(57)【要約】  本出願は、ビオチン酸マグネシウム組成物および使用方法に関する。ここに開示した方法および組成物は、バイオアベイラブルなビオチンを哺乳類に提供し、ビオチン欠乏症の症状を治療または防止するために特に有用である。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
有効量のビオチン酸マグネシウムおよび薬学的に許容されるビヒクル、担体、または希釈剤を含む組成物。
【請求項２】
前記組成物が固体組成物である、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記組成物が、徐放性マトリックスを含む、請求項１〜２のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項４】
前記組成物が、腸溶性である、請求項１〜３のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項５】
前記組成物が、約１０μｇ〜約１，０００μｇのビオチン酸マグネシウムを含む、請求項１〜４のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項６】
前記組成物が、前記ビオチン酸マグネシウムの重量と比較して重量比で約０．８％以下のナトリウムを含む、請求項１〜５のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項７】
哺乳類のビオチン欠乏症を伴う疾患、障害、または状態を治療または防止するのに有効な量のビオチン酸マグネシウムを投与することを含む、前記哺乳類のビオチン欠乏症を伴う疾患、障害、または状態を治療または防止する方法。
【請求項８】
前記疾患、障害、または状態が、ビオチニダーゼ欠損症、マルチプルカルボキシラーゼ欠損症、およびホロカルボキシラーゼ合成酵素欠損症、脆弱毛、過剰な脱毛、脱毛症、貧血、１つ以上の局所真菌感染症、脂漏性皮膚炎、幻覚、嗜眠、食欲不振、うつ病、筋肉痛、感覚異常、過度の疲労、傾眠、長期抗痙攣薬療法、完全非経口栄養の長期使用、栄養不良、長期抗生物質療法、緊張低下、妊娠、短腸症候群、ケトン食、アルコールの過剰摂取、喫煙、嚢胞性線維症、または前記の組合せからなる群から選択される、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
投与するビオチン酸マグネシウムの前記量が、１日当たり約１０μｇ〜約１，０００μｇである、請求項７〜８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
前記ビオチン酸マグネシウムを、経口投与する、請求項７〜９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
有効量のビオチン酸マグネシウムを哺乳類に投与することを含む、肌のきめを改善する方法。
【請求項１２】
哺乳類の異常な肌のきめを同定することをさらに含み、前記同定することが、以下のもの：アレルギー反応、ストレス誘発性発疹、湿疹、尋常性ざ瘡、酒さ性ざ瘡、じんま疹、脂漏性皮膚炎、および乾癬の１つを検出する感度がよい試験を実施することを含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記同定することが、アレルギー反応、ストレス誘発性発疹、湿疹、尋常性ざ瘡、酒さ性ざ瘡、じんま疹、脂漏性皮膚炎、および乾癬の１つ以上の診断を含む、請求項１１〜１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
投与する前記有効量のビオチン酸マグネシウムが、１日当たり約１０μｇ〜約１，０００μｇである、請求項１１〜１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】
前記ビオチン酸マグネシウムを、経口投与する、請求項１１〜１４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１６】
哺乳類の神経の脱髄を伴う疾患、障害、または状態を治療または防止するのに有効な量のビオチン酸マグネシウムを投与することを含む、前記哺乳類の神経の脱髄を伴う疾患、障害、または状態を治療または防止する方法。
【請求項１７】
前記疾患、障害、または状態が、脱髄性髄鞘脱落疾患、脱髄性白質ジストロフィー、多発性硬化症、神経損傷、デビック病、脊髄癆、橋中心髄鞘崩壊、進行性多巣性白質脳症、ギラン・バレー症候群、シャルコー・マリー・トゥース病、慢性炎症性脱髄性多発性神経障害、銅欠乏症、および進行性炎症性神経障害、または前記の組合せから選択される、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
投与するビオチン酸マグネシウムの前記量が、１日当たり約１０μｇ〜約１，０００μｇである、請求項１６〜１７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１９】
前記ビオチン酸マグネシウムを、経口投与する、請求項１６〜１８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２０】
有効量のビオチン酸マグネシウムを前記哺乳類に投与することを含む、脱毛を減少させる方法。
【請求項２１】
哺乳類の脱毛を同定することをさらに含み、前記同定することは、脱毛症またはストレス誘発性脱毛を検出する感度がよい試験を実施することを含む、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記同定することが、ストレス誘発性脱毛の診断を含む、請求項２０〜２１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２３】
投与する治療的に有効な量のビオチン酸マグネシウムが、１日当たり約１０μｇ〜約１，０００μｇである、請求項２０〜２２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２４】
前記ビオチン酸マグネシウムを、経口投与する、請求項２０〜２３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２５】
有効量のビオチン酸マグネシウムを哺乳類に投与することを含む、毛髪強度およびテクスチャを改善する方法。
【請求項２６】
異常な毛髪強度およびテクスチャを有する哺乳類を同定することをさらに含み、前記同定することが、頭皮生検を実施することを含む、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
前記同定することが、ビオチン欠乏症の診断を含む、請求項２５〜２６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２８】
投与する前記有効量のビオチン酸マグネシウムが、１日当たり約１０μｇ〜約１，０００μｇである、請求項２５〜２７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２９】
前記ビオチン酸マグネシウムを、経口投与する、請求項２５〜２８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３０】
有効量のビオチン酸マグネシウムを前記哺乳類に投与することを含む、爪強度およびテクスチャを改善する方法。
【請求項３１】
異常な爪強度およびテクスチャを有する哺乳類を同定することをさらに含み、前記同定することが、ビオチン欠乏症を検出する感度がよい試験を実施することを含む、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
前記同定することが、ビオチン欠乏症の診断を含む、請求項３０〜３１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３３】
投与する前記有効量のビオチン酸マグネシウムが、１日当たり約１０μｇ〜約１，０００μｇである、請求項３０〜３２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３４】
前記ビオチン酸マグネシウムを、経口投与する、請求項３０〜３３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３５】
ビオチン酸マグネシウムおよび薬学的に許容されるビヒクル、担体、または希釈剤から本質的になる経口調合物。
【請求項３６】
Ｄ−ビオチンを塩基性溶液に添加して、ビオチン酸ナトリウム溶液を製造する工程、
マグネシウム塩を前記ビオチン酸ナトリウム溶液に溶解する工程、
前記Ｄ−ビオチン酸マグネシウムを析出させる工程、
析出させた前記Ｄ−ビオチン酸マグネシウムを溶媒で洗浄する工程、および
洗浄した前記Ｄ−ビオチン酸マグネシウムを乾式ろ過する工程
を含む、ビオチン酸マグネシウムを製造する方法。
【請求項３７】
哺乳類のビオチン欠乏症を伴う疾患、障害、または状態を治療または防止するためのビオチン酸マグネシウムを含む組成物の使用。
【請求項３８】
哺乳類のビオチン欠乏症を伴う疾患、障害、または状態を治療または防止するために使用する薬剤を調製するためのビオチン酸マグネシウムを含む組成物の使用。
【請求項３９】
有効量のビオチン酸マグネシウムを哺乳類に投与することを含む、前記哺乳類のビオチンの健康濃度を維持する方法。
【請求項４０】
有効量のビオチン酸マグネシウムを哺乳類に投与することを含む、前記哺乳類のビオチンの最適濃度を維持する方法。
【請求項４１】
有効量のビオチン酸マグネシウムを哺乳類に投与することを含む、前記哺乳類のビオチンの最適濃度を増進する方法。
【請求項４２】
有効量のビオチン酸マグネシウムを投与することを含む、哺乳類のビオチンの健康濃度を増進する方法。
【請求項４３】
哺乳類のビオチン吸収を増加するために有効量のビオチン酸マグネシウムを前記哺乳類に投与することを含む、ビオチンの吸収を改善する方法。
【請求項４４】
カルボキシラーゼ活性を増加するために哺乳類に有効量のビオチン酸マグネシウムを投与することを含む、カルボキシラーゼ活性を増加する方法。
【請求項４５】
前記哺乳類のカルボキシラーゼ活性を増加することが、アセチル−ＣｏＡカルボキシラーゼＡＣＣ−１および／またはＡＣＣ−２、ピルビン酸カルボキシラーゼ（ＰＣ）、プロピオニル−ＣｏＡカルボキシラーゼ（ＰＣＣ）、またはメチルクロトニル−ＣｏＡカルボキシラーゼ（ＭＣＣ）、およびそれらの組合せの活性を増加することを含む、請求項４４に記載の方法。
【請求項４６】
細胞エネルギー生産を増加するために有効量のビオチン酸マグネシウムを哺乳類に投与する工程を含む、細胞エネルギー生産を増加する方法。
【請求項４７】
哺乳類のビオチン欠乏症を伴う疾患、障害、または状態の治療または防止に使用するための有効量のビオチン酸マグネシウムを含む組成物。
【発明の詳細な説明】
【発明の分野】
【０００１】
本出願は、ビオチン酸マグネシウム組成物および使用方法に関する。ここに開示した方法および組成物は、バイオアベイラブルなビオチンを哺乳類に提供し、ビオチン欠乏症の症状を治療または防止するために特に有用である。
【背景技術】
【０００２】
ビオチンは、ビタミンＨ、Ｃｏ酵素Ｒ、およびビタミンＢ７としても公知の必須水溶性ビタミンである。ビオチンは、脂肪酸生合成、糖新生、分枝鎖アミノ酸代謝、脂肪酸代謝、トリカルボン酸回路アナプレロティック反応、および多面性遺伝子、特に炭水化物代謝の遺伝子の調節に関わる５つの公知のカルボキシラーゼ用の重要な補因子である。ビオチンは、ケミカルアブストラクトサービス登録番号５８−８５−５および下記一般式を有する。
【０００３】
【化１】
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【０００４】
ビオチンは、種々の代謝反応で重要な役割を果たし、正常な哺乳類の成長、発達、および健康に不可欠である。例えば、研究では、結腸細胞栄養、ヒストン修飾、細胞増殖、ＤＮＡ修復、タンパク質の発現（インスリン受容体、グルコキナーゼ、特定のがん遺伝子、ホロカルボキシラーゼ合成酵素、およびナトリウム−マルチビタミントランスポーター（ｈＳＭＶＴ）を含む）、および抗体の製造を含む免疫機能、マクロファージ機能、およびＴおよびＢリンパ球の分化を含む、複数の細胞プロセスでのビオチンの役割が示唆されている。ビオチンは、糖新生における重要な酵素である肝臓のホスホエノールピルビン酸カルボキシキナーゼの抑制にも関与する。したがって、いくつかある作用の中で特に、発育遅滞、神経障害、および皮膚障害を含む深刻な臨床的異常が、ビオチン欠損の個体に生じる。
【０００５】
ビオチンは、哺乳類で合成されず、食物源および腸内細菌叢から供給されるが、自然のメカニズムは、十分な量のビオチンを供給するのに不十分である可能性があり、合成品による補給も不十分である可能性がある。ビオチンは、ナトリウム依存性ビタミントランスポーター（ＳＭＶＴ）および非特異的モノカルボキシレートトランスポーターにより消化管から吸収される。
【０００６】
妊娠時に、異常代謝のある対象で、抗痙攣剤を用いた長期治療中の対象で、非経口栄養を長期使用中の対象で、アルコール依存症者で、炎症性腸障害を有する対象で、ならびに脂漏性皮膚炎およびＬｅｎｉｅｒ病を有する対象で、ビオチン欠乏症がしばしば生じる。遺伝性障害、例えばビオチニダーゼ欠損症またはホロカルボキシラーゼ合成酵素欠損症は、ビオチン欠乏症になる可能性がある。
【０００７】
そのような欠損症は、通常、ビオチンの投与に応答性がある。ビオチンの１日許容量は、確立されていないが、乳児および成人で、それぞれ３５マイクログラム（μｇ）および１５０−３００μｇと見積もられている。５−１０ミリグラム（ｍｇ）／ｋｇ体重／日の薬理学的用量は、良好な忍容性を示し、一般に深刻でおよび／または遺伝子的に関連しているビオチン欠乏症を軽減する。最近の臨床試験では、３００ｍｇもの多さのビオチンの１日用量も、神経状態の障害、例えば進行性多発性硬化症の治療について評価されている。
【０００８】
しかし、対象に信頼性が高く着実な外因性ビオチンを提供する能力は、水（約２２ｍｇビオチン／１００ｍＬ）および他の薬学的に許容される溶媒での低い溶解度により大きく制限される。この低い溶解性は、低く、予測不可能なバイオアベイラビリティに対応し、このため自然食品および既存の補充レジメンによる着実で信頼性の高いビオチンの送達が困難に、時には不可能になる。例えば、ビオチンは、シクロデキストリンとともに投与され、少量のアンモニア水に溶解することができる（米国特許第５，８４０，８８１号）。ビオチンは、ラクトースまたはアミノ酸とともに、またはアルカノールアミン塩として（米国特許第４，２７７，４８８号；第４，７２５，４２７号および第５，５５０，２４９号）、またはエステルまたはアミドビオチンプロドラッグとして（米国特許出願公開第２０１４／００１１２５５号）、組成物に供することもできる。
【０００９】
したがって、治療量のビオチンの着実で信頼性の高い送達を促進するための、溶解度およびバイオアベイラビリティを高めたビオチン組成物に対して、長年にわたり要求が満たされていない。
【発明の概要】
【００１０】
いくつかの態様は、水および他の水溶液中のＤ−ビオチンの溶解度を高めるのに有用である、栄養および治療組成物に関する。そのような栄養および治療組成物は、天然に存在せず、天然に存在するビオチンの組成物と大きく異なる。ここに開示した方法は、Ｄ−ビオチンをＤ−ビオチン酸マグネシウム組成物として提供することによりＤ−ビオチンの水溶解度を高めることを含む。Ｄ−ビオチンのバイオアベイラビリティを高める方法も開示しており、Ｄ−ビオチン酸マグネシウム組成物の安全で有効な量を対象に投与することを含むであろう。さらに、温血動物のＤ−ビオチンのバイオアベイラビリティを高める方法を開示している。そのような方法は、治療的に有効な量の、Ｄ−ビオチン酸マグネシウム組成物を含む組成物を投与することを含むであろう。方法は、Ｄ−ビオチンのバイオアベイラビリティを高めるための、栄養および／または治療用の水溶性Ｄ−ビオチン酸マグネシウム組成物を提供することを含むであろう。組成物は、例えば、哺乳類で有用である。いくつかの態様は、ビオチン酸マグネシウムを含む組成物を含み、この場合、組成物は、全組成物の重量と比較して重量比で約０．８％以下のナトリウムを含む。いくつかの態様は、ビオチン酸マグネシウムを含む組成物を含み、この場合、組成物は、ビオチン酸マグネシウムの重量と比較して重量比で約０．８％以下のナトリウムを含む。いくつかの態様は、ビオチン酸マグネシウムを含む組成物を提供し、この場合、ビオチン酸マグネシウムは、少なくとも約１０ｇ／水１リットルの溶解度を有する。いくつかの態様では、ビオチン酸マグネシウム組成物の溶解度は、約２２ｍｇ／水１００ｍＬ〜約１，０００ｍｇ／水１００ｍＬであろう。いくつかの態様では、ビオチン酸マグネシウム組成物の溶解度は、約５０ｍｇ／水１００ｍＬ〜約１，０００ｍｇ／水１００ｍであろう。いくつかの態様では、ビオチン酸マグネシウム組成物の溶解度は、約７５ｍｇ／水１００ｍＬ〜約１，０００ｍｇ／水１００ｍＬであろう。ここに記載した組成物は、Ｄ−ビオチンと比較して吸収を改善することができる。ここに記載した組成物のいくつかの態様は、組成物中に任意のマグネシウムを含有しなくてもよい。ここに記載した組成物のいくつかの態様は、任意のビオチン、より詳細には、任意のＤ−ビオチンを含有しなくてもよい。
【００１１】
いくつかの側面では、ここに開示した組成物は、ビオチン欠乏症を治療または防止するために使用することができる。例えば、組成物は、１つ以上の他の薬物の投与により引き起こされる消失したビオチン濃度を回復するために投与することができる。組成物は、疾患、例えば多発性硬化症、ならびにミエリン鞘の欠陥を伴うおよび／または脱髄を伴う神経損傷を伴う他の疾患を治療または防止するために使用することもできる。本発明の他の特徴、利点、および態様は、以下の記述、例、および添付の請求項から当業者には明らかであろう。
【００１２】
いくつかの態様は、有効量のビオチン酸マグネシウムおよび薬学的に許容されるビヒクル、担体、または希釈剤を含む組成物を提供する。いくつかの態様では、組成物は、固体組成物である。いくつかの態様では、組成物は、徐放性マトリックスを含む。いくつかの態様では、組成物は、腸溶性である。いくつかの態様では、組成物は、約１０μｇ〜約１，０００μｇのビオチン酸マグネシウムを含む。例えば、いくつかの態様は、約５０μｇまたは約１００μｇのビオチン酸マグネシウムを含む。いくつかの態様は、約３００μｇのビオチン酸マグネシウムを含む。いくつかの態様は、約２００μｇ〜約４００μｇのビオチン酸マグネシウムを含む。いくつかの態様は、約５００μｇまたは約７５０μｇのビオチン酸マグネシウムを含む。いくつかの態様は、約２５０μｇ〜約３５０μｇ、約２７５μｇ〜約３２５μｇ、約３００μｇ〜約４００μｇ、約４００μｇ〜５００μｇ、約４５０μｇ〜約５５０μｇ、約４００μｇ〜６００μｇ、約６００μｇ〜約８００μｇ、約６５０μｇ〜約８５０μｇ、約７００μｇ〜約１，０００μｇ、約２５０μｇ〜約１，０００μｇ、約８００μｇ〜約１，１００μｇ、約９００μｇ〜約１，０００μｇ、約９５０μｇ〜約１，０５０μｇ、およびその範囲のビオチン酸マグネシウムを含であろう。いくつかの態様は、約２５０ｍｇ〜約３５０ｍｇ、約２７５ｍｇ〜約３２５ｍｇ、約３００ｍｇ〜約４００ｍｇ、約４００ｍｇ〜５００ｍｇ、約４５０ｍｇ〜約５５０ｍｇ、約４００ｍｇ〜６００ｍｇ、約６００ｍｇ〜約８００ｍｇ、約６５０ｍｇ〜約８５０ｍｇ、約７００ｍｇ〜約１，０００ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約１，０００ｍｇ、約８００ｍｇ〜約１，１００ｍｇ、約９００ｍｇ〜約１，０００ｍｇ、約９５０ｍｇ〜約１，０５０ｍｇ、約０．５ｍｇ〜１０，０００ｍｇ、約２００〜約１０，０００ｍｇ、約３００ｍｇ〜約５，０００ｍｇ、約３００〜約１０，０００ｍｇ、約１，０００ｍｇ〜約１０，０００ｍｇ、約５，０００〜約１０，０００ｍｇ、約１，０００ｍｇ〜約５，０００ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約３，０００ｍｇ、約５００ｍｇ〜約２，５００ｍｇ、約７，０００〜約１０，０００ｍｇおよびその範囲のビオチン酸マグネシウムを含むであろう。いくつかの態様では、組成物は、少なくとも約２００μｇ、３００μｇ、４００μｇ、５００μｇ、１，０００μｇ、１０ｍｇ、１００ｍｇ、３００ｍｇ、５００ｍｇ、７００ｍｇ、１，０００ｍｇ、３，０００ｍｇ、５，０００ｍｇ、７，０００ｍｇ、または１０，０００ｍｇのビオチン酸マグネシウム、ならびにその範囲および限界を含むであろう。
【００１３】
いくつかの態様は、哺乳類のビオチン欠乏症を伴う疾患、障害、または状態を治療または防止する方法を提供する。そのような哺乳類は、ビオチン欠乏症を有するか、または発症するリスクがあることが公知である場合がある。疾患、障害、または状態を治療または防止する方法の態様は、哺乳類のビオチン欠乏症を伴う疾患、障害、または状態を治療または防止するのに有効な量のビオチン酸マグネシウムを投与することを含むであろう。いくつかの態様では、疾患、障害、または状態は、ビオチニダーゼ欠損症、マルチプルカルボキシラーゼ欠損症、およびホロカルボキシラーゼ合成酵素欠損症、脆弱毛、過剰な脱毛、脱毛症、貧血、１つ以上の局所真菌感染症、脂漏性皮膚炎、幻覚、嗜眠、食欲不振、うつ病、筋肉痛、感覚異常、過度の疲労、傾眠、長期抗痙攣薬療法、完全非経口栄養の長期使用、栄養不良、長期抗生物質療法、緊張低下、妊娠、短腸症候群、ケトン食、アルコールの過剰摂取、喫煙、嚢胞性線維症、または前記の組合せからなる群から選択される。いくつかの態様では、投与するビオチン酸マグネシウムの量は１日当たり約１０μｇ〜約１，０００μｇである。いくつかの態様では、ビオチン酸マグネシウムを経口投与する。
【００１４】
いくつかの態様は、哺乳類の異常な肌のきめを同定すること、および哺乳類に治療的に有効な量のビオチン酸マグネシウムを投与することを含む、肌のきめを改善する方法を提供する。いくつかの態様は、肌のきめを改善するために治療的に有効な量のビオチン酸マグネシウムを哺乳類に投与することを含む、肌のきめを改善する方法を提供する。いくつかの態様では、同定することは、以下のもの：アレルギー反応、ストレス誘発性発疹、湿疹、尋常性ざ瘡、酒さ性ざ瘡、じんま疹、脂漏性皮膚炎、および乾癬の１つを検出する感度がよい試験を実施することを含むであろう。いくつかの態様では、試験は、１つ以上のアレルギー反応、ストレス誘発性発疹、湿疹、尋常性ざ瘡、酒さ性ざ瘡、じんま疹、脂漏性皮膚炎、および乾癬の診断を含む。
【００１５】
いくつかの態様では、投与するビオチン酸マグネシウムの量は、１日当たり約１０μｇ〜約１，０００μｇである。いくつかの態様では、ビオチン酸マグネシウムを、経口投与する。
【００１６】
いくつかの態様は、哺乳類の神経の脱髄を伴う疾患、障害、または状態を治療または防止する方法を提供する。そのような哺乳類は、神経の脱髄を有するか、または発症するリスクがあることが公知である場合がある。哺乳類の神経の脱髄を伴う疾患、障害、または状態を治療または防止する方法は、哺乳類の神経の脱髄を伴う疾患、障害、または状態を治療または防止するのに有効な量のビオチン酸マグネシウムを投与することを含むであろう。いくつかの態様は、哺乳類のビオチンの健康濃度を維持する方法を提供し、哺乳類に有効量のビオチン酸マグネシウムを投与することを含む。いくつかの態様は、哺乳類のビチオンの最適濃度を維持する方法を提供し、哺乳類に有効量のビオチン酸マグネシウムを投与することを含む。いくつかの態様は、哺乳類のビオチンの最適濃度を増進する方法を提供し、哺乳類に有効量のビオチン酸マグネシウムを投与することを含む。いくつかの態様は、有効量のビオチン酸マグネシウムを投与することを含む、哺乳類のビオチンの健康濃度を増進する方法を提供する。いくつかの態様は、有効量のビオチン酸マグネシウムを投与することを含む、哺乳類のビオチンのバイオアベイラビリティを増加する方法を提供する。
【００１７】
いくつかの態様では、疾患、障害、または状態は、脱髄性髄鞘脱落疾患、脱髄性白質ジストロフィー疾患、多発性硬化症、神経損傷、デビック病、脊髄癆、橋中心髄鞘崩壊、進行性多巣性白質脳症、ギラン・バレー症候群、シャルコー・マリー・トゥース病、慢性炎症性脱髄性多発性神経障害、銅欠乏症、および進行性炎症性神経障害、または前記の組合せから選択される。
【００１８】
いくつかの態様では、投与するビオチン酸マグネシウムの量は、１日当たり約１０μｇ〜約１，０００μｇである。いくつかの態様では、ビオチン酸マグネシウムを、経口投与する。
【００１９】
いくつかの態様は、治療的に有効な量のビオチン酸マグネシウムを哺乳類に投与することを含む、脱毛を減少する方法を提供する。脱毛を減少するいくつかの態様は、哺乳類の脱毛を同定することを含むであろう。いくつかの態様では、同定することは、脱毛症またはストレス誘発性脱毛を検出する感度がよい試験を実施することを含む。いくつかの態様では、試験を行うことは、ストレス誘発性脱毛の診断を含む。
【００２０】
いくつかの態様では、投与するビオチン酸マグネシウムの量は、１日当たり約１０μｇ〜約１，０００μｇである。いくつかの態様では、ビオチン酸マグネシウムを、経口投与する。
【００２１】
いくつかの態様は、治療的に有効な量のビオチン酸マグネシウムを哺乳類に投与することを含む、毛髪強度およびテクスチャを改善する方法を提供する。いくつかの態様では、毛髪強度および／またはテクスチャを改善する方法は、異常な毛髪強度および／またはテクスチャを有する哺乳類を同定することを含むであろう。異常な毛髪強度およびテクスチャは、これに限定されないが、薄毛、脆弱毛、ぼさぼさの髪、弱い髪などにより示唆されるかもしれず、異常な毛髪強度を有する毛髪のそのような特徴は、容易に想定されることになり、本開示を考慮して当業者により確かめられる。
【００２２】
いくつかの態様では、脱毛を同定することおよび／または異常な毛髪強度および／またはテクスチャを有する哺乳類を同定することは、頭皮生検を実施することを含むであろう。いくつかの態様では、同定することは、ビオチン欠乏症の診断を含むであろう。いくつかの態様では、投与されたビオチン酸マグネシウムの量は、１日当たり約１０μｇ〜約１，０００μｇである場合がある。いくつかの態様では、ビオチン酸マグネシウムを、経口投与する。
【００２３】
いくつかの態様は、哺乳類に治療的に有効な量のビオチン酸マグネシウムを投与することを含む、爪強度およびテクスチャを改善する方法を提供する。爪強度を改善する方法を提供するいくつかの態様は、異常な爪強度および／またはテクスチャを有する哺乳類を同定することを含むであろう。いくつかの態様では、異常な爪強度および／またはテクスチャを有する哺乳類を同定することは、ビオチン欠乏症を検出する感度がよい試験を実施することを含むであろう。いくつかの態様では、試験は、ビオチン欠乏症の診断を含む。いくつかの態様では、投与するビオチン酸マグネシウムの量は、１日当たり約１０μｇ〜約１，０００μｇである。いくつかの態様では、ビオチン酸マグネシウムを、経口投与する。異常な爪強度および／またはテクスチャの示唆の例は、これに限定されるものではないが、爪成長能力の低下、緩やかな爪の成長、黄色様爪、弱い爪、ひび割れし、および／または容易に割れる爪などを含んでいてもよく、そのような異常な爪強度および／またはテクスチャの示唆は、本開示を考慮して当業者により容易に確かめられ、想定されることになる。特定の態様は、馬爪強度および／または耐久性を改善する方法を提供し、いくつかの態様は、馬爪負傷を治療するための方法を提供するであろう。
【００２４】
いくつかの態様は、Ｄ−ビオチン酸マグネシウムを製造する方法を含む。方法は、塩基性溶液にＤ−ビオチンを添加することを含むであろう。塩基性溶液は、１Ｎ  ＮａＯＨであってもよい。方法は、ビオチン酸ナトリウム溶液にマグネシウム塩を溶解することも含むであろう。マグネシウム塩は、ＭｇＣｌ２であってもよい。Ｄ−ビオチン酸マグネシウムは、析出させてもよい。いくつかの側面では、析出させるためにアセトンが添加される。析出物を溶媒で洗浄し、乾式ろ過し、単離してもよい。いくつかの態様は、Ｄ−ビオチンを塩基性溶液に添加して、ビオチン酸ナトリウム溶液を製造する工程、マグネシウム塩をビオチン酸ナトリウム溶液に溶解する工程、Ｄ−ビオチン酸マグネシウムを析出させる工程、析出させたＤ−ビオチン酸マグネシウムを溶媒で洗浄する工程、および洗浄したＤ−ビオチン酸マグネシウムを乾式ろ過する工程を含む、ビオチン酸マグネシウムを製造する方法を提供する。
【００２５】
いくつかの態様は、ビオチンの吸収を増加する方法を提供し、そのような方法は、哺乳類のビオチン吸収を増加するために有効量のビオチン酸マグネシウムを哺乳類に投与することを含むであろう。いくつかの態様は、カルボキシラーゼ活性を増加する方法を提供し、そのような方法は、カルボキシラーゼ活性を増加するために有効量のビオチン酸マグネシウムを哺乳類に投与することを含むであろう。例えば、制限なく、カルボキシラーゼ活性を増加する方法は、カルボキシラーゼ活性を増加することを含んでいてもよく、この場合、カルボキシラーゼ活性は、アセチル−ＣｏＡカルボキシラーゼＡＣＣ−１および／またはＡＣＣ−２、ピルビン酸カルボキシラーゼ（ＰＣ）、プロピオニル−ＣｏＡカルボキシラーゼ（ＰＣＣ）、またはメチルクロトニル−ＣｏＡカルボキシラーゼ（ＭＣＣ）、およびそれらの組合せの活性から選択される。特定の態様は、細胞エネルギー生産を増加する方法を含み、細胞エネルギー生産を増加するために有効量のビオチン酸マグネシウムを哺乳類に投与する工程を含む。ここに記載した組成物の態様は、哺乳類のビオチン吸収、カルボキシラーゼ活性、または細胞エネルギー生産、およびそれらの組合せを増加するために使用してもよい。
【図面の簡単な説明】
【００２６】
【図１】図１は、Ｄ−ビオチンの１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す。
【図２】図２は、例９に記載した方法で調製したＤ−ビオチン酸マグネシウムの１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す。
【図３】図３は、例８に記載した方法で調製したＤ−ビオチン酸マグネシウムの１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す。
【図４−１】図４は、ビオチンと、ここに開示したＤ−ビオチン酸マグネシウムの投与の結果を示す。図４Ａおよび４Ｂは、それぞれ、意外にも改善したアセチル−ＣｏＡカルボキシラーゼＡＣＣ−１とＡＣＣ−２の活性を示す。図４Ｃは、意外にも改善したピルビン酸カルボキシラーゼ（ＰＣ）の活性を示す。
【図４−２】図４は、ビオチンと、ここに開示したＤ−ビオチン酸マグネシウムの投与の結果を示す。図４Ｄは、意外にも改善したプロピオニル−ＣｏＡカルボキシラーゼ（ＰＣＣ）の活性を示す。図４Ｅは、意外にも改善したメチルクロトニル−ＣｏＡカルボキシラーゼ（ＭＣＣ）の活性を示す。
【図５】図５は、ビオチン欠乏細胞培養でビオチン酸マグネシウムを投与する場合と比較して、Ｄ−ビオチンを投与した結果を示す。
【発明の詳細な説明】
【００２７】
ここに示した記述で使用する用語は、ここに記載したある特定の態様の詳細な説明に関して単に利用されているので、任意の制限されたまたは限定的な方法で解釈されるものではない。さらに、ここに記載した態様は、その望ましい属性に専ら原因がある、または、ここに記載した態様を実践するのに重要である、１つではなくいくつかの新規な特徴を含むであろう。
【００２８】
ここでは、「同定すること」は、例えば、特定の対象が一定の固有性または特性を有することを確立するために、潜在的な対象の集団から対象を検出または選択することを指す。「同定すること」は、例えば、自己同定、自己診断、および医療関係者による診断を含むであろう。
【００２９】
ここでは、「治療する」、「治療」、または「治療すること」は、予防および／または治療目的の組成物を投与することまたは提供することを指す。
【００３０】
ここでは、「予防処置」、「予防する」、または「予防すること」という用語は、疾患の症状または状態をまだ示していないが、特定の疾患または状態を受けやすく、そうでない場合はそのリスクがある対象を治療することを指すことがあり、それによって、患者が疾患または状態を発症することになる可能性を治療が低減する。「障害」は、ここに記載した組成物を用いる治療から利益を得ることになる任意の状態である。
【００３１】
以下の請求項および本開示全体で使用するように、表現「から本質的になる」は、表現の後に列挙される任意の要素を含むことを意味し、列挙された要素のために本開示で指定される活性または作用を妨げず、または寄与する他の要素に限定される。したがって、表現「から本質的になる」は、列挙された要素が必要、または必須であるが、他の要素は任意選択であり、列挙された要素の活性または作用に影響を及ぼすか及ぼさないかに依存して、存在してもしなくてもよいことを示す。例えば、特定の疾患または障害をなくそうと努める上で活性であると公知である、特定の疾患の治療または障害の治療用の「ビオチン酸マグネシウムから本質的になる」組成物の使用は、他の成分を除外することになる。
【００３２】
ここでは、組成物が化合物を「実質的に」含むことは、組成物が約８０重量％超、より好ましくは約９０重量％超、さらにより好ましくは約９５重量％超、および最も好ましくは約９８重量％超の化合物を含むことを意味する。
【００３３】
用語「薬剤調合物」、「調合物」、「組成物」などは、有効成分の生物活性が有効であり得るような形態である調製物を指すことがあり、したがって、食事および／または栄養のサプリメントの使用とともに治療用の使用のために対象に投与してもよい。これらの用語の意味は、使われる文脈に基づいて、当業者に明らかになるであろう。
【００３４】
ここでは「治療的に有効な量」は、所望の治療効果を提供するためにここに開示した態様での使用のための、非毒性であるが十分な量の化合物有効成分、またはそれを含む組成物をその意味に含む。同様に、ここに用いた「に有効な量」または「有効量」は、所望の効果を提供するための、非毒性であるが、十分な量の化合物有効成分、またはそれを含む組成物をその意味に含む。ここに開示した、求められる有効成分の正確な量は、因子、例えば、治療される種、対象の年齢および一般状態、治療される状態の重症度、投与する特定の薬剤、対象の重量、および投与の様式などに依存して、対象により変化することになる。したがって、正確な「有効量」を特定することはいつも可能なわけではないことがある。しかし、どのような場合にも、適切な「有効量」は、慣用的方法のみを使用して当業者により決定することができる。いくつかの側面では、治療的に有効な量は、投与レジメンを含むであろう。例えば、治療的に有効な量は、連続１４日間毎日経口摂取されるビオチン酸マグネシウム約１ｍｇを含むであろう。いくつかの側面では、治療的に有効な量は、連続３０日間毎日経口摂取されるビオチン酸マグネシウム約１ｍｇを含むであろう。ビオチン酸マグネシウムを含む組成物は、例えば、ビオチン酸マグネシウム０．１−１０グラムを含むであろう。
【００３５】
さらに、組成物の適切な投薬量は、例えば、治療すべき状態、状態の重症度および経過、組成物が予防または治療目的で投与されるかどうか、以前の療法、患者の病歴および組成物への応答、使用する組成物の種類、および主治医の裁量に依存することがある。組成物を、一度にまたは一連の治療を通して患者に適切に投与することができ、また、診断後いつでも患者に投与することができる。組成物を、唯一の治療として、または当該の状態の治療に有用な他の薬物または療法とともに投与することができる。
【００３６】
例として、ここに開示した化合物の「治療的に有効な量」および／または「有効量」は、例えば、化合物の０．１μｇ／ｋｇ、０．５μｇ／ｋｇ、１μｇ／ｋｇ、１．５μｇ／ｋｇ、２．０μｇ／ｋｇ、２．５μｇ／ｋｇ、３．０μｇ／ｋｇ、３．５μｇ／ｋｇ、４．０μｇ／ｋｇ、４．５μｇ／ｋｇ、５．０μｇ／ｋｇ、１０μｇ／ｋｇ、１５μｇ／ｋｇ、２０μｇ／ｋｇ、２５μｇ／ｋｇ、３０μｇ／ｋｇ、３５μｇ／ｋｇ、４０μｇ／ｋｇ、４５μｇ／ｋｇ、５０μｇ／ｋｇ、５５μｇ／ｋｇ、６０μｇ／ｋｇ、６５μｇ／ｋｇ、７０μｇ／ｋｇ、７５μｇ／ｋｇ、８０μｇ／ｋｇ、８５μｇ／ｋｇ、９０μｇ／ｋｇ、９５μｇ／ｋｇ、１００μｇ／ｋｇ、１５０μｇ／ｋｇ、２００μｇ／ｋｇ、２５０μｇ／ｋｇ、３００μｇ／ｋｇ、３５０μｇ／ｋｇ、４００μｇ／ｋｇ、４５０μｇ／ｋｇ、５００μｇ／ｋｇ、５５０μｇ／ｋｇ、６００μｇ／ｋｇ、６５０μｇ／ｋｇ、７００μｇ／ｋｇ、７５０μｇ／ｋｇ、８０μｇ／ｋｇ０、８５０μｇ／ｋｇ、９００μｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、１．５ｍｇ．ｋｇ、２．０ｍｇ／ｋｇ、２．５ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、３．５ｍｇ／ｋｇ、４．０ｍｇ／ｋｇ、４．５ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、５．５ｍｇ／ｋｇ、６ｍｇ／ｋｇ、６．５ｍｇ／ｋｇ、７ｍｇ／ｋｇ、７．５ｍｇ／ｋｇ、８ｍｇ／ｋｇ、８．５ｍｇ／ｋｇ、９ｍｇ／ｋｇ、９．５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ１０．５ｍｇ／ｋｇ、１１ｍｇ／ｋｇ、１１．５ｍｇ／ｋｇ、１２ｍｇ／ｋｇ、１２．５ｍｇ／ｋｇ、１３ｍｇ／ｋｇ、１３．５ｍｇ／ｋｇ、１４ｍｇ／ｋｇ、１４．５ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ、１６ｍｇ／ｋｇ、１７ｍｇ／ｋｇ、１８ｍｇ／ｋｇ、１９ｍｇ／ｋｇ、２０ｍｇ／ｋｇ、２１ｍｇ／ｋｇ、２２ｍｇ／ｋｇ、２３ｍｇ／ｋｇ、２４ｍｇ／ｋｇ、２５ｍｇ／ｋｇ、３０ｍｇ／ｋｇ、３５ｍｇ／ｋｇ、４０ｍｇ／ｋｇ、４５ｍｇ／ｋｇ、５０ｍｇ／ｋｇ、５５ｍｇ／ｋｇ、６０ｍｇ／ｋｇ、６５ｍｇ／ｋｇ、７０ｍｇ／ｋｇ、またはそれ以上、または化合物の前記先行する量の任意の２つの間の任意の分数または整数でありうる。有効量は、ここに議論したあらゆる範囲および量を含むであろう。
【００３７】
したがって、いくつかの態様では、ここに開示した組成物中の化合物の用量は、好ましくは１日当たり約１０μｇ〜約１０ｇとすることができる。例えば、錯体の量は、ここに開示した１０μｇ、１５μｇ、２０μｇ、２５μｇ、３０μｇ、３５μｇ、４０μｇ、４５μｇ、５０μｇ、５５μｇ、６０μｇ、６５μｇ、７０μｇ、７５μｇ、８０μｇ、８５μｇ、９０μｇ、９５μｇ、１００μｇ、１２５μｇ、１５０μｇ、１７５μｇ、２００μｇ、２２５μｇ、２５０μｇ、２７５μｇ、３００μｇ、３２５μｇ、３５０μｇ、３７５μｇ、４００μｇ、４２５μｇ、４５０μｇ、４７５μｇ、５００μｇ、５２５μｇ、５７５μｇ、６００μｇ、６２５μｇ、６５０μｇ、６７５μｇ、７００μｇ、７２５μｇ、７５０μｇ、７７５μｇ、８００μｇ、８２５μｇ、８５０μｇ、８７５μｇ、９００μｇ、９２５μｇ、９５０μｇ、９７５μｇ、１０００μｇ、１．２５ｇ、１．５ｇ、１．７５ｇ、２．０ｇ、２．２５ｇ、２．５ｇ、２．７５ｇ、３．０ｇ、３．２５ｇ、３．５ｇ、３．５ｇ、３．７５ｇ、４．０ｇ、４．２５ｇ、４．５ｇ、４．７５ｇ、５．０ｇ、５．２５ｇ、５．５ｇ、５．７５ｇ、６．０ｇ、６．２５ｇ、６．５ｇ、６．７５ｇ、７．０ｇ、７．２５ｇ、７．５ｇ、７．７５ｇ、８．０ｇ、８．２５ｇ、８．５ｇ、８．７５ｇ、９．０ｇ、８．２５ｇ、９．５ｇ、９．７５ｇ、１０ｇ、またはそれ以上、または前記値の任意の２つ間の任意の範囲または量、および他の任意の範囲または量とすることができる。上記で列挙した例示的な治療的に有効な量は、いくつかの態様では、所望の治療効果を達成するためにここのどこかで記載する方法で毎時、例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３時間毎、もしくはその間の任意の間隔、または毎日、２日間毎、３日間毎、４日間毎、５日間毎、６日間毎、１週間毎、８日間毎、９日間毎、１０日間毎、２週間毎、１カ月毎、または頻繁に投与することができる。
【００３８】
ここに記載したいくつかの態様は、ビオチンの「健康濃度」および／または「最適濃度」を指す。いくつかの態様では、これは、具体的には、栄養または食事のサプリメント（互換的に使用することができる）としてのＤ−ビオチン酸塩の投与を指し、この投与は、自然食品または天然食品を通して実現することができない哺乳類のビチオンの増加を実現する。例えば、制限なしで、ここに記載したＤ−ビオチン酸塩の投与により、ビオチン濃度が減少した哺乳類が自然食品を通して、または天然食品の摂取を通して実現することができない、最適または健康濃度にまで復帰することが可能になるであろう。いくつかの態様では、ここに記載したＤ−ビオチン酸塩の投与は、対象が、状態、例えば、妊娠から生じるビオチン濃度が消失した場合に、哺乳類のビオチン濃度を健康または最適濃度へと回復することができる。ここに記載したように、態様は、哺乳類のビオチン欠乏症を克服することができる非天然の補給を提供する。いくつかの態様では、天然資源からのビオチンのバイオアベイラビリティと比較して、ここに記載したＤ−ビオチン酸塩の投与は、哺乳類のビオチンのバイオアベイラビリティを増加することができる。
【００３９】
本開示は、ビオチンの水溶解度を高めるのに有用な栄養および治療組成物、およびその使用方法を含む。いくつかの態様は、ビオチンの固形投与形態を提供する。いくつかの態様は、ビオチンの水溶液を提供する。いくつかの態様は、ビオチンをビオチン酸マグネシウムに変換することを含む、ビオチンの水溶解度を増加する方法を提供する。栄養サプリメントとしてビオチン酸塩を含むここに記載した態様は、ビオチン酸塩が非天然の形態で存在する、すなわち、天然に存在するものと異なるサプリメント（例えば、錠剤または粉末）で提供され、または栄養サプリメントが、サプリメントを用いない食事を通して実現することができない非天然の補給を生じることを意味し得る。
【００４０】
用語「ビオチン」は、Ｄ−ビオチン、必須水溶性ビタミンを意味し、これは、ビタミンＨ、Ｃｏ酵素Ｒ、またはビタミンＢ７としても公知である。Ｄ−ビオチンは、ケミカルアブストラクトサービス登録番号５８−８５−５および下記一般式を有する。
【００４１】
【化２】
2019526638.tif 000004
【００４２】
ここでは、「ビオチン酸マグネシウム」という用語は、ヘミビオチン酸マグネシウムを含めて、Ｄ−ビオチンのマグネシウム塩を指す。Ｄ−ビオチン酸マグネシウムは、カルボン酸Ｄ−ビオチンのマグネシウム塩であり、天然には存在しない。いくつかの態様では、Ｄ−ビオチン酸マグネシウムは、明確な組成、分子式Ｍｇ（Ｃ１０Ｈ１５Ｎ２Ｏ３Ｓ）２および下記一般式を有する、安定で、非吸湿性で、オフホワイト色の粉末である。
【００４３】
【化３】
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【００４４】
いくつかの態様は、結晶形、結晶多形、特定のかさ密度またはタップ密度を有する固体形態、および特定の粒径を有する固体形態の、生理学的に相溶性のビオチン酸マグネシウム水和物を提供する。いくつかの態様は、これに限定されないが、オイドラギット、微結晶性セルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレートなどを含み、その放出および／またはバイオアベイラビリティを変更することを意図した薬学的に許容される材料で塗布された組成を提供する。
【００４５】
ここでは、「マグネシウム」という用語は、マグネシウムイオン、Ｍｇ２＋を指す。
【００４６】
ここでは、「薬学的に許容される溶媒」という用語は、水、注射用の水、生理学的に相溶性である水性緩衝溶液、または生理学的に相溶性である有機溶媒を含有する水溶液を指すことがある。薬学的に許容される溶媒の非包括的リストは、米国保健福祉省、食品医薬品局、「Ｇｕｉｄａｎｃｅ  ｆｏｒ  Ｉｎｄｕｓｔｒｙ：Ｑ３Ｃ  Ｉｍｐｕｒｉｔｉｅｓ：Ｒｅｓｉｄｕａｌ  Ｓｏｌｖｅｎｔｓ」、１９９７年１２月版または最新版に示されている。
【００４７】
ここでは、「バイオアベイラビリティ」という用語は、腸で吸収され、最終的に対象の組織および細胞の生物活性用に利用できる物質の量を指す。
【００４８】
ここでは、「バイオアベイラビリティを高めること」という用語などを、ここでは、組成物を哺乳類に投与後に腸から吸収され、または組織および細胞により吸収され、天然に存在しないＤ−ビオチンの量を高める所望の薬理学的および／または生理的効果を得ることを指すのに使用する。この効果により、治療剤の不足により引き起こされる、またはそれに関連する有害症状または状態の発生、リスク、または重症化を防止すること、または部分的に防止することに関して、予防的であってもよい。
【００４９】
ここでは、「防止すること」、「治療すること」、「治療」という用語などを、所望の薬理学的および生理的効果を得ることを一般に指すようにここで使用し、これらの用語を使用する文脈に基づき当業者に明らかとなる栄養または栄養補助食品効果、範囲および意味を指すこともある。効果は、疾患、症状またはその状態を防止することまたは部分的に防止することに関して予防的であってもよく、および／または疾患、症状、状態または疾患に起因する副作用の部分的または完全な治癒に関して治療的であってもよい。ここでは、用語「治療」は、哺乳類、特にヒトの疾患の任意の治療を含み、（ａ）疾患を有するとまだ診断されていないが、疾患にかかる可能性のある対象に疾患が生じるのを防止すること、（ｂ）疾患を抑制すること、もしくはその発症を阻止すること、または（ｃ）疾患を軽減し、疾患および／またはその症状、状態、および併存症を退縮させることを含む。用語「最適な」または「健康な」などは、哺乳類のビオチンの生理的量を指すのに使用することがあり、この場合、ここに記載した組成物の投与は、Ｄ−ビオチン濃度の減少を伴う疾患または疾患の症状を有さない可能性がある哺乳類に投与することがあり、ここに記載した他の生理的結果とともにＤ−ビオチンの健康または最適量を維持するために投与することもある。
【００５０】
ここでは、「治療的に有効な」または「有効な」という用語には、ビオチン欠乏症を伴う悪影響を防止および治療するのに必要なＤ−ビオチンの量をもたらす目標を達成することになるＤ−ビオチン酸マグネシウム組成物の量に限定する意図がある。いくつかの側面では、「有効な」量は、Ｄ−ビオチンの健康量を維持する、またはＤ−ビオチンの最適量を維持するのに有効である量であろう。いくつかの態様では、ここに記載したＤ−ビオチン濃度または他の生物学的側面に影響を及ぼす疾患または他の病弊の効果を経験していない哺乳類に「有効な」量を投与することがあり、「有効な」量は、自然食品または他の補充レジメンにより達成できないようなカルボキシラーゼ活性の増加および／または細胞エネルギー生産の増加（例えば、細胞ミトコンドリア活性の向上）を達成する量であろう。Ｄ−ビオチン酸マグネシウム組成物の量は、協調して投与される同じ単位用量の一部として、または異なる単位用量として対象に経口投与することができる。さらに、Ｄ−ビオチン酸マグネシウム組成物の前記量を、この治療を必要とする対象のバイオアベイラビリティを確実にする必要がある場合、協調して異なる投与の経路により投与してもよい。例として、協調した投与は、有効量のＤ−ビオチン酸マグネシウム組成物の一時点での経口投与、およびＤ−有効量のビオチン酸マグネシウムの経口、経皮、または静脈内投与による、最初の有効量の前記組成物の投与から７２時間以内の別の時点での投与を含むであろう。
【００５１】
ここでは、「賦形剤材料」という用語は、有効成分ではない調合物、すなわち、関連する生物活性を有しない調合物の一部である任意の化合物を指し、これは、例として、化学分解から有効成分を保護すること、錠剤またはカプレットが形成される装置からの放出を促進することなどを含め、投与形態に特定の特性を与えるために調合物に添加する。
【００５２】
本開示の目的では、温血動物は、これらに限定されないが、哺乳類および鳥類を含む動物界の一員である。ここに記載したある態様では、哺乳類は、馬であってもよい。本出願の最も好ましい哺乳類は、ヒトである。
【００５３】
より簡潔に記載するために、ここに示した定量的表現のいくつかは、用語「約」では修正されない。「約」という用語が明瞭に使用されるかどうかに関わらず、ここに示したあらゆる量が、実際の所定値を指すことを意味し、また、そのような所定値の実験条件および／または測定条件による近似を含めて、当業者により合理的に推測されることになるそのような所定値の近似を指すことも意味することを理解されたい。
【００５４】
調製方法のモニタリングを可能にし、最終製品の品質および純度要件を満たすために、ビオチン酸マグネシウムの調製用の方法の例は、ビオチンの溶液とマグネシウム化合物の溶液との反応を含む。表１に示されるように、各溶媒でのビオチンの溶解度が大きく制限されて、大容量の溶媒が必要になるので、一般の溶媒はどれもビオチンの溶液の調製に有用ではなかった。ＳｕらによるＪ．Ｃｈｅｍ．Ｅｎｇ．Ｄａｔａ，５９：３８９４−３８９９（２０１４）を参照されたい。
【００５５】
【表１】
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【００５６】
ビオチンの溶解に必要な薬学的に許容される溶媒量を最小にするために合成手法を開発し、その結果、ここに記載した自然に存在しない製品を製造した。そのような薬学的に許容されるビオチン用の溶媒は、調製全体で薬学的に許容される溶媒を使用できるように、マグネシウム塩の溶液と相溶性であることが好ましいであろう。したがって、水溶性塩基、例えば、水酸化アンモニウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化リチウム、水酸化セシウム、またはアミンを添加することにより、ビオチンを最小量の水に容易に完全に溶解できることを見出した。したがって、最小量の水に溶かしたＤ−ビオチン酸塩の透明溶液を得た。ラセミ化は観察されなかった。マグネシウム塩、例えば、臭化マグネシウムおよびその水和物、塩化マグネシウムおよびその水和物、硝酸マグネシウムなどを最小容量の水に溶解して、透明で無色の溶液を得ることができることも見出した。
【００５７】
驚くべきことに、マグネシウム０．４５−０．５５モル対Ｄ−ビオチン１モルのモル比でマグネシウム塩の透明で無色の水溶液をＤ−ビオチンの透明水溶液に添加した場合、透明溶液が得られ、したがって、形成されたＤ−ビオチン酸マグネシウムが、意外にも水に可溶であることを示した。Ｄ−ビオチン酸マグネシウムの析出は、水に相溶性の共溶媒、例えば、アセトニトリルまたはアセトンの添加により誘発することができた。メタノールまたはエタノールは、Ｄ−ビオチン酸マグネシウムの析出を誘発しなかった。Ｄ−ビオチン酸マグネシウムの旋光度の測定により、ラセミ化が起こっていなかったことを確認した。
【００５８】
いくつかの側面では、Ｄ−ビオチン酸マグネシウムを調製するための方法は、１モル等量のＤ−ビオチン／水および０．５モル等量のマグネシウムアルコキシドを添加することを含む。この反応は、反応混合物を加熱するまでは遅く、その後、マグネシウムアルコキシドはＤ−ビオチンと反応して、Ｄ−ビオチン酸マグネシウム透明溶液を形成した。反応が完了すると、共溶媒を添加した場合でも沈殿を生じなかった。水を除去し、残りの固体をエタノールで洗浄し、１０８℃で乾燥することにより、Ｄ−ビオチン酸マグネシウム組成物を単離した。
【００５９】
意外にも、Ｄ−ビオチン酸マグネシウム組成物は、吸湿性ではなく、露光時にも安定であった。組成物は、２５℃／相対湿度４０％、ならびに４０℃／相対湿度７５％での貯蔵時にも安定であった。
【００６０】
ここに開示したいくつかの態様は、本開示のＤ−ビオチン酸マグネシウム組成物が、投与後に、意外にも、そして不自然に大量のＤ−ビオチンを提供するという驚くべき、そして意外にも優れた研究結果に少なくとも部分的には基づく。したがって、いくつかの側面では、Ｄ−ビオチン酸マグネシウム組成物は、他の公知の組成物と比較した場合、ビオチンのバイオアベイラビリティを高める。任意の特定の仮説または理論に拘泥するものではないが、ここに開示した組成物は、水および他の水溶液中でのかなり大きな溶解度のため、意外にも大量のＤ−ビオチンを提供すると考えられる。ビオチンは、可溶性Ｄ−ビオチン酸塩と腸内ナトリウム依存ビタミントランスポーター（ＳＭＶＴ）との特異的相互作用により、および腸内での可溶性Ｄ−ビオチン酸塩とモノカルボキシレートトランスポーターとの非特異的相互作用により、腸から吸収されるであろう。本出願のＤ−ビオチン酸マグネシウム組成物は、溶液中のマグネシウムイオンおよびＤ−ビオチン酸アニオンの両方を提供する（すなわち、可溶性のマグネシウムイオンと可溶性のＤ−ビオチン酸アニオンの両方）。したがって、両者は、腸内の受容体を経由する生理的取り込みで利用できる。したがって、いくつかの側面では、ここに開示した組成物は、従来の組成物よりもよりバイオアベイラブルなビオチンを提供する。
【００６１】
よりバイオアベイラブルなビオチンを送達することができる組成物は、従来の組成物および調合物よりも少ない総ビオチンの量を有する組成物を生じるであろう。このようにして、製造コストは、低下する可能性があり、対象はより多くのビオチンを有する組成物と同等の効能を実現するためにより少量のビオチンを含む組成物を投与されるであろう。製造方法の改善は、Ｄ−ビオチンを製造するために有機溶媒に依存する従来の方法ではなく、水に依存する新しい製造方法に帰するであろう。有機溶媒ではなく、ここに包含した方法によって記載したように、水を使用するビオチン酸マグネシウムの製造は、ラセミ化しない反応条件を生じさせる。任意の特定の理論に拘泥するものではないが、Ｌ−ビオチンは、生物活性ではなく、したがって、Ｄ−ビオチン酸マグネシウムを含有する高純度の製品を製造することは、驚くべき、そして改善された結果である。従来技術の有機溶媒を使用するビオチン化合物の製造は、ラセミ混合物を生じ、不活性なＬ型のビオチンを生成することがある。したがって、ここに記載した方法は、有利にはより安価でより安全な方法を記載し、ここに記載した不自然で意外な結果を実現することができる改善された非天然の製品を製造する。
【００６２】
これらの同じトランスポーターも、ビタミンの細胞内輸送を仲立ちするので、本出願のＤ−ビオチン酸マグネシウム組成物は、血清および体液中でのＤ−ビオチン酸マグネシウムのかなり高い溶解度のため、非経口投与後に生理学的に相溶性の溶液として、意外かつ不自然なほどの大量のＤ−ビオチンを提供すると考えられる。いくつかの側面では、ビオチン酸マグネシウムを、実質的にすべての塩化ナトリウムおよび／または他の塩を除去するために洗浄する。
【００６３】
ここに開示した１つ以上の組成物の投与は、ここに記載した投与の方法または当業者に公知の送達方法のいずれかによることができる。組成物を、非経口栄養、例えば、栄養チューブにより、静脈内に、または局所的に、および他の公知の手段により経口で投与するであろう。
【００６４】
経口投与では、ここに開示した組成物は、錠剤、水性または油性懸濁液、分散性粉末または顆粒物、エマルション、ハードまたはソフトカプセル、シロップ、エリキシル、または飲料として提供することができる。固形投与形態、例えば錠剤およびカプセルは、腸溶コーティングを含むであろう。経口使用を意図した組成物は、薬学的に許容される組成物を製造するための当該技術分野で公知の任意の方法により調製することができ、そのような組成物は、１つ以上の以下の薬剤：甘味料、矯味剤、着色剤、コーティング、および防腐剤を含むであろう。甘味剤および矯味剤は、調製品の嗜好性を増加することになる。錠剤製造に適した非毒性で薬学的に許容される賦形剤と混合した錯体を含有する錠剤は許容される。製薬学的に許容されるビヒクル、例えば賦形剤は、調合物の他の成分と相溶性である（ならびに、患者に非傷害性である）。そのような賦形剤は、不活性希釈剤、例えば炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、ラクトース、リン酸カルシウムまたはリン酸ナトリウム；顆粒および崩解剤、例えばコーンスターチまたはアルギン酸；結合剤、例えばスターチ、ゼラチンまたはアカシア；および滑沢剤、例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸またはタルクを含む。錠剤は、消化管での崩壊および吸収を遅らせるために公知の技法により素錠またはコーティング錠とすることができ、それによって持続作用を長時間にわたり提供する。例えば、徐放化物質、例えばモノステアリン酸グリセリルまたはジステアリン酸グリセリルは単独でまたはワックスとともに使用することができる。
【００６５】
経口使用用の調合物を、ハードゼラチン含有または非ゼラチン状カプセルとしても提供することができ、この場合、有効成分を、不活性固体希釈剤、例えば炭酸カルシウム、リン酸カルシウムまたはカオリンと混合し、またはソフトゼラチンカプセルとしても提供することができ、この場合、有効成分を、水または油性媒体、例えば落花生油、流動パラフィンまたはオリーブ油と混合する。水性懸濁液は、水性懸濁液の製造に適した賦形剤と混合される、ここに記載した錯体を含有することがある。そのような賦形剤は、懸濁剤、分散剤または湿潤剤、１つ以上の防腐剤、１つ以上の着色剤、１つ以上の矯味剤および１つ以上の甘味剤、例えばスクロースまたはサッカリンを含む。
【００６６】
油性懸濁液は、有効成分を植物油、例えばアラキス油、オリーブ油、ゴマ油またはココナッツ油に、または鉱油、例えば、流動パラフィンに懸濁することにより配合することができる。油性懸濁液は、増粘剤、例えば蜜ろう、硬質パラフィンまたはセチルアルコールを含有することができる。甘味剤、例えば、上記で記載したもの、および矯味剤は、味の良い経口剤を提供するために添加することができる。これらの組成物は、添加される酸化防止剤、例えばアスコルビン酸により保存することができる。水の添加による水性懸濁液の調製に適した分散性粉末および顆粒物は、分散剤または湿潤剤、懸濁剤、および１つ以上の防腐剤と混合した有効成分を提供することができる。追加の賦形剤、例えば甘味剤、矯味剤および着色剤も用いることができる。
【００６７】
シロップおよびエリキシルを、甘味剤、例えば、グリセロール、ソルビトールまたはスクロースと配合することができる。そのような調合物は、粘滑薬、防腐剤、矯味剤または着色剤を含有することもできる。
【００６８】
非経口投与用の組成物は、滅菌した注射用の調製品、例えば、滅菌した注射用の水性または油性懸濁液の形態とすることができる。この懸濁液は、適切な分散剤または湿潤剤および懸濁剤を使用する当該技術分野で周知の方法により配合することができる。滅菌した注射用の調製品は、非毒性で非経口可能な希釈剤または溶媒中の滅菌した注射用の溶液または懸濁液、例えば、１，３−ブタンジオール中の溶液とすることもできる。適切な希釈剤は、例えば、水、リンゲル液および等張塩化ナトリウム溶液を含む。さらに、従来、滅菌した不揮発性油を溶媒または懸濁媒体として使用することができる。この目的のため、合成モノまたはジグリセリドを含む任意の無刺激不揮発性油を使用することができる。さらに、脂肪酸、例えば、オレイン酸は、注射用の調製品の調製で同様に使用することができる。
【００６９】
前記量の化合物をキャリア材料と組み合わせて、単一の投与形態を製造することができることを理解されたい。そのような形態は、治療されるホストおよび投与の特定の様式に依存して変化することになる。
【００７０】
いくつかの側面では、ビオチン酸マグネシウムを動物用に設計された食品に添加するであろう。例えば、化合物または組成物は、ペットフードまたはビスケット、例えば、犬用ビスケットまたはキャットフードに添加および／または含まれるであろう。
【００７１】
水性懸濁液は、水性懸濁液の製造に適した賦形剤と混合した、ここに開示した化合物を含有するであろう。そのような賦形剤は、懸濁剤、分散剤または湿潤剤、１つ以上の防腐剤、１つ以上の着色剤、１つ以上の矯味剤および１つ以上の甘味剤、例えばスクロースまたはサッカリンを含む。
【００７２】
徐放性ビヒクルは、製剤科学の当業者に周知であり、これらの側面は、栄養および食事のサプリメントに適用することができる。当該技術分野の技術および製品は、徐放性（ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  ｒｅｌｅａｓｅ）、徐放性（ｓｕｓｔａｉｎｅｄ  ｒｅｌｅａｓｅ）、持続作用（ｐｒｏｌｏｎｇｅｄ  ａｃｔｉｏｎ）、デポ（ｄｅｐｏｔ）、レポジトリ（ｒｅｐｏｓｉｔｏｒｙ）、遅延作用（ｄｅｌａｙｅｄ  ａｃｔｉｏｎ）、遅延放出（ｒｅｔａｒｄｅｄ  ｒｅｌｅａｓｅ）および持続放出（ｔｉｍｅｄ  ｒｅｌｅａｓｅ）と様々に呼ばれる；単語「徐放性」は、ここでは前述の技術の各々を組み込むものである。
【００７３】
生分解性または生物浸食性ポリマー、例えば、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、および再生コラーゲンを含む、数多くの徐放性ビヒクルが公知である。公知の徐放性薬物送達装置は、クリーム、ローション、錠剤、カプセル、ゲル、ミクロスフェア、リポソーム、眼球インサート、ミニポンプ、および他の輸液器具、例えば、ポンプおよびシリンジを含む。有効成分がゆっくり放出される、埋め込み型または注射用のポリマーマトリックス、および経皮製剤も周知であり、開示される方法で使用することができる。
【００７４】
徐放性調製は、ビオチン酸マグネシウムと錯体を形成、または吸収するポリマーを使用することにより実施することができる。制御送達は、適切な高分子、例えばポリエステル、ポリアミノ酸、ポリビニルピロリドン、エチレン酢酸ビニル、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、および硫酸プロタミンを選択することにより実施することができ、これらの高分子の濃度ならびに組み込む方法を、活性な錯体の放出を制御するために選択する。
【００７５】
活性な錯体の徐放は、いずれかの徐放性（ｅｘｔｅｎｄｅｄ  ｒｅｌｅａｓｅ）投与形態を意味することができる。以下の用語は、本開示の目的では、徐放性と実質的に等価と考えることができる：連続放出（ｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓ  ｒｅｌｅａｓｅ）、徐放性（ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  ｒｅｌｅａｓｅ）、遅延放出（ｄｅｌａｙｅｄ  ｒｅｌｅａｓｅ）、デポ（ｄｅｐｏｔ）、漸進的放出（ｇｒａｄｕａｌ  ｒｅｌｅａｓｅ）、長期放出（ｌｏｎｇ  ｔｅｒｍ  ｒｅｌｅａｓｅ）、プログラム放出（ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄ  ｒｅｌｅａｓｅ）、持続放出（ｐｒｏｌｏｎｇｅｄ  ｒｅｌｅａｓｅ）、プログラム放出（ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄ  ｒｅｌｅａｓｅ）、比例的放出（ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎａｔｅ  ｒｅｌｅａｓｅ）、持続放出（ｐｒｏｔｒａｃｔｅｄ  ｒｅｌｅａｓｅ）、レポジトリ（ｒｅｐｏｓｉｔｏｒｙ）、遅延（ｒｅｔａｒｄ）、持続放出（ｓｌｏｗ  ｒｅｌｅａｓｅ）、間隔を空けた放出（ｓｐａｃｅｄ  ｒｅｌｅａｓｅ）、徐放性（ｓｕｓｔａｉｎｅｄ  ｒｅｌｅａｓｅ）、タイムコート（ｔｉｍｅ  ｃｏａｔ）、持続放出（ｔｉｍｅ  ｒｅｌｅａｓｅ）、遅延作用（ｄｅｌａｙｅｄ  ａｃｔｉｏｎ）、持続作用（ｅｘｔｅｎｄｅｄ  ａｃｔｉｏｎ）、間隔を空けた作用（ｌａｙｅｒｅｄ  ｔｉｍｅ  ａｃｔｉｏｎ）、長時間作用（ｌｏｎｇ  ａｃｔｉｎｇ）、持続作用（ｐｒｏｌｏｎｇｅｄ  ａｃｔｉｏｎ）、持続作用投与（ｓｕｓｔａｉｎｅｄ  ａｃｔｉｏｎ  ｍｅｄｉｃａｔｉｏｎｓ）および徐放性（ｅｘｔｅｎｄｅｄ  ｒｅｌｅａｓｅ）、消化管および腸内のｐＨレベルに関する放出、分子の分解ならびに吸収およびバイオアベイラビリティ基準。
【００７６】
親水性モノオレフィンモノマー、例えば、エチレングリコールメタクリレートの共重合によりヒドロゲルを調製することができ、ヒドロゲルでは、ビオチン酸マグネシウムが水性成分に溶解して経時的に徐々に放出する。ビオチン酸マグネシウムがキャリア材料のマトリックスに分散しているマトリックスデバイスを使用することができる。担体は、多孔質、非多孔質、固体、半固体、透過性または非透過性とすることができる。あるいは、速度制御膜により囲まれるビオチン酸マグネシウムの中央リザーバを含む装置を、錯体の放出を制御するために使用することができる。速度制御膜は、エチレン−酢酸ビニルコポリマーまたはブチレンテレフタレート／ポリテトラメチレンエーテルテレフタレートを含む。シリコンゴムまたはエチレン−ビニルアルコールデポの使用も考えられる。
【００７７】
徐放性経口調合物も周知である。一態様では、活性な錯体を、可溶性または浸食性マトリックス、例えば、丸薬またはトローチに組み込む。別の例では、経口調合物は、舌下投与用に使用される液体とすることができる。これらの液体の組成物は、ゲルまたはペーストの形態とすることもできる。親水性ガム、例えばヒドロキシメチルセルロースが、一般的に用いられる。滑沢剤、例えば、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、またはステアリン酸カルシウムは、錠剤化プロセスを手助けするために使用することができる。
【００７８】
ビオチン酸マグネシウムは、軟膏、クリーム、ローション、軟膏剤、シャンプー、化粧料、またはエマルションを含めて、局所的に送達することもできる。
【００７９】
ここに開示した特定の障害または状態の治療で有効となる錯体の量は、障害または状態の性質に依存し、標準臨床技術により決定することができる。さらに、ｉｎ  ｖｉｔｒｏまたはｉｎ  ｖｉｖｏ分析は、最適な投薬量範囲を同定する手助けのために任意に使用することができる。
【００８０】
組成物を、１日当たり１回、２回、または３回投与することができる。いくつかの側面では、組成物を、１日４回投与する。例えば、組成物を、食前、食後、食事中に投与してもよい。経口投与用の投薬を、毎日の単回投与、または１日おきの単回投与、または最初の投与から７２時間以内の単回投与、または１日を通して複数回の間隔を空けた投与を求めるレジメンで行ってもよい。療法を構成する活性薬剤を、同時に、組合せの投与形態か、実質的に同時の経口投与を意図した別々の投与形態のどちらかで投与してもよい。療法を構成する活性薬剤を、２段階摂取を求めるレジメンにより投与されるどちらかの活性成分を用い、順次投与してもよい。したがって、レジメンは、別々の活性薬剤の間隔を空けた摂取を伴う、活性薬剤の連続投与を求めてもよい。複数の摂取の間の時間は、各活性薬剤の諸特性、例えば、薬剤の効能、溶解度、バイオアベイラビリティ、プラズマ半減期および動態プロファイルに依存して、ならびに患者の年齢および状態に依存して、数分間から約７２時間もの長時間までの範囲であろう。療法の活性薬剤を、同時に、実質的に同時に、または順次投与するかに関わらず、経口経路による１つの活性薬剤および静脈内経路による他の活性薬剤の投与を求めるレジメンを含むことができる。一側面では、ここに記載した態様は、前のＤ−ビオチン組成物より高い溶解度を実現し、したがって、意外にも、また驚くべきことに、より高濃度の溶液を製造することができるので、静脈内投与用の組成物を使用する能力が改善する。療法の活性薬剤を経口または静脈内経路により、別々にまたは一緒に投与するかに関わらず、そのような活性薬剤を各々、薬学的に許容される賦形剤、希釈剤または他の調合物成分の適切な薬剤調合物に含ませることになる。
【００８１】
有効成分（すなわち、Ｄ−ビオチン酸マグネシウムおよび他の存在し得る医薬品成分または補充成分）を、固形投与形態、例えば錠剤、カプセル、および粉末で、または液体の投与形態、例えばエリキシル、シロップ、および懸濁液で経口経路により投与することができる。各有効成分を、液体の投与形態で非経口経路により投与することができる。組成物を、各有効成分の特定の量を含有する投薬量単位の形態とすることができる。本出願の組成物の経口投与形態の一例は、サッシェ内に含有される粉末の混合物である。本出願の組成物は、吸湿性ではなく、いやな味または臭いを有しないので、本出願の組成物を含む粉末の混合物は、使い易さを高め、毎日投与レジメンに対する高レベルのコンプライアンスを得る助けとなるように、食品上に振りかけることができ、または飲料に入れ撹拌することができる。
【００８２】
一般に、本開示の組成物の投与形態を、この分野の標準参照であるＲｅｍｉｎｇｔｏｎのＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，［Ｇｅｎｎａｒｏ  ＡＲ，Ｅｄ．Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ．２０ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ．Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ：Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｌｉａｍｓ，２０００］に記載されるような、従来の技法により調製することができる。治療目的では、この組合せ療法適用の活性成分を、指示される投与経路に適切な１つ以上のアジュバントと組み合わせることができる。便利な投与量のために、成分をラクトース、スクロース、スターチ粉末、アルカン酸のセルロースエステル、セルロースアルキルエステル、タルク、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム、ゼラチン、アカシアガム、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、および／またはポリビニルアルコールと混合し、次いで錠剤にしまたは被包することができ、その量は当業者によって確かめられる。そのようなカプセルまたは錠剤は、ヒドロキシプロピルメチルセルロース中の活性化合物分散系として提供されるであろう、徐放性調合物を含有してもよい。固形投与形態は、薬剤を数時間かけて連続で放出するために徐放性製品として製造することができる。圧縮錠剤を、あらゆる嫌な味を隠すために、および錠剤を雰囲気から保護するために、糖衣コーティングまたはフィルムコーティングすることができ、または消化管での選択的崩壊のために腸溶性にすることができる。固体および液体の経口投与形態はどちらも、患者の受容を高めるために、着色剤および矯味剤を含有することができる。他のアジュバントおよび投与様式は、薬学分野で周知および広く公知であり、これらの側面は、ここに記載した栄養または食事のサプリメントのいずれかに適応することもできる。
【００８３】
本発明を、簡潔さおよび理解の目的である程度詳細に記載したが、本発明の真の範囲から逸脱することなく様々な形態および詳細について改変を実施することができることを理解されたい。
【実施例】
【００８４】
例１
Ｄ−ビオチン酸マグネシウムの調製
メルク・インデックス、１２版、モノグラフ１２７２によれば、ビオチンは、２２ｍｇ／水１００ｍＬ、８０ｍｇ／エタノール１００ｍＬ、１．７ｍｇ／Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドｍＬの溶解度を示し、他の一般的有機溶媒に不溶である。Ｄ−ビオチン（４．８ｇ、２０ｍｍｏｌ）／水１５ｍＬのスラリーを酸化マグネシウム（４２０ｍｇ、１０．５ｍｍｏｌ）とともに撹拌した。数日間の撹拌後でも、周囲温度と高温の両方で透明溶液は得られなかった。したがって、これらの方法は、Ｄ−ビオチン酸マグネシウムを調製するための適切な方法ではない。
【００８５】
例２
Ｄ−ビオチン酸マグネシウムの調製Ａ
Ｄ−ビオチン（２．４４ｇ、１０ｍｍｏｌ）を水１０ｍＬに懸濁し、１Ｎ水酸化ナトリウム溶液１０ｍＬ（ＮａＯＨ；１０ｍｍｏｌ）を添加した。塩化マグネシウム六水和物（ＭｇＣｌ２・６Ｈ２Ｏ；１．０１ｇ；０．０５ｍｍｏｌ）を水２ｍＬに溶解し、得られた溶液をビオチン酸ナトリウムの水溶液に添加した。一定分量の溶液を除去し、４種の共溶媒を評価した。
【００８６】
メタノール約１０ｍＬをビオチン酸マグネシウム溶液１ｍＬに添加して透明溶液を形成した。あるいは、エタノール約１０ｍＬをビオチン酸マグネシウム溶液１ｍＬに添加して透明溶液を形成した。アセトニトリル約７ｍＬをビオチン酸マグネシウム溶液１ｍＬに添加して白色の沈殿を有する白濁溶液を形成した。アセトン約７ｍＬをビオチン酸マグネシウム溶液１ｍＬに添加して白色の沈殿を形成した。
【００８７】
同じスケールで実験を繰り返した。ビオチン酸マグネシウムの透明溶液を得た後、約３倍容量のアセトンを添加した。得られた沈殿をろ過により単離し、アセトン：水（４：１）で洗浄し、次いで、真空下で乾燥して、非晶質のＤ−ビオチン酸マグネシウム２．９ｇ（９５％）を得た。
【００８８】
例３
Ｄ−ビオチン酸マグネシウムの調製Ｂ
Ｄ−ビオチン（２．４４ｇ、１ｍｍｏｌ）を２Ｍ水酸化アンモニウム溶液５０ｍＬに添加した。塩化マグネシウム六水和物（ＭｇＣｌ２・６Ｈ２Ｏ；１．０１ｇ；０．０５ｍｍｏｌ）を水２ｍＬに溶解し、ビオチン酸ナトリウム溶液に添加した。５倍容量のアセトンを添加し、沈殿をろ過により単離し、アセトン：水（４：１）で洗浄し、次いで、真空下で乾燥して、非晶質のＤ−ビオチン酸マグネシウム１．９ｇ（６２％）を得た。
【００８９】
例４
Ｄ−ビオチン酸マグネシウムの調製Ｃ
最小容量（約１４ｍＬ）の１Ｎ  ＮａＯＨをＤ−ビオチン（２４．４ｇ、１００ｍｍｏｌ）に添加して、透明溶液を得た。溶液をろ過した。ＭｇＣｌ２・６Ｈ２Ｏ（１０．１７ｇ；５０ｍｍｏｌ）を最小容量の水に溶解し、ビオチン酸ナトリウム溶液に添加した。アセトン（４００ｍＬ）を添加し、沈殿をろ過により単離し、２００ｍＬのアセトン：水（４：１）で洗浄し、次いで真空下で乾燥して、非晶質のＤ−ビオチン酸マグネシウム２４．５ｇ（９６％）を得た。Ｄ−ビオチン酸マグネシウムの溶解度は、少なくとも約１０ｇ／Ｌである。
【００９０】
例５
Ｄ−ビオチン酸マグネシウムの安定性
本発明のビオチン酸マグネシウム組成物は、室温での貯蔵時に安定であった。非晶質の固体は、重量測定で吸湿性ではなく、相対湿度４０％および２５℃で３０日後に、および相対湿度７５％および４０℃で３０日後に、劣化の兆候は見られなかった。非晶質の固体は、露光により色は変化しなかった。
【００９１】
例６
調製Ｄ：結晶性Ｄ−ビオチン酸マグネシウム
最小容量（約１４ｍＬ）の１Ｎ  ＮａＯＨをＤ−ビオチン（２４．４ｇ、１００ｍｍｏｌ）に添加して、透明溶液を得た。ＭｇＣｌ２・６Ｈ２Ｏ（１０．１７ｇ；５０ｍｍｏｌ）を最小容量の水に溶解し、ビオチン酸ナトリウム溶液に添加した。アセトン（４００ｍＬ）を添加し、沈殿をろ過により単離し、２００ｍＬのアセトン：水（４：１）で洗浄し、次いで真空下で乾燥した。
【００９２】
例７
Ｄ−ビオチン酸マグネシウムの調製Ｅ
Ｄ−ビオチン（２．４４ｇ、１ｍｍｏｌ）を水８０ｍＬに懸濁した。マグネシウムエトキシド（５６０ｍｇ、５ｍｍｏｌ）を添加した。得られたスラリーを懸濁液が透明溶液になるまで８０℃で１時間撹拌した。水を蒸発または凍結乾燥により除去した。そのようにして形成した固体をエタノールで洗浄し、１００−１１０℃で乾燥し、非晶質のＤ−ビオチン酸マグネシウム１．９ｇ（６２％）を得た。
【００９３】
例８
Ｄ−ビオチン酸マグネシウムの大量調製Ｉ
１Ｎ  ＮａＯＨ約１２８ｍＬをＤ−ビオチン（３０ｇ、１２３ｍｍｏｌ）に添加して、透明溶液を得て、その後ろ過した。ＭｇＣｌ２・６Ｈ２Ｏ（１３．１ｇ；６４ｍｍｏｌ）を水１０ｍＬに溶解し、ビオチン酸ナトリウム溶液に添加した。アセトン（７５０ｍＬ）を添加し、得られた沈殿をろ過により単離した。ろ過ケーキを９５％エタノール５００ｍＬに懸濁し、ろ過し、風乾し、次いで１０８℃で真空乾燥して、Ｄ−ビオチン酸マグネシウム２３．８ｇ（７３．６％）を得た。元素分析：Ｍｇ３．９重量％、およびナトリウム０．６重量％（ＮａＣｌとして）。Ｄ−ビオチン酸マグネシウムのＮＭＲスペクトルを図３に示す。比旋光度は＋７７．３°（水；２５℃）であった。
【００９４】
例９
Ｄ−ビオチン酸マグネシウムの大量調製ＩＩ
Ｄ−ビオチン（９．８ｇ、４０ｍｍｏｌ）を水２００ｍＬに懸濁した。マグネシウムエトキシド（２．５ｇ、２２ｍｍｏｌ）を添加し、得られたスラリーを約８０℃に加熱した。得られた透明溶液をろ過し、水を真空下で蒸発により除去した。固体を風乾した。この反応を２回繰り返し、３つの反応から単離した固体を合わせて、１００−１１０℃で真空乾燥して、非晶質のＤ−ビオチン酸マグネシウム２９ｇ（９４．８％）を得た。元素分析：Ｍｇ３．９重量％。Ｄ−ビオチン酸マグネシウムのＮＭＲスペクトルを図２に示す。Ｄ−ビオチン酸マグネシウムの溶解度を１ｇ／１００ｍＬと見積もった。比旋光度は、＋７５．１°（水；２５℃）であった。
【００９５】
例１０
旋光度の測定およびラセミ化がないことの検証
Ｄ−ビオチン酸マグネシウム１ｇ／１００ｍＬの水溶液の旋光度を１００ｍｍの経路長を用い温度２５℃で測定した。５８９ｎｍの波長の入射光を使用した。例８で得た試料Ｄ−ビオチン酸マグネシウムの旋光度を測定し、＋７７．３°であった。これは、指定された参照値であった。例９で調製した試料Ｄ−ビオチン酸マグネシウムの旋光度は（同一の試験条件下で）＋７５．１°であった。したがって、どちらの条件でもラセミ化は生じなかった。
【００９６】
例１１
Ｄ−ビオチン酸マグネシウム−血清ビオチン濃度
二重盲検臨床試験では、対象３０人を２つのグループ（ｎ＝１５）に分ける。対照群に、Ｄ−ビオチン９５６ｍｇおよび酸化マグネシウムとしてマグネシウム３７ｍｇを含有するサプリメントを投与する。試験群に、Ｄ−ビオチン酸マグネシウム５００ｍｇ（マグネシウム２２ｍｇおよびビオチン４７８ｍｇ）、または対照群のビオチンおよびマグネシウムの総用量の半分を含有するサプリメントを投与する。血清中のビオチン濃度（ｎｇ／ｍＬ）を１時間、４時間、６時間、および８時間後に測定する。試験群の平均血清ビオチン濃度は、各時点で対照群の８０−１２０％である。したがって、Ｄ−ビオチン酸マグネシウムは、Ｄ−ビオチンのみの場合（すなわち、酸化マグネシウムとしてのマグネシウム含有調合物中の独立成分として投与される）の２倍用量に比べて８０−１２０％のバイオアベイラブルなビオチンを提供する。
【００９７】
例１２
Ｄ−ビオチン酸マグネシウム−ビオチンＣｍａｘおよびＴｍａｘ
二重盲検臨床試験では、対象３０人を２つのグループ（ｎ＝１５）に分ける。対照群に、ビオチン９５６ｍｇおよび酸化マグネシウムとしてマグネシウム３７ｍｇを含有するサプリメントを投与する。試験群に、Ｄ−ビオチン酸マグネシウム５００ｍｇ（マグネシウム２２ｍｇおよびビオチン４７８ｍｇ）、または対照群のビオチンおよびマグネシウムの総用量の半分を含有するサプリメントを投与する。ビオチンＣｍａｘ（ｎｇ／ｍＬ）およびＴｍａｘ（分）を各対象で測定する。試験群用の平均ビオチンＣｍａｘは、各時点で対照群の８０−１２０％である。したがって、Ｄ−ビオチン酸マグネシウムは、ビオチンのみの場合（すなわち、酸化マグネシウムとしてのマグネシウム含有調合物中の独立成分として投与される）の２倍用量に比べて８０−１２０％の最大血清ビオチン濃度を提供する。試験群用の平均ビオチンＴｍａｘは、各時点で対照群の５０−８０％である。したがって、Ｄ−ビオチン酸マグネシウムは、ビオチンのみの場合（すなわち、酸化マグネシウムとしてのマグネシウム含有調合物中の独立成分として投与される）の２倍用量に比べて５０−８０％少ない時間でバイオアベイラブルなビオチン最大量をもたらす。
【００９８】
例１３
Ｄ−ビオチン酸マグネシウム−ビオチン曲線下面積（ＡＵＣ０→∞）
二重盲検臨床試験では、対象３０人を２つのグループ（ｎ＝１５）に分ける。対照群に、ビオチン９５６ｍｇおよび酸化マグネシウムとしてマグネシウム３７ｍｇを含有するサプリメントを投与する。試験群に、Ｄ−ビオチン酸マグネシウム５００ｍｇ（マグネシウム２２ｍｇおよびビオチン４７８ｍｇ）、または対照群のビオチンおよびマグネシウムの総用量の半分を含有するサプリメントを投与する。ビオチンＡＵＣ０→∞（ｎｇ・ｈ／ｍＬ）を各対象で測定する。試験群の平均ビオチンＡＵＣ０→∞は、各時点で対照群の８０−１２０％である。したがって、Ｄ−ビオチン酸マグネシウムは、ビオチンのみの場合（すなわち、酸化マグネシウムとしてのマグネシウムを含有する調合物中の独立成分として投与される）の２倍用量に比べて８０−１２０％のバイオアベイラブルなビオチン最大量をもたらす。
【００９９】
例１４
Ｄ−ビオチン酸マグネシウム−徐放性
二重盲検臨床試験では、対象３０人を２つのグループ（ｎ＝１５）に分ける。対照群に、ビオチン９５６ｍｇおよび酸化マグネシウムとしてマグネシウム３７ｍｇを含有する腸溶性の多層錠剤を投与する。試験群に、Ｄ−ビオチン酸マグネシウム５００ｍｇ（マグネシウム２２ｍｇおよびビオチン４７８ｍｇ）、または対照群のビオチンおよびマグネシウムの総用量の半分を含有する腸溶性の多層錠剤を投与する。
【０１００】
ビオチンＣｍａｘ（ｎｇ／ｍＬ）；Ｔｍａｘ（分）；およびＡＵＣ０→∞（ｎｇ・ｈ／ｍＬ）を各対象で測定する。Ｃｍａｘ、Ｔｍａｘ、およびＡＵＣ０→∞の値は、血清ビオチン濃度の最初のピーク、次いで比較的一定な血液血清ビオチン濃度の最初のプラトー、次いで血清ビオチン濃度の第２のピーク、次いで比較的一定な血液血清ビオチン濃度の第２のプラトーを示す。各場合に、平均ビオチンＣｍａｘおよびＡＵＣ０→∞は、各時点で対照群の８０−１２０％であり、平均Ｔｍａｘは各時点で対照群の５０−８０％である。したがって、多層腸溶性のＤ−ビオチン酸マグネシウム調合物は、ビオチンのみの場合（すなわち、酸化マグネシウムとしてマグネシウムを含有する調合物中の独立成分として投与される）の２倍用量に比べて、５０−８０％パーセントの時間で、８０−１２０％の最大血清ビオチン濃度および８０−１２０％のバイオアベイラブルなビオチン最大量を送達することができる。
【０１０１】
例１５
ビオチン酸マグネシウム投与の吸収結果
研究として、ビオチンおよびビオチン酸マグネシウムを雄のＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットに投与した。雄のＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットは、温度２２±２
Ｃ、湿度５５±５％、および昼１２時間−夜１２時間のサイクルで飼育した。標準飼料は、米国国立栄養研究所により考案された、食事成分の分析のために一般に用いられるものに小さな変更を行い使用した。唯一のタンパク質源として噴霧乾燥した卵白を含むように食餌を変更した。卵白中のアビジンタンパク質は、不純物を除いた食餌のビオチン１．４４ｍｇ／ｋｇを結び付け、ビオチンの吸収を抑制する。この研究で指定された飼料中のビオチンの濃度は、飼料中の卵白アビジンの結合能を超えたビチオンを表した。以下のビオチン濃度（グループ当りＮ＝７）の１つを含有する標準飼料ベースの卵白粉末状食餌にランダムにラットを割り当てた。
【０１０２】
１．グループＩ（対照）（Ｂ０）：ラットに標準飼料を給餌し、市販のビオチン（ｄ−ビオチン）０．０１ｍｇ／ｋｇ体重を補給した。  
２．グループＩＩ（対照）（Ｂ１）：ラットに標準飼料を給餌し、ビオチン（ｄ−ビオチン）１ｍｇ／ｋｇ体重を補給した。  
３．グループＩＩＩ（対照）（Ｂ１００）：ラットに標準飼料を給餌し、ビオチン（ｄ−ビオチン）１００ｍｇ／ｋｇ体重を補給した。  
４．グループＩＶ（ＭｇＢ０）：ラットに標準飼料を給餌し、ビオチン酸マグネシウム０．０１ｍｇ／ｋｇ体重を補給した。  
５．グループＶ（ＭｇＢ１）：ラットに標準飼料を給餌し、ビオチン酸マグネシウム１ｍｇ／ｋｇ体重を補給した。  
６．グループＶＩ（ＭｇＢ１００）：ラットに標準飼料を給餌し、ビオチン酸マグネシウム１００ｍｇ／ｋｇ体重を補給した。  
研究期間は３０日間であり、結果の概要を以下の表２に示す。
【０１０３】
【表２】
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【０１０４】
追加の結果を図４に示すが、これはビオチンの投与と比較したビオチン酸マグネシウムの投与の結果を示す。Ｂ０．０１およびＭｇＢ０．０１は、それぞれ０．０１ｍｇ／ｋｇ体重のビオチンおよびビオチン酸マグネシウムの投与に対応する。Ｂ１およびＭｇＢ１は、それぞれ１ｍｇ／ｋｇ体重のビオチンおよびビオチン酸マグネシウムの投与に対応する。Ｂ１００およびＭｇＢ１００は、それぞれ１００ｍｇ／ｋｇ体重のビオチンおよびビオチン酸マグネシウムの投与に対応する。図４Ａおよび４Ｂは、意外にも、それぞれアセチル−ＣｏＡカルボキシラーゼＡＣＣ−１およびＡＣＣ−２活性の改善を示す。図４Ｃは、意外にもピルビン酸カルボキシラーゼ（ＰＣ）活性の改善を示す。図４Ｄは、意外にもプロピオニル−ＣｏＡカルボキシラーゼ（ＰＣＣ）活性の改善を示す。図４Ｅは、意外にもメチルクロトニル−ＣｏＡカルボキシラーゼ（ＭＣＣ）活性の改善を示す。これらの結果は、ビオチン酸マグネシウムが、かなり改善した溶解度を有するだけでなく、直観に反した意外な結果であるより高い吸収を有するという驚くべき結果も示す。したがって、これらの結果は、ここに記載した組成物が、どちらもビオチン欠乏症を有する哺乳類に有用であり、ビオチン欠乏症を経験していない哺乳類にビオチン酸マグネシウムを投与することが、改善されたカルボキシラーゼ機能およびここに記載した他の改善された結果を実現し得ることを示す。
【０１０５】
例１６
ミトコンドリア代謝活性
この例では、ビオチン欠乏細胞培養の相対的ミトコンドリア活性を、Ｄ−ビオチンまたはビオチン酸マグネシウムのどちらかとともに供給された末梢血液単核細胞（ＰＢＭＣ）のものと比較した。未処理の細胞は何も処理しなかったが、他の細胞は、Ｄ−ビオチンまたはビオチン酸マグネシウムの０．０５ｍｇ／Ｌの用量を供給し、培養が比色ＭＴＴ分析で処理された後の２４時間これらの連続の希釈に曝露した。結果を図５に示すが、これはビオチン酸マグネシウムの投与が、Ｄ−ビオチン投与に比べ、大きく改善され、意外で重要な結果を実現したことを示す。これらの結果は、各細胞培養の代謝活性の合計を反映する。図５は、未処理の細胞培養と比較した、細胞培養の各３セットの平均＋／−標準偏差としての比色記録を示す。処理分析内の統計上の有意性は、「＊」（Ｐ＜０．０５）で示され、処理間の統計上の有意性は「＃＃」（Ｐ＜０．０１）で示される。
【０１０６】
上記の記述は、本発明のいくつかの方法および材料を開示している。本発明には、方法および材料の改変、ならびに製造方法および装置の変更の余地がある。そのような改変は、本開示またはここに開示した本発明の実施を考慮すると当業者に明らかとなるであろう。したがって、本発明は、ここに開示した特定の態様に限定されるものではなく、本発明の真の範囲および趣旨内から生じるすべての改変および代替物を網羅する。
【０１０７】
本出願の要素またはその好ましい態様を導入する際に、冠詞「ａ」「ａｎ」「ｔｈｅ」および「ｓａｉｄ」は、１つ以上の要素があることを意味するものとする。用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」、「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」、および「有する（ｈａｖｉｎｇ）」は、包括的であり、列挙された要素以外のさらなる要素があり得ることを意味するものである。
【０１０８】
さらなる加工なしに、上記の記述を使用して、当業者は本開示を最大に利用することができると考えられる。したがって、特定の態様は、単に例示的であり、どんなものであれ、本開示の残りの部分について限定的ではないと解釈されるべきである。透明性および理解の目的のため、ある程度詳細に本開示を記述したが、本出願の真の範囲から逸脱することなく、様々な形態および詳細の改変を実施できることを理解されたい。
【０１０９】
これに限定されないが、出版および未出版の出願、特許、および参考文献を含む、ここで引用されるすべての参照は、参照によりその全体をここに組み込み、それにより本明細書の一部となる。参照により組み込む刊行物および特許または特許出願が、本明細書に含有される開示と矛盾する程度まで、本明細書は、任意のそのような矛盾する資料に対し優先（ｓｕｐｅｒｓｅｄｅ）および／または優先（ｔａｋｅ  ｐｒｅｃｅｄｅｎｃｅ  ｏｖｅｒ）するものである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４−１】
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【図４−２】
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【図５】
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【国際調査報告】
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