(57)【要約】  本発明は、ガンマヘルペスウイルス亜科、特に、ヒトヘルペスウイルス８（ＨＨＶ８）またはヒトヘルペスウイルス４（ＨＨＶ４）に関連した障害の予防および／または処置での使用のための、以下の一般式（Ｉ）もしくは（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容される塩および／もしくはその溶媒和物、ならびにかかる化合物を含有する薬学的組成物に関する。2019527207.tif 000015【選択図】なし
2019527207.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の一般式（Ｉ）の化合物、
【化１】
2019527207.tif 000009
または薬学的に許容される塩および／もしくはその溶媒和物であり、式中、
●Ｘが、酸素または硫黄原子であり、
●Ｙが、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル基であり、
●Ｒ１〜Ｒ４が互いに独立して、水素原子、ハロ、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＣＯ２Ｒ１０、−ＣＯＲ１１、−ＣＯＮＲ１２Ｒ１３、−ＮＯ２、または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ２−Ｃ６）アルケニル、および（Ｃ２−Ｃ６）アルキニルから選択された基であり、
●Ｒ５〜Ｒ７が互いに独立して、水素原子、または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−ＯＲ１４、−ＮＲ１５Ｒ１６、−ＣＯＮＲ１７Ｒ１８、−ＣＯ（ＮＲ１９Ｒ２０）２、−ＳＲ２１、−ＣＯＲ２２、−ＣＯＯＲ２３、−ＳＯ２Ｒ２４、−ＮＯ２、および−ＮＯ＋から選択された基であり、前記（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基が、任意選択で、ハロ、−ＯＲ２５、−ＮＲ２６Ｒ２７、−ＣＯＮＲ２８Ｒ２９、−ＣＯ（ＮＲ３０Ｒ３１）２、−ＳＲ３２、−ＣＯＲ３３、−ＣＯＯＲ３４、−ＳＯ２Ｒ３５、−ＮＯ２、および−ＮＯ＋から選択された１つまたはいくつかの基で置換され、
●Ｒ８およびＲ９が互いに独立して、水素原子、もしくは任意選択で、ＯＨで置換された（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル基であるか、またはＲ８およびＲ９が、それらが化学的に結合した窒素原子と一緒になってヘテロ環を形成し、
●Ｒ１０〜Ｒ３５が互いに独立して、水素原子、ハロ、または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基であり、
ガンマヘルペスウイルス亜科、特に、ヒトヘルペスウイルス８（ＨＨＶ８）またはヒトヘルペスウイルス４（ＨＨＶ４）に関連した障害の予防および／または処置での使用のための化合物。
【請求項２】
式中、Ｘが、硫黄原子である、請求項１に記載の使用のための化合物。
【請求項３】
式中、Ｙが、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基であり、好ましくは、Ｙが、エチルである、請求項１または２に記載の使用のための化合物。
【請求項４】
以下の一般式（Ｉａ）の化合物である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【化２】
2019527207.tif 000010
【請求項５】
Ｒ８およびＲ９が互いに独立して、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル基、好ましくは、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基、より好ましくは、エチルである、請求項１〜４のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項６】
Ｒ１〜Ｒ４が互いに独立して、水素原子、ハロ、または（Ｃ１−Ｃ６）アルキルおよび（Ｃ２−Ｃ６）アルケニルから選択された基であり、好ましくは、Ｒ１〜Ｒ４が、水素原子である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項７】
Ｒ５〜Ｒ７が互いに独立して、水素原子、または任意選択で、ハロ、−ＯＲ２５、−ＮＲ２６Ｒ２７、−ＣＯＮＲ２８Ｒ２９、−ＣＯ（ＮＲ３０Ｒ３１）２、−ＳＲ３２、−ＣＯＲ３３、−ＣＯＯＲ３４、−ＳＯ２Ｒ３５、−ＮＯ２、および−ＮＯ＋、特に、ハロ、−ＯＲ２５、−ＮＲ２６Ｒ２７、−ＣＯＮＲ２８Ｒ２９、−ＣＯ（ＮＲ３０Ｒ３１）２、および−ＳＲ３２、好ましくは、−ＯＲ２５、−ＮＲ２６Ｒ２７、および−ＳＲ３２、より好ましくは、−ＯＲ２５から選択された１つまたはいくつかの基で置換された（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基であり、Ｒ２５〜Ｒ３５が、請求項１に定義のとおりである、請求項１〜６のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項８】
Ｒ６およびＲ７が、水素原子であり、Ｒ５が、ＯＨで置換された（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基であり、好ましくは、Ｒ５が、ＯＨで置換されたメチルである、請求項１〜７のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項９】
以下の式（Ｉｂ）の化合物である、請求項１〜８のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【化３】
2019527207.tif 000011
【請求項１０】
以下の一般式（ＩＩ）の化合物、
【化４】
2019527207.tif 000012
または薬学的に許容される塩および／もしくはその溶媒和物であり、式中、
●Ｘが、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル基であり、
●Ｒ’１〜Ｒ’３が互いに独立して、水素原子、ハロ、−ＯＲ’９、−Ｒ’１０ＯＲ’１１、−ＳＲ’１２、−ＣＯＳＲ’１３、−ＮＲ’１４Ｒ’１５、−ＣＯＲ’１６、−ＣＯＯＲ’１７、または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基であり、
●Ｒ’４〜Ｒ’６が互いに独立して、水素原子、ハロ、−ＯＲ’１８、−Ｒ’１９ＯＲ’２０、−ＳＲ’２１、または−ＮＲ’２２Ｒ’２３であり、
●Ｒ’７およびＲ’８が互いに独立して、水素原子もしくは（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル基であるか、またはＲ’７およびＲ’８が、それらが化学的に結合した窒素原子と一緒になってヘテロ環を形成し、
●Ｒ’９〜Ｒ’２３が互いに独立して、水素原子、ハロ、または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、アリール、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルアリール基から選択された基であり、
ガンマヘルペスウイルス亜科、特に、ヒトヘルペスウイルス８（ＨＨＶ８）またはヒトヘルペスウイルス４（ＨＨＶ４）に関連した障害の予防および／または処置での使用のための化合物。
【請求項１１】
Ｘが、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基である、請求項１０に記載の使用のための化合物。
【請求項１２】
以下の一般式（ＩＩａ）の化合物である、請求項１０または１１のいずれかに記載の使用のための化合物。
【化５】
2019527207.tif 000013
【請求項１３】
Ｒ’７およびＲ’８が互いに独立して、水素原子または（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル基、好ましくは、水素原子または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基、より好ましくは、水素原子である、請求項１０〜１２のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項１４】
Ｒ’１〜Ｒ’３が互いに独立して、水素原子、−ＯＲ’９、−ＳＲ’１２、−ＣＯＳＲ’１３、−ＮＲ’１４Ｒ’１５、または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基であり、好ましくは、Ｒ’１〜Ｒ’３が、水素原子であり、Ｒ’９〜Ｒ’１５が、請求項１０に定義のとおりである、請求項１０〜１３のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項１５】
Ｒ’４〜Ｒ’６が互いに独立して、水素原子、ハロ、−ＯＲ’１８、または−Ｒ’１９ＯＲ’２０であり、好ましくは、Ｒ’４およびＲ’６が、水素原子であり、Ｒ’５が、−ＯＲ’１８であり、Ｒ’１８〜Ｒ’２０が、請求項１０に定義のとおりであり、好ましくは、Ｒ’１８〜Ｒ’２０が、水素原子または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基であり、より好ましくは、Ｒ’１８〜Ｒ’２０が、水素原子またはメチルである、請求項１０〜１４のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項１６】
以下の式（ＩＩｂ）の化合物であり、
【化６】
2019527207.tif 000014
好ましくは、式（ＩＩｂ）の前記化合物の二リン酸塩である、請求項１０〜１５のいずれか一項に記載の使用のための化合物。
【請求項１７】
ガンマヘルペスウイルス亜科、特に、ヒトヘルペスウイルス８（ＨＨＶ８）またはヒトヘルペスウイルス４（ＨＨＶ４）に関連した障害の予防および／または処置での使用のための、請求項１〜９のいずれか一項に記載の少なくとも１つの化合物、および／または請求項１０〜１６のいずれか一項に記載の１つの化合物、ならびに少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤、を含む、薬学的組成物。
【請求項１８】
別の活性素、例えば、ブレオマイシン、ビンブラスチン、パクリタキセルおよびドセタキセル、ダウノルビシンリポソーム（ｄａｕｎｏｒｕｂｉｃｉｎｅ  ｌｉｐｏｓｏｍｉａｌｅ）、アドリアマイシン、ビンクリスチン、ナベルビン、ゲムシタビン、インターフェロンα、全トランスレチノイン酸、サリドマイド、ＩＬ−１２、ＩＬ−４、パンレチン、レブラミド、レナリノミド、リツキシマブ、エトポシド、シクロホスファミド、ドキソルビシン、ビンクリスチン、プレドニゾン、シドホビル、ホスカルネット、ガンシクロビル、バルガンシクロビル、トシリズマブ、シルツキシマブ、ボルテゾミブ、ＲＮＡｉの抗ＬＡＮＡ、ならびに／またはｖＦｌｉｐ、ヒドロキシ尿素、ラパマイシンをさらに含む、請求項１７に記載の使用のための薬学的組成物。
【請求項１９】
ヒトヘルペスウイルス８（ＨＨＶ８）に関連した前記障害が、ヒトカポジ肉腫（ＫＳ）、原発性滲出性リンパ腫（ＰＥＬ）、および多中心性キャッスルマン病（ＭＣＤ）から選択され、
ヒトヘルペスウイルス４（ＨＨＶ４）に関連した前記疾患が、
●感染性単核球症（腺熱）、
●ホジキンリンパ腫、バーキットリンパ腫、中枢神経系リンパ腫、形質芽球性リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、および原発性滲出性リンパ腫などのリンパ増殖性障害、
●鼻咽頭癌および胃癌などの非リンパ性腫瘍、ならびに
●皮膚筋炎、全身性エリテマトーデス、関節リウマチ、シェーグレン症候群、多発性硬化症などの自己免疫疾患、から選択される、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の使用のための化合物または請求項１７もしくは１８に記載の使用のための薬学的組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ガンマヘルペスウイルス亜科、例えば、カポジ肉腫ヘルペスウイルス（ＫＳＨＶ：Ｋａｐｏｓｉ’ｓ  ｓａｒｃｏｍａ  ｈｅｒｐｅｓ  ｖｉｒｕｓ）とも称されるヒトヘルペスウイルス８（ＨＨＶ８：ｈｕｍａｎ  ｈｅｒｐｅｓｖｉｒｕｓ  ８）、およびエプスタイン・バーウイル（ＥＢＶ：Ｅｐｓｔｅｉｎ−Ｂａｒｒ  ｖｉｒｕｓ）とも称されるヒトヘルペスウイルス４（ＨＨＶ４：ｈｕｍａｎ  ｈｅｒｐｅｓ  ｖｉｒｕｓ  ４）に関連した障害の予防および／または処置での使用のための２つのファミリーの化合物、プリマキン誘導体およびヒカントン誘導体に関する。本発明はまた、ガンマヘルペスウイルス亜科に関連した障害の予防および／または処置での使用のための前記化合物を含む薬学的組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
癌におけるウイルス感染の負担は高いが、癌研究コミュニティの多くで過小評価されている。国際癌研究機構は、世界中の５つの癌症例のうちの１つが感染によって引き起こされ、ほとんどがウイルスによって引き起こされると推定している。これらの癌は、発展途上国にとって、ならびに先進国における保健医療サービス供給体制が不十分で免疫抑制された集団にとって、特に公衆衛生上の問題である。最も重要なことに、これらの癌は、診断、予防、および治療のための容易に同定可能な標的を有する。
【０００３】
感染性の癌の病原体（ウイルス、バクテリア、および寄生虫を含む）は、癌の細胞形質転換に直接寄与するウイルス性癌遺伝子を発現する直接的発癌物質と、最終的に宿主細胞における発癌性変異につながる、慢性感染および炎症により癌を引き起こすと推測される間接的発癌物質との２つの大きなカテゴリに分割されている。定義によれば、直接的ウイルス発癌物質は、各癌細胞に存在し、ＨＰＶ関連癌、ＭＣＶ関連癌、ＥＢＶ関連癌、およびＫＳＨＶ関連癌で生じる場合、形質転換された腫瘍細胞表現型を維持する少なくとも１つの転写物を発現する。これを支持する証拠は、ウイルスタンパク質の喪失が宿主癌の生存率の喪失をもたらすというノックダウン研究に由来する。大きなＤＮＡ腫瘍ウイルス（ＥＢＶおよびＫＳＨＶなど）に関する研究は、ウイルスゲノム複製を確実にすることよりも潜伏期中の免疫応答を逃れることと関係があり得る、ウイルス性癌遺伝子と宿主細胞との間の複雑な相互作用を示唆する。溶解ウイルス複製中に、これらのウイルスはまた、それら自体のゲノム複製を促進するために、細胞周期の調節の仕組みを乗っ取る。発癌性ヘルペスウイルスは、活性溶解ウイルス複製中に、ＲＢ１および他の腫瘍抑制因子のチェックポイントを阻害するようにタンパク質をコードし、また、ウイルス性にコードされたＤＮＡ合成酵素を持つ。これらのウイルス遺伝子は、それらの、小さなＤＮＡ腫瘍ウイルス中の対応物と同様に、一旦溶解複製が開始されるとウイルスＤＮＡを複製し得るＳ期様細胞状態を生成することによってウイルスゲノムの迅速な複製および増幅の段階を設定する。
【０００４】
しかし、ヘルペスウイルスの腫瘍を駆動するウイルスタンパク質およびウイルスコードされたｍｉＲＮＡは潜伏期中に発現し、これらのウイルス性癌遺伝子は増殖性のウイルス複製には直接寄与することはできない。ヘルペスウイルス腫瘍性タンパク質は、それらがウイルスゲノム複製に必要な細胞資源を生成するのに関与するための誤った時間で発現する。ＫＳＨＶ  ＬＡＮＡ１腫瘍性タンパク質は、溶解複製を抑制してウイルス潜伏期を維持しながら、同時にＲＢ１およびインターフェロンのシグナル応答を標的とする。ＫＳＨＶコードされたサイクリンは、細胞周期に依存する様式で発現する別の潜伏性ウイルス腫瘍性タンパク質である。ＨＰＶ  Ｅ７と同様に、ＲＢ１を標的とし、Ｇ１／Ｓチェックポイントを不活性化するが、ウイルス複製は促進しない。
【０００５】
ヤン・チャン（Ｙｕａｎ  Ｃｈａｎｇ）、パトリック・ムーア（Ｐａｔｒｉｃｋ  Ｍｏｏｒｅ）、およびそれらの同僚による、ヒトカポジ肉腫（ＫＳ：Ｋａｐｏｓｉ  ｓａｒｃｏｍａ）の生検標本における新規ヘルペスウイルスからのＤＮＡの発見から今や２０年である。現在、ＫＳ関連ヘルペスウイルス  （ＫＳＨＶ：ＫＳ−ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｈｅｒｐｅｓｖｉｒｕｓ）またはヒトヘルペスウイルス８（ＨＨＶ−８）と称されるそのウイルスは、クローン化および配列決定され、培養で成長され、インビトロで広範囲にわたって研究されている。疫学研究は、ＫＳＨＶによる感染がＫＳ腫瘍発生に必要であり、さらにウイルスゲノムを少なくとも２つのリンパ増殖性障害、原発性滲出性リンパ腫（ＰＥＬ：ｐｒｉｍａｒｙ  ｅｆｆｕｓｉｏｎ  ｌｙｍｐｈｏｍａ）および多中心性キャッスルマン病（ＭＣＤ：ｍｕｌｔｉｃｅｎｔｒｉｃ  Ｃａｓｔｌｅｍａｎ  ｄｉｓｅａｓｅ）につなげる強力な証拠を提供する。
【０００６】
最もよく特徴付けられた潜伏遺伝子は、すべての潜伏的に感染した細胞で転写される主要な潜伏遺伝子座を構成する。この領域は、潜伏関連核内抗原（ＬＡＮＡ：ｌａｔｅｎｃｙ−ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｎｕｃｌｅａｒ  ａｎｔｉｇｅｎ）、ウイルスサイクリン（ｖ−ｃｙｃｌｉｎ：ｖｉｒａｌ  ｃｙｃｌｉｎ）、ｖ−Ｆｌｉｃｅ阻害タンパク質（ｖ−ＦＬＩＰ：ｖ−Ｆｌｉｃｅ−ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ  ｐｒｏｔｅｉｎ）、ならびにカポジＡ、Ｂ、およびＣをコードするいくつかのＯＲＦを含む。最初の３つの遺伝子は、特異なスプライシングを介して一連のコターミナルｍＲＮＡを生成する単一のプロモータ（ＬＡＮＡプロモータ、またはＬＴｃ）の制御下にある。第２のプロモータ（カポジプロモータ、またはＬＴｄ）は、カポジをコードするスプライシングされた転写物をコードし、また、ｖ−サイクリンおよびｖ−ＦＬＩＰのためのバイシストロニックなＲＮＡを生成し得る。このプロモータはまた、合計１８個の成熟ｍｉＲＮＡを産生するように処理され得る１２個のプレｍｉＲＮＡの発現を支配する。これらの潜伏生成物のすべては、ＫＳ紡錘細胞ならびにＰＥＬ細胞において発現することが見出されている。
【０００７】
ＫＳＨＶがＫＳＶＨ感染細胞においてアポトーシスを阻止することを可能にする多くの因子がある。
−  ＫＳＨＶ  ｖ−ＦＬＩＰは、強力な抗アポトーシスエフェクタである。例えば、ｖ−ＦＬＩＰのｓｉＲＮＡが媒介する不活性化は、ＰＥＬ細胞におけるアポトーシスを誘発する。ｖ−ＦＬＩＰの生存促進性活性は、転写因子ＮＦ−κＢを活性化する能力に関連している。ＮＦ−κＢは、阻害剤ＩκＢに結合した不活性細胞質形態で細胞内に維持される。ｖ−ＦＬＩＰは、ＩκＢキナーゼ（ＩＫＫ：ＩκＢ  ｋｉｎａｓｅ）のγサブユニットに結合し活性化する。得られたＩκＢリン酸化は、ＩκＢをＮＦ−κＢから置き換え、活性転写因子を核に放出し、そこでそれは大きなパネルの抗アポトーシスおよび炎症誘発性遺伝子を活性化する。したがって、紡錘細胞におけるｖ−ＦＬＩＰの発現は、それらの寿命を延ばし得るだけでなく、少なくとも部分的にＫＳ病変の炎症性表現型を説明し得る。内皮細胞におけるｖ−ＦＬＩＰ発現によるＮＦ−κＢ活性化も、ＫＳに関連する第３の表現型、細胞にそれらの特徴的な紡錘形状を与える細胞骨格の劇的な再配列、に関連付けられている。
−  ＫＳＨＶは、主要な潜伏転写物の近くにクラスター化された１２個のｍｉＲＮＡについてコードする。それらのうちの３個（ｍｉＲ−Ｋ１２−１、Ｋ１２−３、およびＫ１２−４−３ｐ）は、アポトーシスエフェクタカスパーゼ３を標的とするアポトーシスの阻害に寄与する。
【０００８】
ヒトヘルペスウイルス４（ＨＨＶ−４）とも称されるエプスタイン・バーウイル（ＥＢＶ）は、世界の人口の９０％超が感染する潜伏ガンマヘルペスウイルスである。一次溶解感染は、中咽頭で発生し、無症候性であり得るか、または感染性単核球症として現れることがある。ＥＢＶは、高い免疫原性があり、一次感染中に、正常者は、一次感染およびすべてのＥＢＶ血清陽性者に発生する定期的な再活性化の両方を制御するＣＤ４およびＣＤ８  Ｔ細胞からなる細胞成分で活発な体液性および細胞性免疫応答を開始する。実際、多量体を使用してＥＢＶ特異的Ｔ細胞を数え上げる解析は、正常なＥＢＶ血清陽性者における最大１％〜５％の循環Ｔ細胞がＥＢＶに対して特異的であり得ることを示している。一次感染のクリアランス後、ＥＢＶは感染したＢ細胞においてエピソームとして存続し、限られた数のサブドミナントなＥＢＶ抗原のみの発現によって特徴付けられる潜伏感染を確立する。
【０００９】
このウイルスは、感染性単核球症（腺熱）；ホジキンリンパ腫、バーキットリンパ腫、中枢神経系リンパ腫、形質芽球性リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、および原発性滲出性リンパ腫などの一部のリンパ増殖性障害；鼻咽頭癌および胃癌などの一部の非リンパ性腫瘍；ならびに皮膚筋炎、全身性エリテマトーデス、関節リウマチ、シェーグレン症候群、多発性硬化症などの一部の自己免疫疾患に関連付けられている（非特許文献１）。
【００１０】
今日まで、ガンマヘルペスウイルス亜科、特に、ヒトヘルペスウイルス８（ＨＨＶ８）またはヒトヘルペスウイルス４（ＨＨＶ４）に関連した障害を予防および／または処置するための必要性が存在する。
【００１１】
以前の研究は、アポトーシスを阻止する因子のうちの１つ（例えば、１つのｓｉＲＮＡを使用するｖ−Ｆｌｉｐ）が不活性化されると、これがＫＳＨＶ感染細胞の証拠の細胞死を誘導すること、およびアポトーシス誘導がカポジ肉腫および他のガンマヘルペスウイルス亜科関連の疾患に対する新しい処置を探すために開発され得る重要な戦略のうちの１つであることを示している。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【００１２】
【非特許文献１】病理学年次報告書:疾患機構（Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｐａｔｈｏｌ．Ｍｅｃｈ．Ｄｉｓ．）、２０１４年。９：３４９−７２、Ｅ．セザーマン（Ｃｅｓａｒｍａｎ）−ジ・オンコロジスト（Ｔｈｅ  Ｏｎｃｏｌｏｇｉｓｔ）、２００８年；１３：５７７−５８５、Ａ．カルボーネ（Ｃａｒｂｏｎｅ）
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１３】
したがって、本発明の発明者は、ヒトヘルペスウイルス８（ＨＨＶ８）に関連した障害の予防および／または処置での使用のための２つのファミリーの化合物、プリマキン誘導体およびヒカントン誘導体を発見した。これらの分子は、アポトーシスによってＨＨＶ８感染細胞死を誘導する一方、ＨＨＶ８に感染していない一次細胞では毒性を誘導しない。
【００１４】
したがって、本発明の第１の目的は、以下の一般式（Ｉ）の化合物、
【００１５】
【化１】
2019527207.tif 000003
【００１６】
または薬学的に許容される塩および／もしくはその溶媒和物であり、式中、
●Ｘが、酸素または硫黄原子であり、
●Ｙが、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル基であり、
●Ｒ１〜Ｒ４が互いに独立して、水素原子、ハロ、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＣＯ２Ｒ１０、−ＣＯＲ１１、−ＣＯＮＲ１２Ｒ１３、−ＮＯ２、または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ２−Ｃ６）アルケニル、および（Ｃ２−Ｃ６）アルキニルから選択された基であり、
●Ｒ５〜Ｒ７が互いに独立して、水素原子、または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−ＯＲ１４、−ＮＲ１５Ｒ１６、−ＣＯＮＲ１７Ｒ１８、−ＣＯ（ＮＲ１９Ｒ２０）２、−ＳＲ２１、−ＣＯＲ２２、−ＣＯＯＲ２３、−ＳＯ２Ｒ２４、−ＮＯ２、および−ＮＯ＋から選択された基であり、前記（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基が、任意選択で、ハロ、−ＯＲ２５、−ＮＲ２６Ｒ２７、−ＣＯＮＲ２８Ｒ２９、−ＣＯ（ＮＲ３０Ｒ３１）２、−ＳＲ３２、−ＣＯＲ３３、−ＣＯＯＲ３４、−ＳＯ２Ｒ３５、−ＮＯ２、および−ＮＯ＋から選択された１つまたはいくつかの基で置換され、
●Ｒ８およびＲ９が互いに独立して、水素原子、もしくは任意選択で、ＯＨで置換された（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル基であるか、またはＲ８およびＲ９が、それらが化学的に結合した窒素原子と一緒になってヘテロ環を形成し、
●Ｒ１０〜Ｒ３５が互いに独立して、水素原子、ハロ、または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基であり、
ガンマヘルペスウイルス亜科、特に、ヒトヘルペスウイルス８（ＨＨＶ８）またはヒトヘルペスウイルス４（ＨＨＶ４）に関連した障害の予防および／または処置での使用のための化合物である。
【００１７】
本発明の第２の目的は、以下の一般式（ＩＩ）の化合物、
【００１８】
【化２】
2019527207.tif 000004
【００１９】
または薬学的に許容される塩および／もしくはその溶媒和物であり、式中、
●Ｘが、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル基であり、
●Ｒ’１〜Ｒ’３が互いに独立して、水素原子、ハロ、−ＯＲ’９、−Ｒ’１０ＯＲ’１１、−ＳＲ’１２、−ＣＯＳＲ’１３、−ＮＲ’１４Ｒ’１５、−ＣＯＲ’１６、−ＣＯＯＲ’１７、または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基であり、
●Ｒ’４〜Ｒ’６が互いに独立して、水素原子、ハロ、−ＯＲ’１８、−Ｒ’１９ＯＲ’２０、−ＳＲ２１、または−ＮＲ２２Ｒ２３であり、
●Ｒ’７およびＲ’８が互いに独立して、水素原子もしくは（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル基であるか、またはＲ’７およびＲ’８が、それらが化学的に結合した窒素原子と一緒になってヘテロ環を形成し、
●Ｒ’９〜Ｒ’２３が互いに独立して、水素原子、ハロ、または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、アリール、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルアリール基から選択された基であり、
ガンマヘルペスウイルス亜科、特に、ヒトヘルペスウイルス８（ＨＨＶ８）またはヒトヘルペスウイルス４（ＨＨＶ４）に関連した障害の予防および／または処置での使用のための化合物である。
【００２０】
本発明の第３の目的は、ガンマヘルペスウイルス亜科、特に、ヒトヘルペスウイルス８（ＨＨＶ８）またはヒトヘルペスウイルス４（ＨＨＶ４）に関連した障害の予防および／または処置での使用のための、一般式（Ｉ）の少なくとも１つの化合物、および／または一般式（ＩＩ）の１つの化合物、ならびに少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤を含む薬学的組成物に関する。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
定義
本発明の目的のために、「薬学的に許容される」という用語は、薬学的組成物の調製に有用であるもの、および薬学的使用のために一般に安全で非毒性であるものを意味することを意図する。
【００２２】
「薬学的に許容される塩または溶媒和物」という用語は、本発明の範囲内で、上で定義されるように薬学的に許容され、かつ対応する化合物の薬学的活性を持つ化合物の塩または溶媒和物を意味することを意図する。
【００２３】
薬学的に許容される塩は、
（１）例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、およびリン酸などの無機酸で形成されるか、または例えば、酢酸、ベンゼンスルホン酸、フマル酸、グルコヘプトン酸、グルコン酸、グルタミン酸、グリコール酸、ヒドロキシナフトエ酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、乳酸、マレイン酸、リンゴ酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、ムコン酸、２−ナフタレンスルホン酸、プロピオン酸、コハク酸、ジベンゾイル−Ｌ−酒石酸、酒石酸、ｐ−トルエンスルホン酸、トリメチル酢酸、およびトリフルオロ酢酸などの有機酸で形成された酸添加塩と、
（２）化合物中に存在する酸プロトンが金属イオン、例えば、アルカリ金属イオン、アルカリ土類金属イオン、もしくはアルミニウムイオンによって置換されているか、または有機もしくは無機塩基と配位されているかのいずれかである場合に形成される基添加塩とを含む。許容される有機塩基は、ジエタノールアミン、エタノールアミン、Ｎ−メチルグルカミン、トリエタノールアミン、トロメタミンなどを含む。許容される無機塩基は、水酸化アルミニウム、水酸化カルシウム、水酸化カリウム、炭酸ナトリウム、および水酸化ナトリウムを含む。
【００２４】
本発明の化合物の治療的使用のための許容される溶媒和物は、溶剤の存在により本発明の化合物の調製の最後のステップ中に形成されるものなどの従来の溶媒和物を含む。一例として、水の存在による溶媒和物（これらの溶媒和物は水和物とも称される）またはエタノールを挙げることができる。
【００２５】
本発明で使用される場合、「（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル」という用語は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソ−プロピル、ｎ−ブチル、イソ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、イソ−ペンチル、ｓｅｃ−ペンチル、ｔｅｒｔ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、イソ−ヘキシル、ｓｅｃ−ヘキシル、ｔｅｒｔ−ヘキシル、ｎ−ヘプチル、ｎ−オクチル、ｎ−ノニル、ｎ−デシルなどを含むが、これらに限定されない１〜１０個の炭素原子を含有する直鎖または分岐鎖の飽和炭化水素鎖を指す。
【００２６】
本発明で使用される場合、「（Ｃ１−Ｃ６）アルキル」という用語は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソ−プロピル、ｎ−ブチル、イソ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、イソ−ペンチル、ｓｅｃ−ペンチル、ｔｅｒｔ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、イソ−ヘキシル、ｓｅｃ−ヘキシル、ｔｅｒｔ−ヘキシルなどを含むが、これらに限定されない１〜６個の炭素原子を含有する直鎖または分岐鎖の飽和炭化水素鎖を指す。
【００２７】
本発明で使用される場合、「（Ｃ２−Ｃ６）アルケニル」という用語は、エテニル、プロペニル、ブテニル、ペンテニル、ヘキセニルなどを含むが、これらに限定されない２〜６個の炭素原子を含有し、少なくとも１つの二重結合を含む直鎖または分岐鎖の不飽和炭化水素鎖を指す。それは、特に、アリル基であり得る。
【００２８】
本発明で使用される場合、「（Ｃ２−Ｃ６）アルキニル」という用語は、エチニル、プロピニル、ブチニル、ペンチニル、ヘキシニルなどを含むが、これらに限定されない２〜６個の炭素原子を含有し、少なくとも１つの三重結合を含む直鎖または分岐鎖の不飽和炭化水素鎖を指す。
【００２９】
本発明で使用される場合、「アリール」という用語は、例えば、フェニルまたはナフチル基などの、好ましくは、６〜１０個の炭素原子を含み、１個以上、とりわけ、１つまたは２つの縮合環を含む芳香族炭化水素基を指す。有利には、フェニル基であるであろう。
【００３０】
本発明で使用される場合、「（Ｃ１−Ｃ６）アルキルアリール」という用語は、上で定義される（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基を介して分子に結合する、上で定義されるアリール基を指す。特に、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルアリール基は、ベンジル基である。
【００３１】
本発明で使用される場合、「ヘテロ環」という用語は、１個以上、有利には、１〜４個、より有利には、１〜２個の炭素原子が各々、窒素原子、酸素原子、および硫黄原子から選択されたヘテロ原子、とりわけ、窒素原子で置換されている、（縮合環、架橋環、またはスピロ環を含む）単環または多環、例えば、二環の飽和炭化水素、不飽和炭化水素、または芳香族炭化水素を指す。有利には、ヘテロ環は、環（複数可）中に５〜１５個、とりわけ、５〜１０個の原子を含む。ヘテロ環の各環は、有利には、５〜６個の員を有する。
【００３２】
特定の実施形態によると、ヘテロ環は、（縮合環、架橋環、またはスピロ環、とりわけ、縮合環を含む）単環または二環の飽和炭化水素、不飽和炭化水素、または芳香族炭化水素であり、各環は、５または６個の員を有し、１〜４個、とりわけ、１または２個の炭素原子が、各々窒素原子または酸素原子、とりわけ、窒素原子で置換されている。
【００３３】
ヘテロ環は、とりわけ、チオフェン、フラン、ピロール、イミダゾール、ピラゾール、オキサゾール、イソキサゾール、チアゾール、イソチアゾール、トリアゾール（１，２，３−トリアゾールおよび１，２，４−トリアゾール）、ベンゾフラン、インドール、ベンゾチオフェン、ベンズイミダゾール、インダゾール、ベンゾキサゾール、ベンズイソキサゾール、ベンゾチアゾール、ベンズイソチアゾール、ピリジン、ピリミジン、ピリダジン、ピラジン、トリアジン、キノリン、イソキノリン、キノキサリン、キナゾリン、ピペリジン、ピペラジン、トリアジナン、モルホリン、ピロリジン、ジヒドロピリジン、ジヒドロピリミジン（とりわけ、１，２−ジヒドロピリミジン）、ジヒドロピリダジン、ジヒドロピラジン、ジヒドロトリアジン、テトラヒドロピリジン、テトラヒドロピリミジン、テトラヒドロピリダジン、テトラヒドロピラジン、テトラヒドロトリアジンなどであり得る。特に、ヘテロ環は、ピペリジンまたはピペラジンである。
【００３４】
本発明で使用される場合、「窒素含有ヘテロ環」という用語は、少なくとも１個の窒素原子を含有する、上で定義されるヘテロ環を指す。
【００３５】
したがって、かかる窒素含有ヘテロ環は、１個以上、有利には、１〜４個、より有利には、１または２個の炭素原子が各々、窒素原子、酸素原子、および硫黄原子から選択されたヘテロ原子で置換されており、ヘテロ原子（複数可）のうちの少なくとも１個が窒素原子であり、とりわけ、すべてのヘテロ原子が窒素である、（縮合環、架橋環、またはスピロ環を含む）単環または多環、例えば、二環の飽和炭化水素、不飽和炭化水素、または芳香族炭化水素である。有利には、ヘテロ環は、環（複数可）中に５〜１５個、とりわけ、５〜１０個の原子を含む。ヘテロ環の各環は、有利には、５または６個の員を有する。
【００３６】
特定の実施形態によると、ヘテロ環は、（縮合環、架橋環、またはスピロ環、とりわけ、縮合環を含む）単環または二環の飽和炭化水素、不飽和炭化水素、または芳香族炭化水素であり、各環は、５または６個の員を有し、１個の炭素原子が窒素原子で置換されており、任意選択で、１〜３個、とりわけ、１個の追加の炭素原子（複数可）が各々、窒素原子または酸素原子、とりわけ、窒素原子で置換されている。
【００３７】
窒素含有ヘテロ環は、とりわけ、ピロール、イミダゾール、ピラゾール、オキサゾール、イソキサゾール、チアゾール、イソチアゾール、トリアゾール（１，２，３−トリアゾールおよび１，２，４−トリアゾール）、インドール、ベンズイミダゾール、インダゾール、ベンゾキサゾール、ベンズイソキサゾール、ベンゾチアゾール、ベンズイソチアゾール、ピリジン、ピリミジン、ピリダジン、ピラジン、トリアジン、キノリン、イソキノリン、キノキサリン、キナゾリン、ピペリジン、ピペラジン、トリアジナン、モルホリン、ピロリジン、ジヒドロピリジン、ジヒドロピリミジン（とりわけ、１，２−ジヒドロピリミジン）、ジヒドロピリダジン、ジヒドロピラジン、ジヒドロトリアジン、テトラヒドロピリジン、テトラヒドロピリミジン、テトラヒドロピリダジン、テトラヒドロピラジン、テトラヒドロトリアジンなどであり得る。特に、ヘテロ環は、ピペリジンまたはピペラジンである。
【００３８】
本発明で使用される場合、「ハロゲン」という用語は、フッ素原子、臭素原子、塩素原子、またはヨウ素原子を指す。
【００３９】
本発明の詳細な説明
ヒカントン誘導体
本発明の第１の目的の特定の実施形態によると、ヒトヘルペスウイルス８（ＨＨＶ８）に関連した障害の予防および／または処置での使用のための、一般式（Ｉ）の化合物、または薬学的に許容される塩および／もしくはその溶媒和物では、Ｘは、硫黄原子である。
【００４０】
好ましい実施形態では、一般式（Ｉ）の化合物において、Ｙは、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基であり、好ましくは、Ｙは、エチルである。
【００４１】
特に、本発明の第１の目的の化合物は、以下の一般式（Ｉａ）の化合物である。
【００４２】
【化３】
2019527207.tif 000005
【００４３】
一般式（Ｉ）または（Ｉａ）の化合物において、Ｒ８およびＲ９は、特に、それらが化学的に結合した窒素原子と一緒になってヘテロ環、好ましくは、窒素含有ヘテロ環、より好ましくは、ピペリジル、ピロリジル、またはピペラジル、とりわけ、ピペリジルを形成する。
【００４４】
好ましい実施形態では、一般式（Ｉ）または（Ｉａ）の化合物において、Ｒ８およびＲ９は互いに独立して、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル基、好ましくは、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基、より好ましくは、エチルである。
【００４５】
好ましい実施形態では、一般式（Ｉ）または（Ｉａ）の化合物において、Ｒ１〜Ｒ４は互いに独立して、水素原子、ハロ、または（Ｃ１−Ｃ６）アルキルおよび（Ｃ２−Ｃ６）アルケニルから選択された基である。
【００４６】
特に、Ｒ１〜Ｒ４は、水素原子である。
【００４７】
一般式（Ｉ）または（Ｉａ）の化合物において、Ｒ５〜Ｒ７は互いに独立して、水素原子、または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、−ＯＲ１４、−ＮＲ１５Ｒ１６、−ＣＯＮＲ１７Ｒ１８、−ＣＯ（ＮＲ１９Ｒ２０）２、−ＳＲ２１、−ＣＯＲ２２、−ＣＯＯＲ２３、−ＳＯ２Ｒ２４、−ＮＯ２、および−ＮＯ＋から選択された基であり、前記（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基は、任意選択で、ハロ、−ＯＲ２５、−ＮＲ２６Ｒ２７、−ＣＯＮＲ２８Ｒ２９、−ＣＯ（ＮＲ３０Ｒ３１）２、−ＳＲ３２、−ＣＯＲ３３、−ＣＯＯＲ３４、−ＳＯ２Ｒ３５、−ＮＯ２、および−ＮＯ＋から選択された１つまたはいくつかの基で置換される。Ｒ１４〜Ｒ３５は、上で定義されるとおりである。
【００４８】
特に、Ｒ５〜Ｒ７は互いに独立して、水素原子または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基であり、前記（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基は、任意選択で、ハロ、−ＯＲ２５、−ＮＲ２６Ｒ２７、−ＣＯＮＲ２８Ｒ２９、−ＣＯ（ＮＲ３０Ｒ３１）２、−ＳＲ３２、−ＣＯＲ３３、−ＣＯＯＲ３４、−ＳＯ２Ｒ３５、−ＮＯ２、および−ＮＯ＋から選択された１つまたはいくつかの基で置換される。Ｒ２５〜Ｒ３５は、上で定義されるとおりである。
【００４９】
Ｒ５〜Ｒ７は、特に、互いに独立して、水素原子、または任意選択で、ハロ、−ＯＲ２５、−ＮＲ２６Ｒ２７、−ＣＯＮＲ２８Ｒ２９、−ＣＯ（ＮＲ３０Ｒ３１）２、および−ＳＲ３２、好ましくは、−ＯＲ２５、−ＮＲ２６Ｒ２７、および−ＳＲ３２、より好ましくは、−ＯＲ２５から選択された１つまたはいくつかの基で置換された（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基を表す。Ｒ２５〜Ｒ３２は、上で定義されるとおりである。
【００５０】
Ｒ５〜Ｒ７は、特に、互いに独立して、水素原子、または任意選択で、ハロ、−ＯＲ２５、−ＮＲ２６Ｒ２７、−ＣＯＮＲ２８Ｒ２９、−ＣＯ（ＮＲ３０Ｒ３１）２、および−ＳＲ３２、好ましくは、−ＯＲ２５、−ＮＲ２６Ｒ２７、および−ＳＲ３２、より好ましくは、−ＯＲ２５から選択された１つまたはいくつかの基で置換された（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基を表す。Ｒ２４〜Ｒ３２は、上で定義されるとおりである。
【００５１】
特に、Ｒ６およびＲ７は、水素原子であり、Ｒ５は、水素原子、またはＯＨで置換された（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基である。より好ましくは、Ｒ６およびＲ７は、水素原子であり、Ｒ５は、ＯＨで置換されたメチルである。
【００５２】
Ｒ５〜Ｒ７の上の定義では、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルは、好ましくは、メチルまたはエチル、より好ましくは、メチルである。
【００５３】
Ｒ５〜Ｒ７の上の定義では、Ｒ１４〜Ｒ２３は互いに独立して、水素原子、ハロ、または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基、好ましくは、水素原子または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基、より好ましくは、水素原子である。
【００５４】
本発明の第１の目的の特定の実施形態では、一般式（Ｉａ）の化合物において、
●Ｒ８およびＲ９は、エチルであり、
●Ｒ１〜Ｒ４は、水素原子であり、
●Ｒ５〜Ｒ７は互いに独立して、水素原子、または任意選択で、−ＯＲ２５、−ＮＲ２６Ｒ２７、および−ＳＲ３２、より好ましくは、−ＯＲ２５から選択された１つまたはいくつかの基で置換された（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基であり、Ｒ２５〜Ｒ３２は、上で定義されるとおりである。
【００５５】
本発明の第１の目的の特定の実施形態では、一般式（Ｉａ）の化合物において、
●Ｒ８およびＲ９は、エチルであり、
●Ｒ１〜Ｒ４は、水素原子であり、
●Ｒ６およびＲ７は、水素原子であり、
●Ｒ５は、水素原子、または任意選択で、−ＯＲ２５、−ＮＲ２６Ｒ２７、および−ＳＲ３２、より好ましくは、−ＯＲ２５から選択された１つまたはいくつかの基で置換された（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基であり、Ｒ２５〜Ｒ３２は、上で定義されるとおりである。
【００５６】
本発明の第１の目的の特定の実施形態では、一般式（Ｉａ）の化合物において、
●Ｒ８およびＲ９は、エチルであり、
●Ｒ１〜Ｒ４は、水素原子であり、
●Ｒ６およびＲ７は、水素原子であり、
●Ｒ５は、水素原子、またはＯＨで置換された（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基である。
【００５７】
本発明の第１の目的の特定の実施形態において、一般式（Ｉ）の化合物は、一般にヒカントンと称される、以下の式（Ｉｂ）の化合物
【００５８】
【化４】
2019527207.tif 000006
【００５９】
ならびに薬学的に許容される塩およびその溶媒和物、特に、その、ＣＨ３ＳＯ２Ｏ−を含むメシレート塩であり得る。
【００６０】
特定の一実施形態によると、本発明は、ガンマヘルペスウイルス亜科、特に、ヒトヘルペスウイルス８（ＨＨＶ８）またはヒトヘルペスウイルス４（ＨＨＶ４）に関連した障害の予防および／または処置での使用のための、上で定義される一般式（Ｉ）の化合物を対象とする。
【００６１】
本発明はまた、ガンマヘルペスウイルス亜科、特に、ヒトヘルペスウイルス８（ＨＨＶ８）またはヒトヘルペスウイルス４（ＨＨＶ４）に関連した障害を予防および／または処置するための方法であって、上で定義される式（Ｉ）の化合物の有効用量を、それを必要とする者に投与することを含む、方法に関する。
【００６２】
本発明はまた、ガンマヘルペスウイルス亜科、特に、ヒトヘルペスウイルス８（ＨＨＶ８）またはヒトヘルペスウイルス４（ＨＨＶ４）に関連した障害の予防および／または処置のための薬物を製造するための、上で定義される式（Ｉ）の化合物の使用に関する。
【００６３】
ヒトヘルペスウイルス８（ＨＨＶ８）に関連した障害は、特に、ヒトカポジ肉腫（ＫＳ）、原発性滲出性リンパ腫（ＰＥＬ）、および多中心性キャッスルマン病（ＭＣＤ）であり得る。
【００６４】
ヒトヘルペスウイルス４（ＨＨＶ４）に関連した障害は、感染性単核球症（腺熱）および以下の一部であり得る。
−  ホジキンリンパ腫、バーキットリンパ腫、中枢神経系リンパ腫、形質芽球性リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、および原発性滲出性リンパ腫などのリンパ増殖性障害、
−  鼻咽頭癌および胃癌などの非リンパ性腫瘍、
−  皮膚筋炎、全身性エリテマトーデス、関節リウマチ、シェーグレン症候群、多発性硬化症などの自己免疫疾患。
【００６５】
特定の実施形態によると、本発明の第１の目的の化合物は、一般式（Ｉ）であって、その中において、
●Ｘが、硫黄原子であり、
●Ｙが、エチルであり、
●Ｒ１〜Ｒ４、Ｒ６、およびＲ７が、水素原子であり、
●Ｒ５が、メチルであり、
●Ｒ８およびＲ９が、エチルである、一般式（Ｉ）の化合物ではない。
【００６６】
プリマキン誘導体
本発明の第２の目的の特定の実施形態によると、ヒトヘルペスウイルス８（ＨＨＶ８）に関連した障害の予防および／または処置での使用のための、一般式（ＩＩ）の化合物、または薬学的に許容される塩および／もしくはその溶媒和物では、Ｘは、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基である。
【００６７】
特に、Ｘは、ｎ−ブチル、イソ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、イソ−ペンチル、ｓｅｃ−ペンチル、ｔｅｒｔ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、イソ−ヘキシル、ｓｅｃ−ヘキシル、またはｔｅｒｔ−ヘキシルである。好ましくは、Ｘは、ｓｅｃ−ブチル、ｓｅｃ−ペンチル、またはｓｅｃ−ヘキシルである。より好ましくは、Ｘは、ｓｅｃ−ペンチルである。
【００６８】
特に、本発明の第１の目的の化合物は、以下の一般式（ＩＩａ）の化合物である。
【００６９】
【化５】
2019527207.tif 000007
【００７０】
一般式（ＩＩ）または（ＩＩａ）の化合物において、Ｒ’７およびＲ’８は、特に、それらが化学的に結合した窒素原子と一緒になってヘテロ環、好ましくは、窒素含有ヘテロ環、より好ましくは、ピペリジル、ピロリジル、またはピペラジル、とりわけ、ピペリジルを形成する。
【００７１】
特定の実施形態では、一般式（ＩＩ）または（ＩＩａ）の化合物において、Ｒ’７およびＲ’８は互いに独立して、（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル基、より好ましくは、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基、とりわけ、エチルである。
【００７２】
好ましい実施形態では、一般式（ＩＩ）または（ＩＩａ）の化合物において、Ｒ’７およびＲ’８は、水素原子である。
【００７３】
好ましい実施形態では、一般式（ＩＩ）または（ＩＩａ）の化合物において、Ｒ’１〜Ｒ’３は互いに独立して、水素原子、ハロ、−ＯＲ’９、−ＳＲ’１２、−ＣＯＳＲ’１３、−ＮＲ’１４Ｒ’１５、または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基であり、好ましくは、Ｒ’１〜Ｒ’３は、水素原子である。
【００７４】
上の定義において、Ｒ’１〜Ｒ’３、Ｒ’９、およびＲ’１２〜Ｒ’１５は互いに独立して、水素原子、ハロ、または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、アリール、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルアリール基から選択された基である。好ましくは、Ｒ’９およびＲ’１２〜Ｒ’１５は互いに独立して、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、フェニル、またはベンジルである。
【００７５】
好ましい実施形態では、一般式（ＩＩ）または（ＩＩａ）の化合物において、Ｒ’４〜Ｒ’６は互いに独立して、水素原子、ハロ、−ＯＲ’１８、または−Ｒ’１９ＯＲ’２０である。
【００７６】
特に、Ｒ’４およびＲ’６は、水素原子であり、Ｒ’５は、−ＯＲ’１８である。
上の定義において、Ｒ’４〜Ｒ’６、Ｒ’１８〜Ｒ’２０は互いに独立して、水素原子、ハロ、または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、アリール、もしくは（Ｃ１−Ｃ６）アルキルアリール基から選択された基であり、好ましくは、Ｒ’１８〜Ｒ’２０は互いに独立して、水素原子または（Ｃ１−Ｃ６）アルキル基であり、より好ましくは、Ｒ’１８〜Ｒ’２０は互いに独立して、水素原子またはメチルである。
【００７７】
本発明の第２の目的の特定の実施形態では、一般式（ＩＩ）の化合物において、
●Ｒ’１〜Ｒ’３、Ｒ’７、およびＲ’８は、水素原子であり、
●Ｒ’４〜Ｒ’６は互いに独立して、水素原子、ハロ、−ＯＲ’１８、または−Ｒ’１９ＯＲ’２０であり、Ｒ’１８〜Ｒ’２０は、上で定義されるとおりである。
【００７８】
本発明の第２の目的の特定の実施形態では、一般式（ＩＩ）の化合物において、
●Ｒ’１〜Ｒ’３、Ｒ’７、およびＲ’８は、水素原子であり、
●Ｒ’４およびＲ’６は、水素原子であり、
●Ｒ’５は、−ＯＲ’１８であり、Ｒ’１８は上で定義されるとおりである。
【００７９】
本発明の第２の目的の特定の実施形態では、一般式（ＩＩ）または（ＩＩａ）の化合物は、ホスフィン酸の塩の形態である。
【００８０】
本発明の第２の目的の特定の実施形態では、一般式（ＩＩ）の化合物は、一般にプリマキンと称される、以下の式（ＩＩｂ）の化合物
【００８１】
【化６】
2019527207.tif 000008
【００８２】
ならびに薬学的に許容される塩およびその溶媒和物、特に、そのリン酸塩であり得る。
【００８３】
好ましくは、一般式（ＩＩ）の化合物は、プリマキン二リン酸であり得る。
【００８４】
特定の一実施形態によると、本発明は、ガンマヘルペスウイルス亜科、特に、ヒトヘルペスウイルス８（ＨＨＶ８）またはヒトヘルペスウイルス４（ＨＨＶ４）に関連した障害の予防および／または処置での使用のための、上で定義される一般式（ＩＩ）の化合物を対象とする。
【００８５】
本発明はまた、ガンマヘルペスウイルス亜科、特に、ヒトヘルペスウイルス８（ＨＨＶ８）またはヒトヘルペスウイルス４（ＨＨＶ４）に関連した障害を予防および／または処置するための方法であって、上で定義される式（ＩＩ）の化合物の有効用量を、それを必要とする者に投与することを含む、方法に関する。
【００８６】
本発明はまた、ガンマヘルペスウイルス亜科、特に、ヒトヘルペスウイルス８（ＨＨＶ８）またはヒトヘルペスウイルス４（ＨＨＶ４）に関連した障害の予防および／または処置のための薬物を製造するための、上で定義される式（ＩＩ）の化合物の使用に関する。
【００８７】
ヒトヘルペスウイルス８（ＨＨＶ８）に関連した障害は、特に、ヒトカポジ肉腫（ＫＳ）、原発性滲出性リンパ腫（ＰＥＬ）、および多中心性キャッスルマン病（ＭＣＤ）であり得る。
【００８８】
ヒトヘルペスウイルス４（ＨＨＶ４）に関連した障害は、感染性単核球症（腺熱）および以下の一部であり得る。
−  ホジキンリンパ腫、バーキットリンパ腫、中枢神経系リンパ腫、形質芽球性リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、および原発性滲出性リンパ腫などのリンパ増殖性障害、
−  鼻咽頭癌および胃癌などの非リンパ性腫瘍、
−  皮膚筋炎、全身性エリテマトーデス、関節リウマチ、シェーグレン症候群、多発性硬化症などの自己免疫疾患。
【００８９】
薬学的組成物
本発明はまた、ヒトヘルペスウイルス８（ＨＨＶ８）に関連した障害の予防および／または処置での使用のための、上で定義される式（Ｉ）または式（ＩＩ）の少なくとも１つの化合物、ならびに少なくとも１つの薬学的に許容される賦形剤を含む。
【００９０】
本発明による薬学的組成物は、とりわけ、局所投与、経口投与、または注射用に配合され得、前記組成物は、ヒトを含む哺乳類向けに意図されている。薬学的組成物は、錠剤およびゼラチンカプセルによって経口投与され得る。
【００９１】
固体組成物が錠剤の形態で調製される場合、主要な活性成分は、薬学的ビヒクル、例えば、ゼラチン、澱粉、ラクトース、ステアリン酸マグネシウム、タルク、アラビアゴムなどと混合される。錠剤は、ショ糖または他の好適な材料で被覆され得るか、または錠剤が延長されるかもしくは遅延された活性を有し、所定の量の活性素を連続的に放出する方法などで処置され得る。
【００９２】
ゼラチンカプセルでの調製は、活性成分を希釈剤と混合し、得られた混合物を軟質または硬質ゼラチンカプセルに流し込むことによって得られる。
【００９３】
注射による投与の場合、水溶性懸濁液、等張性生理食塩水、または薬学的に適合可能な分散剤および／もしくは湿潤剤を含有する無菌で注射可能な溶液が使用される。
【００９４】
本発明による薬学的組成物はまた、すべての手段、および特に、クリーム、ゲル、スティック、または血清によって局所投与され得る。
【００９５】
活性成分は、標準的な薬学的担体との混合で、投与の単位剤形で動物またはヒトに投与され得る。
【００９６】
本発明による薬学的組成物は、ＨＨＶ８および／またはＥＢＶ関連の疾患の処置のために使用される少なくとも１つの他の活性成分、例えば、ブレオマイシン（Ｂｌｅｏｍｙｃｉｎｅ（登録商標））、ビンブラスチン（Ｖｅｌｂｅ（登録商標））、パクリタキセルおよびドセタキセル、ダウノルビシンリポソーム（ｄａｕｎｏｒｕｂｉｃｉｎｅ  ｌｉｐｏｓｏｍｉａｌｅ）（ｄａｕｎｏＸｏｎｅ）、アドリアマイシン、ビンクリスチン、ナベルビン、ゲムシタビン、インターフェロンα（Ｒｏｆｅｒｏｎ−Ａ（登録商標）、ＩｎｔｒｏｎＡ（登録商標））、全トランスレチノイン酸（Ａｔｒａ（登録商標））、サリドマイド、ＩＬ−１２、ＩＬ−４、パンレチン、レブラミド、レナリノミド、リツキシマブ、エトポシド、シクロホスファミド、ドキソルビシン、ビンクリスチン、プレドニゾン（ＣＨＯＰ）、シドホビル、ホスカルネット、ガンシクロビル、バルガンシクロビル、トシリズマブ、シルツキシマブ、ボルテゾミブ、ＲＮＡｉの抗ＬＡＮＡ、ならびに／またはｖＦｌｉｐ、ヒドロキシ尿素、ラパマイシンをさらに含んでも良い。
【００９７】
本発明はまた、薬学的組成物であって、
（ｉ）上で定義される式（Ｉ）または式（ＩＩ）の少なくとも１つの化合物、および
（ｉｉ）化学療法剤などの少なくとも１つの他の活性成分を、
同時使用、分離使用、または逐次使用のための配合剤（ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ  ｐｒｏｄｕｃｔ）として含む、薬学的組成物に関する。
【００９８】
特定の一実施形態によると、本発明は、ヒトヘルペスウイルス８（ＨＨＶ８）に関連した障害の予防および／または処置での使用のための、上で定義される薬学的組成物を対象とする。
【００９９】
本発明はまた、ヒトヘルペスウイルス８（ＨＨＶ８）に関連した障害を予防および／または処置するための方法であって、上で定義される薬学的組成物の有効用量を、それを必要とする者に投与することを含む、方法に関する。
【０１００】
本発明はまた、ヒトヘルペスウイルス８（ＨＨＶ８）に関連した障害の予防および／または処置のための薬物を製造するための、上で定義される薬学的組成物の使用に関する。
【０１０１】
ヒトヘルペスウイルス８（ＨＨＶ８）に関連した障害は、特に、ヒトカポジ肉腫（ＫＳ）、原発性滲出性リンパ腫（ＰＥＬ）、および多中心性キャッスルマン病（ＭＣＤ）であり得る。
【０１０２】
ヒトヘルペスウイルス４（ＨＨＶ４）に関連した障害は、
●感染性単核球症（腺熱）、
●ホジキンリンパ腫、バーキットリンパ腫、中枢神経系リンパ腫、形質芽球性リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、および原発性滲出性リンパ腫などのリンパ増殖性障害、
●鼻咽頭癌および胃癌などの非リンパ性腫瘍、ならびに
●皮膚筋炎、全身性エリテマトーデス、関節リウマチ、シェーグレン症候群、多発性硬化症などの自己免疫疾患であり得る。
【０１０３】
以下の例は、本発明を、その範囲をなんらかの方法で限定することなく、例証する。
【図面の簡単な説明】
【０１０４】
【図１】プリマキン二リン酸、ヒカントン、パクリタキセル、またはドキソルビシンの存在下のＨＨＶ８感染および非感染ヒト細胞の生存率。ＨＨＶ８感染細胞株（ＢＣ３）、ＨＨＶ８非感染細胞株（ＭＲＣ５、ＨｅＬａ  Ｐ４）、およびＨＨＶ８非感染一次細胞（ヒトケラチノサイト、ヒト皮膚繊維芽細胞、Ｂ型リンパ球ＣＤ１９＋）をインビトロで成長させ、１０μＭの濃度のプリマキン二リン酸、ヒカントン、パクリタキセル、またはドキソルビシン塩酸塩のいずれかによって処置した。細胞生存率を処置開始４８時間後にＡＴＰ定量により評価した。図は、処置細胞対未処置対照細胞のパーセンテージとして表される相対的細胞生存率（％）を示す。パクリタキセルおよびドキソルビシンは、ＨＨＶ−８感染細胞に対するプリマキン二リン酸およびヒカントン活性の高い特異性を強調することが示される。
【図２】プリマキン二リン酸、ヒカントン、およびジエチルジチオカルバミン酸に曝露されたＢＣ−３細胞株におけるアポトーシス誘導。ＢＣ−３細胞をインビトロで成長させ、１０μＭの濃度のプリマキン二リン酸、ヒカントン、またはジエチルジチオカルバミン酸（ＤＤＴＣ：Ｄｉｅｔｈｙｌｄｉｔｈｉｏｃａｒｂａｍａｔｅ）のいずれかによって処置した。アポトーシス誘導を、処置開始２４時間後に、処置ＢＣ−３細胞または未処置対照ＢＣ−３細胞におけるカスパーゼ３／７活性を測定することによって評価した。図は、処置細胞対未処置対照細胞におけるカスパーゼ３／７活性の増加率を示す。ＤＤＴＣをＢＣ−３細胞株におけるカスパーゼ３／７活性の陽性誘導物質として使用する（マツノ（Ｍａｔｓｕｎｏ）ら、２０１２年、国際腫瘍学ジャーナル（Ｉｎｔ  Ｊ  Ｏｎｃｏｌ）４０：１０７１−１０７８）。
【図３】プリマキン二リン酸またはヒカントンの存在下におけるＢＣ−３細胞の成長の阻害。ＢＣ−３細胞をインビトロで成長させ、１０μＭの濃度のプリマキン二リン酸またはヒカントンのいずれかによって処置した。細胞の成長を処置日（Ｄ０）から処置開始３日後（Ｄ３）まで毎日測定した。図は、標準条件（黒丸）で成長させた細胞と比較した、プリマキン二リン酸（黒三角）またはヒカントン（黒四角）に曝露されたＢＣ−３の成長曲線を示す。
【図４】細胞死に対するプリマキンおよびヒカントンの相加効果。（Ａ）プリマキンの濃度増加（０〜２０μＭ）を伴う固定濃度のヒカントン（６μＭ）、または（Ｂ）ヒカントンの濃度増加（０〜２０μＭ）を伴う固定濃度のプリマキン（６μＭ）の存在下でのＢＣ３における細胞生存率のパーセンテージ（４８時間でＡＴＰの産生）。
【図５】免疫不全ＮＯＤ／ＳＣＩＤマウスの原発性滲出性リンパ腫異種移植片モデルにおけるプリマキンの有効性のインビボ評価。プリマキンの有効性を免疫不全ＮＯＤ／ＳＣＩＤマウスのマウスモデルを使用して評価した。４つの実験群を設計した。ＢＣ−３移植片もプリマキン処置も受けなかったマウス「モック」（ｎ＝６）、ＢＣ−３移植片は受けなかったが、プリマキン処置（１２．５ｍｇ／ｋｇ）を受けたマウス「プリマキン」（ｎ＝６）、ＢＣ−３異種移植片（ＢＣ−３  ２０．１０６細胞）を受けたが、プリマキン処置を受けなかったマウスＢＣ−３（ｎ＝６）、およびＢＣ−３異種移植片（ＢＣ−３  ２０．１０６細胞）およびプリマキン処置（１２．５ｍｇ／ｋｇ）の両方を受けたマウス「ＢＣ−３＋プリマキン」（ｎ＝６）。マウスの体重を処置開始後の様々な時点（Ｄ６、Ｄ１３、Ｄ２０、およびＤ２４）で測定した。図５Ａは、ベースラインとＤ２４との間のマウスの体重の中央値変動を示す。プリマキン（１２．５ｍｇ／ｋｇを週に３回与えた）は、未処置マウス（ＢＣ３）と比較して、Ｄ２４で体重の中央値の増加を３９．４％低減させる。図５Ｂは、処置の２４日後の「モック」、「ＢＣ−３」、および「ＢＣ−３＋プリマキン」実験群のマウスの写真を示す。ＢＣ−３異種移植片（「ＢＣ−３」）を受けたが、プリマキンによって処置されなかったマウスの腹部における大きな成長腫瘍に留意されたい。対照的に、ＢＣ−３異種移植片およびプリマキン処置の両方（「ＢＣ−３＋プリマキン」）を受けたマウスは、腹部において成長腫瘍の低減を示した。
【図６】プリマキンおよびヒカントンは、ＰＥＬ細胞株においてＩκＢのリン酸化を阻害する。ＢＣ−３細胞を、１０μＭのプリマキンおよびヒカントンで６時間（Ａ）および１２時間（Ｂ）前処置した。ＤＤＴＣを陽性対照として使用した。全細胞可溶化物を実施例Ｆの材料および方法に記載のように調製し、適切な抗体を使用することによってｐ−ＩκＢウエスタンブロット解析のために使用した。ブロットを揮散し、細胞内の総ＩκＢ量に変化がないことを実証するためにＩκＢに向けられた抗体を用いて再検出し、異なるレーンにおけるタンパク質の等量ロードを実証するためにβ−アクチンに対する抗体を用いて再検出した。ＤＤＴＣ（ジエチルジチオカルバミン酸）を用いたＢＣ−３細胞の処置を同じ条件で実施し、陽性対照として役立てた。
【実施例】
【０１０５】
材料および方法
本発明による化合物の生物学的活性
Ａ  −  細胞生存率
材料および方法
プリマキン二リン酸（Ｓｉｇｍａ）、ヒカントン（Ｓｉｇｍａ）、パクリタキセル（Ｓｉｇｍａ）、およびドキソルビシン（Ｓｉｇｍａ）の効果を、ＨＨＶ−８に感染または感染していない関連する一次細胞および細胞株について評価した。
【０１０６】
評価した細胞は以下のとおりである。
−  ＢＣ−３：原発性滲出性リンパ腫（ＰＥＬ）と診断されたヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ：ｈｕｍａｎ  ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ  ｖｉｒｕｓ）陰性患者からの胸膜滲出により確立された細胞株。ＢＣ−３細胞株は、ＨＨＶ８に感染しているが、エプスタイン・バーウイル（ＥＢＶ）、ならびに単純ヘルペスウイルス１および２（ＨＳＶ−１およびＨＳＶ−２）とサイトメガロウイルス（ＣＭＶ：ｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ）とには感染していない（ＡＴＣＣ）。
−  ＭＲＣ５：１４週齢の男性胎児の正常な肺組織由来の細胞株（ＡＴＣＣ）。
−  一次皮膚繊維芽細胞（Ｌｏｎｚａ、ＣＣ  ２５  １１参照）。
−  一次ケラチノサイト（Ｌｏｎｚａ、００  １９２  ６２７参照）。
−  ＨｅＬａ：ＨＶＰ−１８に感染した成人のヒト子宮頸癌により確立された不死細胞株（ＮＩＨ試薬プログラム）。
−  原発性Ｂ型リンパ球ＣＤ１９＋：ＣＤ１９ミクロビーズを使用して積極的に選択された原発性Ｂ細胞（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ）。
【０１０７】
細胞を、１０μＭの濃度のプリマキン二リン酸（Ｓｉｇｍａ）、ヒカントン（Ｓｉｇｍａ）、パクリタキセル（Ｓｉｇｍａ）、またはドキソルビシン塩酸塩（Ｓｉｇｍａ）のいずれかによってインビトロで処置した。細胞の生存率を、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ  Ｇｌｏキット（Ｐｒｏｍｅｇａ）を用いて前述のように処置開始４８時間後に評価した。
【０１０８】
結果
プリマキン二リン酸およびヒカントンは、ＨＨＶ８に感染していない他の細胞型（ＭＲＣ−５、一次皮膚繊維芽細胞、一次ケラチノサイト、Ｈｅｌａ  Ｐ４）において、毒性なし（細胞死の＜２０％）でＨＨＶ８に感染しているＢＣ−３細胞における細胞死の９０％超を誘導した（図１）。パクリタキセルおよびドキソルビシンを対照として使用した。パクリタキセルおよびドキソルビシンは、ＢＣ−３において細胞死を誘導したが、ＨＨＶ８に感染していない他の細胞型においても毒性である（細胞死の＞２０％）（図１）。
【０１０９】
Ｂ  −  カスパーゼ活性の誘導
材料および方法
ＢＣ−３細胞（１００００細胞／ウェル）を、１０μＭの濃度のプリマキン二リン酸（Ｓｉｇｍａ）、ヒカントン（Ｓｉｇｍａ）、またはジエチルジチオカルバミン酸（ＤＤＴＣ）（Ｓｉｇｍａ）とともに２４時間インキュベートし、次いで、溶解し、３／７試薬（ＤＥＶＤ）を添加した。溶解細胞は、アミノルシフェリンからＤＥＶＤ基質を開裂するカスパーゼ３または７を放出する。最後に、ルシフェラーゼによるシフェリンの酸化が光を生成し、これをルミノメータによって測定する。生成された光の量はカスパーゼ３または７活性の量に比例する。ＮＦ−κＢの阻害を介してＢＣ−３細胞内にアポトーシスを誘導することが知られているジスルフィラム（ＤＤＴＣ）（Ｓｉｇｍａ）を陽性対照として使用する。
【０１１０】
結果
プリマキンおよびヒカントンは、アポトーシス（カスパーゼ３／７活性化）によるＢＣ−３における細胞死を誘導した（図２）。プリマキンおよびヒカントンによって誘導されたアポトーシスは、少なくとも、ＤＤＴＣによって誘導されたものと同等であった（ＤＤＴＣを陽性対照として使用し、未処置対照よりも４倍優れたアポトーシスによる細胞死を誘導することができた）（図２）。
【０１１１】
Ｃ−  細胞成長の阻害
材料および方法
ＢＣ−３細胞を、１０％ウシ胎児血清および抗生物質（アミカシンおよびバンコマイシン）を補充したＲＰＭＩ−１６４０  ＧｌｕｔａＭＡＸ（Ｇｉｂｃｏ）中で３日間、成長させた。ミリリットル当たりの細胞の数を、ベースライン、Ｄ０、Ｄ２、およびＤ３で測定する。ＢＣ−３を、プリマキンおよびヒカントンとともにまたはなしで培養した。
【０１１２】
結果
プリマキン二リン酸およびヒカントンは、標準条件下で培養したＢＣ３細胞と比較して、ＢＣ３細胞の成長を阻害した（図３）。
【０１１３】
Ｄ−  プリマキンおよびヒカントンの相加性
材料および方法
ＢＣ−３細胞を、６μＭの濃度のヒカントンおよび異なる濃度のプリマキン二リン酸（０、１、６、１０  １５、および２０μＭ）（図４Ａ）、または６μＭの濃度のプリマキン二リン酸および異なる濃度のヒカントン（０、１、６、１０  １５、および２０μＭ）（図４Ｂ）のいずれかでインビトロで処置した。細胞の生存率を、ｃｅｌｌ  Ｔｉｔｅｒ  Ｇｌｏキットを用いて前述のように処置開始４８時間後に評価した。
【０１１４】
結果
プリマキン二リン酸およびヒカントンは、ＢＣ３細胞死の誘導に対する相加効果を有する（図４ＡおよびＢ）。
【０１１５】
Ｅ−  免疫不全ＮＯＤ／ＳＣＩＤマウスの原発性滲出性リンパ腫異種移植片モデルにおけるプリマキンの有効性の評価
インビトロで同定された分子の抗腫瘍効果を確認するために、免疫不全ＮＯＤ／ＳＣＩＤマウスにおけるＰＥＬのモデルを使用した。
【０１１６】
材料および方法
ベースラインで、腹腔内（ｉ．ｐ：ｉｎｔｒａｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ）注射によって、マウスにＰＥＬ細胞株（ＢＣ−３）を接種する。ＢＣ−３細胞の注射の１日後に、プリマキンを腹腔内注射によって投与し、次いで、８週間の間に１週間に３回投与する。腫瘍負荷を毎週、体重測定によって評価する（参照：Ｔ．マツノ（Ｍａｔｓｕｎｏ）、２０１２年、「ジエチルジチオカルバミン酸はＮＦ−κＢ経路の阻害を介してＨＨＶ−８感染原発性滲出性リンパ腫細胞においてアポトーシスを誘導する（Ｄｉｅｔｈｙｌｄｉｔｈｉｏｃａｒｂａｍａｔｅ  ｉｎｄｕｃｅｓ  ａｐｏｐｔｏｓｉｓ  ｉｎ  ＨＨＶ−８−ｉｎｆｅｃｔｅｄ  ｐｒｉｍａｒｙ  ｅｆｆｕｓｉｏｎ  ｌｙｍｐｈｏｍａ  ｃｅｌｌｓ  ｖｉａ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ＮＦ−κＢ  ｐａｔｈｗａｙ）」；Ｋ．Ａ．サロシエク（Ｓａｒｏｓｉｅｋ）、２０１０年、「原発性滲出性リンパ腫の直接異種移植片モデルにおけるボルテゾミブの有効性（Ｅｆｆｉｃａｃｙ  ｏｆ  ｂｏｒｔｅｚｏｍｉｂ  ｉｎ  ａ  ｄｉｒｅｃｔ  ｘｅｎｏｇｒａｆｔ  ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  ｐｒｉｍａｒｙ  ｅｆｆｕｓｉｏｎ  ｌｙｍｐｈｏｍａ）」；Ｗ．ウー（Ｗｕ）、２００５年、「アジドチミジンおよびインターフェロンによるＮＯＤ／ＳＣＩＤマウスにおけるＨＨＶ−８／ＫＳＨＶ感染原発性滲出性リンパ腫の阻害（Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ＨＨＶ−８／ＫＳＨＶ  ｉｎｆｅｃｔｅｄ  ｐｒｉｍａｒｙ  ｅｆｆｕｓｉｏｎ  ｌｙｍｐｈｏｍａｓ  ｉｎ  ＮＯＤ／ＳＣＩＤ  ｍｉｃｅ  ｂｙ  ａｚｉｄｏｔｈｙｍｉｄｉｎｅ  ａｎｄ  ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ）」）。
【０１１７】
実験を、２４匹のＮＯＤ／ＳＣＩＤマウス（６匹のマウスの４つの群）（チャールス・リバー・ラボラトリーズ（Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ））、異種移植片を有さず（ＢＣ−３なし）、未処置（プリマキンなし）の一群（モック）、異種移植片（ＢＣ−３）を有し、未処置（プリマキンなし）の一群、異種移植片（ＢＣ−３）を有し、処置済み（１２．５ｍｇ／ｋｇのプリマキン（Ｓｉｇｍａ））の一群、ならびに異種移植片を有さず、処置済み（１２．５ｍｇ／ｋｇのプリマキン（Ｓｉｇｍａ））の一群で実施した。
【０１１８】
以前に実施され、文献で入手可能な実験に従って、実験の開始時点でマウスは６週齢であった。実験前に動物を７〜１０日間、順化させた。ＰＥＬの発症を誘導するために、ベースラインで、５００μＬのＰＢＳ中、２０．１０６のＢＣ３細胞をｉ．ｐ．によって注射した。腫瘍の成長は、体重の総増加と相関する。結果として生じる体重の増加は、ベースラインの体重の１５０％を超えるべきではない。異種移植片（ＢＣ−３）を有し、かつプリマキンによって処置されていないマウスの群については、マウスにおけるプリマキンの毒性を評価するために、各マウスにＢＣ−３細胞の代わりに５００μＬのＰＢＳのｉ．ｐ注射を１回与えた。
【０１１９】
結果
プリマキンは、異種移植片を有し、処置されていないマウスに対して、異種移植片を有し、処置されたマウスにおける体重の増加を低減（３９．４％）させた（図５ＡおよびＢ）。プリマキンは、処置後２４日のマウスにおいていかなる毒性も示さなかった。
【０１２０】
Ｆ−  シグナル伝達経路解析のための相補的データ
マウスをプリマキンおよびヒカントンで処置したときのＨＨＶ−８感染細胞死に関与する分子機構を調査するために、ＩκＢの持続的なリン酸化に関連して、ＰＥＬ細胞株において構成的に活性であることが示されたＮＦ−κＢ経路を解析した（Ｌｉｕら、２００２年）。
【０１２１】
材料および方法
細胞の培養およびタンパク質の抽出：  ＨＨＶ−８陽性リンパ芽球性細胞株のＢＣ−３（ＡＴＣＣ  ＣＲＬ−２２７７）と、ヒトバーキットリンパ腫細胞株のＲＡＭＯＳ（ＡＴＣＣ  ＣＲＬ−１５９６）とを、３７℃で５％ＣＯ２インキュベータ中、熱失活した１０％ウシ胎児血清（ＦＢＳ：ｆｅｔａｌ  ｂｏｖｉｎｅ  ｓｅｒｕｍ）および抗生物質（シグマ・ケミカル・カンパニー（Ｓｉｇｍａ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．）、ミズーリ州セントルイス）を補充したＲＰＭＩ  １６４０培地中でルーチン的に維持した。全細胞抽出物を調製するために、細胞を冷たいリン酸緩衝生理食塩水で２回洗浄し、１０ｍＭのトリス−ＨＣｌ、ｐＨ８．０、１４０ｍＭのＮａＣｌ、１％のＴｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００、１ｍＭのＥＤＴＡ、０．５ｍＭのＥＧＴＡ、０．１％のデオキシコール酸ナトリウム、０．１％のＳＤＳを含有し、４℃で３０分間、プロテアーゼ阻害剤混合物（１ｍＭのＰＭＳＦ、１０ｍＭのβ−グリセロリン酸、１０ｍＭのＮａＦ、１ｍＭのオルトバナジン酸ナトリウム、１ｍＭのピロリン酸ナトリウム）（サーモフィッシャー・サイエンティフィック（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ））を補充した溶解ＲＩＰＡ緩衝剤中で溶解した。インキュベーション後、混合物を５または６回ピペットで取って、細胞を分散させ、続いて、４℃で１０分間、１４，０００ｒｐｍで遠心分離した。上澄みを全細胞抽出物として集め、タンパク質濃度をローリー法によって決定した。
【０１２２】
ウエスタンブロット解析：２００μｇの全細胞抽出物を、ノーベックス（Ｎｏｖｅｘ）のＮｕＰＡＧＥの４〜１２％のビス−トリスゲル（１ｍｍ、１２ウェル、インビトロゲン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）、英国）とともに変性条件で電気泳動（ＬＤＳ−ＰＡＧＥ）によって分離し、タンパク質を、ニトロセルロース膜に移し、１時間、２００ｍＭのトリスを含有するＴＢＳ  １Ｘ（トリス緩衝生理食塩水）、１．４ＭのＮａＣｌ（ｐＨ７．６）、５％の脱脂乳、０．１％のＴｗｅｅｎ  ２０からなる２０ｍｌの飽和緩衝剤中で飽和させた。１５ｍｌのＴＢＳ／Ｔ緩衝剤［１Ｘ  ＴＢＳ、０．１％のＴｗｅｅｎ−２０］で１５分間、３回洗浄した後、膜を、１０ｍｌのヒトＩκＢに対するウサギポリクローナル一次抗体（ＳＣ−３７１、１：２０００）、ｐ−ＩκＢ（ＳＣ−７９７７、１：２００）、およびロードを制御するために使用される、５％のＢＳＡを補充したＴＢＳ／Ｔ中で希釈したヒトβ−アクチンに対するマウスモノクローナル抗体（ＳＣ−４７７７８、１：１０００）を用いて、４℃で穏やかに混合しながら一晩インキュベートした（すべての抗体は米国カリフォルニア州サンタクルーズのサンタクルーズ・バイオテクノロジー（Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｉｎｃ．）より購入した）。未結合抗体を除去するために洗浄した後、結合した一次抗体を、ウサギＩｇＧおよびマウスＩｇＧ（それぞれサンタクルーズ・バイオテクノロジーのＳＣ−２３５７、１：５０００およびＳＣ−２００５、１：５０００）に対する二次抗体を使用して１時間、インキュベートすることによって検出した。未結合材料を洗浄することによって除去し、ペルオキシダーゼ活性を化学発光アッセイで検出した（ＷｅｓｔｅｒｎＢｒｉｇｈｔ  ＥＣＬ、アドバンスタ（Ａｄｖａｎｓｔａ）、米国メンローパーク）。
【０１２３】
結果
ＢＣ−３  ＰＥＬ細胞株を使用することで、ＩκＢ経路の構成的活性化を確認し（図６）、細胞をプリマキンおよびヒカントンで６時間および１２時間、前処置した場合、ＩκＢのリン酸化が劇的に低減したことを示した（図６Ａおよび６Ｂ）。陽性対照（ＤＤＴＣ）を並行して使用し、ＩκＢのリン酸化の減少も示した。本発明者らのデータは、プリマキンおよびヒカントンによるＨＨＶ−８陽性細胞の細胞死の活性化がＮＦ−κＢ活性化の阻害に関連するであろうことを実施した。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【国際調査報告】
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