(57)【要約】  本発明は、式（Ｉ）の化合物又は薬学的に許容されるその塩若しくはエステルに関する。本発明は、ＦＫ５０６結合タンパク質４に結合する化合物を含有する組成物の有効量を、対象の外傷に局所投与するステップを含む、対象の外傷において瘢痕組織の形成を治癒させる及び／又は阻害する方法にさらに関する。
2019510820.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＦＫ５０６結合タンパク質４に結合する化合物を含む組成物の有効量を、対象の外傷に局所投与するステップを含む、対象の外傷を治癒させる方法。
【請求項２】
前記組成物が、シクロスポリンＡをさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
ＦＫ５０６結合タンパク質４に結合する化合物が、式（Ｉ）
【化１】
2019510820.tif 000016
［式中、Ｒ１は、ＣＯＯＨ、メトキシ、フェニル、ベンジル、置換フェニル及び置換ベンジルからなる群から選択される。］の化合物又は薬学的に許容されるその塩若しくはエステルである、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記置換フェニル及び前記置換ベンジルが、アルキル基、メトキシ基又はハロゲンでそれぞれ個別に置換される、請求項３に記載の組成物。
【請求項５】
式（Ｉ）の化合物が、
【化２】
2019510820.tif 000017
並びに薬学的に許容されるその塩又はエステルからなる群から選択される、請求項３に記載の組成物。
【請求項６】
式（Ｉ）の化合物が、式（ＩＩ）
【化３】
2019510820.tif 000018
の化合物である、請求項５に記載の組成物。
【請求項７】
外傷の治癒を促進する、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記組成物が、薬学的に許容される担体をさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
シクロスポリンＡを含む第２の組成物の同時又は順次投与をさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
瘢痕組織の形成を阻害する、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
瘢痕組織の形成を予防する、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
式（Ｉ）
【化４】
2019510820.tif 000019
［式中、Ｒ１は、メトキシ、フェニル、ベンジル、置換フェニル又は置換ベンジルである。］の化合物又は薬学的に許容されるその塩若しくはエステル。
【請求項１３】
前記置換フェニル及び前記置換ベンジルが、アルキル基、メトキシ基又はハロゲンでそれぞれ個別に置換される、請求項１２に記載の化合物。
【請求項１４】
【化５】
2019510820.tif 000020
である、請求項１２に記載の化合物。
【請求項１５】
【化６】
2019510820.tif 000021
である、請求項１２に記載の化合物。
【請求項１６】
【化７】
2019510820.tif 000022
である、請求項１２に記載の化合物。
【請求項１７】
請求項１２に記載の化合物及び薬学的に許容される担体を含む局所組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、式（Ｉ）
【０００２】
【化１】
2019510820.tif 000003
の化合物又は薬学的に許容されるその塩若しくはエステルに関する。本発明は、ＦＫ５０６結合タンパク質４に結合する化合物を含有する組成物の有効量を、対象の外傷に局所投与するステップを含む、対象の外傷において瘢痕組織の形成を治癒させる及び／又は阻害する方法にさらに関する。
【背景技術】
【０００３】
傷ついた哺乳動物組織は、再生及び修復の組み合わせにより、通常治癒する。再生によって、本来の組織の構造及び機能を再建させる。対照的に、組織修復は、結合組織のパッチ、又は瘢痕との本来の組織の置き換えを必要とし、この置き換えは、本来の組織よりも機能的に及び審美的に劣る（Ｆｅｒｇｕｓｏｎ  ＭＷら、Ｓｃａｒ−ｆｒｅｅ  ｈｅａｌｉｎｇ：  ｆｒｏｍ  ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ  ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ｔｏ  ａｄｕｌｔ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎ、Ｐｈｉｌｏｓ  Ｔｒａｎｓ  Ｒ  Ｓｏｃ  Ｌｏｎｄ  Ｂ  Ｂｉｏｌ  Ｓｃｉ、２００４年５月２９日、３５９巻（１４４５号）、８３９〜８５０頁）。ほとんどの哺乳動物組織の傷害に対する応答は、全く再生しないと考えられるいくつかの組織により、このスペクトルに属する。最終のアウトカム−瘢痕又は再生される組織にもかかわらず、創傷治癒は、いくつかの段階において生じる。これらの段階には、血餅の形成及び凝集した血小板による放出、急性炎症、顆粒化、最後に組織リモデリングが含まれる。凝固の間、血小板は、これらの貯蔵された顆粒、成長因子及びサイトカインの豊富な供給源を放出する。炎症の間、白血球細胞は、侵入してくる微生物を攻撃し、線維芽細胞及び内皮細胞を刺激し、表在性神経の再生を刺激する追加の成長因子を放出し、これらは、正常な治癒のために絶対的に求められる。顆粒化の間、上皮細胞、線維芽細胞及び内皮細胞が、創傷部位に移動し、創傷に近接してカバーを形成する。最後に、組織リモデリングの間、無秩序なコラーゲンを生産する線維芽細胞及び瘢痕組織に寄与するエラスチン繊維による瘢痕形成と、正常な皮膚再生との間の競合があり、再生される皮膚が、傷害を与えられる前の組織と類似の形態及び機能を有する。多くの研究では、皮膚幹細胞は、損傷した皮膚及び毛髪の再生に寄与することが示されている（Ｉｔｏ  Ｍら、Ｈａｉｒ  ｆｏｌｌｉｃｌｅ  ｓｔｅｍ  ｃｅｌｌｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｌｏｗｅｒ  ｂｕｌｇｅ  ｆｏｒｍ  ｔｈｅ  ｓｅｃｏｎｄａｒｙ  ｇｅｒｍ、ａ  ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｌｙ  ｄｉｓｔｉｎｃｔ  ｂｕｔ  ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｌｙ  ｅｑｕｉｖａｌｅｎｔ  ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒ  ｃｅｌｌ  ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ、ａｔ  ｔｈｅ  ｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｃａｔａｇｅｎ、Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ、２００４年１２月、７２巻（９〜１０号）、５４８〜５５７頁；Ｍｏｒｒｉｓ  ＲＪら、Ｃａｐｔｕｒｉｎｇ  ａｎｄ  ｐｒｏｆｉｌｉｎｇ  ａｄｕｌｔ  ｈａｉｒ  ｆｏｌｌｉｃｌｅ  ｓｔｅｍ  ｃｅｌｌｓ、Ｎａｔ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ、２００４年４月、２２巻（４号）、４１１〜４１７頁；Ｙｕ  Ｈら、Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  ｎｏｖｅｌ  ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｍｕｌｔｉｐｏｔｅｎｔ  ａｄｕｌｔ  ｓｔｅｍ  ｃｅｌｌｓ  ｆｒｏｍ  ｈｕｍａｎ  ｈａｉｒ  ｆｏｌｌｉｃｌｅｓ、Ａｍ  Ｊ  Ｐａｔｈｏｌ、２００６年６月、１６８巻（６号）、１８７９〜１８８８頁）。
【０００４】
再生される正常な皮膚は、瘢痕組織に対していくつかの利点を有する。美容の問題の他に、瘢痕組織は、ＵＶ照射により感受性があり、アポクリン腺及び皮脂腺及び毛嚢を含む皮内の構造が大いに欠けていることを含め、多くの点で正常な皮膚より機能的に劣る。
【０００５】
シクロスポリンＡ（「ＣＳＡ」）は、本来、臓器移植レシピエントにおいて実質臓器移植片拒絶を予防するために免疫抑制薬として開発された。シクロスポリンの免疫調節活性は、カルモジュリン依存性の、セリン／トレオニンタンパク質ホスファターゼ、カルシニュリンへのその堅固な結合によって発揮される（Ｌｉｕ  Ｊら、Ｃａｌｃｉｎｅｕｒｉｎ  ｉｓ  ａ  ｃｏｍｍｏｎ  ｔａｒｇｅｔ  ｏｆ  ｃｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎ−ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎ  Ａ  ａｎｄ  ＦＫＢＰ−ＦＫ５０６  ｃｏｍｐｌｅｘｅｓ、Ｃｅｌｌ、１９９１年８月２３日、６６巻（４号）、８０７〜８１５頁）。Ｔ細胞において、カルシニュリン／シクロスポリン複合体は、ｎｕｃｌｅａｒ  ｆａｃｔｏｒ  ｏｆ  ａｃｔｉｖａｔｅｄ  Ｔ  ｃｅｌｌ（「ＮＦＡＴ」）タンパク質に結合し、その核移行、したがって、インターロイキン２（「ＩＬ−２」）プロモーターへのその結合を防止する。これによって、ＩＬ−２産生を活性化させることができなくなり、細胞の免疫カスケードにおいて早期に遮断される（Ｈａｒｄｉｎｇ、１９８９年；Ｌｉｕら、１９９１年；Ｓｃｈｒｅｉｂｅｒ  Ｓ．ら、Ｃｙｔｏｋｉｎｅ  ｐａｔｔｅｒｎ  ｏｆ  Ｌａｎｇｅｒｈａｎｓ  ｃｅｌｌｓ  ｉｓｏｌａｔｅｄ  ｆｒｏｍ  ｍｕｒｉｎｅ  ｅｐｉｄｅｒｍａｌ  ｃｅｌｌ  ｃｕｌｔｕｒｅｓ、Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９９２年１２月１日、１４９巻（１１号）、３５２４〜３５３４頁；Ｓｉｅｋｉｅｒｋａ  ＪＪら、ＦＫ−５０６  ａｎｄ  ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎ  Ａ：ｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅ  ｍｅｃｈａｎｉｓｍ  ｏｆ  ａｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｂｅｙｏｎｄ、Ｃｕｒｒ  Ｏｐｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌ、１９９２年１０月、４巻（５号）、５４８〜５５２頁）。臓器同種移植片レシピエントのＣＳＡ治療の注意すべき副作用は、毛髪の成長であり：ＣＳＡによって治療した実質臓器同種移植片レシピエント２１％〜４５％は、多毛症を発症した（Ｓａｎｄｉｍｍｕｎｅ（登録商標）添付文書；Ｓａｎｄｉｍｍｕｎｅは、Ｎｏｖａｒｔｉｓ  ＡＧ  Ｃｏｒｐ．の登録商標であり、Ｎｏｖａｒｔｉｓ  ＡＧ  Ｃｏｒｐ．から入手可能である。）。Ｔ細胞に加えて、ＮＦＡＴはまた、胚形成から成人期までのいくつかの組織において幹細胞中で大いに発現され（Ｆｒｉｄａｙ  ＢＢら、Ｃａｌｃｉｎｅｕｒｉｎ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｉｓ  ｒｅｑｕｉｒｅｄ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｉｎｉｔｉａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｓｋｅｌｅｔａｌ  ｍｕｓｃｌｅ  ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ、Ｊ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ、２０００年５月１日、１４９巻（３号）、６５７〜６６６頁；Ｈｏｒｓｌｅｙ  Ｖら、Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｇｒｏｗｔｈ  ｏｆ  ｍｕｌｔｉｎｕｃｌｅａｔｅｄ  ｍｕｓｃｌｅ  ｃｅｌｌｓ  ｂｙ  ａｎ  ＮＦＡＴＣ２−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  ｐａｔｈｗａｙ、Ｊ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ、２００１年４月１６日、１５３巻（２号）、３２９〜３８頁；Ｈｏｒｓｌｅｙ  Ｖら、ＮＦＡＴ：ｕｂｉｑｕｉｔｏｕｓ  ｒｅｇｕｌａｔｏｒ  ｏｆ  ｃｅｌｌ  ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ａｄａｐｔａｔｉｏｎ、Ｊ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ、２００２年３月４日、１５６巻（５号）、７７１〜７７４頁；Ｌｉ  Ｘら、Ｃａｌｃｉｎｅｕｒｉｎ−ＮＦＡＴ  ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  ｃｒｉ���ｉｃａｌｌｙ  ｒｅｇｕｌａｔｅｓ  ｅａｒｌｙ  ｌｉｎｅａｇｅ  ｓｐｅｃｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｍｏｕｓｅ  ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ  ｓｔｅｍ  ｃｅｌｌｓ  ａｎｄ  ｅｍｂｒｙｏｓ、Ｃｅｌｌ  Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌ、２０１１年１月７日、８巻（１号）、４６〜５８頁；Ｚｈｕ  Ｌら、Ｆｏｘｄ３  ｓｕｐｐｒｅｓｓｅｓ  ＮＦＡＴ−ｍｅｄｉａｔｅｄ  ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ  ｔｏ  ｍａｉｎｔａｉｎ  ｓｅｌｆ−ｒｅｎｅｗａｌ  ｏｆ  ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ  ｓｔｅｍ  ｃｅｌｌｓ、ＥＭＢＯ  Ｒｅｐ、２０１４年１２月、１５巻（１２号）、１２８６〜１２９６頁）、幹細胞分化を抑制する（Ｈｏｒｓｌｅｙ  Ｖら、２００２年）。皮膚において、真皮、表皮、アポクリン腺、皮脂腺、毛嚢及び毛髪を含め、皮膚における実質的に全ての構造の形成に寄与する幹細胞は、「バルジ」と称する毛嚢内の構造に存在する（Ｔａｙｌｏｒ  Ｇら、Ｉｎｖｏｌｖｅｍｅｎｔ  ｏｆ  ｆｏｌｌｉｃｕｌａｒ  ｓｔｅｍ  ｃｅｌｌｓ  ｉｎ  ｆｏｒｍｉｎｇ  ｎｏｔ  ｏｎｌｙ  ｔｈｅ  ｆｏｌｌｉｃｌｅ  ｂｕｔ  ａｌｓｏ  ｔｈｅ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｓ、Ｃｅｌｌ、２０００年８月１８日、１０２巻（４号）、４５１〜４６１頁；Ｙｕら、２００６年）。これらの細胞において、ＮＦＡＴは、通常、ＣＤＫ４の転写を抑制し、その結果、幹細胞は静止状態になる。ＣＳＡ治療は、ＮＦＡＴを抑制し、幹細胞において分化の抑圧を軽減し、その結果、早熟性の毛髪分化及び成長期（毛髪の成長）をもたらす（Ｈｏｒｓｌｅｙ  Ｖら、ＮＦＡＴｃ１  ｂａｌａｎｃｅｓ  ｑｕｉｅｓｃｅｎｃｅ  ａｎｄ  ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｓｋｉｎ  ｓｔｅｍ  ｃｅｌｌｓ、Ｃｅｌｌ、２００８年１月２５日、１３２巻（２号）、２９９〜３１０頁）。幹細胞によって媒介される毛髪の成長を促進する他、慢性の、ＣＳＡに長時間曝露すると、毛嚢脂腺及び粘膜皮膚肥大、並びに他の皮膚肥大性病変の誘導をもたらすおそれがあり（Ｐｏｎｔｉｃｅｌｌｉ  Ｃら、Ｎｏｎｎｅｏｐｌａｓｔｉｃ  ｍｕｃｏｃｕｔａｎｅｏｕｓ  ｌｅｓｉｏｎｓ  ｉｎ  ｏｒｇａｎ  ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ  ｒｅｃｉｐｉｅｎｔｓ、Ｔｒａｎｓｐｌ  Ｉｎｔ、２０１１年１１月、２４巻（１１号）、１０４１〜１０５０頁；Ｓｅｇｏｌｏｎｉ  ＧＰら、Ｒｅｎａｌ  ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｏｖｅｒ  ６５  ｙｅａｒｓ  ｏｆ  ａｇｅ：ｎｏ  ｍｏｒｅ  ａ  ｃｏｎｔｒａｉｎｄｉｃａｔｉｏｎ  ｂｕｔ  ａ  ｇｒｏｗｉｎｇ  ｉｎｄｉｃａｔｉｏｎ、Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ  Ｐｒｏｃ、２００５年３月、３７巻（２号）、７２１〜７２５頁；Ｍｅｎｎｉ  Ｓら、Ｃｕｔａｎｅｏｕｓ  ａｎｄ  ｏｒａｌ  ｌｅｓｉｏｎｓ  ｉｎ  ３２  ｃｈｉｌｄｒｅｎ  ａｆｔｅｒ  ｒｅｎａｌ  ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ、Ｐｅｄｉａｔｒ  Ｄｅｒｍａｔｏｌ、１９９１年９月、８巻（３号）、１９４〜１９８頁）、濾胞皮膚細胞に対する影響は、毛髪の成長に対する急性及び急速な影響以上に拡大し得るということが示唆される。
【０００６】
創傷治癒を促していることが示されている別の化合物は、ＲＴ１７５（ＡＭＧ−４７４−００、ＧＭ１４８５、ＧＰＩ１４８５）である。ＲＴ１７５（ＡＭＧ−４７４−００、ＧＭ１４８５、ＧＰＩ１４８５）は、以下の化学構造
【０００７】
【化２】
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を有する２４１ダルトン分子である。ＲＴ１７５は、ＦＫ５０６結合タンパク質４（「ＦＫＢＰ５２」）に対して高親和性で結合する。ＦＫＢＰ５２は、糖質コルチコイド受容体（「ＧＲ」）のための分子シャペロンとして作用することが公知である。リガンドへの結合後、ＲＴ１７５／ＧＲ複合体は、核に移行する（Ｂａｎｅｒｊｅｅ  Ａ．らＣｏｎｔｒｏｌ  ｏｆ  ｇｌｕｃｏｃｏｒｔｉｃｏｉｄ  ａｎｄ  ｐｒｏｇｅｓｔｅｒｏｎｅ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｓｕｂｃｅｌｌｕｌａｒ  ｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ  ｂｙ  ｔｈｅ  ｌｉｇａｎｄ−ｂｉｎｄｉｎｇ  ｄｏｍａｉｎ  ｉｓ  ｍｅｄｉａｔｅｄ  ｂｙ  ｄｉｓｔｉｎｃｔ  ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ  ｗｉｔｈ  ｔｅｔｒａｔｒｉｃｏｐｅｐｔｉｄｅ  ｒｅｐｅａｔ  ｐｒｏｔｅｉｎｓ、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、２００８年、４７巻、１０４７１〜１０４８０頁）。２時間の線維芽細胞のＲＴ１７５治療によって、推定上、そのカーゴによって、ＦＫＢＰ５２の核への移行をもたらすことが示されている。
【０００８】
現在の創傷治癒及び瘢痕予防組成物には、活性化タンパク質Ｃ（米国特許出願公開第２０１４／０２１９９９１号）、ｈｓｐ９０ａ（米国特許第８，４５５，４４３号）及びＦＡＫ阻害剤（米国特許出願公開第２０１３／０１６５４６３号）のような、いくつかの炎症因子組成物が含まれ、ヒアルロン酸（米国特許出願公開第２０１５／００６４１２９号）、ヒアルロン酸ナトリウム（米国特許第８，４２６，３８４号）、グルコン酸亜鉛、ヒアルロン酸ナトリウム及びコラーゲン（米国特許第９，１２５，８９２号）のような、細胞外基質の置き換えが含まれる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】米国特許出願公開第２０１４／０２１９９９１号明細書
【特許文献２】米国特許第８，４５５，４４３号明細書
【特許文献３】米国特許出願公開第２０１３／０１６５４６３号明細書
【特許文献４】米国特許出願公開第２０１５／００６４１２９号明細書
【特許文献５】米国特許第８，４２６，３８４号明細書
【特許文献６】米国特許第９，１２５，８９２号明細書
【非特許文献】
【００１０】
【非特許文献１】Ｆｅｒｇｕｓｏｎ  ＭＷら、Ｓｃａｒ−ｆｒｅｅ  ｈｅａｌｉｎｇ：  ｆｒｏｍ  ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ  ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ｔｏ  ａｄｕｌｔ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎ、Ｐｈｉｌｏｓ  Ｔｒａｎｓ  Ｒ  Ｓｏｃ  Ｌｏｎｄ  Ｂ  Ｂｉｏｌ  Ｓｃｉ、２００４年５月２９日、３５９巻（１４４５号）、８３９〜８５０頁
【非特許文献２】Ｉｔｏ  Ｍら、Ｈａｉｒ  ｆｏｌｌｉｃｌｅ  ｓｔｅｍ  ｃｅｌｌｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｌｏｗｅｒ  ｂｕｌｇｅ  ｆｏｒｍ  ｔｈｅ  ｓｅｃｏｎｄａｒｙ  ｇｅｒｍ、ａ  ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｌｙ  ｄｉｓｔｉｎｃｔ  ｂｕｔ  ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｌｙ  ｅｑｕｉｖａｌｅｎｔ  ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒ  ｃｅｌｌ  ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ、ａｔ  ｔｈｅ  ｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｃａｔａｇｅｎ、Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ、２００４年１２月、７２巻（９〜１０号）、５４８〜５５７頁
【非特許文献３】Ｍｏｒｒｉｓ  ＲＪら、Ｃａｐｔｕｒｉｎｇ  ａｎｄ  ｐｒｏｆｉｌｉｎｇ  ａｄｕｌｔ  ｈａｉｒ  ｆｏｌｌｉｃｌｅ  ｓｔｅｍ  ｃｅｌｌｓ、Ｎａｔ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ、２００４年４月、２２巻（４号）、４１１〜４１７頁
【非特許文献４】Ｙｕ  Ｈら、Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  ｎｏｖｅｌ  ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｍｕｌｔｉｐｏｔｅｎｔ  ａｄｕｌｔ  ｓｔｅｍ  ｃｅｌｌｓ  ｆｒｏｍ  ｈｕｍａｎ  ｈａｉｒ  ｆｏｌｌｉｃｌｅｓ、Ａｍ  Ｊ  Ｐａｔｈｏｌ、２００６年６月、１６８巻（６号）、１８７９〜１８８８頁
【非特許文献５】Ｌｉｕ  Ｊら、Ｃａｌｃｉｎｅｕｒｉｎ  ｉｓ  ａ  ｃｏｍｍｏｎ  ｔａｒｇｅｔ  ｏｆ  ｃｙｃｌｏｐｈｉｌｉｎ−ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎ  Ａ  ａｎｄ  ＦＫＢＰ−ＦＫ５０６  ｃｏｍｐｌｅｘｅｓ、Ｃｅｌｌ、１９９１年８月２３日、６６巻（４号）、８０７〜８１５頁
【非特許文献６】Ｓｃｈｒｅｉｂｅｒ  Ｓ．ら、Ｃｙｔｏｋｉｎｅ  ｐａｔｔｅｒｎ  ｏｆ  Ｌａｎｇｅｒｈａｎｓ  ｃｅｌｌｓ  ｉｓｏｌａｔｅｄ  ｆｒｏｍ  ｍｕｒｉｎｅ  ｅｐｉｄｅｒｍａｌ  ｃｅｌｌ  ｃｕｌｔｕｒｅｓ、Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９９２年１２月１日、１４９巻（１１号）、３５２４〜３５３４頁
【非特許文献７】Ｓｉｅｋｉｅｒｋａ  ＪＪら、ＦＫ−５０６  ａｎｄ  ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎ  Ａ：ｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅ  ｍｅｃｈａｎｉｓｍ  ｏｆ  ａｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｂｅｙｏｎｄ、Ｃｕｒｒ  Ｏｐｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌ、１９９２年１０月、４巻（５号）、５４８〜５５２頁
【非特許文献８】Ｆｒｉｄａｙ  ＢＢら、Ｃａｌｃｉｎｅｕｒｉｎ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｉｓ  ｒｅｑｕｉｒｅｄ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｉｎｉｔｉａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｓｋｅｌｅｔａｌ  ｍｕｓｃｌｅ  ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ、Ｊ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ、２０００年５月１日、１４９巻（３号）、６５７〜６６６頁
【非特許文献９】Ｈｏｒｓｌｅｙ  Ｖら、Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｇｒｏｗｔｈ  ｏｆ  ｍｕｌｔｉｎｕｃｌｅａｔｅｄ  ｍｕｓｃｌｅ  ｃｅｌｌｓ  ｂｙ  ａｎ  ＮＦＡＴＣ２−ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ  ｐａｔｈｗａｙ、Ｊ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ、２００１年４月１６日、１５３巻（２号）、３２９〜３８頁
【非特許文献１０】Ｈｏｒｓｌｅｙ  Ｖら、ＮＦＡＴ：ｕｂｉｑｕｉｔｏｕｓ  ｒｅｇｕｌａｔｏｒ  ｏｆ  ｃｅｌｌ  ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ａｄａｐｔａｔｉｏｎ、Ｊ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ、２００２年３月４日、１５６巻（５号）、７７１〜７７４頁
【非特許文献１１】Ｌｉ  Ｘら、Ｃａｌｃｉｎｅｕｒｉｎ−ＮＦＡＴ  ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  ｃｒｉｔｉｃａｌｌｙ  ｒｅｇｕｌａｔｅｓ  ｅａｒｌｙ  ｌｉｎｅａｇｅ  ｓｐｅｃｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｍｏｕｓｅ  ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ  ｓｔｅｍ  ｃｅｌｌｓ  ａｎｄ  ｅｍｂｒｙｏｓ、Ｃｅｌｌ  Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌ、２０１１年１月７日、８巻（１号）、４６〜５８頁
【非特許文献１２】Ｚｈｕ  Ｌら、Ｆｏｘｄ３  ｓｕｐｐｒｅｓｓｅｓ  ＮＦＡＴ−ｍｅｄｉａｔｅｄ  ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ  ｔｏ  ｍａｉｎｔａｉｎ  ｓｅｌｆ−ｒｅｎｅｗａｌ  ｏｆ  ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ  ｓｔｅｍ  ｃｅｌｌｓ、ＥＭＢＯ  Ｒｅｐ、２０１４年１２月、１５巻（１２号）、１２８６〜１２９６頁
【非特許文献１３】Ｔａｙｌｏｒ  Ｇら、Ｉｎｖｏｌｖｅｍｅｎｔ  ｏｆ  ｆｏｌｌｉｃｕｌａｒ  ｓｔｅｍ  ｃｅｌｌｓ  ｉｎ  ｆｏｒｍｉｎｇ  ｎｏｔ  ｏｎｌｙ  ｔｈｅ  ｆｏｌｌｉｃｌｅ  ｂｕｔ  ａｌｓｏ  ｔｈｅ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｓ、Ｃｅｌｌ、２０００年８月１８日、１０２巻（４号）、４５１〜４６１頁
【非特許文献１４】Ｈｏｒｓｌｅｙ  Ｖら、ＮＦＡＴｃ１  ｂａｌａｎｃｅｓ  ｑｕｉｅｓｃｅｎｃｅ  ａｎｄ  ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｓｋｉｎ  ｓｔｅｍ  ｃｅｌｌｓ、Ｃｅｌｌ、２００８年１月２５日、１３２巻（２号）、２９９〜３１０頁
【非特許文献１５】Ｐｏｎｔｉｃｅｌｌｉ  Ｃら、Ｎｏｎｎｅｏｐｌａｓｔｉｃ  ｍｕｃｏｃｕｔａｎｅｏｕｓ  ｌｅｓｉｏｎｓ  ｉｎ  ｏｒｇａｎ  ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ  ｒｅｃｉｐｉｅｎｔｓ、Ｔｒａｎｓｐｌ  Ｉｎｔ、２０１１年１１月、２４巻（１１号）、１０４１〜１０５０頁
【非特許文献１６】Ｓｅｇｏｌｏｎｉ  ＧＰら、Ｒｅｎａｌ  ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｏｖｅｒ  ６５  ｙｅａｒｓ  ｏｆ  ａｇｅ：ｎｏ  ｍｏｒｅ  ａ  ｃｏｎｔｒａｉｎｄｉｃａｔｉｏｎ  ｂｕｔ  ａ  ｇｒｏｗｉｎｇ  ｉｎｄｉｃａｔｉｏｎ、Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ  Ｐｒｏｃ、２００５年３月、３７巻（２号）、７２１〜７２５頁
【非特許文献１７】Ｍｅｎｎｉ  Ｓら、Ｃｕｔａｎｅｏｕｓ  ａｎｄ  ｏｒａｌ  ｌｅｓｉｏｎｓ  ｉｎ  ３２  ｃｈｉｌｄｒｅｎ  ａｆｔｅｒ  ｒｅｎａｌ  ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ、Ｐｅｄｉａｔｒ  Ｄｅｒｍａｔｏｌ、１９９１年９月、８巻（３号）、１９４〜１９８頁
【非特許文献１８】Ｂａｎｅｒｊｅｅ  Ａ．らＣｏｎｔｒｏｌ  ｏｆ  ｇｌｕｃｏｃｏｒｔｉｃｏｉｄ  ａｎｄ  ｐｒｏｇｅｓｔｅｒｏｎｅ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｓｕｂｃｅｌｌｕｌａｒ  ｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ  ｂｙ  ｔｈｅ  ｌｉｇａｎｄ−ｂｉｎｄｉｎｇ  ｄｏｍａｉｎ  ｉｓ  ｍｅｄｉａｔｅｄ  ｂｙ  ｄｉｓｔｉｎｃｔ  ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ  ｗｉｔｈ  ｔｅｔｒａｔｒｉｃｏｐｅｐｔｉｄｅ  ｒｅｐｅａｔ  ｐｒｏｔｅｉｎｓ、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、２００８年、４７巻、１０４７１〜１０４８０頁
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
利用可能な医薬化合物組成物があるにもかかわらず、局所的に安全かつ有効な医薬品を利用する創傷治癒及び瘢痕形成阻害のために有用な新規な化合物、方法及び組成物について絶えず必要性が存在する。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明は、式（Ｉ）
【００１３】
【化３】
2019510820.tif 000005
の化合物［式中、Ｒ１は、メトキシ、フェニル、ベンジル、置換フェニル又は置換ベンジルである。］又は薬学的に許容されるその塩若しくはエステルを対象とする。
【００１４】
好ましい実施形態では、式（Ｉ）の化合物の置換フェニル及び置換ベンジルは、アルキル基、メトキシ基又はハロゲンでそれぞれ個別に置換される。
【００１５】
より好ましい実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、
【００１６】
【化４】
2019510820.tif 000006
及び薬学的に許容されるその塩若しくはエステルからなる群から選択される。
【００１７】
本発明は、式（Ｉ）の化合物及び薬学的に許容される担体を含む局所組成物をさらに対象とする。
【００１８】
本発明は、ＦＫ５０６結合タンパク質４に結合する化合物を含む組成物の有効量を、対象の外傷に局所投与するステップを含む、対象の外傷において瘢痕形成を治癒させる及び／又は阻害する方法をさらに対象とする。
【００１９】
好ましい実施形態では、本発明は、ＦＫ５０６結合タンパク質４及びシクロスポリンＡに結合する化合物を含む組成物の有効量を、対象の外傷に局所投与するステップを含む、対象の外傷において瘢痕形成を治癒させる及び／又は阻害する方法を対象とする。
【００２０】
別の好ましい実施形態では、本発明は、ＦＫ５０６結合タンパク質４に結合する化合物を含む組成物の有効量を、対象の外傷に局所投与するステップと、シクロスポリンＡを含む第２の組成物を同時に又は順次投与するステップとを含む、対象の外傷において瘢痕形成を治癒させる及び／又は阻害する方法を対象とする。
【００２１】
好ましい実施形態では、ＦＫ５０６結合タンパク質４に結合する化合物は、式（Ｉ）
【００２２】
【化５】
2019510820.tif 000007
［式中、Ｒ１は、ＣＯＯＨ、メトキシ、フェニル、ベンジル、置換フェニル又は置換ベンジルである。］の化合物又は薬学的に許容されるその塩若しくはエステルである。
【００２３】
好ましい実施形態では、式（Ｉ）の化合物の置換フェニル及び置換ベンジルは、アルキル基、メトキシ基又はハロゲンでそれぞれ個別に置換される。
【００２４】
より好ましい実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、
【００２５】
【化６】
2019510820.tif 000008
並びに薬学的に許容されるその塩又はエステルからなる群から選択される。
【００２６】
最も好ましい実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、ＲＴ１７５である。
【００２７】
好ましい実施形態では、本発明は、ＦＫ５０６結合タンパク質４に結合する化合物を含む組成物の有効量を、対象の外傷に局所投与するステップを含む、対象の外傷の治癒を促進する方法を対象とする。
【００２８】
別の好ましい実施形態では、本発明は、ＦＫ５０６結合タンパク質４及びシクロスポリンＡに結合する化合物を含む組成物の有効量を、対象の外傷に局所投与するステップを含む、対象の外傷の治癒を促進する方法を対象とする。
【００２９】
別の好ましい実施形態では、本発明は、ＦＫ５０６結合タンパク質４に結合する化合物を含む組成物の有効量を、対象の外傷に局所投与するステップと、シクロスポリンＡを含む第２の組成物を同時に又は順次投与するステップとを含む、対象の外傷の治癒を促進する方法を対象とする。
【００３０】
別の好ましい実施形態では、本発明は、ＦＫ５０６結合タンパク質４に結合する化合物を含む組成物の有効量を、対象の外傷に局所投与するステップを含む、対象の外傷において瘢痕組織の形成を防止する方法を対象とする。
【００３１】
別の好ましい実施形態では、本発明は、ＦＫ５０６結合タンパク質４及びシクロスポリンＡに結合する化合物を含む組成物の有効量を、対象の外傷に局所投与するステップを含む、対象の外傷において瘢痕組織の形成を防止する方法を対象とする。
【００３２】
別の好ましい実施形態では、本発明は、ＦＫ５０６結合タンパク質４に結合する化合物を含む組成物の有効量を、対象の外傷に局所投与するステップと、シクロスポリンＡを含む第２の組成物を同時に又は順次投与するステップとを含む、対象の外傷において瘢痕組織の形成を防止する方法を対象とする。
【図面の簡単な説明】
【００３３】
【図１】ＲＴ１７５によって局所的に治療した４８歳男性の基底細胞癌の全層切除を示す図である。
【図２】ビヒクル又はＲＴ１７５によって局所的に治療した４８歳男性の前腕上部における基底細胞肉腫の電気切開及び掻爬術を示す図である。
【図３】ビヒクル又はＲＴ１７５によって局所的に治療した４８歳男性の前腕上部における基底細胞肉腫の電気切開及び掻爬術の６カ月フォローアップを示す図である。
【図４】幹細胞マーカーＯｃｔ−４及びＳｏｘ−２の発現について染色した、６２歳男性の前腕において皮膚５ｍｍ生検のために穿孔器で採取した（ｐｕｎｃｈ）１０ミクロン厚の切片を示す図である。
【図５】パンチ生検及びＲＴ１０６１による２１日の治療後のマウスの平均耳孔面積を示す図である。
【図６】マウスの背側の皮膚を剪毛し、擦り落とした後並びにＲＴ１０６１による１０日の治療後の皮膚再生及び毛髪再成長を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００３４】
出願人は、局所適用後に皮膚を再生し、毛髪を再成長させることが可能である化合物のグループを予想外に発見した。出願人は、創傷部位に局所適用した場合、ＦＫ５０６結合タンパク質４に結合する化合物を含有する組成物が、外傷を治癒させる及び／又は外傷における瘢痕組織の形成を阻害することにおいて驚くべきことに有効であることをさらに予想外に発見した。出願人は、創傷部位に局所適用した場合、シクロスポリンＡを、ＦＫ５０６結合タンパク質４に結合する化合物を含有する組成物に加えることが、外傷を治癒させる及び／又は外傷における瘢痕組織の形成を阻害することにおいて、やはり驚くべきことに有効であるということをさらに予想外に発見した。
【００３５】
本明細書で使用される場合、「ＲＴ１７５」とは、次式
【００３６】
【化７】
2019510820.tif 000009
の化合物を指す。
【００３７】
本明細書で使用される場合、「シクロスポリンＡ」とは、次式
【００３８】
【化８】
2019510820.tif 000010
の化合物及び任意の薬学的に許容されるその塩又はエステルを指す。
【００３９】
本明細書で使用される場合、用語「薬学的に許容される」とは、生物学的に又は別の場合で、局所適用において望ましい成分を指す。
【００４０】
本明細書で使用される場合、用語「Ｒ１」とは、ＣＯＯＨ、メトキシ、フェニル、ベンジル、置換フェニル及び置換ベンジルからなる群から選択される置換基を指す。
【００４１】
一般に、用語「置換される」とは、指定された部分の１個以上の水素が、適当な置換基と置き換えられるということを意味する。
【００４２】
本明細書で使用される場合、用語「アルキル」とは、特に他の記載がない限り、１〜２４個の炭素原子（Ｃ１〜Ｃ２４）の飽和炭化水素基からなる分枝鎖又は直鎖のアルキルを指す。アルキル基は、環式でも非環式でもよい。
【００４３】
本明細書で使用される場合、用語「治癒する」又は「治癒」とは、傷つけられた状態からその自然状態への組織の修復の過程を指す。治癒は、生体組織の修復及び正常な機能の再開を含む。治癒の間、体内の細胞は、再生し修復して、損傷した創傷領域のサイズを縮小し、新たな生体組織とそれを置き換える。置き換えは、２つのやり方、すなわち、損傷した又は欠損している細胞が、本来そこにあったものと類似の組織を形成する新たな細胞によって置き換えられる再生により；又は傷ついた組織が、瘢痕組織で置き換えられる修復により起き得る。「治癒」は、創傷サイズの減少及び／又は新しい細胞若しくは瘢痕組織細胞の数と比べた、損傷した細胞の数の減少により示され得る。
【００４４】
本明細書で使用される場合、「阻害する」又は「阻害している」とは、進行を妨害する又は妨げることを指す。
【００４５】
本明細書で使用される場合、用語「促進する」、「促進している」又は「促進される」とは、医薬品介入なしに生じるはずである創傷閉鎖の時間の長さに比べて、創傷閉鎖の時間を短縮することを指す。
【００４６】
本明細書で使用される場合、用語「外傷」とは、対象の表皮及び／又は真皮における任意の破損を指す。
【００４７】
本発明は、式（Ｉ）
【００４８】
【化９】
2019510820.tif 000011
［式中、Ｒ１は、メトキシ、フェニル、ベンジル、置換フェニル又は置換ベンジルである。］の化合物又は薬学的に許容されるその塩若しくはエステルを対象とする。
【００４９】
好ましい実施形態では、式（Ｉ）の化合物の置換フェニル及び置換ベンジルは、アルキル基、メトキシ基又はハロゲンでそれぞれ個別に置換される。
【００５０】
より好ましい実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、
【００５１】
【化１０】
2019510820.tif 000012
並びに薬学的に許容されるその塩又はエステルからなる群から選択される。
【００５２】
本発明は、式（Ｉ）の化合物及び薬学的に許容される担体を含む局所組成物をさらに対象とする。
【００５３】
本発明は、ＦＫ５０６結合タンパク質４に結合する化合物を含む組成物の有効量を、対象の外傷に局所投与するステップを含む、対象の外傷において瘢痕形成を治癒させる及び／又は阻害する方法をさらに対象とする。
【００５４】
好ましい実施形態では、本発明は、ＦＫ５０６結合タンパク質４及びシクロスポリンＡに結合する化合物を含む組成物の有効量を、対象の外傷に局所投与するステップを含む、対象の外傷において瘢痕形成を治癒させる及び／又は阻害する方法を対象とする。
【００５５】
別の好ましい実施形態では、本発明は、ＦＫ５０６結合タンパク質４に結合する化合物を含む組成物の有効量を、対象の外傷に局所投与するステップと、シクロスポリンＡを含む第２の組成物を同時に又は順次投与するステップとを含む、対象の外傷において瘢痕形成を治癒させる及び／又は阻害する方法を対象とする。
【００５６】
好ましい実施形態では、ＦＫ５０６結合タンパク質４に結合する化合物は、式（Ｉ）
【００５７】
【化１１】
2019510820.tif 000013
［式中、Ｒ１は、ＣＯＯＨ、メトキシ、フェニル、ベンジル、置換フェニル又は置換ベンジルである。］の化合物又は薬学的に許容されるその塩若しくはエステルである。
【００５８】
好ましい実施形態では、式（Ｉ）の化合物の置換フェニル及び置換ベンジルは、アルキル基、メトキシ基又はハロゲンでそれぞれ個別に置換される。
【００５９】
より好ましい実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、
【００６０】
【化１２】
2019510820.tif 000014
並びに薬学的に許容されるその塩又はエステルからなる群から選択される。
【００６１】
最も好ましい実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、ＲＴ１７５である。
【００６２】
好ましい実施形態では、本発明は、ＦＫ５０６結合タンパク質４に結合する化合物を含む組成物の有効量を、対象の外傷に局所投与するステップを含む、対象の外傷の治癒を促進する方法を対象とする。
【００６３】
別の好ましい実施形態では、本発明は、ＦＫ５０６結合タンパク質４及びシクロスポリンＡに結合する化合物を含む組成物の有効量を、対象の外傷に局所投与するステップを含む、対象の外傷の治癒を促進する方法を対象とする。
【００６４】
別の好ましい実施形態では、本発明は、ＦＫ５０６結合タンパク質４に結合する化合物を含む組成物の有効量を、対象の外傷に局所投与するステップと、シクロスポリンＡを含む第２の組成物を同時に又は順次投与するステップとを含む、対象の外傷の治癒を促進する方法を対象とする。
【００６５】
別の好ましい実施形態では、本発明は、ＦＫ５０６結合タンパク質４に結合する化合物を含む組成物の有効量を、対象の外傷に局所投与するステップを含む、対象の外傷において瘢痕組織の形成を防止する方法を対象とする。
【００６６】
別の好ましい実施形態では、本発明は、ＦＫ５０６結合タンパク質４及びシクロスポリンＡに結合する化合物を含む組成物の有効量を、対象の外傷に局所投与するステップを含む、対象の外傷において瘢痕組織の形成を防止する方法を対象とする。
【００６７】
別の好ましい実施形態では、本発明は、ＦＫ５０６結合タンパク質４に結合する化合物を含む組成物の有効量を、対象の外傷に局所投与するステップと、シクロスポリンＡを含む第２の組成物を同時に又は順次投与するステップとを含む、対象の外傷において瘢痕組織の形成を防止する方法を対象とする。
【００６８】
好ましい実施形態では、本発明の組成物は、薬学的に許容される担体をさらに含み、好ましくは、薬学的に許容される担体は、Ａｍａｎｔｌｅ（商標）（Ａｍａｎｔｌｅは、Ｄｏａｋ  Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｉｃｓ社から入手可能である。）であり、より好ましくは、薬学的に許容される担体は、水、セテリルアルコール、ラウリル硫酸ナトリウム、セテアリル硫酸ナトリウム、ワセリン、グリセリン、合成ミツロウ、鉱油、メチルパラベン、硫酸アルミニウム、酢酸カルシウム及びジャガイデキストリン（ｗｈｉｔｅ  ｐｏｔａｔｏ  ｄｅｘｔｒｉｎ）を含む。
【００６９】
以下の例は、例示的な目的のために単に示されているものに過ぎず、いかなる方法においても本発明を限定することを意味しない。
【実施例】
【００７０】
[実施例１]
耳周囲の基底細胞癌の切除部位のＲＴ１７５治療後の急速な、瘢痕なしの治癒。
４８歳男性は、外来患者ベースで基底細胞癌の全層切除を行った。図１に示すように、パネルａ．は、手術の間の創傷を示し、パネルｂ．は、手術直後の創傷を示す。Ａｍａｎｔｌｅ（商標）クリーム基剤中に配合されたＲＴ１７５を、手術直後に塗布し、次いで、その後１２日間毎日塗布した。驚くべきことに、術後７日目まで、創傷は閉じ、大いに治癒した。図１、パネルｄを参照のこと。術後１２日目まで、皮膚は、ベースラインに戻ったように思われ、瘢痕がほとんど観察されなかった。図１、パネルｅを参照のこと。瘢痕組織の非存在を、６カ月後の生検により確認された。図１、パネルｃを参照のこと。比較のために、瘢痕生検の長期保存用写真が含まれる。図１、パネルｆを参照のこと。
【００７１】
[実施例２]
基底細胞癌の治療のための上腕の電気切開及び掻爬治療後の急速な、瘢痕なしの治癒。
左及び右上腕の三角筋上領域を、基底細胞肉腫の治療のための電気切開及び掻爬術（「ＥＤ＆Ｃ」）によって治療した。図２、０日目を参照のこと。手術の日に開始し、その後毎日、これらの部位をＡｍａｎｔｌｅ（商標）クリーム基剤中のＲＴ１７５、又はＡｍａｎｔｌｅ（商標）クリーム基剤単独により治療した。驚くべきことに、術後２０日目まで、ＲＴ１７５によって治療した部位は、完全に閉じた。図２、２０日目、下部パネルを参照のこと。対照的に、この手順の６８日後、ビヒクルによって治療した部位は、依然として完全に閉じていなかった。図２、６８日目、上部パネルを参照のこと。この手順の６カ月後、ＲＴ１７５によって治療した部位は、瘢痕がなく（図３、パネルａ．を参照のこと）、一方、ビヒクルによって治療した部位は、はっきりとした、色素不足の星状の形をした瘢痕を有した（図３、パネルｂを参照のこと）。
【００７２】
[実施例３]
ＲＴ１７５による創傷の治療は、治療の部位で幹細胞を誘導する。
６２歳男性は、肘窩から遠位にある前腕、５センチメートル（「ｃｍ」）を穿孔器で採取する両側の５ミリメートル（「ｍｍ」）の皮膚生検を行った。Ａｍａｎｔｌｅ（商標）クリーム基剤中のＲＴ１７５による治療、又はＡｍａｎｔｌｅ（商標）クリーム基剤単独による治療を、止血後直ちに開始した。皮膚を３０日間毎日治療し、その後すぐ、これらの部位を再生検し、組織を免疫組織学用に処理した。１０ミクロン厚の切片を、幹細胞マーカーＯｃｔ−４（図４、パネルａ．及びｃ．を参照のこと）、又はＳｏｘ−２（図４、パネルｂ．及びｄを参照のこと）の発現について染色した。ＲＴ１７５によって治療した組織中の細胞のサブセット（図４、パネルｃ．及びｄを参照のこと）は、両方の幹細胞マーカーを発現し、ビヒクルによって治療した組織中の細胞（図４、パネルａ．及びｂを参照のこと）は、いずれのマーカーも発現しなかった。ある特定の理論に縛られずに、ＲＴ１７５によって治療した創傷部位中の幹細胞マーカーの存在は、活性幹細胞を示す。創傷部位中のこれらの幹細胞の存在により、瘢痕組織を形成せずに、急速かつ適切な創傷治癒をもたらす。また、創傷部位からの幹細胞の非存在により、瘢痕組織の形成が可能になる。
【００７３】
[実施例４]
ＲＴ１７５類似体、ＲＴ１０６１によるマウスの耳のパンチホール生検（Ｐｕｎｃｈ−ｈｏｌｅ  Ｂｉｏｐｓｉｅｓ）の治療。
両方の性別で体重が４５〜５０グラムの引退したＩＣＲブリーダーマウスに、単一の両側パンチホール生検にかけた。次いで、これらの動物を、３グループのうちの１グループに無作為に割り当て、ＲＴ１０６１  ２．４μｇ、ＦＫ５０６  ８０μｇ又はビヒクル対照を投与した。ＲＴ１０６１、ＦＫ５０６又はビヒクル対照を、生検直後を含め１日１回、耳の腹部及び背部表面に局所的に適用した。
【００７４】
全ての創傷を、Ｎｉｋｏｎ  ＣｏｏｌＰｉｘ  ９９０デジタルカメラを用いて撮影した。各画像には、創傷に近づけられた目盛付き物差しが含まれる。Ａｄｏｂｅ  Ｐｈｏｔｏｓｈｏｐで、「測定ツール」を用いて、創傷の画像を開き、物差しの直線の縁に沿って、長さ（画素）３ｃｍを決定した。この数値を用いて、換算係数を算出し、次いで、これを用いて、各写真を正規化した。換算係数を、１００／長さとして算出した。写真中の病変の面積を正規化するために、病変の体積を、「ｍａｇｉｃ  ｗａｎｄ」ツールを用いてボクセルで決定し、ボクセルの数に、換算係数を乗じ、したがって、方程式：面積＝体積（ボクセル）＊換算係数を創出した。ｔ＝０における面積を、１００％として定義した。任意の所与の耳孔の空き面積の百分率を算出するために、本発明者らは、次の方程式：１００［面積（ｔ＝ｘ）／面積（ｔ＝０）］を適用した。初回の孔の平均面積を、（Ａｄｏｂｅ  Ｐｈｏｔｏｓｈｏｐを用いて、物差しに対して測定した孔の外径を用いることにより決定した）ｔ＝０における穿孔器の平均半径２π倍として算出した。一例として、所与の半径１．２８ｍｍは、π＊１．２８２＝５．１５ｍｍ２の値を示す。
【００７５】
試験の結果は、図５において見ることができ、図５は、それぞれ特定の組成物で処理した全てのマウスについての平均耳孔面積を示す。創傷部位へのＲＴ１０６１の局所適用によって、パンチホール生検の２１日以内に、毛嚢及び腺、血管、軟骨、神経及び筋肉を含む、マウスの耳介のほぼ完全に再生された。対照的に、ＦＫ５０６又は対照ビヒクルの局所適用によって、マウスの耳介組織は再生されなかった。
【００７６】
[実施例５]
ＲＴ１７５類似体、ＲＴ１０６１によるマウスの背側の皮膚の皮膚切除病変の治療。
両方の性別で体重が４５〜５０グラムの引退したＩＣＲブリーダーマウスを、剪毛し擦り落として、皮膚切除病変を誘導した。次いで、動物を、２グループのうちの１グループに無作為に割り当て（治療アーム当たり５匹）、１００ナノモルのＲＴ１０６１又はビヒクル対照５μＬを投与した。ＲＴ１０６１又はビヒクル対照を、皮膚切除直後を含め１日１回、病変部位に局所的に適用した。
【００７７】
試験の結果は、図６において見ることができる。示す通り、ＲＴ１０６１（パネルｂ．、ｄ．及びｆ）による治療によって、急速な毛髪の成長がもたらされ、擦り落とした皮膚が急速に再生された。対照的に、対照ビヒクルによる治療によって、瘡蓋形成が生じ、擦り落とした１０日後、毛は再成長しなかった。図６、パネルａ．、ｃ．及びｅを参照のこと。
【００７８】
[実施例６]
ＲＴ１０６１の合成
以下の方法を、出発物質のキラリティーに応じて、スキームＩに示した（Ｓ）−異性体、（Ｒ）−異性体又はラセミ（すなわち、（Ｒ，Ｓ）−異性体）化合物の合成のために用いる。（Ｓ）−プロリノールを用いて化合物４を合成した場合、次いで、全ての得られた化合物は、（Ｓ）−異性体であった。（Ｒ）−プロリノールを用いて化合物４を合成した場合、全ての得られた化合物は、（Ｒ）−異性体であった。（Ｓ）及び（Ｒ）−プロリノール両方を用いて、化合物４を合成した場合、全ての得られた化合物は、ラセミであった。
【００７９】
【化１３】
2019510820.tif 000015
【００８０】
（Ｓ）−プロリノールからの（Ｓ）−２−ベンジルピロリジン（化合物（Ｓ）−４）の合成
スルファミデート（ｓｕｌｆａｍｉｄａｔｅ）の調製（Ａｌｋｅｒ，Ｄ．；Ｄｏｙｌｅ，Ｋ．Ｊ．；Ｈａｒｗｏｏｄ，Ｌ．Ｍ．；ＭｃＧｒｅｇｏｒ，Ａ．；Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ａｓｙｍｍｅｔｒｙ  １９９０年、１巻、８７７頁の方法）。（Ｓ）−プロリノール（Ａｌｄｒｉｃｈ社）（２．６２ｇ、２５．２ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（「Ｅｔ３Ｎ」；７．０ｍＬ、５０．０ｍｍｏｌ）を、５００ｍＬ丸底フラスコ中で、アルゴン下で１５０ｍＬ脱水ジクロロメタン（「ＤＣＭ」）に溶解し、−７８℃まで冷却した。この混合物に、１５０ｍＬ脱水ジクロロメタン中で塩化スルフリル（「ＳＯ２Ｃｌ２」；２．１ｍＬ、２５．９ｍｍｏｌ）を４５分間にわたって滴下し、−７８℃で３時間撹拌し、次いで、放置して室温まで加温し、終夜撹拌した。混合物を、０．１Ｎ  ＨＣｌ（３×７５ｍＬ）、ブライン（７５ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで脱水し、ろ過し、溶媒を真空によって除去し、その結果、黄色油としてスルファミデート（化合物（Ｓ）−２）（２．６６ｇ）を得た。
【００８１】
粗生成物を、７ｍＬジクロロメタン中で乾燥シリカカートリッジ（Ａｎａｌｏｇｉｘ、４０ｇ）に施し、ヘキサン中の酢酸エチルの段階的勾配（０、１０、２０％）で溶出することにより精製した。生成物を含有する画分を合わせ、濃縮して乾燥した。さらなる乾燥後、無色の結晶を形成して、化合物（Ｓ）−２  １．３６ｇ（３３％）を生成した。生成物は、１Ｈ  ＮＭＲ及びｍｓ（ＡＰＣＩ）１６４（Ｍ＋Ｈ）＋と特徴付けられた。
【００８２】
ブロモベンゼン（０．２６５ｍＬ、２．５３ｍｍｏｌ）を、１０ｍＬ丸底フラスコ中で、アルゴン下で２ｍＬ脱水ＴＨＦに溶解し、−７８℃まで冷却した。ｎ−ブチルリチウム（ヘキサン中２．５Ｍ溶液０．９６ｍＬ、２．４０ｍｍｏｌ）を、注射器によって４０分間にわたって加え、反応物を、−７８℃で１ｈ撹拌した。ＴＨＦ１．５ｍＬ中の０．３２６ｇ（２．００ｍｍｏｌ）の２を、注射器によって１０分間にわたって本混合物に加え、反応物を放置して室温まで加温し、終夜撹拌した。反応物を、数滴の水でクエンチし、溶媒を、真空によって除去して、黄褐色の粘性油（化合物３）を生成した。この残留物を、２Ｎ  ＨＣｌ／エタノールの１：１溶液１０ｍＬに溶解し、還流下で２２時間加熱した。冷却後、エタノールを真空によって除去し、０．１Ｎ  ＨＣｌ５ｍＬを加え、水溶液を、酢酸エチル（３×５ｍＬ）で抽出した。水溶液のｐＨを、５０％水酸化ナトリウム（「ＮａＯＨ」）で＞１０まで調整し、酢酸エチル（４×５ｍＬ）で抽出した。酢酸エチル層を合わせ、ブラインで洗浄し、乾燥させ、溶媒を真空によって除去して、その結果、淡褐色の油（８１％）として化合物（Ｓ）−４  ０．２６２ｇを得た。生成物は、１Ｈ  ＮＭＲ及びｍｓ（ＥＳＩ）：１６２（Ｍ＋Ｈ）＋と特徴付けられた。
【００８３】
（Ｒ）−プロリノールからの（Ｒ）−２−ベンジルピロリジン（化合物（Ｒ）−４）の合成
（Ｒ）−プロリノールで（Ｓ）−プロリノールを置き換えたのを除いて、（Ｓ）−プロリノールからの（Ｓ）−２−ベンジルピロリジン（化合物（Ｓ）−４）の合成と同じ手順に従った。
【００８４】
メチル２−（２−ベンジルピロリジン−１−イル）−２−オキソアセテート（化合物５）の合成
２−ベンジルピロリジン（化合物４；ＡＳＤＩ  Ｉｎｃ．）５２ミリグラム（「ｍｇ」；０．３２４ミリモル（「ｍｍｏｌ」））を、２ドラムバイアル中で、脱水ジクロロメタン２ミリリットル（「ｍＬ」）に溶解し、０℃まで冷却した。トリエチルアミン（６８μＬ、０．４８８ｍｍｏｌ）及びメチルクロロオキソアセテート（４７μＬ、０．４８５ｍｍｏｌ）を加え、反応物を、０℃で１時間、次いで、室温で終夜撹拌した。反応混合物を、ジクロロメタン５ｍＬで希釈し、０．１Ｎ  ＨＣｌ（３×３ｍＬ）、飽和炭酸水素ナトリウム溶液（３×３ｍＬ）で洗浄し、乾燥し、溶媒を真空によって除去して、黄褐色の粘性油（７６％）として、化合物５を６１ｍｇ生成した。生成物は、１Ｈ核磁気共鳴（「ＮＭＲ」）分光測定及び液体クロマトグラフィー−質量分析（「ｌｃ／ｍｓ」；ＥＳＩ）：２４８（Ｍ＋Ｈ）＋によって特徴付けられ、以下の反応に直接用いた。
【００８５】
１−（２−ベンジルピロリジン−１−イル）−３，３−ジメチルペンタン−１，２−ジオン（化合物１；ＲＴ１０６１）の合成
化合物５を６１ｍｇ（０．２４７ｍｍｏｌ）、Ｔｅｆｌｏｎ（登録商標）セプタムキャップを取り付けた２ドラムバイアル中で、アルゴン下で、２ｍＬ脱水テトラヒドロフラン（「ＴＨＦ」）に溶解し、−７８℃まで冷却した。１，１−ジメチルプロパンマグネシウムクロリド（１Ｍエーテル溶液、Ａｌｄｒｉｃｈ社）０．３７ｍＬを、注射器によって加え、反応物を−７８℃で２時間撹拌し、次いで、放置して室温まで加温し、終夜撹拌した。反応物を、塩化アンモニウム水溶液を加えることによりクエンチし、水性混合物を酢酸エチル（３×５ｍＬ）で抽出した。該酢酸エチルを、ブライン（１×）で洗浄し、乾燥し、溶媒を真空によって除去して、淡黄褐色の油を生成した。生成物（化合物１）を、酢酸エチル溶液を、乾燥シリカカートリッジ（Ａｎａｌｏｇｉｘ、４ｇ）に適用し、ヘキサンで溶出し、次いで、２％酢酸エチル／ヘキサンで溶出することにより精製した。無色の粘性油として、化合物１  ３５ｍｇを単離し、１Ｈ  ＮＭＲ及びｌｃ／ｍｓ（ＥＳＩ）：２８８．１（Ｍ＋Ｈ）＋と特徴付けられた。
【００８６】
鏡像異性の（Ｅｎｔａｎｔｉｏｍｅｒｉｃ）純度
２−ベンジルピロリジン異性体（化合物４）の最重要な段階での本化合物の鏡像異性体の純度を、モッシャー試薬を用いてジアステレオマーのモッシャーアミド（これらは、高圧液体クロマトグラフィーにより分離可能であった）を生成して推定し、キラル化合物４の合成は、異性体の純度＞９５％の化合物を生ずる形で進んだことが示された（Ｊ．Ａ．Ｄａｌｅ、Ｄ．Ｌ．Ｄｕｌｌ、Ｈ．Ｓ．Ｍｏｓｈｅｒ（１９６９年）の方法。「α−Ｍｅｔｈｏｘｙ−α−ｔｒｉｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌｐｈｅｎｙｌａｃｅｔｉｃ  ａｃｉｄ、ａ  ｖｅｒｓａｔｉｌｅ  ｒｅａｇｅｎｔ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｅｎａｎｔｉｏｍｅｒｉｃ  ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ａｌｃｏｈｏｌｓ  ａｎｄ  ａｍｉｎｅｓ」。Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ３４巻（９号）：２５４３〜２５４９頁。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【国際調査報告】
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