(57)【要約】  ポルフィリン化合物、及びそれから製造され、それを必要とする患者においてがんを治療するのに有用な、又はインビトロでがん細胞を治療するのに有用な抗がん剤にリンカーを介して結合した治療有効量のポルフィリンを含む組成物。化合物及び組成物は、本明細書に開示されるような薬物送達デバイスによって送達されてもよく、キットの一部であってもよい。
2019523783.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式ＩＩＩの化合物又はその塩；
【化１】
2019523783.tif 000039
式中、
Ａ１、Ａ２、Ａ３、及びＡ４はそれぞれポルフィリン環に共有結合しており、Ａ１、Ａ２、Ａ３、及びＡ４は独立して、置換芳香環又は前記ポルフィリン環に対して２、３、又は４位に単一の窒素原子を含有する６員ヘテロ芳香環から選択され；
Ｂ１は、Ｌ９〜Ｌ１６からなる群から選択され、ここでｎは１〜１２から選択され；並びに
Ｚ１は、Ｔ１ｂ、Ｔ２ｂ、Ｔ３ｂ、Ｔ４ｂ、１、Ｔ１ａ、Ｔ３ａ、Ｔ４ａ、Ｔ８ａ、Ｔ１０ａ、Ｔ１４ａ、Ｔ１５ａ、Ｔ１８ａ、Ｔ１９ａ、Ｔ２１ａ、Ｔ２７ａ、Ｔ３１ａ、Ｔ３２ａ、Ｔ３３ａ、Ｔ４ｃ、Ｔ５ｃ、Ｔ９ｃ、及びＴ１０ｃ並びにそれらの誘導体からなる群から選択される細胞傷害剤であり、且つポルフィリン環あたり１つのＺ１が存在する。
【請求項２】
薬学的に許容される担体を更に含む、請求項１に記載の化合物又はその塩。
【請求項３】
前記薬学的に許容される担体が、生理食塩水、グルコース、アルコール、グリコール、エステル、アミド、及びそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される液体担体である、請求項２に記載の化合物又はその塩。
【請求項４】
前記化合物が剤形中にあり、前記剤形が非経口であり、前記剤形が、皮内剤形、皮下剤形、筋肉内剤形、皮下剤形、静脈内剤形、髄腔内剤形、及び硬膜外剤形からなる群から選択される、請求項１に記載の化合物又はその塩。
【請求項５】
前記化合物が剤形中にあり、前記剤形が非経口ではなく、前記剤形が経口剤形、舌下剤形、局所剤形、経皮剤形、眼科剤形、耳用剤形、経鼻剤形、直腸剤形および膣剤形からなる群から選択される、請求項１に記載の化合物又はその塩。
【請求項６】
前記Ａ１の置換芳香環が、前記ポルフィリン環に対してオルト、メタ、又はパラ位のいずれかにカルボン酸アミド官能基を含み、ここでＡ２、Ａ３、及びＡ４はそれぞれ置換芳香環であり、ここで各Ａ２、Ａ３、及びＡ４置換芳香環が前記ポルフィリン環に対してオルト、メタ、又はパラ位のいずれかに置換基を有し、前記置換基がカルボン酸又はカルボン酸メチルエステルのいずれかである、請求項１に記載の化合物又はその塩。
【請求項７】
前記Ａ２、Ａ３、及びＡ４の置換芳香環が、前記ポルフィリン環に対してパラ位にカルボン酸メチルエステルを含み、Ａ１の前記カルボン酸アミドは前記ポルフィリン環に対してパラ位にある、請求項１に記載の化合物又はその塩。
【請求項８】
Ｂ１がＬ１１又はＬ１３である、請求項１に記載の化合物又はその塩。
【請求項９】
Ｚ１がＴ１ｂ、１、及びＴ４ｃからなる群から選択される、請求項１に記載の化合物又はその塩。
【請求項１０】
Ａ１の前記置換芳香環は、前記ポルフィリン環に対してオルト、メタ、又はパラ位のいずれかに芳香族エーテル官能基を含み、Ａ２、Ａ３およびＡ４のそれぞれは前記置換芳香環であり、各Ａ２、Ａ３、及びＡ４置換芳香環は前記ポルフィリン環に対してオルト、メタ、又はパラ位に位置する置換基を有し、各Ａ２、Ａ３、及びＡ４置換芳香環上の前記置換基は、独立して：低級アルキル、分枝低級アルキル、シクロアルキル、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、シアノ、アミノ又は置換アミノ、スルホン酸又はスルホンアミド、芳香族エーテル、芳香族ヒドロキシル、カルボン酸アルキルエステル又はカルボン酸アミドからなる群から選択される、請求項１に記載の化合物又はその塩。
【請求項１１】
Ｂ１が、Ｌ９、Ｌ１０、Ｌ１５、及びＬ１６からなる群から選択される、請求項１に記載の化合物またはその塩。
【請求項１２】
位置Ａ２、Ａ３、及びＡ４の前記置換芳香環の置換基がヒドロキシルであり、前記ポルフィリン環に対してオルト、メタ、又はパラ位を占め得、Ｂ１がＬ９又はＬ１５である、請求項１１に記載の化合物またはその塩。
【請求項１３】
前記置換芳香環Ａ１が芳香族エーテル官能基を含み、前記芳香族エーテルの位置は前記ポルフィリン環に対してメタであり、Ａ２、Ａ３、及びＡ４はそれぞれ置換芳香環であり、前記置換芳香環上の前記置換基は前記ポルフィリン環に対してメタ位の芳香族ヒドロキシルであり、Ｂ１はＬ９又はＬ１５であり、Ｚ１は、Ｔ１ｂ、１、及びＴ４ｃからなる群から選択される、請求項１に記載の化合物またはその塩。
【請求項１４】
Ａ１の前記６員ヘテロ芳香環は窒素原子を含み、前記６員ヘテロ芳香環上の前記窒素原子の位置は、前記ポルフィリン環に対して２、３、又は４位の１つを占め得、Ａ２、Ａ３、及びＡ４はそれぞれピリジン環であり、Ａ２、Ａ３、及びＡ４の各ピリジン環上のピリジン窒素の位置は独立して、前記ポルフィリン環に対して２、３、又は４位の１つを占め得る、請求項１に記載の化合物またはその塩。
【請求項１５】
Ｂ１が、Ｌ９、Ｌ１０、Ｌ１５、及びＬ１６からなる群から選択される、請求項１４に記載の化合物またはその塩。
【請求項１６】
Ａ１での前記窒素原子を含む前記６員ヘテロ芳香環がピリジニウムであり、前記窒素の位置が前記ポルフィリン環に対して４位にあり、Ｂ１は、Ｌ９又はＬ１５であり、Ｚ１は、Ｔ１ｂ、１、又はＴ４ｃからなる群から選択される、請求項１４に記載の化合物又はその塩。
【請求項１７】
前記Ｂ１がＬ９である、請求項１６に記載の化合物又はその塩。
【請求項１８】
前記化合物が、ＯＳ００２、ＯＳ００７、ＯＳ００９、ＯＳ００３０、ＯＳ０３２、及びＯＳ０３５からなる群から選択される、請求項６に記載の化合物またはその塩。
【請求項１９】
前記化合物が、ＯＳ０２３及びＯＳ０２４からなる群から選択される、請求項１０に記載の化合物又はその塩。
【請求項２０】
前記化合物が、ＯＳ０２５、ＯＳ０２６、ＯＳ０２７、及びＯＳ０２９からなる群から選択される、請求項１４に記載の化合物またはその塩。
【請求項２１】
前記塩が薬学的に許容される塩である、請求項１〜２０のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項２２】
がんの治療に使用するための、請求項１〜２０のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩。
【請求項２３】
インビトロでがん細胞の治療に使用するための、請求項１〜２０のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩。
【請求項２４】
請求項１に記載の化合物及び細胞傷害剤を含み、前記細胞傷害剤が、請求項１に記載の化合物のＺ１と同じ又は異なる式である、組成物。
【請求項２５】
前記細胞傷害剤の異なる式が、請求項１に記載の化合物のＺ１と比較して異なるクラスから選択される、請求項２４に記載の組成物。
【請求項２６】
生分解性ポリマーでエンメッシュされた請求項１に記載の化合物を含む、薬物送達デバイス。
【請求項２７】
前記生分解性ポリマーが、ポリ乳酸ｃｏ−グリコール酸、アルギネート、及びポリカプロラクトンからなる群から選択される、請求項２６に記載の薬物送達デバイス。
【請求項２８】
前記化合物は、前記薬物送達デバイスが患者に埋め込まれる場合に経時的に放出される、請求項２７に記載の薬物送達デバイス。
【請求項２９】
請求項１に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩、及び１以上の薬学的に許容される担体を含む、キット。
【請求項３０】
それを必要とする患者のがんを治療する方法であって：
それを必要とする患者に治療有効量の請求項１に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩を投与する工程を含む、方法。
【請求項３１】
前記薬学的に許容される担体が、生理食塩水、グルコース、アルコール、グリコール、エステル、アミド、及びそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される液体担体である、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
前記化合物が剤形にあり、前記剤形が非経口であり、前記剤形が、皮内剤形、皮下剤形、筋肉内剤形、皮下剤形、静脈内剤形、髄腔内剤形、および硬膜外剤形からなる群から選択される、請求項３０に記載の方法。
【請求項３３】
前記化合物が剤形にあり、前記剤形が非経口ではなく、前記剤形は経口剤形、舌下剤形、局所剤形、経皮剤形、眼科剤形、耳用剤形、経鼻剤形、直腸剤形および膣剤形からなる群から選択される、請求項３０に記載の方法。
【請求項３４】
前記化合物のＡ１の前記置換芳香環が、前記ポルフィリン環に対してオルト、メタ、又はパラ位のいずれかにカルボン酸アミド官能基を含み、Ａ２、Ａ３、及びＡ４はそれぞれ置換芳香環であり、各Ａ２、Ａ３、及びＡ４の置換芳香環は前記ポルフィリン環に対してオルト、メタ、又はパラ位のいずれかに置換基を有し、前記置換基がカルボン酸又はカルボン酸メチルエステルのいずれかである、請求項３０に記載の方法。
【請求項３５】
前記化合物のＡ２、Ａ３、及びＡ４の前記置換芳香環が、前記ポルフィリン環に対してパラ位にカルボン酸メチルエステルを含み、Ａ１の前記カルボン酸アミドは前記ポルフィリン環に対してパラ位にある、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
前記化合物のＢ１がＬ１１又はＬ１３である、請求項３０記載の方法。
【請求項３７】
前記化合物のＺ１が、Ｔ１ｂ、１、又はＴ４ｃからなる群から選択される、請求項３０に記載の方法。
【請求項３８】
前記化合物のＡ２、Ａ３、及びＡ４が置換芳香環を表し、前記置換基はスルホン酸又はスルホンアミドであり、前記ポルフィリン環に対してオルト、メタ、又はパラ位を占め得る、請求項３７に記載の方法。
【請求項３９】
前記化合物のＡ１の前記置換芳香環が、前記ポルフィリン環に対してオルト、メタ、又はパラ位のいずれかに芳香族エーテル官能基を含み、前記化合物のＡ２、Ａ３、及びＡ４のそれぞれは前記置換芳香環であり、各Ａ２、Ａ３、及びＡ４の置換芳香環はポルフィリン環に対してオルト、メタ、又はパラ位に位置する置換基を有し、各Ａ２、Ａ３、及びＡ４置換芳香環上の前記置換基は、独立して：低級アルキル、分枝低級アルキル、シクロアルキル、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、シアノ、ヒドロキシル、アミノ又は置換アミノ、スルホン酸又はスルホンアミド、芳香族エーテル、芳香族ヒドロキシル、カルボン酸アルキルエステル又はカルボン酸アミドからなる群から選択される、請求項３０に記載の方法。
【請求項４０】
前記化合物のＢ１が、Ｌ９、Ｌ１０、Ｌ１５、Ｌ１６から独立して選択され得る、請求項３０に記載の方法。
【請求項４１】
前記化合物の位置Ａ２、Ａ３、及びＡ４の前記置換芳香環の前記置換基がヒドロキシルであり、前記ポルフィリン環に対してオルト、メタ、又はパラ位のいずれかを占め得、Ｂ１がＬ９又はＬ１５である、請求項３９に記載の方法。
【請求項４２】
前記化合物の前記置換芳香環Ａ１が芳香族エーテル官能基を含み、前記芳香族エーテルの位置は前記ポルフィリン環に対してメタであり、Ａ２、Ａ３、及びＡ４はそれぞれ前記置換芳香環であり、前記置換芳香環上の前記置換基は前記ポルフィリン環に対してメタ位の芳香族ヒドロキシルであり、Ｂ１はＬ９又はＬ１５であり、Ｚ１は：Ｔ１ｂ、１、及びＴ４ｃからなる群から選択される、請求項３０に記載の方法。
【請求項４３】
前記化合物のＡ１の前記６員ヘテロ芳香環は窒素原子を含み、前記６員ヘテロ芳香環上の前記窒素原子の位置は、前記ポルフィリン環に対して２、３、又は４位の１つを占め得、前記化合物のＡ２、Ａ３、及びＡ４はそれぞれピリジン環であり、Ａ２、Ａ３、及びＡ４の各ピリジン環上のピリジン窒素の位置は、独立して、前記ポルフィリン環に対して２、３、又は４位の１つを占め得る、請求項３０に記載の方法。
【請求項４４】
Ａ１にて前記窒素原子を含む前記６員ヘテロ芳香環はピリジニウムであり、前記窒素の位置が前記ポルフィリン環に対して４位にあり、Ｂ１は、Ｌ９又はＬ１５であり、Ｚ１は、Ｔ１ｂ、１、又はＴ４ｃからなる群から選択される、請求項４３に記載の方法。
【請求項４５】
前記化合物が、ＯＳ００２、ＯＳ００７、ＯＳ００９、ＯＳ００３０、ＯＳ０３２、及びＯＳ０３５からなる群から選択される、請求項３４に記載の方法。
【請求項４６】
前記化合物が、ＯＳ０２３及びＯＳ０２４からなる群から選択される、請求項３９に記載の方法。
【請求項４７】
前記化合物が、ＯＳ０２５、ＯＳ０２６、ＯＳ０２７、及びＯＳ０２９からなる群から選択される、請求項４３に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１６年６月１６日に出願された「がんを治療するための組成物及び使用方法」という名称の米国仮特許出願第６２／３５１，１６５号の出願の優先権及びその利益を主張するものであり、これらの明細書及び特許請求の範囲は本明細書に参照により組み込まれる。
【０００２】
連邦政府による資金提供を受けた研究開発の記載
適用なし。
【０００３】
コンパクトディスクで提出される資料の参照による援用
適用なし。
【０００４】
著作物
適用なし。
【背景技術】
【０００５】
大員環に結合した複数のピロール環を有する大環状構造は、酸素及び電子輸送を含む多くの生物学的プロセスに関与する動的分子である。ポルフィリンは、４個のメチン（＝ＣＨ−）炭素を介して接続されて芳香族大員環を形成する４個のピロール環を含む天然色素である。ＩＵＰＡＣシステムがポルフィリン中の位置の番号付けに使用される。窒素原子を含めて、ポルフィリン環には全部で２４個の位置がある。炭素原子には、α位から始まり、複素環全体の外周を巡って番号１〜２０が割り当てられている。α位には１、４、６、９、１１、１４、１６及び１９の番号が割り当てられ、一方でβ位には２、３、７、８、１２、１３、１７及び１８の番号が割り当てられる。メソ位（メチン架橋における炭素原子）は、５、１０、１５、及び２０の番号が付けられている。他方、窒素原子は２１、２２、２３及び２４の番号が付けられている。
【化１】
2019523783.tif 000003
【０００６】
いくつかのポルフィリンは天然源から単離されており、例えばプロトポルフィリンＩＸは鉄含有ポルフィリンヘミンの有機部分である。他の多くのポルフィリンは合成的に調製されている。これらには、ベンズアルデヒドとピロールとの縮合から製造されるテトラフェニルポルフィリンのような、アルデヒドとピロールとの縮合を介して製造されるものが含まれる。いくつかのポルフィリンは、がんの治療のために励起波長（例えば、４１５ｎｍ）で活性化される場合に光線力学的療法に有用である。いくつかのカチオン性ポルフィリンはＤＮＡとの非共有結合相互作用を示す。ＤＮＡと強く相互作用すること以外に、カチオン性ポルフィリンはまたＤＮＡを切断することができ、高フォトヌクレアーゼ及び光線力学的療法（ＰＤＴ）用途を有し、Ｇ−四重鎖安定化を介してテロメラーゼを阻害すること及び／又はＧ−四重鎖テトラメソ（Ｎ−メチル−４−ピリジル）ポルフィン及びＣ１４−アルキル誘導体トリ−メソ（Ｎ−メチル−４−ピリジル）、メソ（Ｎ−テトラデシル−４−ピリジル）ポルフィン（Ｃ１４と呼ばれる）への結合を介して翻訳を阻害することが見出された。非特許文献１に記載されている化合物のような他のポルフィリンは超音波によって活性化されることが示されている。
【０００７】
ポルフィリンは、組織培養実験、動物モデル及びヒト患者において、正常細胞よりも癌細胞によって優先的に取り込まれることが示されている。この癌細胞選択性が、光線力学的療法におけるポルフィリンの有用性の部分的な要因である。腫瘍におけるポルフィリン局在化の機構はよく理解されていない。この機構を理解することは、腫瘍へのポルフィリン化合物の改善された選択的送達及び腫瘍への細胞傷害性薬物の標的化送達にとって重要な意味を有し得る。
【０００８】
固形腫瘍の外科的切除、放射線、及び化学療法等の様々ながん療法及び治療が存在する。外科的切除及び放射線療法は限局性腫瘍に対して使用されるが、化学療法は全身的に送達されることが多く、伝統的な化学療法は両方の細胞タイプに侵入するため、がん細胞と非がん細胞との両方に影響を与え；非がん細胞に対するがん細胞に侵入する優先傾向はない。このため、化学療法はしばしば所望でない毒性と関連しており、それが死亡にさえつながる可能性がある。従って、非がん細胞と比較してがん細胞に優先的に侵入する化合物又は組成物を用いた癌治療が望ましい。
【０００９】
ポルフィリンは、非がん細胞と比較してがん細胞へのより高い結合及び／又は内在化を示す。この要因となる機構は十分には理解されていない。文献データは、エンドサイトーシス経路ががん細胞による優先的ポルフィリン内在化の機構であり得ることを示唆している。更に、以前の研究は、いくつかのポルフィリンが低密度リポタンパク質受容体（ＬＤＬＲ）と相互作用して非がん細胞に対してがん細胞に優先的に侵入することを示唆している。この情報に基づいて、ＬＤＬＲ相互作用（又は同定されるべき他のエンドサイトーシス関連受容体）を活用するポルフィリン化合物を設計することにより、がん細胞を治療するために使用されるポルフィリン化合物の活性を改善し得る。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【００１０】
【非特許文献１】Ｃａｎｃｅｒ  Ｓｃｉ．Ｊｕｎｅ２００７，ｖｏｌ．９８；ｎｏ．６ｐｇｓ．９１６−９２０
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明の一実施形態は、式ＩＩＩの化合物又はその塩を含み、
式中、
Ａ１、Ａ２、Ａ３及びＡ４はそれぞれポルフィリン環に共有結合しており、Ａ１、Ａ２、Ａ３及びＡ４は独立して、置換芳香環又はポルフィリン環に対して２、３又は４位に単一の窒素原子を含有する６員ヘテロ芳香環から選択され；
Ｂ１は、Ｌ９〜Ｌ１６からなる群から選択され、ここでｎは１〜１２から選択され；並びに、
Ｚ１は、Ｔ１ｂ、Ｔ２ｂ、Ｔ３ｂ、Ｔ４ｂ、１、Ｔ１ａ、Ｔ３ａ、Ｔ４ａ、Ｔ８ａ、Ｔ１０ａ、Ｔ１４ａ、Ｔ１５ａ、Ｔ１８ａ、Ｔ１９ａ、Ｔ２１ａ、Ｔ２７ａ、Ｔ３１ａ、Ｔ３２ａ、Ｔ３３ａ、Ｔ４ｃ、Ｔ５ｃ、Ｔ９ｃ、及びＴ１０ｃ並びにそれらの誘導体からなる群から選択される細胞傷害剤である。
【００１３】
【化２】
2019523783.tif 000004
【００１４】
式ＩＩＩの化合物又はその塩のＡ１の置換芳香環は、ポルフィリン環に対してオルト、メタ、又はパラ位のいずれかにカルボン酸アミド官能基を含んでいてもよく、ここでＡ２、Ａ３及びＡ４はそれぞれ置換芳香環であり、各Ａ２、Ａ３、及びＡ４置換芳香環は、ポルフィリン環に対してオルト、メタ又はパラ位のいずれかに置換基を有し、置換基がカルボン酸又はカルボン酸メチルエステルのいずれかである。例えば、式ＩＩＩの化合物又はその塩のＡ２、Ａ３、及びＡ４の置換芳香環は、ポルフィリン環に対してパラ位にカルボン酸メチルエステルを含み、Ａ１のカルボン酸アミドはポルフィリン環に対してパラ位にある。
【００１５】
本発明の一実施形態では、式ＩＩＩの化合物又はその塩のＢ１は、Ｌ１１又はＬ１３である。
【００１６】
本発明の一実施形態では、式ＩＩＩの化合物又はその塩のＺ１は、Ｔ１ｂ、１及びＴ４ｃからなる群から選択される。
【００１７】
本発明の別の実施形態では、式ＩＩＩの化合物又はその塩のＡ１の置換芳香環は、ポルフィリン環に対してオルト、メタ又はパラ位のいずれかに芳香族エーテル官能基を含み、Ａ２、Ａ３及びＡ４はそれぞれ置換芳香環であり、各Ａ２、Ａ３、及びＡ４置換芳香環はポルフィリン環に対してオルト、メタ又はパラ位に位置する置換基を有し、各Ａ２、Ａ３、及びＡ４の置換芳香環上の置換基は独立して：低級アルキル、分枝低級アルキル、シクロアルキル、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、シアノ、アミノ又は置換アミノ、スルホン酸又はスルホンアミド、芳香族エーテル、芳香族ヒドロキシル、カルボン酸アルキルエステル又はカルボン酸アミドからなる群から選択される。
【００１８】
本発明の一実施形態では、式ＩＩＩの化合物又はその塩のＢ１は：Ｌ９、Ｌ１０、Ｌ１５、及びＬ１６からなる群から選択される。
【００１９】
本発明の一実施形態では、式ＩＩＩの化合物又はその塩の位置Ａ２、Ａ３、及びＡ４の置換芳香環の置換基はヒドロキシルであり、ポルフィリン環に対してオルト、メタ、又はパラ位を占め得、Ｂ１はＬ９又はＬ１５である。
【００２０】
本発明の一実施形態では、式ＩＩＩの化合物又はその塩の置換芳香環Ａ１は芳香族エーテル官能基を含み、ここで芳香族エーテルの位置はポルフィリン環に対してメタであり、ここでＡ２、Ａ３、及びＡ４はそれぞれ置換芳香環であり、ここで置換芳香環上の置換基はポルフィリン環に対してメタ位の芳香族ヒドロキシルであり、Ｂ１はＬ９又はＬ１５であり、Ｚ１は：Ｔ１ｂ、１及びＴ４ｃからなる群から選択される。
【００２１】
本発明の一実施形態では、式ＩＩＩの化合物又はその塩のＡ１の６員ヘテロ芳香環は窒素原子を含み、ここで６員ヘテロ芳香環上のこの窒素原子の位置は、ポルフィリン環に対して２、３、又は４位の１つを占め得、Ａ２、Ａ３、及びＡ４はそれぞれピリジン環であり、ここでＡ２、Ａ３、及びＡ４の各ピリジン環上のピリジン窒素の位置は、独立して、ポルフィリン環に対して２、３、又は４位の１つを占め得る。更になおＢ１は、Ｌ９、Ｌ１０、Ｌ１５、及びＬ１６からなる群から選択される。一例では、Ａ１での窒素原子を含む６員ヘテロ芳香環は、ピリジニウムであり、ここで窒素の位置がポルフィリン環に対して４位にあり、Ｂ１は、Ｌ９又はＬ１５であり、Ｚ１は、Ｔ１ｂ、１又はＴ４ｃからなる群から選択される。更になお、Ｂ１はＬ９である。
【００２２】
本発明の一実施形態では、式ＩＩＩの化合物又はその塩は：ＯＳ００２、ＯＳ００７、ＯＳ００９、ＯＳ００３０、ＯＳ０３２、及びＯＳ０３５からなる群から選択される。
【００２３】
本発明の一実施形態では、式ＩＩＩの化合物又はその塩は、ＯＳ０２３及びＯＳ０２４からなる群から選択される。
【００２４】
本発明の一実施形態では、式ＩＩＩの化合物又はその塩は：ＯＳ０２５、ＯＳ０２６、ＯＳ０２７、及びＯＳ０２９からなる群から選択される。
【００２５】
本発明の別の実施形態は、それを必要とする患者におけるがんの治療方法を提供し、この方法が：それを必要とする患者に治療有効量の式ＩＩＩの化合物又はその薬学的に許容される塩を投与する工程を含む。
【００２６】
本発明の別の実施形態は、インビトロでがん細胞を治療する方法を提供し、非がん細胞に比較してがん細胞に優先的に細胞傷害性を誘導するために、治療有効量の式ＩＩＩの化合物又はその薬学的に許容される塩をがん細胞に投与する工程を含む。
【００２７】
一実施形態は、薬学的に許容される担体を更に含む、本明細書に記載の式ＩＩＩの化合物又はその塩のいずれかを提供し、例えば、薬学的に許容される担体は、生理食塩水、グルコース、アルコール、グリコール、エステル、アミド、及びこれらの任意の組み合わせからなる群から選択される液体担体である。
【００２８】
別の実施形態は、本明細書に記載されるような式ＩＩＩの化合物又はその塩が剤形中にあり、この剤形が非経口であり、この剤形が、皮内剤形、皮下剤形、筋肉内剤形、皮下剤形、静脈内剤形、髄腔内剤形、及び硬膜外剤形からなる群から選択される。代替的に、剤形は非経口ではなく、剤形は経口剤形、舌下剤形、局所剤形、経皮剤形、眼科剤形、耳用剤形、経鼻剤形、直腸剤形、及び膣剤形からなる群から選択される。
【００２９】
一実施形態では、式ＩＩＩの化合物の塩は薬学的に許容される塩である。
【００３０】
提供される式ＩＩＩの化合物又はその薬学的に許容される塩の一実施形態は、がんの治療に有用である。
【００３１】
式ＩＩＩの化合物又はその薬学的に許容される塩の別の実施形態は、インビトロでがん細胞を治療するのに有用である。
【００３２】
一実施形態では、組成物は式ＩＩＩの化合物及び細胞傷害剤を含み、ここで細胞傷害剤は化合物のＺ１と同じ又は異なる式である。例えば、細胞傷害剤の異なる式は、化合物Ｚ１と比較して異なるクラスから選択される。
【００３３】
本発明の別の実施形態は、生分解性ポリマーでエンメッシュ（ｅｎｍｅｓｈ）される式ＩＩＩの化合物を含む薬物送達デバイスを提供する。例えば、薬物送達デバイスの生分解性ポリマーは、ポリ乳酸ｃｏ−グリコール酸、アルギネート、及びポリカプロラクトンからなる群から選択される。更になお、式ＩＩＩの化合物は、薬物送達デバイスが患者に埋め込まれる場合に経時的に放出される。
【００３４】
別の実施形態は、式ＩＩＩの化合物又はその薬学的に許容される塩、及び１以上の薬学的に許容される担体を含むキットを提供する。
【００３５】
本発明の別の実施形態は、それを必要とする患者における癌の治療方法を提供し、この方法が：それを必要とする患者に治療有効量の式ＩＩＩの化合物又はその薬学的に許容される塩を投与する工程を含む。
【００３６】
本発明の一実施形態は、抗がん剤に連結体を介して結合したポルフィリンを含む化合物の治療有効用量を含む治療化合物を提供し、本明細書では時にポルフィリン抗がん共役体（「ＰＡＣ」）化合物と呼ぶ。抗癌剤は、細胞傷害剤及び／又は放射性核種（放射活性核種、放射性同位体、又は放射活性同位体としても知られる）からなる群から選択され得る。例えば、抗がん剤は、アルキル化剤、代謝拮抗剤、抗腫瘍抗生物質、抗微小管剤、キナーゼ阻害剤、ホルモン剤、モノクローナル抗体、グルココルチコイド、有糸分裂阻害剤、トポイソメラーゼＩ阻害剤、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤、免疫調節剤、細胞増殖因子、サイトカイン、ヒストンデアセチラーゼ阻害剤、及び非ステロイド系抗エストロゲン剤であってもよいが、これらに限定されない。治療組成物は、ＰＡＣ化合物及び医薬担体を更に含んでいてもよい。一実施形態では、担体は外因性タンパク質であってもよい。別の実施形態では、担体は外因性タンパク質ではない。
【００３７】
別の実施形態は、それを必要とする患者のがんを治療する方法を提供し、この方法は、本明細書に開示される治療有効なＰＡＣ化合物又は組成物を、それを必要とする患者に投与する工程を含む。
【００３８】
本発明の一態様は、単一の化合物を介して同時に２つの細胞死滅手段を提供する方法を提供する。ＰＡＣ化合物はがん細胞に侵入し、ここで適切な発光のレーザ光にがん細胞を暴露してポルフィリンを励起すると、ポルフィリンは不可逆的にＤＮＡを損傷し、抗がん剤は更に細胞傷害剤として作用する。
【００３９】
本発明の別の態様は、がん細胞及び／又は抗がん治療を必要とする患者に対して、組み合わせて相乗的な治療効果を有する複数の抗がん剤を含む化合物を提供する。
【００４０】
本明細書に開示されるＰＡＣ化合物の別の態様は、がん細胞又は抗がん治療を必要とする患者に対する抗がん剤の抗がん作用を維持しながら、抗がん剤単独の副作用の低減を提供する。
【００４１】
本発明の別の態様は、個別に投与された細胞傷害剤と比較して、治療剤としてのＰＡＣ化合物のより低い毒性を提供する。
【００４２】
本発明の一実施形態では、ＰＡＣ化合物の抗癌剤は、以下を含まない：ポリアミン、ポリアミン類似体、環状ポリアミン、環状ポリアミン類似体、ジオキソナフトキノン、又はジオキソナフトキノン抗腫瘍抗生物質、ブレオマイシン、ダクチノマイシン、ミトキサントロン、マイトマイシン、エピポドフィロトキシン、エトポシド、テニポシド、微小管阻害薬、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、ビノレルビン、他のビンカアルカロイド、タキサン、パクリタキセル（タキソール）、ドセタキセル（タキソテール）、窒素マスタード、クロラムブシル、シクロホスファミド、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、メルファラン、アジリジン、チオテパ、アルキルスルホネート、ブスルファン、ニトロソウレア、カルムスチン、ロムスチン、及びストレプトゾシン、白金錯体、カルボプラチンシスプラチン、アルキル化剤、アルトレタミン、ダカルバジン、プロカルバジン、テモゾラミド（ｔｅｍｏｚｏｌａｍｉｄｅ）、葉酸塩類似体、メトトレキサート、プリン類似体、フルダラビン、メルカプトプリン、チオグアニン（ｔｈｉｏｇａｕｎｉｎｅ）、アデノシン類似体、クラドリビン、ペントスタチン、ピリミジン類似体、カペシタビン、シタラビン、フロキシウリジン、フルオロウラシル、ゲムシタビン、置換ウレア、ヒドロキシウレア、カンプトテシン類似体、イリノテカン及びトポテカン、トポイソメラーゼＩ阻害剤、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤、並びにキノン化合物。
【００４３】
本発明の一実施形態の別の態様は、がん細胞から測定される場合、ポルフィリン蛍光が、ポルフィリンを励起する光の波長及び又はポルフィリンを励起する音波に両方が暴露された場合に非がん細胞と比較して２倍以上大きいようにがん細胞によって取り込まれるＰＡＣ化合物を提供する。
【００４４】
本発明の別の態様は、式Ｐｎ−Ｌｎ−Ｔｎを有するＰＡＣ化合物での被検体の治療を提供し、式中、Ｐｎはポルフィリンであり、ここでｎは１〜４から選択され、Ｌｎはリンカーであり、ここでｎは１〜１５から選択され、Ｔｎは抗癌剤であり、ここでｎは１（ａ）−３３（ａ）若しくは１（ｂ）−４（ｂ）であり、又はＴｎは１である。ＰＡＣ化合物は、がんを有する被験体又はインビトロでがん細胞を治療するために光線力学的療法及び／又は放射線療法と組み合わせて使用することができる。
【００４５】
本発明の一実施形態の別の態様は、細胞内に導入される場合に、例えば細胞内で合成致死突然変異を生じさせるために相乗的に作用し得る第１の細胞傷害剤及び第２の細胞傷害剤を提供するＰＡＣ化合物を提供する。
【００４６】
本発明の別の態様は、ＰＡＣ化合物をがん細胞又は腫瘍に提供し、がん細胞又は腫瘍を以下のうちの１以上で治療することによって、インビトロ若しくはインビボでがん細胞を又はインビボで腫瘍を治療する方法を提供する：ＰＡＣ化合物のポルフィリンを励起するための光の波長の光線療法、ＰＡＣ化合物のポルフィリンを活性化するための波長の音波、ＰＡＣ化合物における抗がん剤との組み合わせ。
【００４７】
本発明の別の態様は、ＰＡＣ化合物をがん細胞に送達することを含むがん細胞を治療する方法を提供し、ここでポルフィリン及び抗がん剤は総合的な致死性を介してがん細胞を死滅させるように作用する。別の実施形態では、本明細書に開示されているようなＰＡＣ化合物の使用は、クロルプロマジン等のフェノチアジン由来薬物の非存在下で提供される。
【００４８】
本発明の一実施形態では、一般式Ｐｎ−Ｌｎ−Ｔｎの細胞傷害剤（Ｔｎ）は、抗腫瘍抗生物質、ブレオマイシン、ダクチノマイシン、ミトキサントロン、マイトマイシン、エピポドフィロトキシン、エトポシド、テニポシド、微小管阻害薬、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、ビノレルビン、他のビンカアルカロイド、タキサン、パクリタキセル（タキソール）、ドセタキセル（タキソテール）、窒素マスタード、クロラムブシル、スクロホスファミド、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、メルファラン、アジリジン、チオテパ、アルキルスルホネート、ブスルファン、ニトロソウレア、カルムスチン、ロムスチン、及びストレプトゾシン、白金錯体、カルボプラチンシスプラチン、アルキル化剤、アルトレタミン、ダカルバジン、プロカルバジン、テモゾラミド（ｔｅｍｏｚｏｌａｍｉｄｅ）、葉酸塩類似体、メトトレキサート、プリン類似体、フルダラビン、メルカプトプリン、チオグアニン（ｔｈｉｏｇａｕｎｉｎｅ）、アデノシン類似体、クラドリビン、ペントスタチン、ピリミジン類似体、カペシタビン、シタラビン、フロキシウリジン、フルオロウラシル、ゲムシタビン、置換ウレア、ヒドロキシウレア、カンプトテシン類似体、イリノテカン及びトポテカン、トポイソメラーゼＩ阻害剤及びトポイソメラーゼＩＩ阻害剤からなる群から選択されない。
【００４９】
本発明の一実施形態では、一般式Ｐｎ−Ｌｎ−Ｔｎのポルフィリン（Ｐｎ）は、以下：メソポルフィリン、ジュウテロポルフィリン、ヘマトポルフィリン、プロトポルフィリン、ウロポルフィリン、コプロポルフィリン、サイトポルフィリン、ロドポルフィリン、ピロポルフィリン、エチオポリフィリン、フィロポルフィリン、ヘプタカルボキシポルフィリン、ヘキサカルボキシポルフィリン、ペンタカルボキシポルフィリン、及び他のアルキルカルボキシポルフィリンのうちの１つではない。
【００５０】
別の実施形態では、ＰＡＣ化合物は、以下の組み合わせのうちの１つを含まない：アミド結合を介したメソポルフィリンＩＸのドキソルビシンへの直接共役体；「クリック（ｃｌｉｃｋ）」連結体を使用した、コルヒチン様毒素トリロボリドとテトラアリール亜鉛ポルフィリンとの間の共役体；ポルフィリンと共役した細胞傷害性ルテニウム複素環；ヘマトポルフィリンＩＸとシスプラチン又はカルボプラチンのような白金薬との直接共役体；エモジンのアリールポルフィリンへの直接共役体；ＰＥＧアミド連結体を介したアリールポルフィリンのレチノイン酸への共役体；アルカロイドブルシンとアリールポルフィリンとの直接共役体；エーテル連結を用いるメタフェノール性ポルフィリンとフルオロウラシルとの共役体、及びキナーゼ阻害剤への直接共役体。
【００５１】
本発明の実施形態は、それを必要とする被検体においてがんを治療する方法、及びそれを必要とする被検体においてがんを治療するのに使用するためのＰＡＣ化合物に関する。別の実施形態は、インビトロでがん細胞を治療するのに使用するための、がん細胞を治療する方法及びＰＡＣ化合物を提供する。
【００５２】
本発明の目的、利点、及び新規な特徴、並びに更なる適用範囲は、添付の図面と併せて以下の詳細な説明に部分的に記載され、以下の試験に関して部分的には当業者には明らかになり、又は本発明の実施によって知ることになり得る。本発明の目的及び利点は、（もしあれば）添付の特許請求の範囲において特に指摘された手段及び組み合わせによって実現され達成され得る。
【図面の簡単な説明】
【００５３】
明細書に組み込まれてその一部を形成する添付の図面は、本発明の１以上の実施形態を示し、明細書と共に本発明の原理を説明するのに役立つ。図面は、本発明の１以上の好ましい実施形態を例示することのみを目的としており、本発明を限定するものとして解釈されるべきではない。図面では：
【００５４】
【図１】ＴＣＰＰ取り込みが、非癌細胞に対して優先的に癌細胞であることを示す。
【図２】様々な条件下での癌細胞におけるＴＣＰＰ取り込みの阻害を示す。
【図３】エンドサイトーシスの異なる阻害剤で処理した癌細胞によるＴＣＰＰ取り込みのグラフを示す。
【図４】化合物ＯＳ００２６の合成スキームを示す。
【図５】化合物ＯＳ００２７の合成スキームを示す。
【図６】化合物ＯＳ００２の合成スキームを示す。
【図７】化合物ＯＳ００２４の合成スキームを示す。
【図８】化合物ＯＳ００７の合成スキームを示す。
【図９】化合物ＯＳ０３０の合成スキームを示す。
【図１０】化合物ＯＳ０３５の合成スキームを示す。
【図１１】化合物ＯＳ０３２の合成スキームを示す。
【図１２】化合物ＯＳ０２５の合成スキームを示す。
【図１３】化合物ＯＳ００２９の合成スキームを示す。
【図１４】化合物ＯＳ００２３の合成スキームを示す。
【図１５】化合物ＯＳ００９の合成スキームを示す。
【発明を実施するための形態】
【００５５】
更に、以下の用語は以下に規定する定義を有するものとする。特定の用語が本明細書において以下に定義されていない場合、その用語は、当業者による文脈内でその典型的な使用の範囲内での意味を有するものとすることが理解される。
【００５６】
本明細書及び添付の特許請求の範囲で使用されるように、単数形「ａ」、「ａｎｄ」、及び「ｔｈｅ」は、文脈が明らかにそうでないことを指示しない限り、複数の言及を含むことに留意すべきである。
【００５７】
「抗がん剤」という用語には、これらに限定されないが、以下のような抗悪性腫瘍剤及び免疫調節剤から選択され得る細胞傷害剤が含まれる：１）以下を含む免疫抑制剤：ポマリドミド、ピルフェニドン、レナリドミド、メトトレキサート、サリドマイド、アザチオプリン；２）以下を含むカルシニューリン阻害剤：ボクロスポリン、タクロリムス、シクロスポリン（Ｃｉｃｌｏｓｐｏｒｉｎ）、シクロスポリン（Ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎｅ）；３）以下を含むインターロイキン阻害剤：ブロダルマブ、シルツキシマブ、セクキヌマブ、ブリアキヌマブ、カナキヌマブ、トシリズマブ、メポリズマブ、ウステキヌマブ、リロナセプト、アナキンラ、バシリキシマブ、ダクリズマブ；４）以下を含む腫瘍壊死因子アルファ（ｔｎｆ−１）阻害剤：ゴリムマブ、セルトリズマブペゴル、アダリムマブ、アフェリモマブ、インフリキシマブ、エタネルセプト；５）以下を含む選択的免疫抑制剤：ベゲロマブ（Ｂｅｇｅｌｏｍａｂ）、アレムツズマブ、ベドリズマブ、アプレミラスト、テリフルノミド、トファシチニブ、ベラタセプト、フィンゴリモド、ベリムマブ、エクリズマブ、アバタセプト、ナタリズマブ、アベチムス（Ａｂｅｔｉｍｕｓ）、エファリズマブ、グスペリムス、エベロリムス、アレファセプト、レフルノミド、シロリムス、マイコフェノール酸、抗胸腺細胞免疫グロブリン（ウサギ）、抗リンパ球免疫グロブリン（ウマ）、ムロモナブ；６）以下を含む免疫賦活薬：ダシプロチムト（Ｄａｓｉｐｒｏｔｉｍｕｔ）、クリダニモド、シプリューセル−Ｔ、プレリキサフォル、ミファムルチド、ヒスタミン二塩酸塩、グラチラマー酢酸塩、メラノーマワクチン、タソネルミン、イムノシアニン、チモペンチン、ピドチモド、ペグアデマーゼ、Ｂｃｇワクチン、ロキニメクス、レンチナン；７）以下を含むインターロイキン：オプレルベキン、アルデスロイキン；８）以下を含むインターフェロン：ペグインターフェロンアルファ−２ａ、ペグインターフェロンアルファ−２ｂ、セペグインターフェロン（Ｃｅｐｅｇｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ）アルファ−２ｂ、ペグインターフェロンベータ−１ａ、ペグインターフェロンベータ−１ａ、アルブインターフェロンアルファ−２ｂ、アルブミン−インターフェロンアルファ、ペグインターフェロンアルファ２ａ、ペグインターフェロンアルファ２ｂ、インターフェロンアルファコン−１、インターフェロンベータ−１ｂ、インターフェロンベータ−１ａ、インターフェロンアルファ−ｎ１、インターフェロンアルファ−２ｂ組み換え、インターフェロンアルファ−２ａ組み換え、インターフェロンガンマ、天然型インターフェロンベータ、天然型インターフェロンアルファ；９）以下のものと含むコロニー刺激因子：バラグラスチム、リペグフィラグラスチム（Ｌｉｐｅｇｆｉｌｇｒａｓｔｉｍ）、ペグフィルグラスチム、アンセスチム、ペグフィルグラスチム、アンセスチム、レノグラスチム、ペグフィルグラスチム、サルグラモスチム、モルグラモスチン（Ｍｏｌｇｒａｍｏｓｔｉｎ）、フィルグラスチム；１０）以下を含むホルモン拮抗薬及び関連薬剤：アビラテロン、デガレリクス、アバレリクス、エキセメスタン、レトロゾール、アナストロゾール、ホルメスタン、アミノグルテチミド、エンザルタミド、ビカルタミド、ニルタミド、フルタミド、フルベストラント、トレミフェン、タモキシフェン；１１）以下を含むホルモン及び関連薬剤：ヒストレリン、トリプトレリン、ゴセレリン、リュープロレリン、ブセレリン；１２）以下を含むプロゲストゲン：ゲストノロン、メドロキシプロゲステロン、メゲストロール；１３）以下を含むエストロゲン：フォスフェステロール（Ｆｏｓｆｅｓｔｅｒｏｌ）、エチニルエストラジオール、エチニルエストラジオール、リン酸ポリエストラジオール、ジエチルスチルベストロール；１４）以下を含む抗悪性腫瘍剤：イキサゾミブ、ベリノスタット、ソニデギブ、イデラリシブ、オラパリブ、カルフィルゾミブ、アフリベルセプト、ビスモジギブ、パノビノスタット、エリブリン、ホモハリントニン、ロミデプシン、ボリノスタット、ＥＧ００９、オブリメルセン、アナグレリド、セレコキシブ、ボルテゾミブ、デニロイキンジフチトクス（Ｄｅｎｉｌｅｕｋｉｎ  ｄｉｆｉｔｏｘ）、三酸化ヒ素、ベキサロテン、ペグアスパラガーゼ、ミトタン、アリトレチノイン、イリノテカン、トポテカン、トレチノイン、エストラムスチン、マソプロコール、ミルテフォシン、ペントスタチン、ロニダミン、ヒドロキシカルバミド、ヒドロキシウレア、アルトレタミン、アスパラギナーゼ、アムサクリン、ティボサニブ、パルボシクリブ、セジラニブ、ニンテダニブ、レンバチニブ、セリチニブ、イブルチニブ、カボザンチニブ、トラメンチニブ、ポナチニブ、ダブラフェニブ、マシチニブ、レゴラフェニブ、ルキソリチニブ、アキシチニブ、クリゾチニブ、ベムラフェニブ、ボスチニブ、アファチニブ、バンデタニブ、パゾパニブ、エベロリムス、テムシロリムス、ニロチニブ、ラパチニブ、ダサチニブ、ソラフェニブ、スニチニブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、イマチニブ；１５）以下を含む光線力学的／放射線療法に使用される増感剤：エファプロキシラル、テモポルフィン、アミノレブリン酸、アミノレブリン酸メチル、ポルフィマー；１６）以下を含むモノクローナル抗体：ネシツマブ、ラムシルマブ、ブリナツモマブ、ペムブロリズマブ、ニボルマブ、ジヌツキシマブ、オビヌツズマブ、ａｄｏ−トラスツズマブエムタンシン（Ａｄｏ−ｔｒａｓｔｕｘｕｍａｂ  ｅｍｔａｎｓａｎｅ）、ペルツズマブ、ブレンツキシマブベドチン、イピリムマブ、オファツムマブ、カツマキソマブ、パニツムマブ、ベバシズマブ、セツキシマブ、ゲムツズマブ、トラスツズマブ、リツキシマブ、エドレコロマブ、メチルヒドラジン、プロカルバジン、白金化合物、ポリプラチレン、サトラプラチン、オキサリプラチン、カルボプラチン、シスプラチン；１７）以下を含む細胞傷害性抗体及び関連物質：イクサベピロン、マイトマイシン、プリカマイシン、ブレオマイシン；１８）以下を含むアントラサイクリン及び関連物質：ピキサントロン、アムルビシン、バルルビシン、ピラルビシン、ミトキサントロン、イダルビシン、ゾルビシン、アクラルビシン、エピルビシン、ダウノルビシン、ドキソルビシン；１９）以下を含むアクチノマイシン：ダクチノマイシン；２０）以下を含む植物性アルカロイド及び他の天然物：トラベクテジン；２１）以下を含むタキサン：カ��ジタキセル、ドセタキセル、パクリタキセル；２２）以下を含むコルヒチン誘導体：デメコルシン；２３）以下を含むポドフィロトキシンン誘導体：テニポシド、エトポシド；２４）以下を含むビンカアルカロイド及び類似体：ビンタフォリド、ビンフルニン、ビノレルビン、ビンデシン、ビンクリスチン、ビンブラスチン；２５）以下を含むピリミジン類似体：トリフルリジン、テガフール、フルオロウラシル、デシタビン、アザシチジン、カペシタビン、ゲムシタビン、カルモフール、テガフール、フルオロウラシル、シタラビン；２６）以下を含むプリン類似体：ネララビン、クロファラビン、フルダラビン、クラドリビン、チオグアニン、メルカプトプリン、プララトレキセート、ペメトレキセド、ラルチトレキセド、メトトレキサート；２７）以下を含む他のアルキル化剤：ダカルバジン、テモゾロミド、ピポブロマン、ミトブロニトール（Ｍｉｔｒｏｂｒｏｎｉｔｏｌ）；２８）以下を含むエポキシド：エトグルシド；２９）以下を含むニトロソウレア：ラニムスチン、ニムスチン、フォテムスチン、ストレプトゾシン、セムスチン、ロムスチン、カルムスチン；３０）以下を含むエチレンイミン：カルボコン、トリアジコン、チオテパ；３１）以下を含むアルキルスルホネート：マンノスルファン、トレオスルファン、ブスルファン；３２）以下を含む窒素マスタード類似体：ベンダムスチン、プレドニムスチン、トロホスファミド、イホスファミド、メクロレタミン、メルファラン、クロラムブシル、シクロホスファミド、並びに開示された細胞傷害剤の誘導体及び類似体。抗悪性腫瘍剤及び免疫調節剤は、微小管安定化剤、微小管破壊剤（ｍｉｃｒｏｔｕｂｕｌｅ−ｄｉｓｒｕｐｔｏｒ  ａｇｅｎｔ）、アルキル化剤、代謝拮抗剤、エピドフィロトキシン、抗悪性腫瘍酵素、トポイソメラーゼ阻害剤、細胞周期進行阻害剤、アンチセンス分子、毒素、及び白金配位錯体として分類され得る。
【００５８】
本明細書で使用される場合、「抗がん治療効果」は、以下の１以上を含む：がん細胞増殖の阻害、がん細胞死の増加（殺腫瘍反応）、腫瘍侵襲性の減少、全体的な腫瘍量の減少、局所的腫瘍量の減少、原発腫瘍のサイズの減少、転移の予防、転移の数の減少、転移のサイズの減少、及び長寿命。治療によって被検体に疾患がなくなることが望ましいが、本発明ががんの治癒に限定されることは意図されていない。がんの進行が単純に遅くなっても治療上の利点はある。本発明がその効果の大きさに限定されることを意図しない。例えば、原発腫瘍（又は転移）のサイズの減少は、１０％程度の小ささ、又は９０％程度（又はそれ以上）の大きさの減少であり得る。本発明が抗がん治療効果の持続期間に限定されることも意図されていない。（本明細書に記載の様々な実施形態を用いた）治療は、がん細胞増殖の一時的な阻害、一時的ながん細胞死の増加、一時的な腫瘍侵襲性の減少、一時的な全体腫瘍量の減少、一時的な局所的腫瘍量の減少、一時的な原発腫瘍のサイズの減少、転移の一時的な予防、転移数の一時的な減少、又は転移のサイズの一時的な減少のみをもたらし得る。一時的な影響は数週間から数カ月、又は数ヶ月から数年続き得る。これらのパラメータは、（例えば、原発性腫瘍のサイズ及び経時的な転移をモニターすることによって）測定することが比較的容易である。転移の予防及び寿命の延長に関して、これらのパラメータは、特定の腫瘍タイプ、ステージ等についての患者集団データに対して測定されてもよい。本明細書中で使用される場合、「がん予防効果」又は「保護効果」は、新しいがんの発生率を減少させる効果を含む。このパラメータは動物で証明することができて、集団ベースのヒトで測定されることができる。
【００５９】
用語「バイオアベイラビリティ」は、患者に投与される細胞傷害剤の全身的利用能（即ち、血液／血漿レベル）を指す。バイオアベイラビリティは、投与された剤形から全身循環に達する薬物の時間（割合）及び総量（程度）の両方の測定を示す絶対的な用語である。
【００６０】
「細胞傷害活性」という用語は、ポルフィリン抗がん剤共役体薬物連結体リガンド共役体の細胞内代謝産物の殺細胞効果、細胞増殖抑制効果、又は抗増殖効果を指す。細胞傷害活性は、細胞の半分が死滅する単位体積当たりの濃度（モル又は質量）である細胞におけるＩＣ５０値、及び／又は動物の１０％が死亡する単位体積当たりの濃度（モル又は質量）である動物におけるＩＣ１０値として表され得る。光誘発ポルフィリン細胞傷害性はポルフィリンの活性化により生じる。
【００６１】
がんは２つの方法、即ち、がんが発生する組織のタイプ（組織タイプ）及び原発部位によって、又はがんが最初に発症した体内の位置によって分類される。組織学的な観点から見ると、２０１６年５月５日に最終表示されたワールド・ワイド・ウェブのｃａｎｃｅｒ  ｒｅｓｅａｒｃｈ  ｓｏｃｉｅｔｙ  ｗｅｂｓｉｔｅ  ｃｒｓ−ｓｒｃ．ｃａから同定されるような癌、肉腫、骨髄腫、白血病、リンパ腫、混合型、中枢神経系、及び中皮腫の６つの主要なカテゴリーに分類される、何百もの様々ながんがある。
【００６２】
「がん」という用語は、本明細書全体を通して、以下の異常な増殖特性：制御されない増殖、不死、転移能、急速増殖及び増殖速度、発癌シグナル伝達の乱れ、並びに特定の形態学特徴のうちの１以上を有する細胞を指すために使用され、上皮細胞組織（癌）、血液細胞、骨髄、及び免疫細胞（白血病、リンパ腫、骨髄腫）、結合組織、骨、軟骨、脂肪、筋肉、血管（肉腫）、中枢神経系組織、グリア細胞、又は支持細胞（神経膠腫、芽細胞腫ＣＮＳリンパ腫）、中皮内層（肺、心臓、腹腔内の中皮腫）、メラノーマ（中胚葉起源）に起源をもち得る。本明細書で使用される場合、がんという用語は、本発明による診断及び治療に適用可能な全てのがん性疾患状態を説明するために使用され、癌、肉腫、骨髄腫、白血病、リンパ腫、混合型を含む実質的に全てのがんタイプに関連する病理学的過程を含む（ｅｍｂｒａｃｅ）又は包含する（ｅｎｃｏｍｐａｓｓ）。好ましい実施形態では、がんは固形腫瘍である。
【００６３】
本発明による化合物及び方法を用いて診断／治療し得るがんの例には、癌（例えば、扁平上皮癌、腺癌、肝細胞癌、及び腎細胞癌）、特に膀胱、腸、乳房、頸部、結腸、食道、頭部、腎臓、肝臓、肺、首、卵巣、膵臓、前立腺、及び胃の癌；悪性リンパ腫、特にバーキットリンパ腫及び非ホジキンリンパ腫；及び悪性黒色腫；骨髄増殖性疾患；肉腫、特にユーイング肉腫、血管肉腫、カポジ肉腫、脂肪肉腫、筋肉腫、末梢性神経上皮腫、及び滑膜肉腫；中枢神経系の腫瘍（例えば、神経膠腫、星状細胞腫、乏突起膠腫、上衣腫、神経膠芽腫（ｇｌｉｏｂａｓｔｏｍａ）、神経芽腫、神経節腫、神経節膠腫、髄芽腫、松果体細胞腫瘍、髄膜腫、髄膜肉腫、神経線維腫、及びシュワン腫）；生殖細胞系腫瘍（例えば：腸癌、乳癌、前立腺癌、子宮頸癌、子宮癌、肺癌、卵巣癌、精巣癌、甲状腺癌、星状細胞腫、食道癌、膵臓癌、胃癌、肝臓癌、大腸癌、及びメラノーマ）；混合型の腫瘍、特に癌肉腫とホジキン病；並びにウィルムス腫瘍及び奇形癌のような混合起源の腫瘍が含まれるが、これらに限定されない。例えば、副腎癌、肛門癌、胆管癌、膀胱癌、骨がん、成人の脳／ＣＮＳ腫瘍、小児の脳／ＣＮＳ腫瘍、乳癌、男性の乳癌、青年期のがん、小児がん、若年成人のがん、未知の原発がん、キャッスルマン病、子宮頸癌、結腸／直腸癌、子宮内膜癌、食道癌、ユーイングファミリー腫瘍、眼癌、胆嚢癌、消化管カルチノイド腫瘍、消化管間質性腫瘍（ＧＩＳＴ）、妊娠性絨毛疾患、ホジキン病、カポジ肉腫、腎臓癌、喉頭癌及び下咽頭癌、肝臓癌、肺癌、肺癌−非小細胞、肺癌−小細胞、肺カルチノイド腫瘍、リンパ腫、皮膚のリンパ腫、悪性中皮腫、多発骨髄腫、骨髄異形成症候群、鼻腔及び副鼻腔癌、鼻咽頭癌、神経芽細胞腫、非ホジキンリンパ腫、小児の非ホジキンリンパ腫、口腔及び中咽頭癌、骨肉腫、卵巣癌、膵臓癌、陰茎癌、下垂体腫瘍、前立腺癌、網膜芽細胞腫、横紋筋肉腫、唾液腺癌、肉腫−成人軟部組織癌、皮膚癌、皮膚癌−基底細胞、及び扁平上皮細胞、皮膚癌−メラノーマ、皮膚癌−メルケル細胞、小腸癌、胃癌、精巣癌、胸腺癌、甲状腺癌、子宮肉腫、膣癌、外陰癌、ワルデンストロームマクログロブリン血症、ウィルムス腫瘍は、本明細書に開示されるような１以上の組成物による治療の対象であり得る。
【００６４】
本明細書で使用される場合、「化合物」という用語は、特に明記しない限り、本明細書で開示されている任意の特定の化学化合物を指す。場合によっては、この用語はまた、開示された化合物の立体異性体及び／若しくは光学異性体（ラセミ混合物を含む）又はエナンチオマー富化混合物を指し得る。場合によっては、この用語はまた、塩、代謝産物、プロドラッグ、結晶、多形体、類似体、溶媒和物、及び水和物を指し得る。
【００６５】
本明細書で言及される化合物はキラル炭素原子を含み得ることを認識すべきである。言い換えれば、それは光学異性体又はジアステレオ異性体を有し得る。化合物はまた塩及びそれらの多形体も含み得る。更に化合物の任意の組み合わせとして組成物が存在してもよい。
【００６６】
本明細書で使用される用語「細胞傷害剤」という用語は、細胞の機能を阻害する及び／又は細胞の破壊を引き起こす物質を指し、ここで細胞傷害剤という用語は細胞増殖抑制剤を含む。この用語は、放射活性同位元素（例えば、２１１Ａｔ、１３１Ｉ、１２５Ｉ、９０Ｙ、１８６Ｒｅ、１８８Ｒｅ、１５３Ｓｍ、２１２Ｂｉ、３２Ｐ、６０Ｃ、及びＬｕの放射活性同位元素）、及び毒素、例えば細菌、真菌、植物、若しくは動物起源の小分子毒素又は酵素活性毒素（その合成類似体及び誘導体を含む）を含むことを意図する。一態様では、この用語は放射性核種を含まない。
【００６７】
細胞傷害剤は、適切な連結体を用いてポルフィリンに共有結合させてもよく、例えばポリエチレングリコール（ＰＥＧ）部分を含むが、これらに限定されない可溶化連結体を含み、ここで一実施形態における細胞傷害剤は表６、表７、及び表８に示すもの並びにドラスタチン類、例えばドラスタチン１０、ドラスタチン１５、モノメチルアウリスタチンＥ、モノメチルアウリスタチンＦ、タシドチン、セマドチンを含む。
【００６８】
「有効な」という用語は、特に明記しない限り、結果が患者又は被検体におけるがん又はインビトロ細胞での治療に関連するかにかかわらず、文脈において意図する結果を生み出すために使用される化合物又は組成物の量を記載するために使用される。有効という用語は、他の全ての有効量又は有効濃度の用語を包含し、それらは本願において他に記載又は使用されている。癌の場合、有効量の組成物は癌細胞の数を減らし；腫瘍のサイズを小さくし；腫瘍部位の数を減らし、隣接組織及び／又は遠位組織への癌細胞浸潤を阻害する（即ち、ある程度遅くするか又は停止させる）可能性がある。
【００６９】
用語「連結体」は、文脈の範囲内で本明細書全体を通して使用され、ポルフィリン及び抗がん剤を例えば共有結合させる共有結合部分を記載する。多種多様な連結体を使用することができ、一実施形態によれば、本発明は使用される連結体のタイプによって限定されない。連結体の例には、置換及び非置換のＣ１−Ｃ１２アルキル、アルケニル、及びアルキニル基、Ｃ１−Ｃ１２ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、及びヘテロアルキニル基、並びにＣ６−Ｃ２０アリール含有及びヘテロアリール含有連結基及びＬ９−Ｌ１６が含まれるが、これらに限定されない。
【００７０】
「患者」又は「被験体」という用語は、文脈の範囲内で本明細書全体を通して使用され、動物（特に治療又は処置が行われる家畜哺乳動物、好ましくはヒトを含む）を記載する。ヒト患者等の特定の動物に特異的なこれらの状態又は病状の治療のために、患者という用語はその特定の動物を指す。ほとんどの場合において、本発明の患者又は被検体は、家畜／農業動物又はどちらか若しくは両方の性別のヒト患者である。
【００７１】
「薬学的に許容される塩」という用語は、当該技術分野において周知の様々な有機及び無機対イオンから誘導される塩を指す。薬学的に許容される酸付加塩は、無機酸及び有機酸を用いて形成することができる。塩を誘導することができる無機酸には、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸等が含まれる。塩を誘導することができる有機酸には、例えば、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、シュウ酸、マレイン酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、ケイ皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、サリチル酸等が挙げられる。薬学的に許容される塩基付加塩は、無機塩基及び有機塩基を用いて形成することができる。塩を誘導することができる無機塩基には、例えば、ナトリウム、カリウム、リチウム、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、鉄、亜鉛、銅、マンガン、アルミニウム等が含まれる。塩を誘導することができる有機塩基は、例えば、一級、二級、及び三級アミン、天然に存在する置換アミンを含む置換アミン、環状アミン、塩基性イオン交換樹脂等を含み、具体的にはイソプロピルアミン、トリメチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、トリプロピルアミン、トリフルオロアセチル、及びエタノールアミンを含む。いくつかの実施形態では、薬学的に許容される塩基付加塩は、アンモニウム塩、カリウム塩、ナトリウム塩、カルシウム塩、及びマグネシウム塩から選択される。
【００７２】
用語「アルキル」は、特定の数の炭素原子を有する、又は数が特定されない場合は１２個までの炭素原子を有する、直鎖、分枝鎖、環状基、及びそれらの組み合わせを含む飽和脂肪族基を指す。「直鎖アルキル」又は「線状アルキル」基とは、環状でも分枝状でもないアルキル基を指し、一般に「ｎ−アルキル」基と呼ばれる。アルキル基の例としては、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ブチル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔ−ブチル、ペンチル、ｎ−ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシル、ウンデシル、ドデシル、ネオペンチル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、及びアダマンチルが挙げられるが、これらに限定されない。分枝鎖基は、イソプロピル、イソブチル、ネオペンチル、三級ブチル、及び三級アミルを含むが、これらに限定されない。環状基は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル等の基、又はアダマンチル若しくはノルボルニル等の基を含むがこれらに限定されない、複数の縮合環を含むがこれらに限定されない１つの環からなることができる。アルキル基の好ましいサブセットには、Ｃ１−Ｃ１２、Ｃ１−Ｃ１０、Ｃ１−Ｃ８、Ｃ１−Ｃ６、Ｃ１−Ｃ４、Ｃ１−Ｃ２、Ｃ３−Ｃ４、Ｃ３、及びＣ４アルキル基が含まれる。
【００７３】
「アリール」又は「Ａｒ」という用語は、単環を有する芳香族炭素環式基（フェニル等の基を含むがこれらに限定されない）を指し、非置換及び置換アリール基の両方を含む。「置換アリール」とは、アルキル、ハロゲン、アルコキシ（ＯＲ）、アミノ又はアルキルアミノ（ＮＨ２、ＮＨＲ、ＮＲＲ’）、ヒドロキシル、カルボキシ、フェニル、シアノ、カルボアルコキシ、及びカルボキシアミド等の基を含むがこれらに限定されない１以上の置換基あるいは本発明の目的のために必要ならば保護基で適切にブロックすることができる官能基で置換されたアリールを指す。
【００７４】
本明細書で使用される場合、「アルコキシ」という用語は、酸素原子に結合し、特定の数の炭素原子を有する、又は特定の数が特定されない場合は１２個までの炭素原子を有するアルキル基を指す。アルコキシ基の例としては、メトキシ、エトキシ、及びｔ−ブトキシ等の基が挙げられるが、これらに限定されない。
【００７５】
本明細書で使用される場合、「ハロ」及び「ハロゲン」という用語は、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｆ、又はＩ置換基を指す。
【００７６】
「細胞内切断された」及び「細胞内切断」という用語は、ＰＡＣ化合物上の細胞内側の代謝プロセス又は反応を指し、これにより細胞傷害剤とポルフィリンとを接続する化合物の一部である連結体が破壊され、その結果遊離した細胞傷害剤又は細胞内側のポルフィリンから解離した共役体の他の代謝産物をもたらす。従って、ＰＡＣ化合物の切断部分は細胞内代謝産物である。
【００７７】
上記で記載されるようながんの治療に加えて、本発明はまた、とりわけ、絨毛がん、精巣絨毛がん、非セミノーマ性胚細胞精巣がん、胎盤がん（栄養膜性腫瘍）、及び胚性がん等のがんを治療するためにも好ましく使用され得る。好ましい実施形態では、治療されるべきがんは肺がんである。
【００７８】
本発明による化合物を含有する製剤は、液体、固体、半固体の形態、又は凍結乾燥粉末形態、例えば、溶液、懸濁液、エマルジョン、徐放性製剤、錠剤、カプセル、粉末、坐薬、クリーム、軟膏、ローション、エアゾール、パッチ等、好ましくは正確な投与量の簡単な投与に適した単位剤形をとり得る。
【００７９】
本発明による医薬組成物は、通常、従来の医薬担体又は賦形剤を含み、更に他の医薬剤、担体、アジュバント、添加剤等を含み得る。賦形剤は、本出願の出願日現在において、ワールド・ワイド・ウェブ上のｆｄａ．ｇｏｖで識別されるもの及びそれらの等価物を含む。抗癌薬／ポルフィリン対１つ以上の賦形剤の重量パーセント比は、約２０：１〜約１：６０、又は約１５：１〜約１：４５、又は約１０：１〜約１；４０、又は約９：１、８：１、７：１、６：１、５：１、４：１、３：１、２：１又は１：１〜約１：２、１：３、１：４、１：５、１：６、１：７、１：８、１：９、１：１０、１：１５、１：２０、１：２５、１：３０、又は１：３５であることができ、好ましくは約２０：１、１９：１、１８：１、１７：１、１６：１、１５：１、１４：１、１３：１、１２：１、１１：１、１０：１、９：１、８：１、７：１、６：１、又は５：１である。いくつかの実施形態では、本発明の製剤は、約２５０ｍｇ〜約５００ｍｇ、又は約３００ｍｇ〜約４５０ｍｇ、又は約３２５ｍｇ〜約４２５ｍｇの総ポルフィリン／抗がん剤を含み、場合により１以上の好適な医薬賦形剤を含有してもよい。
【００８０】
非経口投与（例えば、静脈内、筋肉内、髄腔内、腹腔内、又は頭蓋内）用の注射用組成物は、典型的には適切なｉ．ｖ．溶液、例えば滅菌生理食塩水溶液を含有する。化合物はまた、水性エマルジョン中の懸濁液として処方されてもよい。組成物は、ＰＡＣ化合物又はその薬学的に許容される塩及び少なくとも１つの薬学的に許容される担体を含む。
【００８１】
液体組成物は、ＰＡＣ化合物及び任意の医薬アジュバントを含む医薬組成物を、例えば、水性生理食塩水溶液、デキストロース水溶液、グリセロール、又はエタノール等の担体に溶解又は分散させて溶液又は懸濁液を形成することによって調製することができる。経口液体調製物に使用するためには、組成物は、溶液、懸濁液、エマルジョン、又はシロップとして調製されてもよく、液体形態で又は水若しくは通常の生理食塩水中での水和に適した乾燥形態のいずれかで供給される。
【００８２】
経口投与の場合、そのような賦形剤には、医薬品グレードのマンニトール、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、サッカリンナトリウム、タルク、セルロース、グルコース、ゼラチン、スクロース、炭酸マグネシウム等が含まれる。所望であれば、組成物はまた、湿潤剤、乳化剤、又は緩衝剤等の少量の無毒性補助物質を含有してもよい。
【００８３】
組成物が経口投与用の固体調製物の形態で使用される場合、調製物は錠剤、顆粒剤、粉末、カプセル剤等であってもよい。錠剤製剤では、組成物は典型的には添加剤、例えば賦形剤、例えば糖類又はセルロース調製物、結合剤、例えばデンプンペースト又はメチルセルロース、増量剤、崩壊剤、及び医療調製物の製造に通常使用される他の添加剤を用いて処方される。
【００８４】
そのような剤形を調製するための方法は既知であるか、又は当業者に明らかである；例えばＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（１７ｔｈＥｄ．，ＭａｃｋＰｕｂ．Ｃｏ．１９８５）を参照のこと。投与されるべき組成物は、本発明による患者又は被検体を含む生物システムにおける治療的使用のための薬学的に有効な量で選択された化合物の量を含有する。
【００８５】
特定の病状について、必要としている患者又は被検体を治療する方法は、本発明に従って、治療量の本明細書に記載のポルフィリン／抗癌剤及び場合により少なくとも１つの追加の生物活性（例えば抗がん剤）を含む有効量の医薬組成物の投与を含む。単一剤形を製造するために担体材料と組み合わせてもよい本発明の治療方法において使用されるポルフィリン／抗がん剤の量は、治療される宿主、特定の投与方式に応じて変化する。例えば、組成物は、約０．０１、０．１、１、５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、又は１００ｍｇ／ｋｇ患者／日、あるいはいくつかの実施形態では、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、又は２００ｍｇ／ｋｇ超過の治療有効投与量の新規ポルフィリン／抗がん剤が、これらの組成物を受容する患者に投与することができるように処方できる。
【００８６】
一実施形態では、式ＩＩＩの化合物又はその薬学的に許容される塩、エナンチオマー、溶媒和物、若しくは多形体が提供される。式中、Ａ１〜Ａ４はそれぞれ独立して、置換芳香環又は置換ヘテロ芳香環から選択される。Ｂ１は、Ａ１を細胞傷害剤（本明細書では「細胞毒素」とも呼ぶ）Ｚ１に接続する共有結合連結体部分を表す。
【化３】
2019523783.tif 000005
【００８７】
特定の実施形態では、Ａ１は、カルボン酸アミド官能基を有する芳香環を表し、ここでカルボン酸アミドの位置はポルフィリン環に対してオルト、メタ、又はパラであり得、ここでカルボキサミド官能基のＣＮ結合は、Ａ１をリンカーＢ１に共有結合により接続するように作用する。更に、Ａ２、Ａ３、及びＡ４は一置換芳香環を表し、ここで置換基は独立してポルフィリン環に対してオルト、メタ、又はパラ位を占め得る。Ａ２、Ａ３、及びＡ４上の置換基は独立して、低級アルキル、分枝低級アルキル、シクロアルキル、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、シアノ、アミノ若しくは置換アミノ、スルホニル（スルホン酸、エステル又はアミドを含む）、フェノール、芳香族エーテル（ＯＲ、Ｒは低級アルキルである）、又はカルボニル（カルボン酸、カルボン酸エステル（ＣＯＯＲ、Ｒは低級アルキルである）又はカルボン酸アミドを含む）であり得る。Ｂ１は基Ｌ１１〜Ｌ１４から選択することができる（ここでＢ１は表１のＡ１とＺ１との間の化学式として定義される）。基Ｚ１は、それぞれＢ１に結合した、アントラサイクリンタイプ（表２）、キナーゼ阻害剤（表３）、又はアウリスタチンタイプ（表４）の毒素であり得、ここで細胞毒素Ｚ１の窒素原子は、Ｂ１をＺ１に接続するカルボキサミド官能基の一部である。
【００８８】
好ましい実施形態では、Ａ１は、カルボン酸アミド（カルボキサミド）官能基を有する芳香環を表し、ここでカルボン酸アミドの位置は、ポルフィリン環に対してオルト、メタ、又はパラであり得る。更に、Ａ２、Ａ３、及びＡ４は一置換芳香環を表し、ここで置換基はカルボン酸、カルボン酸エステル、又はカルボン酸アミドであり、ポルフィリン環に対してオルト、メタ、又はパラ位を占め得る。Ｂ１は基Ｌ１１又はＬ１３から選択され得（表１）、Ｚ１はそれぞれアントラサイクリン、キナーゼ阻害剤又はアウリスタチンタイプの細胞毒素から選択され得る（表２〜４）。
【００８９】
最も好ましい実施形態では、Ａ１は、カルボン酸アミド官能基を有する芳香環を表し、ここでカルボン酸アミドの位置はポルフィリン環に対してパラである。更に、Ａ２、Ａ３、及びＡ４は一置換芳香環を表し、ここで置換基はポルフィリン環に対してパラ位にあるカルボン酸又はカルボン酸メチルエステルである。Ｂ１は、基Ｌ１１又はＬ１３（表１）から選択されてもよい。Ｚ１は、表２−４の毒素Ｔ１ｂ、１、又はＴ４ｃからそれぞれ選択されてもよい。
【００９０】
表１．Ｂ１の式（ｎ＝１〜１２）
【表１】
2019523783.tif 000006
【００９１】
表２．細胞毒素Ｚ１（アントラサイクリンタイプの式）
【表２】
2019523783.tif 000007
【００９２】
表３．細胞毒素Ｚ１（キナーゼ阻害剤タイプの式）
【表３】
2019523783.tif 000008
2019523783.tif 000009
2019523783.tif 000010
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【００９３】
表４．細胞毒素Ｚ１（アウリスタチンタイプの式）
【表４】
2019523783.tif 000012
【００９４】
別の特定の実施形態では、Ａ１は芳香族エーテル官能基を有する芳香環を表し、ここで芳香族エーテルの位置はポルフィリン環に対してオルト、メタ、又はパラであり得る。更に、Ａ２、Ａ３、及びＡ４は一置換芳香環を表し、ここで置換基は独立してポルフィリン環に対してオルト、メタ、又はパラ位を占め得る。Ａ２、Ａ３、及びＡ４上の置換基は、独立して、低級アルキル、分枝低級アルキル、シクロアルキル、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、シアノ、アミノ又は置換アミノ、スルホニル（スルホン酸、エステル、又はアミドを含む）、フェノール又は芳香族エーテル（ＯＲ、ここでＲは低級アルキルである）、又はカルボニル（カルボン酸、カルボン酸エステル（ＣＯＯＲ、ここでＲは低級アルキルである）又はカルボン酸アミドを含む）であり得る。Ｂ１は、基Ｌ９、Ｌ１０、Ｌ１５、Ｌ１６から選択され得る（表５）。Ｚ１は、それぞれアントラサイクリン、キナーゼ阻害剤、又はアウリスタチンタイプの細胞毒素から選択され得る（表２〜４）。
【００９５】
好ましい実施形態では、Ａ１は芳香族エーテル官能基を有する芳香環を表し、ここで芳香族エーテルの位置はポルフィリン環に対してオルト、メタ、又はパラであり得る。更に、Ａ２、Ａ３、及びＡ４は一置換芳香環を表し、ここで置換基はフェノールであり、ポルフィリン環に対してオルト、メタ、又はパラ位を占め得る。Ｂ１は、基Ｌ９又はＬ１５から選択され得る（表５）。Ｚ１は、それぞれアントラサイクリン、キナーゼ阻害剤、又はアウリスタチンタイプの細胞毒素から選択され得る（表２〜４）。
【００９６】
最も好ましい態様では、Ａ１は芳香族エーテル官能基を有する芳香環を表し、ここで芳香族エーテルの位置はポルフィリン環に対してメタである。更に、Ａ２、Ａ３、及びＡ４は一置換芳香環を表し、ここで置換基はポルフィリン環に対してメタ位にあるフェノールである。Ｂ１はＬ９である（表５）。Ｚ１は、それぞれ表２〜３の細胞毒素Ｔ１ｂ又は１から選択され得る。
【００９７】
表５．Ｂ１の構造（Ａ１とＺ１との間に表される化学式、ここでｎ＝１〜１２）
【表５】
2019523783.tif 000013
【００９８】
別の特定の実施形態では、Ａ１は、アルキル化窒素原子を有するヘテロ芳香環（即ち、ピリジニウム）を表し、ここでピリジニウム窒素の位置は、ポルフィリン環に対して２、３、又は４位にあり得る。更に、Ａ２、Ａ３、及びＡ４はピリジン又はアルキルピリジニウム環を表し、ここでピリジン又はアルキルピリジニウム窒素の位置は独立してポルフィリン環に対して２、３、又は４位にあり得る。アルキルピリジニウム部分のアルキル部分は、低級アルキル又は分枝アルキルを表す。Ｂ１は、基Ｌ９、Ｌ１０、Ｌ１５、Ｌ１６から選択され得る（表５）。Ｚ１は、それぞれアントラサイクリン、キナーゼ阻害剤、又はアウリスタチンタイプの細胞毒素から選択され得る（表２〜４）。
【００９９】
最も好ましい実施態様では、Ａ１は、窒素原子を有するヘテロ芳香環（即ち、ピリジニウム）であり、ここでピリジニウム窒素の位置は、ポルフィリン環に対して４位にある。更に、Ａ２、Ａ３、及びＡ４はピリジン環を表し、ここで各窒素原子の位置はポルフィリン環に対して４位にある。Ｂ１は、基Ｌ９又はＬ１５から選択され得る（表５）。表２及び３において、Ｚ１はそれぞれ細胞毒素Ｔ１ｂ又は１から選択され得る。
【実施例】
【０１００】
非がん細胞と比較して、ポルフィリンはがん細胞によって優先的に取り込まれる。この要因となる機構は十分には理解されていない。表９は、非がん細胞によるポルフィリンの取り込みと比較してポルフィリンの優先的取り込みを示すいくつかのポルフィリン及びがん細胞のタイプのリストである。このリストは網羅的なものではなく、効果を説明するものである。
【０１０１】
表９．癌細胞株
【数１】
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【０１０２】
ＨＣＣ１５、Ｈ１５７、及びＨ３５８を含む一群のヒト肺がん細胞株によるポルフィリンテトラキス（４−カルボキシフェニル）ポルフィリン（ＴＣＰＰ）の取り込みを、フローサイトメトリーを用いて様々な条件下で調べ、クラスリン依存性及び非依存性エンドサイトーシスを化学阻害剤によって操作した。ここで図１を参照すると、骨髄細胞と比較した場合のがん細胞（ＨＣＣ１５）におけるＴＣＰＰ取り込みが用量依存様式で示されている。骨髄細胞について示されるように、マウス正常肺細胞でも同様の結果が観察される。ＨＣＣ１５によるＴＣＰＰの取り込みは、非癌細胞と比較して１０μｇ／ｍｌで２倍を超える。図２に示されるように、癌細胞株ＨＣＣ１５、Ｈ１５７、及びＨ３５８におけるＴＣＰＰ取り込みは、スクロースによって中程度に阻害され、低温によってほぼ完全に阻害され、このことは、エンドサイトーシスが細胞によるＴＣＰＰ取り込みに関与していることを示唆する。クラスリン媒介エンドサイトーシスのアンタゴニストであるクロルプロマジンは、図３に示されるようにがん細胞株におけるＴＣＰＰ取り込みを最大８０％阻害した。対照的に、クラスリン非依存性エンドサイトーシス阻害剤であるフィリピン（ｆｉｌｉｐｉｎ）は、ＴＣＰＰ取り込みには影響を及ぼさなかった。非がん細胞と比較した場合のがん細胞による優先的ポルフィリンの取り込みは、がん細胞の表面上のＬＤＬ受容体（ＬＤＬＲ）の数の増加によって促進されると推測されている。ＴＣＰＰ取り込みに対するＬＤＬＲの寄与を調べるために、肺がん細胞を操作してＬＤＬＲを発現しないようにし、これがＴＣＰＰ取り込みを２０％のみ減少させた。驚くべきことに、機能的ＬＤＬＲを伴わないヒト線維芽細胞におけるＴＣＰＰ取り込みは、ＴＣＰＰの阻害を全く示さなかった。これらのデータは、（ＬＤＬＲに対する）更なる受容体及び／又は（エンドサイトーシスに対する）機構がＴＣＰＰ取り込みに関与していることを示唆している。
【０１０３】
式ＩＩＩのＰＡＣ化合物は、以下に記載されるように合成できる。標的ＯＳ００２６の合成手順は図４に示されている。
【０１０４】
工程１：１−（５−メトキシ−５−オキソペンチル）−４−（１０，１５，２０−トリ（ピリジン−４−イル）ポルフィリン−５−イル）ピリジン−１−イウムブロミド（３）の合成
【０１０５】
３３ｍＬのＥｔＯＨ及び１００ｍＬのクロロホルム中のメソ−テトラキス（４−ピリジル）ポルフィリン（１）（４２０ｍｇ、０．６７ｍｍｏｌ）及びメチル５−ブロモペンタノエート（２）（１．５８ｇ、８．０８ｍｍｏｌ）の混合物を６日間還流撹拌した。反応混合物を、溶離液としてＥｔＯＨ／クロロホルム（３／７）を用いるシリカゲルでの２回の連続カラムクロマトグラフィにより精製して、（３）を紫色の固体として得た（１８６ｍｇ、３０％）。１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１１．９５（ｓ，２Ｈ），９．５２−９．５５（ｄ，２Ｈ），８．９４−９．１０（ｍ，１６Ｈ），８．２９−８．３１（ｔ，６Ｈ），４．９４（ｔ，２Ｈ），３．６８（ｓ，３Ｈ），２．５１−２．５８（ｍ，２Ｈ），２．６６（ｍ，２Ｈ），１．８４（ｍ，２Ｈ）。ＭＳｍ／ｚ＝７３３［Ｍ］＋。ＨＰＬＣによる純度：＞９５％、ｔＲ＝３．４８。
【０１０６】
工程２：１−（４−カルボキシブチル）−４−（１０，１５，２０−トリ（ピリジン−４−イル）ポルフィリン−５−イル）ピリジン−１−イウムクロリド（４）の合成
【０１０７】
エステル誘導体（３）（２３０ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）を４６ｍＬの１Ｎ  ＨＣｌに溶解して緑色の溶液を得、これを３時間還流撹拌した。反応混合物を凍結乾燥して、対応する酸誘導体（４）を紫色の固体として得た（２４４ｍｇ、粗収率１００％）。粗生成物を更に精製することなく次の工程に直接使用した。１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１１．９０（ｓ，２Ｈ），９．５０（ｄ，２Ｈ），９．３５−９．３７（ｄ，６Ｈ），９．１３（ｍ，８Ｈ），９．０２−９．０４（ｄ，２Ｈ），８．７９（ｓ，６Ｈ），５．５（ｂｒ，５Ｈ），５．０（ｍ，２Ｈ），２．３（ｍ，２Ｈ），１．８５（ｍ，２Ｈ）。ＨＰＬＣによる純度：＞９５％、ｔＲ＝３．２９。
【０１０８】
工程３：１−（５−（（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｒ）−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−（（（１Ｓ，３Ｓ）−３，５，１２−トリヒドロキシ−３−（２−ヒドロキシアセチル）−１０−メトキシ−６，１１−ジオキソ−１，２，３，４，６，１１−ヘキサヒドロテトラセン−１−イル）オキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）アミノ）−５−オキソペンチル）−４−（１０，１５，２０−トリ（ピリジン−４−イル）ポルフィリン−５−イル）ピリジン−１−イウムＴＦＡ塩（ＯＳ００２６）の合成
【０１０９】
４．５ｍＬのＤＭＦ中の酸誘導体（４）（４５ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）の溶液に、ＨＡＴＵ（４５ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）を一度に添加し、続いて室温でＤＩＰＥＡ（４５ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）を滴下した。反応混合物を室温で５分間撹拌した後、塩酸ドキソルビシン（３０ｍｇ、０．０５６ｍｍｏｌ）を一度に添加した。反応混合物を室温で一晩撹拌し、蒸発させて溶媒を除去した。溶離液としてＴＦＡを含むＡＣＮ／水を使用する逆相分取ＨＰＬＣにより残渣を精製して、紫色の固体として所望の標的化合物ＯＳ００２６を得た（３０ｍｇ、３３％）。ＨＰＬＣによる純度：＞９５％、ｔＲ＝３．４８。
【０１１０】
ＨＰＬＣ条件
【数２】
2019523783.tif 000015
【０１１１】
ＯＳ００２６の合成スキームは、メチル５−ブロモペンタノエート（２）でメソ−テトラキス（４−ピリジル）ポルフィリン（１）をアルキル化して中間体エステル（３）を得、次いでこれを対応する酸（４）に加水分解し、続いてペプチドカップリング試薬ＨＡＴＵを用いてドキソルビシンのアミノ糖窒素にカップリングさせてＯＳ００２６を得ることを示す。
【０１１２】
更に、一般構造Ｐ２を有するピリジルポルフィリン共役体を示す。
【化４】
2019523783.tif 000016
【０１１３】
式中、Ｘは窒素（Ｎ）である。しかしながら、代替的に、Ｎは、Ｘの代わりにＹ又はＺで各環上に配置されてもよく、連結体は代替位置でＮに結合している。従って、Ｐ２の各ピリジン環上で、Ｎは独立してＸ又はＹ又はＺのいずれかに位置し得、ＣＨ基は残りの２つの位置を占める。例えば、ポルフィリンメソ−テトラキス（３−ピリジル）ポルフィリンは、４つ全てのピリジン環において、ＹがＮであり、Ｘ及びＺがＣＨである場合に表すことができる。一般的な実施形態では、各環上のＮ原子の位置は異なり得る。より好ましい実施形態では、各ピリジン環中のＮ原子の位置は、４つ全てのピリジン環中で同じである。好ましい実施形態では、ポルフィリンメソ−テトラキス（４−ピリジル）ポルフィリンは、Ｘ＝Ｎであり、Ｙ及びＺは、４つ全てのピリジン環でのＣＨであるときに表すことができる。
【０１１４】
Ｐ２又はその異性体は、Ｌ１又はＬ２のいずれかから選択されるアルキル化剤と反応する。特に、Ｌ１又はＬ２についてｎは１〜１２であり、Ｘはピリジン窒素とのＳＮ２反応がアルキルピリジニウム塩を形成するのに適した脱離基である（例えば、図４の（３））。これに関連して、脱離基Ｘはハロゲン脱離基（Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、又はメシレート、トシレート、若しくはトリフレートのような種々の活性化スルホニルエステルのいずれかである。更に、Ｌ１又はＬ２上のＹは、様々なカルボキシレートエステル（ＯＲ）であり得、ここで、Ｒは、Ｈ、低級直鎖又は分枝アルキル、シクロアルキル、アリール又はヘテロアリールであるように選択され得る。好ましい実施形態では、Ｌ１は、ｎ＝３、Ｘがブロモ、Ｙがメトキシであるように選択される。
【０１１５】
【数３】
2019523783.tif 000017
【０１１６】
図４で共役した毒素はドキソルビシンであるが、より一般的には、表６に示すように、アミド結合を形成することができるアミノ糖部分を有するアントラサイクリン抗生物質から選択することができ、ここでドキソルビシンはＴ１ｂとして示され、従って類似体の例はＴ２ｂ〜Ｔ４ｂで示される。好ましい実施形態では、Ｐ２は、Ｘ＝Ｎであり、Ｙ及びＺが両方ともＣＨであるように選択される。更に、Ｘはポルフィリン環に対して４位に位置している。この実施形態では、Ｌ１は、ＸがＢｒであり、ＹがＯＭｅであり、ｎ＝３であり、毒素がＴ１ｂであるように選択される。
【０１１７】
表６．アミノ糖を含有するアントラサイクリンの例
【表６】
2019523783.tif 000018
【０１１８】
標的ＯＳ００２７の合成のための手順は図５に示され、以下に記載される。
【０１１９】
工程１：１−（５−メトキシ−５−オキソペンチル）−４−（１０，１５，２０−トリ（ピリジン−４−イル）ポルフィリン−５−イル）ピリジン−１−イウムブロミド（３）の合成
【０１２０】
３３ｍＬのＥｔＯＨ及び１００ｍＬのクロロホルム中のメソ−テトラキス（４−ピリジル）ポルフィリン（１）（１）（４２０ｍｇ、０．６７ｍｍｏｌ）及びメチル５−ブロモペンタノエート（２）（１．５８ｇ、８．０８ｍｍｏｌ）の混合物を６日間還流撹拌した。反応混合物を、溶離液としてＥｔＯＨ／クロロホルム（３／７）を用いるシリカゲルでの２回の連続カラムクロマトグラフィにより精製して、（３）を紫色の固体として得た（１８６ｍｇ、３０％）。１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１１．９５（ｓ，２Ｈ），９．５２−９．５５（ｄ，２Ｈ），８．９４−９．１０（ｍ，１６Ｈ），８．２９−８．３１（ｔ，６Ｈ），４．９４（ｔ，２Ｈ），３．６８（ｓ，３Ｈ），２．５１−２．５８（ｍ，２Ｈ），２．６６（ｍ，２Ｈ），１．８４（ｍ，２Ｈ）。ＭＳｍ／ｚ＝７３３［Ｍ］＋。ＨＰＬＣによる純度：＞９５％、ｔＲ＝３．４８。
【０１２１】
工程２：１−（４−カルボキシブチル）−４−（１０，１５，２０−トリ（ピリジン−４−イル）ポルフィリン−５−イル）ピリジン−１−イウムクロリド塩（４）の合成
【０１２２】
エステル誘導体（３）（２３０ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）を４６ｍＬの１Ｎ  ＨＣｌに溶解して緑色の溶液を得、これを３時間還流撹拌した。反応混合物を凍結乾燥して、対応する酸誘導体（４）を紫色の固体として得た（２４４ｍｇ、粗収率１００％）。粗生成物を更に精製することなく次の工程に直接使用した。１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１１．９０（ｓ，２Ｈ），９．５０（ｄ，２Ｈ），９．３５−９．３７（ｄ，６Ｈ），９．１３（ｍ，８Ｈ），９．０２−９．０４（ｄ，２Ｈ），８．７９（ｓ，６Ｈ），５．５（ｂｒ，５Ｈ），５．０（ｍ，２Ｈ），２．３（ｍ，２Ｈ），１．８５（ｍ，２Ｈ）。ＨＰＬＣによる純度：＞９５％、ｔＲ＝３．２９。
【０１２３】
（Ｓ）−１−（５−（４−（４−（６−アミノ−５−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）ピリジン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−イル）−５−オキソペンチル）−４−（１０，１５，２０−トリ（ピリジン−４−イル）ポルフィリン−５−イル）ピリジン−１−イウムＴＦＡ塩（ＯＳ００２７）の合成
【０１２４】
８．６ｍＬのＤＭＦ中の酸誘導体（４）（８６ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）の溶液に、ＨＡＴＵ（５２ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）を一度に添加し、続いて室温でＤＩＰＥＡ（８６ｍｇ、０．６７ｍｍｏｌ）を滴下した。得られた混合物を室温で５分間撹拌した後、塩酸クリゾチニブ（５２ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を一度に添加した。得られた混合物を室温で一晩撹拌し、蒸発させて溶媒を除去した。溶離液としてＴＦＡを含むＡＣＮ／水を使用する逆相分取ＨＰＬＣにより残渣を精製して、所望の標的化合物ＯＳ００２７を紫色の固体として得た（２７ｍｇ、１７％）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ＝１１５０［Ｍ］＋。ＨＰＬＣによる純度（ＥＬＳＤ）：＞９５％、ｔＲ＝４．００。
【０１２５】
ＨＰＬＣ条件
【数４】
2019523783.tif 000019
【０１２６】
ＯＳ００２７の合成スキームは、メソ−テトラキス（４−ピリジル）ポルフィリン（１）メチル５−ブロモペンタノエート（２）をアルキル化して中間体エステル（３）を得て、次いでこれを対応する酸（４）に加水分解し、続いてペプチドカップリング試薬ＨＡＴＵを用いて毒素の二級アミン（クリゾチニブ）にカップリングさせてＯＳ００２７を得ることを示す。
【０１２７】
一実施形態では、Ｐ２の一般構造を有するピリジルポルフィリンが使用される。Ｐ２は、Ｘ又はＹ又はＺに位置する窒素原子（Ｎ）を有し、ＣＨが残りの２つの位置を占める。例えば、ポルフィリンメソ−テトラキス（３−ピリジル）ポルフィリンは、４つ全てのピリジン環において、ＹがＮであり、Ｘ及びＺがＣＨである場合に表すことができる。一般的な実施形態では、各環上のＮの位置は異なり得る。好ましい実施形態では、各環上のＮの位置は同じである。
【０１２８】
別の一般的な実施形態では、Ｐ２はＬ１又はＬ２のいずれかから選択されるアルキル化剤と反応する。Ｌ１又はＬ２において、ｎは１〜１２であり、Ｘは、ピリジン窒素原子とのＳＮ２反応に適したアルキルピリジニウム種を形成するのに適した脱離基である（例えば、図５の（３））。これに関連して、脱離基Ｘはハロゲン脱離基（Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）又はメシレート、トシレート、若しくはトリフレートのような種々の活性化スルホニルエステルのいずれかである。更に、Ｌ１又はＬ２上のＹは、様々なカルボキシレートエステル（ＯＲ）であり得、ここで、Ｒは、Ｈ、低級直鎖又は分枝アルキル、シクロアルキル、アリール又はヘテロアリールであるように選択され得る。好ましい実施形態では、Ｘはブロモであり、Ｙはメトキシである。
【０１２９】
図５に示す特定の毒素はキナーゼ阻害剤クリゾチニブである（１、表７）。一実施形態では、クリゾチニブは、表７のキナーゼ阻害剤Ｔｎａ（ｎ＝１〜３３）で置き換えられる。これに関連して、Ｘは、Ｌ１又はＬ２へのアミド結合形成の位置を表す。好ましい実施形態では、Ｐ２は、Ｘ＝Ｎであり、Ｙ及びＺが両方ともＣＨであるように選択される。更に、Ｘはポルフィリン環に対して４位に位置している。この実施形態では、Ｌ１は、ＸがＢｒであり、ＹがＯＭｅであり、ｎ＝３であり、細胞毒素がクリゾチニブ（１）であるように選択される。
【０１３０】
【表７】
2019523783.tif 000020
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2019523783.tif 000022
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【０１３１】
標的ＯＳ００２の合成のための手順は図６に示され、以下に記載される。
【０１３２】
ｔｅｒｔ−ブチル（２−（（（４−ニトロフェノキシ）カルボキシル）オキシ）エチル）カルバメート（４）の調製
【０１３３】
ＣＨ２Ｃｌ２（８０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル（２−ヒドロキシエチル）カルバメート（２）（１．２ｇ、７．４５ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（２．５８ｍＬ、１８．６ｍｍｏｌ）の混合物に、ｐ−ニトロフェニルクロロホルメート（３）（１．５ｇ、７．４５ｍｍｏｌ）を０℃で少しずつ添加した。得られた混合物を室温に加温し、５時間撹拌した。混合物を１０ｍＬの飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液でクエンチし、ＣＨ２Ｃｌ２（２×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、蒸発させた。粗残渣を、０〜１００％ＥｔＯＡｃ−ヘキサンを用いる順相クロマトグラフィにより精製して、（４）を得た（１．９２ｇ、７９％）。１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ８．２８（ｄ，２Ｈ），７．３９（ｄ，２Ｈ），４．８５−４．９５（ｍ，１Ｈ），４．３３（ｔ，２Ｈ），３．０−３．５１（ｍ，２Ｈ），１．４５（ｓ，９Ｈ）。
【０１３４】
２−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボキシル）アミノ）エチル（Ｓ）−４−（４−（６−アミノ−５−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ））ピリジン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（５）の調製
【０１３５】
ＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍＬ）中のクリゾチニブ塩酸塩（１）（１００ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）及び（４）（１３６ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）の混合物に、室温でＤＩＰＥＡ（０．４ｍＬ、０．６７ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を１６時間撹拌した。混合物を水（２×２０ｍＬ）で洗浄した。有機層をブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、蒸発させた。粗残渣を、０〜１０％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２を用いる順相クロマトグラフィにより精製して、（５）を得た（１３０ｍｇ、９９％）。１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ７．７５（ｄ，１Ｈ），７．５５（ｓ，１Ｈ），７．４７（ｓ，１Ｈ），７．２５−７．２７（ｍ，１Ｈ），７．０１−７．０８（ｍ，１Ｈ），６．８５（ｄ，１Ｈ），６．０５−６．１（ｍ，１Ｈ），４７５−４．８５（ｍ，３Ｈ），４．１−４．３５（ｍ，５Ｈ），３．３９−３．４５（ｍ，２Ｈ），２．９−３．０（ｍ，２Ｈ），２．１−２．１９（ｍ，２Ｈ），１．９−１．９８（ｍ，２Ｈ），１．８６（ｄ，３Ｈ），１２．１−２．１９（ｍ，２Ｈ），１．９−１．９８（ｍ，２Ｈ），１．８６（ｄ，３Ｈ），１．４３（ｓ，９Ｈ）。ＭＳ  ｍ／ｚ＝６３７．２［Ｍ］＋。ｔＲ＝５．１６。
【０１３６】
２−アミノエチル（Ｓ）−４−（４−（６−アミノ−５−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）ピリジン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート・ＨＣｌ（６）の調製
【０１３７】
ＴＨＦ（１０ｍＬ）中の（５）（１２５ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）の混合物に、室温でＨＣｌ（４ｍＬ、ジオキサン中４Ｎ）を添加した。得られた混合物を１６時間撹拌した。溶媒を蒸発させ、得られた残渣をジエチルエーテルで粉砕した。固体を濾過し、乾燥させて（６）を得た（１００ｍｇ、９４％）。これを更に精製することなく次の工程に使用した。１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ８．０３−８．１３（ｍ，３Ｈ），７．７１−７．８５（ｍ，３Ｈ），７．５３−７．６３（ｍ，２Ｈ），７．４２−７．５２（ｍ，１Ｈ），７．１２（ｓ，１Ｈ），６．２１−６．３１（ｍ，１Ｈ），４．２５−４．４５（ｍ，１Ｈ），４．０５−４．１９（ｍ，４Ｈ），２．９−３．０７（ｍ，４Ｈ），１．９１−２．０５（ｍ，２Ｈ），１．８０−１．８９（ｍ，５Ｈ）。ＭＳｍ／ｚ＝５３７．２［Ｍ］＋。ＨＰＬＣ純度＝９８％、ｔＲ＝４．７２。
【０１３８】
４−（１０，１５，２０−トリス（４−（メトキシカルボキシル）フェニル）ポルフィリン−５−イル）安息香酸（８）の調製
【０１３９】
１，２−ジクロロエタン（１０ｍＬ）中のテトラメチルポルフィリン誘導体（７）（１．０ｇ、１．１８ｍｍｏｌ）及びＭｅ３ＳｎＯＨ（０．４３ｇ、２．３６ｍｍｏｌ）の混合物を、マイクロ波反応器中、１５０℃で１時間反応させた。溶媒を蒸発させ、残渣を精製のためにシリカに吸収させた。シリカ吸収粗化合物を０〜１０％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２（０．１％ＣＨ３ＣＯＯＨ）を用いる順相クロマトグラフィにより精製して、所望の化合物（８）（２７５ｍｇ、２８％）を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１７．０（ｓ，１Ｈ），１３．２（ｂｒｓ，１Ｈ），８．８１−８．８２（ｍ，８Ｈ），８．３５−８．３７（ｍ，１６Ｈ），４．０３（ｓ，９Ｈ）。
【０１４０】
トリメチル４，４’，４’’−（２０−（４−（（２−（（４−（４−（６−アミノ−５−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）ピリジン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボキシル）オキシ）エチル）カルバモイル）フェニル）ポルフィリン−５，１０，１５−トリイル）（Ｓ）−トリベンゾエート（標的ＯＳ００２）の調製
【０１４１】
ＮＭＰ（１０ｍＬ）中の（６）（１００ｍｇ、０．１６５ｍｍｏｌ）、（８）（１４３ｍｇ、０．１６５ｍｍｏｌ）、及びＰｙＢＯＰ（１３６ｍｇ、０．２４８ｍｍｏｌ）の混合物に、ＤＩＰＥＡ（０．２ｍＬ、０．９９ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を周囲温度で一晩撹拌した。混合物を水（２ｍＬ）でクエンチし、ＣＨ２Ｃｌ２（２×２０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、蒸発させた。粗化合物を０〜１０％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２を用いる順相クロマトグラフィにより精製して、所望の標的化合物ＯＳ００２を紫色の固体として得た（１３２ｍｇ、５６％）。１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ１２．１７（ｓ，１Ｈ），８．８１（ｄ，８Ｈ），８．４５（ｄ，６Ｈ），８．１８−８．２９（ｍ，１０Ｈ），７．７２（ｓ，１Ｈ），７．４３−７．５３（ｍ，３Ｈ），７．１４−７．１８（ｍ，１Ｈ），６．９３（ｔ，１Ｈ），６．７９（ｓ，１Ｈ），５．９−６．１（ｍ，１Ｈ），４．７２（ｓ，２Ｈ），４．５３（ｔ，１Ｈ），４．２−４．４８（ｍ３Ｈ），４．１０（ｓ，９Ｈ），３．８９−３．９５（ｍ，２Ｈ），２．９−３．１５（ｍ，２Ｈ），２．１３−２．２３（ｍ，２Ｈ），１．９−２．１９（ｍ，２Ｈ），１．７７（ｄ，３Ｈ）、ＨＰＬＣによる純度：＞９６％、ｔＲ＝７．６９。
【０１４２】
ＨＰＬＣ条件
【数５】
2019523783.tif 000024
【０１４３】
ＯＳ００２の合成スキームでは、アミド化試薬ＰｙＢＯＰを用いてアリールカルボキシレート（８）を第一級アミン（６）と縮合させてＯＳ００２を得ることが示されている。一実施形態では、アリールカルボキシレート（８）はカルボキシレートＰ１について交換してもよく、ここでカルボン酸置換基（ＣＯＯＨ）がオルト、メタ、又はパラ、即ち、２、３、又は４位を占め、ここで３つの置換基Ｌ、Ｍ、及びＮはそれらのそれぞれの芳香環上で独立してオルト、メタ、又はパラ（２、３、又は４位）を占め得る。
【０１４４】
【化５】
2019523783.tif 000025
【０１４５】
置換基Ｌ、Ｍ、及びＮは、以下からなる群から選択される：
ａ）Ｈ；
ｂ）カルボキシアリールエステル及び酸（ＣＯＯＲ）（ＲはＨ、低級直鎖又は分枝アルキル、シクロアルキル、ヒドロキシ置換アルキル、ポリエーテル（低級ＰＥＧ）、アミノ置換アルキル、ヘテロ置換シクロアルキル、及び更に糖であり得る）。更に、Ｒはアリール及びヘテロアリール置換基を含み得る；
ｃ）カルボキサミド（ＣＯＮＲ１Ｒ２）（Ｒ１及びＲ２基は、Ｈから個々に選択され得、低級直鎖又は分枝アルキル、シクロアルキル、ヒドロキシ置換アルキル、ポリエーテル（低級ＰＥＧ）、アミノ置換アルキル、ヘテロ置換シクロアルキルであり得る）。更に、Ｒはアリール及びヘテロアリール置換基を含み得る；
ｄ）アミノアリール基（ＮＲ１Ｒ２）（Ｒ１又はＲ２は、低級アルキル、分枝低級アルキル、シクロアルキル、又はヘテロ置換アルキル若しくはヘテロ置換シクロアルキルの群から個々に選択され得る）。ＲはまたＣ（Ｏ）Ｒのようなアシル基であり得、ここでＲは低級アルキル、ヒドロキシ置換アルキル、ポリエーテル（低級ＰＥＧ）、アミノ置換アルキル、シクロアルキルを含み得る。更に、Ｒはアリール及びヘテロアリール置換基を含み得る；
ｅ）チオール、スルホン酸、及びそれらの対応するアミドを含み得る硫黄含有官能基。アミドは更に、窒素部分ＮＨＲを含有するとして定義され得、このＮが硫黄原子に単結合で接続しており、ここでＲは低級アルキル、シクロアルキル、又はヘテロ置換アルキル若しくはヘテロ置換シクロアルキルであり得る。ＲはまたＣ（Ｏ）Ｒのようなアシル基であり得、ここでＲは低級アルキル、ヒドロキシ置換アルキル、ポリエーテル（低級ＰＥＧ）、アミノ置換アルキル、シクロアルキルを含み得る。更に、Ｒはアリール及びヘテロアリール置換基を含み得る；
ｆ）低級直鎖又は分枝アルキル基、シクロアルキル基、ヒドロキシ置換アルキル、ポリエーテル（低級ＰＥＧ）、アミノ置換アルキル、シクロアルキル及びヘテロ置換シクロアルキル；並びに
ｇ）酸素基、例えばヒドロキシ及び置換ヒドロキシアリール（ＯＨ又はＯＲ）（ここでＲは低級直鎖又は分枝アルキル基、シクロアルキル基、ヒドロキシ置換アルキル、ポリエーテル（低級ＰＥＧ）、アミノ置換アルキル、シクロアルキル及びヘテロ置換シクロアルキルを含む群から選択され得る）。更に、Ｒはアシル（Ｃ（Ｏ）Ｒ）、カルバモイルオキシ（Ｃ（Ｏ）ＮＲ１Ｒ２）を含み得、ここでＲ１及びＲ２は低級アルキル、アリール及びヘテロアリール置換基である。
【０１４６】
更なる実施形態では、カルボキシレート置換基（ＣＯＯＨ）はその芳香環上のパラ（４位）を占め、更に他の３つの芳香環のそれぞれ上の置換基は同一であり、即ちＬ＝Ｍ＝Ｎである。更に、置換基Ｌ、Ｍ、及びＮは、各芳香環上のそれらの位置が同一であるように位置している；例えば、各置換基がそのそれぞれの芳香環上のメタ位を占める場合。好ましい実施態様は、置換基Ｌ、Ｍ、及びＮが全てカルボキシレート（ＣＯＯＨ）又はカルボキシメチル（ＣＯＯＭｅ）であり、それらのそれぞれの芳香環のパラ位（即ち、４位）に位置する場合である。
【０１４７】
図６に示すように、出発材料であるｔｅｒｔ−ブチル（２−ヒドロキシエチル）カルバメート（２）は、シゾチニブの窒素に対するカルバメート結合及び（８）のカルボキシレートに対するアミド結合を介してポルフィリン（８）をシゾチニブに接続する連結体部分の重要な構築ブロックとして利用される。一実施形態では、出発材料（２）は保護アミノアルコールＬ５又はＬ６で置き換えられ、ここで基Ｐはカルバメート（例えば、ＢＯＣ、ＦＭＯＣ、Ａｌｌｏｃ、ＣＢＺ）、アミド（例えば、アセトアミド、ジクロロアセトアミド）を含み得るアミン保護基又はアミンの窒素と保護基の炭素又はケイ素のいずれかとの間の結合を含有する他の保護基（例えば、ベンジル、ｔｅｒｔ−ブチル、トリイソプロピルシリル）を表す。Ｌ５又はＬ６では、ｎ＝１〜１２である。好ましい実施形態では、アミノアルコールＬ５は、ＰがＢＯＣであり、ｎ＝１であるように選ばれる。
【０１４８】
【数６】
2019523783.tif 000026
【０１４９】
図６は、クリゾチニブがカルバモイルアミン部分によってその第二級アミンで官能化されている重要な中間体（６）の調製を示す。一実施形態では、（１）の毒素、キナーゼ阻害剤クリゾチニブは、組Ｔｎａから選択されるキナーゼ阻害剤と置き換えられる（表７）。Ｘは、Ｌ５又はＬ６に対するアミド結合を表す。好ましい実施形態では、Ｐ１はポルフィリンであり、ここでＬ、Ｍ、及びＮは、全てポルフィリン環に対してパラに位置するカルボン酸又はカルボキシメチル基であり、ここでリンカーに対してアミド結合を形成するカルボン酸基はポルフィリン環に対してパラに位置する。更に、Ｌ５が使用され、ここでＰ＝Ｈ及びｎ＝１であり、キナーゼ阻害剤はクリゾチニブである。
【０１５０】
標的ＯＳ００９の合成のための手順は図１５に示され、以下に記載される。
【０１５１】
（Ｓ）−４，４’，４’’−（２０−（４−（（２−（（４−（４−（６−アミノ−５−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）ピリジン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボニル）オキシ）エチル）カルバモイル）フェニル）ポルフィリン−５，１０，１５−トリイル）トリ安息香酸（２）の調製
【０１５２】
ＴＨＦ：ＭｅＯＨ：Ｈ２Ｏ（１．５ｍＬ、３：１：１）中のＯＳ００２（３５ｍｇ、２．０３ｍｍｏｌ）の混合物にＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏ（７ｍｇ、０．１６６ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を室温で６４時間撹拌した。溶媒を蒸発させ、０．１ＭのＨＣｌ水溶液を添加することによって反応混合物のｐＨをｐＨ６〜７に調整し、凍結乾燥した。この手順に従って、追加のバッチを２５ｍｇ規模で同様に調製した。合わせたバッチを、溶媒系としてアセトニトリル−水（０．１％ＴＦＡ）を用いる分取ＨＰＬＣによって精製して、緑色の固体として所望の化合物（２）（１７．５ｍｇ、３０％）を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ＝１３０９．３［Ｍ］＋。ＨＰＬＣによる純度（ＥＬＳＤ）：＞９７％、ｔＲ＝６．０。
【０１５３】
ＨＰＬＣ条件。
可変波長検出器及びＥＬＳＤ検出器を備えたＡｇｉｌｅｎｔＴｅｃｈ１１００シリーズＨＰＬＣシステム
カラム：Ａｇｅｌａ、Ｄｕｒａｓｈｅｌｌ  Ｃ１８、３．０μｍ、４．６０×５０ｍｍ。
移動相：Ａ（０．１％ＴＦＡを含むＡＣＮ）
移動相：Ｄ（０．１％ＴＦＡを含むＨ２Ｏ）
【０１５４】
標的ＯＳ００２４の合成のための手順は図７に示され、以下に記載される。
【０１５５】
工程１：エチル５−（３−（１０，１５，２０−トリス（３−ヒドロキシフェニル）ポルフィリン−５−イル）フェノキシ）ペンタノエート）（２）の合成
【０１５６】
ＤＭＦ（３０ｍＬ）中のメソ−テトラキス（３−ヒドロキシフェニル）ポルフィリン（１）（１．２５ｇ、１．８４ｍｍｏｌ）及びＫ２ＣＯ３（０．５ｇ）の混合物を窒素下に室温で３０分間撹拌した。エチル５−ブロモペンタノエート（１．１５ｇ、５．５ｍｍｏｌ、３当量）を添加した。混合物を室温で一晩撹拌した。反応混合物をＤＣＭで希釈し、水、飽和ＮａＨＣＯ３（水溶液）、水、及びブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、蒸発させた。粗残渣を２回の連続カラムクロマトグラフィで精製して（２）を得た（０．４２ｇ、２８％）。１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１２．０（ｓ，１Ｈ），９．９０（ｓ，３Ｈ），８．８８（ｓ，８Ｈ），７．６６−７．７９（ｍ，３Ｈ），７．５２−７．６５（ｍ，９Ｈ），７．３６−７．７．４２（ｍ，１Ｈ），７．１８−７．２６（ｍ，３Ｈ），４．１２−４．２０（ｍ，２Ｈ），４．０５（ｑ，２Ｈ），２．３４−２．４０（ｍ，２Ｈ），１．６５−１．８５（ｍ，４Ｈ），１．１２（ｔ，３Ｈ）。
【０１５７】
工程２：５−（３−（１０，１５，２０−トリス（３−ヒドロキシフェニル）ポルフィリン−５−イル）フェノキシ）ペンタン酸（３）の合成
【０１５８】
ＴＨＦ（４５ｍＬ）中の（２）（１５７ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）の溶液に、室温で水（３０ｍＬ）中のＬｉＯＨ−Ｈ２Ｏ（０．１５ｇ）の溶液を添加した。混合物を室温で一晩撹拌した。ＴＨＦを蒸発させ、飽和ＮＨ４Ｃｌで希釈し、ＤＣＭで抽出し、ブラインで洗浄し、蒸発させた。それを更に精製することなく次の工程の反応に使用した。（３）（０．１４ｇ，９２％）；１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１２．０（ｓ，２Ｈ），９．９０（ｓ，３Ｈ），８．８９（ｓ，８Ｈ），７．６６−７．８２（ｍ，３Ｈ），７．５４−７．６５（ｍ，９Ｈ），７．３６−７．７．４２（ｍ，１Ｈ），７．２０−７．２６（ｍ，３Ｈ），４．１４−４．２２（ｍ，２Ｈ），２．２６−２．３６（ｍ，２Ｈ），１．６５−１．８５（ｍ，４Ｈ）。
【０１５９】
工程３：Ｎ−（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ，６Ｒ）−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−（（（１Ｓ，３Ｓ）−３，５，１２−トリヒドロキシ−３−（２−ヒドロキシアセチル）−１０−メトキシ−６，１１−ジオキソ−１，２，３，４，６，１１−ヘキサヒドロテトラセン−１−イル）オキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−５−（３−（１０，１５，２０−トリス（３−ヒドロキシフェニル）ポルフィリン−５−イル）フェノキシ）ペンタンアミド（ＯＳ００２４）の合成
【０１６０】
ＤＭＦ（５．５ｍＬ）中の（３）（５３ｍｇ、０．０６８ｍｍｏｌ）の溶液に、ＨＡＴＵ（５６ｍｇ、０．１４７ｍｍｏｌ、２．１６当量）及びＤＩＰＥＡ（７５ｍＬ）を添加した。室温で５分間撹拌し、続いてドキソルビシン−ＨＣｌ（３５ｍｇ、０．０６ｍｍｏｌ、０．９当量）を添加する。混合物を室温で一晩撹拌した。ＤＭＦを蒸発させ、残渣を順相カラムクロマトグラフィ、続いて溶離剤としてＴＦＡを含むＡＣＮ／水を用いた分取ＨＰＬＣにより精製して、所望の標的化合物ＯＳ００２４（５ｍｇ）を得た。
ＭＳ（ＥＳ）［Ｍ＋１］＋＝１３０４；ＨＰＬＣ純度：９０％（ＵＶ４００）及びＥＬＳＤ（９６％）。
【０１６１】
ＨＰＬＣ条件
【数７】
2019523783.tif 000027
【０１６２】
図７は、炭素が二官能性リンカー出発材料エチル５−ブロモペンタノエートに由来する共有結合リンカーを介したポルフィリン（１）とドキソルビシンとの共役を示す。一実施形態では、ポルフィリン（１）はポルフィリンＰ４によって置換され得る、
【０１６３】
【化６】
2019523783.tif 000028
【０１６４】
式中、ヒドロキシ置換基は芳香環のオルト、メタ、又はパラ位（２、３、又は４位）に位置することができ、更にここで置換基Ｌ、Ｍ、及びＮは独立して、オルト、メタ、又はパラ、即ち、それらのそれぞれの芳香環上の２位、３位、又は４位を占め得る。置換基Ｌ、Ｍ、及びＮは、以下からなる組から選択される：
ａ）Ｈ；
ｂ）カルボキシアリールエステル及び酸（ＣＯＯＲ）（ＲはＨ、低級直鎖又は分枝アルキル、シクロアルキル、ヒドロキシ置換アルキル、ポリエーテル（低級ＰＥＧ）、アミノ置換アルキル、ヘテロ置換シクロアルキル及び更に糖であり得る）。更に、Ｒはアリール及びヘテロアリール置換基を含み得る；
ｃ）カルボキサミド（ＣＯＮＲ１Ｒ２）（Ｒ１及びＲ２基は個々にＨ、低級直鎖又は分枝アルキル、シクロアルキル、ヒドロキシ置換アルキル、ポリエーテル（低級ＰＥＧ）、アミノ置換アルキル、ヘテロ置換シクロアルキルであり得る）。更に、Ｒはアシル（Ｃ（Ｏ）Ｒ１）、カルバモイルオキシ（Ｃ（Ｏ）ＮＲ１Ｒ２）、アリール及びヘテロアリール置換基を含み得る。
ｄ）アミノアリール基（ＮＲ１Ｒ２）（Ｒ１又はＲ２は、低級アルキル、分枝低級アルキル、シクロアルキル、又はヘテロ置換アルキル若しくはヘテロ置換シクロアルキルの群から個々に選択され得る）。ＲはまたＣ（Ｏ）Ｒのようなアシル基であり得、ここでＲは低級アルキル、ヒドロキシ置換アルキル、ポリエーテル（低級ＰＥＧ）、アミノ置換アルキル、シクロアルキルを含み得る。更に、Ｒはアリール及びヘテロアリール置換基を含み得る；
ｅ）チオール、スルホン酸、及びそれらの対応するアミドを含み得る硫黄含有官能基。アミドは更に、窒素部分ＮＨＲを含有するとして定義され得、このＮが硫黄原子に単結合で接続しており、ここでＲは低級アルキル、シクロアルキル、又はヘテロ置換アルキル若しくはヘテロ置換シクロアルキルであり得る。ＲはまたＣ（Ｏ）Ｒのようなアシル基であり得、ここでＲは低級アルキル、ヒドロキシ置換アルキル、ポリエーテル（低級ＰＥＧ）、アミノ置換アルキル、シクロアルキルを含み得る。更に、Ｒはアリール及びヘテロアリール置換基を含み得る；
ｆ）低級直鎖又は分枝アルキル基、シクロアルキル基、ヒドロキシ置換アルキル、ポリエーテル（低級ＰＥＧ）、アミノ置換アルキル、シクロアルキル及びヘテロ置換シクロアルキル；
ｇ）酸素基、例えばヒドロキシ及び置換ヒドロキシアリール（ＯＨ又はＯＲ）（ここでＲは低級直鎖又は分枝アルキル基、シクロアルキル基、ヒドロキシ置換アルキル、ポリエーテル（低級ＰＥＧ）、アミノ置換アルキル、シクロアルキル及びヘテロ置換シクロアルキルを含む群から選択され得る）。更に、Ｒは、アシル、アリール、及びヘテロアリール置換基を含み得る；並びに
ｈ）シアノ又はハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）。
【０１６５】
更なる実施形態では、芳香族ヒドロキシ置換基（ＯＨ）はその芳香環上のメタ（３位）を占め、更に、他の３つの芳香環のそれぞれの置換基は同一であり、即ち、Ｌ＝Ｍ＝Ｎである。更に、置換基Ｌ、Ｍ、及びＮは、各芳香環上のそれらの位置が同一であるように位置している；例えば、各置換基がそのそれぞれの芳香環上のメタ位を占める場合。好ましい実施形態では、置換基Ｌ、Ｍ、及びＮは全てヒドロキシル（ＯＨ）であり、それらのそれぞれの芳香環のメタ（３位）に位置している。
【０１６６】
図７に示すように、ポルフィリンのフェノール基を塩基性条件下でエチル５−ブロモペンタノエートとのＳＮ２反応によりアルキル化して中間体（２）を得る。一実施形態では、エチル５−ブロモペンタノエートをＬ１又はＬ２で置き換えてもよい。特に、Ｌ１及びＬ２に関して、ｎは１〜１２で選択される。Ｘは、フェノール性酸素原子とのＳＮ２反応によるフェノール性エーテルの形成に適した脱離基である（例えば、図７の（２））。これに関連して、脱離基Ｘはハロゲン脱離基（Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）又はメシレート、トシレート、若しくはトリフレートのような種々の活性化スルホニルエステルのいずれかである。更に、Ｌ１又はＬ２上のＹは、様々なカルボキシレートエステル（ＯＲ）であり得、ここで、Ｒは、Ｈ、低級直鎖又は分枝アルキル、シクロアルキル、アリール又はヘテロアリールであるように選択され得る。好ましい実施形態では、Ｘはブロモであり、Ｙはエトキシである。
【０１６７】
ドキソルビシンへの結合は、ペプチドカップリング試薬ＨＡＴＵを用いて中間体（２）のエステル基を対応するカルボン酸（３）に鹸化し、カルボン酸とドキソルビシンのアミノ糖部分上のアミンとの間にアミド結合を形成し、ＯＳ００２４を得ることによって起こる。図７で共役した毒素はドキソルビシンであるが、より一般的には、表６に示すように、アミド結合を形成することができるアミノ糖部分を有するアントラサイクリン抗生物質から選択することができ、ここでドキソルビシンはＴ１ｂとして示され、類似体の例はＴ２ｂ〜Ｔ４ｂで示される。好ましい実施形態では、全ての置換基（Ｌ＝Ｍ＝Ｎ）がポルフィリン環に対してメタ位に位置するヒドロキシル基であるように選択され、ここでＬ１がｎ＝３、Ｘがブロモであり、ＹがエトキシであるようにＰ４が選択される。更に、この好ましい実施形態では、毒素はドキソルビシン（Ｔ１ｂ）として選択される。
【０１６８】
標的ＯＳ００７の合成手順は図８に示され、以下に記載される。
【０１６９】
４−（１０，１５，２０−トリス（４−（メトキシカルボニル）フェニル）ポルフィリン−５−イル）安息香酸（２）の調製
【０１７０】
１，２−ジクロロエタン（１０ｍＬ）中のテトラキス（４−カルボメトキシフェニル）ポルフィリン（１）（１．０ｇ、１．１８ｍｍｏｌ）及びＭｅ３ＳｎＯＨ（０．４３ｇ、２．３６ｍｍｏｌ）の混合物を、マイクロ波反応器中、１５０℃で１時間反応させた。溶媒を蒸発させ、精製のためにシリカゲルに吸収させた。シリカ吸収粗化合物を０〜１０％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２（０．１％ＣＨ３ＣＯＯＨ）を用いる順相クロマトグラフィにより精製して、所望の化合物（２）（２７５ｍｇ、２８％）を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１７．０（ｓ，１Ｈ），１３．２（ｂｒｓ，１Ｈ），８．８１−８．８２（ｍ，８Ｈ），８．３５−８．３７（ｍ，１６Ｈ），４．０３（ｓ，９Ｈ）。
【０１７１】
６−（４−（１０，１５，２０−トリス（４−（メトキシカルボニル）フェニル）ポルフィリン−５−イル）ベンズアミド）ヘキサン酸（４）の調製
【０１７２】
ＮＭＰ（１５ｍＬ）中の（２）（３００ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）、ＰｙＢＯＰ（３７４ｍｇ、０．７２ｍｍｏｌ）、及びＤＩＰＥＡ（０．４８ｍＬ、２．８ｍｍｏｌ）の混合物を室温で１０分間撹拌した。上記混合物に、６−アミノヘキサン酸（３、１８８ｍｇ、１．４４ｍｍｏｌ）を添加し、得られた混合物を室温で４８時間撹拌した。混合物をＣＨ２Ｃｌ２で希釈し、水（３×５０ｍＬ）で洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、蒸発させた。残渣を０〜１０％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２を用いる順相クロマトグラフィにより精製して、所望の化合物（４）（８９ｍｇ、２６％）を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ１２．１７（ｓ，１Ｈ），８．８０（ｓ，８Ｈ），８．１４−８．４４（ｍ，１６Ｈ），６．３９（ｂｒｔ，１Ｈ），３．５１−３．６２（ｍ，２Ｈ），２．４０−２．４５（ｍ，２Ｈ），１．４５−１．７９（ｍ，６Ｈ）。
【０１７３】
トリメチル４，４’，４’’−（２０−（４−（（６−（（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，６Ｒ）−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−（（（１Ｓ，３Ｓ））−３，５，１２−トリヒドロキシ−３−（２−ヒドロキシアセチル）−１０−メトキシ−６，１１−ジオキソ−１，２，３，４，６，１１−ヘキサヒドロテトラセン−１−イル）オキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）アミノ）−６−オキソヘキシル）カルバモイル）フェニル）ポルフィリン−５，１０，１５−トリイル）トリベンゾエート（ＯＳ００７）の調製。
【０１７４】
ＤＭＦ（２．５ｍＬ）中の（４）（２０ｍｇ、０．０２１ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（１９．２ｍｇ、０．０５１ｍｍｏｌ）、及びＤＩＰＥＡ（３０μＬ、０．１６８ｍｍｏｌ）の混合物に、室温で１０分間撹拌した。上記混合物に、ドキソルビシン．ＨＣｌ（（５）、１３．５ｍｇ、０．０２３ｍｍｏｌ）を添加し、得られた混合物を室温で１６時間撹拌した。混合物をＣＨ２Ｃｌ２で希釈し、水（３×１０ｍＬ）で洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、蒸発させた。残渣を、０〜１０％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２を用いる順相クロマトグラフィにより精製して、所望の化合物ＯＳ００７（２１ｍｇ、６８％）を得た。％）。１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１２．０（ｓ，１Ｈ），９．９０（ｓ，３Ｈ），８．８８（ｓ，８Ｈ），７．６６−７．７９（ｍ，３Ｈ），７．５２−７．６５（ｍ，９Ｈ），７．３６−７．７．４２（ｍ，１Ｈ），７．１８−７．２６（ｍ，３Ｈ），４．１２−４．２０（ｍ，２Ｈ），４．０５（ｑ，２Ｈ），２．３４−２．４０（ｍ，２Ｈ），１．６５−１．８５（ｍ，４Ｈ），１．１２（ｔ，３Ｈ）。
【０１７５】
図８において、ＰｙＢＯＰを用いてポルフィリンカルボキシレート（２）を６−アミノヘキサン酸（３）と縮合させてアミド（４）を得る。一実施形態では、アミノ酸（３）はアミノ酸Ｌ３又はＬ４で置き換えられ、ここで基ＰはＨを表す。Ｌ３及びＬ４におけるｎの値は１〜１２から選択され、ＹはＯＨである。
【０１７６】
【数８】
2019523783.tif 000029
【０１７７】
図８に示すアントラサイクリン毒素はドキソルビシンである。しかしながら、一実施形態では、アントラサイクリンは、Ｔ１ｂがドキソルビシンである基Ｔ１ｂ〜Ｔ４ｂから選択されてもよい（表６）。
【０１７８】
図８は更に、ＢｙＰＯＰを用いて中間体（２）中のアミンを（４）のカルボン酸基と縮合させて共役体ＯＳ００７を得ることを記載している。従ってポルフィリン（４）は、ポルフィリン（２）から誘導され、ポルフィリン（２）は、Ｐ１で置き換えられてもよく、ここでカルボン酸置換基（ＣＯＯＨ）はオルト、メタ、又はパラ位、即ち、２位、３位、又は４位を占め、ここで３つの置換基Ｌ、Ｍ、及びＮは独立して、それらのそれぞれの芳香環上でオルト、メタ、又はパラ（２位、３位、又は４位）を占め得る。置換基Ｌ、Ｍ、及びＮは、以下からなる組から選択される：
ａ）Ｈ；
ｂ）カルボキシアリールエステル及び酸（ＣＯＯＲ）（ＲはＨ、低級直鎖又は分枝アルキル、シクロアルキル、ヒドロキシ置換アルキル、ポリエーテル（低級ＰＥＧ）、アミノ置換アルキル、ヘテロ置換シクロアルキル及び更に糖であり得る）。更に、Ｒはアリール及びヘテロアリール置換基を含み得る；
ｃ）カルボキサミド（ＣＯＮＲ１Ｒ２）（Ｒ１及びＲ２基は個々にＨ、低級直鎖又は分枝アルキル、シクロアルキル、ヒドロキシ置換アルキル、ポリエーテル（低級ＰＥＧ）、アミノ置換アルキル、ヘテロ置換シクロアルキルであり得る）。更に、Ｒはアリール及びヘテロアリール置換基を含み得る；
ｄ）アミノアリール基（ＮＲ１Ｒ２）（Ｒ１又はＲ２は、低級アルキル、分枝低級アルキル、シクロアルキル、又はヘテロ置換アルキル若しくはヘテロ置換シクロアルキルの群から個々に選択され得る）。ＲはまたＣ（Ｏ）Ｒのようなアシル基であり得、ここでＲは低級アルキル、ヒドロキシ置換アルキル、ポリエーテル（低級ＰＥＧ）、アミノ置換アルキル、シクロアルキルを含み得る。更に、Ｒはアリール及びヘテロアリール置換基を含み得る；
ｅ）チオール、スルホン酸、及びそれらの対応するアミドを含み得る硫黄含有官能基。アミドは更に、窒素部分ＮＨＲを含有するとして定義され得、このＮが硫黄原子に単結合で接続しており、ここでＲは低級アルキル、シクロアルキル、又はヘテロ置換アルキル若しくはヘテロ置換シクロアルキルであり得る。ＲはまたＣ（Ｏ）Ｒのようなアシル基であり得、ここでＲは低級アルキル、ヒドロキシ置換アルキル、ポリエーテル（低級ＰＥＧ）、アミノ置換アルキル、シクロアルキルを含み得る。更に、Ｒはアリール及びヘテロアリール置換基を含み得る；
ｆ）低級直鎖又は分枝アルキル基、シクロアルキル基、ヒドロキシ置換アルキル、ポリエーテル（低級ＰＥＧ）、アミノ置換アルキル、シクロアルキル及びヘテロ置換シクロアルキル；
ｇ）酸素基、例えばヒドロキシ及び置換ヒドロキシアリール（ＯＨ又はＯＲ）（ここでＲは低級直鎖又は分枝アルキル基、シクロアルキル基、ヒドロキシ置換アルキル、ポリエーテル（低級ＰＥＧ）、アミノ置換アルキル、シクロアルキル及びヘテロ置換シクロアルキルを含む群から選択され得る）。更に、Ｒはアシル（Ｃ（Ｏ）Ｒ）、カルバモイルオキシ（Ｃ（Ｏ）ＮＲ１Ｒ２）、アリール、及びヘテロアリール置換基を含み得る；並びに
ｈ）シアノ又はハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）。
【０１７９】
更なる実施形態では、カルボキシレート置換基（ＣＯＯＨ）はその芳香環上のパラ（即ち、４位）を占め、更に他の３つの芳香環のそれぞれ上の置換基は同一であり、即ち、Ｌ＝Ｍ＝Ｎである。更に、置換基Ｌ、Ｍ、及びＮは、各芳香環上のそれらの位置が同一であるように位置している；例えば、各置換基がそのそれぞれの芳香環上のメタ位を占める場合。好ましい実施態様は、置換基Ｌ、Ｍ、及びＮが全てカルボキシレート（ＣＯＯＨ）又はカルボキシメチル（ＣＯＯＭｅ）であり、それらのそれぞれの芳香環のパラ位（即ち、４位）に位置する場合である。
【０１８０】
標的ＯＳ０３０の合成手順は図９に示され、以下に記載される。
【０１８１】
４−（１０，１５，２０−トリス（４−（メトキシカルボニル）フェニル）ポルフィリン−５−イル）安息香酸（２）の調製
【０１８２】
１，２−ジクロロエタン（１０ｍＬ）中の１（１．０ｇ、１．１８ｍｍｏｌ）及びＭｅ３ＳｎＯＨ（０．４３ｇ、２．３６ｍｍｏｌ）の混合物を、マイクロ波反応器中、１５０℃で１時間反応させた。溶媒を蒸発させ、精製のためにシリカゲルに吸収させた。シリカ吸収粗化合物を０〜１０％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２（０．１％ＣＨ３ＣＯＯＨ）を用いる順相クロマトグラフィにより精製して、所望の化合物（２）（２７５ｍｇ、２８％）を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１７．０（ｓ，１Ｈ），１３．２（ｂｒｓ，１Ｈ），８．８１−８．８２（ｍ，８Ｈ），８．３５−８．３７（ｍ，１６Ｈ），４．０３（ｓ，９Ｈ）。
【０１８３】
トリメチル４，４’，４’’−（２０−（４−（（２−ヒドロキシエチル）カルバモイル）フェニル）ポルフィリン−５，１０，１５−トリイル）トリベンゾエート（４）の調製
【０１８４】
ＮＭＰ（１ｍＬ）中の（２）（２０ｍｇ、０．０２４ｍｍｏｌ）、エタノールアミン３（５．８ｍｇ、０．０９６ｍｍｏｌ）、及びＰｙＢＯＰ（１９ｍｇ、０．０３６ｍｍｏｌ）の混合物に、ＤＩＰＥＡ（２０μＬ、０．１２ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を周囲温度で一晩撹拌した。混合物を水（１ｍＬ）でクエンチし、ＣＨ２Ｃｌ２（２×５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、蒸発させた。粗化合物を０〜１０％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２を用いる順相クロマトグラフィにより精製して、所望の化合物（４）を紫色の固体として得た（１４ｍｇ、６７％）。１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ１２．０９（ｓ，１Ｈ），８．８０（ｓ，８Ｈ），８．２６−８．４５（ｍ，１６Ｈ），６．９２（ｂｒｓ，１Ｈ），４．１０（ｓ，９Ｈ），３．９８−４．０１（ｍ，２Ｈ），３．８０−３．８４（ｍ，２Ｈ）。
【０１８５】
トリメチル４，４’，４’’−（２０−（４−（（２−（（（４−ニトロフェノキシ）カルボニル）オキシ）エチル）カルバモイル）フェニル）ポルフィリン−５，１０，１５−トリイル）トリベンゾエート（６）の調製。ＣＨ２Ｃｌ２：ＤＭＦ（８：２、１ｍＬ）中の（４）（１２ｍｇ、０．０１３７ｍｍｏｌ）及び（５）（４ｍｇ、０．０４９ｍｍｏｌ）の混合物に、室温でＤＩＰＥＡ（１２μＬｇ、０．０６８ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を４時間撹拌した。混合物をＤＣＭ（２ｍＬ）で希釈し、水（２×１０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、蒸発させた。粗残渣を０〜１０％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２を用いる順相クロマトグラフィにより精製して（６）（８ｍｇ、５７％）を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ１２．１７（ｓ，１Ｈ），８．８１（ｓ，８Ｈ），８．１６−８．４３（ｍ，１８Ｈ），７．４２（ｄ，２Ｈ），６．８４（ｂｒｔ，１Ｈ），４．６２−４．６４（ｍ，２Ｈ），３．９−４．１１（ｍ，１１Ｈ）。
【０１８６】
トリメチル４，４’，４’’−（２０−（４−（（２−（（（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，６Ｒ）−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−（（（１Ｓ，３Ｓ）−３，５，１２−トリヒドロキシ−３−（２−ヒドロキシアセチル）−１０−メトキシ−６，１１−ジオキソ−１，２，３，４，６，１１−ヘキサヒドロテトラセン−１−イル）オキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）カルバモイル）オキシ）エチル）カルバモイル）フェニル）ポルフィリン−５，１０，１５−トリイル）トリベンゾエート（ＯＳ０３０）の調製
【０１８７】
ＤＭＦ（０．８ｍＬ）中の（６）（８ｍｇ、０．００７６ｍｍｏｌ）及びドキソルビシン．ＨＣｌ（７）（３．７ｍｇ、０．００６４ｍｍｏｌ）の混合物に、室温でＤＩＰＥＡ（１０μＬｇ、０．０６１ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を４時間撹拌した。混合物をＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）で希釈した。混合物を水（２×５ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、蒸発させた。粗残渣を、０〜１０％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２を用いる順相クロマトグラフィにより精製して、ＯＳ００３０（７ｍｇ、７７％）を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１２．０（ｓ，１Ｈ），９．９０（ｓ，３Ｈ），８．８８（ｓ，８Ｈ），７．６６−７．７９（ｍ，３Ｈ），７．５２−７．６５（ｍ，９Ｈ），７．３６−７．７．４２（ｍ，１Ｈ），７．１８−７．２６（ｍ，３Ｈ），４．１２−４．２０（ｍ，２Ｈ），４．０５（ｑ，２Ｈ），２．３４−２．４０（ｍ，２Ｈ），１．６５−１．８５（ｍ，４Ｈ），１．１２（ｔ，３Ｈ）。
【０１８８】
図９において、ヒドロキシカルボキサミド（４）は、エタノールアミン（３）とポルフィリンカルボキシレート（２）との縮合から形成される。一実施形態では、エタノールアミン（３）はアミノアルコールＬ５又はＬ６で置き換えられてもよく、ここで基ＰはＨを表し、ｎ＝１〜１２である。図９に示す毒素はドキソルビシンである。しかしながら、一実施形態では、アントラサイクリンは、Ｔ１ｂがドキソルビシンである基Ｔ１ｂ〜Ｔ４ｂから選択されてもよい（表６）。一実施形態では、図９に示すカルボキシアリールポルフィリン（２）はＰ１で置き換えられてもよく、ここでカルボン酸置換基（ＣＯＯＨ）がオルト、メタ、又はパラ、即ち、２、３、又は４位を占め、ここで３つの置換基Ｌ、Ｍ、及びＮは独立して、それらのそれぞれの芳香環上でオルト、メタ、又はパラ（２位、３位、又は４位）を占め得る。置換基Ｌ、Ｍ、及びＮは、以下からなる組から選択される：
ａ）Ｈ；
ｂ）カルボキシアリールエステル及び酸（ＣＯＯＲ）（ＲはＨ、低級直鎖又は分枝アルキル、シクロアルキル、ヒドロキシ置換アルキル、ポリエーテル（低級ＰＥＧ）、アミノ置換アルキル、ヘテロ置換シクロアルキル及び更に糖であり得る）。更に、Ｒはアリール及びヘテロアリール置換基を含み得る；
ｃ）カルボキサミド（ＣＯＮＲ１Ｒ２）（Ｒ１及びＲ２基は個々にＨ、低級直鎖又は分枝アルキル、シクロアルキル、ヒドロキシ置換アルキル、ポリエーテル（低級ＰＥＧ）、アミノ置換アルキル、ヘテロ置換シクロアルキルであり得る）。更に、Ｒはアリール及びヘテロアリール置換基を含み得る；
ｄ）アミノアリール基（ＮＲ１Ｒ２）（Ｒ１又はＲ２は、低級アルキル、分枝低級アルキル、シクロアルキル、又はヘテロ置換アルキル若しくはヘテロ置換シクロアルキルの群から個々に選択され得る）。ＲはまたＣ（Ｏ）Ｒのようなアシル基であり得、ここでＲは低級アルキル、ヒドロキシ置換アルキル、ポリエーテル（低級ＰＥＧ）、アミノ置換アルキル、シクロアルキルを含み得る。更に、Ｒはアリール及びヘテロアリール置換基を含み得る；
ｅ）チオール、スルホン酸、及びそれらの対応するアミドを含み得る硫黄含有官能基。アミドは更に、窒素部分ＮＨＲを含有するとして定義され得、このＮが硫黄原子に単結合で接続しており、ここでＲは低級アルキル、シクロアルキル、又はヘテロ置換アルキル若しくはヘテロ置換シクロアルキルであり得る。ＲはまたＣ（Ｏ）Ｒのようなアシル基であり得、ここでＲは低級アルキル、ヒドロキシ置換アルキル、ポリエーテル（低級ＰＥＧ）、アミノ置換アルキル、シクロアルキルを含み得る。更に、Ｒはアリール及びヘテロアリール置換基を含み得る；
ｆ）低級直鎖又は分枝アルキル基、シクロアルキル基、ヒドロキシ置換アルキル、ポリエーテル（低級ＰＥＧ）、アミノ置換アルキル、シクロアルキル及びヘテロ置換シクロアルキル；
ｇ）酸素基、例えばヒドロキシ及び置換ヒドロキシアリール（ＯＨ又はＯＲ）（ここでＲは低級直鎖又は分枝アルキル基、シクロアルキル基、ヒドロキシ置換アルキル、ポリエーテル（低級ＰＥＧ）、アミノ置換アルキル、シクロアルキル及びヘテロ置換シクロアルキルを含む群から選択され得る）。更に、Ｒはアシル（Ｃ（Ｏ）Ｒ）、カルバモイルオキシ（Ｃ（Ｏ）ＮＲ１Ｒ２）を含み得、ここでＲ１及びＲ２はＨ、低級アルキル、アリール、及びヘテロアリール置換基であってもよい。
【０１８９】
好ましい実施形態では、ポルフィリンはＰ１であるように選択され、ここでカルボン酸基はポルフィリン環に対してパラ位にあり、Ｌ、Ｍ、及びＮは全てカルボン酸又はカルボキシメチルエステル基であり、全てポルフィリン環に対してパラ位にある。更に、この好ましい実施形態では、ｎ＝１及びＰ＝ＨとなるようにＬ５が選択される。
【０１９０】
標的ＯＳ０３５の合成手順は図１０に示され、以下に記載される。
【０１９１】
４−（１０，１５，２０−トリス（４−（メトキシカルボニル）フェニル）ポルフィリン−５−イル）安息香酸（２）の調製。１，２−ジクロロエタン（１０ｍＬ）中の（１）（１．０ｇ、１．１８ｍｍｏｌ）及びＭｅ３ＳｎＯＨ（０．４３ｇ、２．３６ｍｍｏｌ）の混合物を、マイクロ波反応器中、１５０℃で１時間反応させた。溶媒を蒸発させ、精製のためにシリカゲルに吸収させた。シリカ吸収粗化合物を０〜１０％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２（０．１％ＣＨ３ＣＯＯＨ）を用いる順相クロマトグラフィにより精製して、所望の化合物（２）（２７５ｍｇ、２８％）を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１７．０（ｓ，１Ｈ），１３．２（ｂｒｓ，１Ｈ），８．８１−８．８２（ｍ，８Ｈ），８．３５−８．３７（ｍ，１６Ｈ），４．０３（ｓ，９Ｈ）。
【０１９２】
６−（４−（１０，１５，２０−トリス（４−（メトキシカルボニル）フェニル）ポルフィリン−５−イル）ベンズアミド）ヘキサン酸（４）の調製
【０１９３】
ＮＭＰ（１５ｍＬ）中の（２）（３００ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）、ＰｙＢＯＰ（３７４ｍｇ、０．７２ｍｍｏｌ）、及びＤＩＰＥＡ（０．４８ｍＬ、２．８ｍｍｏｌ）の混合物を室温で１０分間撹拌した。上記混合物に、６−アミノヘキサン酸（３、１８８ｍｇ、１．４４ｍｍｏｌ）を添加し、得られた混合物を室温で４８時間撹拌した。混合物をＣＨ２Ｃｌ２で希釈し、水（３×５０ｍＬ）で洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、蒸発させた。残渣を０〜１０％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２を用いる順相クロマトグラフィにより精製して、所望の化合物（４）を得た（８９ｍｇ、２６％）。１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ１２．１７（ｓ，１Ｈ），８．８０（ｓ，８Ｈ），８．１４−８．４４（ｍ，１６Ｈ），６．３９（ｂｒｔ，１Ｈ），３．５１−３．６２（ｍ，２Ｈ），２．４０−２．４５（ｍ，２Ｈ），１．４５−１．７９（ｍ，６Ｈ）。
【０１９４】
トリメチル４，４’，４’’−（２０−（４−（（（３Ｒ，４Ｓ，７Ｓ，１０Ｓ）−４−（（Ｓ）−ｓｅｃ−ブチル））−３−（２−（（Ｓ）−２−（（１Ｒ，２Ｒ）−３−（（（１Ｓ，２Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−フェニルプロパン−２−イル）アミノ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル）ピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−７，１０−ジイソプロピル−５，１１−ジメチル−６，９，１２−トリオキソ−２−オキサ−５，８，１１−トリアザヘプタデカン−１７−イル）カルバモイル）フェニル）ポルフィリン−５，１０，１５−トリイル）トリベンゾエート（ＯＳ０３５）の調製
【０１９５】
ＤＭＦ（２ｍＬ）中の（４）（２１ｍｇ、０．０２２ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（２０．２ｍｇ、０．０５３ｍｍｏｌ）、及びＤＩＰＥＡ（３１μＬ、０．１７７ｍｍｏｌ）の混合物に、室温で１０分間撹拌した。上記混合物に、モノメチルアウリスタチンＥ（５、１７．５ｍｇ、０．０２４ｍｍｏｌ）、続いてＨＯＢｔ（３．３ｍｇ、０．０２４ｍｍｏｌ）を添加し、得られた混合物を室温で１６時間撹拌した。混合物をＣＨ２Ｃｌ２で希釈し、水（３×１０ｍＬ）で洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、蒸発させた。残渣を０〜１０％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２を用いる順相クロマトグラフィにより精製して、所望の標的化合物ＯＳ０３５を得た（１２ｍｇ、３３％）。
【０１９６】
図１０は、ＯＳ０３５を得るための、ペプチドカップリング試薬ＨＡＴＵを用いた、モノメチルアウリスタチンＥ（５）の第二級アミンと中間体４のカルボキシレートとの縮合を示す。一実施形態では、（５）はアウリスタチン関連ペプチドＴ５ｃ、Ｔ９ｃ、及びＴ１０ｃと置き換えられてもよい（表８）。
【０１９７】
表８．アウリスタチン関連ペプチド
【表８】
2019523783.tif 000030
【０１９８】
別の実施形態では、アミノ酸（３）は保護されたＬ３又はＬ４で置き換えられ、ここでＰ＝Ｈ及びｎ＝１〜１２であり、ここでＹはＯＨである。
【０１９９】
【数９】
2019523783.tif 000031
【０２００】
図１０では、ポルフィリンカルボキシレート（２）を第一級アミン（３）と縮合させてアミド結合を形成し、中間体カルボキシレート（４）を得、次にこれをＭＭＡＥ（５）と縮合させてＯＳ０３５を得る。しかしながら、別の実施形態では、（２）をＰ１で置き換えてもよく、ここでカルボン酸置換基（ＣＯＯＨ）が、ポルフィリン環に対してオルト位、メタ位、又はパラ位、即ち、２位、３位、又は４位を占め、ここで３つの置換基Ｌ、Ｍ、及びＮは独立して、それらのそれぞれの芳香環上でオルト、メタ、又はパラ（２位、３位、又は４位）を占め得る。置換基Ｌ、Ｍ、及びＮは、以下からなる組から選択される：
ａ）Ｈ；
ｂ）カルボキシアリールエステル及び酸（ＣＯＯＲ）（ＲはＨ、低級直鎖又は分枝アルキル、シクロアルキル、ヒドロキシ置換アルキル、ポリエーテル（低級ＰＥＧ）、アミノ置換アルキル、ヘテロ置換シクロアルキル、及び更に糖であり得る）。更に、Ｒはアリール及びヘテロアリール置換基を含み得る；
ｃ）カルボキサミド（ＣＯＮＲ１Ｒ２）（Ｒ１及びＲ２基は個々にＨ、低級直鎖又は分枝アルキル、シクロアルキル、ヒドロキシ置換アルキル、ポリエーテル（低級ＰＥＧ）、アミノ置換アルキル、ヘテロ置換シクロアルキルであり得る）。更に、Ｒはアリール及びヘテロアリール置換基を含み得る；
ｄ）アミノアリール基（ＮＲ１Ｒ２）（Ｒ１又はＲ２は、低級アルキル、分枝低級アルキル、シクロアルキル、又はヘテロ置換アルキル若しくはヘテロ置換シクロアルキルの群から個々に選択され得る）。ＲはまたＣ（Ｏ）Ｒのようなアシル基であり得、ここでＲは低級アルキル、ヒドロキシ置換アルキル、ポリエーテル（低級ＰＥＧ）、アミノ置換アルキル、シクロアルキルを含み得る。更に、Ｒはアリール及びヘテロアリール置換基を含み得る；
ｅ）チオール、スルホン酸、及びそれらの対応するアミドを含み得る硫黄含有官能基。アミドは更に、窒素部分ＮＨＲを含有するとして定義され得、このＮが硫黄原子に単結合で接続しており、ここでＲは低級アルキル、シクロアルキル、又はヘテロ置換アルキル若しくはヘテロ置換シクロアルキルであり得る。ＲはまたＣ（Ｏ）Ｒのようなアシル基であり得、ここでＲは低級アルキル、ヒドロキシ置換アルキル、ポリエーテル（低級ＰＥＧ）、アミノ置換アルキル、シクロアルキルを含み得る。更に、Ｒはアリール及びヘテロアリール置換基を含み得る；
ｆ）低級直鎖又は分枝アルキル基、シクロアルキル基、ヒドロキシ置換アルキル、ポリエーテル（低級ＰＥＧ）、アミノ置換アルキル、シクロアルキル及びヘテロ置換シクロアルキル；
ｇ）酸素基、例えばヒドロキシ及び置換ヒドロキシアリール（ＯＨ又はＯＲ）（Ｒは低級直鎖又は分枝アルキル基、シクロアルキル基、ヒドロキシ置換アルキル、ポリエーテル（低級ＰＥＧ）、アミノ置換アルキル、シクロアルキル及びヘテロ置換シクロアルキルを含む群から選択され得る）。更に、Ｒはアシル（Ｃ（Ｏ）Ｒ）、カルバモイルオキシ（Ｃ（Ｏ）ＮＲ１Ｒ２）を含み得、ここでＲ１及びＲ２は低級アルキル、アリール、及びヘテロアリール置換基である。
【０２０１】
好ましい実施形態では、ポルフィリンはＰ１であるように選択され、ここでカルボン酸基はポルフィリン環に対してパラ位にあり、Ｌ、Ｍ、及びＮは全てカルボン酸又はカルボキシメチルエステル基であり、全てポルフィリン環に対してパラ位にある。更に、この好ましい実施形態では、Ｌ３は、ｎ＝４及びＰ＝Ｈとなるように選択される。この実施形態では、毒素はＴ４ｃである（表８）。
【０２０２】
標的ＯＳ０３２の合成手順は図１１に示され、以下に記載される。
【０２０３】
４−（１０，１５，２０−トリス（４−（メトキシカルボニル）フェニル）ポルフィリン−５−イル）安息香酸（２）の調製
【０２０４】
１，２−ジクロロエタン（１０ｍＬ）中のテトラメチルポルフィリンエステル（１）（１．０ｇ、１．１８ｍｍｏｌ）及びＭｅ３ＳｎＯＨ（０．４３ｇ、２．３６ｍｍｏｌ）の混合物をマイクロ波反応器中、１５０℃で１時間反応させた。溶媒を蒸発させ、精製のためにシリカゲルに吸収させた。シリカ吸収粗化合物を０〜１０％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２（０．１％ＣＨ３ＣＯＯＨ）を用いる順相クロマトグラフィにより精製して、所望の化合物（２）を得た（２７５ｍｇ、２８％）。１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１７．０（ｓ，１Ｈ），１３．２（ｂｒｓ，１Ｈ），８．８１−８．８２（ｍ，８Ｈ），８．３５−８．３７（ｍ，１６Ｈ），４．０３（ｓ，９Ｈ）．
【０２０５】
トリメチル４，４’，４’’−（２０−（４−（（２−ヒドロキシエチル）カルバモイル）フェニル）ポルフィリン−５，１０，１５−トリイル）トリベンゾエート（４）の調製
【０２０６】
ＮＭＰ（１ｍＬ）中の（２）（２０ｍｇ、０．０２４ｍｍｏｌ）、エタノールアミン（３）（５．８ｍｇ、０．０９６ｍｍｏｌ）、及びＰｙＢＯＰ（１９ｍｇ、０．０３６ｍｍｏｌ）の混合物に、ＤＩＰＥＡ（２０μＬ、０．１２ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を周囲温度で一晩撹拌した。混合物を水（１ｍＬ）でクエンチし、ＣＨ２Ｃｌ２（２×５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、蒸発させた。粗化合物を０〜１０％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２を用いるＩＳＣＯにより精製して、所望の化合物（４）を紫色の固体として得た（１４ｍｇ、６７％）。１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ１２．０９（ｓ，１Ｈ），８．８０（ｓ，８Ｈ），８．２６−８．４５（ｍ，１６Ｈ），６．９２（ｂｒｓ，１Ｈ），４．１０（ｓ，９Ｈ），３．９８−４．０１（ｍ，２Ｈ），３．８０−３．８４（ｍ，２Ｈ）。
【０２０７】
トリメチル４，４’，４’’−（２０−（４−（（２−（（（４−ニトロフェノキシ）カルボニル）オキシ）エチル）カルバモイル）フェニル）フェニル）ポルフィリン−５，１０，１５−トリイル）トリベンゾエート（６）の調製
【０２０８】
ＣＨ２Ｃｌ２：ＤＭＦ（８：２、１ｍＬ）中の（４）（１２ｍｇ、０．０１３７ｍｍｏｌ）及びｐ−ニトロフェニルクロロホルメート５（４ｍｇ、０．０４９ｍｍｏｌ）の混合物に、室温でＤＩＰＥＡ（１２μＬｇ、０．０６８ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を４時間撹拌した。混合物をＤＣＭ（２ｍＬ）で希釈し、水（２×１０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、蒸発させた。粗残渣を０〜１０％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２を用いる順相クロマトグラフィにより精製して（６）を得た（８ｍｇ、５７％）。１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ１２．１７（ｓ，１Ｈ），８．８１（ｓ，８Ｈ），８．１６−８．４３（ｍ，１８Ｈ），７．４２（ｄ，２Ｈ），６．８４（ｂｒｔ，１Ｈ），４．６２−４．６４（ｍ，２Ｈ），３．９−４．１１（ｍ，１１Ｈ）。
【０２０９】
トリメチル４，４’，４’’−（２０−（４−（（（３Ｒ，４Ｓ，７Ｓ，１０Ｓ）−４−（（Ｓ）−ｓｅｃ−ブチル））−３−（２−（（Ｓ）−２−（（１Ｒ，２Ｒ）−３−（（（１Ｓ，２Ｒ）−１−ヒドロキシ−１−フェニルプロパン−２−イル）アミノ）−１−メトキシ−２−メチル−３−オキソプロピル）ピロリジン−１−イル）−２−オキソエチル）−７，１０−ジイソプロピル−５，１１−ジメチル−６，９，１２−トリオキソ−２，１３−ジオキサ−５，８，１１−トリアザペンタデカン−１５−イル）カルバモイル）フェニル）ポルフィリン−５，１０，１５−トリイル）トリベンゾエート（ＯＳ００３２）の調製
【０２１０】
ＤＭＦ（０．８ｍＬ）中の（６）（２０ｍｇ、０．０１９ｍｍｏｌ）及びモノメチルアウリスタチンＥ（７）（１５．１ｍｇ、０．０２１ｍｍｏｌ）の混合物に、室温でＤＩＰＥＡ（２７μＬｇ、０．１５３ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を周囲温度で１６時間撹拌した。混合物をＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）で希釈し、水（２×１０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、蒸発させた。粗残渣を、０〜１０％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２を用いる順相クロマトグラフィにより精製して、所望の標的ＯＳ００３２を得た（１５ｍｇ、７７％）。１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ８．８５（ｓ，８Ｈ），８．４３（ｄ，６Ｈ，Ｊ＝８），８．１８−８．３３（ｍ，１０Ｈ），７．２１−７．３１（ｍ，５Ｈ），６．４３（ｍ，１Ｈ），３．８０−４．８９（ｍ，１７Ｈ），３．７５（ｄ，１Ｈ，Ｊ＝７），３．１９−３．３４（ｍ，９Ｈ），２．９７（ｍ，６Ｈ），２．３１−２．４２（ｍ，４Ｈ），１．９７−２．１８（ｍ，３Ｈ），１．６０−１．７５（Ｍ，３ｈ），１．１７−１．３８（Ｍ，５Ｈ），０．６８−０．９７（ｍ，２６Ｈ）．
【０２１１】
図１１において、ヒドロキシアミド中間体（４）は、ポルフィリンカルボキシレート２とエタノールアミン（３）との縮合から形成される。
【０２１２】
一実施形態では、３はアミノアルコールＬ５又はＬ６で置き換えられ、ここで基ＰはＨを表し、ｎ＝１〜１２である。
【０２１３】
別の実施形態では、ＭＭＡＥ（７）は、アウリスアチン関連ペプチドＴ５ｃ、Ｔ９ｃ、及びＴ１０ｃで置き換えられてもよい（表８）。ＭＭＡＥは表８においてＴ４ｃとして示される。
【０２１４】
【数１０】
2019523783.tif 000032
【０２１５】
別の実施形態では、ポルフィリン（２）はＰ１で置き換えられてもよく、ここでカルボン酸置換基（ＣＯＯＨ）はオルト、メタ、又はパラ、即ち、２、３、又は４位を占め、ここで３つの置換基Ｌ、Ｍ、及びＮは独立して、それらのそれぞれの芳香環上でオルト、メタ、又はパラ（２、３、又は４位）を占め得る。置換基Ｌ、Ｍ、及びＮは、以下からなる組から選択される：
ａ）Ｈ；
ｂ）カルボキシアリールエステル及び酸（ＣＯＯＲ）（ＲはＨ、低級直鎖又は分枝アルキル、シクロアルキル、ヒドロキシ置換アルキル、ポリエーテル（低級ＰＥＧ）、アミノ置換アルキル、ヘテロ置換シクロアルキル及び更に糖であり得る）。更に、Ｒはアリール及びヘテロアリール置換基を含み得る；
ｃ）カルボキサミド（ＣＯＮＲ１Ｒ２）（Ｒ１及びＲ２基は個々にＨ、低級直鎖又は分枝アルキル、シクロアルキル、ヒドロキシ置換アルキル、ポリエーテル（低級ＰＥＧ）、アミノ置換アルキル、ヘテロ置換シクロアルキルであり得る）。更に、Ｒはアリール及びヘテロアリール置換基を含み得る；
ｄ）アミノアリール基（ＮＲ１Ｒ２）（Ｒ１又はＲ２は、低級アルキル、分枝低級アルキル、シクロアルキル、又はヘテロ置換アルキル若しくはヘテロ置換シクロアルキルの群から個々に選択され得る）。ＲはまたＣ（Ｏ）Ｒのようなアシル基であり得、ここでＲは低級アルキル、ヒドロキシ置換アルキル、ポリエーテル（低級ＰＥＧ）、アミノ置換アルキル、シクロアルキルを含み得る。更に、Ｒはアリール及びヘテロアリール置換基を含み得る；
ｅ）チオール、スルホン酸、及びそれらの対応するアミドを含み得る硫黄含有官能基。アミドは更に、窒素部分ＮＨＲを含有するとして定義され得、このＮが硫黄原子に単結合で接続しており、ここでＲは低級アルキル、シクロアルキル、又はヘテロ置換アルキル若しくはヘテロ置換シクロアルキルであり得る。ＲはまたＣ（Ｏ）Ｒのようなアシル基であり得、ここでＲは低級アルキル、ヒドロキシ置換アルキル、ポリエーテル（低級ＰＥＧ）、アミノ置換アルキル、シクロアルキルを含み得る。更に、Ｒはアリール及びヘテロアリール置換基を含み得る；
ｆ）低級直鎖又は分枝アルキル基、シクロアルキル基、ヒドロキシ置換アルキル、ポリエーテル（低級ＰＥＧ）、アミノ置換アルキル、シクロアルキル及びヘテロ置換シクロアルキル；
ｇ）酸素基、例えばヒドロキシ及び置換ヒドロキシアリール（ＯＨ又はＯＲ）（ここでＲは低級直鎖又は分枝アルキル基、シクロアルキル基、ヒドロキシ置換アルキル、ポリエーテル（低級ＰＥＧ）、アミノ置換アルキル、シクロアルキル及びヘテロ置換シクロアルキルを含む群から選択され得る）。更に、Ｒはアシル（Ｃ（Ｏ）Ｒ）、カルバモイルオキシ（Ｃ（Ｏ）ＮＲ１Ｒ２）を含み得、ここでＲ１及びＲ２はＨ、低級アルキル、アリール、及びヘテロアリール置換基であり得る。
【０２１６】
好ましい実施形態では、アミノアルコールＬ５は、ＰがＨであり、ｎ＝１であるように選択される。この実施形態では、ポルフィリンはＰ１であるように選択され、ここでカルボン酸基はポルフィリン環に対してパラ位にあり、Ｌ、Ｍ、及びＮは全てカルボン酸又はカルボキシメチルエステル基であり、全てポルフィリン環に対してパラ位にある。更に、毒素はＭＭＡＥ（Ｔ４ｃ）である。
【０２１７】
標的ＯＳ０２５の合成手順は図１２に示され、以下に記載される。
【０２１８】
１−（３−ヒドロキシプロピル）−４−（１０，１５，２０−トリ（ピリジン−４−イル）ポルフィリン−５−イル）ピリジン−１−イウム（３）の調製
【０２１９】
ＥｔＯＨ及びＣＨＣｌ３（４００ｍＬ、１：３）の混合物中の（１）（１．２６ｇ、２．０３ｍｍｏｌ）と３−ブロモ−１−プロパノール（２）（０．４３ｇ、２．３６ｍｍｏｌ）の混合物を６日間還流した。溶媒を蒸発させ、精製のためにシリカに吸収させた。シリカ吸収粗化合物を２本の短いシリカゲルカラム（ＣＨ２Ｃｌ２：ＥｔＯＨ、７：３、ｖ／ｖ）で精製して、所望の化合物（３）（７４ｍｇ、６％）を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１１．９（ｓ，１Ｈ），９．５（ｄ，２Ｈ），８．８１−９．０８（ｍ，１６Ｈ），８．２７（ｄ，６Ｈ），５．００−５．０３（ｍ，３Ｈ），２．７５−２．７７（ｍ，２Ｈ），２．３２−２．３５（ｍ，２Ｈ）。ＭＳ  ｍ／ｚ＝６７７［Ｍ］＋。
【０２２０】
１−（３−（（（（２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，６Ｒ）−３−ヒドロキシ−２−メチル−６−（（（１Ｓ，３Ｓ）−３，５，１２−トリヒドロキシ−３−（２−ヒドロキシアセチル）−１０−メトキシ−６，１１−ジオキソ−１，２，３，４，６，１１−ヘキサヒドロテトラセン−１−イル）オキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）カルバモイル）オキシ）プロピル）−４−（１０，１５，２０−トリ（ピリジン−４−イル）ポルフィリン−５−イル）ピリジン−１−イウム（ＯＳ００２５）の調製
【０２２１】
ＤＭＳＯ−ｄ６（１ｍＬ）中の（３）（２３ｍｇ、０．０３４ｍｍｏｌ）及び（４）（１３ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）の混合物に、ＤＩＰＥＡ（９μＬ、０．０５ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を周囲温度で一晩撹拌した。ＨＰＬＣは（３）の消費及び新たなピークを示した。この時点で、（５）（２０ｍｇ、０．０３４ｍｍｏｌ）、続いてＤＩＰＥＡ（１８μＬ、０．１ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温で７時間撹拌し、６４時間かけて０℃で保存した。混合物を９ｍＬのクロロホルムで希釈した。遠心分離（１５分、３０００ｒｐｍ）後に上清層を集め、蒸発させた。残渣を逆相ＩＳＣＯにより水−アセトニトリル（０．１％ＴＦＡ）を用いて精製し、所望の化合物（６）（１２．５ｍｇ、３０％）を紫色の固体として得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ＝１２４７［Ｍ］＋。ＨＰＬＣによる純度（ＥＬＳＤ）：＞８９％、ｔＲ＝３．５８。
【０２２２】
ＨＰＬＣ条件
【数１１】
2019523783.tif 000033
【０２２３】
合成スキームは、ＳＮ２反応を介して、１−ブロモ−３−プロパノール（２）を用いるメソ−テトラキス（４−ピリジル）ポルフィリン（１）のアルキル化によりピリジニウム中間体（３）を得ることを示す。一実施形態では、ブロモアルコール（２）は関連ブロモアルコールＬ７及びＬ８で置き換えられてもよく、ここでｎは１〜１２から選択される。
【０２２４】
【数１２】
2019523783.tif 000034
【０２２５】
ポルフィリン（１）はまた、Ｐ２によって置換されていてもよく、ここでヘテロ原子の位置は、４つの芳香環上のＸ、Ｙ、又はＺのうちの１つである。従って、Ｐ２の各ピリジン環上で、窒素（Ｎ）はＸ又はＹ又はＺのいずれかに位置し、ＣＨは残りの２つの位置を占める。例えば、ポルフィリンメソ−テトラキス（３−ピリジル）ポルフィリンは、４つ全てのピリジン環において、ＹがＮであり、Ｘ及びＺがＣＨである場合に表すことができる。一般的な実施形態では、各環上のＮの位置は異なり得る。より好ましい実施形態では、各ピリジン環中のＮ原子の位置は、４つ全てのピリジン環中で同じである。好ましい実施形態では、ポルフィリンメソ−テトラキス（４−ピリジル）ポルフィリンは、Ｘ＝Ｎとして表すことができ、Ｙ及びＺは、４つ全てのピリジン環上のＣＨである。
【０２２６】
図１２は更に、活性カーボネート（４）とドキソルビシンのアミノ糖とを反応させて、ＯＳ０２５中にカルバメート部分を得ることを示している。別の実施形態では、ドキソルビシンは、Ｔ１ｂがドキソルビシンである基Ｔ１ｂ〜Ｔ４ｂから選択されるアントラサイクリンで置き換えられ得る（表６）。
【０２２７】
好ましい実施形態では、Ｐ２は、Ｘ＝Ｎ、Ｙ＝Ｚ＝ＣＨであるように選択され；Ｌ７はｎ＝１となるように選択され；ＴｎｂはＴ１ｂ（ドキソルビシン）として選択される。
【０２２８】
標的ＯＳ００２９の合成のための手順は図１３に示され、以下に記載される。
【０２２９】
１−（３−ヒドロキシプロピル）−４−（１０，１５，２０−トリ（ピリジン−４−イル）ポルフィリン−５−イル）ピリジン−１−イウム（３）の調製
【０２３０】
ＥｔＯＨ及びＣＨＣｌ３（４００ｍＬ、１：３）の混合物中の（１）（１．２６ｇ、２．０３ｍｍｏｌ）及び（２）（３．３１ｇ、２３．８６ｍｍｏｌ）の混合物を６日間還流した。溶媒を蒸発させ、精製のためにシリカに吸着させた。シリカ吸着粗化合物を２つの連続する短いシリカゲルカラム（ＣＨ２Ｃｌ２：ＥｔＯＨ、７：３、ｖ／ｖ）によって精製して、所望の化合物（３）（７４ｍｇ、６％）を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１１．９（ｓ，１Ｈ），９．５（ｄ，２Ｈ），８．８１−９．０８（ｍ，１６Ｈ），８．２７（ｄ，６Ｈ），５．００−５．０３（ｍ，３Ｈ），２．７５−２．７７（ｍ，２Ｈ），２．３２−２．３５（ｍ，２Ｈ）。ＭＳ  ｍ／ｚ＝６７７［Ｍ］＋。
【０２３１】
（Ｓ）−１−（３−（（４−（４−（４−アミノ−３−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）フェニル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−カルボニル）オキシ）プロピル）−４−（１０，１５，２０−トリ（ピリジン−４−イル）ポルフィリン−５−イル）ピリジン−１−イウム（ＯＳ００２９）の調製
【０２３２】
ＤＭＳＯ−ｄ６（１．５ｍＬ）中の（３）（３０ｍｇ、０．０４４ｍｍｏｌ）及び炭酸ジスクシンイミジル（１３．６ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）の混合物に、ＤＩＰＥＡ（１１μＬ、０．０６６ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を周囲温度で一晩撹拌した。ＨＰＬＣは（３）の消費及び新たなピークを示した。この時点で、クリゾチニブ塩酸塩（２５．８ｍｇ、０．０５３ｍｍｏｌ）、続いてＤＩＰＥＡ（２２μＬ、０．０６６ｍｍｏｌ）を添加した。次いで混合物を室温で７時間撹拌し、０℃で６４時間保存した。粗混合物を逆相カラムにロードし、０〜１００％アセトニトリル−水（０．１％ＴＦＡ）で溶離した。純粋な画分を集めて凍結乾燥した。固体をクロロホルム（５ｍＬ×４）で粉砕／超音波処理し、上清層を分離した。残った固体を一晩真空乾燥して、（６）（２３ｍｇ、４５％）を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ＝１１５２．３［Ｍ］＋。ＨＰＬＣによる純度（ＥＬＳＤ）：＞９７％、ｔＲ＝４．５８。
【０２３３】
ＨＰＬＣ条件
【数１３】
2019523783.tif 000035
【０２３４】
図１３は、ＳＮ２反応により、ヒドロキシピリジニウム中間体（３）を得るための、１−ブロモ−３−プロパノール（２）によるメソ−テトラキス（４−ピリジル）ポルフィリン（１）のアルキル化を示す。一実施形態では、ブロモアルコール（２）はＬ７及びＬ８で置き換えられてもよく、ここでｎ＝１〜１２である。ポルフィリン１はポルフィリンＰ２で置き換えられてもよく、ここでヘテロ原子の位置は４つの芳香環上のＸ、Ｙ、又はＺのうちの１つである。従って、Ｐ２の各ピリジン環上で、窒素（Ｎ）はＸ又はＹ又はＺのいずれかに位置し、ＣＨは残りの２つの位置を占める。例えば、ポルフィリンメソ−テトラキス（３−ピリジル）ポルフィリンは、４つ全てのピリジン環において、ＹがＮであり、Ｘ及びＺがＣＨである場合に表すことができる。一般的な実施形態では、各環上のＮの位置は異なり得る。より好ましい実施形態では、各ピリジン環中のＮ原子の位置は、４つ全てのピリジン環中で同じである。好ましい実施形態では、ポルフィリンメソ−テトラキス（４−ピリジル）ポルフィリンは、Ｘ＝Ｎとして表すことができ、Ｙ及びＺは、４つ全てのピリジン環上のＣＨである。図１３は更に、活性化カーボネート中間体を形成するための（３）とジスクシミジルカーボネートとの反応を示し、これは続いて工程３においてシリゾチニブの第二級アミンと反応してＯＳ００２９を得る。
【０２３５】
更に、表７に示すように、クリゾチニブは、この縮合反応においてキナーゼ阻害剤（Ｔ１ａ〜Ｔ３３ａ）に置き換えられてもよい。
【０２３６】
好ましい実施形態では、Ｐ２は、Ｘ＝Ｎ、Ｙ＝Ｚ＝ＣＨとなるように選択され；Ｌ７はｎ＝１となるように選択され；クリゾチニブは毒素である。
【０２３７】
標的ＯＳ００２３の合成手順を図１４に示され、以下に記載される。
【０２３８】
エチル５−（３−（１０，１５，２０−トリス（３−ヒドロキシフェニル）ポルフィリン−５−イル）フェノキシ）ペンタノエート）（２）の合成
【０２３９】
ＤＭＦ（３０ｍＬ）中の１（１．２５ｇ、１．８４ｍｍｏｌ）及びＫ２ＣＯ３（０．５ｇ）の混合物を窒素下に室温で３０分間撹拌した。エチル５−ブロモペンタノエート（１．１５ｇ、５．５ｍｍｏｌ、３当量）を添加した。混合物を室温で一晩撹拌した。混合物をＤＣＭで希釈し、水で洗浄し、飽和ＮａＨＣＯ３（水溶液）、水、及びブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、蒸発させた。粗残渣を２回連続カラムクロマトグラフィで精製して、（２）（０．４２ｇ、２８％）を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１２．０（ｓ，１Ｈ），９．９０（ｓ，３Ｈ），８．８８（ｓ，８Ｈ），７．６６−７．７９（ｍ，３Ｈ），７．５２−７．６５（ｍ，９Ｈ），７．３６−７．７．４２（ｍ，１Ｈ），７．１８−７．２６（ｍ，３Ｈ），４．１２−４．２０（ｍ，２Ｈ），４．０５（ｑ，２Ｈ），２．３４−２．４０（ｍ，２Ｈ），１．６５−１．８５（ｍ，４Ｈ），１．１２（ｔ，３Ｈ）。
【０２４０】
５−（３−（１０，１５，２０−トリス（３−ヒドロキシフェニル）ポルフィリン−５−イル）フェノキシ）ペンタン酸（３）の合成
【０２４１】
ＴＨＦ（４５ｍＬ）中の（２）（１５７ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）の溶液に、室温で水（３０ｍＬ）中のＬｉＯＨ−Ｈ２Ｏ（０．１５ｇ）の溶液を添加した。混合物を室温で一晩撹拌した。ＴＨＦで蒸発し、飽和ＮＨ４Ｃｌ（水溶液）で希釈し、ＤＣＭで抽出し、ブラインで洗浄し、蒸発させた。中間体を更に精製することなく次の工程の反応に使用した。（３）（０．１４ｇ，９２％）１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ１２．０（ｓ，２Ｈ），９．９０（ｓ，３Ｈ），８．８９（ｓ，８Ｈ），７．６６−７．８２（ｍ，３Ｈ），７．５４−７．６５（ｍ，９Ｈ），７．３６−７．７．４２（ｍ，１Ｈ），７．２０−７．２６（ｍ，３Ｈ），４．１４−４．２２（ｍ，２Ｈ），２．２６−２．３６（ｍ，２Ｈ），１．６５−１．８５（ｍ，４Ｈ）。
【０２４２】
５−（３−（１０，１５，２０−トリス（３−アセトキシフェニル）ポルフィリン−５−イル）フェノキシ）ペンタン酸（４）の合成
【０２４３】
１％ＴｆＯＨ／ＣＨ３ＣＮ（２５ｍＬ）中の（３）（６７ｍｇ、０．０６８ｍｍｏｌ）の混合物に、室温でＡｃＣｌ（１．５ｍＬ）を添加した。反応を同じ温度で２時間撹拌し、次いで冷半濃縮ＮａＨＣＯ３及びＥｔＯＡｃに注ぎ、ＥｔＯＡｃで抽出し、ブラインで洗浄し、溶媒を蒸発させた。粗残渣をカラムクロマトグラフィで精製して、４（７５ｍｇ、９５％）を得た。１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ１２．１（ｓ，１Ｈ），８．９１（ｓ，８Ｈ），８．０３−８．１０（ｍ，３Ｈ），７．９２−７．９８（ｍ，３Ｈ），７．７０＝７．８１（ｍ，５Ｈ），７．５８−７．６４（ｍ，１Ｈ），７．４９−７．５６（ｍ，３Ｈ），７．３２−７．２８（ｍ，１Ｈ），４．０５−４．２０（ｍ，２Ｈ），２．２８−２．３５（ｍ，２Ｈ），２．３７（ｓ，９Ｈ），１．８４−１９４（ｍ，４Ｈ）。
【０２４４】
（Ｓ）−（２０−（３−（（５−（４−（４−（６−アミノ−５−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ））ピリジン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）ピペリジン−１−イル）−５−オキソペンチル）オキシ）フェニル）ポルフィリン−５，１０，１５−トリイル）トリス（ベンゼン−３，１−ジイル）トリアセテート（５）の合成
【０２４５】
ＤＭＦ（６ｍＬ）中の（４）（８０ｍｇ、０．０８７ｍｍｏｌ）の溶液に、ＨＡＴＵ（７７ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ、２．３当量）及びＤＩＰＥＡ（１０４μＬ）を添加した。室温で５分間撹拌した。クリゾチニブ−ＨＣｌ（４７ｍｇ、０．０９６ｍｍｏｌ、１．１当量）を添加した。混合物を室温で一晩撹拌した。ＤＭＦ溶媒を蒸発させ、残渣をＥｔＯＡｃに溶解し、次いで水及びブラインで洗浄した。粗残渣を順相カラムクロマトグラフィにより精製して、（５）（７１ｍｇ、６１％）を得た；ＭＳ［Ｍ＋１］＋＝１３３６。
【０２４６】
（Ｓ）−１−（４−（４−（６−アミノ−５−（１−（２，６−ジクロロ−３−フルオロフェニル）エトキシ）ピリジン−３−イル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル））ピペリジン−１−イル）−５−（３−（１０，１５，２０−トリス（３−ヒドロキシフェニル）ポルフィリン−５−イル）フェノキシ）ペンタン−１−オン（ＯＳ００２３）の合成
【０２４７】
ＭｅＯＨ／ＤＭＦ（２０ｍＬ／６ｍＬ）中の（５）（７１ｍｇ、０．０５３ｍｍｏｌ）の溶液に、メタノール中のＮａＯＭｅの溶液（３．２ｍＬ、５０ｍＭ、１当量）を０℃で添加した。反応をＨＰＬＣでモニターした。同じ温度で１時間撹拌し、次いで室温に加温した。室温で２時間撹拌した後、ＨＰＬＣは反応が完了したことを示した。ＨＯＡｃのＭｅＯＨ溶液（０．４ｍＬ／２ｍＬ）で反応をクエンチさせた。濃縮し、残渣をＥｔＯＡｃに溶解し、水及びブラインで洗浄した。溶媒を蒸発させた後、残渣を順相カラムクロマトグラフィにより精製して、所望の標的ＯＳ００２３（３５ｍｇ、５５％）を得た。ＭＳ［Ｍ＋１］＋＝１２１０。
【０２４８】
図１４は、ペプチドカップリング試薬ＨＡＴＵを使用して、中間体（５）を得るための、クリゾチニブの第二級アミンと中間体４のカルボキシレート基との縮合を示す。一実施形態では、クリゾチニブは、表７に示される組から選択される他のキナーゼ阻害剤と置き換えられてもよく、ここで、クリゾチニブは表７の化合物（１）である。
【０２４９】
更に、他の実施形態では、ＯＳ００２３の合成に使用されるエチル５−ブロモペンタノエートは、Ｌ１又はＬ２のいずれかで置き換えられてもよく、ここでＹはＯＨを表し、ｎはＬ１及びＬ２について１〜１２から選択される。Ｘは、フェノール又はその共役塩基等の求核剤とのＳＮ２反応に適した脱離基を表す。これに関連して、脱離基Ｘはハロゲン脱離基（Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）又はメシレート、トシレート、若しくはトリフレートのような種々の活性化スルホニルエステルのいずれかである。
【０２５０】
図１４は、中間体（２）を得るためのメソ−テトラキス（３−ヒドロキシフェニル）ポルフィリン（１）のアルキル化を示す。更に別の実施形態では、フェノール性ポルフィリン（１）はポルフィリンＰ４で置き換えられ、ここでヒドロキシ置換基は芳香環のオルト、メタ、又はパラ位（２位、３位、又は４位）に位置することができ、更にここで置換基Ｌ、Ｍ、及びＮは独立して、それらのそれぞれの芳香環上で、オルト、メタ、又はパラ、即ち２位、３位、又は４位を占め得る。置換基Ｌ、Ｍ、及びＮは、以下からなる群から選択される：
ａ）Ｈ；
ｂ）カルボキシアリールエステル及び酸（ＣＯＯＲ）（ＲはＨ、低級直鎖又は分枝アルキル、シクロアルキル、ヒドロキシ置換アルキル、ポリエーテル（低級ＰＥＧ）、アミノ置換アルキル、ヘテロ置換シクロアルキル、及び更に糖であり得る）。更に、Ｒはアリール及びヘテロアリール置換基を含み得る；
ｃ）カルボキサミド（ＣＯＮＲ１Ｒ２）（Ｒ１及びＲ２基は個々にＨ、低級直鎖又は分枝アルキル、シクロアルキル、ヒドロキシ置換アルキル、ポリエーテル（低級ＰＥＧ）、アミノ置換アルキル、ヘテロ置換シクロアルキルであり得る）。更に、Ｒはアシル（Ｃ（Ｏ）Ｒ１）、カルバモイルオキシ（Ｃ（Ｏ）ＮＲ１Ｒ２）、アリール、及びヘテロアリール置換基を含み得る。
ｄ）アミノアリール基（ＮＲ１Ｒ２）（Ｒ１又はＲ２は、低級アルキル、分枝低級アルキル、シクロアルキル、又はヘテロ置換アルキル若しくはヘテロ置換シクロアルキルの群から個々に選択され得る）。ＲはまたＣ（Ｏ）Ｒのようなアシル基であり得、ここでＲは低級アルキル、ヒドロキシ置換アルキル、ポリエーテル（低級ＰＥＧ）、アミノ置換アルキル、シクロアルキルを含み得る。更に、Ｒはアリール及びヘテロアリール置換基を含み得る；
ｅ）チオール、スルホン酸、及びそれらの対応するアミドを含み得る硫黄含有官能基。アミドは更に、窒素部分ＮＨＲを含有するとして定義され得、このＮが硫黄原子に単結合で接続しており、ここでＲは低級アルキル、シクロアルキル、又はヘテロ置換アルキル若しくはヘテロ置換シクロアルキルである。ＲはまたＣ（Ｏ）Ｒのようなアシル基であり得、ここでＲは低級アルキル、ヒドロキシ置換アルキル、ポリエーテル（低級ＰＥＧ）、アミノ置換アルキル、シクロアルキルを含み得る。更に、Ｒはアリール及びヘテロアリール置換基を含み得る。
ｆ）低級直鎖又は分枝アルキル基、シクロアルキル基、ヒドロキシ置換アルキル、ポリエーテル（低級ＰＥＧ）、アミノ置換アルキル、シクロアルキル、及びヘテロ置換シクロアルキル；
ｇ）酸素基、例えばヒドロキシ及び置換ヒドロキシアリール（ＯＨ又はＯＲ）（Ｒは低級直鎖又は分枝アルキル基、シクロアルキル基、ヒドロキシ置換アルキル、ポリエーテル（低級ＰＥＧ）、アミノ置換アルキル、シクロアルキル及びヘテロ置換シクロアルキルを含む群から選択され得る）。更に、Ｒは、アシル、アリール、及びヘテロアリール置換基を含み得る；並びに
ｈ）シアノ又はハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）。
【０２５１】
Ｌ１を利用する好ましい実施形態では、ｎ＝４、Ｘはブロモであり、Ｙはエトキシである。更に、Ｐ４は、Ｌ、Ｍ、及びＮが全てポルフィリン環に対してパラ位にあるヒドロキシルであるように選択される。毒素はクリゾチニブであるように選択される。
【０２５２】
ＰＡＣ化合物の細胞傷害活性及び／又は有効性は、以下に記載されるように評価される。一組の腫瘍及び正常細胞株をインビトロで評価する。ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（登録商標）Ａｓｓａｙ（ＰｒｏｍｅｇａＣｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）を使用して、用量応答曲線を決定するために、ある範囲の濃度にわたって本明細書に開示されるような個々のＰＡＣ化合物の細胞傷害活性を決定する。試験されるべきＰＡＣ化合物は使用するまで−２０℃で暗所に保存する。略語：ＴＣＰＰ＝テトラ（４−カルボキシフェニル）ポルフィリン；ＴＨＰＰ＝メソ−テトラキス（３−ヒドロキシフェニル）ポルフィリン。アッセイのために選択された例示的な細胞株は表１０に列挙されている。エントリ１〜４は癌細胞株である一方で、エントリ５〜６は正常細胞株である。
【０２５３】
表１０．インビトロアッセイ用の細胞株
【表９】
2019523783.tif 000036
【０２５４】
細胞培養条件：細胞傷害性アッセイを実施する前に、又は十分な細胞増殖が確立されるまで、細胞を解凍し、増殖させ、２回分割する。細胞はそれらの適切な培地で増殖させる；がん細胞株用の培地には、５％ウシ胎児血清（熱不活性化されていない）及び抗菌剤及び／又は真菌剤が補給される。通常の細胞株の培養には、製造元が指定した培地を使用する。ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（登録商標）Ａｓｓａｙでは、細胞を９６ウェルプレートにプレートあたり１つの細胞株を配置する。各プレート上で、本明細書に開示されるように選択されたＰＡＣ化合物に暴露された細胞についてＡｓｓａｙを実施する（８用量レベル、各用量レベルで３回反復）。同じプレート上で、細胞を未反応細胞傷害剤に暴露するが、これは陽性対照としてプレート上で試験されているＰＡＣ化合物に組み込まれた細胞傷害剤に対応する（３回反復）。各プレート上で、上述の添加剤のいずれもなしで、Ａｓｓａｙをそれらの適切な培地中で増殖させた細胞について行う（３回反復）。これは実験の陰性対照である。
【０２５５】
細胞アッセイは理想的には暗所又は低明所条件で行われる。ＰＡＣ化合物を１００％ＤＭＳＯ溶液に溶解し、表１１に示すような濃度範囲にわたるアッセイにおいて試験する。
【０２５６】
表１１．ＰＡＣ化合物及び細胞毒素を試験するための用量範囲。
【表１０】
2019523783.tif 000037
【０２５７】
例えば、ドキソルビシンのような陽性対照は１０μＭドキソルビシンで使用する。
【０２５８】
培地（陰性対照）：ＰＡＣ化合物及び細胞傷害剤は１００％ＤＭＳＯに溶解されるので、「培地のみ」の陰性対照も同様にＤＭＳＯである。「培地のみ」の対照におけるＤＭＳＯの百分率は、ＰＡＣ化合物及び細胞毒素の濃度範囲における最高のＤＭＳＯ濃度の百分率と等しい。
【０２５９】
ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ（登録商標）Ａｓｓａｙは、細胞を様々なＰＡＣ化合物に最初に暴露してから７２時間後に実行すべきであり、代謝的に活性な細胞（生きている細胞、静止細胞、老化した細胞を示す）と代謝的に不活性な（死んだ）細胞とを識別する。
【０２６０】
ＰＡＣ化合物のインビボ試験
【０２６１】
特定の医薬用途に対する特定のＰＡＣ化合物の有効性を評価するために、化合物を最初にインビトロで適切に選択された試験細胞に対して試験する。非限定的な例において、ＰＡＣ化合物は、腫瘍細胞、例えばマウスのインビボモデルにおける肺腫瘍細胞に対して試験される。
【０２６２】
動物：腫瘍移植時に体重が約２２〜２５ｇの５〜６週齢のオスのヌード（ｎｕ／ｎｕ）マウスを使用する。異種移植片：ヌードマウス宿主において皮下増殖腫瘍から採取したＮＣＩ−Ｈ４６０ヒト非小細胞肺癌腫瘍の断片を用いて、マウスの腋窩部にトロカールにより皮下移植した。腫瘍のサイズが約２４８〜２７０ｍｍ３の場合（移植後１１〜１５日）、動物を処置群及び対照群にペアマッチングさせる。各群は腫瘍を有する８匹のマウスを含み、それぞれマウスに耳タグを付け、実験を通して個別に追跡する。
【０２６３】
試験物品製剤の調製：各投与日に、ポルフィリン共役体を秤量し、最初の溶解のために適切な量のＤＭＳＯを添加する。これに、５％デキストロース水溶液（Ｄ５Ｗ）、等張生理食塩水若しくはグリセロール、又は上記の組み合わせを原液の調製のために添加する。従って、０．１〜１．０ｍｇ／ｍＬの原液は、次いで連続希釈によって低濃度に希釈される。投与溶液は、滅菌シンチレーションバイアルに投与する直前に調製する。同様に、親ポルフィリン及び毒素対照化合物は、共役体に従って製剤化される。
【０２６４】
化合物用量の調製：調製プロセスは、試験動物への非経口投与に適したビヒクル中の化合物の性質に基づいて開発されている。共役体をＤＭＳＯに溶解し、次いで以下の希釈剤：等張生理食塩水、Ｄ５Ｗ又はグリセロールの１又は組み合わせで希釈して原液を調製し、これを更に腹腔内（ＩＰ）又は静脈内（ｉ．ｖ．）投与用に連続希釈する。共役体、親ポルフィリン、及び親毒素の用量範囲は１〜１００ｍｇ／ｋｇである。
【０２６５】
投与溶液保存：調製日に使用した調製済み試験物品投与溶液を、光がない状態で、投与及びサンプリング中、制御された周囲温度に維持する。調製日に使用されなかった調製済み試験物品投与溶液は廃棄される。
【０２６６】
投与手順：ビヒクル又は試験剤の投与は、ペアマッチングと同じ日に開始する（１１日目）。用量は、そのときの各動物の体重に基づいて、１０ｍＬ／ｋｇの一定用量でＩＰ又はｉ．ｖ．注射によって投与される。
【０２６７】
腫瘍体積：腫瘍体積は、デジタルノギスを用いて腫瘍塊の幅（ｍｍ）及び長さ（ｍｍ）を測定することによって週２回モニターされる。腫瘍の測定値は、式｛幅（ｍｍ）２×長さ（ｍｍ）｝×０．５２を用いて腫瘍体積（ｍｍ３）に変換される。
【０２６８】
体重：全てのマウスを各投与前に個々に体重測定するが、週に２回記録するだけである。臨床所見：各投与前及び頻繁に各投与後に、全てのマウスについて異常な臨床徴候が記録される。非投与日の体重測定時に、全てのマウスに異常な臨床徴候が記録される。死亡率の評価は毎日全てのマウスで行われる。
【０２６９】
データ分析：この実験では、それらのそれぞれの対照群と比較した各治療群についての腫瘍増殖阻害及び腫瘍増殖遅延が報告されている。対照マウス体積の中央値が１０００ｍｍ３に達した日の各群からの平均腫瘍体積を用いて、腫瘍増殖阻害（Ｔ／Ｃ）を計算する。腫瘍増殖遅延は、各群のマウス中央値が２０００ｍｍ３の同じ腫瘍体積終点に達するのに必要な時間を利用した。このデータはＴ−Ｃ及びＴ／Ｃ腫瘍増殖遅延として報告されている。各治療群の抗腫瘍活性の分類は、２つの刊行物（Ｈｉｌｌ，２００１；Ｊｏｈｎｓｏｎ，ｅｔａｌ．，２００１）に見られる同様のパラメータに基づいており、後者はＮａｔｉｏｎａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ（Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ）からの参考文献である。以下の表にこれらの知見をまとめる。
【０２７０】
【数１４】
2019523783.tif 000038
【０２７１】
部分的及び完全な退行もモニターされる。部分的な退行は、初回投与時の腫瘍のサイズと比較して腫瘍が５０％以上退行した場合に生じる。腫瘍がもはや見えない又は触知できない場合、その腫瘍は完全な退行として表記される。毒性死とは、投与中又は投与終了直後に起こる死亡である。各群における体重変化率を記録するために、以下の式を使用した：（「ｘ」日目の平均体重−１日目の平均体重）／１日目の体重×１００％。各群の％最大体重減少は、薬物投与後最初の２週間の間に生じた最大体重減少であった。
【０２７２】
本明細書及び特許請求の範囲において、「約」又は「およそ」は、引用された数値の±２０％以内、又は好ましい実施形態では±１０％以内を意味することに留意されたい。本発明をこれらの好ましい態様を特に参照して詳細に説明したが、他の態様も同じ結果を達成することができる。例えば、ポルフィリン細胞傷害性共役体を生分解性マトリックス材料（例えばアルギネート、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、カプロラクトン）と組み合わせて、ポルフィリン細胞傷害剤が、生分解性マトリックスが溶解するときに経時的に組織に送達されるように組織に移植できる。本発明の変形及び修正は当業者には明らかであり、そのような修正及び均等物を全て網羅することを意図している。例えば、式Ｐｎ−Ｌｎ−Ｔｎにおいて、本発明の一実施形態では、Ｌｎのｎは１〜３００から選択され得る。上記及び／又は添付の中に引用されている全ての参考文献、出願、特許、及び出版物、並びに対応する出願の全体の開示は、参照により本明細書に組み込まれる。
【図１】
2019523783.tif 000040
【図２】
2019523783.tif 000041
【図３】
2019523783.tif 000042
【図４】
2019523783.tif 000043
【図５】
2019523783.tif 000044
【図６】
2019523783.tif 000045
【図７】
2019523783.tif 000046
【図８】
2019523783.tif 000047
【図９】
2019523783.tif 000048
【図１０】
2019523783.tif 000049
【図１１】
2019523783.tif 000050
【図１２】
2019523783.tif 000051
【図１３】
2019523783.tif 000052
【図１４】
2019523783.tif 000053
【図１５】
2019523783.tif 000054
【手続補正書】
【提出日】平成31年2月22日(2019.2.22)
【手続補正１】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】図８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図８】
2019523783.tif 000055
【手続補正２】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】図９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図９】
2019523783.tif 000056
【手続補正３】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】図１０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図１０】
2019523783.tif 000057
【手続補正４】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】図１１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図１１】
2019523783.tif 000058
【国際調査報告】
2019523783.tif 000059
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