(57)【要約】  本発明は、Ｂ型肝炎ウイルス感染を治療するための組成物と方法へ向けられる。特に、本発明は、慢性Ｂ型肝炎患者の治療に使用のＴＬＲ７アゴニストとＨＢＶキャプシドアセンブリ阻害剤の投与を含んでなる併用療法（combination therapy）へ向けられる。
2019526610.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＴＬＲ７アゴニストとＨＢＶキャプシドアセンブリ阻害剤を医薬的に許容される担体中に含んでなる医薬組成物。
【請求項２】
前記ＴＬＲ７アゴニストが式（Ｉ）：
【化１】
2019526610.tif 000033
式中：
Ｒ１は、Ｃ１−６アルキルであり；
Ｒ２は、ベンジルであり、該ベンジルは、未置換であるか又はハロゲンとＣ１−６アルキルより独立して選択される１、２又は３の置換基によって置換され；
Ｒ３は、−ＮＲ４Ｒ５であり、ここで：
Ｒ４は、Ｃ１−６アルキル又はＣ１−６アルコキシＣ１−６アルキルであり；
Ｒ５は、（Ｃ１−６アルキル）２ＮＣＯＯＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル（Ｃ１−６アルキル）アミノＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル（フェニル）Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシカルボニルＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシカルボニルオキシＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルカルボニル（Ｃ１−６アルキル）アミノＣ１−６アルキル、又はピロリジニルカルバモイルオキシＣ１−６アルキルである；又は
Ｒ４とＲ５は、それらに付く窒素と一緒に、ヘテロシクリルを形成する；
の化合物、又はその医薬的に許容される塩、エナンチオマー、又はジアステレオマーである、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
前記ＴＬＲ７アゴニストが：
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−［Ｓ（Ｓ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−Ｎ−プロピル−プリン−７−カルボキサミド；
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−［Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−Ｎ−プロピル−プリン−７−カルボキサミド；
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−Ｎ−エチル−２［Ｓ（Ｓ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−プリン−７−カルボキサミド；又は
６−アミノ−２−［Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−Ｎ−プロピル−９−（ｐ−トリルメチル）プリン−７−カルボキサミド；
又はこれらの医薬的に許容される塩、エナンチオマー、又はジアステレオマーである、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項４】
前記ＴＬＲ７アゴニストが式（ＩＩ）：
【化２】
2019526610.tif 000034
式中：
Ｒ４は、Ｃ１−６アルキル、ハロＣ１−６アルキル、Ｃ３−７シクロアルキルＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシＣ１−６アルキル、又はピロリジニルＣ１−６アルキルであり；
Ｒ５は、Ｃ１−６アルキル、フェニルＣ１−６アルキル、ピリジニルＣ１−６アルキル、又はピリミジニルＣ１−６アルキルであり、該フェニルＣ１−６アルキル、ピリジニルＣ１−６アルキル、及びピリミジニルＣ１−６アルキルは、未置換であるか又は、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、シアノ、カルボキシ、カルバモイル、ハロＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルスルホニル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、Ｃ１−６アルコキシＣ１−６アルキルアミノカルボニル、ピロリジニルカルボニル、及びピペリジニルカルボニルより独立して選択される１、２、又は３の置換基によって置換され；
Ｒ６は、Ｈである；
の化合物、又はその医薬的に許容される塩、エナンチオマー、又はジアステレオマーである、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項５】
前記ＴＬＲ７アゴニストが、６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−（Ｓ（Ｓ）−エチルスルホンイミドイル）−７Ｈ−プリン−８−オン；６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−（Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル）−７Ｈ−プリン−８−オン；又は６−アミノ−２−（Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル）−９−（ｐ−トリルメチル）−７Ｈ−プリン−８−オン、又はこれらの医薬的に許容される塩、エナンチオマー、又はジアステレオマーである、請求項１又は４に記載の医薬組成物。
【請求項６】
前記ＨＢＶキャプシドアセンブリ阻害剤が、式（ＩＩＩ）：
【化３】
2019526610.tif 000035
式中：
Ｒ７は、水素、ハロゲン、又はＣ１−６アルキルであり；
Ｒ８は、水素又はハロゲンであり；
Ｒ９は、水素又はハロゲンであり；
Ｒ１０は、Ｃ１−６アルキルであり；
Ｒ１１は、水素、ヒドロキシＣ１−６アルキル、アミノカルボニル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、又はカルボキシであり；
Ｒ１２は、水素、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、又はカルボキシ−ＣｍＨ２ｍ−であり；
Ｘは、カルボニル又はスルホニルであり；
Ｙは、−ＣＨ２−、−Ｏ−、又は−Ｎ（Ｒ１３）−であり、
ここでＲ１３は、水素、Ｃ１−６アルキル、ハロＣ１−６アルキル、Ｃ３−７シクロアルキル−ＣｍＨ２ｍ−、Ｃ１−６アルコキシカルボニル−ＣｍＨ２ｍ−、−ＣｔＨ２ｔ−ＣＯＯＨ、−ハロＣ１−６アルキル−ＣＯＯＨ、−（Ｃ１−６アルコキシ）Ｃ１−６アルキル−ＣＯＯＨ、−Ｃ１−６アルキル−Ｏ−Ｃ１−６アルキル−ＣＯＯＨ、−Ｃ３−７シクロアルキル−ＣｍＨ２ｍ−ＣＯＯＨ、−ＣｍＨ２ｍ−Ｃ３−７シクロアルキル−ＣＯＯＨ、ヒドロキシ−ＣｔＨ２ｔ−、カルボキシスピロ［３．３］ヘプチル又はカルボキシフェニル−ＣｍＨ２ｍ−、カルボキシピリジニル−ＣｍＨ２ｍ−であり；
Ｗは、−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｃ１−６アルキル）２−、−Ｏ−、又はカルボニルであり；
ｎは、０又は１であり；
ｍは、０〜７であり；
ｔは、１〜７である；
の化合物、又はその医薬的に許容される塩、又はエナンチオマー、又はジアステレオマーである、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項７】
前記ＨＢＶキャプシドアセンブリ阻害剤が、３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｓ）−５−エトキシカルボニル−４−（３−フルオロ−２−メチル−フェニル）−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸；又は３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｒ）−４−（２−クロロ−３−フルオロ−フェニル）−５−エトキシカルボニル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸、又はこれらの医薬的に許容される塩、又はエナンチオマー、又はジアステレオマーである、請求項１又は７に記載の医薬組成物。
【請求項８】
医薬的に許容される担体中のＴＬＲ７アゴニストとＨＢＶキャプシドアセンブリ阻害剤からなる、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項９】
医薬的に許容される担体中の：
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−［Ｓ（Ｓ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−Ｎ−プロピル−プリン−７−カルボキサミドと３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｓ）−５−エトキシカルボニル−４−（３−フルオロ−２−メチル−フェニル）−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸；
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−［Ｓ（Ｓ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−Ｎ−プロピル−プリン−７−カルボキサミドと３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｒ）−４−（２−クロロ−３−フルオロ−フェニル）−５−エトキシカルボニル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸；
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−［Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−Ｎ−プロピル−プリン−７−カルボキサミドと３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｓ）−５−エトキシカルボニル−４−（３−フルオロ−２−メチル−フェニル）−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸；
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−［Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−Ｎ−プロピル−プリン−７−カルボキサミドと３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｒ）−４−（２−クロロ−３−フルオロ−フェニル）−５−エトキシカルボニル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸；
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−Ｎ−エチル−２［Ｓ（Ｓ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−プリン−７−カルボキサミドと３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｓ）−５−エトキシカルボニル−４−（３−フルオロ−２−メチル−フェニル）−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸；
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−Ｎ−エチル−２［Ｓ（Ｓ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−プリン−７−カルボキサミドと３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｒ）−４−（２−クロロ−３−フルオロ−フェニル）−５−エトキシカルボニル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸；
６−アミノ−２−［Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−Ｎ−プロピル−９−（ｐ−トリルメチル）プリン−７−カルボキサミドと３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｓ）−５−エトキシカルボニル−４−（３−フルオロ−２−メチル−フェニル）−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸；
６−アミノ−２−［Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−Ｎ−プロピル−９−（ｐ−トリルメチル）プリン−７−カルボキサミドと３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｒ）−４−（２−クロロ−３−フルオロ−フェニル）−５−エトキシカルボニル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸；
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−（Ｓ（Ｓ）−エチルスルホンイミドイル）−７Ｈ−プリン−８−オンと３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｓ）−５−エトキシカルボニル−４−（３−フルオロ−２−メチル−フェニル）−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸；
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−（Ｓ（Ｓ）−エチルスルホンイミドイル）−７Ｈ−プリン−８−オンと３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｒ）−４−（２−クロロ−３−フルオロ−フェニル）−５−エトキシカルボニル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸；
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−（Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル）−７Ｈ−プリン−８−オンと３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｓ）−５−エトキシカルボニル−４−（３−フルオロ−２−メチル−フェニル）−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸；
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−（Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル）−７Ｈ−プリン−８−オンと３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｒ）−４−（２−クロロ−３−フルオロ−フェニル）−５−エトキシカルボニル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸；
６−アミノ−２−（Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル）−９−（ｐ−トリルメチル）−７Ｈ−プリン−８−オンと３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｓ）−５−エトキシカルボニル−４−（３−フルオロ−２−メチル−フェニル）−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸；又は
６−アミノ−２−（Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル）−９−（ｐ−トリルメチル）−７Ｈ−プリン−８−オンと３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｒ）−４−（２−クロロ−３−フルオロ−フェニル）−５−エトキシカルボニル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸；
からなる、請求項１又は８に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
医薬的に許容される担体中の：
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−Ｎ−エチル−２［Ｓ（Ｓ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−プリン−７−カルボキサミドと３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｓ）−５−エトキシカルボニル−４−（３−フルオロ−２−メチル−フェニル）−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸；又は
６−アミノ−２−［Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−Ｎ−プロピル−９−（ｐ−トリルメチル）プリン−７−カルボキサミドと３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｓ）−５−エトキシカルボニル−４−（３−フルオロ−２−メチル−フェニル）−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸；
からなる、請求項１又は９に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
医薬的に許容される担体中の：
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−Ｎ−エチル−２［Ｓ（Ｓ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−プリン−７−カルボキサミドと３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｓ）−５−エトキシカルボニル−４−（３−フルオロ−２−メチル−フェニル）−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸；又は
６−アミノ−２−［Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−Ｎ−プロピル−９−（ｐ−トリルメチル）プリン−７−カルボキサミドと３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｓ）−５−エトキシカルボニル−４−（３−フルオロ−２−メチル−フェニル）−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸；
からなる、医薬組成物。
【請求項１２】
１以上の他の抗ウイルス剤を追加的に含んでなる、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
前記他の抗ウイルス剤が、ラミブジン、アデフォビル、テノフォビル、テルビブジン、及びエンテカビルより選択される、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
ＴＬＲ７アゴニストとＨＢＶキャプシドアセンブリ阻害剤が該医薬品において使用されることを特徴とする、Ｂ型肝炎ウイルス感染の治療又は予防用医薬品を製造するための方法。
【請求項１５】
前記ＴＬＲ７アゴニストとＨＢＶキャプシドアセンブリ阻害剤が同じ製剤又は異なる製剤において同時投与される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記ＴＬＲ７アゴニストとＨＢＶキャプシドアセンブリ阻害剤が同じ経路又は異なる経路による被験者への投与に企図される、請求項１４又は１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記ＴＬＲ７アゴニストとＨＢＶキャプシドアセンブリ阻害剤が非経口投与又は経口投与による被験者への投与に企図される、請求項１４〜１６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１８】
前記投与が同時的又は連続的である、請求項１４〜１７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１９】
前記ＴＬＲ７アゴニストが式（Ｉ）又は式（ＩＩ）の化合物、又はその医薬的に許容される塩、エナンチオマー、又はジアステレオマーである、請求項１４〜１８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２０】
前記ＴＬＲ７アゴニストが：
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−［Ｓ（Ｓ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−Ｎ−プロピル−プリン−７−カルボキサミド；
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−［Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−Ｎ−プロピル−プリン−７−カルボキサミド；
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−Ｎ−エチル−２［Ｓ（Ｓ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−プリン−７−カルボキサミド；
６−アミノ−２−［Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−Ｎ−プロピル−９−（ｐ−トリルメチル）プリン−７−カルボキサミド；
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−（Ｓ（Ｓ）−エチルスルホンイミドイル）−７Ｈ−プリン−８−オン；
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−（Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル）−７Ｈ−プリン−８−オン；又は
６−アミノ−２−（Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル）−９−（ｐ−トリルメチル）−７Ｈ−プリン−８−オン；
又はこれらの医薬的に許容される塩、エナンチオマー、又はジアステレオマーである、請求項１４〜１９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２１】
前記ＨＢＶキャプシドアセンブリ阻害剤が式（ＩＩＩ）の化合物、又はその医薬的に許容される塩、エナンチオマー、又はジアステレオマーである、請求項１４〜２０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２２】
前記ＨＢＶキャプシドアセンブリ阻害剤が：
３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｓ）−５−エトキシカルボニル−４−（３−フルオロ−２−メチル−フェニル）−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸；又は
３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｒ）−４−（２−クロロ−３−フルオロ−フェニル）−５−エトキシカルボニル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸；
又はこれらの医薬的に許容される塩、エナンチオマー、又はジアステレオマーである、請求項１４〜２１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２３】
前記医薬品が１以上の他の抗ウイルス剤を追加的に含む、請求項１４〜２２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２４】
前記他の抗ウイルス剤が、ラミブジン、アデフォビル、テノフォビル、テルビブジン、及びエンテカビルより選択される、請求項１４〜２３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２５】
前記医薬品において使用されるＴＬＲ７アゴニストとＨＢＶキャプシドアセンブリ阻害剤が、医薬的に許容される担体中の：
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−Ｎ−エチル−２［Ｓ（Ｓ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−プリン−７−カルボキサミドと３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｓ）−５−エトキシカルボニル−４−（３−フルオロ−２−メチル−フェニル）−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸；又は
６−アミノ−２−［Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−Ｎ−プロピル−９−（ｐ−トリルメチル）プリン−７−カルボキサミドと３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｓ）−５−エトキシカルボニル−４−（３−フルオロ−２−メチル−フェニル）−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸；
である、請求項１４〜２３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２６】
ＴＬＲ７アゴニストとＨＢＶキャプシドアセンブリ阻害剤を含んでなる容器を含んでなるキット。
【請求項２７】
無菌希釈剤をさらに含んでなる、請求項２６に記載のキット。
【請求項２８】
Ｂ型肝炎ウイルス感染の治療又は予防への方法としてのＴＬＲ７アゴニストとＨＢＶキャプシドアセンブリ阻害剤の併用治療法の使用について指示する印刷された説明書を含んでなる添付文書をさらに含んでなる、請求項２６又は２７に記載のキット。
【請求項２９】
前記ＴＬＲ７アゴニストが：
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−［Ｓ（Ｓ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−Ｎ−プロピル−プリン−７−カルボキサミド；
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−［Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−Ｎ−プロピル−プリン−７−カルボキサミド；
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−Ｎ−エチル−２［Ｓ（Ｓ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−プリン−７−カルボキサミド；
６−アミノ−２−［Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−Ｎ−プロピル−９−（ｐ−トリルメチル）プリン−７−カルボキサミド；
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−（Ｓ（Ｓ）−エチルスルホンイミドイル）−７Ｈ−プリン−８−オン；
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−（Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル）−７Ｈ−プリン−８−オン；又は
６−アミノ−２−（Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル）−９−（ｐ−トリルメチル）−７Ｈ−プリン−８−オン；
又はこれらの医薬的に許容される塩、エナンチオマー、又はジアステレオマーである、請求項２６〜２８のいずれか１項に記載のキット。
【請求項３０】
前記ＨＢＶキャプシドアセンブリ阻害剤が：
３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｓ）−５−エトキシカルボニル−４−（３−フルオロ−２−メチル−フェニル）−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸；又は
３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｒ）−４−（２−クロロ−３−フルオロ−フェニル）−５−エトキシカルボニル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸；
又はこれらの医薬的に許容される塩、又はエナンチオマー、又はジアステレオマーである、請求項２６〜２９のいずれか１項に記載のキット。
【請求項３１】
前記容器において使用されるＴＬＲ７アゴニストとＨＢＶキャプシドアセンブリ阻害剤が、医薬的に許容される担体中の：
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−Ｎ−エチル−２［Ｓ（Ｓ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−プリン−７−カルボキサミドと３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｓ）−５−エトキシカルボニル−４−（３−フルオロ−２−メチル−フェニル）−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸；又は
６−アミノ−２−［Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−Ｎ−プロピル−９−（ｐ−トリルメチル）プリン−７−カルボキサミドと３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｓ）−５−エトキシカルボニル−４−（３−フルオロ−２−メチル−フェニル）−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸である、請求項２６〜２９のいずれか１項に記載のキット。
【請求項３２】
有効な第一量のＴＬＲ７アゴニスト、又はその医薬的に許容される塩、エナンチオマー、又はジアステレオマーと第二量のＨＢＶキャプシドアセンブリ阻害剤、又はその医薬的に許容される塩、エナンチオマー、又はジアステレオマー、又はその反対での被験者への投与を含んでなる、Ｂ型肝炎ウイルス感染の治療又は予防のための方法。
【請求項３３】
前記ＴＬＲ７アゴニストが：
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−［Ｓ（Ｓ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−Ｎ−プロピル−プリン−７−カルボキサミド；
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−［Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−Ｎ−プロピル−プリン−７−カルボキサミド；
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−Ｎ−エチル−２［Ｓ（Ｓ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−プリン−７−カルボキサミド；
６−アミノ−２−［Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−Ｎ−プロピル−９−（ｐ−トリルメチル）プリン−７−カルボキサミド；
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−（Ｓ（Ｓ）−エチルスルホンイミドイル）−７Ｈ−プリン−８−オン；
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−（Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル）−７Ｈ−プリン−８−オン；又は
６−アミノ−２−（Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル）−９−（ｐ−トリルメチル）−７Ｈ−プリン−８−オン；
又はこれらの医薬的に許容される塩、エナンチオマー、又はジアステレオマーである、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
前記ＨＢＶキャプシドアセンブリ阻害剤が：
３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｓ）−５−エトキシカルボニル−４−（３−フルオロ−２−メチル−フェニル）−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸；又は
３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｒ）−４−（２−クロロ−３−フルオロ−フェニル）−５−エトキシカルボニル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸、又はこれらの医薬的に許容される塩、又はエナンチオマー、又はジアステレオマーである、請求項３２又は３３に記載の方法。
【請求項３５】
前記方法において使用されるＴＬＲ７アゴニストとＨＢＶキャプシドアセンブリ阻害剤が、医薬的に許容される担体中の：
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−Ｎ−エチル−２［Ｓ（Ｓ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−プリン−７−カルボキサミドと３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｓ）−５−エトキシカルボニル−４−（３−フルオロ−２−メチル−フェニル）−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸；又は
６−アミノ−２−［Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−Ｎ−プロピル−９−（ｐ−トリルメチル）プリン−７−カルボキサミドと３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｓ）−５−エトキシカルボニル−４−（３−フルオロ−２−メチル−フェニル）−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸；
である、請求項３２〜３４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３６】
請求項１〜１３に記載の医薬組成物の、抗ウイルス医薬品として、特にＢ型肝炎ウイルス感染の治療又は予防用医薬品としての使用。
【請求項３７】
ＴＬＲ７アゴニストとＨＢＶキャプシドアセンブリ阻害剤の、抗ウイルス医薬品、特にＢ型肝炎ウイルス感染の治療又は予防用医薬品としての請求項１〜１３に記載の医薬組成物の製造への使用。
【請求項３８】
上記に記載されるような発明。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、Ｂ型肝炎ウイルス感染を治療するための組成物及び方法へ向けられる。特に、本発明は、慢性Ｂ型肝炎患者の治療に使用のＴＬＲ７アゴニストとＨＢＶキャプシドアセンブリ阻害剤の投与を含んでなる併用療法（combination therapy）へ向けられる。
【発明の概要】
【０００２】
Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）の慢性感染は、全世界で２億４０００万以上の人々が慢性感染している、全世界で深刻な公衆衛生問題である。ＨＢＶは、ヘパドナウイルス科に属する。肝細胞への侵入に続いて、そのウイルスゲノムは、核の中へ送達されて、そこで一部二本鎖のウイルスゲノムのＤＮＡ修復を介して共有結合閉環状ＤＮＡ（ｃｃｃＤＮＡ）が生成される。ｃｃｃＤＮＡは、ウイルスＲＮＡの転写用の鋳型として役立つ。ウイルスのプレゲノムＲＮＡが他の２つのウイルス成分、キャプシドタンパク質とポリメラーゼと相互作用してキャプシド粒子を生成すると、そこでウイルスのＤＮＡ複製が生じる。ＨＢＶは、２４０コピーのキャプシド（又はコア）タンパク質を含んでなる正２０面体のコアを有する。キャプシドタンパク質の主たる生体機能は、構造タンパク質としてプレゲノムＲＮＡをキャプシドで包むように作用して、未熟なキャプシド粒子を細胞質中に形成することである。この工程は、ウイルスのＤＮＡ複製に必須である。ウイルスのプレゲノムＲＮＡの逆転写を介してほぼ全長の弛緩型環状ＤＮＡが生成されるときに、未熟なキャプシドが成熟したキャプシドになる。キャプシドに包まれたゲノムのほとんどのコピーは、ビリオンの組織化及び分泌のために細胞の脂質とウイルスのエンベロープタンパク質（Ｓ、Ｍ、及びＬ）と効率よく会合する。しかしながら、感染性ビリオンより数で大いに優る非感染性の粒子も産生される。これらの空のエンベロープ粒子は、サブウイルス粒子（ＳＶＰ）と呼ばれる。このＳ、Ｍ、及びＬエンベロープタンパク質は、３種の異なる開始コドンを含有する単一のＯＲＦ（オープンリーディングフレーム）より発現される。この３種のタンパク質は、いずれもそのＣ末端に２２６個のアミノ酸配列、Ｓドメインを共有する。Ｓドメインは、ＨＢｓＡｇエピトープを含有する（Lambert, C. & R. Prange.Virol J, 2007, 4, 45）。
【０００３】
多くの観測事実は、いくつかのＨＢＶウイルスタンパク質がウイルス認識のシグナル伝達システムに、そして引き続きインターフェロン（ＩＦＮ）の抗ウイルス活性に干渉することによって、宿主の初期細胞応答に対抗し得ることを示した。この中でも、ＨＢＶエンプティサブウイルス粒子の過剰分泌は、慢性被感染患者（ＣＨＢ）において観測される免疫寛容状態の維持へ参画する場合がある。ＨＢｓＡｇや他のウイルス抗原へ持続的に曝露されると、ＨＢＶ特異的Ｔ細胞の枯渇又は進行性の機能障害をもたらす可能性がある（Kondo et al. Journal of Immunology 1993, 150, 4659-4671; Kondo et al. Journal of Medical Virology 2004, 74, 425-433; Fisicaro et al. Gastroenterology, 2010, 138, 682-93）。さらに、ＨＢｓＡｇについては、単球、樹状細胞（ＤＣ）、及びナチュラルキラー（ＮＫ）細胞のような免疫細胞の機能を直接的な相互作用によって抑制することが報告されてきた（Op den Brouw et al. Immunology, 2009b, 126, 280-9; Woltman et al. PLoS One, 2011, 6, e15324; Shi et al. J Viral Hepat. 2012, 19, e26-33; Kondo et al. ISRN Gasteroenterology, 2013, Article ID 935295）。
【０００４】
ＨＢｓＡｇ定量は、慢性Ｂ型肝炎における予後判定と治療応答についてのバイオマーカーである。ＨＢｓＡｇの消失と血清転換は、臨床治癒の目標であるが、慢性被感染患者ではほとんど観測されない。ＨＢＶ  ＤＮＡ合成を阻害するヌクレオシ（チ）ド類似体のような現行の療法は、ＨＢｓＡｇレベルに直接的には影響しない。ヌクレオシ（チ）ド類似体は、治療を延長したとしても、ＨＢｓＡｇクリアランス率が自然に観測されるものと同様にごく低いことが実証されている（Janssen et al. Lancet, 2005, 365, 123-9; Marcellin et al. N. Engl. J. Med., 2004, 351, 1206-17; Buster et al. Hepatology, 2007, 46, 388-94)。
【０００５】
Ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）は、広範囲の保存された病原体関連分子パターン（ＰＡＭＰ）を検出する。それらは、侵入病原体を感知することと後続の自然免疫応答の始動に重要な役割を担う。ヒトでは、ＴＬＲファミリーに１０種のメンバーが知られていて、それらは、細胞外ロイシンリッチドメインと、保存性Ｔｏｌｌ／インターロイキン（ＩＬ）−１受容体（ＴＩＲ）ドメインを含有する細胞質テールを特徴とするＩ型膜貫通タンパク質である。このファミリーでは、ＴＬＲ３、ＴＬＲ７、ＴＬＲ８、及びＴＬＲ９がエンドソーム内に位置している。ＴＬＲ７は、特定の低分子リガンド（即ち、ＴＬＲ７アゴニスト）又はそのネイティブリガンド（即ち、一本鎖ＲＮＡ、ｓｓＲＮＡ）へ結合することによって活性化され得る。ｓｓＲＮＡのＴＬＲ７への結合に続いて、この受容体は、その二量体型での構造変化を受けて、続いて、骨髄分化一次応答遺伝子８８（ＭｙＤ８８）が含まれる、アダプタータンパク質をその細胞質ドメインで動員すると考えられている。ＭｙＤ８８経路を介した受容体シグナル伝達カスケードの始動に続いて、インターフェロン調節因子７（ＩＲＦ−７）及び核内因子κＢ（ＮＦ−κＢ）のような細胞質転写因子が活性化される。次いで、これらの転写因子は、核内へ転座して、様々な遺伝子、例えば、ＩＦＮ−α遺伝子と他の抗ウイルス性サイトカイン遺伝子の転写を開始させる。ＴＬＲ７は、形質細胞様細胞上で、そしてまたＢ細胞上で主に発現される。慢性ウイルス感染症の間には、免疫細胞の応答性の改変が自然免疫応答の低下へ与する場合がある。故に、アゴニスト誘発性のＴＬＲ７の活性化は、慢性ウイルス感染症の治療への新規アプローチの代表となる可能性がある（D. J Connolly and L. AJ O’Neill, Current Opinion in Pharmacology 2012, 12:510-518, P. A. Roethle et al, J. Med. Chem. 2013, 56, 7324-7333）。
【０００６】
経口ＴＬＲ７アゴニストでの治療は、より大きな効力をより良好な忍容性とともに提供する有望な解決法の代表となる。ペグ化ＩＦＮ−α（ＰＥＧ−ＩＦＮ−α）は、慢性ＨＢＶを治療するのに現在使用されて、抗ウイルス性ヌクレオシ（チ）ド類似体を用いた潜在的に終生の治療法への代替法である。慢性ＨＢＶ患者の亜集合では、ＰＥＧ−ＩＦＮ−α療法が一定期間の療法の後にウイルスの持続的な免疫学的制御を誘導する可能性がある。しかしながら、インターフェロン療法で血清変換を達成するＨＢＶ患者の百分率は低く（ＨＢｅＡｇ陽性患者で２７％まで）、その治療は、典型的には、ほとんど忍容し得ない。さらに、ＰＥＧ−ＩＦＮ−αとヌクレオシ（チ）ド治療のいずれでも、機能的治癒（ＨＢｓＡｇ消失と血清変換として定義される）は、ごく稀である。これらの限界に鑑みて、慢性ＨＢＶを治療してその機能的治癒を引き起こすための改善された治療選択肢が喫緊に求められている。経口の低分子ＴＬＲ７アゴニストでの治療は、より優れた効力及び忍容性を提供する潜在可能性がある、有望なアプローチである（T. Asselah et al, Clin Liver Dis 2007, 11, 839-849）
ＨＢＶキャプシドタンパク質は、ＨＢＶ複製において本質的な役割を担う。組織培養ベースのスクリーニングにおいて、Ｂａｙ４１−４１０９、Ｂａｙ３８−７６９０、及びＢａｙ３９−５４９３と命名された化合物が含まれる、ヘテロアリールジヒドロピリミジン類又はＨＡＰが発見された（Deres K. et al. Science 2003, 893）。これらのＨＡＰ類似体は、合成のアロステリックアクチベータとして作用して、コアタンパク質の分解につながる異常なキャプシド生成を誘導することができる。ＨＡＰ類似体はまた、おそらくはキャプシド「呼吸」（個別のサブユニット間結合の一過性の切断）の間に解放される二量体とＨＡＰの相互作用によって、コアタンパク質を組織化前のキャプシドから非キャプシドポリマーへ再構成した。Ｂａｙ４１−４１０９をＨＢＶ被感染トランスジェニックマウスモデル又はヒト化マウスモデルへ投与したところ、ＨＢＶ  ＤＮＡ低下を伴う生体内（in vivo）効力が実証された（Deres K. et al. Science 2003, 893; Brezillon N. et al. PLoS ONE 2011, e25096）。また、ビス（bis-）ＡＮＳという低分子が分子「ウェッジ」として作用して、正常なキャプシドタンパク質ジオメトリーとキャプシド形成に干渉することが示された（Zlotnick A. et al. J. Virol. 2002, 4848-4854）。
【０００７】
今日、ＨＢＶ感染の臨床治癒の判定基準は、ＨＢｓＡｇの消失及び/又は血清変換である。ＨＢＶ患者には、ＰＥＧ−ＩＦＮ−αとヌクレオシ（チ）ドが利用可能であるが、治療された患者の大多数（約９０％又はそれ以上）でこの目標に達成し得ないのは、主にこの現行療法では、ほとんどの慢性被感染患者において、ＨＢＶ感染の解消の徴候である、ＨＢｓＡｇに対する中和抗体（抗ＨＢｓ）の出現を誘発することができないという事実の故である。従って、ＨＢｓＡｇ消失及び／又は血清変換を誘導して抗ＨＢｓの産生を促進することの成功率が改善された治療法への医療ニーズが確かに存在するのである。
【０００８】
発明の要旨
本発明は、ＴＬＲ７アゴニストとＨＢＶキャプシドアセンブリ阻害剤を医薬的に許容される担体中に含んでなる医薬組成物に関する。本発明の「ＴＬＲ７アゴニスト」は、式（Ｉ）又は（ＩＩ）の化合物であり、特に本発明の「ＴＬＲ７アゴニスト」は、６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−［Ｓ（Ｓ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−Ｎ−プロピル−プリン−７−カルボキサミド；６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−［Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−Ｎ−プロピル−プリン−７−カルボキサミド；６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−Ｎ−エチル−２［Ｓ（Ｓ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−プリン−７−カルボキサミド；６−アミノ−２−［Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−Ｎ−プロピル−９−（ｐ−トリルメチル）プリン−７−カルボキサミド；６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−（Ｓ（Ｓ）−エチルスルホンイミドイル）−７Ｈ−プリン−８−オン；６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−（Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル）−７Ｈ−プリン−８−オン；又は６−アミノ−２−（Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル）−９−（ｐ−トリルメチル）−７Ｈ−プリン−８−オン、又はこれらの医薬的に許容される塩、エナンチオマー、又はジアステレオマーである。本発明のＨＢＶキャプシドアセンブリ阻害剤は、式（ＩＩＩ）の化合物、又は特許のＷＯ２０１４／０３７４８０、ＷＯ２０１４／１８４３２８、及びＷＯ２０１５／１３２２７６に開示される化合物のいずれか１つであり、特に本発明のＨＢＶキャプシドアセンブリ阻害剤は、３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｓ）−５−エトキシカルボニル−４−（３−フルオロ−２−メチル−フェニル）−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸；３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｒ）−４−（２−クロロ−３−フルオロ−フェニル）−５−エトキシカルボニル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸、又はこれらの医薬的に許容される塩、エナンチオマー、又はジアステレオマーである。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
【図１】図面１は化合物１の単結晶Ｘ線回折を示す。
【図２】図面２は化合物３の単結晶Ｘ線回折を示す。
【図３】図面３は化合物４−ａの単結晶Ｘ線回折を示す。
【図４−１】図面４は、担体、１０ｍｇ／ｋｇの化合物４（週１回）、２０ｍｇ／ｋｇの化合物５（１日１回）、及び併用療法で４２日間処理して４２日間の非処理期間を続けたＡＡＶ−ＨＢＶ被感染マウスのＨＢＶ  ＤＮＡ（図面４Ａ）、ＨＢｓＡｇ（図面４Ｂ）、及び抗ＨＢｓ抗体レベル（図面４Ｃ）を示す。この結果は、平均±ＳＥＭとして提示する。ＬＬＯＱ：定量下限。
【図４−２】図面４は、担体、１０ｍｇ／ｋｇの化合物４（週１回）、２０ｍｇ／ｋｇの化合物５（１日１回）、及び併用療法で４２日間処理して４２日間の非処理期間を続けたＡＡＶ−ＨＢＶ被感染マウスのＨＢＶ  ＤＮＡ（図面４Ａ）、ＨＢｓＡｇ（図面４Ｂ）、及び抗ＨＢｓ抗体レベル（図面４Ｃ）を示す。この結果は、平均±ＳＥＭとして提示する。ＬＬＯＱ：定量下限。
【図４−３】図面４−Ｄは、実施例５において、抗ＨＢｓ抗体産生Ｂ細胞をＥＬＩＳＰＯＴによって同定するために８４日目に採取した脾臓を示す。併用群（Combo group）のスポットは、抗ＨＢｓ抗体を活発に産生するＢ細胞の存在を表した。
【図５】図面５は、担体、１ｍｇ／ｋｇの化合物３（隔週１回）、２０ｍｇ／ｋｇの化合物５（１日１回）、及び併用療法で４２日間処理して４５日間の非処理期間を続けたＡＡＶ−ＨＢＶ被感染マウスのＨＢＶ  ＤＮＡ（図面５Ａ）、ＨＢｓＡｇ（図面５Ｂ）、及び抗ＨＢｓ抗体レベル（図面５Ｃ）を示す。この結果は、平均±ＳＥＭとして提示する。ＬＬＯＱ：定量下限。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
他に定義しなければ、本明細書において使用するすべての技術及び科学用語は、本発明に関連する当該技術分野の当業者が通常理解するのと同じ意味を有する。
本明細書において使用するように、「Ｃ１−６アルキル」という用語は、１〜６個の炭素原子の一価で直鎖又は分岐鎖の飽和炭化水素基を意味する。特定の態様では、Ｃ１−６アルキルが１〜６個の炭素原子を有して、より特定の態様では、１〜４個の炭素原子を有する。Ｃ１−６アルキルの例には、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、又はｔｅｒｔ−ブチルが含まれる。
【００１１】
本明細書において使用するように、「Ｃ１−６アルコキシ」という用語は、Ｃ１−６アルキル−Ｏ−（ここで「Ｃ１−６アルキル」は、上記に定義される通りである）の基；例えば、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ−ブトキシ、イソブトキシ、２−ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ、等を意味する。特定の「Ｃ１−６アルコキシ」基は、メトキシとエトキシである。
【００１２】
本明細書において使用するように、「ハロ」又は「ハロゲン」という用語は、本明細書において交換可能的に使用されて、フルオロ、クロロ、ブロモ、又はヨードを意味する。
「ハロＣ１−６アルキル」という用語は、該アルキル基の水素原子の少なくとも１個が同じか又は異なるハロゲン原子、特にフルオロ原子に置き換わったアルキル基を意味する。ハロＣ１−６アルキルの例には、モノフルオロ、ジフルオロ、又はトリフルオロ−メチル、エチル、又はプロピル、例えば、３，３，３−トリフルオロプロピル、２−フルオロエチル、２，２，２−トリフルオロエチル、フルオロメチル、ジフルオロエチル、又はトリフルオロメチルが含まれる。
【００１３】
「カルボニル」という用語は、単独で、又は組合せにおいて、−Ｃ（Ｏ）−基を意味する。
「Ｃ１−６アルキルカルボニル」という用語は、Ｃ１−６アルキル−Ｃ（Ｏ）−基を意味し、ここで「Ｃ１−６アルキル」は、上記に定義される通りである。特定の「Ｃ１−６アルキルカルボニル」基は、アセチルである。
【００１４】
「Ｃ１−６アルコキシカルボニル」という用語は、Ｃ１−６アルコキシ−Ｃ（Ｏ）−基を意味し、ここで「Ｃ１−６アルコキシ」は、上記に定義される通りである。
「Ｃ３−７シクロアルキル」という用語は、単独で、又は組合せにおいて、３〜７個の炭素原子、特に３〜６個の炭素原子を含有する飽和炭素環、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、等を意味する。特定の「Ｃ３−７シクロアルキル」基は、シクロプロピル、シクロペンチル、及びシクロヘキシルである。
【００１５】
「−ＣｍＨ２ｍ−」という用語は、単独で、又は組合せにおいて、ｍ個（ｍ≠０）の炭素原子又は１つの結合（ｍ＝０）を含有する飽和で直鎖又は分岐鎖のアルキル基を意味する。特に、「−ＣｍＨ２ｍ−」は、単独で、又は組合せにおいて、１〜４個の炭素原子を含有する、飽和で直鎖又は分岐鎖のアルキル基を意味する。
【００１６】
「カルボキシ−ＣｍＨ２ｍ−」という用語は、「−ＣｍＨ２ｍ−ＣＯＯＨ」基を意味し、ここで「−ＣｍＨ２ｍ−」は、上記に定義される通りである。
「Ｃ３−７シクロアルキル−ＣｍＨ２ｍ−」という用語は、「Ｃ３−７シクロアルキル」基の水素原子の１個が「−ＣｍＨ２ｍ−」に置き換わっている、上記に定義されるような「Ｃ３−７シクロアルキル」基を意味する。
【００１７】
「ヘテロシクリル」という用語は、Ｎ、Ｏ、及びＳより選択される１〜５個の環ヘテロ原子を含んでなり、残る環原子が炭素である、３〜１０個の環原子の一価で飽和又は部分不飽和の単環式又は二環式の環系を意味する。特定の態様において、ヘテロシクリルは、Ｎ、Ｏ、及びＳより選択される１、２、又は３個の環ヘテロ原子を含んでなり、残る環原子が炭素である、４〜７個の環原子の一価で飽和した単環式の環系である。単環式飽和ヘテロシクリルの例は、アジリジニル、オキシラニル、アゼチジニル、オキセタニル、ピロリジニル、ジメチルピロリジニル、エトキシカルボニルピロリジニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロチエニル、ピラゾリジニル、イミダゾリジニル、オキサゾリジニル、イソオキサゾリジニル、チアゾリジニル、ピペリジニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロチオピラニル、ピペラジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、ジオキソチオモルホリニル、アゼパニル、ジアゼパニル、ホモピペラジニル、又はオキサゼパニルである。単環式飽和ヘテロシクリルは、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル、及びＣ１−６アルコキシカルボニルより独立して選択される１〜３の置換基によってさらに置換され得る。置換された単環式飽和ヘテロシクリルの例は、４−メチルピペラジニル、ジメチルピロリジニル、エトキシカルボニルピロリジニル、ジフルオロピロリジニル、フルオロ（メチル）ピロリジニルである。二環式飽和ヘテロシクリルの例は、アザビシクロ［３．２．１］オクチル、キヌクリジニル、オキサアザビシクロ［３．２．１］オクチル、アザビシクロ［３．３．１］ノニル、オキサアザビシクロ［３．３．１］ノニル、チアアザビシクロ［３．３．１］ノニル、アザスピロ［３．３］ヘプタニル、及びオキサアザスピロ［３．３］ヘプタニルである。部分不飽和ヘテロシクリルの例は、ジヒドロフリル、イミダゾリニル、ジヒドロオキサゾリル、テトラヒドロピリジニル、及びジヒドロピラニルである。
【００１８】
本明細書において使用するように、「ジアステレオマー」という用語は、２個以上のキラル中心があって、それらの分子が互いの鏡像ではない立体異性体を意味する。ジアステレオマーは、異なる物理特性（例、融点、沸点、スペクトル特性、活性、及び反応性）を有する。
【００１９】
本明細書において使用するように、「エナンチオマー」という用語は、互いに重ね合わせることができない鏡像である、化合物の２つの立体異性体を意味する。
本明細書において使用するように、「医薬的に許容される塩」という用語は、生物学的にも他の点でも望ましくなくはない塩を意味する。医薬的に許容される塩には、酸付加塩と塩基付加塩の両方が含まれる。
【００２０】
本明細書において使用するように、「プロドラッグ」という用語は、生体内で（例えば、投与後の被験者による生体液又は酵素によって）化合物の薬理学的に活性な形態へ代謝されて所望される薬理効果を産生する、該化合物の形態又は誘導体を意味する。プロドラッグについては、例えば、「Organic Chemistry of Drug Design and Drug Action（ドラッグデザイン及び薬物作用の有機化学）」Richard B. Silverman 著、アカデミック・プレス、サンディエゴ（2004）、第８章「Prodrus and Drug Delivery Systems（プロドラッグとドラッグデリバリーシステム）（497-558 頁）に記載されている。
【００２１】
「医薬的に許容される酸付加塩」という用語は、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、炭酸、リン酸のような無機酸とともに、そしてギ酸、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、グルコン酸、乳酸、ピルビン酸、シュウ酸、リンゴ酸、マレイン酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、アスパラギン酸、アスコルビン酸、グルタミン酸、アントラニル酸、安息香酸、桂皮酸、マンデル酸、エンボン酸、フェニル酢酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、及びサリチル酸といった、脂肪族、脂環式、芳香族、芳香脂肪族、複素環式、カルボン酸、及びスルホン酸の有機酸群より選択される有機酸とともに生成される医薬的に許容される塩を意味する。
【００２２】
「医薬的に許容される塩基付加塩」という用語は、有機塩基又は無機塩基とともに生成される医薬的に許容される塩を意味する。許容される無機塩基の例には、ナトリウム、カリウム、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、鉄、亜鉛、銅、マンガン、及びアルミニウムの塩が含まれる。医薬的に許容される無害な有機塩基より誘導される塩には、イソプロピルアミン、トリメチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、トリプロピルアミン、エタノールアミン、２−ジエチルアミノエタノール、トリメタミン、ジシクロヘキシルアミン、リジン、アルギニン、ヒスチジン、カフェイン、プロカイン、ヒドラバミン、コリン、ベタイン、エチレンジアミン、グルコサミン、メチルグルカミン、テオブロミン、プリン類、ピペリジン（piperizine）、ピペリジン（piperidine）、Ｎ−エチルピペリジン、及びポリアミン樹脂といった、一級、二級、及び三級アミン、天然に存在する置換アミンが含まれる置換アミン、環状アミン、及び塩基性イオン交換樹脂の塩類が含まれる。
【００２３】
１個又は数個のキラル中心を含有する一般式（Ｉ）の化合物は、ラセミ化合物、ジアステレオマー混合物、又は光学活性がある単一異性体のいずれとしても存在し得る。
本明細書において使用するように、「コンボ（combo）」は、併用（combination）を意味する。
【００２４】
本明細書において使用するように、「ＲＴ−ＰＣＲ」は、逆転写ポリメラーゼ連鎖反応を意味する。
本明細書において使用するように、「ＣＬＩＡ」は、化学発光イムノアッセイを意味する。
【００２５】
本明細書において使用するように、「ＡＡＶ」は、アデノ関連ウイルスを意味する。
本明細書において使用するように、「ＡＡＶ−ＨＢＶ」は、ＡＡＶキャプシドに包まれた１．３コピーのＨＢＶゲノムを担う組換えウイルスを意味する。ＡＡＶ−ＨＢＶを尾静脈注射によりマウスへ注射することによって、慢性ＨＢＶ感染マウスモデルを確立することができる。このマウスモデルでは、活発なＨＢＶ複製により持続的なＨＢＶウイルスマーカー（例、ＨＢＶ  ＤＮＡ、ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、等）が生じる。
【００２６】
本明細書において使用するように、「ＨＢｓＡｇ」は、Ｂ型肝炎（ウイルス）表面抗原を意味する。
本明細書において使用するように、「ＨＢｅＡｇ」は、Ｂ型肝炎（ウイルス）ｅ抗原を意味する。
【００２７】
本明細書において使用するように、「抗ＨＢｓ」は、ＨＢｓＡｇに対する抗体を意味する。
本明細書において使用するように、「ＨＢＶ特異的プライマー」は、ＨＢＶ  ＤＮＡ領域の特異的増幅の始点と終点として役立つ一本鎖核酸の対を意味する。
【００２８】
本明細書において使用するように、「ＴＬＲ７」は、あらゆる起源の種（例、ヒト、ネズミ、ウッドチャック。等）のＴｏｌｌ様受容体７を意味する。
本明細書において使用するように、「ＴＬＲ７アゴニスト」は、ＴＬＲ７のアゴニストとして作用する化合物を意味する。他に示さなければ、ＴＬＲ７アゴニストには、あらゆる異性体（例、ジアステレオマー又はエナンチオマー）、塩、溶媒和物、多形、等が含まれる、製薬的に許容されるあらゆる形態の該化合物が含まれ得る。ある特定の化合物のＴＬＲアゴニズムは、どの好適なやり方でも決定してよい。例えば、試験化合物のＴＬＲアゴニズムを検出するためのアッセイについては、例えば、米国仮特許出願シリアル番号：６０／４３２，６５０（２００２年１２月１１日出願）に記載されて、そのようなアッセイにおける使用に適した組換え細胞系については、例えば、米国仮特許出願シリアル番号：６０／４３２，６５１（２００２年１２月１１日出願）に記載されている。
【００２９】
本発明は、ＴＬＲ７アゴニストとＨＢＶキャプシドアセンブリ阻害剤を医薬的に許容される担体中に含んでなる医薬組成物に関する。
本発明の１つの態様では、「ＴＬＲ７アゴニスト」が式（Ｉ）：
【００３０】
【化１】
2019526610.tif 000003
【００３１】
［式中：
Ｒ１は、Ｃ１−６アルキルであり；
Ｒ２は、ベンジルであり、該ベンジルは、未置換であるか又はハロゲンとＣ１−６アルキルより独立して選択される１、２又は３の置換基によって置換され；
Ｒ３は、−ＮＲ４Ｒ５であり、ここで：
Ｒ４は、Ｃ１−６アルキル又はＣ１−６アルコキシＣ１−６アルキルであり；
Ｒ５は、（Ｃ１−６アルキル）２ＮＣＯＯＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル（Ｃ１−６アルキル）アミノＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル（フェニル）Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシカルボニルＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシカルボニルオキシＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルカルボニル（Ｃ１−６アルキル）アミノＣ１−６アルキル、又はピロリジニルカルバモイルオキシＣ１−６アルキルである；又は
Ｒ４とＲ５は、それらに付く窒素と一緒に、ヘテロシクリルを形成する］の化合物、又はその医薬的に許容される塩、エナンチオマー、又はジアステレオマーである。
【００３２】
本発明の別の態様では、「ＴＬＲ７アゴニスト」が式（ＩＩ）：
【００３３】
【化２】
2019526610.tif 000004
【００３４】
［式中：
Ｒ４は、Ｃ１−６アルキル、ハロＣ１−６アルキル、Ｃ３−７シクロアルキルＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシＣ１−６アルキル、又はピロリジニルＣ１−６アルキルであり；
Ｒ５は、Ｃ１−６アルキル、フェニルＣ１−６アルキル、ピリジニルＣ１−６アルキル、又はピリミジニルＣ１−６アルキルであり、該フェニルＣ１−６アルキル、ピリジニルＣ１−６アルキル、及びピリミジニルＣ１−６アルキルは、未置換であるか又は、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、シアノ、カルボキシ、カルバモイル、ハロＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルキルスルホニル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、Ｃ１−６アルコキシＣ１−６アルキルアミノカルボニル、ピロリジニルカルボニル、及びピペリジニルカルボニルより独立して選択される１、２、又は３の置換基によって置換され；
Ｒ６は、Ｈである］の化合物、又はその医薬的に許容される塩、エナンチオマー、又はジアステレオマーである。
【００３５】
より具体的には、本発明によるＴＬＲ７アゴニストは、６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−［Ｓ（Ｓ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−Ｎ−プロピル−プリン−７−カルボキサミド；６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−［Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−Ｎ−プロピル−プリン−７−カルボキサミド；６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−Ｎ−エチル−２［Ｓ（Ｓ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−プリン−７−カルボキサミド；６−アミノ−２−［Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−Ｎ−プロピル−９−（ｐ−トリルメチル）プリン−７−カルボキサミド；又はこれらの医薬的に許容される塩、エナンチオマー、又はジアステレオマーに関する。投与後、式（Ｉ）の化合物は、有用なＴＬＲ７アゴニストである、それらの活性型へ代謝される。
【００３６】
本明細書において使用するように、「Ｂ型肝炎ウイルス」又は「ＨＢＶ」は、ほぼ３，２００塩基対の小さな二本鎖ＤＮＡゲノムと肝細胞への向性を有する、ヘパドナウイルス科のメンバーを意味する。「ＨＢＶ」には、多様な哺乳動物（例、ヒト、非ヒト霊長動物、等）と鳥類（アヒル、等）の宿主のいずれにも感染するＢ型肝炎ウイルスが含まれる。「ＨＢＶ」には、あらゆる既知のＨＢＶ遺伝子型、例えば、血清型Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、及びＧ；あらゆるＨＢＶ血清型又はＨＢＶサブタイプ；あらゆるＨＢＶ単離株；ＨＢＶ変異株（例、ＨＢｅＡｇ陰性変異株）、薬剤耐性ＨＢＶ変異株（例、ラミブジン耐性変異株；アデホビル耐性突然変異株；テノホビル耐性突然変異株；エンテカビル耐性突然変異株、等）、及びこれらの類似物が含まれる。
【００３７】
本明細書において使用するように、「ＨＢＶキャプシドアセンブリ阻害剤」は、正常なＨＢＶキャプシドアセンブリ（例えば、成熟化の間）及び／又は正常なキャプシド分解（disassembly）（例えば、感染力のある間）を阻害する、及び／又は破壊する、及び／又は促進する、及び／又は妨害する、及び／又は遅延させる、及び／又は抑制する、及び／又は変化させる、及び／又はキャプシド安定性を混乱させることによって、異常なキャプシドの形態及び機能を誘導する化合物を意味する。
【００３８】
本発明の１つの態様において、ＨＢＶキャプシドアセンブリ阻害剤は、式（ＩＩＩ）：
【００３９】
【化３】
2019526610.tif 000005
【００４０】
［式中：
Ｒ７は、水素、ハロゲン、又はＣ１−６アルキルであり；
Ｒ８は、水素又はハロゲンであり；
Ｒ９は、水素又はハロゲンであり；
Ｒ１０は、Ｃ１−６アルキルであり；
Ｒ１１は、水素、ヒドロキシＣ１−６アルキル、アミノカルボニル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、又はカルボキシであり；
Ｒ１２は、水素、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、又はカルボキシ−ＣｍＨ２ｍ−であり；
Ｘは、カルボニル又はスルホニルであり；
Ｙは、−ＣＨ２−、−Ｏ−、又は−Ｎ（Ｒ１３）−であり、
ここでＲ１３は、水素、Ｃ１−６アルキル、ハロＣ１−６アルキル、Ｃ３−７シクロアルキル−ＣｍＨ２ｍ−、Ｃ１−６アルコキシカルボニル−ＣｍＨ２ｍ−、−ＣｔＨ２ｔ−ＣＯＯＨ、−ハロＣ１−６アルキル−ＣＯＯＨ、−（Ｃ１−６アルコキシ）Ｃ１−６アルキル−ＣＯＯＨ、−Ｃ１−６アルキル−Ｏ−Ｃ１−６アルキル−ＣＯＯＨ、−Ｃ３−７シクロアルキル−ＣｍＨ２ｍ−ＣＯＯＨ、−ＣｍＨ２ｍ−Ｃ３−７シクロアルキル−ＣＯＯＨ、ヒドロキシ−ＣｔＨ２ｔ−、カルボキシスピロ［３．３］ヘプチル又はカルボキシフェニル−ＣｍＨ２ｍ−、カルボキシピリジニル−ＣｍＨ２ｍ−であり；
Ｗは、−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｃ１−６アルキル）２−、−Ｏ−、又はカルボニルであり；
ｎは、０又は１であり；
ｍは、０〜７であり；
ｔは、１〜７である］の化合物、又はその医薬的に許容される塩、又はエナンチオマー、又はジアステレオマーである。
【００４１】
より具体的には、本発明によるＨＢＶキャプシドアセンブリ阻害剤は、３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｓ）−５−エトキシカルボニル−４−（３−フルオロ−２−メチル−フェニル）−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸；３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｒ）−４−（２−クロロ−３−フルオロ−フェニル）−５−エトキシカルボニル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸；又はこれらの医薬的に許容される塩、エナンチオマー、又はジアステレオマーに関する。別の態様では、「ＨＢＶキャプシドアセンブリ阻害剤」が特許：ＷＯ２０１５／１３２２７６、ＷＯ２０１４／１８４３２８、及びＷＯ２０１４／０３７４８０に開示される化合物のいずれか１つである。
【００４２】
本発明の１つの態様において、該医薬組成物は、ＴＬＲ７アゴニストとＨＢＶキャプシドアセンブリ阻害剤を含み、ここでＴＬＲ７アゴニストとＨＢＶキャプシドアセンブリ阻害剤は、表１より独立して選択される。（化合物５と化合物６は、特許：ＷＯ２０１５／１３２２７６に開示された）。
【００４３】
表１．ＴＬＲ７アゴニストとＨＢＶキャプシドアセンブリ阻害剤のリスト
【００４４】
【表１−１】
2019526610.tif 000006
【００４５】
【表１−２】
2019526610.tif 000007
【００４６】
より具体的には、本発明は、以下の組合せのいずれか１つより選択される、ＴＬＲ７アゴニストとＨＢＶキャプシドアセンブリ阻害剤を含んでなる医薬組成物に関する：
化合物１と化合物５；化合物１と化合物６；
化合物２と化合物５；化合物２と化合物６；
化合物３と化合物５；化合物３と化合物６；
化合物４と化合物５；化合物４と化合物６；
化合物１ｅ−Ａと化合物５；化合物１ｅ−Ａと化合物６；
化合物１ｅ−Ｂと化合物５；化合物１ｅ−Ｂと化合物６；
化合物４ｆ−Ａと化合物５；化合物４ｆ−Ａと化合物６。
【００４７】
上述の前記組合せの化合物１〜化合物６、化合物１ｅ−Ａ、化合物１ｅ−Ｂ、及び化合物４ｆ−Ａは、本発明の別の側面である、その対応する医薬的に許容される塩、エナンチオマー、又はジアステレオマーに置き換えることが可能である。
【００４８】
本発明の１つの態様において、該医薬組成物は、医薬的に許容される担体中のＴＬＲ７アゴニストとＨＢＶキャプシドアセンブリ阻害剤からなる。
より具体的には、該組成物は：
医薬的に許容される担体中の：
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−［Ｓ（Ｓ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−Ｎ−プロピル−プリン−７−カルボキサミドと３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｓ）−５−エトキシカルボニル−４−（３−フルオロ−２−メチル−フェニル）−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸；
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−［Ｓ（Ｓ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−Ｎ−プロピル−プリン−７−カルボキサミドと３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｒ）−４−（２−クロロ−３−フルオロ−フェニル）−５−エトキシカルボニル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸；
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−［Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−Ｎ−プロピル−プリン−７−カルボキサミドと３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｓ）−５−エトキシカルボニル−４−（３−フルオロ−２−メチル−フェニル）−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸；
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−［Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−Ｎ−プロピル−プリン−７−カルボキサミドと３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｒ）−４−（２−クロロ−３−フルオロ−フェニル）−５−エトキシカルボニル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸；
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−Ｎ−エチル−２［Ｓ（Ｓ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−プリン−７−カルボキサミドと３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｓ）−５−エトキシカルボニル−４−（３−フルオロ−２−メチル−フェニル）−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸；
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−Ｎ−エチル−２［Ｓ（Ｓ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−プリン−７−カルボキサミドと３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｒ）−４−（２−クロロ−３−フルオロ−フェニル）−５−エトキシカルボニル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸；
６−アミノ−２−［Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−Ｎ−プロピル−９−（ｐ−トリルメチル）プリン−７−カルボキサミドと３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｓ）−５−エトキシカルボニル−４−（３−フルオロ−２−メチル−フェニル）−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸；
６−アミノ−２−［Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−Ｎ−プロピル−９−（ｐ−トリルメチル）プリン−７−カルボキサミドと３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｒ）−４−（２−クロロ−３−フルオロ−フェニル）−５−エトキシカルボニル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸；
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−（Ｓ（Ｓ）−エチルスルホンイミドイル）−７Ｈ−プリン−８−オンと３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｓ）−５−エトキシカルボニル−４−（３−フルオロ−２−メチル−フェニル）−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸；
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−（Ｓ（Ｓ）−エチルスルホンイミドイル）−７Ｈ−プリン−８−オンと３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｒ）−４−（２−クロロ−３−フルオロ−フェニル）−５−エトキシカルボニル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸；
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−（Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル）−７Ｈ−プリン−８−オンと３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｓ）−５−エトキシカルボニル−４−（３−フルオロ−２−メチル−フェニル）−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸；
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−（Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル）−７Ｈ−プリン−８−オンと３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｒ）−４−（２−クロロ−３−フルオロ−フェニル）−５−エトキシカルボニル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸；
６−アミノ−２−（Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル）−９−（ｐ−トリルメチル）−７Ｈ−プリン−８−オンと３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｓ）−５−エトキシカルボニル−４−（３−フルオロ−２−メチル−フェニル）−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸；又は
６−アミノ−２−（Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル）−９−（ｐ−トリルメチル）−７Ｈ−プリン−８−オンと３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｒ）−４−（２−クロロ−３−フルオロ−フェニル）−５−エトキシカルボニル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸からなる。
【００４９】
本発明の別の態様は、医薬的に許容される担体中の：
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−Ｎ−エチル−２［Ｓ（Ｓ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−プリン−７−カルボキサミドと３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｓ）−５−エトキシカルボニル−４−（３−フルオロ−２−メチル−フェニル）−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸；又は
６−アミノ−２−［Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−Ｎ−プロピル−９−（ｐ−トリルメチル）プリン−７−カルボキサミドと３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｓ）−５−エトキシカルボニル−４−（３−フルオロ−２−メチル−フェニル）−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸からなる医薬組成物に関する。
【００５０】
本発明の別の態様において、該医薬組成物は、限定されないが、ラミブジン、アデフォビル、テノフォビル、テルビブジン、及びエンテカビルが含まれる、１以上の他の抗ウイルス剤を追加的に含み得る。
【００５１】
ＴＬＲ７アゴニスト及び／又はＨＢＶキャプシドアセンブリ阻害剤の典型的な投与量は、製造業者によって推奨される範囲にあり得て、動物モデルでの試験管内（in vitro）反応によって示される場合は、濃度又は量を約１桁まで低下させることができる。従って、実際の投与量は、医師の判断、患者の状態、及び適正な動物モデルの試験管内反応性に基づいた治療法の有効性に依拠するものである。
【００５２】
本発明の別の態様は、ＴＬＲ７アゴニストとＨＢＶキャプシドアセンブリ阻害剤が該医薬品において使用されることを特徴とする、Ｂ型肝炎ウイルス感染の治療又は予防用医薬品を製造するための方法に関する。
【００５３】
本発明のさらなる態様は、ＴＬＲ７アゴニストとＨＢＶキャプシドアセンブリ阻害剤が同じ製剤又は異なる製剤において同時投与されることを特徴とする、Ｂ型肝炎ウイルス感染の治療又は予防用医薬品を製造するための方法に関する。
【００５４】
本発明の目的のために、「同時投与する」は、２つの活性薬剤としてのＴＬＲ７アゴニストとＨＢＶキャプシドアセンブリ阻害剤の別々又は一緒でのあらゆる投与を意味し、ここでこの２つの活性薬剤は、併用療法の利益を獲得するために設計される適正な用法（dose regimen）の一部として投与される。従って、この２つの活性薬剤は、同じ医薬組成物の一部として投与しても別々の医薬組成物において投与してもよい。また、この２つの活性薬剤は、同時に投与しても連続的に投与してもよい。
【００５５】
ＴＬＲ７アゴニストとＨＢＶキャプシドアセンブリ阻害剤は、様々な医薬的に許容される不活性担体とともに、錠剤、カプセル剤、薬用ドロップ剤、トローチ剤、硬キャンディ剤、散剤、スプレー剤、クリーム剤、膏薬剤、坐剤、ゼリー剤、ゲル剤、ペースト剤、ローション剤、軟膏剤、エリキシル剤、シロップ剤、等の形態で投与することができる。そのような剤形の投与は、単回用量又は反復用量で行うことができる。担体には、固体の希釈剤又は充填剤、無菌の水性媒体、及び様々な無害の有機溶媒が含まれる。そのような剤形の投与は、限定されないが、経口投与、非経口投与、獣医学的投与を介して行うことができる。
【００５６】
本発明のさらなる態様は、ＴＬＲ７アゴニストとＨＢＶキャプシドアセンブリ阻害剤が同じ経路又は異なる経路による被験者への投与に企図されることを特徴とする、Ｂ型肝炎ウイルス感染の治療又は予防用医薬品を製造するための方法に関する。
【００５７】
本発明のさらなる態様は、ＴＬＲ７アゴニストとＨＢＶキャプシドアセンブリ阻害剤が非経口又は経口投与による被験者への投与に企図されることを特徴とする、Ｂ型肝炎ウイルス感染の治療又は予防用医薬品を製造するための方法に関する。
【００５８】
本発明のさらなる態様は、ＴＬＲ７アゴニストとＨＢＶキャプシドアセンブリ阻害剤の被験者への投与が同時的又は連続的であることを特徴とする、Ｂ型肝炎ウイルス感染の治療又は予防用医薬品を製造するための方法に関する。本発明のこの方法のいずれにおいても、薬剤を同時的に投与することは、薬剤を同時にか又は一定の組合せとして一緒に、別々に又は連続的に投与することによって実施することができる。また、本発明のこの方法のいずれにおいても、薬剤の分服的又は連続的な投与は、どの順序でもよい。
【００５９】
本発明の別の態様は、そのＴＬＲ７アゴニストが式（Ｉ）又は式（ＩＩ）の化合物、又はその医薬的に許容される塩、エナンチオマー、又はジアステレオマーであることを特徴とする、Ｂ型肝炎ウイルス感染の治療又は予防用医薬品を製造するための方法に関する。特に、ＴＬＲ７アゴニストは、６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−［Ｓ（Ｓ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−Ｎ−プロピル−プリン−７−カルボキサミド；６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−［Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−Ｎ−プロピル−プリン−７−カルボキサミド；６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−Ｎ−エチル−２［Ｓ（Ｓ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−プリン−７−カルボキサミド；６−アミノ−２−［Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−Ｎ−プロピル−９−（ｐ−トリルメチル）プリン−７−カルボキサミド；６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−（Ｓ（Ｓ）−エチルスルホンイミドイル）−７Ｈ−プリン−８−オン；６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−（Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル）−７Ｈ−プリン−８−オン；又は６−アミノ−２−（Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル）−９−（ｐ−トリルメチル）−７Ｈ−プリン−８−オン、又はこれらの医薬的に許容される塩、エナンチオマー、又はジアステレオマーである。
【００６０】
本発明の別の態様は、ＨＢＶキャプシドアセンブリ阻害剤が式（ＩＩＩ）の化合物、又はその医薬的に許容される塩、エナンチオマー、又はジアステレオマーであることを特徴とする、Ｂ型肝炎ウイルス感染の治療又は予防用医薬品を製造するための方法に関する。特に、ＨＢＶキャプシドアセンブリ阻害剤は、３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｓ）−５−エトキシカルボニル−４−（３−フルオロ−２−メチル−フェニル）−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸；３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｒ）−４−（２−クロロ−３−フルオロ−フェニル）−５−エトキシカルボニル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸；又はこれらの医薬的に許容される塩、エナンチオマー、又はジアステレオマーである。
【００６１】
本発明の別の特徴は、該医薬品が、限定されないが、ラミブジン、アデフォビル、テノフォビル、テルビブジン、及びエンテカビルが含まれる、１以上の他の抗ウイルス剤を追加的に含んでなることを特徴とする、Ｂ型肝炎ウイルス感染の治療又は予防用医薬品を製造するための方法に関する。
【００６２】
本発明の別の態様は、Ｂ型肝炎ウイルス感染の治療又は予防用医薬品を製造するための方法に関し、ここで該医薬品において使用されるＴＬＲ７アゴニストとＨＢＶキャプシドアセンブリ阻害剤は、医薬的に許容される担体中の：
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−Ｎ−エチル−２［Ｓ（Ｓ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−プリン−７−カルボキサミドと３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｓ）−５−エトキシカルボニル−４−（３−フルオロ−２−メチル−フェニル）−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸；又は
６−アミノ−２−［Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−Ｎ−プロピル−９−（ｐ−トリルメチル）プリン−７−カルボキサミドと３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｓ）−５−エトキシカルボニル−４−（３−フルオロ−２−メチル−フェニル）−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸である。
【００６３】
本発明の別の態様は、ＴＬＲ７アゴニストとＨＢＶキャプシドアセンブリ阻害剤を含んでなる容器を含んでなるキットに関し、前記キットは、無菌希釈剤をさらに含み得る。
本発明のさらなる態様は、前記キットに関し、ここで該キットは、Ｂ型肝炎ウイルス感染の治療又は予防への方法としてのＴＬＲ７アゴニストとＨＢＶキャプシドアセンブリ阻害剤の併用治療法の使用について指示する印刷された説明書を含んでなる添付文書をさらに含み得る。
【００６４】
本発明のさらなる態様は、前記キットに関し、ここでＴＬＲ７アゴニストは：
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−［Ｓ（Ｓ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−Ｎ−プロピル−プリン−７−カルボキサミド；
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−［Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−Ｎ−プロピル−プリン−７−カルボキサミド；
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−Ｎ−エチル−２［Ｓ（Ｓ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−プリン−７−カルボキサミド；
６−アミノ−２−［Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−Ｎ−プロピル−９−（ｐ−トリルメチル）プリン−７−カルボキサミド；
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−（Ｓ（Ｓ）−エチルスルホンイミドイル）−７Ｈ−プリン−８−オン；
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−（Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル）−７Ｈ−プリン−８−オン；又は
６−アミノ−２−（Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル）−９−（ｐ−トリルメチル）−７Ｈ−プリン−８−オン、又はこれらの医薬的に許容される塩、エナンチオマー、又はジアステレオマーである。
【００６５】
本発明のさらなる態様は、前記キットに関し、ここで該容器において使用されるＴＬＲ７アゴニストとＨＢＶキャプシドアセンブリ阻害剤は、医薬的に許容される担体中の：
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−Ｎ−エチル−２［Ｓ（Ｓ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−プリン−７−カルボキサミドと３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｓ）−５−エトキシカルボニル−４−（３−フルオロ−２−メチル−フェニル）−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸；又は
６−アミノ−２−［Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−Ｎ−プロピル−９−（ｐ−トリルメチル）プリン−７−カルボキサミドと３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｓ）−５−エトキシカルボニル−４−（３−フルオロ−２−メチル−フェニル）−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸である。
【００６６】
本発明の別の態様は、有効な第一量のＴＬＲ７アゴニスト、又はその医薬的に許容される塩、エナンチオマー、又はジアステレオマーと第二量のＨＢＶキャプシドアセンブリ阻害剤、又はその医薬的に許容される塩、エナンチオマー、又はジアステレオマーでの被験者への投与を含んでなる、Ｂ型肝炎ウイルス感染の治療又は予防のための方法に関し、ここでＴＬＲ７アゴニストは、６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−［Ｓ（Ｓ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−Ｎ−プロピル−プリン−７−カルボキサミド；６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−［Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−Ｎ−プロピル−プリン−７−カルボキサミド；６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−Ｎ−エチル−２［Ｓ（Ｓ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−プリン−７−カルボキサミド；６−アミノ−２−［Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−Ｎ−プロピル−９−（ｐ−トリルメチル）プリン−７−カルボキサミド；６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−（Ｓ（Ｓ）−エチルスルホンイミドイル）−７Ｈ−プリン−８−オン；６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−（Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル）−７Ｈ−プリン−８−オン；又は６−アミノ−２−（Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル）−９−（ｐ−トリルメチル）−７Ｈ−プリン−８−オン、又はこれらの医薬的に許容される塩、エナンチオマー、又はジアステレオマーであり；そしてＨＢＶキャプシドアセンブリ阻害剤は、３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｓ）−５−エトキシカルボニル−４−（３−フルオロ−２−メチル−フェニル）−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸；又は３−［（８ａＳ）−７−［［（４Ｒ）−４−（２−クロロ−３−フルオロ−フェニル）−５−エトキシカルボニル−２−チアゾール−２−イル−１，４−ジヒドロピリミジン−６−イル］メチル］−３−オキソ−５，６，８，８ａ−テトラヒドロ−１Ｈ−イミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン酸、又はこれらの医薬的に許容される塩、又はエナンチオマー、又はジアステレオマーである。
【００６７】
本発明の別の態様は、本明細書の上記に言及した医薬組成物の、抗ウイルス医薬品として、特にＢ型肝炎ウイルス感染の治療又は予防用医薬品としての使用に関する。
本発明の別の態様は、ＴＬＲ７アゴニストとＨＢＶキャプシドアセンブリ阻害剤の、抗ウイルス医薬品、特にＢ型肝炎ウイルス感染の治療又は予防用医薬品として本明細書の上記に言及した医薬組成物の製造への使用に関する。
【実施例】
【００６８】
本発明は、以下の実施例を参照することによってより完全に理解されよう。しかしながら、それらは、本発明の範囲を制限するものとして解釈してはならない。
実施例１
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−［Ｓ（Ｓ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−Ｎ−プロピル−プリン−７−カルボキサミド（化合物１）と６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−［Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−Ｎ−プロピル−プリン−７−カルボキサミド（化合物２）
【００６９】
【化４】
2019526610.tif 000008
【００７０】
工程１：４−アミノ−３−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−オキソ−１Ｈ−イミダゾール−５−カルボニトリルの製造
【００７１】
【化５】
2019526610.tif 000009
【００７２】
トリホスゲン（５．９ｇ）の乾燥ＴＨＦ（４０ｍＬ）溶液へ乾燥ＴＨＦ（８０ｍＬ）中の（４−クロロフェニル）メチルアミン（８．５ｇ，Accela ChemBio 社、カタログ番号：ＳＹ００４０６２−２５ｇ）とＤＩＰＥＡ（１２．４ｇ）を−８０℃で加えた。この溶液を−８０℃で１５分間撹拌した。ｐ−トルエンスルホン酸アミノマロノニトリル（１５．２ｇ，TCI，カタログ番号：Ａ１１１９−２５Ｇ）とＤＩＰＥＡ（６．２ｇ）の乾燥ＴＨＦ（４０ｍＬ）溶液を−８０℃で加えた。室温で２４時間撹拌後、この反応物を真空で濃縮して、残渣をＥｔＯＡｃ（３００ｍＬ）と水（１５０ｍＬ）の間で分配した。分離した有機層を塩水（５０ｍＬ）で２回洗浄して、水酸化ナトリウム溶液（５０ｍＬ，１Ｎ）で２回抽出した。合わせた水酸化ナトリウム溶液層を１０重量％硫酸水素ナトリウム溶液で中和して、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で２回抽出した。合わせた有機層を塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過して真空で濃縮した。残渣をジエチルエーテルで摩砕して、生じる沈殿を採取して乾燥させて、４−アミノ−３−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−オキソ−１Ｈ−イミダゾール−５−カルボニトリル（８．０ｇ，化合物１ａ）を黄色の固形物として得た。MS obsd. (ESI+) [(M+H)+]: 249.
工程２：６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−スルファニル−７Ｈ−プリン−８−オンの製造
【００７３】
【化６】
2019526610.tif 000010
【００７４】
４−アミノ−３−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−オキソ−１Ｈ−イミダゾール−５−カルボニトリル（８．０ｇ，３２．０ミリモル、化合物１ａ）のＴＨＦ（１００ｍＬ）溶液へイソチオシアン酸ベンゾイル（１１．５ｇ，７０．４ミリモル、TCI，カタログ番号：Ａ１１５９６−１００Ｇ）を滴下した。室温で１２時間撹拌後、この反応混合物を真空で濃縮した。残渣をジエチルエーテル（１００ｍＬ）に摩砕して、生じる沈殿を濾過によって採取した。
【００７５】
入手した沈殿のＴＨＦ（３００ｍＬ）溶液へ水酸化ナトリウム（３０ｍＬ，２Ｎ）を加えた。この反応混合物を５０時間還流させてから、１０重量％硫酸水素ナトリウム水溶液でｐＨ３へ酸性化した。生じる沈殿を濾過によって採取して、粗生成物の６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−スルファニル−７Ｈ−プリン−８−オン（６．４ｇ，化合物１ｂ）を黄色の固形物として得て、これをさらに精製せずに次の工程に使用した。MS obsd. (ESI+) [(M+H)+]: 308．
工程３：６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−エチルスルファニル−７Ｈ−プリン−８−オンの製造
【００７６】
【化７】
2019526610.tif 000011
【００７７】
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−スルファニル−７Ｈ−プリン−８−オン（４．４０ｇ，化合物１ｂ）のＤＭＦ（５０ｍＬ）溶液へ炭酸カリウム（３．９５ｇ，２８．５９ミリモル）に続いてヨードエタン（２．６８ｇ，１７．１６ミリモル）を０℃で加えた。室温で１２時間撹拌後、この反応混合物を水（２００ｍＬ）へ注いで、１０重量％硫酸水素ナトリウム水溶液で酸性化した。生じる沈殿を濾過によって採取して、乾燥させて、６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−エチルスルファニル−７Ｈ−プリン−８−オン（２．５０ｇ，化合物１ｃ）を白色の固形物として得て、これをさらに精製せずに次の工程に使用した。MS obsd. (ESI+) [(M+H)+]: 336.0
工程４：６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−エチルスルフィニル−７Ｈ−プリン−８−オンの製造
【００７８】
【化８】
2019526610.tif 000012
【００７９】
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−エチルスルファニル−７Ｈ−プリン−８−オン（２．２ｇ，化合物１ｃ）のＴＨＦ（１００ｍＬ）懸濁液へｍ−ＣＰＢＡ（１．３６ｇ，７．８６ミリモル）を０℃で加えた。反応混合物を０℃で３０分間撹拌した後で、反応混合物の容量を真空で約５０ｍＬまで減少させた。生じる沈殿を濾過によって採取し、メタノールで洗浄して乾燥させて、６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−エチルスルフィニル−７Ｈ−プリン−８−オン（１．９４ｇ，化合物１ｄ）を白色の固形物として得た。MS obsd. (ESI+) [(M+H)+]: 352.0
工程５：６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−（エチルスルホンイミドイル）−７Ｈ−プリン−８−オンの製造
【００８０】
【化９】
2019526610.tif 000013
【００８１】
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−エチルスルフィニル−７Ｈ−プリン−８−オン（１．９４ｇ，５．５１ミリモル）のイートン試薬（Eaton's reagent）（３０ｍＬ）溶液へＮａＮ３（１．０８ｇ）を６０℃で少量ずつ加えて、この混合物をこの温度で３０分間撹拌した。冷却後、この反応混合物を氷と水酸化アンモニウム（１００ｍＬ，１Ｍ）の混合物へ注いだ。生じる沈殿を濾過によって採取した。残渣を分取用ＨＰＬＣによって精製して、６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−（エチルスルホンイミドイル）−７Ｈ−プリン−８−オン（２１７ｍｇ，化合物１ｅ）を白色の固形物として得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm: 10.61 (s, 1H), 7.42-7.35 (m, 4H), 6.98 (s, 2H), 4.96 (s, 2H), 4.05 (s, 1H), 3.42-3.37 (m, 2H), 1.16 (t, J = 7.4 Hz, 3H). MS obsd. (ESI+) [(M+H)+]: 367.0.
メタノール：５％〜４０％（０．０５％  ＤＥＡ）／ＣＯ２、ChiralPak IC-3 カラムでのキラルＨＰＬＣによる化合物１ｅ（１００ｍｇ）の分離により、化合物１ｅ−Ａ（より速い溶出、３１．８ｍｇ）と化合物１ｅ−Ｂ（より遅い溶出、１０ｍｇ）を白色の固形物として得た。
【００８２】
【化１０】
2019526610.tif 000014
【００８３】
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−［Ｓ（Ｓ）−（エチルスルホンイミドイル）］−７Ｈ−プリン−８−オン（化合物１ｅ−Ａ）：1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm: 10.76 (s, 1H), 7.45-7.33 (m, 4H), 7.01 (s, 2H), 4.96 (s, 2H), 4.03 (s, 1H), 3.40-3.34 (m, 2H), 1.17 (t, J = 7.4 Hz, 3H). MS obsd. (ESI+) [(M+H)+]: 367.0.
【００８４】
【化１１】
2019526610.tif 000015
【００８５】
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−［Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル）］−７Ｈ−プリン−８−オン（化合物１ｅ−Ｂ）：1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm: 10.70 (s, 1H), 7.46 -7.28 (m, 4H), 7.01 (s, 2H), 4.96 (s, 2H), 4.03 (s, 1H), 3.44-3.36 (m, 2H), 1.17 (t, J = 7.4 Hz, 3H). MS obsd. (ESI+) [(M+H)+]: 367.0.
工程６：６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−［Ｓ（Ｓ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−Ｎ−プロピル−プリン−７−カルボキサミド（化合物１）と６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−［Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−Ｎ−プロピル−プリン−７−カルボキサミド（化合物２）の製造
【００８６】
【化１２】
2019526610.tif 000016
【００８７】
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−［Ｓ（Ｓ）−（エチルスルホンイミドイル）］−７Ｈ−プリン−８−オン（１００ｍｇ，化合物１ｅ−Ａ）のＤＩＰＥＡ／ピリジン（ｖ／ｖ，１／１２，２．０ｍＬ）懸濁液へＮ−プロピル−Ｎ−メチル−カルバモイルクロリド（１４８ｍｇ，１．０９ミリモル）の溶液を滴下した。２５℃で２時間撹拌した後で、この反応混合物をＭｅＯＨ（５ｍＬ）でクエンチして濃縮した。残渣を分取用ＨＰＬＣによって精製して、６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−［Ｓ（Ｓ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−Ｎ−プロピル−プリン−７−カルボキサミド（７８．０ｍｇ，化合物１）を白色の固形物として得た。MS obsd. (ESI+) [(M+H)+]: 466.2
1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz) δ ppm: 7.43-7.41 (m, 4H), 6.90 (s, 2H), 5.00 (s, 2H), 4.20 (s, 1H), 3.46-3.41 (m, 2H), 3.40-3.39 (m, 2H), 3.10-3.00 (m, 3H), 1.69-1.50 (m, 2H), 1.24-1.12 (m, 3H), 0.93-0.73 (m, 3H).
【００８８】
【化１３】
2019526610.tif 000017
【００８９】
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−［Ｓ（Ｒ）−（エチルスルホンイミドイル）］−７Ｈ−プリン−８−オン（１００ｍｇ，化合物１ｅ−Ｂ）のＤＩＰＥＡ／ピリジン（ｖ／ｖ，１／１２，２．０ｍＬ）懸濁液へＮ−プロピル−Ｎ−メチル−カルバモイルクロリド（１４８ｍｇ，１．０９ミリモル）の溶液を滴下した。２５℃で２時間撹拌した後で、この反応混合物をＭｅＯＨ（５ｍＬ）でクエンチして濃縮した。残渣を分取用ＨＰＬＣによって精製して、６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−［Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−Ｎ−プロピル−プリン−７−カルボキサミド（３８．６ｍｇ，化合物２）を白色の固形物として得た。MS obsd. (ESI+) [(M+H)+]: 466.1
1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz) δ ppm: 7.43-7.41 (m, 4H), 6.90 (s, 2H), 5.00 (s, 2H), 4.19 (s, 1H), 3.46-3.39 (m, 2H), 3.39-3.38 (m, 2H), 3.09-2.99 (m, 3H), 1.69-1.52 (m, 2H), 1.19 (t, J = 7.28 Hz, 3H), 0.95-0.66 (m, 3H)
化合物１の立体化学は、図面１に示す単結晶Ｘ線回折によって決定した。
【００９０】
実施例２
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−Ｎ−エチル−２−［Ｓ（Ｓ）−（エチルスルホンイミドイル）］−Ｎ−メチル−８−オキソ−プリン−７−カルボキサミド（化合物３）
【００９１】
【化１４】
2019526610.tif 000018
【００９２】
６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−［Ｓ（Ｓ）−（エチルスルホンイミドイル）］−７Ｈ−プリン−８−オン（１００ｍｇ，化合物１ｅ−Ａ）のＤＩＰＥＡ／ピリジン（ｖ／ｖ＝１／１２，２．０ｍＬ）懸濁液へＮ−エチル−Ｎ−メチル−カルバモイルクロリド（１３２ｍｇ，１．０９ミリモル）の溶液を滴下した。２５℃で２時間撹拌した後で、この反応混合物をＭｅＯＨ（５ｍＬ）でクエンチして濃縮した。残渣を分取用ＨＰＬＣによって精製して、６−アミノ−９−［（４−クロロフェニル）メチル］−２−［Ｓ（Ｓ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−エチル−８−オキソ−Ｎ−メチル−プリン−７−カルボキサミド（３１．９ｍｇ，化合物３）を得た。
【００９３】
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm: 7.43-7.41 (m, 4H), 6.90 (s, 2H), 4.99 (s, 2H), 4.18 (s, 1H), 3.48-3.40 (m, 2H), 3.39 (s, 2H), 3.05 - 3.01 (m, 3H), 1.20-1.14 (m, 6H). MS obsd. (ESI+) [(M+H)+]: 452.2.
化合物３の立体化学は、図面２に示す単結晶Ｘ線回折によって決定した。
【００９４】
実施例３
６−アミノ−２−［Ｓ（Ｒ）−（エチルスルホンイミドイル）］−Ｎ−メチル−８−オキソ−Ｎ−プロピル−９−（ｐ−トリルメチル）プリン−７−カルボキサミド（化合物４）
【００９５】
【化１５】
2019526610.tif 000019
【００９６】
工程１：１−（イソシアネートメチル）−４−メチルベンゼンの製造
【００９７】
【化１６】
2019526610.tif 000020
【００９８】
トリホスゲン（４０．５ｇ，１３６．３ミリモル）の無水ＤＣＭ（１．２Ｌ）溶液へｐ−トリルメタンアミン（５０．０ｇ，４１３．２ミリモル）とＥｔ３Ｎ（８３．４ｇ，８２６．４ミリモル）のＤＣＭ（８００ｍＬ）溶液を窒素下に−７８℃で滴下した。１時間撹拌した後で、反応混合物をそのまま２０℃へ上昇させて、さらに１２時間撹拌した。この混合物をＤＣＭ（２．０Ｌ）で希釈して、固形物を濾過によって除去した。濾液を真空で濃縮した。残渣を蒸留（沸点：１５０℃，１０ｍｍＨｇ）によって精製して、１−（イソシアネートメチル）−４−メチルベンゼン（３０．０ｇ，化合物４ａ）を無色のオイルとして得た。
【００９９】
工程２：５−アミノ−１−（４−メチルベンジル）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾール−４−カルボニトリルの製造
【０１００】
【化１７】
2019526610.tif 000021
【０１０１】
４−メチルベンゼンスルホン酸アミノマロノニトリル（３２．７ｇ，１２９．５ミリモル）の乾燥ＴＨＦ（８００ｍＬ）溶液へ１−（イソシアネートメチル）−４−メチルベンゼン（２０．０ｇ，化合物４ａ）とＤＩＰＥＡ（１２．２ｇ，９４．２ミリモル）を室温で加えた。２０℃で１６時間撹拌した後で、この反応物を真空で濃縮して、残渣を水（５００ｍＬ）へ注いで、生じる灰色の固形物を濾過によって採取した。濾液をＥｔＯＡｃ（３００ｍＬ）で３回抽出した。分離した有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過して濃縮した。残渣を先の灰色の固形物と合わせた。合わせた固形物へＴＨＦ（２００ｍＬ）と水酸化ナトリウム溶液水溶液（３００ｍＬ，１Ｎ）を加えた。この混合物を５０℃で１時間撹拌し、室温へ冷やし、１５％硫酸水素ナトリウムで中和して、ＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ）で３回抽出した。分離した有機層を塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過して真空で濃縮して、５−アミノ−１−（４−メチルベンジル）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾール−４−カルボニトリル（２６．６ｇ，化合物４ｂ）を灰色の固形物として得て、これをさらに精製せずに次の工程に使用した。MS obsd. (ESI+) [(M+H)+]: 229.2.
工程３：６−アミノ−９−（ｐ−トリルメチル）−２−スルファニル−７Ｈ−プリン−８−オンの製造
【０１０２】
【化１８】
2019526610.tif 000022
【０１０３】
５−アミノ−１−（４−メチルベンジル）−２−オキソ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾール−４−カルボニトリル（２７．０ｇ，化合物４ｂ）のＴＨＦ（５００ｍＬ）溶液へイソチオシアン酸ベンゾイル（４８．３ｇ）を滴下した。２０℃で１６時間撹拌した後で、この反応混合物を真空で濃縮した。残渣をＴＨＦ（２００ｍＬ）で摩砕して、生じる沈殿を濾過によって採取した。
【０１０４】
入手した沈殿のＴＨＦ（２００ｍＬ）溶液へ水酸化ナトリウム水溶液（７０ｍＬ，２Ｎ）を加えた。この混合物を８０℃で２０時間還流させてから、１５％硫酸水素カリウム水溶液でｐＨ５へ酸性化して、生じる沈殿を濾過によって採取して、６−アミノ−９−（ｐ−トリルメチル）−２−スルファニル−７Ｈ−プリン−８−オン（２０．０ｇ，化合物４ｃ）を黄色の固形物として得た。この生成物をさらに精製せずに次の工程に使用した。MS obsd. (ESI+) [(M+H)+]: 288.
工程４：６−アミノ−２−エチルスルファニル−９−（ｐ−トリルメチル）−７Ｈ−プリン−８−オンの製造
【０１０５】
【化１９】
2019526610.tif 000023
【０１０６】
６−アミノ−９−（ｐ−トリルメチル）−２−スルファニル−７Ｈ−プリン−８−オン（１９．０ｇ，化合物４ｃ）のＤＭＦ（１５０ｍＬ）溶液へ炭酸カリウム（１３．７ｇ，９９．３ミリモル）に続いてヨードエタン（７．２ｇ，４６．３ミリモル）を加えた。２５℃で１６時間撹拌した後で、この混合物を水（８００ｍＬ）へ注いだ。生じる沈殿を分離して乾燥させて、６−アミノ−２−エチルスルファニル−９−（ｐ−トリルメチル）−７Ｈ−プリン−８−オンの粗生成物（１３．０ｇ，化合物４ｄ）を黄色の固形物として得た。MS obsd. (ESI+) [(M+H)+]: 316.1.
工程５：６−アミノ−２−エチルスルフィニル−９−（ｐ−トリルメチル）−７Ｈ−プリン−８−オンの製造
【０１０７】
【化２０】
2019526610.tif 000024
【０１０８】
６−アミノ−２−エチルスルファニル−９−（ｐ−トリルメチル）−７Ｈ−プリン−８−オン（８．８ｇ，化合物４ｄ）のＤＭＦ（１００ｍＬ）溶液へＤＭＦ（２０．０ｍＬ）中のｍ−ＣＰＢＡ（８．７ｇ，５０．０ミリモル）を０℃で滴下した。この温度で２時間撹拌した後で、この反応混合物を水（４００ｍＬ）へ注いだ。生じる黄色の沈殿を濾過し、ＭＴＢＥ（５０ｍＬ）で洗浄して乾燥させて、６−アミノ−２−エチルスルフィニル−９−（ｐ−トリルメチル）−７Ｈ−プリン−８−オン（３．５ｇ，化合物４ｅ）を黄色の固形物として得た。MS obsd. (ESI+) [(M+H)+]: 332.2.
工程６：６−アミノ−２−（エチルスルホンイミドイル）−９−（ｐ−トリルメチル）−７Ｈ−プリン−８−オンの製造
【０１０９】
【化２１】
2019526610.tif 000025
【０１１０】
６−アミノ−２−エチルスルフィニル−９−（ｐ−トリルメチル）−７Ｈ−プリン−８−オン（４．３ｇ，化合物４ｅ）のイートン試薬（３０．０ｍＬ）溶液へＮａＮ３（２．１ｇ，３２．０ミリモル）を５５℃で少量ずつ加えた。５５℃で３０分間撹拌した後で、この反応混合物を２Ｍ水酸化アンモニウム溶液（２００ｍＬ）へ０℃で注ぎ、生じる黄色の沈殿を濾過した。この粗生成物を分取用ＨＰＬＣによって精製して、６−アミノ−２−（エチルスルホンイミドイル）−９−（ｐ−トリルメチル）−７Ｈ−プリン−８−オン（２．０ｇ，化合物４ｆ）を白色の固形物として得た。
【０１１１】
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm: 10.53 (s, 1H), 7.24 (d, J = 8.03 Hz, 2H), 7.13 (d, J = 8.03 Hz, 2H), 6.94 (br. s., 2H), 4.91 (s, 2H), 4.03 (s, 1H), 3.36-3.41 (m, 2H), 2.26 (s, 3H), 1.18 (t, J = 7.28 Hz, 3H). MS obsd. (ESI+) [(M+H)+]: 347.
メタノール：５％〜４０％（０．０５％  ＤＥＡ）／ＣＯ２、ChiralPak AD-3 カラムでのキラルＨＰＬＣによる化合物４ｆの分離により、化合物４ｆ−Ａ（より速い溶出、５６．８ｍｇ）と化合物４ｆ−Ｂ（より遅い溶出、５６．７ｍｇ）を白色の固形物として得た。
【０１１２】
【化２２】
2019526610.tif 000026
【０１１３】
化合物４ｆ−Ａ：1H NMR (400 MHz, DMSO-d6)δ ppm: 10.52 (br. s., 1H), 7.23 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.13 (d, J = 7.9 Hz, 2H), 6.94 (br. s., 2H), 4.90 (s, 2H), 4.03 (s, 1H), 3.42-3.33 (m, 2H), 2.25 (s, 3H), 1.17 (t, J = 7.3 Hz, 3H). MS obsd. (ESI+) [(M+H)+]: 347.
【０１１４】
【化２３】
2019526610.tif 000027
【０１１５】
化合物４ｆ−Ｂ：1H NMR (400 MHz, DMSO-d6)δ ppm: 10.56 (br. s., 1H), 7.23 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.13 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 6.95 (br. s., 2H), 4.90 (s, 2H) 4.03 (s, 1H), 3.44-3.29 (m, 2H), 2.25 (s, 3H), 1.17 (t, J = 7.3 Hz, 3H). MS obsd. (ESI+) [(M+H)+]: 347.
工程６：６−アミノ−２−［Ｓ（Ｒ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−Ｎ−プロピル−９−（ｐ−トリルメチル）プリン−７−カルボキサミドの製造
【０１１６】
【化２４】
2019526610.tif 000028
【０１１７】
（Ｒ）−６−アミノ−２−（エチルスルホンイミドイル）−９−（ｐ−トリルメチル）−７Ｈ−プリン−８−オン（２００．０ｍｇ，化合物４ｆ−Ａ）のＤＩＰＥＡ／ピリジン（ｖ／ｖ＝１／１，３．０ｍＬ）懸濁液へＮ−メチル−Ｎ−プロピル−カルバモイルクロリド（３０８ｍｇ，２．２８ミリモル）を滴下した。２５℃で２時間撹拌した後で、この反応混合物を水で希釈し、ＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）で３回抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過して濃縮した。残渣を分取用ＨＰＬＣによって精製して、６−アミノ−２−［Ｓ（Ｒ）−（エチルスルホンイミドイル）］−９−（４−メチルベンジル）−９Ｈ−プリン−８−イルメチル（プロピル）カルバメート（５８．１ｍｇ，化合物４）を白色の固形物として得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm: 7.28 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 7.15 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 6.88 (br. s., 2H), 5.03-4.87 (m, 2H), 4.19 (s, 1H), 3.61-3.36 (m, 4H), 3.11-2.96 (m, 3H), 2.26 (s, 3H), 1.72-1.45 (m, 2H), 1.20 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 0.97-0.65 (m, 3H). MS obsd. (ESI+) [(M+H)+]: 446.
【０１１８】
【化２５】
2019526610.tif 000029
【０１１９】
化合物４−ａは、（（Ｒ）−６−アミノ−２−（エチルスルホンイミドイル）−９−（ｐ−トリルメチル）−７Ｈ−プリン−８−オン（化合物４ｆ−Ａ）の代わりに６−アミノ−２−（エチルスルホンイミドイル）−９−（ｐ−トリルメチル）−７Ｈ−プリン−８−オン（化合物４ｆ−Ｂ）を使用することによって、化合物４、工程６と同様に製造した。６−アミノ−２−［Ｓ（Ｓ）−エチルスルホンイミドイル］−Ｎ−メチル−８−オキソ−Ｎ−プロピル−９−（ｐ−トリルメチル）プリン−７−カルボキサミド（化合物４−ａ，４０．１ｍｇ）を白色の固形物として入手した：1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm: 7.28 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 7.15 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 6.89 (br. s., 2H), 5.03-4.86 (m, 2H), 4.19 (s, 1H), 3.49-3.37 (m, 4H), 3.08-3.00 (m, 3H), 2.27 (s, 3H), 1.70-1.48 (m, 2H), 1.20 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 0.95-0.71 (m, 3H). MS obsd. (ESI+) [(M+H)+]: 446.3.
化合物４−ａの立体化学は、図面３に示す単結晶Ｘ線回折によって決定した。
【０１２０】
実施例４
ＨＥＫ２９３−Ｂｌｕｅ−ｈＴＬＲ−７細胞アッセイ：
InvivoGen（カタログ番号：ｈｋｂ−ｈｔｌｒ７，カリフォルニア州サンディエゴ、アメリカ）より、安定したＨＥＫ２９３−Ｂｌｕｅ−ｈＴＬＲ−７細胞系を購入した。これらの細胞は、ＮＦ−κＢの活性化をモニターすることによってヒトＴＬＲ７の刺激について検討するために設計された。分泌型胚性アルカリホスファターゼ（ＳＥＡＰ）のレポーター遺伝子を５つのＮＦ−κＢ及びＡＰ−１結合部位へ融合したＩＦＮ−β最小プロモーターの制御下に置いた。ＨＥＫ−Ｂｌｕｅ  ｈＴＬＲ７細胞をＴＬＲ７リガンドで刺激するときのＮＦ−κＢとＡＰ−１の活性化によって、ＳＥＡＰを誘導した。ＱＵＡＮＴＩ−ＢｌｕｅＴＭキット（カタログ番号：ｒｅｐ−ｑｂ１，Invivogen，カリフォルニア州サンディエゴ、アメリカ）を６４０ｎｍの波長で使用して、細胞培養上清中のＳＥＡＰ活性を定量した。このようなレポーターアッセイは、ＴＬＲ７アゴニズムの評価に広く使用されてきた（Tsuneyasu Kaisho and Takashi Tanaka, Trends in Immunology, Volume 29, Issue 7, July 2008, Pages 329.sci; Hiroaki Hemmi et al, Nature Immunology 3, 196-200 (2002)）。
【０１２１】
具体的には、ＨＥＫ２９３−Ｂｌｕｅ−ｈＴＬＲ７細胞を、９６ウェルプレートにおいて、４．５ｇ／ｌ  グルコース、５０Ｕ／ｍｌ  ペニシリン、５０ｍｇ／ｍｌ  ストレプトマイシン、１００ｍｇ／ｍｌ  ノルモシン（Normocin）、２ｍＭ  Ｌ−グルタミン、１０％（ｖ／ｖ）熱不活性化ウシ胎仔血清を含有するダルベッコ改良イーグル培地（ＤＭＥＭ）中１８０μＬの容量において２５０，０００〜４５０，０００個の細胞／ｍＬの密度で２４時間インキュベートした。次いで、これらの細胞を、系列希釈の２０μＬの試験化合物とともにＣＯ２インキュベーターにおいて３７℃で２０時間インキュベートした。次いで、各ウェルからの上清の２０μＬを１８０μＬのＱｕａｎｔｉ−ｂｌｕｅ基質溶液とともに３７℃で２時間インキュベートして、分光光度計を使用して６２０〜６５５ｎｍで吸光度を測定した。化合物４と化合物３は、その活性部分（active moieties）である化合物４ｆ−Ａと化合物１ｅ−Ａへそれぞれ効率的に変換される。表１に示すように、ＨＥＫ２９３−ｈＴＬＲ７アッセイにおいて、活性ＴＬＲ７に対する化合物４ｆ−Ａと化合物１ｅ−Ａの力価は、それぞれ０．１１μＭと０．０７１μＭであった。化合物１と化合物２は、その活性部分である化合物１ｅ−Ａと化合物１ｅ−Ｂへそれぞれ効率的に変換されて、ＨＥＫ２９３−ｈＴＬＲ７アッセイにおいて、活性ＴＬＲ７に対する化合物１ｅ−Ａと化合物１ｅ−Ｂの力価は、それぞれ０．０７１μＭと０．０８５μＭであった。ＡＳＩＰ化合物の活性部分がｈＴＬＲ７を試験管内で活性化するのにマイクロモル未満の濃度を必要としたので、このような例外的に高い力価により評価が可能になって、これらの化合物には、単独で、又はキャプシド阻害剤との併用で週１回又は隔週１回の投与で生体内抗ウイルス効果があるという予想外の知見をもたらした。
【０１２２】
表１：ＨＥＫ２９３−ｈＴＬＲ−７アッセイにおける化合物（活性型とプロドラッグ）の活性
【０１２３】
【表２】
2019526610.tif 000030
【０１２４】
実施例５
ＴＬＲ７アゴニスト（化合物４）とＨＢＶキャプシドアセンブリ阻害剤（化合物５）の併用は、ＡＡＶ−ＨＢＶマウスモデルにおいてＨＢＶ  ＤＮＡとＨＢｓＡｇを強力に低下させた。
【０１２５】
動物モデル
中国科学院（ＳＬＡＣ）の上海実験動物センターより特定病原体未感染の４〜６週齢の雄性Ｃ５７ＢＬ／６マウスを購入して、動物飼養施設の個別換気ケージにおいて、実験動物飼養ガイドラインに従って制御される温度及び光条件下に収容した。ＡＡＶ−ＨＢＶウイルスを北京大学分子医学研究所（Beijing FivePlus Molecular Medicine Institute）（北京、中国）より購入した。この組換えウイルスは、ＡＡＶ血清型８（ＡＡＶ８）キャプシド中へ包まれた１．３コピーのＨＢＶゲノムを担う。Ｃ５７ＢＬ／６マウスに、緩衝生理食塩水に希釈した２００μＬの組換えウイルスを尾静脈注射により注射した。３〜４週後、動物を出血させて、血清中のＨＢＶゲノムＤＮＡと表面抗原（ＨＢｓＡｇ）をモニターしてから、これらのＨＢＶバイオマーカーに従って無作為に群分けした。
【０１２６】
ＨＢＶバイオマーカーの測定
ＣＬＩＡキット（Autobio Diagnostics 株式会社、鄭州、中国）を製造業者の説明書に従って使用して、血清のＨＢｓＡｇを測定した。ＨＢｓＡｇの検出下限（ＬＬＯＱ）は、０．０５ＩＵ／ｍＬであった。５００倍の血清希釈液を使用して、標準曲線の線形範囲内の数値を得た。MagNA Pure 96 DNA と Viral NA Small Volume Kit（ロシュ）を製造業者の説明書に従って使用して、血清のＨＢＶ  ＤＮＡを抽出した。このＤＮＡ試料について、ヌクレオチド：２９６９〜３０９６由来の１２８ｂｐ  ＨＢＶゲノム領域の特異的な増幅及び検出用のＨＢＶ特異的プライマー及びプローブのセットを使用するリアルタイム定量ＰＣＲ（ｑＰＣＲ）によって分析した。プライマーとプローブの配列は、以下のように示される：
フォワードプライマー：ＡＡＧＡＡＡＡＡＣＣＣＣＧＣＣＴＧＴＡＡ（配列番号１）；
リバースプライマー：ＣＣＴＧＴＴＣＴＧＡＣＴＡＣＴＧＣＣＴＣＴＣＣ（配列番号２）；
ＨＢＶ−プローブ：５’ＴＡＭＲＡ−ＣＣＴＧＡＴＧＴＧＡＴＧＴＴＣＴＣＣＡＴＧＴＴＣＡＧＣ−ＢＨＱ２−３’（配列番号３）。
【０１２７】
マウス血清中の抗ＨＢ抗体について、anti-HBs CLIA キット（Autobio，鄭州、中国）を製造業者の説明書に従って一部変更して使用して、検証した。約１５μＬの希釈済み（１：３）マウス血清試料を室温で１０分間融解した。６μＬの試料を３０μＬのＰＢＳにさらに希釈して、抗体検定用の最終希釈液（１：１８）を作製した。モノクローナルマウス抗体の抗Ｂ型肝炎ウイルス表面抗原（Ａｄ／Ａｙ）抗体［Ｓ３５］（Abcam ab20402）を希釈済みナイーブ型マウス血清（ＰＢＳで１：１８希釈）において用いて、標準曲線を作成した。１μＬの（１ｍｇ／ｍｌ）抗ＨＢｓ抗体を５００μＬの希釈済みマウス血清へ加えて、標準液１を２０００ｎｇ／ｍｌの最終濃度として作製した。次いで、１５０μＬの希釈済みマウス血清中へ５０μＬの標準液１を加えて、標準液２（１：４希釈）を作製した。検定には、７点の標準液を必要とした。標準液７の最終濃度は、（０．４８８ｎｇ／ｍｌ）であった。バックグラウンド対照として、ブランク血清を使用した。２５μＬの希釈済み血清試料／標準液／ブランク液を９６ウェルプレート中へ移した。試料を室温で１時間インキュベートして、３００μＬのＰＢＳＴで３回の洗浄を続けた。０．５ｍｇ／ｍｌのビオチニル化ヤギ抗マウスＩｇＧＢ（Mabtech 3825-6-250）をＰＢＳへ希釈して、最終濃度：１μｇ／ｍｌとした（１：５００希釈）。５０μｌの希釈済み抗マウスＩｇＧ−Ｂｉｏをプレートへ加え、室温で１時間インキュベートして、３００μＬのＰＢＳＴで３回の洗浄を続けた。ストレプタビジン−ＨＲＰ（Mabtech 3310-9）をＰＢＳへ希釈した（１：２５０）。５０μＬの希釈済みストレプタビジン−ＨＲＰを室温で１時間インキュベートして、３００μＬのＰＢＳＴで３回の洗浄を続けた。基質Ａと基質Ｂ（AntuBio）を混合した。この混合物の５０μＬをプレートへ加えて１０分間インキュベートした後に、Envision マイクロプレートリーダーでの発光読取りへ処した。抗ＨＢｓＡｂの検出下限は、３６ｎｇ／ｍＬであった。SoftMax Pro（v5.4.1）ソフトウェアによる発光生データの抗ＨＢｓＡｂ標準曲線に対する適合より、抗ＨＢｓＡｂ結果を算出した。
【０１２８】
マウスＩｇＧ  ＥＬＩＳＰｏｔ  Ｂａｓｉｃ（ＨＲＰ）キット（Mabtech 3825-2H）を使用して、抗ＨＢｓ分泌型Ｂ細胞を検出するためのＥＬＩＳＰＯＴアッセイを脾細胞で実施した。ＨＢｓＡｇ（ＡＹＷ）５０μｇ（１ｍｇ／ｍｌ）（Abcam Ab7374）をＰＢＳに１００倍希釈して１０μｇ／ｍｌとした。ＰＶＤＦプレート（Millipore ＭＳＩＰタイプ）を１５μＬの３５％エタノール／ウェルで最大１分間処理して、２００μＬのｄｄＨ２Ｏで５回の洗浄を続けた。このウェルへ１００μＬの希釈済みＨＢｓＡｇを加えて、４〜８℃で一晩インキュベートした。プレートを２００μＬの無菌ＰＢＳで洗浄して、過剰な抗体を除去した。２００μＬの１０％  ＦＢＳ含有ＲＰＭＩ１６４０を加えて３７℃で２時間インキュベートして、プレートをブロックした。５ｍｌの２％  ＲＰＭＩ１６４０を含有する gentleMACS C Tubes（Milterny 130-096-334）の中へＰＢＳ中の新鮮な脾臓を移した。次いで、試料を Programm_spleen_03_02 で gentle Macs Dissociator へ処した。次いで、この解離した混合物を７０μＭ細胞ストレイナーに通して濾過した。１５ｍｌの２％  ＲＰＭＩ１６４０を使用して、この細胞ストレイナーを洗浄した。細胞を室温で５分間、３００ｘｇで遠心分離させた。１ｍｌのＡＣＫ溶解緩衝液を加えて、室温で５分間インキュベートして、赤血球細胞を溶解させた。１５ｍｌの２％  ＲＰＭＩ１６４０を加えて、この細胞を洗浄した。細胞を室温で５分間、３００ｘｇで遠心分離させてから、５ｍｌの完全ＲＰＭＩ１６４０に再懸濁させて、７０μＭ細胞ストレイナーを通す濾過を続けた。BioRad 細胞計数器によって細胞を計数した。このウェルへ２ｘ１０６個の細胞／２００μＬを加えて、３７℃で一晩インキュベートした。プレート中の細胞を除去して、２００μＬのＰＢＳで５回の洗浄を続けた。０．５ｍｇ／ｍｌのビオチニル化ヤギ抗マウスＩｇＧ（Mabtech 3825-6-250）を０．５％  ＦＢＳ含有ＰＢＳへ希釈して、最終濃度：１μｇ／ｍｌとした（１：５００希釈）。１００μｌの希釈済み抗マウスＩｇＧ−Ｂｉｏをプレートへ加え、室温で２時間インキュベートして、２００μＬのＰＢＳで５回の洗浄を続けた。ストレプタビジン−ＨＲＰ（Mabtech 3310-9）を０．５％  ＦＢＳ含有ＰＢＳへ希釈した（１：２００）。１００μＬの希釈済みストレプタビジン−ＨＲＰを室温で１時間インキュベートして、３００μＬのＰＢＳで５回の洗浄を続けた。このウェルへ１００μＬのＡＥＣ基質溶液（BD 551951）を加えて、明瞭なスポットが出現するまで（１０分未満）発色させた。ｄｄＨ２Ｏで広範囲に洗浄することによって、発色を止めた。このプレートをそのまま乾燥させてスポットを可視化して、顕微鏡のＡＩＤ  ＥＬＩＳＰＯＴで計数した。
【０１２９】
実験デザインと結果
表２に示すように、本試験では、全部で２０匹のマウスを４群へ層別化した。０１群では、動物を担体で４２日間隔日（ＱＯＤ）処理して、偽薬対照として役立てた。０２群では、化合物４を週１回（ＱＷ）、１０ｍｇ／ｋｇで４２日間投薬した。化合物５は、０３群において、単独で１日１回（ＱＤ）、２０ｍｇ／ｋｇで４２日間投薬するか、又は０４群において、１０ｍｇ／ｋｇの化合物４（ＱＷ）と併用して投薬した。すべての被験物質は、１０ｍＬ／ｋｇの全投与量で強制経口投与（ＰＯ）によって投与された。４２日間の処理に続いて４２日間の非処理期間があった。動物を、試験終了まで週１回、血清採取のために顎下より出血させた。この血清試料をＨＢＶバイオマーカーの分析へ処した。８４日目の試験終了時に、抗ＨＢｓ抗体を産生するＢ細胞を検出するためのＥＬＩＳＰＯＴアッセイ用にマウスの脾臓も採取した。
【０１３０】
表２．ＡＡＶ−ＨＢＶマウスモデルにおける化合物４と化合物５についての併用試験デザイン
【０１３１】
【表３】
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【０１３２】
図面４に示すように、１０ｍｇ／ｋｇ  ＱＷでの化合物４と２０ｍｇ／ｋｇ  ＱＤでの化合物５の単独療法は、それ自体で、４２日間の処理後にＨＢＶ  ＤＮＡとＨＢｓＡｇの有意な低下をもたらした。さらに、化合物４と化合物５の併用は、より大きなＨＢｓＡｇ低下を伴う、ずっとより大きな抗ウイルス利益を明示した。この併用療法を受けたすべての動物において、血清中のＨＢｓＡｇは、４２日間の処理後に定量下限（ＬＬＯＱ）未満の検出不能レベルまで低下して、そのようなＨＢｓＡｇ消失は、次の４２日間の非処理期間を通して持続可能であった。これらすべての動物は、ＨＢｓＡｇの低下とともに、他の群より有意に高いレベルの抗ＨＢｓ抗体を発現した。非処理期間の最後では、併用処理を受けた動物由来の脾臓（図面４−Ｄに示される）において、抗ＨＢｓ抗体を活発に産生しているＢ細胞が依然として検出可能であった。故に、このような併用療法には、慢性ＨＢＶ被感染患者においてＨＢｓＡｇ消失と抗ＨＢ血清変換を達成する可能性がある。
【０１３３】
実施例６
ＴＬＲ７アゴニスト（化合物３）とＨＢＶキャプシドアセンブリ阻害剤（化合物５）の併用は、ＡＡＶ−ＨＢＶマウスモデルにおいてＨＢＶ  ＤＮＡとＨＢｓＡｇを強力に低下させた。
【０１３４】
化合物３と化合物５の併用について、それらの単独療法とともに、実施例５に記載されるのと同じＡＡＶ−ＨＢＶマウスモデルとＨＢＶバイオマーカー測定法を使用して評価した。
【０１３５】
表３に示すように、本試験では、全部で２４匹のマウスを４群へ層別化した。０１群では、動物を担体で４２日間１日１回（ＱＤ）処理して、偽薬対照として役立てた。０２群では、化合物３を隔週１回（ＱＯＷ）、１ｍｇ／ｋｇで４２日間投薬した。化合物５は、０３群において、単独で１日１回（ＱＤ）、２０ｍｇ／ｋｇで４２日間投薬するか、又は０４群において、１ｍｇ／ｋｇの化合物３（ＱＯＷ）と併用して投薬した。すべての被験物質は、１０ｍＬ／ｋｇの全投与量で強制経口投与（ＰＯ）によって投与された。４２日間の処理に続いて４５日間の非処理期間があった。動物を、試験終了まで週１回、血清採取のために顎下より出血させた。この血清試料をＨＢＶバイオマーカーの分析へ処した。      
【０１３６】
表３．ＡＡＶ−ＨＢＶマウスモデルにおける化合物３と化合物５についての併用試験デザイン
【０１３７】
【表４】
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【０１３８】
図面５に示すように、１ｍｇ／ｋｇ  ＱＯＷでの化合物３と２０ｍｇ／ｋｇ  ＱＤでの化合物５の単独療法は、それ自体で、４２日間の処理後にＨＢＶ  ＤＮＡとＨＢｓＡｇの有意な低下をもたらした。化合物３と化合物５の併用は、より大きなＨＢｓＡｇ低下を伴う、ずっとより大きな抗ウイルス利益を明示した。この併用療法群では、６匹の動物のうち４匹が４２日間の処理後に検出不能レベル（ＬＬＯＱ未満）の血清中ＨＢｓＡｇを有して、そのようなＨＢｓＡｇ消失は、次の４５日間の非処理期間を通して持続可能であった。併用療法で処理された群は、ＨＢｓＡｇの低下とともに、他の群より有意に高いレベルの抗ＨＢｓ抗体を明示した。従って、このような併用療法には、慢性ＨＢＶ被感染患者においてＨＢｓＡｇ消失と抗ＨＢ血清変換を達成する可能性がある。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４−１】
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【図４−２】
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【図４−３】
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【図５】
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【国際調査報告】
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