(57)【要約】  本発明は、オーファン核内受容体のリガンドとしての式Ｉの化合物の、及びオーファン核内受容体に関連する疾患を予防又は治療における、使用が提供される。    【化１１８】2019523245.tif 000120
2019523245.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用されるか、又はオーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用される医薬の製造において使用される、式Ｉの化合物、互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルの使用。
【化８４】
2019523245.tif 000086
（式中、
Ｘは−ＮＨ−、−Ｎ（Ｒ）−、−Ｏ−、−ＣＨ２−又はハロゲンを表し；ここで、Ｘがハロゲンである場合、Ｒ１は存在せず；
Ｙと、それに結合している炭素原子との間の結合が単結合である場合、ＹはＨ、ハロゲン、−ＯＲ、−ＳＲ又は−ＮＲＲ’を表し；Ｙと、それに結合している炭素原子との間の結合が二重結合である場合、ＹはＯ、Ｓ又はＮＲを表し；
Ｒ１は存在しないか、又はＨ、−ＰＯ（ＯＲ）２、Ｃ１−６アルキル、グリコシル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル−Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル−アミノアシル、アリール−Ｃ１−６アルキル又はアリールを表し、ここで、前記Ｃ１−６アルキル、グリコシル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル−Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル−アミノアシル、アリール−Ｃ１−６アルキル又はアリールは非置換であるか、又はハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルアミノ及びＣ１−６アルカノイルからなる群から選択される１以上（例えば、１、２、３又は４）の置換基で置換されており；好ましくは、前記アリールは６員〜１４員アリール、例えば６員〜１０員アリールであり；より好ましくはフェニル又はナフチルであり；
Ｒ２はＨ、Ｄ、−ＰＯ（ＯＲ）２、−ＣＯＮＨ２、−ＮＨ２、−ＮＨＲ、−ＮＲＲ’、−ＮＨＣＯＲ、−ＮＲＣＯＲ、−ＮＨＣＯＯＲ、−ＮＨＣＯＮＨＲ、−ＮＨＣＯＮＲＲ’、−ＮＲＣＯＮＨＲ、−ＮＲＣＯＮＲＲ’、−ＯＨ、−ＯＲ、−ＯＣＯＮＨＲ、−ＯＣＯＮＲＲ’、−ＳＨ、−ＳＲ、−ＳＯＲ、−ＳＯＯＲ、−ＳＯ２ＮＨＲ”、ニトロ、ハロゲン、グリコシル、シアノ、トリフルオロメチル、Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル、３員〜８員ヘテロシクロアルキル、アリール、Ｃ１−６アルキル置換アリール、６員〜１５員ヘテロアリール、アルケニル、アルキニル、スルフィニル、スルホン酸基又はスルホネート基を表し；ここで、前記Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル、３員〜８員ヘテロシクロアルキル、アリール、Ｃ１−６アルキル置換アリール、６員〜１５員ヘテロアリール、アルケニル及びアルキニルは非置換であるか、又はアミノ、ハロゲン、ヒドロキシ、オキシ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルチオ、Ｃ１−６アルカノイル、３員〜８員シクロアルキル（例えばシクロプロピル）、３員〜８員オキソシクロアルキル（例えばオキソシクロブチル）、シアノ、トリフルオロメチル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、Ｃ１−６アルキルアミド、ウレイド基、カルバメート、カルボキシル及びアリールからなる群から選択される１以上（例えば、１、２、３又は４）の置換基で置換されており；
Ｒ３及びＲ４はそれぞれ独立して存在しないか、又はＨ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルカノイル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、グリコシル、アリール−Ｃ１−６アルキル又はアリールを表し、ここで前記Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルカノイル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、グリコシル、アリール−Ｃ１−６アルキル及びアリールは、非置換であるか、又はハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルアミノ及びＣ１−６アルカノイルからなる群から選択される１以上（例えば、１、２、３又は４）の置換基で置換されており；好ましくは、前記アリールは、６員〜１４員アリール、例えば６員〜１０員アリール、であり；より好ましくはフェニル又はナフチル；
Ｒ及びＲ’はそれぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル、アリール−Ｃ１−６アルキル又はアリールから選択され、ここで、前記Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル、アリール−Ｃ１−６アルキル及びアリールは、非置換であるか、又はハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、及びＣ１−６アルキルアミノからなる群から選択される１以上（例えば、１、２、３又は４）の置換基で置換されており；
Ｒ”はＣ１−６アルキル又はアリール（例えば６員〜１０員アリール基、好ましくはフェニル）を表し；
式（Ｉ）における
【化８５】
2019523245.tif 000087
は単結合又は二重結合を表し；好ましくは、環Ａは０、１、２又は３個の炭素−炭素二重結合を含有し；環Ｂは０、１又は２個の炭素−炭素二重結合を含有する)
【請求項２】
前記化合物におけるＹと、それに結合している炭素原子との間の結合が二重結合であり、且つ、ＹがＯを表す、請求項１に記載の使用。
【請求項３】
前記化合物中のＸが−ＮＨ−、−Ｎ（Ｒ）−、−Ｏ−、−ＣＨ２−又はハロゲンを表し；ＲがＣ１−６アルキル又は３−員〜８員のシクロアルキル（好ましくはシクロヘキシル）を表し；式中、Ｘがハロゲンである場合、Ｒ１は存在せず；
好ましくは、Ｘは−ＮＨ−、−Ｎ（Ｒ）−、−Ｏ−又はハロゲンを表し；Ｒはシクロヘキシルを表す；
請求項１又は２に記載の使用。
【請求項４】
前記化合物中のＲ１が存在しないか、又は水素、Ｃ１−４アルキル、−ＰＯ（ＯＲ）２、モノグリコシル、Ｃ１−４アルコキシカルボニル−Ｃ１−４アルキル、３員〜６員シクロアルキル−アミノアシル、アリール−Ｃ１−４アルキル又はアリールを表し；ここで、前記Ｃ１−４アルキル、モノグリコシル、Ｃ１−４アルコキシカルボニル−Ｃ１−４アルキル、３員〜６員シクロアルキル−アミノアシル、アリール−Ｃ１−４アルキル及びアリールは、非置換であるか、又はハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、Ｃ１−４アルキルアミノ及びＣ１−４アルカノイルからなる群から選択される１以上の（例えば、１、２、３又は４）置換基で置換され；好ましくは、前記アリールは６員〜１４員のアリール、例えば６員〜１０員のアリールであり；より好ましくはフェニル又はナフチル；
ＲはＣ１−４アルキルを表し；
好ましくは、Ｒ１は存在しないか、又は水素、Ｃ１−４アルキル、−ＰＯ（ＯＲ）２、グルコシル、Ｃ１−２アルコキシカルボニル−Ｃ１−２アルキル、シクロヘキシル−アミノアシル、フェニル−Ｃ１−２アルキル、ナフチル−Ｃ１−２アルキル、フェニル又はナフチルを表し；ここで、前記メチル、エチル、グルコシル、Ｃ１−２アルコキシカルボニル−Ｃ１−２アルキル、シクロヘキシル−アミノアシル、フェニル又はナフチルは非置換であるか、又はＣ１−２アルキル、Ｃ１−２アルコキシ、及びＣ１−２アルカノイルからなる群から選択される１以上（例えば１、２、３又は４）の置換基で置換されており；
ＲはＣ１−４アルキルを表し；
好ましくは、Ｒ１は存在しないか、又は水素、Ｃ１−４アルキル、−ＰＯ（ＯＲ）２、フェニル−Ｃ１−２アルキル、Ｃ１−２アルコキシカルボニル−Ｃ１−２アルキル、３員〜６員シクロアルキル−アミノアシルを表し；
ＲはＣ１−３アルキルを表し；好ましくは、Ｒ１は存在しないか、又は水素、メチル、エチル、−ＰＯ（ＯＭｅ）２、−ＰＯ（ＯＥｔ）２、−ＰＯ（ＯｉＰｒ）２、２，３，４，６−テトラアセトキシ−α−Ｄ−グルコピラノシル、ＥｔＯＣＯＣＨ２−、シクロヘキシル−アミノ基アシル、ベンジル、メトキシフェニル又はｔｅｒｔ−ブチルフェニルを表す、
請求項１〜３のいずれか一項に記載の使用。
【請求項５】
前記化合物中のＲ２が、Ｈ、Ｄ、−ＯＨ、−ＰＯ（ＯＲ）２、Ｃ１−６アルキル、９員〜１５員縮合ヘテロアリール又はスルホネートを表し；ここで、前記Ｃ１−６アルキル又は６員〜１５員ヘテロアリールは非置換であるか、又はアミノ、ハロゲン、ヒドロキシ、オキシ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルカノイル、シアノ、トリフルオロメチル及びカルボキシルからなる群から選択される１以上（例えば１、２、３又は４）の置換基で置換されており；
ＲはＨ、Ｃ１−６アルキル又はアリールを表し；
好ましくは、Ｒ２はＨ、Ｄ、−ＰＯ（ＯＲ）２、Ｃ１−４アルキル、９員〜１５員ベンゾ縮合ヘテロアリール又はスルホネートを表し；ここで、前記Ｃ１−４アルキル又は９員〜１５員ベンゾ縮合ヘテロアリールは、非置換であるか、又はアミノ、ハロゲン、ヒドロキシ、オキシ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、Ｃ１−４アルカノイル、シアノ、トリフルオロメチル及びカルボキシルからなる群から選択される１以上（例えば、１、２、３又は４）の置換基で置換されており；
ＲはＨ、Ｃ１−４アルキル又はフェニルを表し；
好ましくは、Ｒ２はＨ、Ｄ、−ＰＯ（ＯＲ）２、Ｃ１−４アルキル、９員〜１５員ベンゾ縮合ヘテロアリール又はスルホネートを表し；ここで、前記Ｃ１−４アルキル及び９員〜１５員ベンゾ縮合ヘテロアリールは、非置換であるか、又はアミノ、ハロゲン、ヒドロキシ、オキシ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、Ｃ１−４アルカノイル、シアノ、トリフルオロメチル及びカルボキシルからなる群から選択される１以上（例えば１、２、３又は４）の置換基で置換されており；
ＲはＨ、Ｃ１−４アルキル又はフェニルを表し；
好ましくは、Ｒ２はＨ、Ｄ、−ＰＯ（ＯＲ）２、２−オキソフェニル、インドリル又はスルホン酸ナトリウムを表し；ここで、前記インドリルは非置換であるか、又はアミノ、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヒドロキシ、メチル、メトキシ、ホルミル、シアノ、トリフルオロメチル及びカルボキシからなる群から選択される１以上（例えば１、２、３又は４）の置換基で置換されており；
ＲはＨ、メチル、エチル、イソプロピル又はフェニルを表す：
請求項１〜４のいずれか一項に記載の使用。
【請求項６】
前記化合物の７位炭素及び８位の炭素が炭素−炭素二重結合で結合している、請求項１〜５のいずれか一項に記載の使用。
【請求項７】
Ｙと、それに結合している炭素原子との間の結合が、炭素−炭素二重結合である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の使用。
【請求項８】
Ｙと、それに結合している炭素原子との間の結合が、炭素−炭素単結合である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の使用。
【請求項９】
前記化合物が以下の構造を有する、請求項１〜８のいずれか一項に記載の使用。
【化８６】
2019523245.tif 000088
（式中、Ｒ３及びＲ４はそれぞれ独立してＨ、Ｃ１−６アルキル又はＣ１−６アルカノイルを表し；
好ましくは、Ｒ３及びＲ４はそれぞれ独立してＨ、Ｃ１−４アルキル又はＣ１−４アルカノイルを表し；
好ましくは、Ｒ３及びＲ４はそれぞれ独立してＨ、メチル又はブチリルを表す）
【請求項１０】
前記化合物が以下の構造を有する、請求項１〜８のいずれか一項に記載の使用。
【化８７】
2019523245.tif 000089
（式中、Ｒ４はＨ、Ｃ１−６アルカノイル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル又は１以上の（例えば、１、２、３又は４）Ｃ１−６アルカノイル基で置換されたモノグリコシルを表し；
好ましくは、Ｒ４はＨ、Ｃ１−４アルカノイル、Ｃ１−４アルコキシカルボニル又は１以上の（例えば１、２、３又は４）Ｃ１−４アルカノイル基で置換されたモノグリコシルを表し；
好ましくは、Ｒ４はＨ又はＣ１−２アルコキシカルボニルを表し；
好ましくは、Ｒ４はＨ、ブチリル、エトキシカルボニル又は２，３，４，６−テトラアセトキシ−α−Ｄ−グルコピラノースを表す）
【請求項１１】
前記化合物が、以下の化合物から選択される、請求項１に記載の使用。
【化８８】
2019523245.tif 000090
【化８９】
2019523245.tif 000091
【化９０】
2019523245.tif 000092
【化９１】
2019523245.tif 000093
【請求項１２】
請求項１〜１１のいずれか一項に記載の使用であって、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬が、Ｎｕｒ７７の転写活性を阻害するため、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用され；
好ましくは、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬が、細胞におけるＮｕｒ７７の転写活性を阻害するために使用され；
好ましくは、前記細胞はＮｕｒ７７を発現し；
好ましくは、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される；
使用。
【請求項１３】
請求項１〜１１のいずれか一項に記載の使用であって、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬が、細胞におけるＴＮＦαの生物学的作用を阻害するため、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用され；
好ましくは、ＴＮＦαの前記生物学的作用は、κＢ阻害タンパク質（ＩκＢ）キナーゼα／β（ＩＫＫα／β）のリン酸化、ＩκＢαの分解、ＮＦ−κＢのｐ６５サブユニットの核内移行、及び／又はＮＦ−κＢの活性化であり；
好ましくは、前記細胞はＮｕｒ７７を発現し；
好ましくは、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される；
使用。
【請求項１４】
請求項１〜１１のいずれか一項に記載の使用であって、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬が、細胞におけるｍＴＯＲ経路を阻害するため（例えば、Ｐ−ｍＴＯＲ、ｐ−Ｐ７０Ｓ６Ｋ、及び／又はｐ−Ｓ６の活性をダウンレギュレートする）、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用され；
好ましくは、前記細胞はＮｕｒ７７を発現し；
好ましくは、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される；
使用。
【請求項１５】
請求項１〜１１のいずれか一項に記載の使用であって、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬が、それを必要とする対象においてＮｕｒ７７関連疾患を予防又は治療するため、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用され；
好ましくは、前記Ｎｕｒ７７関連疾患はがん（例えば、トリプルネガティブ乳がん）である；
使用。
【請求項１６】
オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７の転写活性を阻害する方法であって、Ｎｕｒ７７を、式Ｉの化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルと接触させるステップを含む方法。
【化９２】
2019523245.tif 000094
Ｘは−ＮＨ−、−Ｎ（Ｒ）−、−Ｏ−、−ＣＨ２−又はハロゲンを表し；ここで、Ｘがハロゲンである場合、Ｒ１は存在せず；
Ｙと、それに結合している炭素原子との間の結合が単結合である場合、ＹはＨ、ハロゲン、−ＯＲ、−ＳＲ又は−ＮＲＲ’を表し；Ｙと、それに結合している炭素原子との間の結合が二重結合である場合、ＹはＯ、Ｓ又はＮＲを表し；
Ｒ１は存在しないか、又はＨ、−ＰＯ（ＯＲ）２、Ｃ１−６アルキル、グリコシル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル−Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル−アミノアシル、アリール−Ｃ１−６アルキル又はアリールを表し、ここで、前記Ｃ１−６アルキル、グリコシル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル−Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル−アミノアシル、アリール−Ｃ１−６アルキル又はアリールは非置換であるか、又はハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルアミノ及びＣ１−６アルカノイルからなる群から選択される１以上（例えば、１、２、３又は４）の置換基で置換されており；好ましくは、前記アリールは６員〜１４員アリール、例えば６員〜１０員アリールであり；より好ましくはフェニル又はナフチル；
Ｒ２はＨ、Ｄ、−ＰＯ（ＯＲ）２、−ＣＯＮＨ２、−ＮＨ２、−ＮＨＲ、−ＮＲＲ’、−ＮＨＣＯＲ、−ＮＲＣＯＲ、−ＮＨＣＯＯＲ、−ＮＨＣＯＮＨＲ、−ＮＨＣＯＮＲＲ’、−ＮＲＣＯＮＨＲ、−ＮＲＣＯＮＲＲ’、−ＯＨ、−ＯＲ、−ＯＣＯＮＨＲ、−ＯＣＯＮＲＲ’、−ＳＨ、−ＳＲ、−ＳＯＲ、−ＳＯＯＲ、−ＳＯ２ＮＨＲ”、ニトロ、ハロゲン、グリコシル、シアノ、トリフルオロメチル、Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル、３員〜８員ヘテロシクロアルキル、アリール、Ｃ１−６アルキル置換アリール、６員〜１５員ヘテロアリール、アルケニル、アルキニル、スルフィニル、スルホン酸基又はスルホネート基を表し；ここで、前記Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル、３員〜８員ヘテロシクロアルキル、アリール、Ｃ１−６アルキル置換アリール、６員〜１５員ヘテロアリール、アルケニル及びアルキニルは非置換であるか、又はアミノ、ハロゲン、ヒドロキシ、オキシ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルチオ、Ｃ１−６アルカノイル、３員〜８員シクロアルキル（例えばシクロプロピル）、３員〜８員シクロアルキル（例えばオキソシクロブチル）、シアノ、トリフルオロメチル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、Ｃ１−６アルキルアミド、ウレイド基、カルバメート、カルボキシル及びアリールからなる群から選択される１以上（例えば、１、２、３又は４）の置換基で置換されており；
Ｒ３及びＲ４はそれぞれ独立して存在しないか、又はＨ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルカノイル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、グリコシル、アリール−Ｃ１−６アルキル又はアリールを表し、ここで前記Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルカノイル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、グリコシル、アリール−Ｃ１−６アルキル及びアリールは、非置換であるか、又はハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルアミノ及びＣ１−６アルカノイルからなる群から選択される１以上（例えば、１、２、３又は４）の置換基で置換されており；好ましくは、前記アリールは、６員〜１４員アリール、例えば６員〜１０員アリール、であり；より好ましくはフェニル又はナフチル；
Ｒ及びＲ’はそれぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル、アリール−Ｃ１−６アルキル又はアリールから選択され、ここで、前記Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル、アリール−Ｃ１−６アルキル及びアリールは、非置換であるか、又はハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、及びＣ１−６アルキルアミノからなる群から選択される１以上（例えば、１、２、３又は４）の置換基で置換されており；
Ｒ”はＣ１−６アルキル又はアリール（例えば６員〜１０員アリール基、好ましくはフェニル）を表し；
式（Ｉ）における
【化９３】
2019523245.tif 000095
は単結合又は二重結合を表し；好ましくは、環Ａは０、１、２又は３個の炭素−炭素二重結合を含有し；環Ｂは０、１又は２個の炭素−炭素二重結合を含有する)
【請求項１７】
請求項１６に記載の方法であって、式Ｉの前記化合物が請求項２〜１１のいずれか一項に定義される通りであり；
好ましくは、当該方法は細胞におけるＮｕｒ７７の前記転写活性を阻害するためのものであり；
好ましくは、当該方法はそれを必要とする細胞に、前記細胞におけるＮｕｒ７７の前記転写活性を阻害するための前記化合物の有効量を投与することを含み；
好ましくは、前記細胞はＮｕｒ７７を発現し；
好ましくは、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される；
方法。
【請求項１８】
細胞におけるＴＮＦαの生物学的作用を阻害するための方法であって、それを必要とする前記細胞に、式Ｉの化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルの有効量を投与することを含む方法。
【化９４】
2019523245.tif 000096
（式中、
Ｘは−ＮＨ−、−Ｎ（Ｒ）−、−Ｏ−、−ＣＨ２−又はハロゲンを表し；ここで、Ｘがハロゲンである場合、Ｒ１は存在せず；
Ｙと、それに結合している炭素原子との間の結合が単結合である場合、ＹはＨ、ハロゲン、−ＯＲ、−ＳＲ又は−ＮＲＲ’を表し；Ｙと、それに結合している炭素原子との間の結合が二重結合である場合、ＹはＯ、Ｓ又はＮＲを表し；
Ｒ１は存在しないか、又はＨ、−ＰＯ（ＯＲ）２、Ｃ１−６アルキル、グリコシル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル−Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル−アミノアシル、アリール−Ｃ１−６アルキル又はアリールを表し、ここで、前記Ｃ１−６アルキル、グリコシル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル−Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル−アミノアシル、アリール−Ｃ１−６アルキル又はアリールは非置換であるか、又はハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルアミノ及びＣ１−６アルカノイルからなる群から選択される１以上（例えば、１、２、３又は４）の置換基で置換されており；好ましくは、前記アリールは６員〜１４員アリール、例えば６員〜１０員アリールであり；より好ましくはフェニル又はナフチル；
Ｒ２はＨ、Ｄ、−ＰＯ（ＯＲ）２、−ＣＯＮＨ２、−ＮＨ２、−ＮＨＲ、−ＮＲＲ’、−ＮＨＣＯＲ、−ＮＲＣＯＲ、−ＮＨＣＯＯＲ、−ＮＨＣＯＮＨＲ、−ＮＨＣＯＮＲＲ’、−ＮＲＣＯＮＨＲ、−ＮＲＣＯＮＲＲ’、−ＯＨ、−ＯＲ、−ＯＣＯＮＨＲ、−ＯＣＯＮＲＲ’、−ＳＨ、−ＳＲ、−ＳＯＲ、−ＳＯＯＲ、−ＳＯ２ＮＨＲ”、ニトロ、ハロゲン、グリコシル、シアノ、トリフルオロメチル、Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル、３員〜８員ヘテロシクロアルキル、アリール、Ｃ１−６アルキル置換アリール、６員〜１５員ヘテロアリール、アルケニル、アルキニル、スルフィニル、スルホン酸基又はスルホネート基を表し；ここで、前記Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル、３員〜８員ヘテロシクロアルキル、アリール、Ｃ１−６アルキル置換アリール、６員〜１５員ヘテロアリール、アルケニル及びアルキニルは非置換であるか、又はアミノ、ハロゲン、ヒドロキシ、オキシ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルチオ、Ｃ１−６アルカノイル、３員〜８員シクロアルキル（例えばシクロプロピル）、３員〜８員オキソシクロアルキル（例えばオキソシクロブチル）、シアノ、トリフルオロメチル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、Ｃ１−６アルキルアミド、ウレイド基、カルバメート、カルボキシル及びアリールからなる群から選択される１以上（例えば、１、２、３又は４）の置換基で置換されており；
Ｒ３及びＲ４はそれぞれ独立して存在しないか、又はＨ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルカノイル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、グリコシル、アリール−Ｃ１−６アルキル又はアリールを表し、ここで前記Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルカノイル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、グリコシル、アリール−Ｃ１−６アルキル及びアリールは、非置換であるか、又はハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルアミノ及びＣ１−６アルカノイルからなる群から選択される１以上（例えば、１、２、３又は４）の置換基で置換されており；好ましくは、前記アリールは、６員〜１４員アリール、例えば６員〜１０員アリール、であり；より好ましくはフェニル又はナフチル；
Ｒ及びＲ’はそれぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル、アリール−Ｃ１−６アルキル又はアリールから選択され、ここで、前記Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル、アリール−Ｃ１−６アルキル及びアリールは、非置換であるか、又はハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、及びＣ１−６アルキルアミノからなる群から選択される１以上（例えば、１、２、３又は４）の置換基で置換されており；
Ｒ”はＣ１−６アルキル又はアリール（例えば６員〜１０員アリール基、好ましくはフェニル）を表し；
式（Ｉ）における
【化９５】
2019523245.tif 000097
は単結合又は二重結合を表し；好ましくは、環Ａは０、１、２又は３個の炭素−炭素二重結合を含有し；環Ｂは０、１又は２個の炭素−炭素二重結合を含有する)
【請求項１９】
請求項１８に記載の方法であって、式Ｉの前記化合物が請求項２〜１１のいずれか一項に定義される通りであり；
好ましくは、ＴＮＦαの前記生物学的作用は、κＢ阻害タンパク質（ＩκＢ）キナーゼα／β（ＩＫＫα／β）のリン酸化、ＩκＢαの分解、ＮＦ−κＢのｐ６５サブユニットの核内移行、及び／又はＮＦ−κＢの活性化であり；
好ましくは、当該方法はＴＮＦα誘導性のＩκＢα分解を阻害するためであり；
好ましくは、前記細胞はＮｕｒ７７を発現し；
好ましくは、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される；
方法。
【請求項２０】
ｍＴＯＲシグナル伝達経路を阻害する方法であって、それを必要とする細胞に、式Ｉの化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルの有効量を投与することを含む方法。
【化９６】
2019523245.tif 000098
（式中、
Ｘは−ＮＨ−、−Ｎ（Ｒ）−、−Ｏ−、−ＣＨ２−又はハロゲンを表し；ここで、Ｘがハロゲンである場合、Ｒ１は存在せず；
Ｙと、それに結合している炭素原子との間の結合が単結合である場合、ＹはＨ、ハロゲン、−ＯＲ、−ＳＲ又は−ＮＲＲ’を表し；Ｙと、それに結合している炭素原子との間の結合が二重結合である場合、ＹはＯ、Ｓ又はＮＲを表し；
Ｒ１は存在しないか、又はＨ、−ＰＯ（ＯＲ）２、Ｃ１−６アルキル、グリコシル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル−Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル−アミノアシル、アリール−Ｃ１−６アルキル又はアリールを表し、ここで、前記Ｃ１−６アルキル、グリコシル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル−Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル−アミノアシル、アリール−Ｃ１−６アルキル又はアリールは非置換であるか、又はハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルアミノ及びＣ１−６アルカノイルからなる群から選択される１以上（例えば、１、２、３又は４）の置換基で置換されており；好ましくは、前記アリールは６員〜１４員アリール、例えば６員〜１０員アリールであり；より好ましくはフェニル又はナフチル；
Ｒ２はＨ、Ｄ、−ＰＯ（ＯＲ）２、−ＣＯＮＨ２、−ＮＨ２、−ＮＨＲ、−ＮＲＲ’、−ＮＨＣＯＲ、−ＮＲＣＯＲ、−ＮＨＣＯＯＲ、−ＮＨＣＯＮＨＲ、−ＮＨＣＯＮＲＲ’、−ＮＲＣＯＮＨＲ、−ＮＲＣＯＮＲＲ’、−ＯＨ、−ＯＲ、−ＯＣＯＮＨＲ、−ＯＣＯＮＲＲ’、−ＳＨ、−ＳＲ、−ＳＯＲ、−ＳＯＯＲ、−ＳＯ２ＮＨＲ”、ニトロ、ハロゲン、グリコシル、シアノ、トリフルオロメチル、Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル、３員〜８員ヘテロシクロアルキル、アリール、Ｃ１−６アルキル置換アリール、６員〜１５員ヘテロアリール、アルケニル、アルキニル、スルフィニル、スルホン酸基又はスルホネート基を表し；ここで、前記Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル、３員〜８員ヘテロシクロアルキル、アリール、Ｃ１−６アルキル置換アリール、６員〜１５員ヘテロアリール、アルケニル及びアルキニルは非置換であるか、又はアミノ、ハロゲン、ヒドロキシ、オキシ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルチオ、Ｃ１−６アルカノイル、３員〜８員シクロアルキル（例えばシクロプロピル）、３員〜８員オキソシクロアルキル（例えばオキソシクロブチル）、シアノ、トリフルオロメチル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、Ｃ１−６アルキルアミド、ウレイド基、カルバメート、カルボキシル及びアリールからなる群から選択される１以上（例えば、１、２、３又は４）の置換基で置換されており；
Ｒ３及びＲ４はそれぞれ独立して存在しないか、又はＨ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルカノイル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、グリコシル、アリール−Ｃ１−６アルキル又はアリールを表し、ここで前記Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルカノイル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、グリコシル、アリール−Ｃ１−６アルキル及びアリールは、非置換であるか、又はハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルアミノ及びＣ１−６アルカノイルからなる群から選択される１以上（例えば、１、２、３又は４）の置換基で置換されており；好ましくは、前記アリールは、６員〜１４員アリール、例えば６員〜１０員アリール、であり；より好ましくはフェニル又はナフチル；
Ｒ及びＲ’はそれぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル、アリール−Ｃ１−６アルキル又はアリールから選択され、ここで、前記Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル、アリール−Ｃ１−６アルキル及びアリールは、非置換であるか、又はハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、及びＣ１−６アルキルアミノからなる群から選択される１以上（例えば、１、２、３又は４）の置換基で置換されており；
Ｒ”はＣ１−６アルキル又はアリール（例えば６員〜１０員アリール基、好ましくはフェニル）を表し；
式（Ｉ）における
【化９７】
2019523245.tif 000099
は単結合又は二重結合を表し；好ましくは、環Ａは０、１、２又は３個の炭素−炭素二重結合を含有し；環Ｂは０、１又は２個の炭素−炭素二重結合を含有する)
【請求項２１】
請求項２０に記載の方法であって、式Ｉの前記化合物が請求項２〜１１のいずれか一項に定義される通りであり；
好ましくは、前記化合物、又は前記互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルは、細胞におけるＰ−ｍＴＯＲ、ｐ−Ｐ７０Ｓ６Ｋ、及び／又はｐ−Ｓ６の活性をダウンレギュレートするためのものであり；
好ましくは、前記細胞はＮｕｒ７７を発現し；
好ましくは、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される；
方法。
【請求項２２】
Ｎｕｒ７７関連疾患を予防又は治療する方法であって、それを必要とする対象に、式Ｉの化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルの有効量を投与することを含む方法。
【化９８】
2019523245.tif 000100
（式中、
Ｘは−ＮＨ−、−Ｎ（Ｒ）−、−Ｏ−、−ＣＨ２−又はハロゲンを表し；ここで、Ｘがハロゲンである場合、Ｒ１は存在せず；
Ｙと、それに結合している炭素原子との間の結合が単結合である場合、ＹはＨ、ハロゲン、−ＯＲ、−ＳＲ又は−ＮＲＲ’を表し；Ｙと、それに結合している炭素原子との間の結合が二重結合である場合、ＹはＯ、Ｓ又はＮＲを表し；
Ｒ１は存在しないか、又はＨ、−ＰＯ（ＯＲ）２、Ｃ１−６アルキル、グリコシル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル−Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル−アミノアシル、アリール−Ｃ１−６アルキル又はアリールを表し、ここで、前記Ｃ１−６アルキル、グリコシル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル−Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル−アミノアシル、アリール−Ｃ１−６アルキル又はアリールは非置換であるか、又はハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルアミノ及びＣ１−６アルカノイルからなる群から選択される１以上（例えば、１、２、３又は４）の置換基で置換されており；好ましくは、前記アリールは６員〜１４員アリール、例えば６員〜１０員アリールであり；より好ましくはフェニル又はナフチル；
Ｒ２はＨ、Ｄ、−ＰＯ（ＯＲ）２、−ＣＯＮＨ２、−ＮＨ２、−ＮＨＲ、−ＮＲＲ’、−ＮＨＣＯＲ、−ＮＲＣＯＲ、−ＮＨＣＯＯＲ、−ＮＨＣＯＮＨＲ、−ＮＨＣＯＮＲＲ’、−ＮＲＣＯＮＨＲ、−ＮＲＣＯＮＲＲ’、−ＯＨ、−ＯＲ、−ＯＣＯＮＨＲ、−ＯＣＯＮＲＲ’、−ＳＨ、−ＳＲ、−ＳＯＲ、−ＳＯＯＲ、−ＳＯ２ＮＨＲ”、ニトロ、ハロゲン、グリコシル、シアノ、トリフルオロメチル、Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル、３員〜８員ヘテロシクロアルキル、アリール、Ｃ１−６アルキル置換アリール、６員〜１５員ヘテロアリール、アルケニル、アルキニル、スルフィニル、スルホン酸基又はスルホネート基を表し；ここで、前記Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル、３員〜８員ヘテロシクロアルキル、アリール、Ｃ１−６アルキル置換アリール、６員〜１５員ヘテロアリール、アルケニル及びアルキニルは非置換であるか、又はアミノ、ハロゲン、ヒドロキシ、オキシ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルチオ、Ｃ１−６アルカノイル、３員〜８員シクロアルキル（例えばシクロプロピル）、３員〜８員オキソシクロアルキル（例えばオキソシクロブチル）、シアノ、トリフルオロメチル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、Ｃ１−６アルキルアミド、ウレイド基、カルバメート、カルボキシル及びアリールからなる群から選択される１以上（例えば、１、２、３又は４）の置換基で置換されており；
Ｒ３及びＲ４はそれぞれ独立して存在しないか、又はＨ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルカノイル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、グリコシル、アリール−Ｃ１−６アルキル又はアリールを表し、ここで前記Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルカノイル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、グリコシル、アリール−Ｃ１−６アルキル及びアリールは、非置換であるか、又はハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルアミノ及びＣ１−６アルカノイルからなる群から選択される１以上（例えば、１、２、３又は４）の置換基で置換されており；好ましくは、前記アリールは、６員〜１４員アリール、例えば６員〜１０員アリール、であり；より好ましくはフェニル又はナフチル；
Ｒ及びＲ’はそれぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル、アリール−Ｃ１−６アルキル又はアリールから選択され、ここで、前記Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル、アリール−Ｃ１−６アルキル及びアリールは、非置換であるか、又はハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、及びＣ１−６アルキルアミノからなる群から選択される１以上（例えば、１、２、３又は４）の置換基で置換されており；
Ｒ”はＣ１−６アルキル又はアリール（例えば６員〜１０員アリール基、好ましくはフェニル）を表し；
式（Ｉ）における
【化９９】
2019523245.tif 000101
は単結合又は二重結合を表し；好ましくは、環Ａは０、１、２又は３個の炭素−炭素二重結合を含有し；環Ｂは０、１又は２個の炭素−炭素二重結合を含有する)
【請求項２３】
請求項２２に記載の方法であって、式Ｉの前記化合物が請求項２〜１１のいずれか一項に定義される通りであり；
好ましくは、前記Ｎｕｒ７７関連疾患はがん（例えば、トリプルネガティブ乳がん）である；
方法。
【請求項２４】
オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用されるか、又はオーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用される医薬の製造において使用される、式ＩＶの化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルの使用。
【化１００】
2019523245.tif 000102
（式中、ＸはＮＨ、Ｏ又はＣＨ２を表し；
ＹはＯ、Ｓ又はＮＲを表し；
Ｒ５及びＲ６はそれぞれ独立してＨ又はＣ１−６アルキルを表し；
Ｒ７と、それに結合している炭素原子との間の結合が単結合である場合、Ｒ７はＯＨを表し、Ｒ７と、それに結合している炭素原子との間の結合が二重結合である場合、Ｒ７はＯを表し；
Ｒ８はＨ又はＣ１−６を表し；
式（ＩＶ）における
【化１０１】
2019523245.tif 000103
は単結合又は二重結合を表す）
【請求項２５】
前記化合物が、以下の化合物から選択される、請求項２４に記載の使用。
【化１０２】
2019523245.tif 000104
【請求項２６】
請求項２４又は２５に記載の使用であって、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬が、Ｎｕｒ７７の転写活性を阻害するため、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用され；
好ましくは、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬が、細胞におけるＮｕｒ７７の転写活性を阻害するために使用され；
好ましくは、前記細胞はＮｕｒ７７を発現し；
好ましくは、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される；
使用。
【請求項２７】
請求項２４又は２５に記載の使用であって、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬が、細胞におけるＴＮＦαの生物学的作用を阻害するため、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用され；
好ましくは、ＴＮＦαの前記生物学的作用は、κＢ阻害タンパク質（ＩκＢ）キナーゼα／β（ＩＫＫα／β）のリン酸化、ＩκＢαの分解、ＮＦ−κＢのｐ６５サブユニットの核内移行、及び／又はＮＦ−κＢの活性化であり；
好ましくは、前記細胞はＮｕｒ７７を発現し；
好ましくは、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される；
使用。
【請求項２８】
請求項２４又は２５に記載の使用であって、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬が、細胞におけるｍＴＯＲ経路を阻害するため（例えば、Ｐ−ｍＴＯＲ、ｐ−Ｐ７０Ｓ６Ｋ、及び／又はｐ−Ｓ６の活性をダウンレギュレートする）、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用され；
好ましくは、前記細胞はＮｕｒ７７を発現し；
好ましくは、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される；
使用。
【請求項２９】
請求項２５又は２６に記載の使用であって、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬が、それを必要とする対象においてＮｕｒ７７関連疾患を予防又は治療するため、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用され；
好ましくは、前記Ｎｕｒ７７関連疾患はがん（例えば、トリプルネガティブ乳がん）である；
使用。
【請求項３０】
オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７の転写活性を阻害する方法であって、Ｎｕｒ７７を、式ＩＶの化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルと接触させるステップを含む方法。
【化１０３】
2019523245.tif 000105
（式中、ＸはＮＨ、Ｏ又はＣＨ２を表し；
ＹはＯ、Ｓ又はＮＲを表し；
Ｒ５及びＲ６はそれぞれ独立してＨ又はＣ１−６アルキルを表し；
Ｒ７と、それに結合している炭素原子との間の結合が単結合である場合、Ｒ７はＯＨを表し、Ｒ７と、それに結合している炭素原子との間の結合が二重結合である場合、Ｒ７はＯを表し；
Ｒ８はＨ又はＣ１−６を表し；
式（ＩＶ）における
【化１０４】
2019523245.tif 000106
は単結合又は二重結合を表す）
【請求項３１】
請求項３０に記載の方法であって、式ＩＶの前記化合物が請求項２５に定義される通りであり；
好ましくは、当該方法は細胞におけるＮｕｒ７７の前記転写活性を阻害するためのものであり；
好ましくは、当該方法はそれを必要とする細胞に、前記細胞におけるＮｕｒ７７の前記転写活性を阻害するための前記化合物の有効量を投与することを含み；
好ましくは、前記細胞はＮｕｒ７７を発現し；
好ましくは、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される；
方法。
【請求項３２】
細胞におけるＴＮＦαの生物学的作用を阻害するための方法であって、それを必要とする前記細胞に、式ＩＶの化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルの有効量を投与することを含む方法。
【化１０５】
2019523245.tif 000107
（式中、ＸはＮＨ、Ｏ又はＣＨ２を表し；
ＹはＯ、Ｓ又はＮＲを表し；
Ｒ５及びＲ６はそれぞれ独立してＨ又はＣ１−６アルキルを表し；
Ｒ７と、それに結合している炭素原子との間の結合が単結合である場合、Ｒ７はＯＨを表し、Ｒ７と、それに結合している炭素原子との間の結合が二重結合である場合、Ｒ７はＯを表し；
Ｒ８はＨ又はＣ１−６を表し；
式（ＩＶ）における
【化１０６】
2019523245.tif 000108
は単結合又は二重結合を表す）
【請求項３３】
請求項３２に記載の方法であって、式Ｉの前記化合物が請求項２６に定義される通りであり；
好ましくは、ＴＮＦαの前記生物学的作用は、κＢ阻害タンパク質（ＩκＢ）キナーゼα／β（ＩＫＫα／β）のリン酸化、ＩκＢαの分解、ＮＦ−κＢのｐ６５サブユニットの核内移行、及び／又はＮＦ−κＢの活性化であり；
好ましくは、当該方法はＴＮＦα誘導性のＩκＢα分解を阻害するためであり；
好ましくは、前記細胞はＮｕｒ７７を発現し；
好ましくは、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される；
方法。
【請求項３４】
ｍＴＯＲ経路を阻害する方法であって、それを必要とする細胞に、式ＩＶの化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルの有効量を投与することを含む方法。
【化１０７】
2019523245.tif 000109
（式中、ＸはＮＨ、Ｏ又はＣＨ２を表し；
ＹはＯ、Ｓ又はＮＲを表し；
Ｒ５及びＲ６はそれぞれ独立してＨ又はＣ１−６アルキルを表し；
Ｒ７と、それに結合している炭素原子との間の結合が単結合である場合、Ｒ７はＯＨを表し、Ｒ７と、それに結合している炭素原子との間の結合が二重結合である場合、Ｒ７はＯを表し；
Ｒ８はＨ又はＣ１−６を表し；
式（ＩＶ）における
【化１０８】
2019523245.tif 000110
は単結合又は二重結合を表す）
【請求項３５】
請求項３４に記載の方法であって、式Ｉの前記化合物が請求項２５に定義される通りであり；
好ましくは、前記化合物、又は前記互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルは、細胞におけるＰ−ｍＴＯＲ、ｐ−Ｐ７０Ｓ６Ｋ、及び／又はｐ−Ｓ６の活性をダウンレギュレートするためのものであり；
好ましくは、前記細胞はＮｕｒ７７を発現し；
好ましくは、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される；
方法。
【請求項３６】
Ｎｕｒ７７関連疾患を予防又は治療する方法であって、それを必要とする対象に、式ＩＶの化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルの有効量を投与することを含む方法。
【化１０９】
2019523245.tif 000111
（式中、ＸはＮＨ、Ｏ又はＣＨ２を表し；
ＹはＯ、Ｓ又はＮＲを表し；
Ｒ５及びＲ６はそれぞれ独立してＨ又はＣ１−６アルキルを表し；
Ｒ７と、それに結合している炭素原子との間の結合が単結合である場合、Ｒ７はＯＨを表し、Ｒ７と、それに結合している炭素原子との間の結合が二重結合である場合、Ｒ７はＯを表し；
Ｒ８はＨ又はＣ１−６を表し；
式（ＩＶ）における
【化１１０】
2019523245.tif 000112
は単結合又は二重結合を表す）
【請求項３７】
請求項３６に記載の方法であって、式ＩＶの前記化合物が請求項２５に定義される通りであり；
好ましくは、前記Ｎｕｒ７７関連疾患はがん（例えば、トリプルネガティブ乳がん）である；
方法。
【請求項３８】
オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用されるか、又はオーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用される医薬の製造において使用される、以下に示す化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルの使用。
【化１１１】
2019523245.tif 000113
【請求項３９】
請求項３８に記載の使用であって、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬が、Ｎｕｒ７７の転写活性を阻害するため、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用され；
好ましくは、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬が、細胞におけるＮｕｒ７７の転写活性を阻害するために使用され；
好ましくは、前記細胞はＮｕｒ７７を発現し；
好ましくは、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される；
使用。
【請求項４０】
請求項３８に記載の使用であって、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬が、細胞におけるＴＮＦαの生物学的作用を阻害するため、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用され；
好ましくは、ＴＮＦαの前記生物学的作用は、κＢ阻害タンパク質（ＩκＢ）キナーゼα／β（ＩＫＫα／β）のリン酸化、ＩκＢαの分解、ＮＦ−κＢのｐ６５サブユニットの核内移行、及び／又はＮＦ−κＢの活性化であり；
好ましくは、前記細胞はＮｕｒ７７を発現し；
好ましくは、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される；
使用。
【請求項４１】
請求項３８に記載の使用であって、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬が、細胞におけるｍＴＯＲ経路を阻害するため（例えば、Ｐ−ｍＴＯＲ、ｐ−Ｐ７０Ｓ６Ｋ、及び／又はｐ−Ｓ６の活性をダウンレギュレートする）、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用され；
好ましくは、前記細胞はＮｕｒ７７を発現し；
好ましくは、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される；
使用。
【請求項４２】
請求項３８に記載の使用であって、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬が、それを必要とする対象においてＮｕｒ７７関連疾患を予防又は治療するため、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用され；
好ましくは、前記Ｎｕｒ７７関連疾患はがん（例えば、トリプルネガティブ乳がん）である；
使用。
【請求項４３】
オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７の転写活性を阻害する方法であって、Ｎｕｒ７７を、以下に示す化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルと接触させるステップを含む方法。
【化１１２】
2019523245.tif 000114
【請求項４４】
請求項４３に記載の方法であって、当該方法は細胞におけるＮｕｒ７７の前記転写活性を阻害するためのものであり；
好ましくは、当該方法はそれを必要とする細胞に、前記化合物の有効量を投与すること、それにより、前記細胞におけるＮｕｒ７７の前記転写活性を阻害すること、を含み；
好ましくは、前記細胞はＮｕｒ７７を発現し；
好ましくは、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される；
方法。
【請求項４５】
細胞におけるＴＮＦαの生物学的作用を阻害するための方法であって、それを必要とする前記細胞に、以下に示す化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルの有効量を投与することを含む方法。
【化１１３】
2019523245.tif 000115
【請求項４６】
請求項４５に記載の方法であって、ＴＮＦαの前記生物学的作用は、κＢ阻害タンパク質（ＩκＢ）キナーゼα／β（ＩＫＫα／β）のリン酸化、ＩκＢαの分解、ＮＦ−κＢのｐ６５サブユニットの核内移行、及び／又はＮＦ−κＢの活性化であり；
好ましくは、当該方法はＴＮＦα誘導性のＩκＢα分解を阻害するためであり；
好ましくは、前記細胞はＮｕｒ７７を発現し；
好ましくは、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される；
方法。
【請求項４７】
ｍＴＯＲ経路を阻害する方法であって、それを必要とする細胞に、以下に示す化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルの有効量を投与することを含む方法。
【化１１４】
2019523245.tif 000116
【請求項４８】
請求項４７に記載の方法であって、前記化合物、又は前記互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルは、細胞におけるＰ−ｍＴＯＲ、ｐ−Ｐ７０Ｓ６Ｋ、及び／又はｐ−Ｓ６の活性をダウンレギュレートするためのものであり；
好ましくは、前記細胞はＮｕｒ７７を発現し；
好ましくは、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される；
方法。
【請求項４９】
Ｎｕｒ７７関連疾患を予防又は治療する方法であって、それを必要とする対象に、以下に示す化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルの有効量を投与することを含む方法。
【化１１５】
2019523245.tif 000117
【請求項５０】
請求項４９に記載の方法であって、前記Ｎｕｒ７７関連疾患はがん（例えば、トリプルネガティブ乳がん）である、方法。
【請求項５１】
以下に示す化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステル。
【化１１６】
2019523245.tif 000118
（式中、
Ｒ９及びＲ１０がそれぞれ独立して水素、Ｃ１−６アルキル及びアリールからなる群から選択され；
好ましくは、Ｒ９及びＲ１０は、それぞれ独立して、水素、Ｃ１−４アルキル、フェニル及びナフチルからなる群から選択され；
好ましくは、Ｒ９及びＲ１０は、それぞれ独立して、メチル、エチル及びイソプロピルから選択される)
【請求項５２】
以下に示す化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステル。
【化１１７】
2019523245.tif 000119
【請求項５３】
抗がん活性を有する薬物をスクリーニングする方法であって、以下のステップ：
（１）オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７を発現するがん細胞（例えば、トリプルネガティブ乳がん細胞）を用意し、ネガティブコントロールを設定する（すなわち、Ｎｕｒ７７を発現しない）ステップと、
（２）前記細胞をＴＮＦα及び候補薬剤で処理するステップと、
（３）前記処理された細胞中のＰ−ｍＴＯＲ、ｐ−Ｐ７０Ｓ６Ｋ、及びｐ−Ｓ６のレベルを検出するステップ（例えば免疫ブロッティング法により検出する）と、
（４）前記細胞及び前記ネガティブコントロール細胞中の対応するタンパク質のレベルを比較し、前記タンパク質レベルの少なくとも１つが低下した場合に、前記候補薬剤は抗がん活性を有すると判断するステップと、
を含む方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
技術分野
本出願は医学及び生物学の分野に関する。特に、本願は、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７の新規リガンド及びその使用に関する。本出願はまた、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとしての式Ｉ〜式Ｖの化合物の使用に関する。本出願はまた、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７に関連する疾患の予防又は治療のための式Ｉ〜式Ｖの化合物の使用に関する。本出願はまた、抗がん（特にトリプルネガティブ乳がん）活性を有する薬物のスクリーニング方法に関する。本出願はまた、核内受容体Ｎｕｒ７７を試験指標として用いて、トリプルネガティブ乳がんなどの診断及び治療効果を評価する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
背景技術
ＮＧＦＩＢ（神経成長因子ＩＢ）又はオーファン核内受容体ＴＲ３とも称すオーファン核内受容体Ｎｕｒ７７は、がんの発病、代謝及び炎症性疾患における重要な調節因子である。即時初期応答遺伝子として、Ｎｕｒ７７は、さまざまな刺激、例えばサイトカイニン、ホルモン、ストレス、代謝、及びアポトーシスシグナル、によって引き起こされる、生存、アポトーシス、炎症、及び自食作用を包含する多数の細胞プロセスにおいて中心的役割を果たしている。（Ｐｅｉ  Ｌ，  ｅｔ  ａｌ．，  （２００６），  “Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｇｅｎｅ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｂｙ  ｔｈｅ  ｏｒｐｈａｎ  ｎｕｃｌｅａｒ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  Ｎｕｒ７７”，  Ｍｏｌ．  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．  ２０  （４）：  ７８６−９４；  Ｚｈａｎｇ  ＸＫ  （２００７），  “Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  Ｎｕｒ７７  ｔｒａｎｓｌｏｃａｔｉｏｎ”，  Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ．  Ｔｈｅｒ．  Ｔａｒｇｅｔｓ  １１  （１）：  ６９−７９）。アポトーシスにおけるＮｕｒ７７の効果は１９９４年に最初に発見された。そこでは、Ｔ細胞受容体シグナル伝達はＮｕｒ７７発現を誘導し、Ｎｕｒ７７発現はＴ細胞受容体媒介アポトーシス中に増加する。（Ｗｏｒｏｎｉｃｚ  ＪＤ，  Ｃａｌｎａｎ  Ｂ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｏｒｐｈａｎ  Ｓｔｅｒｏｉｄ−Ｒｅｃｅｐｔｏｒ  Ｎｕｒ７７  ｉｎ  Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ  ｏｆ  Ｔ−Ｃｅｌｌ  Ｈｙｂｒｉｄｏｍａｓ．  Ｎａｔｕｒｅ，  ３６７：２７７−８１，  １９９４；  Ｌｉｕ  ＺＧ，  Ｓｍｉｔｈ  ＳＷ，  ｅｔ  ａｌ．  Ａｐｏｐｔｏｔｉｃ  Ｓｉｇｎａｌｓ  Ｄｅｌｉｖｅｒｅｄ  ｔｈｒｏｕｇｈ  ｔｈｅ  Ｔ−Ｃｅｌｌ  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｏｆ  ａ  Ｔ−Ｃｅｌｌ  Ｈｙｂｒｉｄ  Ｒｅｑｕｉｒｅ  ｔｈｅ  Ｉｍｍｅｄｉａｔｅ−Ｅａｒｌｙ  Ｇｅｎｅ  Ｎｕｒ７７．  Ｎａｔｕｒｅ，  ３６７：２８１−４，  １９９４）。レチノイド化合物ＡＨＰＮ（ＣＤ４３７としても知られている）の研究において、我々は腫瘍細胞アポトーシスにおけるＮｕｒ７７の役割を発見した。研究は、Ｎｕｒ７７は核から細胞質に移動し、様々なアポトーシスシグナルの刺激によりミトコンドリアに局在し、Ｎｕｒ７７のミトコンドリア位置は、チトクロムｃ（Ｃｙｔｏｃｈｏｒｏｍｅ  ｃ，Ｃｙｔ  ｃ）の放出及びアポトーシスに関連していることを示した。ＤＮＡ結合ドメインを欠くＮｕｒ７７は、ミトコンドリア上に構成的に位置することができ、大量のチトクロムｃをミトコンドリアから放出させてアポトーシスを誘導することを可能にする。（Ｌｉ  Ｙ，  Ｌｉｎ  ＢＺ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｄｅｔｅｒｍｉｎａｎｔｓ  ｏｆ  ＡＨＰＮ  （ＣＤ４３７）−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｇｒｏｗｔｈ  ａｒｒｅｓｔ  ａｎｄ  ａｐｏｐｔｏｓｉｓ  ｉｎ  ｈｕｍａｎ  ｌｕｎｇ  ｃａｎｃｅｒ  ｃｅｌｌ  ｌｉｎｅｓ．  Ｍｏｌ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ，  １９９８，  １８（８）；  ４７１９−４７３１；  Ｌｉ  Ｈ，  Ｋｏｌｌｕｒｉ  ＳＫ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｃｙｔｏｃｈｒｏｍｅ  ｃ  ｒｅｌｅａｓｅ  ａｎｄ  ａｐｏｐｔｏｓｉｓ  ｉｎｄｕｃｅｄ  ｂｙ  ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ  ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｏｆ  ｎｕｃｌｅａｒ  ｏｒｐｈａ���  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ＴＲ３，  Ｓｃｉｅｎｃｅ，  ２０００，  ２８９（５４８２）；  １１５９−１１６４；  Ｌｉｎ  Ｂ，  Ｋｏｌｌｕｒｉ  ＳＫ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎ  ｏｆ  Ｂｃｌ−２  ｆｒｏｍ  ｐｒｏｔｅｃｔｏｒ  ｔｏ  ｋｉｌｌｅｒ  ｂｙ  ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ  ｗｉｔｈ  ｎｕｃｌｅａｒ  ｏｒｐｈａｎ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  Ｎｕｒ７７／ＴＲ３，  Ｃｅｌｌ，  ２００４，  １６；  ５２７  −５４０）。Ｎｕｒ７７の細胞質への移行及びミトコンドリアへの転位置は、そのアポトーシス促進効果にとって必須の条件である。したがって、多くの薬物がミトコンドリアへのＮｕｒ７７の転座を介して、腫瘍細胞のアポトーシス及び他の主要な疾患を誘導し、そしてＮｕｒ７７ミトコンドリア転座は新しい薬物の開発のための有効な標的となる。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
乳がんは女性の健康の「ナンバーワンキラー」である。最新の調査データによると、世界中で１人の女性が３分ごとに乳がんと診断されている。中国では、乳がんの発生率と死亡率は女性において年々増加しており、女性の悪性腫瘍の発生率が最も高くなっている。乳がんが女性の悪性腫瘍死亡率で最初にランクされる理由は、その高い転移性、特にネガティブトリプルネガティブ乳がん（ＴＮＢＣ）であり、そのうちエストロゲン受容体（ＥＲ）、プロゲステロン受容体（ＰＲ）及びがん原遺伝子Ｈｅｒ−２は全てネガティブであり、その典型的な特徴は高い転移性、予後不良、内分泌療法に対する鈍感性、及びこれまでのところ治療に有効な薬物がないことである。以前の研究は、初期の応答遺伝子としてのＮｕｒ７７は、多くの重要な生命過程、例えば細胞増殖、アポトーシス、胚発生及び血管新生など、を調節すること、その発現又は機能不全は腫瘍を包含する一連の疾患を引き起こし得ることを見出した。Ｎｕｒ７７は、通常、正常組織では発現されないか又は低レベルで発現されるが、腫瘍の発生及び治療中に大量に誘導され得る。その誘導された発現は、細胞の生死を決定する細胞増殖及びアポトーシスの二重の効果を媒介することができ、そしてこれら二つの相反する現象は細胞内の異なる刺激及び異なるＮｕｒ７７の位置に依存する。最近の研究は、Ｎｕｒ７７がＴＮＦαのような炎症性因子の刺激下でそのリガンドに特異的に結合することができること、細胞質転座を介してミトコンドリアの機能を調節することによって抗炎症活性を発揮することを示した。
【０００４】
以前の研究では、我々は、乳がん、特にトリプルネガティブ乳がんの発症には、炎症反応及びｍＴＯＲシグナル伝達経路の高活性化をも伴うことを見出した。慢性炎症も乳がん発症の重要な基礎であり、他の腫瘍に有効な多くの非ステロイド系抗炎症薬も乳がんの予防及び治療に使用されている。したがって、炎症性因子によって容易に調節され、且つ、乳がんの調節において重要な役割を果たすＮｕｒ７７に基づいて、トリプルネガティブ乳がんの治療薬を開発するために、Ｎｕｒ７７に特異的に結合する有効なリガンドが求められており、これもまた重要な実用的意義を有する。したがって、本出願は、抗がん剤をスクリーニングするための新規な方法を確立する。すなわち、Ｎｕｒ７７は、がん（例えばトリプルネガティブ乳がんなど）を治療するための新規化合物分子を開発するため、Ｎｕｒ７７に特異的に結合する有効なリガンドを見出すための標的として使用される。本出願は、試験指標としてＮｕｒ７７を使用することによってがん（例えばトリプルネガティブ乳がんなど）の発症を評価及び診断するための方法を確立する。
【０００５】
海洋の生態学的環境は陸地とはかなり異なるため、海洋生物の小分子代謝産物の生合成経路もまた非常に異なる。それ故、海洋天然物は、多種多様な生物学的活性を有する、構造的に独特の化合物を多数含有する。例えば、ステロイド及びステロイド化合物は、良好な抗腫瘍活性及び免疫調節活性などを有する。本出願の発明者らは、広範な実験的研究を通じて五環式トリテルペノイドの新しいクラスＹＸＹ１０１及びその誘導体を発見した。当該化合物は、Ｎｕｒ７７に結合することができ、ｍＴＯＲシグナル伝達経路を阻害し、それによって腫瘍形成を阻害する。従って、本出願は有望な化合物を提供する。そして、本発明の化合物がＮｕｒ７７を発現する細胞に作用し、且つ、Ｎｕｒ７７によって媒介されるｍＴＯＲシグナル伝達経路を調節することは特に有利である。これは、本発明者らによって新たに発見されたものであり、トリプルネガティブ乳がん及び他のがん（例えば、肝臓がん、子宮頸がん、肺がん、トリプルポジティブ乳がん、結腸直腸がん又は前立腺がん）の治療に使用することができる。
【０００６】
発明の概要
本発明において、本明細書で使用される科学的及び技術的用語は、他に述べない限り、当業者によって一般的に理解される意味を有する。さらに、本明細書で使用される細胞培養、分子遺伝学、核酸化学、及び免疫学実験室操作の手順はすべて従来通りであり、且つ、対応する技術分野で広く使用されている。一方、本発明をよりよく理解するために、関連用語の定義及び説明を以下に提供する。
【０００７】
本明細書中で使用される場合、用語「互変異性体」とは、分子中の２つの位置間における原子の急速な移動によって形成される官能基異性体をいう。そのような互変異性体の典型例はケト−エノール互変異性体である。本明細書に記載の化合物は互変異性形態で存在することがあり、したがって、すべての可能な互変異性体、及びそれらのいずれの組み合わせ又はいずれの混合物を包含する。
【０００８】
本明細書中で使用される場合、用語「立体異性体」とは、同一順序の原子又は原子団を有するが空間配置が異なる分子の異性体をいう。本出願において、化合物の「立体異性」は、コンフォメーショナルな(conformational)異性とコンフィギュレーショナル(configurational)立体配置異性とに分けられ、前記コンフォメーショナルな異性はさらにシス−トランス異性と光学異性とに分けられる。したがって、本出願において、「立体異性体」は、全ての可能な光学異性体及びジアステレオ異性体、並びにそれらのいずれの組み合わせ、例えばラセミ体（ラセミ混合物）、単一のエナンチオマー、ジアステレオマーの混合物、単一のジアステレオマー、を包含する。例えば、本発明の化合物が炭素−炭素二重結合を含有する場合、それは、他に特定されない限り、そのシス異性体及びトランス異性体、並びにそれらのいずれの組み合わせを包含する。
【０００９】
本明細書で使用する場合、用語「医薬的に許容可能な塩」は、
（１）本発明の化合物における酸性官能基（例えば、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＳＯ３Ｈ等）と、好適な無機もしくは有機カチオン（アルカリ）とにより形成された塩、例えば本発明の化合物とアルカリ金属もしくはアルカリ土類金属とにより形成された塩、本発明の化合物のアンモニウム塩、及び本発明の化合物と含窒素有機塩基とにより形成された塩；並びに
（２）本発明の化合物と、好適な向きもしくは有機アニオン（酸）を有する塩基性官能基（例えば、−ＮＨ２など）とにより形成された塩、例えば本発明の化合物と、無機酸もしくは有機カルボン酸とにより形成された塩；
を意味する。
【００１０】
したがって、本発明の化合物の「医薬的に許容可能な塩」は、アルカリ金属塩、例えばナトリウム塩、カリウム塩、リチウム塩など；アルカリ土類金属塩、例えばカルシウム塩、マグネシウム塩など；その他の金属塩、例えばアルミニウム塩、鉄塩、亜鉛塩、銅塩、ニッケル塩、コバルト塩など；無機アルカリ塩、例えばアンモニウム塩など；有機塩基塩、例えばｔ−オクチルアミン塩、ジベンジルアミン塩、モルホリン塩、グルカミン塩、フェニルグリシンアルキルエステル塩、エチレンジアミン塩、Ｎ−メチルグルカミン塩、グアニジン塩、ジエチルアミン塩、トリエチルアミン塩、ジシクロヘキシルアミン塩、Ｎ、Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン塩、クロロプロカイン塩、プロカイン塩、ジエタノールアミン塩、Ｎ−ベンジル−フェネチルアミン塩、ピペラジン塩、テトラメチルアミン塩、トリ（ヒドロキシル）アミノメタン塩；ハイドロハライド塩、例えばフッ化水素酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、及びヨウ化水素酸塩など；無機酸の塩、例えば硝酸塩、過塩素酸塩、硫酸塩、リン酸塩など；低級アルキルスルホネート、例えばメシレート、トリフレート、及びエタンスルホネートなど；アリールスルホネート、例えばベシレート、及びｐ−ベンゼンスルホネートなど；有機酸の塩、例えば酢酸塩、リンゴ酸塩、フマル酸塩、コハク酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、シュウ酸塩、及びマレイン酸塩など；並びにアミノ酸の塩、例えばグリシン酸塩、トリメチルグリシン酸塩、アルギニン塩、オルニチン塩、グルタミン酸塩、及びアスパラギン酸など；
を包含するが、これらに限定されない。
【００１１】
本明細書中で使用される場合、用語「医薬的に許容可能なエステル」とは、本発明の化合物と、前記化合物がカルボキシル基を含有する場合、アルコールとのエステル化によって形成されるエステルか、又は本発明の化合物と、前記化合物がヒドロキシル基を含有する場合、有機酸、無機酸、もしくは有機酸の塩等とのエステル化によって形成されるエステルを意味する。前記エステルは、酸又は塩基の存在下で加水分解して対応する酸又はアルコールを形成することができる。
【００１２】
本明細書で使用される場合、用語「Ｃ１−６アルキル」は、１〜６個の炭素原子を有する直鎖又は分枝鎖アルキル、例えばメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、イソペンチル、２−メチルブチル、ネオペンチル、１−エチルプロピル、ｎ−ヘキシル、イソヘキシル、３−メチルペンチル、２−メチルペンチル、１−メチルペンチル、３，３−ジメチルブチル、２，２−ジメチルブチル、１，１−ジメチルブチル、１，２−ジメチルブチル、１，３−ジメチルブチル、２，３−ジメチルブチル、２−エチルブチル、１，２−ジメチルプロピルなどを意味する。前記Ｃ１−６アルキルの好ましい例は、Ｃ１−５アルキル、Ｃ１−４アルキル基、及びＣ１−３アルキル基を包含する。本発明において使用される場合、前記「Ｃ１−４アルキル」は、１〜４個の炭素原子を有する直鎖又は分岐鎖アルキルを意味し、１〜４個の炭素原子を有する上記の例の範囲内の具体例を包含するが、これらに限定されない。
【００１３】
本明細書中で使用される場合、用語「アルケニル」とは、少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を含有する直鎖又は分枝鎖炭化水素基を意味し、その典型例は、Ｃ２−１０アルケニル基、例えばＣ２−６アルケニル基又はＣ２−４アルケニル基である。具体例としては、ビニル、プロペニル、２−プロペニル、ブテニル、２−ブテニル、ブタジエニル、ペンテニル、２−メチル−ブテニル、３−メチル−ブテニル、１，３−ペンタジエニル、１，４−ペンタジエニル、ヘキセニル、２−エチル−ブテニル、３−メチル−ペンテニル、４−メチルペンテニル、１，３−ヘキサジエニル、１，４−ヘキサジエニル、１，５−ヘキサジエニル基等を包含するが、これらに限定されない。
【００１４】
本明細書中で使用される場合、用語「アルキニル」とは、少なくとも１つの炭素−炭素三重結合を含有する直鎖又は分枝鎖炭化水素基を意味し、その典型例は、Ｃ２−１０アルキニル基、例えばＣ２−６アルキニル基又はＣ２−４アルキニル基など、である。具体例としては、エチニル、プロピニル、２−プロピニル、ブチニル、２−ブチニル、２−メチル−プロピニル、ブタジニル、ペンチニル、２−メチル−ブチニル、３−メチル−ブチニル、１，３−ペンタジイニル、１，４−ペンタジイニル、ヘキシニル、２−エチル−ブチニル、３−メチルペンチニル、４−メチルペンチニル、１，３−ヘキサジイニル、１，４−ヘキサジイニル、１，５−ヘキサジイニルなど、を包含するが、これらに限定されない。
【００１５】
本明細書中で使用される場合、用語「シクロアルキル」とは、単環式飽和アルキルを意味し、その典型的な例は、３員〜８員シクロアルキル、例えば３員、４員、５員、６員、７員又は８員シクロアルキル、である。本明細書で使用されるとき、用語「３員〜８員シクロアルキル」は、３〜８個の炭素原子を含有するシクロアルキルを指す。具体例としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチルなど、を包含するが、これらに限定されない。
【００１６】
本明細書中で使用される場合、用語「ヘテロシクロアルキル」とは、Ｎ、Ｏ及びＳから選択される少なくとも１個から最大４個まで（例えば、１、２、３又は４個）のヘテロ原子を含有するシクロアルキルを意味し、ここで「シクロアルキル」の定義は前記の通りであり、その典型例は３員〜８員ヘテロシクロアルキル基、例えば３員、４員、５員、６員、７員又は８員ヘテロシクロアルキル、である。本明細書で使用されるとき、用語「３員〜８員ヘテロシクロアルキル」は、３〜８個の炭素原子を含有するヘテロシクロアルキル基を指す。本明細書で使用される場合、「３員〜８員オキソシクロアルキル」は、ヘテロ原子がＯである、上で定義されたような３員〜８員ヘテロシクロアルキルを意味する。その具体例としては、エポキシエチル、オキソシクロブチル、ピロリジニル、テトラヒドロフラニル、ピペリジニル、ピペラジニル、モルホリニル、チオモルホリニルなどを包含するが、これらに限定されない。
【００１７】
本明細書で使用されるとき、用語「アリール」は芳香族基を指し、その典型的な例は６員〜１４員のアリール基、例えば６〜１０員のアリール基である。本明細書で使用されるとき、用語「６員〜１４員のアリール」は、６〜１４個の炭素原子を含有する単環式、二環式又は多環式芳香族基を指し、例えば、６員〜８員のアリール及び８員〜１４員のアリールを包含する。６員〜８員アリール基とは、６〜８個の炭素原子を有するアリール基、例えばフェニル基、を意味する。８員〜１４員の縮合環アリール基は、２個の隣接炭素原子を共有する２個以上の環構造によって形成された８〜１４個の環形成炭素原子を含有する不飽和芳香族縮合環を意味し、その具体例としては、ナフタレン、アントラセン、フェナントレンなどを包含するが、これらに限定されない。用語「６員〜１０員アリール」は、６〜１０個の炭素原子を有する芳香族基を意味し、これには、上記の例の範囲内の６〜１０個の環原子を有する芳香族基が含まれるが、これらに限定されない。
【００１８】
本明細書で使用されるとき、用語「アリール−Ｃ１−６アルキル」は、アリール−Ｃ１−６アルキルの形態の基を指し、ここで、「アリール」及び「Ｃ１−６アルキル」は、上で定義された通りである。
【００１９】
本明細書で使用されるとき、用語「Ｃ１−６アルコキシ」は、Ｃ１−６アルキル−Ｏ−の形態の基を意味し、ここで、「Ｃ１−６アルキル」は上で定義された通りである。
【００２０】
本明細書で使用されるとき、用語「Ｃ１−６アルキルアミノ」は、Ｃ１−６アルキル−ＮＨ−の形態の基を指し、ここで、「Ｃ１−６アルキル」は上で定義された通りである。
【００２１】
本明細書で使用されるとき、用語「Ｃ１−６アルキルチオ」は、Ｃ１−６アルキル−Ｓ−の形態の基を指し、ここで、「Ｃ１−６アルキル」は上で定義された通りである。
【００２２】
本明細書で使用されるとき、用語「Ｃ１−６アルカノイル」は、Ｃ１−５アルキル−Ｃ（Ｏ）−の形態の基を指し、ここで、「Ｃ１−５アルキル」は上記で定義された通りである。
【００２３】
本明細書で使用されるとき、用語「Ｃ１−６アルコキシカルボニル」は、Ｃ１−６アルキル−ＯＣ（Ｏ）−の形態の基を指し、ここで、「Ｃ１−６アルキル」は、上で定義された通りである。
【００２４】
本明細書で使用される場合、用語「Ｃ１−６アルコキシカルボニル−Ｃ１−６アルキル」は、Ｃ１−６アルキル−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキルの形態の基を指し、ここで、「Ｃ１−６アルキル」は上で定義された通りである。
【００２５】
本明細書で使用されるとき、用語「３員〜８員シクロアルキル−アミノアシル」は、３員〜８員シクロアルキル−ＮＨＣ（Ｏ）−の形態の基を指し、ここで、「３員〜８員シクロアルキル」は、上で定義された通りである。
【００２６】
本明細書で使用されるとき、用語「ハロゲン」は、例えば、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、及びヨウ素原子を包含する。
【００２７】
本明細書中で使用される場合、用語「６員〜１５員ヘテロアリール基」とは、６〜１５個の環原子を含有し、そしてそのうちの少なくとも１個がヘテロ原子である芳香族基をいう。６員〜１５員ヘテロアリール基は、「５員〜８員ヘテロアリール基」、例えば「５員〜７員ヘテロアリール基」、「５員〜６員ヘテロアリール基」等、を包含する。「５員〜８員ヘテロアリール」の具体例としては、フリル、チエニル、ピロリル、チアゾリル、イソチアゾリル、チアジアゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、オキサジアゾリル、イミダゾリル、ピラゾリル、１，２，３−トリアゾリル、１，２，４−トリアゾリル、１，２，３−オキサジアゾリル、１，２，４−オキサジアゾリル、１，２，５−オキサジアゾリル、１，３，４−オキサジアゾリル、ピリジル、２−ヒドロキシ−ピリジル、４−ヒドロキシ−ピリジル、ピリミジニル、１，４−ジオキサシクロヘキサジエニル、２Ｈ−１，２−オキサジニル、４Ｈ−１，２−オキサジニル、６Ｈ−１，２−オキサジニル、４Ｈ−１，３−オキサジニル、６Ｈ−１，３−オキサジニル、４Ｈ−１，４−オキサジニル、ピリダジニル、ピラジニル、１，２，３−トリアジニル、１，３，５−トリアジニル、１，２，４，５−テトラアジニル、アザシクロヘプタトリエニル、１，３−ジアザシクロヘプタトリエニル、アザシクロオクタテトラエニルを包含するが、これらに限定されない。６員〜１５員ヘテロアリール基はまた、「９員〜１５員縮合ヘテロアリール基」（例えば、９員〜１５員ベンゾヘテロアリール基）を包含し、そしてその具体例は、ベンゾフラニル、ベンゾイソフラニル、ベンゾチエニル、インドリル、イソインドリル、ベンゾオキサゾリル、ベンズイミダゾリル、インダゾリル、ベンゾトリアゾリル、キノリル、２−ヒドロキシ−キノリル、４−ヒドロキシ−キノリル、１−ヒドロキシ−イソキノリル、イソキノリル、アクリジニル、フェナントリジニル、ベンゾピリダジニル、フタラジニル、キナゾリニル、キノキサリニル、フェノールジニル、プテリジニル、プリニル、ナフチリジニル、フェナジニル、フェノチアジニルなど、を包含するが、これらに限定されない。
【００２８】
本明細書で使用されるとき、用語「細胞」は、特に好ましくは、Ｎｕｒ７７を発現する細胞を指す。本発明の化合物は、Ｎｕｒ７７に特異的に結合し、且つそのリガンドとして機能することができる。したがって、本発明の化合物が、Ｎｕｒ７７を発現する細胞に作用し、そして新たに発見されたＮｕｒ７７媒介炎症及びｍＴＯＲシグナル伝達経路を調節することは特に有利である。好ましい態様において、細胞はトリプルネガティブ乳がん又は他のがんの細胞である（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）。
【００２９】
本明細書で使用されるとき、用語「オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７」又は「Ｎｕｒ７７」は、ＮＲ４Ａ１遺伝子によってコードされる神経成長因子ＩＢ（ＮＧＦＩＢ）を指す（Ｃｈａｎｇ  Ｃ  ｅｔ  ａｌ．  （１９８９），  “Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｈｕｍａｎ  ＴＲ３  ｒｅｃｅｐｔｏｒ：  ａ  ｍｅｍｂｅｒ  ｏｆ  ｓｔｅｒｏｉｄ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｓｕｐｅｒｆａｍｉｌｙ”，  Ｊ．  Ｓｔｅｒｏｉｄ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．  ３４（１−６）：  ３９１−５）。Ｎｕｒ７７は、細胞周期、炎症、及びアポトーシスなどのプロセスに関与し、その細胞内局在は細胞の生存及び死に関連する（Ｐｅｉ  Ｌ  ｅｔ  ａｌ．  （２００６），  “Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｇｅｎｅ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｂｙ  ｏｒｐｈａｎ  ｎｕｃｌｅａｒ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  Ｎｕｒ７７”，  Ｍｏｌ．  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．  ２０（４）：  ７８６−９４；  Ｚｈａｎｇ  ＸＫ  （２００７），  “Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  Ｎｕｒ７７  ｔｒａｎｓｌｏｃａｔｉｏｎ”，  Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ．  Ｔｈｅｒ．  Ｔａｒｇｅｔｓ  １１（１）：  ６９−７９）。
【００３０】
本明細書中で使用される場合、用語「Ｎｕｒ７７関連疾患」とは、その発生及び／又は進行がＮｕｒ７７シグナル伝達経路と関連する、疾患を指す。研究は、Ｎｕｒ７７が細胞周期、炎症及びアポトーシスのようなプロセスに関与し、そしてその細胞内局在化が細胞の生存及び死に関連することを示した（同書）。加えて、Ｎｕｒ７７は、生理学的刺激、例えば脂肪酸、プロスタグランジン、成長因子、炎症性サイトカイン、ペプチドホルモンなど、並びに物理的刺激、例えば磁場、機械的攪拌（せん断力）、膜の脱分極など、を包含する様々な刺激によって誘発され得ることが報告されている（Ｍａｘｗｅｌｌ  ＭＡ，  Ｍｕｓｃａｔ  ＧＥ  （２００６），  “Ｔｈｅ  ＮＲ４Ａ  ｓｕｂｇｒｏｕｐ：  ｉｍｍｅｄｉａｔｅ  ｅａｒｌｙ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｇｅｎｅｓ  ｗｉｔｈ  ｐｌｅｉｏｔｒｏｐｉｃ  ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ｒｏｌｅｓ”，  Ｎｕｃｌ  Ｒｅｃｅｐｔ  Ｓｉｇｎａｌ  ４：  ｅ００２）。加えて、Ｎｕｒ７７はいくつかの固形腫瘍の転移にも関与していることが示されている（Ｒａｍａｓｗａｍｙ  Ｓ，  Ｒｏｓｓ  ＫＮ，  Ｌａｎｄｅｒ  ＥＳ，  Ｇｏｌｕｂ  ＴＲ  （２００３），  “Ａ  ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｓｉｇｎａｔｕｒｅ  ｏｆ  ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ  ｉｎ  ｐｒｉｍａｒｙ  ｓｏｌｉｄ  ｔｕｍｏｒｓ”，  Ｎａｔ．  Ｇｅｎｅｔ．  ３３（１）：  ４９−５４）。加えて、Ｎｕｒ７７は、炎症性疾患を有する患者、がん細胞、乾癬患者、アテローム性動脈硬化症患者、及び多発性硬化症患者の滑膜組織において異常に発現されることが示されている。したがって、「Ｎｕｒ７７関連疾患」という用語は、炎症（例えば、アテローム性動脈硬化症に関連する炎症、肥満に関連する炎症、糖尿病に関連する炎症、肝炎、肺炎、関節炎、及び炎症性腸疾患）、アテローム性動脈硬化症、肥満、糖尿病、乾癬、多発性硬化症、及びがん（例、トリプルネガティブ乳がん）を包含するがこれらに限定されない。
【００３１】
本明細書中で使用される場合、用語「対象(subject)」とは、動物、特に哺乳動物、好ましくはヒトをいう。
【００３２】
本明細書で使用される場合、用語「高脂肪食」は、脂肪含有量が動物の通常の生理活性に必要な脂肪量を超える、動物（例えば、ヒトなどの哺乳動物）の毎日の摂取のための食餌を指す。
【００３３】
本明細書で使用されるとき、用語「有効量」は、所望の効果を達成するか又は少なくとも部分的に達成するのに十分な量を指す。例えば、予防有効量は、疾患の発症を予防、阻止、又は遅延させるのに十分な量を意味し；治療有効量は、すでに疾患を患っている患者における疾患及びその合併症を治癒又は少なくとも部分的に阻止するのに十分な量を意味する。そのような有効量の決定は、十分に当業者の能力の範囲内である。例えば、治療的使用に有効な量は、治療される疾患の重症度、患者自身の免疫系の一般的な状態、患者の全身状態、例えば年齢、体重及び性別など、薬物の投与方法、並びに同時に投与される他の治療、等々に依存する。
【課題を解決するための手段】
【００３４】
本出願において、鋭意研究の結果、本発明者らは、式Ｉ〜式Ｖで表される化合物（例えば、化合物ＹＸＹ１０１）はオーファン核内受容体Ｎｕｒ７７を標的とすることができ、その配位子として機能することを見出した。例えば、そのような化合物は、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７に関連するがん（例えば、トリプルネガティブ乳がん）を治療するように、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７に結合することによってｍＴＯＲ活性を阻害するために使用することができる。
【００３５】
したがって、第１の態様において、本出願は、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用されるか、又はオーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用される医薬の製造において使用される、式Ｉの化合物、互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルの使用に関する。
【化１】
2019523245.tif 000003
（式中、
Ｘは−ＮＨ−、−Ｎ（Ｒ）−、−Ｏ−、−ＣＨ２−又はハロゲンを表し；ここで、Ｘがハロゲンである場合、Ｒ１は存在せず；
Ｙと、それに結合している炭素原子との間の結合が単結合である場合、ＹはＨ、ハロゲン、−ＯＲ、−ＳＲ又は−ＮＲＲ’を表し；Ｙと、それに結合している炭素原子との間の結合が二重結合である場合、ＹはＯ、Ｓ又はＮＲを表し；
Ｒ１は存在しないか、又はＨ、−ＰＯ（ＯＲ）２、Ｃ１−６アルキル、グリコシル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル−Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル−アミノアシル、アリール−Ｃ１−６アルキル又はアリールを表し、ここで、前記Ｃ１−６アルキル、グリコシル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル−Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル−アミノアシル、アリール−Ｃ１−６アルキル又はアリールは非置換であるか、又はハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルアミノ及びＣ１−６アルカノイルからなる群から選択される１以上（例えば、１、２、３又は４）の置換基で置換されており；好ましくは、前記アリールは６員〜１４員アリール、例えば６員〜１０員アリールであり；より好ましくはフェニル又はナフチルであり；
Ｒ２はＨ、Ｄ、−ＰＯ（ＯＲ）２、−ＣＯＮＨ２、−ＮＨ２、−ＮＨＲ、−ＮＲＲ’、−ＮＨＣＯＲ、−ＮＲＣＯＲ、−ＮＨＣＯＯＲ、−ＮＨＣＯＮＨＲ、−ＮＨＣＯＮＲＲ’、−ＮＲＣＯＮＨＲ、−ＮＲＣＯＮＲＲ’、−ＯＨ、−ＯＲ、−ＯＣＯＮＨＲ、−ＯＣＯＮＲＲ’、−ＳＨ、−ＳＲ、−ＳＯＲ、−ＳＯＯＲ、−ＳＯ２ＮＨＲ”、ニトロ、ハロゲン、グリコシル、シアノ、トリフルオロメチル、Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル、３員〜８員ヘテロシクロアルキル、アリール、Ｃ１−６アルキル置換アリール、６員〜１５員ヘテロアリール、アルケニル、アルキニル、スルフィニル、スルホン酸基又はスルホネート基を表し；ここで、前記Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル、３員〜８員ヘテロシクロアルキル、アリール、Ｃ１−６アルキル置換アリール、６員〜１５員ヘテロアリール、アルケニル及びアルキニルは非置換であるか、又はアミノ、ハロゲン、ヒドロキシ、オキシ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルチオ、Ｃ１−６アルカノイル、３員〜８員シクロアルキル（例えばシクロプロピル）、３員〜８員オキソシクロアルキル（例えばオキソシクロブチル）、シアノ、トリフルオロメチル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、Ｃ１−６アルキルアミド、ウレイド基、カルバメート、カルボキシル及びアリールからなる群から選択される１以上（例えば、１、２、３又は４）の置換基で置換されており；
Ｒ３及びＲ４はそれぞれ独立して存在しないか、又はＨ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルカノイル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、グリコシル、アリール−Ｃ１−６アルキル又はアリールを表し、ここで前記Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルカノイル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、グリコシル、アリール−Ｃ１−６アルキル及びアリールは、非置換であるか、又はハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルアミノ及びＣ１−６アルカノイルからなる群から選択される１以上（例えば、１、２、３又は４）の置換基で置換されており；好ましくは、前記アリールは、６員〜１４員アリール、例えば６員〜１０員アリール、であり；より好ましくはフェニル又はナフチル；
Ｒ及びＲ’はそれぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル、アリール−Ｃ１−６アルキル又はアリールから選択され、ここで、前記Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル、アリール−Ｃ１−６アルキル及びアリールは、非置換であるか、又はハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、及びＣ１−６アルキルアミノからなる群から選択される１以上（例えば、１、２、３又は４）の置換基で置換されており；
Ｒ”はＣ１−６アルキル又はアリール（例えば６員〜１０員アリール基、好ましくはフェニル）を表し；
式（Ｉ）における
【化２】
2019523245.tif 000004
は単結合又は二重結合を表し；好ましくは、環Ａは０、１、２又は３個の炭素−炭素二重結合を含有し；環Ｂは０、１又は２個の炭素−炭素二重結合を含有する)
【００３６】
特定の好ましい実施形態において、Ｘは−ＮＨ−、−Ｎ（Ｒ）−、−Ｏ−、−ＣＨ２−又はハロゲンを表し；ここで、Ｘがハロゲンである場合、Ｒ１は存在せず；
Ｙと、それに結合している炭素原子との間の結合が単結合である場合、ＹはＨ、ハロゲン、−ＯＲ、−ＳＲ又は−ＮＲＲ’を表し；Ｙと、それに結合している炭素原子との間の結合が二重結合である場合、ＹはＯ、Ｓ又はＮＲを表し；
Ｒ１は存在しないか、又はＨ、−ＰＯ（ＯＲ）２、Ｃ１−６アルキル、グリコシル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル−Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル−アミノアシル、アリール−Ｃ１−６アルキル又はアリールを表し、ここで、前記Ｃ１−６アルキル、グリコシル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル−Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル−アミノアシル、アリール−Ｃ１−６アルキル又はアリールは非置換であるか、又はハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルアミノ及びＣ１−６アルカノイルからなる群から選択される１以上（例えば、１、２、３又は４）の置換基で置換されており；好ましくは、前記アリールは６員〜１４員アリール、例えば６員〜１０員アリールであり；より好ましくはフェニル又はナフチル；
Ｒ２はＨ、Ｄ、−ＰＯ（ＯＲ）２、−ＣＯＮＨ２、−ＮＨ２、−ＮＨＲ、−ＮＲＲ’、−ＮＨＣＯＲ、−ＮＲＣＯＲ、−ＮＨＣＯＯＲ、−ＮＨＣＯＮＨＲ、−ＮＨＣＯＮＲＲ’、−ＮＲＣＯＮＨＲ、−ＮＲＣＯＮＲＲ’、−ＯＨ、−ＯＲ、−ＯＣＯＮＨＲ、−ＯＣＯＮＲＲ’、−ＳＨ、−ＳＲ、−ＳＯＲ、−ＳＯＯＲ、−ＳＯ２ＮＨＲ”、ニトロ、ハロゲン、グリコシル、シアノ、トリフルオロメチル、Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル、３員〜８員ヘテロシクロアルキル、アリール、Ｃ１−６アルキル置換アリール、６員〜１５員ヘテロアリール、アルケニル、アルキニル、スルフィニル、スルホン酸基又はスルホネート基を表し；ここで、前記Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル、３員〜８員ヘテロシクロアルキル、アリール、Ｃ１−６アルキル置換アリール、６員〜１５員ヘテロアリール、アルケニル及びアルキニルは非置換であるか、又はアミノ、ハロゲン、ヒドロキシ、オキシ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルチオ、Ｃ１−６アルカノイル、３員〜８員シクロアルキル（例えばシクロプロピル）、３員〜８員オキソシクロアルキル（例えばオキソシクロブチル）、シアノ、トリフルオロメチル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、Ｃ１−６アルキルアミド、ウレイド基、カルバメート、カルボキシル及びアリールからなる群から選択される１以上（例えば、１、２、３又は４）の置換基で置換されており；
Ｒ３及びＲ４はそれぞれ独立して存在しないか、又はＨ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルカノイル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、グリコシル、アリール−Ｃ１−６アルキル又はアリールを表し、ここで前記Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルカノイル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、グリコシル、アリール−Ｃ１−６アルキル及びアリールは、非置換であるか、又はハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルアミノ及びＣ１−６アルカノイルからなる群から選択される１以上（例えば、１、２、３又は４）の置換基で置換されており；好ましくは、前記アリールは、６員〜１４員アリール、例えば６員〜１０員アリール、であり；より好ましくはフェニル又はナフチル；
Ｒ及びＲ’はそれぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル、アリール−Ｃ１−６アルキル又はアリールから選択され、ここで、前記Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル、アリール−Ｃ１−６アルキル及びアリールは、非置換であるか、又はハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、及びＣ１−６アルキルアミノからなる群から選択される１以上（例えば、１、２、３又は４）の置換基で置換されており；
Ｒ”はＣ１−６アルキル又はアリール（例えば６員〜１０員アリール基、好ましくはフェニル）を表し；
式（Ｉ）における
【化３】
2019523245.tif 000005
は単結合又は二重結合を表し；好ましくは、環Ａは０、１、２又は３個の炭素−炭素二重結合を含有し；環Ｂは０、１又は２個の炭素−炭素二重結合を含有する。
【００３７】
本発明の好ましい実施形態では、前記スルホネート基は、スルホン酸ナトリウム、スルホン酸カリウム、スルホン酸カルシウム、及びスルホン酸マグネシウムからなる群から選択される。
【００３８】
本発明の好ましい実施形態において、前記６員〜１５員ヘテロアリールは、９員〜１５員縮合ヘテロアリールからなる群から選択され；より好ましくは、前記６員〜１５員ヘテロアリールは、９員〜１５員ベンゾ−ヘテロアリール、例えばインドリル、ベンゾフラニル、ベンゾチエニル、ベンズイミダゾリル又はキノリル、から選択される。
【００３９】
好ましい実施形態において、Ｙと、それに結合している炭素原子との間の結合は、二重結合であり、ＹはＯを表す。
【００４０】
好ましい実施形態において、ＸはＮＨを表し；Ｙと、それに結合している炭素原子との間の結合は二重結合であり；ＹはＯを表し；Ｒ１は、Ｃ１−６アルキル及びＣ１−６アルコキシからなる群から選択される１以上（例えば、１、２、３又は４）の置換基で置換されたアリールを表し；好ましくは、前記アリール基はフェニル基又はナフチル基であり；Ｒ２はＨを表す。
【００４１】
好ましい実施形態において、ＸはＯを表し；Ｙと、それに結合している炭素原子との間の結合は二重結合であり、ＹはＯを表し；Ｒ１はＨを表し；Ｒ２は、Ｈ、スルホネート基又は６員〜１５員ヘテロアリールを表し；好ましくは、前記スルホネート基は、スルホン酸ナトリウム、スルホン酸カリウム、スルホン酸カルシウム、及びスルホン酸マグネシウムからなる群から選択され；好ましくは、前記６員〜１５員のヘテロアリールは、９員〜１５員縮合ヘテロアリールからなる群から選択され；より好ましくは、前記６員〜１５員ヘテロアリール基は、９員〜１５員ベンゾ縮合ヘテロアリール、例えばインドリル、ベンゾフラニル、ベンゾチエニル、ベンズイミダゾリル及びキノリル、から選択される。
【００４２】
好ましい実施形態において、ＸはＯを表し；Ｙと、それに結合している炭素原子との間の結合は二重結合であり、ＹはＯを表し；Ｒ１は、Ｃ１−６アルキル又はアリール−Ｃ１−６アルキル（好ましくはベンジル）を表し；Ｒ２はＨを表す。
【００４３】
好ましい実施形態において、Ｒ３は存在せず、Ｒ４はＨを表す。好ましい実施形態において、Ｒ３はＨを表し、Ｒ４は存在しない。好ましい実施形態において、Ｒ３及びＲ４は両方ともＨである。
【００４４】
好ましい実施形態において、Ｒ３は存在せず、Ｒ４はＨを表し、環Ａ及び環Ｂはそれぞれ２個の炭素−炭素二重結合を有する。
【００４５】
好ましい実施形態において、Ｒ３はＨを表し、Ｒ４は存在せず、環Ａは、０、１又は２個の炭素−炭素二重結合を有し；さらに好ましくは、環Ｂは、０、１又は２個の炭素−炭素二重結合を有する。
【００４６】
好ましい実施形態において、Ｒ３及びＲ４は両方ともＨであり、環Ａは３個の炭素−炭素二重結合を含有し（すなわち、環Ａはベンゼン環である）；さらに好ましくは、環Ｂは、０又は１個の炭素−炭素二重結合を含有し；より好ましくは、環Ｂにおいて、７位の炭素と８位の炭素は、炭素−炭素二重結合で結合している。
【００４７】
好ましい実施形態において、Ｒ３もＲ４も存在しない。このような実施形態では、環Ａにおいて、２位の炭素原子と、それに結合しているＯ原子との間の結合は、炭素−酸素二重結合であり、３位の炭素原子と、それに結合しているＯ原子との間の結合は、炭素−酸素二重結合である。
【００４８】
好ましい実施形態において、７位の炭素と８位の炭素との間の結合は、炭素−炭素単結合である。
【００４９】
好ましい実施形態において、Ｙと、それに結合している炭素原子との間の結合は二重結合であり、ＹはＯを表す。
【００５０】
好ましい実施形態において、前記化合物におけるＸは、−ＮＨ−、−Ｎ（Ｒ）−、−Ｏ−、−ＣＨ２−又はハロゲンを表し；Ｒは、Ｃ１−６アルキル又は３員〜８員シクロアルキル（好ましくはシクロヘキシル）を表し；ここで、Ｘがハロゲンである場合、Ｒ１は存在しない。
【００５１】
好ましい実施形態において、Ｘは−ＮＨ−、−Ｎ（Ｒ）−、−Ｏ−又はハロゲン（例えば、フルオロ）を表し；Ｒはシクロヘキシルを表す。
【００５２】
好ましい実施形態において、化合物中のＲ１は存在しないか、又は水素、Ｃ１−４アルキル、−ＰＯ（ＯＲ）２、モノグリコシル、Ｃ１−４アルコキシカルボニル−Ｃ１−４アルキル、３員〜６員シクロアルキル−アミノアシル、アリール−Ｃ１−４アルキル又はアリールを表し；ここで、前記Ｃ１−４アルキル、モノグリコシル、Ｃ１−４アルコキシカルボニル−Ｃ１−４アルキル、３員〜６員シクロアルキル−アミノアシル、アリール−Ｃ１−４アルキル及びアリールは、非置換であるか、又はハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、Ｃ１−４アルキルアミノ及びＣ１−６アルカノイルからなる群から選択される１以上（例えば、１、２、３又は４）の置換基で置換されており；好ましくは、前記アリールは６員〜１４員アリール、例えば６員〜１０員アリールであり；より好ましくはフェニル又はナフチル；
ＲはＣ１−４アルキルを表す。
【００５３】
好ましい実施形態において、化合物中のＲ１は存在しないか、又は水素、Ｃ１−４アルキル、−ＰＯ（ＯＲ）２、グルコシル、Ｃ１−２アルコキシカルボニル−Ｃ１−２アルキル、シクロヘキシル−アミノアシル、フェニル−Ｃ１−２アルキル、ナフチル−Ｃ１−２アルキル、フェニル又はナフチルを表し；ここで、前記メチル、エチル、グルコシル、Ｃ１−２アルコキシカルボニル−Ｃ１−２アルキル、シクロヘキシル−アミノアシル、フェニル−Ｃ１−２アルキル、ナフチル−Ｃ１−２アルキル、フェニル又はナフチルは、非置換であるか、又はＣ１−２アルキル、Ｃ１−２アルコキシ、及びＣ１−２アルカノイルからなる群から選択される１以上（例えば、１、２、３又は４）の置換基で置換されており；
ＲはＣ１−４アルキルを表す。
【００５４】
好ましい実施形態において、Ｒ１は存在しないか、又は水素、Ｃ１−４アルキル、−ＰＯ（ＯＲ）２、フェニル−Ｃ１−２アルキル、Ｃ１−２アルコキシカルボニル−Ｃ１−２アルキル、３員〜６員シクロアルキル−アミノアシルを表し；
ＲはＣ１−３アルキル基を表す。
【００５５】
好ましい実施形態において、Ｒ１は存在しないか、又は水素、メチル、エチル、−ＰＯ（ＯＭｅ）２、−ＰＯ（ＯＥｔ）２、−ＰＯ（ＯｉＰｒ）２、２，３，４，６−テトラアセトキシ−α−Ｄ−グルコピラノシル、ＥｔＯＣＯＣＨ２−、シクロヘキシル−アミノアシル、ベンジル、メトキシフェニル又はｔｅｒｔ−ブチルフェニルを表す。
【００５６】
好ましい実施形態において、化合物中のＲ２は、Ｈ、Ｄ、−ＯＨ、−ＰＯ（ＯＲ）２、Ｃ１−６アルキル、９員〜１５員縮合ヘテロアリール又はスルホネートを表し；ここで、前記Ｃ１−６アルキル又は６員〜１５員ヘテロアリールは非置換であるか、又はアミノ、ハロゲン、ヒドロキシ、オキシ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルカノイル、シアノ、トリフルオロメチル及びカルボキシルからなる群から選択される１以上（例えば、１、２、３又は４）の置換基で置換されており；
ＲはＨ、Ｃ１−６アルキル又はアリールを表す。
【００５７】
好ましい実施形態において、Ｒ２は、Ｈ、Ｄ、−ＰＯ（ＯＲ）２、Ｃ１−４アルキル、９員〜１５員ベンゾ縮合ヘテロアリール又はスルホネートを表し；ここで、前記Ｃ１−４アルキル又は９員〜１５員ベン縮合ゾヘテロアリールは、非置換であるか、又はアミノ、ハロゲン、ヒドロキシ、オキシ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、Ｃ１−４アルカノイル、シアノ、トリフルオロメチル及びカルボキシルからなる群から選択される１以上（例えば、１、２、３又は４）の置換基で置換されており；
Ｒは、Ｈ、Ｃ１−４アルキル又はフェニルを表す。
【００５８】
好ましい実施形態において、Ｒ２は、Ｈ、Ｄ、−ＰＯ（ＯＲ）２、Ｃ１−４アルキル、９員〜１５員ベンゾ縮合ヘテロアリール又はスルホネートを表し；ここで、前記Ｃ１−４アルキル及び９員〜１５員のベンゾ縮合ヘテロアリールは、非置換であるか、又はアミノ、ハロゲン、ヒドロキシ、オキシ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、Ｃ１−４アルカノイル、シアノ、トリフルオロメチル及びカルボキシルからなる群から選択される１以上（例えば、１、２、３又は４）の置換基で置換されており；
Ｒは、Ｈ、Ｃ１−４アルキル又はフェニルを表す。
【００５９】
好ましい実施形態において、Ｒ２は、Ｈ、Ｄ、−ＰＯ（ＯＲ）２、２−オキソフェニル、インドリル又は硫酸ナトリウムを表し；ここで、前記インドリルは非置換であるか、又はアミノ、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヒドロキシ、メチル、メトキシ、ホルミル、シアノ、トリフルオロメチル及びカルボキシルからなる群から選択される１以上（例えば、１、２、３又は４）の置換基で置換されており；
ＲはＨ、メチル、エチル、イソプロピル又はフェニルを表す。
【００６０】
好ましい実施形態において、化合物中の７位の炭素と８位の炭素との間の結合は、炭素−炭素二重結合である。
【００６１】
好ましい実施形態において、化合物中のＹとそれに結合している炭素原子との間の結合は、二重結合である。
【００６２】
好ましい実施形態において、化合物中のＹとそれに結合している炭素原子との間の結合は、単結合である。
【００６３】
好ましい実施形態において、化合物は次の構造を有する。：
【化４】
2019523245.tif 000006
（式中、Ｒ３及びＲ４はそれぞれ独立してＨ、Ｃ１−６アルキル又はＣ１−６アルカノイルを表し；
好ましくは、Ｒ３及びＲ４はそれぞれ独立してＨ、Ｃ１−４アルキル又はＣ１−４アルカノイルを表し；
好ましくは、Ｒ３及びＲ４はそれぞれ独立してＨ、メチル又はブチリルを表す）
【００６４】
好ましい実施形態において、化合物は次の構造を有する。：
【化５】
2019523245.tif 000007
（式中、Ｒ４はＨ、Ｃ１−６アルカノイル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル又は１以上の（例えば、１、２、３又は４）Ｃ１−６アルカノイル基で置換されたモノグリコシルを表し；
好ましい実施形態において、Ｒ４はＨ、Ｃ１−４アルカノイル、Ｃ１−４アルコキシカルボニル又は１以上の（例えば１、２、３又は４）Ｃ１−４アルカノイル基で置換されたモノグリコシルを表し；
好ましい実施形態において、Ｒ４はＨ又はＣ１−２アルコキシカルボニルを表し；
好ましい実施形態において、Ｒ４はＨ、ブチリル、エトキシカルボニル又は２，３，４，６−テトラアセトキシ−α−Ｄ−グルコピラノースを表す）
【００６５】
好ましい実施形態において、前記化合物は、以下の化合物からなる群から選択される。：
【化６】
2019523245.tif 000008
【化７】
2019523245.tif 000009
【化８】
2019523245.tif 000010
【化９】
2019523245.tif 000011
【００６６】
好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬が、Ｎｕｒ７７の転写活性を阻害するため、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用される。好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬が、細胞におけるＮｕｒ７７の転写活性を阻害するために使用される。好ましい実施形態において、前記細胞はＮｕｒ７７を発現する。好ましい実施形態において、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される。
【００６７】
好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬は、細胞におけるＴＮＦαの生物学的作用を阻害するため、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用される。好ましい実施形態において、ＴＮＦαの前記生物学的作用は、κＢ阻害タンパク質（ＩκＢ）キナーゼα／β（ＩＫＫα／β）のリン酸化、ＩκＢαの分解、ＮＦ−κＢのｐ６５サブユニットの核内移行、及び／又はＮＦ−κＢの活性化である。好ましい実施形態において、前記細胞はＮｕｒ７７を発現する。好ましい実施形態において、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される。
【００６８】
好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬が、細胞におけるｍＴＯＲ経路を阻害するため（例えば、Ｐ−ｍＴＯＲ、ｐ−Ｐ７０Ｓ６Ｋ、及び／又はｐ−Ｓ６の活性をダウンレギュレートする）、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用される。好ましい実施形態において、前記細胞はＮｕｒ７７を発現する。好ましい実施形態において、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される。
【００６９】
好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬が、それを必要とする対象においてＮｕｒ７７関連疾患を予防又は治療するため、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用される。
【００７０】
好ましい実施形態において、前記Ｎｕｒ７７関連疾患はがんである。例えば、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬が、それを必要とする対象においてＮｕｒ７７関連疾患を予防又は治療するため、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用される。好ましい実施形態において、前記Ｎｕｒ７７関連疾患はがん（例えば、トリプルネガティブ乳がん）である。
【００７１】
別の態様において、本願は、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７の転写活性を阻害する方法であって、Ｎｕｒ７７を、式Ｉの化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルと接触させるステップを含む方法に関する。：
【化１０】
2019523245.tif 000012
式中、前記原子及び置換基は、本願の第１の態様において定義された通りである。
【００７２】
好ましい態様において、当該方法は細胞におけるＮｕｒ７７の前記転写活性を阻害するためのものである。好ましい態様において、当該方法はそれを必要とする細胞に、前記細胞におけるＮｕｒ７７の前記転写活性を阻害するための前記化合物の有効量を投与することを含む。好ましい態様において、前記細胞はＮｕｒ７７を発現する。好ましい態様において、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される。
【００７３】
別の態様において、本願は、細胞におけるＴＮＦαの生物学的作用を阻害するための方法であって、それを必要とする前記細胞に、式Ｉの化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルの有効量を投与することを含む方法に関する。：
【化１１】
2019523245.tif 000013
（式中、前記原子及び置換基の定義は、本願の第１の態様に定義された通りである。
【００７４】
好ましい実施形態において、ＴＮＦαの前記生物学的作用は、κＢ阻害タンパク質（ＩκＢ）キナーゼα／β（ＩＫＫα／β）のリン酸化、ＩκＢαの分解、ＮＦ−κＢのｐ６５サブユニットの核内移行、及び／又はＮＦ−κＢの活性化である。好ましい実施形態において、当該方法はＴＮＦα誘導性のＩκＢα分解を阻害するためである。好ましい実施形態において、前記細胞はＮｕｒ７７を発現する。好ましい実施形態において、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される。
【００７５】
別の態様において、本願は、ｍＴＯＲシグナル伝達経路を阻害する方法であって、それを必要とする細胞に、式Ｉの化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルの有効量を投与することを含む方法に関する。：
【化１２】
2019523245.tif 000014
式中、前記原子及び置換基は、本願の第１の態様において定義された通りである。
【００７６】
好ましい実施形態において、前記化合物、又は前記互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルは、細胞におけるＰ−ｍＴＯＲ、ｐ−Ｐ７０Ｓ６Ｋ、及び／又はｐ−Ｓ６の活性をダウンレギュレートするためのものである。好ましい実施形態において、前記細胞はＮｕｒ７７を発現する。好ましい実施形態において、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される。
【００７７】
別の態様において、本願は、Ｎｕｒ７７関連疾患を予防又は治療する方法であって、それを必要とする対象に、式Ｉの化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルの有効量を投与することを含む方法に関する。：
【化１３】
2019523245.tif 000015
式中、前記原子及び置換基は、本願の第１の態様において定義された通りである。
【００７８】
好ましい実施形態において、前記Ｎｕｒ７７関連疾患はがん（例えば、トリプルネガティブ乳がん）である。
【００７９】
別の態様において、本願は、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用されるか、又はオーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用される医薬の製造において使用される、式ＩＶの化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルの使用に関する。：
【化１４】
2019523245.tif 000016
（式中、ＸはＮＨ、Ｏ又はＣＨ２を表し；
ＹはＯ、Ｓ又はＮＲを表し；
Ｒ５及びＲ６はそれぞれ独立してＨ又はＣ１−６アルキルを表し；
Ｒ７と、それに結合している炭素原子との間の結合が単結合である場合、Ｒ７はＯＨを表し、Ｒ７と、それに結合している炭素原子との間の結合が二重結合である場合、Ｒ７はＯを表し；
Ｒ８はＨ又はＣ１−６を表し；
式（ＩＶ）における
【化１５】
2019523245.tif 000017
は単結合又は二重結合を表す）
【００８０】
好ましい実施形態において、前記化合物は、以下の化合物からなる群から選択される。：
【化１６】
2019523245.tif 000018
【００８１】
好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬が、Ｎｕｒ７７の転写活性を阻害するため、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用される。好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬が、細胞におけるＮｕｒ７７の転写活性を阻害するために使用される。好ましい実施形態において、前記細胞はＮｕｒ７７を発現する。好ましい実施形態において、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される。
【００８２】
好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬が、細胞におけるＴＮＦαの生物学的作用を阻害するため、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用される。好ましい実施形態において、ＴＮＦαの前記生物学的作用は、κＢ阻害タンパク質（ＩκＢ）キナーゼα／β（ＩＫＫα／β）のリン酸化、ＩκＢαの分解、ＮＦ−κＢのｐ６５サブユニットの核内移行、及び／又はＮＦ−κＢの活性化である。好ましい実施形態において、前記細胞はＮｕｒ７７を発現する。好ましい実施形態において、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される。
【００８３】
好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬が、細胞におけるｍＴＯＲ経路を阻害するため（例えば、Ｐ−ｍＴＯＲ、ｐ−Ｐ７０Ｓ６Ｋ、及び／又はｐ−Ｓ６の活性をダウンレギュレートする）、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用される。好ましい実施形態において、前記細胞はＮｕｒ７７を発現する。好ましい実施形態において、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される。
【００８４】
好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬は、それを必要とする対象においてＮｕｒ７７関連疾患を予防又は治療するため、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用される。
【００８５】
好ましい実施形態において、前記Ｎｕｒ７７関連疾患はがん（例えば、トリプルネガティブ乳がん）である。
【００８６】
別の態様において、本願は、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７の転写活性を阻害する方法であって、Ｎｕｒ７７を、式ＩＶの化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルと接触させるステップを含む方法に関する。：
【化１７】
2019523245.tif 000019
（式中、ＸはＮＨ、Ｏ又はＣＨ２を表し；
ＹはＯ、Ｓ又はＮＲを表し；
Ｒ５及びＲ６はそれぞれ独立してＨ又はＣ１−６アルキルを表し；
Ｒ７と、それに結合している炭素原子との間の結合が単結合である場合、Ｒ７はＯＨを表し、Ｒ７と、それに結合している炭素原子との間の結合が二重結合である場合、Ｒ７はＯを表し；
Ｒ８はＨ又はＣ１−６を表し；
式（ＩＶ）における
【化１８】
2019523245.tif 000020
は単結合又は二重結合を表す）
【００８７】
好ましい実施形態において、前記化合物は、以下の化合物からなる群から選択される。：
【化１９】
2019523245.tif 000021
【００８８】
好ましい実施形態において、当該方法は細胞におけるＮｕｒ７７の前記転写活性を阻害するためのものである。好ましい実施形態において、当該方法はそれを必要とする細胞に、前記細胞におけるＮｕｒ７７の前記転写活性を阻害するための前記化合物の有効量を投与することを含む。好ましい実施形態において、前記細胞はＮｕｒ７７を発現する。好ましい実施形態において、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される。
【００８９】
別の態様において、本願は、細胞におけるＴＮＦαの生物学的作用を阻害するための方法であって、それを必要とする前記細胞に、式ＩＶの化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルの有効量を投与することを含む方法に関する。：
【化２０】
2019523245.tif 000022
（式中、ＸはＮＨ、Ｏ又はＣＨ２を表し；
ＹはＯ、Ｓ又はＮＲを表し；
Ｒ５及びＲ６はそれぞれ独立してＨ又はＣ１−６アルキルを表し；
Ｒ７と、それに結合している炭素原子との間の結合が単結合である場合、Ｒ７はＯＨを表し、Ｒ７と、それに結合している炭素原子との間の結合が二重結合である場合、Ｒ７はＯを表し；
Ｒ８はＨ又はＣ１−６を表し；
式（ＩＶ）における
【化２１】
2019523245.tif 000023
は単結合又は二重結合を表す）
【００９０】
好ましい実施形態において、前記化合物は、以下の化合物からなる群から選択される。：
【化２２】
2019523245.tif 000024
【００９１】
好ましい実施形態において、ＴＮＦαの前記生物学的作用は、κＢ阻害タンパク質（ＩκＢ）キナーゼα／β（ＩＫＫα／β）のリン酸化、ＩκＢαの分解、ＮＦ−κＢのｐ６５サブユニットの核内移行、及び／又はＮＦ−κＢの活性化である。好ましい実施形態において、当該方法はＴＮＦα誘導性のＩκＢα分解を阻害するためである。好ましい実施形態において、前記細胞はＮｕｒ７７を発現する。好ましい実施形態において、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される。
【００９２】
別の態様において、本願は、ｍＴＯＲ経路を阻害する方法であって、それを必要とする細胞に、式ＩＶの化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルの有効量を投与することを含む方法に関する。：
【化２３】
2019523245.tif 000025
（式中、ＸはＮＨ、Ｏ又はＣＨ２を表し；
ＹはＯ、Ｓ又はＮＲを表し；
Ｒ５及びＲ６はそれぞれ独立してＨ又はＣ１−６アルキルを表し；
Ｒ７と、それに結合している炭素原子との間の結合が単結合である場合、Ｒ７はＯＨを表し、Ｒ７と、それに結合している炭素原子との間の結合が二重結合である場合、Ｒ７はＯを表し；
Ｒ８はＨ又はＣ１−６を表し；
式（ＩＶ）における
【化２４】
2019523245.tif 000026
は単結合又は二重結合を表す）
【００９３】
好ましい実施形態において、前記化合物は、以下の化合物からなる群から選択される。：
【化２５】
2019523245.tif 000027
【００９４】
好ましい実施形態において、前記化合物、又は前記互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルは、細胞におけるＰ−ｍＴＯＲ、ｐ−Ｐ７０Ｓ６Ｋ、及び／又はｐ−Ｓ６の活性をダウンレギュレートするためのものである。好ましい実施形態において、前記細胞はＮｕｒ７７を発現する。好ましい実施形態において、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される。
【００９５】
別の態様において、本願は、Ｎｕｒ７７関連疾患を予防又は治療する方法であって、それを必要とする対象に、式ＩＶの化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルの有効量を投与することを含む方法に関する。：
【化２６】
2019523245.tif 000028
（式中、ＸはＮＨ、Ｏ又はＣＨ２を表し；
ＹはＯ、Ｓ又はＮＲを表し；
Ｒ５及びＲ６はそれぞれ独立してＨ又はＣ１−６アルキルを表し；
Ｒ７と、それに結合している炭素原子との間の結合が単結合である場合、Ｒ７はＯＨを表し、Ｒ７と、それに結合している炭素原子との間の結合が二重結合である場合、Ｒ７はＯを表し；
Ｒ８はＨ又はＣ１−６を表し；
式（ＩＶ）における
【化２７】
2019523245.tif 000029
は単結合又は二重結合を表す）
【００９６】
好ましい実施形態において、前記化合物は、以下の化合物からなる群から選択される。：
【化２８】
2019523245.tif 000030
【００９７】
好ましい実施形態において、前記Ｎｕｒ７７関連疾患はがん（例えば、トリプルネガティブ乳がん）である。
【００９８】
別の態様において、本願は、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用されるか、又はオーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用される医薬の製造において使用される、以下に示す化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルの使用に関する。：
【化２９】
2019523245.tif 000031
【００９９】
好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬は、Ｎｕｒ７７の転写活性を阻害するため、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用される。好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬は、細胞におけるＮｕｒ７７の転写活性を阻害するために使用される。好ましい実施形態において、前記細胞はＮｕｒ７７を発現する。好ましい実施形態において、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される。
【０１００】
好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬は、細胞におけるＴＮＦαの生物学的作用を阻害するため、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用される。好ましい実施形態において、ＴＮＦαの前記生物学的作用は、κＢ阻害タンパク質（ＩκＢ）キナーゼα／β（ＩＫＫα／β）のリン酸化、ＩκＢαの分解、ＮＦ−κＢのｐ６５サブユニットの核内移行、及び／又はＮＦ−κＢの活性化である。好ましい実施形態において、前記細胞はＮｕｒ７７を発現する。好ましい実施形態において、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される。
【０１０１】
好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬は、細胞におけるｍＴＯＲ経路を阻害するため（例えば、Ｐ−ｍＴＯＲ、ｐ−Ｐ７０Ｓ６Ｋ、及び／又はｐ−Ｓ６の活性をダウンレギュレートする）、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用される。好ましい実施形態において、前記細胞はＮｕｒ７７を発現する。好ましい実施形態において、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される。
【０１０２】
好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬は、それを必要とする対象においてＮｕｒ７７関連疾患を予防又は治療するため、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用される。好ましい実施形態において、前記Ｎｕｒ７７関連疾患はがん（例えば、トリプルネガティブ乳がん）である。
【０１０３】
別の態様において、本願は、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７の転写活性を阻害する方法であって、Ｎｕｒ７７を、以下に示す化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルと接触させるステップを含む方法に関する。：
【化３０】
2019523245.tif 000032
【０１０４】
好ましい実施形態において、当該方法は細胞におけるＮｕｒ７７の前記転写活性を阻害するためのものである。好ましい実施形態において、当該方法はそれを必要とする細胞に、前記化合物の有効量を投与すること、それにより、前記細胞におけるＮｕｒ７７の前記転写活性を阻害すること、を含む。好ましい実施形態において、前記細胞はＮｕｒ７７を発現する。好ましい実施形態において、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される。
【０１０５】
別の態様において、本願は、細胞におけるＴＮＦαの生物学的作用を阻害するための方法であって、それを必要とする前記細胞に、以下に示す化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルの有効量を投与することを含む方法に関する。：
【化３１】
2019523245.tif 000033
【０１０６】
好ましい実施形態において、ＴＮＦαの前記生物学的作用は、κＢ阻害タンパク質（ＩκＢ）キナーゼα／β（ＩＫＫα／β）のリン酸化、ＩκＢαの分解、ＮＦ−κＢのｐ６５サブユニットの核内移行、及び／又はＮＦ−κＢの活性化である。好ましい実施形態において、当該方法はＴＮＦα誘導性のＩκＢα分解を阻害するためである。好ましい実施形態において、前記細胞はＮｕｒ７７を発現する。好ましい実施形態において、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される。
【０１０７】
別の態様において、本願は、ｍＴＯＲ経路を阻害する方法であって、それを必要とする細胞に、以下に示す化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルの有効量を投与することを含む方法に関する。：
【化３２】
2019523245.tif 000034
【０１０８】
好ましい実施形態において、前記化合物、又は前記互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルは、細胞におけるＰ−ｍＴＯＲ、ｐ−Ｐ７０Ｓ６Ｋ、及び／又はｐ−Ｓ６の活性をダウンレギュレートするためのものである。好ましい実施形態において、前記細胞はＮｕｒ７７を発現する。好ましい実施形態において、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される。
【０１０９】
別の態様において、本願は、Ｎｕｒ７７関連疾患を予防又は治療する方法であって、それを必要とする対象に、以下に示す化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルの有効量を投与することを含む方法に関する。：
【化３３】
2019523245.tif 000035
【０１１０】
好ましい実施形態において、前記Ｎｕｒ７７関連疾患はがん（例えば、トリプルネガティブ乳がん）である。
【０１１１】
別の態様において、本願は、以下に示す化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルに関する。：
【化３４】
2019523245.tif 000036
（式中、
Ｒ９及びＲ１０がそれぞれ独立して水素、Ｃ１−６アルキル及びアリールからなる群から選択され；
好ましくは、Ｒ９及びＲ１０は、それぞれ独立して、水素、Ｃ１−４アルキル、フェニル及びナフチルからなる群から選択され；
好ましくは、Ｒ９及びＲ１０は、それぞれ独立して、メチル、エチル及びイソプロピルから選択される)
【０１１２】
好ましい実施形態において、前記化合物は、以下の化合物からなる群から選択される。：
【化３５】
2019523245.tif 000037
【０１１３】
別の態様において、本願は、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用されるか、又はオーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用される医薬の製造において使用される、式Ｖの化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルの使用に関する。：
【化３６】
2019523245.tif 000038
（式中、
Ｒ９及びＲ１０がそれぞれ独立して水素、Ｃ１−６アルキル及びアリールからなる群から選択され；
好ましくは、Ｒ９及びＲ１０は、それぞれ独立して、水素、Ｃ１−４アルキル、フェニル及びナフチルからなる群から選択され；
好ましくは、Ｒ９及びＲ１０は、それぞれ独立して、メチル、エチル及びイソプロピルから選択される)
【０１１４】
好ましい実施形態において、前記化合物は、以下の化合物からなる群から選択される。：
【化３７】
2019523245.tif 000039
【０１１５】
好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬が、Ｎｕｒ７７の転写活性を阻害するため、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用される。好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬が、細胞におけるＮｕｒ７７の転写活性を阻害するためにｉｎ  ｖｉｖｏ、ｉｎ  ｖｉｔｒｏもしくはｅｘ  ｖｉｖｏで使用される。好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬が、細胞におけるＮｕｒ７７の転写活性を阻害するために使用される。好ましい実施形態において、前記細胞はＮｕｒ７７を発現する。好ましい実施形態において、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される。
【０１１６】
好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬が、細胞におけるＴＮＦαの生物学的作用を阻害するため、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用される。好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬が、細胞におけるＴＮＦαの生物学的作用を阻害するため、ｉｎ  ｖｉｖｏ、ｉｎ  ｖｉｔｒｏもしくはｅｘ  ｖｉｖｏで使用される。好ましい実施形態において、ＴＮＦαの前記生物学的作用は、κＢ阻害タンパク質（ＩκＢ）キナーゼα／β（ＩＫＫα／β）のリン酸化、ＩκＢαの分解、ＮＦ−κＢのｐ６５サブユニットの核内移行、及び／又はＮＦ−κＢの活性化である。好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬は、ＴＮＦα誘導ＩκＢα分解を阻害するために使用される。好ましい実施形態において、前記細胞はＮｕｒ７７を発現する。好ましい実施形態において、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される。
【０１１７】
好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬が、細胞におけるｍＴＯＲ経路を阻害するため（例えば、Ｐ−ｍＴＯＲ、ｐ−Ｐ７０Ｓ６Ｋ、及び／又はｐ−Ｓ６の活性をダウンレギュレートする）、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用される。好ましい実施形態において、前記細胞はＮｕｒ７７を発現する。好ましい実施形態において、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される。
【０１１８】
好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬は、それを必要とする対象においてＮｕｒ７７関連疾患を予防又は治療するため、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用される。
【０１１９】
好ましい実施形態において、前記Ｎｕｒ７７関連疾患はがん（例えば、トリプルネガティブ乳がん）である。好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬は、がんを有する対象において、がん細胞の増殖及び／又は転移を阻害するために、及び／又はがん細胞のアポトーシスを促進するために使用される。好ましい実施形態において、前記がんは、肝臓がん、子宮頸がん、肺がん、及び乳がんからなる群より選択される。好ましい実施形態において、前記がんはトリプルネガティブ乳がん（すなわち、ネガティブエストロゲン受容体（ＥＲ）、プロゲステロン受容体（ＰＲ）及びがん原遺伝子Ｈｅｒ−２を有する乳がん）である。好ましい実施形態において、前記医薬はがんを治療するために使用され、且つ、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル、並びにＴＮＦαを含む。
【０１２０】
別の態様において、本願は、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７の転写活性を阻害する方法であって、Ｎｕｒ７７を、式Ｖの化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルと接触させるステップを含む方法に関する。：
【化３８】
2019523245.tif 000040
（式中、
Ｒ９及びＲ１０がそれぞれ独立して水素、Ｃ１−６アルキル及びアリールからなる群から選択され；
好ましくは、Ｒ９及びＲ１０は、それぞれ独立して、水素、Ｃ１−４アルキル、フェニル及びナフチルからなる群から選択され；
好ましくは、Ｒ９及びＲ１０は、それぞれ独立して、メチル、エチル及びイソプロピルから選択される)
【０１２１】
好ましい実施形態において、前記化合物は、以下の化合物からなる群から選択される。：
【化３９】
2019523245.tif 000041
【０１２２】
好ましい態様において、当該方法は細胞におけるＮｕｒ７７の前記転写活性を阻害するためのものである。好ましい態様において、当該方法はそれを必要とする細胞に、前記細胞におけるＮｕｒ７７の前記転写活性を阻害するための前記化合物の有効量を投与することを含む。好ましい態様において、前記細胞はＮｕｒ７７を発現する。好ましい態様において、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される。
【０１２３】
別の態様において、本願は、細胞におけるＴＮＦαの生物学的作用を阻害するための方法であって、それを必要とする前記細胞に、式Ｖの化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルの有効量を投与することを含む方法に関する。：
【化４０】
2019523245.tif 000042
（式中、
Ｒ９及びＲ１０がそれぞれ独立して水素、Ｃ１−６アルキル及びアリールからなる群から選択される）
【０１２４】
好ましい実施形態において、Ｒ９及びＲ１０は、それぞれ独立して、水素、Ｃ１−４アルキル、フェニル及びナフチルからなる群から選択される。
【０１２５】
好ましい実施形態において、Ｒ９及びＲ１０は、それぞれ独立して、メチル、エチル及びイソプロピルから選択される。
【０１２６】
好ましい実施形態において、前記化合物は、以下の化合物からなる群から選択される。：
【化４１】
2019523245.tif 000043
【０１２７】
好ましい実施形態において、ＴＮＦαの前記生物学的作用は、κＢ阻害タンパク質（ＩκＢ）キナーゼα／β（ＩＫＫα／β）のリン酸化、ＩκＢαの分解、ＮＦ−κＢのｐ６５サブユニットの核内移行、及び／又はＮＦ−κＢの活性化である。好ましい実施形態において、当該方法はＴＮＦα誘導性のＩκＢα分解を阻害するためである。好ましい実施形態において、前記細胞はＮｕｒ７７を発現する。好ましい実施形態において、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される。
【０１２８】
別の態様において、本願は、ｍＴＯＲ経路を阻害する方法であって、それを必要とする細胞に、式Ｖの化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルの有効量を投与することを含む方法に関する。：
【化４２】
2019523245.tif 000044
（式中、
Ｒ９及びＲ１０がそれぞれ独立して水素、Ｃ１−６アルキル及びアリールからなる群から選択される）
【０１２９】
好ましい実施形態において、Ｒ９及びＲ１０は、それぞれ独立して、水素、Ｃ１−４アルキル、フェニル及びナフチルからなる群から選択される。
【０１３０】
好ましい実施形態において、Ｒ９及びＲ１０は、それぞれ独立して、メチル、エチル及びイソプロピルから選択される。
【０１３１】
好ましい実施形態において、前記化合物は、以下の化合物からなる群から選択される。：
【化４３】
2019523245.tif 000045
【０１３２】
好ましい実施形態において、前記化合物、又は前記互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルは、細胞におけるＰ−ｍＴＯＲ、ｐ−Ｐ７０Ｓ６Ｋ、及び／又はｐ−Ｓ６の活性をダウンレギュレートするために使用される。好ましい実施形態において、前記細胞はＮｕｒ７７を発現する。好ましい実施形態において、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される。
【０１３３】
別の態様において、本願は、Ｎｕｒ７７関連疾患を予防又は治療する方法であって、それを必要とする対象に、式Ｖの化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルの有効量を投与することを含む方法に関する。：
【化４４】
2019523245.tif 000046
（式中、
Ｒ９及びＲ１０がそれぞれ独立して水素、Ｃ１−６アルキル及びアリールからなる群から選択される）
【０１３４】
好ましい実施形態において、Ｒ９及びＲ１０は、それぞれ独立して、水素、Ｃ１−４アルキル、フェニル及びナフチルからなる群から選択される。
【０１３５】
好ましい実施形態において、Ｒ９及びＲ１０は、それぞれ独立して、メチル、エチル及びイソプロピルから選択される。
【０１３６】
好ましい実施形態において、前記化合物は、以下の化合物からなる群から選択される。：
【化４５】
2019523245.tif 000047
【０１３７】
好ましい実施形態において、前記Ｎｕｒ７７関連疾患はがん（例えば、トリプルネガティブ乳がん）である。
【０１３８】
別の態様において、本願は、以下に示す化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステル関する。：
【化４６】
2019523245.tif 000048
【０１３９】
別の態様において、本願は、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用されるか、又はオーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用される医薬の製造において使用される、以下に示す化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルの使用に関する。：
【化４７】
2019523245.tif 000049
【０１４０】
好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬が、Ｎｕｒ７７の転写活性を阻害するため、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用される。好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬が、細胞におけるＮｕｒ７７の転写活性を阻害するためにｉｎ  ｖｉｖｏ、ｉｎ  ｖｉｔｒｏもしくはｅｘ  ｖｉｖｏで使用される。好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬が、細胞におけるＮｕｒ７７の転写活性を阻害するために使用される。好ましい実施形態において、前記細胞はＮｕｒ７７を発現する。好ましい実施形態において、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される。
【０１４１】
好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬が、細胞におけるＴＮＦαの生物学的作用を阻害するため、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用される。好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬が、細胞におけるＴＮＦαの生物学的作用を阻害するため、ｉｎ  ｖｉｖｏ、ｉｎ  ｖｉｔｒｏもしくはｅｘ  ｖｉｖｏで使用される。好ましい実施形態において、ＴＮＦαの前記生物学的作用は、κＢ阻害タンパク質（ＩκＢ）キナーゼα／β（ＩＫＫα／β）のリン酸化、ＩκＢαの分解、ＮＦ−κＢのｐ６５サブユニットの核内移行、及び／又はＮＦ−κＢの活性化である。好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬は、ＴＮＦα誘導ＩκＢα分解を阻害するために使用される。好ましい実施形態において、前記細胞はＮｕｒ７７を発現する。好ましい実施形態において、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される。
【０１４２】
好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬が、細胞におけるｍＴＯＲ経路を阻害するため（例えば、Ｐ−ｍＴＯＲ、ｐ−Ｐ７０Ｓ６Ｋ、及び／又はｐ−Ｓ６の活性をダウンレギュレートする）、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用される。好ましい実施形態において、前記細胞はＮｕｒ７７を発現する。好ましい実施形態において、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される。
【０１４３】
好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬は、それを必要とする対象においてＮｕｒ７７関連疾患を予防又は治療するため、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用される。好ましい実施形態において、前記Ｎｕｒ７７関連疾患はがんである。好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬は、がんを有する対象において、がん細胞の増殖及び／又は転移を阻害するために、及び／又はがん細胞のアポトーシスを促進するために使用される。好ましい実施形態において、前記がんは、肝臓がん、子宮頸がん、肺がん、及び乳がんからなる群より選択される。好ましい実施形態において、前記がんはトリプルネガティブ乳がん（すなわち、ネガティブエストロゲン受容体（ＥＲ）、プロゲステロン受容体（ＰＲ）及びがん原遺伝子Ｈｅｒ−２を有する乳がん）である。好ましい実施形態において、前記医薬はがんを治療するために使用され、且つ、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル、並びにＴＮＦαを含む。
【０１４４】
別の態様において、本願は、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７の転写活性を阻害する方法であって、Ｎｕｒ７７を、以下に示す化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルと接触させるステップを含む方法に関する。：
【化４８】
2019523245.tif 000050
【０１４５】
好ましい態様において、当該方法は細胞におけるＮｕｒ７７の前記転写活性を阻害するためのものである。好ましい態様において、当該方法はそれを必要とする細胞に、前記細胞におけるＮｕｒ７７の前記転写活性を阻害するための前記化合物の有効量を投与することを含む。好ましい態様において、前記細胞はＮｕｒ７７を発現する。好ましい態様において、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される。
【０１４６】
別の態様において、本願は、細胞におけるＴＮＦαの生物学的作用を阻害するための方法であって、それを必要とする前記細胞に、以下に示す化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルの有効量を投与することを含む方法に関する。：
【化４９】
2019523245.tif 000051
【０１４７】
好ましい実施形態において、ＴＮＦαの前記生物学的作用は、κＢ阻害タンパク質（ＩκＢ）キナーゼα／β（ＩＫＫα／β）のリン酸化、ＩκＢαの分解、ＮＦ−κＢのｐ６５サブユニットの核内移行、及び／又はＮＦ−κＢの活性化である。好ましい実施形態において、当該方法はＴＮＦα誘導性のＩκＢα分解を阻害するためである。好ましい実施形態において、前記細胞はＮｕｒ７７を発現する。好ましい実施形態において、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される。
【０１４８】
別の態様において、本願は、ｍＴＯＲシグナル伝達経路を阻害する方法であって、それを必要とする細胞に、以下に示す化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルの有効量を投与することを含む方法に関する。：
【化５０】
2019523245.tif 000052
【０１４９】
好ましい実施形態において、前記化合物、又は前記互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルは、細胞におけるＰ−ｍＴＯＲ、ｐ−Ｐ７０Ｓ６Ｋ、及び／又はｐ−Ｓ６の活性をダウンレギュレートするためのものである。好ましい実施形態において、前記細胞はＮｕｒ７７を発現する。好ましい実施形態において、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される。
【０１５０】
別の態様において、本願は、Ｎｕｒ７７関連疾患を予防又は治療する方法であって、それを必要とする対象に、以下に示す化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルの有効量を投与することを含む方法に関する。：
【化５１】
2019523245.tif 000053
【０１５１】
好ましい実施形態において、前記Ｎｕｒ７７関連疾患はがん（例えば、トリプルネガティブ乳がん）である。
【０１５２】
別の態様において、本願は、抗がん活性を有する薬物をスクリーニングする方法であって、以下のステップ：
（１）オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７を発現するがん細胞（例えば、トリプルネガティブ乳がん細胞）を用意し、ネガティブコントロールを設定する（すなわち、Ｎｕｒ７７を発現しない）ステップと、
（２）前記細胞をＴＮＦα及び候補薬剤で処理するステップと、
（３）前記処理された細胞中のＰ−ｍＴＯＲ、ｐ−Ｐ７０Ｓ６Ｋ、及びｐ−Ｓ６のレベルを検出するステップ（例えば免疫ブロッティング法により検出する）と、
（４）前記細胞及び前記ネガティブコントロール細胞中の対応するタンパク質のレベルを比較し、前記タンパク質レベルの少なくとも１つが低下した場合に、前記候補薬剤は抗がん活性を有すると判断するステップと、
を含む方法に関する。
【発明の効果】
【０１５３】
発明の効果
（１）本発明者らは、式Ｉ〜式Ｖで表される化合物がオーファン核内受容体Ｎｕｒ７７を標的とし、そのリガンドとして機能し得ることを初めて見出した。例えば、そのような化合物は、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７の活性（例えば、転写活性）を低下又は阻害するために使用され得る。
【０１５４】
（２）ｍＴＯＲシグナル伝達経路の阻害は、抗がん剤のスクリーニングに有効な指標として使用することができる。本発明者らは、Ｎｕｒ７７によるｍＴＯＲシグナル伝達経路を阻害する化合物が潜在的な抗がん活性を有することを見出した。したがって、本出願はまた、抗がん（特にトリプルネガティブ乳がん）活性を有する薬物をスクリーニングするための方法を提供する。
【０１５５】
（３）本願の化合物は、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７に関連する疾患、例えばがん（例えば、トリプルネガティブ乳がん）など、の予防及び治療にも使用することができる。したがって、本発明は、Ｎｕｒ７７に特異的に結合することができ、且つ、がん、例えばトリプルネガティブ乳がんなど、を治療するための新しい治療法を開発するために使用することができる新規かつ強力なリガンドを提供する。
【発明を実施するための形態】
【０１５６】
発明を実施するための特定のモデル
以下の実施例を参照しながら本発明を説明するが、これらの実施例は例示を意図するものであり、本発明を限定するものではない。
【０１５７】
他に特定されない限り、本発明において使用される分子生物学実験方法及びイムノアッセイは、基本的には、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：  Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，  ２ｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，  Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，  １９８９，  ｂｙ  Ｊ．  Ｓａｍｂｒｏｏｋ  ｅｔ  ａｌ．，  ａｎｄ  Ｓｈｏｒｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，  ３ｒｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎの方法を参照することによって行われる。制限酵素は、製品製造元によって推奨されている条件に従って使用される。製造元によって示されていないいずれの試薬や機器は市販の製品である。
【図面の簡単な説明】
【０１５８】
図面
【図１】図１は、Ｂｉａｃｏｒｅ  Ｔ２００装置を用いたＮｕｒ７７に結合可能な化合物のスクリーニングを示す。Ｂｉａｃｏｒｅ  Ｔ２００機器を用いてＮｕｒ７７−ＬＢＤへのＹＸＹ１０１の結合を検出するための実験の結果が示されており、ここで、赤い点は化合物ＹＸＹ１０１を表し；青い点はコントロール化合物を表す。結果は、化合物ＹＸＹ１０１がＮｕｒ７７−ＬＢＤに結合することができたことを示した。
【図２】図２Ａは、セラストロール（化合物ＹＸＹ１０１）の化学構造式を示す。；図２Ｂは、Ｎｕｒ７７−ＬＢＤへの異なる濃度のＹＸＹ１０１（０．０４μＭ、０．０８μＭ、０．１６μＭ、０．３２μＭ、０．６４μＭ）の結合のさらなる実験の結果を示す。結果は、Ｎｕｒ７７−ＬＢＤに対する化合物ＹＸＹ１０１の解離定数（Ｋｄ）は２９２ｎＭであることを示した。；図２Ｃは、円二色性分光法によって、Ｎｕｒ７７−ＬＢＤへのＹＸＹ１０１の結合を検出する実験結果を示し、ここで、赤色の曲線はＹＸＹ１０１＋Ｎｕｒ７７−ＬＢＤを表し、青色の曲線はＮｕｒ７７−ＬＢＤを表す。結果は、化合物ＹＸＹ１０１がＮｕｒ７７−ＬＢＤのＣＤスペクトルを変えることができることを示した。これは、化合物ＹＸＹ１０１がＮｕｒ７７−ＬＢＤに結合できることを示している。；図２Ｄは、ＨＰＬＣによりＹＸＹ１０１のＮｕｒ７７−ＬＢＤへの結合を検出するための実験の結果を示し、ここで、赤色の曲線はＹＸＹ１０１＋Ｎｕｒ７７−ＬＢＤを表し、紫色の曲線はＹＸＹ１０１＋ＲＸＲα−ＬＢＤを表す。結果は、化合物ＹＸＹ１０１が、複合体を形成するため、Ｎｕｒ７７−ＬＢＤと結合することができたが、ＲＸＲα−ＬＢＤには結合しなかったことを示した。；図２Ｅは、デュアルルシフェラーゼレポーターアッセイシステムを使用して、ＹＸＹ１０１のＮｕｒ７７−ＬＢＤへの結合を検出するための実験の結果を示す。結果は、化合物ＹＸＹ１０１は、Ｎｕｒ７７の転写活性化機能を阻害することができたが、グルココルチコイド受容体（ＧＲ）の転写活性化機能に有意な影響を及ぼさなかったことを示した。これは、化合物ＹＸＹ１０１がＮｕｒ７７−ＬＢＤに結合することができ、且つ、Ｎｕｒ７７−ＬＢＤの転写活性を阻害することができるのに対し、化合物ＹＸＹ１０１はＧＲに結合しないことを示している。；図２Ｆは、ＹＸＹ１０１とＮｕｒ７７との分子ドッキングを示す。分子ドッキングの結果は、ＹＸＹ１０１が主に疎水性相互作用によってＮｕｒ７７タンパク質の表面上の既知の疎水性溝に結合することを示している。
【図３】図３Ａ〜３Ｂは、異なる濃度のＹＸＹ１０１及びＴＮＦαで処理した細胞におけるＩκＢα及びリン酸化ＩＫＫα／βの免疫ブロット分析の結果を示す。；図３Ｃは、ＹＸＹ１０１及びＴＮＦαで処理した細胞の免疫蛍光染色の結果を示す（スケールバー：２０μｍ）。；図３Ｄは、ＹＸＹ１０１及びＴＮＦαで処理した細胞のＮＦ−κＢ活性の分析結果を示し、ここで、＊＊Ｐ＜０．０１、＊＊＊Ｐ＜０．００１（Ｔ検定）である。；図３Ｅは、異なる濃度のＹＸＹ１０１及びＴＮＦαで処理した異なるがん細胞株におけるＩκＢα及びリン酸化ＩＫＫα／βの免疫ブロット分析の結果を示す。；図３Ｆは、ＴＮＦαで刺激し、異なる化合物で処理した、ＨｅｐＧ２細胞におけるＩκＢαの免疫ブロット分析の結果を示す。
【図４】図４Ａ〜４Ｂは、異なるｓｉＲＮＡでトランスフェクトし、異なる濃度のＹＸＹ１０１及びＴＮＦαで処理したＨｅｐＧ２細胞におけるＮｕｒ７７、ＲＸＲα及びＩκＢαの免疫ブロット分析の結果を示す。；図４Ｃは、異なる濃度のＹＸＹ１０１及びＴＮＦαで処理したＭＥＦ細胞及びＮｕｒ７７−／−ＭＥＦ細胞におけるＩκＢαの免疫ブロット分析の結果を示す。；図４Ｄは、ＹＸＹ１０１及びＴＮＦαで処理したＭＥＦ細胞及びＮｕｒ７７−／−ＭＥＦ細胞の免疫蛍光染色の結果を示す（スケールバー：１０μｍ）。；図４Ｅは、異なる濃度のＸＳ０２８４及びＴＮＦαで処理したＭＥＦ細胞及びＮｕｒ７７−／−ＭＥＦ細胞におけるＩκＢαの免疫ブロット分析の結果を示す。
【図５】図５Ａは、ＹＸＹ１０１濃度に対する、異なる乳がん細胞（ＭＤＡ−ＭＢ−２３１；ＭＤＡ−ＭＢ−４６８；ＢＴ５４９；ＳＫＢＲ３；Ｔ４７Ｄ及びＭＣＦ−７）の増殖比、並びにＹＸＹ１０１のＩＣ５０値を示す。ここで、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１、ＭＤＡ−ＭＢ−４６８、ＢＴ５４９及びＳＫＢＲ３は、赤色の曲線で示されるトリプルネガティブ乳がん細胞であり、Ｔ４７Ｄ及びＭＣＦ−７は、青色の曲線で示されるトリプルポジティブ乳がん細胞である。；図５Ｂは、異なる濃度のＹＸＹ１０１（０μＭ、０．２５μＭ、０．５μＭ、１μＭ、２μＭ、又は４μＭ）で処理したＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞及びＭＣＦ−７細胞におけるｐａｒｐ及びＥＲの免疫ブロット分析の結果を示す。；図５Ｃは、異なる濃度のＹＸＹ１０１（０μＭ、２μＭ、又は４μＭ）で１２時間又は２４時間処理したＭＤＡ−ＭＢ−２３１におけるｐａｒｐ及びｐ−ｍＴＯＲの免疫ブロット分析の結果を示す。；図５Ｄは、異なる時間（１時間、６時間又は１２時間）でＴＮＦαと組み合わせてＹＸＹ１０１で処理したＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞におけるｐａｒｐの免疫ブロット分析の結果を示す。；図５Ｅは、ＹＬＹ１０１の濃度に対するＨｅＬａ細胞の増殖率の曲線を示し、結果は、野生型Ｈｅｌａ細胞に対するＹＸＹ１０１のＩＣ５０値は１．１８９μＭである一方、Ｎｕｒ７７ノックアウトＨｅｌａ細胞に対するＩＣ５０は５８．１６６μＭであることを示した。
【図６】図６Ｂは、各グループのヌードマウスの腫瘍組織の免疫組織化学染色の結果を示す。図６Ａにおいて、左パネルは各グループのヌードマウスに形成された腫瘍を示し；中央パネルは各グループのヌードマウスに形成された腫瘍のＲＴＶを示し；右パネルは各グループのヌードマウスに形成された腫瘍の重量を示す。
【図７】図７Ａは、２ｍｇ／ｋｇのＹＸＹ１０１の胃内投与後、２週間、１１週間、１３週間又は１７週間におけるＭＭＴＶ−ＰＹＶＴマウスの全身状態を示す。；図７Ｂは、２ｍｇ／ｋｇのＹＸＹ１０１の胃内投与後、２週間、１１週間、１３週間又は１７週間におけるＭＭＴＶ−ＰＹＶＴマウスの腫瘍組織のＨＥ染色及び免疫組織化学染色の結果を示す。；図７Ｃは、２ｍｇ／ｋｇのＹＸＹ１０１の胃内投与後、２週間、１１週間、１３週間又は１７週間におけるＭＭＴＶ−ＰＹＶＴマウスの肺組織の重量、形態、ＨＥ染色及び免疫組織化学的染色の分析結果を示す。
【図８】図８Ａは、野生型ｍｍｔｖ−ＰｙＭＴマウス、及びＮｕｒ７７ノックアウトｍｍｔｖ−ＰｙＭＴマウスの６０日以内の生存曲線を示す。；図８Ｂは、野生型ｍｍｔｖ−ＰｙＭＴマウス、Ｎｕｒ７７ノックアウトｍｍｔｖ−ＰｙＭＴマウスにおける１１週、１３週及び１７週における腫瘍重量比較の統計結果を示す。；図８Ｃは、野生型ｍｍｔｖ−ＰｙＭＴマウス及びＮｕｒ７７ノックアウトｍｍｔｖ−ＰｙＭＴマウスにおける１１週、１３週及び１７週における腫瘍の外観及び形態学的サイズの比較結果を示す。；図８Ｄは、動物レベルで検出されるｍｍｔｖ−ＰｙＭＴマウスの生存率に対するＹＸＹ１０１の効果を示す。
【図９】図９Ａは、免疫ブロッティング技術により検出された、飢餓条件下でのＴＮＦαにより処理されたＭＢ−ＭＤＡ−２３１乳がん細胞におけるｐ−Ｐ７０Ｓ６Ｋレベルの結果を示す。；図９Ｂは、免疫ブロッティング技術により検出された、飢餓条件下でのＴＮＦαにより処理されたＳＫＢＲ３乳がん細胞におけるｐ−Ｐ７０Ｓ６Ｋレベルの結果を示す。；図９Ｃは、免疫ブロッティング技術により検出された、飢餓条件下での異なる時間（３０分、２時間）又は異なる濃度（２０ｎｇ／ｍｌ／、４０ｎｇ／ｍｌ）でＴＮＦαにより処理された野生型及びＮｕｒ７７ノックアウトＭＥＦ細胞におけるｐ−ｍＴＯＲ、ｐ−Ｐ７０Ｓ６Ｋ、ｐ−Ｓ６のレベルの結果を示す。
【図１０】図１０Ａは、免疫ブロッティング技術により検出された、飢餓条件下でのＴＮＦα（２０ｎｇ／ｍｌ）、ＹＸＹ１０１（１μＭ、２μＭ、４μＭ）より処理されたＭＢ−ＭＤＡ−２３１乳がん細胞におけるｐ−ｍＴＯＲ、ｐ−Ｐ７０Ｓ６Ｋのレベルの結果を示す。；図１０Ｂは、免疫ブロッティング技術により検出された、Ｆｌａｇエンプティプラスミド又はＦｌａｇ−Ｎｕｒ７７プラスミドでトランスフェクトされ、且つ、飢餓条件下での、３時間、６時間、ＴＮＦαにより処理されたＳＫＢＲ３乳がん細胞におけるｐ−ｍＴＯＲ、ｐ−Ｐ７０Ｓ６Ｋ、Ｎｕｒ７７のレベルの結果を示す。；図１０Ｃは、免疫ブロッティング技術により検出された、飢餓条件下での、Ｎｕｒ７７遺伝子を沈黙させるために処理され、及び次いでＴＮＦα、ＹＸＹ１０１で処理されたＭＢ−ＭＤＡ−２３１細胞におけるｐ−Ｐ７０Ｓ６Ｋ及びＮｕｒ７７のレベルの結果を示す。；図１０Ｄは、免疫ブロッティング技術により検出された、ＴＮＦα、ＹＸＹ１０１（０．５Ｍｍ、１μＭ）で処理された野生型又はＮｕｒ７７ノックアウト型ＭＥＦ細胞におけるｐ−Ｓ６、ｐ−ｍＴＯＲ、及びｐ６２のレベルの結果を示す。
【図１１】図１１Ａは、ＸＳ０５０３濃度に対する異なる乳がん細胞（ＭＤＡ−ＭＢ−２３１及びＭＣＦ−７）の増殖比、並びにＸＳ０５０３のＩＣ５０値を示す。；図１１Ｂは、ＹＸＹ１０１誘導体ＸＳ００７７、ＸＳ０３３５、ＸＳ０４１９、ＸＳ０４７４、又はＸＳ０４８８で処理されたＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞のＩＣ５０分析を示す。；図１１Ｃは、ＹＸＹ１０１誘導体ＸＳ０２８４、ＸＳ０２８５、ＸＳ０３９４、ＸＳ０４１８、ＸＳ０４１９、ＸＳ０４７４、ＸＳ０４８６、ＸＳ０４６２、ＸＳ０４９１、ＸＳ０４９２、又はＸＳ０４８８で処理した７つの乳がん細胞、ＢＴ４７４、ＺＲ−７５−１、ＢＴ５４９、ＨＣＣ１９３７、ＨＳ５７８Ｔ、ＭＣＦ−７、及びＴ４７Ｄに対する阻害率の分析結果を示す。
【図１２】図１２Ａは、ＹＸＹ１０１（４μＭ）又は異なるＹＸＹ１０１誘導体（４μＭ）、ＸＳ０３９４、ＸＳ０３９５、ＸＳ０４１９、ＸＳ０４２０、ＸＳ０４２１、ＸＳ０２８４、ＸＳ０３３５、ＸＳ０４８８、ＸＳ０４９１、ＸＳ０４９２、ＸＳ０４１８、ＸＳ０５０２、ＸＳ０５０３、ＸＳ０５０４、ＸＳ０５０６、ＸＳ０５０７、ＸＳ０５０８、ＸＳ００７７、並びにＴＮＦα（２０ｎｇ／ｍｌ）で処理したＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞におけるＰＡＲＰの免疫ブロット分析の結果を示す。；図１２Ｂは、無血清培地で１０時間飢餓処理されており、及び、ＹＸＹ１０１（２μＭ）又は異なるＹＸＹ１０１誘導体（２μＭ）、ＸＳ０２８４、ＸＳ０２８５、ＸＳ０３３５、ＸＳ０３９４、ＸＳ０４１８、ＸＳ０４１９、ＸＳ０４５４、ＸＳ０４５５、ＸＳ０４６２、ＸＳ０４７３、ＸＳ０４７４、ＸＳ０４８０、ＸＳ０４８６、ＸＳ０４８８、ＸＳ０４９１、又はＸＳ０４９２、並びにＴＮＦα（２０ｎｇ／ｍｌ）で処理したＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞におけるＰ−ｍＴＯＲ、Ｐ−ｐ７０Ｓ６Ｋ、及びＰ−Ｓ６の免疫ブロット分析の結果を示す。；図１２Ｃは、ＹＸＹ１０１（２μＭ）又はその誘導体ＸＳ０４５５（１、２、４μＭ）及びＴＮＦ（２０ｎｇ  ／  ｍｌ）で処理したＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞におけるＰ−ｍＴＯＲ、Ｐ−ｐ７０Ｓ６Ｋ、Ｐ−Ｓ６及びＩκＢαｎｏ免疫ブロット分析の結果を示す。
【図１３】図１３は、Ｂｉａｃｏｒｅ  Ｔ２００装置を用いて、Ｎｕｒ７７−ＬＢＤへの異なる化合物（ＸＳ０４１８、ＸＳ０４１９、ＸＳ０４７４、ＸＳ０３９４、ＸＳ０４９２、ＸＳ０４９１、ＸＳ０４８８）の結合を検出するための実験の結果を示す。結果は、Ｎｕｒ７７−ＬＢＤに対する化合物ＸＳ０４１８の解離定数（Ｋｄ）は３．６７μＭであること、Ｎｕｒ７７−ＬＢＤに対する化合物ＸＳ０４１９の解離定数（Ｋｄ）は４０４ｎＭであること、Ｎｕｒ７７−ＬＢＤに対する化合物ＸＳ０４７４の解離定数（Ｋｄ）は２．６０μＭであること、Ｎｕｒ７７−ＬＢＤに対する化合物ＸＳ０３９４の解離定数（Ｋｄ）は１．２６μＭであること、Ｎｕｒ７７−ＬＢＤに対する化合物ＸＳ０４９２の解離定数（Ｋｄ）は１．３０μＭであること、Ｎｕｒ７７−ＬＢＤに対する化合物ＸＳ０４９１の解離定数（Ｋｄ）は０．３３６μＭであること、Ｎｕｒ７７−ＬＢＤに対する化合物ＸＳ０４４８の解離定数（Ｋｄ）は１．２８μＭであること、を示す。
【図１４】図１４は、それぞれＬＦＤ給餌及びＨＦＤ給餌で処置し、２つの化合物、ＹＸＹ１０１及びその誘導体ＸＳ０２８４を胃内投与した、ＷＴマウス及びＰＹＶＴマウスでの実験結果を示す。；図１４Ａは、異なる処置条件下での異なる実験群におけるマウスの形態学的外観特性を示す。図１４Ｂは、上記マウス腫瘍の形態及びサイズの比較を示す。；図１４Ｃは、胃内投与の１２日間の、上記マウスの体重の変化の曲線を示す。；図１４Ｄは、治療前後の上記マウスの体重変化の統計的有意性を示す。
【図１５】図１５Ａは、ＰＹＶＴのＷＴマウス及びＮｕｒ７７ノックアウトマウスにおける、ＹＸＹ１０１及びその誘導体ＸＳ０２８４による治療後の腫瘍の形態及びサイズの比較を示す。；図１５Ｂは、上記マウスにおける腫瘍組織重量の統計結果を示す。
【図１６】図１６は、各群のマウスの心臓、肝臓、小腸、白色脂肪及び腎臓の組織形態学及びＨＥ染色の結果を示す。これらは、２００ｍｇ／ｋｇのＹＸＹ１０１又はその誘導体ＸＳ０２８４の１回の胃内投与又は腹腔内注射によって誘発された急性毒性モデルマウスにおいて、ＹＸＹ１０１又はＸＳ０２８４（２００ｍｇ／ｋｇ）の胃内投与又は腹腔内注射の１２時間後に観察された。
【図１７】図１７は、コンピュータ支援シミュレーション方法を使用することによる、Ｎｕｒ７７のそのリガンドへの結合の機能モード図を示す。
【実施例】
【０１５９】
実施例１  化合物ＹＸＹ１０１の特徴付け
（１）表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）
ＹＸＹ１０１のＮｕｒ７７への結合は、表面プラズモン共鳴によって決定された。簡単に述べると、Ｎｕｒ７７（Ｎｕｒ７７−ＬＢＤ）タンパク質の５０μｇ精製リガンド結合ドメインを、ＢｉａｃｏｒｅのＣＭ５チップに結合させた。続いて、ＹＸＹ１０１（２０μＭ）のＮｕｒ７７−ＬＢＤへの結合を、Ｂｉａｃｏｒｅ  Ｔ２００装置により測定した。無関係の化合物をコントロールとして使用した。測定結果を図１に示す。
【０１６０】
図１は、Ｂｉａｃｏｒｅ  Ｔ２００装置を用いてＹＸＹ１０１をＮｕｒ７７−ＬＢＤと結合した実験の結果を示し、ここで、赤い点は化合物ＹＸＹ１０１を表し、青い点はコントロール化合物を表す。結果は、化合物ＹＸＹ１０１がＮｕｒ７７−ＬＢＤに結合することができたことを示した。
【０１６１】
（２）ＹＸＹ１０１のＮｕｒ７７への結合動態
ＹＸＹ１０１とＮｕｒ７７の解離定数（Ｋｄ）は表面プラズモン共鳴によって決定された。簡単に説明すると、Ｂｉａｃｏｒｅ  Ｔ２００装置を使用して、Ｎｕｒ７７−ＬＢＤへの異なる濃度における（０．０４μＭ、０．０８μＭ、０．１６μＭ、０．３２μＭ、０．６４μＭ）ＹＸＹ１０１の結合を測定した。測定結果を図２Ｂに示す。
【０１６２】
結果は、Ｎｕｒ７７−ＬＢＤの化合物ＹＸＹ１０１に対する解離定数（Ｋｄ）が２９２ｎＭであることを示した。
【０１６３】
（３）円二色性分光法（ＣＤ）
円二色性分光法（ＣＤ）を使用して、ＹＸＹ１０１とＮｕｒ７７−ＬＢＤとの結合についてさらなる分析を行った。簡単に説明すると、ＹＸＹ１０１（１ｍＬ、１ｍｇ／ｍＬ）をＮｕｒ７７−ＬＢＤタンパク質（１ｍＬ、１ｍｇ／ｍＬ）のリン酸緩衝液（１０μｍ、ｐＨ７．４）に添加し、そして４℃で３時間インキュベートした。その後、０．７ｍＬの溶液を取り、Ｊａｓｃｏ  Ｊ−８１０分光偏光計を用いて検出した。１９０ｎｍから２６０ｎｍまでのＣＤスペクトルを記録した。別のＮｕｒ７７−ＬＢＤ溶液（すなわち、化合物ＹＸＹ１０１を添加しなかった）をコントロールとして使用した。検出結果を図２Ｃに示す。
【０１６４】
結果は、化合物ＹＸＹ１０１がＮｕｒ７７−ＬＢＤのＣＤスペクトルを変えることができることを示した。これは、化合物ＹＸＹ１０１がＮｕｒ７７−ＬＢＤに結合できることを示している。
【０１６５】
（４）高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）分析
高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）を用いてＹＸＹ１０１のＮｕｒ７７−ＬＢＤへの結合をさらに分析した。簡単に説明すると、ＹＸＹ１０１（６００μＬ、０．１ｍｇ／ｍＬ）を、精製Ｎｕｒ７７−ＬＢＤタンパク質（５ｍＬ、１ｍｇ／ｍＬ）と共にインキュベートした。４℃で３時間インキュベートした後、ＹＸＹ１０１とＮｕｒ７７−ＬＢＤとの複合体をＮｉビーズで捕捉した。その後、クロロホルムを用いて前記複合体を解離させ、解離生成物中のＹＸＹ１０１を抽出した。次に、ＨＰＬＣ分光光度計（Ｓｈｉｍａｄｚｕ  ＬＣ  ２０Ａ、日本）を用いて、抽出生成物中のＹＸＹ１０１を検出した。ここで、使用したカラムは、ＯＤＳカラム（５μｍ、４．６×２５０ｍｍ）であり、移動相は、０．２％Ｈ３ＰＯ４を含有するアセトニトリル水溶液であった。検出波長は４２５ｎｍであった。また、ＹＸＹ１０１及びＲＸＲα−ＬＢＤ（レチノイドＸ受容体αのリガンド結合ドメイン）を使用してコントロールとして、上記実験を繰り返した。検出結果は、図２Ｄに示す。
【０１６６】
結果は、複合体を形成するため、化合物ＹＸＹ１０１がＮｕｒ７７−ＬＢＤと結合することができたが、ＲＸＲα−ＬＢＤには結合できなかったことを示した。
【０１６７】
（５）デュアルルシフェラーゼレポーター遺伝子アッセイ
デュアルルシフェラーゼレポーターアッセイを使用して、ＹＸＹ１０１とＮｕｒ７７−ＬＢＤとの結合をさらに分析した。また、コントロールとして、ＹＸＹ１０１とグルココルチコイド受容体（ＧＲ）とを用いて実験を繰り返した。実験結果を図２Ｅに示す。
【０１６８】
結果は、化合物ＹＸＹ１０１がＮｕｒ７７の転写活性化機能を阻害することができたが、グルココルチコイド受容体（ＧＲ）の転写活性化機能に有意な影響を及ぼさないことを示した。これは、化合物ＹＸＹ１０１がＮｕｒ７７−ＬＢＤに結合することができ、且つ、その転写活性を阻害することができたが、ＧＲには結合しないことを示している。
【０１６９】
（６）分子シミュレーション
ＹＸＹ１０１のＮｕｒ７７（ＰＤＢコード：４ＪＧＶ）へのドッキングは、ＡｕｔｏＤｏｃｋ  Ｖ４．２を使って行われた。ＹＸＹ１０１の立体配座は、Ｌａｍａｒｃｋ遺伝的アルゴリズムにより構築した。Ｎｕｒ７７の結晶構造において、グリッド中心は、ＴＨＰＮの報告された座標（−１２．０８、１８．２９、−４．２３３）で選択され、グリッドサイズは４０×４０×４０（Ｘ、Ｙ、Ｚ）グリッド点に設定され、格子点間の間隔は０．３７５Ａであった。
【０１７０】
分子ドッキングでは、標準的なドッキングプロトコルが適用された。ここでは、ランダムに配置された個人の数は１５０であった、エネルギー評価の最大数は２５０万であった、遺伝子変異の比率は０．０２であった、クロスオーバー比率は０．８であった、局所評価を行う確率は０．０６、ｒｈｏの下方限界は０．０１であった、分子の可視化のためにＰｙＭＯＬのバージョン０．９９を用いた。結果を図２Ｆに示す。
【０１７１】
分子ドッキングの調査は、ＹＸＹ１０１が主に疎水性相互作用によってＮｕｒ７７タンパク質の表面上の既知の疎水性溝に結合することを示している。
【０１７２】
実施例２  ＹＸＹ１０１はＴＮＦαの生物学的効果を阻害する
ＨｅｐＧ２細胞を異なる濃度のＹＸＹ１０１（０μＭ、０．２５μＭ、０．５μＭ、１μＭ、２μＭ又は４μＭ）で１時間処理し、次いでＴＮＦα（０ｎｇ／ｍＬ又は２０ｎｇ／ｍＬ）で３０分間さらに処理した。続いて、細胞内のＩκＢα及びリン酸化ＩＫＫα／βをウエスタンブロッティング（ＷＢ）により検出した。結果を図３Ａ〜３Ｂに示す。
【０１７３】
図３Ａ〜３Ｂの結果は、ＴＮＦαが細胞内でＩＫＫα／βのリン酸化及びＩκＢαの分解を誘導することができるのに対し、ＹＸＹ１０１はＩＫＫα／βのＴＮＦα誘導リン酸化及びＩκＢαの分解を阻害することができることを示している。
【０１７４】
ＨｅｐＧ２細胞をＹＸＹ１０１（０又は１μＭ）で１時間処理し、次いでＴＮＦα（２０ｎｇ／ｍＬ）で３０分間処理した。続いて、細胞内のＮＦ−κＢのｐ６５サブユニットを免疫蛍光染色によって検出した。未処理細胞をコントロールとして使用した。結果を図３Ｃに示す。
【０１７５】
図３Ｃは、ＹＸＹ１０１及びＴＮＦαで処理したＨｅｐＧ２細胞の免疫蛍光染色の結果を示す（スケールバー：２０μｍ）。図３Ｃにおける結果は、ＴＮＦαが細胞内でＮＦ−κＢのｐ６５サブユニットの核内移行を誘導することができた一方で、ＹＸＹ１０１はＴＮＦα誘導性ｐ６５核内移行を阻害することができたことを示している。
【０１７６】
ＮＦ−κＢレポーター遺伝子をＨＥＫ−２９３Ｔ細胞にトランスフェクトし、次いでＹＸＹ１０１（０又は１μＭ）及びＴＮＦα（２０ｎｇ／ｍＬ）で処理した。続いて、細胞内のＮＦ−κＢ活性を調べた。未処理細胞をコントロールとして使用した。結果を図３Ｄに示す。
【０１７７】
図３Ｄは、ＹＸＹ１０１及びＴＮＦαで処理した細胞のＮＦ−κＢ活性の分析結果を示し、ここで、＊＊Ｐ＜０．０１、＊＊＊Ｐ＜０．００１（Ｔ検定）である。図４Ｄにおける結果は、ＴＮＦαが細胞内でＮＦ−κＢの転写活性化を誘導することができるのに対し、ＹＸＹ１０１はＴＮＦα誘導ＮＦ−κＢ転写活性化を阻害することができることを示している。
【０１７８】
様々ながん細胞株（ＬＯ２、ＳＭＭＣ−７７２１、ＱＧＹ−７７０３、ＨｅＬａ、Ｈ４６０）を異なる濃度のＹＸＹ１０１（０μＭ、１μＭ又は４μＭ）で１時間処理した後、ＴＮＦα（０ｎｇ／ｍＬ又は２０ｎｇ／ｍＬ）で処理した。続いて、細胞内のＩκＢα及びリン酸化ＩＫＫα／βをウエスタンブロッティングにより検出した。結果を図３Ｅに示す。
【０１７９】
結果は、ＴＮＦαが様々な細胞株においてＩＫＫα  ／βのリン酸化及びＩκＢαの分解を誘導することができる一方、ＹＸＹ１０１はＩＫＫα／βのＴＮＦα誘導リン酸化及びＩκＢαの分解を阻害することができることを示した。
【０１８０】
さらに、ＨｅｐＧ２細胞も実験に使用した。簡単に説明すると、ＨｅｐＧ２細胞を明示された濃度の様々な化合物（ＹＸＹ１０１、ＸＳ０２８４、及びＸＳ０２８７）で示された時間処理し、次いでＴＮＦα（０ｎｇ／ｍＬ又は２０ｎｇ／ｍＬ）で３０分間処理した。続いて、細胞内のＩκＢαをウエスタンブロッティングにより検出した。結果を図３Ｆに示す。
【０１８１】
図３Ｆは、ＹＸＹ１０１並びにその誘導体ＸＳ０２８４及びＸＳ０２８７が、ＨｅｐＧ２細胞におけるＩκＢαのＴＮＦα誘導分解を阻害することができたことを示す。
【０１８２】
図３Ａ〜３Ｆの結果は、ＹＸＹ１０１並びにその誘導体ＸＳ０２８４及びＸＳ０２８７が、ＩＫＫα／βのリン酸化、ＩκＢαの分解、ＮＦ−κＢのｐ６５サブユニットの核内移行、及びＮＦ−κＢの転写活性化を包含する、細胞内のＴＮＦαの様々な生物学的効果を阻害できたことを示す。
【０１８３】
実施例３  Ｎｕｒ７７は、ＴＮＦαの生物学的効果に対するＹＸＹ１０１の阻害効果を媒介する。
コントロールとしてＳｉＲＮＡ、Ｎｕｒ７７  ＳｉＲＮＡ又はＲＸＲα  ＳｉＲＮＡをＨｅｐＧ２細胞にトランスフェクトした。続いて、ＨｅｐＧ２細胞を異なる濃度のＹＸＹ１０１（０μＭ、１μＭ又は４μＭ）で１時間処理し、次いでＴＮＦα（０ｎｇ／ｍＬ又は２０ｎｇ／ｍＬ）で３０分間処理した。続いて、細胞内のＮｕｒ７７、ＲＸＲα及びＩκＢαをウエスタンブロッティングにより検出した。結果を図４Ａ〜４Ｂに示す。
【０１８４】
図４Ａ〜４Ｂは、異なるＳｉＲＮＡでトランスフェクトし、異なる濃度のＹＸＹ１０１及びＴＮＦαで処理したＨｅｐＧ２細胞におけるＮｕｒ７７、ＲＸＲα及びＩκＢαの免疫ブロット分析の結果を示す。結果は、Ｎｕｒ７７  ＳｉＲＮＡは細胞内のＮｕｒ７７の発現を効果的に阻害／ノックアウトしたこと、ＲＸＲα  ＳｉＲＮＡは細胞内のＲＸＲαの発現を効果的に阻害／ノックアウトしたこと、それに対し、コントロールＳｉＲＮＡはＮｕｒ７７及びＲＸＲαの正常発現に影響を及ぼさなかった。さらに、図５Ａ〜５Ｂの結果は、ＹＸＹ１０１が、Ｎｕｒ７７を発現する細胞においてＩκＢαのＴＮＦα誘導性分解を阻害することができたが；しかし、Ｎｕｒ７７発現がノックアウトされると、ＹＸＹ１０１はＩκＢα分解を阻害するその能力を失うことを示す。これらの結果は、ＴＮＦαの生物学的効果に対するＹＸＹ１０１の阻害効果がＮｕｒ７７によって媒介されたことを示している。
【０１８５】
上記の実験結果はまた、ＭＥＦ細胞及びＮｕｒ７７−／−ＭＥＦ細胞（すなわち、Ｎｕｒ７７を発現していないＭＥＦ細胞）を用いて検証された。簡単に説明すると、ＭＥＦ細胞及びＮｕｒ７７−／−ＭＥＦ細胞を異なる濃度のＹＸＹ１０１（０μＭ又は１μＭ）で１時間処理し、次いでＴＮＦα（０ｎｇ／ｍＬ又は２０ｎｇ／ｍＬ）で３０分間処理した。続いて、細胞内のＩκＢαをウエスタンブロッティングにより検出した。結果を図４Ｃに示す。
【０１８６】
結果は、ＹＸＹ１０１がＮｕｒ７７を発現するＭＥＦ細胞においてＩκＢαのＴＮＦα誘導性分解を阻害することができたが、しかしながら、Ｎｕｒ７７−／−ＭＥＦ細胞において、ＹＸＹ１０１はＩκＢα分解を阻害する能力を失ったことを示す。これらの結果は、ＴＮＦαの生物学的効果に対するＹＸＹ１０１の阻害効果がＮｕｒ７７によって媒介されることを示している。
【０１８７】
さらに、ＭＥＦ細胞及びＮｕｒ７７−／−ＭＥＦ細胞をＹＸＹ１０１（０又は１μＭ）で１時間処理し、次いでＴＮＦα（２０ｎｇ／ｍＬ）で３０分間処理した。続いて、細胞内のＮＦ−κＢのｐ６５サブユニットを免疫蛍光染色によって検出した。未処理細胞をコントロールとして使用した。結果を図４Ｄに示す。
【０１８８】
図４Ｄは、ＹＸＹ１０１及びＴＮＦαで処理したＭＥＦ細胞及びＮｕｒ７７−／−ＭＥＦ細胞の免疫蛍光染色の結果を示す（スケールバー：１０μｍ）。結果は、ＹＸＹ１０１がＮｕｒ７７を発現するＭＥＦ細胞においてＴＮＦα誘導ｐ６５核内移行を阻害することができたが、しかしながら、Ｎｕｒ７７−／−ＭＥＦ細胞において、ＹＸＹ１０１はｐ６５の核内移行を阻害する能力を失ったことを示す。これらの結果は、ＴＮＦαの生物学的効果に対するＹＸＹ１０１の阻害効果がＮｕｒ７７によって媒介されることを示している。
【０１８９】
図４Ｅは、異なる濃度のＸＳ０２８４及びＴＮＦαで処理したＭＥＦ細胞及びＮｕｒ７７−／−ＭＥＦ細胞におけるＩκＢαの免疫ブロット分析の結果を示す。結果は、ＸＳ０２８４がＮｕｒ７７を発現するＭＥＦ細胞においてＩκＢαのＴＮＦα誘導分解を阻害することができたが、しかし、Ｎｕｒ７７−／−ＭＥＦ細胞において、ＸＳ０２８４はＩκＢα分解を阻害する能力を失ったことを示す。これらの結果は、ＴＮＦαの生物学的効果に対するＸＳ０２８４の阻害効果がＮｕｒ７７によって媒介されることを示している。
【０１９０】
実施例４  ＹＸＹ１０１は、ある有意な腫瘍抑制活性を有し、トリプルネガティブ乳がんに対して特に敏感であり、生物学的機能はＮｕｒ７７に依存する。
【０１９１】
異なる乳がん細胞（ＭＤＡ−ＭＢ−２３１；ＭＤＡ−ＭＢ−４６８；ＢＴ５４９；ＳＫＢＲ３；Ｔ４７Ｄ及びＭＣＦ−７）を異なる濃度のＹＸＹ１０１（１μＭ、１．３μＭ、１．６μＭ、１．９μＭ、２．２μＭ、２．５μＭ、２．８μＭ、３．１μＭ、３．４μＭ、３．７μＭ、４．０μＭ）で７２時間処理し、そして乳がん細胞の増殖率を決定した。ＹＸＹ１０１の濃度に対するがん細胞増殖率の曲線をプロットし、そしてＹＸＹ１０１のＩＣ５０を決定した。結果を図５Ａに示す。
【０１９２】
図５Ａは、ＹＸＹ１０１濃度に対する、異なる乳がん細胞（ＭＤＡ−ＭＢ−２３１；ＭＤＡ−ＭＢ−４６８；ＢＴ５４９；ＳＫＢＲ３；Ｔ４７Ｄ及びＭＣＦ−７）の増殖比、並びにＹＸＹ１０１のＩＣ５０値を示す。ここで、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１、ＭＤＡ−ＭＢ−４６８、ＢＴ５４９及びＳＫＢＲ３は、トリプルネガティブ乳がん細胞であり、それらの結果は赤色の曲線で示され、；Ｔ４７Ｄ及びＭＣＦ−７は、トリプルポジティブ乳がん細胞であり、それらの結果は青色の曲線で示される。結果は、トリプルネガティブ乳がん細胞の増殖を阻害するＹＸＹ１０１の能力が、トリプルポジティブ乳がん細胞の増殖を阻害するその能力より有意に強かったことを示す。ここで、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１、ＭＤＡ−ＭＢ−４６８、ＢＴ５４９及びＳＫＢＲ３の増殖を阻害するためのＹＸＹ１０１のＩＣ５０は、それぞれ１．２０４、０．１８７、０．２４５及び２．６４６μＭであり、それらはＴ４７Ｄ及びＭＣＦ−７のもの（それぞれ７４．４６５μＭ及び１１．４９８μＭ）よりはるかに低く、ＹＸＹ１０１がトリプルネガティブ乳がんの治療に特に有利に使用できることを示唆している。
【０１９３】
図５Ｅは、野生型Ｈｅｌａ細胞におけるＹＸＹ１０１のＩＣ５０値が１．１８９μＭであり、一方、Ｎｕｒ７７ノックアウトＨｅｌａ細胞におけるＩＣ５０が５８．１６６μＭであることを示す。結果は、ＹＸＹ１０１の腫瘍抑制効果がＮｕｒ７７に依存することを示す。図１及び図２Ｂから、ＹＸＹ１０１はＮｕｒ７７に特異的に結合することができ、ＹＸＹ１０１の腫瘍抑制活性はＮｕｒ７７と密接に関連していることを示す。
【０１９４】
さらに、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１及びＭＣＦ−７細胞を異なる濃度のＹＸＹ１０１（０μＭ、０．２５μＭ、０．５μＭ、１μＭ、２μＭ、又は４μＭ）で処理した後、ＷＢにより細胞内のｐａｒｐ及びＥＲを検出した。結果を図５Ｂに示す。
【０１９５】
図５Ｂは、異なる濃度のＹＸＹ１０１（０μＭ、０．２５μＭ、０．５μＭ、１μＭ、２μＭ、又は４μＭ）で処理したＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞及びＭＣＦ−７細胞におけるｐａｒｐ及びＥＲの免疫ブロット分析の結果を示す。結果は、ＹＸＹ１０１はＭＤＡ−ＭＢ−２３１におけるｐａｒｐ切断、すなわちアポトーシス現象、を誘導した。
【０１９６】
さらに、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１を異なる濃度のＹＸＹ１０１（０μＭ、２μＭ、又は４μＭ）で異なる時間（１２時間又は２４時間）処理した後、細胞内のｐａｒｐ及びｐ−ｍＴＯＲをＷＢで検出した。結果を図５Ｃに示す。
【０１９７】
図５Ｃは、異なる濃度のＹＸＹ１０１（０μＭ、２μＭ、又は４μＭ）で１２時間又は２４時間処理したＭＤＡ−ＭＢ−２３１中のｐａｒｐ及びｐ−ｍＴＯＲの免疫ブロット分析の結果を示す。結果は、ＹＸＹ１０１が時間及び濃度依存的にＭＤＡ−ＭＢ−２３１においてアポトーシスを誘導することができることを示した。
【０１９８】
さらに、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞をＴＮＦαと組み合わせたＹＸＹ１０１で異なる時間（１時間、６時間又は１２時間）処理した後、ＷＢによって細胞内のｐａｒｐを検出した。結果を図５Ｄに示す。
【０１９９】
図５Ｄは、異なる時間（１時間、６時間又は１２時間）、ＴＮＦαと組み合わせたＹＸＹ１０１で処理したＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞におけるｐａｒｐの免疫ブロット分析の結果を示す。結果は、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１において、ＴＮＦαと組み合わせたＹＸＹ１０１がより強いアポトーシスを誘導できることを示した。
【０２００】
実施例５．  乳がん腫瘍の増殖に対するＹＸＹ１０１の阻害効果
このセクションでは、我々は、ヌードマウス異種移植片実験によって、トリプルネガティブ乳がんに対するＹＸＹ１０１単独又はＴＮＦαとの併用の抗腫瘍効果を試験した。
【０２０１】
１）実験動物及び試薬
ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞、ＢＡＬＢ／ｃ（ｎｕ／ｎｕ）ヌードマウス、体重１８〜２０ｇ、雌、ＳＰＦ動物飼育場で哺育、飼料、飲料水、動物用ケージ、ごみは２日ごとに交換され、厳密には無菌操作が行われた。無菌条件下で、対数増殖期に接種する細胞を集め、それらを無血清培地で洗浄し、倒立顕微鏡下で生存細胞数をカウントし、生存率＞９５％、細胞濃度を１×１０６／ｍＬに調整し、そして、細胞懸濁液を調製するため腫瘍細胞をＰＢＳに再懸濁した。各ヌードマウスの腕の右側に、０．２ｍＬの上記細胞懸濁液を接種し、そして腫瘍増殖状態を定期的に観察した。
【０２０２】
２）グループ分けと管理
薬物投与群：  ヌードマウスの移植腫瘍の直径が約０．５ｃｍに達したとき、出血、壊死及び感染のないヌードマウスを実験用に選択した。ヌードマウスの体重を量り、それの腫瘍直径を測定し、そして各群６匹のヌードマウスにグループ分けした。実験群のマウスに、ＴＮＦα（１２０×１０４  Ｕ／ｋｇ）、ＹＸＹ１０１（２ｍｇ／ｋｇ）、又はその組み合わせを投与し、コントロール群のマウスには同量の生理食塩水を投与した。ＴＮＦαを腫瘍内注射により一日おきに投与し；ＹＸＹ１０１を胃内に毎日投与した。最後の投与から６時間後にヌードマウスを屠殺し、そして腫瘍重量を測定した。
【０２０３】
治療中、ヌードマウスの摂餌量及び体重は有意に減少せず、活動は正常であり、そして脱毛及び下痢のような症状は現れなかった。処置終了時に、各グループのヌードマウスにおいて死亡は起こらなかった。ヌードマウスを屠殺した後、剖検は、明らかな腫瘍境界、不均一な表面、堅い質感、局所血管が明らかに拡張していること、そしていくつかの腫瘍は中心部で壊死していることを示した。全てのグループのヌードマウスに転移性病変は見られなかった。各処置群のヌードマウスの心臓、肝臓、脾臓、肺、腎臓及び他の臓器に外観の明らかな変化は見られなかった。
【０２０４】
３）観察指標
腫瘍増殖曲線の描画
腫瘍体積（tumor  volume,ＴＶ）を計算するための式は、
Ｖ  ＝  １／２×ａ×ｂ×ｃ
である。式中、ａ、ｂ、及びｃは、それぞれ長さ、幅、及び高さを表す。測定結果に基づいて腫瘍体積を算出し、横軸に時間、縦軸に腫瘍体積をとって腫瘍増殖曲線をプロットした。
【０２０５】
抗腫瘍活性評価指数は、相対的腫瘍増殖率Ｔ／Ｃ（％）であった。：  ここで、Ｔは治療群のＲＴＶを表し；Ｃはネガティブコントロール群のＲＴＶを表す。有効性評価基準は、：  Ｔ／Ｃ％＞４０％は無効であり；Ｔ／Ｃ％≦４０％及びｐ＜０．０５は有効であった。
【０２０６】
実験結果を図６に示す。図６Ａの左パネルはヌードマウスの各グループに形成された腫瘍を示し；中央パネルはヌードマウスの各グループに形成された腫瘍のＲＴＶを示し；右パネルはヌードマウスの各グループに形成された腫瘍の重量を示す。図６Ａの結果は、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞を接種した後にヌードマウスにおいて腫瘍が生成されたことを示し；そして、ＹＸＹ１０１は良好な腫瘍抑制効果を有し；そして、ＹＸＹ１０１とＴＮＦαとの組み合わせはより強い腫瘍抑制効果を誘導する。
【０２０７】
図６Ｂは、各群のヌードマウスにおける腫瘍組織の免疫組織化学染色の結果を示す。図６Ｂの結果は、ＹＸＹ１０１が腫瘍組織においてカスパーゼ３切断を誘導し、且つ腫瘍細胞のアポトーシスを促進することができ；そしてＹＸＹ１０１及びＴＮＦαの組み合わせが腫瘍細胞のより強いアポトーシスを誘導しうることを示す。
【０２０８】
実施例６．乳がん腫瘍の増殖及び転移に対するＹＸＹ１０１の阻害
１）実験動物及び試薬
ＭＭＴＶ−ＰＹＶＴ乳がんトランスジェニックマウス、９週齢、メス、ＳＰＦ動物飼育場で哺育、飼料、飲料水、動物用ケージ、ごみは全てオートクレーブし、前記ごみは２日ごとに交換し、厳密な無菌操作が行われた。
【０２０９】
２）グループ分けと管理
乳がんの雌ＭＭＴＶ−ＰＹＶＴトランスジェニックマウスを、温度２３±１℃、湿度４０〜６０％、自然光、自由な飲料水、及び一般的な飼料への自由なアクセスの条件下で飼育した。胸部に腫瘍が増殖し始めた３６匹のマウスを選択肢、無作為に３つの群に分け、そして各群をコントロール群とＹＸＹ１０１処置群とに細分した。
【０２１０】
以下のように投与が行われた。
１１ｗｋ時点
コントロール群：  ９週齢のマウスに、飼料を与える前に、毎日午後７時に生理食塩水を与えた
ＹＸＹ１０１群：  ９週齢のマウスに、毎日午後７時に２ｍｇ／ｋｇの用量で一度に胃内投与した。
１３ｋ時点
コントロール群：  １１週齢のマウスに、飼料を与える前に、毎日午後７時に生理食塩水を与えた。
グループＹＸＹ１０１：  １１週齢のマウスに、毎日午後７時に、２ｍｇ／ｋｇの用量で一度に胃内投与した。
１７ｋ時点
コントロール群：  １５週齢のマウスに、飼料を与える前に、毎日午後７時に生理食塩水を与えた。
グループＹＸＹ１０１：  １５週齢のマウスに、毎日午後７時に、２ｍｇ／ｋｇの用量で一度に胃内投与した。
【０２１１】
上記の方法に従って２週間連続投与した後、各動物について眼球を採血し、血清炎症指数を決定するため、上澄み液を除去した；明確な境界、不均一な表面及び堅いきめを有する腫瘍組織を日常的に処置しそして免疫染色のために包埋した。
【０２１２】
実験結果を図７及び８に示す。図７Ａは、ＹＸＹ１０１の２ｍｇ／ｋｇの胃内投与後２週、１１週、１３週又は１７週におけるＭＭＴＶ−ＰＹＶＴマウスの全身状態を示す。図７Ａの結果は、ＹＸＹ１０１が乳がん腫瘍の進行を抑制することを示している。
【０２１３】
図７Ｂは、２週間のＹＸＹ１０１の２ｍｇ／ｋｇの胃内投与後、１１週、１３週又は１７週におけるＭＭＴＶ−ＰＹＶＴマウスの腫瘍組織のＨＥ染色及び免疫組織化学染色の結果を示す。図７Ｂの結果は、ＹＸＹ１０１が乳がん腫瘍の増殖を抑制し得ることを示す。
【０２１４】
図７Ｃは、２週間のＹＸＹ１０１の２ｍｇ／ｋｇの胃内投与後、１１週、１３週又は１７週におけるＭＭＴＶ−ＰＹＶＴマウスの肺組織の重量、形態、ＨＥ染色及び免疫組織化学的染色の分析結果を示す。図７Ｃの結果は、ＹＸＹ１０１が乳がんによって引き起こされる肺転移を抑制することができることを示している。
【０２１５】
図７Ａ〜７Ｃにおけるこれらの実験の結果は、ＹＸＹ１０１が乳がん腫瘍の増殖及び転移を阻害することができることを示している。
【０２１６】
図８Ａは、６０日以内の野生型ｍｍｔｖ−ＰｙＭＴマウス及びＮｕｒ７７ノックアウトｍｍｔｖ−ＰｙＭＴマウスの動物レベルでの生存曲線を示し、図８Ｄは、動物レベルでの検出されたｍｍｔｖ−ＰｙＭＴマウスの生存率に対するＹＸＹ１０１の効果を示す。結果は、Ｎｕｒ７７のノックアウト後のマウスの生存率が有意に改善されたことを示し、結果は、Ｎｕｒ７７が乳がんの発症と有意に関連していることを予測した。図８Ｂは、上記の２種のマウスの腫瘍組織重量の統計結果を示し、そして結果は、Ｎｕｒ７７をノックアウトした後に乳がん組織の重量が有意に減少されたことを示し、そして図８Ｃもこれらの腫瘍組織の外観及び形態の比較を示し、Ｎｕｒ７７ノックアウトマウスが、より小さくより滑らかな腫瘍組織を有したことを明確に示す。上記の結果は、Ｎｕｒ７７が乳がんの発症において決定的な役割を果たすことを示している。
【０２１７】
要約すると、ＳＰＲ技術を用いて、我々はＮｕｒ７７を標的とした薬物を創造的にスクリーニングした。それにより、Ｎｕｒ７７に特異的に結合する薬物分子であるＹＸＹ１０１を得た。それは顕著な、特にトリプルネガティブ乳がんに敏感である、抗腫瘍活性を示し、そしてこの乳がんに対する治療活性はＮｕｒ７７に依存していた。当該化合物は、トリプルネガティブ乳がんの治療に非常に有望な活性分子であった。当該スクリーニング方法は、Ｎｕｒ７７に特異的に結合する薬物分子を開発するための、及びトリプルネガティブ乳がんの標的治療のための有効な方法であった。
【０２１８】
実施例７．炎症はある程度まで腫瘍産生を誘導することができ、且つこのプロセスはＮｕｒ７７に関連する。
これまでの研究で、我々は、乳がん、特にトリプルネガティブ乳がんの発症は、炎症反応及びｍＴＯＲシグナル伝達経路の高活性化をも伴うことを見出した。慢性炎症も乳がん発症の重要な基礎であった。他の腫瘍に有効な多くの非ステロイド系抗炎症薬も乳がんの予防と治療に使用されていた。
【０２１９】
図９Ａ〜９Ｂは、免疫ブロッティングによってが検出された、飢餓条件下で１時間、３時間及び６時間、ＴＮＦαで処理したＭＢ−ＭＤＡ−２３１及びＳＫＢＲ３乳がん細胞のｐ−Ｐ７０Ｓ６Ｋレベルを示す。結果は、ｐ−Ｐ７０Ｓ６ＫがＴＮＦαの誘導下でアップレギュレートされたことを示し、これは時間依存的であった。結果は、ｍＴＯＲシグナル伝達経路が炎症性環境において活性化されたことを示し、それは腫瘍形成に密接に関連している可能性がある。図９Ｃは、免疫ブロッティングにより検出された、飢餓条件下で濃度勾配又は時間勾配においてＴＮＦαで処理した、野生型又はＮｕｒ７７ノックアウトＭＥＦ細胞におけるｐ−ｍＴＯＲ、ｐ−Ｐ７０Ｓ６Ｋ、及びｐ−Ｓ６のレベルを示す。結果は、ＴＮＦαによって引き起こされたｍＴＯＲシグナル伝達経路の活性化は、時間及び濃度によって調節され、そしてそのような活性化はＮｕｒ７７に依存することを示す。
【０２２０】
実施例６と実施例７との組み合わせにおいて、Ｎｕｒ７７は乳がんの発症に重要であるだけでなく、乳がんの治療のための標的としても使用することができる。従って、Ｎｕｒ７７は乳がんの発症を検出するための貴重な生化学的指標であり、乳がんの進行及び治療戦略の評価に使用することができる。
【０２２１】
実施例８  ＹＸＹ１０１は、ｍＴＯＲ活性を有意に阻害することができ、それによって腫瘍を阻害し、このプロセスはＮｕｒ７７に依存する。
このセクションでは、腫瘍の内部環境が実験的にシミュレートされた。すなわち、急性炎症を引き起こすサイトカインであるＴＮＦαを、腫瘍形成をシミュレートするのに使用した。この方法は腫瘍を抑制する薬物をスクリーニングするための実験的基礎を提供することができる。この方法により、トリプルネガティブ乳がんの治療を標的にするのに有効な薬物を見出すため、ｍＴＯＲシグナル伝達経路を阻害するＮｕｒ７７依存性化合物がスクリーニングされた。
【０２２２】
図１０Ａは、免疫ブロッティングにより検出された、飢餓条件下でのＴＮＦα（２０ｎｇ／ｍＬ）、ＹＸＹ１０１（１μＭ、２μＭ、４μＭ）により処理したＭＢ−ＭＤＡ−２３１乳がん細胞における、ｐ−ｍＴＯＲ、ｐ−Ｐ７０Ｓ６Ｋレベルの試験結果を示す。結果は、ＹＸＹ１０１がＴＮＦαによって活性化されたｐ−ｍＴＯＲ及びｐ−Ｐ７０Ｓ６Ｋを有意にダウンレギュレートできることを示し、これは、化合物の抗腫瘍メカニズムはｍＴＯＲ活性のその阻害によるものであることを示唆している。図１０Ｂは、免疫ブロッティングにより検出された、Ｆｌａｇエンプティプラスミド又はＦｌａｇ−Ｎｕｒ７７プラスミドでトランスフェクトされ、飢餓条件下で３時間、６時間、ＴＮＦα、ＹＸＹ１０１で処理した、ＭＢ−ＭＤＡ−２３１乳がん細胞における、ｐ−ｍＴＯＲ、ｐ−Ｐ７０Ｓ６Ｋ、Ｎｕｒ７７レベルの試験結果を示す。図１０Ｃは、免疫ブロッティングにより検出された、Ｎｕｒ７７遺伝子をサイレンシングするため処理され、次いで飢餓条件下でＴＮＦα、ＹＸＹ１０１で処理された、ＭＢ−ＭＤＡ−２３１細胞におけるｐ−Ｐ７０Ｓ６Ｋ及びＮｕｒ７７レベルの試験結果を示す。図１０Ｄは、免疫ブロッティングにより検出された、ＴＮＦα、ＹＸＹ１０１（０．５ｍＭの、１μＭ）で処理された野生型又はＮｕｒ７７ノックアウト型ＭＥＦ細胞におけるｐ−Ｓ６、ｐ−ｍＴＯＲ、及びｐ６２レベルの試験結果を示す。図１０Ｂ〜１０Ｄの結果から、Ｎｕｒ７７の過剰発現及びノックアウトの方法により、ｍＴＯＲ活性をダウンレギュレートするＹＸＹ１０１の活性がＮｕｒ７７に依存していることが確認されたことが示された。
【０２２３】
結論として、ｍＴＯＲシグナル伝達経路の阻害は抗がん剤のスクリーニングのための有効な指標として使用することができる。この方法により、Ｎｕｒ７７を介してｍＴＯＲシグナル伝達経路を阻害する強力な活性を有するスクリーニングされた化合物は、潜在的な抗がん活性を有する。
【０２２４】
実施例９．トリプルネガティブ乳がん細胞に対するＹＸＹ１０１誘導体のアポトーシスの誘導
異なる乳がん細胞（ＭＤＡ−ＭＢ−２３１及びＭＣＦ−７）を異なる濃度のＹＸＹ１０１誘導体ＸＳ０５０３（０．１６μＭ、０．３１μＭ、０．６２５μＭ、１．２５μＭ、２．５μＭ、５μＭ、１０．０μＭ）で２４時間処理し、そして乳がん細胞の増殖率を測定した。ＸＳ０５０３の濃度に対するがん細胞増殖率の曲線をプロットし、ＹＸＹ１０１のＩＣ５０が決定された。結果を図１１Ａに示す。
【０２２５】
図１１Ａは、ＸＳ０５０３濃度に対する異なる乳がん細胞（ＭＤＡ−ＭＢ−２３１及びＭＣＦ−７）の増殖比、並びにＸＳ０５０３のＩＣ５０値を示し、ここで、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１は赤の曲線で表され；ＭＣＦ−７、トリプルポジティブ乳がん細胞は、青い曲線で表される。結果は、トリプルネガティブ乳がん細胞の増殖に対するＸＳ０５０３の阻害能力が、トリプルポジティブ乳がん細胞に対するよりも有意に強いことが示された。ここで、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１の増殖を阻害するためのＩＣ５０は１．１９μＭであり、これは、ＭＣＦ−７についてのＩＣ５０（２．６５μＭ）よりも低かった。このことは、ＹＸＹ１０１がトリプルネガティブ乳がんの治療に特に有利に使用できることを示唆している。
【０２２６】
さらに、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１を異なるＹＸＹ１０１誘導体、ＸＳ００７７、ＸＳ０３３５、ＸＳ０４１９、ＸＳ０４７４、ＸＳ０４８８（０．１６μＭ、０．３１μＭ、０．６２５μＭ、１．２５μＭ、２．５μＭ、５μＭ、１０．０μＭ）で処理し、続いてＭＤＡ−ＭＢ−２３１増殖比を測定した。図１１Ｂにおける結果は、ＸＳ００７７、ＸＳ０３３５、ＸＳ０４１９、ＸＳ０４７４、及びＸＳ０４８８で処理したＭＤＡ−ＭＢ−２３１の増殖の阻害についてＩＣ５０が、それぞれ１．８４μＭ、１．８８μＭ、１．２７μＭ、２．９３μＭ、及び１．９０μＭであることを示した。
【０２２７】
図１１Ｃは、ＹＸＹ１０１誘導体、ＸＳ０２８４、ＸＳ０２８５、ＸＳ０３９４、ＸＳ０４１８、ＸＳ０４１９、ＸＳ０４７４、ＸＳ０４８６、ＸＳ０４６２、ＸＳ０４９１、ＸＳ０４９２、又はＸＳ０４８８で処理された、７つの乳がん細胞、ＢＴ４７４、ＺＲ−７５−１、ＢＴ５４９、ＨＣＣ１９３７、ＨＳ５７８Ｔ、ＭＣＦ−７、及びＴ４７Ｄ、の阻害率分析結果を示す。結果は、上記の誘導体が異なる乳がん細胞に対して一定の抑制効果を持つことを示した。ここで、ＸＳ０２８４、ＸＳ０２８５、ＸＳ０４１８、ＸＳ０４１９、ＸＳ０４６２及びＸＳ０４８８は、様々な乳がん細胞の増殖に対する抑制効果を有いていた。これらは、ＹＸＹ１０１のそれよりも近いか、あるいはさらに強かった。
【０２２８】
さらに、ＹＸＹ１０１（４μＭ）又は異なるＹＸＹ１０１誘導体（４μＭ）、ＸＳ０３９４、ＸＳ０３９５、ＸＳ０４１９、ＸＳ０４２０、ＸＳ０４２１、ＸＳ０２８４、ＸＳ０３３５、ＸＳ０４８８、ＸＳ０４９１、ＸＳ０４９２、ＸＳ０４１８、ＸＳ０５０２、ＸＳ０５０３、ＸＳ０５０４、ＸＳ０５０６、ＸＳ０５０７、ＸＳ０５０８、又はＸＳ００７７、及びＴＮＦα（２０ｎｇ／ｍＬ）を、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞を処理するのに使用した。前記細胞におけるＰＡＲＰを免疫ブロット分析に付した。図１２Ａにおける結果は、ＹＸＹ１０１と比較して、ＸＳ０４１８、ＸＳ０４１９、ＸＳ０４９２、ＸＳ０５０８及びＸＳ００７７を包含する、赤色フォントで標識された誘導体は、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞のトリプルネガティブ乳がんにおいて、より顕著にＰＡＲＰ切断を誘導することができることを示す。
【０２２９】
図１２Ｂは、無血清培地で１０時間、飢餓下処理した、ＹＸＹ１０１（２μＭ）及び異なるＹＸＹ１０１誘導体（２μＭ）、ＸＳ０２８４、ＸＳ０２８５、ＸＳ０３３５、ＸＳ０３９４、ＸＳ０４１８、ＸＳ０４１９、ＸＳ０４５４、ＸＳ０４５５、ＸＳ０４６２、ＸＳ０４７３、ＸＳ０４７４、ＸＳ０４８０、ＸＳ０４８６、ＸＳ０４８８、ＸＳ０４９１、又はＴＮＦ０４９２、及びＴＮＦα（２０ｎｇ／ｍＬ）で処理した、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞におけるＰ−ｍＴＯＲ、Ｐ−ｐ７０Ｓ６Ｋ、及びＰ−Ｓ６のイムノブロッティング分析の結果を示す。ＹＸＹ１０１と比較して、ＸＳ０３３５、ＸＳ０３９４、ＸＳ０４１８、ＸＳ０４１９、ＸＳ０４５５、ＸＳ０４７４、ＸＳ０４８６、ＸＳ０４９１、及びＸＳ０４９２を包含する、赤いフォントでラベルされた誘導体は、Ｐ−ｍＴＯＲ、Ｐ−ｐ７０Ｓ６Ｋ、及びＰ−Ｓ６をより有意に減少させた。
【０２３０】
図１２Ｃは、ＹＸＹ１０１（２μＭ）及びＹＸＹ１０１誘導体ＸＳ０４５５（１、２、４μＭ）並びにＴＮＦα（２０ｎｇ／ｍＬ）で処理したＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞におけるＰ−ｍＴＯＲ、Ｐ−ｐ７０Ｓ６Ｋ、Ｐ−Ｓ６及びＩκＢαのイムノブロット分析の結果を示す。結果は、ＸＳ０４５５が、ＰＡＲＰ切断及びＩκＢα分解の逆転を有意に引き起こすことなく、濃度依存的にＰ−ｍＴＯＲ、Ｐ−ｐ７０Ｓ６Ｋ、及びＰ−Ｓ６をダウンレギュレートすることができることを示した。これまでのデータと組み合わせると、Ｘ−Ｓ０４５５はＰ−ｍＴＯＲ、Ｐ−ｐ７０Ｓ６Ｋ、Ｐ−Ｓ６を選択的にダウンレギュレートすることができるが、ＰＡＲＰの切断及びＩκＢαの分解を有意に引き起こすことはなかった。この化合物は新しいタイプの特定の抗がん剤分子になると期待されている。
【０２３１】
実施例１０．表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）による他の化合物の特徴化
実施例１及び２に記載の方法に従って、様々なＹＸＹ１０１誘導体（ＸＳ０４１８、ＸＳ０４１９、ＸＳ０４７４、ＸＳ０３９４、ＸＳ０４９２、ＸＳ０４９１、ＸＳ０４８８）のＮｕｒ７７−ＬＢＤへの結合を、Ｂｉａｃｏｒｅ  Ｔ２００機器を用いてＳＰＲにより検出した。結果を図１３に示す。
【０２３２】
図１３は、Ｂｉａｃｏｒｅ  Ｔ２００装置を用いて、Ｎｕｒ７７−ＬＢＤへ種々の化合物（ＸＳ０４１８、ＸＳ０４１９、ＸＳ０４７４、ＸＳ０３９４、ＸＳ０４９２、ＸＳ０４９１、ＸＳ０４８８）の結合を検出するための実験の結果を示す。結果は、Ｎｕｒ７７−ＬＢＤに対する化合物ＸＳ０４１８の解離定数（Ｋｄ）は３．６７μＭであること、Ｎｕｒ７７−ＬＢＤに対する化合物ＸＳ０４１９の解離定数（Ｋｄ）は４０４ｎＭであること、Ｎｕｒ７７−ＬＢＤに対する化合物ＸＳ０４７４の解離定数（Ｋｄ）は２．６０μＭであること、Ｎｕｒ７７−ＬＢＤに対する化合物ＸＳ０３９４の解離定数（Ｋｄ）は１．２６μＭであること、Ｎｕｒ７７−ＬＢＤに対する化合物ＸＳ０４９２の解離定数（Ｋｄ）は１．３０μＭであること、Ｎｕｒ７７−ＬＢＤに対する化合物ＸＳ０４９１の解離定数（Ｋｄ）は０．３３６μＭであること、Ｎｕｒ７７−ＬＢＤに対する化合物ＸＳ０４４８の解離定数（Ｋｄ）は１．２８μＭであること、を示す。
【０２３３】
実施例１１．ＸＳ０２８４は、ＹＸＹ１０１よりも高脂肪誘発性乳がんの治療においてより効果的である。
ＹＸＹ１０１誘導体が乳がんも抑制し得ることを証明するために、我々は、検証のために、Ｐ−ｍＴＯＲ、Ｐ−ｐ７０Ｓ６Ｋ及びＰ−Ｓ６に対して強い抑制効果を示すＸＳ０２８４を選択した。図１４Ａ〜１４Ｄの結果は、ＹＸＹ１０１とＸＳ０２８４の両方が、低脂肪条件下でも高脂肪条件下でも、乳がんの発症を有意に抑制することができることを示す。低脂肪食条件下では、ＸＳ０２８４の乳がんに対する抑制効果がＹＸＹ１０１のそれに近かったのに対して、高脂肪食条件下では、ＸＳ０２８４の抑制効果は、ＹＸＹ１０１のそれよりも強かった。腫瘍組織の大きさやマウスの体重の変化に反映される可能性があります。上記の結論は、腫瘍組織の大きさ及びマウスの体重の変化に反映され得る。
【０２３４】
これらの結果は、一連のＹＸＹ１０１誘導体（例えばＸＳ０２８４）も腫瘍発生を抑制することができ、そしてそれらは腫瘍抑制に関してＹＸＹ１０１よりも優れていることを示している。
【０２３５】
実施例１２．ＹＸＹ１０１及びその誘導体の腫瘍抑制効果はＮｕｒ７７に依存する。
ＹＸＹ１０１及びその誘導体の腫瘍抑制効果はＮｕｒ７７に依存することを検証するために、我々は、検証のため、Ｐ−ｍＴＯＲ、Ｐ−ｐ７０Ｓ６Ｋ及びＰ−Ｓ６に対して有意な抑制効果を示すＹＸＹ１０１及びその誘導体ＸＳ０２８４を選択した。図１５Ａ〜図１５Ｂは、それぞれ２週間にわたってＹＸＹ１０１（５ｍｇ／ｋｇ）及びＸＳ０２８４（１０ｍｇ／ｋｇ）を以内投与された、２つのタイプの野生型及びＮｕｒ７７ノックアウト型のＰＹＶＴマウスの結果を示す。各実験群の腫瘍組織サイズを比較することによって、結果は、ＹＸＹ１０１及びＸＳ０２８４が野生型マウスにおいて腫瘍を阻害するのに有効であったが、２つの化合物のいずれもＮｕｒ７７欠損マウスにおいて阻害効果を発揮できないことを示した。
【０２３６】
以上の結果から、腫瘍抑制効果を発揮するために、ＹＸＹ１０１及びその誘導体はＮｕｒ７７に依存することが示唆された。
【０２３７】
実施例１３．ＸＳ０２８４の急性毒性副作用はＹＸＹ１０１より低い
この実施例では、２００ｍｇ／ｋｇのＹＸＹ１０１もしくはその誘導体ＸＳ０２８４の単一胃内注射により、又は２０ｍｇ／ｋｇのＹＸＹ１０１もしくはその誘導体ＸＳ０２８４の探知腹腔内注射により、急性毒性モデルマウスを確立した。この例では、ＹＸＹ１０１もしくはＸＳ０２８４の胃内投与もしくは腹腔内注射後、マウスは、食物摂取量、飲料水、自発的活動、精神状態、四肢活動、腸の質、毛のつやなどについて観察した。可能性のある毒性反応及び一組の時点並びにそれらの相殺を詳細に記録した。組織病理学的方法により心臓、肝臓、小腸、白脂肪及び腎臓の組織形態を観察した。
【０２３８】
実験結果を図１６に示す。図１６Ａは胃内注射群を示した：
１）コントロール群からのマウスの心筋細胞は、明確な境界を有した。十分かつ明白な核によって、心筋線維はきれいにそして明確に配置されていた。；肝組織では、洞性洞は十分且つ明瞭であり、肝小葉は明確な境界を有していた。；腸の組織は明確な境界を持ち、細胞はふくよかで、明らかな境界を持つ腸の絨毛はきれいに配置されていた。；脂肪組織細胞は明確な境界を有し、きれいに配置されていた。
２）コントロール群と比較して、ＹＸＹ１０１群からのマウスの心筋細胞及び心筋線維は無秩序に配置された。；肝小葉境界がぼやけ、細胞質が減少し、ほとんどの肝細胞が死んだ。；腸組織が明らかに腫れ、細胞死が増加し、炎症反応が明らかになり、腸絨毛が無秩序に配置された。；脂肪組織細胞は無秩序に配置され、そして繊維のいくつかは破壊された。
３）ブランク群と比較して、ＸＳ０２８４群からのマウスの心筋細胞は比較的明確な境界を有し、心筋線維は比較的きれいに配置され、そして明らかな境界を有した。；肝組織における肝細胞は明らかな境界と明確な構造を持っていた。；腸の組織は明確な境界を持ち、細胞はふっくらし、腸の絨毛はきちんと配置され、明らかな境界を持っていた。；脂肪組織細胞は明確な境界を有し、きちんと配置されており、そして繊維の破損は減少した。ＸＳ０２８４グループは、ＹＸＹ１０１よりも肝臓及び小腸に対して弱い毒性効果を示したと結論付けることができる。
【０２３９】
図１６Ｂは腹腔内注射群を示す。
１）コントロール群からのマウスの心筋細胞は明確な境界を持っていた、十分で明白な核で、心筋線維はきちんと配置されて明確な境界を持っていた。；肝組織では、洞性副鼻腔は十分で明瞭であり、肝小葉は明確な境界を有していた。；脂肪組織細胞は明確な境界を有し、きれいに配置されていた。；腎臓組織の糸球体は明確な境界を持っていた、細胞はふくよかで、きちんと配置されて、明白な境界を持っていた。
２）コントロール群と比較して、ＹＸＹ１０１群からのマウスの心筋細胞と心筋線維は無秩序に配置された。；肝小葉は実質的に明白な境界を有し、肝細胞はふくよかでありそして正常な形態を有した。；しかし、脂肪組織細胞は無秩序に配置されており、多くの炎症性細胞浸潤を示した。；腎臓組織は、糸球体の境界がぼやけており、多くの炎症細胞浸潤を有した。
３）コントロール群と比較して、ＸＳ０２８４群からのマウスの心筋細胞は比較的明確な境界を有し、心筋線維は比較的きれいに配置され、そして明らかな境界を有した。；肝組織の肝細胞は明らかな境界と明確な構造を持っていた。；脂肪組織細胞は明確な境界を有し、きれいに配置され、繊維の破断は減少した。；腎臓組織は明確な糸球体境界を有し、細胞は一杯であり、そして少量の炎症性細胞浸潤があった。；腹腔内注射群のＸＳ０２８４群は、ＹＸＹ１０１よりも腎臓及び脂肪に対する毒性が低いと結論付けることができる。
【０２４０】
これらの結果は、ＸＳ０２８４のような一連のＹＸＹ１０１の誘導体は、ＹＸＹ１０１よりも、動物に対する急性毒性が少ないことを示した。さらに、この一連の化合物は、ＹＸＹ１０１よりも強い標的化及び特異性を有し、そしてこの一連のＹＸＹ１０１誘導体はおそらくより安全な抗癌剤として開発されるべきであることを示唆した。
【０２４１】
実施例１４
コンピュータ支援分子ドッキング技術を使用して、海洋天然物は仮想スクリーニングに付された。Ｎｕｒ７７がターゲットであった。良好な結合活性を有する化合物が得られ、以下に示した。
【化５２】
2019523245.tif 000054
【０２４２】
この例におけるコンピュータ支援仮想スクリーニングのステップは以下の通りである。：
タンパク共晶構造ＰＤＢ  ＩＤ：３Ｖ３Ｑがダウンロードされ、タンパク質が前処理に付され、水素化、結晶質の水及び結晶構造中のグリセロールの小分子は除去された。；リガンドが選択され、前記リガンドを中心として１２オングストロームのサイズを使用するドッキンググリッドファイルが構築された。；Ｇｌｉｄｅドッキングを実行し、構築済みのグリッドファイルと処理済みの海藻代謝データベースをドッキング用に選択する。；ドッキングスコア及び化合物とタンパク質受容体との間の相互作用に従ってドッキング結果の包括的な評価を行う。シミュレートした組み合わせについての動作モードの例を図１７に示す。
【０２４３】
化合物ＸＳ００７７の調製
【化５３】
2019523245.tif 000055
【０２４４】
化合物ＹＸＹ１０１（５０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を２ｍＬのＤＭＦに撹拌溶解した後、炭酸水素ナトリウム（５６ｍｇ、０．６６ｍｍｏｌ）及び塩化メチレン（４２μＬ、０．６６ｍｍｏｌ）を添加し、室温で１２時間撹拌しながら反応に付した。１ｍｏｌ／Ｌ  ＨＣｌ（１ｍＬ）で反応を停止し、９ｍＬの純水を加え、酢酸エチルで３回（各５ｍＬ）抽出した。有機層を集め、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、有機溶媒酢酸エチルを除去するため、得られた混合物を真空蒸発に付し、それにより混合粗生成物の橙赤色固体を得た。前記橙赤色固体生成物はカラムクロマトグラフィーにより得られた。ここで、溶離液としてｎ−ヘキサン及び酢酸エチル（ヘキサン／酢酸エチル＝１０：１）が使用され、前記カラムは、３００〜４００メッシュのシリカゲルが充填された。
【０２４５】
１Ｈ  ＮＭＲ  （６００ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  ０．４４  （ｓ，  ３Ｈ），  ０．９１  （ｄ，  Ｊ  ＝  １４．３１  Ｈｚ，  １Ｈ），  １．０７  （ｓ，  ３Ｈ），  １．１２  （ｓ，  ３Ｈ），  １．２１  （ｓ，  ３Ｈ），  １．３０−１．３５  （ｍ，  １Ｈ），  １．３８  （ｓ，  ３Ｈ），  １．４１−１．４６  （ｍ，  １Ｈ），  １．５０−１．５９  （ｍ，  ３Ｈ），  １．６１−１．７２  （ｍ，  ４Ｈ），  １．７８−１．８６  （  ｍ，１Ｈ），  １．９５  （ｔｄ，  Ｊ＝１３．９８，  ３．７６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ２．０６  （ｄ，  Ｊ  ＝  １４．１２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ２．０９  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．１７−２．２２  （ｍ，  １Ｈ），  ２．３１  （ｄ），  Ｊ＝１５．７７Ｈｚ，１Ｈ），  ３．４８（ｓ，３Ｈ），  ６．３５（ｄ，Ｊ＝７．１５Ｈｚ，１Ｈ），  ６．３９（ｄ，Ｊ＝１．２８Ｈｚ，１Ｈ），  ７．０７（ｄｄ，Ｊ＝７．１５，１．１０Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．７２  （ｓ，  １Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１５１  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  １０．１０，  １７．９６，  ２１．４１，  ２８．０８，  ２９．１９，  ２９．４２，  ３０．１２，  ３０．３４，  ３１．３４，  ３２．２３，  ３２．９１，  ３４．３９，  ３６．０２，  ３７．８３，  ３８．８，  ３９．８３，  ４１．９９，  ４３．６４，  ４４．４８，  ５１．４４，  １１７．２６，  １１８．０５，  １２０．１８，  １２６．８９，  １３３．１３，  １４６．４２，  １６２．９４，  １６７．８０，  １７７．９３，  １７７．９６．
【０２４６】
実施例１５．化合物ＸＳ０２８４の調製
【化５４】
2019523245.tif 000056
【０２４７】
化合物ＹＸＹ１０１（５０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）をメタノール（２．５ｍＬ）に窒素雰囲気下、撹拌しながら溶解した。次いで亜硫酸水素ナトリウム水溶液（１４ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ、１ｍＬの水に溶解）を加え、室温で３時間反応させた。反応終了後、反応系をロータリーエバポレーターで濃縮して無色結晶を得た。前記無色結晶をメタノール／水から再結晶し、得られた生成物を真空乾燥して、化合物ＸＳ０２８４（５６．６ｍｇ）を白色固体として得た。
【０２４８】
１Ｈ  ＮＭＲ  （６００ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  ０．５９  （ｓ，  ３Ｈ）  ０．８６  （ｄ，  Ｊ  ＝  １２．１０  Ｈｚ，  １Ｈ）  １．０５  （ｓ，  ３Ｈ）  １．０９  （ｓ，  ３Ｈ）  １．１８  （ｓ，  ３Ｈ）  １．４３−  １．６０（ｍ，６Ｈ）  １．６２（ｓ，３Ｈ）  １．７８−１．８５（ｍ，１Ｈ）  １．９３−２．０４（ｍ，３Ｈ）  ２．２１（ｓ，３Ｈ）  ２．３２（ｄ，Ｊ＝１５．２２Ｈｚ，１Ｈ）  ４．４８（ｄ，Ｊ  ＝６．２４  Ｈｚ，  １Ｈ）  ５．８１  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．６０  Ｈｚ，  １Ｈ）  ６．５８  （ｓ，  １Ｈ）  ７．６１  （ｂｒ．ｓ．，  １Ｈ）  ８．８１  （ｂｒ．ｓ．，  １Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１５１  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  １３．５７，  １８．４６，  ２１．６４，  ２９．０４，  ２９．９８，  ３０．４７，  ３０．６０，  ３０．６４，  ３１．９４，  ３２．９２，  ３４．８０，  ３５．１１，  ３６．９０，  ３６．９６，  ３７．９０，  ３８．０７，  ４３．９５，  ４４．３９，  ６０．１９，  １０８．９６，  １１８．８７，  １２３．２６，  １２４．３９，  １４０．８９，  １４１．９３，  １４４．０２，  １５０．０７，  １８０．００．
【０２４９】
実施例１６．化合物ＸＳ０２８５の調製
【化５５】
2019523245.tif 000057
【０２５０】
化合物ＹＸＹ１０１（５０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）をＮ、Ｎ−ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）に撹拌しながら溶解した。炭酸水素ナトリウム（５０．４ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）を加えた後、臭化ベンジル（０．１７ｍｇ、２０μＬ）を加え、撹拌下、室温度２４時間反応を行った。反応を停止し、脱イオン水（１５ｍＬ）を反応混合物に加え、そして酢酸エチルで３回抽出した。合わせた酢酸エチル層をＮａＣｌの飽和水溶液で３回洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、粗生成物（暗赤色−褐色油状物）を得るため、ロータリーエバポレーターで濃縮した。高速カラムクロマトグラフィ（酢酸エチル：ｎ−ヘキサン）により前記粗生成物を分離及び精製し、赤色固体として化合物ＸＳ０２８５（４４ｍｇ）を得るため、真空乾燥した。
【０２５１】
１Ｈ  ＮＭＲ  （６００  ＭＨｚ，  ＣＨＬＯＲＯＦＯＲＭ−ｄ）  δ  ｐｐｍ  ０．５０  （ｓ，  ３  Ｈ）  ０．９７  （ｄ，  Ｊ＝１３．７５  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．０９  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２１  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２２  −  １．２５  （ｍ，  ３  Ｈ）  １．２５  −  １．２８  （ｍ，  １  Ｈ）  １．４１  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．４７  −  １．５８  （ｍ，  ３  Ｈ）  １．５８  −  １．７２  （ｍ，  ５  Ｈ）  １．８７  （ｄ，  Ｊ＝６．０５  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．９９  −  ２．１１  （ｍ，  ３  Ｈ）  ２．２１  （ｄ，  Ｊ＝１．６５  Ｈｚ，  ３  Ｈ）  ２．２４  （ｄ，  Ｊ＝１４．１２  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ２．４４  （ｄ，  Ｊ＝１５．７７  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ４．９３  （ｄ，  Ｊ＝１２．２９  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ５．０２  （ｄ，  Ｊ＝１２．４７  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ６．３２  （ｄ，  Ｊ＝７．１５  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ６．４９  （ｓ，  １  Ｈ）  ７．０１  （ｄ，  Ｊ＝６．９７  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ７．２７  −  ７．３０  （ｍ，  ２  Ｈ）  ７．３０  −  ７．３６  （ｍ，  ３  Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１５１  ＭＨｚ，  ＣＨＬＯＲＯＦＯＲＭ−ｄ）  δ  ｐｐｍ  １０．２９，  １８．５３，  ２１．５８，  ２８．６１，  ２９．５３，  ２９．９０，  ３０．５５，  ３０．７６，  ３１．５７，  ３２．７６，  ３３．２７，  ３４．６９，  ３６．３５，  ３８．２５，  ３９．４３，  ４０．４４，  ４２．９３，  ４４．２５，  ４５．０３，  ６６．３２，  １１７．３６，  １１８．１２，  １１９．６２，  １２７．３８，  １２８．２４，  １２８．３２，  １２８．６４，  １３４．２４，  １３５．６８，  １４６．０６，  １６４．７９，  １７０．２７，  １７７．９５，  １７８．３６．
【０２５２】
実施例１７．化合物ＸＳ０３３５の調製
【化５６】
2019523245.tif 000058
【０２５３】
化合物ＹＸＹ１０１（５０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１ｍＬ）に撹拌しながら溶解した。パラジウム炭素（５ｍｇ）を加え、これにジクロロメタン（１ｍＬ）を加え、水素ガスを連続的に導入し、室温で２４時間反応した。反応を停止し、脱イオン水（１５ｍＬ）を反応混合物に加え、そして酢酸エチルで３回抽出した。酢酸エチル層を合わせ、次いで、飽和ＮａＣｌで３回洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、粗生成物（無色油状物）を得るため、ロータリーエバポレーターで濃縮した。高速カラムクロマトグラフィ（酢酸エチル：ｎ−ヘキサン）により前記粗生成物を分離及び精製し、白色固体として化合物ＸＳ０３３５（４４ｍｇ）を得るため、真空乾燥した。
【０２５４】
１Ｈ  ＮＭＲ  （６００  ＭＨｚ，  ＭＥＴＨＡＮＯＬ−ｄ４）  δ  ｐｐｍ  ０．９３  −  １．００  （ｍ，  ２  Ｈ）  １．０３  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．１１  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．１９  （ｔ，  Ｊ＝３．４８  Ｈｚ，  ４  Ｈ）  １．２６  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．４１  −  １．４５  （ｍ，  ６  Ｈ）  １．４７  −  １．５５  （ｍ，  ２  Ｈ）  １．５７  （ｄ，  Ｊ＝８．２５  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．５９  −  １．６８  （ｍ，  ２  Ｈ）  １．８３  −  １．９８  （ｍ，  ３  Ｈ）  ２．０６  −  ２．１１  （ｍ，  ４  Ｈ）  ２．１１  −  ２．２０  （ｍ，  ４  Ｈ）  ２．４３  （ｄ，  Ｊ＝１５．７７  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ２．６８  （ｄ，  Ｊ＝１４．６７  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ６．６７  （ｓ，  １  Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１５１  ＭＨｚ，  ＭＥＴＨＡＮＯＬ−ｄ４）  δ  ｐｐｍ  １１．９４，  １８．５１，  ２０．５４，  ２６．８２，  ２８．６６，  ３０．７４，  ３１．１５，  ３１．５７，  ３１．６１，  ３２．０２，  ３２．０９，  ３２．３２，  ３３．６３，  ３４．６５，  ３７．０９，  ３７．５６，  ３８．５３，  ３９．４５，  ３９．８５，  ４１．６９，  ５８．１２，  ５８．４８，  １１２．２４，  １２１．７４，  １２９．３６，  １４１．４７，  １４２．３９，  １４４．１９，  １８２．９５．
【０２５５】
実施例１８．化合物ＸＳ０３６６、ＸＳ０４３４〜ＸＳ０４３８、ＸＳ０４４０、ＸＳ０４４１、ＸＳ０４４３、ＸＳ０４６３及びＸＳ０４６４の調製
【化５７】
2019523245.tif 000059
【０２５６】
例えばＸＳ０３６６の調製の場合、化合物ＹＸＹ１０１（１００ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（４ｍＬ）に撹拌しながら溶解した。インドール（５２ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）を添加した後、三塩化アルミニウム六水和物（５．３ｍｇ、０．０２２ｍｍｏｌ）を添加し、室温で５時間撹拌しながら反応を行った。反応を停止し、脱イオン水（１５ｍＬ）を反応系に加え、次いで酢酸エチルで３回抽出した。合わせた酢酸エチル層を飽和ＮａＣｌで３回洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、粗生成物（褐色油状物）を得るため、ロータリーエバポレーターで濃縮した。高速カラムクロマトグラフィ（酢酸エチル：ｎ−ヘキサン）により前記粗生成物を分離及び精製し、紫がかった赤色固体として化合物ＸＳ０３３６（１２２．２ｍｇ）を得るため、真空乾燥した。
【０２５７】
１Ｈ  ＮＭＲ  （６００  ＭＨｚ，  ＣＨＬＯＲＯＦＯＲＭ−ｄ）  δ  ｐｐｍ  ０．７３  （ｂｒ．  ｓ．，  ３  Ｈ）  ０．８７  −  ０．９０  （ｍ，  １  Ｈ）  ０．９５  −  １．００  （ｍ，  ３  Ｈ）  １．０１  （ｂｒ．  ｓ．，  ３  Ｈ）  １．１４  （ｂｒ．  ｓ．，  ３  Ｈ）  １．１９  （ｔ，  Ｊ＝７．０６  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．２５  −  １．２７  （ｍ，  １  Ｈ）  １．３４  （ｂｒ．  ｓ．，  ３  Ｈ）  １．４２  −  １．５７  （ｍ，  ４  Ｈ）  １．５７  −  １．７６  （ｍ，  ４  Ｈ）  １．９０  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．９９  −  ２．０７  （ｍ，  ２  Ｈ）  ２．１０  −  ２．１７  （ｍ，  １  Ｈ）  ２．４０  （ｄ，  Ｊ＝１５．０４  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ４．９０  （ｄ，  Ｊ＝５．６９  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ６．２１  （ｄ，  Ｊ＝６．２４  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ６．２３  （ｂｒ．  ｓ．，  １  Ｈ）  ６．７９  （ｂｒ．  ｓ．，  １  Ｈ）  ７．１１  （ｔ，  Ｊ＝７．４３  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ７．１６  （ｔ，  Ｊ＝７．４３  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ７．２８  （ｄ，  Ｊ＝７．８９  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ７．７５  （ｄ，  Ｊ＝７．７０  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ７．８８  （ｂｒ．  ｓ．，  １  Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１５１  ＭＨｚ，  ＣＨＬＯＲＯＦＯＲＭ−ｄ）  δ  ｐｐｍ  １１．５３，  １８．８４，  ２１．９３，  ２８．８９，  ２９．６３，  ２９．７５，  ３０．４０，  ３０．５４，  ３０．７２，  ３１．５５，  ３２．８４，  ３４．６２，  ３５．５０，  ３６．７４，  ３６．９４，  ３７．７６，  ４０．３５，  ４３．６２，  ４４．２８，  １０８．９３，  １１１．３０，  １１９．０９，  １１９．２８，  １２０．２３，  １２１．５５，  １２１．５８，  １２１．６７，  １２７．１０，  １２７．８４，  １３６．４９，  １３９．９２，  １４２．１７，  １４２．８３，  １４７．４８，  １８４．３０．
【０２５８】
上記の方法に従って、本発明において、以下の化合物もまた合成される。
【化５８】
2019523245.tif 000060
【０２５９】
実施例１９．化合物ＸＳ０３９５の調製
【化５９】
2019523245.tif 000061
【０２６０】
化合物ＹＸＹ１０１（５０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を２５ｍＬの反応フラスコに秤量し、４ｍＬのアセトンをそれに加えて攪拌溶解した後、触媒として濃塩酸を１滴加えて、室温で１２時間反応を行った。反応を止め、溶媒を除去するため、反応混合物を直接濃縮した。残留物を酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝４：１を用いるシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して、５１％の収率で白色固体を与えた。
【０２６１】
１Ｈ  ＮＭＲ  （６００ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  ０．６２  （ｓ，  ３Ｈ），  ０．８２−１．８６  （ｍ，  １Ｈ），  １．０４  （ｓ，  ３Ｈ），  １．０９  （ｓ，  ３Ｈ），  １．１５  （ｓ，  ３Ｈ），  １．２５−１．３８  （ｍ，  ４Ｈ），  １．３９  （ｓ，  ３Ｈ），  １．４２−１．５０  （ｍ，  ２Ｈ），  １．５５−１．７１  （ｍ，  ４Ｈ），  １．７７  （ｔｄ，  Ｊ  ＝  １３．９，  ６．１  Ｈｚ，  １Ｈ），  １．９３  ２．０２  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．０３  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．０９  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．２７−２．３６  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．６７  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １６．２，  ２．７  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．７１−３．７８  （ｍ，  １Ｈ），  ５．７２  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．６３  （ｓ，  １Ｈ），  ７．９１  （ｓ，  １Ｈ），  ８．９４  （ｓ，  １Ｈ），  １２．０６  （ｂｒ．ｓ．，  １Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１５１  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  １１．６４，  １８．４３，  ２２．６３，  ２９．０１，  ２９．９０，  ３０．３６，  ３０．４７，  ３０．６２，  ３０．７７，  ３１．４４，  ３１．８７，  ３２．８８，  ３２．９２，  ３４．９４，  ３５．６０，  ３６．７９，  ３６．８５，  ３６．９８，  ３７．７４，  ３９．８７，  ４３．７４，  ４４．３６，  ５１．７２，  １０９．０６，  １２０．００，  １２２．０４，  １２６．５３，  １４０．４６，  １４１．６２，  １４３．８５，  １４９．９１，  １７９．９６．２０８．０１．
【０２６２】
実施例２０．化合物ＸＳ０４１９の調製
【化６０】
2019523245.tif 000062
【０２６３】
化合物ＹＸＹ１０１（５０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を撹拌しながら、２ｍＬの重水素化メタノールに溶解し、次いで水素化ホウ素ナトリウム（４４ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）を加え、反応を室温で３０分間行った。１ｍｏｌ／Ｌ  ＨＣｌ（１ｍＬ）で反応を停止した後、純水９ｍＬを加え、ジクロロメタン（各回５ｍＬ）で３回抽出した。有機層を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、有機溶媒のジクロロメタンを真空蒸留により迅速に除去し、化合物ＸＳ０４１９（５０．１ｍｇ）を白色の固体として得た。
【０２６４】
１Ｈ  ＮＭＲ  （６００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  ｐｐｍ  ０．６６  （ｓ，  ３  Ｈ）  ０．８５  （ｄ，  Ｊ＝１３．９  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．０５  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．１１  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．１７  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２２  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２９  （ｄｄｄ，  Ｊ＝１３．７，  ４．４  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．３６  −  １．４１  （ｍ，  １  Ｈ）  １．４３  −  １．５１  （ｍ，  ３  Ｈ）  １．５３  −  １．５９  （ｍ，  １  Ｈ）  １．５９  −  １．６３  （ｍ，  １  Ｈ）  １．６３  −  １．６９  （ｍ，  １  Ｈ）  １．７９  （ｄｄｄ，  Ｊ＝１３．８，  ６．５  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．８６  （ｄｄｄ，  Ｊ＝１３．８，  ５．０  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．９４  −  ２．００  （ｍ，  ２  Ｈ）  ２．０１  （ｓ，  ３  Ｈ）  ２．０４  （ｄ，  Ｊ＝１３．６  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ２．３４  （ｄ，  Ｊ＝１５．６  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ２．９１  （ｄｄ，  Ｊ＝２０．０，  １．５  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ３．１８  （ｄｄ，  Ｊ＝２０．５，  ６．２  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ５．７２  （ｄｄ，  Ｊ＝６．１，  １．８  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ６．６１  （ｓ，  １  Ｈ）  ７．８２  （ｓ，  １  Ｈ）  ８．８０  （ｓ，  １  Ｈ）  １２．０５  （ｂｒ．  ｓ．，  １  Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１５１  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  ｐｐｍ  １１．５３，  １８．１０，  ２２．７０，  ２７．３０，  ２８．４５，  ２９．４６，  ２９．７７，  ３０．０８，  ３０．１９，  ３１．３９，  ３２．４４，  ３４．０６，  ３４．０９，  ３４．４０，  ３６．０７，  ３６．５６，  ３７．１４，  ３９．４４，  ４３．２５，  ４３．８３，  １０８．１７，  １１７．６７，  １２０．１０，  １２３．１０，  １３９．３５，  １４０．５６，  １４３．１１，  １４９．２２，  １７９．５１．
【０２６５】
実施例２１．化合物ＸＳ０４６２の調製
【化６１】
2019523245.tif 000063
【０２６６】
最初に、セラストロール（１３５．２ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）を２ｍＬのＤＭＦに攪拌しながら溶解し、続いて炭酸水素ナトリウム（１３８．６ｍｇ、１．６５ｍｍｏｌ）及び臭化エチル（２３４μＬ、０．１５ｍｍｏｌ）を添加し、室温で１２時間、攪拌しながら反応を行った。反応を１ｍｏｌ／Ｌ  ＨＣｌ（１ｍＬ）で停止し、９ｍＬの純水を加えた。得られた混合物を、酢酸エチルで３回（各回１５ｍＬ）抽出した。有機層を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、次いで有機溶媒である酢酸エチルを真空蒸発により除去して、粗生成物を橙赤色の混合固体として得た。粗生成物を、３００〜４００メッシュのシリカゲル充填カラムを用いて、溶離剤としてｎ−ヘキサン及び酢酸エチル（ヘキサン／酢酸エチル＝１０：１）を用いるカラムクロマトグラフィーによって分離して、橙赤色固体生成物を得た。
【０２６７】
１Ｈ  ＮＭＲ  （６００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  ０．４７  （ｓ，  ３  Ｈ），  ０．９１  （ｄ，  Ｊ  ＝  １４．１  Ｈｚ，  １  Ｈ），  １．０７  （ｓ，  ３  Ｈ），  １．１１  （ｓ，  ３  Ｈ），  １．１２  −  １．１５  （ｍ，  ３  Ｈ），  １．２１  （ｓ，  ３  Ｈ），  １．３１  −  １．３６  （ｍ，  １  Ｈ），  １．３８  （ｓ，  ３  Ｈ），  １．４１  −  １．４６  （ｍ，  １  Ｈ），  １．５２  −  １．５８  （ｍ，  ３  Ｈ），  １．６１  −  １．７１  （ｍ，  ４  Ｈ），  １．７８  −  １．８７  （ｍ，  １  Ｈ），  １．９０  −  １．９９  （ｍ，  １  Ｈ），  ２．０３  −  ２．０８  （ｍ，  １  Ｈ），  ２．０９  （ｓ，  ３  Ｈ），  ２．２１  （ｄ，  Ｊ  ＝  １１．２  Ｈｚ，  １  Ｈ），  ２．３４  （ｄ，  Ｊ  ＝  １５．６  Ｈｚ，  １  Ｈ），  ３．９１  （ｍ，  ２  Ｈ），  ６．３５  （ｄ，  Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  １  Ｈ），  ６．３９  （ｓ，  １  Ｈ），  ７．０５  −  ７．１０  （ｍ，  １  Ｈ），  ８．７３  （ｓ，  １  Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１５１  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  １０．５３，  １４．２８，  １８．５０，  ２１．８４，  ２８．５５，  ２９．５７，  ２９．７５，  ３０．５８，  ３１．７６，  ３２．７６，  ３３．３２，  ３４．７８，  ３６．４３，  ３８．２０，  ３９．２７，  ４０．１３，  ４０．４４，  ４２．４３，  ４４．０４，  ４４．９３，  ６０．３３，  １１７．７４，  １１８．５１，  １２０．５６，  １２７．２９，  １３３．６７，  １４６．８６，  １６３．４０，  １６８．３１，  １７７．８３，  １７８．４１．
【０２６８】
実施例２２．化合物ＸＳ０４７４の調製
【化６２】
2019523245.tif 000064
【０２６９】
化合物ＹＸＹ１０１（５０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を２ｍＬの重水素化メタノールに撹拌しながら溶解させ、次いでホウ化水素化ナトリウム（４８．４ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）を加え、反応を室温で３０分間行った。反応を１ｍｏｌ／Ｌ  ＨＣｌ（１ｍＬ）で停止した後、９ｍＬの純水を加えた。得られた混合物をジクロロメタン（各回５ｍＬ）で３回抽出した。有機層を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、次いで有機溶媒ジクロロメタンを真空蒸留により迅速に除去して、白色固体として化合物ＸＳ０４７４（５０．２ｍｇ）を得た。
【０２７０】
１Ｈ  ＮＭＲ  （６００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  ｐｐｍ  ０．６６  （ｓ，  ３  Ｈ）  ０．８５  （ｄ，  Ｊ＝１２．８４  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．０４  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．１０  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．１７  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２２  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２９  （ｔｄ，  Ｊ＝１３．６６，  ４．４０  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．３５  −  １．４１  （ｍ，  １  Ｈ）  １．４３  −  １．５２  （ｍ，  ３  Ｈ）  １．５３  −  １．５８  （ｍ，  １  Ｈ）  １．５８  −  １．６３  （ｍ，  １  Ｈ）  １．６３  −  １．６９  （ｍ，  １  Ｈ）  １．７９  （ｔｄ，  Ｊ＝１３．６６，  ６．６０  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．８６  （ｔｄ，  Ｊ＝１３．７１，  ５．０４  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．９４  −  １．９９  （ｍ，  ２  Ｈ）  ２．０１  （ｓ，  ３  Ｈ）  ２．０４  （ｄ，  Ｊ＝１２．１０  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ２．３４  （ｄ，  Ｊ＝１５．５９  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ３．１６  （ｄ，  Ｊ＝６．０５  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ５．７１  （ｄ，  Ｊ＝６．２４  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ６．６１  （ｓ，  １  Ｈ）  ７．８２  （ｓ，  １  Ｈ）  ８．８３  （ｓ，  １  Ｈ）  １２．０３  （ｂｒ．  ｓ．，  １  Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１５１  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  ｐｐｍ  １１．６０，  １８．１５，  ２２．７４，  ２６．９８，  ２８．５２，  ２９．５１，  ２９．８３，  ３０．１４，  ３０．２５，  ３１．４５，  ３２．５０，  ３４．１５，  ３４．２１，  ３４．４６，  ３６．１４，  ３６．６２，  ３７．２１，  ３９．４９，  ４３．３１，  ４３．８９，  １０８．２３，  １１７．６８，  １２０．２０，  １２３．１１，  １３９．４５，  １４０．６０，  １４３．１８，  １４９．３２，  １７９．５９．
【０２７１】
実施例２３．化合物ＸＳ０５０３の調製
【化６３】
2019523245.tif 000065
【０２７２】
まず、プリスチメリン（２５０ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ）を２０ｍＬのテトラヒドロフランに溶解し、続いてＬｉＡｌＨ４（１．２ｍＬ、１．１ｍｍｏｌ）を加え、反応を室温で２時間撹拌しながら行った。反応を１０ｍＬの脱イオン水でクエンチした後、１ｍｏｌ／Ｌ  ＨＣｌ（５ｍＬ）で酸性化した。得られた混合物を酢酸エチル（各回１５ｍＬ）で３回抽出した。有機層を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、有機溶媒の酢酸エチルを真空蒸留により除去して、粗生成物をオレンジ−黄色の混合固体として得た。前記粗生成物を、３００〜４００メッシュのシリカゲル充填カラムを用いて、溶離剤としてｎ−ヘキサン及び酢酸エチル（ヘキサン／酢酸エチル＝２：１）を用いるクロマトグラフィーカラムにより分離し、オレンジ−黄色の固体生成物を得た。
【０２７３】
１Ｈ  ＮＭＲ  （６００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  ｐｐｍ  ０．７６  （ｓ，  ３  Ｈ）  ０．８３  −  ０．８７  （ｍ，  １  Ｈ）  ０．８９  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．１１  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２１  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２３  −  １．２５  （ｍ，  １  Ｈ）  １．２６  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２７  −  １．３４  （ｍ，  ２  Ｈ）  １．４８  （ｄｄ，  Ｊ＝６．７，  ３．９  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．５０  −  １．５４  （ｍ，  １  Ｈ）  １．５５  −  １．５９  （ｍ，  １  Ｈ）  １．６０  （ｄ，  Ｊ＝５．０  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．６４  （ｄｄ，  Ｊ＝９．２，  ４．６  Ｈｚ，  ２  Ｈ）  １．６５  −  １．６９  （ｍ，  ２  Ｈ）  １．６９  −  １．７２  （ｍ，  １  Ｈ）  １．９１  （ｄ，  Ｊ＝５．３  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．９３  −  １．９７  （ｍ，  １  Ｈ）  ２．０２  （ｓ，  ３  Ｈ）  ２．９２  （ｄ，  Ｊ＝１９．４  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ２．９６  （ｄｄ，  Ｊ＝１０．３，  ４．８  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ３．１５  −  ３．２０  （ｍ，  １  Ｈ）  ３．２１  （ｔ，  Ｊ＝６．０  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ４．４４  （ｔ，  Ｊ＝５．０  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ５．７３  （ｄｄ，  Ｊ＝６．１，  １．７  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ６．６１  （ｓ，  １  Ｈ）  ７．８０  （ｓ，  １  Ｈ）  ８．７８  （ｓ，  １  Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１５１  ＭＨｚ，  ＣＨＬＯＲＯＦＯＲＭ−ｄ）  ｐｐｍ  １１．４９，  １９．３５，  ２５．６５，  ２７．８０，  ２８．１０，  ２８．７５，  ２９．３６，  ３０．３１，  ３０．４５，  ３０．５７，  ３２．２７，  ３２．８９，  ３３．５８，  ３４．２４，  ３６．５５，  ３６．８２，  ３６．９５，  ３７．６８，  ４２．９１，  ４３．１５，  ７１．８２，  １０８．４２，  １１８．１５，  １２０．４２，  １２５．２７，  １３９．９６，  １４１．０９，  １４１．８７，  １５１．０４．
【０２７４】
実施例２４．化合物ＸＳ０５０８の調製
【化６４】
2019523245.tif 000066
【０２７５】
５０ｍｌの丸底瓶にＸＳ００７７（５０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を秤量し、溶解のために３ｍＬのメタノールを加え、保護のために空気を窒素で置換し、次いで重亜硫酸ナトリウム溶液（２８ｍｇのＮａＨＳＯ３−１ｍｌのＨ２Ｏ、０．２６ｍｍｏｌ）を添加し、窒素で保護しながら室温で３時間反応させた。反応を停止し、溶媒を減圧蒸留により濃縮して除去した。残留固形物にピリジンを加えて溶解させた後、濾過し、真空中で濃縮して白色固形物を収率９０％で得た。
【０２７６】
１Ｈ  ＮＭＲ  （６００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  ０．５７  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．０７  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．１２  −  １．１４  （ｍ，  １  Ｈ）  １．１４  −  １．１６  （ｍ，  １  Ｈ）  １．１７  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２１  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２２  −  １．２３  （ｍ，  ２  Ｈ）１．２４  −  １．２８  （ｍ，  ４  Ｈ）  １．２８  −  １．３２  （ｍ，  ２  Ｈ）  １．３８  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．４０  −  １．４６  （ｍ，  ２  Ｈ）  １．４７  −  １．５２  （ｍ，  ２  Ｈ）  １．５７  （ｄ，  Ｊ＝６．７９  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．５９  −  １．６３  （ｍ，  ４  Ｈ）  １．６４  −  １．７２  （ｍ，  ６  Ｈ）  １．７５  −  １．８３  （ｍ，  ４  Ｈ）  １．９２  −  １．９６  （ｍ，  １  Ｈ）  １．９７  −  ２．０１  （ｍ，  １  Ｈ）  ２．０３  −  ２．０７  （ｍ，  １  Ｈ）  ２．０９  （ｓ，  ３  Ｈ）  ２．１８  （ｄ，  Ｊ＝１０．８２  Ｈｚ，  ２  Ｈ）  ２．７３  （ｄ，  Ｊ＝１５．０４  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ３．４０  −  ３．４９  （ｍ，  １  Ｈ）  ３．８０  −  ３．８９  （ｍ，  １  Ｈ）  ６．３６  （ｄ，  Ｊ＝７．３４  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ６．４０  （ｄ，  Ｊ＝０．９２  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ７．０７  （ｄｄ，  Ｊ＝６．９７，  ０．９２  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ７．７３  （ｄ，  Ｊ＝８．０７  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ８．７１  （ｓ，  １  Ｈ）．  
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１５１  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  １０．０８，１８．３２，  ２１．８３，  ２４．６８，  ２４．７５，  ２５．１３，  ２５．２９，  ２５．６３，  ２５．６７，  ２８．３８，  ２８．５９，  ２９．９１，  ３０．１３，  ３１．０２，  ３１．０８，  ３１．３９，  ３１．８２，  ３１．９１，  ３１．９３，  ３２．３６，  ３３．１０，  ３６．０２，  ３６．１３，  ３７．６７，  ３８．９９，  ４２．１６，  ４２．８１，  ４４．４５，  ４４．４９，  ５０．０５，  ５４．７７，  １１７．２３，  １１７．９３，  １２０．０４，  １２６．７５，  １３３．２５，  １４６．４３，  １５３．９７，  １６３．０９，  １６８．７４，  １７５．４４，  １７７．８３．
【０２７７】
実施例２５．化合物ＸＳ０５３６の調製
【化６５】
2019523245.tif 000067
【０２７８】
ＸＳ００７７（１５０ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）を秤量し、重壁圧力容器に入れ、炭酸カリウム（２２０ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ）、及び４ｍｌのアセトンを攪拌しながら加えてサンプルを室温で溶解させ、次いで１００μＬの硫酸ジメチル溶液を加えた。；反応混合物を７０℃の油浴に移し、８時間加熱した。反応を１ｍｏｌ／Ｌ  ＨＣｌでクエンチし、続いて水を加え、次いで酢酸エチルで３回抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、そして溶媒をロータリーエバポレーターで濃縮した。残留物を酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝１：２０を用いるシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して、純粋な生成物を白色の固体として与えた、収率２１％。
【０２７９】
１Ｈ  ＮＭＲ  （６００  ＭＨｚ，  ＣＨＬＯＲＯＦＯＲＭ−ｄ）  ｄ  ｐｐｍ  ０．６１  （ｓ，  ３  Ｈ）  ０．９４  （ｄ，  Ｊ＝１３．７５  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．０８  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．１７  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２２  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．３４  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．４０  （ｄｄ，  Ｊ＝１４．１２，  ４．２２  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．４４  （ｄｄ，  Ｊ＝１４．４０，  ２．８４  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．５１  −  １．５７  （ｍ，  ２  Ｈ）  １．５７  −  １．６３  （ｍ，  １  Ｈ）  １．６３  −  １．６９  （ｍ，  ２  Ｈ）  １．７３  （ｄ，  Ｊ＝１１．３７  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．８５  （ｔｄ，  Ｊ＝１３．７１，  ６．３３  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ２．０１  −  ２．０７  （ｍ，  １  Ｈ）  ２．０７  −  ２．１３  （ｍ，  ２  Ｈ）  ２．１７  （ｓ，  ３  Ｈ）  ２．１８  −  ２．２３  （ｍ，  １  Ｈ）  ２．４４  （ｄ，  Ｊ＝１５．５９  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ３．０２  （ｄ，  Ｊ＝１９．９９  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ３．２８  （ｄｄ，  Ｊ＝２０．００，  ５．８７  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ３．５４  （ｓ，  ３  Ｈ）  ３．７７  （ｓ，  ３  Ｈ）  ３．８７  （ｓ，  ３  Ｈ）  ５．７７  （ｄ，  Ｊ＝４．５８  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ６．７８  （ｓ，  １  Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１５１  ＭＨｚ，  ＣＨＬＯＲＯＦＯＲＭ−ｄ）  ｄ  ｐｐｍ  １１．７７，  １８．２８，  ２２．７３，  ２７．８５，  ２８．８５，  ２９．８７，  ３０．２９，  ３０．５０，  ３０．８５，  ３１．５５，  ３２．８８，  ３４．１６，  ３４．５１，  ３４．７９，  ３６．８３，  ３７．１５，  ３７．５２，  ４０．４５，  ４３．６９，  ４４．３３，  ５１．４７，  ５５．８８，  ６０．３０，  １０６．３０，  １１７．６３，  １２５．４９，  １２７．８０，  １４４．６２，  １４４．８０，  １４９．１３，  １５０．８９，  １７９．０５．
【０２８０】
実施例２６．化合物ＸＳ０２８６の調製
【化６６】
2019523245.tif 000068
【０２８１】
化合物ＹＸＹ１０１（５０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を撹拌しながらＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）に溶解した。触媒ＥＤＣＩ（８５．４ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）及びＨＯＢＴ（７４．３ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）を加え、溶解させるために撹拌した。；ｐ−ｔｅｒｔ−ブチルアニリン（４９．２ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）を添加し、そして反応を室温で３６時間撹拌しながら実施した。反応を停止し、反応系に脱イオン水（１５ｍＬ）を加え、酢酸エチルで３回抽出した。合わせた酢酸エチル層を飽和ＮａＣｌで３回洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、ロータリーエバポレーターで濃縮して粗生成物（暗赤色油状物）を得た。前記粗生成物をラピッドカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ｎ−ヘキサン）で精製し、真空中で乾燥して、暗赤色固体として化合物ＸＳ０２８６（１０ｍｇ）を得た。
【０２８２】
１Ｈ  ＮＭＲ  （６００  ＭＨｚ，  ＣＨＬＯＲＯＦＯＲＭ−ｄ）  δ  ｐｐｍ  ０．６４  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．０８  （ｄ，  Ｊ＝１３．２０  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．１５  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２４  −  １．２７  （ｍ，６  Ｈ）  １．４０  −  １．４２  （ｍ，  ４  Ｈ）  １．４８  −  １．５７  （ｍ，  ３  Ｈ）  １．６３  （ｍ，  ５  Ｈ）  １．６５  −  １．７９  （ｍ，  ５  Ｈ）  １．８５  （ｄ，  Ｊ＝１１．９２  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．９１  （ｄ，  Ｊ＝６．２４  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．９８  −  ２．０６  （ｍ，  ３  Ｈ）  ２．０８  （ｄ，  Ｊ＝１２．１０  Ｈｚ，  ２  Ｈ）  ２．１８  （ｄ，  Ｊ＝１．６５  Ｈｚ，  ３  Ｈ）  ２．５４  （ｄ，  Ｊ＝１５．７７  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ６．２９  （ｄ，  Ｊ＝６．７９  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ６．４５  （ｓ，  １  Ｈ）  ６．９２  −  ７．００  （ｍ，  ２  Ｈ）  ７．３０  −  ７．３４  （ｍ，  ２  Ｈ）  ７．３４  −  ７．３７  （ｍ，  ２  Ｈ）  ７．３７  −  ７．４１  （ｍ，  １  Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１５１  ＭＨｚ，  ＣＨＬＯＲＯＦＯＲＭ−ｄ）  δ  ｐｐｍ  １０．２１，  １８．４９，  ２１．７５，  ２８．５８，  ２９．６３，  ２９．６９，  ３０．４１，  ３０．８３，  ３１．３３，  ３３．２４，  ３３．７３，  ３４．３５，  ３４．９８，  ３６．３２，  ３８．０６，  ３９．３８，４１．１０，  ４２．９６，  ４４．４７，  ４５．１１，  ７６．８１，  ７７．０２，  ７７．２３，  １１６．９９，  １１７．９５，  １１９．５３，  １１９．８１，  １２５．８９，  １２７．３８，  １３３．９５，  １３５．１１，  １４６．０１，  １４７．２６，  １６４．６８，  １７０．０２，  １７５．８３，  １７８．３８．
【０２８３】
実施例２７．化合物ＸＳ０２８７の調製
【化６７】
2019523245.tif 000069
【０２８４】
化合物ＹＸＹ１０１（５０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を撹拌しながらＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）に溶解した。触媒ＥＤＣＩ（８５．４ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）及びＨＯＢＴ（７４．３ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）を加え、溶解させるために撹拌した。；ｐ−メトキシアニリン（４０．６ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）を加え、室温で３６時間攪拌しながら反応を行った。反応を止めた。反応系に脱イオン水（１５ｍＬ）を加え、酢酸エチルで３回抽出した。合わせた酢酸エチル層を飽和ＮａＣｌで３回洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、ロータリーエバポレーターで濃縮して粗生成物（暗赤色油状物）を得た。粗生成物をラピッドカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ｎ−ヘキサン）で精製し、真空中で乾燥させて化合物ＸＳ０２８７（２０ｍｇ）を暗赤色固体として得た。
【０２８５】
１Ｈ  ＮＭＲ  （６００  ＭＨｚ，  ＣＨＬＯＲＯＦＯＲＭ−ｄ）  δ  ｐｐｍ  ０．５３  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．０５  （ｄ，  Ｊ＝１３．９４  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．１３  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２１  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２４  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２６  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．３５  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．４８  −  １．５４  （ｍ，  ２  Ｈ）  １．５８  （ｄ，  Ｊ＝７．３４  Ｈｚ，  ２  Ｈ）  １．６４  −  １．７２  （ｍ，  ２  Ｈ）  １．７８  −  １．８９  （ｍ，  ３  Ｈ）  ２．０３  −  ２．１１  （ｍ，  ２  Ｈ）  ２．１８  （ｓ，  ３  Ｈ）  ２．５５  （ｄ，  Ｊ＝１５．７７  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ３．７９  （ｓ，  ３  Ｈ）  ６．２５  （ｄ，  Ｊ＝７．１５  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ６．３４  （ｓ，  １  Ｈ）  ６．９１  （ｍ，  Ｊ＝８．９９  Ｈｚ，  ２  Ｈ）  ６．９６  （ｄ，  Ｊ＝７．１５  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ７．４０  （ｍ，  Ｊ＝８．８０  Ｈｚ，  ２  Ｈ）  ７．４８  （ｓ，  １  Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１５１  ＭＨｚ，  ＣＨＬＯＲＯＦＯＲＭ−ｄ）  δ  ｐｐｍ  １０．２３，  １８．３０，  ２１．７５，  ２８．４６，  ２９．３９，  ２９．７０，  ３０．３０，  ３０．７９，  ３１．５２，  ３２．８６，  ３３．８１，  ３４．８９，  ３６．２１，  ３７．９９，  ３９．２８，  ４０．９６，  ４２．９６，  ４４．４３，  ４５．１２，  ５５．４８，  １１４．２１，  １１７．１８，  １１７．８２，  １１９．３８，  １２１．９９，  １２７．３４，  １３０．９８，  １３４．０６，  １４６．０６，  １５６．４１，  １６４．８０，  １７０．２３，  １７５．８８，  １７８．４２．
【０２８６】
実施例２８．化合物ＸＳ０３９４の調製
【化６８】
2019523245.tif 000070
【０２８７】
化合物ＹＸＹ１０１（５０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（３７μＬ）を再蒸留テトラヒドロフラン（３．０ｍＬ、０．２６ｍｍｏｌ）に撹拌しながら溶解し、次いで−３０℃に冷却した。１０分後、クロロギ酸エチル（２２μＬ、０．２３ｍｍｏｌ）を反応液に滴下した。撹拌しながら−３０℃で１２時間反応させた後、反応を停止した。不溶物をフリットガラスディスク付きブフナーロートで濾別し、テトラヒドロフランで洗浄して黄色濾液を得た。黄色ろ液に純水１０ｍＬを加え、酢酸エチルで３回抽出した（各回１５ｍＬ）。有機層を合わせ、飽和食塩水で３回（各回３０ｍＬ）洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。有機溶媒を減圧留去し、粗生成物を油状混合物として得た。溶離剤としてｎ−ヘキサン及び酢酸エチル（ヘキサン／酢酸エチル＝１０：１）を用い、３００〜４００メッシュのシリカゲル充填カラムを使用するカラムクロマトグラフィー分離により黄色固体としての生成物を得た。
【０２８８】
１Ｈ  ＮＭＲ  （６００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  ｐｐｍ  １．０５  −  １．０７  （ｍ，  １  Ｈ）  １．０８  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．０９  −  １．１２  （ｍ，  １  Ｈ）  １．１８  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２３  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２７  （ｔ，  Ｊ＝７．０６  Ｈｚ，  ３  Ｈ）  １．２８  −  １．３１  （ｍ，  １  Ｈ）  １．４１  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．４３  −  １．５０  （ｍ，  ４  Ｈ）  １．５３  （ｄｄ，  Ｊ＝１２．１０，  ５．６９  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．５９  （ｄ，  Ｊ＝７．８９  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．６５  （ｄ，  Ｊ＝１０．６４  Ｈｚ，  ２  Ｈ）  １．７０  −  １．７８  （ｍ，  ２  Ｈ）  １．７９  −  １．８５  （ｍ，  １  Ｈ）  １．９０  （ｔｄ，  Ｊ＝１３．９８，  ３．３９  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．９５  −  ２．０１  （ｍ，  １  Ｈ）  ２．０１  −  ２．０６  （ｍ，  １  Ｈ）  ２．１５  （ｓ，  ３  Ｈ）  ２．２６  （ｄ，  Ｊ＝１５．２２  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ４．２１  （ｑ，  Ｊ＝１．００  Ｈｚ，  ２  Ｈ）  ６．３０  （ｄ，  Ｊ＝７．１５  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ６．４０  （ｄ，  Ｊ＝０．７３  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ７．２９  （ｄｄ，  Ｊ＝７．５２，  ０．７３  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １２．０７  （ｂｒ．  ｓ，  １  Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１５１  ＭＨｚ，  ＣＨＬＯＲＯＦＯＲＭ−ｄ）  ｐｐｍ  １１．１７，  １４．０９，  １９．００，  ２１．９６，  ２８．６０，  ２９．３５，  ２９．３６，  ３０．４７，  ３０．６７，  ３１．４９，  ３２．６７，  ３３．３８，  ３４．５３，  ３６．２０，  ３８．２４，  ３９．１３，  ４０．１６，  ４２．８８，  ４４．０５，  ４５．３４，  ６５．０５，  １１７．７６，  １１７．７８，  １２２．７０，  １２６．０８，  １３３．３７，  １４２．５４，  １５２．６２，  １６３．３０，  １７２．９６，  １８３．８６，  １８３．９０．
【０２８９】
実施例２９．化合物ＸＳ０４１８の調製
【化６９】
2019523245.tif 000071
【０２９０】
最初に、化合物ＹＸＹ１０１（５０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を撹拌し、２ｍＬのテトラヒドロフランに溶解し、続いて炭酸カリウム（１５．２ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を加えた。ブロモ酢酸エチル（１８．３７ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を１ｍＬのテトラヒドロフランに溶解した後、反応液に滴下した。室温で４時間攪拌しながら反応を行い、その後１ｍｏｌ／Ｌ  ＨＣｌ（１ｍＬ）で反応停止し、９ｍＬの純水を加えた。得られた混合物を酢酸エチル（各回１５ｍＬ）で３回抽出した。集めた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、有機溶媒の酢酸エチルを真空中での蒸留により除去して粗生成物を橙赤色の混合固体として得た。３００〜４００メッシュのシリカゲル充填カラムを用いて、溶離剤としてｎ−ヘキサン及び酢酸エチル（ヘキサン／酢酸エチル＝１０：１）を用いるカラムクロマトグラフィー分離により、橙赤色固体としての生成物を得た。
【０２９１】
１Ｈ  ＮＭＲ  （６００  ＭＨｚ，  ＣＨＬＯＲＯＦＯＲＭ−ｄ）  ｐｐｍ  ０．５３  （ｓ，  ３  Ｈ）  ０．９９  （ｄ，  Ｊ＝１４．３１  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．１１  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２５  （ｔ，  Ｊ＝７．２０  Ｈｚ，  ３  Ｈ）  １．２７  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２８  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．３９  −  １．４４  （ｍ，  １  Ｈ）  １．４５  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．５１  （ｄｄ，  Ｊ＝１４．９５，  ４．１３  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．５４  −  １．５８  （ｍ，  １  Ｈ）  １．６０  （ｄ，  Ｊ＝７．８９  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．６３  −  １．６７  （ｍ，  １  Ｈ）  １．６７  −  １．７１  （ｍ，  １  Ｈ）  １．７５  （ｄｄ，  Ｊ＝１５．９６，  ８．０７  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．８０  −  １．８２  （ｍ，  １  Ｈ）  １．８３  −  １．８５  （ｍ，  １  Ｈ）  １．８５  −  １．９２  （ｍ，  １  Ｈ）  ２．０６  （ｔｄ，  Ｊ＝１４．１２，  ３．８５  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ２．１３  −  ２．１８  （ｍ，  １  Ｈ）  ２．２１  （ｓ，  ３  Ｈ）  ２．２５  （ｄ，  Ｊ＝１４．３１  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ２．４８  （ｄ，  Ｊ＝１５．９６  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ４．１９  （ｑ，  Ｊ＝７．１５  Ｈｚ，  ２  Ｈ）  ４．４１  （ｄ，  Ｊ＝１５．７７  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ４．５４  （ｄ，  Ｊ＝１５．９６  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ６．３５  （ｄ，  Ｊ＝７．１５  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ６．５３  （ｄ，  Ｊ＝１．１０  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ７．０２  （ｄｄ，  Ｊ＝７．０６，  １．１９  Ｈｚ，  １  Ｈ）
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１５１  ＭＨｚ，  ＣＨＬＯＲＯＦＯＲＭ−ｄ）  ｐｐｍ  １０．２３，  １４．０４，  １８．５７，  ２１．６１，  ２８．５９，  ２９．５７，  ２９．７４，  ３０．４７，  ３０．６３，  ３１．５５，  ３２．５６，  ３３．５０，  ３４．６７，  ３６．３１，  ３８．２４，  ３９．３９，  ４０．４０，  ４２．９１，  ４４．１９，  ４５．０１，  ６０．５２，  ６１．２８，  １１７．１５，  １１８．１３，  １１９．５２，  １２７．３７，  １３４．０９，  １４５．９８，  １６４．７４，  １６７．７０，  １７０．０３，  １７７．５３，  １７８．３１
【０２９２】
実施例３０．化合物ＸＳ０４２１、ＸＳ０４５７、ＸＳ０４７３及びＸＳ０４９３の調製
【化７０】
2019523245.tif 000072
【０２９３】
一例としてＸＳ０４２１の合成を取り上げると：  化合物ＹＸＹ１０１（５０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を５０ｍＬの封管中で秤量し、次いで亜リン酸ジメチル（１２３ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）及び２．７ｍｇの塩化アルミニウム六水和物（０．１当量）を添加し、２ｍＬのＤＣＭを溶解のために添加した。前記管を密閉し、反応を室温で６時間行った。反応を停止させ、飽和ＮａＣｌでクエンチした。得られた混合物を酢酸エチルで３回抽出し、有機相を合わせ、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮して溶媒を除去した。残留物を酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝１：２を用いるシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して、白色固体を得た、収率５５％。
【０２９４】
１Ｈ  ＮＭＲ  （６００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  ｐｐｍ  ０．６１  （３  Ｈ，  ｓ）  ０．８６  （１  Ｈ，  ｄ，  Ｊ＝１２．８４  Ｈｚ）  １．０６  （３  Ｈ，  ｓ）  １．１０  （３  Ｈ，  ｓ）  １．１９  （３  Ｈ，  ｓ）  １．２２  −  １．２７  （１  Ｈ，  ｍ）  １．２７  −  １．３２  （１  Ｈ，  ｍ）  １．４０  （１  Ｈ，  ｄ，  Ｊ＝４．９５  Ｈｚ）  １．４３  （１  Ｈ，  ｄ，  Ｊ＝５．３２  Ｈｚ）  １．４９  （１  Ｈ，  ｄ，  Ｊ＝８．０７  Ｈｚ）  １．５１  −  １．５５  （１  Ｈ，  ｍ）  １．５７  （３  Ｈ，  ｓ）  １．５９  −  １．６０  （１  Ｈ，  ｍ）  １．６０  −  １．６４  （１  Ｈ，  ｍ）  １．７６  −  １．８５  （１  Ｈ，  ｍ）  １．９３  −  １．９７  （１  Ｈ，  ｍ）  １．９９  （１  Ｈ，  ｄ，  Ｊ＝２．２０  Ｈｚ）  ２．００  −  ２．０２  （１  Ｈ，  ｍ）  ２．０２  −  ２．０６  （１  Ｈ，  ｍ）  ２．１３  （３  Ｈ，  ｓ）  ２．３２  （１  Ｈ，  ｄ，  Ｊ＝１５．５９  Ｈｚ）  ３．４９  （３  Ｈ，  ｄ，  Ｊ＝８．８０  Ｈｚ）  ３．５１  （３  Ｈ，  ｄ，  Ｊ＝８．９９  Ｈｚ）  ４．１９  （１  Ｈ，  ｄｄ，  Ｊ＝２３．６６，  ６．２４  Ｈｚ）  ５．６４  （１  Ｈ，  ｄｄ，  Ｊ＝６．３３，  ３．２１  Ｈｚ）  ６．６６  （１  Ｈ，  ｓ）  ７．９７  （１  Ｈ，  ｓ）  ９．０４  （１  Ｈ，  ｂｒ．  ｓ．）  １２．０４  （１  Ｈ，  ｓ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１５１  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  ｐｐｍ  １２．６０，  １４．００  （１  Ｃ，  ｓ）  １８．０４，  ２１．５８  （１  Ｃ，  ｄ，  Ｊ＝６．６０  Ｈｚ）  ２２．１１，  ２８．７８，  ２９．４８，  ３０．０２  （１  Ｃ，  ｄ，  Ｊ＝１３．２０  Ｈｚ）  ３０．１８，  ３１．００，  ３１．４５，  ３２．４２，  ３３．４９，  ３３．５７，  ３４．５７，  ３６．４２，  ３７．４３，  ３７．８９，  ３８．７９，  ４３．８８，  ５２．３１  （１  Ｃ，  ｄ，  Ｊ＝６．６０  Ｈｚ）  ５２．８１  （１  Ｃ，  ｄ，  Ｊ＝６．６０  Ｈｚ）  １０９．３２，  １１４．６４  （１  Ｃ，  ｄ，  Ｊ＝１２．１０  Ｈｚ）  １１７．９０  （１  Ｃ，  ｄ，  Ｊ＝７．７０  Ｈｚ）  １２１．３５  （１  Ｃ，  ｄ，  Ｊ＝４．４０  Ｈｚ）  １４０．５０  （１  Ｃ，  ｄ，  Ｊ＝６．６０  Ｈｚ）  １４１．０５  （１  Ｃ，  ｄ，  Ｊ＝３．３０  Ｈｚ）  １４４．０８  （１  Ｃ，  ｄ，  Ｊ＝３．３０  Ｈｚ）  １５０．６２  （１  Ｃ，  ｄ，  Ｊ＝１２．１０  Ｈｚ）  １７９．５１．
【０２９５】
上記の製造方法に従って、本発明では以下の化合物も合成された。
【化７１】
2019523245.tif 000073
【０２９６】
実施例３１．化合物ＸＳ０４３９、ＸＳ０４４２、ＸＳ０４４４〜ＸＳ０４４９、ＸＳ０４７８〜ＸＳ０４８０、ＸＳ０４８７及びＸＳ０４９０の調製
【化７２】
2019523245.tif 000074
【０２９７】
製造方法はＸＳ０４３９により例示される：  化合物ＹＸＹ１０１（１００ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）を攪拌しながらジクロロメタン（４ｍＬ）に溶解した。７−メトキシ−置換インドール（６５．３ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）を加え、次いで三塩化アルミニウム六水和物（５．３ｍｇ、０．０２２ｍｍｏｌ）を加えた。反応は室温で５時間攪拌しながら行った。反応を停止し、反応混合物に脱イオン水（１５ｍＬ）を加え、そして酢酸エチルで３回抽出した。酢酸エチル層を合わせ、飽和ＮａＣｌで３回洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、ロータリーエバポレーターで濃縮して粗生成物（褐色油状物）を得た。粗生成物をラピッドカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝１：４）で分離精製し、真空乾燥して生成物を紫赤色固体として得た。
【０２９８】
１Ｈ−ＮＭＲ  （ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  ０．７１  （ｓ，  ３Ｈ），  ０．８６  （ｄ，  Ｊ＝９．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ０．９６  （ｓ，  ３Ｈ），  １．０１  （ｓ，  ３Ｈ），  １．１０  （ｓ，  ３Ｈ），  １．２２−１．２９  （ｍ，  ２Ｈ），  １．３２  （ｓ，  ３Ｈ），  １．３４−１．４０  （ｍ，２Ｈ），  １．４５  （ｄ，  Ｊ＝８．１  Ｈｚ，  １Ｈ），  １．５０−１．６１  （ｍ，  ３Ｈ），  １．６２−１．７５  （ｍ，  ２Ｈ），  １．７９  （ｓ，  ３Ｈ），  １．９６−２．０８  （ｍ，  ３Ｈ），  ２．３４  （ｄ，  Ｊ＝１５．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．８８  （ｓ，  ３Ｈ），  ４．７９  （ｄ，  Ｊ＝５．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．１２  （ｄ，  Ｊ＝６．２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．１８  （ｓ，  １Ｈ），  ６．６２  （ｄ，  Ｊ＝７．７  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．７３  （ｓ，  １Ｈ），  ６．９０  （ｔ，  Ｊ＝７．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．２２  （ｄ，  Ｊ＝７．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．８８  （ｂｒ．  ｓ．，  １Ｈ），  ８．９９  （ｂｒ．  ｓ．，  １Ｈ），  １０．６９  （ｓ，  １Ｈ），  １２．０４  （ｂｒ．  ｓ．，  １Ｈ）．
１３Ｃ−ＮＭＲ  （ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  １１．９，  １８．５，  ２２．３，  ２９．１，  ２９．９，  ３０．４，  ３０．５，  ３０．６，  ３１．８，  ３２．９，  ３４．９，  ３５．４，  ３５．５，  ３５．６，  ３６．８，  ３６．９，  ３７．８，  ４３．５，  ４４．３，  ５５．４，  １０１．８，  １０８．８，  １１２．２，  １１９．２，  １１９．８，  １２１．１，  １２１．６，  １２２．６，  １２６．３，  １２６．７，  １２８．５，  １４０．８，  １４１．４，  １４４．０，  １４６．６，  １４７．０，  １８０．０．
【０２９９】
実施例３２．化合物ＸＳ０４８６、ＸＳ０４９１及びＸＳ０４９２の調製
【化７３】
2019523245.tif 000075
【０３００】
一例として化合物ＸＳ０４８６の製造を取ると：  まず、化合物ＹＸＹ１０１（５０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）をジオキサン（６００μＬ）に溶解し、トリエチルアミン（１５０μＬ、０．３３ｍｍｏｌ）を添加し、次いで反応瓶の壁の残渣を洗浄するため、ジオキサン（１００μＬ）を添加し、反応溶液を０℃に冷却した。亜リン酸ジメチル（１１０ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）を四塩化炭素５０μＬに溶解した後、溶解した亜リン酸ジメチルをセラストロールに溶解した反応溶液にゆっくり滴下し、０℃で１２時間、反応を実施し、次いで１０ｍＬの氷冷脱イオン水１０ｍＬｗｏ加え、反応を停止させるため、１０ｍＬの飽和塩化アンモニウム溶液１０ｍＬを加えた。得られた混合物を酢酸エチルで３回（各回１５ｍＬ）抽出し、有機層を集め、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。次いで有機溶媒酢酸エチルを減圧下での蒸留により除去して、粗生成物を赤色の混合固体として得た。粗生成物を、溶離液としてｎ−ヘキサン及び酢酸エチル（ヘキサン／酢酸エチル＝１：１）を用いる３００〜４００メッシュのシリカゲル充填カラムを用いるラピッドカラムクロマトグラフィーにより分離して、赤色の固体生成物を得た。
【０３０１】
１Ｈ  ＮＭＲ  （６００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  ０．６０  （ｓ，  ３  Ｈ）  ０．９６  （ｄ，  Ｊ＝１３．５７  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．０８  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２３  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２４  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．３８  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．４１  −  １．４８  （ｍ，  ２  Ｈ）  １．５５  −  １．６０  （ｍ，  ３  Ｈ）  １．６１  −  １．６７  （ｍ，  ２  Ｈ）  １．６９  −  １．７４  （ｍ，  １  Ｈ）  １．７８  （ｄｄ，  Ｊ＝１６．１４，  ７．８９  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．８１  −  １．８８  （ｍ，  １  Ｈ）  １．９５  （ｔｄ，  Ｊ＝１４．１２，  ３．８５  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ２．０２  （ｄ，  Ｊ＝１３．９４  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ２．０９  （ｓ，  ３  Ｈ）  ２．２１  −  ２．２４  （ｍ，  １  Ｈ）  ２．２７  （ｄ，  Ｊ＝１５．９６  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ３．７４  （ｄｄ，  Ｊ＝１１．５５，  ５．１４  Ｈｚ，  ６  Ｈ）  ６．３６  （ｄ，  Ｊ＝７．１５  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ６．３９  （ｄ，  Ｊ＝１．２８  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ７．０８  （ｄｄ，  Ｊ＝６．９７，  １．１０  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ８．７５  （ｓ，  １  Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１５１  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  １０．０７，  １８．５３，  ２１．４３，  ２８．０３，  ２９．０９，  ２９．２４，  ２９．７１，  ３０．０７，  ３１．２１，  ３１．４６，  ３２．７６，  ３３．９２，  ３５．８５，  ３７．７１，  ３８．７８，  ４１．２３  （ｄ，  Ｊ＝５．５０  Ｈｚ，）  ４１．９７，  ４３．３７，  ４４．４５，  ５５．１５  （ｄｄ，  Ｊ＝１７．６１，  ５．５０  Ｈｚ，  ２  Ｃ）  １１７．２４，  １１８．１３，１２０．１２，  １２６．８９，  １３３．１２，  １４６．４４，１６２．８２，１６７．４３，  １７２．２１  （ｄ，  Ｊ＝１１．００  Ｈｚ）  １７７．９８．
【０３０２】
実施例３３．化合物ＸＳ０４８８の調製
【化７４】
2019523245.tif 000076
【０３０３】
最初に、化合物ＸＳ００７７（８０ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（４ｍＬ）に溶解し、トリエチルアミン（３７０μＬ、２．５ｍｍｏｌ）を加え、次いで４−ＤＭＡＰ（２４．７ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）を加え、均一に攪拌し、塩化ｎ−ブチリル（１１３μＬ、１．１ｍｍｏｌ）を加えた。反応を室温で３０分間撹拌しながら実施し、次いで１０ｍＬの飽和塩化アンモニウム溶液でクエンチした。得られた混合物を酢酸エチルで３回抽出した（各回１５ｍＬ）。有機層を集め、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、有機溶媒の酢酸エチルを減圧留去して粗生成物を赤色の混合固体として得た。溶離液としてｎ−ヘキサン及び酢酸エチル（ヘキサン／酢酸エチル＝４：１）を用いて３００〜４００メッシュのシリカゲル充填カラムを用いたカラムクロマトグラフィーにより分離を行い、生成物を明黄色固体として得た。
【０３０４】
１Ｈ  ＮＭＲ  （６００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  ｐｐｍ  ０．４６  −  ０．５１  （ｍ，  ３  Ｈ）  ０．９１  （ｄ，  Ｊ＝１．００  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ０．９５  −  １．０１  （ｍ，  ３  Ｈ）  １．０８  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．１２  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２３  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．３６  （ｄｄｄ，  Ｊ＝１３．８０，  ４．２０  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．４２  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．４４  −  １．４８  （ｍ，  １  Ｈ）  １．５４  −  １．６０  （ｍ，  ３  Ｈ）  １．６３  （ｓ，  ２  Ｈ）  １．６６  −  １．６８  （ｍ，  ２  Ｈ）  １．７０  （ｄ，  Ｊ＝９．１７  Ｈｚ，  ２  Ｈ）  １．８３  （ｄｄ，  Ｊ＝１３．５７，  ７．７０  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．９３  −  １．９９  （ｍ，  １  Ｈ）  ２．０６  （ｄ，  Ｊ＝１３．９４  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ２．１０  （ｓ，  ３  Ｈ）  ２．２２  （ｄ，  Ｊ＝７．３４  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ２．３２  （ｄ，  Ｊ＝１５．５９  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ２．５５  （ｔ，  Ｊ＝７．１５  Ｈｚ，  ２  Ｈ）  ３．４９  （ｓ，  ３  Ｈ）  ６．３８  （ｓ，  １  Ｈ）  ６．４１  （ｄ，  Ｊ＝７．１５  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ７．３１  （ｄ，  Ｊ＝６．９７  Ｈｚ，  １  Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１５１  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  ｐｐｍ  １３．４１，  １８．０５，  ２１．５９，  ２８．０６，  ２９．１１，  ２９．４２，  ３０．１１，  ３０．１６，  ３０．３２，  ３１．３２，  ３２．２１，  ３２．３１，  ３３．０６，  ３４．３６，  ３４．９１，  ３６．００，  ３７．９０，  ３８．７７，  ３９．８３，  ４２．２２，  ４３．６４，  ４４．８５，  ５１．４８，  １１７．９９，  １２２．１３，  １２５．２１，  １３３．５２，  １３６．６９，  １４２．２６，  １６２．８１，  １７０．６５，  １７１．２１，  １７６．２１，  １７７．９１．
【０３０５】
実施例３４．化合物ＸＳ０５０６の調製
【化７５】
2019523245.tif 000077
【０３０６】
化合物ＹＸＹ１０１（５０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を５０ｍｌの丸底フラスコに秤量し、ジシクロヘキシルカルボジイミド（２３ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）及びグルコース（２４ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を加えた後、溶解のために２ｍＬのＤＣＭを加えた。反応を室温で１２時間行い、大量の水でクエンチし、酢酸エチルで３回抽出した。有機相を合わせ、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮して溶媒を除去した。酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝１：４を用いてシリカゲルカラムで分離精製し、橙赤色固体を得た。収率４２％。
【０３０７】
１Ｈ  ＮＭＲ  （６００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  ０．５７  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．０７  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．１２  −  １．１４  （ｍ，  １  Ｈ）  １．１４  −  １．１６  （ｍ，  １  Ｈ）  １．１７  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２１  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２２  −  １．２３  （ｍ，  ２  Ｈ）１．２４  −  １．２８  （ｍ，  ４  Ｈ）  １．２８  −  １．３２  （ｍ，  ２  Ｈ）  １．３８  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．４０  −  １．４６  （ｍ，  ２  Ｈ）  １．４７  −  １．５２  （ｍ，  ２  Ｈ）  １．５７  （ｄ，  Ｊ＝６．７９  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．５９  −  １．６３  （ｍ，  ４  Ｈ）  １．６４  −  １．７２  （ｍ，  ６  Ｈ）  １．７５  −  １．８３  （ｍ，  ４  Ｈ）  １．９２  −  １．９６  （ｍ，  １  Ｈ）  １．９７  −  ２．０１  （ｍ，  １  Ｈ）  ２．０３  −  ２．０７  （ｍ，  １  Ｈ）  ２．０９  （ｓ，  ３  Ｈ）  ２．１８  （ｄ，  Ｊ＝１０．８２  Ｈｚ，  ２  Ｈ）  ２．７３  （ｄ，  Ｊ＝１５．０４  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ３．４０  −  ３．４９  （ｍ，  １  Ｈ）  ３．８０  −  ３．８９  （ｍ，  １  Ｈ）  ６．３６  （ｄ，  Ｊ＝７．３４  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ６．４０  （ｄ，  Ｊ＝０．９２  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ７．０７  （ｄｄ，  Ｊ＝６．９７，  ０．９２  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ７．７３  （ｄ，  Ｊ＝８．０７  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ８．７１  （ｓ，  １  Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１５１  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  １０．０８，１８．３２，  ２１．８３，  ２４．６８，  ２４．７５，  ２５．１３，  ２５．２９，  ２５．６３，  ２５．６７，  ２８．３８，  ２８．５９，  ２９．９１，  ３０．１３，  ３１．０２，  ３１．０８，  ３１．３９，  ３１．８２，  ３１．９１，  ３１．９３，  ３２．３６，  ３３．１０，  ３６．０２，  ３６．１３，  ３７．６７，  ３８．９９，  ４２．１６，  ４２．８１，  ４４．４５，  ４４．４９，  ５０．０５，  ５４．７７，  １１７．２３，  １１７．９３，  １２０．０４，  １２６．７５，  １３３．２５，  １４６．４３，  １５３．９７，  １６３．０９，  １６８．７４，  １７５．４４，  １７７．８３．
【０３０８】
実施例３５化合物ＸＳ０５０７の調製
【化７６】
2019523245.tif 000078
【０３０９】
化合物ＹＸＹ１０１（５０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を５０ｍｌの丸底フラスコ中で秤量し、溶解のために２ｍｌのＤＣＭを加え、次いで−７８℃に移して撹拌した。ＤＡＳＴ（１５０μｌ、１０当量）を加え、−７８℃で１時間反応させた。反応液を大量の氷に直接注いで反応を停止させた。水性相をＤＣＭで３回抽出した。有機相を合わせ、そして無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。有機相を減圧下で濃縮して溶媒を除去した。酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝１：４系を用いるカラムクロマトグラフィーで分離精製し、橙赤色固体を得た。収率５８％。
【０３１０】
１Ｈ  ＮＭＲ  （６００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  ０．５６  （ｓ，  ３  Ｈ）  ０．９８  （ｄ，  Ｊ＝１１．９２  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．０８  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２２  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２９  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．３８  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．４３  −  １．４７  （ｍ，  １  Ｈ）  １．４８  −  １．５２  （ｍ，  １  Ｈ）  １．５５  −  １．５９  （ｍ，  ２  Ｈ）  １．６０  −  １．６４  （ｍ，  １  Ｈ）  １．６７  （ｄ，  Ｊ＝４．０３  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．７１  （ｄ，  Ｊ＝３．８５  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．８０  （ｄｄ，  Ｊ＝１６．４１，  ８．１６  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．８３  −  １．８７  （ｍ，  １  Ｈ）  １．８８  −  １．９２  （ｍ，  １  Ｈ）  １．９６  （ｄ，  Ｊ＝１７．６１  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．９５  −  １．９５  （ｍ，  １  Ｈ）  ２．０９  （ｓ，  ３  Ｈ）  ２．２０  （ｄ，  Ｊ＝１．８３  Ｈｚ，  ２  Ｈ）  ６．３５  （ｄ，  Ｊ＝７．３４  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ６．３８  （ｄ，  Ｊ＝１．２８  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ７．０６  （ｄｄ，  Ｊ＝６．９７，  １．２８  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ８．７３  （ｓ，  １  Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１５１  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  １０．０７，  １８．８５，  ２１．４１，  ２７．８９，  ２９．２６，  ２９．３３，  ２９．４６，  ２９．９４，  ３１．１６，  ３２．７１，  ３３．７９，  ３５．７８，  ３７．８７，  ３８．７４，  ４０．０４，  ４０．２２，  ４１．８９，  ４３．２６，  ４４．３３，  １１７．２１，  １１８．１４，  １２０．１５，  １２６．９９，  １３２．８８，  １４６．４１，  １６２．７８，  １６７．３９  （ｄ，  Ｊ＝４１８．１５  Ｈｚ，  １  Ｃ），  １６６．７１，  １７７．９７．
【０３１１】
実施例３６．化合物ＸＳ０５０９の調製
【化７７】
2019523245.tif 000079
【０３１２】
化合物ＹＸＹ１０１（５０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を２５ｍｌの重壁圧力容器中で秤量し、臭化テトラブチルアンモニウム（ＴＢＡＢ、１７．５ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）を加え、溶解のために２ｍＬのジクロロメタン（ＤＣＭ）を加え、次いで５％ＮａＯＨ（１８０μＬ）を滴下した。反応を室温で３０分間行った後、５０℃の油浴に移し、２，３，４，６−テトラアセトキシ−α−Ｄ−グルコピラノースブロミドのジクロロメタン溶液（５７ｍｇ−１ｍＬ、０．１３８ｍｍｏｌ）を滴下し、そして、５０℃で１２時間反応した。反応を止め、大量の水と飽和食塩水を加えた。得られた混合物をＤＣＭで３回抽出した。有機相を合わせ、そして無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。有機相を減圧下で濃縮し、そして酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝４：１系を用いるシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して、黄色の固体を得た、収率２５％。
【０３１３】
１Ｈ  ＮＭＲ  （６００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  ０．５１  （ｓ，  ３  Ｈ）０．９５  （ｄ，  Ｊ＝１３．５７  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．０８  （ｄ，  Ｊ＝６．２４  Ｈｚ，  ６  Ｈ）  １．２２  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２３  （ｂｒ．  ｓ．，  １  Ｈ）  １．３８  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．４１  （ｄ，  Ｊ＝４．２２  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．４６  （ｄ，  Ｊ＝１１．９２  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．５６  （ｄ，  Ｊ＝７．５２  Ｈｚ，  ２  Ｈ）  １．５８  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．６０  −  １．６３  （ｍ，  １  Ｈ）  １．６４  （ｄ，  Ｊ＝４．９５  Ｈｚ，  ２  Ｈ）１．６６  −  １．６９  （ｍ，  １  Ｈ）  １．８１  −  １．８７  （ｍ，  １  Ｈ）  １．９１  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．９４  （ｄ，  Ｊ＝３．６７  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．９７  （ｓ，  ３  Ｈ）  ２．００  −  ２．０４  （ｍ，  １  Ｈ）  ２．０８  （ｓ，  ３  Ｈ）  ２．１２  （ｓ，  ３  Ｈ）  ２．１９  （ｄ，  Ｊ＝８．８０  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ２．３１  （ｄ，  Ｊ＝１５．５９  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ３．８５  −  ３．９０  （ｍ，  １  Ｈ）  ３．９２  −  ３．９６  （ｍ，  １  Ｈ）  ４．３０  （ｄｄ，  Ｊ＝８．１６，  ４．１３  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ５．０５  （ｄｄ，  Ｊ＝１０．０９，  ８．４４  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ５．２３  （ｄ，  Ｊ＝３．４８  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ５．２９  （ｄｄ，  Ｊ＝１０．４５，  ３．６７  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ５．８３  （ｄ，  Ｊ＝８．２５  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ６．３６  （ｄ，  Ｊ＝７．１５  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ６．３７  （ｄ，  Ｊ＝０．９２  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ７．０６  （ｄ，  Ｊ＝６．９７  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ８．７１  （ｓ，  １  Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１５１  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  １０．０６，  １８．６３，  １９．９７，  ２０．３１，  ２０．４２，  ２１．５７，  ２８．１１，  ２８．５９，  ２９．２２，  ２９．９７，  ３０．０７，  ３１．３１，  ３２．６２，  ３２．８４，  ３４．５７，  ３５．９３，  ３７．７６，  ３８．５２，  ４０．０５，  ４０．２４，  ４１．９７，  ４３．４６，  ４４．５４，  ６１．７６，  ６７．３５，  ６７．８５，  ６９．７８，  ７１．２１，  ９１．６４，  １１７．２９，  １１８．０８，  １２０．１１，  １２６．９３，  １３３．０７，  １４６．３６，  １６２．８６，  １６７．７８，  １６９．２４，  １６９．４１，  １６９．５７，  １６９．９７，  １７６．５１，  １７７．９３．
【０３１４】
実施例３７．化合物ＸＳ０５１４、ＸＳ０５１５の調製
【化７８】
2019523245.tif 000080
【０３１５】
一例としてＸＳ０５１４の合成を取ると：  ５０ｍＬの丸底フラスコにＸＳ０４１９（５０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を秤量し、溶解のために２ｍＬのＤＣＭを加え、次いで−７８℃に移し、そして撹拌し、続いてジエチルアミノスルフルトリフルオリド（ＤＡＳＴ、１５０μＬ、１０当量）を添加し、−７８℃で１時間反応させた。反応溶液を大量の氷に注いで反応を停止させた。水性相をＤＣＭで３回抽出した。有機相を合わせ、飽和ＮａＨＣＯ３で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮した。酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝１：８系を用いてシリカゲルカラムクロマトグラフィーで分離精製し、橙赤色固体を得た。収率５８％。
【０３１６】
１Ｈ  ＮＭＲ  （６００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  ０．６１  （ｓ，  ３  Ｈ）  ０．９５  （ｄ，  Ｊ＝１４．４９  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．０６  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．１８  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２３  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２８  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．４１  （ｄ，  Ｊ＝１４．８６  Ｈｚ，  ２  Ｈ）  １．４７  （ｄｄ，  Ｊ＝１３．８５，  ４．３１  Ｈｚ，  ２  Ｈ）  １．５４  （ｄ，  Ｊ＝７．７０  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．５８  −  １．６３  （ｍ，  ２  Ｈ）  １．７４  −  １．８４  （ｍ，  ２  Ｈ）  １．８８  （ｄ，  Ｊ＝６．０５  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．９４  （ｄ，  Ｊ＝１０．６４  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．９８  （ｄ，  Ｊ＝１０．０９  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ２．０１  （ｓ，  ３  Ｈ）  ２．０７  （ｄ，  Ｊ＝１７．９７  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ２．２４  （ｄ，  Ｊ＝１５．９６  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ２．８９  −  ２．９４  （ｍ，  １  Ｈ）  ３．１６  −  ３．２１  （ｍ，  １  Ｈ）  ５．７４  （ｄ，  Ｊ＝４．７７  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ６．６１  （ｓ，  １  Ｈ）  ７．８１  （ｂｒ．  ｓ．，  １  Ｈ）  ８．７８  （ｂｒ．  ｓ．，  １  Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１５１  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  １１．５６，  １８．６６，  ２２．５７，  ２７．３０，  ２８．２７，  ２９．２１，  ２９．５４，  ２９．９８，  ３０．０２，  ３０．０８，  ３１．１８，  ３３．６９，  ３３．９９，  ３４．１３，  ３６．０５，  ３６．２７，  ３７．１４，  ４０．２５，  ４３．１２，  ４３．４２，  １０８．２１，  １１８．０７，  １２０．１３，  １２３．０２，  １３９．２３，  １４０．６１，  １４３．１７，  １４８．７６，  １６７．６４  （ｄ，  Ｊ＝３８０．７３  Ｈｚ，  １  Ｃ）．
【０３１７】
実施例３８．化合物ＸＳ０５１６の調製
【化７９】
2019523245.tif 000081
【０３１８】
ＸＳ００７７（５０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を２５ｍｌの重壁圧力容器中で秤量し、臭化テトラブチルアンモニウム（ＴＢＡＢ、１７．５ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）を加え、次いで溶解のために２ｍＬのジクロロメタン（ＤＣＭ）を加え、次いで５％ＮａＯＨ（１８０μＬ）を滴下して加えた。混合物を室温で３０分間反応させ、続いて５０℃の油浴に移し、２，３，４，６−テトラアセトキシ−α−Ｄ−グルコピラノースブロミド−ジクロロメタン溶液（５７ｍｇ−１ｍＬ、０．１３８ｍｍｏｌ）を滴下して加え、５０℃で１２時間反応させた。反応を停止させ、大量の水及び飽和食塩水を添加し、混合物をＤＣＭで３回抽出した。有機相を合わせ、減圧下で濃縮した無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、そして酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝４：１を用いるシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して、黄色の固体を得た、収率２５％。
【０３１９】
１Ｈ  ＮＭＲ  （６００  ＭＨｚ，  ＣＨＬＯＲＯＦＯＲＭ−ｄ）  δ  ｐｐｍ  ０．５３  （ｓ，  ３  Ｈ）  ０．９７  （ｄ，  Ｊ＝１４．３１  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．１０  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．１８  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２６  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．３８  （ｔｄ，  Ｊ＝１４．０３，  ４．５８  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．４７  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．５０  （ｄｄ，  Ｊ＝１５．５９，  ４．５８  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．５３  −  １．５６  （ｍ，  １  Ｈ）  １．５８  （ｄ，  Ｊ＝８．２５  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．６２  −  １．６５  （ｍ，  ２  Ｈ）  １．６６  （ｄ，  Ｊ＝５．３２  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．６７  −  １．７２  （ｍ，  ２  Ｈ）  １．７６  −  １．８０  （ｍ，  １  Ｈ）  １．８２  −  １．８７  （ｍ，  １  Ｈ）  １．８７  −  １．９１  （ｍ，  １  Ｈ）  １．９８  （ｓ，  ３  Ｈ）  ２．０１  （ｓ，  ３  Ｈ）  ２．１０  −  ２．１４  （ｍ，  １  Ｈ）  ２．１５  （ｓ，  ３  Ｈ）  ２．１８  （ｓ，  ３  Ｈ）  ２．２３  （ｓ，  ３  Ｈ）  ２．４２  （ｄ，  Ｊ＝１５．７７  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ３．５５  （ｓ，  ３  Ｈ）  ３．８６  （ｔ，  Ｊ＝７．３４  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ４．０６  （ｄｄ，  Ｊ＝１１．１０，  ７．６１  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ４．１６  （ｄｄ，  Ｊ＝１１．１０，  ６．１４  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ５．１１  （ｄｄ，  Ｊ＝１０．３６，  ３．５８  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ５．３１  （ｄ，  Ｊ＝７．８９  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ５．３８  −  ５．４３  （ｍ，  ２  Ｈ）  ６．３１  （ｄ，  Ｊ＝７．１５  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ６．３９  （ｄ，  Ｊ＝１．１０  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ７．０２  （ｄｄ，  Ｊ＝７．０６，  １．０１  Ｈｚ，  １  Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１５１  ＭＨｚ，  ＣＨＬＯＲＯＦＯＲＭ−ｄ）  δ  ｐｐｍ  １１．５４，  １８．３３，  ２０．６１，  ２０．７０，  ２１．０２，  ２１．８６，  ２８．５７，  ２９．５７，  ２９．８５，  ３０．５２，  ３０．８２，  ３１．５５，  ３２．６５，  ３３．６７，  ３４．７０，  ３６．３４，  ３８．２０，  ３９．２４，  ４０．３７，  ４２．３０，  ４４．２７，  ４５．０７，  ５１．５４，  ６０．８１，  ６６．９０，  ６９．０９，  ７０．４９，  ７０．８４，  １００．３７，  １１７．９３，  １２３．３３，  １２６．９２，  １３４．３２，  １３４．９６，  １４５．７１，  １６２．５０，  １７０．０７，  １７０．３３，  １７０．３５，  １７０．３７，  １７０．６１，  １７８．６８，  １７９．１４．
【０３２０】
実施例３９．化合物ＸＳ０５３４の調製
【化８０】
2019523245.tif 000082
【０３２１】
ＸＳ００７７（１５０ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）を秤量し、４ｍＬのアセトンに撹拌しながら溶解し、無水炭酸カリウム（１８０ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ）及び硫酸ジメチル（９５μＬ、０．９６ｍｍｏｌ）を撹拌しながら添加し、混合物を７０℃の油浴下で１２時間反応させた。反応を１ｍｏｌ／ＬのＨＣｌでクエンチし、次いでｐＨ＝７に調整し、そして酢酸エチルで３回抽出した。有機相を合わせ、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧下で溶媒を除去するため濃縮し、そして酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝１：１０系を用いるシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製して白色の固体を得た、収率２４．３％。
【０３２２】
１Ｈ  ＮＭＲ  （６００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  ０．５１  （ｓ，  ３  Ｈ）  ０．８７  −  ０．９２  （ｍ，  １  Ｈ）  １．０６  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．１２  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．１８  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２７  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．３２  −  １．３７  （ｍ，  １  Ｈ）  １．３７  −  １．４２  （ｍ，  １  Ｈ）  １．４７  −  １．５２  （ｍ，  ３  Ｈ）  １．５５  −  １．６１  （ｍ，  ２  Ｈ）  １．６５  （ｄｄ，  Ｊ＝１５．６８，  ８．１６  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．８０  （ｔｄ，  Ｊ＝１３．４３，  ７．２４  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．８４  −  １．９０  （ｍ，  １  Ｈ）  １．９７  （ｔｄ，  Ｊ＝１３．７５，  ４．０３  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ２．０２  （ｓ，  ３  Ｈ）  ２．０６  （ｄ，  Ｊ＝１３．５７  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ２．１２  −  ２．１８  （ｍ，  １  Ｈ）  ２．３３  （ｄ，  Ｊ＝１５．７７  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ２．９５  （ｄｄ，  Ｊ＝２０．１７，  １．４０  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ３．２１  （ｄｄ，  Ｊ＝２０．７２，  ６．２４  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ３．４６  −  ３．５０  （ｍ，  ３  Ｈ）  ３．７７  （ｓ，  ３  Ｈ）  ５．７２  （ｄｄ，  Ｊ＝６．４２，  １．２８  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ６．７２  （ｓ，  １  Ｈ）  ８．１０  （ｓ，  １  Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１５１  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  １１．３５，  １７．６９，  ２２．４１，  ２７．３１，  ２８．４１，  ２９．４２，  ２９．９０，  ３０．１３，  ３０．２５，  ３１．３６，  ３２．３７，  ３４．０１，  ３４．２１，  ３４．３６，  ３６．４１，  ３６．４９，  ３７．１１，  ３９．８５，  ４３．２３，  ４３．８０，  ５１．３７，  ５５．８２，  １０５．２９，  １１７．４８，  １１９．７９，  １２４．５８，  １３９．０３，  １４１．５２，  １４５．８３，  １４８．７３，  １７８．０４．
【０３２３】
実施例４０．化合物ＸＳ０４５５、ＸＳ０５０４の調製
【化８１】
2019523245.tif 000083
【０３２４】
一例としてＸＳ０４５５を取り上げる。最初に、化合物ＹＸＹ１０１（４０ｍｇ、０．０９ｍｍｏｌ）を１．２ｍＬのＴＨＦに攪拌溶解し、続いてサマリウム粉末（７０ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）及びｐ−メチルベンゼンスルホン酸（６７ｍｇ、０．３６ｍｍｏｌ）を加え、室温で４時間攪拌しながら反応させた。前記触媒サマリウム粉末及び不溶物をフリットガラスディスクを備えたブフナー漏斗で濾別し、酢酸エチルで３回（各回１０ｍＬ）洗浄した。ろ液を集め、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、有機溶媒の酢酸エチルとテトラヒドロフランを減圧留去して粗生成物を黄褐色の混合固体として得た。溶離液としてｎ−ヘキサンと酢酸エチル（ヘキサン／酢酸エチル＝２：１）を用いて３００〜４００メッシュのシリカゲルカラムクロマトグラフィーで分離して、黄褐色の固体生成物を得た。
【０３２５】
１Ｈ  ＮＭＲ  （６００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  ０．８２  （１  Ｈ，  ｄ，  Ｊ＝１３．３９  Ｈｚ）  ０．８９  （３  Ｈ，  ｓ）  ０．９４  （３  Ｈ，  ｂｒ．  ｓ．）  ０．９４  （３  Ｈ，  ｂｒ．  ｓ．）  １．０２  （３  Ｈ，  ｓ）  １．１３  （３  Ｈ，  ｓ）  １．２２  （１  Ｈ，  ｄ，  Ｊ＝１５．９６  Ｈｚ）  １．２９  −  １．３４  （１  Ｈ，  ｍ）  １．３６  （１  Ｈ，  ｄｄ，  Ｊ＝１３．３９，  ３．１２  Ｈｚ）  １．６３  −  １．７６  （４  Ｈ，  ｍ）  １．９２  （１  Ｈ，  ｄｄｄ，  Ｊ＝１３．６０，  ４．００  Ｈｚ）  １．９６  −  ２．００  （１  Ｈ，  ｍ）  ２．０２  （１  Ｈ，  ｄ，  Ｊ＝６．９７  Ｈｚ）  ２．０６  （３  Ｈ，  ｓ）  ２．１２  （２  Ｈ，  ｄｄ，  Ｊ＝１３．６６，  ７．０６  Ｈｚ）  ５．４１  （１  Ｈ，  ｄ，  Ｊ＝５．８７  Ｈｚ）  ６．２１  （１  Ｈ，  ｄ，  Ｊ＝９．９０  Ｈｚ）  ６．３１  （１  Ｈ，  ｄ，  Ｊ＝９．９０  Ｈｚ）  ６．５６  （１  Ｈ，  ｓ）  ８．０３  （１  Ｈ，  ｓ）  ９．２０  （１  Ｈ，  ｓ）  １２．０３  （１  Ｈ，  ｂｒ．  ｓ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１５１  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  １１．１８，  １８．８１，  １９．２５，  ２２．４９，  ２３．３９，  ２９．２５，  ３０．５１，  ３０．７５，  ３１．２４，  ３２．６８，  ３２．８２，  ３６．７９，  ３７．２６，  ３８．３７，  ４０．０４，  ４０．２４，  ４３．３８，  ４６．３１，  １０８．５２，  １１９．５０，  １１９．７１，  １２１．０２，  １２２．８４，  １２８．５６，  １３７．３７，  １４２．００，  １４２．９４，  １４４．１６，  １７９．８２．
【０３２６】
実施例４１．化合物ＸＳ０４２０の調製
【化８２】
2019523245.tif 000084
【０３２７】
化合物ＹＸＹ１０１（５０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を５０ｍｌの丸底フラスコに秤量し、ＰＴＳＡ（１００ｍｇ、過剰）及び２ｍＬのトルエンを添加し、混合物を室温で６時間撹拌し、飽和ＮａＨＣＯ３溶液でクエンチし、酢酸エチルで３回抽出した。有機相を合わせ、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、溶媒を除去するために減圧下で濃縮し、そして酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝１：４系を用いるシリカゲルカラムクロマトグラフィーによで分離精製してオフホワイトの固体を収率７０％で得た。
【０３２８】
１Ｈ  ＮＭＲ  （６００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  １．０３  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．０６  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．０７  −  １．１１  （ｍ，  １  Ｈ）  １．１５  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．１８  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２１  −  １．２４  （ｍ，  １  Ｈ）  １．２８  −  １．３２  （ｍ，  １  Ｈ）  １．３７  （ｔｄ，  Ｊ＝１３．７５，  ５．３２  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．４６  （ｄｄ，  Ｊ＝８．６２，  ４．０３  Ｈｚ，  ２  Ｈ）  １．４８  −  １．５０  （ｍ，  ２  Ｈ）  １．５１  −  １．５５  （ｍ，  １  Ｈ）  １．５８  （ｄｄ，  Ｊ＝１２．９３，  １．９３  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．８３  −  １．９０  （ｍ，  ３  Ｈ）  ２．３３  （ｔ，  Ｊ＝１．００  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ２．３６  （ｓ，  ３  Ｈ）  ２．３８  （ｓ，  ３  Ｈ）  ２．８０  −  ２．９２  （ｍ，  ２  Ｈ）  ２．８０  −  ２．９２  （ｍ，  ２  Ｈ）  ７．０６  （ｄ，  Ｊ＝８．６２  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ７．１８  （ｓ，  １  Ｈ）  ７．４９  （ｄ，  Ｊ＝８．４４  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ８．４８  （ｂｒ．  ｓ．，  １  Ｈ）  ９．９２  （ｓ，  １  Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１５１  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  １０．９６，  １９．４５，  ２１．７３，  ２１．９５，  ２３．５１，  ２４．０３，  ２５．４５，  ３０．８９，  ３０．９６，  ３４．５９，  ３５．０８，  ３６．４１，  ３７．９８，  ３８．３０，  ４０．７１，  ４１．７０，  ４３．５０，  ９９．０１，  １０２．９１，  １１５．７４，  １２０．７３，  １２６．０７，  １２７．１７，  １２７．３０，  １２９．０３，  １３２．３６，  １４３．６０，  １４６．１２，  １７５．６８．
【０３２９】
実施例４２．化合物ＸＳ０５０２の調製
【化８３】
2019523245.tif 000085
【０３３０】
化合物ＸＳ００７７（５０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を５０ｍＬ丸底フラスコに秤量し、ＳｅＯ２（２００ｍｇ、過剰）及び２ｍＬのジオキサンを加え、混合物を５５℃で１２時間撹拌した。脱イオン水を加えて反応を停止させ、酢酸エチルで３回抽出した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧下で溶媒を除去するため濃縮し、そして酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝１：１０系を用いるシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製して、オフホワイトの固体を得た、収率１６．８％。
【０３３１】
１Ｈ  ＮＭＲ  （６００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  ０．７５  （ｓ，  ３  Ｈ）  ０．９３  −  ０．９７  （ｍ，  １  Ｈ）  １．１０  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２１  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２２  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．４０  （ｔｄ，  Ｊ＝１４．０８，  ４．１３  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．４９  （ｄｔ，  Ｊ＝１４．５３，  ４．６５  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．７１  −  １．７９  （ｍ，  ２  Ｈ）  １．７９  −  １．８２  （ｍ，  １  Ｈ）  １．８２  −  １．８８  （ｍ，  １  Ｈ）  ２．０７  −  ２．１０  （ｍ，  １  Ｈ）  ２．１０  −  ２．１２  （ｍ，  １  Ｈ）  ２．１３  （ｓ，  ３  Ｈ）  ２．２９  （ｄ，  Ｊ＝１４．３１  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ２．４６  （ｔ，  Ｊ＝４．７７  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ２．５４  （ｓ，  ３  Ｈ）  ３．５０  （ｓ，  ３  Ｈ）  ６．２０  （ｄ，  Ｊ＝９．５４  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ６．４５  （ｄ，  Ｊ＝９．５４  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ７．１１  （ｓ，  １  Ｈ）  ９．４４  （ｓ，  １  Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１５１  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  １１．８８，  １７．４５，  １９．７０，  ２１．８８，  ２６．７８，  ２９．０４，  ３０．３４，  ３０．４２，  ３０．４７，  ３１．０２，  ３４．１９，  ３６．４７，  ４０．０５，  ４０．４３，  ４１．８４，  ４６．１５，  ５１．５８，  １２２．９７，  １２５．７２，  １２５．７８，  １２９．２４，  １３６．２０，  １３９．２２，  １４２．１１，  １４２．４３，  １４４．６１，  １４６．３０，  １７６．９２，  １７８．２５，  １８１．３８．
【０３３２】
本発明の実施形態を詳細に説明したが、開示された教示によれば、本発明の範囲内にある本発明の実施形態の詳細に対して様々な修正及び変更を加えることができる。本発明の全範囲は、添付の特許請求の範囲及びその任意の均等物によって定義される。
【図１】
2019523245.tif 000121
【図２Ａ】
2019523245.tif 000122
【図２Ｂ】
2019523245.tif 000123
【図２Ｃ】
2019523245.tif 000124
【図２Ｄ】
2019523245.tif 000125
【図２Ｅ】
2019523245.tif 000126
【図２Ｆ】
2019523245.tif 000127
【図３Ａ】
2019523245.tif 000128
【図３Ｂ】
2019523245.tif 000129
【図３Ｃ】
2019523245.tif 000130
【図３Ｄ】
2019523245.tif 000131
【図３Ｅ】
2019523245.tif 000132
【図３Ｆ】
2019523245.tif 000133
【図４Ａ】
2019523245.tif 000134
【図４Ｂ】
2019523245.tif 000135
【図４Ｃ】
2019523245.tif 000136
【図４Ｄ】
2019523245.tif 000137
【図４Ｅ】
2019523245.tif 000138
【図５】
2019523245.tif 000139
【図６】
2019523245.tif 000140
【図７】
2019523245.tif 000141
【図８】
2019523245.tif 000142
【図９Ａ】
2019523245.tif 000143
【図９Ｂ】
2019523245.tif 000144
【図９Ｃ】
2019523245.tif 000145
【図１０Ａ】
2019523245.tif 000146
【図１０Ｂ】
2019523245.tif 000147
【図１０Ｃ】
2019523245.tif 000148
【図１０Ｄ】
2019523245.tif 000149
【図１１】
2019523245.tif 000150
【図１２Ａ】
2019523245.tif 000151
【図１２Ｂ】
2019523245.tif 000152
【図１２Ｃ】
2019523245.tif 000153
【図１３】
2019523245.tif 000154
【図１４】
2019523245.tif 000155
【図１５Ａ】
2019523245.tif 000156
【図１５Ｂ】
2019523245.tif 000157
【図１６Ａ】
2019523245.tif 000158
【図１６Ｂ】
2019523245.tif 000159
【図１７】
2019523245.tif 000160
【手続補正書】
【提出日】平成31年3月5日(2019.3.5)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下に示す化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステル。
【化１】
2019523245.tif 000161
（式中、
Ｒ９及びＲ１０がそれぞれ独立して水素、Ｃ１−６アルキル及びアリールからなる群から選択され；
場合によって、Ｒ９及びＲ１０は、それぞれ独立して、水素、Ｃ１−４アルキル、フェニル及びナフチルからなる群から選択され；
場合によって、Ｒ９及びＲ１０は、それぞれ独立して、メチル、エチル及びイソプロピルから選択され；
場合によって、当該化合物は、
【化２】
2019523245.tif 000162
から選択される)
【請求項２】
以下に示す化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステル。
【化３】
2019523245.tif 000163
【請求項３】
抗がん活性を有する薬物をスクリーニングする方法であって、以下のステップ：
（１）オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７を発現するがん細胞を用意し、ネガティブコントロールを設定する（すなわち、Ｎｕｒ７７を発現しない）ステップと、
（２）前記細胞をＴＮＦα及び候補薬剤で処理するステップと、
（３）前記処理された細胞中のＰ−ｍＴＯＲ、ｐ−Ｐ７０Ｓ６Ｋ、及びｐ−Ｓ６のレベルを検出するステップと、
（４）前記細胞及び前記ネガティブコントロール細胞中の対応するタンパク質のレベルを比較し、前記タンパク質レベルの少なくとも１つが低下した場合に、前記候補薬剤は抗がん活性を有すると判断するステップと、
を含む方法。
【請求項４】
オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用のための、（１）〜（３）から選択される化合物、互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステル。
（１）
【化４】
2019523245.tif 000164
（２）
【化５】
2019523245.tif 000165
（３）請求項１に記載の化合物；
（ここで、式Ｉにおいて、
Ｘは−ＮＨ−、−Ｎ（Ｒ）−、−Ｏ−、−ＣＨ２−又はハロゲンを表し；ここで、Ｘがハロゲンである場合、Ｒ１は存在せず；
Ｙと、それに結合している炭素原子との間の結合が単結合である場合、ＹはＨ、ハロゲン、−ＯＲ、−ＳＲ又は−ＮＲＲ’を表し；Ｙと、それに結合している炭素原子との間の結合が二重結合である場合、ＹはＯ、Ｓ又はＮＲを表し；
Ｒ１は存在しないか、又はＨ、−ＰＯ（ＯＲ）２、Ｃ１−６アルキル、グリコシル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル−Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル−アミノアシル、アリール−Ｃ１−６アルキル又はアリールを表し、ここで、前記Ｃ１−６アルキル、グリコシル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル−Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル−アミノアシル、アリール−Ｃ１−６アルキル又はアリールは非置換であるか、又はハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルアミノ及びＣ１−６アルカノイルからなる群から選択される１以上の置換基で置換されており；
Ｒ２はＨ、Ｄ、−ＰＯ（ＯＲ）２、−ＣＯＮＨ２、−ＮＨ２、−ＮＨＲ、−ＮＲＲ’、−ＮＨＣＯＲ、−ＮＲＣＯＲ、−ＮＨＣＯＯＲ、−ＮＨＣＯＮＨＲ、−ＮＨＣＯＮＲＲ’、−ＮＲＣＯＮＨＲ、−ＮＲＣＯＮＲＲ’、−ＯＨ、−ＯＲ、−ＯＣＯＮＨＲ、−ＯＣＯＮＲＲ’、−ＳＨ、−ＳＲ、−ＳＯＲ、−ＳＯＯＲ、−ＳＯ２ＮＨＲ”、ニトロ、ハロゲン、グリコシル、シアノ、トリフルオロメチル、Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル、３員〜８員ヘテロシクロアルキル、アリール、Ｃ１−６アルキル置換アリール、６員〜１５員ヘテロアリール、アルケニル、アルキニル、スルフィニル、スルホン酸基又はスルホネート基を表し；ここで、前記Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル、３員〜８員ヘテロシクロアルキル、アリール、Ｃ１−６アルキル置換アリール、６員〜１５員ヘテロアリール、アルケニル及びアルキニルは非置換であるか、又はアミノ、ハロゲン、ヒドロキシ、オキシ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルチオ、Ｃ１−６アルカノイル、３員〜８員シクロアルキル、３員〜８員オキソシクロアルキル、シアノ、トリフルオロメチル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、Ｃ１−６アルキルアミド、ウレイド基、カルバメート、カルボキシル及びアリールからなる群から選択される１以上の置換基で置換されており；
Ｒ３及びＲ４はそれぞれ独立して存在しないか、又はＨ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルカノイル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、グリコシル、アリール−Ｃ１−６アルキル又はアリールを表し、ここで前記Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルカノイル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、グリコシル、アリール−Ｃ１−６アルキル及びアリールは、非置換であるか、又はハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルアミノ及びＣ１−６アルカノイルからなる群から選択される１以上の置換基で置換されており；
Ｒ及びＲ’はそれぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル、アリール−Ｃ１−６アルキル又はアリールから選択され、ここで、前記Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル、アリール−Ｃ１−６アルキル及びアリールは、非置換であるか、又はハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、及びＣ１−６アルキルアミノからなる群から選択される１以上の置換基で置換されており；
Ｒ”はＣ１−６アルキル又はアリールを表し；
式（Ｉ）における
【化６】
2019523245.tif 000166
は単結合又は二重結合を表す)
【請求項５】
式Ｉにおいて、Ｙと、それに結合している炭素原子との間の結合が二重結合であり、且つ、ＹがＯを表す、請求項４に記載の使用のための化合物。
【請求項６】
式Ｉにおいて、前記化合物中のＸが−ＮＨ−、−Ｎ（Ｒ）−、−Ｏ−、−ＣＨ２−又はハロゲンを表し；ＲがＣ１−６アルキル又は３−員〜８員のシクロアルキルを表し；式中、Ｘがハロゲンである場合、Ｒ１は存在せず；
場合によって、Ｘは−ＮＨ−、−Ｎ（Ｒ）−、−Ｏ−又はハロゲンを表し；Ｒはシクロヘキシルを表す；
請求項４又は５に記載の使用のための化合物。
【請求項７】
式Ｉにおいて、前記化合物中のＲ１が存在しないか、又は水素、Ｃ１−４アルキル、−ＰＯ（ＯＲ）２、モノグリコシル、Ｃ１−４アルコキシカルボニル−Ｃ１−４アルキル、３員〜６員シクロアルキル−アミノアシル、アリール−Ｃ１−４アルキル又はアリールを表し；ここで、前記Ｃ１−４アルキル、モノグリコシル、Ｃ１−４アルコキシカルボニル−Ｃ１−４アルキル、３員〜６員シクロアルキル−アミノアシル、アリール−Ｃ１−４アルキル及びアリールは、非置換であるか、又はハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、Ｃ１−４アルキルアミノ及びＣ１−４アルカノイルからなる群から選択される１以上の置換基で置換され；
場合によって、Ｒ１は存在しないか、又は水素、Ｃ１−４アルキル、−ＰＯ（ＯＲ）２、グルコシル、Ｃ１−２アルコキシカルボニル−Ｃ１−２アルキル、シクロヘキシル−アミノアシル、フェニル−Ｃ１−２アルキル、ナフチル−Ｃ１−２アルキル、フェニル又はナフチルを表し；ここで、前記メチル、エチル、グルコシル、Ｃ１−２アルコキシカルボニル−Ｃ１−２アルキル、シクロヘキシル−アミノアシル、フェニル−Ｃ１−２アルキル、ナフチル−Ｃ１−２アルキル、フェニル又はナフチルは非置換であるか、又はＣ１−２アルキル、Ｃ１−２アルコキシ、及びＣ１−２アルカノイルからなる群から選択される１以上の置換基で置換されており；
ＲはＣ１−４アルキルを表し；
場合によって、Ｒ１は存在しないか、又は水素、Ｃ１−４アルキル、−ＰＯ（ＯＲ）２、フェニル−Ｃ１−２アルキル、Ｃ１−２アルコキシカルボニル−Ｃ１−２アルキル、３員〜６員シクロアルキル−アミノアシルを表し；
ＲはＣ１−３アルキルを表し；
場合によって、Ｒ１は存在しないか、又は水素、メチル、エチル、−ＰＯ（ＯＭｅ）２、−ＰＯ（ＯＥｔ）２、−ＰＯ（ＯｉＰｒ）２、２，３，４，６−テトラアセトキシ−α−Ｄ−グルコピラノシル、ＥｔＯＣＯＣＨ２−、シクロヘキシル−アミノ基アシル、ベンジル、メトキシフェニル又はｔｅｒｔ−ブチルフェニルを表す、
請求項４〜６のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項８】
式Ｉにおいて、前記化合物中のＲ２が、Ｈ、Ｄ、−ＯＨ、−ＰＯ（ＯＲ）２、Ｃ１−６アルキル、９員〜１５員縮合ヘテロアリール又はスルホネートを表し；ここで、前記Ｃ１−６アルキル又は６員〜１５員ヘテロアリールは非置換であるか、又はアミノ、ハロゲン、ヒドロキシ、オキシ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルカノイル、シアノ、トリフルオロメチル及びカルボキシルからなる群から選択される１以上の置換基で置換されており；
ＲはＨ、Ｃ１−６アルキル又はアリールを表し；
場合によって、Ｒ２はＨ、Ｄ、−ＰＯ（ＯＲ）２、Ｃ１−４アルキル、９員〜１５員ベンゾ縮合ヘテロアリール又はスルホネートを表し；ここで、前記Ｃ１−４アルキル又は９員〜１５員ベンゾ縮合ヘテロアリールは、非置換であるか、又はアミノ、ハロゲン、ヒドロキシ、オキシ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、Ｃ１−４アルカノイル、シアノ、トリフルオロメチル及びカルボキシルからなる群から選択される１以上の置換基で置換されており；
ＲはＨ、Ｃ１−４アルキル又はフェニルを表し；
場合によって、Ｒ２はＨ、Ｄ、−ＰＯ（ＯＲ）２、Ｃ１−４アルキル、９員〜１５員ベンゾ縮合ヘテロアリール又はスルホネートを表し；ここで、前記Ｃ１−４アルキル及び９員〜１５員ベンゾ縮合ヘテロアリールは、非置換であるか、又はアミノ、ハロゲン、ヒドロキシ、オキシ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、Ｃ１−４アルカノイル、シアノ、トリフルオロメチル及びカルボキシルからなる群から選択される１以上の置換基で置換されており；
ＲはＨ、Ｃ１−４アルキル又はフェニルを表し；
場合によって、Ｒ２はＨ、Ｄ、−ＰＯ（ＯＲ）２、２−オキソフェニル、インドリル又はスルホン酸ナトリウムを表し；ここで、前記インドリルは非置換であるか、又はアミノ、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヒドロキシ、メチル、メトキシ、ホルミル、シアノ、トリフルオロメチル及びカルボキシからなる群から選択される１以上の置換基で置換されており；
ＲはＨ、メチル、エチル、イソプロピル又はフェニルを表す：
請求項４〜７のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項９】
式Ｉにおいて、前記化合物の７位炭素及び８位の炭素が炭素−炭素二重結合で結合している、請求項４〜８のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項１０】
式Ｉにおいて、前記化合物におけるＹと、それに結合している炭素原子との間の結合が、炭素−炭素二重結合である、請求項４〜９のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項１１】
前記化合物におけるＹと、それに結合している炭素原子との間の結合が、炭素−炭素単結合である、請求項４〜９のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項１２】
式Ｉの前記化合物が以下の構造を有する、請求項４に記載の使用のための化合物。
【化７】
2019523245.tif 000167
（式中、Ｒ３及びＲ４はそれぞれ独立してＨ、Ｃ１−６アルキル又はＣ１−６アルカノイルを表し；
場合によって、Ｒ３及びＲ４はそれぞれ独立してＨ、Ｃ１−４アルキル又はＣ１−４アルカノイルを表し；
場合によって、Ｒ３及びＲ４はそれぞれ独立してＨ、メチル又はブチリルを表す）
【請求項１３】
式Ｉの前記化合物が以下の構造を有する、請求項４に記載の使用のための化合物。
【化８】
2019523245.tif 000168
（式中、Ｒ４はＨ、Ｃ１−６アルカノイル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル又は１以上のＣ１−６アルカノイル基で置換されたモノグリコシルを表し；
場合によって、Ｒ４はＨ、Ｃ１−４アルカノイル、Ｃ１−４アルコキシカルボニル又は１以上のＣ１−４アルカノイル基で置換されたモノグリコシルを表し；
場合によって、Ｒ４はＨ又はＣ１−２アルコキシカルボニルを表し；
場合によって、Ｒ４はＨ、ブチリル、エトキシカルボニル又は２，３，４，６−テトラアセトキシ−α−Ｄ−グルコピラノースを表す）
【請求項１４】
式Ｉの前記化合物が、以下の化合物から選択される、請求項４に記載の使用のための化合物。
【化９】
2019523245.tif 000169
【化１０】
2019523245.tif 000170
【化１１】
2019523245.tif 000171
【化１２】
2019523245.tif 000172
【請求項１５】
請求項４〜１３のいずれか一項に記載の使用のための化合物であって、前記化合物は、
（１）Ｎｕｒ７７の転写活性を阻害する；
（２）細胞におけるＴＮＦαの生物学的作用を阻害する；
（３）細胞におけるｍＴＯＲ経路を阻害する；又は
（４）それを必要とする対象におけるＮｕｒ７７関連疾患を予防又は治療する；
ためのものであり；
場合によって、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬が、細胞におけるＮｕｒ７７の転写活性を阻害するためのものであり；
場合によって、ＴＮＦαの前記生物学的作用は、κＢ阻害タンパク質（ＩκＢ）キナーゼα／β（ＩＫＫα／β）のリン酸化、ＩκＢαの分解、ＮＦ−κＢのｐ６５サブユニットの核内移行、及び／又はＮＦ−κＢの活性化であり；
場合によって、ｍＴＯＲ経路を阻害することは、Ｐ−ｍＴＯＲ、ｐ−Ｐ７０Ｓ６Ｋ、及び／又はｐ−Ｓ６の活性をダウンレギュレートすることを意味し；
場合によって、前記Ｎｕｒ７７関連疾患はがんであり；
場合によって、前記がんはトリプルネガティブ乳がんであり；
場合によって、前記細胞はＮｕｒ７７を発現し；
場合によって、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、及び前立腺がん細胞から選択される；
使用のための化合物。
【手続補正書】
【提出日】令和1年6月20日(2019.6.20)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
技術分野
本出願は医学及び生物学の分野に関する。特に、本願は、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７の新規リガンド及びその使用に関する。本出願はまた、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとしての式Ｉ〜式Ｖの化合物の使用に関する。本出願はまた、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７に関連する疾患の予防又は治療のための式Ｉ〜式Ｖの化合物の使用に関する。本出願はまた、抗がん（特にトリプルネガティブ乳がん）活性を有する薬物のスクリーニング方法に関する。本出願はまた、核内受容体Ｎｕｒ７７を試験指標として用いて、トリプルネガティブ乳がんなどの診断及び治療効果を評価する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
背景技術
ＮＧＦＩＢ（神経成長因子ＩＢ）又はオーファン核内受容体ＴＲ３とも称するオーファン核内受容体Ｎｕｒ７７は、がんの発病、代謝及び炎症性疾患における重要な調節因子である。即時初期応答遺伝子として、Ｎｕｒ７７は、さまざまな刺激、例えばサイトカイニン、ホルモン、ストレス、代謝、及びアポトーシスシグナル、によって引き起こされる、生存、アポトーシス、炎症、及び自食作用を包含する多数の細胞プロセスにおいて中心的役割を果たしている。（Ｐｅｉ  Ｌ，  ｅｔ  ａｌ．，  （２００６），  “Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｇｅｎｅ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｂｙ  ｔｈｅ  ｏｒｐｈａｎ  ｎｕｃｌｅａｒ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  Ｎｕｒ７７”，  Ｍｏｌ．  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．  ２０  （４）：  ７８６−９４；  Ｚｈａｎｇ  ＸＫ  （２００７），  “Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  Ｎｕｒ７７  ｔｒａｎｓｌｏｃａｔｉｏｎ”，  Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ．  Ｔｈｅｒ．  Ｔａｒｇｅｔｓ  １１  （１）：  ６９−７９）。アポトーシスにおけるＮｕｒ７７の効果は１９９４年に最初に発見された。そこでは、Ｔ細胞受容体シグナル伝達はＮｕｒ７７発現を誘導し、Ｎｕｒ７７発現はＴ細胞受容体媒介アポトーシス中に増加する。（Ｗｏｒｏｎｉｃｚ  ＪＤ，  Ｃａｌｎａｎ  Ｂ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｏｒｐｈａｎ  Ｓｔｅｒｏｉｄ−Ｒｅｃｅｐｔｏｒ  Ｎｕｒ７７  ｉｎ  Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ  ｏｆ  Ｔ−Ｃｅｌｌ  Ｈｙｂｒｉｄｏｍａｓ．  Ｎａｔｕｒｅ，  ３６７：２７７−８１，  １９９４；  Ｌｉｕ  ＺＧ，  Ｓｍｉｔｈ  ＳＷ，  ｅｔ  ａｌ．  Ａｐｏｐｔｏｔｉｃ  Ｓｉｇｎａｌｓ  Ｄｅｌｉｖｅｒｅｄ  ｔｈｒｏｕｇｈ  ｔｈｅ  Ｔ−Ｃｅｌｌ  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｏｆ  ａ  Ｔ−Ｃｅｌｌ  Ｈｙｂｒｉｄ  Ｒｅｑｕｉｒｅ  ｔｈｅ  Ｉｍｍｅｄｉａｔｅ−Ｅａｒｌｙ  Ｇｅｎｅ  Ｎｕｒ７７．  Ｎａｔｕｒｅ，  ３６７：２８１−４，  １９９４）。レチノイド化合物ＡＨＰＮ（ＣＤ４３７としても知られている）の研究において、我々は腫瘍細胞アポトーシスにおけるＮｕｒ７７の役割を発見した。研究は、Ｎｕｒ７７は核から細胞質に移動し、様々なアポトーシスシグナルの刺激によりミトコンドリアに局在し、Ｎｕｒ７７のミトコンドリア位置は、チトクロムｃ（Ｃｙｔｏｃｈｏｒｏｍｅ  ｃ，Ｃｙｔ  ｃ）の放出及びアポトーシスに関連していることを示した。ＤＮＡ結合ドメインを欠くＮｕｒ７７は、ミトコンドリア上に構成的に位置することができ、大量のチトクロムｃをミトコンドリアから放出させてアポトーシスを誘導することを可能にする。（Ｌｉ  Ｙ，  Ｌｉｎ  ＢＺ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｄｅｔｅｒｍｉｎａｎｔｓ  ｏｆ  ＡＨＰＮ  （ＣＤ４３７）−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｇｒｏｗｔｈ  ａｒｒｅｓｔ  ａｎｄ  ａｐｏｐｔｏｓｉｓ  ｉｎ  ｈｕｍａｎ  ｌｕｎｇ  ｃａｎｃｅｒ  ｃｅｌｌ  ｌｉｎｅｓ．  Ｍｏｌ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ，  １９９８，  １８（８）；  ４７１９−４７３１；  Ｌｉ  Ｈ，  Ｋｏｌｌｕｒｉ  ＳＫ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｃｙｔｏｃｈｒｏｍｅ  ｃ  ｒｅｌｅａｓｅ  ａｎｄ  ａｐｏｐｔｏｓｉｓ  ｉｎｄｕｃｅｄ  ｂｙ  ｍｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａｌ  ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｏｆ  ｎｕｃｌｅａｒ  ｏｒｐｈ���ｎ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ＴＲ３，  Ｓｃｉｅｎｃｅ，  ２０００，  ２８９（５４８２）；  １１５９−１１６４；  Ｌｉｎ  Ｂ，  Ｋｏｌｌｕｒｉ  ＳＫ，  ｅｔ  ａｌ．  Ｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎ  ｏｆ  Ｂｃｌ−２  ｆｒｏｍ  ｐｒｏｔｅｃｔｏｒ  ｔｏ  ｋｉｌｌｅｒ  ｂｙ  ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ  ｗｉｔｈ  ｎｕｃｌｅａｒ  ｏｒｐｈａｎ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  Ｎｕｒ７７／ＴＲ３，  Ｃｅｌｌ，  ２００４，  １６；  ５２７  −５４０）。Ｎｕｒ７７の細胞質への移行及びミトコンドリアへの転位置は、そのアポトーシス促進効果にとって必須の条件である。したがって、多くの薬物がミトコンドリアへのＮｕｒ７７の転座を介して、腫瘍細胞のアポトーシス及び他の主要な疾患を誘導し、そしてＮｕｒ７７ミトコンドリア転座は新しい薬物の開発のための有効な標的となる。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
乳がんは女性の健康の「ナンバーワンキラー」である。最新の調査データによると、世界中で１人の女性が３分ごとに乳がんと診断されている。中国では、乳がんの発生率と死亡率は女性において年々増加しており、女性の悪性腫瘍の発生率が最も高くなっている。乳がんが女性の悪性腫瘍死亡率で最初にランクされる理由は、その高い転移性、特にネガティブトリプルネガティブ乳がん（ＴＮＢＣ）であり、そのうちエストロゲン受容体（ＥＲ）、プロゲステロン受容体（ＰＲ）及びがん原遺伝子Ｈｅｒ−２は全てネガティブであり、その典型的な特徴は高い転移性、予後不良、内分泌療法に対する鈍感性、及びこれまでのところ治療に有効な薬物がないことである。以前の研究は、初期の応答遺伝子としてのＮｕｒ７７は、多くの重要な生命過程、例えば細胞増殖、アポトーシス、胚発生及び血管新生など、を調節すること、その発現又は機能不全は腫瘍を包含する一連の疾患を引き起こし得ることを見出した。Ｎｕｒ７７は、通常、正常組織では発現されないか又は低レベルで発現されるが、腫瘍の発生及び治療中に大量に誘導され得る。その誘導された発現は、細胞の生死を決定する細胞増殖及びアポトーシスの二重の効果を媒介することができ、そしてこれら二つの相反する現象は細胞内の異なる刺激及び異なるＮｕｒ７７の位置に依存する。最近の研究は、Ｎｕｒ７７がＴＮＦαのような炎症性因子の刺激下でそのリガンドに特異的に結合することができること、細胞質転座を介してミトコンドリアの機能を調節することによって抗炎症活性を発揮することを示した。
【０００４】
以前の研究では、我々は、乳がん、特にトリプルネガティブ乳がんの発症には、炎症反応及びｍＴＯＲシグナル伝達経路の高活性化をも伴うことを見出した。慢性炎症も乳がん発症の重要な基礎であり、他の腫瘍に有効な多くの非ステロイド系抗炎症薬も乳がんの予防及び治療に使用されている。したがって、炎症性因子によって容易に調節され、且つ、乳がんの調節において重要な役割を果たすＮｕｒ７７に基づいて、トリプルネガティブ乳がんの治療薬を開発するために、Ｎｕｒ７７に特異的に結合する有効なリガンドが求められており、これもまた重要な実用的意義を有する。したがって、本出願は、抗がん剤をスクリーニングするための新規な方法を確立する。すなわち、Ｎｕｒ７７は、がん（例えばトリプルネガティブ乳がんなど）を治療するための新規化合物分子を開発するため、Ｎｕｒ７７に特異的に結合する有効なリガンドを見出すための標的として使用される。本出願は、試験指標としてＮｕｒ７７を使用することによってがん（例えばトリプルネガティブ乳がんなど）の発症を評価及び診断するための方法を確立する。
【０００５】
海洋の生態学的環境は陸地とはかなり異なるため、海洋生物の小分子代謝産物の生合成経路もまた非常に異なる。それ故、海洋天然物は、多種多様な生物学的活性を有する、構造的に独特の化合物を多数含有する。例えば、ステロイド及びステロイド化合物は、良好な抗腫瘍活性及び免疫調節活性などを有する。本出願の発明者らは、広範な実験的研究を通じて五環式トリテルペノイドの新しいクラスＹＸＹ１０１及びその誘導体を発見した。当該化合物は、Ｎｕｒ７７に結合することができ、ｍＴＯＲシグナル伝達経路を阻害し、それによって腫瘍形成を阻害する。従って、本出願は有望な化合物を提供する。そして、本発明の化合物がＮｕｒ７７を発現する細胞に作用し、且つ、Ｎｕｒ７７によって媒介されるｍＴＯＲシグナル伝達経路を調節することは特に有利である。これは、本発明者らによって新たに発見されたものであり、トリプルネガティブ乳がん及び他のがん（例えば、肝臓がん、子宮頸がん、肺がん、トリプルポジティブ乳がん、結腸直腸がん又は前立腺がん）の治療に使用することができる。
【０００６】
発明の概要
本発明において、本明細書で使用される科学的及び技術的用語は、他に述べない限り、当業者によって一般的に理解される意味を有する。さらに、本明細書で使用される細胞培養、分子遺伝学、核酸化学、及び免疫学実験室操作の手順はすべて従来通りであり、且つ、対応する技術分野で広く使用されている。一方、本発明をよりよく理解するために、関連用語の定義及び説明を以下に提供する。
【０００７】
本明細書中で使用される場合、用語「互変異性体」とは、分子中の２つの位置間における原子の急速な移動によって形成される官能基異性体をいう。そのような互変異性体の典型例はケト−エノール互変異性体である。本明細書に記載の化合物は互変異性形態で存在することがあり、したがって、すべての可能な互変異性体、及びそれらのいずれの組み合わせ又はいずれの混合物を包含する。
【０００８】
本明細書中で使用される場合、用語「立体異性体」とは、同一順序の原子又は原子団を有するが空間配置が異なる分子の異性体をいう。本出願において、化合物の「立体異性」は、コンフォメーショナルな(conformational)異性とコンフィギュレーショナル(configurational)立体配置異性とに分けられ、前記コンフォメーショナルな異性はさらにシス−トランス異性と光学異性とに分けられる。したがって、本出願において、「立体異性体」は、全ての可能な光学異性体及びジアステレオ異性体、並びにそれらのいずれの組み合わせ、例えばラセミ体（ラセミ混合物）、単一のエナンチオマー、ジアステレオマーの混合物、単一のジアステレオマー、を包含する。例えば、本発明の化合物が炭素−炭素二重結合を含有する場合、それは、他に特定されない限り、そのシス異性体及びトランス異性体、並びにそれらのいずれの組み合わせを包含する。
【０００９】
本明細書で使用する場合、用語「医薬的に許容可能な塩」は、
（１）本発明の化合物における酸性官能基（例えば、−ＣＯＯＨ、−ＯＨ、−ＳＯ３Ｈ等）と、好適な無機もしくは有機カチオン（アルカリ）とにより形成された塩、例えば本発明の化合物とアルカリ金属もしくはアルカリ土類金属とにより形成された塩、本発明の化合物のアンモニウム塩、及び本発明の化合物と含窒素有機塩基とにより形成された塩；並びに
（２）本発明の化合物と、好適な向きもしくは有機アニオン（酸）を有する塩基性官能基（例えば、−ＮＨ２など）とにより形成された塩、例えば本発明の化合物と、無機酸もしくは有機カルボン酸とにより形成された塩；
を意味する。
【００１０】
したがって、本発明の化合物の「医薬的に許容可能な塩」は、アルカリ金属塩、例えばナトリウム塩、カリウム塩、リチウム塩など；アルカリ土類金属塩、例えばカルシウム塩、マグネシウム塩など；その他の金属塩、例えばアルミニウム塩、鉄塩、亜鉛塩、銅塩、ニッケル塩、コバルト塩など；無機アルカリ塩、例えばアンモニウム塩など；有機塩基塩、例えばｔ−オクチルアミン塩、ジベンジルアミン塩、モルホリン塩、グルカミン塩、フェニルグリシンアルキルエステル塩、エチレンジアミン塩、Ｎ−メチルグルカミン塩、グアニジン塩、ジエチルアミン塩、トリエチルアミン塩、ジシクロヘキシルアミン塩、Ｎ、Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン塩、クロロプロカイン塩、プロカイン塩、ジエタノールアミン塩、Ｎ−ベンジル−フェネチルアミン塩、ピペラジン塩、テトラメチルアミン塩、トリ（ヒドロキシル）アミノメタン塩；ハイドロハライド塩、例えばフッ化水素酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、及びヨウ化水素酸塩など；無機酸の塩、例えば硝酸塩、過塩素酸塩、硫酸塩、リン酸塩など；低級アルキルスルホネート、例えばメシレート、トリフレート、及びエタンスルホネートなど；アリールスルホネート、例えばベシレート、及びｐ−ベンゼンスルホネートなど；有機酸の塩、例えば酢酸塩、リンゴ酸塩、フマル酸塩、コハク酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、シュウ酸塩、及びマレイン酸塩など；並びにアミノ酸の塩、例えばグリシン酸塩、トリメチルグリシン酸塩、アルギニン塩、オルニチン塩、グルタミン酸塩、及びアスパラギン酸など；
を包含するが、これらに限定されない。
【００１１】
本明細書中で使用される場合、用語「医薬的に許容可能なエステル」とは、本発明の化合物と、前記化合物がカルボキシル基を含有する場合、アルコールとのエステル化によって形成されるエステルか、又は本発明の化合物と、前記化合物がヒドロキシル基を含有する場合、有機酸、無機酸、もしくは有機酸の塩等とのエステル化によって形成されるエステルを意味する。前記エステルは、酸又は塩基の存在下で加水分解して対応する酸又はアルコールを形成することができる。
【００１２】
本明細書で使用される場合、用語「Ｃ１−６アルキル」は、１〜６個の炭素原子を有する直鎖又は分枝鎖アルキル、例えばメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、イソペンチル、２−メチルブチル、ネオペンチル、１−エチルプロピル、ｎ−ヘキシル、イソヘキシル、３−メチルペンチル、２−メチルペンチル、１−メチルペンチル、３，３−ジメチルブチル、２，２−ジメチルブチル、１，１−ジメチルブチル、１，２−ジメチルブチル、１，３−ジメチルブチル、２，３−ジメチルブチル、２−エチルブチル、１，２−ジメチルプロピルなどを意味する。前記Ｃ１−６アルキルの好ましい例は、Ｃ１−５アルキル、Ｃ１−４アルキル基、及びＣ１−３アルキル基を包含する。本発明において使用される場合、前記「Ｃ１−４アルキル」は、１〜４個の炭素原子を有する直鎖又は分岐鎖アルキルを意味し、１〜４個の炭素原子を有する上記の例の範囲内の具体例を包含するが、これらに限定されない。
【００１３】
本明細書中で使用される場合、用語「アルケニル」とは、少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を含有する直鎖又は分枝鎖炭化水素基を意味し、その典型例は、Ｃ２−１０アルケニル基、例えばＣ２−６アルケニル基又はＣ２−４アルケニル基である。具体例としては、ビニル、プロペニル、２−プロペニル、ブテニル、２−ブテニル、ブタジエニル、ペンテニル、２−メチル−ブテニル、３−メチル−ブテニル、１，３−ペンタジエニル、１，４−ペンタジエニル、ヘキセニル、２−エチル−ブテニル、３−メチル−ペンテニル、４−メチルペンテニル、１，３−ヘキサジエニル、１，４−ヘキサジエニル、１，５−ヘキサジエニル基等を包含するが、これらに限定されない。
【００１４】
本明細書中で使用される場合、用語「アルキニル」とは、少なくとも１つの炭素−炭素三重結合を含有する直鎖又は分枝鎖炭化水素基を意味し、その典型例は、Ｃ２−１０アルキニル基、例えばＣ２−６アルキニル基又はＣ２−４アルキニル基など、である。具体例としては、エチニル、プロピニル、２−プロピニル、ブチニル、２−ブチニル、２−メチル−プロピニル、ブタジニル、ペンチニル、２−メチル−ブチニル、３−メチル−ブチニル、１，３−ペンタジイニル、１，４−ペンタジイニル、ヘキシニル、２−エチル−ブチニル、３−メチルペンチニル、４−メチルペンチニル、１，３−ヘキサジイニル、１，４−ヘキサジイニル、１，５−ヘキサジイニルなど、を包含するが、これらに限定されない。
【００１５】
本明細書中で使用される場合、用語「シクロアルキル」とは、単環式飽和アルキルを意味し、その典型的な例は、３員〜８員シクロアルキル、例えば３員、４員、５員、６員、７員又は８員シクロアルキル、である。本明細書で使用されるとき、用語「３員〜８員シクロアルキル」は、３〜８個の炭素原子を含有するシクロアルキルを指す。具体例としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチルなど、を包含するが、これらに限定されない。
【００１６】
本明細書中で使用される場合、用語「ヘテロシクロアルキル」とは、Ｎ、Ｏ及びＳから選択される少なくとも１個から最大４個まで（例えば、１、２、３又は４個）のヘテロ原子を含有するシクロアルキルを意味し、ここで「シクロアルキル」の定義は前記の通りであり、その典型例は３員〜８員ヘテロシクロアルキル基、例えば３員、４員、５員、６員、７員又は８員ヘテロシクロアルキル、である。本明細書で使用されるとき、用語「３員〜８員ヘテロシクロアルキル」は、３〜８個の炭素原子を含有するヘテロシクロアルキル基を指す。本明細書で使用される場合、「３員〜８員オキソシクロアルキル」は、ヘテロ原子がＯである、上で定義されたような３員〜８員ヘテロシクロアルキルを意味する。その具体例としては、エポキシエチル、オキソシクロブチル、ピロリジニル、テトラヒドロフラニル、ピペリジニル、ピペラジニル、モルホリニル、チオモルホリニルなどを包含するが、これらに限定されない。
【００１７】
本明細書で使用されるとき、用語「アリール」は芳香族基を指し、その典型的な例は６員〜１４員のアリール基、例えば６〜１０員のアリール基である。本明細書で使用されるとき、用語「６員〜１４員のアリール」は、６〜１４個の炭素原子を含有する単環式、二環式又は多環式芳香族基を指し、例えば、６員〜８員のアリール及び８員〜１４員のアリールを包含する。６員〜８員アリール基とは、６〜８個の炭素原子を有するアリール基、例えばフェニル基、を意味する。８員〜１４員の縮合環アリール基は、２個の隣接炭素原子を共有する２個以上の環構造によって形成された８〜１４個の環形成炭素原子を含有する不飽和芳香族縮合環を意味し、その具体例としては、ナフタレン、アントラセン、フェナントレンなどを包含するが、これらに限定されない。用語「６員〜１０員アリール」は、６〜１０個の炭素原子を有する芳香族基を意味し、これには、上記の例の範囲内の６〜１０個の環原子を有する芳香族基が含まれるが、これらに限定されない。
【００１８】
本明細書で使用されるとき、用語「アリール−Ｃ１−６アルキル」は、アリール−Ｃ１−６アルキルの形態の基を指し、ここで、「アリール」及び「Ｃ１−６アルキル」は、上で定義された通りである。
【００１９】
本明細書で使用されるとき、用語「Ｃ１−６アルコキシ」は、Ｃ１−６アルキル−Ｏ−の形態の基を意味し、ここで、「Ｃ１−６アルキル」は上で定義された通りである。
【００２０】
本明細書で使用されるとき、用語「Ｃ１−６アルキルアミノ」は、Ｃ１−６アルキル−ＮＨ−の形態の基を指し、ここで、「Ｃ１−６アルキル」は上で定義された通りである。
【００２１】
本明細書で使用されるとき、用語「Ｃ１−６アルキルチオ」は、Ｃ１−６アルキル−Ｓ−の形態の基を指し、ここで、「Ｃ１−６アルキル」は上で定義された通りである。
【００２２】
本明細書で使用されるとき、用語「Ｃ１−６アルカノイル」は、Ｃ１−５アルキル−Ｃ（Ｏ）−の形態の基を指し、ここで、「Ｃ１−５アルキル」は上記で定義された通りである。
【００２３】
本明細書で使用されるとき、用語「Ｃ１−６アルコキシカルボニル」は、Ｃ１−６アルキル−ＯＣ（Ｏ）−の形態の基を指し、ここで、「Ｃ１−６アルキル」は、上で定義された通りである。
【００２４】
本明細書で使用される場合、用語「Ｃ１−６アルコキシカルボニル−Ｃ１−６アルキル」は、Ｃ１−６アルキル−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−６アルキルの形態の基を指し、ここで、「Ｃ１−６アルキル」は上で定義された通りである。
【００２５】
本明細書で使用されるとき、用語「３員〜８員シクロアルキル−アミノアシル」は、３員〜８員シクロアルキル−ＮＨＣ（Ｏ）−の形態の基を指し、ここで、「３員〜８員シクロアルキル」は、上で定義された通りである。
【００２６】
本明細書で使用されるとき、用語「ハロゲン」は、例えば、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、及びヨウ素原子を包含する。
【００２７】
本明細書中で使用される場合、用語「６員〜１５員ヘテロアリール基」とは、６〜１５個の環原子を含有し、そしてそのうちの少なくとも１個がヘテロ原子である芳香族基をいう。６員〜１５員ヘテロアリール基は、「５員〜８員ヘテロアリール基」、例えば「５員〜７員ヘテロアリール基」、「５員〜６員ヘテロアリール基」等、を包含する。「５員〜８員ヘテロアリール」の具体例としては、フリル、チエニル、ピロリル、チアゾリル、イソチアゾリル、チアジアゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、オキサジアゾリル、イミダゾリル、ピラゾリル、１，２，３−トリアゾリル、１，２，４−トリアゾリル、１，２，３−オキサジアゾリル、１，２，４−オキサジアゾリル、１，２，５−オキサジアゾリル、１，３，４−オキサジアゾリル、ピリジル、２−ヒドロキシ−ピリジル、４−ヒドロキシ−ピリジル、ピリミジニル、１，４−ジオキサシクロヘキサジエニル、２Ｈ−１，２−オキサジニル、４Ｈ−１，２−オキサジニル、６Ｈ−１，２−オキサジニル、４Ｈ−１，３−オキサジニル、６Ｈ−１，３−オキサジニル、４Ｈ−１，４−オキサジニル、ピリダジニル、ピラジニル、１，２，３−トリアジニル、１，３，５−トリアジニル、１，２，４，５−テトラアジニル、アザシクロヘプタトリエニル、１，３−ジアザシクロヘプタトリエニル、アザシクロオクタテトラエニルを包含するが、これらに限定されない。６員〜１５員ヘテロアリール基はまた、「９員〜１５員縮合ヘテロアリール基」（例えば、９員〜１５員ベンゾヘテロアリール基）を包含し、そしてその具体例は、ベンゾフラニル、ベンゾイソフラニル、ベンゾチエニル、インドリル、イソインドリル、ベンゾオキサゾリル、ベンズイミダゾリル、インダゾリル、ベンゾトリアゾリル、キノリル、２−ヒドロキシ−キノリル、４−ヒドロキシ−キノリル、１−ヒドロキシ−イソキノリル、イソキノリル、アクリジニル、フェナントリジニル、ベンゾピリダジニル、フタラジニル、キナゾリニル、キノキサリニル、フェノールジニル、プテリジニル、プリニル、ナフチリジニル、フェナジニル、フェノチアジニルなど、を包含するが、これらに限定されない。
【００２８】
本明細書で使用されるとき、用語「細胞」は、特に好ましくは、Ｎｕｒ７７を発現する細胞を指す。本発明の化合物は、Ｎｕｒ７７に特異的に結合し、且つそのリガンドとして機能することができる。したがって、本発明の化合物が、Ｎｕｒ７７を発現する細胞に作用し、そして新たに発見されたＮｕｒ７７媒介炎症及びｍＴＯＲシグナル伝達経路を調節することは特に有利である。好ましい態様において、細胞はトリプルネガティブ乳がん又は他のがんの細胞である（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）。
【００２９】
本明細書で使用されるとき、用語「オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７」又は「Ｎｕｒ７７」は、ＮＲ４Ａ１遺伝子によってコードされる神経成長因子ＩＢ（ＮＧＦＩＢ）を指す（Ｃｈａｎｇ  Ｃ  ｅｔ  ａｌ．  （１９８９），  “Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｈｕｍａｎ  ＴＲ３  ｒｅｃｅｐｔｏｒ：  ａ  ｍｅｍｂｅｒ  ｏｆ  ｓｔｅｒｏｉｄ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｓｕｐｅｒｆａｍｉｌｙ”，  Ｊ．  Ｓｔｅｒｏｉｄ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．  ３４（１−６）：  ３９１−５）。Ｎｕｒ７７は、細胞周期、炎症、及びアポトーシスなどのプロセスに関与し、その細胞内局在は細胞の生存及び死に関連する（Ｐｅｉ  Ｌ  ｅｔ  ａｌ．  （２００６），  “Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ｇｅｎｅ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｂｙ  ｏｒｐｈａｎ  ｎｕｃｌｅａｒ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  Ｎｕｒ７７”，  Ｍｏｌ．  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．  ２０（４）：  ７８６−９４；  Ｚｈａｎｇ  ＸＫ  （２００７），  “Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  Ｎｕｒ７７  ｔｒａｎｓｌｏｃａｔｉｏｎ”，  Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ．  Ｔｈｅｒ．  Ｔａｒｇｅｔｓ  １１（１）：  ６９−７９）。
【００３０】
本明細書中で使用される場合、用語「Ｎｕｒ７７関連疾患」とは、その発生及び／又は進行がＮｕｒ７７シグナル伝達経路と関連する、疾患を指す。研究は、Ｎｕｒ７７が細胞周期、炎症及びアポトーシスのようなプロセスに関与し、そしてその細胞内局在化が細胞の生存及び死に関連することを示した（同書）。加えて、Ｎｕｒ７７は、生理学的刺激、例えば脂肪酸、プロスタグランジン、成長因子、炎症性サイトカイン、ペプチドホルモンなど、並びに物理的刺激、例えば磁場、機械的攪拌（せん断力）、膜の脱分極など、を包含する様々な刺激によって誘発され得ることが報告されている（Ｍａｘｗｅｌｌ  ＭＡ，  Ｍｕｓｃａｔ  ＧＥ  （２００６），  “Ｔｈｅ  ＮＲ４Ａ  ｓｕｂｇｒｏｕｐ：  ｉｍｍｅｄｉａｔｅ  ｅａｒｌｙ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｇｅｎｅｓ  ｗｉｔｈ  ｐｌｅｉｏｔｒｏｐｉｃ  ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ｒｏｌｅｓ”，  Ｎｕｃｌ  Ｒｅｃｅｐｔ  Ｓｉｇｎａｌ  ４：  ｅ００２）。加えて、Ｎｕｒ７７はいくつかの固形腫瘍の転移にも関与していることが示されている（Ｒａｍａｓｗａｍｙ  Ｓ，  Ｒｏｓｓ  ＫＮ，  Ｌａｎｄｅｒ  ＥＳ，  Ｇｏｌｕｂ  ＴＲ  （２００３），  “Ａ  ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｓｉｇｎａｔｕｒｅ  ｏｆ  ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ  ｉｎ  ｐｒｉｍａｒｙ  ｓｏｌｉｄ  ｔｕｍｏｒｓ”，  Ｎａｔ．  Ｇｅｎｅｔ．  ３３（１）：  ４９−５４）。加えて、Ｎｕｒ７７は、炎症性疾患を有する患者、がん細胞、乾癬患者、アテローム性動脈硬化症患者、及び多発性硬化症患者の滑膜組織において異常に発現されることが示されている。したがって、「Ｎｕｒ７７関連疾患」という用語は、炎症（例えば、アテローム性動脈硬化症に関連する炎症、肥満に関連する炎症、糖尿病に関連する炎症、肝炎、肺炎、関節炎、及び炎症性腸疾患）、アテローム性動脈硬化症、肥満、糖尿病、乾癬、多発性硬化症、及びがん（例、トリプルネガティブ乳がん）を包含するがこれらに限定されない。
【００３１】
本明細書中で使用される場合、用語「対象(subject)」とは、動物、特に哺乳動物、好ましくはヒトをいう。
【００３２】
本明細書で使用される場合、用語「高脂肪食」は、脂肪含有量が動物の通常の生理活性に必要な脂肪量を超える、動物（例えば、ヒトなどの哺乳動物）の毎日の摂取のための食餌を指す。
【００３３】
本明細書で使用されるとき、用語「有効量」は、所望の効果を達成するか又は少なくとも部分的に達成するのに十分な量を指す。例えば、予防有効量は、疾患の発症を予防、阻止、又は遅延させるのに十分な量を意味し；治療有効量は、すでに疾患を患っている患者における疾患及びその合併症を治癒又は少なくとも部分的に阻止するのに十分な量を意味する。そのような有効量の決定は、十分に当業者の能力の範囲内である。例えば、治療的使用に有効な量は、治療される疾患の重症度、患者自身の免疫系の一般的な状態、患者の全身状態、例えば年齢、体重及び性別など、薬物の投与方法、並びに同時に投与される他の治療、等々に依存する。
【課題を解決するための手段】
【００３４】
本出願において、鋭意研究の結果、本発明者らは、式Ｉ〜式Ｖで表される化合物（例えば、化合物ＹＸＹ１０１）はオーファン核内受容体Ｎｕｒ７７を標的とすることができ、その配位子として機能することを見出した。例えば、そのような化合物は、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７に関連するがん（例えば、トリプルネガティブ乳がん）を治療するように、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７に結合することによってｍＴＯＲ活性を阻害するために使用することができる。
【００３５】
したがって、第１の態様において、本出願は、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用されるか、又はオーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用される医薬の製造において使用される、式Ｉの化合物、互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルの使用に関する。
【化１】
2019523245.tif 000173
（式中、
Ｘは−ＮＨ−、−Ｎ（Ｒ）−、−Ｏ−、−ＣＨ２−又はハロゲンを表し；ここで、Ｘがハロゲンである場合、Ｒ１は存在せず；
Ｙと、それに結合している炭素原子との間の結合が単結合である場合、ＹはＨ、ハロゲン、−ＯＲ、−ＳＲ又は−ＮＲＲ’を表し；Ｙと、それに結合している炭素原子との間の結合が二重結合である場合、ＹはＯ、Ｓ又はＮＲを表し；
Ｒ１は存在しないか、又はＨ、−ＰＯ（ＯＲ）２、Ｃ１−６アルキル、グリコシル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル−Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル−アミノアシル、アリール−Ｃ１−６アルキル又はアリールを表し、ここで、前記Ｃ１−６アルキル、グリコシル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル−Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル−アミノアシル、アリール−Ｃ１−６アルキル又はアリールは非置換であるか、又はハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルアミノ及びＣ１−６アルカノイルからなる群から選択される１以上（例えば、１、２、３又は４）の置換基で置換されており；好ましくは、前記アリールは６員〜１４員アリール、例えば６員〜１０員アリールであり；より好ましくはフェニル又はナフチルであり；
Ｒ２はＨ、Ｄ、−ＰＯ（ＯＲ）２、−ＣＯＮＨ２、−ＮＨ２、−ＮＨＲ、−ＮＲＲ’、−ＮＨＣＯＲ、−ＮＲＣＯＲ、−ＮＨＣＯＯＲ、−ＮＨＣＯＮＨＲ、−ＮＨＣＯＮＲＲ’、−ＮＲＣＯＮＨＲ、−ＮＲＣＯＮＲＲ’、−ＯＨ、−ＯＲ、−ＯＣＯＮＨＲ、−ＯＣＯＮＲＲ’、−ＳＨ、−ＳＲ、−ＳＯＲ、−ＳＯＯＲ、−ＳＯ２ＮＨＲ”、ニトロ、ハロゲン、グリコシル、シアノ、トリフルオロメチル、Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル、３員〜８員ヘテロシクロアルキル、アリール、Ｃ１−６アルキル置換アリール、６員〜１５員ヘテロアリール、アルケニル、アルキニル、スルフィニル、スルホン酸基又はスルホネート基を表し；ここで、前記Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル、３員〜８員ヘテロシクロアルキル、アリール、Ｃ１−６アルキル置換アリール、６員〜１５員ヘテロアリール、アルケニル及びアルキニルは非置換であるか、又はアミノ、ハロゲン、ヒドロキシ、オキシ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルチオ、Ｃ１−６アルカノイル、３員〜８員シクロアルキル（例えばシクロプロピル）、３員〜８員オキソシクロアルキル（例えばオキソシクロブチル）、シアノ、トリフルオロメチル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、Ｃ１−６アルキルアミド、ウレイド基、カルバメート、カルボキシル及びアリールからなる群から選択される１以上（例えば、１、２、３又は４）の置換基で置換されており；
Ｒ３及びＲ４はそれぞれ独立して存在しないか、又はＨ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルカノイル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、グリコシル、アリール−Ｃ１−６アルキル又はアリールを表し、ここで前記Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルカノイル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、グリコシル、アリール−Ｃ１−６アルキル及びアリールは、非置換であるか、又はハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルアミノ及びＣ１−６アルカノイルからなる群から選択される１以上（例えば、１、２、３又は４）の置換基で置換されており；好ましくは、前記アリールは、６員〜１４員アリール、例えば６員〜１０員アリール、であり；より好ましくはフェニル又はナフチル；
Ｒ及びＲ’はそれぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル、アリール−Ｃ１−６アルキル又はアリールから選択され、ここで、前記Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル、アリール−Ｃ１−６アルキル及びアリールは、非置換であるか、又はハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、及びＣ１−６アルキルアミノからなる群から選択される１以上（例えば、１、２、３又は４）の置換基で置換されており；
Ｒ”はＣ１−６アルキル又はアリール（例えば６員〜１０員アリール基、好ましくはフェニル）を表し；
式（Ｉ）における
【化２】
2019523245.tif 000174
は単結合又は二重結合を表し；好ましくは、環Ａは０、１、２又は３個の炭素−炭素二重結合を含有し；環Ｂは０、１又は２個の炭素−炭素二重結合を含有する)
【００３６】
特定の好ましい実施形態において、Ｘは−ＮＨ−、−Ｎ（Ｒ）−、−Ｏ−、−ＣＨ２−又はハロゲンを表し；ここで、Ｘがハロゲンである場合、Ｒ１は存在せず；
Ｙと、それに結合している炭素原子との間の結合が単結合である場合、ＹはＨ、ハロゲン、−ＯＲ、−ＳＲ又は−ＮＲＲ’を表し；Ｙと、それに結合している炭素原子との間の結合が二重結合である場合、ＹはＯ、Ｓ又はＮＲを表し；
Ｒ１は存在しないか、又はＨ、−ＰＯ（ＯＲ）２、Ｃ１−６アルキル、グリコシル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル−Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル−アミノアシル、アリール−Ｃ１−６アルキル又はアリールを表し、ここで、前記Ｃ１−６アルキル、グリコシル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル−Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル−アミノアシル、アリール−Ｃ１−６アルキル又はアリールは非置換であるか、又はハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルアミノ及びＣ１−６アルカノイルからなる群から選択される１以上（例えば、１、２、３又は４）の置換基で置換されており；好ましくは、前記アリールは６員〜１４員アリール、例えば６員〜１０員アリールであり；より好ましくはフェニル又はナフチル；
Ｒ２はＨ、Ｄ、−ＰＯ（ＯＲ）２、−ＣＯＮＨ２、−ＮＨ２、−ＮＨＲ、−ＮＲＲ’、−ＮＨＣＯＲ、−ＮＲＣＯＲ、−ＮＨＣＯＯＲ、−ＮＨＣＯＮＨＲ、−ＮＨＣＯＮＲＲ’、−ＮＲＣＯＮＨＲ、−ＮＲＣＯＮＲＲ’、−ＯＨ、−ＯＲ、−ＯＣＯＮＨＲ、−ＯＣＯＮＲＲ’、−ＳＨ、−ＳＲ、−ＳＯＲ、−ＳＯＯＲ、−ＳＯ２ＮＨＲ”、ニトロ、ハロゲン、グリコシル、シアノ、トリフルオロメチル、Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル、３員〜８員ヘテロシクロアルキル、アリール、Ｃ１−６アルキル置換アリール、６員〜１５員ヘテロアリール、アルケニル、アルキニル、スルフィニル、スルホン酸基又はスルホネート基を表し；ここで、前記Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル、３員〜８員ヘテロシクロアルキル、アリール、Ｃ１−６アルキル置換アリール、６員〜１５員ヘテロアリール、アルケニル及びアルキニルは非置換であるか、又はアミノ、ハロゲン、ヒドロキシ、オキシ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルチオ、Ｃ１−６アルカノイル、３員〜８員シクロアルキル（例えばシクロプロピル）、３員〜８員オキソシクロアルキル（例えばオキソシクロブチル）、シアノ、トリフルオロメチル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、Ｃ１−６アルキルアミド、ウレイド基、カルバメート、カルボキシル及びアリールからなる群から選択される１以上（例えば、１、２、３又は４）の置換基で置換されており；
Ｒ３及びＲ４はそれぞれ独立して存在しないか、又はＨ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルカノイル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、グリコシル、アリール−Ｃ１−６アルキル又はアリールを表し、ここで前記Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルカノイル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、グリコシル、アリール−Ｃ１−６アルキル及びアリールは、非置換であるか、又はハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルアミノ及びＣ１−６アルカノイルからなる群から選択される１以上（例えば、１、２、３又は４）の置換基で置換されており；好ましくは、前記アリールは、６員〜１４員アリール、例えば６員〜１０員アリール、であり；より好ましくはフェニル又はナフチル；
Ｒ及びＲ’はそれぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル、アリール−Ｃ１−６アルキル又はアリールから選択され、ここで、前記Ｃ１−６アルキル、３員〜８員シクロアルキル、アリール−Ｃ１−６アルキル及びアリールは、非置換であるか、又はハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、及びＣ１−６アルキルアミノからなる群から選択される１以上（例えば、１、２、３又は４）の置換基で置換されており；
Ｒ”はＣ１−６アルキル又はアリール（例えば６員〜１０員アリール基、好ましくはフェニル）を表し；
式（Ｉ）における
【化３】
2019523245.tif 000175
は単結合又は二重結合を表し；好ましくは、環Ａは０、１、２又は３個の炭素−炭素二重結合を含有し；環Ｂは０、１又は２個の炭素−炭素二重結合を含有する。
【００３７】
本発明の好ましい実施形態では、前記スルホネート基は、スルホン酸ナトリウム、スルホン酸カリウム、スルホン酸カルシウム、及びスルホン酸マグネシウムからなる群から選択される。
【００３８】
本発明の好ましい実施形態において、前記６員〜１５員ヘテロアリールは、９員〜１５員縮合ヘテロアリールからなる群から選択され；より好ましくは、前記６員〜１５員ヘテロアリールは、９員〜１５員ベンゾ−ヘテロアリール、例えばインドリル、ベンゾフラニル、ベンゾチエニル、ベンズイミダゾリル又はキノリル、から選択される。
【００３９】
好ましい実施形態において、Ｙと、それに結合している炭素原子との間の結合は、二重結合であり、ＹはＯを表す。
【００４０】
好ましい実施形態において、ＸはＮＨを表し；Ｙと、それに結合している炭素原子との間の結合は二重結合であり；ＹはＯを表し；Ｒ１は、Ｃ１−６アルキル及びＣ１−６アルコキシからなる群から選択される１以上（例えば、１、２、３又は４）の置換基で置換されたアリールを表し；好ましくは、前記アリール基はフェニル基又はナフチル基であり；Ｒ２はＨを表す。
【００４１】
好ましい実施形態において、ＸはＯを表し；Ｙと、それに結合している炭素原子との間の結合は二重結合であり、ＹはＯを表し；Ｒ１はＨを表し；Ｒ２は、Ｈ、スルホネート基又は６員〜１５員ヘテロアリールを表し；好ましくは、前記スルホネート基は、スルホン酸ナトリウム、スルホン酸カリウム、スルホン酸カルシウム、及びスルホン酸マグネシウムからなる群から選択され；好ましくは、前記６員〜１５員のヘテロアリールは、９員〜１５員縮合ヘテロアリールからなる群から選択され；より好ましくは、前記６員〜１５員ヘテロアリール基は、９員〜１５員ベンゾ縮合ヘテロアリール、例えばインドリル、ベンゾフラニル、ベンゾチエニル、ベンズイミダゾリル及びキノリル、から選択される。
【００４２】
好ましい実施形態において、ＸはＯを表し；Ｙと、それに結合している炭素原子との間の結合は二重結合であり、ＹはＯを表し；Ｒ１は、Ｃ１−６アルキル又はアリール−Ｃ１−６アルキル（好ましくはベンジル）を表し；Ｒ２はＨを表す。
【００４３】
好ましい実施形態において、Ｒ３は存在せず、Ｒ４はＨを表す。好ましい実施形態において、Ｒ３はＨを表し、Ｒ４は存在しない。好ましい実施形態において、Ｒ３及びＲ４は両方ともＨである。
【００４４】
好ましい実施形態において、Ｒ３は存在せず、Ｒ４はＨを表し、環Ａ及び環Ｂはそれぞれ２個の炭素−炭素二重結合を有する。
【００４５】
好ましい実施形態において、Ｒ３はＨを表し、Ｒ４は存在せず、環Ａは、０、１又は２個の炭素−炭素二重結合を有し；さらに好ましくは、環Ｂは、０、１又は２個の炭素−炭素二重結合を有する。
【００４６】
好ましい実施形態において、Ｒ３及びＲ４は両方ともＨであり、環Ａは３個の炭素−炭素二重結合を含有し（すなわち、環Ａはベンゼン環である）；さらに好ましくは、環Ｂは、０又は１個の炭素−炭素二重結合を含有し；より好ましくは、環Ｂにおいて、７位の炭素と８位の炭素は、炭素−炭素二重結合で結合している。
【００４７】
好ましい実施形態において、Ｒ３もＲ４も存在しない。このような実施形態では、環Ａにおいて、２位の炭素原子と、それに結合しているＯ原子との間の結合は、炭素−酸素二重結合であり、３位の炭素原子と、それに結合しているＯ原子との間の結合は、炭素−酸素二重結合である。
【００４８】
好ましい実施形態において、７位の炭素と８位の炭素との間の結合は、炭素−炭素単結合である。
【００４９】
好ましい実施形態において、Ｙと、それに結合している炭素原子との間の結合は二重結合であり、ＹはＯを表す。
【００５０】
好ましい実施形態において、前記化合物におけるＸは、−ＮＨ−、−Ｎ（Ｒ）−、−Ｏ−、−ＣＨ２−又はハロゲンを表し；Ｒは、Ｃ１−６アルキル又は３員〜８員シクロアルキル（好ましくはシクロヘキシル）を表し；ここで、Ｘがハロゲンである場合、Ｒ１は存在しない。
【００５１】
好ましい実施形態において、Ｘは−ＮＨ−、−Ｎ（Ｒ）−、−Ｏ−又はハロゲン（例えば、フルオロ）を表し；Ｒはシクロヘキシルを表す。
【００５２】
好ましい実施形態において、化合物中のＲ１は存在しないか、又は水素、Ｃ１−４アルキル、−ＰＯ（ＯＲ）２、モノグリコシル、Ｃ１−４アルコキシカルボニル−Ｃ１−４アルキル、３員〜６員シクロアルキル−アミノアシル、アリール−Ｃ１−４アルキル又はアリールを表し；ここで、前記Ｃ１−４アルキル、モノグリコシル、Ｃ１−４アルコキシカルボニル−Ｃ１−４アルキル、３員〜６員シクロアルキル−アミノアシル、アリール−Ｃ１−４アルキル及びアリールは、非置換であるか、又はハロゲン、ヒドロキシ、アミノ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、Ｃ１−４アルキルアミノ及びＣ１−６アルカノイルからなる群から選択される１以上（例えば、１、２、３又は４）の置換基で置換されており；好ましくは、前記アリールは６員〜１４員アリール、例えば６員〜１０員アリールであり；より好ましくはフェニル又はナフチル；
ＲはＣ１−４アルキルを表す。
【００５３】
好ましい実施形態において、化合物中のＲ１は存在しないか、又は水素、Ｃ１−４アルキル、−ＰＯ（ＯＲ）２、グルコシル、Ｃ１−２アルコキシカルボニル−Ｃ１−２アルキル、シクロヘキシル−アミノアシル、フェニル−Ｃ１−２アルキル、ナフチル−Ｃ１−２アルキル、フェニル又はナフチルを表し；ここで、前記メチル、エチル、グルコシル、Ｃ１−２アルコキシカルボニル−Ｃ１−２アルキル、シクロヘキシル−アミノアシル、フェニル−Ｃ１−２アルキル、ナフチル−Ｃ１−２アルキル、フェニル又はナフチルは、非置換であるか、又はＣ１−２アルキル、Ｃ１−２アルコキシ、及びＣ１−２アルカノイルからなる群から選択される１以上（例えば、１、２、３又は４）の置換基で置換されており；
ＲはＣ１−４アルキルを表す。
【００５４】
好ましい実施形態において、Ｒ１は存在しないか、又は水素、Ｃ１−４アルキル、−ＰＯ（ＯＲ）２、フェニル−Ｃ１−２アルキル、Ｃ１−２アルコキシカルボニル−Ｃ１−２アルキル、３員〜６員シクロアルキル−アミノアシルを表し；
ＲはＣ１−３アルキル基を表す。
【００５５】
好ましい実施形態において、Ｒ１は存在しないか、又は水素、メチル、エチル、−ＰＯ（ＯＭｅ）２、−ＰＯ（ＯＥｔ）２、−ＰＯ（ＯｉＰｒ）２、２，３，４，６−テトラアセトキシ−α−Ｄ−グルコピラノシル、ＥｔＯＣＯＣＨ２−、シクロヘキシル−アミノアシル、ベンジル、メトキシフェニル又はｔｅｒｔ−ブチルフェニルを表す。
【００５６】
好ましい実施形態において、化合物中のＲ２は、Ｈ、Ｄ、−ＯＨ、−ＰＯ（ＯＲ）２、Ｃ１−６アルキル、９員〜１５員縮合ヘテロアリール又はスルホネートを表し；ここで、前記Ｃ１−６アルキル又は６員〜１５員ヘテロアリールは非置換であるか、又はアミノ、ハロゲン、ヒドロキシ、オキシ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルカノイル、シアノ、トリフルオロメチル及びカルボキシルからなる群から選択される１以上（例えば、１、２、３又は４）の置換基で置換されており；
ＲはＨ、Ｃ１−６アルキル又はアリールを表す。
【００５７】
好ましい実施形態において、Ｒ２は、Ｈ、Ｄ、−ＰＯ（ＯＲ）２、Ｃ１−４アルキル、９員〜１５員ベンゾ縮合ヘテロアリール又はスルホネートを表し；ここで、前記Ｃ１−４アルキル又は９員〜１５員ベン縮合ゾヘテロアリールは、非置換であるか、又はアミノ、ハロゲン、ヒドロキシ、オキシ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、Ｃ１−４アルカノイル、シアノ、トリフルオロメチル及びカルボキシルからなる群から選択される１以上（例えば、１、２、３又は４）の置換基で置換されており；
Ｒは、Ｈ、Ｃ１−４アルキル又はフェニルを表す。
【００５８】
好ましい実施形態において、Ｒ２は、Ｈ、Ｄ、−ＰＯ（ＯＲ）２、Ｃ１−４アルキル、９員〜１５員ベンゾ縮合ヘテロアリール又はスルホネートを表し；ここで、前記Ｃ１−４アルキル及び９員〜１５員のベンゾ縮合ヘテロアリールは、非置換であるか、又はアミノ、ハロゲン、ヒドロキシ、オキシ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルコキシ、Ｃ１−４アルカノイル、シアノ、トリフルオロメチル及びカルボキシルからなる群から選択される１以上（例えば、１、２、３又は４）の置換基で置換されており；
Ｒは、Ｈ、Ｃ１−４アルキル又はフェニルを表す。
【００５９】
好ましい実施形態において、Ｒ２は、Ｈ、Ｄ、−ＰＯ（ＯＲ）２、２−オキソフェニル、インドリル又は硫酸ナトリウムを表し；ここで、前記インドリルは非置換であるか、又はアミノ、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヒドロキシ、メチル、メトキシ、ホルミル、シアノ、トリフルオロメチル及びカルボキシルからなる群から選択される１以上（例えば、１、２、３又は４）の置換基で置換されており；
ＲはＨ、メチル、エチル、イソプロピル又はフェニルを表す。
【００６０】
好ましい実施形態において、化合物中の７位の炭素と８位の炭素との間の結合は、炭素−炭素二重結合である。
【００６１】
好ましい実施形態において、化合物中のＹとそれに結合している炭素原子との間の結合は、二重結合である。
【００６２】
好ましい実施形態において、化合物中のＹとそれに結合している炭素原子との間の結合は、単結合である。
【００６３】
好ましい実施形態において、化合物は次の構造を有する。：
【化４】
2019523245.tif 000176
（式中、Ｒ３及びＲ４はそれぞれ独立してＨ、Ｃ１−６アルキル又はＣ１−６アルカノイルを表し；
好ましくは、Ｒ３及びＲ４はそれぞれ独立してＨ、Ｃ１−４アルキル又はＣ１−４アルカノイルを表し；
好ましくは、Ｒ３及びＲ４はそれぞれ独立してＨ、メチル又はブチリルを表す）
【００６４】
好ましい実施形態において、化合物は次の構造を有する。：
【化５】
2019523245.tif 000177
（式中、Ｒ４はＨ、Ｃ１−６アルカノイル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル又は１以上の（例えば、１、２、３又は４）Ｃ１−６アルカノイル基で置換されたモノグリコシルを表し；
好ましい実施形態において、Ｒ４はＨ、Ｃ１−４アルカノイル、Ｃ１−４アルコキシカルボニル又は１以上の（例えば１、２、３又は４）Ｃ１−４アルカノイル基で置換されたモノグリコシルを表し；
好ましい実施形態において、Ｒ４はＨ又はＣ１−２アルコキシカルボニルを表し；
好ましい実施形態において、Ｒ４はＨ、ブチリル、エトキシカルボニル又は２，３，４，６−テトラアセトキシ−α−Ｄ−グルコピラノースを表す）
【００６５】
好ましい実施形態において、前記化合物は、以下の化合物からなる群から選択される。：
【化６】
2019523245.tif 000178
【化７】
2019523245.tif 000179
【化８】
2019523245.tif 000180
【化９】
2019523245.tif 000181
【００６６】
好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬が、Ｎｕｒ７７の転写活性を阻害するため、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用される。好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬が、細胞におけるＮｕｒ７７の転写活性を阻害するために使用される。好ましい実施形態において、前記細胞はＮｕｒ７７を発現する。好ましい実施形態において、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される。
【００６７】
好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬は、細胞におけるＴＮＦαの生物学的作用を阻害するため、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用される。好ましい実施形態において、ＴＮＦαの前記生物学的作用は、κＢ阻害タンパク質（ＩκＢ）キナーゼα／β（ＩＫＫα／β）のリン酸化、ＩκＢαの分解、ＮＦ−κＢのｐ６５サブユニットの核内移行、及び／又はＮＦ−κＢの活性化である。好ましい実施形態において、前記細胞はＮｕｒ７７を発現する。好ましい実施形態において、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される。
【００６８】
好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬が、細胞におけるｍＴＯＲ経路を阻害するため（例えば、Ｐ−ｍＴＯＲ、ｐ−Ｐ７０Ｓ６Ｋ、及び／又はｐ−Ｓ６の活性をダウンレギュレートする）、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用される。好ましい実施形態において、前記細胞はＮｕｒ７７を発現する。好ましい実施形態において、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される。
【００６９】
好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬が、それを必要とする対象においてＮｕｒ７７関連疾患を予防又は治療するため、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用される。
【００７０】
好ましい実施形態において、前記Ｎｕｒ７７関連疾患はがんである。例えば、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬が、それを必要とする対象においてＮｕｒ７７関連疾患を予防又は治療するため、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用される。好ましい実施形態において、前記Ｎｕｒ７７関連疾患はがん（例えば、トリプルネガティブ乳がん）である。
【００７１】
別の態様において、本願は、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７の転写活性を阻害する方法であって、Ｎｕｒ７７を、式Ｉの化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルと接触させるステップを含む方法に関する。：
【化１０】
2019523245.tif 000182
式中、前記原子及び置換基は、本願の第１の態様において定義された通りである。
【００７２】
好ましい態様において、当該方法は細胞におけるＮｕｒ７７の前記転写活性を阻害するためのものである。好ましい態様において、当該方法はそれを必要とする細胞に、前記細胞におけるＮｕｒ７７の前記転写活性を阻害するための前記化合物の有効量を投与することを含む。好ましい態様において、前記細胞はＮｕｒ７７を発現する。好ましい態様において、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される。
【００７３】
別の態様において、本願は、細胞におけるＴＮＦαの生物学的作用を阻害するための方法であって、それを必要とする前記細胞に、式Ｉの化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルの有効量を投与することを含む方法に関する。：
【化１１】
2019523245.tif 000183
（式中、前記原子及び置換基の定義は、本願の第１の態様に定義された通りである。
【００７４】
好ましい実施形態において、ＴＮＦαの前記生物学的作用は、κＢ阻害タンパク質（ＩκＢ）キナーゼα／β（ＩＫＫα／β）のリン酸化、ＩκＢαの分解、ＮＦ−κＢのｐ６５サブユニットの核内移行、及び／又はＮＦ−κＢの活性化である。好ましい実施形態において、当該方法はＴＮＦα誘導性のＩκＢα分解を阻害するためである。好ましい実施形態において、前記細胞はＮｕｒ７７を発現する。好ましい実施形態において、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される。
【００７５】
別の態様において、本願は、ｍＴＯＲシグナル伝達経路を阻害する方法であって、それを必要とする細胞に、式Ｉの化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルの有効量を投与することを含む方法に関する。：
【化１２】
2019523245.tif 000184
式中、前記原子及び置換基は、本願の第１の態様において定義された通りである。
【００７６】
好ましい実施形態において、前記化合物、又は前記互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルは、細胞におけるＰ−ｍＴＯＲ、ｐ−Ｐ７０Ｓ６Ｋ、及び／又はｐ−Ｓ６の活性をダウンレギュレートするためのものである。好ましい実施形態において、前記細胞はＮｕｒ７７を発現する。好ましい実施形態において、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される。
【００７７】
別の態様において、本願は、Ｎｕｒ７７関連疾患を予防又は治療する方法であって、それを必要とする対象に、式Ｉの化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルの有効量を投与することを含む方法に関する。：
【化１３】
2019523245.tif 000185
式中、前記原子及び置換基は、本願の第１の態様において定義された通りである。
【００７８】
好ましい実施形態において、前記Ｎｕｒ７７関連疾患はがん（例えば、トリプルネガティブ乳がん）である。
【００７９】
【００８０】
【００８１】
【００８２】
【００８３】
【００８４】
【００８５】
好ましい実施形態において、前記Ｎｕｒ７７関連疾患はがん（例えば、トリプルネガティブ乳がん）である。
【００８６】
別の態様において、本願は、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７の転写活性を阻害する方法であって、Ｎｕｒ７７を、式ＩＶの化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルと接触させるステップを含む方法に関する。：    
【化１７】
2019523245.tif 000186
（式中、ＸはＮＨ、Ｏ又はＣＨ２を表し；
ＹはＯ、Ｓ又はＮＲを表し；
Ｒ５及びＲ６はそれぞれ独立してＨ又はＣ１−６アルキルを表し；
Ｒ７と、それに結合している炭素原子との間の結合が単結合である場合、Ｒ７はＯＨを表し、Ｒ７と、それに結合している炭素原子との間の結合が二重結合である場合、Ｒ７はＯを表し；
Ｒ８はＨ又はＣ１−６を表し；
式（ＩＶ）における
【化１８】
2019523245.tif 000187
は単結合又は二重結合を表す）
【００８７】
好ましい実施形態において、前記化合物は、以下の化合物からなる群から選択される。：
【化１９】
2019523245.tif 000188
【００８８】
【００８９】
【００９０】
【００９１】
【００９２】
【００９３】
【００９４】
【００９５】
【００９６】
【００９７】
好ましい実施形態において、前記Ｎｕｒ７７関連疾患はがん（例えば、トリプルネガティブ乳がん）である。
【００９８】
別の態様において、本願は、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用されるか、又はオーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用される医薬の製造において使用される、以下に示す化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルの使用に関する。：
【化２９】
2019523245.tif 000189
【００９９】
好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬は、Ｎｕｒ７７の転写活性を阻害するため、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用される。好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬は、細胞におけるＮｕｒ７７の転写活性を阻害するために使用される。好ましい実施形態において、前記細胞はＮｕｒ７７を発現する。好ましい実施形態において、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される。
【０１００】
好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬は、細胞におけるＴＮＦαの生物学的作用を阻害するため、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用される。好ましい実施形態において、ＴＮＦαの前記生物学的作用は、κＢ阻害タンパク質（ＩκＢ）キナーゼα／β（ＩＫＫα／β）のリン酸化、ＩκＢαの分解、ＮＦ−κＢのｐ６５サブユニットの核内移行、及び／又はＮＦ−κＢの活性化である。好ましい実施形態において、前記細胞はＮｕｒ７７を発現する。好ましい実施形態において、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される。
【０１０１】
好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬は、細胞におけるｍＴＯＲ経路を阻害するため（例えば、Ｐ−ｍＴＯＲ、ｐ−Ｐ７０Ｓ６Ｋ、及び／又はｐ−Ｓ６の活性をダウンレギュレートする）、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用される。好ましい実施形態において、前記細胞はＮｕｒ７７を発現する。好ましい実施形態において、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される。
【０１０２】
好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬は、それを必要とする対象においてＮｕｒ７７関連疾患を予防又は治療するため、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用される。好ましい実施形態において、前記Ｎｕｒ７７関連疾患はがん（例えば、トリプルネガティブ乳がん）である。
【０１０３】
別の態様において、本願は、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７の転写活性を阻害する方法であって、Ｎｕｒ７７を、以下に示す化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルと接触させるステップを含む方法に関する。：
【化３０】
2019523245.tif 000190
【０１０４】
好ましい実施形態において、当該方法は細胞におけるＮｕｒ７７の前記転写活性を阻害するためのものである。好ましい実施形態において、当該方法はそれを必要とする細胞に、前記化合物の有効量を投与すること、それにより、前記細胞におけるＮｕｒ７７の前記転写活性を阻害すること、を含む。好ましい実施形態において、前記細胞はＮｕｒ７７を発現する。好ましい実施形態において、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される。
【０１０５】
別の態様において、本願は、細胞におけるＴＮＦαの生物学的作用を阻害するための方法であって、それを必要とする前記細胞に、以下に示す化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルの有効量を投与することを含む方法に関する。：
【化３１】
2019523245.tif 000191
【０１０６】
好ましい実施形態において、ＴＮＦαの前記生物学的作用は、κＢ阻害タンパク質（ＩκＢ）キナーゼα／β（ＩＫＫα／β）のリン酸化、ＩκＢαの分解、ＮＦ−κＢのｐ６５サブユニットの核内移行、及び／又はＮＦ−κＢの活性化である。好ましい実施形態において、当該方法はＴＮＦα誘導性のＩκＢα分解を阻害するためである。好ましい実施形態において、前記細胞はＮｕｒ７７を発現する。好ましい実施形態において、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される。
【０１０７】
別の態様において、本願は、ｍＴＯＲ経路を阻害する方法であって、それを必要とする細胞に、以下に示す化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルの有効量を投与することを含む方法に関する。：
【化３２】
2019523245.tif 000192
【０１０８】
好ましい実施形態において、前記化合物、又は前記互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルは、細胞におけるＰ−ｍＴＯＲ、ｐ−Ｐ７０Ｓ６Ｋ、及び／又はｐ−Ｓ６の活性をダウンレギュレートするためのものである。好ましい実施形態において、前記細胞はＮｕｒ７７を発現する。好ましい実施形態において、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される。
【０１０９】
別の態様において、本願は、Ｎｕｒ７７関連疾患を予防又は治療する方法であって、それを必要とする対象に、以下に示す化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルの有効量を投与することを含む方法に関する。：
【化３３】
2019523245.tif 000193
【０１１０】
好ましい実施形態において、前記Ｎｕｒ７７関連疾患はがん（例えば、トリプルネガティブ乳がん）である。
【０１１１】
別の態様において、本願は、以下に示す化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルに関する。：
【化３４】
2019523245.tif 000194
（式中、
Ｒ９及びＲ１０がそれぞれ独立して水素、Ｃ１−６アルキル及びアリールからなる群から選択され；
好ましくは、Ｒ９及びＲ１０は、それぞれ独立して、水素、Ｃ１−４アルキル、フェニル及びナフチルからなる群から選択され；
好ましくは、Ｒ９及びＲ１０は、それぞれ独立して、メチル、エチル及びイソプロピルから選択される)
【０１１２】
好ましい実施形態において、前記化合物は、以下の化合物からなる群から選択される。：
【化３５】
2019523245.tif 000195
【０１１３】
別の態様において、本願は、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用されるか、又はオーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用される医薬の製造において使用される、式Ｖの化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルの使用に関する。：
【化３６】
2019523245.tif 000196
（式中、
Ｒ９及びＲ１０がそれぞれ独立して水素、Ｃ１−６アルキル及びアリールからなる群から選択され；
好ましくは、Ｒ９及びＲ１０は、それぞれ独立して、水素、Ｃ１−４アルキル、フェニル及びナフチルからなる群から選択され；
好ましくは、Ｒ９及びＲ１０は、それぞれ独立して、メチル、エチル及びイソプロピルから選択される)
【０１１４】
好ましい実施形態において、前記化合物は、以下の化合物からなる群から選択される。：
【化３７】
2019523245.tif 000197
【０１１５】
好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬が、Ｎｕｒ７７の転写活性を阻害するため、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用される。好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬が、細胞におけるＮｕｒ７７の転写活性を阻害するためにｉｎ  ｖｉｖｏ、ｉｎ  ｖｉｔｒｏもしくはｅｘ  ｖｉｖｏで使用される。好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬が、細胞におけるＮｕｒ７７の転写活性を阻害するために使用される。好ましい実施形態において、前記細胞はＮｕｒ７７を発現する。好ましい実施形態において、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される。
【０１１６】
好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬が、細胞におけるＴＮＦαの生物学的作用を阻害するため、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用される。好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬が、細胞におけるＴＮＦαの生物学的作用を阻害するため、ｉｎ  ｖｉｖｏ、ｉｎ  ｖｉｔｒｏもしくはｅｘ  ｖｉｖｏで使用される。好ましい実施形態において、ＴＮＦαの前記生物学的作用は、κＢ阻害タンパク質（ＩκＢ）キナーゼα／β（ＩＫＫα／β）のリン酸化、ＩκＢαの分解、ＮＦ−κＢのｐ６５サブユニットの核内移行、及び／又はＮＦ−κＢの活性化である。好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬は、ＴＮＦα誘導ＩκＢα分解を阻害するために使用される。好ましい実施形態において、前記細胞はＮｕｒ７７を発現する。好ましい実施形態において、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される。
【０１１７】
好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬が、細胞におけるｍＴＯＲ経路を阻害するため（例えば、Ｐ−ｍＴＯＲ、ｐ−Ｐ７０Ｓ６Ｋ、及び／又はｐ−Ｓ６の活性をダウンレギュレートする）、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用される。好ましい実施形態において、前記細胞はＮｕｒ７７を発現する。好ましい実施形態において、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される。
【０１１８】
好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬は、それを必要とする対象においてＮｕｒ７７関連疾患を予防又は治療するため、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用される。
【０１１９】
好ましい実施形態において、前記Ｎｕｒ７７関連疾患はがん（例えば、トリプルネガティブ乳がん）である。好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬は、がんを有する対象において、がん細胞の増殖及び／又は転移を阻害するために、及び／又はがん細胞のアポトーシスを促進するために使用される。好ましい実施形態において、前記がんは、肝臓がん、子宮頸がん、肺がん、及び乳がんからなる群より選択される。好ましい実施形態において、前記がんはトリプルネガティブ乳がん（すなわち、ネガティブエストロゲン受容体（ＥＲ）、プロゲステロン受容体（ＰＲ）及びがん原遺伝子Ｈｅｒ−２を有する乳がん）である。好ましい実施形態において、前記医薬はがんを治療するために使用され、且つ、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル、並びにＴＮＦαを含む。
【０１２０】
別の態様において、本願は、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７の転写活性を阻害する方法であって、Ｎｕｒ７７を、式Ｖの化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルと接触させるステップを含む方法に関する。：
【化３８】
2019523245.tif 000198
（式中、
Ｒ９及びＲ１０がそれぞれ独立して水素、Ｃ１−６アルキル及びアリールからなる群から選択され；
好ましくは、Ｒ９及びＲ１０は、それぞれ独立して、水素、Ｃ１−４アルキル、フェニル及びナフチルからなる群から選択され；
好ましくは、Ｒ９及びＲ１０は、それぞれ独立して、メチル、エチル及びイソプロピルから選択される)
【０１２１】
好ましい実施形態において、前記化合物は、以下の化合物からなる群から選択される。：
【化３９】
2019523245.tif 000199
【０１２２】
好ましい態様において、当該方法は細胞におけるＮｕｒ７７の前記転写活性を阻害するためのものである。好ましい態様において、当該方法はそれを必要とする細胞に、前記細胞におけるＮｕｒ７７の前記転写活性を阻害するための前記化合物の有効量を投与することを含む。好ましい態様において、前記細胞はＮｕｒ７７を発現する。好ましい態様において、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される。
【０１２３】
別の態様において、本願は、細胞におけるＴＮＦαの生物学的作用を阻害するための方法であって、それを必要とする前記細胞に、式Ｖの化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルの有効量を投与することを含む方法に関する。：
【化４０】
2019523245.tif 000200
（式中、
Ｒ９及びＲ１０がそれぞれ独立して水素、Ｃ１−６アルキル及びアリールからなる群から選択される）
【０１２４】
好ましい実施形態において、Ｒ９及びＲ１０は、それぞれ独立して、水素、Ｃ１−４アルキル、フェニル及びナフチルからなる群から選択される。
【０１２５】
好ましい実施形態において、Ｒ９及びＲ１０は、それぞれ独立して、メチル、エチル及びイソプロピルから選択される。
【０１２６】
好ましい実施形態において、前記化合物は、以下の化合物からなる群から選択される。：
【化４１】
2019523245.tif 000201
【０１２７】
好ましい実施形態において、ＴＮＦαの前記生物学的作用は、κＢ阻害タンパク質（ＩκＢ）キナーゼα／β（ＩＫＫα／β）のリン酸化、ＩκＢαの分解、ＮＦ−κＢのｐ６５サブユニットの核内移行、及び／又はＮＦ−κＢの活性化である。好ましい実施形態において、当該方法はＴＮＦα誘導性のＩκＢα分解を阻害するためである。好ましい実施形態において、前記細胞はＮｕｒ７７を発現する。好ましい実施形態において、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される。
【０１２８】
別の態様において、本願は、ｍＴＯＲ経路を阻害する方法であって、それを必要とする細胞に、式Ｖの化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルの有効量を投与することを含む方法に関する。：
【化４２】
2019523245.tif 000202
（式中、
Ｒ９及びＲ１０がそれぞれ独立して水素、Ｃ１−６アルキル及びアリールからなる群から選択される）
【０１２９】
好ましい実施形態において、Ｒ９及びＲ１０は、それぞれ独立して、水素、Ｃ１−４アルキル、フェニル及びナフチルからなる群から選択される。
【０１３０】
好ましい実施形態において、Ｒ９及びＲ１０は、それぞれ独立して、メチル、エチル及びイソプロピルから選択される。
【０１３１】
好ましい実施形態において、前記化合物は、以下の化合物からなる群から選択される。：
【化４３】
2019523245.tif 000203
【０１３２】
好ましい実施形態において、前記化合物、又は前記互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルは、細胞におけるＰ−ｍＴＯＲ、ｐ−Ｐ７０Ｓ６Ｋ、及び／又はｐ−Ｓ６の活性をダウンレギュレートするために使用される。好ましい実施形態において、前記細胞はＮｕｒ７７を発現する。好ましい実施形態において、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される。
【０１３３】
別の態様において、本願は、Ｎｕｒ７７関連疾患を予防又は治療する方法であって、それを必要とする対象に、式Ｖの化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルの有効量を投与することを含む方法に関する。：
【化４４】
2019523245.tif 000204
（式中、
Ｒ９及びＲ１０がそれぞれ独立して水素、Ｃ１−６アルキル及びアリールからなる群から選択される）
【０１３４】
好ましい実施形態において、Ｒ９及びＲ１０は、それぞれ独立して、水素、Ｃ１−４アルキル、フェニル及びナフチルからなる群から選択される。
【０１３５】
好ましい実施形態において、Ｒ９及びＲ１０は、それぞれ独立して、メチル、エチル及びイソプロピルから選択される。
【０１３６】
好ましい実施形態において、前記化合物は、以下の化合物からなる群から選択される。：
【化４５】
2019523245.tif 000205
【０１３７】
好ましい実施形態において、前記Ｎｕｒ７７関連疾患はがん（例えば、トリプルネガティブ乳がん）である。
【０１３８】
別の態様において、本願は、以下に示す化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステル関する。：
【化４６】
2019523245.tif 000206
【０１３９】
別の態様において、本願は、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用されるか、又はオーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用される医薬の製造において使用される、以下に示す化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルの使用に関する。：
【化４７】
2019523245.tif 000207
【０１４０】
好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬が、Ｎｕｒ７７の転写活性を阻害するため、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用される。好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬が、細胞におけるＮｕｒ７７の転写活性を阻害するためにｉｎ  ｖｉｖｏ、ｉｎ  ｖｉｔｒｏもしくはｅｘ  ｖｉｖｏで使用される。好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬が、細胞におけるＮｕｒ７７の転写活性を阻害するために使用される。好ましい実施形態において、前記細胞はＮｕｒ７７を発現する。好ましい実施形態において、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される。
【０１４１】
好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬が、細胞におけるＴＮＦαの生物学的作用を阻害するため、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用される。好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬が、細胞におけるＴＮＦαの生物学的作用を阻害するため、ｉｎ  ｖｉｖｏ、ｉｎ  ｖｉｔｒｏもしくはｅｘ  ｖｉｖｏで使用される。好ましい実施形態において、ＴＮＦαの前記生物学的作用は、κＢ阻害タンパク質（ＩκＢ）キナーゼα／β（ＩＫＫα／β）のリン酸化、ＩκＢαの分解、ＮＦ−κＢのｐ６５サブユニットの核内移行、及び／又はＮＦ−κＢの活性化である。好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬は、ＴＮＦα誘導ＩκＢα分解を阻害するために使用される。好ましい実施形態において、前記細胞はＮｕｒ７７を発現する。好ましい実施形態において、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される。
【０１４２】
好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬が、細胞におけるｍＴＯＲ経路を阻害するため（例えば、Ｐ−ｍＴＯＲ、ｐ−Ｐ７０Ｓ６Ｋ、及び／又はｐ−Ｓ６の活性をダウンレギュレートする）、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用される。好ましい実施形態において、前記細胞はＮｕｒ７７を発現する。好ましい実施形態において、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される。
【０１４３】
好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬は、それを必要とする対象においてＮｕｒ７７関連疾患を予防又は治療するため、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７のリガンドとして使用される。好ましい実施形態において、前記Ｎｕｒ７７関連疾患はがんである。好ましい実施形態において、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル又は前記医薬は、がんを有する対象において、がん細胞の増殖及び／又は転移を阻害するために、及び／又はがん細胞のアポトーシスを促進するために使用される。好ましい実施形態において、前記がんは、肝臓がん、子宮頸がん、肺がん、及び乳がんからなる群より選択される。好ましい実施形態において、前記がんはトリプルネガティブ乳がん（すなわち、ネガティブエストロゲン受容体（ＥＲ）、プロゲステロン受容体（ＰＲ）及びがん原遺伝子Ｈｅｒ−２を有する乳がん）である。好ましい実施形態において、前記医薬はがんを治療するために使用され、且つ、前記化合物、又はその互変異性体、立体異性体又は医薬的に許容可能な塩もしくはエステル、並びにＴＮＦαを含む。
【０１４４】
別の態様において、本願は、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７の転写活性を阻害する方法であって、Ｎｕｒ７７を、以下に示す化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルと接触させるステップを含む方法に関する。：
【化４８】
2019523245.tif 000208
【０１４５】
好ましい態様において、当該方法は細胞におけるＮｕｒ７７の前記転写活性を阻害するためのものである。好ましい態様において、当該方法はそれを必要とする細胞に、前記細胞におけるＮｕｒ７７の前記転写活性を阻害するための前記化合物の有効量を投与することを含む。好ましい態様において、前記細胞はＮｕｒ７７を発現する。好ましい態様において、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される。
【０１４６】
別の態様において、本願は、細胞におけるＴＮＦαの生物学的作用を阻害するための方法であって、それを必要とする前記細胞に、以下に示す化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルの有効量を投与することを含む方法に関する。：
【化４９】
2019523245.tif 000209
【０１４７】
好ましい実施形態において、ＴＮＦαの前記生物学的作用は、κＢ阻害タンパク質（ＩκＢ）キナーゼα／β（ＩＫＫα／β）のリン酸化、ＩκＢαの分解、ＮＦ−κＢのｐ６５サブユニットの核内移行、及び／又はＮＦ−κＢの活性化である。好ましい実施形態において、当該方法はＴＮＦα誘導性のＩκＢα分解を阻害するためである。好ましい実施形態において、前記細胞はＮｕｒ７７を発現する。好ましい実施形態において、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される。
【０１４８】
別の態様において、本願は、ｍＴＯＲシグナル伝達経路を阻害する方法であって、それを必要とする細胞に、以下に示す化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルの有効量を投与することを含む方法に関する。：
【化５０】
2019523245.tif 000210
【０１４９】
好ましい実施形態において、前記化合物、又は前記互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルは、細胞におけるＰ−ｍＴＯＲ、ｐ−Ｐ７０Ｓ６Ｋ、及び／又はｐ−Ｓ６の活性をダウンレギュレートするためのものである。好ましい実施形態において、前記細胞はＮｕｒ７７を発現する。好ましい実施形態において、前記細胞はトリプルネガティブ乳がん細胞及び他のがん細胞（例えば、肝臓がん細胞、子宮頸がん細胞、肺がん細胞、トリプルポジティブ乳がん細胞、結腸直腸がん細胞、又は前立腺がん細胞）から選択される。
【０１５０】
別の態様において、本願は、Ｎｕｒ７７関連疾患を予防又は治療する方法であって、それを必要とする対象に、以下に示す化合物、又は互変異性体、立体異性体、又はそれらの医薬的に許容可能な塩もしくはエステルの有効量を投与することを含む方法に関する。：
【化５１】
2019523245.tif 000211
【０１５１】
好ましい実施形態において、前記Ｎｕｒ７７関連疾患はがん（例えば、トリプルネガティブ乳がん）である。
【０１５２】
別の態様において、本願は、抗がん活性を有する薬物をスクリーニングする方法であって、以下のステップ：
（１）オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７を発現するがん細胞（例えば、トリプルネガティブ乳がん細胞）を用意し、ネガティブコントロールを設定する（すなわち、Ｎｕｒ７７を発現しない）ステップと、
（２）前記細胞をＴＮＦα及び候補薬剤で処理するステップと、
（３）前記処理された細胞中のＰ−ｍＴＯＲ、ｐ−Ｐ７０Ｓ６Ｋ、及びｐ−Ｓ６のレベルを検出するステップ（例えば免疫ブロッティング法により検出する）と、
（４）前記細胞及び前記ネガティブコントロール細胞中の対応するタンパク質のレベルを比較し、前記タンパク質レベルの少なくとも１つが低下した場合に、前記候補薬剤は抗がん活性を有すると判断するステップと、
を含む方法に関する。
【発明の効果】
【０１５３】
発明の効果
（１）本発明者らは、式Ｉ〜式Ｖで表される化合物がオーファン核内受容体Ｎｕｒ７７を標的とし、そのリガンドとして機能し得ることを初めて見出した。例えば、そのような化合物は、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７の活性（例えば、転写活性）を低下又は阻害するために使用され得る。
【０１５４】
（２）ｍＴＯＲシグナル伝達経路の阻害は、抗がん剤のスクリーニングに有効な指標として使用することができる。本発明者らは、Ｎｕｒ７７によるｍＴＯＲシグナル伝達経路を阻害する化合物が潜在的な抗がん活性を有することを見出した。したがって、本出願はまた、抗がん（特にトリプルネガティブ乳がん）活性を有する薬物をスクリーニングするための方法を提供する。
【０１５５】
（３）本願の化合物は、オーファン核内受容体Ｎｕｒ７７に関連する疾患、例えばがん（例えば、トリプルネガティブ乳がん）など、の予防及び治療にも使用することができる。したがって、本発明は、Ｎｕｒ７７に特異的に結合することができ、且つ、がん、例えばトリプルネガティブ乳がんなど、を治療するための新しい治療法を開発するために使用することができる新規かつ強力なリガンドを提供する。
【発明を実施するための形態】
【０１５６】
発明を実施するための特定のモデル
以下の実施例を参照しながら本発明を説明するが、これらの実施例は例示を意図するものであり、本発明を限定するものではない。
【０１５７】
他に特定されない限り、本発明において使用される分子生物学実験方法及びイムノアッセイは、基本的には、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：  Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，  ２ｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，  Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，  １９８９，  ｂｙ  Ｊ．  Ｓａｍｂｒｏｏｋ  ｅｔ  ａｌ．，  ａｎｄ  Ｓｈｏｒｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，  ３ｒｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎの方法を参照することによって行われる。制限酵素は、製品製造元によって推奨されている条件に従って使用される。製造元によって示されていないいずれの試薬や機器は市販の製品である。
【図面の簡単な説明】
【０１５８】
図面
【図１】図１は、Ｂｉａｃｏｒｅ  Ｔ２００装置を用いたＮｕｒ７７に結合可能な化合物のスクリーニングを示す。Ｂｉａｃｏｒｅ  Ｔ２００機器を用いてＮｕｒ７７−ＬＢＤへのＹＸＹ１０１の結合を検出するための実験の結果が示されており、ここで、赤い点は化合物ＹＸＹ１０１を表し；青い点はコントロール化合物を表す。結果は、化合物ＹＸＹ１０１がＮｕｒ７７−ＬＢＤに結合することができたことを示した。
【図２】図２Ａは、セラストロール（化合物ＹＸＹ１０１）の化学構造式を示す。；図２Ｂは、Ｎｕｒ７７−ＬＢＤへの異なる濃度のＹＸＹ１０１（０．０４μＭ、０．０８μＭ、０．１６μＭ、０．３２μＭ、０．６４μＭ）の結合のさらなる実験の結果を示す。結果は、Ｎｕｒ７７−ＬＢＤに対する化合物ＹＸＹ１０１の解離定数（Ｋｄ）は２９２ｎＭであることを示した。；図２Ｃは、円二色性分光法によって、Ｎｕｒ７７−ＬＢＤへのＹＸＹ１０１の結合を検出する実験結果を示し、ここで、赤色の曲線はＹＸＹ１０１＋Ｎｕｒ７７−ＬＢＤを表し、青色の曲線はＮｕｒ７７−ＬＢＤを表す。結果は、化合物ＹＸＹ１０１がＮｕｒ７７−ＬＢＤのＣＤスペクトルを変えることができることを示した。これは、化合物ＹＸＹ１０１がＮｕｒ７７−ＬＢＤに結合できることを示している。；図２Ｄは、ＨＰＬＣによりＹＸＹ１０１のＮｕｒ７７−ＬＢＤへの結合を検出するための実験の結果を示し、ここで、赤色の曲線はＹＸＹ１０１＋Ｎｕｒ７７−ＬＢＤを表し、紫色の曲線はＹＸＹ１０１＋ＲＸＲα−ＬＢＤを表す。結果は、化合物ＹＸＹ１０１が、複合体を形成するため、Ｎｕｒ７７−ＬＢＤと結合することができたが、ＲＸＲα−ＬＢＤには結合しなかったことを示した。；図２Ｅは、デュアルルシフェラーゼレポーターアッセイシステムを使用して、ＹＸＹ１０１のＮｕｒ７７−ＬＢＤへの結合を検出するための実験の結果を示す。結果は、化合物ＹＸＹ１０１は、Ｎｕｒ７７の転写活性化機能を阻害することができたが、グルココルチコイド受容体（ＧＲ）の転写活性化機能に有意な影響を及ぼさなかったことを示した。これは、化合物ＹＸＹ１０１がＮｕｒ７７−ＬＢＤに結合することができ、且つ、Ｎｕｒ７７−ＬＢＤの転写活性を阻害することができるのに対し、化合物ＹＸＹ１０１はＧＲに結合しないことを示している。；図２Ｆは、ＹＸＹ１０１とＮｕｒ７７との分子ドッキングを示す。分子ドッキングの結果は、ＹＸＹ１０１が主に疎水性相互作用によってＮｕｒ７７タンパク質の表面上の既知の疎水性溝に結合することを示している。
【図３】図３Ａ〜３Ｂは、異なる濃度のＹＸＹ１０１及びＴＮＦαで処理した細胞におけるＩκＢα及びリン酸化ＩＫＫα／βの免疫ブロット分析の結果を示す。；図３Ｃは、ＹＸＹ１０１及びＴＮＦαで処理した細胞の免疫蛍光染色の結果を示す（スケールバー：２０μｍ）。；図３Ｄは、ＹＸＹ１０１及びＴＮＦαで処理した細胞のＮＦ−κＢ活性の分析結果を示し、ここで、＊＊Ｐ＜０．０１、＊＊＊Ｐ＜０．００１（Ｔ検定）である。；図３Ｅは、異なる濃度のＹＸＹ１０１及びＴＮＦαで処理した異なるがん細胞株におけるＩκＢα及びリン酸化ＩＫＫα／βの免疫ブロット分析の結果を示す。；図３Ｆは、ＴＮＦαで刺激し、異なる化合物で処理した、ＨｅｐＧ２細胞におけるＩκＢαの免疫ブロット分析の結果を示す。
【図４】図４Ａ〜４Ｂは、異なるｓｉＲＮＡでトランスフェクトし、異なる濃度のＹＸＹ１０１及びＴＮＦαで処理したＨｅｐＧ２細胞におけるＮｕｒ７７、ＲＸＲα及びＩκＢαの免疫ブロット分析の結果を示す。；図４Ｃは、異なる濃度のＹＸＹ１０１及びＴＮＦαで処理したＭＥＦ細胞及びＮｕｒ７７−／−ＭＥＦ細胞におけるＩκＢαの免疫ブロット分析の結果を示す。；図４Ｄは、ＹＸＹ１０１及びＴＮＦαで処理したＭＥＦ細胞及びＮｕｒ７７−／−ＭＥＦ細胞の免疫蛍光染色の結果を示す（スケールバー：１０μｍ）。；図４Ｅは、異なる濃度のＸＳ０２８４及びＴＮＦαで処理したＭＥＦ細胞及びＮｕｒ７７−／−ＭＥＦ細胞におけるＩκＢαの免疫ブロット分析の結果を示す。
【図５】図５Ａは、ＹＸＹ１０１濃度に対する、異なる乳がん細胞（ＭＤＡ−ＭＢ−２３１；ＭＤＡ−ＭＢ−４６８；ＢＴ５４９；ＳＫＢＲ３；Ｔ４７Ｄ及びＭＣＦ−７）の増殖比、並びにＹＸＹ１０１のＩＣ５０値を示す。ここで、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１、ＭＤＡ−ＭＢ−４６８、ＢＴ５４９及びＳＫＢＲ３は、赤色の曲線で示されるトリプルネガティブ乳がん細胞であり、Ｔ４７Ｄ及びＭＣＦ−７は、青色の曲線で示されるトリプルポジティブ乳がん細胞である。；図５Ｂは、異なる濃度のＹＸＹ１０１（０μＭ、０．２５μＭ、０．５μＭ、１μＭ、２μＭ、又は４μＭ）で処理したＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞及びＭＣＦ−７細胞におけるｐａｒｐ及びＥＲの免疫ブロット分析の結果を示す。；図５Ｃは、異なる濃度のＹＸＹ１０１（０μＭ、２μＭ、又は４μＭ）で１２時間又は２４時間処理したＭＤＡ−ＭＢ−２３１におけるｐａｒｐ及びｐ−ｍＴＯＲの免疫ブロット分析の結果を示す。；図５Ｄは、異なる時間（１時間、６時間又は１２時間）でＴＮＦαと組み合わせてＹＸＹ１０１で処理したＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞におけるｐａｒｐの免疫ブロット分析の結果を示す。；図５Ｅは、ＹＬＹ１０１の濃度に対するＨｅＬａ細胞の増殖率の曲線を示し、結果は、野生型Ｈｅｌａ細胞に対するＹＸＹ１０１のＩＣ５０値は１．１８９μＭである一方、Ｎｕｒ７７ノックアウトＨｅｌａ細胞に対するＩＣ５０は５８．１６６μＭであることを示した。
【図６】図６Ｂは、各グループのヌードマウスの腫瘍組織の免疫組織化学染色の結果を示す。図６Ａにおいて、左パネルは各グループのヌードマウスに形成された腫瘍を示し；中央パネルは各グループのヌードマウスに形成された腫瘍のＲＴＶを示し；右パネルは各グループのヌードマウスに形成された腫瘍の重量を示す。
【図７】図７Ａは、２ｍｇ／ｋｇのＹＸＹ１０１の胃内投与後、２週間、１１週間、１３週間又は１７週間におけるＭＭＴＶ−ＰＹＶＴマウスの全身状態を示す。；図７Ｂは、２ｍｇ／ｋｇのＹＸＹ１０１の胃内投与後、２週間、１１週間、１３週間又は１７週間におけるＭＭＴＶ−ＰＹＶＴマウスの腫瘍組織のＨＥ染色及び免疫組織化学染色の結果を示す。；図７Ｃは、２ｍｇ／ｋｇのＹＸＹ１０１の胃内投与後、２週間、１１週間、１３週間又は１７週間におけるＭＭＴＶ−ＰＹＶＴマウスの肺組織の重量、形態、ＨＥ染色及び免疫組織化学的染色の分析結果を示す。
【図８】図８Ａは、野生型ｍｍｔｖ−ＰｙＭＴマウス、及びＮｕｒ７７ノックアウトｍｍｔｖ−ＰｙＭＴマウスの６０日以内の生存曲線を示す。；図８Ｂは、野生型ｍｍｔｖ−ＰｙＭＴマウス、Ｎｕｒ７７ノックアウトｍｍｔｖ−ＰｙＭＴマウスにおける１１週、１３週及び１７週における腫瘍重量比較の統計結果を示す。；図８Ｃは、野生型ｍｍｔｖ−ＰｙＭＴマウス及びＮｕｒ７７ノックアウトｍｍｔｖ−ＰｙＭＴマウスにおける１１週、１３週及び１７週における腫瘍の外観及び形態学的サイズの比較結果を示す。；図８Ｄは、動物レベルで検出されるｍｍｔｖ−ＰｙＭＴマウスの生存率に対するＹＸＹ１０１の効果を示す。
【図９】図９Ａは、免疫ブロッティング技術により検出された、飢餓条件下でのＴＮＦαにより処理されたＭＢ−ＭＤＡ−２３１乳がん細胞におけるｐ−Ｐ７０Ｓ６Ｋレベルの結果を示す。；図９Ｂは、免疫ブロッティング技術により検出された、飢餓条件下でのＴＮＦαにより処理されたＳＫＢＲ３乳がん細胞におけるｐ−Ｐ７０Ｓ６Ｋレベルの結果を示す。；図９Ｃは、免疫ブロッティング技術により検出された、飢餓条件下での異なる時間（３０分、２時間）又は異なる濃度（２０ｎｇ／ｍｌ／、４０ｎｇ／ｍｌ）でＴＮＦαにより処理された野生型及びＮｕｒ７７ノックアウトＭＥＦ細胞におけるｐ−ｍＴＯＲ、ｐ−Ｐ７０Ｓ６Ｋ、ｐ−Ｓ６のレベルの結果を示す。
【図１０】図１０Ａは、免疫ブロッティング技術により検出された、飢餓条件下でのＴＮＦα（２０ｎｇ／ｍｌ）、ＹＸＹ１０１（１μＭ、２μＭ、４μＭ）より処理されたＭＢ−ＭＤＡ−２３１乳がん細胞におけるｐ−ｍＴＯＲ、ｐ−Ｐ７０Ｓ６Ｋのレベルの結果を示す。；図１０Ｂは、免疫ブロッティング技術により検出された、Ｆｌａｇエンプティプラスミド又はＦｌａｇ−Ｎｕｒ７７プラスミドでトランスフェクトされ、且つ、飢餓条件下での、３時間、６時間、ＴＮＦαにより処理されたＳＫＢＲ３乳がん細胞におけるｐ−ｍＴＯＲ、ｐ−Ｐ７０Ｓ６Ｋ、Ｎｕｒ７７のレベルの結果を示す。；図１０Ｃは、免疫ブロッティング技術により検出された、飢餓条件下での、Ｎｕｒ７７遺伝子を沈黙させるために処理され、及び次いでＴＮＦα、ＹＸＹ１０１で処理されたＭＢ−ＭＤＡ−２３１細胞におけるｐ−Ｐ７０Ｓ６Ｋ及びＮｕｒ７７のレベルの結果を示す。；図１０Ｄは、免疫ブロッティング技術により検出された、ＴＮＦα、ＹＸＹ１０１（０．５Ｍｍ、１μＭ）で処理された野生型又はＮｕｒ７７ノックアウト型ＭＥＦ細胞におけるｐ−Ｓ６、ｐ−ｍＴＯＲ、及びｐ６２のレベルの結果を示す。
【図１１】図１１Ａは、ＸＳ０５０３濃度に対する異なる乳がん細胞（ＭＤＡ−ＭＢ−２３１及びＭＣＦ−７）の増殖比、並びにＸＳ０５０３のＩＣ５０値を示す。；図１１Ｂは、ＹＸＹ１０１誘導体ＸＳ００７７、ＸＳ０３３５、ＸＳ０４１９、ＸＳ０４７４、又はＸＳ０４８８で処理されたＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞のＩＣ５０分析を示す。；図１１Ｃは、ＹＸＹ１０１誘導体ＸＳ０２８４、ＸＳ０２８５、ＸＳ０３９４、ＸＳ０４１８、ＸＳ０４１９、ＸＳ０４７４、ＸＳ０４８６、ＸＳ０４６２、ＸＳ０４９１、ＸＳ０４９２、又はＸＳ０４８８で処理した７つの乳がん細胞、ＢＴ４７４、ＺＲ−７５−１、ＢＴ５４９、ＨＣＣ１９３７、ＨＳ５７８Ｔ、ＭＣＦ−７、及びＴ４７Ｄに対する阻害率の分析結果を示す。
【図１２】図１２Ａは、ＹＸＹ１０１（４μＭ）又は異なるＹＸＹ１０１誘導体（４μＭ）、ＸＳ０３９４、ＸＳ０３９５、ＸＳ０４１９、ＸＳ０４２０、ＸＳ０４２１、ＸＳ０２８４、ＸＳ０３３５、ＸＳ０４８８、ＸＳ０４９１、ＸＳ０４９２、ＸＳ０４１８、ＸＳ０５０２、ＸＳ０５０３、ＸＳ０５０６、ＸＳ０５０７、ＸＳ０５０８、ＸＳ００７７、並びにＴＮＦα（２０ｎｇ／ｍｌ）で処理したＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞におけるＰＡＲＰの免疫ブロット分析の結果を示す。；図１２Ｂは、無血清培地で１０時間飢餓処理されており、及び、ＹＸＹ１０１（２μＭ）又は異なるＹＸＹ１０１誘導体（２μＭ）、ＸＳ０２８４、ＸＳ０２８５、ＸＳ０３３５、ＸＳ０３９４、ＸＳ０４１８、ＸＳ０４１９、ＸＳ０４５４、ＸＳ０４６２、ＸＳ０４７３、ＸＳ０４７４、ＸＳ０４８０、ＸＳ０４８６、ＸＳ０４８８、ＸＳ０４９１、又はＸＳ０４９２、並びにＴＮＦα（２０ｎｇ／ｍｌ）で処理したＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞におけるＰ−ｍＴＯＲ、Ｐ−ｐ７０Ｓ６Ｋ、及びＰ−Ｓ６の免疫ブロット分析の結果を示す。
【図１３】図１３は、Ｂｉａｃｏｒｅ  Ｔ２００装置を用いて、Ｎｕｒ７７−ＬＢＤへの異なる化合物（ＸＳ０４１８、ＸＳ０４１９、ＸＳ０４７４、ＸＳ０３９４、ＸＳ０４９２、ＸＳ０４９１、ＸＳ０４８８）の結合を検出するための実験の結果を示す。結果は、Ｎｕｒ７７−ＬＢＤに対する化合物ＸＳ０４１８の解離定数（Ｋｄ）は３．６７μＭであること、Ｎｕｒ７７−ＬＢＤに対する化合物ＸＳ０４１９の解離定数（Ｋｄ）は４０４ｎＭであること、Ｎｕｒ７７−ＬＢＤに対する化合物ＸＳ０４７４の解離定数（Ｋｄ）は２．６０μＭであること、Ｎｕｒ７７−ＬＢＤに対する化合物ＸＳ０３９４の解離定数（Ｋｄ）は１．２６μＭであること、Ｎｕｒ７７−ＬＢＤに対する化合物ＸＳ０４９２の解離定数（Ｋｄ）は１．３０μＭであること、Ｎｕｒ７７−ＬＢＤに対する化合物ＸＳ０４９１の解離定数（Ｋｄ）は０．３３６μＭであること、Ｎｕｒ７７−ＬＢＤに対する化合物ＸＳ０４４８の解離定数（Ｋｄ）は１．２８μＭであること、を示す。
【図１４】図１４は、それぞれＬＦＤ給餌及びＨＦＤ給餌で処置し、２つの化合物、ＹＸＹ１０１及びその誘導体ＸＳ０２８４を胃内投与した、ＷＴマウス及びＰＹＶＴマウスでの実験結果を示す。；図１４Ａは、異なる処置条件下での異なる実験群におけるマウスの形態学的外観特性を示す。図１４Ｂは、上記マウス腫瘍の形態及びサイズの比較を示す。；図１４Ｃは、胃内投与の１２日間の、上記マウスの体重の変化の曲線を示す。；図１４Ｄは、治療前後の上記マウスの体重変化の統計的有意性を示す。
【図１５】図１５Ａは、ＰＹＶＴのＷＴマウス及びＮｕｒ７７ノックアウトマウスにおける、ＹＸＹ１０１及びその誘導体ＸＳ０２８４による治療後の腫瘍の形態及びサイズの比較を示す。；図１５Ｂは、上記マウスにおける腫瘍組織重量の統計結果を示す。
【図１６】図１６は、各群のマウスの心臓、肝臓、小腸、白色脂肪及び腎臓の組織形態学及びＨＥ染色の結果を示す。これらは、２００ｍｇ／ｋｇのＹＸＹ１０１又はその誘導体ＸＳ０２８４の１回の胃内投与又は腹腔内注射によって誘発された急性毒性モデルマウスにおいて、ＹＸＹ１０１又はＸＳ０２８４（２００ｍｇ／ｋｇ）の胃内投与又は腹腔内注射の１２時間後に観察された。
【実施例】
【０１５９】
実施例１  化合物ＹＸＹ１０１の特徴付け
（１）表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）
ＹＸＹ１０１のＮｕｒ７７への結合は、表面プラズモン共鳴によって決定された。簡単に述べると、Ｎｕｒ７７（Ｎｕｒ７７−ＬＢＤ）タンパク質の５０μｇ精製リガンド結合ドメインを、ＢｉａｃｏｒｅのＣＭ５チップに結合させた。続いて、ＹＸＹ１０１（２０μＭ）のＮｕｒ７７−ＬＢＤへの結合を、Ｂｉａｃｏｒｅ  Ｔ２００装置により測定した。無関係の化合物をコントロールとして使用した。測定結果を図１に示す。
【０１６０】
図１は、Ｂｉａｃｏｒｅ  Ｔ２００装置を用いてＹＸＹ１０１をＮｕｒ７７−ＬＢＤと結合した実験の結果を示し、ここで、赤い点は化合物ＹＸＹ１０１を表し、青い点はコントロール化合物を表す。結果は、化合物ＹＸＹ１０１がＮｕｒ７７−ＬＢＤに結合することができたことを示した。
【０１６１】
（２）ＹＸＹ１０１のＮｕｒ７７への結合動態
ＹＸＹ１０１とＮｕｒ７７の解離定数（Ｋｄ）は表面プラズモン共鳴によって決定された。簡単に説明すると、Ｂｉａｃｏｒｅ  Ｔ２００装置を使用して、Ｎｕｒ７７−ＬＢＤへの異なる濃度における（０．０４μＭ、０．０８μＭ、０．１６μＭ、０．３２μＭ、０．６４μＭ）ＹＸＹ１０１の結合を測定した。測定結果を図２Ｂに示す。
【０１６２】
結果は、Ｎｕｒ７７−ＬＢＤの化合物ＹＸＹ１０１に対する解離定数（Ｋｄ）が２９２ｎＭであることを示した。
【０１６３】
（３）円二色性分光法（ＣＤ）
円二色性分光法（ＣＤ）を使用して、ＹＸＹ１０１とＮｕｒ７７−ＬＢＤとの結合についてさらなる分析を行った。簡単に説明すると、ＹＸＹ１０１（１ｍＬ、１ｍｇ／ｍＬ）をＮｕｒ７７−ＬＢＤタンパク質（１ｍＬ、１ｍｇ／ｍＬ）のリン酸緩衝液（１０μｍ、ｐＨ７．４）に添加し、そして４℃で３時間インキュベートした。その後、０．７ｍＬの溶液を取り、Ｊａｓｃｏ  Ｊ−８１０分光偏光計を用いて検出した。１９０ｎｍから２６０ｎｍまでのＣＤスペクトルを記録した。別のＮｕｒ７７−ＬＢＤ溶液（すなわち、化合物ＹＸＹ１０１を添加しなかった）をコントロールとして使用した。検出結果を図２Ｃに示す。
【０１６４】
結果は、化合物ＹＸＹ１０１がＮｕｒ７７−ＬＢＤのＣＤスペクトルを変えることができることを示した。これは、化合物ＹＸＹ１０１がＮｕｒ７７−ＬＢＤに結合できることを示している。
【０１６５】
（４）高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）分析
高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）を用いてＹＸＹ１０１のＮｕｒ７７−ＬＢＤへの結合をさらに分析した。簡単に説明すると、ＹＸＹ１０１（６００μＬ、０．１ｍｇ／ｍＬ）を、精製Ｎｕｒ７７−ＬＢＤタンパク質（５ｍＬ、１ｍｇ／ｍＬ）と共にインキュベートした。４℃で３時間インキュベートした後、ＹＸＹ１０１とＮｕｒ７７−ＬＢＤとの複合体をＮｉビーズで捕捉した。その後、クロロホルムを用いて前記複合体を解離させ、解離生成物中のＹＸＹ１０１を抽出した。次に、ＨＰＬＣ分光光度計（Ｓｈｉｍａｄｚｕ  ＬＣ  ２０Ａ、日本）を用いて、抽出生成物中のＹＸＹ１０１を検出した。ここで、使用したカラムは、ＯＤＳカラム（５μｍ、４．６×２５０ｍｍ）であり、移動相は、０．２％Ｈ３ＰＯ４を含有するアセトニトリル水溶液であった。検出波長は４２５ｎｍであった。また、ＹＸＹ１０１及びＲＸＲα−ＬＢＤ（レチノイドＸ受容体αのリガンド結合ドメイン）を使用してコントロールとして、上記実験を繰り返した。検出結果は、図２Ｄに示す。
【０１６６】
結果は、複合体を形成するため、化合物ＹＸＹ１０１がＮｕｒ７７−ＬＢＤと結合することができたが、ＲＸＲα−ＬＢＤには結合できなかったことを示した。
【０１６７】
（５）デュアルルシフェラーゼレポーター遺伝子アッセイ
デュアルルシフェラーゼレポーターアッセイを使用して、ＹＸＹ１０１とＮｕｒ７７−ＬＢＤとの結合をさらに分析した。また、コントロールとして、ＹＸＹ１０１とグルココルチコイド受容体（ＧＲ）とを用いて実験を繰り返した。実験結果を図２Ｅに示す。
【０１６８】
結果は、化合物ＹＸＹ１０１がＮｕｒ７７の転写活性化機能を阻害することができたが、グルココルチコイド受容体（ＧＲ）の転写活性化機能に有意な影響を及ぼさないことを示した。これは、化合物ＹＸＹ１０１がＮｕｒ７７−ＬＢＤに結合することができ、且つ、その転写活性を阻害することができたが、ＧＲには結合しないことを示している。
【０１６９】
（６）分子シミュレーション
ＹＸＹ１０１のＮｕｒ７７（ＰＤＢコード：４ＪＧＶ）へのドッキングは、ＡｕｔｏＤｏｃｋ  Ｖ４．２を使って行われた。ＹＸＹ１０１の立体配座は、Ｌａｍａｒｃｋ遺伝的アルゴリズムにより構築した。Ｎｕｒ７７の結晶構造において、グリッド中心は、ＴＨＰＮの報告された座標（−１２．０８、１８．２９、−４．２３３）で選択され、グリッドサイズは４０×４０×４０（Ｘ、Ｙ、Ｚ）グリッド点に設定され、格子点間の間隔は０．３７５Ａであった。
【０１７０】
分子ドッキングでは、標準的なドッキングプロトコルが適用された。ここでは、ランダムに配置された個人の数は１５０であった、エネルギー評価の最大数は２５０万であった、遺伝子変異の比率は０．０２であった、クロスオーバー比率は０．８であった、局所評価を行う確率は０．０６、ｒｈｏの下方限界は０．０１であった、分子の可視化のためにＰｙＭＯＬのバージョン０．９９を用いた。結果を図２Ｆに示す。
【０１７１】
分子ドッキングの調査は、ＹＸＹ１０１が主に疎水性相互作用によってＮｕｒ７７タンパク質の表面上の既知の疎水性溝に結合することを示している。
【０１７２】
実施例２  ＹＸＹ１０１はＴＮＦαの生物学的効果を阻害する
ＨｅｐＧ２細胞を異なる濃度のＹＸＹ１０１（０μＭ、０．２５μＭ、０．５μＭ、１μＭ、２μＭ又は４μＭ）で１時間処理し、次いでＴＮＦα（０ｎｇ／ｍＬ又は２０ｎｇ／ｍＬ）で３０分間さらに処理した。続いて、細胞内のＩκＢα及びリン酸化ＩＫＫα／βをウエスタンブロッティング（ＷＢ）により検出した。結果を図３Ａ〜３Ｂに示す。
【０１７３】
図３Ａ〜３Ｂの結果は、ＴＮＦαが細胞内でＩＫＫα／βのリン酸化及びＩκＢαの分解を誘導することができるのに対し、ＹＸＹ１０１はＩＫＫα／βのＴＮＦα誘導リン酸化及びＩκＢαの分解を阻害することができることを示している。
【０１７４】
ＨｅｐＧ２細胞をＹＸＹ１０１（０又は１μＭ）で１時間処理し、次いでＴＮＦα（２０ｎｇ／ｍＬ）で３０分間処理した。続いて、細胞内のＮＦ−κＢのｐ６５サブユニットを免疫蛍光染色によって検出した。未処理細胞をコントロールとして使用した。結果を図３Ｃに示す。
【０１７５】
図３Ｃは、ＹＸＹ１０１及びＴＮＦαで処理したＨｅｐＧ２細胞の免疫蛍光染色の結果を示す（スケールバー：２０μｍ）。図３Ｃにおける結果は、ＴＮＦαが細胞内でＮＦ−κＢのｐ６５サブユニットの核内移行を誘導することができた一方で、ＹＸＹ１０１はＴＮＦα誘導性ｐ６５核内移行を阻害することができたことを示している。
【０１７６】
ＮＦ−κＢレポーター遺伝子をＨＥＫ−２９３Ｔ細胞にトランスフェクトし、次いでＹＸＹ１０１（０又は１μＭ）及びＴＮＦα（２０ｎｇ／ｍＬ）で処理した。続いて、細胞内のＮＦ−κＢ活性を調べた。未処理細胞をコントロールとして使用した。結果を図３Ｄに示す。
【０１７７】
図３Ｄは、ＹＸＹ１０１及びＴＮＦαで処理した細胞のＮＦ−κＢ活性の分析結果を示し、ここで、＊＊Ｐ＜０．０１、＊＊＊Ｐ＜０．００１（Ｔ検定）である。図４Ｄにおける結果は、ＴＮＦαが細胞内でＮＦ−κＢの転写活性化を誘導することができるのに対し、ＹＸＹ１０１はＴＮＦα誘導ＮＦ−κＢ転写活性化を阻害することができることを示している。
【０１７８】
様々ながん細胞株（ＬＯ２、ＳＭＭＣ−７７２１、ＱＧＹ−７７０３、ＨｅＬａ、Ｈ４６０）を異なる濃度のＹＸＹ１０１（０μＭ、１μＭ又は４μＭ）で１時間処理した後、ＴＮＦα（０ｎｇ／ｍＬ又は２０ｎｇ／ｍＬ）で処理した。続いて、細胞内のＩκＢα及びリン酸化ＩＫＫα／βをウエスタンブロッティングにより検出した。結果を図３Ｅに示す。
【０１７９】
結果は、ＴＮＦαが様々な細胞株においてＩＫＫα  ／βのリン酸化及びＩκＢαの分解を誘導することができる一方、ＹＸＹ１０１はＩＫＫα／βのＴＮＦα誘導リン酸化及びＩκＢαの分解を阻害することができることを示した。
【０１８０】
さらに、ＨｅｐＧ２細胞も実験に使用した。簡単に説明すると、ＨｅｐＧ２細胞を明示された濃度の様々な化合物（ＹＸＹ１０１、ＸＳ０２８４、及びＸＳ０２８７）で示された時間処理し、次いでＴＮＦα（０ｎｇ／ｍＬ又は２０ｎｇ／ｍＬ）で３０分間処理した。続いて、細胞内のＩκＢαをウエスタンブロッティングにより検出した。結果を図３Ｆに示す。
【０１８１】
図３Ｆは、ＹＸＹ１０１並びにその誘導体ＸＳ０２８４及びＸＳ０２８７が、ＨｅｐＧ２細胞におけるＩκＢαのＴＮＦα誘導分解を阻害することができたことを示す。
【０１８２】
図３Ａ〜３Ｆの結果は、ＹＸＹ１０１並びにその誘導体ＸＳ０２８４及びＸＳ０２８７が、ＩＫＫα／βのリン酸化、ＩκＢαの分解、ＮＦ−κＢのｐ６５サブユニットの核内移行、及びＮＦ−κＢの転写活性化を包含する、細胞内のＴＮＦαの様々な生物学的効果を阻害できたことを示す。
【０１８３】
実施例３  Ｎｕｒ７７は、ＴＮＦαの生物学的効果に対するＹＸＹ１０１の阻害効果を媒介する。
コントロールとしてＳｉＲＮＡ、Ｎｕｒ７７  ＳｉＲＮＡ又はＲＸＲα  ＳｉＲＮＡをＨｅｐＧ２細胞にトランスフェクトした。続いて、ＨｅｐＧ２細胞を異なる濃度のＹＸＹ１０１（０μＭ、１μＭ又は４μＭ）で１時間処理し、次いでＴＮＦα（０ｎｇ／ｍＬ又は２０ｎｇ／ｍＬ）で３０分間処理した。続いて、細胞内のＮｕｒ７７、ＲＸＲα及びＩκＢαをウエスタンブロッティングにより検出した。結果を図４Ａ〜４Ｂに示す。
【０１８４】
図４Ａ〜４Ｂは、異なるＳｉＲＮＡでトランスフェクトし、異なる濃度のＹＸＹ１０１及びＴＮＦαで処理したＨｅｐＧ２細胞におけるＮｕｒ７７、ＲＸＲα及びＩκＢαの免疫ブロット分析の結果を示す。結果は、Ｎｕｒ７７  ＳｉＲＮＡは細胞内のＮｕｒ７７の発現を効果的に阻害／ノックアウトしたこと、ＲＸＲα  ＳｉＲＮＡは細胞内のＲＸＲαの発現を効果的に阻害／ノックアウトしたこと、それに対し、コントロールＳｉＲＮＡはＮｕｒ７７及びＲＸＲαの正常発現に影響を及ぼさなかった。さらに、図５Ａ〜５Ｂの結果は、ＹＸＹ１０１が、Ｎｕｒ７７を発現する細胞においてＩκＢαのＴＮＦα誘導性分解を阻害することができたが；しかし、Ｎｕｒ７７発現がノックアウトされると、ＹＸＹ１０１はＩκＢα分解を阻害するその能力を失うことを示す。これらの結果は、ＴＮＦαの生物学的効果に対するＹＸＹ１０１の阻害効果がＮｕｒ７７によって媒介されたことを示している。
【０１８５】
上記の実験結果はまた、ＭＥＦ細胞及びＮｕｒ７７−／−ＭＥＦ細胞（すなわち、Ｎｕｒ７７を発現していないＭＥＦ細胞）を用いて検証された。簡単に説明すると、ＭＥＦ細胞及びＮｕｒ７７−／−ＭＥＦ細胞を異なる濃度のＹＸＹ１０１（０μＭ又は１μＭ）で１時間処理し、次いでＴＮＦα（０ｎｇ／ｍＬ又は２０ｎｇ／ｍＬ）で３０分間処理した。続いて、細胞内のＩκＢαをウエスタンブロッティングにより検出した。結果を図４Ｃに示す。
【０１８６】
結果は、ＹＸＹ１０１がＮｕｒ７７を発現するＭＥＦ細胞においてＩκＢαのＴＮＦα誘導性分解を阻害することができたが、しかしながら、Ｎｕｒ７７−／−ＭＥＦ細胞において、ＹＸＹ１０１はＩκＢα分解を阻害する能力を失ったことを示す。これらの結果は、ＴＮＦαの生物学的効果に対するＹＸＹ１０１の阻害効果がＮｕｒ７７によって媒介されることを示している。
【０１８７】
さらに、ＭＥＦ細胞及びＮｕｒ７７−／−ＭＥＦ細胞をＹＸＹ１０１（０又は１μＭ）で１時間処理し、次いでＴＮＦα（２０ｎｇ／ｍＬ）で３０分間処理した。続いて、細胞内のＮＦ−κＢのｐ６５サブユニットを免疫蛍光染色によって検出した。未処理細胞をコントロールとして使用した。結果を図４Ｄに示す。
【０１８８】
図４Ｄは、ＹＸＹ１０１及びＴＮＦαで処理したＭＥＦ細胞及びＮｕｒ７７−／−ＭＥＦ細胞の免疫蛍光染色の結果を示す（スケールバー：１０μｍ）。結果は、ＹＸＹ１０１がＮｕｒ７７を発現するＭＥＦ細胞においてＴＮＦα誘導ｐ６５核内移行を阻害することができたが、しかしながら、Ｎｕｒ７７−／−ＭＥＦ細胞において、ＹＸＹ１０１はｐ６５の核内移行を阻害する能力を失ったことを示す。これらの結果は、ＴＮＦαの生物学的効果に対するＹＸＹ１０１の阻害効果がＮｕｒ７７によって媒介されることを示している。
【０１８９】
図４Ｅは、異なる濃度のＸＳ０２８４及びＴＮＦαで処理したＭＥＦ細胞及びＮｕｒ７７−／−ＭＥＦ細胞におけるＩκＢαの免疫ブロット分析の結果を示す。結果は、ＸＳ０２８４がＮｕｒ７７を発現するＭＥＦ細胞においてＩκＢαのＴＮＦα誘導分解を阻害することができたが、しかし、Ｎｕｒ７７−／−ＭＥＦ細胞において、ＸＳ０２８４はＩκＢα分解を阻害する能力を失ったことを示す。これらの結果は、ＴＮＦαの生物学的効果に対するＸＳ０２８４の阻害効果がＮｕｒ７７によって媒介されることを示している。
【０１９０】
実施例４  ＹＸＹ１０１は、ある有意な腫瘍抑制活性を有し、トリプルネガティブ乳がんに対して特に敏感であり、生物学的機能はＮｕｒ７７に依存する。
【０１９１】
異なる乳がん細胞（ＭＤＡ−ＭＢ−２３１；ＭＤＡ−ＭＢ−４６８；ＢＴ５４９；ＳＫＢＲ３；Ｔ４７Ｄ及びＭＣＦ−７）を異なる濃度のＹＸＹ１０１（１μＭ、１．３μＭ、１．６μＭ、１．９μＭ、２．２μＭ、２．５μＭ、２．８μＭ、３．１μＭ、３．４μＭ、３．７μＭ、４．０μＭ）で７２時間処理し、そして乳がん細胞の増殖率を決定した。ＹＸＹ１０１の濃度に対するがん細胞増殖率の曲線をプロットし、そしてＹＸＹ１０１のＩＣ５０を決定した。結果を図５Ａに示す。
【０１９２】
図５Ａは、ＹＸＹ１０１濃度に対する、異なる乳がん細胞（ＭＤＡ−ＭＢ−２３１；ＭＤＡ−ＭＢ−４６８；ＢＴ５４９；ＳＫＢＲ３；Ｔ４７Ｄ及びＭＣＦ−７）の増殖比、並びにＹＸＹ１０１のＩＣ５０値を示す。ここで、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１、ＭＤＡ−ＭＢ−４６８、ＢＴ５４９及びＳＫＢＲ３は、トリプルネガティブ乳がん細胞であり、それらの結果は赤色の曲線で示され、；Ｔ４７Ｄ及びＭＣＦ−７は、トリプルポジティブ乳がん細胞であり、それらの結果は青色の曲線で示される。結果は、トリプルネガティブ乳がん細胞の増殖を阻害するＹＸＹ１０１の能力が、トリプルポジティブ乳がん細胞の増殖を阻害するその能力より有意に強かったことを示す。ここで、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１、ＭＤＡ−ＭＢ−４６８、ＢＴ５４９及びＳＫＢＲ３の増殖を阻害するためのＹＸＹ１０１のＩＣ５０は、それぞれ１．２０４、０．１８７、０．２４５及び２．６４６μＭであり、それらはＴ４７Ｄ及びＭＣＦ−７のもの（それぞれ７４．４６５μＭ及び１１．４９８μＭ）よりはるかに低く、ＹＸＹ１０１がトリプルネガティブ乳がんの治療に特に有利に使用できることを示唆している。
【０１９３】
図５Ｅは、野生型Ｈｅｌａ細胞におけるＹＸＹ１０１のＩＣ５０値が１．１８９μＭであり、一方、Ｎｕｒ７７ノックアウトＨｅｌａ細胞におけるＩＣ５０が５８．１６６μＭであることを示す。結果は、ＹＸＹ１０１の腫瘍抑制効果がＮｕｒ７７に依存することを示す。図１及び図２Ｂから、ＹＸＹ１０１はＮｕｒ７７に特異的に結合することができ、ＹＸＹ１０１の腫瘍抑制活性はＮｕｒ７７と密接に関連していることを示す。
【０１９４】
さらに、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１及びＭＣＦ−７細胞を異なる濃度のＹＸＹ１０１（０μＭ、０．２５μＭ、０．５μＭ、１μＭ、２μＭ、又は４μＭ）で処理した後、ＷＢにより細胞内のｐａｒｐ及びＥＲを検出した。結果を図５Ｂに示す。
【０１９５】
図５Ｂは、異なる濃度のＹＸＹ１０１（０μＭ、０．２５μＭ、０．５μＭ、１μＭ、２μＭ、又は４μＭ）で処理したＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞及びＭＣＦ−７細胞におけるｐａｒｐ及びＥＲの免疫ブロット分析の結果を示す。結果は、ＹＸＹ１０１はＭＤＡ−ＭＢ−２３１におけるｐａｒｐ切断、すなわちアポトーシス現象、を誘導した。
【０１９６】
さらに、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１を異なる濃度のＹＸＹ１０１（０μＭ、２μＭ、又は４μＭ）で異なる時間（１２時間又は２４時間）処理した後、細胞内のｐａｒｐ及びｐ−ｍＴＯＲをＷＢで検出した。結果を図５Ｃに示す。
【０１９７】
図５Ｃは、異なる濃度のＹＸＹ１０１（０μＭ、２μＭ、又は４μＭ）で１２時間又は２４時間処理したＭＤＡ−ＭＢ−２３１中のｐａｒｐ及びｐ−ｍＴＯＲの免疫ブロット分析の結果を示す。結果は、ＹＸＹ１０１が時間及び濃度依存的にＭＤＡ−ＭＢ−２３１においてアポトーシスを誘導することができることを示した。
【０１９８】
さらに、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞をＴＮＦαと組み合わせたＹＸＹ１０１で異なる時間（１時間、６時間又は１２時間）処理した後、ＷＢによって細胞内のｐａｒｐを検出した。結果を図５Ｄに示す。
【０１９９】
図５Ｄは、異なる時間（１時間、６時間又は１２時間）、ＴＮＦαと組み合わせたＹＸＹ１０１で処理したＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞におけるｐａｒｐの免疫ブロット分析の結果を示す。結果は、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１において、ＴＮＦαと組み合わせたＹＸＹ１０１がより強いアポトーシスを誘導できることを示した。
【０２００】
実施例５．  乳がん腫瘍の増殖に対するＹＸＹ１０１の阻害効果
このセクションでは、我々は、ヌードマウス異種移植片実験によって、トリプルネガティブ乳がんに対するＹＸＹ１０１単独又はＴＮＦαとの併用の抗腫瘍効果を試験した。
【０２０１】
１）実験動物及び試薬
ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞、ＢＡＬＢ／ｃ（ｎｕ／ｎｕ）ヌードマウス、体重１８〜２０ｇ、雌、ＳＰＦ動物飼育場で哺育、飼料、飲料水、動物用ケージ、ごみは２日ごとに交換され、厳密には無菌操作が行われた。無菌条件下で、対数増殖期に接種する細胞を集め、それらを無血清培地で洗浄し、倒立顕微鏡下で生存細胞数をカウントし、生存率＞９５％、細胞濃度を１×１０６／ｍＬに調整し、そして、細胞懸濁液を調製するため腫瘍細胞をＰＢＳに再懸濁した。各ヌードマウスの腕の右側に、０．２ｍＬの上記細胞懸濁液を接種し、そして腫瘍増殖状態を定期的に観察した。
【０２０２】
２）グループ分けと管理
薬物投与群：  ヌードマウスの移植腫瘍の直径が約０．５ｃｍに達したとき、出血、壊死及び感染のないヌードマウスを実験用に選択した。ヌードマウスの体重を量り、それの腫瘍直径を測定し、そして各群６匹のヌードマウスにグループ分けした。実験群のマウスに、ＴＮＦα（１２０×１０４  Ｕ／ｋｇ）、ＹＸＹ１０１（２ｍｇ／ｋｇ）、又はその組み合わせを投与し、コントロール群のマウスには同量の生理食塩水を投与した。ＴＮＦαを腫瘍内注射により一日おきに投与し；ＹＸＹ１０１を胃内に毎日投与した。最後の投与から６時間後にヌードマウスを屠殺し、そして腫瘍重量を測定した。
【０２０３】
治療中、ヌードマウスの摂餌量及び体重は有意に減少せず、活動は正常であり、そして脱毛及び下痢のような症状は現れなかった。処置終了時に、各グループのヌードマウスにおいて死亡は起こらなかった。ヌードマウスを屠殺した後、剖検は、明らかな腫瘍境界、不均一な表面、堅い質感、局所血管が明らかに拡張していること、そしていくつかの腫瘍は中心部で壊死していることを示した。全てのグループのヌードマウスに転移性病変は見られなかった。各処置群のヌードマウスの心臓、肝臓、脾臓、肺、腎臓及び他の臓器に外観の明らかな変化は見られなかった。
【０２０４】
３）観察指標
腫瘍増殖曲線の描画
腫瘍体積（tumor  volume,ＴＶ）を計算するための式は、
Ｖ  ＝  １／２×ａ×ｂ×ｃ
である。式中、ａ、ｂ、及びｃは、それぞれ長さ、幅、及び高さを表す。測定結果に基づいて腫瘍体積を算出し、横軸に時間、縦軸に腫瘍体積をとって腫瘍増殖曲線をプロットした。
【０２０５】
抗腫瘍活性評価指数は、相対的腫瘍増殖率Ｔ／Ｃ（％）であった。：  ここで、Ｔは治療群のＲＴＶを表し；Ｃはネガティブコントロール群のＲＴＶを表す。有効性評価基準は、：  Ｔ／Ｃ％＞４０％は無効であり；Ｔ／Ｃ％≦４０％及びｐ＜０．０５は有効であった。
【０２０６】
実験結果を図６に示す。図６Ａの左パネルはヌードマウスの各グループに形成された腫瘍を示し；中央パネルはヌードマウスの各グループに形成された腫瘍のＲＴＶを示し；右パネルはヌードマウスの各グループに形成された腫瘍の重量を示す。図６Ａの結果は、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞を接種した後にヌードマウスにおいて腫瘍が生成されたことを示し；そして、ＹＸＹ１０１は良好な腫瘍抑制効果を有し；そして、ＹＸＹ１０１とＴＮＦαとの組み合わせはより強い腫瘍抑制効果を誘導する。
【０２０７】
図６Ｂは、各群のヌードマウスにおける腫瘍組織の免疫組織化学染色の結果を示す。図６Ｂの結果は、ＹＸＹ１０１が腫瘍組織においてカスパーゼ３切断を誘導し、且つ腫瘍細胞のアポトーシスを促進することができ；そしてＹＸＹ１０１及びＴＮＦαの組み合わせが腫瘍細胞のより強いアポトーシスを誘導しうることを示す。
【０２０８】
実施例６．乳がん腫瘍の増殖及び転移に対するＹＸＹ１０１の阻害
１）実験動物及び試薬
ＭＭＴＶ−ＰＹＶＴ乳がんトランスジェニックマウス、９週齢、メス、ＳＰＦ動物飼育場で哺育、飼料、飲料水、動物用ケージ、ごみは全てオートクレーブし、前記ごみは２日ごとに交換し、厳密な無菌操作が行われた。
【０２０９】
２）グループ分けと管理
乳がんの雌ＭＭＴＶ−ＰＹＶＴトランスジェニックマウスを、温度２３±１℃、湿度４０〜６０％、自然光、自由な飲料水、及び一般的な飼料への自由なアクセスの条件下で飼育した。胸部に腫瘍が増殖し始めた３６匹のマウスを選択肢、無作為に３つの群に分け、そして各群をコントロール群とＹＸＹ１０１処置群とに細分した。
【０２１０】
以下のように投与が行われた。
１１ｗｋ時点
コントロール群：  ９週齢のマウスに、飼料を与える前に、毎日午後７時に生理食塩水を与えた
ＹＸＹ１０１群：  ９週齢のマウスに、毎日午後７時に２ｍｇ／ｋｇの用量で一度に胃内投与した。
１３ｋ時点
コントロール群：  １１週齢のマウスに、飼料を与える前に、毎日午後７時に生理食塩水を与えた。
グループＹＸＹ１０１：  １１週齢のマウスに、毎日午後７時に、２ｍｇ／ｋｇの用量で一度に胃内投与した。
１７ｋ時点
コントロール群：  １５週齢のマウスに、飼料を与える前に、毎日午後７時に生理食塩水を与えた。
グループＹＸＹ１０１：  １５週齢のマウスに、毎日午後７時に、２ｍｇ／ｋｇの用量で一度に胃内投与した。
【０２１１】
上記の方法に従って２週間連続投与した後、各動物について眼球を採血し、血清炎症指数を決定するため、上澄み液を除去した；明確な境界、不均一な表面及び堅いきめを有する腫瘍組織を日常的に処置しそして免疫染色のために包埋した。
【０２１２】
実験結果を図７及び８に示す。図７Ａは、ＹＸＹ１０１の２ｍｇ／ｋｇの胃内投与後２週、１１週、１３週又は１７週におけるＭＭＴＶ−ＰＹＶＴマウスの全身状態を示す。図７Ａの結果は、ＹＸＹ１０１が乳がん腫瘍の進行を抑制することを示している。
【０２１３】
図７Ｂは、２週間のＹＸＹ１０１の２ｍｇ／ｋｇの胃内投与後、１１週、１３週又は１７週におけるＭＭＴＶ−ＰＹＶＴマウスの腫瘍組織のＨＥ染色及び免疫組織化学染色の結果を示す。図７Ｂの結果は、ＹＸＹ１０１が乳がん腫瘍の増殖を抑制し得ることを示す。
【０２１４】
図７Ｃは、２週間のＹＸＹ１０１の２ｍｇ／ｋｇの胃内投与後、１１週、１３週又は１７週におけるＭＭＴＶ−ＰＹＶＴマウスの肺組織の重量、形態、ＨＥ染色及び免疫組織化学的染色の分析結果を示す。図７Ｃの結果は、ＹＸＹ１０１が乳がんによって引き起こされる肺転移を抑制することができることを示している。
【０２１５】
図７Ａ〜７Ｃにおけるこれらの実験の結果は、ＹＸＹ１０１が乳がん腫瘍の増殖及び転移を阻害することができることを示している。
【０２１６】
図８Ａは、６０日以内の野生型ｍｍｔｖ−ＰｙＭＴマウス及びＮｕｒ７７ノックアウトｍｍｔｖ−ＰｙＭＴマウスの動物レベルでの生存曲線を示し、図８Ｄは、動物レベルでの検出されたｍｍｔｖ−ＰｙＭＴマウスの生存率に対するＹＸＹ１０１の効果を示す。結果は、Ｎｕｒ７７のノックアウト後のマウスの生存率が有意に改善されたことを示し、結果は、Ｎｕｒ７７が乳がんの発症と有意に関連していることを予測した。図８Ｂは、上記の２種のマウスの腫瘍組織重量の統計結果を示し、そして結果は、Ｎｕｒ７７をノックアウトした後に乳がん組織の重量が有意に減少されたことを示し、そして図８Ｃもこれらの腫瘍組織の外観及び形態の比較を示し、Ｎｕｒ７７ノックアウトマウスが、より小さくより滑らかな腫瘍組織を有したことを明確に示す。上記の結果は、Ｎｕｒ７７が乳がんの発症において決定的な役割を果たすことを示している。
【０２１７】
要約すると、ＳＰＲ技術を用いて、我々はＮｕｒ７７を標的とした薬物を創造的にスクリーニングした。それにより、Ｎｕｒ７７に特異的に結合する薬物分子であるＹＸＹ１０１を得た。それは顕著な、特にトリプルネガティブ乳がんに敏感である、抗腫瘍活性を示し、そしてこの乳がんに対する治療活性はＮｕｒ７７に依存していた。当該化合物は、トリプルネガティブ乳がんの治療に非常に有望な活性分子であった。当該スクリーニング方法は、Ｎｕｒ７７に特異的に結合する薬物分子を開発するための、及びトリプルネガティブ乳がんの標的治療のための有効な方法であった。
【０２１８】
実施例７．炎症はある程度まで腫瘍産生を誘導することができ、且つこのプロセスはＮｕｒ７７に関連する。
これまでの研究で、我々は、乳がん、特にトリプルネガティブ乳がんの発症は、炎症反応及びｍＴＯＲシグナル伝達経路の高活性化をも伴うことを見出した。慢性炎症も乳がん発症の重要な基礎であった。他の腫瘍に有効な多くの非ステロイド系抗炎症薬も乳がんの予防と治療に使用されていた。
【０２１９】
図９Ａ〜９Ｂは、免疫ブロッティングによってが検出された、飢餓条件下で１時間、３時間及び６時間、ＴＮＦαで処理したＭＢ−ＭＤＡ−２３１及びＳＫＢＲ３乳がん細胞のｐ−Ｐ７０Ｓ６Ｋレベルを示す。結果は、ｐ−Ｐ７０Ｓ６ＫがＴＮＦαの誘導下でアップレギュレートされたことを示し、これは時間依存的であった。結果は、ｍＴＯＲシグナル伝達経路が炎症性環境において活性化されたことを示し、それは腫瘍形成に密接に関連している可能性がある。図９Ｃは、免疫ブロッティングにより検出された、飢餓条件下で濃度勾配又は時間勾配においてＴＮＦαで処理した、野生型又はＮｕｒ７７ノックアウトＭＥＦ細胞におけるｐ−ｍＴＯＲ、ｐ−Ｐ７０Ｓ６Ｋ、及びｐ−Ｓ６のレベルを示す。結果は、ＴＮＦαによって引き起こされたｍＴＯＲシグナル伝達経路の活性化は、時間及び濃度によって調節され、そしてそのような活性化はＮｕｒ７７に依存することを示す。
【０２２０】
実施例６と実施例７との組み合わせにおいて、Ｎｕｒ７７は乳がんの発症に重要であるだけでなく、乳がんの治療のための標的としても使用することができる。従って、Ｎｕｒ７７は乳がんの発症を検出するための貴重な生化学的指標であり、乳がんの進行及び治療戦略の評価に使用することができる。
【０２２１】
実施例８  ＹＸＹ１０１は、ｍＴＯＲ活性を有意に阻害することができ、それによって腫瘍を阻害し、このプロセスはＮｕｒ７７に依存する。
このセクションでは、腫瘍の内部環境が実験的にシミュレートされた。すなわち、急性炎症を引き起こすサイトカインであるＴＮＦαを、腫瘍形成をシミュレートするのに使用した。この方法は腫瘍を抑制する薬物をスクリーニングするための実験的基礎を提供することができる。この方法により、トリプルネガティブ乳がんの治療を標的にするのに有効な薬物を見出すため、ｍＴＯＲシグナル伝達経路を阻害するＮｕｒ７７依存性化合物がスクリーニングされた。
【０２２２】
図１０Ａは、免疫ブロッティングにより検出された、飢餓条件下でのＴＮＦα（２０ｎｇ／ｍＬ）、ＹＸＹ１０１（１μＭ、２μＭ、４μＭ）により処理したＭＢ−ＭＤＡ−２３１乳がん細胞における、ｐ−ｍＴＯＲ、ｐ−Ｐ７０Ｓ６Ｋレベルの試験結果を示す。結果は、ＹＸＹ１０１がＴＮＦαによって活性化されたｐ−ｍＴＯＲ及びｐ−Ｐ７０Ｓ６Ｋを有意にダウンレギュレートできることを示し、これは、化合物の抗腫瘍メカニズムはｍＴＯＲ活性のその阻害によるものであることを示唆している。図１０Ｂは、免疫ブロッティングにより検出された、Ｆｌａｇエンプティプラスミド又はＦｌａｇ−Ｎｕｒ７７プラスミドでトランスフェクトされ、飢餓条件下で３時間、６時間、ＴＮＦα、ＹＸＹ１０１で処理した、ＭＢ−ＭＤＡ−２３１乳がん細胞における、ｐ−ｍＴＯＲ、ｐ−Ｐ７０Ｓ６Ｋ、Ｎｕｒ７７レベルの試験結果を示す。図１０Ｃは、免疫ブロッティングにより検出された、Ｎｕｒ７７遺伝子をサイレンシングするため処理され、次いで飢餓条件下でＴＮＦα、ＹＸＹ１０１で処理された、ＭＢ−ＭＤＡ−２３１細胞におけるｐ−Ｐ７０Ｓ６Ｋ及びＮｕｒ７７レベルの試験結果を示す。図１０Ｄは、免疫ブロッティングにより検出された、ＴＮＦα、ＹＸＹ１０１（０．５ｍＭの、１μＭ）で処理された野生型又はＮｕｒ７７ノックアウト型ＭＥＦ細胞におけるｐ−Ｓ６、ｐ−ｍＴＯＲ、及びｐ６２レベルの試験結果を示す。図１０Ｂ〜１０Ｄの結果から、Ｎｕｒ７７の過剰発現及びノックアウトの方法により、ｍＴＯＲ活性をダウンレギュレートするＹＸＹ１０１の活性がＮｕｒ７７に依存していることが確認されたことが示された。
【０２２３】
結論として、ｍＴＯＲシグナル伝達経路の阻害は抗がん剤のスクリーニングのための有効な指標として使用することができる。この方法により、Ｎｕｒ７７を介してｍＴＯＲシグナル伝達経路を阻害する強力な活性を有するスクリーニングされた化合物は、潜在的な抗がん活性を有する。
【０２２４】
実施例９．トリプルネガティブ乳がん細胞に対するＹＸＹ１０１誘導体のアポトーシスの誘導
異なる乳がん細胞（ＭＤＡ−ＭＢ−２３１及びＭＣＦ−７）を異なる濃度のＹＸＹ１０１誘導体ＸＳ０５０３（０．１６μＭ、０．３１μＭ、０．６２５μＭ、１．２５μＭ、２．５μＭ、５μＭ、１０．０μＭ）で２４時間処理し、そして乳がん細胞の増殖率を測定した。ＸＳ０５０３の濃度に対するがん細胞増殖率の曲線をプロットし、ＹＸＹ１０１のＩＣ５０が決定された。結果を図１１Ａに示す。
【０２２５】
図１１Ａは、ＸＳ０５０３濃度に対する異なる乳がん細胞（ＭＤＡ−ＭＢ−２３１及びＭＣＦ−７）の増殖比、並びにＸＳ０５０３のＩＣ５０値を示し、ここで、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１は赤の曲線で表され；ＭＣＦ−７、トリプルポジティブ乳がん細胞は、青い曲線で表される。結果は、トリプルネガティブ乳がん細胞の増殖に対するＸＳ０５０３の阻害能力が、トリプルポジティブ乳がん細胞に対するよりも有意に強いことが示された。ここで、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１の増殖を阻害するためのＩＣ５０は１．１９μＭであり、これは、ＭＣＦ−７についてのＩＣ５０（２．６５μＭ）よりも低かった。このことは、ＹＸＹ１０１がトリプルネガティブ乳がんの治療に特に有利に使用できることを示唆している。
【０２２６】
さらに、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１を異なるＹＸＹ１０１誘導体、ＸＳ００７７、ＸＳ０３３５、ＸＳ０４１９、ＸＳ０４７４、ＸＳ０４８８（０．１６μＭ、０．３１μＭ、０．６２５μＭ、１．２５μＭ、２．５μＭ、５μＭ、１０．０μＭ）で処理し、続いてＭＤＡ−ＭＢ−２３１増殖比を測定した。図１１Ｂにおける結果は、ＸＳ００７７、ＸＳ０３３５、ＸＳ０４１９、ＸＳ０４７４、及びＸＳ０４８８で処理したＭＤＡ−ＭＢ−２３１の増殖の阻害についてＩＣ５０が、それぞれ１．８４μＭ、１．８８μＭ、１．２７μＭ、２．９３μＭ、及び１．９０μＭであることを示した。
【０２２７】
図１１Ｃは、ＹＸＹ１０１誘導体、ＸＳ０２８４、ＸＳ０２８５、ＸＳ０３９４、ＸＳ０４１８、ＸＳ０４１９、ＸＳ０４７４、ＸＳ０４８６、ＸＳ０４６２、ＸＳ０４９１、ＸＳ０４９２、又はＸＳ０４８８で処理された、７つの乳がん細胞、ＢＴ４７４、ＺＲ−７５−１、ＢＴ５４９、ＨＣＣ１９３７、ＨＳ５７８Ｔ、ＭＣＦ−７、及びＴ４７Ｄ、の阻害率分析結果を示す。結果は、上記の誘導体が異なる乳がん細胞に対して一定の抑制効果を持つことを示した。ここで、ＸＳ０２８４、ＸＳ０２８５、ＸＳ０４１８、ＸＳ０４１９、ＸＳ０４６２及びＸＳ０４８８は、様々な乳がん細胞の増殖に対する抑制効果を有いていた。これらは、ＹＸＹ１０１のそれよりも近いか、あるいはさらに強かった。
【０２２８】
さらに、ＹＸＹ１０１（４μＭ）又は異なるＹＸＹ１０１誘導体（４μＭ）、ＸＳ０３９４、ＸＳ０３９５、ＸＳ０４１９、ＸＳ０４２０、ＸＳ０４２１、ＸＳ０２８４、ＸＳ０３３５、ＸＳ０４８８、ＸＳ０４９１、ＸＳ０４９２、ＸＳ０４１８、ＸＳ０５０２、ＸＳ０５０３、ＸＳ０５０６、ＸＳ０５０７、ＸＳ０５０８、又はＸＳ００７７、及びＴＮＦα（２０ｎｇ／ｍＬ）を、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞を処理するのに使用した。前記細胞におけるＰＡＲＰを免疫ブロット分析に付した。図１２Ａにおける結果は、ＹＸＹ１０１と比較して、ＸＳ０４１８、ＸＳ０４１９、ＸＳ０４９２、ＸＳ０５０８及びＸＳ００７７を包含する、赤色フォントで標識された誘導体は、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞のトリプルネガティブ乳がんにおいて、より顕著にＰＡＲＰ切断を誘導することができることを示す。
【０２２９】
図１２Ｂは、無血清培地で１０時間、飢餓下処理した、ＹＸＹ１０１（２μＭ）及び異なるＹＸＹ１０１誘導体（２μＭ）、ＸＳ０２８４、ＸＳ０２８５、ＸＳ０３３５、ＸＳ０３９４、ＸＳ０４１８、ＸＳ０４１９、ＸＳ０４５４、ＸＳ０４６２、ＸＳ０４７３、ＸＳ０４７４、ＸＳ０４８０、ＸＳ０４８６、ＸＳ０４８８、ＸＳ０４９１、又はＴＮＦ０４９２、及びＴＮＦα（２０ｎｇ／ｍＬ）で処理した、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞におけるＰ−ｍＴＯＲ、Ｐ−ｐ７０Ｓ６Ｋ、及びＰ−Ｓ６のイムノブロッティング分析の結果を示す。ＹＸＹ１０１と比較して、ＸＳ０３３５、ＸＳ０３９４、ＸＳ０４１８、ＸＳ０４１９、ＸＳ０４７４、ＸＳ０４８６、ＸＳ０４９１、及びＸＳ０４９２を包含する、赤いフォントでラベルされた誘導体は、Ｐ−ｍＴＯＲ、Ｐ−ｐ７０Ｓ６Ｋ、及びＰ−Ｓ６をより有意に減少させた。
【０２３０】
【０２３１】
実施例１０．表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）による他の化合物の特徴化
実施例１及び２に記載の方法に従って、様々なＹＸＹ１０１誘導体（ＸＳ０４１８、ＸＳ０４１９、ＸＳ０４７４、ＸＳ０３９４、ＸＳ０４９２、ＸＳ０４９１、ＸＳ０４８８）のＮｕｒ７７−ＬＢＤへの結合を、Ｂｉａｃｏｒｅ  Ｔ２００機器を用いてＳＰＲにより検出した。結果を図１３に示す。
【０２３２】
図１３は、Ｂｉａｃｏｒｅ  Ｔ２００装置を用いて、Ｎｕｒ７７−ＬＢＤへ種々の化合物（ＸＳ０４１８、ＸＳ０４１９、ＸＳ０４７４、ＸＳ０３９４、ＸＳ０４９２、ＸＳ０４９１、ＸＳ０４８８）の結合を検出するための実験の結果を示す。結果は、Ｎｕｒ７７−ＬＢＤに対する化合物ＸＳ０４１８の解離定数（Ｋｄ）は３．６７μＭであること、Ｎｕｒ７７−ＬＢＤに対する化合物ＸＳ０４１９の解離定数（Ｋｄ）は４０４ｎＭであること、Ｎｕｒ７７−ＬＢＤに対する化合物ＸＳ０４７４の解離定数（Ｋｄ）は２．６０μＭであること、Ｎｕｒ７７−ＬＢＤに対する化合物ＸＳ０３９４の解離定数（Ｋｄ）は１．２６μＭであること、Ｎｕｒ７７−ＬＢＤに対する化合物ＸＳ０４９２の解離定数（Ｋｄ）は１．３０μＭであること、Ｎｕｒ７７−ＬＢＤに対する化合物ＸＳ０４９１の解離定数（Ｋｄ）は０．３３６μＭであること、Ｎｕｒ７７−ＬＢＤに対する化合物ＸＳ０４４８の解離定数（Ｋｄ）は１．２８μＭであること、を示す。
【０２３３】
実施例１１．ＸＳ０２８４は、ＹＸＹ１０１よりも高脂肪誘発性乳がんの治療においてより効果的である。
ＹＸＹ１０１誘導体が乳がんも抑制し得ることを証明するために、我々は、検証のために、Ｐ−ｍＴＯＲ、Ｐ−ｐ７０Ｓ６Ｋ及びＰ−Ｓ６に対して強い抑制効果を示すＸＳ０２８４を選択した。図１４Ａ〜１４Ｄの結果は、ＹＸＹ１０１とＸＳ０２８４の両方が、低脂肪条件下でも高脂肪条件下でも、乳がんの発症を有意に抑制することができることを示す。低脂肪食条件下では、ＸＳ０２８４の乳がんに対する抑制効果がＹＸＹ１０１のそれに近かったのに対して、高脂肪食条件下では、ＸＳ０２８４の抑制効果は、ＹＸＹ１０１のそれよりも強かった。腫瘍組織の大きさやマウスの体重の変化に反映される可能性があります。上記の結論は、腫瘍組織の大きさ及びマウスの体重の変化に反映され得る。
【０２３４】
これらの結果は、一連のＹＸＹ１０１誘導体（例えばＸＳ０２８４）も腫瘍発生を抑制することができ、そしてそれらは腫瘍抑制に関してＹＸＹ１０１よりも優れていることを示している。
【０２３５】
実施例１２．ＹＸＹ１０１及びその誘導体の腫瘍抑制効果はＮｕｒ７７に依存する。
ＹＸＹ１０１及びその誘導体の腫瘍抑制効果はＮｕｒ７７に依存することを検証するために、我々は、検証のため、Ｐ−ｍＴＯＲ、Ｐ−ｐ７０Ｓ６Ｋ及びＰ−Ｓ６に対して有意な抑制効果を示すＹＸＹ１０１及びその誘導体ＸＳ０２８４を選択した。図１５Ａ〜図１５Ｂは、それぞれ２週間にわたってＹＸＹ１０１（５ｍｇ／ｋｇ）及びＸＳ０２８４（１０ｍｇ／ｋｇ）を以内投与された、２つのタイプの野生型及びＮｕｒ７７ノックアウト型のＰＹＶＴマウスの結果を示す。各実験群の腫瘍組織サイズを比較することによって、結果は、ＹＸＹ１０１及びＸＳ０２８４が野生型マウスにおいて腫瘍を阻害するのに有効であったが、２つの化合物のいずれもＮｕｒ７７欠損マウスにおいて阻害効果を発揮できないことを示した。
【０２３６】
以上の結果から、腫瘍抑制効果を発揮するために、ＹＸＹ１０１及びその誘導体はＮｕｒ７７に依存することが示唆された。
【０２３７】
実施例１３．ＸＳ０２８４の急性毒性副作用はＹＸＹ１０１より低い
この実施例では、２００ｍｇ／ｋｇのＹＸＹ１０１もしくはその誘導体ＸＳ０２８４の単一胃内注射により、又は２０ｍｇ／ｋｇのＹＸＹ１０１もしくはその誘導体ＸＳ０２８４の探知腹腔内注射により、急性毒性モデルマウスを確立した。この例では、ＹＸＹ１０１もしくはＸＳ０２８４の胃内投与もしくは腹腔内注射後、マウスは、食物摂取量、飲料水、自発的活動、精神状態、四肢活動、腸の質、毛のつやなどについて観察した。可能性のある毒性反応及び一組の時点並びにそれらの相殺を詳細に記録した。組織病理学的方法により心臓、肝臓、小腸、白脂肪及び腎臓の組織形態を観察した。
【０２３８】
実験結果を図１６に示す。図１６Ａは胃内注射群を示した：
１）コントロール群からのマウスの心筋細胞は、明確な境界を有した。十分かつ明白な核によって、心筋線維はきれいにそして明確に配置されていた。；肝組織では、洞性洞は十分且つ明瞭であり、肝小葉は明確な境界を有していた。；腸の組織は明確な境界を持ち、細胞はふくよかで、明らかな境界を持つ腸の絨毛はきれいに配置されていた。；脂肪組織細胞は明確な境界を有し、きれいに配置されていた。
２）コントロール群と比較して、ＹＸＹ１０１群からのマウスの心筋細胞及び心筋線維は無秩序に配置された。；肝小葉境界がぼやけ、細胞質が減少し、ほとんどの肝細胞が死んだ。；腸組織が明らかに腫れ、細胞死が増加し、炎症反応が明らかになり、腸絨毛が無秩序に配置された。；脂肪組織細胞は無秩序に配置され、そして繊維のいくつかは破壊された。
３）ブランク群と比較して、ＸＳ０２８４群からのマウスの心筋細胞は比較的明確な境界を有し、心筋線維は比較的きれいに配置され、そして明らかな境界を有した。；肝組織における肝細胞は明らかな境界と明確な構造を持っていた。；腸の組織は明確な境界を持ち、細胞はふっくらし、腸の絨毛はきちんと配置され、明らかな境界を持っていた。；脂肪組織細胞は明確な境界を有し、きちんと配置されており、そして繊維の破損は減少した。ＸＳ０２８４グループは、ＹＸＹ１０１よりも肝臓及び小腸に対して弱い毒性効果を示したと結論付けることができる。
【０２３９】
図１６Ｂは腹腔内注射群を示す。
１）コントロール群からのマウスの心筋細胞は明確な境界を持っていた、十分で明白な核で、心筋線維はきちんと配置されて明確な境界を持っていた。；肝組織では、洞性副鼻腔は十分で明瞭であり、肝小葉は明確な境界を有していた。；脂肪組織細胞は明確な境界を有し、きれいに配置されていた。；腎臓組織の糸球体は明確な境界を持っていた、細胞はふくよかで、きちんと配置されて、明白な境界を持っていた。
２）コントロール群と比較して、ＹＸＹ１０１群からのマウスの心筋細胞と心筋線維は無秩序に配置された。；肝小葉は実質的に明白な境界を有し、肝細胞はふくよかでありそして正常な形態を有した。；しかし、脂肪組織細胞は無秩序に配置されており、多くの炎症性細胞浸潤を示した。；腎臓組織は、糸球体の境界がぼやけており、多くの炎症細胞浸潤を有した。
３）コントロール群と比較して、ＸＳ０２８４群からのマウスの心筋細胞は比較的明確な境界を有し、心筋線維は比較的きれいに配置され、そして明らかな境界を有した。；肝組織の肝細胞は明らかな境界と明確な構造を持っていた。；脂肪組織細胞は明確な境界を有し、きれいに配置され、繊維の破断は減少した。；腎臓組織は明確な糸球体境界を有し、細胞は一杯であり、そして少量の炎症性細胞浸潤があった。；腹腔内注射群のＸＳ０２８４群は、ＹＸＹ１０１よりも腎臓及び脂肪に対する毒性が低いと結論付けることができる。
【０２４０】
これらの結果は、ＸＳ０２８４のような一連のＹＸＹ１０１の誘導体は、ＹＸＹ１０１よりも、動物に対する急性毒性が少ないことを示した。さらに、この一連の化合物は、ＹＸＹ１０１よりも強い標的化及び特異性を有し、そしてこの一連のＹＸＹ１０１誘導体はおそらくより安全な抗癌剤として開発されるべきであることを示唆した。
【０２４１】
【０２４２】
【０２４３】
化合物ＸＳ００７７の調製
【化５３】
2019523245.tif 000212
【０２４４】
化合物ＹＸＹ１０１（５０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を２ｍＬのＤＭＦに撹拌溶解した後、炭酸水素ナトリウム（５６ｍｇ、０．６６ｍｍｏｌ）及び塩化メチレン（４２μＬ、０．６６ｍｍｏｌ）を添加し、室温で１２時間撹拌しながら反応に付した。１ｍｏｌ／Ｌ  ＨＣｌ（１ｍＬ）で反応を停止し、９ｍＬの純水を加え、酢酸エチルで３回（各５ｍＬ）抽出した。有機層を集め、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、有機溶媒酢酸エチルを除去するため、得られた混合物を真空蒸発に付し、それにより混合粗生成物の橙赤色固体を得た。前記橙赤色固体生成物はカラムクロマトグラフィーにより得られた。ここで、溶離液としてｎ−ヘキサン及び酢酸エチル（ヘキサン／酢酸エチル＝１０：１）が使用され、前記カラムは、３００〜４００メッシュのシリカゲルが充填された。
【０２４５】
１Ｈ  ＮＭＲ  （６００ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  ０．４４  （ｓ，  ３Ｈ），  ０．９１  （ｄ，  Ｊ  ＝  １４．３１  Ｈｚ，  １Ｈ），  １．０７  （ｓ，  ３Ｈ），  １．１２  （ｓ，  ３Ｈ），  １．２１  （ｓ，  ３Ｈ），  １．３０−１．３５  （ｍ，  １Ｈ），  １．３８  （ｓ，  ３Ｈ），  １．４１−１．４６  （ｍ，  １Ｈ），  １．５０−１．５９  （ｍ，  ３Ｈ），  １．６１−１．７２  （ｍ，  ４Ｈ），  １．７８−１．８６  （  ｍ，１Ｈ），  １．９５  （ｔｄ，  Ｊ＝１３．９８，  ３．７６  Ｈｚ，  １Ｈ），  ２．０６  （ｄ，  Ｊ  ＝  １４．１２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ２．０９  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．１７−２．２２  （ｍ，  １Ｈ），  ２．３１  （ｄ），  Ｊ＝１５．７７Ｈｚ，１Ｈ），  ３．４８（ｓ，３Ｈ），  ６．３５（ｄ，Ｊ＝７．１５Ｈｚ，１Ｈ），  ６．３９（ｄ，Ｊ＝１．２８Ｈｚ，１Ｈ），  ７．０７（ｄｄ，Ｊ＝７．１５，１．１０Ｈｚ，  １Ｈ），  ８．７２  （ｓ，  １Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１５１  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  １０．１０，  １７．９６，  ２１．４１，  ２８．０８，  ２９．１９，  ２９．４２，  ３０．１２，  ３０．３４，  ３１．３４，  ３２．２３，  ３２．９１，  ３４．３９，  ３６．０２，  ３７．８３，  ３８．８，  ３９．８３，  ４１．９９，  ４３．６４，  ４４．４８，  ５１．４４，  １１７．２６，  １１８．０５，  １２０．１８，  １２６．８９，  １３３．１３，  １４６．４２，  １６２．９４，  １６７．８０，  １７７．９３，  １７７．９６．
【０２４６】
実施例１５．化合物ＸＳ０２８４の調製
【化５４】
2019523245.tif 000213
【０２４７】
化合物ＹＸＹ１０１（５０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）をメタノール（２．５ｍＬ）に窒素雰囲気下、撹拌しながら溶解した。次いで亜硫酸水素ナトリウム水溶液（１４ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ、１ｍＬの水に溶解）を加え、室温で３時間反応させた。反応終了後、反応系をロータリーエバポレーターで濃縮して無色結晶を得た。前記無色結晶をメタノール／水から再結晶し、得られた生成物を真空乾燥して、化合物ＸＳ０２８４（５６．６ｍｇ）を白色固体として得た。
【０２４８】
１Ｈ  ＮＭＲ  （６００ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  ０．５９  （ｓ，  ３Ｈ）  ０．８６  （ｄ，  Ｊ  ＝  １２．１０  Ｈｚ，  １Ｈ）  １．０５  （ｓ，  ３Ｈ）  １．０９  （ｓ，  ３Ｈ）  １．１８  （ｓ，  ３Ｈ）  １．４３−  １．６０（ｍ，６Ｈ）  １．６２（ｓ，３Ｈ）  １．７８−１．８５（ｍ，１Ｈ）  １．９３−２．０４（ｍ，３Ｈ）  ２．２１（ｓ，３Ｈ）  ２．３２（ｄ，Ｊ＝１５．２２Ｈｚ，１Ｈ）  ４．４８（ｄ，Ｊ  ＝６．２４  Ｈｚ，  １Ｈ）  ５．８１  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．６０  Ｈｚ，  １Ｈ）  ６．５８  （ｓ，  １Ｈ）  ７．６１  （ｂｒ．ｓ．，  １Ｈ）  ８．８１  （ｂｒ．ｓ．，  １Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１５１  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  １３．５７，  １８．４６，  ２１．６４，  ２９．０４，  ２９．９８，  ３０．４７，  ３０．６０，  ３０．６４，  ３１．９４，  ３２．９２，  ３４．８０，  ３５．１１，  ３６．９０，  ３６．９６，  ３７．９０，  ３８．０７，  ４３．９５，  ４４．３９，  ６０．１９，  １０８．９６，  １１８．８７，  １２３．２６，  １２４．３９，  １４０．８９，  １４１．９３，  １４４．０２，  １５０．０７，  １８０．００．
【０２４９】
実施例１６．化合物ＸＳ０２８５の調製
【化５５】
2019523245.tif 000214
【０２５０】
化合物ＹＸＹ１０１（５０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）をＮ、Ｎ−ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）に撹拌しながら溶解した。炭酸水素ナトリウム（５０．４ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）を加えた後、臭化ベンジル（０．１７ｍｇ、２０μＬ）を加え、撹拌下、室温度２４時間反応を行った。反応を停止し、脱イオン水（１５ｍＬ）を反応混合物に加え、そして酢酸エチルで３回抽出した。合わせた酢酸エチル層をＮａＣｌの飽和水溶液で３回洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、粗生成物（暗赤色−褐色油状物）を得るため、ロータリーエバポレーターで濃縮した。高速カラムクロマトグラフィ（酢酸エチル：ｎ−ヘキサン）により前記粗生成物を分離及び精製し、赤色固体として化合物ＸＳ０２８５（４４ｍｇ）を得るため、真空乾燥した。
【０２５１】
１Ｈ  ＮＭＲ  （６００  ＭＨｚ，  ＣＨＬＯＲＯＦＯＲＭ−ｄ）  δ  ｐｐｍ  ０．５０  （ｓ，  ３  Ｈ）  ０．９７  （ｄ，  Ｊ＝１３．７５  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．０９  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２１  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２２  −  １．２５  （ｍ，  ３  Ｈ）  １．２５  −  １．２８  （ｍ，  １  Ｈ）  １．４１  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．４７  −  １．５８  （ｍ，  ３  Ｈ）  １．５８  −  １．７２  （ｍ，  ５  Ｈ）  １．８７  （ｄ，  Ｊ＝６．０５  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．９９  −  ２．１１  （ｍ，  ３  Ｈ）  ２．２１  （ｄ，  Ｊ＝１．６５  Ｈｚ，  ３  Ｈ）  ２．２４  （ｄ，  Ｊ＝１４．１２  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ２．４４  （ｄ，  Ｊ＝１５．７７  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ４．９３  （ｄ，  Ｊ＝１２．２９  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ５．０２  （ｄ，  Ｊ＝１２．４７  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ６．３２  （ｄ，  Ｊ＝７．１５  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ６．４９  （ｓ，  １  Ｈ）  ７．０１  （ｄ，  Ｊ＝６．９７  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ７．２７  −  ７．３０  （ｍ，  ２  Ｈ）  ７．３０  −  ７．３６  （ｍ，  ３  Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１５１  ＭＨｚ，  ＣＨＬＯＲＯＦＯＲＭ−ｄ）  δ  ｐｐｍ  １０．２９，  １８．５３，  ２１．５８，  ２８．６１，  ２９．５３，  ２９．９０，  ３０．５５，  ３０．７６，  ３１．５７，  ３２．７６，  ３３．２７，  ３４．６９，  ３６．３５，  ３８．２５，  ３９．４３，  ４０．４４，  ４２．９３，  ４４．２５，  ４５．０３，  ６６．３２，  １１７．３６，  １１８．１２，  １１９．６２，  １２７．３８，  １２８．２４，  １２８．３２，  １２８．６４，  １３４．２４，  １３５．６８，  １４６．０６，  １６４．７９，  １７０．２７，  １７７．９５，  １７８．３６．
【０２５２】
実施例１７．化合物ＸＳ０３３５の調製
【化５６】
2019523245.tif 000215
【０２５３】
化合物ＹＸＹ１０１（５０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１ｍＬ）に撹拌しながら溶解した。パラジウム炭素（５ｍｇ）を加え、これにジクロロメタン（１ｍＬ）を加え、水素ガスを連続的に導入し、室温で２４時間反応した。反応を停止し、脱イオン水（１５ｍＬ）を反応混合物に加え、そして酢酸エチルで３回抽出した。酢酸エチル層を合わせ、次いで、飽和ＮａＣｌで３回洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、粗生成物（無色油状物）を得るため、ロータリーエバポレーターで濃縮した。高速カラムクロマトグラフィ（酢酸エチル：ｎ−ヘキサン）により前記粗生成物を分離及び精製し、白色固体として化合物ＸＳ０３３５（４４ｍｇ）を得るため、真空乾燥した。
【０２５４】
１Ｈ  ＮＭＲ  （６００  ＭＨｚ，  ＭＥＴＨＡＮＯＬ−ｄ４）  δ  ｐｐｍ  ０．９３  −  １．００  （ｍ，  ２  Ｈ）  １．０３  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．１１  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．１９  （ｔ，  Ｊ＝３．４８  Ｈｚ，  ４  Ｈ）  １．２６  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．４１  −  １．４５  （ｍ，  ６  Ｈ）  １．４７  −  １．５５  （ｍ，  ２  Ｈ）  １．５７  （ｄ，  Ｊ＝８．２５  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．５９  −  １．６８  （ｍ，  ２  Ｈ）  １．８３  −  １．９８  （ｍ，  ３  Ｈ）  ２．０６  −  ２．１１  （ｍ，  ４  Ｈ）  ２．１１  −  ２．２０  （ｍ，  ４  Ｈ）  ２．４３  （ｄ，  Ｊ＝１５．７７  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ２．６８  （ｄ，  Ｊ＝１４．６７  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ６．６７  （ｓ，  １  Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１５１  ＭＨｚ，  ＭＥＴＨＡＮＯＬ−ｄ４）  δ  ｐｐｍ  １１．９４，  １８．５１，  ２０．５４，  ２６．８２，  ２８．６６，  ３０．７４，  ３１．１５，  ３１．５７，  ３１．６１，  ３２．０２，  ３２．０９，  ３２．３２，  ３３．６３，  ３４．６５，  ３７．０９，  ３７．５６，  ３８．５３，  ３９．４５，  ３９．８５，  ４１．６９，  ５８．１２，  ５８．４８，  １１２．２４，  １２１．７４，  １２９．３６，  １４１．４７，  １４２．３９，  １４４．１９，  １８２．９５．
【０２５５】
実施例１８．化合物ＸＳ０３６６、ＸＳ０４３４〜ＸＳ０４３８、ＸＳ０４４０、ＸＳ０４４１、ＸＳ０４４３、ＸＳ０４６３及びＸＳ０４６４の調製
【化５７】
2019523245.tif 000216
【０２５６】
例えばＸＳ０３６６の調製の場合、化合物ＹＸＹ１０１（１００ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（４ｍＬ）に撹拌しながら溶解した。インドール（５２ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）を添加した後、三塩化アルミニウム六水和物（５．３ｍｇ、０．０２２ｍｍｏｌ）を添加し、室温で５時間撹拌しながら反応を行った。反応を停止し、脱イオン水（１５ｍＬ）を反応系に加え、次いで酢酸エチルで３回抽出した。合わせた酢酸エチル層を飽和ＮａＣｌで３回洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、粗生成物（褐色油状物）を得るため、ロータリーエバポレーターで濃縮した。高速カラムクロマトグラフィ（酢酸エチル：ｎ−ヘキサン）により前記粗生成物を分離及び精製し、紫がかった赤色固体として化合物ＸＳ０３３６（１２２．２ｍｇ）を得るため、真空乾燥した。
【０２５７】
１Ｈ  ＮＭＲ  （６００  ＭＨｚ，  ＣＨＬＯＲＯＦＯＲＭ−ｄ）  δ  ｐｐｍ  ０．７３  （ｂｒ．  ｓ．，  ３  Ｈ）  ０．８７  −  ０．９０  （ｍ，  １  Ｈ）  ０．９５  −  １．００  （ｍ，  ３  Ｈ）  １．０１  （ｂｒ．  ｓ．，  ３  Ｈ）  １．１４  （ｂｒ．  ｓ．，  ３  Ｈ）  １．１９  （ｔ，  Ｊ＝７．０６  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．２５  −  １．２７  （ｍ，  １  Ｈ）  １．３４  （ｂｒ．  ｓ．，  ３  Ｈ）  １．４２  −  １．５７  （ｍ，  ４  Ｈ）  １．５７  −  １．７６  （ｍ，  ４  Ｈ）  １．９０  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．９９  −  ２．０７  （ｍ，  ２  Ｈ）  ２．１０  −  ２．１７  （ｍ，  １  Ｈ）  ２．４０  （ｄ，  Ｊ＝１５．０４  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ４．９０  （ｄ，  Ｊ＝５．６９  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ６．２１  （ｄ，  Ｊ＝６．２４  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ６．２３  （ｂｒ．  ｓ．，  １  Ｈ）  ６．７９  （ｂｒ．  ｓ．，  １  Ｈ）  ７．１１  （ｔ，  Ｊ＝７．４３  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ７．１６  （ｔ，  Ｊ＝７．４３  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ７．２８  （ｄ，  Ｊ＝７．８９  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ７．７５  （ｄ，  Ｊ＝７．７０  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ７．８８  （ｂｒ．  ｓ．，  １  Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１５１  ＭＨｚ，  ＣＨＬＯＲＯＦＯＲＭ−ｄ）  δ  ｐｐｍ  １１．５３，  １８．８４，  ２１．９３，  ２８．８９，  ２９．６３，  ２９．７５，  ３０．４０，  ３０．５４，  ３０．７２，  ３１．５５，  ３２．８４，  ３４．６２，  ３５．５０，  ３６．７４，  ３６．９４，  ３７．７６，  ４０．３５，  ４３．６２，  ４４．２８，  １０８．９３，  １１１．３０，  １１９．０９，  １１９．２８，  １２０．２３，  １２１．５５，  １２１．５８，  １２１．６７，  １２７．１０，  １２７．８４，  １３６．４９，  １３９．９２，  １４２．１７，  １４２．８３，  １４７．４８，  １８４．３０．
【０２５８】
上記の方法に従って、本発明において、以下の化合物もまた合成される。
【化５８】
2019523245.tif 000217
【０２５９】
実施例１９．化合物ＸＳ０３９５の調製
【化５９】
2019523245.tif 000218
【０２６０】
化合物ＹＸＹ１０１（５０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を２５ｍＬの反応フラスコに秤量し、４ｍＬのアセトンをそれに加えて攪拌溶解した後、触媒として濃塩酸を１滴加えて、室温で１２時間反応を行った。反応を止め、溶媒を除去するため、反応混合物を直接濃縮した。残留物を酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝４：１を用いるシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して、５１％の収率で白色固体を与えた。
【０２６１】
１Ｈ  ＮＭＲ  （６００ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  ０．６２  （ｓ，  ３Ｈ），  ０．８２−１．８６  （ｍ，  １Ｈ），  １．０４  （ｓ，  ３Ｈ），  １．０９  （ｓ，  ３Ｈ），  １．１５  （ｓ，  ３Ｈ），  １．２５−１．３８  （ｍ，  ４Ｈ），  １．３９  （ｓ，  ３Ｈ），  １．４２−１．５０  （ｍ，  ２Ｈ），  １．５５−１．７１  （ｍ，  ４Ｈ），  １．７７  （ｔｄ，  Ｊ  ＝  １３．９，  ６．１  Ｈｚ，  １Ｈ），  １．９３  ２．０２  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．０３  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．０９  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．２７−２．３６  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．６７  （ｄｄ，  Ｊ  ＝  １６．２，  ２．７  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．７１−３．７８  （ｍ，  １Ｈ），  ５．７２  （ｄ，  Ｊ  ＝  ６．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．６３  （ｓ，  １Ｈ），  ７．９１  （ｓ，  １Ｈ），  ８．９４  （ｓ，  １Ｈ），  １２．０６  （ｂｒ．ｓ．，  １Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１５１  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  １１．６４，  １８．４３，  ２２．６３，  ２９．０１，  ２９．９０，  ３０．３６，  ３０．４７，  ３０．６２，  ３０．７７，  ３１．４４，  ３１．８７，  ３２．８８，  ３２．９２，  ３４．９４，  ３５．６０，  ３６．７９，  ３６．８５，  ３６．９８，  ３７．７４，  ３９．８７，  ４３．７４，  ４４．３６，  ５１．７２，  １０９．０６，  １２０．００，  １２２．０４，  １２６．５３，  １４０．４６，  １４１．６２，  １４３．８５，  １４９．９１，  １７９．９６．２０８．０１．
【０２６２】
実施例２０．化合物ＸＳ０４１９の調製
【化６０】
2019523245.tif 000219
【０２６３】
化合物ＹＸＹ１０１（５０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を撹拌しながら、２ｍＬの重水素化メタノールに溶解し、次いで水素化ホウ素ナトリウム（４４ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）を加え、反応を室温で３０分間行った。１ｍｏｌ／Ｌ  ＨＣｌ（１ｍＬ）で反応を停止した後、純水９ｍＬを加え、ジクロロメタン（各回５ｍＬ）で３回抽出した。有機層を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、有機溶媒のジクロロメタンを真空蒸留により迅速に除去し、化合物ＸＳ０４１９（５０．１ｍｇ）を白色の固体として得た。
【０２６４】
１Ｈ  ＮＭＲ  （６００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  ｐｐｍ  ０．６６  （ｓ，  ３  Ｈ）  ０．８５  （ｄ，  Ｊ＝１３．９  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．０５  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．１１  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．１７  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２２  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２９  （ｄｄｄ，  Ｊ＝１３．７，  ４．４  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．３６  −  １．４１  （ｍ，  １  Ｈ）  １．４３  −  １．５１  （ｍ，  ３  Ｈ）  １．５３  −  １．５９  （ｍ，  １  Ｈ）  １．５９  −  １．６３  （ｍ，  １  Ｈ）  １．６３  −  １．６９  （ｍ，  １  Ｈ）  １．７９  （ｄｄｄ，  Ｊ＝１３．８，  ６．５  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．８６  （ｄｄｄ，  Ｊ＝１３．８，  ５．０  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．９４  −  ２．００  （ｍ，  ２  Ｈ）  ２．０１  （ｓ，  ３  Ｈ）  ２．０４  （ｄ，  Ｊ＝１３．６  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ２．３４  （ｄ，  Ｊ＝１５．６  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ２．９１  （ｄｄ，  Ｊ＝２０．０，  １．５  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ３．１８  （ｄｄ，  Ｊ＝２０．５，  ６．２  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ５．７２  （ｄｄ，  Ｊ＝６．１，  １．８  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ６．６１  （ｓ，  １  Ｈ）  ７．８２  （ｓ，  １  Ｈ）  ８．８０  （ｓ，  １  Ｈ）  １２．０５  （ｂｒ．  ｓ．，  １  Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１５１  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  ｐｐｍ  １１．５３，  １８．１０，  ２２．７０，  ２７．３０，  ２８．４５，  ２９．４６，  ２９．７７，  ３０．０８，  ３０．１９，  ３１．３９，  ３２．４４，  ３４．０６，  ３４．０９，  ３４．４０，  ３６．０７，  ３６．５６，  ３７．１４，  ３９．４４，  ４３．２５，  ４３．８３，  １０８．１７，  １１７．６７，  １２０．１０，  １２３．１０，  １３９．３５，  １４０．５６，  １４３．１１，  １４９．２２，  １７９．５１．
【０２６５】
実施例２１．化合物ＸＳ０４６２の調製
【化６１】
2019523245.tif 000220
【０２６６】
最初に、セラストロール（１３５．２ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）を２ｍＬのＤＭＦに攪拌しながら溶解し、続いて炭酸水素ナトリウム（１３８．６ｍｇ、１．６５ｍｍｏｌ）及び臭化エチル（２３４μＬ、０．１５ｍｍｏｌ）を添加し、室温で１２時間、攪拌しながら反応を行った。反応を１ｍｏｌ／Ｌ  ＨＣｌ（１ｍＬ）で停止し、９ｍＬの純水を加えた。得られた混合物を、酢酸エチルで３回（各回１５ｍＬ）抽出した。有機層を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、次いで有機溶媒である酢酸エチルを真空蒸発により除去して、粗生成物を橙赤色の混合固体として得た。粗生成物を、３００〜４００メッシュのシリカゲル充填カラムを用いて、溶離剤としてｎ−ヘキサン及び酢酸エチル（ヘキサン／酢酸エチル＝１０：１）を用いるカラムクロマトグラフィーによって分離して、橙赤色固体生成物を得た。
【０２６７】
１Ｈ  ＮＭＲ  （６００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  ０．４７  （ｓ，  ３  Ｈ），  ０．９１  （ｄ，  Ｊ  ＝  １４．１  Ｈｚ，  １  Ｈ），  １．０７  （ｓ，  ３  Ｈ），  １．１１  （ｓ，  ３  Ｈ），  １．１２  −  １．１５  （ｍ，  ３  Ｈ），  １．２１  （ｓ，  ３  Ｈ），  １．３１  −  １．３６  （ｍ，  １  Ｈ），  １．３８  （ｓ，  ３  Ｈ），  １．４１  −  １．４６  （ｍ，  １  Ｈ），  １．５２  −  １．５８  （ｍ，  ３  Ｈ），  １．６１  −  １．７１  （ｍ，  ４  Ｈ），  １．７８  −  １．８７  （ｍ，  １  Ｈ），  １．９０  −  １．９９  （ｍ，  １  Ｈ），  ２．０３  −  ２．０８  （ｍ，  １  Ｈ），  ２．０９  （ｓ，  ３  Ｈ），  ２．２１  （ｄ，  Ｊ  ＝  １１．２  Ｈｚ，  １  Ｈ），  ２．３４  （ｄ，  Ｊ  ＝  １５．６  Ｈｚ，  １  Ｈ），  ３．９１  （ｍ，  ２  Ｈ），  ６．３５  （ｄ，  Ｊ  ＝  ７．２  Ｈｚ，  １  Ｈ），  ６．３９  （ｓ，  １  Ｈ），  ７．０５  −  ７．１０  （ｍ，  １  Ｈ），  ８．７３  （ｓ，  １  Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１５１  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  １０．５３，  １４．２８，  １８．５０，  ２１．８４，  ２８．５５，  ２９．５７，  ２９．７５，  ３０．５８，  ３１．７６，  ３２．７６，  ３３．３２，  ３４．７８，  ３６．４３，  ３８．２０，  ３９．２７，  ４０．１３，  ４０．４４，  ４２．４３，  ４４．０４，  ４４．９３，  ６０．３３，  １１７．７４，  １１８．５１，  １２０．５６，  １２７．２９，  １３３．６７，  １４６．８６，  １６３．４０，  １６８．３１，  １７７．８３，  １７８．４１．
【０２６８】
実施例２２．化合物ＸＳ０４７４の調製
【化６２】
2019523245.tif 000221
【０２６９】
化合物ＹＸＹ１０１（５０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を２ｍＬの重水素化メタノールに撹拌しながら溶解させ、次いでホウ化水素化ナトリウム（４８．４ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）を加え、反応を室温で３０分間行った。反応を１ｍｏｌ／Ｌ  ＨＣｌ（１ｍＬ）で停止した後、９ｍＬの純水を加えた。得られた混合物をジクロロメタン（各回５ｍＬ）で３回抽出した。有機層を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、次いで有機溶媒ジクロロメタンを真空蒸留により迅速に除去して、白色固体として化合物ＸＳ０４７４（５０．２ｍｇ）を得た。
【０２７０】
１Ｈ  ＮＭＲ  （６００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  ｐｐｍ  ０．６６  （ｓ，  ３  Ｈ）  ０．８５  （ｄ，  Ｊ＝１２．８４  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．０４  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．１０  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．１７  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２２  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２９  （ｔｄ，  Ｊ＝１３．６６，  ４．４０  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．３５  −  １．４１  （ｍ，  １  Ｈ）  １．４３  −  １．５２  （ｍ，  ３  Ｈ）  １．５３  −  １．５８  （ｍ，  １  Ｈ）  １．５８  −  １．６３  （ｍ，  １  Ｈ）  １．６３  −  １．６９  （ｍ，  １  Ｈ）  １．７９  （ｔｄ，  Ｊ＝１３．６６，  ６．６０  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．８６  （ｔｄ，  Ｊ＝１３．７１，  ５．０４  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．９４  −  １．９９  （ｍ，  ２  Ｈ）  ２．０１  （ｓ，  ３  Ｈ）  ２．０４  （ｄ，  Ｊ＝１２．１０  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ２．３４  （ｄ，  Ｊ＝１５．５９  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ３．１６  （ｄ，  Ｊ＝６．０５  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ５．７１  （ｄ，  Ｊ＝６．２４  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ６．６１  （ｓ，  １  Ｈ）  ７．８２  （ｓ，  １  Ｈ）  ８．８３  （ｓ，  １  Ｈ）  １２．０３  （ｂｒ．  ｓ．，  １  Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１５１  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  ｐｐｍ  １１．６０，  １８．１５，  ２２．７４，  ２６．９８，  ２８．５２，  ２９．５１，  ２９．８３，  ３０．１４，  ３０．２５，  ３１．４５，  ３２．５０，  ３４．１５，  ３４．２１，  ３４．４６，  ３６．１４，  ３６．６２，  ３７．２１，  ３９．４９，  ４３．３１，  ４３．８９，  １０８．２３，  １１７．６８，  １２０．２０，  １２３．１１，  １３９．４５，  １４０．６０，  １４３．１８，  １４９．３２，  １７９．５９．
【０２７１】
実施例２３．化合物ＸＳ０５０３の調製
【化６３】
2019523245.tif 000222
【０２７２】
まず、プリスチメリン（２５０ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ）を２０ｍＬのテトラヒドロフランに溶解し、続いてＬｉＡｌＨ４（１．２ｍＬ、１．１ｍｍｏｌ）を加え、反応を室温で２時間撹拌しながら行った。反応を１０ｍＬの脱イオン水でクエンチした後、１ｍｏｌ／Ｌ  ＨＣｌ（５ｍＬ）で酸性化した。得られた混合物を酢酸エチル（各回１５ｍＬ）で３回抽出した。有機層を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、有機溶媒の酢酸エチルを真空蒸留により除去して、粗生成物をオレンジ−黄色の混合固体として得た。前記粗生成物を、３００〜４００メッシュのシリカゲル充填カラムを用いて、溶離剤としてｎ−ヘキサン及び酢酸エチル（ヘキサン／酢酸エチル＝２：１）を用いるクロマトグラフィーカラムにより分離し、オレンジ−黄色の固体生成物を得た。
【０２７３】
１Ｈ  ＮＭＲ  （６００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  ｐｐｍ  ０．７６  （ｓ，  ３  Ｈ）  ０．８３  −  ０．８７  （ｍ，  １  Ｈ）  ０．８９  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．１１  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２１  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２３  −  １．２５  （ｍ，  １  Ｈ）  １．２６  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２７  −  １．３４  （ｍ，  ２  Ｈ）  １．４８  （ｄｄ，  Ｊ＝６．７，  ３．９  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．５０  −  １．５４  （ｍ，  １  Ｈ）  １．５５  −  １．５９  （ｍ，  １  Ｈ）  １．６０  （ｄ，  Ｊ＝５．０  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．６４  （ｄｄ，  Ｊ＝９．２，  ４．６  Ｈｚ，  ２  Ｈ）  １．６５  −  １．６９  （ｍ，  ２  Ｈ）  １．６９  −  １．７２  （ｍ，  １  Ｈ）  １．９１  （ｄ，  Ｊ＝５．３  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．９３  −  １．９７  （ｍ，  １  Ｈ）  ２．０２  （ｓ，  ３  Ｈ）  ２．９２  （ｄ，  Ｊ＝１９．４  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ２．９６  （ｄｄ，  Ｊ＝１０．３，  ４．８  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ３．１５  −  ３．２０  （ｍ，  １  Ｈ）  ３．２１  （ｔ，  Ｊ＝６．０  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ４．４４  （ｔ，  Ｊ＝５．０  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ５．７３  （ｄｄ，  Ｊ＝６．１，  １．７  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ６．６１  （ｓ，  １  Ｈ）  ７．８０  （ｓ，  １  Ｈ）  ８．７８  （ｓ，  １  Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１５１  ＭＨｚ，  ＣＨＬＯＲＯＦＯＲＭ−ｄ）  ｐｐｍ  １１．４９，  １９．３５，  ２５．６５，  ２７．８０，  ２８．１０，  ２８．７５，  ２９．３６，  ３０．３１，  ３０．４５，  ３０．５７，  ３２．２７，  ３２．８９，  ３３．５８，  ３４．２４，  ３６．５５，  ３６．８２，  ３６．９５，  ３７．６８，  ４２．９１，  ４３．１５，  ７１．８２，  １０８．４２，  １１８．１５，  １２０．４２，  １２５．２７，  １３９．９６，  １４１．０９，  １４１．８７，  １５１．０４．
【０２７４】
実施例２４．化合物ＸＳ０５０８の調製
【化６４】
2019523245.tif 000223
【０２７５】
５０ｍｌの丸底瓶にＸＳ００７７（５０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を秤量し、溶解のために３ｍＬのメタノールを加え、保護のために空気を窒素で置換し、次いで重亜硫酸ナトリウム溶液（２８ｍｇのＮａＨＳＯ３−１ｍｌのＨ２Ｏ、０．２６ｍｍｏｌ）を添加し、窒素で保護しながら室温で３時間反応させた。反応を停止し、溶媒を減圧蒸留により濃縮して除去した。残留固形物にピリジンを加えて溶解させた後、濾過し、真空中で濃縮して白色固形物を収率９０％で得た。
【０２７６】
１Ｈ  ＮＭＲ  （６００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  ０．５７  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．０７  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．１２  −  １．１４  （ｍ，  １  Ｈ）  １．１４  −  １．１６  （ｍ，  １  Ｈ）  １．１７  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２１  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２２  −  １．２３  （ｍ，  ２  Ｈ）１．２４  −  １．２８  （ｍ，  ４  Ｈ）  １．２８  −  １．３２  （ｍ，  ２  Ｈ）  １．３８  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．４０  −  １．４６  （ｍ，  ２  Ｈ）  １．４７  −  １．５２  （ｍ，  ２  Ｈ）  １．５７  （ｄ，  Ｊ＝６．７９  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．５９  −  １．６３  （ｍ，  ４  Ｈ）  １．６４  −  １．７２  （ｍ，  ６  Ｈ）  １．７５  −  １．８３  （ｍ，  ４  Ｈ）  １．９２  −  １．９６  （ｍ，  １  Ｈ）  １．９７  −  ２．０１  （ｍ，  １  Ｈ）  ２．０３  −  ２．０７  （ｍ，  １  Ｈ）  ２．０９  （ｓ，  ３  Ｈ）  ２．１８  （ｄ，  Ｊ＝１０．８２  Ｈｚ，  ２  Ｈ）  ２．７３  （ｄ，  Ｊ＝１５．０４  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ３．４０  −  ３．４９  （ｍ，  １  Ｈ）  ３．８０  −  ３．８９  （ｍ，  １  Ｈ）  ６．３６  （ｄ，  Ｊ＝７．３４  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ６．４０  （ｄ，  Ｊ＝０．９２  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ７．０７  （ｄｄ，  Ｊ＝６．９７，  ０．９２  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ７．７３  （ｄ，  Ｊ＝８．０７  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ８．７１  （ｓ，  １  Ｈ）．  
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１５１  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  １０．０８，１８．３２，  ２１．８３，  ２４．６８，  ２４．７５，  ２５．１３，  ２５．２９，  ２５．６３，  ２５．６７，  ２８．３８，  ２８．５９，  ２９．９１，  ３０．１３，  ３１．０２，  ３１．０８，  ３１．３９，  ３１．８２，  ３１．９１，  ３１．９３，  ３２．３６，  ３３．１０，  ３６．０２，  ３６．１３，  ３７．６７，  ３８．９９，  ４２．１６，  ４２．８１，  ４４．４５，  ４４．４９，  ５０．０５，  ５４．７７，  １１７．２３，  １１７．９３，  １２０．０４，  １２６．７５，  １３３．２５，  １４６．４３，  １５３．９７，  １６３．０９，  １６８．７４，  １７５．４４，  １７７．８３．
【０２７７】
実施例２５．化合物ＸＳ０５３６の調製
【化６５】
2019523245.tif 000224
【０２７８】
ＸＳ００７７（１５０ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）を秤量し、重壁圧力容器に入れ、炭酸カリウム（２２０ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ）、及び４ｍｌのアセトンを攪拌しながら加えてサンプルを室温で溶解させ、次いで１００μＬの硫酸ジメチル溶液を加えた。；反応混合物を７０℃の油浴に移し、８時間加熱した。反応を１ｍｏｌ／Ｌ  ＨＣｌでクエンチし、続いて水を加え、次いで酢酸エチルで３回抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、そして溶媒をロータリーエバポレーターで濃縮した。残留物を酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝１：２０を用いるシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して、純粋な生成物を白色の固体として与えた、収率２１％。
【０２７９】
１Ｈ  ＮＭＲ  （６００  ＭＨｚ，  ＣＨＬＯＲＯＦＯＲＭ−ｄ）  ｄ  ｐｐｍ  ０．６１  （ｓ，  ３  Ｈ）  ０．９４  （ｄ，  Ｊ＝１３．７５  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．０８  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．１７  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２２  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．３４  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．４０  （ｄｄ，  Ｊ＝１４．１２，  ４．２２  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．４４  （ｄｄ，  Ｊ＝１４．４０，  ２．８４  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．５１  −  １．５７  （ｍ，  ２  Ｈ）  １．５７  −  １．６３  （ｍ，  １  Ｈ）  １．６３  −  １．６９  （ｍ，  ２  Ｈ）  １．７３  （ｄ，  Ｊ＝１１．３７  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．８５  （ｔｄ，  Ｊ＝１３．７１，  ６．３３  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ２．０１  −  ２．０７  （ｍ，  １  Ｈ）  ２．０７  −  ２．１３  （ｍ，  ２  Ｈ）  ２．１７  （ｓ，  ３  Ｈ）  ２．１８  −  ２．２３  （ｍ，  １  Ｈ）  ２．４４  （ｄ，  Ｊ＝１５．５９  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ３．０２  （ｄ，  Ｊ＝１９．９９  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ３．２８  （ｄｄ，  Ｊ＝２０．００，  ５．８７  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ３．５４  （ｓ，  ３  Ｈ）  ３．７７  （ｓ，  ３  Ｈ）  ３．８７  （ｓ，  ３  Ｈ）  ５．７７  （ｄ，  Ｊ＝４．５８  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ６．７８  （ｓ，  １  Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１５１  ＭＨｚ，  ＣＨＬＯＲＯＦＯＲＭ−ｄ）  ｄ  ｐｐｍ  １１．７７，  １８．２８，  ２２．７３，  ２７．８５，  ２８．８５，  ２９．８７，  ３０．２９，  ３０．５０，  ３０．８５，  ３１．５５，  ３２．８８，  ３４．１６，  ３４．５１，  ３４．７９，  ３６．８３，  ３７．１５，  ３７．５２，  ４０．４５，  ４３．６９，  ４４．３３，  ５１．４７，  ５５．８８，  ６０．３０，  １０６．３０，  １１７．６３，  １２５．４９，  １２７．８０，  １４４．６２，  １４４．８０，  １４９．１３，  １５０．８９，  １７９．０５．
【０２８０】
実施例２６．化合物ＸＳ０２８６の調製
【化６６】
2019523245.tif 000225
【０２８１】
化合物ＹＸＹ１０１（５０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を撹拌しながらＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）に溶解した。触媒ＥＤＣＩ（８５．４ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）及びＨＯＢＴ（７４．３ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）を加え、溶解させるために撹拌した。；ｐ−ｔｅｒｔ−ブチルアニリン（４９．２ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）を添加し、そして反応を室温で３６時間撹拌しながら実施した。反応を停止し、反応系に脱イオン水（１５ｍＬ）を加え、酢酸エチルで３回抽出した。合わせた酢酸エチル層を飽和ＮａＣｌで３回洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、ロータリーエバポレーターで濃縮して粗生成物（暗赤色油状物）を得た。前記粗生成物をラピッドカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ｎ−ヘキサン）で精製し、真空中で乾燥して、暗赤色固体として化合物ＸＳ０２８６（１０ｍｇ）を得た。
【０２８２】
１Ｈ  ＮＭＲ  （６００  ＭＨｚ，  ＣＨＬＯＲＯＦＯＲＭ−ｄ）  δ  ｐｐｍ  ０．６４  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．０８  （ｄ，  Ｊ＝１３．２０  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．１５  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２４  −  １．２７  （ｍ，６  Ｈ）  １．４０  −  １．４２  （ｍ，  ４  Ｈ）  １．４８  −  １．５７  （ｍ，  ３  Ｈ）  １．６３  （ｍ，  ５  Ｈ）  １．６５  −  １．７９  （ｍ，  ５  Ｈ）  １．８５  （ｄ，  Ｊ＝１１．９２  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．９１  （ｄ，  Ｊ＝６．２４  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．９８  −  ２．０６  （ｍ，  ３  Ｈ）  ２．０８  （ｄ，  Ｊ＝１２．１０  Ｈｚ，  ２  Ｈ）  ２．１８  （ｄ，  Ｊ＝１．６５  Ｈｚ，  ３  Ｈ）  ２．５４  （ｄ，  Ｊ＝１５．７７  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ６．２９  （ｄ，  Ｊ＝６．７９  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ６．４５  （ｓ，  １  Ｈ）  ６．９２  −  ７．００  （ｍ，  ２  Ｈ）  ７．３０  −  ７．３４  （ｍ，  ２  Ｈ）  ７．３４  −  ７．３７  （ｍ，  ２  Ｈ）  ７．３７  −  ７．４１  （ｍ，  １  Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１５１  ＭＨｚ，  ＣＨＬＯＲＯＦＯＲＭ−ｄ）  δ  ｐｐｍ  １０．２１，  １８．４９，  ２１．７５，  ２８．５８，  ２９．６３，  ２９．６９，  ３０．４１，  ３０．８３，  ３１．３３，  ３３．２４，  ３３．７３，  ３４．３５，  ３４．９８，  ３６．３２，  ３８．０６，  ３９．３８，４１．１０，  ４２．９６，  ４４．４７，  ４５．１１，  ７６．８１，  ７７．０２，  ７７．２３，  １１６．９９，  １１７．９５，  １１９．５３，  １１９．８１，  １２５．８９，  １２７．３８，  １３３．９５，  １３５．１１，  １４６．０１，  １４７．２６，  １６４．６８，  １７０．０２，  １７５．８３，  １７８．３８．
【０２８３】
実施例２７．化合物ＸＳ０２８７の調製
【化６７】
2019523245.tif 000226
【０２８４】
化合物ＹＸＹ１０１（５０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を撹拌しながらＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）に溶解した。触媒ＥＤＣＩ（８５．４ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）及びＨＯＢＴ（７４．３ｍｇ、０．５５ｍｍｏｌ）を加え、溶解させるために撹拌した。；ｐ−メトキシアニリン（４０．６ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）を加え、室温で３６時間攪拌しながら反応を行った。反応を止めた。反応系に脱イオン水（１５ｍＬ）を加え、酢酸エチルで３回抽出した。合わせた酢酸エチル層を飽和ＮａＣｌで３回洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、ロータリーエバポレーターで濃縮して粗生成物（暗赤色油状物）を得た。粗生成物をラピッドカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ｎ−ヘキサン）で精製し、真空中で乾燥させて化合物ＸＳ０２８７（２０ｍｇ）を暗赤色固体として得た。
【０２８５】
１Ｈ  ＮＭＲ  （６００  ＭＨｚ，  ＣＨＬＯＲＯＦＯＲＭ−ｄ）  δ  ｐｐｍ  ０．５３  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．０５  （ｄ，  Ｊ＝１３．９４  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．１３  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２１  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２４  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２６  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．３５  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．４８  −  １．５４  （ｍ，  ２  Ｈ）  １．５８  （ｄ，  Ｊ＝７．３４  Ｈｚ，  ２  Ｈ）  １．６４  −  １．７２  （ｍ，  ２  Ｈ）  １．７８  −  １．８９  （ｍ，  ３  Ｈ）  ２．０３  −  ２．１１  （ｍ，  ２  Ｈ）  ２．１８  （ｓ，  ３  Ｈ）  ２．５５  （ｄ，  Ｊ＝１５．７７  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ３．７９  （ｓ，  ３  Ｈ）  ６．２５  （ｄ，  Ｊ＝７．１５  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ６．３４  （ｓ，  １  Ｈ）  ６．９１  （ｍ，  Ｊ＝８．９９  Ｈｚ，  ２  Ｈ）  ６．９６  （ｄ，  Ｊ＝７．１５  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ７．４０  （ｍ，  Ｊ＝８．８０  Ｈｚ，  ２  Ｈ）  ７．４８  （ｓ，  １  Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１５１  ＭＨｚ，  ＣＨＬＯＲＯＦＯＲＭ−ｄ）  δ  ｐｐｍ  １０．２３，  １８．３０，  ２１．７５，  ２８．４６，  ２９．３９，  ２９．７０，  ３０．３０，  ３０．７９，  ３１．５２，  ３２．８６，  ３３．８１，  ３４．８９，  ３６．２１，  ３７．９９，  ３９．２８，  ４０．９６，  ４２．９６，  ４４．４３，  ４５．１２，  ５５．４８，  １１４．２１，  １１７．１８，  １１７．８２，  １１９．３８，  １２１．９９，  １２７．３４，  １３０．９８，  １３４．０６，  １４６．０６，  １５６．４１，  １６４．８０，  １７０．２３，  １７５．８８，  １７８．４２．
【０２８６】
実施例２８．化合物ＸＳ０３９４の調製
【化６８】
2019523245.tif 000227
【０２８７】
化合物ＹＸＹ１０１（５０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（３７μＬ）を再蒸留テトラヒドロフラン（３．０ｍＬ、０．２６ｍｍｏｌ）に撹拌しながら溶解し、次いで−３０℃に冷却した。１０分後、クロロギ酸エチル（２２μＬ、０．２３ｍｍｏｌ）を反応液に滴下した。撹拌しながら−３０℃で１２時間反応させた後、反応を停止した。不溶物をフリットガラスディスク付きブフナーロートで濾別し、テトラヒドロフランで洗浄して黄色濾液を得た。黄色ろ液に純水１０ｍＬを加え、酢酸エチルで３回抽出した（各回１５ｍＬ）。有機層を合わせ、飽和食塩水で３回（各回３０ｍＬ）洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。有機溶媒を減圧留去し、粗生成物を油状混合物として得た。溶離剤としてｎ−ヘキサン及び酢酸エチル（ヘキサン／酢酸エチル＝１０：１）を用い、３００〜４００メッシュのシリカゲル充填カラムを使用するカラムクロマトグラフィー分離により黄色固体としての生成物を得た。
【０２８８】
１Ｈ  ＮＭＲ  （６００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  ｐｐｍ  １．０５  −  １．０７  （ｍ，  １  Ｈ）  １．０８  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．０９  −  １．１２  （ｍ，  １  Ｈ）  １．１８  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２３  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２７  （ｔ，  Ｊ＝７．０６  Ｈｚ，  ３  Ｈ）  １．２８  −  １．３１  （ｍ，  １  Ｈ）  １．４１  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．４３  −  １．５０  （ｍ，  ４  Ｈ）  １．５３  （ｄｄ，  Ｊ＝１２．１０，  ５．６９  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．５９  （ｄ，  Ｊ＝７．８９  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．６５  （ｄ，  Ｊ＝１０．６４  Ｈｚ，  ２  Ｈ）  １．７０  −  １．７８  （ｍ，  ２  Ｈ）  １．７９  −  １．８５  （ｍ，  １  Ｈ）  １．９０  （ｔｄ，  Ｊ＝１３．９８，  ３．３９  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．９５  −  ２．０１  （ｍ，  １  Ｈ）  ２．０１  −  ２．０６  （ｍ，  １  Ｈ）  ２．１５  （ｓ，  ３  Ｈ）  ２．２６  （ｄ，  Ｊ＝１５．２２  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ４．２１  （ｑ，  Ｊ＝１．００  Ｈｚ，  ２  Ｈ）  ６．３０  （ｄ，  Ｊ＝７．１５  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ６．４０  （ｄ，  Ｊ＝０．７３  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ７．２９  （ｄｄ，  Ｊ＝７．５２，  ０．７３  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １２．０７  （ｂｒ．  ｓ，  １  Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１５１  ＭＨｚ，  ＣＨＬＯＲＯＦＯＲＭ−ｄ）  ｐｐｍ  １１．１７，  １４．０９，  １９．００，  ２１．９６，  ２８．６０，  ２９．３５，  ２９．３６，  ３０．４７，  ３０．６７，  ３１．４９，  ３２．６７，  ３３．３８，  ３４．５３，  ３６．２０，  ３８．２４，  ３９．１３，  ４０．１６，  ４２．８８，  ４４．０５，  ４５．３４，  ６５．０５，  １１７．７６，  １１７．７８，  １２２．７０，  １２６．０８，  １３３．３７，  １４２．５４，  １５２．６２，  １６３．３０，  １７２．９６，  １８３．８６，  １８３．９０．
【０２８９】
実施例２９．化合物ＸＳ０４１８の調製
【化６９】
2019523245.tif 000228
【０２９０】
最初に、化合物ＹＸＹ１０１（５０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を撹拌し、２ｍＬのテトラヒドロフランに溶解し、続いて炭酸カリウム（１５．２ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を加えた。ブロモ酢酸エチル（１８．３７ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を１ｍＬのテトラヒドロフランに溶解した後、反応液に滴下した。室温で４時間攪拌しながら反応を行い、その後１ｍｏｌ／Ｌ  ＨＣｌ（１ｍＬ）で反応停止し、９ｍＬの純水を加えた。得られた混合物を酢酸エチル（各回１５ｍＬ）で３回抽出した。集めた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、有機溶媒の酢酸エチルを真空中での蒸留により除去して粗生成物を橙赤色の混合固体として得た。３００〜４００メッシュのシリカゲル充填カラムを用いて、溶離剤としてｎ−ヘキサン及び酢酸エチル（ヘキサン／酢酸エチル＝１０：１）を用いるカラムクロマトグラフィー分離により、橙赤色固体としての生成物を得た。
【０２９１】
１Ｈ  ＮＭＲ  （６００  ＭＨｚ，  ＣＨＬＯＲＯＦＯＲＭ−ｄ）  ｐｐｍ  ０．５３  （ｓ，  ３  Ｈ）  ０．９９  （ｄ，  Ｊ＝１４．３１  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．１１  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２５  （ｔ，  Ｊ＝７．２０  Ｈｚ，  ３  Ｈ）  １．２７  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２８  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．３９  −  １．４４  （ｍ，  １  Ｈ）  １．４５  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．５１  （ｄｄ，  Ｊ＝１４．９５，  ４．１３  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．５４  −  １．５８  （ｍ，  １  Ｈ）  １．６０  （ｄ，  Ｊ＝７．８９  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．６３  −  １．６７  （ｍ，  １  Ｈ）  １．６７  −  １．７１  （ｍ，  １  Ｈ）  １．７５  （ｄｄ，  Ｊ＝１５．９６，  ８．０７  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．８０  −  １．８２  （ｍ，  １  Ｈ）  １．８３  −  １．８５  （ｍ，  １  Ｈ）  １．８５  −  １．９２  （ｍ，  １  Ｈ）  ２．０６  （ｔｄ，  Ｊ＝１４．１２，  ３．８５  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ２．１３  −  ２．１８  （ｍ，  １  Ｈ）  ２．２１  （ｓ，  ３  Ｈ）  ２．２５  （ｄ，  Ｊ＝１４．３１  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ２．４８  （ｄ，  Ｊ＝１５．９６  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ４．１９  （ｑ，  Ｊ＝７．１５  Ｈｚ，  ２  Ｈ）  ４．４１  （ｄ，  Ｊ＝１５．７７  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ４．５４  （ｄ，  Ｊ＝１５．９６  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ６．３５  （ｄ，  Ｊ＝７．１５  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ６．５３  （ｄ，  Ｊ＝１．１０  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ７．０２  （ｄｄ，  Ｊ＝７．０６，  １．１９  Ｈｚ，  １  Ｈ）
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１５１  ＭＨｚ，  ＣＨＬＯＲＯＦＯＲＭ−ｄ）  ｐｐｍ  １０．２３，  １４．０４，  １８．５７，  ２１．６１，  ２８．５９，  ２９．５７，  ２９．７４，  ３０．４７，  ３０．６３，  ３１．５５，  ３２．５６，  ３３．５０，  ３４．６７，  ３６．３１，  ３８．２４，  ３９．３９，  ４０．４０，  ４２．９１，  ４４．１９，  ４５．０１，  ６０．５２，  ６１．２８，  １１７．１５，  １１８．１３，  １１９．５２，  １２７．３７，  １３４．０９，  １４５．９８，  １６４．７４，  １６７．７０，  １７０．０３，  １７７．５３，  １７８．３１
【０２９２】
実施例３０．化合物ＸＳ０４２１、ＸＳ０４５７、ＸＳ０４７３及びＸＳ０４９３の調製
【化７０】
2019523245.tif 000229
【０２９３】
一例としてＸＳ０４２１の合成を取り上げると：  化合物ＹＸＹ１０１（５０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を５０ｍＬの封管中で秤量し、次いで亜リン酸ジメチル（１２３ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）及び２．７ｍｇの塩化アルミニウム六水和物（０．１当量）を添加し、２ｍＬのＤＣＭを溶解のために添加した。前記管を密閉し、反応を室温で６時間行った。反応を停止させ、飽和ＮａＣｌでクエンチした。得られた混合物を酢酸エチルで３回抽出し、有機相を合わせ、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮して溶媒を除去した。残留物を酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝１：２を用いるシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して、白色固体を得た、収率５５％。
【０２９４】
１Ｈ  ＮＭＲ  （６００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  ｐｐｍ  ０．６１  （３  Ｈ，  ｓ）  ０．８６  （１  Ｈ，  ｄ，  Ｊ＝１２．８４  Ｈｚ）  １．０６  （３  Ｈ，  ｓ）  １．１０  （３  Ｈ，  ｓ）  １．１９  （３  Ｈ，  ｓ）  １．２２  −  １．２７  （１  Ｈ，  ｍ）  １．２７  −  １．３２  （１  Ｈ，  ｍ）  １．４０  （１  Ｈ，  ｄ，  Ｊ＝４．９５  Ｈｚ）  １．４３  （１  Ｈ，  ｄ，  Ｊ＝５．３２  Ｈｚ）  １．４９  （１  Ｈ，  ｄ，  Ｊ＝８．０７  Ｈｚ）  １．５１  −  １．５５  （１  Ｈ，  ｍ）  １．５７  （３  Ｈ，  ｓ）  １．５９  −  １．６０  （１  Ｈ，  ｍ）  １．６０  −  １．６４  （１  Ｈ，  ｍ）  １．７６  −  １．８５  （１  Ｈ，  ｍ）  １．９３  −  １．９７  （１  Ｈ，  ｍ）  １．９９  （１  Ｈ，  ｄ，  Ｊ＝２．２０  Ｈｚ）  ２．００  −  ２．０２  （１  Ｈ，  ｍ）  ２．０２  −  ２．０６  （１  Ｈ，  ｍ）  ２．１３  （３  Ｈ，  ｓ）  ２．３２  （１  Ｈ，  ｄ，  Ｊ＝１５．５９  Ｈｚ）  ３．４９  （３  Ｈ，  ｄ，  Ｊ＝８．８０  Ｈｚ）  ３．５１  （３  Ｈ，  ｄ，  Ｊ＝８．９９  Ｈｚ）  ４．１９  （１  Ｈ，  ｄｄ，  Ｊ＝２３．６６，  ６．２４  Ｈｚ）  ５．６４  （１  Ｈ，  ｄｄ，  Ｊ＝６．３３，  ３．２１  Ｈｚ）  ６．６６  （１  Ｈ，  ｓ）  ７．９７  （１  Ｈ，  ｓ）  ９．０４  （１  Ｈ，  ｂｒ．  ｓ．）  １２．０４  （１  Ｈ，  ｓ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１５１  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  ｐｐｍ  １２．６０，  １４．００  （１  Ｃ，  ｓ）  １８．０４，  ２１．５８  （１  Ｃ，  ｄ，  Ｊ＝６．６０  Ｈｚ）  ２２．１１，  ２８．７８，  ２９．４８，  ３０．０２  （１  Ｃ，  ｄ，  Ｊ＝１３．２０  Ｈｚ）  ３０．１８，  ３１．００，  ３１．４５，  ３２．４２，  ３３．４９，  ３３．５７，  ３４．５７，  ３６．４２，  ３７．４３，  ３７．８９，  ３８．７９，  ４３．８８，  ５２．３１  （１  Ｃ，  ｄ，  Ｊ＝６．６０  Ｈｚ）  ５２．８１  （１  Ｃ，  ｄ，  Ｊ＝６．６０  Ｈｚ）  １０９．３２，  １１４．６４  （１  Ｃ，  ｄ，  Ｊ＝１２．１０  Ｈｚ）  １１７．９０  （１  Ｃ，  ｄ，  Ｊ＝７．７０  Ｈｚ）  １２１．３５  （１  Ｃ，  ｄ，  Ｊ＝４．４０  Ｈｚ）  １４０．５０  （１  Ｃ，  ｄ，  Ｊ＝６．６０  Ｈｚ）  １４１．０５  （１  Ｃ，  ｄ，  Ｊ＝３．３０  Ｈｚ）  １４４．０８  （１  Ｃ，  ｄ，  Ｊ＝３．３０  Ｈｚ）  １５０．６２  （１  Ｃ，  ｄ，  Ｊ＝１２．１０  Ｈｚ）  １７９．５１．
【０２９５】
上記の製造方法に従って、本発明では以下の化合物も合成された。
【化７１】
2019523245.tif 000230
【０２９６】
実施例３１．化合物ＸＳ０４３９、ＸＳ０４４２、ＸＳ０４４４〜ＸＳ０４４９、ＸＳ０４７８〜ＸＳ０４８０、ＸＳ０４８７及びＸＳ０４９０の調製
【化７２】
2019523245.tif 000231
【０２９７】
製造方法はＸＳ０４３９により例示される：  化合物ＹＸＹ１０１（１００ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）を攪拌しながらジクロロメタン（４ｍＬ）に溶解した。７−メトキシ−置換インドール（６５．３ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）を加え、次いで三塩化アルミニウム六水和物（５．３ｍｇ、０．０２２ｍｍｏｌ）を加えた。反応は室温で５時間攪拌しながら行った。反応を停止し、反応混合物に脱イオン水（１５ｍＬ）を加え、そして酢酸エチルで３回抽出した。酢酸エチル層を合わせ、飽和ＮａＣｌで３回洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、ロータリーエバポレーターで濃縮して粗生成物（褐色油状物）を得た。粗生成物をラピッドカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝１：４）で分離精製し、真空乾燥して生成物を紫赤色固体として得た。
【０２９８】
１Ｈ−ＮＭＲ  （ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  ０．７１  （ｓ，  ３Ｈ），  ０．８６  （ｄ，  Ｊ＝９．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ０．９６  （ｓ，  ３Ｈ），  １．０１  （ｓ，  ３Ｈ），  １．１０  （ｓ，  ３Ｈ），  １．２２−１．２９  （ｍ，  ２Ｈ），  １．３２  （ｓ，  ３Ｈ），  １．３４−１．４０  （ｍ，２Ｈ），  １．４５  （ｄ，  Ｊ＝８．１  Ｈｚ，  １Ｈ），  １．５０−１．６１  （ｍ，  ３Ｈ），  １．６２−１．７５  （ｍ，  ２Ｈ），  １．７９  （ｓ，  ３Ｈ），  １．９６−２．０８  （ｍ，  ３Ｈ），  ２．３４  （ｄ，  Ｊ＝１５．４  Ｈｚ，  １Ｈ），  ３．８８  （ｓ，  ３Ｈ），  ４．７９  （ｄ，  Ｊ＝５．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．１２  （ｄ，  Ｊ＝６．２  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．１８  （ｓ，  １Ｈ），  ６．６２  （ｄ，  Ｊ＝７．７  Ｈｚ，  １Ｈ），  ６．７３  （ｓ，  １Ｈ），  ６．９０  （ｔ，  Ｊ＝７．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．２２  （ｄ，  Ｊ＝７．９  Ｈｚ，  １Ｈ），  ７．８８  （ｂｒ．  ｓ．，  １Ｈ），  ８．９９  （ｂｒ．  ｓ．，  １Ｈ），  １０．６９  （ｓ，  １Ｈ），  １２．０４  （ｂｒ．  ｓ．，  １Ｈ）．
１３Ｃ−ＮＭＲ  （ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  １１．９，  １８．５，  ２２．３，  ２９．１，  ２９．９，  ３０．４，  ３０．５，  ３０．６，  ３１．８，  ３２．９，  ３４．９，  ３５．４，  ３５．５，  ３５．６，  ３６．８，  ３６．９，  ３７．８，  ４３．５，  ４４．３，  ５５．４，  １０１．８，  １０８．８，  １１２．２，  １１９．２，  １１９．８，  １２１．１，  １２１．６，  １２２．６，  １２６．３，  １２６．７，  １２８．５，  １４０．８，  １４１．４，  １４４．０，  １４６．６，  １４７．０，  １８０．０．
【０２９９】
実施例３２．化合物ＸＳ０４８６、ＸＳ０４９１及びＸＳ０４９２の調製
【化７３】
2019523245.tif 000232
【０３００】
一例として化合物ＸＳ０４８６の製造を取ると：  まず、化合物ＹＸＹ１０１（５０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）をジオキサン（６００μＬ）に溶解し、トリエチルアミン（１５０μＬ、０．３３ｍｍｏｌ）を添加し、次いで反応瓶の壁の残渣を洗浄するため、ジオキサン（１００μＬ）を添加し、反応溶液を０℃に冷却した。亜リン酸ジメチル（１１０ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）を四塩化炭素５０μＬに溶解した後、溶解した亜リン酸ジメチルをセラストロールに溶解した反応溶液にゆっくり滴下し、０℃で１２時間、反応を実施し、次いで１０ｍＬの氷冷脱イオン水１０ｍＬｗｏ加え、反応を停止させるため、１０ｍＬの飽和塩化アンモニウム溶液１０ｍＬを加えた。得られた混合物を酢酸エチルで３回（各回１５ｍＬ）抽出し、有機層を集め、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。次いで有機溶媒酢酸エチルを減圧下での蒸留により除去して、粗生成物を赤色の混合固体として得た。粗生成物を、溶離液としてｎ−ヘキサン及び酢酸エチル（ヘキサン／酢酸エチル＝１：１）を用いる３００〜４００メッシュのシリカゲル充填カラムを用いるラピッドカラムクロマトグラフィーにより分離して、赤色の固体生成物を得た。
【０３０１】
１Ｈ  ＮＭＲ  （６００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  ０．６０  （ｓ，  ３  Ｈ）  ０．９６  （ｄ，  Ｊ＝１３．５７  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．０８  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２３  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２４  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．３８  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．４１  −  １．４８  （ｍ，  ２  Ｈ）  １．５５  −  １．６０  （ｍ，  ３  Ｈ）  １．６１  −  １．６７  （ｍ，  ２  Ｈ）  １．６９  −  １．７４  （ｍ，  １  Ｈ）  １．７８  （ｄｄ，  Ｊ＝１６．１４，  ７．８９  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．８１  −  １．８８  （ｍ，  １  Ｈ）  １．９５  （ｔｄ，  Ｊ＝１４．１２，  ３．８５  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ２．０２  （ｄ，  Ｊ＝１３．９４  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ２．０９  （ｓ，  ３  Ｈ）  ２．２１  −  ２．２４  （ｍ，  １  Ｈ）  ２．２７  （ｄ，  Ｊ＝１５．９６  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ３．７４  （ｄｄ，  Ｊ＝１１．５５，  ５．１４  Ｈｚ，  ６  Ｈ）  ６．３６  （ｄ，  Ｊ＝７．１５  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ６．３９  （ｄ，  Ｊ＝１．２８  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ７．０８  （ｄｄ，  Ｊ＝６．９７，  １．１０  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ８．７５  （ｓ，  １  Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１５１  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  １０．０７，  １８．５３，  ２１．４３，  ２８．０３，  ２９．０９，  ２９．２４，  ２９．７１，  ３０．０７，  ３１．２１，  ３１．４６，  ３２．７６，  ３３．９２，  ３５．８５，  ３７．７１，  ３８．７８，  ４１．２３  （ｄ，  Ｊ＝５．５０  Ｈｚ，）  ４１．９７，  ４３．３７，  ４４．４５，  ５５．１５  （ｄｄ，  Ｊ＝１７．６１，  ５．５０  Ｈｚ，  ２  Ｃ）  １１７．２４，  １１８．１３，１２０．１２，  １２６．８９，  １３３．１２，  １４６．４４，１６２．８２，１６７．４３，  １７２．２１  （ｄ，  Ｊ＝１１．００  Ｈｚ）  １７７．９８．
【０３０２】
実施例３３．化合物ＸＳ０４８８の調製
【化７４】
2019523245.tif 000233
【０３０３】
最初に、化合物ＸＳ００７７（８０ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（４ｍＬ）に溶解し、トリエチルアミン（３７０μＬ、２．５ｍｍｏｌ）を加え、次いで４−ＤＭＡＰ（２４．７ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）を加え、均一に攪拌し、塩化ｎ−ブチリル（１１３μＬ、１．１ｍｍｏｌ）を加えた。反応を室温で３０分間撹拌しながら実施し、次いで１０ｍＬの飽和塩化アンモニウム溶液でクエンチした。得られた混合物を酢酸エチルで３回抽出した（各回１５ｍＬ）。有機層を集め、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、有機溶媒の酢酸エチルを減圧留去して粗生成物を赤色の混合固体として得た。溶離液としてｎ−ヘキサン及び酢酸エチル（ヘキサン／酢酸エチル＝４：１）を用いて３００〜４００メッシュのシリカゲル充填カラムを用いたカラムクロマトグラフィーにより分離を行い、生成物を明黄色固体として得た。
【０３０４】
１Ｈ  ＮＭＲ  （６００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  ｐｐｍ  ０．４６  −  ０．５１  （ｍ，  ３  Ｈ）  ０．９１  （ｄ，  Ｊ＝１．００  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ０．９５  −  １．０１  （ｍ，  ３  Ｈ）  １．０８  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．１２  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２３  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．３６  （ｄｄｄ，  Ｊ＝１３．８０，  ４．２０  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．４２  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．４４  −  １．４８  （ｍ，  １  Ｈ）  １．５４  −  １．６０  （ｍ，  ３  Ｈ）  １．６３  （ｓ，  ２  Ｈ）  １．６６  −  １．６８  （ｍ，  ２  Ｈ）  １．７０  （ｄ，  Ｊ＝９．１７  Ｈｚ，  ２  Ｈ）  １．８３  （ｄｄ，  Ｊ＝１３．５７，  ７．７０  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．９３  −  １．９９  （ｍ，  １  Ｈ）  ２．０６  （ｄ，  Ｊ＝１３．９４  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ２．１０  （ｓ，  ３  Ｈ）  ２．２２  （ｄ，  Ｊ＝７．３４  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ２．３２  （ｄ，  Ｊ＝１５．５９  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ２．５５  （ｔ，  Ｊ＝７．１５  Ｈｚ，  ２  Ｈ）  ３．４９  （ｓ，  ３  Ｈ）  ６．３８  （ｓ，  １  Ｈ）  ６．４１  （ｄ，  Ｊ＝７．１５  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ７．３１  （ｄ，  Ｊ＝６．９７  Ｈｚ，  １  Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１５１  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  ｐｐｍ  １３．４１，  １８．０５，  ２１．５９，  ２８．０６，  ２９．１１，  ２９．４２，  ３０．１１，  ３０．１６，  ３０．３２，  ３１．３２，  ３２．２１，  ３２．３１，  ３３．０６，  ３４．３６，  ３４．９１，  ３６．００，  ３７．９０，  ３８．７７，  ３９．８３，  ４２．２２，  ４３．６４，  ４４．８５，  ５１．４８，  １１７．９９，  １２２．１３，  １２５．２１，  １３３．５２，  １３６．６９，  １４２．２６，  １６２．８１，  １７０．６５，  １７１．２１，  １７６．２１，  １７７．９１．
【０３０５】
実施例３４．化合物ＸＳ０５０６の調製
【化７５】
2019523245.tif 000234
【０３０６】
化合物ＹＸＹ１０１（５０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を５０ｍｌの丸底フラスコに秤量し、ジシクロヘキシルカルボジイミド（２３ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）及びグルコース（２４ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を加えた後、溶解のために２ｍＬのＤＣＭを加えた。反応を室温で１２時間行い、大量の水でクエンチし、酢酸エチルで３回抽出した。有機相を合わせ、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮して溶媒を除去した。酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝１：４を用いてシリカゲルカラムで分離精製し、橙赤色固体を得た。収率４２％。
【０３０７】
１Ｈ  ＮＭＲ  （６００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  ０．５７  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．０７  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．１２  −  １．１４  （ｍ，  １  Ｈ）  １．１４  −  １．１６  （ｍ，  １  Ｈ）  １．１７  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２１  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２２  −  １．２３  （ｍ，  ２  Ｈ）１．２４  −  １．２８  （ｍ，  ４  Ｈ）  １．２８  −  １．３２  （ｍ，  ２  Ｈ）  １．３８  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．４０  −  １．４６  （ｍ，  ２  Ｈ）  １．４７  −  １．５２  （ｍ，  ２  Ｈ）  １．５７  （ｄ，  Ｊ＝６．７９  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．５９  −  １．６３  （ｍ，  ４  Ｈ）  １．６４  −  １．７２  （ｍ，  ６  Ｈ）  １．７５  −  １．８３  （ｍ，  ４  Ｈ）  １．９２  −  １．９６  （ｍ，  １  Ｈ）  １．９７  −  ２．０１  （ｍ，  １  Ｈ）  ２．０３  −  ２．０７  （ｍ，  １  Ｈ）  ２．０９  （ｓ，  ３  Ｈ）  ２．１８  （ｄ，  Ｊ＝１０．８２  Ｈｚ，  ２  Ｈ）  ２．７３  （ｄ，  Ｊ＝１５．０４  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ３．４０  −  ３．４９  （ｍ，  １  Ｈ）  ３．８０  −  ３．８９  （ｍ，  １  Ｈ）  ６．３６  （ｄ，  Ｊ＝７．３４  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ６．４０  （ｄ，  Ｊ＝０．９２  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ７．０７  （ｄｄ，  Ｊ＝６．９７，  ０．９２  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ７．７３  （ｄ，  Ｊ＝８．０７  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ８．７１  （ｓ，  １  Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１５１  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  １０．０８，１８．３２，  ２１．８３，  ２４．６８，  ２４．７５，  ２５．１３，  ２５．２９，  ２５．６３，  ２５．６７，  ２８．３８，  ２８．５９，  ２９．９１，  ３０．１３，  ３１．０２，  ３１．０８，  ３１．３９，  ３１．８２，  ３１．９１，  ３１．９３，  ３２．３６，  ３３．１０，  ３６．０２，  ３６．１３，  ３７．６７，  ３８．９９，  ４２．１６，  ４２．８１，  ４４．４５，  ４４．４９，  ５０．０５，  ５４．７７，  １１７．２３，  １１７．９３，  １２０．０４，  １２６．７５，  １３３．２５，  １４６．４３，  １５３．９７，  １６３．０９，  １６８．７４，  １７５．４４，  １７７．８３．
【０３０８】
実施例３５．  化合物ＸＳ０５０７の調製
【化７６】
2019523245.tif 000235
【０３０９】
化合物ＹＸＹ１０１（５０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を５０ｍｌの丸底フラスコ中で秤量し、溶解のために２ｍｌのＤＣＭを加え、次いで−７８℃に移して撹拌した。ＤＡＳＴ（１５０μｌ、１０当量）を加え、−７８℃で１時間反応させた。反応液を大量の氷に直接注いで反応を停止させた。水性相をＤＣＭで３回抽出した。有機相を合わせ、そして無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。有機相を減圧下で濃縮して溶媒を除去した。酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝１：４系を用いるカラムクロマトグラフィーで分離精製し、橙赤色固体を得た。収率５８％。
【０３１０】
１Ｈ  ＮＭＲ  （６００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  ０．５６  （ｓ，  ３  Ｈ）  ０．９８  （ｄ，  Ｊ＝１１．９２  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．０８  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２２  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２９  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．３８  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．４３  −  １．４７  （ｍ，  １  Ｈ）  １．４８  −  １．５２  （ｍ，  １  Ｈ）  １．５５  −  １．５９  （ｍ，  ２  Ｈ）  １．６０  −  １．６４  （ｍ，  １  Ｈ）  １．６７  （ｄ，  Ｊ＝４．０３  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．７１  （ｄ，  Ｊ＝３．８５  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．８０  （ｄｄ，  Ｊ＝１６．４１，  ８．１６  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．８３  −  １．８７  （ｍ，  １  Ｈ）  １．８８  −  １．９２  （ｍ，  １  Ｈ）  １．９６  （ｄ，  Ｊ＝１７．６１  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．９５  −  １．９５  （ｍ，  １  Ｈ）  ２．０９  （ｓ，  ３  Ｈ）  ２．２０  （ｄ，  Ｊ＝１．８３  Ｈｚ，  ２  Ｈ）  ６．３５  （ｄ，  Ｊ＝７．３４  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ６．３８  （ｄ，  Ｊ＝１．２８  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ７．０６  （ｄｄ，  Ｊ＝６．９７，  １．２８  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ８．７３  （ｓ，  １  Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１５１  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  １０．０７，  １８．８５，  ２１．４１，  ２７．８９，  ２９．２６，  ２９．３３，  ２９．４６，  ２９．９４，  ３１．１６，  ３２．７１，  ３３．７９，  ３５．７８，  ３７．８７，  ３８．７４，  ４０．０４，  ４０．２２，  ４１．８９，  ４３．２６，  ４４．３３，  １１７．２１，  １１８．１４，  １２０．１５，  １２６．９９，  １３２．８８，  １４６．４１，  １６２．７８，  １６７．３９  （ｄ，  Ｊ＝４１８．１５  Ｈｚ，  １  Ｃ），  １６６．７１，  １７７．９７．
【０３１１】
実施例３６．化合物ＸＳ０５０９の調製
【化７７】
2019523245.tif 000236
【０３１２】
化合物ＹＸＹ１０１（５０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を２５ｍｌの重壁圧力容器中で秤量し、臭化テトラブチルアンモニウム（ＴＢＡＢ、１７．５ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）を加え、溶解のために２ｍＬのジクロロメタン（ＤＣＭ）を加え、次いで５％ＮａＯＨ（１８０μＬ）を滴下した。反応を室温で３０分間行った後、５０℃の油浴に移し、２，３，４，６−テトラアセトキシ−α−Ｄ−グルコピラノースブロミドのジクロロメタン溶液（５７ｍｇ−１ｍＬ、０．１３８ｍｍｏｌ）を滴下し、そして、５０℃で１２時間反応した。反応を止め、大量の水と飽和食塩水を加えた。得られた混合物をＤＣＭで３回抽出した。有機相を合わせ、そして無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。有機相を減圧下で濃縮し、そして酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝４：１系を用いるシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して、黄色の固体を得た、収率２５％。
【０３１３】
１Ｈ  ＮＭＲ  （６００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  ０．５１  （ｓ，  ３  Ｈ）０．９５  （ｄ，  Ｊ＝１３．５７  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．０８  （ｄ，  Ｊ＝６．２４  Ｈｚ，  ６  Ｈ）  １．２２  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２３  （ｂｒ．  ｓ．，  １  Ｈ）  １．３８  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．４１  （ｄ，  Ｊ＝４．２２  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．４６  （ｄ，  Ｊ＝１１．９２  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．５６  （ｄ，  Ｊ＝７．５２  Ｈｚ，  ２  Ｈ）  １．５８  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．６０  −  １．６３  （ｍ，  １  Ｈ）  １．６４  （ｄ，  Ｊ＝４．９５  Ｈｚ，  ２  Ｈ）１．６６  −  １．６９  （ｍ，  １  Ｈ）  １．８１  −  １．８７  （ｍ，  １  Ｈ）  １．９１  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．９４  （ｄ，  Ｊ＝３．６７  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．９７  （ｓ，  ３  Ｈ）  ２．００  −  ２．０４  （ｍ，  １  Ｈ）  ２．０８  （ｓ，  ３  Ｈ）  ２．１２  （ｓ，  ３  Ｈ）  ２．１９  （ｄ，  Ｊ＝８．８０  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ２．３１  （ｄ，  Ｊ＝１５．５９  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ３．８５  −  ３．９０  （ｍ，  １  Ｈ）  ３．９２  −  ３．９６  （ｍ，  １  Ｈ）  ４．３０  （ｄｄ，  Ｊ＝８．１６，  ４．１３  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ５．０５  （ｄｄ，  Ｊ＝１０．０９，  ８．４４  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ５．２３  （ｄ，  Ｊ＝３．４８  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ５．２９  （ｄｄ，  Ｊ＝１０．４５，  ３．６７  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ５．８３  （ｄ，  Ｊ＝８．２５  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ６．３６  （ｄ，  Ｊ＝７．１５  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ６．３７  （ｄ，  Ｊ＝０．９２  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ７．０６  （ｄ，  Ｊ＝６．９７  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ８．７１  （ｓ，  １  Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１５１  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  １０．０６，  １８．６３，  １９．９７，  ２０．３１，  ２０．４２，  ２１．５７，  ２８．１１，  ２８．５９，  ２９．２２，  ２９．９７，  ３０．０７，  ３１．３１，  ３２．６２，  ３２．８４，  ３４．５７，  ３５．９３，  ３７．７６，  ３８．５２，  ４０．０５，  ４０．２４，  ４１．９７，  ４３．４６，  ４４．５４，  ６１．７６，  ６７．３５，  ６７．８５，  ６９．７８，  ７１．２１，  ９１．６４，  １１７．２９，  １１８．０８，  １２０．１１，  １２６．９３，  １３３．０７，  １４６．３６，  １６２．８６，  １６７．７８，  １６９．２４，  １６９．４１，  １６９．５７，  １６９．９７，  １７６．５１，  １７７．９３．
【０３１４】
実施例３７．化合物ＸＳ０５１４、ＸＳ０５１５の調製
【化７８】
2019523245.tif 000237
【０３１５】
一例としてＸＳ０５１４の合成を取ると：  ５０ｍＬの丸底フラスコにＸＳ０４１９（５０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を秤量し、溶解のために２ｍＬのＤＣＭを加え、次いで−７８℃に移し、そして撹拌し、続いてジエチルアミノスルフルトリフルオリド（ＤＡＳＴ、１５０μＬ、１０当量）を添加し、−７８℃で１時間反応させた。反応溶液を大量の氷に注いで反応を停止させた。水性相をＤＣＭで３回抽出した。有機相を合わせ、飽和ＮａＨＣＯ３で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮した。酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝１：８系を用いてシリカゲルカラムクロマトグラフィーで分離精製し、橙赤色固体を得た。収率５８％。
【０３１６】
１Ｈ  ＮＭＲ  （６００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  ０．６１  （ｓ，  ３  Ｈ）  ０．９５  （ｄ，  Ｊ＝１４．４９  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．０６  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．１８  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２３  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２８  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．４１  （ｄ，  Ｊ＝１４．８６  Ｈｚ，  ２  Ｈ）  １．４７  （ｄｄ，  Ｊ＝１３．８５，  ４．３１  Ｈｚ，  ２  Ｈ）  １．５４  （ｄ，  Ｊ＝７．７０  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．５８  −  １．６３  （ｍ，  ２  Ｈ）  １．７４  −  １．８４  （ｍ，  ２  Ｈ）  １．８８  （ｄ，  Ｊ＝６．０５  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．９４  （ｄ，  Ｊ＝１０．６４  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．９８  （ｄ，  Ｊ＝１０．０９  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ２．０１  （ｓ，  ３  Ｈ）  ２．０７  （ｄ，  Ｊ＝１７．９７  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ２．２４  （ｄ，  Ｊ＝１５．９６  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ２．８９  −  ２．９４  （ｍ，  １  Ｈ）  ３．１６  −  ３．２１  （ｍ，  １  Ｈ）  ５．７４  （ｄ，  Ｊ＝４．７７  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ６．６１  （ｓ，  １  Ｈ）  ７．８１  （ｂｒ．  ｓ．，  １  Ｈ）  ８．７８  （ｂｒ．  ｓ．，  １  Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１５１  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  １１．５６，  １８．６６，  ２２．５７，  ２７．３０，  ２８．２７，  ２９．２１，  ２９．５４，  ２９．９８，  ３０．０２，  ３０．０８，  ３１．１８，  ３３．６９，  ３３．９９，  ３４．１３，  ３６．０５，  ３６．２７，  ３７．１４，  ４０．２５，  ４３．１２，  ４３．４２，  １０８．２１，  １１８．０７，  １２０．１３，  １２３．０２，  １３９．２３，  １４０．６１，  １４３．１７，  １４８．７６，  １６７．６４  （ｄ，  Ｊ＝３８０．７３  Ｈｚ，  １  Ｃ）．
【０３１７】
実施例３８．化合物ＸＳ０５１６の調製
【化７９】
2019523245.tif 000238
【０３１８】
ＸＳ００７７（５０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を２５ｍｌの重壁圧力容器中で秤量し、臭化テトラブチルアンモニウム（ＴＢＡＢ、１７．５ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）を加え、次いで溶解のために２ｍＬのジクロロメタン（ＤＣＭ）を加え、次いで５％ＮａＯＨ（１８０μＬ）を滴下して加えた。混合物を室温で３０分間反応させ、続いて５０℃の油浴に移し、２，３，４，６−テトラアセトキシ−α−Ｄ−グルコピラノースブロミド−ジクロロメタン溶液（５７ｍｇ−１ｍＬ、０．１３８ｍｍｏｌ）を滴下して加え、５０℃で１２時間反応させた。反応を停止させ、大量の水及び飽和食塩水を添加し、混合物をＤＣＭで３回抽出した。有機相を合わせ、減圧下で濃縮した無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、そして酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝４：１を用いるシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して、黄色の固体を得た、収率２５％。
【０３１９】
１Ｈ  ＮＭＲ  （６００  ＭＨｚ，  ＣＨＬＯＲＯＦＯＲＭ−ｄ）  δ  ｐｐｍ  ０．５３  （ｓ，  ３  Ｈ）  ０．９７  （ｄ，  Ｊ＝１４．３１  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．１０  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．１８  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２６  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．３８  （ｔｄ，  Ｊ＝１４．０３，  ４．５８  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．４７  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．５０  （ｄｄ，  Ｊ＝１５．５９，  ４．５８  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．５３  −  １．５６  （ｍ，  １  Ｈ）  １．５８  （ｄ，  Ｊ＝８．２５  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．６２  −  １．６５  （ｍ，  ２  Ｈ）  １．６６  （ｄ，  Ｊ＝５．３２  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．６７  −  １．７２  （ｍ，  ２  Ｈ）  １．７６  −  １．８０  （ｍ，  １  Ｈ）  １．８２  −  １．８７  （ｍ，  １  Ｈ）  １．８７  −  １．９１  （ｍ，  １  Ｈ）  １．９８  （ｓ，  ３  Ｈ）  ２．０１  （ｓ，  ３  Ｈ）  ２．１０  −  ２．１４  （ｍ，  １  Ｈ）  ２．１５  （ｓ，  ３  Ｈ）  ２．１８  （ｓ，  ３  Ｈ）  ２．２３  （ｓ，  ３  Ｈ）  ２．４２  （ｄ，  Ｊ＝１５．７７  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ３．５５  （ｓ，  ３  Ｈ）  ３．８６  （ｔ，  Ｊ＝７．３４  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ４．０６  （ｄｄ，  Ｊ＝１１．１０，  ７．６１  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ４．１６  （ｄｄ，  Ｊ＝１１．１０，  ６．１４  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ５．１１  （ｄｄ，  Ｊ＝１０．３６，  ３．５８  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ５．３１  （ｄ，  Ｊ＝７．８９  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ５．３８  −  ５．４３  （ｍ，  ２  Ｈ）  ６．３１  （ｄ，  Ｊ＝７．１５  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ６．３９  （ｄ，  Ｊ＝１．１０  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ７．０２  （ｄｄ，  Ｊ＝７．０６，  １．０１  Ｈｚ，  １  Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１５１  ＭＨｚ，  ＣＨＬＯＲＯＦＯＲＭ−ｄ）  δ  ｐｐｍ  １１．５４，  １８．３３，  ２０．６１，  ２０．７０，  ２１．０２，  ２１．８６，  ２８．５７，  ２９．５７，  ２９．８５，  ３０．５２，  ３０．８２，  ３１．５５，  ３２．６５，  ３３．６７，  ３４．７０，  ３６．３４，  ３８．２０，  ３９．２４，  ４０．３７，  ４２．３０，  ４４．２７，  ４５．０７，  ５１．５４，  ６０．８１，  ６６．９０，  ６９．０９，  ７０．４９，  ７０．８４，  １００．３７，  １１７．９３，  １２３．３３，  １２６．９２，  １３４．３２，  １３４．９６，  １４５．７１，  １６２．５０，  １７０．０７，  １７０．３３，  １７０．３５，  １７０．３７，  １７０．６１，  １７８．６８，  １７９．１４．
【０３２０】
実施例３９．化合物ＸＳ０５３４の調製
【化８０】
2019523245.tif 000239
【０３２１】
ＸＳ００７７（１５０ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）を秤量し、４ｍＬのアセトンに撹拌しながら溶解し、無水炭酸カリウム（１８０ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ）及び硫酸ジメチル（９５μＬ、０．９６ｍｍｏｌ）を撹拌しながら添加し、混合物を７０℃の油浴下で１２時間反応させた。反応を１ｍｏｌ／ＬのＨＣｌでクエンチし、次いでｐＨ＝７に調整し、そして酢酸エチルで３回抽出した。有機相を合わせ、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧下で溶媒を除去するため濃縮し、そして酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝１：１０系を用いるシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製して白色の固体を得た、収率２４．３％。
【０３２２】
１Ｈ  ＮＭＲ  （６００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  ０．５１  （ｓ，  ３  Ｈ）  ０．８７  −  ０．９２  （ｍ，  １  Ｈ）  １．０６  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．１２  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．１８  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２７  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．３２  −  １．３７  （ｍ，  １  Ｈ）  １．３７  −  １．４２  （ｍ，  １  Ｈ）  １．４７  −  １．５２  （ｍ，  ３  Ｈ）  １．５５  −  １．６１  （ｍ，  ２  Ｈ）  １．６５  （ｄｄ，  Ｊ＝１５．６８，  ８．１６  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．８０  （ｔｄ，  Ｊ＝１３．４３，  ７．２４  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．８４  −  １．９０  （ｍ，  １  Ｈ）  １．９７  （ｔｄ，  Ｊ＝１３．７５，  ４．０３  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ２．０２  （ｓ，  ３  Ｈ）  ２．０６  （ｄ，  Ｊ＝１３．５７  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ２．１２  −  ２．１８  （ｍ，  １  Ｈ）  ２．３３  （ｄ，  Ｊ＝１５．７７  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ２．９５  （ｄｄ，  Ｊ＝２０．１７，  １．４０  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ３．２１  （ｄｄ，  Ｊ＝２０．７２，  ６．２４  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ３．４６  −  ３．５０  （ｍ，  ３  Ｈ）  ３．７７  （ｓ，  ３  Ｈ）  ５．７２  （ｄｄ，  Ｊ＝６．４２，  １．２８  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ６．７２  （ｓ，  １  Ｈ）  ８．１０  （ｓ，  １  Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１５１  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  １１．３５，  １７．６９，  ２２．４１，  ２７．３１，  ２８．４１，  ２９．４２，  ２９．９０，  ３０．１３，  ３０．２５，  ３１．３６，  ３２．３７，  ３４．０１，  ３４．２１，  ３４．３６，  ３６．４１，  ３６．４９，  ３７．１１，  ３９．８５，  ４３．２３，  ４３．８０，  ５１．３７，  ５５．８２，  １０５．２９，  １１７．４８，  １１９．７９，  １２４．５８，  １３９．０３，  １４１．５２，  １４５．８３，  １４８．７３，  １７８．０４．
【０３２３】
【０３２４】
【０３２５】
【０３２６】
実施例４１．化合物ＸＳ０４２０の調製
【化８２】
2019523245.tif 000240
【０３２７】
化合物ＹＸＹ１０１（５０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を５０ｍｌの丸底フラスコに秤量し、ＰＴＳＡ（１００ｍｇ、過剰）及び２ｍＬのトルエンを添加し、混合物を室温で６時間撹拌し、飽和ＮａＨＣＯ３溶液でクエンチし、酢酸エチルで３回抽出した。有機相を合わせ、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、溶媒を除去するために減圧下で濃縮し、そして酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝１：４系を用いるシリカゲルカラムクロマトグラフィーによで分離精製してオフホワイトの固体を収率７０％で得た。
【０３２８】
１Ｈ  ＮＭＲ  （６００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  １．０３  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．０６  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．０７  −  １．１１  （ｍ，  １  Ｈ）  １．１５  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．１８  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２１  −  １．２４  （ｍ，  １  Ｈ）  １．２８  −  １．３２  （ｍ，  １  Ｈ）  １．３７  （ｔｄ，  Ｊ＝１３．７５，  ５．３２  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．４６  （ｄｄ，  Ｊ＝８．６２，  ４．０３  Ｈｚ，  ２  Ｈ）  １．４８  −  １．５０  （ｍ，  ２  Ｈ）  １．５１  −  １．５５  （ｍ，  １  Ｈ）  １．５８  （ｄｄ，  Ｊ＝１２．９３，  １．９３  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．８３  −  １．９０  （ｍ，  ３  Ｈ）  ２．３３  （ｔ，  Ｊ＝１．００  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ２．３６  （ｓ，  ３  Ｈ）  ２．３８  （ｓ，  ３  Ｈ）  ２．８０  −  ２．９２  （ｍ，  ２  Ｈ）  ２．８０  −  ２．９２  （ｍ，  ２  Ｈ）  ７．０６  （ｄ，  Ｊ＝８．６２  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ７．１８  （ｓ，  １  Ｈ）  ７．４９  （ｄ，  Ｊ＝８．４４  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ８．４８  （ｂｒ．  ｓ．，  １  Ｈ）  ９．９２  （ｓ，  １  Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１５１  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  １０．９６，  １９．４５，  ２１．７３，  ２１．９５，  ２３．５１，  ２４．０３，  ２５．４５，  ３０．８９，  ３０．９６，  ３４．５９，  ３５．０８，  ３６．４１，  ３７．９８，  ３８．３０，  ４０．７１，  ４１．７０，  ４３．５０，  ９９．０１，  １０２．９１，  １１５．７４，  １２０．７３，  １２６．０７，  １２７．１７，  １２７．３０，  １２９．０３，  １３２．３６，  １４３．６０，  １４６．１２，  １７５．６８．
【０３２９】
実施例４２．化合物ＸＳ０５０２の調製
【化８３】
2019523245.tif 000241
【０３３０】
化合物ＸＳ００７７（５０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）を５０ｍＬ丸底フラスコに秤量し、ＳｅＯ２（２００ｍｇ、過剰）及び２ｍＬのジオキサンを加え、混合物を５５℃で１２時間撹拌した。脱イオン水を加えて反応を停止させ、酢酸エチルで３回抽出した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、減圧下で溶媒を除去するため濃縮し、そして酢酸エチル：ｎ−ヘキサン＝１：１０系を用いるシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより分離精製して、オフホワイトの固体を得た、収率１６．８％。
【０３３１】
１Ｈ  ＮＭＲ  （６００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  ０．７５  （ｓ，  ３  Ｈ）  ０．９３  −  ０．９７  （ｍ，  １  Ｈ）  １．１０  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２１  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．２２  （ｓ，  ３  Ｈ）  １．４０  （ｔｄ，  Ｊ＝１４．０８，  ４．１３  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．４９  （ｄｔ，  Ｊ＝１４．５３，  ４．６５  Ｈｚ，  １  Ｈ）  １．７１  −  １．７９  （ｍ，  ２  Ｈ）  １．７９  −  １．８２  （ｍ，  １  Ｈ）  １．８２  −  １．８８  （ｍ，  １  Ｈ）  ２．０７  −  ２．１０  （ｍ，  １  Ｈ）  ２．１０  −  ２．１２  （ｍ，  １  Ｈ）  ２．１３  （ｓ，  ３  Ｈ）  ２．２９  （ｄ，  Ｊ＝１４．３１  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ２．４６  （ｔ，  Ｊ＝４．７７  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ２．５４  （ｓ，  ３  Ｈ）  ３．５０  （ｓ，  ３  Ｈ）  ６．２０  （ｄ，  Ｊ＝９．５４  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ６．４５  （ｄ，  Ｊ＝９．５４  Ｈｚ，  １  Ｈ）  ７．１１  （ｓ，  １  Ｈ）  ９．４４  （ｓ，  １  Ｈ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ  （１５１  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ｐｐｍ  １１．８８，  １７．４５，  １９．７０，  ２１．８８，  ２６．７８，  ２９．０４，  ３０．３４，  ３０．４２，  ３０．４７，  ３１．０２，  ３４．１９，  ３６．４７，  ４０．０５，  ４０．４３，  ４１．８４，  ４６．１５，  ５１．５８，  １２２．９７，  １２５．７２，  １２５．７８，  １２９．２４，  １３６．２０，  １３９．２２，  １４２．１１，  １４２．４３，  １４４．６１，  １４６．３０，  １７６．９２，  １７８．２５，  １８１．３８．
【０３３２】
本発明の実施形態を詳細に説明したが、開示された教示によれば、本発明の範囲内にある本発明の実施形態の詳細に対して様々な修正及び変更を加えることができる。本発明の全範囲は、添付の特許請求の範囲及びその任意の均等物によって定義される。
【手続補正２】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】図１２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図１２】
2019523245.tif 000242
【手続補正３】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】図１７
【補正方法】削除
【補正の内容】
【国際調査報告】
2019523245.tif 000243
2019523245.tif 000244
2019523245.tif 000245
2019523245.tif 000246
2019523245.tif 000247
2019523245.tif 000248
2019523245.tif 000249
2019523245.tif 000250