(57)【要約】  ＬＯＸＬ２受容体と相互に作用するプローブ化合物、そのようなプローブ化合物を作る方法、ならびに、そのようなプローブ化合物をインビトロおよびインビボで使用する方法が本明細書に記載される。【選択図】図１
2019529387.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
プローブ化合物であって：
（ａ）小分子リシルオキシダーゼ様２（ＬＯＸＬ２）阻害剤（ＬＯＸＬ２ｉ）と；
（ｂ）ＬＯＸＬ２に結合される小分子ＬＯＸＬ２ｉの検出、単離、または検出および単離のためのタグ部分（Ｑ）と；
（ｃ）タグ部分からＬＯＸＬ２阻害剤を分離する随意のリンカー（Ｌ）と、
を含むプローブ化合物。
【請求項２】
小分子ＬＯＸＬ２ｉは、ＬＯＸＬ２対リシルオキシダーゼ（ＬＯＸ）に対して選択的である、請求項１に記載のプローブ化合物。
【請求項３】
小分子ＬＯＸＬ２ｉは、ＬＯＸＬ２のリジンチロシルキノン（ＬＴＱ）依存性のアミンオキシターゼに結合する、請求項１または２に記載のプローブ化合物。
【請求項４】
小分子ＬＯＸＬ２ｉは、置換または非置換のヘテロシクリルメチルアミン化合物、あるいは置換または非置換のアリールメチルアミン化合物である、請求項１から３のいずれか１つに記載のプローブ化合物。
【請求項５】
小分子ＬＯＸＬ２ｉは、置換または非置換のヘテロアリールメチルアミンである、請求項１から４のいずれか１つに記載のプローブ化合物。
【請求項６】
小分子ＬＯＸＬ２ｉは、置換または非置換の（単環式のヘテロアリール）メチルアミンである、請求項１から５のいずれか１つに記載のプローブ化合物。
【請求項７】
小分子ＬＯＸＬ２ｉは、置換または非置換の（６−員の単環式のヘテロアリール）メチルアミンである、請求項１から６のいずれか１つに記載のプローブ化合物である。
【請求項８】
小分子ＬＯＸＬ２ｉは、置換または非置換のピリジニルメチルアミン、置換または非置換のピリミジニルメチルアミン、置換または非置換のピラジニルメチルアミン、置換または非置換のピリダジニルメチルアミン、あるいは置換または非置換のトリアジニルメチルアミンである、請求項１から７のいずれか１つに記載のプローブ化合物。
【請求項９】
小分子ＬＯＸＬ２ｉは、置換または非置換の（５−員の単環式のヘテロアリール）メチルアミンである、請求項１から６のいずれか１つに記載のプローブ化合物。
【請求項１０】
小分子ＬＯＸＬ２ｉは、置換または非置換のイミダゾリルメチルアミン、置換または非置換のピラゾリルメチルアミン、置換または非置換のトリアゾリルメチルアミン、置換または非置換のフリルメチルアミン、置換または非置換のチエニルメチルアミン、置換または非置換のイソオキサゾリルメチルアミン、置換または非置換のチアゾリルメチルアミン、置換または非置換のオキサゾリルメチルアミン、置換または非置換のイソチアゾリルメチルアミン、置換または非置換のピロリルメチルアミン、置換または非置換のオキサジアゾリルメチルアミン、置換または非置換のチアジアゾリルメチルアミン、あるいは置換または非置換のフラザニルメチルアミンである、置換または非置換の（５−員の単環式のヘテロアリール）メチルアミンである、請求項１から６のいずれか１つに記載のプローブ化合物である。
【請求項１１】
小分子ＬＯＸＬ２ｉは、置換または非置換の（二環式のヘテロアリール）メチルアミンである、請求項１から５のいずれか１つに記載のプローブ化合物である。
【請求項１２】
小分子ＬＯＸＬ２ｉは、置換または非置換のインドリジニルメチルアミン、置換または非置換のインドリルメチルアミン、置換または非置換のベンゾフラニルメチルアミン、置換または非置換のベンゾチオフェニルメチルアミン、置換または非置換のインダゾリルメチルアミン、ベンズイミダゾリルメチルアミン、置換または非置換のプリニルメチルアミン、置換または非置換のキノリジニルメチルアミン、置換または非置換のキノリニルメチルアミン、置換または非置換のイソキノリニルメチルアミン、置換または非置換のシンノリニルメチルアミン、置換または非置換のフタラジニルメチルアミン、置換または非置換のキナゾリニルメチルアミン、置換または非置換のキノキサリニルメチルアミン、置換または非置換の１，８−ナフチリジニルメチルアミン、あるいは置換または非置換のプテリジニルメチルアミンである、置換または非置換の（二環式のヘテロアリール）メチルアミンである、請求項１から５のいずれか１つに記載のプローブ化合物。
【請求項１３】
小分子ＬＯＸＬ２ｉは、置換または非置換のキノリノニルメチルアミン、置換または非置換のイソキノリノニルメチルアミン、置換または非置換のクロモニルメチルアミン、あるいは置換または非置換のクマリニルメチルアミンである、置換または非置換の二環式のヘテロシクリルメチルアミンである、請求項１から４のいずれか１つに記載のプローブ化合物。
【請求項１４】
ＬＯＸＬ２に結合される小分子ＬＯＸＬ２ｉの検出、単離、または検出および単離のためのタグ部分（Ｑ）は、固体支持体、レポーター基、親和性精製のために使用されるタグ、固体支持体上の式（Ｉ）の化合物を選別するか固定化するために使用されるタグ、ハプテン、蛍光部分、放射性部分、磁気共鳴画像（ＭＲＩ）部分、比色部分、発光部分、生物発光部分、化学発光部分、オリゴヌクレオチド、あるいはそれらの組み合わせである、請求項１から１３のいずれか１つに記載のプローブ化合物。
【請求項１５】
以下の式（１）の構造を有する化合物であって：
【化１】
2019529387.tif 000067
式中、
Ｑは、生体サンプル中の式（Ｉ）の化合物の検出、単離、または検出および単離のためのタグ部分であり；あるいは、
式（Ｉ）の化合物が、式（Ｉ）の化合物中に放射性変異体または任意の原子の同位体変異体を含む場合、Ｑは存在せず；
Ｌは存在しないか、リンカーであり；
Ｒ１はそれぞれ独立して、Ｈ、Ｄ、またはＦであり；
環Ａは、非置換または置換のアリール、あるいは非置換または置換の複素環であって、ここで、環Ａが置換される場合、環Ａは１、２、あるいは３のＲａ基で置換され；
Ｌ１は、Ｘ１−Ｙ１−、−Ｙ１−Ｘ１−、またはＹ１であり；
Ｘ１は、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ２−、−ＮＲ２Ｃ（＝Ｏ）−、または−ＮＲ２−であり；
Ｒ２は、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６フルオロアルキル、またはＣ１−Ｃ６ジュウテロアルキルでありであり；
Ｙ１は存在しないか、Ｃ１−Ｃ６アルキレンであり；
Ｂは存在しないか、非置換または置換の単環式の炭素環、非置換または置換の二環式の炭素環、非置換または置換の単環式の複素環、あるいは非置換または置換の二環式の複素環であり、ここで、Ｂが置換される場合、Ｂは１以上のＲｂで置換され；
ＲａおよびＲｂはそれぞれ独立して、Ｈ、Ｄ、ハロゲン、ＣＮ、−ＯＲ５、−ＳＲ５、−Ｓ（＝Ｏ）Ｒ４、−Ｓ（＝Ｏ）２Ｒ４、−Ｓ（＝Ｏ）２Ｎ（Ｒ５）２、ＮＲ５Ｓ（＝Ｏ）２Ｒ４、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ４、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ４、−ＣＯ２Ｒ５、−ＯＣＯ２Ｒ４、Ｎ（Ｒ４）２、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ５）２、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ５）２、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｒ４、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＯＲ４、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６フルオロアルキル、Ｃ１−Ｃ６ジュウテロアルキルであり、Ｃ１−Ｃ６ヘテロアルキル、置換または非置換のＣ３−Ｃ１０シクロアルキル、置換または非置換のＣ２−Ｃ１０ヘテロシクロアルキル、置換または非置換のアリール、および置換または非置換のヘテロアリールからなる群から選択され；
Ｒ４はそれぞれ独立して、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６フルオロアルキル、Ｃ１−Ｃ６ジュウテロアルキルであり、Ｃ１−Ｃ６ヘテロアルキル、置換または非置換のＣ３−Ｃ１０シクロアルキル、置換または非置換のＣ２−Ｃ１０ヘテロシクロアルキル、置換または非置換のアリール、および置換または非置換のヘテロアリールから選択され；
Ｒ５はそれぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６フルオロアルキル、Ｃ１−Ｃ６ジュウテロアルキルであり、Ｃ１−Ｃ６ヘテロアルキル、置換または非置換のＣ３−Ｃ１０シクロアルキル、置換または非置換のＣ２−Ｃ１０ヘテロシクロアルキル、置換または非置換のアリール、置換または非置換のヘテロアリール、−Ｃ１−Ｃ４アルキレン−（置換または非置換のＣ３−Ｃ８シクロアルキル）、置換または非置換のＣ２−Ｃ８ヘテロシクロアルキル、−Ｃ１−Ｃ４アルキレン−（置換または非置換のＣ２−Ｃ８ヘテロシクロアルキル）、置換または非置換のアリール、−Ｃ１−Ｃ４アルキレン−（置換または非置換のアリール）、置換または非置換のヘテロアリール、および−Ｃ１−Ｃ４アルキレン−（置換または非置換のヘテロアリール）から選択され；あるいは、
同じＮ原子上の２つのＲ５は、それらが結合しているＮ原子と一体となって、置換または非置換のＮ含有複素環を形成する、化合物。
【請求項１６】
Ｌは存在しないか、式−Ｌ２−Ｃ−Ｌ３−を有するリンカーであり；
Ｌ２は、Ｘ２−Ｙ２−、−Ｙ２−Ｘ２−、またはＹ２であり；
Ｘ２は、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２−、−Ｓ（＝Ｏ）２ＮＲ３−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ３−、−ＮＲ３Ｃ（＝Ｏ）−、−ＮＲ３Ｓ（＝Ｏ）２−、または―ＮＲ３−であり；
Ｒ３は、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６フルオロアルキル、またはＣ１−Ｃ６ジュウテロアルキルでありであり；
Ｙ２は存在しないか、Ｃ１−Ｃ６アルキレンであり；
Ｃは存在しないか、置換または非置換のＣ１−Ｃ６アルキル、置換または非置換のＣ１−Ｃ６フルオロアルキル、置換または非置換のＣ１−Ｃ６ヘテロアルキル、置換または非置換のＣ３−Ｃ８シクロアルキル、−Ｃ１−Ｃ４アルキレン−（置換または非置換のＣ３−Ｃ８シクロアルキル）、置換または非置換のＣ２−Ｃ８ヘテロシクロアルキル、−Ｃ１−Ｃ４アルキレン−（置換または非置換のＣ２−Ｃ８ヘテロシクロアルキル）、置換または非置換のアリール、−Ｃ１−Ｃ４アルキレン−（置換または非置換のアリール）、置換または非置換のヘテロアリール、あるいは−Ｃ１−Ｃ４アルキレン−（置換または非置換のヘテロアリール）であり；ここで、Ｃが置換される場合、Ｃは１以上のＲｃで置換され；あるいは、
ＣおよびＲ３が同じＮ原子に結合している場合、ＣおよびＲ３は、それらが結合しているＮ原子と一体となって環Ｄを形成し、ここで、環Ｄは置換または非置換のＮ含有複素環であり、環Ｄが置換される場合、環Ｄは１、２、または３のＲｄで置換され；
ＲｃおよびＲｄはそれぞれ独立して、Ｄ、ハロゲン、ＣＮ、−ＯＲ５、−ＳＲ５、−Ｓ（＝Ｏ）Ｒ４、−Ｓ（＝Ｏ）２Ｒ４、−Ｓ（＝Ｏ）２Ｎ（Ｒ５）２、ＮＲ５Ｓ（＝Ｏ）２Ｒ４、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ４、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ４、−ＣＯ２Ｒ５、−ＯＣＯ２Ｒ４、−Ｎ（Ｒ４）２、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ５）２、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ５）２、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｒ４、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＯＲ４、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６フルオロアルキル、Ｃ１−Ｃ６ジュウテロアルキルであり、Ｃ１−Ｃ６ヘテロアルキル、置換または非置換のＣ３−Ｃ１０シクロアルキル、置換または非置換のＣ２−Ｃ１０ヘテロシクロアルキル、置換または非置換のアリール、および置換または非置換のヘテロアリールからなる群から選択され；あるいは、
同じ炭素原子に結合する２つのＲｄ基は、それらが結合する炭素原子と一体となって、置換または非置換の炭素環、あるいは置換または非置換の複素環のいずれかを形成し；
Ｌ３は存在しないか、−Ｌ４−Ｌ５−Ｌ６−Ｌ７−であり；
Ｌ４は存在しないか、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２−、−ＮＲ４−、−ＣＨ（ＯＨ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−ＣＨ（＝Ｎ）−、−ＣＨ（＝Ｎ−ＮＨ）−、−ＣＣＨ３（＝Ｎ）−、−ＣＣＨ３（＝Ｎ−ＮＨ）−、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ−、−（ ＣＨ２）ｐ−、−（ＯＣＨ２ ＣＨ２）ｐ−、または−（ＯＣＨ２ ＣＨ２）ｐ−であり、ｐは１、２、３、４、５、または６であり；
Ｌ５は存在しないか、非置換または置換のアルキレン、非置換または置換のヘテロアルキレン、非置換または置換のアルケニレン、非置換または置換のアルキニレン、非置換または置換のシクロアルキレン、非置換または置換のヘテロシクロアルキレン、非置換または置換のアリーレン、非置換または置換のヘテロアリーレン、−（ＯＣＨ２ ＣＨ２）ｐ−、あるいは−（ＯＣＨ２ ＣＨ２）ｐ−であり、ｐは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２であり；
Ｌ６は存在しないか、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−ＮＲ４−、−ＣＨ（ＯＨ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ−、または−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ−であり；
Ｌ７は存在しないか、非置換または置換のアルキレン、非置換または置換のヘテロアルキレンである、請求項１５に記載の化合物。
【請求項１７】
Ｒ１がそれぞれＨであり；
Ｒａはそれぞれ独立して、Ｈ、Ｄ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、−ＣＮ、−ＯＲ５、−ＣＯ２Ｒ５、−Ｎ（Ｒ５）２、−ＮＲ２Ｃ（＝Ｏ）Ｒ４、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２、−Ｃ（ＣＨ３）３、−ＣＨ２Ｆ、−ＣＨＦ２、−ＣＦ３、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、置換または非置換の単環式のＣ２−Ｃ６ヘテロシクロアルキル、置換または非置換のフェニル、および置換または非置換の単環式のヘテロアリールからなる群から選択される、請求項１５または１６に記載の化合物。
【請求項１８】
Ｒａはそれぞれ独立して、Ｈ、Ｄ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、−ＣＮ、−ＯＣＨ３、−ＯＣＦ３、−ＣＨ３、−ＣＨ２Ｆ、−ＣＨＦ２、−ＣＦ３、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、置換または非置換の単環式のＣ２−Ｃ６ヘテロシクロアルキル、置換または非置換のフェニル、あるいは置換または非置換の単環式のヘテロアリールからなる群から選択される、請求項１５から１７のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項１９】
Ｒａはそれぞれ独立して、Ｈ、Ｄ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、−ＣＮ、−ＯＣＨ３、−ＯＣＦ３、−ＣＨ３、−ＣＨ２Ｆ、−ＣＨＦ２、および−ＣＦ３からなる群から選択される、請求項１５から１８のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項２０】
Ｒａはそれぞれ独立して、Ｈ、Ｄ、および−ＣＦ３からなる群から選択される、請求項１５から１９のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項２１】
環Ａは非置換または置換の単環式の芳香族の複素環であり、ここで、環Ａが置換される場合、環Ａは１、２、または３のＲａ基で置換される、請求項１５から２０のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項２２】
環Ａは非置換または置換の単環式の芳香族の６−員の複素環、あるいは非置換または置換の単環式の芳香族の５−員の複素環であり、ここで、環Ａが置換される場合、環Ａは１、２、または３のＲａ基で置換される、請求項１５から２１のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項２３】
環Ａは非置換または置換のピリジニル、非置換または置換のピリミジニル、非置換または置換のピラジニル、非置換または置換のピリダジニル、あるいは非置換または置換のトリアジニルであり、ここで、環Ａが置換される場合、環Ａは１、２、または３のＲａ基で置換される、請求項１５から２２のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項２４】
式（Ｉ）の化合物が、式（ＩＩ）または式（ＩＩＩ）の構造を有する請求項１５から２３にいずれか１つに記載の化合物。
【化２】
2019529387.tif 000068
【請求項２５】
式（Ｉ）の化合物は式（ＩＩａ）の構造を有する請求項１５から２４のいずれか１つに記載の化合物。
【化３】
2019529387.tif 000069
【請求項２６】
環Ａは、非置換または置換のイミダゾリル、非置換または置換のピラゾリル、非置換または置換のトリアゾリル、非置換または置換のテトラゾリル、非置換または置換のフリル、非置換または置換のチエニル、非置換または置換のイソキサゾリル、非置換または置換のチアゾリル、非置換または置換のオキサゾリル、非置換または置換のイソチアゾリル、非置換または置換のピロリル、非置換または置換のオキサジアゾリル、非置換または置換のチアジアゾリル、あるいは非置換または置換のフラザニルである、非置換または置換の単環式の芳香族５−員の複素環である、請求項１５から２２のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項２７】
環Ａは、非置換または置換の二環式の複素環である、請求項１５から２０のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項２８】
環Ａは、非置換または置換のキノリノン、非置換または置換のイソキノリノン、非置換または置換のクロモン、あるいは非置換または置換のクマリンである、請求項１５から２０のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項２９】
式（Ｉ）の化合物は、式（ＩＶ）、式（Ｖ）、式（ＶＩ）、式（ＶＩＩ）、または式（ＶＩＩＩ）の構造を有する、請求項１５から２０のいずれか１つに記載の化合物。
【化４】
2019529387.tif 000070
【請求項３０】
環Ａは、非置換または置換のインドリジニル、非置換または置換のインドリル、非置換または置換のベンゾフラニル、非置換または置換のベンゾチオフェニル、非置換または置換のインダゾリル、非置換または置換のベンズイミダゾリル、非置換または置換のプリニル、非置換または置換のキノリジニル、非置換または置換のキノリニル、非置換または置換のイソキノリニル、非置換または置換のシンノリニル、非置換または置換のフタラジニル、非置換または置換のキナゾリニル、非置換または置換のキノキサリニル、非置換または置換の１、８−ナフチリジニル、あるいは非置換または置換のプテリジニルである、請求項１５から２０のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項３１】
式（Ｉ）の化合物は、式（ＩＸ）、式（Ｘ）、式（ＸＩ）、または式（ＸＩＩ）の構造を有する、請求項１５から２０のいずれか１つに記載の化合物。
【化５】
2019529387.tif 000071
【請求項３２】
環Ａは、非置換または置換のフェニル、あるいは非置換または置換のナフチルである、請求項１５から２０のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項３３】
Ｌ１は存在しないか、Ｘ１、またはＸ１−Ｃ１−Ｃ６アルキレンである、請求項１５から３２のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項３４】
Ｌ１は存在しないか、−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ２、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＣＨ２−、−ＮＨＣ（＝Ｏ）−、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２−、または−ＮＨ−である、請求項１５から３３のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項３５】
Ｌ１は存在しないか、−Ｏ−、または−Ｏ−ＣＨ２−である、請求項１５から３４のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項３６】
Ｌ１は−Ｏ−である、請求項１５から３５のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項３７】
Ｂは、単環式のＣ３−Ｃ６炭素環、二環式のＣ６−Ｃ１２炭素環、単環式のＣ１−Ｃ５複素環、二環式のＣ５−Ｃ１０複素環である、請求項１５から３６のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項３８】
Ｂはフェニルである、請求項１５から３７のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項３９】
Ｂは、
【化６】
2019529387.tif 000072
である、請求項１５から３８のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項４０】
Ｂは、ナフチル、インダニル、インデニルまたはテトラヒドロナフチルである、二環式のＣ９−Ｃ１０炭素環である、請求項１５から３７のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項４１】
環Ａは、１−４のＮ原子と０または１つのＯまたはＳ原子を含む単環式の複素環、０−４のＮ原子と１つのＯまたはＳ原子を含む単環式の複素環、１−４のＮ原子と０または１つのＯまたはＳ原子を含む二環式の複素環、あるいは０−４のＮ原子と１つのＯまたはＳ原子を含む二環式の複素環である、請求項１５から３７のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項４２】
Ｂは、ピロリジニル、ピロリジノニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロフラノニル、ジヒドロフラノニル、ジヒドロフラニル、テトラヒドロチエニル、オキサゾリジノニル、テトラヒドロピラニル、ジヒドロピラニル、テトラヒドロチオピラニル、ピペリジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、ピペラジニル、アジリジニル、アゼチジニル、オキセタニル、チエタニル、ホモピペリジニル、オキセパニル、チエパニル、オキサゼピニル、ジアゼピニル、チアゼピニル、１，２，３，６−テトラヒドロピリジニル、インドリニル、インドリノニル、１，２，３，４−テトラヒドロキノリニル、１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリニル、３，４−ジヒドロ−２（１Ｈ）−キノリノニル、フラニル、ピロリル、オキサゾリル、チアゾリル、イミダゾリル、ピラゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、イソキサゾリル、イソチアゾリル、オキサジアゾリル、チアジアゾリル、ピリジニル、ピリミジニル、ピラジニル、ピリダジニル、トリアジニル、キノリニル、イソキノリニル、キナゾリニル、キノキサリニル、ナフチリジニル、インドリル、インダゾリル、ベンズオキサゾリル、ベンズイソキサゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾチエニル、ベンゾチアゾリル、ベンズイミダゾリル、プリニル、シンノリニル、フタラジニル、プテリジニル、ピリドピリミジニル、ピラゾロピリミジニル、またはアザインドリルである、請求項１５から３７のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項４３】
Ｂは、
【化７】
2019529387.tif 000073
である、請求項１５から３７のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項４４】
Ｂは、
【化８】
2019529387.tif 000074
である、請求項１５から３７のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項４５】
式（Ｉ）の化合物は、式（ＩＩｂ）の構造を有する、請求項１５から３８のいずれか１つに記載の化合物。
【化９】
2019529387.tif 000075
【請求項４６】
式（Ｉ）の化合物は、以下の式（ＩＩｃ）の構造を有する、請求項４５に記載の化合物。
【化１０】
2019529387.tif 000076
【請求項４７】
Ｌは、−Ｌ２−Ｃ−Ｌ３−であり；
Ｌ２は、−Ｘ２−Ｙ２−、−Ｙ２−Ｘ２−、またはＹ２であり；
Ｘ２は、−Ｏ−、−Ｓ（＝Ｏ）２ＮＲ３−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ３−、−ＮＲ３Ｃ（＝Ｏ）−、−ＮＲ３Ｓ（＝Ｏ）２−、または―ＮＲ３−であり；
Ｒ３は、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６フルオロアルキル、またはＣ１−Ｃ６ジュウテロアルキルでありであり；
Ｙ２は存在しないか、Ｃ１−Ｃ６アルキレンであり；
Ｃは存在しないか、置換または非置換のＣ１−Ｃ６アルキル、置換または非置換のＣ１−Ｃ６フルオロアルキル、置換または非置換のＣ１−Ｃ６ヘテロアルキル、置換または非置換のＣ３−Ｃ８シクロアルキル、−Ｃ１−Ｃ４アルキレン−（置換または非置換のＣ３−Ｃ８シクロアルキル）、置換または非置換のＣ２−Ｃ８ヘテロシクロアルキル、−Ｃ１−Ｃ４アルキレン−（置換または非置換のＣ２−Ｃ８ヘテロシクロアルキル）、置換または非置換のアリール、−Ｃ１−Ｃ４アルキレン−（置換または非置換のアリール）、置換または非置換のヘテロアリール、あるいは−Ｃ１−Ｃ４アルキレン−（置換または非置換のヘテロアリール）であり；ここで、Ｃが置換される場合、Ｃは１以上のＲｃで置換され；あるいは、
ＣおよびＲ３が同じＮ原子上にある場合、ＣおよびＲ３は、それらが結合しているＮ原子と一体になって環Ｄを形成し、ここで、環Ｄは置換または非置換の単環式のＮ含有複素環、あるいは置換または非置換の二環式のＮ含有複素環であり、環Ｄが置換される場合、環Ｄは１、２、または３のＲｄで置換される、請求項１６から４６のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項４８】
Ｌ２は、−Ｘ２−Ｙ２−であり；
Ｘ２は、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ３−であり；
Ｙ２は存在しないか、Ｃ１−Ｃ６アルキレンである、請求項１６から４７のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項４９】
Ｃは存在しないか、置換または非置換のＣ１−Ｃ６アルキル、置換または非置換のＣ１−Ｃ６フルオロアルキル、置換または非置換のＣ１−Ｃ６ヘテロアルキル、置換または非置換のＣ３−Ｃ８シクロアルキル、−Ｃ１−Ｃ４アルキレン−（置換または非置換のＣ３−Ｃ８シクロアルキル）、置換または非置換のＣ２−Ｃ８ヘテロシクロアルキル、−Ｃ１−Ｃ４アルキレン−（置換または非置換のＣ２−Ｃ８ヘテロシクロアルキル）、置換または非置換のアリール、−Ｃ１−Ｃ４アルキレン−（置換または非置換のアリール）、置換または非置換のヘテロアリール、あるいは−Ｃ１−Ｃ４アルキレン−（置換または非置換のヘテロアリール）であり；ここで、Ｃが置換される場合、Ｃは１以上のＲｃで置換され；あるいは、
ＣおよびＲ３が同じＮ原子上にある場合、ＣおよびＲ３は、それらが結合しているＮ原子と一体となって環Ｄを形成し、ここで環Ｄは、置換または非置換のアジリジニル、置換または非置換のアゼチジニル、置換または非置換のピロリジニル、置換または非置換のピロリジノニル、置換または非置換のピペリジニル、置換または非置換のピペリジノニル、置換または非置換のモルホリニル、置換または非置換のチオモルホリニル、置換または非置換のピペラジニル、置換または非置換のピペラジノニル、置換または非置換のインドリニル、置換または非置換のインドリノニル、置換または非置換の１，２，３，４−テトラヒドロキノリニル、置換または非置換の１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリニル、あるいは置換または非置換の３，４−ジヒドロ−２（１Ｈ）−キノリノニルであり、ここで環Ｄが置換される場合、環Ｄは１、２、または３のＲｄで置換される、請求項１６から４８のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項５０】
式（Ｉ）の化合物は、以下の式（ＩＩｄ）の構造を有する、請求項１６から４９のいずれか１つに記載の化合物。
【化１１】
2019529387.tif 000077
【請求項５１】
Ｌ３は存在しないか、−Ｌ４−Ｌ５−Ｌ６−Ｌ７−であるリンカーであり；
Ｌ４は存在しないか、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２−、−ＮＲ４−、−ＣＨ（ＯＨ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−ＣＨ（＝Ｎ）−、−ＣＨ（＝Ｎ−ＮＨ）−、−ＣＣＨ３（＝Ｎ）−、−ＣＣＨ３（＝Ｎ−ＮＨ）−、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ−、−（ ＣＨ２）ｐ−、−（ＯＣＨ２ ＣＨ２）ｐ−、または−（ＯＣＨ２ ＣＨ２）ｐ−であり、ｐは１、２、３、４、５、または６であり；
Ｌ５は存在しないか、非置換または置換のアルキレン、非置換または置換のヘテロアルキレン、非置換または置換のアルケニレン、非置換または置換のアルキニレン、非置換または置換のシクロアルキレン、非置換または置換のヘテロシクロアルキレン、非置換または置換のアリーレン、非置換または置換のヘテロアリーレン、−（ＯＣＨ２ ＣＨ２）ｐ−、あるいは−（ＯＣＨ２ ＣＨ２）ｐ−であり、ｐは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２であり；
Ｌ６は存在しないか、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−ＮＲ４−、−ＣＨ（ＯＨ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ−、または−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ−であり；
Ｌ７は存在しないか、非置換または置換のアルキレン、非置換または置換のヘテロアルキレンである、請求項１６から５０のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項５２】
Ｑは、生体サンプル中の式（Ｉ）の化合物の検出、単離、または検出および単離のためのタグ部分であり、タグ部分は：固体支持体、レポーター基、親和性精製のために使用されるタグ、固体支持体上の式（Ｉ）の化合物を選別するか固定化するために使用されるタグ、ハプテン、蛍光部分、放射性部分、磁気共鳴画像（ＭＲＩ）部分、比色部分、発光部分、生物発光部分、化学発光部分、オリゴヌクレオチド、あるいはそれらの組み合わせであり；あるいは、
式（Ｉ）の化合物が、式（Ｉ）の化合物中に任意の原子の放射性変異体または同位体変異体を含む場合、Ｑは存在しない、請求項１５から５１のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項５３】
Ｑは、タンパク質に特異的に結合して、緊密に結合した複合体を生成することができる親和性精製のために使用されるタグである、請求項１５から５２のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項５４】
Ｑは、アビジンまたはストレプトアビジンに特異的に結合することができるタグである、請求項１５から５３のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項５５】
Ｑはビオチンまたはデスチオビオチンである、請求項１５から５４のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項５６】
Ｌは、
【化１２】
2019529387.tif 000078
である、請求項１５から５５のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項５７】
−Ｌ−Ｑは、
【化１３】
2019529387.tif 000079
である、請求項５５または５６に記載の化合物。
【請求項５８】
Ｑは、ビオチン、クマリン色素、ローダミン色素、キサンテン色素、シアニン色素、ＢＯＤＩＰＹ色素、ルシファーイエロー色素、ジゴキシゲニン、ダンシル、またはジニトロフェニルから選択されるハプテンである、請求項１５から５２のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項５９】
Ｑはタグ部分であり：蛍光部分、放射性部分、比色部分、発光部分、化学発光部分、またはそれらの組み合わせである、請求項１５から５２のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項６０】
Ｑは蛍光部分であるタグ部分である、請求項１５から５２のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項６１】
Ｑは、キサンテン色素、シアニン色素、スクアライン色素、環置換のスクアライン色素、ナフタレン色素、クマリン色素、オキサジアゾール色素、アントラセン色素、オキサジン色素、アクリジン色素、アリールメチン色素、ＢＯＤＩＰＹ色素、およびテトラピロール色素からなる群から選択される蛍光部分であるタグ部分である、請求項１５から５２のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項６２】
Ｑは、フルオレセイン色素、ローダミン色素、オレゴングリーン色素、エオシン色素、テキサスレッド色素、シアニン色素、インドカルボシアニン色素、オキサカルボシアニン色素、チアカルボシアニン色素、メロシアニン色素、Ｓｅｔａ，ＳｅＴａｕ，Ｓｑｕａｒｅ色素、ダンシル色素、プロダン色素、クマリン色素、ＢＯＤＩＰＹ色素、ピリジルオキサゾール色素、ニトロベンゾオキサジアゾール色素、ベンゾオキサジアゾール色素、ＤＲＡＱ５、ＤＲＡＱ７、ＣｙＴＲＡＫオレンジカスケードブルー、ナイルレッド、ナイルブルー、クレシルバイオレット、オキサジン  １７０、プロフラビン色素、アクリジンオレンジ色素、アクリジンイエロー色素、オーラミン色素、クレシルバイオレット色素、マラカイトグリーン色素、ポルフィン色素、フタロシアニン色素、およびビリルビン色素からなる群から選択される蛍光部分である、請求項１５から５２のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項６３】
Ｑは、キサンテン、シアニン、スクアライン、ナフタレン、クマリン、オキサジアゾール、アントラセン、ピレン、オキサジン、アクリジン、アリールメチン、テトラピロール、ダンシル、ＢＯＤＩＰＹである、請求項１５から５２のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項６４】
Ｑはシアニン、クマリン、またはダンシルである、請求項１５から５２のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項６５】
Ｑは、キサンテン、シアニン２、シアニン３、シアニン３Ｂ、シアニン３．５、シアニン５、シアニン５．５、シアニン７、スクアライン、ナフタレン、クマリン、オキサジアゾール、アントラセン、ピレン、オキサジン、アクリジン、アリールメチン、テトラピロール、ダンシル、ＢＯＤＩＰＹ  ＦＬ、ＢＯＤＩＰＹ  Ｒ６Ｇ、ＢＯＤＩＰＹ  ＴＭＲ、ＢＯＤＩＰＹ  ５８１／５９１、ＢＯＤＩＰＹ  ＴＲ、ＢＯＤＩＰＹ  ６３０／６５０、またはＢＯＤＩＰＹ  ６５０／６６５である、請求項１５から５２のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項６６】
―Ｌ−は、―ＮＨ−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−、
【化１４】
2019529387.tif 000080
である、請求項５８から６５のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項６７】
Ｑは、
【化１５】
2019529387.tif 000081
である、請求項６６に記載の化合物。
【請求項６８】
―Ｌ−Ｑは、
【化１６−１】
2019529387.tif 000082
【化１６−２】
2019529387.tif 000083
である、請求項６６または６７に記載の化合物。
【請求項６９】
Ｑは化学発光部分である、請求項１５から５２のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項７０】
Ｑは、過酸化物またはペルオキシダーゼによる処理後、光あるいは着色物を生成する化学発光部分である、請求項１５から５２のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項７１】
Ｑは、ルミノール、イソルミノール、Ｎ−（４−アミノブチル）−Ｎ−エチル  イソルミノール（ＡＢＥＩ）、Ｎ−（４−アミノブチル）−Ｎ−−メチル  イソルミノール（ＡＢＭＩ）、２，２’−アジノ−ビス（３−エチルベンゾチアゾリン‐６‐スルホン酸（ＡＢＴＳ）、３、３’、５、５’−テトラメチルベンジジン（ＴＭＢ）、３，３’−ジアミノベンジジン（ＤＡＢ）、ｏ−フェニレンジアミン二塩酸塩（ＯＰＤ）、ＡｍｐｌｅｘＲｅｄ、ＡＥＣ、またはホモバニリン酸である、請求項１５から５２、または６９のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項７２】
Ｑは、西洋ワサビペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）による処理後、光あるいは着色物を生成する化学発光部分である、請求項１５から５２、または６９のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項７３】
Ｑは、３，３’−ジアミノベンジジン（ＤＡＢ）、３，３’，５，５’−テトラメチルベンジジン（ＴＭＢ）、２、２’−アジノビス［３−エチルベンゾチアゾリン−６−スルホン酸］（ＡＢＴＳ）、ｏ−フェニレンジアミン、または二塩酸塩（ＯＰＤ）である、請求項６９に記載の化合物。
【請求項７４】
Ｑはルシフェラーゼ酵素のための基質である、請求項１５から５２のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項７５】
ＱはＤ−ルシフェリン、またはセレンテラジンである、請求項７４に記載の化合物。
【請求項７６】
Ｑは、アルカリホスファターゼ（ＡＰ）による処理後、光あるいは着色物を生成する化学発光部分である、請求項１５から５２のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項７７】
Ｑは、ニトロブルーテトラゾリウム塩化物（ＮＢＴ）、５−ブロモ−４−クロロ−３−インドリルリン酸塩（ＢＣＩＰ）、またはｐ−ニトロフェニル燐酸（ＰＮＰＰ）である、請求項７６に記載の化合物。
【請求項７８】
Ｑは、グルコースオキシダーゼによる処理後、光あるいは着色物を生成する化学発光部分である、請求項１５から５２のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項７９】
Ｑはニトロブルーテトラゾリウム塩化物（ＮＢＴ）である、請求項７８に記載の化合物。
【請求項８０】
Ｑは、β−ガラクトシダーゼによる処理後、光あるいは着色物を生成する化学発光部分である、請求項１５から５２のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項８１】
Ｑは、５−ブロモ−４−クロロ−３−インドイル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（ＢＣＩＧまたはＸ−Ｇａｌ）である、請求項８０に記載の化合物。
【請求項８２】
Ｑは存在せず、式（Ｉ）の化合物が、式（Ｉ）の化合物中に任意の原子の放射性変異体または同位体変異体を含む、請求項１５から５２のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項８３】
式（Ｉ）の化合物は、式（Ｉ）の化合物中に任意の原子の放射性変異体または同位体変異体を含み、陽電子射出断層撮影（ＰＥＴ）分析における使用に適している、請求項１５から８２のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項８４】
Ｑは存在せず、式（Ｉ）の化合物は、トリチウム（３Ｈ）、フッ素−１８（１８Ｆ）、炭素−１１（１１Ｃ）、炭素−１４（１４Ｃ）、窒素−１３（１３Ｎ）、酸素−１５（１５Ｏ）、または硫黄−３５（３５Ｓ）から選択される１以上の原子を含む、請求項１５から８３のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項８５】
−Ｌ−Ｑは、
【化１７】
2019529387.tif 000084
である、請求項１５から５２のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項８６】
Ｑはキレート化された放射性同位体を含む、請求項１５から５２のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項８７】
Ｑは、陽電子射出断層撮影（ＰＥＴ）分析に適したキレート化された放射性同位体を含む、請求項１５から５２のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項８８】
Ｑは、キレート化された放射性同位体を含み、ここで、Ｑは、ジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）キレート、１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＡ）キレート、または１，４，７−トリアザシクロノナン−１，４，７−トリス酢酸（ＮＯＴＡ）キレート、または１、４、７、１０−テトラアザシクロドデカン−１、４、７、１０−テトラメチル−１、４、７、１０−四酢酸（ＤＯＴＭＡ）キレート、または放射性同位体である、請求項１５から５２のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項８９】
Ｌは、
【化１８】
2019529387.tif 000085
である、請求項８８に記載の化合物。
【請求項９０】
Ｑは、
【化１９】
2019529387.tif 000086
であって、Ｚが放射性同位体である、請求項８６から８９のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項９１】
Ｑは、銅−６４（６４Ｃｕ）、ガリウム−６８（６８Ｇａ）、またはテクネチウム−９９ｍ（９９ｍＴｃ）である、キレート化された放射性同位体を含む、請求項８６から９０のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項９２】
−Ｌ−Ｑは、
【化２０】
2019529387.tif 000087
である、請求項８６から９１のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項９３】
Ｑは磁気共鳴画像（ＭＲＩ）部分である、請求項１５から５２のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項９４】
Ｑは、磁気共鳴画像（ＭＲＩ）に適した原子のキレートを含む、請求項１５から５２のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項９５】
Ｑは磁気共鳴画像（ＭＲＩ）に適した原子のキレートを含み、ここで、キレートは、ジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）キレート、１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＡ）キレート、１，４，７−トリアザシクロノナン−１，４，７−トリス酢酸（ＮＯＴＡ）キレート、または１、４、７、１０−テトラアザシクロドデカン−１、４、７、１０−テトラメチル−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＭＡ）キレートである、請求項１５から５２のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項９６】
Ｑは、銅、ガリウム、ツリウム、ユウロピウム、ガドリニウム、またはマンガンのキレートを含む、請求項１５から５２のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項９７】
Ｑは、ガドテル酸、ガドジアミド、ガドベン酸、ガドペンテト酸、ガドテリドール、ガドベルセタミド、ガドキセト酸、ガドブトロール、およびガドホスベセットから選択されるガドリニウムのキレートを含む、請求項１５から５２のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項９８】
−Ｌ−Ｑは、
【化２１】
2019529387.tif 000088
である、請求項１５から５２のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項９９】
Ｑは固体支持体である、請求項１５から５２のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項１００】
Ｑは、ナノ粒子、ビーズ、または樹脂である固体支持体である、請求項１５から５２のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項１０１】
Ｑは、鉄、コバルト、ニッケル、ガドリニウム、クロム、マンガン、および金から選択された１以上の金属を含む、ナノ粒子またはビーズである、請求項１００に記載の化合物。
【請求項１０２】
Ｑは、磁性または常磁性のナノ粒子あるいはビーズである、請求項１００から１０１のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項１０３】
磁気部分はフェライト磁気ビーズである、請求項１０２に記載の化合物。
【請求項１０４】
Ｌ３は非切断可能なリンカーである、請求項９９から１０３のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項１０５】
−Ｌ−Ｑは、
【化２２】
2019529387.tif 000089
であり、ＦＧがフェライトビーズである、請求項９９から１０４のいずれか１つに記載の化合物。
【請求項１０６】
請求項１から１０５のいずれか１つに記載の化合物で標識されたＬＯＸＬ２を含む組成物。
【請求項１０７】
生体サンプル中のＬＯＸＬ２を定量化するための方法であって、該方法は：
（ｉ）
（ａ）小分子リシルオキシダーゼ様２（ＬＯＸＬ２）阻害剤（ＬＯＸＬ２ｉ）と；
（ｂ）ＬＯＸＬ２に結合される小分子ＬＯＸＬ２ｉの検出、単離、または検出および単離のためのタグ部分（Ｑ）と；
（ｃ）タグ部分からＬＯＸＬ２阻害剤を分離する随意のリンカー（Ｌ）と、
を含むプローブ化合物を、１以上のタンパク質を含む生体サンプルに接触させる工程であって、ここで、接触は、生体サンプル中のプローブ化合物とタンパク質との間の相互作用が平衡に到達するために十分な条件下および持続時間で達成される工程と；
（ｉｉ）プローブ化合物で標識されたタンパク質を識別および定量化する工程と、
を含む方法。
【請求項１０８】
生体サンプル中のＬＯＸＬ２とリシルオキシダーゼ様２（ＬＯＸＬ２）阻害剤（ＬＯＸＬ２ｉ）とのエンゲージメントを評価するための方法であって、該方法は；
（ｉ）小分子ＬＯＸＬ２リシルオキシダーゼ様２（ＬＯＸＬ２）阻害剤（ＬＯＸＬ２ｉ）を、１以上のタンパク質を含む生体サンプルに接触させる工程であって、ここで、接触は、生体サンプル中のＬＯＸＬ２ｉとタンパク質との間の相互作用が平衡に到達するために十分な条件下および持続時間で達成される工程と；
（ｉｉ）
（ａ）小分子リシルオキシダーゼ様２（ＬＯＸＬ２）阻害剤（ＬＯＸＬ２ｉ）と；
（ｂ）ＬＯＸＬ２に結合される小分子ＬＯＸＬ２ｉの検出、単離、または検出および単離のためのタグ部分（Ｑ）と；
（ｃ）タグ部分からＬＯＸＬ２阻害剤を分離する随意のリンカー（Ｌ）と、
を含むプローブ化合物を、工程（ｉ）の生体サンプル中のプローブ化合物とタンパク質との間の相互作用が平衡に到達するために十分な条件下および持続時間で、工程（ｉ）の生体サンプルに添加する工程と；
（ｉｉｉ）プローブ化合物で標識されたタンパク質を識別し定量化する工程と、
を含む方法。
【請求項１０９】
標的タンパク質および非標的タンパク質とＬＯＸＬ２阻害剤（ＬＯＸＬ２ｉ）との間の相互作用を評価するための方法であって：
（ｉ）小分子リシルオキシダーゼ様２（ＬＯＸＬ２）阻害剤（ＬＯＸＬ２ｉ）を、１以上のタンパク質を含む生体サンプルに接触させる工程であって、ここで、接触は、生体サンプル中のＬＯＸＬ２ｉとタンパク質との間の相互作用が平衡に到達するために十分な条件下および持続時間で達成される工程と；
（ｉｉ）
（ａ）小分子リシルオキシダーゼ様２（ＬＯＸＬ２）阻害剤（ＬＯＸＬ２ｉ）と；
（ｂ）ＬＯＸＬ２に結合される小分子ＬＯＸＬ２ｉの検出、単離、または検出および単離のためのタグ部分（Ｑ）と；
（ｃ）タグ部分からＬＯＸＬ２阻害剤を分離する随意のリンカー（Ｌ）と、
を含むプローブ化合物を、工程（ｉ）の生体サンプル中のプローブ化合物とタンパク質との間の相互作用が平衡に到達するために十分な条件下および持続時間で、工程（ｉ）の生体サンプルに添加する工程と：
（ｉｉｉ）プローブ化合物で標識されたタンパク質を識別し定量化する工程と、
を含む方法。
【請求項１１０】
ＬＯＸＬ２ｉを再設計する工程であって、再設計されたＬＯＸＬ２ｉを用いて工程（ｉ）−（ｉｉｉ）が繰り返される場合、プローブ化合物で捕らえられたＬＯＸＬ２タンパク質を除去するか変更する工程、をさらに含む、請求項１０９に記載の方法。
【請求項１１１】
生体サンプルは、タンパク質を含む細胞溶解物または組織である、請求項１０７から１１０のいずれか１つに記載の方法。
【請求項１１２】
生体サンプルはＬＯＸＬ２を含む、請求項１０７から１１１のいずれか１つに記載の方法。
【請求項１１３】
プローブ化合物は、請求項１から１０５のいずれか１つに記載の化合物である、請求項１０７から１１２のいずれか１つに記載の方法。
【請求項１１４】
哺乳動物において、ＬＯＸＬ２を発現する組織または器官をインビボで画像化するための方法であって、該方法は：
（ｉ）
（ａ）小分子リシルオキシダーゼ様２（ＬＯＸＬ２）阻害剤（ＬＯＸＬ２ｉ）と；
（ｂ）陽電子射出断層撮影（ＰＥＴ）分析または磁気共鳴画像（ＭＲＩ）を用いてＬＯＸＬ２に結合された小分子ＬＯＸＬ２ｉを検出するのに適したタグ部分（Ｑ）と；
（ｃ）（ｂ）のタグ部分から（ａ）のＬＯＸＬ２ｉを分離する随意のリンカー（Ｌ）と、を含むプローブ化合物を投与する工程と；
（ｉｉ）哺乳動物に陽電子射出断層撮影（ＰＥＴ）分析または磁気共鳴画像（ＭＲＩ）を行なう工程と、
を含む方法。
【請求項１１５】
ＬＯＸＬ２を過剰発現させる哺乳動物中の組織または器官を識別するための方法であって、該方法は：
（ｉ）
（ａ）小分子リシルオキシダーゼ様２（ＬＯＸＬ２）阻害剤（ＬＯＸＬ２ｉ）と；
（ｂ）陽電子射出断層撮影（ＰＥＴ）分析または磁気共鳴画像（ＭＲＩ）を用いてＬＯＸＬ２に結合された小分子ＬＯＸＬ２ｉを検出するのに適したタグ部分（Ｑ）と；
（ｃ）（ｂ）のタグ部分から（ａ）のＬＯＸＬ２ｉを分離する随意のリンカー（Ｌ）と、を含むプローブ化合物を哺乳動物に投与する工程と：
（ｉｉ）哺乳動物に陽電子射出断層撮影（ＰＥＴ）分析または磁気共鳴画像（ＭＲＩ）を行なう工程と、
を含む方法。
【請求項１１６】
ＬＯＸＬ２を過剰発現させる組織または器官をエクスビボで画像化するための方法であって、該方法は：
（ｉ）
（ａ）小分子リシルオキシダーゼ様２（ＬＯＸＬ２）阻害剤（ＬＯＸＬ２ｉ）と；
（ｂ）免疫蛍光測定法（ＩＦ）、免疫組織化学的検査（ＩＨＣ）、またはオートラジオグラフィを用いて、ＬＯＸＬ２に結合された小分子ＬＯＸＬ２ｉを検出するのに適したタグ部分（Ｑ）と、
を含むプローブ化合物で組織または器官をインキュベートする工程と；
（ｉｉ）免疫蛍光検査法（ＩＦ）、免疫組織化学的検査（ＩＨＣ）、またはオートラジオグラフィを行なう工程と、
を含む方法。
【請求項１１７】
哺乳動物は線維症または癌であると診断されている、請求項１１４または１１５に記載の方法。
【請求項１１８】
請求項１−１０５のいずれか１つに記載のプローブ化合物と容器とを含むキット。
【請求項１１９】
プローブ化合物の使用についての説明書および情報をさらに含む、請求項１１８に記載のキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
＜関連出願＞
本出願は、２０１６年９月０７日出願された「ＣＨＥＭＩＣＡＬ  ＰＲＯＢＥＳ  ＯＦ  ＬＹＳＹＬ  ＯＸＩＤＡＳＥ−ＬＩＫＥ  ２  ＡＮＤ  ＵＳＥＳ  ＴＨＥＲＥＯＦ」と題する米国仮特許出願第６２／３８４，６４２号の利益を主張し、全体として参照により取り込まれる。
【０００２】
リシルオキシダーゼ様２（ＬＯＸＬ２）のためのプローブ化合物、そのような化合物を作る方法、およびそのようなＬＯＸＬ２プローブ化合物を使用する方法が本明細書に記載される。
【背景技術】
【０００３】
リシルオキシダーゼ様２（ＬＯＸＬ２）は、細胞外マトリックスタンパク質の架橋を触媒するアミンオキシターゼ酵素である。ＬＯＸＬ２も、細胞の上皮間葉転換を媒介するような細胞内のプロセスにも関与する。ＬＯＸＬ２シグナル伝達は例えば、線維性疾患および癌に関係している。
【発明の概要】
【０００４】
本明細書に記載されるプローブ化合物は、複雑な細胞環境内のＬＯＸＬ２のプロファイリングのために有用である。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるプローブ化合物は、プロテオームとＬＯＸＬ２阻害剤との相互作用を評価するために使用される。プロテオームは、または与えられた条件下で、与えられた時間で、与えられた生物体、生物系、組織、または細胞によって発現されたすべてのタンパク質の組み合わせあるいは集合として定義される。本明細書に記載される方法およびプローブ化合物は、バイオマーカーの発見、インビボの画像化、および小分子スクリーニング、ならびに薬物標的の発見の分野を進歩させるために適用され得る。
【０００５】
本明細書に記載されるプローブ化合物は３要素：つまり、（ｉ）反応性基または「ウォーヘッド（ｗａｒｈｅａｄ）」と；（ｉｉ）リンカー領域と；（ｉｉｉ）タグと、を含む。反応性基または「ウォーヘッド」は、ＬＯＸＬ２への選択性を提供する。いくつかの実施形態では、リンカーは、標的の組織または細胞に対するプローブ化合物の特異性をコントロールするように設計され得る。タグは、複雑な細胞環境からのプローブ化合物の検出、単離、または検出および単離のために使用される。
【０００６】
１つの態様において、以下を含むプローブ化合物が本明細書で提供される：
（ａ）小分子リシルオキシダーゼ様２（ＬＯＸＬ２）阻害剤（ＬＯＸＬ２ｉ）；
（ｂ）ＬＯＸＬ２に結合される小分子ＬＯＸＬ２ｉの検出、単離、または検出および単離のためのタグ部分（Ｑ）；ならびに、
（ｃ）タグ部分からＬＯＸＬ２阻害剤を分離する随意のリンカー（Ｌ）。
【０００７】
いくつかの実施形態では、小分子ＬＯＸＬ２ｉは、ＬＯＸＬ２対リシルオキシダーゼ（ＬＯＸ）に対して選択的である。いくつかの実施形態では、小分子ＬＯＸＬ２ｉは、リジンチロシルキノン（ｔｙｒｏｓｙｌｑｕｉｎｏｎｅ）（ＬＴＱ）依存性のＬＯＸＬ２のアミンオキシターゼに結合する。
【０００８】
いくつかの実施形態では、小分子ＬＯＸＬ２ｉは、置換または非置換のヘテロシクリルメチルアミン化合物、あるいは置換または非置換のアリールメチルアミン化合物である。
【０００９】
いくつかの実施形態では、小分子ＬＯＸＬ２ｉは、置換または非置換のヘテロアリールメチルアミンである。
【００１０】
いくつかの実施形態では、小分子ＬＯＸＬ２ｉは、置換または非置換の（単環式のヘテロアリール）メチルアミンである。
【００１１】
いくつかの実施形態では、小分子ＬＯＸＬ２ｉは、置換または非置換の６−員の単環式の（ヘテロアリール）メチルアミンである。いくつかの実施形態では、小分子ＬＯＸＬ２ｉは、置換または非置換のピリジニルメチルアミン、置換または非置換のピリミジニルメチルアミン、置換または非置換のピラジニルメチルアミン、置換または非置換のピリダジニルメチルアミン、あるいは置換または非置換のトリアジニルメチルアミンである。
【００１２】
いくつかの実施形態では、小分子ＬＯＸＬ２ｉは、置換または非置換のピリジニルメチルアミン、あるいは置換または非置換のピリミジニルメチルアミンである。いくつかの実施形態では、小分子ＬＯＸＬ２ｉは、置換または非置換のピリジニルメチルアミンである。いくつかの実施形態では、小分子ＬＯＸＬ２ｉは、置換または非置換のピリミジニルメチルアミンである。
【００１３】
いくつかの実施形態では、小分子ＬＯＸＬ２ｉは、置換または非置換の（５−員の単環式のヘテロアリール）メチルアミンである。いくつかの実施形態では、小分子ＬＯＸＬ２ｉは、置換または非置換の（５−員の単環のヘテロアリール）メチルアミン、置換または非置換のイミダゾリルメチルアミン、置換または非置換のピラゾリルメチルアミン、置換または非置換のトリアゾリルメチルアミン、置換または非置換のフリルメチルアミン、置換または非置換のチエニルメチルアミン、置換または非置換のイソオキサゾリルメチルアミン、置換または非置換のチアゾリルメチルアミン、置換または非置換のオキサゾリルメチルアミン、置換または非置換のイソチアゾリルメチルアミン、置換または非置換のピロリルメチルアミン、置換または非置換のオキサジアゾリルメチルアミン、置換または非置換のチアジアゾリルメチルアミン、あるいは置換または非置換のフラザニルメチルアミンである。
【００１４】
いくつかの実施形態では、小分子ＬＯＸＬ２ｉは、置換または非置換の（二環式のヘテロアリール）メチルアミン）である。いくつかの実施形態では、小分子ＬＯＸＬ２ｉは、置換または非置換の（二環式のヘテロアリール）メチルアミンであり、それは、置換または非置換のインドリジニルメチルアミン、置換または非置換のインドリルメチルアミン、置換または非置換のベンゾフラニルメチルアミン、置換または非置換のベンゾチオフェニルメチルアミン、置換または非置換のインダゾリルメチルアミン、ベンズイミダゾリルメチルアミン、置換または非置換のプリニルメチルアミン、置換または非置換のキノリジニルメチルアミン、置換または非置換のアクリジニルメチルアミン、置換または非置換のイソキノリニルメチルアミン、置換または非置換のシンノリニルメチルアミン、置換または非置換のフタラジニルメチルアミン、置換または非置換のキナゾリニルメチルアミン、置換または非置換のキノキサリニルメチルアミン、置換または非置換の１，８−ナフチリジニルメチルアミン、あるいは置換または非置換のプテリジニルメチルアミンである。
【００１５】
いくつかの実施形態では、小分子ＬＯＸＬ２ｉは、置換または非置換の（二環式のヘテロシクリル）メチルアミンである、置換または非置換の二環式のヘテロシクリルメチルアミンである。いくつかの実施形態では、二環式のヘテロシクリルは、置換または非置換のキノリノニルメチルアミン、置換または非置換のイソキノリノニルメチルアミン、置換または非置換のクロモニルメチルアミン、あるいは置換または非置換のクマリニルメチルアミンである。
【００１６】
いくつかの実施形態では、小分子ＬＯＸＬ２ｉは、置換または非置換のフェニルメチルアミン、あるいは置換または非置換のナフチルメチルアミンである。
【００１７】
いくつかの実施形態では、ＬＯＸＬ２に結合される小分子ＬＯＸＬ２ｉの検出、単離、または検出および単離のためのタグ部分（Ｑ）は：固体支持体、レポーター基、親和性精製のために使用されるタグ、固体支持体上の式（Ｉ）の化合物を選別するか固定化するために使用されるタグ、ハプテン、蛍光部分、放射性部分、磁気共鳴画像（ＭＲＩ）部分、比色（ｃｏｌｏｒｏｍｅｔｒｉｃ）部分、発光部分、生物発光部分、化学発光部分、オリゴヌクレオチド、あるいはそれらの組み合わせからなる群から選択される。
【００１８】
１つの態様では、本明細書に記載のプローブ化合物は、以下の式（Ｉ）の構造を有する化合物であり：
【００１９】
【化１】
2019529387.tif 000003
式中、
Ｑは、生体サンプルにおける式（Ｉ）の化合物の検出、単離、または検出および単離のためのタグ部分であるか；あるいは、
式（Ｉ）の化合物が、式（Ｉ）の化合物中に任意の原子の放射性変異体または同位体変異体を含む場合、Ｑは存在せず；
Ｌは存在しないか、リンカーであり；
Ｒ１はそれぞれ独立してＨ、Ｄ、またはＦであり；
環Ａは、非置換または置換のアリール、あるいは非置換または置換の複素環であって、ここで、環Ａが置換される場合、環Ａは１、２、あるいは３のＲａ基で置換され；
Ｌ１は、Ｘ１−Ｙ１−、−Ｙ１−Ｘ１−、またはＹ１であり；
Ｘ１は−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ２−、−ＮＲ２Ｃ（＝Ｏ）−、または−ＮＲ２−であり；
Ｒ２はＨ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６フルオロアルキル、またはＣ１−Ｃ６ジュウテロアルキルでありでありであり；
Ｙ１は、存在しないか、Ｃ１−Ｃ６アルキレンであり；
Ｂは存在しないか、非置換または置換の単環式の炭素環、非置換または置換の二環式の炭素環、非置換または置換の単環式の複素環、あるいは非置換または置換の二環式の複素環であり、ここで、Ｂが置換される場合、Ｂは１以上のＲｂで置換され；
ＲａおよびＲｂはそれぞれ独立して、Ｈ、Ｄ、ハロゲン、ＣＮ、−ＯＲ５、−ＳＲ５、−Ｓ（＝Ｏ）Ｒ４、−Ｓ（＝Ｏ）２Ｒ４、−Ｓ（＝Ｏ）２Ｎ（Ｒ５）２、ＮＲ５Ｓ（＝Ｏ）２Ｒ４、Ｃ（＝Ｏ）Ｒ４、ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ４、ＣＯ２Ｒ５、ＯＣＯ２Ｒ４、Ｎ（Ｒ４）２、ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ５）２、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｒ４、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６フルオロアルキル、Ｃ１−Ｃ６ジュウテロアルキルであり、Ｃ１−Ｃ６ヘテロアルキル、置換または非置換のＣ３−Ｃ１０シクロアルキル、置換または非置換のＣ２−Ｃ１０ヘテロシクロアルキル、置換または非置換のアリール、あるいは置換または非置換のヘテロアリールからなる群から選択され；
Ｒ４はそれぞれ独立して、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６フルオロアルキル、Ｃ１−Ｃ６ジュウテロアルキルであり、Ｃ１−Ｃ６ヘテロアルキル、置換または非置換のＣ３−Ｃ１０シクロアルキル、置換または非置換のＣ２−Ｃ１０ヘテロシクロアルキル、置換または非置換のアリール、および置換または非置換のヘテロアリールから選択され；
Ｒ５はそれぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６フルオロアルキル、Ｃ１−Ｃ６ジュウテロアルキルであり、Ｃ１−Ｃ６ヘテロアルキル、置換または非置換のＣ３−Ｃ１０シクロアルキル、置換または非置換のＣ２−Ｃ１０ヘテロシクロアルキル、置換または非置換のアリール、置換または非置換のヘテロアリール、−Ｃ１−Ｃ４アルキレン−（置換または非置換のＣ３−Ｃ８シクロアルキル）、置換または非置換のＣ２−Ｃ８ヘテロシクロアルキル、−Ｃ１−Ｃ４アルキレン−（置換または非置換のＣ２−Ｃ８ヘテロシクロアルキル）、置換または非置換のアリール、−Ｃ１−Ｃ４アルキレン−（置換または非置換のアリール）、非置換のヘテロアリール、および−Ｃ１−Ｃ４アルキレン−（置換または非置換のヘテロアリール）から選択され；あるいは、
同じＮ原子上の２つのＲ５は、それらが結合しているＮ原子と一体となって、置換または非置換のＮ含有複素環を形成する。
【００２０】
いくつかの実施形態では、Ｌは存在しないか、式−Ｌ２−Ｃ−Ｌ３−を有するリンカーであり；
Ｌ２は、Ｘ２−Ｙ２−、−Ｙ２−Ｘ２−、またはＹ２であり；
Ｘ２は、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２−、−Ｓ（＝Ｏ）２ＮＲ３−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ３−、−ＮＲ３Ｃ（＝Ｏ）−、−ＮＲ３Ｓ（＝Ｏ）２−、または―ＮＲ３−であり；
Ｒ３は、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６フルオロアルキル、またはＣ１−Ｃ６ジュウテロアルキルであり：
Ｙ２は、存在しないか、Ｃ１−Ｃ６アルキレンであり；
Ｃは存在しないか、置換または非置換のＣ１−Ｃ６アルキル、置換または非置換のＣ１−Ｃ６フルオロアルキル、置換または非置換のＣ１−Ｃ６ヘテロアルキル、置換または非置換のＣ３−Ｃ８シクロアルキル、−Ｃ１−Ｃ４アルキレン−（置換または非置換のＣ３−Ｃ８シクロアルキル）、置換または非置換のＣ２−Ｃ８ヘテロシクロアルキル、−Ｃ１−Ｃ４アルキレン−（置換または非置換のＣ２−Ｃ８ヘテロシクロアルキル）、置換または非置換のアリール、−Ｃ１−Ｃ４アルキレン−（置換または非置換のアリール）、置換または非置換のヘテロアリール、あるいは−Ｃ１−Ｃ４アルキレン−（置換または非置換のヘテロアリール）であり；ここで、Ｃが置換される場合、Ｃは１つ以上のＲｃで置換され；あるいは、
ＣおよびＲ３が同じＮ原子に結合している場合、ＣおよびＲ３は、それらが結合しているＮ原子と一体になって環Ｄを形成し、ここで、環Ｄは置換または非置換のＮ含有複素環であり、環Ｄが置換される場合、環Ｄは１、２、または３のＲｄで置換され；
ＲｃおよびＲｄはそれぞれ独立して、Ｄ、ハロゲン、ＣＮ、−ＯＲ５、−ＳＲ５、−Ｓ（＝Ｏ）Ｒ４、−Ｓ（＝Ｏ）２Ｒ４、−Ｓ（＝Ｏ）２Ｎ（Ｒ５）２、ＮＲ５Ｓ（＝Ｏ）２Ｒ４、Ｃ（＝Ｏ）Ｒ４、ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ４、ＣＯ２Ｒ５、ＯＣＯ２Ｒ４、Ｎ（Ｒ４）２、ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ５）２、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｒ４、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＯＲ４、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６フルオロアルキル、Ｃ１−Ｃ６ジュウテロアルキルであり、Ｃ１−Ｃ６ヘテロアルキル、置換または非置換のＣ３−Ｃ１０シクロアルキル、置換または非置換のＣ２−Ｃ１０ヘテロシクロアルキル、置換または非置換のアリール、あるいは置換または非置換のヘテロアリールからなる群から選択され；あるいは、
同じ炭素原子に結合する２つのＲｄ基は、それらが結合する炭素原子と一体となって、置換または非置換の炭素環、あるいは置換または非置換の複素環のいずれかを形成し；
Ｌ３は存在しないか、−Ｌ４−Ｌ５−Ｌ６−Ｌ７−であり；
Ｌ４は存在しないか、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−ＮＲ４−、−ＣＨ（ＯＨ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−ＣＨ（＝Ｎ）−、−ＣＨ（＝Ｎ−ＮＨ）−、−ＣＣＨ３（＝Ｎ）−、−ＣＣＨ３（＝Ｎ−ＮＨ）−、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ−、−（ＣＨ２）ｐ−、−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐ−、または−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐ−であり、ｐは１、２、３、４、５、または６であり；
Ｌ５は存在しないか、非置換または置換のアルキレン、非置換または置換のヘテロアルキレン、非置換または置換のアルケニレン、非置換または置換のアルキニレン、非置換または置換のシクロアルキレン、非置換または置換のヘテロシクロアルキレン、非置換または置換のアリーレン、非置換または置換のヘテロアリーレン、−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐ−、あるいは−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐ−であり、ｐは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２であり；
Ｌ６は存在しないか、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−ＮＲ４−、−ＣＨ（ＯＨ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ−、または−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ−であり；
Ｌ７は存在しないか、非置換または置換のアルキレン、非置換または置換のヘテロアルキレンである。
【００２１】
いくつかの実施形態では、環Ａは非置換または置換の複素環であり、ここで、環Ａが置換される場合、環Ａは１、２、あるいは３のＲａ基で置換される。
【００２２】
いくつかの実施形態では、環Ａは非置換または置換の単環の芳香族の複素環であり、ここで、環Ａが置換される場合、環Ａは１、２、あるいは３のＲａ基で置換される。
【００２３】
いくつかの実施形態では、環Ａは非置換または置換の単環の芳香族の６−員の複素環、あるいは非置換または置換の単環式の芳香族の５−員の複素環であり、ここで、環Ａが置換される場合、環Ａは１、２、または３のＲａ基で置換される。
【００２４】
いくつかの実施形態では、環Ａは非置換または置換のピリジニル、非置換または置換のピリミジニル、非置換または置換のピラジニル、非置換または置換のピリダジニル、あるいは非置換または置換のトリアジニルであり、ここで、環Ａが置換される場合、環Ａは１、２、または３のＲａ基で置換される。
【００２５】
いくつかの実施形態では、環Ａは非置換または置換のピリジニル、あるいは非置換または置換のピリミジニルであり、ここで、環Ａが置換される場合、環ＡはＲａで置換される。
【００２６】
いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、以下の式（ＩＩ）または式（ＩＩＩ）の構造を有する。
【００２７】
【化２】
2019529387.tif 000004
【００２８】
いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、以下の式（ＩＩａ）の構造を有する。
【００２９】
【化３】
2019529387.tif 000005
【００３０】
いくつかの実施形態では、環Ａは、非置換または置換のイミダゾリル、非置換または置換のピラゾリル、非置換または置換のトリアゾリル、非置換または置換のテトラゾリル、非置換または置換のフリル、非置換または置換のチエニル、非置換または置換のイソキサゾリル、非置換または置換のチアゾリル、非置換または置換のオキサゾリル、非置換または置換のイソチアゾリル、非置換または置換のピロリル、非置換または置換のオキサジアゾリル、非置換または置換のチアジアゾリル、あるいは非置換または置換のフラザニルである、非置換または置換の単環式の芳香族５−員の複素環である。
【００３１】
いくつかの実施形態では、環Ａは非置換または置換の二環式の複素環である。
【００３２】
いくつかの実施形態では、環Ａは、非置換または置換のキノリノン、非置換または置換のイソキノリノン、非置換または置換のクロモン、あるいは非置換または置換のクマリンである。
【００３３】
いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、以下の式（ＩＶ）、式（（Ｖ）、式（ＶＩ）、式（ＶＩＩ）、または式（ＶＩＩＩ）の構造を有する。
【００３４】
【化４】
2019529387.tif 000006
【００３５】
いくつかの実施形態では、環Ａは、非置換または置換のインドリジニル、非置換または置換のインドリル、非置換または置換のベンゾフラニル、非置換または置換のベンゾチオフェニル、非置換または置換のインダゾリル、非置換または置換のベンズイミダゾリル、非置換または置換のプリニル、非置換または置換のキノリジニル、非置換または置換のキノリニル、非置換または置換のイソキノリニル、非置換または置換のシンノリニル、非置換または置換のフタラジニル、非置換または置換のキナゾリニル、非置換または置換のキノキサリニル、非置換または置換の１、８−ナフチリジニル、あるいは非置換または置換のプテリジニルである。
【００３６】
いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、以下の式（ＩＸ）、式（Ｘ）、式（ＸＩ）、または式（ＸＩＩ）の構造を有する。
【００３７】
【化５】
2019529387.tif 000007
【００３８】
いくつかの実施形態では、小分子ＬＯＸＬ２ｉは、置換または非置換のピリジニルメチルアミン、あるいは置換または非置換のピリミジニルメチルアミンである。いくつかの実施形態では、環Ａは、非置換または置換のフェニル、あるいは非置換または置換のナフチルである。
【００３９】
いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、式（ＩＩｂ）の構造を有する。
【００４０】
【化６】
2019529387.tif 000008
【００４１】
いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、式（ＩＩｃ）の構造を有する。
【００４２】
【化７】
2019529387.tif 000009
【００４３】
いくつかの実施形態では、Ｑは、生体サンプルにおける式（Ｉ）の化合物の検出、単離、または検出および単離のためのタグ部分であり：それは、固体支持体、レポーター基、親和性精製のために使用されるタグ、固体支持体上の式（Ｉ）の化合物を選別するか固定化するために使用されるタグ、ハプテン、蛍光部分、放射性部分、磁気共鳴画像（ＭＲＩ）部分、比色（ｃｏｌｏｒｏｍｅｔｒｉｃ）部分、発光部分、生物発光部分、化学発光部分、オリゴヌクレオチド、あるいはそれらの組み合わせからなる群から選択され；あるいは、式（Ｉ）の化合物が、式（Ｉ）の化合物中に任意の原子の放射性変異体または同位体変異体を含む場合、Ｑは存在しない。
【００４４】
いくつかの実施形態では、Ｑは既知のタンパク質に特異的に結合して、緊密に結合した複合体を生成することができる親和性精製のために使用されるタグである。
【００４５】
いくつかの実施形態では、Ｑは、アビジンまたはストレプトアビジンに特異的に結合できるタグである。いくつかの実施形態では、Ｑはビオチンまたはデスチオビオチンである。
【００４６】
いくつかの実施形態では、Ｑは、ビオチン、クマリン色素、ローダミン色素、（フルオレセインのような）キサンテン色素、シアニン色素、ＢＯＤＩＰＹ色素、ルシファーイエロー色素、ジゴキシゲニン、ダンシル、またはジニトロフェニルから選択されるハプテンである。
【００４７】
いくつかの実施形態では、Ｑは、蛍光部分、放射性部分、比色部分、発光部分、化学発光部分、またはそれらの組み合わせからなる群から選択されるタグ部分である。
【００４８】
いくつかの実施形態では、Ｑは、蛍光部分であるタグ部分である。いくつかの実施形態では、Ｑは、キサンテン色素、シアニン色素、スクアライン色素、環置換のスクアライン色素、ナフタレン色素、クマリン色素、オキサジアゾール色素、アントラセン色素、オキサジン色素、アクリジン染料、アリールメチン色素、ＢＯＤＩＰＹ色素、またはテトラピロール色素からなる群から選択される蛍光部分である、タグ部分である。いくつかの実施形態では、Ｑは、フルオレセイン色素、ローダミン色素、オレゴングリーン色素、エオシン色素、テキサスレッド色素、シアニン色素、インドカルボシアニン色素、オキサカルボシアニン色素、チアカルボシアニン色素、メロシアニン色素、Ｓｅｔａ，ＳｅＴａｕ，Ｓｑｕａｒｅ色素、ダンシル色素、プロダン色素、クマリン色素、ＢＯＤＩＰＹ色素、ピリジルオキサゾール色素、ニトロベンゾオキサジアゾール色素、ベンゾオキサジアゾール色素、ＤＲＡＱ５、ＤＲＡＱ７、ＣｙＴＲＡＫオレンジカスケードブルー、ナイルレッド、ナイルブルー、クレシルバイオレット、オキサジン  １７０、プロフラビン色素、アクリジンオレンジ色素、アクリジンイエロー色素、オーラミン色素、クレシルバイオレット色素、マラカイトグリーン色素、ポルフィン色素、フタロシアニン色素１７０、またはビリルビン色素からなる群から選択される蛍光部分である。いくつかの実施形態では、Ｑは、キサンテン、シアニン、スクアライン、ナフタレン、クマリン、オキサジアゾール、アントラセン、ピレン、オキサジン、アクリジン、アリールメチン、テトラピロール、ダンシル、ＢＯＤＩＰＹである。いくつかの実施形態では、Ｑは、シアニン、クマリン、またはダンシルである。いくつかの実施形態では、Ｑは、キサンテン、シアニン２、シアニン３、シアニン３Ｂ、シアニン３．５、シアニン５、シアニン５．５、シアニン７、スクアライン、ナフタレン、クマリン、オキサジアゾール、アントラセン、ピレン、オキサジン、アクリジン、アリールメチン、テトラピロール、ダンシル、ＢＯＤＩＰＹ  ＦＬ、ＢＯＤＩＰＹ  Ｒ６Ｇ、ＢＯＤＩＰＹ  ＴＭＲ、ＢＯＤＩＰＹ  ５８１／５９１、ＢＯＤＩＰＹ  ＴＲ、ＢＯＤＩＰＹ  ６３０／６５０、またはＢＯＤＩＰＹ  ６５０／６６５である。
【００４９】
いくつかの実施形態では、Ｑは、化学発光部分であるタグ部分である。いくつかの実施形態では、Ｑは、過酸化物またはペルオキシダーゼによる処理後、光あるいは着色物を生成する化学発光部分である。いくつかの実施形態では、Ｑは、ルミノール、イソルミノール、Ｎ−（４−アミノブチル）−Ｎ−エチル  イソルミノール（ＡＢＥＩ）、Ｎ−（４−アミノブチル）−Ｎ−メチル  イソルミノール（ＡＢＭＩ）、２，２’−アジノ−ビス（３−エチルベンゾチアゾリン‐６‐スルホン酸（ＡＢＴＳ）、３、３’、５、５’−テトラメチルベンジジン（ＴＭＢ）、３，３’−ジアミノベンジジン（ＤＡＢ）、ｏ−フェニレンジアミン二塩酸塩（ＯＰＤ）、ＡｍｐｌｅｘＲｅｄ、ＡＥＣ、またはホモバニリン酸である。
【００５０】
いくつかの実施形態では、Ｑは、西洋ワサビペルオキシダーゼによる処理後、光あるいは着色物を生成する化学発光部分である。いくつかの実施形態では、Ｑは、３，３’−ジアミノベンジジン（ＤＡＢ）、（３，３’，５，５’−テトラメチルベンジジン（ＴＭＢ））、２、２’−アジノビス［３−エチルベンゾチアゾリン−６−スルホン酸］（ＡＢＴＳ）、ｏ−フェニレンジアミン二塩酸塩（ＯＰＤ）である。
【００５１】
いくつかの実施形態では、Ｑはルシフェラーゼ酵素のための基質である。いくつかの実施形態では、ＱはＤ−ルシフェリン、またはセレンテラジンである。
【００５２】
いくつかの実施形態では、Ｑは、アルカリホスファターゼ（ＡＰ）による処理後、光あるいは着色物を生成する化学発光部分である。いくつかの実施形態では、Ｑは、ニトロブルーテトラゾリウム塩化物（ＮＢＴ）、５−ブロモ−４−クロロ−３−インドリルリン酸塩（ＢＣＩＰ）、またはパラニトロフェニル燐酸（ＰＮＰＰ）である。
【００５３】
いくつかの実施形態では、Ｑは、グルコースオキシダーゼによる処理後、光あるいは着色物を生成する化学発光部分である。いくつかの実施形態では、Ｑは、ニトロブルーテトラゾリウム塩化物（ＮＢＴ）である。
【００５４】
いくつかの実施形態では、Ｑは、β−ガラクトシダーゼによる処理後、光あるいは着色物を生成する化学発光部分である。いくつかの実施形態では、Ｑは、５−ブロモ−４−クロロ−３−インドイル（ｉｎｄｏｙｌ）−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（ＢＣＩＧまたはＸ−Ｇａｌ）である。
【００５５】
いくつかの実施形態では、Ｑは存在せず、式（Ｉ）の化合物は、式（Ｉ）の化合物中に任意の原子の放射性変異体または同位体変異体を含む。
【００５６】
いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、式（Ｉ）の化合物中に任意の原子の放射性変異体または同位体変異体を含み、陽電子射出断層撮影（ＰＥＴ）分析における使用に適している。いくつかの実施形態では、Ｑは存在せず、式（Ｉ）の化合物は、トリチウム（３Ｈ）、フッ素−１８（１８Ｆ）、炭素−１１（１１Ｃ）、炭素−１４（１４Ｃ）、窒素−１３（１３Ｎ）、酸素−１５（１５Ｏ）、または硫黄−３５（３５Ｓ）から選択される１以上の原子を含む。いくつかの実施形態では、Ｑはキレート化された放射性同位体を含む。
【００５７】
いくつかの実施形態では、Ｑは、陽電子射出断層撮影（ＰＥＴ）分析に適したキレート化された放射性同位体を含む。いくつかの実施形態では、Ｑは、キレート化された放射性同位体を含み、ここで、Ｑは、ジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）キレート、１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＡ）キレート、または１，４，７−トリアザシクロノナン−１，４，７−トリス酢酸（ＮＯＴＡ）キレートである、あるいは（１、４、７、１０−テトラアザシクロドデカン−１、４、７、１０−テトラメチル−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＭＡ）キレート、または放射性同位体である。いくつかの実施形態では、Ｑは、銅６４（６４Ｃｕ）、ガリウム６８（６８Ｇａ）、またはテクネチウム９９ｍ（９９ｍＴｃ）である、キレート化された放射性同位体を含む。
【００５８】
いくつかの実施形態では、Ｑは磁気共鳴画像（ＭＲＩ）部分である。いくつかの実施形態では、Ｑは、磁気共鳴画像（ＭＲＩ）に適した原子のキレートを含む。いくつかの実施形態では、Ｑは磁気共鳴画像（ＭＲＩ）に適した原子のキレートを含み、それは、ジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）キレート、１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＡ）キレート、１，４，７−トリアザシクロノナン−１，４，７−トリス酢酸（ＮＯＴＡ）キレート、または１、４、７、１０−テトラアザシクロドデカン−１、４、７、１０−テトラメチル−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＭＡ）キレートである。いくつかの実施形態では、Ｑは、銅、ガリウム、ツリウム、ユウロピウム、ガドリニウム、またはマンガンのキレートを含む。いくつかの実施形態では、Ｑは、ガドテル酸、ガドジアミド、ガドベン酸、ガドペンテト酸、ガドテリドール、  ガドベルセタミド、  ガドキセト酸、ガドブトロール、または  ガドホスベセットから選択されるガドリニウムのキレートを含む。
【００５９】
いくつかの実施形態では、Ｑは固体支持体である。いくつかの実施形態では、Ｑは、ナノ粒子、ビーズ、または樹脂である固体支持体である。いくつかの実施形態では、Ｑは、鉄、コバルト、ニッケル、ガドリニウム、クロム、マンガン、または金から選択された１以上の金属を含む、ナノ粒子あるいはビーズである。いくつかの実施形態では、Ｑは、磁性または常磁性のナノ粒子あるいはビーズである。いくつかの実施形態では、磁気部分はフェライトビーズである。
【００６０】
様々な変数について上に記載される群の任意の組み合わせが本明細書で考慮される。明細書全体にわたって、群およびそれらの置換基は、安定した部分と化合物を提供するために当業者によって選択される。
【００６１】
一態様では、そうすることが適切で実用的である場合、プローブ化合物は、本明細書に記載される化合物、あるいは薬学的に許容可能な塩またはその溶媒和物、および少なくとも１つの薬学的に許容可能な賦形剤を含む医薬組成物に製剤される。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、静脈内投与、皮下投与、経口投与、吸入、経鼻投与、皮膚投与、または経眼投与による哺乳動物への投与のために製剤される。いくつかの実施形態では、医薬組成物は静脈内投与、皮下投与、または経口投与による哺乳動物への投与のために製剤される。いくつかの実施形態では、医薬組成物は経口投与による哺乳動物への投与のために製剤される。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、錠剤、丸剤、カプセル、液体、懸濁液、ゲル、分散剤、溶液、エマルジョン、軟膏、またはローション剤の形態である。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、錠剤、丸剤、またはカプセルの形態をしている。
【００６２】
前述の態様のいずれかにおいて、本明細書に記載されるプローブ化合物またはその薬学的に許容可能な塩は、（ａ）哺乳動物に全身に投与され、および／または、（ｂ）哺乳動物に経口で投与され、および／または、（ｃ）哺乳動物に静脈内投与され、および／または、（ｄ）吸入によって投与され、および／または、（ｅ）経鼻投与によって投与され；あるいは、および／または、（ｆ）哺乳動物へ注入によって投与され、および／または、（ｇ）哺乳動物に局所的に投与され、および／または、（ｈ）点眼によって投与され、および／または、（ｉ）哺乳動物に直腸で投与され、および／または、（ｊ）哺乳動物に非全身的にあるいは局所的に投与される、さらなる実施形態がある。
【００６３】
前述の態様のいずれかにおいて、有効な量の化合物の単回投与を含むさらなる実施形態は、化合物が哺乳動物へ一日に一度投与されるか、または化合物が１日のスパンにわたって哺乳動物に複数回投与されるさらなる実施形態を含んでいる。いくつかの実施形態では、化合物は連続的な投薬スケジュールで投与される。いくつかの実施形態では、化合物は、連続的な毎日の投薬スケジュールで投与される。
【００６４】
本明細書に開示された実施形態のいずれかにおいて、哺乳動物はヒトである。
【００６５】
いくつかの実施形態では、本明細書に提供される化合物はヒトに投与される。
【００６６】
いくつかの実施形態では、本明細書に提供される化合物は経口で投与される。
【００６７】
キットもまた提供される。キットは、本明細書に記載されるプローブ化合物および容器を含む。いくつかの実施形態では、キットは、プローブ化合物に使用における説明書または情報を含む。
【００６８】
包装材料と、包装材料内の本明細書に記載されるプローブ化合物またはその薬学的に許容可能な塩と、化合物または組成物、あるいはその薬学的に許容可能な塩また薬学的に許容可能な溶媒和物が、ＬＯＸＬ２の活性の阻害、ＬＯＸＬ２とＬＯＸＬ２との相互作用の分析、あるいは生体サンプル中のＬＯＸＬ２の存在の識別のために使用されることを示すラベルとを含む製品が提供される。
【００６９】
本明細書に記載される化合物、方法、および組成物の他の目標、特徴、および利点は、以下の詳細な記載から明らかとなる。しかしながら、本開示の精神と範囲内の様々な変更と修正が詳細な説明から当業者に明らかとなるため、詳細な説明と特定の実施例は特定の実施形態を示しつつも一例として与えられるものに過ぎないことが理解されなければならない。
【図面の簡単な説明】
【００７０】
【図１】本明細書に記載されるプローブ化合物とのターゲットエンゲージメントを評価するための一般的な戦略を表す。
【図２】エクスビボの生体サンプルからまたはインビトロの系における、遊離（非結合）のＬＯＸＬ２酵素を捕捉して検出し、単離させて定量化するために、ビオチン部分を含むプローブ化合物を使用するための一般的な戦略を示す。
【図３ａ】ＬＯＸＬ２を検出し定量化するために、蛍光部分を含むプローブ化合物を使用するための戦略を表す。
【図３ｂ】ＬＯＸＬ２を検出し定量化するために、（ＰＥＴ画像化に有用な）放射標識された部分または放射性同位体を含むプローブ化合物を使用するための一般的な戦略を表す。
【図３ｃ】ＬＯＸＬ２を検出し定量化するために、（ＭＲＩ画像化に有用な）造影剤部分を含むプローブ化合物を使用するための一般的な戦略を表す。
【図４】ＬＯＸＬ２を単離、検出、および定量化するために、磁気ビーズに結合されたプローブ化合物を使用するための一般的な戦略を表す。
【図５】ビオチン化されたＬＯＸＬ２阻害剤（化合物１−１）を用いて遊離／非結合のＬＯＸＬ２を捕捉後の、ストレプトアビジンでコーティングされたプレートに結合されたＬＯＸＬ２のＥＬＩＳＡに基づく定量化の結果を示す。ヒトとマウスのＬＯＸＬ２の濃度範囲がテストされた。精製された組み換えヒトＭＡＯ−Ｂは、負の対照として使用された。
【図６】（ＦＧビーズ化学的に結合された）化合物１−７を用いて捕捉された遊離／非結合ＬＯＸＬ２のウエスタンブロット解析。２人の異なるヒトドナーからの１０ｍＬの血漿は、ＬＯＸＬ２阻害剤結合ＦＧビーズとのインキュベートに先立って、３７°Ｃで２時間、ビヒクル、あるいは１μＭまたは１０μＭの化合物１−１３ａとともに事前にインキュベートされた。矢印はＬＯＸＬ２の全長を示す。
【図７】ＦＧビーズに化学的に結合された化合物１−７を用いて捕捉された遊離／非結合ＬＯＸＬ２のウエスタンブロット解析。投与前、および健康な志願者への化合物１−１３ａ（１５０  ｍｇ）またはプラセボの経口投与の２、２４、および４８時間後に、血液が採取され、血漿が単離された。６人の被験体が化合物１−１３ａを投与され（被験体２および４−８）、２人がプラセボを投与された（被験体１および３）。遊離（非化合物１−１３ａ結合）ＬＯＸＬ２が、各被験体からの８ｍＬの血漿を用いて捕捉され、ウエスタンブロット法によって分析された。
【図８】遊離／非結合ＬＯＸＬ２の分析のためのＥｒｅｎｎａ（登録商標）に基づく螢光アッセイ。ＬＯＸＬ２の様々な濃度はバッファー中で希釈され、次に、化合物１−２でインキュベートし、その後、蛍光標識された検出抗体およびストレプトアビジンでコーティングした磁性微粒子（ＭＰ）でインキュベートされることによって定量化された。各濃度の２−３回反復したものについての平均の検出されたイベント（ＤＥ）が示される。
【図９】遊離／非結合ＬＯＸＬ２の分析のためのＥｒｅｎｎａ（登録商標）に基づく螢光アッセイ。５００ｐｇ／ｍＬのＬＯＸＬ２の溶液は、３７°Ｃで１時間、様々な濃度の化合物１−１３Ａ（またはビヒクル）で事前にインキュベートされ、次に、遊離／非結合ＬＯＸＬ２が化合物１−２とともにインキュベートし、その後、蛍光標識された検出抗体およびストレプトアビジンでコーティングした磁性微粒子（ＭＰ）インキュベートされることによって定量化された。２−３回反復したものから計算された平均のｐｇ／ｍＬのＬＯＸＬ２に計算が示される。
【図１０】ａは化合物１−１３をマウスに投与後、すべての器官についての全体的な％注射量（％  ＩＤ）／ｇ組織体内分布データを示す。ｂは特定の器官についての％注射量（％  ＩＤ）／ｇ体内分布データのより接近した図を示す。
【図１１】化合物１−２を使用して、Ｅｒｅｎｎａ（登録商標）に基づいたアッセイを用いて測定された健康な女性および男性の被験体および強皮症患者（ｎ＝それぞれ１０）において、測定された血漿ＬＯＸＬ２の濃度を示す（＊ｐ＝０．０４、実施例Ｂ−５の方法２で記載されるようなＳＳｃ（女性）ｖｓ．  健康（女性）の独立ｔ検定）。
【図１２】実施例Ｂ−５の方法１に記載されるような手順を用いて、化合物１−１３ａと共に投与した後の、健康な人間の志願者からの血漿中の計測された循環ＬＯＸＬ２の％ターゲットエンゲージメントｖｓ．血漿中の化合物１−１３ａへの濃度を示す。
【発明を実施するための形態】
【００７１】
人間のための多くの処置が、対象の疾患の進行に関与する特異タンパク質、またはタンパク質の小分子阻害剤を使用する。例えば、ターゲットエンゲージメントの範囲、ならびに薬動力学および／または薬物動態とのその関係を理解する目的で、インビボの特異タンパク質とそのような小分子阻害剤との結合の範囲を定量化することができることはしばしば有用である。小分子タンパク質の相互作用を研究および定量化の重要な態様は、そのような複合体の検出に適している技術を開発することである。これらの技術の多くが、適切な小分子阻害剤プローブなどの検知できる結合パートナーを用いてタンパク質を捕らえことを含む。小分子阻害剤プローブは、検出、単離、またはプローブの検出および単離を可能にする部分を含む。
【００７２】
本明細書に記載される小分子プローブ化合物を用いてタンパク質を捕らえた後、タグ部分は直接検出されるか、または試薬との化学的相互作用を受けて、定量化が可能な検知できる産物を形成する。いくつかの実施形態では、小分子プローブは、ＬＯＸＬ２阻害剤（ＬＯＸＬ２ｉ）である。いくつかの実施形態において、捕捉されたタンパク質はＬＯＸＬ２である。
【００７３】
適切なレポータータグ部分は、これらに限定されないが、フルオロフォア、発色団、薬物、ナノ粒子、生体高分子、放射標識された部分、抗体または抗体断片、親和性部分、磁気部分、アルブミン結合部分、造影剤部分、あるいはキレート化剤が挙げられる。いくつかの実施形態では、レポータータグ部分は、光の特異的な波長によって検知されるフルオロフォアである。あるいは、タグ部分はビオチン部分であり、それは、ストレプトアビジン（またはその変異体）、あるいは磁気または非磁気のビーズで被覆されたストレプトアビジンなどの結合パートナーに結合して、分離可能で検知できる分子複合体を形成する。あるいは、他の実施形態では、タグ部分は磁気部分である。いくつかの実施形態では、磁気部分は、切断可能な結合部分を介して結合される磁気ビーズであり、小分子タンパク質複合体の単離および検出を可能にする。あるいは、いくつかの実施形態では、タグ部分は放射性同位体などの放射標識された部分である。適切な放射性同位体の例としては、これらに限定されないが、陽電子射出断層撮影（ＰＥＴ）画像に有用な炭素−１１、窒素−１３、フッ素−１８、水素−３、またはガリウム−６８が挙げられる。あるいは、いくつかの実施形態では、レポーター部分は、ＭＲＩ使用に適している造影剤部分である。適切な造影剤部分の例としては、これらに制限されないが、ツリウム、ユウロピウム、ガドリニウム、またはマンガンが挙げられる。
【００７４】
従って、本明細書に記載される化合物は、少なくとも１つの適切なタグ部分を含むＬＯＸＬ２阻害剤であり、それは、エクスビボの生体サンプルまたはインビトロのシステムからの非結合のリシルオキシダーゼ様２（ＬＯＸＬ２）を定量化するために有用である。特に、本明細書に記載される式（Ｉ）の化合物は、エクスビボの生体サンプルまたはインビトロのシステムからの遊離（非結合の）ＬＯＸＬ２酵素を捕捉して検出するために使用される。さらに、本明細書に記載される化合物は、ターゲットエンゲージメントアッセイの開発に有用である。いくつかの例では、化合物は、ＬＯＸＬ２阻害剤の投与後、患者におけるＬＯＸＬ２阻害の範囲を決定するために有用である。いくつかの例では、本明細書に記載される化合物は、化合物の投与後に、哺乳動物中のＬＯＸＬ２阻害剤の薬物動態を評価し、哺乳動物中の本明細書に開示される化合物のいずれか１つの組織分布を評価するために有用である。
【００７５】
リシルオキシダーゼ様２（ＬＯＸＬ２）
リシルオキシダーゼ様２（ＬＯＸＬ２）はリシルオキシダーゼ（ＬＯＸ）ファミリーのメンバーであり、これはＣｕ２＋とリジンチロシルキノン（ＬＴＱ）依存性のアミンオキシターゼを含む。このファミリーは５つの遺伝子を含む：ｌｏｘ（ＬＯＸ）、ｌｏｘｌ１（リシルオキシダーゼ様１、ＬＯＸＬ１）、ｌｏｘｌ２（ＬＯＸＬ２）、ｌｏｘｌ３（リシルオキシダーゼ様３、ＬＯＸＬ３）、およびｌｏｘｌ４（リシルオキシダーゼ様４、ＬＯＸＬ４）。ＬＯＸファミリーは、コラーゲンとエラスチン中のリジンとヒドロキシリシンのε−アミノ基の酸化的脱アミノを触媒して、これらの分子の架橋を促すことで知られている。コラーゲンとエラスチンの架橋は、細胞外マトリックスの抗張力の維持にとって必要不可欠である。
【００７６】
ＬＯＸＬ２は、細胞外マトリックスのリモデリングにおけるその役割に加えて細胞内機能を有することが実証されている。ＬＯＸＬ２は、上皮間葉転換（ＥＭＴ）トランスデューサー（Ｓｎａｉｌ１）の安定性と機能的な活性を促進することにより、Ｓｎａｉｌ１を正に調節する。ＬＯＸＬ２は、接着斑キナーゼ（ＦＡＫ）シグナル伝達経路の活性化に正に寄与し、接着斑複合体の組織化に関与する。ＬＯＸＬ２遺伝子のサイレンシングは上皮細胞極性の再獲得につながり、乳腺細胞株の移動および侵襲能力を低下させる。細胞接着と細胞極性の調節は細胞内のＬＯＸＬ２によって媒介することが報告されている。ＬＯＸＬ２は、Ｓｎａｉｌ１依存性のメカニズムとＳｎａｉｌ１から独立したメカニズムによって、密着結合と細胞極性の遺伝子と同様に、転写的にＥ−カドヘリンを抑制する。ＬＯＸＬ２は、最近では、染色質に関連付けられると説明されており、ＬＯＸＬ２の触媒性ドメインに依存する機能であるヒストンＨ３脱アミノに関与することが報告されている。
【００７７】
いくつかの実施形態では、本明細書に開示される方法は細胞内のＬＯＸＬ２を阻害する方法である。いくつかの実施形態では、本明細書に開示される方法は細胞外の（分泌された）ＬＯＸＬ２を阻害する方法である。いくつかの実施形態では、本明細書に開示される方法は、細胞外および細胞内のＬＯＸＬ２を阻害する方法である。
【００７８】
線維症
ＬＯＸＬ２は、線維化プロセスに関与することが示されている。線維形成プロセスは、コラーゲンのような細胞外マトリックス成分の過剰な沈着を含み、これは、不完全な臓器機能と臓器不全をもたらす身体的、生化学的、および生体力学的なマトリックス特性を変える。組織線維症もまた、細胞形質転換および転移を直接的に促すことによって癌の進行に関係している。腫瘍は一般に正常組織より堅く、腫瘍の硬さは腫瘍の転移に影響を及ぼす。
【００７９】
過剰なＬＯＸＬ２酵素活性は、腫瘍の硬さの増大に関与している。高いＬＯＸＬ２は、ウィルソン病や原発性胆汁性肝硬変に苦しむ患者の肝臓由来の線維症の病変にも関与している。さらに、ＬＯＸＬ２に特異的なモノクローナル抗体ＡＢ００２３の投与は、線維症のモデルの疾患を減少させるのに効果的であった。ＡＢ００２３は、成長因子および架橋コラーゲンマトリックスとＴＧＦベータのシグナル伝達の産生を阻害することが示された。
【００８０】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるプローブ化合物は、線維症を有する哺乳動物へのＬＯＸＬ２阻害剤の投与を含むターゲットバリデーションおよび疾患生物学の研究において使用される。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるプローブ化合物は、共有結合的にＬＯＸＬ２を反応する。
【００８１】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるプローブ化合物は、ＬＯＸＬ２阻害剤（ＬＯＸＬ２ｉ）および哺乳動物の線維症の処置におけるＬＯＸＬ２の役割を評価するために使用される。
【００８２】
「線維症」は、本明細書で使用されるように、外傷、炎症、組織修復、免疫反応、細胞過形成、および腫瘍形成後に生じる細胞外マトリックス成分の蓄積を指す。
【００８３】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるプローブ化合物は、ＬＯＸＬ２ｉの投与後に、本明細書に開示されるプローブ化合物と線維症の細胞または組織とを接触させることを含む、組織中の線維症の減少を評価するために使用される。
【００８４】
いくつかの実施形態において、線維症は、肺線維症、肝線維症、腎線維症、心線維症、腹膜線維症、目の線維症、あるいは皮膚の線維症を含む。いくつかの実施形態では、線維症は肺線維症を含む。いくつかの実施形態では、線維症は肝線維症を含む。いくつかの実施形態では、線維症は腎線維症を含む。いくつかの実施形態では、線維症は心線維症を含む。いくつかの実施形態では、線維症は腹膜線維症を含む。いくつかの実施形態では、線維症は目の線維症を含む。いくつかの実施形態では、線維症は皮膚の線維症を含む。
【００８５】
いくつかの実施形態では、線維症を減らすこと、あるいは線維性疾患の処置は、以下の１つ以上を減らすまたは阻害することを含む：細胞外マトリックスタンパク質の形成または沈着；前線維症性の細胞タイプの数（例えば、繊維芽細胞または免疫細胞の数）；線維症の病変内の細胞のコラーゲンまたはヒドロキシプロリンの含有物；線維形成タンパク質の発現または活性；あるいは、炎症反応に関連する線維症の減少。
【００８６】
いくつかの実施形態では、線維性疾患は肺の線維性疾患である。
【００８７】
いくつかの実施形態では、線維性疾患は肝臓の線維性疾患である。
【００８８】
いくつかの実施形態では、線維性疾患は心臓の線維性疾患である。
【００８９】
いくつかの実施形態では、線維性疾患は腎臓の線維性疾患である。
【００９０】
いくつかの実施形態では、線維性疾患は皮膚の線維性疾患である。
【００９１】
いくつかの実施形態では、線維性疾患は目の線維性疾患である。
【００９２】
いくつかの実施形態では、線維性疾患は胃腸管の線維性疾患である。
【００９３】
いくつかの実施形態では、線維性疾患は骨髄の線維性疾患である。
【００９４】
いくつかの実施形態では、線維性疾患は耳の線維性疾患である。
【００９５】
いくつかの実施形態では、線維性疾患は特発性である。いくつかの実施形態では、線維性疾患は、疾患（例えば、感染症、炎症性疾患、自己免疫疾患、悪性または癌の疾患、および／または、結合性疾患）；毒素；発作（例えば、環境ハザード（例えばアスベスト、炭塵、多環式芳香族炭化水素）、たばこの煙、創傷）；医学的処置（例えば、外科的切開、化学療法、または放射線）、あるいはこれらの組み合わせに関連付けられる（例えば、これらに続発する）。
【００９６】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるプローブ化合物は、哺乳類の線維症の予防におけるＬＯＸＬ２ｉまたはＬＯＸＬ２の役割を評価するために使用される。
【００９７】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるプローブ化合物は、哺乳類の肺機能の改善におけるＬＯＸＬ２ｉまたはＬＯＸＬ２の役割を評価するために使用される。いくつかの実施形態では、哺乳動物は肺線維症を患っていると診断された。
【００９８】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるプローブ化合物は、哺乳類の特発性肺線維症におけるＬＯＸＬ２ｉまたはＬＯＸＬ２の役割を評価するために使用される。
【００９９】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるプローブ化合物は、哺乳動物の組織中の細胞、フィブロネクチン、コラーゲン、または増加した線維芽細胞動員の異常な蓄積または活性化の制御におけるＬＯＸＬ２ｉまたはＬＯＸＬ２の役割を評価するために使用される。いくつかの実施形態では、組織中の細胞、フィブロネクチン、コラーゲン、または増大した繊維芽細胞動員の異常な蓄積または活性化は、線維症を生じさせる。
【０１００】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるプローブ化合物は、哺乳類の強皮症の処置あるいは予防におけるＬＯＸＬ２ｉまたはＬＯＸＬ２の役割を評価するために使用される。
【０１０１】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるプローブ化合物は、哺乳類の望ましくないあるいは異常な皮膚の肥厚の減少におけるＬＯＸＬ２ｉまたはＬＯＸＬ２の役割を評価するために使用される。いくつかの実施形態では、皮膚の肥厚は強皮症に関連付けられる。
【０１０２】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるプローブ化合物は、哺乳動物の組織中の細胞、フィブロネクチン、コラーゲン、または増加した線維芽細胞動員の異常な蓄積または活性化の制御におけるＬＯＸＬ２ｉまたはＬＯＸＬ２の役割を評価するために使用される。いくつかの実施形態では、真皮組織中の細胞、フィブロネクチン、コラーゲンあるいは増大した線維芽細胞動員の異常な蓄積または活性化は、線維症を生じさせる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるプローブ化合物は、線維症を有する哺乳類の組織中のヒドロキシプロリン含有量の減少におけるＬＯＸＬ２ｉまたはＬＯＸＬ２の役割を評価するために使用される。
【０１０３】
癌
ＬＯＸＬ２は、癌細胞の増殖、接着、運動、および浸潤に関連するシグナル伝達に関与することが示されている。具体的には、ＬＯＸＬ２は、腫瘍浸潤を促すために細胞の上皮間葉転換（ＥＭＴ）を引き起こす。ＬＯＸＬ２はさらに、腫瘍細胞の浸潤を増強する低酸素性の腫瘍環境下でアップレギュレートされる。ＬＯＸＬ２は、低酸素性の腫瘍環境下で血管新生を促すことが示されている。
【０１０４】
ＬＯＸＬ２発現の増加は、結腸、食道腫瘍、口の扁平上皮細胞癌、喉頭の扁平上皮癌、および頭頸部の扁平上皮癌を抱える患者の予後不良に関係している。ＬＯＸＬ２は、乳癌、結腸癌、胃癌、頭頸部癌、肺癌、および黒色腫に関与すると提唱されている。
【０１０５】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるプローブ化合物は、哺乳類の癌の処置におけるＬＯＸＬ２ｉまたはＬＯＸＬ２の役割を評価するために使用される。
【０１０６】
本明細書で使用されるように、用語「癌」は、制御されない方法で増殖し、場合によっては転移（拡散）する傾向がある細胞の異常な成長を指す。癌のタイプとしては、限定されないが、固形腫瘍（膀胱腫瘍、腸腫瘍、脳腫瘍、乳腫瘍、子宮内膜腫瘍、心臓腫瘍、腎臓腫瘍、肺腫瘍、肝臓腫瘍、子宮腫瘍、リンパ組織腫瘍（リンパ腫）、卵巣腫瘍、膵臓腫瘍、または他の内分泌器官（甲状腺）腫瘍、前立腺腫瘍、皮膚腫瘍（黒色腫または基底細胞癌）、または転移のあるまたは転移のない疾患の任意の段階の血液の腫瘍（白血病とリンパ腫など）が挙げられる。
【０１０７】
用途
いくつかの実施形態では、本明細書に開示される化合物は、エクスビボの生体サンプルまたはインビトロのシステムからの遊離（非結合の）ＬＯＸＬ２酵素を定量化するために使用される。さらなるいくつかの実施形態では、本明細書に記載される化合物は、ターゲットエンゲージメントアッセイの開発に有用である。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される化合物は、ＬＯＸＬ２ｉの薬動力学または薬物動態の評価のために有用である。
【０１０８】
本明細書で提供されるのは、哺乳動物における標的組織中のＬＯＸＬ２発現を定量化するための方法であり：本明細書に開示されるプローブ化合物の少なくとも１つを、哺乳動物、または哺乳動物から単離させた細胞に投与する工程；細胞溶解物または組織中のプローブ化合物とタンパク質との間の相互作用が平衡に到達するために十分な時間待つ工程；および、プローブ化合物で標識されたタンパク質の量を識別し定量化する。
【０１０９】
さらに、哺乳動物における潜在的なＬＯＸＬ２阻害剤の有効性を評価するための方法が提供され、その方法は、哺乳動物への潜在的なＬＯＸＬ２阻害剤を投与する工程；本明細書に開示される化合物のいずれか１つを、哺乳動物、または哺乳動物から単離させた細胞に投与する工程；および、化合物のＬＯＸＬ２活性を測定する工程を含む。
【０１１０】
さらに、本明細書で提供されるのは、哺乳動物におけるＬＯＸＬ２阻害剤の薬力学を評価するための方法が提供され、その方法は、複数の哺乳動物にＬＯＸＬ２阻害剤を投与する工程；本明細書に開示される化合物のいずれかを、複数の哺乳動物または複数の哺乳動物から単離させた細胞に投与する工程；および、ＬＯＸＬ２阻害剤の投与後の異なる時点で化合物のＬＯＸＬ２活性を測定する工程を含む。
【０１１１】
また、本明細書で提供されるのは、哺乳動物における本明細書に開示される化合物のいずれか１つの組織分布を評価するための方法であり、その方法は、本明細書に開示される化合物のいずれか１つを複数の哺乳動物に投与する工程；および、化合物の投与後の異なる時点で、様々な型の組織について、化合物の活性測定する工程を含む。
【０１１２】
本明細書では、用語「固体支持体」は、表面を有する非気体、非液状材料を意味する。したがって、固体支持体は、例えば、グラス、ケイ素、金属、プラスチックまたは複合物で構成された平坦面であり得；または、シリカゲル、制御細孔ガラス、磁気あるいはセルロースのビーズなどのビーズの形態であり得；または、コンビナトリアル合成あるいは分析に適している一連のピンを含む、ピンであり得る。
【０１１３】
化合物
「ウォーヘッド」
本明細書に記載されるプローブ化合物は、ＬＯＸＬ２とプローブ化合物との選択的な相互作用を可能にする「ウォーヘッド」基を含む。ウォーヘッドは、小分子リシルオキシダーゼ様２（ＬＯＸＬ２）阻害剤（ＬＯＸＬ２ｉ）である。いくつかの実施形態では、ウォーヘッドは、置換または非置換のヘテロシクリルメチルアミン、あるいは置換または非置換のアリールメチルアミンである。
【０１１４】
いくつかの実施形態では、「ウォーヘッド」基は置換または非置換のヘテロシクリルメチルアミンである。いくつかの実施形態では、「ウォーヘッド」基は、置換または非置換のヘテロアリールメチルアミンである。いくつかの実施形態では、「ウォーヘッド」基は、置換または非置換の（単環式のヘテロアリール）メチルアミンである。いくつかの実施形態では、単環式のヘテロアリールは６−員の単環式のヘテロアリール、または５−員の単環式のヘテロアリールである。いくつかの実施形態では、単環式のヘテロアリールは、ピリジニル、ピリミジニル、ピラジニル、ピリダジニル、またはトリアジニルである６−員の単環式のヘテロアリールである。いくつかの実施形態では、単環式のヘテロアリールは、イミダゾリル、ピラゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、フリル、チエニル、イソキサゾリル、チアゾリル、オキサゾリル、イソチアゾリル、ピロリル、オキサジアゾリル、チアジアゾリル、またはフラザニルである、５−員の単環式のヘテロアリールである。
【０１１５】
いくつかの実施形態では「ウォーヘッド」基は、置換または非置換の（二環式のヘテロアリール）メチルアミンである。いくつかの実施形態では、二環式のヘテロアリールは、インドリジニル、インドリル、ベンゾフラニル、ジベンゾチオフェニル、インダゾリル、ベンズイミダゾリル、プリニル、キノリジニル、キノリニル、イソキノリニル、シンノリニル、フタラジニル、キナゾリニル、キノキサリニル、１、８−ナフチリジニル、またはプテリジニルである。
【０１１６】
いくつかの実施形態では「ウォーヘッド」基は、置換または非置換の（二環式のヘテロシクリル）メチルアミンである。いくつかの実施形態では、二環式のヘテロシクリルは、キノリノニル、イソキノリノニル、クロモニルまたはクマリニルである。
【０１１７】
いくつかの実施形態では、ＬＯＸＬ２ｉは、置換されたピリジニルメチルアミンである。いくつかの実施形態では、置換されたピリジニルメチルアミンは置換されたピリジン−４−イルメチルアミン化合物である。いくつかの実施形態では、置換されたピリジニルメチルアミンは、「Ｌｙｓｙｓｌ  Ｏｘｉｄａｓｅ−Ｌｉｋｅ  ２  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ａｎｄ  Ｕｓｅｓ  Ｔｈｅｒｅｏｆ」と題する２０１６年３月３日に出願された国際特許出願ＰＣＴ／ＵＳ２０１６／０２０７３１に記載される化合物であり、そのような化合物への参照によって本明細書に取り込まれる。いくつかの実施形態では、ＬＯＸＬ２ｉは、国際特許出願ＰＣＴ／ＵＳ２０１６／０２０７３１の表１、表２、表３、または表４に記載される化合物である。
【０１１８】
いくつかの実施形態では、ＬＯＸＬ２ｉは、置換されたピリジニルメチルアミンであり、それは、４−（４−（アミノメチル）ピリジン−２−イル）−Ｎ−（２−メトキシエチル）ベンズアミド；
ラセミ体（４−（４−（アミノメチル）ピリジン−２−イル）フェニル）（３−ヒドロキシ−３−（トリフルオロメチル）ピロリジン−１−イル）メタノン；
４−（４−（アミノメチル）ピリジン−２−イル）−Ｎ−フェニルベンズアミド；
４−（４−（アミノメチル）ピリジン−２−イル）−Ｎ−ベンジルベンズアミド；
３−（４−（アミノメチル）ピリジン−２−イル）−Ｎ−（２−メトキシエチル）ベンズアミド；
ラセミ体−（３−（４−（アミノメチル）ピリジン−２−イル）フェニル）（３−ヒドロキシ−３−（トリフルオロメチル）ピロリジン−１−イル）メタノン；
３−（４−（アミノメチル）ピリジン−２−イル）−Ｎ−フェニルベンズアミド；
３−（４−（アミノメチル）ピリジン−２−イル）−Ｎ−ベンジルベンズアミド；
３−（４−（アミノメチル）ピリジン−２−イル−Ｎ−（５−クロロ−２−メチルフェニル）ベンズアミド；
３−（４−（アミノメチル）ピリジン−２−イル）−Ｎ−（６−クロロ−１Ｈ−インドール−４−イル）ベンズアミド；
４−（（４−（アミノメチル）ピリミジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（２−メトキシエチル）ベンズアミド；
ラセミ体４―（（４−（アミノメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）フェニル）（３−ヒドロキシ−３−（トリフルオロメチル）ピロリジン−１−イル）メタノン；
４―（（４―（アミノメチル）ピリミジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−フェニルベンズアミド；
４―（（４―（アミノメチル）ピリミジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−ベンジルベンズアミド；
３−（（４−（アミノメチル）ピリミジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（２−メトキシエチル）ベンズアミド；
ラセミ体−（３−（（４−（アミノメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）フェニル）（３−ヒドロキシ−３−（トリフルオロメチル）ピロリジン−１−イル）メタノン；
３−（（４−（アミノメチル）ピリミジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−フェニルベンズアミド；
３−（（４−（アミノメチル）ピリミジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−ベンジルベンズアミド；
３−（（４−（アミノメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（３−メトキシフェニル）ベンズアミド；
３−（（４−（アミノメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（４−メトキシフェニル）ベンズアミド；
３−（（４−（アミノメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）ベンズアミド；
３−（（４−（アミノメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（４−（トリフルオロメチル）フェニル）ベンズアミド；
３−（（４−（アミノメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（４−フルオロフェニル）ベンズアミド；
３−（（４−（アミノメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（２，４−ジフルオロフェニル）ベンズアミド；
３−（（４−（アミノメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（４−ブロモフェニル）ベンズアミド；
メチル４−（３−（（４−（アミノメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）ベンズアミド）安息香酸塩；
エチル３−（３−（（４−（アミノメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）ベンズアミド）安息香酸塩；
３−（３−（（４−（アミノメチル）ピリミジン−２−イル）オキシ）ベンズアミド）安息香酸；
４−（３−（（４−（アミノメチル）ピリミジン−２−イル）オキシ）ベンズアミド）安息香酸；
３−（（４−（アミノメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（２，４−ジフルオロベンジル）ベンズアミド；
３−（（４−（アミノメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（４−（トリフルオロメチル）ベンジル）ベンズアミド；
３−（（４−（アミノメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（４−ブロモベンジル）ベンズアミド；
メチル４−（（３−（（４−（アミノメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）ベンズアミド）メチル）安息香酸塩；
４−（（３−（（４−（アミノメチル）ピリミジン−２−イル）オキシ）ベンズアミド）メチル）安息香酸；
３−（（３−（（４−（アミノメチル）ピリミジン−２−イル）オキシ）ベンズアミド）メチル）安息香酸；
（Ｒ）−３−（（４−（アミノメチル）ピリミジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（２−ヒドロキシ−１−フェニルエチル）ベンズアミド；
３−（（４−（アミノメチル）ピリジン−２−イル）オキシ−Ｎ−（３−フルオロ−４−（１Ｈ−イミダゾール−１−イル）ベンジル）ベンズアミド；
３−（（４−（アミノメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（４−（４−エチルピペラジン−１−イル）ベンジル）ベンズアミド；
３−（（４−（アミノメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（３−カルバムイミドイルベンジル）ベンズアミド；
３−（（４−（アミノメチル）ピリミジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−フェネチルベンズアミド；
（３−（（４−（アミノメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）フェニル）（３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）メタノン；
３−（（４−（アミノメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−イルメチル）ベンズアミド；
３−（（４−（アミノメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（ピラジン−２−イルメチル）ベンズアミド；
３−（（４−（アミノメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−トリデシルベンズアミド；または、
３−（（（４−（アミノメチル）ピリミジン−２−イル）オキシ）メチル）−Ｎ−フェニルベンズアミドである。
【０１１９】
いくつかの実施形態では、ＬＯＸＬ２ｉは、置換されたピリジニルメチルアミンであり、それは、ラセミ体−トランス−（１−（４―（アミノメチル）ピリジン−２−イル）−４−フルオロピロリジン−３−オール；
ラセミ体−１−（４―（アミノメチル）ピリジン−２−イル）−３−（トリフルオロメチル）ピロリジン−３−オール；
［２，３’−ビピリジン］−４−イルメタンアミン；
（２−（４−フルオロフェニル）ピリジン−４−イル）メタンアミン；
３−（（４−（アミノメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）安息香酸；
４−（４−（アミノメチル）ピリジン−２−イル）安息香酸；
（２−フェノキシピリジン−４−イル）メタンアミン；
（２−（３−フェノキシフェノキシ）ピリミジン−４−イル）メタンアミン；
４−（（４−（アミノメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）安息香酸；
（２−（（１−ベンジル−１Ｈ−インドール−４−イル）オキシ）ピリジン−４−イル）メタンアミン；
（２−（（１−（２，４−ジフルオロベンジル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イル）オキシ）ピリジン−４−イル）メタンアミン；
（２−（（１−（２，４−ジフルオロベンジル）−３−メチル−１Ｈ−インドール−４−イル）オキシ）ピリジン−４−イル）メタンアミン；
（２−（（１−（（６−メトキシピリジン−３−イル）メチル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イル）オキシ）ピリジン−４−イル）メタンアミン；
（２−（（１−（（６−メトキシピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−１Ｈ−インドール−４−イル）オキシ）ピリジン−４−イル）メタンアミン；
（２−（（１−（（５−フルオロピリジン−２−イル）メチル）−１Ｈ−インドール−４−イル）オキシ）ピリジン−４−イル）メタンアミン；
（２−（（１−（キノリン−２−イルメチル）−１Ｈ−インドール−４−イル）オキシ）ピリジン−４−イル）メタンアミン；
（２−（（１−（（２−（トリフルオロメチル）チアゾール−５−イル）メチル）−１Ｈ−インドール−４−イル）オキシ）ピリジン−４−イル）メタンアミン；
（２−（（１−（４−フルオロフェニル）−１Ｈ−インドール−４−イル）オキシ）ピリジン−４−イル）メタンアミン；
（２−（（１−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−１Ｈ−インドール−４−イル）オキシ）ピリジン−４−イル）メタンアミン；
（２−（（１−（６−メトキシピリジン−３−イル）−１Ｈ−インドール−４−イル）オキシ）ピリジン−４−イル）メタンアミン；
（２−（（１−（６−フルオロベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）−１Ｈ−インドール−４−イル）オキシ）ピリジン−４−イル）メタンアミン；
（２−（（１−（４−フルオロフェネチル−１Ｈ−インドール−４−イル）オキシ）ピリジン−４−イル）メタンアミン；
（２−（（３−ブロモ−１−（４−フルオロフェネチル−１Ｈ−インドール−４−イル）オキシ）ピリジン−４−イル）メタンアミン；
（４−（（４−（アミノメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−１Ｈ−インドール−１−イル）（フェニル）メタノン；
４−（（４−（アミノメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−フェニル−１Ｈ−インドール−１−カルボキサミド；
２−（４−（（４−（アミノメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−１Ｈ−インドール−１−イル）−Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド；
２−（４−（（４−（アミノメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−１Ｈ−インドール−１−イル）−１−（ピペリジン−１−イル）エタノン；
（Ｒ）または（Ｓ）−２−（４−（（４−（アミノメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−１Ｈ−インドール−１−イル）−１−（３−ヒドロキシ−３−（トリフルオロメチル）ピペリジン−１−イル）エタン−１−オン（エナンチオマー１）；
（Ｒ）または（Ｓ）−２−（４−（（４−（アミノメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−１Ｈ−インドール−１−イル）−１−（３−ヒドロキシ−３−（トリフルオロメチル）ピペリジン−１−イル）エタン−１−オン（エナンチオマー２）；
２−（４−（（４−（アミノメチル）ピリミジン−２−イル）オキシ）−１Ｈ−インドール−１−イル）−Ｎ−メチル−Ｎ−フェニルアセトアミド；
２−（４−（（４−（アミノメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−１Ｈ−インドール−１−イル）−１−（３，４−ジヒドロキノリン−１（２Ｈ）−イル）エタノン；
（２−（（１Ｈ−インドール−４−イル）オキシ）ピリジン−４−イル）メタンアミン；
（２−（（１−（６−フルオロベンゾ［ｄ］チアゾール−２−イル）インドリン−４−イル）オキシ）ピリジン−４−イル）メタンアミン；
（２−（（１−（（６−メトキシピリジン−３−イル）メチル）−１Ｈ−インドール−５−イル）オキシ）ピリジン−４−イル）メタンアミン；
（２−（（１−（２，４−ジフルオロベンジル−３−メチル−１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）ピリジン−４−イル）メタンアミン；
５−（（４−（アミノメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−１−（２，４−ジフルオロベンジル）−３，４−ジヒドロキノリン−２（１Ｈ）−オン；
５−（（４−（アミノメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−１−（（６−メトキシピリジン−３−イル）メチル）−３，４−ジヒドロキノリン−２（１Ｈ）−オン；
（Ｓ）−（３−（（４−（アミノメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）ピペリジン−１−イル）（フェニル）メタノン；
（Ｓ）−３−（（４−（アミノメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−フェニルピペリジン−１−カルボキサミド；
ラセミ体−（４−（アミノメチル）ピリジン−２−イル）（３−ヒドロキシ−３−（トリフルオロメチル）ピロリジン−１−イル）メタノン；
４−（アミノメチル）−Ｎ−ベンジルピコリンアミド；
Ｎ−（４−（アミノメチル）ピリジン−２−イル）−２−フルオロ−４−メチルベンズアミド；
Ｎ−（４−（アミノメチル）ピリジン−２−イル）−２−（３，４−ジクロロフェニル）アセトアミドである。
【０１２０】
いくつかの実施形態では、ＬＯＸＬ２ｉは、置換されたピリジニルメチルアミン化合物であり、それは、４−（アミノメチル）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−６−（３−フェノキシフェノキシ）ピリジン−２−アミン；
４−（アミノメチル）−Ｎ−（２−メトキシエチル）−６−（３−フェノキシフェノキシ）ピリジン−２−アミン；または、
（２−（４−フルオロフェニル）−６−（３−フェノキシフェノキシ）ピリジン−４−イル）メタンアミンである。
【０１２１】
いくつかの実施形態では、ＬＯＸＬ２ｉは、置換されたピリジニルメチルアミンであり、それは、２−フルオロ−３−（アミノメチル）ピリジン；
３−フルオロ−４−（アミノメチル）ピリジン；
２−フルオロ−４−（アミノメチル）ピリジン；
２−トリフルオロメチル−４−（アミノメチル）ピリジン；
２−クロロ−４−（アミノメチル）ピリジン；
２−ベンジルオキシ−４−（アミノメチル）ピリジン；
２−シクロヘキシルオキシ−４−（アミノメチル）ピリジン；
２−（４−フルオロフェノキシ）−４−（アミノメチル）ピリジン；
２−（２−トリフルオロメチルフェノキシ）−４−（アミノメチル）ピリジン；
２−（１−ピロリジノ）−４−（アミノメチル）ピリジン；
２−（イミダゾール−１−イル）−４−（アミノメチル）ピリジン；
２−（４−エチルピペラジン−１−イル−４−（アミノメチル）ピリジン；
４−（アミノメチル）−Ｎ−（２−メトキシエチル）ピコリンアミド；
４−（アミノメチル）−Ｎ−（２，２，２−トリフルオロエチル）ピコリンアミドである。
【０１２２】
いくつかの実施形態では、ＬＯＸＬ２ｉは、置換または非置換の６−（トリフルオロメチル）ピリジン−４−イル）メタンアミンである。いくつかの実施形態では、置換された６−（トリフルオロメチル）ピリジン−４−イル）メタンアミンは、２０１６年３月３日に出願される「Ｆｌｕｏｒｉｎａｔｅｄ  Ｌｙｓｙｌ  Ｏｘｉｄａｓｅ−Ｌｉｋｅ  ２  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ａｎｄ  Ｕｓｅｓ  Ｔｈｅｒｅｏｆ」と題した国際特許出願ＰＣＴ／ＵＳ２０１６／０２０７３２に記載された化合物であり、それは、そのような化合物についての参照によって本明細書に組み込まれる。
【０１２３】
いくつかの実施形態では、ＬＯＸＬ−２阻害剤化合物は、２０１６年３月３日に出願された「Ｆｌｕｏｒｉｎａｔｅｄ  Ｌｙｓｙｌ  Ｏｘｉｄａｓｅ−Ｌｉｋｅ  ２  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ａｎｄ  Ｕｓｅｓ  Ｔｈｅｒｅｏｆ」と題した国際特許出願ＰＣＴ／ＵＳ２０１６／０２０７３２に記載された化合物であり、それは、そのような化合物についての参照によって本明細書に組み込まれる。
【０１２４】
いくつかの実施形態では、ＬＯＸＬ２ｉは、国際特許出願ＰＣＴ／ＵＳ２０１６／０２０７３２の表１に記載される化合物である。
【０１２５】
いくつかの実施形態では、ＬＯＸＬ２ｉは、置換または非置換の６−（トリフルオロメチル）ピリジン−４−イル）メタンアミンであり、それは、（６−（トリフルオロメチル）−［２，３’−ビピリジン］−４−イル）メタンアミン；
（２−（［１，１’−ビフェニル］−３−イルオキシ）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−４−イル）メタンアミン；
（２−（３−フェノキシフェノキシ）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−４−イル）メタンアミン；
（２−（３−（フェノキシメチル）フェノキシ）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−４−イル）メタンアミン；
３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−フェニルアニリン；
（２−（３−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）フェノキシ）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−４−イル）メタンアミン；
３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−フェニルベンズアミド；
３−（（４−（アミノメチル−ｄ２）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−フェニルベンズアミド；
３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（４−フルオロベンジル）−ベンズアミド；
３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−イルメチル）−ベンズアミド；
３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）フェニル）（３，４−ジヒドロイソキノリン−２（１Ｈ）−イル）メタノン；
（３−（１Ｈ−ピラゾール−１−イル）アゼチジン−１−イル）（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）フェニル）メタノン；
Ｎ−（（２Ｈ−テトラゾール−５−イル）メチル）−３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）ベンズアミド；
Ｎ−（２−（１Ｈ−１、２、４−トリアゾール−１−イル）エチル）−３−（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）ベンズアミド；
Ｎ−（２−（１Ｈ−テトラゾール−１−イル）エチル）−３−（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）ベンズアミド；
３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）ベンズアミド；
（Ｓ）−３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）フェニル）（３−ヒドロキシピロリジン−１−イル）メタノン；
（Ｒ）−３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）フェニル）（３−ヒドロキシピロリジン−１−イル）メタノン；
ラセミ体−トランス−３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）フェニル）（３−フルオロ−４−ヒドロキシピロリジン−１−イル）メタノン；
（Ｓ，Ｓ）−トランス−（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）フェニル）（３−フルオロ−４−ヒドロキシピロリジン−１−イル）メタノン；
（Ｒ，Ｒ）−トランス−（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）フェニル）（３−フルオロ−４−ヒドロキシピロリジン−１−イル）メタノン；
（Ｒ）−（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）フェニル）（３−アミノピロリジン−１−イル）メタノン；
ラセミ体−トランス−３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）フェニル）（−３−（ジメチルアミノ）−４−ヒドロキシピロリジン−１−イル）メタノン；
（Ｓ）−１−（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）ベンゾイル）ピロリジン−２−カルボン酸；
（Ｒ）−１−（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）ベンゾイル）ピロリジン−２−カルボン酸；
（Ｒ）−３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）フェニル）（３−（ヒドロキシメチル）ピロリジン−１−イル）メタノン；
８−（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）ベンゾイル）−１−オキサ−３，８−ジアザスピロ［４．５］デカン−２−オン；
３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（２−（２−オキソオキサゾリジン−３−イル）エチル）ベンズアミド；
ラセミ体−３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（（５−オキソピロリジン−２−イル）メチル）ベンズアミド；
３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（２−（メチルスルホニル）エチル）ベンズアミド；
３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（１−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）ベンズアミド；
３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（２−ヒドロキシ−２−メチルプロピル）ベンズアミド；
（Ｒ）−３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（２，３−ジヒドロキシプロピル）ベンズアミド；
３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（２−スルファモイルエチル）ベンズアミド；
３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（２−（ジメチルアミノ）エチル）ベンズアミド；
ラセミ体−トランス−３−（（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）メチル）フェニル）（３−フルオロ−４−ヒドロキシピロリジン−１−イル）メタノン；
（２−（（１−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−１Ｈ−インドール−４−イル）オキシ）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−４−イル）メタンアミン；
２−（４−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリミジン−２−イル）オキシ）−１Ｈ−インドール−１−イル）−Ｎ−メチル−Ｎ−フェニルアセトアミド；
（Ｒ）−３−（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−フェニルピロリジン−１−カルボキサミド；
（Ｓ）−３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−フェニルピロリジン−１−カルボキサミド；
４−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−フェニルピペリジン−１−カルボキサミド；
４−（（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）メチル）−Ｎ−フェニルピペリジン−１−カルボキサミド；
（Ｒ）−３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−フェニルピペリジン−１−カルボキサミド；
（Ｓ）−３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−フェニルピペリジン−１−カルボキサミド；
（Ｓ）−３−（（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）メチル）−Ｎ−フェニルピペリジン−１−カルボキサミド；
（Ｓ）−１−（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）ピペリジン−１−イル）−２−フェニルエタノン；
（Ｓ）−１−（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）ピペリジン−１−イル）−２−（３，４−ジクロロフェニル）エタノン；
（Ｓ）−２−（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）ピペリジン−１−カルボニル）−４Ｈ−クロメン−４−オン；
（Ｓ）−（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）ピペリジン−１−イル）（ピリジン−３−イル）メタノン；
（Ｓ）−（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）ピペリジン−１−イル）（ピリミジン−５−イル）メタノン；
（Ｓ）−３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）ピペリジン−１−イル）（５−メチル−１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）メタノン；
（Ｓ）−１−（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）ピペリジン−１−イル）−２−メチルプロパン−１−オン；
５−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（２−（メチルスルホニル）エチル）ニコチンアミド；
（Ｒ）−（５−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）ピリジン−３−イル）（３−アミノピロリジン−１−イル）メタノン；
ラセミ体−トランス−（５−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）ピリジン−３−イル）（−３−フルオロ−４−ヒドロキシピロリジン−１−イル）メタノン；
２−（４−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−１Ｈ−インドール−１−イル）−１−（ピペリジン−１−イル）エタノン；
ｔｅｒｔ−ブチル４−（２−（４−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−１Ｈ−インドール−１−イル）アセチル）ピペラジン−１−カルボン酸塩；
（２−（（１Ｈ−インドール−４−イル）オキシ）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−４−イル）メタンアミン；
５−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−３，４−ジヒドロキノリン−２（１Ｈ）−オン；
５−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−１−（２−ヒドロキシエチル）−３，４−ジヒドロキノリン−２（１Ｈ）−オン；
３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）チオ）−Ｎ−フェニルベンズアミド；
３−（（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）アミノ）メチル）−Ｎ−フェニルベンズアミド；
３−（（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）アミノ）メチル）−Ｎ−（２−（メチルスルホニル）エチル）ベンズアミド；
３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）メチル）−１−ベンジル−６−メチルピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン；
３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）メチル）−１−（２−ヒドロキシエチル）−６−メチルピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン；
４’−（アミノメチル）−６’−（トリフルオロメチル）−２Ｈ−［１，２’−ビピリジン］−２−オン；
１−（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）フェニル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン；
３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（２−シアノエチル）ベンズアミド；
１−（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）ベンゾイル）アゼチジン−３−カルボニトリル；
３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（オキセタン−３−イル）ベンズアミド；
３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（（１−ヒドロキシシクロブチル）メチル）ベンズアミド；
３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）−Ｎ−メチルベンズアミド；
（Ｓ）−（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）フェニル）（３−（ヒドロキシメチル）ピペリジン−１−イル）エタノン；
（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）フェニル）（４−（ヒドロキシメチル）ピペリジン−１−イル）メタノン；
（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）フェニル）（４−ヒドロキシ−４−メチルピペリジン−１−イル）メタノン；
（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）フェニル）（３−（メトキシメチル）アゼチジン−１−イル）メタノン；
（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）フェニル）（７−オキサ−２−アザスピロ［３．５］ノナン−２−イル）メタノン；
３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（（３Ｓ，４Ｓ）−４−ヒドロキシテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）ベンズアミド；
３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−ヒドロキシシクロペンチル）ベンズアミド；
３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（（１Ｓ，２Ｒ）−２−ヒドロキシシクロペンチル）ベンズアミド；
ラセミ体−シス−（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）フェニル）（３−フルオロ−４−ヒドロキシピロリジン−１−イル）メタノン；
（Ｒ）−３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）フェニル）（３−フルオロピロリジン−１−イル）メタノン；
（Ｓ）−３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）フェニル）（３−フルオロピロリジン−１−イル）メタノン；
（３Ｒ，４Ｒ）−１−（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）ベンゾイル）−４−フルオロピロリジン−３−イルメタンスルホナート；
（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）フェニル）（２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−イル）メタノン；
３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（ヘキス−５−イン−１−イル）ベンズアミド；
３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（４−（１−フェニル−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）ブチル）ベンズアミド；
３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−ヒドロキシベンズアミド；
３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−メトキシベンズアミド；
メチル（Ｓ）−３−（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）ベンズアミド）ペント−４−イノアート；
（Ｓ）−３−（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）ベンズアミド）ペント−４−イン酸；
メチル（Ｒ）−３−（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）ベンズアミド）ペント−４−イノアート；
（Ｒ）−３−（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）ベンズアミド）ペント−４−イン酸；
３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）安息香酸；
３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（２−アミノフェニル）ベンズアミド；
３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（ピリミジン−５−イル）ベンズアミド；
３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（オキサゾール−２−イル）ベンズアミド；
３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（１，３，４−オキサジアゾール−２−イル）ベンズアミド；
ラセミ体−トランス−（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−４−ヒドロキシフェニル）（３−フルオロ−４−ヒドロキシピロリジン−１−イル）メタノン；
ラセミ体−トランス−（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−５−ヒドロキシフェニル）（３−フルオロ−４−ヒドロキシピロリジン−１−イル）メタノン；
ラセミ体−トランス−（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−４−（ベンジルオキシ）フェニル）（３−フルオロ−４−ヒドロキシピロリジン−１−イル）メタノン；
ラセミ体−トランス−（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−５−メトキシフェニル）（３−フルオロ−４−ヒドロキシピロリジン−１−イル）メタノン；
２−（４−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−１Ｈ−インドール−１−イル）−１−（ピペラジン−１−イル）エタン−１−オン；
２−（４−（（４−（アミノメチル−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−１Ｈ−インドール−１−イル）−Ｎ−カルバムイミドイルアセトアミド；
エチル２−（５−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−２−オキソ−３，４−ジヒドロキノリン−１（２Ｈ）−イル）酢酸；
２−（５−（（４−（アミノメチル−６−トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−２−オキソ−３，４−ジヒドロキノリン−１（２Ｈ）−イル）酢酸；
（Ｓ）−（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）アミノ）メチル）フェニル）（３−ヒドロキシピロリジン−１−イル）メタノン；
メチル３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）カルバモイル）安息香酸塩；
３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）カルバモイル）安息香酸；
Ｎ１−（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）−Ｎ３−フェニルイソフタルアミド；
（Ｓ）−Ｎ−（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）−３−（３−ヒドロキシピロリジン−１−カルボニル）ベンズアミド；
Ｎ１−（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）−Ｎ３−（２−（メチルスルホニル）エチル）イソフタルアミド；
３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）メチル）−６−メチル−１−（ピリミジン−４−イルメチル）ピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン；
１−（２−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−６−アザスピロ［３．４］オクタン−６−イル）エタノン；
３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（３−エチルフェニル）ベンズアミド；
３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（４−エチルフェニル）ベンズアミド；
３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（３−エチニルフェニル）ベンズアミド；
３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（プロプ−２−イン−１−イル）ベンズアミド；
３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）Ｎ−（４−メチル−２−オキソ−２Ｈ−クロメン−７−イル）ベンズアミド；
（Ｒ，Ｓ）−シス−（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）フェニル）（３−フルオロ−４−ヒドロキシピロリジン−１−イル）メタノン；
（Ｓ，Ｒ）−シス−（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）フェニル）（３−フルオロ−４−ヒドロキシピロリジン−１−イル）メタノン；または、
４−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−フェニルピコリンアミドである。
【０１２６】
いくつかの実施形態では、ＬＯＸＬ２ｉは、置換または非置換のピリミジニルメチルアミンである。いくつかの実施形態では、置換または非置換のピリミジニルメチルアミンは、置換または非置換のピリミジン−４−イルメチルアミン化合物である。いくつかの実施形態では、置換または非置換のピリミジニルメチルアミンは、２０１６年６月２４日に出願された「Ｌｙｓｙｌ  Ｏｘｉｄａｓｅ−Ｌｉｋｅ  ２  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ａｎｄ  Ｕｓｅｓ  Ｔｈｅｒｅｏｆ」と題する国際特許出願ＵＳ２０１６／０３９２５３に記載された化合物であり、そのような化合物についての参照によって本明細書に組み込まれる。
【０１２７】
いくつかの実施形態では、ＬＯＸＬ２ｉは、国際特許出願ＰＣＴ／ＵＳ２０１６／０３９２５３の表１に記載される置換または非置換のピリミジニルメチルアミン化合物である。  
【０１２８】
いくつかの実施形態では、ＬＯＸＬ２ｉは、置換または非置換のピリミジニルメチルアミンであり、それは、（６−（４−フルオロフェノキシ）ピリジン−４−イル）メタンアミン；
（６−（３−フェノキシフェノキシ）ピリミジン−４−イル）メタンアミン；
３−（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）−Ｎ−フェニルベンズアミド；
４−（３−（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）ベンズアミド）安息香酸；
４−（（３−（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）ベンズアミド）メチル）安息香酸；
３−（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）−Ｎ−（ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−イルメチル）ベンズアミド；
３−（３−（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）ベンズアミド）プロパン酸；
４−（３−（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）ベンズアミド）ブタン酸；
３−（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）−Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）ベンズアミド；
（Ｓ）−（３−（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）フェニル）（３−ヒドロキシピロリジン−１−イル）メタノン；
ラセミ体−トランス−（３−（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）フェニル）（３−フルオロ−４−ヒドロキシピロリジン−１−イル）メタノン；
３−（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）−Ｎ−（２−（メチルスルホニル）エチル）ベンズアミド；
３−（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）−Ｎ−（２−スルファモイルエチル）ベンズアミド；
２−（５−（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）−２−オキソ−３，４−ジヒドロキノリン−１（２Ｈ）−イル）酢酸；
５−（６−アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）−１−（２−ヒドロキシエチル）−３，４−ジヒドロキノリン−２（１Ｈ）−オン；
５−（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）−１−（（６−メトキシピリジン−３−イル）メチル）−３，４−ジヒドロキノリン−２（１Ｈ）−オン；
（６−（（１Ｈ−インドール−６−イル）オキシ）ピリミジン−４−イル）メタンアミン；
（６−（（１Ｈ−インドール−５−イル）オキシ）ピリミジン−４−イル）メタンアミン；
（６−（（１Ｈ−インドール−４−イル）オキシ）ピリミジン−４−イル）メタンアミン；
（６−（（１−エチル−１Ｈ−インドール−４−イル）オキシ）ピリミジン−４−イル）メタンアミン；
メチル２−（４−（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）−１Ｈ−インドール−１−イル）酢酸塩；
２−（４−（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）−１Ｈ−インドール−１−イル）酢酸；
２−（４−（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）−１Ｈ−インドール−１−イル）−１−（ピペリジン−１−イル）エタン−１−オン；
２−（４−（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）−１Ｈ−インドール−１−イル）−Ｎ−メチル−Ｎ−フェニルアセトアミド；
（６−（（１−（２−メチルスルホニル）エチル）−１Ｈ−インドール−４−イル）オキシ）ピリミジン−４−イル）メタンアミン；
（６−（（１−ベンジル−１Ｈ−インドール−４−イル）オキシ）ピリミジン−４−イル）メタンアミン；
メチル３−（（４−（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）−１Ｈ−インドール−１−イル）メチル）安息香酸塩；
３−（（４−（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）−１Ｈ−インドール−１−イル）メチル）安息香酸；
（６−（（１−（（６−メトキシピリジン−３−イル）メチル）−１Ｈ−インドール−５−イル）オキシ）ピリミジン−４−イル）メタンアミン；
（６−（（１−（（６−メトキシピリジン−３−イル）メチル）−２−メチル−１Ｈ−インドール−４−イル）オキシ）ピリミジン−４−イル）メタンアミン；
（６−（（１−（（６−メトキシピリジン−３−イル）メチル）−３−メチル−１Ｈ−インドール−４−イル）オキシ）ピリミジン−４−イル）メタンアミン；
（６−（（１−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−１Ｈ−インドール−４−イル）オキシ）ピリミジン−４−イル）メタンアミン；
３−（（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）メチル）−Ｎ，Ｎ−ジメチルベンズアミド；
３−（（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）メチル）−Ｎ−（２−ヒドロキシ−２−メチルプロピル）ベンズアミド；
ラセミ体−（３−（（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）メチル）フェニル）（３−ヒドロキシ−３−（トリフルオロメチル）ピペリジン−１−イル）メタノン；
ラセミ体−３−（（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）メチル）−Ｎ−（（３−メチル−２−オキソオキサゾリジン−５−イル）メチル）ベンズアミド；
３−（（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）メチル）−Ｎ−（２−（メチルスルホニル）エチル）ベンズアミド；
３−（（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）メチル）−Ｎ−（２−（２−オキソオキサゾリジン−３−イル）エチル）ベンズアミド；
Ｎ−（２−（１Ｈ−ピラゾール−１−イル）エチル）−３−（（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）メチル）ベンズアミド；
３−（（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）メチル）−Ｎ−フェニルベンズアミド；
３−（（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）メチル）−Ｎ−ベンジルベンズアミド；
３−（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）アミノ）−Ｎ−フェニルベンズアミド；
３−（（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）アミノ）メチル）−Ｎ−フェニルベンズアミド；
４−（３−（（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）アミノ）メチル）ベンズアミド）安息香酸；
３−（（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）（メチル）アミノ）メチル）−Ｎ−フェニルベンズアミド；
Ｎ−（２−（１Ｈ−テトラゾール−１−イル）エチル）−３−（（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）メチル）ベンズアミド；
５−（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）−１−（２−（メチルスルホニル）エチル）−３，４−ジヒドロキノリン−２（１Ｈ）−オン；
２−（４−（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）−１Ｈ−インドール−１−イル）エタン−１−オール；
（６−（（１−（オキセタン−３−イル）−１Ｈ−インドール−４−イル）オキシ）ピリミジン−４−イル）メタンアミン；
（３−（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）フェニル）（６−クロロインドリン−１−イル）メタノン；
（３−（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）フェニル）（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１−イル）メタノン；
（３−（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）フェニル）（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル）メタノン；
Ｎ−（（１Ｈ−インドール−２−イル）メチル）−３−（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）ベンズアミド；
３−（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）−Ｎ−（ピリジン−３−イルメチル）ベンズアミド；
３−（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）−Ｎ−（（２−クロロピリジン−４−イル）メチル）ベンズアミド；
３−（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）−Ｎ−ベンジルベンズアミド；
（Ｒ）−３−（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）−Ｎ−（２−ヒドロキシ−１−フェニルエチル）ベンズアミド；
（３−（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）フェニル）（４−（ピリジン−２−イル）ピペラジン−１−イル）メタノン；
（３−（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）フェニル）（４，４−ジメチルピペリジン−１−イル）メタノン；
（６−（（１Ｈ−インダゾール−４−イル）オキシ）ピリミジン−４−イル）メタンアミン；
（１−（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−４−イル）メタノール；
３−（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）−Ｎ−（（４’−フルオロ−［１，１’−ビフェニル］−４−イル）メチル）ベンズアミド；
３−（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）−Ｎ−（キノリン−２−イルメチル）ベンズアミド；
３−（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）−Ｎ−（（３−クロロベンゾ［ｂ］チオフェン−２−イル）メチル）ベンズアミド；
３−（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）−Ｎ−（（５−フルオロ−１Ｈ−インドール−２−イル）メチル）ベンズアミド；
３−（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）−Ｎ−（（１−メチル−１Ｈ−インドール−２−イル）メチル）ベンズアミド；
Ｎ−（（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−イル）メチル）−３−（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）ベンズアミド；
３−（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）−Ｎ−（ベンゾ［ｄ］オキサゾール−２−イルメチル）ベンズアミド；
（３−（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）フェニル）（５，６−ジヒドロ−１，７−ナフチリジン−７（８Ｈ）−イル）メタノン；
（３−（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）フェニル）（３−メチル−６，７−ジヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジン−５（４Ｈ）−イル）メタノン；
（３−（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）フェニル）（５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ：５，４−ｃ’］ジピリジン−７（６Ｈ，８Ｈ，９Ｈ）−イル）メタノン；
（３−（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）フェニル）（４−フェニルピペラジン−１−イル）メタノン；
（３−（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）フェニル）（４−（３，５−ジクロロピリジン−２−イル）ピペラジン−１−イル）メタノン；
（３−（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）フェニル）（４−ヒドロキシ−４−（トリフルオロメチル）ピペリジン−１−イル）メタノン；
（Ｓ）−メチル３−（３−（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）ベンズアミド）ペンタ−４−イノアート；
（Ｒ）−メチル３−（３−（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）ベンズアミド）ペンタ−４−イノアート；
３−（（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）メチル）−Ｎ−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）ベンズアミド；
（Ｒ）−３−（（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）メチル）−Ｎ−（２−ヒドロキシ−１−フェニルエチル）ベンズアミド；
３−（（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）メチル）−Ｎ−（ピリジン−３−イルメチル）ベンズアミド；
３−（（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）メチル）−Ｎ−（（２−クロロピリジン−４−イル）メチル）ベンズアミド；
３−（（（６−（アミノメチル）ピリジン−４−イル）オキシ）メチル）−Ｎ−（ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−イルメチル）ベンズアミド；
３−（（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）メチル）−Ｎ−（（５−フルオロベンゾ［ｂ］チオフェン−２−イル）メチル）ベンズアミド；
３−（（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）メチル）−Ｎ−（ベンゾ［ｄ］オキサゾール−２−イルメチル）ベンズアミド；
Ｎ−（（１Ｈ−インドール−２−イル）メチル）−３−（（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）メチル）ベンズアミド；
３−（（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）メチル）−Ｎ−（（５−フルオロ−１Ｈ−インドール−２−イル）メチル）ベンズアミド；
３−（（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）メチル）−Ｎ−（（１−メチル−１Ｈ−インドール−２−イル）メチル）ベンズアミド；
Ｎ−（（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−２−イル）メチル）−３−（（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）メチル）ベンズアミド；
（３−（（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）メチル）フェニル）（５，６−ジヒドロ−１，７−ナフチリジン−７（８Ｈ）−イル）メタノン；
（３−（（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）メチル）フェニル）（３−メチル−６，７−ジヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［４，３ｃ］ピリジン−５（４Ｈ）−イル）メタノン；
（３−（（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）メチル）フェニル）（５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ：５，４−ｃ’］ジピリジン−７（６Ｈ，８Ｈ，９Ｈ）−イル）メタノン；
（３−（（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）メチル）フェニル）（４−フェニルピペラジン−１−イル）メタノン；
（３−（（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）メチル）フェニル）（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−１−イル）メタノン；
（３−（（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）メチル）フェニル）（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル）メタノン；
（３−（（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）メチル）フェニル）（４−ヒドロキシ−４−（トリフルオロメチル）ピペリジン−１−イル）メタノン；
ラセミ体−３−（１−（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）エチル）−Ｎ−フェニルベンズアミド；
３−（（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）アミノ）メチル）−Ｎ−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）ベンズアミド；
３−（（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）アミノ）メチル）−Ｎ−（ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−イルメチル）ベンズアミド；
３−（（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）アミノ）メチル）−Ｎ−（（３−クロロベンゾ［ｂ］チオフェン−２−イル）メチル）ベンズアミド；
（１−（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）−１Ｈ−インドール−４−イル）メタノール；
（３−（（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）アミノ）メチル）フェニル）（４−フェニルピペラジン−１−イル）メタノン；
５−（（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）オキシ）−３，４−ジヒドロキノリン−２（１Ｈ）−オン；
（Ｒ）−１−（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）−Ｎ−フェニルピロリジン−３−カルボキサミド；
１−（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）−Ｎ−フェニルピペリジン−４−カルボキサミド；
（４−（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−イル）（フェニル）メタノン；
４−（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）−Ｎ−フェニルピペラジン−１−カルボキサミド；
１−（４−（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−イル）−２−フェニルエタノン；または、
１−（６−（アミノメチル）ピリミジン−４−イル）−５−（ベンジルオキシ）−３，４−ジヒドロキノリン−２（１Ｈ）−オンである。
【０１２９】
いくつかの実施形態では、ＬＯＸＬ２ｉは、置換または非置換のクロメノニルメチルアミン化合物である。いくつかの実施形態では、置換または非置換のクロメノニルメチルアミン化合物は、置換または非置換のクロメン−４−オニルメチルアミンである。いくつかの実施形態では、ＬＯＸＬ２ｉは、２０１６年７月１８日に出願された「Ｌｙｓｙｌ  Ｏｘｉｄａｓｅ−ｌｉｋｅ  ２  （ＬＯＸＬ２）  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ａｎｄ  Ｕｓｅｓ  Ｔｈｅｒｅｏｆ」と題する国際特許出願ＰＣＴ／ＵＳ２０１６／０４２８２６に記載された化合物であり、そのような化合物についての参照によって本明細書に組込まれる。
【０１３０】
いくつかの実施形態では、ＬＯＸＬ２ｉは、国際特許出願ＵＳ２０１６／０４２８２６の表１に記載される化合物である。
【０１３１】
いくつかの実施形態において、ＬＯＸＬ２ｉは以下のとおりである：２−（アミノメチル）−６−ブロモ−４Ｈ−クロメン−４−オン；
２−（アミノメチル）−７−ブロモ−４Ｈ−クロメン−４−オン；
２−（アミノメチル）−６−エチニル−４Ｈ−クロメン−４−オン；
２−（アミノメチル）−６−（３−ヒドロキシ−３−メチルブト−１−イン−１−イル）−４Ｈ−クロメン−４−オン；
２−（アミノメチル）−６−（３−メチルブト−３−エン−１−イン−１−イル）−４Ｈ−クロメン−４−オン；
２−（アミノメチル）−６−フェニル−４Ｈ−クロメン−４−オン；
２−（アミノメチル）−６−（ピリジン−２−イル）−４Ｈ−クロメン−４−オン；
２−（アミノメチル）−６−（ピリジン−３−イル）−４Ｈ−クロメン−４−オン；
２−（アミノメチル）−６−（キノリン−３−イル）−４Ｈ−クロメン−４−オン；
２−（アミノメチル）−６−（１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−４Ｈ−クロメン−４−オン；
２−（アミノメチル）−７−（１Ｈ−ピラゾール−１−イル）−４Ｈ−クロメン−４−オン；
２−（アミノメチル）−６−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−４Ｈ−クロメン−４−オン；
２−（アミノメチル）−６−（１−メチル−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）−４Ｈ−クロメン−４−オン；
２−（アミノメチル）−６−（１−フェニル−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）−４Ｈ−クロメン−４−オン；
２−（アミノメチル）−６−（１−ベンジル−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）−４Ｈ−クロメン−４−オン；
２−（アミノメチル）−６−（１−（２−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）−４Ｈ−クロメン−４−オン；
２−（４−（２−（アミノメチル）−４−オキソ−４Ｈ−クロメン−６−イル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド；
２−（アミノメチル）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−４−オキソ−４Ｈ−クロメン−６−カルボキサミド；
２−（アミノメチル）−６−（ピペリジン−１−カルボニル）−４Ｈ−クロメル−４−オン；
（Ｓ）−２−（アミノメチル）−６−（３−ヒドロキシピロリジン−１−イル）−４Ｈ−クロメン−４−オン；
Ｎ−（２−（１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−１−イル）エチル）−２−（アミノメチル）−４−オキソ−４Ｈ−クロメン−６−カルボキサミド；
２−（アミノメチル）−４−オキソ−Ｎ−（２−スルファモイルエチル）−４Ｈ−クロメン−６−カルボキサミド；
（Ｒ）−２−（アミノメチル）−６−（３−アミノピロリジン−１−カルボニル）−４Ｈ−クロメン−４−オン；
メチル（Ｒ）−１−（２−（アミノメチル）−４−オキソ−４Ｈ−クロメン−６−カルボニル）ピロリジン−３−カルボン酸塩；
ラセミ体−トランス−２−（アミノメチル）−６−（３−フルオロ−４−ヒドロキシピロリジン−１−カルボニル）−４Ｈ−クロメン−４−オン；
２−（アミノメチル）−Ｎ−（２−（メチルスルホニル）エチル）−４−オキソ−４Ｈ−クロメン−６−カルボキサミド；
２−（アミノメチル）−６−メトキシ−４Ｈ−クロメン−４−オン；
２−（アミノメチル）−７−メトキシ−４Ｈ−クロメン−４−オン；
２−（アミノメチル）−７−（ベンジルオキシ）−４Ｈ−クロメン−４−オン；
２−（アミノメチル）−６−（ベンジルオキシ）−４Ｈ−クロメン−４−オン；
２−（アミノメチル）−７−エチニル−４Ｈ−クロメン−４−オン；
２−（（２−（アミノメチル）−４−オキソ−４Ｈ−クロメン−７−イル）オキシ）−Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド；
２−（アミノメチル）−７−（１−フェニル−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）−４Ｈ−クロメン−４−オン；
２−（（２−（アミノメチル）−４−オキソ−４Ｈ−クロメン−６−イル）オキシ）酢酸；
２−（（２−（アミノメチル）−４−オキソ−４Ｈ−クロメン−６−イル）オキシ）−Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド；
メチル（Ｓ）−１−（２−（アミノメチル）−４−オキソ−４Ｈ−クロメン−６−カルボニル）ピロリジン−３−カルボン酸塩；
１−（２−（アミノメチル）−４−オキソ−４Ｈ−クロメン−６−カルボニル）ピロリジン−３−カルボン酸；
（Ｒ）−１−（２−（アミノメチル）−４−オキソ−４Ｈ−クロメン−６−カルボニル）ピロリジン−３−カルボン酸；
（Ｓ）−１−（２−（アミノメチル）−４−オキソ−４Ｈ−クロメン−６−カルボニル）ピロリジン−３−カルボン酸；
２−（アミノメチル）−７−（１−メチル−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）−４Ｈ−クロメン−４−オン；
２−（アミノメチル）−７−（４−フェニルピペラジン−１−イル）−４Ｈ−クロメン−４−オン；
２−（アミノメチル）−７−（４−ベンゾイルピペラジン−１−イル）−４Ｈ−クロメン−４−オン；
２−（アミノメチル）−７−（３，４−ジヒドロキノリン−１（２Ｈ）−イル）−４Ｈ−クロメン−４−オン；
２−（アミノメチル）−７−ヒドロキシ−４Ｈ−クロメン−４−オン；
２−（アミノメチル）−７−イソブトキシ−４Ｈ−クロメン−４−オン；
２−（アミノメチル）−７−（プロプ−２−イン−１−イルオキシ）−４Ｈ−クロメン−４−オン；
２−（アミノメチル）−７−（２−フェノキシエトキシ）−４Ｈ−クロメン−４−オン；
２−（アミノメチル）−７−（（１−フェニル−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）メトキシ）−４Ｈ−クロメン−４−オン；
３−（（（２−（アミノメチル）−４−オキソ−４Ｈ−クロメン−７−イル）オキシ）メチル）−Ｎ−フェニルベンズアミド；
３−（（２−（アミノメチル）−４−オキソ−４Ｈ−クロメン−７−イル）アミノ）−Ｎ−フェニルベンズアミド；
２−（アミノメチル）−８−ブロモ−４Ｈ−クロメン−４−オン；
２−（アミノメチル）−８−エチニル−４Ｈ−クロメン−４−オン；
２−（アミノメチル）−８−ヒドロキシ−４Ｈ−クロメン−４−オン；
２−（アミノメチル）−８−（プロプ−２−イン−１−イルオキシ）−４Ｈ−クロメン−４−オン；
２−（アミノメチル）−８−（ベンジルオキシ）−４Ｈ−クロメン−４−オン；
２−（アミノメチル）−８−フェネトキシ−４Ｈ−クロメン−４−オン；
２−（アミノメチル）−８−（２−フェノキシエトキシ）−４Ｈ−クロメン−４−オン；
２−（（２−（アミノメチル）−４−オキソ−４Ｈ−クロメン−８−イル）オキシ）−Ｎ−フェニルアセトアミド；
３−（（（２−（アミノメチル）−４−オキソ−４Ｈ−クロメン−８−イル）オキシ）メチル）−Ｎ−フェニルベンズアミド；
２−（アミノメチル）−Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）−４−オキソ−４Ｈ−クロメン−６−カルボキサミド；
２−（アミノメチル）−６−（（３Ｓ，４Ｓ）−３−フルオロ−４−ヒドロキシピロリジン−１−カルボニル）−４Ｈ−クロメン−４−オン；
２−（アミノメチル）−６−（（３Ｒ，４Ｒ）−３−フルオロ−４−ヒドロキシピロリジン−１−カルボニル）−４Ｈ−クロメン−４−オン；
２−（アミノメチル）−７−（（４−（トリフルオロメチル）ベンジル）オキシ）−４Ｈ−クロメン−４−オン；
２−（アミノメチル）−７−（（３−フェニルプロプ−２−イン−１−イル）オキシ）−４Ｈ−クロメン−４−オン；
２−（アミノメチル）−７−（（４−メトキシベンジル）オキシ）−４Ｈ−クロメン−４−オン；
２−（アミノメチル）−７−（キノリン−２−イルメトキシ）−４Ｈ−クロメン−４−オン；
２−（アミノメチル）−７−（ベンゾ［ｂ］チオフェン−２−イルメトキシ）−４Ｈ−クロメン−４−オン；
２−（アミノメチル）−７−（３−（トリフルオロメチル）フェノキシ）−４Ｈ−クロメン−４−オン；
２−（アミノメチル）−７−フェノキシ−４Ｈ−クロメン−４−オン；
２−（アミノメチル）−７−（ベンジルオキシ）−６−メトキシ−４Ｈ−クロメン−４−オン；または、
２−（アミノメチル）−７−（（１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）アミノ）−４Ｈ−クロメン−４−オン。
【０１３２】
いくつかの実施形態では、ＬＯＸＬ２ｉは、置換または非置換のキノリノニルメチルアミンである。いくつかの実施形態において、置換または非置換のキノリノニルメチルアミン化合物は、置換または非置換のキノリン−４−オニルメチルアミンである。
【０１３３】
いくつかの実施形態では、ＬＯＸＬ２ｉは、２０１７年２月７日に出願された「Ｑｕｉｎｏｌｉｎｏｎｅ  Ｌｙｓｙｌ  Ｏｘｉｄａｓｅ−Ｌｉｋｅ  ２  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ａｎｄ  Ｕｓｅｓ  Ｔｈｅｒｅｏ」と題する国際特許出願ＰＣＴ／ＵＳ２０１７／０１６８４７に記載の化合物であり、そのような化合物についての参照によって本明細書に取り込まれる。
【０１３４】
いくつかの実施形態では、ＬＯＸＬ２ｉは、国際特許出願  ＰＣＴ／ＵＳ２０１７／０１６８４７の表１に記載される化合物である。
【０１３５】
いくつかの実施形態において、ＬＯＸＬ２ｉは以下のとおりである：２−（アミノメチル）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−１−メチルキノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−ブロモキノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−エチニルキノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−フェニルキノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（１−フェニル−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（フェニルエチニル）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（１Ｈ−ピラゾール−１−イル）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−メトキシキノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−ヒドロキシキノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（４−フルオロフェニル）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（３−フルオロフェニル）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（２−フルオロフェニル）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（２Ｈ−テトラゾール−２−イル）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（１Ｈ−テトラゾール−１−イル）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イル）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（（４−フルオロフェニル）エチニル）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（（３−フルオロフェニル）エチニル）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（（２−フルオロフェニル）エチニル）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−フェノキシキノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（２−フルオロフェノキシ）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（３−フルオロフェノキシ）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（４−フルオロフェノキシ）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（ベンジルオキシ）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（（２−フルオロベンジル）オキシ）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（（３−フルオロベンジル）オキシ）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（（４−フルオロベンジル）オキシ）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（フェニルアミノ）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（ベンジルアミノ）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（プロプ−２−イン−１−イルオキシ）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（（４，４，４−トリフルオロブト−２−イン−１−イル）オキシ）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（（３−フェニルプロプ−２−イン−１−イル）オキシ）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（プロプ−２−イン−１−イルアミノ）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（（４，４，４−トリフルオロブト−２−イン−１−イル）アミノ）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（（３−フェニルプロプ−２−イン−１−イル）アミノ）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（ピリジン−２−イル）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（ピリジン−３−イル）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（ピリジン−４−イル）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（ピリミジン−５−イル）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（ピラジン−２−イル）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（オキサゾール−２−イル）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（チアゾール−２−イル）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２’−（アミノメチル）−［２，６’−ビキノリン］−４’（１’Ｈ）−オン；
２’−（アミノメチル）−［３，６’−ビキノリン］−４’（１’Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（５−メチル−２−オキソピリジン−１（２Ｈ）−イル）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（４−フェニル−４Ｈ−ピラゾール−１−イル）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（（１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）アミノ）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（（１−フェニル−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）アミノ）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（（１−（２−フルオロフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）アミノ）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（（１−（３−フルオロフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）アミノ）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（（１−（４−フルオロフェニル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）アミノ）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２’−（アミノメチル）−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−［１，６’−ビキノリン］−４’（１’Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（４−フェニルピペラジン−１−イル）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（ピロリジン−１−カルボニル）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（（３Ｓ，４Ｓ）−３−フルオロ−４−ヒドロキシピロリジン−１−カルボニル）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（（３Ｒ，４Ｒ）−３−フルオロ−４−ヒドロキシピロリジン−１−カルボニル）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−６−カルボキサミド；
２−（アミノメチル）−Ｎ−メチル−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−６−カルボキサミド；
２−（アミノメチル）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−６−カルボン酸；
２−（アミノメチル）−６−イソプロポキシキノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−イソブトキシキノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−［６，８’−ビキノリン］−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（５−（ベンジルオキシ）ピリジン−３−イル）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（４−クロロフェニル）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（３−クロロフェニル）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（２−クロロフェニル）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（２−クロロ−４−フルオロフェニル）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（４−クロロ−２−フルオロフェニル）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（３−フルオロ−４−メトキシフェニル）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（２−フルオロ−４−メトキシフェニル）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（６−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（５−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（４−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）キノリン−４（１Ｈ）−オン；
２−（アミノメチル）−６−（２−（トリフルオロメチル）ピリミジン−５−イル）キノリン−４（１Ｈ）−オン；または、
２−（アミノメチル）−６−（２−メトキシエトキシ）キノリン−４（１Ｈ）−オン。
【０１３６】
「ウォーヘッド」基の同一性は、ＬＯＸＬ２とプローブ化合物と相互作用の特異性を変更することができる。
【０１３７】
１つの態様では、本明細書に記載のプローブ化合物は、以下の式（Ｉ）の構造を有する化合物であり：
【０１３８】
【化８】
2019529387.tif 000010
式中、
Ｑは、検出、単離、または生体サンプル中の式（Ｉ）の化合物の検出および単離のためのタグ部分であり；または、
式（Ｉ）の化合物が、式（Ｉ）の化合物中に放射性変異体、あるいは任意の原子の同位体変異体を含む場合、Ｑは存在せず；
Ｌは存在しないか、リンカーであり；
Ｒ１はそれぞれ独立してＨ、Ｄ、またはＦであり；
環Ａは、非置換または置換のアリール、あるいは非置換または置換の複素環であり、環Ａが置換される場合、環Ａは１、２、あるいは３のＲａ基で置換され；
Ｌ１は、Ｘ１−Ｙ１−、−Ｙ１−Ｘ１−、またはＹ１であり；
Ｘ１は−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ２−、−ＮＲ２Ｃ（＝Ｏ）−、または−ＮＲ２−であり；
Ｒ２はＨ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６フルオロアルキル、またはＣ１−Ｃ６ジュウテロアルキルでありであり；
Ｙ１は存在しないか、Ｃ１−Ｃ６アルキレンであり；
Ｂは存在しないか、非置換または置換の単環式の炭素環、非置換または置換の二環式の炭素環、非置換または置換の単環式の複素環、あるいは非置換または置換の二環式の複素環であり、ここで、Ｂが置換される場合、Ｂは１以上のＲｂで置換され；
ＲａおよびＲｂはそれぞれ独立して、Ｈ、Ｄ、ハロゲン、ＣＮ、−ＯＲ５、−ＳＲ５、Ｓ（＝Ｏ）Ｒ４、−Ｓ（＝Ｏ）２Ｒ４、−Ｓ（＝Ｏ）２Ｎ（Ｒ５）２、ＮＲ５Ｓ（＝Ｏ）２Ｒ４、Ｃ（＝Ｏ）Ｒ４、ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ４、ＣＯ２Ｒ５、ＯＣＯ２Ｒ４、Ｎ（Ｒ４）２、ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ５）２、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｒ４、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＯＲ４、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６フルオロアルキル、Ｃ１−Ｃ６ジュウテロアルキルであり、Ｃ１−Ｃ６ヘテロアルキル、置換または非置換のＣ３−Ｃ１０シクロアルキル、置換または非置換のＣ２−Ｃ１０ヘテロシクロアルキル、置換または非置換のアリール、あるいは置換または非置換のヘテロアリールであり；
Ｒ４はそれぞれ独立して、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６フルオロアルキル、Ｃ１−Ｃ６ジュウテロアルキルであり、Ｃ１−Ｃ６ヘテロアルキル、置換または非置換のＣ３−Ｃ１０シクロアルキル、置換または非置換のＣ２−Ｃ１０ヘテロシクロアルキル、置換または非置換のアリール、および置換または非置換のヘテロアリールから選択され；
Ｒ５はそれぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６フルオロアルキル、Ｃ１−Ｃ６ジュウテロアルキルであり、Ｃ１−Ｃ６ヘテロアルキル、置換または非置換のＣ３−Ｃ１０シクロアルキル、置換または非置換のＣ２−Ｃ１０ヘテロシクロアルキル、置換または非置換のアリール、置換または非置換のヘテロアリール、−Ｃ１−Ｃ４アルキレン−（置換または非置換のＣ３−Ｃ８シクロアルキル）、置換または非置換のＣ２−Ｃ８ヘテロシクロアルキル、−Ｃ１−Ｃ４アルキレン−（置換または非置換のＣ２−Ｃ８ヘテロシクロアルキル）、置換または非置換のアリール、−Ｃ１−Ｃ４アルキレン−（置換または非置換のアリール）、置換または非置換のヘテロアリール、および−Ｃ１−Ｃ４アルキレン−（置換または非置換のヘテロアリール）から選択され；あるいは、
同じＮ原子上の２つのＲ５は、それらが結合しているＮ原子と一体となって、置換または非置換のＮ含有複素環を形成する。
【０１３９】
いくつかの実施形態では、Ｌは存在しないか、式−Ｌ２−Ｃ−Ｌ３−を有するリンカーであり；
Ｌ２は、Ｘ２−Ｙ２−、−Ｙ２−Ｘ２−、またはＹ２であり；
Ｘ２は−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２−、−Ｓ（＝Ｏ）２ＮＲ３−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ３−、−ＮＲ３Ｃ（＝Ｏ）−、−ＮＲ３Ｓ（＝Ｏ）２−、または―ＮＲ３−であり；
Ｒ３はＨ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６フルオロアルキル、またはＣ１−Ｃ６ジュウテロアルキルでありであり；
Ｙ２は存在しないか、Ｃ１−Ｃ６アルキレンであり；
Ｃは存在しないか、置換または非置換のＣ１−Ｃ６アルキル、置換または非置換のＣ１−Ｃ６フルオロアルキル、置換または非置換のＣ１−Ｃ６ヘテロアルキル、置換または非置換のＣ３−Ｃ８シクロアルキル、−Ｃ１−Ｃ４アルキレン−（置換または非置換のＣ３−Ｃ８シクロアルキル）、置換または非置換のＣ２−Ｃ８ヘテロシクロアルキル、−Ｃ１−Ｃ４アルキレン−（置換または非置換のＣ２−Ｃ８ヘテロシクロアルキル）、置換または非置換のアリール、−Ｃ１−Ｃ４アルキレン−（置換または非置換のアリール）、置換または非置換のヘテロアリール、あるいは−Ｃ１−Ｃ４アルキレン−（置換または非置換のヘテロアリール）であり；ここで、Ｃが置換される場合、Ｃは１つ以上のＲｃで置換され；あるいは、
ＣおよびＲ３が同じＮ原子に結合している場合、ＣおよびＲ３は、それらが結合しているＮ原子と一体になって環Ｄを形成し、ここで、環Ｄは置換または非置換のＮ含有複素環であり、環Ｄが置換される場合、環Ｄは１、２、または３つのＲｄで置換され；
ＲｃおよびＲｄはそれぞれ独立して、Ｄ、ハロゲン、ＣＮ、−ＯＲ５、−ＳＲ５、−Ｓ（＝Ｏ）Ｒ４、−Ｓ（＝Ｏ）２Ｒ４、−Ｓ（＝Ｏ）２Ｎ（Ｒ５）２、ＮＲ５Ｓ（＝Ｏ）２Ｒ４、Ｃ（＝Ｏ）Ｒ４、ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ４、ＣＯ２Ｒ５、ＯＣＯ２Ｒ４、Ｎ（Ｒ４）２、ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ５）２、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｒ４、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＯＲ４、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６フルオロアルキル、Ｃ１−Ｃ６ジュウテロアルキルであり、Ｃ１−Ｃ６ヘテロアルキル、置換または非置換のＣ３−Ｃ１０シクロアルキル、置換または非置換のＣ２−Ｃ１０ヘテロシクロアルキル、置換または非置換のアリール、あるいは置換または非置換のヘテロアリールからなる群から選択され；あるいは、
同じ炭素原子に結合する２つのＲｄ基は、それらが結合する炭素原子と一体となって、置換または非置換の炭素環、あるいは置換または非置換の複素環のいずれかを形成し；
Ｌ３は存在しないか、−Ｌ４−Ｌ５−Ｌ６−Ｌ７−であり；
Ｌ４は存在しないか、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−ＮＲ４−、−ＣＨ（ＯＨ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−ＣＨ（＝Ｎ）−、−ＣＨ（＝Ｎ−ＮＨ）−、−ＣＣＨ３（＝Ｎ）−、−ＣＣＨ３（＝Ｎ−ＮＨ）−、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ−、−（ＣＨ２）ｐ−、−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐ−、または−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐ−であり、ｐは１、２、３、４、５、または６であり；
Ｌ５は存在しないか、非置換または置換のアルキレン、非置換または置換のヘテロアルキレン、非置換または置換のアルケニレン、非置換または置換のアルキニレン、非置換または置換のシクロアルキレン、非置換または置換のヘテロシクロアルキレン、非置換または置換のアリーレン、非置換または置換のヘテロアリーレン、−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐ−、あるいは−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐ−であり、ｐは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２であり；
Ｌ６は存在しないか、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−ＮＲ４−、−ＣＨ（ＯＨ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ−、または−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ−であり；
Ｌ７は存在しないか、非置換または置換のアルキレン、非置換または置換のヘテロアルキレンである。
【０１４０】
いくつかの実施形態において、Ｒ１はそれぞれＨである。
【０１４１】
いくつかの実施形態では、Ｒａはそれぞれ独立して、Ｈ、Ｄ、ハロゲン、−ＣＮ、−ＯＲ５、−ＳＲ５、−Ｓ（＝Ｏ）Ｒ４、−Ｓ（＝Ｏ）２Ｒ４、−Ｓ（＝Ｏ）２Ｎ（Ｒ５）２、−ＮＲ２Ｓ（＝Ｏ）２Ｒ４、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ４、−ＯＣ＝（Ｏ）Ｒ４、−ＣＯ２Ｒ５、−ＯＣＯ２Ｒ５、−Ｎ（Ｒ５）２、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ５）２、−ＮＲ２Ｃ（＝Ｏ）Ｒ４、−ＮＲ２Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ５、−ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２、−Ｃ（ＣＨ３）３、−ＣＨ２Ｆ、−ＣＨＦ２、−ＣＦ３、Ｃ１−Ｃ６ジュウテロアルキルであり、Ｃ１−Ｃ６ヘテロアルキル、置換または非置換のＣ３−Ｃ１０シクロアルキル、置換または非置換の単環式のＣ２−Ｃ６ヘテロシクロアルキル、置換または非置換のフェニル、あるいは置換または非置換の単環式のヘテロアリールからなる群から選択される。
【０１４２】
いくつかの実施形態では、Ｒａはそれぞれ独立して、Ｈ、Ｄ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、−ＣＮ、−ＯＲ５、−ＣＯ２Ｒ５、−Ｎ（Ｒ５）２、−ＮＲ２Ｃ（＝Ｏ）Ｒ４、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２、−Ｃ（ＣＨ３）３、−ＣＨ２Ｆ、−ＣＨＦ２、−ＣＦ３、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、置換または非置換単環式のＣ２−Ｃ６ヘテロシクロアルキル、置換または非置換のフェニル、あるいは置換または非置換の単環式のヘテロアリールからなる群から選択される。
【０１４３】
いくつかの実施形態では、Ｒａはそれぞれ独立して、Ｈ、Ｄ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、−ＣＮ、−ＯＣＨ３、−ＯＣＦ３、−ＣＨ３、−ＣＨ２Ｆ、−ＣＨＦ２、−ＣＦ３、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、置換または非置換の単環式のＣ２−Ｃ６ヘテロシクロアルキル、置換または非置換のフェニル、あるいは置換または非置換の単環式のヘテロアリールからなる群から選択される。
【０１４４】
いくつかの実施形態では、Ｒａはそれぞれ独立して、Ｈ、Ｄ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、−ＣＮ、−ＯＣＨ３、−ＯＣＦ３、−ＣＨ３、−ＣＨ２Ｆ、−ＣＨＦ２、−ＣＦ３からなる群から選択される。
【０１４５】
いくつかの実施形態では、Ｒａはそれぞれ独立して、Ｈ、Ｄ、または−ＣＦ３からなる群から選択される。
【０１４６】
いくつかの実施形態では、環Ａは非置換または置換の複素環であり、ここで、環Ａが置換される場合、環Ａは１、２、あるいは３のＲａ基で置換される。
【０１４７】
いくつかの実施形態では、環Ａは非置換または置換の単環式の芳香族の複素環であり、ここで、環Ａが置換される場合、環Ａは１、２、あるいは３のＲａ基で置換される。
【０１４８】
いくつかの実施形態では、環Ａは非置換または置換の単環式の芳香族の６−員の複素環、あるいは非置換または置換の単環式の芳香族の５−員の複素環であり、ここで、環Ａが置換される場合、環Ａは１、２、または３のＲａ基で置換される。
【０１４９】
いくつかの実施形態では、環Ａは非置換または置換のピリジニル、非置換または置換のピリミジニル、非置換または置換のピラジニル、非置換または置換のピリダジニル、あるいは非置換または置換のトリアジニルであり、ここで、環Ａが置換される場合、環Ａは１、２、または３のＲａ基で置換される。
【０１５０】
いくつかの実施形態において、環Ａは、非置換または置換のピリジニル、あるいは非置換または置換のピリミジニルであり、環Ａが置換される場合、環ＡはＲａで置換される。
【０１５１】
いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物は式（ＩＩ）または式（ＩＩＩ）の構造を有する：
【０１５２】
【化９】
2019529387.tif 000011
【０１５３】
いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物は式（ＩＩａ）の以下の構造を有する：
【０１５４】
【化１０】
2019529387.tif 000012
【０１５５】
いくつかの実施形態において、環Ａは、非置換または置換のイミダゾリル、非置換または置換のピラゾリル、非置換または置換のトリアゾリル、非置換または置換のテトラゾリル、非置換または置換のフリル、非置換または置換のチエニル、非置換または置換のイソキサゾリル、非置換または置換のチアゾリル、非置換または置換のオキサゾリル、非置換または置換のイソチアゾリル、非置換または置換のピロリル、非置換または置換のオキサジアゾリル、非置換または置換のチアジアゾリル、あるいは非置換または置換のフラザニルである、非置換または置換の単環式の芳香族の５−員の複素環である。
【０１５６】
いくつかの実施形態では、環Ａは非置換または置換の二環式の複素環である。
【０１５７】
いくつかの実施形態では、環Ａは、非置換または置換のキノリノン、非置換または置換のイソキノリノン、非置換または置換のクロモン、あるいは非置換または置換のクマリンである。
【０１５８】
いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、式（ＩＶ）、式（Ｖ）、式（ＶＩ）、式（ＶＩＩ）、または式（ＶＩＩＩ）の以下の構造を有する。
【０１５９】
【化１１】
2019529387.tif 000013
【０１６０】
いくつかの実施形態では、環Ａは、非置換または置換のインドリジニル、非置換または置換のインドリル、非置換または置換のベンゾフラニル、非置換または置換のベンゾチオフェニル、非置換または置換のインダゾリル、非置換または置換のベンズイミダゾリル、非置換または置換のプリニル、非置換または置換のキノリジニル、非置換または置換のキノリニル、非置換または置換のイソキノリニル、非置換または置換のシンノリニル、非置換または置換のフタラジニル、非置換または置換のキナゾリニル、非置換または置換のキノキサリニル、非置換または置換の１，８−ナフチリジニル、あるいは非置換または置換のプテリジニルである。
【０１６１】
いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、式（ＩＸ）、式（Ｘ）、（ＸＩ）、または式（ＸＩＩ）の以下の構造を有する。
【０１６２】
【化１２】
2019529387.tif 000014
【０１６３】
いくつかの実施形態では、環Ａは、非置換または置換のフェニル、あるいは非置換または置換のナフチルである。
【０１６４】
いくつかの実施形態では、Ｌ１は存在しないか、Ｘ１、またはＸ１−Ｃ１−Ｃ６アルキレンである。
【０１６５】
いくつかの実施形態では、Ｘ１は−Ｏ−である。
【０１６６】
いくつかの実施形態では、Ｌ１は存在しないか、−Ｏ−、または−Ｏ−ＣＨ２−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＣＨ２−、−ＮＨＣ（＝Ｏ）−、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ２−である。
【０１６７】
いくつかの実施形態では、Ｌ１は−Ｏ−または−Ｏ−ＣＨ２−である。
【０１６８】
いくつかの実施形態では、Ｂは単環式のＣ３−Ｃ６炭素環、二環式のＣ６−Ｃ１２炭素環、単環式のＣ１−Ｃ５複素環、二環式のＣ５−Ｃ１０複素環である。
【０１６９】
いくつかの実施形態では、Ｂは単環式のＣ３−Ｃ６炭素環である。
【０１７０】
いくつかの実施形態では、Ｂはフェニル、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、またはシクロヘキシルである。
【０１７１】
いくつかの実施形態では、Ｂはフェニルである。
【０１７２】
いくつかの実施形態では、Ｂは
【０１７３】
【化１３】
2019529387.tif 000015
である。
【０１７４】
いくつかの実施形態では、Ｂは
【０１７５】
【化１４】
2019529387.tif 000016
である。いくつかの実施形態では、Ｂは
【０１７６】
【化１５】
2019529387.tif 000017
である。
【０１７７】
いくつかの実施形態では、Ｂは二環式のＣ９−Ｃ１０炭素環である。
【０１７８】
いくつかの実施形態では、Ｂはナフチル、インダニル、インデニル、またはテトラヒドロナフチルである。
【０１７９】
いくつかの実施形態では、Ｂは、１−４のＮ原子と０または１つのＯまたはＳ原子を含む単環式の複素環、０−４のＮ原子と１つのＯまたはＳ原子を含む単環式の複素環、１−４のＮ原子と０または１つのＯまたはＳ原子を含む二環式の複素環、あるいは０−４のＮ原子と１つのＯまたはＳ原子を含む二環式の複素環である。
【０１８０】
いくつかの実施形態では、Ｂは、ピロリジニル、ピロリジノニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロフラノニル、ジヒドロフラノニル、ジヒドロフラニル、テトラヒドロチエニル、オキサゾリジノニル、テトラヒドロピラニル、ジヒドロピラニル、テトラヒドロチオピラニル、ピペリジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、ピペラジニル、アジリジニル、アゼチジニル、オキセタニル、チエタニル、ホモピペリジニル、オキセパニル、チエパニル、オキサゼピニル、ジアゼピニル、チアゼピニル、１，２，３，６−テトラヒドロピリジニル、インドリニル、インドリノニル、１，２，３，４−テトラヒドロキノリニル、１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリニル、３，４−ジヒドロ−２（１Ｈ）−キノリノニル、フラニル、ピロリル、オキサゾリル、チアゾリル、イミダゾリル、ピラゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、イソキサゾリル、イソチアゾリル、オキサジアゾリル、チアジアゾリル、ピリジニル、ピリミジニル、ピラジニル、ピリダジニル、トリアジニル、キノリニル、イソキノリニル、キナゾリニル、キノキサリニル、ナフチリジニル、インドリル、インダゾリル、ベンゾキサゾリル、ベンズイソオキサゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾチエニル、ベンゾチアゾリル、ベンズイミダゾリル、プリニル、シンノリニル、フタラジニル、プテリジニル、ピリドピリミジニル、ピラゾロピリミジニル、またはアザインドリルである。
【０１８１】
いくつかの実施形態では、Ｂはピロリジニル、ピロリジノニル、ピペリジニル、ピペラジニル、インドリニル、インドリノニル、１，２，３，４−テトラヒドロキノリニル、１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリニル、３，４−ジヒドロ−２（１Ｈ）−キノリノニル、ピロリル、イミダゾリル、ピラゾリル、ピリジニル、ピリミジニル、ピラジニル、ピリダジニル、インドリル、インダゾリル、またはベンズイミダゾリルである。
【０１８２】
いくつかの実施形態では、Ｂは
【０１８３】
【化１６】
2019529387.tif 000018
である。
【０１８４】
いくつかの実施形態では、Ｂは
【０１８５】
【化１７】
2019529387.tif 000019
である。
【０１８６】
いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物は式（ＩＩｂ）の以下の構造を有する：
【０１８７】
【化１８】
2019529387.tif 000020
【０１８８】
いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物は式（ＩＩｃ）の以下の構造を有する：
【０１８９】
【化１９】
2019529387.tif 000021
【０１９０】
リンカー
リンカー領域またはスペーサー（Ｌ）は、反応性基または「ウォーヘッド（ｗａｒｈｅａｄ）」と標識タグ（Ｑ）との間の架橋としてみなすことができる。このプローブ要素は、プローブ化合物の反応性を阻害することができるタグによって立体障害を防ぐ役割を果たす。その最も塩基性の形態で、リンカーは、拡張アルキルまたはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）スペーサーの形態をとることができる。さらに、リンカーは、特定の組織あるいは臓器に対してプローブを標的化することを可能にする特異性因子としての役割を果たすことができる。いくつかの実施形態において、リンカーは、化合物に対してさらなる溶解性を与える。
【０１９１】
いくつかの実施形態において、ウォーヘッドとリンカーＬは、標準的なＳＤＳローディングバッファー中での沸騰などのタンパク質を変性する条件下でＬＯＸＬ２から切断される。
【０１９２】
いくつかの実施形態において、リンカー領域（Ｌ）は、光切断可能な、酵素切断可能な、酸切断可能な、アルカリ切断可能な、酸化切断可能な、あるいは還元的切断可能な基である。
【０１９３】
いくつかの実施形態において、リンカー領域（Ｌ）は化学的、酵素的、あるいは光分解的に不安定な基を含む。
【０１９４】
本明細書で使用されるように、切断可能な結合または部分は、化学的、酵素的、または光分解的などの特定の条件下で切断されるか、または切断可能である結合または部分を指す。例えば、このような結合は、ＵＶまたはＩＲのレーザーによるなどしてＭＡＬＤＩ−ＭＳ分析の条件下で切断可能である。
【０１９５】
本明細書で使用されるように、「選択的に切断可能な」部分は、所望の化合物の他の部分の組成に影響を与えたり、これを変えたりすることなく選択的に切断可能である部分である。例えば、本明細書で提供される化合物の切断可能な部分Ｌは、タンパク質を含む抱合した生体分子の組成に影響を与えたりこれを変えたりすることなく、化学的、酵素的、光分解的、または他の手段によって切断可能である部分である。「非切断可能な」部分とは、所望の化合物の他の部分の組成に影響を与えたり、これを変えたりすることなく選択的に切断することができない部分である。
【０１９６】
いくつかの実施形態において、プローブ化合物がビーズなどの固体支持体に結合するとき、タンパクの同定と特徴づけには質量分析法を使用することができる。例えば、当初の質量スペクトルは、プローブ化合物で捕捉されたすべてのタンパク質の分子量をもたらす。その後、各々の同一性は、従来の手段（例えば、消化と分析、あるいはペプチドフラグメントとゲノム／プロテオームデータベース検索）によって決定することができる。タンパク質はすべての他のもの（例えば、質量スペクトル同定、あるいはビーズからの除去後のＸ線結晶学）から物理的に単離しているため、プローブ化合物を用いて研究者はタンパク質をさらに分析し、特徴づけることができる。そうするために、タンパク質は、固体支持体から洗い流され（例えば、アビジン／ストレプトアビジンのビーズを使用する場合、ビオチンでビーズを処理することで捕捉したタンパク質を置き換える）、あるいは、取り込まれた光切断可能なリンカー、あるいは酵素的または化学的に切断可能なリンカーを利用し、それによって固体支持体から捕捉された精製タンパク質を放出する。
【０１９７】
ある実施形態では、本明細書で提供される方法で使用されるプローブ化合物は、限定されないが、マトリックス支援レーザー脱離イオン化飛行時間型（ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ）質量分析法などの質量分析法を含む生体分子の分析に使用される条件下では切断できないＬ部分を有する。これらの実施形態のプローブ化合物は、例えば、混合物中の生体分子を同定するための、タンパク質−タンパク質を含む生体分子−生体分子の相互作用を判定するための、および、タンパク質−薬物またはタンパク質−薬物候補を含む生体分子−小分子の相互作用を判定するための本明細書で提供される方法において使用可能である。これらの実施形態では、分析のためにＬ基を切断する必要はない。
【０１９８】
いくつかの実施形態において、生体分子およびＱタグ部分機能が低い立体障害を有する場合、スペーサーＬは任意である。特定の実施形態では、立体障害はさらに「ウォーヘッド」基と協同してＬＯＸＬ２の選択性を増強することができる。スペーサー基は疎水性であっても親水性であってもよく、その長さはＬＯＸＬ２との効率的な相互作用および／または生体サンプルからの選別を達成するために変えられてもよい；それらは剛性であっても軟性であってもよい。
【０１９９】
特定の実施形態では、リンカー基Ｌは、タンパク質などの生体分子の分析の前または最中に切断される。分析は質量スペクトル分析、例えば、ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ質量スペクトル分析を含み得る。切断可能な基は、生体分子への抱合中、および抱合した生体分子の選別と洗浄の間に安定するように、選択されるが、限定されないが、質量スペクトル分析、例えば、ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ分析を含む生体分子の分析の条件下で切断の影響を受けやすい。ある実施形態では、切断可能な基Ｌはジスルフィド部分を含む。ジスルフィド結合は、限定されないが、ジチオトレイトールと２−メルカプトエタノールによる処理を含む様々な還元条件下で切断可能である。
【０２００】
別の実施形態では、Ｌは光切断可能な基であり、これは、質量分析法の前またはその最中に適切な波長のＵＶ光を用いる短時間の処理によって切断可能である。レーザー光線の作用によってＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ質量分析法中に切断することができる結合を含む光切断可能な基を使用することができる。例えば、トリチルエーテルまたはオルトニトロで置換されたベンジルを含む置換されたアラルキル基は、ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ質量分析中のレーザー誘起結合切断の影響を受けやすい。他の有用な切断可能な基は、限定されないが、ｏ−ニトロベンジル、フェナシル、およびニトロフェニルスルフェニルの基を含む。他の光切断可能な基は、国際特許公報第ＷＯ９８／２０１６６で開示されたものを含む。
【０２０１】
結合切断が弱酸〜中程度の酸に対する曝露後のカチオンの形成によって促される場合、他の切断可能なＬ基は酸敏感な基を含む。これらの酸不安定基について、基Ｌの切断は、マトリックス分子の酸性度によって、あるいはトリフルオロ酢酸の蒸気などの酸でアレイの短い処理を適用することによって、質量分光分析を含む分析の前またはその最中に、達成可能である。酢酸またはトリフルオロ酢酸に対するトリチル基の曝露は、ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ質量分析の前またはその最中にエーテル結合の切断をもたらす。
【０２０２】
いくつかの実施形態では、リンカーＬは非切断可能なリンカーである。
【０２０３】
いくつかの実施形態では、リンカーＬは切断可能なリンカーである。いくつかの実施形態において、リンカーＬは、中程度の還元剤またはヒドラジンを用いる処理の後に切断にかけられる切断リンカーである。
【０２０４】
いくつかの実施形態において、リンカーＬは、ジアゾベンゼン、レブリノイルエステル、ジスルフィド、ニトロベンゼンスルホンアミド、ジチオカルバマート、あるいはヒドラゾンを含む。いくつかの実施形態において、リンカーＬはジアゾベンゼン、レブリノイルエステル、ジスルフィド、あるいはニトロベンゼンスルホンアミドを含む。
【０２０５】
いくつかの実施形態では、Ｌは存在しないか、式−Ｌ２−Ｃ−Ｌ３−を有するリンカーであり、
Ｌ２はＸ２−Ｙ２−、−Ｙ２−Ｘ２−、あるいはＹ２であり、
Ｘ２は、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−Ｓ（＝Ｏ）２−、−Ｓ（＝Ｏ）２ＮＲ３−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ３−、−ＮＲ３Ｃ（＝Ｏ）−、−ＮＲ３Ｓ（＝Ｏ）２−、または―ＮＲ３−であり、
Ｒ３は、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６フルオロアルキル、またはＣ１−Ｃ６ジュウテロアルキルであり：
Ｙ２は、存在しないか、Ｃ１−Ｃ６アルキレンであり、
Ｃは存在しないか、置換または非置換のＣ１−Ｃ６アルキル、置換または非置換のＣ１−Ｃ６フルオロアルキル、置換または非置換のＣ１−Ｃ６ヘテロアルキル、置換または非置換のＣ３−Ｃ８シクロアルキル、−Ｃ１−Ｃ４アルキレン−（置換または非置換のＣ３−Ｃ８シクロアルキル）、置換または非置換のＣ２−Ｃ８ヘテロシクロアルキル、−Ｃ１−Ｃ４アルキレン−（置換または非置換のＣ２−Ｃ８ヘテロシクロアルキル）、置換または非置換のアリール、−Ｃ１−Ｃ４アルキレン−（置換または非置換のアリール）、置換または非置換のヘテロアリール、あるいは−Ｃ１−Ｃ４アルキレン−（置換または非置換のヘテロアリール）であり、ここで、Ｃが置換される場合、Ｃは１つ以上のＲｃで置換され；あるいは、
ＣおよびＲ３が同じＮ原子に結合している場合、ＣおよびＲ３は、それらが結合しているＮ原子と一緒になって環Ｄを形成し、ここで、環Ｄは置換または非置換のＮ含有複素環であり、環Ｄが置換される場合、環Ｄは１、２、または３のＲｄで置換され；
ＲｃおよびＲｄはそれぞれ独立して、Ｄ、ハロゲン、ＣＮ、−ＯＲ５、−ＳＲ５、−Ｓ（＝Ｏ）Ｒ４、−Ｓ（＝Ｏ）２Ｒ４、−Ｓ（＝Ｏ）２Ｎ（Ｒ５）２、ＮＲ５Ｓ（＝Ｏ）２Ｒ４、Ｃ（＝Ｏ）Ｒ４、ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ４、ＣＯ２Ｒ５、ＯＣＯ２Ｒ４、Ｎ（Ｒ４）２、ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ５）２、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｒ４、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＯＲ４、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６フルオロアルキル、Ｃ１−Ｃ６ジュウテロアルキル、Ｃ１−Ｃ６ヘテロアルキル、置換または非置換のＣ３−Ｃ１０シクロアルキル、置換または非置換のＣ２−Ｃ１０ヘテロシクロアルキル、置換または非置換のアリール、あるいは置換または非置換のヘテロアリールからなる群から選択され；あるいは、
同じ炭素原子に結合する２つのＲｄ基は、それらが結合する炭素原子と一体となって、置換または非置換の炭素環、あるいは置換または非置換の複素環のいずれかを形成し、
Ｌ３は存在しないか、−Ｌ４−Ｌ５−Ｌ６−Ｌ７−であり、
Ｌ４は存在しないか、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−ＮＲ４−、−ＣＨ（ＯＨ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−ＣＨ（＝Ｎ）−、−ＣＨ（＝Ｎ−ＮＨ）−、−ＣＣＨ３（＝Ｎ）−、−ＣＣＨ３（＝Ｎ−ＮＨ）−、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ−、−（ＣＨ２）ｐ−、−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐ−、または−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐ−であり、ｐは１、２、３、４、５、または６であり、
Ｌ５は存在しないか、非置換または置換のアルキレン、非置換または置換のヘテロアルキレン、非置換または置換のアルケニレン、非置換または置換のアルキニレン、非置換または置換のシクロアルキルエン、非置換または置換のヘテロシクロアルキレン、非置換または置換のアリーレン、非置換または置換のヘテロアリーレン、−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐ−、あるいは−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐ−であり、ｐは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２であり、
Ｌ６は存在しないか、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−ＮＲ４−、−ＣＨ（ＯＨ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ−、または−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ−であり、
Ｌ７は存在しないか、非置換または置換のアルキレン、非置換または置換のヘテロアルキレンである。
【０２０６】
いくつかの実施形態において、Ｌは−Ｌ２−Ｃ−Ｌ３−であり、
Ｌ２は−Ｘ２−Ｙ２−、−Ｙ２−Ｘ２−、あるいはＹ２であり、
Ｘ２は、−Ｏ−、−Ｓ（＝Ｏ）２ＮＲ３−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ３−、−ＮＲ３Ｃ（＝Ｏ）−、−ＮＲ３Ｓ（＝Ｏ）２−、あるいは−ＮＲ３−であり、
Ｒ３は、Ｈ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ６フルオロアルキル、またはＣ１−Ｃ６ジュウテロアルキルであり、
Ｙ２は、存在しないか、Ｃ１−Ｃ６アルキレンであり、
Ｃは存在しないか、置換または非置換のＣ１−Ｃ６アルキル、置換または非置換のＣ１−Ｃ６フルオロアルキル、置換または非置換のＣ１−Ｃ６ヘテロアルキル、置換または非置換のＣ３−Ｃ８シクロアルキル、−Ｃ１−Ｃ４アルキレン−（置換または非置換のＣ３−Ｃ８シクロアルキル）、置換または非置換のＣ２−Ｃ８ヘテロシクロアルキル、−Ｃ１−Ｃ４アルキレン−（置換または非置換のＣ２−Ｃ８ヘテロシクロアルキル）、置換または非置換のアリール、−Ｃ１−Ｃ４アルキレン−（置換または非置換のアリール）、置換または非置換のヘテロアリール、あるいは−Ｃ１−Ｃ４アルキレン−（置換または非置換のヘテロアリール）であり、ここで、Ｃが置換される場合、Ｃは１つ以上のＲｃで置換され；あるいは、
ＣおよびＲ３が同じＮ原子上にある場合、ＣおよびＲ３はそれらが結合しているＮ原子と一緒になって環Ｄを形成し、ここで、環Ｄは単環式のＮ含有複素環あるいは置換または非置換の二環式のＮ含有複素環であり、環Ｄが置換される場合、環Ｄは１、２、または３のＲｄで置換される。
【０２０７】
いくつかの実施形態では、Ｌ２は、−Ｘ２−Ｙ２−であり、Ｘ２は−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ３−であり、Ｙ２は、存在しないか、Ｃ１−Ｃ６アルキレンである。
【０２０８】
いくつかの実施形態では、Ｃは存在しないか、置換または非置換のＣ１−Ｃ６アルキル、置換または非置換のＣ１−Ｃ６フルオロアルキル、置換または非置換のＣ１−Ｃ６ヘテロアルキル、置換または非置換のＣ３−Ｃ８シクロアルキル、−Ｃ１−Ｃ４アルキレン−（置換または非置換のＣ３−Ｃ８シクロアルキル）、置換または非置換のＣ２−Ｃ８ヘテロシクロアルキル、−Ｃ１−Ｃ４アルキレン−（置換または非置換のＣ２−Ｃ８ヘテロシクロアルキル）、置換または非置換のアリール、−Ｃ１−Ｃ４アルキレン−（置換または非置換のアリール）、置換または非置換のヘテロアリール、あるいは−Ｃ１−Ｃ４アルキレン−（置換または非置換のヘテロアリール）であり、ここで、Ｃが置換される場合、Ｃは１つ以上のＲｃで置換され；あるいは、ＣおよびＲ３が同じＮ原子上にあるとき、ＣおよびＲ３はそれらが結合しているＮ原子と一体となって、環Ｄを形成し、ここで環Ｄは、置換または非置換のアジリジニル、置換または非置換のアゼチジニル、置換または非置換のピロリジニル、置換または非置換のピロリジノニル、置換または非置換のピペリジニル、置換または非置換のピペリジノニル、置換または非置換のモルホリニル、置換または非置換のチオモルホリニル、置換または非置換のピペラジニル、置換または非置換のピペラジノニル、置換または非置換のインドリニル、置換または非置換のインドリノニル、置換または非置換の１，２，３，４−テトラヒドロキノリニル、置換または非置換の１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリニル、置換または非置換の３，４−ジヒドロ−２（１Ｈ）−キノリノニルであり、ここで環Ｄが置換される場合、環Ｄは１、２、または３のＲｄで置換される。
【０２０９】
いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物は式（ＩＩｄ）の以下の構造を有する：
【０２１０】
【化２０】
2019529387.tif 000022
【０２１１】
いくつかの実施形態において、Ｌ３は存在しないか、あるいは−Ｌ４−Ｌ５−Ｌ６−Ｌ７−であるリンカーであり、
Ｌ４は存在しないか、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−ＮＲ４−、−ＣＨ（ＯＨ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−ＣＨ（＝Ｎ）−、−ＣＨ（＝Ｎ−ＮＨ）−、−ＣＣＨ３（＝Ｎ）−、−ＣＣＨ３（＝Ｎ−ＮＨ）−、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ−、−（ＣＨ２）ｐ−、−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐ−、または−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐ−であり、ｐは１、２、３、４、５、または６であり、
Ｌ５は存在しないか、非置換または置換のアルキレン、非置換または置換のヘテロアルキレン、非置換または置換のアルケニレン、非置換または置換のアルキニレン、非置換または置換のシクロアルキルエン、非置換または置換のヘテロシクロアルキレン、非置換または置換のアリーレン、非置換または置換のヘテロアリーレン、−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐ−、あるいは−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｐ−であり、ｐは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２であり、
Ｌ６は存在しないか、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−ＮＲ４−、−ＣＨ（ＯＨ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ−、または−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ−であり、
Ｌ７は存在しないか、非置換または置換のアルキレン、非置換または置換のヘテロアルキレンである。
【０２１２】
タグ部分（Ｑ）
タグは修飾された酵素の同定または精製を可能にする。ビオチン、蛍光性の小分子、および放射性同位体は、タグとしてのプローブ化合物への取り込みのために企図されたタグであり、３つともＳＤＳ−ＰＡＧＥ後に標識されたタンパク質を視覚化するために使用することができる。他のタグが企図される。ビオチンタグは、質量分析法による修飾された酵素の親和性精製およびその後の同定、あるいは、標識されたストレプトアビジン分子を使用する直接的な視覚化のために使用される。標識された標的のより簡単な直接的な視覚化のために、蛍光性かつ放射標識されたタグがしばしば使用される。蛍光性または放射標識されたタグは、ダイナミックレンジが高く、データを生成する時間も手間も少なくて済むため、ビオチンよりも優れた利点を有する。さらに、ゲルに基づいた方法を使用して、サンプル分析を多重化するために、重複しない励起／発光スペクトルを備えた複数の蛍光タグを利用可能である。
【０２１３】
いくつかの実施形態では、Ｑは、生体サンプルにおける式（Ｉ）の化合物の検出、単離、または検出と単離のためのタグ部分であり、あるいは、式Ｉの化合物が、式（Ｉ）の化合物中に任意の原子の放射性変異体または同位体変異体を含む場合、Ｑは存在しない。
【０２１４】
いくつかの実施形態では、Ｑは、生体サンプルにおける式（Ｉ）の化合物の検出、単離、または検出と単離のためのタグ部分であり、それは、固体支持体、レポーター基、親和性精製のために使用されるタグ、固体支持体上の式（Ｉ）の化合物を選別または固定化するために使用されるタグ、ハプテン、蛍光部分、放射性部分、磁気共鳴画像（ＭＲＩ）部分、比色（ｃｏｌｏｒｏｍｅｔｒｉｃ）部分、発光部分、生物発光部分、化学発光部分、オリゴヌクレオチド、抗体、ペプチド、あるいはこれらの組み合わせからなる群から選択され、あるいは、式Ｉの化合物が、式Ｉの化合物中に任意の原子の放射性変異体または同位体変異体を含む場合、Ｑは存在しない。
【０２１５】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載される式（Ｉ）の化合物は、エクスビボの生体サンプルまたはインビトロのシステムからの遊離（非結合の）ＬＯＸＬ２酵素を捕捉して検出するために使用される。いくつかの実施形態において、ビオチン部分を含み、一般構造Ａ−１を有する式（Ｉ）の化合物を用いて、図２に示されるようなＬＯＸＬ２を単離し、検知し、および定量化する。
【０２１６】
いくつかの実施形態において、ビオチン標識された小分子ＬＯＸＬ２阻害剤Ａ−１を用いる、遊離（未結合）ＬＯＸＬ２を含む生体サンプルまたは系の処理により、小分子ＬＯＸＬ２阻害剤−ＬＯＸＬ２酵素複合体Ａ−２をもたらす。いくつかの実施形態において、複合体Ａ−２は、ストレプトアビジンでコーティングされたビーズの添加によってさらに捕捉されることで、複合体Ａ−３が得られる。いくつかの実施形態において、ビオチン標識されたＬＯＸＬ２阻害剤Ａ−１は、ストレプトアビジンでコーティングされたビーズで処理されることで複合体Ａ−４を得た。いくつかの実施形態において、複合体Ａ−４を用いる、遊離（未結合）ＬＯＸＬ２を含有する生体サンプルまたは系の処理により、Ａ−３が得られる。いくつかの実施形態において、適切に標識されたＬＯＸＬ２抗体を用いる、Ａ−３を含有する生体サンプルの処理により、複合体Ａ−５が得られる。いくつかの実施形態において、こうした標識は、蛍光染料、蛍光性のフィコビリンタンパク質、磁気抵抗性ナノセンサー、あるいは金属キレート化化合物を含む。いくつかの実施形態において、ビーズ含有複合体Ａ−５は生体媒質から単離され、その後の溶出により、精製された標識されたＬＯＸＬ２タンパク質抗体複合体Ａ−６が得られ、これは、適切な分析技術を使用して検知および定量化される。いくつかの実施形態において、ビーズ含有複合体Ａ−５は生体媒質から単離され、その後の溶出により、精製された抗体Ａ−７が得られ、これは、適切な分析技術を使用して検知および定量化される。
【０２１７】
いくつかの実施形態では、Ｑは、緊密に結合した複合体を生成するために、既知のタンパク質に特異的結合することができる親和性精製のために使用されるタグである。
【０２１８】
いくつかの実施形態では、Ｑは、アビジンまたはストレプトアビジンに特異的に結合することができるタグである。
【０２１９】
いくつかの実施形態において、Ｑはビオチンまたはデスチオビオチンである。
【０２２０】
いくつかの実施形態では、Ｌは
【０２２１】
【化２１】
2019529387.tif 000023
である。
【０２２２】
いくつかの実施形態では、−Ｌ−Ｑは
【０２２３】
【化２２】
2019529387.tif 000024
である。
【０２２４】
いくつかの実施形態において、親和性部分はアビジンまたはストレプトアビジンと結合する。いくつかの実施形態において、親和性部分はビオチンあるいはビオチンアナログである。
【０２２５】
いくつかの実施形態では、Ｑは、ビオチン、クマリン色素、ローダミン色素、（フルオレセイなどの）キサンテン色素、シアニン色素、ＢＯＤＩＰＹ色素、ルシファーイエロー色素、ジゴキシゲニン、ダンシル、またはジニトロフェニルから選択されるハプテンである。
【０２２６】
いくつかの実施形態において、Ｑがハプテンである場合、蛍光消光が使用されてもよい。そのような方法は蛍光消光イムノアッセイと呼ばれる。例えば、フルオレセイン誘導体がタンパク質と非特異的に抱合し、特定の（抗フルオレセイン）抗体に結合するとき、あるいは、ＦＩＴＣ標識された抗原が対応する抗体と反応するとき、フルオレセイン誘導体の蛍光は減少（消光）する。
【０２２７】
いくつかの実施形態において、蛍光部分を含み、かつ、一般構造Ｂ−１を有する式（Ｉ）の化合物を用いて、図３ａで示されるようにＬＯＸＬ２を検知して定量化する。
【０２２８】
いくつかの実施形態において、蛍光部分を含む小分子ＬＯＸＬ２阻害剤Ｂ−１を用いる、遊離（未結合）ＬＯＸＬ２を含む生体サンプルまたは系の処置により、小分子ＬＯＸＬ２阻害剤−ＬＯＸＬ２酵素複合体Ｂ−２が得られる。いくつかの実施形態において、適切な蛍光イメージングおよび分析技術を使用して、複合体Ｂ−２を検知して定量化する。
【０２２９】
適切なフルオロフォアの例としては、限定されないが、フルオレセイン、ローダミン、Ｏｒｅｇｏｎ  ｇｒｅｅｎ、エオシン、およびＴｅｘａｓ  ｒｅｄなどのキサンテン；シアニン、Ｃｙ２、Ｃｙ３、Ｃｙ３Ｂ、Ｃｙ３．５、Ｃｙ５、Ｃｙ５．５、Ｃｙ７、Ｃｙ７．５、インドシアニングリーン、およびスルホＣｙ色素などのシアニン；Ｓｅｔａ、ＳｅＴａｕ、およびＳｑｕａｒｅ色素などのスクアライン；プロダン色素とダンシル色素などのナフタレン；ヒドロキシクマリン、アミノクマリン、およびメトキシクマリンなどのクマリン；ピリジルオキサゾール、ニトロベンゾオキサジアゾール、およびベンゾオキサジアゾールなどのオキサジアゾール；アントラキノン、ＤＲＡＱ５、ＤＲＡＱ７、およびＣｙＴＲＡＫオレンジなどのアントラセン；カスケードブルーなどのピレン；ナイルレッド、ナイルブルー、クレシルバイオレット、およびオキサジン１７０などのオキサジン；プロフラビン、アクリジンオレンジ、およびアクリジンイエローなどのアクリジン；オーラミン、クリスタルバイオレット、マラカイトグリーンなどのアリールメチン；ポルフィン、フタロシアニン、ビリルビンなどのテトラピロールが挙げられる。他の例はさらに、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ、ＤｙＬｉｇｈｔ  Ｆｌｕｏｒ、ＢＯＤＩＰＹ、ＦｌｕｏＰｒｏｂｅｓ、ＳｕｒｅＬｉｇｈｔＤｙｅｓ、ＨｉＬｙｔｅ  Ｆｌｕｏｒ、およびＩＲＤｙｅｓを含む。さらに、緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）、黄色蛍光タンパク質（ＹＦＰ）、および赤色蛍光タンパク質（ＲＦＰ）などの蛍光タンパク質も使用について企図される。
【０２３０】
いくつかの実施形態では、フルオロフォアは、キサンテン、シアニン、スクアライン、ナフタレン、クマリン、オキサジアゾール、アントラセン、ピレン、オキサジン、アクリジン、アリールメチン、テトラピロール、またはダンシルである。いくつかの実施形態では、フルオロフォアは、シアニン、クマリン、またはダンシルである。
【０２３１】
いくつかの実施形態では、Ｑは、蛍光部分、放射性部分、比色部分、発光部分、化学発光部分、またはそれらの組み合わせからなる群から選択されるタグ部分である。
【０２３２】
いくつかの実施形態では、Ｑは、蛍光部分であるタグ部分である。
【０２３３】
いくつかの実施形態では、Ｑは、キサンテン色素、シアニン色素、スクアライン色素、環置換スクアライン色素、ナフタレン色素、クマリン色素、オキサジアゾール色素、アントラセン色素、オキサジン色素、アクリジン色素、アリールメチン色素、ＢＯＤＩＰＹ色素、またはテトラピロール色素からなる群から選択される蛍光部分である、タグ部分である。
【０２３４】
いくつかの実施形態では、Ｑは、フルオレセイン色素、ローダミン色素、オレゴングリーン色素、エオシン色素、テキサス赤色色素、シアニン色素、インドカルボシアニン色素、オキサカルボシアニン色素、チアカルボシアニン色素、メロシアニン色素、Ｓｅｔａ、ＳｅＴａｕ、Ｓｑｕａｒｅ  色素、ダンシル色素、プロダン色素、クマリン色素、ＢＯＤＩＰＹ色素、ピリジルオキサゾール色素、ニトロベンゾオキサジアゾール色素、ベンゾオキサジアゾール色素、ＤＲＡＱ５、ＤＲＡＱ７、ＣｙＴＲＡＫオレンジカスケードブルー、ナイルレッド、ナイルブルー、クレシルバイオレット、オキサジン  １７０、プロフラビン色素、アクリジンオレンジ色素、アクリジンイエロー色素、オーラミン色素、クリスタルバイオレット色素、マラカイトグリーン色素、ポルフィン色素、フタロシアニン色素１７０、およびビリルビン色素からから選択される蛍光部分である。
【０２３５】
いくつかの実施形態では、Ｑは、キサンテン、シアニン、スクアライン、ナフタレン、クマリン、オキサジアゾール、アントラセン、ピレン、オキサジン、アクリジン、アリールメチン、テトラピロール、ダンシル、またはＢＯＤＩＰＹである。
【０２３６】
いくつかの実施形態では、Ｑは、シアニン、クマリン、またはダンシルである。
【０２３７】
いくつかの実施形態では、Ｑは、キサンテン、シアニン２、シアニン３、シアニン３Ｂ、シアニン３．５、シアニン５、シアニン５．５、シアニン７、スクアライン、ナフタレン、クマリン、オキサジアゾール、アントラセン、ピレン、オキサジン、アクリジン、アリールメチン、テトラピロール、ダンシル、ＢＯＤＩＰＹ  ＦＬ、ＢＯＤＩＰＹ  Ｒ６Ｇ、ＢＯＤＩＰＹ  ＴＭＲ、ＢＯＤＩＰＹ  ５８１／５９１、ＢＯＤＩＰＹ  ＴＲ、ＢＯＤＩＰＹ  ６３０／６５０、またはＢＯＤＩＰＹ  ６５０／６６５である。
【０２３８】
いくつかの実施形態において、−Ｌ−は−ＮＨ−、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ−、
【０２３９】
【化２３】
2019529387.tif 000025
である。
【０２４０】
いくつかの実施形態では、Ｑは
【０２４１】
【化２４】
2019529387.tif 000026
である。
【０２４２】
いくつかの実施形態では、−Ｌ−Ｑは、
【０２４３】
【化２５】
2019529387.tif 000027
【０２４４】
【化２６】
2019529387.tif 000028
である。
【０２４５】
いくつかの実施形態において、Ｑは化学発光部分であるタグ部分である。
【０２４６】
いくつかの実施形態では、Ｑは、過酸化物またはペルオキシダーゼによる処理後、光あるいは着色物を生成する化学発光部分である。
【０２４７】
いくつかの実施形態では、Ｑは、ルミノール、イソルミノール、Ｎ−（４−アミノブチル）−Ｎ−エチル  イソルミノール（ＡＢＥＩ）、Ｎ−（４−アミノブチル）−Ｎ−メチル  イソルミノール（ＡＢＭＩ）、２，２’−アジノ−ビス（３−エチルベンゾチアゾリン−６−スルホン酸）（ＡＢＴＳ）、３，３’，５，５’−テトラメチルベンジジン（ＴＭＢ）、３，３’−ジアミノベンジジン（ＤＡＢ）、ｏ−フェニレンジアミン二塩酸塩（ＯＰＤ）、ＡｍｐｌｅｘＲｅｄ、ＡＥＣ、またはホモバニリン酸である。
【０２４８】
いくつかの実施形態では、Ｑは、西洋ワサビペルオキシダーゼによる処理後、光あるいは着色物を生成する化学発光部分である。
【０２４９】
いくつかの実施形態では、Ｑは、３，３’−ジアミノベンジジン（ＤＡＢ）、３，３’，５，５’−テトラメチルベンジジン（ＴＭＢ）、２，２’−アジノビス［３−エチルベンゾチアゾリン−６−スルホン酸］（ＡＢＴＳ）、ｏ−フェニレンジアミン二塩酸塩（ＯＰＤ）である。
【０２５０】
いくつかの実施形態では、Ｑはルシフェラーゼ酵素のための基質である。
【０２５１】
いくつかの実施形態では、ＱはＤ−ルシフェリン、またはセレンテラジンである。
【０２５２】
いくつかの実施形態では、Ｑは、アルカリホスファターゼ（ＡＰ）による処理後、光あるいは着色物を生成する化学発光部分である。
【０２５３】
いくつかの実施形態では、Ｑは、ニトロブルーテトラゾリウム塩化物（ＮＢＴ）、５−ブロモ−４−クロロ−３−インドリルリン酸塩（ＢＣＩＰ）、またはｐ−ニトロフェニルリン酸（ＰＮＰＰ）である。
【０２５４】
いくつかの実施形態では、Ｑは、グルコースオキシダーゼによる処理後、光あるいは着色物を生成する化学発光部分である。
【０２５５】
いくつかの実施形態では、Ｑは、ニトロブルーテトラゾリウム塩化物（ＮＢＴ）である。
【０２５６】
いくつかの実施形態では、Ｑは、ベータガラクトシダーゼによる処理後、光あるいは着色物を生成する化学発光部分である。
【０２５７】
いくつかの実施形態では、Ｑは、５−ブロモ−４−クロロ−３−インドリル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（ＢＣＩＧまたはＸ−Ｇａｌ）である。
【０２５８】
いくつかの実施形態において、放射標識された部分、または放射性同位体（陽電子射出断層撮影法（ＰＥＴ）画像化に役立つ）を含み、かつ、一般構造Ｃ−１を有する式（Ｉ）の化合物を用いて、図３ｂで示されるように、ＬＯＸＬ２を検知して定量化する。
【０２５９】
いくつかの実施形態において、ＰＥＴ画像化での使用に適した放射標識された部分を含む小分子ＬＯＸＬ２阻害剤Ｃ−１を用いる、遊離（未結合）ＬＯＸＬ２を発現する動物またはヒトの処理により、小分子ＬＯＸＬ２阻害剤−ＬＯＸＬ２酵素複合体Ｃ−２がインビボで得られる。いくつかの実施形態において、放射標識された部分は、例えば、炭素−１１、窒素−１３、酸素−１５、フッ素−１８、あるいは水素−３である。いくつかの実施形態において、放射標識された部分は銅−６４またはガリウム−６８である。いくつかの実施形態において、適切なＰＥＴ画像化および分析技術を使用して、複合体Ｃ−２を検知して定量化する。
【０２６０】
いくつかの実施形態において、放射標識された部分はフッ素放射性同位体あるいは水素放射性同位体である。いくつかの実施形態において、放射標識された部分は１８Ｆあるいは３Ｈである。
【０２６１】
いくつかの実施形態において、Ｑは存在せず、および、式（Ｉ）の化合物は式（Ｉ）の化合物中に任意の原子の放射性変異体または同位体変異体を含む。
【０２６２】
いくつかの実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、式（Ｉ）の化合物中に任意の原子の放射性変異体または同位体変異体を含み、ＰＥＴ分析における使用に適している。
【０２６３】
いくつかの実施形態において、Ｑは存在せず、式（Ｉ）の化合物は、トリチウム（３Ｈ）、フッ素−１８（１８Ｆ）、炭素−１１（１１Ｃ）、炭素−１４（１４Ｃ）、窒素−１３（１３Ｎ）、酸素−１５（１５Ｏ）、あるいは硫黄−３５（３５Ｓ）から選択された１つ以上の原子を含む。
【０２６４】
いくつかの実施形態では、−Ｌ−Ｑは
【０２６５】
【化２７】
2019529387.tif 000029
である。
【０２６６】
いくつかの実施形態では、Ｑはキレート化された放射性同位体を含む。
【０２６７】
いくつかの実施形態では、Ｑは、陽電子射出断層撮影（ＰＥＴ）分析に適したキレート化された放射性同位体を含む。
【０２６８】
いくつかの実施形態では、Ｑは、キレート化された放射性同位体を含み、ここで、Ｑは、ジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）キレート、１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＡ）キレート、または１，４，７−トリアザシクロノナン−１，４，７−トリス酢酸（ＮＯＴＡ）キレート、あるいは１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−テトラメチル−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＭＡ）キレート、または放射性同位体である。
【０２６９】
いくつかの実施形態では、Ｌは
【０２７０】
【化２８】
2019529387.tif 000030
である。
【０２７１】
いくつかの実施形態において、Ｑは
【０２７２】
【化２９】
2019529387.tif 000031
であり、ここで、Ｚは放射性同位体である。
【０２７３】
いくつかの実施形態では、Ｑは、銅−６４（６４Ｃｕ）、ガリウム−６８（６８Ｇａ）、またはテクネチウム−９９ｍ（９９ｍＴｃ）である、キレート化された放射性同位体を含む。
【０２７４】
いくつかの実施形態では、−Ｌ−Ｑは
【０２７５】
【化３０】
2019529387.tif 000032
である。
【０２７６】
いくつかの実施形態において、造影剤部分（ＭＲＩ画像化に役立つ）を含み、かつ、一般構造Ｄ−１を有する式（Ｉ）の化合物を用いて、図３ｃで示されるように、ＬＯＸＬ２を検知して定量化する。
【０２７７】
いくつかの実施形態において、ＭＲＩ画像化での使用に適した造影剤を含む小分子ＬＯＸＬ２阻害剤Ｄ−１を用いる、遊離（未結合）ＬＯＸＬ２を発現する動物またはヒトの処理により、小分子ＬＯＸＬ２阻害剤−ＬＯＸＬ２酵素複合体Ｄ−２がインビボで得られる。いくつかの実施形態において、造影剤は例えば、ツリウム、ユーロビウム、ガドリニウム、またはマンガンである。いくつかの実施形態において、適切なＰＥＴ画像化および分析技術を使用して、複合体Ｄ−２を検知して定量化する。
【０２７８】
いくつかの実施形態では、Ｑは磁気共鳴画像（ＭＲＩ）部分である。
【０２７９】
いくつかの実施形態では、Ｑは、磁気共鳴画像（ＭＲＩ）に適した原子のキレートを含む。
【０２８０】
いくつかの実施形態において、Ｑは磁気共鳴画像（ＭＲＩ）に適した原子のキレートを含み、それは、ジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）キレート、１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＡ）キレート、１，４，７−トリアザシクロノナン−１，４，７−トリス酢酸（ＮＯＴＡ）キレート、または１、４、７、１０−テトラアザシクロドデカン−１、４、７、１０−テトラメチル−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＭＡ）キレートである。
【０２８１】
いくつかの実施形態では、Ｑは、銅、ガリウム、ツリウム、ユウロピウム、ガドリニウム、またはマンガンのキレートを含む。
【０２８２】
いくつかの実施形態では、Ｑは、ガドテル酸、ガドジアミド、ガドベン酸、ガドペンテト酸、ガドテリドール、ガドベルセタミド、ガドキセト酸、ガドブトロール、またはガドホスベセットから選択されるガドリニウムのキレートを含む。
【０２８３】
いくつかの実施形態では、−Ｌ−Ｑは
【０２８４】
【化３１】
2019529387.tif 000033
である。
【０２８５】
いくつかの実施形態では、Ｑは固体支持体である。
【０２８６】
いくつかの実施形態では、Ｑは、ナノ粒子、ビーズ、または樹脂である固体支持体である。
【０２８７】
いくつかの実施形態では、Ｑは、鉄、コバルト、ニッケル、ガドリニウム、クロム、マンガン、または金から選択された１以上の金属を含む、ナノ粒子あるいはビーズである。
【０２８８】
いくつかの実施形態では、Ｑは、磁性または常磁性のナノ粒子あるいはビーズである。
【０２８９】
いくつかの実施形態では、磁気部分はフェライト磁気ビーズである。
【０２９０】
いくつかの実施形態では、−Ｌ−Ｑは
【０２９１】
【化３２】
2019529387.tif 000034
であり、ＦＧはフェライトビーズである。
【０２９２】
いくつかの実施形態において、磁気ビーズを含み、かつ、一般構造Ｅ−１を有する式（Ｉ）の化合物を用いて、図４に示されるようにＬＯＸＬ４を単離し、検知し、および定量化する。
【０２９３】
いくつかの実施形態において、切断可能なまたは非切断可能なリンカー（Ｘ−Ｙ）を含む磁気ビーズで標識された小分子ＬＯＸＬ２阻害剤Ｅ−１を用いる、遊離（未結合）ＬＯＸＬ２を含む生体サンプルまたは系の処置により、小分子ＬＯＸＬ２阻害剤−ＬＯＸＬ２酵素複合体Ｅ−２が得られる。いくつかの実施形態において、リンカーＸ−Ｙは、化学切断または光切断可能なリンカーである（切断可能なリンカーの再考のために、Ｌｅｒｉｃｈｅ  ｅｔ  ａｌ  Ｂｉｏｏｒｇ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．，  ２０１２，  ２０，  ｐ５７１−５８２  や引用された文献を参照のこと）。いくつかの実施形態において、リンカーＸ−Ｙは例えば、ＤＴＴまたはＴＣＥＰなどの生体適合性の中程度の還元剤によって切断され得るジスルフィド部分である。いくつかの実施形態において、リンカーＸ−Ｙは例えば、ジアゾベンゼン誘導体であり、これは、亜ジチオン酸ナトリウムなどの生体適合性の還元剤によって切断される。いくつかの実施形態において、リンカーＸ−Ｙは例えば、高いｐＨ条件下で、あるいは代替的にヒドロキシルアミンまたはヒドラジンなどの求核分子を用いる処理によって切断されるエステル誘導体である。いくつかの実施形態において、リンカーＸ−Ｙは例えば、ＵＶ光の特定の波長で切断される、適切に置換された感光性の誘導体である。いくつかの実施形態において、ビーズ含有複合体Ｅ−２は生体媒質から単離され、その後の切断可能なリンカーの切断により、精製されたＬＯＸＬ２タンパク質−小分子阻害剤複合体Ｅ−３と切断された磁気ビーズ含有部分Ｅ−４が得られる。いくつかの実施形態において、複合体Ｅ−３は適切な分析技術（ＥＬＩＳＡまたはウエスタンブロッティングなど）を使用して、直接検知されて定量化される。いくつかの実施形態において、複合体Ｅ−３がさらに溶出されることで、精製されたＬＯＸＬ２タンパク質Ｅ−５が得られ、これは、適切な分析技術を使用して、検知されて定量化される。いくつかの実施形態において、複合体Ｅ−２が溶出されることで、精製されたＬＯＸＬ２タンパク質Ｅ−５が得られ、これは、適切な分析技術を使用して、検知されて定量化される。
【０２９４】
いくつかの実施形態では、磁気部分はフェライト磁気ビーズである。
【０２９５】
いくつかの実施形態では、Ｌは切断可能なリンカーである。いくつかの実施形態にて、Ｌは、中程度の還元剤またはヒドラジンを用いる処理下で切断にかけられる切断可能なリンカーである。いくつかの実施形態において、Ｌは、ジアゾベンゼン、レブリノイルエステル、ジスルフィド、ニトロベンゼンスルホンアミド、ジチオカルバマート、あるいはヒドラゾンを含む。いくつかの実施形態において、Ｌはジアゾベンゼン、レブリノイルエステル、ジスルフィド、あるいはニトロベンゼンスルホンアミドを含む。
【０２９６】
様々な変数について上に記載された基の任意の組み合わせが本明細書で企図される。明細書全体にわたって、群およびそれらの置換基は、安定した部分と化合物を提供するために当業者によって選択される。
【０２９７】
いくつかの実施形態において、式（Ｉ）の化合物は、限定されないが、表１に記載されるものを含む。
【０２９８】
【表１−１】
2019529387.tif 000035
【０２９９】
【表１−２】
2019529387.tif 000036
【０３００】
【表１−３】
2019529387.tif 000037
【０３０１】
【表１−４】
2019529387.tif 000038
【０３０２】
いくつかの実施形態において、式（Ｉ）の化合物は、限定されないが、以下を含む：３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（５−（５−（（３ａＳ，４Ｓ，６ａＲ）−２−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−チエノ［３，４−ｄ］イミダゾール−４−イル）ペンタンアミド）ペンチル）ベンズアミド（化合物１−１）；
３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（３７−オキソ−４１−（（３ａＳ，４Ｓ，６ａＲ）−２−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−チエノ［３，４−ｄ］イミダゾール−４−イル）−３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４，２７，３０，３３−ウンデカオキサ−３６−アザヘンテトラコンタイル）ベンズアミド（化合物１−２）；
１−（６−（（３−（４−（４−（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）ベンズアミド）ブチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）プロピル）アミノ）−６−オキソヘキシル）−３，３−ジメチル−２−（（１Ｅ，３Ｅ）−３−（１，３，３−トリメチルインドリン−２−イリデン）プロプ−１−エン−１−イル）−３Ｈ−インドール−１−イウム（化合物１−３）；
１−（６−（（３−（４−（４−（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）ベンズアミド）ブチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）プロピル）アミノ）−６−オキソヘキシル）−３，３−ジメチル−２−（（１Ｅ，３Ｅ，５Ｅ）−５−（１，３，３−トリメチルインドリン−２−イリデン）ペンタ−１，３−ジエン−１−イル）−３Ｈ−インドール−１−イウム（化合物１−４）；
３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（４−メチル−２−オキソ−２Ｈ−クロメン−７−イル）ベンズアミド（化合物１−５）；
Ｎ−（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）フェニル）−５−（ジメチルアミノ）ナフタレン−１−スルホンアミド（化合物１−６）；
３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（２１−（ＦＧ−ビーズ）−１０，１７，２１−トリヒドロキシ−７−オキソ−１２，１５−ジオキサ−３，４−ジチア−８，１９−ジアザヘニコシル）ベンズアミド（化合物１−７）；
（Ｅ）−３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（２−（４−（（４−（３−（４−（３−（（３−（２−（３−（（２−（ＦＧ−ビーズ）−２−ヒドロキシエチル）アミノ）−２−ヒドロキシプロポキシ）エトキシ）−２−ヒドロキシプロピル）カルバモイル）フェニル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）プロポキシ）フェニル）ジアゼニル）ベンズアミド）エチル）ベンズアミド（化合物１−８）；
１−（４−（４−（（２−（２−（４−（４−（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）ベンズアミド）ブチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）エトキシ）エチル）アミノ）−４−オキソブトキシ）−５−メトキシ−２−ニトロフェニル）エチル（２−ヒドロキシ−３−（２−（２−ヒドロキシ−３−（（２−ヒドロキシ−２−（ＦＧ−ビーズ）−エチル）アミノ）プロポキシ）エトキシ）プロピル）カルバマート（化合物１−９）；
４−（１−（ＦＧ−ビーズ）−１，５，１２−トリヒドロキシ−１５−オキソ−７，１０−ジオキサ−３，１４−ジアザヘプタデカン−１７−イル）−２，６−ジイソプロピルフェニル  ７−（４−（４−（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）ベンズアミド）ブチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）−４−オキソヘプタノアート（化合物１−１０）；
４−（Ｎ−（４−（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）ベンズアミド）ブチル）スルファモイル）−Ｎ−（３−（２−（３−（（２−（ＦＧ−ビーズ）−２−ヒドロキシエチル）アミノ）−２−ヒドロキシプロポキシ）エトキシ）−２−ヒドロキシプロピル）−３−ニトロベンズアミド（化合物１−１１）；
３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（３−（１，１，２，２−テトラ−３Ｈ−エチル）フェニル）ベンズアミド（化合物１−１２）；
（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）フェニル）（（３Ｒ，４Ｒ）−３−１８フルオロ−４−ヒドロキシピロリジン−１−イル）メタノン（化合物１−１３）；
（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）フェニル）（３Ｒ，４Ｒ）−３−フルオロ−４−ヒドロキシピロリジン−１−イル）メタノン（化合物１−１３ａ）；
２，２’，２’’−（１０−（２−（（４−（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）ベンズアミド）ブチル）アミノ）−２−オキソエチル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７−トリイル）三酢酸−６４銅複合体（化合物１−１４）；
２，２’，２’’−（１０−（２−（（４−（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）ベンズアミド）ブチル）アミノ）−２−オキソエチル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７−トリイル）三酢酸−６８ガリウム複合体（化合物１−１５）；
２，２’−（（１５−（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）フェニル）−１−カルボキシラト−２，５−ビス（カルボキシラトメチル）−１５−オキソ−９−オキサ−２，５，１４−トリアザペンタデカン−７−イル）アザンジイル）ジアセテート−ガドリニウム（ＩＩＩ）複合体（化合物１−１６）；
１−（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）フェニル）−９−カルボキシラト−１０，１３，１６−トリス（カルボキシラトメチル）−１−オキソ−７−オキサ−２，１０，１３，１６−テトラアザオクタデカン−１８−ｏａｔｅ−ガドリニウム（ＩＩＩ）複合体（化合物１−１７）；
２−（（１Ｅ，３Ｅ，５Ｅ）−５−（３−（６−（（５−（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）ベンズアミド）ペンチル）アミノ）−６−オキソヘキシル）−３−メチル−５−スルホ−１−（３−スルホプロピル）インドリン−２−イリデン）ペンタ−１，３−ジエン−１−イル）−３，３−ジメチル−５−スルホ−１−（３−スルホプロピル）−３Ｈ−インドール−１−イウム（化合物１−１８）；
３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（１３−オキソ−１７−（（３ａＳ，４Ｓ，６ａＲ）−２−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−チエノ［３，４−ｄ］イミダゾール−４−イル）−３，６，９−トリオキサ−１２−アザヘプタデシル）ベンズアミド（化合物１−１９）；
３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（２−（６−（６−（５−（（３ａＳ，４Ｓ，６ａＲ）−２−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−チエノ［３，４−ｄ］イミダゾール−４−イル）ペンタンアミド）ヘキサンアミド）ヘキサンアミド）エチル）ベンズアミド（化合物１−２０）；
ペンタ−ナトリウム２−（（１Ｅ，３Ｚ，５Ｚ）−３−（３−（５−（（２−（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）ベンズアミド）エチル）アミノ）−５−オキソペンチル）フェニル）−５−（１，１−ジメチル−６，８−ジスルホナト−３−（３−スルホナトプロピル）−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール−２（３Ｈ）−イリデン）ペンタ−１，３−ジエン−１−イル）−１，１−ジメチル−３−（３−スルホナトプロピル）−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール−３−イウム−６，８−二スルホン酸塩（化合物１−２１）；
３−（２−（（１Ｅ，３Ｚ，５Ｚ）−３−（３−（５−（（６−（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）ベンズアミド）ヘキシル）アミノ）−５−オキソペンチル）フェニル）−５−（１，１−ジメチル−６，８−ジスルホ−３−（３−スルホプロピル）−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール−２（３Ｈ）−イリデン）ペンタ−１，３−ジエン−１−イル）−１，１−ジメチル−６，８−ジスルホ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール−３−イウム−３−イル）プロパン−１−スルホナート（化合物１−２２）；
ビス−ナトリウム（Ｚ）−２−（（２Ｚ，４Ｅ）−３−（３−（３−（（６−（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）ベンズアミド）ヘキシル）アミノ）−３−オキソプロピル）フェニル）−５−（５−クロロ−３，３−ジメチル−７−（３−スルホナトプロピル）−３Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−７−イウム−２−イル）ペンタ−２，４−ジエン−１−イリデン）−３，３−ジメチル−１−（３−スルホナトプロピル）インドリン−５−スルホナート（化合物１−２３）；
３−（２−（（１Ｅ，３Ｚ，５Ｚ）−３−（３−（１−（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）フェニル）−１，２７−ジオキソ−５，８，１１，１４，１７，２０，２３−ヘプトキサ−２，２６−ジアザヘントリアコンタン（ｄｉａｚａｈｅｎｔｒｉａｃｏｎｔａｎ）−３１−イル）フェニル）−５−（１，１−ジメチル−６，８−ジスルホ−３−（３−スルホプロピル）−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール−２（３Ｈ）−イリデン）ペンタ−１，３−ジエン−１−イル）−１，１−ジメチル−６，８−ジスルホ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール−３−イウム−３−イル）プロパン−１−スルホナート（化合物１−２５）。
【０３０３】
様々な変数について上に記載された基の任意の組み合わせが本明細書で企図される。明細書全体にわたって、基とその置換基は、安定した部分と化合物を提供するために当業者によって選択される。
【０３０４】
１つの態様において、本明細書に記載される化合物は、薬学的に許容可能な塩の形態である。同様に、同じタイプの活性を有するこうした化合物の活性代謝物は、本開示の範囲内に含まれている。加えて、本明細書に記載される化合物は、非溶媒和形態だけでなく、水、エタノールなどの薬学的に許容可能な溶媒を含む溶媒和形態で存在することができる。本明細書に提示の化合物の溶媒和形態は、同様に本明細書で開示されるものとみなされる。
【０３０５】
「薬学的に許容可能な」とは、本明細書で使用されるように、担体または希釈剤などの材料を指し、これは、化合物の生物学的活性あるいは特性を抑制せず、比較的無毒であり、つまり、この材料は望ましくない生物学的作用を引き起こすことなく、あるいはそれが含まれている組成物の成分のいずれかにも有害なやり方で相互作用することなく、個体に投与される。
【０３０６】
用語「薬学的に許容可能な塩」とは、適切なアニオンと組み合わせた治療上活性な薬剤のカチオンの形態、あるいは他の実施形態では、適切なカチオンと組み合わせた治療上活性な薬剤のアニオン形態からなる治療上有効な薬剤の形態を指す。Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ：  Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，  Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｕｓｅ．  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｕｎｉｏｎ  ｏｆ  Ｐｕｒｅ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，  Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ  ２００２．  Ｓ．Ｍ．  Ｂｅｒｇｅ，  Ｌ．Ｄ．  Ｂｉｇｈｌｅｙ，  Ｄ．Ｃ．  Ｍｏｎｋｈｏｕｓｅ，  Ｊ．  Ｐｈａｒｍ．  Ｓｃｉ．  １９７７，  ６６，  １−１９．  Ｐ．  Ｈ．  Ｓｔａｈｌ  ａｎｄ  Ｃ．  Ｇ．  Ｗｅｒｍｕｔｈ，  ｅｄｉｔｏｒｓ，  Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ：  Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，  Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｕｓｅ，  Ｗｅｉｎｈｅｉｍ／Ｚｕｒｉｃｈ：Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ／ＶＨＣＡ，  ２００２．医薬品の塩は一般に、非イオン性の種よりも胃液と腸液で可溶性が強く、かつ迅速に溶解可能であり、したがって、固体の剤形に役立つ。さらに、その溶解度がしばしばｐＨに応じたものであるため、消化管の１つまたは別の部分における選択的な溶解が可能であり、こうした能力は遅延放出および徐放の挙動の１つの態様として操作可能である。さらに、塩成形分子が中性の形態と平衡状態になり得るため、生体膜の通過を調節することができる。
【０３０７】
いくつかの実施形態において、薬学的に許容可能な塩は、本明細書に記載される化合物を酸と反応させることにより得られる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される化合物（つまり遊離塩基形態）は塩基性であり、有機酸または無機酸と反応させる。無機酸としては、限定されないが、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、硝酸、およびメタリン酸が挙げられる。有機酸としては、限定されないが、１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸；２，２−ジクロロ酢酸；２−ヒドロキシエタンスルホン酸；２−オキソグルタール酸；４−アセトアミド安息香酸；４−アミノサリチル酸；酢酸；アジピン酸；アスコルビン酸（Ｌ）；アスパラギン酸（Ｌ）；ベンゼンスルホン酸；安息香酸；樟脳酸（＋）；カンフル−１０−スルホン酸（＋）；カプリン酸（デカン酸）；カプロン酸（ヘキサン酸）；カプリル酸（オクタン酸）；炭酸；桂皮酸；クエン酸；シクラミン酸；ドデシル硫酸；エタン−１，２−二スルホン酸；エタンスルホン酸；ギ酸；フマル酸；ガラクタル酸；ゲンチジン酸；グルコヘプトン酸（Ｄ）；グルコン酸（Ｄ）；グルクロン酸（Ｄ）；グルタミン酸；グルタル酸；グリセロリン酸；グリコール酸；馬尿酸；イソ酪酸；乳酸（ＤＬ）；ラクトビオン酸；ラウリン酸；マレイン酸；リンゴ酸（−Ｌ）；マロン酸；マンデル酸（ＤＬ）；メタンスルホン酸；フマル酸モノメチル；ナフタレン−１，５−ジスルホン酸；ナフタレン−２−スルホン酸；ニコチン酸；オレイン酸；シュウ酸；パルミチン酸；パモ酸；リン酸；プロピオン酸；ピログルタミン酸（−Ｌ）；サリチル酸；セバシン酸；ステアリン酸；コハク酸；硫酸；酒石酸（＋Ｌ）；チオシアン酸；トルエンスルホン酸（ｐ）；および、ウンデシレン酸が挙げられる。
【０３０８】
いくつかの実施形態において、本明細書に記載される化合物は、塩化物塩、硫酸塩、臭化物塩、メシレート塩、マレイン酸塩、クエン酸塩、あるいはリン酸塩として調製される。いくつかの実施形態において、本明細書に記載される化合物は塩酸塩として調製される。
【０３０９】
いくつかの実施形態において、薬学的に許容可能な塩は、本明細書に記載される化合物を塩基と反応させることにより得られる。いくつかの実施形態において、本明細書に記載される化合物は、酸性であり、塩基と反応させる。こうした状況下で、本明細書で記載される化合物の酸性プロトンは、金属イオン、例えば、リチウムイオン、ナトリウムイオン、カリウムイオン、マグネシウムイオン、カルシウムイオン、アルミニウムイオンと取り替えられる。いくつかの場合、本明細書に記載される化合物は、限定されないが、エタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、トロメタミン、メグルミン、Ｎ−メチルグルカミン、ジシクロヘキシルアミン、トリス（ヒドロキシメチル）メチルアミンなどの有機塩基と協調する。他の場合では、本明細書に記載される化合物は、アルギニン、リジンなどのアミノ酸とともに塩を形成する。酸性プロトンを含む化合物とともに塩を形成するために使用される許容可能な無機塩基は、限定されないが、水酸化アルミニウム、水酸化カルシウム、水酸化カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、水酸化ナトリウム、水酸化リチウムなどを含む。いくつかの実施形態では、本明細書で提供される化合物は、ナトリウム塩、カルシウム塩、カリウム塩、マグネシウム塩、メグルミン塩、Ｎ−メチルグルカミン塩、またはアンモニウム塩として調製される。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される化合物は、ナトリウム塩として調製される。
【０３１０】
薬学的に許容可能な塩に対する言及は、溶媒和物の付加形態を含むことを理解されたい。いくつかの実施形態では、溶媒和物は溶媒の化学量論または非化学量論のいずれかを含み、水、エタノールなどのような薬学的に許容可能な溶媒を用いる結晶化のプロセスの間に形成される。水和物は溶媒が水である場合に形成され、アルコラートは溶媒がアルコールの際に形成される。本明細書に記載される化合物の溶媒和物は、本明細書に記載されるプロセスの間に都合よく調製されるか、または形成される。加えて、本明細書で提供される化合物は随意に、溶媒和形態と同様に非溶媒和形態で存在する。
【０３１１】
本明細書に記載される方法と製剤は、本明細書に記載される化合物のＮ−オキシド（適切な場合）、結晶形態（多形体としても知られている）、あるいは薬学的に許容可能な塩と同様に、同じタイプの活性を有するこれらの化合物の活性代謝物の使用を含む。
【０３１２】
いくつかの実施形態において、本明細書に記載される化合物の有機ラジカル（例えば、アルキル基、芳香族環）の部位は、様々な代謝反応に弱い。有機ラジカルへの適切な置換基の取り込みにより、この代謝経路は減らされ、最小限に抑えられ、または除去される。特定の実施形態では、代謝反応に対する芳香環の感受性を減らすまたは取り除くための適切な置換基は、一例として、ハロゲン、ジューテリウム、アルキル基、ハロアルキル基、またはジュウテロアルキル基である。
【０３１３】
別の実施形態では、本明細書に記載される化合物は、同位体で（例えば、放射性同位体で）、あるいは、限定されないが、発色団あるいは蛍光性の部分、生物発光標識、または化学発光標識の使用を含む他の手段によって、標識される。
【０３１４】
本明細書に記載される化合物は同位体標識された化合物を含み、これは、１つ以上の原子が自然界で通常見られる原子質量または質量数とは異なる原子質量または質量数を有する原子と取り替えられるという事実を除けば、様々な式と構造において詳述されるものと同一である。本化合物に組み入れることができる同位体の例としては、例えば、２Ｈ、３Ｈ、１１Ｃ、１３Ｃ、１４Ｃ、１５Ｎ、１８Ｏ、１７Ｏ、３５Ｓ、１８Ｆ、３６Ｃｌなどの、水素、炭素、窒素、酸素、フッ素、および塩素の同位体が挙げられる。１つの態様において、本明細書に記載される同位体標識された化合物、例えば、３Ｈと１４Ｃなどの放射性同位体が組み入れられる化合物は、薬物および／または基質組織分布アッセイに役立つ。１つの態様では、重水素のような同位体を用いる置換は、例えば、インビボでの半減期の増大または必要用量の減少などの一層の代謝安定性に起因する特定の治療上の利点を与えるものである。
【０３１５】
いくつかの実施形態において、本明細書に記載される化合物は、１つ以上の立体中心を有し、各立体中心はＲあるいはＳ配置のいずれかで独立して存在する。本明細書で提示される化合物は、すべてのジアステレオマー形態、エナンチオマー形態、アトロプ異性体、およびエピマー形態と、これらの適切な混合物を含む。本明細書で提供される化合物と方法は、すべてのシス（ｃｉｓ）、トランス（ｔｒａｎｓ）、ｓｙｎ、ａｎｔｉ、ｅｎｔｇｅｇｅｎ（Ｅ）、およびｚｕｓａｍｍｅｎ（Ｚ）の異性体と、これらの適切な混合物を含む。
【０３１６】
個々の立体異性体は、必要に応じて、キラルクロマトグラフィーカラムによる立体選択的な合成および／または立体異性体の分離などの方法によって得られる。ある実施形態では、本明細書に記載される化合物は、一対のジアステレオマー異性体化合物／塩を形成するために光学的に活性な分割剤に化合物のラセミ混合物を反応させ、ジアステレオマーを分離し、光学的に純粋なエナンチオマーを回復させることにより、その個々の立体異性体として調製される。いくつかの実施形態では、エナンチオマーの分解は、本明細書に記載される化合物の共有結合のジアステレオマー誘導体を用いて実行される。別の実施形態では、ジアステレオマーは溶解度の差に基づいて分離／分解技術によって分離される。他の実施形態では、立体異性体の分離は、クロマトグラフィーによって、またはジアステレオマー塩の分離、および再結晶化またはクロマトグラフィーまたはその任意の組み合わせによる分離によって行われる。Ｊｅａｎ  Ｊａｃｑｕｅｓ，Ａｎｄｒｅ  Ｃｏｌｌｅｔ，Ｓａｍｕｅｌ  Ｈ．Ｗｉｌｅｎ，“Ｅｎａｎｔｉｏｍｅｒｓ，Ｒａｃｅｍａｔｅｓ  ａｎｄ  Ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎｓ”，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，１９８１．いくつかの実施形態では、立体異性体は立体選択的な合成によって得られる。
【０３１７】
化合物の合成
本明細書に記載される式（Ｉ）の化合物は、本明細書に記載される方法と組み合わせて標準的な合成技術を用いて、あるいは当該技術分野で知られている方法を用いて合成される。
【０３１８】
別段の定めのない限り、質量分光法、ＮＭＲ、ＨＰＬＣ、タンパク質化学、生化学、組換ＤＮＡ技術、および薬理学の従来の方法が使用される。
【０３１９】
化合物は、例えば、Ｍａｒｃｈ’ｓ  Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，６ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃに記載されるような標準的な有機化学技術を用いて調製される。アミン類、アルコール類、およびカルボン酸などの、官能性を一時的に保護する保護基の使用の標準的な手順は、例えば、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，  ３ｒｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，  Ｉｎｃに記載されている。溶媒、反応温度、反応時間の変化、および様々な化学試薬や他の反応条件などの本明細書に記載される合成形質転換の代替的な反応条件が用いられることもある。出発物質は市販の供給源から入手可能であるか、または容易に調製される。
【０３２０】
ピリジンは、周知の合成経路を用いて調製され（例えば、Ａｌｌａｉｓ  ｅｔ  ａｌ  Ｃｈｅｍ．  Ｒｅｖ．，  ２０１４，  １１４，  ｐ１０８２９−１０８６８及び引用文献を参照）、これらを、様々な方法を用いてさらに官能化することで２−置換ピリジンが得られる。いくつかの実施形態において、２−クロロピリジンは、適切な塩素化試薬を使用してピリジンを直接塩素化することで得られる。いくつかの実施形態において、塩素化試薬はＣｌ２である。いくつかの実施形態において、２−クロロピリジンは、ＰＯＣｌ３による２−ヒドロキシピリジンの処理により調製される。他の実施形態において、２−クロロピリジンは、適切な塩素化試薬によるピリジン−Ｎ−オキシドの塩素化によって調製される。いくつかの実施形態において、塩素化試薬はＰＯＣｌ３、ホスゲン、またはトリホスゲンである。２−トリフルオロメチル置換ピリジンは、様々な経路によって調製される。いくつかの実施形態において、２−ヨードピリジンを（トリフルオロメチル）銅と反応させることで、２−トリフルオロメチルピリジンを得ることができる（Ｃｏｔｔｅｔ  ａｎｄ  Ｓｃｈｌｏｓｓｅｒ  Ｅｕｒ．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，  ２００２，２，ｐ３２７−３３０を参照）。
【０３２１】
いくつかの実施形態において、スキーム１に示されるように、一般構造１−８を有する式（Ｉ）のアミド結合化合物が調製される。
【０３２２】
【化３３】
2019529387.tif 000039
【０３２３】
いくつかの実施形態において、４−シアノ−２−ハロピリジン１−１を、適切な極性溶媒を用いて適切な塩基の存在下で適切に置換されたフェニル誘導体１−２で処理することにより、１−３を得る。いくつかの実施形態において、適切な塩基はＫ２ＣＯ３または代替的にＫＯｔＢｕである。いくつかの実施形態において、適切な極性溶媒はＤＭＦである。いくつかの実施形態において、４−シアノピリジン誘導体１−３は、適切な還元剤を用いて、対応するメチルアミノ誘導体１−４に変換される。いくつかの実施形態において、適切な還元剤は、ＴＨＦ−ＭｅＯＨなどの適切な溶媒中のＮａＢＨ４／ＣｏＣｌ２、あるいは代替的にＥｔＯＡｃ−ＭｅＯＨなどの適切な溶媒中の炭素上の水素／パラジウムである。いくつかの実施形態において、１−４のアミノ部分が適切な保護基で保護されることで１−５が得られる。いくつかの実施形態において、ピリジンまたはＤＩＥＡなどの適切な有機塩基の存在下において、および、ＴＨＦまたはＤＣＭなどの適切な溶媒下において、Ｆｍｏｃ−Ｃｌを用いるアミン誘導体１−４の処理により、１−５（Ｒ２＝Ｆｍｏｃ）が得られる。他の実施形態において、ピリジンまたはＤＩＥＡなどの適切な有機塩基の存在下において、および、ＴＨＦまたはＤＣＭなどの適切な溶媒下において、Ｂｏｃ２Ｏを用いるアミン誘導体１−４の処理により、１−５（Ｒ２＝Ｂｏｃ）が得られる。いくつかの実施形態において、エステルは、適切な有機溶媒を有する水性のＬｉＯＨを使用して加水分解されることで、酸１−６を得る。いくつかの実施形態において、適切な溶媒はＭｅＯＨまたはＴＨＦである。いくつかの実施形態において、カルボン酸１−６と適切に置換されたアミンＨＮＲ３（Ｌ３−Ｑ）との間の標準的なペプチドカップリング反応条件により、アミド誘導体１−７が得られる。いくつかの実施形態において、標準的なアミン脱保護条件を使用することにより、１−８が得られる。いくつかの実施形態において、カルボン酸１−６とＮ−ヒドロキシスクシンイミドとの間の標準的なカップリング条件により、活性化されたエステル１−９が得られる。
【０３２４】
いくつかの実施形態において、ＤＭＦなどの適切な溶媒中での適切に置換されたアミンＨＮＲ３（Ｌ３−Ｑ）を用いる１−９の反応と、その後のアミン脱保護により、１−８が得られる。
【０３２５】
いくつかの実施形態において、スキーム２に示されるように、一般構造２−８または２−１０を有する式（Ｉ）のアミドまたはスルホンアミド−結合化合物が調製される。
【０３２６】
【化３４】
2019529387.tif 000040
【０３２７】
いくつかの実施形態において、４−シアノ−２−ハロピリジン２−１を、適切な極性溶媒を用いて適切な塩基の存在下で置換されたニトロフェニル誘導体２−２で処理することにより、２−３を得る。いくつかの実施形態において、適切な塩基はＫ２ＣＯ３または代替的にＫＯｔＢｕである。いくつかの実施形態において、適切な極性溶媒はＤＭＦである。いくつかの実施形態において、４−シアノピリジン誘導体２−３は、適切な還元剤を用いて、対応するメチルアミノ誘導体２−４に変換される。いくつかの実施形態において、還元剤は、ＴＨＦ−ＭｅＯＨなどの適切な溶媒中のＮａＢＨ４／ＣｏＣｌ２、あるいは代替的にＴＨＦなどの適切な溶媒中のＢＨ３−ＤＭＳである。いくつかの実施形態において、２−４のアミノ部分が適切な保護基で保護されることで２−５が得られる。いくつかの実施形態において、ピリジンまたはＤＩＥＡなどの適切な有機塩基の存在下において、および、ＴＨＦまたはＤＣＭなどの適切な溶媒下において、Ｆｍｏｃ−Ｃｌを用いるアミン誘導体２−４の処理により、２−５（Ｒ２＝Ｆｍｏｃ）が得られる。他の実施形態において、ピリジンまたはＤＩＥＡなどの適切な有機塩基の存在下において、および、ＴＨＦまたはＤＣＭなどの適切な溶媒下において、Ｂｏｃ２Ｏを用いるアミン誘導体２−４の処理により、２−５（Ｒ２＝Ｂｏｃ）が得られる。いくつかの実施形態において、２−５は、適切な還元剤を用いる処置によって、アニリン誘導体２−６に変換される。いくつかの実施形態において、適切な還元剤は、ＴＨＦ−Ｈ２Ｏ中のＮａ２Ｓ２Ｏ６、あるいは代替的にＥｔＯＡｃ−ＭｅＯＨなどの適切な溶媒中の炭素上の水素／パラジウムである。いくつかの実施形態において、アニリン２−６と、適切に置換されたカルボン酸Ｑ−Ｌ３−ＣＯ２Ｈ、あるいは酸塩化物Ｑ−Ｌ３−ＣＯＣｌ、またはＱ−Ｌ３−ＣＯ−（Ｎ−オキシ−スクシンイミド）などの活性化されたエステルとの間の標準的なカップリング反応条件によって、アミド誘導体２−７が得られる。いくつかの実施形態において、標準的なアミン脱保護条件を使用することにより、２−８が得られる。いくつかの実施形態において、ピリジンまたはＤＩＥＡなどの適切な有機塩基の存在下において、および、ＤＭＦまたはＤＣＭなどの適切な溶媒下において、適切に置換された塩化スルホニルＱ−Ｌ３−ＳＯ２Ｃｌを用いるアニリン２−６の反応によって、スルホンアミド２−９が得られる。いくつかの実施形態において、標準的なアミン脱保護条件下での２−９の処置により、２−１０が得られる。
【０３２８】
いくつかの実施形態において、スキーム３に示されるように、一般構造３−５または３−１０を有する式（Ｉ）のトリアゾール結合化合物が調製される。
【０３２９】
【化３５】
2019529387.tif 000041
【０３３０】
いくつかの実施形態において、（スキーム１で示されるように調製された）カルボン酸３−１と適切に置換されたアミン３−２との間の標準的なペプチドカップリング条件により、アルキン含有アミド誘導体３−３が得られる。いくつかの実施形態において、ｔＢｕＯＨ−Ｈ２ＯあるいはＤＭＳＯ−Ｈ２Ｏなどの溶媒中で、ＣｕＳＯ４またはＣｕＩなどの触媒の存在下において、および、アスコルビン酸ナトリウムと安息香酸の存在下において、適切に置換されたアジドＮ３−Ｌ３−Ｑを用いるアルキン誘導体３−３の処置により、トリアゾール誘導体３−４が得られる。いくつかの実施形態において、標準的なアミン脱保護条件を使用することにより、３−５が得られる。いくつかの実施形態において、カルボン酸３−１と適切に置換されたアミン３−６との間の標準的なペプチドカップリング反応条件により、アジド含有アミド誘導体３−７が得られる。いくつかの実施形態において、ｔＢｕＯＨ−Ｈ２ＯあるいはＤＭＳＯ−Ｈ２Ｏなどの溶媒中で、ＣｕＳＯ４またはＣｕＩなどの適切な触媒の存在下において、および、アスコルビン酸ナトリウムと安息香酸の存在下において、適切に置換されたアルキン３−８を用いるアジド誘導体３−７の処置により、トリアゾール３−９が得られる。いくつかの実施形態において、標準的なアミン脱保護条件下での３−９の処置により、３−１０が得られる。
【０３３１】
いくつかの実施形態において、スキーム４に示されるように、一般構造４−３を有する式（Ｉ）のトリアゾール結合化合物が調製される。
【０３３２】
【化３６】
2019529387.tif 000042
【０３３３】
いくつかの実施形態において、ｔＢｕＯＨ−Ｈ２ＯあるいはＤＭＳＯ−Ｈ２Ｏなどの溶媒中で、ＣｕＳＯ４またはＣｕＩなどの触媒の存在下において、および、アスコルビン酸ナトリウムと安息香酸の存在下において、適切に置換されたアジドＮ３−Ｌ３−Ｑを用いるアルキン誘導体４−１（スキーム１で概略された一般的な手順を用いて調製される）の処置により、トリアゾール誘導体３−４が得られる。いくつかの実施形態において、標準的なアミン脱保護条件を使用することにより、４−３が得られる。
【０３３４】
いくつかの実施形態において、スキーム５に示されるように、一般構造５−３を有する式（Ｉ）のトリアゾール結合化合物が調製される。
【０３３５】
【化３７】
2019529387.tif 000043
【０３３６】
いくつかの実施形態において、ｔＢｕＯＨ−Ｈ２ＯあるいはＤＭＳＯ−Ｈ２Ｏなどの溶媒中で、ＣｕＳＯ４またはＣｕＩなどの適切な触媒の存在下において、および、アスコルビン酸ナトリウムと安息香酸の存在下において、適切に置換されたアルキン５−２を用いるアジド誘導体５−１（スキーム１で概略された一般的な手順を用いて調製される）の処置により、トリアゾール誘導体５−３が得られる。いくつかの実施形態において、標準的なアミン脱保護条件を使用することにより、５−４が得られる。
【０３３７】
いくつかの実施形態において、スキーム６に示されるように、一般構造６−４を有する式（Ｉ）のピリダジン結合化合物が調製される。
【０３３８】
【化３８】
2019529387.tif 000044
【０３３９】
いくつかの実施形態において、Ｈ２ＯあるいはＭｅＣＮ−Ｈ２Ｏなどのなどの適切な溶媒中で、適切に置換されたテトラジン誘導体６−２を用いるトランス−シクロオクテン（ＴＣＯ）誘導体６−１（スキーム１に概説された基本手順を使用して調製される）の処置により、ピリダジン誘導体６−３が得られる（Ｋｎａｌｌ  ａｎｄ  Ｓｌｕｇｏｖｃ，  Ｃｈｅｍ．  Ｓｏｃ．  Ｒｅｖ．，  ２０１３，  ４２，  ｐ５１３１−５１４２と、本明細書で引用される文献を参照のこと）。いくつかの実施形態において、標準的なアミン脱保護条件を使用することにより、６−４が得られる。
【０３４０】
いくつかの実施形態において、スキーム７に示されるように、一般構造７−４を有する式（Ｉ）のピリダジン結合化合物が調製される。
【０３４１】
【化３９】
2019529387.tif 000045
【０３４２】
いくつかの実施形態において、Ｈ２ＯあるいはＭｅＣＮ−Ｈ２Ｏなどの適切な溶媒中で、適切に置換されたトランス−シクロオクテン（ＴＣＯ）誘導体７−２を用いるテトラジン誘導体７−１（スキーム１で概説された基本手順を使用して調製される）の処置により、ピリダジン誘導体７−３が得られる。いくつかの実施形態において、標準的なアミン脱保護条件を使用することにより、７−４が得られる。
【０３４３】
いくつかの実施形態において、実施例に記載されるように、化合物は調製される。
【０３４４】
特定の化学用語
別段の定めのない限り、本出願で使用される以下の用語の定義を下に示す。用語「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」に加えて、「含む（ｉｎｃｌｕｄｅ）」、「含む（ｉｎｃｌｕｄｅｓ）」、および「含まれる（ｉｎｃｌｕｄｅｄ）」などの他の形態の使用は、限定的なものではない。本明細書で使用されるセクションの見出しは、構成上の目的のみのためのものであり、記載される主題を制限すると解釈されるものではない。
【０３４５】
本明細書で使用されるように、Ｃ１−Ｃｘは、Ｃ１−Ｃ２、Ｃ１−Ｃ３．．．Ｃ１−Ｃｘを含む。ほんの一例として、「Ｃ１−Ｃ４」として指定された基は、その部分に１乃至４の炭素原子があることを示す（すなわち、基は、１つの炭素原子、２つの炭素原子、３つの炭素原子、または４つの炭素原子を含有する）。したがって、ほんの一例として、「Ｃ１−Ｃ４アルキル」は、アルキル基に１乃至４の炭素原子があることを示す（すなわち、アルキル基は、メチル、エチル、プロピル、イソ−プロピル、ｎ−ブチル、イソ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、およびｔ−ブチルから選択される）。
【０３４６】
「アルキル」基とは脂肪族炭化水素基を指す。アルキル基は分枝鎖または直鎖である。いくつかの実施形態では、「アルキル」基は、１乃至１０の炭素原子、すなわち、Ｃ１−Ｃ１０アルキルを有する。「１乃至１０」などの数の範囲は、本明細書で出てくるときは常に、所定の範囲内の各々の整数を指す。例えば、「１乃至１０の炭素原子」とは、アルキル基が、１つの炭素原子、２つの炭素原子、３つの炭素原子などから最大で１０の炭素原子からなることを意味するが、本定義は数の範囲が指定されていない用語「アルキル」の登場も包含するものである。いくつかの実施形態では、アルキルはＣ１−Ｃ６アルキルである。１つの態様では、アルキルは、メチル、エチル、プロピル、イソ−プロピル、ｎ−ブチル、イソ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、またはｔ−ブチルである。典型的なアルキル基としては、限定されないが、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、三級ブチル、ペンチル、ネオペンチル、またはヘキシルが挙げられる。
【０３４７】
「アルキレン」基は二価アルキルラジカルを指す。上記の一価アルキル基のいずれかがアルキルからの第２の水素原子の除去によるアルキレンであってもよい。いくつかの実施形態では、アルキレンはＣ１−Ｃ６アルキレンである。他の実施形態では、アルキレンはＣ１−Ｃ４アルキレンである。典型的なアルキレン基は、限定されないが、−ＣＨ２−、−ＣＨ（ＣＨ３）−、−Ｃ（ＣＨ３）２−、−ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）−、−ＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）２−、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−などを含む。
【０３４８】
「ジュウテロアルキル」は、アルキルの１つ以上の水素原子が重水素と取り替えられる場合のアルキル基を指す。
【０３４９】
用語「アルケニル」は、少なくとも１つの炭素炭素二重結合が存在するアルキル基の一種を指す。１つの実施形態では、アルケニル基は、式−Ｃ（Ｒ）＝ＣＲ２を有し、Ｒはアルケニル基の残りの部分を指し、それは同じこともあれば、異なることもある。いくつかの実施形態では、ＲはＨまたはアルキルである。アルケニル基の非限定的な例としては、−ＣＨ＝ＣＨ２、−Ｃ（ＣＨ３）＝ＣＨ２、−ＣＨ＝ＣＨＣＨ３、−Ｃ（ＣＨ３）＝ＣＨＣＨ３、および−ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２が挙げられる。
【０３５０】
用語「アルキニル」は、少なくとも１つの炭素炭素三重結合が存在するアルキル基の一種を指す。１つの実施形態では、アルキニル基は式−Ｃ≡Ｃ−Ｒを有し、Ｒはアルキニル基の残りの部分を指す。いくつかの実施形態では、ＲはＨまたはアルキルである。アルキニル基の非限定的な例としては、−Ｃ≡ＣＨ、−Ｃ≡ＣＣＨ３、−Ｃ≡ＣＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ２Ｃ≡ＣＨが挙げられる。
【０３５１】
「アルコキシ」基は（アルキル）Ｏ−基を指し、アルキルは本明細書で定義される通りである。
【０３５２】
用語「アルキルアミン」は−Ｎ（アルキル）ｘＨｙ基を指し、ｘが０で、ｙが２であるか、あるいはｘが１で、ｙが１であるか、あるいは、ｘが２でｙが０である。
【０３５３】
用語「芳香族」とは、４ｎ＋２π電子（ｎは整数である）を含む、非局在化されたπ−電子系を有する平面環を指す。用語「芳香族」は、炭素環式アリール（「アリール」、例えば、フェニル）と複素環式アリール（または「ヘテロアリール」または「複素環式芳香族」）基（例えばピリジン）の両方を含んでいる。この用語は単環式または縮合環の多環式（つまり、隣接する炭素原子対を共有する環）基を含んでいる。
【０３５４】
用語「炭素環式」あるいは「炭素環」は、環の骨格を形成する原子がすべて炭素原子である、環または環系を指す。したがって、該用語は、環骨格が炭素とは異なる少なくとも１つの原子を含有している「複素環式」または「複素環」と、炭素環式とを区別している。いくつかの実施形態では、二環式の炭素環の２つの環の少なくとも１つは、芳香族である。いくつかの実施形態では、二環式の炭素環の両方の環は、芳香族である。
【０３５５】
本明細書で使用されるように、用語「アリール」は、環を形成する原子の各々が炭素原子である、芳香族環を指す。１つの態様では、アリールは、フェニルまたはナフチルである。いくつかの実施形態では、アリールはフェニルである。いくつかの実施形態では、アリールはＣ６−Ｃ１０アリールである。構造によっては、アリール基はモノラジカルまたはジラジカル（つまり、アリーレン基）である。
【０３５６】
用語「シクロアルキル」は、単環式または多環式の脂肪族の非芳香族ラジカルを指し、環を形成する原子（つまり骨格原子）の各々は炭素原子である。いくつかの実施形態では、シクロアルキルは、スピロ環状化合物または架橋化合物である。いくつかの実施形態では、シクロアルキルは、随意に芳香環で縮合され、付着点は、芳香環炭素原子ではない炭素にある。シクロアルキル基は、３〜１０の環状原子を有する基を含む。いくつかの実施形態では、シクロアルキル基は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロペンテニル、シクロヘキシル、シクロヘキセニル、シクロヘプチル、シクロオクチル、スピロ［２．２］ペンチル、ノルボルニルおよびビシクロ［１．１．１］ペンチルの中から選択される。いくつかの実施形態では、シクロアルキルは、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキルである。
【０３５７】
用語「ハロ」あるいは代替的に「ハロゲン」または「ハロゲン化物」は、フルオロ、クロロ、ブロモ、あるいはヨードを意味する。いくつかの実施形態では、ハロはフルオロ、クロロ、またはブロモである。
【０３５８】
用語「フルオロアルキル」は、１つ以上の水素原子がフッ素原子と取り替えられるアルキルを指す。１つの態様では、フルオロアルキルはＣ１−Ｃ６フルオロアルキルである。
【０３５９】
用語「ヘテロアルキル」は、アルキルの１つ以上の骨格原子が炭素以外の原子、例えば、酸素、窒素（例えば、−ＮＨ−、−Ｎ（アルキル）−、硫黄、あるいはこれらの組み合わせ）から選択されるアルキル基を指す。ヘテロアルキルはヘテロアルキルの炭素原子で分子の残りに付けられる。１つの態様では、ヘテロアルキルはＣ１−Ｃ６ヘテロアルキルである。
【０３６０】
用語「複素環」あるいは「複素環式」とは、環に１〜４つのヘテロ原子を含む芳香族複素環（ヘテロアリールとしても知られている）およびヘテロシクロアルキル環（ヘテロ脂環式基としても知られている）を指し、ここで環のヘテロ原子はＯ、Ｓ、およびＮから選択され、ここで、環の各複素環基は、その環系中に３〜１０の原子を有し、ただし、どの環も２つの隣接するＯあるいはＳ原子を含んでいないとする。非芳香族複素環基（ヘテロシクロアルキルとしても知られる）は、その環系に３乃至１０の原子を有する環を含み、芳香族複素環基は、その環系に５乃至１０の原子を有する環を含む。複素環式基はベンゾ縮合環系を含む。非芳香族複素環基の例は、ピロリジニル、テトラヒドロフラニル、ジヒドロフラニル、テトラヒドロチエニル、オキサゾリジノニル、テトラヒドロピラニル、ジヒドロピラニル、テトラヒドロチオピラニル、ピペリジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、チオキサニル、ピペラジニル、アジリジニル、アゼチジニル、オキセタニル、チエタニル、ホモピペリジニル、オキセパニル、チエパニル、オキサゼピニル、ジアゼピニル、チアゼピニル、１，２，３，６−テトラヒドロピリジニル、ピロリン（ｐｙｒｒｏｌｉｎ）−２−イル、ピロリン（ｐｙｒｒｏｌｉｎ）−３−イル、インドリニル、２Ｈ−ピラニル、４Ｈ−ピラニル、ジオキサニル、１，３−ジオキソラニル、ピラゾリニル、ジチアニル、ジチオラニル、ジヒドロピラニル、ジヒドロチエニル、ジヒドロフラニル、ピラゾリジニル、イミダゾリニル、イミダゾリジニル、３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサニル、３−アザビシクロ［４．１．０］ヘプタニル、３Ｈ−インドリル、インドリン−２−オニル（ｏｎｙｌ）、イソインドリン−１−オニル、イソインドリン−１，３−ジオニル、３，４−ジヒドロイソキノリン−１（２Ｈ）−オニル、３，４−ジヒドロキノリン−２（１Ｈ）−オニル、イソインドリン−１，３−ジチオニル、ベンゾ［ｄ］オキサゾール−２（３Ｈ）−オニル、１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２（３Ｈ）−オニル、およびベンゾ［ｄ］チアゾール−２（３Ｈ）−オニル、およびキノリジニルである。芳香族複素環式基の例は、ピリジニル、イミダゾリル、ピリミジニル、ピラゾリル、トリアゾリル、ピラジニル、テトラゾリル、フリル、チエニル、イソキサゾリル、チアゾリル、オキサゾリル、イソチアゾリル、ピロリル、キノリニル、イソキノリニル、インドリル、ベンズイミダゾリル、ベンゾフラニル、シンノリニル、インダゾリル、インドリジニル、フタラジニル、ピリダジニル、トリアジニル、イソインドリル、プテリジニル、プリニル、オキサジアゾリル、チアジアゾリル、フラザニル、ベンゾフラザニル、ベンゾチオフェニル、ベンゾチアゾリル、ベンズオキサゾリル、キナゾリニル、キノキサリニル、ナフチリジニル、およびフロピリジニルである。前述の基は、可能であれば、Ｃ結合される（またはＣ連結される）か、あるいはＮ結合される。例えば、ピロールに由来する基は、ピロール−１−イル（Ｎ結合された）またはピロール−３−イル（Ｃ結合された）を含む。さらに、イミダゾールに由来する基は、イミダゾール−１−イルまたはイミダゾール−３−イル（両方ともＮ結合された）またはイミダゾール−２−イル、イミダゾール−４−イルまたはイミダゾール−５−イル（すべてＣ結合された）を含む。複素環式基はベンゾ縮合環系を含む。非芳香族複素環は、ピロリジン−２−オンなどの、１つまたは２つのオキソ（＝Ｏ）部分と随意に置換される。いくつかの実施形態では、二環式の複素環の２つの環の少なくとも１つは芳香族である。いくつかの実施形態では、二環式の複素環の両方の環は芳香族である。
【０３６１】
「ヘテロアリール」あるいは代替的には「ヘテロ芳香族」との用語は、窒素、酸素、および硫黄から選択された１つ以上の環ヘテロ原子を含むアリール基を指す。ヘテロアリール基の実例となる例は、単環式のヘテロアリールと二環式のヘテロアリールを含む。単環式のヘテロアリールは、ピリジニル、イミダゾリル、ピリミジニル、ピラゾリル、トリアゾリル、ピラジニル、テトラゾリル、フリル、チエニル、イソキサゾリル、チアゾリル、オキサゾリル、イソチアゾリル、ピロリル、ピリダジニル、トリアジニル、オキサジアゾリル、チアジアゾリル、およびフラザニルを含む。二環式ヘテロアリールはインドリジニル、インドリル、ベンゾフラニル、ベンゾチオフェニル、インダゾリル、ベンズイミダゾリル、プリニル、キノリジニル、キノリニル、イソキノリニル、シンノリニル、フタラジニル、キナゾリニル、キノキサリニル、１，８−ナフチリジニル、およびプテリジニルを含む。いくつかの実施形態では、ヘテロアリールは環に０−４のＮ原子を含有する。いくつかの実施形態では、ヘテロアリールは環に１−４のＮ原子を含有する。いくつかの実施形態では、ヘテロアリールは環に０−４のＮ原子、０−１のＯ原子、および０−１のＳ原子を含有する。いくつかの実施形態では、ヘテロアリールは環に１−４のＮ原子、０−１のＯ原子、および０−１のＳ原子を含有する。いくつかの実施形態では、ヘテロアリールはＣ１−Ｃ９ヘテロアリールである。いくつかの実施形態では、単環式のヘテロアリールはＣ１−Ｃ５ヘテロアリールである。いくつかの実施形態では、単環式のヘテロアリールは５−員または６−員のヘテロアリールである。いくつかの実施形態では、二環式のヘテロアリールはＣ６−Ｃ９ヘテロアリールである。
【０３６２】
「ヘテロシクロアルキル」あるいは「ヘテロ脂環式」基は、窒素、酸素、および硫黄から選択された少なくとも１つのヘテロ原子を含むシクロアルキル基を指す。いくつかの実施形態では、ヘテロシクロアルキルはアリールまたはヘテロアリールで縮合される。いくつかの実施形態では、ヘテロシクロアルキルは、オキサゾリジノニル、ピロリジニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロチエニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロチオピラニル、ピペリジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、ピペラジニル、ピペリジン−２−オニル、ピロリジン−２，５−ジチオニル、ピロリジン−２，５−ジオニル、ピロリジノニル、イミダゾリジニル、イミダゾリジン−２−オニル、またはチアゾリジン−２−オニルである。ヘテロ脂環式との用語は、限定されないが、単糖類、二糖類、および少糖類を含む、炭水化物の環状形態もすべて含んでいる。１つの態様では、ヘテロシクロアルキルはＣ２−Ｃ１０ヘテロシクロアルキルである。別の態様では、ヘテロシクロアルキルはＣ４−Ｃ１０ヘテロシクロアルキルである。いくつかの実施形態では、ヘテロシクロアルキルは環に０−２のＮ原子を含有する。いくつかの実施形態では、ヘテロシクロアルキルは環に０−２のＮ原子、０−２のＯ原子、および０−１のＳ原子を含有する。
【０３６３】
用語「結合」あるいは「単結合」とは、結合によって結合された原子がより大きな下部構造の一部であると考えられるときの２つの原子間あるいは２つの部分間の化学結合を指す。１つの態様では、本明細書に記載される基が単結合であるときに、参照された基は存在せず、それによって、残りの特定された基の間での単結合の形成が可能になる。
【０３６４】
用語「部分」は、分子の特定のセグメントまたは官能基を指す。化学的部分は、分子に埋め込まれたまたは付加された化学物質と認識されることが多い。
【０３６５】
「随意に置換された」または「置換された」との用語は、参照された基がハロゲン、−ＣＮ、−ＮＨ２、−ＮＨ（アルキル）、−Ｎ（アルキル）２、−ＯＨ、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２アルキル、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ２、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）２、−Ｓ（＝Ｏ）２ＮＨ２、−Ｓ（＝Ｏ）２ＮＨ（アルキル）、−Ｓ（＝Ｏ）２Ｎ（アルキル）２、アルキル、シクロアルキル、フルオロアルキル、ヘテロアルキル、アルコキシ、フルオロアルコキシ、ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アリールオキシ、アルキルチオ、アリールチオ、アルキルスルホキシド、アリールスルホキシド、アルキルスルホン、およびアリールスルホンから選択される個々に、かつ独立して選択された１つ以上の追加の基で随意に置換されることを意味する。他のいくつかの実施形態では、随意の置換基は、ハロゲン、−ＣＮ、−ＮＨ２、−ＮＨ（ＣＨ３）、−Ｎ（ＣＨ３）２、−ＯＨ、−ＣＯ２Ｈ、−ＣＯ２（Ｃ１−Ｃ４アルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ２、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（Ｃ１−Ｃ４アルキル）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｃ１−Ｃ４アルキル）２、−Ｓ（＝Ｏ）２ＮＨ２、−Ｓ（＝Ｏ）２ＮＨ（Ｃ１−Ｃ４アルキル）、−Ｓ（＝Ｏ）２Ｎ（Ｃ１−Ｃ４アルキル）２、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル、Ｃ１−Ｃ４フルオロアルキル、Ｃ１−Ｃ４ヘテロアルキル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、Ｃ１−Ｃ４フルオロアルコキシ、−ＳＣ１−Ｃ４アルキル、−Ｓ（＝Ｏ）Ｃ１−Ｃ４アルキル、および−Ｓ（＝Ｏ）２Ｃ１−Ｃ４アルキルから独立して選択される。いくつかの実施形態では、随意の置換基は、ハロゲン、−ＣＮ、−ＮＨ２、−ＯＨ、−ＮＨ（ＣＨ３）、−Ｎ（ＣＨ３）２、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＦ３、−ＯＣＨ３、および−ＯＣＦ３から独立して選択される。いくつかの実施形態では、置換された基は、前述の基の１つまたは２つで置換される。いくつかの実施形態では、脂肪族炭素原子（非環式または環式）上の随意の置換基は、オキソ（＝Ｏ）を含む。
【０３６６】
本明細書で使用されるように、製剤、組成物、あるいは成分に関して「許容可能な」との用語は、処置されている被験体の健康状態に持続的な有害作用を持たないことを意味する。
【０３６７】
用語「修飾する」とは、本明細書で使用されるように、ほんの一例として、標的の活性を増強するか、標的の活性を阻害するか、標的の活性を制限するか、あるいは標的の活性を拡大することを含む、標的の活性を変更するために、標的と直接あるいは間接的に相互作用することを意味する。
【０３６８】
本明細書で使用されるように、用語「モジュレーター」は、標的と直接あるいは間接的に相互作用する分子を指す。相互作用は、限定されないが、アゴニスト、部分アゴニスト、インバースアゴニスト、アンタゴニスト、分解剤（ｄｅｇｒａｄｅｒ）、またはそれらの組み合わせの相互作用を含む。いくつかの実施形態では、モジュレーターはアンタゴニストである。いくつかの実施形態では、モジュレーターは分解剤である。
【０３６９】
用語「投与する」、「投与すること」、「投与」などは、本明細書で使用されるように、生物学的作用の所望の部位への化合物あるいは組成物の送達を可能にするために使用され得る方法を指す。これらの方法は、限定されないが、経口経路、十二指腸内経路、非経口注入（静脈内、皮下、腹腔内、筋肉内、血管内、または点滴を含む）、局所投与、および直腸投与を含む。当業者は、本明細書に記載される化合物および方法を用いて使用され得る投与技術に精通している。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される化合物および組成物は、経口で投与される。
【０３７０】
用語「同時投与」などは、本明細書で使用されるように、一人の患者に対する選択された治療薬の投与を包含することを意味しており、同じあるいは異なる投与経路によって、または同じあるいは異なるときに薬剤が投与される治療レジメンを含むことを意図している。
【０３７１】
「有効な量」あるいは「治療上有効な量」という用語は、本明細書で使用されるように、処置されている疾患または疾病の症状の１つ以上をある程度まで軽減する、投与されている十分な量の薬剤あるいは化合物を指す。結果は、疾患の徴候、症状、または原因の減少および／または緩和、あるいは生体系の他の所望の変化を含む。例えば、治療用途のための「有効な量」は、疾患症状の臨床的に有意な減少をもたらすのに必要とされる、本明細書に開示されるような化合物を含む組成物の量である。個々のケースでの適切な「有効な」量は、用量漸増試験などの技術を使用して随意に決定される。
【０３７２】
用語は「増強する」あるいは「増強すること」は、本明細書で使用されるように、効能または持続時間のいずれかにおいて所望の効果を増加させるか延ばすことを意味する。従って、治療薬の効果を増強することに関して、用語「増強すること」は、効力または持続時間のいずれかで、系に対する他の治療薬の効果を増加または延長する能力を指す。「増強有効量」は、本明細書で使用されるように、所望の系において別の治療薬の効果を増強するのに十分な量を指す。
【０３７３】
用語「医薬配合」は、本明細書で使用されるように、１より多い活性成分の混合または組み合わせにより生じた生成物を意味し、活性成分の固定された配合と固定されていない配合の両方を含む。用語「固定された組み合わせ」は、有効成分、例えば本明細書に記載される化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、および助剤が共に、単一の実体または用量の形態で同時に患者に投与されることを意味する。用語「固定されていない組み合わせ」は、有効成分、例えば、本明細書に記載される化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、および助剤が、特定の介在時間の制限なく、同時に、同時発生的に、または連続して、別々の実体として患者に投与されることを意味し、こうした投与は、患者の身体に有効レベルの２つの化合物を提供する。後者の用語はカクテル療法、例えば、３つ以上の有効成分の投与にも当てはまる。
【０３７４】
用語「キット」および「製造品」は、同義語として用いられる。
【０３７５】
用語「被験体」または「患者」は、哺乳動物を包含する。哺乳動物の例として、限定されないが、哺乳動物のクラスの任意のメンバーがあげられる：ヒト；チンパンジー等のヒト以外の霊長類、および他の類人猿とサル類；ウシ、ウマ、ヒツジ、ヤギ、ブタなどの家畜；ウサギ、イヌ、およびネコなどの飼育動物；ラット、マウスおよびモルモットなどのげっ歯類を含む実験動物。１つの態様では、哺乳動物はヒトである。
【０３７６】
本明細書で使用される用語「処置する（ｔｒｅａｔ）」、「処置すること（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」または「処置（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」は、予防的におよび／または治療的に、疾患または疾病の少なくとも１つの症状を緩和、軽減または改善すること、追加の症状を予防すること、疾患または疾病を阻害すること、例えば、疾患または疾病の進行を妨げること、疾患または疾病を軽減すること、疾患または疾病の後退を引き起こすこと、疾患または疾病によって引き起こされた状態を軽減すること、あるいは疾患または疾病の症状を止めることを含む。
【０３７７】
＜医薬組成物＞
いくつかの実施形態では、プローブ化合物は医薬組成物へと調剤される。医薬組成物は、薬学的に使用される調製物への化合物の処理を促進する１つ以上の薬学的に許容可能な不活性成分を使用して、従来の方法で製剤される。適切な製剤は、選択される投与の経路に依存する。本明細書に記載される医薬組成物の要約は、例えばＲｅｍｉｎｇｔｏｎの：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｎｉｎｅｔｅｅｎｔｈ  Ｅｄ（Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．：Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，１９９５）；Ｈｏｏｖｅｒ，Ｊｏｈｎ  Ｅ．，Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａ  １９７５；Ｌｉｂｅｒｍａｎ，Ｈ．Ａ．ａｎｄ  Ｌａｃｈｍａｎ，Ｌ．，Ｅｄｓ．，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ，Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｃｋｅｒ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．，１９８０；およびＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｓｅｖｅｎｔｈ  Ｅｄ．（Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓ１９９９）で見ることができ、これらの文献は、開示のために引用することで本明細書に組み込まれる。
【０３７８】
いくつかの実施形態において、本明細書に記載される化合物は単独で、または医薬組成物中の薬学的に許容可能な担体、賦形剤または希釈剤と組み合わせて、投与される。本明細書に記載される化合物および組成物の投与は、作用部位への化合物の送達を可能にする方法によって達成され得る。これらの方法は、限定されないが、腸内経路（経口、胃または十二指腸の栄養管、肛門坐剤および直腸の浣腸を含む）、非経口経路（動脈内、心臓内、皮内、十二指腸内、髄内、筋肉内、骨内、腹腔内、鞘内、血管内、静脈内、硝子体内、硬膜外および皮下を含む、注射または注入）、吸入、経皮、経粘膜、舌下、頬側、および局所（上皮、真皮、浣腸、点眼、点耳、鼻腔内、膣を含む）の投与を介した送達を含むが、最も適切な経路は、例えばレシピエントの疾病または障害に左右され得る。ほんの一例として、本明細書に記載される化合物は、例えば局所注入、注射、カテーテル、または移植によって、処置を必要としている領域へと局所的に投与され得る。投与はまた、病変組織または臓器の部位での直接注射によるものであり得る。
【０３７９】
＜サンプル、解析技術、および器具使用＞
特定の実施形態では、本明細書に開示される方法の１つ以上は、サンプルを含む。いくつかの実施形態において、サンプルは細胞サンプルまたは組織サンプルである。いくつかの例では、サンプルは細胞サンプルである。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される方法と共に使用するためのサンプルは、哺乳動物の細胞から得られる。いくつかの例では、哺乳動物細胞は、霊長類、ヒト、類人猿、ウマ、ウシ、ブタ、イヌ、ネコ、またはげっ歯類の細胞である。いくつかの例では、哺乳動物は、ヒト、類人猿、イヌ、ネコ、ウサギ、シロイタチ、マウス、ラット、ハムスター、アレチネズミ、ハムスター、チンチラまたはモルモットである。いくつかの例では、哺乳動物はヒトである。
【０３８０】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載される方法と共に使用するためのサンプルは、哺乳動物細胞から得られる。いくつかの例では、哺乳動物細胞は、上皮細胞、結合組織細胞、ホルモン分泌細胞、神経細胞、骨格筋細胞、血液細胞、または免疫系細胞である。
【０３８１】
いくつかの実施形態では、該方法に使用されるサンプルは、個体からの組織または流体に由来する。サンプルは、限定されないが、組織（例えば、結合組織、筋組織、神経組織、または上皮組織）、全血、解離した骨髄、骨髄穿刺液、胸膜液、腹腔液、中枢髄液、腹液（ａｂｄｏｍｉｎａｌ  ｆｌｕｉｄ）、膵液、脳脊髄液、脳液、腹水、心膜液、尿、唾液、気管支洗浄液、汗、涙、耳流体（ｅａｒ  ｆｌｏｗ）、痰、陰嚢水腫液、精液、膣液、ミルク、羊水、および呼吸器、腸管、または尿生殖路の分泌物を含む。いくつかの実施形態では、サンプルは、生検から得られたサンプルまたは腫瘍組織サンプルなどの組織サンプルである。いくつかの実施形態では、サンプルは血清サンプルである。
【０３８２】
本明細書で使用されるように、「サンプル」は検出されることになっている物質を含む組成物を指す。本明細書の目的のために、サンプルは、限定されないがＬＯＸＬ２等の生体分子を含むことができるものを指す。サンプルは、生体液、任意の有機体から得られた生体組織、または有機体の細胞または有機体からの細胞等の生体サンプルであり得る。体液の例として、尿、血液、血漿、血清、唾液、精液、便通、唾液、脳脊髄液、涙、粘液、精子、羊水等があげられる。生体組織は細胞の集団であり、結合組織、上皮組織、筋肉組織および神経組織を含む、ヒト、動物、植物、細菌、真菌、またはウイルスの構造の構造物質の１つを形成するそれらの細胞間質と一緒の、通常は特定の種類のものである。生体組織の例としてさらに、臓器、腫瘍、リンパ節、動脈、および個体の細胞があげられる。したがって、サンプルは生体サンプルを含む（例えば生物（例えばヒト、動物、植物、細菌、真菌、原生生物、ウイルス）から始まる源から得られた任意の物質）。生体サンプルは、固形物質（例えば組織、細胞ペレット剤および生検、死体からの組織）、および生体液（例えば尿、血液、唾液、羊水および含嗽液（頬側細胞を含む））を含む任意の形態であり得る。ある実施形態では、固形物質は流体と混じり合っている。本明細書の実施形態では、質量分光分析のためのサンプルは、式（Ｉ）−ＬＯＸＬ２複合体などの、式（Ｉ）−生体分子複合体の化合物の混合物を含むサンプルを含む。
【０３８３】
いくつかの実施形態では、サンプルは、周知の、かつ通例の臨床法を使用してサンプルを得る適切な手段によって個体から得られる。個体から組織サンプルを得るための手順は周知である。例えば、針吸引生検などから組織サンプルを収集および処理するための手順は周知であり、提供される方法で使用するためのサンプルを得るために利用される。典型的に、そのような組織サンプルの収集のために、細い中空針が、細胞のサンプリングのために腫瘤などの瘤へと挿入され、染色後に顕微鏡で検査される。
【０３８４】
＜サンプルの調製および解析＞
いくつかの実施形態では、サンプルは溶液である。いくつかの例では、サンプル溶液は、緩衝液（例えば、リン酸緩衝食塩水）または培地などの溶液を含む。
【０３８５】
いくつかの実施形態では、サンプル（例えば細胞または細胞溶液）は、ＬＯＸＬ２等のサンプル中の生体分子とのプローブ相互作用の解析のために、本明細書に記載されるプローブでインキュベートされる。いくつかの例では、サンプル（例えば細胞または細胞溶液）は、本明細書に記載のプローブを加える前に、ＬＯＸＬ２ｉの存在下でさらにインキュベートされる。いくつかの例では、サンプルは対照と比較される。いくつかの例では、その対照はＬＯＸＬ２ｉではなくプローブを含む。いくつかの例では、サンプルと対照との間のプローブとタンパク質の相互作用間で差異が観察される。いくつかの例では、差異は、ＬＯＸＬ２等のサンプル中のＬＯＸＬ２ｉと生体分子の間の相互作用に相関する。
【０３８６】
いくつかの例では、サンプルは、第１の細胞溶液と第２の細胞溶液に分けられる。いくつかの場合には、第１の細胞溶液は、システイン反応性のプローブ−タンパク質複合体の第１の群を生成するために、本明細書に記載のプローブで第１の細胞溶液をインキュベートする前に、長時間、ＬＯＸＬ２ｉでインキュベートされる。いくつかの例では、長時間は、約５、１０、１５、２０、３０、６０、９０、１２０分、またはそれ以上である。いくつかの例では、第２の細胞溶液は、プローブ−タンパク質複合体の第２の群を生成するために第２のプローブを含む。いくつかの例では、第１および第２のプローブは同じである。いくつかの実施形態では、第２の細胞溶液はさらに対照を含む。
【０３８７】
いくつかの実施形態では、プローブ−タンパク質複合体はさらに、フルオロフォアなどの発色団に結合される。いくつかの例では、プローブ−タンパク質複合体は分離され、ゲル電気泳動法またはキャピラリー電気泳動法などの電気泳動システムを利用して可視化される。典型的なゲル電気泳動法は、アガロースベースのゲル、ポリアクリルアミドベースのゲル、またはデンプンベースのゲルを含む。いくつかの例では、プローブ−タンパク質は、未変性電気泳動条件にさらされる。いくつかの例では、プローブ−タンパク質は、変性電気泳動条件にさらされる。
【０３８８】
いくつかの例では、収集後のプローブ−タンパク質複合体はさらに、タンパク質断片を生成するために断片化される。いくつかの例では、断片化は、機械的ストレス、圧力、または化学的手段によって生成される。いくつかの例では、プローブ−タンパク質複合体からのタンパク質は、化学的手段によって断片化される。いくつかの実施形態では、化学的手段はプロテアーゼである。
【０３８９】
いくつかの例では、断片化はランダム断片化である。いくつかの例では、断片化が具体的な長さのタンパク質断片を生成する、または剪断力がアミノ酸部位の特定の配列で生じる。
【０３９０】
いくつかの例では、タンパク質断片は、液体クロマトグラフィー（ＬＣ）（例えば、高速液体クロマトグラフィー）、液体クロマトグラフィー質量分析（ＬＣ−ＭＳ）、マトリックス支援レーザー脱離／イオン化（ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ）、ガスクロマトグラフィー／質量分析（ＧＣ−ＭＳ）、キャピラリー電気泳動質量分析（ＣＥ−ＭＳ）、または核磁気共鳴イメージング（ＮＭＲ）などによるプロテオミクス法によってさらに解析される。
【０３９１】
いくつかの実施形態では、ＬＣ法は、サンプルをその個別部分へと分離するための、当該技術分野で周知の適切なＬＣ法である。この分離は、サンプルの移動相および固定相との相互作用に基づいて生じる。混合物を分離するときに利用される多くの固定／移動相の組み合わせが存在するため、それらの相の物理状態に基づいて分類されるいくつかの異なるタイプのクロマトグラフィーがある。いくつかの実施形態では、ＬＣは、順相クロマトグラフィー、逆相クロマトグラフィー、サイズ排除クロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、親和性クロマトグラフィー、置換クロマトグラフィー、分配クロマトグラフィー、フラッシュクロマトグラフィー、キラルクロマトグラフィー、および水性順相クロマトグラフィーとしてさらに分類される。
【０３９２】
いくつかの実施形態では、ＬＣ法は、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）法である。いくつかの実施形態では、ＨＰＬＣ法は、順相クロマトグラフィー、逆相クロマトグラフィー、サイズ排除クロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、親和性クロマトグラフィー、置換クロマトグラフィー、分配クロマトグラフィー、キラルクロマトグラフィー、または水性順相クロマトグラフィーとしてさらに分類される。
【０３９３】
いくつかの実施形態では、本開示のＨＰＬＣ法は、当技術分野で周知の任意の標準的な技術によって実行される。典型的なＨＰＬＣ法は、親水性相互作用液体クロマトグラフィー（ＨＩＬＩＣ）、静電反発力親水性相互作用液体クロマトグラフィー（ＥＲＬＩＣ）および逆相液体クロマトグラフィー（ＲＰＬＣ）を含む。
【０３９４】
いくつかの実施形態では、ＬＣは、ＬＣ−ＭＳ法として質量分析に結び付けられる。いくつかの実施形態では、ＬＣ−ＭＳ法は、超高性能液体クロマトグラフィーエレクトロスプレーイオン化四重極飛行時間型質量分析（ＵＰＬＣ−ＥＳＩ−ＱＴＯＦ−ＭＳ）、超高性能液体クロマトグラフィーエレクトロスプレーイオン化タンデム質量分析（ＵＰＬＣ−ＥＳＩ−ＭＳ／ＭＳ）、逆相液体クロマトグラフィー質量分析（ＲＰＬＣ−ＭＳ）、親水性相互作用液体クロマトグラフィー質量分析（ＨＩＬＩＣ−ＭＳ）、親水性相互作用液体クロマトグラフィー三連四重極タンデム質量分析（ＨＩＬＩＣ−ＱＱＱ）、静電反発力親水性相互作用液体クロマトグラフィー質量分析（ＥＲＬＩＣ−ＭＳ）、液体クロマトグラフィー飛行時間型質量分析（ＬＣ−ＴＯＦ−ＭＳ）、液体クロマトグラフィー四極子飛行時間型質量分析（ＬＣ−ＱＴＯＦ−ＭＳ）、液体クロマトグラフィータンデム質量分析（ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ）、タンデム質量分析と結び付けられた多次元液体クロマトグラフィー（ＬＣ／ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ）を含む。いくつかの例では、ＬＣ−ＭＳ法は、ＬＣ／ＬＣ−ＭＳ／ＭＳである。いくつかの実施形態では、本開示のＬＣ−ＭＳ法は、当技術分野で周知の標準的な技術によって実行される。
【０３９５】
いくつかの実施形態では、ＧＣは、ＧＣ−ＭＳ法として質量分析に結び付けられる。いくつかの実施形態では、ＧＣ−ＭＳ法は、二次元ガスクロマトグラフィー飛行時間型質量分析（ＧＣ＊ＧＣ−ＴＯＦＭＳ）、ガスクロマトグラフィー飛行時間型質量分析（ＧＣ−ＱＴＯＦ−ＭＳ）およびガスクロマトグラフィータンデム質量分析（ＧＣ−ＭＳ／ＭＳ）を含む。
【０３９６】
いくつかの実施形態では、ＣＥは、ＣＥ−ＭＳ法として質量分析に結び付けられる。いくつかの実施形態では、ＣＥ−ＭＳ法は、キャピラリー電気泳動−負のエレクトロスプレーイオン化質量分析（ＣＥ−ＥＳＩ−ＭＳ）、キャピラリー電気泳動−負のエレクトロスプレーイオン化−四重極飛行時間型質量分析（ＣＥ−ＥＳＩ−ＱＴＯＦ−ＭＳ）およびキャピラリー電気泳動−四重極飛行時間型質量分析（ＣＥ−ＱＴＯＦ−ＭＳ）を含む。
【０３９７】
いくつかの実施形態では、核磁気共鳴（ＮＭＲ）法は、本明細書に開示される１つ以上のシステイン結合タンパク質またはタンパク質断片の検出のための当技術分野で周知の適切な方法である。いくつかの実施形態では、ＮＭ方法は、一次元（１Ｄ）ＮＭＲ法、二次元（２Ｄ）ＮＭＲ法、固体ＮＭＲ法およびＮＭＲクロマトグラフィーを含む。典型的な１Ｄ  ＮＭＲ法は、１水素、１３炭素、１５窒素、１７酸素、１９フッ素、３１リン、３９カリウム、２３ナトリウム、３３硫黄、８７ストロンチウム、２７アルミニウム、４３カルシウム、３５塩素、３７塩素、６３銅、６５銅、５７鉄、２５マグネシウム、１９９水銀、または６７亜鉛のＮＭＲ法、分極移動（ＤＥＰＴ）法による歪みのない強化、アタッチドプロトンテスト（ＡＰＴ）法、およびＩＮＡＤＥＱＵＡＴＥ（１Ｄ−ｉｎｃｒｅｄｉｂｌｅ  ｎａｔｕｒａｌ  ａｂｕｎｄａｎｃｅ  ｄｏｕｂｌｅ  ｑｕａｎｔｕｍ  ｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ  ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ）法を含む。典型的な２Ｄ  ＮＭＲ法は、相関分光法（ＣＯＳＹ）、全相関分光法（ＴＯＣＳＹ）、２Ｄ−ＩＮＡＤＥＱＵＡＴＥ、２Ｄ−アデクエイト二重量子遷移実験（２Ｄ−ａｄｅｑｕａｔｅ  ｄｏｕｂｌｅ  ｑｕａｎｔｕｍ  ｔｒａｎｓｆｅｒ  ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ）（ＡＤＥＱＵＡＴＥ）、核オーバーハウザー効果分光法（ＮＯＳＥＹ）、回転フレームＮＯＥ分光法（ＲＯＥＳＹ）、異種核多量子相関分光法（ｈｅｔｅｒｏｎｕｃｌｅａｒ  ｍｕｌｔｉｐｌｅ−ｑｕａｎｔｕｍ  ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ  ｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｙ）（ＨＭＱＣ）、異種核単一量子コヒーレンス分光法（ｈｅｔｅｒｏｎｕｃｌｅａｒ  ｓｉｎｇｌｅ  ｑｕａｎｔｕｍ  ｃｏｈｅｒｅｎｃｅ  ｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｙ）（ＨＳＱＣ）、近距離カップリング（ｓｈｏｒｔ  ｒａｎｇｅ  ｃｏｕｐｌｉｎｇ）および遠距離カップリング（ｌｏｎｇ  ｒａｎｇｅ  ｃｏｕｐｌｉｎｇ）の方法を含む。典型的な固体ＮＭＲ法は、固体１３炭素ＮＭＲ、高解像度のマジック角回転（ＨＲ−ＭＡＳ）および交差分極のマジック角回転（ＣＰ−ＭＡＳ）のＮＭＲ法を含む。典型的なＮＭＲ技術として、拡散秩序化分光法（ｄｉｆｆｕｓｉｏｎ  ｏｒｄｅｒｅｄ  ｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｙ）（ＤＯＳＹ）、ＤＯＳＹ−ＴＯＣＳＹおよびＤＯＳＹ−ＨＳＱＣがあげられる。
【０３９８】
いくつかの実施形態では、タンパク質断片は、Ｗｅｅｒａｐａｎａ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ  ｒｅａｃｔｉｖｉｔｙ  ｐｒｏｆｉｌｉｎｇ  ｐｒｅｄｉｃｔｓ  ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  ｃｙｓｔｅｉｎｅｓ  ｉｎ  ｐｒｏｔｅｏｍｅｓ，”Ｎａｔｕｒｅ，４６８：７９０−７９５（２０１０）に記載されるような方法によって解析される。
【０３９９】
いくつかの実施形態では、質量分析法からの結果は、タンパク質同定のためにアルゴリズムによって解析される。いくつかの実施形態では、アルゴリズムは、タンパク質同定のために質量分析法からの結果をタンパク質の配列データベースと組み合わせる。いくつかの実施形態では、アルゴリズムは、ＰｒｏＬｕＣＩＤアルゴリズム、Ｐｒｏｂｉｔｙ、Ｓｃａｆｆｏｌｄ、ＳＥＱＵＥＳＴ、またはＭａｓｃｏｔを含む。
【０４００】
＜デジタル処理デバイス＞
いくつかの実施形態では、本明細書に記載される方法は、デジタル処理デバイスまたはその使用を含む。さらなる実施形態では、デジタル処理デバイスは、デバイスの機能を実行する１つ以上のハードウェア中央処理装置（ＣＰＵ）を含んでいる。またさらなる実施形態では、デジタル処理デバイスは、実行可能な命令を行うように構成された操作オペレーティングシステムをさらに含む。いくつかの実施形態では、デジタル処理デバイスは、コンピュータネットワークに随意に接続される。さらなる実施形態では、デジタル処理デバイスはワールド・ワイド・ウェブにアクセスするようにインターネットに随意に接続される。またさらなる実施形態では、デジタル処理デバイスは、クラウド・コンピューティング・インフラストラクチャーに随意に接続される。他の実施形態では、デジタル処理デバイスは、イントラネットに随意に接続される。他の実施形態では、デジタル処理デバイスは、データ記憶装置に随意に接続される。
【０４０１】
本明細書の記載に従い、適切なデジタル処理デバイスとして、限定されないが、サーバーコンピュータ、デスクトップコンピュータ、ラップトップコンピュータ、ノート型コンピュータ、サブノート型コンピュータ、ネットブックコンピュータ、ネットパッドコンピュータ、セットトップコンピュータ、メディアストリーミングデバイス、ハンドヘルドコンピュータ、インターネットアプライアンス、モバイルスマートフォン、タブレットコンピュータ、携帯情報端末、ビデオゲーム機、および媒体があげられる。適切なタブレットコンピュータは、ブックレット、スレートまたは変換可能な構成を含む。
【０４０２】
いくつかの実施形態では、デジタル処理デバイスは、実行可能な命令を行うように構成されたオペレーティングシステムを含む。オペレーティングシステムは、例えば、デバイスのハードウェアを管理し、アプリケーションの実行のためのサービスを提供する、プログラムおよびデータを含むソフトウェアである。
【０４０３】
いくつかの実施形態では、デバイスは記憶装置および／またはメモリデバイスを含む。記憶装置および／またはメモリデバイスは、一時的または永久的にデータまたはプログラムを記憶するために使用される１つ以上の物理的な機器である。いくつかの実施形態において、デバイスは揮発性メモリであり、記憶した情報を維持するための電力を必要とする。いくつかの実施形態において、デバイスは不揮発性メモリであり、デジタル処理デバイスに電力が供給されないときに記憶した情報を保持する。さらなる実施形態において、不揮発性メモリはフラッシュメモリを含む。いくつかの実施形態において、不揮発性メモリは、ダイナミックランダムアクセスメモリ（ＤＲＡＭ）を含む。いくつかの実施形態において、不揮発性メモリは、強誘電体ランダムアクセスメモリ（ＦＲＡＭ（登録商標））を含む。いくつかの実施形態において、不揮発性メモリは、相変化ランダムアクセスメモリ（ＰＲＡＭ）を含む。他の実施形態において、デバイスは、非限定的な例として、ＣＤ−ＲＯＭ、ＤＶＤ、フラッシュメモリ装置、磁気ディスクドライブ、磁気テープドライブ、光ディスクドライブ、およびクラウドコンピューティングベースの記憶装置を含む記憶装置である。さらなる実施形態において、記憶装置および／またはメモリデバイスは、本明細書に開示されるものなどのデバイスの組み合わせである。
【０４０４】
いくつかの実施形態では、デジタル処理デバイスは、ユーザーに視覚情報を送るディスプレイを含む。いくつかの実施形態では、ディスプレイは、陰極線管（ＣＲＴ）、液晶ディスプレイ（ＬＣＤ）、薄膜トランジスター液晶ディスプレイ（ＴＦＴ−ＬＣＤ）、有機発光ダイオード（ＯＬＥＤ）ディスプレイ、プラズマディスプレイ、ビデオプロジェクター、またはそれらの組み合わせを含む。
【０４０５】
いくつかの実施形態では、デジタル処理デバイスは、ユーザーからの情報を受け取るための入力装置を含む。いくつかの実施形態において、入力装置はキーボードである。いくつかの実施形態において、入力装置は、非限定的な例として、マウス、トラックボール、トラックパッド、ジョイスティック、ゲームコントローラ、またはスタイラスを含むポインティング装置である。いくつかの実施形態において、入力装置はタッチスクリーンまたはマルチタッチスクリーンである。他の実施形態において、入力装置は、声または他の音入力を捕らえるマイクロホンである。他の実施形態では、入力装置は、動作入力または視覚入力を捉えるためのビデオカメラあるいは他のセンサーである。またさらなる実施形態において、入力装置は本明細書に開示されるものなどのデバイスの組み合わせである。
【０４０６】
いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるシステムと方法は、随意にネットワーク化されたデジタル処理デバイスのオペレーティングシステムによって実行可能な命令を含むプログラムでコードされた、１つ以上の非一時的コンピュータ可読記憶媒体を含む。さらなる実施形態では、コンピュータ可読記憶媒体は、デジタル処理デバイスの有形の構成要素である。またさらなる実施形態では、コンピュータ可読記憶媒体は、デジタル処理デバイスから随意に取り除くことができる。いくつかの実施形態では、コンピュータ可読記憶媒体は、非限定的な例として、ＣＤ−ＲＯＭ、ＤＶＤ、フラッシュメモリ装置、ソリッドステート記憶装置、磁気ディスクドライブ、磁気テープドライブ、光ディスクドライブ、クラウドコンピューティングシステムおよびサービスなどを含む。場合によっては、プログラムと命令は媒体上で永久に、実質的に永久に、半永久に、または非一時的に符号化される。
【０４０７】
いくつかの実施形態において、本明細書に開示されるシステムと方法は、少なくとも１つのコンピュータプログラム、またはその使用を含む。コンピュータプログラムは、デジタル処理デバイスのＣＰＵで実行可能であり、特定のタスクを実行するために書き込まれる一連の指示を含む。いくつかの実施形態では、コンピュータ可読命令は、特定のタスクを実行する、または特定の抽象データ型を実装する、機能、オブジェクト、アプリケーションプログラムインターフェース（ＡＰＩ）、データ構造などのプログラムモジュールとして実装される。
【０４０８】
いくつかの実施形態において、コンピュータ可読指示の機能性は、様々な環境に所望されるものとして組み合わせられ、または分配されてもよい。いくつかの実施形態では、コンピュータプログラムは１つの命令列を含む。いくつかの実施形態において、コンピュータプログラムは複数の命令列を含む。いくつかの実施形態では、コンピュータプログラムは１つの位置から提供される。他の実施形態では、コンピュータプログラムは複数の位置から提供される。様々な実施形態において、コンピュータプログラムは、１つ以上のソフトウェアモジュールを含む。様々な実施形態において、コンピュータプログラムは、一部または全体として、１つ以上のウェブアプリケーション、１つ以上のモバイルアプリケーション、１つ以上のスタンドアロンアプリケーション、１つ以上のウェブブラウザプラグイン、拡張、アドイン、またはアドオン、あるいはこれらの組み合わせを含む。
【０４０９】
＜組成物、プローブ−タンパク質組成物を生成するプロセス＞
いくつかの実施形態において、本明細書に開示されるのは、プローブ−ＬＯＸＬ２タンパク質複合体の組成物、およびプローブ−ＬＯＸＬ２タンパク質複合体とサンプルを含む組成物である。
【０４１０】
いくつかの実施形態において、本明細書に開示されるのは、本明細書に記載のプローブおよびＬＯＸＬ２タンパク質を含むプローブ−タンパク質組成物である。いくつかの実施形態において、さらに本明細書に記載されるのは、本明細書に記載のプロセスによって生成されたプローブ−タンパク質組成物である。
【０４１１】
＜キット／製品＞
本明細書には、特定の実施形態において、本明細書に記載される１つ以上の方法と共に使用するためのキットおよび製品が開示される。いくつかの実施形態において、本明細書には、ＬＯＸＬ２とのＬＯＸＬ２ｉの標的結合を識別および／または定量化するためのキットが記載される。いくつかの例において、本明細書にはまた、ＬＯＸＬ２上の結合部位をマッピングするためのキットが記載される。場合によっては、本明細書には、ＬＯＸＬ２ｉと相互作用するタンパク質の識別のためのキットが記載される。
【０４１２】
いくつかの実施形態では、そのようなキットは、本明細書に記載のプローブ等のＬＯＸＬ２ｉプローブ、および本明細書に記載の方法の１つ以上を実行するのに適した試薬を含む。いくつかの例では、キットはさらに、細胞サンプルなどのサンプル、および緩衝液または培地などの適切な溶液を含む。いくつかの実施形態では、キットはさらに、本明細書に記載される方法の１つ以上で使用するための組換えタンパク質を含む。いくつかの実施形態では、キットの追加のコンポーネントは、バイアル、チューブなどの１つ以上の容器を受けるように区画されている担体、パッケージ、または容器を含み、容器の各々は、本明細書に記載される方法で使用される別個の要素の１つを含む。適切な容器としては、例えば、ボトル、バイアル、プレート、シリンジ、および試験管があげられる。他の実施形態において、容器は、ガラスまたはプラスチックのような様々な材料から形成される。
【０４１３】
本明細書で提供される製品は、パッケージング材を含む。製薬用のパッケージング材の例としては、限定されないが、ボトル、チューブ、バッグ、容器、および選択される製剤および意図した使用様式に適した任意のパッケージング材が挙げられる。
【０４１４】
例えば、容器は、本明細書に記載のプローブの１つ以上、および本明細書に開示される方法で使用される１つ以上の試薬を含む。そのようなキットは随意に、識別用の記載またはラベル、あるいは本明細書に記載される方法での使用に関する説明書を含む。
【０４１５】
キットはまた、内容物をリストするラベル、および／または使用説明書、および使用説明書を伴う添付文書を含む。１セットの説明書も典型的に含まれる。
【０４１６】
一実施形態では、ラベルは容器の上にある、または容器に付随する。１つの実施形態において、ラベルを形成する文字、数字または他の表示が、容器自体に貼り付けられ、成形され、または刻まれている場合、ラベルは容器上にある；ラベルは、例えば添付文書として容器を保持するレセプタクルまたは運搬装置内に存在するとき、容器に付随する。１つの実施形態において、ラベルは、内容物が特定の治療用途に用いられるべきものであるということを示すために用いられる。ラベルは、本明細書に記載の方法等で、内容物を使用するための指示をさらに示す。
【０４１７】
＜サービス＞
いくつかの実施形態では、本明細書に提供される方法は、サービスとしても機能する。いくつかの例では、サービスプロバイダーは、本明細書に記載されるプローブの１つ以上を用いる分析のために、顧客からサンプルを得る。いくつかの実施形態では、サービスプロバイダーは、本明細書に記載される方法の１つ以上を使用してサンプルを解析し、次に顧客にその結果を提供する。いくつかの例では、サービスプロバイダーは、本明細書に記載のプローブの１つ以上および本明細書に記載される方法の１つ以上を利用する解析のために、適切な試薬を顧客に提供する。いくつかの場合では、顧客は、本明細書に記載される方法の１つ以上を実行し、その後、解析のためにその結果をサービスプロバイダーに提供する。いくつかの実施形態では、サービスプロバイダーはその後、結果を解析し、顧客に結果を提供する。いくつかの場合では、顧客は、（顧客の場所で）ローカルにまたは（例えば、ネットワークを介して到達可能なサーバー上で）遠隔にインストールされたソフトウェアとインタラクトすることによって、結果をさらに解析する。典型的な顧客として、製薬会社、臨床検査室、医師、患者などがあげられる。いくつかの例では、顧客は、本明細書に記載される方法、システム、組成物、およびキットを使用する必要のある、またはそれを望む適切な顧客または関係者である。
【０４１８】
＜実施例＞
以下の実施例は、例示的目的のためだけに提供され、および本願で提供される特許請求の範囲を制限しない。
【０４１９】
Ｉｎｔ−Ａの合成
【０４２０】
【化４０】
2019529387.tif 000046
【０４２１】
＜工程１：メチル３−（（４−シアノ−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）安息香酸塩（Ａ−２）＞
ＴＨＦ／ＤＭＦ（４：１、５５ｍｌ）の混合物中の２−クロロ−６−（トリフルオロメチル）イソニコチノニトリルＡ−１（４．０ｇ、１９．４ｍｍｏｌ）およびメチル３−ヒドロキシベンゾアート（３．２４ｇ、２１．３ｍｍｏｌ）の溶液に、炭酸カリウム（８．０ｇ、５８ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を６０℃で２時間加熱した。ＴＨＦを減圧下で蒸発させ、残りの反応混合物を、水（２００ｍＬ）と酢酸エチル（１００ｍＬ）に分割した。有機層を分離し、水層をＥｔＯＡｃ（１×１００ｍｌ）で再抽出した。結合した有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、その後、減圧下で濃縮した。粗製の残留物を精製し（シリカゲル；ヘキサン中の０−５０％のＥｔＯＡｃで溶出）、淡黄色固形物（５．６３ｇ、９１％）として化合物Ａ−２を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ８．２１（ｍ，１Ｈ），８．０７（ｍ，１Ｈ），７．８７（ｍ，１Ｈ），７．７７（ｍ，１Ｈ），７．６４（ｍ，１Ｈ），７．５５（ｍ，１Ｈ），３．８５（ｓ，３Ｈ）；ＬＣＭ  Ｍａｓｓ：３２３．０（Ｍ＋＋１）。
【０４２２】
＜工程２：メチル３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）安息香酸塩（Ａ−３）＞
０℃でＴＨＦ／ＭｅＯＨ（１：１、１４０ｍＬ）中のメチル３−（（４−シアノ−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）安息香酸塩Ａ−２（１．５ｇ、４．６５ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ＣｏＣｌ２（１．８ｇ、１３．９８ｍｍｏｌ）、その後ＮａＢＨ４（１．７７ｇ、４６．５ｍｍｏｌ）を少しずつ加えた。反応混合物を０℃で２０分間撹拌した。混合物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で希釈し、セライトに通して濾過した。濾液を濃縮し、結果として生じた残留物を水（２００ｍＬ）とＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）に分割した。水−有機層をセライトに通して濾過し、有機層を分離し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、減圧下で濃縮して、さらなる精製を必要としないコハク油（１．３８ｇ、９２％）として化合物Ａ−３を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  ７．８３（ｍ，１Ｈ），７．６７（ｍ，１Ｈ），７．６５（ｂｒ  ｍ，１Ｈ），７．６０（ｍ，１Ｈ），７．４７（ｍ，１Ｈ），７．３３（ｂｒ  ｍ，１Ｈ），３．８０−３．８３（ｍ，５Ｈ）；ＬＣＭＳ  Ｍａｓｓ：３２７．０（Ｍ＋＋１）。
【０４２３】
＜工程３：メチル３−（（４−（（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）メチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）安息香酸塩（Ａ−４）＞
０℃のＴＨＦ（２５ｍＬ）中のエステルＡ−３（１．３８ｇ、４．２４ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボナート（１．２９ｇ、５．９４ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（２．２１ｍＬ、１２．７４ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温（ＲＴ）に暖め、更に４時間撹拌した。混合物を濃縮し、残留物をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）と水（５０ｍＬ）に分割した。有機層を分離し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、真空下で濃縮した。残留物を精製し（シリカゲル；ヘキサン中の０−６０％のＥｔＯＡｃ）、コハク油（１．４２ｇ、７８％）として化合物Ａ−４を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  ７．８５（ｍ，１Ｈ），７．６９（ｍ，１Ｈ），７．５８−７．６２（ｍ，２Ｈ），７．４８−７．５１（ｍ，２Ｈ），７．１３（ｂｒ  ｍ，１Ｈ），４．２０（ｍ，２Ｈ），３．８４（ｓ，３Ｈ），１．３６（ｓ，９Ｈ）；ＬＣＭＳ  Ｍａｓｓ：４２７．０（Ｍ＋＋１）。
【０４２４】
＜工程４：３−（（４−（（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）メチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）安息香酸（Ｉｎｔ−Ａ）＞
ＴＨＦ／Ｈ２Ｏ（６：１、２１ｍＬ）の混合物中のエステルＡ−４（１．４２ｇ、３．３４ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、４Ｍ  ＬｉＯＨ水溶液（１７ｍＬ、６８ｍｍｏｌ）を加えた。混合物をＲＴで１６時間撹拌し、水（３０ｍｌ）で希釈し、水性飽和クエン酸を使用してｐＨ３−４に酸性化した。混合物をＥｔＯＡｃ（２×５０ｍＬ）で抽出し、結合させた有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、減圧下で濃縮して、オフホワイト固形物（１．２ｇ、８７％）としてＩｎｔ−Ａを得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  １３．１７（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），７．８３（ｍ，１Ｈ），７．６６（ｂｒ  ｍ，１Ｈ），７．５３−７．６２（ｍ，２Ｈ），７．４４−７．５１（ｍ，２Ｈ），７．１２（ｂｒ  ｍ，１Ｈ），４．２５（ｍ，２Ｈ），１．３６（ｓ，９Ｈ）；ＬＣＭＳ  Ｍａｓｓ：４１３．０（Ｍ＋＋１）。
【０４２５】
Ｉｎｔ−Ｂの合成
【０４２６】
【化４１】
2019529387.tif 000047
【０４２７】
＜工程１：３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）安息香酸（Ｂ−１）＞
ＲＴでＤＣＭ中のＩｎｔ−Ａ（３ｇ、７．２８ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、１，４−ジオキサン（３６ｍＬ、１４４ｍｍｏｌ）中の追加の４Ｍ  ＨＣｌを加えた。混合物を室温で２時間撹拌した。混合物を減圧下で濃縮して、さらなる精製を必要としない淡黄色固形物として化合物Ｂ−１（２．５４ｇ、１００％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  １３．１９（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），８．６３（ｂｒ  ｓ，３Ｈ），７．８２−７．８５（ｍ，２Ｈ），７．４５−７．６６（ｍ，４Ｈ），４．１８−４．２５（ｍ，２Ｈ）；ＬＣＭＳ  Ｍａｓｓ：３１３．０（Ｍ＋＋１）。
【０４２８】
＜工程２：３−（（４−（（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）メチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）安息香酸（Ｉｎｔ−Ｂ）＞
０℃でアミンＢ−１（２．５４ｇ、７．２８ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（３．０７ｇ、２２．２ｍｍｏｌ）、１，４−ジオキサン（７４ｍＬ）、および水（７４ｍＬ）の撹拌混合物に、（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチルクロロ炭酸塩（２．１１ｇ、８．１４ｍｍｏｌ）を滴加した。混合物をＲＴに暖め、１５時間撹拌した。反応混合物をＥｔ２Ｏ（２×５０ｍＬ）で洗浄し、水層を分離し、水性飽和クエン酸を使用してｐＨ３に酸性化した。水層をＥｔＯＡｃ（２×７５ｍＬ）で抽出し、結合させた有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、その後に減圧下で濃縮した。粗製の残留物を精製し（シリカゲル；ヘキサン中０−１００％のＥｔＯＡｃ、その後ＤＣＭ中の０−１０％のＭｅＯＨで溶出）、淡黄色固形物としてＩｎｔ−Ｂ（２．７ｇ、６９％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  １３．１７（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），７．６６−８．０２（ｍ，１５Ｈ），４．２０−４．４０（ｍ，５Ｈ）；ＬＣＭＳ  Ｍａｓｓ：５３５．０（Ｍ＋＋１）。
【０４２９】
Ｉｎｔ−Ｃの合成
【０４３０】
【化４２】
2019529387.tif 000048
【０４３１】
室温でＤＣＭ（１０ｍＬ）中のＩｎｔ−Ａ（６００ｍｇ、１．４５ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ＨＡＴＵ（６３３ｍｇ、１．６７ｍｍｏｌ）を加え、その混合物を室温で２０分間、撹拌した。ヘキサン−５−イン−１−アミン塩酸塩（２１４μＬ、１．６ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（４３０ｍｇ、３．３３ｍｍｏｌ）を加え、混合物をＲＴで３．２時間撹拌した。反応混合物を、水とブラインの混合物で希釈した。混合物をＥｔＯＡｃで繰り返し抽出し、結合させた有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、減圧下で濃縮した。粗製の残留物を精製して（シリカゲル；ヘキサン中０−１００％のＥｔＯＡｃで溶出）、白色固形物として化合物Ｉｎｔ−Ｃ（６１０ｍｇ、８６％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  ８．５２（ｍ，１Ｈ），７．７４（ｍ，１Ｈ），７．５０−７．６３（ｍ，４Ｈ），７．３４（ｍ，１Ｈ），７．０８（ｓ，１Ｈ），４．２０−４．２８（ｍ，２Ｈ），３．２０−３．２８（ｍ，２Ｈ），２．７４（ｍ，１Ｈ），２．１０−２．２０（ｍ，２Ｈ），１．４０−１．６２（ｍ，４Ｈ），１．３５（ｓ，９Ｈ）。
【０４３２】
実施例１：３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（５−（５−（（３ａＳ，４Ｓ，６ａＲ）−２−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−チエノ［３，４−ｄ］イミダゾール−４−イル）ペンタンアミド）ペンチル）ベンズアミド塩酸塩（化合物１−１）
【０４３３】
【化４３】
2019529387.tif 000049
【０４３４】
＜工程１：ｔｅｒｔ−ブチル（（２−（３−（（５−（５−（（３ａＳ，４Ｓ，６ａＲ）−２−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−チエノ［３，４−ｄ］イミダゾール−４−イル）ペンタンアミド）ペンチル）カルバモイル）フェノキシ）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−４−イル）メチル）カルバミン酸（１）＞
室温でＤＭＦ（２ｍＬ）中のＩｎｔ−Ａ（２０７ｍｇ、０．５０ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ＨＡＴＵ（１７４ｍｇ、０．４６ｍｍｏｌ）を加え、その混合物を室温で２０分間、撹拌した。Ｎ−（５−アミノペンチル）−５−（（３ａＳ，４Ｓ，６ａＲ）−２−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−チエノ［３，４−ｄ］イミダゾール−４−イル）ペンタンアミド（ＥＺ−リンク（商標）ペンチルアミン−ビオチン；ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，ＵＳＡ；カタログ番号２１３４５）（１５０ｍｇ、０．４６のｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（２３９μＬ、１．３７ｍｍｏｌ）を加え、混合物をＲＴで６．５時間撹拌した。反応混合物を、水、ブライン、および水性１Ｍ  ＨＣｌの混合物で希釈した。混合物をＥｔＯＡｃで繰り返し抽出し、結合させた有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、減圧下で濃縮した。粗製の残留物を精製し（シリカゲル；ＤＣＭ中の０−２０％のＭｅＯＨで溶出）、白色固形物として化合物１（２４８ｍｇ、７５％）を得た。ＬＣＭＳ  Ｍａｓｓ：６２３．０（ＭＨ＋−Ｃ５Ｈ８Ｏ２）。
【０４３５】
＜工程２：３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（５−（５−（（３ａＳ，４Ｓ，６ａＲ）−２−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−チエノ［３，４−ｄ］イミダゾール−４−イル）ペンタンアミド）ペンチル）ベンズアミド塩酸塩（化合物１−１）＞
ＲＴでＤＣＭ（２ｍＬ）中の１（２４８ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）の撹拌混合物に、Ｅｔ２Ｏ（２ｍＬ、４．０ｍｍｏｌ）の中の２Ｍ  ＨＣｌを加え、混合物をＲＴで１８時間撹拌した。混合物を減圧下で濃縮し、白色固形物として表題化合物１−１（２１６ｍｇ、９６％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  ８．５０−８．７０（ｍ，４Ｈ），７．８３（ｍ，１Ｈ），７．７３−７．７７（ｍ，３Ｈ），７．６２（ｍ，１Ｈ），７．４０−７．６０（ｍ，３Ｈ），７．３４（ｍ，１Ｈ），４．１０−４．３０（ｍ，４Ｈ），３．２０−３．３０（ｍ，２Ｈ），２．９０−３．２０（ｍ，３Ｈ），２．７９（ｍ，１Ｈ），２．５０（ｍ，１Ｈ），１．９９−２．０５（ｍ，２Ｈ），１．２０−１．６０（ｍ，１２Ｈ）。
【０４３６】
実施例２：３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（３７−オキソ−４１−（（３ａＳ，４Ｓ，６ａＲ）−２−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−チエノ［３，４−ｄ］イミダゾール−４−イル）−３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４，２７，３０，３３−ウンデカオキサ−３６−アザヘンテトラコンタイル）ベンズアミド塩酸塩（化合物１−２）
【０４３７】
【化４４】
2019529387.tif 000050
【０４３８】
表題化合物（１−２）は、実施例１のための手順を使用して、工程１のＮ−（３５−アミノ−３，６，９，１２，１５，１８，２１，２４，２７，３０，３３−ウンデカオキサペンタトリアコンタイル）−５−（（３ａＳ，４Ｓ，６ａＲ）−２−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−チエノ［３，４−ｄ］イミダゾール−４−イル）ペンタンアミド（ＥＺーＬｉｎｋ（商標）アミン−ＰＥＧ１１−ビオチン；ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，ＵＳＡ；カタログ番号２６１３６）を使用して、調製された。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  ８．６０（ｍ，１Ｈ），８．５１（ｂｒ  ｓ，３Ｈ），７．７７−７．８３（ｍ，３Ｈ），７．６５（ｍ，１Ｈ），７．５５（ｍ，１Ｈ），７．４８（ｓ，１Ｈ），７．３７（ｍ，１Ｈ），６．３９（ｂｒ  ｓ，２Ｈ），４．３０（ｍ，１Ｈ），４．２１−４．２４（ｍ，２Ｈ），４．１２（ｍ，１Ｈ），３．６５−３．９０（ｂｒ  ｍ，４０Ｈ），３．４８−３．５３（ｍ，５Ｈ），３．３５−３．４５（ｍ，５Ｈ），３．１６−３．２０（ｍ，２Ｈ），３．０９（ｍ，１Ｈ），２．８２（ｍ，１Ｈ），２．５７（ｍ，１Ｈ），２．０４−２．０７（ｍ，２Ｈ），１．６０（ｍ，１Ｈ），１．３５−１．５３（ｍ，３Ｈ），１．３０（ｍ，１Ｈ）；ＬＣＭ  Ｍａｓｓ：１０６６．０（Ｍ＋＋１）。
【０４３９】
実施例３：１−（６−（（３−（４−（４−（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）ベンズアミド）ブチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）プロピル）アミノ）−６−オキソヘキシル）−３，３−ジメチル−２−（（１Ｅ，３Ｅ）−３−（１，３，３−トリメチルインドリン−２−イリデン）プロパ−１−エン−１−イル）−３Ｈ−インドール−１−イウム塩化物塩酸塩（化合物１−３）
【０４４０】
【化４５】
2019529387.tif 000051
【０４４１】
＜工程１：１−（６−（（３−（４−（４−（３−（（４−（（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）メチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）ベンズアミド）ブチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）プロピル）アミノ）−６−オキソヘキシル）−３，３−ジメチル−２−（（１Ｅ，３Ｅ）−３−（１，３，３−トリメチルインドリン−２−イリデン）プロパ−１−エン−１−イル）−３Ｈ−インドール−１−イウムトリフルオロ酢酸塩（１）＞
Ｉｎｔ−Ｃ（２１ｍｇ、０．０４３ｍｍｏｌ）、１−（６−（（３−アジドプロピル）アミノ）−６−オキソヘキシル）−３，３−ジメチル−２−（（１Ｅ，３Ｅ）−３−（１，３，３−トリメチルインドリン−２−イリデン）プロパ−１−エン−１−イル）−３Ｈ−インドール−１−イウム塩化物（Ｃｙａｎｉｎｅ３  アジ化物；Ｌｕｍｉｐｒｏｂｅ，Ｆｌｏｒｉｄａ  ＵＳＡ；カタログ番号Ｄ１０３０）（２５ｍｇ，０．０４３ｍｍｏｌ）、ＣｕＳＯ４（触媒反応、１．２５ｍｏｌ％）、ナトリウムＬ−（＋）−アスコビル酸塩（触媒反応、２５ｍｏｌ％）、安息香酸（触媒反応、１０ｍｏｌ％）、ｎ−ブタノール（１．３ｍＬ）および水（２．６ｍＬ）の混合物を、ＲＴで１６時間撹拌した。混合物に、ＤＭＳＯ（１．５ｍＬ）、ＣｕＳＯ４（触媒反応、１．２５ｍｏｌ％）およびナトリウムＬ−（＋）−アスコビル酸塩（触媒反応、２５ｍｏｌ％）を加え、さらに１６時間撹拌を続けた。反応混合物をＥｔＯＡｃ（５ｍＬ）で希釈し、有機層を分離させた。水層を追加のＥｔＯＡｃで再抽出し、そして結合させた有機層を減圧下で濃縮させた。残留物をＭｅＣＮに溶解し、分取逆相ＨＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ  ＸＴｅｒｒａ（登録商標）Ｐｒｅｐ  ＭＳ  Ｃ−１８  ＯＢＤ  ５μＭ  ５０ｘ１００ｍｍカラム；１８分間、０．１％のＴＦＡを含む０−９５％のＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏで、次に１０分間、９５％のＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏで溶出）で精製して、ピンク色固形物として化合物１（２１ｍｇ、４８％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  ８．５１（ｍ，１Ｈ），８．３１（ｍ，１Ｈ），７．８２−７．８８（ｍ，２Ｈ），７．７２（ｍ，１Ｈ），７．５６−７．６２（ｍ，４Ｈ），７．４８−７．５５（ｍ，２Ｈ），７．２１−７．４５（ｍ，７Ｈ），７．０８（ｍ，１Ｈ），６．４０−６．５０（ｍ，２Ｈ），４．２０−４．３０（ｍ，４Ｈ），４．００−４．１５（ｍ，２Ｈ），３．６２（ｓ，３Ｈ），３．２０−３．３０（ｍ，２Ｈ），２．９２−３．０２（ｍ，２Ｈ），２．５５−２．６５（ｍ，２Ｈ），２．０３−２．１０（ｍ，２Ｈ），１．８０−１．９０（ｍ，２Ｈ），１．５０−１．７５（ｍ，２０Ｈ），１．３０−１．４０（ｍ，１１Ｈ）；ＬＣＭＳ  Ｍａｓｓ：１０３１．０（Ｍ＋）。
【０４４２】
＜工程２：１−（６−（（３−（４−（４−（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）ベンズアミド）ブチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）プロピル）アミノ）−６−オキソヘキシル）−３，３−ジメチル−２−（（１Ｅ，３Ｅ）−３−（１，３，３−トリメチルインドリン−２−イリデン）プロパ−１−エン−１−イル）−３Ｈ−インドール−１−イウム塩化物塩酸塩（化合物１−３）＞
ＲＴでＤＣＭ（３ｍＬ）中の１（１９ｍｇ、０．０１８ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ＤＣＭ（０．５ｍＬ）中の２０％のＴＦＡを加え、混合物をＲＴで１６時間撹拌した。混合物を減圧下で濃縮し、高真空下で乾燥させた。残留物をＤＣＭ（１．５ｍＬ）に溶解し、これにＥｔ２Ｏ（５２μＬ、０．１ｍｍｏｌ）中の２Ｍ  ＨＣｌを加えて、混合物をＲＴで２５分間撹拌した。反応物を減圧下で濃縮して、ピンク色固形物として化合物１−３（１８ｍｇ、１００％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  ８．５５−８．７０（ｍ，４Ｈ），８．３２（ｍ，１Ｈ），７．９６（ｍ，１Ｈ），７．８２−７．８８（ｍ，２Ｈ），７．７５（ｍ，１Ｈ），７．２０−７．６５（ｍ，１２Ｈ），６．４２−６．５０（ｍ，２Ｈ），４．１５−４．２５（ｍ，４Ｈ），４．０２−４．１２（ｍ，２Ｈ），３．６２（ｓ，３Ｈ），３．２０−３．３０（ｍ，２Ｈ），２．９２−３．００（ｍ，２Ｈ），２．５５−２．６２（ｍ，２Ｈ），２．０３−２．１０（ｍ，２Ｈ），１．８０−１．９０（ｍ，２Ｈ），１．５０−１．７５（ｍ，２０Ｈ），１．３０−１．４０（ｍ，２Ｈ）；ＬＣＭＳ  Ｍａｓｓ：９３１．０（Ｍ＋）。
【０４４３】
実施例４：１−（６−（（３−（４−（４−（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）ベンズアミド）ブチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）プロピル）アミノ）−６−オキソヘキシル）−３，３−ジメチル−２−（（１Ｅ，３Ｅ，５Ｅ）−５−（１，３，３−トリメチルインドリン−２−イリデン）ペンタ−１，３−ジエン−１−イル）−３Ｈ−インドール−１−イウム塩化物塩酸塩（化合物１−４）
【０４４４】
【化４６】
2019529387.tif 000052
【０４４５】
表題化合物（１−４）は、実施例３のための手順を使用して、工程１の１−（６−（（３−アジドプロピル）アミノ）−６−オキソヘキシル）−３，３−ジメチル−２−（（１Ｅ，３Ｅ，５Ｅ）−５−（１，３，３−トリメチルインドリン−２−イリデン）ペンタ−１，３−ジエン−１−イル）−３Ｈ−インドール−１−イウム塩化物（Ｃｙａｎｉｎｅ５  アジ化物；Ｌｕｍｉｐｒｏｂｅ，Ｆｌｏｒｉｄａ  ＵＳＡ；カタログ番号Ｄ３０３０）を使用して調製された。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  ８．５０−８．６０（ｍ，５Ｈ），８．２５−８．３５（ｍ，２Ｈ），７．８０−７．９０（ｍ，３Ｈ），７．７５（ｍ，１Ｈ），７．４７−７．６３（ｍ，５Ｈ），７．３０−７．４０（ｍ，４Ｈ），７．２０−７．２８（ｍ，２Ｈ），６．５３（ｍ，１Ｈ），６．２０−６．３０（ｍ，２Ｈ），４．１５−４．２５（ｍ，４Ｈ），４．０２−４．１２（ｍ，２Ｈ），３．５７（ｓ，３Ｈ），３．２０−３．３０（ｍ，２Ｈ），２．９２−３．００（ｍ，２Ｈ），２．５５−２．６２（ｍ，２Ｈ），２．０３−２．１０（ｍ，２Ｈ），１．８０−１．９０（ｍ，２Ｈ），１．５０−１．７５（ｍ，２０Ｈ），１．３０−１．４０（ｍ，２Ｈ）；ＬＣＭＳ  Ｍａｓｓ：９５７．０（Ｍ＋）。
【０４４６】
実施例５：３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（４−メチル−２−オキソ−２Ｈ−クロメン−７−イル）ベンズアミド塩酸塩（化合物１−５）；
【０４４７】
【化４７】
2019529387.tif 000053
【０４４８】
表題化合物（１−５）を、工程１の７−アミノ−４−メチルクマリンを使用して、実施例１のための手順を使用して調製した。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  １０．７６（ｓ，１Ｈ），８．５０−８．７５（ｂｒｓ，３Ｈ），７．７０−７．９５（ｍ，６Ｈ），７．６６（ｍ，１Ｈ），７．４５−７．５５（ｍ，２Ｈ），６．２３（ｓ，１Ｈ），４．１５−４．２５（ｍ，２Ｈ），２．４１（ｓ，３Ｈ）；ＬＣＭＳ  Ｍａｓｓ：４７０．０（Ｍ＋＋１）。
【０４４９】
実施例６：Ｎ−（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）フェニル）−５−（ジメチルアミノ）ナフタリン−１−スルホンアミド塩酸塩（化合物１−６）
【０４５０】
【化４８】
2019529387.tif 000054
【０４５１】
＜工程１：２−（３−ニトロフェノキシ）−６−（トリフルオロメチル）イソニコチノニトリル（２）＞
２−クロロ−６−（トリフルオロメチル）イソニコチノニトリル１（１ｇ、４．８４ｍｍｏｌ）、３−ニトロフェノール（１．３５ｇ、９．７ｍｍｏｌ）、Ｃｓ２ＣＯ３（４．７３ｇ、１４．５ｍｍｏｌ）およびＤＭＡ（２４ｍＬ）の撹拌混合物を、６０℃で１．５時間加熱した。反応混合物を水とブラインで希釈し、次にＥｔＯＡｃ（４×３０ｍＬ）で抽出した。結合させた有機層を水、次にブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物を精製し（シリカゲル；ヘキサン中の０−４０％のＥｔＯＡｃで溶出）、固形物として化合物２（７５０ｍｇ、５０％）を得た。
【０４５２】
＜工程２：（２−（３−ニトロフェノキシ）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−４−イル）メタンアミン（３）＞
０℃でＴＨＦ（７ｍＬ）中のニトリル２（７４４ｍｇ、２．４１ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ボラン−硫化ジメチル（ＴＨＦ中の２Ｍ溶液、２．７７ｍＬ、５．５４ｍｍｏｌ）を滴加した。混合物を室温に暖めて、次に６０℃で１．５時間加熱した。混合物をＲＴに冷まし、次にＭｅＯＨ（３ｍＬ）で注意深くクエンチした。混合物を減圧下で濃縮し、高真空下で乾燥させて、オレンジ色の油として化合物３を得て、それはさらに精製されることはなかった。ＬＣＭ  Ｍａｓｓ：３１４．０（Ｍ＋＋１）。
【０４５３】
＜工程３：ｔｅｒｔ−ブチル（（２−（３−ニトロフェノキシ）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−４−イル）メチル）カルバミン酸（４）＞
０℃でアミン３（７６０ｍｇ）、ジ−ｔｅｒｔブチルジカルボナート（６２２ｍｇ、４．８５ｍｍｏｌ）およびＤＣＭ（１２ｍＬ）の撹拌混合物に、ＤＩＥＡ（１．２７ｍＬ、７．３０ｍｍｏｌ）を加えた。混合物をＲＴに暖め、１６時間撹拌した。混合物を水とブラインで希釈し、次にＤＣＭ（３×３０ｍＬ）で抽出した。結合させた有機層を、水性１Ｍ  ＨＣｌ（２×２０ｍＬ）、１：１の水／ブライン（５×２０ｍＬ）で洗浄し、次に乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、減圧下で濃縮した。残留物を精製し（シリカゲル；ヘキサン中の０−４０％のＥｔＯＡｃで溶出）、油として化合物４（５０５ｍｇ、２工程にわたり５１％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  ８．１１−８．１３（ｍ，２Ｈ），７．７０−７．８０（ｍ，２Ｈ），７．６２（ｍ，１Ｈ），７．５４（ｍ，１Ｈ），７．２１（ｍ，１Ｈ），４．２０−４．３０（ｍ，２Ｈ），１．３８（ｓ，９Ｈ）；ＬＣＭＳ  Ｍａｓｓ：４１４．０（Ｍ＋＋１）。
【０４５４】
＜工程４：ｔｅｒｔ−ブチル（（２−（３−アミノフェノキシ）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−４−イル）メチル）カルバミン酸（５）＞
化合物４（４５９ｍｇ、１．１１ｍｍｏｌ）、炭素（触媒反応、１０ｍｏｌ％）上の１０ｗｔ％のＰｄ、およびＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ（１：１、１２ｍＬ）の混合物を、ＲＴで、Ｈ２ガスの１大気下で撹拌した。３時間後に、混合物をセライトで濾過し、セライトパッドを追加のＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ（１：１、１００ｍＬ）で洗浄した。得られた濾液を減圧下で濃縮して、黄色の油として化合物５（５１１ｍｇ）を得て、さらなる精製は行わなかった。ＬＣＭＳ  Ｍａｓｓ：３２８．０（ＭＨ＋−Ｃ４Ｈ８）。
【０４５５】
＜工程５：ｔｅｒｔ−ブチル（（２−（３−（ジメチルアミノ）ナフタレン−１−スルホンアミド）フェノキシ）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−４−イル）メチル）カルバミン酸（６）＞
０℃で、化合物５（４３０ｍｇ）、ダンシルクロリド（３９３ｍｇ、１．４６ｍｍｏｌ）、およびＤＭＦの撹拌混合物に、ＤＩＥＡ（３９０μＬ、２．２４ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温に暖めて、１６時間撹拌した。混合物を水とブラインで希釈し、次にＥｔＯＡｃで繰返し抽出した。結合させた有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、減圧下で濃縮した。残留物を精製し（シリカゲル；ヘキサン中の０−４０％のＥｔＯＡｃ、その後ＤＣＭ中の０−１０％のＥｔＯＡｃで溶出）、黄色油として化合物６（３７８ｍｇ、２工程にわたり５６％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  １０．８６（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），８．４３（ｍ，１Ｈ），８．３２（ｍ，１Ｈ），８．１８（ｍ，１Ｈ），７．５０−７．６２（ｍ，３Ｈ），７．４７（ｍ，１Ｈ），７．２０−７．３０（ｍ，２Ｈ），６．９０（ｍ，１Ｈ），６．６８−６．９４（ｍ，３Ｈ），４．１５−４．２５（ｍ，２Ｈ），２．７９（ｓ，６Ｈ），１．３５（ｓ，９Ｈ）；ＬＣＭＳ  Ｍａｓｓ：６１７．０（Ｍ＋＋１）。
【０４５６】
＜工程６：Ｎ−（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）フェニル）−５−（ジメチルアミノ）ナフタレン−１−スルホンアミド塩酸塩（化合物１−６）＞
ＲＴでＤＣＭ（６ｍＬ）中の６（３７５ｍｇ、０．６０８ｍｍｏｌ）の撹拌混合物に、Ｅｔ２Ｏ（６ｍＬ、１２．０ｍｍｏｌ）中の２Ｍ  ＨＣｌを加え、混合物をＲＴで４時間撹拌した。混合物を減圧下で濃縮して、白色固形物として表題化合物１−６（２７４ｍｇ、８２％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  １０．９６（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），８．６０−８．７５（ｂｒ  ｓ，３Ｈ），８．５０（ｍ，１Ｈ），８．４０（ｍ，１Ｈ），８．２０（ｍ，１Ｈ），７．８２（ｍ，１Ｈ），７．５０−７．６８（ｍ，２Ｈ），７．２８−７．４０（ｍ，２Ｈ），７．２０（ｍ，１Ｈ），６．８０−６．９３（ｍ，２Ｈ），６．７４（ｍ，１Ｈ），４．１０−４．２０（ｍ，２Ｈ），２．８５（ｂｒ  ｓ，６Ｈ）；ＬＣＭＳ  Ｍａｓｓ：５１７．０（Ｍ＋＋１）。
【０４５７】
実施例７：３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（２１−（ＦＧ−ｂｅａｄ）−１０，１７，２１−トリヒドロキシ−７−オキソ−１２，１５−ジオキサ−３，４−ジチア−８，１９−ジアザヘンイコシル）ベンズアミド（化合物１−７）
【０４５８】
【化４９】
2019529387.tif 000055
【０４５９】
＜工程１：（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル（（２−（３−（クロロカルボニル）フェノキシ）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−４−イル）メチル）カルバミン酸（１）＞
不活性空気下でＲＴにおいてＩｎｔ−Ｂ（５００ｍｇ、０．９３５ｍｍｏｌ）、ＤＣＭ（６ｍＬ）およびＴＨＦ（６ｍＬ）の撹拌溶液に、ＤＭＦ（触媒反応、３滴）およびオキサリル塩化物（１５８μＬ、１．８７ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で４０時間撹拌した。混合物を減圧下で濃縮した。混合物を水とブラインで希釈し、次にＥｔＯＡｃ（３×２５ｍＬ）で抽出した。結合させた有機層を、水性飽和ＮａＨＣＯ３（２×２０ｍＬ）、ブラインで洗浄し、次に乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、減圧下で濃縮した。得られた固形物をＥｔ２Ｏ（２×１５ｍＬ）での研和により精製し、白色固形物として化合物１（３００ｍｇ、５８％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  ８．０３（ｍ，１Ｈ），７．８０−７．９０（ｍ，３Ｈ），７．６３−７．７０（ｍ，３Ｈ），７．５０−７．６０（ｍ，２Ｈ），７．２５−７．５０（ｍ，５Ｈ），７．１６（ｍ，１Ｈ），４．１０−４．４０（ｍ，５Ｈ）。
【０４６０】
＜工程２：３−（（２−（３−（（４−（（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）メチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）ベンズアミド）エチル）ジスルファニル）プロパン酸（２）＞
ＲＴで化合物１（２９５ｍｇ、０．５３４ｍｍｏｌ）、３−［（２−アミノエチル）ジチオ］プロピオン酸塩酸塩（１４９ｍｇ、０．６８４ｍｍｏｌ）、ＴＨＦ（１２ｍＬ）およびＤＭＦ（０．５ｍＬ）の撹拌溶液に、ＤＩＥＡ（１８μＬ、１．０７ｍｍｏｌ）を滴加し、その混合物をＲＴで２５分間撹拌した。混合物を減圧下で濃縮し、次に水とブラインで希釈し、その後にＥｔＯＡｃ（３×１０ｍＬ）で抽出した。結合させた有機層を、水性飽和１Ｍ  ＨＣｌ（２×４ｍＬ）、ブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、減圧下で濃縮した。残留物を精製して（シリカゲル；ヘキサン中の０−１００％のＥｔＯＡｃで溶出）、白色固形物として化合物２（２１４ｍｇ、５７％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  １２．３５（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），８．７０（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），８．０３（ｍ，１Ｈ），７．８０−７．９５（ｍ，２Ｈ），７．６０−７．７８（ｍ，４Ｈ），７．５１（ｍ，１Ｈ），７．２３−７．４３（ｍ，６Ｈ），７．１４（ｍ，１Ｈ），４．２０−４．４０（ｍ，５Ｈ），３．４５−３．５５（ｍ，２Ｈ），２．８０−２．９０（ｍ，４Ｈ），２．５５−２．６５（ｍ，２Ｈ）；ＬＣＭＳ  Ｍａｓｓ：６９６．０（Ｍ＋−１）。
【０４６１】
＜工程３：３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（２１−（ＦＧ−ｂｅａｄ）−１０，１７，２１−トリヒドロキシ−７−オキソ−１２，１５−ジオキサ−３，４−ジチア−８，１９−ジアザヘンイコシル）ベンズアミド（化合物１−７）＞
化合物１−７は、以下の方法で調製され、そのまま使用された；ＮＨ２誘導体化高性能磁性ナノ粒子ビーズ（ＦＧ−ｂｅａｄｓ；２００から３００ｎｍｏｌ／ｍｇのＮＨ２を含有）を、Ｎａｃａｌａｉ  ＵＳＡ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ  ＣＡ（カタログ番号：ＴＡＳ８８４８Ｎ１１３０；脱イオン水中の２０ｍｇ／ｍＬの懸濁液の１ｍＬ）から得た。
【０４６２】
ＮＨ２誘導体化ＦＧ−ｂｅａｄｓ３（０．２５ｍＬの脱イオン水中に５ｍｇ）を、１．５ｍＬのミクロチューブに入れた。その混合物をＲＴで５分間、１５，０００ｘｇで遠心分離にかけた。チューブを磁石の上に置き、上清を取り除いて捨てた。以下の洗浄手順を３回行った：ビーズを分散させるためにＤＭＦ（１ｍＬ）を添加し、混合物をＲＴで５分間、１５，０００ｘｇで遠心分離にかけた。チューブを磁石の上に置き、上清を取り除いて捨てた。
【０４６３】
ＲＴで５ｍｇのＦＧ−ｂｅａｄｓ３を含むチューブに、ＤＭＦ（４００μＬ）を加え、次に化合物２（ＤＭＦ０．０２ｍｍｏｌ中の０．１Ｍの溶液の２００μＬ）を加えた。１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水化物（ＨＯＢｔ）（ＤＭＦ、０．１ｍｍｏｌ中の０．５Ｍの溶液の２００μＬ）を加え、次に１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（ＥＤＣ）（ＤＭＦ、０．１ｍｍｏｌ中の０．５Ｍの溶液の２００μＬ）を加えた。チューブに封をし、ＲＴで一晩、優しく回転させた。混合物を５分間、１５，０００ｘｇで遠心分離にかけ、次にチューブを磁石の上において、上清を取り除いて捨てた。以下の洗浄手順を３回行った：ビーズを分散させるためにＤＭＦ（１ｍＬ）を添加し、混合物をＲＴで５分間、１５，０００ｘｇで遠心分離にかけた。チューブを磁石の上に置き、上清を取り除いて捨てた。
【０４６４】
ＦＧ−ｂｅａｄｓに付いた未反応のＮＨ２基をアセチル化（キャップ付加）するために、得られた誘導体化ＦＧ−ｂｅａｄｓを、ＲＴでＤＭＦ（１ｍＬ）中の２０％の無水酢酸に再懸濁し、チューブに封をして１時間、優しく回転させた。混合物を５分間、１５，０００ｘｇで遠心分離にかけ、次にチューブを磁石の上において、上清を取り除いて捨てた。以下の洗浄手順を３回行った：ビーズを分散させるためにＤＭＦ（１ｍＬ）を添加し、混合物をＲＴで５分間、１５，０００ｘｇで遠心分離にかけた。チューブを磁石の上に置き、上清を取り除いて捨てた。
【０４６５】
得られた誘導体化ＦＧ−ｂｅａｄｓを、ＲＴでＤＭＦ（１ｍＬ）中の３０％のピペリジンに再懸濁し、チューブに封をして３０分間、優しく回転させた。混合物を５分間、１５，０００ｘｇで遠心分離にかけ、次にチューブを磁石の上において、上清を取り除いて捨てた。以下の洗浄手順を３回行った：ＤＭＦ（１ｍＬ）を加えてビーズを分散させた。その混合物をＲＴで５分間、１５，０００ｘｇで遠心分離にかけた。チューブを磁石の上に置き、上清を取り除いて捨てた。さらなる洗浄手順を３回行った：ビーズを分散させるために水（１ｍＬ）中の５０％のメタノールを加え、混合物をＲＴで５分間、１５，０００ｘｇで遠心分離にかけた。チューブを磁石の上に置き、上清を取り除いて捨てた。
【０４６６】
得られた化合物１−７を、５０％のメタノール（０．５ｍＬ）に再懸濁し、使用前に最大１ヶ月間まで、４°Ｃで保管した。
【０４６７】
実施例８：（Ｅ）−３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（２−（４−（（４−（３−（４−（３−（（３−（２−（３−（（２−（ＦＧ−ｂｅａｄ）−２−ヒドロキシエチル）アミノ）−２−ヒドロキシプロポキシ）エトキシ）−２−ヒドロキシプロピル）カルバモイル）フェニル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）プロポキシ）フェニル）ジアゼニル）ベンズアミド）エチル）ベンズアミド（化合物１−８）
【０４６８】
【化５０】
2019529387.tif 000056
【０４６９】
＜工程１：（Ｅ）−（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル（（２−（３−（（２−（４−（（４−（３−アジドプロポキシ）フェニル）ジアゼニル）ベンズアミド）エチル）カルバモイル）フェノキシ）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−４−イル）メチル）カルバミン酸（２）＞
ＲＴでＤＭＦ（６ｍＬ）中のＩｎｔ−Ｂ（５００ｍｇ、０．９３５ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ＨＡＴＵ（３８０ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）を加え、その混合物を室温で２０分間、撹拌した。（Ｅ）−Ｎ−（２−アミノエチル）−４−｛２−［４−（３−アジドプロポキシ）フェニル］ジアゼニル｝ベンズアミド塩酸塩１（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ，ＵＳＡ；カタログ番号７７１１３９）（３７８ｍｇ、０．９３５ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（４８８μＬ、２．８０ｍｍｏｌ）を加え、その混合物をＲＴで１６時間撹拌した。反応混合物を水で希釈し、ＥｔＯＡｃで繰り返し抽出した。結合させた有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、減圧下で濃縮した。粗製の残留物を、４：１のＭｅＯＨ：ＥｔＯＡｃを用いた研和により精製して、黄色固形物として化合物２（６１０ｍｇ、７４％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  ８．７４（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），８．７２（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），７．９７−８．０３（ｍ，３Ｈ），７．８４−７．９２（ｍ，６Ｈ），７．７６（ｍ，１Ｈ），７．６５−７．７０（ｍ，３Ｈ），７．５０−７．５５（ｍ，２Ｈ），７．２５−７．４２（ｍ，５Ｈ），７．１２−７．１８（ｍ，３Ｈ），４．２７−４．４０（ｍ，４Ｈ），４．１０−４．２６（ｍ，４Ｈ），３．５３（ｍ，１Ｈ），３．４０−３．５０（ｍ，４Ｈ），１．９６−２．０５（ｍ，２Ｈ）；ＬＣＭＳ  Ｍａｓｓ：８８４．０（Ｍ＋＋１）。
【０４７０】
＜工程２：（Ｅ）−３−（１−（３−（４−（（４−（（２−（３−（（４−（（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）メチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）ベンズアミド）エチル）カルバモイル）フェニル）ジアゼニル）フェノキシプロピル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）安息香酸（３）＞
化合物２（２００ｍｇ、０．２２６ｍｍｏｌ）、３−エチニル安息香酸（３５ｍｇ、０．２４２ｍｍｏｌ）、ＣｕＳＯ４（触媒反応、１．２５ｍｏｌ％）、ナトリウムＬ−（＋）−アスコビル酸塩（触媒反応、２５ｍｏｌ％）、安息香酸（触媒反応、１０ｍｏｌ％）、ＤＭＳＯ（３ｍＬ）、および水（１ｍＬ）の混合物を、ＲＴで１６時間撹拌した。その混合物に、３−エチニル安息香酸（３０ｍｇ、０．２０５ｍｍｏｌ）、追加のＣｕＳＯ４（触媒反応、１．２５ｍｏｌ％）、ナトリウムＬ−（＋）−アスコビル酸塩（触媒反応、２５ｍｏｌ％）、および安息香酸（触媒反応、１０ｍｏｌ％）を加えた。反応混合物を４５℃で２時間加熱した。混合物を減圧下で濃縮させ、次にＤＭＳＯ（４ｍＬ）で希釈した。混合物を分取逆相ＨＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ  ＸＴｅｒｒａ（登録商標）Ｐｒｅｐ  ＭＳ  Ｃ−１８  ＯＢＤ  ５μＭ  ５０ｘ１００ｍｍカラム；１８分間、０．１％のＴＦＡを含む２５−１００％のＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏで、次に８分間、１００％のＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏで溶出）で精製して、黄色固形物として化合物３（５８ｍｇ、２５％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  ８．８０（ｍ，１Ｈ），８．７５（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），８．６７（ｂｒ  ｓ，１Ｈ），８．４０（ｍ，１Ｈ），７．９７−８．１０（ｍ，４Ｈ），７．８３−７．９０（ｍ，７Ｈ），７．７５（ｍ，１Ｈ），７．６３−７．７０（ｍ，３Ｈ），７．５０−７．６０（ｍ，３Ｈ），７．２５−７．４３（ｍ，５Ｈ），７．１０−７．１５（ｍ，３Ｈ），４．５６−４．６２（ｍ，２Ｈ），４．２６−４．３８（ｍ，４Ｈ），４．１０−４．２４（ｍ，３Ｈ），３．４１−３．４８（ｍ，４Ｈ），２．３５−２．４４（ｍ，２Ｈ）；ＬＣＭＳ  Ｍａｓｓ：１０３１．０（Ｍ＋＋１）。
【０４７１】
＜工程３：（Ｅ）−３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（２−（４−（（４−（３−（４−（３−（（３−（２−（３−（（２−（ＦＧ−ｂｅａｄ）−２−ヒドロキシエチル）アミノ）−２−ヒドロキシプロポキシ）エトキシ）−２−ヒドロキシプロピル）カルバモイル）フェニル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）プロポキシ）フェニル）ジアゼニル）ベンズアミド）エチル）ベンズアミド（化合物１−８）＞
表題化合物（１−８）を、実施例７、工程３に記載される手順を使用して、化合物３から調製した。調製した化合物１−８はそのまま使用された。
【０４７２】
実施例９：１−（４−（４−（（２−（２−（４−（４−（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）ベンズアミド）ブチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）エトキシ）エチル）アミノ）−４−オキソブトキシ）−５−メトキシ−２−ニトロフェニル）エチル（２−ヒドロキシ−３−（２−（２−ヒドロキシ−３−（（２−ヒドロキシ−２−（ＦＧ−ｂｅａｄｓ）−エチル）アミノ）プロポキシ）エトキシ）プロピル）カルバミン酸（化合物１−９）
【０４７３】
【化５１】
2019529387.tif 000057
【０４７４】
＜工程１：（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル（（２−（３−（ヘキシン−５−イン−１−イルカルバモイル）フェノキシ）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−４−イル）メチル）カルバミン酸（１）＞
表題化合物（１）（１０４ｍｇ、８２％）を、ヘキシン−５−イン−１−アミン塩酸塩を使用して、実施例８、工程１のための手順を使用して調製した。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  ８．５２（ｍ，１Ｈ），８．０３（ｍ，１Ｈ），７．８５−７．９０（ｍ，２Ｈ），７．６２−７．７４（ｍ，４Ｈ），７．４８−７．５４（ｍ，２Ｈ），７．２６−７．４３（ｍ，５Ｈ），７．１４（ｍ，１Ｈ），４．２８−４．４０（ｍ，４Ｈ），４．２３（ｍ，１Ｈ），３．２０−３．２８（ｍ，２Ｈ），２．７５（ｍ，１Ｈ），２．１２−２．２０（ｍ，２Ｈ），１．５１−１．６２（ｍ，２Ｈ），１．４０−１．５０（ｍ，２Ｈ）；ＬＣＭＳ  Ｍａｓｓ：６１４．０（Ｍ＋＋１）。
【０４７５】
＜工程２：（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル（（２−（３−（（４−（１−（１６−（４−（１−（（（（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）オキシ）カルボニル）オキシ）エチル）−２−メトキシ−５−ニトロフェノキシ）−１３−オキソ−３，６，９−トリオキサ−１２−アザヘキサデシル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−４−イル）ブチル）カルバモイル）フェノキシ）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−４−イル）メチル）カルバミン酸（３）＞
化合物１（２５ｍｇ、０．０４１ｍｍｏｌ）、１−（４−（（１−アジド−１３−オキソ−３，６，９−トリオキサ−１２−アザヘキサデカン−１６−イル）オキシ）−５−メトキシ−２−ニトロフェニル）エチル（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）炭酸塩（ＰＣ  Ａｚｉｄｏ−ＮＨＳ  Ｅｓｔｅｒ；Ｃｌｉｃｋ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｔｏｏｌｓ，Ｓｃｏｔｔｓｄａｌｅ  ＡＺ，ＵＳＡ；カタログ番号１１６１）（２６ｍｇ、０．０４１ｍｍｏｌ）、ＣｕＳＯ４（触媒反応、１．２５ｍｏｌ％）、ナトリウムＬ−（＋）−アスコビル酸塩（触媒反応、２５ｍｏｌ％）、安息香酸（触媒反応、１０ｍｏｌ％）、ＤＭＳＯ（２ｍＬ）、および水（０．４ｍＬ）の混合物を、ＲＴで４時間撹拌した。混合物を減圧下で濃縮させ、次にＤＭＳＯで希釈した。混合物を分取逆相ＨＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ  ＸＴｅｒｒａ（登録商標）Ｐｒｅｐ  ＭＳ  Ｃ−１８  ＯＢＤ  ５μＭ  ５０ｘ１００ｍｍカラム；０．１％のＴＦＡを含む０−１００％のＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏで溶出）で精製して、固形物として化合物３（２１ｍｇ、４１％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  ８．５１（ｂｒ  ｍ，１Ｈ），８．０３（ｂｒ  ｍ，１Ｈ），７．８５−７．９４（ｍ，３Ｈ），７．７８（ｍ，１Ｈ），７．６０−７．７５（ｍ，４Ｈ），７．５７（ｍ，１Ｈ），７．４７−７．５３（ｍ，２Ｈ），７．２６−７．４２（ｍ，５Ｈ），７．１２−７．１５（ｍ，２Ｈ），６．２７（ｍ，１Ｈ），４．３２−４．４２（ｍ，４Ｈ），４．２８−４．３１（ｍ，２Ｈ），４．２１（ｍ，１Ｈ），４．００−４．０７（ｍ，２Ｈ），３．９２−３．９６（ｍ，３Ｈ），３．７０−３．９０（ｍ，５Ｈ），３．３９−３．４４（ｍ，６Ｈ），３．３２−３．３７（ｍ，２Ｈ），３．２０−３．３０（ｍ，２Ｈ），３．１２−３．１９（ｍ，２Ｈ），２．７４（ｓ，３Ｈ），２．５５−２．６４（ｍ，２Ｈ），２．１９−２．２４（ｍ，２Ｈ），１．９０−１．９８（ｍ，２Ｈ），１．６７−１．７１（ｍ，３Ｈ），１．５０−１．６３（ｍ，４Ｈ）；ＬＣＭＳ  Ｍａｓｓ：１２５４．０（Ｍ＋）。
【０４７６】
＜工程３：１−（４−（４−（（２−（２−（４−（４−（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）ベンズアミド）ブチル）−１Ｈ−１，２，３−トリアゾール−１−イル）エトキシ）エチル）アミノ）−４−オキソブトキシ）−５−メトキシ−２−ニトロフェニル）エチル（２−ヒドロキシ−３−（２−（２−ヒドロキシ−３−（（２−ヒドロキシ−２−（ＦＧ−ｂｅａｄ）−エチル）アミノ）プロポキシ）エトキシ）プロピル）カルバミン酸（化合物１−９）＞
表題化合物（１−９）は、実施例７、工程３のための手順を使用して、その手順への以下の重要な修正を用いて、化合物３から調製されてもよい；記載されたＨＯＢｔ／ＥＤＣ媒介アミドカップリングの代わりに、化合物３は、加熱の有無に関わらず、ＤＭＦなどの溶媒の存在下で、ＮＨ２誘導体化ＦＧ−ｂｅａｄｓを用いて直接処理されてもよい。調製した化合物１−９はそのまま使用してもよい。
【０４７７】
実施例１０：３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（３−（１，１，２，２−テトラ−３Ｈ−エチル）フェニル）ベンズアミド（化合物１−１２）
【０４７８】
【化５２】
2019529387.tif 000058
【０４７９】
＜工程１：ｔｅｒｔ−ブチル（（２−（３−（（３−エチニルフェニル）カルバモイル）フェノキシ）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−４−イル）メチル）カルバミン酸（１）＞
室温でＤＭＦ（１３ｍＬ）中のＩｎｔ−Ａ（１ｇ、２．４３ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ＨＡＴＵ（１．８５ｇ、４．８６ｍｍｏｌ）を加え、その混合物を室温で２０分間、撹拌した。混合物を０℃に冷まし、および３−エチニルアニリン（３４１ｍｇ、２．９１ｍｍｏｌ）とＤＩＥＡ（１．２７ｍＬ（７．２９ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温に暖めて、１時間撹拌した。混合物を水とブラインの混合物で希釈した。混合物をＥｔＯＡｃで繰り返し抽出し、結合させた有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、減圧下で濃縮した。粗製の残留物を精製して（シリカゲル；ヘキサン中の０−６５％のＥｔＯＡｃで溶出）、淡黄色油として化合物１（１ｇ、８１％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  １０．３５（ｓ，１Ｈ），７．１０−８．００（ｍ，１１Ｈ），４．１８−４．２７（ｍ，３Ｈ），１．３６（ｓ，９Ｈ）。
【０４８０】
＜工程２：３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（３−エチニルフェニル）ベンズアミド塩酸塩（２）＞
ＲＴでＤＣＭ（５．４ｍＬ）中の１（２７８ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ）の撹拌混合物に、Ｅｔ２Ｏ（５．４ｍＬ、１０．８ｍｍｏｌ）中の２Ｍ  ＨＣｌを加え、混合物をＲＴで１６時間撹拌した。Ｅｔ２Ｏ（１．３５ｍＬ、２．７０ｍｍｏｌ）中の追加の２Ｍ  ＨＣｌを加え、混合物をさらに２時間撹拌した。混合物を減圧下で濃縮して、白色固形物として化合物２（２３０ｍｇ、９５％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  １０．４５（ｓ，１Ｈ），８．６７（ｂｒ  ｓ，３Ｈ），７．２０−８．００（ｍ，１０Ｈ），４．２０−４．４０（ｍ，３Ｈ）；ＬＣＭ  Ｍａｓｓ：４１２．０（Ｍ＋＋１）。
【０４８１】
＜工程３：３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（３−（１，１，２，２−テトラ−３Ｈ−エチル）フェニル）ベンズアミド（化合物１−１２）＞
炭素（０．４ｍｇ）上の１０％のパラディウムをトリチウム反応槽に加え、その後にＤＭＦ（０．３ｍＬ）中の化合物２（０．４ｍｇ）の溶液を加えた。反応槽をトリチウム線に取り付け、−２００℃においてトリチウムガスで０．５の大気に加圧した。その溶液をＲＴで３０分間撹拌し、次に−２００℃に冷却し、余分なガスを除去した。反応フラスコをＭｅＯＨで数回すすぎ、セライトパッドに通して各ＭｅＯＨを洗浄した。結合させたＭｅＯＨ溶液を減圧下で濃縮した。粗製物質（２１ｍＣｉ）を、セミ分取逆相ＨＰＬＣにより精製して、化合物１−１２（８ｍＣｉ、＞９９％純粋）を得て、これをＥｔＯＨに溶解させた。比活性は質量分光法によって測定される５８Ｃｉ／ｍｍｏｌであると判定された。
【０４８２】
実施例１１：（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）フェニル）（（３Ｒ，４Ｒ）−３−１８フルオロ−４−ヒドロキシピロリジン−１−イル）メタノン塩酸塩（化合物１−１３）
【０４８３】
【化５３】
2019529387.tif 000059
【０４８４】
＜工程１：ｔｅｒｔ−ブチル（（２−（３−（２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−１−カルボニル）フェノキシ）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−４−イル）メチル）カルバミン酸（１）＞
ＲＴでＤＭＦ（４ｍＬ）中のＩｎｔ−Ａ（５００ｍｇ、１．２１ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ＨＡＴＵ（４６０ｍｇ、１．２１ｍｍｏｌ）を加え、混合物をＲＴで２０分間撹拌した。２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール塩酸塩（１４１ｍｇ、１．３３ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（６３２μＬ、３．６３ｍｍｏｌ）を加えて、混合物をＲＴで１．５時間撹拌した。反応混合物を、水とブラインの混合物で希釈した。混合物をＥｔＯＡｃで繰り返し抽出し、結合させた有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、減圧下で濃縮した。粗製の残留物を精製し（シリカゲル；ヘキサン中の０−８０％のＥｔＯＡｃで溶出）、無色の油として化合物１（４４３ｍｇ、７９％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  ７．５９（ｍ，１Ｈ），７．４９−７．５４（ｍ，２Ｈ），７．３９−７．４２（ｍ，２Ｈ），７．２８（ｍ，１Ｈ），７．１２（ｍ，１Ｈ），５．９２（ｍ，１Ｈ），５．７９（ｍ，１Ｈ），４．２２−４．２６（ｍ，４Ｈ），４．１７−４．２０（ｍ，２Ｈ），１．３７（ｓ，９Ｈ）；ＬＣＭＳ  Ｍａｓｓ：４０８．０（ＭＨ＋−Ｃ４Ｈ８）。
【０４８５】
＜工程２：ｔｅｒｔ−ブチル（（２−（３−（６−オキサ−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−３−カルボニル）フェノキシ）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−４−イル）メチル）カルバミン酸（２）＞
ＲＴでＤＣＭ中の化合物１（５０ｍｇ、０．１０８ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ｍＣＰＢＡ（７０％；３３０ｍｇ、１．３５ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で１６時間撹拌した。混合物を水性Ｎａ２ＳＯ３で希釈し、次に飽和水性ＮａＨＣＯ３溶液で洗浄した。混合物を減圧下で濃縮した。残留物を水性Ｎａ２ＳＯ３で洗浄し、次に飽和水性ＮａＨＣＯ３溶液で洗浄した。有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、減圧下で濃縮した。残留物を精製して（シリカゲル；ヘキサン中の−８０％のＥｔＯＡｃで溶出）、白色固形物として化合物２（３０ｍｇ、５９％）を得た。ＬＣＭＳ  Ｍａｓｓ：４２４．０（ＭＨ＋−Ｃ４Ｈ８）。
【０４８６】
＜工程３：（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）フェニル）（（３Ｒ，４Ｒ）−３−１８フルオロ−４−ヒドロキシピロリジン−１−イル）メタノン塩酸塩（化合物１−１３）＞
Ｃｈｒｏｍａｆｉｘ  ＰＳ−ＨＣＯ３カートリッジを、Ｈ２Ｏ（１０ｍＬ）、Ｎａ２ＣＯ３（１０ｍＬのＨ２Ｏ中に２６０ｍｇ）で、次にＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で、前もって整えた。次に、カートリッジに水性［１８Ｆ］フッ化物］（２．５ｍＬのＨ２Ｏ中）（Ｓｉｅｍｅｎｓ  Ｅｃｌｉｐｓｅ  ｃｙｃｌｏｔｒｏｎ製造）を載せ、使用直前に調製されたＭｅＯＨ（１ｍＬ）中の（Ｓ，Ｓ，Ｓ，Ｓ）−（結合サレン）Ｃｏ２（ＯＴｓ）２複合体３（２０ｍｇ）（Ｔ．Ｊ．Ａ．Ｇｒａｈａｍ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．２０１４，１３６，５２９１−４に記載の手順を使用して調製）の溶液で溶出した。混合物を、Ｎ２の流れ下で、４０℃で濃縮乾固した。乾燥した（Ｓ，Ｓ，Ｓ，Ｓ）−（結合サレン）Ｃｏ２（ＯＴｓ）１８Ｆ複合体をＲＴに冷まし、次に無水ＭｅＣＮ（０．５ｍＬ×２）を加え、６０℃で加熱して乾燥させた。乾燥した（Ｓ，Ｓ，Ｓ，Ｓ）−（結合サレン）Ｃｏ２（ＯＴｓ）１８Ｆ複合体をＲＴに冷まし、ＭｅＣＮ（０．５ｍＬ）中の化合物２（１２ｍｇ）の溶液を加えて、混合物を６０℃で２５分間加熱した。混合物をＨ２Ｏ（１ｍＬ）でクエンチし、ろ過し、セミ分取逆相ＨＰＬＣ（Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｅｃｌｉｐｓｅ  ＸＤＢ−フェニル  逆相カラム、９．４ｘ２５０ｍｍ、５μｍ、流速５ｍＬ／分、および３０分にわたりＨ２Ｏ中の４０％のＭｅＣＮで溶出、Ｒｔ１７．９分）で精製した。得られたＮ−Ｂｏｃ保護１８Ｆ標識生成物を、１Ｍのギ酸アンモニウム溶液（２０ｍＬ）で希釈し、ｌｉｇｈｔ  Ｃ−１８カートリッジに載せて、ＥｔＯＨ（１ｍＬ）で溶出した。得られた溶液を５０℃で濃縮した。４Ｍ  ＨＣｌ（０．１ｍＬ）を加え、混合物を５分間撹拌した。水性の２Ｍ  ＮａＯＨを使用してｐＨを中和した。Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｅｃｌｉｐｓｅ  ＸＤＢ−フェニル逆相カラム（４．６×１５０ｍｍ、５μｍ）を分析に使用し、ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ（流速：１ｍＬ／分；ｔ＝０−２分：Ｈ２Ｏ中の５％のＭｅＣＮ、ｔ＝２−１３分：Ｈ２Ｏ中の５−９５％のＭｅＣＮ、ｔ＝１２−１３分：Ｈ２Ｏ中の９５−５％のＭｅＣＮ、およびｔ＝１３−１４分：Ｈ２Ｏ中の５％のＭｅＣＮ；Ｒｔ７．１分）で溶出した。トレーサーは、それぞれの基準の保持時間と一致し、および９５％の放射化学的純度を上回り、０．７５−３．２ｍＣｉが得られた（０．３−１．３％の放射化学的収率、ＴＯＩで修正された減衰、１１０分の合成時間）。
【０４８７】
実施例１２：（Ｒ，Ｒ）−トランス−（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）フェニル）（３−フルオロ−４−ヒドロキシピロリジン−１−イル）メタノン塩酸塩（１−１３ａ）
【０４８８】
【化５４】
2019529387.tif 000060
【０４８９】
＜工程１：ラセミ−トランス−ｔｅｒｔ−ブチル（（２−（３−（３−フルオロ−４−ヒドロキシピロリジン−１−カルボニル）フェノキシ）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−４−イル）メチル）カルバミン酸（Ｂ）＞
２つの別個の同等の反応バッチを以下のように作った：ＤＣＭ／ＤＭＦ（３：１、１１ｍＬ）の混合物中のＩｎｔ−Ａ（７５０ｍｇ、１．８２ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ＨＡＴＵ（１．０ｇ、２．６３ｍｍｏｌ）を加え、混合物をＲＴで２０分間撹拌した。ラセミ−トランス−４−フルオロ−３−ヒドロキシピロリジン塩酸塩（Ｓｙｎｔｈｏｎｉｘ；３０４ｍｇ、２．１４ｍｍｏｌ）とＤＩＥＡ（９３８ｍｇ、７．２７ｍｍｏｌ）を加え、混合物をＲＴで２．５時間撹拌した。この時点で、両方の反応バッチを組み合わせ、ＤＣＭを減圧下で蒸発させた。残りの反応混合物を、水（２００ｍＬ）とＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）に分割した。有機層を分離させ、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、その後に減圧下で濃縮した。粗製の残留物を精製し（シリカゲル；ヘキサン中で１０−１００％のＥｔＯＡｃで溶出）、白色固形物として化合物Ｂ（１．５８ｇ、８７％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  ７．６０（ｍ，１Ｈ），７．４７−７．５６（ｍ，２Ｈ），７．３６−７．４４（ｍ，２Ｈ），７．３１（ｍ，１Ｈ），７．１４（ｓ，１Ｈ），５．５６（ｍ，１Ｈ），４．９３（ｍ，１Ｈ），４．１０−４．３０（ｍ，３Ｈ），３．４５−３．９０（ｍ，４Ｈ），１．３８（ｓ，９Ｈ）；ＬＣＭＳ  Ｍａｓｓ：５２２．０（Ｍ＋＋Ｎａ）。
【０４９０】
＜工程２：（Ｒ，Ｒ）−トランス−ｔｅｒｔ−ブチル（（２−（３−（３−フルオロ−４−ヒドロキシピロリジン−１−カルボニル）フェノキシ）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−４−イル）メチル）カルバミン酸（Ｃ）、および（Ｓ，Ｓ）−トランス−ｔｅｒｔ−ブチル（（２−（３−（３−フルオロ−４−ヒドロキシピロリジン−１−カルボニル）フェノキシ）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−４−イル）メチル）カルバミン酸（Ｄ）＞
化合物Ｃ（１０２ｍｇ）および化合物Ｄ（８８ｍｇ）は共に、キラルＨＰＬＣ分離（Ｃｈｉｒａｌ  Ｐａｋ  ＡＤＨ、２５０ｘ２０ｍｍ、５μｍカラム、１０％のＭｅＯＨ：イソプロパノール（１：１）および９０％のヘキサン（０．１％のＤＥＡを含有）により均一濃度で溶出、流速１８ｍＬ／分）により化合物Ｂ（３００ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ）から得られ、化合物Ｃを最初に溶出し、化合物Ｄを２番目に溶出した。
【０４９１】
化合物Ｃ：１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  ７．５９（ｍ，１Ｈ），７．４７−７．５６（ｍ，２Ｈ），７．３５−７．４５（ｍ，２Ｈ），７．３１（ｍ，１Ｈ），７．１６（ｓ，１Ｈ），５．５６（ｍ，１Ｈ），４．９４（ｍ，１Ｈ），４．２５−４．３０（ｍ，２Ｈ），４．１７（ｍ，１Ｈ），３．４５−３．９０（ｍ，４Ｈ），１．３９（ｓ，９Ｈ）；ＬＣＭＳ  Ｍａｓｓ：５００．０（Ｍ＋＋１）。キラルＨＰＬＣ分析：Ｒｔ＝１１．８４分（Ｃｈｉｒａｌ  Ｐａｋ  ＡＤＨ、２５０×４．６ｍｍ、５μｍカラム、２５分にわたり１０％のＭｅＯＨ：ＥｔＯＨ（１：１）および９０％のヘキサン（０．１％のＤＥＡを含有）により均一濃度で溶出；流速１．０ｍＬ／分）。
【０４９２】
化合物Ｄ：１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  ７．５９（ｍ，１Ｈ），７．４７−７．５６（ｍ，２Ｈ），７．３５−７．４５（ｍ，２Ｈ），７．３１（ｍ，１Ｈ），７．１６（ｓ，１Ｈ），５．５６（ｍ，１Ｈ），４．９５（ｍ，１Ｈ），４．２５−４．３０（ｍ，２Ｈ），４．１７（ｍ，１Ｈ），３．４５−３．９０（ｍ，４Ｈ），１．３９（ｓ，９Ｈ）；ＬＣＭＳ  Ｍａｓｓ：５００．０（Ｍ＋＋１）。キラルＨＰＬＣ分析：Ｒｔ＝１４．７１分（Ｃｈｉｒａｌ  Ｐａｋ  ＡＤＨ、２５０×４．６ｍｍ、５μｍカラム、２５分にわたり１０％のＭｅＯＨ：ＥｔＯＨ（１：１）および９０％のヘキサン（０．１％のＤＥＡを含有）により均一濃度で溶出；流速１．０ｍＬ／分）。
【０４９３】
＜工程３：（Ｓ，Ｓ）−トランス−（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）フェニル）（３−フルオロ−４−ヒドロキシピロリジン−１−イル）メタノン塩酸塩（化合物ｅｎｔ−１３ａ）＞
ＲＴでＤＣＭ（２ｍＬ）中の化合物Ｄ（８７ｍｇ、０．１７４ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、Ｅｔ２Ｏ（２．０ｍＬ、４．０ｍｍｏｌ）中の２Ｍ  ＨＣｌを加え、混合物をＲＴで１８時間撹拌した。混合物を減圧下で濃縮して、白色固形物として表題化合物（７７ｍｇ、１００％ｍｍｏｌ）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  ８．６１（ｂｒ  ｓ，３Ｈ），７．８４（ｓ，１Ｈ），７．５１−７．５７（ｍ，２Ｈ），７．４３（ｍ，１Ｈ），７．２８−７．３７（ｍ，２Ｈ），５．５７（ｂｒ  ｍ，１Ｈ），４．９５（ｍ，１Ｈ），４．１２−４．３０（ｂｒ  ｍ，３Ｈ），３．３０−３．９２（ｍ，４Ｈ）；ＬＣＭＳ  Ｍａｓｓ：４００．０（Ｍ＋＋１）。
【０４９４】
＜工程４：（Ｒ，Ｒ）−トランス−（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）フェニル）（３−フルオロ−４−ヒドロキシピロリジン−１−イル）メタノン塩酸塩（１−１３ａ）＞
ＲＴでＤＣＭ（２ｍＬ）中の化合物Ｃ（１０２ｍｇ、０．２０４ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、Ｅｔ２Ｏ（２．０ｍＬ、４．０ｍｍｏｌ）中の２Ｍ  ＨＣｌを加え、混合物をＲＴで１８時間撹拌した。混合物を減圧下で濃縮して、白色固形物として表題化合物（１０２ｍｇ、１００％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  ８．６１（ｂｒ  ｓ，３Ｈ），７．８４（ｓ，１Ｈ），７．５１−７．５７（ｍ，２Ｈ），７．４３（ｍ，１Ｈ），７．２８−７．３７（ｍ，２Ｈ），５．６２（ｂｒ  ｍ，１Ｈ），４．９５（ｍ，１Ｈ），４．１２−４．３０（ｂｒ  ｍ，３Ｈ），３．３０−３．９２（ｍ，４Ｈ）；ＬＣＭＳ  Ｍａｓｓ：４００．０（Ｍ＋＋１）。
【０４９５】
実施例１３：３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（１３−オキソ−１７−（（３ａＳ，４Ｓ，６ａＲ）−２−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−チエノ［３，４−ｄ］イミダゾール−４−イル）−３，６，９−トリオキサ−１２−アザヘプタデシル）ベンズアミド塩酸塩（化合物１−１９）
【０４９６】
【化５５】
2019529387.tif 000061
【０４９７】
表題化合物（１−１９）は、実施例１のための手順を使用して、工程１のＮ−（２−（２−（２−（２−アミノエトキシ）エトキシ）エトキシ）エチル）−５−（（３ａＳ，４Ｓ，６ａＲ）−２−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−チエノ［３，４−ｄ］イミダゾール−４−イル）ペンタンアミド（ＥＺ−Ｌｉｎｋ（商標）Ａｍｉｎｅ−ＰＥＧ３−Ｂｉｏｔｉｎ；ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，ＵＳＡ；カタログ番号２１３４７）を使用して調製された。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  ８．６４（ｍ，１Ｈ），８．６１（ｂｒ  ｓ，３Ｈ），７．８０−７．９０（ｍ，２Ｈ），７．７８（ｍ，１Ｈ），７．６５（ｍ，１Ｈ），７．５６（ｍ，１Ｈ），７．５０（ｓ，１Ｈ），７．３７（ｍ，１Ｈ），６．３９（ｂｒ  ｓ，２Ｈ），４．３０（ｍ，１Ｈ），４．２１−４．２４（ｍ，２Ｈ），４．１２（ｍ，１Ｈ），３．６５−３．９０（ｂｒ  ｍ，８Ｈ），３．３４−３．４１（ｍ，５Ｈ），３．０４−３．１８（ｍ，４Ｈ），２．８２（ｍ，１Ｈ），２．５７（ｍ，１Ｈ），２．０４−２．０７（ｍ，２Ｈ），１．６０（ｍ，１Ｈ），１．３５−１．５３（ｍ，３Ｈ），１．２０−１．３０（ｍ，２Ｈ）；ＬＣＭＳ  Ｍａｓｓ：７１３．０（Ｍ＋＋１）。
【０４９８】
実施例１４：３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（２−（６−（６−（５−（（３ａＳ，４Ｓ，６ａＲ）−２−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−チエノ［３，４−ｄ］イミダゾール−４−イル）ペンタンアミド）ヘキサンアミド）ヘキサンアミド）エチル）ベンズアミド塩酸塩（化合物１−２０）
【０４９９】
【化５６】
2019529387.tif 000062
【０５００】
＜工程１：ｔｅｒｔ−ブチル（（２−（３−（（２−（３−（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル）カルバモイル）エチル）フェノキシ）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−４−イル）メチル）カルバミン酸（１）＞
ＲＴでＤＣＭ（５ｍＬ）とＤＭＦ（４ｍＬ）の混合物中のＩｎｔ−Ａ（５００ｍｇ、１．２１ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ＨＡＴＵ（９２０ｍｇ、２．４２ｍｍｏｌ）を加え、混合物をＲＴで２０分間撹拌した。（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル（２−アミノエチルカルバマート）塩酸塩（４６３ｍｇ、１．４５ｍｍｏｌ）と、ＤＩＥＡ（６３２μＬ、３．６３ｍｍｏｌ）を加えて、混合物をＲＴで１時間撹拌した。反応混合物を、水、飽和水性ＮａＨＣＯ３、およびブラインの混合物で希釈した。混合物を繰り返しＤＣＭで抽出した。結合させた有機層を、水と水性の２Ｍ  ＨＣｌの混合物で洗浄し、その後に分離させ、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、ろ過し、減圧下で濃縮した。粗製の残留物をＤＣＭを用いた研和によって精製し、白色固形物として化合物１（３２０ｍｇ、３９％）を得た。ＬＣＭＳ  Ｍａｓｓ：６７７．０（Ｍ＋＋１）。
【０５０１】
＜工程２：ｔｅｒｔ−ブチル（（２−（３−（（２−アミノエチル）カルバモイル）フェノキシ）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−４−イル）メチル）カルバミン酸（２）＞
ピペリジン（２．２６ｍＬ）とＤＭＦ（５．３０ｍＬ）中の化合物１（２５６ｍｇ、０．３７８ｍｍｏｌ）の混合物を、ＲＴで１０分間撹拌した。反応混合物を、水とブラインの混合物で希釈した。混合物をＥｔＯＡｃで繰り返し抽出し、結合させた有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、減圧下で濃縮した。粗製の残留物を、Ｅｔ２ＯとＤＣＭの混合物を用いた研和により精製して、黄色固形物として化合物２（４３ｍｇ、２５％）を得た。ＬＣＭＳ  Ｍａｓｓ：４５５．０（Ｍ＋＋１）。
【０５０２】
＜工程３：ｔｅｒｔ−ブチル（（２−（３−（（２−（６−（６−（５−（（３ａＳ，４Ｓ，６ａＲ）−２−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−チエノ［３，４−ｄ］イミダゾール−４−イル）ペンタンアミド）ヘキサンアミド）ヘキサンアミド）エチル）カルバモイル）フェノキシ）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−４−イル）メチル）カルバミン酸（３）＞
化合物２（２５ｍｇ、０．０５５ｍｍｏｌ）、ＥＺ−ｌｉｎｋ（登録商標）スルホ−ＮＨＳ−ＬＣ−ＬＣビオチン（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，ＵＳＡ；カタログ番号２１３３８）（７２ｍｇ、０．１０８ｍｍｏｌ）、およびＤＭＦ（０．５ｍＬ）の混合物を、ＲＴで２．５時間撹拌した。反応混合物を、水、ブライン、およびＥｔ２Ｏの混合物で希釈した。観察された固形物を、ろ過により回収して乾燥させ、白色固形物として化合物３（１６ｍｇ、３２％）を得た。ＬＣＭＳ  Ｍａｓｓ：９０７．０（Ｍ＋）。
【０５０３】
＜工程４：３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（２−（６−（６−（５−（（３ａＳ，４Ｓ，６ａＲ）−２−オキソヘキサヒドロ−１Ｈ−チエノ［３，４−ｄ］イミダゾール−４−イル）ペンタンアミド）ヘキサンアミド）ヘキサンアミド）エチル）ベンズアミド塩酸塩（化合物１−２０）＞
ＲＴでＤＣＭ（０．３５ｍＬ）中の化合物３（１６ｍｇ、０．０１７６ｍｍｏｌ）の撹拌混合物に、Ｅｔ２Ｏ（０．３５ｍＬ、０．７０４ｍｍｏｌ）中の２Ｍ  ＨＣｌを加えて、混合物をＲＴで１０分間撹拌した。混合物を減圧下で濃縮した。粗製の残留物をＥｔ２Ｏを用いた研和によって精製し、黄色固形物として表題化合物１−２０（１０ｍｇ、６８％）を得た。ＬＣＭＳ  Ｍａｓｓ：８０７．０（Ｍ＋＋１）。
【０５０４】
実施例１５：３−（２−（（１Ｅ，３Ｚ，５Ｚ）−３−（３−（５−（（６−（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）ベンズアミド）ヘキシル）アミノ）−５−オキソペンチル）フェニル）−５−（１，１−ジメチル−６，８−ジスルホ−３−（３−スルホプロピル）−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール−２（３Ｈ）−イリデン）ペンタ−１，３−ジエン−１−イル）−１，１−ジメチル−６，８−ジスルホ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール−３−イウム−３−イル）プロパン−１−スルホン酸塩トリフルオロ酢酸（化合物１−２２）
【０５０５】
【化５７】
2019529387.tif 000063
【０５０６】
＜工程１：ｔｅｒｔ−ブチル（（２−（３−（（６−（Ｆｍｏｃ−アミノ）ヘキシル）カルバモイル）フェノキシ）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−４−イル）メチル）カルバミン酸（１）＞
ＲＴでＤＣＭ（１０ｍＬ）とＤＭＦ（１ｍＬ）中のＩｎｔ−Ａ（７００ｍｇ、１．６９ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ＨＡＴＵ（７４２ｍｇ、１．９５ｍｍｏｌ）を加え、混合物をＲＴで１０分間撹拌した。ＤＩＥＡ（８８６μＬ、５．０９ｍｍｏｌ）およびＦｍｏｃ−１，６−ジアミノヘキサン塩酸塩（７６４ｍｇ、２．０３ｍｍｏｌ）を加えて、混合物をＲＴでさらに３時間、撹拌した。混合物を水とＤＣＭに分割し、水層を分離し、ＤＣＭでさらに抽出した。結合させた有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物を精製して（シリカゲル；ヘキサン中の１０−１００％のＥｔＯＡｃで溶出）、オフホワイト固形物として化合物１（１．０５ｇ、８５％）を得た。ＬＣＭＳ  Ｍａｓｓ：７３３．０（Ｍ＋＋１）。
【０５０７】
＜工程２：ｔｅｒｔ−ブチル（（２−（３−（（６−アミノヘキシル）カルバモイル）フェノキシ）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−４−イル）メチル）カルバミン酸（２）＞
ピペリジン（０．５ｍＬ）とＤＭＦ（２ｍＬ）中の化合物１（２５０ｍｇ、０．３４１ｍｍｏｌ）の混合物を、ＲＴで１５分間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮した。粗製の残留物を精製して（シリカゲル；ヘキサン中で１０−１００％のＥｔＯＡｃ、次いでＤＣＭ中のＭｅＯＨで溶出）、白色固形物として化合物２（６２ｍｇ、３６％）を得た。ＬＣＭＳ  Ｍａｓｓ：５１１．０（Ｍ＋＋１）。
【０５０８】
＜工程３：３−（２−（（１Ｅ，３Ｚ，５Ｚ）−３−（３−（５−（（６−（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）ベンズアミド）ヘキシル）アミノ）−５−オキソペンチル）フェニル）−５−（１，１−ジメチル−６，８−ジスルホ−３−（３−スルホプロピル）−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール−２（３Ｈ）−イリデン）ペンタ−１，３−ジエン−１−イル）−１，１−ジメチル−６，８−ジスルホ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール−３−イウム−３−イル）プロパン−１−スルホン酸塩トリフルオロ酢酸（化合物１−２２）＞
ＲＴでＴＨＦ（０．３ｍＬ）中の化合物２（３．８ｍｇ、０．００７４ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ＤＭＳＯ（１ｍＬ）中のＩＲＤｙｅ（登録商標）６８０ＬＴ  ＮＨＳエステル（Ｌｉ−Ｃｏｒ；カタログ番号Ｐ／Ｎ９２９−７１５００）（１０ｍｇ、０．００７ｍｍｏｌ）の溶液を加えた。混合物を１６時間室温で撹拌した。混合物を減圧下で濃縮した。残留物を分取逆相ＨＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ  ＸＴｅｒｒａ（登録商標）Ｐｒｅｐ  ＭＳ  Ｃ−１８  ＯＢＤ  ５μＭ  ５０ｘ１００ｍｍカラム；０．１％のＴＦＡを含む１０−７０％のＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏで溶出）で精製して、固形物としてＮ−Ｂｏｃ脱保護化合物１−２２（１２ｍｇ、１００％）を直接得た。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  ８．９６−８．９８（ｍ，２Ｈ），８．６０−８．６２（ｍ，２Ｈ），８．３０−８．５０（ｍ，５Ｈ），８．２１（ｓ，２Ｈ），７．９５（ｍ，１Ｈ），７．７０−７．８０（ｍ，４Ｈ），７．５８（ｓ，１Ｈ），７．４０−７．５６（ｍ，２Ｈ），７．３０（ｍ，１Ｈ），７．２０−７．２８（ｍ，２Ｈ），７．１０−７．１５（ｍ，２Ｈ），５．７０−５．７５（ｍ，２Ｈ），３．９０−４．３０（ｍ，１１Ｈ），３．１０−３．２０（ｍ，２Ｈ），２．９５−３．０５（ｍ，４Ｈ），２．６５−２．７０（ｍ，２Ｈ），２．４０−２．６０（ｍ，６Ｈ），２．１０−２．１５（ｍ，２Ｈ），１．８５−２．０５（ｍ，１４Ｈ），１．５０−１．５５（ｍ，４Ｈ），１．１０−１．４５（ｍ，４Ｈ），１．１５−１．２０（ｍ，４Ｈ）；ＬＣＭＳ  Ｍａｓｓ：１５８９．０（Ｍ＋＋１）。
【０５０９】
実施例１６：３−（２−（（１Ｅ，３Ｚ，５Ｚ）−３−（３−（１−（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキソ）フェニル）−１，２７−ジオキソ−５，８，１１，１４，１７，２０，２３−ヘプタオキサ−２，２６−ジアザヘントリアコンタン−３１−イル）フェニル）−５−（１，１−ジメチル−６，８−ジスルホ−３−（３−スルホプロピル）−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール−２（３Ｈ）−イリデン）ペンタ−１，３−ジエン−１−イル）−１，１−ジメチル−６，８−ジスルホ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール−３−イウム−３−イル）プロパン−１−スルホン酸塩トリフルオロ酢酸（化合物１−２５）
【０５１０】
【化５８】
2019529387.tif 000064
【０５１１】
＜工程１：（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル（２３−アミノ−３，６，９，１２，１５，１８，２１−ヘプタオキサトリコシル）カルバミン酸塩酸塩（２）＞
０℃で１，４−ジオキサン（５ｍＬ）中の、ｔｅｒｔ−ブチル（２３−アミノ−３，６，９，１２，１５，１８，２１−ヘプタオキサトリコシル）カルバミン酸１（５００ｍｇ、１．０７ｍｍｏｌ）、およびＮａＨＣＯ３（２６９ｍｇ、３．２ｍｍｏｌ）の撹拌混合物に、１，４−ジオキサン（２ｍＬ）中の９−フルオレニルメチルクロロ炭酸塩（３０４ｍｇ、１．１７ｍｍｏｌ）の溶液を加えた。混合物を室温に暖めて、１６時間撹拌した。ＤＣＭとＥｔ２Ｏを加えて混合物を濾過した。得られた濾液を減圧下で濃縮した。残留物を精製して（シリカゲル；ヘキサン中の１００％のＥｔＯＡｃ、次いでＤＣＭ中の１０％のＭｅＯＨで溶出）、無色の油を得た。得られた油をＤＣＭ（７ｍＬ）中に溶解し、これにエーテル（９ｍＬ、１８ｍｍｏｌ）中の２Ｍ  ＨＣｌを加えた。混合物を室温で４時間撹拌した。混合物を減圧下で濃縮して、半固形物として化合物２（４７９ｍｇ、８１％）を得た。ＬＣＭＳ  Ｍａｓｓ：５９１．０（Ｍ＋＋１）。
【０５１２】
＜工程２：ｔｅｒｔ−ブチル（（２−（３−（（２３−Ｆｍｏｃ−アミノ−３，６，９，１２，１５，１８，２１−ヘプタオキサトリコシル）カルバモイル）フェノキシ）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−４−イル）メチル）カルバミン酸（３）＞
ＲＴでＤＣＭ（１ｍＬ）とＤＭＦ（１ｍＬ）中のＩｎｔ−Ａ（１７１ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ＨＡＴＵ（１８０ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ）を加えて、混合物をＲＴで１５分間撹拌した。ＤＩＥＡ（２１６μＬ、２．２ｍｍｏｌ）および化合物２（２６０ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ）を加えて、混合物をＲＴでさらに３時間、撹拌した。混合物を水とＤＣＭに分割し、水層を分離し、ＤＣＭでさらに抽出した。結合させた有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、減圧下で濃縮した。残留物を精製し（シリカゲル；ヘキサン中の１００％のＥｔＯＡｃ、その後ＤＣＭ中の１−２０％のＭｅＯＨで溶出）、油として化合物３（１８６ｍｇ、４７％）を得た。ＬＣＭＳ  Ｍａｓｓ：９８６．０（Ｍ＋＋１）。
【０５１３】
＜工程３：ｔｅｒｔ−ブチル（（２−（３−（（２３−アミノ−３，６，９，１２，１５，１８，２１−ヘプタオキサトリコシル）カルバモイル）フェノキシ）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−４−イル）メチル）カルバミン酸（４）＞
ピペリジン（０．３ｍＬ）とＤＭＦ（１．２ｍＬ）中の化合物３（１８０ｍｇ、０．１８３ｍｍｏｌ）の混合物を、ＲＴで１時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮した。残留物を、分取逆相ＨＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ  ＸＴｅｒｒａ（登録商標）Ｐｒｅｐ  ＭＳ  Ｃ−１８  ＯＢＤ  ５μＭ  ５０ｘ１００ｍｍカラム；０．１％のＴＦＡを含む１５−６５％のＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏで溶出）で精製した。得られた純粋な断片を部分的に濃縮して、水性飽和ＮａＨＣＯ３で塩基化した。混合物をＥｔＯＡｃで繰り返し抽出し、結合させた有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、減圧下で濃縮して、黄色の油として化合物４（７５ｍｇ、５４％）を得た。ＬＣＭＳ  Ｍａｓｓ：７６３．０（Ｍ＋＋１）。
【０５１４】
＜工程４：３−（２−（（１Ｅ，３Ｚ，５Ｚ）−３−（３−（１−（３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキソ）フェニル）−１，２７−ジオキソ−５，８，１１，１４，１７，２０，２３−ヘプタオキサ−２，２６−ジアザヘントリアコンタン−３１−イル）フェニル）−５−（１，１−ジメチル−６，８−ジスルホ−３−（３−スルホプロピル）−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール−２（３Ｈ）−イリデン）ペンタ−１，３−ジエン−１−イル）−１，１−ジメチル−６，８−ジスルホ−１Ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール−３−イウム−３−イル）プロパン−１−スルホン酸塩トリフルオロ酢酸（化合物１−２５）＞
ＲＴでＤＭＳＯ（０．２ｍＬ）中の化合物４（１８ｍｇ、０．０２３５ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ＤＭＳＯ（０．８ｍＬ）中のＩＲＤｙｅ（登録商標）６８０ＬＴ  ＮＨＳエステル（Ｌｉ−Ｃｏｒ；カタログ番号Ｐ／Ｎ９２９−７１５００）（２０ｍｇ、０．０１４ｍｍｏｌ）の溶液を加えた。混合物をＲＴで１６時間撹拌し、次いで４０℃で５時間加熱し、さらに１６時間ＲＴにおいた。混合物を分取逆相ＨＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ  ＸＴｅｒｒａ（登録商標）Ｐｒｅｐ  ＭＳ  Ｃ−１８  ＯＢＤ  ５μＭ  ５０ｘ１００ｍｍカラム；０．１％のＴＦＡを含む１０−９５％のＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏで溶出）で直接精製して、固形物としてＮ−Ｂｏｃ脱保護化合物１−２５（１４ｍｇ、３１％）を直接得た。ＬＣＭＳ  Ｍａｓｓ：１８４１．０（Ｍ＋＋１）。
【０５１５】
実施例Ａ−１：非経口医薬組成物
注射（皮下、静脈内）による投与に適した非経口医薬組成物を調製するために、本明細書に記載される１−１０００ｍｇの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩あるいは溶媒和物を、滅菌水中に溶解し、その後、１０ｍＬの０．９％滅菌生理食塩水と混合した。適切な緩衝液を、随意に、随意の酸または塩基とともに加えて、ｐＨを調整した。混合物を、注射による投与に適した単位剤形に組み込む。
【０５１６】
実施例Ａ−２：経口溶液
経口送達用の医薬組成物を調製するために、十分な量の本明細書に記載される化合物、またはその薬学的に許容な塩を、（随意の可溶化剤、随意の緩衝液、および味を隠す賦形剤と共に）水に加え、２０ｍｇ／ｍＬの溶液を得る。
【０５１７】
実施例Ａ−３：経口錠剤
２０−５０重量％の本明細書に記載される化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、２０−５０重量％の微結晶性セルロース、１−１０重量％の低置換ヒドロキシプロピルセルロース、１−１０重量％のステアリン酸マグネシウム、および他の適切な賦形剤を混合することによって、錠剤を調製する。錠剤は直接の圧縮によって調製される。圧縮錠剤の全重量を、１００−５００ｍｇで維持する。
【０５１８】
実施例Ａ−４：経口カプセル
経口送達用の医薬組成物を調製するために、１０−５００ｍｇの本明細書に記載される化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を、デンプンまたは他の適切な粉末混合物と混合する。混合物を、経口投与に適した、ハードゼラチンカプセルなどの経口剤形に組み込む。
【０５１９】
別の実施形態において、１０−５００ｍｇの本明細書に記載される化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を、サイズ４のカプセル、またはサイズ１のカプセル（ヒプロメロースまたはハードゼラチン）に入れ、カプセルを閉じる。
【０５２０】
実施例Ｂ−１：ヒトＬＯＸＬ２アミンオキシダーゼ活性アッセイ
ヒトＬＯＸＬ２を安定して発現するＣＨＯ細胞からの１０−２０×濃縮した調整培地を使用して、ＬＯＸＬ２アミンオキシダーゼ活性を、Ａｍｐｌｅｘ  Ｒｅｄ蛍光を測定することによって評価する。アミンオキシダーゼ活性を分析するために、１０μＬの濃縮した調整培地を、３７℃で２時間、ＤＭＳＯ中の２μＬの試験化合物および７３μＬのアッセイ緩衝液（Ａｓｓａｙ  Ｂｕｆｆｅｒ）（５０ｍＭのホウ酸塩緩衝液、ｐＨ８）でインキュベートする。２時間のインキュベート後、アッセイ緩衝液に希釈した１０ｍＭの１，５−ジアミノペンタン（ＤＡＰ）５μｌおよび１０μｌのＡｍｐｌｅｘ  Ｒｅｄ  Ｍｉｘ（８．５μｌのアッセイ緩衝液＋１０ｍＭのＡｍｐｌｅｘ  Ｒｅｄ０．５μｌ＋５００Ｕ／ｍｌのホースラディッシュペルオキシダーゼ１μｌ）を加え、プレートを混合し、蛍光測定のためにすぐにＦｌｅｘＳｔａｉｏｎ上に置く。蛍光を、励起＝５４４ｎｍおよび発光＝５９０ｎｍで１時間、２分ごとに動的モードで読み取る。アミンオキシダーゼ活性を、曲線の直線部分の勾配から計算する。
【０５２１】
【表２】
2019529387.tif 000065
【０５２２】
実施例Ｂ−２：ＬＯＸＬ２ヒト血液アミンオキシダーゼ活性のアッセイ
ヒト全血に関するヒトＬＯＸＬ２のアミンオキシダーゼ活性を、Ａｍｐｌｅｘ  Ｒｅｄアッセイを使用して測定する。簡潔に言えば、水中で再組織された０．５−２μｇの組換え、ヒトＬＯＸＬ２（Ｓｉｎｏ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ，Ｂｅｉｊｉｎｇ，Ｃｈｉｎａ）を、ヘパリンバキュテイナ管に収集された１９２μＬのヒト血液に加え、次にＤＭＳＯ中の２μＬの試験化合物を加えた。サンプルを混合し、３７°Ｃで２時間インキュベートする。２時間のインキュベート後、血液を室温で１５分間、２０００ｘｇで遠心分離にかけ、血漿を分離する。５０μＬの血漿を除去し、４０ｍＭのＤＡＰの２５μｌ（水中に希釈）および２５μｌのＡｍｐｌｅｘ  Ｒｅｄ  Ｍｉｘ（２３．５μｌ、５０ｍＭのホウ酸塩緩衝液、ｐＨ８＋０．５μＬ、１０ｍＭのＡｍｐｌｅｘ  Ｒｅｄ＋１μＬ、５００Ｕ／ｍｌのホースラディッシュペルオキシダーゼ）と混合する。サンプルを混合し、蛍光測定のためにすぐにＦｌｅｘＳｔａｉｏｎに置く。蛍光を、励起＝５４４ｎｍおよび発光＝５９０ｎｍで１時間、２分ごとに動的モードで読み取る。アミンオキシダーゼ活性を、曲線の直線部分の勾配から計算する。
【０５２３】
実施例Ｂ−３：ビオチン化標識ＬＯＸＬ２阻害剤（化合物１−１）を使用したＬＯＸＬ２のＥＬＩＳＡベースの定量化
ＥＬＩＳＡベースのアッセイを使用してＬＯＸＬ２を定量化するために、ビオチン化ＬＯＸＬ２阻害剤（化合物１−１）を、適切な結合を可能にするために、３７℃で２時間などの、適切な時間と温度で組換えマウスまたはヒトのＬＯＸＬ２でインキュベートした。インキュベート後、次いで混合物を９６ウェルのストレプトアビジンコーティングされたプレートに移し、室温で１−２時間インキュベートして、ビオチン化標識ＬＯＸＬ２阻害剤（化合物１−１）／ＬＯＸＬ２複合体を捕らえた。次に各ウェルを洗浄して過剰な／未結合のＬＯＸＬ２を除去し、その後にＥＬＩＳＡ検出のために、Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  ｃａｔ＃ＡＦ２６３９からの市販の抗体などの、ヤギの抗ＬＯＸＬ２抗体でインキュベートした。ホースラディッシュペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）結合抗ヤギ抗体を使用して検出を行った。
【０５２４】
図５は、ビオチン化されたＬＯＸＬ２阻害因子（化合物１−１）に結合されたヒトまたはマウスのＬＯＸＬ２のＥＬＩＳＡベースの定量化の結果を示す。ヒトとマウスのＬＯＸＬ２の濃度範囲を試験した。精製された組換えヒトＭＡＯ−Ｂを、負の対照として使用した。
【０５２５】
実施例Ｂ−４：ビオチン化標識ＬＯＸＬ２阻害剤（化合物１−１）を使用したＬＯＸＬ２のウエスタンベースの定量化
ウエスタンベースのアッセイを使用してＬＯＸＬ２を定量化するために、１０μＭ等の適切な量のＬＯＸＬ２阻害剤１−１３ａまたはＤＭＳＯを、１ｎｇ、１０ｎｇまたは１００ｎｇ等の適切な量のＬＯＸＬ２で、３７°Ｃで１−２時間等の適切な時間と適切な温度で事前にインキュベートした。次に、５μＭ等の適切な量のビオチン化標識ＬＯＸＬ２阻害剤（化合物１−１）を加え、３７°Ｃで１時間等の適切な時間と適切な温度で、ＬＯＸＬ２でインキュベートした。その後、ビオチン化標識ＬＯＸＬ２阻害剤（化合物１−１）／ＬＯＸＬ２複合体を、ストレプトアビジンでコーティングされた磁気ビーズで単離した。適切な時間、ストレプトアビジン磁気ビーズでインキュベートした後、磁石（例えばＤｙｎａＭａｇ（商標）−２Ｍａｇｎｅｔ）を使用してビオチン化標識ＬＯＸＬ２阻害剤（化合物１−１）／ＬＯＸＬ２ビーズ結合複合体を捕らえ、そして上清を除去した。ビオチン化標識ＬＯＸＬ２阻害剤（化合物１−１）／ＬＯＸＬ２ビーズ結合複合体をその後、適切な溶液で洗浄し、そしてビオチン化標識ＬＯＸＬ２阻害剤（化合物１−１）／ＬＯＸＬ２複合体を、１Ｘ  ＢＯＬＴ（登録商標）Ｓａｍｐｌｅ  Ｒｅｄｕｃｉｎｇ  Ａｇｅｎｔ（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ）を含む１Ｘ  ＢＯＬＴ（登録商標）ＬＤＳ  Ｓａｍｐｌｅ  Ｂｕｆｆｅｒ（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ）を使用してビーズから溶出し、９０℃で１０分間インキュベートした。
【０５２６】
次に抗ＬＯＸＬ２抗体でウエスタンブロットを行い、ビオチン化ＬＯＸＬ２阻害剤（化合物１−１）へのＬＯＸＬ２結合の量を定量化した。
【０５２７】
ＬＯＸＬ２阻害剤１−１３ａでの事前のインキュベートは、ビオチン化ＬＯＸＬ２阻害剤によって捕捉される未結合の／遊離したＬＯＸＬ２の量を７０−１００％まで減らすことが観察された。
【０５２８】
実施例Ｂ−５：ＬＯＸＬ２阻害剤結合フェライトビーズを用いた生体液中でのＬＯＸＬ２検出
【０５２９】
方法１：遊離した／未結合のＬＯＸＬ２の判定のためのウエスタンベースの磁気ビーズアッセイ
５０％のメタノール中に１０ｍｇ／ｍｌで、結合ＦＧ−ｂｅａｄｓの３−（（４−（アミノメチル）−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）オキシ）−Ｎ−（２１−（ＦＧ−ｂｅａｄ）−１０，１７，２１−トリヒドロキシ−７−オキソ−１２，１５−ジオキサ−３，４−ジチア−８，１９−ジアザヘンイコシル）ベンズアミド（実施例７：化合物１−７）を、室温で５分間、１５，０００ｘｇで遠心分離にかけ、水を吸引する。Ｗａｓｈ  Ｂｕｆｆｅｒ（２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ  ｐＨ８，０．２％  ＮＰ−４０，１２０ｍＭ  ＮａＣｌ）中の１０ｍｇ／ｍＬにビーズを再懸濁し、１ｍｇのビーズ（１００μＬ）をＬＯＸＬ２を含む１−１０ｍＬの血漿、血清、または他の生体液に加え、３７℃で０．５−２時間、回転させながらインキュベートする。磁気分離（例えば、ＤｙｎａＭａｇ（商標）−１５Ｍａｇｎｅｔ）を使用して、室温で１０分間、ビーズを血漿または他のマトリックスから分離し、次に血漿／マトリックスを取り除く。ビーズを１ｍＬのＷａｓｈ  Ｂｕｆｆｅｒに再懸濁し、室温で５分間、４５００ｘｇで遠心分離にかけて、すべてのビーズを管の底に移動させる。ビーズを１．５ｍＬの微量遠心管に移し、磁気分離（例えばＤｙｎａＭａｇ（商標）−２Ｍａｇｎｅｔ）を使用してＷａｓｈ  Ｂｕｆｆｅｒで３回洗浄する。最後の洗浄後、ビーズを、１Ｘ  ＢＯＬＴ（登録商標）Ｓａｍｐｌｅ  Ｒｅｄｕｃｉｎｇ  Ａｇｅｎｔ（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ）を含む４０μＬの１Ｘ  ＢＯＬＴ（登録商標）ＬＤＳ  Ｓａｍｐｌｅ  Ｂｕｆｆｅｒ（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ）に再懸濁し、９０°Ｃで１０分間インキュベートする。サンプルを１分間、１０，０００ｘｇで遠心分離機にかけ、次に２分間、ＤｙｎａＭａｇ（商標）−２Ｍａｇｎｅｔを使用して磁気的に分離した。４０μＬの各上清を、１０ウェルの４−１２％のＢｉｓ−Ｔｒｉｓ  Ｐｌｕｓゲル（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ）のうちの１つのウェルに載せ、１Ｘ  ＭＥＳ  ＳＤＳ  Ｒｕｎｎｉｎｇ  Ｂｕｆｆｅｒ（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ）で４５分間、１６４ボルトでゲルを泳動する。メーカーの推奨にしたがって、ゲルをｉＢｌｏｔ（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ）を使用して、ニトロセルロースに移す。ブロットをＢｕｌｌｅｔ  Ｂｌｏｃｋｉｎｇ  Ｏｎｅ（Ｎａｃａｌａｉ  ＵＳＡ，Ｉｎｃ）で、室温で５分間インキュベートし、次にＳｉｇｎａｌ  Ｅｎｈａｎｃｅｒ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ  １（Ｎａｃａｌａｉ  ＵＳＡ，Ｉｎｃ）に希釈した抗ＬＯＸＬ２抗体（例えば、Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓのヤギポリクローナル）を用いて４°Ｃで一晩インキュベートする。ブロットを、ＰＢＳ／０．１％のツイーン−２０中で素早くすすぎ、次に３回、それぞれＰＢＳ／ツイーン溶液中で１０分間、洗浄する。Ｓｉｇｎａｌ  Ｅｎｈａｎｃｅｒ  ２（Ｎａｃａｌａｉ  ＵＳＡ，Ｉｎｃ）に希釈した二次赤外線吸収染料（ＩＲｄｙｅ）−結合二次抗体（ＬＩ−ＣＯＲ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｌｉｎｃｏｌｎ，ＮＥ）をブロットに加えて、室温で４５分から１時間、暗闇でインキュベートする。ブロットをＰＢＳ／ツイーンで上記のよう���洗浄し、その後、ＬＩ−ＣＯＲ  Ｏｄｙｓｓｅｙ（ＬＩ−ＣＯＲ，Ｌｉｎｃｏｌｎ，ＮＥ）での画像化の前にＰＢＳですすぐ。
【０５３０】
２人の異なるヒトドナーからの１０ｍＬの血漿を、ＬＯＸＬ２阻害剤結合ＦＧビーズでのインキュベートに先立って、３７°Ｃで２時間、１μＭまたは１０μＭのいずれかの化合物１−１３ａで事前にインキュベートすると、遊離した／未結合のＬＯＸＬ２の量は、ビヒクル対照に対してそれぞれおよそ６３％および１００％減少した（図６を参照）。
【０５３１】
遊離した／未結合のＬＯＸＬ２の量を、化合物１−１３Ａの投与前、または単回の経口投与後の２、２４または４８時間において、６人の健康な被験体からの８ｍＬの血漿、および偽薬を投与された２人の健康な被験体で評価した。平均では、遊離した／未結合のＬＯＸＬ２の量は、１５０ｍｇの化合物１−１３ａを受けた被験体において、投与後２時間でおよそ６０％減少した。表３は、健康なボランティアに投与された化合物１−１３ａの単回漸増投与（ｓｉｎｇｌｅ  ｒｉｓｉｎｇ  ｄｏｓｅ）後の２時間と２４時間での、化合物１−１３ａの血漿濃度とターゲットエンゲージメントとの関係を示す。図１２は、健康なボランティアへの化合物１−１３ａの投与後に得られた血漿サンプルから測定された、％ターゲットエンゲージメントと血漿濃度の関係を示す。ＩＣ５０は０．９０５μＭであるとわかった。
【０５３２】
化合物１−１３ａの単回経口投与後の、平均のヒト血漿薬物濃度とパーセントターゲットエンゲージメント（ＴＥ）
【０５３３】
【表３】
2019529387.tif 000066
健康なヒト被験体（男女）に、溶液中の化合物２を投与した。血液サンプルを一定間隔で採取し、および血漿を単離して、ＬＯＸＬ２標的結合と共に化合物１−１３ａの濃度について分析した。プラセボデータは、単回量試験（ｎ＝１０）のすべてのプラセボ被験体の平均である。
【０５３４】
方法２：遊離した／未結合のＬＯＸＬ２の判定のためのＥｒｅｎｎａベースの蛍光磁気ビーズアッセイ。
ＬＯＸＬ２を含む血漿、血清または他の生体液を、振動させながら、室温で２−１５時間、９６ウェルのポリプロピレンのＶ底プレートにおいて、１５−３５ｎＭの化合物１−２でインキュベートする。インキュベート後、ストレプトアビジンでコーティングした１０μｇの磁気微粒子（ＭＰ）を各ウェルに加えて、振動させながら室温で３０分から２時間、インキュベートする。磁気分離を使用してＭＰを１回洗浄し、２０μＬの蛍光結合抗ＬＯＸＬ２抗体を各ウェルに加え（例えばＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ  ６４７に結合したＲ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓの抗ＬＯＸＬ２ヤギＩｇＧポリクローナル抗体）、振動させながら室温で３０分から２時間インキュベートする。ＭＰを磁気分離を用いて４回洗浄して、新たなプレートに移す。すべての液体をプレートから吸引し、溶出緩衝液を加え、そして振動させながら室温で１０分間インキュベートする。溶離物を、中和緩衝液を含む３８４ウェルのプレートに移して封をし、Ｅｒｅｎｎａ（登録商標）上で読み取る。
【０５３５】
様々な濃度のＬＯＸＬ２を、室温で１５時間、３４ｎＭの化合物１−２でインキュベートし、その後、ストレプトアビジンでコーティングされた磁気微粒子とＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ  ６４７結合抗ＬＯＸＬ２抗体でインキュベートした。遊離した／未結合のＬＯＸＬ２の信号に、５００ｐｇ／ｍＬまでの線形増加があった（図８を参照）。
【０５３６】
ＬＯＸＬ２の５００ｐｇ／ｍＬの溶液の１００μＬを、化合物１−１３ａの濃度を増加させながら事前にインキュベートした場合、遊離した／未結合のＬＯＸＬ２の量には、ストレプトアビジンでコーティングした磁気微粒子とＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ  ６４７結合抗ＬＯＸＬ２抗体を使用して検出される、濃度に応じた減少があった（図９を参照）。
【０５３７】
実施例Ｂ−６：１８Ｆ−ＰＥＴ画像化を用いた化合物組織の分布試験
これらの試験では、未処理のマウスまたはブレオマイシンを注入されたマウスに、３０−５０μＣｉの化合物１−１３（１８Ｆ標識）を静脈注射し、放射性同位体の注入後に９０−１２０分間、ＰＥＴ画像化を行った。次に、１８Ｆ標識された化合物１−１３の投与後２．５時間でこれらの動物を死なせ、残りの放射能の濃度を判定するために、シンチレーション測定によって組織と血液を分析した。
【０５３８】
特異的結合を判定するために、２．５−４時間前等の、ＰＥＴ−リガンド注入前の適切な時点で、マウスのサブセットに化合物１−１３ａの遮断薬または媒介物を投与した（６０ｍｇ／ｋｇ  ＰＯで送達）。
【０５３９】
図１０のａは、すべての臓器に関する、すべての％注射用量（％ＩＤ）／ｇ体内分布データを示す。図１０のｂは、特定の臓器に関する図１０のａからの％注射用量（％ＩＤ）／ｇ体内分布データのより詳細な図である。
【０５４０】
リガンドの最も高い初期濃度が、肝臓、腎臓および肺で観察された。
【０５４１】
本明細書中に記載される実施例と実施形態は、例示を目的としているだけのものであり、当業者に提案される様々な改良または変更が、本出願の精神と範囲、および添付の特許請求の範囲の範囲に包含される。
【図１】
2019529387.tif 000090
【図２】
2019529387.tif 000091
【図３ａ】
2019529387.tif 000092
【図３ｂ】
2019529387.tif 000093
【図３ｃ】
2019529387.tif 000094
【図４】
2019529387.tif 000095
【図５】
2019529387.tif 000096
【図６】
2019529387.tif 000097
【図７】
2019529387.tif 000098
【図８】
2019529387.tif 000099
【図９】
2019529387.tif 000100
【図１０】
2019529387.tif 000101
【図１１】
2019529387.tif 000102
【図１２】
2019529387.tif 000103
【国際調査報告】
2019529387.tif 000104
2019529387.tif 000105
2019529387.tif 000106
2019529387.tif 000107