(57)【要約】  本明細書には、化学療法剤粒子を腫瘍内に直接注射することにより固形腫瘍を治療する方法、腫瘍を有する対象に化学療法剤粒子を投与することにより腫瘍転移を阻害する方法および化学療法剤粒子と、少量のポリソルベートと、担体とを含む組成物が開示される。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
固形腫瘍を治療する方法であって、固形腫瘍を有する対象に化学療法剤粒子を含む有効量の組成物を投与して前記腫瘍を治療することを含み、前記組成物を悪性腫瘍などの前記腫瘍内に直接注射する、方法。
【請求項２】
前記組成物が、前記化学療法剤粒子と、液体担体などの薬学的に許容される担体とからなる、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記投与により、化学療法剤が前記対象のリンパ系内に移動する、請求項１〜２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４】
腫瘍転移を阻害する方法であって、悪性腫瘍を有する対象に化学療法剤粒子を含む有効量の組成物を投与して腫瘍転移を阻害する、方法。
【請求項５】
前記組成物を前記腫瘍内に直接注射するか、または腫瘍周囲に注射する、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記組成物が、前記化学療法剤粒子と担体（液体担体、半固体担体または固体担体など）とからなる、請求項４〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
前記担体が水性液体担体である、請求項１〜３および６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
前記水性液体担体が、通常の生理食塩水などの生理食塩水である、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記組成物が懸濁液である、請求項１〜８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
前記粒子が、（ｉ）コートされておらず、（ｉｉ）固体添加剤の中に埋入も、含有も、封入も、カプセル化もされておらず、かつ（ｉｉｉ）化学療法剤と添加剤とを含むマイクロスフェアでも、リポソームでも、マイクロカプセルでもない、請求項１〜９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
前記化学療法剤が、パクリタキセル；パクリタキセル、ドセタキセル、カバジタキセル、タキサンの誘導体；エピチロン（ｅｐｉｔｈｉｌｏｎｅ）、ビンカアルカロイド、例えばビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、ビノレルビンなど；カンプトテシン類似体；エピポドフィロトキシン、例えばシスプラチン、カルボプラチン、オキサリプラチン、エトポシドおよびテニポシドなど；ドキソルビシン、アンスルサイクリン（ａｎｔｈｒｃｙｃｌｉｎｅ）、５‐フルオロウラシル、トポテカン、ゲムシタビン、ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体（ＰＰＡＲ）リガンドおよび抗血管新生剤またはその薬学的に許容される塩からなる群より選択される、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
請求項１２は、前記化学療法剤がタキサンまたはその薬学的に許容される塩である、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
前記化学療法剤がパクリタキセルまたはその薬学的に許容される塩である、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
前記腫瘍が、肉腫、癌腫およびリンパ腫、乳腺腫瘍、前立腺腫瘍、頭頸部腫瘍、膠芽腫、膀胱腫瘍、膵臓腫瘍、肝臓腫瘍、卵巣腫瘍、結腸直腸腫瘍、皮膚腫瘍、リンパ系腫瘍および胃腸腫瘍からなる群より選択される、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】
前記腫瘍が、卵巣腫瘍、膀胱腫瘍、乳腺腫瘍、前立腺腫瘍、肺腫瘍、膵臓腫瘍、皮膚腫瘍、リンパ系腫瘍および胃腸腫瘍からなる群より選択される、請求項１３に記載の方法。
【請求項１６】
前記腫瘍が、卵巣腫瘍および膀胱腫瘍からなる群より選択される、請求項１３に記載の方法。
【請求項１７】
前記化学療法剤がドセタキセルまたはその薬学的に許容される塩である、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１８】
前記腫瘍が、卵巣腫瘍、膀胱腫瘍、乳腺腫瘍および前立腺腫瘍からなる群より選択される、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記腫瘍が、乳腺腫瘍および前立腺腫瘍からなる群より選択される、請求項１７に記載の方法。
【請求項２０】
前記化学療法剤粒子が、少なくとも９５％の化学療法剤を含み、前記粒子が、少なくとも１０ｍ２／ｇまたは少なくとも１２ｍ２／ｇ、１４ｍ２／ｇ、１６ｍ２／ｇ、１８ｍ２／ｇ、２０ｍ２／ｇ、２５ｍ２／ｇ、３０ｍ２／ｇ、３２ｍ２／ｇ、３４ｍ２／ｇまたは３５ｍ２／ｇの比表面積（ＳＳＡ）を有する、請求項１〜１９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２１】
請求項２１は、前記化学療法剤粒子が、約１０ｍ２／ｇ〜約５０ｍ２／ｇのＳＳＡを有する、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記化学療法剤粒子が：
（ａ）１６ｍ２／ｇ〜３１ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ〜５０ｍ２／ｇ、
（ｂ）１６ｍ２／ｇ〜３０ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ〜５０ｍ２／ｇ、
（ｃ）１６ｍ２／ｇ〜２９ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ〜５０ｍ２／ｇ、
（ｄ）１７ｍ２／ｇ〜３１ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ〜５０ｍ２／ｇ、
（ｅ）１７ｍ２／ｇ〜３０ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ〜５０ｍ２／ｇ、
（ｆ）１７ｍ２／ｇ〜２９ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ〜５０ｍ２／ｇ、
（ｇ）１６ｍ２／ｇ〜３１ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ〜５０ｍ２／ｇ、
（ｈ）１６ｍ２／ｇ〜３０ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ〜５０ｍ２／ｇ、
（ｉ）１６ｍ２／ｇ〜２９ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ〜５０ｍ２／ｇ、
（ｊ）１７ｍ２／ｇ〜３１ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ〜５０ｍ２／ｇ、
（ｋ）１７ｍ２／ｇ〜３０ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ〜５０ｍ２／ｇ、
（ｌ）１７ｍ２／ｇ〜２９ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ〜５０ｍ２／ｇ、
（ｍ）１６ｍ２／ｇ〜３１ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ以上、
（ｈ）１７ｍ２／ｇ〜３１ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ以上、
（ｉ）１６ｍ２／ｇ〜３０ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ以上、
（ｊ）１７ｍ２／ｇ〜３０ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ以上、
（ｋ）１６ｍ２／ｇ〜２９ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ以上、
（ｌ）１７ｍ２／ｇ〜２９ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ以上、
（ｍ）１６ｍ２／ｇ〜３１ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ以上、
（ｎ）１７ｍ２／ｇ〜３１ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ以上、
（ｏ）１６ｍ２／ｇ〜３０ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ以上、
（ｐ）１７ｍ２／ｇ〜３０ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ以上、
（ｑ）１６ｍ２／ｇ〜２９ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ以上または
（ｒ）１７ｍ２／ｇ〜２９ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ以上
のＳＳＡを有する、請求項２０〜２１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２３】
前記化学療法剤がパクリタキセルまたはその薬学的に許容される塩である、請求項２０〜２２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２４】
前記化学療法剤がドセタキセルまたはその薬学的に許容される塩である、請求項２０〜２２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２５】
前記化学療法剤粒子が、少なくとも９５重量％のタキサンまたはその薬学的に許容される塩を含み、前記粒子が、以下の特性：
（ｉ）約０．０５０ｇ／ｃｍ３〜約０．１５ｇ／ｃｍ３の平均かさ密度および／または
（ｉｉ）少なくとも１８ｍ２／ｇ、２０ｍ２／ｇ、２５ｍ２／ｇ、３０ｍ２／ｇ、３２ｍ２／ｇ、３４ｍ２／ｇもしくは３５ｍ２／ｇの比表面積（ＳＳＡ）を有する
のうちの一方または両方を有する、請求項１〜２４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２６】
前記タキサンが、パクリタキセル、ドセタキセル、カバジタキセル、タキサジエン、バッカチンＩＩＩ、タクスキニンＡ、ブレビフォリオールおよびタキススピンＤまたはその薬学的に許容される塩からなる群より選択される、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
前記タキサンが、パクリタキセル、ドセタキセルおよびカバジタキセルまたはその薬学的に許容される塩からなる群より選択される、請求項２５に記載の方法。
【請求項２８】
前記タキサンが、パクリタキセルまたはその薬学的に許容される塩であり、前記粒子が、約０．０５０ｇ／ｃｍ３〜約０．１２ｇ／ｃｍ３または約０．０６０ｇ／ｃｍ３〜約０．１１ｇ／ｃｍ３の平均かさ密度を有する、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
前記タキサンが、パクリタキセルまたはその薬学的に許容される塩であり、前記パクリタキセル粒子が、少なくとも１８ｍ２／ｇ、２０ｍ２／ｇ、２５ｍ２／ｇ、３０ｍ２／ｇ、３２ｍ２／ｇ、３４ｍ２／ｇまたは３５ｍ２／ｇの比表面積（ＳＳＡ）を有する、請求項２７または２８に記載の方法。
【請求項３０】
前記タキサンが、パクリタキセルまたはその薬学的に許容される塩であり、前記パクリタキセル粒子が、約２２ｍ２／ｇ〜約４０ｍ２／ｇ、２５ｍ２／ｇ〜約４０ｍ２／ｇ、３０ｍ２／ｇ〜約４０ｍ２／ｇまたは約３５ｍ２／ｇ〜約４０ｍ２／ｇのＳＳＡを有する、請求項２７〜２９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３１】
前記パクリタキセル粒子が、約０．０６０ｇ／ｃｍ３〜約０．１１ｇ／ｃｍ３のかさ密度と、約２２ｍ２／ｇ〜約４０ｍ２／ｇのＳＳＡとを有する、請求項２８〜３０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３２】
前記パクリタキセルの少なくとも４０％（ｗ／ｗ）が、７５ＲＰＭで稼働しているＵＳＰ  ＩＩのパドル法の装置中、３７℃およびｐＨ７．０で５０％メタノール／５０％水（ｖ／ｖ）の溶液に３０分以内に溶解する、請求項２８〜３１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３３】
前記タキサンが、ドセタキセルまたはその薬学的に許容される塩であり、前記粒子が、約０．０５０ｇ／ｃｍ３〜約０．１２ｇ／ｃｍ３または約０．０６ｇ／ｃｍ３〜約０．１ｇ／ｃｍ３の平均かさ密度を有する、請求項２７に記載の方法。
【請求項３４】
前記タキサンが、ドセタキセルまたはその薬学的に許容される塩であり、前記ドセタキセル粒子が、少なくとも１８ｍ２／ｇ、２０ｍ２／ｇ、２５ｍ２／ｇ、３０ｍ２／ｇ、３５ｍ２／ｇ、４０ｍ２／ｇまたは４２ｍ２／ｇのＳＳＡを有する、請求項２７または３３に記載の方法。
【請求項３５】
前記タキサンが、ドセタキセルまたはその薬学的に許容される塩であり、前記ドセタキセル粒子が、約４０ｍ２／ｇ〜約５０ｍ２／ｇまたは約４３ｍ２／ｇ〜約４６ｍ２／ｇのＳＳＡを有する、請求項２７または３３〜３４に記載の方法。
【請求項３６】
前記ドセタキセル粒子が、約０．０６ｇ／ｃｍ３〜約０．１ｇ／ｃｍ３のかさ密度と、約４０ｍ２／ｇ〜約５０ｍ２／ｇのＳＳＡとを有する、請求項３３〜３５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３７】
前記ドセタキセルの少なくとも２０％（ｗ／ｗ）が、７５ＲＰＭで稼働しているＵＳＰ  ＩＩのパドル法の装置中、３７℃およびｐＨ７．０で１５％メタノール／８５％水の溶液に３０分以内に溶解する、請求項３３〜３６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３８】
前記化学療法剤粒子が、少なくとも９５重量％のパクリタキセルまたはその薬学的に許容される塩を含み、前記粒子が、少なくとも１２ｍ２／ｇの比表面積（ＳＳＡ）を有する、請求項１〜２２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３９】
前記パクリタキセル粒子が、少なくとも１２ｍ２／ｇ、１５ｍ２／ｇ、２０ｍ２／ｇ、２５ｍ２／ｇ、３０ｍ２／ｇ、３２ｍ２／ｇ、３４ｍ２／ｇまたは３５ｍ２／ｇのＳＳＡを有する、請求項３８に記載の方法。
【請求項４０】
前記パクリタキセルの少なくとも４０％（ｗ／ｗ）が、７５ＲＰＭで稼働しているＵＳＰ  ＩＩのパドル法の装置中、３７℃およびｐＨ７．０で５０％メタノール／５０％水（ｖ／ｖ）の溶液に３０分以内に溶解する、請求項３８〜３９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４１】
前記化学療法剤粒子が、少なくとも９５重量％のパクリタキセルを含み、前記パクリタキセルの少なくとも４０％（ｗ／ｗ）が、７５ＲＰＭで稼働しているＵＳＰ  ＩＩのパドル法の装置中、３７℃およびｐＨ７．０で５０％メタノール／５０％水（ｖ／ｖ）の溶液に３０分以内に溶解する、請求項１〜２２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４２】
前記化学療法剤粒子が、少なくとも９５重量％のドセタキセルを含み、前記ドセタキセルの少なくとも２０％（ｗ／ｗ）が、７５ＲＰＭで稼働しているＵＳＰ  ＩＩのパドル法の装置中、３７℃およびｐＨ７．０で１５％メタノール／８５％水の溶液に３０分以内に溶解する、請求項１〜２２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４３】
前記粒子が、約０．４μｍ〜約１．２μｍまたは約０．６μｍ〜約１．０μｍの平均粒子径数値を有する、請求項１〜４２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４４】
前記粒子がコートされておらず、前記組成物からポリマー、タンパク質、ポリエトキシル化ヒマシ油ならびに／あるいはモノグリセリド、ジグリセリドおよびトリグリセリドとポリエチレングリコールのモノエステルおよびジエステルとからなるポリエチレングリコールグリセリドが除外される、請求項１〜４３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４５】
前記化学療法剤粒子が、薬学的に許容される水性担体をさらに含む懸濁液中に存在する、請求項１〜４２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４６】
前記粒子が、少なくとも９６％、９７％、９８％、９９％または１００％の前記化合物を含む、請求項１〜４５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４７】
前記化学療法剤粒子が、ポリソルベート８０などのポリソルベートをさらに含む懸濁液中に存在し、前記ポリソルベートが、前記懸濁液中に約０．０１％ｖ／ｖ〜約１．５％ｖ／ｖまたは約０．０１％ｖ／ｖ〜約１％ｖ／ｖ、約０．０１％ｖ／ｖ〜約０．５％ｖ／ｖ、約０．０１％ｖ／ｖ〜約０．４％ｖ／ｖ、約０．０１％ｖ／ｖ〜約０．２５％ｖ／ｖ、約０．０５％ｖ／ｖ〜約０．５％ｖ／ｖ、約０．０５％ｖ／ｖ〜約０．２５％ｖ／ｖ、約０．１％ｖ／ｖ〜約０．５％ｖ／ｖ、約０．１％ｖ／ｖ〜約０．２５％ｖ／ｖ、約０．１％ｖ／ｖ、約０．１６ｖ／ｖまたは約０．２５％ｖ／ｖの濃度で存在する、請求項１〜４６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４８】
前記化学療法剤が、前記懸濁液中に約１ｍｇ／ｍｌ〜約４０ｍｇ／ｍｌまたは約６ｍｇ／ｍｌ〜約２０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する、請求項４７に記載の方法。
【請求項４９】
前記化学療法剤粒子が、パクリタキセルまたはその薬学的に許容される塩を含み、前記パクリタキセルが、前記懸濁液中に約１ｍｇ／ｍｌ〜約４０ｍｇ／ｍｌまたは約６ｍｇ／ｍｌ〜約２０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する、請求項４８に記載の方法。
【請求項５０】
前記化学療法剤粒子が、ドセタキセルまたはその薬学的に許容される塩を含み、前記パクリタキセルが、前記懸濁液中に約１ｍｇ／ｍｌ〜約４０ｍｇ／ｍｌまたは約６ｍｇ／ｍｌ〜約２０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する、請求項４８に記載の方法。
【請求項５１】
（ａ）化学療法剤粒子と；
（ｂ）薬学的に許容される担体と；
（ｃ）ポリソルベートと
を含む懸濁液であって、前記ポリソルベートが、前記懸濁液中に約０．０１％ｖ／ｖ〜約１．５％ｖ／ｖまたは約０．０１％ｖ／ｖ〜約１％ｖ／ｖ、約０．０１％ｖ／ｖ〜約０．５％ｖ／ｖ、約０．０１％ｖ／ｖ〜約０．４％ｖ／ｖ、約０．０１％ｖ／ｖ〜約０．２５％ｖ／ｖ、約０．０５％ｖ／ｖ〜約０．５％ｖ／ｖ、約０．０５％ｖ／ｖ〜約０．２５％ｖ／ｖ、約０．１％ｖ／ｖ〜約０．５％ｖ／ｖ、約０．１％ｖ／ｖ〜約０．２５％ｖ／ｖ、約０．１％ｖ／ｖ、約０．１６ｖ／ｖまたは約０．２５％ｖ／ｖの濃度で存在する、懸濁液。
【請求項５２】
（ａ）化学療法剤粒子が含まれる第一のバイアルと、
（ｂ）ポリソルベートと薬学的に許容される担体とが含まれる第二のバイアルと、
（ｃ）患者に投与する前に、前記第一のバイアルと前記第二のバイアルの内容物を組み合わせることにより前記化学療法剤粒子を懸濁液に再構成するためおよび前記懸濁液を０．９％生理食塩溶液などの希釈液で希釈するための指示書と
を含む、キット。
【請求項５３】
前記化学療法剤粒子が、パクリタキセル；パクリタキセル、ドセタキセル、カバジタキセル、タキサンの誘導体；エピチロン（ｅｐｉｔｈｉｌｏｎｅ）、ビンカアルカロイド、例えばビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、ビノレルビンなど；カンプトテシン類似体；エピポドフィロトキシン、例えばシスプラチン、カルボプラチン、オキサリプラチン、エトポシドおよびテニポシドなど；ドキソルビシン、アンスルサイクリン（ａｎｔｈｒｃｙｃｌｉｎｅ）、５‐フルオロウラシル、トポテカン、ゲムシタビン、ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体（ＰＰＡＲ）リガンドおよび抗血管新生剤またはその薬学的に許容される塩からなる群より選択される、請求項５１に記載の懸濁液または請求項５２に記載のキット。
【請求項５４】
前記化学療法剤がタキサンまたはその薬学的に許容される塩である、請求項５１〜５３のいずれか１項に記載の懸濁液またはキット。
【請求項５５】
前記化学療法剤がパクリタキセルまたはその薬学的に許容される塩である、請求項５１〜５４のいずれか１項に記載の懸濁液またはキット。
【請求項５６】
前記化学療法剤がドセタキセルまたはその薬学的に許容される塩である、請求項５１〜５４のいずれか１項に記載の懸濁液またはキット。
【請求項５７】
前記化学療法剤が、前記懸濁液中に約１ｍｇ／ｍｌ〜約４０ｍｇ／ｍｌまたは約６ｍｇ／ｍｌ〜約２０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する、請求項５１および５３〜５６のいずれか１項に記載の懸濁液。
【請求項５８】
前記化学療法剤粒子が、少なくとも９５％の化学療法剤を含み、前記粒子が、少なくとも１０ｍ２／ｇまたは少なくとも１２ｍ２／ｇ、１４ｍ２／ｇ、１６ｍ２／ｇ、１８ｍ２／ｇ、２０ｍ２／ｇ、２５ｍ２／ｇ、３０ｍ２／ｇ、３２ｍ２／ｇ、３４ｍ２／ｇまたは３５ｍ２／ｇの比表面積（ＳＳＡ）を有する、請求項５１〜５７のいずれか１項に記載の懸濁液またはキット。
【請求項５９】
前記化学療法剤粒子が、約１０ｍ２／ｇ〜約５０ｍ２／ｇのＳＳＡを有する、請求項５１〜５８のいずれか１項に記載の懸濁液またはキット。
【請求項６０】
請求項６０は、前記化学療法剤粒子が
（ａ）１６ｍ２／ｇ〜３１ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ〜５０ｍ２／ｇ、
（ｂ）１６ｍ２／ｇ〜３０ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ〜５０ｍ２／ｇ、
（ｃ）１６ｍ２／ｇ〜２９ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ〜５０ｍ２／ｇ、
（ｄ）１７ｍ２／ｇ〜３１ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ〜５０ｍ２／ｇ、
（ｅ）１７ｍ２／ｇ〜３０ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ〜５０ｍ２／ｇ、
（ｆ）１７ｍ２／ｇ〜２９ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ〜５０ｍ２／ｇ、
（ｇ）１６ｍ２／ｇ〜３１ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ〜５０ｍ２／ｇ、
（ｈ）１６ｍ２／ｇ〜３０ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ〜５０ｍ２／ｇ、
（ｉ）１６ｍ２／ｇ〜２９ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ〜５０ｍ２／ｇ、
（ｊ）１７ｍ２／ｇ〜３１ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ〜５０ｍ２／ｇ、
（ｋ）１７ｍ２／ｇ〜３０ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ〜５０ｍ２／ｇ、
（ｌ）１７ｍ２／ｇ〜２９ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ〜５０ｍ２／ｇ、
（ｍ）１６ｍ２／ｇ〜３１ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ以上、
（ｈ）１７ｍ２／ｇ〜３１ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ以上、
（ｉ）１６ｍ２／ｇ〜３０ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ以上、
（ｊ）１７ｍ２／ｇ〜３０ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ以上、
（ｋ）１６ｍ２／ｇ〜２９ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ以上、
（ｌ）１７ｍ２／ｇ〜２９ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ以上、
（ｍ）１６ｍ２／ｇ〜３１ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ以上、
（ｎ）１７ｍ２／ｇ〜３１ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ以上、
（ｏ）１６ｍ２／ｇ〜３０ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ以上、
（ｐ）１７ｍ２／ｇ〜３０ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ以上、
（ｑ）１６ｍ２／ｇ〜２９ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ以上または
（ｒ）１７ｍ２／ｇ〜２９ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ以上
のＳＳＡを有する、請求項５１〜５９のいずれか１項に記載の懸濁液またはキット。
【請求項６１】
前記化学療法剤粒子が、少なくとも９５重量％のタキサンまたはその薬学的に許容される塩を含み、前記粒子が、以下の特性：
（ｉ）約０．０５０ｇ／ｃｍ３〜約０．１５ｇ／ｃｍ３の平均かさ密度および／または
（ｉｉ）少なくとも１８ｍ２／ｇ、２０ｍ２／ｇ、２５ｍ２／ｇ、３０ｍ２／ｇ、３２ｍ２／ｇ、３４ｍ２／ｇもしくは３５ｍ２／ｇの比表面積（ＳＳＡ）を有する
のうちの一方または両方を有する、請求項５１〜６０のいずれか１項に記載の懸濁液またはキット。
【請求項６２】
前記タキサンが、パクリタキセルまたはその薬学的に許容される塩であり、前記粒子が、約０．０５０ｇ／ｃｍ３〜約０．１２ｇ／ｃｍ３または約０．０６０ｇ／ｃｍ３〜約０．１１ｇ／ｃｍ３の平均かさ密度を有する、請求項５１〜５５および５７〜６１のいずれか１項に記載の懸濁液またはキット。
【請求項６３】
前記タキサンが、パクリタキセルまたはその薬学的に許容される塩であり、前記パクリタキセル粒子が、少なくとも１２ｍ２／ｇ、１８ｍ２／ｇ、２０ｍ２／ｇ、２５ｍ２／ｇ、３０ｍ２／ｇ、３２ｍ２／ｇ、３４ｍ２／ｇまたは３５ｍ２／ｇの比表面積（ＳＳＡ）を有する、請求項５１〜５５および５７〜６２のいずれか１項に記載の懸濁液またはキット。
【請求項６４】
前記タキサンが、パクリタキセルまたはその薬学的に許容される塩であり、パクリタキセル粒子が、約２２ｍ２／ｇ〜約４０ｍ２／ｇ、２５ｍ２／ｇ〜約４０ｍ２／ｇ、３０ｍ２／ｇ〜約４０ｍ２／ｇまたは約３５ｍ２／ｇ〜約４０ｍ２／ｇのＳＳＡを有する、請求項５１〜５５および５７〜６３のいずれか１項に記載の懸濁液またはキット。
【請求項６５】
前記パクリタキセル粒子が、約０．０６０ｇ／ｃｍ３〜約０．１１ｇ／ｃｍ３のかさ密度と、約２２ｍ２／ｇ〜約４０ｍ２／ｇのＳＳＡとを有する、請求項５１〜５５および５７〜６４のいずれか１項に記載の懸濁液またはキット。
【請求項６６】
前記パクリタキセルの少なくとも４０％（ｗ／ｗ）が、７５ＲＰＭで稼働しているＵＳＰ  ＩＩのパドル法の装置中、３７℃およびｐＨ７．０で５０％メタノール／５０％水（ｖ／ｖ）の溶液に３０分以内に溶解する、請求項５１〜５５および５７〜６５のいずれか１項に記載の懸濁液またはキット。
【請求項６７】
前記タキサンが、ドセタキセルまたはその薬学的に許容される塩であり、前記粒子が、約０．０５０ｇ／ｃｍ３〜約０．１２ｇ／ｃｍ３または約０．０６ｇ／ｃｍ３〜約０．１ｇ／ｃｍ３の平均かさ密度を有する、請求項５１〜５４および５６〜６１のいずれか１項に記載の懸濁液またはキット。
【請求項６８】
前記タキサンが、ドセタキセルまたはその薬学的に許容される塩であり、前記ドセタキセル粒子が、少なくとも１８ｍ２／ｇ、２０ｍ２／ｇ、２５ｍ２／ｇ、３０ｍ２／ｇ、３５ｍ２／ｇ、４０ｍ２／ｇまたは４２ｍ２／ｇのＳＳＡを有する、請求項５１〜５４、５６〜６１および６７のいずれか１項に記載の懸濁液またはキット。
【請求項６９】
前記タキサンが、ドセタキセルまたはその薬学的に許容される塩であり、前記ドセタキセル粒子が、約４０ｍ２／ｇ〜約５０ｍ２／ｇまたは約４３ｍ２／ｇ〜約４６ｍ２／ｇのＳＳＡを有する、請求項５１〜５４、５６〜６１および６７〜６８のいずれか１項に記載の懸濁液またはキット。
【請求項７０】
前記ドセタキセル粒子が、約０．０６ｇ／ｃｍ３〜約０．１ｇ／ｃｍ３のかさ密度と、約４０ｍ２／ｇ〜約５０ｍ２／ｇのＳＳＡとを有する、請求項５１〜５４、５６〜６１および６７〜６９のいずれか１項に記載の懸濁液またはキット。
【請求項７１】
前記ドセタキセルの少なくとも２０％（ｗ／ｗ）が、７５ＲＰＭで稼働しているＵＳＰ  ＩＩのパドル法の装置中、３７℃およびｐＨ７．０で１５％メタノール／８５％水の溶液に３０分以内に溶解する、請求項５１〜５４、５６〜６１および６７〜７０のいずれか１項に記載の懸濁液またはキット。
【請求項７２】
前記粒子が、約０．４μｍ〜約１．２μｍまたは約０．６μｍ〜約１．０μｍの平均粒子径数値を有する、請求項５１〜７１のいずれか１項に記載の懸濁液またはキット。
【請求項７３】
前記粒子がコートされておらず、前記懸濁液またはキットからポリマー、タンパク質、ポリエトキシル化ヒマシ油ならびに／あるいはモノグリセリド、ジグリセリドおよびトリグリセリドとポリエチレングリコールのモノエステルおよびジエステルとからなるポリエチレングリコールグリセリドが除外される、請求項５１〜７２のいずれか１項に記載の懸濁液またはキット。
【請求項７４】
前記薬学的に許容される担体が、０．９％塩化ナトリウム溶液などの生理食塩水である、請求項５１〜７３のいずれか１項に記載の懸濁液またはキット。
【請求項７５】
前記ポリソルベートがポリソルベート８０である、請求項５１〜７４のいずれか１項に記載の懸濁液またはキット。
【請求項７６】
前記第一のバイアルおよび前記第二のバイアルの内容物が無菌である、請求項５２〜７５のいずれか１項に記載のキット。
【請求項７７】
前記化学療法剤粒子が、凝集していない個別粒子である、請求項１〜７６のいずれか１項に記載の方法、懸濁液またはキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（相互参照）
本願は、２０１６年４月４日に出願された米国仮特許出願第６２／３１８０１４号および２０１６年８月２３日に出願された米国仮特許出願第６２／３７８５４３号の優先権を主張するものであり、上記出願はともに、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【背景技術】
【０００２】
世界では毎年数百万人の患者が癌であると診断され、毎年さらに数百万人が癌または癌による合併症により死亡している。癌のリスクは加齢とともに大幅に増大し、多くの癌は先進国の方が頻度が高く、先進国の平均余命が延びるにつれて癌の罹患率が増大する。現在用いられている治療法としては、化学療法剤の静脈内（ＩＶ）注入液注射などの全身治療が挙げられる。しかし、これらの治療法は一般に、全身毒性により患者に重大な望ましくない副作用をもたらす。化学療法剤を腫瘍内に直接注射することが試みられているが、化学療法剤には、特にそれを可溶化した場合に腫瘍から「漏出」する傾向がある。このため、癌を有する患者を治療するための改善された方法が必要とされている。
【発明の概要】
【０００３】
本発明の一態様では、固形腫瘍を治療する方法であって、固形腫瘍を有する対象に化学療法剤粒子を含む有効量の組成物を投与して腫瘍を治療することを含み、組成物を腫瘍内に直接注射する、方法が開示される。
【０００４】
本発明の別の態様では、腫瘍転移を阻害する方法であって、腫瘍を有する対象に化学療法剤粒子を含む有効量の組成物を投与して腫瘍転移を阻害する、方法が提供される。
【０００５】
本発明の別の態様では、化学療法剤粒子と、薬学的に許容される担体と、ポリソルベートとを含む、懸濁液が開示される。
【０００６】
本発明の別の態様では、化学療法剤粒子が含まれる第一のバイアル；ポリソルベートが含まれる第二のバイアル；および患者に投与する前に、化学療法剤粒子を懸濁液に再構成するためおよび懸濁液を希釈液で希釈するための指示書を含む、キットが開示される。
【０００７】
本発明に関連して、以下の実施形態１〜７７も開示される：
【０００８】
実施形態１は、固形腫瘍を治療する方法であって、固形腫瘍を有する対象に化学療法剤粒子を含む有効量の組成物を投与して腫瘍を治療することを含み、組成物を悪性腫瘍などの腫瘍内に直接注射する、方法である。
【０００９】
実施形態２は、組成物が、化学療法剤粒子と、液体担体などの薬学的に許容される担体とからなる、実施形態１の方法である。
【００１０】
実施形態３は、投与により、化学療法剤が対象のリンパ系内に移動する、実施形態１〜２のいずれか１つの実施形態である。
【００１１】
実施形態４は、腫瘍転移を阻害する方法であって、悪性腫瘍を有する対象に化学療法剤粒子を含む有効量の組成物を投与して腫瘍転移を阻害する、方法である。
【００１２】
実施形態５は、組成物を腫瘍内に直接注射するか、または腫瘍周囲に注射する、実施形態４の方法である。
【００１３】
実施形態６は、組成物が、化学療法剤粒子と担体（液体担体、半固体担体または固体担体など）とからなる、実施形態４〜５のいずれか１つの方法である。
【００１４】
実施形態７は、担体が水性液体担体である、実施形態１〜３および６のいずれか１つの方法である。
【００１５】
実施形態８は、水性液体担体が、通常の生理食塩水などの生理食塩水である、実施形態７の方法である。
【００１６】
実施形態９は、組成物が懸濁液である、実施形態１〜８のいずれか１つの方法である。
【００１７】
実施形態１０は、粒子が、（ｉ）コートされておらず；（ｉｉ）固体添加剤の中に埋入も、含有も、封入も、カプセル化もされておらず；かつ（ｉｉｉ）化学療法と添加剤とを含むマイクロスフェアでも、リポソームでも、マイクロカプセルでもない、実施形態１〜９のいずれか１つの方法である。
【００１８】
実施形態１１は、化学療法が、パクリタキセル；パクリタキセル、ドセタキセル、カバジタキセル、タキサンの誘導体；エピチロン（ｅｐｉｔｈｉｌｏｎｅ）、ビンカアルカロイド、例えばビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、ビノレルビンなど；カンプトテシン類似体；エピポドフィロトキシン、例えばシスプラチン、カルボプラチン、オキサリプラチン、エトポシドおよびテニポシドなど；ドキソルビシン、アンスルサイクリン（ａｎｔｈｒｃｙｃｌｉｎｅ）、５‐フルオロウラシル、トポテカン、ゲムシタビン、ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体（ＰＰＡＲ）リガンドおよび抗血管新生剤またはその薬学的に許容される塩からなる群より選択される、実施形態１〜１０のいずれか１つの方法である。
【００１９】
実施形態１２は、化学療法剤がタキサンまたはその薬学的に許容される塩である、実施形態１〜１１のいずれか１つの方法である。
【００２０】
実施形態１３は、化学療法剤がパクリタキセルまたはその薬学的に許容される塩である、実施形態１〜１２のいずれか１つの方法である。
【００２１】
実施形態１４は、腫瘍が、肉腫、癌腫およびリンパ腫、乳腺腫瘍、前立腺腫瘍、頭頸部腫瘍、膠芽腫、膀胱腫瘍、膵臓腫瘍、肝臓腫瘍、卵巣腫瘍、結腸直腸腫瘍、皮膚腫瘍、リンパ系腫瘍および胃腸腫瘍からなる群より選択される、実施形態１〜１３のいずれか１つの方法である。
【００２２】
実施形態１５は、腫瘍が、卵巣腫瘍、膀胱腫瘍、乳腺腫瘍、前立腺腫瘍、肺腫瘍、膵臓腫瘍、皮膚腫瘍、リンパ系腫瘍および胃腸腫瘍からなる群より選択される、実施形態１３の方法である。
【００２３】
実施形態１６は、腫瘍が、卵巣腫瘍および膀胱腫瘍からなる群より選択される、実施形態１３の方法である。
【００２４】
実施形態１７は、化学療法剤がドセタキセルまたはその薬学的に許容される塩である、実施形態１〜１２のいずれか１つの方法である。
【００２５】
実施形態１８は、腫瘍が、卵巣腫瘍、膀胱腫瘍、乳腺腫瘍および前立腺腫瘍からなる群より選択される、実施形態１７の方法である。
【００２６】
実施形態１９は、腫瘍が、乳腺腫瘍および前立腺腫瘍からなる群より選択される、実施形態１７の方法である。
【００２７】
実施形態２０は、化学療法剤粒子が、少なくとも９５％の化学療法剤を含み、粒子が、少なくとも１０ｍ２／ｇまたは少なくとも１２ｍ２／ｇ、１４ｍ２／ｇ、１６ｍ２／ｇ、１８ｍ２／ｇ、２０ｍ２／ｇ、２５ｍ２／ｇ、３０ｍ２／ｇ、３２ｍ２／ｇ、３４ｍ２／ｇまたは３５ｍ２／ｇの比表面積（ＳＳＡ）を有する、実施形態１〜１９のいずれか１つの方法である。
【００２８】
実施形態２１は、化学療法剤粒子が、約１０ｍ２／ｇ〜約５０ｍ２／ｇのＳＳＡを有する、実施形態２０の方法である。
【００２９】
実施形態２２は、化学療法剤粒子が：
（ａ）１６ｍ２／ｇ〜３１ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ〜５０ｍ２／ｇ；
（ｂ）１６ｍ２／ｇ〜３０ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ〜５０ｍ２／ｇ；
（ｃ）１６ｍ２／ｇ〜２９ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ〜５０ｍ２／ｇ；
（ｄ）１７ｍ２／ｇ〜３１ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ〜５０ｍ２／ｇ；
（ｅ）１７ｍ２／ｇ〜３０ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ〜５０ｍ２／ｇ；
（ｆ）１７ｍ２／ｇ〜２９ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ〜５０ｍ２／ｇ；
（ｇ）１６ｍ２／ｇ〜３１ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ〜５０ｍ２／ｇ；
（ｈ）１６ｍ２／ｇ〜３０ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ〜５０ｍ２／ｇ；
（ｉ）１６ｍ２／ｇ〜２９ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ〜５０ｍ２／ｇ；
（ｊ）１７ｍ２／ｇ〜３１ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ〜５０ｍ２／ｇ；
（ｋ）１７ｍ２／ｇ〜３０ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ〜５０ｍ２／ｇ；
（ｌ）１７ｍ２／ｇ〜２９ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ〜５０ｍ２／ｇ；
（ｍ）１６ｍ２／ｇ〜３１ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ以上；
（ｈ）１７ｍ２／ｇ〜３１ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ以上；
（ｉ）１６ｍ２／ｇ〜３０ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ以上；
（ｊ）１７ｍ２／ｇ〜３０ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ以上；
（ｋ）１６ｍ２／ｇ〜２９ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ以上；
（ｌ）１７ｍ２／ｇ〜２９ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ以上；
（ｍ）１６ｍ２／ｇ〜３１ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ以上；
（ｎ）１７ｍ２／ｇ〜３１ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ以上；
（ｏ）１６ｍ２／ｇ〜３０ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ以上；
（ｐ）１７ｍ２／ｇ〜３０ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ以上；
（ｑ）１６ｍ２／ｇ〜２９ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ以上；または
（ｒ）１７ｍ２／ｇ〜２９ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ以上
のＳＳＡを有する、実施形態２０〜２１のいずれか１つの方法である。
【００３０】
実施形態２３は、化学療法剤がパクリタキセルまたはその薬学的に許容される塩である、実施形態２０〜２２のいずれか１つの方法である。
【００３１】
実施形態２４は、化学療法剤がドセタキセルまたはその薬学的に許容される塩である、実施形態２０〜２２のいずれか１つの方法である。
【００３２】
実施形態２５は、化学療法剤粒子が、少なくとも９５重量％のタキサンまたはその薬学的に許容される塩を含み、粒子が、以下の特性：
（ｉ）約０．０５０ｇ／ｃｍ３〜約０．１５ｇ／ｃｍ３の平均かさ密度および／または
（ｉｉ）少なくとも１８ｍ２／ｇ、２０ｍ２／ｇ、２５ｍ２／ｇ、３０ｍ２／ｇ、３２ｍ２／ｇ、３４ｍ２／ｇもしくは３５ｍ２／ｇの比表面積（ＳＳＡ）を有する、
のうちの一方または両方を有する、実施形態１〜２４のいずれか１つの方法である。
【００３３】
実施形態２６は、タキサンが、パクリタキセル、ドセタキセル、カバジタキセル、タキサジエン、バッカチンＩＩＩ、タクスキニンＡ、ブレビフォリオールおよびタキススピンＤまたはその薬学的に許容される塩からなる群より選択される、実施形態２５の方法である。
【００３４】
実施形態２７は、タキサンが、パクリタキセル、ドセタキセルおよびカバジタキセルまたはその薬学的に許容される塩からなる群より選択される、実施形態２５の方法である。
【００３５】
実施形態２８は、タキサンが、パクリタキセルまたはその薬学的に許容される塩であり、粒子が、約０．０５０ｇ／ｃｍ３〜約０．１２ｇ／ｃｍ３または約０．０６０ｇ／ｃｍ３〜約０．１１ｇ／ｃｍ３の平均かさ密度を有する、実施形態２７の方法である。
【００３６】
実施形態２９は、タキサンが、パクリタキセルまたはその薬学的に許容される塩であり、パクリタキセル粒子が、少なくとも１８ｍ２／ｇ、２０ｍ２／ｇ、２５ｍ２／ｇ、３０ｍ２／ｇ、３２ｍ２／ｇ、３４ｍ２／ｇまたは３５ｍ２／ｇの比表面積（ＳＳＡ）を有する、実施形態２７または２８の方法である。
【００３７】
実施形態３０は、タキサンが、パクリタキセルまたはその薬学的に許容される塩であり、パクリタキセル粒子が、約２２ｍ２／ｇ〜約４０ｍ２／ｇ、２５ｍ２／ｇ〜約４０ｍ２／ｇ、３０ｍ２／ｇ〜約４０ｍ２／ｇまたは約３５ｍ２／ｇ〜約４０ｍ２／ｇのＳＳＡを有する、実施形態２７〜２９のいずれか１つの方法である。
【００３８】
実施形態３１は、パクリタキセル粒子が、約０．０６０ｇ／ｃｍ３〜約０．１１ｇ／ｃｍ３のかさ密度と、約２２ｍ２／ｇ〜約４０ｍ２／ｇのＳＳＡとを有する、実施形態２８〜３０のいずれか１つの方法である。
【００３９】
実施形態３２は、パクリタキセルの少なくとも４０％（ｗ／ｗ）が、７５ＲＰＭで稼働しているＵＳＰ  ＩＩのパドル法の装置中、３７℃およびｐＨ７．０で５０％メタノール／５０％水（ｖ／ｖ）の溶液に３０分以内に溶解する、実施形態２８〜３１のいずれか１つの方法である。
【００４０】
実施形態３３は、タキサンが、ドセタキセルまたはその薬学的に許容される塩であり、粒子が、約０．０５０ｇ／ｃｍ３〜約０．１２ｇ／ｃｍ３または約０．０６ｇ／ｃｍ３〜約０．１ｇ／ｃｍ３の平均かさ密度を有する、実施形態２７の方法である。
【００４１】
実施形態３４は、タキサンが、ドセタキセルまたはその薬学的に許容される塩であり、ドセタキセル粒子が、少なくとも１８ｍ２／ｇ、２０ｍ２／ｇ、２５ｍ２／ｇ、３０ｍ２／ｇ、３５ｍ２／ｇ、４０ｍ２／ｇまたは４２ｍ２／ｇのＳＳＡを有する、実施形態２７または３３の方法である。
【００４２】
実施形態３５は、タキサンが、ドセタキセルまたはその薬学的に許容される塩であり、ドセタキセル粒子が、約４０ｍ２／ｇ〜約５０ｍ２／ｇまたは約４３ｍ２／ｇ〜約４６ｍ２／ｇのＳＳＡを有する、実施形態２７または３３〜３４の方法である。
【００４３】
実施形態３６は、ドセタキセル粒子が、約０．０６ｇ／ｃｍ３〜約０．１ｇ／ｃｍ３のかさ密度と、約４０ｍ２／ｇ〜約５０ｍ２／ｇのＳＳＡとを有する、実施形態３３〜３５のいずれか１つの方法である。
【００４４】
実施形態３７は、ドセタキセルの少なくとも２０％（ｗ／ｗ）が、７５ＲＰＭで稼働しているＵＳＰ  ＩＩのパドル法の装置中、３７℃およびｐＨ７．０で１５％メタノール／８５％水の溶液に３０分以内に溶解する、実施形態３３〜３６のいずれか１つの方法である。
【００４５】
実施形態３８は、化学療法剤粒子が、少なくとも９５重量％のパクリタキセルまたはその薬学的に許容される塩を含み、粒子が、少なくとも１２ｍ２／ｇの比表面積（ＳＳＡ）を有する、実施形態１〜２２のいずれか１つの方法である。
【００４６】
実施形態３９は、パクリタキセル粒子が、少なくとも１２ｍ２／ｇ、１５ｍ２／ｇ、２０ｍ２／ｇ、２５ｍ２／ｇ、３０ｍ２／ｇ、３２ｍ２／ｇ、３４ｍ２／ｇまたは３５ｍ２／ｇのＳＳＡを有する、実施形態３８の方法である。
【００４７】
実施形態４０は、パクリタキセルの少なくとも４０％（ｗ／ｗ）が、７５ＲＰＭで稼働しているＵＳＰ  ＩＩのパドル法の装置中、３７℃およびｐＨ７．０で５０％メタノール／５０％水（ｖ／ｖ）の溶液に３０分以内に溶解する、実施形態３８〜３９のいずれか１つの方法である。
【００４８】
実施形態４１は、化学療法剤粒子が、少なくとも９５重量％のパクリタキセルを含み、パクリタキセルの少なくとも４０％（ｗ／ｗ）が、７５ＲＰＭで稼働しているＵＳＰ  ＩＩのパドル法の装置中、３７℃およびｐＨ７．０で５０％メタノール／５０％水（ｖ／ｖ）の溶液に３０分以内に溶解する、実施形態１〜２２のいずれか１つの方法である。
【００４９】
実施形態４２は、化学療法剤粒子が、少なくとも９５重量％のドセタキセルを含み、ドセタキセルの少なくとも２０％（ｗ／ｗ）が、７５ＲＰＭで稼働しているＵＳＰ  ＩＩのパドル法の装置中、３７℃およびｐＨ７．０で１５％メタノール／８５％水の溶液に３０分以内に溶解する、実施形態１〜２２のいずれか１つの方法である。
【００５０】
実施形態４３は、粒子が、約０．４μｍ〜約１．２μｍまたは約０．６μｍ〜約１．０μｍの平均粒子径数値を有する、実施形態１〜４２のいずれか１つの方法である。
【００５１】
実施形態４４は、粒子がコートされておらず、組成物からポリマー、タンパク質、ポリエトキシル化ヒマシ油ならびに／あるいはモノグリセリド、ジグリセリドおよびトリグリセリドとポリエチレングリコールのモノエステルおよびジエステルとからなるポリエチレングリコールグリセリドが除外される、実施形態１〜４３のいずれか１つの方法である。
【００５２】
実施形態４５は、化学療法剤粒子が、薬学的に許容される水性担体をさらに含む懸濁液中に存在する、実施形態１〜４２のいずれか１つの方法である。
【００５３】
実施形態４６は、粒子が、少なくとも９６％、９７％、９８％、９９％または１００％の化合物を含む、実施形態１〜４５のいずれか１つの方法である。
【００５４】
実施形態４７は、化学療法剤粒子が、ポリソルベート８０などのポリソルベートをさらに含む懸濁液中に存在し、ポリソルベートが、懸濁液中に約０．０１％ｖ／ｖ〜約１．５％ｖ／ｖまたは約０．０１％ｖ／ｖ〜約１％ｖ／ｖ、約０．０１％ｖ／ｖ〜約０．５％ｖ／ｖ、約０．０１％ｖ／ｖ〜約０．４％ｖ／ｖ、約０．０１％ｖ／ｖ〜約０．２５％ｖ／ｖ、約０．０５％ｖ／ｖ〜約０．５％ｖ／ｖ、約０．０５％ｖ／ｖ〜約０．２５％ｖ／ｖ、約０．１％ｖ／ｖ〜約０．５％ｖ／ｖ、約０．１％ｖ／ｖ〜約０．２５％ｖ／ｖ、約０．１％ｖ／ｖ、約０．１６ｖ／ｖまたは約０．２５％ｖ／ｖの濃度で存在する、実施形態１〜４６のいずれか１つの方法である。
【００５５】
実施形態４８は、化学療法剤が、懸濁液中に約１ｍｇ／ｍｌ〜約４０ｍｇ／ｍｌまたは約６ｍｇ／ｍｌ〜約２０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する、実施形態４７の方法である。
【００５６】
実施形態４９は、化学療法剤粒子が、パクリタキセルまたはその薬学的に許容される塩を含み、パクリタキセルが、懸濁液中に約１ｍｇ／ｍｌ〜約４０ｍｇ／ｍｌまたは約６ｍｇ／ｍｌ〜約２０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する、実施形態４８の方法である。
【００５７】
実施形態５０は、化学療法剤粒子が、ドセタキセルまたはその薬学的に許容される塩を含み、パクリタキセルが、懸濁液中に約１ｍｇ／ｍｌ〜約４０ｍｇ／ｍｌまたは約６ｍｇ／ｍｌ〜約２０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する、実施形態４８の方法である。
【００５８】
実施形態５１は、
（ａ）化学療法剤粒子と；
（ｂ）薬学的に許容される担体と；
（ｃ）ポリソルベートと
を含む懸濁液であって、ポリソルベートが、懸濁液中に約０．０１％ｖ／ｖ〜約１．５％ｖ／ｖまたは約０．０１％ｖ／ｖ〜約１％ｖ／ｖ、約０．０１％ｖ／ｖ〜約０．５％ｖ／ｖ、約０．０１％ｖ／ｖ〜約０．４％ｖ／ｖ、約０．０１％ｖ／ｖ〜約０．２５％ｖ／ｖ、約０．０５％ｖ／ｖ〜約０．５％ｖ／ｖ、約０．０５％ｖ／ｖ〜約０．２５％ｖ／ｖ、約０．１％ｖ／ｖ〜約０．５％ｖ／ｖ、約０．１％ｖ／ｖ〜約０．２５％ｖ／ｖ、約０．１％ｖ／ｖ、約０．１６ｖ／ｖまたは約０．２５％ｖ／ｖの濃度で存在する、懸濁液である。
【００５９】
実施形態５２は、
（ａ）化学療法剤粒子が含まれる第一のバイアルと；
（ｂ）ポリソルベートと薬学的に許容される担体とが含まれる第二のバイアルと；
（ｃ）患者に投与する前に、第一のバイアルと第二のバイアルの内容物を組み合わせることにより化学療法剤粒子を懸濁液に再構成するためおよび懸濁液を０．９％生理食塩溶液などの希釈液で希釈するための指示書と
を含む、キットである。
【００６０】
実施形態５３は、化学療法剤粒子が、パクリタキセル；パクリタキセル、ドセタキセル、カバジタキセル、タキサンの誘導体；エピチロン（ｅｐｉｔｈｉｌｏｎｅ）、ビンカアルカロイド、例えばビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、ビノレルビンなど；カンプトテシン類似体；エピポドフィロトキシン、例えばシスプラチン、カルボプラチン、オキサリプラチン、エトポシドおよびテニポシドなど；ドキソルビシン、アンスルサイクリン（ａｎｔｈｒｃｙｃｌｉｎｅ）、５‐フルオロウラシル、トポテカン、ゲムシタビン、ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体（ＰＰＡＲ）リガンドおよび抗血管新生剤またはその薬学的に許容される塩からなる群より選択される、実施形態５１の懸濁液または実施形態５２のキットである。
【００６１】
実施形態５４は、化学療法剤がタキサンまたはその薬学的に許容される塩である、実施形態５１〜５３のいずれか１つの懸濁液またはキットである。
【００６２】
実施形態５５は、化学療法剤がパクリタキセルまたはその薬学的に許容される塩である、実施形態５１〜５４のいずれか１つの懸濁液またはキットである。
【００６３】
実施形態５６は、化学療法剤がドセタキセルまたはその薬学的に許容される塩である、実施形態５１〜５４のいずれか１つの懸濁液またはキットである。
【００６４】
実施形態５７は、化学療法剤が、懸濁液中に約１ｍｇ／ｍｌ〜約４０ｍｇ／ｍｌまたは約６ｍｇ／ｍｌ〜約２０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する、実施形態５１および５３〜５６のいずれか１つの懸濁液である。
【００６５】
実施形態５８は、化学療法剤粒子が、少なくとも９５％の化学療法剤を含み、粒子が、少なくとも１０ｍ２／ｇまたは少なくとも１２ｍ２／ｇ、１４ｍ２／ｇ、１６ｍ２／ｇ、１８ｍ２／ｇ、２０ｍ２／ｇ、２５ｍ２／ｇ、３０ｍ２／ｇ、３２ｍ２／ｇ、３４ｍ２／ｇまたは３５ｍ２／ｇの比表面積（ＳＳＡ）を有する、実施形態５１〜５７のいずれか１つの懸濁液またはキットである。
【００６６】
実施形態５９は、化学療法剤粒子が、約１０ｍ２／ｇ〜約５０ｍ２／ｇのＳＳＡを有する、実施形態５１〜５８のいずれか１つの懸濁液またはキットである。
【００６７】
実施形態６０は、化学療法剤粒子が
（ａ）１６ｍ２／ｇ〜３１ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ〜５０ｍ２／ｇ；
（ｂ）１６ｍ２／ｇ〜３０ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ〜５０ｍ２／ｇ；
（ｃ）１６ｍ２／ｇ〜２９ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ〜５０ｍ２／ｇ；
（ｄ）１７ｍ２／ｇ〜３１ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ〜５０ｍ２／ｇ；
（ｅ）１７ｍ２／ｇ〜３０ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ〜５０ｍ２／ｇ；
（ｆ）１７ｍ２／ｇ〜２９ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ〜５０ｍ２／ｇ；
（ｇ）１６ｍ２／ｇ〜３１ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ〜５０ｍ２／ｇ；
（ｈ）１６ｍ２／ｇ〜３０ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ〜５０ｍ２／ｇ；
（ｉ）１６ｍ２／ｇ〜２９ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ〜５０ｍ２／ｇ；
（ｊ）１７ｍ２／ｇ〜３１ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ〜５０ｍ２／ｇ；
（ｋ）１７ｍ２／ｇ〜３０ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ〜５０ｍ２／ｇ；
（ｌ）１７ｍ２／ｇ〜２９ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ〜５０ｍ２／ｇ；
（ｍ）１６ｍ２／ｇ〜３１ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ以上；
（ｈ）１７ｍ２／ｇ〜３１ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ以上；
（ｉ）１６ｍ２／ｇ〜３０ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ以上；
（ｊ）１７ｍ２／ｇ〜３０ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ以上；
（ｋ）１６ｍ２／ｇ〜２９ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ以上；
（ｌ）１７ｍ２／ｇ〜２９ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ以上；
（ｍ）１６ｍ２／ｇ〜３１ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ以上；
（ｎ）１７ｍ２／ｇ〜３１ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ以上；
（ｏ）１６ｍ２／ｇ〜３０ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ以上；
（ｐ）１７ｍ２／ｇ〜３０ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ以上；
（ｑ）１６ｍ２／ｇ〜２９ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ以上；または
（ｒ）１７ｍ２／ｇ〜２９ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ以上
のＳＳＡを有する、実施形態５１〜５９のいずれか１つの懸濁液またはキットである。
【００６８】
実施形態６１は、化学療法剤粒子が、少なくとも９５重量％のタキサンまたはその薬学的に許容される塩を含み、粒子が、以下の特性：
（ｉ）約０．０５０ｇ／ｃｍ３〜約０．１５ｇ／ｃｍ３の平均かさ密度および／または
（ｉｉ）少なくとも１８ｍ２／ｇ、２０ｍ２／ｇ、２５ｍ２／ｇ、３０ｍ２／ｇ、３２ｍ２／ｇ、３４ｍ２／ｇもしくは３５ｍ２／ｇの比表面積（ＳＳＡ）を有する、
のうちの一方または両方を有する、実施形態５１〜６０のいずれか１つの懸濁液またはキットである。
【００６９】
実施形態６２は、タキサンが、パクリタキセルまたはその薬学的に許容される塩であり、粒子が、約０．０５０ｇ／ｃｍ３〜約０．１２ｇ／ｃｍ３または約０．０６０ｇ／ｃｍ３〜約０．１１ｇ／ｃｍ３の平均かさ密度を有する、実施形態５１〜５５および５７〜６１のいずれか１つの懸濁液またはキットである。
【００７０】
実施形態６３は、タキサンが、パクリタキセルまたはその薬学的に許容される塩であり、パクリタキセル粒子が、少なくとも１２ｍ２／ｇ、１８ｍ２／ｇ、２０ｍ２／ｇ、２５ｍ２／ｇ、３０ｍ２／ｇ、３２ｍ２／ｇ、３４ｍ２／ｇまたは３５ｍ２／ｇの比表面積（ＳＳＡ）を有する、実施形態５１〜５５および５７〜６２のいずれか１つの懸濁液またはキットである。
【００７１】
実施形態６４は、タキサンが、パクリタキセルまたはその薬学的に許容される塩であり、パクリタキセル粒子が、約２２ｍ２／ｇ〜約４０ｍ２／ｇ、２５ｍ２／ｇ〜約４０ｍ２／ｇ、３０ｍ２／ｇ〜約４０ｍ２／ｇまたは約３５ｍ２／ｇ〜約４０ｍ２／ｇのＳＳＡを有する、実施形態５１〜５５および５７〜６３のいずれか１つの懸濁液またはキットである。
【００７２】
実施形態６５は、パクリタキセル粒子が、約０．０６０ｇ／ｃｍ３〜約０．１１ｇ／ｃｍ３のかさ密度と、約２２ｍ２／ｇ〜約４０ｍ２／ｇのＳＳＡとを有する、実施形態５１〜５５および５７〜６４のいずれか１つの懸濁液またはキットである。
【００７３】
実施形態６６は、パクリタキセルの少なくとも４０％（ｗ／ｗ）が、７５ＲＰＭで稼働しているＵＳＰ  ＩＩのパドル法の装置中、３７℃およびｐＨ７．０で５０％メタノール／５０％水（ｖ／ｖ）の溶液に３０分以内に溶解する、実施形態５１〜５５および５７〜６５のいずれか１つの懸濁液またはキットである。
【００７４】
実施形態６７は、タキサンが、ドセタキセルまたはその薬学的に許容される塩であり、粒子が、約０．０５０ｇ／ｃｍ３〜約０．１２ｇ／ｃｍ３または約０．０６ｇ／ｃｍ３〜約０．１ｇ／ｃｍ３の平均かさ密度を有する、実施形態５１〜５４および５６〜６１のいずれか１つの懸濁液またはキットである。
【００７５】
実施形態６８は、タキサンが、ドセタキセルまたはその薬学的に許容される塩であり、ドセタキセル粒子が、少なくとも１８ｍ２／ｇ、２０ｍ２／ｇ、２５ｍ２／ｇ、３０ｍ２／ｇ、３５ｍ２／ｇ、４０ｍ２／ｇまたは４２ｍ２／ｇのＳＳＡを有する、実施形態５１〜５４、５６〜６１および６７のいずれか１つの懸濁液またはキットである。
【００７６】
実施形態６９は、タキサンが、ドセタキセルまたはその薬学的に許容される塩であり、ドセタキセル粒子が、約４０ｍ２／ｇ〜約５０ｍ２／ｇまたは約４３ｍ２／ｇ〜約４６ｍ２／ｇのＳＳＡを有する、実施形態５１〜５４、５６〜６１および６７〜６８のいずれか１つの懸濁液またはキットである。
【００７７】
実施形態７０は、ドセタキセル粒子が、約０．０６ｇ／ｃｍ３〜約０．１ｇ／ｃｍ３のかさ密度と、約４０ｍ２／ｇ〜約５０ｍ２／ｇのＳＳＡとを有する、実施形態５１〜５４、５６〜６１および６７〜６９のいずれか１つの懸濁液またはキットである。
【００７８】
実施形態７１は、ドセタキセルの少なくとも２０％（ｗ／ｗ）が、７５ＲＰＭで稼働しているＵＳＰ  ＩＩのパドル法の装置中、３７℃およびｐＨ７．０で１５％メタノール／８５％水の溶液に３０分以内に溶解する、実施形態５１〜５４、５６〜６１および６７〜７０のいずれか１つの懸濁液またはキットである。
【００７９】
実施形態７２は、粒子が、約０．４μｍ〜約１．２μｍまたは約０．６μｍ〜約１．０μｍの平均粒子径数値を有する、実施形態５１〜７１のいずれか１つの懸濁液またはキットである。
【００８０】
実施形態７３は、粒子がコートされておらず、懸濁液またはキットからポリマー、タンパク質、ポリエトキシル化ヒマシ油ならびに／あるいはモノグリセリド、ジグリセリドおよびトリグリセリドとポリエチレングリコールのモノエステルおよびジエステルとからなるポリエチレングリコールグリセリドが除外される、実施形態５１〜７２のいずれか１つの懸濁液またはキットである。
【００８１】
実施形態７４は、薬学的に許容される担体が、０．９％塩化ナトリウム溶液などの生理食塩水である、実施形態５１〜７３のいずれか１つの懸濁液またはキットである。
【００８２】
実施形態７５は、ポリソルベートがポリソルベート８０である、実施形態５１〜７４のいずれか１つの懸濁液またはキットである。
【００８３】
実施形態７６は、第一のバイアルおよび第二のバイアルの内容物が無菌である、実施形態５２〜７５のいずれか１つのキットである。
【００８４】
実施形態７７は、化学療法剤粒子が、凝集していない個別粒子である、実施形態１〜７６のいずれか１つの方法、懸濁液またはキットである。
【図面の簡単な説明】
【００８５】
【図１】溶媒およびパクリタキセル粒子の直接腫瘍内注射（ＩＴＵ）により治療したマウスのＰＣ３ヒト前立腺癌の腫瘍体積中央値を示す図である（試験Ｐ−ＰＰｒ−０１−２０１５）。
【図２】溶媒、ＮａｎｏＤｏｃｅ（商標）、ＮａｎｏＰａｃ（商標）のＩＴにより治療したマウスＰＣ−３前立腺腫瘍異種移植片およびドセタキセルのＩＶにより治療した同移植片の腫瘍体積中央値を示す図である（試験ＰＤ−ＰＰｒ−０２−２０１６）。
【図３】溶媒、ＮａｎｏＤｏｃｅ（商標）、ＮａｎｏＰａｃ（商標）のＩＴにより治療したマウスＭＤＡ−ＭＢ−２３１異種移植片およびドセタキセルまたはパクリタキセルのＩＶにより治療した同移植片の平均腫瘍体積を示す図である（試験ＰＤ−ＰＢ−０４−２０１６）。
【図４】溶媒、ＮａｎｏＤｏｃｅ（商標）、ＮａｎｏＰａｃ（商標）のＩＴにより治療したマウスＭＸ−１異種移植片およびドセタキセルまたはパクリタキセルのＩＶにより治療した同移植片の平均腫瘍体積を示す図である（試験Ｐ−ＰＢ−０３−２０１６）。
【発明を実施するための形態】
【００８６】
（発明の詳細な説明）
本明細書で使用される単数形「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」は、文脈上明らかにそうでないことが明らかでない限り、複数形の指示対象を包含する。本明細書で使用される「および（ならびに）」は、別途明記されない限り、「または（もしくは、あるいは）」と互換的に使用される。
【００８７】
本明細書で使用される「約」は、記載される測定単位の＋／−５パーセント（５％）を意味する。
【００８８】
本発明の任意の態様の実施形態はいずれも、文脈上そうでないことが明らかでない限り、組み合わせて用いることができる。
【００８９】
文脈上別の意味に解釈する必要がない限り、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ、ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇなど）」という単語は、説明および請求項の全体を通して、排他的な意味でも網羅的な意味でもなく包括的な意味で、つまり、「特に限定されないが、〜を含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」という意味で解釈されるべきである。単数または複数を用いる単語は、それぞれ複数および単数も包含する。さらに、「本明細書に」、「上に」および「下に」ならびにこれに類する意味の単語は、本願で使用される場合、本願全体を指し、本願のいかなる特定の部分をも指すものではないものとする。組成物およびその使用方法は、本明細書全体を通して開示されるいずれかの成分または段階を「含む」か、それ「より実質的になる」か、またはそれ「よりなる」ものであり得る。「〜より実質的になる」という語句に関して、本発明の組成物の基本的で新規な特性は、同組成物が、コートされていない（純粋な）化学療法剤粒子の直接注射により固形腫瘍を治療することができることである。このことは、コーティング、カプセル化およびその他の薬物送達補助を用いずに達成することができる。
【００９０】
本開示の実施形態の記載は、網羅的なものではなく、また本開示を開示される正確な形態に限定するものではないことが意図される。当業者に認識されるように、本開示の具体的な実施形態および実施例は、例示を目的として本明細書に記載されるものであり、本開示の範囲内で様々な等価の修正が可能である。
【００９１】
一態様では、本発明は、固形腫瘍を治療する方法であって、固形腫瘍を有する対象に化学療法剤粒子を含む有効量の組成物を投与して腫瘍を治療することを含み、組成物を腫瘍内に直接注射する、方法を提供する。本発明者らは驚くべきことに、本発明の方法に従って投与した化学療法剤粒子が長期間にわたり、望ましくない位置に漏出せずに腫瘍内に極めて高レベルで蓄積し得ることを発見した。当業者に理解されるように、腫瘍内に直接投与した遊離薬物は、腫瘍細胞内に侵入して最適な治療利益が得られるほど十分に腫瘍内に保持されることはない。したがって、本発明の方法により、先行技術の方法を上回る大幅な改善がもたらされる。この化学療法剤粒子は、典型的な方法により調製した化学療法剤粒子と比較して表面積がはるかに大きい。これにより、腫瘍内に注射した粒子が体循環により運び去られない程度の大きさになり、なおかつ従来の粒子よりはるかに速い速度で化学療法剤を放出するようになる。
【００９２】
本明細書で使用される「化学療法剤粒子」とは、化学療法剤より実質的になり（すなわち、少なくとも９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％の化学療法剤）、直径が０．１μｍ〜５μｍである粒子のことである。化学療法剤粒子は、化学療法剤と少なくとも１つの添加剤とを含有する粒子である「化学療法剤を含有する粒子」とは異なるものである。本発明の化学療法剤粒子は、コートされておらず、かつ固体添加剤の中に包埋も、含有も、封入も、カプセル化もされていない。ただし、本発明の化学療法剤粒子は、化学療法剤の調製過程で通常みられる不純物および副生成物を含有し得る。たとえそうであっても、化学療法剤粒子は、化学療法剤を少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％含み、このことは、化学療法剤粒子が実質的に純粋な化学療法剤よりなるか、またはこれより実質的になることを意味する。
【００９３】
他の実施形態では、化学療法剤粒子は、直径が０．２μｍまたは０．３μｍを上回る。別の実施形態では、化学療法剤粒子は、直径が少なくとも０．４μｍである。さらなる実施形態では、化学療法剤粒子は、直径が０．４μｍ〜２μｍ、０．５μｍ〜１．５μｍ、０．２μｍ〜１μｍまたは０．２μｍ〜１μｍ未満である。さらなる実施形態では、化学療法剤粒子は、約０．４μｍ〜約５μｍ、約０．４μｍ〜約３μｍ、約０．５μｍ〜約１．４μｍ、約０．４μｍ〜約０．８μｍ、約０．４μｍ〜約０．７μｍまたは約０．５μｍ〜約０．７μｍの範囲の間にある平均粒子径数値を有し得る。さらなる実施形態では、化学療法剤またはパクリタキセル粒子は、約０．４μｍ〜約１．２μｍまたは約０．６μｍ〜約１．０μｍの平均粒子径数値を有する。別の実施形態では、化学療法剤またはパクリタキセル粒子は、０．６μｍ〜０．８６１μｍ、約０．５μｍ〜約０．７μｍ、約０．２μｍ〜約１μｍ、約０．２μｍ〜１μｍ未満、約０．３μｍ〜約１μｍ、約０．３μｍ〜１μｍ未満、約０．４μｍ〜約１μｍまたは約０．４μｍ〜１μｍ未満の平均粒子径数値を有する。
【００９４】
米国特許第５，８３３，８９１号、同第６，１１３，７９５号、同第８，２２１，７７９号および国際公開第２０１６／１９７０９１号（その全体が参照により組み込まれる）には、化合物の粒子径を０．１〜５μｍまで小さくする様々な工程が開示されている。
【００９５】
本明細書で使用される「固形腫瘍」とは、通常は嚢胞も液体領域も含まない異常な組織の塊のことである。固形腫瘍は良性（癌でなない）または悪性（癌である）であり得る。様々な種類の固形腫瘍が、それを形成する細胞の種類にちなんで命名されている。固形腫瘍の例には、肉腫、癌腫およびリンパ腫がある。ある特定の実施形態では、固形腫瘍は悪性固形腫瘍である。
【００９６】
本明細書で使用される「腫瘍内に直接注射する」は、懸濁液などの組成物の一部または全部を腫瘍塊の中に注射することを意味する。当業者に理解されるように、このような直接注射は、組成物またはその懸濁液の量が多いため全量を固形腫瘍塊の中に直接注射することができない場合などに、懸濁液などの組成物、例えば薬物の一部を固形腫瘍の周辺に（「腫瘍周囲に」）注射することを含み得る。一実施形態では、組成物またはその懸濁液を固形腫瘍塊の中に全量注射する。本明細書で使用される腫瘍は、腫瘍塊ならびに特に限定されないが骨および軟部組織転移を含めた腫瘍転移の両方を包含する。
【００９７】
本明細書で使用される「治療する」または「治療」は、以下のうち１つまたは複数のものを遂行することを意味する：（ａ）腫瘍サイズの縮小；（ｂ）腫瘍成長の抑制；（ｃ）転移の発現および／または拡散の抑制または制限；（ｄ）化学療法治療による１つまたは複数の副作用発現の抑制または制限。
【００９８】
化学療法治療による副作用としては、特に限定されないが、貧血、好中球減少症、血小板減少症、神経毒性、食欲減退、便秘、下痢、脱毛、疲労、嘔気／嘔吐および疼痛が挙げられる。
【００９９】
一実施形態では、腫瘍の治療は腫瘍転移の阻害を含む。腫瘍細胞転移の「阻害」は、無治療と比較した任意の量の阻害を含み得る。様々な非限定的な実施形態では、この方法は、対照（無治療など）と比較して５％、１０％、２５％、５０％；１００％またはそれ以上の腫瘍細胞転移発現の阻害または既存の腫瘍転移の減少を含み得る。
【０１００】
別の態様では、本発明は、腫瘍転移を阻害する方法であって、腫瘍を有する対象に化学療法剤粒子を含む有効量の組成物を投与して腫瘍転移を阻害することを含む、方法を提供する。
【０１０１】
本発明者らは驚くべきことに、対象に投与した本明細書に記載される化学療法剤が対象のリンパ系の中に移動し、そこに保持されることを発見した。当業者に理解されるように、腫瘍には循環血が灌流しており、腫瘍内に直接注射した遊離薬物は、腫瘍細胞内に侵入して最適な治療利益が得られるほど十分に腫瘍内に保持されることはない。腫瘍内の悪性細胞は、転移として知られる過程で、癌細胞が腹膜腔の液体内を移動することにより血液系、リンパ系を経てリンパ節および遠隔部位まで拡散する。したがって、本発明の方法を用いて転移を阻害することができる。この態様では、化学療法剤粒子を直接注射、腹腔内注射、腫瘍周囲注射またはその他の適切な投与経路により投与することができる。
【０１０２】
腫瘍細胞転移の「阻害」は、無治療と比較した任意の量の阻害を含み得る。様々な非限定的な実施形態では、この方法は、対照（無治療など）と比較して５％、１０％、２５％、５０％；１００％またはそれ以上の腫瘍細胞転移発現の阻害または既存の腫瘍転移の減少を含み得る。
【０１０３】
様々な実施形態では、化学療法剤は、タキサン（パクリタキセル、パクリタキセル、ドセタキセル、カバジタキセルの誘導体など）、エピチロン（ｅｐｉｔｈｉｌｏｎｅ）、ビンカアルカロイド、例えばビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、ビノレルビンなど；カンプトテシン類似体；エピポドフィロトキシン、例えばシスプラチン、カルボプラチン、オキサリプラチン、エトポシドおよびテニポシドなど；ドキソルビシン、アンスルサイクリン（ａｎｔｈｒｃｙｃｌｉｎｅ）、５‐フルオロウラシル、トポテカン、ゲムシタビン、ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体（ＰＰＡＲ）リガンドならびに抗血管新生剤からなる群より選択される。
【０１０４】
様々な実施形態では、固形腫瘍は、肉腫，癌腫およびリンパ腫，乳腺腫瘍，前立腺腫瘍，頭頸部腫瘍，膠芽腫，膀胱腫瘍，膵臓腫瘍，肝臓腫瘍，卵巣腫瘍，結腸直腸腫瘍，肺腫瘍，皮膚腫瘍、リンパ系腫瘍および胃腸腫瘍からなる群より選択される。特定の実施形態では、固形腫瘍は前立腺腫瘍であり、化学療法剤粒子はパクリタキセルまたはドセタキセル粒子である。別の特定の実施形態では、固形腫瘍は卵巣腫瘍であり、化学療法剤粒子はパクリタキセルまたはドセタキセル粒子である。別の特定の実施形態では、固形腫瘍は乳腺腫瘍であり、化学療法剤粒子はドセタキセル粒子である。別の特定の実施形態では、固形腫瘍は膵臓腫瘍であり、化学療法剤粒子はパクリタキセルまたはドセタキセル粒子である。これらの実施形態ではいずれも、腫瘍は、例えば腺癌であり得る。
【０１０５】
本発明者らは予想外にも、下に記載する新規な粒子の作製方法を用いて、約０．０５０ｇ／ｃｍ３〜約０．１５ｇ／ｃｍ３の平均かさ密度および／または少なくとも１８ｍ２／ｇの比表面積（ＳＳＡ）を有するタキサン粒子などの化学療法剤粒子を作製することができた。のちの実施例で示すように、タキサン粒子の比表面積が増大し、かさ密度が減少することにより、比較に用いた未加工タキサンおよび粉砕タキサン製品と比較して溶解速度が大幅に増大した。溶解は固体／液体界面でのみ起こる。したがって、比表面積が増大すると、溶解媒体と接している粒子表面の分子数が多くなるため溶解速度が増大する。かさ密度は粉末のマクロ構造および粒子間間隙を考慮に入れたものである。かさ密度に寄与するパラメータとしては、粒子径分布、粒子の形状および粒子同士の親和性（すなわち、凝集）が挙げられる。粒子のかさ密度が小さいと溶解速度が速くなる。これは、溶解媒体が間質または粒子間の間隙をさらに容易に貫通し、粒子表面との接触を増やすことができることによる。したがって、比表面積の増大およびかさ密度の減少のそれぞれが、比較に用いた未処理または未加工の原料および粉砕タキサン製品と比較して本発明のタキサン粒子の溶解速度の大幅な増大をもたらす。このことは、例えば腫瘍治療への本発明のタキサン粒子の使用に大幅な改善をもたらす。
【０１０６】
したがって、別の実施形態では、化学療法剤粒子は、少なくとも１０ｍ２／ｇまたは少なくとも１２ｍ２／ｇ、１４ｍ２／ｇ、１６ｍ２／ｇ、１８ｍ２／ｇ、２０ｍ２／ｇ、２５ｍ２／ｇ、３０ｍ２／ｇ、３２ｍ２／ｇ、３４ｍ２／ｇまたは３５ｍ２／ｇの比表面積（ＳＳＡ）を有する。一実施形態では、化学療法剤粒子は約１０ｍ２／ｇ〜約５０ｍ２／ｇのＳＳＡを有する。
【０１０７】
これらの実施形態では、化学療法剤粒子はタキサン粒子であるのが好ましい。タキサンは、水に極めて難溶性のタキサジエン核を含むジテルペノイドのクラスの１つである。本発明のタキサン粒子は、特に限定されないが、パクリタキセル、ドセタキセル、カバジタキセル、タキサジエン、バッカチンＩＩＩ、タクスキニンＡ、ブレビフォリオールおよびタキススピンＤ、その組合せまたはその薬学的に許容される塩を含めた任意の適切なタキサンであり得る。一実施形態では、タキサンは、パクリタキセル、ドセタキセルおよびカバジタキセルまたはその薬学的に許容される塩からなる群より選択される。本発明の様々な実施形態では、タキサン粒子はコートされていない（純粋な）個別粒子であり；タキサン粒子はいかなる物質とも結合もコンジュゲートもしておらず；いかなる物質もタキサン粒子の表面に吸着しておらず；タキサン粒子はいかなる物質内にもカプセル化されておらず；タキサン粒子はいかなる物質でもコートされておらず；タキサン粒子は、タキサンのマイクロエマルション、ナノエマルション、マイクロスフェア、リポソームのいずれでもなく；かつ／またはタキサン粒子はモノマー、ポリマー（または生体適合性ポリマー）、タンパク質、界面活性剤、アルブミンのいずれにも結合も、付着もしておらず、これらの中にカプセル化もされておらず、これらでコートされてもいない。いくつかの実施形態では、モノマー、ポリマー（または生体適合性ポリマー）、コポリマー、タンパク質、界面活性剤、アルブミンのいずれもタキサン粒子の表面に吸着していない。いくつかの実施形態では、組成物は、ポリマー／コポリマーも生体適合性ポリマー／コポリマーもない／これを含むことも含有することもない。いくつかの実施形態では、組成物は、タンパク質がない／これを含むことも含有することもない。本発明のいくつかの態様では、組成物は、アルブミンがない／これを含むことも含有することもない。本発明のいくつかの態様では、組成物は、ヒアルロン酸がない／これを含むことも含有することもない。本発明のいくつかの態様では、組成物は、ヒアルロン酸とタキサンのコンジュゲートがない／これを含むことも含有することもない。本発明のいくつかの態様では、組成物は、ヒアルロン酸とパクリタキセルのコンジュゲートがない／これを含むことも含有することもない。本発明のいくつかの態様では、組成物は、ポロキサマー、ポリアニオン、ポリカチオン、修飾ポリアニオン、修飾ポリカチオン、キトサン、キトサン誘導体、金属イオン、ナノベクター、ポリ−ガンマ−グルタミン酸（ＰＧＡ）、ポリアクリル酸（ＰＡＡ）、アルギン酸（ＡＬＧ）、ビタミンＥ−ＴＰＧＳ、ジメチルイソソルビド（ＤＭＩ）、メトキシＰＥＧ３５０、クエン酸、抗ＶＥＧＦ抗体、エチルセルロース、ポリスチレン、ポリ酸無水物、ポリヒドロキシ酸、ポリホスファゼン、ポリオルトエステル、ポリエステル、ポリアミド、多糖、ポリタンパク質、スチレン−イソブチレン−スチレン（ＳＩＢＳ）、ポリ酸無水物コポリマー、ポリカプロラクトン、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリ（ビス（Ｐ−カルボキシフェノキシ）プロパン−セバシン酸、ポリ（ｄ，ｌ−乳酸）（ＰＬＡ）、ポリ（ｄ．ｌ−乳酸−ｃｏ−グリコール酸）（ＰＬＡＧＡ）および／またはポリ（Ｄ、Ｌ乳酸−ｃｏ−グリコール酸（ＰＬＧＡ）がない／これを含むことも含有することもない。
【０１０８】
１つのこのような実施形態では、化学療法剤粒子は、少なくとも９５重量％のタキサンまたはその薬学的に許容される塩を含み、粒子は以下の特徴：
（ｉ）約０．０５０ｇ／ｃｍ３〜約０．１５ｇ／ｃｍ３の平均かさ密度および／または
（ｉｉ）少なくとも１８ｍ２／ｇ、２０ｍ２／ｇ、２５ｍ２／ｇ、３０ｍ２／ｇ、３２ｍ２／ｇ、３４ｍ２／ｇまたは３５ｍ２／ｇの比表面積（ＳＳＡ）を有する
のうちの一方または両方を有する。
【０１０９】
本明細書で使用される「比表面積」とは、ブルナウアー・エメット・テラー（「ＢＥＴ」）等温式により測定されるタキサンの質量単位当たりのタキサン粒子の総表面積（すなわち、ＢＥＴ  ＳＳＡ）のことである。当業者に理解されるように、「タキサン粒子」は凝集タキサン粒子および非凝集タキサン粒子の両方を含み得る；ＳＳＡは１グラム当たりで求めるため、組成物中の凝集タキサン粒子および非凝集タキサン粒子の両方を考慮に入れる。ＢＥＴ比表面積試験の方法は、米国薬局方および欧州薬局方の両方に含まれる公定法である。
【０１１０】
本明細書で使用されるタキサン粒子のかさ密度は、組成物中の粒子全体の質量を、メスシリンダーに粒子を注入しメスシリンダーをタップせずに粒子が占める総体積で除したものである。総体積には、粒子の体積、粒子間の空隙体積および内部細孔体積が含まれる。
【０１１１】
一実施形態では、タキサンはパクリタキセルまたはその薬学的に許容される塩であり、粒子は約０．０５０ｇ／ｃｍ３〜約０．１２ｇ／ｃｍ３の平均かさ密度を有する。別の実施形態では、パクリタキセル粒子は約０．０６０ｇ／ｃｍ３〜約０．１１ｇ／ｃｍ３の平均かさ密度を有する。いくつかの実施形態では、化学療法剤およびタキサン粒子は、凝集していない個別粒子であり、複数の化学療法剤粒子のクラスターではない。
【０１１２】
さらなる実施形態では、タキサンはパクリタキセルまたはその薬学的に許容される塩であり、パクリタキセル粒子は少なくとも１２ｍ２／ｇの比表面積（ＳＳＡ）を有する。Ｉ様々な実施形態では、パクリタキセル粒子は、少なくとも１２ｍ２／ｇ、１３ｍ２／ｇ、１４ｍ２／ｇ、１５ｍ２／ｇ、１６ｍ２／ｇ、１７ｍ２／ｇ、１８ｍ２／ｇ、１９ｍ２／ｇ、２０ｍ２／ｇ、２１ｍ２／ｇ、２２ｍ２／ｇ、２３ｍ２／ｇ、２４ｍ２／ｇ、２５ｍ２／ｇ、２６ｍ２／ｇ、２７ｍ２／ｇ、２８ｍ２／ｇ、２９ｍ２／ｇ、３０ｍ２／ｇ、３１ｍ２／ｇ、３２ｍ２／ｇ、３３ｍ２／ｇ、３４ｍ２／ｇ、３５ｍ２／ｇ、３６ｍ２／ｇ、３７ｍ２／ｇ、３８ｍ２／ｇ、３９ｍ２／ｇまたは少なくとも４０ｍ２／ｇのＳＳＡを有する。様々なさらなる実施形態では、パクリタキセル粒子は、約１２ｍ２／ｇ〜約４０ｍ２／ｇ、約１４ｍ２／ｇ〜約４０ｍ２／ｇ、約１５ｍ２／ｇ〜約４０ｍ２／ｇ、約１６ｍ２／ｇ〜約４０ｍ２／ｇ、約１７ｍ２／ｇ〜約４０ｍ２／ｇ、約１８ｍ２／ｇ〜約４０ｍ２／ｇ、約１９ｍ２／ｇ〜約４０ｍ２／ｇ、約２０ｍ２／ｇ〜約４０ｍ２／ｇ、約２２ｍ２／ｇ〜約４０ｍ２／ｇ、約２５ｍ２／ｇ〜約４０ｍ２／ｇ、約２６ｍ２／ｇ〜約４０ｍ２／ｇ、約３０ｍ２／ｇ〜約４０ｍ２／ｇ、約３５ｍ２／ｇ〜約４０ｍ２／ｇ、約２０ｍ２／ｇ〜約２９ｍ２／ｇ、約２０ｍ２／ｇ〜約２８ｍ２／ｇ、約２０ｍ２／ｇ〜約２６．２ｍ２／ｇ、約２２ｍ２／ｇ〜約２９ｍ２／ｇ、約２２ｍ２／ｇ〜約２８ｍ２／ｇ、約２２ｍ２／ｇ〜約２６．２ｍ２／ｇ、約３２ｍ２／ｇ〜約４０ｍ２／ｇ、約３２ｍ２／ｇ〜約３８ｍ２／ｇまたは約３２ｍ２／ｇ〜約３６ｍ２／ｇのＳＳＡを有する。
【０１１３】
好ましい一実施形態では、パクリタキセル粒子は、約０．０５０ｇ／ｃｍ３〜約０．１２ｇ／ｃｍ３の平均かさ密度と、少なくとも３０ｍ２／ｇのＳＳＡとを有する。別の好ましい実施形態では、パクリタキセル粒子は、約０．０５０ｇ／ｃｍ３〜約０．１２ｇ／ｃｍ３の平均かさ密度と、少なくとも３５ｍ２／ｇのＳＳＡとを有する。１つでは、パクリタキセル粒子は、約０．０５０ｇ／ｃｍ３〜約０．１２ｇ／ｃｍ３の平均かさ密度と、約３０ｍ２／ｇ〜約４０ｍ２／ｇのＳＳＡとを有する。別の好ましい実施形態では、パクリタキセル粒子は、約０．０６０ｇ／ｃｍ３〜約０．１１ｇ／ｃｍ３の平均かさ密度と、約３０ｍ２／ｇ〜約４０ｍ２／ｇのＳＳＡとを有する。別の好ましい実施形態では、パクリタキセル粒子は、約０．０６０ｇ／ｃｍ３〜約０．１１ｇ／ｃｍ３の平均かさ密度と、少なくとも３０ｍ２／ｇのＳＳＡとを有する。さらなる実施形態では、パクリタキセル粒子は、約０．０６０ｇ／ｃｍ３〜約０．１１ｇ／ｃｍ３の平均かさ密度と、少なくとも３５ｍ２／ｇのＳＳＡとを有する。これらの様々な実施形態については、のちの実施例に例示する。
【０１１４】
これらの様々な実施形態ではいずれも、パクリタキセル粒子は、パクリタキセル粒子１個当たり少なくとも４．１６×１０−１３グラムのパクリタキセルまたはその薬学的に許容される塩を含み得る。
【０１１５】
別の実施形態では、組成物のパクリタキセル粒子中のパクリタキセルの少なくとも４０％（ｗ／ｗ）が、７５ＲＰＭで稼働しているＵＳＰ  ＩＩのパドル法の装置中、５０％メタノール／５０％水（ｖ／ｖ）の溶液に３０分以内に溶解する。ｐＨ７を用いており、ｐＨによりタキサンの溶解性がもたらされることはない。別の実施形態では、３７℃で溶解試験を実施する。
【０１１６】
別の実施形態では、タキサンはドセタキセルまたはその薬学的に許容される塩であり、ドセタキセル粒子は約０．０５０ｇ／ｃｍ３〜約０．１２ｇ／ｃｍ３の平均かさ密度を有する。さらなる実施形態では、ドセタキセル粒子の平均かさ密度は約０．０６ｇ／ｃｍ３〜約０．１ｇ／ｃｍ３である。
【０１１７】
別の実施形態では、タキサンはドセタキセルまたはその薬学的に許容される塩であり、ドセタキセル粒子は少なくとも１８ｍ２／ｇのＳＳＡを有する。様々なさらなる実施形態では、ドセタキセル粒子は、少なくとも２０ｍ２／ｇ、２５ｍ２／ｇ、３０ｍ２／ｇ、３５ｍ２／ｇ、４０ｍ２／ｇまたは４２ｍ２／ｇのＳＳＡを有する。さらなる実施形態では、ドセタキセル粒子は約４０ｍ２／ｇ〜約５０ｍ２／ｇのＳＳＡを有する。別の実施形態では、ドセタキセル粒子は約４３ｍ２／ｇ〜約４６ｍ２／ｇのＳＳＡを有する。
【０１１８】
好ましい一実施形態では、ドセタキセル粒子は、約０．０５０ｇ／ｃｍ３〜約０．１２ｇ／ｃｍ３の平均かさ密度と、少なくとも３０ｍ２／ｇのＳＳＡとを有する。別の好ましい実施形態では、ドセタキセル粒子は、約０．０５０ｇ／ｃｍ３〜約０．１２ｇ／ｃｍ３の平均かさ密度と、少なくとも３５ｍ２／ｇのＳＳＡとを有する。さらなる好ましい実施形態では、ドセタキセル粒子は、約０．０５０ｇ／ｃｍ３〜約０．１２ｇ／ｃｍ３の平均かさ密度と、少なくとも４０ｍ２／ｇのＳＳＡとを有する。好ましい一実施形態では、ドセタキセル粒子は、約０．０５０ｇ／ｃｍ３〜約０．１２ｇ／ｃｍ３の平均かさ密度と、約４０ｍ２／ｇ〜約５０ｍ２／ｇのＳＳＡとを有する。別の好ましい実施形態では、ドセタキセル粒子の平均かさ密度は約０．０６ｇ／ｃｍ３〜約０．１ｇ／ｃｍ３であり、ＳＳＡは約４０ｍ２／ｇ〜約５０ｍ２／ｇである。これらの様々な実施形態については、のちの実施例に例示する。
【０１１９】
これらの様々な実施形態ではいずれも、ドセタキセル粒子は、ドセタキセル粒子１個当たり少なくとも４．１６×１０−１３グラムのドセタキセルまたはその薬学的に許容される塩を含み得る。
【０１２０】
別の実施形態では、ドセタキセルの少なくとも２０％（ｗ／ｗ）が、７５ＲＰＭで稼働しているＵＳＰ  ＩＩのパドル法の装置中、１５％メタノール／８５％水（ｖ／ｖ）の溶液に３０分以内に溶解する。中性ｐＨを用いており、この場合、ｐＨによりタキサンの溶解性がもたらされることはない。別の実施形態では、３７℃で溶解試験を実施する。
【０１２１】
さらなる実施形態では、化学療法剤粒子は、少なくとも９５重量％のパクリタキセルまたはその薬学的に許容される塩を含み、粒子は、
（ａ）１６ｍ２／ｇ〜３１ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ〜４０ｍ２／ｇ；
（ｂ）１６ｍ２／ｇ〜３０ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ〜４０ｍ２／ｇ；
（ｃ）１６ｍ２／ｇ〜２９ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ〜４０ｍ２／ｇ；
（ｄ）１７ｍ２／ｇ〜３１ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ〜４０ｍ２／ｇ；
（ｅ）１７ｍ２／ｇ〜３０ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ〜４０ｍ２／ｇ；
（ｆ）１７ｍ２／ｇ〜２９ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ〜４０ｍ２／ｇ；
（ｇ）１６ｍ２／ｇ〜３１ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ〜４０ｍ２／ｇ；
（ｈ）１６ｍ２／ｇ〜３０ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ〜４０ｍ２／ｇ；
（ｉ）１６ｍ２／ｇ〜２９ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ〜４０ｍ２／ｇ；
（ｊ）１７ｍ２／ｇ〜３１ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ〜４０ｍ２／ｇ；
（ｋ）１７ｍ２／ｇ〜３０ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ〜４０ｍ２／ｇ；
（ｌ）１７ｍ２／ｇ〜２９ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ〜４０ｍ２／ｇ；
（ｍ）１６ｍ２／ｇ〜３１ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ以上；
（ｈ）１７ｍ２／ｇ〜３１ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ以上；
（ｉ）１６ｍ２／ｇ〜３０ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ以上；
（ｊ）１７ｍ２／ｇ〜３０ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ以上；
（ｋ）１６ｍ２／ｇ〜２９ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ以上；
（ｌ）１７ｍ２／ｇ〜２９ｍ２／ｇもしくは３２ｍ２／ｇ以上；
（ｍ）１６ｍ２／ｇ〜３１ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ以上；
（ｎ）１７ｍ２／ｇ〜３１ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ以上；
（ｏ）１６ｍ２／ｇ〜３０ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ以上；
（ｐ）１７ｍ２／ｇ〜３０ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ以上；
（ｑ）１６ｍ２／ｇ〜２９ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ以上；または
（ｒ）１７ｍ２／ｇ〜２９ｍ２／ｇもしくは３３ｍ２／ｇ以上
の比表面積（ＳＳＡ）を有する。
【０１２２】
別の実施形態では、組成物のパクリタキセル粒子中のパクリタキセルまたはその薬学的に許容される塩の少なくとも４０％（ｗ／ｗ）が、７５ＲＰＭで稼働しているＵＳＰ  ＩＩのパドル法の装置中、５０％メタノール／５０％水（ｖ／ｖ）の溶液に３０分以内に溶解する。ｐＨ７を用いており、ｐＨによりタキサンの溶解性がもたらされることはない。別の実施形態では、３７℃で溶解試験を実施する。
【０１２３】
さらなる実施形態では、化学療法剤粒子は、少なくとも９５重量％のパクリタキセルまたはその薬学的に許容される塩を含み、パクリタキセルの少なくとも４０％（ｗ／ｗ）が、７５ＲＰＭで稼働しているＵＳＰ  ＩＩのパドル法の装置中、５０％メタノール／５０％水（ｖ／ｖ）の溶液に３０分以内に溶解する。ｐＨ７を用いており、ｐＨによりタキサンの溶解性がもたらされることはない。別の実施形態では、３７℃で溶解試験を実施する。
【０１２４】
さらなる実施形態では、化学療法剤粒子は、少なくとも９５重量％のドセタキセルまたはその薬学的に許容される塩を含み、ドセタキセルの少なくとも２０％（ｗ／ｗ）が、７５ＲＰＭで稼働しているＵＳＰ  ＩＩのパドル法の装置中、５％メタノール／８５％水（ｖ／ｖ）の溶液に３０分以内に溶解する。ｐＨ７を用いており、ｐＨによりタキサンの溶解性がもたらされることはない。別の実施形態では、３７℃で溶解試験を実施する。
【０１２５】
一実施形態では、化学療法剤粒子は、約０．１ｍｇ／ｍｌ〜約１００ｍｇ／ｍｌの化学療法剤の懸濁液の形の（すなわち、薬学的に許容される担体および他の任意の成分を含む）化学療法剤の剤形を含む。様々なさらなる実施形態では、剤形は、約０．５ｍｇ／ｍｌ〜約１００ｍｇ／ｍｌ、約１ｍｇ／ｍｌ〜約１００ｍｇ／ｍｌ、約２ｍｇ／ｍｌ〜約１００ｍｇ／ｍｌ、約５ｍｇ／ｍｌ〜約１００ｍｇ／ｍｌ、約１０ｍｇ／ｍｌ〜約１００ｍｇ／ｍｌ、約２５ｍｇ／ｍｌ〜約１００ｍｇ／ｍｌ、約０．１ｍｇ／ｍｌ〜約７５ｍｇ／ｍｌ、約０．５ｍｇ／ｍｌ〜約７５ｍｇ／ｍｌ、約１ｍｇ／ｍｌ〜約７５ｍｇ／ｍｌ、約２ｍｇ／ｍｌ〜約７５ｍｇ／ｍｌ、約５ｍｇ／ｍｌ〜約７５ｍｇ／ｍｌ、約１０ｍｇ／ｍｌ〜約７５ｍｇ／ｍｌ、約２５ｍｇ／ｍｌ〜約７５ｍｇ／ｍ、約０．１ｍｇ／ｍｌ〜約５０ｍｇ／ｍｌ、約０．５ｍｇ／ｍｌ〜約５０ｍｇ／ｍｌ、約１ｍｇ／ｍｌ〜約５０ｍｇ／ｍｌ、約２ｍｇ／ｍｌ〜約５０ｍｇ／ｍｌ、約５ｍｇ／ｍｌ〜約５０ｍｇ／ｍｌ、約１０ｍｇ／ｍｌ〜約５０ｍｇ／ｍｌ、約２５ｍｇ／ｍｌ〜約５０ｍｇ／ｍ、約０．１ｍｇ／ｍｌ〜約２５ｍｇ／ｍｌ、約０．５ｍｇ／ｍｌ〜約２５ｍｇ／ｍｌ、約１ｍｇ／ｍｌ〜約４０ｍｇ／ｍｌ、約１ｍｇ／ｍｌ〜約２５ｍｇ／ｍｌ、約２ｍｇ／ｍｌ〜約２５ｍｇ／ｍｌ、約５ｍｇ／ｍｌ〜約２５ｍｇ／ｍｌ、約１０ｍｇ／ｍｌ〜約２５ｍｇ／ｍｌ、約０．１ｍｇ／ｍｌ〜約１５ｍｇ／ｍｌ、約０．５ｍｇ／ｍｌ〜約１５ｍｇ／ｍｌ、約１ｍｇ／ｍｌ〜約１５ｍｇ／ｍｌ、約２ｍｇ／ｍｌ〜約１５ｍｇ／ｍｌ、約５ｍｇ／ｍｌ〜約１５ｍｇ／ｍｌ、約１０ｍｇ／ｍｌ〜約１５ｍｇ／ｍｌ、約０．１ｍｇ／ｍｌ〜約１０ｍｇ／ｍｌ、約０．５ｍｇ／ｍｌ〜約１０ｍｇ／ｍｌ、約１ｍｇ／ｍｌ〜約１０ｍｇ／ｍｌ、約２ｍｇ／ｍｌ〜約１０ｍｇ／ｍｌ、約５ｍｇ／ｍｌ〜約１０ｍｇ／ｍｌ、約０．１ｍｇ／ｍｌ〜約５ｍｇ／ｍｌ、約０．５ｍｇ／ｍｌ〜約５ｍｇ／ｍｌ、約１ｍｇ／ｍｌ〜約５ｍｇ／ｍｌ、約２ｍｇ／ｍｌ〜約５ｍｇ／ｍｌ、約０．１ｍｇ／ｍｌ〜約２ｍｇ／ｍｌ、約０．５ｍｇ／ｍｌ〜約２ｍｇ／ｍｌ、約１ｍｇ／ｍｌ〜約２ｍｇ／ｍｌ、約０．１ｍｇ／ｍｌ〜約１ｍｇ／ｍｌ、約０．５ｍｇ／ｍｌ〜約１ｍｇ／ｍｌ、約０．１ｍｇ／ｍｌ〜約０．５ｍｇ／ｍｌ、約０．１ｍｇ／ｍｌ〜約１５ｍｇ／ｍｌ、約０．５ｍｇ／ｍｌ〜約１５ｍｇ／ｍｌ、約１ｍｇ／ｍｌ〜約１５ｍｇ／ｍｌ、約２ｍｇ／ｍｌ〜約１５ｍｇ／ｍｌ、約５ｍｇ／ｍｌ〜約１５ｍｇ／ｍｌ、約３ｍｇ／ｍｌ〜約８ｍｇ／ｍｌもしくは約４ｍｇ／ｍｌ〜約６ｍｇ／ｍｌのパクリタキセルまたは少なくとも約０．１ｍｇ／ｍｌ、０．５ｍｇ／ｍｌ、１ｍｇ／ｍｌ、１０ｍｇ／ｍｌ、２０ｍｇ／ｍｌ、２５ｍｇ／ｍｌ、５０ｍｇ／ｍｌ、７５ｍｇ／ｍｌもしくは１００ｍｇ／ｍｌの化学療法剤であり得る。
【０１２６】
本発明のあらゆる態様および実施形態では、組成物は、担当の医療関係者が適切であると考える適切な薬学的に許容される担体に溶かして提供され得る。一実施形態では、製剤は少量（すなわち、１０ｕｌ〜４０ｍｌ；他の実施形態では、１０ｕｌ〜３５ｍｌ、１０ｕｌ〜３０ｍｌ、１０ｕｌ〜２５ｍｌ、１０ｕｌ〜２０ｍｌ、１０ｕｌ〜１５ｍｌ、１０ｕｌ〜１０ｍｌ、１０ｕｌ〜７．５ｍｌ、１０ｕｌ〜５ｍｌ、１０ｕｌ〜４ｍｌ、１０ｕｌ〜３ｍｌ、５０ｕｌ〜４０ｍｌ、５０ｕｌ〜３５ｍｌ、５０ｕｌ〜３０ｍｌ、５０ｕｌ〜２５ｍｌ、５０ｕｌ〜２０ｍｌ、５０ｕｌ〜１５ｍｌ、５０ｕｌ〜１０ｍｌ、５０ｕｌ〜７．５ｍｌ、５０ｕｌ〜５ｍｌ、５０ｕｌ〜４ｍｌ、５０ｕｌ〜３ｍｌ、１００ｕｌ〜４０ｍｌ、１００ｕｌ〜３５ｍｌ、１００ｕｌ〜３０ｍｌ、１００ｕｌ〜２５ｍｌ、１００ｕｌ〜２０ｍｌ、１００ｕｌ〜１５ｍｌ、１００ｕｌ〜１０ｍｌ、１００ｕｌ〜７．５ｍｌ、１００ｕｌ〜５ｍｌ、１００ｕｌ〜５ｍｌ、１００ｕｌ〜４ｍｌ、１００ｕｌ〜３ｍｌ、５００ｕｌ〜４０ｍｌ、５００ｕｌ〜３５ｍｌ、５００ｕｌ〜３０ｍｌ、５００ｕｌ〜２５ｍｌ、５００ｕｌ〜２０ｍｌ、５００ｕｌ〜１５ｍｌ、５００ｕｌ〜１０ｍｌ、５００ｕｌ〜７．５ｍｌ、５００ｕｌ〜５ｍｌ、５００ｕｌ〜４ｍｌ、５００ｕｌ〜３ｍｌ、１ｍｌ〜４０ｍｌ、１ｍｌ〜３５ｍｌ、１ｍｌ〜３０ｍｌ、１ｍｌ〜２５ｍｌ、１ｍｌ〜２０ｍｌ、１ｍｌ〜１５ｍｌ、１ｍｌ〜１０ｍｌ、１ｍｌ〜７．５ｍｌ、１ｍｌ〜５ｍｌ、１ｍｌ〜４ｍｌまたは１ｍｌ〜３ｍｌ）を含む。したがって、別の態様では、本発明は、化学療法剤粒子と薬学的に許容される担体とを含み、組成物の総体積が１ｍｌ〜４０ｍｌ、１ｍｌ〜３５ｍｌ、１ｍｌ〜３０ｍｌ、１ｍｌ〜２５ｍｌ、１ｍｌ〜２０ｍｌ、１ｍｌ〜１５ｍｌ、１ｍｌ〜１０ｍｌ、１ｍｌ〜７．５ｍｌ、１ｍｌ〜５ｍｌ、１ｍｌ〜４ｍｌまたは１ｍｌ〜３ｍｌである、医薬組成物を提供する。一実施形態では、組成物は、化学療法剤粒子と、液体担体、半固体担体または固体担体などの薬学的に許容される担体とを含む。
【０１２７】
一実施形態では、組成物は、化学療法剤粒子と液体担体とを含むか、またはこれよりなる。水性液体担体などの任意の適切な液体担体を使用し得る。特に限定されないが、Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ  ＵＳＰ用の０．９％塩化ナトリウムなどの０．９％生理食塩溶液（通常の生理食塩水）を含めた任意の適切な水性液体担体を使用することができる。別の実施形態では、組成物は懸濁液を含む。いくつかの実施形態では、懸濁液は水性担体を含む。担体は、水に溶かした緩衝剤、浸透圧塩および／または界面活性剤ならびに等張性および粘度を調整するためのその他の薬剤を含み得る。水性担体を使用する一実施形態では、界面活性剤の濃度は、ｗ／ｗまたはｗ／ｖで１％未満；他の実施形態では、０．５％未満、０．２５％未満または約０．１％である。他の実施形態では、水性担体から界面活性剤のＧＥＬＵＣＩＲＥ（登録商標）（モノグリセリド、ジグリセリドおよびトリグリセリドとポリエチレングリコールのモノエステルおよびジエステルとからなるポリエチレングリコールグリセリド）および／またはクレモフォール（登録商標）（ポリエトキシル化ヒマシ油）が除外され得る。いくつかの実施形態では、組成物または懸濁液からポリマー、タンパク質（アルブミンなど）、ポリエトキシル化ヒマシ油ならびに／あるいはモノグリセリド、ジグリセリドおよびトリグリセリドとポリエチレングリコールのモノエステルおよびジエステルとからなるポリエチレングリコールグリセリドが除外される。
【０１２８】
懸濁液は、そのまま投与するか、または投与前に希釈剤、例えば任意選択で緩衝剤および１つまたは複数の他の添加剤を含む塩水（０．９％生理食塩溶液）で希釈することができる。希釈剤は、注射により患者に投与するのに適した任意の液体であり得る。例えば、懸濁液と希釈剤の体積比は、１：１〜１：１００ｖ／ｖまたはその他の適切な比の範囲内であり得る。
【０１２９】
いくつかの実施形態では、懸濁液は、水ならびに任意選択で、緩衝剤、浸透圧調整剤、保存剤、粘滑剤、粘度調整剤、浸透圧剤、界面活性剤、抗酸化剤、アルカリ化剤、酸性化剤、消泡剤および着色剤からなる群より選択される１つまたは複数の添加剤を含み得る。例えば、懸濁液は、化学療法剤粒子、水、緩衝剤および塩を含み得る。懸濁液は、任意選択で界面活性剤をさらに含む。いくつかの実施形態では、懸濁液は、水、水に懸濁したパクリタキセル粒子および緩衝剤より実質的になるか、またはこれよりなる。懸濁液は、浸透圧塩をさらに含有し得る。
【０１３０】
懸濁液は１つまたは複数の界面活性剤を含み得る。適切な界面活性剤には、例として、特に限定されないがポリソルベート、ラウリル硫酸、アセチル化モノグリセリド、ジアセチル化モノグリセリドおよびポロキサマーがある。ポリソルベートとは、ソルビトールと、ソルビトール１モル毎に約２０モル、５モルまたは４モルのエチレンオキシドとコポリマー化した無水ソルビトールと、無水ソルビトールの一連の部分脂肪酸エステルである、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルのことである。ポリソルベートの非限定的な例には、ポリソルベート２０、ポリソルベート２１、ポリソルベート４０、ポリソルベート６０、ポリソルベート６１、ポリソルベート６５、ポリソルベート８０、ポリソルベート８１、ポリソルベート８５およびポリソルベート１２０がある。エチレンオキシドが約２０モル含まれるポリソルベートは親水性の非イオン性界面活性剤である。エチレンオキシドが約２０モル含まれるポリソルベートの例としては、ポリソルベート２０、ポリソルベート４０、ポリソルベート６０、ポリソルベート６５、ポリソルベート８０、ポリソルベート８５およびポリソルベート１２０が挙げられる。ポリソルベートは、Ｃｒｏｄａ社から商標名ＴＷＥＥＮ（商標）で市販されている。ポリソルベートの番号の指定は、ＴＷＥＥＮの番号の指定に対応しており、例えば、ポリソルベート２０がＴＷＥＥＮ２０、ポリソルベート４０がＴＷＥＥＮ４０、ポリソルベート６０がＴＷＥＥＮ６０、ポリソルベート８０がＴＷＥＥＮ８０などである。ＵＳＰ／ＮＦグレードのポリソルベートとしては、ポリソルベート２０ＮＦ、ポリソルベート４０ＮＦ、ポリソルベート６０ＮＦおよびポリソルベート８０ＮＦが挙げられる。ポリソルベートはＰｈＥｕｒグレード（欧州薬局方）、ＢＰグレードおよびＪＰグレードのものも入手可能である。「ポリソルベート」という用語は一般名である。ポリソルベート２０の化学名はポリオキシエチレン２０ソルビタンモノラウラートである。ポリソルベート４０の化学名はポリオキシエチレン２０ソルビタンモノパルミタートである。ポリソルベート６０の化学名はポリオキシエチレン２０ソルビタンモノステアラートである。ポリソルベート８０の化学名はポリオキシエチレン２０ソルビタンモノオレアートである。いくつかの実施形態では、懸濁液はポリソルベートの混合物を含み得る。いくつかの実施形態では、懸濁液は、ポリソルベート２０、ポリソルベート４０、ポリソルベート６０、ポリソルベート６５、ポリソルベート８０、ポリソルベート８５および／またはポリソルベート１２０を含む。他の実施形態では、懸濁液は、ポリソルベート２０、ポリソルベート４０、ポリソルベート６０および／またはポリソルベート８０を含む。一実施形態では、懸濁液はポリソルベート８０を含む。
【０１３１】
懸濁液は１つまたは複数の浸透圧調整剤を含み得る。適切な浸透圧調整剤には、例として、特に限定されないが、１つまたは複数の無機塩、電解質、塩化ナトリウム、塩化カリウム、リン酸ナトリウム、リン酸カリウム、硫酸ナトリウム、硫酸カリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウムおよびアルカリ土類金属無機塩などのアルカリ土類金属塩、例えば、カルシウム塩およびマグネシウム塩、マンニトール、デキストロース、グリセリン、プロピレングリコールならびにその混合物がある。
【０１３２】
懸濁液は１つまたは複数の緩衝剤を含み得る。適切な緩衝剤には、例として、特に限定されないが、二塩基性リン酸ナトリウム、一塩基性リン酸ナトリウム、クエン酸、クエン酸ナトリウム塩酸、水酸化ナトリウム、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン、ビス（２−ヒドロキシエチル）イミノトリス−（ヒドロキシメチル）メタンおよび炭酸水素ナトリウムならびに当業者に公知のその他の緩衝剤がある。緩衝剤は通常、ｐＨを腹腔内に使用するのに望ましい範囲に調整するのに用いられる。通常、５〜９、５〜８、６〜７．４、６．５〜７．５または６．９〜７．４前後のｐＨが望ましい。
【０１３３】
懸濁液は１つまたは複数の粘滑剤を含み得る。粘滑剤とは、腹膜およびその中の臓器を裏打ちする膜などの粘膜上に鎮痛効果のある薄膜を形成する薬剤のことである。粘滑剤は軽度の疼痛および炎症を緩和し得るものであり、粘膜保護剤と呼ばれることもある。適切な粘滑剤としては、約０．２〜約２．５％のセルロース誘導体、例えばカルボキシメチルセルロースナトリウム、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースおよびメチルセルロースなど；約０．０１％のゼラチン；約０．０５〜約１％のグリセリン、ポリエチレングリコール３００、ポリエチレングリコール４００およびプロピレングリコールも含めた約０．０５〜約１％のポリオール；約０．１〜約４％のポリビニルアルコール；約０．１〜約２％のポビドン；ならびに本明細書に記載される別のポリマー性粘滑剤とともに用いる場合、約０．１％のデキストラン７０が挙げられる。
【０１３４】
懸濁液は、ｐＨを調整するための１つまたは複数のアルカリ化剤を含み得る。本明細書で使用される「アルカリ化薬剤」という用語は、アルカリ性の媒体を得るために使用する化合物を意味するものとする。このような化合物には、例として、特に限定されないが、アンモニア溶液、炭酸アンモニウム、水酸化カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウムおよび水酸化ナトリウムならびに当業者に公知のその他の化合物がある。
【０１３５】
懸濁液は、ｐＨを調整するための１つまたは複数の酸性化剤を含み得る。本明細書で使用される「酸性化剤」という用語は、酸性の媒体を得るために使用する化合物を意味するものとする。このような化合物には、例として、特に限定されないが、酢酸、アミノ酸、クエン酸、硝酸、フマル酸およびその他のアルファヒドロキシ酸、塩酸、アスコルビン酸および硝酸ならびに当業者に公知のその他の化合物がある。
【０１３６】
懸濁液は１つまたは複数の消泡剤を含み得る。本明細書で使用される「消泡剤」という用語は、充填組成物の表面に生じる泡立ちを防ぐ、またはその量を抑える１つまたは複数の化合物を意味するものとする。適切な消泡剤には、例として、特に限定されないが、ジメチコン、シメチコン、オクトキシノールおよび当業者に公知のその他の消泡剤がある。
【０１３７】
懸濁液は、懸濁液の粘度を増大または減少させる１つまたは複数の粘度調整剤を含み得る。適切な粘度調整剤としては、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチセルロース（ｈｙｄｒｏｘｙｐｒｏｐｙｌ  ｍｅｔｈｙｃｅｌｌｕｌｏｓｅ）、マンニトールおよびポリビニルピロリドンが挙げられる。
【０１３８】
いくつかの実施形態では、化学療法剤粒子は、ポリソルベートをさらに含む懸濁液中に存在する。ある特定の実施形態では、化学療法剤粒子は、ポリソルベートをさらに含む懸濁液中に存在し、ポリソルベートはポリソルベート８０である。他の実施形態では、ポリソルベートまたはポリソルベート８０は、懸濁液中に約０．０１％ｖ／ｖ〜約１．５％ｖ／ｖの濃度で存在する。本発明者らは驚くべきことに、ここに記載した極めて少量のポリソルベート８０により懸濁液中の化学療法剤粒子と水性担体（生理食塩水など）の界面における表面張力が減少することを発見した。これらの実施形態は通常、組成物の使用直前に製剤化する。これらの実施形態では、粒子はポリソルベートでもポリソルベート８０でもコートされていない。様々な他の実施形態では、ポリソルベートまたはポリソルベート８０は、懸濁液中に約０．０１％ｖ／ｖ〜約１％ｖ／ｖ、約０．０１％ｖ／ｖ〜約０．５％ｖ／ｖ、約０．０１％ｖ／ｖ〜約０．４％ｖ／ｖ、約０．０１％ｖ／ｖ〜約０．２５％ｖ／ｖ、約０．０５％ｖ／ｖ〜約０．５％ｖ／ｖ、約０．０５％ｖ／ｖ〜約０．２５％ｖ／ｖ、約０．１％ｖ／ｖ〜約０．５％ｖ／ｖ、約０．１％ｖ／ｖ〜約０．２５％ｖ／ｖ、約０．１％ｖ／ｖ、約０．１６ｖ／ｖまたは約０．２５％ｖ／ｖの濃度で存在する。さらなる実施形態では、パクリタキセルなどの化学療法剤が懸濁液中に約１ｍｇ／ｍｌ〜約４０ｍｇ／ｍｌまたは約６ｍｇ／ｍｌ〜約２０ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。様々なさらなる実施形態では、化学療法剤は、懸濁液中に約６ｍｇ／ｍｌ〜約１５ｍｇ／ｍｌ、約６ｍｇ／ｍｌ〜約１０ｍｇ／ｍｌ、約１０ｍｇ／ｍｌ〜約２０ｍｇ／ｍｌ、約１０ｍｇ／ｍｌ〜約１５ｍｇ／ｍｌ、約６ｍｇ／ｍｌ、約１０ｍｇ／ｍｌまたは約１５ｍｇ／ｍｌの濃度で存在する。様々なさらなる実施形態では、組成物中の水性担体は、約０．９％塩化ナトリウムなどの生理食塩水であり得る。
【０１３９】
したがって、本発明は、
（ａ）化学療法剤粒子と；
（ｂ）薬学的に許容される担体と；
（ｃ）ポリソルベートと
を含み、ポリソルベートが、懸濁液中に約０．０１％ｖ／ｖ〜約１．５％ｖ／ｖまたは約０．０１％ｖ／ｖ〜約１％ｖ／ｖ、約０．０１％ｖ／ｖ〜約０．５％ｖ／ｖ、約０．０１％ｖ／ｖ〜約０．４％ｖ／ｖ、約０．０１％ｖ／ｖ〜約０．２５％ｖ／ｖ、約０．０５％ｖ／ｖ〜約０．５％ｖ／ｖ、約０．０５％ｖ／ｖ〜約０．２５％ｖ／ｖ、約０．１％ｖ／ｖ〜約０．５％ｖ／ｖ、約０．１％ｖ／ｖ〜約０．２５％ｖ／ｖ、約０．１％ｖ／ｖ、約０．１６ｖ／ｖまたは約０．２５％ｖ／ｖの濃度で存在する、懸濁液も提供する。
【０１４０】
一実施形態では、ポリソルベートはポリソルベート８０である。一実施形態では、薬学的に許容される担体は０．９％生理食塩溶液である。別の実施形態では、化学療法剤粒子はタキサン粒子である。
【０１４１】
したがって、本発明は、
（ａ）化学療法剤粒子が含まれる第一のバイアルと；
（ｂ）ポリソルベートおよび薬学的に許容される担体が含まれる第二のバイアルと；
（ｃ）患者に投与する前に、第一のバイアルと第二のバイアルの内容物を組み合わせることにより化学療法剤粒子に再構成するためおよび懸濁液を０．９％生理食塩溶液などの希釈液で希釈するための指示書と
を含む、キットも提供する。
【０１４２】
一実施形態では、ポリソルベートはポリソルベート８０である。一実施形態では、薬学的に許容される担体は０．９％生理食塩溶液である。一実施形態では、第一のバイアルおよび第二のバイアルは無菌である。化学療法剤粒子とポリソルベートの懸濁液を希釈液で希釈すると、化学療法剤粒子の過剰な溶解が避けられる。
【０１４３】
本発明のこの態様の組成物、懸濁剤およびキットは、本明細書に記載される化学療法剤粒子の任意の実施形態または実施形態の組合せおよび本明細書に記載されるポリソルベートまたはポリソルベート８０濃度の任意の実施形態を含み得る。様々なさらなる実施形態では、組成物中の水性担体は、約０．９％塩化ナトリウムなどの生理食塩水であり得る。組成物、懸濁剤およびキットからポリマー、タンパク質（アルブミンなど）、ポリエトキシル化ヒマシ油ならびに／あるいはモノグリセリド、ジグリセリドおよびトリグリセリドとポリエチレングリコールのモノエステルおよびジエステルとからなるポリエチレングリコールグリセリドが除外され得る。
【０１４４】
組成物およびキットは、所与の化学療法剤粒子に適した他の成分をさらに含み得る。一実施形態では、ドセタキセル粒子は、溶媒としてエタノールをさらに含んでよく；任意の適切な量のエタノール、例えば約０．１３％〜３．２％の無水アルコール（エタノール）（２００ｐｒｏｏｆ、Ｕｎｄｅｎａｔｕｒｅｄ、ＵＳＰ）などを使用し得る。
【０１４５】
対象は、特に限定されないが哺乳動物（ヒトおよびその他の霊長類、イヌ、ネコ、ウマ、ウシ、ブタ、ヒツジ、ヤギなど）を含めた、治療から利益を得ることができる任意の適切な対象であり得る。
【０１４６】
化学療法剤粒子の「有効量」は、主治医があらゆる関連因子に基づき決定することができる。化学療法剤粒子は、投与する唯一の化学療法剤であっても、あるいは主治医があらゆる状況を考慮に入れ適切であると考える他の治療剤とともに投与してもよい。一実施形態では、この方法は、治療する腫瘍に対する標準治療法、例えば静脈内化学療法、放射線療法、外科的切除などで対象を治療することをさらに含む。例えば、前立腺癌の治療方法を、前立腺のサルベージ切除、病巣または前立腺全体の近接照射療法、凍結療法、強力集束超音波（ＨＩＦＵ）および体幹部定位放射線療法（ＳＢＲＴ）のうち１つまたは複数のものと組み合わせ得る。
【０１４７】
腫瘍内への化学療法剤粒子の直接注射は、任意の適切な手段により遂行し得る。非限定的な実施形態では、（前立腺腫瘍注射などに対する）磁気共鳴画像法−経直腸的超音波融合（ＭＲ−ＴＲＵＳ）ガイダンスまたは超音波内視鏡下細針注入（ＥＵＳ−ＦＮＩ）により注射を実施し得る。
【０１４８】
実施例１．パクリタキセル粒子およびドセタキセル粒子の作製
材料および方法
Ｐｈｙｔｏｎ  Ｂｉｏｔｅｃｈ社（ブリティッシュコロンビア州、カナダ）から未加工のパクリタキセルおよびドセタキセル（それぞれロット番号ＦＰ２−１５００４およびＤＴ７−１４０２５）を購入した。ともにその未加工形態で特徴付けた。Ｄｅｃｏ−ＰＢＭ−Ｖ−０．４１ミル（Ｄｅｃｏ社）を用いて両薬の粉砕を実施した。両化合物の粉砕条件を以下の通りとした：
ボールサイズ＝５ｍｍ
ＲＰＭ＝６００
処理時間＝６０分
室温。
【０１４９】
パクリタキセル粒子の調製
６５ｍｇ／ｍｌのパクリタキセル溶液をアセトンで調製した。ＢＥＴＥ  ＭｉｃｒｏＷｈｉｒｌ（登録商標）噴霧ノズル（ＢＥＴＥ  Ｆｏｇ  Ｎｏｚｚｌｅ社）および超音波プローブ（Ｑｓｏｎｉｃａ社、モデル番号Ｑ７００）を晶析チャンバ内に約８ｍｍ離して配置した。析出したパクリタキセルナノ粒子を収集するため、孔が約１００ｎｍのステンレス鋼メッシュフィルタを晶析チャンバに取り付けた。製造設備の晶析チャンバ内に超臨界二酸化炭素を置き、約３８℃、流量２４ｋｇ／時で約１２００ｐｓｉ（約８３００ｋＰａ）にした。超音波プローブを周波数２０ｋＨｚで総出力の６０％に調整した。パクリタキセルを含有するアセトン溶液を流量４．５ｍＬ／分で約３６時間、ポンプでノズルに通した。作製されたパクリタキセルナノ粒子は、平均数値で加重した平均サイズが０．８１μｍであり、別々に実施した３回の標準偏差の平均が０．７４μｍであった。
【０１５０】
ドセタキセル粒子の調製
７９．３２ｍｇ／ｍｌのドセタキセル溶液をエタノールで調製した。ノズルおよび超音波プローブを加圧チャンバ内に約９ｍｍ離して配置した。析出したドセタキセルナノ粒子を収集するため、孔が約１００ｎｍのステンレス鋼メッシュフィルタを加圧チャンバ内に取り付けた。製造設備の加圧チャンバ内に超臨界二酸化炭素を置き、約３８℃、流量６８標準Ｌ／分で約１２００ｐｓｉ（約８３００ｋＰａ）にした。超音波プローブを周波数２０ｋＨｚで総出力の６０％に調整した。ドセタキセルを含有するエタノールを流量２ｍＬ／分で約９５分間、ポンプでノズルに通した。次いで、ポンプで混合物をステンレス鋼メッシュフィルタに通すとき、析出したドセタキセルの凝集物および粒子を超臨界二酸化炭素から収集した。ドセタキセルのナノ粒子が入ったフィルタを開け、得られた生成物をフィルタから収集した。
【０１５１】
作製されたドセタキセルナノ粒子は、平均数値で加重した平均サイズが０．８２μｍであり、別々にエタノールで実施した３回の標準偏差の平均が０．６６μｍであった。
【０１５２】
粒子径解析
粒子径を光遮蔽法およびレーザー回折法の両方により解析した。光遮蔽法にはＰａｒｔｉｃｌｅ  Ｓｉｚｉｎｇ  Ｓｙｓｔｅｍｓ社のＡｃｃｕＳｉｚｅｒ  ７８０ＳＩＳシステムを使用し、レーザー回折法にはＳｈｉｍａｄｚｕ  ＳＡＬＤ−７１０１を使用した。パクリタキセルナノ粒子は、水に溶かした０．１０％（ｗ／ｖ）ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）を分散剤として使用し解析した。ドセタキセルナノ粒子はｉｓｏｐａｒ  Ｇを分散剤として使用し解析した。
【０１５３】
パクリタキセル粒子が約４ｍｇ入ったガラス製バイアルにろ過済みの分散剤を約７ｍＬ加えることにより、パクリタキセル懸濁液を調製した。バイアルを約１０秒間ボルテックスし、次いで、超音波浴中で１分間超音波処理した。試料が既に懸濁していた場合、パクリタキセル懸濁液と０．１％ＳＤＳ溶液の１：１溶液を作製し、１０秒間ボルテックスし、超音波浴中で１分間超音波処理した。
【０１５４】
ドセタキセル粒子が約４ｍｇ入ったガラス製バイアルにろ過済み分散剤を約７ｍＬ加えることにより、ドセタキセル懸濁液を調製した。バイアルを約１０秒間ボルテックスし、次いで、超音波浴中で２分間超音波処理した。この懸濁液をレーザー回折解析に用いた。未使用の懸濁液を１２５ｍＬの無粒子プラスチックボトルに注入し、次いで、これをろ過済み分散剤で約１００ｍＬまで満たした。懸濁液を約１０秒間ボルテックスし、次いで、超音波浴中で２分間超音波処理した。この希釈懸濁液を光遮蔽解析に用いた。
【０１５５】
最初にバックグラウンド試験を実施した後、ＡｃｃｕＳｉｚｅｒ  ７８０ＳＩＳで粒子を解析した。蠕動ポンプを用いてブランク懸濁溶液をリザーバから０．２２μｍのＭｉｌｌｉｐｏｒｅフィルタに通してボトルに入れることにより、新たな無粒子プラスチックボトルをブランク懸濁溶液で満たした。バックグランド解析を実施して、粒子／ｍＬのカウントが１００粒子／ｍＬ未満であることを確認した。溶液の濃度に応じて少量のパクリタキセル懸濁液５〜１００μＬをバックグランド試験から配置してあるプラスチックにピペットで入れ、約１００ｍＬの分散剤で満たし、解析を開始した。カウントをモニターし、解析全体を通して６０００〜８０００粒子数／ｍＬに達し、かつ／またはこれが維持されるようパクリタキセル溶液を加えた。解析終了後、バックグランドデータを除外し、４カウント未満の測定結果をいずれも除外した。
【０１５６】
ＳＡＬＤ−７１０１でバッチセルを用いて粒子を解析するため、手動測定を選択することにより解析を開始した。屈折率を１．５〜１．７に設定した。刻まれた線をちょうど超えたところまでバッチセルをろ過済み分散剤で満たした。ブランク測定を実施した。許容される０．１５〜０．２吸光度単位の吸光度にする必要に応じて、少量のＡＰＩ（パクリタキセルまたはドセタキセル）懸濁液、一般には１ｍＬ未満、溶液農濃度によっては１００μＬの懸濁液をピペットでバッチセルに入れた。測定を実行し、得られたグラフのうち信頼度が最も高いものを選択し；バックグランドは自動的に考慮された。
【０１５７】
ＢＥＴ解析
２００〜３００ｍｇの質量既知の分析物を３０ｍＬの試料チューブに加えた。次いで、充填済みのチューブをＰｏｒｏｕｓ  Ｍａｔｅｒｉａｌｓ社のＳＯＲＰＴＯＭＥＴＥＲ（登録商標）、ＢＥＴ−２０２Ａモデルに装着した。次いでＢＥＴＷＩＮ（登録商標）ソフトウェアパッケージを用いて自動試験を実施し、次いで各試料の表面積を算出した。
【０１５８】
かさ密度分析物
パクリタキセル粒子またはドセタキセル粒子の調製物を室温でプラスチック製秤量漏斗から１０ｍＬの風袋引き済みメスシリンダーに加えた。薬物の質量をほぼ０．１ｍｇまで測定し、体積をほぼ０．１ｍＬまで求め、密度を算出した。
【０１５９】
溶解試験
パクリタキセル
原料（すなわち、未加工パクリタキセル、粉砕パクリタキセルまたはパクリタキセル粒子）約５０ｍｇと１ｍｍガラスビーズ約１．５グラムをバイアルの中で約１時間転がすことにより、原料をビーズにコートした。ビーズをステンレス鋼メッシュ容器に移し、３７℃、ｐＨ７のメタノール／水（５０／５０（ｖ／ｖ））媒体および７５ｒｐｍで稼働するＵＳＰ装置ＩＩ（パドル）が入った溶解浴に入れた。１０分後、２０分後、３０分後、６０分後および９０分後に５ｍＬのアリコートを取り出し、０．２２μｍのフィルタでろ過し、Ｕ（Ｖ／Ｖ）ｉｓ分光光度計を用いて２２７ｎｍで解析した。試料の吸光度値を溶解媒体で調製した基準溶液のものと比較して、溶解した原料の量を求めた。
【０１６０】
ドセタキセル
原料（すなわち、未加工ドセタキセル、粉砕ドセタキセルまたはドセタキセル粒子）約５０ｍｇを３７℃、ｐＨ７のメタノール／水（１５／８５（ｖ／ｖ））媒体および７５ｒｐｍで稼働するＵＳＰ装置ＩＩ（パドル）が入った溶解浴に直接入れた。５分後、１５分後、３０分後、６０分後、１２０分後および２２５分後に５ｍＬのアリコートを取り出し、０．２２μｍのフィルタでろ過し、ＵＶ／ＶＩＳ分光光度計を用いて２３２ｎｍで解析した。試料の吸光度値を溶解媒体で調製した基準溶液のものと比較して、溶解した原料の量を求めた。
【０１６１】
結果
上記のプロトコルおよびその変形形態（すなわち、ノズル、フィルタ、超音波エネルギー源、流量などの修正）を用いて作製した粒子のＢＥＴ表面積は２２２／ｇ〜３９ｍ２／ｇの範囲内に収まっていた。比較により、未加工パクリタキセルのＢＥＴ表面積は７．２５ｍ２／ｇと測定され（図２）、米国特許第５８３３８９１号および同第５８７４０２９号の方法に従って作製したパクリタキセル粒子は１１．３ｍ２／ｇ〜１５．５８ｍ２／ｇの範囲内に収まっていた。本発明の方法を用いて得られた例示的粒子径を表１に示す。
【０１６２】
【表１】
2019510038.tif 000002
【０１６３】
未加工薬物、粉砕薬物粒子および本発明の方法により作製した薬物粒子のかさ密度、ＳＳＡおよび溶解速度（上記の通りに実施したもの）に関する比較試験を下の表２および３に記載する。パクリタキセル原料およびドセタキセル原料の溶解の経時変化全体をそれぞれ表４および５に記載する。
【０１６４】
【表２】
2019510038.tif 000003
【０１６５】
【表３】
2019510038.tif 000004
【０１６６】
【表４】
2019510038.tif 000005
【０１６７】
【表５】
2019510038.tif 000006
【０１６８】
実施例２．パクリタキセル粒子のマウス腹腔内注射後の薬物動態および組織分布
目的：この試験は、パクリタキセル粒子懸濁液を腹腔内に送達した後のパクリタキセルの腹膜腔から体循環中への吸収レベルを明らかにするために実施したものである。腹腔内投与後のパクリタキセル粒子懸濁液から組織へのパクリタキセルの分布も評価した。
【０１６９】
実験の詳細：雌Ｃ５７ＢＬ６マウスにＩＤ８卵巣癌細胞を接種し、腫瘍を４５日間成長させた。これらのマウスをパクリタキセル粒子の０．９％生理食塩水懸濁液（３６ｍｇ／ｋｇ）の総体積４ｍＬの腹腔内投与により治療した。０時間後（投与前）、１時間後、６時間後、２４時間後および４８時間後（１時点当たり少なくとも４個体のマウス）に血漿および腹水の試料を採取し、血漿中および腹水中のパクリタキセルをＬＣＭＳＭＳにより測定した。さらに、パクリタキセル粒子の腹腔内投与から０時間後（投与前）、１時間後、６時間後、２４時間後および４８時間後に組織試料を採取した。パクリタキセル粒子を投与したマウスの鼠径リンパ節、腹膜壁、卵巣、肝臓、心臓、腎臓、肺、脳および腫瘍の組織試料をＬＣ／ＭＳ／ＭＳにより解析した。
【０１７０】
結果および重要性：血漿、腹水および臓器組織の試料中のパクリタキセルレベルの結果を下の表に示す。血漿中パクリタキセルは４８時間の間にわたって極めて低いレベルであった。腹水中のパクリタキセルレベルの方がはるかに高く、相当量の変動がみられた。パクリタキセルの解析方法の定量限界は０．０１μｇ／ｇｍであった。腹膜腔の内側の組織中のパクリタキセルレベルは、卵巣腫瘍、卵巣、鼠径リンパ節および腹膜の結果からわかるように一貫して高かった。これに対し、腹膜腔の外側の組織中のパクリタキセルレベルは、肝臓、心臓、肺および脳の組織にみられるように一貫して低かった。上に挙げた結果を表６に示す。
【０１７１】
腹水と接している組織（卵巣腫瘍、卵巣、鼠径リンパ節および腹膜）中のパクリタキセルのレベルが予想外に高く、腹水と接していない組織のパクリタキセルが少ないことから、このデータは重要なものである。これらの試験および他の試験を踏まえれば、パクリタキセル粒子からのパクリタキセルの放出は数週間持続し、多量のパクリタキセルを連続的に供給することが期待され、このことは、パクリタキセルを腫瘍内に直接注射すればパクリタキセルが極めて高いレベルで蓄積し得ることを意味するものと思われる。
【０１７２】
【表６】
2019510038.tif 000007
【０１７３】
実施例３．膠芽腫に関する試験
この試験では、パクリタキセル粒子の膠芽腫（ＧＢ）に対する有効性を評価した。ヌードマウスの脳にＧＢ細胞を注射して原発性腫瘍を確立し、２週間後にパクリタキセル粒子を注射した。生理食塩水注射液のみを投与した対照群およびＴａｘｏｌ（商標）（クレモフォールで製剤化されたもの）注射液を投与した対照群に対する生存面の有益性を評価した。成長している腫瘍に用量１００ｍｇ／ｍ２を直接注射により送達した。下の表に、腫瘍が球状であると仮定した場合の４種類の異なる腫瘍サイズおよびそれに対応する本発明のパクリタキセル粒子の用量を示す。対照実験として、クレモフォールで製剤化し生理食塩水で正確な濃度に希釈したＴａｘｏｌ（商標）を用いた。
【０１７４】
【表７】
2019510038.tif 000008
＊用量１００ｍｇ／ｍ２
＊＊５μｌの注射；Ｎａｎｏｔａｘストック溶液：３，１５０ｎｇ／μｌ
【０１７５】
最大用量である注射１回当たり５μｇのパクリタキセルで毒性は認められなかった。注射したマウスを８〜９日間生存させた後、神経症状は認められなかった。９日後、マウスを屠殺し、脳を採取し；脳を注射経路に沿って解剖し解析した。Ｎｅｉｔｈｅｒ  ｔｈｅ  パクリタキセル粒子群、Ｔａｘｏｌ（商標）群のいずれにも壊死、病変ともにみられなかった。脳スライスをそれ以上調製せずに用いて３種類の異なる撮像手技で解析し、重ね合せ画像を作製した（データ不掲載）：
（ａ）第二高調波発生（ＳＨＧ）：画像が青色で表示され、大部分がコラーゲン、血管およびパクリタキセル粒子である。
（ｂ）二光子励起蛍光（ＴＰＥＦ）：画像が緑色で表示され、大部分が反応性細胞、ミクログリア、マクロファージ、一部の神経細胞体である。
（ｃ）コヒーレント反ストークスラマン散乱（ＣＡＲＳ）：画像が赤色で表示され、脂質（大部分がＣＮＳ内のミエリン）を見るため−ＣＨ２振動に調整されているが、泡沫細胞と呼ばれる脂肪滴含有細胞も陽性シグナルを発生する。脂質液胞を有する変性細胞およびマクロファージも見える。
【０１７６】
パクリタキセル粒子の結晶の非線形光学特性により、第二高調波発生撮像法で決勝を直接見ることができる。パクリタキセル粒子５μｇを注射したマウスでは、注射から９日後に注射部位にパクリタキセル粒子のクラスターが明確に視認でき（すなわち、腫瘍内に蓄積された）、神経症状は一切見られなかった（データ不掲載）。
【０１７７】
実施例４．前立腺癌に関する試験
ヌードマウス固形腫瘍ＰＣ−３ヒト前立腺癌ヌードマウス異種移植におけるパクリタキセル粒子の腫瘍内（ＩＴＵ）送達の効果を明らかにするため、２種類のｉｎ  ｖｉｖｏ非臨床薬理学試験を実施した。試験番号Ｐ−ＰＰｒ−０１−２０１５では、マウスにパクリタキセル粒子（ＮａｎｏＰａｃ（商標）とも呼ばれる）を３７．５ｍｇ／ｋｇ、ｑｗｋ×１（すなわち、単回投与）；１２．５ｍｇ／ｋｇ、ｑｗｋ×３（すなわち、１週間で単回投与を３回）；または３７．５ｍｇ／ｋｇ、ｑｗｋ×３で投与するか；パクリタキセル（３０ｍｇ／ｋｇ、ｑｗｋ×３）または溶媒（生理食塩水中０．１％ｗ／ｖのポリソルベート８０、ｑｗｋ×３）を投与した。パクリタキセル粒子および溶媒での治療はＩＴＵ注射により実施した。細胞移植から３５日後の試験第１日、個々の腫瘍体積が１０８〜１９６ｍｍ３のマウスをグループの平均腫瘍体積が１５０〜１５３ｍｍ３の５つのグループ（ｎ＝１０）に振り分けた。いずれの治療も試験第１日に開始した。パクリタキセルはＩＶ注入として投与した。実験的治療はいずれも１０個体のマウスからなるグループで試験した。週２回腫瘍を測定した。一部の治療結果は、治療を実施したマウスと溶媒対照マウスの第３２日の腫瘍体積中央値のパーセントの差と定義されるパーセント腫瘍成長阻害（％ＴＧＩ）に基づくものとした。実験終了は、腫瘍体積が２０００ｍｍ３に達した時点または６０日が経過した時点のいずれか早い方とした。
【０１７８】
パクリタキセル粒子はＰＣ−３前立腺癌モデルで有意な活性を示した（図１）。パクリタキセル粒子の単回投与または週３回の投与によりマウスを治療したところ、溶媒治療対照マウスと比較して、同じ生存期間延長および試験生存個体／退縮の数の増大がみられた。この試験ではパクリタキセル粒子を１２．５ｍｇ／ｋｇまたは３７．５ｍｇ／ｋｇのｑｗｋ×３で投与した場合に生存期間延長が最大になったことから、用量依存性の応答はみられなかった。パクリタキセル粒子で治療したマウスの結果はいずれも、潜在的な治療活性を示す６０％のＴＧＩ閾値を十分に上回るものであった。この試験では、ＩＶ投与パクリタキセルにより、有意なＴＧＩおよび生存期間延長の有意な改善が得られた。いずれの治療も耐容性に優れていた。
【０１７９】
試験番号ＰＤ−ＰＰｒ−０２−２０１６には、上記の通りに作製したドセタキセル粒子（ＮａｎｏＤｏｃｅ（商標）とも呼ばれる）およびパクリタキセル粒子を含めた。ＰＣ−３前立腺癌腫瘍異種移植片を有するマウスに、ＩＴＵによりドセタキセル粒子を１００ｍｇ／ｋｇ、ｑｗｋ×１；３７．５ｍｇ／ｋｇ、ｑｗｋ×３；または１００ｍｇ／ｋｇ、ｑｗｋ×３で；パクリタキセル粒子を３７．５ｍｇ／ｋｇ、ｑｗｋ×３で投与するか；溶媒（生理食塩水中０．１％ｗ／ｖのポリソルベート８０、ｑｗｋ×３）をＩＴ注射により投与するか；あるいはドセタキセル（３０ｍｇ／ｋｇ、ｑｗｋ×３）を静脈内投与した。細胞移植から２６日後の試験第１日、個々の腫瘍体積が１０８〜１７２ｍｍ３のマウスをグループの平均腫瘍体積が１３６〜１４１ｍｍ３の５つのグループ（ｎ＝１０）に振り分けた。いずれの治療も試験第１日に開始した。実験的治療はいずれも１０個体のマウスからなるグループで試験した。週２回腫瘍を測定した。実験終了は、腫瘍体積が２０００ｍｍ３に達した時点または６０日が経過した時点のいずれか早い方とした。この試験で可能な腫瘍成長遅延（ＴＧＤ）の最大値は４１％であることが明らかになった。
【０１８０】
パクリタキセル粒子およびドセタキセル粒子はＰＣ−３前立腺癌モデルで高い活性を示した。いずれの治療法でも、用量／スケジュールに関係なく有意な生存期間延長が得られ、いずれの場合もこの試験で許容される最大限可能なＴＧＤに達した。パクリタキセル粒子、ドセタキセル粒子およびドセタキセルで治療したマウスの結果は、有効性レベルが同程度であった。いずれの治療法も耐容性に優れていた。図２に、溶媒、ＮａｎｏＤｏｃｅ、ＮａｎｏＰａｃでＩＴ治療したマウスＰＣ−３前立腺腫瘍異種移植片およびドセタキセルでＩＶ治療した同移植片の平均腫瘍体積を示す。
【０１８１】
実施例５．ＭＤＡ−ＭＢ−２３１乳癌に関する試験
この試験の目的は、パクリタキセル粒子（「ＮａｎｏＰａｃ（商標）」）およびドセタキセル粒子（「ＮａｎｏＤｏｃｅ（商標）」）による治療に対する皮下（ＳＣ）移植ＭＤＡ−ＭＢ−２３１ヒト乳癌異種移植片の応答を明らかにすることとした。被験物質は表８に示す通りのものとした。
【０１８２】
【表８】
2019510038.tif 000009
＊２５ｇのマウスを基準とした
【０１８３】
投与製剤
ＮａｎｏＰａｃ（商標）：１％ポリソルベート８０（「Ｔ８０」）再構成溶液０．７５ｍＬをＮａｎｏＰａｃ（商標）（３０６ｍｇ／バイアル）のバイアルに加えた。再構成溶液を調製し、調製当日に０．２２ミクロンのフィルタで無菌ろ過し、最大７日間冷蔵保存（２〜８℃）した。バイアルを反転させながら１分間手で激しく振盪した。振盪直後、バイアルにＩｎｊｅｃｔｉｏｎ  ＵＳＰ用の０．９％塩化ナトリウム６．９ｍＬを加えて４０ｍｇ／ｍＬの懸濁液（７．６５ｍＬ）とし、バイアルを手でさらに１分間振盪した。混合後、懸濁液を５分間静置して、閉じ込められている空気および泡を減少させた。
【０１８４】
取扱い：室温。
安定性：投与製剤を室温で維持し、８時間安定であると考えられた。
【０１８５】
ＮａｎｏＤｏｃｅ（商標）：０．９％生理食塩水中１％Ｔ８０／１０％エタノールの再構成溶液１．３３ｍｌをＮａｎｏＤｏｃｅ粒子（２００ｍｇ／バイアル）のバイアルに加えた。再構成溶液を調製し、調製当日に０．２２ミクロンのフィルタで無菌ろ過し、最大７日間冷蔵保存（２〜８℃）した。バイアルを反転させながら１分間手で激しく振盪した。振盪直後、Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ  ＵＳＰ用の０．９％塩化ナトリウム２ｍｌを加え、バイアルを手でさらに１分間振盪した。バイアルにＩｎｊｅｃｔｉｏｎ  ＵＳＰ用の０．９％塩化ナトリウム１．６７ｍｌを追加し、反転させながら手で混合する操作を１分間続けた。最終体積は４０ｍｇ／ｍＬの懸濁液５ｍＬであった。混合後、懸濁液を少なくとも５分間静置して、閉じ込められている空気および泡を減少させた。
【０１８６】
取扱い：室温。
安定性：投与製剤を室温で維持し、８時間安定であると考えられた。
【０１８７】
パクリタキセル：臨床用パクリタキセル製剤（５０％エタノール：５０％クレモフォールＥＬ中６ｍｇ／ｍＬ）にバルクパクリタキセルを加えて１２ｍｇ／ｍＬの溶液とし、必要に応じてボルテックスした。Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ  ＵＳＰ用の塩化ナトリウム（０．９％）を加えて３ｍｇ／ｍＬのパクリタキセル溶液とし、ボルテックスで混合した。
【０１８８】
取扱い：温水。
安定性：製剤化から２０分以内に注射した。
【０１８９】
ドセタキセル：Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ  ＵＳＰ用の塩化ナトリウム（０．９％）を加えて３ｍｇ／ｍＬのドセタキセル溶液（５０％エタノール：５０％Ｔ８０中２０ｍｇ／ｍＬ）とし、ボルテックスで混合した。
【０１９０】
取扱い：室温。
安定性：投与製剤を室温で維持し、８時間安定であると考えられた。
【０１９１】
試験方式：
種および系統：マウス；ＮＣｒ−ｎｕ／ｎｕ
供給業者：Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ社
試験個体数：雌５０個体
【０１９２】
試験デザイン：ｉｎ  ｖｉｖｏ継代で得たＭＤＡ−ＭＢ−２３１乳腺腫瘍断片を雌ＮＣｒ−ｎｕ／ｎｕマウス計８８個体の右側腹部の皮下（ＳＣ）に移植した。腫瘍細胞移植当日（２０１６年８月４日）を第０日とした。治療開始日／ステージ日（ＳＤ）である腫瘍細胞移植後第１３日（２０１６年８月１７日）、５０個体の個々の腫瘍が重量１００〜２２１ｍｇ（大きさ１００〜２２１ｍｍ３）に成長していた。第１３日の平均腫瘍重量が全グループとも１４７．４〜１４９．６ｍｇ（腫瘍重量中央値が１３５〜１４９ｍｇ）になるよう５０個体をグループ１〜５に割り付けた。
【０１９３】
【表９】
2019510038.tif 000010
＊ＩＴ＝腫瘍内
＊＊総用量は２５ｇのマウスを基準とした。
【０１９４】
ＮａｎｏＰａｃ（商標）およびＮａｎｏＤｏｃｅ（商標）は懸濁液である。各シリンジを充填する前および各個体への注射と注射の間に、被験物質を穏やかに回転／反転させた。被験物質の腫瘍内投与には必ず、１腫瘍当たり６つの針刺入経路（２７Ｇ、１／２インチ（約１．３ｃｍ）の針）を使用した。各経路とも投与体積の６分の１を緩徐ボーラスで注射し、約１５秒間休止した後、針をゆっくりと抜き、腫瘍表面全体にわたり間隔を空けて次の注射部位に移動した。１日１回、マウスの死亡および瀕死を観察した。治療初日から開始して週２回、マウスの体重を測定し、腫瘍の測定を実施した。各腫瘍の長さおよび幅を測定した。楕円の式：
長さ×幅２／２＝体積（ｍｍ３）
を用いて腫瘍体積を求めた。
【０１９５】
この式を用い、単一密度（１ｍｍ３＝１ｍｇ）を仮定して腫瘍重量も算出した。腫瘍検出の限界を３２ｍｇ（４×４ｍｍ）とした。実験は腫瘍移植日から６１日間継続した。体重が治療初日の体重から３０％超減少した個体または腫瘍が重量４，０００ｍｇに達するか、腫瘍に潰瘍がみられるか、もしくは腫瘍が剥がれ落ちた個体は試験終了前に安楽死させた。被験物質であるドセタキセルとＮａｎｏＤｏｃｅ（商標）およびパクリタキセルとＮａｎｏＰａｃ（商標）の投与後の平均腫瘍体積の比較を図３に示す。グループ１〜２では、第２１日までに個体の５０％超が腫瘍潰瘍、死亡または腫瘍サイズが大きいことにより失われたため、これらのグループの平均データは示していない。
【０１９６】
結果
第２９日、溶媒治療対照群（グループ１）のヒトＭＤＡ−ＭＢ−２３１乳癌異種移植片は、全１０個体のマウスで平均腫瘍重量１，９２９ｍｇまで成長していた（ｎ＝９；治療最終日後の最初の測定、１個体を潰瘍のため第２２日に除外した）。個体の死亡も平均体重減少もみられなかった。腫瘍阻害については、対照群が６個体であった第３３日まで対照群と比較するにとどまった。
【０１９７】
用量１００ｍｇ／ｋｇのＮａｎｏＰａｃ（商標）によるＩＴ治療を（週）３回実施した場合（グループ２）、３個体が死亡し（第２０日および２７日）、平均体重減少はみられなかった。個体の死亡はＩＴ注射の日にみられた。ＮａｎｏＰａｃ（商標）での反復治療によりＭＤＡ−ＭＢ−２３１乳癌異種移植片の成長が有意に阻害されることはなかった［第２９日の平均腫瘍重量１，０３１ｍｇ（ｎ＝７）は溶媒治療対照に対する−４６．６％の％差に相当する（ｐ＞０．０５）］。第２６日に応答の最低値がみられ、その％差は溶媒治療対照群と有意差のある−５１．８％であり（ｐ＜０．０５）；第１９日にも溶媒対照群と有意差がみられた（ｐ＜０．０５）。完全な腫瘍退縮が２例みられ、試験終了時まで無腫瘍の状態であった。
【０１９８】
用量１００ｍｇ／ｋｇのＮａｎｏＤｏｃｅ（商標）によるＩＴ治療を（週）３回実施した場合（グループ３）、２個体が死亡し（第２０日および２７日）、平均体重減少はみられなかった。個体の死亡はＩＴ注射の日にみられた。ＮａｎｏＤｏｃｅ（商標）での反復治療によりＭＤＡ−ＭＢ−２３１乳癌異種移植片の成長が有意に阻害された［第２９日の平均腫瘍重量１４３ｍｇ（ｎ＝８）は溶媒治療対照に対する−９２．６％の％差に相当する（ｐ＜０．０５）］。腫瘍成長阻害は、％差が−９４．２％（ｐ＜０．０５）となる第３３日の最低値まで進行し；平均腫瘍体積は第４０日に０まで減少していた。％差は、第１９日から始まり比較が不可能になるまで有意なものであった。生存した８個体は第６１日の試験終了時まで無腫瘍の状態であった。
【０１９９】
用量３０ｍｇ／ｋｇのドセタキセルによるＩＶ治療を（週）３回実施した場合（グループ４）、個体の死亡はみられず、平均体重減少は１９．６％（４．７８ｇ、第３３日）であった。ドセタキセルでの反復治療によりＭＤＡ−ＭＢ−２３１乳癌異種移植片の成長が有意に阻害された［第２９日の平均腫瘍重量６ｍｇ（ｎ＝１０）は溶媒治療対照に対する−９９．２％の％差に相当する（ｐ＜０．００１）］。腫瘍成長阻害は、％差が−９９．８％（ｐ＜０．０５）となる第３３日の最低値まで進行し；平均腫瘍体積は第４０日に０まで減少していた。％差は、第１９日から始まり比較が不可能になるまで有意なものであった。第４０日に完全な腫瘍阻害が観察され、この時点で全１０個体に腫瘍の完全な退縮が認められ、試験終了時まで無腫瘍の状態であった。ドセタキセル治療個体とＮａｎｏＤｏｃｅ（商標）治療個体の腫瘍成長阻害に有意差がみられたのは第２２日〜３３日に限られた。
【０２００】
用量３０ｍｇ／ｋｇのパクリタキセルによる（週）３回のＩＶ治療（グループ５）には耐容性が認められ、個体の死亡も平均体重減少もみられなかたった。パクリタキセル治療によりＭＤＡ−ＭＢ−２３１乳癌異種移植片の成長が有意に阻害された［第２９日の平均腫瘍重量１１８ｍｇ（ｎ＝１０）は溶媒治療対照に対する−９３．９％の％差に相当する（ｐ＜０．０５）］。第３３日に応答の最低値がみられ、％差は−９７．４％であった。％差は、第１９日から始まり比較が不可能になるまで有意なものであった。完全な腫瘍退縮が６例みられ、３個体が試験終了時に無腫瘍であった。パクリタキセル治療個体とＮａｎｏＰａｃ（商標）治療個体の腫瘍成長阻害には第１５日および第２２〜３６日に有意差がみられた。
【０２０１】
考察
ＮａｎｏＰａｃ（商標）またはＮａｎｏＤｏｃｅ（商標）によるＩＴ治療を実施したグループでは、それぞれ３個体または２個体の死亡がみられた。この個体の死亡は早期にみられたものであり、治療によるものではないと考えられた。対照群およびパクリタキセルもしくはドセタキセルでの治療には耐容性が認められ、個体の死亡はみられなかった。無腫瘍生存個体が８例みられたＮａｎｏＤｏｃｅ（商標）での治療によりヒトＭＤＡ−ＭＢ−２３１乳癌異種移植片の成長が有意に阻害された。無腫瘍個体が１０例みられたドセタキセルでの治療によりヒトＭＤＡ−ＭＢ−２３１乳癌異種移植片の成長が阻害され、第２２〜３３日にはＮａｎｏＤｏｃｅ（商標）治療との間に有意差がみられた。ＮａｎｏＰａｃ（商標）での治療により評価日にヒトＭＤＡ−ＭＢ−２３１乳癌異種移植片の成長の有意な阻害はみられなかったが、第１９日および２１日に有意差がみられた。さらに、第４９日まで無腫瘍個体が２例みられた（データ不掲載）。パクリタキセルでの治療によりヒトＭＤＡ−ＭＢ−２３１乳癌異種移植片が有意に阻害され、この治療では第１５日および第２２〜３６日にＮａｎｏＰａｃ（商標）治療より高い効果が認められた。第４９日、ＩＶパクリタキセル治療群に無腫瘍個体が３例、ＩＴ  ＮａｎｏＰａｃ（商標）治療群に無腫瘍個体が２例みられた。ドセタキセルおよびＮａｎｏＤｏｃｅ（商標）での治療によりヒトＭＤＡ−ＭＢ−２３１乳癌異種移植片の成長が有意に阻害され、第４９日、ＩＶドセタキセル治療群に無腫瘍個体が１０例、ＩＴ  ＮａｎｏＤｏｃｅ（商標）治療群に無腫瘍個体が８例みられた。
【０２０２】
実施例６．ＭＸ−１ヒト乳癌異種移植片に関する試験
この試験の目的は、パクリタキセル粒子（ＮａｎｏＰａｃ（商標）とも呼ばれる）およびドセタキセル粒子（ＮａｎｏＤｏｃｅ（商標）とも呼ばれる）による治療に対する皮下（ＳＣ）移植ＭＸ−１ヒト乳癌異種移植片の応答を明らかにすることとした。被験物質は表１０に示す通りのものとした：
【表１０】
2019510038.tif 000011
＊２５ｇのマウスを基準とした
＊＊計算間違いにより、プロトコル（添付資料Ａ）にはＮａｎｏＤｏｃｅの溶媒の配合が０．２６７％Ｔ８０／２．６７％エタノール／２３．７１％ＰＢＳ／７３．３３％生理食塩水（０．９％）のように誤って記載された。
【０２０３】
投与製剤：
ＮａｎｏＰａｃ（商標）：１）１％Ｔ８０再構成溶液０．７５ｍＬをＮａｎｏＰａｃ（３０６ｍｇ／バイアル）のバイアルに加える。反転させながら１分間手で激しく振盪する。３）振盪直後、バイアルにＩｎｊｅｃｔｉｏｎ  ＵＳＰ用の０．９％塩化ナトリウム６．９ｍＬを加えて４０ｍｇ／ｍＬの懸濁液（７．６５ｍＬ）とし、バイアルを手でさらに１分間振盪する。混合後、懸濁液を５分間静置して、閉じ込められている空気および泡を減少させる。
【０２０４】
取扱い：室温。
安定性：投与製剤は室温で維持され、８時間安定であると考えられる。
【０２０５】
ＮａｎｏＤｏｃｅ（商標）：１）１％Ｔ８０／１０％エタノール／８９％ＰＢＳ再構成溶液１．０ｍｌをＮａｎｏＤｏｃｅ  ｐａｒｔｉｃｌｅｓ（２００ｍｇ／バイアル）のバイアルに加える。２）バイアルを反転させながら１分間手で激しく振盪する。３）振盪直後、バイアルにＩｎｊｅｃｔｉｏｎ  ＵＳＰ用の０．９％塩化ナトリウム（０．９％）２ｍｌを加え、バイアルを手でさらに１分間振盪する。４）バイアルにＩｎｊｅｃｔｉｏｎ  ＵＳＰ用の塩化ナトリウム（０．９％）２ｍｌを追加し、反転させながら手で混合する操作を１分間続ける。最終体積５ｍＬの４０ｍｇ／ｍＬ  ＮａｎｏＤｏｃｅ懸濁液。混合後、混合後、懸濁液を少なくとも５分間静置して、閉じ込められている空気および泡を減少させる。
【０２０６】
取扱い：室温。
安定性：投与製剤は室温で維持され、８時間安定であると考えられる。
【０２０７】
パクリタキセル：１）臨床用パクリタキセル製剤（５０％エタノール：５０％クレモフォールＥＬ中６ｍｇ／ｍＬ）にバルクパクリタキセルを加えて１２ｍｇ／ｍＬの溶液とする。必要に応じてボルテックスする。２）Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ  ＵＳＰ用の塩化ナトリウム（０．９％）を加えて３ｍｇ／ｍＬのパクリタキセル溶液とする。ボルテックスで混合する。
【０２０８】
取扱い：温水。
安定性：製剤化から２０分以内に注射する。
【０２０９】
ドセタキセル：１）Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ  ＵＳＰ用の塩化ナトリウム（０．９％）を加えて３ｍｇ／ｍＬのドセタキセル溶液（５０％エタノール：５０％Ｔ８０中２０ｍｇ／ｍＬ）とする。ボルテックスで混合する。
【０２１０】
試験方式：
種および系統：マウス；ＮＣｒ−ｎｕ／ｎｕ
供給業者：Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ社
試験個体数：雌５０個体
【０２１１】
腫瘍モデル：ｉｎ  ｖｉｖｏ継代で得たＭＸ−１乳腺腫瘍断片を雌ＮＣｒ−ｎｕ／ｎｕマウス計８８個体の右側腹部の皮下（ＳＣ）に移植した。腫瘍細胞移植当日を第０日とした。治療開始日／ステージ日（ＳＤ）である腫瘍細胞移植後第１０日、５０個体の個々の腫瘍が重量１００〜１９８ｍｇ（大きさ１００〜１９８ｍｍ３）に成長していた。第１０日の全５グループの平均腫瘍重量が１３９．９〜１４１．９ｍｇ（腫瘍重量中央値が１３５ｍｇまたは１４４ｍｇ）になるよう５０個体をグループ１〜５に割り付けた。
【０２１２】
【表１１】
2019510038.tif 000012
＊ＩＴ＝腫瘍内：１腫瘍当たり６つの針刺入経路（２７Ｇ、１／２インチ（約１．３ｃｍ）の針）を使用し、各経路とも体積の６分の１を緩徐ボーラスで注射し、約１５秒待ってから針をゆっくりと抜き、腫瘍表面全体にわたり経路の間隔を空ける。
【０２１３】
ＮａｎｏＰａｃ（商標）およびＮａｎｏＤｏｃｅ（商標）は懸濁液である。各シリンジを充填する前および各個体への注射と注射の間に、被験物質を穏やかに回転／反転させた。１日１回、マウスの死亡および瀕死を観察した。有害な徴候を例外のみにより記録した。ＳＤから開始して週２回、体重を記録した。ＳＤから開始して週２回、デジタルノギスを用いて腫瘍の測定を実施した。各腫瘍の長さおよび幅を測定した。楕円の式：長さ×幅２／２＝体積（ｍｍ３）を用いて腫瘍体積を求めた。この式を用い、単一密度（１ｍｍ３＝１ｍｇ）を仮定して腫瘍重量も算出した。腫瘍検出の限界は３２ｍｇ（４×４ｍｍ）である。実験は腫瘍移植日から６３日間継続した。体重が治療初日の体重から３０％超減少した個体または腫瘍が重量４，０００ｍｇに達するか、腫瘍に潰瘍があるか、もしくは腫瘍が剥がれ落ちた個体は試験終了前に安楽死させた。各治療の平均腫瘍体積を図４に示す。グループ１〜２では、第２６日までに個体の５０％超が腫瘍潰瘍、死亡または腫瘍サイズが大きいことにより失われたため、これらのグループの平均データは示していない。
【０２１４】
結果
第２４日、溶媒治療対照群（グループ１）のヒトＭＸ−１乳癌異種移植片は、全１０個体のマウスで平均腫瘍重量１，１５３ｍｇまで成長していた（ｎ＝９；治療最終日）。死亡が１例（第２１日）みられ、瀕死個体１例を安楽死させ（第２５日）、平均体重減少は１．０６％（０．２６ｇ、第１４日）であった。腫瘍阻害については、対照群が６個体であった第３８日まで比較するにとどまった。
【０２１５】
用量１００ｍｇ／ｋｇのＮａｎｏＰａｃ（商標）による（週）３回のＩＴ治療（すなわち、グループ２）では、２個体が死亡し（第１７日および２８日）、平均体重減少は１％未満であった。第１７日の個体死亡はＩＴ注射後にみられた。ＮａｎｏＰａｃ（商標）での反復治療によりＭＸ−１乳癌異種移植片の成長が有意に阻害されることはなかった［第２４日の平均腫瘍重量１，０９６ｍｇ（ｎ＝９）は溶媒治療対照に対する−４．９％の％差に相当する（ｐ＞０．０５）］。第３８日に応答の最低値がみられ、％差は、溶媒治療対照群との有意差がみられない（ｐ＞０．０５）−１４．１％であった。
【０２１６】
用量１００ｍｇ／ｋｇのＮａｎｏＤｏｃｅ（商標）による（週）３回のＩＴ治療過程（すなわち、グループ３）では、２個体の死亡がみられ（第１７日および２４日）、平均体重減少はみられなかった。第１７日および２４日の個体死亡はＩＴ注射後にみられた。ＮａｎｏＤｏｃｅ（商標）での反復治療によりＭＸ−１乳癌異種移植片の成長が有意に阻害された［第２４日の平均腫瘍重量４４９ｍｇ（ｎ＝９）は溶媒治療対照に対する−６１．０％の％差に相当する（ｐ＜０．０１）］。腫瘍成長阻害は、％差が−９０．１％（ｐ＜０．００１）となる第３８日の最低値まで進行し；平均腫瘍体積は第５６日まで減少し続けた。％差は、第１７日から始まり比較が不可能になるまで有意なものであった。完全な腫瘍退縮が４例みられ、その個体は試験終了時まで無腫瘍の状態であった。
【０２１７】
用量３０ｍｇ／ｋｇのドセタキセルによるＩＶ治療を（週）３回実施した場合（すなわち、グループ４）、２個体を３０％超の体重減少のため安楽死させ（第２４日および３１日）、平均体重減少は２４．９％（５．９０ｇ、第３１）であった。ドセタキセルでの反復治療によりＭＸ−１乳癌異種移植片の成長が有意に阻害された［第２８日の平均腫瘍重量０．９ｍｇ（ｎ＝９）は溶媒治療対照に対する−９９．９％の％差に相当する（ｐ＜０．００１）］。％差は、第１４日から始まり比較が不可能になるまで有意なものであった。第３１日、完全な腫瘍阻害が観察され、全９個体に完全な腫瘍退縮が認められた。生存した８個体は第６３日の試験終了時まで無腫瘍の状態であった。第１４日〜５２日までドセタキセル治療個体とＮａｎｏＤｏｃｅ（商標）治療個体の腫瘍成長阻害に有意差がみられたが、第５６日〜６３日には差はみられなかった。
【０２１８】
用量３０ｍｇ／ｋｇのパクリタキセルによる（週）３回のＩＶ治療（すなわち、グループ５）には耐容性が認められ、個体の死亡はみられず、平均体重減少は２．４４％（０．５９ｇ、第１４日）であった。パクリタキセル治療によりＭＸ−１乳癌異種移植片の成長が有意に阻害された［第２４日の平均腫瘍重量３０９ｍｇ（ｎ＝１０）は溶媒治療対照に対する−７３．２％の％差に相当する（ｐ＜０．００１）］。第３１日に応答の最低値がみられ、％差は−８６．０％であった。％差は、第１４日から始まり比較が不可能になるまで有意なものであった。第１４日〜３８日までパクリタキセル治療個体とＮａｎｏＰａｃ（商標）治療個体の腫瘍成長阻害に有意差がみられた（最終日、ＮａｎｏＰａｃ（商標）治療群ではいずれのマウスも生存していた）。
【０２１９】
考察：
パクリタキセル治療群を除く各グループに死亡個体、瀕死個体または体重減少のため安楽死させた個体が２例みられた。パクリタキセルでの治療には耐容性が認められ、個体の死亡はみられなかった。ＮａｎｏＤｏｃｅ（商標）でのＩＴ治療によりヒトＭＸ−１乳癌異種移植片の成長が有意に阻害され、無腫瘍生存個体が４例みられた。ドセタキセルでのＩＶ治療によりヒトＭＸ−１乳癌異種移植片の成長が阻害され、無腫瘍生存個体が８例みられ、試験終了時（第５６〜６３）を除きＮａｎｏＤｏｃｅ（商標）治療との有意差がみられた。ＮａｎｏＰａｃ（商標）での治療によりヒトＭＸ−１乳癌異種移植片の成長が有意に阻害されることはなかった。パクリタキセルでの治療によりヒトＭＸ−１乳癌異種移植片が有意に阻害され、ＮａｎｏＰａｃ（商標）治療より高い効果がみられた。
【０２２０】
実施例７．ＪＩＭＴ−１ヒト乳癌異種移植片に関する試験
この試験の目的は、パクリタキセル粒子（Ｎａｎｏｔａｘ（商標）とも呼ばれる）による治療に対する皮下（ＳＣ）移植ＪＩＭＴ−１ヒト乳癌異種移植片の応答を明らかにすることとした。被験物質は以下の通りのものとした：
【０２２１】
方法：
・ＣＲ雌ＣＢ．１７ＳＣＩＤマウス１００個体の側腹部に５０％マトリゲル中１×１０７個のＪＩＭＴ−１腫瘍細胞をｓｃ注射した。
・細胞注射体積を０．１ｍＬ／マウスとした。
・開示日の週齢：８〜１２週齢。
・腫瘍が１００〜１５０ｍｍ３の平均サイズに達した時点でペアマッチを実施し、治療を開始した。被験物質は表１２に示すものとした：
【表１２】
2019510038.tif 000013
＃対照群
パクリタキセル＝Ｄ５Ｗ中５％エタノール：５％クレモフォールＥＬに溶かしたパクリタキセル
Ｎａｎｏｔａｘ＝生理食塩水中０．１％ｗ／ｖポリソルベート８０に溶かしたＮａｎｏｔａｘ
溶媒＝生理食塩水中０．１％ｗ／ｖのポリソルベート８０
投与体積＝２．５ｍＬ／ｋｇ（０．０５０ｍＬ／２０ｇマウス）。体重に合わせて体積を調整。ＩＶパクリタキセルのグループ５は投与体積を１０ｍＬ／ｋｇ（０．２０ｍＬ／２０ｇマウス）とした。
・体重：５／２（５日間測定し、２日間休む）ののち、終了時までｂｉｗｋ
・３０％超の体重減少が１回でも観察された個体または２５％超の体重減少が３回連続して測定された個体についてはいずれも安楽死させた。
・エンドポイントＴＧＤ。個体を個別にモニターした。実験のエンドポイントは、腫瘍体積１０００ｍｍ３または６０日のうちいずれか早い方とした。エンドポイントに達した時点で個体を安楽死させた。
【０２２２】
Ｄ２９（５回投与する個体Ｇ１、Ｇ３、Ｇ４の投与最終日）に１０００ｍｍ３で腫瘍成長阻害を評価し、全生存期間の解析には、Ｄ５０に６００ｍｍ３の修正腫瘍体積エンドポイントで試験を終了した。
【０２２３】
次いで、第５０日に各グループで優れた応答を示した上位３個体から腫瘍を採取して解析に供し、腫瘍組織中のパクリタキセル濃度を求めた。各グループの薬物投与最終日と比較した解析のタイミングは以下の通りである：
グループ１、３および４は最後の投与から２１日後；
グループ２は４９日後；および
グループ５は３５日後。
【０２２４】
これらの試験から、Ｎａｎｏｔａｘ（ＮａｎｏＰａｃ）がＪＩＭＴ−１乳癌モデルに有意な活性を示さないことがわかった。５用量のＮａｎｏｔａｘ（ＮａｎｏＰａｃ）で個体を治療することにより、溶媒治療対照個体と比較して生存期間がわずかに延長し、試験生存個体数が増大した。Ｎａｎｏｔａｘ（ＮａｎｏＰａｃ）治療個体の結果はいずれも、潜在的な治療活性を示す６０％のＴＧＩ閾値をはるかに下回っていた。この試験では、パクリタキセルにより有意なＴＧＩおよび生存期間の有意な改善が得られた。いずれの治療も耐容性に優れていた。
【０２２５】
組織処理を以下の通りに実施した：
１．対照腫瘍組織および腫瘍組織の試料の重量を測定し、それぞれに３体積の水を加えて希釈係数４の試料とした。
２．腫瘍組織をホノジナイザーＦａｓｔＰｒｅｐ（登録商標）−２４で４．０ｍ／秒の速度で１００秒間ホモジナイズした。
３．対照腫瘍組織ホモジネート５０μＬをＳＴＤ、ＱＣ試料およびブランクとして９６ウェルプレートの別個のウェルに加えた。
４．対照腫瘍組織ホモジネートにＳＴＤおよびＱＣ試料に適した溶液５０μＬを加えた（ブランクには希釈液５０μＬを加えた）。
５．腫瘍組織ホモジネート試験の試料については、各試料５０μＬを９６ウェルプレートの別個のウェルに加え、各組織試料に希釈液の５０μＬアリコートを加えた。
６．全試料に内部標準（２００ｎｇ／ｍＬのワルファリン）ＡＣＮ溶液２００μＬを加えた。
７．プレートを１０分間激しくボルテックスし、次いで１５℃、４０００ｒｐｍで１０分間遠心分離した（Ｓｏｒｖａｌｌ  Ｌｅｇｅｎｄ  Ｘ１Ｒ遠心機、Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社）。
８．遠心分離後、上清の１００μＬアリコートを各ウェルに水１００μＬが入った新たな９６ウェルプレートに移した。
９．プレートを約１分間ボルテックスし、次いで、アリコートを注入してＬＣ／ＭＳ／ＭＳ解析を実施した。
【０２２６】
結果を表１３に示す：
【表１３】
2019510038.tif 000014
ＢＱＬ：希釈係数を適用する前に１ｎｇ／ｇの定量限界未満であった。
グループ１：溶媒（ＩＴ、ｑｗｋ×３）
グループ２：Ｎａｎｏｔａｘ（３７．５ｍｇ／ｋｇ、ＩＴ、ｑｗｋ×１）
グループ３：Ｎａｎｏｔａｘ（１２．５ｍｇ／ｋｇ、ＩＴ、ｑｗｋ×３）
グループ４：Ｎａｎｏｔａｘ（３７．５ｍｇ／ｋｇ、ＩＴ、ｑｗｋ×３）
グループ５：パクリタキセル（３０ｍｇ／ｋｇ、ＩＶ、ｑｗｋ×３）
【０２２７】
このデータから驚くべきことに、パクリタキセル粒子（グループ２、３および４）が腫瘍内に極めて長期間にわたって存在したことがわかる。
【０２２８】
実施例８
右側腹部にＭＤＡ−ＭＢ−２３１乳腺腫瘍異種移植片を移植した雌ヌードマウス（ＮＣｒ−ｎｕ／ｎｕ）（ＰＤ−ＰＢ−０４−２０１６；上を参照されたい）に腫瘍移植から１３日後、２０日後および２７日後に用量１００ｍｇ／ｋｇのＮａｎｏＤｏｃｅ（登録商標）を腫瘍内注射剤として投与した。腫瘍移植後第６１日、グループ３（１００ｍｇ／ｋｇ  ＮａｎｏＤｏｃｅ、ＩＴ、ｑｗｋ×３）の４個体を剖検し、腫瘍移植部位の皮膚および下層組織を採取した。組織を水中でホモジナイズした。ホモジネートのアリコートをアセトニトリルで抽出し、抽出物をＬＣ／ＵＶ／ＭＳにより解析した。ドセタキセルの合成標準品を用いて、滞留時間（ＴＲ）、ＵＶおよびフラグメンテーションパターンを組織試料中に存在する未知の化合物と比較した。腫瘍部位組織抽出物の解析から、被験組織４例のうち２例の試料（個体３−７および３−８）中にドセタキセルが存在することがわかった。ＬＣ／ＵＶ／ＭＳ解析では、組織抽出物から得られた滞留時間（ＴＲ＝１６．６分）およびｍ／ｚ８０７．７−８０８．７の抽出イオンクロマトグラム（ＸＩＣ）内のクロマトグラフピークのＭＳ２スペクトルがドセタキセル（ＴＲ＝１６．１６分）の標準試料とほぼ同じであることがわかった。
【０２２９】
以上をまとめると、滞留時間および質量スペクトルデータが標準品と類似していることに基づき、腫瘍内にＮａｎｏＤｏｃｅ（登録商標）を投与したマウス乳腺腫瘍（ＭＤＡ−ＭＢ−２３１）異種移植モデル４例のうち２例では、腫瘍移植部位の組織試料から単離された化合物がドセタキセルであることが確認された。
【０２３０】
実施例９．根治的前立腺切除術を受けている対象の前立腺癌に対するパクリタキセル粒子（ＮａｎｏＰａｃ（商標））局所療法に関する第ＰＩＩａ相用量漸増試験
プロトコルの概要
耐容性および安全性プロファイルが最も優れていることが明らかになった本明細書のパクリタキセル粒子の用量で拡大コホートを対象とするこの非盲検用量漸増第ＩＩａ相試験では、前立腺癌を有し前立腺切除術を受ける予定の対象に、前立腺切除術の４週間前、画像誘導下で優勢病変を有する前立腺葉内にパクリタキセル粒子を直接注射する。この試験には用量漸増相および用量確認相が含まれる。
【０２３１】
用量漸増相では、３つのコホートを対象にコホートを最低濃度から開始し順次組み入れ、６１５ｍｇ／ｍＬ、１０１５ｍｇ／ｍＬおよび１５ｍｇ／ｍＬのパクリタキセル粒子濃度を優勢病変が含まれる前立腺葉の最大２０％の注射体積で試験する。データ安全性モニタリング委員会（ＤＳＭＢ）によるコホートデータの審査の後、次のコホートの組入れが開始され、現時点の用量でさらに３つのコホートが組み入れられ得るか、あるいは、最初の用量で十分な安全性および耐容性が認められなかった場合、試験が中止され得る。ＤＳＭＢによる決定で許容される安全性および耐容性プロファイルを有する最大用量と定義され、さらなる評価に最も適していることが明らかになった用量にさらに対象を組み入れて、その用量レベルの１２例の対象からなるコホートとする。
【０２３２】
パクリタキセル粒子を注射する前に腫瘍体積および血清中前立腺特異抗原（ＰＳＡ）を測定する。注射と前立腺切除術の間の区間で薬物動態試料、ＰＳＡおよび射精液を採取する。パクリタキセル粒子（ＮａｎｏＰａｃ（商標）とも呼ばれる）注射の２〜３週間前および前立腺切除術の前にマルチパラメトリックＭＲＩ（ｍｐＭＲＩ）を実施する。前立腺切除術で切除した前立腺および骨盤リンパ節を評価する。
【０２３３】
エンドポイント：
主要エンドポイント：有害事象（ＡＥ）、臨床検査評価の変化、身体検査所見およびバイタルサインにより示される安全性および耐容性。
副次エンドポイント：
・注射後および前立腺切除術前の体循環中のパクリタキセル濃度；
・前立腺切除術で切除した前立腺、同側の前立腺葉、反対側の前立腺葉および骨盤リンパ節内の腫瘍中のパクリタキセルの有無；
・腫瘍応答（ｍｐＭＲＩでの画像体積の変化；生検による組織学的評価）；
・前立腺切除術で切除した前立腺、同側の前立腺葉、反対側の前立腺葉および骨盤リンパ節内の腫瘍中の腫瘍細胞の有無。
【０２３４】
集団：前立腺癌のある単一部位の根治的前立腺切除術を受ける予定の最大３０例までの男性。
【０２３５】
被験薬剤の説明：優勢病変が含まれる前立腺葉内に６ｍｇ／ｍＬ、１０ｍｇ／ｍＬ、１５ｍｇ／ｍＬの濃度で、優勢病変が含まれる前立腺葉の最大２０％の体積で直接注射する懸濁用ＮａｎｏＰａｃ（商標）（無菌パクリタキセル粒子）（「ＮａｎｏＰａｃ」）。
【０２３６】
被験薬剤の名称および説明：
超臨界二酸化炭素およびアセトンを用い、よく特徴付けられた粒子径分布内にあるパクリタキセルナノ粒子を作製する圧縮貧溶媒析出（ＰＣＡ）法を用いて、懸濁用ＮａｎｏＰａｃ（商標）（無菌粒子状パクリタキセル）粉末として特定される粒子状パクリタキセル製剤を製造する。ＰＣＡの後、パクリタキセル粒子を６０ｍＬのタイプ１、ＵＳＰ、透明ガラスバイアルに充填し（３０６ｍｇ／バイアル）、それぞれブロモブチルゴム栓およびアルミニウムクリンプシールで閉じ、ガンマ線照射により滅菌する。病院／診療所で投与する前にパクリタキセル粒子をＩｎｊｅｃｔｉｏｎ、ＵＳＰ用０．９％塩化ナトリウム（生理食塩水）中１％のポリソルベート８０、ＮＦで再構成して懸濁液にする。この懸濁液をＩｎｊｅｃｔｉｏｎ、ＵＳＰ用０．９％塩化ナトリウムでさらに希釈して、最終臨床製剤とする。この再構成および希釈は臨床現場の薬局で実施する。最終臨床製剤中のＮａｎｏＰａｃ濃度は６ｍｇ／ｍＬ、１０ｍｇ／ｍＬまたは１５ｍｇ／ｍＬとなる。ポリソルベート８０の最終濃度は、６ｍｇ／ｍＬ懸濁液では０．１％、１０ｍｇ／ｍＬ懸濁液では０．１６％、１５ｍｇ／ｍＬ懸濁液では０．２５％である。
【０２３７】
この試験の重要性：
前立腺癌は、非メラノーマ皮膚癌に次いで男性で最も頻度の高い癌である。前立腺癌は有病率が高いにもかかわらず、常に発展し続けている医学領域の１つであり、患者および医療提供者に難しい決断を迫るものとなっている。現在、前立腺癌の治療は主として、積極的監視か根治的全腺療法かの２つの選択肢からなる。しかし、このほうな二分法では前立腺癌の多様性および微妙に異なる患者の経験が反映されない。スクリーニング手段としてＰＳＡが広く採用されているという理由もあって、より低リスク、低グレードの癌で診断を下される男性が増加している。根治的全腺療法には陰萎および失禁など人生を変化させるほどの結果を伴うリスクがあることから、このような男性に一部には積極的監視が適切な選択であると思われる。このことは、根治的前立腺切除術を受けている男性の４９％が治療不要または緩徐進行性の癌を有するに過ぎないという統計により裏付けられている。それでも、前立腺癌は癌全体で４番目に死亡率が高く、最初に積極的監視に参加し最終的には前立腺切除術を受ける患者の７３％に重大な癌があることが明らかになる。このため、積極的監視には疾患進行のリスクがあるのみならず、患者に精神的苦悩をもたらすこともある。
【０２３８】
理論的根拠：
この第ＩＩａ相試験には、前立腺切除術を受ける予定の前立腺癌患者を含める。試験デザインは、前立腺切除術前の局所療法として優勢病変が含まれる前立腺葉内にパクリタキセル粒子を直接注射することの安全性の評価が可能なものである。本発明者らは、前立腺内にパクリタキセル粒子を直接注射することにより、パクリタキセルの全身曝露があるとしてもこれが低く抑えられ、このためＡＥが軽度で一時的なものにとどまるはずであると考える。
【０２３９】
パクリタキセル粒子を静脈内（ＩＶ）に投与するのではなく直接注射すれば、より高濃度の薬物で局所疾患を標的とし、全身毒性を軽減することが可能になるものと思われる。前立腺内パクリタキセル粒子は、前立腺内での滞留および溶解時間が長くなり、その結果、腫瘍部位内のパクリタキセル濃度が持続的で高濃度のものとなるため、ＩＶパクリタキセルより高い効果が得られることが期待される。対象には、磁気共鳴画像法−−経直腸的超音波融合（ＭＲ−ＴＲＵＳ）ガイダンス下、優勢病変が含まれる前立腺葉内にＮａｎｏＰａｃ（商標）を直接注射する。ＮａｎｏＰａｃ（商標）の注射から４週間後、患者に根治的前立腺切除術を実施する。
【０２４０】
試験登録前、対象に超音波誘導前立腺生検を実施して、前立腺癌の診断およびステージ分類を実施する。この生検を用いて、グリーソンスコアが最も高い病変として定義される優勢病変を特定する。この生検で実施した超音波を用いて前立腺全体の体積も算出する。試験前の生検時に超音波により求めた前立腺の総体積の５０％を算出することにより、優勢病変が含まれる前立腺葉の体積を求める。
【０２４１】
この試験には用量漸増相および用量確認相が含まれる。
・用量漸増：優勢病変が含まれる前立腺葉の最大２０％の注射体積で濃度６ｍｇ／ｍＬ、１０ｍｇ／ｍＬおよび１５ｍｇ／ｍＬのＮａｎｏＰａｃ（商標）を試験する。コホートを最低濃度から開始し順次組み入れる。各コホートは計画された最小限の対象３例を有する。コホートの最初の３例のデータがＤＳＭＢにより審査および評価される。結果は、ａ）次の用量に増大させるか；ｂ）現時点の用量にさらに３例追加するが；またはｃ）前回の用量を３例だけ拡大するかに決定される。
・用量確認相：拡大およびさらなる評価に適していると考えられる用量が決定された後、そのレベルで投与する対象が計１２例になるよう対象をその用量に組み入れる。２種類の用量が同じである場合、それぞれの用量に対象を組み入れるが、治療する対象の総数は１２のままである。
【０２４２】
標準治療に関する試験の方法
この試験に組み込む対象は、予定された前立腺切除術を受ける者である。術前のルーチンの精密検査および手術そのものは標準治療と見なす。手術のフォローアップは標準治療に従う。パクリタキセル粒子注射前に、またパクリタキセル粒子注射と前立腺切除術の間の区間では週１回、血清中ＰＳＡを測定する。
【０２４３】
試験参加前、ルーチンの腺癌の評価および確定の一環として超音波およびｍｐＭＲＩによる撮像を実施しておく。これらの結果は、パクリタキセル粒子を注射する前の治療前（またはベースライン）データとしての役割を果たし；のちに試験に独自のｍｐＭＲＩ検査を前立腺切除術前３日以内に別に実施し、前立腺切除術の方法の一環として超音波検査を実施する。
【０２４４】
パクリタキセル粒子注射と前立腺切除術の間の区間では、注射から１週間後に開始して週１回の頻度で射精液を採取し、パクリタキセル濃度の測定値を評価する。
【０２４５】
前立腺切除術の当日、麻酔をかけた後に生検を実施する。生検直後、同じ麻酔下で、対象に予定された前立腺切除術を実施し、手術後、既に記載した通り、パクリタキセル濃度の評価および腫瘍細胞の評価に切除組織（前立腺およびリンパ節）から試料を採取する。
【０２４６】
実施例１０．局所進行膵臓癌を有する対象におけるパクリタキセル粒子の腫瘍内注射の安全性を評価する第ＩＩａ相試験
この非盲検第ＩＩａ相試験では、膵臓の尾部または体部に局所進行膵臓癌を有する対象は、標準治療（ＳＯＣ）の一環として少なくとも１治療単位の化学療法を完了している。十分な血液学的回復が認められた後、内視鏡超音波誘導下での直接注射により対象にＩＴＵパクリタキセル粒子（すなわち、ＮａｎｏＰａｃ（商標））を投与する。対象の全生存期間（ＯＳ）、無進行生存（ＰＦＳ）、ＣＡ−１９−９レベル、癌胎児抗原（ＣＥＡ）レベル、疼痛軽減および治療に対する腫瘍応答（撮像により示される）を追跡する。
【０２４７】
濃度６ｍｇ／ｍＬ、１０ｍｇ／ｍＬまたは１５ｍｇ／ｍＬのパクリタキセル粒子を腫瘍体積の最大２０％（いずれの対象も最大で５ｍＬの体積を投与する）で膵臓内の腫瘍内に直接注射する順次漸増コートに対象を組み込む。この試験には用量漸増相および用量確認相が含まれる。
【０２４８】
これらの腫瘍体積の計算結果に基づき、いずれの対象も５ｍＬを超えず、腫瘍体積の２０％に相当する量のパクリタキセル粒子を腫瘍内に注射し得る。
【０２４９】
この試験に用いるパクリタキセル粒子（ＮａｎｏＰａｃ（商標）と呼ばれる）は、ＣｒｉｔｉＴｅｃｈ社（ローレンス、カンザス州）で超臨界二酸化炭素およびアセトンを用い、よく特徴付けられた粒子径分布内にあるパクリタキセルナノ粒子を作製する、圧縮貧溶媒析出（ＰＣＡ）法を用いて製造されるものである。病院／診療所で投与する前に、バイアルに入ったパクリタキセル粒子の粉末を無菌再構成溶液（Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ、ＵＳＰ用０．９％塩化ナトリウム中１％のポリソルベート８０、ＮＦ）で懸濁させ、次いで、Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ、ＵＳＰ用０．９％塩化ナトリウムでさらに希釈して６ｍｇ／ｍＬ、１０ｍｇ／ｍＬまたは１５ｍｇ／ｍＬのＮａｎｏＰａｃ（商標）懸濁液にする。
【０２５０】
悪性腫瘍部位の中に粒子状パクリタキセルの懸濁液を導入することにより、患部（この場合、膵臓腫瘍）内にパクリタキセルの蓄積が生じ、粒子から腫瘍間隙内にパクリタキセルが徐々に放出され、それにより悪性腫瘍部位でのパクリタキセル曝露時間が長くなるものと考えられる。膵臓からのクリアランスが減少することによりパクリタキセルの全身レベルが低くなり、さらには全身毒性が抑えられるはずである。
【０２５１】
この第ＩＩａ相試験を実施して、膵臓の尾部または体部に位置する局所進行膵臓癌に対する化学療法を受ける予定の最大３０例の患者を対象にパクリタキセル粒子の安全性および耐容性を評価する。この臨床試験では、内視鏡超音波誘導下細針注入（ＥＵＳ−ＦＮＩ）によりパクリタキセル粒子を膵臓内に直接投与する。
【０２５２】
製剤は、粒子状パクリタキセルの粉末を充填し、ブチルゴム栓およびアルミニウムクリンプシールで閉じ、ガンマ線照射により滅菌したものとして透明な６０ｍＬのタイプ１、ＵＳＰ、透明ガラスバイアル（３０６ｍｇ／バイアル）に入れられている。臨床投与には、バイアル中のパクリタキセル粒子粉末を無菌再構成溶液（Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ、ＵＳＰ用０．９％塩化ナトリウム中１％のポリソルベート８０、ＮＦ）で懸濁させ、次いで、様々な体積のＩｎｊｅｃｔｉｏｎ、ＵＳＰ用０．９％塩化ナトリウムでさらに希釈する。その結果、Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ、ＵＳＰ用０．９％塩化ナトリウム中それぞれ０．１％、０．１６％または０．２５％のポリソルベート８０、ＮＦを含有する６ｍｇ／ｍＬ、１０ｍｇ／ｍＬまたは１５ｍｇ／ｍＬのＮａｎｏＰａｃ懸濁液が得られる。
【０２５３】
【表１４】
2019510038.tif 000015
【０２５４】
エンドポイント：主要エンドポイント：有害事象（ＡＥ）、臨床検査評価の変化、身体検査所見およびバイタルサインにより示される安全性および耐容性。
副次エンドポイント：
・注射後の体循環中のパクリタキセル濃度（ＰＫ解析により求める）；
・腫瘍応答（Ｅｉｓｅｎｈａｕｅｒら，２００９によるＲＥＣＩＳＴ）；
・疼痛軽減（視覚的アナログ尺度［ＶＡＳ］により測定する）；
・腫瘍マーカーＣＡ１９−９の変化；
・腫瘍マーカーＣＥＡの変化。
【０２５５】
集団：膵臓の尾部または体部に位置する局所進行膵臓癌を有する最大３０例の対象。
【図１】
2019510038.tif 000016
【図２】
2019510038.tif 000017
【図３】
2019510038.tif 000018
【図４】
2019510038.tif 000019
【国際調査報告】
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2019510038.tif 000021
2019510038.tif 000022