(57)【要約】前立腺器官からの標的前立腺細胞の脱離を誘発し、その細胞を収集し、続いてその細胞集団を検査する方法が開示される。そのような方法は、前立腺内部からの標的細胞の脱離を促進する薬剤の投与を含み、その標的細胞は次に尿道に移動する。例示的な薬剤としては５−αリダクターゼ阻害剤が挙げられる。尿道内に移行するように誘発された細胞は、次に例えば尿または精液試料を通じて非侵襲的に収集される。そのような収集は、目的の標的細胞の試料収集を最大限にするために、薬剤の投与に対してさらに戦略的に計算される。剥離した前立腺上皮細胞はその後、前立腺癌の検出、投薬計画に対する前立腺腫瘍の感受性の予測／測定、前立腺生検結果が陰性であるが、前立腺癌と一致する症状を示し続ける患者の監視療法、およびバイオマーカーアッセイに関連した偽陽性結果の識別などの目的のために用いられる。
2019509042.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
個体の前立腺内に位置する前立腺上皮細胞を遊離させて収集する方法において、前記方法は、
ａ．前記個体に対して少なくとも１種の薬剤を前立腺内部から前記前立腺上皮細胞を分離するために有効な量で投与するステップであって、前記分離された前立腺上皮細胞の一部は前立腺管を通って尿道前立腺部に移行するように作用する、ステップと、
ｂ．尿道前立腺部から放出される検体を収集するステップと
を含み、前記検体の収集は、ステップａ）における前記薬剤の前記投与後に、前記分離された前立腺上皮細胞が前記尿道前立腺部に移動する時に対応し、かつ増大した前記分離された前立腺上皮細胞の集団が尿道前立腺部内に存在する時と一致する、方法。
【請求項２】
ステップａ）は、５−αリダクターゼ阻害剤の群からの減量剤または細胞減少剤を投与することを含む請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記５−αリダクターゼ阻害剤はフィナステリドを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
ステップｂ）は、フィナステリドの前記投与から７２時間〜６か月以上の時に前記検体を収集することを含む、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
ステップｂ）において、前記検体収集は、前記個体から射精液を収集することを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
ステップｂ）において、前記検体収集は、前記個体から前立腺圧出液を収集することを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
ステップｂ）において、前記検体収集は、前記個体から尿検体を収集することを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記尿検体を収集する前に、前記個体に対して内部前立腺マッサージが実施される、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記尿検体を収集する前に、前記個体に対して外部前立腺マッサージが実施される、請求項７に記載の方法。
【請求項１０】
前記尿検体を収集する前に、前記個体に対して直腸指診が実施される、請求項７に記載の方法。
【請求項１１】
ステップｂ）は、前記前立腺が前記薬剤の投与後に減量した生理学的状態をとる時に前記検体を収集することを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
前記前立腺が前記減量状態をとる時の判定は心悸亢進（ｐａｌｐｉｔａｔｉｏｎ）によってなされる、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記前立腺が前記減量状態をとる時の判定は目視検査によって判定される、請求項１１に記載の方法。
【請求項１４】
前記前立腺が前記減量状態をとる時の判定はＭＲＩおよび超音波のうちから選択される画像診断法によって判定される、請求項１１に記載の方法。
【請求項１５】
ステップｂ）は、前記前立腺が前記薬剤の投与後に減量した生理学的状態をとる時を示す濃度でバイオマーカーが存在するときに対応する時間に前記検体を収集することを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１６】
前記バイオマーカーはＰＳＡからなり、前記ＰＳＡは、前記前立腺が前記減量状態をとる時を示す濃度で存在する、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
ステップｂ）は、フィナステリドの前記投与から７２時間〜３０日の時間に前記検体を収集することを含む、請求項４に記載の方法。
【請求項１８】
前記フィナステリドは５ｍｇ／日〜８ｍｇ／日の範囲の投与量で投与される、請求項２に記載の方法。
【請求項１９】
前記フィナステリドは５ｍｇ／日の投与量で投与される、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
ステップａ）は第１薬剤および第２薬剤を投与することを含み、前記第１薬剤はフィナステリドを含み、かつ前記第２薬剤はドキサゾシンを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項２１】
ステップａ）は、８０ｍｇ〜６００ｍｇの範囲の１回量のフィナステリドを投与することを含む、請求項１に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本開示は、前立腺癌および良性前立腺肥大症を発見するための前立腺液体生検に関する。
【背景技術】
【０００２】
前立腺癌は男性に最もよく見られる癌であり、また癌で死亡する男性の死因の第２位である。５０歳までに前立腺癌の症状を有する男性はごく小数であるが、若干の前癌細胞または癌細胞が存在することがある。すべての米国人男性の半数以上は８０歳までに彼らの前立腺に若干の癌を有する。これらの癌の大部分は問題を生じない。非特許文献１を参照されたい。米国癌学会の２０１５年の米国における前立腺癌の推定では、前立腺癌の新たな症例は約２２０，８００件であり、前立腺癌による死亡は２７，５４０件である。非特許文献２を参照されたい。２０１２年に、世界保健機関（ＷＨＯ）は世界中で１１０万人の男性が前立腺癌と診断されたと推定した（参考：世界保健機関前立腺癌ファクトシート（Ｗｏｒｌｄ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ  Ｐｒｏｓｔａｔｅ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｆａｃｔ  Ｓｈｅｅｔ）。非特許文献３を参照されたい）。その数は男性において診断されたすべての癌の１５％であった。また２０１２年に、ＷＨＯは男性の癌による死亡総数の６．６％にあたる３０７，０００人が死亡したと推定した。
【０００３】
そのような疾患を示すために、図１および図２には、他の器官および解剖学的構造に近接した前立腺１０、並びに前立腺内における癌性増殖がステージＩ、ＩＩ、ＩＩＩおよびＩＶを通じてどのように進行するかが断面図で示されている。図１に示すように、前立腺は、膀胱４０の真下かつ直腸５０の前方に位置する。前立腺１０は、さらに尿道６０の一部を包囲し、男性生殖器系の一部として精子を養い、かつ輸送する精液をさらに生成する。前立腺癌の進行は、他の型の癌と同様に、ステージＩまたはＴ１からステージＩＶまたはＴ４にわたる前立腺腫瘍の局所的な広がりを記述する４つの病期のカテゴリーによって特徴付けられる。ステージＩに関して、腫瘍２０は、典型的には、触知することができないか、または経直腸超音波などの画像化装置によって見ることさえできない。非常に理想的であるが、そのようなステージの癌の発見はほとんど偶然であると思われ、典型的には別の前立腺の経尿道的切除術（ｔｒａｎｓｕｒｅｔｈｒａｌ  ｒｅｓｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｐｒｏｓｔａｔｅ：ＴＵＲＰ）に付随して生じる。そのようなステージでの発見はまた、以下においてより十分に検討する前立腺特異性抗原（ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ａｎｔｉｇｅｎ：ＰＳＡ）の増大の結果として実施される針生検によってもたらされることもある。
【０００４】
ステージＩＩは、癌２０が直腸指診（ｄｉｇｉｔａｌ  ｒｅｃｔａｌ  ｅｘａｍ：ＤＲＥ）によって触知することができるか、または経直腸超音波などの画像化によって見ることができる場所まで拡がっていると特徴付けられる。しかしながら、そのようなステージの癌２０は引き続き前立腺１０に閉じ込められている。
【０００５】
ステージＩＩＩでは、癌２０は前立腺１０の外側に成長しており、さらに精嚢３０内に成長していることがある。ステージＩＶでは、癌２０は前立腺に隣接した（すなわち精嚢以外の）組織内に成長しており、尿道括約筋、直腸５０、膀胱４０および／または骨盤壁などの構造内に拡がっている可能性がある。
【０００６】
前立腺癌の治療は、癌がどれくらい速く成長しているか、癌がどれくらい拡がっているか、患者の健康全般、並びに治療の効果および起こり得る副作用などの要因によって大きく変化し得る。事実上すべての種類の癌に当てはまることであるが、早期発見は常に好ましく、後期段階における発見と比較して、副作用が実質的に少なく、かつ患者予後が有意により良好な治療の選択肢が存在する。しかしながら、前立腺癌の正確な診断に関連する多くの不都合を伴う前立腺の解剖学的配置を考えると、前立腺癌をその最も早期のステージで発見する能力は得られ難く、以下で検討するような有害で準最適な処置を実施する結果となることが周知である。
【０００７】
Ｉ．現在の前立腺癌スクリーニング法に伴う不都合
前立腺癌の管理および治療は、前立腺組織の十分な試料へのアクセスの点で制限されている。非特許文献４を参照されたい。この点に関して、前立腺癌の確定診断は、前立腺コア針生検として知られている侵襲的な外科処置を用いて前立腺組織を取得するという制約によって妨げられている。非特許文献５および非特許文献６を参照されたい。具体的には、そのような生検法は、典型的には、医師が経直腸超音波を用いて前立腺を視覚化しながら、直腸壁を介して中空針を前立腺内に挿入することによって実施される。注射針が前立腺組織に入り込むにつれて、組織のコアが注射針の内側に生じる。この注射針を前立腺から後退させると、組織コアは注射針から放出され、検査用の顕微鏡スライド上に載せられる。注射針の経路に沿った組織しか検査することができない。この処置は、前立腺の複数の領域から組織生検試料を取得するために、８〜１８回（平均で１２回）繰り返される。典型的には、該生検法に関連する疼痛を軽減するために、前立腺に隣接する領域に局所麻酔が注射される。直腸付近の創傷に関連する高い感染リスクを低減するために抗生物質も投与される。
【０００８】
米国で実施された１３０万件の前立腺生検法の推定値および生検１件当たり平均１２のコアに基づくと、米国では毎年約１５００万点のコア生検検体が集められ、検査されている。これらの生検のうちの１０００万件超（〜７０％）は前立腺癌について陰性と判定されている。非特許文献７を参照されたい。前立腺コア生検の物理的制約により、おそらく針が癌組織を貫通するのを失敗したことに起因する３００万件を超える偽陰性の生検が報告されている。陰性の生検結果を有する多くの男性は積極的監視下に置かれ、再生検（ｒｅｐｅａｔ  ｂｉｏｐｓｙ）に対する持続的な適応のために２回目および３回目の生検法を受けるであろう。認識されるように、この過剰な偽陰性率の重要な原因は、コア針生検法に固有の限定された針の経路である。
【０００９】
前立腺コア生検法が精査される場合に、小さな腫瘍は容易に見落とされ、発見および治療されることなく育ち続けるであろうことは明らかである。またこの腫瘍の発見の失敗の一因となるのは、生検法によって試料採取される前立腺組織の割合が小さいことである。前立腺コア生検の大半は１８ゲージの針を用いて実施される。そのような生検針は、０．８４ｍｍの最大径および１２ｍｍの典型的な長さを有する前立腺組織コアを生成する。非特許文献８を参照されたい。各コアについて８マイクロリットルの平均前立腺組織体積が取得される。一処置当たり平均１２のコアに基づくと、一処置当たり０．０９６ミリリットルの推定総体積の前立腺組織が取得される。非特許文献９を参照されたい。１コア当たり約８マイクロリットル×１２コア＝９６マイクロリットル（０．０９６ｍＬ）。しかしながら、成人男子の前立腺組織体積は２５〜５０ｍＬに及ぶ。したがって、生検によって取得される総前立腺組織体積の割合は、総前立腺体積の０．３８４％〜０．２％にわたり、顕微鏡検査のためにコアを載せて切断した後には、全前立腺組織体積の０．０１％未満が検査される。
【００１０】
さらに、生検法は直腸を介して前立腺にアクセスし、それにより前立腺後部が生検装置に対して最も容易にアクセス可能となる。従って、試料採取バイアスが存在し、（尿道の前方に位置する）前部腫瘍は後部腫瘍よりも有意に多くの生検セッションを必要とする。非特許文献１０を参照されたい。この点に関して、（本願で検討する本発明の別の態様を示す）図５に示すように、腫瘍２０は、他の場合には前立腺が直腸を介してアクセスされ得る対向端部に位置する深い前方位置に位置する。結果として、針生検が癌組織の存在にアクセスして、その存在を検出することができる範囲においてさえ、そのようなアプローチは、前立腺器官についてなされる無作為抽出の全体と同程度に有効であるに過ぎず、前立腺器官は、より容易にアクセスされる領域においてではなく、そのまわりで十分に完全に試料採取される必要がある。図５の腫瘍２０は、そのような腫瘍の検出がどのように問題となるかを示している。
【００１１】
同様に前立腺コア針生検に関連する有意な不快感および医学的危険性がある可能性がある。出血、抗生物質耐性感染症／敗血症、尿貯留、および腫瘍播種（すなわち、腫瘍細胞の組織液中または循環中への脱離（ｄｉｓｌｏｄｇｉｎｇ））は、すべてそのような処置に関連した周知の不都合である。例えば、非特許文献１１〜１４を参照されたい。医学的危険性、不十分な感度、および患者の不快感を総合すると、前立腺コア生検法は、理想的な積極的監視ツールとは言えず、年に１回または半年に１回の使用に限定される。現在、前立腺癌の存在について前立腺を検査するための低侵襲的な診断法が必要とされている。
【００１２】
可能な診断の代替として、バイオマーカーはコア針生検に対する非侵襲的な監視代替案として長く提案されてきた。具体的には、非侵襲的または低侵襲的な診断法は、前立腺コア生検のための指標として開発されてきた。概して、これらの方法は、体液中または血液中に存在する細胞外バイオマーカーの検出に依拠する。非特許文献１５を参照されたい。バイオマーカーデータは、典型的には、直腸を介した指診（直腸指診（ｄｉｇｉｔａｌ  ｒｅｃｔａｌ  ｅｘａｍｉｎｅ）すなわちＤＲＥ）の結果に対して解釈される。この目的に用いられる最も一般的なバイオマーカーは前立腺特異性抗原（ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ａｎｔｉｇｅｎ：ＰＳＡ）である。前立腺癌とヒト漿液中で測定されるＰＳＡの（正常範囲より高い）上昇レベルとのリンクは１９７９年に初めて公表された。ＰＳＡの発見以来、多くのＰＳＡの代替案が臨床的に提案され開発されてきた。前立腺癌のためのバイオマーカーの完全な検討は、非特許文献１６に開示されており、参照によって本願に援用される。
【００１３】
残念ながら、前立腺癌に関連する多くのバイオマーカーが利用可能であるにもかかわらず、いずれも病理学者による前立腺組織の熟練した診断の明確な特異度に匹敵することはできない。さらに、前立腺癌のバイオマーカー指標は患者の治療および管理の前に組織生検によって常に確認され、この標準治療を支持するデータは圧倒的である。この点に関して、前立腺癌監視用の標準治療としてＰＳＡ／ＤＲＥに置き換わるバイオマーカーは存在せず、せいぜいバイオマーカーは前立腺癌に関連していると推定される細胞型を検討する代わりとして機能する。従って、バイオマーカーは物理的な前立腺細胞の照合（ｉｎｔｅｒｒｏｇａｔｉｏｎ）と同等の特異度を達成することはできない。従って、組織生検は確定診断法として優っている。
【００１４】
実際、バイオマーカーが患者管理の低侵襲的な方法を提供し得るという確信にもかかわらず、データによれば、多くの患者への害は前立腺癌に対する患者管理におけるバイオマーカーの使用に関連することが示されている。この線に沿って、有力な証拠によりＰＳＡ検査がしばしば偽陽性の結果を生じることが示されており、２．５〜４．０μｇ／Ｌのカットオフが用いられる場合、陽性のＰＳＡ検査結果の約８０％は偽陽性であると報告されている。偽陽性のＰＳＡ検査結果が前立腺癌についての持続的な心配を含む負の心理的効果に関連しているという十分な証拠も存在する。偽陽性の検査結果を有する男性は、陰性の検査結果を有する人々よりも、翌年に１回以上の生検を含む追加検査を受ける可能性が高く、１０年余りで、男性の約１５％〜２０％は、ＰＳＡ閾値および用いられる検査間隔に応じて、生検のきっかけとなるＰＳＡ検査結果を有するであろう。実際、上記で検討した知見に加えて、スクリーニングによって発見された癌の治療の無作為化検査からの最近の証拠により、前立腺生検に受けた男性のおよそ３分の１が疼痛、発熱、出血、感染、一時的な泌尿器障害、または男性が「中程度または重大な問題」とみなし、約１％が入院を必要とする、臨床医によるフォローアップが必要な他の問題を経験することが示されている。
【００１５】
ＩＩ．スクリーニングによって発見された癌の治療に関連する害
十分な証拠により、米国におけるＰＳＡによって発見された前立腺癌の男性のほぼ９０％が手術、放射線、またはアンドロゲン除去療法による早期治療を受けていることが示されている。十分な証拠により、１０００人の男性のうち５人までが前立腺癌手術の１か月内に死亡し、１０人〜７０人の男性は生存するが重篤な合併症を起こすであろうことが示されている。放射線療法および外科手術は、これらの治療法で治療された男性１０００人のうち少なくとも２００〜３００人において、尿失禁および勃起不全を含む長期的な副作用をもたらす。放射線療法はまた腸管機能不全にも関係している。
【００１６】
一部の臨床医は、そのようなアプローチはアメリカ食品薬品局（ＦＤＡ）が承認した指示ではなく、局所前立腺癌における生存を向上するとは示されていないという事実にもかかわらず、初期の前立腺癌に対する一次療法として、特に高齢男性において、アンドロゲン除去療法を用いてきた。十分な証拠により、局所前立腺癌に対するアンドロゲン除去療法は勃起不全（治療を受けた男性１０００人中約４００人）、並びに女性化乳房およびホットフラッシュに関連していることが示されている。
【００１７】
上記で検討したように、ＰＳＡに基づいたスクリーニングは前立腺腫瘍の多大な過剰診断をもたらすという有力な証拠が存在する。結果として、現在のところ無痛性のままであろう腫瘍を致死的となる腫瘍と区別することができないにもかかわらず、医師および患者はスクリーニングによって発見された癌のほとんどの症例を治療することを選択する傾向が高い。したがって、多くの男性は症状が現れないであろう前立腺癌の治療の害を受けている。後にスクリーニングなしで識別されたであろう癌をスクリーニングによって発見された男性でさえ、ほとんどが同一の転帰を経験し、従って遥かに長い期間にわたって治療の害を不必要に受ける。前立腺癌に対するそのようなＰＳＡに基づいたスクリーニングは相当な過剰治療およびそれに関連する害をもたらしてきており、米国予防医学専門委員会（Ｕｎｉｔｅｄ  Ｓｔａｔｅｓ  Ｐｒｅｖｅｎｔａｔｉｖｅ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ  Ｔａｓｋ  Ｆｏｒｃｅ：ＵＳＰＳＴＦ）は、これらの治療に関連する害の大きさは少なくとも中程度であるとみなしている。前立腺コア生検結果の約７０％が陰性であるという事実はまた、生検のための現在の非侵襲的な指標（典型的にはＰＳＡの上昇およびＤＲＥ）は前立腺癌に特異的ではなく、以前に検討したように、多くの男性に不必要な生検法を受けさせ、これに関連する疼痛および不快感を我慢させていることを示している。
【００１８】
ＩＩＩ．遊離細胞の検出により前立腺癌を診断する試み
前立腺癌を発見するために精液中および尿中の剥離した前立腺上皮細胞を用いることが報告されている。例えば、非特許文献１７〜１９を参照されたい。しかしながら、一部の研究者は、これらの検体中の前立腺腫瘍細胞を定期的に検出する試みは、尿中に見られる前立腺細胞の数が希少なために承諾しがたいほど感度が低いことによって妨げられると報告している。非特許文献２０を参照されたい。
【００１９】
診断感度を高めるために、従来技術は、前立腺細胞の細胞選別法または免疫磁気分離（ｉｍｍｕｎｏｍａｇｎｅｔｉｃ  ｉｓｏｌａｔｉｏｎ）を用いて前立腺細胞集団を富化してきた。しかしながら、これらの細胞収集技術の使用はまた、十分な細胞数および診断感度を提供しなかった。研究によれば、排出尿の収集前にＤＲＥを用いて前立腺細胞を剥離させた場合でさえ、感度は１５％〜３０％にわたることが報告されている。非特許文献２１を参照されたい。更に、細胞学的に発見される場合、尿中のＰＣａ細胞は、高悪性度または進行癌を有する患者においてほとんど排他的に生じる（非特許文献２２）。
【００２０】
剥離した前立腺上皮細胞は非侵襲的または低侵襲的な試料収集法によって得ることができるが、前立腺マッサージの後でさえ入手可能な前立腺細胞の数が少ないために、前立腺癌の検出のための信頼できる診断法として使用される可能性は現実化されていない。実際、目的の標的細胞を遊離させて検出できる確率を高めようとして、試料の収集を促進するように作動する装置を開発した努力にもかかわらず、そのような装置は効果がないと判明した。典型的なそのような装置としては、尿道前立腺部内に延びて、それに近接する試料を得るように作動するいくつかの尿道内装置が挙げられ、また２００２年２月２８日公開の「ＭＥＴＨＯＤ  ＡＮＤ  ＤＥＶＩＣＥ  ＦＯＲ  ＯＢＴＡＩＮＩＮＧ  ＰＲＯＳＴＡＴＩＣ  ＭＡＴＥＲＩＡＬ」と題されたハン（Ｈｕｎｇ）の名前で出願された特許文献１、２００５年３月１０日公開の「ＣＡＴＨＥＴＥＲＳ  ＷＩＴＨ  ＳＵＣＴＩＯＮ  ＣＡＰＡＢＩＬＩＴＹ  ＡＮＤ  ＲＥＬＡＴＥＤ  ＭＥＴＨＯＤＳ  ＡＮＤ  ＳＹＳＴＥＭＳ  ＦＯＲ  ＯＢＴＡＩＮＩＮＧ  ＢＩＯ−ＳＡＭＰＬＥＳ  ＩＮ  ＶＩＶＯ」と題されたシオアンタ（Ｃｉｏａｎｔａ）らの名前で出願された特許文献２、および２０１１年８月２５日公開の「ＤＥＶＩＣＥ  ＡＮＤ  ＭＥＴＨＯＤＳ  ＦＯＲ  ＳＡＭＰＬＩＮＧ  ＰＲＯＳＴＡＴＩＣ  ＦＬＵＩＤ」と題されたブラワー（Ｂｒａｗｅｒ）らの名前で出願された特許文献３に開示されたものが挙げられる。上記特許文献のすべての教示は参照により本願に明確に援用される。
【００２１】
とりわけ、すべてのそのような装置およびそのような装置を用いた収集技術に関連した不都合としては、そのような装置を標的の前立腺尿道部位において目的の標的細胞を捕捉する可能性を最大限にするような手法で選択的に留置することができないことが挙げられる。実際、そのような装置の使用は、完全に無作為であり、目的の標的癌細胞を収集する確率が非常に高められた時を判定する方法はなく、ましてその時にそのような装置を選択的に留置する方法はない。同様に、標的癌細胞が、図５に示すように前立腺内の深部に位置するのとは対照的に、尿道前立腺部に存在する確率を最大にする種類の手段は存在せず、よってそのような装置によって標的癌細胞にアクセスすることはできない。従って、やや低侵襲性であるにもかかわらず、そのような装置は、よくても目的の標的癌細胞を検出する可能性を中等度に増大させるに過ぎない。
【００２２】
２００９年１０月２２日公開の「ＡＳＳＡＹ  ＦＯＲ  ＰＲＯＳＴＡＴＥ  ＣＡＮＣＥＲ」と題されたスミス（Ｓｍｉｔｈ）らの名前で出願された特許文献４にはさらなるアプローチが開示されている。スミスの出願は、前立腺癌の検出用の検体として前立腺圧出液（Ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ  Ｐｒｏｓｔａｔｉｃ  Ｓｅｃｒｅｔｉｏｎ：ＥＰＳ）の使用を提案している。より具体的には、ＥＰＳ試料中に存在する様々な複数のバイオマーカーを用いて、患者が前立腺細胞増殖障害（前立腺癌、前立腺癌腫または前立腺新生物）を有するかどうかを判定する。スミスの方法は、前立腺細胞がバイオマーカーの供給源（起源）であるという仮定に依拠しているが、スミスは、バイオマーカーの供給源とされる無傷の前立腺上皮細胞の列挙または検査を含んでいない。スミスは同様に、バイオマーカーアッセイの感度を増大するための剥離剤（ｅｘｆｏｌｉａｔｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）の使用を予想していない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００２３】
【特許文献１】米国特許出願公開第２００２／００２６２０９号明細書
【特許文献２】米国特許出願公開第２００５／００５４９９４号明細書
【特許文献３】米国特許出願公開第２０１１／０２０８０２２号明細書
【特許文献４】米国特許出願公開第２００９／０２６３７９９号明細書
【非特許文献】
【００２４】
【非特許文献１】米国国立がん研究所（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ）、「Ｕｎｄｅｒｓｔａｎｄｉｎｇ  Ｐｒｏｓｔａｔｅ  Ｃｈａｎｇｅｓ：Ａ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｇｕｉｄｅ  ｆｏｒ  Ｍｅｎ」、ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗｄｏｔｃａｎｃｅｒｄｏｔｇｏｖ／ｔｙｐｅｓ／ｐｒｏｓｔａｔｅ／ｕｎｄｅｒｓｔａｎｄｉｎｇ−ｐｒｏｓｔａｔｅ−ｃｈａｎｇｅｓ、最新ウェブサイトガイド、２０１６年１月２６日
【非特許文献２】米国癌学会（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｓｏｃｉｅｔｙ）、「Ｐｒｏｓｔａｔｅ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｇｕｉｄｅ」、参考：ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗｄｏｔｃａｎｃｅｒｄｏｔｏｒｇ／ａｃｓ／ｇｒｏｕｐｓ／ｃｉｄ／ｄｏｃｕｍｅｎｔｓ／ｗｅｂｃｏｎｔｅｎｔ／００３１３４−ｐｄｆ．ｐｄｆ．
【非特許文献３】ＧｌｏｂｏＣａｎ  ２０１２、「Ｅｓｔｉｍａｔｅｄ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ，Ｍｏｒｔａｌｉｔｙ  ａｎｄ  Ｐｒｅｖａｌｅｎｃｅ  Ｗｏｒｌｄｗｉｄｅ  ｉｎ  ２０１２」、ｈｔｔｐ：／／ｇｌｏｂｏｃａｎｄｏｔｉａｒｃｄｏｔｆｒ／Ｐａｇｅｓ／ｆａｃｔ＿ｓｈｅｅｔｓ＿ｃａｎｃｅｒ．ａｓｐｘ
【非特許文献４】プレスティ、ジェイ．（Ｐｒｅｓｔｉ，Ｊ．）、「Ｐｒｏｓｔａｔｅ  Ｂｉｏｐｓｙ：Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｓｔａｔｕｓ  ａｎｄ  Ｌｉｍｉｔａｔｉｏｎｓ」、Ｒｅｖ  Ｕｒｏｌ．、２００７年  夏、第９巻、第３号、第９３〜９８頁
【非特許文献５】シャリーア（Ｓｈａｒｉａｔ）ら、「Ｕｓｉｎｇ  Ｂｉｏｐｓｙ  ｔｏ  Ｄｅｔｅｃｔ  Ｐｒｏｓｔａｔｅ  Ｃａｎｃｅｒ」、Ｒｅｖｉｅｗｓ  ｉｎ  Ｕｒｏｌｏｇｙ、２００８年秋、第１０巻、第４号、第２６２〜２８０頁
【非特許文献６】タネジャ（Ｔａｎｅｊａ）ら、「ＡＵＡ／Ｏｐｔｉｍａｌ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｓｔａｔｅ  Ｂｉｏｐｓｙ  ａｎｄ  Ｓｐｅｃｉｍｅｎ  Ｈａｎｄｌｉｎｇ」、米国泌尿器科学会のホワイトペーパー（Ｗｈｉｔｅ  Ｐａｐｅｒ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｕｒｏｌｏｇｉｃａｌ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ，Ｉｎｃ．）、ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗｄｏｔａｕａｎｅｔｄｏｔｏｒｇ／ｃｏｍｍｏｎ／ｐｄｆ／ｅｄｕｃａｔｉｏｎ／ｃｌｉｎｉｃａｌ−ｇｕｉｄａｎｃｅ／Ｐｒｏｓｔａｔｅ−Ｂｉｏｐｓｙ−ＷｈｉｔｅＰａｐｅｒ．ｐｄｆ、２０１６年１月２６日現在
【非特許文献７】チン（Ｃｈｉｎ）ら、「Ｉｓ  Ｒｅｐｅａｔ  Ｂｉｏｐｓｙ  ｆｏｒ  Ｉｓｏｌａｔｅｄ  Ｈｉｇｈ−Ｇｒａｄｅ  Ｐｒｏｓｔａｔｉｃ  Ｉｎｔｒａｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ  Ｎｅｏｐｌａｓｉａ  Ｎｅｃｅｓｓａｒｙ？」、Ｒｅｖ  Ｕｒｏｌｏｇｙ  ２００７年、第９巻、第３号、第１２４〜１３１頁
【非特許文献８】オベク（Ｏｂｅｋ）ら、「Ｃｏｒｅ  ｌｅｎｇｔｈ  ｉｎ  ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｂｉｏｐｓｙ：ｓｉｚｅ  ｍａｔｔｅｒｓ．」、Ｊ  Ｕｒｏｌ．、２０１２年６月；第１８７巻、第６号、第２０１５〜５頁
【非特許文献９】ムスタファ（Ｍｕｓｔａｆａ）ら、「Ｗｈｅｎ  ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｃａｎｃｅｒ  ｒｅｍａｉｎｓ  ｕｎｄｅｔｅｃｔａｂｌｅ：Ｔｈｅ  ｄｉｌｅｍｍａ」、Ｔｕｒｋｉｓｈ  Ｊ  Ｕｒｏｌ  ２０１５年、第４１巻、第１号、第３２〜８頁
【非特許文献１０】ジョーンズ（Ｊｏｎｅｓ）、「Ｍａｎａｇｉｎｇ  Ｐａｔｉｅｎｔｓ  Ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ  ａ  Ｎｅｇａｔｉｖｅ  Ｐｒｏｓｔａｔｅ  Ｂｉｏｐｓｙ」、Ｒｅｎａｌ  ａｎｄ  Ｕｒｏｌｏｇｙ  Ｎｅｗｓ、２０１１年２月１日
【非特許文献１１】米国予防医学専門委員会（ＵＳ  Ｐｒｅｖｅｎｔａｔｉｖｅ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ  Ｔａｓｋ  Ｆｏｒｃｅ）、「Ｆｉｎａｌ  Ｒｅｃｏｍｍｅｎｄａｔｉｏｎ  Ｓｔａｔｅｍｅｎｔ  Ｐｒｏｓｔａｔｅ  Ｃａｎｃｅｒ：Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ」、２０１２年５月
【非特許文献１２】ケイ．シャマラ（Ｋ．Ｓｈｙａｍａｌａ）ら、「Ｒｉｓｋ  ｏｆ  ｔｕｍｏｒ  ｃｅｌｌ  ｓｅｅｄｉｎｇ  ｔｈｒｏｕｇｈ  ｂｉｏｐｓｙ  ａｎｄ  ａｓｐｉｒａｔｉｏｎ  ｃｙｔｏｌｏｇｙ」、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  ｏｆ  Ｐｒｅｖｅｎｔｉｖｅ  ＆  Ｃｏｍｍｕｎｉｔｙ  Ｄｅｎｔｉｓｔｒｙ、２０１４年１月〜４月、第４巻、第１号、第５〜１１頁
【非特許文献１３】ヴォラニス（Ｖｏｌａｎｉｓ）ら、「Ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ  ｏｆ  ｎｅｅｄｌｅ−ｔｒａｃｔ  ｓｅｅｄｉｎｇ  ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ  ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｂｉｏｐｓｙ  ｆｏｒ  ｓｕｓｐｅｃｔｅｄ  ｃａｎｃｅｒ：ａ  ｒｅｖｉｅｗ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｌｉｔｅｒａｔｕｒｅ」、ＢＪＵ  Ｉｎｔ．、２０１５年  Ｍ、第１１５巻、第５号、第６９８〜７０４頁
【非特許文献１４】ゴンザレス（Ｇｏｎｚａｌｅｓ）ら、「ＡＵＡ／ＳＵＮＡ  Ｗｈｉｔｅ  Ｐａｐｅｒ  ｏｎ  ｔｈｅ  Ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ，Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｃｏｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  Ｒｅｌａｔｅｄ  ｔｏ  Ｐｒｏｓｔａｔｅ  Ｎｅｅｄｌｅ  Ｂｉｏｐｓｙ」、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｕｒｏｌｏｇｉｃａｌ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，Ｉｎｃ．、２０１２年
【非特許文献１５】トルオン（Ｔｒｕｏｎｇ）ら、「Ｔｏｗａｒｄｓ  ｔｈｅ  Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｓｔａｔｅ  Ｃａｎｃｅｒ  ｉｎ  Ｕｒｉｎｅ：Ａ  Ｃｒｉｔｉｃａｌ  Ａｎａｌｙｓｉｓ」、Ｊ  Ｕｒｏｌ．、２０１３年２月、第１８９巻、第２号、第４２２〜４２９頁
【非特許文献１６】ヴェロナス  ブイ．（Ｖｅｌｏｎａｓ  Ｖ．）ら、「Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｓｔａｔｕｓ  ｏｆ  Ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ  ｆｏｒ  Ｐｒｏｓｔａｔｅ  Ｃａｎｃｅｒ」、Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｓｃｉｅｎｃｅ、２０１３年６月、第１４巻、第６号、第１１０３４〜１１０６０頁
【非特許文献１７】クチュール（Ｃｏｕｔｕｒｅ）ら、「Ｔｈｅ  ｉｓｏｌａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｅｘｆｏｌｉａｔｅｄ  ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｃｅｌｌｓ  ｆｒｏｍ  ｈｕｍａｎ  ｓｅｍｅｎ．」、Ａｃｔａ  Ｃｙｔｏ．、１９８０年５月〜６月、第２４巻、第３号、第２６２〜２６７頁
【非特許文献１８】バレン（Ｂａｒｒｅｎ）ら、「Ｍｅｔｈｏｄ  ｆｏｒ  Ｉｄｅｎｔｉｆｙｉｎｇ  Ｐｒｏｓｔａｔｅ  Ｃｅｌｌｓ  ｉｎ  Ｓｅｍｅｎ  Ｕｓｉｎｇ  Ｆｌｏｗ  Ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ」、Ｔｈｅ  Ｐｒｏｓｔａｔｅ、１９９８年８月、第３６巻：第１８１〜１８８頁
【非特許文献１９】アンドレイド＝ローシャ（Ａｎｄｒａｄｅ−Ｒｏｃｈａ）、「Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ  ｏｆ  ｅｘｆｏｌｉａｔｅｄ  ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｃｅｌｌｓ  ｉｎ  ｓｅｍｅｎ：ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ  ｗｉｔｈ  ｔｈｅ  ｓｅｃｒｅｔｏｒｙ  ｆｕｎｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｐｒｏｓｔａｔｅ．」
【非特許文献２０】ナカイら、「Ｐｈｏｔｏｄｙｎａｍｉｃ  ｄｉａｇｎｏｓｉｓ  ｏｆ  ｓｈｅｄ  ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｃａｎｃｅｒ  ｃｅｌｌｓ  ｉｎ  ｖｏｉｄｅｄ  ｕｒｉｎｅ  ｔｒｅａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  ５−ａｍｉｎｏｌｅｖｕｌｉｎｉｃ  ａｃｉｄ」、ＢＭＣ  Ｕｒｏｌｏｇｙ、２０１４年、第１４巻：第５９頁
【非特許文献２１】フジタ  ケイ（Ｆｕｊｉｔａ  Ｋ）、パヴロビッチ  シーピー（Ｐａｖｌｏｖｉｃｈ  ＣＰ）、ネットー  ジージェイ（Ｎｅｔｔｏ  ＧＪ）ら、「Ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｃａｎｃｅｒ  ｃｅｌｌｓ  ｉｎ  ｕｒｉｎｅ  ｂｙ  ｍｕｌｔｉｐｌｅｘ  ｉｍｍｕｎｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ  ｃｙｔｏｌｏｇｙ」、Ｈｕｍ  Ｐａｔｈｏｌ．、２００９年、第４０号、第９２４頁、［ＰｕｂＭｅｄ：１９３６８９５９］
【非特許文献２２】タイラー  ケーエル（Ｔｙｌｅｒ  ＫＬ）、セルヴァギー  エスエム（Ｓｅｌｖａｇｇｉ  ＳＭ）、「Ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃ  ｆｅａｔｕｒｅｓ  ｏｆ  ｐｒｏｓｔａｔｉｃ  ａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｏｎ  ＴｈｉｎＰｒｅｐ（ｒ）  ｕｒｉｎａｒｙ  ｃｙｔｏｌｏｇｙ」、Ｄｉａｇｎ  Ｃｙｔｏｐａｔｈｏｌ．、２０１１年、第３９巻：第１０１頁、［ＰｕｂＭｅｄ：２０１４６３０３］
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００２５】
要約すると、従来技術の非侵襲的および低侵襲的な診断法は、臨床検体（末梢血液、尿、精液、前立腺圧出液など）が前立腺に由来するバイオマーカー、遺伝物質、および／または細胞を含有しているという推測に依拠する。従来技術の検出技術の成否は、検出に十分な量のバイオマーカー、遺伝物質または前立腺細胞の存在に左右される。しかしながら、従来技術は、患者の病状をより簡単に、即座に、かつ正確に評価するために、求められているバイオマーカー、遺伝物質または前立腺細胞を個数および濃度において増大させることができる確率を実質的に増大することができる何らかの構造化された方法論が完全に不足している。
【００２６】
従って、標的前立腺細胞を収集および検出する能力を、信頼でき、かつ容易に再現可能であり、また収集した細胞を多種多様な用途のために続いて検査したり、または他の態様で用いたりすることを可能にするような手法で、強化するように展開され得る方法が当分野において圧倒的に必要である。針生検法に関連する疼痛、複雑さ、および多くの他の不都合を排除しないにしても実質的に最小限にし、一方でそれと同時にバイオマーカー、遺伝物質または前立腺細胞の存在を従来技術の方法よりも遥かに良好に検出することができる、実質的により正確で、感度の高い試料採取を提供するような方法論が当分野においてさらに必要である。さらに、低侵襲的であり、患者の不快感を実質的に最小限にし、感染のリスクに関連する副作用、従来の検査に伴う瘢痕化および衰弱といった副作用を有さず、かついかなる種類の特別な医療器具も、高度に訓練された医療関係者によって実施されることも、または他の場合には高コストの医療処置に関連するいかなる種類の処置も要することなく、オンデマンドで容易に展開され得るような方法論が当分野において必要である。
【課題を解決するための手段】
【００２７】
本発明は、とりわけ上記で特定した当分野における不備に対処し、それを軽減する。この点に関して、本発明は、標的前立腺細胞またはそのような細胞によって発現される前立腺癌の症状に関連する他のバイオマーカー、遺伝物質もしくは他の化合物を、検査を目的としてそのようなものの存在が非常に高められ、従来の方法よりも簡単に、容易に、かつ予想通りに収集することができるように、生成、収集、および検出するための低侵襲的な方法に関する。最も広義には、上記方法論は、２つの本質的な構成要素、すなわち、１）前立腺中に存在する異常細胞および正常細胞が、例えば脱落（ｓｈｅｄｄｉｎｇ）または剥離（ｅｘｆｏｌｉａｔｉｎｇ）型の作用によって分離（ｄｅｔａｃｈｅｄ）または脱離（ｄｉｓｌｏｄｇｅｄ）して、尿道前立腺部上皮細胞を通じて尿道内に移動することを、促進、増強、増進、または他の態様でそのようにさせるように作用する薬剤の投与と、２）尿道に移動した細胞を後続の検査のために収集することとから構成される。
【００２８】
前者に関して、様々な薬剤のいずれも、例えば脱落または剥離活性によって脱離効果を増進するのに有効な量で指示された投与計画に従って投与され得ることが考えられる。そのような薬剤としては、デュタステリド、ベキスロステリド、イゾンステリド、エプリステリド、ラピステリド、ツルステリド（Ｔｕｒｓｔｅｒｉｄｅ）、ＦＣＥ  ２８２６０、亜鉛、ノコギリヤシ（Ｓｅｒｅｎｏａ  ｒｅｐｅｎｓ）（ソウ  パルメット）抽出物、ピジウム  アフリカナム抽出物、イラクサ根（Ｎｅｔｔｌｅ  Ｒｏｏｔ）抽出物、リコピン、緑茶カテキン類（（−）−エピガロカテキン、（−）−エピガロカテキン−３−ガラートおよび（−）−エピカテキンを含むが、これらに限定されるものではない）、ポリフェノンＥ、テアフラビン類、食物イソフラボン類（ゲニステイン、ダイゼイン、ホルモノネチンおよびビオカニンＡを含む）、クルクミン、レセルバトロール（Ｒｅｓｅｒｖａｔｒｏｌ）（（３，５，４’）−トリヒドロキシスチルベン）、ザクロ果汁、およびルペオールが挙げられる。最も理想的な候補は、フィナステリドを含む５−αリダクターゼ阻害剤クラスの薬剤で生じるような減量型の活性（ｄｅｂｕｌｋｉｎｇ−ｔｙｐｅ  ａｃｔｉｖｉｔｙ）を有するそれらの薬剤と考えられるであろう。しかしながら、すべてのそのような薬剤に共通していることは、投与薬剤が、有効な量で投与された場合に、前立腺の血管新生によって浸透し、前立腺全体にわたって脱離、分離、脱落または剥離型の作用を促進し、よって最終的には、針生検で生じるようなごく僅かな量の前立腺組織の試料採取とは対照的に、前立腺の最適で、十分にすべてを含んだ試料採取を得るために、前立腺管を介して標的細胞を尿道へ移動させることができることである。
【００２９】
そのような薬剤は、最適な程度の疑わしい標的細胞が患者の尿道に移動しているであろう試料採取「時間枠」を得られやすくするために、指示された投与計画に従って、単独で、または１つ以上の他の薬剤と併用して、単回投与または経時的に多回投与として与えられ得る。そのため、特定の薬剤の投与後の特定の時間枠は、目的の標的細胞が尿道内においてより高濃度で存在し、試料または検体の一部として捕捉できる可能性が高い時に相当するであろうと考えられる。例えば、フィナステリドの場合には、５ｍｇ／日の投与量は、特に良好な程度の脱落を生じ、従って尿道内において標的細胞集団の増大を生じ、これは投与から約７２時間で開始し、６か月または約１８０日まで持続すると考えられる。一部の場合には、８０ｍｇ〜６００ｍｇの範囲の一回のフィナステリド投与量が投与されてもよいことが考えられる。他の場合には、一日のフィナステリド供与量は５ｍｇ／日から〜８０ｍｇ／日にわたってもよいことが考えられる。初めの３０日は収集のために特に良好な標的細胞集団を生じ得ると思われる。他の例としては、５ｍｇ／日〜８０ｍｇ／日のフィナステリドと、４ｍｇ／日〜８ｍｇ／日のドキサゾシンとの併用供与が挙げられ、これは概ね投与後７２時間に開始し、さらに３０日以上にわたって続く特に良好な試料採取「時間枠」を生じるであろう。
【００３０】
最適な試料採取「時間枠」の時間に基づく決定の代替案として経験的方法を用いてもよい。例えば、触診、目視検査、ＭＲＩまたは超音波によって判定されるような前立腺体積の減少を、いつ検体を収集すべきか関して決定力のある事象として用いてもよい。加えて、前立腺減量プロセスに関連付けられたバイオマーカーの濃度の上昇または低下は、試料収集のための最適な時間枠を示し得る。すべてのそのような応用において、所与の薬剤または所与の薬剤の組み合わせの投与は、収集しようとする標的細胞の数および濃度が選択的にもたらされ、捕捉に利用可能となることができる最適な機会に至るであろうことが理解されるであろう。
【００３１】
薬剤の脱落または剥離現象を生じる能力を増進するためには、上記薬剤は二次投与薬剤（ｓｅｃｏｎｄ  ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｅｄ  ａｇｅｎｔ）、または前立腺マッサージ、振動、超音波などのような機械的操作によって補足され、よって投与薬剤の脱落または剥離作用を補完してもよいことが考えられる。そのような機械的力の適用も同様に、好ましくは、標的細胞が最適な試料収集と一致するであろう予測可能な時間に脱離、分離、脱落、または剥離される能力を高めるように、選択的に時間設定されるであろう。そのような補足的な機械的力は当分野において周知の様々な技術のいずれによって適用されてもよい。
【００３２】
また、良性前立腺肥大症（ＢＰＨ）の治療中であり、５−αリダクターゼ阻害剤および特にフィナステリドまたは他の同様のＢＰＨ療法を六（６）箇月以上にわたって受けた一部の患者は標的細胞の脱落が少ないことがあり、脱落を起こしやすい標的細胞を再成長させるために、患者にそのような治療を適切に中止させる必要がある場合があることも考えられる。「治療中止（ｏｆｆ−ｔｈｅｒａｐｙ）」期間は経験的に決定または判定されてもよい。例えば、触診によって、またはＭＲＩもしくは超音波による目視検査によって判定されるような前立腺体積の増大は、いつ薬剤を再投与することができるかを判定するために用いられ得る。加えて、前立腺増量過程に関連するバイオマーカーの濃度の上昇または低下は、いつ標的細胞が採取するのに十分に補充されたかを知らせ得る。一旦確認されたならば、患者は治療に戻されて、標的細胞の剥離を生じ得る。
【００３３】
本発明の第２態様、すなわち試料収集に関して、尿道に移動させた目的の標的細胞は簡単な検体収集によって尿道から取り出すことができると考えられる。現在のところ、様々な種類の検体のいずれも、検査のための理想的な検体を得るために収集することができると考えられる。しかしながら、本発明の方法によって収集される検体の種類の序列が存在し、所与の検体が最も高濃度の目的の標的細胞を有する可能性に従って格付けされ得ると思われる。この点に関して、最適な試料採取「時間枠」と一致する時間に収集された射精液検体は、標的細胞の数および濃度の点から、検査に最良の検体を提供するであろうと考えられる。最適な「時間枠」の間に収集された射精液検体に続いて、以下の他の検体は、検査しようとしている標的細胞の最大量を含有するそれらの各確率に従って有効性の高いものから低いものへ、すなわち、前立腺圧出液（ＥＰＳ）、内部前立腺マッサージ後の排出尿（ｕｒｉｎｅ  ｖｏｉｄ）、外部前立腺マッサージ後の排出尿、直腸指診後の排出尿、および最後に、単なる排出尿と格付けされる。さらに、各種類の試料は、個体に投与された薬剤が標的細胞集団を最高の割合または濃度で尿道内に脱落、剥離などさせた時間間隔において得られるであろう。
【００３４】
一旦収集されたならば、上記試料は様々な従来の手段のいずれかにより、目的とする様々な検査対象のいずれか（それらが癌細胞、バイオマーカー、ＰＳＡ、ＣｔＤＮＡ、ｍＲＮＡ、マイクロ−ＲＮＡ、エクソソームなどの遺伝物質、並びに当分野において理解されるように、既知であり、検査が求められる他の物質であるかにかかわらず）について検査され得る。しかしながら、目的の細胞の数および濃度を選択的に増大させることにより、また標的細胞およびそれに関連する他の生体物質を患者の不快感を最小限にし、代りに天然の生物学的機構に依拠するような手法で収集する低侵襲的な方法を用いることより、本発明の方法は、従来技術方法より遥かに容易で、遥かに痛みが少なく、かつ実質的により費用効率の高い手法で、優れた検査試料を得ることができる。さらに本発明の方法によって収集された試料の富化された性質のために、そのような方法は、実質的により正確な結果、並びにそのような目的の標的細胞を特定の時間に選択的かつ最適に得ることができる確率を他の形で増大させない無作為抽出に依拠する方法よりも高い感度を有することができるという結果をもたらす試料を生じるものと思われる。
【００３５】
当業者には容易に分かるように、最適な試料および富化された試料のその後の検査を得るために本願において検討する方法は、とりわけ、無症候患者における前立腺癌の検出、投薬計画に対する前立腺腫瘍感受性の予測／測定、前立腺生検結果が陰性である（ただし引き続き前立腺癌と一致する症状を示す）患者の監視療法、およびバイオマーカーアッセイに関連する偽陽性の結果の識別のような様々な目的のためのものであり得る。非常に重要であると考えられる１つの特定の用途において、本発明の方法は、前立腺における腺癌の前浸潤性ステージと広く認識されており、また腺癌の高度な予測マーカーと見なされている高悪性度前立腺上皮細胞内腫瘍（ｐｒｏｓｔａｔｉｃ  ｉｎｔｒａｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ  ｎｅｏｐｌａｓｉａ：ＰＩＮ）を検出するために用いることができる。
【００３６】
従って、本発明の目的は、前立腺全体から上皮細胞を一様に試料採取する方法を提供することにある。
本発明のさらなる目的は、前立腺癌の持続的な指標を有する男性の監視療法のための方法に提供することにある。
【００３７】
本発明のさらなる目的は、形態学的に正しい前立腺上皮細胞を、分子分析手法、免疫化学的分析手法、および物理的分析手法の任意の組み合わせによって前記前立腺細胞の識別および照合を可能にする十分な量で、非侵襲的に剥離および遊離させるための方法を提供することにある。
【００３８】
本発明のさらなる目的は、尿、精液および前立腺圧出液を含む（しかしこれらに限定されない）体液中における検出に利用可能な前立腺上皮細胞の数を増大させる目的で、前立腺細胞の剥離（脱落）を促進する治療薬または他の薬剤を投与することにある。
【００３９】
本発明の別の目的は、前立腺上皮細胞の剥離により、高悪性度ＰＩＮを有する個体の識別を容易にする、非侵襲的な前立腺癌のスクリーニング方法を提供することにある。
本願に開示する様々な実施形態のこれらおよび他の特徴並びに利点は以下の説明および図面に関して一層よく理解され、それらの図面では同様の数字は全体にわたって同様の部分を指す。
【図面の簡単な説明】
【００４０】
【図１】癌性腫瘍を内部に有する前立腺、並びに周囲の器官および男性生殖器系の部分側断面図。
【図２】ステージＩ〜ＩＶに対応する癌性前立腺の断面図。
【図３】膀胱の下方で飽和した、癌性腫瘍と内部を通って延びる尿道とを有する前立腺の断面図であって、その前立腺は生来の状態から想像線で示す減量状態に移行するように示されている、断面図。
【図４】前立腺が想像線でその生来の状態において示され、実線で減量状態において示されている図３の断面図であって、減量構成が前立腺内に含まれる腫瘍から細胞を抽出するために尿道に脱落させるように作用していることが示されている、断面図。
【図５】前立腺および前立腺の前部に位置する癌性腫瘍の断面図であって、抽出のために腫瘍から尿道への細胞の移行を促進する際に使用するために直腸を通って前立腺に隣接して留置された機械的機構がさらに示されている断面図。
【発明を実施するための形態】
【００４１】
以下で述べる詳細な説明は、本発明の現在の好ましい実施形態の説明として意図され、本発明が実行または実施され得る唯一の形態を表すものではない。説明は本発明を実施するためのステップの機能および順序を示す。しかしながら、同一または同等の機能および順序が異なる実施形態によって得られてもよく、それらはまた本発明の範囲内に包含されることも意図されることを理解すべきである。
【００４２】
この点に関して、本発明は、前立腺内に位置する前立腺上皮細胞が前立腺から脱離して、その後の収集のために尿道に移動する能力を促進する方法に関する。従って、本発明の方法は、より多くの前立腺上皮細胞集団を生成し、それらの細胞集団が当分野においてよく認識されているようなＢＰＨと前立腺癌との区別、投薬計画に対する前立腺腫瘍の感受性の予測または測定、任意の前癌活性の監視および識別、およびバイオマーカーアッセイに関連した偽陽性の結果の識別を含む多種多様な用途のいずれかのためにより容易に収集および検出されるように作用する。一般に前立腺上皮細胞として特徴付けられるそのような標的細胞は、例えば、正常、過形成、異型、腫瘍性、悪性、または当分野において周知の他の型である可能性がある。特に興味深いことに、本発明の方法は、前立腺内の腺癌および最も可能性の高い腺癌の前浸潤ステージの高度な予測マーカーと見なされる高悪性度前立腺上皮内腫瘍（ＰＩＮ）の検出に非常に優れた有効性を有すると考えられる。
【００４３】
これらの目的を達成するために、本発明は、脱落、剥離などのような機構によるものであり得る標的前立腺上皮細胞の前立腺からの脱離を促進するように作用する薬剤の投与と、それに後続するそれらの細胞の尿道内への移動とを含む第１ステップを展開するように作用する。以下でより完全に検討されるそのような初期ステップは、本質的に、前立腺上皮細胞の前立腺管からの細胞脱離（ｃｅｌｌｕｌａｒ  ｄｉｓｌｏｄｇｍｅｎｔ）をもたらすように作用する薬剤の投与によって行われる。
【００４４】
第２ステップでは、前立腺管から尿道に移動した細胞は次に、好ましくは非侵襲的に、射精液または排出尿などの液状検体として収集される。検体収集のタイミングが、識別し特徴付けようとしているそれらの細胞の数を増大させる、好ましくは実質的に増大させるために、脱離、脱落、または剥離して尿道に移動するように誘導された前立腺上皮細胞集団が最大の個体数または密度に達する最適な試料「時間枠」が生じる時に一致するように、そのような検体の収集は薬剤の投与と調整されるであろう。その目的を手助けするために、機械的力、振動、前立腺マッサージなどの適用のような任意の補足的な力が、投与薬剤の有効性を増進するため、並びに試料収集中にそのような細胞により容易にアクセスできるようにするために、細胞が脱離して尿道に移動する能力を高めるように配置されてもよいことが考えられる。これらの特定の態様の各々について以下で検討する。
【００４５】
Ｉ．前立腺上皮細胞の収集を促進する薬剤の投与
本発明は、標的細胞の試料を取り出して検査することが求められる雄個体によって摂取されるか、または他の場合にはそのような雄個体に全身投与される「薬剤」を明らかに企図する。その目的のために、そのような薬剤は、収集のために標的前立腺上皮細胞およびそれらの成分（例えばＤＮＡ、ｍＲＮＡ、エクソソームなど）の前立腺から最終的には尿道への脱離を引き起こすように作用する、以下でより完全に議論される様々な化合物のうちのいずれを用いてもよい。そのような活性が得られる一般的なプロセスは、本発明の目的を達成する例示的な機構を示す図３および図４に示されている。図３に示すように、薬剤の投与は、その生来の形状および構成１０にある前立腺を参照番号１０ａとして想像線で示される減量状態に移行させる、前立腺１０のまわりの内側に向いた矢印によって示される効果を与えるように作用するであろう。この点に関して、前立腺１０の脈管構造を通る薬剤の送達によって雄個体に投与される薬剤は、参照番号１０ａとして示した減量効果を与える。有利には、減量効果は前立腺１０の全体にわたってもたらされ、そのため、そのような細胞が針生検によって捕捉され得る偶然とは対照的に、前立腺全体に分布する前立腺上皮細胞がすべて脱離、脱落または剥離作用を起こしやすくなる。従って、本発明は、このように標的前立腺上皮細胞が前立腺中のどこにおいても潜在的に得られることを可能にし、これは、そのような細胞を取り出すための機構としてこれまでに得られていない。
【００４６】
薬剤の減量活性の結果として、図４にはその後の効果が示されており、それにより、薬剤の作用が「Ａ」と表された矢印によって示すように前立腺を通って浸透し、その結果、薬剤の効果により腫瘍内に位置する標的前立腺上皮細胞がそこから脱離し、尿道６０内に移動し、遊離細胞９０として特徴付けられることが示されている。薬剤がそのような脱離とそれに続く尿道への移動を行う機構に関して、そのような効果を生じるように作用するいかなる薬剤も本発明の範囲内にあると見なされるものと考えられる。この点に関して、本発明に関連して展開される薬剤は、とりわけ、当業者によって理解されるであろう細胞の脱落または剥離などの機構によって脱離効果を与え得ると考えられる。
【００４７】
前立腺管からおよび尿道内への最適な程度の細胞の脱離および移動は、以下でより完全に検討される検体の収集を、最大数の識別されるべき標的異常細胞を有する試料が収集され得る確率を最大にする間隔または「時間枠」に正確に時間設定するために、特定の薬剤の投与に続いて選択的に時間設定され得ることがさらに考えられる。本発明の実施に使用される例示的な薬剤に関して、そのような薬剤としては、デュタステリド、ベキスロステリド、イゾンステリド、エプリステリド、ラピステリド、ツルステリド（Ｔｕｒｓｔｅｒｉｄｅ）、ＦＣＥ  ２８２６０、亜鉛、ノコギリヤシ（Ｓｅｒｅｎｏａ  ｒｅｐｅｎｓ）（ソウ  パルメット）抽出物、ピジウム  アフリカナム抽出物、イラクサ根（Ｎｅｔｔｌｅ  Ｒｏｏｔ）抽出物、リコピン、緑茶カテキン類（（−）−エピガロカテキン、（−）−エピガロカテキン−３−ガラートおよび（−）−エピカテキンを含むがこれらに限定されるものではない）、ポリフェノンＥ、テアフラビン類、食物イソフラボン類（ゲニステイン、ダイゼイン、ホルモノネチンおよびビオカニンＡを含む）、クルクミン、レセルバトロール（（３，５，４’）−トリヒドロキシスチルベン）、ザクロ果汁、およびルペオールが挙げられるが、これらに限定されるものではない。投与量、投与経路、および所与の薬剤が投与される時から所望の標的細胞が最適な収集のために尿道前立腺部に移動する時までのおよその時間的間隔（すなわち、投与薬剤が生体系に適用された時から特定の薬理効果がもたらされる時間までの薬剤潜伏期間）は、当業者が従来の時間−投与量曲線分析を用いて投与量依存的な生理学的効果を経時的に測定し、定量することにより決定することができる。従って、そのような薬剤の投与量、そのような薬剤がどのように好ましく投与されるか、および各々の薬剤の投与後から最大数の目的の細胞が最適な試料採取「時間枠」と一致するように脱離させられ尿道に移動させられる時までのおおよその時間は、当業者の技能のうちにあると見なされる。
【００４８】
薬剤の投与に対して最適な程度の標的細胞の収集がいつ起こるかの時間依存的な判定に加えて、またはそれに代わって、最適な試料収集は、薬剤の投与後の対応する生理学的事象に基づいて決定されてもよいことがさらに考えられる。例えば、所与の薬剤の投与後の最適な標的細胞の収集は、前立腺の生理学的変化と同時に起こり得る。具体的には、薬剤の投与後に前立腺によって減量状態を示す一定の生理学的変化が現れる場合、試料収集のタイミングはそのような生理学的変化と一致し得る。例えば、前立腺における生理学的変化が、心悸亢進（ｐａｌｐｉｔａｔｉｏｎ）、目視検査、またはＭＲＩまたは超音波のような画像診断法などによって判定され得る限り、薬剤の投与後のそのような生理学的変化と一致する試料収集は、よって最適な試料収集のための「時間枠」を示すであろう。
【００４９】
同様に、薬剤の投与後における１つ以上のバイオマーカーの存在は、最適な試料収集の機会を知らせ得る。例えば、１種以上の薬剤の投与後にＰＳＡレベルが特定のレベルに低下することが示される限り、それは前立腺上皮細胞が以下で検討する後の収集のために脱落、脱離などさせられ、前立腺管を通って尿道内に移動させられている時を示すと見なされ得る。従って、当業者に周知の技術を用いて、特定のバイオマーカーの存在の投与量依存的な変化がこのように最適な試料収集と同時に起こり得ると考えられる。
【００５０】
さらに理解されるように、薬剤の投与後の最適な標的細胞の収集を確実にするそのような方法の組み合わせが展開され得ると思われる。例えば、薬剤の投与後の一定の時間間隔はＰＳＡレベルなどのバイオマーカーの低下の測定と関連付けられてもよく、その結果、ＰＳＡレベルの報告された低下（ｄｏｃｕｍｅｎｔｅｄ  ｄｅｃｒｅａｓｅ）と関連付けられた薬剤の投与後の一定の期間は、よって最適な試料収集の機会を画定するであろうと考えられる。同様に、薬剤の投与後の特定の期間の後に、前立腺は、例えば心悸亢進（ｐａｌｐｉｔａｔｉｏｎ）などによって検査され、また脱落または剥離活性などを示す前立腺の生理学的状態の特定の報告された変化により、いつ細胞の最適な収集がなされるべきかについて示すであろう。
【００５１】
合成または天然起源の５−αリダクターゼ阻害剤として分類される典型的なそのような薬剤（参考：カーン（Ｋｈａｎ）ら、「Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ  ｂｙ  ｄｉｅｔａｒｙ  ａｇｅｎｔｓ  ｆｏｒ  ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｃａｎｃｅｒ」、Ｅｎｄｏｃｒ  Ｒｅｌａｔ  Ｃａｎｃｅｒ、２０１０年３月、第１７巻、第１号：Ｒ３９−Ｒ５２）は周知であり、前立腺組織の大きさ（ｍａｓｓ）を治療的に低減するために広く用いられている（参考：ジョンソン（Ｊｏｈｎｓｏｎ）、米国特許第際５４９６５５６号）（参考：ウィキペディア（Ｗｉｋｉｐｅｄｉａ）、５−αリダクターゼ阻害剤、２０１６年１月２０日）。エンゲル（Ｅｎｇｅｌ）らは、２０％〜４０％の前立腺体積の減少（組織減量）が４〜８週間の治療時間で生じ得ることを示した（米国特許第６０５４４３２号）。同様の知見は、単独でまたは他の薬剤と組み合わせて用いられる５−αリダクターゼ阻害剤に関わる多くの臨床研究において示されてきた（スミス（Ｓｍｉｔｈ）ら、「Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ  ａｎｄ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｒｉｓｋ  Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ」、２００９年、第５巻、第５３５〜５４５頁）。当業者には分かるように、これは、前立腺コア針生検を用いて取得される組織の量を遥かに上回る前立腺組織体積である。フィナステリド（Ｐｒｏｓｃａｒ（登録商標）という商標で販売）は良性前立腺肥大症の治療のために日常的に処方されている。前立腺癌の化学的予防のための５−αリダクターゼ阻害剤の使用を調査する研究において、著者はフィナステリドの長期使用により低悪性度の前立腺癌の危険性が低減されると結論付けている（参考：トムプソン（Ｔｈｏｍｐｓｏｎ）ら、Ｌｏｎｇ−Ｔｅｒｍ  Ｓｕｒｖｉｖａｌ  ｏｆ  Ｐａｒｔｉｃｉｐａｎｔｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｐｒｏｓｔａｔｅ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ  Ｔｒｉａｌ、Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ、２０１３年、第３６９号、第６０３〜６１０頁）。治療目的のために前立腺細胞を剥離する５−αリダクターゼ阻害剤および他の薬剤の周知の有益性にもかかわらず、これらの同一の薬剤を診断目的で前立腺細胞を剥離するために使用することは報告されていない。
【００５２】
本発明を実施する目的のために、８０ｍｇ〜６００ｍｇの１回量のフィナステリドは、投与から約７２時間後における尿道内での標的細胞集団の増大に対応する良好な程度の脱落活性を生じるであろう。これに代わって、５ｍｇ／日〜８０ｍｇ／日の一日量のフィナステリドは、投与から約７２時間後における尿道内での標的細胞集団の増大に対応する特に良好な脱落活性を生じるであろう。最高６か月にわたる連続的な５ｍｇ／日の投与量の治療は連続的な脱落活性を提供し、よって収集しようとしている標的細胞集団を富化すると思われる。３０日間のそのような治療は、特に多数の収集しようとしている細胞を生じるために経時的に十分な程度の脱落を生じ得ると思われる。別の応用において、所望の程度の脱落を生じるために、第１薬剤および第２薬剤の組み合わせを投与することができると思われる。典型的な第１薬剤および第２薬剤のそのような投与としては、第１薬剤として５ｍｇ／日〜８０ｍｇ／日のフィナステリドを、第２薬剤として４ｍｇ／日〜８ｍｇ／日で投与されるドキサゾシンと共に投与することが挙げられる。そのような投与薬剤の組み合わせは特に良好な試料採取「時間枠」をもたらすであろう。
【００５３】
フルタミドなどのアンドロゲン遮断薬は、同様に前癌性上皮細胞を尿道内に脱落させることができる。そのようなクラスの薬剤は、ＰＳＡの上昇に先行し得るＰＩＮの脱離および収集を促進するのに特に適し得る。そのようなアプローチは、ＰＳＡ値の上昇がみられる前までに、前立腺癌を発見または予測する可能なかぎり早期の方法を可能にすると思われる。実際、前立腺コア生検はＰＳＡ上昇の結果が得られるまで指示されない。
【００５４】
実際には、本発明の特定の用途において、既に５−αリダクターゼ阻害剤療法を受けている患者は、必然的に、被験者内においてそのような阻害剤の摂取に付随する脱落誘発活性が停止するまで、そのような療法を中止する必要がある場合があると考えられる。そのため、標的細胞が最も数が多く、最も高濃度であると思われる試料を得ることは、そのような阻害剤によって生じる任意の進行中の脱落または剥離活性の停止を必要とし得る。脱落または剥離活性が停止するような時間まで十分な期間にわたって待機することにより、細胞集団は再生し、蓄積することができ、その結果、５−αリダクターゼ阻害剤で維持療法を受けている個体において生じるよりも多くのそのような細胞が存在し、脱落およびそれに続く検出に利用可能となるので、そのような阻害剤が個体に再導入されたときに、最大数の前立腺細胞が後続の「採取」に利用可能となる。実際、そのような細胞集団が再増量することができない限り、ＰＩＮ細胞を脱落させるフィナステリドの投与などの特定の応用において、最適な細胞検出は妨げられ得る。
【００５５】
ＩＩ．後続の試料収集
図４に示したように、目的の標的細胞９０は、尿道６０内に位置していることにより、非侵襲的な収集に最適に配置されている。この点に関して、細胞９０が膀胱４０および精嚢３０から下流に配置されることにより、そのような標的細胞９０は、よってそのような流体源から下流に位置し、それにより尿道６０を通って体外に運ばれるように有利に配置される。当業者には容易に分かるように、低侵襲性であるだけでなく、従来技術の検出の実施に伴う不都合をすべて排除する方法で、最大限の目的の標的細胞を有する試料を収集できることにより、従来技術よりも実質的に進歩している。実際に、非侵襲的な試料を収集する能力は、針生検の実施に伴う実質的な不都合をすべて排除するだけでなく、標的細胞集団が尿道内において最大または最大に近い濃度に達する時に一致する試料の収集をもたらし、かつそのような収集を選択的に時間設定する本発明の方法の選択的な能力を考えると、標的細胞が遥かに豊富で、容易に再現可能であり、また実質的により高い感度を有することができる試料が収集されることも可能にする。
【００５６】
本発明によって想定される試料収集に関して、患者の尿道を介して収集することができるいかなる生体試料も本発明の範囲内にあると見なされると考えられる。本発明の実施中に収集することができる典型的な検体の種類としては、射精液、ＥＰＳ（前立腺圧出液（Ｅｘｐｒｅｓｓ  Ｐｒｏｓｔａｔｉｃ  Ｓｅｃｒｅｔｉｏｎｓ））、先行して内部前立腺マッサージを行った排出尿、先行して外部前立腺マッサージを行った排出尿、先行して直腸指診を行った排出尿、および単なる排出尿が挙げられる。
【００５７】
上記で検討したように、前述の検体のうちのいずれの収集も、好ましくは、所与の投与薬剤の投与後の最適な試料収集「時間枠」と一致するように調整されるであろう。しかしながら、すべてのそのような試料収集の方法において、任意の従来技術を用いることができ、使用中のまたは後に開発されるいずれの収集方法も本発明の範囲内にあると見なされると考えられる。
【００５８】
本発明の任意選択の別例では、複数の薬剤が、異常な標的細胞集団を可能な限り最大限に脱離、脱落、または剥離するなどして尿道に移動するように増進させることができる限り、２種以上の薬剤が試料収集前に投与されてもよいと思われる。その目的のために、そのような薬剤の投与およびその後の試料収集は、試料中の収集しようとしている細胞集団を最大限にするように選択的に選択されることが明らかに認識される。同様に、図５に示すように、補足的な機械的力または刺激は、尿道内における異型細胞の存在およびその後の収集を最大限にするために、薬剤およびその後の試料収集と併用して配置されてもよいと考えられる。図５に示す例示的な実施形態において、圧力付与機構１２０を有する器具１００は、直腸を介して挿入され、前立腺１０に隣接して配置され、前立腺１０内の深部に配置された腫瘍２０から細胞を最終的に尿道６０内において遊離細胞９０として脱離させることを促進するために前立腺１０に圧縮力を与えるように作用する。この点に関して、圧力付与機構１２０は、前立腺マッサージに類似したマッサージ型の力を与えてもよいし、または腫瘍２０から尿道６０内への細胞の脱離および移動を促進するようにさらに作用する他の機械的力、例えば振動エネルギー、超音波、ＲＦエネルギー、熱、または他の様々な機械的力および／もしくはエネルギーのいずれか、並びにそれらの組み合わせなどを配置してもよい。そのため、任意のそのような外力またはエネルギーは、前立腺上の特定の標的部位に所望の機械的力またはエネルギーを最適に適用するために、外部または内部のいずれかから適所に適用されてもよいと考えられる。
【００５９】
すべての場合において、適当な検体が収集されたならば、その検体は、上述したように、多種多様な用途のいずれに用いられてもよい。例えば、本発明の方法によって収集された検体は、生検後化学療法サーベイランスのために用いることができる。本発明は、同様に、前立腺組織を診断に必要な任意の頻度で効果的に試料採取する方法を提供することができる。前立腺細胞剥離の非侵襲的な性質および潜在的な健康上の恩恵は、ＢＰＨか癌かにかかわらず、鑑別診断を支援するために患者から逐次試料採取することを可能にする。また、従来技術の針によって収集された生検材料によるよりも多くの利用可能な検査の選択肢があり、そのような選択肢はリフレックステスト（ｒｅｆｌｅｘ  ｔｅｓｔｉｎｇ）を有利に可能にする。例えば、ＡＭＡＣＲまたはＰＡＰ染色を用いた初期評価は、分子検査、例えば、蛍光ｉｎ  ｓｉｔｕハイブリダイゼーション、遺伝子アレイ、ＰＣＲ、ＮＧＳなどを保証し得る。
【００６０】
また、多くの遺伝的異常およびバイオマーカーは複数の供給源を有することがあり、細胞型に特異的ではない。Ｈｅｒ２−ｎｅｕ、ＰＴＥＮ、ｔＰ５３異常は前立腺以外の多くの癌において起こる。ＰＩＮ（前立腺上皮内腫瘍）において、前立腺上皮細胞は顕微鏡下で異常に見える可能性があり、時に異常が軽微である間には、場合により、そのような細胞は癌細胞に特徴的な細胞変化のように見え始める。本発明の目的は、細胞の正しい起源を特定することができるように、細胞型に対する特異性を提供することにある。例えば、尿管内に見られる細胞の異数性は、膀胱癌、扁平上皮癌、腎癌および前立腺癌を表し得る。これらの癌は同時に生じる可能性がある。前立腺癌は膀胱癌を有する男性の３０％において生じる。
【００６１】
本発明の試料収集方法は、ＰＳＡレベルの上昇によってもたらされる陽性または陰性の検査結果を確認するためにさらに用いることができる。よく知られているように、ＰＳＡは、ＵＴＩ、前立腺炎、前立腺処置、性活動などによって上昇することがあり、必ずしも前立腺癌の存在に起因しない場合がある。本発明は、ＰＳＡレベルの上昇が、癌に起因するか、または癌に関連しないいくつかの他の原因因子に起因するか判断されることを可能にする。上記で検討したように用いることができる多数の他の従来の検査、並びに多数の他の用途は当業者によって容易に理解される。
【００６２】
ここで一例として、本発明を実施するためにその構成要素が用いられる個体用前立腺検診キット（ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌ  ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｈｅａｌｔｈ  ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ  ｋｉｔ）を提供する。想定されるように、該キットは、１０対の剥離タブレットのパッケージを含み、１０対のタブレットはそれぞれ、一定量の剥離剤１を含有する第１タブレットと、一定量の剥離剤２を含有する第２タブレットとを含む。また前立腺クレードルおよび検体収集容器も含まれている。前記キットに備えられたタブレットを用いて、個体は前記剥離タブレットを１０日間にわたって１日１回摂取する。１０番目（最後）の第１剥離タブレットおよび第２剥離タブレットの対の摂取後２４時間に、前記個体は前立腺クレードルを、着座したときに前立腺を外部からマッサージする圧力を印加するような方法で、鼠径部に配置する。前記個体は前記前立腺クレードル上に１５分間着座する。１５分間の外部前立腺マッサージの後、射精液検体を前記検体収集容器に収集する。
【００６３】
ここで第２の実施例として、本発明を実施するためにその構成要素が用いられる個体用前立腺検診キットを提供する。そのような実施形態により、１０対の剥離タブレットのパッケージを含むキットが提供される。１０対のタブレットの各対は、一定量の剥離剤１を含有する第１タブレットおよび一定量の剥離剤２を含有する第２タブレットと、圧力印加器具１００と、検体収集容器とを含む。前記キットに備えられたタブレットを用いて、個体は一対の前記剥離タブレットを１０日間にわたって１日１回摂取する。１０番目（最後）の剥離タブレットの対の摂取後２４時間に、前記個体は、圧力付与機構１２０を有する圧力付与器具１００を用いて内部前立腺マッサージを実施する。圧力付与機構１２０は、直腸を介して挿入され、前立腺１０に隣接して配置され、かつ前立腺１０内の深部に配置された腫瘍２０から細胞を最終的に尿道６０内において遊離細胞９０として脱離させることを促進するために前立腺１０に圧縮力を与えるように作用する。前記前立腺マッサージを５分間以上にわたって実施した後に、射精液検体を前記標本収集容器内に収集する。
【００６４】
上述の前立腺検診キットのいずれかにおいて、排出尿が射精液検体と置き換えられてもよいことが考えられる。同様に、上述の前立腺検診キットのいずれかにおいて、前記内部または外部マッサージは、医師または前立腺マッサージ術の訓練を受けたその他の人の助けを借りて実施されてもよい。
【００６５】
本願において検討する方法は特に前立腺への適用に合わせられているが、目的の標的細胞の脱離を促進する薬剤を投与し、その標的細胞を容易かつ非侵襲的に収集されるように配置するという一般的な原理は、多くの異なる種類の癌に対して、または他の場合には生検などによって得ることが困難な細胞を確保しようと試みることが所望され得る場合にはいつでも、広範囲に応用されてもよいことが理解されるはずである。例えば、脱落によるか、剥離によるか、または任意の他の機構によるかにかかわらず、細胞の脱離を促進し、また喀痰試料によって得られる肺中の癌細胞のように容易にアクセスすることができる標的細胞を入手可能にするように作用する薬剤、または尿に排泄される腎臓内に位置する腫瘍細胞を脱離および放出するように作用する薬剤の投与は、本発明の範囲内のあると考えられるさらなる例であると思われる。そのため、そのように選択された薬剤は、標的器官において、それが肺であるか、腎臓であるか、または他の標的器官であるかにかかわらず、目的の細胞に対して脱離効果を与えるように作用し、さらに、最終的な試料収集に対するそのような薬剤の投与に関連するタイミングおよび／または状況は、目的の標的細胞を検出することができる統計的確率を増大するために、所与の試料中の細胞の数および濃度を最適化するように選択的に決定されることが理解されるであろう。
【００６６】
本発明の付加的な変更および改善はまた、当業者には明らかであり得る。したがって、本願に記載し示した部分およびステップの特定の組み合わせは、本発明の特定の実施形態のみを表すように意図され、本発明の趣旨および範囲内にある別の装置および方法の限定として機能するようには意図されない。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【国際調査報告】
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