(57)【要約】本発明は、腎傷害のリスクがある患者を識別する方法および組成物を提供する。患者から得られるＩＧＦＢＰ７（インスリン様増殖因子結合タンパク質７）の尿中濃度およびＴＩＭＰ−２（メタロプロテアーゼの組織阻害剤２）の尿中濃度の複合体であるリスクスコアが決定され、患者の処置を管理するために使用される。本発明は、ＣＫＤ（慢性腎傷害）を有するリスク、およびＣＫＤに併発するＡＫＩ（急性腎傷害）の短期リスクがある対象を識別し得る。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
対象を虚弱腎臓を有するとして識別および処置する方法であって、前記対象が急性腎傷害または慢性腎臓病（ＣＫＤ）を有すると識別されず、
ＩＧＦＢＰ７（インスリン様増殖因子結合タンパク質７）の尿中濃度およびＴＩＭＰ−２（メタロプロテアーゼの組織阻害剤２）の尿中濃度を複合体であるリスクスコアを、患者から得られる尿試料中のＩＧＦＢＰ７濃度およびＴＩＭＰ−２濃度それぞれを測定すること、および前記リスクスコアを得る提供するために、前記ＩＧＦＢＰ７およびＴＩＭＰ−２濃度を数学的に組み合わせることにより算出するステップ、
前記リスクスコアをリスクスコア閾値と比較するステップであって、前記リスクスコアが前記リスクスコア閾値を下回る場合、前記リスクスコアが前記リスクスコア閾値を超える場合と比較して、前記患者は虚弱腎臓を有するリスクがより高いと決定される、ステップ、ならびに
前記リスクスコアが前記閾値を下回る場合、任意選択で、前記対象をＣＫＤ患者として管理するステップ
を含む、方法。
【請求項２】
前記リスクスコア閾値が、ＣＫＤを有する個人およびＣＫＤを有しない個人を含む個人についての集団研究の結果に基づいて選択され、尿試料が前記個人それぞれから得られ、リスクスコアが前記個人それぞれについて前記尿試料から算出され、前記リスクスコア閾値が、前記集団を、前記リスクスコア閾値未満のリスクスコアを有する前記個人の第１の亜集団および前記リスクスコア閾値より大きいリスクスコアを有する前記個人の第２の亜集団に分けるように選択され、前記第１の亜集団が、前記第２の亜集団と比較して、ＣＫＤを有するリスクが少なくとも１．５倍高い、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記リスクスコア閾値が、健康な個人についての集団研究の結果に基づいて選択され、尿試料が前記個人それぞれから得られ、リスクスコアが前記個人それぞれについて前記尿試料から算出され、前記リスクスコア閾値が、前記集団におけるリスクスコアの最下位の１０パーセンタイルについてのリスクスコア値である、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記濃度を数学的に組み合わせることが、前記ＩＧＦＢＰ７濃度またはそこから得られる値と、前記ＴＩＭＰ−２濃度またはそこから得られる値を乗じることを含む、請求項１から３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
前記リスクスコアが（［ＴＩＭＰ−２］・［ＩＧＦＢＰ７］）／１０００として数学的に表され、前記リスクスコア閾値が約０．０７である、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記ＩＧＦＢＰ７の尿中濃度および前記ＴＩＭＰ−２の尿中濃度が、前記患者から得られる前記尿試料をイムノアッセイ装置に導入することにより測定され、前記イムノアッセイ装置が、固相、前記固相の第１の位置で固定化されたＩＧＦＢＰ７抗体、および前記固相の第２の位置で固定化されたＴＩＭＰ−２抗体を含み、前記装置が、前記尿試料を前記第１の位置および前記第２の位置に接触させ、前記装置が、前記第１の位置で固定化された前記ＩＧＦＢＰ７抗体に結合するＩＧＦＢＰ７の量を測定し、そこから前記尿試料中の前記ＩＧＦＢＰ７濃度を決定し、前記装置が、前記第２の位置で固定化された前記ＴＩＭＰ−２抗体に結合するＴＩＭＰ−２の量を測定し、そこから前記尿試料中の前記ＴＩＭＰ−２濃度を決定し、前記装置が、前記尿試料中の前記ＩＧＦＢＰ７濃度および前記ＴＩＭＰ−２濃度を１数学的に前記リスクスコアに組み合せ、前記装置がヒトに読み取り可能な形態で前記リスクスコアを報告する、請求項１から５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
前記患者から得られる前記尿試料が、検出可能な標識にコンジュゲートされた第２のＩＧＦＢＰ７抗体および検出可能な標識にコンジュゲートされた第２のＴＩＭＰ−２抗体とさらに接触させられ、第１のサンドイッチ複合体が、前記ＩＧＦＢＰ７抗体、前記尿試料中に存在するＩＧＦＢＰ７、および前記第２のＩＧＦＢＰ７抗体の間で形成され、第２のサンドイッチ複合体が、前記ＴＩＭＰ−２抗体、前記尿試料中に存在するＴＩＭＰ−２、および前記第２のＴＩＭＰ−２抗体の間で形成され、前記ＩＧＦＢＰ７抗体に結合するＩＧＦＢＰ７の量が、前記第１の位置で結合する前記検出可能な標識を検出する前記装置により決定され、前記ＴＩＭＰ−２抗体に結合するＴＩＭＰ−２の量が、前記第２の位置で結合する前記検出可能な標識を検出する前記装置により決定される、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記患者をＣＫＤ患者として管理するステップが、ＧＦＲおよびアルブミン尿の評価、目標までの血圧管理、急性腎傷害のモニタリング、アンジオテンシン受容体遮断薬（ＡＲＢ）の使用、ならびにＡＣＥ阻害剤（ＡＣＥ−Ｉ）の使用のうち１つまたは複数を含む、請求項１から７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
対象における慢性腎臓病（ＣＫＤ）リスクを識別する方法であって、
ＩＧＦＢＰ７（インスリン様増殖因子結合タンパク質７）の尿中濃度およびＴＩＭＰ−２（メタロプロテアーゼの組織阻害剤２）の尿中濃度を複合体であるリスクスコアを、患者から得られる尿試料中のＩＧＦＢＰ７濃度およびＴＩＭＰ−２濃度それぞれを測定すること、および前記ＩＧＦＢＰ７およびＴＩＭＰ−２濃度を数学的に前記リスクスコアに組み合わせることにより算出するステップ、
前記リスクスコアをリスクスコア閾値と比較するステップであって、前記リスクスコアが前記リスクスコア閾値を下回る場合、前記リスクスコアが前記リスクスコア閾値を超える場合と比較して、前記患者はＣＫＤを有するリスクがより高いと決定される、ステップ
を含む、方法。
【請求項１０】
前記リスクスコアが前記リスクスコア閾値を下回る場合、前記リスクスコアが前記リスクスコア閾値を超える場合と比較して、前記患者はＣＫＤを有するリスクが少なくとも１．５倍高いと決定される、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記リスクスコア閾値が、ＣＫＤを有する個人およびＣＫＤを有しない個人を含む個人についての集団研究の結果に基づいて選択され、尿試料が前記個人それぞれから得られ、リスクスコアが前記個人それぞれについて前記尿試料から算出され、前記リスクスコア閾値が、前記集団を、前記リスクスコア閾値未満のリスクスコアを有する前記個人の第１の亜集団および前記リスクスコア閾値より大きいリスクスコアを有する前記個人の第２の亜集団に分けるように選択され、前記第１の亜集団が、前記第２の亜集団と比較して、ＣＫＤを有するリスクが少なくとも１．５倍高い、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記濃度を数学的に組み合わせることが、前記ＩＧＦＢＰ７濃度またはそこから得られる値と、前記ＴＩＭＰ−２濃度またはそこから得られる値を乗じるステップを含む、請求項９から１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
前記リスクスコアが（［ＴＩＭＰ−２］・［ＩＧＦＢＰ７］）／１０００として数学的に表され、前記リスクスコア閾値が約０．０７である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記ＩＧＦＢＰ７の尿中濃度および前記ＴＩＭＰ−２の尿中濃度が、前記患者から得られる前記尿試料をイムノアッセイ装置に導入することにより測定され、前記イムノアッセイ装置が、固相、前記固相の第１の位置で固定化されたＩＧＦＢＰ７抗体、および前記固相の第２の位置で固定化されたＴＩＭＰ−２抗体を含み、前記装置が、前記尿試料を前記第１の位置および前記第２の位置に接触させ、前記装置が、前記第１の位置で固定化された前記ＩＧＦＢＰ７抗体に結合するＩＧＦＢＰ７の量を測定し、そこから前記尿試料中の前記ＩＧＦＢＰ７濃度を決定し、前記装置が、前記第２の位置で固定化された前記ＴＩＭＰ−２抗体に結合するＴＩＭＰ−２の量を測定し、そこから前記尿試料中の前記ＴＩＭＰ−２濃度を決定し、前記装置が、前記尿試料中の前記ＩＧＦＢＰ７濃度および前記ＴＩＭＰ−２濃度を１数学的に前記リスクスコアに組み合せ、前記装置がヒトに読み取り可能な形態で前記リスクスコアを報告する、請求項９から１３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
前記患者から得られる前記尿試料が、検出可能な標識にコンジュゲートされた第２のＩＧＦＢＰ７抗体および検出可能な標識にコンジュゲートされた第２のＴＩＭＰ−２抗体とさらに接触させられ、第１のサンドイッチ複合体が、前記ＩＧＦＢＰ７抗体、前記尿試料中に存在するＩＧＦＢＰ７、および前記第２のＩＧＦＢＰ７抗体の間で形成され、第２のサンドイッチ複合体が、前記ＴＩＭＰ−２抗体、前記尿試料中に存在するＴＩＭＰ−２、および前記第２のＴＩＭＰ−２抗体の間で形成され、前記ＩＧＦＢＰ７抗体に結合するＩＧＦＢＰ７の量が、前記第１の位置で結合する前記検出可能な標識を検出する前記装置により決定され、前記ＴＩＭＰ−２抗体に結合するＴＩＭＰ−２の量が、前記第２の位置で結合する前記検出可能な標識を検出する前記装置により決定される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
ＣＫＤリスクが高い前記患者を管理するステップが、ＧＦＲおよびアルブミン尿の評価、目標までの血圧管理、急性腎傷害のモニタリング、アンジオテンシン受容体遮断薬（ＡＲＢ）の使用、ならびにＡＣＥ阻害剤（ＡＣＥ−Ｉ）の使用のうち１つまたは複数を含む、請求項９から１５のいずれか一項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本願は、２０１６年６月６日に出願された米国仮特許出願第６２／３４６，３８１号の利益を主張しており、この仮特許出願は、本明細書によって、すべての表、図面および請求項を含むその全体が参考として援用される。
【背景技術】
【０００２】
発明の背景
本発明の背景についての以下の考察は、読者の本発明への理解を助けるために提供されるものに過ぎず、本発明に対する先行技術を記載または構成することを認めるものではない。
【０００３】
腎臓は、体からの水および溶質の排泄に関与する。その機能には、酸−塩基バランスの維持、電解質濃度の調節、血液量の制御、および血圧の調節が含まれる。したがって、傷害および／または疾患による腎機能の喪失で、相当の罹患率および死亡率がもたらされる。腎傷害についての詳細な考察が、その全体にわたって参照により本明細書に組み込まれる、Ｈａｒｒｉｓｏｎ’ｓ  Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  Ｉｎｔｅｒｎａｌ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、第１７版、ＭｃＧｒａｗ  Ｈｉｌｌ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、１７４１〜１８３０頁で提供されている。腎臓病および／または傷害は、急性または慢性でありうる。急性および慢性腎臓病について以下のように記載されている（その全体にわたって参照により本明細書に組み込まれる、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ  ＆  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ２００８年、第４７版、ＭｃＧｒａｗ  Ｈｉｌｌ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、７８５〜８１５頁より）：「急性腎不全は数時間〜数日にわたる腎機能の悪化であり、血液中の窒素老廃物（尿素窒素など）およびクレアチニン維持をもたらす。これらの物質の維持は高窒素血症と呼ばれる。慢性腎不全（慢性腎臓病）は、数ヶ月〜数年にわたる腎機能の異常な喪失から生じる」。
【０００４】
急性腎不全（ＡＲＦ、急性腎傷害、またはＡＫＩとしても公知）は、急激な（通常約４８時間〜１週間以内に検出される）糸球体濾過の低下である。この濾過能力喪失により、通常は腎臓によって排泄される窒素老廃物（尿素およびクレアチニン）および非窒素老廃物の維持、尿排出量の減少、またはその両方がもたらされる。ＡＲＦは、入院の約５％、心肺バイパス術の４〜１５％、および集中処置入院の最大３０％に併発することが報告されている。ＡＲＦは、因果関係によって腎前性、腎性、または腎後性として分類することができる。腎性疾患は、糸球体、尿細管、間質、および血管の異常にさらに分けられる。ＡＲＦの主要な原因について、Ｍｅｒｃｋ  Ｍａｎｕａｌ、第１７版、２２２章出典の、その全体にわたって参照により本明細書に組み込まれる以下の表に記載する：
【表１−１】
2019523889.tif 000003
【表１−２】
2019523889.tif 000004
【０００５】
ＡＫＩを定義および検出するための一般的に報告される基準は、急激な（通常約２〜７日以内または入院期間内）血清クレアチニン上昇である。ＡＫＩを定義および検出するのに血清クレアチニン上昇を使用することは十分に確立されているが、ＡＫＩを定義するための、血清クレアチニン上昇の程度およびそれが測定される時間は出版物によって大きく異なる。従来、ＡＫＩを定義するには、１００％、２００％などの、血清クレアチニンの比較的大きな増加、少なくとも１００％の、２ｍｇ／ｄＬを超える値までの増加、およびその他の定義が使用された。しかし最近の傾向は、ＡＫＩを定義するのにより小さい血清クレアチニン上昇を使用することに向かっている。血清クレアチニン上昇、ＡＫＩおよび関連する健康リスク間の関係については、それらに列挙される参考文献とともにその全体にわたって参照により本明細書に組み込まれる、ＰｒａｕｇｈｔおよびＳｈｌｉｐａｋ、Ｃｕｒｒ  Ｏｐｉｎ  Ｎｅｐｈｒｏｌ  Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓ  １４巻：２６５〜２７０頁、２００５年、ならびにＣｈｅｒｔｏｗら、Ｊ  Ａｍ  Ｓｏｃ  Ｎｅｐｈｒｏｌ  １６巻：３３６５〜３３７０頁、２００５年において概説されている。これらの出版物に記載されるように、腎機能の急速な悪化（ＡＫＩ）ならびに死亡およびその他の有害転帰リスクの増大が、血清クレアチニンの非常にわずかな増加に関連することが現在公知である。これらの増加は、相対（パーセント）値または公称値として決定することができる。血清クレアチニンの、傷害前の値からわずか２０％の相対的増加が、腎機能の急速な悪化（ＡＫＩ）および健康リスクの増大を示すことが報告されているが、ＡＫＩおよび健康リスクの増大を定義するためのより一般的に報告される値は、少なくとも２５％の相対的増加である。わずか０．３ｍｇ／ｄＬ、０．２ｍｇ／ｄＬまたはさらに０．１ｍｇ／ｄＬの増加が、腎機能の悪化および死亡リスクの増大を示すことが報告されている。ＡＫＩを定義するのに、例えば２日、３日、７日の範囲の、血清クレアチニンがこれらの閾値まで上昇する様々な期間、または患者が病院もしくは集中処置室に入院している時間として定義される可変的期間が使用されている。これらの研究は、腎機能の悪化またはＡＫＩについての、血清クレアチニン上昇の特定の閾値（または上昇の期間）は存在しないものの、血清の程度の増加に伴いリスクが継続的に増大することを示している。
【０００６】
臨床試験および診療においてＡＫＩを定義するための、血清クレアチニンを使用する統一された分類系について共通認識に至るため、その全体にわたって参照により本明細書に組み込まれる、Ｂｅｌｌｏｍｏら、Ｃｒｉｔ  Ｃａｒｅ．  ８巻（４号）：Ｒ２０４〜１２頁、２００４年では、ＡＫＩ患者を階層化するための以下の分類を提唱している：
「Ｒｉｓｋ」：血清クレアチニンがベースラインから１．５倍増加または尿産生０．５ｍｌ／ｋｇ体重／時間未満が６時間；
「Ｉｎｊｕｒｙ」：血清クレアチニンがベースラインから２．０倍増加または尿産生０．５ｍｌ／ｋｇ／時間未満が１２時間；
「Ｆａｉｌｕｒｅ」：血清クレアチニンがベースラインから３．０倍増加またはクレアチニン３５５μｍｏｌ／ｌ超（４４超の上昇）または尿排出量０．３ｍｌ／ｋｇ／時間未満が２４時間または少なくとも１２時間の無尿；
さらに２つの臨床転帰が含まれる：
「Ｌｏｓｓ」：４週間を超える腎代替療法が持続的に必要。
「ＥＳＲＤ」：末期腎臓病−３ヶ月間を超える透析が必要。
【０００７】
これらの基準はＲＩＦＬＥ基準と呼ばれ、腎臓の状態を分類するのに有用な臨床的手段を提供する。それぞれがその全体にわたって参照により本明細書に組み込まれる、Ｋｅｌｌｕｍ、Ｃｒｉｔ．  Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ．  ３６：Ｓ１４１〜４５頁、２００８年、およびＲｉｃｃｉら、Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔ．  ７３巻、５３８〜５４６頁、２００８年で考察されているように、ＲＩＦＬＥ基準は、数多くの研究で検証されたＡＫＩの一様な定義を提供する。
【０００８】
より最近では、その全体にわたって参照により本明細書に組み込まれる、Ｍｅｈｔａら、Ｃｒｉｔ．  Ｃａｒｅ  １１巻：Ｒ３１頁（ｄｏｉ：１０．１１８６．ｃｃ５７１３）、２００７年が、ＲＩＦＬＥから改変された、ＡＫＩ患者を階層化するための以下の類似の分類を提唱している：
「ステージＩ」：血清クレアチニンの、ベースラインからの０．３ｍｇ／ｄＬを超えるもしくはそれに等しい（２６．４μｍｏｌ／Ｌ以上）増加または１５０％（１．５倍）を超えるもしくはそれに等しい増加、または尿排出量１時間あたり０．５ｍＬ／ｋｇ未満が６時間超；
「ステージＩＩ」：血清クレアチニンの、ベースラインから２００％超（２倍超）の増加または尿排出量１時間あたり０．５ｍＬ／ｋｇ未満が１２時間超；
「ステージＩＩＩ」：血清クレアチニンの、ベースラインから３００％超（３倍超）の増加、または少なくとも４４μｍｏｌ／Ｌの急速な増加を伴う血清クレアチニン３５４μｍｏｌ／Ｌ以上、または尿排出量１時間あたり０．３ｍＬ／ｋｇ未満が２４時間または１２時間の無尿。
【０００９】
ＣＩＮ  Ｃｏｎｓｅｎｓｕｓ  Ｗｏｒｋｉｎｇ  Ｐａｎｅｌ（その全体にわたって参照により本明細書に組み込まれるＭｃＣｏｌｌｏｕｇｈら、Ｒｅｖ  Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ  Ｍｅｄ．  ２００６年；７巻（４号）：１７７〜１９７頁）では、造影剤腎症（ＡＫＩの一種）を定義するのに２５％の血清クレアチニン上昇を使用する。ＡＫＩを検出するための、血清クレアチニンを使用するわずかに異なる基準を様々なグループが提唱しているが、ＡＫＩ（腎機能の悪化）を検出するには、血清クレアチニンの、０．３ｍｇ／ｄＬまたは２５％などのわずかな変化で十分であること、ならびに血清クレアチニン変化の程度がＡＫＩの重症度および死亡リスクの指標であることは共通認識である。
【００１０】
対照的に、慢性腎臓病（ＣＫＤ）は、不可逆的ネフロン喪失により特徴付けられる異なる臨床実体である。進行性の腎機能低下は、慢性傷害がはるかに進行するまで症状がもしあったとしてもごくわずかで、数ヶ月または数年の期間にわたって観察される。ＣＫＤは、糸球体硬化症および尿細管間質性線維症を同時に発症することにより組織学的に特徴付けられる。いくつかの糸球体病理機構が糸球体硬化症の発生に収束する重要な機構として、ポドサイトの損傷および喪失が識別されている。メサンギウム細胞は糸球体における主要なマトリックス形成細胞であり、糸球体硬化症プロセスにとっても極めて重要であり、活性化（アルファ平滑筋アクチン陽性）間質線維芽細胞または筋線維芽細胞は尿細管間質性線維症の発症にとって重要である。慢性腎不全では、尿細管が損なわれて水の喪失を引き起こす。ＡＫＩに見られる乏尿とは対照的に、ＣＫＤは通常、多尿（ｐｏｌｙｒｕｒｉａ）（尿量の増加）をもたらす。
Ｍｅｒｃｋ  Ｍａｎｕａｌは、急性腎不全および慢性腎臓病が異なる療法を有する異なる状態であることから、これらを区別する必要性について論じている（とりわけ１８４６頁、右列、「診断」セクション、最初の文「最初のステップは、腎不全が急性、慢性または慢性に併発したものであるかを決定することである」、および１８４７頁の表２２２−４「急性対慢性腎不全の分類」を参照のこと）。最近、ＡＫＩについての２種類の新規のバイオマーカーが、重篤な成人患者の発見コホートで識別され、次いで、不均一な重篤患者の独立した検証コホートにおいて臨床でのアッセイを使用して検証され、ＡＫＩの既存のマーカー前向き多施設研究と比較された。尿中のインスリン様増殖因子結合タンパク質７（ＩＧＦＢＰ７）およびメタロプロテアーゼの組織阻害剤２（ＴＩＭＰ−２）は、ＡＫＩリスクを検出する既存の方法と直接比較して改善された性能特性を有するだけでなく、臨床データにさらなる有意義な情報をもたらす強力なマーカーである。ＩＧＦＢＰ７およびＴＩＭＰ−２がそれぞれ、細胞傷害の非常に初期の段階におけるＧ１での細胞周期停止という現象に関係し、実験による敗血症または虚血に由来する傷害の後、腎尿細管細胞が短期のＧ１での細胞周期停止に入ることが示されていることは注目に値する。例えば、Ｙａｎｇら、Ｊ．  Ｉｎｆｅｃｔ．  ５８巻：４５９〜４６４頁、２００９年；Ｗｉｔｚｇａｌｌら、Ｊ．  Ｃｌｉｎ．  Ｉｎｖｅｓｔ．  ９３巻：２１７５〜２１８８頁、１９９４年を参照のこと。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【００１１】
【非特許文献１】Ｈａｒｒｉｓｏｎ’ｓ  Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  Ｉｎｔｅｒｎａｌ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、第１７版、ＭｃＧｒａｗ  Ｈｉｌｌ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、１７４１〜１８３０頁
【非特許文献２】Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ  ＆  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ２００８年、第４７版、ＭｃＧｒａｗ  Ｈｉｌｌ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、７８５〜８１５頁
【非特許文献３】Ｍｅｒｃｋ  Ｍａｎｕａｌ、第１７版、２２２章
【非特許文献４】ＰｒａｕｇｈｔおよびＳｈｌｉｐａｋ、Ｃｕｒｒ  Ｏｐｉｎ  Ｎｅｐｈｒｏｌ  Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓ  １４巻：２６５〜２７０頁、２００５年
【非特許文献５】Ｃｈｅｒｔｏｗら、Ｊ  Ａｍ  Ｓｏｃ  Ｎｅｐｈｒｏｌ  １６巻：３３６５〜３３７０頁、２００５年
【非特許文献６】Ｂｅｌｌｏｍｏら、Ｃｒｉｔ  Ｃａｒｅ．  ８巻（４号）：Ｒ２０４〜１２頁、２００４年
【非特許文献７】Ｋｅｌｌｕｍ、Ｃｒｉｔ．  Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ．  ３６：Ｓ１４１〜４５頁、２００８年
【非特許文献８】Ｒｉｃｃｉら、Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔ．  ７３巻、５３８〜５４６頁、２００８年
【非特許文献９】Ｍｅｈｔａら、Ｃｒｉｔ．  Ｃａｒｅ  １１巻：Ｒ３１頁（ｄｏｉ：１０．１１８６．ｃｃ５７１３）、２００７年
【非特許文献１０】ＭｃＣｏｌｌｏｕｇｈら、Ｒｅｖ  Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ  Ｍｅｄ．  ２００６年；７巻（４号）：１７７〜１９７頁
【非特許文献１１】Ｙａｎｇら、Ｊ．  Ｉｎｆｅｃｔ．  ５８巻：４５９〜４６４頁、２００９年
【非特許文献１２】Ｗｉｔｚｇａｌｌら、Ｊ．  Ｃｌｉｎ．  Ｉｎｖｅｓｔ．  ９３巻：２１７５〜２１８８頁、１９９４年
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１２】
発明の簡単な要旨
本発明の目的は、ＣＫＤを有するリスク、およびＣＫＤに併発するＡＫＩの短期リスクがある対象の識別のための方法および組成物を提供することである。
【００１３】
第１の態様では、本発明は、腎機能を損なう内科的外科的手技の前および後に急性腎傷害（ＡＫＩ）を患っていない患者を管理する方法に関する。これらの方法は：
ＩＧＦＢＰ７（インスリン様増殖因子結合タンパク質７）の尿中濃度およびＴＩＭＰ−２（メタロプロテアーゼの組織阻害剤２）の尿中濃度を複合体であるリスクスコアを、内科的または外科的手技を実施する直前に患者から得られる尿試料中のＩＧＦＢＰ７濃度およびＴＩＭＰ−２濃度それぞれを測定し、リスクスコアを提供するために、ＩＧＦＢＰ７およびＴＩＭＰ−２濃度を数学的にリスクスコアに組み合わせることにより算出するステップ、
リスクスコアをリスクスコア閾値と比較するステップであって、リスクスコアがリスクスコア閾値を下回る場合、リスクスコアがリスクスコア閾値を超える場合と比較して、患者はＣＫＤを有するリスクがより高いと決定される、ステップ
を含む。
【００１４】
ＣＫＤリスクの上昇が確認される場合、患者はＣＫＤ患者の診療に従って管理されうる。例えば、参照により本明細書に組み込まれるＫｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔｌ．  ３巻（１号）、１〜１３６頁、２０１３年１月を参照のこと。これには、ＧＦＲおよびアルブミン尿の評価、目標までの血圧管理、急性腎傷害のモニタリング、アンジオテンシン受容体遮断薬（ＡＲＢ）またはＡＣＥ阻害剤（ＡＣＥ−Ｉ）の使用が含まれていてよいが、これらに限定されない。
【００１５】
あるいは、リスクスコア閾値は相対リスクの観点で選択される。例えば、リスクスコアがリスクスコア閾値を下回る場合、リスクスコアがリスクスコア閾値を超える場合と比較して、患者はＣＫＤを有するリスクが少なくとも１．５倍高いと決定される。これは限定を意図するものではない。したがって、様々な実施形態では、相対リスクの増大は少なくとも２倍のリスク増大、少なくとも３倍のリスク増大などであってよい。
【００１６】
リスクスコア閾値を決定するのに様々な方法を使用することができる。例として、リスクスコア閾値は、ＣＫＤを有する個人およびＣＫＤを有しない個人を含む個人についての集団研究の結果に基づいて選択され、尿試料は個人それぞれから得られ、リスクスコアは個人それぞれについて尿試料から算出され、リスクスコア閾値は、集団を、リスクスコア閾値未満のリスクスコアを有する個人の第１の亜集団およびリスクスコア閾値より大きいリスクスコアを有する個人の第２の亜集団に分けるように選択され、第１の亜集団は、第２の亜集団と比較して、ＣＫＤを有するリスクが少なくとも１．５倍高い。
【００１７】
ある特定の実施形態では、方法は、ＩＧＦＢＰ７濃度またはそこから得られる値と、ＴＩＭＰ−２濃度またはそこから得られる値を乗じることを含む、濃度を数学的に組み合わせるステップを含む。例えば、リスクスコアは（［ＴＩＭＰ−２］・［ＩＧＦＢＰ７］）／１０００として数学的に表すことができる。これらの実施形態では、第１のリスクスコア閾値は約０．０６であってよく、第２のリスクスコア閾値は約０．３であってよい。
【００１８】
関連する態様では、本発明は、対象を虚弱腎臓を有するとして識別および処置する方法であって、対象が急性腎傷害または慢性腎臓病（ＣＫＤ）を有すると識別されない、方法に関する。これらの方法は：
ＩＧＦＢＰ７（インスリン様増殖因子結合タンパク質７）の尿中濃度およびＴＩＭＰ−２（メタロプロテアーゼの組織阻害剤２）の尿中濃度を複合体であるリスクスコアを、患者から得られる尿試料中のＩＧＦＢＰ７濃度およびＴＩＭＰ−２濃度それぞれを測定すること、およびリスクスコアを提供するために、ＩＧＦＢＰ７およびＴＩＭＰ−２濃度を数学的にリスクスコアに組み合わせることにより算出するステップ、
リスクスコアをリスクスコア閾値と比較するステップであって、リスクスコアがリスクスコア閾値を下回る場合、リスクスコアがリスクスコア閾値を超える場合と比較して、患者は虚弱腎臓を有するリスクがより高いと決定される、ステップ、ならびに
リスクスコアが閾値を下回る場合、任意選択で、対象をＣＫＤ患者として管理するステップ
を含む。
【００１９】
ある特定の実施形態では、リスクスコア閾値は、ＣＫＤを有する個人およびＣＫＤを有しない個人を含む個人についての集団研究の結果に基づいて選択され、尿試料は個人それぞれから得られ、リスクスコアは個人それぞれについて尿試料から算出され、リスクスコア閾値は、集団を、リスクスコア閾値未満のリスクスコアを有する個人の第１の亜集団およびリスクスコア閾値より大きいリスクスコアを有する個人の第２の亜集団に分けるように選択され、第１の亜集団は、第２の亜集団と比較して、ＣＫＤを有するリスクが少なくとも１．５倍高い。
【００２０】
代替的実施形態では、リスクスコア閾値は、健康な個人についての集団研究の結果に基づいて選択され、尿試料は個人それぞれから得られ、リスクスコアは個人それぞれについて尿試料から算出され、リスクスコア閾値は、集団における下位のリスクスコアで表される。例として、適切なリスクスコア閾値は、集団における値の最下位２０％、値の最下位１５％、値の最下位１０％、値の最下位５％などの上限値であってよい。
【００２１】
ある特定の実施形態では、濃度を数学的に組み合わせるステップは、ＩＧＦＢＰ７濃度またはそこから得られる値と、ＴＩＭＰ−２濃度またはそこから得られる値を乗じることを含む。好ましい実施形態では、リスクスコアは（［ＴＩＭＰ−２］・［ＩＧＦＢＰ７］）／１０００として数学的に表され、リスクスコア閾値は、約０．１２〜約０．０４の間、好ましくは約０．０９〜約０．０４の間、最も好ましくは約０．０７またはそれ未満である。
【００２２】
「約」という用語は、本明細書で使用される場合、所与の値の＋／−１０％を指す。
【００２３】
ある特定の実施形態では、ＩＧＦＢＰ７の尿中濃度およびＴＩＭＰ−２の尿中濃度は、尿試料を受け、特異的結合アッセイを実施し、操作者に読み取り可能な形態でアッセイ結果を報告する装置を使用して測定される。一例では、濃度は患者から得られる尿試料をイムノアッセイ装置に導入することにより得られ、イムノアッセイ装置は、固相、固相の第１の位置で固定化されたＩＧＦＢＰ７抗体、および固相の第２の位置で固定化されたＴＩＭＰ−２抗体を含み、装置は、尿試料を第１の位置および第２の位置に接触させ、装置は、第１の位置で固定化されたＩＧＦＢＰ７抗体に結合するＩＧＦＢＰ７の量を測定し、そこから尿試料中のＩＧＦＢＰ７濃度を決定し、装置は、第２の位置で固定化されたＴＩＭＰ−２抗体に結合するＴＩＭＰ−２の量を測定し、そこから尿試料中のＴＩＭＰ−２濃度を決定し、装置は、尿試料中のＩＧＦＢＰ７濃度およびＴＩＭＰ−２濃度を１数学的にリスクスコアに組み合せ、装置はヒトに読み取り可能な形態でリスクスコアを報告する。
【００２４】
サンドイッチイムノアッセイが好ましい。これらの実施形態では、患者から得られる尿試料は、検出可能な標識にコンジュゲートされた第２のＩＧＦＢＰ７抗体および検出可能な標識にコンジュゲートされた第２のＴＩＭＰ−２抗体とさらに接触させられてよく、第１のサンドイッチ複合体は、ＩＧＦＢＰ７抗体、尿試料中に存在するＩＧＦＢＰ７、および第２のＩＧＦＢＰ７抗体の間で形成され、第２のサンドイッチ複合体は、ＴＩＭＰ−２抗体、尿試料中に存在するＴＩＭＰ−２、および第２のＴＩＭＰ−２抗体の間で形成され、ＩＧＦＢＰ７抗体に結合するＩＧＦＢＰ７の量は、第１の位置で結合する検出可能な標識を検出する装置により決定され、ＴＩＭＰ−２抗体に結合するＴＩＭＰ−２の量は、第２の位置で結合する検出可能な標識を検出する装置により決定される。
【００２５】
将来的なＡＫＩリスクが高い患者を管理することは、ＫＤＩＧＯ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅ  ｆｏｒ  Ａｃｕｔｅ  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｊｕｒｙ、Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔｌ．  ２巻（補遺１）、２０１２年３月、１〜１３８頁に記載されるように実施することができる。ある特定の実施形態では、管理は、１つまたは複数の腎毒性薬剤を中止または回避すること、外科的手技中の腎臓酸素灌流を維持すること、少なくとも０．８ｇ／ｋｇ／日のタンパク質摂取を維持すること、１１０〜１４９ｍｇ／ｄＬの範囲内に血漿グルコースを維持すること、および血行動態を維持するため等張溶液の静脈内投与を実施することのうち１つまたは複数を含んでいてよい。上記で論じられるように、本明細書に記載される方法は、腎臓に有害であることが公知の様々な処置または状態に先立って予防として、またはその後の処置として使用することができる。
【００２６】
ＣＫＤについて患者を管理することは、Ｋｉｄｎｅｙ  Ｄｉｓｅａｓｅ：  Ｉｍｐｒｏｖｉｎｇ  Ｇｌｏｂａｌ  Ｏｕｔｃｏｍｅｓ  （ＫＤＩＧＯ）  ＣＫＤ  Ｗｏｒｋ  Ｇｒｏｕｐ．  ＫＤＩＧＯ  ２０１２  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｃｈｒｏｎｉｃ  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｄｉｓｅａｓｅ．  Ｋｉｄｎｅｙ  ｉｎｔｅｒ．、補遺、２０１３年；３巻：１〜１５０頁に記載されるように実施することができる。ある特定の実施形態では、管理は、ＣＫＤの進行を遅らせる；ＣＫＤにおける貧血の管理；ＣＫＤに関連するカルシウム異常を管理する；代謝性アシドーシスを管理する；ＡＫＩリスクを管理する状況で検討されてきた、血圧管理、レニン−アンジオテンシン−アルドステロン系（「ＲＡＡＳ」）の妨害、血糖コントロールおよび食物／ライフスタイルの操作のうち１つまたは複数を含んでいてよい。
【００２７】
ある特定の実施形態では、対象は、重大な血管外科手術、冠動脈バイパス術、もしくはその他の心臓外科手術を受ける予定のもしくは受けたことがある対象；先行するうっ血性心不全、妊娠高血圧腎症、子癇、糖尿病、高血圧、冠動脈疾患、タンパク尿、腎機能不全、正常な範囲を下回る糸球体濾過、肝硬変、正常な範囲を超える血清クレアチニン、もしくは敗血症を有する対象；またはＮＳＡＩＤ、タクロリムス、アミノグリコシド、ホスカルネット、エチレングリコール、ヘモグロビン、ミオグロビン、イホスファミド、重金属、メトトレキセート、放射線不透過性造影剤、もしくはストレプトゾトシンに曝露された対象に基づいて、リスク階層化のため選択される。
【００２８】
健康状態、特に腎臓充足のさらなる臨床徴候を、本明細書に記載される方法におけるＩＧＦＢＰ７および／またはＴＩＭＰ−２測定と組み合わせることができる。このような臨床徴候には、以下のうち１つまたは複数が含まれていてよい：患者のベースライン尿排出量値、患者の血清クレアチニンのベースライン変化、人口統計学的情報（例えば、体重、性別、年齢、人種）、病歴（例えば、家族歴、外科手術の種類、動脈瘤、うっ血性心不全、妊娠高血圧腎症、子癇、糖尿病、高血圧、冠動脈疾患、タンパク尿、腎機能不全、または敗血症などの先行疾患、ＮＳＡＩＤ、シクロスポリン、タクロリムス、アミノグリコシド、ホスカルネット、エチレングリコール、ヘモグロビン、ミオグロビン、イホスファミド、重金属、メトトレキセート、放射線不透過性造影剤、またはストレプトゾトシンなどの毒素曝露の種類）、その他の臨床変数（例えば、血圧、体温、呼吸数）、リスクスコア（ＡＰＡＣＨＥスコア、ＰＲＥＤＩＣＴスコア、ＵＡ／ＮＳＴＥＭＩ用のＴＩＭＩリスクスコア、Ｆｒａｍｉｎｇｈａｍリスクスコア、Ｔｈａｋａｒら（Ｊ．  Ａｍ．  Ｓｏｃ．  Ｎｅｐｈｒｏｌ．  １６巻：１６２〜６８頁、２００５年）、Ｍｅｈｒａｎら（Ｊ．  Ａｍ．  Ｃｏｌｌ．  Ｃａｒｄｉｏｌ．  ４４巻：１３９３〜９９頁、２００４年）、Ｗｉｊｅｙｓｕｎｄｅｒａら（ＪＡＭＡ  ２９７巻：１８０１〜９頁、２００７年）、ＧｏｌｄｓｔｅｉｎおよびＣｈａｗｌａ（Ｃｌｉｎ．  Ｊ．  Ａｍ．  Ｓｏｃ．  Ｎｅｐｈｒｏｌ．  ５巻：９４３〜４９頁、２０１０年）、またはＣｈａｗｌａら（Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔｌ．  ６８巻：２２７４〜８０頁、２００５年）のリスクスコア）、糸球体濾過率、推定糸球体濾過率、尿産生率、血清または血漿クレアチニン濃度、尿中クレアチニン濃度、ナトリウム排泄分画、尿中ナトリウム濃度、尿中クレアチニン対血清または血漿クレアチニン比、尿比重、尿浸透圧、尿中尿素窒素対血漿尿素窒素比、血漿ＢＵＮ対クレアチニン（ｃｒｅａｔｎｉｎｅ）比、尿中ナトリウム／（尿中クレアチニン／血漿クレアチニン）として算出される腎不全指標、血清または血漿好中球ゼラチナーゼ（ＮＧＡＬ）濃度、尿中ＮＧＡＬ濃度、血清または血漿シスタチンＣ濃度、血清または血漿心筋トロポニン濃度、血清または血漿ＢＮＰ濃度、血清または血漿ＮＴｐｒｏＢＮＰ濃度、および血清または血漿ｐｒｏＢＮＰ濃度。ＩＧＦＢＰ７および／またはＴＩＭＰ−２アッセイ結果と組み合わせることができるその他の腎機能の尺度は、以下、ならびにそれぞれがその全体にわたって参照により本明細書に組み込まれる、Ｈａｒｒｉｓｏｎ’ｓ  Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  Ｉｎｔｅｒｎａｌ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、第１７版、ＭｃＧｒａｗ  Ｈｉｌｌ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、１７４１〜１８３０頁、およびＣｕｒｒｅｎｔ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ  ＆  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ２００８年、第４７版、ＭｃＧｒａｗ  Ｈｉｌｌ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、７８５〜８１５頁に記載されている。
【００２９】
上記の通り、様々な方法を使用して、ＩＧＦＢＰ７および／またはＴＩＭＰ−２バイオマーカー結果を評価することができる。例として、妥当な集団を２つまたはそれを超える群に分割するように予め決定された、バイオマーカーまたはバイオマーカーの組合せのカットオフを選択することができる。大抵は便宜上「非罹患」集団と呼ばれる第１の群は、ＣＫＤまたはＡＫＩに併発するＣＫＤのリスクが高い患者を表す。第２の群は、バイオマーカー結果により測定するとＣＫＤまたはＡＫＩに併発するＣＫＤのリスクがより低い患者を表す。第２の群についての、ＣＫＤまたはＡＫＩに併発するＣＫＤの相対リスクは、第１の群におけるリスクに対して決定される。相対リスク１は２群間にリスクの差がないことを意味し、相対リスク１超は第２の群でリスクがより高いことを意味する。
【００３０】
特定の試験が２つの集団を区別する能力を、ＲＯＣ解析を使用して確立することができる。例えば、腎臓の状態の１つまたは複数の将来的な変化を被りやすい「第１の」亜集団およびそれほど被りやすくない「第２の」亜集団から確立されるＲＯＣ曲線を使用してＲＯＣ曲線を算出することができ、曲線下面積により試験の質の尺度がもたらされる。好ましくは、本明細書に記載される試験で、０．５より大きい、好ましくは少なくとも０．６、より好ましくは０．７、さらにより好ましくは少なくとも０．８、さらにより好ましくは少なくとも０．９、最も好ましくは少なくとも０．９５のＲＯＣ曲線面積がもたらされる。
【００３１】
ある特定の態様では、測定されるＩＧＦＢＰ７および／またはＴＩＭＰ−２濃度を連続変数として扱うことができる。例えば、任意の特定の濃度を、対応する、対象での将来的な腎機能低下の確率、傷害の発生率、分類などに変換することができる。さらに別の代替において、対象の集団を、「第１の」亜集団（例えば、腎臓の状態の１つまたは複数の将来的な変化、傷害の発生、分類などを被りやすい）およびそれほど被りやすくない「第２の」亜集団などの「ビン（ｂｉｎ）」に区別する際に、許容されるレベルの特異度および感度をもたらしうる閾値。閾値は、試験精度についての以下の尺度のうち１つまたは複数によりこの第１および第２の集団を区別するように選択される：
オッズ比が１超、好ましくは少なくとも約２もしくはそれを超える、または約０．５もしくはそれ未満、より好ましくは少なくとも約３もしくはそれを超える、または約０．３３もしくはそれ未満、さらにより好ましくは少なくとも約４もしくはそれを超える、または約０．２５もしくはそれ未満、さらにより好ましくは少なくとも約５もしくはそれを超える、または約０．２もしくはそれ未満、最も好ましくは少なくとも約１０もしくはそれを超える、または約０．１もしくはそれ未満；
特異度が０．５超、好ましくは少なくとも約０．６、より好ましくは少なくとも約０．７、さらにより好ましくは少なくとも約０．８、さらにより好ましくは少なくとも約０．９、最も好ましくは少なくとも約０．９５で、対応する感度が０．２超、好ましくは約０．３超、より好ましくは約０．４超、さらにより好ましくは少なくとも約０．５、さらにより好ましくは約０．６、さらにより好ましくは約０．７超、さらにより好ましくは約０．８超、より好ましくは約０．９超、最も好ましくは約０．９５超；
感度が０．５超、好ましくは少なくとも約０．６、より好ましくは少なくとも約０．７、さらにより好ましくは少なくとも約０．８、さらにより好ましくは少なくとも約０．９、最も好ましくは少なくとも約０．９５で、対応する特異度が０．２超、好ましくは約０．３超、より好ましくは約０．４超、さらにより好ましくは少なくとも約０．５、さらにより好ましくは約０．６、さらにより好ましくは約０．７超、さらにより好ましくは約０．８超、より好ましくは約０．９超、最も好ましくは約０．９５超；
特異度少なくとも約７５％と組み合わせる感度少なくとも約７５％；
陽性尤度比（感度／（１−特異度）として算出）が１超、少なくとも約２、より好ましくは少なくとも約３、さらにより好ましくは少なくとも約５、最も好ましくは少なくとも約１０；または
陰性尤度比（（１−感度）／特異度として算出）が１未満、約０．５未満もしくはそれに等しい、より好ましくは約０．３未満もしくはそれに等しい、最も好ましくは約０．１未満もしくはそれに等しい。
「約」という用語は、上記の測定値のうちのいずれかについての文脈では、所与の測定値の＋／−５％を指す。
【００３２】
対象の腎臓の状態を評価するのに複数の閾値を使用することもできる。例えば、腎臓の状態の１つまたは複数の将来的な変化、傷害の発生、分類などを被りやすい「第１の」亜集団、およびそれほど被りやすくない「第２の」亜集団を単一の群に組み合わせることができる。次いでこの群が、３またはそれを超える等分（細分区画の数に応じて、三分位、四分位、五分位などとして公知）に細分化される。どの細分区画に入るかに基づいてオッズ比が対象に割り当てられる。三分位で考えると、最下位または最上位の三分位を、その他の細分区画の比較における参照として使用することができる。この参照細分区画にはオッズ比１が割り当てられる。第２三分位には、その第１三分位に応じたオッズ比が割り当てられる。すなわち、第２三分位の人は、第１三分位の人と比較して、腎臓の状態の１つまたは複数の将来的な変化を被る可能性が３倍高くなりうる。第３三分位にもその第１三分位に応じたオッズ比が割り当てられる。
【図面の簡単な説明】
【００３３】
【図１】図１は、サファイアおよびトパーズ研究両方での患者リクルートの流れを示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００３４】
本文書の目的のため、以下の定義を適用する：
【００３５】
発明の詳細な説明
本明細書で使用される場合、「腎機能への傷害」は、腎機能の尺度の急激な（１４日以内、好ましくは７日以内、より好ましくは７２時間以内、さらにより好ましくは４８時間以内）測定可能な低下である。このような傷害は、例えば、糸球体濾過率または推定ＧＦＲの低下、尿排出量の減少、血清クレアチニンの増加、血清シスタチンＣの増加、腎代替療法の必要性などにより識別することができる。「腎機能の改善」は、腎機能の尺度の急激な（１４日以内、好ましくは７日以内、より好ましくは７２時間以内、さらにより好ましくは４８時間以内）測定可能な増大である。ＧＦＲを測定および／または推定する好ましい方法を以下に記載する。
【００３６】
本明細書で使用される場合、「腎機能の低下」は、血清クレアチニンの、０．１ｍｇ／ｄＬを超えるもしくはそれに等しい（８．８μｍｏｌ／Ｌ以上）絶対的増加、血清クレアチニンの、２０％を超えるもしくはそれに等しいパーセンテージ増加（ベースラインから１．２倍）、または尿排出量の減少（１時間あたり０．５ｍｌ／ｋｇ未満が実証された乏尿）により識別される、腎機能の急激な（１４日以内、好ましくは７日以内、より好ましくは７２時間以内、さらにより好ましくは４８時間以内）低下である。
【００３７】
本明細書で使用される場合、「急性腎不全」または「ＡＲＦ」は、血清クレアチニンの、０．３ｍｇ／ｄｌを超えるもしくはそれに等しい絶対的増加（２６．４μｍｏｌ／ｌ以上）、血清クレアチニンの、５０％を超えるもしくはそれに等しいパーセンテージ増加（ベースラインから１．５倍）、または尿排出量の減少（１時間あたり０．５ｍｌ／ｋｇ未満で少なくとも６時間が実証された乏尿）により識別される、腎機能の急激な（１４日以内、好ましくは７日以内、より好ましくは７２時間以内、さらにより好ましくは４８時間以内）低下である。この用語は「急性腎傷害」または「ＡＫＩ」と同義である。
【００３８】
本明細書で使用される場合、慢性腎臓病または「ＣＫＤ」は、健康状態に関する影響を伴う、３ヶ月を超えて存在する腎臓の構造または機能の異常と定義される。報告によれば米国の成人の約１１％がＣＫＤを有し、その多くが高齢者である。この状態は、その進行期に至るまでは通常無症状である。
【００３９】
「対象」という用語は、本明細書で使用される場合、ヒトまたは非ヒト生物を指す。したがって、本明細書に記載される方法および組成物は、ヒトおよび獣医学における疾患の両方に適用可能である。さらに、対象は好ましくは生体であるが、本明細書に記載される本発明は死後の分析に使用してもよい。好ましい対象はヒトであり、最も好ましくは、本明細書で使用される場合、疾患または状態に対する医療を受けている生きたヒトを指す「患者」である。これには、病理学的徴候について研究されている、規定の病気を有しない人が含まれる。
【００４０】
好ましくは、分析対象は試料において測定される。このような試料は対象から得てもよく、対象に提供されることが意図される生体物質から得てもよい。例えば試料は、対象への移植可能性について評価される腎臓、および先行する損傷について腎臓を評価するのに使用される分析対象測定から得ることができる。好ましい試料は体液試料である。
【００４１】
「体液試料」という用語は、本明細書で使用される場合、患者または移植ドナーなどの目的の対象の、診断、予後、分類または評価を目的として得られる体液の試料を指す。ある特定の実施形態では、このような試料は、進行中の状態の転帰、または状態に対する処置レジメンの効果を決定する目的で得ることができる。好ましい体液試料には、血液、血清、血漿、脳脊髄液、尿、唾液、痰、および胸水が含まれる。さらに、ある特定の体液試料が、分画または精製手順、例えば全血を血清または血漿成分に分離した後により容易に分析されることを当業者は認識しているものである。体液試料は、手順開始から７２時間以内、好ましくは４８時間以内、２４時間以内、１８時間以内、１２時間以内、または６時間以内に得られる場合、手順の「直前に」得られる。
【００４２】
「診断」という用語は、本明細書で使用される場合、患者が所与の疾患または状態を患っているかどうかについての確率（「見込み」）を当業者が推定および／または決定することができる方法を指す。本発明の場合、「診断」は、本発明の腎傷害マーカーについてのアッセイ、最も好ましくはイムノアッセイの結果を、任意選択でその他の臨床的特性とともに使用して、試料を得、アッセイした対象についての急性腎傷害またはＡＲＦの診断（すなわち発生または非発生）に至ることを含む。このような診断が「決定される」ことは、診断が１００％正確であることを含意することを意図するものではない。多くのバイオマーカーは複数の状態を示す。熟練した臨床医は情報が全くない状態でバイオマーカー結果を使用するのではなく、試験結果をその他の臨床徴候とともに使用して診断に至る。したがって、所定の診断閾値の一方の側の測定バイオマーカーレベルは、所定の診断閾値の他方の側の測定レベルと比較して、対象における疾患発生の見込みがより大きいことを示す。
【００４３】
同様に、予後リスクは、所与の経過または転帰が発生する確率（「見込み」）を示す。罹患状態（例えば、腎機能の悪化、将来的なＡＲＦ、または死亡）の確率増大に関連する予後指標のレベルまたはレベル変化は、患者の有害転帰の「見込み増大を示す」と呼ばれる。
【００４４】
ＩＧＦＢＰ７およびＴＩＭＰ−２アッセイ
【００４５】
概して、イムノアッセイは、目的のバイオマーカーを含むか含む疑いがある試料を、バイオマーカーに特異的に結合する少なくとも１つの抗体と接触させることを伴う特異的結合アッセイである。次いで、試料中のポリペプチドが抗体に結合することで形成される複合体の存在または量を示すシグナルが生成される。次いで、シグナルは試料中のバイオマーカーの存在または量に関連付けられる。バイオマーカーの検出および分析のための数多くの方法および機器が当業者に周知である。例えば、それぞれが、表、図および請求項全てを含むその全体にわたって参照により本明細書に組み込まれる、米国特許第６，１４３，５７６号；第６，１１３，８５５号；第６，０１９，９４４号；第５，９８５，５７９号；第５，９４７，１２４号；第５，９３９，２７２号；第５，９２２，６１５号；第５，８８５，５２７号；第５，８５１，７７６号；第５，８２４，７９９号；第５，６７９，５２６号；第５，５２５，５２４号；および第５，４８０，７９２号、ならびにＴｈｅ  Ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ、Ｄａｖｉｄ  Ｗｉｌｄ編、Ｓｔｏｃｋｔｏｎ  Ｐｒｅｓｓ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、１９９４年を参照のこと。
【００４６】
当技術分野で公知のアッセイ機器および方法により、様々なサンドイッチ、競合、または非競合アッセイ様式で、標識された分子を利用して、目的のバイオマーカーの存在または量に関連付けられるシグナルを生成することができる。適切なアッセイ様式には、クロマトグラフィー、質量スペクトログラフィー、およびタンパク質「ブロッティング」法も含まれる。さらに、バイオセンサーおよび光学イムノアッセイなどのある特定の方法および機器を用いて、標識された分子の必要なく分析対象の存在または量を決定することができる。例えば、それぞれが、表、図および請求項全てを含むその全体にわたって参照により本明細書に組み込まれる、米国特許第５，６３１，１７１号；および第５，９５５，３７７号を参照のこと。Ｂｅｃｋｍａｎ  ＡＣＣＥＳＳ（登録商標）、Ａｂｂｏｔｔ  ＡＸＳＹＭ（登録商標）、Ｒｏｃｈｅ  ＥＬＥＣＳＹＳ（登録商標）、Ｄａｄｅ  Ｂｅｈｒｉｎｇ  ＳＴＲＡＴＵＳ（登録商標）システムを含むがこれらに限定されないロボット設備が、イムノアッセイを実施することができるイムノアッセイ分析装置に含まれることも当業者は認識している。しかし、任意の適切なイムノアッセイ、例えば、酵素結合イムノアッセイ（ＥＬＩＳＡ）、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）、ラテラルフローアッセイ、競合的結合アッセイなども利用することができる。
【００４７】
抗体またはその他のポリペプチドを、アッセイにおいて使用するための様々な固体支持体に固定化することができる。特定の結合メンバーを固定化するのに使用可能な固相には、固相結合アッセイにおける固相として開発および／または使用される固相が含まれる。適切な固相の例には、メンブレンフィルター、セルロースベースの紙、ビーズ（高分子、ラテックスおよび常磁性粒子を含む）、ガラス、シリコンウエハー、微粒子、ナノ粒子、ＴｅｎｔａＧｅｌ、ＡｇｒｏＧｅｌ、ＰＥＧＡゲル、ＳＰＯＣＣゲル、および複数ウェルプレートが含まれる。抗体または複数の抗体をアレイ状に固体支持体上にコーティングすることでアッセイストリップを調製することができた。次いでこのストリップを試験試料に浸漬し、次いで洗浄および検出ステップを経て迅速に処理して、着色スポットなどの測定可能なシグナルを生成することができた。抗体またはその他のポリペプチドを、アッセイ機器表面に直接コンジュゲートさせることまたは間接的な結合のいずれかにより、アッセイ機器の特定の区域に結合させることができる。後者の場合の例では、抗体またはその他のポリペプチドを粒子またはその他の固体支持体に固定化することができ、その固体支持体を機器表面に固定化することができる。
【００４８】
このようなアッセイには検出のための方法が必要であり、結果を定量化する最も一般的な方法の１つは、検出可能な標識を、研究対象の生物システムにおける成分のうち１つに対する親和性を有するタンパク質または核酸とコンジュゲートさせることである。検出可能な標識には、それ自体が検出可能な分子（例えば、蛍光部分、電気化学的標識、金属キレートなど）、および検出可能な反応産物の産生（例えば、西洋ワサビペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼなどの酵素）またはそれ自体が検出可能な特異的結合分子（例えば、ビオチン、ジゴキシゲニン、マルトース、オリゴヒスチジン、２，４−ジニトロベンゼン（ｄｉｎｔｒｏｂｅｎｚｅｎｅ）、ヒ酸フェニル、ｓｓＤＮＡ、ｄｓＤＮＡなど）により間接的に検出可能な分子が含まれうる。
【００４９】
固相および検出可能な標識コンジュゲートの調製は大抵、化学的架橋剤の使用を含む。架橋試薬は少なくとも２つの反応基を含み、概してホモ官能性架橋剤（同一の反応基を含む）およびヘテロ官能性架橋剤（同一でない反応基を含む）に分割される。アミン、スルフヒドリルを介して結合させるか非特異的に反応するホモ二官能性架橋剤が、多くの供給元から入手可能である。マレイミド、ハロゲン化アルキルおよびアリール、アルファ−ハロアシルならびにピリジルジスルフィドはチオール反応基である。マレイミド、ハロゲン化アルキルおよびアリール、ならびにアルファ−ハロアシルはスルフヒドリルと反応してチオールエーテル結合を形成し、ピリジルジスルフィドはスルフヒドリルと反応して混合ジスルフィドを生じる。ピリジルジスルフィド産物は切断可能である。イミドエステルもタンパク質−タンパク質架橋に非常に有用である。コンジュゲーション成功のための様々な特質をそれぞれ組み合わせた様々なヘテロ二官能性架橋剤が市販されている。
【００５０】
ある特定の態様では、本発明は、ＩＧＦＢＰ７および／またはＴＩＭＰ−２の分析のためのキットを提供する。キットは、アッセイ対象の各バイオマーカーに結合する少なくとも１つの抗体を含む、少なくとも１つの試験試料の分析のための試薬を含む。キットは、本明細書に記載される診断および／または予後での関連付けのうち１つまたは複数を実施するための機器および説明書も含んでいてよい。好ましいキットは、分析対象用の、サンドイッチアッセイを実施するための抗体の対、または競合アッセイを実施するための標識された化学種を含む。好ましくは、抗体の対は、固相にコンジュゲートされる第１の抗体および検出可能な標識にコンジュゲートされる第２の抗体を含み、第１および第２の抗体はそれぞれ腎傷害マーカーに結合する。最も好ましくは、抗体はそれぞれモノクローナル抗体である。キットの使用および関連付けを実施するための説明書はラベルの形態であってよく、ラベルはその製造、輸送、販売または使用中常にキットに貼付されているか別途付随する、記載または記録された任意の材料を指す。例えば、ラベルという用語は、広告リーフレットおよびブローシャ、パッケージング材料、説明書、オーディオまたはビデオカセット、コンピュータディスク、ならびにキットに直接印字された書面を包含する。
【００５１】
抗体
【００５２】
「抗体」という用語は、本明細書で使用される場合、抗原またはエピトープに特異的に結合することができる、単一または複数の免疫グロブリン遺伝子またはその断片に由来するか、それをもとに設計されるか、それにより実質的にコードされるペプチドまたはポリペプチドを指す。例えばＦｕｎｄａｍｅｎｔａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、第３版、Ｗ．Ｅ．  Ｐａｕｌ編、Ｒａｖｅｎ  Ｐｒｅｓｓ、Ｎ．Ｙ．  （１９９３年）；Ｗｉｌｓｏｎ（１９９４年；Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  Ｍｅｔｈｏｄｓ  １７５巻：２６７〜２７３頁；Ｙａｒｍｕｓｈ（１９９２年）Ｊ．  Ｂｉｏｃｈｅｍ．  Ｂｉｏｐｈｙｓ．  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２５巻：８５〜９７頁を参照のこと。抗体という用語は、（ｉ）ＶＬ、ＶＨ、ＣＬおよびＣＨ１ドメインからなる一価断片であるＦａｂ断片；（ｉｉ）ヒンジ領域でジスルフィド架橋により連結された２つのＦａｂ断片を含む二価断片であるＦ（ａｂ’）２断片；（ｉｉｉ）ＶＨおよびＣＨ１ドメインからなるＦｄ断片；（ｉｖ）抗体の片腕のＶＬおよびＶＨドメインからなるＦｖ断片、（ｖ）ＶＨドメインからなるｄＡｂ断片（Ｗａｒｄら、（１９８９年）Ｎａｔｕｒｅ  ３４１巻：５４４〜５４６頁）；ならびに（ｖｉ）単離された相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む、抗原に結合する能力を維持する抗原−結合部分、すなわち「抗原結合部位」（例えば、断片、部分配列、相補性決定領域（ＣＤＲ））を含む。一本鎖抗体も「抗体」という用語に参照により含まれる。
【００５３】
本明細書に記載されるイムノアッセイに使用される抗体は、好ましくは本発明の腎傷害マーカーに特異的に結合する。「特異的に結合する」という用語は、上記の通り抗体はその抗体が結合するエピトープを提示する任意のポリペプチドに結合することから、抗体がその所期の標的だけに結合することを示すことを意図するものではない。そうではなく、その所期の標的に対するその親和性が、適切なエピトープを提示しない非標的分子に対するその親和性と比較して約５倍大きい場合に、抗体は「特異的に結合する」。好ましくは、抗体の親和性は、非標的分子に対するその親和性と比較して、標的分子に対しては少なくとも約５倍、好ましくは１０倍、より好ましくは２５倍、さらにより好ましくは５０倍、最も好ましくは１００倍またはそれを超えて大きい。好ましい実施形態では、好ましい抗体は、少なくとも約１０７Ｍ−１、好ましくは約１０８Ｍ−１〜約１０９Ｍ−１の間、約１０９Ｍ−１〜約１０１０Ｍ−１の間、または約１０１０Ｍ−１〜約１０１２Ｍ−１の間の親和性で結合する。
【００５４】
親和性は、Ｋｄ＝ｋｏｆｆ／ｋｏｎ（ｋｏｆｆは解離速度定数、Ｋｏｎは会合速度定数、Ｋｄは平衡定数）として算出される。親和性は、平衡状態で、様々な濃度（ｃ）の標識されたリガンドの結合画分（ｒ）を測定することで決定することができる。Ｓｃａｔｃｈａｒｄ方程式：ｒ／ｃ＝Ｋ（ｎ−ｒ）を使用して、データをグラフにする：式中、ｒ＝平衡状態での結合するリガンドのモル数／受容体のモル数；ｃ＝平衡状態での遊離リガンド濃度；Ｋ＝平衡会合定数；ｎ＝受容体分子あたりのリガンド結合部位数。グラフでの分析により、ｒ／ｃがＹ軸に、それに対してｒがＸ軸にプロットされ、それによりＳｃａｔｃｈａｒｄプロットが作成される。Ｓｃａｔｃｈａｒｄ分析による抗体親和性測定は当技術分野で周知である。例えば、ｖａｎ  Ｅｒｐら、Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ  １２巻：４２５〜４３頁、１９９１年；ＮｅｌｓｏｎおよびＧｒｉｓｗｏｌｄ、Ｃｏｍｐｕｔ．  Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｐｒｏｇｒａｍｓ  Ｂｉｏｍｅｄ．  ２７巻：６５〜８頁、１９８８年を参照のこと。
【００５５】
「エピトープ」という用語は、抗体への特異的な結合を可能にする抗原決定基を指す。エピトープは通常、アミノ酸または糖側鎖などの分子の化学的に活性な表面基からなり、通常、特定の３次元構造特性、および特定の電荷特性を有する。立体構造および非立体構造エピトープは、前者への結合は変性溶媒の存在下で失われるが後者への結合では失われないという点で区別される。
【００５６】
数多くの出版物が、選択された分析対象に結合させるためのポリペプチドライブラリを作製およびスクリーニングするため、ファージディスプレイ技術を使用することについて論じている。例えば、Ｃｗｉｒｌａら、Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  ＵＳＡ  ８７巻、６３７８〜８２頁、１９９０年；Ｄｅｖｌｉｎら、Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４９巻、４０４〜６頁、１９９０年、ＳｃｏｔｔおよびＳｍｉｔｈ、Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４９巻、３８６〜８８頁、１９９０年；ならびにＬａｄｎｅｒら、米国特許第５，５７１，６９８号を参照のこと。ファージディスプレイ法の基本的な概念は、スクリーニング対象のポリペプチドをコードするＤＮＡとそのポリペプチドの間の物理的会合を確立することである。この物理的会合は、ポリペプチドを、そのポリペプチドをコードするファージゲノムを封入したカプシドの一部として提示するファージ粒子によりもたらされる。ポリペプチドとその遺伝子材料の間の物理的会合の確立により、様々なポリペプチドを有する非常に多数のファージを同時にマススクリーニングすることができる。標的に対する親和性を有するポリペプチドを提示するファージが標的に結合し、これらのファージが標的に対する親和性スクリーニングにより強化される。これらのファージより提示されるポリペプチドが何であるかは、各ゲノムから決定することができる。これらの方法を使用して、望ましい標的に対する結合親和性を有すると識別されたポリペプチドが次いで、従来の手段によりバルクで合成されうる。例えば、表、図、および請求項全てを含むその全体にわたって本明細書に組み込まれる米国特許第６，０５７，０９８号を参照のこと。
【００５７】
次いで、これらの方法により生成された抗体を、精製された目的のポリペプチドとの親和性および特異性についてまずスクリーニングすること、ならびに必要に応じて、結果を、抗体の、結合から除外されることが望ましいポリペプチドとの親和性および特異性と比較することによって選択することができる。スクリーニング手順は、マイクロタイタープレートの別々のウェルへの、精製ポリペプチドの固定化を伴っていてよい。次いで、可能性のある抗体または抗体の群を含む溶液を各マイクロタイターウェルに入れ、約３０分〜２時間インキュベートする。次いで、マイクロタイターウェルを洗浄し、標識された二次抗体（例えば、産生された抗体がマウス抗体である場合、アルカリホスファターゼにコンジュゲートされた抗マウス抗体）をウェルに添加し、約３０分間インキュベートし、次いで洗浄する。ウェルに基質を添加し、固定化されたポリペプチドに対する抗体が存在すれば色反応が現れる。
【００５８】
次いで、そのように識別された抗体を、選択されたアッセイ設計において親和性および特異性についてさらに分析することができる。標的タンパク質のためのイムノアッセイ開発では、精製された標的タンパク質が、選択された抗体を使用するイムノアッセイの感度および特異性を判断するための標準物質として作用する。様々な抗体の結合親和性は異なりうるため、ある特定の抗体の対（例えばサンドイッチアッセイにおける）が、立体的に互いを妨げるなどする場合があり、抗体のアッセイ性能が、抗体の絶対的な親和性および特異性よりも重要な尺度となることがある。
【００５９】
本出願では、抗体ベースの結合アッセイについて詳細に記載しているが、アッセイにおける結合種としての抗体の代替物が当技術分野で周知である。これらには、特定の標的に対する受容体、アプタマーなどが含まれる。アプタマーは、特定の標的分子に結合するオリゴ核酸またはペプチド分子である。アプタマーは通常、大きなランダム配列プールから選択することで作り出されるが、天然のアプタマーも存在する。改変ヌクレオチドを含む高親和性アプタマーは、改善されたｉｎ  ｖｉｖｏ安定性または改善された送達特性などの改善された特性をリガンドに付与する。このような改変の例には、リボースおよび／またはリン酸および／または塩基の位置での化学的置換が含まれ、アミノ酸側鎖の官能性が含まれていてよい。
【００６０】
アッセイ関連付け
【００６１】
「関連付ける」という用語は、本明細書でバイオマーカーの使用に言及する際に使用される場合、患者におけるバイオマーカーの存在または量を、所与の状態を患っていることが分かっている、もしくはそのリスクがあることが分かっている人、または所与の状態を有しないことが分かっている人におけるその存在または量と比較することを指す。これは大抵、バイオマーカー濃度の形態でのアッセイ結果を、疾患の発生もしくは非発生、または何らかの将来的な転帰の見込みを示すように選択される所定の閾値と比較する形態をとる。
【００６２】
診断閾値を選択することには、とりわけ、疾患の確率の考慮、様々な試験閾値での正しい診断および誤った診断の分布、ならびに診断に基づく処置（または処置しないこと）の結果の推定を伴う。例えば、非常に有効かつリスクレベルが低い特定の療法を投与することを考えると、臨床医は相当の診断の不確実性を受容しうるため、試験はほとんど必要ない。一方で、処置選択肢の有効性がより低くリスクがより高い状況では、臨床医は大抵、より高度の診断の確実性を必要とする。したがって、診断閾値の選択にはコスト／ベネフィット分析が関与する。
【００６３】
適切な閾値は様々な方法で決定されうる。例えば、心筋トロポニンを使用する急性心筋梗塞の診断において推奨される１つの診断閾値は、正常な集団で見られる濃度の９７．５パーセンタイルである。別の方法では、同じ患者由来の連続試料に注目することができ、先の「ベースライン」結果を使用してバイオマーカーレベルの経時変化がモニタリングされる。
【００６４】
集団研究を使用して決定閾値を選択することもできる。受信者動作特性（「ＲＯＣ」）は、レーダー画像の分析のために第二次世界大戦中に発展した信号検出理論分野から生まれたものであり、ＲＯＣ分析は大抵、「罹患」亜集団を「非罹患」亜集団と最も良好に区別することができる閾値を選択するのに使用される。この場合、人が陽性を示すが実際には疾患を有しないときに偽陽性が生じる。一方で、人が陰性を示し健康であると示唆されるが実際には疾患を有するときに偽陰性が生じる。ＲＯＣ曲線を描くため、決定閾値を継続的に変動させながら、真陽性率（ＴＰＲ）および偽陽性率（ＦＰＲ）が決定される。ＴＰＲは感度と同等でありＦＰＲは１−特異度に等しいため、ＲＯＣグラフは感度対（１−特異度）プロットと呼ばれることもある。完全な試験はＲＯＣ曲線下面積１．０を有し、ランダム試験は面積０．５を有する。閾値は、許容されるレベルの特異度および感度をもたらすように選択される。
【００６５】
この文脈では、「罹患」は、ある特性（疾患もしくは状態の存在または何らかの転帰の発生）を有する集団を指すことを意図し、「非罹患」は、その特性を欠く集団を指すことを意図する。単一の決定閾値はこのような方法の最も簡便な適用であるが、複数の決定閾値が使用されうる。例えば、第１の閾値未満では疾患の非存在が比較的高い信頼度で割り当てられてよく、第２の閾値を超えると疾患の存在が比較的高い信頼度で割り当てられてよい。２つの閾値の間は未定と考えられてよい。これは、本質的に例示に過ぎないことを意図するものである。
【００６６】
閾値比較に加えて、アッセイ結果を患者の分類（疾患の発生または非発生、転帰の見込みなど）と関連付けるためのその他の方法には、決定木、ルールセット、ベイズ法、およびニューラルネットワーク法が含まれる。これらの方法は、複数の分類のうちの１つの分類に対象が属する程度を表す確率値を生ずることができる。
【００６７】
試験精度の尺度は、Ｆｉｓｃｈｅｒら、Ｉｎｔｅｎｓｉｖｅ  Ｃａｒｅ  Ｍｅｄ．  ２９巻：１０４３〜５１頁、２００３年に記載されるように得られ、所与のバイオマーカーの有効性を決定するのに使用されうる。これらの尺度には、感度および特異度、予測値、尤度比、診断オッズ比、ならびにＲＯＣ曲線面積が含まれる。ＲＯＣプロットの曲線下面積（「ＡＵＣ」）は、分類器が、無作為に選択される正事例を無作為に選択される負事例より高く順位付けする確率に等しい。ＲＯＣ曲線下面積は、群が連続データからなる場合に考慮される、２つの群で得られたスコア間の中央値の差を検定するＭａｎｎ−Ｗｈｉｔｎｅｙ  Ｕ検定または順位のＷｉｌｃｏｘｏｎ検定と同等であると考えられる。
【００６８】
上記で論じられるように、適切な検定は、これらの様々な尺度で以下の結果のうち１つまたは複数を示しうる：特異度０．５超、好ましくは少なくとも０．６、より好ましくは少なくとも０．７、さらにより好ましくは少なくとも０．８、さらにより好ましくは少なくとも０．９、最も好ましくは少なくとも０．９５で、対応する感度０．２超、好ましくは０．３超、より好ましくは０．４超、さらにより好ましくは少なくとも０．５、さらにより好ましくは０．６、さらにより好ましくは０．７超、さらにより好ましくは０．８超、より好ましくは０．９超、最も好ましくは０．９５超；感度０．５超、好ましくは少なくとも０．６、より好ましくは少なくとも０．７、さらにより好ましくは少なくとも０．８、さらにより好ましくは少なくとも０．９、最も好ましくは少なくとも０．９５で、対応する特異度０．２超、好ましくは０．３超、より好ましくは０．４超、さらにより好ましくは少なくとも０．５、さらにより好ましくは０．６、さらにより好ましくは０．７超、さらにより好ましくは０．８超、より好ましくは０．９超、最も好ましくは０．９５超；特異度少なくとも７５％と組み合わせた感度少なくとも７５％；ＲＯＣ曲線面積０．５超、好ましくは少なくとも０．６、より好ましくは０．７、さらにより好ましくは少なくとも０．８、さらにより好ましくは少なくとも０．９、最も好ましくは少なくとも０．９５；オッズ比１以外、好ましくは少なくとも約２もしくはそれを超える、または約０．５もしくはそれ未満、より好ましくは少なくとも約３もしくはそれを超える、または約０．３３もしくはそれ未満、さらにより好ましくは少なくとも約４もしくはそれを超える、または約０．２５もしくはそれ未満、さらにより好ましくは少なくとも約５もしくはそれを超える、または約０．２もしくはそれ未満、最も好ましくは少なくとも約１０もしくはそれを超える、または約０．１もしくはそれ未満；陽性尤度比（感度／（１−特異度）として算出）１超、少なくとも２、より好ましくは少なくとも３、さらにより好ましくは少なくとも５、最も好ましくは少なくとも１０；およびまたは陰性尤度比（（１−感度）／特異度として算出）１未満、０．５未満もしくはそれに等しい、より好ましくは０．３未満もしくはそれに等しい、最も好ましくは０．１未満もしくはそれに等しい。
【００６９】
本発明の腎傷害マーカーアッセイ結果と組み合わせることができる臨床徴候には、人口統計学的情報（例えば、体重、性別、年齢、人種）、病歴（例えば、家族歴、外科手術の種類、動脈瘤、うっ血性心不全、妊娠高血圧腎症、子癇、糖尿病、高血圧、冠動脈疾患、タンパク尿、腎機能不全、または敗血症などの先行疾患、ＮＳＡＩＤ、シクロスポリン、タクロリムス、アミノグリコシド、ホスカルネット、エチレングリコール、ヘモグロビン、ミオグロビン、イホスファミド、重金属、メトトレキセート、放射線不透過性造影剤、またはストレプトゾトシンなどの毒素曝露の種類）、臨床変数（例えば、血圧、体温、呼吸数）、リスクスコア（ＡＰＡＣＨＥスコア、ＰＲＥＤＩＣＴスコア、ＵＡ／ＮＳＴＥＭＩ用のＴＩＭＩリスクスコア、Ｆｒａｍｉｎｇｈａｍリスクスコア）、尿中総タンパク質測定値、糸球体濾過率、推定糸球体濾過率、尿産生率、血清または血漿クレアチニン濃度、腎乳頭抗原１（ＲＰＡ１）測定値；腎乳頭抗原２（ＲＰＡ２）測定値；尿中クレアチニン濃度、ナトリウム排泄分画、尿中ナトリウム濃度、尿中クレアチニン対血清または血漿クレアチニン比、尿比重、尿浸透圧、尿中尿素窒素対血漿尿素窒素比、血漿ＢＵＮ対クレアチニン比、および／または尿中ナトリウム／（尿中クレアチニン／血漿クレアチニン）として算出される腎不全指標が含まれる。本発明の方法において組み合わせることができる腎機能のその他の尺度が、以下、ならびにそれぞれがその全体にわたって参照により本明細書に組み込まれるＨａｒｒｉｓｏｎ’ｓ  Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  Ｉｎｔｅｒｎａｌ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、第１７版、ＭｃＧｒａｗ  Ｈｉｌｌ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、１７４１〜１８３０頁、およびＣｕｒｒｅｎｔ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ  ＆  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ２００８年、第４７版、ＭｃＧｒａｗ  Ｈｉｌｌ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、７８５〜８１５頁に記載されている。
【００７０】
このようにしてアッセイ結果／臨床徴候を組み合わせることは、多変量ロジスティック回帰、対数線形モデリング、ニューラルネットワーク分析、ｎ−ｏｆ−ｍ分析、決定木分析などの使用を含んでいてよい。このリストは限定的であることを意図するものではない。
【００７１】
急性腎不全の診断
【００７２】
上記の通り、「急性腎（または腎）傷害」および「急性腎（または腎）不全」という用語は、本明細書で使用される場合、血清クレアチニンのベースライン値からの変化という観点で一部定義される。大部分のＡＲＦ定義は、血清クレアチニンおよびしばしば尿排出量の使用を含む共通の要素を有する。患者は、この比較において使用するための利用可能な腎機能のベースライン尺度なしに、腎機能傷害を呈することがある。このようなイベントでは、患者が最初は正常なＧＦＲを有していたと仮定することで、ベースライン血清クレアチニン値を推定することができる。糸球体濾過率（ＧＦＲ）は、単位時間あたりに、腎臓（腎臓）糸球体毛細血管からボーマン嚢へ濾過された体液の体積である。糸球体濾過率（ＧＦＲ）は、血液中で安定したレベルを有し、腎臓で自由に濾過されるが再吸収も分泌もされない任意の化学物質を測定することで算出することができる。ＧＦＲは通常、単位ｍｌ／分で表される：
【数１】
2019523889.tif 000005
【００７３】
ＧＦＲを体表面積に正規化することにより、１．７３ｍ２あたりＧＦＲ約７５〜１００ｍｌ／分が想定されうる。したがって、測定される比率は、計算可能な血液体積から生じた尿中の物質の量である。
【００７４】
糸球体濾過率（ＧＦＲまたはｅＧＦＲ）を算出または推定するのに使用される様々な技術がいくつか存在する。しかし診療では、ＧＦＲを測定するのにクレアチニンクリアランスが使用される。クレアチニンは体で天然に産生される（クレアチニンは筋肉に見られるクレアチン代謝物である）。クレアチニンは糸球体で自由に濾過されるだけでなく、腎尿細管により非常に少量活発に分泌もされるため、クレアチニンクリアランスは実際のＧＦＲを１０〜２０％過剰評価する。クレアチニンクリアランスが容易に測定されることを考慮すれば、この誤差の範囲は許容される。
【００７５】
クレアチニンクリアランス（ＣＣｒ）は、クレアチニン尿中濃度（ＵＣｒ）、尿流速（Ｖ）、およびクレアチニン血漿濃度（ＰＣｒ）の値が分かれば算出可能である。尿中濃度と尿流速の積によりクレアチニン排泄率が得られるため、クレアチニンクリアランスは、クレアチニン血漿濃度で割ったクレアチニン排泄率（ＵＣｒ×Ｖ）とも言われる。これは通常、数学的に：
【数２】
2019523889.tif 000006
と表される。
通常、ある朝の空の膀胱から翌朝の膀胱内容物までの２４時間採尿が行われ、次いで比較血液試験が行われる：
【数３】
2019523889.tif 000007
様々なサイズの人々の間での結果の比較を可能にするため、ＣＣｒは大抵、体表面積（ＢＳＡ）に対して補正され、平均サイズの人と比較してｍｌ／分／１．７３ｍ２と表される。大部分の成人は１．７（１．６〜１．９）に近いＢＳＡを有するが、極めて肥満または痩せている患者ではその実際のＢＳＡに対してＣＣｒを補正すべきである：
【数４】
2019523889.tif 000008
【００７６】
糸球体濾過率（ＧＦＲ）が下降するにつれてクレアチニン分泌が増加し、そのため血清クレアチニンの上昇が小さくなることから、クレアチニンクリアランス測定の精度（収集が完全であっても）は限られる。したがって、クレアチニン排泄は濾過された量をはるかに超え、潜在的に大きなＧＦＲの過剰評価が生じる（２倍もの差）。しかし、臨床目的では、腎機能が安定しているのか、悪化しているのか向上しているのかを決定することが重要である。これは大抵、血清クレアチニン単独をモニタリングすることで決定される。クレアチニンクリアランス同様、血清クレアチニンも、ＡＲＦの非定常状態におけるＧＦＲの正確な反映ではない。それにもかかわらず、血清クレアチニンがベースラインから変化した程度は、ＧＦＲの変化を反映する。血清クレアチニンは容易にかつ簡単に測定され、かつ腎機能に特異的である。
【００７７】
ｍＬ／ｋｇ／時間での尿排出量を決定するには、１時間ごとの採尿および測定が適切である。例えば、累積２４時間排出量しか入手可能でなく、かつ患者の体重が提供されない場合、ＲＩＦＬＥ尿排出量基準の軽度な改変が記載されている。例えば、Ｂａｇｓｈａｗら、Ｎｅｐｈｒｏｌ．  Ｄｉａｌ．  Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ．  ２３巻：１２０３〜１２１０頁、２００８年は、平均患者体重を７０ｋｇと仮定し、患者を以下に基づいてＲＩＦＬＥ分類に割り当てている：３５ｍＬ／時間未満（Ｒｉｓｋ）、２１ｍＬ／時間未満（Ｉｎｊｕｒｙ）または４ｍＬ／時間未満（Ｆａｉｌｕｒｅ）。
【００７８】
処置レジメンの選択
【００７９】
診断が得られると、腎代替療法の開始、腎臓を損傷することが公知の化合物の送達中止、腎臓移植、腎臓を損傷することが公知の手技の延期または回避、利尿薬投与の改変、目標指向型療法の開始などの、診断に適合する処置レジメンを臨床医が容易に選択することができる。当業者は、本明細書に記載される診断方法に関して論じられる数多くの疾患について、適切な処置を認識している。例えば、Ｍｅｒｃｋ  Ｍａｎｕａｌ  ｏｆ  Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ  ａｎｄ  Ｔｈｅｒａｐｙ、第１７版、Ｍｅｒｃｋ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、Ｗｈｉｔｅｈｏｕｓｅ  Ｓｔａｔｉｏｎ、ＮＪ、１９９９年を参照のこと。さらに、本明細書に記載される方法および組成物は予後の情報をもたらすため、本発明のマーカーを使用して処置経過をモニタリングすることができる。例えば、改善したまたは悪化した予後の状態は、特定の処置が有効か有効でないかを示しうる。
【００８０】
腎前性ＡＫＩと腎性ＡＫＩの区別は、処置介入を方向付ける重要な臨床評価である。腎前性の患者には、腎臓の血流を改善するように、血行動態を目標とする療法が必要である。これらの療法は大抵、変力物質、静脈内液および／または昇圧剤を伴う。これらの介入はそれぞれ潜在的な副作用（例えば不整脈、容積負荷、血管収縮）を有し、腎機能を改善することにならないのであればこれらの療法を行うことは望ましくない。したがって、腎前性ＡＫＩと腎性ＡＫＩの区別は、処方されるべき療法を決定する一助となる。腎前性ＡＫＩが存在しなければ、療法はＡＫＩを軽減させ支持的ケアを提供することを目標とする。
【００８１】
腎前性急性腎不全は、腎臓カメラへの血流の突発的な減少（腎臓低灌流）により腎機能の喪失が引き起こされると発生する。原因には、血液体積の減少、血圧低下、腎臓からの血液の短絡、心不全、および腎臓に供給する血管の局所変化が含まれていてよい。腎前性急性腎不全では、腎臓自体に問題はない。処置は腎前性急性腎不全の原因を矯正することに重点を置く。
【００８２】
体液負荷のない腎前性ＡＫＩでは、通常は静脈内液の投与が、腎機能を改善するための第１のステップである。これは特に、血管内体積の欠乏の結果として腎前性ＡＫＩを発症する患者に対し、正常な循環血液体積を回復させるために使用される。本明細書に記載されるように、体液の過剰代替または過少代替を回避するため、体積状態がモニタリングされうる。アルブミンなどのコロイド粒子を有する体液が、単純な生理食塩水注入よりも好ましいことがある。前方への流れが失われた腎前性状態では、心拍出量を増強することを目標とする薬物が通常用いられる。
【００８３】
過度の利尿の結果としてＡＫＩを発症したうっ血性心不全の患者では、腎機能を回復させるには、利尿薬の保留および慎重な体積代替が十分であることがある。心拍出量、ゆえに腎臓灌流を改善するため、ノルエピネフリンおよびドブタミンなどの変力物質が投与されてよい。
【００８４】
入院した体液負荷患者は通常、水分制限、ＩＶ利尿薬、変力物質（例えば、ミルリノンまたはドブタミン）および併用療法で処置される。ループ利尿薬フロセミドは、ＨＦにおける容積負荷の処置に最もよく処方される利尿薬である。労作時呼吸困難および容積負荷の徴候を有し、緊急入院の適応症を有しない患者には、初回経口用量１日１回２０〜４０ｍｇが投与されるべきである。重度の負荷および肺水腫は、入院および静脈内フロセミドの適応症である。一部の軽度のＨＦ患者は、チアジド利尿薬で有効に処置されうる。チアジド利尿薬でも持続的な容積負荷を有する患者は、経口ループ利尿薬に切り替えられるべきである。重度の腎傷害患者では、利尿薬が有意義な利尿をもたらさないことがある。このような場合の体液負荷を処置するため、アクアフェレーシスとも呼ばれる限外濾過が使用されうる。
【００８５】
腎前性ＡＫＩとは対照的に、急性尿細管壊死（ＡＴＮ）の処置についての主要な目標は、腎臓へのさらなる傷害を防止することである。虚血性ＡＴＮは、腎臓が長期間十分に灌流されない（例えば腎動脈狭窄症により）とき、またはショックにより引き起こされうる。敗血症は、ＡＴＮ患者の死亡の３０％〜７０％を引き起こす。したがって、静脈内ライン、膀胱カテーテル、および人工呼吸器を回避することが推奨される。敗血症患者は血管が拡張しているため、投与された大量の体液がこれらの患者の肺間質に蓄積する。細胞外液の体積が直ちに評価されるべきであり、任意の欠陥に対する充足が直ちに開始されるべきである。適切な輸液療法、昇圧剤および／または変力物質の投与、ならびに根底にある敗血症の処置により、血行動態が改変されるべきである。可能性のある腎毒性薬物は全て停止されるべきである。さらに、腎臓により除去される医薬品全ての用量が調整されるべきである。
【００８６】
本発明が、目的を実施し、言及される目標および利点、ならびに本発明に固有の目標および利点を得るのに十分に適していることを、当業者は容易に理解する。本明細書で提供される実施例は、好ましい実施形態を表し、例示的なものであり、本発明の範囲に対する制限と意図するものではない。
【実施例】
【００８７】
（実施例１）
研究デザインおよび参加者
【００８８】
ＡＫＩにおける［ＴＩＭＰ２］・［ＩＧＦＢＰ７］を検証するのに使用された２つの多施設臨床試験、「サファイア」および「トパーズ」研究から収集されたデータの二次分析を実施した。サファイア研究は、ＡＫＩ発症のリスクがある重篤な成人（２１歳より上）患者７４４名を登録した。トパーズ研究では、サファイア研究と同様の組入れ／除外基準で、不健康な成人患者４２０名が登録された。特に、両研究の対象は、有意な肺（呼吸器ＳＯＦＡスコア２超）または心血管（心臓ＳＯＦＡスコア１超）機能傷害のエビデンスを有する必要があり、中度〜重度ＡＫＩ（ＫＤＩＧＯステージ２または３）の基準をまだ満たすことができなかった。患者リクルートは、集中処置室（ＩＣＵ）入院から２４時間以内に行われた。両研究についてのより詳細な説明は以前に公表されている。サファイアおよびトパーズ研究はともに、Ｗｅｓｔｅｒｎ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ  Ｒｅｖｉｅｗ  Ｂｏａｒｄ（Ｏｌｙｍｐｉａ、Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ、ＵＳＡ）および必要に応じて個々の施設の治験審査委員会の承認を受けており、対象（またはその法的代理人）全員から書面によるインフォームドコンセントを得た。
【００８９】
（実施例２）
手順
【００９０】
臨床データ収集には、患者の人口統計、ＩＣＵ入院の理由、ＡＰＡＣＨＥ  ＩＩＩスコア変数、１時間ごとの尿排出量および臨床試験結果が含まれていた。入手可能な診療記録の調査に基づき、かつ診断コードに基づき併存疾患状態を決定した。ＣＫＤ−ＥＰＩ方程式を使用して推定ＧＦＲを決定した。人種欠測または不明の患者は黒人でないとみなした。各施設はデータを臨床情報元から抽出し、データを非特定化されたパスワードで保護されたデータセットとしてオンライン電子症例報告書にインプットした。研究データは独立したサーバー施設（Ｍｅｄｉｄａｔａ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、ＮＹ）で保存した。
【００９１】
主要転帰は、ＫＤＩＧＯ基準（ＫＤＩＧＯ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅ  ｆｏｒ  Ａｃｕｔｅ  Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｊｕｒｙ、２０１２年）で、登録から１２時間以内に発症したステージ２または３のＡＫＩと定義される中度〜重度ＡＫＩであった。トパーズ研究では、ＡＫＩの最終決定は、バイオマーカー結果に対し盲検化された独立した３名の腎臓専門医のエキスパートパネルにより判定した。
【００９２】
（実施例３）
分析
【００９３】
尿および血液試料を収集し、標準的な方法を使用して処理した。試料上清を収集から２時間以内に凍結させ、分析のため中央研究施設にバッチ輸送する前に−７０℃で保存した。分析直前に試料を解凍した。臨床イムノアッセイ（ＮＥＰＨＲＯＣＨＥＣＫ  ＴｅｓｔおよびＡＳＴＵＴＥ１４０  Ｍｅｔｅｒ；Ａｓｔｕｔｅ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｉｎｃ．、Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ、ＣＡ）を使用して［ＴＩＭＰ２］・［ＩＧＦＢＰ７］についての試験を実施し、試験を実施する研究施設の技術者は、患者の転帰に対し盲検化されていた。サファイア研究にリクルートされた対象については、［ＴＩＭＰ２］・［ＩＧＦＢＰ７］試験をＡｓｔｕｔｅ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｉｎｃ．の研究施設で実施した；トパーズ研究では、独立した研究施設３ヶ所（Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ  ａｔ  Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｌｏｕｉｓｖｉｌｌｅ、およびＡＲＵＰ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ  ｉｎ  Ｓａｌｔ  Ｌａｋｅ  Ｃｉｔｙ）において３連で試験を実施した。［ＴＩＭＰ２］・［ＩＧＦＢＰ７］についての試験結果は、文面を通して一様に単位（ｎｇ／ｍｌ）２／１０００として報告される。
【００９４】
連続変数は、ＡＫＩ群間でＷｉｌｃｏｘｏｎ順位和検定またはｔ検定を使用して比較した。カテゴリー変数は、ＡＫＩ群間でカイ二乗検定を使用して比較した。［ＴＩＭＰ２］・［ＩＧＦＢＰ７］レベルに対する併存疾患の効果を評価するため、本発明者らは、応答変数が順位変換された［ＴＩＭＰ２］・［ＩＧＦＢＰ７］であり、説明変数がＡＫＩ状態、併存疾患状態、およびそれらの間の相互作用である、各併存疾患についての多重線形回帰分析を実施した。ＡＵＣ算出および２つのＡＵＣの差についての試験は、Ｒパッケージ「ｐＲＯＣ」．１２を使用し、Ｄｅｌｏｎｇ法に基づいていた。必要であれば、Ｂｅｎｊａｍｉｎｉ−Ｈｏｃｈｂｅｒｇ法により、多重検定のためｐ値を調整した。多変量ロジスティック回帰モデルを構築して、併存疾患状態に関与するＡＫＩの主要転帰を予測した。後退的選択を使用して、ｐ０．１０未満の変数を除去し、最終モデルに至った。統計分析は、Ｒバージョン３．１．０．（Ｒ  Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ、ｗｗｗ．ｒ−ｐｒｏｊｅｃｔ．ｏｒｇ／）およびＳＡＳ９．３（ＳＡＳ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ、Ｃａｒｙ、ＮＣ）を使用して実施した。
【００９５】
（実施例４）
結果
【００９６】
図１は、サファイアおよびトパーズ研究両方での患者リクルートの流れを示す。合計１１６４名の患者がリクルートされた；サファイア研究では、患者２１名（２．８％）が登録後に除外され、トパーズ研究では患者１２名（２．９％）が除外された。患者特性は２つの研究間で同様であった。最終コホートは患者１１３１名からなり、そのうち１３９名（１２．３％）が中度〜重度ＡＫＩ（ＫＤＩＧＯステージ２または３）．５を発症した。簡潔にするために、実施例を通して、ＡＫＩはＫＤＩＧＯステージ２または３のＡＫＩを指すものとし、ＡＫＩなしはＡＫＩなしまたはステージ１のＡＫＩのいずれかを示すものとする。
【００９７】
ＡＫＩ状態により階層化された患者特性を表１に示す。ＡＫＩを発症した患者のうち、ＡＫＩなしの患者と比較してより大きいパーセンテージが、先行する糖尿病および高血圧を有していた。根底にＣＫＤを有する患者のパーセンテージはＡＫＩ群間で同様であったが、登録時の血清クレアチニン中央値はＡＫＩを発症した患者でより高かった。
【００９８】
急性腎傷害状態により階層化された患者特性。カテゴリー変数はＮ（％）として、数値変数は平均値（標準偏差）または中央値（四分位範囲）として示す。
【表２−１】
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【表２−２】
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【００９９】
コホート全体では、［ＴＩＭＰ２］・［ＩＧＦＢＰ７］の中央値は、非ＡＫＩ患者と比較してＡＫＩ患者で有意に高かった（１．５［ＩＱＲ０．６〜２．８］対０．３［ＩＱＲ０．１〜０．７］、ｐ＜０．００１）。これらの値は様々な併存疾患状態にわたって一定であり、ＡＫＩと非ＡＫＩ患者の間で統計的に差があるままであった。
【０１００】
ＣＫＤ患者９７名のコホートでは、中度〜重度ＡＫＩの［ＴＩＭＰ２］・［ＩＧＦＢＰ７］予測のためのＡＵＣは０．９１（９５％ＣＩ  ０．８５〜０．９７）であった。以前に検証されたカットオフ０．３を超える［ＴＩＭＰ２］・［ＩＧＦＢＰ７］値でのＡＫＩの相対リスクは３２．４（９５％ＣＩ  ３．７〜２８４．８）であった。非ＡＫＩ患者では、ＣＫＤの存在が［ＴＩＭＰ２］・［ＩＧＦＢＰ７］の低下に関連していた。非ＡＫＩ患者においてＣＫＤを非ＣＫＤと識別するための［ＴＩＭＰ２］・［ＩＧＦＢＰ７］のＡＵＣ（９５％ＣＩ）は０．６０（０．５４〜０．６６）、ｐ＝０．００１であった。
ＣＫＤ状態ごとの、中度〜重度ＡＫＩでない患者の［ＴＩＭＰ２］・［ＩＧＦＢＰ７］。
【表３】
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【０１０１】
Ｃｏｃｈｒａｎ−Ａｒｍｉｔａｇｅ傾向検定で、ＣＫＤ患者のパーセンテージは、［ＴＩＭＰ２］・［ＩＧＦＢＰ７］四分位にわたって１２．１％から５．６％に減少し、ｐ＝０．００６であった。第４四分位と比較した第１四分位のＣＫＤのオッズ比（ＯＲ）は２．３であり、ｐ＝０．０１３であった。
【０１０２】
中度〜重度ＡＫＩでない患者における、［ＴＩＭＰ２］・［ＩＧＦＢＰ７］四分位ごとのＣＫＤのパーセンテージおよびオッズ比。
【表４】
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【０１０３】
（実施例５）
健康なドナーにおける［ＴＩＭＰ２］・［ＩＧＦＢＰ７］
【０１０４】
健康なドナー３７８名から尿試料を収集し、Ｃｈｉｎｄａｒｋａｒ，  ＮＳら「［ＩＧＦＢＰ７］・［ＴＩＭＰ２］  ｉｎ  ａｐｐａｒｅｎｔｌｙ  ｈｅａｌｔｈｙ  ｓｕｂｊｅｃｔｓ  ａｎｄ  ｃｈｒｏｎｉｃ  ｃｏｍｏｒｂｉｄ  ｓｕｂｊｅｃｔｓ  ｗｉｔｈｏｕｔ  ＡＫＩ」、Ｃｌｉｎ  Ｃｈｉｍ  Ａｃｔａ．  ２０１６年１月１５日；４５２巻：３２〜７頁に記載されるように、［ＴＩＭＰ２］・［ＩＧＦＢＰ７］について試験した。２．５％きざみでの、２．５〜９７．５パーセンタイルの範囲のパーセンタイルに対応する［ＴＩＭＰ２］・［ＩＧＦＢＰ７］値を以下の表に示す。［ＴＩＭＰ２］・［ＩＧＦＢＰ７］アッセイの報告すべき範囲は０．０４〜１０．００（ｎｇ／ｍＬ）２／１０００としてある。
【表５】
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【０１０５】
［ＴＩＭＰ２］・［ＩＧＦＢＰ７］値の最下位パーセンタイルの患者は、本明細書で「虚弱腎臓」を有すると呼ばれる状態である、これらの患者に既存の潜在性ＣＫＤの可能性を示す。任意の理論に縛られることを望むものではないが、低い［ＴＩＭＰ２］・［ＩＧＦＢＰ７］値を有する患者は、腎臓ストレスに対し有効に応答することができず、それゆえに傷害による損傷リスクの増大が生じうる。このような個人（例えば、値の最下位１０％の個人）を、ＣＫＤを患うものとして処置することで、これらの個人へのこのような損傷を回避することができる。
【０１０６】
（実施例６）
虚弱腎臓の術前評価
【０１０７】
以下は、安定な（急性疾患でない）患者における術前評価の一例である。ＣＫＤと診断されておらず、急性腎傷害リスクが高い（＞５％）手技（例えば冠動脈バイパス術）を受ける予定の患者についてである。
【表６】
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【０１０８】
虚弱腎臓の者に対しては、以下の措置が検討されるべきである：
・患者の目標および好みと一致する、外科手術の代替案の検討
・術前腎臓病診断
・遠隔虚血プレコンディショニングの実施
・オフポンプ技術を使用する外科手術の実施
・ＡＣＥ阻害剤の開始および３〜４週間で試験の再チェック
【０１０９】
（実施例７）
虚弱腎臓の通例の評価
【０１１０】
以下は、通例の健康スクリーニング（例えば年に一度の身体検査）の一例である。
【表７】
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【０１１１】
虚弱腎臓の者に対しては、以下の措置が検討されるべきである：
・アルブミンについて尿を試験、３〜６ヶ月ごとに血清クレアチニンを測定
・高血圧、糖尿病のスクリーニング−ＣＫＤの管理ガイドラインに従う
・腎毒性医薬品（例えばＮＳＡＩＤ）の回避；腎毒性の低い医薬品への切り替え
・ＡＣＥ阻害剤の開始および３〜４ヶ月で試験の再チェック
＊＊以下の措置が検討されうる：
・可能性のあるストレス源についての医薬品の見直し−原因薬剤の中止
・ライフスタイル（例えば過度の運動）の見直し、およびそれに従う改変
【０１１２】
本発明について、当業者がこれを作製および使用するのに十分な詳細さで記載および例示してきたが、本発明の趣旨および範囲から逸脱することなく様々な代替、改変、および改善が明らかであるはずである。本明細書で提供される実施例は好ましい実施形態を表し、例示的なものであり、本発明の範囲に対する制限と意図するものではない。当業者は本発明における改変およびその他の使用を思いつくはずである。これらの改変は本発明の趣旨の範囲内に包含され、特許請求の範囲により定義される。
【０１１３】
本発明の範囲および趣旨から逸脱することなく、本明細書で開示される本発明に対して様々な置換および改変を行ってよいことが、当業者には自明のはずである。
【０１１４】
本明細書で言及される特許および出版物は全て、本発明が関連する分野の技術者のレベルを示す。特許および出版物は全て、それぞれ個々の出版物が参照により組み込まれると具体的にかつ個別に示されるのと同じ程度に、参照により本明細書に組み込まれる。
【０１１５】
本明細書で説明的に記載される本発明は、本明細書で特に開示されない、任意の単一または複数の要素、単一または複数の制限が存在しない状態で、適切に実施されうる。したがって、例えば、本明細書の各例において、「〜を含む」、「〜から本質的になる」および「〜からなる」という用語のいずれかを、その他の２つの語のいずれかと置き換えることができる。用いられる用語および表現は説明のための用語として使用され、制限のための用語としては使用されず、このような用語および表現の使用において、示され、記載される特徴の任意の同等物またはその一部を除外する意図は存在せず、特許請求される本発明の範囲内で様々な改変が可能であることが認識される。したがって、本発明は好ましい実施形態および任意選択の特徴により具体的に開示されてきたが、本明細書で開示される概念の改変および変更が当業者によって行使されてよく、このような改変および変更が、添付の特許請求の範囲により定義される本発明の範囲内に入るとみなされることが理解されよう。
【０１１６】
その他の実施形態は以下の特許請求の範囲に示す。
【図１】
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【国際調査報告】
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