(57)【要約】  イヌ科動物用の局所適用（スポットオン）するための単回投与獣医学的組成物であって、（ａ）８．１８〜１０．００％のイミダクロプリド、（ｂ）２．８６〜３．５０％のモキシデクチン、（ｃ）８．１８〜１０．００％のプラジカンテル、並びに（ｄ）６５．４５〜８０．００％の非プロトン性溶媒であって、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（ＤＭＡＣ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）及びこれらの混合物から選択される、非プロトン性溶媒を、獣医学の観点から許容し得る賦形剤と共に含むことにより特徴付けられる組成物であって、上記百分率は該組成物の総重量に対するものである、組成物。イヌ科動物における外部及び内部の寄生虫病を治療、制御及び予防するための単回投与獣医学的組成物を調製するための、有効量の、（ａ）イミダクロプリド、（ｂ）モキシデクチン；（ｃ）プラジカンテル；並びに（ｄ）ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（ＤＭＡＣ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）及びこれらの混合物から選択される非プロトン性溶媒の、獣医学的に許容し得る賦形剤と共での使用であって、該獣医学的組成物が、局所的に（スポットオン）投与されるように適合されている、使用。【特許請求の範囲】
【請求項１】
イヌ科動物用の局所適用（スポットオン）するための単回投与獣医学的組成物であって、
（ａ）８．１８〜１０．００％のイミダクロプリド、
（ｂ）２．８６〜３．５０％のモキシデクチン、
（ｃ）８．１８〜１０．００％のプラジカンテル、並びに
（ｄ）６５．４５〜８０．００％の非プロトン性溶媒であって、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（ＤＭＡＣ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）及びこれらの混合物から選択される、非プロトン性溶媒
を、獣医学の観点から許容し得る賦形剤と共に含むことにより特徴付けられる組成物であって、上記百分率は該組成物の総重量に対するものである、組成物。
【請求項２】
前記賦形剤が、ブチルヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、ブチルヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、チオジプロピオン酸、没食子酸プロピル及びベンジルアルコールであることにより特徴付けられる、請求項２記載の組成物。
【請求項３】
ａ）８．１８〜１０．００％のイミダクロプリド；
（ｂ）２．８６ｇ〜３．５０％のモキシデクチン；
（ｃ）８．１８ｇ〜１０．００％のプラジカンテル；
（ｄ）６５．４５〜ｙ８０．００％のジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）；
（ｅ）０．０１４〜０．０１７％のブチルヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）；
（ｆ）０．００６〜０．００８％のブチルヒドロキシトルエン  ＢＨＴ）；
（ｇ）０．０４１〜０．０５０％のチオジプロピオン酸；
（ｈ）０．２０ｇ〜０．２４ｇの没食子酸プロピル；ｙ
（ｉ）１００．００％とする（c.s.p. 100.00％）ベンジルアルコール
を含むことにより特徴付けられる、請求項１又は２記載の組成物。
【請求項４】
イヌ科動物における外部及び内部の寄生虫病を治療、制御及び予防するための単回投与獣医学的組成物を調製するための、有効量の、（ａ）イミダクロプリド、（ｂ）モキシデクチン；（ｃ）プラジカンテル；並びに（ｄ）ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（ＤＭＡＣ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）及びこれらの混合物から選択される非プロトン性溶媒の、獣医学的に許容し得る賦形剤と共での使用であって、該獣医学的組成物が、局所的に（スポットオン）投与されるように適合されている、使用。
【請求項５】
前記組成物が、首筋又は背中の領域に、浸漬によりかけて、動物の乾燥皮膚に直接適用されるように適合されていることにより特徴付けられる、請求項５記載の使用。
【請求項６】
前記外部又は内部の寄生虫の感染が、Ctenocephalides felis、Ctenocephalides canis、Rhipicephalus sanguineus、Ascaris種（幼生L4、Toxocara canisの未成熟成体及び成体）、Ancylostoma種、Uncinaria種、Trichuris vulpis、Dirofilaria immitis（幼生L3及びL4）、Dipylidium caninum、Taenia taenieformis、Otodectes cynotis、Demodex canis、Sarcoptes scabiei var. canisにより引き起こされるものであることにより特徴付けられる、請求項５記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
［本発明の分野］
本発明は、ペット動物の臨床処置の分野に関し、詳細には、イヌにおいて最も頻発する寄生虫病の体系的な対処のための単回投与の一体的な処置に関する。より詳細には、当該処置は、皮膚局所適用による外部及び内部の寄生虫病の治療及び予防用の皮膚局所液からなる。
【背景技術】
【０００２】
［従来技術の説明］
外部及び内部の寄生虫病は、イヌにおいて非常に頻発し、イヌは、１年の内のいつでも、何歳でも、冒され得る。これらの寄生虫病は、通常、寄生虫の種類、寄生の程度、並びに冒される動物の生理学的及び免疫学的状態に依存する多様な兆候を惹起する。
【０００３】
寄生虫病での問題は、特定の状況下では寄生虫は人に伝染され得るため（寄生虫病を重大な人獣共通感染症に変化させる）、動物の単なる損害を超えている。これは、そのペットと密接に接触している子供にはずっとより頻繁であり、衛生、公衆衛生、環境及び家庭の条件に高度に関連している。
【０００４】
人及び特に子供での臨床徴候を含む寄生虫性の人獣共通感染症の知識は、ヒトの医学の分野にまで拡大されなければならず、後者は獣医学の分野と永続的に協同する。他方、ペットの所有者は、寄生虫感染が、健康（自身のペットだけではなく、そのペットの周囲に住む家族全てや人々全てについても）にもたらすリスクについて知らされるべきである。ペットについての定期的な寄生虫駆除と健康管理プログラムは、一般に、公衆にとって十分に明確でなければならず、それは、ネコやイヌの責任ある所有を定義する一連の手段に貢献しており、公衆の健康のケアに重要な役割を果たす。
【０００５】
イヌの寄生虫病は、コンパニオンペット用医療相談についての理由の高い割合を構成し、それらの不可欠な制御は、社会全体と共に獣医師による責任ある対処を要求する。その目標を達成するためには、常により実用的で効率的で安全なツールを有することが必要であり、それによって、寄生虫病がタイミングよく正しく対応され得る。
【０００６】
現在、イヌを冒す寄生虫のスペクトルの部分的なカバーを可能にする一定範囲の市販製品が存在し、結果、それらの製品は、処方、医薬品形態、投与経路及び治療期間に関して、一定の組み合わせで適用される必要が必ずある。変数のこの組合せは、それらの治療が果たされない可能性の増大を必然的に引き起こしており、これによって、駆除することを意図した寄生虫が耐性も生じる可能性が生じている。
【０００７】
一般に、これらの寄生虫駆除剤は、獣医師によって経口又は非経口で投与され、これは適用の時期が来た際に困難を付け加える側面である。
【０００８】
皮膚は、局所的効果と全身的効果が求められる場合の両方で、医薬品の適用にとって重要な部位である。しかし、角質層が、活性成分の浸透に対する主なバリアである。
【０００９】
経皮送達は、全身経路に到達すること及びこれらの分布を達成することを目的とした、無傷の皮膚を通しての治療剤の投与からなる。
【００１０】
この投与経路は、とりわけ医薬品の制御された投与を可能とすることによって、経口経路に関して多くの利点を提供する。それらの利点の中で、優れているものは以下のものである：
−  それは、肝臓での代謝によって生じる初回通過効果を回避する。
−  それは、投与の中断を可能とするので、いかなるあり得る望ましくない効果をも迅速に逆転させる可能性を提供する。
−  それは、経口経路によって提供されるものよりも、もっと制御され長時間作用する形態での投与を可能とする。
−  それは、吸収を達成するために皮膚バリアの生物学的特性の改変を可能とする。
【００１１】
浸透を促進するために開発された系（促進剤）は、経皮投与に利用可能な薬物の数を増加することが可能な重要な技術的挑戦を意味する。
【００１２】
上記浸透の促進を可能にする化学的方法及び物理的方法が存在し、当該浸透の促進は、以下の３つの経路で起こることが知られている：
−  角質層を通しての経皮浸透。
−  角質層を通しての細胞間浸透。
−  毛包、皮脂腺及び汗腺を通しての浸透。
【００１３】
ほとんどの分子は細胞間経路によって皮膚を浸透し、それは、多くの促進技術が皮膚構造を無秩序化するか又は迂回することを目的としているからである。
【００１４】
浸透促進剤は、以下の３つのうちの１つ又はそれ以上のメカニズムを介して作用し得る：
−  角質層の脂質構造を改変ことによって。
−  細胞間タンパク質と相互作用することによって。
−  角質層中で共促進剤（co-enhancers）又は溶媒として作用して、薬物の分離を向上させることによって。
【００１５】
促進剤はまた、皮膚タンパク質を介した薬物の拡散を増大し得る。
【００１６】
局所適用の単一製品による寄生虫病の不可欠な治療に向けられた医薬品を商業的に見ることができても、これらの医薬品はネコに処方されており、同等の治療目標を有する製品を開発する必要がある場合、イヌに関しては必ず考慮されなければならない著しい生理学的差異が存在することを考えなければならない。
【００１７】
吸収、分布、代謝及び排泄等の薬物動態パラメータに関して並びにそれらの異なる活性成分の薬力学に関しての両方で、両種間で様々な薬物の挙動における差異が報告されている（Herve P. Lefebvre, 2007; Akos, 2012）。
【００１８】
上記の差異の中では、ネコでの７４％に対してイヌで４％の薬理学の生物学的利用能の結果が得られた、セラメクチン（Selamectin）（大環状ラクトン、モキシデクチン（Moxidectin）と同様）を用いて行われた経皮浸透に関する比較試験が特に重要になる（Sarasola, 2002）。
【００１９】
イヌの皮膚バリアの組織学的特徴は、ネコのそれと比較したとき、この挙動の大半を説明する。被毛の毛細血管血流、密度、構造及び成長速度、皮脂腺及び汗腺の量及び配置、並びに主に皮膚厚（即ち、イヌ及びネコにおいてそれぞれ、約２１．１６±２．５５μｍ及び１２．９７±０．９３μmである（Dermal Absorption and Toxicity Assessment, Second Edition, Roberts, 2008 - Animal Skin Morphology and Dermal Absorption, Monteiro-Riviere et al.））などの変数は、特定の薬物の吸収にかなりの影響を与え、そしてそれぞれの種に対して適切かつ安全な治療処方を開発するための時機が到来した場合、挑戦になる。
【００２０】
Wyeth Five Giralda Farmsに付与された特許出願AR067751A1は、有効量の、（ａ）プラジカンテル（Praziquantel）及び（ｂ）大環状ラクトン、イミダクロプリド（Imidacloprid）、及び該成分の組合せからなる群より選択される第２の内部寄生虫駆除剤；並びに（ｃ）担体としての４−アリル−２−メトキシフェノールを含む組成物を提供する。また、恒温動物における内部寄生虫感染及び寄生を処置するための方法が提供される。大環状ラクトンとしては、モキシデクチンを用いることができる。その目的は、各適用において活性成分のより大きな安定性及び高濃度を達成することである。しかし、与えられた例を超えて、２つの活性成分を有するだけの組成物は、イヌにおいては厳密には有効ではない。なぜなら、イヌの皮膚には浸透を非常に困難にする独自の特徴があるからである。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００２１】
したがって、本発明の目的は、単一製品を用いて、そして単回で実用的で効果的な適用において、イヌの寄生虫病の不可欠な処置を可能にすることによって、治療の成功を確実にすることである。
【課題を解決するための手段】
【００２２】
［本発明の要旨］
それ故に、本発明の目的は、イヌ科動物を対象とする局所適用（スポットオン）のための単回投与獣医学的組成物（monodose veterinary composition）であり、該組成物は：
（ａ）８．１８〜１０．００％のイミダクロプリド、
（ｂ）２．８６〜３．５０％のモキシデクチン、
（ｃ）８．１８〜１０．００％のプラジカンテル、並びに
（ｄ）６５．４５〜８０．００％の非プロトン性溶媒であって、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（ＤＭＡＣ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）及びこれらの混合物から選択される、非プロトン性溶媒
を、獣医学の観点から許容し得る賦形剤と共に含む（ここで、上記百分率は組成物の総重量に対するものである）。
【００２３】
好ましくは、この組成物用の賦形剤は、ブチルヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、ブチルヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、チオジプロピオン酸、没食子酸プロピル及びベンジルアルコールである。
【００２４】
更に好ましくは、当該獣医学的組成物は：
（ａ）８．１８〜１０．００％のイミダクロプリド；
（ｂ）２．８６ｇ〜３．５０％のモキシデクチン；
（ｃ）８．１８ｇ〜１０．００％のプラジカンテル、；
（ｄ）６５．４５〜ｙ８０．００％のジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）；
（ｅ）０．０１４〜０．０１７％のブチルヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）；
（ｆ）０．００６〜０．００８％のブチルヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）；
（ｇ）０．０４１〜０．０５０％のチオジプロピオン酸；
（ｈ）０．２０ｇ〜０．２４ｇの没食子酸プロピル；及び
（ｉ）１００．００％とする（c.s.p. 100.00％）ベンジルアルコール
を含む。
【００２５】
本発明の別の目的は、イヌ科動物における外部及び内部寄生虫病の治療、制御及び予防用の単回投与獣医学的組成物を調製するための、有効量の、（ａ）イミダクロプリド、（ｂ）モキシデクチン；（ｃ）プラジカンテル；並びに（ｄ）ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（ＤＭＡＣ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）及びこれらの混合物から選択される非プロトン性溶媒の、獣医学的に許容し得る賦形剤と共での使用であり、ここで、当該獣医学的組成物は、局所的に（スポットオン）投与されるように適合されている。
【００２６】
好ましくは、当該該組成物が、首筋又は背中の領域に、浸漬によりかけて、動物の乾燥皮膚に直接適用されるように適合されている使用。
【００２７】
更に好ましくは、当該外部又は内部の寄生虫の感染が、Ctenocephalides felis、Ctenocephalides canis、Rhipicephalus sanguineus、Ascaris種（幼生L4、Toxocara canisの未成熟成体及び成体）、Ancylostoma種、Uncinaria種、Trichuris vulpis、Dirofilaria immitis（幼生L3 ｙ L4）、Dipylidium caninum、Taenia taenieformis、Otodectes cynotis、Demodex canis、Sarcoptes scabiei var. canisにより引き起こされる使用。
【００２８】
［発明の詳細な説明］
本発明は、適切で有効な担体の選択によってそれらの剤の全てを皮下経路により浸透させ、したがって、イヌにおいて薬理学的に有効な血中濃度を達成する、広く知られている寄生虫駆除剤の新規な組合せ及び濃度での組成物からなる。
【００２９】
言及する製品は、イヌ科動物を冒す外部及び内部の寄生虫病の治療、制御及び予防用の、イヌ科動物に局所剤形（スポットオン）で投与される、特定の担体（ｄ）及び複数の獣医学的に許容し得る賦形剤と組合せた、（ａ）イミダクロプリド、（ｂ）モキシデクチン、及び（ｃ）プラジカンテルの溶液に相当する。
【００３０】
更に具体的には、当該製品は、以下により引き起こされる、イヌにおける外部及び内部の寄生虫病の治療、制御及び予防用に処方される：
ノミ：Ctenocephalides felis及びCtenocephalides canis。
ダニ（tick）：Rhipicephalus sanguineus。
線虫：Ascaris種（幼生L4、Toxocara canisの未成熟成体及び成体）、Anquilostomas種、Uncinaria種及びTrichuris vulpis。Dirofilaria immitis（幼生L3 ｙ L4）。
条虫：Dipylidium caninum、Taenia taenieformis。
ダニ（mite）：Otodectes cynotis、Demodex canis、Sarcoptes scabiei var. canis。
【００３１】
本発明による獣医学的組成物の実用化の好ましい形態においては、製品１００ml毎に：
（ａ）９．００ｇ〜１１．００ｇのイミダクロプリド；
（ｂ）３．１５ｇ〜３．８５ｇのモキシデクチン；
（ｃ）９．００ｇ〜１１．００ｇのプラジカンテル；及び
（ｄ）７２．００ml〜８０．００mlのジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）
を、獣医学的に許容し得る賦形剤と共に、含む。
【００３２】
実用化の好ましい形態においては、本発明の獣医学的組成物は、製品１００mlあたり：
（ａ）９．００ｇ〜１１．００ｇのイミダクロプリド；
（ｂ）３．１５ｇ〜３．８５ｇのモキシデクチン；
（ｃ）９．００ｇ〜１１．００ｇのプラジカンテル；並びに
（ｃ）７２．００ml〜８０．００mlのジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）；
（ｅ）０．０１５８ｇ〜０．０１９３ｇのブチルヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）；
（ｆ）０．００７ｇ〜０．００９ｇのブチルヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）；
（ｇ）０．０４５ｇ〜０．０５５ｇのチオジプロピオン酸；
（ｈ）０．２３ｇ〜０．２８ｇの没食子酸プロピル；及び
（ｉ）１００．００mlとするベンジルアルコール
を含む（ここで、（ｅ）、（ｆ）、（ｇ）、（ｈ）及び（ｉ）は、好ましい賦形剤である）。
【００３３】
同様に、本発明による製品（密度＝１．１０g/cm３）の１００ｇ毎は：
（ａ）８．１８ｇ〜１０．００ｇのイミダクロプリド；
（ｂ）２．８６ｇ〜３．５０ｇのモキシデクチン；
（ｃ）８．１８ｇ〜１０．００ｇのプラジカンテル；ｙ
（ｃ）６５．４５ｇ〜８０．００ｇのジメチルスルホキシド
を、獣医学的に許容し得る賦形剤と共に、含む。
【００３４】
本発明の実用化の好ましい方法において、本発明による製品（密度＝１．１０g/cm３）の１００ｇ毎は：
（ａ）８．１８ｇ〜１０．００ｇのイミダクロプリド；
（ｂ）２．８６ｇ〜３．５０ｇのモキシデクチン；
（ｃ）８．１８ｇ〜１０．００ｇのプラジカンテル；
（ｃ）６５．４５ml〜８０．００mlのジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）；
（ｅ）０．０１４ｇ〜０．０１７ｇのブチルヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）；
（ｆ）０．００６〜０．００８ｇのブチルヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）；
（ｇ）０．０４１ｇ〜０．０５０ｇのチオジプロピオン酸；
（ｈ）０．２０ｇ〜０．２４ｇの没食子酸プロピル；及び
（ｉ）１００．００ｇとするベンジルアルコール
を含む（ここで、（ｅ）、（ｆ）、（ｇ）、（ｈ）及び（ｉ）は、好ましい賦形剤である）。
【００３５】
成分（ａ）、（ｂ）及び（ｃ）は、組成物の活性成分であり；（ｄ）は有効な担体であり、そして（ｅ）、（ｆ）、（ｇ）、（ｈ）及び（ｉ）は、酸化を阻止しかつ当該成分のビヒクルとして作用することになっている獣医学的に許容し得る賦形剤である。よって、必須の処置が成功するのに適切な条件及び量での活性成分の有用性が保証される。
【００３６】
前記の割合は、異なる成分の各それぞれの薬物動態及び薬力学の特性に基づく。
【００３７】
イミダクロプリドは、表皮及び毛嚢脂腺を介して分布され、皮脂腺に蓄積されて、後に毛包の管を介して徐々に放出される。
【００３８】
局所投与された場合の薬物の分布及び吸収を立証するためのビーグル犬での試験を行った。試験を実施するために、イミダクロプリドを１４Ｃで放射標識し、１２mg/kgの用量で局所投与した。続いて、適用後３、７、１５、２１、２９及び５６日目に、皮膚生検（５mm２）を行った。
【００３９】
標本の腰背部に由来するこれらの皮膚断片の分析から、７日目と５６日目との間に１４Ｃ標識したイミダクロプリドが角質層及び皮脂腺に高濃度に見出されることが判明した。脂肪中のイミダクロプリドの蓄積は、皮膚及び被毛を介しての薬物の移動のために起こっていることが分かった。皮下組織、脂肪組織又は表皮基底層の細胞には放射活性の痕跡は検出されず、このことにより、イミダクロプリドの吸収が実際にないことが明らかになった。皮膚構造及び被毛における放射活性の長期持続は、局所適用後のイミダクロプリド活性の持続時間と良好に一致している。
【００４０】
スプレー製剤及び主にスポットオン製剤が使用される場合、適用部から、被毛及び皮膚に存在する皮脂分泌を介した受動拡散による活性成分の移行があることに留意されたい。イミダクロプリドのこの特異性は、製剤とは独立して、イヌ及びネコの被毛中での高濃度のその持続性を保証し、したがって、動物が濡れるか又は入浴させた場合でさえ、その有効性を保証する（Harish Chopade, 2010）。
【００４１】
それは、ネオニコチノイドの化学群に属し、その薬力学により、その作用は神経細胞を興奮させることによるアセチルコリンの作用に類似している。アセチルコリンエステラーゼによって急速に分解されるアセチルコリンで起こるものとは異なり、イミダクロプリドは分解されないか又はこれは非常にゆっくり起こり、寄生昆虫の神経系に影響を及ぼす。この薬物は、シナプス後細胞膜のニコチン受容体と結び付くのが容易であるため、ネオニコチノイドに分類される。
【００４２】
ある種の昆虫及び哺乳動物は、この化合物の影響をより受けにくいムスカリン受容体の割合が高い。哺乳動物において、ニコチン受容体部位は、昆虫のものと生理学的に異なることが知られている。
【００４３】
イミダクロプリドは、ノミ及び他の昆虫種に対して特異的様式で選択活性を有する。
【００４４】
モキシデクチンは大環状ラクトンであり、その体内動態は、薬物リザーバが脂肪沈着物である場合、高容量の分布を特徴とするその高い親油性に関連する。その薬物動態は線形であり、製剤及び投与経路の影響を受ける。
【００４５】
ヒト及びイヌ科動物で行われた研究は、薬物動態が用量依存性であることを示しており、このため、適用用量を増加させると血漿濃度が線形に上昇する。その血漿スパイクは３〜５時間で得られ、モキシデクチンの排出半減期は種特異的であり、以下の順序で増加する：ブタ（０．５日）＜イヌ（１．８日）＜ヒツジ（２．７日）＜ウシ（２．８日）。モキシデクチンを０．５及び２．０mg/kg/１２時間の用量で経口投与したビーグル犬で行った３６日間の研究において、血漿中の濃度が２〜８日目の間で劇的に上昇し、次の３週間安定なままであったことが検出された。元の用量を４倍増加させると、血漿中の濃度は平均８倍超の増加となった。
【００４６】
他方で、モキシデクチンはリポタンパク質及びアルブミンに広範に結合することが知られており、そのため栄養不良の動物では、このことが、遊離薬物のより高い割合という知見を説明し得る。
【００４７】
薬物の残留物は、モキシデクチンの経皮投与後には、経口投与の場合よりも長い期間検出可能である。
【００４８】
大環状ラクトンは、重要な寄生虫駆除の特性を有する細菌発酵の産物である。これらは、獣医学において、内部と外部の両方の寄生虫を制御するためによく使われている薬物である。世界中の複数の治療研究がその広い有効性を示している。これらのラクトンは、無脊椎動物に特異的な、グルタミン酸によって活性化される塩素チャネルのサブタイプのアゴニストとして作用するので、種々の寄生虫種において麻痺による死を引き起こす。当該チャネルは、ＧＡＢＡが介在する塩素チャネルに系統学的に関連しているものの、高等哺乳動物には存在しない。高濃度では、一例としてイベルメクチンのような幾つかのラクトンは、塩素チャネルでのＧＡＢＡ活性を高め、高等脊椎動物に毒性作用を生じ得ることが示されている。
【００４９】
他方で、抗寄生虫薬としてのイベルメクチンの導入により、幾つかの標本、特にコリー種の標本は、薬物を投与されたときに顕著な神経毒性を示したが、他の種では認められなかったことが見出されたが、これは、エネルギー（ＡＴＰ）に依存する外部に向かうポンプシステム（排出輸送体）によって感受性臓器への薬物の侵入を制限する血液脳関門に位置する分子であるＰ糖タンパク質活性（Manzuc, AVEACA, 2009）の欠損に後に関係付けられた事実である。
【００５０】
モキシデクチンは大環状ラクトンの内部外部駆虫剤（endectocide）群に属する。それは、２つの近縁化合物の混合物であるイベルメクチンとは対照的に、天然化合物であるネマデクチン（次いで、Streptomyces cyaneogriseusの発酵産物）の化学改変によって得られる。これらは、塩化物イオンに対する膜の透過性を増大し、よって、線虫及びある種の外部寄生虫に麻痺を引き起こす強力な殺虫剤、ダニ駆除剤及び駆虫剤化合物である。前記化合物のこれらの作用は、グルタミン酸に関連する塩化物輸送チャネルに、選択的に大きな親和性で結合するその特性により、無脊椎動物の神経及び筋細胞において起こる事象を遂行することができる。この選択的作用の結果は、塩化物の細胞内侵入並びに筋及び神経細胞の過分極であり、その結果、寄生虫の麻痺及び死をもたらす。この種の化合物はまた、γ−アミノ酪酸（ＧＡＢＡ）神経伝達物質のような他のリガンドに関連する他の塩化物輸送チャネルにも結合し得る。これらの作用の選択性は、哺乳動物がグルタミン酸関連チャネルを持たず、他の輸送チャネルに対するそれらの化合物の親和性が非常に低いという事実のためであり、これに加えて血液脳関門を越える能力が非常に限定されている。当初この薬物で行われた研究は、Ｃｌ−依存性模倣ＧＡＢＡチャネルを開くその能力に焦点を当てていた。
【００５１】
モキシデクチンは、脊椎動物及び無脊椎動物の両方において、ＧＡＢＡ受容体に及ぼす強力な活性を有しており、ＧＡＢＡは、線虫の体性神経筋系における主要な阻害性神経伝達物質であることが知られている。しかし、後に科学者らは、この種の薬物の主な標的として、グルタミン酸依存性Ｃｌ−チャネルを同定した。
【００５２】
他の活性成分のプラジカンテルに関しては、吸収された活性成分の量は、Ｃｍｘ及びＡＵＣが投薬量に比例して増加するのと同じように、投薬量と線形関係を維持する。血漿ピークレベルは、１時間〜３時間の間に得られる。
【００５３】
組織におけるプラジカンテルの分布は完全には解明されていない。しかしながら、多様な研究において、組織及び血漿中で同じ濃度が観察されており、この濃度は最大１４〜２０％である。
【００５４】
プラジカンテルは、正常な肝臓及び腎臓機能を有する成人において、０．８時間〜１．５時間の範囲の半減期を有する。しかしながら、血清中の代謝産物は、４〜５時間の範囲の半減期を有する。代謝経路は依然として正確には知られていないが、薬物は、主として肝臓で、ヒドロキシル化によってモノヒドロキシル化及びポリヒドロキシル化代謝物に、迅速かつ広範囲に代謝される。これらの代謝産物が駆虫活性を有するかどうかは知られていない。
【００５５】
プラジカンテル及びその代謝産物は主に尿を介して排泄される。経口用量の７０〜８０％が最初の２４時間以内に排泄され、経口用量の１％未満は変化せずに排泄される。
【００５６】
その薬力学に関して、プラジカンテルは、数種の吸虫及び条虫の寄生虫に対して活性を有するイソキノリン−ピラジンの合成誘導体である。インビボ及びインビトロ研究において、数分以内に、吸虫及び条虫がプラジカンテルを非常に迅速に捕捉することが見出されている。この薬物は、寄生虫の筋組織のテタニー収縮及び寄生虫の合胞体外被の急速な空胞化を引き起こす。この急速な収縮は、その後の筋麻痺を伴う、カルシウムに対する膜透過性の増大に関連する。この外被の空胞化は、条虫の横分体の前部領域に限定されているが、吸虫の表面上では、より散在している；空胞は合胞体層に形成され始め、時間の経過とともにそれらのサイズは増大し、その結果、それらは外被表面上に目に見える水疱を作り出す。これらの水疱は破裂し、顆粒球、好中球及び好酸球が寄生虫組織の内部に侵入して溶解を起こす病変をもたらす。筋収縮及び外被空胞化の現象がカルシウムに依存するように見える場合でさえ、筋レベルでのプラジカンテルの作用様式の知識はなおも不完全である。
【００５７】
正味の効果は、寄生虫がその宿主から離れることである。
【００５８】
プラジカンテルの安全マージンは、その急速な代謝及び排泄、並びに感受性寄生虫に対するその選択的効果に起因する。
【００５９】
使用される促進剤の種類は、製品の設計及び開発に顕著な影響を及ぼす。
【００６０】
ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）は、強力な非プロトン性溶媒である。それは、無色で無臭で吸湿性であり、そして薬品科学の多くの領域において万能溶媒として使用されている。ＤＭＳＯ単独で炎症の局所治療に使用されてきた。それは、浸透促進剤として効き目が速く、その効果は、その濃度に依存する。
【００６１】
例えばＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（ＤＭＡＣ）及びＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）のような、同様の強力な非プロトン性溶媒である化学的に類似の他の促進剤が存在する。
【００６２】
ＤＭＡＣは、実験室レベル及び医薬品レベルの両方の有機合成において、並びに合成繊維紡糸のためのテキスタイル工業において、並びに殺虫剤合成のために、大いに使用される極性の非プロトン性有機溶媒である。それは、水溶性の液体であり、無色〜帯黄色で透明、そして非常に純粋ならば無臭である。
【００６３】
ＤＭＦは、水及び大部分の有機化合物に混和性である、無色及び無臭の液体である。ＤＭＦは、化学反応の溶媒として使用されるアミドの非プロトン性溶媒である。それはまた、組織、臓器及び胚の凍結保存のための細胞内凍結保護剤としても使用される。加えて、生分解性プラスチックの製造に使用され得る。
【００６４】
ＤＭＳＯとＤＭＡＣ及びＤＭＦとの両方とも、水性チャネルによって角質層をより浸透性にすることによって、脂質を抽出することができる。スルホキシドの作用の機序が大いに利用される。ヒトの皮膚において、スルホキシドが、細胞間タンパク質を変性することによって、αケラチンのコンフォメーションをβ型に改変することが示されている。
【００６５】
本発明の獣医学的組成物によって、イヌ科動物を通常冒す条虫誘発性寄生虫病の処置に有効な血中濃度に達するプラジカンテルの経皮浸透がイヌにおいて初めて達成された。プラジカンテルは、腸管のDipylidium caninumに対して直接作用し、また、イミダクロプリドのその成分に起因して、これらの寄生虫の中間宿主であるノミにも作用する。
【００６６】
他方、適切な濃度及び投薬量でのモキシデクチンの使用は、イヌにおいて初めて、イヌ科動物に一般的に見られる褐色イヌダニであるRhipicephalus sanguineusの治療、制御及び予防に対するその効力を示すことができた。その周知の殺線虫作用及びイミダクロプリドの殺ノミ剤としての寄与と共に、両化合物は、適切な担体を使用することにより、単回で非常に実用的な適用で動物体内でその効果を到達させる新規な処方を構成する。
【００６７】
成体形の外部寄生虫には速効の致死効果を有すると共に、それはイヌを最長４週間、ノミ及びダニがいない状態を維持可能な持続性の残留効果を有する。
【００６８】
本発明の獣医学的組成物は、皮膚に直接適用される外用製品である。
【００６９】
それは、以下のスキームに従って適用されるべき単回投薬のボトルで差し出される：
最大４キロの体重のイヌには、０．４０ミリリットルのピペット。
５〜１０キロの体重のイヌには、１．００ミリリットルのピペット。
１１〜２５キロの体重のイヌには、２．５０ミリリットルのピペット。
２６〜４０キロの体重のイヌには、４．００ミリリットルのピペット。
４１〜６０キロの体重のイヌには、６．００ミリリットルのピペット。
【００７０】
中身は、動物が舐めるのを防ぐために首筋又は背中の領域に、動物の乾燥皮膚上に直接適用しなければならない。皮膚に製品を容易に適用できるように、被毛を分けることが重要である。ボトルの中身を、被毛上にこぼしてはならない。
【００７１】
ダニによる寄生が高度の場合には、イヌの頭部の最高点に、皮膚に製品１滴を適用するのが賢明である。
【００７２】
処置は単回投与で行われる。
【００７３】
この新しい投与方法は、これまでイヌにおいて効果的に使用も試験もされておらず、経口投与の間に攻撃的で咬むイヌによって提起される困難性、並びに嘔吐又は丸薬を「吐き出す気難しいイヌ」に起因する失敗を取り除くので、治療の成功を保証する容易さと実用性をもたらす。
【実施例】
【００７４】
［実施例１：本発明の組成物の実用化の好ましい形態のバルクでの製造］
供給の制御を行ったら、本発明の組成物を、以下に詳述される工程に従って、バルクで製造した。
【００７５】
製品１００リットルを製造するために、撹拌下で以下を仕込んだ完全に清浄にしたガラス状反応容器を使用した：
ジメチルスルホキシド ８０．００dm３
モキシデクチン ３．５０kg
イミダクロプリド １０．００kg
プラジカンテル １０．００kg
【００７６】
次に完全に希釈するまで撹拌を維持した。固形物が希釈されたら、撹拌を維持しつつ、以下を加えた：
ＢＨＡ １７．５０ｇ
ＢＨＴ ８．７５ｇ
チオジプロピオン酸 ５０．００ｇ
没食子酸プロピル ２５０．０ｇ
ベンジルアルコール １００．００dm３とする
【００７７】
最終的に、完全に希釈されるまで全てを撹拌した。
完全な希釈が達成されたら、試料を採取して、ＨＰＬＣにより分析し、満足な結果が得られた後、混合物を１時間静置し、次に濾過を行った。
【００７８】
濾過後、得られた組成物は、少量に分ける準備ができており、各カニューレには、調整すべき製品の提示用に特定の容量が含まれている。制御のための試料を定期的に採取しなければならない。
【００７９】
各カニューレは、設計及び対応するデータをタンポン印刷し、その後、それぞれのリーフレットを含む印刷された厚紙の箱に個々に入れる。
【００８０】
［実施例２：ノミ、ダニ、線虫及び条虫が自然条件で寄生したイヌの処置のための、イミダクロプリド、モキシデクチン及びプラジカンテルを含有するスポットオン獣医学的組成物の評価］
この研究の目的は、自然感染したイヌにおけるノミ、ダニ；胃腸内の線虫卵及び条虫の片節／卵の除去に基づいて、本発明の獣医学的組成物（スポットオン適用のためのピペット中の、イミダクロプリド、モキシデクチン及びプラジカンテル）の有効性を評価することであった。評価は、ノミとダニの場合には処置の３０日後、そして内部寄生虫の場合には処置の１５日後の除去量である。この研究を開始した時点で、ダニが寄生した動物は存在しなかったため、当該外部寄生虫に対する有効性は除外しなければならない。
【００８１】
この研究の実施のために、一揃いの群の動物を選択し、３つのバッチに分けた：Ａ、処置群、ノミ寄生；Ｂ、ノミ寄生、未処置対照群；及びＣ、処置群、内部寄生虫。
【００８２】
バッチＡ：ノミ寄生の処置動物群。ノミが自然感染した異なる種のイヌ６頭を使用し、製品の適用前に数を数え、動物１頭当たりノミ１０匹という平均最小寄生虫感染数であった。観察を、０時間、３６時間、並びに処置（モーメント０）の７、１４及び３２日後に行った。
バッチＢ：ノミ寄生の対照群、未処置群：動物１頭当たりノミ１０匹という平均最小寄生虫感染数を持つ動物６頭。観測を、０時間、３６時間、並びに７、１４及び３０日後に行った。
バッチＣ：胃腸内寄生虫を有する、処置群。雑種及び異なる種のイヌ６頭を、各寄生生物種について、幾つかの場合には混合感染したイヌを使用した（Toxocara canis、Toxocara cati及びToxocara leoninaなどのAscaris；Ancylostoma caninum及びUnicinaria stenocephal；並びに条虫：Dipilidium caninoに自然感染）。寄生虫の数と糞便の分析に基づいてイヌ科動物を前もって選択し、陰性の結果を示す動物を除いた。
【００８３】
動物のプロフィール及びその糞便で同定された寄生虫を含む、各動物についてのデータワークシートを作成した。
【００８４】
実験の開始前に、陽性数のAscaris（cati、gati若しくはleonina、又は同時にそれらの全て）の卵を有する動物、及びAncylostomas種の卵に陽性の動物、並びにDipilidium種（幾つかの場合に混合感染が存在した）の片節若しくは卵の存在、又は同時にその両方を示す動物を、モーメント０（３日間連続、即ち、処置の３、２及び１日前の糞便の採取）で得、試料を１０％ホルマリンを含む保存培地に保持した。
【００８５】
イヌに処置をして、モーメント１の各動物から糞便試料を採取した（処置の３、４及び５日後）。処置の効果の評価を、肉眼的検査（条虫の場合には片節の存在）、並びに系列化した試料全ての浮遊及び遠心分離を介した別の顕微鏡検査（線虫の場合には卵）（Benbrook法による）によって行い、軽度の寄生をＸ（稀少量の卵：１顕微鏡視野当たり１〜２個）で分類し、中程度の寄生を２Ｘ中程度寄生で（通常量の卵：１顕微鏡視野当たり３〜５個）；及び、３Ｘ重度寄生（充分量の卵：１顕微鏡視野当たり５個超）で分類した。また、評価には、卵若しくは片節、又は同時にその両方の同定を含めた。
【００８６】
ノミ及び内部寄生虫を有する使用した動物の数は、ノミでは６頭、Ancylostomaでは６頭、Toxocaraでは３頭、Trichurisでは２頭、及びDipilidiumでは２頭であった。イヌ科動物の年齢は、２ヵ月から９歳までの範囲であり、両方の性別で、体重は２〜２０kgの範囲であり、各動物の首輪によって識別した。
【００８７】
推奨される快適さ（最小表面積０．７×０．７ｍ２）が遵守された個別の環境にイヌを維持した。
【００８８】
栄養は、周知の商業ブランドのバランスの良い高級飼料と水とによるものであり、この全てを自由に摂取させた。
【００８９】
研究の間、他の処置は実施しなかった。
【００９０】
試験した獣医学的製剤は、イミダクロプリド １０．００％、モキシデクチン ３．５０％；プラジカンテル １０．００％；ＢＨＡ ０．０１７５ｇ；ＢＨＴ ０．００８７５ｇ；ジメチルスルホキシド ８０．００ml；及びベンジルアルコール １００．００mlとするまでとした。
【００９１】
各活性成分について使用した投薬量範囲は以下のとおりであった：
イミダクロプリド：１０〜２５mg/kg
モキシデクチン：３．００〜８．００mg/kg
プラジカンテル：１０．０〜２５mg/kg
【００９２】
採用した用量は以下のとおりであった：
１kg〜４kg未満のイヌ：０．３０ml ピペット
４〜１０kgのイヌ：１．００ml ピペット
１１〜２５kgのイヌ：２．５０ml ピペット
２５〜４０kgのイヌ：４．００ml ピペット
【００９３】
スポットオン使用のためのピペット中の本発明の獣医学的組成物を、被毛を広げて投薬装置を皮膚上に配置することによって、耳の付け根に、並びに首、首筋及び背部に沿って適用した。
【００９４】
動物上に存在するノミ及びダニを数える方法
ノミを、異なる試験バッチに含まれる動物のそれぞれで数えた。実際の計数を行うために、被毛を指で除けて、Ctenocephalides種の計数を容易にする目の細かい櫛を用いた。
個々の櫛を各動物に使用することによって、処置動物の間での、そして何よりも未処置対照バッチの動物への、活性成分の偶然の移動を回避した。
ダニを有する動物がいなかったため、その外部寄生虫の評価は行わなかった。
バッチが形成され、研究の開始が決定されたら、処置したイヌのバッチ及び未処置の対照イヌの両方で、０日目、３６時間、７日目、２１日目及び３２日目に計数を行った。
【００９５】
内部寄生虫を数える方法
肉眼的検査及び系列化した試料全ての浮遊による顕微鏡検査を利用した。
顕微鏡検査のために、浮遊及び遠心分離による濃縮方法（この方法では、厚いカプセルと薄いカプセル両方のカプセル状態の卵の大部分、並びに、嚢胞、オーシスト及び栄養体を同定することができる）を用いた。
水を加熱しながら砂糖を加えて作られるBenbrook溶液（砂糖４５４ｇ及び水３５５ml）及びホルマリン６mlを、溶液全体の保存料として加える；密度を１２００〜１２５０g/cm３に調整する。
【００９６】
検査のために以下の工程を実施した：
ａ）糞便を、１０％ホルマリンを含有する運搬フラスコ中でホモジナイズし、同時に、肉眼により寄生虫形態を検索した。フラスコが糞便よりホルマリンを多く含む場合、ホモジナイズする前にホルマリンの一部が捨てられた。他方、ホルマリンの量に対して多くの糞便があることが分かった場合、試料は充分にホモジナイズされ、次に１０％ホルマリンが更に添加された。
ｂ）次の工程は、微細メッシュのふるいを通して糞便を濾過することであった。
ｃ）濾過された部分をコニカルチューブに入れ、その後、１５００rpmで５分間遠心分離した。
ｄ）ふるいに残った部分は、より清潔でより安全な方法での顕微鏡検査の実施を可能にするために、蛇口の下に置かれ、ここで充分量の水をそれを通して流した。
ｅ）試料を遠心分離したら、遠心分離管を外して、上清を捨て、浮遊液と置き換えた。
ｆ）新しく遠心分離を１５００rpmで５分間行った。
ｇ）液体の表面から液滴を採取し、スライドとカバースリップの間に入れて、１０倍及び４０倍の倍率で顕微鏡により観察した。
【００９７】
ノミの場合：Abbotの式を使用して、各群の算術平均を用いることによって、対照群の寄生と各時点の寄生を比較した。実験者と低温に由来する汚染の可能性のために、Abbotの式を７、１４及び３２日目の時点で得られた結果に適用し、次に当該結果を平均し、９３．１０％の有効性が達成された。
【００９８】
内部寄生虫：各時点で糞便の試料によって示された陽性又は陰性の結果によって決定した。
【００９９】
ノミに対する製品の有効性を、動物の多様な領域を通した目の細かい櫛を用いて、試験動物上の寄生虫の有無によって肉眼的に評価した。対照動物では、プロセスを首の領域で開始し、ノミが様々な領域で計数されたので、試験したイヌの予めチェックした首の領域に、ノミを再び配置した。
【０１００】
内部寄生虫に対する製品の有効性を、肉眼的には、片節又は寄生虫の形態の有無によって、顕微鏡的には、系列化した糞便寄生虫学的試料中の卵の量によって、評価した。
【０１０１】
結論
ノミ：ノミに対する有効性を示すために本発明の組成物を用いて実施した研究では、その最初のダンピング力（適用の３６時間後に確認された）及び最長３２日間のその残留力の両方に関して最適な結果が得られた。動物１頭あたりノミ３０匹の最初の平均数から、ノミ０匹が３６時間後の計数で達成され、適用の３２日後もこれが維持され、そして全ての動物について、Abbotの式により９３．１０％の有効性であった。また、未処置対照動物とは異なり、目の細かい櫛を通したときに、ノミが見つからなかっただけでなく、３２日後にその寄生虫からの糞便も回収されなかったことも強調しなければならない：即ち、目の細かい櫛は、それぞれ通した後に非常にきれいだった。
【０１０２】
対照として放置された動物に関しては、たとえノミの数が３６時間後に減少した場合でも、この事実は以下の２つの状態に起因すると考えられた。一つはある程度の室温の低下があるが最初に処置群が扱われたという事実、及び、処置群を運搬し拘束していた人々が、最小量の製品にコンタミネーションされ、これが、対照群の動物に影響を及ぼしてしまった可能性がある。次いで、部屋を加熱する装置及び保護パネルを設置し、この後、対照動物のノミの量は再び増加し始め、初期と同様の量に達した。３２日後、それぞれ通した目の細かい櫛で引き出されたノミの糞便量は、顕著であった。
【０１０３】
内部寄生虫：処置後７日目及び１４日目に有効性を確認した。有効性を、Ancylostoma ７例、Toxocara ３例、Trichuris ２例及びDipilidium ２例で確認し、全ての試料が上記２日間に陰性であった。
【０１０４】
処置に反応しなかったココ（Coco）という名の動物１頭で、Hepatozoon canisの存在が診断されたが、この寄生虫は確実に、ココの低い防御力、及び製品の作用の欠如の原因であった。
【０１０５】
［実施例３：イヌ科動物のダニの処置及び制御のために処方されたスポットオン適用のための処方のダニ駆除剤としての有効性の評価］
外用抗寄生虫薬としてのその利用が提案されている、本発明の獣医学的組成物のダニ駆除剤としての適合性及び有効性を評価し、イヌ科動物（Canis familiaris）にRiphicephalus sanguineusが引き起こした寄生に対する、製品のダンピング力、外部寄生虫死亡率及び残留力を、３５日間の研究期間で測定した。
【０１０６】
実施した研究では、合計３５日間のイヌ科動物の追跡調査を計画した。
【０１０７】
実験単位を、対照群及び処置群として識別した２群に分けた合計１２頭の動物から構成し、その各々は、同数の標本を含んだ：イヌ科動物６頭。
【０１０８】
均質な年齢及びサイズで、両方の性別、平均で動物１頭当たり外部寄生虫１５匹の最小寄生虫負荷を有する不確定種及び雑種のイヌ科動物を選択した。イヌ科動物を、研究を行った全時間、研究が行われる建物に維持した。それらは、製品の活性成分でも、当該製品に干渉するかもしれない他のどのような薬物でも、以前に処置されなかった。臨床検査の下で健康状態が良好であると判明したそれらの標本のみを、作業プロトコールに含めた。参加動物の区別のために、栄養状態、身体状態、粘膜着色、毛細血管再充満時間、心音及び肺の聴診、腹部触診及び病気の兆候の有無を考慮した。全く例外なく、その生理学的（妊娠、授乳期、低体重又は身体状態など）又は病理学的状態のために、研究の進行を損なったり害したりするような標本は、除外された。
【０１０９】
評価する標本を、研究用に特別に設計された１２の犬舎に入れた。各犬舎は長さ１．３９ｍ、幅１．１９ｍ、高さ１．９０ｍで、レンガ壁、トタン屋根及びセメント床を有していた。
【０１１０】
犬舎の掃除を、糞便及び食べ残しの掃引及び機械的収集によって、１日２回実施した。許可された唯一の洗浄は水道水によるものだった。
【０１１１】
給餌法は、動物が受けるのに慣れていたものと同じであり、それは基本的にバランスの良い餌の１日２回の配給と自由に摂取できる水とからなっていた。
【０１１２】
群を構成するために、イヌ科動物を、その初期の外部寄生虫の数を数えた後に無作為化した。
【０１１３】
これら標本を、独立した犬舎に入れ、コンクリートの壁と、ある群と次の群との間の長さがほぼ７メートルの通路によって物理的に隔てた。
【０１１４】
ちょうど収容した標本に応じて犬舎を番号及び色により識別したように、バッチに応じて異なる番号及び色を有する首輪の使用によって、標本の識別を行った。
【０１１５】
動物の個別化のための番号及び色、それが収容された犬舎の番号及び色、動物が属している群、並びに正しい識別のための写真が含まれた、それぞれのイヌ科動物に関する臨床記録を作成した。体重、性別、およその年齢、被毛、見分ける特徴、寄生虫駆除計画などのデータ；研究に使用される製剤の投薬量、その効果、及び結果の解釈に重要であり得る任意の他の所見を照合した。
【０１１６】
投薬量を、各動物の体重範囲に応じて以下の表１に基づいて割り当て、当該投薬量を、各動物についての個別のワークシートに記録した。
【０１１７】
【表１】
2019516793.tif 000002
【０１１８】
【表２】
2019516793.tif 000003
【０１１９】
投与経路は局所（スポットオン）であった。スポットオン形態の製品を首の領域に配置し、被毛に目立つ流出がないように被毛を分けた後に、頭の後ろ、頸椎のレベルで、当該領域の中央で、皮膚上で適用を行った。
【０１２０】
処置群を、研究開始時に動物１頭当たり最低ダニ１５匹で自然感染した動物６頭で構成した。寄生虫の計数のために、当該寄生虫の制御及び計数に排他的に割り当てた熟練作業者によって、各動物を手作業で検査した。
【０１２１】
同様の条件で、残りの標本６頭を対照群として使用した。
【０１２２】
製品を適用した０日目、そして次に２４及び４８時間後に、各動物を計数し、０日目より処置後７、１４、２１、２８及び３５日目に継続して計数した。有効性の持続性を評価するために、各動物を自然に再感染させた。
【０１２３】
処置後３５日目までの研究に伴い行われた計数の各々における各イヌについて得られた結果を表３に示す。
【０１２４】
有効性の割合Ｅを評価するために、Abbotの式を用い、その結果を表４に詳述する。
Ｅ（％）＝１００×（Ａ−Ｂ）／Ａ
Ａ＝対照群における寄生虫数の幾何平均
Ｂ＝処置群における寄生虫数の幾何平均
【０１２５】
【表３】
2019516793.tif 000004
【０１２６】
【表４】
2019516793.tif 000005
【０１２７】
結論
表４から、有効性の最も高い割合は投与後２１日目に到達し、この時９６．９４％になることが理解される。
評価した製品のダンピング力は、製品適用の４８時間後に５０％より大きく、２日目で６１．９２％の有効性であった。
表４の解析から、イヌ科におけるRiphisephalus種の寄生虫病に関して、製品の有効性は、１４日目に７５％を超え、その後の全ての計数においてその範囲を超えたままであったことが明らかとなる。
【０１２８】
［実施例４：成犬にスポットオン手法によって投与されたプラジカンテルの薬物動態］
イヌ科動物６頭に、本発明の組成物中０．１４５ml/kgの用量のプラジカンテルをスポットオン経路で投与した。報告すべきインシデントはなかった。動物７頭は、陰性対照であったため処置を受けなかった。
【０１２９】
１、２、４、６、１２、２４及び４８時間後に試料を採取した。報告すべきインシデントはなかった。２時間を超えない間に、全ての試料を実験室に送り、そこで遠心分離し、そしてその血漿を分離して、試料を定量するまで−２０℃に凍結した。
【０１３０】
以下の表は、得られたプラジカンテルの血漿濃度の個々の値を表す。
【０１３１】
【表５】
2019516793.tif 000006
【０１３２】
【表６】
2019516793.tif 000007
【０１３３】
結論：
本研究は、イヌに投与されるプラジカンテルのスポットオン製剤の薬物動態データを提供する最初の試験である。結果は、４時間から６時間に及ぶ範囲を持つ５時間のＴmax、及び１４．５mg/kgの投与量に対して７７．６ng/mlのＣmaxを有する４８時間まで検出可能な血漿濃度の存在を示す。
【０１３４】
プラジカンテルは、ネコの処置を意図とした製品において、そのスポットオン投与のために製剤化されている。例えば、商業的には、２つの他の抗寄生虫薬と組合せて製剤化された製品のProfender（登録商標）が存在する。European Medicines Agency（EMA）の承認を受けたProfender（登録商標）に関する報告によると、この研究で投与された用量（０．１４ml/kg）と同様のプラジカンテル用量の最大濃度は、６１．３±４４．１ng/mlであった。これは示されたデータと一致している（EMA, 2008）。他方、本研究において記録されたプラジカンテルのＴmaxは、イヌに経口剤形で投与されたプラジカンテルに関するCommitee of Veterinary Medicinal Productsによって発行されたSummaryに報告されたもの（ピークは３０〜１２０分に到達する）よりも大きい（EMEA - European Medicines Evaluation Agency, 1996, Praziquantel: Summary Report (1)。http://www.ema.europa.euldocs/en GB/document_library/Maximum Residue_Limits_Reportl2009111IWC500015784.pdf から得られる）。
【０１３５】
Xieら（Xie, S., Pan, B., Shi, B., Zhang, Z., Zhang, X., Wang, M., & Zhou, W.(2011). Solid lipid nanoparticle suspension enhanced the therapeutic efficacy of praziquantel against tapeworm. International Journal of Nanomedicine, 6,2367- 2374. doi:10.2147/IJN.S24919）は、プラジカンテル原末製剤の薬物動態パラメータを、ナノ粒子化されたものと比較した（両方とも皮下投与用である）。この場合に投与された用量は、５mg/kgであった。即ち、我々の研究で使用されたものよりも、３倍超少々小さい。Xieらの研究は、４７．８２ng/mlのＣmaxを示し、Ｔmaxは１．４５時間であり、４８時間後には１０ng/ml未満の値であった。したがって、この研究で見出されたＣｐの範囲は、他の著者らによって公表された記録と矛盾しないものであり得ると結論付けることができる。Xieらによって報告されたように、皮下経路によって保証されるより高い吸収速度は、スポットオン経路によって提供される投与の大いなる容易さによって補償され得るものである。４８時間後には、一方の製剤と他方の製剤によって検出される血漿濃度が同等であることに留意すべきである。
【０１３６】
要約すると：イヌへのスポットオン経路によって投与されるべきプラジカンテルを含有する本発明による獣医学的組成物は、他の投与経路によって適用される同様の製剤について報告されたものと同等の薬物動態挙動を示す。
【国際調査報告】
2019516793.tif 000008