(57)【要約】  複雑な創傷を処置するための治療上有効な量の胎児支持組織産物を個体の複雑な創傷に投与することによって複雑な創傷を処置する方法。複雑な下肢潰瘍を処置するための治療上有効な量の胎児支持組織産物を個体の複雑な下肢潰瘍に投与することによって複雑な下肢潰瘍を処置する方法。胎児支持組織産物を肉芽組織に投与することによって肉芽組織からの瘢痕形成を低減または予防する方法。治療上有効な量の臍帯産物を個体の欠損に投与することにより二分脊椎欠損を修復する方法。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
必要とする固体において複雑な創傷を処置する方法であって、該方法は：個体の複雑な創傷に治療上有効な量の胎児支持組織産物を投与する工程を含む、方法。
【請求項２】
複雑な創傷は、潰瘍、下肢潰瘍、足潰瘍、慢性足潰瘍、褥瘡または虚血性創傷である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
複雑な創傷は骨の露出を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
複雑な創傷は骨量減少を含む、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
複雑な創傷のデブリードマンを行う工程をさらに含む、請求項１から４のいずれか１つに記載の方法。
【請求項６】
デブリードマンは外科的デブリードマンである、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
骨を摘除する工程をさらに含む、請求項１から６のいずれか１つに記載の方法。
【請求項８】
骨の摘除は健康な骨に達するまで行なわれる、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
骨の摘除は壊死性骨または罹患した骨を実質的に除去するために行われる、請求項７に記載の方法。
【請求項１０】
露出した骨の皮質を切開する工程をさらに含む、請求項１から９のいずれか１つに記載の方法。
【請求項１１】
複雑な創傷に第２の胎児支持組織産物を投与する工程をさらに含む、請求項１から１０のいずれか１つに記載の方法。
【請求項１２】
ドレッシング材、抗菌性ドレッシング材、抗菌性アルギネートドレッシング材、圧迫ドレッシング材、メピテル創傷接触層、ガーゼ、パッチ、基材、裏当て、被覆材、包帯またはそれらの組み合わせにより胎児支持組織産物を被覆する工程をさらに含む、請求項１から１１のいずれか１つに記載の方法。
【請求項１３】
抗生物質、高圧酸素療法、血管再生療法、およびそれらの組み合わせから成る群から選択される処置を与える工程をさらに含む、請求項１から１２のいずれか１つに記載の方法。
【請求項１４】
個体は骨髄炎を患っている、請求項１から１３のうちのいずれか１つに記載の方法。
【請求項１５】
胎児支持組織産物は、胎盤羊膜、臍帯、臍帯羊膜、絨毛膜、羊膜絨毛膜、胎盤、またはそれらの任意の組み合わせに由来する、請求項１から１４のいずれか１つに記載の方法。
【請求項１６】
胎児支持組織産物は、砕かれ、粉砕され、分割される、移植片、シート、粉末、ゲル、ホモジネートまたは抽出物である、請求項１から１５のいずれか１つに記載の方法。
【請求項１７】
胎児支持組織産物は無菌的に処理されるか、または最終滅菌される、請求項１から１６のいずれか１つに記載の方法。
【請求項１８】
胎児支持組織産物は移植片である、請求項１から１７のいずれか１つに記載の方法。
【請求項１９】
胎児支持組織産物は実質的に平らにされたシートである、請求項１から１７のいずれか１つに記載の方法。
【請求項２０】
胎児支持組織産物は、ヒト、ヒト以外の霊長類、ウシ、またはブタ由来である、請求項１から１９のいずれか１つに記載の方法。
【請求項２１】
胎児支持組織産物は臍帯産物である、請求項１から２０のいずれか１つに記載の方法。
【請求項２２】
臍帯産物は臍帯羊膜を含む、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
臍帯産物はさらにホウォートンゼリーを含む、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
臍帯産物は実質的に血液を含まない、請求項２１から２３のいずれか１つに記載の方法。
【請求項２５】
臍帯産物は臍帯の静脈および臍帯の動脈を欠く、請求項２１から２４のいずれか１つに記載の方法。
【請求項２６】
必要とする固体において複雑な下肢潰瘍を処置する方法であって、該方法は：個体の複雑な下肢潰瘍に治療上有効な量の胎児支持組織産物を投与する工程を含む、方法。
【請求項２７】
潰瘍のデブリードマンを行う工程をさらに含む、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
デブリードマンは外科的デブリードマンである、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
骨を摘除する工程をさらに含む、請求項２６から２８のいずれか１つに記載の方法。
【請求項３０】
骨の摘除は健康な骨に達するまで行なわれる、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
骨の摘除は壊死性骨または罹患した骨を実質的に除去するために行われる、請求項２９に記載の方法。
【請求項３２】
露出した骨の皮質を切開する工程をさらに含む、請求項２６から３１のいずれか１つに記載の方法。
【請求項３３】
潰瘍に第２の胎児支持組織産物を投与する工程をさらに含む、請求項２６から３２のいずれか１つに記載の方法。
【請求項３４】
ドレッシング材、抗菌性ドレッシング材、抗菌性アルギネートドレッシング材、圧迫ドレッシング材、メピテル創傷接触層、ガーゼ、パッチ、基材、裏当て、被覆材、包帯またはそれらの組み合わせにより胎児支持組織産物を被覆する工程をさらに含む、請求項２６から３３のいずれか１つに記載の方法。
【請求項３５】
抗生物質、高圧酸素療法、血管再生療法、およびそれらの組み合わせから成る群から選択される処置を与える工程をさらに含む、請求項２６から３４のいずれか１つに記載の方法。
【請求項３６】
胎児支持組織産物は、胎盤羊膜、臍帯、臍帯羊膜、絨毛膜、羊膜絨毛膜、胎盤、またはそれらの任意の組み合わせに由来する、請求項２６から３５のいずれか１つに記載の方法。
【請求項３７】
胎児支持組織産物は、砕かれ、粉砕され、分割される、移植片、粉末、ゲル、ホモジネートまたは抽出物である、請求項２６から３６のいずれか１つに記載の方法。
【請求項３８】
胎児支持組織産物は無菌的に処理されるか、または最終滅菌される、請求項２６から３７のいずれか１つに記載の方法。
【請求項３９】
胎児支持組織産物は移植片である、請求項２６から３８のいずれか１つに記載の方法。
【請求項４０】
胎児支持組織産物は実質的に平らにされたシートである、請求項２６から３８のいずれか１つに記載の方法。
【請求項４１】
胎児支持組織産物は、ヒト、ヒト以外の霊長類、ウシ、またはブタ由来である、請求項２６から４０のいずれか１つに記載の方法。
【請求項４２】
胎児支持組織産物は臍帯産物である、請求項２６から４１のいずれか１つに記載の方法。
【請求項４３】
臍帯産物は臍帯羊膜を含む、請求項４２に記載の方法。
【請求項４４】
臍帯産物はさらにホウォートンゼリーを含む、請求項４３に記載の方法。
【請求項４５】
臍帯産物は実質的に血液を含まない、請求項４２から４４のいずれか１つに記載の方法。
【請求項４６】
臍帯産物は臍帯の静脈および臍帯の動脈を欠く、請求項４２から４５のいずれか１つに記載の方法。
【請求項４７】
必要とする固体において二分脊椎欠損を修復する方法であって、該方法は：欠損を修復するために、個体の二分脊椎欠損に治療上有効な量の臍帯産物を投与する工程をさらに含む、方法。
【請求項４８】
個体は子宮内の胎児である、請求項４７に記載の方法。
【請求項４９】
臍帯産物は適所に縫合される、請求項４７または４８に記載の方法。
【請求項５０】
修復は表皮、真皮、および皮下の層を再生する工程を含む、請求項４７から４９のいずれか１つに記載の方法。
【請求項５１】
臍帯産物は、砕かれ、粉砕され、分割される、移植片、シート、粉末、ゲル、ホモジネートまたは抽出物である、請求項４７から５０のいずれか１つに記載の方法。
【請求項５２】
臍帯産物は無菌的に処理されるか、または最終滅菌される、請求項４７から５１のいずれか１つに記載の方法。
【請求項５３】
臍帯産物は移植片である、請求項４７から５２のいずれか１つに記載の方法。
【請求項５４】
臍帯産物は実質的に平らにされたシートである、請求項４７から５３のいずれか１つに記載の方法。
【請求項５５】
臍帯産物は、ヒト、ヒト以外の霊長類、ウシ、またはブタ由来である、請求項４７から５４のいずれか１つに記載の方法。
【請求項５６】
臍帯産物は臍帯羊膜を含む、請求項４７から５５のいずれか１つに記載の方法。
【請求項５７】
臍帯産物はさらにホウォートンゼリーを含む、請求項５６に記載の方法。
【請求項５８】
臍帯産物は実質的に血液を含まない、請求項４７から５７のいずれか１つに記載の方法。
【請求項５９】
臍帯産物は臍帯の静脈および臍帯の動脈を欠く、請求項４７から５８のいずれか１つに記載の方法。
【請求項６０】
必要とする個体において肉芽組織からの瘢痕形成を低減または予防する方法であって、該方法は：個体の肉芽組織に治療上有効な量の胎児支持組織産物を投与する工程であって、それにより瘢痕形成を低減または予防する工程を含む、方法。
【請求項６１】
肉芽組織は損傷した組織が治癒する間に生じる、請求項６０に記載の方法。
【請求項６２】
損傷した組織は、やけど、創傷、障害、潰瘍または手術の結果である、請求項６１に記載の方法。
【請求項６３】
損傷した組織は皮膚、骨、筋肉、腱、軟骨、靭帯、軟組織または関節である、請求項６１または６２に記載の方法。
【請求項６４】
肉芽組織に第２の胎児支持組織産物を投与する工程をさらに含む、請求項６０または６１に記載の方法。
【請求項６５】
ドレッシング材、抗菌性ドレッシング材、抗菌性アルギネートドレッシング材、圧迫ドレッシング材、メピテル創傷接触層、ガーゼ、パッチ、基材、裏当て、被覆材、包帯またはそれらの組み合わせにより胎児支持組織産物を被覆する工程をさらに含む、請求項６０から６２のいずれか１つに記載の方法。
【請求項６６】
胎児支持組織産物は、胎盤羊膜、臍帯、臍帯羊膜、絨毛膜、羊膜絨毛膜、胎盤、またはそれらの任意の組み合わせに由来する、請求項６０から６３のいずれか１つに記載の方法。
【請求項６７】
胎児支持組織産物は、砕かれ、粉砕され、分割される、移植片、粉末、ゲル、ホモジネートまたは抽出物である、請求項６０から６４のいずれか１つに記載の方法。
【請求項６８】
胎児支持組織産物は無菌的に処理されるか、または最終滅菌される、請求項６０から６５のいずれか１つに記載の方法。
【請求項６９】
胎児支持組織産物は移植片である、請求項６０から６６のいずれか１つに記載の方法。
【請求項７０】
胎児支持組織産物は実質的に平らにされたシートである、請求項６０から６７のいずれか１つに記載の方法。
【請求項７１】
胎児支持組織産物は、ヒト、ヒト以外の霊長類、ウシ、またはブタ由来である、請求項６０から６８のいずれか１つに記載の方法。
【請求項７２】
胎児支持組織産物は臍帯産物である、請求項６０から６９のいずれか１つに記載の方法。
【請求項７３】
臍帯産物は臍帯羊膜を含む、請求項７２に記載の方法。
【請求項７４】
臍帯産物はさらにホウォートンゼリーを含む、請求項７３に記載の方法。
【請求項７５】
臍帯産物は実質的に血液を含まない、請求項７２から７４のいずれか１つに記載の方法。
【請求項７６】
臍帯産物は臍帯の静脈および臍帯の動脈を欠く、請求項７２から７５のいずれか１つに記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
＜関連出願への相互参照＞
本出願は、２０１６年１月２９日に出願された米国仮出願第６２／２８８，８８１号の優先権を主張するものであり、これは参照により全体として本明細書に組み込まれる。
【発明の概要】
【０００２】
本明細書に開示されるのは、特定の実施形態において、それを必要とする個体において複雑な創傷を処置する方法であり、該方法は：個体の複雑な創傷に治療上有効な量の胎児支持組織産物を投与する工程を含む。いくつかの実施形態では、複雑な創傷は、潰瘍、下肢潰瘍、足潰瘍、慢性足潰瘍、褥瘡または虚血性創傷である。幾つかの実施形態では、複雑な創傷は骨の露出を含む。幾つかの実施形態では、複雑な創傷は骨量減少を含む。いくつかの実施形態では、該方法は複雑な創傷のデブリードマンを行う工程をさらに含む。いくつかの実施形態では、デブリードマンは外科的デブリードマンである。いくつかの実施形態では、該方法は骨を摘除する工程をさらに含む。いくつかの実施形態では、健康な骨に達するまで、骨の摘除が行なわれる。いくつかの実施形態では、骨の摘除は壊死性骨または罹患した骨を実質的に除去するために行われる。いくつかの実施形態において、該方法は露出した骨の皮質を切開する工程をさらに含む。いくつかの実施形態では、該方法は、複雑な創傷に第２の胎児支持組織産物を投与する工程をさらに含む。いくつかの実施形態では、該方法は、ドレッシング材、抗菌性ドレッシング材、抗菌性アルギネートドレッシング材、圧迫ドレッシング材、メピテル創傷接触層、ガーゼ、パッチ、基材、裏当て、被覆材、包帯またはそれらの組み合わせにより胎児支持組織産物を被覆する工程をさらに含む。いくつかの実施形態では、該方法は、抗生物質、高圧酸素療法、血管再生療法、およびそれらの組み合わせから成る群から選択される処置を与える工程をさらに含む。いくつかの実施形態では、個体は骨髄炎を患っている。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は、胎盤羊膜、臍帯、臍帯羊膜、絨毛膜、羊膜絨毛膜（ａｍｎｉｏｎ−ｃｈｏｒｉｏｎ）、胎盤、またはそれらの任意の組み合わせに由来する。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は、砕かれ、粉砕され、分割される、移植片、シート、粉末、ゲル、ホモジネートまたは抽出物である。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は無菌的に処理されるか、または最終滅菌される。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は移植片である。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は実質的に平らにされたシートである。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は、ヒト、ヒト以外の霊長類、ウシ、またはブタ由来である。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は臍帯産物である。いくつかの実施形態では、臍帯産物は臍帯羊膜を含む。いくつかの実施形態において、臍帯産物はホウォートンゼリー（Ｗｈａｒｔｏｎ’ｓ  Ｊｅｌｌｙ）を含む。いくつかの実施形態では、臍帯産物は血液を実質的に含まない。いくつかの実施形態では、臍帯産物は臍帯の静脈および臍帯の動脈を欠く。
【０００３】
本明細書に開示されるのは、特定の実施形態において、それを必要とする個体において複雑な下肢潰瘍を処置する方法であり、該方法は：個体の複雑な下肢潰瘍に治療上有効な量の胎児支持組織産物を投与する工程を含む。いくつかの実施形態では、該方法は潰瘍のデブリードマンを行う工程をさらに含む。いくつかの実施形態では、デブリードマンは外科的デブリードマンである。幾つかの実施形態では、潰瘍は骨の露出を含む。幾つかの実施形態では、潰瘍は骨量減少を含む。いくつかの実施形態では、潰瘍は、壊死性軟組織、壊死性骨、またはそれらの組み合わせを含む。いくつかの実施形態では、該方法は骨を摘除する工程をさらに含む。いくつかの実施形態では、健康な骨に達するまで、骨の摘除が行なわれる。いくつかの実施形態では、骨の摘除は壊死性骨または罹患した骨を実質的に除去するために行われる。いくつかの実施形態において、該方法は露出した骨の皮質を切開する工程をさらに含む。いくつかの実施形態では、該方法は、潰瘍に第２の胎児支持組織産物を投与する工程をさらに含む。いくつかの実施形態では、該方法は、ドレッシング材、抗菌性ドレッシング材、抗菌性アルギネートドレッシング材、圧迫ドレッシング材、メピテル創傷接触層、ガーゼ、パッチ、基材、裏当て、被覆材、包帯またはそれらの組み合わせにより胎児支持組織産物を被覆する工程をさらに含む。いくつかの実施形態では、該方法は、抗生物質、高圧酸素療法、血管再生療法、およびそれらの組み合わせから成る群から選択される処置を与える工程をさらに含む。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は、胎盤羊膜、臍帯、臍帯羊膜、絨毛膜、羊膜絨毛膜（ａｍｎｉｏｎ−ｃｈｏｒｉｏｎ）、胎盤、またはそれらの任意の組み合わせに由来する。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は、砕かれ、粉砕され、分割される、移植片、シート、粉末、ゲル、ホモジネートまたは抽出物である。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は無菌的に処理されるか、または最終滅菌される。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は移植片である。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は実質的に平らにされたシートである。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は、ヒト、ヒト以外の霊長類、ウシ、またはブタ由来である。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は臍帯産物である。いくつかの実施形態では、臍帯産物は臍帯羊膜を含む。いくつかの実施形態において、臍帯産物はホウォートンゼリー（Ｗｈａｒｔｏｎ’ｓ  Ｊｅｌｌｙ）をさらに含む。いくつかの実施形態では、臍帯産物は血液を実質的に含まない。いくつかの実施形態では、臍帯産物は臍帯の静脈および臍帯の動脈を欠く。
【０００４】
本明細書に開示されるのは、特定の実施形態において、それを必要とする個体において二分脊椎欠損を修復する方法であり、該方法は：欠損を修理するために、個体の二分脊椎欠損に治療上有効な量の臍帯産物を投与する工程を含む。いくつかの実施形態では、個体は子宮内の胎児である。いくつかの実施形態では、臍帯産物は適所に縫合される。いくつかの実施形態では、修復は、表皮、真皮および皮下の層を再生する工程を含む。いくつかの実施形態では、臍帯産物は、砕かれ、粉砕され、分割される、移植片、シート、粉末、ゲル、ホモジネートまたは抽出物である。いくつかの実施形態では、臍帯産物は無菌的に処理されるか、または最終滅菌される。いくつかの実施形態では、臍帯産物は移植片である。いくつかの実施形態では、臍帯産物は実質的に平らにされたシートである。いくつかの実施形態では、臍帯産物は、ヒト、ヒト以外の霊長類、ウシ、またはブタ由来である。いくつかの実施形態では、臍帯産物は臍帯羊膜を含む。いくつかの実施形態において、臍帯産物はホウォートンゼリー（Ｗｈａｒｔｏｎ’ｓ  Ｊｅｌｌｙ）をさらに含む。いくつかの実施形態では、臍帯産物は血液を実質的に含まない。いくつかの実施形態では、臍帯産物は臍帯の静脈および臍帯の動脈を欠く。
【０００５】
本明細書に開示されるのは、特定の実施形態において、それを必要とする個体において肉芽組織からの瘢痕形成を低減または予防する方法であり、該方法は：個体の肉芽組織に治療上有効な量の胎児支持組織産物を投与する工程であって、それにより肉芽組織からの瘢痕形成を低減または予防する工程を含む。いくつかの実施形態では、肉芽組織は損傷した組織が治癒する間に生じる。いくつかの実施形態では、損傷した組織は、やけど、創傷、傷害、潰瘍または手術の結果である。いくつかの実施形態では、損傷した組織は、皮膚、骨、筋肉、腱、軟骨、靭帯、軟組織または関節である。いくつかの実施形態では、該方法は、肉芽組織に第２の胎児支持組織産物を投与する工程をさらに含む。いくつかの実施形態では、該方法は、ドレッシング材、抗菌性ドレッシング材、抗菌性アルギネートドレッシング材、圧迫ドレッシング材、メピテル創傷接触層、ガーゼ、パッチ、基材、裏当て、被覆材、包帯またはそれらの組み合わせにより胎児支持組織産物を被覆する工程をさらに含む。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は、胎盤羊膜、臍帯、臍帯羊膜、絨毛膜、羊膜絨毛膜（ａｍｎｉｏｎ−ｃｈｏｒｉｏｎ）、胎盤、またはそれらの任意の組み合わせに由来する。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は、砕かれ、粉砕され、分割される、移植片、シート、粉末、ゲル、ホモジネートまたは抽出物である。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は無菌的に処理されるか、または最終滅菌される。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は移植片である。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は実質的に平らにされたシートである。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は、ヒト、ヒト以外の霊長類、ウシ、またはブタ由来である。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は臍帯産物である。いくつかの実施形態では、臍帯産物は臍帯羊膜を含む。いくつかの実施形態において、臍帯産物はホウォートンゼリー（Ｗｈａｒｔｏｎ’ｓ  Ｊｅｌｌｙ）を含む。いくつかの実施形態では、臍帯産物は血液を実質的に含まない。いくつかの実施形態では、臍帯産物は臍帯の静脈および臍帯の動脈を欠く。
【図面の簡単な説明】
【０００６】
本発明の新規な特徴は、とりわけ添付の特許請求の範囲において説明される。本発明の特徴および利点のより良い理解は、本発明の原理が用いられる実施形態を説明する以下の詳細な説明と、以下の添付図面とを引用することによって得られるであろう。
【図１】図１は、臍帯（ＵＣ）の断面を例証する。
【図２】図２は、カプランマイヤー分析により、経時的に治癒した創傷の割合を判定するために、完全な治癒を示した２６の創傷の創傷閉鎖時間を例示する。
【図３Ａ】図３Ａは、初期の創傷領域に基づいた創傷閉鎖を例示する。図３Ａは、完全な治癒に達した２６の創傷について、初期創傷領域に基づいて四分位に分けられた創傷を例示する。
【図３Ｂ】図３Ｂは、初期の創傷領域に基づいた創傷閉鎖を例示する。図３Ｂは、各四分位値について完全な創傷閉鎖を達成するための合計時間を例示する。初期の創傷のサイズに有意な差があり、すなわち＊ｐ＜０．０５対Ｑ１；＾ｐ＜０．０５対Ｑ２；＃ｐ＜０．０５対Ｑ３だったが（図３Ａ）、４つの四分位値間で比較した場合、創傷閉鎖、すなわちｐ＞０．０５を達成する平均時間に差はない（図３Ｂ）。
【発明を実施するための形態】
【０００７】
複雑な創傷を処置する方法が本明細書に提供される。複雑な慢性の創傷は生命を脅かし、重症な衰弱性の疾患を構成する。複雑な創傷が、慢性病の処置のために動きが制限される長期間の入院を必要とする患者に生じることがあり（例えば褥瘡または床擦れ）、結果として死亡率をより高く、生活の質をより低くする場合がある。静脈鬱滞潰瘍形成による複雑な創傷は、相当な病的状態および生活の質の低下を引き起こす。複雑な創傷は、自己免疫疾患を有する患者に生じることがあり、または、免疫抑制療法下（例えば、広範囲な潰瘍に至る血管炎）で入院時間をより長くし、かつ処置のコストを高くさせる可能性がある。フルニエ壊疽はまた別の複雑な創傷であり、好気生物および嫌気生物の混合体によって引き起こされる会陰部および生殖器の領域の感染性の壊疽性筋膜炎を特徴とする。この感染症からの死亡率は６７％にもなり得る。
【０００８】
例えば、非治癒性の糖尿病足潰瘍（ＤＦＵ）は、世界中のヘルスケアシステムに対する重要な系統（ｓｔｒａｉｎ）になった。世界保健機構は、世界中の３億４７００万人が糖尿病に罹患していると算定し、ＵＳ  Ｃｅｎｔｅｒｓ  ｏｆ  Ｄｉｓｅａｓｅ  Ｃｏｎｔｒｏｌによれば、２０１０年には糖尿病である２５８０万人のアメリカ人が存在した。糖尿病の人は、その生涯で足潰瘍を発症する危険性が約２５％であり、推定される年間の発生率は２％である。
【０００９】
骨髄炎と、骨および／または腱、筋肉、関節包の露出とは、糖尿病足潰瘍の蔓延している重症合併症である。骨髄炎は、骨の炎症または感染を指し、約２０％の糖尿病足潰瘍を併発する症状である。したがって、毎年、米国では、１００，０００人が、根底にある骨髄炎により併発される糖尿病足潰瘍に罹患する、と算定される。深く大きな潰瘍、特に骨が露出している潰瘍は、骨髄炎によって併発される可能性がより高い。根底にある骨髄炎を伴うほぼすべての糖尿病足潰瘍は、隣接する軟組織から皮質骨および／または骨髄への感染の連続的な広がりに起因する。
【００１０】
そのような複雑な非治癒性糖尿病足潰瘍の予後は概して悪い。露出した骨および骨髄炎を伴う糖尿病足潰瘍は、潰瘍の治癒が遅れ／治癒しないこと（ｄｅｌａｙｅｄ／ｎｏｎ−  ｈｅａｌｉｎｇ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｕｌｃｅｒｓ）、潰瘍の再発、および、切断の可能性の増加、のリスクが高い。非治癒性潰瘍は、真皮の第１の防衛線を損なうため、患者は感染および非感染性組織喪失の影響を受けやすい。潰瘍の感染は、多くの場合入院を促し、切断に至るものである。潰瘍の感染が進行して重度になると、または、四肢が脅かされると、切断率が５１％と高いことが、報告されてきた。米国では毎年、糖尿病の人々のために６５，０００以上の非外傷性下肢切断が行われている。軟組織感染のみの時と比べ、足潰瘍が骨髄炎に併発した時、切断の危険性は４倍にも増す。不運にも、ある大きな下肢切断後、５年生存率は５０％であると推定され、これは悪性腫瘍の５年生存率よりも悪く、肺癌の５年生存率に次ぐものである。さらに、一旦切断されれば、患者の５０％は５年以内に対側肢に潰瘍を発症するだろう。切断術の生存者にとっては、日々の機能が大きく損なわれる。多くの人は、杖や歩行器を使用してもしなくても歩くことができない。２０１０年に米国で下肢切断術を受けた患者の２２．８％が３０日以内に再入院したことが、ある研究からわかり、これはこの研究で検討された手術の中で再入院率が最も高いものであった。さらに、医療の最善を尽くしても、切断およびその余波は、患者が外見や機能の喪失による社会的および財政的影響に対処するにあたり、うつ病を引き起こすと予想されうるトラウマ的な経験である。まとめると、この国および世界中で切断に至る可能性のある高リスクの複雑な非治癒性足潰瘍の重症度の深刻な画を想像することができる。
【００１１】
骨および／または腱、筋肉、関節包を露出させた骨髄炎という臨床的な疑いを有する、高リスクの複雑な非治癒性糖尿病足潰瘍を処置することの主要な処置目標は、潰瘍をできる限り迅速に閉鎖し、それによって切断につながる可能性のある感染の重篤度の増大などの、さらなる創傷関連合併症のリスクを低減することである。現在の医学的治療には、局所的な創傷のケア（例えば、創傷ドレッシング材適用およびデブリードマン）、疼痛緩和、圧力緩和（除荷）および感染の処置が含まれる。真空抽出装置、高圧酸素処理、音波技術などの新しい技術も導入されてきた。創傷のケア製品の新しい進歩には、高度な皮膚代替物および血小板由来成長因子（ＰＤＧＦ）などの組換え成長因子が含まれる。しかし、高度な皮膚代替物のいずれも、骨髄炎を呈する複雑な潰瘍を処置することを示していない。加えて、その大多数が、骨および／または腱、筋肉、関節包の露出を示す深く複雑な非治癒性糖尿病足潰瘍の処置において安全であるか有効であることが実証されていない。これらの製品の少なくとも一部は、腱、筋肉、包または骨が露出している潰瘍のために示されておらず、臨床的に感染した創傷に使用することは禁忌である。さらに、これらの高度な皮膚代替物のほとんどすべてが、「生着」または「移植片摂取」を必要とする。
【００１２】
本特許請求の方法は、スキャフォールドとして機能する胎児支持組織産物と、その創傷床に適用された時の血管形成または宿主組織／細胞の統合に依存する生着と、に依存しない。したがって、特定の理論に縛られることを望まないが、胎児支持組織産物（例えば、臍帯産物）は、従来の高度な皮膚代替物とは異なる治癒メカニズムを利用しうる。ある症状の特定の作用を処置することを目標としている現在利用可能な療法の多く、例えば、銀ドレッシング材は感染を特異的に管理することを意図しており、ＰＤＧＦは血管新生を刺激することを意図していることとは対照的に、胎児支持組織産物（例えば、臍帯産物）は、異なるタイプの細胞における抗炎症、抗瘢痕および再生の効果を含む、マルチモーダル作用を発揮する。
【００１３】
複雑な創傷はしばしば慢性および非治癒性であり、感染組織および壊死組織が、高齢または免疫不全の患者、または、不十分な治癒をもたらす他の慢性疾患（例えば、糖尿病、免疫系欠損、動脈または静脈不全、慢性閉塞性肺疾患、または対麻痺または四肢麻痺）を有する患者に、存在するかまたは生じる場合にさらなる処置上の課題をもたらす。本方法は、複雑な創傷に対する改善された処置を提供する。本明細書において第１の例示的な研究で提供されるように、複雑な創傷への胎児支持組織の投与後、２７の複雑な創傷のうち２６が完全に治癒した（実施例１）。本明細書において提供される第２の例示的な研究では、胎児支持組織で処置された、外科手術および放射線療法後の組織および骨の壊死を含む頭皮の複雑な創傷を有する患者は、軟組織の治癒および骨再増殖の刺激を示した。したがって、本開示の方法は、世界的な公衆衛生上の懸念となっており、満たされていない医療的な必要性を提示している、この重大で潜在的に致命的な症状に対処する。
【００１４】
本明細書に開示されるのは、特定の実施形態において、それを必要とする個体において複雑な創傷を処置する方法であり、該方法は：複雑な創傷を処置するのに有効な量で個体の複雑な創傷に胎児支持組織産物を適用する工程を含む。
【００１５】
本明細書に開示されるのは、特定の実施形態において、それを必要とする個体において複雑な下肢潰瘍を処置する方法であり、該方法は：複雑な下肢潰瘍を処置するのに有効な量で個体の複雑な下肢潰瘍に胎児支持組織産物を適用する工程を含む。
【００１６】
本明細書に開示されるのは、特定の実施形態において、それを必要とする個体において二分脊椎欠損を修復する方法であり、該方法は：該欠損を修復するのに有効な量で個体の二分脊椎欠損に臍帯産物を適用する工程を含む。
【００１７】
本明細書に開示されるのは、特定の実施形態において、それを必要とする個体において肉芽組織からの瘢痕形成を低減または予防する方法であり、該方法は：瘢痕形成を低減または予防するのに有効な量で個体の肉芽組織に胎児支持組織産物を適用する工程を含む。
【００１８】
＜特定の定義＞
本明細書に使用されるとおり、「胎児支持組織産物」は、胎児の発達を支持するために使用される組織に由来する任意の単離された産物を意味する。胎児支持組織産物の例は、限定されないが、（ｉ）胎盤羊膜（ＰＡＭ）または実質的に単離されたＰＡＭ、（ｉｉ）臍帯羊膜（ＵＣＡＭ）または実質的に単離されたＵＣＡＭ、（ｉｉｉ）絨毛膜または実質的に単離された絨毛膜、（ｉｖ）羊膜絨毛膜または実質的に単離された羊膜絨毛膜、（ｖ）胎盤または実質的に単離された胎盤、（ｖｉ）臍帯または実質的に単離された臍帯、あるいは（ｖｉｉ）それらの任意の組み合わせ、を含む。いくつかの実施形態では、胎児支持組織は、胎盤羊膜（ＰＡＭ）、臍帯羊膜（ＵＣＡＭ）、絨毛膜、羊膜絨毛膜（ａｍｎｉｏｎ−ｃｈｏｒｉｏｎ）、胎盤、臍帯、またはそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、胎児支持組織は臍帯を含む。胎児支持組織産物は、凍結保存され、最終滅菌され、凍結乾燥された、胎児支持組織、または胎児支持組織を摩砕することにより得られる粉末を含む、任意の形態の胎児支持組織を含む。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は、砕かれ、粉砕され、分割される、移植片、シート、粉末、ゲル、ホモジネート、抽出物、または、最終滅菌された産物、である。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は移植片である。
【００１９】
本明細書に使用されるように、「ヒト組織」は人体に由来する任意の組織を意味する。いくつかの実施形態では、ヒト組織は、胎盤羊膜、臍帯、臍帯羊膜、絨毛膜、羊膜絨毛膜（ａｍｎｉｏｎ−ｃｈｏｒｉｏｎ）、胎盤、またはそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される胎児支持組織である。
【００２０】
本明細書に使用されるように、「肉芽組織」というフレーズは、治癒のプロセスの間に創傷の表面に形成される、新しい組織および小さな血管を指す。いくつかの実施形態では、肉芽組織は、新しい毛細血管の伸長を含む、でこぼこまたは粒状の表面を示す。いくつかの実施形態では、肉芽組織は創傷の基部から成長し、ほとんどのサイズの創傷を埋めることができる。いくつかの実施形態では、本明細書に開示される胎児支持組織産物は、肉芽組織に適用されて、肉芽組織からの瘢痕組織の形成を予防または低減する。いくつかの実施形態では、本明細書に開示される胎児支持組織産物は組織再生創傷修復を促進するために肉芽組織に適用される。いくつかの実施形態では、過剰肉芽形成（ｈｙｐｅｒｇｒａｎｕｌａｔｉｏｎ）は上皮化を防止し、治癒プロセスが阻止される。
【００２１】
本明細書に使用されるとおり、「複雑な創傷」は露出した骨、筋肉、腱、関節包またはそれらの組み合わせを有する創傷を指す。幾つかの実施形態では、複雑な創傷は骨の露出を含む。幾つかの実施形態では、複雑な創傷は骨の減少を含む。いくつかの実施形態では、骨量減少は壊死によるものである。いくつかの実施形態では、複雑な創傷は、軟組織、骨、またはそれらの組み合わせの壊死を含む。複雑な創傷は概して治癒することが難しく、皮膚、筋肉および腱の伝染に非常に影響を受けやすく、かつ、患者を骨髄炎の危険にさらされやすくさせる。複雑な創傷は、特に血流不全または感染に関連している場合、切断に至る危険性がより大きい。いくつかの実施形態では、複雑な創傷は、潰瘍、下肢潰瘍、足潰瘍、慢性足潰瘍、または虚血性創傷である。幾つかの実施形態では、複雑な創傷は褥瘡である。いくつかの実施形態では、複雑な創傷は静脈鬱滞潰瘍または血管炎による潰瘍である。幾つかの実施形態では、複雑な創傷は虚血性である。いくつかの実施形態では、複雑な創傷は、頭皮、頭蓋骨、硬膜、またはそれらの組み合わせの創傷を含む。幾つかの実施形態では、複雑な創傷は感染に関連する。幾つかの実施形態では、複雑な創傷は骨髄炎に関連する。幾つかの実施形態では、複雑な創傷は虚血性および感染性である。
【００２２】
本明細書に使用されるような「単純な創傷」は、筋肉、腱、関節または骨などの根本的な組織への損傷がほとんどない皮膚の創傷を指す。
【００２３】
本明細書に使用されるように、「移植片」はタンパク質（例えばコラーゲンおよびエラスチン）および多糖類（例えばデルマタン、ヒアルロナン、およびコンドロイチン）のマトリックスを意味し、損傷した組織、傷ついた組織、または欠けている組織を置き換えるために使用される。特定の例では、マトリックスは下に敷かれ、宿主細胞が徐々にマトリックスに一体化する。
【００２４】
本明細書に使用されるように、「最小限の操作」とは、（１）構造的な組織については、再構成、修復、または置換のための、組織の有用性に関連する組織の元々の関連特性を変更しない処理；および、（２）細胞または非構造的組織については、細胞または組織の関連生物学的特性を変化させない処理、を意味する。
【００２５】
本明細書に使用されるように、「処理」とは、微生物の試験、調製、滅菌、外来性の物質の不活性化または除去のための工程、保管のための保存、および、保管からの除去などの、回復、ドナースクリーニング、ドナー試験、保管、ラベリング、パッケージング、または配布以外の、胎児支持組織産物上で行なわれる任意の活動を意味する。
【００２６】
本明細書で使用されているように、「シート」は任意の連続的な広がりまたは表面を意味する。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物のシートは実質的に平らにされている。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物のシートは平らである。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物のシートは管状である。該シートは、処置される創傷に適した任意の形状またはサイズであり得る。いくつかの実施形態において、シートは正方形、円、三角形、または長方形である。
【００２７】
本明細書で使用されるように、用語「被験体」は任意の動物、好ましくはヒトまたはヒト以外を含む哺乳類を意味するために使用される。患者、被験体、個体という用語は交換可能に使用される。これらの用語のいずれも、医療専門家（例えば、医者、看護師、医師助手、看護助手、ホスピスワーカー）の監督を必要とするものであるとは解釈されない。
【００２８】
「実質的に単離された」または「単離された」が、胎児支持組織産物の文脈において使用される場合、胎児支持組織産物が元の供給源となる生物に由来する大部分の他の非胎児支持組織材料（例えば、他の組織、赤血球、静脈、動脈）から分離される、ということを意味する。
【００２９】
本明細書に使用されるように、「単離された胎児支持組織産物の生物学的および構造的な完全性が実質的に保存されている」というフレーズは、新鮮なＵＣの生物学的活性および構造的な完全性と比べた時、単離されたＵＣの生物学的活性および構造的な完全性が、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約５０％、または約６０％のみ減少した、ということを意味する。
【００３０】
「新鮮な胎児支持組織」という用語は、出生後１０日未満であり、出生後と実質的に同じ形態の胎児支持組織を指す。
【００３１】
本明細書に使用されるように、「生物学的活性」は、胎児支持組織のポリペプチドおよび多糖類の活性を意味する。いくつかの実施形態では、胎児支持組織に見られるポリペプチドと多糖類の生物学的活性は、抗炎症性、抗瘢痕化、抗血管新生、または抗癒着である。いくつかの実施形態では、生物学的活性は、胎児支持組織におけるＨＣ−ＨＡ／ＰＴＸ３複合体の生物学的活性である。いくつかの実施形態では、胎児支持組織におけるＨＣ−ＨＡ／ＰＴＸ３複合体の生物学的活性は、実質的に保存されている。いくつかの実施形態では、胎児支持組織に見られるポリペプチドと多糖類の活性は、創傷の治癒を促進している。いくつかの実施形態では、胎児支持組織に見られるポリペプチドと多糖類の活性は、瘢痕化を予防している。いくつかの実施形態では、胎児支持組織に見られるポリペプチドと多糖類の活性は、炎症を低減している。
【００３２】
本明細書に使用されるように、「構造的な完全性」は胎児支持組織産物を構築する間質および基底膜の完全性を意味する。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物の構造的な完全性は、縫合引き抜き強度（ｓｕｔｕｒｅ  ｐｕｌｌ  ｏｕｔ  ｓｔｒｅｎｇｔｈ）をもたらす。
【００３３】
「処置する」、「処置すること」、または「処置」という用語は、本明細書で使用されるように、疾患または疾病の症状を緩和するか、軽減するか、または改善すること、追加の症状を予防すること、症状の根本的な代謝原因を改善するか、または予防すること、疾患または疾病を阻害すること、例えば、疾患または疾病の発症を妨げること、疾患または疾病を軽減すること、疾患または疾病の退行を引き起こすこと、疾患または疾病によって引き起こされた状態を緩和すること、あるいは、予防的または治療的に疾患または疾病の症状を止めることを含む。いくつかの実施形態では、複雑な創傷または複雑な下肢潰瘍などの創傷を処置することは、創傷閉鎖を促進することを指す。いくつかの実施形態では、複雑な創傷または複雑な下肢潰瘍などの創傷を処置することは、創傷治癒を完了することを指す。いくつかの実施形態では、創傷治癒を完了することは、創傷領域の１００％の再上皮化を指す。いくつかの実施形態では、複雑な創傷または複雑な下肢潰瘍などの創傷を処置することは、新しい骨、腱、筋肉、および皮膚の発生を促進することを指す。いくつかの実施形態では、複雑な創傷または複雑な下肢潰瘍などの創傷を処置することは、創傷を閉鎖するように、骨、腱、筋肉、および皮膚の発生を促進することを指す。いくつかの実施形態では、複雑な創傷または複雑な下肢潰瘍などの創傷を処置することは、罹患した四肢の切断の必要性を回避または最小化することを指す。
【００３４】
＜胎児支持組織産物＞
本明細書に使用されるように、用語「産物」は、胎児支持組織由来の、砕かれ、粉砕され、分割される、移植片、シート、粉末、ゲル、ホモジネート、抽出物、または最終滅菌された産物、である。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は移植片である。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物はシートである。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は、胎盤羊膜、臍帯、臍帯羊膜、絨毛膜、羊膜絨毛膜（ａｍｎｉｏｎ−ｃｈｏｒｉｏｎ）、胎盤、またはそれらの任意の組み合わせに由来する。
【００３５】
いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は臍帯産物である。いくつかの実施形態では、臍帯産物は、臍帯羊膜および少なくともいくつかのホウォートンゼリーを含む。いくつかの実施形態では、臍帯産物は臍帯の静脈および動脈を欠く。
【００３６】
本明細書で使用されているように、「胎盤羊膜」（ＰＡＭ）とは、胎盤に由来する羊膜を意味する。いくつかの実施形態では、ＰＡＭは実質的に単離される。
【００３７】
本明細書で使用されているように、「臍帯」とは、発達中の胎児を胎盤につなぐ臓器を意味する。臍帯は羊膜（ＵＣＡＭ）、ホウォートンゼリーおよび血管から構成される。ＵＣＡＭは、ＵＣ内の流体圧力を調整するように機能する。臍帯の断面視については、図１を参照。本明細書に使用されるように、「ホウォートンゼリー」は、主としてムコ多糖類（ヒアルロン酸とコンドロイチン硫酸）から構成される、臍帯内のゼラチン質の物質を意味する。臍帯はさらに、２つの動脈（臍動脈）と１つの静脈（臍静脈）を含み、ホウォートンゼリーに埋め込まれている。特定の例では、臍静脈は、胎盤由来の酸素を含んだ血液を発達中の胎児に供給する。特定の例では、臍動脈は、胎盤への脱酸素化血液を送り返す。
【００３８】
本明細書で使用されるように、「臍帯羊膜」（ＵＣＡＭ）は、臍帯に由来する羊膜を意味する。これは炎症を低減し、血管形成を低減し、瘢痕化を低減し、癒着を低減する。ＵＣＡＭは半透明の膜である。ＵＣＡＭには、複数の層：上皮の層；基底膜；緻密層、繊維芽細胞層、および、海綿層、を有する。さらに、ＵＣＡＭの基底膜は幹細胞のための天然の隙間として役立つ。ＵＣＡＭは血管または直接的な血液供給を欠いている。いくつかの実施形態では、ＵＣＡＭは実質的に単離される。いくつかの実施形態において、ＵＣＡＭはホウォートンゼリーを含む。いくつかの実施形態において、ＵＣＡＭはさらにホウォートンゼリーの少なくとも一部を含む。いくつかの実施形態では、ＵＣＡＭは血管および／または動脈を含む。いくつかの実施形態では、ＵＣＡＭはホウォートンゼリーと血管および／または動脈を含む。
【００３９】
本明細書で使用されるように、「胎盤」とは、母体の血液供給によって栄養分の摂取、廃棄物の排出、およびガス交換を可能にするために、母体の子宮壁と発育中の胎児とをつなぐ臓器を意味する。胎盤は３層からなる。胎児を包む最も内側の胎盤の層は羊膜と呼ばれる。尿膜は（胚の後腸に由来する）胎盤の中心の層であり、臍から始まる血管はこの膜を横断する。胎盤の最も外側の層である、絨毛膜は子宮内膜と接触する。絨毛膜と尿膜は絨毛尿膜を形成するために融合する。
【００４０】
本明細書で使用されているように、「絨毛膜」とは、胚外中胚葉と栄養芽層の２つの層によって形成された膜を意味する。絨毛膜の絨毛は絨毛膜から現れ、子宮内膜に侵入し、母胎の血液から胎児の血液へと栄養素を転送することを可能にする。絨毛膜は２層からなる：栄養芽層によって形成された外側の層、および、壁側中胚葉によって形成された内側の層であり；羊膜は後者に接している。栄養芽層は、立体またはプリズム状の細胞の内部層、ラングハンスの栄養膜細胞層または層、および、細胞境界を欠いた豊富に核が形成された原形質の外層、合胞体栄養細胞から構成されている。無血管羊膜は絨毛膜の中間層に付着している。
【００４１】
本明細書で使用されているように、「羊膜絨毛膜（ａｍｎｉｏｎ−ｃｈｏｒｉｏｎ）」は、羊膜と絨毛膜を含む産物を意味する。いくつかの実施形態では、羊膜と絨毛膜は分離していない（すなわち、羊膜は、絨毛膜の中間層に自然に付着している）。いくつかの実施形態では、羊膜は絨毛膜から最初に分離し、その後、処理中に絨毛膜と結合する。
【００４２】
＜ＵＣ産物の生成＞
いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物はＵＣ産物である。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物は：静脈または動脈を含まない単離されたＵＣ組織を含む。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物は：静脈または動脈を含まない、代謝活性を備えた細胞、活性のＨＩＶ−１、活性のＨＩＶ−２、活性のＨＴＬＶ−１、活性のＢ型肝炎、活性のＣ型肝炎、活性の西ナイルウイルス、活性のサイトメガロウイルス、活性のヒト伝染性海綿状脳症、または活性の梅毒トレポネーマ、を含まない分離されたＵＣ組織を含み、ここで、ＵＣ産物の天然の構造的な完全性は、最初の調達後に少なくとも１５日間は実質的に保存される。いくつかの実施形態において、ＵＣ産物は臍帯羊膜およびホウォートンゼリーを含む。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物におけるＨＣ−ＨＡ／ＰＴＸ３複合体の生物学的活性は、実質的に保存される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物におけるＨＣ−ＨＡ／ＰＴＸ３複合体の生物学的活性は、少なくとも１５日間は実質的に保存される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物の生物学的および構造的な完全性は、最初の調達後少なくとも２０日間は実質的に保存される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物の生物学的および構造的な完全性は、最初の調達後少なくとも２５日間は実質的に保存される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物の生物学的および構造的な完全性は、最初の調達後少なくとも３０日間は実質的に保存される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物の生物学的および構造的な完全性は、最初の調達後少なくとも３５日間は実質的に保存される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物の生物学的および構造的な完全性は、最初の調達後少なくとも４０日間は実質的に保存される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物の生物学的および構造的な完全性は、最初の調達後少なくとも４５日間は実質的に保存される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物の生物学的および構造的な完全性は、最初の調達後少なくとも５０日間は実質的に保存される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物の生物学的および構造的な完全性は、最初の調達後少なくとも５５日間は実質的に保存される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物の生物学的および構造的な完全性は、最初の調達後少なくとも６０日間は実質的に保存される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物の生物学的および構造的な完全性は、最初の調達後少なくとも９０日間は実質的に保存される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物の生物学的および構造的な完全性は、最初の調達後少なくとも１８０日間は実質的に保存される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物の生物学的および構造的な完全性は、最初の調達後少なくとも１年間は実質的に保存される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物の生物学的および構造的な完全性は、最初の調達後少なくとも２年間は実質的に保存される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物の生物学的および構造的な完全性は、最初の調達後少なくとも３年間は実質的に保存される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物の生物学的および構造的な完全性は、最初の調達後少なくとも４年間は実質的に保存される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物の生物学的および構造的な完全性は、最初の調達後少なくとも５年間は実質的に保存される。
【００４３】
さらに、本明細書では、特定の実施形態において、ＵＣ産物を生成する方法が開示され、該方法は、予め冷凍された臍帯を得る工程、および臍静脈と臍動脈を除去する工程を含み、ＵＣ産物の構造的な完全性は、処理後少なくとも１５日間は実質的に保存される。いくつかの実施形態では、実質的に全ての血液が臍帯産物から除去される。いくつかの実施形態では、臍帯は、予め冷凍された臍帯を溶かし、臍静脈と臍動脈を除去し、臍帯から実質的に全ての血液を除去することにより処理される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物の生物学的および構造的な完全性は、処理後少なくとも２０日間は実質的に保存される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物の生物学的および構造的な完全性は、処理後少なくとも２５日間は実質的に保存される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物の生物学的および構造的な完全性は、処理後少なくとも３０日間は実質的に保存される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物の生物学的および構造的な完全性は、処理後少なくとも３５日間は実質的に保存される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物の生物学的および構造的な完全性は、処理後少なくとも４０日間は実質的に保存される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物の生物学的および構造的な完全性は、処理後少なくとも４５日間は実質的に保存される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物の生物学的および構造的な完全性は、処理後少なくとも５０日間は実質的に保存される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物の生物学的および構造的な完全性は、処理後少なくとも５５日間は実質的に保存される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物の生物学的および構造的な完全性は、処理後少なくとも６０日間は実質的に保存される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物の生物学的および構造的な完全性は、処理後少なくとも９０日間は実質的に保存される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物の生物学的および構造的な完全性は、処理後少なくとも１８０日間は実質的に保存される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物の生物学的および構造的な完全性は、処理後少なくとも１年間は実質的に保存される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物の生物学的および構造的な完全性は、処理後少なくとも２年間は実質的に保存される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物の生物学的および構造的な完全性は、処理後少なくとも３年間は実質的に保存される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物の生物学的および構造的な完全性は、処理後少なくとも４年間は実質的に保存される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物の生物学的および構造的な完全性は、処理後少なくとも５年間は実質的に保存される。いくつかの実施形態では、ホウォートンゼリーの少なくとも一部は除去される。臍帯は任意の適切な供給源（例えば病院または組織バンク）から回収される。いくつかの実施形態において、臍帯は哺乳類から得られる。いくつかの実施形態では、臍帯は、ヒト、ヒト以外の霊長類、ウシまたはブタから得られる。
【００４４】
ドナーと標本の適格性が判定されるまで、臍帯産物は−８０度で維持される。いくつかの実施形態では、−８０度でＵＣ産物を保存することで、ＵＣに見られる実質的に全ての細胞を死滅させる。いくつかの実施形態では、−８０度でＵＣ産物を保存することで、ＵＣに見られる実質的に全ての細胞を死滅させるが、一方、新鮮な（すなわち、冷凍されていない）ＵＣに関するＵＣ産物の生物学的活性（例えば抗炎症性、抗瘢痕化、抗抗原性、抗癒着特性）を維持または増加させる。いくつかの実施形態では、−８０度でＵＣ産物を保存することで、ＵＣに見られる実質的に全ての細胞における代謝活性の損失を結果としてもたらす。いくつかの実施形態では、−８０度でＵＣを保存することで、ＵＣに見られる実質的に全ての細胞における代謝活性の損失を結果としてもたらすが、一方、新鮮な（すなわち、冷凍されていない）ＵＣに関するＵＣＡＭの生物学的活性（例えば抗炎症性、抗瘢痕化、抗抗原性、抗癒着特性）を維持または増加させる。いくつかの実施形態では、ＵＣは乾燥させられる。いくつかの実施形態では、ＵＣは脱水されない。
【００４５】
＜ＵＣ産物の処理＞
汚染物質がＵＣ産物へ導入されないことを保証するために、処理はすべて、細胞・組織医薬品の製造・品質管理基準（Ｇｏｏｄ  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｐｒａｃｔｉｃｅｓ）（ＧＴＰ）にしたがって行われる。
【００４６】
臍帯は、ＦＤＡに認可されたスクリーニングテストを使用して、ＨＩＶ−１、ＨＩＶ−２、ＨＴＬＶ−１、Ｂ型肝炎およびＣ型肝炎、西ナイルウイルス、サイトメガロウイルス、ヒト伝染性海綿状脳症（例えばクロイツフェルトヤコブ病）、および、梅毒トレポネーマに関してテストされる。組織がＨＩＶ−１、ＨＩＶ−２、ＨＴＬＶ−１、Ｂ型肝炎およびＣ型肝炎、西ナイルウイルス、またはサイトメガロウイルスに汚染されているという示唆は、結果として、組織標本の即時隔離およびその後の破壊に帰着する。
【００４７】
さらに、ドナーの医療記録は、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、またはＨＩＶ感染の危険因子および臨床的証拠について検査される。ドナーが、ＨＩＶ−１、ＨＩＶ−２、ＨＴＬＶ−１、Ｂ型肝炎およびＣ型肝炎、西ナイルウイルス、サイトメガロウイルス、ヒト伝染性海綿状脳症（例えばクロイツフェルトヤコブ病）および梅毒トレポネーマの危険因子および／または臨床的証拠を有しているという示唆は、結果として、組織標本の即時隔離およびその後の破壊に帰着する。
【００４８】
幾つかの実施形態において、ＵＣは冷凍されている。いくつかの実施形態では、ＵＣは冷凍されない。ＵＣが冷凍されていない場合、直ちに下記に述べられるように処理される。
【００４９】
いくつかの実施形態では、実質的に全ての血液が、ＵＣから（例えばＵＣにある任意の動脈および静脈、および、組織へ浸透した血液から）除去される。いくつかの実施形態では、実質的に全ての血液が、ＵＣが冷凍される前にＵＣから除去される。いくつかの実施形態では、血液はＵＣから除去されない。いくつかの実施形態では、血液は、ＵＣが冷凍される前にＵＣから除去されない。いくつかの実施形態では、ＵＣが冷凍された後、血液は実質的に除去される。
【００５０】
いくつかの実施形態では、臍帯組織は、余分な血液および組織を除去するために、撹拌しながら緩衝液で洗浄される。いくつかの実施形態では、臍帯組織は、余分な血液および組織を除去するために、撹拌しながら緩衝液に浸漬される。いくつかの実施形態では、攪拌しながら洗浄または浸漬することで洗浄時間が短縮される。いくつかの実施形態では、緩衝洗浄液は新しい緩衝液と交換される。いくつかの実施形態では、臍帯組織は等張液に浸漬され、かつ、該液は交換される。いくつかの実施形態では、臍帯は等張緩衝液または組織培養培地で洗浄される。いくつかの実施形態では、ＵＣは生理食塩水で洗浄される。いくつかの実施形態では、ＵＣはＰＢＳで洗浄される。いくつかの実施形態では、ＵＣは１ＸＰＢＳで洗浄される。いくつかの実施形態では、ＵＣはＴＲＩＳ緩衝生理食塩水で洗浄される。いくつかの実施形態では、ＵＣはＨＥＰＥＳ−緩衝生理食塩水で洗浄される。いくつかの実施形態では、ＵＣはリンゲル液で洗浄される。いくつかの実施形態では、ＵＣはハルトマンの溶液（Ｈａｒｔｍａｎｎ’ｓ  ｓｏｌｕｔｉｏｎ）で洗浄される。いくつかの実施形態では、ＵＣはＥＢＳＳで洗浄される。いくつかの実施形態では、ＵＣはＨＢＳＳで洗浄される。いくつかの実施形態では、ＵＣはタイロード塩類溶液（Ｔｙｒｏｄｅ’ｓ  Ｓａｌｔ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ）で洗浄される。いくつかの実施形態では、ＵＣはゲイ平衡塩類溶液（Ｇｅｙ’ｓ  Ｂａｌａｎｃｅｄ  Ｓａｌｔ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ）で洗浄される。いくつかの実施形態では、ＵＣはＤＭＥＭで洗浄される。いくつかの実施形態では、ＵＣはＥＭＥＭで洗浄される。いくつかの実施形態では、ＵＣはＧＭＥＭで洗浄される。いくつかの実施形態では、ＵＣはＲＰＭＩで洗浄される。
【００５１】
いくつかの実施形態では、ＵＣは多数のセクションへ（例えばメスを使用して）切り分けられる。セクションのサイズは、ＵＣ由来のＵＣ産物の所望の用途によって異なる。いくつかの実施形態では、臍帯のセクションは、ＵＣを切開するために長軸方向に（例えば、メスまたははさみを使用して）カットされる。いくつかの実施形態では、ＵＣのセクションは半分にカットされない。いくつかの実施形態では、ＵＣのセクションは半分にカットされる。いくつかの実施形態では、ＵＣを平らにするのを助けるために、さらなるカットがホウォートンゼリーにおいてなされる。
【００５２】
いくつかの実施形態では、カットされたＵＣ組織を、余分な血液および組織をさらに除去するために、随意に緩衝液で再度洗浄する。
【００５３】
いくつかの実施形態では、ＵＣは、任意の適切な方法（例えば、針またはピン（例えばＴピン）で固定）を使用して、基材（例えば、スタイロフォームボード）上に固定される。いくつかの実施形態では、臍帯の両端部が基材に固定される。いくつかの実施形態では、１端部のみが基材に付けられる。いくつかの実施形態では、ＵＣは、基材（例えば、吸収性タオル布、ドレープ）で安定化される。いくつかの実施形態では、ＵＣは、ＵＣの内面（例えば、ホウォートンゼリーを含む面）が上を向き、一方、外面（すなわち、ＵＣＡＭを含む面）が基材に面するように配向される。臍帯の１端部が開放されたままの場合、いくつかの実施形態では、ホウォートンゼリーの一部または全部を除去しながら、臍帯の自由端を（例えば、クランプ、止血鉗子または一組の鉗子（例えば、幅広の鋸歯状鉗子）によって）保持する。代替的に、いくつかの実施形態では、ＵＣの両端部は開放されたままにしておかれる。
【００５４】
臍帯は２つの動脈（臍動脈）および１つの静脈（臍静脈）を含む。いくつかの実施形態では、静脈と動脈はＵＣから除去される。ある実例では、静脈と動脈はホウォートンゼリーに囲まれている（または懸濁しているか、または埋め込まれている）。いくつかの実施形態では、静脈と動脈はホウォートンゼリーの除去と同時に除去される。いくつかの実施形態では、静脈と動脈は（例えば、１セットの鉗子を使用して）臍帯から剥がされる（または引っ張られる）。いくつかの実施形態では、静脈と動脈は、セクション中の臍帯から切り取られる（例えば、削られる）。いくつかの実施形態では、ロトブレーター（ｒｏｔｏｂｌａｔｏｒ）は、ホウォートンゼリーと同時に静脈と動脈を除去する。いくつかの実施形態では、脂肪吸引機が、ホウォートンゼリーと同時に静脈と動脈を除去するために利用される。いくつかの実施形態では、静脈ストリッパーが、ホウォートンゼリーと同時に静脈と動脈を除去するために利用される。いくつかの実施形態では、高圧下の液体が、ホウォートンゼリーと同時に静脈と動脈を除去する。いくつかの実施形態では、ブラシがホウォートンゼリーと同時に静脈と動脈を除去する。いくつかの実施形態では、外科的デルマトーム（ｓｕｒｇｉｃａｌ  ｄｅｒｍａｔｏｍｅ）はホウォートンゼリーと同時に静脈と動脈を除去する。
【００５５】
ＵＣ産物の所望の厚さにより、ホウォートンゼリーがどの程度除去されるかが判定される。いくつかの実施形態では、ホウォートンゼリーとＵＣＡＭの分離を促進するために、臍帯を緩衝液と接触させる。いくつかの実施形態では、ホウォートンゼリーは、層のＵＣから（例えば、１セットの鉗子、止血鉗子を使用して）剥がされる。いくつかの実施形態では、ホウォートンゼリーはセクションのＵＣから切り取られる（例えば、削られる）。いくつかの実施形態では、ロトブレーター（ｒｏｔｏｂｌａｔｏｒ）（すなわち、ダイヤモンド被覆バリを有するドリルに取り付けられたカテーテル）がホウォートンゼリーを除去するために利用される。いくつかの実施形態では、脂肪吸引機がホウォートンゼリーを除去するために利用される。いくつかの実施形態では、高圧下の液体がホウォートンゼリーを除去するために適用される。いくつかの実施形態では、ブラシがホウォートンゼリーを除去するために利用される（例えば、高速で回転する機械化されたブラシ）。いくつかの実施形態では、外科的デルマトームがホウォートンゼリーを除去するために利用される。
【００５６】
いくつかの実施形態では、ＵＣ産物は単離された臍帯羊膜（ＵＣＡＭ）を含む。ある実例では、ＵＣＡＭは、タンパク質、グリカン、タンパク質−グリカン複合体（例えばヒアルロン酸およびＩαＩとＰＴＸ３との重鎖の複合体）および組織修復を促進する酵素を含む。例えば、ＵＣＡＭの間質は成長因子、抗血管新生性および抗炎症性のタンパク質、ならびに、様々なプロテアーゼへの天然の阻害剤、を包含している。いくつかの実施形態では、ＵＣＡＭに見られるタンパク質と酵素は、ＵＣから周囲の組織へと拡散する。いくつかの実施形態では、ＵＣＡＭは、ＵＣＡＭを残して、ＵＣからホウォートンゼリーおよび臍帯の血管をすべて除去することにより単離される。いくつかの実施形態では、ホウォートンゼリーとＵＣＡＭの分離を促進するために、臍帯を緩衝液と接触させる。いくつかの実施形態では、ホウォートンゼリーは、層のＵＣから（例えば、１セットの鉗子、止血鉗子を使用して）剥がされる。いくつかの実施形態では、ホウォートンゼリーはセクションのＵＣから切り取られる（例えば、削られる）。いくつかの実施形態では、ロトブレーター（ｒｏｔｏｂｌａｔｏｒ）（すなわち、ダイヤモンド被覆バリを有するドリルに取り付けられたカテーテル）がホウォートンゼリーを除去するために利用される。いくつかの実施形態では、脂肪吸引機がホウォートンゼリーを除去するために利用される。いくつかの実施形態では、高圧下の液体がホウォートンゼリーを除去するために適用される。いくつかの実施形態では、ブラシがホウォートンゼリーを除去するために利用される（例えば、高速で回転する機械化されたブラシ）。いくつかの実施形態では、外科的デルマトームがホウォートンゼリーを除去するために利用される。いくつかの実施形態では、ＵＣＡＭは管状の臍帯から直接除去される。いくつかの実施形態では、ＵＣＡＭは臍帯から削り落とされる。いくつかの実施形態では、ＵＣＡＭは任意の適切な方法を使用して、臍帯から削り落とされる。いくつかの実施形態では、ＵＣＡＭはシェーバーまたは外科的デルマトームを使用して、臍帯から削り落とされる。実質的に純粋なＵＣＡＭが得られた後、ＵＣＡＭは余分な血液および組織を除去するために緩衝液で随意に洗われる。
【００５７】
いくつかの実施形態では、ＵＣ産物は、スキャフォールドとしてのＵＣＡＭと、スキャフォールドに一体化された複数の細胞と、を含む。いくつかの実施形態では、細胞は、胚性幹細胞、間葉幹細胞、または成体の分化系列決定幹細胞（ｌｉｎｅａｇｅ−ｃｏｍｍｉｔｔｅｄ  ｓｔｅｍ  ｃｅｌｌｓ）または分化した表皮細胞（例えば皮膚中のやけどまたは外科的切開を処置するためのもの）である。いくつかの実施形態では、細胞は、中皮細胞（例えば内臓の創傷（例えば外科的切開）を処置するためのもの）である。
【００５８】
いくつかの実施形態では、使用は、相同的な使用（例えば機能的に相同的な使用または構造的に相同な使用）である。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物は最小限に操作される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物は、水、晶質または、殺菌剤、保存料、または、保管剤（ｓｔｏｒａｇｅ  ａｇｅｎｔ）を除いて、他の品目を含まない。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物には全身性の効果はなく、主要な機能のための生細胞の代謝活性に依存しない。
【００５９】
いくつかの実施形態では、ＵＣ産物は、任意の適切な形状（例えば正方形、円、三角形、長方形）である。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物は１枚のＵＣから生成される。いくつかの実施形態では、シートは平らである。いくつかの実施形態では、シートは管状である。
【００６０】
ＵＣ産物のサイズは、ＵＣ産物の所望の用途に左右される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物は多数のセクションに切り分けられる（例えば、メスを使用）。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物は約１．０ｃｍ×約０．２５ｃｍのセクションに分割される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物は約１．０ｃｍ×約０．５ｃｍのセクションに分割される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物は約１．０ｃｍｘ約０．７５ｃｍのセクションに分割される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物は約１ｃｍ×約１ｃｍのセクションに分割される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物は約１ｃｍ×約２ｃｍのセクションに分割される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物は約１ｃｍ×約３ｃｍのセクションに分割される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物は約１ｃｍ×約４ｃｍのセクションに分割される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物は約１ｃｍ×約５ｃｍのセクションに分割される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物は約１ｃｍ×約６ｃｍのセクションに分割される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物は約２ｃｍ×約２ｃｍのセクションに分割される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物は約２ｃｍ×約３ｃｍのセクションに分割される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物は約２ｃｍ×約４ｃｍのセクションに分割される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物は約２ｃｍ×約５ｃｍのセクションに分割される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物は約２ｃｍ×約６ｃｍのセクションに分割される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物は約３ｃｍ×約３ｃｍのセクションに分割される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物は約３ｃｍ×約４ｃｍのセクションに分割される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物は約３ｃｍ×約５ｃｍのセクションに分割される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物は約３ｃｍ×約６ｃｍのセクションに分割される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物は約４ｃｍ×約４ｃｍのセクションに分割される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物は約４ｃｍ×約５ｃｍのセクションに分割される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物は約４ｃｍ×約６ｃｍのセクションに分割される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物は約５ｃｍ×約５ｃｍのセクションに分割される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物は約５ｃｍ×約６ｃｍのセクションに分割される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物は約６ｃｍ×約６ｃｍのセクションに分割される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物は約８ｃｍ×約１ｃｍのセクションに分割される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物は約８ｃｍ×約２ｃｍのセクションに分割される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物は約８ｃｍ×約３ｃｍのセクションに分割される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物は約８ｃｍ×約４ｃｍのセクションに分割される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物は約８ｃｍ×約５ｃｍのセクションに分割される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物は約８ｃｍ×約６ｃｍのセクションに分割される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物は約１０ｃｍ×約１０ｃｍのセクションに分割される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物は約１２ｃｍ×約１０ｃｍのセクションに分割される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物は約１５ｃｍ×約１０ｃｍのセクションに分割��れる。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物は約２０ｃｍ×約１０ｃｍのセクションに分割される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物は約２５ｃｍ×約１０ｃｍのセクションに分割される。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物は約３０ｃｍ×約１０ｃｍのセクションに分割される。
【００６１】
いくつかの実施形態では、残存する赤血球を実質的にすべて取り除くために、ＵＣ産物を緩衝剤と接触させる。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物を等張緩衝剤と接触させる。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物を食塩水と接触させる。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物をＰＢＳと接触させる。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物をＰＢＳ  １Ｘと接触させる。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物をリンゲル液と接触させる。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物をハルトマンの溶液と接触させる。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物をトリス緩衝食塩水と接触させる。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物をＨＥＰＥＳ緩衝食塩水と接触させる。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物をＥＢＳＳと接触させる。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物をＨＢＳＳと接触させる。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物をタイロード塩類溶液と接触させる。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物をゲイの平衡塩類溶液と接触させる。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物をＤＭＥＭと接触させる。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物をＥＭＥＭと接触させる。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物をＧＭＥＭと接触させる。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物をＲＰＭＩと接触させる。
【００６２】
いくつかの実施形態では、残存する赤血球を実質的にすべて取り除くために、ＵＣ産物を撹拌下で緩衝剤と接触させる。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物を１０分間、緩衝剤と接触させる。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物を１５分間、緩衝剤と接触させる。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物を２０分間、緩衝剤と接触させる。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物を２５分間、緩衝剤と接触させる。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物を３０分間、緩衝剤と接触させる。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物を３５分間、緩衝剤と接触させる。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物を４０分間、緩衝剤と接触させる。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物を４５分間、緩衝剤と接触させる。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物を５０分間、緩衝剤と接触させる。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物を５５分間、緩衝剤と接触させる。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物を６０分間、緩衝剤と接触させる。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物を２時間、緩衝剤と接触させる。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物を３時間、緩衝剤と接触させる。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物を４時間、緩衝剤と接触させる。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物を５時間、緩衝剤と接触させる。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物を６時間、緩衝剤と接触させる。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物を６時間、緩衝剤と接触させる。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物を１０時間、緩衝剤と接触させる。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物を１２時間、緩衝剤と接触させる。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物を１８時間、緩衝剤と接触させる。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物を２４時間、緩衝剤と接触させる。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物を２日間、緩衝剤と接触させる。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物を３日間、緩衝剤と接触させる。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物を４日間、緩衝剤と接触させる。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物を５日間、緩衝剤と接触させる。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物を６日間、緩衝剤と接触させる。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物を７日間、緩衝剤と接触させる。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物を１０日間、緩衝剤と接触させる。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物を１４日間、緩衝剤と接触させる。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物を２１日間、緩衝剤と接触させる。いくつかの実施形態では、ＵＣ産物を３０日間、緩衝剤と接触させる。いくつかの実施形態では、接触中に緩衝剤を随意に変更する（例えば、赤血球がＵＣシートから拡散する速さが遅くなる場合）。いくつかの実施形態では、マグネチックスターラーを接触中に加える。いくつかの実施形態では、マグネチックスターラーを加える（および活性化する）ことで、赤血球がＵＣシートから拡散する速度が増す。
【００６３】
＜粉砕された胎児支持組織産物を生成する処理＞
いくつかの実施形態では、単離された胎児支持組織産物は、粉砕された胎児支持組織産物を生成するために使用される。明細書において使用されるように、「粉砕された胎児支持組織産物」は、粉砕された（または切り離された）組織を含む胎児支持組織産物を意味する。いくつかの実施形態では、粉砕された胎児支持組織産物は乾燥粉末である。いくつかの実施形態では、粉砕された胎児支持組織産物はさらに、胎児支持組織粉末を担体と混ぜ合わせることにより、溶液、懸濁剤またはエマルションに加工される。いくつかの実施形態では、粉砕された胎児支持組織産物は、クリーム、ローション、軟膏、ペースト、ゲル、フィルムまたは塗布剤へと調剤される。いくつかの実施形態では、粉砕された胎児支持組織産物は、パッチまたは創傷ドレッシング材と接触する。
【００６４】
いくつかの実施形態では、単離した胎児支持組織は任意の適切な方法で粉砕される。いくつかの実施形態では、単離した胎児支持組織は、粉砕機（例えば、Ｂｅｓｓｍａｎ  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｐｕｌｖｅｒｉｚｅｒ、Ｂｉｏｓｐｅｃ  ｂｉｏｐｕｌｖｅｒｉｚｅｒ、またはＣｏｖａｒｉｓ  ＣｒｙｏＰｒｅｐ）を使用して粉砕される。いくつかの実施形態では、単離した胎児支持組織は、ホモジナイザー（例えば、Ｐｏｔｔｅｒ−ＥｌｖｅｈｊｅｍホモジナイザーまたはＷｈｅａｔｏｎ  Ｏｖｅｒｈｅａｄ  Ｓｔｉｒｒｅｒ）を使用して粉砕される。いくつかの実施形態では、単離した胎児支持組織はソニケーターを使用して粉砕される。いくつかの実施形態では、単離した胎児支持組織はビーズ破砕機（ｂｅａｄ  ｂｅａｔｅｒ）を使用して粉砕される。いくつかの実施形態では、単離した胎児支持組織は凍結粉砕装置（例えば、ＳＰＥＸ  ＳａｍｐｌｅＰｒｅｐ  Ｆｒｅｅｚｅｒ／ＭｉｌｌまたはＲｅｔｃｈ  Ｂａｌｌ  Ｍｉｌｌ）を使用して粉砕される。いくつかの実施形態では、単離した胎児支持組織は乳棒とすり鉢を用いて粉砕される。いくつかの実施形態では、単離した胎児支持組織は乳棒とすり鉢を手動で使用して粉砕される。
【００６５】
いくつかの実施形態では、単離した胎児支持組織は、粉砕される前に随意に凍結乾燥される。いくつかの実施形態では、単離した胎児支持組織は、任意の適切な方法（例えば、液体ガスにさらす、冷凍庫に入れる）によって凍結乾燥される。いくつかの実施形態では、単離した胎児支持組織は、全ての又は実質的に全ての液体（例えば水）が取り除かれるまで、凍結乾燥装置の真空槽に置かれる。いくつかの実施形態では、単離した胎児支持組織は、以下の凍結法によって凍結乾燥される（例えば、０℃、−２０℃、−４０℃、−５０℃、−６０℃、−７０℃、−７５℃、−８０℃、−９０℃、または−１００℃より低い温度にさらす）。
【００６６】
＜胎児支持組織産物の保管＞
いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は後々の使用のために保管される。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物の保管は、胎児支持組織の細胞間マトリックスの完全性を破壊しない。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は凍結乾燥される。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は任意の適切な保管媒体で保管される。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は５０％のＤＭＥＭ＋５０％のグリセロールに保管される。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または１００％のグリセロールに保管される。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または１００％のプロピレングリコールに保管される。
【００６７】
いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は、随意に基材（すなわち支えとなる裏当て）と接触する。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は基材と接触しない。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物が基材と接するように、胎児支持組織産物を配向する。いくつかの実施形態では、間質が基材と接するように、胎児支持組織産物を配向する。いくつかの実施形態では、上皮の側が基材に接するように、胎児支持組織産物を配向する。
【００６８】
いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は基材に取り付けられている。いくつかの実施形態では、基材はニトロセルロース紙（ＮＣ）である。いくつかの実施形態では、基材はナイロン膜（ＮＭ）である。いくつかの実施形態では、基材はポリエーテルスルホン膜（ＰＥＳ）である。
【００６９】
＜凍結保存＞
いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は凍結保存のために冷凍される。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物の凍結保存は、胎児支持組織の細胞間マトリックスの完全性を破壊しない。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物を液体ガス（例えば液体窒素または液体水素）にさらす。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物を液体窒素にさらす。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は液体ガスと接触しない。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物を容器に入れ、および該容器を液体ガスと接触させる。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物が凍るまで、胎児支持組織産物を液体ガスにさらす。
【００７０】
＜凍結乾燥＞
いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は凍結乾燥される。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は、凍結後に凍結乾燥される。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は、任意の適切な方法（例えば、液体ガスにさらす、冷凍庫に入れる）による凍結後に凍結乾燥される。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物を、約０℃より低い温度にさらして凍結する。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物を、約−２０℃より低い温度にさらして凍結する。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物を、約−４０℃より低い温度にさらして凍結する。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物を、約−５０℃より低い温度にさらして凍結する。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物を、約−６０℃より低い温度にさらして凍結する。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物を、約−７０℃より低い温度にさらして凍結する。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物を、約−７５℃より低い温度にさらして凍結する。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物を、約−８０℃より低い温度にさらして凍結する。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物を、約−９０℃より低い温度にさらして凍結する。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物を、約−１００℃より低い温度にさらして凍結する。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物を液体ガスにさらして凍結する。
【００７１】
いくつかの実施形態では、凍結保存された胎児支持組織産物は凍結乾燥される。いくつかの実施形態では、凍結保存された胎児支持組織産物は、全ての又は実質的に全ての液体（例えば水）が取り除かれるまで、凍結乾燥装置の真空槽に置かれる。
【００７２】
＜滅菌＞
いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物を、任意の適切な（例えば医学的に許容可能な）方法で最終滅菌にさらす。いくつかの実施形態では、凍結乾燥された胎児支持組織産物を、胎児支持組織産物を殺菌するのに十分な期間、ガンマ線にさらす。いくつかの実施形態では、凍結乾燥された胎児支持組織産物を、胎児支持組織産物を殺菌するのに十分な期間、２５  ｋＧｙのガンマ線にさらす。いくつかの実施形態では、凍結乾燥された胎児支持組織産物を、胎児支持組織産物を殺菌するのに十分な期間、電子ビームにさらす。いくつかの実施形態では、凍結乾燥された胎児支持組織産物を、胎児支持組織産物を殺菌するのに十分な期間、Ｘ線照射にさらす。いくつかの実施形態では、凍結乾燥された胎児支持組織産物を、胎児支持組織産物を殺菌するのに十分な期間、ＵＶ照射にさらす。
【００７３】
＜水分補給＞
いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物を部分的に、または完全に水分補給する。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物を緩衝剤または水と接触させることにより、胎児支持組織産物に水分を補給する。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物を等張緩衝剤と接触させる。いくつかの実施形態では、胎児支持組織を食塩水と接触させる。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物をＰＢＳと接触させる。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物をリンゲル液と接触させる。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物をハルトマンの溶液と接触させる。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物をトリス緩衝食塩水と接触させる。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物をＨＥＰＥＳ緩衝食塩水と接触させる；５０％のＤＭＥＭ＋５０％のグリセロール；１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または１００％のグリセロール；および／または１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または１００％のプロピレングリコール。
【００７４】
いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物を１０分間、緩衝剤と接触させる。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物を１５分間、緩衝剤と接触させる。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物を２０分間、緩衝剤と接触させる。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物を２５分間、緩衝剤と接触させる。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物を３０分間、緩衝剤と接触させる。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物を３５分間、緩衝剤と接触させる。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物を４０分間、緩衝剤と接触させる。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物を４５分間、緩衝剤と接触させる。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物を５０分間、緩衝剤と接触させる。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物を５５分間、緩衝剤と接触させる。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物を６０分間、緩衝剤と接触させる。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物を２時間、緩衝剤と接触させる。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物を３時間、緩衝剤と接触させる。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物を４時間、緩衝剤と接触させる。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物を５時間、緩衝剤と接触させる。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物を６時間、緩衝剤と接触させる。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物を６時間、緩衝剤と接触させる。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物を１０時間、緩衝剤と接触させる。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物を１２時間、緩衝剤と接触させる。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物を１８時間、緩衝剤と接触させる。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物を２４時間、緩衝剤と接触させる。
【００７５】
＜使用方法＞
＜複雑な創傷の処置＞
本明細書に開示されるのは、特定の実施形態において、必要としている個体の複雑な創傷を処置する方法であり、治療上有効な量の胎児支持組織産物を、個体の複雑な創傷に投与する工程を含む。いくつかの実施形態では、複雑な創傷は、潰瘍、下肢潰瘍、足潰瘍、慢性足潰瘍、または虚血性創傷である。いくつかの実施形態では、複雑な創傷は、頭皮の創傷、頭蓋の創傷、硬膜の創傷、またはそれらの組み合わせである。いくつかの実施形態では、複雑な創傷は骨の露出を含む。いくつかの実施形態では、複雑な創傷は虚血性である。いくつかの実施形態では、複雑な創傷は感染性である。いくつかの実施形態では、複雑な創傷は虚血性および感染性である。いくつかの実施形態では、該方法はさらに、複雑な創傷のデブリードマンを行う工程を含む。いくつかの実施形態では、デブリードマンは外科的デブリードマンである。いくつかの実施形態では、該方法はさらに、骨を切除する工程を含む。いくつかの実施形態では、骨の切除は、健康な骨に到達するまで行なわれる。いくつかの実施形態では、骨の切除は、壊死した又は病的な骨を実質的に取り除くために行なわれる。いくつかの実施形態では、該方法はさらに、露出した骨の皮質を切開する工程を含む。いくつかの実施形態では、皮質の切開は、骨梁骨まで皮質骨に穴をあける工程を含む。いくつかの実施形態では、該方法はさらに、創傷の治癒をモニタリングする工程を含む。いくつかの実施形態では、該方法はさらに、創傷に第２の胎児支持組織産物を投与する工程を含む。いくつかの実施形態では、該方法はさらに、露出した骨に第２の胎児支持組織産物を投与する工程を含む。いくつかの実施形態では、露出した骨に第２の胎児支持組織産物を投与する工程は、露出した骨に第２の胎児支持組織を注入する工程を含む。いくつかの実施形態では、該方法はさらに、ドレッシング材、抗菌性ドレッシング材、抗菌性アルギネートドレッシング材、圧迫ドレッシング材、メピテル創傷接触層、ガーゼ、パッチ、基材、裏当て、被覆材、包帯またはそれらの組み合わせにより胎児支持組織産物を被覆する工程を含む。いくつかの実施形態では、該方法はさらに、抗生物質、高圧酸素療法、血管再生療法、およびそれらの組み合わせから成る群から選択された処置を施す工程を含む。いくつかの実施形態では、個体は骨髄炎を患っている。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は、胎盤羊膜、臍帯、臍帯羊膜、絨毛膜、羊膜絨毛膜、胎盤、またはそれらの任意の組み合わせに由来する。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は臍帯に由来する。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は砕かれ、粉砕され、小さく分割される、移植片、粉末、ゲル、ホモジネート、抽出物、または最終滅菌された産物である。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は移植片である。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は実質的に平らなシートである。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は、ヒト、ヒト以外の霊長類、ウシ、またはブタ由来である。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は実質的に血液を含まない。
【００７６】
いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は臍帯産物である。いくつかの実施形態では、臍帯産物は臍帯羊膜を含む。いくつかの実施形態では、臍帯産物はさらにホウォートンゼリーを含む。いくつかの実施形態では、臍帯産物は実質的に血液を含まない。いくつかの実施形態では、臍帯産物は臍帯静脈および臍帯動脈を欠いている。いくつかの実施形態では、臍帯産物は、砕かれ、粉砕され、小さく分割される、移植片、粉末、ゲル、ホモジネート、または抽出物である。いくつかの実施形態では、臍帯産物は移植片である。いくつかの実施形態では、臍帯産物は実質的に平らなシートである。いくつかの実施形態では、臍帯産物は、ヒト臍帯、ヒト以外の霊長類の臍帯、ウシ臍帯、またはブタ臍帯由来である。
【００７７】
＜複雑な下肢潰瘍の処置＞
本明細書に開示されるのは、特定の実施形態において、必要としている個体の複雑な下肢潰瘍を処置する方法であり、複雑な下肢潰瘍を処置するために、治療上有効な量の胎児支持組織産物を、個体の複雑な下肢潰瘍に投与する工程を含む。いくつかの実施形態では、潰瘍は、足潰瘍、慢性潰瘍、糖尿病性足潰瘍、動脈不全潰瘍、静脈鬱滞（ＶＳ）性潰瘍、神経栄養性潰瘍、または動脈（虚血性）潰瘍である。いくつかの実施形態では、複雑な創傷は骨の露出を含む。いくつかの実施形態では、該方法はさらに、潰瘍のデブリードマンを行う工程を含む。いくつかの実施形態では、デブリードマンは外科的デブリードマンである。いくつかの実施形態では、該方法はさらに、骨を切除する工程を含む。いくつかの実施形態では、骨の切除は、健康な骨に到達するまで行なわれる。いくつかの実施形態では、骨の切除は、壊死した又は病的な骨を実質的に取り除くために行なわれる。いくつかの実施形態では、該方法はさらに、露出した骨の皮質を切開する工程をさらに含む。いくつかの実施形態では、皮質の切開は、骨梁骨まで皮質骨に穴をあける工程を含む。いくつかの実施形態では、該方法はさらに、潰瘍の治癒をモニタリングする工程を含む。いくつかの実施形態では、該方法はさらに、潰瘍に第２の胎児支持組織産物を投与する工程を含む。いくつかの実施形態では、該方法はさらに、露出した骨に第２の胎児支持組織産物を投与する工程を含む。いくつかの実施形態では、露出した骨に第２の胎児支持組織産物を投与する工程は、露出した骨に第２の胎児支持組織を注入する工程を含む。いくつかの実施形態では、該方法はさらに、ドレッシング材、抗菌性ドレッシング材、抗菌性アルギネートドレッシング材、圧迫ドレッシング材、メピテル創傷接触層、ガーゼ、パッチ、基材、裏当て、被覆材、包帯、またはそれらの組み合わせにより、胎児支持組織産物を被覆する工程を含む。いくつかの実施形態では、該方法はさらに、抗生物質、高圧酸素療法、血管再生治療、およびそれらの組み合わせから成る群から選択された処置を施す工程を含む。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は、胎盤羊膜、臍帯、臍帯羊膜、絨毛膜、羊膜絨毛膜、胎盤、またはそれらの任意の組み合わせに由来する。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は臍帯に由来する。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は砕かれ、粉砕され、小さく分割される、移植片、粉末、ゲル、ホモジネート、抽出物、または最終滅菌された産物である。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は移植片である。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は実質的に平らなシートである。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は、ヒト、ヒト以外の霊長類、ウシ、またはブタ由来である。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は実質的に血液を含まない。
【００７８】
いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は臍帯産物である。いくつかの実施形態では、臍帯産物は臍帯羊膜を含む。いくつかの実施形態では、臍帯産物はさらにホウォートンゼリーを含む。いくつかの実施形態では、臍帯産物は実質的に血液を含まない。いくつかの実施形態では、臍帯産物は臍帯静脈および臍帯動脈を欠いている。いくつかの実施形態では、臍帯産物は、砕かれ、粉砕され、小さく分割される、移植片、粉末、ゲル、ホモジネート、または抽出物である。いくつかの実施形態では、臍帯産物は移植片である。いくつかの実施形態では、臍帯産物は実質的に平らなシートである。いくつかの実施形態では、臍帯産物は、ヒト臍帯、ヒト以外の霊長類の臍帯、ウシ臍帯、またはブタ臍帯由来である。
【００７９】
＜二分脊椎の処置＞
二分脊椎は、脊柱、および脊髄のまわりの膜の不完全な閉鎖に関する神経管の先天的欠損症である。二分脊椎は、潜在性の二分脊椎または嚢胞性の二分脊椎に分類することができる。潜在性二分脊椎は、１つ以上の脊椎骨が適切に形成されない、二分脊椎の最も軽い形態であり、通常はくぼみ、房状の毛、または背中の赤あざなどとして目に見える形で現われるのみである。嚢胞性二分脊椎はより重篤な形態であり、髄膜を含む嚢胞（髄膜瘤）、髄膜と脊髄の両方を含む嚢胞（髄膜脊髄瘤）、または脊髄のみ（脊髄瘤、あるいは脊髄裂として知られる）のいずれかの形態をとる。
【００８０】
本明細書に開示されるのは、特定の実施形態において、必要としている個体の二分脊椎を修復する方法であり、欠損を修復するために、治療上有効な量の臍帯産物を個体の二分脊椎の欠損に投与する工程を含む。いくつかの実施形態では、二分脊椎の欠損は二分脊椎の嚢胞性の欠損である。いくつかの実施形態では、二分脊椎の嚢胞性の欠損は、髄膜瘤の欠損、髄膜脊髄瘤の欠損、または脊髄瘤の欠損である。いくつかの実施形態では、個体は子宮内の胎児または新生児である。いくつかの実施形態では、個体は子宮内の胎児である。いくつかの実施形態では、臍帯産物は定位置で縫合される。いくつかの実施形態では、修復は、上皮と真皮と皮下の層を再生成する工程を含む。いくつかの実施形態では、臍帯産物を投与する工程は、子宮内外科手術を含む。いくつかの実施形態では、臍帯産物を投与する工程は、生後１２、２４または４８時間以内に行われる外科手術を含む。
【００８１】
いくつかの実施形態では、臍帯産物は臍帯羊膜を含む。いくつかの実施形態では、臍帯産物はさらにホウォートンゼリーを含む。いくつかの実施形態では、臍帯産物は実質的に血液を含まない。いくつかの実施形態では、臍帯産物は臍帯静脈および臍帯動脈を欠いている。いくつかの実施形態では、臍帯産物は、砕かれ、粉砕され、小さく分割される、移植片、シート、粉末、ゲル、ホモジネート、または抽出物である。いくつかの実施形態では、臍帯産物は移植片である。いくつかの実施形態では、臍帯産物は実質的に平らなシートである。いくつかの実施形態では、臍帯産物は、無菌で加工される、または最終滅菌される。いくつかの実施形態では、臍帯産物は、ヒト臍帯、ヒト以外の霊長類の臍帯、ウシ臍帯、またはブタ臍帯由来である。
【００８２】
＜肉芽組織からの瘢痕形成の低減または予防＞
本明細書に開示されるのは、特定の実施形態において、必要としている個体の肉芽組織からの瘢痕形成を低減または予防する方法であり、瘢痕形成を低減または予防するために、治療上有効な量の胎児支持組織産物を、個体の肉芽組織に投与する工程を含む。いくつかの実施形態では、肉芽組織は傷ついた組織の治癒中に生じる。いくつかの実施形態では、傷ついた組織は、やけど、創傷、損傷、潰瘍または外科手術に起因する。いくつかの実施形態では、傷ついた組織は、皮膚、骨、筋肉、腱、軟骨、靱帯、軟組織または関節である。いくつかの実施形態では、該方法はさらに、傷ついた組織の治癒をモニタリングする工程を含む。いくつかの実施形態では、該方法はさらに、肉芽組織に第２の胎児支持組織産物を投与する工程を含む。いくつかの実施形態では、該方法はさらに、ドレッシング材、抗菌性ドレッシング材、抗菌性アルギネートドレッシング材、圧迫ドレッシング材、メピテル創傷接触層、ガーゼ、パッチ、基材、裏当て、被覆材、包帯、またはそれらの組み合わせにより、胎児支持組織産物を被覆する工程を含む。
【００８３】
いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は、胎盤羊膜、臍帯、臍帯羊膜、絨毛膜、羊膜絨毛膜、胎盤、またはそれらの組み合わせに由来する。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は砕かれ、粉砕され、小さく分割される、移植片、粉末、ゲル、ホモジネート、抽出物、または最終滅菌された産物である。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は移植片である。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は実質的に平らなシートである。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は、ヒト、ヒト以外の霊長類、ウシ、またはブタ由来である。いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は実質的に血液を含まない。
【００８４】
いくつかの実施形態では、胎児支持組織産物は臍帯産物である。いくつかの実施形態では、臍帯産物は臍帯羊膜を含む。いくつかの実施形態では、臍帯産物はさらにホウォートンゼリーを含む。いくつかの実施形態では、臍帯産物は実質的に血液を含まない。いくつかの実施形態では、臍帯産物は臍帯静脈および臍帯動脈を欠いている。いくつかの実施形態では、臍帯産物は、砕かれ、粉砕され、小さく分割される、移植片、粉末、ゲル、ホモジネート、または抽出物である。いくつかの実施形態では、臍帯産物は移植片である。いくつかの実施形態では、臍帯産物は実質的に平らなシートである。いくつかの実施形態では、臍帯産物は、ヒト臍帯、ヒト以外の霊長類の臍帯、ウシ臍帯、またはブタ臍帯由来である。
【実施例】
【００８５】
＜実施例１：潜在的な骨髄炎を有する患者の複雑な足潰瘍の治療を促すための、凍結保存された臍帯の単一施設での遡及的研究＞
【００８６】
鋭器を用いたデブリードマン、病気に冒された骨の切除、皮質切開、および凍結保存された臍帯（ｃＵＣ）の適用によって、同じ外科医により単一の創傷治療センターにおいて処置された骨髄炎の確定された病理組織学的診断を有する、３３の複雑な足潰瘍を示す３１人の患者の治癒を評価するために、遡及的な調査を行った。
【００８７】
＜方法＞
＜臨床データ検索＞
この遡及的な調査は、３１人の適格患者の関連する全ての臨床データを取り込み、確証し、その後に分析するために、Ｉｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ  Ｒｅｖｉｅｗ  Ｂｏａｒｄ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｂａｒｎａｂａｓ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｙｓｔｅｍ（Ｗｅｓｔ  Ｏｒａｎｇｅ，ＮＪ）による承認後に実施され、これは、慢性的で複雑な足潰瘍の創傷治癒の促進におけるｃＵＣの安全性と有効性を判定するために、Ｗｏｕｎｄ  Ｃａｒｅ  Ｃｅｎｔｅｒ  ａｔ  Ｃｌａｒａ  Ｍａａｓｓ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｃｅｎｔｅｒにおいて、２０１３年１月から２０１４年１２月の間に、同じ外科医によって行われた。臨床データは、人口学的情報、糖尿病、高血圧症、末梢血管疾患、腎臓病および心疾患などの併存症を含む過去および現在の病歴、前処置および事前の切断を含んだ。骨、腱、筋肉または関節襄の露出、創傷領域（ｃｍ２）、創傷位置、軟組織感染症および虚血の存在を確証することにより、指標潰瘍の程度を評価するために、特別な注意が払われた。加えて、追跡期間全体にわたって潰瘍の変化を立証するために、創傷の測定値および写真の評価に関してデータも検索された。
【００８８】
＜対象患者＞
全ての対象患者は、露出した骨、腱、筋肉または関節襄を示した、慢性的な非治癒性の足潰瘍を患っていた。これらの複雑な創傷はすべて、リンパ球または形質細胞を含む骨組織の、陽性微生物培養および組織病理学的証拠を有した骨生検によって確定された骨髄炎の臨床診断に関連していた。
【００８９】
＜標準的な評価および管理＞
全面的な最初の医学評価に続いて、すべての患者が、骨髄炎により複雑化した潰瘍を示し、それは持続期間が３週以上であり、幅は２ｃｍより大きく、深さは３ｍｍより大きく、骨プローブ（ｐｒｏｂｅ−ｔｏ−ｂｏｎｅ）陽性または骨の露出であった。感染症の診察を受けるために患者が紹介され、同時にベースラインＸ線、および全血珠算定、Ｃ反応性タンパク質、赤血球沈降速度およびアルカリホスファターゼを含む血液検査を得た。末梢血管疾患の疑われる患者もまた、血管の診察のために紹介された。骨壊死を示すＸ線写真の証拠と共に、骨髄炎の臨床的な疑いの高い（すなわち、白血球数、Ｃ反応性タンパク質、赤血球沈降速度またはアルカリホスファターゼの上昇）、顕著な血管を除去された患者は、以下の処置を直ちに受けることになった：手術室で、全ての潰瘍は鋭器を用いた外科的デブリードマンを受け、および外科医によって医学的に必要であると考えられた場合は、壊死した骨が切除された。足の前部の潰瘍の患者については、物性に基づいて、健康な骨に達するまで骨切除を行なった。足の中部および後部の潰瘍については、病的な骨組織の大部分を切除すると同時に、可能な限り長い長さを残すことを意図して、「段階的な」方法で骨切除を行った。切除に続いて、微生物培養および骨髄炎を組織病理学的に確定するためのサンプルを得るために、骨生検を行った。病的な骨の完全除去を確実にするための、また体系的な抗生物質投与の期間を導き出すための病理学的分析のために、臨床的に健康な骨と推定された骨の小幅（〜２ｍｍ）をさらに得て、提出した。その後、露出した骨は、６−２ｋ−ワイヤーまたは外科的デブリードマン器具（Ｍｉｓｏｎｉｘ．Ｉｎｃ．，Ｆａｒｍｉｎｇｄａｌｅ，ＮＹ）のいずれかを使用して、皮質骨からその下にある骨梁骨まで、〜３（創傷のサイズに応じて）の等距離にある穴を作るために、皮質切開術を受けた。これにより、前述の修復を助けるための、多能性成体前駆幹細胞へのアクセスが可能になった。次に、露出した外科的創傷を、組織接着剤（Ｉｎｄｅｒｍｉｌ（登録）ｔｉｓｓｕｅ  ａｄｈｅｓｉｖｅ，Ｕｎｉｔｅｄ  Ｓｔａｔｅｓ  Ｓｕｒｇｉｃａｌ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，ＣＴ）またはステープラーのいずれかを用いて適所に保った１層のｃＵＣ（ＮＥＯＸ（登録商標）ＣＯＲＤ  １Ｋ，Ａｍｎｉｏｘ  Ｍｅｄｉｃａｌ，Ｉｎｃ．，Ａｔｌａｎｔａ，ＧＡ）によって完全に覆った。その後、全ての創傷を、標準的な非粘着性のドレッシング材（Ｘｅｒｏｆｏｒｍ  ｄｒｅｓｓｉｎｇ，ＤｅＲｏｙａｌ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．，Ｐｏｗｅｌｌ，ＴＮ）、続いて圧迫ドレッシング材（ＣｏｂａｎＴＭ  ２  ｌａｙｅｒ  ｃｏｍｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｓｙｓｔｅｍ，３Ｍ，Ｃｏ．，Ｓｔ．Ｐａｕｌ，ＭＮ）および負荷を軽減する様々な方法で被覆した。すべての患者は、骨培養の結果によって続く細菌特異的な抗生物質の投与を導き出すことができるようになるまで、まずは経口の広範囲抗生物質を受けとった。足の前部の潰瘍の患者は、骨縁の組織病理学的結果を待つ間に、最初の２週間の抗生物質レジメンにより退院した。骨生検に併発がなかった場合は、抗生物質を中止したが、縁が明瞭ではなかった場合は、抗生物質治療をさらに４−６週間継続した。足の中央または後部の足骨髄炎を有する患者は、６−８週間の連続的なＩＶ抗生物質により退院した。
【００９０】
すべての患者は、臨床的に安定すると病院から退院し、ドレッシング材の交換を含む週１回の創傷モニタリングのために創傷クリニックに戻り、その後、高定着のためのスルファジアジン銀（Ｓｉｌｖａｄｅｎｅ（登録商標），Ｐｆｉｚｅｒ  Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ＮＹ）の付加を伴う上記の標準的治療が行われた。創傷の進行が失速したと思われれば、さらなるｃＵＣの適用が与えられ、その期間に、鋭器を用いたデブリードマン、および骨皮質の切開がさらに行なわれた。患者は、治験担当外科医／ＰＩが指示した場合、高圧酸素療法および血管再生治療などの他の処置を受けた。
【００９１】
＜評価項目＞
創傷領域は、創傷の長さと幅を測定するために定規を使用して判定された。完全な創傷治癒は、治験責任医師によって判定される１００％の再上皮形成として定義された。完全な治癒に達した創傷について、最初の創傷閉鎖を達するために必要とされる総時間を評価した。創傷閉鎖に加えて、最初の創傷領域と、閉鎖に達するのに要する時間の関係を、前述したように最初の創傷領域を四分位値に細分することにより評価した。平均創傷領域および創傷閉鎖に達するまでの平均時間を、非対応ｔ検定を用いて四分位値間で比較した；グループ間のｐ値＜０．０５を、統計的に有意であると見なした。
【００９２】
＜結果＞
患者は、糖尿病、高血圧症、末梢血管疾患、腎不全および冠動脈疾患を含む多数の併存症を患っていた。潰瘍はほぼ虚血性であり、および半分以上は壊疽にかかっており、いくつかには事前の部分的切断と血管再生の試みが行われた。潰瘍の平均サイズは１５．６±１７．７ｃｍ２（０．４−７３．９５ｃｍ２）であった。全体として、２６の創傷が完全閉鎖に達した（７８．８％）。５人の患者が追跡不能となり、１人の患者が処置の過程で亡くなったが処置に関連した死とは考えられず、結果として追跡不能とならなかった患者におけるｃＵＣの平均１．２４の適用による治癒率は９６．３％であった。１６の潰瘍は診察時に切断が推奨されたが、２人の患者は切断を要することなく、ｃＵＣを使用して完全な創傷閉鎖を達成し、１人の患者は最終的に下肢切断を受け、および残りの１３の創傷は部分的な指切除を受けた。
【００９３】
＜臨床徴候＞
３３の足潰瘍を示す合計３１人の患者が、試験への包含のために特定された。彼らの臨床データの概要は表１で提供される。２６人の男性と５人の女性がおり、平均年齢は５８．３±１２．９歳であった。処置された患者の大部分は白人（１２／３１）またはアフリカ系アメリカ人（１０／３１）であった。全体として、これらの患者は多数の併存症を引き起こし、それらのうち最も有意なものは、糖尿病（２６／３１）、高血圧症（２３／３１）、末梢血管疾患（１６／３１）、腎不全（１２／３１）および冠動脈疾患（９／３１）であった。加えて、２４／３３の創傷（７２．２％）は、病気に冒された四肢において虚血性と臨床的に判断され、および１７／３３の創傷（５１．５％）は冒された四肢に壊疽を有した。
【００９４】
【表１】
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【００９５】
試験に包含された全ての潰瘍は、３週より長く、最大１年７ヶ月まで持続する、慢性的で非治癒性の創傷だった。ｃＵＣの適用時点において、全ての創傷に対する平均創傷領域は、１５．６±１７．７ｃｍ２（０．４−７３．９５ｃｍ２）であった。最初の診察時に、９／３３の潰瘍（２７．３％）は足の後部であり、２１／３３の潰瘍（６３．６％）は主として指に関係する足の前部であり、１つの潰瘍は足底であり、および２つの潰瘍は非治癒性のショパール切断部位であった。３３すべての潰瘍は、露出した腱、筋肉、関節襄または骨を伴う「複雑な」ものとみなされ、および２７／３３の潰瘍（８１．８％）は、４つすべての組織の露出を示した。加えて、全ての患者は、骨髄および陽性の微生物培養における炎症細胞の存在を組織病理学的に示した、骨生検によって確定された骨髄炎の診断を有した。３３の創傷のうち１６（４８．５％）には、いずれかの委託医師によって切断が推奨された。
【００９６】
＜ｃＵＣの適用後の創傷治癒＞
３３のすべての複雑な潰瘍は、鋭器を用いたデブリードマン、生検による壊死した骨の切除、皮質の切開、およびｃＵＣの適用受け、合併症はなかった。合計２６の創傷が、完全な上皮形成により立証されたように、完全な創傷閉鎖を達成し、結果として７８．８％の全体的な治癒率をもたらした。ｃＵＣの最初の適用に続いて、５人の患者はｃＵＣ適用後の追跡が不可能になり、試験産物との関連は考えられない原因により１人の患者が亡くなった。追跡不能とならなかった２７の創傷については、全体的な治癒率は９６．３％だった。完全に治癒した２６の創傷については、創傷閉鎖までの平均時間は１６．０±９．３週（範囲：４−４４週間）であった（図２）。治癒した２６の創傷のうちの２１は、ｃＵＣの適用を１回受け、残りの５の創傷は、治癒に達するためにｃＵＣの２回目の適用を要し、その２回目の適用は、最初の適用後４−１０週間の間に行われた。非治癒性の創傷を伴った患者は、創傷合併症および他の併存症により、下腿切断を受けた。
【００９７】
最初の創傷領域が、完全な創傷閉鎖に達するまでの時間に何らかの影響を有するかどうかを判定するために、創傷は最初の領域に基づいて、それぞれ２．２±０．９、５．８±１．６、１３．８±３．９、および４３．０±２３．１ｃｍ２の、４つの四分位値に分けられた（０−２５％、２５−５０％、５０−７５％および７５−１００％）（図３Ａ）。予想通り、これらの４つの四分位値には、創傷サイズ間の統計的な違いがあった。しかしながら、創傷閉鎖を達する平均時間は似通っており、それら間に統計的有意差はないことがわかった。（図３Ｂ）。
【００９８】
診察時に、１６の潰瘍には切断が推奨されたが、２人の患者は切断を要することなく、ｃＵＣを使用して完全な創傷閉鎖に成功した。上述のように、１人の患者（６．２５％）は１回のｃＵＣの適用後に、最終的には下腿切断を受けた。残りの１３の創傷は、最初に推奨されたよりも少ない程度の、部分的な指切除を受けた。
【００９９】
＜代表的症例＞
＜症例研究＃１：壊疽を伴う第２および第３中足骨の創傷＞
ある５２歳の女性は、タイプＩＩ糖尿病、糖尿病性神経障害、末梢血管疾患、末期腎臓病、高血圧症、高コレステロール血症および冠動脈疾患を含む、複数の併存症を示した。彼女は、病院の感染症部門によって紹介され、第２および第３指の切断を推奨されると共に、露出した筋肉、腱、靱帯および壊疽のある骨を伴った左の第２および第３中足骨の前足潰瘍を示した。鋭器を用いたデブリードマン、骨切除、骨生検および皮質切開術に続いて、完全に指標潰瘍を覆うためにｃＵＣを適用した。骨生検は、骨髄炎の診断を確定した。６週目には、創傷のサイズはおよそ５０％まで減少した。７週目には、創傷治癒の進行が止まっていることがわかり、２回目のｃＵＣの適用を、デブリードマンおよび皮質切開外科手術の後に行った。１２週目には、指標潰瘍は、切断を要することなく完全な上皮形成に成功し、第２および第３番指の両方を救った。３２週の全追跡期間にわたり、再発は起こらなかった。
【０１００】
＜症例研究＃２：４回目の趾列切断後の創傷＞
糖尿病、蜂巣炎および虚血を有する５７歳の男性は、露出した骨、腱、筋肉および靱帯を伴う左の４番目の足指切断後に、開放創傷を示した。鋭器を用いたデブリードマン、骨切除、骨生検および皮質切開術の後、完全に創傷を被覆するためにｃＵＣを適用した。適用後４日と２週目では、血液でいっぱいになったｃＵＣを観察することができた。しかしながら、ｃＵＣの残りは創傷床を被覆する適所に残され、創傷の治癒は続き、１３週までに完全な再上皮形成を達成した。
【０１０１】
＜症例研究＃３：１回目の趾列切断＞
タイプＩ糖尿病と末梢血管疾患の病歴のある６３歳の男性は、１回目の趾列切断後に、中足部に開放創傷を示した。骨髄炎に加えて、病気に冒された肢に壊疽があった。鋭器を用いたデブリードマン、骨切除、骨生検および皮質切開術の後、創傷をｃＵＣで覆った。７週目には、創傷の大きさは４４％の減少を見せた。９週目には、さらなるｃＵＣの適用を、鋭器を用いたデブリードマンおよび皮質切開外科手術の後に行った。指標創傷は、１１週目には改善を示し続け、続いて１５週目には完全な治癒に至った。２８週目には、創傷は再発することなく治癒状態を保った。
【０１０２】
＜実施例２：出生前の二分脊椎修復のための、凍結保存されたヒト臍帯（ＨＵＣ）対バイオセルロースフィルム（ＢＳＣＦ）＞
レチン酸（ＲＡ）ラットモデルの二分脊椎（ＳＢ）病変上に縫合された２つのパッチ、ＨＵＣおよびＢＣＦを、体内に生じた細胞の再生の内部成長および関連する炎症性反応について比較した。
【０１０３】
妊娠し時間の経過したＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットに、子におけるＳＢを誘発するために、妊娠１０日（ＧＤ１０）にＲＡ（４０ｍｇ／ｋｇ）をチューブで投与した。開腹術と子宮切開をＧＤ２０に行い、ＨＵＣ（ｎ＝１１）またはＢＣＦ（ｎ＝１０）を脊柱の欠損上に縫合した。病変上に縫合せずに羊膜腔内に配置したパッチを対照とした。移植後３０−３４時間で、子が生まれ、ホルマリン固定された。Ｈ＆Ｅおよびトリクローム染色で、パッチ内への細胞の移動を評価した。免疫組織化学を行い、細胞の移動の性質を実証した。評価された体内に生じた細胞マーカーは、ＣＫ  ５／６（上皮）、ＧＦＡＰ（アストロサイト）およびｖＷＦ（内皮）であった。炎症性マーカーはＣＤ３（リンパ球）、ＭＰＯ（好中球）およびＦ４−８０（マクロファージ）であった。全てのパッチおよび周囲の滲出液の４つの高倍率視野（ｈｐｆ）を評価し、およびＩｍａｇｅ−Ｊソフトウェアを用いて細胞の量を計った。
【０１０４】
子の生存率は同等であった：ＨＵＣ  ８／１１、ＢＣＦ  ７／１０（ｐ＝０．９）。組織像は、ＢＣＦパッチでは細胞移動が見られなかった（図；ｐ＜０．００１）のに対し、病変上に適用された全てのＨＵＣパッチでは細胞移動を示した（中央値：３８［範囲：１３−１０２］細胞／ｈｐｆ）。ＣＫ  ５／６陽性細胞は、ＨＵＣパッチ表面上に移動しているのが見られた（４−７細胞／ｈｐｆ）：ＧＦＡＰ陽性細胞は、病変に隣接するＨＵＣパッチの表面上に見られた（３−１１細胞／ｈｐｆ）；ｖＷＦ陽性細胞はＨＵＣパッチ内に見られた（５−１５細胞／ｈｐｆ）。Ｎｏ  ＣＫ  ５／６、ＧＦＡＰまたはｖＷＦ陽性細胞はＢＣＦパッチ内には見られなかった（ｐ＝０．０３）。ＨＵＣパッチは最小のＭＰＯ（２％［０−７％］）、ＣＤ３（７％［３−１２％］）およびＦ４−８０（０％）陽性細胞を示した。ＨＵＣで処置された子の滲出液は、ＢＣＦと比較してより少ないＭＰＯ（０％［０−９％］対１７％［０−３９％］；ｐ＜０．０１）およびＣＤ３（７％［０−１３％］対１５％［０−２２％］；ｐ＜０．０１）陽性細胞を有し、およびＦ４−８０における差を示さなかった。ＨＵＣとＢＣＦの対照パッチは共に、浸潤を実証しなかった。
【０１０５】
＜実施例３：子宮内での脊髄裂修復のための、凍結保存されたヒト臍帯＞
【０１０６】
本明細書に記載されるのは、２３週間の妊娠において子宮内での二分脊椎修復を受けたキアリＩＩ奇形を有する、大きな腰仙の脊髄裂の症例である。皮膚の欠損を、髄膜層の１次閉鎖に続いて、凍結保存されたヒト臍帯パッチを使用して閉鎖した。妊娠は合併症を伴わず、３７週目に選択的な帝王切開によって出産が行われた。修復部位は無傷であり、皮膚の髄液漏を示す証拠はなかった。皮膚は、出産後４週間をかけてパッチの中へと再生した。キアリＩＩ奇形の完全な反転、正常な側脳室、下肢の正常な知覚反応および運動反応、正常な排尿時膀胱尿道造影があった。
【０１０７】
２１歳のＧ１Ｐ０−０−０は、２１  ６／７週の妊娠において胎児の脊髄裂を有し、可能性のある子宮内での二分脊椎修復のために、Ｆｅｔａｌ  Ｃｅｎｔｅｒ  ａｔ  Ｃｈｉｌｄｒｅｎ’ｓ  Ｍｅｍｏｒｉａｌ  Ｈｅｒｍａｎｎ  Ｈｏｓｐｉｔａｌに紹介された。超音波とＭＲＩの両方を用いた評価では、皮膚の欠損はＬ３レベルからＳ４まで拡がり、識別可能な髄膜の嚢はなかった。病変の全体寸法は１．６ｃｍ×２．７ｃｍであった。上後腸骨棘は欠損を通じて顕著だった。彼女は、４６ＸＸ核型の発見物、中央値の８．２５倍の上昇した母体血清α胎児タンパク質、および陽性のアセチルコリンエステラーゼを用いた羊水穿刺を受けた。胎児のＭＲＩは、Ｃ２−Ｃ３レベルまでの大槽と第四脳室の抹消および小脳扁桃のヘルニア形成を伴うグレードＩＩＩのキアリＩＩ奇形を示した。左側脳室を測定すると７．１ｍｍであり、右側脳室は８．１ｍｍであった。下肢は両方ともによい動きをし、弯足はなかった。患者は、子宮内での二分脊椎修復に関するＭａｎａｇｅｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｍｙｅｌｏｍｅｎｉｎｇｏｃｅｌｅ  Ｓｔｕｄｙ（ＭＯＭＳ）の全てを満たした。皮膚縁と上後腸骨棘との関係を伴う脊髄裂の大きなサイズゆえに、皮膚を被覆するためにパッチを使用する必要を討議した。患者には、Ｆｅｔａｌ  Ｔｈｅｒａｐｙ  Ｂｏａｒｄ  ａｎｄ  ｔｈｅ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ  Ｒｅｖｉｅｗ  Ｂｏａｒｄ  ａｔ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｔｅｘａｓ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｓｃｈｏｏｌ（Ｈｏｓｕｔｏｎ，ＴＸ）の承認後に、通常のＡｌｌｏｄｅｒｍ（登録商標）の代替としてＨＵＣパッチが提供された。
【０１０８】
妊娠の２４週間では、外科手術はＭＯＭ研究プロトコルと同様に実施された。手短に言えば、患者は全身麻酔下で開腹術を受け、続いて子宮を露出させた。二分脊椎病変が子宮切開の可能性のある部位に近くなるように、胎児を位置づけた。子宮への侵入は、２つの全層の支持縫合の間で行われた。切り込みは吸収性ステープル（Ｃｏｖｉｄｉｅｎ，Ｄｕｂｌｉｎ，Ｉｒｅｌａｎｄ）を使用して広げられた。胎児の二分脊椎の欠損部位を露出させた。フォーリーカテーテルを介して、ナフシリン１ｇ／Ｌと共に乳酸リンゲル液を連続的に子宮に注入した。フェンタニル２０μｇ／ｋｇおよび麻痺薬（ベクロニウム４００μｇ／ｋｇ）から成る胎児麻酔を、筋肉内に投与した。欠損は、上後腸骨棘が突き出て、髄膜層が病変の縁を越えて延びている脊髄裂であると確定された。皮膚病変を測定すると、５ｃｍ×６ｃｍであった。切開は髄膜と皮膚の接合部で行われた。髄膜層は筋膜から切開され、および６−Ｏ  Ｍｏｎｏｃｒｙｌ縫合糸（Ｅｔｈｉｃｏｎ，Ｓｏｍｅｒｖｉｌｌｅ，ＮＪ）を使用して主要な入口の中線において閉鎖された。皮膚縁は、６−Ｏ  Ｍｏｎｏｃｒｙｌ縫合糸を使用し、連続ロッキング（パッチに向かって）法により、周辺でＨＵＣパッチに縫合された。胎児の位置を子宮内で変えた。子宮腔を再び満たすために、羊膜腔内灌注を行なった。子宮の切開を、０−Ｏ  Ｐｒｏｌｅｎｅ縫合糸を用いて、縁に再接近するために多数の支持縫合および連続縫合によって閉鎖した。開腹は通常の方法で閉鎖された。手術後に、患者は平穏無事な経過を経て、手術後の５日目に退院して帰宅した。出生後の経過は合併症を伴わなかった。毎週の超音波検査では、病変部位が厚さ３−４ｍｍの組織で覆われているのがわかった。脊髄の後部、および修復部位の組織の下に、液体で満たされた空間があった。
【０１０９】
妊娠の３７  １／７週において、患者は選択的な帝王切開による分娩を行った。病変部位は完全に覆われ、皮膚の脳脊髄液漏の跡は見られなかった。パッチは半透明であり、その下に透明な液体が見えた；パッチを通して硬膜の閉鎖を見ることができた。欠損のサイズは６ｃｍ×５ｃｍであった。大泉門は柔らかかった；頭囲は３３．５ｃｍであった。脚の全ての近位筋群に均斉の取れた５／５の力があった。当初はわずかに右の背屈力低下がみられたが、退院時には改善していた。痛覚試験（ｐｉｎ  ｔｅｓｔｉｎｇ）に対する知覚は、全ての腰椎の真皮節、Ｓ１および周産期の範囲で見られた。排尿時膀胱尿道造影は正常であり、排尿後の残留量は＜５ｍｌであった。新生児は、予防策として２週間、下部脊椎を高くした状態で背臥位に配置された。合間の期間に、皮膚から移植片への急速な再生があった。創傷治療は、毎日の非粘着性ドレッシング材の交換を含んだ。
【０１１０】
１日目に、パッチは末梢における脈管質の増加により不透明になった。７日目に、末梢縁において血管新生および上皮形成が継続していた。パッチの中心上に置かれた１層のフィブリンがあった。１４日目に、フィブリンで覆われた維管束組織のある欠損の下側部２ｃｍ×１．５ｃｍを除いて、欠損の完全な上皮形成があった。角質生成は、末梢から欠損の中心部分、上皮で覆われた組織へと進んでいることがわかった。２１日目には、上皮形成と角質生成に囲まれた１ｃｍ×１ｃｍの肉芽組織の中央領域があった。２８日目には、依然として上皮形成が成されている３×５ｍｍの領域を除いて、皮膚は角質生成により完全に治癒した。
【０１１１】
頭部超音波およびＭＲＩを２１日目に行なった。外科手術に先立って、後脳ヘルニア形成の徴候と一致する左小脳半球の萎縮性変化を伴う、キアリＩＩ奇形の完全な反転があった。側脳室を測定したところ正常範囲内であった。欠損部位を覆う４−５ｍｍの組織橋があった。再生成された皮膚には、液体で満たされた空間はなかった。脊髄および包膜層の後部に流体空間があった。Ｔ１／Ｔ２強調像は低密度の線維組織を示し、修復の上側端部の脊髄から、脊椎管の後部包膜被膜の間の係留を示唆した。係留した癒合の厚さは、Ｌ３のレベルにおいて１ｍｍであった。円錐体（ｃｏｎｕｓ）はＬ４のレベルで終端となった。円錐体の係留はなかった。後部脊柱の構成要素の癒合不全はＬ２−Ｓ１において見られた。欠損に重なる皮膚は無傷であり、皮下の管ははっきりと見えなかった。
【０１１２】
新生児は、２２日目に退院し帰宅した。退院時の頭囲は３３ｃｍのままであり、大泉門は柔らかく舟状の形状であった。下肢は正常に動いた。新生児の尿流動態検査は正常範囲内であり、および肛門反射は正常であった。
【０１１３】
この症例では、パッチの主目的は、脊髄と羊水との間に耐水性の有効なバリアを生成することであり、これは成功した。ＨＵＣパッチはさらに、出生時に、キアリＩＩ奇形の反転および下肢神経機能の保存を示した。子宮内での上皮形成と角質生成の欠如は、驚くべき発見であった。さらに、分娩後の血管新生、上皮形成および角質生成の急速な内部成長は並外れており、我々はそれを毎日のように証明することができた。パッチおよび硬膜の閉鎖との間の脳脊髄液の存在、および前部大泉門の変動性の実証は、不完全な髄膜封着の可能性を裏付ける。しかしながら、パッチの完全な修復の後、ＭＲＩでは修復部位と髄膜との間に流体空間は見られなかった。これは水密性の治癒を裏付ける。
【０１１４】
＜実施例４＞：ｃＵＣの製造工程
ｃＵＣは、細胞・組織医薬品の製造・品質管理基準（ｃＧＴＰ）に従って、ドナーの適格性および胎盤／へその緒の適合性を判定した後に、提供されたヒト胎盤組織から無菌的に処理される。
【０１１５】
出荷された組織の受領に際し、出荷用容器は指定の冷凍庫に保管される。
【０１１６】
凍結した組織は、処理のために解凍される。ＵＣは胎盤から単離し、および切開されている。動脈、静脈およびホウォートンゼリーの一部、すなわち欠損に関係するものが、ＡＭおよび残りのホウォートンゼリーを残して、除去される。血液は、溶液に浸してかき回すことによって、および手動で優しく除去することによって、取り除かれる。
【０１１７】
組織を、指定の商品サイズになるように切る。
【０１１８】
組織の各ユニットは、１回の適用に対して無菌の透明なプラスチックピールの小袋が１つになるように、保管媒体に無菌的に包装される。
【０１１９】
＜実施例５：肉芽組織中の瘢痕形成を低減または予防するための、胎児支持組織産物の使用＞
肉芽組織を示す創傷を有する個体を特定する。胎児支持組織産物を調製する。胎児支持組織産物を肉芽組織に適用する。保護被覆材を、胎児支持組織産物上に配置する。
【０１２０】
＜実施例６：歯肉の創傷を修復するための胎児支持組織産物の使用＞
歯肉の創傷の修復を必要とする個体を特定する。胎児支持組織産物を調製する。必要に応じて創傷のデブリードを行う。胎児支持組織産物を創傷上に配置する。保護被覆材を、胎児支持組織産物上に配置する。
【０１２１】
＜実施例７：損傷を受けた関節腔を修復するための胎児支持組織産物の使用
損傷を受けた関節腔の修復を必要とする個体を特定する。胎児支持組織産物を調製する。関節腔を整える。胎児支持組織産物を関節腔上に配置する。保護被覆材を、胎児支持組織産物上に配置する。
【０１２２】
＜実施例８：複雑な足潰瘍を処置するための胎児支持組織産物の使用
複雑な足潰瘍を患う個体を特定する。胎児支持組織産物を調製する。必要に応じて潰瘍のデブリードを行う。必要に応じて骨を切除する。随意に、皮質切開術を行なう。胎児支持組織産物を潰瘍上に配置する。保護被覆材を、胎児支持組織産物上に配置する。
【０１２３】
＜実施例９：黒色腫の除去後の、軟組織と骨に関する放射線による創傷の、凍結保存された臍帯（ｃＵＣ）処置＞
患者は、腎多嚢胞病のための腎移植手術、および最も最近では頭皮の黒色腫の病歴のある８７歳の男性であった。外科的切除は、癌が骨に達していることを明らかにした。黒色腫が脳に隣接していたため、外科的にその全てを切除することは不可能であり、したがって患者は放射線治療を受けた。放射線は結果として、頭蓋の壊死、および露出した脳硬膜を伴う重大な創傷をもたらした。
【０１２４】
４×３ｃｍのｃＵＣ移植片（Ｎｅｏｘ１ｋ；ＮＸ−１０−４０３０）を、６つの小片に切り、創傷上にアスタリスクの形状で配置し、非粘着ドレッシング材（Ａｄａｐｔｉｃ  ｔｏｕｃｈ）で覆った。４週間以内に移植片は同化し、および傷床は粒状になり始めた。ｃＵＣ移植片の最初の適用の１６週間後に、１００ｍｇの微粒子状の組織（ＣＲ−ＦＬ−１００ｍｇ；Ｃｌａｒｉｘ  Ｆｌｏ）を、頭蓋縁における進行を刺激するために、骨に注入した。最初のｃＵＣ適用から２１週間で、進行は上皮形成および頭蓋縁の両方で見られた。したがって、この創傷を完全な治癒へと前進させるために、さらに１００ｍｇの微粒子のｃＵＣ（Ｃｌａｒｉｘ  Ｆｌｏ）を骨に注入し、および第２の４×３ｃｍのｃＵＣ組織移植片（ＮＸ−１０−４０３０）を、創傷の縁に沿って配置した。
【０１２５】
この症例研究は、ｃＵＣ特有の治癒性能を実証した。有意に、この患者の年齢、損なわれた腎機能、および放射線被曝は、極めて挑戦的な創傷環境を作り出した。しかしながら、創傷へのｃＵＣの導入は、創傷の軟組織を完全な治癒へと前進させるだけでなく、骨の再生を刺激する性能があることを示し、これは新規性のある所見であった。
【０１２６】
本発明の好ましい実施形態が本明細書に示され、記載されたが、そのような実施形態が単なる例として提供されていることは、当業者にとって明白だろう。多くの変形、変更、および置換が、本発明から逸脱することなく、当業者に想到されるであろう。本明細書に記載される本発明の実施形態の様々な代案が、本発明の実施において利用され得ることを理解されたい。以下の特許請求の範囲が本発明の範囲を定義し、これらの特許請求の範囲内の方法および構造およびそれらの同等物がそれによって包含されることが意図されている。
【図１】
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【図２】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【国際調査報告】
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