(57)【要約】ベネトクラクス及びインドリノン誘導体の組み合わせを用いて急性骨髄性白血病及びびまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫を治療するための方法及び組成物が提供される。【選択図】図１
2019522037.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
急性骨髄性白血病で産生される骨髄芽球又はびまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫で産生されるリンパ球を含む細胞においてアポトーシスを誘導するための方法であって、
ブロモドメイン、特異的末端をもつタンパク質阻害剤、抗ＣＤ２０モノクローナル抗体、及びＢＣＬ２阻害剤からなる群より選ばれる少なくとも１つの治療剤、及び
式（Ｉ）の構造を有するか、もしくはその立体異性体、その薬学的に許容される塩、又はその溶媒和物である化合物
【化１】
2019522037.tif 000060
の組み合わせの有効量と前記細胞とを接触させることを含み、
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃｌ、−ＣＮ、及びＣＦ３からなる群より選ばれ、Ａは、Ｈ及びＣ１−６アルキルからなる群より選ばれ、Ｄは、−ＯＨ及びＯ（Ｃ１−６アルキル）からなる群より選ばれ、Ｒ５及びＲ６は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｆ、及びＣ１−６アルキルからなる群より選ばれるか、又は、Ｒ５及びＲ６は、置換もしくは非置換のシクロアルキル環を一緒になって形成しており、Ｒ１２は、独立して、置換又は非置換のＣ３−８シクロアルキル、置換又は非置換のＣ３−８ヘテロシクロアルキル、
【化２】
2019522037.tif 000061
及び
【化３】
2019522037.tif 000062
（ここで、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、及びＲ１１は、それぞれ独立して、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、ＣＦ３、Ｃ１−６アルキル、アリール、ヘテロアリール、−Ｏ（Ｃ１−６アルキル）、−Ｏ（アリール）、−Ｏ（ヘテロアリール）、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２（Ｃ１−６アルキル）、−ＮＨＳＯ２（Ｃ１−６アルキル）、−ＮＨＳＯ２（アリール）、−ＮＨＣＯＮＨ（Ｃ１−６アルキル）、−ＮＨＣＯＮ（Ｃ１−６アルキル）２、−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）ＣＯＮＨ２、−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）ＣＯＮＨ（Ｃ１−６アルキル）、−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）ＣＯＮ（Ｃ１−６アルキル）２、−ＳＯ２（Ｃ１−６アルキル）、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＳＯ２ＮＨ（Ｃ１−６アルキル）、−ＳＯ２Ｎ（Ｃ１−６アルキル）２からなる群より選ばれ、Ｒ１３は、−Ｏ（Ｃ１−６アルキル）及びＮ（Ｃ１−６アルキル）２からなる群より選ばれる）からなる群より選ばれる、方法。
【請求項２】
急性骨髄性白血病又はびまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫を治療するための方法であって、
ブロモドメイン、特異的末端をもつタンパク質阻害剤、抗ＣＤ２０モノクローナル抗体、及びＢＣＬ２阻害剤からなる群より選ばれる少なくとも１つの治療剤、及び
式（Ｉ）の構造を有するか、もしくはその立体異性体、その薬学的に許容される塩、又はその溶媒和物である化合物
【化４】
2019522037.tif 000063
の組み合わせの抗増殖量を、それを必要とする患者に投与することを含み、
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃｌ、−ＣＮ、及びＣＦ３からなる群より選ばれ、Ａは、Ｈ及びＣ１−６アルキルからなる群より選ばれ、Ｄは、−ＯＨ及びＯ（Ｃ１−６アルキル）からなる群より選ばれ、Ｒ５及びＲ６は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｆ、及びＣ１−６アルキルからなる群より選ばれるか、又は、Ｒ５及びＲ６は、置換もしくは非置換のシクロアルキル環を一緒になって形成しており、Ｒ１２は、独立して、置換又は非置換のＣ３−８シクロアルキル、置換又は非置換のＣ３−８ヘテロシクロアルキル、
【化５】
2019522037.tif 000064
及び
【化６】
2019522037.tif 000065
（ここで、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、及びＲ１１は、それぞれ独立して、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、ＣＦ３、Ｃ１−６アルキル、アリール、ヘテロアリール、−Ｏ（Ｃ１−６アルキル）、−Ｏ（アリール）、−Ｏ（ヘテロアリール）、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２（Ｃ１−６アルキル）、−ＮＨＳＯ２（Ｃ１−６アルキル）、−ＮＨＳＯ２（アリール）、−ＮＨＣＯＮＨ（Ｃ１−６アルキル）、−ＮＨＣＯＮ（Ｃ１−６アルキル）２、−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）ＣＯＮＨ２、−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）ＣＯＮＨ（Ｃ１−６アルキル）、−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）ＣＯＮ（Ｃ１−６アルキル）２、−ＳＯ２（Ｃ１−６アルキル）、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＳＯ２ＮＨ（Ｃ１−６アルキル）、−ＳＯ２Ｎ（Ｃ１−６アルキル）２からなる群より選ばれ、Ｒ１３は、−Ｏ（Ｃ１−６アルキル）及びＮ（Ｃ１−６アルキル）２からなる群より選ばれる）からなる群より選ばれる、方法。
【請求項３】
Ｒ９は、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、ＣＦ３、Ｃ１−６アルキル、アリール、ヘテロアリール、−Ｏ（アリール）、−Ｏ（ヘテロアリール）、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２（Ｃ１−６アルキル）、−ＮＨＳＯ２（Ｃ１−６アルキル）、−ＮＨＳＯ２（アリール）、−ＮＨＣＯＮＨ（Ｃ１−６アルキル）、−ＮＨＣＯＮ（Ｃ１−６アルキル）２、−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）ＣＯＮＨ２、−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）ＣＯＮＨ（Ｃ１−６アルキル）、−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）ＣＯＮ（Ｃ１−６アルキル）２、−ＳＯ２（Ｃ１−６アルキル）、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＳＯ２ＮＨ（Ｃ１−６アルキル）、−ＳＯ２Ｎ（Ｃ１−６アルキル）２からなる群より選ばれ、Ｒ１３は、−Ｏ（Ｃ１−６アルキル）及びＮ（Ｃ１−６アルキル）２からなる群より選ばれる、請求項１〜２のいずれか１つに記載の方法。
【請求項４】
前記細胞が哺乳動物のものである、請求項１〜３のいずれか１つに記載の方法。
【請求項５】
前記細胞がヒトのものである、請求項１〜４のいずれか１つに記載の方法。
【請求項６】
前記細胞がインビトロでのものである、請求項１〜５のいずれか１つに記載の方法。
【請求項７】
前記細胞がインビボでのものである、請求項１〜６のいずれか１つに記載の方法。
【請求項８】
前記治療剤は、ブロモドメイン及び特異的末端をもつタンパク質阻害剤である、請求項１〜７のいずれか１つに記載の方法。
【請求項９】
前記ブロモドメイン及び特異的末端をもつタンパク質阻害剤は、ＯＴＸ０１５である、請求項１〜７のいずれか１つに記載の方法。
【請求項１０】
前記治療剤は、抗ＣＤ２０モノクローナル抗体である、請求項１〜７のいずれか１つに記載の方法。
【請求項１１】
前記抗ＣＤ２０モノクローナル抗体は、リツキシマブである、請求項１〜７のいずれか１つに記載の方法。
【請求項１２】
前記治療剤は、ＢＣＬ２阻害剤である、請求項１〜７のいずれか１つに記載の方法。
【請求項１３】
前記ＢＣＬ２阻害剤は、ベネトクラクスである、請求項１〜７のいずれか１つに記載の方法。
【請求項１４】
Ｒ９は、アジリジニル、アゼチジニル、ピロリジニル、及びモルホリノリルからなる群より選ばれる、請求項１〜１３のいずれか１つに記載の方法。
【請求項１５】
Ｒ９は、イソプロピル及びシクロプロピルからなる群より選ばれる、請求項１〜１３のいずれか１つに記載の方法。
【請求項１６】
前記化合物は、式（Ｉａ）の構造を有するか、もしくはその立体異性体、その薬学的に許容される塩、又はその溶媒和物であり、
【化７】
2019522037.tif 000066
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４は、それぞれ独立して、Ｈ及びＣｌからなる群より選ばれ、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ１０、及びＲ１１は、それぞれ独立して、Ｈ及びハロゲンからなる群より選ばれ、Ｒ９は、独立して、Ｃ３−８シクロアルキル及びＣ３−８ヘテロシクロアルキルからなる群より選ばれる、請求項１〜１３のいずれか１つに記載の方法。
【請求項１７】
Ｒ１及びＲ４は、Ｃｌであり、Ｒ２及びＲ３は、Ｈである、請求項１〜１３のいずれか１つに記載の方法。
【請求項１８】
前記化合物は、
【化８】
2019522037.tif 000067
【化９】
2019522037.tif 000068
からなる群より選ばれる構造を有するか、もしくはその立体異性体、その薬学的に許容される塩、エステル又はその溶媒和物である、請求項１〜１３のいずれか１つに記載の方法。
【請求項１９】
前記化合物は、
【化１０】
2019522037.tif 000069
からなる群より選ばれる構造を有するか、もしくはその立体異性体、その薬学的に許容される塩、エステル又はその溶媒和物である、請求項１〜１３のいずれか１つに記載の方法。
【請求項２０】
前記化合物は、
【化１１】
2019522037.tif 000070
からなる群より選ばれる構造を有するか、もしくはその立体異性体、その薬学的に許容される塩、エステル又はその溶媒和物である、請求項１〜１３のいずれか１つに記載の方法。
【請求項２１】
前記化合物は、
【化１２】
2019522037.tif 000071
からなる群より選ばれる構造を有するか、もしくはその立体異性体、その薬学的に許容される塩、エステル又はその溶媒和物である、請求項１〜１３のいずれか１つに記載の方法。
【請求項２２】
前記化合物は、
【化１３】
2019522037.tif 000072
の構造を有するか、もしくはその立体異性体、その薬学的に許容される塩、エステル又はその溶媒和物である、請求項１〜１３のいずれか１つに記載の方法。
【請求項２３】
前記化合物は、
【化１４】
2019522037.tif 000073
の構造を有するか、もしくはその立体異性体、その薬学的に許容される塩、エステル又はその溶媒和物である、請求項１〜１３のいずれか１つに記載の方法。
【請求項２４】
前記化合物は、
【化１５】
2019522037.tif 000074
の構造を有するか、もしくはその立体異性体、その薬学的に許容される塩、エステル又はその溶媒和物である、請求項１〜１３のいずれか１つに記載の方法。
【請求項２５】
医薬組成物であって、
ブロモドメイン、特異的末端をもつタンパク質阻害剤、抗ＣＤ２０モノクローナル抗体、及びＢＣＬ２阻害剤からなる群より選ばれる少なくとも１つの治療剤、及び
式（Ｉ）の構造を有するか、もしくはその立体異性体、その薬学的に許容される塩、又はその溶媒和物である化合物
【化１６】
2019522037.tif 000075
を含み、
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃｌ、−ＣＮ、及びＣＦ３からなる群より選ばれ、Ａは、Ｈ及びＣ１−６アルキルからなる群より選ばれ、Ｄは、−ＯＨ及びＯ（Ｃ１−６アルキル）からなる群より選ばれ、Ｒ５及びＲ６は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｆ、及びＣ１−６アルキルからなる群より選ばれるか、又は、Ｒ５及びＲ６は、置換もしくは非置換のシクロアルキル環を一緒になって形成しており、Ｒ１２は、独立して、置換又は非置換のＣ３−８シクロアルキル、置換又は非置換のＣ３−８ヘテロシクロアルキル、
【化１７】
2019522037.tif 000076
及び
【化１８】
2019522037.tif 000077
（ここで、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、及びＲ１１は、それぞれ独立して、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、ＣＦ３、Ｃ１−６アルキル、アリール、ヘテロアリール、−Ｏ（Ｃ１−６アルキル）、−Ｏ（アリール）、−Ｏ（ヘテロアリール）、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２（Ｃ１−６アルキル）、−ＮＨＳＯ２（Ｃ１−６アルキル）、−ＮＨＳＯ２（アリール）、−ＮＨＣＯＮＨ（Ｃ１−６アルキル）、−ＮＨＣＯＮ（Ｃ１−６アルキル）２、−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）ＣＯＮＨ２、−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）ＣＯＮＨ（Ｃ１−６アルキル）、−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）ＣＯＮ（Ｃ１−６アルキル）２、−ＳＯ２（Ｃ１−６アルキル）、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＳＯ２ＮＨ（Ｃ１−６アルキル）、−ＳＯ２Ｎ（Ｃ１−６アルキル）２からなる群より選ばれ、Ｒ１３は、−Ｏ（Ｃ１−６アルキル）及びＮ（Ｃ１−６アルキル）２からなる群より選ばれる）からなる群より選ばれる、医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
インドリノン誘導体を用いて急性骨髄性白血病及びびまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫を治療するための方法及び組成物が提供される。
【背景技術】
【０００２】
様々なユーイング肉腫ファミリー腫瘍（ＥＳＦＴ）に存在するＥＷＳ−ＦＬＩ転写因子は、１０年以上前に特徴付けられている。小児及び青年で２番目に多い骨腫瘍であるユーイング肉腫の治療における進展は、局所腫瘍を有する患者の生存性を改善した。しかし、転移を有する患者についてはまだうまく行かず、治療は短期及び長期の毒性をもたらす。ユーイング肉腫ファミリー腫瘍（ＥＳＦＴ）は、継続的な発現がＥＳＦＴ細胞生存について重要であると考えられている発癌性融合転写因子でＥＷＳ−ＦＬＩ１を生成する染色体転座によって特徴付けられる（Ｂａｌａｍｕｔｈ、ＮＪ、Ｗｏｍｅｒ、ＲＢ、Ｌａｎｃｅｔ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ  １１、１８４−１９２（２０１０））。ＦＬＩ１及びＳＰＩＢ等のＥＴＳ転写因子は、ヒトリンパ腫において自由に再発する（Ｂｏｎｅｔｔｉら、Ｂｌｏｏｄ  ２０１３、Ｌｅｎｚら、ＰＮＡＳ  ２００８）。小分子ＹＫ−４−２７９は、ユーイング肉腫細胞における増殖停止及びアポトーシスをもたらすＲＨＡへのＥＷＳ１−ＦＬＩ１融合タンパク質の結合を阻害し（Ｅｒｋｉｚａｎら、Ｎａｔ  Ｍｅｄ  ２００９）、それは以前にＹＫ−４−２７９がインビトロ抗リンパ腫活性を有することを示した（Ｃｈｕｎｇら、ＡＡＣＲ  ２０１５）。
【０００３】
インビトロ及びインビボ研究は、ＲＮＡヘリカーゼＡ（ＲＨＡ）への腫瘍性タンパク質ＥＷＳ−ＦＬＩ１の結合の阻害がＥＳＦＴ細胞株の増殖の減少及び腫瘍容積の減少をもたらすことを実証した。ＥＷＳ−ＦＬＩ１は、酵素活性を欠くが、しかし、ＲＮＡヘリカーゼＡ（ＲＨＡ）とＥＷＳ−ＦＬＩ１との間のタンパク質−タンパク質相互作用は、発癌性を調節し、したがって腫瘍増殖の維持に必要とされる（Ｈｙａｒｉｙｅ  Ｎ  Ｅｒｋｉｚａｎら、Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  １５（７）、７５０−７５６（２００９））。キータンパク質相互作用を破壊するパラダイムは、同様の転座を有する肉腫及びＭＬＬ転座を有する白血病を含む疾患の治療に有用性を有し得る（Ｈｅｌｍａｎ  ＬＪ、Ｍｅｌｔｚｅｒ  Ｐ、肉腫進展のメカニズム、Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｃａｎｃｅｒ  ２００３；３（９）：６８５−９４；及びＰｕｉ  ＣＨら、Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ  ２００４；３５０（１５）：１５３５−１５４８）。また、変性タンパク質は、それらの固有の生化学的特性に基づけば優れた治療標的であり得る（Ｃｈｅｎｇ  Ｙ、ＬｅＧａｌｌ  Ｔ、Ｏｌｄｆｉｅｌｄ  ＣＪら、Ｔｒｅｎｄｓ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ  ２００６；２４（１０）：４３５−４２）。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】Ｂａｌａｍｕｔｈ、ＮＪ、Ｗｏｍｅｒ、ＲＢ、Ｌａｎｃｅｔ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ  １１、１８４−１９２（２０１０）
【非特許文献２】Ｈｙａｒｉｙｅ  Ｎ  Ｅｒｋｉｚａｎら、Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  １５（７）、７５０−７５６（２００９）
【非特許文献３】Ｈｅｌｍａｎ  ＬＪ、Ｍｅｌｔｚｅｒ  Ｐ、肉腫進展のメカニズム、Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｃａｎｃｅｒ  ２００３；３（９）：６８５−９４
【非特許文献４】Ｐｕｉ  ＣＨら、Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ  ２００４；３５０（１５）：１５３５−１５４８
【非特許文献５】Ｃｈｅｎｇ  Ｙ、ＬｅＧａｌｌ  Ｔ、Ｏｌｄｆｉｅｌｄ  ＣＪら、Ｔｒｅｎｄｓ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ  ２００６；２４（１０）：４３５−４２
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
ＥＷＳ−ＦＬＩ１に向けられたアンチセンス及びｓｉＲＮＡを用いたインビトロ異種移植の長年の研究にもかかわらず、これらのいずれも、不充分な送達及び安定性からヒトの治療としてこれまで実用には至っていない。したがって、ＥＳＦＴ等の障害を治療する改善された治療が必要である。
【０００６】
ＦＬＩ−１は、通常は発生中の胚において活性であるが出生後はそうではないＥＴＳファミリー転写因子のメンバーである。転写因子のこのファミリーのメンバーは２９個あり、そのうちの４つである、ＦＬＩ−１、ＥＴＶ１、ＥＴＶ４及びＥＲＧは、広範囲の癌と関連している。
【０００７】
ＦＬＩ１、ＥＴＶ１、ＥＴＶ４又はＥＲＧの発癌性融合タンパク質又は転写因子自体の結合の阻害をターゲットとする治療用化合物は、ユーイング肉腫ファミリー腫瘍、膵臓癌、前立腺癌、神経膠芽腫、非小細胞肺癌、及びいくつかの他の癌を含む、癌の治療に有用性を有することになるであろう。好ましい実施形態は、これらのニーズを満たし、また他の利点も同様に提供する。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本明細書で開示されるいくつかの実施形態は、立体異性体、遊離形態、薬学的に許容されるその塩又はエステル、溶媒和物、又はそのような形態の組み合わせ等の形態を含む式（Ｉ）の化合物に関し、式中、Ａ、Ｄ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、及びＲ１２は、本明細書で定義される。
【化１】
2019522037.tif 000003
【０００９】
本明細書に開示されるいくつかの実施形態は、立体異性体、遊離形態、もしくは薬学的に許容されるその塩等の形態を含む式（Ｉ）の１つ以上の化合物、又は、立体異性体、遊離形態、もしくは薬学的に許容されるその塩等の形態を含む式（Ｉ）の１つ以上の化合物を含む医薬組成物の有効量を哺乳動物に投与することを備える、哺乳動物における癌を治療するための方法に関する。本明細書に記載の他の実施形態は、癌の治療のための医薬の製造における、立体異性体、遊離形態、又は薬学的に許容されるその塩等の形態を含む式（Ｉ）の１つ以上の化合物を使用することに関する。
【００１０】
本明細書に記載のさらに他の実施形態は、癌の治療のための、立体異性体、遊離形態、又は薬学的に許容されるその塩等の形態を含む式（Ｉ）の化合物に関し、癌は、ユーイング肉腫、神経膠芽腫、急性骨髄性白血病、乳癌、頭頸部癌、黒色腫、非小細胞肺癌、卵巣癌、前立腺癌、及び子宮癌からなる群より選ばれる。これら及び他の実施形態は、以下でより詳細に記載される。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】図１は、ＴＫ２１６（本明細書においてはまたＴＫ−２１６とも称され、これは４，７−ジクロロ−３−（２−（４−シクロプロピルフェニル）−２−オキソエチル）−３−ヒドロキシインドリン−２−オンである）が、発癌において活性であり、アポトーシスを阻害することを示す図である。
【図２】図２は、ＴＫ２１６治療がＥＷＳ−ＦＬＩ１タンパク質相互作用を阻害して転写及び増殖の減少をもたらしたことを示す。
【図３】図３は、ＴＫ２１６がＥＷＳ−ＦＬＩ１とＥＷＳ−ＦＬＩ１  ＤＮＡ結合部位を含むＮＲＯＢ１レポータールシフェラーゼプラスミドとで同時形質移入したＣＯＳ７細胞において転写活性を低下させたことを示す。
【図４】図４は、ＴＫ２１６を用いた治療がユーイング肉腫Ａ４５７３細胞株の増殖の用量依存的阻害をもたらしたことを示す。
【図５】図５は、ＴＫ２１６がＡＭＬ細胞株において抗増殖活性を表示したことを示す。
【図６】図６は、ＴＫ２１６がＤＬＢＣＬ細胞株において抗増殖活性を表示したことを示す。
【図７】図７は、β−アクチンへと基準化され、対照実験に対する倍数として提示された切断カスパーゼ３の量を用いてＤＬＢＣＬ細胞株においてＴＫ２１６がアポトーシスを誘導したことを示す。
【図８】図８は、β−アクチンへと基準化され、対照実験に対する倍数として提示された切断カスパーゼ３の量を用いてＤＬＢＣＬ細胞株においてＴＫ２１６がアポトーシスを誘導したことを示す。
【図９】図９は、ＢＣＬ−２（ＡＢＴ１９９）阻害剤と組み合わせた場合にＴＫ２１６が相乗作用を表示したことを示し、ここではＣａｌｃｕＳｙｎソフトウェアがＣｈｏｕ／Ｔａｌａｌａｙの式を用いて組み合わせ指数（ＣＩ）を決定するために使用された。
【図１０】図１０は、ＢＴＫ（ＡＣＰ１９６）阻害剤と組み合わせた場合にＴＫ２１６が相乗作用を表示したことを示し、ここではＣａｌｃｕＳｙｎソフトウェアがＣｈｏｕ／Ｔａｌａｌａｙの式を用いて組み合わせ指数（ＣＩ）を決定するために使用された。
【図１１】図１１は、ＴＫ２１６がＴＭＤ８異種移植モデルにおいて抗腫瘍活性を表示したことを示す。
【図１２】図１２は、ＴＫ２１６を用いた治療が、治療の１３日後のビヒクル対照実験と比較した場合にＴＭＤ−８異種移植モデルの腫瘍増殖阻害となったことを示す。
【図１３】図１３は、ＴＭＤ８細胞株におけるベネトクラクスと組み合わせたときのＴＫ２１６についての用量効果曲線であり、上部曲線（×）は組み合わせ治療についての、中間曲線（◎）はＴＫ２１６についての、下部曲線（＋）はベネトクラクスについてのものである。
【図１４】図１４は、Ｕ２９３２細胞株におけるベネトクラクスと組み合わせたときのＴＫ２１６についての用量効果曲線であり、上部曲線（×）は組み合わせ治療についての、中間曲線（◎）はＴＫ２１６についての、下部曲線（＋）はベネトクラクスについてのものである。
【図１５】図１５は、ＨＬＢ１細胞株におけるベネトクラクスと組み合わせたときのＴＫ２１６についての用量効果曲線であり、上部曲線（×）は組み合わせ治療についての、中間曲線（◎）はＴＫ２１６についての、下部曲線（＋）はベネトクラクスについてのものである。
【図１６】図１６は、ＤＬＢＬＣ細胞株（ＴＭＤ８、ＨＢＬ１、Ｕ２９３２）で行われた用量効果試験の結果を示し、用量にわたる相乗作用を指し示す。
【図１７】図１７は、個々の組織型によるリンパ腫細胞株におけるＴＫ−２１６についてのＩＣ５０値の分布を示す。Ｙ軸はＩＣ５０値である。各ボックスプロットにおいて、ボックスの中央の線は中央値を示し、ボックスは、２５から７５パーセンタイル（四分位範囲、ＩＱ）へと延びている。ウィスカーは、上下隣接値（すなわち、±１．５ＩＱ）まで延びている。
【図１８Ａ】図１８Ａ及び図１８Ｂは、ＤＬＢＣＬ細胞株におけるＴＫ−２１６のアポトーシス及び細胞周期分布を示す（図１８Ａ）。２４、４８又は７２時間、ＴＫ−２１６（５００ｎＭ）に曝されたＤＬＢＣＬ細胞株におけるアポトーシスの誘導である。図面では、４つの代表的な（２つのＡＢＣ及び２つのＧＣＢ）結果を示している（図１８Ｂ）。２４、４８又は７２時間、５００ｎＭのＴＫ−２１６で治療されたＤＬＢＣＬ細胞株における細胞周期分布である。図面では、２つの代表的な（１つのＡＢＣ及び１つのＧＣＢ）の結果を示している。ＤＭＳＯ治療を、対照実験として使用した。
【図１８Ｂ】図１８Ａ及び図１８Ｂは、ＤＬＢＣＬ細胞株におけるＴＫ−２１６のアポトーシス及び細胞周期分布を示す（図１８Ａ）。２４、４８又は７２時間、ＴＫ−２１６（５００ｎＭ）に曝されたＤＬＢＣＬ細胞株におけるアポトーシスの誘導である。図面では、４つの代表的な（２つのＡＢＣ及び２つのＧＣＢ）結果を示している（図１８Ｂ）。２４、４８又は７２時間、５００ｎＭのＴＫ−２１６で治療されたＤＬＢＣＬ細胞株における細胞周期分布である。図面では、２つの代表的な（１つのＡＢＣ及び１つのＧＣＢ）の結果を示している。ＤＭＳＯ治療を、対照実験として使用した。
【図１９】図１９は、ＡＢＣ−ＤＬＢＣＬの異種移植モデルにおけるＴＫ−２１６の効果を示す。ＴＭＤ８細胞（１５×１０６）を皮下接種させたＮＯＤ−Ｓｃｉｄマウスを、それぞれＴＫ−２１６（１００ｍｇ／ｋｇ、ＢＩＤ、ｐｏ、ｎ＝９）と対照実験ビヒクル（ｎ＝１０）とで治療したものの２つのグループにそれぞれ分けた。各ボックスプロットにおいて、ボックスの中央の線は中央値を示し、ボックスは、２５から７５パーセンタイル（四分位範囲、ＩＱ）へと延びている。ウィスカーは、上下隣接値（すなわち、±１．５ＩＱ）まで延びている。
【図２０】図２０は、ＤＬＢＣＬ細胞株におけるＴＫ２１６の組み合わせを示し、ＣＩ値のボックスプロットは個々の細胞株で得られた。Ｙ軸はＣＩ値である。各ボックスプロットにおいて、ボックスの中央の線は中央値を示し、ボックスは、２５から７５パーセンタイル（四分位範囲、ＩＱ）へと延びている。ウィスカーは、上下隣接値（すなわち、±１．５ＩＱ）まで延びている。外の値は図から省略されている。ＴＭＤ８におけるＴＫ−２１６／リツキシマブ、Ｋａｒｐａｓ４２２におけるＴＫ−２１６／リツキシマブ、ＯＣＩ−ＬＹ−１０におけるＴＫ−２１６／リツキシマブについてのＣＩは、ＣＩ値＞３のためプロットされていない。試験された組み合わせは、ベンダムスチン、ボルテゾミブ、イブルチニブ、イデラリシブ、レナリドマイド、ＯＴＸ０１５（ビラブレシブ、ＣＡＳ番号２０２５９０−９８−５）、ＰＱＲ３０９（ビミラリシブ、ＣＡＳ番号１２２５０３７−３９−７（遊離塩基））、セリネクソール、ベネトクラクス及びビンクリスチンを含む。相乗作用は、ボルテゾミブ（ＴＭＤ８）、イデラリシブ（ＯＣＩ−ＬＹ−１０、ＫＡＲＰＡＳ４２２）、レナリドマイド（ＯＣＩ−ＬＹ−１０、ＴＭＤ８）、ＯＴＸ０１５（ＫＡＲＰＡＳ４２２）、ベネトクラクス（ＯＣＩ−ＬＹ−１０、ＫＡＲＰＡＳ４２２、ＴＭＤ８）、及びビンクリスチン（ＳＵ−ＤＨＬ−４）との組み合わせにおけるＴＫ２１６について観察された。相加作用は、ベンダムスチン（ＫＡＲＰＡＳ４２２）、イブルチニブ（ＯＣＩ−ＬＹ−１０、ＴＭＤ８）、イデラリシブ（ＴＭＤ８）、ＯＴＸ０１５（ＯＣＩ−ＬＹ−１０、ＴＭＤ８）、ＰＱＲ３０９（ＫＡＲＰＡＳ４２２、ＳＵ−ＤＨＬ−４、ＴＭＤ８）、セリネクソール（ＫＡＲＰＡＳ４２２、ＴＭＤ８）、及びビンクリスチン（ＯＣＩ−ＬＹ−１０、ＫＡＲＰＡＳ４２２）との組み合わせにおけるＴＫ２１６について観察された。ベンダムスチン（ＯＣＩ−ＬＹ−１０、ＳＵ−ＤＨＬ−４、ＴＭＤ８）、ボルテゾミブ（ＯＣＩ−ＬＹ−１０）、イデラリシブ（ＳＵ−ＤＨＬ−４）、ＯＴＸ０１５（ＳＵ−ＤＨＬ−４）、ＰＱＲ３０９（ＯＣＩ−ＬＹ−１０）、セリネクソール（ＯＣＩ−ＬＹ−１０、ＳＵ−ＤＨＬ−４）、ベネトクラクス（ＳＵ−ＤＨＬ−４）、及びビンクリスチン（ＴＭＤ８）との組み合わせにおけるＴＫ２１６については、何の有益な効果も観察されなかった。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
以下の記載及び実施例では、本発明の好適な実施形態を詳細に説明する。当業者は、その範囲に含まれる本発明の多数の変形及び修正が存在することを理解するであろう。したがって、好適な実施形態の記載により、本発明の範囲が限定されるものではない。
【００１３】
発癌性転写因子を生じる染色体転座は、多くの肉腫を含む、各種腫瘍の特質である。ユーイング肉腫ファミリー腫瘍（ＥＳＦＴ）は、この腫瘍の高い悪性形質の原因となる、ユーイング肉腫ブレイクポイントリージョン１及びフレンド白血病ウイルスインテグレーション１（ＥＷＳ−ＦＬＩ１）融合転移因子を生じるｔ（１１；２２）（ｑ２４；ｑ１２）転座によって、特徴付けられる。ＥＷＳ−ＦＬＩ１の連続した発現は、ＥＳＦＴ細胞の生存にとっての臨界であると考えられる。ＥＷＳ−ＦＬＩ１は、その悪性細胞特異性の点から、ユーイング肉腫に対する魅力的な治療の標的である。さらに、ＥＷＳ／ＦＬＩ発現は、ユーイング肉腫腫瘍細胞にとって不可欠であることが、実験によって証明されている。インビトロにおいて、アンチセンスオリゴデオキシヌクレオチド及びＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）でＥＷＳ−ＦＬＩ１を標的にすることにより、潜在的治療様相としてのＥＷＳ−ＦＬＩ１減衰をサポートする、ユーイング肉腫細胞の生存能力、増殖、及び発癌性形質転換が阻害される。好適な実施形態に係る治療剤は、より大きな腫瘍群に対して広く適用可能であり、化学療法耐性肉腫及び白血病等の悪性腫瘍、ならびにユーイング肉腫等の治療が困難な腫瘍に関連した他の発癌性転写因子の治療のための治療剤として有用である。
【００１４】
＜定義＞
特に定義がない限り、本明細書で使用される全ての技術的及び科学的用語は、当業者が通常、理解しているものと同じ意味を有する。本明細書で引用される全ての特許、出願、公開出願、及び他の公開物は、特に規定がない限り、もっぱら参考として組み込まれている。本明細書の用語について複数の定義がある場合には、特に規定がない限り、該セクションにおける定義を優先する。
【００１５】
本明細書において、例えば、限定はないが、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、及びＲ１２等のいずれかの「Ｒ」基（複数可）は、指定される原子に結合できる置換基を示す。Ｒ基は、置換されていてもよく、非置換であってもよい。２つの「Ｒ」基が「一緒になって」と記載される場合、Ｒ基とそれらが結合する原子とにより、シクロアルキル、シクロアルケニル、アリール、ヘテロアリール、又は複素環を形成できる。例えば、限定はないが、ＮＲａＲｂ基におけるＲａ及びＲｂは、「一緒になって」と示される場合、ＲａとＲｂとは互いに共有結合して下記のような環：
【化２】
2019522037.tif 000004
を形成することを意味する。さらに、２つの「Ｒ」基が、それらが結合する原子（複数可）で「一緒になって」と記載され、選択肢として環を形成する場合、「Ｒ」基は、先に定義の可変基又は置換基に限定されなくともよい。
【００１６】
本明細書において、「アルキル」は、完全に飽和した（二重結合又は三重結合を有しない）炭化水素基を含む直鎖状又は分岐鎖状の炭化水素鎖を指す。アルキル基は、１個〜２０個の炭素原子（本明細書で示される場合、「１〜２０」等の数値範囲は、その指定された範囲における各整数を指す。例えば、「１個〜２０個の炭素原子」は、アルキル基が１個の炭素原子、２個の炭素原子、３個の炭素原子等の、２０個以下の炭素原子からなり得ることを意味するが、本定義はまた、数値範囲が全く指定されない「アルキル」との用語の発生もカバーする）を有し得る。アルキル基は、１個〜１０個の炭素原子を有する中間サイズのアルキルであり得る。アルキル基は、１個〜６個の炭素原子を有する低級アルキルであることができる。化合物のアルキル基は、「Ｃ１〜Ｃ６アルキル」又は類似の名称として示され得る。例としてのみであるが、「Ｃ１〜Ｃ６アルキル」は、アルキル鎖において１個〜６個の炭素原子があることを示す。すなわち、アルキル鎖は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔ−ブチル、ペンチル（直鎖状及び分岐鎖状）、及びヘキシル（直鎖状及び分岐鎖状）から選ばれる。典型的なアルキル基としては、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、ペンチル（直鎖状及び分岐鎖状）、及びヘキシル（直鎖状及び分岐鎖状）が含まれるが、これらに限定されない。アルキル基は、置換されていてもよく、非置換であってもよい。
【００１７】
本明細書において、「シクロアルキル」は、完全に飽和した（二重結合又は三重結合を有しない）単環式又は多環式炭化水素環系を指す。２つ以上の環から構成される場合、それらの環は、縮合環の形で互いに結合され得る。シクロアルキル基は、環（複数可）に３個〜１０個の原子、又は環（複数可）に３個〜８個の原子を含むことができる。シクロアルキル基は、置換されていてもよく、非置換であってもよい。典型的なシクロアルキル基としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、及びシクロオクチルが含まれるが、これらに限定されない。
【００１８】
本明細書において、「アリール」は、すべての環にわたって完全に非局在化したπ電子系を有する炭素環式（すべて炭素）の単環式又は多環式芳香環系（２つの炭素環が化学結合を共有する縮合環系を含む）を指す。アリール基の炭素原子数は変更可能である。例えば、アリール基は、Ｃ６〜Ｃ１４アリール基、Ｃ６〜Ｃ１０アリール基、又はＣ６アリール基であることができる。アリール基の例としては、ベンゼン、ナフタレン、及びアズレンが含まれるが、これらに限定されない。アリール基は、置換されていてもよく、非置換であってもよい。
【００１９】
本明細書において、「ヘテロアリール」は、１つ以上のヘテロ原子（例えば、１個〜５個のヘテロ原子）、すなわち炭素以外の元素を含む単環式又は多環式芳香環系（完全に非局在化したπ電子系を有する環系）を指す。そのヘテロ原子としては、窒素、酸素、及び硫黄が含まれるが、これらに限定されない。ヘテロアリール基の環（複数可）の原子数は変更可能である。例えば、ヘテロアリール基は、環（複数可）に４個〜１４個の原子、環（複数可）に５個〜１０個の原子、又は環（複数可）に５個〜６個の原子を含むことができる。さらに、用語「ヘテロアリール」は縮合環系を含み、その縮合環系において、２つの環、例えば少なくとも１つのアリール環及び少なくとも１つのヘテロアリール環、又は少なくとも２つのヘテロアリール環は、少なくとも１つの化学結合を共有する。ヘテロアリール環の例としては、フラン、フラザン、チオフェン、ベンゾチオフェン、フタラジン、ピロール、オキサゾール、ベンゾオキサゾール、１，２，３−オキサジアゾール、１，２，４−オキサジアゾール、チアゾール、１，２，３−チアジアゾール、１，２，４−チアジアゾール、ベンゾチアゾール、イミダゾール、ベンズイミダゾール、インドール、インダゾール、ピラゾール、ベンゾピラゾール、イソオキサゾール、ベンゾイソオキサゾール、イソチアゾール、トリアゾール、ベンゾトリアゾール、チアジアゾール、テトラゾール、ピリジン、ピリダジン、ピリミジン、ピラジン、プリン、プテリジン、キノリン、イソキノリン、キナゾリン、キノキサリン、シンノリン、及びトリアジンが含まれるが、これらに限定されない。ヘテロアリール基は、置換されていてもよく、非置換であってもよい。
【００２０】
本明細書において、「ヘテロシクロアルキル」は、炭素原子と１個〜５個のヘテロ原子とにより構成される、三員、四員、五員、六員、七員、八員、九員、十員、十八員までの単環式、二環式、及び三環式の環系を指す。複素環は、このように位置している１つ以上の不飽和結合を任意選択的に含み得るが、完全に非局在化したπ電子系がすべての環にわたって発生することはない。ヘテロ原子（複数可）は、酸素、硫黄、及び窒素を含む、炭素以外の元素であるが、これらに限定されるものではない。複素環は、ラクタム、ラクトン、環状イミド、環状チオイミド、及び環状カルバマート等のオキソ系及びチオ系を含むように定義されるために、１つ以上のカルボニル又はチオカルボニル官能基をさらに含み得る。２つ以上の環から構成される場合、それらの環は、縮合環の形で互いに結合され得る。また、ヘテロシクロアルキルにおける任意の窒素は、四級化され得る。ヘテロシクロアルキル基は、置換されていてもよく、非置換であってもよい。このようなヘテロシクロアルキル基の例としては、１，３−ジオキシン、１，３−ジオキサン、１，４−ジオキサン、１，２−ジオキソラン、１，３−ジオキソラン、１，４−ジオキソラン、１，３−オキサチアン、１，４−オキサチイン、１，３−オキサチオラン、１，３−ジチオール、１，３−ジチオラン、１，４−オキサチアン、テトラヒドロ−１，４−チアジン、２Ｈ−１，２−オキサジン、マレイミド、スクシンイミド、バルビツール酸、チオバルビツール酸、ジオキソピペラジン、ヒダントイン、ジヒドロウラシル、トリオキサン、ヘキサヒドロ−１，３，５−トリアジン、イミダゾリン、イミダゾリジン、イソオキサゾリン、イソオキサゾリジン、オキサゾリン、オキサゾリジン、オキサゾリジノン、チアゾリン、チアゾリジン、モルホリン、オキシラン、ピペリジンＮ−オキシド、ピペリジン、ピペラジン、ピロリジン、ピロリドン、ピロリジオン、４−ピペリドン、ピラゾリン、ピラゾリジン、２−オキソピロリジン、テトラヒドロピラン、４Ｈ−ピラン、テトラヒドロチオピラン、チアモルホリン、チアモルホリンスルホキシド、チアモルホリンスルホン、及びそれらのベンゾ縮合類似物（例えば、ベンズイミダゾリジノン、テトラヒドロキノリン、３，４−メチレンジオキシフェニル）が含まれるが、これらに限定されない。
【００２１】
「薬学的に許容される塩」という用語は、それが投与され、化合物の生物活性及び特性を破棄することがない有機体に、重篤な刺激を生じさせない化合物の塩を指す。いくつかの実施形態では、該塩は、化合物の酸付加塩である。薬学的な塩は、化合物と、ハロゲン化水素酸（例えば、塩酸又は臭化水素酸）、硫酸、硝酸、及びリン酸等の無機酸との反応によって得られる。薬学的な塩はまた、化合物と、例えば、ギ酸、酢酸、コハク酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、ニコチン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、サリチル酸、又はナフタレンスルホン酸等の脂肪族もしくは芳香族カルボン酸又は脂肪族もしくはスルホン酸等の有機酸との反応によって得られる。薬学的な塩はまた、化合物と、アンモニウム塩、ナトリウム塩又はカリウム塩といったアルカリ金属塩、カルシウム塩又はマグネシウム塩といったアルカリ土類金属塩、ジシクロヘキシルアミン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、トリス（ヒドロキシメチル）メチルアミン、Ｃ１〜Ｃ７アルキルアミン、シクロヘキシルアミン、トリエタノールアミン、エチレンジアミン等の有機塩基の塩、ならびにアルギニン及びリシンといったアミノ酸を有する塩等の塩を形成する塩基との反応によって得られる。
【００２２】
本明細書に記載の、１つ以上のキラル中心を有する任意の化合物では、絶対的な原子団の空間的配置が明確に示されていないのであれば、各中心は独立して、（Ｒ）体、又は（Ｓ）体、又はこれらの混合物のものであればよいと理解される。このように、本明細書にて提供される化合物は、エナンチオマー的に純粋なものであるか、エナンチオマー的に強化されたものであるか、ラセミ体混合物であるか、ジアステレオマー的に純粋なものであるか、ジアステレオマー的に強化されたものであるか、又は立体異性体混合物であり得る。さらに、本明細書に記載の、Ｅ又はＺとして定義されることが可能な幾何異性体を生成する１つ以上の二重結合を有する任意の化合物では、各二重結合は独立して、Ｅ、又はＺ、又はこれらの混合物であり得る。
【００２３】
本明細書に開示の化合物は未充足原子価を有し、該原子価は、水素又はその同位元素、例えば水素１（軽水素）及び水素２（重水素）によって充足されるべきであると理解される。
【００２４】
本明細書に記載の化合物は、同位体標識されることができると理解される。重水素等の同位元素での置換は、より優れた代謝的安定性による、例えば、インビボでの半減期の増大又は必要摂取量の減少といった、特定の治療上の利点をもたらし得る。化合物構造において表されている各化学元素は、該元素の同位元素のいずれかを含み得る。例えば、化合物構造において水素原子は、明らかに開示され得るか、又は化合物中に存在していることが理解され得る。化合物において水素原子が存在し得るいずれかの位置で、水素原子は水素の任意の同位元素であることができる。該水素の同位元素には水素１（軽水素）及び水素２（重水素）が含まれるが、これらに限定されない。このように、本明細書で参照される化合物は、特にコンテクストがそうでないものと明記しない限り、全ての潜在的な同位体形を含む。
【００２５】
本明細書に記載の方法及び組み合わせは、結晶形（「多形」としても既知、その化合物と同じ元素組成であって、異なる結晶パッキング配列を含むもの）、非晶形相、塩、溶媒和物、及び水和物を含むと理解される。いくつかの実施形態において、本明細書に記載の化合物は、水、エタノール又は同様のもの等の薬学的に許容される溶媒と共に、溶媒和物の形態で存在する。他の実施形態においては、本明細書に記載の化合物は、非溶媒和物の形態で存在する。溶媒和物は、化学量論的な、又は非化学量論的な量の溶媒を含有しており、水、エタノール又は同様のもの等の薬学的に許容される溶媒での結晶化の過程において形成され得る。水和物は、溶媒が水の場合に形成され、アルコラートは、溶媒がアルコールの場合に形成される。さらに、本明細書において提供される化合物は、溶媒和物の形態だけでなく、非溶媒和物の形態でも存在することができる。通常、本明細書において提供される化合物及び方法の目的に対して、溶媒和物の形態は、非溶媒和物の形態と同等であると考えられる。
【００２６】
数値範囲を提供する場合、上限及び下限、ならびにその範囲における上限と下限との間の各介在値は、実施形態の範囲内に包含されると理解されるべきである。
【００２７】
＜治療の方法＞
第１の態様では、急性骨髄性白血病で産生された骨髄芽球又はびまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫で産生されたリンパ球を含む細胞にアポトーシスを誘導する方法が提供され、該方法は、ベネトクラクス及び化合物の組み合わせの有効量と細胞とを接触させることを含み、該化合物は、式（Ｉ）の構造を有するか、もしくはその立体異性体、その薬学的に許容される塩、又はその溶媒和物であり、
【化３】
2019522037.tif 000005
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃｌ、−ＣＮ、及びＣＦ３からなる群より選ばれ、Ａは、Ｈ及びＣ１−６アルキルからなる群より選ばれ、Ｄは、−ＯＨ及びＯ（Ｃ１−６アルキル）からなる群より選ばれ、Ｒ５及びＲ６は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｆ、及びＣ１−６アルキルからなる群より選ばれるか、又は、置換もしくは非置換のシクロアルキル環を一緒になって形成しており、Ｒ１２は、独立して、Ｃ３−８シクロアルキル及び
【化４】
2019522037.tif 000006
（ここで、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、及びＲ１１は、それぞれ独立して、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、ＣＦ３、Ｃ１−６アルキル、アリール、ヘテロアリール、−Ｏ（Ｃ１−６アルキル）、−Ｏ（アリール）、−Ｏ（ヘテロアリール）、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２（Ｃ１−６アルキル）、−ＮＨＳＯ２（Ｃ１−６アルキル）、−ＮＨＳＯ２（アリール）、−ＮＨＣＯＮＨ（Ｃ１−６アルキル）、−ＮＨＣＯＮ（Ｃ１−６アルキル）２、−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）ＣＯＮＨ２、−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）ＣＯＮＨ（Ｃ１−６アルキル）、−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）ＣＯＮ（Ｃ１−６アルキル）２、−ＳＯ２（Ｃ１−６アルキル）、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＳＯ２ＮＨ（Ｃ１−６アルキル）、−ＳＯ２Ｎ（Ｃ１−６アルキル）２、Ｃ３−８シクロアルキル、及びＣ３−８ヘテロシクロアルキルからなる群より選ばれる）からなる群より選ばれる。
【００２８】
第１の態様の実施形態では、Ｒ９は、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、ＣＦ３、Ｃ１−６アルキル、アリール、ヘテロアリール、−Ｏ（アリール）、−Ｏ（ヘテロアリール）、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２（Ｃ１−６アルキル）、−ＮＨＳＯ２（Ｃ１−６アルキル）、−ＮＨＳＯ２（アリール）、−ＮＨＣＯＮＨ（Ｃ１−６アルキル）、−ＮＨＣＯＮ（Ｃ１−６アルキル）２、−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）ＣＯＮＨ２、−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）ＣＯＮＨ（Ｃ１−６アルキル）、−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）ＣＯＮ（Ｃ１−６アルキル）２、−ＳＯ２（Ｃ１−６アルキル）、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＳＯ２ＮＨ（Ｃ１−６アルキル）、−ＳＯ２Ｎ（Ｃ１−６アルキル）２、Ｃ３−８シクロアルキル、及びＣ３−８ヘテロシクロアルキルからなる群より選ばれる。
【００２９】
第１の態様の実施形態では、細胞は哺乳動物のものである。
【００３０】
第１の態様の実施形態では、細胞はヒトのものである。
【００３１】
第１の態様の実施形態では、細胞はインビトロでのものである。
【００３２】
第１の態様の実施形態では、細胞はインビボでのものである。
【００３３】
第２の態様では、急性骨髄性白血病又はびまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫を治療する方法が提供され、該方法は、ベネトクラクス及び化合物の組み合わせの抗増殖量をその必要がある患者に投与することを含み、該化合物は、式（Ｉ）の構造を有するか、もしくはその立体異性体、その薬学的に許容される塩、又はその溶媒和物であり、
【化５】
2019522037.tif 000007
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃｌ、−ＣＮ、及びＣＦ３からなる群より選ばれ、Ａは、Ｈ及びＣ１−６アルキルからなる群より選ばれ、Ｄは、−ＯＨ及びＯ（Ｃ１−６アルキル）からなる群より選ばれ、Ｒ５及びＲ６は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｆ、及びＣ１−６アルキルからなる群より選ばれるか、又は、置換もしくは非置換のシクロアルキル環を一緒になって形成しており、Ｒ１２は、独立して、Ｃ３−８シクロアルキル及び
【化６】
2019522037.tif 000008
（ここで、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、及びＲ１１は、それぞれ独立して、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、ＣＦ３、Ｃ１−６アルキル、アリール、ヘテロアリール、−Ｏ（Ｃ１−６アルキル）、−Ｏ（アリール）、−Ｏ（ヘテロアリール）、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２（Ｃ１−６アルキル）、−ＮＨＳＯ２（Ｃ１−６アルキル）、−ＮＨＳＯ２（アリール）、−ＮＨＣＯＮＨ（Ｃ１−６アルキル）、−ＮＨＣＯＮ（Ｃ１−６アルキル）２、−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）ＣＯＮＨ２、−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）ＣＯＮＨ（Ｃ１−６アルキル）、−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）ＣＯＮ（Ｃ１−６アルキル）２、−ＳＯ２（Ｃ１−６アルキル）、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＳＯ２ＮＨ（Ｃ１−６アルキル）、−ＳＯ２Ｎ（Ｃ１−６アルキル）２、Ｃ３−８シクロアルキル、及びＣ３−８ヘテロシクロアルキルからなる群より選ばれる）からなる群より選ばれる。
【００３４】
第２の態様の実施形態では、Ｒ９は、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、ＣＦ３、Ｃ１−６アルキル、アリール、ヘテロアリール、−Ｏ（アリール）、−Ｏ（ヘテロアリール）、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２（Ｃ１−６アルキル）、−ＮＨＳＯ２（Ｃ１−６アルキル）、−ＮＨＳＯ２（アリール）、−ＮＨＣＯＮＨ（Ｃ１−６アルキル）、−ＮＨＣＯＮ（Ｃ１−６アルキル）２、−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）ＣＯＮＨ２、−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）ＣＯＮＨ（Ｃ１−６アルキル）、−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）ＣＯＮ（Ｃ１−６アルキル）２、−ＳＯ２（Ｃ１−６アルキル）、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＳＯ２ＮＨ（Ｃ１−６アルキル）、−ＳＯ２Ｎ（Ｃ１−６アルキル）２、Ｃ３−８シクロアルキル、及びＣ３−８ヘテロシクロアルキルからなる群より選ばれる。
【００３５】
第３の態様では、急性骨髄性白血病又はびまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫の治療のためのベネトクラクス及び化合物の組み合わせの使用が提供され、該化合物は、式（Ｉ）の構造を有するか、もしくはその立体異性体、その薬学的に許容される塩、又はその溶媒和物であり、
【化７】
2019522037.tif 000009
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃｌ、−ＣＮ、及びＣＦ３からなる群より選ばれ、Ａは、Ｈ及びＣ１−６アルキルからなる群より選ばれ、Ｄは、−ＯＨ及びＯ（Ｃ１−６アルキル）からなる群より選ばれ、Ｒ５及びＲ６は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｆ、及びＣ１−６アルキルからなる群より選ばれるか、又は、置換もしくは非置換のシクロアルキル環を一緒になって形成しており、Ｒ１２は、独立して、置換又は非置換のＣ３−８シクロアルキル、置換又は非置換のＣ３−８ヘテロシクロアルキル、
【化８】
2019522037.tif 000010
及び
【化９】
2019522037.tif 000011
（ここで、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、及びＲ１１は、それぞれ独立して、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、ＣＦ３、Ｃ１−６アルキル、アリール、ヘテロアリール、−Ｏ（Ｃ１−６アルキル）、−Ｏ（アリール）、−Ｏ（ヘテロアリール）、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２（Ｃ１−６アルキル）、−ＮＨＳＯ２（Ｃ１−６アルキル）、−ＮＨＳＯ２（アリール）、−ＮＨＣＯＮＨ（Ｃ１−６アルキル）、−ＮＨＣＯＮ（Ｃ１−６アルキル）２、−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）ＣＯＮＨ２、−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）ＣＯＮＨ（Ｃ１−６アルキル）、−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）ＣＯＮ（Ｃ１−６アルキル）２、−ＳＯ２（Ｃ１−６アルキル）、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＳＯ２ＮＨ（Ｃ１−６アルキル）、−ＳＯ２Ｎ（Ｃ１−６アルキル）２、Ｃ３−８シクロアルキル、及びＣ３−８ヘテロシクロアルキルからなる群より選ばれ、Ｒ１３は、−Ｏ（Ｃ１−６アルキル）及びＮ（Ｃ１−６アルキル）２からなる群より選ばれる）からなる群より選ばれる。
【００３６】
第３の態様の実施形態では、Ｒ９は、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、ＣＦ３、Ｃ１−６アルキル、アリール、ヘテロアリール、−Ｏ（アリール）、−Ｏ（ヘテロアリール）、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２（Ｃ１−６アルキル）、−ＮＨＳＯ２（Ｃ１−６アルキル）、−ＮＨＳＯ２（アリール）、−ＮＨＣＯＮＨ（Ｃ１−６アルキル）、−ＮＨＣＯＮ（Ｃ１−６アルキル）２、−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）ＣＯＮＨ２、−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）ＣＯＮＨ（Ｃ１−６アルキル）、−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）ＣＯＮ（Ｃ１−６アルキル）２、−ＳＯ２（Ｃ１−６アルキル）、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＳＯ２ＮＨ（Ｃ１−６アルキル）、−ＳＯ２Ｎ（Ｃ１−６アルキル）２、Ｃ３−８シクロアルキル、及びＣ３−８ヘテロシクロアルキルからなる群より選ばれる。
【００３７】
第１の態様の実施形態では、Ｒ１２は、非置換であるか、又はハロゲン、例えば、Ｃｌ又はＦで置換される。
【００３８】
第１の態様、第２の態様、又は第３の態様の実施形態では、Ｒ９は、アジリジニル、アゼチジニル、ピロリジニル、及びモルホリノリルからなる群より選ばれる。
【００３９】
第１の態様、第２の態様、又は第３の態様の実施形態では、Ｒ９は、イソプロピル及びシクロプロピルからなる群より選ばれる。
【００４０】
第１の態様、第２の態様、又は第３の態様の実施形態では、化合物は、式（Ｉａ）の構造を有するか、もしくはその立体異性体、その薬学的に許容される塩、又はその溶媒和物であり、
【化１０】
2019522037.tif 000012
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４は、それぞれ独立して、Ｈ及びＣｌからなる群より選ばれ、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ１０、及びＲ１１は、それぞれ独立して、Ｈ及びハロゲンからなる群より選ばれ、Ｒ９は、独立して、Ｃ３−８シクロアルキル及びＣ３−８ヘテロシクロアルキルからなる群より選ばれる。
【００４１】
第１の態様、第２の態様、又は第３の態様の実施形態では、Ｒ１及びＲ４は、Ｃｌであり、Ｒ２及びＲ３は、Ｈである。
【００４２】
第１の態様、第２の態様、又は第３の態様の実施形態では、化合物は、
【化１１】
2019522037.tif 000013
【化１２】
2019522037.tif 000014
からなる群より選ばれる構造を有するか、もしくはその立体異性体、その薬学的に許容される塩、エステル又はその溶媒和物である。
【００４３】
第１の態様、第２の態様、又は第３の態様の実施形態では、化合物は、
【化１３】
2019522037.tif 000015
からなる群より選ばれる構造を有するか、もしくはその立体異性体、その薬学的に許容される塩、エステル又はその溶媒和物である。
【００４４】
請求項１〜６のいずれか１つに記載の方法では、化合物は、
【化１４】
2019522037.tif 000016
からなる群より選ばれる構造を有するか、もしくはその立体異性体、その薬学的に許容される塩、エステル又はその溶媒和物である。
【００４５】
第１の態様、第２の態様、又は第３の態様の実施形態では、化合物は、
【化１５】
2019522037.tif 000017
からなる群より選ばれる構造を有するか、もしくはその立体異性体、その薬学的に許容される塩、エステル又はその溶媒和物である。
【００４６】
第１の態様、第２の態様、又は第３の態様の実施形態では、化合物は、
【化１６】
2019522037.tif 000018
の構造を有するか、もしくはその立体異性体、その薬学的に許容される塩、エステル又はその溶媒和物である。
【００４７】
第１の態様、第２の態様、又は第３の態様の実施形態では、化合物は、
【化１７】
2019522037.tif 000019
の構造を有するか、もしくはその立体異性体、その薬学的に許容される塩、エステル又はその溶媒和物である。
【００４８】
第１の態様、第２の態様、又は第３の態様の実施形態では、化合物は、
【化１８】
2019522037.tif 000020
の構造を有するか、もしくはその立体異性体、その薬学的に許容される塩、エステル又はその溶媒和物である。
【００４９】
＜合成方法＞
【化１９】
2019522037.tif 000021
本明細書に記載の式（Ｉ）の化合物は、種々の方法にて調製され得る。本明細書では、式（Ｉ）の化合物を合成する通常のルートを示し、説明する。本明細書に示して説明するルートは単なる実例であり、いかなる場合でも、本請求の範囲を限定することが意図されることも解釈されることもない。当業者によって、開示された合成方法の修正を認識することが可能であり、本明細書の開示に基づく代替ルートの考案も可能である。このような修正及び代替ルートは、全て本請求の範囲の範囲内である。
【００５０】
置換基の存在により、小分子阻害剤は、薬学的に許容される塩の形であることができる。本明細書において、「薬学的に許容される塩」との用語は、広義の用語であり、当業者にとって通常かつ慣用的な意味である（特別な意味又はカスタマイズされた意味に限定されるべきではない）。また、薬学的に許容される非毒性の酸又は塩基で調製される塩を指すが、これに限定されない。適切な薬学的に許容される塩としては、アルミニウム及び亜鉛等の金属塩、リチウム、ナトリウム、及びカリウムの塩等のアルカリ金属塩、カルシウム及びマグネシウムの塩等のアルカリ土類金属塩が例示される金属塩；リシン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、クロロプロカイン、コリン、ジエタノールアミン、エチレンジアミン、メグルミン（Ｎ−メチルグルカミン）、プロカイン、及びトリスの塩等が例示される有機塩；遊離酸及び遊離塩基の塩；硫酸塩、塩酸塩、及び臭化水素酸塩等が例示される無機塩；ならびに；例えばＴｈｅ  Ｍｅｒｃｋ  Ｉｎｄｅｘのような当業者に周知の情報源に記載され、現在広範な医薬用途に用いられる他の塩が含まれる。いずれかの好適な成分を選択し、本明細書でいう治療剤の塩を製造することが可能である。これらの塩は、非毒性で、所望の活性を実質上、阻害しない。
【００５１】
好適な実施形態に係る化合物は、異性体、ラセミ体、光学異性体、エナンチオマー、ジアステレオマー、互変異性体、及びシス／トランス配座異性体を含むことができる。これらの異性体は全て、これらの混合物を含み、混合物も好適な実施形態の範囲内に含まれる。前記のとおり、好適な実施形態に係る化合物は、キラル中心を有し得る。例えば、これらの化合物が不斉炭素原子を含み得、したがって、エナンチオマー又はジアステレオマー体の形か、これらの混合物、例えばラセミ体として存在し得る。不斉炭素原子（複数可）は、（Ｒ）体もしくは（Ｓ）体に存在しているか、又は（Ｒ）体及び（Ｓ）体の混合物に存在することができる。以下に、式（Ｉ）の化合物の異性体を示す。
【化２０】
2019522037.tif 000022
【化２１】
2019522037.tif 000023
【化２２】
2019522037.tif 000024
【化２３】
2019522037.tif 000025
【化２４】
2019522037.tif 000026
【化２５】
2019522037.tif 000027
【００５２】
これらの化合物は、非晶形又は結晶形であることができる。好適な実施形態に係る化合物の結晶形は、好適な実施形態に含まれる多形であることができる。さらに、好適な実施形態に係るいくつかの化合物は、水又は他の有機溶媒とともに溶媒和物を形成し得る。このような溶媒和物は、同様に、好適な実施形態の範囲内に含まれる。
【００５３】
＜特定の医薬組成物＞
一般に、好適な実施形態に係る阻害剤を、静脈内又は皮下の単位剤形で投与することが好ましいが、他の投与経路も考えられる。考えられる投与経路としては、経口、非経口、静脈内、及び皮下が含まれるが、これらに限定されない。好適な実施形態に係る阻害剤は、例えば経口投与のための液体製剤に製剤化することができる。適切な剤形には、懸濁剤、シロップ剤、エリキシル剤等が含まれる。経口投与のための特に好適な単位剤形には、錠剤及びカプセル剤が含まれる。単位剤形は、１日１回投与するように構成されることが特に好ましいが、特定の実施形態において、１日２回又はそれ以上の回数で投与するように構成されることが望ましい場合もある。
【００５４】
好適な実施形態に係る医薬組成物は、受容者の血液又は他の体液と等張であることが好ましい。組成物の等張性は、酒石酸ナトリウム、プロピレングリコール、又は他の無機もしくは有機溶質の使用によって得られる。塩化ナトリウムは特に好ましい。例えば、酢酸及びその塩、クエン酸及びその塩、ホウ酸及びその塩、ならびにリン酸及びその塩等の緩衝剤を使用することができる。非経口用賦形剤には、塩化ナトリウム溶液、リンゲルデキストロース、デキストロース及び塩化ナトリウム、乳酸リンゲル、又は不揮発性油が含まれる。静脈内用賦形剤には、水分補給剤及び栄養補充液、電解質補充液（リンゲルデキストロースに基づくもの等）ならびに同様のものが含まれる。
【００５５】
医薬組成物の粘度は、薬学的に許容される増粘剤を使用して、選択されたレベルに維持することができる。メチルセルロースは、容易に入手可能かつ経済的に利用可能で、使い易いので好ましい。他の適切な増粘剤としては、例えば、キサンタンガム、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、カルボマー及び同様のものが含まれる。増粘剤の好適な濃度は、選択された増粘剤によって決定される。選択された粘度が得られるような量で使用することが好ましい。粘性組成物は通常、このような増粘剤を添加することによって溶液で調製される。
【００５６】
薬学的に許容される保存剤は、医薬組成物の貯蔵寿命を増長させるために使用することができる。例えば、パラベン、チメロサール、クロロブタノール、又は塩化ベンザルコニウムを含む種々の保存剤を使用できるが、ベンジルアルコールが適切である。選択された保存剤に応じて、多い量が望ましい場合も、少ない量が望ましい場合もあるが、保存剤の適切な濃度は、典型的に、組成物の総重量に基づいて約０．０２％〜約２％である。前記のごとき還元剤の使用は、製剤の良好な貯蔵寿命を維持するために有利である。
【００５７】
好適な実施形態に係る阻害剤は、適切な担体、希釈剤、又は滅菌水、生理食塩水、グルコースもしくは同様のもの等の賦形剤と混合されることができ、所望の投与経路及び製剤に応じて、湿潤又は乳化剤、ｐＨ緩衝剤、ゲル化又は増粘剤、保存剤、香料、着色剤及び同様のもの等の補助物質を含むことができる。例えば、「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ」Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ；２０ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ（２００３年６月１日）、及び「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ」Ｍａｃｋ  Ｐｕｂ．Ｃｏ．；１８ｔｈ  ａｎｄ  １９ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎｓ（それぞれ１９８５年１２月及び１９９０年６月）を参照する。このような製剤としては、錯化剤、金属イオン、ポリ酢酸、ポリグリコール酸、ヒドロゲル、デキストラン及び同様のもの等の高分子化合物、リポソーム、マイクロエマルジョン、ミセル、単層もしくは多層ベシクル、赤血球ゴースト、又はスフェロプラストを含むことができる。リポソーム製剤に適した脂質としては、モノグリセリド、ジグリセリド、スルファチド、リゾレシチン、リン脂質、サポニン、胆汁酸及び同様のものが含まれるが、これらに限定されない。このような追加成分の存在は、物理的状態、溶解度、安定性、インビボ放出速度、及びインビボクリアランス速度に影響を与えることができるので、担体の特性が選択された投与経路に合わさるように、意図された用途に応じて選択される。
【００５８】
経口投与の場合、医薬組成物は、錠剤、水性もしくは油性懸濁液、分散性粉末もしくは顆粒剤、エマルジョン、硬カプセル剤もしくは軟カプセル剤、シロップ剤、又はエリキシル剤として提供することができる。経口使用が意図された組成物は、医薬組成物を製造するための当技術分野で既知の任意の方法に応じて調製することができ、甘味料、香料、着色剤、及び保存剤のうちの１つ以上の添加剤を含むことができる。水性懸濁剤は、水性懸濁剤の製造に適した賦形剤と混合される活性成分を含むことができる。
【００５９】
経口使用のための製剤は、活性成分（複数可）が炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、又はカオリン等の不活性固体希釈剤と混合されている硬ゼラチンカプセル剤として提供されることができ、又は、軟ゼラチンカプセル剤として提供されることができる。軟カプセル剤において、阻害剤は、水や、ピーナッツ油、オリーブ油、脂肪油、流動パラフィン、又は液体ポリエチレングリコール等の油媒体のような適切な液体に溶解又は懸濁させることができる。経口投与用に製剤化された安定剤及びミクロスフェアもまた使用することができる。カプセル剤には、ゼラチンからなるプッシュフィットカプセル剤、ならびに、ゼラチン及びグリセロール又はソルビトール等の可塑剤からなる軟密閉カプセル剤が含まれることができる。プッシュフィットカプセル剤は、ラクトース等の充填剤、デンプン等の結合剤、及び／又は、タルクもしくはステアリン酸マグネシウム等の潤滑剤、ならびに任意選択的には安定剤と混合される活性成分を含むことができる。
【００６０】
錠剤は、コーティングされていなくてもよく、又は、消化管での崩壊及び吸収を遅らせることによって、長期間にわたって持続作用が提供されるように、既知の方法でコーティングされていてもよい。例えば、モノステアリン酸グリセリン等の時間遅延材料を使用することができる。錠剤形態等の固形で投与する場合、固形の薬剤は典型的に、約０．００１重量％以下から約５０重量％以上までの活性成分（複数可）を含み、好ましくは、約０．００５重量％、０．０１重量％、０．０２重量％、０．０３重量％、０．０４重量％、０．０５重量％、０．０６重量％、０．０７重量％、０．０８重量％、０．０９重量％、０．１重量％、０．２重量％、０．３重量％、０．４重量％、０．５重量％、０．６重量％、０．７重量％、０．８重量％、０．９重量％、又は１重量％から、約２重量％、３重量％、４重量％、５重量％、６重量％、７重量％、８重量％、９重量％、１０重量％、１５重量％、２０重量％、２５重量％、３０重量％、３５重量％、４０重量％、又は４５重量％までの活性成分を含む。
【００６１】
錠剤は、不活性物質を含む非毒性の薬学的に許容される賦形剤と混合される活性成分を含むことができる。例えば、錠剤は、任意選択的に１つ以上の追加成分とともに、圧縮又は成形によって製造することができる。圧縮錠剤は、粉末又は顆粒等の自由流動形態の活性成分を、結合剤、潤滑剤、不活性希釈剤、界面活性剤、又は分散剤と任意選択的に混合して、適当な機械で圧縮することによって製造することができる。成形錠剤は、不活性液体希釈剤に湿らせた粉状阻害剤を混合して、適切な機械で成形することによって製造することができる。
【００６２】
好適には、各錠剤又はカプセル剤は、約１ｍｇ以下から、約１０００ｍｇ以上までの好適な実施形態に係る阻害剤を含み、より好適には、約１０ｍｇ、２０ｍｇ、３０ｍｇ、４０ｍｇ、５０ｍｇ、６０ｍｇ、７０ｍｇ、８０ｍｇ、９０ｍｇ、又は１００ｍｇから、約１５０ｍｇ、２００ｍｇ、２５０ｍｇ、３００ｍｇ、３５０ｍｇ、４００ｍｇ、４５０ｍｇ、５００ｍｇ、５５０ｍｇ、６００ｍｇ、６５０ｍｇ、７００ｍｇ、７５０ｍｇ、８００ｍｇ、又は９００ｍｇまでの好適な実施形態に係る阻害剤を含む。最も好適には、錠剤又はカプセル剤は、分割投与を可能にするための用量範囲で提供される。患者に適した投与量及び１日当たりの投与回数をこのように選択することができ、便利である。特定の実施形態において、２つ以上の治療剤を併用して単一の錠剤又は他の剤形で投与する（例えば、併用療法において）ことが好ましいが、他の実施形態においては、別個の剤形で治療剤を提供することが好ましい場合もある。
【００６３】
適切な不活性物質には、炭水化物、マンニトール、ラクトース、無水ラクトース、セルロース、スクロース、修飾デキストラン、デンプン及び同様のもの等の希釈剤、又は、三リン酸カルシウム、リン酸カルシウム、リン酸ナトリウム、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、炭酸マグネシウム、及び塩化ナトリウム等の無機塩類が含まれる。製剤には崩壊剤又は造粒剤が含まれることができ、崩壊剤又は造粒剤としては、例えば、コーンスターチ等のデンプン、アルギン酸、デンプングリコール酸ナトリウム、アンバーライト、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ウルトラミロペクチン、アルギン酸ナトリウム、ゼラチン、オレンジピール、酸性カルボキシメチルセルロース、天然スポンジ及びベントナイト、不溶性陽イオン交換樹脂、寒天、カラヤゴムもしくはトラガカントゴム等の粉末ゴム、又は、アルギン酸もしくはその塩等が含まれる。
【００６４】
硬い錠剤を形成するために、結合剤を使用することができる。結合剤としては、アラビアゴム、トラガカントゴム、デンプン及びゼラチン、メチルセルロース、エチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース及び同様のもの等の天然物由来の材料が含まれる。
【００６５】
錠剤製剤には、例えば、ステアリン酸又はそのマグネシウム塩もしくはカルシウム塩、ポリテトラフルオロエチレン、流動パラフィン、植物油及びワックス、ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリル硫酸マグネシウム、ポリエチレングリコール、デンプン、タルク、焼成シリカ、シリコアルミネート水和物及び同様のもの等の潤滑剤を含むことができる。
【００６６】
界面活性剤もまた使用することができ、界面活性剤としては、例えば、ラウリル硫酸ナトリウム、ジオクチルスルホコハク酸ナトリウム、及びジオクチルスルホン酸ナトリウム等の陰イオン界面活性剤、塩化ベンザルコニウムもしくは塩化ベンゼトニウム等の陽イオン界面活性剤、又は、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、モノステアリン酸グリセロール、ポリソルベート、ショ糖脂肪酸エステル、メチルセルロース、もしくはカルボキシメチルセルロース等の非イオン界面活性剤が含まれる。
【００６７】
拡散機構又は浸出機構のいずれかにより放出を可能にする不活性マトリクスにアミホスチン又はその類似物（複数可）が組み込まれている放出制御製剤を使用することができる。徐々に変性するマトリクスを、製剤に組み込むことができる。他の送達システムには、時限放出、遅延放出、又は持続放出送達システムが含まれる。
【００６８】
コーティングを使用することができ、コーティングとしては、例えば、メチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、メチルヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、プロビドン、及びポリエチレングリコール類等の非腸溶性材料、又は、フタル酸エステル等の腸溶性材料が含まれる。染料又は顔料を、識別のため、又は阻害剤の用量の異なる組み合わせを特徴づけるために添加することができる。
【００６９】
液体形態で経口投与する場合、水、石油等の液体担体、ピーナッツ油、鉱油、大豆油、もしくはゴマ油等の動物性油もしくは植物性油、又は合成油を、活性成分（複数可）に添加することができる。生理食塩水溶液、デキストロース、もしくは他の糖溶液、又は、エチレングリコール、プロピレングリコール、もしくはポリエチレングリコール等のグリコール類もまた、適切な液体担体である。医薬組成物は、水中油型エマルジョンの形態であることができる。油相は、オリーブ油もしくはラッカセイ油等の植物油、流動パラフィン等の鉱油、又はこれらの混合物であることができる。適切な乳化剤としては、アラビアゴム及びトラガカントゴム等の天然ゴムと、大豆レシチン等の天然リン脂質と、モノオレイン酸ソルビタン等の、脂肪酸及び無水ヘキシトールに由来するエステル又は部分エステルと、モノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン等の、それらの部分エステルとエチレンオキシドとの縮合生成物とが含まれる。エマルジョンはまた、甘味料及び香料を含むことができる。
【００７０】
肺送達もまた利用することができる。化合物は、吸入の間に肺に送達され、肺上皮層を透過して血流に達する。治療剤の肺送達のために設計された種々の機器を使用することができる。該機器としては、当業者に周知のネブライザー、定量吸入器、及び粉末吸入器が含まれるが、これらに限定されない。これらの機器には、化合物の投薬に適した製剤を使用する。典型的に、各製剤は、使用する機器の種類に応じて特定され、治療に有効な希釈剤、補助剤、及び／又は担体に加え、適切な噴射剤材料を使用することができる。
【００７１】
化合物及び／又は他の任意選択的な活性成分は、有利には、０．１μｍ以下から１０μｍ以上まで、より好適には約０．２μｍ、０．３μｍ、０．４μｍ、０．５μｍ、０．６μｍ、０．７μｍ、０．８μｍ、又は０．９μｍから、約１．０μｍ、１．５μｍ、２．０μｍ、２．５μｍ、３．０μｍ、３．５μｍ、４．０μｍ、４．５μｍ、５．０μｍ、５．５μｍ、６．０μｍ、６．５μｍ、７．０μｍ、７．５μｍ、８．０μｍ、８．５μｍ、９．０μｍ、又は９．５μｍまでの平均粒径を有する微粒子の形態で、肺送達のために調製される。阻害剤の肺送達のための、薬学的に許容される担体としては、トレハロース、マンニトール、キシリトール、スクロース、ラクトース、及びソルビトール等の炭水化物が含まれる。製剤に使用する他の成分は、ＤＰＰＣ、ＤＯＰＥ、ＤＳＰＣ、及びＤＯＰＣを含むことができる。天然又は合成の界面活性剤を使用することができ、該界面活性剤としては、ポリエチレングリコールと、シクロデキストラン等のデキストランとが含まれる。セルロース及びセルロース誘導体と同様に、胆汁酸塩類及び他の関連するエンハンサー類、ならびにアミノ酸類もまた使用することができる。リポソーム、マイクロカプセル、ミクロスフェア、包接錯体、及び他の種類の担体もまた使用することができる。
【００７２】
ジェット式又は超音波式のいずれかのネブライザーでの使用に適している医薬製剤は、典型的に、水に溶解又は懸濁される阻害剤を、約０．０１ｍｇ／ｍＬ以下から約１００ｍｇ／ｍＬ以上までの、溶液における阻害剤の濃度で、好適には約０．１ｍｇ／ｍＬ、１ｍｇ／ｍＬ、２ｍｇ／ｍＬ、３ｍｇ／ｍＬ、４ｍｇ／ｍＬ、５ｍｇ／ｍＬ、６ｍｇ／ｍＬ、７ｍｇ／ｍＬ、８ｍｇ／ｍＬ、９ｍｇ／ｍＬ、又は１０ｍｇ／ｍＬから、約１５ｍｇ／ｍＬ、２０ｍｇ／ｍＬ、２５ｍｇ／ｍＬ、３０ｍｇ／ｍＬ、３５ｍｇ／ｍＬ、４０ｍｇ／ｍＬ、４５ｍｇ／ｍＬ、５０ｍｇ／ｍＬ、５５ｍｇ／ｍＬ、６０ｍｇ／ｍＬ、６５ｍｇ／ｍＬ、７０ｍｇ／ｍＬ、７５ｍｇ／ｍＬ、８０ｍｇ／ｍＬ、８５ｍｇ／ｍＬ、又は９０ｍｇ／ｍＬまでの、溶液における阻害剤の濃度で含む。製剤はまた、緩衝液及び単糖を含むことができる（例えば、タンパク質安定化及び浸透圧の調節のために）。ネブライザー製剤には、エアロゾルを形成する際の、溶液の噴霧化による阻害剤の表面誘起凝集を減少又は防止するために、界面活性剤が含まれることができる。
【００７３】
定量吸入装置とともに使用するための製剤は、一般的に、界面活性剤の助けを借りて噴射剤に懸濁される活性成分を含有する微粉を含む。噴射剤は、クロロフルオロカーボン、ヒドロクロロフルオロカーボン、ヒドロフルオロカーボン、及び炭化水素等の従来の噴射剤を含むことができる。好ましい噴射剤としては、トリクロロフルオロメタン、ジクロロジフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタノール、１，１，１，２−テトラフルオロエタン、及びこれらの組み合わせが含まれる。適切な界面活性剤としては、ソルビタントリオレエート、大豆レシチン、及びオレイン酸が含まれる。
【００７４】
粉末吸入装置から投薬するための製剤は、典型的に、阻害剤を含有するとともに、ラクトース、ソルビトール、スクロース、マンニトール、トレハロース、又はキシリトール等の充填剤を任意選択的に含有する乾燥微粉砕粉末を含む。該乾燥微粉砕粉末は、装置からの粉末の分散を促進する量で、典型的に、製剤の約１重量％以下から約９９重量％以上まで、好適には製剤の約５重量％、１０重量％、１５重量％、２０重量％、２５重量％、３０重量％、３５重量％、４０重量％、４５重量％、又は５０重量％から、５５重量％、６０重量％、６５重量％、７０重量％、７５重量％、８０重量％、８５重量％、又は９０重量％までの量で含まれる。
【００７５】
好適な実施形態に係る化合物は、静脈内、非経口、又は他の注射経路により投与される場合、発熱物質を含まない、非経口的に許容される水溶液又は油性懸濁液の形態であることが好ましい。懸濁液は、当技術分野で周知の方法にしたがって、適切な分散剤又は湿潤剤及び懸濁剤を用いて調製することができる。適切なｐＨ、等張性、安定性及び同様のものを有し、許容される水溶液の調製方法は、当業者に周知の範囲内にある。好適な注射用医薬組成物は、１，３−ブタンジオール、水、等張塩化ナトリウム溶液、リンゲル溶液、デキストロース溶液、デキストロース及び塩化ナトリウム溶液、乳酸リンゲル溶液等の等張賦形剤、又は当技術分野で周知の他の賦形剤を含むことが好ましい。さらに、滅菌不揮発性油は、従来の溶媒又は懸濁媒体として使用することができる。この目的のために、合成のモノグリセリド又はジグリセリドを含む任意の無菌性不揮発性油を使用することができる。さらに、オレイン酸等の脂肪酸を、同様に、注射用製剤の調製に使用することができる。医薬組成物はまた、安定剤、保存剤、緩衝液、抗酸化剤、又は当業者に周知の他の添加剤を含むことができる。
【００７６】
注射持続時間は、種々の要因に応じて調整することができ、数秒以内の間に投与される単回注射時間と、０．５時間、０．１時間、０．２５時間、０．５時間、０．７５時間、１時間、２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、７時間、８時間、９時間、１０時間、１１時間、１２時間、１３時間、１４時間、１５時間、１６時間、１７時間、１８時間、１９時間、２０時間、２１時間、２２時間、２３時間、又は２４時間以上の持続静脈内投与時間とを含むことができる。
【００７７】
好適な実施形態に係る化合物は、医薬組成物によく見られる従来の補助成分を、それらの技術分野で慣用の方法、及び慣用のレベルでさらに使用することができる。したがって、例えば、組成物は、併用療法のために添加される相溶性のある薬学的活性物質（例えば、補助的抗菌剤、止痒剤、収斂剤、局所麻酔剤、抗炎症剤、還元剤、化学療法剤及び同様のもの）を含むことができ、又は、好適な実施形態に係る種々の剤形を物理的に調製するのに有用である材料、例えば賦形剤、染料、増粘剤、安定剤、保存剤又は抗酸化剤等を含むことができる。好適な実施形態に係る化合物と併用可能である抗癌剤は、ビンブラスチン及びビンクリスチン等のビンカアルカロイド；ドキソルビシン、ダウノルビシン、エピルビシン等のアントラサイクリン；ビスアントレン及びミトキサントロン等のアントラセン；エトポシド及びテニポシド等のエピポドフィロトキシン；アクチノマイシンＤ、マイトマイシンＣ、ミトラマイシン、メトトレキサート、ドセタキセル、エトポシド（ＶＰ−１６）、パクリタキセル、ドセタキセル、及びアドリアマイシン等のその他の抗癌剤；ならびに免疫抑制剤（例えば、シクロスポリンＡ、タクロリムス）を含むが、これらに限定されない。いくつかの実施形態において、本明細書で提供される化合物、組成物、及び方法は、ヒストンデアセチラーゼ阻害剤（ＨＤＡＣ）、オーロラキナーゼ阻害剤、脱メチル化剤（５−ＡＺＡシチジン等）、ナチュラルキラー細胞による免疫療法、ＩＧＦ−ＩＲ抗体、ユーイング抗原抗体、免疫抑制薬、及びヒドロキシウレアと併用され得る。ヒストンデアセチラーゼ阻害剤の例としては、ボリノスタット、ロミデプシン、パノビノスタット、バルプロ酸、ベリノスタット、モセチノスタット、ギビノスタット、及びトリコスタチンＡが含まれる。オーロラキナーゼ阻害剤の例としては、ＺＭ４４７４３９、ヘスペラジン（ｈｅｓｐｅｒａｄｉｎ）、及びＶＸ−６８０が含まれる。脱メチル化剤の例としては、５−アザシチジン、５−アザデオキシシチジン、及びプロカインが含まれる。免疫抑制薬の例としては、６−メルカプトプリン、及びアザチオプリンが含まれる。
【００７８】
＜特定のキット＞
好適な実施形態に係る化合物は、キットの形で、医師又は他の医療専門家による投与に提供されることができる。キットは、適切な医薬組成物における化合物の収納容器、及び対象に医薬組成物を投与するための使用説明を収容するパッケージである。キットは、例えば、本明細書に記載される肉腫の治療に現在、使用されている化学療法薬等の１つ以上の付加的治療剤もまた任意選択的に含むことができる。例えば、１つ以上の付加的化学療法薬と組み合わせて、好適な実施形態に係る化合物が含まれる１つ以上の組成物を含有するキットを提供することができる。又は、好適な実施形態に係る阻害剤が含まれる医薬組成物と付加的治療剤とを別個に提供することができる。キットは、順次又は連続投与のために、個別投与量の好ましい実施形態に係る化合物を含むことができる。キットは、１つ以上の診断ツール及び使用説明を任意選択的に含むことができる。キットは、例えば注射器及び同様のもの等の適切な送達デバイスを、阻害剤（複数可）及び他の任意の治療剤を投与するための使用説明とともに含むことができる。キットは、それに含まれる一部又は全ての治療剤の保管、再構成（必要な場合）、及び投与のための使用説明を任意選択的に含むことができる。キットは、対象への投与回数に相応する複数の容器を含むことができる。
【実施例】
【００７９】
転写因子のＥＴＳファミリーは、発生、分化、増殖について重要であり、アポトーシス及び組織再構築に重要な役割を果たしている。ＲＡＳ／ＭＡＰＫ及びＰＩ３Ｋシグナリングによって過剰発現、遺伝子融合、及び変調によるＥＴＳタンパク質の調節解除の転写結果は、正常な細胞機能の変化に結びつけられ、増加した増殖、持続的な腫瘍起因性血管形成、浸潤、及び転移につながる。過剰発現ＥＴＳタンパク質及びＥＴＳファミリー融合タンパク質は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）とびまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）とで報告されている。ＤＬＢＣＬにおいて、１１ｑ２４．３領域が、ＥＴＳファミリーメンバー、ＥＴＳ１及びＦＬＩ１の調節解除につながる、再発病変及び疾患の病因の一因として同定されている。さらに、ＡＭＬにおいて、ＥＴＳファミリーメンバーであるＥＲＧの過剰発現及び転座は、複雑な又は正常な核型における予後不良と関連することが示されている。
【００８０】
ＴＫ２１６は、ＥＴＳファミリー転写因子癌タンパク質の生物学的活性を阻害するＥＷＳ−ＦＬＩ１に直接、結合するファーストインクラスの小分子であり、現在、ユーイング肉腫患者における臨床試験中である。ＥＷＳ１−ＦＬＩ１は、ユーイング肉腫（ＥＳ）の原動力であることが示されている融合タンパク質である。前臨床効力モデルでは、ＴＫ２１６は、ＥＷＳ−ＦＬＩ１及びＲＮＡヘリカーゼＡ間の結合をブロックし、ＥＷＳ−ＦＬＩ１応答性プロモーター（ＥＣ５０＜１００ｎＭ）で形質移入したＣＯＳ７細胞の有意な転写減少を示し、ナノモル濃度（ＥＣ５０＜２００ｎＭ）でＡ４５７３細胞（ＥＷＳ−ＦＬＩ１発現ユーイング肉腫細胞株）の増殖を阻害した。
【化２６】
2019522037.tif 000028
ＴＫ２１６
４，７−ジクロロ−３−（２−（４−シクロプロピルフェニル）−２−オキソエチル）−３−ヒドロキシインドリン−２−オン
【００８１】
ＴＫ２１６はまた、抗増殖効果を有し、細胞周期停止を引き起こし、調節解除されたＥＴＳファミリーメンバーを伴うＡＭＬ及びＤＬＢＣＬ細胞株のパネルにおけるアポトーシスを誘導する。ＦＬＩ１及び／又はＥＲＧ  ＥＴＳファミリーメンバーのアップレギュレーションが、評価される骨髄細胞株（ＨＬ−６０、Ｋａｓｕｍｉ−１、ＭＬ−２、ＭＯＬＭ−１３、ＭＯＬＭ−１６、及びＴＨＰ−１）で観察された。ＴＫ２１６での治療は、細胞生存率の減少を示し、４８時間後に細胞の用量依存性アポトーシスを誘導した。同様に、ＤＬＢＣＬ細胞株（ＴＭＤ−８、ＨＢＬ−１、Ｕ２９３２、ＤＯＨＨ２、ＷＳＵ−ＤＬＣＬ２、ＯＣＩ−Ｌｙｌ８、及びＯＣＩ−Ｌｙｌ９）のパネルにおいて、ＴＫ２１６治療は、細胞増殖の減少及びアポトーシスの増加をもたらした。ＤＬＢＣＬの異種移植モデルでのインビボ有効性研究は、インビトロでの知見と一致した抗腫瘍活性を示し、転写因子のＥＴＳファミリーにおける異常な発現及び転座を標的とすることによってＡＭＬ及びＤＬＢＣＬの治療におけるＴＫ２１６の有用性及び有効性が確認でき、これは、病気の病因に貢献する。
【００８２】
ＴＫ２１６の作用機序が、図１に示されている。図１に示すように、ＴＫ２１６は、発癌（付着非依存性増殖；マウスの腫瘍）、改変された遺伝子発現（↑Ｅ２Ｇ２（クロマチンレギュレータ；↑ＶＥＧＦ−Ａ（血管新生））、及び選択的スプライシング（サイクリンＤ１ｂ（細胞周期の活性化）；ＡＲＩＤ１Ａ−ｅｘ１８Ｌ（クロマチンレギュレータ））において活性である。ＴＫ２１６は、アポトーシス（プログラム細胞死、腫瘍の増殖の阻害）、改変された遺伝子発現（↓Ｅ２Ｇ２；↓ＶＥＧＦ−Ａ）、及び変異体アイソフォーム（サイクリンＤ１ａ（細胞周期の遅延）；ＡＲＩＤ１Ａ−ｅｘ１８５（非発癌性））を阻害した。
【００８３】
ＴＫ２１６治療は、転写及び増殖の減少をもたらす、ＥＷＳ−ＦＬＩ１タンパク質相互作用を阻害した。ＦＬＩ１は、Ａ４５７３におけるＴＫ２１６又はＤＭＳＯ対照実験を伴う治療後に免疫沈降した（図２参照）。
【００８４】
ＴＫ２１６は、図３に示すように、ＥＷＳ−ＦＬＩ１とＥＷＳ−ＦＬＩ１  ＤＮＡ結合部位を含むＮＲＯＢ１レポータールシフェラーゼプラスミドとで同時形質移入したＣＯＳ７細胞において転写活性を減少させた。
【００８５】
ＴＫ２１６での治療は、図４に示すようにユーイング肉腫Ａ４５７３細胞株における用量依存的な増殖阻害をもたらした。
【００８６】
ＴＫ２１６は、ＡＭＬ細胞株において抗増殖活性を表示した。各細胞株についてのＴＫ２１６のＩＣ５０は、図５及び表１に示すように、７２時間のＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏアッセイで決定された。
【表１】
2019522037.tif 000029
【００８７】
ＴＫ２１６は、ＤＬＢＣＬ細胞株において抗増殖活性を表示した。各細胞株についてのＴＫ２１６のＩＣ５０は、図６及び表２に示すように、７２時間のＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏアッセイで決定された。
【表２】
2019522037.tif 000030
【００８８】
ＴＫ２１６は、ＤＬＢＣＬ細胞株においてアポトーシスを誘導した。細胞を１８時間、種々の濃度のＴＫ２１６で処理し、切断カスパーゼ３の検出によってアポトーシスについて評価した。切断カスパーゼ３の量を、図７及び図８に示すように、β−アクチンに対して標準化し、対照実験に対する倍数として提示した。
【００８９】
ＢＣＬ−２（ＡＢＴ１９９）及びＢＴＫ（ＡＣＰ１９６）阻害剤と組み合わせた場合、ＴＫ２１６は相乗作用を表示した。ＡＢＴ１９９（ＢＣＬ−２ｉ）とＡＣＰ１９６（ＢＴＫｉ）とを組み合わせた場合のＴＫ２１６の相乗作用、拮抗性、又は相加作用を決定するために、中央値−効果分析を使用した。図９及び図１０に示すように、Ｃｈｏｕ／Ｔａｌａｌａｙの式を用いて組み合わせ指数（ＣＩ）を決定するために、ＣａｌｃｕＳｙｎソフトウェアを使用した。
【００９０】
ＴＫ２１６は、ＤＬＢＣＬ異種移植モデルにおいて抗腫瘍活性を表示した。ＴＫ２１６の抗腫瘍活性を、ＴＭＤ−８腫瘍、ＤＬＢＣＬ−ＡＢＣ異種移植モデルを保有するヌードマウスで評価した。ＴＫ２１６は、１３日間、１００ｍｇ／ｋｇのＢＩＤにおける溶液として経口投与した。結果を図１１に示す。
【００９１】
ＴＫ２１６による治療は、腫瘍増殖阻害をもたらした。図１２に示すように治療の１３日後に賦形剤対照実験と比較した場合、ＴＫ２１６は、ＴＭＤ−８異種移植モデルの７７％腫瘍増殖阻害をもたらした。
【００９２】
上記データが実証するように、ＴＫ２１６は、ＥＴＳファミリー転写因子の生物学的活性を阻害するＥＷＳ−ＦＬＩｌを直接、結合するファーストインクラスの小分子である。調節解除されたＥＴＳファミリーメンバーを伴うＡＭＬ及びＤＬＢＣＬ細胞株では、ＴＫ２１６による治療は、強力な増殖の阻害及びアポトーシスの誘導をもたらした。ＤＬＢＣＬ細胞株におけるＢＣＬ−２及びＢＴＫ阻害剤とＴＫ２１６との組み合わせは、相乗活性をもたらし、細胞増殖のより効果的な阻害を可能にした。毎日のＴＫ２１６の経口投与は、ＥＴＳファミリーメンバーの発現を調節解除し伴うＤＬＢＣＬの異種移植モデルでの腫瘍成長を強力に阻害し、耐容性が良好である。ＥＷＳ−ＦＬＩ１癌遺伝子の阻害は、ユーイング肉腫、例えば、再発／難治性ユーイング肉腫の治療のための有望なアプローチを提供する。
【００９３】
ベネトクラクス「４−（４−｛［２−（４−クロロフェニル）−４，４−ジメチル−１−シクロヘキセン−１−イル］メチル｝−１−ピペラジニル）−Ｎ−（｛３−ニトロ−４−［（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルメチル）アミノ］フェニル｝スルホニル）−２−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−５−イルオキシ）ベンズアミド」は、例えば、再発しているか、以前の治療に難治性となっており、１７ｐ欠失遺伝子変異を有する患者における、慢性リンパ性白血病の治療のために使用される。
【化２７】
2019522037.tif 000031
ベネトクラクス
【００９４】
ＴＫ２１６は、ベネトクラクスと組み合わせて試験され、ＤＬＢＣＬ細胞株の用量効果に相乗作用を示すことが実証されている。図１３〜図１５のそれぞれにおいて、上部曲線（×）は組み合わせ治療についての、中間曲線（◎）はＴＫ２１６についての、下部曲線（＋）はベネトクラクスについてのものである。図１３は、ＴＭＤ８細胞株におけるベネトクラクスとの組み合わせにおけるＴＫ２１６の用量効果曲線である。図１４は、Ｕ２９３２細胞株におけるベネトクラクスとの組み合わせにおけるＴＫ２１６の用量効果曲線である。図１５は、ＨＬＢ１細胞株におけるベネトクラクスとの組み合わせにおけるＴＫ２１６の用量効果曲線である。
【００９５】
用量効果試験は、図１６に示すように、用量を横切る相乗作用を示すＤＬＢＣＬ細胞株（ＴＭＤ８、ＨＢＬ１、Ｕ２９３２）で行われた。
【００９６】
ＦＬＩ１及びＳＰＩＢ等のＥＴＳ転写因子は、再帰的にヒトリンパ腫において調節解除される。小分子ＹＫ−４−２７９（ＹＫ−２７９又はＹＫ２７９とも称され、４，７−ジクロロ−３−ヒドロキシ−３−（２−（４−メトキシフェニル）−２−オキソエチル）インドリン−２−オンである）は、ユーイング肉腫細胞における増殖停止及びアポトーシスを伴うＲＨＡへのＥＷＳ１−ＦＬＩ１融合タンパク質の結合を阻害し、インビトロ抗リンパ腫活性を呈示する。
ＹＫ−４−２７９
【化２８】
2019522037.tif 000032
４，７−ジクロロ−３−ヒドロキシ−３−（２−（４−メトキシフェニル）−２−オキソエチル）インドリン−２−オン
【００９７】
ＴＫ−２１６は、再発性又は難治性ユーイング肉腫を有する患者についてのフェーズ１であるＹＫ−４−２７９の臨床誘導剤である。前臨床試験は、リンパ腫モデルでＴＫ−２１６について行われている。
【００９８】
５６個のリンパ腫細胞株［２７個のびまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）；１０個のマントル細胞リンパ腫；６個の辺縁帯リンパ腫；５個の未分化大細胞型Ｔ細胞リンパ腫；８個の他のもの］を、テカンＤ３００ｅデジタルディスペンサー及び３８４枚のウェルプレートを用いて７２時間、ＴＫ−２１６漸増用量に曝露した。細胞増殖は、ＭＴＴを用いて測定した。インビボ研究は、ＮＯＤ−ＳＣＩＤマウスで行った。治療は、約ｓｃ６０ｍｍ３の腫瘍体積を使用して開始した。研究によれば、図１に示すように、ＴＫ−２１６が４４９ｎＭの中央値ＩＣ５０（９５％Ｃ．Ｉ．：３６７〜５０６）で非常に活性であったことが実証された。感度は、起源のリンパ腫細胞（Ｂ対Ｔ；活性化Ｂ細胞型ＤＬＢＣＬ対胚中心型ＤＬＢＣＬ）又はＭＹＣ及びＴＰ５３状態によっては影響を受けなかった。ＢＣＬ２染色体転座を有する細胞株において感度がより低いとの、統計的に有意な傾向はなかった（Ｐ＝０．０７、ＤＬＢＣＬのみ；Ｐ＝０．０６、すべての細胞株）。６個のＤＬＢＣＬ細胞株（ＴＭＤ８、Ｕ２９３２、ＨＢＬ１、ＯＣＩ−ＬＹ−１８、ＷＳＵ−ＤＬＣＬ２、ＤＯＨＨ２；ＴＫ−２１６又はＤＭＳＯで２４、４８、７２時間）で細胞周期分析及びアネキシンＶ染色を行って確認されたように、抗腫瘍活性は、主に細胞傷害性であり、図２に示すように、時間依存性アポトーシスは、Ｇ２／Ｍ停止が先行していた。
【００９９】
抗腫瘍活性はそして、図３に示すように、ＤＬＢＣＬ  ＴＭＤ８細胞異種移植片を用いて試験した。対照実験群（ｎ＝１０）と比較して、ＴＫ−２１６で治療したマウス（１００ｍｇ／Ｋｇ、ＢＩＤ；ｎ＝９）は明らかに、３日目で既に明らかに腫瘍増殖の減少を示し、時間とともにはるかに強くなり（Ｄ３、Ｄ５、Ｄ８、Ｄ１１：Ｐ＜０．０１、Ｄ１３では、対照実験群について腫瘍体積により停止しなければならなかったのでＰが利用不可）、Ｄ１１（Ｐ＜０．０１）において腫瘍体積は４倍の減少となった。ＴＫ−２１６はまた、図４に示すように、ＤＬＢＣＬ細胞株において他の標的薬剤と組み合わせて試験された。ＴＫ−２１６と以下との組み合わせで利点が観察された；免疫調節剤レナリドマイド（２／２の活性化Ｂ細胞型ＤＬＢＣＬにおける相乗作用）、ブロモドメイン及び特異的末端をもつタンパク質（ＢＥＴ）阻害剤ＯＴＸ０１５（ＭＫ−８６２８）（２／４の細胞における相乗作用と１／４の細胞における相加作用）、抗ＣＤ２０モノクローナル抗体リツキシマブ（２／３の細胞において相乗作用）、及びＢＣＬ２阻害剤ベネトクラクス（３／４の細胞において相乗作用）。後者の相乗作用は、ＴＫ−２１６  ＩＣ５０値及びＢＣＬ２転座の存在との間の前述の負の傾向に関連し得る。
【０１００】
試験結果は、ＴＫ−２１６が、単剤として、及び他の治療剤と組み合わせての両方で、強力な前臨床抗リンパ腫活性を示したことを実証した。
【０１０１】
２つの主ＤＬＢＣＬサブタイプは、個々の生物学的及び臨床的特徴によって特徴付けられる胚中心Ｂ細胞（ＧＣＢ）及びＡＢＣタイプである。４０％ものＤＬＢＣＬ患者がいまだ標準的な治療で治療されていないので、新しい治療法の必要性がある。ＹＫ−４−２７９は、ＲＨＡへのＥＷＳ１−ＦＬＩ１融合タンパク質の結合を阻害する小分子であり、ユーイング肉腫細胞における増殖停止及びアポトーシスをもたらす。その誘導体であるＴＫ−２１６は、フェーズＩにおける転写因子のＥＴＳファミリーの画期的新薬阻害剤である（再発性又は難治性ユーイング肉腫についてのＮＣＴ０２６５７００５）。両方の化合物は、前臨床抗リンパ腫活性の有望性を示している。データはＤＬＢＣＬにおけるそれらの作用機序において得られている。
【０１０２】
細胞株を、テカンＤ３００ｅデジタルディスペンサー及び９６枚のウェルプレートを用いて７２時間、単独で又は他の化合物と組み合わせて、ＹＫ−４−２７９又はＴＫ−２１６に曝露した。細胞増殖はＭＴＴを用いて測定した。相乗作用は、Ｃｈｏｕ−Ｔａｌａｌａｙ組み合わせ指数で決定された。遺伝子発現プロファイリング（ＧＥＰ）は、イルミナＨｕｍａｎＨＴ  １２  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ＢｅａｄＣｈｉｐを用いて行われた。インビボ試験はＮＯＤ−ＳＣＩＤマウスで行われ、治療は６０ｍｍ３の腫瘍体積ｓｃで開始された。
【０１０３】
ＴＫ−２１６は、インビトロ及びインビボの強い抗リンパ腫活性を示した。抗腫瘍活性は、ＴＫ−２１６についてと同じくＡＢＣ  ＤＬＢＣＬモデル（ＴＭＤ８異種移植）においてＹＫ−４−２７９について実証されている。対照実験群（ｎ＝１０）と比較すると、ＹＫ−４−２７９で治療したマウス（１００ｍｇ／Ｋｇ、ＢＩＤ；ｎ＝９）は明確に、Ｄ８及びＤ１１（Ｐ＜０．０１）ならびにＤ１３（対照実験群について腫瘍体積により停止しなければならなかったのでＰが利用不可）での腫瘍増殖の減少を示した。ＡＢＣ  ＤＬＢＣＬにおける免疫調節薬（ＩＭＩＤ）レナリドマイドとの組み合わせの場合のＴＫ−２１６の具体的な相乗作用を示す組み合わせデータによれば、４つのＤＬＢＣＬ細胞株（２つのＡＢＣ、２つのＧＣＢ）においてＹＫ−４−２７９が、ＢＴＫ阻害剤イブルチニブ、ＰＩ３Ｋデルタ阻害剤イデラリシブ、ＢＥＴ阻害剤ＯＴＸ−０１５及びレナリドマイドと組み合わせた場合に、ＹＫ−４−２７９とレナリドマイドとの組み合わせで両方のＡＢＣ  ＤＬＢＣＬにおいて相乗作用を伴って最大の利点が達成された。レナリドマイドは、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）において活性であるので、ＴＫ−２１６及びレナリドマイドの組み合わせの相乗作用はまた、２つのＭＣＬ細胞株においても確認された。
【０１０４】
ＹＫ−４−２７９及びＴＫ−２１６の作用機序を理解する目的で、異なるＥＴＳ因子のベースラインＲＮＡ発現レベルを、薬剤に対する感受性と相関させた。ＳＰＩＢは、特にＡＢＣ  ＤＬＢＣＬ細胞株（Ｐ＜０．０５）のうちＹＫ−４−２７９及びＴＫ−２１６の両方で最も有意な負の相関を示す遺伝子であった。ＳＰＩＢはＡＢＣ  ＤＬＢＣＬについて既知の癌遺伝子であり（レンツら、ＰＮＡＳ  ２００８）、ＡＢＣ  ＤＬＢＣＬにおいてレナリドマイドへの応答に関与している（Ｙａｎｇら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｌｌ  ２０１２）。ＹＫ−４−２７９は、ヘリカーゼＲＨＡ及びＤＤＸ５へのＥＷＳ１−ＦＬＩ１の結合を阻害する（Ｓｅｌｖａｎａｔｈａｎら、ＰＮＡＳ  ２０１２）。したがって、ＹＫ−４−２７９及びＴＫ−２１６がＳＰＩＢ上で同様の効果を持つことができるかどうか、及び、それらがレナリドマイドに似た細胞効果を誘発するかどうかを評価した。タンパク質モデリングは、ＦＬＩ１及びＳＰＩＢの３Ｄ構造が非常に重複していることを実証した。Ｃｏ−ＩＰ実験は、２つのＡＢＣ  ＤＬＢＣＬ細胞株でＲＨＡ及びＤＤＸ５へのＳＰＩＢの結合を示した。ＲＨＡへの、及び、それより少ない程度でのＤＤＸ５への結合は、ＴＫ２１６又はＹＫ−４−２７９（５００ｎＭ、４〜１０ｈ）へと細胞を暴露する際に減少した。レナリドマイドと同様に（Ｙａｎｇら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｌｌ  ２０１２）、ＴＫ−２１６は、細胞中のＩＲＦ４及びアップレギュレートされたＩＲＦ７タンパク質を減少させた。活性（Ｓ）エナンチオマー又は不活性（Ｒ）エナンチオマーに曝された２つのＡＢＣ  ＤＬＢＣＬ細胞株のＧＥＰ（５００ｎＭ、４〜８ｈ）は、（Ｓ）−ＹＫ−４−２７９が、複数のｓｎｏＲＮＡの重要なアップレギュレーション、つまりヘリカーゼ上の化合物の干渉及びＲＮＡ編集と互換性のある効果を引き起こしたことを示した。ＡＢＣ  ＤＬＢＣＬにおいて、ＥＴＳ阻害剤ＹＫ−４−２７９及びその臨床誘導体ＴＫ−２１６は、ＲＮＡ編集に関与するＳＰＩＢ及びヘリカーゼに干渉する。また、両方の化合物は、レナリドマイドがＩＲＦ４を阻害し、ＩＲＦ７をアップレギュレートするのと同様に作用し、ＡＢＣ  ＤＬＢＣＬ及びＭＣＬの両方でＩＭＩＤと相乗作用を示す。
【０１０５】
＜代表的な方法及び組成物＞
方法１：
急性骨髄性白血病で産生される骨髄芽球又はびまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫で産生されるリンパ球を含む細胞においてアポトーシスを誘導するための方法であって、
免疫調節剤、ブロモドメイン、特異的末端をもつタンパク質阻害剤、抗ＣＤ２０モノクローナル抗体、及びＢＣＬ２阻害剤からなる群より選ばれる少なくとも１つの治療剤、及び
式（Ｉ）の構造を有するか、もしくはその立体異性体、その薬学的に許容される塩、又はその溶媒和物である化合物
【化２９】
2019522037.tif 000033
の組み合わせの有効量と細胞とを接触させることを含み、
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃｌ、−ＣＮ、及びＣＦ３からなる群より選ばれ、Ａは、Ｈ及びＣ１−６アルキルからなる群より選ばれ、Ｄは、−ＯＨ及びＯ（Ｃ１−６アルキル）からなる群より選ばれ、Ｒ５及びＲ６は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｆ、及びＣ１−６アルキルからなる群より選ばれるか、又は、置換もしくは非置換のシクロアルキル環を一緒になって形成しており、Ｒ１２は、独立して、置換又は非置換のＣ３−８シクロアルキル、置換又は非置換のＣ３−８ヘテロシクロアルキル、
【化３０】
2019522037.tif 000034
及び
【化３１】
2019522037.tif 000035
（ここで、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、及びＲ１１は、それぞれ独立して、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、ＣＦ３、Ｃ１−６アルキル、アリール、ヘテロアリール、−Ｏ（Ｃ１−６アルキル）、−Ｏ（アリール）、−Ｏ（ヘテロアリール）、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２（Ｃ１−６アルキル）、−ＮＨＳＯ２（Ｃ１−６アルキル）、−ＮＨＳＯ２（アリール）、−ＮＨＣＯＮＨ（Ｃ１−６アルキル）、−ＮＨＣＯＮ（Ｃ１−６アルキル）２、−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）ＣＯＮＨ２、−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）ＣＯＮＨ（Ｃ１−６アルキル）、−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）ＣＯＮ（Ｃ１−６アルキル）２、−ＳＯ２（Ｃ１−６アルキル）、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＳＯ２ＮＨ（Ｃ１−６アルキル）、−ＳＯ２Ｎ（Ｃ１−６アルキル）２からなる群より選ばれ、Ｒ１３は、−Ｏ（Ｃ１−６アルキル）及びＮ（Ｃ１−６アルキル）２からなる群より選ばれる）からなる群より選ばれる。
【０１０６】
方法２：
急性骨髄性白血病又はびまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫を治療するための方法であって、
免疫調節剤、ブロモドメイン、特異的末端をもつタンパク質阻害剤、抗ＣＤ２０モノクローナル抗体、及びＢＣＬ２阻害剤からなる群より選ばれる少なくとも１つの治療剤、及び
式（Ｉ）の構造を有するか、もしくはその立体異性体、その薬学的に許容される塩、又はその溶媒和物である化合物
【化３２】
2019522037.tif 000036
の組み合わせの抗増殖量を、それを必要とする患者に投与することを含み、
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃｌ、−ＣＮ、及びＣＦ３からなる群より選ばれ、Ａは、Ｈ及びＣ１−６アルキルからなる群より選ばれ、Ｄは、−ＯＨ及びＯ（Ｃ１−６アルキル）からなる群より選ばれ、Ｒ５及びＲ６は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｆ、及びＣ１−６アルキルからなる群より選ばれるか、又は、置換もしくは非置換のシクロアルキル環を一緒になって形成しており、Ｒ１２は、独立して、置換又は非置換のＣ３−８シクロアルキル、置換又は非置換のＣ３−８ヘテロシクロアルキル、
【化３３】
2019522037.tif 000037
及び
【化３４】
2019522037.tif 000038
（ここで、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、及びＲ１１は、それぞれ独立して、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、ＣＦ３、Ｃ１−６アルキル、アリール、ヘテロアリール、−Ｏ（Ｃ１−６アルキル）、−Ｏ（アリール）、−Ｏ（ヘテロアリール）、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２（Ｃ１−６アルキル）、−ＮＨＳＯ２（Ｃ１−６アルキル）、−ＮＨＳＯ２（アリール）、−ＮＨＣＯＮＨ（Ｃ１−６アルキル）、−ＮＨＣＯＮ（Ｃ１−６アルキル）２、−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）ＣＯＮＨ２、−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）ＣＯＮＨ（Ｃ１−６アルキル）、−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）ＣＯＮ（Ｃ１−６アルキル）２、−ＳＯ２（Ｃ１−６アルキル）、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＳＯ２ＮＨ（Ｃ１−６アルキル）、−ＳＯ２Ｎ（Ｃ１−６アルキル）２からなる群より選ばれ、Ｒ１３は、−Ｏ（Ｃ１−６アルキル）及びＮ（Ｃ１−６アルキル）２からなる群より選ばれる）からなる群より選ばれる。
【０１０７】
方法３：
方法１〜２のいずれか１つの方法であって、Ｒ９は、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、ＣＦ３、Ｃ１−６アルキル、アリール、ヘテロアリール、−Ｏ（アリール）、−Ｏ（ヘテロアリール）、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２（Ｃ１−６アルキル）、−ＮＨＳＯ２（Ｃ１−６アルキル）、−ＮＨＳＯ２（アリール）、−ＮＨＣＯＮＨ（Ｃ１−６アルキル）、−ＮＨＣＯＮ（Ｃ１−６アルキル）２、−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）ＣＯＮＨ２、−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）ＣＯＮＨ（Ｃ１−６アルキル）、−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）ＣＯＮ（Ｃ１−６アルキル）２、−ＳＯ２（Ｃ１−６アルキル）、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＳＯ２ＮＨ（Ｃ１−６アルキル）、−ＳＯ２Ｎ（Ｃ１−６アルキル）２からなる群より選ばれ、Ｒ１３は、−Ｏ（Ｃ１−６アルキル）及びＮ（Ｃ１−６アルキル）２からなる群より選ばれる。
【０１０８】
方法４：
方法１〜３のいずれか１つの方法であって、細胞が哺乳動物のものである。
【０１０９】
方法５：
方法１〜４のいずれか１つの方法であって、細胞がヒトのものである。
【０１１０】
方法６：
方法１〜５のいずれか１つの方法であって、細胞がインビトロでのものである。
【０１１１】
方法７：
方法１〜６のいずれか１つの方法であって、細胞がインビボでのものである。
【０１１２】
方法８：
方法１〜７のいずれか１つの方法であって、治療剤は、免疫調節剤である。
【０１１３】
方法９：
方法１〜７のいずれか１つの方法であって、免疫調節剤は、レナリドマイドである。
【０１１４】
方法１０：
方法１〜７のいずれか１つの方法であって、治療剤は、ブロモドメイン及び特異的末端をもつタンパク質阻害剤である。
【０１１５】
方法１１：
方法１〜７のいずれか１つの方法であって、ブロモドメイン及び特異的末端をもつタンパク質阻害剤は、ＯＴＸ０１５である。
【０１１６】
方法１２：
方法１〜７のいずれか１つの方法であって、治療剤は、抗ＣＤ２０モノクローナル抗体である。
【０１１７】
方法１３：
方法１〜７のいずれか１つの方法であって、抗ＣＤ２０モノクローナル抗体は、リツキシマブである。
【０１１８】
方法１４：
方法１〜７のいずれか１つの方法であって、治療剤は、ＢＣＬ２阻害剤である。
【０１１９】
方法１５：
方法１〜７のいずれか１つの方法であって、ＢＣＬ２阻害剤は、ベネトクラクスである。
【０１２０】
方法１６：
方法１〜１５のいずれか１つの方法であって、Ｒ９は、アジリジニル、アゼチジニル、ピロリジニル、及びモルホリノリルからなる群より選ばれる。
【０１２１】
方法１７：
方法１〜１５のいずれか１つの方法であって、Ｒ９は、イソプロピル及びシクロプロピルからなる群より選ばれる。
【０１２２】
方法１８：
方法１〜１５のいずれか１つの方法であって、化合物は、式（Ｉａ）の構造を有するか、もしくはその立体異性体、その薬学的に許容される塩、又はその溶媒和物であり、
【化３５】
2019522037.tif 000039
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４は、それぞれ独立して、Ｈ及びＣｌからなる群より選ばれ、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ１０、及びＲ１１は、それぞれ独立して、Ｈ及びハロゲンからなる群より選ばれ、Ｒ９は、独立して、Ｃ３−８シクロアルキル及びＣ３−８ヘテロシクロアルキルからなる群より選ばれる。
【０１２３】
方法１９：
方法１〜１５のいずれか１つの方法であって、Ｒ１及びＲ４は、Ｃｌであり、Ｒ２及びＲ３は、Ｈである。
【０１２４】
方法２０：
方法１〜１５のいずれか１つの方法であって、化合物は、
【化３６】
2019522037.tif 000040
【化３７】
2019522037.tif 000041
からなる群より選ばれる構造を有するか、もしくはその立体異性体、その薬学的に許容される塩、エステル又はその溶媒和物である。
【０１２５】
方法２１：
方法１〜１５のいずれか１つの方法であって、化合物は、
【化３８】
2019522037.tif 000042
からなる群より選ばれる構造を有するか、もしくはその立体異性体、その薬学的に許容される塩、エステル又はその溶媒和物である。
【０１２６】
方法２２：
方法１〜１５のいずれか１つの方法であって、化合物は、
【化３９】
2019522037.tif 000043
からなる群より選ばれる構造を有するか、もしくはその立体異性体、その薬学的に許容される塩、エステル又はその溶媒和物である。
【０１２７】
方法２３：
方法１〜１５のいずれか１つの方法であって、化合物は、
【化４０】
2019522037.tif 000044
からなる群より選ばれる構造を有するか、もしくはその立体異性体、その薬学的に許容される塩、エステル又はその溶媒和物である。
【０１２８】
方法２４：
方法１〜１５のいずれか１つの方法であって、化合物は、
【化４１】
2019522037.tif 000045
の構造を有するか、もしくはその立体異性体、その薬学的に許容される塩、エステル又はその溶媒和物である。
【０１２９】
方法２５：
方法１〜１５のいずれか１つの方法であって、化合物は、
【化４２】
2019522037.tif 000046
の構造を有するか、もしくはその立体異性体、その薬学的に許容される塩、エステル又はその溶媒和物である。
【０１３０】
方法２６：
方法１〜１５のいずれか１つの方法であって、化合物は、
【化４３】
2019522037.tif 000047
の構造を有するか、もしくはその立体異性体、その薬学的に許容される塩、エステル又はその溶媒和物である。
【０１３１】
組成物２７：
医薬組成物であって、
免疫調節剤、ブロモドメイン、特異的末端をもつタンパク質阻害剤、抗ＣＤ２０モノクローナル抗体、及びＢＣＬ２阻害剤からなる群より選ばれる少なくとも１つの治療剤、及び
式（Ｉ）の構造を有するか、もしくはその立体異性体、その薬学的に許容される塩、又はその溶媒和物である化合物
【化４４】
2019522037.tif 000048
を含み、
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃｌ、−ＣＮ、及びＣＦ３からなる群より選ばれ、Ａは、Ｈ及びＣ１−６アルキルからなる群より選ばれ、Ｄは、−ＯＨ及びＯ（Ｃ１−６アルキル）からなる群より選ばれ、Ｒ５及びＲ６は、それぞれ独立して、Ｈ、Ｆ、及びＣ１−６アルキルからなる群より選ばれるか、又は、置換もしくは非置換のシクロアルキル環を一緒になって形成しており、Ｒ１２は、独立して、置換又は非置換のＣ３−８シクロアルキル、置換又は非置換のＣ３−８ヘテロシクロアルキル、
【化４５】
2019522037.tif 000049
及び
【化４６】
2019522037.tif 000050
（ここで、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、及びＲ１１は、それぞれ独立して、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、ＣＦ３、Ｃ１−６アルキル、アリール、ヘテロアリール、−Ｏ（Ｃ１−６アルキル）、−Ｏ（アリール）、−Ｏ（ヘテロアリール）、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２（Ｃ１−６アルキル）、−ＮＨＳＯ２（Ｃ１−６アルキル）、−ＮＨＳＯ２（アリール）、−ＮＨＣＯＮＨ（Ｃ１−６アルキル）、−ＮＨＣＯＮ（Ｃ１−６アルキル）２、−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）ＣＯＮＨ２、−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）ＣＯＮＨ（Ｃ１−６アルキル）、−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）ＣＯＮ（Ｃ１−６アルキル）２、−ＳＯ２（Ｃ１−６アルキル）、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＳＯ２ＮＨ（Ｃ１−６アルキル）、−ＳＯ２Ｎ（Ｃ１−６アルキル）２からなる群より選ばれ、Ｒ１３は、−Ｏ（Ｃ１−６アルキル）及びＮ（Ｃ１−６アルキル）２からなる群より選ばれる）からなる群より選ばれる。
【０１３２】
組成物２８：
組成物１の組成物であって、Ｒ９は、Ｈ、ハロゲン、ＣＮ、ＣＦ３、Ｃ１−６アルキル、アリール、ヘテロアリール、−Ｏ（アリール）、−Ｏ（ヘテロアリール）、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２（Ｃ１−６アルキル）、−ＮＨＳＯ２（Ｃ１−６アルキル）、−ＮＨＳＯ２（アリール）、−ＮＨＣＯＮＨ（Ｃ１−６アルキル）、−ＮＨＣＯＮ（Ｃ１−６アルキル）２、−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）ＣＯＮＨ２、−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）ＣＯＮＨ（Ｃ１−６アルキル）、−Ｎ（Ｃ１−６アルキル）ＣＯＮ（Ｃ１−６アルキル）２、−ＳＯ２（Ｃ１−６アルキル）、−ＳＯ２ＮＨ２、−ＳＯ２ＮＨ（Ｃ１−６アルキル）、−ＳＯ２Ｎ（Ｃ１−６アルキル）２からなる群より選ばれ、Ｒ１３は、−Ｏ（Ｃ１−６アルキル）及びＮ（Ｃ１−６アルキル）２からなる群より選ばれる。
【０１３３】
組成物２９：
組成物２７〜２８のいずれか１つの組成物であって、治療剤は、免疫調節剤である。
【０１３４】
組成物３０：
組成物２７〜２８のいずれか１つの組成物であって、免疫調節剤は、レナリドマイドである。
【０１３５】
組成物３１：
組成物２７〜２８のいずれか１つの組成物であって、治療剤は、ブロモドメイン及び特異的末端をもつタンパク質阻害剤である。
【０１３６】
組成物３２：
組成物２７〜２８のいずれか１つの組成物であって、ブロモドメイン及び特異的末端をもつタンパク質阻害剤は、ＯＴＸ０１５である。
【０１３７】
組成物３３：
組成物２７〜２８のいずれか１つの組成物であって、治療剤は、抗ＣＤ２０モノクローナル抗体である。
【０１３８】
組成物３４：
組成物２７〜２８のいずれか１つの組成物であって、抗ＣＤ２０モノクローナル抗体は、リツキシマブである。
【０１３９】
組成物３５：
組成物２７〜２８のいずれか１つの組成物であって、治療剤は、ＢＣＬ２阻害剤である。
【０１４０】
組成物３６：
組成物２７〜２８のいずれか１つの組成物であって、ＢＣＬ２阻害剤は、ベネトクラクスである。
【０１４１】
組成物３７：
組成物２７〜３７のいずれか１つの組成物であって、Ｒ９は、アジリジニル、アゼチジニル、ピロリジニル、及びモルホリノリルからなる群より選ばれる。
【０１４２】
組成物３８：
組成物２７〜３７のいずれか１つの組成物であって、Ｒ９は、イソプロピル及びシクロプロピルからなる群より選ばれる。
【０１４３】
組成物３９：
組成物２７〜３７のいずれか１つの組成物であって、化合物は、式（Ｉａ）の構造を有するか、もしくはその立体異性体、その薬学的に許容される塩、又はその溶媒和物であり、
【化４７】
2019522037.tif 000051
式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４は、それぞれ独立して、Ｈ及びＣｌからなる群より選ばれ、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ１０、及びＲ１１は、それぞれ独立して、Ｈ及びハロゲンからなる群より選ばれ、Ｒ９は、独立して、Ｃ３−８シクロアルキル及びＣ３−８ヘテロシクロアルキルからなる群より選ばれる。
【０１４４】
組成物４０：
組成物２７〜３７のいずれか１つの組成物であって、Ｒ１及びＲ４は、Ｃｌであり、Ｒ２及びＲ３は、Ｈである。
【０１４５】
組成物４１：
組成物２７〜３７のいずれか１つの組成物であって、化合物は、
【化４８】
2019522037.tif 000052
【化４９】
2019522037.tif 000053
からなる群より選ばれる構造を有するか、もしくはその立体異性体、その薬学的に許容される塩、エステル又はその溶媒和物である。
【０１４６】
組成物４２：
組成物２７〜３７のいずれか１つの組成物であって、化合物は、
【化５０】
2019522037.tif 000054
からなる群より選ばれる構造を有するか、もしくはその立体異性体、その薬学的に許容される塩、エステル又はその溶媒和物である。
【０１４７】
組成物４３：
組成物２７〜３７のいずれか１つの組成物であって、化合物は、
【化５１】
2019522037.tif 000055
からなる群より選ばれる構造を有するか、もしくはその立体異性体、その薬学的に許容される塩、エステル又はその溶媒和物である。
【０１４８】
組成物４４：
組成物２７〜３７のいずれか１つの組成物であって、化合物は、
【化５２】
2019522037.tif 000056
からなる群より選ばれる構造を有するか、もしくはその立体異性体、その薬学的に許容される塩、エステル又はその溶媒和物である。
【０１４９】
組成物４５：
組成物２７〜３７のいずれか１つの組成物であって、化合物は、
【化５３】
2019522037.tif 000057
の構造を有するか、もしくはその立体異性体、その薬学的に許容される塩、エステル又はその溶媒和物である。
【０１５０】
組成物４６：
組成物２７〜３７のいずれか１つの組成物であって、化合物は、
【化５４】
2019522037.tif 000058
の構造を有するか、もしくはその立体異性体、その薬学的に許容される塩、エステル又はその溶媒和物である。
【０１５１】
組成物４７：
化合物は、
【化５５】
2019522037.tif 000059
の構造を有するか、もしくはその立体異性体、その薬学的に許容される塩、エステル又はその溶媒和物である。
【０１５２】
本開示は、図面及び前述の記載で詳しく例証及び説明されているが、このような例証及び説明は、実例又は例示にすぎず、限定的に解釈されるべきではない。本開示は、開示された実施形態に限定されるものではない。特許請求された開示を実施する際に、開示された実施形態の変形は、図面、本開示、及び添付された特許請求の範囲への研究から、当業者によって理解及び達成されることができる。
【０１５３】
本明細書で引用した全ての参考文献は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。参考として組み込まれる刊行物及び特許又は特許出願は、本明細書に含まれる開示と矛盾する場合、本明細書は任意のこのような矛盾する素材に置き換わる及び／又は優先することを意図している。
【０１５４】
別段の定めがない限り、すべての用語（技術用語及び科学用語を含む）は、当業者に通常かつ慣用の意味を与えるものであり、本明細書で明白に定義しない限り、特別な又はカスタマイズされた意味に限定されるものではない。本開示の特定の特徴又は様態を説明する場合に特定の専門用語の使用は、専門用語が関連する本開示の特徴又は様態の任意の特定の特性を含むように制限されるために、本明細書中でその専門用語が再定義される意味に解釈されるべきではないことを注意すべきである。
【０１５５】
数値範囲を提供する場合、上限及び下限、ならびにその範囲における上限と下限との間の各介在値は、実施形態の範囲内に包含されると理解されるべきである。
【０１５６】
本願に使用される用語及び表現、ならびにそれらの変形は、特に添付の特許請求の範囲において、特に明記しない限り、制限に対立する開放式として解釈されるべきである。前述の実施例のように、用語「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」は「含むが、これらに限らない（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ，ｗｉｔｈｏｕｔ  ｌｉｍｉｔａｔｉｏｎ）」、「含むが、これらに限定されない（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ  ｂｕｔ  ｎｏｔ  ｌｉｍｉｔｅｄ  ｔｏ）」等の意味に解釈されるべきである。本明細書で使用される用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」は、「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」、「含む（ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ）」、又は「特徴づけられる（ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚｅｄ  ｂｙ）」と同義で、包含的又は開放式であり、追加の、記載されていない要素又は方法ステップを除外しない。用語「有する（ｈａｖｉｎｇ）」は、「少なくとも有する」と解釈されるべきである。用語「含む（ｉｎｃｌｕｄｅｓ）」は、「含むが、これらに限定されない（ｉｎｃｌｕｄｅｓ  ｂｕｔ  ｉｓ  ｎｏｔ  ｌｉｍｉｔｅｄ  ｔｏ）」と解釈されるべきである。用語「（実施）例（ｅｘａｍｐｌｅ）」は、討論されるアイテムの典型的な事例を提供するために使用され、それらの完全又は限定的なリストではない。「既知の（ｋｎｏｗｎ）」、「慣用の（ｎｏｒｍａｌ）」、「標準の（ｓｔａｎｄａｒｄ）」等の形容詞、及び類似した意味の用語は、所定の期間に記載されるアイテム、又は所定の時点で利用可能なアイテムに限定されるものとして解釈されるべきではないが、その代わりに、現在又は将来の任意の時点で入手可能又は知られ得る、既知、慣用又は標準の技術を包含すると解釈されるべきである。「好ましい（ｐｒｅｆｅｒａｂｌｙ）」、「好ましい（ｐｒｅｆｅｒｒｅｄ）」、「所望（ｄｅｓｉｒｅｄ）」、又は「所望（ｄｅｓｉｒａｂｌｅ）」等の用語、及び類似した意味の言葉の使用は、特定の特徴が本発明の構造又は機能に対して重大、本質的、又は重要であることを意味すると理解すべきではないが、その代わりに、単に、本発明の特定の実施形態に利用可能又は利用され得ない代替的又は追加の特徴を強調することを意図している。同様に、接続詞「及び（ａｎｄ）」に関連しているアイテムグループは、それらのアイテムの１つ１つがグルーピングに存在する必要があると理解されるべきではないが、別段の記載がない限り、むしろ、「及び／又は（ａｎｄ／ｏｒ）」として理解されるべきである。同様に、接続詞「又は（ｏｒ）」に関連しているアイテムグループは、それらのグループの間で相互排他性を必要とすることが理解されるべきではないが、別段の記載がない限り、むしろ、「及び／又は（ａｎｄ／ｏｒ）」と理解されるべきである。
【０１５７】
本明細書で実質的に任意の複数形及び／又は単数形の用語の使用に関して、当業者は、複数形から単数形への変換、及び／又は、単数形から複数形への変換を文脈及び／又は適用に合わせるように行うことができる。種々の単数形／複数形の置き換えは、明確にするために、本明細書に明示的に説明され得る。不定冠詞「ａ」又は「ａｎ」は複数を除外しない。特定の手段が互いに異なる従属請求項に記載されるという単なる事実は、これらの手段の組み合わせを有利に使用できないことを示すものではない。特許請求の範囲における任意の引用符号は、本発明の範囲を限定すると解釈されるべきではない。
【０１５８】
導入される請求項の記載における特定の数字が意図される場合に、そのような意図が請求項に明確に記載される一方、そのような記載が存在しない場合に、そのような意図は存在しないことは、当業者にとって理解されるであろう。例えば、理解の助けとして、以下に添付される特許請求の範囲は、請求項の記載を導入する導入句「少なくとも１つ（ａｔ  ｌｅａｓｔ  ｏｎｅ）」及び「１つ以上（ｏｎｅ  ｏｒ  ｍｏｒｅ）」の使用を含み得る。しかし、このような語句の使用は、同一の請求項が導入句「１つ以上（ｏｎｅ  ｏｒ  ｍｏｒｅ）」又は「少なくとも１つ（ａｔ  ｌｅａｓｔ  ｏｎｅ）」、及び「ａ」又は「ａｎ」等の不定冠詞（例えば、「ａ」及び／又は「ａｎ」は、一般的に、「少なくとも１つ（ａｔ  ｌｅａｓｔ  ｏｎｅ）」又は「１つ以上（ｏｎｅ  ｏｒ  ｍｏｒｅ）」を意味すると解釈されるべきである）を含む場合であっても、不定冠詞「ａ」又は「ａｎ」による請求項の記載の導入が、そのような導入された請求項の記載を含む任意の特定の請求項を、このような記載の１つのみを含む実施形態に限定すると解釈されるべきではない。請求項の記載を導入するために使用される定冠詞の使用についても同じである。さらに、導入された請求項の記載における特定の数字を明示的に記載する場合であっても、そのような記載が典型的に少なくとも記載の数を意味するように解釈されるべきであることは、当業者にとって理解されるであろう（例えば、他の修飾のない「２つの記載」という最低限の記載は、典型的に、少なくとも２つの記載、又は２つ以上の記載を意味する）。さらに、「Ａ、Ｂ、及びＣ等の少なくとも１つ」に類似している慣例を使用するこれらの例において、一般的に、このような構成は、その慣例について当業者が理解する意味で意図されている（例えば、「Ａ、Ｂ、及びＣの少なくとも１つを有するシステム」は、単独のＡ、単独のＢ、単独のＣ、ＡとＢを一緒に、ＡとＣを一緒に、ＢとＣを一緒に、及び／又は、ＡとＢとＣとを一緒に等を有するシステムを含むが、これらに限定されない）。「Ａ、Ｂ、及びＣ等の少なくとも１つ」に類似している慣例を使用するこれらの例において、一般的に、このような構成は、その慣例について当業者が理解する意味で意図されている（例えば、「Ａ、Ｂ、及びＣの少なくとも１つを有するシステム」は、単独のＡ、単独のＢ、単独のＣ、ＡとＢを一緒に、ＡとＣを一緒に、ＢとＣを一緒に、及び／又は、ＡとＢとＣとを一緒に等を有するシステムを含むが、これらに限定されない）。２つ以上の選択可能な用語が存在する実質的に任意の離接語及び／又は語句は、明細書、特許請求の範囲、又は図面にあるなしを問わず、その選択可能な用語の１つ、いずれか一方、又は両方ともを含む可能性を意図すると理解されるべきであることは当業者にとってさらに理解されるであろう。例えば、語句「Ａ又はＢ」は、「Ａ」又は「Ｂ」又は「Ａ及びＢ」の可能性を含むと理解されるであろう。
【０１５９】
明細書中で使用される成分、反応条件等の数量を表すすべての数字は、すべての例において用語「約（ａｂｏｕｔ）」により修飾されるものとして理解されるべきである。したがって、反対に示されない限り、本明細書で説明される数値パラメータは、得ようとする所望の特性に応じて変更できる近似値である。本出願の優先権を主張する任意の出願における任意の特許請求の範囲に対しては、少なくとも均等論が適用されるが、これに限定されず、各数値パラメータは、有効数字及び通常の丸めアプローチの数字に照らして解釈されるべきである。
【０１６０】
さらに、前述において、明瞭さ及び理解のために例示及び実施例を手段として多少詳しく述べられているが、特定の変更及び修飾が実施され得ることは、当業者にとって明らかである。したがって、説明及び実施例は、本発明の範囲を本明細書に記載される特定の実施形態及び実施例に限定するものとして解釈されるべきではないが、むしろ、本発明の真の範囲及び趣旨に伴うすべての修飾及び代替物を包含する。
【図１】
2019522037.tif 000078
【図２】
2019522037.tif 000079
【図３】
2019522037.tif 000080
【図４】
2019522037.tif 000081
【図５】
2019522037.tif 000082
【図６】
2019522037.tif 000083
【図７】
2019522037.tif 000084
【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８Ａ】
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【図１８Ｂ】
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【図１９】
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【図２０】
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【国際調査報告】
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