(57)【要約】  フェノルドパム（化合物（Ｉ）又はその薬学的に許容される塩若しくは溶媒和物）を投与するための安定な局所用組成物の実施形態が、（血圧を低下させるリスクを減らす）フェノルドパムの安全な最小全身曝露を伴う長期にわたる即時又は持続性徐放投与について開示される。この組成物は、薬物の安定性及び皮膚吸収性を高める組成物、特に無水半固体組成物及びクリームを含む。これは可溶性形態又は分散形態のフェノルドパムを軟膏又は無水ゲルのような半固体組成物に組み込むことによって達成される。乾癬、脱毛症アトピー性皮膚炎、及び白斑を含む皮膚科学的疾患の治療において局所用組成物を使用する方法の実施形態が開示される。
2019526636.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
治療上有効量のフェノルドパム又はその薬学的に許容される塩を局所投与することを含み、前記フェノルドパムの濃度が５％未満である、皮膚疾患を治療する方法。
【請求項２】
酸性化剤及び／又は緩衝系を更に含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記緩衝系が、クエン酸とクエン酸ナトリウム、酢酸と酢酸ナトリウム、アルギン酸とアルギン酸ナトリウム、並びにポリアクリル酸とポリアクリル酸ナトリウム塩から選択される分子又は高分子ポリ酸緩衝剤から選択される、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記酸性化剤が、クエン酸、マレイン酸、マロン酸、乳酸、グリコール酸、アクリル酸若しくはメタクリル酸、マレイン酸含有ポリマー若しくはアルギン酸塩、又は硫酸塩、スルホン酸塩、リン酸塩若しくはホスホン酸である、請求項２に記載の方法。
【請求項５】
前記治療上有効量のフェノルドパムが、０．０１〜３％（ｗ／ｗ）で含まれる、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記治療上有効量のフェノルドパムが、０．１％（ｗ／ｗ）で含まれる、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記治療上有効量のフェノルドパムが、１％（ｗ／ｗ）で含まれる、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記皮膚疾患が、乾癬、アトピー性皮膚炎、脱毛症、及び白斑から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
その塩基又は塩の形態の治療上有効量のフェノルドパムを含み、少なくとも８０％のフェノルドパムが可溶化形態である、Ｔ細胞媒介性の自己免疫炎症性疾患の治療のための局所用組成物。
【請求項１０】
その塩基又は塩の形態の治療上有効量のフェノルドパムを含む、Ｄ１受容体媒介性の皮膚疾患の治療のための局所用組成物。
【請求項１１】
前記組成物が、クリームベースの組成物、無水ＰＥＧベースのゲル、脂質ベースの軟膏、フォーム、固体粒子、ペースト、ローション、及び接着性のストリップ又はパッチである、請求項９又は１０に記載の局所用組成物。
【請求項１２】
前記疾患が、乾癬、アトピー性皮膚炎、脱毛症、白斑、基底細胞がん、及び扁平上皮がんから選択される、請求項９又は１０に記載の局所用組成物。
【請求項１３】
約０．０１〜３％（ｗ／ｗ）のフェノルドパムを含む、請求項９又は１０に記載の局所用組成物。
【請求項１４】
前記無水ＰＥＧ組成物が、水系組成物と比較して、皮膚を通してより高いフェノルドパムの流入を示す、請求項１１に記載の無水ＰＥＧ系組成物。
【請求項１５】
皮膚への浸透性を改善するために少なくとも１つの浸透促進剤を更に含む、請求項９又は１０に記載の局所用組成物。
【請求項１６】
前記浸透促進剤が、ポリオール、アルコール、脂肪アルコール、脂肪酸、脂肪酸エステル、アニオン性界面活性剤、カチオン性界面活性剤、両性界面活性剤、及び非イオン性界面活性剤から選択される、請求項１５に記載の局所用組成物。
【請求項１７】
前記組成物中でのフェノルドパムの安定性を改善するために少なくとも１つの抗酸化剤を更に含む、請求項９又は１０に記載の局所用組成物。
【請求項１８】
前記抗酸化剤が、ブチル化ヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、ブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、アスコルビン酸などのアスコルビン酸誘導体、エリソルビン酸、アスコルビン酸ナトリウム、チオグリセロール等のチオール誘導体、システイン、アセチルシステイン、シスチン、ジチオエリスリトール、ジチオトレイトール、グルタチオン、トコフェロール、亜硫酸塩、例えば硫酸ナトリウム、亜硫酸水素ナトリウム、アセトン重亜硫酸ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、亜硫酸ナトリウム、ホルムアルデヒドスルホキシル酸ナトリウム、及びチオ硫酸ナトリウムから選択される、請求項１７に記載の局所用組成物。
【請求項１９】
前記水性組成物の安定性を更に改善するために少なくとも１つの保存剤を更に含む、請求項９又は１０に記載の局所用組成物。
【請求項２０】
前記保存剤が、ベンジルアルコール、クロロクレゾール、ヒドロキシ安息香酸エステル、安息香酸、チメロサール、クロラムフェニコール、及びパラベンから選択される、請求項１９に記載の局所用組成物。
【請求項２１】
室温で少なくとも９ヶ月間安定である、請求項９又は１０に記載の局所用組成物。
【請求項２２】
治療上有効量のフェノルドパム又はその薬学的に許容される塩を局所投与することを含み、少なくとも８０％のフェノルドパムが可溶化形態である、皮膚疾患を治療する方法。
【請求項２３】
請求項９又は１０に記載の組成物を一日少なくとも１回又は２回、皮膚の患部に局所投与し、それによって疾患を治療することを含む、乾癬を治療する方法。
【請求項２４】
皮膚疾患の治療のためのフェノルドパムを含み、４以下のｐＨを有し、少なくとも１週間の一日曝露後に皮膚刺激を引き起こさない、非刺激性の局所用組成物。
【請求項２５】
室温で少なくとも３ヶ月間安定であり、４より高いｐＨを有する、局所用フェノルドパム組成物。
【請求項２６】
皮膚疾患の治療用のフェノルドパムを含み、室温で少なくとも３ヶ月間安定である、局所用無水ｐＨ非依存性フェノルドパム組成物。
【請求項２７】
天然ポリ酸、アルギン酸、ポリ（アクリル酸）及びポリ（マレイン酸）、並びにそれらのコポリマー及び架橋誘導体から選択される高分子ポリ酸を更に含む、請求項２５に記載の局所用組成物。
【請求項２８】
抗炎症剤、鎮痛剤、局所麻酔剤、タール、又はＴ細胞媒介性の炎症性皮膚疾患を治療するために使用される他の有効物質を更に含む、請求項９又は１０に記載の組成物。
【請求項２９】
乾癬誘発炎症誘発性サイトカイン分泌を阻害する方法であって、有効量のフェノルドパムを局所適用し、それによって前記サイトカイン分泌を阻害することを含み、ここで前記フェノルドパムの濃度が５％（ｗ／ｗ）未満である、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１６年８月３１日に出願された米国仮出願第６２／３８１，６７４号及び２０１７年８月６日に出願された米国仮出願第６２／５４１，７５６号の優先権を主張する。両出願の内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【０００２】
発明の技術分野
本発明は、フェノルドパムの安定な局所製剤（又は組成物）及び皮膚疾患の治療におけるその使用に関する。
【背景技術】
【０００３】
乾癬は多くの人々に影響を与える一般的な皮膚病である。これは、銀色の鱗屑を有する皮膚の赤い斑点とケラチノサイトの過形成によって引き起こされる肥厚した表皮によって特徴付けられる。この疾患の影響は、局所的な小さな病変から全身の表面を覆う病変にまで及ぶ。乾癬にはいくつかの形態があるが、その中でもプラーク型の乾癬が最も一般的な形態である。局所療法、全身療法、光線療法が乾癬の治療法として利用可能であり、その中でも局所療法は他の治療法と比較して安全性に対する有効性がより高い。乾癬の改善のための臨床的に利用可能な多数の治療法は、乾癬の慢性及び再発性の性質を例示している。しかし、利用可能な治療の選択肢は、それらの不適切な毒性のために患者の服薬遵守率を下げる。従って、より少ない副作用で安全且つ有効な治療の開発に対する要求が高まっている。
【０００４】
白斑は、皮膚の斑点が色素を失い、白色になることを特徴とする状況である。原因はわかっていないが、免疫的及び遺伝的要因によって引き起こされるものと考えられる。疾患の裏付けは組織生検により得ることができる。病気の治癒や効果的な治療はない。日焼け止め、遮蔽性化粧料、ステロイドクリーム、及び光線療法は、病気の症状を改善するために使用される。
【０００５】
円形脱毛症は、頭皮の禿げた斑点として見られる、頭皮の一部又は全部の領域から毛が抜け落ちる自己免疫疾患である。瘢痕性脱毛症は、線維化及び毛包の喪失を特徴とし、非瘢痕性脱毛症では、毛幹は失われているが、毛包はこのタイプの脱毛症を可逆的なままにする。
【０００６】
アトピー性皮膚炎は、かゆみ、発赤、腫脹、及びひび割れた皮膚を特徴とする皮膚炎の一種である。１歳から５歳までの間の子供達がこの病気の影響を最も受ける。原因はわかっていないが、免疫疾患又は遺伝的性質に関連している可能性がある。この病気は、子供の頃又はその後に消失することがある。これは潤滑クリームと局所用ステロイドで治療される。
【０００７】
その全体の内容が参照により本明細書に組み込まれる、「フェノルドパム製剤及びプロドラッグ誘導体」と題するＰＣＴ公開ＷＯ２００９／０５２４９１は、細胞表面上に上昇したレベルのＤ１Ｒを劇的に発現するＴＣＲ活性化細胞（Ｔ細胞受容体を発現する非がん性ヒト末梢Ｔ細胞）に対するメシル酸フェノルドパムの活性を開示している。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】国際公開ＷＯ２００９／０５２４９１号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
メシル酸フェノルドパム、化学的には６−クロロ−２，３，４，５−テトラヒドロ−１−（４−ヒドロキシフェニル）−［１Ｈ］−３−ベンズアゼピン−７，８−ジオール，メタンスルホネート（「ＦＤ」）は、その血管拡張作用のために診療所で使用されるドーパミンＤ１受容体（Ｄ１Ｒ）のための非常に選択的なアゴニストである。いくらかの血管拡張効果を有するフェノルドパムの最低血中濃度は１〜１０ｎｇ／ｍＬの範囲内であり（ＦＤＡ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ＆  Ｂｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ  Ｒｅｖｉｅｗ，ＮＤＡ  １９９２２，Ｃｏｒｌｏｐａｍ（登録商標））、これは局所製剤がこれらの血中濃度に達してはいけないことを意味する。フェノルドパムは酸化感受性のために安定性の懸念を示す。また、塩形態の薬物はより高い融点を有し、これはまた、「フェノルドパムの経皮投与」と題するＰＣＴ公開ＷＯ９９／５５３４１によれば、成分の経皮フラックスの低下を意味する。
【００１０】
発明の概要
本発明は、治療上有効量のフェノルドパム（「ＦＤ」）又はその薬学的に許容される塩を局所投与することによって、皮膚疾患、好ましくはＴ細胞媒介性の自己免疫性皮膚炎症性疾患を治療する方法に関する。より好ましくは、本発明は、Ｄ１受容体媒介性の皮膚疾患を治療する方法に関する。
【００１１】
本発明は、最小の全身吸収を示す局所用組成物に関する。ＦＤＡ（Ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ＆  ｂｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｓ  Ｒｅｖｉｅｗ，ＮＤＡ  １９９２２，Ｃｏｒｌｏｐａｍ）は、１〜１０ｎｇ／ｍｌの範囲のいくらかの血管拡張効果を有するフェノルドパムの最小血中濃度を開示している。従って、フェノルドパムの局所用組成物は、いかなる心血管系の副作用も防ぐために、皮膚内での最大の局在化及び最小の全身吸収を有することが望ましい。本発明の発明者らは、この組成物が最小の全身吸収を示すことを見出した。従って、本発明の組成物の局所適用は、血圧に実質的な影響を何ら及ぼさない。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
一実施形態では、本発明は、安定した形態で且つ最小限の全身薬物レベルで、罹患した皮膚表面に薬物を送達するためのメシル酸フェノルドパムを製剤化する方法、及び皮膚への薬物の浸透能力を増強する方法に関する。
【００１３】
乾癬、アトピー性皮膚炎、脱毛症、及び白斑のようなＴ細胞媒介性の自己免疫性皮膚炎症性疾患の治療のための安定なフェノルドパム組成物を提供することが本発明の目的である。
【００１４】
本発明の別の目的は、ある種の皮膚がんを含むＤ１受容体結合剤に反応する皮膚疾患の治療のためのその塩基又は塩形態の局所用フェノルドパム組成物を提供することである。
【００１５】
一実施形態では、皮膚に適用される組成物は、フェノルドパム又はその塩を０．０１％〜３％（ｗ／ｗ）の濃度で含む。別の実施形態では、組成物は、フェノルドパム又はその塩、水和物若しくは溶媒和物を０．１％又は０．０１％（ｗ／ｗ）の濃度で含む。より好ましい実施形態では、組成物は、乾癬、アトピー性皮膚炎、脱毛症、及び白斑を含むがこれらに限定されない皮膚科学的疾患の治療のために、フェノルドパム又はその塩を約０．１％〜約１％（ｗ／ｗ）の濃度で含む。別の実施形態では、組成物は、フェノルドパム又はその塩を５％（ｗ／ｗ）未満の濃度で含む。
【００１６】
一実施形態では、フェノルドパムは局所用担体に完全に可溶化されている。一実施形態では、組成物は３％（ｗ／ｗ）以下のフェノルドパムを含み、ここでフェノルドパムは局所用担体に完全に可溶化されている。一実施形態では、組成物は、約１％（ｗ／ｗ）の割合でフェノルドパムを含み、ここでフェノルドパムは局所用担体に完全に可溶化されている。一実施形態では、組成物は、約０．１％（ｗ／ｗ）の割合でフェノルドパムを含み、ここで、フェノルドパムは局所用担体に完全に可溶化されている。一実施形態では、組成物は、フェノルドパムを約０．１％〜約１％（ｗ／ｗ）の濃度で含み、ここでフェノルドパムは局所用担体に完全に可溶化されている。
【００１７】
一実施形態では、少なくとも８０％のフェノルドパムが局所用担体に可溶化されている。一実施形態では、組成物は３％（ｗ／ｗ）以下のフェノルドパムを含み、ここで少なくとも８０％のフェノルドパムは局所用担体に可溶化されている。一実施形態では、組成物は、約１％（ｗ／ｗ）の割合でフェノルドパムを含み、ここで少なくとも８０％のフェノルドパムは局所用担体に可溶化されている。一実施形態では、組成物は約０．１％（ｗ／ｗ）の割合でフェノルドパムを含み、ここで少なくとも８０％のフェノルドパムは局所用担体に可溶化されている。一実施形態では、組成物は、フェノルドパムを約０．１％〜約１％（ｗ／ｗ）の濃度で含み、ここで少なくとも８０％のフェノルドパムは局所用担体に可溶化されている。
【００１８】
一実施形態では、組成物は３％（ｗ／ｗ）以下のフェノルドパムを含み、ここでフェノルドパムは局所用担体に懸濁されており、その粒径は５００ｎｍよりも大きい。一実施形態では、組成物は、約１％（ｗ／ｗ）の割合でフェノルドパムを含み、ここでフェノルドパムは局所用担体に懸濁されており、その粒径は５００ｎｍよりも大きい。一実施形態では、組成物は、約０．１％（ｗ／ｗ）の割合でフェノルドパムを含み、ここでフェノルドパムは局所用担体に懸濁されており、その粒径は５００ｎｍよりも大きい。一実施形態では、組成物は、約０．１％〜約１％（ｗ／ｗ）（ｗ／ｗ）の割合でフェノルドパムを含み、ここでフェノルドパムは局所用担体に懸濁されており、その粒径は５００ｎｍよりも大きい。一実施形態では、組成物は５％（ｗ／ｗ）未満の割合でフェノルドパムを含み、ここでフェノルドパムは局所用担体に懸濁されており、その粒径は５００ｎｍよりも大きい。
【００１９】
一実施形態では、本発明は、Ｔ細胞媒介性の自己免疫性皮膚炎症性疾患の治療のための、その塩基又は塩の形態の局所用フェノルドパム組成物に関し、ここで組成物を加速安定条件（４０℃及び湿度７５％）に６ヶ月まで曝露した後に１０％未満のフェノルドパムが分解される。好ましい実施形態では、組成物を加速安定条件に６ヶ月まで曝露した後に５％未満のフェノルドパムが分解される。
【００２０】
一実施形態では、本発明は、乾癬、アトピー性皮膚炎、脱毛症、及び白斑を含むがこれらに限定されない皮膚科学的疾患の治療のための、その塩基又は塩の形態のフェノルドパムを、３％以下の量、好ましくは約１％未満の量、より好ましくは約０．０５％〜約０．１５％の量で含む局所用フェノルドパム組成物に関する。
【００２１】
一実施形態では、本発明は、その塩基又は塩の形態のフェノルドパムと、組成物中で又は皮膚への適用後にｐＨ＞４で分解するのを防ぐためにｐＨを４以下に維持する酸性化剤及び／又は緩衝系とを含む安定性フェノルドパム局所用組成物に関する。局所用組成物は、乾癬、アトピー性皮膚炎、脱毛症、及び白斑を含むがこれらに限定されない皮膚科学的疾患の治療に使用される。
【００２２】
一実施形態では、緩衝系は、クエン酸及びクエン酸ナトリウム、酢酸及び酢酸ナトリウム、アルギン酸及びアルギン酸ナトリウム、並びにポリアクリル酸及びポリアクリル酸ナトリウム塩を含む、薬学的に許容される分子又はポリマーの酸性緩衝剤から選択される。
【００２３】
別の実施形態では、酸性化剤は、クエン酸、マレイン酸、マロン酸、乳酸、グリコール酸、アクリル酸若しくはメタクリル酸又はマレイン酸含有ポリマー又はアルギン酸塩から選択される。
【００２４】
別の実施形態では、酸性化剤は、硫酸塩、スルホン酸塩、リン酸塩、又は酸性エチル硫酸塩（ｅｔｈｙｌ  ｓｕｌｆａｔｅ  ａｃｉｄ）及び酸性ドデシル硫酸塩（ｄｏｄｅｃｙｌ  ｓｕｌｆａｔｅ  ａｃｉｄ）等の酸性ホスホン酸塩（ｐｈｏｓｐｈｏｎａｔｅ  ａｃｉｄ）に基づく有機酸から選択される。
【００２５】
一実施形態では、本発明は、皮膚疾患の治療のための、フェノルドパムを含む無水でｐＨ非依存性の局所用組成物に関する。
【００２６】
一実施形態では、本発明は、皮膚疾患の治療のための、フェノルドパムを含む非刺激性の局所用組成物に関し、この組成物は４以下のｐＨを有し、ここで組成物は少なくとも１週間の一日曝露後に皮膚刺激を引き起こさない。
【００２７】
別の実施形態では、本発明は、４より高いｐＨを有する局所用フェノルドパム組成物に関し、ここで組成物は室温で少なくとも３ヶ月間安定である。別の実施形態では、局所用組成物は更に、抗炎症剤、鎮痛剤、局所麻酔剤、タール、及びＴ細胞媒介性の炎症性皮膚疾患を治療するために使用される他の有効物質を含む。
【００２８】
別の実施形態では、本発明は、有効量のフェノルドパムの局所適用を含み、それによってサイトカイン分泌を阻害することを含む、乾癬誘発炎症誘発性サイトカイン分泌を阻害する方法に関する。
【図面の簡単な説明】
【００２９】
【図１】フェノルドパム安定性に及ぼすｐＨの影響を示す。図１ａは、マススペクトル（ＭＳ）により測定した、異なるｐＨレベルでの溶液中のフェノルドパム安定性を示す。２．５のｐＨのフェノルドパムサンプル及びＮａＯＨで３．６、６．６、及び７．２のｐＨに調整されたサンプルを７２時間維持し、その後、ＭＳ分析を行った。図１ｂは、４より高いｐＨへの曝露後に得られる可能性のあるフェノルドパムの分解生成物を示す。
【図２】本発明の異なる軟膏基剤からのメシル酸フェノルドパムの放出を示すプロットである。
【図３】異なる割合のＰＥＧ及び可溶化剤を用いた水溶性塩基からのメシル酸フェノルドパムの放出を示すプロットである。
【図４】抗酸化剤を用いた場合と用いなかった場合の、無水ゲル基剤からのメシル酸フェノルドパムの放出を示すプロットである。
【図５】軟膏及び無水ゲルからのフェノルドパムの比較放出プロファイルを示すプロットである。
【図６】平行板法により測定した、フェノルドパム組成物の展延性を示す。ＦＤ水洗性軟膏（ＷＢ４５／５５）及びＦＤ無水ゲル（ＡＧＢＨＴ）の展延性のグラフ表示。ＷＢ４５／５５は、ＡＧＢＨＴと比較して、適用した全ての重りにおいて相対的に高い展延性を示す。
【図７】蛍光顕微鏡による軟膏及び無水ゲルの皮膚分布を示す。フルオレセインイソチオシアネート（「ＦＩＴＣ」）充填水洗性軟膏（ＦＩＴＣ＿ＷＢ）で治療した３時間（Ａ）及び６時間（Ｂ）で採取した皮膚切片の蛍光画像並びにＦＩＴＣ充填無水ゲル（ＦＩＴＣ＿ＡＧ）で治療した３時間（Ｃ）及び６時間（Ｄ）で採取した皮膚切片の蛍光画像。Ａ’、Ｂ’、Ｃ’、及びＤ’は、ＦＩＴＣ充填組成物の適用から３時間及び６時間後に採取した皮膚切片のそれぞれの明視野画像を表す。
【図８】ＢＡＬＢ／ｃマウスで試験したフェノルドパム局所用組成物の生体適合性を示す。開発した製剤を７日間連続して適用した後の７日目に生体適合性試験のために単離した皮膚切片の病理組織画像：Ａ）フェノルドパム溶液（ＦＤ溶液）で治療した皮膚；Ｂ）フェノルドパム軟膏（ＷＢ４５／５５）で治療した皮膚；Ｃ）フェノルドパム無水ゲル（ＡＧＢＨＴ）で治療した皮膚。
【図９】ＢＡＬＢ／ｃマウスへのフェノルドパム組成物のインビボ皮膚沈着の測定を示す。無水ゲルは、軟膏及び溶液組成物と比較して、両方の時点で最も高いフェノルドパムの皮膚沈着を示した。＊＊＊＊Ｐ＜０．０００１（対溶液）、＊＊ｐ＜０．０１（対溶液）、＃＃Ｐ＜０．０１（対軟膏）、＃ｐ＜０．０５（対軟膏）。
【図１０】フェノルドパム組成物で治療し、ＵＶ−Ａ照射に曝露したＢＡＬＢ／ｃマウスの耳肥厚の測定による光毒性評価を示す。パートａ）は、１回目のＵＶ−Ａ照射後６日目の耳肥厚の測定値を示す；ｂ）は、２回目のＵＶ−Ａ照射後１２日目の耳肥厚の測定値を示す。全てのデータは平均値±ＳＤを表す（ｎ＝４）。
【図１１】異なる治療群からの代表的なマウスのマウス背部皮膚の表現型画像及び乾癬面積重篤度指数（「ＰＡＳＩ」）スコアを示す。Ａ）ＳＨＡＭ．これは正常な皮膚の状態を表す。Ｂ）ＩＭＱ．乾癬、紅斑、鱗屑化、及び皮膚肥厚の典型的な症状は、イミキモド（「ＩＭＱ」）治療群において観察された。Ｃ）ＩＭＱ＿ＢＭＶ．吉草酸ベタメタゾン（「ＢＭＶ」）による治療は乾癬症状の改善を示した。Ｄ）ＩＭＱ＿ＦＤ．ＦＤ溶液による治療は乾癬症状の改善を示した。Ｅ）ＩＭＱ＿ＷＢ４５／５５．ＷＢ４５／５５は、それぞれ４５部及び５５部のＰＥＧ４００及びＰＥＧ４０００を含むフェノルドパム水洗性軟膏である。ＦＤ水洗性軟膏による治療は乾癬症状の改善を示した。Ｆ）ＩＭＱ＿ＡＧ＿ＢＨＴ．ＡＧＢＨＴは、抗酸化剤としてブチル化ヒドロキシトルエン（「ＢＨＴ」）を含むフェノルドパム無水ゲルである。ＦＤ無水ゲルによる治療は乾癬症状の改善を示した。Ｇ）紅斑のＰＡＳＩスコア。Ｈ）鱗屑化のＰＡＳＩスコア。Ｉ）皮膚肥厚のＰＡＳＩスコア。
【図１２】異なる治療群からの代表的なマウスの背部皮膚のヘマトキシリン及びエオシン（「Ｈ＆Ｅ」）染色を示す（１０倍率）。この図は、Ａ）ＳＨＡＭから採取した皮膚切片の病理組織画像を示す。これは表皮及び真皮の正常な組織像を表す。Ｂ）ＩＭＱ．乾癬、表皮肥厚（表皮増殖）、過角化症、錯角化症（角質層における核の保持を伴う角質層の肥厚）、及び炎症性浸潤の典型的な特徴は、ＩＭＱ治療群において観察された。Ｃ）ＩＭＱ＿ＢＭＶ．ＢＭＶによる治療は乾癬の特徴の強度の低下を示した。Ｄ）ＩＭＱ＿ＦＤ．ＦＤ溶液による治療は乾癬の特徴の強度の低下を示した。Ｅ）ＩＭＱ＿ＷＢ４５／５５．ＦＤ水洗性軟膏による治療は乾癬の特徴の強度の低下を示した。Ｆ）ＩＭＱ＿ＡＧＢＨＴ．ＦＤ無水ゲルによる治療は乾癬の特徴の強度の低下を示した。
【図１３】酵素結合免疫吸着剤アッセイ（「ＥＬＩＳＡ」）を使用して測定した炎症誘発性サイトカインのレベルを示す。この図は、異なる治療群の皮膚ホモジネート中の測定したサイトカインレベルの平均±ＳＤ（ｎ＝５動物）を示す。Ａ）ＩＬ−１７．ＩＭＱ治療群におけるＩＬ−１７のレベルは増加し、ＦＤ治療群及びＢＭＶ治療群において阻害された。Ｂ）ＩＬ−２３．ＩＭＱ治療群におけるＩＬ−２３のレベルは著しく増加し、ＦＤ治療群及びＢＭＶ治療群において阻害された。Ｃ）ＴＮＦ−α．ＩＭＱ治療群におけるＴＮＦ−αのレベルは有意に増加し、ＦＤ治療群及びＢＭＶ治療群において阻害された。＊＊＊Ｐ＜０．００１（対ＳＨＡＭ）、＃＃＃ｐ＜０．００１（対ＩＭＱ）、＊＃ｐ＜０．０１（対ＩＭＱ＿ＦＤ）。ＳＨＡＭは未治療のサンプルである；ＩＭＱは陰性対照である；ＩＭＱ＿ＢＭＶはＩＭＱ＋陽性対照である；ＩＭＱ＿ＦＤはＩＭＱ＋フェノルドパム溶液である。ＩＭＱ＿ＷＢ４５／５５はＩＭＱ  ＋フェノルドパム水洗性軟膏である；ＩＭＱ＿ＡＧＢＨＴはＩＭＱ  ＋フェノルドパム無水ゲルである。
【図１４】異なる治療群からの代表的なマウスの背部皮膚の表現型画像を示す。Ｓｈａｍ：正常な皮膚の状態を表す；ＩＭＱ：紅斑、鱗屑化、及び皮膚肥厚を含む乾癬の典型的な症状がＩＭＱ治療群において観察された。ＩＭＱ＿ＢＭＶ：ＢＭＶによる治療は乾癬症状の改善を示した；ＩＭＱ＿ＷＢ＿０．０１％、ＩＭＱ＿ＷＢ＿０．１％、ＩＭＱ＿ＷＢ＿１％：水洗性基剤（ＷＢ４５／５５）による治療は用量依存的に乾癬症状の改善を示した；ＩＭＱ＿ＯＢ＿０．０１％、ＩＭＱ＿ＯＢ＿０．１％、ＩＭＱ＿ＯＢ＿１％：油性軟膏による治療は用量依存的に乾癬症状の改善を示した。ＩＭＱ＿ＷＢ＿１％＿クエン酸なし：クエン酸を含まない水洗性軟膏による治療は乾癬の症状の寛解を示し、クエン酸の効果を排除した。ＦＤ＿ＩＰ：全身性フェノルドパム（腹腔内「ＩＰ」）製剤による治療は乾癬症状に対してあまり効果を示さなかった。
【図１５】紅斑、鱗屑化、及び皮膚肥厚のＰＡＳＩスコアを示す。６日目に採点したスコアを異なる乾癬パラメータについてｙ軸にプロットした。表示したパラメータは、Ｓｈａｍ、未治療のマウス；ＩＭＱ、イミキモド治療；ＩＭＱ＿ＢＭＶ、イミキモド及び吉草酸ベタメタゾンによる治療；ＩＭＱ＿ＷＢ−４５／５５＿０．０１％、イミキモド及び０．０１％フェノルドパム水洗性軟膏による治療；ＩＭＱ＿ＷＢ−４５／５５＿０．１％、イミキモド及び０．１％フェノルドパム水洗性軟膏による治療；ＩＭＱ＿ＷＢ−４５／５５＿１％、イミキモド及び１％フェノルドパム水洗性軟膏による治療；ＩＭＱ＿ＯＢ＿０．０１％、イミキモド及び０．０１％フェノルドパム油性軟膏による治療；ＩＭＱ＿ＯＢ＿０．１％、イミキモド及び０．１％フェノルドパム油性軟膏による治療；ＩＭＱ＿ＯＢ＿１％、イミキモド及び１％フェノルドパム油性軟膏による治療；ＩＭＱ＿ＷＢ−４５／５５＿１％＿クエン酸なし；イミキモド及びクエン酸を含まない１％フェノルドパム水洗性軟膏による治療；ＩＭＱ＿ＦＤ＿ＩＰ、イミキモド及びフェノルドパムＩＰによる治療（全身）。結果は平均値±ＳＤを表す（ｎ＝５）。
【図１６】ＥＬＩＳＡを用いた異なる群におけるＩＬ−１７レベルの評価を示す。全てのデータは平均値±ＳＤを表す（ｎ＝５）。＊＊＊＊（対Ｓｈａｍ、ｐ＜０．０００１）、＃（対ＩＭＱ、ｐ＜０．０５）、＃＃＃（対ＩＭＱ、ｐ＜０．００１）、＃＃＃＃（対ＩＭＱ、ｐ＜０．０００１）、Ω（対ＩＭＱ＿ＢＭＶ、ｐ＜０．０５）、＠＠＠（対ＩＭＱ＿ＷＢ４５／５５＿０．０１％、ｐ＜０．００１）、＄＄（対ＩＭＱ＿ＷＢ４５／５５＿０．１％、ｐ＜０．０１）、＄＄＄（対ＩＭＱ＿ＷＢ４５／５５＿０．１％、ｐ＜０．００１）、＆＆（対ＩＭＱ＿ＷＢ４５／５５＿１％、ｐ＜０．０１）、＆＆＆（対ＩＭＱ＿ＷＢ４５／５５＿１％、ｐ＜０．００１）、ＸＸＸ（対ＩＭＱ＿ＯＢ＿０．０１％、ｐ＜０．００１）、ＸＸＸＸ（対ＩＭＱ＿ＯＢ＿０．０１％、ｐ＜０．０００１）、Ｙ（対ＩＭＱ＿ＯＢ＿０．１％、ｐ＜０．０５）、＾＾＾（対ＩＭＱ＿ＯＢ＿１％、ｐ＜０．００１）、ΦΦΦΦ（対ＩＭＱ＿ＷＢ４５／５５＿１％クエン酸なし、ｐ＜０．００１）。Ｓｈａｍと比較して、ＩＭＱ群においてＩＬ−１７レベルの有意な増加（ｐ＜０．０００１）が観察された。ＩＭＱ＿ＯＢ＿０．０１％及びＩＭＱ＿ＦＤ＿ＩＰの場合を除き、陰性対照と比較して、全ての治療群においてＩＬ−１７レベルの低下が見られた。
【図１７】ＥＬＩＳＡを用いた異なる群におけるＩＬ−２３レベルの評価を示す。全てのデータは平均値±ＳＤを表す（ｎ＝５）。＊＊（対Ｓｈａｍ、ｐ＜０．０１）、＃（対ＩＭＱ、ｐ＜０．０５）、＃＃（対ＩＭＱ、ｐ＜０．０１）、Ω（対ＩＭＱ＿ＢＭＶ、ｐ＜０．０５）、ΩΩΩ（対ＩＭＱ＿ＢＭＶ、ｐ＜０．００１）、＆＆（対ＩＭＱ＿ＷＢ４５／５５＿１％、ｐ＜０．０１）、ＸＸ（対ＩＭＱ＿ＯＢ＿０．０１％、ｐ＜０．０１）。Ｓｈａｍと比較して、ＩＭＱ群においてＩＬ−２３レベルの有意な増加（ｐ＜０．０１）が観察された。陰性対象と比較して、ＩＭＱ＿ＢＭＶ（ｐ＜０．０１）、ＩＭＱ＿ＷＢ４５／５５＿１％（ｐ＜０．０５）、及びＩＭＱ＿ＷＢ４５／５５＿１％＿クエン酸（ｐ＜０．０１）群を含むいくつかの治療群においてＩＬ−２３レベルの低下が見られた。
【図１８】ＥＬＩＳＡを用いた異なる群におけるＴＮＦ−αレベルの評価を示す。全てのデータは平均値±ＳＤを表す（ｎ＝５）。＊＊＊＊（対Ｓｈａｍ、ｐ＜０．０００１）、＃＃（対ＩＭＱ、ｐ＜０．０１）、＃＃＃（対ＩＭＱ、ｐ＜０．００１）、＃＃＃＃（対ＩＭＱ、ｐ＜０．０００１）、Ω（対ＩＭＱ＿ＢＭＶ、ｐ＜０．０５）。Ｓｈａｍと比較して、ＩＭＱ群においてＴＮＦ−αレベルの有意な増加（ｐ＜０．０００１）が観察された。ＩＭＱ＿ＯＢ＿０．０１％群の場合を除き、全ての治療群においてＴＮＦ−αレベルの低下が見られた。フェノルドパムＩＰ群はまた、ＩＬ−１７及びＩＬ−２３レベルとは異なり、ＴＮＦ−αレベルの低下を示した。
【図１９】ＥＬＩＳＡを用いた異なる群におけるＩＬ−２２レベルの評価を示す。全てのデータは平均値±ＳＤを表す（ｎ＝５）。＊（対Ｓｈａｍ、ｐ＜０．０５）、＃＃（対ＩＭＱ、ｐ＜０．０１）、＃＃＃（対ＩＭＱ、ｐ＜０．００１）。Ｓｈａｍと比較して、ＩＭＱ群においてＩＬ−２２レベルの有意な増加（ｐ＜０．０５）が観察された。ＩＭＱ＿ＷＢ４５／５５＿０．０１％、ＩＭＱ＿ＯＢ＿０．０１％、及びＩＭＱ＿ＦＤ＿ＩＰ群を除き、フェノルドパム治療群においてＩＬ−２２レベルの統計的に有意な低下が見られた。
【図２０】有効性試験の７日目に各群の代表的なマウスから採取した皮膚について撮影した病理組織画像を示す。Ａ）Ｓｈａｍ、未治療のマウス；Ｂ）ＩＭＱ、イミキモド治療；Ｃ）ＩＭＱ＿ＢＭＶ、イミキモド及び吉草酸ベタメタゾンによる治療；Ｄ）ＩＭＱ＿ＷＢ４５／５５＿０．０１％、イミキモド及び０．０１％フェノルドパム水洗性軟膏による治療；Ｅ）ＩＭＱ＿ＷＢ４５／５５＿０．１％、イミキモド及び０．１％フェノルドパム水洗性軟膏による治療；Ｆ）ＩＭＱ＿ＷＢ４５／５５＿１％、イミキモド及び１％フェノルドパム水洗性軟膏による治療；Ｇ）ＩＭＱ＿ＯＢ＿０．０１％、イミキモド及び０．０１％フェノルドパム油性軟膏による治療；Ｈ）ＩＭＱ＿ＯＢ＿０．１％、イミキモド及び０．１％フェノルドパム油性軟膏による治療；Ｉ）ＩＭＱ＿ＯＢ＿１％、イミキモド及び１％フェノルドパム油性軟膏による治療；Ｊ）ＩＭＱ＿ＷＢ４５／５５＿１％クエン酸なし、イミキモド及びクエン酸を含まない１％フェノルドパム水洗性軟膏による治療；Ｋ）ＩＭＱ＿ＦＤ＿ＩＰ、イミキモド及びフェノルドパムＩＰによる治療。
【発明を実施するための形態】
【００３０】
発明の詳細な説明
一実施形態では、本発明は、乾癬のような一般的なＴ細胞媒介性の炎症性疾患の局所治療における薬物の可能性を実証する。遺伝的異常及び免疫系の異常は、病状の家族歴、肥満、喫煙、抑制されていないストレス、ウイルス又は細菌感染、及び特定の薬物の使用を含む危険因子と共に、病状の発症において重要な役割を果たす。この疾患は、身体的、心理的、及び社会的に重大な影響を及ぼす。本発明は、安定な形態のフェノルドパムの局所用組成物を提供し、これは利用可能な治療法でしばしば見られる深刻な副作用を引き起こさない。本発明は更に、非刺激性組成物における準拠に則った適切な組成物を提供する。
【００３１】
一実施形態では、本発明は、安定した形態で、且つ最小限の全身薬物レベルで、罹患した皮膚表面に薬物を送達するためのメシル酸フェノルドパムを製剤化する方法、及び皮膚への薬物の浸透能力を増強する方法に関する。ＦＤＡ（Ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  ｂｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｓ  Ｒｅｖｉｅｗ，ＮＤＡ  １９９２２，Ｃｏｒｌｏｐａｍ）は、１〜１０ｎｇ／ｍｌの範囲のいくらかの血管拡張効果を有するフェノルドパムの最小血中濃度を開示している。従って、局所用組成物は、いかなる心血管系の副作用も防ぐために、皮膚内で最大の局在化及び最小の全身吸収を有することが望ましい。
【００３２】
一実施形態では、局所用フェノルドパム組成物の最大全身吸収は、血中で約１０ｎｇ／ｍｌ未満である。別の実施形態では、局所用フェノルドパム組成物の最大全身吸収は、約５ｎｇ／ｍｌ未満である。別の実施形態では、局所用フェノルドパム組成物の最大全身吸収は、約２．５ｎｇ／ｍｌ未満である。別の実施形態では、局所用フェノルドパム組成物の最大全身吸収は、約１ｎｇ／ｍｌ未満である。別の実施形態では、局所用フェノルドパム組成物の最大全身吸収は、約０．５ｎｇ／ｍｌ未満である。別の実施形態では、局所用フェノルドパム組成物の最大全身吸収は、約０．１ｎｇ／ｍｌ未満である。
【００３３】
別の実施形態では、本発明の局所用組成物は、疎水性軟膏、親水性軟膏、親水性溶液、クリーム、ゲル、ローション、懸濁液、スプレー、又はフォームであり得る。本発明の局所用組成物は、フェノルドパムの安定性及び浸透性を改善することができる。これらの組成物は、軟膏として又はパッチ若しくは他の支持体において患部に適用することができる。本発明のフェノルドパム局所用組成物は、フェノルドパムの安定性及び皮膚への浸透性を改善することができる。
【００３４】
本発明の一実施形態は、可溶性形態又は分散形態の薬物を適切な半固体基剤に組み込むことによる、フェノルドパム又はその薬学的に許容される塩の局所用組成物である。様々な態様では、基剤は軟膏又はゲルであり得る。
【００３５】
一実施形態では、組成物は、フェノルドパム又はその塩を０．０１％〜３％（ｗ／ｗ）の濃度で含む。一実施形態では、組成物は、フェノルドパム又はその塩を０．０１％〜２％（ｗ／ｗ）の濃度で含む。一実施形態では、組成物は、フェノルドパム又はその塩を０．０１％〜１％（ｗ／ｗ）の濃度で含む。一実施形態では、組成物は、フェノルドパム又はその塩を０．１％〜３％（ｗ／ｗ）の濃度で含む。一実施形態では、組成物は、フェノルドパム又はその塩を０．１％〜２％（ｗ／ｗ）の濃度で含む。一実施形態では、皮膚に適用される組成物は、フェノルドパム又はその塩を０．１％〜１％（ｗ／ｗ）の濃度で含む。一実施形態では、組成物は、フェノルドパム又はその塩を０．５％〜３％（ｗ／ｗ）の濃度で含む。一実施形態では、組成物は、フェノルドパム又はその塩を０．５％〜２％（ｗ／ｗ）の濃度で含む。一実施形態では、組成物は、フェノルドパム又はその塩を０．５％〜１％（ｗ／ｗ）の濃度で含む。より好ましい実施形態では、組成物は、フェノルドパム又はその塩を約０．１％〜約１％（ｗ／ｗ）の濃度で含む。別の実施形態では、組成物は、フェノルドパム又はその塩を５％未満の濃度で含む。
【００３６】
別の実施形態では、組成物は、フェノルドパム又はその塩を０．１％又は０．０１％（ｗ／ｗ）の濃度で含む。より好ましい実施形態では、組成物は、フェノルドパム又はその塩を１％（ｗ／ｗ）の濃度で含む。
【００３７】
一実施形態では、組成物は軟膏である。別の実施形態では、軟膏組成物は、治療上有効濃度のフェノルドパム又はその塩を、好ましくは０．０１％〜３％（ｗ／ｗ）の範囲で含み、酸性調整剤を１％〜２％（ｗ／ｗ）、可溶化剤又は浸透促進剤を１０％〜２０％（ｗ／ｗ）、及び軟膏基剤を７０％〜８５％（ｗ／ｗ）を含む。
【００３８】
一実施形態では、組成物は無水ゲルである。別の実施形態では、無水ゲル組成物は、フェノルドパムを０．０１％〜３％（ｗ／ｗ）、抗酸化剤を０．０５％〜０．２％（ｗ／ｗ）、可溶化剤を１０％〜２０％（ｗ／ｗ）、ゲル化剤２％〜２．５％（ｗ／ｗ）、及び水和剤又はゲル促進剤９０％（ｗ／ｗ）の治療上有効濃度を含む。一実施形態では、無水ゲルは抗酸化剤を含まない。
【００３９】
いくつかの実施形態では、組成物は更に、保存剤、浸透促進剤、及び湿潤剤を含むがこれらに限定されない追加の成分を含む。
【００４０】
本発明の一態様では、本発明の軟膏又は無水ゲル等の医薬組成物は、局所投与時に治療上有効量のフェノルドパム又はその類似体を皮膚の表皮層に送達するように製剤化される。特定の実施形態では、局所用組成物は、局所適用時に、約０．５％〜約１％（ｗ／ｗ）の濃度の薬物を皮膚の表皮層に送達するように製剤化される。より好ましい実施形態では、皮膚に適用される局所用組成物は、局所適用時に、約１％〜約５％（ｗ／ｗ）の濃度のフェノルドパム又はその類似体を表皮層に送達するように製剤化される。
【実施例】
【００４１】
実施例１：異なるｐＨ値におけるフェノルドパムの安定性
【００４２】
４より高い様々なｐＨに維持した溶液中及び酸性ｐＨに更に調整し戻した更なる溶液中でのフェノルドパムの安定性を評価するために、以下の実験を行った。メシル酸フェノルドパムを最初にｐＨ２．５のリン酸緩衝液に０．１ｍｇ／ｍＬの濃度で溶解した（サンプルＡ）。次いで溶液を５つのサンプルに分けた。
サンプルＡ：ｐＨ２．５に維持。
サンプルＢ：ＮａＯＨを用いてｐＨをｐＨ３．６に調整した。
サンプルＣ：ＮａＯＨを用いてｐＨをｐＨ６．６に調整した。
サンプルＤ：ＮａＯＨを用いてｐＨをｐＨ７．２に調整した。
サンプルＥ：ＮａＯＨを用いてｐＨをｐＨ９．３に調整した。
【００４３】
全てのサンプルを光から保護し、室温で１２時間放置した。１２時間後、ｐＨ調整済みのサンプルのｐＨを、ＨＣｌを用いてｐＨ２．５に調整し戻し、全てのサンプルを光から保護し、室温で５時間（サンプルＢ１、Ｃ１、Ｄ１、Ｅ１）又は４８時間（サンプルＢ２、Ｃ２、Ｄ２、Ｅ２）放置した。次いで、全てのサンプルをＨＰＬＣ及びＵＶ検出器により２２５ｎｍで分析した。
【００４４】
表１は、異なるフェノルドパムサンプルを用いて行ったＨＰＬＣ分析により得られた結果を表す。サンプルＢ、Ｂ１、Ｂ２（ｐＨ３．６で１２時間、続いてｐＨ２．５に戻すｐＨ調整）及びサンプルＢ３（ｐＨ３．６で７２時間）は安定でフェノルドパムの単一ピークを伴い、１％未満のＲＲＴ−０．９不純物を示した。サンプルＣ、Ｃ１、及びＣ２（ｐＨ６．６で１２時間、続いてｐＨ２．５に戻すｐＨ調整）は４％のＲＲＴ−０．９不純物を示し、サンプルＣ３（ｐＨ６．６で７２時間、ｐＨ２．５に戻すｐＨ調整なし）は１７．５％のＲＲＴ−０．９不純物を示し、これは１８％のフェノルドパムが分解されたことを示している。サンプルＤ、Ｄ１、及びＤ２（ｐＨ７．２で１２時間、続いてｐＨ２．５に戻すｐＨ調整）は１１．５％〜１５．８％のＲＲＴ−０．９不純物を示し、サンプルＤ３（ｐＨ調整なしでｐＨ７．２で７２時間）は４９．８％のＲＰＴ−０．９不純物を示し、これは５０％のフェノルドパムが分解されたことを示している。サンプルＥ、Ｅ１、及びＥ２（ｐＨ９．３で１２時間、続いてｐＨ２．５に戻すｐＨ調整）並びにサンプルＥ３（ｐＨ９．３で７２時間、ｐＨ２．５に戻すｐＨ調整なし）はフェノルドパムの微少ピーク（〜２％）を示し、これはほぼ全てのフェノルドパムが分解されたことを示している。
【００４５】
【表１】
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【００４６】
追加のフェノルドパムサンプル（サンプルＡ３〜Ｄ３）をｐＨ２．５に調整し戻さずに２．５、３．６、６．６、及び７．２のｐＨに維持し、７２時間後に２２５ｎｍのＨＰＬＣ及び質量分析（ＭＳ）により分析した。
【００４７】
結果：２．５及び３．６のｐＨのフェノルドパムサンプルは３日後に安定しており、ＭＳ分析を用いて単一のピークを示した（図１ａ、上の２つのグラフ）。しかしながら、ｐＨ６．６及び７．２のサンプルは、３日後にいくつかのピークの形成を示し（図１ａ、下の２つのグラフ）、これはｐＨ６．６及び７．２のフェノルドパム分子の変化を示している。
【００４８】
ｐＨ７．２で３日間貯蔵されたサンプルにおいて得られたフェノルドパム分解生成物の推定される構造は、図１ｂに示されるように質量分析により決定した。主な分解生成物は、７員環から６員環へのフェノルドパムの変換（１４ＭＳ単位の損失について説明する）とその水和である。
【００４９】
実施例２：
【表２】
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【００５０】
一実施形態では、本発明において使用される酸性調整剤は、典型的には１〜２％（ｗ／ｗ）の濃度で存在し、クエン酸、酒石酸、乳酸、マレイン酸、グリコール酸、コハク酸、フマル酸、リンゴ酸、プロピオン酸、安息香酸、ケイ皮酸を含み得るが、これらに限定されない。より好ましくは、クエン酸は、ｐＨ調整剤として選択され、ここでクエン酸対薬物の比は１：１〜１０：１の範囲である。酸性調整剤は、Ｅｖｏｎｉｋ社のＥｕｄｒａｇｉｔとして知られるポリ（メタクリル酸−コ−メチルメタクリレート）等のアクリル酸若しくはメタクリル酸ホモポリマー及びコポリマー等の線状若しくは架橋ポリマー、又はＣａｒｂｏｐｏｌとして知られる架橋メタクリル酸であり得る。他の酸性ポリマーは、スルホン酸、硫酸、ホスホン酸、又はリン酸側鎖を有するポリマーである。１０〜２０％（ｗ／ｗ）の濃度で本発明において使用される可溶化剤は、プロピレングリコール、トリエチレングリコール及びそれらのメチル又はエチル末端封鎖された液体ポリ（エチレングリコール）（ＰＥＧ）、Ｎ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、並びに軟膏、クリーム、又はゲル組成物に一般的に使用される他の溶媒を含み得るが、これらに限定されない。別の実施形態では、本発明において使用されるプロピレングリコール、ＰＥＧ、及びＤＭＳＯは、可溶化剤としてのみならず、皮膚用の浸透促進剤及び保湿剤としても作用し得る。
【００５１】
本発明の一実施形態では、軟膏に使用される半固体基剤は、吸収基剤、油性基剤、又は水洗性基剤を含み得るが、これらに限定されない。本発明の一実施形態における吸収基剤は、８６％（ｗ／ｗ）の白色ワセリン、８％（ｗ／ｗ）の白色ワックス、３％（ｗ／ｗ）のコレステロール、及び３％（ｗ／ｗ）のステアリルアルコールを含み得る。本発明の別の実施形態における油性基剤は、９５％（ｗ／ｗ）の白色ワセリン及び５％（ｗ／ｗ）の白色ワックスを含み得る。本発明の別の実施形態における水洗性基剤は、４０％〜６０％のＰＥＧ４００（ｗ／ｗ）及び４０％〜６０％のＰＥＧ４００（ｗ／ｗ）を含み得る。上記の異なる基剤を含む軟膏からのフェノルドパムの放出を３７℃で２４時間にわたって測定した。受容体区画を既知容量のリン酸ナトリウム緩衝液で満たし、オルトリン酸を用いて、これをｐＨ２．７５に調整した。図２は、明確な分子量カットオフを有する異なる軟膏からのゼラチン膜を通したフェノルドパムのインビトロ放出を示す。
【００５２】
本発明の一実施形態では、ＰＥＧ４００及びＰＥＧ４０００の割合は、水洗性基剤中でそれぞれ４０％〜６０％（ｗ／ｗ）で変動した。別の実施形態では、水洗性軟膏の組成物は、約４５％（ｗ／ｗ）、約５０％（ｗ／ｗ）、約５５％（ｗ／ｗ）、又は約６０％（ｗ／ｗ）のＰＥＧ４００と、約４５％（ｗ／ｗ）、約５０％（ｗ／ｗ）、約５５％（ｗ／ｗ）、又は約６０％（ｗ／ｗ）のＰＥＧ４０００と、を含有する。また、溶媒の割合は、ＰＥＧの割合に従って変化し、それ自体は可溶性形態又は分散形態のいずれかで薬物の送達を助ける。図３は、分散形態及び可溶性形態で存在する薬物の放出の間の比較を得るために、異なる割合のＰＥＧを含む水洗性軟膏からのゼラチン膜を通したフェノルドパムのインビトロ放出を示す。
【００５３】
本発明の好ましい実施形態では、薬物を無水ゲル基剤に組み込んだ。本発明における使用に適したゲル化剤は、２％〜２．５％（ｗ／ｗ）の濃度のＣａｒｂｏｐｏｌ（登録商標）を含み得るが、これらに限定されない。基剤中に可溶化剤を１０％〜２０％（ｗ／ｗ）で添加することで、薬物の可溶化が助けられ、皮膚浸透性も改善される。一実施形態では、ＤＭＳＯは、浸透促進剤としても作用する可溶化剤としても使用され得る。
【００５４】
別の実施形態では、グリセリンを９０％（ｗ／ｗ）の濃度で添加することで、ゲル化の促進が助けられ、保湿剤としても作用し、これは乾癬のような乾燥状態の場合に皮膚を保湿するのに役立つ。また、グリセリンを添加することで、中和剤の使用が避けられ、それ自体は最終組成物のｐＨを酸性範囲に維持する。
【００５５】
最終組成物の酸性ｐＨはフェノルドパムの溶解度を改善する。また、フェノルドパムは酸化に対して非常に敏感であるので、抗酸化剤の存在がフェノルドパムの安定性を改善する。本発明において使用される抗酸化剤は、０．０５％〜０．２％（ｗ／ｗ）の濃度で、ブチル化ヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）；ブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）；アスコルビン酸、エリソルビン酸、アスコルビン酸ナトリウム等のアスコルビン酸誘導体；チオグリセロール等のチオール誘導体；システイン；アセチルシステイン；シスチン；ジチオエリスリトール；ジチオトレイトール；グルタチオン；トコフェロール；並びに硫酸ナトリウム、亜硫酸水素ナトリウム、アセトン亜硫酸水素ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、亜硫酸ナトリウム、ホルムアルデヒドスルホキシル酸ナトリウム、及びチオ硫酸ナトリウム等の亜硫酸塩を含み得るが、これらに限定されない。抗酸化剤の有無にかかわらず、無水ゲルからのフェノルドパムの放出は、オルトリン酸を用いてｐＨ２．７５に調整した既知容量のリン酸ナトリウム緩衝液の受容体媒体を用いて３７℃で２４時間かけて行った。図４は、無水ゲルからのメシル酸フェノルドパムの放出を示す。４８時間にわたる上記の放出媒体中の水洗性軟膏と無水ゲルとの間の比較放出を図５に示し、放出動態を表３に示す。
【００５６】
【表３】
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【００５７】
「Ｑｔ」は、時間「ｔ」で放出された薬物の量であり、「Ｑ０」は、薬物の初期量であり、「Ｑ∞」は、剤形が使い果たされたときに溶解した薬物の総量である。「Ｋ０」、「Ｋ１」、「ＫＨ」、及び「Ｋｋ」は、ゼロ次式、一次式、Ｈｉｇｕｃｈｉ式、及びＫｏｒｓｍｅｙｅｒ−Ｐｅｐｐａｓ式についての放出速度定数である。水洗性軟膏及び無水ゲルについてインビトロ放出試験を行った。動態プロファイリングは、ＷＢ４５／５５とＡＧＢＨＴの両方からのＦＤ放出がＫｏｒｓｍｅｙｅｒ−Ｐｅｐｐａｓモデルにより良好に適合することを示した。
【００５８】
本発明の更なる実施形態では、組成物は、該組成物の劣化を防ぐことによって更なる安定性を提供するために保存剤を含み得る。適切な保存剤は、ベンジルアルコール（１％〜２％）、クロロクレゾール（０．１％）、ヒドロキシ安息香酸エステル（０．０５％〜０．４％）、安息香酸（５％）等を含み得るが、これらに限定されない。
【００５９】
本発明の他の実施形態では、組成物に使用される浸透促進剤は、ポリオール、アルコール、脂肪アルコール、脂肪酸、脂肪酸エステル、アニオン性界面活性剤、カチオン性界面活性剤、両性界面活性剤、非イオン性界面活性剤等を含み得るが、これらに限定されず、１０％〜２０％（ｗ／ｗ）の濃度で使用される。
【００６０】
水洗性軟膏及び無水ゲルの組成物を、３７℃、２℃〜８℃、及びＲＴの異なる条件で安定性試験に供した。
【００６１】
一定期間にわたって放出された薬物の量を、３ヶ月にわたり一定の間隔で初期プロファイルと比較する。表４は、３ヶ月までの期間にわたり組成物を異なる安定条件に曝露した後の２４時間の期間中にフェノルドパム組成物から放出された累積薬物量（％）を示す。安定期間中に所定の間隔で採取した異なるサンプルからの薬物の放出プロファイルは、初期プロファイルと比較して放出量に関して同様であった。
【００６２】
【表４】
2019526636.tif 000006
【００６３】
フェノルドパム組成物を安定性試験のために様々な条件（２℃〜８℃、３７℃、及びＲＴ）で貯蔵した。各サンプルを所定の時点で採取し、ＨＰＬＣにより分析した。上記の表は、０、１５、４５、及び９０日の異なる時点で、２℃〜８℃、ＲＴ、及び３７℃で貯蔵された軟膏組成物（ＷＢ４５／５５）から２４時間で回収されたフェノルドパムの累積パーセント；並びに２℃から８℃、ＲＴ、及び３７℃で貯蔵された無水ゲル組成物（ＡＧＢＨＴ）から２４時間で回収されたフェノルドパムの累積パーセントを示す。全てのデータは平均値±標準偏差（ｎ＝３）を表す。組成物からのフェノルドパムの放出は、６ヶ月の貯蔵後及び９ヶ月の貯蔵後に影響を受けなかった。
【００６４】
フェノルドパム組成物の展延性は、平行板法により評価した。手短に言えば、０．５ｇのそれぞれ最適化された軟膏及びゲルサンプルをガラス板の中央に置き、別の板を第１の板の上に同心円状に配置した。組成物が展延した円の直径を初期直径として測定した。その後、５、１０、２０、５０、１００、１５０、及び２００ｇのオーダーの既知の重りを各重りの間に１分間隔で上部プレートに徐々に置いた。適用した重りの関数としての組成物の展延性を直径の変化に基づいて測定した。既知の重りを追加するたびに展延面積の増加を縦軸と横軸に沿って測定した。結果は、式［Ｓ＝πｒ２］に従って、適用した重りの関数としての展延面積に関して表し、式中、Ｓは、決定された重り（ｇ）の適用後の展延面積（ｃｍ２）であり、ｒは、各サンプルが達した平均半径（ｃｍ）である。展延性プロファイルは、ｘ軸上に追加された重りに対してｙ軸上に展延領域をプロットすることによって得た。全ての測定は３回行った。
【００６５】
局所用組成物の有効性はその展延性に依存し、従って、展延性は局所用組成物の開発中の有意なパラメータの一つと考えられている。展延性は、標的部位への正確な用量移動、基材上への適用の容易性、及びパッケージからの押出性の要因である。組成物の最適な粘稠度は、適切な用量が標的部位に送達されるようにすることを助ける。フェノルドパムの最適化された組成物、即ち軟膏及び無水ゲルの展延性を評価して、最適化された組成物の粘稠度及び適用の容易性を検証した。図６は、軟膏及び無水ゲルの展延性プロファイルを示す。軟膏の初期展延面積は２．４４ｃｍ２±０．１３ｃｍ２であったが、無水ゲルは１．５２ｃｍ２±０．０１４ｃｍ２の展延面積を示した。組成物に２００ｇの重りを追加した後、軟膏の場合には展延面積は１５．４９ｃｍ２±０．５５ｃｍ２であり、無水ゲルについては１２．６０ｃｍ２±０．０６ｃｍ２であった。
【００６６】
ＢＡＬＢ／ｃマウス並びにＦＩＴＣ充填軟膏及びゲル組成物を用いて、異なる皮膚層における軟膏及び無水ゲルの真皮分布を調べた。ＦＩＴＣ充填組成物を含有する皮膚サンプルを得て、ラベル付きクライオモールドに入れ、最適切断温度剤（ＯＣＴ）で覆った。サンプルを含有する型を、切片が切断されるまで−８０℃の冷凍庫に貯蔵した。−３０℃でＬｅｉｃａ（登録商標）クリオスタットを用いて厚さ５μｍの凍結切片を得て、ＦＩＴＣフィルターを備えた蛍光顕微鏡を用いて切片を観察した。
【００６７】
水洗性軟膏及び無水ゲルの真皮分布を、ＦＩＴＣ充填組成物、即ちＦＩＴＣ充填軟膏及びＦＩＴＣ充填無水ゲルを用いて試験した。皮膚サンプルを切片化し、３時間及び６時間の時点で蛍光について観察した。図７は、ＦＩＴＣ充填組成物の適用から３時間及び６時間後に採取した皮膚切片の蛍光画像（Ａ、Ｂ、Ｃ、及びＤ）並びにそれぞれの明視野画像（Ａ’、Ｂ’、Ｃ’、及びＤ’）を表す。ＦＩＴＣ充填軟膏の適用から３時間後に、角質層及び表皮層に蛍光が観察された。６時間の時点で、蛍光強度はＦＩＴＣ充填軟膏と共に表皮層において増加した。これらの蛍光画像は、軟膏が細胞間経路を介して受動的な浸透経路を辿ることを明らかにしている。水洗性軟膏中のＰＧのような化学的浸透促進剤の存在は、皮膚へのＦＤの受動的浸透を助ける。同じメカニズムが、拡散性、皮膚内での薬物の溶解度、及び賦形剤内での薬物の飽和度の増加を介した、フェノルドパム軟膏からのフェノルドパムの皮膚浸透にも適用され得る。ＦＩＴＣ充填無水ゲルの場合、蛍光は３時間では角質層に限定されたが、６時間では表皮／真皮層に蛍光が見られ得る。無水ゲルで治療された皮膚について得られた蛍光画像は、受動的浸透が無水ゲルの浸透の背景にある主要なメカニズムでもあることを示している。無水ゲルにおいて最も広く試験されている浸透促進剤であるＤＭＳＯの存在は、その浸透に役割を果たし得る。理論に縛られることなく、ＤＭＳＯは、角質層の細胞間脂質ドメイン及びいくつかの二層脂質の頭部基と相互作用して充填形状を歪めることを示している。ＤＭＳＯによる浸透促進のこのメカニズムは、フェノルドパム−無水ゲルからのフェノルドパムの皮膚浸透に影響を及ぼし得る。６時間でＦＩＴＣ充填軟膏と比較してＦＩＴＣ充填無水ゲルで観察されたより高い蛍光強度は、軟膏からよりも無水ゲルからＦＩＴＣが容易に移動するためであろう。
【００６８】
報告されている方法に従って、わずかに変更を加えて生体適合性試験を行った。マウスの背側を剃毛し、次いで３つの試験群、即ちフェノルドパム溶液、軟膏、及びゲル群に分けた。試験組成物の生体適合性の検査のために、フェノルドパム溶液、軟膏、及びゲルをそれぞれの動物群の剃毛した背部皮膚上に２ｃｍ２の区切られた領域に７日間連続して適用した。試験の終わりに、皮膚サンプルを投与領域から摘出し、１０％（ｗ／ｖ）緩衝ホルマリン溶液に固定した。ホルマリン固定サンプルを、Ｈ＆Ｅ染色を用いて皮膚の形態変化について観察した。
【００６９】
本発明の組成物の生体適合性は病理組織学的分析により評価した。健康なマウスに７日間連続してフェノルドパム溶液、軟膏、及び無水ゲルを適用した後、皮膚サンプルを採取し、Ｈ＆Ｅ染色のために処理した。組織学的分析は、図８に示されるように、正常な皮膚と比較して、フェノルドパム治療群の皮膚サンプルにおいて明らかな形態学的変化を示さない。表皮及び真皮の正常な組織像は、試験組成物に曝露した後、紅斑及び腫脹のような皮膚刺激の視覚的徴候のないフェノルドパム組成物治療群において見られ得る。この試験は、開発された組成物が生体適合性であり、局所適用に適していることを示している。
【００７０】
真皮組織中のフェノルドパムの濃度を、マウスへの単回局所適用後に分析した。フェノルドパム（１０ｍｇ／ｍＬ）及びベナゼプリル原液（１ｍｇ／ｍＬ）を０．０５％（ｖ／ｖ）ギ酸中で調製した。検量線の作成のために、標準液を０．０５％（ｖ／ｖ）ギ酸中で作業濃度１００００、８０００、４０００、２０００、及び１０００μｇ／ｍＬに希釈した。１０ｇのアスコルビン酸を１００ｍＬのミリポア水に溶解することによって１０％アスコルビン酸の溶液を調製した。
【００７１】
真皮組織中のフェノルドパムの濃度を決定するために、ＢＡＬＢ／ｃマウスの背側を剃毛した；背側の皮膚を分離し、使用するまで−２０℃で貯蔵した。試験中、皮膚をミリポア水で再水和し、次いでミリポア水と組織ホモジナイザーを用いて調製した０．０５％（ｖ／ｖ）ギ酸中で３０００ＲＰＭにて５分間ホモジナイズした。ホモジネートを１３，０００ＲＰＭにて４℃で１５分間遠心分離し、得られた上清を検量線の作成のために回収した。
【００７２】
皮膚ホモジネート中のフェノルドパムの検量のために、２０μＬの作業溶液を１８０μＬの分離された皮膚ホモジネートに添加して、１０００、８００、４００、２００、及び１００μｇ／ｍＬの濃度を有する検量線用標準試料を作製した。全てのサンプルを、新たに調製した１０％アスコルビン酸溶液と混合して、最終濃度０．５％（ｗ／ｖ）のアスコルビン酸を得た。各サンプルに、１００μｇ／ｍＬに相当する内部標準（ベナゼプリル）をスパイクした。上記混合物を４０μＬの２．５％（ｖ／ｖ）水酸化アンモニウムと混合し、サンプルを２０秒間ボルテックスした。サンプルに酢酸エチル（１．０ｍＬ）を添加し、次いでサンプルを室温で５分間ボルテックスした。サンプルを５０００ＲＰＭにて４℃で１０分間遠心分離した。上清の０．５ｍＬアリコートを室温で真空乾燥した。残りの残渣を１００μＬの移動相中で再構成した。混合物を１０秒間ボルテックスし、次いで１００００ＲＰＭにて４℃で１５分間遠心分離した。得られた上清を、２２５ｎｍの波長でアセトニトリル：０．０５％（ｖ／ｖ）ギ酸（４０：６０、％（ｖ／ｖ））によりＨＰＬＣを用いて分析した。
【００７３】
インビボ皮膚沈着：ＢＡＬＢ／ｃマウスを、時点（６時間及び１８時間）ごとに、フェノルドパム溶液群、軟膏群、及び無水ゲル群（１群あたり５匹の動物を伴う）を含む３つの異なる群に分類した。マウスの背部皮膚を剃毛し、試験のために１ｃｍ２の面積を選択した。フェノルドパム組成物（１％（ｗ／ｗ）水洗性軟膏（１００ｍｇ）、１％（ｗ／ｗ）無水ゲル（１００ｍｇ）、及びｐＨ２．７５リン酸緩衝液（１００μＬ）中の１０ｍｇ／ｍＬ溶液（１０００μｇのフェノルドパムに相当））を、それぞれの群の選択された領域に適用した。治療した皮膚を採取し、次いで綿で拭き、分析するまで−２０℃で貯蔵した。検量線用サンプルについて記載したように皮膚サンプルをホモジナイズし、ホモジネートを採取した。それらを内部標準でスパイクし、上記と同じ手順により抽出し、ＨＰＬＣにより分析した。
【００７４】
図９は、フェノルドパム組成物の局所適用から６時間及び１８時間後のフェノルドパムのインビボ皮膚沈着を示す。溶液組成物は、両方の時点で軟膏組成物と無水ゲル組成物の両方よりも比較的少ないフェノルドパムの沈着を示す。軟膏組成物は、６時間で２１４．５３μｇ／ｃｍ２±６６．０６μｇ／ｃｍ２及び１８時間で３７６．７９μｇ／ｃｍ２±２９．６５μｇ／ｃｍ２の皮膚沈着を示し、無水ゲル組成物は、６時間で３８３．２８μｇ／ｃｍ２±６５．６６μｇ／ｃｍ２及び１８時間で４４２．２９μｇ／ｃｍ２±４４．１２μｇ／ｃｍ２を示す。軟膏組成物中のＰＧ及び無水ゲル組成物中のＤＭＳＯのような浸透促進剤の存在は、純粋な薬液と比較して皮膚沈着を有意に増加させる。軟膏基剤と比較してゲル基剤からの薬物のより迅速な移動は、６時間（ｐ＜０．０１）及び１８時間（ｐ＜０．０５）での軟膏と比較してゲルのより高い皮膚沈着の背景にある理由であり得る。１８時間で、軟膏及び無水ゲルは、約３８．３２％及び４４．２２％の皮膚沈着を示し、この試験は、異なる層の皮膚におけるフェノルドパムの局在化を示している。
【００７５】
フェノルドパム組成物の光毒性試験も同様に行った。ＢＡＬＢ／ｃマウスを、照射（１回目の照射及び２回目の照射）ごとに、紫外線Ａ光（「ＵＶ−Ａ」）のみ、フェノルドパム溶液＋ＵＶ−Ａ、軟膏＋ＵＶ−Ａ、及びフェノルドパム無水ゲル＋ＵＶ−Ａを含む４つの異なる群（１群あたり４匹の動物を伴う）に分けた。この群の各動物は、剃毛した背部皮膚と左耳に対してそれぞれの組成物１００ｍｇで治療した。適用から３０分後、マウスの背部皮膚からケージの上部に逆さまに配置されたランプのガラスカバーまで１５ｃｍの距離で、Ｐｈｉｌｉｐｓ（登録商標）ＵＶＡ  ９Ｗ／１０ランプ（発光範囲３１５〜４００ｎｍ；ピーク３６５ｎｍ）を用いて動物をＵＶ−Ａ照射に１００分間曝露した。同様の用量を皮膚に適用し、２回照射の処置動物については、１回目の照射処置後６日目にＵＶ−Ａに曝露した。耳肥厚はノギスを用いて測定した。１回目の照射の効果を評価するために６日目と２回目の照射の効果を評価するために１２日目に紅斑及び浮腫の徴候を視覚的に観察した。
【００７６】
紅斑又は浮腫を含む皮膚刺激の視覚的徴候は、フェノルドパム治療動物へのＵＶ−Ａの１回目の照射及び２回目の照射後に観察されなかった。図１０は、ＵＶ−Ａ曝露による１回目の照射後及び２回目の照射後の耳肥厚の測定値を示す。１回目と２回目の照射では、全ての群で耳肥厚に有意差は観察されず、これは、開発された組成物が皮膚科学的用途に安全であることを示している。
【００７７】
実施例３：クリーム
【００７８】
本発明のクリームは、皮膚に適用することができる油中水型又は水中油型の半固体エマルジョン中の外用製剤である。油中水型エマルジョンの形態の疎水性製剤は、「油性クリーム」と呼ばれることがある。クリームは通常、油相成分と水相成分の両方を混合することにより調製する。これらの相のいずれも、各成分及び２相内でのフェノルドパムの溶解度に応じてフェノルドパムを含有することができる。クリームでは、微生物の増殖を防ぐために、十分な量の保存剤を反復投与用容器に充填された製剤に添加することができる。
【００７９】
【表５】
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【００８０】
本発明の別の態様では、フェノルドパム局所用クリームは以下の手順により調製することができる。クリームは、水相と油相の両方を含む水中油型エマルジョンベースの製剤である。油相の成分は、磁器皿において絶えず撹拌しながら溶融することによって一緒に混合される。水相の成分を一緒に混合し、油相とほぼ同じ温度に温める。絶えず撹拌しながら水相を油相に一滴ずつ添加する。混合物を室温に冷却した後、保存剤であるプロピルパラベンとメチルパラベンを添加する。クエン酸は、貯蔵中又は皮膚への適用後のいずれかにｐＨ＞４でフェノルドパムが分解するのを防ぐために、組成物に酸性ｐＨを提供する。抗酸化保存剤は、薬物を酸化から保護するために添加される。上記の実施例は、本発明の様式で調製及び使用される好ましい局所用クリームを例示するが、これを限定することを意図しない。
【００８１】
実施例４：懸濁液
【００８２】
別の実施形態では、組成物は懸濁液である。懸濁液は、適切な賦形剤中に微細かつ均一に懸濁されているフェノルドパムの液体製剤である。懸濁液は、懸濁化剤又は他の適切な医薬品添加剤及び精製水又は油を固体活性物質に添加することにより調製する。必要な保存剤、安定剤等を添加してもよい。劣化を避けるために、懸濁液は使用直前に調製し、均一に混合する。本発明の別の実施形態では、フェノルドパム局所用懸濁液１ｍＬは、精製水、プロピレングリコール、ジエタノールアミン、ポリエチレングリコール４００、ヒドロキシエチルセルロース、メチルパラベン、プロピルパラベン、キサンタンガム、クエン酸、及びメタ重亜硫酸ナトリウムからなる賦形剤中に１％〜１０％の薬物を含有する。
【００８３】
【表６】
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【００８４】
本発明の別の実施形態では、フェノルドパム局所用懸濁液は以下の手順で調製することができる。フェノルドパムは湿潤剤を含有する賦形剤の助けを借りて湿式粉砕する。賦形剤に同じく比例して、他の成分を懸濁し混合する。両方の相を目盛り付き容器中で混合し懸濁液の最終容量を調整する。この組成物は、薬物がより高い濃度で必要とされる用途の場合に有用であり得る。上記の実施例は、本発明の様式で調製及び使用される好ましい局所用懸濁液を例示するが、これを限定することを意図しない。
【００８５】
実施例５：フォーム及び軟膏
【００８６】
更に別の実施形態では、フォームを調製することができる。この型枠は、クリーム及び軟膏に代わる、革新的で適用し易い最新の代替品を提供する。フォーム組成物の有意な利点は、それが広い皮膚面積に容易に展延し、適用後に脂肪性又は油性の膜を皮膚に残さず、適用中及び適用後に脂肪性の感触を与えないことである。
【００８７】
一実施形態では、フェノルドパムフォームは、セチルアルコール（１％〜５％（ｗ／ｗ））、クエン酸（１％〜１０％（ｗ／ｗ））、エタノール（６０％〜６５％）、ポリソルベート８０（１％〜２％（ｗ／ｗ））、クエン酸カリウム（１％〜５％（ｗ／ｗ））、プロピレングリコール（１０％〜１５％（ｗ／ｗ））、メタ重亜硫酸ナトリウム（０．１０％（ｗ／ｗ））、メチルパラベン（０．１０％（ｗ／ｗ））、プロピルパラベン（０．０５％（ｗ／ｗ））、精製水（３０％〜４０％（ｗ／ｗ））、及びステアリルアルコール（１０％〜１５％（ｗ／ｗ））からなる水性エマルジョンフォーム賦形剤中にフェノルドパム０．１〜１０ｍｇ／ｇを含有することができ、炭化水素（プロパン／ブタン）噴射剤で加圧される。
【００８８】
本発明の別の実施形態では、フェノルドパムフォームは以下の手順で調製することができる。フェノルドパムはエタノール及びプロピレングリコールを含有する賦形剤に溶解する。セチルアルコールはフォーム中で皮膚軟化剤として使用する。他の成分は混合し、水に溶解する。この調製物を適切な噴射剤で加圧し、アルミニウム缶から施与する。上記の実施例は、本発明の様式で調製及び使用される好ましい局所用フォームを例示するが、これを限定することを意図しない。
【００８９】
別の非限定的な実施形態では、フェノルドパムフォームは以下の成分を含有する：スーパー白色ワセリン−６６．１％、ＰＰＧ−１５ステアリルエーテル−８％、鉱油−１０．９％、ステアレス−２−４％、ＢＨＡ−１％、プロピレングリコール−１０％、及びメシル酸フェノルドパム−０．１％。
【００９０】
別の非限定的な実施形態では、フェノルドパム軟膏は以下の成分を含有する：白色ワセリン−７９％、パラフィン−３％、白蜜ロウ−７％、鉱油ＵＳＰ−１％、プロピレングリコール−１０％、及びメシル酸フェノルドパム−０．１％。
【００９１】
実施例６：ローション
【００９２】
本発明の別の実施形態では、ローションを調製することができる。本発明によれば、ローションは、フェノルドパムを水性賦形剤に溶解、乳化、又は微細分散させることができる外部液体である。本発明の一実施形態では、ローションは通常、医薬品添加剤と共に精製水に薬物を溶解、懸濁、又は乳化させ、組成物を全体として均質にすることにより調製する。本発明のローションは、必要ならば、保存剤及び抗酸化剤を含み得る。ローションは通常、溶液よりも濃いと考えられ、水又はアルコールと同様に油を含有している可能性が高い。懸濁性ローションは、時間と共に部分に分かれるので、使用前に懸濁液に振盪させる必要がある。
【００９３】
一実施形態では、フェノルドパムローションは、エタノール（２０％〜３０％（ｗ／ｖ））、プロピレングリコール（１０％〜１５％（ｗ／ｖ））、クエン酸ナトリウム（１％〜２％（ｗ／ｖ））、クエン酸（１％〜１０％（ｗ／ｖ））、グリセロール（２０％〜３０％（ｗ／ｖ））、及び精製水（４０％〜５０％ｗ／ｖ）を含有する賦形剤中に０．０１％〜１％（ｗ／ｖ）のフェノルドパムを含有することができる。別の実施形態では、フェノルドパムはプロピレングリコールに溶解されており、他の成分は精製水中で混合されており、両方の溶液は一緒に混合されている。上記の例は、本発明の様式で調製及び使用される好ましい局所用ローションを例示するが、これを限定することを意図しない。
【００９４】
実施例７：パッチ
【００９５】
本発明の別の実施形態では、フェノルドパムの経皮パッチは、皮膚を通して血流内に特定用量の薬物を送達するために皮膚上に置かれる薬用接着パッチである。別の態様では、これはＴ細胞媒介性の皮膚疾患の治療に役立ち得る。別の実施形態では、パッチはマトリックスパッチ又はリザーバパッチであり得る。マトリックスパッチは、剥離ライナー、薬物／接着剤層、及びバッキング層を含み、リザーバパッチは、剥離ライナー、接着剤層、速度制御膜、薬物リザーバ、及びバッキング層を含む。
【００９６】
フェノルドパムのマトリックスパッチのための方法：バッキング膜を２％（ｗ／ｖ）ポリビニルアルコール溶液を注ぐことによって流延させ、続いて６０℃で６時間乾燥させる。薬物リザーバは、クロロホルム：メタノール（１：１）混合物にエチルセルロースを溶解することにより調製する。可塑剤として１５％フタル酸ジブチル（乾燥ポリマー組成物の（ｗ／ｗ））を使用する。プロピレングリコールに溶解した１％〜５％（ｗ／ｗ）のテルペン（浸透促進剤）と共にフェノルドパム（１％〜１０％（ｗ／ｗ））を、磁気撹拌機でゆっくり撹拌しながら均質な分散液に添加する。接着剤溶液を薬物−増強剤混合物に添加し、電動撹拌機を用いて混合物を適切に混合して均質な混合物を調製する。溶液が透明になるまで上記混合物を数分間超音波処理する。均一な分散液をＰＶＡバッキング膜上に流延させ、次いで室温で乾燥させる。乾燥パッチを積層し、次いで必要な面積に切断し、更なる評価まで４０℃／７５％ＲＨでポリエチレンバッグに貯蔵する。
【００９７】
本発明によれば、本明細書に記載の組成物は、優れた安定性を有し、皮膚によく接着し、優れた浸透能力を有する。本発明に記載の組成物は、クリーム、ゲル、パッチ、フォーム、ローション、懸濁液、又は軟膏の形態で皮膚疾患の治療に適用することができる。上記の実施例は、本発明の様式で調製及び使用される好ましい局所用組成物を例示するが、これを限定することを意図しない。
【００９８】
実施例８：フェノルドパムのカプセル化
【００９９】
本発明の一態様では、フェノルドパムは、薬学的に許容される担体及び組成物成分を使用して微粒子にカプセル化することができる。
【０１００】
フェノルドパムのカプセル化方法
フェノルドパムカプセル化微粒子は、エマルジョン溶媒拡散法により調製する。１：１、１：２、１：３、及び１：４の薬物対ポリマー（エチルセルロース）の異なる比を使用して、放出に及ぼすポリマー／薬物比の効果及びミクロスフェアの物理的特性を調査する。エチルセルロースをジクロロメタンに溶解し、次いでフェノルドパムを３５℃での超音波処理により溶液に添加し、ＰＶＡを蒸留水に６０℃で１０分間溶解することにより外相を調製する。内相をＰＶＡ溶液に徐々に添加する。得られた混合物を磁気撹拌機により２５℃で１時間撹拌し、濾過して微粒子を分離する。微粒子を４０℃の熱風オーブンで１２時間乾燥させ、秤量して収率を決定する。これらのフェノルドパム微粒子を、局所適用のためにゲル基剤に更に組み込む。この実施例は、フェノルドパム微粒子の調製のための遅延ポリマー及び乳化剤としてのエチルセルロース及びＰＶＡの使用を例示するが、これを限定することを意図しない。
【０１０１】
別の実施形態では、フェノルドパム微粒子は以下のように調製する：フェノルドパムは、生分解性ポリマー、ポリ（ラクチド−グリコリド）５０：５０若しくは７５：２５の比、又はポリ（セバシン酸無水物）のジクロロメタン溶液に分散させる。溶液を貧溶媒ヘプタンに添加し、沈殿した粒子を回収して無水軟膏又はゲルに更に添加する。微粒子中のフェノルドパムの充填量は、ポリマー担体当たり５〜５０％（ｗ／ｗ）である。
【０１０２】
カプセル化されたフェノルドパムは、組成物が罹患した皮膚上に留まる期間中に放出されるべきである。放出プロファイルは、患者にとって有毒である、血中レベルに達することができる量よりも低い治療用量を皮膚上に放出するように調整されるべきである。放出時間は１２時間から２４時間の範囲であるべきであり、これは２つの適用の間の時間である；しかしながら、より長時間の放出組成物も長時間作用型パッチに有用である。
【０１０３】
別の実施形態では、水添植物油を溶融し（〜５５℃）、１％（ｗ／ｗ）のフェノルドパム粉末を添加し、次いで成分をよく混合する。混合物に、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）８０等の界面活性剤を添加する。油を貧溶媒に滴下添加し、それを急速に均質化して微粒子を形成する。水溶性薬物カプセル化のための一般的な方法を適用する。
【０１０４】
別の実施形態では、カプセル化されたフェノルドパム粒子を、ｐＨ制御軟膏又はゲル基剤に添加し、皮膚疾患を治療するために使用する。
【０１０５】
実施例９：０．０１％及び０．１％（ｗ／ｗ）のフェノルドパムの組成物及び他の薬物との併用
【０１０６】
この実施例では、２５０グラムのフェノルドパム局所用組成物を調製した。
【０１０７】
【表７】
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【０１０８】
【表８】
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【０１０９】
【表９】
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【０１１０】
この組成物は、メシル酸フェノルドパムをプロピレングリコールに溶解又は分散させ、次いで配合基剤中で混合することにより調製した。組成物は、薬物含有量の均一性を伴って均質であり、滑らかであり、且つ皮膚に適用し易かった。
【０１１１】
実施例１０
本発明の一実施形態では、プロピレングリコールはフェノルドパムの可溶化剤として使用する。フェノルドパムは親水性溶媒であるプロピレングリコールによって可溶化する。一実施形態では、可溶化剤としてプロピレングリコールを含むフェノルドパムの局所用組成物は、無水組成物、ＰＥＧ系ゲル、又は軟膏若しくは軟膏フォームであり得る。
【０１１２】
【数１】
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【０１１３】
【数２】
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【０１１４】
【数３】
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【０１１５】
他の有効薬剤との併用
皮膚疾患を治療するために一般に使用される局所用組成物との併用組成物は、調製中に追加の有効薬剤をフェノルドパムに溶解若しくは分散させるか、又は調製されたフェノルドパム局所用組成物に追加の有効薬剤を混合することにより調製する。コルチコステロイド、トリアミルアミン、ビタミンＤ、ビタミンＡ、ビタミンＤ類似体、タザロテン、タクロリムス、ラパマイシン、ピウメロリムス、及びシクロスポリンなどの有効薬剤は、調製中に組成物に０．００５％〜０．１％（ｗ／ｗ）の量で添加する。インドメタシン、イブプロフェン、及びアスピリンなどの抗炎症剤は、０．１％〜３％（ｗ／ｗ）の量で添加する；サリチル酸及び安息香酸は、０．１％〜約３％（ｗ／ｗ）の量で添加する。コールタールは、組成物を形成するために１％〜５％の量で基剤中に混合する。例えば、２つより多い薬剤の組合せ物も調製することができる：０．０１％〜０．１％（ｗ／ｗ）のデキサメタゾンとビタミンＤ。スルホンアミドナトリウム、バシトラシン、エリスロマイシン、スルファジアジン銀、ポリミキシン、及びアムホテリシンＢ等の抗菌剤を添加することができる。ＮＳＡＩＤ等の鎮痛剤並びにリドカイン、ブピバカイン、及びプロカインアミド等の局所麻酔剤を添加して疼痛を軽減することができる。上記のような有効薬剤を有する薬草抽出物は、調製中又はフェノルドパムを含有する軟膏を調製した後に組成物に添加する。
【０１１６】
アダリムマブ及び他のＴＮＦ−α阻害剤等の生物学的薬物はフェノルドパムと組み合わせて添加する。これらの種類の有効薬剤は非常に強力であるので、添加量はナノグラム単位である。これらの敏感薬剤は、軟膏に混合する前にプレ組成物中で安定化させるべきである。局所用組成物中に組み込まれる、フェノルドパムを含む上記の有効薬剤は、局所用組成物に添加する前に、何ら予備調製しないで混合するか、カプセル化するか、又は安定剤と混合する。
【０１１７】
追加の有効薬剤は、フェノルドパムと同じ剤形に、又は別の剤形に組み込んでもよい。一実施形態では、デキサメタゾンは、調製中に０．００１％〜０．１％の量で組成物に添加する。フェノルドパム軟膏及びゲルに配合することができる他のステロイドは、リン酸デキサメタゾン又はコハク酸デキサメタゾン、トリアムシノロン、ベクロメタゾン、及びそれらの誘導体を含む。
【０１１８】
実施例１０：使用目的
【０１１９】
乾癬治療のためのフェノルドパム局所用組成物（有効性試験）
乾癬の治療に及ぼす局所用組成物の効果を、２つの動物実験で試験した。両方の試験において、乾癬の典型的な特徴、即ち紅斑、鱗屑化、及び皮膚肥厚さを、６日間連続し期間にわたってＢＡＬＢ／ｃマウスの背部皮膚に５％（ｗ／ｗ）イミキモド（ＩＭＱ）クリームを適用することによって誘発させた。乾癬様症状を発症した動物を、フェノルドパム局所用組成物の有効性を試験するために使用した。フェノルドパム処理群では、動物に最初の２日間だけイミキモドを投与した。試験の３日目から、動物に次の４日間はイミキモドとフェノルドパムを与えた。
【０１２０】
最初の動物実験：
最初の動物試験で使用したマウスの異なる治療群は以下の通りであった：この試験におけるＳＨＡＭ群は、背側が剃毛された一切治療されていないマウスを表す；陰性対照群は、イミキモド５％（ＩＭＱ）によって誘発された典型的な乾癬モデルを表す；陽性対照群は、イミキモドにより乾癬を誘発させ、次いで市販の吉草酸ステロイドベタメタゾン（ＩＭＱ  ＢＭＶ）で治療したマウスを表す；治療群は、イミキモドにより乾癬を誘発させ、次いで溶液（ＩＭＱ  ＦＤ）、水洗性軟膏（ＩＭＱ  ＷＢ  ４５／５５）、又は無水ゲル（ＩＭＱ  ＡＧ  ＢＨＴ）組成物などの異なる組成のフェノルドパムを用いて１ｍｇ／ｃｍ２の局所用量のフェノルドパムで治療したマウスを表す。
【０１２１】
乾癬面積・重症度指数（ＰＡＳＩ）スコアを分析して、試験の一部として適切な対照を用いて本発明のフェノルドパム組成物の有効性を決定した。図１１は、試験中に決定した体重、紅斑、鱗屑化、及び皮膚肥厚さを含むＰＡＳＩスコアを示す。試験期間中の規則的な時点で０〜４の尺度で与えた採点を図１２に示している。典型的な乾癬状態を表す陰性対照群は、全てのパラメータに関して最も高いＰＡＳＩスコアを示した。陽性対照、フェノルドパム溶液、フェノルドパム軟膏、及びフェノルドパム無水ゲルを含む治療群は、陽性対照とほぼ同様に、治療期間にわたってＰＡＳＩスコアの低下を示した。ＰＡＳＩスコアに基づくと、フェノルドパム治療群から見える抗乾癬効果は、市販のステロイドで治療された陽性対照群に匹敵していた。
【０１２２】
有効性試験の一部として、病理組織学的試験を行って、異なる治療群を代表するマウスの皮膚の形態学的観察を試験した。試験の陰性対照群（イミキモド治療動物）は、Ｈ＆Ｅ染色時の典型的な乾癬の特徴である表皮肥厚、錯角化症、過角化症、及び真皮内浸潤を表す。治療群のマウスから採取した皮膚の同様の染色は、表皮の肥厚の低下、角質層の肥厚の低下、及び真皮内浸潤の数の減少を示した。病理組織画像を図１２に示す。フェノルドパム組成物による治療の効果は、吉草酸ベタメタゾンの効果に匹敵していた。
【０１２３】
ＩＭＱ誘発乾癬モデルは、ヒト乾癬病変に特徴的な生化学的及び病理組織学的特性を再現する。ＩＭＱクリームの局所適用は、治療された皮膚組織中のＩＬ−２３、ＴＮＦ−α、及びＩＬ−１７等のサイトカインのレベルを増加させた。選択されたインターロイキンは乾癬の典型的な炎症マーカーであるので、異なる群のマウスから得られた皮膚ホモジネートを、ＩＬ−１７、ＩＬ−２３、及びＴＮＦ−αレベルの定量化のためにＥＬＩＳＡを用いて分析した。ＳＨＡＭ（正常）群と比較して、ＩＭＱ群は乾癬性炎症の発症を反映するインターロイキンレベルの有意な上昇を示した（ｐ＜０．００１）。図１３に示すように、治療群はＩＭＱ群と比較してＩＬ−１７、ＩＬ−２３、及びＴＮＦ−αの有意な減少を示した（ｐ＜０．００１）。ＦＤ組成物の中で、水洗性軟膏及び無水ゲルが、純粋な薬液と比較してインターロイキンレベルのより高い減少を示した（ｐ＜０．０１）。水洗性軟膏と無水ゲルがインターロイキンレベルに及ぼす効果の間に有意差はない。ＩＭＱ群はＳＨＡＭ群と比較して５倍のＩＬ−１７レベルの上昇を示したが、市販のステロイド、フェノルドパム溶液、フェノルドパム軟膏、及びフェノルドパムゲルの群は、ＩＭＱ群と比較してＩＬ−１７レベルがそれぞれ２．７４、２．５５、８．６９、及び１１．５６倍の減少を示した（図１３Ａ）。ＩＭＱ群では、ＩＬＡＭ−２３濃度がＳＨＡＭ群と比較して２．３０倍増加し、市販のステロイド、フェノルドパム溶液、フェノルドパム軟膏、及びフェノルドパムゲル群では、ＩＭＱ群と比較してそれぞれ２．０２、１．１８、２．０５、及び２．６５倍の減少を示した（図１３Ｂ）。ＩＭＱ群では、ＳＨＡＭ群と比較して８．４２倍のＴＮＦ−αレベルの増加が観察され、市販のステロイド、フェノルドパム溶液、フェノルドパム軟膏、及びフェノルドパムゲルの群は、ＩＭＱ群と比較してＴＮＦ−αレベルがそれぞれ２．７５、３．１７、６．２７、及び５．８２倍の減少を示した（図１３Ｃ）。この試験は、乾癬のマウスモデルへのＷＢ４５／５５及びＡＧＢＨＴの局所適用が、ＩＭＱ群と比較して炎症誘発性サイトカインレベルに対して統計的に有意な阻害効果をもたらしたことを裏付けている。フェノルドパムの効果は、市販のステロイドによる参照局所治療と同じくらい効果的であった。
【０１２４】
第２の動物試験：
第２の動物試験は、異なる強度（フェノルドパム０．０１％、０．１％、及び１％）を有するフェノルドパムの追加の局所用組成物、並びにフェノルドパムの全身投与の効果を試験するために行った。第２の動物試験で使用したマウスの異なる群は以下の通りであった：試験におけるＳＨＡＭ群は、背側が剃毛された一切治療されていないマウスを表す；陰性対照群は、イミキモド５％（ＩＭＱ）によって誘発された典型的な乾癬モデルを表す；陽性対照群は、イミキモドにより乾癬を誘発させ、次いで市販の吉草酸ステロイドベタメタゾン（ＩＭＱ  ＢＭＶ）で治療したマウスを表す；治療群は、イミキモドにより乾癬を誘発させ、次いで局所用量のフェノルドパムの種々の組成物で治療したマウスを表す：水洗性基剤（ＩＭＱ＿ＷＢ４５／５５−０．１％、ＩＭＱ＿ＷＢ４５／５５−０．１％、ＩＭＱ＿ＷＢ４５／５５−１％、又はＩＭＱ＿ＷＢ４５／５５＿１％＿クエン酸なし）、又は油性軟膏組成物（ＩＭＱ＿ＯＢ０．０１％、ＩＭＱ＿ＯＢ０．１％、又はＩＭＱ＿ＯＢ０．０１％）。追加のマウス群には、腹腔内注射による全身性フェノルドパムを投与した（ＩＭＱ＿ＦＤ＿ＩＰ）。
【０１２５】
図１４は、異なる群の試験、即ち、ｓｈａｍ群、陰性対照群、陽性対照群、及び異なる濃度のフェノルドパム軟膏組成物で治療した治療群を表すマウスの画像を示す。フェノルドパム群には、異なる濃度の軟膏組成物を０．０２〜２ｍｇ／ｃｍ２（０．０２％〜２％に相当）の範囲の一日用量を投与した。Ｓｈａｍ群は正常な未治療の皮膚を示し、陰性対照群は典型的な乾癬の特徴（紅斑、鱗屑化、及び皮膚肥厚）（ＩＭＱ）を示し、吉草酸ベタメタゾン及びフェノルドパムの治療群（ＩＰ群を除く）は、陰性対照と比較して乾癬症状の寛解を示した。ＩＭＱ＿ＷＢ４５／５５＿０．０１％とＩＭＱ＿ＷＢ４５／５５＿０．１％は、鱗屑化と紅斑の減少を示したが、皮膚肥厚は両群で観察された。ＩＭＱ＿ＷＢ４５／５５＿１％は、陰性対照と比較して乾癬症状の完全な寛解を示したが、これは比較的高用量の薬物によるものと考えることができる。同様の結果が油性軟膏群でも観察され、ここでＩＭＱ＿ＯＢ＿０．０１％とＩＭＱ＿ＯＢ＿０．１％は皮膚肥厚を示し、ＩＭＱ＿ＯＢ＿１％は発赤、鱗屑化、及び皮膚肥厚の減少を示した。症状の寛解の緩やかな増加が、０．０１％〜０．１％の範囲のフェノルドパムの濃度に基づいて、両方の軟膏グループ（ＰＥＧベースの軟膏及び脂肪ベースの軟膏）で観察された。ＩＭＱ＿ＷＢ４５／５５＿１％＿クエン酸なしも１％軟膏群と同様の乾癬症状の軽減を示し、クエン酸の効果を排除した。ＩＭＱ＿ＦＤ＿ＩＰは乾癬症状に対してあまり効果を示さなかったが、これは乾癬のような皮膚科学的疾患に及ぼす薬物の局所的効果を裏付けている。
【０１２６】
軟膏は賦形剤として使用され、有効成分の完全な吸収をもたらし、それはまた、長期間にわたって湿った皮膚状態を維持するのに役立ち得る。これに加えて、軟膏中にプロピレングリコールが存在することで、皮膚のより深い層への薬物の浸透を助けることによって乾癬症状の寛解に役立ち得る。
【０１２７】
乾癬面積・重症度指数（ＰＡＳＩスコア）の分析は、試験の一部として適切な対照を用いて開発された組成物の有効性を決定するために行った。６日目に採点した紅斑、鱗屑化、及び皮膚肥厚の強度を図１５に示し、異なる群間で比較した。ＩＭＱ群は、ＩＭＱ治療の６日目に約３（重症）のスコアで紅斑、鱗屑化、及び肥厚を示し、これはＳｈａｍ群と比較してＩＭＱによって発症した炎症反応を示す。紅斑、鱗屑化、及び肥厚スコアの低下は、フェノルドパム軟膏群に関して６日目に観察された。両方の軟膏群に関して異なる用量のフェノルドパムの間にわずかな差が観察された。フェノルドパムの全身投与群（ＩＭＱ＿ＦＤ＿ＩＰ）と陰性対照（ＩＭＱ）との間に有意差は観察されなかった。これはフェノルドパムの全身投与が乾癬のような局所的皮膚状態の治療に効果的ではないことを示す。
【０１２８】
選択されたインターロイキンは乾癬の典型的な炎症マーカーであるので、異なる群のマウスから得られた皮膚ホモジネートを、ＩＬ−１７、ＩＬ−２３、ＴＮＦ−α、及びＩＬ−２２レベルの定量化のためにＥＬＩＳＡを用いて分析した。
【０１２９】
図１６に示されるように、ＩＭＱ群は、Ｓｈａｍと比較してＩＬ−１７レベルの有意な増加を示した（ｐ＜０．０００１）。ＩＭＱ＿ＯＢ＿０．０１％及びＩＭＱ＿ＦＤ＿ＩＰの場合を除き、陰性対照と比較して、全ての治療群においてＩＬ−１７レベルの低下が見られた。
【０１３０】
図１７に示されるように、ＩＭＱ群は、Ｓｈａｍと比較してＩＬ−２３レベルの有意な増加を示した（ｐ＜０．０１）。陰性対照と比較してＩＭＱ＿ＢＭＶ（ｐ＜０．０１）、ＩＭＱ＿ＷＢ４５／５５＿１％（ｐ＜０．０５）、及びＩＭＱ＿ＷＢ４５／５５＿１％＿クエン酸なし（ｐ＜０．０１）群を含むいくつかの治療群においてＩＬ−２３レベルの低下が見られた。
【０１３１】
図１８に示されるように、ＩＭＱ群は、Ｓｈａｍと比較してＴＮＦ−αレベルの有意な増加を示した（ｐ＜０．０００１）。ＩＭＱ＿ＯＢ＿０．０１％群の場合を除き、全ての治療群においてＴＮＦ−αレベルの低下が見られた。フェノルドパムＩＰ群はまた、ＩＬ−１７及びＩＬ−２３レベルとは異なり、ＴＮＦ−αレベルの低下を示した。
【０１３２】
図１９に示されるように、ＩＭＱ群は、Ｓｈａｍと比較してＩＬ−２２レベルの有意な増加を示した（ｐ＜０．０５）。ＩＬ−２２レベルの統計的に有意な低下は、ＩＭＱ＿ＷＢ４５／５５＿０．０１％、ＩＭＱ＿ＯＢ＿０．０１％、及びＩＭＱ＿ＦＤ＿ＩＰ群を除き、フェノルドパム治療群において見られた。
【０１３３】
この試験は、異なる軟膏群の局所適用がフェノルドパムの濃度に応じて異なる効果を示すことを裏付けている。軟膏群の間では、インターロイキンレベルの倍数減少は、フェノルドパム濃度の増加と共に徐々に増加した。フェノルドパムのＩＰ群は、分析されたパラメータの中でＩＬ−１７、ＩＬ−２２、及びＩＬ−２３レベルの何ら有意な減少を示さなかった。表６は、異なるパラメータに関して異なる群間で観察された倍数差を示す。
【０１３４】
【表１０】
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【０１３５】
陰性対照（ＩＭＱ）群では、Ｓｈａｍと比較してＩＬ−１７レベル（１．６３倍）、ＩＬ−２３（１．５５倍）、ＴＮＦ−α（２．０８倍）、及びＩＬ−２２（１．３６倍）の統計的に有意な増加が観察された。治療群の中で、陽性対照群は、インターロイキンレベル、即ちＩＬ−１７レベル（１．４３倍）、ＩＬ−２３（１．５７倍）、ＴＮＦ−α（２．２１倍）、及びＩＬ−２２（１．５５倍）の低下を示した。軟膏群の中で、インターロイキンレベルの倍数減少は、フェノルドパム濃度の増加と共に徐々に増加した。フェノルドパムＩＰ群は、全てのフェノルドパム治療群の中でサイトカインレベルの減少がより少なかった。
【０１３６】
有効性試験の一部として、異なる群を代表するマウスの皮膚の形態学的観察を試験するために病理組織学試験を行った。この試験の陰性対照は、Ｈ＆Ｅ染色による過角化症、錯角化症、表皮肥厚、表皮突起、及び目立たない慢性炎症性浸潤の典型的な乾癬の特徴を表す。参照化合物ＢＭＶによる局所治療は、上記のパラメータの全てを改善した（図２０Ｃ）。ＷＢ４５／５５（フェノルドパム水洗性軟膏）及びＯＢ（フェノルドパム油性軟膏）による治療は、典型的な乾癬の特徴の濃度依存的な寛解を示した。両方の軟膏群の中で、０．０１％（ｗ／ｗ）の用量は、表皮肥厚及び慢性炎症性浸潤の特徴にあまり効果を示さなかった。３つの異なる用量のフェノルドパム水洗性軟膏（ＷＢ＿４５／５５）（即ちＷＢ４５／５５＿０．０１％（図２０Ｄ）、ＷＢ４５／５５＿０．１％（図２０Ｅ）、及びＷＢ４５／５５＿１％（図２０Ｆ））の中で、最も高い用量（１％（ｗ／ｗ））は、他の２つのより低い用量と比較して、両方の軟膏群において乾癬の特徴の寛解を示した。異なる用量の油性軟膏（即ち、ＯＢ＿０．０１％（図２０Ｇ）、ＯＢ＿０．１％（図２０Ｈ）、及びＯＢ＿１％（図２０Ｉ）の間）で同様の結果が観察され、最も高い用量は、他の２つの用量と比較して症状の寛解を示した。ＷＢ４５／５５＿１％軟膏とＯＢ＿１％軟膏との間に有意差は見られなかった。クエン酸を含まないフェノルドパム水洗性軟膏（ＷＢ４５／５５％＿クエン酸なし）も１％の水洗性軟膏及び油性軟膏と同様に同等の効果を示した（図２０Ｊ）。この結果は、フェノルドパム油性軟膏と水洗性軟膏の両方の場合において賦形剤中に存在するクエン酸の効果を排除した。フェノルドパムＩＰ群（図２０Ｋ）は乾癬の特徴に対していかなる効果も示さず、これはフェノルドパムの全身投与と比較してフェノルドパムの局所用賦形剤の局所的かつ標的化された効果を裏付けていた。
【０１３７】
本発明の局所用組成物は、フェノルドパム等のＤ１受容体結合剤に反応する皮膚疾患を治療するために使用される。メラノーマ、扁平上皮がん、及び基底細胞がんを含む特定の皮膚がんはフェノルドパムに反応し、皮膚がんの治療のためのＦＤＡ承認済みの５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）とイミキモドとの併用で単剤として皮膚がんの治療に使用できる。
【図１ａ】
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【図１ａ−２】
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【図１ｂ】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８Ａ】
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【図８Ｂ】
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【図８Ｃ】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２Ａ】
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【図１２Ｂ】
2019526636.tif 000032
【図１２Ｃ】
2019526636.tif 000033
【図１２Ｄ】
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【図１２Ｅ】
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【図１２Ｆ】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【国際調査報告】
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