(57)【要約】大気汚染物質から皮膚、頭皮、毛髪および外部粘膜を保護するための、オーク抽出物、ブドウ種子抽出物および緑茶抽出物を含む化粧品組成物の使用が開示される。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
大気汚染物質からの皮膚、頭皮、毛髪および外部粘膜の保護における、オーク抽出物、ブドウ種子抽出物および緑茶抽出物を含む化粧品組成物の使用であって、前記大気汚染物質が重金属である使用。
【請求項２】
前記外部粘膜が鼻粘膜または口腔粘膜である、請求項１に記載の使用。
【請求項３】
前記外部粘膜が唇である、請求項２に記載の使用。
【請求項４】
局所投与のための、請求項１〜３に記載の使用。
【請求項５】
前記オーク抽出物は、総ポリフェノール含量が３０％〜６０％ｗ／ｗの範囲、より好ましくは４５％ｗ／ｗ以上であることを特徴とする、請求項１〜４に記載の使用。
【請求項６】
前記オーク抽出物が、０．０１％〜５％ｗ／ｗ、好ましくは０．０５％〜１％ｗ／ｗの範囲、より好ましくは０．２５％ｗ／ｗ、最も好ましくは０．１％ｗ／ｗの量で存在する、請求項１〜５に記載の使用。
【請求項７】
前記ブドウ種子抽出物は、総プロアントシアニジン含量（フォリン法により計算され、カテキン類として表される）が９５％ｗ／ｗ以上、およびモノマー含量（カテキンとして表されるエピカテキンとカテキンの合計に由来する）が５％〜１５％ｗ／ｗの範囲であることを特徴とする、請求項１〜６に記載の使用。
【請求項８】
前記ブドウ種子抽出物が、０．０１％〜５％ｗ／ｗ、好ましくは０．０５％〜１％ｗ／ｗの範囲、より好ましくは０．２５％ｗ／ｗ、最も好ましくは０．１％ｗ／ｗの量で存在する、請求項１〜７に記載の使用。
【請求項９】
前記緑茶抽出物は、ポリフェノール含量（フォリン法により計算され、カテキン類として表される）が４０％ｗ／ｗ以上、およびカテキン含量（エピカテキン−３−Ｏ−ガラートとして表される）が１５％ｗ／ｗ以上であることを特徴とする、請求項１〜８に記載の使用。
【請求項１０】
前記緑茶抽出物が、０．０１％〜５％ｗ／ｗ、好ましくは０．０５％〜１％ｗ／ｗの範囲、より好ましくは０．２５％ｗ／ｗ、最も好ましくは０．１％ｗ／ｗの量で存在する、請求項１〜９に記載の使用。
【請求項１１】
抽出物が水性乾燥抽出物である、請求項１〜１０に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、オーク抽出物、ブドウ種子抽出物および緑茶抽出物を含み、大気汚染物質からの保護に有用な化粧品組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
大気汚染が人間の健康に重大な影響を及ぼしていることは長い間知られており、最近、その影響に関するいくつかの特別な警告が当局によって発せられた。例えば、２０１４年に、米国環境保護庁は、１億４，２００万人を超えるアメリカ人が、大気環境が国家環境大気質基準（https://www.epa.gov/air-trends）を満たさない地域に住んでいると報告した。
【０００３】
同年、ＷＨＯは、７００万人の早期死亡を大気汚染への暴露に帰し（http://who.int/mediacentre/news/releases/2014/air-pollution/en/）、大気汚染物質が内臓器官に悪影響を及ぼすという証拠が増えている（Curr. Vasc. Pharmacol., 2006, 4, 199-203）。
【０００４】
内臓器官に加えて、呼吸器管は明らかに大気汚染物質の主要な標的であり（Annu. Rev. Public Health, 1994, 15, 107-132）、皮膚は、その広い表面と継続的な暴露のために、最も露出した標的器官の１つである。
【０００５】
今日まで、皮膚の健康に対する環境の影響は、主に太陽光からの紫外線の皮膚への影響に関して評価されている（J. Invest. Dermatol., 2003, 120, 1087-1093、Prog. Biophys. Mol. Biol., 2006, 92, 119-131）。しかしながら、紫外線に加えて、汚染には、潜在的に皮膚の健康にさらなる危険を伴う可能性がある有機物や無機物も含まれる。
【０００６】
環境汚染物質の中には、ＮＯ、ＣＯおよびＳＯ2などのガス状汚染物質や揮発性有機化合物（ＶＯＣ）から、残留有機汚染物質（農薬やダイオキシン様化合物を含む）まで様々な化学物質が分類されている。
【０００７】
さらに、粒子状物質（ガス中の懸濁液中の液体の液滴および／または固体の複雑な混合物や、カドミウム、鉛、クロムおよび水銀のような重金属は、一般的な大気汚染物質である）は、典型的には空気中に懸濁した炭素粒子によって吸収され、皮膚に浸透して蓄積することができるため、生体蓄積による健康リスクの原因である（Environ. Pollut., 2008, 151, 362-367）。
【０００８】
環境汚染物質が皮膚に損傷を与え得る全体的なメカニズムの説明がない場合、現在利用可能なデータに基づいて皮膚損傷の主要な原因として特定されているいくつかのメカニズムがある。主に重金属に関する該メカニズムは、以下を含む。
−フリーラジカルの生成（J. Toxicol. Cut & Ocular Toxicol., 1987, 6 (3), 183-191）
−炎症カスケードの誘発（重金属を含む粉末は、炎症性サイトカインの遺伝子発現を増加させることが明らかとなっている）（Toxicol. Lett., 1999, 105, 92-99）
−自然防御メカニズムの減少
【０００９】
皮膚の外部組織は、大気汚染物質（特に重金属）に最も暴露される組織であり、フリーラジカルに対する細胞の防御を低減させる。そして、重金属は、自然防御メカニズムの有効性を低下させ、皮膚の老化を促進するため、他のガス状汚染物質の毒性を悪化させる。
【００１０】
これらの事象は、特に、（皺および黒ずんだ斑点の形成の増加を伴う）外因性皮膚老化の加速（Biol. Chem., 2010, 391, 1235-1248、J. Investig. Dermatol., 2010, 130, 2719-2726）およびアトピー性皮膚炎の増加（Allergy, 1996, 51, 532-539）をもたらすことが実証されている。
【００１１】
大気汚染物質が皮膚に有害な影響を及ぼすメカニズムを完全に理解するためには、さらなる詳細な研究が必要であるが、科学的な証拠が限られていることから、頭皮や毛髪への暴露を制限することの他に、大気汚染から頭皮や毛髪を保護するためのガイドラインはない（JEADV, 2015, 29, 2326-2332）。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
上記の要因を考慮すると、特に大気汚染物質から皮膚、頭皮、毛髪および外部粘膜を効果的に保護する化粧品組成物を見出す必要性が依然として存在する。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
発明の概要
本発明は、オーク抽出物、ブドウ種子抽出物および緑茶抽出物を含み、大気汚染物質から皮膚、頭皮、毛髪および外部粘膜を保護するために有用な化粧品組成物に関する。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
発明の説明
本発明は、オーク抽出物、ブドウ種子抽出物および緑茶抽出物を含み、大気汚染物質から皮膚、頭皮、毛髪および外部粘膜を保護するために有用な化粧品組成物の使用に関する。
【００１５】
好ましい態様によれば、本発明に係る組成物は、外部粘膜、特に鼻および口腔の粘膜（唇など）を保護するために有用である。
【００１６】
オーク抽出物（Ｑ）は、総ポリフェノール含量が、好ましくは３０％〜６０％ｗ／ｗの範囲、より好ましくは４５％ｗ／ｗ以上であることを特徴とする抽出物である。オーク抽出物（Ｑ）は、好ましくは水性乾燥抽出物である。
【００１７】
好ましい態様によれば、オーク抽出物は樹皮から得ることができる。
【００１８】
オーク抽出物は、組成物中に０．０１％〜５％ｗ／ｗ、好ましくは０．０５％〜１％ｗ／ｗ、より好ましくは０．０５％〜０．２５％ｗ／ｗの範囲、さらにより好ましくは０．１％ｗ／ｗの量で存在することができる。
【００１９】
ブドウ種子（ＧＳ）抽出物は、好ましくは、総プロアントシアニジン含量（フォリン法により計算され、カテキン類として表される）が９５％ｗ／ｗ以上、およびＨＰＬＣ法によって評価されるモノマー含量（カテキンとして表されるエピカテキンとカテキンの合計に由来する）が５％〜１５％ｗ／ｗの範囲であることを特徴とする抽出物であり、より好ましくは水性乾燥抽出物である。
【００２０】
ブドウ種子抽出物は、組成物中に０．０１％〜５％ｗ／ｗ、好ましくは０．０５％〜１％ｗ／ｗ、より好ましくは０．０５％〜０．２５％ｗ／ｗの範囲、さらにより好ましくは０．１％ｗ／ｗの量で存在することができる。
【００２１】
緑茶（ＧＴ）抽出物は、好ましくは、ポリフェノール含量（フォリン法により計算され、カテキン類として表される）が４０％ｗ／ｗ以上、およびＨＰＬＣ法によって評価されるカテキン含量（エピカテキン−３−Ｏ−ガラートとして表される）が１５％ｗ／ｗ以上であることを特徴とする抽出物であり、より好ましくは水性乾燥抽出物である。
【００２２】
好ましい態様によれば、緑茶抽出物は、葉から得ることができる。
【００２３】
緑茶抽出物は、組成物中に０．０１％〜５％ｗ／ｗ、好ましくは０．０５％〜１％ｗ／ｗ、より好ましくは０．０５％〜０．２５％ｗ／ｗの範囲、さらにより好ましくは０．１％ｗ／ｗの量で存在することができる。
【００２４】
すべての抽出物は、市販されているか、または当業者が既知の技術を用いて容易に調製することができる。
【００２５】
組成物は、好ましくは、局所的に投与することができる。
【００２６】
本発明に係る組成物を含む製剤は、例えば、米国ニューヨーク州のＭａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．の「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ」に記載されているような従来の技術によって得ることができる。
【００２７】
局所製剤の例は、エマルション、ゲル、ファンデーション、口紅および軟膏である。
【００２８】
驚くべきことに、オーク抽出物、ブドウ種子抽出物および緑茶抽出物を含む組成物は、それらの抽出物を別々に使用した場合に得られるよりも、大気汚染物質に対する皮膚、頭皮、毛髪および外部粘膜の高い保護活性を示し、すなわち相乗的な活性を実証することが明らかとなった。これは、実施された実験的研究の結果によって裏付けられている。
【００２９】
特に、本発明に係る組成物は、大気汚染物質としての重金属によって引き起こされる有害な影響を低減するために有用であることが判明した。
【００３０】
以下の実施例は、本発明をさらに説明する。
【実施例】
【００３１】
［製剤実施例１］
【００３２】
【表１】
2019510800.tif 000002
【００３３】
実施例１の化粧品組成物、および該組成物中に存在する量と等しい量の、使用された個々の抽出物について、保護効果を評価するために行った実験を以下に記載する。
【００３４】
［実施例２］細胞生存率における有効性の評価
この試験に用いる実験モデルは、ヒト皮膚由来線維芽細胞（ＡＴＣＣ−ＣＲＬ−２７０３）によって代表される。細胞を、１０％ウシ胎仔血清を含む完全ＤＭＥＭ培地で培養し、３７℃、５％ＣＯ2の培養器中で保持した。試験を行うために、細胞がコンフルエンスになるまで増殖させた。試験を実施するために、ヒト線維芽細胞培養物を、空気分散汚染条件下で通常存在する既知の汚染物質である重金属の混合物（Ｐｂ−Ｅｆ−Ｃｒ、各金属９０μＭ）により２４時間処理した。環境損傷と同時に、該細胞培養物を、予備細胞毒性試験で細胞毒性を示さなかったものの中から選択した３つの濃度の試験製品で処理した。
【００３５】
該細胞培養物を４８時間サンプルに暴露した。試験期間の終わりに、細胞生存率をＭＴＴ試験によって評価した。ＭＴＴ（３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−２，５−ジフェニルテトラゾリウムブロマイド）試験は、細胞生存率の測定のための簡単で正確な標準比色法である。この試験は、ミトコンドリア酵素コハク酸デヒドロゲナーゼによる、黄色のテトラゾリウム塩の、青／紫ホルマザン結晶への細胞内還元に基づく。したがって、この反応は、代謝的に活性な細胞でのみ起こり、分光光度計から得られる光学濃度値は、存在する生存細胞の量と相関させることができる。各処理の終わりに、全てのウェルをＰＢＳで洗浄し、０．５ｍｇ／ｍＬのＭＴＴ溶液で染色し、３６．５℃／５％ＣＯ2雰囲気下で３時間培養した。次いで、ウェルをイソプロパノールで処理し、室温で２時間培養した。培養後、吸光度の読み取り値を、マイクロプレートリーダー（ブランクとしてイソプロパノール溶液を使用）中、５７０ｎｍで採取した。各実験条件において、処理された培養物の平均光学密度と、陰性対照の平均光学密度との比が細胞生存率を決定する。
【００３６】
陰性対照培養物（未処理、ＣＴＲ−）および陽性対照培養物（重金属のみで処理した、ＣＴＲ＋）の結果を比較した。処理は３回実施した。
【００３７】
以下の表（表１）は、タンパク質含量および陽性対照と比較した保護％として表した結果を示す。統計的に有意なｔ検定値は、ｐ＜０．０５については（＊）、ｐ＜０．９５については（＊＊）によって示される。
【００３８】
【表２】
2019510800.tif 000003
【００３９】
［実施例３］細胞代謝（タンパク質含量）における有効性の評価
この試験に用いる実験モデルは、ヒト皮膚由来線維芽細胞（ＡＴＣＣ−ＣＲＬ−２７０３）によって代表される。細胞を、１０％ウシ胎仔血清を含む完全ＤＭＥＭ培地で培養し、３７℃、５％ＣＯ2の培養器中で保持した。試験を行うために、細胞がコンフルエンスになるまで増殖させた。試験を実施するために、ヒト線維芽細胞培養物を、空気分散汚染条件下で通常存在する既知の汚染物質である重金属の混合物（Ｐｂ−Ｅｆ−Ｃｒ、各金属９０μＭ）により２４時間処理した。環境損傷と同時に、該細胞培養物を、予備細胞毒性試験で細胞毒性を示さなかったものの中から選択した３つの濃度の試験製品で処理した。
【００４０】
該細胞培養物を４８時間サンプルに暴露した。試験期間の終わりに、細胞代謝を、培養培地中のタンパク質含量を分析することによって評価した。
【００４１】
前記評価は、細胞培養培地上のローリー比色分析法によって行った。ローリー試験は、ビウレット法と同じ原理、すなわち、アルカリ媒体中でタンパク質とＣｕ＋イオンとの錯体を形成し、チロシンおよびトリプトファン残基の酸化プロセスを触媒する反応を用いる。前記酸化は、特徴的な黄色から青色に変わるフォリンチオカルトー試薬の還元を生じさせる。青色が濃いほど、生物学的マトリックス中に存在するタンパク質が多くなる。定量的測定は、既知の標準アルブミン濃度の増加により構築された検量線を使用する。
【００４２】
以下の表は、タンパク質含量および陽性対照と比較した保護％として表した結果を示す。統計的に有意なｔ検定値は、ｐ＜０．０５については（＊）、ｐ＜０．９５については（＊＊）によって示される。
【００４３】
【表３】
2019510800.tif 000004
【００４４】
上記の実施例により明らかに示されるように、本発明に係る組成物を投与することによって得られる効果は、オーク、ブドウ種子および場合により緑茶抽出物を別々に投与することによって得られる個々の効果の合計よりも大きい。換言すれば、個々の活性成分間の相互作用は、明らかな相乗効果をもたらす。
【手続補正書】
【提出日】平成30年2月7日(2018.2.7)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
大気汚染物質からの皮膚、頭皮、毛髪および外部粘膜の保護における、活性成分としてオーク抽出物、ブドウ種子抽出物および緑茶抽出物を含む化粧品組成物の非治療的使用であって、前記大気汚染物質が重金属である使用。
【請求項２】
前記外部粘膜が鼻粘膜または口腔粘膜である、請求項１に記載の使用。
【請求項３】
前記外部粘膜が唇である、請求項２に記載の使用。
【請求項４】
局所投与のための、請求項１〜３に記載の使用。
【請求項５】
前記オーク抽出物は、総ポリフェノール含量が３０％〜６０％ｗ／ｗの範囲、より好ましくは４５％ｗ／ｗ以上であることを特徴とする、請求項１〜４に記載の使用。
【請求項６】
前記オーク抽出物が、０．０１％〜５％ｗ／ｗ、好ましくは０．０５％〜１％ｗ／ｗの範囲、より好ましくは０．２５％ｗ／ｗ、最も好ましくは０．１％ｗ／ｗの量で存在する、請求項１〜５に記載の使用。
【請求項７】
前記ブドウ種子抽出物は、総プロアントシアニジン含量（フォリン法により計算され、カテキン類として表される）が９５％ｗ／ｗ以上、およびモノマー含量（カテキンとして表されるエピカテキンとカテキンの合計に由来する）が５％〜１５％ｗ／ｗの範囲であることを特徴とする、請求項１〜６に記載の使用。
【請求項８】
前記ブドウ種子抽出物が、０．０１％〜５％ｗ／ｗ、好ましくは０．０５％〜１％ｗ／ｗの範囲、より好ましくは０．２５％ｗ／ｗ、最も好ましくは０．１％ｗ／ｗの量で存在する、請求項１〜７に記載の使用。
【請求項９】
前記緑茶抽出物は、ポリフェノール含量（フォリン法により計算され、カテキン類として表される）が４０％ｗ／ｗ以上、およびカテキン含量（エピカテキン−３−Ｏ−ガラートとして表される）が１５％ｗ／ｗ以上であることを特徴とする、請求項１〜８に記載の使用。
【請求項１０】
前記緑茶抽出物が、０．０１％〜５％ｗ／ｗ、好ましくは０．０５％〜１％ｗ／ｗの範囲、より好ましくは０．２５％ｗ／ｗ、最も好ましくは０．１％ｗ／ｗの量で存在する、請求項１〜９に記載の使用。
【請求項１１】
抽出物が水性乾燥抽出物である、請求項１〜１０に記載の使用。
【国際調査報告】
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