(57)【要約】  本出願の開示は、２μｍ未満のＤ５０を有する神経ステロイドのナノ粒子と、ヒドロキシエチルデンプン、デキストラン及びポビドンから選択されるポリマー表面安定剤とを含み、患者の体重１ｋｇ当たり０．１〜５０ｍｇの神経ステロイドが含まれる製剤を患者に投与することを含む、患者における脳波バーストサプレッション又は脳波サプレッションを誘発する方法を開示する。神経ステロイドは、静脈内、筋肉内、皮下又は経口的に投与することができる。連続する静脈内投与、及び２回の連続する投与の間に３０分未満の間隔で、患者の体重１ｋｇ当たり０．５ｍｇのガナキソロンを含む連続するボーラス用量の静脈内、筋肉内、皮下又は経口的の投与は、本出願の開示に含まれる。【選択図】図４Ａ
2019537565.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
２μｍ未満のＤ５０を有する神経ステロイドのナノ粒子と、ヒドロキシエチルデンプン、デキストラン及びポビドンから選択されるポリマー表面安定剤とを含み、患者の体重１ｋｇ当たり０．１〜５０ｍｇの神経ステロイドが含まれる製剤を患者に投与することを含む、患者における脳波バーストサプレッション又は脳波サプレッションを誘発する方法。
【請求項２】
神経ステロイドが、式Ｉの化合物又はその薬学上許容される塩である、請求項１に記載の方法。
【化１】
2019537565.tif 000017
〔式中、破線を併記した直線は、二重結合又は単結合である。
ＸはＯ、Ｓ、又はＮＲ１１である。
Ｒ１は、水素、ヒドロキシル、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいヘテロアルキル、置換されていてもよいヘテロアリール、置換されていてもよいヘテロアリールアルキル、置換されていてもよいアリール、又は置換されていてもよいアリールアルキルである。
Ｒ４は、水素、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよい（シクロアルキル）アルキル、又は−ＯＲ４０である。
Ｒ４０は、水素、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよい（シクロアルキル）アルキル、又は置換されていてもよいＣ３〜Ｃ６炭素環である。
Ｒ４ａは、水素であるか、又はＲ４及びＲ４ａが一緒になってオキソ（＝Ｏ）を形成する。
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ５及びＲ６は、それぞれ独立して、水素、ヒドロキシル、ハロゲン、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよい（シクロアルキル）アルキル、又は置換されていてもよいヘテロアルキルである。
Ｒ７は、水素、ハロゲン、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいＣ３〜Ｃ６炭素環、置換されていてもよい（Ｃ３〜Ｃ６炭素環）アルキル、又は−ＯＲ７０である。
Ｒ７０は、水素、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいＣ３〜Ｃ６炭素環、又は置換されていてもよい（Ｃ３〜Ｃ６炭素環）アルキルである。
Ｒ８は、水素、置換されていてもよいアルキル、又は置換されていてもよいＣ３〜Ｃ６炭素環であり、Ｒ９は、ヒドロキシルであるか、又はＲ８及びＲ９が一緒になってオキソを形成する。
Ｒ１０は、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいヘテロアルキル、置換されていてもよいＣ３〜Ｃ６炭素環、又は置換されていてもよい（Ｃ３〜Ｃ６炭素環）アルキルである。
Ｒ１０ａは、水素、ハロゲン、又は置換されていてもよいアルキルである。ただし、破線を併記した直線が二重結合である場合、Ｒ１０ａは存在しない。
各アルキルは、Ｃ１〜Ｃ１０アルキルであり、任意に二重結合又は三重結合で置換された１以上の単結合を含んでもよい。
各ヘテロアルキルは、１以上のメチルが独立して選択された−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ１１）−、−Ｓ（＝Ｏ）−、又はＳ（＝Ｏ）２−で置換されたアルキルである。
Ｒ１１は、それぞれの場合に独立して選択され、水素、アルキル、又は１以上のメチレンが−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−若しくは−Ｎ−アルキルで置き換えられたアルキルである。〕
【請求項３】
神経ステロイドがガナキソロンである、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
神経ステロイドが、アロプレグナノロン、ガナキソロン、アルファキサロン、アルファドロン、ヒドロキシジオン、ミナキソロン、プレグナノロン、アセブロコール、イソプレグナノロン、テトラヒドロコルチコステロン、又は下式の化合物である、請求項２に記載の方法。
【化２】
2019537565.tif 000018
【請求項５】
神経ステロイドが、静脈内、筋肉内、皮下又は経口的に投与される、請求項１〜４のいずれかに記載の方法。
【請求項６】
２回の連続する投与の間に３０分未満の間隔で、連続するボーラス用量の静脈内、筋肉内、又は皮下注射として神経ステロイドが投与される、請求項１〜４のいずれかに記載の方法。
【請求項７】
１０分未満若しくは５分未満の間隔で、又は３分ごとに、ボーラス用量の神経ステロイド製剤が投与される、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
少なくとも３回、５回を超える、又は１０回を超える神経ステロイドのボーラス用量が投与される、請求項１〜７のいずれかに記載の方法。
【請求項９】
患者に投与される神経ステロイドの量が、患者の体重に対して２５０ｍｇ／ｋｇ、１００ｍｇ／ｋｇ、５０ｍｇ／ｋｇ、又は３０ｍｇ／ｋｇを超えない、請求項１〜８のいずれかに記載の方法。
【請求項１０】
持続注入液として神経ステロイドが静脈内に投与される、請求項１〜５のいずれかに記載の方法。
【請求項１１】
５ｍｇ／時間〜３００ｍｇ／時間、１０ｍｇ／時間〜２００ｍｇ／時間、又は２０ｍｇ／時間〜１５０ｍｇ／時間の速度で、神経ステロイドが投与される、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
０．０５ｍｇ／ｋｇ／時間〜５ｍｇ／ｋｇ／時間、０．１ｍｇ／ｋｇ／時間〜３．５ｍｇ／ｋｇ／時間、又は０．２ｍｇ／ｋｇ／時間〜２．５ｍｇ／ｋｇ／時間の速度で、神経ステロイドが投与される、請求項１０に記載の方法。
【請求項１３】
前記神経ステロイドの投与が患者に完全な麻酔効果をもたらさない、請求項１〜１２のいずれか記載の方法。
【請求項１４】
神経ステロイドの投与が患者に完全な麻酔効果をもたらす、請求項１〜１２のいずれかに記載の方法。
【請求項１５】
神経ステロイドナノ粒子が５００ｎｍ未満のＤ５０を有する、請求項１〜１４のいずれかに記載の方法。
【請求項１６】
神経ステロイド製剤が、以下の（ｉ）〜（ｉｖ）：
（ｉ）５００ｎｍ未満のＤ５０を有し、ガナキソロンを含むナノ粒子であって、ガナキソロンの重量百分率が１〜１０％であるナノ粒子；
（ｉｉ）ヒドロキシエチルデンプン、デキストラン、及びポビドンから選択されたポリマー表面安定剤であって、ポリマー表面安定剤の重量百分率が２〜２０％であるポリマー表面安定剤；
（ｉｉｉ）追加の表面安定剤がコール酸ナトリウム、デオキシコール酸ナトリウム、及び硫酸コレステロールナトリウムから選択されるイオン性又は非イオン性界面活性剤であり、界面活性剤の重量百分率が０．１〜２．０％である追加の表面安定剤；及び
（ｉｖ）消泡剤
を含む水性製剤であり、神経ステロイドがガナキソロンである、請求項１〜４のいずれかに記載の方法。
【請求項１７】
製剤が、以下（ｉ）〜（ｉｖ）：
（ｉ）５００ｎｍ未満のＤ５０を有し、ガナキソロンを含むナノ粒子であって、ガナキソロンの重量百分率が５％であるナノ粒子；
（ｉｉ）ヒドロキシエチルデンプン１３０／０．４及びプラスドンＣ−１２から選択されるポリマー表面安定剤であって、ポリマー表面安定剤の重量百分率が１０％である、ポリマー表面安定剤；
（ｉｉｉ）追加の表面安定剤がデオキシコール酸ナトリウムであり、デオキシコール酸ナトリウムの重量百分率が０．７５％である追加の表面安定剤；及び
（ｉｖ）任意に、重量％が０．００９％であるシメチコン
を含む水性製剤である、請求項１に記載の方法。
【請求項１８】
てんかん症状を治療するための、又は麻酔をもたらすための神経ステロイドの有効な用量を決定する方法であって、
患者の体重１ｋｇ当たり０．１〜５０ｍｇの神経ステロイドを患者に静脈内、筋肉内又は皮下に投与すること、
患者の脳内の脳波パターンを連続的に測定すること、
脳波パターン中の脳波バーストサプレッションを検出すること、及び
脳波パターン中に検出された脳波バーストサプレッションを生じさせるのに必要な神経ステロイドの量を有効な用量と決定すること、を含む方法。
【請求項１９】
神経ステロイドがガナキソロンであり、製剤が２μｍ未満のＤ５０を有する粒子を含む注射用ガナキソロン製剤であり、前記ナノ粒子が
ａ）神経ステロイド、及び
ｂ）ヒドロキシエチルデンプン、ポビドン、及びデキストランから選択される少なくとも１つのポリマー表面安定剤を含む、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
２回の連続する投与の間に３０分未満の間隔で、連続するボーラス用量として神経ステロイドが投与される、請求項１８又は１９に記載の方法。
【請求項２１】
神経ステロイドがガナキソロンであり、ガナキソロン製剤が３分毎に投与される、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
１０回以下のガナキソロンのボーラス用量が投与される、請求項２０に記載の方法。
【請求項２３】
投与されるガナキソロンの用量が少なくとも３０ｍｇ／ｋｇである、請求項２０に記載の方法。
【請求項２４】
持続注入液としてガナキソロンが静脈内に投与される、請求項２０に記載の方法。
【請求項２５】
５ｍｇ／時間〜３００ｍｇ／時間、１０ｍｇ／時間〜２００ｍｇ／時間、又は２０ｍｇ／時間〜１５０ｍｇ／時間の速度で、神経ステロイドが投与される、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
０．０５ｍｇ／ｋｇ／時間〜５ｍｇ／ｋｇ／時間、０．１ｍｇ／ｋｇ／時間〜３．５ｍｇ／ｋｇ／時間、又は０．２ｍｇ／ｋｇ／時間〜２．５ｍｇ／ｋｇ／時間の速度で、神経ステロイドが投与される、請求項２４に記載の方法。
【請求項２７】
ガナキソロンの投与が患者に完全麻酔をもたらす、請求項２０〜２６のいずれかに記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
＜関連出願への相互参照＞
本出願は、２０１６年１０月１４日に出願された米国仮出願第６２／４０８，３３０号及び２０１７年４月１８日に出願された米国仮出願第６２／４８６，７８１号からの優先権を主張し、その両内容は、全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【背景技術】
【０００２】
プレグナン神経ステロイドは、麻酔薬、鎮静薬、催眠薬、抗不安薬、抗けいれん薬として有用な化合物群である。これらの化合物は、非常に低い水溶性によって特徴付けられ、これがその製剤化における選択肢を制限する。これらの化合物は、麻酔や、特に激しい発作の治療のような、経口投与が排除される臨床適応症のために使用されるので、プレグナン神経ステロイドの注射用製剤が特に望ましい。
【０００３】
てんかん重積症（ＳＥ）は、てんかん患者が５分以上継続する発作、又は発作間に回復しない５分以内に１回以上の発作を経験する重度の発作性障害である。ある場合には、けいれん発作は数日又は数週間続くこともある。てんかん重積症は、従来の抗けいれん剤を用いて救急室で治療される。ベンゾジアゼピン（ＢＺ）等のＧＡＢＡＡ受容体モジュレーターは、第一選択薬である。ＢＺ単独投与に反応しない患者は、通常、ＢＺと組み合わせて麻酔剤又はバルビツール酸塩で治療される。ベンゾジアゼピン及び少なくとも１種の追加の抗てんかん薬で治療されているてんかん重積症患者の約２３〜４３％が治療に応答せず、難治性と考えられている（Rossetti, A. O. and Lowenstein, D. H., Lancet Neurol. (2011) 10(10): 922-930）。現在、これらの患者には良好な治療選択肢はない。難治性てんかん重積症（ＲＳＥ）患者の死亡率は高く、ほとんどのＲＳＥ患者は、そのＲＳＥ前の臨床状態には戻らない。ＳＥで病院に入院した患者の約１５％は、ＲＳに、更には超難治性ＳＥ（ＳＲＳＥ）に進行する。このＳＲＳＥでは、患者は２４時間以上の継続性又は再発性の発作を有する。これらの患者は麻酔薬治療を受けており、定期的に全身麻酔薬を外して治療効果を確認する。ＳＲＳＥは、高い死亡率及び罹患率と関連している（Shorvon, S. and Ferlisi, M., Brain, (2011) 134(10): 2802-2818）。
【０００４】
別の深刻な発作性障害は、ＰＣＤＨ１９の女性小児てんかんであり、米国において約１５００〜３０００の女性が罹患している。この遺伝性疾患は、人生の早い時期に発症する発作と関連しており、主に局限性群発性の発作は数週間続きうる。ＰＣＤＨ１９遺伝子の変異は、低レベルのアロプレグナノロンと関連している。患者はしばしば群発中に入院し、経静脈療法を必要とする。
【０００５】
ガナキソロンを含む神経ステロイドは、神経細胞の興奮性を調節する役割によって、麻酔特性を有することが知られている。神経ステロイドは、全身麻酔薬の標的であるニコチン性アセチルコリン受容体を阻害すると考えられている。
【０００６】
バーストサプレッションは、脳の無活動期間と高電圧の電気的活動期間との交替を特徴とするＥＥＧパターンである。バーストサプレッションパターンは、麻酔患者又は昏睡状態の患者等の脳の状態が不活発な人に見られる。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Rossetti, A. O. and Lowenstein, D. H., Lancet Neurol. (2011) 10(10): 922-930
【非特許文献２】Shorvon, S. and Ferlisi, M., Brain, (2011) 134(10): 2802-2818
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
バーストサプレッションをもたらす薬剤を用いて治療することができる発作性障害のための更なる治療が必要とされている。これらの発作性障害には、てんかん重積症、難治性てんかん重積症、超難治性てんかん重積症、及びＰＣＤＨ１９女性小児てんかんが含まれる。更なる鎮静剤又は麻酔剤も必要とされている。本出願の開示は、注射用プレグナン神経ステロイド製剤を提供することによって、この必要性を満たす。そして本明細書に記載される更なる利点を提供する。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本出願の開示は、脳波（ＥＥＧ）バーストサプレッション／ＥＥＧサプレッションを誘発するために神経ステロイド製剤を投与する方法を提供する。本方法は、２μｍ未満のＤ５０を有する神経ステロイドのナノ粒子と、ヒドロキシエチルデンプン、デキストラン及びポビドンから選択されるポリマー表面安定剤とを含み、患者の体重１ｋｇ当たり０．１〜２５０ｍｇの神経ステロイドが含まれる製剤を患者に投与することを含む。本製剤は、２回の連続する投与の間に３０分未満の間隔で、連続するボーラス用量として投与することができる。特定の実施態様において、神経ステロイドは以下の式Ｉの化合物又はその薬学上許容される塩である。
【００１０】
【化１】
2019537565.tif 000003
【００１１】
〔式中、破線を併記した直線は、二重結合又は単結合である。
ＸはＯ、Ｓ、又はＮＲ１１である。
Ｒ１は、水素、ヒドロキシル、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいヘテロアルキル、置換されていてもよいヘテロアリール、置換されていてもよいヘテロアリールアルキル、置換されていてもよいアリール、又は置換されていてもよいアリールアルキルである。
Ｒ４は、水素、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよい（シクロアルキル）アルキル、又は−ＯＲ４０である。
Ｒ４０は、水素、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよい（シクロアルキル）アルキル、又は置換されていてもよいＣ３〜Ｃ６炭素環である。
Ｒ４ａは、水素であるか、又はＲ４及びＲ４ａが一緒になってオキソ（＝Ｏ）を形成する。
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ５及びＲ６は、それぞれ独立して、水素、ヒドロキシル、ハロゲン、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいシクロアルキル、置換されていてもよい（シクロアルキル）アルキル、又は置換されていてもよいヘテロアルキルである。
Ｒ７は、水素、ハロゲン、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいＣ３〜Ｃ６炭素環、置換されていてもよい（Ｃ３〜Ｃ６炭素環）アルキル、又は−ＯＲ７０である。
Ｒ７０は、水素、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいＣ３〜Ｃ６炭素環、又は置換されていてもよい（Ｃ３〜Ｃ６炭素環）アルキルである。
Ｒ８は、水素、置換されていてもよいアルキル、又は置換されていてもよいＣ３〜Ｃ６炭素環であり、Ｒ９は、ヒドロキシルであるか、又はＲ８及びＲ９が一緒になってオキソを形成する。
Ｒ１０は、水素、ハロゲン、ヒドロキシル、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいヘテロアルキル、置換されていてもよいＣ３〜Ｃ６炭素環、又は置換されていてもよい（Ｃ３〜Ｃ６炭素環）アルキルである。
Ｒ１０ａは、水素、ハロゲン、又は置換されていてもよいアルキルである。ただし、破線を併記した直線が二重結合である場合、Ｒ１０ａは存在しない。
各アルキルは、Ｃ１〜Ｃ１０アルキルであり、任意に二重結合又は三重結合で置換された１以上の単結合を含んでもよい。
各ヘテロアルキルは、１以上のメチルが独立して選択された−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｎ（Ｒ１１）−、−Ｓ（＝Ｏ）−、又はＳ（＝Ｏ）２−で置換されたアルキルである。
Ｒ１１は、それぞれの場合に独立して選択され、水素、アルキル、又は１以上のメチレンが−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−若しくは−Ｎ−アルキルで置き換えられたアルキルである。〕
【００１２】
特定の実施態様において、神経ステロイドはガナキソロンである。他の実施態様において、神経ステロイドは、アロプレグナノロン、アルファキサロン、ミナキソロン、アロテトラヒドロデオキシコルチコステロン、エチオコラノン、デヒドロエピアンドロステロン（硫酸デヒドロエピアンドロステロンを含む）、又はプレグナノロン（硫酸プレグナノロンを含む）である。神経ステロイドの投与は、静脈内、筋肉内、皮下又は経口投与によることができる。投与は、単回（ボーラス）投与、又は３〜３０分の間隔をあけた繰り返し投与、又は点滴静脈注射若しくは筋肉内若しくは皮下デポーによる持続注入による投与であり得る。
【００１３】
本出願の開示はまた、てんかん症状を治療するための、又は麻酔をもたらすためのガナキソロンの有効な用量レベルを決定する方法を提供する。本方法に従って、患者の体重１ｋｇ当たり０．１〜５０ｍｇの神経ステロイドを含む製剤の連続するボーラス用量を、２回の連続する投与の間に３０分未満の間隔で、静脈内、筋肉内、又は皮下に投与する。次に、患者の脳内の脳波パターンを連続的に測定する。累積的な有効な用量の投与後、脳波パターン中の脳波バーストサプレッション／ＥＥＧサプレッションが検出される。脳波パターン中に検出された脳波バーストサプレッションを生じさせるのに必要な神経ステロイドの量を有効な用量と決定する。続いて、有効な用量によって生成される神経ステロイドの血漿レベルが患者中で維持され、てんかん症状が治療されるか、又は麻酔がもたらされる。
【００１４】
本出願の開示の上記及び他の側面及び特徴が、添付の図面を参照しながらその例示的な実施態様を詳細に説明することによってより明らかになるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
【図１】図１は、ガナキソロン製剤の様々な用量で得られたＥＥＧバーストサプレッション／ＥＥＧサプレッションのパターンを示す。
【図２Ａ】図２Ａは、ガナキソロン製剤が３分毎に投与されたテールピンチ試験の結果を示す、初回投与からの時間（分）に対するテール反射スコア（tail reflex score）のグラフである。
【図２Ｂ】図２Ｂは、ガナキソロン製剤が３０分毎に投与されたテールピンチ試験の結果を示す、初回投与からの時間（分）に対するテール反射スコアのグラフである。
【図３Ａ】図３Ａは、ガナキソロン／ヒドロキシエチルデンプン製剤及び陽性コントロールのガナキソロン／カプチゾール（Captisol）製剤について、１２ｍｇ／ｋｇ用量の単回静脈内注射後のラットにおける２時間の平均血漿ガナキソロン濃度（ｎｇ／ｍｌ）を示す。
【図３Ｂ】図３Ｂは、ガナキソロン／ヒドロキシエチルデンプン製剤及び陽性コントロールのガナキソロン／カプチゾール製剤について、１２ｍｇ／ｋｇ用量の単回静脈内注射後のラットにおける２時間の平均脳ガナキソロン濃度（ｎｇ／ｍｌ）を示す。ガナキソロンナノ粒子製剤は、ガナキソロン／カプチソール溶液製剤よりも実質的に高いガナキソロンの脳濃度を与えた。
【図４Ａ】図４Ａは、ガナキソロンナノ懸濁製剤の用量反応曲線を示す。発作を誘発するためのピロカルピンを投与し（「時間」−１５分）、続いて「時間」０でガナキソロンボーラスを静脈内投与し、ラットにおけるＥＥＧパワーをモニターした。
【図４Ｂ】図４Ｂは、ピロカルピン誘発発作モデルにおけるＥＥＧパワーに対するガナキソロンナノ懸濁製剤及び完全に可溶化されたカプチゾール製剤の効果の比較を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
数値範囲の記述は、本明細書中に別段の指示がない限り、当該範囲内の別個のそれぞれの値を個別に参照する簡略方法として機能することを意図しており、それぞれの別個の値は本明細書に個別に列挙されている場合と同様に、明細書に組み込まれる。全ての範囲の終点は当該範囲内に含まれており、独立して組み合わせることが可能である。本明細書中に記載される全ての方法は、本明細書中で別段の指示がなされない限り、又は文脈により明らかに矛盾しない限り、適切な順序で実施されうる。任意の及び全ての例、又は例示的な表現（例えば「・・・等の」）の使用は、単に説明のためのものであり、別段の主張がない限り、本発明の範囲の限定をもたらすものではない。本明細書中のいかなる表現も、特許請求の範囲に記載されていない要素が、本発明の実施に不可欠であると示していると解釈されるべきではない。
【００１７】
用語「ａ」及び「ａｎ」は、量の限定を意味するのではなく、むしろ、参照された項目の少なくとも１の存在を示す。
【００１８】
「約」という用語は、用語「概ね」と同義で用いられる。当業者が理解するように、「約」の正確な境界は、当該組成物の成分に依存する。例示的に、用語「約」の使用は、引用された値のわずかに外側の値、すなわち、±０．１％〜１０％の、有効かつ安全な値を示す。したがって、引用した範囲のわずかに外側の組成物も、本願の請求項の範囲に包含される。
【００１９】
用語「含む」は非限定的である。これらの移行句によって請求される実施形態には、他の非引用の要素が存在していてもよい。「含む」が移行句として使用される場合、他の要素が含まれてもよく、それが依然として請求項の範囲内の実施態様を構成してもよい。開放的な移行句「含む」は、中間的な遷移句「から実質的になる」、及び閉鎖句「からなる」を包含する。
【００２０】
「ボーラス用量」は、短期間、例えば１〜３０分以内に投与される、比較的大用量の薬剤の用量である。
【００２１】
「注入（Infusion）」投与は非経口投与であり、典型的には静脈内投与であるが、一部の実施態様には、硬膜外投与等の他の非経口投与が含まれる。注入投与は、ボーラス投与よりも長い期間、例えば少なくとも１５分間、少なくとも３０分間、少なくとも１時間、少なくとも２時間、少なくとも３時間、又は少なくとも４時間にわたって生じる。
【００２２】
「アルキル」は、特定の数の炭素原子、一般には１〜８個の炭素原子を有する、分枝鎖又は直鎖の飽和脂肪族炭化水素基である。本明細書で使用される用語Ｃ１〜Ｃ６アルキルは、１、２、３、４、５又は６個の炭素原子を有するアルキルを示す。他の実施態様は、１〜６個の炭素原子、１〜４個の炭素原子、又は１〜２個の炭素原子を有するアルキル、例えばＣ１〜Ｃ８アルキル、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、及びＣ１〜Ｃ２アルキルを含む。アルキルの例としては、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、３−メチルブチル、ｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、及びｓｅｃ−ペンチルが挙げられるが、これらに限定されない。本出願の開示において、「アルキル」は、１個以上のＣ−Ｃ飽和結合が二重結合又は三重結合で置き換えられたアルキル、すなわちアルケニル又はアルキニルを含む。
【００２３】
「アリール」は、芳香環に炭素のみを含む芳香族基を示す。典型的なアリールは、１〜３個の別個の環、縮合環、又はペンダント環を含むとともに、６〜１８個の環原子を含み、環原子としてヘテロ原子を有さない。示されている場合、そのようなアリールは、炭素又は非炭素の原子又は基でさらに置換されていてもよい。アリールには、例えば、フェニル、ナフチルが含まれ、これらには、１−ナフチル、２−ナフチル、及びビフェニルが含まれる。「アリールアルキル」置換基は、アルキレン連結基を介してアリールが置換する基に結合する、本明細書で定義されているアリールである。アルキレンは、それが２価であることを除いて、本明細書に記載されたアルキルである。
【００２４】
「炭素環」は、示された数の環原子を有し、全ての環原子が炭素である、飽和、不飽和又は芳香族の環式基である。「（炭素環）アルキル」は、アルキル連結基を介して炭素環が置換する基に結合する、定義された炭素環である。
【００２５】
「シクロアルキル」は、特定の数の炭素原子を有する飽和炭化水素環基である。単環式シクロアルキルは、典型的には３〜６個（３、４、５又は６個）の炭素環原子を有する。シクロアルキル置換基は、置換された窒素、酸素若しくは炭素原子からのペンダントであってもよく、又は２つの置換基を有していてもよい置換炭素原子は、スピロ基として結合したシクロアルキルを有していてもよい。シクロアルキルの例には、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、及びシクロヘキシルが含まれる。「（シクロアルキル）アルキル」は、Ｃ１〜Ｃ４アルキル又はＣ１〜Ｃ２アルキル等のアルキルを介してシクロアルキルが置換する基に結合する、記載されたシクロアルキルである。
【００２６】
「Ｃｍａｘ」は、最大濃度の点における血漿中の活性濃度の測定濃度である。
【００２７】
「ヘテロアルキル」は、少なくとも１個の炭素がヘテロ原子、例えばＮ、Ｏ又はＳで置換されている、記載されたアルキルである。
【００２８】
「ヘテロアリール」は、１〜４個、若しくはいくつかの実施態様において１〜２個の、Ｎ、Ｏ及びＳから選択されるヘテロ原子を含み、残る環原子が炭素である、示された数の環原子を有する安定な単環式芳香環であるか、又は、１〜４個、若しくはいくつかの実施態様において１〜２個の、Ｎ、Ｏ及びＳから選択されるヘテロ原子を含み、残る環原子が炭素である、少なくとも１つの５〜７員芳香環を含む安定な二環式又は三環式の芳香環である。単環式ヘテロアリールは、典型的には５〜７個の環原子を有する。特定の実施態様において、ヘテロアリールは、１、２、３又は４個のＮ、Ｏ及びＳから選択されるヘテロ原子を有し、２個以下のＯ原子及び１個のＳ原子を有する５又は６員単環式ヘテロアリールである。ヘテロアリールの例には、チエニル、フラニル、オキサゾリル、チアゾリル、イミダゾリル、ピロリル、ピラゾリル、ピリジル、ピリミジニル、及びピリジジニルが含まれる。
【００２９】
「患者」は、医学的治療を必要とするヒト又は非ヒト動物である。医学的治療には、障害又は傷害等の既存の状態の治療が含まれる。特定の実施態様において、治療はまた、予防的治療、又は診断的治療を含む。
【００３０】
「医薬組成物」は、式Ｉの化合物、塩、溶媒和物又は水和物等の、少なくとも１種の活性成分と、担体等の少なくとも１種の他の物質とを含む組成物である。医薬組成物は、１つ以上のさらなる活性成分を含有していてもよい。特定される場合、医薬組成物は、ヒト薬物又は非ヒト薬物の、米国ＦＤＡのＧＭＰ（医薬品適性製造基準）基準を満たす。「薬学的組み合わせ」は、少なくとも２つの活性成分の組み合わせであり、単一投与形態の中で組み合わされてもよいし、発作障害等の障害を治療するために活性成分を一緒に使用するべきとの指示書と共に、別々の投与形態で一緒に提供されてもよい。
【００３１】
ポリビドン及びポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）としても知られる「ポビドン」は、モノマーであるＮ−ビニルピロリドンから作られた水溶性ポリマーである。プラスドン（Plasdone）Ｃ−１２及びＣ−１７は、Ｎ−ビニルピロリドンの医薬グレードのホモポリマーである。プラスドンＣ−１２は、１０．２〜１３．８のＫ値、及び４０００ｄの公称分子量を有する。プラスドンＣ−１７は、１５．５〜１７．５のＫ値、及び１００００ｄの公称分子量を有する。
【００３２】
本明細書で使用される「置換された」という用語は、指定された原子又は基上の任意の１以上の水素が、指定された原子の通常の原子価を超えない範囲で、示された基から選択されて置き換えられることを意味する。置換基がオキソ（すなわち、＝Ｏ）である場合、当該原子上の２個の水素が置換される。オキソがヘテロ芳香族部分を置換する場合、得られる分子は場合により互変異性体を採用することができる。例えば、２−位又は４−位でオキソにより置換されたピリジルは、ピリジン又はヒドロキシピリジンとして記載されることもある。置換基及び／又は類似体の組み合わせは、そのような組合せが安定な化合物又は有用な合成中間体をもたらす場合にのみ許容される。安定な化合物又は安定な構造は、反応混合物からの単離及びその後の有効な治療剤への処方に耐えるのに十分に頑強な化合物であることが示唆されることを意味する。特に明記しない限り、置換基はコア構造に向けて命名される。例えば、アミノアルキルは、この置換基のコア構造への結合点がアルキル部分にあることを意味し、アルキルアミノは、結合点がアミノの窒素への結合であることを意味する。
【００３３】
「置換された」又は「置換されていてもよい」位置に存在していてもよい適切な基としては、例えば、ハロゲン；シアノ；−ＯＨ；オキソ；−ＮＨ２；ニトロ；アジド；アルカノイル（例えば、Ｃ２〜Ｃ６アルカノイル）；Ｃ（Ｏ）ＮＨ２；１〜８個の炭素原子、又は１〜６個の炭素原子を有するアルキル（シクロアルキル及び（シクロアルキル）アルキルを含む）；１個以上の不飽和結合、及び２〜８個、又は２〜６個の炭素原子を有する基を含むアルケニル及びアルキニル；１個以上の酸素連結基、及び１〜８個、又は１〜６個の炭素原子を有するアルコキシ；フェノキシ等のアリールオキシ；１個以上のチオエーテル連結基、及び１〜８個、又は１〜６個の炭素原子を有する基を含むアルキルチオ；１個以上のスルフィニル連結基、及び１〜８個、又は１〜６個の炭素原子を有する基を含むアルキルスルフィニル；１以上のスルホニル連結基、及び１〜８個、又は１〜６個の炭素原子を有する基を含むアルキルスルホニル；１個以上のＮ原子、及び１〜８個、又は１〜６個の炭素原子を有する基を含むアミノアルキル；１〜６個の炭素原子のアルキルを有する基を含むモノ又はジアルキルアミノ；１〜６個の炭素原子のアルキルを有するモノ又はジアルキルアミノカルボニル（すなわち、アルキルＮＨＣＯ−又は（アルキル１）（アルキル２）ＮＣＯ−）；６個以上の炭素を有するアリールが含まれるが、これらに限定されない。特定の実施態様において、任意に置換される位置に存在し得る置換基には、ハロゲン、ヒドロキシル、−ＣＮ、−ＳＨ、ニトロ、オキソ、アミノ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルチオ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルスルホニル、モノ及びジ（Ｃ１〜Ｃ４アルキル）アミノ、モノ及びジＣ１〜Ｃ４アルキルカルボキサミド、（Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル）Ｃ０〜Ｃ２アルキル、Ｃ１〜Ｃ２ハロアルキル、及びＣ１〜Ｃ２ハロアルコキシが含まれる。
【００３４】
「治療有効量」又は「有効量」は、薬理学的効果を達成するための医薬の量である。用語「治療有効量」は、例えば、予防有効量を含む。神経ステロイドの「有効量」は、過度の有害な副作用なしに所望の薬理学的効果又は治療的改善を達成するために必要な量である。神経ステロイドの有効量は、特定の患者及び疾患に応じて、当業者によって選択される。「有効量」又は「治療有効量」は、神経ステロイドの代謝の変化、年齢、体重、患者の全身状態、治療される状態、治療される状態の重症度、処方する医師の判断等によって、患者ごとに変化しうるものである。
【００３５】
「治療する」又は「治療」は、障害の抑制、例えば、障害の発症の阻止、障害の緩和、障害又は疾患の減退の誘起、疾患又は障害によって引き起こされる状態の緩和、疾患又は障害の症状の軽減等の障害の任意の治療を意味する。本出願の開示の文脈において、治療は、発作性障害を有する患者における麻酔の実施、活発な発作の阻止、及び発作の頻度及び重症度の軽減を含む。
【００３６】
神経ステロイドの「ナノ粒子懸濁液」又は「ナノ粒子分散液」又は「ナノ分散液」は、水性媒体中に懸濁された２０００ｎｍ未満の体積加重メジアン径（Ｄ５０）を有する神経ステロイド粒子を指し、互換的に使用される。
【００３７】
化学の説明
本出願の開示は、脳波（ＥＥＧ）バーストサプレッション／ＥＥＧサプレッションを誘発するために神経ステロイド製剤を投与する方法を提供する。
【００３８】
神経ステロイドは、課題を解決するための手段の節で論じた式Ｉの化合物又はその塩であり得る。特定の実施態様において、神経ステロイドは、アロプレグナノロン、ガナキソロン、アルファキサロン、アルファドロン、ヒドロキシジオン、ミナキソロン、プレグナノロン、アセブロコロンである。神経ステロイドは、ガナキソロンであり得る。神経ステロイドはまた、下式を有する式Ｉの化合物であってもよい。
【００３９】
【化２】
2019537565.tif 000004
【００４０】
神経ステロイドは、静脈内、筋肉内、皮下又は経口的に投与することができる。
【００４１】
特定の実施態様において、２回の連続する投与の間に３０分未満、１０分未満、５分未満又は３分の間隔で、体重１ｋｇ当たり、０．１ｍｇ〜１００ｍｇ、０．１ｍｇ〜５０ｍｇ、０．１ｍｇ〜１０ｍｇ、少なくとも１０ｍｇ、少なくとも５ｍｇ、少なくとも３ｍｇ、少なくとも１ｍｇ、少なくとも０．５ｍｇ、少なくとも０．１ｍｇの神経ステロイドを含む、静脈内ボーラス用量等の連続するボーラス用量として神経ステロイドが、投与される。特定の実施態様において、少なくとも３回、５回を超える、又は１０回を超える神経ステロイドのボーラス用量が投与される。
【００４２】
特定の実施態様において、神経ステロイドはガナキソロンである。ガナキソロン（ＣＡＳ登録番号３８３９８−３２−２、３α−ヒドロキシ−３β−メチル−５α−プレグナン−２０−オン）は、てんかん及び他の中枢神経系の疾患の治療に有用な抗けいれん活性を有する合成ステロイドである。
【００４３】
【化３】
2019537565.tif 000005
【００４４】
ガナキソロンは、経口投与後にヒト血漿中で約２０時間という比較的長い半減期を有す
る（Nohria, V. and Giller, E., Neurotherapeutics, (2007) 4(1): 102-105）。さらに、ガナキソロンは短いＴｍａｘを有し、これは治療的血中濃度に迅速に到達することを意味する。したがって、初回のボーラス用量（負荷用量）は必要ではない可能性があり、これは他の治療よりも有利な点である。ガナキソロンは、成人及び小児のてんかん患者における発作の治療に有用である。
【００４５】
アロプレグナノロン（ＣＡＳ登録番号５１６−５４−１、３α，５α−テトラヒドロプロゲステロン）は、抗けいれん活性を有する内因性プロゲステロン誘導体である。
【００４６】
【化４】
2019537565.tif 000006
【００４７】
アロプレグナロノンは、ヒト血漿中で４５分という比較的短い半減期を有する。発作の治療効果に加えて、アロプレグナノロンは、アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病、筋萎縮性側索硬化症等の神経変性疾患の治療、及びニーマン・ピック病Ａ、Ｂ及びＣ、ゴーシェ病、及びタイ・サックス病等のコレステロール合成の異常を特徴とするリソソーム蓄積障害の治療について評価されている（参照、ＵＳ８６０４０１１。なお、神経障害を処置するためのアロプレグナノロンの使用に関するその教示については参照により本明細書に組み込まれる）。
【００４８】
アルファキサロン（ＣＡＳ登録番号２３９３０−１９−０、３α−ヒドロキシ−５α−プレグナン−１１，２０−ジオン）は、麻酔作用を有する神経ステロイドである。それは獣医学診療では全身麻酔薬として使用される。麻酔薬は、難治性発作の治療のための抗けいれん薬と組み合わせて頻繁に投与される。アルファキサロンを単独で、又はガナキソロン又はアロプレグナノロンと組み合わせて含む注射用ナノ粒子神経ステロイド剤形は、本出願の開示の範囲内である。
【００４９】
【化５】
2019537565.tif 000007
【００５０】
アルファドロン（ＣＡＳ登録番号１４１０７−３７−０、３α，２１−ジヒドロキシ−５α−プレグナン−１１，２０−ジオン）は、麻酔性を有する神経ステロイドである。その塩であるアルファドロン酢酸塩は、アルファキサロンと組み合わせて獣医学の麻酔薬として使用される。
【００５１】
【化６】
2019537565.tif 000008
【００５２】
本出願の開示の注射用ナノ粒子神経ステロイド製剤に使用することができる追加の神経ステロイドには、ヒドロキシジオン（ＣＡＳ登録番号３０３−０１−５、（５β）−２１−ヒドロキシプレグナン−３，２０−ジオン）、ミナキソロン（ＣＡＳ登録番号６２５７１−８７−３、（２β，３α，５α，１１α）−１１−（ジメチルアミノ）−２−エトキシ−３−ヒドロキシプレグナン−２０−オン）、プレグナノロン（ＣＡＳ登録番号１２８−２０−１、（３α，５β）−ｄ−ヒドロキシプレグナン−２０−オン）、レナノロン（ＣＡＳ登録番号５６５−９９−１、３α−ヒドロキシ−５β−プレグナン−１１，２０−ジオン）、イソプレグナノロン（ＣＡＳ登録番号５１６−５５−２、３β−ヒドロキシ−５α−プレグナン−２０−オン）、又はテトラヒドロコルチコステロン（ＣＡＳ登録番号６８−４２−８、３α，５α−プレグナン−２０−ジオン）が含まれる。
【００５３】
特定の実施態様において、神経ステロイドは、課題を解決するための手段の節で示された式Ｉの化合物又はその薬学上許容される塩である。特定の実施態様において、神経ステロイドは、ガナキソロンである。他の実施態様において、神経ステロイドは、アロプレグナノロン、アルファキサロン、ミナキソロン、テトラヒドロデオキシコルチコステロン、エチオコラノン、デヒドロエピアンドロステロン、若しくはプレグナノロン、又はこれらの薬学上許容される塩である。
【００５４】
特定の実施態様において、神経ステロイドは、アロプレグナノロン、ガナキソロン、アルファキサロン、アルファドロン、ヒドロキシジオン、ミナキソロン、プレグナノロン、アセブロコール、イソプレグナノロン、又はテトラヒドロコルチコステロンである。
【００５５】
本出願の開示には、課題を解決するための手段の節で示された式Ｉの化合物が含まれ、同節中、神経ステロイドは、可変基（例えば、Ｒ１〜Ｒ１１）の以下の条件の全てが満たされた、式Ｉの化合物である。式Ｉの安定な化合物が生じる限り、本出願の開示で使用される可変基の全ての定義を組み合わせることができる。
【００５６】
Ｒ１は、メチル、−ＣＨ２Ｂｒ、又は−ＣＨ２ＯＨである。
Ｒ１は下式の基である。
【００５７】
【化７】
2019537565.tif 000009
【００５８】
ＲＡ、ＲＢ、ＲＣ、ＲＤ、及びＲＥの各々の例は、独立して、水素、ハロゲン、−ＮＯ２、−ＣＮ、−ＯＲＧＡ、−Ｎ（ＲＧＡ）２、−Ｃ（＝Ｏ）ＲＧＡ、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＧＡ、−ＯＣ（＝Ｏ）ＲＧＡ、−ＯＣ（＝Ｏ）ＯＲＧＡ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＧＡ）２、−Ｎ（ＲＧＡ）Ｃ（＝Ｏ）ＲＧＡ、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＧＡ）２、−Ｎ（ＲＧＡ）Ｃ（＝Ｏ）ＯＲＧＡ、−Ｎ（ＲＧＡ）Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＲＧＡ）２、−ＳＲＧＡ、−Ｓ（Ｏ）ＲＧＡ、例えば、−Ｓ（＝Ｏ）ＲＧＡ、−Ｓ（＝Ｏ）２ＲＧＡ、−Ｓ（＝Ｏ）２ＯＲＧＡ、−ＯＳ（＝Ｏ）２ＲＧＡ、−Ｓ（＝Ｏ）２Ｎ（ＲＧＡ）２、−Ｎ（ＲＧＡ）Ｓ（＝Ｏ）２ＲＧＡ、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいＣ３〜Ｃ６炭素環基、又は置換されていてもよい３〜６員へテロシクリルである。ＲＧＡの例は、独立して、水素、置換されていてもよいアルキル、置換されていてもよいＣ３〜Ｃ６炭素環基、置換されていてもよい３〜６員ヘテロシクリル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいヘテロアリール、酸素と結合している場合の酸素保護基、窒素に結合している場合の窒素保護基であるか、又は２個のＲＧＡが介在する原子と共に一緒になって、置換又は非置換のヘテロシクリル又はヘテロアリール環を形成する。
【００５９】
特定の実施態様において、ＲＡ、ＲＢ、ＲＣ、ＲＤ、及びＲＥは、独立して、水素、ハロゲン、シアノ、メチル、メトキシ、エチル、エトキシ、Ｃ１〜Ｃ２ハロアルキル、及びＣ１〜Ｃ２ハロアルコキシから選択される。
特定の実施態様において、Ｒ１は、下式の基であり、
【００６０】
【化８】
2019537565.tif 000010
【００６１】
ＲＡ、ＲＢ、及びＲＣが全て水素であるか、又はＲＡ及びＲＣが水素であり、ＲＢがシアノである。
【００６２】
本出願の開示は、上記のＲ１値のいずれかを有する式Ｉの化合物及び塩であって、Ｒ２がメチルであり、Ｒ３が水素であり、Ｒ４とＲ４ａが共に水素であるか、又は一緒になってオキソを形成し、Ｒ６が水素であり、Ｒ７が水素であり、Ｒ８が水素又はメチルであり、Ｒ９がヒドロキシルであるか、又はＲ８とＲ９が一緒になってオキソを形成し、及びＲ１０とＲ１０Ａが共に水素である、化合物及び塩に関する。
【００６３】
特定の実施態様において、破線を併記した直線は、単結合でもある。
特定の実施態様において、式Ｉは、以下の下位構造のうちの１つで表される。
【００６４】
【化９】
2019537565.tif 000011
【００６５】
投与方法
本出願の開示は、ＥＥＧバーストサプレッション／ＥＥＧサプレッションを誘発するためにガナキソロン製剤を投与する方法を提供する。投与方法には、静脈内投与、筋肉内投与、経口投与、及び皮下投与が含まれる。例えば、２０００ｎｍ未満のＤ５０を有する神経ステロイドナノ粒子及びポリマー表面安定剤を含む注射用神経ステロイド製剤の連続する静脈内投与によって、バーストサプレッションがもたらされ得る。健康な志願者における臨床試験から、ガナキソロン製剤の連続する点滴静脈注射によって、ＥＥＧの緩慢化を表す麻酔の尺度であるバイスペクトル指数（ＢＩＳ）が低下することが示された。ＢＩＳはバーストサプレッションと同等ではないが、バーストサプレッションが誘導され得る最低用量をある程度示す。４ｍｇ／時間の用量でＢＩＳが変化することが分かった。
【００６６】
投与方法にはまた、反復静脈内投与が含まれる。
【００６７】
他の実施態様には、２回の連続する投与の間に３０分未満の間隔で、体重１ｋｇ当たり、０．１ｍｇ〜１００ｍｇ、０．１ｍｇ〜５０ｍｇの神経ステロイド、又は体重１ｋｇ当たり、０．５ｍｇの神経ステロイドを含む、神経ステロイド製剤の連続するボーラス用量を、静脈内、筋肉内、経口的又は皮下に投与することが含まれる。ガナキソロン及びアロプレグナノロンを含む多くの神経ステロイドは経口利用可能性が低く、有効な脳内濃度を達成することが困難であることが証明されている。２μｍ（２０００ｎｍ）未満のＤ５０を有するナノ粒子を含む注射用神経ステロイド製剤が、驚くほど高い脳レベルの神経ステロイドを提供できることが発見された。ナノ粒子は、神経ステロイドと、ヒドロキシエチルデンプン、デキストラン、又はポビドン等のポリマー表面安定剤と、必要に応じて追加の表面安定剤としてのイオン性又は非イオン性界面活性剤とを含む。このような高レベルの神経ステロイドを提供するこれらの注射用ナノ粒子神経ステロイド製剤の能力は、同製剤を患者におけるバーストサプレッションの誘導及び麻酔の実施に特によく適したものにする。一実施態様において、静脈内投与は、２回の連続する注射の間に３０分未満の間隔で投与されてもよい注射である。神経ステロイド製剤は、２５分ごと、２０分ごと、１５分ごと、１０分ごと、５分ごと、４分ごと、３分ごと、２分ごと、及び１分ごとに注射することができ、その後、ＥＥＧ状態を維持するために持続注入を続けることができる。例えば、神経ステロイド製剤は３分毎に注射することができる。投与はまた、体重１キログラム当たり、０．１ｍｇ／分〜３ｍｇ／分の用量注入速度で、連続する点滴静脈注射によってもよい。
【００６８】
前段落に記載した神経ステロイド製剤の投与は、電気生理学的実験を実施することによって観察され得るバーストサプレッション／ＥＥＧサプレッションパターンを誘発し得る。現代の科学実験は、脳によって通常作り出される振動を変調させ又は混乱させる振動を、麻酔薬が引き起こすという仮説を強く支持している（Purdon, P.L., Sampson, A., Pavone, K.J., Brown, E.N., Anesthesiology, 2015 October; 123(4): 937-960）。これらのスペクトル変化は、脳波図で容易に見ることができる。麻酔薬の投与は、異なる脳波の波形によって特徴付けられる様々な行動的及び神経生理学的状態を誘発し得る。これらの麻酔深度の状態は、覚醒状態、逆説的興奮、鎮静状態、低速及びα振動麻酔状態、低速振動麻酔状態、バーストサプレッション、及び等電状態を含み得る。その中で、バーストサプレッションは、等電位（電気的な沈黙）の期間と電気的な期間が交互に現れることで特徴付けられる、意識不明と深刻な脳の不活化の状態を表す。スペクトログラムでは、バーストサプレッションは、脳の不活性期間によって分離された垂直線として見ることができる。多くの麻酔薬を投与すると、中間状態を通してバーストサプレッションが到達される。しかし、導入ボーラスとしてプロポフォールを投与すると、患者は覚醒状態から直接バーストサプレッションに入ることができることが示された。
【００６９】
完全な循環停止を必要とする手術のために、低体温によってバーストサプレッションを引き起こすことができる。あるいは、頭蓋内圧亢進症を治療するために、又はてんかん重積症を治療するために、脳保護のための集中治療室で麻酔薬を投与することでバーストサプレッションを誘発することができる。麻酔薬投与は、医学的に誘発された昏睡としても知られている。患者がバーストサプレッションにある場合、麻酔薬の用量の増加によって、バースト間のスプレッション期間の長さが増加する。昏睡等の深刻な脳の不活化を伴う他の状態で、又は脳の発達障害のある人でも、脳サプレッションが観察されている。このデータは、異なるメカニズムがこの状態に到達する原因となり得ることを示唆している。
【００７０】
バーストサプレッションは、バーストサプレッションの比又はバーストサプレッションの確率を用いることによって定量化することができる。バーストサプレッションの比は、０〜１の間の数値であり、脳波が抑制されている時間の割合を所定の時間間隔中で測定する。バーストサプレッションの確率は、脳がサプレッション状態である瞬間的な確率であり、これは状態空間法を用いて計算することができ、これを用いることで、リアルタイムでバーストサプレッションを追跡することができ、また医療上の昏睡のための制御システムを実装することができる。バーストサプレッションの比とバーストサプレッションの確率の両方が、麻酔深度を評価するために用いられている。
【００７１】
バーストサプレッションの特徴的なパターンは、細胞外カルシウムの枯渇の結果であり、神経細胞の活動によって回復する。スペクトログラムでは、バーストは、シナプス伝達を阻害するレベルまでの細胞外皮質カルシウムイオンの枯渇によって引き起こされるサプレッション期間によって交互にされている。サプレッションの間、神経細胞はカルシウムイオン濃度を正常レベルに回復させる。麻酔薬の用量が増えるにつれて、脳はより不活発になり、バースト期間が短くなり、サプレッション期間が長くなる。患者における麻酔薬の用量の更なる増加によって、通常、等電状態に至る。
【００７２】
その特徴のために、バーストサプレッションパターンを用いて、患者における昏睡のレベルを評価することができる。また、バーストサプレッションパターンを用いて、昏睡状態から患者の覚醒を誘導するための麻酔覚醒剤の能力を評価することもできる。
【００７３】
一実施態様において、ＥＥＧシグナルは、１０時間、９時間、８時間、７時間、６時間、５時間、４時間、３時間、２時間、又は１時間、測定することができる。例えば、ＥＥＧシグナルは６時間、連続的に測定することができる。一実施態様において、バーストサプレッションは、神経ステロイドの２回目の投与、３回目の投与、４回目の投与、５回目の投与、６回目の投与、７回目の投与、８回目の投与、９回目の投与、及び１０回目の投与の後に最初に検出することができる。したがって、バーストサプレッションの効果を誘発させるために、少なくとも２回、少なくとも３回、少なくとも４回、少なくとも５回、少なくとも６回、少なくとも７回、少なくとも８回、又は少なくとも９回の神経ステロイドボーラス用量を投与することができる。例えば、１０回以下の神経ステロイド用量を投与することができる。
【００７４】
一実施態様において、神経ステロイドの累積ボーラス用量は、少なくとも０．１ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、６ｍｇ／ｋｇ、９ｍｇ／ｋｇ、１２ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ、１８ｍｇ／ｋｇ、２１ｍｇ／ｋｇ、２４ｍｇ／ｋｇ、２７ｍｇ／ｋｇ、３０ｍｇ／ｋｇ、３５ｍｇ／ｋｇ、４０ｍｇ／ｋｇ、４５ｍｇ／ｋｇ、又は５０ｍｇ／ｋｇである。例えば、いくつかの実施態様において、神経ステロイドの累積ボーラス用量は、少なくとも３０ｍｇ／ｋｇである。本出願の開示は、神経ステロイドの投与が患者に完全麻酔を引き起こさない実施態様を含む。本出願の開示はまた、バーストサプレッションが達成され、完全麻酔が患者にもたらされる実施態様も含む。
【００７５】
製剤中の神経ステロイドの濃度は、０．１ｍｇ／ｍｌ〜１５ｍｇ／ｍｌ、例えば、１ｍｇ／ｍｌ〜１０ｍｇ／ｍｌであり得る。
【００７６】
別の実施態様において、神経ステロイド製剤は、２０００ｎｍ未満のＤ５０を有するナノ粒子を含む注射用神経ステロイド製剤であり、当該ナノ粒子が
ａ）神経ステロイド；及び
ｂ）少なくとも１つのポリマー表面安定剤
を含む、注射用神経ステロイド製剤であり得る。
【００７７】
注射用神経ステロイドナノ粒子製剤は、０．２５ｍｇ／ｍｌ、０．５ｍｇ／ｍｌ、１．０ｍｇ／ｍｌ、１．５ｍｇ／ｍｌ、２．０ｍｇ／ｍｌ、２．５ｍｇ／ｍｌ、３．０ｍｇ／ｍｌ、３．５ｍｇ／ｍｌ、４．０ｍｇ／ｍｌ、４．５ｍｇ／ｍｌ、５．０ｍｇ／ｍｌ、５．５ｍｇ／ｍｌ、６．０ｍｇ／ｍｌ、６．５ｍｇ／ｍｌ、７．０ｍｇ／ｍｌ、７．５ｍｇ／ｍｌ、８．０ｍｇ／ｍｌ、８．５ｍｇ／ｍｌ、９．０ｍｇ／ｍｌ、１０ｍｇ／ｍｌ、１１ｍｇ／ｍｌ、１２ｍｇ／ｍｌ、１３ｍｇ／ｍｌ、１５ｍｇ／ｍｌ、２０ｍｇ／ｍｌ、２５ｍｇ／ｍｌ、３０ｍｇ／ｍｌ、３５ｍｇ／ｍｌ、４０ｍｇ／ｍｌ、４５ｍｇ／ｍｌ、又は５０ｍｇ／ｍｌの濃度の神経ステロイドを含んでもよい。終点としての神経ステロイドの前記の濃度のいずれか２つを含む全ての範囲も本開示に含まれる。例えば、本出願の開示は、０．５ｍｇ／ｍｌ〜１５ｍｇ／ｍｌ、１．０ｍｇ／ｍｌ〜１０ｍｇ／ｍｌ、２．０ｍｇ／ｍｌ〜８．０ｍｇ／ｍｌ、又は４．０ｍｇ／ｍｌ〜８．０ｍｇ／ｍｌの神経ステロイドを含む、神経ステロイドナノ粒子製剤を含む。
【００７８】
ナノ粒子は、神経ステロイドと、ヒドロキシエチルデンプン、ポビドン又はデキストランのいずれか等の表面安定剤とを含み、表面安定剤に対する神経ステロイドの重量比が１０：１〜０．２：１、５：１〜０．２：１、４：１〜１：１、３．５：１〜３：１、又は３．３：１である。本出願の開示は、注射用神経ステロイドナノ粒子製剤が緩衝剤をさらに含む実施態様を含む。特定の実施態様において、緩衝液はリン酸緩衝液である。特定の実施態様において、緩衝液はリン酸緩衝食塩水である。
【００７９】
特定の実施態様において、表面安定剤は、血液増量剤等の血液代替物であってもよい。他の実施態様において、表面安定剤は、ヒドロキシエチルデンプン、デキストラン、又はポビドンのいずれかである。ヒドロキシエチルデンプンは、重度の失血に苦しむ患者の血液増量剤として使用される。神経ステロイドナノ粒子における使用に適したヒドロキシエチルデンプンの等級には、１３０／０．４（ＣＡＳ登録番号９００５−２７−０）が含まれる。特定の実施態様において、表面安定剤はデキストランである。デキストランは、様々な長さの鎖を有する一本鎖分枝グルカンである。デキストランは、ヒドロキシエチルデンプンと同様に、血液増量剤としても使用される。デキストランは分子量に従って分類される。４０ｋＤ〜７５ｋＤの分子量を有するデキストランが、血液増量剤として使用されている。静脈内使用に適したデキストランは、デキストラン４０、デキストラン６０、デキストラン７０及びデキストラン７５を含む。特定の実施態様において、表面安定剤は、４０ｋＤ〜７５ｋＤの分子量を有するデキストランである。特定の実施態様において、表面安定剤はデキストラン７０である。ポリビニルピロリドンとしても知られているポビドンは、別の承認された血漿増量剤である。ポビドンには、Ashland, Inc.のプラスドンが含まれる。
【００８０】
注射用神経ステロイドナノ粒子製剤の表面安定剤として有用な他の賦形剤には、ヒト血清アルブミン、加水分解ゼラチン、ポリオキシエチレンヒマシ油、及びポリオキシエチレン水素化ヒマシ油が含まれる。注射用神経ステロイドナノ粒子製剤は、界面活性剤を含む。
【００８１】
界面活性剤には、レシチン（リン脂質類）、トリオレイン酸ソルビタン及び他のソルビタンエステル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル（例えば、モノラウリン酸ポリオキシエチレンソルビタン（Ｔｗｅｅｎ２０）及びモノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン（Ｔｗｅｅｎ８０）（ICI Specialty Chemicals）等の商業的に入手可能なＴｗｅｅｎ）；ポロキサマー（例えば、エチレンオキシドとプロピレンオキシドのブロックコポリマーであるポロキサマー１８８（プルロニック（Pluronic）Ｆ−６８）及びポロキサマー３３８（プルロニックＦ−１０８））、レシチン、硫酸コレステロールナトリウム又は他のコレステロール塩、及びデオキシコール酸ナトリウム等の胆汁塩等の化合物が含まれる。界面活性剤として使用することができる追加の胆汁塩には、コール酸ナトリウム、グリコラートナトリウム、デオキシコール酸の塩、グリコール酸の塩、ケノデオキシコール酸の塩、及びリトコール酸の塩が含まれる。
【００８２】
本出願の開示は、５０ｎｍ〜２０００ｎｍ、５０ｎｍ〜５００ｎｍ、１０ｎｍ〜３５０ｎｍの体積加重メジアン径（Ｄ５０）を有する、又は５０ｎｍ〜３００ｎｍのＤ５０を有する、又は１００〜２５０ｎｍのＤ５０を有する、又は１５０〜２２０ｎｍのＤ５０を有する、又は２０００ｎｍ未満、５００ｎｍ未満、３５０ｎｍ未満、３００ｎｍ未満、２５０ｎｍ未満又は２００ｎｍ未満のＤ５０を有する神経ステロイドナノ粒子を含む。
【００８３】
一側面において、神経ステロイドナノ粒子は、以下の特性の少なくとも１つを有する：（ａ）９０重量％超の神経ステロイドが５０ｎｍ〜３００ｎｍの有効サイズを有するサブミクロン粒子の形態である；（ｂ）少なくとも２０重量％の神経ステロイドが非晶質粉末の形態である；（ｃ）少なくとも５０重量％の神経ステロイドが単一の多形の結晶性粉末の形態である；（ｄ）少なくとも５０重量％の神経ステロイドが半結晶性粉末の形態である；（ｅ）神経ステロイドが、粒子の少なくとも５０重量％、少なくとも６０重量％、少なくとも重量７０％、少なくとも重量８０％、又は少なくとも重量９０％が３００ｎｍ未満の有効サイズを有する粒子の形態である；（ｆ）神経ステロイドが、粒子の少なくとも５０重量％が２５０ｎｍ未満の有効サイズを有する粒子の形態である；（ｇ）神経ステロイドが５０ｎｍ〜２００ｎｍのＤ５０を有する粒子の形態であり、ここで粒径分布は、３スライスモデルによって記載され、ある百分率は１０ｎｍと１００ｎｍとの間の重量による有効粒径を有し、ある百分率は１００ｎｍと２００ｎｍの間の重量による有効粒径を有し、ある百分率は２００ｎｍを超える重量による有効粒径を有し、さらに、３スライスモデルはそれぞれｘ％／ｙ％／ｚ％と同定される（例えば、４０％／３０％／３０％）；（ｐ）神経ステロイドが、４０％／３０％／３０％、５０％／３０％／２０％、６０％／３０％／１０％、４０％／４０％／２０％、５０％／４０％／１０％、７０％／２０％／１０％、５０％／４５％／５％、７０％／２５％／５％、６０％／３５％／５％、８０％／１５％／５％、７０％／３０％／０％、６０％／４０％／０％、９０％／１０％／０％及び１００％／０％／０％の群から選択される３スライス分布を有する；（ｈ）神経ステロイドが、粒度分布の標準偏差を体積加重平均直径で除算した分布が、３０％未満、２５％未満、２０％未満、１５％未満、又は１０％未満である粒子の形態である。代替の実施態様において、組成物中の神経ステロイドは、前記の特性の少なくとも２つ、前記の特性の少なくとも３つ、前記の特性の少なくとも４つ、又は前記の特性の少なくとも５つを有する。
【００８４】
神経ステロイドナノ粒子は粉砕によって調製することができる。粉砕は任意の適当な粉砕機で行うことができる。適切なミルには、エアジェットミル、ローラーミル、ボールミル、アトライターミル、振動ミル、プラネタリーミル、サンドミル及びビーズミルが含まれる。小さな粒子が望まれる場合には、高エネルギー媒体ミルが好ましい。ミルは回転シャフトを含むことができる。
【００８５】
粉砕容器中に存在する、粉砕媒体、神経ステロイド、任意の液体分散媒、及び分散剤、湿潤剤、又は他の粒子安定化剤の好ましい割合は、広い範囲で変化しうるものであり、例えば、粉砕媒体の大きさ及び密度、選択されたミルのタイプ、粉砕時間等に依存する。このプロセスは、連続、バッチ又はセミバッチモードで実施することができる。高エネルギー媒体ミルでは、粉砕チャンバーの体積の８０％〜９５％を粉砕媒体で満たすことが望ましい場合がある。一方、ローラーミルでは、粉砕容器を半分まで空気で充填したままにすることがしばしば望ましく、残りの容積は、存在する場合には、粉砕媒体及び液体分散媒体を含む。これは、効率的な粉砕を可能にするローラーの容器内のカスケード効果を可能にする。しかし、湿式粉砕中に発泡が問題となる場合には、容器に液体分散媒体を完全に充填するか、又は消泡剤を液体分散液に添加してもよい。
【００８６】
磨砕時間は、広く変化しうるものであり、第一次的に、薬物、選択された機械的手段及び滞留条件、初期粒径及び所望の最終粒径等に依存する。
【００８７】
磨砕が完了した後、粉砕媒体を、ろ過、メッシュスクリーンによるふるい分け等の従来の分離技術を用いて、（乾燥形態又は液体分散形態のいずれかの）粉砕した神経ステロイド粒状生成物から分離する。
【００８８】
一側面において、粉砕媒体は、０．０５〜４ｍｍ、好ましくは０．１〜０．４ｍｍの範囲のサイズを有するビーズを含む。例えば、２５００ｒｐｍでの再循環モードで２５分〜１．５時間の粉砕滞留時間で、イットリウム安定化酸化ジルコニウム０．４ｍｍビーズによる神経ステロイドの高エネルギー粉砕を行うことができる。別の例では、バッチモードで２時間の粉砕滞留時間で、０．１ｍｍの酸化ジルコニウムボールを有する神経ステロイドの高エネルギー粉砕を行うことができる。さらに、懸濁液の粘度が劇的に変化するため、粉砕温度は５０℃を超えるべきではない。粉砕濃度は、１重量％〜４０重量％の神経ステロイドである。一実施態様において、濃度は２５重量％の神経ステロイドである。一実施態様において、粉砕媒体は、所望の粒子が均一に懸濁するように粘度を調節する少なくとも１種の薬剤と、連続的粉砕モードで均一な供給速度が適用されるように、最初の神経ステロイド懸濁液をコーティングするための湿潤剤及び／又は分散剤を含む。別の実施態様において、粘度を調節するために、及び／又は湿潤効果を提供するために少なくとも１種の薬剤を含む粉砕媒体でバッチ粉砕モードを利用し、これにより神経ステロイドが粉砕媒体中で良好に分散されるようになる。
【００８９】
注射用神経ステロイドナノ粒子製剤はまた、ｐＨを所望のレベルに調整するための酸緩衝剤又は塩基緩衝剤を含んでもよい。いくつかの実施態様において、所望のｐＨは、２．５〜１１．０、３．５〜９．０、５．０〜８．０、６．０〜８．０、７．０〜７．６、又は７．４である。注射用神経ステロイドナノ粒子製剤に有用な酸緩衝剤の例には、シュウ酸、マレイン酸、フマル酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、酢酸、メタンスルホン酸、ヒスチジン、コハク酸、トルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、エタンスルホン酸等が含まれる。上記の酸の酸塩も同様に使用することができる。製剤に有用な塩基緩衝剤の例には、炭酸ナトリウム及び重炭酸ナトリウム等の炭酸及び重炭酸塩系、リン酸一水素ナトリウム及びリン酸二水素ナトリウム等のリン酸緩衝系が含まれる。リン酸緩衝系の各成分の濃度は、１０ｍＭ〜２００ｍＭ、２０ｍＭ〜１５０ｍＭ、又は５０ｍＭ〜１００ｍＭである。
【００９０】
本出願の開示には、神経ステロイドナノ粒子製剤のｐＨが約７．４である実施態様が含まれる。
【００９１】
製剤は、ナトリウム又はカリウム等の電解質を含んでもよい。本出願の開示は、製剤が０．５％〜１．５％の塩化ナトリウム（食塩水）である実施態様を含む。
【００９２】
製剤は、それがヒト血漿と等張になるように張度調節剤を含んでもよい。製剤に有用な張度調節剤の例には、デキストロース、マンニトール、塩化ナトリウム、又はグリセリンが含まれるが、これらに限定されない。特定の実施態様において、張度調節剤は０．９％塩化ナトリウムである。
【００９３】
注射用神経ステロイドナノ粒子製剤は、神経ステロイドと適合性があり、本製剤のための所望の薬理学的放出プロフィールを提供することができる、任意の医薬上許容される賦形剤を含んでもよい。賦形剤には、例えば、懸濁剤、界面活性剤、可溶化剤、安定剤、潤滑剤、湿潤剤、消泡剤、希釈剤等が含まれる。薬学上許容される賦形剤は、アカシア、ゼラチン、コロイド状二酸化ケイ素、グリセロリン酸カルシウム、乳酸カルシウム、マルトデキストリン、グリセリン、ケイ酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、コレステロール、コレステロールエステル、カゼインナトリウム、大豆レシチン、タウロコール酸、ホスファチジルコリン、塩化ナトリウム、リン酸三カルシウム、リン酸二カリウム、セルロース及びセルロース複合体、ステアロイルラクチル酸ナトリウム糖、カラギーナン、モノグリセリド、ジグリセリド、アルファ化デンプン等を含むが、これらに限定されるものではない。
【００９４】
適切な消泡剤には、ジメチコン、ミリスチン酸、パルミチン酸、及びシメチコンが含まれる。
【００９５】
注射用神経ステロイドナノ粒子製剤は、エタノール等の非水性希釈剤、１つ以上のポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール）、油性担体、又はこれらの任意の組合せを含んでもよい。
【００９６】
注射用神経ステロイドナノ粒子製剤は、保存剤をさらに含んでもよい。保存剤は、細菌の増殖を阻害するために、又は活性成分の劣化を防止するために使用することができる。非経口製剤に好適な保存剤には、アスコルビン酸、アセチルシステイン、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、安息香酸、ベンジルアルコール、クロロブタノール、クロルヘキシデン、ｍ−クレゾール、２−エトキシエタノール、ヒト血清アルブミン、モノチオグリセロール、パラベン（メチル、エチル、プロピル、ブチル及び組み合わせ）、フェノール、フェニル水銀塩（酢酸塩、硼酸塩、硝酸塩）、ソルビン酸、亜硫酸塩（重亜硫酸塩及びメタ重亜硫酸塩）、及びチメロサールが含まれる。特定の実施態様において、保存剤は、アスコルビン酸、グルタチオン、又はアミノ酸等の抗酸化剤である。抗酸化剤として有用なアミノ酸には、メチオニン、システイン、及びＬ−アルギニンが含まれる。
【００９７】
一実施態様において、神経ステロイドナノ粒子は５００ｎｍ未満のＤ５０を有してもよい。
【００９８】
本出願の開示はまた、てんかん症状を治療するか、又は麻酔をもたらすために有効な神経ステロイドの用量レベルを検出するための方法を提供する。有効な用量の投与の後に、脳波パターンにおける脳波バーストサプレッションが検出される。続いて、有効な用量が患者に維持され、てんかん症状が治療されるか、又は麻酔が維持される。
【００９９】
一実施態様において、神経ステロイドは、バーストサプレッションをもたらすために、又はバーストサプレッションをもたらすために必要とされる神経ステロイドの用量を決定するために、持続注入として静脈内投与される。この方法に従って、神経ステロイドを、１ｍｇ／時間〜１０００ｍｇ／時間、１ｍｇ／時間〜５００ｍｇ／時間、５ｍｇ／時間〜３００ｍｇ／時間、１０ｍｇ／時間〜２００ｍｇ／時間、２０ｍｇ／時間〜１５０ｍｇ／時間、５ｍｇ／時間〜１５０ｍｇ／時間、５ｍｇ／時間〜１００ｍｇ／時間、少なくとも５ｍｇ／時間、少なくとも１０ｍｇ／時間、少なくとも２０ｍｇ／時間、又は少なくとも５０ｍｇ／時間の速度で、投与することができる。また、神経ステロイドを、０．０１ｍｇ／ｋｇ／時間〜１５ｍｇ／ｋｇ／時間、０．５ｍｇ／ｋｇ／時間〜１０ｍｇ／ｋｇ／時間、０．０５ｍｇ／ｋｇ／時間〜５ｍｇ／ｋｇ／時間、０．１ｍｇ／ｋｇ／時間〜３．５ｍｇ／ｋｇ／時間、０．２ｍｇ／ｋｇ／時間〜２．５ｍｇ／ｋｇ／時間、少なくとも０．５ｍｇ／ｋｇ／時間、少なくとも１ｍｇ／ｋｇ／時間、少なくとも２ｍｇ／ｋｇ／時間、又は少なくとも５ｍｇ／ｋｇ／時間の速度で、投与することができる。
【０１００】
神経ステロイドは、目標の血漿レベルが達成されるまで投与することができる。特定の実施態様において、少なくとも１０ｎｇ／ｍｌ、少なくとも２０ｎｇ／ｍｌ、少なくとも５０ｎｇ／ｍｌ、少なくとも１００ｎｇ／ｍｌ、少なくとも２００ｎｇ／ｍｌ、又は少なくとも５００ｎｇ／ｍｌの神経ステロイド濃度を得るために必要とされる神経ステロイドが、投与される。特定の実施態様において、１０ｎｇ／ｍｌ〜５０００ｎｇ／ｍｌ、１０ｎｇ／ｍｌ〜１０００ｎｇ／ｍｌ、１０ｎｇ／ｍｌ〜５００ｎｇ／ｍｌ、又は１０ｎｇ／ｍｌ〜３００ｎｇ／ｍｌの神経ステロイドの血漿レベルを達成するために必要とされる神経ステロイドが、投与される。
【０１０１】
一実施態様において、バーストサプレッションをもたらすために、又はバーストサプレッションを生成するために必要な用量を決定するために、ボーラス用量の神経ステロイドの用量が用いられる。この方法に従って、てんかん症状を治療するために、２回の連続する投与の間に３０分未満の間隔で、体重１ｋｇ当たり、０．５ｍｇの神経ステロイドを含む製剤の連続するボーラス用量が、最初に患者に静脈内、筋肉内、又は皮下に投与される。麻酔をもたらすには、有効な用量は、より高く、例えば０．１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇ、又は０．５ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ、２０ｍｇ／ｋｇ、３０ｍｇ／ｋｇ、４０ｍｇ／ｋｇ、又は５０ｍｇ／ｋｇである。次いで、患者の脳内の脳波記録パターンが連続的に測定される。
【０１０２】
バーストサプレッションの効果を誘発させるために、少なくとも２回、少なくとも３回、少なくとも４回、少なくとも５回、少なくとも６回、少なくとも７回、少なくとも８回、又は少なくとも９回の神経ステロイドのボーラス用量を投与することができる。例えば、１０回以下の神経ステロイドの用量を投与することができる。
【０１０３】
一実施態様において、神経ステロイドの累積ボーラス用量は、９ｍｇ／ｋｇ、１２ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ、１８ｍｇ／ｋｇ、２１ｍｇ／ｋｇ、２４ｍｇ／ｋｇ、２７ｍｇ／ｋｇ、３０ｍｇ／ｋｇ、４０ｍｇ／ｋｇ、又は５０ｍｇ／ｋｇを超えてはならない。例えば、特定の実施態様における神経ステロイドの累積ボーラス用量は、麻酔をもたらすためには、少なくとも３０ｍｇ／ｋｇの累積用量である。
【０１０４】
神経ステロイド製剤は、１分ごと、２分ごと、３分ごと、４分ごと、５分ごと、１０分ごと、１５分ごと、２０分ごと、又は２５分ごとに投与することができる。例えば、神経ステロイド製剤は、３分毎に投与することができる。神経ステロイド製剤の累積的投与は、患者に完全麻酔をもたらす。
【０１０５】
本発明の概念は、以下の実施例によって更に説明される。これらの実施例は例示にすぎず、本発明の概念の範囲を限定するものではない。
【実施例】
【０１０６】
実施例１：注射用ガナキソロン／カプチゾール製剤の調製
以下の製剤を陽性コントロールとして用いる。注射用溶液を調製するために、過剰のガナキソロンを、４００ｍｇ／ｍｌのカプチゾール水溶液に添加する。溶液を少なくとも一晩振盪し、０．４５μｍのフィルターを通して濾過する。濾過した溶液のガナキソロン濃度をＨＰＬＣで決定する。ガナキソロン／カプチゾール溶液（４００ｍｇ／ｍｌのカプチゾール水溶液中の７．６８ｍｇ／ｍｌのガナキソロン）を、食塩水で希釈して、０．９％食塩水中の３．８４ｍｇ／ｍｌ、０．７７ｍｇ／ｍｌ及び０．３９ｍｇ／ｍｌのガナキソロン溶液を得る。全ての溶液は透明であり、いかなる目に見える沈殿もなかった。凍結して融解した後も、ガナキソロン溶液は目に見える沈殿が全くなかった。
【０１０７】
実施例２：注射用ガナキソロン／カプチゾール溶液（５ｍｇ／ｍｌ）
この製剤もまた陽性コントロールとして用いる。ガナキソロン（０．５０ｇ）を、スパチュラを用いて、少量（約２０ｍｌ）の注射用滅菌水中の３０ｗ／ｖ％カプチゾール溶液と手動で混合して、均一なペーストを形成した。次に、追加量（約４０ｍｌ）の３０ｗ／ｖ％カプチゾール溶液を加えてスラリーを得た。磁気攪拌棒を用いて懸濁液を２０分間攪拌した。プローブソニケーターを用いて２時間超音波処理した。超音波処理しながら、追加の３０ｗ／ｖ％カプチゾール溶液を、カプチゾール溶液の総量が９９．５８ｍｌに達するまで加えた。次に、攪拌した配合物を６８．５℃で２．５時間加熱して溶液を得た。熱を取り除き、溶液を室温で約２時間撹拌した。蒸発で失われた体積を水で補充した。透明な溶液を０．２μｍのナイロンメンブランフィルターを通して滅菌濾過した。
【０１０８】
実施例３：湿式ビーズミル粉砕によるガナキソロンナノ懸濁液（１０重量％）の調製
ガナキソロン（２５ｇ）、ヒドロキシエチルデンプン（７．５ｇ）、デオキシコール酸ナトリウム（０．５ｇ）及び３０％シメチコン（１滴）を含む水性スラリー（２５０ｇ）を、０．３ｍｍのＹＴＺビーズ（イットリウム安定化粉砕媒体，東ソー株式会社，日本，ＺｒＯ２＋ＨｆＯ２（９５重量％），Ｙ２Ｏ３（５重量％））と共に、Netzsch Mill（Minicer）を用いて粉砕した。粉砕を開始してから１００分後、及び１３０分後に、さらに２分量の固体デオキシコール酸ナトリウム（各０．５ｇ）を添加した。粉砕したスラリーの粒子径を、レーザー回折粒径分析計（Horiba LA-910）を用いて測定した。１７０分の粉砕の後、Ｄ５０は１９２ｎｍ（１分間の超音波処理後に１８８ｎｍ）であった。この時点で、粉砕を停止し、粉砕したスラリーを一晩室温に保った。翌朝、粉砕を再開し、総粉砕時間が３２０分に達し、その時点でＤ５０は１６７ｎｍ（１分間の超音波処理後に１６９ｎｍ）であった。Ｄ５０粒子径を、レーザー光散乱装置（Horiba 910）で測定した。
【０１０９】
実施例４：ポロキサマー１８８を含むガナキソレンナノ懸濁液
KDL Bachofen Millが、バッチチャンバーアタッチメント（約３５０ｍｌ）とシャフトに取り付けられた９６ｍｍポリウレタンローターで構成された。次に、２６５ｍｌの０．３ｍｍイットリア−ジルコニアビーズをチャンバーに乾式で添加し、続いて１７６．７ｇのガナキソロン（ＧＮＸ）スラリーを添加した。ゆっくりと、１５分かけて、ガナキソロンスラリーを、攪拌しながら、プルロニックＦ−６８（ポロキサマー１８８）を含む安定剤溶液に添加した。混合物を一晩ゆっくり撹拌した。断続的に粒度を測定しながら、スラリーをスピード設定１（１５００ｒｐｍ）で粉砕した。９０分後、Ｄ５０粒子径は３７８ｎｍであると決定された。Ｄ５０測定値は、レーザー光散乱装置（Horiba 910）で測定した。
【０１１０】
【表１】
2019537565.tif 000012
【０１１１】
実施例５：１２．５％ポロキサマー１８８及びデキストランを含むガナキソレンナノ懸濁液
KDL Bachofen Millが、バッチチャンバーアタッチメント（約３５０ｍｌ）とシャフトに取り付けられた９６ｍｍポリウレタンローターで構成された。次に、３００ｍｌの０．１ｍｍイットリア−ジルコニアビーズをチャンバーに乾式で添加し、続いて１７６．５ｇのガナキソロン（ＧＮＸ）粉砕懸濁液を添加した。ガナキソロン粉砕懸濁液は、撹拌しながら、デキストラン、プルロニックＦ−６８、デオキシコール酸ナトリウム、及びシメチコン乳状液の成分を混合し、次いで最後にガナキソロンを撹拌しながら加えることで調製した。懸濁液を１．５時間撹拌した。懸濁液（１７６．５ｇ）をバッチチャンバーに添加し、そして粉砕をスピード設定１で開始した。スラリーを６０分間粉砕し、２０分、４０分、５０分、及び６０分の粉砕の後にＤ５０粒子径を測定した。
【０１１２】
【表２】
2019537565.tif 000013
【０１１３】
実施例６：追加の注射用ナノ粒子製剤
表３は、本出願の開示の実験のバーストサプレッション方法における使用に適する製剤Ｉ〜Ｖの組成を示す。製剤Ｉ〜Ｖに用いられたポリマーは、ＩではプラスドンＣ−１７、ＩＩではヒドロキシエチルデンプン１３０／０．４、ＩＩＩではデキストラン７０、ＩＶではプラスドンＣ−１２、Ｖではヒドロキシエチルデンプン１３０／０．４である。全ての製剤において、ＡＰＩはガナキソロンである。
【０１１４】
【表３】
2019537565.tif 000014
【０１１５】
実施例７：バーストサプレッションの研究
動物
雄のSprague-Dawleyラットを研究に用いた。ラットにＥＥＧ電極と頸静脈カテーテルを外科的に移植した。記録時の平均重量は３２１±３ｇ（２６９〜３５１ｇ）であった。
【０１１６】
ＥＥＧ電極を麻酔したラットに外科的に埋め込んだ。動物はまた、外科手術及び皮下局所麻酔薬の前に、抗炎症性鎮痛薬（リマダイル（カルプロフェン））で処置された。ステンレス鋼製ねじ電極を、ねじの端部が頭蓋骨の内側表面と同一平面になるように、頭蓋骨内に慢性的に埋め込んだ（０−８０×１／４インチ、Plastics-One，Roanoke，VA）。第１の電極は、ブレグマの３．０ｍｍ前方で正中線の左２ｍｍに配置し、第２の電極はブレグマの後方４．０ｍｍ及び正中線の右２．５ｍｍに配置した。電極の周りの頭蓋骨表面をスーパーグルー及び歯科用アクリルでシールし、歯科用アクリルを用いて頭蓋骨に取り付けられたプラスチック台座にＥＥＧ電極リード線を挿入した。創傷端をトリプル抗生物質クリーム（バシトラシン亜鉛，硫酸ネオマイシン，硫酸ポリミキシンＢ；Walgreens）で処理した。手術の後、動物に抗生物質（アンピシリン，０．４ｍｌ／ｋｇで５０ｍｇ／ｋｇ，腹腔内）を投与し、またチュアブル用量（約１０ｍｇ）のリマダイルを投与した。動物を１週間ＥＥＧ手術から回復させた。
【０１１７】
ラットに、ＥＥＧ手術の１週間後に頸静脈カテーテル（ＪＶＣ）を移植した。ラットに抗炎症鎮痛薬を投与し、麻酔をかけて仰臥位にした。首の右側の外側面の皮膚を切開して外頸静脈を露出させ、外頸静脈を周囲の筋膜から切り離した。前側で静脈の周りを結紮糸で結んで心臓に戻る血流を閉塞させた。後側で静脈の周りを第２の結紮糸で緩く結んで、静脈切開術及びカテーテル挿入の間に血管に張力を生じさせた。静脈を切開した後、ＰＥカテーテル（３Ｆｒ）を静脈内に挿入し、心臓に向かって約３０ｍｍ前進させ、先端を上大静脈（precava）と右心房の接合部に配置した。採血によってカテーテルの開存性を確認した後、後側の結紮糸を縛り、カテーテルを「ヘパリンロック」溶液（５単位ヘパリン／ｍｌ生理食塩水）で洗い流し、滅菌ステンレス鋼ピンで栓をした。次に、カテーテルを、皮下組織を貫通させて肩甲骨の間の頭部の後方に出すことによって、体外に出した。最後に、カテーテルを皮膚に縫合した後、全ての創傷を縫合糸又は創傷クリップを用いて閉じた。手術直後に、カテーテル開存性を評価するために動物を起こした。動物はまた、疼痛及び炎症を最小限に抑えるために、手術後にチュアブル用量（約１０ｍｇ）のリマダイルの投与を受けた。
【０１１８】
ＪＶＣ手術の後、１週間の回復時間を動物に与えた。開存性を維持するために、毎日、頸静脈カテーテルを０．１ｍｌのヘパリン溶液（５単位／ｍｌ）で洗い流した。手術当日、洗浄液はアンピシリン・スルバクタム（５０ｍｇ／ｋｇ）を含んだ。カテーテルを洗い流すのが困難になった場合、動物を除外するか、又は可能であれば媒体（vehicle）群に割り当てることができるように、その動物番号及び日付を記録した。テールピンチで麻酔が測定される。３が麻酔を表わし、０〜３でスコアが付けられる。
【０１１９】
ＥＥＧ記録手順
ＥＥＧ記録のために、各ラットにＬｉＣｌを投与し、記録の前夜に記録容器（金網の蓋を備えた３０×３０×３０ｃｍ）に入れた。動物は絶食させず、食物と水を自由に摂取させ、スコポラミン投与の時点で食物を取り除いた。録音容器を、換気扇、天井灯、及びビデオカメラを含む消音キャビネットの内側に置いた。
【０１２０】
皮質のＥＥＧシグナルを、接続されたケーブルを経由して整流子（Plastics-One, Roanoke, VA）に送り、次に増幅器（A-M Systems model 1700：１０００×増幅）に送り、バンドパス（０．３〜１０００Ｈｚ）をフィルターした。最後に、National Instruments（Austin, TX）データ取得ソフトウェア（Labview 5.1）及びハードウェア（PCI-MIO-16E-4）の下で動作する、ICELUS取得／睡眠スコアリングソフトウェア（M. Opp, U. Michigan）を用いて、毎秒５１２サンプルでデジタル化した。
【０１２１】
発作前、発作中、及び発作後のＥＥＧ分析
ICELUSソフトウェアを用いて、１〜９６Ｈｚの１Ｈｚ周波数ビンでフーリエ解析（高速フーリエ変換、ＦＦＴ）によって、ＥＥＧパワー（ｍＶ２／Ｈｚ）を分析した。最低周波数ビンは「０〜５Ｈｚ」と示されているが、技術的に記録された最低周波数は０．３Ｈｚであった。周波数の範囲は、以下の通りであった：δは０〜５Ｈｚ（０．３〜４．９９Ｈｚ）であり、θは５〜１０Ｈｚであり、βは１０〜３０Ｈｚであり、γは３０〜５０Ｈｚであり、γ−２は５０〜７０Ｈｚであり、γ−３は７０〜９６Ｈｚであった。ＥＥＧパワー分析は、連続する５分間にわたる平均パワーを決定することからなった。大振幅低周波数ＥＥＧ活動によるバイアス結果を最小にするために、ＦＦＴ振幅を対数変換した。この期間中、全ての動物が同様の活動状態にあるべきであるため、記録開始からスコポラミン投与までのベースラインＥＥＧ期間を用いて、動物全体のＥＥＧパワーを正規化した。
【０１２２】
ベースラインを正規化するために、全ベースライン期間及び全周波数範囲（０〜９６Ｈｚ）にわたるｌｏｇ−ＦＦＴ値を合計して、単一の正規化定数Ｋｎｏｒｍを得た。
【０１２３】
【数１】
2019537565.tif 000015
【０１２４】
〔式中、ｆは周波数（Ｈｚ）である。ｔは時間（分）である。〕
その後の分析のために、（各周波数及び全ての時点における）全てのＦＦＴパワー値からＫｎｏｒｍを減じた。この手順は、各動物についての全ベースラインＥＥＧパワーの平均をゼロに等しくする効果を有し、その後、全ての動物についてのベースライン周波数曲線は密接に重なる。
【０１２５】
ＥＥＧパワーのデータを、ガナキソロン投与の１時間前から投与の１時間後までの間、測定した。ＥＥＧパワーを５分間にわたって平均し、別々の波長：０〜４、４〜８、８〜１３、１３〜３０、３０〜５０、５０〜７０、及び７０〜９６Ｈｚに分けた。
【０１２６】
本発明の概念を例示的な原理及び実施態様に関して説明した。しかし、当業者は、特許請求の範囲によって定義される本出願の開示の範囲及び趣旨から逸脱することなく、説明されたものを変形して等価物に置き換えることができることを認識するであろう。
【０１２７】
実施例８：ラットてんかん重積症モデルにおける神経ステロイドナノ粒子製剤の有効性
雄のSprague-Dawleyラットにピロカルピン（５０ｍｇ／ｋｇ＠５ｍｌ／ｋｇ，腹腔内）を投与して、発作を誘発させた。発作発症の１５分後、２．５ｍｇ／ｍｌガナキソロン濃度の３０％カプチゾール溶液として、又は６ｍｌのガナキソロンナノ粒子分散液の濃縮物（下表に示す組成）を５％デキストロース溶液で５０ｍｌにまで十分に希釈して調製された、６ｍｇ／ｍｌのガナキソロンナノ粒子懸濁液として、３ｍｇ／ｋｇのガナキソロンの単回静脈内ボーラス用量を静脈内投与した。
【０１２８】
【表４】
2019537565.tif 000016
【０１２９】
処置後にＥＥＧパワーをモニターした。図４Ａは、ガナキソロンナノ懸濁製剤の増加する用量についての用量反応曲線を示す。図４Ｂは、ガナキソロンナノ懸濁液及びカプチゾール製剤の比較を示す。この図は、ＥＥＧパワーの低下の点、及びバーストサプレッションがもたらされる点で、ナノ懸濁製剤の約２倍高い効力を示す。
【図１】
2019537565.tif 000019
【図２Ａ】
2019537565.tif 000020
【図２Ｂ】
2019537565.tif 000021
【図３Ａ】
2019537565.tif 000022
【図３Ｂ】
2019537565.tif 000023
【図４Ａ】
2019537565.tif 000024
【図４Ｂ】
2019537565.tif 000025
【国際調査報告】
2019537565.tif 000026
2019537565.tif 000027