(57)【要約】  本発明は、約５〜約６の範囲のｐＨを有する生理学的緩衝液中に、エキセンディン（９−３９）又はその薬学的に許容される塩と等張化剤とを含む液体医薬製剤が提供される。一部の実施形態では、液体医薬製剤は、酢酸緩衝液又はクエン酸緩衝液中にエキセンディン（９−３９）又はその薬学的に許容される塩を含む。被験者の高インスリン性低血糖症を治療又は予防する方法であって、液体医薬製剤を被験者に投与するステップを含む方法も提供される。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
約５〜約６の範囲のｐＨを有する生理学的に許容される緩衝液中に、エキセンディン（９−３９）又はその薬学的に許容される塩と等張化剤とを含む液体医薬製剤。
【請求項２】
前記生理学的に許容される緩衝液が、酢酸緩衝液又はクエン酸緩衝液を含む、請求項１に記載の液体医薬製剤。
【請求項３】
前記生理学的に許容される緩衝液が、酢酸ナトリウム又はクエン酸ナトリウムを含む、請求項１又は２に記載の液体医薬製剤。
【請求項４】
前記生理学的に許容される緩衝液が、約５ｍＭ〜約３０ｍＭの濃度で酢酸ナトリウム又はクエン酸ナトリウムを含む、請求項１〜３のいずれか１項に記載の液体医薬製剤。
【請求項５】
前記生理学的に許容される緩衝液が、約１０ｍＭの濃度で酢酸ナトリウムを含む、請求項１〜４のいずれか１項に記載の液体医薬製剤。
【請求項６】
前記緩衝液が、５．２〜５．８の範囲のｐＨを有する、請求項１〜５のいずれか１項に記載の液体医薬製剤。
【請求項７】
前記ｐＨが、約５．５である、請求項６に記載の液体医薬製剤。
【請求項８】
前記等張化剤が、マンニトール、デキストロース、グリセリン、ラクトース、スクロース、又はトレハロースを含む、請求項１〜７のいずれか１項に記載の液体医薬製剤。
【請求項９】
前記等張化剤が、マンニトールを含む、請求項８に記載の液体医薬製剤。
【請求項１０】
前記等張化剤が、約２０〜約６０ｍｇ／ｍｌの量で存在する、請求項８又は９に記載の液体医薬製剤。
【請求項１１】
前記等張化剤が、約２９０ｍＯｓｍ／ｋｇの浸透圧を達成する量で存在する、請求項１０に記載の液体医薬製剤。
【請求項１２】
前記エキセンディン（９−３９）の薬学的に許容される塩が、エキセンディン（９−３９）酢酸塩又はエキセンディン（９−３９）トリフルオロ酢酸塩である、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の液体医薬製剤。
【請求項１３】
前記エキセンディン（９−３９）又はその薬学的に許容される塩が、約１０ｍｇ／ｍｌ〜約１２０ｍｇ／ｍｌの濃度である、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の液体医薬製剤。
【請求項１４】
前記エキセンディン（９−３９）又はその薬学的に許容される塩が、少なくとも１５ｍｇ／ｍｌの濃度である、請求項１３に記載の液体医薬製剤。
【請求項１５】
前記エキセンディン（９−３９）又はその薬学的に許容される塩が、約３０ｍｇ／ｍｌの濃度である、請求項１３に記載の液体医薬製剤。
【請求項１６】
前記エキセンディン（９−３９）又はその薬学的に許容される塩が、約６０ｍｇ／ｍｌの濃度である、請求項１３に記載の液体医薬製剤。
【請求項１７】
前記エキセンディン（９−３９）又はその薬学的に許容される塩が、前記製剤中に検出可能な凝集を呈示しない、請求項１〜１６のいずれか１項に記載の液体医薬製剤。
【請求項１８】
皮下投与のために製剤化される、請求項１〜１７のいずれか１項に記載の液体医薬製剤。
【請求項１９】
前記液体医薬製剤が、ヒト被験者に投与されるとき、０．９％通常生理食塩水中で製剤化された同じ用量のエキセンディン（９−３９）又はその薬学的に許容される塩を含む組成物と比較して、向上した薬物動態プロフィールを有する、請求項１〜１８のいずれか１項に記載の液体医薬製剤。
【請求項２０】
前記液体医薬製剤が、ヒト被験者に投与されるとき、０．９％通常生理食塩水中で製剤化された同じ用量のエキセンディン（９−３９）又はその薬学的に許容される塩を含む組成物よりも高いエキセンディン（９−３９）のＣｍａｘを呈示する、請求項１９に記載の液体医薬製剤。
【請求項２１】
前記液体医薬製剤が、ヒト被験者に投与されるとき、０．９％通常生理食塩水中で製剤化された同じ用量のエキセンディン（９−３９）又はその薬学的に許容される塩を含む組成物よりも高いエキセンディン（９−３９）の１２時間ＡＵＣを呈示する、請求項１９に記載の液体医薬製剤。
【請求項２２】
前記液体医薬製剤が、ヒト被験者に投与されるとき、０．９％通常生理食塩水中で製剤化された同じ用量のエキセンディン（９−３９）又はその薬学的に許容される塩を含む組成物よりも高いエキセンディン（９−３９）のトラフ血漿濃度を呈示する、請求項１９に記載の液体医薬製剤。
【請求項２３】
被験者の高インスリン性低血糖症を治療又は予防する方法であって、請求項１〜２２のいずれか１項に記載の液体医薬製剤を前記被験者に投与するステップを含む方法。
【請求項２４】
前記被験者が、上部消化管処置を以前受けたことがある、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
前記被験者が、肥満処置を以前受けたことがある、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記方法が、エキセンディン（９−３９）を含む液体医薬製剤を、約４５ｍｇ〜約７５ｍｇの用量で１日１回（ＱＤ）前記被験者に皮下投与するステップを含む、請求項２３〜２５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２７】
前記方法が、エキセンディン（９−３９）を含む液体医薬製剤を、約６０ｍｇＱＤの用量で前記被験者に皮下投与するステップを含む、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
前記方法が、エキセンディン（９−３９）を含む液体医薬製剤を、約３０ｍｇの用量で１日２回（ＢＩＤ）前記被験者に皮下投与するステップを含む、請求項２３〜２５のいずれか１項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１６年１１月２１日に提出された米国仮出願第６２／４２４，９７９号明細書、及び２０１７年６月８日に提出された米国仮出願第６２／５１７，０６５号明細書に対する優先権を主張する。なお、これら文献の各々の全内容は、参照により本明細書に組み込むものとする。
【０００２】
本発明は、約５〜約６の範囲のｐＨを有する生理学的に許容される緩衝液中のエキセンディン（９−３９）又はその薬学的に許容される塩及び等張化剤の改善された医薬製剤、並びに肥満手術後の低血糖症（ＰＢＨ）を含む高インスリン性低血糖症を治療若しくは予防するためにエキセンディン（９−３９）の製剤を使用する方法に関し、従って、医学、医薬品化学、薬理学、化学、及び生物学の分野に関する。
【背景技術】
【０００３】
インスリンは、高血糖値を制御するために分泌されるホルモンである。インスリン分泌の異常な上昇は、重度の低血糖症を引き起こす恐れがあり、これは、発作、脳損傷及び死を招き得る。グルカゴン様ペプチド−１（ＧＬＰ−１）は、消化管ホルモンであり、これは、腸管Ｌ−細胞から食後に放出され、膵臓のβ細胞上のＧＬＰ−１受容体に結合し、これによってインスリン放出を増大する。ＰＢＨを有する患者の場合、ＧＬＰ−１媒介性インスリン分泌が増大する。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
米国では毎年約１５０，０００〜２００，０００件の肥満外科手術が実施されている。重度の肥満を治療するための肥満手術の件数が増えるにつれ、ＰＢＨを経験する個体の数も増加する。従って、高インスリン性低糖症及びＰＢＨを安全且つ有効に緩和する治療法のアンメットニーズがますます高まっている。
【０００５】
エキセンディン（９−３９）は、グルカゴン様ペプチド−１（ＧＬＰ−１）受容体を選択的にターゲティングし、遮断して、ＰＢＨ患者の膵臓によるインスリン分泌を正常化することにより、低血糖症を軽減する３１−アミノ酸ペプチドである。静脈内又は皮下投与のために食塩水中で再構成されるエキセンディン（９−３９）が、ＰＢＨの治療薬として現在進行中のヒト臨床試験である（Ｓｔａｎｆｏｒｄ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｔｒｉａｌｓ，Ｃｌｉｎｉｃａｌｔｒｉａｌｓ．ｇｏｖ．，ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｔｒｉａｌｓ  ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｒｓ：ＮＣＴ０２７７１５７４及びＮＣＴ０２５５０１４５）。しかし、効力、純度及び安定性の向上を提供するエキセンディン（９−３９）の改善された液体医薬製剤に対するニーズは依然として存在する。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
一態様では、約５〜約６の範囲のｐＨを有する生理学的緩衝液中にエキセンディン（９−３９）又はその薬学的に許容される塩を含む液体医薬製剤が提供される。一部の実施形態では、液体医薬製剤は、薬学的に許容される塩のエキセンディン（９−３９）酢酸塩又はエキセンディン（９−３９）トリフルオロ酢酸塩を含む。
【０００７】
一部の実施形態では、生理学的に許容される緩衝液は、酢酸緩衝液、クエン酸緩衝液、リン酸緩衝液、又はヒスチジン緩衝液である。一部の実施形態では、生理学的に許容される緩衝液は、酢酸ナトリウム又はクエン酸ナトリウムである。一部の実施形態では、緩衝剤（例えば、酢酸ナトリウム又はクエン酸ナトリウム）は、約５ｍＭ〜約３０ｍＭの濃度で製剤中に存在する。一部の実施形態では、緩衝剤（例えば、酢酸ナトリウム又はクエン酸ナトリウム）は、約１０ｍＭ〜約３０ｍＭ（例えば、１０ｍＭ〜２０ｍＭ）の濃度で製剤中に存在する。一部の実施形態では、生理学的に許容される緩衝液は、約１０ｍＭ、約２０ｍＭ、又は約３０ｍＭの濃度で酢酸ナトリウムを含む。一部の実施形態では、生理学的に許容される緩衝液は、約１０ｍＭの濃度で酢酸ナトリウムを含む。一部の実施形態では、生理学的に許容される緩衝液は、約１０ｍＭの濃度でクエン酸ナトリウムを含む。一部の実施形態では、生理学的に許容される緩衝液は、少なくとも約１０ｍＭの濃度で酢酸ナトリウムを含む。一部の実施形態では、生理学的に許容される緩衝液は、少なくとも約１０ｍＭの濃度でクエン酸ナトリウムを含む。
【０００８】
一部の実施形態では、緩衝液体製剤は、等張化剤を含む。一部の実施形態では、等張化剤は、マンニトール、デキストロース、グリセリン、ラクトース、スクロース、トレハロース、又はこれらの混合物を含む。一部の実施形態では、等張化剤は、マンニトールである。一部の実施形態では、等張化剤は、約２０〜約６０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。一部の実施形態では、等張化剤は、約４５ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。一部の実施形態では、等張化剤は、約２０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。一部の実施形態では、等張化剤は、約２９０ｍＯｓｍ／ｋｇの等生理学的（ｉｓｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ）浸透圧を目標に添加する。
【０００９】
一部の実施形態では、緩衝液体製剤は、５を超えるｐＨ、例えば、少なくともｐＨ５．１〜約ｐＨ６．０を有する。一部の実施形態では、緩衝液体製剤は、５．２〜５．８の範囲のｐＨを有する緩衝液を含む。一部の実施形態では、バッファーは、約５．５のｐＨを有する。
【００１０】
一部の実施形態では、緩衝液体製剤は、約１０〜約６０ｍｇ／ｍｌ（例えば、約１０ｍｇ／ｍｌ、約１５ｍｇ／ｍｌ、約２０ｍｇ／ｍｌ、約２５ｍｇ／ｍｌ、約３０ｍｇ／ｍｌ、約３５ｍｇ／ｍｌ、約４０ｍｇ／ｍｌ、約４５ｍｇ／ｍｌ、約５０ｍｇ／ｍｌ、約５５ｍｇ／ｍｌ、若しくは約６０ｍｇ／ｍｌ）の濃度（例えば、ペプチド濃度）で、エキセンディン（９−３９）又はその薬学的に許容される塩を含む。一部の実施形態では、緩衝液体製剤は、約３０〜約１８０ｍｇ／ｍｌ、例えば、約３０ｍｇ／ｍｌ〜約１５０ｍｇ／ｍｌ、約３０ｍｇ／ｍｌ〜約１２０ｍｇ／ｍｌ、約５０ｍｇ／ｍｌ〜約１５０ｍｇ／ｍｌ、又は約６０ｍｇ／ｍｌ〜約１２０ｍｇ／ｍｌ（例えば、約３０ｍｇ／ｍｌ、約４０ｍｇ／ｍｌ、約５０ｍｇ／ｍｌ、約６０ｍｇ／ｍｌ、約７０ｍｇ／ｍｌ、約８０ｍｇ／ｍｌ、約９０ｍｇ／ｍｌ、約１００ｍｇ／ｍｌ、約１１０ｍｇ／ｍｌ、約１２０ｍｇ／ｍｌ、約１３０ｍｇ／ｍｌ、約１４０ｍｇ／ｍｌ、約１５０ｍｇ／ｍｌ、約１６０ｍｇ／ｍｌ、約１７０ｍｇ／ｍｌ、若しくは約１８０ｍｇ／ｍｌ）の濃度で、エキセンディン（９−３９）又はその薬学的に許容される塩を含む。一部の実施形態では、緩衝液体製剤は、約１５ｍｇ／ｍｌ、３０ｍｇ／ｍｌ、４５ｍｇ／ｍｌ、若しくは６０ｍｇ／ｍｌの濃度でエキセンディン（９−３９）又はその薬学的に許容される塩を含む。一部の実施形態では、緩衝液体製剤は、少なくとも１５ｍｇ／ｍｌの濃度でエキセンディン（９−３９）又はその薬学的に許容される塩を含む。一部の実施形態では、緩衝液体製剤は、約３０ｍｇ／ｍｌの濃度でエキセンディン（９−３９）又はその薬学的に許容される塩を含む。一部の実施形態では、緩衝液体製剤は、３０ｍｇ／ｍｌを超える濃度でエキセンディン（９−３９）又はその薬学的に許容される塩を含む。一部の実施形態では、緩衝液体製剤は、少なくとも６０ｍｇ／ｍｌの濃度でエキセンディン（９−３９）又はその薬学的に許容される塩を含む。一部の実施形態では、緩衝液体製剤は、約６０ｍｇ／ｍｌの濃度でエキセンディン（９−３９）又はその薬学的に許容される塩を含む。一部の実施形態では、緩衝液体製剤は、約９０ｍｇ／ｍｌの濃度でエキセンディン（９−３９）又はその薬学的に許容される塩を含む。一部の実施形態では、緩衝液体製剤は、約１２０ｍｇ／ｍｌの濃度でエキセンディン（９−３９）又はその薬学的に許容される塩を含む。
【００１１】
一部の実施形態では、エキセンディン（９−３９）又はその薬学的に許容される塩を含む緩衝液体製剤は、エキセンディン（９−３９）又はその薬学的に許容される塩の検出可能な凝集を呈示しない。一部の実施形態では、緩衝液体製剤は、５０℃で１８、２４、３６、４８若しくは７２時間にわたって保存されるとき、緩衝液体製剤が非ゼラチン状溶液として残るか否かによって決定される場合、エキセンディン（９−３９）又はその薬学的に許容される塩の検出可能な凝集を呈示しない。一部の実施形態では、緩衝液体製剤は、５０℃で１８、２４、３６、４８若しくは７２時間にわたって保存されるとき、凝集又は沈殿について緩衝液体製剤の視覚又は光学顕微鏡検査により決定される場合、エキセンディン（９−３９）又はその薬学的に許容される塩の検出可能な凝集を呈示しない。
【００１２】
一部の実施形態では、本明細書に記載のエキセンディン（９−３９）又はその薬学的に許容される塩を含む緩衝液体製剤は、皮下投与のために製剤化される。一部の実施形態では、緩衝液体製剤は、１日１回（ＱＤ）又は１日２回（ＢＩＤ）の皮下投与のために製剤化される。一部の実施形態では、緩衝液体製剤は、朝、夕方、又はその両方に投与される。一部の実施形態では、緩衝液体製剤は、朝（例えば、朝食の少なくとも６０分前）に、皮下注射によりＱＤ投与される。一部の実施形態では、緩衝液体製剤は、皮下注射によりＢＩＤ（例えば、朝及び夕方）投与される。
【００１３】
一部の実施形態では、本明細書に記載のエキセンディン（９−３９）又はその薬学的に許容される塩を含む緩衝液体製剤は、ヒト被験者に投与されるとき、０．９％通常生理食塩水中で製剤化された同じ用量のエキセンディン（９−３９）又はその薬学的に許容される塩を含む組成物と比較して、向上した薬物動態プロフィールを示す。一部の実施形態では、緩衝液体製剤は、０．９％通常生理食塩水中で製剤化された同じ用量のエキセンディン（９−３９）又はその薬学的に許容される塩を含む組成物よりも高いエキセンディン（９−３９）のＣｍａｘ（例えば、製剤を投与された被験者からの血漿サンプル中で測定して）を呈示する。
【００１４】
別の態様では、本明細書に記載の緩衝液体エキセンディン（９−３９）製剤を用いた治療方法が提供される。一部の実施形態では、高インスリン性低血糖症を治療又は予防する方法が提供される。一部の実施形態では、肥満手術後の低血糖症を治療又は予防する方法が提供される。一部の実施形態では、本明細書に記載の緩衝液体エキセンディン（９−３９）製剤は、約５ｍｇ〜約３０ｍｇの範囲の用量で１日２回（ＢＩＤ）、例えば約７．５ｍｇ〜約３０ｍｇＢＩＤ又は約１０ｍｇ〜約３０ｍｇＢＩＤで、例えば約７．５ｍｇ、約１０ｍｇ、約１５ｍｇ、約２０ｍｇ、約２５ｍｇ、若しくは約３０ｍｇＢＩＤの用量で被験者に投与する。一部の実施形態では、本明細書に記載の緩衝液体エキセンディン（９−３９）製剤は、約２０ｍｇ〜約７５ｍｇの範囲の用量で１日１回（ＱＤ）、例えば約３０ｍｇ〜約７５ｍｇＱＤ、３０〜６０ｍｇＱＤ、４０〜７０ｍｇＱＤ、又は３０〜６０ｍｇＱＤで、例えば約３０ｍｇ、約３５ｍｇ、約４０ｍｇ、約４５ｍｇ、約５０ｍｇ、約５５ｍｇ、約６０ｍｇ、約６５ｍｇ、約７０ｍｇ、若しくは約７５ｍｇＱＤの用量で被験者に投与する。一部の実施形態では、本明細書に記載の緩衝液体エキセンディン（９−３９）製剤は、約６０ｍｇＱＤの用量で被験者に投与する。一部の実施形態では、本明細書に記載の緩衝液体エキセンディン（９−３９）製剤は、約３０ｍｇＢＩＤの用量で被験者に投与する。一部の実施形態では、高インスリン性低血糖症を治療又は予防する方法は、上部消化管処置、例えば、肥満手術又は代謝処置（例えば、胃バイパス術）を以前受けたことがある被験者に対する緩衝液体エキセンディン（９−３９）製剤の投与を含む。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
【図１】５０℃で一晩静置した、０．９％通常生理食塩水中で調製されたエキセンディン（９−３９）製剤のアリコートを示す光学顕微鏡画像である。左側パネル：２４時間後に形成され、顕微鏡下でゼラチン状に見える凝集体。右側パネル：３６時間後、溶液は、ゼリー状の粘性液体の外観を有した。
【図２Ａ−２Ｂ】エキセンディン（９−３９）製剤の効力及び純度データである。（Ａ）様々なイオン強度を有する酢酸又はクエン酸緩衝液中で調製された１５ｍｇ／ｍｌに相当する濃度のエキセンディン（９−３９）を含む製剤について、５０℃で５日間にわたり観察された効力データを示すグラフ。（Ｂ）様々なイオン強度を有する酢酸又はクエン酸緩衝液中で調製された１５ｍｇ／ｍｌに相当する濃度のエキセンディン（９−３９）を含む製剤について、５０℃で５日間にわたり観察された純度データを示すグラフ。
【図３】５０℃で５日間にわたり、１０ｍＭ酢酸ナトリウム中で調製された１５ｍｇ／ｍｌに相当するエキセンディン（９−３９）濃度を有する製剤の純度及び効力に対するｐＨの作用を示すグラフである。
【図４】１０ｍＭ酢酸ナトリウム中で調製された１５ｍｇ／ｍｌに相当するエキセンディン（９−３９）濃度を有する製剤に観察される不純物に対するｐＨの作用を示すグラフである。
【図５Ａ−５Ｂ】エキセンディン（９−３９）を含む製剤の血漿薬物動態プロフィールである。（Ａ）０．７２ｍｇ／ｋｇの用量（総用量７．２ｍｇ、３０ｍｇのヒト用量に相当する）でイヌへの皮下投与により送達される、０．９％通常生理食塩水中で製剤化されたエキセンディン（９−３９）酢酸塩粉末の血漿薬物動態プロフィール。（Ｂ）ｐＨ５．５の１０ｍＭ酢酸ナトリウム中で製剤化され、４５ｍｇ／ｍｌのマンニトールを含み、ヒトにおける１５ｍｇ／ｍｌ、３０ｍｇ／ｍｌ、又は４５ｍｇ／ｍｌに相当するエキセンディン（９−３９）の濃度でイヌへの皮下投与により送達される、エキセンディン（９−３９）酢酸塩（総用量７．２ｍｇ）の血漿薬物動態プロフィール。
【図６】再構成された凍結乾燥エキセンディン（９−３９）（「パートＡ」）及び緩衝液体エキセンディン（９−３９）（「パートＢ」）製剤の各々についての参加者の人数、投与、並びに経口グルコース負荷試験時点を含む、試験の概略図である。
【図７Ａ−７Ｄ】食塩水中で再構成された約３０ｍｇの凍結乾燥エキセンディン（９−３９）（「Ｌｙｏ  Ｅｘ９−３９」）（Ａ、Ｃ）、ｎ＝６、又は３０ｍｇの緩衝液体エキセンディン（９−３９）（「Ｌｉｑ  Ｅｘ９−３９」）（Ｂ、Ｄ）、ｎ＝４を用いた処置のベースライン及び最終日のＯＧＴＴに対する平均代謝応答を示す。時間に対する血漿濃度（平均±ＳＥＭ）及び挿入図のＡＵＣレベル（平均±ＳＥＭ）をグルコース（Ａ、Ｂ）及びインスリン（Ｃ、Ｄ）について示す。ベースライン（ＢＬ）：丸を含む実線、黒いバー（挿入図）。Ｌｙｏ  Ｅｘ９−３９：正方形を含む破線、赤いバー（挿入図）。Ｌｉｑ  Ｅｘ９−３９：三角を含む破線、青いバー（挿入図）。ベースライン試験は全て、グルコース＜５０ｍｇ／ｄＬで停止し、ＩＶデキストロースを投与した。１２０分以降に示すベースラインデータは、最終観察値による外挿（Ｌａｓｔ  ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎ  ｃａｒｒｉｅｄ  ｆｏｒｗａｒｄ）（ＬＯＣＦ）を表し、それによって、処置とベースライン結果の間の真の差を過小評価している。ペアード両側ペアードスチューデントｔ検定によるＰ値：＊≦０．０５；＊＊≦０．０１。
【図８Ａ−８Ｃ】食塩水中で再構成された凍結乾燥エキセンディン（９−３９）（「Ｌｙｏ  Ｅｘ９−３９」）の複数漸増用量（緑、黄、オレンジ、赤）及び３０ｍｇの緩衝液体エキセンディン（９−３９）製剤（「Ｌｉｑ  Ｅｘ９−３９」）（青）による処置のベースラインと最終日との間のＯＧＴＴに対する応答の改善を示す。変化率（％）（平均±ＳＥＭ）をグルコース最下点（Ａ）、インスリンピーク（Ｂ）、及び低血糖症状スコア（Ｃ）について示す。症状は、エジンバラ低血糖症状尺度（Ｅｄｉｎｂｕｒｇｈ  Ｈｙｐｏｇｌｙｃｅｍｉａ  Ｓｙｍｐｔｏｍ  Ｓｃａｌｅ）に従う５点リッカート尺度（Ｌｉｋｅｒｔ  ｓｃａｌｅ）（０＝なし；５＝重度）に基づき等級付けした：自律型（発汗、震え、動悸、空腹感）；神経低糖症（目のかすみ、錯乱、眠気、奇妙な行動、言語障害、協調不能、眩暈、集中不能）；不快感（吐き気、頭痛）。ペアード両側ペアードスチューデントｔ検定によるＰ値：＊≦０．０５；＊＊≦０．０１。ベースライン試験は全て、グルコース＜５０ｍｇ／ｄＬで停止した後、ＩＶデキストロースを投与したため、改善率（％）を過小評価している。エキセンディン（９−３９）＜１８ｍｇを受けた被験者は、ＩＶデキストロースによるレスキューを必要とした。
【図９Ａ−９Ｂ】エキセンディン（９−３９）を含む製剤の薬物動態プロフィールである。（Ａ）食塩水で再構成された複数漸増用量の凍結乾燥エキセンディン（９−３９）（「Ｌｙｏ  Ｅｘ９−３９」）（赤）又は３０ｍｇの緩衝液体エキセンディン（９−３９）製剤（「Ｌｉｑ  Ｅｘ９−３９」）（青）の、最終日での１９人のＰＢＨ被験者における用量及び製剤別の１２時間薬物動態プロフィール。用量（ｍｇ）別の時間に対する血漿濃度（平均±ＳＥＭ）。（Ｂ）複数漸増用量のＬｙｏ  Ｅｘ  ９−３９（赤）又はＬｉｑ  Ｅｘ９−３９（青）の、最終日での１９人のＰＢＨ被験者における用量及び製剤別のＡＵＣエキセンディン（９−３９）濃度。用量（ｍｇ／ｋｇ）に対する個別の血漿ＡＵＣ濃度。
【図１０Ａ−１０Ｂ】エキセンディン（９−３９）を含む製剤の２４時間薬物動態プロフィールである。（Ａ）７．５〜９０ｍｇの範囲の用量の緩衝液体エキセンディン（９−３９）製剤の単回皮下投与後のＰＫプロフィール。用量（ｍｇ）別の時間に対する血漿濃度（平均）。Ｓ１＝単一漸増用量試験、７．５ｍｇ用量；Ｓ２＝単一漸増用量試験、１５ｍｇ用量；Ｓ３＝単一漸増用量試験、３０ｍｇ用量；Ｓ４＝単一漸増用量試験、４５ｍｇ用量；Ｍ１＝複数漸増用量試験、６０ｍｇ用量；Ｍ２＝複数漸増用量試験、７５ｍｇ用量；Ｍ３＝複数漸増用量試験、９０ｍｇ用量。（Ｂ）３日間の３０ｍｇＢＩＤ投与（実施例３のスタンフォード（Ｓｔａｎｆｏｒｄ）ＭＡＤ試験）後、及び６０ｍｇＱＤ投与（実施例４の第１相試験）後の緩衝液体エキセンディン（９−３９）製剤の複数回皮下投与後の薬物動態プロフィール。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
１．概論
エキセンディン（９−３９）は、膵臓細胞上に存在するＧＬＰ−１受容体を選択的に遮断し、これにより、インスリン分泌のＧＬＰ−１媒介性増大を阻止するグルカゴン様ペプチド−１（ＧＬＰ−１）アンタゴニストである。通常生理食塩水（０．９％塩化ナトリウム、本明細書では、「０．９％通常生理食塩水」とも呼ばれる）中で製剤化されたエキセンディン（９−３９）は、高インスリン性低血糖症の治療のための動物及びヒト臨床試験で投与されている。しかし、通常生理食塩水中で再構成されたエキセンディン（９−３９）の皮下注射を含む最初の臨床試験では、注入液の濃度漸増と共に逆用量線形性が実証され、これは、濃度依存性ペプチド凝集及び沈殿を示唆し、濃度が高いほど薬物動態曝露及び臨床活性が低くなる。参照により本明細書に組み込まれる国際公開第２０１６／１９１３９５号パンフレットの実施例３を参照されたい。さらに、本明細書の実施例１及び２に記載するように、通常生理食塩水中のエキセンディン（９−３９）は、特定の保存条件、又は特定のエキセンディン（９−３９）の濃度といった特定の条件下で、エキセンディン（９−３９）の曝露低下を招く凝集を呈示することが明らかにされた。
【００１７】
従って、一態様では、本開示は、０．９％通常生理食塩水中に同じ濃度のエキセンディン（９−３９）製剤を含む組成物と比較して低い凝集を呈示する、改善されたエキセンディン（９−３９）の液体医薬製剤を提供する。別の態様では、本発明は、０．９％通常生理食塩水中で製剤化された同じ用量のエキセンディン（９−３９）を含む組成物と比較して、改善された薬物動態プロフィールを示すエキセンディン（９−３９）の製剤を提供する。一部の実施形態では、例えば、実施例２に示すように、本開示の緩衝液体エキセンディン（９−３９）製剤は、被験者に投与されると、０．９％通常生理食塩水中で製剤化された同じ用量のエキセンディン（９−３９）又はその薬学的に許容される塩を含む組成物よりも高いエキセンディン（９−３９）のＣｍａｘを呈示する。さらに、実施例３に記載するように、本開示の緩衝液体エキセンディン（９−３９）製剤は、０．９％通常生理食塩水中に製剤化されたエキセンディン（９−３９）と比較して、より長い作用期間と共に、より高い薬物動態曝露を賦与することが見い出された。従って、本明細書に記載のエキセンディン（９−３９）の液体医薬製剤は、薬物動態の向上という利点も提供する。加えて、本明細書に記載のエキセンディン（９−３９）の液体医薬製剤は、高インスリン性低血糖症の治療又は予防のためのより低用量及び／若しくは低頻度の投与を支持することもできる。
【００１８】
ＩＩ．定義
本明細書で使用する用語は、特定の実施形態のみを説明することを目的とし、限定を意図するものではない。別に定義されない限り、本明細書で使用する全ての技術及び科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者には一般的に理解されるものと同じ意味を有する。本明細書及びそれに続く特許請求の範囲では、反対の意図が明らかではない限り、以下の意味を有することが定義されるいくつかの用語を参照するものとする。いくつかのケースでは、一般的に理解される意味を有する用語が、明瞭化及び／又は参照しやすさの目的で本明細書において定義され、本明細書におけるこうした定義の包含が、当技術分野で一般に理解される用語の定義に対して実質的な相違を表すものとして解釈すべきではない。
【００１９】
本明細書に記載するものと類似又は同等のあらゆる方法及び材料を本発明の実施又は試験に使用することができるが、好ましい方法及び材料を以下に記載する。本明細書に引用される全ての技術及び特許公報は、参照によりその全体を本明細書に組み込むものとする。
【００２０】
全ての数値表示、例えば、ｐＨ、温度、時間、濃度、及び分子量は、範囲を含め、必要に応じて、適宜、０．１若しくは１．０の増分により変動（＋）又は（−）する近似値である（例えば、ｐＨ５．４又は５．５）。常に明示されているわけではないが、全ての数値表示は、「約」という用語が先に付けられることが理解される。範囲の指示対象は、別に記載のない限り、端点を含む。例えば、１５ｍｇ／ｍｌ〜４５ｍｇ／ｍｌの範囲のエキセンディン（９−３９）の用量の投与は、１５ｍｇ／ｍｌ又は４５ｍｇ／ｍｌの投与を含む。
【００２１】
単数形「１つの（ａ）」、「１つの（ａｎ）」、及び「その（ｔｈｅ）」は、文脈が明らかに別の解釈を要求しない限り、複数の指示対象を含む。従って、例えば、「１つの化合物」と言うとき、複数の化合物を含む。
【００２２】
「含む」という用語は、化合物、組成物及び方法が、記載される要素を含むが、他を排除しないことを意味することが意図される。「〜から構成される」は、化合物、組成物及び方法を定義するために使用される場合、請求される発明の基本的且つ新規の特徴に実質的に影響し得る他の要素を排除しないことを意味する。「〜から構成される」は、特許請求の範囲に記載されないあらゆる要素、ステップ、又は成分を除外することを意味する。これらの転換用語の各々によって定義される実施形態は、本発明の範囲内に含まれる。
【００２３】
「エキセンディン（９−３９）」又は「Ｅｘ（９−３９）」は、Ｃ１４９Ｈ２３４Ｎ４０Ｏ４７Ｓの実験式及び３３６９．８ダルトンの分子量を有する３１アミノ酸ペプチドを指す。エキセンディン（９−３９）は、ＧＬＰ−１受容体アゴニストエキセンディン−４の残基９〜３９を含み、ＧＬＰ−１受容体アンタゴニストである。Ｍｏｎｔｒｏｓｅ−Ｒａｆｉｚａｄｅｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２７２：２１２０１−２１２０６（１９９７）を参照されたい。エキセンディン（９−３９）のアミノ酸配列は、次のように示される：Ｈ−Ａｓｐ−Ｌｅｕ−Ｓｅｒ−Ｌｙｓ−Ｇｌｎ−Ｍｅｔ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ａｌａ−Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ｇｌｕ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｓｅｒ−ＮＨ２（配列番号１）。エキセンディン（９−３９）は、４．６９の予測等電点を有し、ｐＨ６で−１の正味電荷を有し、これは、ｐＨ３．０で＋４の正味電荷に増加する。本明細書で使用される場合、「エキセンディン（９−３９）」という用語は、エキセンディン（９−３９）の薬学的に許容される塩も包含し、そうしたものとして、限定されないが、硫酸塩、塩酸塩、リン酸塩、スルファミン酸塩、酢酸塩クエン酸塩、乳酸塩、酒石酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、シクロヘキシルスルファミン酸塩及びキナ酸塩が挙げられる。一部の実施形態では、エキセンディン（９−３９）は、エキセンディン（９−３９）酢酸塩又はエキセンディン（９−３９）トリフルオロ酢酸塩の形態である。本明細書で別に指定されない場合には、エキセンディン（９−３９）酢酸塩を使用する。エキセンディン（９−３９）及びその薬学的に許容される塩は、市販されている（例えば、Ｂａｃｈｅｍ（Ｃｌｉｎａｌｆａ，Ｌａｅｕｆｅｌｆｉｎｇｅｎ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ））。
【００２４】
本明細書で使用される場合、「等張化剤」という用語は、生理液の張度と有意に異なる溶液の投与時に、起こり得る有害な作用を予防するために溶液の張度（浸透圧勾配）を調節する化合物又は薬剤を指す。一部の実施形態では、等張化剤は、マンニトール、デキストロース、グリセリン、ラクトース、スクロース、トレハロース、又はそれらの混合物を含む。
【００２５】
本明細書で使用される場合、「生理学的に許容される緩衝液」という用語は、被験者への投与のための製剤での使用に好適であり、且つ製剤のｐＨをその製剤に要望されるｐＨ範囲内に維持又は制御する作用を有する溶液を指す。一部の実施形態では、生理学的に許容される緩衝液は、製剤のｐＨを約５〜約６のｐＨ範囲内に維持する。一部の実施形態では、生理学的に許容される緩衝液は、製剤のｐＨを５超のｐＨに維持する。許容される緩衝液としては、限定されないが、酢酸緩衝液、クエン酸緩衝液、リン酸緩衝液、及びそれらの混合物が挙げられる。
【００２６】
本明細書で使用される場合、「医薬製剤」又は「医薬製剤」という用語は、被験者への投与に好適な組成物を指す。一般に、医薬製剤は、滅菌されており、好ましくは、被験者において望ましくない応答を誘発することができる混入物が存在しない（例えば、医薬製剤中の化合物は、医薬品グレードである）。医薬製剤は、それを必要とする被験者又は患者に対し、経口、静脈内、口腔、直腸、非経口、腹腔内、皮内、筋肉内、皮下、吸入などをはじめとするいくつかの異なる投与経路を介した投与のために設計することができる。一部の実施形態では、本明細書に記載する医薬製剤は、皮下投与のために製剤化される。
【００２７】
本明細書で使用される場合、「治療有効量」は、それが投与される対象である症状を排除、改善、緩和する、若しくはその軽減又は臨床転帰をもたらす活性成分（例えば、エキセンディン（９−３９）又はその薬学的に許容される塩）の量である。
【００２８】
「治療」、「治療すること」、及び「治療する」という用語は、高インスリン性低血糖症を治療するためのエキセンディン（９−３９）の投与に関して本明細書で使用される場合、ヒト被験者の疾患のあらゆる治療を対象とし、以下：（ａ）高インスリン性低血糖症の病歴を有する患者における低血糖症エピソードのリスク、頻度又は重症度を低減すること、（ｂ）疾患に罹患しやすいと判断された被験者、例えば、肥満手術を受けたことがあるが、まだ疾患を有すると診断されていない人における低血糖症の発生のリスクを低減すること、（ｃ）疾患の発症を防ぐこと；並びに／又は（ｄ）疾患を軽減する、すなわち、疾患の退行をもたらす、及び／若しくは１若しくは複数の疾患症状を軽減することを含む。
【００２９】
本明細書で使用される場合、「投与する」、「投与すること」、及び「投与」という用語は、ヒトなどの被験者又は患者に化合物（例えば、エキセンディン（９−３９））、組成物、若しくは薬剤を導入することを指す。本明細書で使用される場合、この用語は、直接の投与、（例えば、自己投与又は医療専門家による患者への投与）及び間接的投与（例えば、被験者に対して化合物又は組成物を処方する行為）の両方を包含する。
【００３０】
「ＱＤ」及び「ＢＩＤ」は、それぞれ、１日１回又は１日２回のエキセンディン（９−３９）の緩衝液体製剤の投与というそれらの通常の意味を有する。一部の実施形態では、１日１回（ＱＤ）の投与は、投与の間に、少なくとも２０時間、少なくとも２２時間、又は約２４時間経過することを意味する。一部の実施形態では、１日１回の投与は、２４時間毎の投与を意味する。一部の実施形態では、１日２回（ＢＩＤ）の投与は、投与の間に、少なくとも４時間、少なくとも６時間、少なくとも８時間、少なくとも１０時間、少なくとも１１時間、又は約１２時間が経過することを意味する。一部の実施形態では、１日２回の投与は、約１２時間毎の投与を意味する。
【００３１】
本明細書で使用される場合、「患者」及び「被験者」という用語は、置き換え可能に、本明細書に記載のエキセンディン（９−３９）製剤の投与により治療又は予防することができる状態を有する、又はそれに罹患しやすい個体（例えば、ヒト若しくはヒト以外の哺乳動物）を指す。一部の実施形態では、患者又は被験者は、高インスリン性低血糖症を有する。一部の実施形態では、患者又は被験者は、以前、肥満処置（例えば、胃バイパス手術）を受けたことがある。
【００３２】
本明細書で使用される場合、「凝集体」、「凝集」、及び「沈殿」という用語は、置き換え可能に、オリゴマーの形成をもたらす製剤中のエキセンディン（９−３９）ポリペプチド同士の物理的相互作用を指し、これにより、大きな凝集体が形成されて、溶液から沈殿し得る。一部の実施形態では、エキセンディン（９−３９）の大きな凝集体は、裸眼で見ることができるか、又は光学顕微鏡などの当技術分野で公知の検出方法を用いて見ることができる。一部の実施形態では、例えば製剤の保存中などに、ポリペプチドによる凝集体形成が、ポリペプチドの生物活性に悪影響を及ぼし、医薬製剤の治療効果の喪失を招く恐れがある。一部の実施形態では、本明細書に記載のエキセンディン（９−３９）を含む製剤は、例えば、保存又は被験者への投与時に、「検出可能な凝集」を呈示せず、その際、凝集体は、光学顕微鏡検査によって見ることができない（例えば、２４、３６、又は４８時間などの時間の経過後）。
【００３３】
本明細書で使用される場合、「保存される」又は「保存」という用語は、製剤、例えば、本明細書に記載のエキセンディン（９−３９）又はその薬学的に許容される塩を含む緩衝液体製剤の、指定温度で指定期間にわたる保存を指す。一部の実施形態では、製剤は、長期（例えば、１ヵ月、２ヵ月、３ヵ月、４ヵ月、５ヵ月、６ヵ月若しくはそれ以上）にわたって保存される。一部の実施形態では、製剤は、約５℃、２５℃、３０℃、３７℃、４０℃、又は５０℃の温度で保存される。一部の実施形態では、製剤は、製剤の１つ又は複数の特性を試験する、例えば、製剤が凝集を呈示するか否かを試験する目的のために、規定された期間（例えば、１２時間、２４時間、３６時間、４８時間、６０時間、若しくは７２時間）にわたって、規定期間にわたり規定温度（例えば、５０℃）で製剤を保存する。
【００３４】
ＩＩＩ．エキセンディン（９−３９）製剤
一態様では、ｐＨ５．０超の生理学的に許容される緩衝液中にエキセンディン（９−３９）又はその薬学的に許容される塩を含む緩衝液体製剤が提供される。一部の実施形態では、ｐＨが約５〜約６の範囲の生理学的に許容される緩衝液中にエキセンディン（９−３９）又はその薬学的に許容される塩を含む緩衝液体製剤が提供される。一部の実施形態では、製剤は、等張化剤をさらに含む。
【００３５】
本明細書に記載するように、驚くべきことに、エキセンディン（９−３９）又はその薬学的に許容される塩を含む緩衝液体製剤の特定の特性及び薬物動態パラメータは、適切なエキセンディン（９−３９）濃度、等張化剤、生理学的に許容される緩衝液、及びｐＨを選択することによって調節することができることが見い出された。例えば、以下の実施例１に記載するように、エキセンディン（９−３９）又はその薬学的に許容される塩を含む緩衝液体製剤は、エキセンディン（９−３９）濃度、等張化剤、生理学的に許容される緩衝液、及びｐＨの選択により、所定期間の保存後のエキセンディン（９−３９）凝集、所定期間の保存後のエキセンディン（９−３９）の効力、及び所定期間の保存後のエキセンディン（９−３９）の純度などの特性に関して改善することができる。
【００３６】
また、以下の実施例２及び３に記載するように、５を超えるｐＨ、例えば、約５〜約６の範囲のｐＨを有する生理学的に許容される緩衝液中にエキセンディン（９−３９）を含む製剤は、当技術分野で公知の再構成された凍結乾燥エキセンディン（９−３９）と比較して、向上した薬物動態特性を示すことが見い出された。例えば、実施例２は、緩衝エキセンディン（９−３９）製剤の皮下注射によって、０．９％通常生理食塩水中で製剤化された同じ用量のエキセンディン（９−３９）又はその薬学的に許容される塩を含む組成物と比べ、血漿中エキセンディン（９−３９）の高いＣｍａｘがもたらされたことを示す。図５Ａ及び図５Ｂを参照されたい。実施例３は、緩衝エキセンディン（９−３９）製剤の皮下注射により、再構成された凍結乾燥エキセンディン（９−３９）と比較して、エキセンディン（９−３９）の高いＣｍａｘ、高い１２時間ＡＵＣ、及び高いトラフ血漿濃度がもたらされたことを示す。
【００３７】
エキセンディン（９−３９）
一部の実施形態では、緩衝製剤は、エキセンディン（９−３９）を含む。一部の実施形態では、製剤は、エキセンディン（９−３９）の薬学的に許容される塩を含む。一部の実施形態では、製剤は、薬学的に許容される塩、エキセンディン（９−３９）酢酸塩又はエキセンディン（９−３９）トリフルオロ酢酸塩を含む。
【００３８】
一部の実施形態では、製剤は、約４〜９０ｍｇ／ｍｌ、約４〜６０ｍｇ／ｍｌ、約４〜４５ｍｇ／ｍｌ、約１０〜９０ｍｇ／ｍｌ、約１０〜６０ｍｇ／ｍｌ、約１０〜４５ｍｇ／ｍｌ、約１０〜４０ｍｇ／ｍｌ、約１０〜３５ｍｇ／ｍｌ、約１０〜３０ｍｇ／ｍｌ、約１２〜２５ｍｇ／ｍｌ、約１２〜２０ｍｇ／ｍｌ、約１２〜１５ｍｇ／ｍｌ、約３０〜９０ｍｇ／ｍｌ、約３０〜６０ｍｇ／ｍｌ、約３０〜７０ｍｇ／ｍｌ、約４５〜９０ｍｇ／ｍｌ、約４５〜７５ｍｇ／ｍｌ、約６０〜９０ｍｇ／ｍｌ、又は約３０〜７０ｍｇ／ｍｌ（例えば、約４ｍｇ／ｍｌ、約５ｍｇ／ｍｌ、約６ｍｇ／ｍｌ、約７ｍｇ／ｍｌ、約８ｍｇ／ｍｌ、約９ｍｇ／ｍｌ、約１０ｍｇ／ｍｌ、約１１ｍｇ／ｍｌ、約１２ｍｇ／ｍｌ、約１３ｍｇ／ｍｌ、約１４ｍｇ／ｍｌ、約１５ｍｇ／ｍｌ、約１６ｍｇ／ｍｌ、約１７ｍｇ／ｍｌ、約１８ｍｇ／ｍｌ、約１９ｍｇ／ｍｌ、約２０ｍｇ／ｍｌ、約２５ｍｇ／ｍｌ、約３０ｍｇ／ｍｌ、約３５ｍｇ／ｍｌ、約４０ｍｇ／ｍｌ、約４５ｍｇ／ｍｌ、約５０ｍｇ／ｍｌ、約５５ｍｇ／ｍｌ、約６０ｍｇ／ｍｌ、約６５ｍｇ／ｍｌ、約７０ｍｇ／ｍｌ、約７５ｍｇ／ｍｌ、約８０ｍｇ／ｍｌ、約８５ｍｇ／ｍｌ、若しくは約９０ｍｇ／ｍｌ）の濃度でエキセンディン（９−３９）又はその薬学的に許容される塩を含む。一部の実施形態では、製剤は、約１５ｍｇ／ｍｌ〜約４５ｍｇ／ｍｌの濃度でエキセンディン（９−３９）を含む。一部の実施形態では、製剤は、約１５ｍｇ／ｍの濃度でエキセンディン（９−３９）を含む。一部の実施形態では、製剤は、約２５ｍｇ／ｍｌ〜約３５ｍｇ／ｍｌの範囲の濃度でエキセンディン（９−３９）を含む。一部の実施形態では、製剤は、約３０ｍｇ／ｍの濃度でエキセンディン（９−３９）を含む。一部の実施形態では、製剤は、約４０ｍｇ／ｍｌ〜約５０ｍｇ／ｍｌの範囲の濃度でエキセンディン（９−３９）を含む。一部の実施形態では、製剤は、約４５ｍｇ／ｍの濃度でエキセンディン（９−３９）を含む。一部の実施形態では、製剤は、約３０ｍｇ／ｍｌ〜約６０ｍｇ／ｍｌの範囲の濃度でエキセンディン（９−３９）を含む。一部の実施形態では、製剤は、約３０ｍｇ／ｍｌ〜約９０ｍｇ／ｍｌの範囲の濃度でエキセンディン（９−３９）を含む。一部の実施形態では、製剤は、約４５ｍｇ／ｍｌ〜約９０ｍｇ／ｍｌの範囲の濃度でエキセンディン（９−３９）を含む。一部の実施形態では、製剤は、約６０ｍｇ／ｍｌの濃度でエキセンディン（９−３９）を含む。一部の実施形態では、製剤は、約７５ｍｇ／ｍｌの濃度でエキセンディン（９−３９）を含む。
【００３９】
生理学的に許容される緩衝液
一部の実施形態では、緩衝液体製剤は、約５〜約６の範囲のｐＨを有する生理学的に許容される緩衝液中にエキセンディン（９−３９）又はその薬学的に許容される塩を含む。一部の実施形態では、緩衝液は、皮下投与と適合性である。一部の実施形態では、生理学的に許容される緩衝液は、生理学的ｐＨ若しくはほぼ生理学的ｐＨ、又は生理学的ｐＨ付近の比較的狭いｐＨ範囲内（例えば、約５．０〜約８．０）のｐＨを有する液体製剤をもたらす緩衝液である。一部の実施形態では、生理学的に許容される緩衝液は、保存又は被験者への投与時に、液体医薬製剤中のエキセンディン（９−３９）凝集体の形成を防止、制限、又は低減するｐＨである。一部の実施形態では、生理学的に許容される緩衝液は、５．０を超えるｐＨを有する。
【００４０】
一実施形態では、生理学的に許容される緩衝液は、長期（例えば、約１時間、約２時間、約４時間、約８時間、約１２時間、約３日、約５日、約７日、約１０日、約１４日、約１ヵ月、又はそれ以上）にわたって安定なｐＨを有する溶液を含む。一部の実施形態では、生理学的に許容される緩衝液は、長期にわたる保存の間、エキセンディン（９−３９）の機能性を安定化する溶液を含む。一実施形態では、保存は、約１時間、約２時間、約４時間、約８時間、約１２時間、約３日、約５日、約７日、約１０日、約１４日、約１ヵ月、又はそれ以上を含み得る。
【００４１】
一実施形態では、緩衝液体製剤は、約５〜約６の範囲（例えば、５．０、５．１、５．２、５．３、５．４、５．５、５．６、５．７、５．８、５．９、及び６．０を含む範囲）のｐＨを有する生理学的に許容される緩衝液を含む。一実施形態では、緩衝液体製剤は、約５．０超から約６までのｐＨを有する生理学的に許容される緩衝液を含む。一実施形態では、生理学的に許容される緩衝液は、約５．０超及び最大約５．５のｐＨを有する。一実施形態では、生理学的に許容される緩衝液は、約５．２〜５．８の範囲（例えば、５．２、５．３、５．４、５．５、５．６、５．７、又は５．８）のｐＨを有する。一実施形態では、生理学的に許容される緩衝液は、約５．０〜５．５の範囲（例えば、５．１、５．２、５．３、５．４、又は５．５）のｐＨを有する。一実施形態では、生理学的に許容される緩衝液は、約５．５〜約６の範囲のｐＨを有する。一実施形態では、生理学的に許容される緩衝液は、約５．５のｐＨを有する。
【００４２】
一実施形態では、生理学的に許容される緩衝液は、酢酸緩衝液、クエン酸緩衝液、リン酸緩衝液、ヒスチジン緩衝液、又はこれらの混合物を含む。一実施形態では、生理学的に許容される緩衝液は、酢酸ナトリウム、酢酸カリウム、クエン酸三ナトリウム、クエン酸マグネシウム、クエン酸カリウム、リン酸カリウム、又はこれらの混合物を含む。一実施形態では、生理学的に許容される緩衝液は、約５ｍＭ〜約３０ｍＭ、約１０ｍＭ〜約３０ｍＭ、約１５ｍＭ〜約３０ｍＭ、約２０ｍＭ〜約３０ｍＭ、又は約２５ｍＭ〜約３０ｍＭ（例えば、約５ｍＭ、約８ｍＭ、約１０ｍＭ、約１２ｍＭ、約１５ｍＭ、約１８ｍＭ、約２０ｍＭ、約２２ｍＭ、約２５ｍＭ、約２８ｍＭ、又は約３０ｍＭ）の濃度で緩衝剤（例えば、酢酸ナトリウム）を含む。一部の実施形態では、生理学的に許容される緩衝液は、少なくとも１０ｍＭの濃度で緩衝剤（例えば、酢酸ナトリウム）を含む。
【００４３】
一部の実施形態では、生理学的に許容される緩衝液は、酢酸緩衝液を含む。一部の実施形態では、緩衝剤は、酢酸ナトリウムである。一部の実施形態では、緩衝剤は、酢酸カリウムである。一部の実施形態では、生理学的に許容される緩衝液は、約５ｍＭ〜約３０ｍＭ、例えば約１０ｍＭ〜約２０ｍＭの濃度で、酢酸緩衝液（例えば、酢酸ナトリウム又は酢酸カリウム）を含む。一部の実施形態では、生理学的に許容される緩衝液は、約１０ｍＭの濃度で、酢酸緩衝液（例えば、酢酸ナトリウム又は酢酸カリウム）を含む。
【００４４】
一部の実施形態では、生理学的に許容される緩衝液は、クエン酸緩衝液を含む。一部の実施形態では、緩衝剤は、クエン酸三ナトリウムである。一部の実施形態では、緩衝剤は、クエン酸マグネシウムである。一部の実施形態では、緩衝剤は、クエン酸カリウムである。一部の実施形態では、生理学的に許容される緩衝液は、約５ｍＭ〜約３０ｍＭ、例えば約１０ｍＭ〜約２０ｍＭの濃度で、クエン酸緩衝液（例えば、クエン酸ナトリウム、クエン酸マグネシウム、又はクエン酸カリウム）を含む。一部の実施形態では、生理学的に許容される緩衝液は、約１０ｍＭの濃度で、クエン酸緩衝液（例えば、クエン酸ナトリウム、クエン酸マグネシウム、又はクエン酸カリウム）を含む。
【００４５】
一実施形態では、生理学的に許容される緩衝液は、リン酸緩衝液を含む。一部の実施形態では、生理学的に許容される緩衝液は、リン酸カリウムを含む。一部の実施形態では、生理学的に許容される緩衝液は、約５ｍＭ〜約３０ｍＭ、例えば約１０ｍＭ〜約２０ｍＭの濃度で、リン酸カリウムを含む。一部の実施形態では、生理学的に許容される緩衝液は、約１０ｍＭの濃度で、リン酸緩衝液（例えば、リン酸カリウム）を含む。
【００４６】
等張化剤
一部の実施形態では、緩衝製剤は、等張化剤を含む。一部の実施形態では、等張化剤は、マンニトール、デキストロース、グリセリン、ラクトース、スクロース、トレハロース、又はそれらの混合物を含む。一部の実施形態では、等張化剤は、マンニトールである。等張化剤の使用は、医学分野では公知であり、当業者であれば、本明細書に開示される１若しくは複数種の等張化剤を使用して、皮下投与に好適な液体医薬製剤を提供する。例えば、Ｐｒａｍａｎｉｃｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｈａｒｍａ  Ｔｉｍｅｓ．，Ｖｏｌ  ４５，Ｎｏ．３，（２０１３）を参照されたい；また、Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｎｇ  Ｐｏｏｒｌｙ  Ｗａｔｅｒ  Ｓｏｌｕｂｌｅ  Ｄｒｕｇｓ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ，Ｗａｔｔｓ，ａｎｄ  Ｍｉｌｌｅｒ，ｅｄｓ．，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｂｕｓｉｎｅｓｓ  Ｍｅｄｉａ（２０１１）を参照されたい。
【００４７】
一部の実施形態では、等張化剤又は等張化剤の組合せは、約２０〜７５ｍｇ／ｍｌ、約２０〜６０ｍｇ／ｍｌ、約２５〜５５ｍｇ／ｍｌ、約３０〜７５ｍｇ／ｍｌ、約３０〜５０ｍｇ／ｍｌ、約３５〜４５ｍｇ／ｍｌ、約４０〜４５ｍｇ／ｍｌ、約４５〜７５ｍｇ／ｍｌ、又は約４５〜６０ｍｇ／ｍｌ（例えば、約２０ｍｇ／ｍｌ、約２２ｍｇ／ｍｌ、約２５ｍｇ／ｍｌ、約２８ｍｇ／ｍｌ、約３０ｍｇ／ｍｌ、約３２ｍｇ／ｍｌ、約３５ｍｇ／ｍｌ、約３８ｍｇ／ｍｌ、約４０ｍｇ／ｍｌ、約４２ｍｇ／ｍｌ、約４５ｍｇ／ｍｌ、約４８ｍｇ／ｍｌ、約５０ｍｇ／ｍｌ、約５２ｍｇ／ｍｌ、約５５ｍｇ／ｍｌ、約５８ｍｇ／ｍｌ、約６０ｍｇ／ｍｌ、約６５ｍｇ／ｍｌ、約７０ｍｇ／ｍｌ、又は約７５ｍｇ／ｍｌ）の濃度で、製剤中に存在する。一部の実施形態では、製剤は、約３０〜約６０ｍｇ／ｍｌの濃度範囲で等張化剤を含む。
【００４８】
一部の実施形態では、等張化剤又は等張化剤の組合せは、等生理学的浸透圧を有する製剤をもたらす量で、製剤中に存在する。一部の実施形態では、等張化剤又は等張化剤の組合せは、約２７５〜３００ｍＯｓｍ／ｋｇ（例えば、約２７５ｍＯｓｍ／ｋｇ、約２８０ｍＯｓｍ／ｋｇ、約２８５ｍＯｓｍ／ｋｇ、約２９０ｍＯｓｍ／ｋｇ、約２９５ｍＯｓｍ／ｋｇ、又は約３００ｍＯｓｍ／ｋｇ）の浸透圧を有する製剤をもたらす量で、製剤中に存在する。一部の実施形態では、等張化剤又は等張化剤の組合せ（例えば、マンニトール、デキストロース、グリセリン、ラクトース、スクロース、トレハロース、又はこれらの組合せ）は、約２９０ｍＯｓｍ／ｋｇの浸透圧を有する製剤をもたらす量で、製剤中に存在する。
【００４９】
一部の実施形態では、等張化剤は、マンニトールを含む。一部の実施形態では、マンニトールは、約４０〜５０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。一部の実施形態では、マンニトールは、約４０ｍｇ／ｍｌ〜約４５ｍｇ／ｍｌの範囲の濃度で存在する。一部の実施形態では、マンニトールは、約４５ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。一部の実施形態では、マンニトールは、少なくとも４５ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。
【００５０】
一実施形態では、等張化剤は、デキストロースを含む。一実施形態では、デキストロースは、約２０ｍｇ／ｍｌ〜約６０ｍｇ／ｍｌ（例えば、約２０ｍｇ／ｍｌ、約４０ｍｇ／ｍｌ、約４５ｍｇ／ｍｌ、又は約６０ｍｇ／ｍｌ）の濃度で存在する。
【００５１】
一実施形態では、等張化剤は、グリセリンを含む。一部の実施形態では、グリセリンは、約２０ｍｇ／ｍｌ〜約６０ｍｇ／ｍｌ（例えば、約２０ｍｇ／ｍｌ、約４０ｍｇ／ｍｌ、約４５ｍｇ／ｍｌ、又は約６０ｍｇ／ｍｌ）の濃度で存在する。
【００５２】
一実施形態では、等張化剤は、ラクトースを含む。一態様では、ラクトースは、約２０ｍｇ／ｍｌ〜約６０ｍｇ／ｍｌ（例えば、約２０ｍｇ／ｍｌ、約４０ｍｇ／ｍｌ、約４５ｍｇ／ｍｌ、又は約６０ｍｇ／ｍｌ）の濃度で存在する。
【００５３】
一実施形態では、等張化剤は、スクロースを含む。一部の実施形態では、スクロースは、約２０ｍｇ／ｍｌ〜約６０ｍｇ／ｍｌ（例えば、約２０ｍｇ／ｍｌ、約４０ｍｇ／ｍｌ、約４５ｍｇ／ｍｌ、又は約６０ｍｇ／ｍｌ）の濃度で存在する。
【００５４】
一実施形態では、等張化剤は、トレハロースを含む。一態様では、トレハロースは、約２０ｍｇ／ｍｌ〜約６０ｍｇ／ｍｌ（例えば、約２０ｍｇ／ｍｌ、約４０ｍｇ／ｍｌ、約４５ｍｇ／ｍｌ、又は約６０ｍｇ／ｍｌ）の濃度で存在する。
【００５５】
一部の実施形態では、緩衝製剤は、２種以上の等張化剤を含む。一部の実施形態では、緩衝製剤は、マンニトール、デキストロース、グリセリン、ラクトース、スクロース、及びトレハロースからなる群から選択される２種以上の等張化剤を含む。一部の実施形態では、緩衝製剤は、マンニトール、少なくとも１種の他の等張化剤を含む。
【００５６】
別の賦形剤
一部の実施形態では、製剤は、保存料、界面活性剤（例えば、ポリソルベート若しくはポリオキサマー）、又は着色料（例えば、薬学的に許容される色素、無機顔料、及び天然着色料）などの１種又は複数種の別の賦形剤をさらに含む。非常に多様な薬学的に許容される賦形剤が当技術分野では公知である。薬学的に許容される賦形剤は、様々な刊行物に詳細に記載されており、そうしたものとして、例えば、Ａ．Ｇｅｎｎａｒｏ（２０００）“Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，”２０ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ，＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ；Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ（１９９９）Ｈ．Ｃ．Ａｎｓｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，ｅｄｓ．，７ｔｈ  ｅｄ．，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ，＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ；及びＨａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ（２０００）Ａ．Ｈ．Ｋｉｂｂｅ  ｅｔ  ａｌ．，ｅｄｓ．，３ｒｄ  ｅｄ．Ａｍｅｒ．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ａｓｓｏｃ．が挙げられ、これらの各々は、参照により本明細書に組み込まれる。
【００５７】
ＩＶ．治療方法
別の態様では、本明細書に記載のエキセンディン（９−３９）又はその薬学的に許容される塩を含む緩衝液体製剤を投与するステップを含む治療方法が提供される。一部の実施形態では、この方法は、高インスリン性低血糖症の症状を予防又は軽減するのに有効な量で、本明細書に記載のエキセンディン（９−３９）の緩衝液体製剤を投与するステップを含む。一部の実施形態では、この方法は、肥満手術後の低血糖症の症状、代謝転帰、及び／又は臨床転帰を予防又は軽減するのに有効な量で、本明細書に記載のエキセンディン（９−３９）の緩衝液体製剤を投与するステップを含む。
【００５８】
患者集団
一部の実施形態では、本明細書に記載する方法に従って治療しようとする被験者は、高インスリン性低血糖症（ＨＨ）を有する被験者である。特定の実施形態では、高インスリン性低血糖症を有する被験者は、以前、肥満手術（例えば、Ｒｏｕｘ−ｅｎ−Ｙ胃バイパス術）及び／又は関連代謝処置を受けたことがある。特定の実施形態では、被験者は、以前、肥満手術（例えば、Ｒｏｕｘ−ｅｎ−Ｙ胃バイパス術）及び／又は関連代謝処置を受けたことがあり、高インスリン性低血糖症を発症するリスクを有する。一部の実施形態では、高インスリン性低血糖症を有する被験者は、以前、胃切除術又は食道切除術などの上部消化管処置を受けたことがある。
【００５９】
本明細書で使用する場合、「高インスリン性低血糖症」は、ダンピング症候群、後期ダンピング症候群、膵島細胞症、非インスリノーマ低血糖症候群（ＮＩＰＨＳ）、及び／又は食後反応性低血糖症を包含する。高インスリン性低血糖症は、Ｒｏｕｘ−ｅｎ−Ｙ胃バイパス術（ＲＹＧＢ）若しくは垂直方向スリーブ胃切除術（ＶＳＧ）などの胃、肥満、又は代謝処置に起因するか、或いは、先天的、後天的、又は誘発性原因を有し得る。
【００６０】
高インスリン性低血糖症を有する被験者は、あらゆる好適な方法によって識別され得る。一部の実施形態では、高インスリン性低血糖症は、ウィップルの三徴（Ｗｈｉｐｐｌｅ’ｓ  ｔｒｉａｄ）の存在によって診断され、これは、下記の基準を有する：（１）低血糖症の症状の発生；（２）症状のタイプについて記録されている低血漿グルコースレベル；及び（３）血漿グルコースが上昇した後の症状の分利。一部の実施形態では、高インスリン性低血糖症は、被験者による報告又は医療記録による毎月少なくとも１回の細管グルコース≦５０ｍｇ／ｄＬの発生によって定義される。一部の実施形態では、高インスリン性低血糖症は、血漿グルコースの自己モニタリング、少なくとも２０分間の連続的なグルコースモニタリング、又は血漿グルコースの実験室測定により検出される血漿グルコース濃度＜５４ｍｇ／ｄＬによって定義される。一部の実施形態では、高インスリン性低血糖症は、グルコースが≦５５ｍｇ／ｄＬであったとき、不適切に上昇した血漿インスリン（≧３ｕＵ／ｍＬ）若しくはｃ−ペプチド（＞０．３ｍｇ／ｄＬ）に関連する経口グルコース負荷試験又は食事負荷試験中の血漿グルコース濃度≦５５ｍｇ／ｄＬによって定義される。一部の実施形態では、高インスリン性低血糖症は、グルコースが≦６０ｍｇ／ｄＬであったとき、不適切に上昇した血漿インスリン（≧３ｕＵ／ｍＬ）若しくはｃ−ペプチド（＞０．３ｍｇ／ｄＬ）に関連する経口グルコース負荷試験又は食事負荷試験中の血漿グルコース濃度≦６０ｍｇ／ｄＬによって定義される。一部の実施形態では、高インスリン性低血糖症は、誘発試験、例えば、経口グルコース負荷試験（ＯＧＴＴ）又は混合食負荷試験（ＭＭＴＴ）によって診断される。Ｅｉｓｅｎｂｅｒｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｕｒｇｅｒｙ  ｆｏｒ  Ｏｂｅｓｉｔｙ  ａｎｄ  Ｒｅｌａｔｅｄ  Ｄｉｓｅａｓｅｓ，２０１７，１３：３７１−３７８；また、Ｄｉａｂｅｔｅｓ  Ｃａｒｅ，２０１６，ｄｏｉ：１０．２３３７／ｄｃ１６−２２１５も参照されたい。
【００６１】
一実施形態では、治療しようとする被験者は、以前、Ｒｏｕｘ−ｅｎ−Ｙ胃バイパス術などの肥満手術及び／又は関連代謝処置を受けたことがある。肥満及び／又は関連代謝処置として、限定されないが、Ｒｏｕｘ−ｅｎ−Ｙ胃バイパス術、垂直方向スリーブ胃切除術、エンドスリーブデバイス、例えば、「腔内ライナー」とも呼ばれるＥｎｄｏＢａｒｒｉｅｒ  Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  Ｌｉｎｅｒ  Ｓｙｓｔｅｍの配置、十二指腸アブレーションとも呼ばれる十二指腸粘膜焼灼術、十二指腸−回腸若しくは十二指腸−空腸吻合を伴う十二指腸の部分バイパス、迷走神経遮断及び／又は幽門形成）が挙げられる。
【００６２】
肥満処置（すなわち、肥満手術）は、典型的に、以下：十二指腸の部分的若しくは完全なバイパス形成及び／又は十二指腸に対する栄養素曝露の低減、腸の下部（多くの場合、特に回腸）に対する栄養素輸送の迅速性の増大、及び／又はそれ以外に回腸への栄養素曝露の増加、のいずれかを伴う。肥満手術は、減量若しくは代謝利益（例えば、糖尿病の分利）、又はその両方を目的とし得る。こうした減量若しくは代謝処置は、本明細書で「肥満処置」と呼ばれ、遠位小腸、特に回腸からのＧＬＰ−１の分泌を増大し得るが、これは、インスリン分泌の上昇、また、一部の被験者においては低血糖症を招く。一部の実施形態では、被験者は、「肥満手術後の」患者又は「ＲＹＧＢ後」と呼ぶこともある。
【００６３】
別の実施形態では、治療しようとする被験者は、以前、関連代謝処置を受けたことがある。一例に過ぎないが、一実施形態では、治療しようとする被験者は、以前、消化管系に関する非肥満手術（限定されないが、例えば、食道癌の治療のための食道切除術、例えば、胃食道逆流症の治療のためのニッセン（Ｎｉｓｓｅｎ）噴門形成術、又は例えば、胃癌の治療若しくは予防のための胃切除術を含む）を受けたことがあり、従って、本明細書では「消化管手術後」と呼ばれることもある。
【００６４】
別の実施形態では、治療しようとする被験者は、前糖尿病及び／又はインスリン耐性であり、食後低血糖症を招く炭水化物の経口摂取に起因する膵臓の過刺激の予防から利益を被り得る。別の実施形態では、治療しようとする被験者は、例えば、先天性高インスリン症（又は時として、先天性膵島細胞症とも呼ばれる）などの先天性、後天性、又は誘導型の高インスリン性低血糖症を有する。
【００６５】
好適な患者集団及び患者を識別する方法も、本明細書に参照により組み込まれるＰＣＴ特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０１６／０３３８３７号明細書に記載されている。
【００６６】
一部の実施形態では、患者は、ヒト患者である。一部の実施形態では、患者は、成人である。一部の実施形態では、患者は、青年である。一部の実施形態では、患者は、以前、肥満処置（例えば、胃バイパス手術）を受けた成人である。
【００６７】
投与経路及び投与レジメン
一部の実施形態では、本明細書に記載のエキセンディン（９−３９）を含む緩衝液体製剤は、皮下投与（例えば、皮下注射）により投与される。注射の部位は、限定されないが、大腿、腹部、上腕領域、又は上方臀部領域が挙げられる。
【００６８】
一部の実施形態では、本開示の緩衝液体エキセンディン（９−３９）製剤は、皮下投与のために製剤化される。一実施形態では、本発明の緩衝液体エキセンディン（９−３９）製剤は、１日１回（ＱＤ）又は１日２回（ＢＩＤ）レジームに従う皮下投与のために製剤化される。
【００６９】
注射液製剤
一部の実施形態では、緩衝液体エキセンディン（９−３９）製剤は、例えば、複数の単回使用プレフィルシリンジ（例えば、１０、２０、３０、４０、５０、又は６０本のプレフィルシリンジ）を含むキット内に、単回使用プレフィルシリンジとして製剤化される。一部の実施形態では、単回使用プレフィルシリンジは、約５〜７５ｍｇのエキセンディン（９−３９）、等張化剤、及び５．０〜６．０の範囲のｐＨを有する緩衝液を含むエキセンディン（９−３９）液体医薬製剤を含む。
【００７０】
一部の実施形態では、緩衝液体エキセンディン（９−３９）製剤は、グルカゴン応急キットと同様に、シリンジを用いた投与用の単位若しくは多回用量ガラスバイアル若しくはアンプル中に滅菌、保存された等張液として製剤化される。一部の実施形態では、緩衝液体エキセンディン（９−３９）製剤は、本明細書に記載の緩衝液体エキセンディン（９−３９）製剤（例えば、約５〜７５ｍｇのエキセンディン（９−３９）、等張化剤、及び約５．５のｐＨを有する緩衝液、並びに任意選択で適切な量の抗菌保存料を含む製剤）のバイアル、バイアルコネクター、シリンジ、及び１つ若しくは複数のニードルを含む単回用量トレー内の注射液として提供される。
【００７１】
一部の実施形態では、緩衝液体エキセンディン（９−３９）製剤は、ガラスカートリッジペン型注射器装置中に滅菌、保存された等張液として製剤化する。非限定的例として、製剤は、約５〜７５ｍｇのエキセンディン（９−３９）（例えば、約５〜４５ｍｇ又は、約３０〜７５ｍｇのエキセンディン（９−３９））、等張化剤、及び約５．５の範囲のｐＨを有する緩衝液、並びに任意選択で適切な量の抗菌性保存料を含む。
【００７２】
一部の実施形態では、各用量は、０．２５〜２ｍｌの範囲の注射液の総量で投与され、ほとんどの被験者は、０．５〜１．５ｍｌ、例えば０．７〜１ｍｌの範囲の注射量を投与する。
【００７３】
治療パラメータ
一部の実施形態では、約５〜約６の範囲のｐＨを有する生理学的に許容される緩衝液中にエキセンディン（９−３９）又はその薬学的に許容される塩及び等張化剤を含む治療有効量の液体医薬製剤を含む組成物が、高インスリン性低血糖症の治療又は予防のために、それが必要な被験者に投与される。
【００７４】
一部の実施形態では、本方法は、約５〜約６の範囲のｐＨを有する生理学的に許容される緩衝液中の治療有効量のエキセンディン（９−３９）又はその薬学的に許容される塩及び等張化剤をそれが必要な被験者に投与（例えば、皮下投与）するステップを含む。一部の実施形態では、治療有効量のエキセンディン（９−３９）（又はその薬学的に許容される塩）は、約１５ｍｇ／ｍｌ〜約１８０ｍｇ／ｍｌ、例えば、約１５ｍｇ／ｍｌ〜約６０ｍｇ／ｍｌ、約１８ｍｇ／ｍｌ〜約５０ｍｇ／ｍｌ、約２０ｍｇ／ｍｌ〜約３０ｍｇ／ｍｌ、約３０ｍｇ／ｍｌ〜約６０ｍｇ／ｍｌ、約３０ｍｇ／ｍｌ〜約４５ｍｇ／ｍｌ、約４５ｍｇ／ｍｌ〜約９０ｍｇ／ｍｌ、約４５ｍｇ／ｍｌ〜約６０ｍｇ／ｍｌ、約３０ｍｇ／ｍｌ〜約１８０ｍｇ／ｍｌ、約３０ｍｇ／ｍｌ〜約１５０ｍｇ／ｍｌ、約３０ｍｇ／ｍｌ〜約９０ｍｇ／ｍｌ、約３０ｍｇ／ｍｌ〜約１２０ｍｇ／ｍｌ、約４５ｍｇ／ｍｌ〜約１５０ｍｇ／ｍｌ、又は約６０ｍｇ／ｍｌ〜約１８０ｍｇ／ｍｌの範囲の量である。一部の実施形態では、治療有効量のエキセンディン（９−３９）（又はその薬学的に許容される塩）は、約１５ｍｇ／ｍｌ、約１８ｍｇ／ｍｌ、約２０ｍｇ／ｍｌ、約２５ｍｇ／ｍｌ、約３０ｍｇ／ｍｌ、約３５ｍｇ／ｍｌ、約４０ｍｇ／ｍｌ、約４２ｍｇ／ｍｌ、約４５ｍｇ／ｍｌ、約４８ｍｇ／ｍｌ、約５０ｍｇ／ｍｌ、約５２ｍｇ／ｍｌ、約５５ｍｇ／ｍｌ、約５８ｍｇ／ｍｌ、約６０ｍｇ／ｍｌ、約６５ｍｇ／ｍｌ、約７０ｍｇ／ｍｌ、約７５ｍｇ／ｍｌ、約８０ｍｇ／ｍｌ、約８５ｍｇ／ｍｌ、又は約９０ｍｇ／ｍｌの量である。
【００７５】
一部の実施形態では、本方法は、約１０ｍｇ〜約９０ｍｇのエキセンディン（９−３９）の総１日用量、例えば、約１０ｍｇ〜約７５ｍｇ、約１０ｍｇ〜約６０ｍｇ、約１５ｍｇ〜約９０ｍｇ、約１５ｍｇ〜約７５ｍｇ、約１５ｍｇ〜約６０ｍｇ、約２０ｍｇ〜約９０ｍｇ、約２０ｍｇ〜約７５ｍｇ、約２５ｍｇ〜約７５ｍｇ、約２５ｍｇ〜約６０ｍｇ、約３０ｍｇ〜約９０ｍｇ、約３０ｍｇ〜約７５ｍｇ、約３０ｍｇ〜約６０ｍｇ、又は約４０ｍｇ〜約９０ｍｇのエキセンディン（９−３９）の総１日用量で、本明細書に記載のエキセンディン（９−３９）の緩衝液体製剤を投与（例えば、皮下投与）するステップを含む。一部の実施形態では、少なくとも約２０ｍｇ、少なくとも約３０ｍｇ、少なくとも約４０ｍｇ、少なくとも約５０ｍｇ、又は少なくとも約６０ｍｇのエキセンディン（９−３９）の総１日用量で、緩衝製剤を投与する。一部の実施形態では、約１０ｍｇ、約１５ｍｇ、約２０ｍｇ、約２５ｍｇ、約３０ｍｇ、約３５ｍｇ、約４０ｍｇ、約４５ｍｇ、約５０ｍｇ、約５５ｍｇ、約６０ｍｇ、約６５ｍｇ、約７０ｍｇ、約７５ｍｇ、約８０ｍｇ、約８５ｍｇ、又は約９０ｍｇのエキセンディン（９−３９）の総１日用量で、緩衝製剤を投与する。
【００７６】
上記に記載の用量範囲は、例示的な成人用量であり、製剤分野の当業者には周知のように、患者の年齢及び体重に応じて変動し得る。一部の実施形態では、用量は、治療期間中に増減することができることを理解されたい。例えば、一部の医師は、低い、若しくは初期（開始）用量で治療して、初期用量が十分な治療利益をもたらさない場合には、より多い量に漸増し、初期用量が十分な治療利益をもたらす場合には、初期用量を維持することを望む。
【００７７】
一部の実施形態では、治療有効量のエキセンディン（９−３９）（又はその薬学的に許容される塩）を緩衝液体製剤として１日１回（ＱＤ）投与する。ＱＤ投与は、医学分野において公知である。一部の実施形態では、ＱＤ用量は、約２４時間の間隔（例えば、連日７ａ．ｍ．）で投与（例えば、自己投与）する。しかし、投与を少なくとも約１８時間あけて行うという条件で、より短い（例えば、連日８ａ．ｍ．及び６ａ．ｍ．）又はより長い（例えば、連日７ａ．ｍ．及び９ａ．ｍ．）投与間隔も可能である。好ましくは、投与は、少なくとも約２０時間、２１時間、２２時間、２３時間、又は２４時間の間隔をあける。好ましくは、投与は、３０時間以下の間隔をあける。１日１回の投与が好ましいが、用量の投与は、より高頻度（例えば、１日２回）又はより低頻度（例えば、１日置き）であってもよい。
【００７８】
一部の実施形態では、緩衝液体製剤を１日２回（ＢＩＤ）投与する。ＢＩＤ（１日２回）投与は、医学分野において公知である。緩衝液体製剤は、１日又は被験者のスケジュールの特定の時点で、例えば、午前中、午後、夕方、夜、食前若しくは食中若しくは食後、就寝前などに投与することができる。一部の実施形態では、１２時間毎にほぼ１回液体医薬製剤を投与する。一部の実施形態では、ＢＩＤ用量は、約１２時間の間隔（例えば、７ａ．ｍ．及び７ｐ．ｍ．）で投与（例えば、自己投与）する。しかし、より短い（例えば、８ａ．ｍ．及び６ｐ．ｍ．）又はより長い（例えば、７ａ．ｍ．及び１０ｐ．ｍ．）投与間隔も可能である。一部の実施形態では、投与は、少なくとも約４時間、６時間、７時間、８時間、９時間、１０時間又は１１時間の間隔をあける。好ましくは、投与は、１５時間以下の間隔をあける。ＢＩＤ用量投与の時間設定方法は、例えば、本明細書に参照により組み込まれるＰＣＴ特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０１６／０３３８３７号明細書に記載されている。
【００７９】
一部の実施形態では、緩衝液体製剤は、５ｍｇ〜３０ｍｇＢＩＤ又は１０ｍｇ〜４５ｍｇＢＩＤ、例えば、約７．５〜３０ｍｇＢＩＤ、約１０〜３０ｍｇＢＩＤ、約１５〜４５ｍｇＢＩＤ、約２５〜４５ｍｇＢＩＤ、又は約３０〜４５ｍｇＢＩＤの範囲のエキセンディン（９−３９）の用量で投与（例えば、皮下投与）する。一部の実施形態では、緩衝液体製剤は、約７．５ｍｇＢＩＤの用量で投与する。一部の実施形態では、緩衝液体製剤は、約１０ｍｇＢＩＤの用量で投与する。一部の実施形態では、緩衝液体製剤は、約１５ｍｇＢＩＤの用量で投与する。一部の実施形態では、緩衝液体製剤は、約２０ｍｇＢＩＤの用量で投与する。一部の実施形態では、緩衝液体製剤は、約３０ｍｇＢＩＤの用量で投与する。一部の実施形態では、緩衝液体製剤は、約４５ｍｇＢＩＤの用量で投与する。一部の実施形態では、３０ｍｇ／ｍｌ以上の濃度でエキセンディン（９−３９）を含む緩衝液体製剤は、約３０〜４５ｍｇＢＩＤの用量で、例えば、約３０ｍｇＢＩＤの用量で投与する。
【００８０】
一部の実施形態では、緩衝液体製剤は、２０ｍｇ〜９０ｍｇＱＤ、例えば、約３０〜９０ｍｇＱＤ、約３０〜７５ｍｇＱＤ、約４５〜９０ｍｇＱＤ、又は約４５〜７５ｍｇＱＤの範囲のエキセンディン（９−３９）の用量で投与（例えば、皮下投与）する。一部の実施形態では、緩衝液体製剤は、約２０ｍｇＱＤの用量で投与する。一部の実施形態では、緩衝液体製剤は、約３０ｍｇＱＤの用量で投与する。一部の実施形態では、緩衝液体製剤は、約４５ｍｇＱＤの用量で投与する。一部の実施形態では、緩衝液体製剤は、約６０ｍｇＱＤの用量で投与する。一部の実施形態では、緩衝液体製剤は、約７５ｍｇＱＤの用量で投与する。一部の実施形態では、緩衝液体製剤は、約９０ｍｇＱＤの用量で投与する。一部の実施形態では、６０ｍｇ／ｍｌ以上の濃度でエキセンディン（９−３９）を含む緩衝液体製剤は、少なくとも４５ｍｇＱＤの用量、例えば、４５〜９０ｍｇＱＤの用量、約６０ｍｇＱＤの用量、又は約７５ｍｇＱＤの用量で投与する。
【００８１】
一部の実施形態では、緩衝液体製剤は、朝食及び夕食前（又はその日の２回の主食前）の約６０分以内に１日２回（ＢＩＤ）投与（例えば、皮下投与）する。一部の実施形態では、朝食及び夕食前（又はその日の２回の主食前）の投与は、少なくとも約６時間の間隔をあける。一部の実施形態では、緩衝液体製剤の投与は、食事に合わせない。
【００８２】
一部の実施形態では、緩衝液体製剤は、朝食及び夕食を最大限カバーするために、朝又は夜に１日１回（ＱＤ）投与（例えば、皮下投与）する。例えば、一部の実施形態では、製剤は、夜、夕飯後に又は早朝、朝食前（例えば、朝食の少なくとも６０分前）に投与する。
【００８３】
一部の実施形態では、緩衝液体製剤は、異なる用量で１日２回（ＢＩＤ）投与（例えば、皮下投与）する。一部の実施形態では、製剤は、朝及び午後に異なる用量で投与する。一部の実施形態では、製剤は、朝及び夕方又は夜に異なる用量で投与する。例えば、一部の実施形態では、製剤は、朝及び夕方又は夜に投与し、その場合、夕方又は夜の用量は、朝の用量より低い。
【００８４】
本明細書に記載のエキセンディン（９−３９）を含む緩衝液体製剤が投与される被験者は、予定期間、不定期間、又はエンドポイントに達するまで、治療法を受けることができる。治療は、少なくとも２ヶ月〜３ヵ月、６ヵ月、１年、若しくはそれ以上にわたって連続して日若しくは週単位で継続してよい。一部の実施形態では、治療法は、少なくとも３０日、少なくとも６０日、少なくとも９０日、少なくとも１２０日、少なくとも１５０日、又は少なくとも１８０日に及ぶ。一部の実施形態では、治療は、少なくとも６ヵ月、少なくとも７ヵ月、少なくとも８ヵ月、少なくとも９ヵ月、少なくとも１０ヵ月、少なくとも１１ヵ月、又は少なくとも１年にわたって継続する。一部の実施形態では、治療は、患者の生涯にわたって、又は有意義な治療利益を提供する上で投与がもはや有効ではなくなるまで継続する。
【００８５】
薬物動態特性の向上
一部の実施形態では、約５〜約６の範囲のｐＨを有する生理学的に許容される緩衝液中のエキセンディン（９−３９）又はその薬学的に許容される塩及び等張化剤を含む緩衝液体製剤は、０．９％通常生理食塩水中で製剤化された同じ用量のエキセンディン（９−３９）又はその薬学的に許容される塩を含む組成物と比較して、エキセンディン（９−３９）の吸収プロフィールの向上をもたらす。一部の実施形態では、緩衝液体製剤は、０．９％通常生理食塩水中で製剤化された同じ用量のエキセンディン（９−３９）を投与された被験者の同じ時間にわたる又は同じ時間のエキセンディン（９−３９）の血漿濃度と比較して、被験者への投与後約１〜６時間にわたって（例えば、約１時間後、約２時間後、約３時間後、又は約４時間後、１〜４時間にわたって）エキセンディン（９−３９）のより高い血漿濃度をもたらす。
【００８６】
一部の実施形態では、本開示の緩衝液体エキセンディン（９−３９）製剤は、被験者に投与されると、０．９％通常生理食塩水中で製剤化された同じ用量のエキセンディン（９−３９）を含む組成物を投与された被験者の同じ時間にわたる血漿濃度の増加と比較して、被験者への投与後約１〜１２時間にわたって（例えば、約１時間後、約２時間後、約３時間後、又は約４時間後、１〜１０時間、６〜１２時間、１〜８時間、又は４〜１２時間にわたって）エキセンディン（９−３９）のより大きな血漿濃度の増加をもたらす。一部の実施形態では、エキセンディン（９−３９）の血漿濃度の変化は、エキセンディン（９−３９）製剤を被験者に投与してから約１時間、２時間、３時間、４時間、５時間、又は６時間後に測定する。
【００８７】
一部の実施形態では、本明細書に記載のエキセンディン（９−３９）を含む緩衝液体製剤の皮下注射は、０．９％通常生理食塩水中で製剤化された同じ用量のエキセンディン（９−３９）を含む組成物と比較して、エキセンディン（９−３９）のより高いＣｍａｘをもたらす。
【００８８】
一部の実施形態では、本明細書に記載のエキセンディン（９−３９）を含む緩衝液体製剤の皮下注射は、０．９％通常生理食塩水中で製剤化された同じ用量のエキセンディン（９−３９）を含む組成物と比較して、エキセンディン（９−３９）のより高いＡＵＣをもたらす。例えば、一部の実施形態では、本明細書に記載のエキセンディン（９−３９）を含む緩衝液体製剤の皮下注射は、０．９％通常生理食塩水中で製剤化された同じ用量のエキセンディン（９−３９）を含む組成物と比較して、エキセンディン（９−３９）のより高い１２時間ＡＵＣをもたらす。
【００８９】
一部の実施形態では、本明細書に記載のエキセンディン（９−３９）を含む緩衝液体製剤の皮下注射は、０．９％通常生理食塩水中で製剤化された同じ用量のエキセンディン（９−３９）を含む組成物と比較して、エキセンディン（９−３９）のより遅いＴｍａｘをもたらす。
【００９０】
一部の実施形態では、本明細書に記載のエキセンディン（９−３９）を含む緩衝液体製剤の皮下注射は、０．９％通常生理食塩水中で製剤化された同じ用量のエキセンディン（９−３９）を含む組成物と比較して、エキセンディン（９−３９）のより高いトラフ濃度をもたらす（例えば、少なくとも３日間の投与、少なくとも１週間の投与、少なくとも２週間の投与、又は少なくとも１ヵ月の投与などの反復投与後に測定したとき）。
【実施例】
【００９１】
Ｖ．実施例
以下の実施例は、例示のために記載するのであり、請求される発明を限定するためではない。
【００９２】
実施例１：０．９％通常生理食塩水中で再構成したエキセンディン（９−３９）及び緩衝エキセンディン（９−３９）製剤の特性
この実施例は、エキセンディン（９−３９）の緩衝製剤の特性と比較して、０．９％の通常生理食塩水中で再構成した凍結乾燥エキセンディン（９−３９）酢酸塩の物理的及び化学的特性を記載する。
【００９３】
通常生理食塩水中で製剤化したエキセンディン（９−３９）の特性
０．９％通常生理食塩水中で再構成することにより、様々な濃度（５、１０．２４、１５．３、２５．２２、及び４４．９９ｍｇ／ｍｌ）の凍結乾燥エキセンディン（９−３９）酢酸塩を調製して、５℃で保存した。再構成したエキセンディン（９−３９）製剤各々のｐＨを第０日に記録し、最大１４日間にわたってモニターした。再構成したエキセンディン（９−３９）製剤の全ての濃度によって、初期ｐＨ４．４〜４．５が得られた。再構成したエキセンディン（９−３９）製剤各々の視覚検査も第０日に記録し、５℃に維持しながら、最大１４日間にわたってモニターした。結果を以下の表１に示す。１４日間にわたって５℃に維持したサンプルのいずれにおいても、再構成エキセンディン（９−３９）製剤の凝集、ゲル化又は沈殿は観察されなかった。
【００９４】
【表１】
2019535734.tif 000003
【００９５】
７日間にわたって５℃に維持した再構成エキセンディン（９−３９）製剤（５、１０．２４、１５．３、２５．２２、及び４４．９９ｍｇ／ｍｌ）の各々のアリコートを５０℃で一晩配置した。再構成エキセンディン（９−３９）製剤は全て、５０℃で２４時間以内に凝集を示し、凝集体は、光学顕微鏡下でゼラチン状の外観を呈した（図１、左側パネル）。５０℃で３６時間後、再構成エキセンディン（９−３９）製剤は、さらに凝集した（図１、右側パネル）。
【００９６】
０．９％生理食塩水中で再構成したエキセンディン（９−３９）製剤が、沈殿及び／又は凝集し始める温度をさらに調べるために、１５ｍｇ／ｍｌの再構成エキセンディン（９−３９）製剤のアリコートを５℃、２５℃、３０℃、３７℃、及び４０℃で一晩保存した。以下の表２に示すように、再構成エキセンディン（９−３９）製剤の視覚検査によって、４０℃まで一晩保存した１５ｍｇ／ｍｌ再構成エキセンディン（９−３９）製剤のいずれも溶液から沈殿しなかったことが明らかにされた。
【００９７】
【表２】
2019535734.tif 000004
【００９８】
エキセンディン（９−３９）の緩衝液体製剤の特性
様々なイオン強度（１０ｍＭ〜３０ｍＭ）及び異なるｐＨ（ｐＨ３．５〜６．０）の２つのイオン緩衝液（酢酸緩衝液又はクエン酸緩衝液）の一方で、エキセンディン（９−３９）酢酸塩を製剤化した。各サンプルを５℃又は５０℃で最大５日間保存した。製剤を凝集について視覚的に検査し、純度及び効力を強カチオン交換（ＳＣＸ）−ＨＰＬＣにより試験した。
【００９９】
以下の表３に示すように、試験した緩衝エキセンディン（９−３９）製剤のいずれも５℃で溶液から沈殿しなかった。５０℃で４８時間以内に、ｐＨ４．５及び５．０の製剤は、目に見える凝集を示したが、他の製剤についてはいずれも凝集は見えなかった。
【０１００】
【表３】
2019535734.tif 000005
【０１０１】
純度及び効力について強カチオン交換−高性能液体クロマトグラフィー（ＳＣＸ−ＨＰＬＣ）により５日間にわたって製剤を分析した。エキセンディン（９−３９）緩衝液体製剤の純度及び効力に対する５０℃で５日間の保存の影響を図２Ａ及び図２Ｂに示す。
【０１０２】
図２Ａ及び以下の表４に示すように、クエン酸及び酢酸緩衝液は、５日の保存期間の終了時にエキセンディン（９−３９）の有効性に関して同等であった。ｐＨ３．５及びｐＨ６．０で、最少のエキセンディン（９−３９）喪失（すなわち、有効性に対する最後の影響）が観察された。これより高い緩衝強度は、５日の期間の終了時に、より多くのエキセンディン（９−３９）喪失を伴った。図２Ｂ及び表４に示すように、ｐＨ４．０の製剤について最少の純度低下が観察されたのに対し、ｐＨ６．０の製剤では最大の純度低下が観察された。イオン緩衝強度が（例えば、１０ｍＭから２０ｍＭ又は３０ｍＭに）増加すると、純度喪失が高くなった。クエン酸及び酢酸緩衝液は、同等の活性を呈示した。
【０１０３】
【表４】
2019535734.tif 000006
【０１０４】
５０℃で５日の保存後、様々なｐＨの１０ｍＭ酢酸緩衝液中で製剤化したエキセンディン（９−３９）の効力及び純度を図３に示す。図３に示すように、エキセンディン（９−３９）の最小の減少が、４．０以下のｐＨ又は５．５以上のｐＨで観察された。効力の喪失は、凝集が見えた場合（ｐＨ４．５及び５．０）に最大であった。
【０１０５】
１０ｍＭ酢酸緩衝液中で製剤化したエキセンディン（９−３９）のｐＨに対して純度の寄与をプロットした。図４は、純度に対するｐＨの作用を示し、これは、％面積寄与として測定した。
【０１０６】
特定の理論に拘束されることは意図しないが、エキセンディン（９−３９）の予測等電点（ｐＨ４．７）を超える緩衝液中でエキセンディン（９−３９）を製剤化するのが有利であることが提示されている。というのは、一旦この製剤が投与（例えば、注射）されると、製剤は、約７．４の生理学的ｐＨへの移行中に等電ｐＨを通過しないからである。さらに、こうしたｐＨの緩衝液中でエキセンディン（９−３９）を製剤化すれば、効力、化学的安定性、及び凝集に対する低感受性の向上などの特性の向上がもたらされると予想される。対照的に、典型的には約４．５のｐＨを有する通常生理食塩水中でエキセンディン（９−３９）を製剤化すると、こうした製剤は、生理学的ｐＨに向かう途中でエキセンディン（９−３９）の等電ｐＨを通過しなければならないことから、沈殿又は凝集の可能性が高くなり得る。
【０１０７】
実施例２：緩衝エキセンディン（９−３９）製剤の血漿濃度プロフィール
この実施例は、約５〜６の範囲のｐＨを有する緩衝液中で製剤化されたエキセンディン（９−３９）が、通常生理食塩水中で再構成したエキセンディン（９−３９）と比較して、向上した薬物動態特性を示すことを示す。この実施例のために、７．２ｍｇの用量（ヒトの場合、３０ｍｇの用量と同等）のエキセンディン（９−３９）酢酸塩を１０ｍＭ酢酸ナトリウム及び４５ｍｇ／ｍｌのマンニトール中で製剤化した。製剤は、５．５のｐＨを有した。３つの濃度：１５ｍｇ／ｍｌ、３０ｍｇ／ｍｌ、又は４５ｍｇ／ｍｌのうちの１つで皮下注射により製剤をイヌ（群当たり３匹の雄イヌ）に投与した。エキセンディン（９−３９）の血漿濃度は、投与後、０〜２４時間の期間にわたってモニターした（図５Ｂ）。
【０１０８】
対照として、７．２ｍｇの用量（ヒトの場合、３０ｍｇの用量と同等）のエキセンディン（９−３９）酢酸塩を、約４．５のｐＨを有する０．９％通常生理食塩水中で再構成し、２匹のイヌ（１匹の雄及び１匹の雌）に対して皮下投与した。図５Ａは、０．９％通常生理食塩水中で再構成したエキセンディン（９−３９）を投与することによって得られた血漿濃度プロフィールを示す。
【０１０９】
図５Ａ及び図５Ｂの比較から分かるように、緩衝液体製剤（１０ｍＭ酢酸ナトリウム中にエキセンディン（９−３９）と４５ｍｇ／ｍｌのマンニトールを含み、５．５のｐＨを有する）は、試験をした全ての濃度で、通常生理食塩水中で再構成した凍結乾燥エキセンディン（９−３９）と比較して、投与から最初の４時間にわたり、エキセンディン（９−３９）のより高い血漿濃度をもたらした。
【０１１０】
実施例３：エキセンディン９−３９の反復皮下投与は、肥満手術後の低血糖症を有する患者における高インスリン性低血糖症及び神経低血糖症状を軽減する
要約
肥満手術後の低血糖症（ＰＢＨ）は、徴候的な食後低血糖症の一般的エピソードによって発現される肥満手術の稀だが、重篤な合併症であり、そのための承認された薬物療法はない。インスリン分泌の調節異常を伴うインクレチンホルモン、グルカゴン様ペプチド−１（ＧＬＰ−１）の食事誘導型分泌の増大の主要な役割が立証され、これによりＧＬＰ−１受容体拮抗は魅力的な標的治療手法となった。ＧＬＰ−１受容体アンタゴニストのエキセンディン（９−３９）の単回静脈内（ＩＶ）注入又は皮下（ＳＣ）注射の使用を評価する試験は、単回用量のエキセンディン（９−３９）が、経口グルコース負荷試験（ＯＧＴＴ）中に、ＰＢＨ患者における食後低血糖症を予防し、β細胞機能を正常化すると共に、神経低血糖症状を軽減することができることを実証した。
【０１１１】
この複数漸増用量（ＭＡＤ）試験では、ＰＢＨを有する参加者に、最大３日にわたりＢＩＤで皮下投与した２つのエキセンディン（９−３９）製剤の効果、耐容性、及び薬物動態プロフィールを評価した。この２部試験のパートＡでは、ＰＢＨを有する１４人の参加者が、ベースラインＯＧＴＴに続いて、０．９％通常生理食塩水中で再構成した凍結乾燥エキセンディン（９−３９）（「Ｌｙｏ」）を最大３日間ＢＩＤで複数漸増用量を受け、投与最終日に反復ＯＧＴＴを受けた。この試験のパートＢでは、５人の参加者が、ｐＨ５．５の１０ｍＭ酢酸ナトリウム中に３０ｍｇエキセンディン（９−３９）と４５ｍｇ／ｍｌのマンニトールを含む緩衝液体製剤（「Ｌｉｑ」）による３日間のＢＩＤ処置を受けた。ＳＣエキセンディン（９−３９）の両製剤の反復投与は、良好な耐容性を示し、ＰＢＨ患者において用量依存的に、高インスリン性低血糖症を改善すると共に、関連症状を軽減した。緩衝液体エキセンディン（９−３９）製剤は、食塩水中で再構成した凍結乾燥エキセンディン（９−３９）と同等又はそれより高い効率で、食後代謝及び臨床パラメータを改善し、より高い曝露及び作用持続時間を賦与することも分かった。結論として、緩衝液体エキセンディン（９−３９）製剤は、エキセンディン（９−３９）の皮下投与のための有望で、好都合な製剤を提供し、より低用量且つ／又は低頻度の投与を達成し得る。
【０１１２】
背景
ＰＢＨは、徴候的な食後低血糖症の一般的エピソードによって発現される肥満手術の稀だが、重篤な合併症であり、そのための承認された薬物療法はない。インスリン分泌の調節異常を伴うインクレチンホルモン、グルカゴン様ペプチド−１（ＧＬＰ−１）の食事誘導型分泌の増大の主要な役割が立証され、これによりＧＬＰ−１受容体拮抗は魅力的且つ標的化された治療手法となった。ＧＬＰ−１受容体アンタゴニストＥｘ−９−３９のＩＶ注入（Ｓａｌｅｈｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ，２０１４，１４６：６６９−６８０；Ｃｒａｉｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｄｉａｂｅｔｏｌｏｇｉａ，２０１７，６０：５３１−５４０）又はＳＣ注射（国際公開第２０１６／１９１３９５号パンフレットを参照）を評価する試験は、単回用量のエキセンディン（９−３９）が、ＯＧＴＴ中に、ＰＢＨ患者における食後低血糖症を予防し、β細胞機能を正常化すると共に、神経低血糖症状を軽減できることを実証した。本試験は、緩衝液体製剤中で製剤化された皮下投与エキセンディン（９−３９）のヒトにおける最初の評価となることを示す。本発明者らは、ＰＢＨ参加者に最大３日間ＢＩＤで投与した、皮下投与エキセンディン（９−３９）の２つの製剤（食塩水中で再構成した凍結乾燥エキセンディン（９−３９）、又は緩衝液体製剤中のエキセンディン（９−３９））の複数漸増用量の効果、耐容性、及び動態プロフィールを評価することを目的とするこの研究から得られた中間結果（参加者２０人のうちの１９人）を示す。
【０１１３】
方法
試験設計及び手順：
この第２相ＭＡＳ試験を２つのパート、パートＡ及びＢで実施した。パートＡでは、１４人の参加者が、ベースラインＯＧＴＴに続いて、２．５〜３２ｍｇの範囲のエキセンディン（９−３９）の再構成凍結乾燥製剤（「Ｌｙｏ」）の最大３日間のＢＩＤ投与を受け、また投与最終日に反復ＯＧＴＴを受けた。パートＢでは、５人の参加者が、ベースラインＯＧＴＴに続いて、１０ｍＭ酢酸ナトリウム及び４５ｍｇ／ｍｌのマンニトールを含み、ｐＨ５．５を有する緩衝液中で製剤化した３０ｍｇＢＩＤのエキセンディン（９−３９）（「Ｌｉｑ」）を受け、処置の第３日の反復ＯＧＴＴを受けた（図６を参照）。両方のパートで、代謝、臨床、及び薬物動態応答を評価し、耐容性及び安全性をモニターした。用量レベル及び頻度の決定は、ＰＫ、ＰＤ、及び安全性データの中間評価に基づいて行った。低血糖症の症状は、エジンバラ低血糖症状尺度（Ｅｄｉｎｂｕｒｇｈ  Ｈｙｐｏｇｌｙｃｅｍｉａ  Ｓｙｍｐｔｏｍ  Ｓｃａｌｅ）（ＥＨＳＳ）（４、５）を使用して、各ＯＧＴＴ中に評価した。血漿グルコース≦５０ｍｇ／ｄＬで、ＩＶデキストロースを用いた治験責任医師レスキューによりＯＧＴＴを停止した。
【０１１４】
試験参加者：
適格参加者は、年齢１８〜６５歳の男性又は女性で、少なくとも１２ヵ月前にＲｏｕｘ−ｅｎ  Ｙ胃バイパス（ＲＹＧＢ）手術を受けており、ウィップルの三徴の病歴を有し、低血糖症（≦５５ｍｇ／ｄＬ）の際に不適切に上昇したインスリン濃度（＞３μＵ／ｍＬ）及び患者の報告により最低限毎月１つの症状エピソードを有する。１４人の試験参加者の特徴を以下の表５に記載する。
【０１１５】
【表５】
2019535734.tif 000007
【０１１６】
結果
代謝及び臨床応答：
パートＡ：再構成したエキセンディン（９−３９）の凍結乾燥製剤を用いた処置により、全ての用量レベルで低血糖症の存在及び程度を低減した。用量≧１８ｍｇを受けた参加者は、ＩＶデキストロースレスキューを必要としなかった。再構成凍結乾燥エキセンディン（９−３９）の場合、グルコース最下点、インスリンピーク、及び症状スコアにおいて徐々に増加する改善と共に、用量−応答関係が観察された（図８Ａ〜８Ｃ及び以下の表６）。３日にわたり平均して約３０ｍｇの再構成凍結乾燥エキセンディン（９−３９）ＢＩＤを受けた上位２つの用量コホートは、グルコース最下点の平均３７％増加、ピークインスリン濃度の５０％低下、並びに全体的低血糖症状スコアの５０％低下、及び神経低血糖症状の５０％低下を示した（図７Ａ及び７Ｃ並びに以下の表６）。全ての用量が、軽度の頭痛又は吐き気が報告されただけで、良好な耐容性を示し、薬剤関連有害事象（ＤＲＡＥ）は観察されなかった。
【０１１７】
中間効果、安全性、及び耐容性結果に基づき、３０ｍｇＢＩＤの固定用量のエキセンディン（９−３９）緩衝液体製剤をパートＢについて選択した。
【０１１８】
パートＢ：３０ｍｇのエキセンディン（９−３９）緩衝液体製剤のＢＩＤ用量を用いた処置により、評価した全参加者において、投与の第３日のＯＧＴＴ中に食後グルコース最下点が上昇し、ＩＶデキストロースレスキューは必要とする者はなかった。平均して、参加者は、グルコース最下点の４９％増加、ピークインスリン濃度の５８％減少、並びに全体的低血糖症状スコアの５６％低下、及び神経低血糖症状の１２％低下を達成した（図７Ｂ、７Ｄ、８Ａ〜８Ｃ）。全ての用量が、良好な耐容性を示し、ＤＲＡＥは一切観察されなかった。
【０１１９】
薬物動態応答：
パートＡ：再構成凍結乾燥エキセンディン（９−３９）の用量の増加によって、Ｃｍａｘ及び１２時間ＡＵＣ濃度によって示されるように、エキセンディン（９−３９）曝露が徐々に増加した（図９Ａ〜９Ｂ及び表６）。
【０１２０】
パートＢ：ｍｇ／ｋｇ基準で投与された同等用量のエキセンディン（９−３９）緩衝液体製剤は、再構成凍結乾燥エキセンディン（９−３９）と比べて、より高いＣｍａｘ、より高い１２時間ＡＵＣ、及びより遅いＴｍａｘをもたらした。エキセンディン（９−３９）緩衝液体製剤は、投与の最終日に、より高いトラフ血漿濃度をもたらし、同等用量の再構成凍結乾燥エキセンディン（９−３９）よりも持続的な吸収プロフィールを示した（図９Ａ〜９Ｂ及び表６）。
【０１２１】
【表６】
2019535734.tif 000008
【０１２２】
結論
難治性ＰＢＨ患者において、皮下投与エキセンディン（９−３９）の反復投与は、ＯＧＴＴ誘発中に下記の結果をもたらした：（１）食後高インスリン性低血糖症の用量依存的改善及び関連症状の実質的な低減；（２）用量≧１８ｍｇで、レスキュー療法を必要としない神経低血糖症の予防；並びに（３）薬剤関連の有害事象又は耐容性に対する懸念がないこと。エキセンディン（９−３９）緩衝液体製剤、すぐに使える製剤は、徴候的な高インスリン性低血糖症に対して少なくとも同等の防御をもたらし、より長い作用持続時間と共に、より高い薬物動態暴露を賦与し得る。
【０１２３】
実施例４：単一及び複数漸増用量の皮下投与緩衝エキセンディン（９−３９）製剤の薬物動態プロフィール
単一及び複数漸増用量のエキセンディン（９−３９）の皮下投与緩衝液体製剤の安全性、耐容性、薬物動態及び薬力学プロフィールを調べる第１相試験を実施した。この試験のために、１０ｍＭ酢酸ナトリウムと４５ｍｇ／ｍｌマンニトールを含み、ｐＨ５．５を有する液体緩衝剤中３０ｍｇ／ｍｌの濃度で、エキセンディン（９−３９）を製剤化した。健常なボランティアによるこの単一施設試験では、３２人の被験者に、７．５ｍｇ〜４５ｍｇの範囲の単一漸増用量のエキセンディン（９−３９）（２４人のボランティア）又はプラセボ（８人のボランティア）のいずれかを皮下投与し（パートＡ）；１６人の被験者が、３つの漸増用量のうちの１つ（連続した３日間６０、７５若しくは９０ｍｇのエキセンディン（９−３９）を１日１回投与）を受けた。
【０１２４】
パートＡの単一漸増用量群では、３２人の健常な被験者が、以下の通り各々８人の被験者から成る４つの連続したコホートに登録された：６人の被験者は、７．５、１５、３０又は４５ｍｇの用量でエキセンディン（９−３９）を受け、２人の被験者は、各コホートでプラセボを受けた。パートＢの複数漸増用量群では、１６人の健常な被験者が、６、６及び４人の被験者から成る３つの連続したコホートに登録され、連続した３日間１日１回投与されるエキセンディン（９−３９）の６０、７５若しくは９０ｍｇのそれぞれ３つの用量レベルのうちの１つを受けた。
【０１２５】
以下の表７及び図１０Ａに示すように、平均全身曝露（Ｃｍａｘ、ＡＵＣ０−ｔａｕ及びＡＵＣ０−ｉｎｆ）は、ほぼ用量比例的に用量と共に増加した。
【０１２６】
【表７】
2019535734.tif 000009
【０１２７】
図１０Ｂに示すように、３０ｍｇＢＩＤ投与の第３日の投与前トラフ血漿濃度は、治療的であると考えられるエキセンディン（９−３９）の血漿濃度に近くなり（＞２２０ｎｇ／ｍｌ）、日中時間（次の投与時間前のＴ＝１２時間）全体を通して比較持続的な血漿濃度を有した。６０ｍｇＡＭ用量の投与から６０分以内に、目標の予想治療濃度（＞２２０ｎｇ／ｍｌ）を達成され、日中時間全体を通して、より高いピーク濃度及び持続的治療濃度が観察された。
【０１２８】
計画第２相試験のためのエキセンディン（９−３９）の用量レベル及び投与間隔は、この第１相試験の結果（例えば、表７及び図１０Ａ〜１０Ｂに示す通り）並びにスタンフォード大学（Ｓｔａｎｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ）で実施されたＰＢＨ患者における完了ＭＡＤ試験の結果に基づいて選択した。スタンフォードＭＡＤ試験では、難治性ＰＢＨ患者は、エキセンディン（９−３９）の３０ｍｇＢＩＤ投与後の経口グルコース負荷試験中にグルコース最下点及び神経低血糖症状の有意な改善を経験し、食塩水中で再構成した凍結乾燥エキセンディン（９−３９）と比較して、緩衝液体製剤後では食後代謝及び臨床パラメータが改善された。スタンフォードＭＡＤ試験では、最適な薬力学効果（食後グルコース最下点＞５０ｍｇ／ｄｌ及び少なくとも５０％のピークインスリンの減少）が、少なくとも２２０ｎｇ／ｍｌのピーク血漿濃度（Ｃｍａｘ）で達成された。対照的に、本明細書に記載する研究（例えば、この実施例及び実施例３に示す通り）では、緩衝液体製剤は、通常生理食塩水中で製剤化した再構成凍結乾燥エキセンディン（９−３９）と比較して、より高い薬物動態及び薬力学的効果を示した。
【０１２９】
総合すると、表７及び図１０Ａ〜１０Ｂに示すように、健常なボランティアによるこの第１相試験からのＰＫデータ、並びに実施例３に記載するように、完了スタンフォードＭＡＤ試験からのＰＫ及びＰＤデータは、３０ｍｇＢＩＤの緩衝液体製剤の反復皮下投与が、投与後まで食事を待つ必要なく、食後低血糖症からの防御を賦与するのに十分なエキセンディン（９−３９）の血漿濃度をもたらし得ることを示唆している。データはまた、６０ｍｇＱＤなどのより高い用量により賦与される長期且つより高い曝露が、より高い全身曝露が必要な患者及び／又は１日１回のレジメンの利便性を優先する患者に、約１６時間にわたる治療血漿濃度をもたらし得ることも示唆している。１日１回の投与レジメンの下では、朝食前に、投与から少なくとも６０分の間隔を置くこと、及び夜遅く食べることを回避するのが好ましいであろう。従って、６０ｍｇの総１日用量（１２時間毎に３０ｍｇ又は毎朝６０ｍｇのいずれかとして皮下投与される）を難治性ＰＢＨ患者による次の第２相試験のために選択した。
【０１３０】
上述の発明を説明及び明瞭な理解のための例としてある程度詳細に記載してきたが、当業者には明らかなように、本発明の精神及び範囲から逸脱することなく、本発明の多くの改変及び変更を実施できることを当業者は理解されよう。本明細書に記載の具体的な実施形態は例として提供されるに過ぎず、何ら限定を意図するものではない。本明細書及び実施例は、あくまで例として考慮され、本発明の真の範囲及び精神は、以下の特許請求の範囲によって示されることが意図される。
【０１３１】
本明細書に引用される全ての刊行物、特許、特許出願又は他の文献は、刊行物、特許、特許出願又は他の文献の各々が、あらゆる目的のために参照により組み込まれると個別に記載されているのと同じ範囲まであらゆる目的のためにその全体が参照により本明細書に組み込まれるものとする。
【図１】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図３】
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【図４】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図６】
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【図７Ａ】
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【図７Ｂ】
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【図７Ｃ】
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【図７Ｄ】
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【図８Ａ】
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【図８Ｂ】
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【図８Ｃ】
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【図９Ａ】
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【図９Ｂ】
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【図１０Ａ】
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【図１０Ｂ】
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【国際調査報告】
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