの１つを使用した（上記の緩衝剤Ａ及びＢ）。電子噴霧分析（ＥＳ−ＡＰＩ、陽性イオンスキャン）により各ペプチドの質量分析が提供された。全ての場合において、複数の荷電種が観察され、１／３［Ｍ＋３］＋及び１／４［Ｍ＋４］＋イオンが特徴のある、最も顕著に観察されたイオンであった。全ての生成物は、許容可能な限度内で、予想される複数の荷電イオンをもたらした。ペプチドの質量スペクトル分析の結果及び観察されたＬＣ保持時間（ＲＴ）を表１に示す。
【０２９９】
【表１−１】
2019534283.tif 000093
【０３００】
【表１−２】
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【０３０１】
【表１−３】
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【０３０２】
中間体
本明細書に記載の以下の実施例及び実施形態は例示の目的のみであって、それらを考慮した様々な修正又は変更が当業者に提示され、本出願の趣旨及び範囲、並びに添付の特許請求の範囲内に含まれることが理解される。本明細書で引用される全ての発行物、特許、及び特許出願は、全ての目的においてそれらの全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【０３０３】
中間体１
α−トコフェリルオキシ酢酸（ＡｃＶｉｔＥ）（８）の合成
Ａ）Ｔｅｒｔ−ブチルα−トコフェリルオキシアセテート（７）：
【０３０４】
【化９１】
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【０３０５】
アセトン（１０ｍＬ）中のα−トコフェロール（１．１４ｇ、２．６５ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ−ブチルブロモアセテート（４７０μＬ、３．１８ｍｍｏｌ）、及びＫ２ＣＯ３（１．１ｇ、７．９４ｍｍｏｌ）の混合物を室温で２〜３日間撹拌した。次いで、混合物をＫ２ＣＯ３の小さなプラグを通して濾過し、濾液を減圧下で濃縮した。得られた残渣を、ＥｔＯＡｃ／ヘプタン（０〜５％）で溶出させるシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、ｔｅｒｔ−ブチルα−トコフェリルオキシアセテート（７）を無色の油状物として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ４．１７（ｓ，２Ｈ），２．５６（ｔ，Ｊ＝６．５７Ｈｚ，２Ｈ），２．１８（ｓ，３Ｈ），２．１４（ｓ，３Ｈ），２．０７（ｓ，３Ｈ），１．６５−１．８６（ｍ，２Ｈ），１．５２（ｓ，９Ｈ），０．９８〜１．４６（ｍ，２２Ｈ），０．８０〜０．９０（ｍ，１４Ｈ）。
【０３０６】
Ｂ）α−トコフェリルオキシ酢酸（ＡｃＶｉｔＥ）（８）
【０３０７】
【化９２】
2019534283.tif 000097
【０３０８】
ＤＣＭ（１２ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチルα−トコフェリルオキシアセテート（７）（１．４ｇ、２．５７ｍｍｏｌ）の溶液にＴＦＡ（６ｍＬ）を添加し、得られた溶液を室温で撹拌した。２時間後、溶液を減圧下で濃縮し、得られた暗色油状物を、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ（０〜２．５％含有０．５％ＨＯＡｃ）で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、α−トコフェリルオキシ酢酸（ＡｃＶｉｔＥ）（８）を琥珀色のシロップとして得、これを真空下でゆっくり凝固させた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ４．３４（ｓ，２Ｈ），２．５７（ｔ，Ｊ＝６．８２Ｈｚ，２Ｈ），２．１６（ｓ，３Ｈ），２．１２（ｓ，３Ｈ），２．０８（ｓ，３Ｈ），１．７９（ｑｔ，Ｊ＝６．７６，１３．０１Ｈｚ，２Ｈ），１．４８〜１．５９（ｍ，３Ｈ），１．１８〜１．４８（ｍ，１２Ｈ），１．０１〜１．１７（ｍ，７Ｈ），０．７７〜０．９３（ｍ，１４Ｈ）。ＬＣ／ＭＳ：Ｃ３１Ｈ５２Ｏ４の質量計算値：４８８．７５；実測値：４８９．５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３０９】
中間体２
１．（Ｓ）−２２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−４３，４３−ジメチル−１０，１９，２４，４１−テトラオキソ−３，６，１２，１５，４２−ペンタオキサ−９，１８，２３−トリアザテトラテトラコンタン−１−酸（１６）の合成
Ａ）ベンジル２，２−ジメチル−４−オキソ−３，８，１１−トリオキサ−５−アザトリデカン−１３−オエート（９）
【０３１０】
【化９３】
2019534283.tif 000098
【０３１１】
１００ｍＬの丸底フラスコに、２，２−ジメチル−４−オキソ−３，８，１１−トリオキサ−５−アザトリデカン−１３−酸（１８ｇ、６８．３６６ｍｍｏｌ）、臭化ベンジル（２３．３８６ｇ、１３６．７３２ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（２８．３４６ｇ、２０５．０９９ｍｍｏｌ）、及びＤＭＦ（２００ｍＬ）を入れた。得られた溶液を室温で一晩撹拌し、ＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ）で希釈した。混合物を水（３００ｍＬ）及び食塩水（１５０ｍＬ×２）で洗浄した。有機相を蒸発させ、シリカゲルカラム（ＥｔＯＡｃ／プロピルエーテル、１：５）で精製して、ベンジル２，２−ジメチル−４−オキソ−３，８，１１−トリオキサ−５−アザトリデカン−１３−オエートを無色の油状物（９）として得た。ＬＣ／ＭＳ：Ｃ１８Ｈ２７ＮＯ６の質量計算値：３５３．２、実測値：３５４．０５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３１２】
Ｂ）ベンジル２−（２−（２−アミノエトキシ）エトキシ）アセテート（１０）
【０３１３】
【化９４】
2019534283.tif 000099
【０３１４】
５００ｍＬの丸底フラスコに、ベンジル２，２−ジメチル−４−オキソ−３，８，１１−トリオキサ−５−アザトリデカン−１３−オエート（１２ｇ、３３．９５５ｍｍｏｌ）、ＴＦＡ（１９．３５８ｇ、１６９．７７４ｍｍｏｌ）、及びＤＣＭ（１５０ｍＬ）を入れた。得られた溶液を室温で一晩撹拌した。混合物を蒸発させ、乾燥させて、ベンジル２−（２−（２−アミノエトキシ）エトキシ）アセテートを淡黄色の油状物（１０）として得た。ＬＣ／ＭＳ：Ｃ１３Ｈ１９ＮＯ４の質量計算値：２５３．１３、実測値：２５４．０５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３１５】
Ｃ）．ベンジル２，２−ジメチル−４，１３−ジオキソ−３，８，１１，１７，２０−ペンタオキサ−５，１４−ジアザドコサン−２２−オエート（１１）
【０３１６】
【化９５】
2019534283.tif 000100
【０３１７】
２５０ｍＬの丸底フラスコに、２，２−ジメチル−４−オキソ−３，８，１１−トリオキサ−５−アザトリデカン−１３−酸（８．８３５ｇ、３３．５５８ｍｍｏｌ）、ベンジル２−（２−（２−アミノエトキシ）エトキシ）アセテート（８．５ｇ、３３．５５８ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（１５．３１２ｇ、４０．２７０ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（８．６７４ｇ、６７．１１６ｍｍｏｌ）、及びＤＭＦ（１００ｍＬ）を入れた。得られた溶液を室温で一晩撹拌し、ＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ）で希釈した。有機層を、水（２００ｍＬ）及び食塩水（１００ｍＬ×２）で洗浄した。有機相を蒸発させ、シリカゲルカラム（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ、１０：１）で精製して、ベンジル２，２−ジメチル−４，１３−ジオキソ−３，８，１１，１７，２０−ペンタオキサ−５，１４−ジアザドコサン−２２−オエートを淡黄色の油状物（１１）として得た。ＬＣ／ＭＳ：Ｃ２４Ｈ３８Ｎ２Ｏ９の質量計算値：４９８．２６、実測値：４９９．５０［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３１８】
Ｄ）ベンジル１７−アミノ−１０−オキソ−３，６，１２，１５−テトラオキサ−９−アザヘプタデカン−１−オエート（１２）
【０３１９】
【化９６】
2019534283.tif 000101
【０３２０】
５００ｍＬの丸底フラスコに、ベンジル２，２−ジメチル−４，１３−ジオキソ−３，８，１１，１７，２０−ペンタオキサ−５，１４−ジアザドコサン−２２−オエート（１５ｇ、３０．０８６ｍｍｏｌ）、ＴＦＡ（１７．１５３ｇ、１５０．４３１ｍｍｏｌ）、及びＤＣＭ（２００ｍＬ）を入れた。得られた溶液を室温で一晩撹拌した。混合物を蒸発させ、乾燥させて、ベンジル１７−アミノ−１０−オキソ−３，６，１２，１５−テトラオキサ−９−アザヘプタデカン−１−オエートを淡黄色の油状物（１２）として得た。ＬＣ／ＭＳ：Ｃ１９Ｈ３０Ｎ２Ｏ７の質量計算値：３９８．２１、実測値：３９９．２［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３２１】
Ｅ）（Ｓ）−１−ベンジル２３−ｔｅｒｔ−ブチル２２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−１０，１９−ジオキソ−３，６，１２，１５−テトラオキサ−９，１８−ジアザトリコサン−１，２３−ジオエート（１３）
【０３２２】
【化９７】
2019534283.tif 000102
【０３２３】
２５０ｍＬの丸底フラスコに、ベンジル１７−アミノ−１０−オキソ−３，６，１２，１５−テトラオキサ−９−アザヘプタデカン−１−オエート（１１ｇ、２７．６０７ｍｍｏｌ）、（Ｓ）−４−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−５−ｔｅｒｔ−ブトキシ−５−オキソペンタン酸（１１．７４６ｇ、２７．６０７ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（１２．５９６ｇ、３３．１２８ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（７．１３６ｇ、５５．２１４ｍｍｏｌ）、及びＤＭＦ（１００ｍＬ）を入れた。得られた溶液を室温で一晩撹拌し、ＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ）で希釈した。有機層を、水（２００ｍＬ×２）及び食塩水（２００ｍＬ）で洗浄した。有機相を蒸発させ、シリカゲルクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ、１０：１）により精製して、（Ｓ）−１−ベンジル２３−ｔｅｒｔ−ブチル２２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−１０，１９−ジオキソ−３，６，１２，１５−テトラオキサ−９，１８−ジアザトリコサン−１，２３ジオエートを淡黄色の油状物（１３）として得た。ＬＣ／ＭＳ：Ｃ４３Ｈ５５Ｎ３Ｏ１２の質量計算値：８０５．３８、実測値：８０６．８０［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３２４】
Ｆ）（Ｓ）−１−ベンジル２３−ｔｅｒｔ−ブチル２２−アミノ−１０，１９−ジオキソ−３，６，１２，１５−テトラオキサ−９，１８−ジアザトリコサン−１，２３−ジオエート（１４）
【０３２５】
【化９８】
2019534283.tif 000103
【０３２６】
２５０ｍＬの丸底フラスコに、ＤＣＭ（３％、１００ｍＬ）中の（Ｓ）−１−ベンジル２３−ｔｅｒｔ−ブチル２２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−１０，１９−ジオキソ−３，６，１２，１５−テトラオキサ−９，１８−ジアザトリコサン−１，２３−ジオエート（１０ｇ、１２．４０８ｍｍｏｌ）、及びＤＢＵを入れた。得られた溶液を室温で一晩撹拌した後、水（２００ｍＬ×２）で洗浄した。有機相を濃縮した。残渣を水（２００ｍＬ）で溶解し、エーテル（２００ｍＬ×２）で抽出した。水相をＤＣＭ（２００ｍＬ）で抽出した。有機相を蒸発させ、乾燥させて、（Ｓ）−１−ベンジル２３−ｔｅｒｔ−ブチル２２−アミノ−１０，１９−ジオキソ−３，６，１２，１５−テトラオキサ−９，１８−ジアザトリコサン−１，２３−ジオエートを淡黄色の油状物（１４）として得た。ＬＣ／ＭＳ：Ｃ２８Ｈ４５Ｎ３Ｏ１０の質量計算値：５８３．３１、実測値：５８４．６５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３２７】
Ｇ）（Ｓ）−１−ベンジル２１，３９−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル９，１８，２３−トリオキソ−２，５，１１，１４−テトラオキサ−８，１７，２２−トリアザノナトリアコンタン−１，２１，３９−トリカルボキシレート（１５）
【０３２８】
【化９９】
2019534283.tif 000104
【０３２９】
５０ｍＬの丸底フラスコに、（Ｓ）−１−ベンジル２３−ｔｅｒｔ−ブチル２２−アミノ−１０，１９−ジオキソ−３，６，１２，１５−テトラオキサ−９，１８−ジアザトリコサン−１，２３−ジオエート（１．５７５ｇ、２．６９９ｍｍｏｌ）、１８−ｔｅｒｔ−ブトキシ−１８−オキソオクタデカン酸（１ｇ、２．６９９ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（１．２３１ｇ、３．２３９ｍｍｏｌ）、ＤＩＥＡ（６９７．６５４ｍｇ、５．３９８ｍｍｏｌ、２当量）、及びＤＭＦ（１５ｍＬ）を入れた。得られた溶液を室温で一晩撹拌し、ＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）で希釈した。有機層を、水（１００ｍＬ×２）及び食塩水（１００ｍＬ）で洗浄した。有機相を濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィー（ＤＣＭ／ＭｅＯＨ、１０：１）により精製して、（Ｓ）−１−ベンジル２１，３９−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル９，１８，２３−トリオキソ−２，５，１１，１４−テトラオキサ−８，１７，２２−トリアザノナトリアコンタン−１，２１，３９−トリカルボキシレートを淡黄色の油状物（１５）として得た。ＬＣ／ＭＳ：Ｃ５０Ｈ８５Ｎ３Ｏ１３の質量計算値：９３５．６１、実測値：９３６．６［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３３０】
Ｈ）（Ｓ）−２２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−４３，４３−ジメチル−１０，１９，２４，４１−テトラオキソ−３，６，１２，１５，４２−ペンタオキサ−９，１８，２３−トリアザテトラテトラコンタン−１−酸（１６）
【０３３１】
【化１００】
2019534283.tif 000105
【０３３２】
１００ｍＬの丸底フラスコに、（Ｓ）−１−ベンジル２１，３９−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル９，１８，２３−トリオキソ−２，５，１１，１４−テトラオキサ−８，１７，２２−トリアザノナトリアコンタン−１，２１，３９−トリカルボキシレート（２．５ｇ、３．０４１ｍｍｏｌ）、Ｐｄ／Ｃ（１０重量％、５００ｍｇ）、及びＭｅＯＨ（５０ｍＬ）を入れた。得られた溶液を室温で一晩、Ｈ２（３．５気圧）下で撹拌した。残渣を濾過し、濃縮し、逆相シリカゲルクロマトグラフィー（ＮＨ４ＨＣＯ３／Ｈ２Ｏ、０．０５％）により精製して、（Ｓ）−２２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−４３，４３−ジメチル−１０，１９，２４，４１−テトラオキソ−３，６，１２，１５，４２−ペンタオキサ−９，１８，２３−トリアザテトラテトラコンタン−１−酸を淡黄色の半固体（１６）として得た。ＬＣ／ＭＳ：Ｃ４３Ｈ７９Ｎ３Ｏ１３の質量計算値：８４５．５６、実測値：８４６．５５［Ｍ＋Ｈ］＋。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ：４．２４〜４．２９（ｍ，１Ｈ），４．０７（ｓ，２Ｈ），４．０３（ｓ，２Ｈ），３．６９〜３．７２（ｍ，８Ｈ），３．５７〜３．６７（ｍ，４Ｈ），３．４５〜３．４９（ｍ，２Ｈ），３．３４〜３．４２（ｍ，２Ｈ），２．２３〜２．３５（ｍ，６Ｈ），２．１２〜２．２１（ｍ，１Ｈ），１．９３〜１．９６（ｍ，１Ｈ），１．５２〜１．７０（ｍ，４Ｈ），１．４５〜１．５１（ｍ，１８Ｈ），１．３３（ｓ，２４Ｈ）。
【実施例】
【０３３３】
本発明の化合物は、当業者に既知の手法により調製することができる。以下の実施例は、本発明の代表例に過ぎず、本発明を何ら限定するものではない。
【０３３４】
実施例１：環状ＰＹＹ類似体配列番号１の合成
【０３３５】
【化１０１】
2019534283.tif 000106
【０３３６】
スキーム１４．Ｆｍｏｃ−ｐｓｉ−［Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−（Ｎ−Ｂｏｃ）Ｔｙｒ（ｔＢｕ）］−ＯＨの合成
１．Ｆｍｏｃ−ｐｓｉ−［Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−（Ｎ−Ｂｏｃ）Ｔｙｒ（ｔＢｕ）］−ＯＨの合成
Ａ．Ｈ２Ｎ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＡｌｌの合成
氷冷したＤＭＦ（５００ｍＬ）中のＦｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｏ（６９ｇ、１５０．１５ｍｍｏｌ）及びＫ２ＣＯ３（６２ｇ、４４５．３６ｍｍｏｌ）の溶液に、臭化アリル（７２ｇ、５９５．１６ｍｍｏｌ）を添加し、得られた混合物を３時間撹拌した。次いで、氷／水（１Ｌ）を添加し、混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、減圧下で濃縮して、黄色の油状物としてＦｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＡｌｌを得た。氷冷したＤＭＦ（６００ｍＬ）中のＦｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＡｌｌ（７０ｇ、１４０．１ｍｍｏｌ）の溶液に、ピペリジン（１５０ｍＬ）を２０分かけて滴下して添加した。３時間後、反応溶液を水／氷（１Ｌ）に注ぎ、ＥｔＯＡｃ（２×２Ｌ）で抽出した。合わせた有機抽出物を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、減圧下で濃縮した。このようにして得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、ＥｔＯＡｃ／石油エーテル（１０：１）で溶出して、黄色の油状物として３４ｇのＨ２Ｎ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＡｌｌを得た。
【０３３７】
Ｂ．Ｆｍｏｃ  Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｎ（Ｍｅ）ＯＭｅ（２）の合成
氷冷したＤＣＭ（５００ｍＬ）中のＦｍｏｃ  Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＨ（１）（６４．８ｇ、９９．８８ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩（２０ｇ、２０６．２ｍｍｏｌ）、及びＨＡＴＵ（５７ｇ、１４９．９１ｍｍｏｌ）の混合物に、ＤＩＥＡ（５２ｇ、４０２．２ｍｍｏｌ）を１０分かけて滴下して添加し、得られた混合物を室温で一晩撹拌した。次いで、反応物を水／氷（１Ｌ）に注ぎ、ＤＣＭ（１Ｌ）で抽出した。有機抽出物を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、減圧下で濃縮して、黄色の固体として７０ｇの粗Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｎ（Ｍｅ）ＯＭｅ（２）を得て、これを更に精製することなく使用した。
【０３３８】
Ｃ．Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＣＨＯ（３）の合成
窒素の不活性雰囲気下で、冷却した（−７８℃）ＴＨＦ（１Ｍ、１０７ｍＬ、０．１０７ｍｍｏｌ）中のＬＡＨの溶液に、カニューレを通して、冷却した（−５０℃）ＴＨＦ（１００ｍＬ）中のＦｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｎ（Ｍｅ）ＯＭｅ（２）（５０ｇ、７２．３ｍｍｏｌ）の溶液を１時間かけて滴下して添加した。−７８℃で５時間撹拌した後、混合物を１Ｎ  ＨＣｌ溶液（３００ｍＬ）に注ぎ、必要に応じて追加の１Ｎ  ＨＣｌを添加してｐＨを４に調整し、次いでＥｔＯＡｃ（２×２Ｌ）で抽出した。合わせた有機抽出物を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、減圧下で濃縮して、黄色の固体として４５ｇの粗Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＣＨＯ（３）を得て、これを更に精製することなく使用した。
【０３３９】
Ｄ．Ｆｍｏｃ−ｐｓｉ−［Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）］−ＯＡｌｌ（４）の合成
氷冷したＴＨＦ（２００ｍＬ）中の工程ＣのＦｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＣＨＯ（３）（４５ｇ、７１．１２ｍｍｏｌ）及び工程ＡのＨ２Ｎ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＡｌｌ（３２ｇ、１１５．３７ｍｍｏｌ）、ＭｅＯＨ（２００ｍＬ）、並びにＨＯＡｃ（１５ｍＬ）の溶液に、シアノ水素化ホウ素ナトリウム（１８．０ｇ、２８６．４ｍｍｏｌ）を３０分かけて少しずつ添加し、得られた溶液を室温で一晩撹拌した。飽和水性ＮａＨＣＯ３（５００ｍＬ）溶液を添加して反応をクエンチし、混合物をＥｔＯＡｃ（２×２Ｌ）で抽出した。合わせた有機抽出物を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、減圧下で濃縮した。残渣を、ＥｔＯＡｃ／石油エーテル（１０：１）で溶出させるシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、黄色の固体として４０ｇのＦｍｏｃ−ｐｓｉ−［Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）］−ＯＡｌｌ（４）を得た。
【０３４０】
Ｅ．Ｆｍｏｃ−ｐｓｉ−［Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｎ（Ｂｏｃ）Ｔｙｒ（ｔＢｕ）］−ＯＡｌｌ（５）の合成
ＭｅＣＮ（２４０ｍＬ）中のＦｍｏｃ−ｐｓｉ−［Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＡｌｌ］（４）（５３ｇ、５９．２８ｍｍｏｌ）の溶液に、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート（２０ｇ、９１．３ｍｍｏｌ）を添加し、得られた溶液を５０℃で一晩撹拌した。次いで、混合物を減圧下で濃縮し、残渣を、ＥｔＯＡｃ／石油エーテル（１：１）で溶出させるシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、黄色の固体として３２ｇのＦｍｏｃ  ｐｓｉ−［Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｎ（Ｂｏｃ）Ｔｙｒ（ｔＢｕ）］−ＯＡｌｌ（５）を得た。
【０３４１】
Ｆ．Ｆｍｏｃ−ｐｓｉ−［Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｎ（Ｂｏｃ）Ｔｙｒ（ｔＢｕ）］−ＯＨ（６）の合成
窒素の不活性雰囲気下で、冷却した（−３０℃）ＤＣＭ（６００ｍＬ）中のＦｍｏｃ−ｐｓｉ−［Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｎ（Ｂｏｃ）Ｔｙｒ（ｔＢｕ）］−ＯＡｌｌ（５）（３２ｇ、３２ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（３．０ｇ、４．３３ｍｍｏｌ）を添加し、続いてＮ−メチルアニリン（１０ｇ、９３ｍｍｏｌ）を３０分かけて滴下して添加した。得られた混合物を室温で２時間撹拌した後、減圧下で濃縮した。残渣を、ＥｔＯＡｃ／石油エーテル（１：１）で溶出させるシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、黄色がかった固体として２６．８ｇのＦｍｏｃ−ｐｓｉ−［Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｎ（Ｂｏｃ）Ｔｙｒ（ｔＢｕ）］−ＯＨ（６）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）δ７．７５〜７．７７（２Ｈ，ｍ），７．５９〜７．６０（２Ｈ，ｍ），７．３２〜７．３３（４Ｈ，ｍ），７．０９〜７．１１（２Ｈ，ｍ），６．８７〜７．００（２Ｈ，ｍ），４．２７〜４．５０（３Ｈ，ｍ），３．３０〜３．５０（４Ｈ，ｍ），３．０２〜３．２３（３Ｈ，ｍ），２．７５−２．９８（３Ｈ，ｍ），２．５７（３Ｈ，ｓ），２．４８（３Ｈ，ｓ），２．００（３Ｈ，ｓ），１．３１〜１．４１（２８Ｈ，ｍ）。ＬＣ／ＭＳ（ＥＳ，ｍ／ｚ）：Ｃ５２Ｈ６７Ｎ５Ｏ１０Ｓの質量計算値：９５３．４６、実測値：９５４．５５［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０３４２】
２．ジペプチドＦｍｏｃ−ｐｓｉ−（Ｒ３５−Ｎ（Ｂｏｃ）−Ｙ３６）のＳｉｅｂｅｒ樹脂上への充填
フリット化されたマイクロ波反応槽（ＣＥＭ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎにより供給）中で、ＮｏｖａＳｙｎ  ＴＧ  Ｓｉｅｂｅｒ樹脂（Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍにより供給）（０．２ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（１０ｍＬ）中２０％ピペリジンで処理し、ＣＥＭマイクロ波反応器内で５０℃で２．５分間加熱した。反応物を排出し、樹脂をＤＭＦで洗浄し、ＣＥＭマイクロ波反応器内で、５０℃で５分間、ＤＭＦ中２０％ピペリジンで再度処理した。排出し、ＤＭＦで洗浄した後、脱保護処理をもう１回繰り返した。次いで、樹脂を、ＤＭＦ（４ｍＬ）中の上記から得たＦｍｏｃ−ｐｓｉ−［Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−（Ｎ−Ｂｏｃ）Ｔｙｒ（ｔＢｕ）］−ＯＨ（３〜５当量）、ＨＡＴＵ（２．７５〜４．８当量）、及びＤＩＥＡ（６〜１０当量）の溶液で処理し、室温で６〜２４時間混合した。混合物を排出し、樹脂をＤＭＦで十分に洗浄した後、５０℃で５分間、マイクロ波条件下で、ＤＭＦ（５ｍＬ）中２０％Ａｃ２Ｏで処理することにより末端保護した。反応物を排出し、樹脂をＤＭＦ及びＤＣＭで十分に洗浄した。
【０３４３】
３．Ｆｍｏｃ−βＡ−ＩＫＰＥＡＰＧＥＫ（Ａｌｌｏｃ）ＡＳＰＥＥＬＮＲＹＹＡＳＬＲＨＹＬＮＬ（ｈＣ）ＴＲＱ（ｐｓｉ−Ｒ３５Ｙ３６）−Ｓｉｅｂｅｒ樹脂の合成
事前充填された（ｐｓｉ−Ｒ３５，Ｙ３６）−Ｓｉｅｂｅｒ樹脂（０．２ｍｍｏｌ）上へのアミノ酸延長をＣＥＭ  Ｌｉｂｅｒｔｙ  Ｂｌｕｅ  Ｍｉｃｒｏｗａｖｅペプチド合成装置で実行した。標準的なα−Ｆｍｏｃ保護されたアミノ酸は、結合剤としてＨＢＴＵ／ＤＩＥＡを使用して、５０℃で１５分間、初期樹脂充填に対して３．８倍過剰で二重結合された。Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＨを、室温で２５分、続いて５０℃で１５分の２段階プロトコルを用いて二重結合し、Ｆｍｏｃ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨを、室温で４分、続いて５０℃で８分間の２段階プロトコルを用いて二重結合した。
【０３４４】
４．Ｆｍｏｃ−βＡ−ＩＫＰＥＡＰＧＥＫ（ＮＨ２）ＡＳＰＥＥＬＮＲＹＹＡＳＬＲＨＹＬＮＬ（ｈＣ）ＴＲＱ（ｐｓｉ−Ｒ３５Ｙ３６）−Ｓｉｅｂｅｒ樹脂の合成：Ａｌｌｏｃ脱保護
上記から得られた樹脂を、脱酸素化ＤＣＭ（１０ｍＬ）中のフェニルシラン（２５当量）の溶液で処理した。約２分間撹拌した後、ＤＣＭ（１０ｍＬ）中のＰｄ（ＰＰｈ３）４（０．５当量）の溶液を添加し、樹脂混合物をアルゴン下で３０分間撹拌した。反応物を排出し、樹脂を脱酸素化ＤＣＭで洗浄した。脱保護を新しい試薬で繰り返し、その後、反応物を排出し、樹脂をＤＣＭ及びＤＭＦで十分に洗浄した。
【０３４５】
５．Ｆｍｏｃ−βＡ−ＩＫＰＥＡＰＧＥＫ（ＮＨ−ｄＰＥＧ１２−ＮＨＦｍｏｃ）ＡＳＰＥＥＬＮＲＹＹ  ＡＳＬＲＨＹＬＮＬ（ｈＣ）ＴＲＱ（ｐｓｉ−Ｒ３５Ｙ３６）−Ｓｉｅｂｅｒ樹脂の合成：Ｎ−Ｆｍｏｃ  ｄＰＥＧ１２カルボン酸の１１Ｋへの結合
上記のＡｌｌｏｃ脱保護されたペプチド−Ｓｉｅｂｅｒ樹脂を、ＣＥＭマイクロ波反応器内で、５０℃で１５分間、ＤＭＦ（７ｍＬ）中のＮ−Ｆｍｏｃ−ｄＰＥＧ１２−カルボン酸（５当量）、ＨＢＴＵ（４．８当量）、及びＤＩＥＡ（１０当量）の溶液で処理し、その時点までに、反応は負のＫａｉｓｅｒ試験を示した。反応物を排出し、樹脂をＤＭＦ及びＤＣＭで十分に洗浄した。
【０３４６】
６．ＢｒＣＨ２ＣＯＨＮ−βＡ−ＩＫＰＥＡＰＧＥＫ（ＮＨ−ｄＰＥＧ１２−ＮＨＣＯＣＨ２Ｂｒ）ＡＳＰＥＥＬ  ＮＲＹＹＡＳＬＲＨＹＬＮＬ（ｈＣ）ＴＲＱ（ｐｓｉ−Ｒ３５Ｙ３６）−Ｓｉｅｂｅｒ樹脂の合成：βＡ及びｄＰＥＧ１２におけるビス−ブロモアセチル化
上記の樹脂を、ＣＥＭマイクロ波反応器内で、５０℃で５分間、新しいＤＭＦ中の２０％ピペリジンを使用して、Ｆｍｏｃ脱保護を行った。脱保護を２回繰り返した。このようにして得られたＦｍｏｃ脱保護されたペプチド樹脂を、ＣＥＭマイクロ波反応器内で、５０℃で１０分間、ＤＭＦ（５ｍＬ）中のブロモ酢酸無水物（２０当量）の溶液で処理し、その時点までに、反応は負のＫａｉｓｅｒ試験を示した。反応物を排出し、樹脂をＤＭＦ及びＤＣＭで十分に洗浄した後、乾燥させた。
【０３４７】
７．ＢｒＣＨ２ＣＯＨＮ−βＡ−ＩＫＰＥＡＰＧＥＫ（ＮＨ−ｄＰＥＧ１２−ＮＨＣＯＣＨ２Ｂｒ）ＡＳＰＥＥＬ  ＮＲＹＹＡＳＬＲＨＹＬＮＬ（ｈＣ）ＴＲＱ（ｐｓｉ−Ｒ３５Ｙ３６）−ＣＯＮＨ２の合成：樹脂からの切断及び全体的な脱保護
乾燥させた樹脂を、ＤＣＭ（１０ｍＬ）中１．５％ＴＦＡの溶液で処理し、５〜１０分間混合した後、濾過した。各処理に新しいカクテルを使用して、この処理を更に９回繰り返した。次いで、合わせた濾液を合わせ、濃縮して、黄色の発泡体としての保護された粗ペプチドを得た。この発泡体を、室温で２．５時間、２０ｍＬの切断カクテル（ＴＦＡ／フェノール／Ｈ２Ｏ／ＴＩＰＳ＝８８／５／５／２）で処理し、次いで窒素流下で約２．５ｍＬの体積に濃縮し、次いで、冷エーテル（４０ｍＬ）を添加してペプチドを沈殿させた。混合物を遠心分離し（５分間、５０００ｒｐｍ）、デカントした。このプロセスを更に２回繰り返して、オフホワイト色の粉末としての粗ペプチドを得た。
【０３４８】
あるいは、樹脂を、ＤＣＭ中１〜２％ＴＦＡで前処理することなく、切断カクテルで処理して、完全に脱保護されたペプチドを得た。
【０３４９】
８．環状ＰＹＹ類似体配列番号１：環化手順Ａ及び精製
上記の粗ペプチドを脱酸素化５０％ＭｅＣＮ／水（５〜１０ｍｇ／ｍＬ）に溶解し、ＥＤＴＡ（１ｍＭ）を任意に添加した。次いで、７．５ｗ／ｖ％  ＮａＨＣＯ３溶液を添加して、反応溶液のｐＨを約８に上昇させた。得られた溶液を室温で０．５〜２．５時間撹拌した後、ＴＦＡを添加することによってｐＨ＜１に酸性化した。次いで、室温の減圧下で、溶液を元の体積の約半分（約２４ｍＬ）に濃縮した。得られた溶液を逆相分取ＨＰＬＣにより精製した。Ｖａｒｉａｎ  Ｐｕｒｓｕｉｔ  ＸＲ  Ｃ１８カラム（３０×２５０ｍｍ、１００Å、５μｍ）を使用して、Ｇｉｌｓｏｎ  ＨＰＬＣ  ２０２０  Ｐｅｒｓｏｎａｌ  Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ  Ｓｙｓｔｅｍで精製した。移動相は、緩衝剤Ａ（水中０．１％ＴＦＡ）、及び３６分かけて初期濃度２０％Ｂから最終濃度５０％Ｂの範囲の緩衝剤Ｂ（ＭｅＣＮ中０．１％ＴＦＡ）の勾配溶出からなった。ＵＶ検出は、２２０及び２５４ｎｍで監視された。生成物含有画分は、上記と同じカラムタイプ（４．６×２５０ｍｍ、５μｍ）を使用して、Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００  ＨＰＬＣシステムで分析ＨＰＬＣによって分析された。純粋な画分を合わせ、次いで凍結乾燥させて、綿様の固体として生成物を得た。１２．２７分（ＬＣ：Ａｔｌａｎｔｉｓ  Ｔ３  Ｃ１８カラム、５ｕｍ、４．６×２５０ｍｍ、１．０ｍＬ／分、１５〜６０％勾配）での生成物のピークに関してＬＣＭＳ：１２２５．５（Ｍ＋４Ｈ）／４，１６３３．４（Ｍ＋３Ｈ）／３及び２４５０．０（Ｍ＋２Ｈ）／２。
【０３５０】
実施例２：環状ＰＹＹ類似体配列番号２の合成
１．Ｈ２Ｎ−ＩＫＰＥＡＰＧＥＤＡＳＰＥＥＬＮＲＹＹＡＳＬＲＨＹＬＮＬ（ｈＣ）ＴＲＱＲＹ−ＰＡＬ−ＰＥＧ樹脂の合成
保護されたペプチジル樹脂は、スキーム１に示されるように、上述のＦｍｏｃ戦略を使用して、０．１ｍｍｏｌスケールで、低充填Ｒｉｎｋアミド樹脂、好ましくはＦｍｏｃ−ＰＡＬ−ＰＥＧ  ＰＳ樹脂（約０．１６〜０．２ｍｅｑ／ｇ、Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓにより供給）を使用して、ＣＥＭ  Ｌｉｂｅｒｔｙ  Ｂｌｕｅ  Ｍｉｃｒｏｗａｖｅペプチド合成装置で合成された。標準的なＦｍｏｃ保護されたアミノ酸は、結合剤としてＤＩＣ／Ｏｘｙｍａ及び４分間約９０℃の反応温度を使用して、樹脂充填に対して５倍過剰で結合された。Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＨは、それぞれ９０℃で４分間二重結合し、Ｆｍｏｃ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨは、室温で４分間、続いて５０℃で８分間の２段階プロトコルを用いて結合した。１回のＦｍｏｃ脱保護は、ＤＭＦ中の２０％ピペリジン（脱保護溶液）を使用して、９０℃で１．５分間行った。
【０３５１】
２．ｍ−ＢｒＣＨ２ＰｈＣＯＨＮ−ＩＫＰＥＡＰＧＥＤＡＳＰＥＥＬＮＲＹＹＡＳＬＲＨＹＬＮＬ（ｈＣ）ＴＲＱＲＹ−ＰＡＬ−ＰＥＧ樹脂の合成
上記のＦｍｏｃ脱保護されたペプチド−樹脂（０．１ｍｍｏｌ）を、マイクロ波反応器内で、７５℃で１５分間、ＤＭＦ（４ｍＬ）中のｍ−ブロモメチル安息香酸（２０当量）及びＤＩＣ（１０当量）の溶液で処理し、その時点までに、反応はＫａｉｓｅｒニンヒドリン試験により完了であると概ね決定された（Ｋａｉｓｅｒ，ｅｔ  ａｌ．，Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｃｈｅｍ．，１９７０，３４，５９５〜５９８）。結合が不完全であると決定された場合、結合は新しい試薬で繰り返された。反応物を排出し、樹脂をＤＭＦ及びＤＣＭで十分に洗浄した。
【０３５２】
３．ｍ−ＢｒＣＨ２ＰｈＣＯＨＮ−ＩＫＰＥＡＰＧＥＤＡＳＰＥＥＬＮＲＹＹＡＳＬＲＨＹＬＮＬ（ｈＣ）ＴＲＱＲＹ−ＣＯＮＨ２の合成：脱保護及び樹脂からの切断
次いで、上記の樹脂を、ＴＦＡ／水／フェノール／ＴＩＰＳ（８８：５：５：２）からなる切断カクテル（１０ｍＬ／０．１ｍｍｏｌスケール）で処理し、マイクロ波反応器内で３８℃で４０分間加熱した後、濾過した。樹脂をＴＦＡで洗浄し、合わせた濾液を窒素流下で約２．５ｍＬの体積に濃縮し、ペプチドを、冷ジエチルエーテル（４０ｍＬ）を添加することにより沈殿させた。ペプチド／エーテル懸濁液を遠心分離し、エーテル層をデカントした。ペプチドペレットをエーテルに再懸濁し、遠心分離し、デカントし、このプロセスを３回繰り返した。このようにして得られた粗ペプチドを穏やかな窒素流下で乾燥させた。
【０３５３】
４．環状ＰＹＹ類似体配列番号２：環化手順Ａ及び精製
上記の粗ペプチドを、≦４ｍｇ／ｍＬ．の濃度で脱酸素化ＭｅＣＮ／水（６０％ＭｅＣＮ）に溶解した。次いで、ペプチド溶液のｐＨを、水性ＮＨ４ＯＡｃ（２００ｍＭ、ｐＨ８．４）を添加することにより約７〜９に上昇させ、得られた溶液を、ＬＣＭＳにより環化が完了するまで（典型的には３〜４時間）、室温で撹拌した。環化反応混合物を、ＴＦＡを添加することによりｐＨ１．５〜３に酸性化し、溶液を濃縮して、有機共溶媒の大部分をわずかな濁りが生じる点まで除去した。混合物を均質にするために必要に応じて最小限の量のＭｅＣＮを添加し戻し、次いで、得られた溶液を、Ｃ１８  Ｖａｒｉａｎ  Ｐｕｒｓｕｉｔ  ＸＲ  Ｃ１８（２１×２５０ｍｍ、１００Å、５μｍ）カラムを使用して、複数回の注入で分取ＨＰＬＣによって直接精製した。移動相は、緩衝剤Ａ（水中０．１％ＴＦＡ）、及び４５分かけて初期濃度２０％Ｂから最終濃度４０％Ｂの範囲の緩衝剤Ｂ（ＭｅＣＮ中０．１％ＴＦＡ）の勾配溶出からなった。ＵＶ検出は、２２０及び２５４ｎｍで監視された。生成物含有画分は、表１に列記される適切なカラムを使用して、Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００  ＨＰＬＣシステムで分析ＨＰＬＣによって分析された。純粋な画分を合わせ、濃縮して有機相の大部分を除去した後、凍結乾燥させた。
【０３５４】
実施例３：環状ＰＹＹ類似体配列番号３の合成
１．（Ｈ２Ｎ）−ＩＫＰＥＡＰＧＥＤＡＳＰＥＥＬＮＲＹＹＡＳＬＲＨＹＬＮＬ−（アジド−ｎｏｒＬｅｕ）−ＴＲＱＲＹＰＡＬ−ＰＥＧ樹脂の合成
３１位のＦｍｏｃ−ｈＣｙｓ（ｔｒｔ）−ＯＨの代わりにＦｍｏｃ−アジドｎｏｒＬｅｕ−ＯＨを使用して、実施例２、工程１に記載の方法に従って、樹脂結合されたペプチドを０．１ｍｍｏｌスケールで調製した。
【０３５５】
２．（ＨＣＣＨ（ＣＨ２）２ＣＯＮＨ）−ＩＫＰＥＡＰＧＥＤＡＳＰＥＥＬＮＲＹＹＡＳＬＲＨＹＬＮＬ−（アジド−ｎｏｒＬｅｕ）−ＴＲＱＲＹＰＡＬ−ＰＥＧ樹脂の合成
ＤＩＣ／ＨＯＢＴプロトコル（７５℃、１０分間）を用いて、マイクロ波条件下で、４−ペンチン酸を上記の樹脂上に結合した。反応物を排出し、樹脂をＤＭＦ及びＤＣＭで十分に洗浄した。
【０３５６】
３．（ＨＣＣＨ（ＣＨ２）２ＣＯＮＨ）−ＩＫＰＥＡＰＧＥＤＡＳＰＥＥＬＮＲＹＹＡＳＬＲＨＹＬＮＬ−（アジド−ｎｏｒＬｅｕ）−ＴＲＱＲＹＰＡＬ−ＣＯＮＨ２の合成
上記の樹脂を、マイクロ波条件下（３８℃、４０分間）下で、ＴＦＡ／ＤＯＤＴ／Ｈ２Ｏ／ＴＩＳ（９２．５：２．５：２．５：２．５）からなる１０ｍＬの切断カクテルで処理した。反応物を排出し、樹脂をＴＦＡ（１０ｍＬ）で洗浄した。次いで、合わせた濾液を窒素流下で約２．５ｍＬの体積に濃縮した。次いで、冷エーテル（４０ｍＬ）を添加してペプチドを沈殿させ、混合物を遠心分離し（５分間、５０００ｒｐｍ）、デカントした。このプロセスを更に２回繰り返して、オフホワイト色の粉末としての粗ペプチドを得た。
【０３５７】
４．環状ＰＹＹ類似体配列番号３
２ｍＬの脱酸素化Ｈ２Ｏ中に７ｍｇのＣｕＳＯ４を調製する。５．４ｍＬのＥｔＯＨ及び０．６ｍＬのＭｅＣＮ中に３０ｍｇのＴＢＴＡを調製する。０．９４ｍＬのＣｕＳＯ４溶液及び４．８ｍＬのＴＢＴＡ溶液を予備混合する。３ｍＬの脱酸素化Ｈ２Ｏ中に３０ｍｇのアスコルビン酸Ｎａを調製する。
【０３５８】
２０ｍＬの脱酸素化水中の工程３の粗アジド含有ペプチド（１００ｍｇ）の溶液に、予備混合したＣｕＳＯ４／ＴＢＴＡ溶液を添加し、続いて２．４ｍＬのアスコルビン酸Ｎａ溶液を添加した（溶液は直ちに乳白色になった）。混合物を４０℃に加温し、１．５時間撹拌し、この時点で、ＬＣＭＳ分析は完全な反応を示した。混合物を水で約４０ｍＬに希釈し（０．１％ＴＦＡ）、混合物を遠心分離し、上清を逆相分取ＨＰＬＣにより精製した。精製は、Ｖａｒｉａｎ  Ｐｕｒｓｕｉｔ  ＸＲ  Ｃ１８カラム（２１×２５０ｍｍ、１００Å、５μｍ）を使用して、３５℃で行った。移動相は、緩衝剤Ａ（水中０．１％ＴＦＡ）、及び初期濃度１０％Ｂから中間濃度１８％Ｂ（２１ｍｐｍ）、そして３５分かけて最終濃度３３％Ｂ（１０．５ｍｐｍ）の範囲の緩衝剤Ｂ（ＭｅＣＮ中０．１％ＴＦＡ）の勾配溶出からなった。ＵＶ検出は、２２０及び２５４ｎｍで監視された。生成物含有画分は、上記と同じカラムタイプ（４．６×２５０ｍｍ、５μｍ）を使用して、Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００  ＨＰＬＣシステムで分析ＨＰＬＣによって分析された。純粋な画分を合わせ、次いで凍結乾燥させて、綿様の固体として生成物を得た。
【０３５９】
実施例４：環状ＰＹＹ類似体配列番号４の合成
１．（Ｄｄｅ）Ｋ（ＮＨ２）ＡＳＰＥＥＬＮＲＹＹＡＳＬＲＨＹＬＮＬ（ｈＣ）ＴＲＱＲＹ−ＰＡＬ−ＰＥＧ樹脂の合成
実施例２、工程１に記載の方法を用い、樹脂結合されたペプチドを調製した。
【０３６０】
２．（Ｄｄｅ）Ｋ（ＮＨ−Ｇｌｕ−（ＯｔＢｕ）ＮＨ２）ＡＳＰＥＥＬＮＲＹＹＡＳＬＲＨＹＬＮＬ（ｈＣ）ＴＲＱＲＹ−ＰＡＬ−ＰＥＧ樹脂の合成
Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ−ＯｔＢｕ（５当量）を、マイクロ波条件下で、ＤＩＣ／Ｏｘｙｍａ結合方法（９０℃、６分間、ｄｃ）を用いて上記の樹脂上に結合させた。樹脂を排出し、ＤＭＦで洗浄した。次いで、Ｆｍｏｃ脱保護を、３段階プロトコル（７５℃で０．５分間、７５℃で３分間、７５℃で３分間）を用いて（各段階でＤＭＦ洗浄を行う）、ＤＭＦ中２０％ピペリジンを使用して行った。
【０３６１】
３．（Ｄｄｅ）Ｋ（ＮＨ−Ｇｌｕ−（ＯｔＢｕ）ＮＨ−Ｐａｌ）ＡＳＰＥＥＬＮＲＹＹＡＳＬＲＨＹＬＮＬ（ｈＣ）ＴＲＱＲＹ−ＰＡＬ−ＰＥＧ樹脂の合成
パルミチン酸（５当量）を、マイクロ波条件下で、ＤＩＣ／Ｏｘｙｍａ結合方法（９０℃、５分）を用いて上記の樹脂上に結合させた。樹脂を排出し、ＤＭＦ及びＤＣＭで十分に洗浄した。
【０３６２】
４．（Ｈ２Ｎ）Ｋ（ＮＨ−Ｇｌｕ−（ＯｔＢｕ）ＮＨ−Ｐａｌ）ＡＳＰＥＥＬＮＲＹＹＡＳＬＲＨＹＬＮＬ（ｈＣ）ＴＲＱＲＹ−ＰＡＬ−ＰＥＧ樹脂の合成
上記の樹脂をＤＭＦで洗浄した後、室温で５分間、ＤＭＦ中２％ヒドラジンの溶液（６ｍＬ／０．１ｍｍｏｌ樹脂）で処理し、次いで排出し、ＤＭＦで洗浄した。処理を更に５回繰り返した。
【０３６３】
５．（Ｈ２Ｎ）ＩＫＰＥＡＰＧＥＫ（ＮＨ−Ｇｌｕ−（ＯｔＢｕ）ＮＨ−Ｐａｌ）ＡＳＰＥＥＬＮＲＹＹＡＳＬＲＨＹＬＮＬ（ｈＣ）ＴＲＱＲＹ−ＰＡＬ−ＰＥＧ樹脂の合成
残りのアミノ酸結合は、実施例２、工程１に記載の方法を用いて行われた。
【０３６４】
６．環状ＰＹＹ類似体配列番号４
実施例２、工程２〜４に記載の方法を用いて、残りの合成を行った。生成物の精製は、Ｖａｒｉａｎ  Ｐｕｒｓｕｉｔ  ＸＲＳ  Ｃ１８カラム（２１×２５０ｍｍ、１００Å、５μｍ）を使用して、室温で行った。移動相は、緩衝剤Ａ（水中０．１％ＴＦＡ）、及び５分かけて２３％Ｂから中間濃度３３％Ｂ（２１ｍｐｍ）、そして５５分かけて最終濃度４８％Ｂ（１０．５ｍｐｍ）の範囲の緩衝剤Ｂ（ＭｅＣＮ中０．１％ＴＦＡ）の勾配溶出からなった。
【０３６５】
実施例５：環状ＰＹＹ類似体配列番号５の合成
工程３においてパルミチン酸の代わりにα−トコフェリルオキシ酢酸（ＡｃＶｉｔＥ）（８）を使用して、実施例４に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。生成物の精製は、Ａｇｉｌｅｎｔ  ３００ＳＢ  Ｃ８カラム（２１×２５０ｍｍ、１００Å、５μｍ）を使用して、室温で行った。移動相は、緩衝剤Ａ（水中０．１％ＴＦＡ）、及び５分かけて初期濃度３５％Ｂから中間濃度４５％Ｂ（２１ｍｐｍ）、そして６０分かけて最終濃度６０％Ｂ（１０．５ｍｐｍ）の範囲の緩衝剤Ｂ（ＭｅＣＮ中０．１％ＴＦＡ）の勾配溶出からなった。
【０３６６】
実施例６：環状ＰＹＹ類似体配列番号６の合成
１．（ＨＣＣＨ（ＣＨ２）２ＣＯＮＨ）−ＩＫＰＥＡＰＧＥＤＡＳＰＥＥＬＮＲＹＹＡＳＬＲＨＹＬＮＫ（Ｄｄｅ）−（アジド−ｎｏｒＬｅｕ）−ＴＲＱＲＹ−ＰＡＬ−ＰＥＧ樹脂の合成
樹脂結合されたペプチドは、実施例３、工程１に記載されるように、３０位のＦｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨの代わりにＦｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｄｄｅ）−ＯＨを使用し、この工程において、３位のＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨの後に、２位に４−ペンチン酸（二重結合）を組み込み、調製された。
【０３６７】
２．（ＨＣＣＨ（ＣＨ２）２ＣＯＮＨ）−ＩＫＰＥＡＰＧＥＤＡＳＰＥＥＬＮＲＹＹＡＳＬＲＨＹＬＮＫ（ＮＨ２）−（アジド−ｎｏｒＬｅｕ）−ＴＲＱＲＹ−ＰＡＬ−ＰＥＧ樹脂の合成
上記の樹脂を、室温で５分間、ＤＭＦ中３％ヒドラジン（８ｍＬ／０．１ｍｍｏｌスケール）で処理し、次いで混合物を排出し、ＤＭＦで洗浄した。この手順を約５回繰り返し、その後、樹脂をＤＭＦで、次いでＤＣＭで十分に洗浄した。
【０３６８】
３．（ＨＣＣＨ（ＣＨ２）２ＣＯＮＨ）−ＩＫＰＥＡＰＧＥＤＡＳＰＥＥＬＮＲＹＹＡＳＬＲＨＹＬＮＫ（ＮＨ−γ−Ｇｌｕ−ＡｃＶｉｔＥ）−（アジド−ｎｏｒＬｅｕ）−ＴＲＱＲＹ−ＰＡＬ−ＰＥＧ樹脂の合成
実施例２、工程１に記載の結合手順を用いて、５分間の結合時間で、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ−ＯｔＢｕを上記の樹脂上に結合した。樹脂を、３段階マイクロ波プロトコル（７５℃で０．５分間、７５℃で３分間、７５℃で３分間）を用いて、ＤＭＦ中２０％ピペリジンで処理することにより脱保護し、その後、樹脂をＤＭＦ及びＤＣＭで十分に洗浄した。次いで、α−トコフェリルオキシ酢酸（ＡｃＶｉｔＥ）（８）を、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ−ＯｔＢｕの結合に使用した同じ手順を用いて、樹脂上に結合した。
【０３６９】
４．（ＨＣＣＨ（ＣＨ２）２ＣＯＮＨ）−ＩＫＰＥＡＰＧＥＤＡＳＰＥＥＬＮＲＹＹＡＳＬＲＨＹＬＮＫ（ＮＨ−γ−Ｇｌｕ−ＡｃＶｉｔＥ）−（アジド−ｎｏｒＬｅｕ）−ＴＲＱＲＹ−ＣＯＮＨ２の合成
上記の樹脂からのペプチドの切断及び沈殿は、実施例３、工程３に記載の手順を用いて行った。
【０３７０】
５．環状ＰＹＹ類似体配列番号６
実施例３、工程４に記載の手順を用いて、表題化合物を調製した。生成物の精製は、Ｖａｒｉａｎ  Ｐｕｒｓｕｉｔ  ＸＲ  Ｃ８カラム（２１×２５０ｍｍ、１００Å、５μｍ）で、３５℃で行った。移動相は、緩衝剤Ａ（水中０．１％ＴＦＡ）、及び５分かけて初期濃度３５％Ｂから中間濃度４８％Ｂ（２１ｍｐｍ）、そして４０分かけて最終濃度６３％Ｂ（１０．５ｍｐｍ）の範囲の緩衝剤Ｂ（ＭｅＣＮ中０．１％ＴＦＡ）の勾配溶出からなった。
【０３７１】
実施例７：環状ＰＹＹ類似体配列番号７の合成
１１位の代わりに９位に配置されたＫ（ＮＨ−γ−Ｇｌｕ−Ｐａｌ）残基を用いて、実施例４に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。生成物の精製は、Ａｇｉｌｅｎｔ  ３００ＳＢ  Ｃ８カラム（２１×２５０ｍｍ、１００Å、５μｍ）を使用して、室温で行った。移動相は、緩衝剤Ａ（水中０．１％ＴＦＡ）、及び初期濃度２３％Ｂから中間濃度４３％Ｂ（２１ｍｐｍ）、そして４０分かけて最終濃度４３％Ｂ（１０．５ｍｐｍ）の範囲の緩衝剤Ｂ（ＭｅＣＮ中０．１％ＴＦＡ）の勾配溶出からなった。不純な生成物含有画分を、初期濃度２５％Ｂから中間濃度３５％Ｂ（２１ｍｐｍ）、そして８０分かけて最終濃度４５％Ｂ（１０．５ｍｐｍ）の勾配を使用して、室温で、Ｗａｔｅｒｓ  Ｔ３  Ｃ１８カラム（２５０×１９ｍｍ、１００Å、５μｍ）上で再精製した。
【０３７２】
実施例８：環状ＰＹＹ類似体配列番号８の合成
１１位の代わりに３０位に配置されたＫ（ＮＨ−γ−Ｇｌｕ−Ｐａｌ）残基を用いて、実施例４に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。生成物の精製は、Ａｇｉｌｅｎｔ  ３００ＳＢ  Ｃ８カラム（２１×２５０ｍｍ、１００Å、５μｍ）を使用して、３５℃で行った。移動相は、緩衝剤Ａ（水中０．１％ＴＦＡ）、及び初期濃度２１％Ｂから中間濃度３１％Ｂ（２１ｍｐｍ）、そして４０分かけて最終濃度４１％Ｂ（１０．５ｍｐｍ）の範囲の緩衝剤Ｂ（ＭｅＣＮ中０．１％ＴＦＡ）の勾配溶出からなった。不純な生成物含有画分を、初期濃度２１％Ｂから中間濃度３１％Ｂ（２１ｍｐｍ）、そして８０分かけて最終濃度４０％Ｂ（１０．５ｍｐｍ）の勾配を使用して、室温で、Ｗａｔｅｒｓ  Ｔ３  Ｃ１８カラム（２５０×１９ｍｍ、１００Å、５μｍ）上で再精製した。
【０３７３】
実施例９：環状ＰＹＹ類似体配列番号９の合成
１．Ｈ２Ｎ−ＩＫＰＥＡＰＧＥＤＡＳＰＥＥＬＮＲＹＹＡＳＬＲＨＹＬＮＬ（ｈＣ）ＴＲＱ（ｐｓｉ−Ｒ３５Ｙ３６）−Ｓｉｅｂｅｒ樹脂の合成
実施例１、工程２からの事前充填された（ｐｓｉ−Ｒ３５，Ｙ３６）−Ｓｉｅｂｅｒ樹脂（０．１ｍｍｏｌ）上へのアミノ酸延長は、保護されたアミノ酸の５倍過剰を使用する修正を加えて、実施例１、工程３に記載されるように行われた。
【０３７４】
２．ｍ−ＢｒＣＨ２ＰｈＣＯＨＮ−ＩＫＰＥＡＰＧＥＤＡＳＰＥＥＬＮＲＹＹＡＳＬＲＨＹＬＮＬ（ｈＣ）ＴＲＱ（ｐｓｉ−Ｒ３５Ｙ３６）−Ｓｉｅｂｅｒ樹脂の合成
結合を７５℃の代わりに５０℃で行う修正を加えて、実施例１、工程に記載の手順に従って、ｍ−ブロモメチル安息香酸を上記の樹脂上に結合した。
【０３７５】
３．環状ＰＹＹ類似体配列番号９
実施例１、工程７及び８に記載の手順に従って、上記の樹脂から表題化合物を調製した。生成物の精製は、Ｖａｒｉａｎ  Ｐｕｒｓｕｉｔ  ＸＲ  Ｃ１８カラム（２１×２５０ｍｍ、１００Å、５μｍ）を使用して、３５℃で行った。移動相は、緩衝剤Ａ（水中０．１％ＴＦＡ）、及び１０分かけて初期濃度１０％Ｂから中間濃度１８％Ｂ（２１ｍｐｍ）、そして３５分かけて最終濃度３３％Ｂ（１０．５ｍｐｍ）の範囲の緩衝剤Ｂ（ＭｅＣＮ中０．１％ＴＦＡ）の勾配溶出からなった。
【０３７６】
実施例１０：環状ＰＹＹ類似体配列番号１０の合成
３０位のＦｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨの代わりにＤｄｅ−Ｌｙｓ（Ｆｍｏｃ）−ＯＨを使用し、工程３においてパルミチン酸の代わりにα−トコフェリルオキシ酢酸（ＡｃＶｉｔＥ）（８）を使用して、実施例４に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。生成物の精製は、Ａｇｉｌｅｎｔ  ３００ＳＢ  Ｃ８カラム（２１×２５０ｍｍ、１００Å、５μｍ）を使用して、室温で行った。移動相は、緩衝剤Ａ（水中０．１％ＴＦＡ）、及び１０分かけて初期濃度３０％Ｂから中間濃度４０％Ｂ（２１ｍｐｍ）、そして３５分かけて最終濃度５５％Ｂ（２１ｍｐｍ）の範囲の緩衝剤Ｂ（ＭｅＣＮ中０．１％ＴＦＡ）の勾配溶出からなった。不純な生成物含有画分を、５分かけて初期濃度３５％Ｂから中間濃度４３％Ｂ（２１ｍｐｍ）、そして４０分かけて最終濃度５８％Ｂ（１０．５ｍｐｍ）の修正した勾配を使用して再精製した。
【０３７７】
実施例１１：環状ＰＹＹ類似体配列番号１１の合成
１．（Ａｌｌｏｃ）Ｋ（ＮＨ２）−（ｈＣ）−ＴＲＱ（ｐｓｉ−Ｒ３５Ｙ３６）−Ｓｉｅｂｅｒ樹脂の合成
３０位のＦｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨの代わりにＡｌｌｏｃ−Ｌｙｓ（Ｆｍｏｃ）−ＯＨを使用して、実施例９、工程１に記載の手順に従って、上記の樹脂を調製した。
【０３７８】
２．（Ａｌｌｏｃ）Ｋ（ＮＨ−γ−Ｇｌｕ−ＡｃＶｉｔＥ）−（ｈＣ）−ＴＲＱ（ｐｓｉ−Ｒ３５Ｙ３６）−Ｓｉｅｂｅｒ樹脂の合成
Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ−ＯｔＢｕ及びα−トコフェリルオキシ酢酸（ＡｃＶｉｔＥ）（８）（それぞれ５当量）を、５０℃で１５〜２０分間、マイクロ波条件下で、ＨＢＴＵ／ＤＩＥＡ媒介結合を使用して上記の樹脂上に順次結合した。
【０３７９】
３．Ｈ２Ｎ−Ｋ（ＮＨ−γ−Ｇｌｕ−ＡｃＶｉｔＥ）−（ｈＣ）−ＴＲＱ（ｐｓｉ−Ｒ３５Ｙ３６）−Ｓｉｅｂｅｒ樹脂の合成
実施例１、工程４に記載の手順に従って、ａｌｌｏｃ保護基を除去した。
【０３８０】
４．環状ＰＹＹ類似体配列番号１１
ＮＨ４ＯＡｃ緩衝剤の代わりに１Ｍ  ＴＲＩＳ／ＨＣｌ緩衝剤（ｐＨ７．５）を使用して環化を引き起こす修正を加えて、実施例９、工程１〜３に記載の手順に従って、上記の樹脂から表題化合物を調製した。生成物の精製は、Ｖａｒｉａｎ  Ｐｕｒｓｕｉｔ  ＸＲ  Ｃ１８カラム（２１×２５０ｍｍ、１００Å、５μｍ）を使用して、３５℃で行った。移動相は、緩衝剤Ａ（水中０．１％ＴＦＡ）、及び１０分かけて初期濃度１０％Ｂから中間濃度１８％Ｂ（２１ｍｐｍ）、そして３５分かけて最終濃度３３％Ｂ（１０．５ｍｐｍ）の範囲の緩衝剤Ｂ（ＭｅＣＮ中０．１％ＴＦＡ）の勾配溶出からなった。
【０３８１】
実施例１２：環状ＰＹＹ類似体配列番号１２の合成
工程１において３５位のＦｍｏｃ−Ａｒｇ（ｐｂｆ）−ＯＨの代わりにＦｍｏｃ−Ｎ−Ｍｅ−Ａｒｇ（ｐｂｆ）−ＯＨを使用し、ＮＨ４ＯＡｃ緩衝剤の代わりに１Ｍ  ＮａＨＣＯ３緩衝剤を使用して環化を引き起こす修正を加えて、実施例２に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。生成物の精製は、Ｖａｒｉａｎ  Ｐｕｒｓｕｉｔ  ＸＲ  Ｃ１８カラム（３０×２５０ｍｍ、１００Å、５μｍ）を使用して、室温で行った。移動相は、緩衝剤Ａ（水中０．１％ＴＦＡ）、及び３６分かけて１０〜６０％Ｂ（３０ｍｐｍ）の範囲の緩衝剤Ｂ（ＭｅＣＮ中０．１％ＴＦＡ）の勾配溶出からなった。
【０３８２】
実施例１３：環状ＰＹＹ類似体配列番号１３の合成
工程２においてα−トコフェリルオキシ酢酸（ＡｃＶｉｔＥ）（８）の代わりにパルミチン酸を使用し、６０％ＥｔＯＨ／Ｈ２ＯをＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏの代わりに溶媒として使用し、飽和水性ＮａＨＣＯ３を、ＮＨ４ＯＡｃ緩衝剤の代わりに使用して環化を引き起こす修正を加えて、実施例１１に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。生成物の精製は、Ｗａｔｅｒｓ  ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｃ１８  ＯＢＤカラム（５０×２５０ｍｍ、５μｍ）を使用して、室温で行った。移動相は、緩衝剤Ａ（水中１０ｍＭ  ＮＨ４ＯＨ、ｐＨ約９）、及び５分かけて初期濃度１５％Ｂから中間濃度２０％Ｂ（１００ｍｐｍ）、そして４０分かけて最終濃度３５％Ｂ（１００ｍｐｍ）の範囲の緩衝剤Ｂ（ＭｅＣＮ）の勾配溶出からなった。
【０３８３】
実施例１４：環状ＰＹＹ類似体配列番号１４の合成
工程１において、１１位の代わりに３０位に配置されたＬｙｓ（ＮＨ−γ−Ｇｌｕ−Ｐａｌ）残基を用い、工程１において３５位のＦｍｏｃ−Ａｒｇ（ｐｂｆ）−ＯＨの代わりにＦｍｏｃ−Ｎ−Ｍｅ−Ａｒｇ（ｐｂｆ）−ＯＨを用い、工程６においてＮＨ４ＯＡｃ緩衝剤の代わりに１Ｍ  ＮａＨＣＯ３緩衝剤を使用して環化を引き起こす修正を加えて、実施例４に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。生成物の精製は、Ｖａｒｉａｎ  Ｐｕｒｓｕｉｔ  ＸＲ  Ｃ１８カラム（３０×２５０ｍｍ、１００Å、５μｍ）を使用して、室温を行った。移動相は、緩衝剤Ａ（水中０．１％ＴＦＡ）、及び３６分かけて２０〜７０％Ｂ（３０ｍｐｍ）の範囲の緩衝剤Ｂ（ＭｅＣＮ中０．１％ＴＦＡ）の勾配溶出からなった。不純な画分を、２５分かけて３０〜５０％Ｂ（３０ｍｐｍ）の勾配を使用して、室温で、Ｖａｒｉａｎ  Ｐｕｒｓｕｉｔ  ＸＲジフェニルカラム（３０×１００ｍｍ、１００Å、５μｍ）上で再精製した。
【０３８４】
実施例１５：環状ＰＹＹ類似体配列番号１５の合成
１１位の代わりに３０位に配置されたＬｙｓ（ＮＨ−γ−Ｇｌｕ−Ｐａｌ）残基を用い、３位のＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ結合の代わりにＦｍｏｃ−βＡｌａ−ＯＨを使用し、また、ＮＨ４ＯＡｃ緩衝剤の代わりに１Ｍ  ＮａＨＣＯ３緩衝剤を使用して環化を引き起こし、ブロモ酢酸無水物との結合が、以下の手順を用いて、工程６（実施例２の工程２）において、ｍ−ブロモメチル安息香酸の代わりに使用される修正を加えて、実施例４に記載の手順に従って、表題化合物を調製した：Ｆｍｏｃ脱保護されたペプチド樹脂（０．１ｍｍｏｌ）を、５０℃で５〜１０分間、マイクロ波反応器内で、ＤＭＦ（５ｍＬ）中のブロモ酢酸無水物（１０当量）の溶液で処理する（この時点までに、反応は概して、Ｋａｉｓｅｒニンヒドリン試験により完了したと判定された）。結合が不完全であると判定された場合、結合は新しい試薬で繰り返された。生成物の精製は、Ｖａｒｉａｎ  Ｐｕｒｓｕｉｔ  ＸＲ  Ｃ１８カラム（３０×２５０ｍｍ、１００Å、５μｍ）を使用して、室温で行った。移動相は、緩衝剤Ａ（水中０．１％ＴＦＡ）、及び３６分かけて２０〜６０％Ｂ（３０ｍｐｍ）の範囲の緩衝剤Ｂ（ＭｅＣＮ中０．１％ＴＦＡ）の勾配溶出からなった。不純な画分を、２５分かけて３０〜５０％Ｂ（３０ｍｐｍ）の勾配を使用して、室温で、Ｖａｒｉａｎ  Ｐｕｒｓｕｉｔ  ＸＲジフェニルカラム（３０×１００ｍｍ、１００Å、５μｍ）上で再精製した。
【０３８５】
実施例１６：環状ＰＹＹ類似体配列番号１６の合成
１１位の代わりに３０位に配置されたＬｙｓ（ＮＨ−γ−Ｇｌｕ−Ｐａｌ）残基を用い、３位のＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ結合を省略し、工程６において（実施例２の工程２）、ｍ−ブロモメチル安息香酸の代わりにｐ−ブロモメチル安息香酸を使用して、実施例４に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。加えて、１Ｍ  ＮａＨＣＯ３緩衝剤をＮＨ４ＯＡｃ緩衝剤の代わりに使用して、環化を引き起こした。生成物の精製は、Ｖａｒｉａｎ  Ｐｕｒｓｕｉｔ  ＸＲ  Ｃ１８カラム（３０×２５０ｍｍ、１００Å、５μｍ）を使用して、室温で行った。移動相は、緩衝剤Ａ（水中０．１％ＴＦＡ）、及び３６分かけて２０〜７０％Ｂ（３０ｍｐｍ）の範囲の緩衝剤Ｂ（ＭｅＣＮ中０．１％ＴＦＡ）の勾配溶出からなった。不純な画分を、２５分かけて３０〜５０％Ｂ（３０ｍｐｍ）の勾配を使用して、室温で、Ｖａｒｉａｎ  Ｐｕｒｓｕｉｔ  ＸＲジフェニルカラム（３０×１００ｍｍ、１００Å、５μｍ）上で再精製した。
【０３８６】
実施例１７：環状ＰＹＹ類似体配列番号１７の合成
１１位の代わりに３０位に配置されたＬｙｓ（ＮＨ−γ−Ｇｌｕ−Ｐａｌ）残基を用い、工程１において４位のＦｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨの代わりにＦｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨを使用して、実施例４に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。工程６において、ＴＲＩＳ／ＨＣｌ緩衝剤（１Ｍ、ｐＨ７．５）をＮＨ４ＯＡｃ緩衝剤の代わりに使用して、環化を引き起こした。生成物の精製は、Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｐｏｌａｒｉｓ  Ｃ１８−Ａカラム（３０×２５０ｍｍ、１００Å、５μｍ）を使用して、室温で行った。移動相は、緩衝剤Ａ（水中０．１％ＴＦＡ）、及び５分かけて初期濃度２０％Ｂから中間濃度３５％Ｂ（４０ｍｐｍ）、そして４０分かけて最終濃度４５％Ｂ（４０ｍｐｍ）の範囲の緩衝剤Ｂ（ＭｅＣＮ中０．１％ＴＦＡ）の勾配溶出からなった。
【０３８７】
実施例１８：環状ＰＹＹ類似体配列番号１８の合成
１１位の代わりに３０位に配置されたＬｙｓ（ＮＨ−γ−Ｇｌｕ−Ｐａｌ）残基を用い、工程１において４位のＦｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨの代わりにＦｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−ＯＨを使用して、実施例４に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。工程６において、ＴＲＩＳ／ＨＣｌ緩衝剤（１Ｍ、ｐＨ７．５）をＮＨ４ＯＡｃ緩衝剤の代わりに使用して、環化を引き起こした。生成物の精製は、Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｐｏｌａｒｉｓ  Ｃ１８−Ａカラム（３０×２５０ｍｍ、１００Å、５μｍ）を使用して、室温で行った。移動相は、緩衝剤Ａ（水中０．１％ＴＦＡ）、及び５分かけて初期濃度２０％Ｂから中間濃度３５％Ｂ（４０ｍｐｍ）、そして４０分かけて最終濃度４５％Ｂ（４０ｍｐｍ）の範囲の緩衝剤Ｂ（ＭｅＣＮ中０．１％ＴＦＡ）の勾配溶出からなった。
【０３８８】
実施例１９：環状ＰＹＹ類似体配列番号１９の合成
１１位の代わりに３０位に配置されたＬｙｓ（ＮＨ−γ−Ｇｌｕ−Ｐａｌ）残基、工程１において、３５位のＦｍｏｃ−Ａｒｇ（ｐｂｆ）−ＯＨの代わりにＦｍｏｃ−Ｎ−Ｍｅ−Ａｒｇ（ｐｂｆ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−ｈＣｙｓ（ｔｒｔ）−ＯＨの代わりにＦｍｏｃ−Ｃｙｓ（ｔｒｔ）−ＯＨを用い、工程６において（実施例２の工程２）、ｍ−ブロモメチル安息香酸の代わりにｐ−ブロモメチル安息香酸を使用して、実施例４に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。
【０３８９】
以下の修正は、工程６（実施例２、工程３及び４）に対して行われた：環化前に得た粗ペプチドを、Ｖａｒｉａｎ  Ｐｕｒｓｕｉｔ  ＸＲ  Ｃ１８カラム（３０×２５０ｍｍ、１００Å、５μｍ）を使用して、室温で精製した。移動相は、緩衝剤Ａ（水中０．１％ＴＦＡ）、及び３６分かけて２０〜７０％Ｂ（３０ｍｐｍ）の範囲の緩衝剤Ｂ（ＭｅＣＮ中０．１％ＴＦＡ）の勾配溶出からなった。生成物含有画分を合わせ、固体ＮａＨＣＯ３で処理して、ｐＨを約７〜８に上昇させた。得られた溶液を室温で４時間撹拌した後、ＴＦＡでｐＨ４に酸性化した。溶液を５〜１０ｍＬの体積に濃縮し、ＭｅＣＮを添加して、あらゆる沈殿物を溶解させた。生成物の精製は、３６分かけて２０〜６０％Ｂ（３０ｍｐｍ）の勾配で、上記のように行った。
【０３９０】
実施例２０：環状ＰＹＹ類似体配列番号２０の合成
１１位の代わりに３０位に配置されたＬｙｓ（ＮＨ−γ−Ｇｌｕ−Ｐａｌ）残基、工程１において３５位のＦｍｏｃ−Ａｒｇ（ｐｂｆ）−ＯＨの代わりにＦｍｏｃ−Ｎ−Ｍｅ−Ａｒｇ（ｐｂｆ）−ＯＨ、及びＦｍｏｃ−ｈＣｙｓ（ｔｒｔ）−ＯＨの代わりにＦｍｏｃ−Ｃｙｓ（ｔｒｔ）−ＯＨを用いて、実施例４に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。粗直鎖状ペプチドを、実施例１９に記載の修正に従って精製及び環化した。最終生成物の精製は、３６分かけて２０〜６０％Ｂ（３０ｍｐｍ）の勾配を使用して行った。
【０３９１】
実施例２１：環状ＰＹＹ類似体配列番号２１の合成
１１位の代わりに３０位に配置されたＬｙｓ（ＮＨ−γ−Ｇｌｕ−Ｐａｌ）残基を用い、２６位のＦｍｏｃ−Ｈｉｓ（ｔｒｔ）−ＯＨの代わりにＦｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨを使用し、工程１において４位のＦｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨの代わりにＦｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨを使用して、実施例４に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。工程６において、ＴＲＩＳ／ＨＣｌ緩衝剤（１Ｍ、ｐＨ７．５）をＮＨ４ＯＡｃ緩衝剤の代わりに使用して、環化を引き起こした。生成物の精製は、Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｐｏｌａｒｉｓ  Ｃ１８−Ａカラム（３０×２５０ｍｍ、１００Å、５μｍ）を使用して、室温で行った。移動相は、緩衝剤Ａ（水中０．１％ＴＦＡ）、及び５分かけて初期濃度２０％Ｂから中間濃度３５％Ｂ（４０ｍｐｍ）、そして４０分かけて最終濃度４５％Ｂ（４０ｍｐｍ）の範囲の緩衝剤Ｂ（ＭｅＣＮ中０．１％ＴＦＡ）の勾配溶出からなった。
【０３９２】
実施例２２：環状ＰＹＹ類似体配列番号２２の合成
１１位の代わりに３０位に配置されたＬｙｓ（ＮＨ−γ−Ｇｌｕ−Ｐａｌ）残基を用い、２６位のＦｍｏｃ−Ｈｉｓ（ｔｒｔ）−ＯＨの代わりにＦｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨを使用し、工程１において４位のＦｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨの代わりにＦｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−ＯＨを使用して、実施例４に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。工程６において、ＴＲＩＳ／ＨＣｌ緩衝剤（１Ｍ、ｐＨ７．５）をＮＨ４ＯＡｃ緩衝剤の代わりに使用して、環化を引き起こした。生成物の精製は、Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｐｏｌａｒｉｓ  Ｃ１８−Ａカラム（３０×２５０ｍｍ、１００Å、５μｍ）を使用して、室温で行った。移動相は、緩衝剤Ａ（水中０．１％ＴＦＡ）、及び５分かけて初期濃度２０％Ｂから中間濃度３３％Ｂ（４０ｍｐｍ）、そして４０分かけて最終濃度４３％Ｂ（４０ｍｐｍ）の範囲の緩衝剤Ｂ（ＭｅＣＮ中０．１％ＴＦＡ）の勾配溶出からなった。
【０３９３】
実施例２３：環状ＰＹＹ類似体配列番号２３の合成
α−トコフェリルオキシ酢酸（ＡｃＶｉｔＥ）（８）の代わりにオクタデカン二酸モノ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル（ＡｓｔａＴｅｃｈ，Ｉｎｃ．から入手可能）を使用し、工程２において５０℃で３０分間のＨＡＴＵ／ＤＩＥＡ及びＤＭＦの代わりにＮＭＰを溶媒として用いた結合プロトコルを使用し、工程２において、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ−ＯｔＢｕを結合する前に直列にＦｍｏｃ−ＯＥＧ−ＯＨの２つの単位を結合して、実施例１１に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。粗直鎖状ペプチドを、２０〜６０％Ｂの勾配を使用して、実施例１９に記載の修正に従って精製及び環化した。最終生成物の精製は、３６分かけて２０〜７０％Ｂ（３０ｍｐｍ）の勾配を使用して行った。
【０３９４】
実施例２４：環状ＰＹＹ類似体配列番号２４の合成
オクタデカン二酸モノ−ｔｅｒｔ−ブチルエステルの代わりに２０−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−２０オキソイコサン酸（Ｋｅｙ  Ｏｒｇａｎｉｃｓ，Ｉｎｃ．から入手可能）を使用して、実施例２３に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。粗直鎖状ペプチドを、２０〜６０％Ｂの勾配を使用して、実施例１９に記載の修正に従って精製及び環化した。最終生成物の精製は、３６分かけて２０〜６０％Ｂ（３０ｍｐｍ）の勾配を使用して行った。
【０３９５】
実施例２５：環状ＰＹＹ類似体配列番号２５の合成
α−トコフェリルオキシ酢酸（ＡｃＶｉｔＥ）（８）の代わりにステアリン酸を使用し、工程２において５０℃で３０分間のＨＡＴＵ／ＤＩＥＡ及びＤＭＦの代わりにＮＭＰを溶媒として用いた結合プロトコルを用いて、実施例１１に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。粗直鎖状ペプチドを、２０〜８０％Ｂの勾配を使用して、実施例１９に記載の修正に従って精製及び環化した。最終生成物の精製は、３６分かけて２０〜８０％Ｂ（３０ｍｐｍ）の勾配を使用して行った。
【０３９６】
実施例２６：環状ＰＹＹ類似体配列番号２６の合成
α−トコフェリルオキシ酢酸（ＡｃＶｉｔＥ）（８）の代わりにアラキジン酸を使用し、工程２において５０℃で３０分間のＨＡＴＵ／ＤＩＥＡ及びＤＭＦの代わりにＮＭＰを溶媒として用いた結合プロトコルを用いて、実施例１１に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。粗直鎖状ペプチドを、２０〜９０％Ｂの勾配を使用して、実施例１９に記載の修正に従って精製及び環化した。最終生成物の精製は、３６分かけて２０〜９０％Ｂ（３０ｍｐｍ）の勾配を使用して行った。
【０３９７】
実施例２７：環状ＰＹＹ類似体配列番号２７の合成
実施例２３に記載の手順に従うが、直列Ｆｍｏｃ−ＯＥＧ−ＯＨ結合後のＦｍｏｃ−Ｇｌｕ−ＯｔＢｕの結合を省略して、表題化合物を調製した。粗直鎖状ペプチドを、２０〜６０％Ｂの勾配を使用して、実施例１９に記載の修正に従って精製及び環化した。最終生成物の精製は、３６分かけて２０〜６０％Ｂ（３０ｍｐｍ）の勾配を使用して行った。
【０３９８】
実施例２８：環状ＰＹＹ類似体配列番号２８の合成
α−トコフェリルオキシ酢酸（ＡｃＶｉｔＥ）（８）の代わりにパルミチン酸を使用し、３位におけるＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨの結合を省略し、工程４（実施例９、工程２）においてｍ−ブロモメチル安息香酸の代わりにｐ−ブロモメチル安息香酸を使用して、実施例１１に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。粗直鎖状ペプチドを、２０〜６０％Ｂの勾配を使用して、実施例１９に記載の修正に従って精製及び環化した。最終生成物の精製は、３６分かけて２０〜６０％Ｂ（３０ｍｐｍ）の勾配を使用して行った。
【０３９９】
実施例２９：環状ＰＹＹ類似体配列番号２９の合成
α−トコフェリルオキシ酢酸（ＡｃＶｉｔＥ）（８）の代わりにパルミチン酸を使用し、３位のＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨの代わりにＦｍｏｃ−βＡｌａ−ＯＨを使用し、実施例１５に記載の修正を使用して、工程４（実施例９、工程２）においてｍ−ブロモメチル安息香酸の代わりにブロモ酢酸無水物を結合して、実施例１１に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。粗直鎖状ペプチドを、２０〜６０％Ｂの勾配を使用して、実施例１９に記載の修正に従って精製及び環化した。最終生成物の精製は、３６分かけて２０〜６０％Ｂ（３０ｍｐｍ）の勾配を使用して行った。
【０４００】
実施例３０：環状ＰＹＹ類似体配列番号３０の合成
α−トコフェリルオキシ酢酸（ＡｃＶｉｔＥ）（８）の代わりにパルミチン酸を使用し、３位のＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨの代わりにＦｍｏｃ−β−ＯＨを使用し、実施例１５に記載の修正を使用して、工程４（実施例９、工程２）においてｍ−ブロモメチル安息香酸の代わりにブロモ酢酸無水物を結合して、実施例１１に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。粗直鎖状ペプチドを、２０〜６０％Ｂの勾配を使用して、実施例１９に記載の修正に従って精製及び環化した。最終生成物の精製は、３６分かけて２０〜６０％Ｂ（３０ｍｐｍ）の勾配を使用して行った。
【０４０１】
実施例３１：環状ＰＹＹ類似体配列番号３１の合成
オクタデカン二酸モノ−ｔｅｒｔ−ブチルエステルの代わりにステアリン酸を使用して、実施例２３に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。粗直鎖状ペプチドを、２０〜６０％Ｂの勾配を使用して、実施例１９に記載の修正に従って精製及び環化した。最終生成物の精製は、３６分かけて２０〜６０％Ｂ（３０ｍｐｍ）の勾配を使用して行った。
【０４０２】
実施例３２：環状ＰＹＹ類似体配列番号３２の合成
工程２においてα−トコフェリルオキシ酢酸（ＡｃＶｉｔＥ）（８）の代わりにパルミチン酸を使用し、２６位のＦｍｏｃ−Ｈｉｓ（ｔｒｔ）−ＯＨの代わりにＦｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨを使用し、工程４（実施例９、工程１）において、４位のＦｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨの代わりにＦｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨを使用して、実施例１１に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。工程６において、ＴＲＩＳ／ＨＣｌ緩衝剤（１Ｍ、ｐＨ７．５）をＮＨ４ＯＡｃ緩衝剤の代わりに使用して、環化を引き起こした。生成物の精製は、Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｐｏｌａｒｉｓ  Ｃ１８−Ａカラム（３０×２５０ｍｍ、１００Å、５μｍ）を使用して、室温で行った。移動相は、緩衝剤Ａ（水中０．１％ＴＦＡ）、及び５分かけて初期濃度２０％Ｂから中間濃度３５％Ｂ（４０ｍｐｍ）、そして４０分かけて最終濃度４５％Ｂ（４０ｍｐｍ）の範囲の緩衝剤Ｂ（ＭｅＣＮ中０．１％ＴＦＡ）の勾配溶出からなった。
【０４０３】
実施例３３：環状ＰＹＹ類似体配列番号３３の合成
工程２においてα−トコフェリルオキシ酢酸（ＡｃＶｉｔＥ）（８）の代わりにパルミチン酸を使用し、工程４（実施例９、工程１）において、３４位のＦｍｏｃ−Ｇｌｎ（ｔｒｔ）−ＯＨの代わりにＦｍｏｃ−Ｎ（Ｍｅ）−Ｇｌｎ（ｔｒｔ）−ＯＨを使用して、実施例１１に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。この場合、結合は、ＮＭＰを溶媒として、及びＨＡＴＵ／ＤＩＥＡプロトコル（１時間、単一結合）を使用して、室温で行った。Ｆｍｏｃ−Ｎ（Ｍｅ）−Ｇｌｎ（ｔｒｔ）−ＯＨ及びＦｍｏｃ−Ａｒｇ（ｐｂｆ）−ＯＨを二重結合した。２段階Ｆｍｏｃ脱保護プロトコルを全体にわたって使用した（ＤＭＦ中２０％ピペリジン；室温；１０分、１５分）。粗直鎖状ペプチドを、２０〜７０％Ｂの勾配を使用して、実施例１９に記載の修正に従って精製及び環化した。最終生成物の精製は、３６分かけて２０〜７０％Ｂ（３０ｍｐｍ）の勾配を使用して行った。
【０４０４】
実施例３４：環状ＰＹＹ類似体配列番号３４の合成
α−トコフェリルオキシ酢酸（ＡｃＶｉｔＥ）（８）の代わりにパルミチン酸を使用し、３１位のＦｍｏｃ−ｈＣｙｓ（ｔｒｔ）−ＯＨの代わりにＦｍｏｃ−Ｃｙｓ（ｔｒｔ）−ＯＨを使用し、３位のＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨの代わりに６−Ｆｍｏｃ−アミノヘキサン酸を使用し、実施例１５に記載の修正を使用し、工程４（実施例９、工程２）においてｍ−ブロモメチル安息香酸の代わりにブロモ酢酸無水物を結合して、実施例１１に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。水性ＮａＨＣＯ３（２Ｎ）をＮＨ４ＯＡｃ緩衝剤の代わりに使用して、環化を引き起こした。生成物の精製は、Ｖａｒｉａｎ  Ｐｕｒｓｕｉｔ  ＸＲ  Ｃ１８カラム（３０×２５０ｍｍ、１００Å、５μｍ）を使用して、室温で行った。移動相は、緩衝剤Ａ（水中０．１％ＴＦＡ）、及び３６分かけて２０〜７０％Ｂ（３０ｍｐｍ）の範囲の緩衝剤Ｂ（ＭｅＣＮ中０．１％ＴＦＡ）の勾配溶出からなった。
【０４０５】
実施例３５：環状ＰＹＹ類似体配列番号３５の合成
以下の修正を加えて、実施例９に記載の手順に従って、表題化合物を調製した：本明細書で使用される充填されたＳｉｅｂｅｒ樹脂を調製するために、実施例１、工程１に記載の手順に従って、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＨの代わりにＦｍｏｃ−Ｎ−Ｍｅ−Ａｒｇ（ｐｂｆ）−ＯＨから調製したＦｍｏｃ−ｐｓｉ−［Ｎ−Ｍｅ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｎ（Ｂｏｃ）Ｔｙｒ（ｔＢｕ）］−ＯＨが、Ｆｍｏｃ−ｐｓｉ−［Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｎ（Ｂｏｃ）Ｔｙｒ（ｔＢｕ）］−ＯＨ（６）の代わりに使用され、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｐａｌ−Ｇｌｕ−ＯｔＢｕ）−ＯＨ（Ａｃｔｉｖｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅから）が、３０位のＬｅｕの代わりに使用され、ｍ−クロロメチル安息香酸が、工程２において、ｍ−ブロモメチル安息香酸の代わりに使用され、ＮＭＰを溶媒として使用して結合が室温で行われ、ＨＡＴＵ／ＤＩＥＡプロトコル（１時間、単一結合）が使用され、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（ｐｂｆ）−ＯＨが二重結合された。２段階Ｆｍｏｃ脱保護プロトコルを全体にわたって使用した（ＤＭＦ中２０％ピペリジン；室温；１０分、１５分）。粗直鎖状ペプチドを、２０〜７０％Ｂの勾配を使用して、実施例１９に記載の修正に従って精製及び環化した。最終生成物の精製は、３６分かけて２０〜７０％Ｂ（３０ｍｐｍ）の勾配を使用して行った。
【０４０６】
実施例３６：環状ＰＹＹ類似体配列番号３６の合成
３位のＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨの代わりにＦｍｏｃ−βＡｌａ−ＯＨを使用し、実施例１５に記載の修正を使用して、工程４（実施例９、工程２）においてｍ−ブロモメチル安息香酸の代わりにブロモ酢酸無水物を結合して、実施例３５に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。実施例１９の修正されたワークアップは省略した。Ｆｍｏｃ−βＡｌａ−ＯＨをマイクロ波条件下で５０℃で２０分間結合した。飽和水性ＮａＨＣＯ３をＮＨ４ＯＡｃ緩衝剤の代わりに使用して、環化を引き起こした。生成物の精製は、Ｖａｒｉａｎ  Ｐｕｒｓｕｉｔ  ＸＲ  Ｃ１８カラム（３０×２５０ｍｍ、１００Å、５μｍ）を使用して、室温で行った。移動相は、緩衝剤Ａ（水中０．１％ＴＦＡ）、及び３６分かけて２０〜７０％Ｂ（３０ｍｐｍ）の範囲の緩衝剤Ｂ（ＭｅＣＮ中０．１％ＴＦＡ）の勾配溶出からなった。
【０４０７】
実施例３７：環状ＰＹＹ類似体配列番号３７の合成
３１位のＦｍｏｃ−ｈＣｙｓ（ｔｒｔ）−ＯＨの代わりにＦｍｏｃ−Ｃｙｓ（ｔｒｔ）−ＯＨを使用し、３０位のＦｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨの代わりにＦｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｐａｌ−Ｇｌｕ−ＯｔＢｕ）−ＯＨ（Ａｃｔｉｖｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅから）を使用して、実施例９に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。加えて、Ｆｍｏｃ−Ａｂｕ−ＯＨが、工程１において２位の配列上に付加され、ブロモ酢酸無水物との結合が、実施例１５に記載の修正を使用して、工程２においてｍ−ブロモメチル安息香酸の代わりに使用された。飽和水性ＮａＨＣＯ３を工程３においてＮＨ４ＯＡｃ緩衝剤の代わりに使用して、環化を引き起こした。生成物の精製は、Ｖａｒｉａｎ  Ｐｕｒｓｕｉｔ  ＸＲ  Ｃ１８カラム（３０×２５０ｍｍ、１００Å、５μｍ）を使用して、室温で行った。移動相は、緩衝剤Ａ（水中０．１％ＴＦＡ）、及び３６分かけて２０〜７０％Ｂ（３０ｍｐｍ）の範囲の緩衝剤Ｂ（ＭｅＣＮ中０．１％ＴＦＡ）の勾配溶出からなった。
【０４０８】
実施例３８：環状ＰＹＹ類似体配列番号３８の合成
以下の修正を加えて、実施例３５に記載の手順に従って、表題化合物を調製した：Ｆｍｏｃ−βＡｌａ−ＯＨが、５０℃で２０分間、マイクロ波条件を使用して工程１に従い２位の配列上に付加され、実施例１５に記載の修正を使用して、工程２においてブロモ酢酸無水物との結合がｍ−ブロモメチル安息香酸の代わりに使用された。飽和水性ＮａＨＣＯ３をＮＨ４ＯＡｃ緩衝剤の代わりに使用して、環化を引き起こした。生成物の精製は、Ｖａｒｉａｎ  Ｐｕｒｓｕｉｔ  ＸＲ  Ｃ１８カラム（３０×２５０ｍｍ、１００Å、５μｍ）を使用して、室温で行った。移動相は、緩衝剤Ａ（水中０．１％ＴＦＡ）、及び３６分かけて２０〜８０％Ｂ（３０ｍｐｍ）の範囲の緩衝剤Ｂ（ＭｅＣＮ中０．１％ＴＦＡ）の勾配溶出からなった。
【０４０９】
実施例３９：環状ＰＹＹ類似体配列番号３９の合成
工程２において、α−トコフェリルオキシ酢酸（ＡｃＶｉｔＥ）（８）の代わりにアラキジン酸を使用して、実施例１１に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−ＯＨが、工程４（実施例９、工程１）において、４位のＦｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨの代わりに使用され、ｍ−クロロメチル安息香酸が、工程４（実施例９、工程２）において、ｍ−ブロモメチル安息香酸の代わりに使用された。６０％ＥｔＯＨ／Ｈ２ＯをＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏの代わりに溶媒として使用し、飽和水性ＮａＨＣＯ３を工程４においてＮＨ４ＯＡｃ緩衝剤の代わりに使用して、環化を引き起こした。生成物の精製は、Ｗａｔｅｒｓ  ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｃ１８  ＯＢＤカラム（５０×２５０ｍｍ、５μｍ）を使用して、室温で行った。移動相は、緩衝剤Ａ（水中１０ｍＭ  ＮＨ４ＯＨ、ｐＨ約９）、及び５分かけて初期濃度２０％Ｂから中間濃度２５％Ｂ（１００ｍｐｍ）、そして４０分かけて最終濃度４０％Ｂ（１００ｍｐｍ）の範囲の緩衝剤Ｂ（ＭｅＣＮ）の勾配溶出からなった。
【０４１０】
実施例４０：環状ＰＹＹ類似体配列番号４０の合成
１．（ＨＣＣＨ（ＣＨ２）２ＣＯＮＨ）−ＩＫＰＥＡＰＧＥＤＡＳＰＥＥＬＮＲＹＹＡＳＬＲＨＹＬＮＫ（Ｄｄｅ）−（アジド−ｎｏｒＬｅｕ）−ＴＲＱ（ｐｓｉ−Ｒ３５Ｙ３６）−Ｓｉｅｂｅｒ樹脂の合成
実施例１、工程２からの事前充填された（ｐｓｉ−Ｒ３５，Ｙ３６）−Ｓｉｅｂｅｒ樹脂（０．１ｍｍｏｌ）上へのアミノ酸延長は、溶媒としてＮＭＰ、５倍過剰の保護されたアミノ酸、及びＨＡＴＵ／ＤＩＥＡプロトコル（１時間、単一結合）を使用して、室温で行われた。Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（ｐｂｆ）−ＯＨ及びＦｍｏｃ−Ｈｉｓ（ｔｒｔ）−ＯＨを二重結合した。２段階Ｆｍｏｃ脱保護プロトコルを全体にわたって使用した（ＤＭＦ中２０％ピペリジン；室温；１０分、１５分）。
【０４１１】
２．（ＨＣＣＨ（ＣＨ２）２ＣＯＮＨ）−ＩＫＰＥＡＰＧＥＤＡＳＰＥＥＬＮＲＹＹＡＳＬＲＨＹＬＮＫ（ＮＨ２）−（アジド−ｎｏｒＬｅｕ）−ＴＲＱ（ｐｓｉ−Ｒ３５Ｙ３６）−Ｓｉｅｂｅｒ樹脂の合成
上記の樹脂を、室温で２分間、ＤＭＦ中２％ヒドラジン（１２ｍＬ／０．２ｍｍｏｌスケール）で処理し、次いで混合物を排出した。この手順を約４回繰り返し、その後、樹脂をＤＭＦで、次いでＤＣＭで十分に洗浄した。
【０４１２】
３．（ＨＣＣＨ（ＣＨ２）２ＣＯＮＨ）−ＩＫＰＥＡＰＧＥＤＡＳＰＥＥＬＮＲＹＹＡＳＬＲＨＹＬＮＫ（（ＯＥＧ）２−γ−Ｇｌｕ−Ｐａｌ）−（アジド−ｎｏｒＬｅｕ）−ＴＲＱ（ｐｓｉ−Ｒ３５Ｙ３６）−Ｓｉｅｂｅｒ樹脂の合成
室温で１．５時間、ＨＢＴＵ／ＤＩＥＡプロトコルを使用して、上記樹脂を、（Ｓ）−１０，１９−ジオキソ−２２−パルミトアミド−３，６，１２，１５−テトラオキサ−９，１８−ジアザトリコサン二酸（５当量）と結合させた［工程Ｇにおいて１８−ｔｅｒｔ−ブトキシ−１８−オキソオクタデカン酸の代わりにパルミチン酸を使用することにより、中間体３の合成について記載した手順に従って調製された］。樹脂を排出し、ＤＭＦ及びＤＣＭで十分に洗浄した。
【０４１３】
４．（ＨＣＣＨ（ＣＨ２）２ＣＯＮＨ）−ＩＫＰＥＡＰＧＥＤＡＳＰＥＥＬＮＲＹＹＡＳＬＲＨＹＬＮＫ（（ＯＥＧ）２−γ−Ｇｌｕ−Ｐａｌ）−（アジド−ｎｏｒＬｅｕ）−ＴＲＱ（ｐｓｉ−Ｒ３５Ｙ３６）−ＣＯＮＨ２の合成
乾燥させた樹脂を、ＤＣＭ（２０ｍＬ）中２％ＴＦＡの溶液で処理し、２０分間混合した後、濾過した。各処理に新しいカクテルを使用して、この処理を更に２回繰り返した。次いで、合わせた濾液を合わせ、濃縮して、黄色の発泡体としての保護された粗ペプチドを得た。この発泡体を、室温で２．５時間、２０ｍＬの切断カクテル（ＴＦＡ／Ｈ２Ｏ／ＴＩＰＳ＝９５／２．５／２．５）で処理し、次いで窒素流下で約２．５ｍＬの体積に濃縮した。次いで、冷エーテル（４０ｍＬ）を添加してペプチドを沈殿させ、混合物を遠心分離し（５分間、５０００ｒｐｍ）、デカントした。このプロセスを更に２回繰り返して、オフホワイト色の粉末としての粗ペプチドを得た。
【０４１４】
あるいは、樹脂を、ＤＣＭ中１〜２％ＴＦＡで前処理することなく、切断カクテルで処理して、完全に脱保護されたペプチドを直接得た。
【０４１５】
粗ペプチドを、Ｖａｒｉａｎ  Ｐｕｒｓｕｉｔ  ＸＲ  Ｃ１８カラム（３０×２５０ｍｍ、１００Å、５μｍ）を使用して逆相分取ＨＰＬＣにより精製した。移動相は、緩衝剤Ａ（水中０．１％ＴＦＡ）、及び３６分かけて２０〜７０％Ｂの範囲の緩衝剤Ｂ（ＭｅＣＮ中０．１％ＴＦＡ）の勾配溶出からなった。ＵＶ検出は、２２０及び２５４ｎｍで監視された。生成物含有画分は、上記と同じカラムタイプ（４．６×２５０ｍｍ、５μｍ）を使用して、Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００  ＨＰＬＣシステムで分析ＨＰＬＣによって分析された。純粋な画分を合わせ、次いで凍結乾燥させて、綿様の固体として生成物を得た。１６．８７分（ＬＣ：Ａｔｌａｎｔｉｓ  Ｔ３  Ｃ１８カラム、５μｍ、４．６×２５０ｍｍ、１．０ｍＬ／分、３０〜６０％勾配）での生成物のピークに関してＬＣＭＳ：１２１１．８（Ｍ＋４Ｈ）／４，１６１５．４（Ｍ＋３Ｈ）／３及び２４２２．９（Ｍ＋２Ｈ）／２。
【０４１６】
５．環状ＰＹＹ類似体配列番号４０
１ｍＬのＨ２Ｏ中５．１ｍｇのＣｕＳＯ４を調製する。３ｍＬのＥｔＯＨ中１０．４ｍｇのＴＢＴＡを調製する。４００μＬのＣｕＳＯ４溶液及び３ｍＬのＴＢＴＡ溶液を予備混合する。２ｍＬのＨ２Ｏ中１３ｍｇのアスコルビン酸Ｎａを調製する。
【０４１７】
４ｍＬのＨＥＰＥＳ（０．１Ｍ、ｐＨ７．４）中の工程４で精製されたアジド含有ペプチド（３７ｍｇ）の溶液に、１．７ｍＬの予備混合したＣｕＳＯ４／ＴＢＴＡ溶液を添加し、続いて１ｍＬのアスコルビン酸Ｎａ溶液を添加した。反応溶液が透明になるまでＥｔＯＨ／Ｈ２Ｏ比を調整する。混合物を室温で３時間撹拌し、ＨＰＬＣによって監視した。３０分後、反応は完了した。混合物をｐＨ４に調整し、逆相分取ＨＰＬＣにより精製した。精製は、Ｖａｒｉａｎ  Ｐｕｒｓｕｉｔ  ＸＲ  Ｃ１８カラム（３０×２５０ｍｍ、１００Å、５μｍ）を使用して行った。移動相は、緩衝剤Ａ（水中０．１％ＴＦＡ）、及び３６分かけて２０〜６０％Ｂの範囲の緩衝剤Ｂ（ＭｅＣＮ中０．１％ＴＦＡ）の勾配溶出からなった。ＵＶ検出は、２２０及び２５４ｎｍで監視された。生成物含有画分は、上記と同じカラムタイプ（４．６×２５０ｍｍ、５μｍ）を使用して、Ａｇｉｌｅｎｔ  １１００  ＨＰＬＣシステムで分析ＨＰＬＣによって分析された。純粋な画分を合わせ、次いで凍結乾燥させて、綿様の固体として生成物を得た。
【０４１８】
実施例４１：環状ＰＹＹ類似体配列番号４１の合成
工程３において、（Ｓ）−１０，１９−ジオキソ−２２−パルミトアミド−３，６，１２，１５−テトラオキサ−９，１８−ジアザトリコサン二酸の代わりに、Ｌ−グルタミン酸，Ｎ−（１−オキソヘキサデシル）−，１−（１，１−ジメチルエチル）エステルを使用して、実施例４０に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。
【０４１９】
実施例４２：環状ＰＹＹ類似体配列番号４２の合成
工程３において、（Ｓ）−１０，１９−ジオキソ−２２−パルミトアミド−３，６，１２，１５−テトラオキサ−９，１８−ジアザトリコサン二酸の代わりに、（Ｓ）−２２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−４３，４３−ジメチル−１０，１９，２４，４１−テトラオキソ−３，６，１２，１５，４２−ペンタオキサ−９，１８，２３−トリアザテトラテトラコンタン−１−酸（１６）（中間体２）を使用して、実施例４０に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。
【０４２０】
実施例４３環状ＰＹＹ類似体配列番号４３の合成
１．（Ａｌｌｏｃ）Ｌｙｓ（（ＯＥＧ）２−γ−Ｇｌｕ−ＮＨ２）−（ｈＣ）−ＴＲＱ（ｐｓｉ−Ｒ３５Ｙ３６）−Ｓｉｅｂｅｒ樹脂の合成
実施例１、工程２からの事前充填された（ｐｓｉ−Ｒ３５，Ｙ３６）−Ｓｉｅｂｅｒ樹脂（０．１ｍｍｏｌ）上へのアミノ酸延長は、溶媒としてＮＭＰ、５倍過剰の保護されたアミノ酸、及びＨＡＴＵ／ＤＩＥＡプロトコル（１時間、単一結合）を使用して、室温で行われた。Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（ｐｂｆ）−ＯＨが二重結合された。２段階Ｆｍｏｃ脱保護プロトコルを全体にわたって使用した（ＤＭＦ中２０％ピペリジン；室温；１０分、１５分）。
【０４２１】
２．（Ａｌｌｏｃ）Ｌｙｓ（（ＯＥＧ）２−γ−Ｇｌｕ−Ｐａｌ）−（ｈＣ）−ＴＲＱ（ｐｓｉ−Ｒ３５Ｙ３６）−Ｓｉｅｂｅｒ樹脂の合成
５０℃で２０〜３０分間、ＨＡＴＵ／ＤＩＥＡ及びＮＭＰを溶媒として用いるマイクロ波条件を使用して、工程１からの樹脂上にパルミチン酸を結合させた。
【０４２２】
３．（Ｈ２Ｎ）Ｌｙｓ（（ＯＥＧ）２−−γ−Ｇｌｕ−Ｐａｌ）−（ｈＣ）−ＴＲＱ（ｐｓｉ−Ｒ３５Ｙ３６）−Ｓｉｅｂｅｒ樹脂の合成
実施例１、工程４に記載の手順に従って、上記樹脂のａｌｌｏｃ保護基を除去した。
【０４２３】
４．環状ＰＹＹ類似体配列番号４３
工程２においてｍ−ブロモメチル安息香酸の代わりにｍ−クロロメチル安息香酸を使用して、実施例９、工程１〜３に記載の手順に従って、上記の樹脂から表題化合物を調製した。粗直鎖状ペプチドを、２０〜６０％Ｂの勾配を使用して、実施例１９に記載の修正に従って精製及び環化した。最終生成物の精製は、３６分かけて２０〜６０％Ｂ（３０ｍｐｍ）の勾配を使用して行った。
【０４２４】
実施例４４環状ＰＹＹ類似体配列番号４４の合成
直列Ｆｍｏｃ−ＯＥＧ−ＯＨ単位及びＦｍｏｃ−Ｇｌｕ−ＯｔＢｕ単位が工程１の代わりに工程２において組み込まれるように修正された、実施例４３に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。オクタデカン二酸モノ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル（ＡｓｔａＴｅｃｈ，Ｉｎｃ．）を、工程２においてパルミチン酸の代わりに使用し、リンカー脂質配列を３０位の代わりに１１位に配置した。粗直鎖状ペプチドを、２０〜７０％Ｂの勾配を使用して、実施例１９に記載の修正に従って精製及び環化した。最終生成物の精製は、３６分かけて２０〜７０％Ｂ（３０ｍｐｍ）の勾配を使用して行った。
【０４２５】
実施例４５環状ＰＹＹ類似体配列番号４５の合成
Ｆｍｏｃ−ｄＰＥＧ２４−カルボン酸を、直列Ｆｍｏｃ−ＯＥＧ−ＯＨ単位の代わりに使用し、パルミチン酸と共に工程２に組み込まれるように修正された、実施例４３に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。リンカー−脂質配列を３０位の代わりに１１位に配置した。粗直鎖状ペプチドを、２０〜９０％Ｂの勾配を使用して、実施例１９に記載の修正に従って精製及び環化した。最終生成物の精製は、３６分かけて２０〜９０％Ｂ（３０ｍｐｍ）の勾配を使用して行った。
【０４２６】
実施例４６環状ＰＹＹ類似体配列番号４６の合成
３０位のＬｅｕの代わりにＦｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｐａｌ−Ｇｌｕ−ＯｔＢｕ）−ＯＨ（Ａｃｔｉｖｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅから）を使用して、実施例９に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。加えて、Ｆｍｏｃ−βＡｌａ−ＯＨが、５０℃で２０分間、マイクロ波条件を使用して工程１に従い、２位の配列上に付加され、ブロモ酢酸無水物との結合が、実施例１５に記載の修正を使用して、工程２においてｍ−ブロモメチル安息香酸の代わりに使用された。固体粗直鎖状ペプチドを、２０〜７０％Ｂの勾配を使用して、実施例１９に記載の修正に従って精製及び環化した。最終生成物の精製は、３６分かけて２０〜７０％Ｂ（３０ｍｐｍ）の勾配を使用して行った。
【０４２７】
実施例４７環状ＰＹＹ類似体配列番号４７の合成
１１位の代わりに７位にリンカー−脂質配列を配置して、実施例４４に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。生成物の精製は、Ｖａｒｉａｎ  Ｐｕｒｓｕｉｔ  ＸＲ  Ｃ１８カラム（３０×２５０ｍｍ、１００Å、５μｍ）を使用して、室温で行った。粗直鎖状ペプチドを、２０〜６０％Ｂの勾配を使用して、実施例１９に記載の修正に従って精製及び環化した。最終生成物の精製は、３６分かけて２０〜６０％Ｂ（３０ｍｐｍ）の勾配を使用して行った。
【０４２８】
実施例４８環状ＰＹＹ類似体配列番号４８の合成
工程２においてパルミチン酸の代わりにオクタデカン二酸モノ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル（ＡｓｔａＴｅｃｈ，Ｉｎｃ．）を使用し、３０分の結合時間で、３０位の代わりに２２位にリンカー−脂質配列を配置して、実施例４３に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。粗直鎖状ペプチドを、２０〜７０％Ｂの勾配を使用して、実施例１９に記載の修正に従って精製及び環化した。最終生成物の精製は、３６分かけて２０〜７０％Ｂ（３０ｍｐｍ）の勾配を使用して行った。
【０４２９】
実施例４９環状ＰＹＹ類似体配列番号４９の合成
工程２においてα−トコフェリルオキシ酢酸（ＡｃＶｉｔＥ）（８）の代わりに１６−テトラヒドロピラン−２−イルオキシパルミチン酸を使用し、工程４（実施例９、工程２）においてｍ−ブロモメチル安息香酸の代わりにｍ−クロロメチル安息香酸を使用して、実施例１１に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。６０％ＥｔＯＨ／Ｈ２ＯをＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏの代わりに溶媒として使用し、飽和水性ＮａＨＣＯ３を工程４においてＮＨ４ＯＡｃ緩衝剤の代わりに使用して、環化を引き起こした。生成物の精製は、Ｗａｔｅｒｓ  ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｃ１８  ＯＢＤカラム（５０×２５０ｍｍ、５μｍ）を使用して、室温で行った。移動相は、緩衝剤Ａ（水中１０ｍＭ  ＮＨ４ＯＨ、ｐＨ約９）、及び５分かけて初期濃度２０％Ｂから中間濃度１０％Ｂ（１００ｍｐｍ）、そして４０分かけて最終濃度３０％Ｂ（１００ｍｐｍ）の範囲の緩衝剤Ｂ（ＭｅＣＮ）の勾配溶出からなった。
【０４３０】
実施例５０環状ＰＹＹ類似体配列番号５０の合成
実施例４８に記載の手順に従い、３０位の代わりに２３位にリンカー−脂質配列を配置して、表題化合物を調製した。
【０４３１】
実施例５１環状ＰＹＹ類似体配列番号５１の合成
３０位のＦｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨの代わりにＦｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｐａｌ−Ｇｌｕ−ＯｔＢｕ）−ＯＨ（Ａｃｔｉｖｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅから）を使用し、工程１において４位のＦｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨの代わりにＦｍｏｃ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−ＯＨを使用して、実施例９に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。６０％ＥｔＯＨ／Ｈ２ＯをＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏの代わりに溶媒として使用し、飽和水性ＮａＨＣＯ３を工程４においてＮＨ４ＯＡｃ緩衝剤の代わりに使用して、環化を引き起こした。生成物の精製は、Ｗａｔｅｒｓ  ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｃ１８  ＯＢＤカラム（５０×２５０ｍｍ、５μｍ）を使用して、室温で行った。移動相は、緩衝剤Ａ（水中１０ｍＭ  ＮＨ４ＯＨ、ｐＨ約９）、及び５分かけて初期濃度１０％Ｂから中間濃度２０％Ｂ（１００ｍｐｍ）、そして４０分かけて最終濃度３０％Ｂ（１００ｍｐｍ）の範囲の緩衝剤Ｂ（ＭｅＣＮ）の勾配溶出からなった。不純な画分を、５分かけて初期濃度１０％Ｂから中間濃度２０％Ｂ（１００ｍｐｍ）、そして６０分かけて最終濃度３０％Ｂ（１００ｍｐｍ）で構成される勾配を使用して再クロマトグラフした。
【０４３２】
実施例５２環状ＰＹＹ類似体配列番号５２の合成
Ｆｍｏｃ−ｄＰＥＧ１２−カルボン酸を、直列Ｆｍｏｃ−ＯＥＧ−ＯＨ単位の代わりに使用し、それを、工程２においてＦｍｏｃ−Ｇｌｕ−ＯｔＢｕ及びパルミチン酸と共に組み込んで、実施例４３に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。リンカー−脂質配列を３０位の代わりに１１位に配置した。粗直鎖状ペプチドを、２０〜７０％Ｂの勾配を使用して、実施例１９に記載の修正に従って精製及び環化した。最終生成物の精製は、３６分かけて２０〜７０％Ｂ（３０ｍｐｍ）の勾配を使用して行った。
【０４３３】
実施例５３環状ＰＹＹ類似体配列番号５３の合成
Ｆｍｏｃ−ｄＰＥＧ１２−カルボン酸の代わりに直列の４単位のＦｍｏｃ−ＯＥＧ−ＯＨを使用して、実施例５２に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。
【０４３４】
実施例５４環状ＰＹＹ類似体配列番号５４の合成
２つの代わりに直列の２単位のＦｍｏｃ−ＯＥＧ−ＯＨを配置して、実施例５３に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。
【０４３５】
実施例５５環状ＰＹＹ類似体配列番号５５の合成
３０位の代わりに２３位にリンカー−脂質配列を配置して、実施例４３に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。粗直鎖状ペプチドを、２０〜７０％Ｂの勾配を使用して、実施例１９に記載の修正に従って精製及び環化した。最終生成物の精製は、３６分かけて２０〜７０％Ｂ（３０ｍｐｍ）の勾配を使用して行った。
【０４３６】
実施例５６：環状ＰＹＹ類似体配列番号５６の合成
工程２においてα−トコフェリルオキシ酢酸（ＡｃＶｉｔＥ）（８）の代わりに（４’−クロロビフェニル−４−イル）酢酸を使用し、工程４（実施例９、工程２）においてｍ−ブロモメチル安息香酸の代わりにｍ−クロロメチル安息香酸を使用して、実施例１１に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。６０％ＥｔＯＨ／Ｈ２ＯをＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏの代わりに溶媒として使用し、飽和水性ＮａＨＣＯ３を工程４においてＮＨ４ＯＡｃ緩衝剤の代わりに使用して、環化を引き起こした。生成物の精製は、Ｗａｔｅｒｓ  ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｃ１８  ＯＢＤカラム（５０×２５０ｍｍ、５μｍ）を使用して、室温で行った。移動相は、緩衝剤Ａ（水中１０ｍＭ  ＮＨ４ＯＨ、ｐＨ約９）、及び４０分かけて１０〜２８％Ｂ（１００ｍｐｍ）の範囲の緩衝剤Ｂ（ＭｅＣＮ）の勾配溶出からなった。
【０４３７】
実施例５７：環状ＰＹＹ類似体配列番号５７の合成
工程２においてα−トコフェリルオキシ酢酸（ＡｃＶｉｔＥ）（８）の代わりに３−［（２，４−ジクロロフェノキシ）フェン−４−イル］プロピオン酸を使用し、工程４（実施例９、工程２）においてｍ−ブロモメチル安息香酸の代わりにｍ−クロロメチル安息香酸を使用して、実施例１１に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。６０％ＥｔＯＨ／Ｈ２ＯをＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏの代わりに溶媒として使用し、飽和水性ＮａＨＣＯ３を工程４においてＮＨ４ＯＡｃ緩衝剤の代わりに使用して、環化を引き起こした。生成物の精製は、Ｗａｔｅｒｓ  ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｃ１８  ＯＢＤカラム（５０×２５０ｍｍ、５μｍ）を使用して、室温で行った。移動相は、緩衝剤Ａ（水中１０ｍＭ  ＮＨ４ＯＨ、ｐＨ約９）、及び４０分かけて１０〜３０％Ｂ（８０ｍｐｍ）の範囲の緩衝剤Ｂ（ＭｅＣＮ）の勾配溶出からなった。生成物含有画分を合わせ、ＴＦＡで酸性化し、濃縮し、Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｐｏｌａｒｉｓ  Ｃ１８−Ａカラム（３０×２５０ｍｍ、１００Å、５μｍ）上で、室温で再クロマトグラフした。移動相は、緩衝剤Ａ（水中０．１％ＴＦＡ）、及び４５分かけて初期濃度２０％Ｂから中間濃度１５％Ｂ（４０ｍｐｍ）、そして最終濃度４５％Ｂ（４０ｍｐｍ）の範囲の緩衝剤Ｂ（ＭｅＣＮ中０．１％ＴＦＡ）の勾配溶出からなった。
【０４３８】
実施例５８：環状ＰＹＹ類似体配列番号５８の合成
工程２においてα−トコフェリルオキシ酢酸（ＡｃＶｉｔＥ）（８）の代わりに１１−（４−フルオロフェニル｝ウンデカン酸を使用し、工程４（実施例９、工程２）においてｍ−ブロモメチル安息香酸の代わりにｍ−クロロメチル安息香酸を使用して、実施例１１に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。６０％ＥｔＯＨ／Ｈ２ＯをＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏの代わりに溶媒として使用し、飽和水性ＮａＨＣＯ３を工程４においてＮＨ４ＯＡｃ緩衝剤の代わりに使用して、環化を引き起こした。生成物の精製は、Ｗａｔｅｒｓ  ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｃ１８  ＯＢＤカラム（５０×２５０ｍｍ、５μｍ）を使用して、室温で行った。移動相は、緩衝剤Ａ（水中１０ｍＭ  ＮＨ４ＯＨ、ｐＨ約９）、及び４０分かけて１５〜３５％Ｂ（１００ｍｐｍ）の範囲の緩衝剤Ｂ（ＭｅＣＮ）の勾配溶出からなった。
【０４３９】
実施例５９：環状ＰＹＹ類似体配列番号５９の合成
工程２を省略し、工程１にパルミチン酸結合を組み込んで、実施例４３に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。リンカー−脂質配列を１１位の代わりに２２位に配置した。粗直鎖状ペプチドを、２０〜７０％Ｂの勾配を使用して、実施例１９に記載の修正に従って精製及び環化した。最終生成物の精製は、３６分かけて２０〜７０％Ｂ（３０ｍｐｍ）の勾配を使用して行った。
【０４４０】
実施例６０：環状ＰＹＹ類似体配列番号６０の合成
４つの代わりに直列の２つのＦＭＯＣ−ＯＥＧ−ＯＨ単位を組み込み、１１位の代わりに７位にリンカー−脂質配列を配置して、実施例５３に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。粗直鎖状ペプチドを、２０〜８０％Ｂの勾配を使用して、実施例１９に記載の修正に従って精製及び環化した。最終生成物の精製は、３６分かけて２０〜８０％Ｂ（３０ｍｐｍ）の勾配を使用して行った。
【０４４１】
実施例６１：環状ＰＹＹ類似体配列番号６１の合成
工程２においてα−トコフェリルオキシ酢酸（ＡｃＶｉｔＥ）（８）の代わりに１１−［（４−トリフルオロメチル）フェニル｝ウンデカン酸を使用し、工程４（実施例９、工程２）においてｍ−ブロモメチル安息香酸の代わりにｍ−クロロメチル安息香酸を使用して、実施例１１に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。６０％ＥｔＯＨ／Ｈ２ＯをＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏの代わりに溶媒として使用し、飽和水性ＮａＨＣＯ３を工程４においてＮＨ４ＯＡｃ緩衝剤の代わりに使用して、環化を引き起こした。生成物の精製は、Ｗａｔｅｒｓ  ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｃ１８  ＯＢＤカラム（５０×２５０ｍｍ、５μｍ）を使用して、室温で行った。移動相は、緩衝剤Ａ（水中１０ｍＭ  ＮＨ４ＯＨ、ｐＨ約９）、及び４０分かけて１５〜３５％Ｂ（１００ｍｐｍ）の範囲の緩衝剤Ｂ（ＭｅＣＮ）の勾配溶出からなった。
【０４４２】
実施例６２：環状ＰＹＹ類似体配列番号６２の合成
工程２においてα−トコフェリルオキシ酢酸（ＡｃＶｉｔＥ）（８）の代わりに１１，１１，１１−トリフルオロウンデカン酸を使用し、工程４（実施例９、工程２）においてｍ−ブロモメチル安息香酸の代わりにｍ−クロロメチル安息香酸を使用して、実施例１１に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。６０％ＥｔＯＨ／Ｈ２ＯをＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏの代わりに溶媒として使用し、飽和水性ＮａＨＣＯ３を工程４においてＮＨ４ＯＡｃ緩衝剤の代わりに使用して、環化を引き起こした。生成物の精製は、Ｗａｔｅｒｓ  ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｃ１８  ＯＢＤカラム（５０×２５０ｍｍ、５μｍ）を使用して、室温で行った。移動相は、緩衝剤Ａ（水中１０ｍＭ  ＮＨ４ＯＨ、ｐＨ約９）、及び４０分かけて１０〜２８％Ｂ（１００ｍｐｍ）の範囲の緩衝剤Ｂ（ＭｅＣＮ）の勾配溶出からなった。
【０４４３】
実施例６３：環状ＰＹＹ類似体配列番号６３の合成
工程２においてα−トコフェリルオキシ酢酸（ＡｃＶｉｔＥ）（８）の代わりに１５，１５，１５−トリフルオロペンタデカン酸を使用し、工程４（実施例９、工程２）においてｍ−ブロモメチル安息香酸の代わりにｍ−クロロメチル安息香酸を使用して、実施例１１に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。６０％ＥｔＯＨ／Ｈ２ＯをＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏの代わりに溶媒として使用し、飽和水性ＮａＨＣＯ３を工程４においてＮＨ４ＯＡｃ緩衝剤の代わりに使用して、環化を引き起こした。生成物の精製は、Ｗａｔｅｒｓ  ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｃ１８  ＯＢＤカラム（５０×２５０ｍｍ、５μｍ）を使用して、室温で行った。移動相は、緩衝剤Ａ（水中１０ｍＭ  ＮＨ４ＯＨ、ｐＨ約９）、及び４０分かけて１５〜３０％Ｂ（１００ｍｐｍ）の範囲の緩衝剤Ｂ（ＭｅＣＮ）の勾配溶出からなった。
【０４４４】
実施例６４：環状ＰＹＹ類似体配列番号６４の合成
工程２においてα−トコフェリルオキシ酢酸（ＡｃＶｉｔＥ）（８）の代わりに１６−エトキシパルミチン酸を使用し、工程４（実施例９、工程２）においてｍ−ブロモメチル安息香酸の代わりにｍ−クロロメチル安息香酸を使用して、実施例１１に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。６０％ＥｔＯＨ／Ｈ２ＯをＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏの代わりに溶媒として使用し、飽和水性ＮａＨＣＯ３を工程４においてＮＨ４ＯＡｃ緩衝剤の代わりに使用して、環化を引き起こした。生成物の精製は、Ｗａｔｅｒｓ  ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｃ１８  ＯＢＤカラム（５０×２５０ｍｍ、５μｍ）を使用して、室温で行った。移動相は、緩衝剤Ａ（水中１０ｍＭ  ＮＨ４ＯＨ、ｐＨ約９）、及び４０分かけて１５〜３０％Ｂ（１００ｍｐｍ）の範囲の緩衝剤Ｂ（ＭｅＣＮ）の勾配溶出からなった。
【０４４５】
実施例６５：環状ＰＹＹ類似体配列番号６５の合成
工程２においてα−トコフェリルオキシ酢酸（ＡｃＶｉｔＥ）（８）の代わりに１３，１３，１４，１４，１５，１５，１６，１６，１６−Ｄ９−パルミチン酸（Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ  Ｉｓｏｔｏｐｅｓ）を使用し、工程４（実施例９、工程２）においてｍ−ブロモメチル安息香酸の代わりにｍ−クロロメチル安息香酸を使用して、実施例１１に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。６０％ＥｔＯＨ／Ｈ２ＯをＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏの代わりに溶媒として使用し、飽和水性ＮａＨＣＯ３を工程４においてＮＨ４ＯＡｃ緩衝剤の代わりに使用して、環化を引き起こした。生成物の精製は、Ｗａｔｅｒｓ  ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｃ１８  ＯＢＤカラム（５０×２５０ｍｍ、５μｍ）を使用して、室温で行った。移動相は、緩衝剤Ａ（水中１０ｍＭ  ＮＨ４ＯＨ、ｐＨ約９）、及び５分かけて１５〜２０％Ｂ（１００ｍｐｍ）から、そして４０分かけて３５％Ｂ（１００ｍｐｍ）の範囲の緩衝剤Ｂ（ＭｅＣＮ）の勾配溶出からなった。
【０４４６】
実施例６６：環状ＰＹＹ類似体配列番号６６の合成
工程２においてα−トコフェリルオキシ酢酸（ＡｃＶｉｔＥ）（８）の代わりに１１−［（２，４−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］ウンデカン酸を使用し、工程４（実施例９、工程２）においてｍ−ブロモメチル安息香酸の代わりにｍ−クロロメチル安息香酸を使用して、実施例１１に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。６０％ＥｔＯＨ／Ｈ２ＯをＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏの代わりに溶媒として使用し、飽和水性ＮａＨＣＯ３を工程４においてＮＨ４ＯＡｃ緩衝剤の代わりに使用して、環化を引き起こした。生成物の精製は、Ｗａｔｅｒｓ  ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｃ１８  ＯＢＤカラム（５０×２５０ｍｍ、５μｍ）を使用して、室温で行った。移動相は、緩衝剤Ａ（水中１０ｍＭ  ＮＨ４ＯＨ、ｐＨ約９）、及び４０分かけて１５〜３５％Ｂ（１００ｍｐｍ）の範囲の緩衝剤Ｂ（ＭｅＣＮ）の勾配溶出からなった。
【０４４７】
実施例６７：環状ＰＹＹ類似体配列番号６７の合成
工程２においてα−トコフェリルオキシ酢酸（ＡｃＶｉｔＥ）（８）の代わりに１１−［（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル］ウンデカン酸を使用し、工程４（実施例９、工程２）においてｍ−ブロモメチル安息香酸の代わりにｍ−クロロメチル安息香酸を使用して、実施例１１に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。６０％ＥｔＯＨ／Ｈ２ＯをＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏの代わりに溶媒として使用し、飽和水性ＮａＨＣＯ３を工程４においてＮＨ４ＯＡｃ緩衝剤の代わりに使用して、環化を引き起こした。生成物の精製は、Ｗａｔｅｒｓ  ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｃ１８  ＯＢＤカラム（５０×２５０ｍｍ、５μｍ）を使用して、室温で行った。移動相は、緩衝剤Ａ（水中１０ｍＭ  ＮＨ４ＯＨ、ｐＨ約９）、及び４０分かけて１５〜３５％Ｂ（１００ｍｐｍ）の範囲の緩衝剤Ｂ（ＭｅＣＮ）の勾配溶出からなった。
【０４４８】
実施例６８：環状ＰＹＹ類似体配列番号６８の合成
１．（Ｆｍｏｃ）−βＡ−ＩＫＰＥＡＰＧＥＫ（Ａｌｌｏｃ）ＡＳＰＥＥＬＮＲＹＹＡＳＬＲＨＹＬＮＣＶＴＲＱ（ｐｓｉ−Ｒ３５Ｙ３６）−Ｓｉｅｂｅｒ樹脂の合成
実施例１、工程２からの事前充填された（ｐｓｉ−Ｒ３５，Ｙ３６）−Ｓｉｅｂｅｒ樹脂（０．１ｍｍｏｌ）上へのアミノ酸延長は、溶媒としてＤＭＦ、６倍過剰の保護されたアミノ酸、及びＨＡＴＵ／ＤＩＥＡプロトコル（１０分間、二重結合）を使用して、室温で行われた。２段階Ｆｍｏｃ脱保護プロトコルを全体にわたって使用した（ＤＭＦ中２０％ピペリジン；室温；１０分、１５分）。
【０４４９】
２．（Ｆｍｏｃ）−βＡ−ＩＫＰＥＡＰＧＥＫ（（ＯＥＧ）２−γ−Ｇｌｕ−ＮＨＣＯ（ＣＨ２）１６ＣＯ２ｔＢｕ）−ＡＳＰＥＥＬＮＲＹＹＡＳＬＲＨＹＬＮＣＶＴＲＱ（ｐｓｉ−Ｒ３５Ｙ３６）−Ｓｉｅｂｅｒ樹脂の合成
各処理について１０分間の修正した反応時間を使用して、実施例１、工程４に記載の方法に従って、上記の樹脂の脱保護を行った。次いで、ＤＭＦ中でＨＡＴＵ／ＤＩＥＡプロトコル（１時間、室温）を使用して、樹脂を中間体２（１５）（５当量）と結合させた。
【０４５０】
３．（ＢｒＡｃ）−βＡ−ＩＫＰＥＡＰＧＥＫ（（ＯＥＧ）２−γ−Ｇｌｕ−ＮＨＣＯ（ＣＨ２）１６ＣＯ２ｔＢｕ）−ＡＳＰＥＥＬＮＲＹＹＡＳＬＲＨＹＬＮＣＶＴＲＱ（ｐｓｉ−Ｒ３５Ｙ３６）−Ｓｉｅｂｅｒ樹脂の合成
Ｆｍｏｃ脱保護（２０％ピペリジン／ＤＭＦ）後、上記の樹脂をブロモ酢酸無水物（１０当量、室温、３０分間）で処理してブロモアセチル化樹脂を得た。
【０４５１】
４．（ＢｒＡｃ）−βＡ−ＩＫＰＥＡＰＧＥＫ（（ＯＥＧ）２−γ−Ｇｌｕ−ＮＨＣＯ（ＣＨ２）１６ＣＯ２ｔＢｕ）−ＡＳＰＥＥＬＮＲＹＹＡＳＬＲＨＹＬＮＣＶＴＲＱ（ｐｓｉ−Ｒ３５Ｙ３６）−ＣＯＮＨ２の合成
上記の樹脂を、室温で１．５時間、ＴＦＡ／Ｈ２Ｏ／ＴＩＰＳ（９５：２．５：２．５）からなる切断カクテルで処理した。実施例１、工程７に記載の手順に従って、粗ペプチドをエーテルで沈殿させた。
【０４５２】
５．環状ＰＹＹ類似体配列番号６８
上記で得られた粗ペプチドを、１０％ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ中１０ｍｇ／ｍＬの濃度で溶解し、ＴＥＡを添加して溶液ｐＨを８〜９に上昇させた。室温で約２０分間撹拌した後、ＴＦＡを添加してｐＨを２に下げ、溶液を、Ｋｉｎｅｔｉｃｓ  Ｃ１８  Ｅｖｏカラム（３０×１００ｍｍ、１００Å、５μｍ）上で分取ＨＰＬＣにより直接精製した。移動相は、緩衝剤Ａ（水中０．１％ＴＦＡ）、及び２２分かけて２０〜６０％Ｂの範囲の緩衝剤Ｂ（ＭｅＣＮ中０．１％ＴＦＡ）の勾配溶出からなった。ＵＶ検出は、２２０及び２５４ｎｍで監視された。純粋な画分を合わせ、次いで凍結乾燥させて、綿様の固体として生成物を得た。
【０４５３】
実施例６９：環状ＰＹＹ類似体配列番号６９の合成
１．（Ｂｏｃ）−Ｇ−ＩＳＰＥＡＰＧＥＫ（ｄｄｅ）ＡＳＰＥＥＬＮＲＹＹＡＳＬＲＨＹＬＮＬＥ（ＯＡｌｌｙｌ）ＴＲＱ（ｐｓｉ−Ｒ３５Ｙ３６）−Ｓｉｅｂｅｒ樹脂の合成
実施例１、工程２からの事前充填された（ｐｓｉ−Ｒ３５，Ｙ３６）−Ｓｉｅｂｅｒ樹脂（０．１ｍｍｏｌ）上へのアミノ酸延長は、溶媒としてＤＭＦ、６倍過剰の保護されたアミノ酸、及びＨＡＴＵ／ＮＭＭプロトコル（１０分間、二重結合）を使用して、室温で行われた。２段階Ｆｍｏｃ脱保護プロトコルを全体にわたって使用した（ＤＭＦ中２０％ピペリジン；室温；１０分、１５分）。
【０４５４】
２．（Ｂｏｃ）−Ｇ−ＩＳＰＥＡＰＧＥＫ（ｄｄｅ）ＡＳＰＥＥＬＮＲＹＹＡＳＬＲＨＹＬＮＬＥ（ＮＨＳ）ＴＲＱ（ｐｓｉ−Ｒ３５Ｙ３６）−Ｓｉｅｂｅｒ樹脂の合成
各処理について１０分間の修正した反応時間を使用して、実施例１、工程４に記載の方法に従って、上記の樹脂のＡｌｌｏｃ脱保護を行った。次いで、ＤＭＦ中でＨＡＴＵ／ＤＩＥＡプロトコル（１時間、室温、二重結合）を使用して、樹脂をＮＨＳ（１０当量）と結合させた。
【０４５５】
３．（ＮＨ２）−Ｇ−ＩＳＰＥＡＰＧＥＫ（ｄｄｅ）ＡＳＰＥＥＬＮＲＹＹＡＳＬＲＨＹＬＮＬＥ（ＮＨＳ）ＴＲＱ（ｐｓｉ−Ｒ３５Ｙ３６）の合成
上記の樹脂を、室温で１．５時間、ＴＦＡ／Ｈ２Ｏ／ＴＩＰＳ（９５：２．５：２．５）からなる切断カクテルで処理した。実施例１、工程７に記載の手順に従って、粗ペプチドをエーテルで沈殿させた。
【０４５６】
４．環状ＰＹＹ類似体配列番号６９
上記で得られた粗ペプチドを、ＤＭＳＯ中８０ｍｇ／ｍＬの濃度で溶解し、ＴＥＡ（２５当量）を添加して、ラクタム化を引き起こした。室温で約３０分間撹拌した後、反応物を１０％ＭｅＣＮ／水で１０倍希釈し、ｐＨを２に調整し、粗ペプチドを、Ｋｉｎｅｔｉｃｓ  Ｃ１８  Ｅｖｏカラム（３０×１００ｍｍ、１００Å、５μｍ）上で分取ＨＰＬＣにより直接精製した。移動相は、緩衝剤Ａ（水中０．１％ＴＦＡ）、及び２２分かけて１０〜６０％Ｂの範囲の緩衝剤Ｂ（ＭｅＣＮ中０．１％ＴＦＡ）の勾配からなった。ＵＶ検出は、２２０及び２５４ｎｍで監視された。純粋な画分を合わせ、次いで凍結乾燥させて、Ｋ（Ｄｄｅ）保護されたペプチドを得た。室温で３０分間、２％ヒドラジン／ＤＭＦ（１０ｍｇペプチド／ｍｌ）を使用して、Ｄｄｅ保護基を除去した。反応物を１０％ＭｅＣＮ／水で１０倍希釈し、ｐＨをＴＦＡで２に調整し、粗ペプチド溶液を上記のように精製して、綿様固体として生成物を得た。
【０４５７】
実施例７０：環状ＰＹＹ類似体配列番号７０の合成
３０位のＦｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨの代わりにＦｍｏｃ−Ｅ（ＯＡｌｌ）−ＯＨを使用し、３１位のＦｍｏｃ−Ｅ（ＯＡｌｌ）−ＯＨの代わりにＦｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨを使用して、実施例６９の手順に従って、表題化合物を調製した。
【０４５８】
実施例７１：環状ＰＹＹ類似体配列番号７１の合成
１．（Ｂｏｃ）−Ｇ−ＩＳＰＥＡＰＧＥＫ（ｄｄｅ）ＡＳＰＥＥＬＮＲＹＹＡＳＬＲＨＹＬＮ  Ｅ（ＯＡｌｌｙｌ）ＶＴＲＱ（Ｎ−Ｍｅ−Ｒ）Ｙ−ＮｏｖａＳｙｎ  ＴＧＲ樹脂の合成
実施例６９、工程１に記載の手順を使用して、ＮｏｖａＳｙｎ  ＴＧＲ樹脂（０．１ｍｍｏｌ）上へのアミノ酸延長を行った。
【０４５９】
２．環状ＰＹＹ類似体配列番号７１
実施例６９、工程２〜４に記載の手順に従って、上記の樹脂から表題化合物を調製した。
【０４６０】
実施例７２：環状ＰＹＹ類似体配列番号７２の合成
１．（Ｓ）−２２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−４３，４３−ジメチル−１０，１９，２４，４１−テトラオキソ−３，６，１２，１５，４２−ペンタオキサ−９，１８，２３−トリアザテトラテトラコンタン−１−ｏｉｃＮ−ヒドロキシスクシンイミドエステルの合成
１．０ｍＬのＤＭＦ中の（Ｓ）−２２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−４３，４３−ジメチル−１０，１９，２４，４１−テトラオキソ−３，６，１２，１５，４２−ペンタオキサ−９，１８，２３−トリアザテトラテトラコンタン−１−酸（中間体２（１６））（５４．０ｍｇ、０．０６３ｍｍｏｌ）、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（１４．６ｍｇ、０．１２７ｍｍｏｌ）、及びＨＡＴＵ（２４．１ｍｇ、０．０６３ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＩＥＡ（０．０２２ｍＬ、０．１２７ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を室温で３０分間撹拌し、更に精製することなく次の工程で直接使用した。
【０４６１】
２．環状ＰＹＹ類似体配列番号７２の合成
ＤＭＦ（０．２ｍＬ）中の［シクロ−（Ｇ２−Ｅ３０），Ｓ４，Ｋ１１，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ２〜３６（実施例７０で調製）（４ｍｇ、０．９６μｍｏｌ）の溶液に、２４μＬのＮ−ヒドロキシエステル溶液（工程１で調製）及びＴＥＡ（０．６６μＬ；５当量）を添加し、混合物を室温で一晩撹拌した。反応物を１０％ＭｅＣＮ／水で１０倍希釈し、ｐＨをＴＦＡで２に調整し、粗ペプチドを、Ｋｉｎｅｔｉｃｓ  Ｃ１８  Ｅｖｏカラム（３０×１００ｍｍ、１００Å、５μｍ）上で分取ＨＰＬＣにより直接精製した。移動相は、緩衝剤Ａ（水中０．１％ＴＦＡ）、及び２２分かけて１０〜６０％Ｂの範囲の緩衝剤Ｂ（ＭｅＣＮ中０．１％ＴＦＡ）の勾配溶出からなった。ＵＶ検出は、２２０及び２５４ｎｍで監視された。純粋な画分を合わせ、次いで凍結乾燥させて、ｔ−ブチルエステル保護されたペプチドを得た。ｔ−ブチルエステル保護基を、室温で１．５時間、ＴＦＡ／Ｈ２Ｏ／ＴＩＰＳ（９５：２．５：２．５）の混合物を使用して除去した。混合物を濃縮し、ペプチドを上記のとおり精製して、綿様固体として生成物を得た。
【０４６２】
実施例７３：環状ＰＹＹ類似体配列番号７３の合成
工程５においてＮ−Ｆｍｏｃ−ｄＰＥＧ１２−カルボン酸の代わりにＮ−Ｆｍｏｃ−ｄＰＥＧ６−カルボン酸を使用して、実施例１に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。
【０４６３】
実施例７４：環状ＰＹＹ類似体配列番号７４の合成
実施例１に記載の手順に従うが、ＰＥＧリンカー結合工程５を省略して、表題化合物を調製した。
【０４６４】
実施例７５：環状ＰＹＹ類似体配列番号７５の合成
３１位のＦｍｏｃ−ｈＣｙｓ（ｔｒｔ）−ＯＨに代わりＦｍｏｃ−Ｃｙｓ（ｔｒｔ）−ＯＨを使用し、工程３においてＦｍｏｃ−βＡｌａ−ＯＨ結合工程を省略して、実施例１に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。
【０４６５】
実施例７６：環状ＰＹＹ類似体配列番号７６の合成
工程３及び工程４に修正を加えて、実施例１に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。工程３において、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−ＯＨ及びＦｍｏｃ−Ｌｙｓ（ｄｄｅ）−ＯＨを、それぞれ３０位及び１１位に使用した。３０位のＡｌｌｏｃをＰｄ（ＰＰｈ３）４−フェニルシランで脱保護した後、ｍＰＥＧ１６−カルボン酸をＨＡＴＵ  ＤＩＰＥＡと結合させた。工程４において、ＤＭＦ中２％ヒドラジンを用いて、１１位のｄｄｅを除去した。
【０４６６】
実施例７７：環状ＰＹＹ類似体配列番号７７の合成
工程３においてｍＰＥＧ１６−カルボン酸の代わりにｍＰＥＧ１２−カルボン酸を使用し、工程５においてＦｍｏｃ−ｄＰＥＧ１２−カルボン酸結合工程を省略して、実施例７６に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。
【０４６７】
実施例７８：環状ＰＹＹ類似体配列番号７８の合成
工程３においてＦｍｏｃ−Ｇｌｎ（ｔｒｔ）−ＯＨの代わりにＦｍｏｃ−Ｎ−Ｍｅ−Ｇｌｎ（ｔｒｔ）−ＯＨを使用して、実施例１に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。
【０４６８】
実施例７９：環状ＰＹＹ類似体配列番号７９の合成
工程１ＢにおいてＦｍｏｃ−Ａｒｇ（ｐｂｆ）−ＯＨの代わりにＦｍｏｃ−Ｎ−Ｍｅ−Ａｒｇ（ｐｂｆ）−ＯＨを使用して、実施例１に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。
【０４６９】
実施例８０：環状ＰＹＹ類似体配列番号８０の合成
４位のＦｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨの代わりにＦｍｏｃ−Ａｒｇ（ｐｂｆ）−ＯＨを使用し、工程３において３０位のＦｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨの代わりにＦｍｏｃ−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−ＯＨを使用して、実施例７９に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。
【０４７０】
実施例８１：環状ＰＹＹ類似体配列番号８１の合成
３１位のＦｍｏｃ−ｈＣｙｓ（ｔｒｔ）−ＯＨの代わりにＦｍｏｃ−Ｃｙｓ（ｔｒｔ）−ＯＨを使用し、工程３においてＦｍｏｃ−βＡｌａ−ＯＨの代わりにＦｍｏｃ−γ−アミノブタン酸を使用して、実施例８０に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。
【０４７１】
実施例８２：環状ＰＹＹ類似体配列番号８２の合成
Ｆｍｏｃ−βＡｌａ−ＯＨの代わりにＦｍｏｃ−ＰＥＧ２−カルボン酸を使用し、３１位のＦｍｏｃ−ｈＣｙｓ（ｔｒｔ）−ＯＨの代わりにＦｍｏｃ−Ｃｙｓ（ｔｒｔ）−ＯＨを使用し、工程３においてＦｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨの結合を省略して、実施例１に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。
【０４７２】
実施例８３：環状ＰＹＹ類似体配列番号８３の合成
３１位のＦｍｏｃ−ｈＣｙｓ（ｔｒｔ）−ＯＨの代わりにＦｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｎ３）−ＯＨを使用し、工程３においてＦｍｏｃ−βＡｌａ−ＯＨの代わりにペンタ−４−イン酸を使用し、以下の環化手順Ｂに従い、実施例１に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。
【０４７３】
環化手順Ｂ：２ｍＬのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）中の１１位に配置されたＰＥＧ１２−ＡｃＢｒ（３８ｍｇ、０．００６７ｍｍｏｌ）で完全に脱保護されたペプチドの溶液に、１．７ｍＬの予備混合されたＣｕＳＯ４／ＴＢＴＡ溶液を添加し（溶液は、水（０．４ｍＬ）中２．２ｍｇのＣｕＳＯ４の溶液とＥｔＯＨ中１１ｍｇのＴＢＴＡの溶液とを混合することによって調製された）、続いて水（１ｍＬ）中７ｍｇのアスコルビン酸ナトリウムを添加した。透明な反応溶液を室温で混合したままにし、ＨＰＬＣにより監視した。３０分後、反応は完了し、ＴＦＡを用いて反応混合物をｐＨ４に調整し、ＨＰＬＣ精製（Ｐｕｒｓｕｉｔ  ＸＲＳ  ５  ２５０×３０ｍｍ  Ｃ１８カラム、３０ｍｐｍ流量で実行し、２１４  ｎＭ波長を監視し、３６分かけて２０〜６０％ＭｅＣＮ−水／水（両方とも０．１％ＴＦＡを有する）の範囲の勾配を用いた）を行った。所望の画分を回収し、凍結乾燥した。
【０４７４】
実施例８４：環状ＰＹＹ類似体配列番号８４の合成
Ｆｍｏｃ−βＡｌａ−ＯＨ結合工程を省略し、工程５においてＦｍｏｃ−ｄＰＥＧ１２−カルボン酸の代わりにＮ３−ＰＥＧ８カルボン酸を使用し、工程３においてブロモ酢酸無水物アシル化の代わりにＤＩＣとの３−（ブロモメチル）安息香酸結合を使用し、以下の環化手順Ｃに従い、実施例１に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。
【０４７５】
環化手順Ｃ：５ｍＬの脱気水中の完全に脱保護されたペプチド（２０ｍｇ、０．００３５ｍｍｏｌ）の溶液に、水性ＮａＨＣＯ３溶液を添加して、反応混合物をｐＨ６．４以上に調整した。２０分後、ＬＣＭＳは反応が完了したことを示し、ＴＦＡを用いて反応混合物をｐＨ４に調整し、ＨＰＬＣ精製（Ｐｕｒｓｕｉｔ  ＸＲＳ  ５  ２５０×３０ｍｍ  Ｃ１８カラム、３０ｍｐｍ流量で実行し、２１４  ｎＭ波長を監視し、３６分かけて１０〜６０％ＭｅＣＮ−水／水（両方とも０．１％ＴＦＡを有する）の範囲の勾配を用いた）を行った。所望の画分を回収し、凍結乾燥した。
【０４７６】
環化後、環化中間体は、Ｎ−（１−ブロモ−２−オキソ−７，１０，１３−トリオキサ−３−アザヘキサデカン−１６−イル）ペンタ−４−インアミドを用いた環化手順Ｂに従って、クリックケミストリーによってリンカー延長を受け、これは、ＨＡＴＵ−ＤＩＰＥＡを使用して、Ｎ−Ｂｏｃ−ＰＥＧ４−ＮＨ２をペンタ−４−イン酸と結合させ、続いてＴＦＡでＢｏｃを脱保護し、ＴＥＡの存在下でブロモ酢酸無水物でアシル化することによって調製した。
【０４７７】
実施例８５：環状ＰＹＹ類似体配列番号８５の合成
１１位の代わりに２３位に配置されたＰＥＧ１２−ＡｃＢｒリンカーを用いて、実施例１に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。
【０４７８】
実施例８６：環状ＰＹＹ類似体配列番号８６の合成
１１位の代わりに２２位に配置されたＰＥＧ１２−ＡｃＢｒリンカーを用いて、実施例１に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。
【０４７９】
実施例８７：環状ＰＹＹ類似体配列番号８７の合成
１１位の代わりに７位に配置されたＰＥＧ１２−ＡｃＢｒリンカーを用いて、実施例１に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。
【０４８０】
実施例８８：環状ＰＹＹ類似体配列番号８８の合成
３１位のＦｍｏｃ−ｈＣｙｓ（ｔｒｔ）−ＯＨの代わりにＦｍｏｃ−Ｖ−ＯＨを使用し、３０位のＦｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨの代わりにＦｍｏｃ−Ｃｙｓ（ｔｒｔ）−ＯＨを使用し、工程３においてＦｍｏｃ−βＡｌａ−ＯＨの代わりにＦｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨを使用して、実施例１に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。
【０４８１】
実施例８９：環状ＰＹＹ類似体配列番号８９の合成
工程１を省略して還元ジペプチドを作製し、工程２においてＦｍｏｃ−ｐｓｉ−（Ｒ３５−Ｎ（Ｂｏｃ）−Ｙ３６）−ＯＨ充填の代わりにＦｍｏｃ−（Ｎ−Ｍｅ）Ａｒｇ−ＯＨとの結合が続くＦｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ充填を使用して、実施例８８に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。
【０４８２】
実施例９０：環状ＰＹＹ類似体配列番号９０の合成
工程３においてＦｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨの代わりにＦｍｏｃ−βＡｌａ−ＯＨを使用して、実施例８９に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。
【０４８３】
実施例９１：環状ＰＹＹ類似体配列番号９１の合成
工程３において３０位のＦｍｏｃ−Ｃｙｓ（ｔｒｔ）−ＯＨの代わりにＦｍｏｃ−ｈＣｙｓ（ｔｒｔ）−ＯＨを使用して、実施例８９に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。
【０４８４】
実施例９２：環状ＰＹＹ類似体配列番号９２の合成
３１位のＦｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨの代わりにＦｍｏｃ−ｈＣｙｓ（ｔｒｔ）−ＯＨを使用し、工程３において３０位のＦｍｏｃ−Ｃｙｓ（ｔｒｔ）−ＯＨの代わりにＦｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨを使用して、実施例９０に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。
【０４８５】
実施例９３：環状ＰＹＹ類似体配列番号９３の合成
３１位のＦｍｏｃ−ｈＣｙｓ（ｔｒｔ）−ＯＨの代わりにＦｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨを使用し、３０位のＦｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨの代わりにＦｍｏｃ−Ｃｙｓ（ｔｒｔ）−ＯＨを使用し、工程３においてＮ末端のＦｍｏｃ−βＡｌａ−ＯＨの代わりにＦｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨを使用して、実施例１に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。
【０４８６】
実施例９４：環状ＰＹＹ類似体配列番号９４の合成
３１位のＦｍｏｃ−ｈＣｙｓ（ｔｒｔ）−ＯＨの代わりにＦｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨを使用し、工程３において３０位のＦｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨの代わりにＦｍｏｃ−Ｃｙｓ（ｔｒｔ）−ＯＨを使用して、実施例１に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。
【０４８７】
実施例９５：環状ＰＹＹ類似体配列番号９５の合成
３１位のＦｍｏｃ−ｈＣｙｓ（ｔｒｔ）−ＯＨの代わりにＦｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨを使用し、３０位のＦｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨの代わりにＦｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯＡｌｌｏｃ）−ＯＨを使用し、１１位のＦｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ａｌｌｏｃ）−ＯＨの代わりにＦｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｄｄｅ）−ＯＨを使用し、４位のＦｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨの代わりにＦｍｏｃ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−ＯＨを使用し、工程３においてＮ末端のＦｍｏｃ−βＡｌａ−ＯＨの代わりにＢｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨを使用して、実施例１に記載の手順に従って、表題化合物を調製した（０．０５ｍｍｏｌスケール）。
【０４８８】
上記から得られた樹脂に、脱酸素化ＤＣＭ（１０ｍＬ）、フェニルシラン（１０当量）、及びＤＣＭ（１ｍＬ）中のＰｄ（ＰＰｈ３）４（０．２当量）の溶液を添加し、混合物を１０分間撹拌した。反応物を排出し、樹脂を脱酸素化ＤＣＭで洗浄し、脱保護を１回繰り返した。
【０４８９】
上記から得られた樹脂に、ＤＭＦ（１０ｍＬ）、ＨＡＴＵ（５当量）、及びＤＩＥＡ（１０当量）を添加し、混合物を５分間撹拌した後、ＤＭＦ中のＮ−ヒドロキシスクシンイミド（１０当量）の溶液を添加し、更に２０分間撹拌した。樹脂を濾過し、手順を１回繰り返した。
【０４９０】
上記の樹脂を、ＴＦＡ／ＴＩＰＳ／水（９５／２．５／２．５）（１０ｍＬ）中、室温で２時間脱保護した。切断カクテルを約１ｍＬに濃縮した後、４０ｍＬのエーテルに添加した。得られた沈殿物を遠心分離により回収し、Ｎ２下で乾燥させた。
【０４９１】
上記から得られた材料を、１０当量のＴＥＡを添加した９ｍＬのＤＭＳＯに溶解し、反応を室温で３時間進行させた。得られた溶液を水で３０ｍＬに希釈し、ｐＨを２に調整し、３０分で水（０．１％ＴＦＡ）中２０〜４０％ＭｅＣＮの直線勾配で溶出させる、３０ｍｍ×２５０ｍｍ  Ｃ１８カラム上でＲＰ−ＨＰＬＣにより精製した。生成物を含有する画分を凍結乾燥させた。
【０４９２】
次いで、上記から得られた材料を１〜２％ヒドラジン／ＤＭＦ（１ｍＬ）で処理して、リジンからＤｄｅを除去した。得られた混合物を水で１０ｍＬに希釈し、ｐＨを２に調整した後、上記のようにＲＰ−ＨＰＬＣにより精製した。
【０４９３】
次いで、得られた生成物を１０％ＭｅＣＮ／水に溶解し、ｐＨを１０に調整し、ブロモ酢酸Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル（３当量の０．１Ｍ／ＤＭＦ溶液）の溶液を添加し、反応を室温で１０分間進行させた。得られた混合物を水で１０ｍＬに希釈し、ｐＨを２に調整した後、上記のようにＲＰ−ＨＰＬＣにより精製して表題生成物を得た。
【０４９４】
実施例９６：環状ＰＹＹ類似体配列番号９６の合成
工程５においてＮ−Ｆｍｏｃ−ｄＰＥＧ１２−カルボン酸の代わりにＮ−Ｆｍｏｃ−ｄＰＥＧ２４−カルボン酸を使用して、実施例１に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。
【０４９５】
実施例９７：環状ＰＹＹ類似体配列番号９７の合成
工程３においてＦｍｏｃ−βＡｌａ−ＯＨの代わりにＦｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨを使用して、実施例１に記載の手順に従って、表題化合物を調製した。
【０４９６】
実施例９８：環状ＰＹＹ類似体配列番号９８の合成
実施例８９に記載の手順に従うが、工程５においてＦｍｏｃ−ｄＰＥＧ１２−カルボン酸結合工程を省略して、表題化合物を調製した。
【０４９７】
実施例９９：環状ＰＹＹ類似体配列番号９９の合成
実施例９０に記載の手順に従うが、工程５においてＦｍｏｃ−ｄＰＥＧ１２−カルボン酸結合工程を省略して、表題化合物を調製した。
【０４９８】
実施例１００：環状ＰＹＹ類似体配列番号１００の合成
実施例９４に記載の手順に従うが、工程５においてＦｍｏｃ−ｄＰＥＧ１２−カルボン酸結合工程を省略して、表題化合物を調製した。
【０４９９】
以下の配列の全ては、本発明の実施例と考えられる。
【０５００】
配列表
配列番号１
名称：［シクロ−（βＡ２−ＣＯＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ（ＰＥＧ１２−ＡｃＢｒ）１１，ｐｓｉ−（３５Ｒ，３６Ｙ）］−ＰＹＹ２−３６
構造：
【０５０１】
【化１０２】
2019534283.tif 000107
【０５０２】
配列番号２
名称：［シクロ−（Ｉ３−ｍ−ＣＯＰｈＣＨ２−ｈＣ３１）］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０５０３】
【化１０３】
2019534283.tif 000108
【０５０４】
配列番号３
名称：［シクロ−（Ｉ３−ＣＯ（ＣＨ２）２トリアゾリル−Ｎｌｅ３１）］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０５０５】
【化１０４】
2019534283.tif 000109
【０５０６】
配列番号４
名称：［シクロ−（Ｉ３−ｍ−ＣＯＰｈＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ（γ−Ｇｌｕ−Ｐａｌ）１１］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０５０７】
【化１０５】
2019534283.tif 000110
【０５０８】
配列番号５
名称：［シクロ−（Ｉ３−ｍ−ＣＯＰｈＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ（γ−Ｇｌｕ−ＡｃＶｉｔＥ）１１］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０５０９】
【化１０６】
2019534283.tif 000111
【０５１０】
配列番号６
名称：［シクロ−（Ｉ３−ＣＯ（ＣＨ２）２トリアゾリル−Ｎｌｅ３１），Ｋ（γ−Ｇｌｕ−ＡｃＶｉｔＥ）１１］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０５１１】
【化１０７】
2019534283.tif 000112
【０５１２】
配列番号７
名称：［シクロ−（Ｉ３−ｍ−ＣＯＰｈＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ（γ−Ｇｌｕ−Ｐａｌ）９］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０５１３】
【化１０８】
2019534283.tif 000113
【０５１４】
配列番号８
名称：［シクロ−（Ｉ３−ｍ−ＣＯＰｈＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ（γ−Ｇｌｕ−Ｐａｌ）３０］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０５１５】
【化１０９】
2019534283.tif 000114
【０５１６】
配列番号９
名称：［シクロ−（Ｉ３−ｍ−ＣＯＰｈＣＨ２−ｈＣ３１），ｐｓｉ−（Ｒ３５Ｙ３６）］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０５１７】
【化１１０】
2019534283.tif 000115
【０５１８】
配列番号１０
名称：［シクロ−（Ｉ３−ｍ−ＣＯＰｈＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ（γ−Ｇｌｕ−ＡｃＶｉｔＥ）３０］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０５１９】
【化１１１】
2019534283.tif 000116
【０５２０】
配列番号１１
名称：［シクロ−（Ｉ３−ｍ−ＣＯＰｈＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ（γ−Ｇｌｕ−ＡｃＶｉｔＥ）３０，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０５２１】
【化１１２】
2019534283.tif 000117
【０５２２】
配列番号１２
名称：［シクロ−（Ｉ３−ｍ−ＣＯＰｈＣＨ２−ｈＣ３１），（Ｎ−Ｍｅ−Ｒ３５）］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０５２３】
【化１１３】
2019534283.tif 000118
【０５２４】
配列番号１３
名称：［シクロ−（Ｉ３−ｍ−ＣＯＰｈＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ（γ−Ｇｌｕ−Ｐａｌ）３０，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０５２５】
【化１１４】
2019534283.tif 000119
【０５２６】
配列番号１４
名称：［シクロ−（Ｉ３−ｍ−ＣＯＰｈＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ（γ−Ｇｌｕ−Ｐａｌ）３０，（Ｎ−Ｍｅ−Ｒ３５）］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０５２７】
【化１１５】
2019534283.tif 000120
【０５２８】
配列番号１５
名称：［シクロ−（Ｋ４−ＣＯ（ＣＨ２）２ＮＨＣＯＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ（γ−Ｇｌｕ−Ｐａｌ）３０］−ＰＹＹ４−３６
構造：
【０５２９】
【化１１６】
2019534283.tif 000121
【０５３０】
配列番号１６
名称：［シクロ−（Ｋ４−ｐ−ＣＯＰｈＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ（γ−Ｇｌｕ−Ｐａｌ）３０］−ＰＹＹ４−３６
構造：
【０５３１】
【化１１７】
2019534283.tif 000122
【０５３２】
配列番号１７
名称：［シクロ−（Ｉ３−ｍ−ＣＯＰｈＣＨ２−ｈＣ３１），Ａ４，Ｋ（γ−Ｇｌｕ−Ｐａｌ）３０］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０５３３】
【化１１８】
2019534283.tif 000123
【０５３４】
配列番号１８
名称：［シクロ−（Ｉ３−ｍ−ＣＯＰｈＣＨ２−ｈＣ３１），Ｅ４，Ｋ（γ−Ｇｌｕ−Ｐａｌ）３０］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０５３５】
【化１１９】
2019534283.tif 000124
【０５３６】
配列番号１９
名称：［シクロ−（Ｉ３−ｐ−ＣＯＰｈＣＨ２−Ｃ３１），Ｋ（γ−Ｇｌｕ−Ｐａｌ）３０，（Ｎ−Ｍｅ−Ｒ３５）］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０５３７】
【化１２０】
2019534283.tif 000125
【０５３８】
配列番号２０
名称：［シクロ−（Ｉ３−ｍ−ＣＯＰｈＣＨ２−Ｃ３１），Ｋ（γ−Ｇｌｕ−Ｐａｌ）３０，（Ｎ−Ｍｅ−Ｒ３５）］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０５３９】
【化１２１】
2019534283.tif 000126
【０５４０】
配列番号２１
名称：［シクロ−（Ｉ３−ｍ−ＣＯＰｈＣＨ２−ｈＣ３１），Ａ４，Ａ２６，Ｋ（γ−Ｇｌｕ−Ｐａｌ）３０］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０５４１】
【化１２２】
2019534283.tif 000127
【０５４２】
配列番号２２
名称：［シクロ−（Ｉ３−ｍ−ＣＯＰｈＣＨ２−ｈＣ３１），Ｅ４，Ａ２６，Ｋ（γ−Ｇｌｕ−Ｐａｌ）３０］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０５４３】
【化１２３】
2019534283.tif 000128
【０５４４】
配列番号２３
名称：［シクロ−（Ｉ３−ｍ−ＣＯＰｈＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ（（ＯＥＧ）２−γ−Ｇｌｕ−ＣＯＣ１６ＣＯ２Ｈ）３０，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０５４５】
【化１２４】
2019534283.tif 000129
【０５４６】
配列番号２４
名称：［シクロ−（Ｉ３−ｍ−ＣＯＰｈＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ（（ＯＥＧ）２−γ−Ｇｌｕ−ＣＯＣ１８ＣＯ２Ｈ）３０，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０５４７】
【化１２５】
2019534283.tif 000130
【０５４８】
配列番号２５
名称：［シクロ−（Ｉ３−ｍ−ＣＯＰｈＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ（γ−Ｇｌｕ−Ｓｔｅａｒ）３０，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０５４９】
【化１２６】
2019534283.tif 000131
【０５５０】
配列番号２６
名称：［シクロ−（Ｉ３−ｍ−ＣＯＰｈＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ（γ−Ｇｌｕ−Ａｒａｃｈ）３０，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０５５１】
【化１２７】
2019534283.tif 000132
【０５５２】
配列番号２７
名称：［シクロ−（Ｉ３−ｍ−ＣＯＰｈＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ（（ＯＥＧ）２−ＣＯＣ１６ＣＯ２Ｈ）３０，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０５５３】
【化１２８】
2019534283.tif 000133
【０５５４】
配列番号２８
名称：［シクロ−（Ｋ４−ｐ−ＣＯＰｈＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ（γ−Ｇｌｕ−Ｐａｌ）３０，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ４−３６
構造：
【０５５５】
【化１２９】
2019534283.tif 000134
【０５５６】
配列番号２９
名称：［シクロ−（Ｋ４−ＣＯ（ＣＨ２）２ＮＨＣＯＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ（γ−Ｇｌｕ−Ｐａｌ）３０，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ４−３６
構造：
【０５５７】
【化１３０】
2019534283.tif 000135
【０５５８】
配列番号３０
名称：［シクロ−（Ｋ４−ＣＯ（ＣＨ２）３ＮＨＣＯＣＨ２−Ｃ３１），Ｋ（γ−Ｇｌｕ−Ｐａｌ）３０，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ４−３６
構造：
【０５５９】
【化１３１】
2019534283.tif 000136
【０５６０】
配列番号３１
名称：［シクロ−（Ｉ３−ｍ−ＣＯＰｈＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ（（ＯＥＧ）２−γ−Ｇｌｕ−Ｓｔｅａｒ）３０，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０５６１】
【化１３２】
2019534283.tif 000137
【０５６２】
配列番号３２
名称：［シクロ−（Ｉ３−ｍ−ＣＯＰｈＣＨ２−ｈＣ３１），Ａ４，Ａ２６，Ｋ（γ−Ｇｌｕ−Ｐａｌ）３０，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０５６３】
【化１３３】
2019534283.tif 000138
【０５６４】
配列番号３３
名称：［シクロ−（Ｉ３−ｍ−ＣＯＰｈＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ（γ−Ｇｌｕ−Ｐａｌ）３０，（Ｎ−Ｍｅ−Ｑ３４），ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０５６５】
【化１３４】
2019534283.tif 000139
【０５６６】
配列番号３４
名称：［シクロ−（Ｋ４−ＣＯ（ＣＨ２）５ＮＨＣＯＣＨ２−Ｃ３１），Ｋ（γ−Ｇｌｕ−Ｐａｌ）３０，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ４−３６
構造：
【０５６７】
【化１３５】
2019534283.tif 000140
【０５６８】
配列番号３５
名称：［シクロ−（Ｉ３−ｍ−ＣＯＰｈＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ（γ−Ｇｌｕ−Ｐａｌ）３０，（Ｎ−Ｍｅ−Ｒ３５），ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０５６９】
【化１３６】
2019534283.tif 000141
【０５７０】
配列番号３６
名称：［シクロ−（Ｋ４−ＣＯ（ＣＨ２）２ＮＨＣＯＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ（γ−Ｇｌｕ−Ｐａｌ）３０，（Ｎ−Ｍｅ−Ｒ３５），ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ４−３６
構造：
【０５７１】
【化１３７】
2019534283.tif 000142
【０５７２】
配列番号３７
名称：［シクロ−（Ｉ３−ＣＯ（ＣＨ２）３ＮＨＣＯＣＨ２−Ｃ３１），Ｋ（γ−Ｇｌｕ−Ｐａｌ）３０，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０５７３】
【化１３８】
2019534283.tif 000143
【０５７４】
配列番号３８
名称：［シクロ−（Ｉ３−ＣＯ（ＣＨ２）２ＮＨＣＯＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ（γ−Ｇｌｕ−Ｐａｌ）３０，（Ｎ−Ｍｅ−Ｒ３５），ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ３〜３６
構造：
【０５７５】
【化１３９】
2019534283.tif 000144
【０５７６】
配列番号３９
名称：［シクロ−（Ｉ３−ｍ−ＣＯＰｈＣＨ２−ｈＣ３１），Ｓ４，Ｋ（γ−Ｇｌｕ−Ａｒａｃｈ）３０，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０５７７】
【化１４０】
2019534283.tif 000145
【０５７８】
配列番号４０
名称：［シクロ−（Ｉ３−ＣＯ（ＣＨ２）２トリアゾリル−Ｎｌｅ３１），Ｋ（（ＯＥＧ）２−γ−Ｇｌｕ−Ｐａｌ）３０，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０５７９】
【化１４１】
2019534283.tif 000146
【０５８０】
配列番号４１
名称：［シクロ−（Ｉ３−ＣＯ（ＣＨ２）２トリアゾリル−Ｎｌｅ３１），Ｋ（γ−Ｇｌｕ−Ｐａｌ）３０，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０５８１】
【化１４２】
2019534283.tif 000147
【０５８２】
配列番号４２
名称：［シクロ−（Ｉ３−ＣＯ（ＣＨ２）２トリアゾリル−Ｎｌｅ３１），Ｋ（（ＯＥＧ）２−γ−Ｇｌｕ−ＣＯＣ１６ＣＯ２Ｈ）３０，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０５８３】
【化１４３】
2019534283.tif 000148
【０５８４】
配列番号４３
名称：［シクロ−（Ｉ３−ｍ−ＣＯＰｈＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ（（ＯＥＧ）２−γ−Ｇｌｕ−Ｐａｌ）３０，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０５８５】
【化１４４】
2019534283.tif 000149
【０５８６】
配列番号４４
名称：［シクロ−（Ｉ３−ｍ−ＣＯＰｈＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ（（ＯＥＧ）２−γ−Ｇｌｕ−ＣＯＣ１６ＣＯ２Ｈ）１１，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０５８７】
【化１４５】
2019534283.tif 000150
【０５８８】
配列番号４５
名称：［シクロ−（Ｉ３−ｍ−ＣＯＰｈＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ（ＣＯＣＨ２ＣＨ２（ＯＣＨ２ＣＨ２）２４ＮＨ−γ−Ｇｌｕ−Ｐａｌ）１１，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０５８９】
【化１４６】
2019534283.tif 000151
【０５９０】
配列番号４６
名称：［シクロ−（Ｉ３−ＣＯ（ＣＨ２）２ＮＨＣＯＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ（γ−Ｇｌｕ−Ｐａｌ）３０，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０５９１】
【化１４７】
2019534283.tif 000152
【０５９２】
配列番号４７
名称：［シクロ−（Ｉ３−ｍ−ＣＯＰｈＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ（（ＯＥＧ）２−γ−Ｇｌｕ−ＣＯＣ１６ＣＯ２Ｈ）７，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０５９３】
【化１４８】
2019534283.tif 000153
【０５９４】
配列番号４８
名称：［シクロ−（Ｉ３−ｍ−ＣＯＰｈＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ（（ＯＥＧ）２−γ−Ｇｌｕ−ＣＯＣ１６ＣＯ２Ｈ）２２，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０５９５】
【化１４９】
2019534283.tif 000154
【０５９６】
配列番号４９
名称：［シクロ−（Ｉ３−ｍ−ＣＯＰｈＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ（γ−Ｇｌｕ−（Ｐａｌ−１６−ＯＨ））３０，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０５９７】
【化１５０】
2019534283.tif 000155
【０５９８】
配列番号５０
名称：［シクロ−（Ｉ３−ｍ−ＣＯＰｈＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ（（ＯＥＧ）２−γ−Ｇｌｕ−ＣＯＣ１６ＣＯ２Ｈ）２３，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０５９９】
【化１５１】
2019534283.tif 000156
【０６００】
配列番号５１
名称：［シクロ−（Ｉ３−ｍ−ＣＯＰｈＣＨ２−ｈＣ３１），Ｓ４，Ｋ（γ−Ｇｌｕ−Ｐａｌ）３０，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０６０１】
【化１５２】
2019534283.tif 000157
【０６０２】
配列番号５２
名称：［シクロ−（Ｉ３−ｍ−ＣＯＰｈＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ（ＣＯＣＨ２ＣＨ２（ＯＣＨ２ＣＨ２）１２ＮＨ−γ−Ｇｌｕ−Ｐａｌ）１１，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０６０３】
【化１５３】
2019534283.tif 000158
【０６０４】
配列番号５３
名称：［シクロ−（Ｉ３−ｍ−ＣＯＰｈＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ（（ＯＥＧ）４−γ−Ｇｌｕ−Ｐａｌ）１１，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０６０５】
【化１５４】
2019534283.tif 000159
【０６０６】
配列番号５４
名称：［シクロ−（Ｉ３−ｍ−ＣＯＰｈＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ（（ＯＥＧ）２−γ−Ｇｌｕ−Ｐａｌ）１１，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０６０７】
【化１５５】
2019534283.tif 000160
【０６０８】
配列番号５５
名称：［シクロ−（Ｉ３−ｍ−ＣＯＰｈＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ（（ＯＥＧ）２−γ−Ｇｌｕ−Ｐａｌ）２３，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０６０９】
【化１５６】
2019534283.tif 000161
【０６１０】
配列番号５６
名称：［シクロ−（Ｉ３−ｍ−ＣＯＰｈＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ（γ−Ｇｌｕ−ＣＯＣＨ２Ｐｈ−（４−ＣｌＰｈ）３０，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０６１１】
【化１５７】
2019534283.tif 000162
【０６１２】
配列番号５７
名称：［シクロ−（Ｉ３−ｍ−ＣＯＰｈＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ（γ−Ｇｌｕ−ＣＯ（ＣＨ２）２ＰｈＯ−（２，４−Ｃｌ２Ｐｈ）３０，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０６１３】
【化１５８】
2019534283.tif 000163
【０６１４】
配列番号５８
名称：［シクロ−（Ｉ３−ｍ−ＣＯＰｈＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ（γ−Ｇｌｕ−ＣＯ（ＣＨ２）１０−（４−Ｆ−Ｐｈ））３０，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０６１５】
【化１５９】
2019534283.tif 000164
【０６１６】
配列番号５９
名称：［シクロ−（Ｉ３−ｍ−ＣＯＰｈＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ（（ＯＥＧ）２−γ−Ｇｌｕ−Ｐａｌ）２２，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０６１７】
【化１６０】
2019534283.tif 000165
【０６１８】
配列番号６０
名称：［シクロ−（Ｉ３−ｍ−ＣＯＰｈＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ（（ＯＥＧ）２−γ−Ｇｌｕ−Ｐａｌ）７，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０６１９】
【化１６１】
2019534283.tif 000166
【０６２０】
配列番号６１
名称：［シクロ−（Ｉ３−ｍ−ＣＯＰｈＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ（γ−Ｇｌｕ−ＣＯ（ＣＨ２）１０−（４−Ｆ３Ｃ−Ｐｈ））３０，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０６２１】
【化１６２】
2019534283.tif 000167
【０６２２】
配列番号６２
名称：［シクロ−（Ｉ３−ｍ−ＣＯＰｈＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ（γ−Ｇｌｕ−ＣＯ（ＣＨ２）１０−ＣＦ３）３０，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０６２３】
【化１６３】
2019534283.tif 000168
【０６２４】
配列番号６３
名称：［シクロ−（Ｉ３−ｍ−ＣＯＰｈＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ（γ−Ｇｌｕ−ＣＯ（ＣＨ２）１３−ＣＦ３）３０，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０６２５】
【化１６４】
2019534283.tif 000169
【０６２６】
配列番号６４
名称：［シクロ−（Ｉ３−ｍ−ＣＯＰｈＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ（γ−Ｇｌｕ−（Ｐａｌ−１６−ＯＥｔ））３０，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０６２７】
【化１６５】
2019534283.tif 000170
【０６２８】
配列番号６５
名称：［シクロ−（Ｉ３−ｍ−ＣＯＰｈＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ（γ−Ｇｌｕ−ＣＯ（ＣＨ２）１１（ＣＤ２）３ＣＤ３）３０，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０６２９】
【化１６６】
2019534283.tif 000171
【０６３０】
配列番号６６
名称：［シクロ−（Ｉ３−ｍ−ＣＯＰｈＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ（γ−Ｇｌｕ−ＣＯ（ＣＨ２）１０−（２，４−（ＣＦ３）２−Ｐｈ））３０，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０６３１】
【化１６７】
2019534283.tif 000172
【０６３２】
配列番号６７
名称：［シクロ−（Ｉ３−ｍ−ＣＯＰｈＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ（γ−Ｇｌｕ−ＣＯ（ＣＨ２）１０−（３，５−（ＣＦ３）２−Ｐｈ））３０，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０６３３】
【化１６８】
2019534283.tif 000173
【０６３４】
配列番号６８
名称：［シクロ−（Ｉ３−ＣＯ（ＣＨ２）２ＮＨＣＯＣＨ２−Ｃ３０），Ｋ（（ＯＥＧ）２−γ−Ｇｌｕ−ＣＯＣ１６ＣＯ２Ｈ）１１，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０６３５】
【化１６９】
2019534283.tif 000174
【０６３６】
配列番号６９
名称：［シクロ−（Ｇ２−Ｅ３１），Ｓ４，Ｋ１１，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ２−３６
構造：
【０６３７】
【化１７０】
2019534283.tif 000175
【０６３８】
配列番号７０
名称：［シクロ−（Ｇ２−Ｅ３０），Ｓ４，Ｋ１１，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ２−３６
構造：
【０６３９】
【化１７１】
2019534283.tif 000176
【０６４０】
配列番号７１
名称：［シクロ−（Ｇ２−Ｅ３０），Ｓ４，Ｋ１１，（Ｎ−Ｍｅ−Ｒ３５）］−ＰＹＹ３〜３６
構造：
【０６４１】
【化１７２】
2019534283.tif 000177
【０６４２】
配列番号７２
名称：［シクロ−（Ｇ２−Ｅ３０），Ｓ４，Ｋ（（ＯＥＧ）２−γ−Ｇｌｕ−ＣＯＣ１６ＣＯ２Ｈ）１１，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ２−３６
構造：
【０６４３】
【化１７３】
2019534283.tif 000178
【０６４４】
配列番号７３
名称：［シクロ−（βＡ２−ＣＯＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ（ＰＥＧ６−ＡｃＢｒ）１１，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ２−３６
構造：
【０６４５】
【化１７４】
2019534283.tif 000179
【０６４６】
配列番号７４
名称：［シクロ−（βＡ２−ＣＯＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ（ＡｃＢｒ）１１，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ２−３６
構造：
【０６４７】
【化１７５】
2019534283.tif 000180
【０６４８】
配列番号７５
名称：［シクロ−（Ｉ３−ＣＯＣＨ２−Ｃ３１），Ｋ（ＰＥＧ１２−ＡｃＢｒ）１１，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０６４９】
【化１７６】
2019534283.tif 000181
【０６５０】
配列番号７６
名称：［シクロ−（βＡ２−ＣＯＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ（ＰＥＧ１２−ＡｃＢｒ）１１，Ｋ（ｍＰＥＧ１６）３０，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ２−３６
構造：
【０６５１】
【化１７７】
2019534283.tif 000182
【０６５２】
配列番号７７
名称：［シクロ−（βＡ２−ＣＯＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ（ＡｃＢｒ）１１，Ｋ（ｍＰＥＧ１２）２０，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ２−３６
構造：
【０６５３】
【化１７８】
2019534283.tif 000183
【０６５４】
配列番号７８
名称：［シクロ−（βＡ２−ＣＯＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ（ＰＥＧ１２−ＡｃＢｒ）１１，（Ｎ−Ｍｅ）Ｑ３４，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ２−３６
構造：
【０６５５】
【化１７９】
2019534283.tif 000184
【０６５６】
配列番号７９
名称：［シクロ−（βＡ２−ＣＯＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ（ＰＥＧ１２−ＡｃＢｒ）１１，Ｎ−Ｍｅ−Ｒ３５，ｐｓｉ−（Ｒ３５，３６Ｙ）］−ＰＹＹ２−３６
構造：
【０６５７】
【化１８０】
2019534283.tif 000185
【０６５８】
配列番号８０
名称：［シクロ−（βＡ２−ＣＯＣＨ２−ｈＣ３１），Ｒ４，Ｋ（ＰＥＧ１２−ＡｃＢｒ）１１，Ｗ３０，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ２−３６
構造：
【０６５９】
【化１８１】
2019534283.tif 000186
【０６６０】
配列番号８１
名称：［シクロ−（３Ｉ−ＣＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣＯＣＨ２−Ｃ３１），Ｒ４，Ｋ（ＰＥＧ１２−ＡｃＢｒ）１１，Ｗ３０，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０６６１】
【化１８２】
2019534283.tif 000187
【０６６２】
配列番号８２
名称：［シクロ−（Ｋ４−ＯＥＧ−ＣＯＣＨ２−Ｃ３１），Ｋ（ＰＥＧ１２−ＡｃＢｒ）１１，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ４−３６
構造：
【０６６３】
【化１８３】
2019534283.tif 000188
【０６６４】
配列番号８３
名称：［シクロ−（Ｉ３−ＣＯＣＨ２ＣＨ２ｔｒｉａｚｏｌｙｌＮｌｅ３１），Ｋ（ＰＥＧ１２−ＡｃＢｒ）１１，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０６６５】
【化１８４】
2019534283.tif 000189
【０６６６】
配列番号８４
名称：［シクロ−（Ｉ３−ｍ−ＣＯ−ｂｅｎｚｙｌ−ｈＣ３１），Ｋ（ＰＥＧ８−ｔｒｉａｚｏｌｙｌ−ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ−ＰＥＧ４−ＡｃＢｒ）１１，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ３−３６
構造：
【０６６７】
【化１８５】
2019534283.tif 000190
【０６６８】
配列番号８５
名称：［シクロ−（βＡ２−ＣＯＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ（ＰＥＧ１２−ＡｃＢｒ）２３，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ２−３６
構造：
【０６６９】
【化１８６】
2019534283.tif 000191
【０６７０】
配列番号８６
名称：［シクロ−（βＡ２−ＣＯＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ（ＰＥＧ１２−ＡｃＢｒ）２２，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ２−３６
構造：
【０６７１】
【化１８７】
2019534283.tif 000192
【０６７２】
配列番号８７
名称：［シクロ−（βＡ２−ＣＯＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ（ＰＥＧ１２−ＡｃＢｒ）７，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ２−３６
構造：
【０６７３】
【化１８８】
2019534283.tif 000193
【０６７４】
配列番号８８
名称：［シクロ−（Ｇ２−ＣＯＣＨ２−Ｃ３０），Ｋ（ＰＥＧ１２−ＡｃＢｒ）１１，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ２−３６
構造：
【０６７５】
【化１８９】
2019534283.tif 000194
【０６７６】
配列番号８９
名称：［シクロ−（Ｇ２−ＣＯＣＨ２−Ｃ３０），Ｋ（ＰＥＧ１２−ＡｃＢｒ）１１，Ｎ−Ｍｅ−Ｒ３５］−ＰＹＹ２−３６
構造：
【０６７７】
【化１９０】
2019534283.tif 000195
【０６７８】
配列番号９０
名称：［シクロ−（βＡ２−ＣＯＣＨ２−Ｃ３０），Ｋ（ＰＥＧ１２−ＡｃＢｒ）１１，Ｎ−Ｍｅ−Ｒ３５］−ＰＹＹ２−３６
構造：
【０６７９】
【化１９１】
2019534283.tif 000196
【０６８０】
配列番号９１
名称：［シクロ−（Ｇ２−ＣＯＣＨ２−ｈＣ３０），Ｋ（ＰＥＧ１２−ＡｃＢｒ）１１，Ｎ−Ｍｅ−Ｒ３５］−ＰＹＹ２−３６
構造：
【０６８１】
【化１９２】
2019534283.tif 000197
【０６８２】
配列番号９２
名称：［シクロ−（βＡ２−ＣＯＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ（ＰＥＧ１２−ＡｃＢｒ）１１，Ｎ−Ｍｅ−Ｒ３５］−ＰＹＹ２−３６
構造：
【０６８３】
【化１９３】
2019534283.tif 000198
【０６８４】
配列番号９３
名称：［シクロ−（Ｇ２−ＣＯＣＨ２−ｈＣ３０），Ｋ（ＰＥＧ１２−ＡｃＢｒ）１１，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ２−３６
構造：
【０６８５】
【化１９４】
2019534283.tif 000199
【０６８６】
配列番号９４
名称：［シクロ−（βＡ２−ＣＯＣＨ２−Ｃ３０），Ｋ（ＰＥＧ１２−ＡｃＢｒ）１１，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ２−３６
構造：
【０６８７】
【化１９５】
2019534283.tif 000200
【０６８８】
配列番号９５
名称：［シクロ−（Ｇ２−Ｅ３０），Ｓ４，Ｋ（ＡｃＢｒ）１１，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ２−３６
構造：
【０６８９】
【化１９６】
2019534283.tif 000201
【０６９０】
配列番号９６
名称：［シクロ−（βＡ２−ＣＯＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ（ＰＥＧ２４−ＡｃＢｒ）１１，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ２−３６
構造：
【０６９１】
【化１９７】
2019534283.tif 000202
【０６９２】
配列番号９７
名称：［シクロ−（Ｇ２−Ａｃ−ｈＣ３１），Ｋ（ＰＥＧ１２−ＡｃＢｒ）１１，ｐｓｉ−（Ｒ３５−Ｙ３６）］−ＰＹＹ２−３６
構造：
【０６９３】
【化１９８】
2019534283.tif 000203
【０６９４】
配列番号９８
名称：［シクロ−（Ｇ２−ＣＯＣＨ２−Ｃ３０），Ｋ（ＡｃＢｒ）１１，Ｎ−Ｍｅ−Ｒ３５］−ＰＹＹ２−３６
構造：
【０６９５】
【化１９９】
2019534283.tif 000204
【０６９６】
配列番号９９
名称：［シクロ−（βＡ２−ＣＯＣＨ２−Ｃ３０），Ｋ（ＡｃＢｒ）１１，Ｎ−Ｍｅ−Ｒ３５］−ＰＹＹ２−３６
構造：
【０６９７】
【化２００】
2019534283.tif 000205
【０６９８】
配列番号１００
名称：［シクロ−（βＡ２−ＣＯＣＨ２−Ｃ３０），Ｋ（ＡｃＢｒ）１１，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ２−３６
構造：
【０６９９】
【化２０１】
2019534283.tif 000206
【０７００】
配列番号１０１
名称：［シクロ−（βＡ２−ＣＯＣＨ２−ｈＣ３１），ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ２−３６
構造：
【０７０１】
【化２０２】
2019534283.tif 000207
【０７０２】
配列番号１０２
名称：［シクロ−（βＡ２−ＣＯＣＨ２−ｈＣ３１），Ｋ１１，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ２−３６
構造：
【０７０３】
【化２０３】
2019534283.tif 000208
【０７０４】
配列番号１０３
名称：［シクロ−（Ｇ２−Ｅ３０），Ｓ４，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ２−３６
構造：
【０７０５】
【化２０４】
2019534283.tif 000209
【０７０６】
配列番号１０４
名称：［シクロ−（Ｇ２−Ｅ３０），Ｓ４，Ｋ１１，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ２−３６
構造：
【０７０７】
【化２０５】
2019534283.tif 000210
【０７０８】
配列番号１０５
名称：［シクロ−（Ｇ２−ＣＯＣＨ２−Ｃ３０），Ｎ−Ｍｅ−Ｒ３５］−ＰＹＹ２−３６
構造：
【０７０９】
【化２０６】
2019534283.tif 000211
【０７１０】
配列番号１０６
名称：［シクロ−（Ｇ２−ＣＯＣＨ２−Ｃ３０），Ｋ１１，Ｎ−Ｍｅ−Ｒ３５］−ＰＹＹ２−３６
構造：
【０７１１】
【化２０７】
2019534283.tif 000212
【０７１２】
配列番号１０７
名称：［シクロ−（βＡ２−ＣＯＣＨ２−Ｃ３０），Ｎ−Ｍｅ−Ｒ３５］−ＰＹＹ２−３６
構造：
【０７１３】
【化２０８】
2019534283.tif 000213
【０７１４】
配列番号１０８
名称：［シクロ−（βＡ２−ＣＯＣＨ２−Ｃ３０），Ｋ１１，Ｎ−Ｍｅ−Ｒ３５］−ＰＹＹ２−３６
構造：
【０７１５】
【化２０９】
2019534283.tif 000214
【０７１６】
配列番号１０９
名称：［シクロ−（βＡ２−ＣＯＣＨ２−Ｃ３０），ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ２−３６
構造：
【０７１７】
【化２１０】
2019534283.tif 000215
【０７１８】
配列番号１１０
名称：［シクロ−（βＡ２−ＣＯＣＨ２−Ｃ３０），Ｋ１１，ｐｓｉ−（Ｒ３５，Ｙ３６）］−ＰＹＹ２−３６
構造：
【０７１９】
【化２１１】
2019534283.tif 000216
【０７２０】
実施例１１１：ヒトＮＰＹ２Ｒ  ｃＡＭＰインビトロ効力アッセイ（ｈＹ２アッセイ）
インビトロでＰＹＹ類似体の効力を試験するために使用される方法は、ヒトＮＰＹ２Ｒ  Ｇｉ−タンパク質結合受容体の調節を通してアデニル酸シクラーゼによって産生されたフォルスコリン誘導ｃＡＭＰの阻害を測定するように設計された細胞系アッセイであった。ヒトＮＰＹ２ＲトランスフェクトされたＨＥＫ細胞におけるフォルスコリン誘導ｃＡＭＰ産生は、用量依存的な方法でＰＹＹ類似体及び対照によるＮＰＹ２Ｒの活性化によって低減され、ＬＡＮＣＥ  ＦＲＥＴ系競合ｃＡＭＰイムノアッセイ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）において測定された。
【０７２１】
細胞を冷凍保存から解凍し、１５ｍＬの細胞培地（ＤＭＥＭ／高グルコース（Ｃｅｌｌｇｒｏ）、１０％ＦＢＳ（Ｈｙｃｌｏｎｅ）、１％Ｐｅｎ／Ｓｔｒｅｐ（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、１％Ｌ−グルタミン（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）、１％ピルビン酸Ｎａ（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ））に添加した。細胞を４５０×ｇで５分間遠心分離し、上清を吸引し、細胞を０．２×１０６細胞／ｍｌの密度で細胞培地に再懸濁した。細胞を、Ｂｉｏｃｏａｔコラーゲンコーティングした白色３８４ウェルプレート（Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）に、５０００細胞／ウェルの最終密度に分注し（２５μＬ／ウェル）、３７℃、５％ＣＯ２で１６〜２４時間インキュベートした。アッセイプレート中の上清をデカントした。ＰＹＹ類似体及び対照の希釈物を、１×ＨＢＳＳ（Ｃｅｌｌｇｒｏ）、５ｍＭ  ＨＥＰＥＳ（Ｃｅｌｌｇｒｏ）、０．１％ＢＳＡ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）、及び０．５ｍＭ  ３−イソブチル−１−メチルキサンチン（Ｓｉｇｍａ）において調製し、６μＬ／ウェルの各試料を指定ウェルに添加した。Ｌａｎｃｅ  ｃＡＭＰ抗体（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）を、１ｘＨＢＳＳ（Ｃｅｌｌｇｒｏ）、５ｍＭ  ＨＥＰＥＳ（Ｃｅｌｌｇｒｏ）、０．００５ｍＭフォルスコリン（Ｓｉｇｍａ）、０．１％ＢＳＡ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）、及び０．５ｍＭ  ３−イソブチル−１−メチルキサンチン（Ｓｉｇｍａ）に１：１００希釈し、６μＬの抗体混合物をプレートに添加し、次いで、これを室温で２５分間インキュベートした。次いで、ビオチン−ｃＡＭＰ（１：７５０）及びユウロピウム−Ｗ８０４４（１：２２５０）（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）を含有する１２μＬ／ウェルのＬＡＮＣＥ  ｃＡＭＰ検出試薬ミックスを各アッセイプレートに添加し、次いで、これを室温で２時間インキュベートした。プレートをＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ  Ｅｎｖｉｓｉｏｎプレートリーダー（励起３２０ｎｍ、発光−６１５ｎｍ及び６６５ｎｍ）で読み取り、相対蛍光単位（ＲＦＵ）を（６１５ｎｍ／６６５ｎｍ）×１０，０００．として計算した。全ての試料は３つ組で測定された。Ｅｕｄｅａｎ  Ｓｈａｗによって設計されたＣｒｕｃｉｂｌｅ社内データ分析ソフトウェアを使用して、データを分析した。各ウェル内の未知のｃＡＭＰ濃度は、各プレート内に含まれる既知のｃＡＭＰ濃度の参照標準から補間された。ＥＣ５０、Ｌｏｇ（ＥＣ５０）、ＨｉｌｌＳｌｏｐｅ（ｎＨ）、頂部、及び底部などのパラメータは、Ｎｏｎ−Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ  ＆  Ｃｏｍｐｕｔｉｎｇ  ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ａｔ  Ｊａｎｓｓｅｎ  Ｒ＆Ｄにより実施された、Ｒ環境内の非線形加重最小二乗法アプリケーションを使用して、４−Ｐモデルを適合させたｌｏｇ化合物濃度に対してｃＡＭＰ濃度値をプロットすることによって得られた（オープンソースｈｔｔｐ：／／ｃｒａｎ．ｕｓ．ｒ−ｐｒｏｊｅｃｔ．ｏｒｇ／）。
【０７２２】
同じアッセイにおいて対照として使用された、ＰＹＹ３〜３６に対する本発明のＮＴＳＣ−ＰＹＹ類似体の効力を以下の表２に示す。
【０７２３】
【表２−１】
2019534283.tif 000217
【０７２４】
【表２−２】
2019534283.tif 000218
【０７２５】
実施例１１２：インビボでの有効性試験
Ａ）痩せたＣ５７ＢＬ６Ｎマウスにおける食物摂取：急性投与
雄のＣ５７ＢＬ／６マウス（１０〜１２週齢）をＴａｃｏｎｉｃ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙから得た。１２時間の光／暗サイクルの温度制御された部屋の、ＡｌｐｈａＤｒｉ床敷を有する各ケージに１匹のマウスを収容した。マウスには水を自由に摂取させ、通常の食餌（Ｌａｂ  Ｄｉｅｔ  Ｃａｔ：５００１）で維持した。実験開始７２時間以上前に、動物をＢｉｏＤＡＱケージ（Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｄｉｅｔｓ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ  Ｂｒｕｎｓｗｉｃｋ，ＮＪ））に馴化させた。
【０７２６】
ＢｉｏＤＡＱケージに馴化させたら、前２４時間にわたる個々の食物摂取に基づいて、マウスを８匹の動物のコホートに分けた。４：００〜５：００ｐｍに、動物の体重を量り、皮下投与を介して１μｍｏｌ／ｋｇ（５００ｎｍｏｌ／ｍＬ）の用量で、ビヒクル（２．７ｍＭリン酸二ナトリウム、６１．３３ｍＭプロピレングリコール、１９．５ｍＭフェノール、ｐＨ８．２）又は試験化合物のいずれかで処置した。化合物投与後、各ケージの食物重量の変化を、ＢｉｏＤＡＱ自動監視システムによって２４時間連続的に記録した。ホッパー及びケージの周囲の領域からバキュームで屑を毎日除去した。必要に応じて飼料を補充した。化合物投与後２４時間にわたるビヒクルに対する平均累積食物摂取量の割合を計算し、表３に報告する。ＰｒｉｓｍにおけるＴｕｋｅｙの事後検定を用いて、一方向ＡＮＯＶＡを使用して統計分析を実行した。全てのデータは平均として提示される。
【０７２７】
Ｂ）食餌誘導型肥満（ＤＩＯ）マウスにおける体重減少：急性投与
雄のＤＩＯ  Ｃ５７ＢＬ／６マウス（２０週齢、高脂肪食餌で１４週間）をＴａｃｏｎｉｃ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙから得た。１２時間の光／暗サイクルの温度制御された部屋の、ＡｌｐｈａＤｒｉ床敷を有する各ケージに１匹のマウスを収容した。マウスには水を自由に摂取させ、高脂肪食餌（Ｄ１２４９２，Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｄｉｅｔ）で維持した。実験開始の少なくとも１週間前に、動物を施設に馴化させた。
【０７２８】
投与前日、マウスを、個々の体重に基づいて８匹の動物のコホートに分けた。翌日の３：００〜４：００ｐｍに、動物の体重を量り、皮下投与を介して１００ｎｍｏｌ／ｋｇ（５０ｎｍｏｌ／ｍＬ）の用量で、ビヒクル（２．７ｍＭリン酸二ナトリウム、６１．３３ｍＭプロピレングリコール、１９．５ｍＭフェノール、ｐＨ８．２）又は試験化合物のいずれかで処置した。体重を投与２４時間後に測定し、体重減少の割合を計算し、表３に報告する。ＰｒｉｓｍにおけるＴｕｋｅｙの事後検定を用いて、一方向ＡＮＯＶＡを使用して統計分析を実行した。全てのデータは平均として提示される。
【０７２９】
Ｃ）食餌誘導型肥満マウスにおける体重減少：慢性投与
雄のＤＩＯ  Ｃ５７ＢＬ／６マウス（２０週齢、高脂肪食餌で１４週間）をＴａｃｏｎｉｃ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙから得た。１２時間の光／暗サイクルの温度制御された部屋の、ＡｌｐｈａＤｒｉ床敷を有する各ケージに１匹のマウスを収容した。マウスには水を自由に摂取させ、高脂肪食餌（Ｄ１２４９２，Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｄｉｅｔ）で維持した。実験開始の少なくとも１週間前に、動物を施設に馴化させた。
【０７３０】
投与前日、マウスを、個々の体重に基づいて分けた。その後７日間の各日の３：００〜４：００ｐｍに、動物の体重を量り、皮下投与を介して１００ｎｍｏｌ／ｋｇ（５０ｎｍｏｌ／ｍＬ）の用量で、ビヒクル（２．７ｍＭリン酸二ナトリウム、６１．３３ｍＭプロピレングリコール、１９．５ｍＭフェノール、ｐＨ８．２）又は試験化合物のいずれかで処置した。７日後、体重を測定し、体重減少の割合を計算し、表３に報告する。ＰｒｉｓｍにおけるＴｕｋｅｙの事後検定を用いて、一方向ＡＮＯＶＡを使用して統計分析を実行した。全てのデータは平均として提示される。
【０７３１】
【表３】
2019534283.tif 000219
ＮＤ＝決定されず
＃％  ビヒクル対照動物に対する体重変化
＊ｐ  ＜  ０．０５；＊＊ｐ  ＜  ０．０１；＊＊＊ｐ  ＜  ０．００１
【０７３２】
上記の明細書は、説明を目的として与えられる実施例と共に本発明の原理を教示するものであるが、本発明の実施には、以下の特許請求の範囲及びその均等物の範囲内に含まれる全ての通常の変形例、適合例及び／又は改変例が包含される点が理解されるであろう。
【０７３３】
引用した全ての文献は、参照により本明細書に援用される。
【配列表】
2019534283000001.app
【国際調査報告】
2019534283.tif 000242
2019534283.tif 000243
2019534283.tif 000244