(57)【要約】  本発明は、（ａ）ドーパミン−β−ヒドロキシラーゼ阻害剤として有用である式Ｉａ（本明細書で定義されているようなＲ１、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、ｎ及びＡを伴う）の化合物及びその薬学上許容できる塩または溶媒和物；（ｂ）そのような化合物、塩または溶媒和物を含む医薬組成物；（ｃ）治療法におけるそのような化合物、塩または溶媒和物の使用；（ｄ）そのような化合物、塩または溶媒和物を用いた治療の治療方法；ならびに（ｅ）そのような化合物の合成に有用なプロセス及び中間体に関する。2019529459.tif 000098
2019529459.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉａ
【化１】
2019529459.tif 000092
の化合物、またはその薬学上許容できる塩または溶媒和物であって、
式中
Ｒ１は水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、部分的にまたは完全に重水素化されたＣ１−Ｃ６アルキル、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル、Ｃ２−Ｃ６シアノアルキル、Ｃ１−Ｃ６メルカプトアルキルまたはアミノであり；
Ｒ４は水素またはＣ１−Ｃ３アルキルであり；
Ｒ５は水素またはＣ１−Ｃ２アルキルであり；
またはＲ４及びＲ５はそれらが連結される炭素原子と一緒に結合して、ＣＨ２部分が任意で２つの重水素原子によって置換されるシクロプロピル環を形成し；
Ｒ６はＣ１−Ｃ６アルキル、または部分的にまたは完全に重水素化されたＣ１−Ｃ６アルキルであり、
ＡはＣ５−Ｃ７シクロアルキル、フラニル、チオフェニル、メチルチオフェニルまたは
【化２】
2019529459.tif 000093
であり、式中、
Ｘ１は水素、ハロまたはメチルであり；
Ｘ１’は水素またはハロであり；
Ｘ２は水素、ハロまたはメチルであり；
Ｘ２’は水素またはハロであり；
Ｘ３は水素またはフルオロであり；
ｎは０または１であり、ｎが０のとき、単結合はｎが１であるときＣＨ２部分が連結される炭素原子を結合する、
前記化合物、またはその薬学上許容できる塩または溶媒和物。
【請求項２】
ｎが０である請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ４及びＲ５はそれらが連結される炭素原子と一緒に結合してＣＨ２が任意で２つの重水素原子によって置換されるシクロプロピル環を形成する請求項１または２に記載の化合物。
【請求項４】
５０％を超える置換基Ｒ５及びＡが式Ｉｄ
【化３】
2019529459.tif 000094
の立体化学構造を有する請求項１〜３に記載の化合物。
【請求項５】
５０％を超える置換基Ｒ５及びＡが式Ｉｅ
【化４】
2019529459.tif 000095
の立体化学構造を有する請求項１〜３に記載の化合物。
【請求項６】
Ａが
【化５】
2019529459.tif 000096
であり、式中、Ｘ１、Ｘ１’、Ｘ２、Ｘ２’及びＸ３が請求項１で定義されるとおりである請求項１〜５に記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ１が水素、メチル、ｄ３−メチル、プロピル、シクロプロピル、シアノメチル、メルカプトエチルまたはアミノである請求項１〜６に記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ４が水素またはメチルである請求項１〜２または４〜７に記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ５が水素またはメチルである請求項１〜２または４〜８に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ６がメチル、ｎ−ブチルまたはｄ３−メチルである請求項１〜９に記載の化合物。
【請求項１１】
Ａが
【化６】
2019529459.tif 000097
であり、式中、
Ｘ１が水素、フルオロ、クロロまたはメチルであり；
Ｘ１’が水素、フルオロまたはクロロであり；
Ｘ２が水素、フルオロ、クロロ、ブロモまたはメチルであり；
Ｘ２’が水素、フルオロ、クロロまたはブロモであり；
Ｘ３が水素またはフルオロである、請求項１〜１０に記載の化合物。
【請求項１２】
治療法で使用するための請求項１に記載の式Ｉａの化合物、またはその薬学上許容できる塩または溶媒和物。
【請求項１３】
ドーパミン−ベータ−ヒドロキシラーゼの阻害によって改善される状態の治療で使用するための請求項１に記載の式Ｉａの化合物、またはその薬学上許容できる塩または溶媒和物。
【請求項１４】
ドーパミン−ベータ−ヒドロキシラーゼの阻害によって改善される状態の治療のための薬物の製造における請求項１に記載の式Ｉａの化合物、またはその薬学上許容できる塩または溶媒和物の使用。
【請求項１５】
ドーパミン−ベータ−ヒドロキシラーゼの阻害によって改善される状態を治療するまたは予防する方法であって、それを必要とする患者に治療上有効な量の請求項１に記載の式Ｉａの化合物、またはその薬学上許容できる塩または溶媒和物を投与することを含む、前記方法。
【請求項１６】
（ｉ）治療上有効な量の請求項１に記載の式Ｉａの化合物、またはその薬学上許容できる塩または溶媒和物と、（ｉｉ）薬学上許容できる賦形剤とを含む医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、（ａ）ドーパミン−β−ヒドロキシラーゼ阻害剤として有用である化合物及びその薬学上許容できる塩または溶媒和物；（ｂ）そのような化合物、塩または溶媒和物を含む医薬組成物；（ｃ）治療法におけるそのような化合物、塩または溶媒和物の使用；（ｄ）そのような化合物、塩または溶媒和物を用いた治療の治療法；及び（ｅ）そのような化合物の合成に有用なプロセス及び中間体に関する。
【背景技術】
【０００２】
ドーパミンβ−モノオキシゲナーゼとしても知られる酵素ドーパミン−β−ヒドロキシラーゼ（ＤβＨ）は末梢及び中枢神経系（ＣＮＳ）の双方で発現される。ＤβＨはドーパミン（ＤＡ）の特定の水酸化を触媒してノルアドレナリン（ＮＡ）としても知られるノルエピネフリンを生じる。そのようなものとして、ＤβＨの阻害剤はＮＡの生合成を阻害し、その濃度を限定し、ＤＡのレベルを高めることができる。
【０００３】
従来、ＤβＨの阻害剤の開発における関心は、この酵素の阻害が、たとえば、高血圧症または慢性心不全のような循環器疾患を患っている患者で顕著な臨床的改善を提供し得るという仮説に集中していた。ＤβＨ阻害剤の使用についての論理的根拠はＤＡの酵素的水酸化を介して達成されるＮＡの生合成を阻害するその能力に基づく。交感神経の活性化はうっ血性心不全の主要な臨床症状であるが、ＤβＨの阻害を介したＮＡの生合成の低下により、その機能を直接抑制することができる（Ｐａｒｍｌｅｙ，Ｗ．Ｗ．，Ｃｌｉｎ．Ｃａｒｄｉｏｌ．，１８：４４０−４４５，１９９５）。従って、末梢ＤβＨ阻害剤は交感神経活動を低下させる。うっ血性心不全の患者は、高い濃度の血漿ノルアドレナリン（Ｌｅｖｉｎｅ，Ｔ．Ｂ．ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ．Ｊ．Ｃａｒｄｉｏｌ．，４９：１６５９−１６６６，１９８２）、中枢性交感神経流出の亢進（Ｌｅｉｍｂａｃｈ，Ｗ．Ｎ．ｅｔ  ａｌ．，Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ，７３：９１３−９１９，１９８６）、及び心腎ノルアドレナリン溢出の増大（Ｈａｓｋｉｎｇ，Ｇ．Ｊ．ｅｔ  ａｌ．，Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ，７３：６１５−６２１，１９６６）を有する。心筋のノルアドレナリンに対する長期で過剰な曝露は心臓β１−アドレナリン受容体の下方調節、左心室のリモデリング、不整脈及び壊死をもたらす可能性があり、それらはすべて心臓の機能的な完全性を低下させ得る。高い血漿濃度のノルアドレナリンを有するうっ血性心不全患者は最も好ましくない長期の予後も有する（Ｃｏｈｎ，Ｊ．Ｎ．ｅｔ  ａｌ．，Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．，３１１：８１９−８２３，１９８４）。さらに重大なことは、血漿ノルアドレナリン濃度が明白な心不全のない無症候性の患者ですでに上昇し、確かな死亡率及び病的状態を予測できることである（Ｂｅｎｅｄｉｃｔ，Ｃ．Ｒ．ｅｔ  ａｌ．，Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ，９４：６９０−６９７，１９９６）。従って、活性化された交感神経活動は単にうっ血性心不全の臨床マーカーであるだけでなく、疾患の進行性の悪化に寄与し得る。
【０００４】
ＤβＨ阻害剤は、薬物中毒、精神疾患、認知の低下または認知症を含むＣＮＳの疾患でも適用を見いだしてもよい。たとえば、コカインは主として、セロトニン及びノルエピネフリンの輸送体と同様にシナプス前のドーパミン（ＤＡ）輸送体の阻害を介して作用する。高いレベルのシナプスＤＡとそれによってコカイン投与に続くＤＡ受容体結合は、コカインが強化していく重要なメカニズムである。コカインはまた、内在性のオピオイド系、特にμ−オピオイド受容体（ＭＯＲ）、κ−オピオイド受容体（ＫＯＲ）及びプレプロジノルフィンも調節する。ドーパミン作動性経路の刺激はコカインの強化効果を引き起こすのに十分であってもよいのに対して、ＤＡ輸送体遺伝子の欠失試験はこの経路がコカインの自己投与の進行に必須ではないことを示している。しかしながら、ＭＯＲの選択的遺伝子破壊はコカインの自己投与の進行を妨げる。
【０００５】
アルデヒド脱水素酵素（ＡＬＤＨ）を阻害し、アルコール依存症の治療で５０年を超えて使用されているジスルフィラム（Ａｎｔａｂｕｓｅ）（Ｆｕｌｌｅｒ，Ｒ．Ｋ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ａｍｅｒ．Ｍｅｄ．Ａｓｓｏｃ．，２５６：１４４９−５５，１９８６）は、共依存患者集団でアルコールとコカインの摂取を減らすことが見いだされた（Ｃａｒｒｏｌｌ，Ｋ．Ｍ．ｅｔ  ａｌ．，Ａｒｃｈ．Ｇｅｎ．Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ，６１：２６４−７２，２０００；Ｃａｒｒｏｌｌ，Ｋ．Ｍ．ｅｔ  ａｌ．，Ａｄｄｉｃｔｉｏｎ，９３：７１３−２７，１９９８；Ｃａｒｒｏｌｌ，Ｋ．Ｍ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｓｔｕｄ．Ａｌｃｏｈｏｌ，５４：１９９−２０８，１９９３）。驚くべきことに、さらなる研究はジスルフィラムが、アルコールを摂取しないコカイン常用者を治療するのに少なくとも有効であり、一層さらに有効であってもよいことを示した（Ｃａｒｒｏｌｌ，Ｋ．Ｍ．ｅｔ  ａｌ．，Ａｒｃｈ．Ｇｅｎ．Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ，６１：２６４−７２，２００４；Ｇｅｏｒｇｅ，Ｔ．Ｐ．ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｌ．Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ，４７：１０８０−６，２０００；Ｐｅｔｒａｋｉｓ，Ｉ．Ｌ．ｅｔ  ａｌ．，Ａｄｄｉｃｔｉｏｎ，９５：２１９−２８，２０００）。従って、ＡＬＤＨ依存性のメカニズムはコカインの自制を促進するジスルフィラムの能力に関与するに違いない（Ｇａｖａｌ−Ｃｒｕｚ，Ｍ．ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌ．Ｉｎｔｅｒｖ．，９：１７５−８７，２００９；Ｗｅｉｎｓｈｅｎｋｅｒ，Ｄ．ｅｔ  ａｌ．，Ｎｅｕｒｏｐｓｙｃｈｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，３２：１４３３−５１，２００７）。その後、Ｓｃｈｒｏｅｄｅｒらは、ラットにおけるコカイン及び食物の自己投与行動ならびにコカイン探索の薬物刺激した回復に対するジスルフィラムの効果を調べた（Ｓｃｈｒｏｅｄｅｒ，Ｊ．Ｐ．ｅｔ  ａｌ．，Ｎｅｕｒｏｐｓｙｃｈｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，３５：２４４０−９，２０１０）。その結果は、コカイン中毒の治療におけるジスルフィラムの有効性は、ＤβＨの阻害及び再発をもたらす環境刺激の能力の妨害に関連することを示唆している（Ｓｃｈｒｏｅｄｅｒ，Ｊ．Ｐ．ｅｔ  ａｌ．，Ｎｅｕｒｏｐｓｙｃｈｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，３５：２４４０−９，２０１０）。
【０００６】
さらに、ノルアドレナリン作動系は、作業記憶、注意及び記憶の固定を含む多数の認知領域で役割を担っている（Ｃｏｕｌｌ，Ｊ．Ｔ．ｅｔ  ａｌ．，ＮｅｕｒｏＩｍａｇｅ，１０：７０５−１５，１９９９；ＭｃＧａｕｇｈ，Ｊ．Ｌ．ｅｔ  ａｌ．，Ｐｓｙｃｈｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，２０２：３−１４，２００９；Ｓａｒａ，Ｓ．Ｊ．，Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ，１０：２１１−２３，２００９）。しかしながら、過度のノルアドレナリン作動系の活性は認知を損なう可能性がある。動物試験は過剰なノルアドレナリン作動性活性と注意及び作業記憶における損傷との間での関連性を示している（Ａｒｎｓｔｅｎ，Ａ．Ｆ．，Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．，１０：４１０−２２，２００９；Ｓａｒａ，Ｓ．Ｊ．，Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ，１０：２１１−２３，２００９）。他の研究がストレス条件下に置かれた人々における認識能力の低下を示しているということは、過剰なノルアドレナリン作動性活性が同様にヒトの認知に影響を及ぼすことを示唆している（Ｃａｍｐｂｅｌｌ，Ｈ．Ｌ．ｅｔ  ａｌ．，Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｅｈａｖ．，８８：２２２−９，２００８；Ｈｅｒｍａｎｓ，Ｅ．Ｊ．ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，３３４：１１５１−３，２０１１）。認識能力とノルアドレナリン作動系活性のこの関連性を考えると、活性の基本レベルにおける差異は認識能力の差異に関係しうるのかどうか、及びこの関係は年齢によっても影響を受けるのかどうかという疑問が残る。ノルアドレナリン作動系の活性は末梢及びＣＮＳの双方で若年成人よりも高齢者で高いと思われる（Ｆｅａｔｈｅｒｓｔｏｎｅ，Ｊ．Ａ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｇｅｒｏｎｔｏｌ．，４２，２７１−６，１９８７；Ｌａｗｌｏｒ，Ｂ．Ａ．ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｌ．Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ，３８：１８５−８，１９９５；Ｓｕｐｉａｎｏ，Ｍ．Ａ．ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．，２５９：Ｅ４２２−３１，１９９０）。以前、脳脊髄液ＮＡの濃度は若年成人に比べて高齢者で高かったことが実証されているが、ノルアドレナリン作動系の年齢差が認知の差異における因子であり得るかどうかは分かっていない。多数の研究は過剰なノルアドレナリン作動性活性を認知の損傷に結び付けてきた。そのようなものとして、ＤβＨ阻害剤は、特に、前頭側頭型認知症（ＦＴＤ）、パーキンソン病及びアルツハイマー病（ＡＤ）または軽度認知損傷（ＭＣＩ）を含む認知症を患っているものにおいて認知を高めることに適用を見いだしてもよい。
【０００７】
これまでのところ、ＤβＨの幾つかの阻害剤が文献で報告されている。たとえば、ジスルフィラム（Ｇｏｌｄｓｔｅｉｎ，Ｍ．ｅｔ  ａｌ．，Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉ．，３：７６３，１９６４）及びジエチルジチオールカルバメート（Ｌｉｐｐｍａｎｎ，Ｗ．ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，１８：２５０７，１９６９）またはフザリン酸（Ｈｉｄａｋａ，Ｈ．Ｎａｔｕｒｅ，２３１，１９７１）及び芳香族チオウレアまたはアルキルチオウレア（Ｊｏｈｎｓｏｎ，Ｇ．Ａ．ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．，１７１：８０，１９７０）のような早期の第１及び第２世代の例は、効力が低いことが見いだされ、ＤβＨに対する不十分な選択性を示し、毒性の副作用を引き起こした。しかしながら、たとえば、早期の臨床試験に対して開発されたネピカスタット（ＲＳ−２５５６０−１９７、ＩＣ５０＝９ｎＭ）（Ｓｔａｎｌｅｙ，Ｗ．Ｃ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｂｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，１２１：１８０３−１８０９，１９９７）のようなＤβＨ阻害剤の第３世代ははるかに大きな効力を有することが見いだされた。それは当初末梢の適応（高血圧症及びうっ血性心不全）のために開発されたが、重要な発見は、ネピカスタットが脳血管関門（ＢＢＢ）を横断することが見いだされ、それによって末梢性の効果と同様に中枢性の効果をもたらすことができるということであった。
【０００８】
ネピカスタット及びその類似体はＷＯ９５／２９１６５にて開示されている。さらに、ＷＯ２００４／０３３４４７及びＷＯ２００８／１３６６９５は、高い効力と顕著に低下した脳へのアクセスを有し、強力で末梢性に選択性のＤβＨ阻害剤を生じるＤβＨ阻害剤を開示している。しかしながら、これらの化合物はＣＮＳで効果を示さず、または主として末梢で作用し、循環器系または全身組織にて、たとえば、低下した交感神経活動のような、望ましくない二次的作用を生じる可能性がある。ＤβＨのメカニズム、基質及び阻害剤の概説は、Ｂｅｌｉａｅｖ，Ａ．，ｅｔ  ａｌ．ｉｎ  Ｃｕｒｒｅｎｔ−Ｅｎｚｙｍｅ  Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ，５，２７−４３，２００９によって与えられている。
【０００９】
従って、たとえば、高血圧症、慢性心不全、及び肺動脈高血圧症（ＰＡＨ）のような特定の循環器疾患の治療に使用されてもよい強力で非毒性の、ＤβＨの末梢選択性阻害剤についての満たされない臨床的要求が残っている。ネピカスタットに類似するまたはさらに大きな効力を持つが、ＣＮＳ効果（すなわち、ＢＢＢを効果的に横断することができない）を持たず、さらにＤβＨ阻害の長期の持続時間を提供するように末梢での長い滞留時間を示すＤβＨ阻害剤は従来技術でこれまでに記載されたＤβＨ阻害剤化合物すべてを超える顕著な改善を提供することになる。さらに、そのような化合物は好ましくは、経口で生体利用でき、高度に可溶性であり、合成するのに容易で安価である。
【００１０】
従って、コカイン中毒、アルコール中毒、付随するオピオイド中毒、ＦＴＤにおける認知低下、ＭＣＩにおける認知低下、ＡＤにおける認知低下、注意欠陥多動性障害（ＡＤＨＤ）、外傷後ストレス障害（ＰＴＳＤ）及び単極性うつ病を含む特定のＣＮＳ疾患の治療に使用されてもよい、好適な薬物動態特性を伴う強力で非毒性の、ＤβＨのＣＮＳ透過剤／活性のある阻害剤に対する満たされない臨床的要件が残っている。ネピカスタットと同様のまたはそれを超える効力を持ち、ＢＢＢを横断し、ＣＮＳにて長期間のＤβＨ阻害を提供するように脳にて長い滞留時間を示す能力を含む有益なＣＮＳ効果を持つＤβＨ阻害剤は、これまで従来技術で記載されたＤβＨ阻害剤化合物すべてを超える顕著な改善を提供する。従って、そのような化合物は好ましくは経口で生体利用でき、合成するのに容易であり且つ安価である。
【発明の概要】
【００１１】
本発明は、式Ｉａ
【化１】
2019529459.tif 000003
の化合物、その薬学上許容できる塩または溶媒和物を提供し、
式中、
Ｒ１は水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、部分的にまたは完全に重水素化されたＣ１−Ｃ６アルキル、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル、Ｃ２−Ｃ６シアノアルキル、Ｃ１−Ｃ６メルカプトアルキルまたはアミノであり；
Ｒ４は水素またはＣ１−Ｃ３アルキルであり；
Ｒ５は水素またはＣ１−Ｃ２アルキルであり；
またはＲ４及びＲ５は、それらが連結される炭素原子と一緒になってＣＨ２部分が任意で２つの重水素（Ｄ）原子によって置換されるシクロプロピル環を形成し；
Ｒ６はＣ１−Ｃ６アルキル、または部分的にまたは完全に重水素化されたＣ１−Ｃ６アルキルであり、
ＡはＣ５−Ｃ７シクロアルキル、フラニル、チオフェニル、メチルチオフェニルまたは
【化２】
2019529459.tif 000004
であり、
式中：
Ｘ１は水素、ハロまたはメチルであり；
Ｘ１’は水素またはハロであり；
Ｘ２は水素、ハロまたはメチルであり；
Ｘ２’は水素またはハロであり；
Ｘ３は水素またはフルオロであり；
ｎは０または１であり、ｎが０であるとき、単結合はｎが１であるときＣＨ２部分が連結される炭素原子を結合する。
【００１２】
本発明はまた、治療法で使用するための上記で定義されているような式Ｉａの化合物、またはその薬学上許容できる塩または溶媒和物にも関する。
【００１３】
本発明はまた、ＣＮＳ内でのＤβＨの阻害によって改善される状態を治療するのに使用するための上記で定義されているような式Ｉａの化合物、またはその薬学上許容できる塩または溶媒和物にも関する。
【００１４】
本発明はまた、ＣＮＳ内でのＤβＨの阻害によって改善される状態を治療するための薬剤の製造における上記で定義されているような式Ｉａの化合物、またはその薬学上許容できる塩または溶媒和物にも関する。
【００１５】
本発明はまた、治療上有効な量の、上記で定義されているような式Ｉａの化合物、またはその薬学上許容できる塩または溶媒和物をそれを必要とする患者に投与することを含む、ＣＮＳ内でのＤβＨの阻害によって改善される状態を治療するまたは予防する方法にも関する。
【００１６】
本発明はまた、（ｉ）治療上有効な量の、上記で定義されているような式Ｉａの化合物、またはその薬学上許容できる塩または溶媒和物と（ｉｉ）薬学上許容できる賦形剤とを含む医薬組成物にも関する。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
Ａ．定義
「Ｃ１−Ｃ６アルキル」は１〜６の炭素原子を有する一価の非置換の飽和した直鎖または分岐鎖の炭化水素ラジカルを意味する。「Ｃ１−Ｃ２アルキル」、「Ｃ１−Ｃ３アルキル」、「Ｃ１−Ｃ４アルキル」及び「Ｃ１−Ｃ５アルキル」は類似の意味を有する。
【００１８】
「部分的にまたは完全に重水素化されたＣ１−Ｃ６アルキル」は水素原子の一部またはすべてがそれぞれ重水素で選択的に置き換えられているＣ１−Ｃ６アルキルを意味する。
【００１９】
「Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル」は３〜６の炭素原子を有する一価の非置換の飽和環状炭化水素ラジカルを意味する。Ｃ５−Ｃ７シクロアルキルは類似の意味を有する。
【００２０】
「Ｃ２−Ｃ６シアノアルキル」は、シアノ基を形成するものを含む、２〜６の炭素原子を有する一価のシアノ置換された飽和した直鎖または分岐鎖の炭化水素ラジカルを意味する。
【００２１】
「Ｃ１−Ｃ６メルカプトアルキル」は、１〜６の炭素原子を有する一価のチオール置換された飽和した直鎖または分岐鎖の炭化水素ラジカルを意味する。
【００２２】
「ハロ」は、フッ素（−Ｆとして描かれてもよい）、塩素（−Ｃｌとして描かれてもよい）、臭素（−Ｂｒとして描かれてもよい）またはヨウ素（−Ｉとして描かれてもよい）のラジカルを意味する。
【００２３】
「アミノ」は−ＮＨ２を意味する。
【００２４】
「薬学上許容できる塩」は、塩形成に関する標準の教科書に記載されたもののような塩を意味し、たとえば、Ｐ．Ｓｔａｈｌ，ｅｔ  ａｌ．，Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ：Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｕｓｅ（ＶＣＨＡ／Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ，２００２），またはＳ．Ｍ．Ｂｅｒｇｅ，ｅｔ  ａｌ．，“Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ”（１９７７），Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，６６，１−１９を参照のこと。
【００２５】
「薬学上許容できる溶媒和物」は本発明の化合物と１以上の薬学上許容できる溶媒分子、たとえば、水またはエタノールとを含む分子複合体を意味する。用語「水和物」は上記溶媒が水である場合に採用されてもよい。薬学上許容できる溶媒和物には、水和物、及び結晶化の溶媒が同位体で置換されてもよい、たとえば、Ｄ２Ｏ、ｄ６−アセトン、ｄ６−ＤＭＳＯのような他の溶媒和物が挙げられる。
【００２６】
「薬学上許容できる賦形剤」は本発明の化合物（複数可）または他の既知の薬理学上活性がある成分以外の医薬組成物の任意の成分を意味する。賦形剤の選択は、たとえば、投与の特定の方式、溶解性及び安定性に対する賦形剤の効果、及び剤形の性質のような因子に大部分依存するであろう。
【００２７】
「治療法」、「治療」及び「治療すること」は状態、疾患または障害の予防的な及び治癒的な治療の双方を含む。それにはまた、状態、疾患または障害の進行を遅くすること、妨げること、制御すること、または止めることも含まれる。それにはまた、状態、疾患または障害の症状を予防すること、治癒させること、遅らせること、妨げること、制御すること、または止めることも含まれる。
【００２８】
開示されている実施形態に対する他の変化は、本開示の検討及び添付の特許請求の範囲から本発明を実践することにおいて当業者によって理解され、達成されることが可能である。請求項では、単語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」は他の要素または工程を排除せず、不定冠詞「ａ」または「ａｎ」は複数を排除しない。特定の基準が相互に異なる従属請求項で引用されるという単なる事実は、これらの基準の組み合わせを有利に使用することができないことを示さない。
【００２９】
Ｂ．化合物
本発明は上記で定義されているような式Ｉａの化合物、またはその薬学上許容できる塩または溶媒和物を提供する。
【化３】
2019529459.tif 000005
【００３０】
Ｂ０．コア化合物
式Ｉａの一部の実施形態では、ｎは０であり、単結合はｎが１であるとき、ＣＨ２部分が連結される炭素原子を結合して式Ｉｂ
【化４】
2019529459.tif 000006
の構造を形成する。
【００３１】
式Ｉａの一部の実施形態では、Ｒ４及びＲ５はそれらが連結される炭素原子と一緒に結合して、ＣＨ２部分が任意で２つの重水素原子によって置換されるシクロプロピル環を有する式Ｉｃ
【化５】
2019529459.tif 000007
の構造を形成する。
【００３２】
一部の実施形態では、式Ｉａの化合物の５０％を超える、好ましくは９０％を超える、さらに好ましくは９５％を超える、及び一層さらに好ましくは９９％を超える置換基Ｒ５及びＡが式Ｉｄ
【化６】
2019529459.tif 000008
の立体化学構造を有する。
【００３３】
一部の実施形態では、式Ｉａの化合物の５０％を超える、好ましくは９０％を超える、さらに好ましくは９５％を超える、及び一層さらに好ましくは９９％を超える置換基Ｒ５及びＡが式Ｉｅ
【化７】
2019529459.tif 000009
の立体化学構造を有する。
【００３４】
式Ｉａの好まれる実施形態には、式Ｉｈの化合物が含まれる。
【化８】
2019529459.tif 000010
【００３５】
式Ｉｈの一部の特に好まれる実施形態では、式Ｉｈの化合物の５０％を超える、好ましくは９０％を超える、さらに好ましくは９５％を超える、及び一層さらに好ましくは９９％を超える置換基Ｒ５及びＡが式Ｉｕ
【化９】
2019529459.tif 000011
の立体化学構造を有する。
【００３６】
式Ｉｈの他の特に好まれる実施形態では、式Ｉｈの化合物の５０％を超える、好ましくは９０％を超える、さらに好ましくは９５％を超える、及び一層さらに好ましくは９９％を超える置換基Ｒ５及びＡが式Ｉｖ
【化１０】
2019529459.tif 000012
の立体化学構造を有する。
【００３７】
式Ｉａの他の好まれる実施形態には式Ｉｋの化合物が含まれる。
【化１１】
2019529459.tif 000013
【００３８】
式Ｉｋの一部の特に好まれる実施形態では、５０％を超える、好ましくは９０％を超える、さらに好ましくは９５％を超える、及び一層さらに好ましくは９９％を超えるものが式Ｉｎ
【化１２】
2019529459.tif 000014
の立体化学構造を有する。
【００３９】
Ｂ１．置換基Ｒ１
Ｒ１は、水素、Ｃ１−Ｃ６アルキル、部分的にまたは完全に重水素化されたＣ１−Ｃ６アルキル、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル、Ｃ２−Ｃ６シアノアルキル、Ｃ１−Ｃ６メルカプトアルキル及びアミノから成る群から選択される。
【００４０】
Ｒ１は好ましくは、水素及びＣ１−Ｃ６アルキルから成る群から選択される。
一部の実施形態では、Ｒ１は水素である。
一部の実施形態では、Ｒ１はＣ１−Ｃ６アルキルである。
一部の実施形態では、Ｒ１は部分的に重水素化されたＣ１−Ｃ６アルキルである。
一部の実施形態では、Ｒ１は完全に重水素化されたＣ１−Ｃ６アルキルである。
一部の実施形態では、Ｒ１はＣ３−Ｃ６シクロアルキルである。
一部の実施形態では、Ｒ１はＣ２−Ｃ６シアノアルキルである。
一部の実施形態では、Ｒ１はＣ１−Ｃ６メルカプトアルキルである。
一部の実施形態では、Ｒ１はアミノである。
【００４１】
Ｒ１は好ましくは、水素、メチル、ｄ３−メチル、プロピル、シクロプロピル、シアノメチル、メルカプトエチル及びアミノから成る群から選択される。
【００４２】
Ｒ１はさらに好ましくは、水素及びメチルから成る群から選択される。
一部の実施形態では、Ｒ１は好ましくは水素である。
一部の実施形態では、Ｒ１は好ましくはメチルである。
一部の実施形態では、Ｒ１は好ましくはｄ３−メチルである。
一部の実施形態では、Ｒ１は好ましくはプロピルである。
一部の実施形態では、Ｒ１は好ましくはシクロプロピルである。
一部の実施形態では、Ｒ１は好ましくはシアノメチルである。
一部の実施形態では、Ｒ１は好ましくはメルカプトエチルである。
一部の実施形態では、Ｒ１は好ましくはアミノである。
【００４３】
Ｒ１は最も好ましくは水素である。
【００４４】
Ｂ２．置換基Ｒ４（Ｒ５と組み合わせない場合）
Ｒ４は、水素及びＣ１−Ｃ３アルキルから成る群から選択される。
一部の実施形態では、Ｒ４は水素である。
一部の実施形態では、Ｒ４はＣ１−Ｃ３アルキルである。
【００４５】
Ｒ４は好ましくは水素及びメチルから成る群から選択される。
一部の実施形態では、Ｒ４は好ましくは水素である。
一部の実施形態では、Ｒ４は好ましくはメチルである。
【００４６】
Ｒ４は最も好ましくは水素である。
【００４７】
Ｂ３．置換基Ｒ５（Ｒ４と組み合わせない場合）
Ｒ５は、水素及びＣ１−Ｃ２アルキルから成る群から選択される。
一部の実施形態では、Ｒ５は水素である。
一部の実施形態では、Ｒ５はＣ１−Ｃ２アルキルである。
【００４８】
Ｒ５は好ましくは水素及びメチルから成る群から選択される。
一部の実施形態では、Ｒ５は好ましくは水素である。
一部の実施形態では、Ｒ５は好ましくはメチルである。
【００４９】
Ｒ５は最も好ましくは水素である。
【００５０】
Ｂ４．置換基Ｒ６
Ｒ６はＣ１−Ｃ６アルキル、及び部分的にまたは完全に重水素化されたＣ１−Ｃ６アルキルから選択される。
【００５１】
Ｒ６は好ましくはＣ１−Ｃ６アルキルである。
一部の実施形態では、Ｒ６は部分的に重水素化されたＣ１−Ｃ６アルキルである。
一部の実施形態では、Ｒ６は完全に重水素化されたＣ１−Ｃ６アルキルである。
【００５２】
Ｒ６は好ましくはメチル、ｎ−ブチル及びｄ３−メチルから成る群から選択される。
一部の実施形態では、Ｒ６は好ましくはメチルである。
一部の実施形態では、Ｒ６は好ましくはｎ−ブチルである。
一部の実施形態では、Ｒ６は好ましくはｄ３−メチルである。
【００５３】
Ｒ６は最も好ましくはメチルである。
【００５４】
Ｂ５．置換基Ａ
Ａは、Ｃ５−Ｃ７シクロアルキル、フラニル、チオフェニル、メチルチオフェニル及び
【化１３】
2019529459.tif 000015
から成る群から選択され、
式中、
Ｘ１は水素，ハロまたはメチルであり；
Ｘ１’は水素またはハロであり；
Ｘ２は水素、ハロまたはメチルであり；
Ｘ２’は水素またはハロであり；
Ｘ３は水素またはフルオロである。
【００５５】
好ましくはＡは、
【化１４】
2019529459.tif 000016
であり、
式中、Ｘ１、Ｘ１’、Ｘ２、Ｘ２’及びＸ３は上記で定義されたとおりである。
【００５６】
さらに好ましくは、Ａは、
【化１５】
2019529459.tif 000017
であり、
式中、
Ｘ１は水素、フルオロ、クロロまたはメチルであり；
Ｘ１’は水素、フルオロまたはクロロであり；
Ｘ２は水素、フルオロ、クロロ、ブロモまたはメチルであり；
Ｘ２’は水素、フルオロ、クロロまたはブロモであり；
Ｘ３は水素またはフルオロである。
好まれる一実施形態では、Ｘ１、Ｘ１’、Ｘ２、Ｘ２’及びＸ３のすべてが水素であるわけではない。
【００５７】
好ましくは、Ａは、
【化１６】
2019529459.tif 000018
から成る群から選択される。
【００５８】
最も好ましくは、Ａは、
【化１７】
2019529459.tif 000019
から成る群から選択される。
【００５９】
Ｂ６．式Ｉの化合物の具体的な実施形態
置換基Ｒ１、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ａ、Ｘ、Ｘ１、Ｘ１’、Ｘ２、Ｘ２’及びＸ３の種々の実施形態は上記Ｂ１〜Ｂ５で議論されている。これらの「置換基」の実施形態は、上記Ｂ０で議論された「コア構造」の実施形態のいずれかと組み合わせて式Ｉａの化合物のさらなる実施形態を形成することができる。上記で議論されている「置換」の実施形態と「コア構造」の実施形態を組み合わせることによって形成される式Ｉａの化合物の実施形態すべてが出願者の発明の範囲内であり、式Ｉの化合物の一部の好まれるさらなる実施形態が以下で提供されている。
【００６０】
式Ｉａの一部の実施形態では、式Ｉｈ、Ｉｋ及びＩｎ（特に式Ｉｈ）
【化１８】
2019529459.tif 000020
の構造が高度に好まれ、
式中、
Ｒ１は、水素及びメチルから成る群から選択され；
Ｒ４は（存在するならば）水素及びメチルから成る群から選択され；
Ｒ５は（存在するならば）水素及びメチルから成る群から選択され；
Ｒ６はメチルであり；
Ａは、
【化１９】
2019529459.tif 000021
から成る群から選択される。
【００６１】
式Ｉａの一部の実施形態では、式Ｉｒ
【化２０】
2019529459.tif 000022
の構造が一層さらに高度に好まれ、
式中、
Ａは、
【化２１】
2019529459.tif 000023
から成る群から選択される。
【００６２】
以下の化合物は本発明の具体的な実施形態を表す：
（５ａＳ，６ａＲ）−５ａ−（２，５−ジフルオロフェニル）−１−メチル−５，５ａ，６，６ａ−テトラヒドロシクロプロパ［３，４］ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−３（２Ｈ）−チオン；
（５ａＳ，６ａＲ）−５ａ−（３，５−ジフルオロフェニル）−１−メチル−５，５ａ，６，６ａ−テトラヒドロシクロプロパ［３，４］ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−３（２Ｈ）−チオン；
（Ｓ）−１−ブチル−６−（３，５−ジフルオロフェニル）−６，７−ジヒドロ−２Ｈ−ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−３（５Ｈ）−チオン；
（Ｓ）−６−（３，５−ジフルオロフェニル）−１−メチル−２，５，６，７−テトラヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−３−チオン；
（Ｒ）−１−メチル−６−（２，３，５，６−テトラフルオロフェニル）−２，５，６，７−テトラヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−３−チオン；
（Ｓ）−１−メチル−６−（２，３，５，６−テトラフルオロフェニル）−２，５，６，７−テトラヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−３−チオン；
（Ｓ）−６−（２，６−ジフルオロフェニル）−１−メチル−２，５，６，７−テトラヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−３−チオン；
（５ａＳ，６ａＲ）−５ａ−（５−クロロ−２−フルオロフェニル）−１−メチル−５，５ａ，６，６ａ−テトラヒドロシクロプロパ［３，４］ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−３（２Ｈ）−チオン；
（５ａＳ，６ａＲ）−５ａ−（５−クロロ−２−フルオロフェニル）−１−（メチル−ｄ３）−５，５ａ，６，６ａ−テトラヒドロシクロプロパ［３，４］ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−３（２Ｈ）−チオン；
（Ｒ）−６−（３−クロロ−２，６−ジフルオロフェニル）−１−メチル−２，５，６，７−テトラヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−３−チオン；
（Ｓ）−６−（３−クロロ−２，６−ジフルオロフェニル）−１−メチル−２，５，６，７−テトラヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−３−チオン；
（５ａＳ，６ａＲ）−５ａ−（３−ブロモ−２，６−ジフルオロフェニル）−１−メチル−５，５ａ，６，６ａ−テトラヒドロシクロプロパ［３，４］ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−３（２Ｈ）−チオン；
（５ａＳ，６ａＲ）−５ａ−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）−１−メチル−５，５ａ，６，６ａ−テトラヒドロシクロプロパ［３，４］ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−３（２Ｈ）−チオン；
（５ａＳ，６ａＲ）−５ａ−（３−クロロ−２，６−ジフルオロフェニル）−１−メチル−５，５ａ，６，６ａ−テトラヒドロシクロプロパ［３，４］ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−３（２Ｈ）−チオン；
（Ｒ）−６−（３−ブロモ−２，６−ジフルオロフェニル）−１−メチル−２，５，６，７−テトラヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−３−チオン；
（Ｓ）−６−（３−ブロモ−２，６−ジフルオロフェニル）−１−メチル−２，５，６，７−テトラヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−３−チオン；
（５ａＳ，６ａＲ）−５ａ−（３−クロロ−５−フルオロフェニル）−１−メチル−５，５ａ，６，６ａ−テトラヒドロシクロプロパ［３，４］ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−３（２Ｈ）−チオン；
（５ａＳ，６ａＲ）−５ａ−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）−１−（メチル−ｄ３）−５，５ａ，６，６ａ−テトラヒドロシクロプロパ［３，４］ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−３（２Ｈ）−チオン；
（Ｓ）−６−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）−１−メチル−２，５，６，７−テトラヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−３−チオン；
（Ｒ）−１−メチル−６−（２，３，６−トリフルオロフェニル）−６，７−ジヒドロ−２Ｈ−ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−３（５Ｈ）−チオン；
（Ｒ）−６−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）−１−メチル−２，５，６，７−テトラヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−３−チオン；
（Ｒ）−６−（２，６−ジフルオロフェニル）−１−メチル−２，５，６，７−テトラヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−３−チオン；
（Ｒ）−６−（５−クロロ−２−フルオロフェニル）−１−メチル−２，５，６，７−テトラヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−３−チオン；及び
（Ｓ）−６−（５−クロロ−２−フルオロフェニル）−１−メチル−２，５，６，７−テトラヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−３−チオン
【００６３】
Ｃ．組成物
医薬用途を対象とした本発明の化合物は、単独で投与されてもよいし、または本発明の他の１以上の化合物との併用で、もしくは１以上の他の薬剤との併用で（もしくはその任意の組み合わせとして）投与されてもよい。一般に、それらは１以上の薬学上許容できる賦形剤と関連した製剤として投与されるであろう。従って、本発明は、（ｉ）治療上有効な量の、上記で定義されたような式Ｉａの化合物またはその薬学上許容できる塩または溶媒和物と、（ｉｉ）薬学上許容できる賦形剤とを含む医薬組成物にも関する。
【００６４】
本発明の化合物の送達に好適な医薬組成物及びその調製法は当業者に容易に明らかであろう。そのような組成物及びその調製法は、たとえば、“Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ”，１９ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ（Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，１９９５）にて見いだされてもよい。
【００６５】
Ｄ．使用方法
本発明はまた、治療法での使用のための、特にＤβＨの阻害によって改善される状態の治療での使用のための、上記で定義されているような式Ｉａの化合物、またはその薬学上許容できる塩または溶媒和物にも関する。
【００６６】
本発明はまた、ＤβＨの阻害によって改善される状態の治療のための薬物の製造における上記で定義されているような式Ｉａの化合物、またはその薬学上許容できる塩または溶媒和物の使用にも関する。
【００６７】
本発明はまた、治療上有効な量の、上記で定義されているような式Ｉａの化合物、またはその薬学上許容できる塩または溶媒和物をそれを必要とする患者に投与することを含む、ドーパミン−β−ヒドロキシラーゼの阻害によって改善される状態を治療する方法にも関する。
【００６８】
ＣＮＳの外側でＤβＨの阻害によって改善される状態には、たとえば、高血圧症、慢性心不全及び肺動脈高血圧症（ＰＡＨ）を挙げることができるが、これらに限定されない。
【００６９】
ＣＮＳ内でのＤβＨの阻害によって改善される状態には、コカイン中毒、アルコール中毒、付随するオピオイド中毒、ＦＴＤにおける認知低下、ＭＣＩにおける認知低下、ＡＤにおける認知低下、ＡＤＨＤ、ＰＴＳＤ及び単極性うつ病が挙げることができるが、これらに限定されない。
【００７０】
Ｅ．一般的な合成法
本発明の化合物の合成に使用される方法を以下のスキームによって説明する。これらの化合物を調製するのに使用される出発物質及び試薬は供給業者から入手可能であり、または当業者に明白な方法によって調製することができる。スキームを読み易くするために、特定の位置で重水素を取り込む選択肢は示さない。具体的には、重水素化した生成物は以下の実施例で使用したものを含むが、これらに限定されない具体的に重水素化された出発物質を用いて作製することができる。
【００７１】
式Ｉａの化合物はスキーム１にて要点を示した方法によって一般に合成することができる。
スキーム１
【化２２】
2019529459.tif 000024
【００７２】
スキーム１における出発物質はスキーム２にて要点を示した方法によって一般に合成することができる。
スキーム２
【化２３】
2019529459.tif 000025
【００７３】
スキーム２における出発物質は、ｎ＝０のとき、濃縮したエナンチオマーまたはラセミ化合物のいずれかとしてスキーム３にて要点を示した方法によって一般に合成することができる。
スキーム３
【化２４】
2019529459.tif 000026
【００７４】
Ｒ４及びＲ５が結合してシクロプロピル基を形成する場合、スキーム１における出発物質は、スキーム４にて要点を示した方法によって一般に合成することができる。
スキーム４
【化２５】
2019529459.tif 000027
【００７５】
スキーム４についての出発物質は、スキーム５にて要点を示した方法によって一般に合成することができる。
スキーム５
【化２６】
2019529459.tif 000028
【００７６】
同様にして、スキーム５の出発物質は、濃縮されたエナンチオマーまたはラセミ化合物として、特定の重水素化を含むスキーム６にて要点を示した方法によって一般に合成することができる。
スキーム６
【化２７】
2019529459.tif 000029
【００７７】
この合成法によれば、本発明は、式Ｉａ
【化２８】
2019529459.tif 000030
の化合物の調製のためのプロセスを提供し、それは、ｎ、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６及びＡが上記式Ｉａについて定義されたとおりである式ＩＩａ
【化２９】
2019529459.tif 000031
の化合物を式Ｒ１−Ｎ＝Ｃ＝Ｓの化合物と反応させることを含む。
【００７８】
従って、ｎ、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６及びＡが上記式Ｉａについて定義されたとおりである式ＩＩａの化合物は本発明のさらなる実施形態を説明する有用な中間体である。
【実施例】
【００７９】
Ｆ．実施例
化合物及び中間体はすべてＮＭＲによって特徴付けた。スペクトルは内部標準として使用した溶媒を用いてＢｒｕｋｅｒ  Ａｖａｎｃｅ  ＩＩＩ  ６００ＭＨｚ分光計で記録した。１３Ｃのスペクトルは１５０ＭＨｚで記録し、１Ｈのスペクトルは６００ＭＨｚで記録した。データは以下の順：近似の化学シフト（ｐｐｍ）、プロトンの数、多重度（ｂｒ：幅広線、ｄ：二重線、ｍ：多重線、ｓ：一重線、ｔ：三重線）及びカップリング定数（Ｈｚ）で報告する。
【００８０】
以下のプロトコールにおける室温は２０℃から２５℃に及ぶ温度を意味する。
【００８１】
予備実施例１
工程１：（Ｅ）−１，３−ジフルオロ−５−（２−ニトロビニル）ベンゼン
【化３０】
2019529459.tif 000032
外部冷却によって内部温度を５〜１０℃の間で維持しながら、メタノール（７２ｍＬ）と水（３６ｍＬ）と２．５Ｍの水酸化ナトリウム（３２．４ｍＬ，８１ｍｍｏｌ）の溶液に５℃にて３，５−ジフルオロベンズアルデヒド（１０ｇ，７０．４ｍｍｏｌ）及びニトロメタン（４．３６ｍＬ，８１ｍｍｏｌ）のメタノール（１２．００ｍＬ）溶液を３０分かけて一滴ずつ加えた。次いで反応物を低温でさらに０．５時間撹拌し、次いでｃｃ．ＨＣｌ（１１．７３ｍＬ，１４１ｍｍｏｌ）の水（３６ｍＬ）溶液を撹拌しながら０〜１０℃にて一気に加えた。得られた結晶を回収し、水で洗浄し、乾燥させて淡黄色の粉末（収量：７．０ｇ、５４％）として生成物を得た。
【００８２】
工程２：２−（１−（３，５−ジフルオロフェニル）−２−ニトロエチル）マロン酸（Ｒ）−ジエチル
【化３１】
2019529459.tif 000033
撹拌した（Ｅ）−１，３−ジフルオロ−５−（２−ニトロビニル）ベンゼン（７．４ｇ，４０．０ｍｍｏｌ）の無水テトラヒドロフラン（７５ｍＬ）溶液に撹拌しながら室温で４−（（Ｓ）−ヒドロキシ（（１Ｓ，２Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）−５−ビニルキヌクリジン−２−イル）メチル）キノリン−６−オール（ＣＡＳ＃７０８７７−７５−７）（０．６２０ｇ，１．９９９ｍｍｏｌ）を加え、その後、マロン酸ジエチル（８．６５ｍＬ，５６．７ｍｍｏｌ）を加えた。不活性雰囲気下で混合物を−５〜−７℃に冷却し、低温で２０時間撹拌した。その後すぐに、混合物を真空下で蒸発乾固させ、残留物をジクロロメタン（１００ｍＬ）に溶解し、１ＭのＨＣｌ、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、シリカのパッドで濾過した。濾液を２０ｍＬに濃縮し、残留物を石油エーテル（約５０ｍＬ）による希釈物で結晶化した。混合物をさらに石油エーテル（１２０ｍＬ）で希釈し、５〜１０℃で熟成させた。得られた固体を回収し、石油エーテルで洗浄し、乾燥させて灰白色の粉末（収量：９．１ｇ、７０％）として生成物を得た。
【００８３】
工程３：４−（３，５−ジフルオロフェニル）−２−オキソピロリジン−３−カルボン酸（４Ｒ）−エチル
【化３２】
2019529459.tif 000034
２−（１−（３，５−ジフルオロフェニル）−２−ニトロエチル）マロン酸（Ｒ）−ジエチル（９ｇ，２６．１ｍｍｏｌ）のメタノール（１５０ｍＬ）懸濁液に塩化（ＩＩ）ニッケル６水和物（６．２０ｇ，２６．１ｍｍｏｌ）を加え、その後、氷冷しながら少しずつ水素化ホウ素ナトリウム（７．８９ｇ，２０９ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で６時間撹拌し、次いで塩化アンモニウム溶液（２５０ｍＬ）で反応を止め、ジクロロメタン（１５０ｍＬ）で希釈し、６ＭのＨＣｌでｐＨ＝２に酸性化し、１６時間撹拌した。その後すぐに、混合物をジクロロメタンで抽出し、有機相をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、蒸発乾固させてベージュ色の粉末（収量：６．８７ｇ、９８％）として生成物を得た。
【００８４】
工程４：（４Ｒ）−４−（３，５−ジフルオロフェニル）−２−オキソピロリジン−３−カルボン酸
【化３３】
2019529459.tif 000035
撹拌した４−（３，５−ジフルオロフェニル）−２−オキソピロリジン−３−カルボン酸（４Ｒ）−エチル（６．８５ｇ，２５．４ｍｍｏｌ）のエタノール（１００ｍＬ）溶液に１Ｍの水酸化ナトリウム（３０．５ｍＬ，３０．５ｍｍｏｌ）を加えた。得られた懸濁液を１時間撹拌し、次いで真空下で有機物を取り除き、残留物を水（２５０ｍＬ）に溶解した。６ＭのＨＣｌによる酸性化で生成物を結晶化した。得られた結晶を回収し、冷水で洗浄し、５０℃の真空下で乾燥させてベージュ色の粉末として生成物を得た：収量：５．２ｇ、２１.８５％。
【００８５】
工程５：（Ｒ）−４−（３，５−ジフルオロフェニル）ピロリジン−２−オン
【化３４】
2019529459.tif 000036
（４Ｒ）−４−（３，５−ジフルオロフェニル）−２−オキソピロリジン−３−カルボン酸（５．２ｇ，２１．５６ｍｍｏｌ）のトルエン（３００ｍＬ）溶液を還流下で３時間撹拌し、そうするとすぐに、混合物を蒸発乾固させた。石油エーテルからの結晶化によってベージュ色の粉末を得た。収量：４．０６ｇ、９６％。
【００８６】
工程６：４−（３，５−ジフルオロフェニル）−２−オキソピロリジン−１−カルボン酸（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル
【化３５】
2019529459.tif 000037
撹拌した（Ｒ）−４−（３，５−ジフルオロフェニル）ピロリジン−２−オン（４．０５ｇ，２０．５４ｍｍｏｌ）の無水ジクロロメタン（１５ｍＬ）に室温で二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（６．７２ｇ，３０．８ｍｍｏｌ）を加え、その後、Ｎ，Ｎ−ジメチルピリジン−４−アミン（２．５０９ｇ，２０．５４ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（２．８６ｍＬ，２０．５４ｍｍｏｌ）を加えた。次いで混合物を室温で３時間撹拌し、次いで真空下で濃縮した。クロマトグラフィ（石油エーテル／酢酸エチル、４：１）によって、石油エーテル（６０ｍＬ）から結晶化される油を得た。白色の粉末として生成物を得た。収量：６．２４ｇ、８８％。
【００８７】
工程７：４−（３，５−ジフルオロフェニル）−２−ヒドロキシピロリジン−１−カルボン酸（４Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル
【化３６】
2019529459.tif 000038
撹拌した４−（３，５−ジフルオロフェニル）−２−オキソピロリジン−１−カルボン酸（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル（２ｇ，６．７３ｍｍｏｌ）の無水ジエチルエーテル（３０ｍＬ）溶液に０〜５℃にて窒素のもとでトルエン中６５％のＲＥＤ−Ａｌ（ビス（２−メトキシエトキシ）アルミニウム（ＩＩＩ）水素化ナトリウム）（１．２１２ｍＬ，４．０４ｍｍｏｌ）を一滴ずつ加え、混合物を低温にて３０分間撹拌した。その後すぐに、重炭酸ナトリウム溶液で混合物の反応を止め、混合物を３０分間撹拌した。有機相をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、蒸発乾固させて無色の油（収量：２．０７ｇ、９３％）として生成物を得た。
【００８８】
工程８：２−シアノ−４−（３，５−ジフルオロフェニル）ピロリジン−１−カルボン酸（４Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル
【化３７】
2019529459.tif 000039
撹拌した４−（３，５−ジフルオロフェニル）−２−ヒドロキシピロリジン−１−カルボン酸（４Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル（２ｇ，６．６８ｍｍｏｌ）の無水ジクロロメタン（５０ｍＬ）溶液に−７０℃にてトリメチルシランカルボニトリル（１．７９２ｍＬ，１３．３６ｍｍｏｌ）を加え、その後、三フッ化ホウ素エーテラート（１．８６３ｍＬ，１４．７０ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を低温で４時間撹拌し、重炭酸ナトリウム溶液で反応を止め、次いで混合物を撹拌しながら室温まで温めた。有機相をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、真空下で蒸発乾固させた。クロマトグラフィ（石油エーテル／酢酸エチル、９：１によって無色の油（収量：１．３６ｇ、６６％）として化合物を得た。
【００８９】
工程９：（４Ｒ）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−４−（３，５−ジフルオロフェニル）ピロリジン−２−カルボン酸
【化３８】
2019529459.tif 000040
撹拌した２−シアノ−４−（３，５−ジフルオロフェニル）ピロリジン−１−カルボン酸（４Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル（１．３５ｇ，４．３８ｍｍｏｌ）のエタノール（１５ｍＬ）溶液に３Ｍの水酸化ナトリウム（７．３０ｍＬ，２１．８９ｍｍｏｌ）を加え、溶液を穏やかに３時間還流した（８０℃の油槽）。その後すぐに、真空下でエタノールを取り除き、残留物を水（１０ｍＬ）で希釈し、次いで１０〜１５℃にて２ＭのＨＣｌでｐＨ＝２に酸性化した。混合物をジクロロメタン（４０ｍＬ）で抽出し、双方の相での不溶物質を濾別し、そうするとすぐに、有機相をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、蒸発乾固させて０．８９ｇの帯黄色の油（収率：６２％）を得た。
【００９０】
実施例１：（５ａＳ，６ａＲ）−５ａ−（２，５−ジフルオロフェニル）−１−メチル−５，５ａ，６，６ａ−テトラヒドロシクロプロパ［３，４］ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−３（２Ｈ）−チオン
【化３９】
2019529459.tif 000041
実施例３に類似する方法で（５Ｓ）−３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（２，５−ジフルオロフェニル）−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−２−カルボン酸及びヨウ化メチルマグネシウムから化合物を調製し、黄色の固体として単離した。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：１１．６６（１Ｈ，ｂｒｓ），７．２８（２Ｈ，ｍ），７．２０（１Ｈ，ｍ），４．０６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ），３．７８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ），２．８６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．２，４．３Ｈｚ），２．０９（１Ｈ，ｍ），２．０４（３Ｈ，ｓ），１．６３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．１，５．４Ｈｚ），１．１３（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：１５８．８，１５８．７，１５７．２，１５７．１，１５５．７，１３０．３，１２８．８，１２８．８，１２８．８，１２８．７，１２８．６，１１７．２，１１７．１，１１７．０，１１６．９，１１６．８，１１５．９，１１５．８，１１５．７，１１５．７，１１４．８，５１．５，３２．５，２２．４，２０．３，９．４．
【００９１】
実施例２：（５ａＳ，６ａＲ）−５ａ−（３，５−ジフルオロフェニル）−１−メチル−５，５ａ，６，６ａ−テトラヒドロシクロプロパ［３，４］ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−３（２Ｈ）−チオン
【化４０】
2019529459.tif 000042
実施例３と類似の方法で（５Ｓ）−３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−（３，５−ジフルオロフェニル）−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−２−カルボン酸及びヨウ化メチルマグネシウムから化合物を調製し、黄色の固体として単離した。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：１．６３（１Ｈ，ｂｒ  ｓ），７．１０（３Ｈ，ｍ），４．１７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ），４．００（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．２Ｈｚ），２．９７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．３，４．３Ｈｚ），２．０３（３Ｈ，ｓ），１．６５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．２，５．１Ｈｚ），１．１５（１Ｈ，ｍ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：１６３．４，１６３．３，１６１．８，１６１．７，１５６，１４５，１３０．２，１１４．５，１１０，１１０，１０９．９，１０９．９，１０２．１，５０．７，３６．１，２５．４，２２．４，９．４．
【００９２】
実施例３：（Ｓ）−１−ブチル−６−（３，５−ジフルオロフェニル）−６，７−ジヒドロ−２Ｈ−ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−３（５Ｈ）−チオン
工程１：４−（３，５−ジフルオロフェニル）−２−（メトキシ（メチル）カルバモイル）ピロリジン−１−カルボン酸（４Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル
【化４１】
2019529459.tif 000043
（４Ｓ）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−４−（３，５−ジフルオロフェニル）ピロリジン−２−カルボン酸（予備実施例１の工程９に類似する様式で調整された）（０．９８２ｇ，３ｍｍｏｌ）の無水ジクロロメタン（１０ｍＬ）溶液に室温でジ（１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メタノン（０．５８４ｇ，３．６０ｍｍｏｌ）を少しずつ加え、混合物を３０分間撹拌した。その後すぐに、Ｎ，Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩（０．３５１ｇ，３．６０ｍｍｏｌ）を加え、室温で撹拌を４０時間継続した。次いで反応物を水で洗浄し、有機相をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、真空下で濃縮した。クロマトグラフィ（石油エーテル／酢酸エチル、２：１）によって灰白色の固体（収量：０．９２ｇ、８３％）として生成物を得た。
【００９３】
工程２：（４Ｓ）−４−（３，５−ジフルオロフェニル）−２−ペンタノイルピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル
【化４２】
2019529459.tif 000044
０〜５℃にて窒素のもとで、４−（３，５−ジフルオロフェニル）−２−（メトキシ（メチル）カルバモイル）ピロリジン−１−カルボン酸（４Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル（０．４０ｇ，１．０８ｍｍｏｌ）の無水テトラヒドロフラン（２ｍＬ）溶液に２Ｍの臭化ブチルマグネシウム（１．６２ｍＬ，３．２４ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温まで温め、３時間撹拌した。その後すぐに、混合物を１ＭのＨＣｌに注ぎ、次いでジエチルエーテルで抽出した。有機相をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、蒸発乾固させた。クロマトグラフィ（石油エーテル／酢酸エチル、９：１）によって無色の油（収量：０．２ｇ、５０％）として生成物を得た。
【００９４】
工程３：（Ｓ）−１−ベンジル−６−（３，５−ジフルオロフェニル）−６，７−ジヒドロ−２Ｈ−ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−３（５Ｈ）−チオン
【化４３】
2019529459.tif 000045
ジオキサンにおける４−（３，５−ジフルオロフェニル）−２−ペンタノイルピロリジン−１−カルボン酸（４Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル（０．１９ｇ，０．５１７ｍｍｏｌ）と４ＭのＨＣｌ（２．５９ｍＬ，１０．３４ｍｍｏｌ）との混合物を室温で一晩撹拌した。次いで混合物を室温に冷却し、蒸発乾固させた。こうして得られた油性残留物をエタノール（２ｍＬ）と水（２ｍＬ）の混合物に溶解し、その後、チオシアン酸カリウム（０．０５５ｇ，０．５６９ｍｍｏｌ）及び６ＭのＨＣｌ（０．０４３ｍＬ，０．２５９ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を還流下で１時間撹拌し、次いで室温で３０分間撹拌した。得られた固体を濾過によって回収し、エタノールと水（１：１）の混合物で洗浄し、５０℃での真空下で乾燥させてライトベージュ色の粉末（収量：０．１２ｇ、７５％）として生成物を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：１１．７１（１Ｈ，ｓ），７．１３（３Ｈ，ｍ），４．１４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．２，７．９Ｈｚ），４．０７（１Ｈ，五重項，Ｊ＝８．１Ｈｚ），３．６７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．１，８．３Ｈｚ），３．２０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１５．０，７．８Ｈｚ），２．８４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１５．１，８．８Ｈｚ），２．３５（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ），１．５０（２Ｈ，ｍ），１．２６（２Ｈ，ｍ），０．８６（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：１６３．３，１６３．２，１６１．７，１６１．６，１５５．１，１４５．８，１４５．７，１４５．６，１２７．６，１２０，１１０．８，１１０．７，１１０．６，１１０．６，１０２．６，１０２．５，１０２．３，４９．９，４６．５，３０．４，２９．８，２３．６，２１．５，１３．６．
【００９５】
実施例４：（Ｓ）−６−（３，５−ジフルオロフェニル）−１−メチル−２，５，６，７−テトラヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−３−チオン
工程１：２−（シアノ（ヒドロキシ）メチル）−４−（３，５−ジフルオロフェニル）ピロリジン−１−カルボン酸（４Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル
【化４４】
2019529459.tif 000046
テトラヒドロフラン（１０ｍＬ）と水（５ｍＬ）の混合物における４−（３，５−ジフルオロフェニル）−２−ホルミルピロリジン−１−カルボン酸（４Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル（１．２ｇ，３．８５ｍｍｏｌ）の撹拌した溶液にシアン化カリウム（０．３０１ｇ，４．６３ｍｍｏｌ）を加え、その後、ｃｃ  ＨＣｌ（０．３１９ｍＬ，３．８５ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を８時間撹拌し、次いでジクロロメタンで抽出した。有機相をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、蒸発乾固させて帯黄色の油（収量：１．４４ｇ、９９％）として２−（シアノ（ヒドロキシ）メチル）−４−（３，５−ジフルオロフェニル）ピロリジン−１−カルボン酸（４Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチルを得た。
【００９６】
工程２：４−（３，５−ジフルオロフェニル）−２−（２−エトキシ−１−ヒドロキシ−２−オキソエチル）ピロリジン−１−カルボン酸（４Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル
【化４５】
2019529459.tif 000047
２−（シアノ（ヒドロキシ）メチル）−４−（３，５−ジフルオロフェニル）ピロリジン−１−カルボン酸(４Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル（１．４３ｇ，３．８０ｍｍｏｌ）と２ＭのＨＣｌ（２８．５ｍＬ，５７．１ｍｍｏｌ）との混合物を還流下で１６時間撹拌した。室温に冷却した後、セライトのプラグを介して混合物を濾過して不溶性の着色した沈殿物を取り除き、次いで濾液を真空下で蒸発乾固させた。残留物を無水エタノールと共に２回共沸し、残留物を無水エタノール（２０ｍＬ）に溶解した。こうして得られた溶液をジオキサン中４ＭのＨＣｌ（９．５１ｍＬ，３８．０ｍｍｏｌ）で処理し、還流下で２時間撹拌した。混合物を蒸発乾固させ、次いで無水エタノールと共に共沸した。得られた半固体を無水エタノール（３０ｍＬ）に溶解し、トリエチルアミンの添加によってｐＨ＝６〜７に中和し、次いで第２群のトリエチルアミン（０．５３０ｍＬ，３．８０ｍｍｏｌ）を加え、その後二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（０．８３０ｇ，３．８０ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を室温で２時間撹拌し、次いで４０℃にて蒸発乾固させた。残留物をジクロロメタンと水の間で分配し、有機相をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、減圧下で濃縮した。クロマトグラフィ（石油エーテル／酢酸エチル、９：１、次いで４：１）によって黄色の油（収量：１．１６ｇ、７９％）として生成物を得た。
【００９７】
工程３：４−（３，５−ジフルオロフェニル）−２−（２−エトキシ−２−オキソアセチル）ピロリジン−１−カルボン酸（４Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル
【化４６】
2019529459.tif 000048
撹拌した４−（３，５−ジフルオロフェニル）−２−（２−エトキシ−１−ヒドロキシ−２−オキソエチル）ピロリジン−１−カルボン酸（４Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル（１．１５ｇ，２．９８ｍｍｏｌ）の無水ジクロロメタン（２５ｍＬ）溶液に室温でデス・マーチンペルヨージナン（三酢酸３−オキソ−１λ５−ベンゾ［ｄ］［１，２］ヨードオキソール−１，１，１（３Ｈ）−トリイル）（１．２６６ｇ，２．９８ｍｍｏｌ）を一気に加え、混合物を２時間撹拌した。反応混合物を真空下で濃縮し、そうするとすぐに、クロマトグラフィ（石油エーテル／酢酸エチル、４：１によって残留物を精製した。帯黄色の油（収量：１．０８ｇ、９４％）として生成物を単離した。
【００９８】
工程４：２−（（４Ｓ）−４−（３，５−ジフルオロフェニル）ピロリジン−２−イル）−２−オキソ酢酸エチル塩酸塩
【化４７】
2019529459.tif 000049
撹拌した４−（３，５−ジフルオロフェニル）−２−（２−エトキシ−２−オキソアセチル）ピロリジン−１−カルボン酸（４Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル（０．４ｇ，１．０４３ｍｍｏｌ）のジオキサン中４ＭのＨＣｌ（５．２２ｍＬ，２０．８７ｍｍｏｌ）溶液を室温で４時間撹拌した。反応混合物をジエチルエーテル（２０ｍＬ）と石油エーテル（５ｍＬ）の混合物で希釈し、３０分間撹拌した。その後すぐに、得られた沈殿物を回収し、ジエチルエーテル、石油エーテルで洗浄し、５０℃での真空下で乾燥させて白色の粉末（収量：０．３４ｇ、９２％）として２−（（４Ｓ）−４−（３，５−ジフルオロフェニル）ピロリジン−２−イル）−２−オキソ酢酸エチル塩酸塩を得た。
【００９９】
工程５：６−（３，５−ジフルオロフェニル）−３−チオキソ−３，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−１−カルボン酸（Ｓ）−エチル
【化４８】
2019529459.tif 000050
エタノール（５ｍＬ）と水（５ｍＬ）の混合物における２−（（４Ｓ）−４−（３，５−ジフルオロフェニル）ピロリジン−２−イル）−２−オキソ酢酸エチル塩酸塩（０．３３ｇ，１．０３２ｍｍｏｌ）と６ＭのＨＣｌ（０．０８６ｍＬ，０．５１６ｍｍｏｌ）とチオシアン酸カリウム（０．１１０ｇ，１．１３５ｍｍｏｌ）との溶液を還流下で３０分間撹拌した。次いで反応物を室温に冷却し、得られた固体を回収し、エタノールと水（１：１）の混合物で洗浄し、５０℃での真空下で乾燥させて白色の固体（収量：０．２８ｇ、８４％）として６−（３，５−ジフルオロフェニル）−３−チオキソ−３，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−１−カルボン酸（Ｓ）−エチルを得た。
【０１００】
工程６：（Ｓ）−６−（３，５−ジフルオロフェニル）−１−メチル−６，７−ジヒドロ−２Ｈ−ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−３（５Ｈ）−チオン
【化４９】
2019529459.tif 000051
６−（３，５−ジフルオロフェニル）−３−チオキソ−３，５，６，７−テトラヒドロ−２Ｈ−ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−１−カルボン酸（Ｓ）−エチル（０．１ｇ，０．３０８ｍｍｏｌ）の無水テトラヒドロフラン（２ｍＬ）溶液に水素化ホウ素ナトリウム（０．０５８ｇ，１．５４２ｍｍｏｌ）を加え、その後、氷水槽で冷却しながら三フッ化ホウ素エーテラート（０．１９５ｍＬ，１．５４２ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温まで温め、１６時間撹拌した。その後すぐに、混合物を再び０〜５℃に冷却し、２ＭのＨＣｌ（１．２３３ｍｌ，２．４６７ｍｍｏｌ）で反応を止めた。真空下で有機溶媒を取り除き、次いで残留物を酢酸エチルで抽出した。有機相をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発乾固させた。クロマトグラフィ（石油エーテル／酢酸エチル、１：１）によって白色の粉末（０．０２１ｇ、０．０７９ｍｍｏｌ、２５．６％収率）として（Ｓ）−６−（３，５−ジフルオロフェニル）−１−メチル−６，７−ジヒドロ−２Ｈ−ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−３（５Ｈ）−チオンを得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：１１．６９（１Ｈ，ｂｒｓ），７．１３（３Ｈ，ｍ），５．７６（１Ｈ，ｓ），４．１５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．２，７．９Ｈｚ），４．０７（１Ｈ，五重項，Ｊ＝７．８Ｈｚ），３．６６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．２，８．４Ｈｚ），３．１８（１Ｈ，ｍ），２．８２（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１５．０，８．９，１．３Ｈｚ），１．９８（３Ｈ，ｓ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：１６３．３，１６３．２，１６１．７，１６１．６，１５５．１，１４５．７，１４５．７，１４５．６，１２７．８，１１５．４，１１０．８，１１０．７，１１０．６，１１０．６，１０２．６，１０２．５，１０２．３，５０．０，４６．５，３０．０，９．４．
【０１０１】
実施例５：（Ｒ）−１−メチル−６−（２，３，５，６−テトラフルオロフェニル）−２，５，６，７−テトラヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−３−チオン
【化５０】
2019529459.tif 000052
実施例３と類似の方法で（４Ｒ）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−４−（２，３，５，６−テトラフルオロフェニル）ピロリジン−２−カルボン酸及びヨウ化メチルマグネシウムから化合物を調製し、灰白色の粉末として単離した。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：１１．７４（１Ｈ，ｂｒ  ｓ），７．８５（１Ｈ，ｍ），４．４９（１Ｈ，五重項，Ｊ＝８．５Ｈｚ），４．４２（１Ｈ，ｍ），４．１５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．６，９．２Ｈｚ），３．７６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．７，７．８Ｈｚ），３．２７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１５．６，９．２Ｈｚ），２．８９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１５．４，７．９Ｈｚ），１．９７（３Ｈ，ｓ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：１５５．０，１４６．４，１４６．３，１４６．３，１４５．３，１４５．２，１４４．８，１４４．７，１４４．６，１４３．７，１４３．６，１２７．５，１２０．５，１２０．４，１２０．３，１１５．３，１０５．９，１０５．７，１０５．６，４８．４，３５．９，２８．６，９．３．
【０１０２】
実施例６：（Ｓ）−１−メチル−６−（２，３，５，６−テトラフルオロフェニル）−２，５，６，７−テトラヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−３−チオン
【化５１】
2019529459.tif 000053
実施例３と類似の方法で（４Ｓ）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−４−（２，３，５，６−テトラフルオロフェニル）ピロリジン−２−カルボン酸及びヨウ化メチルマグネシウムから化合物を調製し、ライトベージュ色の粉末として単離した。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：１１．７４（１Ｈ，ｂｒ  ｓ），７．８５（１Ｈ，ｍ），４．４９（１Ｈ，五重項，Ｊ＝８．５Ｈｚ），４．１５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．６，９．２Ｈｚ），３．７６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．７，７．８Ｈｚ），３．２７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１５．６，９．２Ｈｚ），２．８９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１５．４，７．９Ｈｚ），１．９７（３Ｈ，ｓ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：１５５，１４６．４，１４６．３，１４６．３，１４５．３，１４５．２，１４４．８，１４４．７，１４４．６，１４３．７，１４３．６，１２７．５，１２０．５，１２０．４，１２０．３，１１５．３，１０５．９，１０５．７，１０５．６，４８．７，４８．４，３５．９，２８．６，９．３．
【０１０３】
実施例７：（Ｓ）−６−（２，６−ジフルオロフェニル）−１−メチル−２，５，６，７−テトラヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−３−チオン
【化５２】
2019529459.tif 000054
実施例３と類似の方法で（４Ｓ）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−４−（２，６−ジフルオロフェニル）ピロリジン−２−カルボン酸及びヨウ化メチルマグネシウムから化合物を調製し、ライトベージュ色の粉末として単離した。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：１１．７２（１Ｈ，ｂｒ  ｓ），７．４０（１Ｈ，ｍ），７．１３（２Ｈ，ｍ），４．４１（１Ｈ，五重項，Ｊ＝８．７Ｈｚ），４．１２（１Ｈ，ｂｒ  ｔ，Ｊ＝１０．１Ｈｚ），３．７０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．８，１０．８Ｈｚ），３．２１（１Ｈ，ｂｒ  ｄｄ，Ｊ＝１５．３，９．２Ｈｚ），２．８４（１Ｈ，ｂｒ  ｄｄ，Ｊ＝１５．２，８．６Ｈｚ），１．９７（３Ｈ，ｓ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：１６１．６，１６１．６，１６０．０，１５９．９，１５５．０，１２９．８，１２９．７，１２９．７，１２７．８，１１６．６，１１６．５，１１６．４，１１５．２，１１２．３，１１２．２，１１２．１，１１２．１，４８．６，３５．４，２８．８，９．３．
【０１０４】
実施例８：（５ａＳ，６ａＲ）−５ａ−（５−クロロ−２−フルオロフェニル）−１−メチル−５，５ａ，６，６ａ−テトラヒドロシクロプロパ［３，４］ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−３（２Ｈ）−チオン
【化５３】
2019529459.tif 000055
実施例３と類似の方法で（１Ｓ，５Ｒ）−１−（５−クロロ−２−フルオロフェニル）−４−（メトキシ（メチル）カルバモイル）−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−３−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル及びヨウ化メチルマグネシウムから化合物を調製した。ベージュ色の固体として生成物を単離した。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：１１．６５（１Ｈ，ｂｒ  ｓ），７．４７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．５，２．６Ｈｚ），７．４２（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝８．８，４．４，２．７Ｈｚ），７．２９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．０，８．９Ｈｚ），４．０６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．７Ｈｚ），３．７７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ），２．８７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．２，４．３Ｈｚ），２．０４（３Ｈ，ｍ），１．６４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．１，５．４Ｈｚ），１．１２（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：１６１．３，１５９．７，１５５．７，１３０．３，１３０．１，１３０．１，１２９．３，１２９．３，１２９．０，１２８．９，１２８．３，１２８．３，１１７．６，１１７．４，１１４．８，５１．５，５１．５，３２．３，２２．３，２０．２，９．４．
【０１０５】
実施例９：（５ａＳ，６ａＲ）−５ａ−（５−クロロ−２−フルオロフェニル）−１−（メチル−ｄ３）−５，５ａ，６，６ａ−テトラヒドロシクロプロパ［３，４］ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−３（２Ｈ）−チオン
【化５４】
2019529459.tif 000056
実施例３と類似の方法で（１Ｓ，５Ｒ）−１−（５−クロロ−２−フルオロフェニル）−４−（メトキシ（メチル）カルバモイル）−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−３−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル及びヨウ化メチル−ｄ３−マグネシウムから化合物を調製した。淡橙色の固体として生成物を単離した。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：１１．６５（１Ｈ，ｓ），７．４７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．６，２．８Ｈｚ），７．４２（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝８．８，４．４，２．７Ｈｚ），７．２９（１Ｈ，ｍ），４．０６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１１．９Ｈｚ），３．７７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ），２．８７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．３，４．３Ｈｚ），１．６４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．３，５．４Ｈｚ），１．１２（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：１６１．３，１５９．７，１５５．７，１５５．６，１３０．３，１３０．１，１３０．１，１２９．３，１２９．３，１２９．０，１２８．９，１２８．３，１２８．３，１１７．６，１１７．４，１１４．７，１１４．６，５１．５，５１．５，３２．３，２２．３，２０．２．
【０１０６】
実施例１０：（Ｒ）−６−（３−クロロ−２，６−ジフルオロフェニル）−１−メチル−２，５，６，７−テトラヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−３−チオン
【化５５】
2019529459.tif 000057
実施例３と類似の方法で（４Ｓ）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−４−（３−クロロ−２，６−ジフルオロフェニル）ピロリジン−２−カルボン酸及びヨウ化メチルマグネシウムから化合物を調製し、白っぽい粉末として単離した。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：１１．７３（１Ｈ，ｂｒ  ｓ），７．６１（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝８．８，５．６Ｈｚ），７．２１（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝９．５Ｈｚ），４．４４（１Ｈ，ｑｕｉｎ，Ｊ＝８．６Ｈｚ），４．１３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．４，９．２Ｈｚ），３．７２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．６，７．９Ｈｚ），３．２３（１Ｈ，ｍ），２．８４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１５．５，８．１Ｈｚ），１．９７（３Ｈ，ｓ）．
１３Ｃ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：１６０．２，１６０．１，１５８．５，１５８．５，１５６．６，１５６．５，１５５，１５４．９，１５４．９，１２９．７，１２９．７，１２７．７，１１８．９，１１８．７，１１８．６，１１６．１，１１６．１，１１６．０，１１６．０，１１５．２，１１３．３，１１３．３，１１３．１，１１３．１，４８．５，３５．８，２８．７，９．４．
【０１０７】
実施例１１：（Ｓ）−６−（３−クロロ−２，６−ジフルオロフェニル）−１−メチル−２，５，６，７−テトラヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−３−チオン
【化５６】
2019529459.tif 000058
実施例３と類似の方法で（４Ｒ）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−４−（３−クロロ−２，６−ジフルオロフェニル）ピロリジン−２−カルボン酸及びヨウ化メチルマグネシウムから化合物を調製し、ライトベージュ色の粉末として単離した。
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：１１．７３（１Ｈ，ｂｒ  ｓ），７．６１（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝８．８，５．６Ｈｚ），７．２１（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝９．５Ｈｚ），４．４４（１Ｈ，ｑｕｉｎ，Ｊ＝８．６Ｈｚ），４．１３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．４，９．２Ｈｚ），３．７２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．６，７．９Ｈｚ），３．２３（１Ｈ，ｍ），２．８４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１５．５，８．１Ｈｚ），１．９７（３Ｈ，ｓ）．
１３Ｃ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：１６０．２，１６０．１，１５８．５，１５８．５，１５６．６，１５６．５，１５４．９，１５４．９，１２９．７，１２９．６，１２７．７，１１８．９，１１８．７，１１８．６，１１６．１，１１６．１，１１６．０，１１５．９，１１５．２，１１３．３，１１３．３，１１３．１，１１３．１，４８．５，３５．７，２８．７，９．４．
【０１０８】
実施例１２：（５ａＳ，６ａＲ）−５ａ−（３−ブロモ−２，６−ジフルオロフェニル）−１−メチル−５，５ａ，６，６ａ−テトラヒドロシクロプロパ［３，４］ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−３（２Ｈ）−チオン
【化５７】
2019529459.tif 000059
実施例３と類似の方法で２−（５−ブロモ−２，６−ジフルオロフェニル）アセトニトリル及び（Ｒ）−２−（クロロメチル）オキシランから化合物を調製し、白色の固体として単離した。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：１１．６８（１Ｈ，ｂｒ  ｓ），７．７４（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝８．４，５．９Ｈｚ），７．１５（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝９．２，１．２Ｈｚ），４．０１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．３Ｈｚ），３．７１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ），２．７２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．３，４．５Ｈｚ），２．０５（３Ｈ，ｓ），１．６５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．２，５．６Ｈｚ），１．２５（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．０Ｈｚ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：１６１．９，１６１．９，１６０．３，１６０．２，１５８．８，１５８．８，１５７．２，１５７．１，１５５．７，１３３．０，１３３．０，１３０．０，１１７．２，１１７．１，１１５．１，１１３．５，１１３．３，１０３．７，１０３．７，１０３．６，５１．４，２６．５，２１．８，２０．９，９．４．
【０１０９】
実施例１３：（５ａＳ，６ａＲ）−５ａ−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）−１−メチル−５，５ａ，６，６ａ−テトラヒドロシクロプロパ［３，４］ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−３（２Ｈ）−チオン
【化５８】
2019529459.tif 000060
工程１：（（１Ｒ，２Ｓ）−２−（アミノメチル）−２−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）シクロプロピル）メタノール
【化５９】
2019529459.tif 000061
撹拌した２−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）アセトニトリル（１０ｇ，４６．７ｍｍｏｌ）の無水テトラヒドロフラン（１００ｍＬ）溶液に室温にて不活性雰囲気下で（Ｒ）−２−（クロロメチル）オキシラン（４．３８ｍＬ，５６．１ｍｍｏｌ）を加えた。次いで反応物を０℃に冷却し、温度を０〜５℃の間に保ちながらテトラヒドロフラン中２Ｍのナトリウムビス（トリメチルシリル）アミド（４０．９ｍＬ，８２ｍｍｏｌ）を一滴ずつ加えた。その後すぐに、得られた赤色の混合物を室温にまで温め、３時間撹拌した。反応物を無水テトラヒドロフラン（１００ｍＬ）で希釈し、０℃に冷却し、水素化ホウ素ナトリウム（７．０７ｇ，１８７ｍｍｏｌ）を加え、その後三フッ化ホウ素ジエチルエーテラート（２３．６８ｍＬ，１８７ｍｍｏｌ）を一滴ずつ加えた。混合物を自然に室温に温め、一晩撹拌した。得られた浅黄色の懸濁液を次いで０℃に冷却し、２ＭのＨＣｌ（１４０ｍｌ，２８０ｍｍｏｌ）で慎重に反応を止めた。真空下でテトラヒドロフランを蒸発させ、水性相をジエチルエーテルで洗浄し（廃棄）、次いでｐＨ＝１０に塩基性化し（３ＭのＮａＯＨ）、ジクロロメタンで抽出した。有機相をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させて黄色の油を残した。収量：１１．７５ｇ、７３％
【０１１０】
工程２：（（（１Ｓ，２Ｒ）−１−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）メチル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル
【化６０】
2019529459.tif 000062
氷冷した（（１Ｒ，２Ｓ）−２−（アミノメチル）−２−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）シクロプロピル）メタノール（１１．７５ｇ，４２．９ｍｍｏｌ）のエタノール（１４５ｍＬ）溶液に二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（９．３５ｇ，４２．９ｍｍｏｌ）を加えた。溶液を室温で４時間撹拌した。次いで溶媒を蒸発させ、残留物をカラムで分離した。黄色の泡状物として表題の化合物を単離した。収量：１０．１ｇ、５６％。
【０１１１】
工程３：（１Ｓ，５Ｒ）−１−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）−４−ヒドロキシ−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−３−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル
【化６１】
2019529459.tif 000063
撹拌した二塩化オキサリル（２．６０ｍＬ，２９．７ｍｍｏｌ）の無水ジクロロメタン（６２．８ｍＬ）溶液に，−７８℃で３０分かけてＤＭＳＯ（４．２１ｍＬ，５９．４ｍｍｏｌ）の無水ジクロロメタン（１２．５ｍＬ）溶液を一滴ずつ加えた。反応混合物を低温で５分間撹拌し、次いで（（（１Ｓ，２Ｒ）−１−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）−２−（ヒドロキシメチル）シクロプロピル）メチル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１０．１ｇ，２７．０ｍｍｏｌ）の無水ジクロロメタン（２５ｍＬ）溶液を３０分かけて一滴ずつ加えた。混合物を−７８℃で１時間撹拌し、次いでトリエチルアミン（１８．８ｍＬ，１３５ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を徐々に室温まで温め、２時間撹拌した。その後すぐに、混合物を水で３回洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させて黄色の油を得た。収量：１０．１ｇ、８５％
【０１１２】
工程４：（１Ｓ，５Ｒ）−１−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）−４−シアノ−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−３−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル
【化６２】
2019529459.tif 000064
撹拌した（１Ｓ，５Ｒ）−１−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）−４−ヒドロキシ−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−３−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１０．１ｇ，２７．１ｍｍｏｌ）の無水ジクロロメタン（１３３ｍＬ）溶液に室温にて不活性雰囲気下でトリメチルシランカルボニトリル（９．７１ｍＬ，７２．４ｍｍｏｌ）を加えた。次いで、溶液を−７８℃に冷却し、三フッ化ホウ素ジエチルエーテラート（１０．０８ｍＬ，８０．０ｍｍｏｌ）を一滴ずつ加えた。反応混合物を−７８℃で４時間撹拌し、次いでＮａＨＣＯ３の飽和溶液を加え、混合物を室温まで温めた。有機相を分離し、水性相をジクロロメタンで抽出した。合わせた有機相をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させて１０．３ｇの黄色の油を得た。収率：８５％
【０１１３】
工程５：（１Ｒ，５Ｓ）−５−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）−３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−２−カルボン酸
【化６３】
2019529459.tif 000065
撹拌した（１Ｓ，５Ｒ）−１−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）−４−シアノ−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−３−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル（１０．３ｇ，２７．０ｍｍｏｌ）のエタノール（９３ｍＬ）溶液に室温で３ＭのＮａＯＨ（４５ｍＬ，１３５ｍｍｏｌ）溶液を加えた。溶液を８０℃で３時間加熱した。次いで、反応物を室温に冷却し、エタノールを蒸発させ、水性相を２ＮのＨＣｌ溶液で酸性化し、得られた固体を濾別し、ジクロロメタン／イソプロパノール（７：３）の混合物に溶解した。有機相をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させて黄色の半固体として表題の生成物を得た。収量：１０．５ｇ、７８％
【０１１４】
工程６：（１Ｓ，５Ｒ）−１−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）−４−（メトキシ（メチル）カルバモイル）−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−３−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル
【化６４】
2019529459.tif 000066
撹拌した（（１Ｒ，５Ｓ）−５−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）−３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−２−カルボン酸（２．５ｇ，６．２５ｍｍｏｌ）の無水ジクロロメタン（３６ｍＬ）溶液に窒素のもとでジ（１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メタノン（１．２１５ｇ，７．５０ｍｍｏｌ）を少しずつ加え、反応物を３０分間撹拌した。その後すぐに、Ｎ，Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩（０．７３１ｇ，７．５０ｍｍｏｌ）を加え、混合物を一晩撹拌した。次いで反応混合物をジクロロメタンで希釈し（約６０ｍＬに）、水で洗浄した。有機相をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させて黄色の油として表題の生成物を得た。収量：１．５７ｇ、４５％。
【０１１５】
工程７：（１Ｓ，５Ｒ）−４−アセチル−１−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−３−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル
【化６５】
2019529459.tif 000067
撹拌した１−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）−４−（メトキシ（メチル）カルバモイル）−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−３−カルボン酸（１Ｓ，５Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル（１．５７ｇ，３．５４ｍｍｏｌ）の無水テトラヒドロフラン（１５ｍＬ）溶液に０℃にてヨウ化メチルマグネシウム（３．５４ｍｌ，１０．６２ｍｍｏｌ）を一滴ずつ加えた。反応混合物を低温で１時間撹拌し、次いで１ＭのＨＣｌ（１４．１７ｍｌ，１４．１７ｍｍｏｌ）の添加によって反応を止めた。混合物を酢酸エチル／石油エーテル（１：１）の混合物で抽出した。有機相をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させて１．３４ｇの黄色の油を得た。収率：８６％
【０１１６】
工程８：１−（（１Ｒ，５Ｓ）−５−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−２−イル）エタン−１−オン塩酸塩
【化６６】
2019529459.tif 000068
４−アセチル−１−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−３−カルボン酸（１Ｓ，５Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル（１．３３ｇ，３．３４ｍｍｏｌ）の撹拌した溶液にジオキサン中４ＭのＨＣｌ（６．６８ｍＬ，２６．７ｍｍｏｌ）を加え、次いで混合物を室温で２時間撹拌した。その後すぐに、ジエチルエーテルを加え、混合物を蒸発乾固させて橙色の油を得た。収量：１．２ｇ、９１％
【０１１７】
工程９：（５ａＳ，６ａＲ）−５ａ−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）−１−メチル−５，５ａ，６，６ａ−テトラヒドロシクロプロパ［３，４］ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−３（２Ｈ）−チオン
【化６７】
2019529459.tif 000069
エタノール（１３．５ｍＬ）と水（１３．５ｍＬ）の混合物における１−（（１Ｒ，５Ｓ）−５−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）−３−アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン−２−イル）エタノン塩酸塩（１．１ｇ，３．２９ｍｍｏｌ）の撹拌した溶液にチオシアン酸カリウム（０．３５１ｇ，３．６２ｍｍｏｌ）を加え、その後、ｃｃ．ＨＣｌ（０．１３５ｍＬ，１．６４４ｍｍｏｌ）を加えた。溶液を還流で１時間加熱した。反応物を室温に冷却し、次いでエタノールを除いた。水性相をジクロロメタンで抽出し、有機相をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発させた。ジクロロメタン／メタノールの混合物でのクロマトグラフィによってベージュ色の泡状物として表題の化合物を得た。収量：０．９ｇ、７７％
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：１１．６５（１Ｈ，ｓ），７．５９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．７，２．５Ｈｚ），７．５５（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝８．７，４．５，２．６Ｈｚ），７．２４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．１，８．７Ｈｚ），４．０５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ），３．７６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ），２．８７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．３，４．３Ｈｚ），２．０４（３Ｈ，ｓ），１．６４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．２，５．３Ｈｚ），１．１２（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：１６１．８，１６０．２，１５５．７，１３２．９，１３２．９，１３２．３，１３２．２，１３０．２，１２９．４，１２９．３，１１８，１１７．８，１１６．２，１１６．２，１１４．８，５１．５，５１．５，３２．２，２２．２，２０．２，９．３．
【０１１８】
実施例１４：（５ａＳ，６ａＲ）−５ａ−（３−クロロ−２，６−ジフルオロフェニル）−１−メチル−５，５ａ，６，６ａ−テトラヒドロシクロプロパ［３，４］ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−３（２Ｈ）−チオン
【化６８】
2019529459.tif 000070
実施例１３と類似の方法で２−（３−クロロ−２，６−ジフルオロフェニル）アセトニトリルから化合物を調製した。ベージュ色の固体として生成物を単離した。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：１１．６８（１Ｈ，ｓ），７．６３（１Ｈ，ｔｄ，Ｊ＝８．６，５．８Ｈｚ），７．２１（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．６Ｈｚ），４．０１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．２Ｈｚ），３．７２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．２Ｈｚ），２．７３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．２，４．４Ｈｚ），２．０５（３Ｈ，ｓ），１．６５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．２，５．６Ｈｚ），１．２５（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．０Ｈｚ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：１６１．２，１６１．２，１５９．６，１５９．６，１５７．８，１５７．８，１５６．２，１５６．１，１５５．７，１３０．３，１３０．２，１２９．９，１１７．２，１１７．１，１１７，１１５．７，１１５．７，１１５．６，１１５．６，１１５．１，１１２．９，１１２．９，１１２．８，１１２．８，５１．４，２６．４，２１．７，２０．８，９．４．
【０１１９】
実施例１５：（Ｒ）−６−（３−ブロモ−２，６−ジフルオロフェニル）−１−メチル−２，５，６，７−テトラヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−３−チオン
【化６９】
2019529459.tif 000071
実施例２０と類似の方法で３−ブロモ−２，６−ジフルオロベンズアルデヒドから化合物を調製し、ベージュ色の粉末として単離した。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：１１．７３（１Ｈ，ｂｒ  ｓ），７．７２（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝８．９，８．１，５．８Ｈｚ），７．１６（１Ｈ，ｍ），４．４４（１Ｈ，五重項，Ｊ＝８．６Ｈｚ），４．１３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．５，９．２Ｈｚ），３．７１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．６，７．９Ｈｚ），３．２３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１５．５，９．３Ｈｚ），２．８４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１５．４，８．１Ｈｚ），１．９７（３Ｈ，ｓ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：１６０．８，１６０．８，１５９．２，１５９．１，１５７．５，１５７．５，１５５．９，１５５．８，１５５，１３２．４，１３２．４，１２７．７，１１８．８，１１８．７，１１８．６，１１５．１，１１３．８，１１３．８，１１３．６，１１３．６，１０４．１，１０４，１０３．９，１０３．９，４８．５，３５．８，２８．７，９．３．
【０１２０】
実施例１６：（Ｓ）−６−（３−ブロモ−２，６−ジフルオロフェニル）−１−メチル−２，５，６，７−テトラヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−３−チオン
【化７０】
2019529459.tif 000072
実施例２０と類似の方法で触媒として４−（（Ｒ）−ヒドロキシ（（１Ｓ，２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−５−ビニルキヌクリジン−２−イル）メチル）キノリン−６−オール（ＣＡＳ＃５２４−６３−０）を用いて３−ブロモ−２，６−ジフルオロベンズアルデヒドから化合物を調製し、ベージュ色の粉末として単離した。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：１１．７２（１Ｈ，ｂｒ  ｓ），７．７２（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝８．９，８．１，５．８Ｈｚ），７．１６（１Ｈ，ｍ），４．４４（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．７Ｈｚ），４．１３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．５，９．２Ｈｚ），３．７１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．６，７．９Ｈｚ），３．２３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１５．５，９．３Ｈｚ），２．８４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１５．５，８．１Ｈｚ），１．９７（３Ｈ，ｓ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：１６０．８，１６０．８，１５９．２，１５９．１，１５７．５，１５７．５，１５５．９，１５５．８，１５５，１３２．４，１３２．４，１２７．７，１１８．８，１１８．７，１１８．６，１１５．１，１１３．８，１１３．８，１１３．６，１１３．６，１０４．１，１０４，１０３．９，１０３．９，４８．５，３５．８，２８．７，９．３．
【０１２１】
実施例１７：（５ａＳ，６ａＲ）−５ａ−（３−クロロ−５−フルオロフェニル）−１−メチル−５，５ａ，６，６ａ−テトラヒドロシクロプロパ［３，４］ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−３（２Ｈ）−チオン
【化７１】
2019529459.tif 000073
実施例１３と類似の方法で２−（３−クロロ−５−フルオロフェニル）アセトニトリルから化合物を調製した。ベージュ色の固体として生成物を単離した。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：１１．６４（１Ｈ，ｓ），７．３０（１Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝８．７，２．１Ｈｚ），７．２８（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝１．６Ｈｚ），７．２３（１Ｈ，ｄｔ，Ｊ＝１０．０，１．８Ｈｚ），４．１９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．２Ｈｚ），３．９９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ），３．００（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．３，４．３Ｈｚ），２．０３（３Ｈ，ｓ），１．６４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．３，５．２Ｈｚ），１．１４（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：１６３．１，１６１．４，１５６，１４５，１４４．９，１３４．１，１３４．１，１３０．２，１２３，１２３，１１４．５，１１４．３，１１４．１，１１２．９，１１２．８，５０．８，３６，３６，２５．２，２２．２，９．３．
【０１２２】
実施例１８：（５ａＳ，６ａＲ）−５ａ−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）−１−（メチル−ｄ３）−５，５ａ，６，６ａ−テトラヒドロシクロプロパ［３，４］ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−３（２Ｈ）−チオン
【化７２】
2019529459.tif 000074
実施例１３と類似の方法で２−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）アセトニトリルから化合物を調製した。ベージュ色の固体として生成物を単離した。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：１１．６５（１Ｈ，ｓ），７．５９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．７，２．６Ｈｚ），７．５５（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝８．７，４．５，２．６Ｈｚ），７．２３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．１，８．７Ｈｚ），４．０５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ），３．７６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ），２．８７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．２，４．３Ｈｚ），１．６４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．３，５．４Ｈｚ），１．１２（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：１６１．８，１６０．２，１５５．７，１３２．９，１３２．９，１３２．３，１３２．２，１３０．３，１２９．４，１２９．３，１１８，１１７．８，１１６．２，１１６．２，１１４．７，５１．５，５１．５，３２．３，２２．２，２０．２．
【０１２３】
実施例１９：（Ｓ）−６−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）−１−メチル−２，５，６，７−テトラヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−３−チオン
【化７３】
2019529459.tif 000075
実施例２０と類似の方法で触媒として４−（（Ｒ）−ヒドロキシ（（１Ｓ，２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−５−ビニルキヌクリジン−２−イル）メチル）キノリン−６−オール（ＣＡＳ＃５２４−６３−０）を用いて５−ブロモ−２−フルオロベンズアルデヒドから化合物を調製し、灰白色の固体として単離した。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：１１．７０（１Ｈ，ｂｒ  ｓ），７．５８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．７，２．５Ｈｚ），７．５３（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝８．７，４．５，２．５Ｈｚ），７．２３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．３，８．８Ｈｚ），４．２０（１Ｈ，五重項，Ｊ＝８．１Ｈｚ），４．１１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．９，８．１Ｈｚ），３．７１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．３，７．９Ｈｚ），３．１８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１５．２，８．１Ｈｚ），２．８５（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１５．２，８．３，１．２Ｈｚ），１．９８（３Ｈ，ｓ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：１６０．３，１５８．７，１５５．１，１３１．８，１３１．８，１３１．４，１３１．４，１３０．６，１３０．５，１２７．５，１１８，１１７．９，１１６．５，１１６．４，１１５．４，４９，４０．５，２９，９．３．
【０１２４】
実施例２０：（Ｒ）−１−メチル−６−（２，３，６−トリフルオロフェニル）−６，７−ジヒドロ−２Ｈ−ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−３（５Ｈ）−チオン
【化７４】
2019529459.tif 000076
工程１：（Ｅ）−１，２，４−トリフルオロ−３−（２−ニトロビニル）ベンゼン
【化７５】
2019529459.tif 000077
外部を冷却した状態で内部温度を５〜１０℃の間で維持しながら、メタノール（９０ｍＬ）と１．５Ｍ水酸化ナトリウム（１３１ｍＬ，１９７ｍｍｏｌ）の溶液に５℃で２，３，６−トリフルオロベンズアルデヒド（３０ｇ，１８７ｍｍｏｌ）とニトロメタン（１６ｍＬ，２９９ｍｍｏｌ）のメタノール（６０ｍＬ）溶液を４０分かけて一滴ずつ加えた。次いで反応物を低温で３０分間撹拌し、次いで撹拌しながら、０〜１０℃で酢酸（１６ｍＬ，２８１ｍｍｏｌ）の溶液を一気に加えた。得られた混合物をジクロロメタン（約２００ｍＬ）で抽出し、有機相をブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過してジクロロメタンにおける１−（３−ブロモ−２，６−ジフルオロフェニル）−２−ニトロエタノール溶液を得た。その後すぐに、上記の溶液（約２７０ｍＬ）をＮ，Ｎ−ジメチルピリジン−４−アミン（２．２８９ｇ，１８．７４ｍｍｏｌ）で処理し、その後、無水酢酸（２１．２６ｍｌ，２２５ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で一晩撹拌した。次いで反応混合物を水及び重炭酸ナトリウム溶液でそれぞれ洗浄した。有機相をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発乾固させた。粗生成物をイソプロパノールと水の混合物から結晶化して帯薄茶色の固体を得た。収量：３８．１ｇ、８８％
【０１２５】
工程２：（Ｒ）−２−（２−ニトロ−１−（２，３，６−トリフルオロフェニル）エチル）マロン酸ジエチル
【化７６】
2019529459.tif 000078
（Ｅ）−１，２，４−トリフルオロ−３−（２−ニトロビニル）ベンゼン（５ｇ，２４．６２ｍｍｏｌ）と１−（３，５−ビス（トリフルオロメチル）フェニル）−３−（（１Ｒ，２Ｒ）−２−（ジメチルアミノ）シクロヘキシル）チオ尿素（ＣＡＳ＃６２０９６０−２６−１）（０．３０５ｇ，０．７３８ｍｍｏｌ）の無水トルエン（４０ｍｌ）冷溶液にマロン酸ジエチル（４．８８ｍＬ，３２．０ｍｍｏｌ）を加え、溶液を−２０℃（冷凍庫にて）で１６時間保持し、次いで反応物を室温まで温め、３０ｍＬの１ＭのＨＣｌ溶液で洗浄し、ＭｇＳＯ４上で乾燥させ、シリカのパッドを介して濾過し、蒸発乾固させて帯黄色の油として２−（２−ニトロ−１−（２，３，６−トリフルオロフェニル）エチル）マロン酸（Ｒ）−ジエチルを得た。収量：１０．３ｇ、９８％
【０１２６】
工程３：（４Ｒ）−２−オキソ−４−（２，３，５−トリフルオロフェニル）ピロリジン−３−カルボン酸エチル
【化７７】
2019529459.tif 000079
２−（２−ニトロ−１−（２，３，６−トリフルオロフェニル）エチル）マロン酸（Ｒ）−ジエチル（１０．３ｇ，２２．６８ｍｍｏｌ）のメタノール（１１５ｍＬ）懸濁液に塩化ニッケル（ＩＩ）６水和物（５．３９ｇ，２２．６８ｍｍｏｌ）を加え、その後、氷冷しながら３０分かけて水素化ホウ素ナトリウム（６．８６ｇ，１８１ｍｍｏｌ）を少しずつ加えた。混合物を室温で５時間撹拌し、次いで２ＭのＨＣｌ溶液（６０ｍＬ）で反応を止め、その後、ｃｃ.アンモニア（５ｍＬ）を加えた。次いで混合物をジクロロメタン（１５０ｍＬ）で希釈し、６ＭのＨＣｌでｐＨ＝２に酸性化し、１６時間撹拌して透明な溶液を得た。その後すぐに、混合物をジクロロメタンで抽出し、有機相をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発乾固させた。石油エーテルからの結晶化によってライトベージュ色の粉末として表題の生成物を得た（収量：６．１９ｇ、９５％）。
【０１２７】
工程４：（４Ｒ）−２−オキソ−４−（２，３，５−トリフルオロフェニル）ピロリジン−３−カルボン酸
【化７８】
2019529459.tif 000080
撹拌した２−オキソ−４−（２，３，６−トリフルオロフェニル）ピロリジン−３−カルボン酸（４Ｒ）−エチル（６ｇ，２０．８９ｍｍｏｌ）のエタノール（９０ｍＬ）溶液に１Ｍの水酸化ナトリウム（２５．１ｍＬ，２５．１ｍｍｏｌ）を加えた。得られた懸濁液を室温で２時間撹拌し、次いで真空下で有機物を取り除き、残留物を水（５０ｍＬ）に溶解した。６ＭのＨＣｌによる酸性化で生成物を結晶化した。得られた結晶を回収し、冷水で洗浄し、５０℃での真空下で乾燥させてベージュ色の粉末として生成物を得た。収量：４．７５ｇ、８８％
【０１２８】
工程５：（Ｒ）−４−（２，３，５−トリフルオロフェニル）ピロリジン−２−オン
【化７９】
2019529459.tif 000081
（４Ｒ）−２−オキソ−４−（２，３，６−トリフルオロフェニル）ピロリジン−３−カルボン酸（４．６４ｇ，１７．９０ｍｍｏｌ）のトルエン（１５０ｍＬ）溶液を還流下で３時間撹拌し、その後すぐに、混合物を３０ｍＬに蒸発させ、その後、石油エーテルの添加によってベージュ色の粉末として表題の生成物を得た。収量：３．４５ｇ、９０％。
【０１２９】
工程６：（Ｒ）−２−オキソ−４−（２，３，５−トリフルオロフェニル）ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル
【化８０】
2019529459.tif 000082
撹拌した（Ｒ）−４−（２，３，６−トリフルオロフェニル）ピロリジン−２−オン（３．３５ｇ，１５．５７ｍｍｏｌ））の無水ジクロロメタン（１４ｍＬ）溶液に室温で二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（５．１０ｇ，２３．３５ｍｍｏｌ）を加え、その後、Ｎ，Ｎ−ジメチルピリジン−４−アミン（１．９０２ｇ，１５．５７ｍｍｏｌ）を加えた。次いで混合物を室温で２４時間撹拌し、次いでジクロロメタンで８０ｍＬに希釈し、１０％クエン酸（８０ｍＬ）で洗浄した。有機相を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、シリカのパッドを介して濾過し、次いで濾液を蒸発乾固させた。石油エーテルからの結晶化によって灰白色の粉末として２−オキソ−４−（２，３，６−トリフルオロフェニル）ピロリジン−１−カルボン酸（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチルを得た。収量：４．１５ｇ、８５％
【０１３０】
工程７：（４Ｒ）−２−ヒドロキシ−４−（２，３，５−トリフルオロフェニル）ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル
【化８１】
2019529459.tif 000083
無水ジエチルエーテル（３９ｍＬ）とテトラヒドロフラン（１３ｍＬ）の混合物における２−オキソ−４−（２，３，６−トリフルオロフェニル）ピロリジン−１−カルボン酸（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル（４ｇ，１２．６９ｍｍｏｌ）の撹拌した溶液に、５〜７℃にて窒素のもとで、トルエン中６５％のＲＥＤ−Ａｌ（水素化ビス（２−メトキシエトキシ）アルミニウム（ＩＩＩ）ナトリウム）（２．６７ｍＬ，８．８８ｍｍｏｌ）を一滴ずつ加え、混合物を低温で１時間撹拌した。その後すぐに、重炭酸ナトリウム溶液（約４０ｍＬ）で混合物の反応を止め、混合物を３０分間撹拌した。有機相をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発乾固させて帯黄色の油として生成物を得た（収量：４．５５ｇ、９６％）。
【０１３１】
工程８：（４Ｒ）−２−シアノ−４−（２，３，５−トリフルオロフェニル）ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル
【化８２】
2019529459.tif 000084
撹拌した２−メトキシ−４−（２，３，６−トリフルオロフェニル）ピロリジン−１−カルボン酸（４Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル（４．３３ｇ，１１．７６ｍｍｏｌ）の無水ジクロロメタン（９０ｍＬ）溶液にトリメチルシランカルボニトリル（３．１５ｍＬ，２３．５２ｍｍｏｌ）を加え、その後、−７０℃で三フッ化ホウ素ジエチルエーテラート（３．２８ｍＬ，２５．９ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を低温で４時間撹拌し、重炭酸ナトリウム溶液で反応を止め、次いで撹拌しながら室温まで温めた。有機相をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、真空下で蒸発乾固させて帯黄色の油として表題の化合物を得た（収量：４．４１ｇ、９８％）。
【０１３２】
工程９：（４Ｒ）−２−カルバモイル−４−（２，３，６−トリフルオロフェニル）ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル
【化８３】
2019529459.tif 000085
アセトン（５４ｍＬ）と水（１８ｍＬ）の混合物における２−シアノ−４−（２，３，６−トリフルオロフェニル）ピロリジン−１−カルボン酸（４Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル（４．４ｇ，１１．４６ｍｍｏｌ）の撹拌した溶液に、尿素過酸化水素複合体（５．３９ｇ，５７．３ｍｍｏｌ）を加え、その後、炭酸カリウム（０．３１７ｇ，２．２９２ｍｍｏｌ）を加え、反応物を室温で１６時間撹拌した。次いで真空下で油が分離するまでアセトンを部分的に取り除いた。混合物を水及び石油エーテルで希釈し、５〜７℃で撹拌しながら１時間熟成した（結晶化が起きた）。固体を回収し、水、石油エーテルで洗浄し、乾燥させて２−カルバモイル−４−（２，３，６−トリフルオロフェニル）ピロリジン−１−カルボン酸（４Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチルを得た。収量：３．４６ｇ、８８％。
【０１３３】
工程１０：（４Ｒ）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−４−（２，３，６−トリフルオロフェニル）ピロリジン−２−カルボン酸
【化８４】
2019529459.tif 000086
２−カルバモイル−４−（２，３，６−トリフルオロフェニル）ピロリジン−１−カルボン酸(４Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル（３．３６ｇ，９．７６ｍｍｏｌ）の２ＭのＨＣｌ（７３ｍＬ，１４６ｍｍｏｌ）における撹拌した懸濁液を３時間還流して最少量の黒っぽい不溶性物質を伴った透明な溶液を得た。室温に冷却した後、固体を濾別し、濾液を真空下で濃縮した。残留物を水（約５０ｍＬ）に溶解し、１ＭのＮａＯＨ（１９．５２ｍＬ，１９．５２ｍｍｏｌ）の添加によってｐＨを７に合わせた。次いで溶液をおよそ５０ｍＬに濃縮し、メタノール（５５ｍＬ）を加え、その後、二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（２．３４３ｇ，１０．７３ｍｍｏｌ）を加え、混合物を４５分間撹拌した。次いで真空下でメタノールを除き、残留物を水（２５ｍＬ）で希釈し、石油エーテルで洗浄した。２ＭのＨＣｌの添加によって水性相をｐＨ＝１〜２に酸性化し、次いでＤＣＭ（５０ｍＬ）で抽出した。有機相をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、蒸発乾固させてライトベージュ色の粉末として（４Ｒ）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−４−（２，３，６−トリフルオロフェニル）ピロリジン−２−カルボン酸を得た。収量：２．８ｇ、８３％。
【０１３４】
工程１１〜１４：（Ｒ）−１−メチル−６−（２，３，６−トリフルオロフェニル）−２，５，６，７−テトラヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−３−チオン
【化８５】
2019529459.tif 000087
実施例１３（工程６〜９）と類似の方法で（４Ｒ）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−４−（２，３，６−トリフルオロフェニル）ピロリジン−２−カルボン酸から化合物を調製し、灰白色の粉末として単離した。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：１１．７２（１Ｈ，ｂｒ  ｓ），７．４７（１Ｈ，ｑｄ，Ｊ＝９．４，５．０Ｈｚ），７．１７（１Ｈ，ｔｄｄ，Ｊ＝９．６，９．６，３．７，１．９Ｈｚ），４．４３（１Ｈ，五重項，Ｊ＝８．７Ｈｚ），４．１４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．３，９．２Ｈｚ），３．７３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．５，８．１Ｈｚ），３．２４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１５．６，９．２Ｈｚ），２．８６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１５．４，８．４Ｈｚ），１．９７（３Ｈ，ｓ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：１５６．９，１５６．９，１５６．９，１５６．９，１５５．３，１５５．３，１５５．３，１５５．３，１５５，１４９．１，１４９，１４９，１４８．９，１４７．５，１４７．５，１４７．４，１４７．４，１４７．３，１４７．３，１４５．９，１４５．９，１４５．８，１４５．８，１２７．６，１１８．９，１１８．８，１１８．８，１１８．７，１１６．５，１１６．４，１１６．３，１１６．３，１１５．２，１１２，１１２，１１１．９，１１１．９，１１１．８，１１１．８，１１１．８，１１１．７，４８．４，３５．７，２８．６，９．３．
【０１３５】
実施例２１：（Ｒ）−６−（５−ブロモ−２−フルオロフェニル）−１−メチル−２，５，６，７−テトラヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−３−チオン
【化８６】
2019529459.tif 000088
実施例２０と類似の方法で５−ブロモ−２−フルオロベンズアルデヒドから化合物を調製し、灰白色の固体として単離した。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：１１．７０（１Ｈ，ｂｒ  ｓ），７．５８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．６，２．５Ｈｚ），７．５３（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝８．７，４．５，２．５Ｈｚ），７．２３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．３，８．７Ｈｚ），４．２０（１Ｈ，五重項，Ｊ＝８．１Ｈｚ），４．１１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．９，８．２Ｈｚ），３．７１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．３，７．９Ｈｚ），３．１８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１５．２，８．１Ｈｚ），２．８５（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１５．２，８．４，１．１Ｈｚ），１．９８（３Ｈ，ｓ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：１６０．３，１５８．７，１５５．１，１３１．８，１３１．８，１３１．４，１３１．４，１３０．６，１３０．５，１２７．６，１１８，１１７．９，１１６．５，１１６．４，１１５．４，４９，４０．５，２９，９．３．
【０１３６】
実施例２２：（Ｒ）−６−（２，６−ジフルオロフェニル）−１−メチル−２，５，６，７−テトラヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−３−チオン
【化８７】
2019529459.tif 000089
実施例２０と類似の方法で２，６−ジフルオロベンズアルデヒドから化合物を調製し、灰白色の固体として単離した。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：１１．７２（１Ｈ，ｂｒ  ｓ），７．４０（１Ｈ，ｔｔ，Ｊ＝８．４，６．６Ｈｚ），７．１３（２Ｈ，ｍ），４．４１（１Ｈ，五重項，Ｊ＝８．８Ｈｚ），４．１２（１Ｈ，ｍ），３．７０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．４，８．４Ｈｚ），３．２１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１５．２，９．２Ｈｚ），２．８４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１５．４，８．７Ｈｚ），１．９７（３Ｈ，ｓ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：１６１．６，１６１．６，１６０，１５９．９，１５５，１２９．８，１２９．７，１２９．７，１２７．８，１１６．６，１１６．５，１１６．４，１１５．２，１１２．３，１１２．２，１１２．１，１１２．１，４８．６，３５．４，２８．８，９．３．
【０１３７】
実施例２３：（Ｓ）−６−（５−クロロ−２−フルオロフェニル）−１−メチル−２，５，６，７−テトラヒドロ−３Ｈ−ピロロ［１，２−ｃ］イミダゾール−３−チオン
【化８８】
2019529459.tif 000090
実施例２０と類似の方法で触媒として４−（（Ｒ）−ヒドロキシ（（１Ｓ，２Ｓ，４Ｓ，５Ｒ）−５−ビニルキヌクリジン−２−イル）メチル）キノリン−６−オール（ＣＡＳ＃５２４−６３−０）を用いて５−クロロ−２−フルオロベンズアルデヒドから化合物を調製し、ベージュ色の固体として単離した。
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：１１．７０（１Ｈ，ｂｒ  ｓ），７．４６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝６．５，２．７Ｈｚ），７．４０（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝８．８，４．４，２．６Ｈｚ），７．２９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．１，８．８Ｈｚ），４．２０（１Ｈ，五重項，Ｊ＝８．１Ｈｚ），４．１１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．８，８．１Ｈｚ），３．７２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１１．３，７．９Ｈｚ），３．１８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１５．１，８．１Ｈｚ），２．８５（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１５．２，８．３，１．２Ｈｚ），１．９８（３Ｈ，ｓ）．
１３Ｃ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：１５９．８，１５８．２，１５５．１，１３０．２，１３０．１，１２８．９，１２８．８，１２８．５，１２８．５，１２７．６，１１７．６，１１７．４，１１５．５，４９．１，４９．１，４０．５，２９，９．３．
【０１３８】
Ｇ．ドーパミン−β−ヒドロキシラーゼ阻害アッセイ
以下の細胞アッセイを用いて、化合物のＤβＨ活性を阻害する能力を評価してもよい。本発明の目的では、この細胞アッセイにて化合物が１０μｍで≦２０％の「対照の％」での活性を示せば、化合物は「ＤβＨの阻害剤」であると見なされる。本発明の好まれる化合物（上記の具体的な実施例のほとんどを含む）はこの細胞アッセイにて１．０μｍで≦５０％の「対照の％」での活性を示す。本発明のさらに好まれる化合物はこの細胞アッセイにて１．０μｍで≦２０％の「対照の％」での活性を示す。本発明の特に好まれる化合物はこの細胞アッセイにて１００ｎｍで≦５０％の「対照の％」での活性を示す。
【０１３９】
ＬＧＣ標準（Ｔｅｄｄｉｎｇｔｏｎ，ＵＫ）から入手したＳＫ−Ｎ−ＳＨ細胞（ＡＴＣＣ  ＨＴＢ−１１）を、２５ｍＭのＨｅｐｅｓ、１００Ｕ／ｍＬのペニシリンＧ、０．２５μｇ／ｍＬのアンホテリシンＢ、１００μｇ／ｍＬのストレプトマイシン及び１０％Ｇｉｂｃｏ（登録商標）ウシ胎児血清で補完したＥａｇｌｅの最少必須培地で培養した。細胞を５％ＣＯ２−９５％空気の湿気のある雰囲気にて３７℃でＴ１６２ｃｍフラスコ（Ｃｏｒｎｉｎｇ，ＮＹ）において増殖させた。回収によりも４時間前にウシ胎児血清を細胞から取り除いた。
【０１４０】
細胞のホモジネートの調製については、培地を取り除き、細胞の単層を５０ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ７．４で洗浄した。その後、細胞をフラスコから剥がし、５０ｍＭのＴｒｉｓ、ｐＨ７．４に再浮遊させた。短いストロークでのＳｉｌｅｎｔＣｒｕｓｈｅｒ  Ｍ（Ｈｅｉｄｏｌｐｈ）によって細胞浮遊液をホモジネートし、得られたホモジネートを等分し、−８０℃で凍結保存した。
【０１４１】
ＢＳＡ（５０〜２５０μｇ／ｍＬ）の標準曲線を用いてＢｉｏＲａｄタンパク質アッセイ（ＢｉｏＲａｄ）によって細胞ホモジネートにて総タンパク質を定量した。
【０１４２】
ＤβＨの活性は、チラミンのオクトパミンへの酵素的な水酸化に基づくＮａｇａｔｓｕ及びＵｄｅｎｆｒｉｅｎｄ（Ｎａｇａｔｓｕ，Ｔ．  ａｎｄ  Ｓ．Ｕｄｅｎｆｒｉｅｎｄ：”Ｐｈｏｔｏｍｅｔｒｉｃ  ａｓｓａｙ  ｏｆ  ｄｏｐａｍｉｎｅ−ｈｙｄｒｏｘｙｌａｓｅ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｉｎ  ｈｕｍａｎ  ｂｌｏｏｄ．”Ｃｌｉｎ．Ｃｈｅｍ．１８（９）：９８０−３，１９７２）の方法を修正したものによって測定した。形成されたオクトパミンは続いてｐ−ヒドロキシベンズアルデヒドに酸化され、分光光度計で測定される。手短には、反応混合物（総容量：５００μＬ）は、細胞ホモジネート（７５μｇ総タンパク質）、酢酸ナトリウム：ｐＨ５．０（２００ｍＭ）、ＮＥＭ（３０ｍＭ）、ＣｕＳＯ４（５μＭ）、カタラーゼ水溶液（０．５ｍｇ／ｍＬ）、パルギリン−ＨＣｌ（１ｍＭ）、フマル酸ナトリウム（１０ｍＭ）、アスコルビン酸（１０ｍＭ）、阻害剤またはビヒクル及びチラミン（２５ｍＭ）を含有した。３７℃での１０分間の予備インキュベートの後、チラミンの添加によって反応を開始した。反応は３７℃で４５分間行った後、５０μＬのＰＣＡ（２Ｍ）で終結させた。試料を１６１００ｇで３分間遠心分離し、上清を固相抽出に供した。固相抽出は、予めＭｉｌｌｉＱ水で平衡化したＳＰＥカートリッジＩＳＯＬＵＴＥ  ＳＣＸ−３（１００ｍｇ，１ｍＬ）またはＳＰＥ  ２ｍＬで固定した９６ウェルプレートＩＳＯＬＵＴＥ  ＳＣＸ−３（１００ｍｇ）を用いて行った。カラム／プレートを１５０ｇで２分間遠心した。溶離液を捨て、マトリクスを１ｍＬのＭｉｌｌｉＱ水で洗浄し、その後、２×０．２５ｍＬの水酸化アンモニウム（４Ｍ）でオクトパミンを溶出した。オクトパミンのｐ−ヒドロキシベンズアルデヒドへの酸化は１００μＬの過ヨウ素酸ナトリウム（２％）で６分間行い、１００μＬのピロ亜硫酸ナトリウム（１０％）で停止させた。吸光度はＳｐｅｃｔｒａｍａｘマイクロプレートリーダー（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ，Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ，ＣＡ）にて３３０ｎｍで測定した。酵素反応はすべて２連で行った。結果は調べた阻害剤濃度における対照の％での活性として以下の表にて報告する。
【０１４３】
さらに、ＤβＨの活性を阻害する化合物の能力は、以下のアッセイを用いてヒト血漿にて評価されてもよい。本発明の目的では、このアッセイにて化合物が１０μｍで≦２０％の「対照の％」での活性を示せば、化合物は「ＤβＨの阻害剤」であると見なされる。本発明の好まれる化合物（上記の具体的な実施例のほとんどを含む）はこの細胞アッセイにて１．０μｍで≦５０％の「対照の％」での活性を示す。本発明のさらに好まれる化合物はこの細胞アッセイにて１．０μｍで≦２０％の「対照の％」での活性を示す。本発明の特に好まれる化合物はこの細胞アッセイにて１００ｎｍで≦５０％の「対照の％」での活性を示す。
【０１４４】
ヒト血漿におけるドーパミンベータヒドロキシラーゼ活性は、軽微な改変と共に以前開発された方法（Ｎａｇａｔｓｕ，Ｔ．  ａｎｄ  Ｕｄｅｎｆｒｉｅｎｄ，Ｓ．Ｐｈｏｔｏｍｅｔｒｉｃ  ａｓｓａｙ  ｏｆ  ｄｏｐａｍｉｎｅ−β−ｈｙｄｒｏｘｙｌａｓｅ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｉｎ  ｈｕｍａｎ  ｂｌｏｏｄ．Ｃｌｉｎ．Ｃｈｅｍ．１８（９）９８０−９８３，１９７２）によって測定した。カタラーゼ、Ｎ−エチルマレイミド、チラミン、フマル酸二ナトリウム、パルギリン、酢酸ナトリウム、アスコルビン酸、硫酸銅及びオクトパミンはＳｉｇｍａ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，Ｍｏ．６３１７８から入手した。ヒト血漿試料は健常ドナーから入手した（Ｉｎｓｔｉｔｕｔｏ  Ｐｏｒｔｕｇｕｅｓ  ｄｏ  Ｓａｎｇｕｅ  Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｃａｏ，Ｃｅｎｔｒｏ  Ｓａｎｇｕｅ  Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｃａｏ，Ｐｏｒｔｏ，Ｐｏｒｔｕｇａｌ）。採取の日から血漿は使用まで−８０℃で保存した。試験化合物は当初ジメチルスルホキシドにて１０ｍＭの濃度で調製し、ジメチルスルホキシドで必要な濃度に希釈した。試験化合物はさらに、調べる最終濃度の２０倍の濃度に超純水で希釈した。試験化合物の最終濃度は、１０、１００及び１０００ｎＭだった。インキュベート緩衝液を構成するのに使用した種々の試薬は前もって混合し、以下の成分：酢酸ナトリウム緩衝液（１Ｍ、ｐＨ５．０、１８ｍｌ）、フマル酸ナトリウム（０．２Ｍ、４．５ｍｌ）、アスコルビン酸（０．２Ｍ、４．５ｍｌ、新たに調製する）、パルギリン（２０ｍＭ、新たに調製する、４．５ｍｌ）、Ｎ−エチルマレイミド（０．２Ｍ、４．５ｍｌ）、カタラーゼ（１００００Ｕ／ｍｌ、９ｍｌ）、硫酸銅（２０μＭ、４．５ｍｌ）及び４．５の超純水から成った。標準のインキュベート混合物（総容量：９５０μＬ）は、５０μＬの化合物またはビヒクル（ジメチルスルホキシド２％）；７００μＬのインキュベート緩衝液；１２５μｌの血漿（またはブランク反応もしくは標準曲線のための生理食塩水）；７５μｌの生理食塩水を含有した。３７℃で振盪しながら反応混合物を水槽に入れ、１０分間、予備インキュベートした。チラミン（０．５Ｍ）を添加し、インキュベートを４５分間進めた。反応内容物を空気にさらした。予備インキュベート時間の終了時に過塩素酸２Ｍを加えた酵素調製物（１２５μＬの血漿を伴う）の試料をブランクとして使用した。試験化合物のそれぞれについてブランクを使用した。オクトパミンの標準曲線については、過塩素酸２Ｍで調製した漸増濃度のオクトパミン（０．５、１、２．５、５、７．５、１０、１５、２０μｇ／ｍＬ、最終濃度）によって過塩素酸２Ｍを置き換えた。２００μＬの２Ｍモルの過塩素酸を加えることによってインキュベートを停止させ、混合物を９０００ｇで５分間遠心分離した。上清の流体（８００μＬ）をカラム（ＳＰＥカートリッジＩＳＯＬＵＴＥ  ＳＣＸ−３，１００ｍｇ）に移し、１５０ｇで２分間遠心分離した。１５０ｇで２分間遠心分離することによって０．５ｍＬの超純水でカラムをさらに２回洗浄した。１５０ｇで２分間遠心分離することによって０．３ｍＬの４Ｍ水酸化アンモニウムで、吸着したオクトパミンを２回溶出した。次いで、２００μＬの過ヨウ素酸ナトリウム（２％）を加え、６分間インキュベートすることによって溶離液におけるオクトパミンをｐ−ヒドロキシベンズアルデヒドに変換した。次いで、２００μＬのピロ重亜硫酸ナトリウム（１０％）を加えることによって過剰の過ヨウ素酸塩を還元した。ソフトウエアＳＯＦＴｍａｘ（登録商標）ＰＲＯソフトウエア５．３分光光度計と共にＳｐｅｃｔｒａＭＡＸ  ｐｌｕｓ  ３８４（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ）を使用することによって、９６ウェルプレートにて３３０ｎｍで吸光度を測定した。吸光度は、０．５〜２０μｇ／ｍＬのオクトパミン濃度と共に線形だった。ドーパミンベータヒドロキシラーゼ活性は、形成されたオクトパミンのナノモル／血漿のｍｌ／時間として決定され、化合物の効果は％対照として提示される。
【０１４５】
結果は、調べた阻害剤の濃度における対照の％での活性として以下の表（括弧内）にて報告されている。
【０１４６】
Ｈ．生物学データ
【表１】
2019529459.tif 000091
【国際調査報告】
2019529459.tif 000099
2019529459.tif 000100