(57)【要約】脊髄性筋萎縮症（ＳＭＡ）を治療するための組成物および方法が本明細書に開示される。特定の実施形態において、ＳＭＮ２遺伝子による運動ニューロン（ＳＭＮ）タンパク質産生の完全長生存を増加させる化合物が提供される。【選択図】図１Ａ、図１Ｂおよび図１Ｃ
2019509272.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＳＭＮタンパク質安定剤およびＳＭＮ２転写エンハンサーを含む組成物。
【請求項２】
前記ＳＭＮタンパク質安定剤が、式Ｉの式：
【化１】
2019509272.tif 000073
（式中、
Ｘは、炭素または窒素からなる群から選択され、
Ｙは、炭素または窒素からなる群から選択され、
Ｚは、硫黄または酸素からなる群から選択され、
Ｒ１は、水素、アルキル、アルコキシ、ハロゲン、ハロアルキル、およびアミノアルキルから選択され、
Ｒ２は、非置換または置換アリールおよび非置換または置換ヘテロアリールから選択される）
を有する化合物、またはそのプロドラッグを含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記ＳＭＮタンパク質安定剤が、
【化２】
2019509272.tif 000074
【化３】
2019509272.tif 000075
【化４】
2019509272.tif 000076
【化５】
2019509272.tif 000077
からなる群から選択される、請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
前記ＳＭＮタンパク質安定剤が、
【化６】
2019509272.tif 000078
である、請求項２に記載の組成物。
【請求項５】
前記ＳＭＮタンパク質安定剤が、式ＩＩＩの式：
【化７】
2019509272.tif 000079
（式中、
環Ａ’’は、置換されていてもよいフェニル、窒素である１〜３個のヘテロ原子を有する５〜６員の単環式ヘテロアリール環、または窒素、酸素、もしくは硫黄から独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を有する８〜１０員の二環式ヘテロアリール環から選択され、
環Ｂ’’は、窒素、酸素、または硫黄から独立して選択される１〜２個のヘテロ原子を有する、置換されていてもよい５〜６員のヘテロアリール環であり、
Ｌ３は、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−であり、
各々のＲ４は、ハロゲンまたは置換されていてもよいＣ１−６脂肪族であり、
ｄは、０〜５であり、
Ｒ５は、Ｃ１−６直鎖もしくは分枝アルキルまたは置換されているＣ３−６脂環式であり、ここでＣ３−６脂環式は少なくとも１つのヒドロキシル基で置換されている）
を有する化合物またはその薬学的に許容される塩である、請求項１に記載の組成物。
【請求項６】
前記ＳＭＮタンパク質安定剤が、
【化８】
2019509272.tif 000080
【化９】
2019509272.tif 000081
からなる群から選択される構造を有する、請求項５に記載の組成物。
【請求項７】
前記ＳＭＮタンパク質安定剤が、
【化１０】
2019509272.tif 000082
からなる群から選択される構造を含む、請求項５に記載の組成物。
【請求項８】
前記ＳＭＮ２転写エンハンサーが、式（ＩＶ）の式：
【化１１】
2019509272.tif 000083
（式中、
Ｒ２およびＲ３の各々は独立してハロゲン、Ｒ’、−ＯＲ’であり、
ｂは１〜５であり、
Ｘ１は、−Ｃ（Ｒｘ）２−、−ＮＲｘ−、−ＮＲｘＣ（Ｒｘ）２−または−ＯＣ（Ｒｘ）２−であり、
Ｘ２は、−Ｃ（Ｒｘ）２−または−ＮＲｘ−であり、
各々のＲｘは独立してＲ’、−（Ｃ１−６脂肪族）−Ｎ（Ｒ’）２、または−（Ｃ１−６脂肪族）−ＯＲ’であり、
各々のＲ’は独立して−Ｒ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ、−ＣＯ２Ｒ、もしくは−ＳＯ２Ｒであるか、または同じ窒素上の２つのＲ’はそれらの介在する原子と一緒になって、窒素、酸素および硫黄から独立して選択される１〜２個のヘテロ原子を有する３〜７員の複素環を形成し、
各々のＲは、水素、またはＣ１−６脂肪族、フェニル、３〜７員の飽和もしくは部分不飽和炭素環、８〜１０員の二環式飽和、部分不飽和もしくはアリール炭素環、窒素、酸素もしくは硫黄から独立して選択される１〜３個のヘテロ原子を有する５〜６員の単環式ヘテロアリール環、窒素、酸素もしくは硫黄から独立して選択される１〜２個のヘテロ原子を有する３〜７員の飽和もしくは部分不飽和複素環、窒素、酸素もしくは硫黄から独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を有する８〜１０員の二環式飽和もしくは部分不飽和複素環、または窒素、酸素もしくは硫黄から独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を有する８〜１０員の二環式ヘテロアリール環から選択される置換されていてもよい基である）
を有する化合物またはその薬学的に許容される塩である、請求項１に記載の組成物。
【請求項９】
前記ＳＭＮ転写エンハンサーが、
【化１２】
2019509272.tif 000084
【化１３】
2019509272.tif 000085
【化１４】
2019509272.tif 000086
【化１５】
2019509272.tif 000087
【化１６】
2019509272.tif 000088
からなる群から選択される構造を有する、請求項８に記載の組成物。
【請求項１０】
前記ＳＭＮタンパク質安定剤が、
【化１７】
2019509272.tif 000089
の構造を有し、
前記ＳＭＮ転写エンハンサーが、
【化１８】
2019509272.tif 000090
の構造を有する、請求項１に記載の組成物。
【請求項１１】
前記ＳＭＮタンパク質安定剤が、
【化１９】
2019509272.tif 000091
の構造を有し、
前記ＳＭＮ転写エンハンサーが、
【化２０】
2019509272.tif 000092
の構造を有する、請求項１に記載の組成物。
【請求項１２】
請求項１に記載の組成物を投与する工程を含む、それを必要とする対象における脊髄性筋萎縮症を治療する方法。
【請求項１３】
前記組成物が、経口、皮下、および腹腔内からなる群から選択される方法によって投与される、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
ＳＭＮ２スプライシング化合物およびＳＭＮ２転写エンハンサーを含む組成物。
【請求項１５】
前記スプライシング化合物が、ＳＭＮ−Ｃ２、ＮＶＳ−ＳＭ２ヌシネルセン、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１４に記載の組成物。
【請求項１６】
前記ＳＭＮ２転写エンハンサーが、式（ＩＶ）の式：
【化２１】
2019509272.tif 000093
（式中、
Ｒ２およびＲ３の各々は、独立してハロゲン、Ｒ’、−ＯＲ’であり、
ｂは、１〜５であり、
Ｘ１は、−Ｃ（Ｒｘ）２−、−ＮＲｘ−、−ＮＲｘＣ（Ｒｘ）２−または−ＯＣ（Ｒｘ）２−であり、
Ｘ２は、−Ｃ（Ｒｘ）２−または−ＮＲｘ−であり、
各々のＲｘは、独立して、Ｒ’、−（Ｃ１−６脂肪族）−Ｎ（Ｒ’）２、または−（Ｃ１−６脂肪族）−ＯＲ’であり、
各々のＲ’は、独立して、−Ｒ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ、−ＣＯ２Ｒ、もしくは−ＳＯ２Ｒであるか、または同じ窒素上の２つのＲ’はそれらの介在原子と一緒になって、窒素、酸素および硫黄から独立して選択される１〜２個のヘテロ原子を有する３〜７員の複素環を形成し、
各々のＲは、水素、またはＣ１−６脂肪族、フェニル、３〜７員の飽和もしくは部分不飽和炭素環、８〜１０員の二環式飽和、部分不飽和もしくはアリール炭素環、窒素、酸素、もしくは硫黄から独立して選択される１〜３個のヘテロ原子を有する５〜６員の単環式ヘテロアリール環、窒素、酸素、もしくは硫黄から独立して選択される１〜２個のヘテロ原子を有する３〜７員の飽和もしくは部分不飽和複素環、窒素、酸素、もしくは硫黄から独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を有する８〜１０員の二環式飽和もしくは部分不飽和複素環、または窒素、酸素、もしくは硫黄から独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を有する８〜１０員の二環式ヘテロアリール環から選択される置換されていてもよい基である）
を有する化合物、またはその薬学的に許容される塩である、請求項１４に記載の組成物。
【請求項１７】
前記ＳＭＮ転写エンハンサーが、
【化２２】
2019509272.tif 000094
【化２３】
2019509272.tif 000095
【化２４】
2019509272.tif 000096
【化２５】
2019509272.tif 000097
【化２６】
2019509272.tif 000098
からなる群から選択される構造を有する、請求項１６に記載の組成物。
【請求項１８】
ＳＭＮタンパク質安定剤をさらに含む、請求項１４に記載の組成物。
【請求項１９】
前記ＳＭＮタンパク質安定剤が、式Ｉの式：
【化２７】
2019509272.tif 000099
（式中、
Ｘは、炭素または窒素からなる群から選択され、
Ｙは、炭素または窒素からなる群から選択され、
Ｚは、硫黄または酸素からなる群から選択され、
Ｒ１は、水素、アルキル、アルコキシ、ハロゲン、ハロアルキル、およびアミノアルキルから選択され、
Ｒ２は、非置換または置換アリールおよび非置換または置換ヘテロアリールから選択される）
を有する化合物を含む、請求項１８に記載の組成物。
【請求項２０】
前記ＳＭＮタンパク質安定剤が、
【化２８】
2019509272.tif 000100
【化２９】
2019509272.tif 000101
【化３０】
2019509272.tif 000102
【化３１】
2019509272.tif 000103
からなる群から選択される、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２１】
前記ＳＭＮタンパク質安定剤が、
【化３２】
2019509272.tif 000104
である、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２２】
前記ＳＭＮタンパク質安定剤が、式ＩＩＩの式：
【化３３】
2019509272.tif 000105
（式中、
環Ａ’’は、置換されていてもよいフェニル、窒素である１〜３個のヘテロ原子を有する５〜６員の単環式ヘテロアリール環、または窒素、酸素、もしくは硫黄から独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を有する８〜１０員の二環式ヘテロアリール環から選択され、
環Ｂ’’は、窒素、酸素、または硫黄から独立して選択される１〜２個のヘテロ原子を有する、置換されていてもよい５〜６員のヘテロアリール環であり、
Ｌ３は、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−であり、
各々のＲ４は、ハロゲンまたは置換されていてもよいＣ１−６脂肪族であり、
ｄは、０〜５であり、
Ｒ５は、Ｃ１−６直鎖もしくは分枝アルキルまたは置換されているＣ３−６脂環式であり、ここでＣ３−６脂環式は少なくとも１つのヒドロキシル基で置換されている）
を有する化合物、またはその薬学的に許容される塩である、請求項１８に記載の組成物。
【請求項２３】
前記ＳＭＮタンパク質安定剤が、
【化３４】
2019509272.tif 000106
【化３５】
2019509272.tif 000107
からなる群から選択される構造を有する、請求項２２に記載の組成物。
【請求項２４】
前記ＳＭＮタンパク質安定剤が、
【化３６】
2019509272.tif 000108
からなる群から選択される構造を含む、請求項２２に記載の組成物。
【請求項２５】
請求項１４に記載の組成物を投与する工程を含む、それを必要とする対象における脊髄性筋萎縮症を治療する方法。
【請求項２６】
ＳＭＮタンパク質安定剤およびＳＭＮ２スプライシング化合物を含む組成物。
【請求項２７】
前記ＳＭＮタンパク質安定剤が、式Ｉの式：
【化３７】
2019509272.tif 000109
（式中、
Ｘは、炭素または窒素からなる群から選択され、
Ｙは、炭素または窒素からなる群から選択され、
Ｚは、硫黄または酸素からなる群から選択され、
Ｒ１は、水素、アルキル、アルコキシ、ハロゲン、ハロアルキル、およびアミノアルキルから選択され、
Ｒ２は、非置換または置換アリールおよび非置換または置換ヘテロアリールから選択される）
を有する化合物、またはそのプロドラッグを含む、請求項２６に記載の組成物。
【請求項２８】
前記ＳＭＮタンパク質安定剤が、
【化３８】
2019509272.tif 000110
【化３９】
2019509272.tif 000111
【化４０】
2019509272.tif 000112
【化４１】
2019509272.tif 000113
からなる群から選択される、請求項２７に記載の組成物。
【請求項２９】
前記ＳＭＮタンパク質安定剤が、
【化４２】
2019509272.tif 000114
である、請求項２７に記載の組成物。
【請求項３０】
前記ＳＭＮタンパク質安定剤が、式ＩＩＩの式：
【化４３】
2019509272.tif 000115
（式中、
環Ａ’’は、置換されていてもよいフェニル、窒素である１〜３個のヘテロ原子を有する５〜６員の単環式ヘテロアリール環、または窒素、酸素、もしくは硫黄から独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を有する８〜１０員の二環式ヘテロアリール環から選択され、
環Ｂ’’は、窒素、酸素、または硫黄から独立して選択される１〜２個のヘテロ原子を有する、置換されていてもよい５〜６員のヘテロアリール環であり、
Ｌ３は、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−であり、
各々のＲ４は、ハロゲンまたは置換されていてもよいＣ１−６脂肪族であり、
ｄは、０〜５であり、
Ｒ５は、Ｃ１−６直鎖もしくは分枝アルキルまたは置換されているＣ３−６脂環式であり、ここでＣ３−６脂環式は少なくとも１つのヒドロキシル基で置換されている）
を有する化合物、またはその薬学的に許容される塩である、請求項２６に記載の組成物。
【請求項３１】
前記ＳＭＮタンパク質安定剤が、
【化４４】
2019509272.tif 000116
【化４５】
2019509272.tif 000117
からなる群から選択される構造を有する、請求項３０に記載の組成物。
【請求項３２】
前記ＳＭＮタンパク質安定剤が、
【化４６】
2019509272.tif 000118
からなる群から選択される構造を含む、請求項３０に記載の組成物。
【請求項３３】
前記スプライシング化合物が、ＳＭＮ−Ｃ２、ＮＶＳ−ＳＭ２ヌシネルセン、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項２６に記載の組成物。
【請求項３４】
ＳＭＮ遺伝子置換療法と、ＳＭＮタンパク質安定剤およびＳＭＮ２スプライシング化合物のうちの少なくとも１つを含む組成物とを投与する工程を含む、それを必要とする対象における脊髄性筋萎縮症を治療する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
政府支援の声明
本発明は、国立衛生研究所により授与されたＨＤ０６４８５０およびＮＳ０８８５２２の下で政府の支援によりなされた。米国政府は本発明において特定の権利を有する。
【０００２】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１６年２月２３日に出願された米国仮特許出願第６２／２９８，６８９号、および２０１６年６月１７日に出願された米国仮特許出願第６２／３５１，７７３号に対する優先権を主張し、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【０００３】
開示の分野
本開示は、脊髄性筋萎縮症の治療または重症度の軽減に有用な薬学的に活性な化合物およびそれらの組み合わせに関する。
【背景技術】
【０００４】
脊髄性筋萎縮症（ＳＭＡ）は、脊髄における前角細胞の機能喪失から生じる神経学的障害であり、進行性の運動衰弱、筋肉疲労、および麻痺として現れる。ＳＭＡは、生存運動ニューロン（ＳＭＮ）タンパク質の不十分なレベルによって引き起こされる。染色体５ｑ１３上のＳＭＮ遺伝子座は、ＳＭＮ１およびＳＭＮ２と呼ばれるＳＭＮの２つの逆位コピーを含む。ＳＭＡのほとんどの症例は、ＳＭＮ１遺伝子のホモ接合性欠失を有し、ＳＭＮ２の少なくとも１つのコピーを保持する。約１／４０の保因率で、ＳＭＡは乳児死亡率の最も頻繁な遺伝的原因であると推定される。
【０００５】
ＳＭＮ２は、同じ予測アミノ酸コード能力を有するＳＭＮ１の遺伝子重複である。ＳＭＮ１およびＳＭＮ２のヌクレオチド配列はほとんど同一である。決定的な相違点は、エクソン７における＋６位でのＣからＴへの遷移であり、これはこれらの遺伝子のスプライシングパターンに劇的に影響を及ぼす。９０％を超えるＳＭＮ１転写産物はエクソン７を含むが、ＳＭＮ２転写産物においてエクソン７を含むのは１５％未満である。この選択的スプライシング産物は、ＳＭＮタンパク質の切断された不安定な形態を生成する。ＳＭＮ２転写産物におけるエクソン７の含有の増加は、より高レベルの全長ＳＭＮタンパク質をもたらし、特に、全長ＳＭＮ２  ｍＲＮＡの量をちょうど２倍にすることは、臨床的に有意であり得る。全長ＳＭＮ２  ｍＲＮＡの量を増加させる処置は、増加したレベルのＳＭＮタンパク質を生じるはずである。ＳＭＡを治療するための候補薬物は、（ｉ）ＳＭＮ２遺伝子からのＳＭＮタンパク質発現の細胞レベルを有意に増加させ；（ｉｉ）マウスにおいて一貫した（およびヒトについて予測される）血漿および脳曝露を与え；そして（ｉｉｉ）ＳＭＡマウスモデルにおいて有効であるべきであると考えられる。この前提に基づいて、全長エクソン７を含むＳＭＮ２転写産物の増加を検出できるｉｎ  ｖｉｖｏスクリーニングが開発された。
【０００６】
ＳＭＡのための現在の治療ストラテジーは、大部分が、全長（野生型）ＳＭＮタンパク質レベルの上昇、エクソン７含有に対するスプライシングの調節、野生型タンパク質の安定化、およびより少ない程度ではあるが、栄養補助を提供することによって、または骨格筋萎縮を阻害することによって、ＳＭＡにおける筋機能を回復することに集中している。運動ニューロン喪失および筋萎縮に至る機構は依然として不明であるが、この疾患の動物モデルの利用可能性はこの分野において急速に知見を増加させている（非特許文献１；非特許文献２；非特許文献３；非特許文献４）。また、ＳＭＮタンパク質の機能は依然として部分的に未知であり、研究により、それがｍＲＮＡ代謝（非特許文献５；非特許文献６）、およびおそらく神経筋接合部へのタンパク質／ｍＲＮＡの輸送（非特許文献７；非特許文献８；非特許文献９；非特許文献１０）に関与し得ることが示されている。
【０００７】
したがって、脊髄性筋萎縮症を治療するための新規薬物が必要とされている。ＳＭＮレポーターは、例えば、ＳＭＮ２の転写の増加、ＳＭＮ２  ｍＲＮＡにおけるエクソン７の含有量の増加、ＳＭＮ２  ｍＲＮＡの安定性の増加、および完全長ＳＭＮタンパク質の分解の減少を含む機構を介して、完全長ＳＭＮタンパク質のレベルを増加させるタンパク質因子および化合物を同定し、特徴付けるための手段として使用され得る。この細胞に基づくＳＭＮ−ルシフェラーゼレポーターアッセイを使用してＳＭＮタンパク質を増加させる化合物を同定するための高スループットシステムからの結果が本明細書に記載される。したがって、本開示は、脊髄性筋萎縮症の治療または重症度の軽減に有用な化合物、ならびにこれらの化合物の組み合わせを提供する。本開示はまた、本開示の化合物または組成物を、脊髄性筋萎縮症に罹患しやすい患者または脊髄性筋萎縮症を有する患者に投与することを含む、脊髄性筋萎縮症を治療または脊髄性筋萎縮症の重症度を軽減する方法を提供する。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】Ｆｒｕｇｉｅｒ  Ｔら、（２０００）  Ｈｕｍ  Ｍｏｌ．  Ｇｅｎｅｔ．９：８４９−５８
【非特許文献２】Ｍｏｎａｎｉ  Ｕ  Ｒら、（２０００）  Ｈｕｍ  Ｍｏｌ  Ｇｅｎｅｔ  ９：３３３−９
【非特許文献３】Ｈｓｉｅｈ−Ｌｉ  Ｈ  Ｍら、（２０００）  Ｎａｔ  Ｇｅｎｅｔ  ２４：６６−７０
【非特許文献４】Ｊａｂｌｏｎｋａ  Ｓら、（２０００）  Ｈｕｍ  Ｍｏｌ．Ｇｅｎｅｔ．９：３４１−６
【非特許文献５】Ｍｅｉｓｔｅｒ  Ｇら、（２００２）  Ｔｒｅｎｄｓ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．１２：４７２−８
【非特許文献６】Ｐｅｌｌｉｚｚｏｎｉ  Ｌら、（２００２）  Ｓｃｉｅｎｃｅ．２９８：１７７５−９
【非特許文献７】Ｃｉ−ｆｕｅｎｔｅｓ−Ｄｉａｚ  Ｃら、（２００２）  Ｈｕｍ  Ｍｏｌ．Ｇｅｎｅｔ．１１：１４３９−４７
【非特許文献８】Ｃｈａｎ  Ｙ  Ｂら、（２００３）  Ｈｕｍ  Ｍｏｌ．Ｇｅｎｅｔ．１２：１３６７−７６
【非特許文献９】ＭｃＷｈｏｒｔｅｒ  Ｍ  Ｌら、（２００３）  Ｊ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．１６２：９１９−３１
【非特許文献１０】Ｒｏｓｓｏｌｌ  Ｗら、（２００３）  Ｊ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．１６３：８０１−８１２
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本開示は概して、単独でまたはＳＭＡの治療のために知られている他の薬物と組み合わせた化合物、該化合物を含む組成物、ならびに化合物および組成物を利用する脊髄性筋萎縮症（ＳＭＡ）の治療のための方法に関する。特定の実施形態では、ＳＭＮ２遺伝子による運動ニューロン（ＳＭＮ）タンパク質産生の完全長生存を増加させる化合物、およびそのプロドラッグが提供される。
【００１０】
したがって、一態様では、本開示は、ＳＭＮタンパク質安定剤およびＳＭＮ２転写エンハンサーを含む組成物に関する。いくつかの実施形態では、ＳＭＮタンパク質安定剤は、式（Ｉ）の式を有する化合物である：
【化１】
2019509272.tif 000003
式中、
Ｘは、炭素または窒素からなる群から選択され、
Ｙは、炭素または窒素からなる群から選択され、
Ｚは、硫黄または酸素からなる群から選択され、
Ｒ１は、水素、アルキル、アルコキシ、ハロゲン、ハロアルキルおよびアミノアルキルから選択され、
Ｒ２は、非置換または置換アリールおよび非置換または置換ヘテロアリールから選択される。
【００１１】
他の実施形態では、ＳＭＮタンパク質安定剤は、式（ＩＩＩ）の式を有する化合物またはその薬学的に許容される塩である：
【化２】
2019509272.tif 000004
式中、
環Ａ’’は、置換されていてもよいフェニル、窒素である１〜３個のヘテロ原子を有する５〜６員の単環式ヘテロアリール環、または窒素、酸素、もしくは硫黄から独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を有する８〜１０員の二環式ヘテロアリール環から選択され、
環Ｂ’’は、窒素、酸素、または硫黄から独立して選択される１〜２個のヘテロ原子を有する、置換されていてもよい５〜６員のヘテロアリール環であり、
Ｌ３は、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−であり、
各々のＲ４は、ハロゲンまたは置換されていてもよいＣ１−６脂肪族であり、
ｄは、０〜５であり、
Ｒ５は、Ｃ１−６直鎖もしくは分枝アルキルまたは置換されているＣ３−６脂環式であり、ここでＣ３−６脂環式は少なくとも１つのヒドロキシル基で置換されている。さらに他の実施形態では、ＳＭＮタンパク質安定剤は、式（Ｉ）および（ＩＩＩ）の化合物のプロドラッグを含む。
【００１２】
ＳＭＮ２転写エンハンサーは概して、式（ＩＶ）の式を有する化合物またはその薬学的に許容される塩である：
【化３】
2019509272.tif 000005
式中、
Ｒ２およびＲ３の各々は独立してハロゲン、Ｒ’、−ＯＲ’であり、
ｂは１〜５であり、
Ｘ１は、−Ｃ（Ｒｘ）２−、−ＮＲｘ−、−ＮＲｘＣ（Ｒｘ）２−または−ＯＣ（Ｒｘ）２−であり、
Ｘ２は、−Ｃ（Ｒｘ）２−または−ＮＲｘ−であり、
各々のＲｘは独立してＲ’、−（Ｃ１−６脂肪族）−Ｎ（Ｒ’）２、または−（Ｃ１−６脂肪族）−ＯＲ’であり、
各々のＲ’は独立して−Ｒ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ、−ＣＯ２Ｒ、もしくは−ＳＯ２Ｒであるか、または同じ窒素上の２つのＲ’はそれらの介在する原子と一緒になって、窒素、酸素および硫黄から独立して選択される１〜２個のヘテロ原子を有する３〜７員の複素環を形成し、各々のＲは、水素、またはＣ１−６脂肪族、フェニル、３〜７員の飽和もしくは部分不飽和炭素環、８〜１０員の二環式飽和、部分不飽和もしくはアリール炭素環、窒素、酸素もしくは硫黄から独立して選択される１〜３個のヘテロ原子を有する５〜６員の単環式ヘテロアリール環、窒素、酸素もしくは硫黄から独立して選択される１〜２個のヘテロ原子を有する３〜７員の飽和もしくは部分不飽和複素環、窒素、酸素もしくは硫黄から独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を有する８〜１０員の二環式飽和もしくは部分不飽和複素環、または窒素、酸素もしくは硫黄から独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を有する８〜１０員の二環式ヘテロアリール環から選択される置換されていてもよい基である。
【００１３】
別の態様では、本開示は、必要とする対象における脊髄性筋萎縮症を治療する方法に関する。この方法は、上記のＳＭＮタンパク質安定剤およびＳＭＮ２転写エンハンサーを含む組成物を投与する工程を含む。
【００１４】
さらに別の態様では、本開示は、ＳＭＮ２スプライシング化合物およびＳＭＮ２転写エンハンサーを含む組成物に関する。ＳＭＮ２転写エンハンサーは概して、上記の式（ＩＶ）を有する化合物を含む。いくつかの実施形態では、ＳＭＮ２スプライシング化合物は、次式を有するＳＭＮ−Ｃ２である：
【化４】
2019509272.tif 000006
【００１５】
別の実施形態では、ＳＭＮ２スプライシング化合物は、次式を有するＮＶＳ−ＳＭ２である：
【化５】
2019509272.tif 000007
さらに別の実施形態では、ＳＭＮ２スプライシング化合物は、ヌシネルセン（ａｌｌ−Ｐ−ａｍｂｏ−２’−Ｏ−（２−メトキシエチル）−５−メチル−Ｐ−チオウリジルイル−（３’→５’）−２’−Ｏ−（２−メトキシエチル）−５−メチル−Ｐ−チオシチジルイル−（３’→５’）−２’−Ｏ−（２−メトキシエチル）−Ｐ−チオアデニルイル−（３’→５’）−２’−Ｏ−（２−メトキシエチル）−５−メチル−Ｐ−チオシチジルイル−（３’→５’）−２’−Ｏ−（２−メトキシエチル）−５−メチル−Ｐ−チオウリジルイル−（３’→５’）−２’−Ｏ−（２−メトキシエチル）−５−メチル−Ｐ−チオウリジルイル−（３’→５’）−２’−Ｏ−（２−メトキシエチル）−５−メチル−Ｐ−チオウリジルイル−（３’→５’）−２’−Ｏ−（２−メトキシエチル）−５−メチル−Ｐ−チオシチジルイル−（３’→５’）−２’−Ｏ−（２−メトキシエチル）−Ｐ−チオアデニルイル−（３’→５’）−２’−Ｏ−（２−メトキシエチル）−５−メチル−Ｐ−チオウリジルイル−（３’→５’）−２’−Ｏ−（２−メトキシエチル）−Ｐ−チオアデニルイル−（３’→５’）−２’−Ｏ−（２−メトキシエチル）−Ｐ−チオアデニルイル−（３’→５’）−２’−Ｏ−（２−メトキシエチル）−５−メチル−Ｐ−チオウリジルイル−（３’→５’）−２’−Ｏ−（２−メトキシエチル）−Ｐ−チオグアニルイル−（３’→５’）−２’−Ｏ−（２−メトキシエチル）−５−メチル−Ｐ−チオシチジルイル−（３’→５’）−２’−Ｏ−（２−メトキシエチル）−５−メチル−Ｐ−チオウリジルイル−（３’→５’）−２’−Ｏ−（２−メトキシエチル）−Ｐ−チオグアニルイル−（３’→５’）−２’−Ｏ−（２−メトキシエチル）グアノシン）であり、ＳＰＩＮＲＡＺＡ（商標）として市販されている。
【００１６】
さらに別の態様では、本開示は、必要とする対象における脊髄性筋萎縮症を治療する方法に関する。この方法は、本明細書に記載されるＳＭＮ２スプライシング化合物およびＳＭＮ２転写エンハンサーを含む組成物を投与する工程を含む。
【００１７】
別の態様では、本開示は、必要とする対象における脊髄性筋萎縮症を治療する方法に関する。この方法は、ＳＭＮタンパク質安定剤およびＳＭＮ２スプライシング化合物のうちの少なくとも１つを含む組成物を投与することと組み合わせて、ＳＭＮ遺伝子置換療法を投与する工程を含む。ＳＭＮタンパク質安定剤は概して、式（Ｉ）もしくは（ＩＩＩ）の式を有する化合物、または上記のそれらのプロドラッグを含む。ＳＭＮ２転写エンハンサーは概して、上記の式（ＩＶ）を有する化合物を含む。ＳＭＮ遺伝子置換療法は、化合物ＡＶＸＳ−１０１を含むことができる。
【図面の簡単な説明】
【００１８】
【図１Ａ】化合物２９１−８８−１（化合物ＬＤＮ−２９１−８８−１と交換可能に使用される）のルシフェラーゼ活性を示すグラフである。
【図１Ｂ】患者由来線維芽細胞（３８１３細胞；ＳＭＮ１−／−ＳＭＮ２＋／＋）におけるＳＭＮタンパク質発現に対する化合物２９１−８８−１の効果を示す。
【図１Ｃ】患者由来線維芽細胞（３８１３細胞；ＳＭＮ１−／−ＳＭＮ２＋／＋）におけるＳＭＮタンパク質発現に対する化合物２９１−８８−１の効果を示す。
【図２】ＬＤＮ−２９１−８８−１によるＨＥＫ２９３  ＳＭＮ２レポーター細胞の２４および４８時間曝露でのＳＭＮ−ルシフェラーゼの濃度依存的増加を示すグラフである。
【図３】図３Ａおよび３Ｂは、２つの異なる定数比でのＬＤＮ−２９１−８８−１およびＬＤＮ−７６の濃度の増加に対してプロットされたルシフェラーゼ活性を示す。
【図４】ＬＤＮ２１２０１４と混合した化合物２９１−８８−１のルシフェラーゼ活性を示す。
【図５】４８時間での、ＬＤＮ−７６類似体、ＬＤＮ−２１２３９１と混合した化合物２９１−８８−１のルシフェラーゼ活性を示す。
【図６】２４時間での、ＳＭＮ２スプライシング化合物、ＳＭＮ−Ｃ２と混合した化合物２９１−８８−１のルシフェラーゼ活性を示す。
【図７】図７Ａおよび７Ｂは、２４時間および４８時間での、ＳＭＮ２スプライシング化合物、ＮＶＳ−ＳＭ２と混合した化合物２９１−８８−１のルシフェラーゼ活性を示す。
【図８】ＳＭＮ２スプライシング化合物、ＳＭＮ−Ｃ２と混合したＬＤＮ−７６類似体、ＬＤＮ−２１２３９１のルシフェラーゼ活性を示す。
【図９】図９Ａおよび９Ｂは、ＳＭＮ２スプライシング化合物、ＮＶＳ−ＳＭ２と混合したＬＤＮ−７６類似体、ＬＤＮ−２１２３９１のルシフェラーゼ活性を示す。
【図１０】ＬＤＮ−７６類似体、ＬＤＮ−２１２３９１、およびＳＭＮ２スプライシング化合物、ＮＶＳ−ＳＭ２と混合した化合物２９１−８８−１のルシフェラーゼ活性を示す。
【図１１】正常成体Ｃ５７ＢＬ／６マウスに腹腔内（ＩＰ）投与した場合のＬＤＮ−２９１−８８−１薬物動態を示す。
【図１２】正常成体Ｃ５７ＢＬ／６マウスに経口（ＰＯ）投与した場合のＬＤＮ−２９１−８８−１薬物動態を示す。
【図１３】ＬＤＮ−２９１−８８−１を投与した動物の生存率を、未処置動物およびビヒクル（ＶＨ）処置動物の生存率と比較して示す。
【図１４】ハウスキーピング遺伝子、アクチンと比較した、総ＳＭＮタンパク質についての脳抽出物を示すウェスタンブロットである。
【図１５】ハウスキーピング遺伝子、ＧＡＰＤＨと比較した、総ＳＭＮタンパク質についての脳抽出物を示すウェスタンブロットである。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
１．定義
本開示の化合物は上記に一般的に記載されているものを含み、本明細書に開示される実施形態、サブ実施形態、および種によってさらに例示される。本明細書に使用される場合、以下の定義は他に示さない限り、本明細書に記載される化合物のいずれか１つ以上に適用される。本開示の目的のために、化学元素は元素周期表、ＣＡＳバージョン、Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｐｈｙｓｉｃｓ、第７５版に従って同定される。さらに、有機化学の一般原理は、「Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ」、Ｔｈｏｍａｓ  Ｓｏｒｒｅｌｌ、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｂｏｏｋｓ、Ｓａｕｓａｌｉｔｏ：１９９９、ならびに「Ｍａｒｃｈ’ｓ  Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ」、第５版：Ｓｍｉｔｈ，Ｍ．Ｂ．およびＭａｒｃｈ，Ｊ．、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ：２００１に記載され、それらの全内容は、それらが本明細書と一致する範囲で参照により本明細書に組み込まれる。
【００２０】
本明細書に記載される場合、化合物は、上記に一般的に例示されるか、または特定のクラス、サブクラス、および種によって例示されるように、１つ以上の置換基で置換されていてもよい。「置換されていてもよい」という語句は、「置換されているか、または置換されていない」という語句と交換可能に使用されることが理解されるであろう。一般に、「置換されている」という用語は、用語「任意に」が先行するか否かにかかわらず、所与の構造における水素ラジカルを特定の置換基のラジカルで置換することを指す。別段の指示がない限り、置換されていてもよい基は、基の各置換可能な位置に置換基を有していてもよく、任意の所与の構造における２つ以上の位置が特定の基から選択される２つ以上の置換基で置換されていてもよい場合、置換基はすべての位置で同じであっても異なっていてもよい。本開示によって想定される置換基の組み合わせは、好ましくは安定なまたは化学的に実現可能な化合物の形成をもたらすものである。
【００２１】
本明細書に使用される場合、「安定な」という用語は、本明細書に開示される目的の１つまたは複数について、それらの製造、検出、および好ましくはそれらの回収、精製、および使用を可能にする条件に供した場合に、実質的に変化しない化合物を指す。いくつかの実施形態では、安定な化合物又は化学的に実現可能な化合物は、少なくとも１週間、４０℃以下の温度で、水分又は他の化学的に反応性の条件の非存在下で保存したときに、実質的に変化しない化合物である。
【００２２】
本明細書に使用される場合、「複素環」、「ヘテロシクリル」、「ヘテロ脂環式」、または「複素環式」という用語は、１つ以上の環員が独立して選択されるヘテロ原子である、非芳香族、単環、二環、または三環系を意味する。いくつかの実施形態では、「複素環」、「ヘテロシクリル」、「ヘテロ脂環式」、または「複素環式」基は、３〜１４個の環員を有し、ここで、１つ以上の環員は、酸素、硫黄、窒素、またはリンから独立して選択されるヘテロ原子であり、その系における各環は３〜７個の環員を含む。
【００２３】
複素環式環は、安定な構造をもたらす任意のヘテロ原子または炭素原子においてそのペンダント基に結合することができ、特定の場合、環原子のいずれかは置換されていてもよい。このような飽和または部分不飽和複素環式ラジカルの例としては、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロチオフェニルピロリジニル、ピペリジニル、ピロリニル、テトラヒドロキノリニル、テトラヒドロイソキノリニル、デカヒドロキノリニル、オキサゾリジニル、ピペラジニル、ジオキサニル、ジオキソラニル、ジアゼピニル、オキサゼピニル、チアゼピニル、モルホリニル、およびキヌクリジニル、ならびにそれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。
【００２４】
「ヘテロ原子」という用語は、酸素、硫黄、窒素、リン、またはケイ素（窒素、硫黄、リン、またはケイ素の任意の酸化形態；任意の塩基性窒素の四級化形態または；複素環式環の置換可能な窒素、例えば、Ｎ（３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピロリルにおけるような）、ＮＨ（ピロリジニルにおけるような）またはＮＲ＋（Ｎ−置換ピロリジニルにおけるような）のうちの１つ以上を指す。
【００２５】
本明細書に使用される場合、「不飽和」という用語は、不飽和の１つ以上の単位を有する部分を指す。
【００２６】
本明細書に使用される場合、「部分的に不飽和」という用語は、少なくとも１つの二重結合または三重結合を含む環部分を指す。「部分的に不飽和」という用語は、複数の不飽和部位を有する環を包含することを意図するが、本明細書に定義されるようなアリールまたはヘテロアリール部分を含むことを意図しない。
【００２７】
単独で、または「アラルキル」、「アラルコキシ」、もしくは「アリールオキシアルキル」のようなより大きな部分の一部として使用される「アリール」という用語は、全部で５〜１４個の環員を有する単環式、二環式、および三環式環系を指し、ここで、系における１つ以上の環は芳香族であり、系における各環は３〜７個の環員を含む。「アリール」という用語は、「アリール環」という用語と交換可能に使用することができる。「アリール」という用語はまた、本明細書以下に定義されるヘテロアリール環系も指す。本開示の特定の実施形態では、「アリール」とは、限定されないが、フェニル、ビフェニル、ナフチル、アントラシル（ａｎｔｈｒａｃｙｌ）など、およびそれらの組み合わせを含む芳香環系を指し、１つ以上の置換基を有していてもよい。また、本明細書に使用される場合、芳香環が、インダニル、フタルイミジル、ナフトイミジル（ｎａｐｈｔｈｉｍｉｄｙｌ）、フェナントリジニル（ｐｈｅｎａｎｔｈｒｉｄｉｎｙｌ）、またはテトラヒドロナフチルなど、およびそれらの組み合わせの１つ以上の非芳香環と縮合する基も「アリール」という用語の範囲内に含まれる。
【００２８】
単独で、または「ヘテロアラルキル」もしくは「ヘテロアリールアルコキシ」におけるようなより大きな部分の一部として使用される「ヘテロアリール」という用語は、全部で５〜１４個の環員を有する単環式、二環式、および三環式環系を指し、ここで、系における１つ以上の環は芳香族であり、系における１つ以上の環は１つ以上のヘテロ原子を含み、系における各環は３〜７個の環員を含む。「ヘテロアリール」という用語は、「ヘテロアリール環」という用語または「ヘテロ芳香族」という用語と交換可能に使用することができる。ヘテロアリール基としては、チエニル、フラニル、ピロリル、イミダゾリル、ピラゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、オキサジアゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、チアジアゾリル、ピリジル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、インドリジニル、プリニル、ナフチリジニル、およびプテリジニル、ならびにそれらの組み合わせが挙げられる。
【００２９】
本明細書に使用される場合、「ヘテロアリール」および「ヘテロアリ−（ｈｅｔｅｒｏａｒ−）」という用語はまた、ヘテロ芳香環が、１つまたは複数のアリール、脂環式またはヘテロシクリル環と縮合する基も含む。ヘテロアリール環の例としては、インドリル、イソインドリル、ベンゾチエニル、ベンゾフラニル、ジベンゾフラニル、インダゾリル、ベンゾイミダゾリル、ベンズチアゾリル、キノリル、イソキノリル、シンノリニル、フタラジニル、キナゾリニル、キノキサリニル、４Ｈ−キノリジニル、カルバゾリル、アクリジニル、フェナジニル、フェノチアジニル、フェノキサジニル、テトラヒドロキノリニル、テトラヒドロイソキノリニル、およびピリド［２，３−ｂ］−１，４−オキサジン−３（４Ｈ）−オンおよびそれらの組み合わせが挙げられる。
【００３０】
特に明記しない限り、本明細書に記載される構造はまた、構造の全ての異性体（例えば、鏡像異性体、ジアステレオマー、および幾何学的（または立体配座））形態；例えば、各不斉中心、（Ｚ）および（Ｅ）二重結合異性体、ならびに（Ｚ）および（Ｅ）立体配座異性体についてのＲおよびＳ立体配置を含むことを意味する。したがって、本化合物の単一の立体化学異性体、ならびに鏡像異性体、ジアステレオマー、および幾何学的（または立体配座）混合物は、本開示の範囲内である。
【００３１】
特に明記しない限り、本開示の化合物の全ての互変異性形態は、本開示の範囲内である。
【００３２】
さらに、特に明記しない限り、本明細書に表される構造はまた、１つ以上の同位体が濃縮された原子の存在下でのみ異なる化合物を含むことを意味する。例えば、重水素もしくはトリチウムによる水素の置換、または１１Ｃ−もしくは１３Ｃ−もしくは１４Ｃ−が豊富な炭素による炭素の置換を除いて、本発明の構造を有する化合物は、本開示の範囲内である。このような化合物は、例えば、生物学的アッセイにおける分析ツールまたはプローブとして有用である。
【００３３】
２．本開示の化合物の概要
本開示の化合物は概して、ＳＭＮタンパク質安定剤として脊髄性筋萎縮症を治療するように機能する。すなわち、「ＳＭＮタンパク質安定剤」とは、ＳＭＮタンパク質の半減期を増加させ、その異化または代謝回転を減少させることによって作用し、細胞内により高いレベルで蓄積できる化合物またはそのプロドラッグを指す。これは、例えば、ユビキチン介在性プロテアソーム経路による、またはタンパク質分解を媒介するプロセスである自食作用による、その異化および分解を妨げることによって生じ得る。
【００３４】
一実施形態によれば、本開示は、式Ｉの化合物またはそのプロドラッグを提供する：
【化６】
2019509272.tif 000008
式中、
Ｘは炭素または窒素からなる群から選択され、
Ｙは、炭素または窒素からなる群から選択され、
Ｚは、硫黄または酸素からなる群から選択され、
Ｒ１は、水素、アルキル、アルコキシ、ハロゲン、ハロアルキルおよびアミノアルキルから選択され、Ｒ２は、非置換または置換アリールおよび非置換または置換ヘテロアリールから選択される。本開示の化合物は、ＳＭＮ２を安定化することによって、脊髄性筋萎縮症を治療できるか、または脊髄性筋萎縮症の重症度を軽減できることが見出された。このような「ＳＭＮタンパク質安定剤」は、ＳＭＮ２  ｍＲＮＡおよびタンパク質を安定化することによって作用する。式（１）の化合物は、２０１３年７月１２日に出願されたＡｎｄｒｏｐｈｙらの国際公開第２０１４／０１２０５０号により完全に記載されており、これは、本明細書と一致する範囲で参照により本明細書に組み込まれる。
【００３５】
一実施形態によれば、本開示は、式ＩＩの化合物を提供する：
【化７】
2019509272.tif 000009
式中、
Ｘは炭素または窒素からなる群から選択され、
Ｙは、炭素または窒素からなる群から選択され、
Ｒ２は、非置換または置換アリール、非置換または置換ヘテロアリールから選択される。より特に好適な実施形態では、Ｒ２は以下から選択される：
【化８】
2019509272.tif 000010
【化９】
2019509272.tif 000011
式中、Ｒ３は、アルキル、アルコキシ、アルコキシアルキル、−Ｏ（ＣＨ２）ｎＮＲａＲｂ、およびハロゲンから選択され、ここで、ｎは１〜３の整数であり、ＲａおよびＲｂは、水素およびアルキルからなる群から独立して選択される。
【００３６】
例示的な化合物を以下の表１に示す。
【００３７】
【表１】
2019509272.tif 000012
【００３８】
【表２】
2019509272.tif 000013
【００３９】
【表３】
2019509272.tif 000014
【００４０】
【表４】
2019509272.tif 000015
【００４１】
上記化合物のプロドラッグは、改善された薬物動態を提供し、対象における上記化合物のレベルを増加させる方法に使用できることが見出された。式（ＩＩ）の化合物の例示的なプロドラッグは、例えば、下記から選択される式を有する、化合物２９１−８８−１のホスホノオキシメチレンプロドラッグを含む：
【化１０】
2019509272.tif 000016
【化１１】
2019509272.tif 000017
【００４２】
いくつかの実施形態では、本開示は、上記表１に示される化合物、またはその薬学的に許容される塩を提供する。
【００４３】
３．上記化合物を提供する一般的な方法
プロドラッグおよびその塩を含む、本開示の上記化合物は、一般的に、公知の有機合成技術を使用して調製または単離することができ、多数の可能な合成経路のいずれかに従って合成することができる。
【００４４】
式（Ｉ）の化合物は、例えば、スキーム１に示される手順に従って調製することができる。必要な４−ハロ−３−アミノ−ピリジンをアセトン中の適切なイソチオシアネートで処理すると、所望の化合物が形成される。
【化１２】
2019509272.tif 000018
【００４５】
あるいは、式（Ｉ）の化合物は、スキーム２に示される手順に従って調製することができる。適切なアミノチアゾールおよびカルボン酸を適切なカップリング剤（例えば、ＨＡＴＵ、ＤＣＣ、ＰｙＢＯＰなど）および適切な塩基（例えば、ＤＩＰＥＡ、トリメチルアミンなど）で処理すると、所望の化合物が形成される。
【化１３】
2019509272.tif 000019
【００４６】
さらに、式（Ｉ）の化合物は、スキーム３に示される手順に従って調製することができる。適切なアミノピリジノールおよびジ（１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メタニミンの処理は所望のアミノオキサゾールを与え、適切な酸塩化物とのカップリングは所望の化合物を与える。
【化１４】
2019509272.tif 000020
【００４７】
本明細書に記載されるプロセスは、本明細書に提供される化合物を合成することができるただ一つの手段ではなく、本開示の化合物を合成する際に利用できる可能性がある合成有機反応の幅広いレパートリーが利用可能であることは当業者によって理解されるであろう。当業者は適切な合成経路を選択し、実施する方法を知っている。出発物質、中間体および生成物の適切な合成方法は、以下の参考文献などを含む文献を参照することにより同定することができる：Ａｄｖａｎｃｅｓ  ｉｎ  Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｖｏｌｓ．１−１０７（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，１９６３−２０１２）；Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｖｏｌｓ．１−４９（Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１９６４−２０１２）；Ｃａｒｒｅｉｒａら（Ｅｄ．）  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ｏｆ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｖｏｌｓ．１−４８（２００１−２０１０）およびＫｎｏｗｌｅｄｇｅ  Ｕｐｄａｔｅｓ  ＫＵ２０１０／１−４；２０１１／１−４；２０１２／１−２（Ｔｈｉｅｍｅ，２００１−２０１２）；Ｋａｔｒｉｔｚｋｙら（Ｅｄ．）  Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  Ｇｒｏｕｐ  Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ，（Ｐｅｒｇａｍｏｎ  Ｐｒｅｓｓ，１９９６）；Ｋａｔｒｉｔｚｋｙら（Ｅｄ．）；Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  Ｇｒｏｕｐ  Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ  ＩＩ（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，２ｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，２００４）；Ｋａｔｒｉｔｚｋｙら（Ｅｄ．），Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（Ｐｅｒｇａｍｏｎ  Ｐｒｅｓｓ，１９８４）；Ｋａｔｒｉｔｚｋｙら、Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ＩＩ，（Ｐｅｒｇａｍｏｎ  Ｐｒｅｓｓ，１９９６）；Ｓｍｉｔｈら、Ｍａｒｃｈ’ｓ  Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ：Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ，Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ，ａｎｄ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，６ｔｈ  Ｅｄ．（Ｗｉｌｅｙ，２００７）；Ｔｒｏｓｔら（Ｅｄ．），Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（Ｐｅｒｇａｍｏｎ  Ｐｒｅｓｓ，１９９１）。
【００４８】
本明細書に記載される化合物を調製するための反応は、有機合成の当業者によって容易に選択され得る適切な溶媒中で実施することができる。適切な溶媒は、反応が実施される温度（例えば、溶媒の凍結温度から溶媒の沸騰温度までの範囲であり得る温度）において、出発物質（反応物）、中間体、または生成物と実質的に非反応性であり得る。所与の反応は、１種の溶媒または１種より多い溶媒の混合物中で実施することができる。特定の反応工程に依存して、特定の反応工程についての適切な溶媒が当業者によって選択され得る。
【００４９】
本明細書に記載される化合物の調製は、種々の化学基の保護および脱保護を含み得る。保護および脱保護の必要性、ならびに適切な保護基の選択は、当業者によって容易に決定され得る。保護基の化学は例えば、Ｔ．Ｗ．ＧｒｅｅｎｅおよびＰ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、第３版、Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９９９）に見出すことができる。
【００５０】
反応は当該分野において公知の任意の適切な方法に従ってモニターすることができる。例えば、生成物の形成は、核磁気共鳴分光法（例えば、１Ｈまたは１３Ｃ）、赤外線分光法、分光光度法（例えば、ＵＶ−可視化）、質量分析法などの分光学的方法によって、または高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、液体クロマトグラフィー−質量分析法（ＬＣＭＳ）、もしくは薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）などのクロマトグラフィー法によってモニターすることができる。
【００５１】
化合物は、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）および順相シリカクロマトグラフィーを含む種々の方法によって、当業者によって精製され得る。化合物は、核磁気共鳴分光法（例えば、１Ｈまたは１３Ｃ）、赤外線分光法、質量分析法を含む任意の好適な技術によって、または高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、液体クロマトグラフィー−質量分光法（ＬＣＭＳ）などのクロマトグラフィー法によって、同一性および純度について特徴付けることができる。
【００５２】
本開示によって提供される化合物は併用療法において利用されてもよく、これは、本化合物が１種以上の他の所望の治療剤（例えば、公知のＳＭＡ治療剤）または医療処置と同時に、その前に、またはその後に投与されてもよいことを意味する。併用レジメンにおいて利用するための治療（治療剤または処置）の特定の組み合わせは、所望の治療剤および／または処置の適合性と、達成されるべき所望の治療効果とを考慮する。また、利用される治療は同じ障害に対して所望の効果を達成し得るか（例えば、本明細書に記載される化合物は同じ障害を治療するために使用される別の治療剤と同時に投与され得る）、またはそれらは、異なる効果（例えば、いずれかの有害な作用の制御）を達成し得ることが理解される。
【００５３】
例えば、１つの実施形態では、上記の１つ以上の化合物は、ＳＭＮ２転写エンハンサーと組み合わされる。本明細書に使用される場合、「ＳＭＮ２転写エンハンサー」とは、ＳＭＮタンパク質をコードするＳＭＮ２  ｍＲＮＡの転写を刺激または増加させることによって作用する化合物を指す。例示的なＳＭＮ２転写エンハンサーは、２０１３年７月１２日に出願されたＡｎｄｒｏｐｈｙらの国際公開第２０１４／０１２０５０号に記載されているように調製され、同定され、これは本明細書と一致する範囲で参照により本明細書に組み込まれる。より詳細には、例示的なＳＭＮ２転写エンハンサーには、式（ＩＶ）の一般式を有するものまたはその薬学的に許容される塩が含まれる：
【化１５】
2019509272.tif 000021
式中、
Ｒ２およびＲ３の各々は、独立してハロゲン、Ｒ’、−ＯＲ’であり、
ｂは、１〜５であり、
Ｘ１は、−Ｃ（Ｒｘ）２−、−ＮＲｘ−、−ＮＲｘＣ（Ｒｘ）２−または−ＯＣ（Ｒｘ）２−であり、
Ｘ２は、−Ｃ（Ｒｘ）２−または−ＮＲｘ−であり、
各々のＲｘは、独立して、Ｒ’、−（Ｃ１−６脂肪族）−Ｎ（Ｒ’）２、または−（Ｃ１−６脂肪族）−ＯＲ’であり、
各々のＲ’は、独立して、−Ｒ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ、−ＣＯ２Ｒ、もしくは−ＳＯ２Ｒであるか、同じ窒素上の２つのＲ’はそれらの介在原子と一緒になって、窒素、酸素および硫黄から独立して選択される１〜２個のヘテロ原子を有する３〜７員複素環を形成し、各々のＲは、水素、またはＣ１−６脂肪族、フェニル、３〜７員の飽和もしくは部分不飽和炭素環、８〜１０員の二環式飽和、部分不飽和もしくはアリール炭素環、窒素、酸素、もしくは硫黄から独立して選択される１〜３個のヘテロ原子を有する５〜６員の単環式ヘテロアリール環、窒素、酸素、もしくは硫黄から独立して選択される１〜２個のヘテロ原子を有する３〜７員の飽和もしくは部分不飽和複素環、窒素、酸素、もしくは硫黄から独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を有する８〜１０員の二環式飽和もしくは部分不飽和複素環、または窒素、酸素、もしくは硫黄から独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を有する８〜１０員の二環式ヘテロアリール環から選択される置換されていてもよい基である。
【００５４】
より詳細には、例示的なＳＭＮ２転写エンハンサーは表２のものを含む：
【００５５】
【表５】
2019509272.tif 000022
【００５６】
【表６】
2019509272.tif 000023
【００５７】
【表７】
2019509272.tif 000024
【００５８】
【表８】
2019509272.tif 000025
【００５９】
【表９】
2019509272.tif 000026
【００６０】
なおさらなる例は、Ｃａｌｄｅｒら、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、２０１６、５９（２２）、ｐｐ．１００６７−１００８３に見出され得、それは、本明細書と一致する範囲で参照により組み込まれる。
【００６１】
さらに別の実施形態では、本開示は、公知のＳＭＮ２スプライシング化合物である１つ以上の化合物と組み合わせて、本明細書に記載される１つ以上の化合物を含む組成物を提供する。本明細書に使用される場合、「ＳＭＮ２スプライシング化合物」とは、エクソン７を含むエクソン組成物を生じるＳＭＮ２  ｐｒｅ−ｍＲＮＡ転写物における切除反応の触媒作用を促進する化合物を指す。例示的なＳＭＮ２スプライシング化合物は以下を含む：
【化１６】
2019509272.tif 000027
さらに別の実施形態では、ＳＭＮ２スプライシング化合物は、ヌシネルセン（ａｌｌ−Ｐ−ａｍｂｏ−２’−Ｏ−（２−メトキシエチル）−５−メチル−Ｐ−チオウリジルイル−（３’→５’）−２’−Ｏ−（２−メトキシエチル）−５−メチル−Ｐ−チオシチジルイル−（３’→５’）−２’−Ｏ−（２−メトキシエチル）−Ｐ−チオアデニルイル−（３’→５’）−２’−Ｏ−（２−メトキシエチル）−５−メチル−Ｐ−チオシチジルイル−（３’→５’）−２’−Ｏ−（２−メトキシエチル）−５−メチル−Ｐ−チオウリジルイル−（３’→５’）−２’−Ｏ−（２−メトキシエチル）−５−メチル−Ｐ−チオウリジルイル−（３’→５’）−２’−Ｏ−（２−メトキシエチル）−５−メチル−Ｐ−チオウリジルイル−（３’→５’）−２’−Ｏ−（２−メトキシエチル）−５−メチル−Ｐ−チオシチジルイル−（３’→５’）−２’−Ｏ−（２−メトキシエチル）−Ｐ−チオアデニルイル−（３’→５’）−２’−Ｏ−（２−メトキシエチル）−５−メチル−Ｐ−チオウリジルイル−（３’→５’）−２’−Ｏ−（２−メトキシエチル）−Ｐ−チオアデニルイル−（３’→５’）−２’−Ｏ−（２−メトキシエチル）−Ｐ−チオアデニルイル−（３’→５’）−２’−Ｏ−（２−メトキシエチル）−５−メチル−Ｐ−チオウリジルイル−（３’→５’）−２’−Ｏ−（２−メトキシエチル）−Ｐ−チオグアニルイル−（３’→５’）−２’−Ｏ−（２−メトキシエチル）−５−メチル−Ｐ−チオシチジルイル−（３’→５’）−２’−Ｏ−（２−メトキシエチル）−５−メチル−Ｐ−チオウリジルイル−（３’→５’）−２’−Ｏ−（２−メトキシエチル）−Ｐ−チオグアニルイル−（３’→５’）−２’−Ｏ−（２−メトキシエチル）グアノシン）であり、ＳＰＩＮＲＡＺＡ（商標）として市販されている。なおさらなる例は、Ｃａｌｄｅｒら、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、２０１６、５９（２２）、ｐｐ．１００６７−１００８３に見出され得、それは、本明細書と一致する範囲で参照により組み込まれる。
【００６２】
あるいはいくつかの実施形態では、ＳＭＡを治療するための組成物は、上記のようなＳＭＮ２転写エンハンサーおよび／またはＳＭＮ２スプライシング化合物を含み得、本開示の式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物以外の１つ以上のＳＭＮタンパク質安定化剤をさらに含む。例えば、いくつかの実施形態では、組成物は、２０１３年７月１２日に出願されたＡｎｄｒｏｐｈｙらの国際公開第２０１４／０１２０５０に記載されるように調製され、同定されたＳＭＮタンパク質安定剤を含み、それは、本明細書と一致する範囲で参照により本明細書に組み込まれる。より詳細には、例示的なＳＭＮ２タンパク質安定剤は、式（ＩＩＩ）の一般式を有するものまたはその薬学的に許容される塩を含む：
【化１７】
2019509272.tif 000028
式中、
環Ａ’’は、置換されていてもよいフェニル、窒素である１〜３個のヘテロ原子を有する５〜６員の単環式ヘテロアリール環、または窒素、酸素、もしくは硫黄から独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を有する８〜１０員の二環式ヘテロアリール環から選択され、
環Ｂ’’は、窒素、酸素、もしくは硫黄から独立して選択される１〜２個のヘテロ原子を有する、置換されていてもよい５〜６員のヘテロアリール環であり、
Ｌ３は、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−であり、
各々のＲ４は、ハロゲンまたは置換されていてもよいＣ１−６脂肪族であり、
ｄは０〜５であり、
Ｒ５は、Ｃ１−６直鎖もしくは分枝アルキルまたは置換Ｃ３−６脂環式であり、ここでＣ３−６脂環式は少なくとも１つのヒドロキシル基で置換されている。
【００６３】
特に好適な実施形態では、環Ｂ’’は、
【化１８】
2019509272.tif 000029
からなる群から選択される。さらなる特に好適な一実施形態では、Ｒ５は置換Ｃ３−４脂環式であり、ここで、Ｃ３−４脂環式は、少なくとも１つのヒドロキシル基で置換されている。例示的な化合物は、国際公開第２０１４／０１２０５０号に記載される化合物を含み、それは、本明細書と一致する範囲で参照により本明細書に組み込まれる。
【００６４】
いくつかの特に好ましい実施形態では、ＳＭＮ２タンパク質安定剤は、表３のものを含む：
【００６５】
【表１０】
2019509272.tif 000030
【００６６】
【表１１】
2019509272.tif 000031
【００６７】
さらに別の実施形態では、本開示の組成物は、ＳＭＮ遺伝子置換療法と組み合わせたＳＭＮタンパク質安定剤および／またはＳＭＮ２転写エンハンサーを含む。ＳＭＮタンパク質安定剤は一般に、上記の式（Ｉ）もしくは（ＩＩＩ）の式を有する化合物、またはそれらのプロドラッグを含む。ＳＭＮ２転写エンハンサーは一般に、上記の式（ＩＶ）を有する化合物を含む。ＳＭＮ遺伝子置換療法は、化合物ＡＶＸＳ−１０１を含むことができる。
【００６８】
本開示の組成物中に存在する追加の治療剤の量は、唯一の活性剤としてその治療剤を含む組成物中に通常投与される量以下であろう。特定の実施形態では、本組成物中の追加の治療剤の量は、唯一の治療活性剤としてその薬剤を含む組成物中に通常存在する量の約５０％〜１００％の範囲であろう。
【００６９】
代替の実施形態では、本開示の方法は、追加の治療剤を含まない組成物を利用し、追加の治療剤を前記患者に別々に投与する追加の工程を含む。これらの追加の治療剤が別々に投与される場合、それらは、本開示の組成物の投与の前、投与と連続して、または投与の後に、患者に投与され得る。
【００７０】
４．薬学的に許容される組成物
本明細書に記載される特定の化合物は、治療のために遊離形態で、または適切な場合、その薬学的に許容される塩として存在してもよいことは理解されるであろう。
【００７１】
本明細書に使用される場合、「薬学的に許容される塩」という用語は、十分な医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、アレルギー応答などを有さずに、ヒトおよび下等動物の組織と接触して使用するのに適し、妥当な利益／リスク比に相応する塩を指す。「薬学的に許容される塩」とは、本開示の化合物の任意の非毒性の塩またはエステルの塩が、受容者に投与されると、直接または間接的のいずれかで、本開示の化合物またはその薬学的に活性な代謝産物もしくは残留物を提供できることを意味する。本明細書に使用される場合、「薬学的に活性な代謝産物またはその残留物」という用語は、その代謝産物または残留物もまた、本開示に従う薬学的に活性な化合物であることを意味する。
【００７２】
薬学的に許容される塩は当該技術分野において周知である。例えば、Ｓ．Ｍ．Ｂｅｒｇｅらは、Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、１９７７、６６、１−１９（それは、本明細書と一致する範囲で参照により本明細書に組み込まれる）において詳細に薬学的に許容される塩を記載している。本開示の化合物の薬学的に許容される塩としては、適切な無機酸および有機酸ならびに無機塩基および有機塩基から誘導されるものが挙げられる。薬学的に許容される、非毒性の酸付加塩の例は、塩酸、臭化水素酸、リン酸、硫酸および過塩素酸などの無機酸、または酢酸、シュウ酸、マレイン酸、酒石酸、クエン酸、コハク酸もしくはマロン酸などの有機酸により形成されるか、あるいはイオン交換などの当該技術分野において使用される他の方法を使用することによって形成されるアミノ基の塩である。他の薬学的に許容される塩としては、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスコルビン酸塩、アスパラギン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、重硫酸塩、ホウ酸塩、酪酸塩、ショウノウ酸塩、カンファースルホン酸塩、クエン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、グルコヘプトン酸塩、グリセロリン酸塩、グルコン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシ−エタンスルホン酸塩、ラクトビオン酸塩、乳酸塩、ラウリン酸塩、ラウリル硫酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メタンスルホン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、パモ酸塩、ペクチン酸塩（ｐｅｃｔｉｎａｔｅ）、過硫酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、リン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、ウンデカン酸塩、吉草酸塩などが挙げられる。適切な塩基から誘導される塩としては、アルカリ金属、アルカリ土類金属、アンモニウムおよびＮ＋（Ｃ１−４アルキル）４塩が挙げられる。本開示はまた、本明細書に開示される化合物の任意の塩基性窒素含有基の四級化を想定する。このような四級化によって、水もしくは油溶性または分散性製剤を得ることができる。代表的なアルカリまたはアルカリ土類金属塩としては、ナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、マグネシウムなどが挙げられる。さらなる薬学的に許容される塩としては、適切な場合、ハロゲン化物、水酸化物、カルボン酸塩、硫酸塩、リン酸塩、硝酸塩、低級アルキルスルホン酸塩およびアリールスルホン酸塩などの対イオンを使用して形成される非毒性アンモニウム、第四級アンモニウム、ならびにアミンカチオンが挙げられる。
【００７３】
いくつかの場合、本開示の化合物は１つ以上の酸性官能基を含んでもよく、したがって、薬学的に許容される塩基と薬学的に許容される塩を形成することができる。これらの場合、「薬学的に許容される塩」という用語は、本開示の化合物の比較的非毒性の無機および有機塩基付加塩を指す。これらの塩は同様に、投与ビヒクルもしくは剤形製造プロセスにおいてｉｎ  ｓｉｔｕで調製することができるか、またはその遊離酸形態において精製化合物を、薬学的に許容される金属カチオンの水酸化物、炭酸塩もしくは重炭酸塩などの適切な塩基と、アンモニアと、または薬学的に許容される有機第一級、第二級もしくは第三級アミンと別々に反応させることによって調製することができる。代表的なアルカリ又はアルカリ土類塩としては、リチウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、およびアルミニウム塩などが挙げられる。塩基付加塩の形成に有用な代表的な有機アミンとしては、エチルアミン、ジエチルアミン、エチルジアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、ピペラジンなどが挙げられる。
【００７４】
本開示の別の態様によれば、薬学的に許容される組成物が提供され、これらの組成物は本明細書に記載される化合物のいずれかを含み、任意選択に、薬学的に許容される担体、補助剤またはビヒクルを含み、これらは、本明細書に使用される場合、所望の特定の剤形に適するように、任意および全ての溶媒、希釈剤、または他の液体ビヒクル、分散剤または懸濁助剤、界面活性剤、等張剤、増粘剤または乳化剤、保存剤、固形結合剤、潤滑剤などを含む。
【００７５】
Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、第１６版、Ｅ．Ｗ．Ｍａｒｔｉｎ（Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ、Ｅａｓｔｏｎ、Ｐａ、１９８０）は、薬学的に許容される組成物を製剤化する際に使用される種々の担体およびそれらを調製するための公知技術を開示している。いずれかの望ましくない生物学的作用を生じるか、または薬学的に許容される組成物のいずれかの他の成分と有害に相互作用することなどにより、任意の従来の担体媒体が本開示の化合物と適合性がない限り、その使用は、本開示の範囲内であると意図される。薬学的に許容される担体として役立ち得る材料のいくつかの例としては、限定されないが、イオン交換体、アルミナ、ステアリン酸アルミニウム、レシチン、ヒト血清アルブミンなどの血清タンパク質、リン酸塩、グリシン、ソルビン酸、またはソルビン酸カリウムなどの緩衝物質、飽和植物脂肪酸、水、塩、または電解質の部分的なグリセリド混合物、例えば、硫酸プロタミン、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛塩、コロイドシリカ、三ケイ酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、ポリアクリレート、ワックス、ポリエチル−ポリオキシプロピル−ブロックポリマー、羊毛脂、ラクトース、グルコースおよびスクロースなどの糖；コーンスターチおよびジャガイモデンプンなどのデンプン；セルロースならびにカルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロースおよび酢酸セルロースなどのその誘導体；粉末トラガカント；麦芽；ゼラチン；タルク；ココアバターおよび坐薬ワックスなどの賦形剤；ピーナッツ油、綿実油などの油；サフラワー油；ゴマ油；オリーブ油；コーン油および大豆油；グリコール；プロピルグリコールまたはポリエチルグリコールなど；オレイン酸エチルおよびラウリン酸エチルなどのエステル；寒天；水酸化マグネシウムおよび水酸化アルミニウムなどの緩衝剤；アルギン酸；発熱物質を含まない水；等張食塩水；リンゲル液；エチルアルコールおよびリン酸緩衝溶液、ならびにラウリル硫酸ナトリウムおよびステアリン酸マグネシウムなどの他の非毒性適合性潤滑剤、ならびに着色剤、離型剤、コーティング剤、甘味料、香味料および香料が挙げられ、配合者の判断に従って、保存剤および酸化防止剤もまた、組成物中に存在してもよい。いくつかの実施形態では、本開示の組成物は、ＤＭＳＯ、ＰＥＧ４００、Ｔｗｅｅｎ−８０、およびヒドロプロピルベータシクロデキストリン（ＨＰ−β−ＣＤ）のうちの１つ以上をさらに含む。
【００７６】
本開示の薬学的に許容される組成物は、治療される障害の重症度に応じて、経口、直腸、非経口、静脈内、皮下、脳槽内、膣内、腹腔内、局所（粉末、軟膏、または滴下などによる）、口腔、経口もしくは鼻スプレーなどとして、またはそれらの組み合わせで、ヒトおよび他の動物に投与されてもよい。
【００７７】
経口投与のための液体剤形としては、限定されないが、薬学的に許容されるエマルション、マイクロエマルション、溶液、懸濁液、シロップおよびエリキシルが挙げられるが、これらに限定されない。活性化合物に加えて、液体剤形は、当該技術分野で一般に使用される不活性希釈剤、例えば、水または他の溶媒、可溶化剤および乳化剤、例えば、エチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピルグリコール、１，３−ブチルグリコール、ジメチルホルムアミド、油（特に、綿実、落花生、トウモロコシ、胚芽、オリーブ、ヒマシおよびゴマ油）、グリセロール、テトラヒドロフルフリルアルコール、ポリエチルグリコールおよびソルビタンの脂肪酸エステル、ならびにそれらの混合物を含有してもよい。不活性希釈剤の他に、経口組成物はまた、湿潤剤、乳化剤および懸濁化剤、甘味料、香味料、および香料などのアジュバントを含んでもよい。
【００７８】
注射用調製物、例えば、無菌注射用水性または油性懸濁剤は、好適な分散剤または湿潤剤および懸濁剤を使用して、当該技術分野において公知の技術に従って製剤化することができる。無菌注射用調製物はまた、例えば、１，３−ブタンジオールの溶液のような、非毒性の非経口的に許容される希釈剤または溶媒中の無菌注射用溶液、懸濁液、またはエマルションであってもよい。利用され得る許容されるビヒクルおよび溶媒の中には、水、リンゲル液、Ｕ．Ｓ．Ｐ．および等張性塩化ナトリウム溶液がある。さらに、無菌の不揮発性油が従来のように溶媒または懸濁媒体として利用される。この目的のために、合成モノ−またはジグリセリドを含む、任意の無刺激性の不揮発性油を利用することができる。さらに、オレイン酸などの脂肪酸が注射用調製物に使用される。
【００７９】
注射用製剤は、例えば、細菌保持フィルターを通す濾過によって、または使用前に滅菌水もしくは他の滅菌注射用媒体に溶解または分散することができる滅菌固形組成物の形態で滅菌剤を組む込むことによって、滅菌することができる。
【００８０】
本開示の化合物の効果を延長するために、皮下または筋肉内注射からの化合物の吸収を遅らせることがしばしば望ましい。これは、低い水溶性を有する結晶質または非晶質材料の液体懸濁液の使用によって達成され得る。次いで、化合物の吸収速度は、その溶解速度に依存し、そして次に結晶サイズおよび結晶形態に依存し得る。あるいは、非経口投与された化合物形態の遅延吸収が、化合物を油性ビヒクルに溶解または懸濁することによって達成される。注射用デポー形態は、ポリラクチド−ポリグリコリドなどの生分解性ポリマー中に化合物のマイクロカプセルマトリクスを形成することによって作製される。化合物対ポリマーの比および利用する特定のポリマーの性質に応じて、化合物放出速度を制御することができる。他の生分解性ポリマーの例としては、ポリ（オルトエステル）およびポリ（無水物）が挙げられる。デポー注射用製剤はまた、体組織と適合するリポソームまたはマイクロエマルションに化合物を封入することによって調製される。
【００８１】
直腸または膣投与のための組成物は、好ましくは、本開示の化合物を、室温で固形であるが、体温で液体であり、したがって直腸または膣腔内で溶解し、活性化合物を放出できるココアバター、ポリエチレングリコールまたは座薬ワックスなどの好適な非刺激性賦形剤または担体と混合することによって調製できる座薬である。
【００８２】
経口投与のための固体剤形としては、カプセル剤、錠剤、丸剤、粉剤、および顆粒剤が挙げられる。このような固体剤形において、活性化合物は、クエン酸ナトリウムもしくはリン酸二カルシウムなどの１種以上の不活性な薬学的に許容される賦形剤もしくは担体ならびに／またはａ）デンプン、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトール、およびケイ酸などの充填剤または増量剤、ｂ）例えば、カルボキシメチルセルロース、アルギン酸塩、ゼラチン、ポリビニルピロリジノン、スクロース、およびアカシアなどの結合剤、ｃ）グリセロールなどの保湿剤、ｄ）寒天、炭酸カルシウム、ジャガイモまたはタピオカデンプン、アルギン酸、特定のケイ酸塩、および炭酸ナトリウムなどの崩壊剤、ｅ）パラフィンなどの溶液遅延剤、ｆ）第四級アンモニウム化合物などの吸収促進剤、ｇ）例えば、セチルアルコールおよびグリセロールモノステアレートなどの湿潤剤、ｈ）カオリンおよびベントナイト粘土などの吸収剤、ならびにｉ）タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウムなどの滑沢剤、ならびにそれらの混合物と混合される。カプセル剤、錠剤および丸剤の場合、剤形は緩衝剤も含んでもよい。
【００８３】
類似の種類の固形組成物もまた、ラクトースまたは乳糖ならびに高分子量ポリエチルグリコールなどの賦形剤を使用して軟質および硬質充填ゼラチンカプセル中の充填剤として利用されてもよい。錠剤、糖衣錠、カプセル剤、丸剤、および顆粒剤の固形剤形は、腸溶コーティングおよび医薬製剤技術分野において周知の他のコーティングなどのコーティングおよびシェルを用いて調製することができる。それらは任意選択で乳白剤を含んでもよく、また、それらは活性成分のみを放出するか、または優先的には、腸管の特定の部分において、任意選択で、遅延様式で活性成分を放出する組成物であってもよい。使用され得る包埋組成物の例としては、ポリマー物質およびワックスが挙げられる。類似の種類の固形組成物もまた、ラクトースまたは乳糖ならびに高分子量ポリエチルグリコールなどの賦形剤を使用して軟質および硬質充填ゼラチンカプセル中の充填剤として利用されてもよい。
【００８４】
活性化合物はまた、上記のような１つ以上の賦形剤と共にマイクロカプセル化形態であってもよい。錠剤、糖衣錠、カプセル剤、丸剤、および顆粒剤の固形剤形は、腸溶コーティング、放出制御コーティング、および医薬製剤技術分野において周知の他のコーティングなどのコーティングおよびシェルを用いて調製することができる。このような固形剤形において、活性化合物は、スクロース、ラクトースまたはデンプンなどの１種以上の不活性希釈剤と混合することができる。このような剤形はまた、通常の慣行のように、不活性希釈剤以外のさらなる物質、例えば、潤滑錠剤ならびにステアリン酸マグネシウムおよび微結晶性セルロースなどの他の補助錠剤を含んでもよい。カプセル剤、錠剤および丸剤の場合、剤形はまた、緩衝剤を含んでもよい。それらは任意選択で乳白剤を含んでもよく、また、それらは活性成分のみを放出するか、または優先的には、腸管の特定の部分において、任意選択で、遅延様式で活性成分を放出する組成物であってもよい。使用され得る包埋組成物の例としては、ポリマー物質およびワックスが挙げられる。
【００８５】
本開示の化合物の局所または経皮投与のための剤形としては、軟膏、ペースト、クリーム、ローション、ゲル、粉末、溶液、スプレー、吸入剤またはパッチが挙げられる。活性成分は、滅菌条件下で、薬学的に許容される担体および必要に応じて任意の必要な防腐剤または緩衝剤と混合される。眼科用製剤、点耳剤、および点眼剤もまた、本開示の範囲内であると意図される。さらに、本開示は、身体への化合物の制御送達を提供する利点を付加する経皮パッチの使用を意図する。このような剤形は、化合物を適切な媒体に溶解または分配することによって作製され得る。また、吸収増強剤を用いて、皮膚を横切る化合物のフラックスを増加させることもできる。速度は、速度制御膜を提供することによって、またはポリマーマトリクスもしくはゲル中に化合物を分散させることによって制御することができる。
【００８６】
化合物および薬学的に許容される組成物の使用
本開示の化合物は、好ましくは、投与の容易さおよび投薬量の均一性のために、投薬単位形態で製剤化される。本明細書で使用される「投薬単位形態」という表現は、治療されるべき患者に適した薬剤の物理的に分離した単位を指す。しかしながら、本開示の化合物および組成物の一日の総使用量（本明細書において「治療有効量」とも称される）は、十分な医学的判断の範囲内で主治医により決定されることが理解される。より詳細には、本明細書に使用される場合、本開示の方法において使用される化合物の「治療有効量」という語句は、任意の医療処置に適用可能な妥当な利益／リスク比で、本明細書に定義されるＳＭＡを治療するのに十分な量の化合物を指す。しかしながら、本開示の方法において使用するための化合物および該化合物を含む薬学的に許容される組成物の一日総使用量は、十分な医学的判断の範囲内で主治医により決定され得ることが理解され得る。任意の特定の患者についての特定の治療有効用量レベルは、治療される運動ニューロン機能エピソードの喪失およびエピソードの重症度；利用される特定の化合物の活性；利用される特定の薬学的に許容される組成物；患者の年齢、体重、一般的健康状態、性別および食事；利用される化合物の投与時間、投与経路および排泄速度；治療の期間；利用される特定の化合物と組み合わせてまたは同時に使用される薬物；ならびに医療分野で周知の同様の要因を含む種々の要因に依存し得る。例えば、所望の治療効果を達成するために必要とされるよりも低いレベルで化合物の用量を開始し、所望の効果が達成されるまで投薬量を徐々に増加させることは、十分に当該分野の技術の範囲内である。
【００８７】
「患者」および「対象」という用語は、本明細書において交換可能に使用され、動物、好ましくは哺乳動物、最も好ましくはヒトを指す。特に、患者は、ＳＭＡに感受性があるか、またはＳＭＡを有する対象を指す。本明細書に使用される場合、「感受性」とは、特定の疾患、障害または状態、特にＳＭＡに対してほとんど耐性を有さないことを指し、遺伝的な傾向があること、疾患、障害もしくは状態の家族歴を有すること、および／または疾患、障害もしくは状態の症状を有することを含む。したがって、いくつかの実施形態では、化合物および／または薬学的に許容される組成物は、運動ニューロン機能の喪失、進行性運動衰弱、筋肉疲労、および麻痺を予防／最小化／制御することを必要とする対象のサブセットに投与され得る。回復／維持された運動ニューロン機能を特に必要とする一部の対象は、反射消失、筋力低下、筋緊張低下、筋肉疲労、麻痺、舌の線維束性攣縮、吸引または嚥下困難、関節拘縮症、低体重などに対して感受性があるか、またはそれらの高いリスクがある対象を含む、運動ニューロン機能の喪失の経験に対して感受性があるか、またはその高いリスクがある患者を含み得る。一つの特定の実施形態では、方法は、ＳＭＡを有するか、またはＳＭＡに感受性があるか、またはＳＭＡの高いリスクがある患者に投与され得る。対象は、ＳＭＡの経験、一般的に、運動ニューロン機能の喪失、反射消失、筋力低下、筋緊張低下、筋肉疲労、麻痺、舌の線維束性攣縮、吸引または嚥下困難、関節拘縮症、家族歴、年齢、環境、および／または生活様式による低体重に対して感受性があり得るか、またはそれらの高いリスクがあり得る。上記に基づいて、本開示の方法の実施形態のいくつかは、同定された対象の特定のサブセットまたはサブクラス（すなわち、本明細書に言及される１つ以上の特定の状態に感受性がある患者のサブセットまたはサブクラス）を対象とするので、全ての対象が特定の疾患、障害または状態について本明細書に記載される対象のサブセットまたはサブクラス内に入るわけではない。
【００８８】
本開示のこれらおよび他の実施形態の種々の機能および利点は、以下に記載される実施例からより十分に理解される。以下の実施例は本開示の利点を例示することを意図するが、本開示の全範囲を例示しない。
【実施例】
【００８９】
この実施例では、本開示の化合物２９１−８８−１をＳＭＮ発現活性についてｉｎ  ｖｉｔｒｏで評価した。
【００９０】
ＳＭＮ２−ルシフェラーゼレポーターアッセイ
このハイスループットスクリーニングアッセイにおいて、ＳＭＮプロモーターを、ＳＭＮ転写、エクソン７含有を増加させる化合物に応答するか、またはＳＭＮ  ＲＮＡもしくはタンパク質を安定化させ得る単一の構築物中のエクソン１〜６およびエクソン７スプライシングカセットと組み合わせた。ＳＭＮ２レポーターを発現する安定なクローンＨＥＫ２９３細胞株を単離した。特に、細胞を５％ＣＯ２で３７℃にてインキュベートした。ＨＥＫ−２９３細胞を、１０％ウシ胎児血清（ＦＢＳ；Ａｔｌａｓ）および１×ｐｅｎ−ｓｔｒｅｐ（Ｇｉｂｃｏ  １５１４０）を含むＤ−ＭＥＭ（Ｇｉｂｃｏ  １１９９５）中で培養した。ＳＭＮ１、ＳＭＮ２、またはＳＶ４０駆動ホタルルシフェラーゼレポーターおよび対照（ウミシイタケ（ｒｅｎｉｌｌａ）ルシフェラーゼレポーター）を含有するレポーター細胞株を選択し、２００μｇ／ｍＬハイグロマイシンＢ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  １０６８７−０１０）と共に１０％ＦＢＳおよび１×ｐｅｎ−ｓｔｒｅｐを含むＤ−ＭＥＭ中で維持した。３８１３および３８１４線維芽細胞を、１０％ウシ胎児血清（ＦＢＳ；Ａｔｌａｓ）および１×ｐｅｎ−ｓｔｒｅｐ（Ｇｉｂｃｏ  １５１４０）を含むＤ−ＭＥＭ（Ｇｉｂｃｏ  １１９９５）中で培養した。
【００９１】
次いで、ＨＥＫ２９３レポーター細胞株を、９６ウェルプレートにおいて１ウェルあたり５０，０００細胞にて播種し、一晩インキュベートした。化合物２９１−８８−１を各ウェルに添加し、３７℃にて一晩インキュベートした。最終ＤＭＳＯ濃度は０．１％であった。ルシフェラーゼ活性を、Ｐｈｅｒａｓｔａｒ  ＦＳ（ＢＭＧ  Ｌａｂｔｅｃｈ）プレートリーダーを使用して、ＳｔｅａｄｙＧｌｏ（Ｐｒｏｍｅｇａ  Ｅ２５１０）またはＤｕａｌＧｌｏ（Ｐｒｏｍｅｇａ  Ｅ２９２０）ルシフェラーゼのいずれかでアッセイした。詳細なアッセイ条件については、表４を参照のこと。全てのデータポイントを、処理した対照ウェルにおける基礎発現（必要に応じたＤＭＳＯ濃度、通常０．１％）に対して光単位から増加パーセントに変換し、活性化パーセントとして表した（図１Ａ）。
【００９２】
【表１２】
2019509272.tif 000032
【００９３】
タンパク質検出
患者の線維芽細胞におけるＳＭＮタンパク質の検出のために、１ｃｍ２あたり８０００個の細胞を、化合物の添加の２４時間前に播種した。ＳＭＮは遍在的に発現されるので、ヒトＳＭＮ１遺伝子の１つでさえコピーを含有する細胞は、ＳＭＮ２遺伝子からの発現に対する化合物の効果をマスクする。ＳＭＮヌル細胞は生存できない。現在の標準は、重篤なＳＭＡ患者由来のヒト細胞株を使用することである。線維芽細胞株３８１３は、ＳＭＮ２の３つのコピーを有するＳＭＮ１ヌルである。担体親株由来の３８１４細胞（ＳＭＮ２の２つのコピーを有するＳＭＮ１＋／−）は、３８１３細胞（Ｃｏｒｉｅｌ  ＧＭ０３８１３）よりも約３〜５倍長い完全長ＳＭＮタンパク質を発現する。それぞれ３８１３Ｔおよび３８１４Ｔと呼ばれるｈＴＥＲＴ不死化３８１３および３８１４細胞クローンを単離して、内因性ＳＭＮタンパク質レベルを測定した。ＳＭＮタンパク質レベルは適宜、ＤｕｎｎｅｔｔまたはＢｏｎｆｅｒｒｏｎｉを使用した事後分析（ｐｏｓｔ−ｈｏｃ  ａｎａｌｙｓｉｓ）による一元配置ＡＮＯＶＡによる統計分析により、定量的イムノブロットにおける用量応答により分析した。新鮮な培地および化合物を添加し、４８時間インキュベートした。４８時間後、細胞を採取し、冷リン酸緩衝生理食塩水で洗浄し、Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｌｙｓｉｓ  Ｂｕｆｆｅｒ（１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、１０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ  ｐＨ８．０、２％ＳＤＳ、およびタンパク質阻害剤カクテル）中に溶解した。レーンあたり約５μｇの総タンパク質が、ＳＭＮおよびａ−チューブリンのイムノブロット検出のための線形範囲内にあることが見出された。ウェスタンブロットを、２Ｆ１（ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  ＃１２９７６）マウスモノクローナル抗体およびａ−チューブリンを用いてＳＭＮについてプローブした。タンパク質の定量は、Ｆｕｊｉｆｉｌｍ  ＬＡＳ−４０００  Ｍｕｌｔｉｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  Ｉｍａｇｉｎｇ  Ｓｙｓｔｅｍを用いて実施した。イムノブロット上でそれぞれのバンドについてシグナル強度を測定し、ローディング対照に対して正規化し、増加倍率を適切なＤＭＳＯ処理対照に対して決定した。患者由来の線維芽細胞（３８１３細胞；ＳＭＮ１−／−ＳＭＮ２＋／＋）の化合物２９１−８８−１による処理により、ウェスタンブロット分析によって決定して、用量依存的にＳＭＮタンパク質発現が２〜３倍増加した（図１Ｂ）。
【００９４】
ＬＤＮ−２９１−８８−１によるＨＥＫ２９３  ＳＭＮ２レポーター細胞の２４時間および４８時間曝露でのＳＭＮ−ルシフェラーゼの濃度依存的増加が示された。３μＭのＬＤＮ  ２９１−８８−１では、４８時間でＤＭＳＯ対照を４００％上回る最大増加が認められた（図２）。
【００９５】
ＬＤＮ２９１−８８−１の作用機構を調べるために、ＨＥＫ２９３  ＳＭＮ２レポーター細胞を、１０μＭ＋１０μＭのシクロヘキシミドの濃度でＬＤＮ２９１−８８−１に曝露して新たなタンパク質合成を遮断するか、または比較のためにシクロヘキシミド＋ＤＭＳＯの同じ濃度で曝露した。細胞溶解物を、図３Ａおよび３Ｂにおけるように２４時間まで示された時間で調製した。ＳＭＮ−ルシフェラーゼタンパク質の量をルシフェラーゼアッセイによって定量し、時間に対してプロットした。ＤＭＳＯ処理細胞におけるＳＭＮ−ルシフェラーゼの半減期は３．５時間であったが、ＬＤＮ２９１−８８−１はその半減期を２４時間超に増加させた（図３Ａ）。ウミシイタケ（ｒｅｎｉｌｌａ）ルシフェラーゼに対する効果はなかった（図３Ｂ）。これらのデータは、ＬＤＮ２９１−８８−１がＳＭＮタンパク質を安定化することによって転写後に作用することを示す。
【００９６】
実施例２
この実施例では、ＬＤＮ−７５シリーズ化合物ＬＤＮ２１２１０４と組み合わせた化合物２９１−８８−１の活性を、ＳＭＮタンパク質レベルの相加的または相乗的増加について分析した。
【００９７】
ＬＤＮ−７５シリーズ化合物が転写後に作用し、ＳＭＮタンパク質を安定化する一方で、ＬＤＮ−７６シリーズ化合物が転写レベルでＳＭＮ２を刺激するという証拠が以前に報告された（Ｃｈｅｒｒｙら、ＥＭＢＯ  Ｍｏｌ  Ｍｅｄ（２０１３）５、１０３５〜５０頁）。従って、本開示の化合物を同様に分析した。
【００９８】
化合物２９１−８８−１を用量応答実験においてＬＤＮ−７６と混合した。ＬＤＮ−７６単独（青色）またはＬＤＮ２９１−８８−１単独（緑色）と比較して、ＳＭＮ２−ルシフェラーゼ活性化の大きさは増強された（２９１−８８−１＋ＬＤＮ−２１４３０１、紫線）。理論的添加物は黒で示される（図３Ａおよび３Ｂ）。応答の大きさの相乗的増加は、別の機構または経路を介して協働する化合物の組み合わせに起因すると提案される。
【００９９】
しかしながら、化合物２９１−８８−１をＬＤＮ−７５（ＬＤＮ２１２０１４）と組み合わせた場合、活性の増加はなかった（図４）。類似の作用様式を有する２つの化合物の組み合わせに起因して、大きさの応答がないことが提案される。
【０１００】
実施例３
この実施例では、ＬＤＮ−７６シリーズ類似体、ＬＤＮ−２１２３９１と組み合わせた化合物２９１−８８−１の活性を、ＳＭＮタンパク質レベルの相加的または相乗的増加について分析した。
【０１０１】
実施例２に記載されるように、化合物２９１−８８−１を用量応答実験においてＬＤＮ−２１２３９１と混合した。ＬＤＮ−７６単独（緑色）またはＬＤＮ２９１−８８−１単独（青色）と比較して、ＳＭＮ２−ルシフェラーゼ活性化の大きさは増強された（２９１−８８−１＋ＬＤＮ−２１２３９１、紫線）。理論的添加物は黒で示される（図５）。
【０１０２】
実施例４
この実施例では、ＳＭＮ２スプライシング化合物ＳＭＮ−Ｃ２と組み合わせた化合物２９１−８８−１の活性を、ＳＭＮタンパク質レベルの相加的または相乗的増加について分析した。
【０１０３】
実施例２に記載されるように、化合物２９１−８８−１を用量応答実験においてＳＭＮ−Ｃ２と混合した。ＳＭＮ２−ルシフェラーゼ活性化の大きさは、ＳＭＮ−Ｃ２単独（赤色）またはＬＤＮ２９１−８８−１単独（青色）と比較して増強された（２９１−８８−１＋ＳＭＮ−Ｃ２、紫線）。理論的添加物は黒で示される（図６）。応答の大きさの相乗的増加は、別の機構または経路を介して協働する化合物の組み合わせに起因すると提案される。
【０１０４】
実施例５
この実施例では、ＳＭＮ２スプライシング化合物ＮＶＳ−ＳＭ２と組み合わせた化合物２９１−８８−１の活性を、ＳＭＮタンパク質レベルの相加的または相乗的増加について分析した。
【０１０５】
実施例２に記載されるように、化合物２９１−８８−１を用量応答実験においてＮＶＳ−ＳＭ２と混合した。ＳＭＮ２−ルシフェラーゼ活性化の大きさは、ＮＶＳ−ＳＭ２単独（赤色）またはＬＤＮ２９１−８８−１単独（青色）と比較して増強された（２９１−８８−１＋ＮＶＳ−ＳＭ２、紫線）。理論的添加物は黒で示される（図７Ａおよび７Ｂ）。応答の大きさの相乗的増加は、別の機構または経路を介して協働する化合物の組み合わせに起因すると提案される。
【０１０６】
実施例６
この実施例では、ＳＭＮ２スプライシング化合物ＳＭＮ−Ｃ２と組み合わせたＬＤＮ−７６シリーズ類似体、ＬＤＮ−２１２３９１の活性を、ＳＭＮタンパク質レベルの相加的または相乗的増加について分析した。
【０１０７】
実施例２に記載されるように、ＬＤＮ−２１２３９１を用量応答実験においてＳＭＮ−Ｃ２と混合した。ＳＭＮ２−ルシフェラーゼ活性化の大きさは、ＳＭＮ−Ｃ２単独（赤色）またはＬＤＮ−２１３９１単独（緑色）と比較して増強された（ＬＤＮ−２１２３９１＋ＳＭＮ−Ｃ２、紫線）。理論的添加物は黒で示されている（図８）。応答の大きさの相乗的増加は、別の機構または経路を介して協働する化合物の組み合わせに起因すると提案される。
【０１０８】
実施例７
この実施例では、ＳＭＮ２スプライシング化合物、ＮＶＳ−ＳＭ２と組み合わせたＬＤＮ−７６シリーズ類似体、ＬＤＮ−２１２３９１の活性を、ＳＭＮタンパク質レベルの相加的または相乗的増加について分析した。
【０１０９】
実施例２に記載されるように、ＬＤＮ−２１２３９１を、用量応答実験においてＮＶＳ−ＳＭ２と混合した。ＳＭＮ２−ルシフェラーゼ活性化の大きさは、ＮＶＳ−ＳＭ２単独（赤色）またはＬＤＮ２９１−８８−１単独（青色）と比較して増強された（ＬＤＮ−２１２３９１＋ＮＶＳ−ＳＭ２、紫線）。理論的添加物は黒で示される（図９Ａおよび９Ｂ）。応答の大きさの相乗的増加は、別の機構または経路を介して協働する化合物の組み合わせに起因すると提案される。
【０１１０】
実施例８
この実施例では、ＬＤＮ−７６シリーズ類似体ＬＤＮ−２１２３９１およびＳＭＮ２スプライシング化合物ＮＶＳ−ＳＭ２の両方と組み合わせた化合物２９１−８８−１の活性を、ＳＭＮタンパク質レベルの相加的または相乗的増加について分析した。
【０１１１】
実施例２に記載されるように、化合物２９１−８８−１を、用量応答実験においてＬＤＮ−２１２３９１およびＮＶＳ−ＳＭ２と混合した。ＳＭＮ２−ルシフェラーゼ活性化の大きさは、ＬＤＮ−７６単独（緑色）、ＮＶＳ−ＳＭ２（赤色）またはＬＤＮ２９１−８８−１単独（青色）と比較して、増強された（２９１−８８−１＋ＬＤＮ−２１２３９１＋ＮＶＳ−ＳＭ２、紫色線）。理論的添加物は黒で示される（図１０）。
【０１１２】
実施例９
この実施例では、化合物２９１−８８−１のｉｎ  ｖｉｖｏ生存効果をマウスにおいて分析した。
【０１１３】
化合物２９１−８８−１を、正常成体Ｃ５７ＢＬ／６マウスに腹腔内（ＩＰ）または経口（ＰＯ）投与のいずれかにより投与した。両投与手段についての薬物動態データを図１１および１２に示す。
【０１１４】
化合物２９１−８８−１を、ＳＭＡマウスＳＭＮΔ７ＦＶＢ．ＳＭＮΔ７；ＳＭＮ２；Ｓｍｎ（Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ  ００５０２５）への腹腔内（ＩＰ）投与のいずれかによって投与した。１０ｍｇ／ｋｇ（ＩＰ）でのＳＭＮΔ７動物の毎日の処置を可能な限り継続した。処置動物の寿命を、未処置動物およびビヒクル（ＶＨ）処置動物の寿命と比較した（図１３）。ＶＨ処置動物は、４０％ＰＥＧ４００＋６０％（水中の１０％ＨＰ−β−ＣＤ）での処置を含んだ。未処置動物の生存期間中央値は１１．５日であったが、ＶＨ処置動物の生存期間中央値は１３日であった（統計的に有意ではない、ｐ＝０．３１）。化合物２９１−８８−１による処置は、生存期間中央値を１８．５日に増加させた（ｐ＜０．０００１）。
【０１１５】
実施例１０
この実施例では、マウスにおける化合物２９１−８８−１のｉｎ  ｖｉｖｏ効果を評価した。
【０１１６】
動物を１日１回（皮下注射または経口）で５日間処置し、生後２日目（ＰＮＤ）から開始し、２９１−８８−１の用量を増加させた。ＰＮＤ７において、マウスを屠殺し、組織を採取した。組織をＰＮＤ７において処置動物から採取し、非トランスジェニック対照マウス（ＦＶＢ）およびＶＨ（ビヒクル：ＰＥＧ：ＰＢＳ  ５０：５０）処置動物からの組織と比較した。脳抽出物を、ハウスキーピング遺伝子、アクチンおよびＧＡＰＤＨと比較して、総ＳＭＮタンパク質についてアッセイした（それぞれ図１４および１５）。２〜３倍の範囲のＳＭＮタンパク質レベルの用量依存的増加があった。
【０１１７】
実施例１１
この実施例では、化合物２９８−８９８−１の種々の類似体を製造する。
【化１９】
2019509272.tif 000033
ｔｅｒｔ−ブチル（６−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）カルバメート。６−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−アミン（５ｇ、３０．８ｍｍｏｌ）およびジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート（６．７３ｇ、３０．８ｍｍｏｌ）を１，４−ジオキサン（３０ｍＬ）に溶解した。反応物を１００℃にて４８時間還流した。別の半当量のジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネートを、８時間および２４時間の撹拌後に溶液に添加した。混合物を室温に冷却した。過剰の酢酸エチルを加え、反応物をブラインで２回洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥し、濃縮し、１０：１シクロヘキサン／酢酸エチル混合物中で再結晶して、生成物を得た。収率：７０％．１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：１０．００（ｓ，１Ｈ），８．７３（ｄ，Ｊ＝２．４３Ｈｚ，１Ｈ），８．１１（ｄｄ，Ｊ＝８．６５，２．２４Ｈｚ，１Ｈ），７．７９（ｄ，Ｊ＝８．６５Ｈｚ，１Ｈ），１．４８（ｓ，９Ｈ）．［Ｍ＋１］＋＝２６２．１。
【化２０】
2019509272.tif 000034
【０１１８】
ｔｅｒｔ−ブチル（４−ヨード−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）カルバメート。不活性雰囲気下で、ｔｅｒｔ−ブチル（６−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）カルバメート（２．５ｇ、９．５３ｍｍｏｌ）を無水テトラヒドロフラン（５０ｍＬ）に溶解した。ＴＭＥＤＡ（２．５５ｇ、２１．９３ｍｍｏｌ）を溶液に添加し、次いで、それをアセトン／ドライアイス浴を使用して−７８℃に冷却し、３０分間撹拌した。ｎ−ＢｕＬｉ（１０．９５ｍＬ、２１．９３ｍｍｏｌ）を１５分にわたって滴下し、溶液を−７８℃でさらに３０分間撹拌した。次いで、丸底フラスコを塩漬けした氷浴に移し、−１０℃で３０分間撹拌した。反応溶液を−７８℃に冷却した後、テトラヒドロフラン（１０ｍＬ）に溶解したヨウ素（３．６３ｇ、１４．３ｍｍｏｌ）の溶液を滴下した。反応物を室温に達するまで一晩撹拌した。混合物を飽和ＫＨＳＯ３（１０ｍＬ）でクエンチし、生成物を飽和ＮａＣｌで洗浄し、酢酸エチルで回収した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥し、濃縮した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（シクロヘキサン／酢酸エチル：９５／５）で精製し、真空下で乾燥した。収率：３５％．１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：９．０７（ｓ，１Ｈ），８．６２（ｓ，１Ｈ），８．３６（ｓ，１Ｈ），１．４８（ｓ，９Ｈ）．［Ｍ＋１］＋＝３８９．０。
【化２１】
2019509272.tif 000035
【０１１９】
４−ヨード−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−アミン。ｔｅｒｔ−ブチル（４−ヨード−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−イル）カルバメート（２．５ｇ、６．４４ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（４５ｍＬ）に溶解した。トリフルオロ酢酸（３．６７ｇ、３２．２ｍｍｏｌ）を溶液に添加した。溶液を２１℃で２４時間撹拌した。次いで、溶液を過剰のジクロロメタンに取り、飽和ＮａＣｌで洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥し、濃縮した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（シクロヘキサン／酢酸エチル  ８０／２０）で精製し、真空下で乾燥した。収率：９１％．１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：８．０（ｓ，１Ｈ），７．９５（ｓ，１Ｈ），６．２１（ｓ，２Ｈ）．［Ｍ＋１］＋＝２８９．０。
【化２２】
2019509272.tif 000036
【０１２０】
６−（トリフルオロメチル）チアゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−２−アミン。チオシアン酸カリウム（１．０１ｇ、１０．４ｍｍｏｌ）を１Ｍ塩酸溶液（２４ｍＬ）に溶解した。４−ヨード−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−アミン（１．５ｇ、５．２ｍｍｏｌ）を加え、溶液を９０℃で４８時間加熱した。室温に冷却した後、溶液をｐＨが７に等しくなるまで飽和ＮａＨＣＯ３で中和した。溶液を酢酸エチルに取り、２層を分離した。水層を過剰の酢酸エチルで処理して、より多くの生成物を抽出した。全ての有機層を合わせ、飽和ＮａＣｌで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濃縮した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（シクロヘキサン／酢酸エチル  ５０／５０）で精製し、真空下で乾燥した。収率：５８％．１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：８．６４（ｓ，１Ｈ），８．３３（ｓ，１Ｈ），８．１５（ｓ，２Ｈ）．［Ｍ＋１］＋＝２２１．１。
【化２３】
2019509272.tif 000037
【０１２１】
Ｎ−（６−トリフルオロメチル）チアゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）ベンズアミド。Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）（２５８ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（２ｍＬ）中の１−［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］−１Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジニウム３−オキシドヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ）（５７０ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）の溶液に徐々に滴下した。溶液を５分間撹拌し、次いで反応バイアル中の適切なカルボン酸（１２２ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）および６−（トリフルオロメチル）チアゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−２−アミン（２２０ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）の混合物に滴下した。溶液を８５℃で２４時間撹拌した。反応物を室温まで冷却した後、反応物を酢酸エチルに取り、飽和ＮＨ４Ｃｌ、飽和ＮａＨＣＯ３、および飽和ＮａＣｌで洗浄した。全ての有機層を合わせ、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濃縮した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（シクロヘキサン／酢酸エチル  ６５／３５）で精製し、真空下で乾燥した。収率：４３％．１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：１３．３３３（ｓ，１Ｈ），９．１６５（ｓ，１Ｈ），８．７２０（ｄ，Ｊ＝０．５６，１Ｈ），８．１５０（ｄｔ，Ｊ＝８．２５，１．５９Ｈｚ，２Ｈ），７．６８６（ｍ，１Ｈ），７．５８２（ｍ，２Ｈ）．［Ｍ＋１］＋＝３２４．１。
または
【化２４】
2019509272.tif 000038
【０１２２】
Ｎ−（６−トリフルオロメチル）チアゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）ベンズアミド。４−ヨード−６−（トリフルオロメチル）ピリジン−３−アミン（１４４ｍｇ、０．５ミリモル）をアセトン（１５ｍＬ）に溶解した。ベンゾイルイソチオシアネート（１６３ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）を加え、溶液を４８時間還流した。溶液を室温まで冷却した後、生成物が溶液から沈殿した。固体を真空下で乾燥させた。収率：９０％．１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：１３．３３３（ｓ，１Ｈ），９．１６５（ｓ，１Ｈ），８．７２０（ｄ，Ｊ＝０．５６，１Ｈ），８．１５０（ｄｔ，Ｊ＝８．２５，１．５９Ｈｚ，２Ｈ），７．６８６（ｍ，１Ｈ），７．５８２（ｍ，２Ｈ）．［Ｍ＋１］＋＝３２４．１。
【化２５】
2019509272.tif 000039
【０１２３】
６−（トリフルオロメチル）オキサゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−２−アミン。５−アミノ−２−（トリフルオロメチル）ピリジン−４−オール（２２０ｍｇ、１．２４ｍｍｏｌ）を無水ＴＨＦ（７ｍＬ）に溶解した。次いで、ジ（１Ｈ−イミダゾール−１−イル）メタニミンを溶液に溶解した。反応物を６５℃で２４時間撹拌した。溶液を室温まで冷却した後、溶液を酢酸エチルに取り、脱イオン水、飽和ＮＨ４Ｃｌ、および飽和ＮａＣｌで洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮して粗物質にした。過剰のＣＨ２Ｃｌ２を粗固形物に添加し、沈殿させた。純粋な固体を濾過し、真空下で乾燥させた。収率：９１％．１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：８．５８（ｓ，１Ｈ），８．１７（ｓ，２Ｈ），８．０２（ｓ，１Ｈ）．［Ｍ＋１］＋＝２０４．１。
【化２６】
2019509272.tif 000040
【０１２４】
Ｎ−（６−（トリフルオロメチル）オキサゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）ベンズアミド。６−（トリフルオロメチル）オキサゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−２−アミン（７０ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）および４−（ジメチルアミノ）ピリジン（４．２１ｍｇ、１０％ｍｍｏｌ）を無水ピリジン（２ｍＬ）に溶解し、窒素下で０℃に冷却した。塩化ベンゾイル（４８．４ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）を撹拌溶液に滴下した。反応物を室温に温め、さらに１８時間撹拌した。次いで、溶液を濃縮し、ＤＣＭに取った。有機層を脱イオン水、飽和ＮａＨＣＯ３、および飽和ＮａＣｌで洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥し、粗物質まで濃縮した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（シクロヘキサン／酢酸エチル：８０／２０）で精製し、真空下で乾燥した。収率：２０％．１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：８．９７（ｓ，１Ｈ），８．３４（ｓ，１Ｈ），８．０５（ｄ，Ｊ＝７．３５Ｈｚ，２Ｈ），７．５６−７．５３（ｍ，３Ｈ）．［Ｍ＋１］＋＝３０８．１。
【化２７】
2019509272.tif 000041
【０１２５】
Ｎ−（（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）カルバモチオイル）ベンズアミド。３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−アミン（５．８８ｇ、３０ｍｍｏｌ）およびベンゾイルイソチオシアネート（７．３４ｇ、４５ｍｍｏｌ）をアセトン（５０ｍＬ）に溶解した。その溶液を４８時間還流した。反応物を室温に冷却した後、溶液を黄色の油に濃縮した。粗物質を酢酸エチル（２００ｍＬ）および飽和ＮａＣｌに取った。有機層を回収し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濃縮した。ＴＬＣを４：１のヘキサン／酢酸エチル中に取り、純度を確認した。黄色の固体を濾過により回収した。収率：９３％．１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：１２．５８（ｓ，１Ｈ），１２．００（ｓ，１Ｈ），８．９２（ｄ，Ｊ＝０．８５Ｈｚ，１Ｈ），８．６５（ｄ，Ｊ＝１．４６Ｈｚ，１Ｈ），８．０１（ｄ，Ｊ＝７．３８Ｈｚ，２Ｈ），７．６８（ｔ，Ｊ＝７．４３Ｈｚ，１Ｈ），７．５６（ｔ，Ｊ＝７．７６Ｈｚ，２Ｈ）．［Ｍ＋１］＋＝３６０．１。
【化２８】
2019509272.tif 000042
【０１２６】
Ｎ−（６−（トリフルオロメチル）チアゾロ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イル）ベンズアミド。Ｎ−（（３−クロロ−５−（トリフルオロメチル）ピリジン−２−イル）カルバモチオイル）ベンズアミド（１０ｇ、３１ｍｍｏｌ）およびナトリウムメトキシド（３．２４ｇ、６０ｍｍｏｌ）をメチルピロリドン（６０ｍＬ）に溶解した。溶液を１２０℃で２時間撹拌した。溶液を室温に冷却した後、反応物を水に注いだ。固体を濾過し、乾燥した。収率：３０％。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：１３．４６（ｓ，１Ｈ），９．０１（ｓ，１Ｈ），８．９４（ｓ，１Ｈ），８．１８（ｄ，Ｊ＝７．３１Ｈｚ，２Ｈ），７．７１（ｔ，Ｊ＝７．３８Ｈｚ，１Ｈ），７．６０（ｔ，Ｊ＝７．７１Ｈｚ，２Ｈ）．［Ｍ＋１］＋＝３２４．１。
【０１２７】
アミド類似体を合成するための一般手順
【化２９】
2019509272.tif 000043
【０１２８】
Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）（２５８ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（２ｍＬ）中の１−［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］−１Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジニウム３−オキシドヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ）（５７０ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）の溶液にゆっくり滴下した。溶液を５分間撹拌し、次いで、反応バイアル中の適切なカルボン酸（１．０ｍｍｏｌ）およびチアゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−２−アミン誘導体（１．０ｍｍｏｌ）の混合物に滴下した。溶液を８５℃で２４時間撹拌した。反応をＴＬＣまたはＬＣＭＳでモニターした。生成物を最初に酢酸エチル中でワークアップし、飽和塩化アンモニウム、飽和重炭酸ナトリウム、および飽和塩化ナトリウムで洗浄し、次いで単離し、適切なシクロヘキサンおよび酢酸エチル混合物を使用するシリカゲルクロマトグラフィーによって精製した。
【０１２９】
以下の化合物を、上記の一般的手順を使用して調製した。
【０１３０】
Ｎ−（６−（トリフルオロメチル）チアゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）ベンズアミド
【化３０】
2019509272.tif 000044
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：１３．３５（ｓ，１Ｈ），９．１８（ｓ，１Ｈ），８．７４（ｓ，１Ｈ），８．１７（ｔｄ，Ｊ＝７．７４，１．６６Ｈｚ，２Ｈ），７．７（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ），７．６（ｔ，Ｊ＝７．５７Ｈｚ，２Ｈ）．［Ｍ＋１］＋＝３２４．１
【０１３１】
Ｎ−（６−（トリフルオロメチル）チアゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）ピコリンアミド
【化３１】
2019509272.tif 000045
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：９．２０（ｓ，１Ｈ），８．８２（ｄ，Ｊ＝３．８５Ｈｚ，１Ｈ），８．７６（ｓ，１Ｈ），８．２５（ｄ，Ｊ＝７．７３Ｈｚ，１Ｈ），８．１４（ｔ，Ｊ＝７．３２Ｈｚ，１Ｈ），７．７８（ｔ，Ｊ＝５．８１Ｈｚ，１Ｈ）．［Ｍ＋１］＋＝３２５．１
【０１３２】
Ｎ−（６−（トリフルオロメチル）チアゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）ニコチンアミド
【化３２】
2019509272.tif 000046
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：１３．５５（ｓ，１Ｈ），９．２７（ｄ，Ｊ＝１．６９Ｈｚ，１Ｈ），９．２１（ｓ，１Ｈ），８．８５（ｄｄ，Ｊ＝４．８２，１．６１Ｈｚ，１Ｈ），８．７６（ｓ，１Ｈ），８．４９（ｄｔ，Ｊ＝８．１４，１．９８Ｈｚ，１Ｈ），７．６４（ｄｄｄ，Ｊ＝７．９９，４．８４，０．６５Ｈｚ，１Ｈ）．［Ｍ＋１］＋＝３２５．１
【０１３３】
Ｎ−（６−（トリフルオロメチル）チアゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）ピリミジン−２−カルボキサミド
【化３３】
2019509272.tif 000047
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：１３．２８５（ｓ，１Ｈ），９．２２（ｓ，１Ｈ），９．１１（ｄ，Ｊ＝４．８８Ｈｚ，２Ｈ），８．７７（ｄ，Ｊ＝０．４６Ｈｚ，１Ｈ），７．９１（ｔ，Ｊ＝４．８８Ｈｚ，１Ｈ）．［Ｍ＋１］＋＝３２６．１
【０１３４】
Ｎ−（６−（トリフルオロメチル）チアゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）ピリミジン−５−カルボキサミド
【化３４】
2019509272.tif 000048
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：１３．７２（ｓ，１Ｈ），９．４３（ｓ，１Ｈ），９．４１（ｓ，２Ｈ），９．２１（ｓ，１Ｈ），８．７６（ｓ，１Ｈ）．［Ｍ＋１］＋＝３２６．１
【０１３５】
３−クロロ−４−フルオロ−Ｎ−（６−（トリフルオロメチル）チアゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）ベンズアミド
【化３５】
2019509272.tif 000049
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：１３．４４（ｓ，１Ｈ），９．１８（ｓ，１Ｈ），８．７３（ｓ，１Ｈ），８．４２（ｄｄ，Ｊ＝７．１，２．３Ｈｚ，１Ｈ），８．１９−８．１６（ｍ，１Ｈ），７．６５（ｔ，Ｊ＝８．９Ｈｚ，１Ｈ）．［Ｍ＋１］＋＝３７６．０
【０１３６】
４−クロロ−Ｎ−（６−（トリフルオロメチル）チアゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）ベンズアミド
【化３６】
2019509272.tif 000050
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，アセトン）：１１．９７（ｓ，１Ｈ），９．１０（ｓ，１Ｈ），８．５９（ｓ，１Ｈ），８．２７（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，２Ｈ），７．６８（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，２Ｈ）．［Ｍ＋１］＋＝３５８．１
【０１３７】
Ｎ−（６−（トリフルオロメチル）チアゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）チアゾール−４−カルボキサミド
【化３７】
2019509272.tif 000051
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：１０．７５（ｓ，１Ｈ），９．１８（ｓ，１Ｈ），８．９２（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），８．４８（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），８．２２（ｓ，１Ｈ）．［Ｍ＋１］＋＝３３１．０。
【０１３８】
４−フルオロ−Ｎ−（６−（トリフルオロメチル）チアゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）ベンズアミド
【化３８】
2019509272.tif 000052
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，アセトン）：１１．９０（ｓ，１Ｈ），９．０９（ｓ，１Ｈ），８．５８（ｓ，１Ｈ），８．３４（ｄｄ，Ｊ＝８．８，５．３Ｈｚ，２Ｈ），７．４（ｔ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ）．［Ｍ＋１］＋＝３４２．０，３４３．１，３４４．０
【０１３９】
Ｎ−（６−（トリフルオロメチル）チアゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）チアゾール−２−カルボキサミド
【化３９】
2019509272.tif 000053
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：１０．７０（ｓ，１Ｈ），９．２０（ｓ，１Ｈ），８．２３（ｓ，１Ｈ），８．０６（ｄ，Ｊ＝３．０Ｈｚ，１Ｈ），７．８２（ｄ，Ｊ＝３．０Ｈｚ，１Ｈ）．［Ｍ＋１］＋＝３３１．０
【０１４０】
Ｎ−（６−（トリフルオロメチル）チアゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）オキサゾール−５−カルボキサミド
【化４０】
2019509272.tif 000054
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：１３．６５（ｓ，１Ｈ），９．２０（ｓ，１Ｈ），８．８１（ｓ，１Ｈ），８．７５（ｓ，１Ｈ），８．３７（ｓ，１Ｈ）．［Ｍ＋１］＋＝３１５．１
【０１４１】
Ｎ−（６−（トリフルオロメチル）チアゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）オキサゾール−４−カルボキサミド
【化４１】
2019509272.tif 000055
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：１３．２０（ｓ，１Ｈ），９．２０（ｓ，１Ｈ），９．１３（ｓ，１Ｈ），８．７５（ｓ，１Ｈ），８．７０（ｓ，１Ｈ）．［Ｍ＋１］＋＝３１５．１
【０１４２】
Ｎ−（６−（トリフルオロメチル）チアゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）イソオキサゾール−３−カルボキサミド
【化４２】
2019509272.tif 000056
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：１３．７５（ｓ，１Ｈ），９．２５（ｄ，Ｊ＝１．７６Ｈｚ，１Ｈ），９．２２（ｓ，１Ｈ），８．７６（ｓ，１Ｈ），７．２６（ｄ，Ｊ＝１．７Ｈｚ，１Ｈ）．［Ｍ＋１］＋＝３１５．１
【０１４３】
Ｎ−（６−（トリフルオロメチル）チアゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）ピリダジン−４−カルボキサミド
【化４３】
2019509272.tif 000057
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：１３．８３（ｓ，１Ｈ），９．７６（ｄｄ，Ｊ＝２．３２，１．２６Ｈｚ，１Ｈ），９．５７（ｄｄ，Ｊ＝５．３１，１．２２Ｈｚ，１Ｈ），９．２３（ｓ，１Ｈ），８．７７（ｓ，１Ｈ），８．２８（ｄｄ，Ｊ＝５．３２，２．３７Ｈｚ，１Ｈ）．［Ｍ＋１］＋＝３２６．１
【０１４４】
Ｎ−（６−（トリフルオロメチル）チアゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）ピリミジン−４−カルボキサミド
【化４４】
2019509272.tif 000058
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：１３．３８（ｓ，１Ｈ），９．５１（ｄ，Ｊ＝１．４１Ｈｚ，１Ｈ），９．２５（ｓ，１Ｈ），９．２２（ｄ，Ｊ＝５．１２Ｈｚ，１Ｈ），８．８０（ｓ，１Ｈ），８．２４（ｄｄ，Ｊ＝５．１１，１．２６Ｈｚ，１Ｈ）．［Ｍ＋１］＋＝３２６．１
【０１４５】
Ｎ−（６−（トリフルオロメチル）チアゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）チアゾール−５−カルボキサミド
【化４５】
2019509272.tif 000059
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：１３．６８（ｓ，１Ｈ），９．６３（ｓ，１Ｈ），９．５６（ｓ，１Ｈ），９．４４（ｓ，１Ｈ），９．０４（ｓ，１Ｈ）．［Ｍ＋１］＋＝３３１．０
【０１４６】
Ｎ−（６−メトキシチアゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）ベンズアミド
【化４６】
2019509272.tif 000060
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，アセトン）：８．５９（ｓ，１Ｈ），８．２３（ｓ，１Ｈ），８．２１（ｔ，Ｊ＝１．５７Ｈｚ，１Ｈ），７．７０（ｔ，Ｊ＝７．３７Ｈｚ，１Ｈ），７．６１（ｔ，Ｊ＝７．５９Ｈｚ，２Ｈ），７．３６（ｓ，１Ｈ），３．９５（ｓ，３Ｈ）．［Ｍ＋１］＋＝２８６．１
【０１４７】
Ｎ−（６−（トリフルオロメチル）チアゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド
【化４７】
2019509272.tif 000061
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，アセトン）：９．０９（ｓ，１Ｈ），８．５９（ｓ，１Ｈ），８．００（ｓ，１Ｈ），７．０５（ｓ，１Ｈ）．［Ｍ＋１］＋＝３１４．１
【０１４８】
Ｎ−（６−（トリフルオロメチル）チアゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）イソオキサゾール−５−カルボキサミド
【化４８】
2019509272.tif 000062
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，アセトン）：９．１４３（ｓ，１Ｈ），８．７６２（ｄ，Ｊ＝１．９２Ｈｚ，１Ｈ），８．６３５（ｓ，１Ｈ），７．５０５（ｄ，Ｊ＝１．９２Ｈｚ，１Ｈ）．［Ｍ＋１］＋＝３１５．１
【０１４９】
５−メチル−Ｎ−（６−（トリフルオロメチル）チアゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）イソオキサゾール−３−カルボキサミド
【化４９】
2019509272.tif 000063
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：１３．６９（ｓ，１Ｈ），９．２１（ｓ，１Ｈ），８．７６（ｓ，１Ｈ），６．８９（ｓ，１Ｈ），２．５４（ｓ，３Ｈ）．［Ｍ＋１］＋＝３２９．１
【０１５０】
Ｎ−（６−（トリフルオロメチル）チアゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）イソチアゾール−５−カルボキサミド
【化５０】
2019509272.tif 000064
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：１３．８２（ｓ，１Ｈ），９．２０（ｓ，１Ｈ），８．８１（ｄ，Ｊ＝１．８８Ｈｚ，１Ｈ），８．７５（ｓ，１Ｈ），８．３７（ｄ，Ｊ＝１．８１，１Ｈ）．［Ｍ＋１］＋＝３３１．１
【０１５１】
Ｎ−（６−（トリフルオロメチル）チアゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）イソチアゾール−４−カルボキサミド
【化５１】
2019509272.tif 000065
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：１３．４６（ｓ，１Ｈ），１０．０５（ｓ，１Ｈ），９．１８（ｓ，２Ｈ），８．７４（ｓ，１Ｈ）．［Ｍ＋１］＋＝３３１．０
【０１５２】
Ｎ−（６−（トリフルオロメチル）チアゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）イソチアゾール−３−カルボキサミド
【化５２】
2019509272.tif 000066
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：１３．４２（ｓ，１Ｈ），９．２９（ｄ，Ｊ＝４．７２Ｈｚ，１Ｈ），９．２０（ｓ，１Ｈ），８．７５（ｓ，１Ｈ），８．０７（ｄ，Ｊ＝４．７，１Ｈ）．［Ｍ＋１］＋＝３３１．１
【０１５３】
Ｎ−（６−（トリフルオロメチル）オキサゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）ベンズアミド
【化５３】
2019509272.tif 000067
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：８．９７（ｓ，１Ｈ），８．３４（ｓ，１Ｈ），８．０５（ｄ，Ｊ＝７．３５Ｈｚ，２Ｈ），７．５６−７．５３（ｍ，３Ｈ）．［Ｍ＋１］＋＝３０８．１
【０１５４】
Ｎ−（６−（トリフルオロメチル）チアゾロ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イル）ベンズアミド
【化５４】
2019509272.tif 000068
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：１３．４６（ｓ，１Ｈ），９．０１（ｓ，１Ｈ），８．９４（ｓ，１Ｈ），８．１８（ｄ，Ｊ＝７．３１Ｈｚ，２Ｈ），７．７１（ｔ，Ｊ＝７．３８Ｈｚ，１Ｈ），７．６０（ｔ，Ｊ＝７．７１Ｈｚ，２Ｈ）．［Ｍ＋１］＋＝３２４．１
【０１５５】
Ｎ−（６−（トリフルオロメチル）チアゾロ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イル）ピコリンアミド
【化５５】
2019509272.tif 000069
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：９．０３（ｄ，Ｊ＝１．８７Ｈｚ，１Ｈ），８．９５（ｔ，Ｊ＝１．１３Ｈｚ，１Ｈ），８．８２（ｄｄｄ，Ｊ＝４．７０，１．５８，０．９０Ｈｚ，１Ｈ），８．２４（ｄｔ，Ｊ＝７．８１，０．９８Ｈｚ，１Ｈ），８．１４（ｔｄ，Ｊ＝７．７１，１．６８Ｈｚ，１Ｈ），７．７８（ｄｄｄ，Ｊ＝７．５８，４．７３，１．１８Ｈｚ，１Ｈ）．［Ｍ＋１］＋＝３２５．１
【０１５６】
Ｎ−（６−（トリフルオロメチル）チアゾロ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イル）チアゾール−４−カルボキサミド
【化５６】
2019509272.tif 000070
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：９．０６（ｓ，１Ｈ），８．５５（ｓ，１Ｈ），８．３８（ｓ，１Ｈ），８．３１（ｓ，１Ｈ）．［Ｍ＋１］＋＝３３１．０
【０１５７】
Ｎ−（６−（トリフルオロメチル）チアゾロ［４，５−ｂ］ピリジン−２−イル）チアゾール−５−カルボキサミド
【化５７】
2019509272.tif 000071
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）：９．４３（ｓ，１Ｈ），８．９５（ｄ，Ｊ＝７．２０Ｈｚ，２Ｈ），８．９１（ｓ，１Ｈ）．［Ｍ＋１］＋＝３３１．０
【０１５８】
Ｎ−（６−トリフルオロメチル）チアゾロ［４，５−ｃ］ピリジン−２−イル）オキサゾール−２−カルボキサミド
【化５８】
2019509272.tif 000072
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，アセトン）：９．１０（ｓ，１Ｈ），８．５８（ｂｒ，１Ｈ），８．３３（ｄ，Ｊ＝１．０Ｈｚ，１Ｈ），７．５５（ｂｒ，１Ｈ）．［Ｍ＋１］＋＝３１５．０
【図１Ａ】
2019509272.tif 000119
【図１Ｂ】
2019509272.tif 000120
【図１Ｃ】
2019509272.tif 000121
【図２】
2019509272.tif 000122
【図３】
2019509272.tif 000123
【図４】
2019509272.tif 000124
【図５】
2019509272.tif 000125
【図６】
2019509272.tif 000126
【図７】
2019509272.tif 000127
【図８】
2019509272.tif 000128
【図９】
2019509272.tif 000129
【図１０】
2019509272.tif 000130
【図１１】
2019509272.tif 000131
【図１２】
2019509272.tif 000132
【図１３】
2019509272.tif 000133
【図１４】
2019509272.tif 000134
【図１５】
2019509272.tif 000135
【手続補正書】
【提出日】平成30年10月24日(2018.10.24)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉの式：
【化１】
2019509272.tif 000136
（式中、
Ｘは、炭素または窒素からなる群から選択され、
Ｙは、炭素または窒素からなる群から選択され、ここで、ＸおよびＹのうちの少なくとも１つは窒素であり、
Ｚは、硫黄または酸素からなる群から選択され、
Ｒ１は、水素、アルキル、アルコキシ、ハロゲン、ハロアルキル、およびアミノアルキルから選択され、
Ｒ２は、非置換または置換フェニルおよび非置換または置換ヘテロアリールから選択され、ここで、非置換ヘテロアリールは、６員ヘテロアリールおよび５員ヘテロアリールからなる群から選択され、Ｒ２が置換フェニルまたは置換ヘテロアリールである場合、置換基は、水素、ハロゲン、低級アルキル、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される）
を有する化合物、またはそのプロドラッグを含むＳＭＮタンパク質安定剤および
式（ＩＶ）の式：
【化２】
2019509272.tif 000137
（式中、
Ｒ２およびＲ３の各々は独立してハロゲン、Ｒ’、−ＯＲ’であり、
ｂは１〜５であり、
Ｘ１は、−Ｃ（Ｒｘ）２−、−ＮＲｘ−、−ＮＲｘＣ（Ｒｘ）２−または−ＯＣ（Ｒｘ）２−であり、
Ｘ２は、−Ｃ（Ｒｘ）２−または−ＮＲｘ−であり、
各々のＲｘは独立してＲ’、−（Ｃ１−６脂肪族）−Ｎ（Ｒ’）２、または−（Ｃ１−６脂肪族）−ＯＲ’であり、
各々のＲ’は独立して−Ｒ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ、−ＣＯ２Ｒ、もしくは−ＳＯ２Ｒであるか、または同じ窒素上の２つのＲ’はそれらの介在する原子と一緒になって、窒素、酸素および硫黄から独立して選択される１〜２個のヘテロ原子を有する３〜７員の複素環を形成し、
各々のＲは、水素、またはＣ１−６脂肪族、フェニル、３〜７員の飽和もしくは部分不飽和炭素環、８〜１０員の二環式飽和、部分不飽和もしくはアリール炭素環、窒素、酸素もしくは硫黄から独立して選択される１〜３個のヘテロ原子を有する５〜６員の単環式ヘテロアリール環、窒素、酸素もしくは硫黄から独立して選択される１〜２個のヘテロ原子を有する３〜７員の飽和もしくは部分不飽和複素環、窒素、酸素もしくは硫黄から独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を有する８〜１０員の二環式飽和もしくは部分不飽和複素環、または窒素、酸素もしくは硫黄から独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を有する８〜１０員の二環式ヘテロアリール環から選択される置換されていてもよい基である）
を有する化合物、またはその薬学的に許容される塩を含むＳＭＮ２転写エンハンサーを含む組成物。
【請求項２】
前記ＳＭＮタンパク質安定剤が、
【化３】
2019509272.tif 000138
【化４】
2019509272.tif 000139
【化５】
2019509272.tif 000140
【化６】
2019509272.tif 000141
からなる群から選択される、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記ＳＭＮタンパク質安定剤が、
【化７】
2019509272.tif 000142
である、請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
【化８】
2019509272.tif 000143
【化９】
2019509272.tif 000144
からなる群から選択される構造を含むＳＭＮタンパク質安定剤および式（ＩＶ）の式：
【化１０】
2019509272.tif 000145
（式中、
Ｒ２およびＲ３の各々は独立してハロゲン、Ｒ’、−ＯＲ’であり、
ｂは１〜５であり、
Ｘ１は、−Ｃ（Ｒｘ）２−、−ＮＲｘ−、−ＮＲｘＣ（Ｒｘ）２−または−ＯＣ（Ｒｘ）２−であり、
Ｘ２は、−Ｃ（Ｒｘ）２−または−ＮＲｘ−であり、
各々のＲｘは独立してＲ’、−（Ｃ１−６脂肪族）−Ｎ（Ｒ’）２、または−（Ｃ１−６脂肪族）−ＯＲ’であり、
各々のＲ’は独立して−Ｒ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ、−ＣＯ２Ｒ、もしくは−ＳＯ２Ｒであるか、または同じ窒素上の２つのＲ’はそれらの介在する原子と一緒になって、窒素、酸素および硫黄から独立して選択される１〜２個のヘテロ原子を有する３〜７員の複素環を形成し、
各々のＲは、水素、またはＣ１−６脂肪族、フェニル、３〜７員の飽和もしくは部分不飽和炭素環、８〜１０員の二環式飽和、部分不飽和もしくはアリール炭素環、窒素、酸素もしくは硫黄から独立して選択される１〜３個のヘテロ原子を有する５〜６員の単環式ヘテロアリール環、窒素、酸素もしくは硫黄から独立して選択される１〜２個のヘテロ原子を有する３〜７員の飽和もしくは部分不飽和複素環、窒素、酸素もしくは硫黄から独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を有する８〜１０員の二環式飽和もしくは部分不飽和複素環、または窒素、酸素もしくは硫黄から独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を有する８〜１０員の二環式ヘテロアリール環から選択される置換されていてもよい基である）
を有する化合物またはその薬学的に許容される塩を含むＳＭＮ２転写エンハンサーを含む組成物。
【請求項５】
前記ＳＭＮタンパク質安定剤が、
【化１１】
2019509272.tif 000146
からなる群から選択される構造を含む、請求項４に記載の組成物。
【請求項６】
前記ＳＭＮ転写エンハンサーが、
【化１２】
2019509272.tif 000147
【化１３】
2019509272.tif 000148
【化１４】
2019509272.tif 000149
【化１５】
2019509272.tif 000150
【化１６】
2019509272.tif 000151
からなる群から選択される構造を有する、請求項１または請求項４に記載の組成物。
【請求項７】
前記ＳＭＮタンパク質安定剤が、
【化１７】
2019509272.tif 000152
の構造を有し、
前記ＳＭＮ転写エンハンサーが、
【化１８】
2019509272.tif 000153
の構造を有する、請求項１または請求項４に記載の組成物。
【請求項８】
ＳＭＮ２スプライシング化合物および式（ＩＶ）の式：
【化１９】
2019509272.tif 000154
（式中、
Ｒ２およびＲ３の各々は独立してハロゲン、Ｒ’、−ＯＲ’であり、
ｂは１〜５であり、
Ｘ１は、−Ｃ（Ｒｘ）２−、−ＮＲｘ−、−ＮＲｘＣ（Ｒｘ）２−または−ＯＣ（Ｒｘ）２−であり、
Ｘ２は、−Ｃ（Ｒｘ）２−または−ＮＲｘ−であり、
各々のＲｘは独立してＲ’、−（Ｃ１−６脂肪族）−Ｎ（Ｒ’）２、または−（Ｃ１−６脂肪族）−ＯＲ’であり、
各々のＲ’は独立して−Ｒ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ、−ＣＯ２Ｒ、もしくは−ＳＯ２Ｒであるか、または同じ窒素上の２つのＲ’はそれらの介在する原子と一緒になって、窒素、酸素および硫黄から独立して選択される１〜２個のヘテロ原子を有する３〜７員の複素環を形成し、
各々のＲは、水素、またはＣ１−６脂肪族、フェニル、３〜７員の飽和もしくは部分不飽和炭素環、８〜１０員の二環式飽和、部分不飽和もしくはアリール炭素環、窒素、酸素もしくは硫黄から独立して選択される１〜３個のヘテロ原子を有する５〜６員の単環式ヘテロアリール環、窒素、酸素もしくは硫黄から独立して選択される１〜２個のヘテロ原子を有する３〜７員の飽和もしくは部分不飽和複素環、窒素、酸素もしくは硫黄から独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を有する８〜１０員の二環式飽和もしくは部分不飽和複素環、または窒素、酸素もしくは硫黄から独立して選択される１〜４個のヘテロ原子を有する８〜１０員の二環式ヘテロアリール環から選択される置換されていてもよい基である）
を有する化合物またはその薬学的に許容される塩を含むＳＭＮ２転写エンハンサーを含む組成物。
【請求項９】
前記スプライシング化合物が、ＳＭＮ−Ｃ２、ＮＶＳ−ＳＭ２ヌシネルセン、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項８に記載の組成物。
【請求項１０】
前記ＳＭＮ転写エンハンサーが、
【化２０】
2019509272.tif 000155
【化２１】
2019509272.tif 000156
【化２２】
2019509272.tif 000157
【化２３】
2019509272.tif 000158
【化２４】
2019509272.tif 000159
からなる群から選択される構造を有する、請求項８に記載の組成物。
【請求項１１】
式Ｉの式：
【化２５】
2019509272.tif 000160
（式中、
Ｘは、炭素または窒素からなる群から選択され、
Ｙは、炭素または窒素からなる群から選択され、ここで、ＸおよびＹのうちの少なくとも１つは窒素であり、
Ｚは、硫黄または酸素からなる群から選択され、
Ｒ１は、水素、アルキル、アルコキシ、ハロゲン、ハロアルキル、およびアミノアルキルから選択され、
Ｒ２は、非置換または置換フェニルおよび非置換または置換ヘテロアリールから選択され、ここで、非置換ヘテロアリールは、６員ヘテロアリールおよび５員ヘテロアリールからなる群から選択され、Ｒ２が置換フェニルまたは置換ヘテロアリールである場合、置換基は、水素、ハロゲン、低級アルキル、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される）
を有する化合物、またはそのプロドラッグを含むＳＭＮタンパク質安定剤をさらに含む、請求項８に記載の組成物。
【請求項１２】
前記ＳＭＮタンパク質安定剤が、
【化２６】
2019509272.tif 000161
【化２７】
2019509272.tif 000162
【化２８】
2019509272.tif 000163
【化２９】
2019509272.tif 000164
からなる群から選択される、請求項１１に記載の組成物。
【請求項１３】
【化３０】
2019509272.tif 000165
【化３１】
2019509272.tif 000166
からなる群から選択される構造を有するＳＭＮタンパク質安定剤をさらに含む、請求項８に記載の組成物。
【請求項１４】
請求項１、４または８のいずれか一項に記載の組成物を投与する工程を含む、それを必要とする対象における脊髄性筋萎縮症を治療する方法に使用するための組成物。
【請求項１５】
前記組成物が、経口、皮下、および腹腔内からなる群から選択される方法によって投与される、請求項１４に記載の方法に使用するための組成物。
【請求項１６】
式Ｉの式：
【化３２】
2019509272.tif 000167
（式中、
Ｘは、炭素または窒素からなる群から選択され、
Ｙは、炭素または窒素からなる群から選択され、ここで、ＸおよびＹのうちの少なくとも１つは窒素であり、
Ｚは、硫黄または酸素からなる群から選択され、
Ｒ１は、水素、アルキル、アルコキシ、ハロゲン、ハロアルキル、およびアミノアルキルから選択され、
Ｒ２は、非置換または置換フェニルおよび非置換または置換ヘテロアリールから選択され、ここで、非置換ヘテロアリールは、６員ヘテロアリールおよび５員ヘテロアリールからなる群から選択され、Ｒ２が置換フェニルまたは置換ヘテロアリールである場合、置換基は、水素、ハロゲン、低級アルキル、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される）
を有する化合物、またはそのプロドラッグを含むＳＭＮタンパク質安定剤およびＳＭＮ２スプライシング化合物を含む組成物。
【請求項１７】
前記ＳＭＮタンパク質安定剤が、
【化３３】
2019509272.tif 000168
【化３４】
2019509272.tif 000169
【化３５】
2019509272.tif 000170
【化３６】
2019509272.tif 000171
からなる群から選択される、請求項１６に記載の組成物。
【請求項１８】
前記ＳＭＮタンパク質安定剤が、
【化３７】
2019509272.tif 000172
である、請求項１６に記載の組成物。
【請求項１９】
【化３８】
2019509272.tif 000173
【化３９】
2019509272.tif 000174
からなる群から選択される構造を有するＳＭＮタンパク質安定剤およびＳＭＮ２スプライシング化合物を含む組成物。
【請求項２０】
前記スプライシング化合物が、ＳＭＮ−Ｃ２、ＮＶＳ−ＳＭ２ヌシネルセン、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１９に記載の組成物。
【国際調査報告】
2019509272.tif 000175