(57)【要約】本開示は、それぞれ個別にキャリヤータンパク質にコンジュゲートしている肺炎球菌莢膜多糖類血清型を含む多価肺炎球菌ワクチン組成物に関する。コンジュゲートした状態で、肺炎球菌莢膜多糖類血清型とキャリヤーの組合わせを本明細書中で多糖類−タンパク質コンジュゲートと呼ぶ。肺炎球菌ワクチン組成物はさらに下記のうち１種類以上を含むことができる；医薬的に許容できるキャリヤー、医薬的に許容できる希釈剤、緩衝剤、保存剤、安定剤、アジュバント、および／または凍結乾燥用賦形剤。本明細書に記載する肺炎球菌ワクチン組成物を製造および投与する方法をも提供する。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
２種類以上の肺炎球菌莢膜多糖類血清型を含み、それぞれが個別に、キャリヤータンパク質である肺炎球菌表面接着タンパク質Ａ（ＰｓａＡ）またはキャリヤータンパク質としてのＰｓａＡとＣＲＭ１９７の組合わせにコンジュゲートしている、肺炎球菌ワクチン組成物。
【請求項２】
肺炎球菌ワクチン組成物が１０価、１３価、１４価、１５価、１７価、１８価、１９価、２０価、２２価、２３価、２４価または２５価の肺炎球菌ワクチン組成物である、請求項１に記載の肺炎球菌ワクチン組成物。
【請求項３】
それぞれの肺炎球菌多糖類が、１、２、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、６Ｃ、７Ｆ、８、９Ｎ、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１８Ｃ、１９Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆ、３４、３５Ｂ、３５Ｆ、３８、３９および４５から選択される１種類以上の血清型を含む、請求項１または２に記載の肺炎球菌ワクチン組成物。
【請求項４】
約０．５〜約２．０のキャリヤータンパク質−対−肺炎球菌多糖類パーセント比（タンパク質／ＰＳ）を有する、前記請求項のいずれか１項に記載の肺炎球菌ワクチン組成物。
【請求項５】
肺炎球菌ワクチン組成物がさらに、医薬的に許容できるキャリヤーを含む、前記請求項のいずれか１項に記載の肺炎球菌ワクチン組成物。
【請求項６】
肺炎球菌多糖類が少なくとも１０種類の肺炎球菌多糖類を含み、それぞれの肺炎球菌多糖類が血清型１、２、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、６Ｃ、７Ｆ、８、９Ｎ、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１８Ｃ、１９Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆ、３４、３５Ｂ、３５Ｆ、３８、３９および４５から選択され、キャリヤータンパク質がＰｓａＡ、またはＰｓａＡとＣＲＭ１９７の組合わせを含む、前記請求項のいずれか１項に記載の肺炎球菌ワクチン組成物。
【請求項７】
肺炎球菌ワクチン組成物が少なくとも１４種類の肺炎球菌多糖類を含む、前記請求項のいずれか１項に記載の肺炎球菌ワクチン組成物。
【請求項８】
肺炎球菌ワクチン組成物が少なくとも１７種類の肺炎球菌多糖類を含む、前記請求項のいずれか１項に記載の肺炎球菌ワクチン組成物。
【請求項９】
肺炎球菌ワクチン組成物が少なくとも１９種類の肺炎球菌多糖類を含む、前記請求項のいずれか１項に記載の肺炎球菌ワクチン組成物。
【請求項１０】
肺炎球菌ワクチン組成物が少なくとも２０種類の肺炎球菌多糖類を含む、前記請求項のいずれか１項に記載の肺炎球菌ワクチン組成物。
【請求項１１】
肺炎球菌ワクチン組成物が少なくとも２２種類の肺炎球菌多糖類を含む、前記請求項のいずれか１項に記載の肺炎球菌ワクチン組成物。
【請求項１２】
肺炎球菌ワクチン組成物が少なくとも２４種類の肺炎球菌多糖類を含む、前記請求項のいずれか１項に記載の肺炎球菌ワクチン組成物。
【請求項１３】
それぞれの肺炎球菌多糖類が血清型１、２、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、６Ｃ、７Ｆ、８、９Ｎ、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１８Ｃ、１９Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆ、３４、３５Ｂ、３５Ｆ、３８、３９および４５から選択され、キャリヤータンパク質がＰｓＡである、前記請求項のいずれか１項に記載の肺炎球菌ワクチン組成物。
【請求項１４】
肺炎球菌ワクチン組成物が血清型１、３、４、５、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆから選択される肺炎球菌多糖類を含む１４価肺炎球菌ワクチン組成物であり、その際、少なくとも血清型３および６ＢはＰｓａＡにコンジュゲートしており、１種類以上の血清型１、４、５、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３ＦはＣＲＭ１９７にコンジュゲートしている、前記請求項のいずれか１項に記載の肺炎球菌ワクチン組成物。
【請求項１５】
肺炎球菌ワクチン組成物が血清型１、３、４、５、６Ａ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆから選択される肺炎球菌多糖類を含む１４価肺炎球菌ワクチン組成物であり、その際、少なくとも血清型３および６ＡはＰｓａＡにコンジュゲートしており、１種類以上の血清型１、４、５、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３ＦはＣＲＭ１９７にコンジュゲートしている、前記請求項のいずれか１項に記載の肺炎球菌ワクチン組成物。
【請求項１６】
肺炎球菌ワクチン組成物が血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ，１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆから選択される肺炎球菌多糖類を含む１５価肺炎球菌ワクチン組成物であり、その際、少なくとも血清型３、６Ａおよび６ＢはＰｓａＡにコンジュゲートしており、１種類以上の血清型１、４、５、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３ＦはＣＲＭ１９７にコンジュゲートしている、前記請求項のいずれか１項に記載の肺炎球菌ワクチン組成物。
【請求項１７】
肺炎球菌ワクチン組成物が血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１２Ｆ，１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂから選択される肺炎球菌多糖類を含む１７価肺炎球菌ワクチン組成物であり、その際、少なくとも血清型３、６Ａおよび６ＢはＰｓａＡにコンジュゲートしており、１種類以上の血清型１、４、５、７Ｆ、９Ｖ、１２Ｆ，１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆおよび３５ＢはＣＲＭ１９７にコンジュゲートしている、前記請求項のいずれか１項に記載の肺炎球菌ワクチン組成物。
【請求項１８】
肺炎球菌ワクチン組成物が血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆ、３５Ｂおよび４５から選択される肺炎球菌多糖類を含む２０価肺炎球菌ワクチン組成物であり、その際、少なくとも血清型３、６Ａおよび６ＢはＰｓａＡにコンジュゲートしており、１種類以上の血清型１、４、５、７Ｆ、９Ｖ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆ、３５Ｂおよび４５はＣＲＭ１９７にコンジュゲートしている、前記請求項のいずれか１項に記載の肺炎球菌ワクチン組成物。
【請求項１９】
肺炎球菌ワクチン組成物が血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１０Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆ、３４、３５Ｂおよび３８から選択される肺炎球菌多糖類を含む２２価肺炎球菌ワクチン組成物であり、その際、少なくとも血清型３、６Ａおよび６ＢはＰｓａＡにコンジュゲートしており、１種類以上の血清型１、４、５、７Ｆ、９Ｖ、１０Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆ、３４、３５Ｂおよび３８はＣＲＭ１９７にコンジュゲートしている、前記請求項のいずれか１項に記載の肺炎球菌ワクチン組成物。
【請求項２０】
肺炎球菌ワクチン組成物が血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１０Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆ、３４、３５Ｂおよび３８から選択される肺炎球菌多糖類を含む２２価肺炎球菌ワクチン組成物であり、その際、血清型１、３、６Ａ、１０Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｂ、２２Ｆ、３４、３５Ｂ、３８はＰｓａＡにコンジュゲートしており、血清型１４、５、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２３Ｆおよび３３ＦはＣＲＭ１９７にコンジュゲートしている、前記請求項のいずれか１項に記載の肺炎球菌ワクチン組成物。
【請求項２１】
肺炎球菌ワクチン組成物が血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ，１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１６Ｆ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆ、３４、３５Ｂおよび３８から選択される肺炎球菌多糖類を含む２４価肺炎球菌ワクチン組成物であり、その際、少なくとも血清型３、６Ａおよび６ＢはＰｓａＡにコンジュゲートしており、１種類以上の血清型１、４、５、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１６Ｆ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆ、３４、３５Ｂおよび３８はＣＲＭ１９７にコンジュゲートしている、前記請求項のいずれか１項に記載の肺炎球菌ワクチン組成物。
【請求項２２】
肺炎球菌ワクチン組成物が血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１６Ｆ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆ、３４、３５Ｂおよび３８から選択される肺炎球菌多糖類を含む２４価肺炎球菌ワクチン組成物であり、その際、血清型１、３、６Ａ、８、１０Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｂ、１６Ｆ、２２Ｆ、３４、３５Ｂ、３８はＰｓａＡにコンジュゲートしており、血清型１４、５、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２３Ｆおよび３３ＦはＣＲＭ１９７にコンジュゲートしている、前記請求項のいずれか１項に記載の肺炎球菌ワクチン組成物。
【請求項２３】
２種類以上の血清型の肺炎球菌多糖類およびキャリヤータンパク質を含み、その際、血清型が１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ｆ、１９Ａおよび２２Ｆから選択され、キャリヤータンパク質がＰｓａＡである、肺炎球菌ワクチン組成物。
【請求項２４】
２種類以上の血清型の肺炎球菌多糖類およびキャリヤータンパク質を含み、その際、血清型が１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１０Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ｆ、１９Ａ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆ、３４、３５、３８および４５から選択され、キャリヤータンパク質がＰｓａＡである、肺炎球菌ワクチン組成物。
【請求項２５】
肺炎球菌ワクチン組成物が投与単位に配合されている、前記請求項のいずれか１項に記載の肺炎球菌ワクチン組成物。
【請求項２６】
投与単位が約０．１μｇ〜約５０μｇのそれぞれの肺炎球菌多糖類、約０．１μｇ〜約１０μｇまたは約１μｇ〜約５μｇのそれぞれの肺炎球菌多糖類を含み、その際、それぞれの肺炎球菌多糖類がそれぞれ個別にキャリヤータンパク質に、約１．５μｇから約５μｇまでのキャリヤータンパク質にコンジュゲートしている、前記請求項のいずれか１項に記載の肺炎球菌ワクチン組成物。
【請求項２７】
さらに、医薬的に許容できる希釈剤、緩衝剤、保存剤、安定剤、アジュバント、および／または凍結乾燥用賦形剤を含む、前記請求項のいずれか１項に記載の肺炎球菌ワクチン組成物。
【請求項２８】
投与単位が単回量バイアル、多数回量バイアル、またはプレフィルドシリンジとして供給される、前記請求項のいずれか１項に記載の肺炎球菌ワクチン組成物。
【請求項２９】
肺炎球菌ワクチン組成物が、下記のものを含む０．５ｍＬの単回量である：
約２．２〜４．４μｇの１種類以上の肺炎球菌多糖類；
１種類以上の肺炎球菌多糖類のそれぞれにコンジュゲートした約１μｇ〜約１０μｇのＰｓａＡ；
１種類以上の肺炎球菌多糖類のそれぞれにコンジュゲートした約１μｇ〜約１０μｇのＣＲＭ１９７；
約０．２ｍｇ〜約１ｍｇのリン酸アルミニウムアジュバント；および
賦形剤；
前記請求項のいずれか１項に記載の肺炎球菌ワクチン組成物。
【請求項３０】
肺炎球菌ワクチン組成物が血清型１、３、４、５、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆおよび３３Ｆから選択される肺炎球菌多糖類を含む１３価肺炎球菌ワクチン組成物であり、それぞれの肺炎球菌多糖類がそれぞれ個別にＰｓａＡ、またはＰｓａＡとＣＲＭ１９７の組合わせにコンジュゲートしており、
その際、肺炎球菌ワクチン組成物が下記のものを含む無菌液剤として配合された約０．５ｍＬ量である：
約２．２μｇ〜約４．４μｇのそれぞれの肺炎球菌多糖類；
約２５μｇ〜約３０μｇのＰｓａＡおよびＣＲＭ１９７；
約０．５ｍｇのリン酸アルミニウムとしての約０．１２５ｍｇのアルミニウム元素、
塩化ナトリウム：および
Ｌ−ヒスチジン緩衝剤；
前記請求項のいずれか１項に記載の肺炎球菌ワクチン組成物。
【請求項３１】
肺炎球菌ワクチン組成物が血清型１、３、４、５、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆから選択される肺炎球菌多糖類を含む１４価肺炎球菌ワクチン組成物であり、それぞれの肺炎球菌多糖類がそれぞれ個別にＰｓａＡ、またはＰｓａＡとＣＲＭ１９７の組合わせにコンジュゲートしており、
その際、肺炎球菌ワクチン組成物が下記のものを含む無菌液剤として配合された約０．５ｍＬ量である：
約２．２μｇ〜約４．４μｇのそれぞれの肺炎球菌多糖類；
約２０μｇ〜約３５μｇのＰｓａＡおよびＣＲＭ１９７；
約０．５ｍｇのリン酸アルミニウムとしての約０．１２５ｍｇのアルミニウム元素、
塩化ナトリウム；および
Ｌ−ヒスチジン緩衝剤；
前記請求項のいずれか１項に記載の肺炎球菌ワクチン組成物。
【請求項３２】
肺炎球菌ワクチン組成物が血清型１、３、４、５、６Ａ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆから選択される肺炎球菌多糖類を含む１４価肺炎球菌ワクチン組成物であり、それぞれの肺炎球菌多糖類がそれぞれ個別にＰｓａＡ、またはＰｓａＡとＣＲＭ１９７の組合わせにコンジュゲートしており、
その際、肺炎球菌ワクチン組成物が下記のものを含む無菌液剤として配合された約０．５ｍＬ量である：
約２．２〜４．４μｇのそれぞれの肺炎球菌多糖類；
約２０μｇ〜約３５μｇのＰｓａＡおよびＣＲＭ１９７；
約０．５ｍｇのリン酸アルミニウムとしての約０．１２５ｍｇのアルミニウム元素、
塩化ナトリウム；および
Ｌ−ヒスチジン緩衝剤；
前記請求項のいずれか１項に記載の肺炎球菌ワクチン組成物。
【請求項３３】
肺炎球菌ワクチン組成物が血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ，１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆから選択される肺炎球菌多糖類を含む１５価肺炎球菌ワクチン組成物であり、その際、少なくとも血清型３、６Ａおよび６ＢはＰｓａＡにコンジュゲートしており、１種類以上の血清型１、４、５、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３ＦはＣＲＭ１９７にコンジュゲートしており、
その際、肺炎球菌ワクチン組成物が下記のものを含む無菌液剤として配合された約０．５ｍＬ量である：
約２．２μｇ〜約４．４μｇのそれぞれの肺炎球菌多糖類；
約５μｇ〜約２０μｇのＰｓａＡ；
約２０μｇ〜約４０μｇのＣＲＭ１９７；
約０．５ｍｇのリン酸アルミニウムとしての約０．１２５ｍｇのアルミニウム元素；
塩化ナトリウム；および
Ｌ−ヒスチジン緩衝剤；
前記請求項のいずれか１項に記載の肺炎球菌ワクチン組成物。
【請求項３４】
肺炎球菌ワクチン組成物が血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１２Ｆ，１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂから選択される肺炎球菌多糖類を含む１７価肺炎球菌ワクチン組成物であり、その際、少なくとも血清型３、６Ａおよび６ＢはＰｓａＡにコンジュゲートしており、１種類以上の血清型１、４、５、７Ｆ、９Ｖ、１２Ｆ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆおよび３５ＢはＣＲＭ１９７にコンジュゲートしており、
その際、肺炎球菌ワクチン組成物が下記のものを含む無菌液剤として配合された約０．５ｍＬ量である：
約２．２μｇ〜約４．４μｇのそれぞれの肺炎球菌多糖類；
約５μｇ〜約２０μｇのＰｓａＡ；
約２０μｇ〜約４０μｇのＣＲＭ１９７、
約０．５ｍｇのリン酸アルミニウムとしての約０．１２５ｍｇのアルミニウム元素；
塩化ナトリウム；および
Ｌ−ヒスチジン緩衝剤；
前記請求項のいずれか１項に記載の肺炎球菌ワクチン組成物。
【請求項３５】
肺炎球菌ワクチン組成物が血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆ、３５Ｂおよび４５から選択される肺炎球菌多糖類を含む２０価肺炎球菌ワクチン組成物であり、その際、少なくとも血清型３、６Ａおよび６ＢはＰｓａＡにコンジュゲートしており、１種類以上の血清型１、４、５、７Ｆ、９Ｖ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆ、３５Ｂおよび４５はＣＲＭ１９７にコンジュゲートしており、
その際、肺炎球菌ワクチン組成物が下記のものを含む無菌液剤として配合された約０．５ｍＬ量である：
約２．２μｇ〜約４．４μｇのそれぞれの肺炎球菌多糖類；
約５μｇ〜約２０μｇのＰｓａＡ；
約２０μｇ〜約５０μｇのＣＲＭ１９７；
約０．５ｍｇのリン酸アルミニウムとしての約０．１２５ｍｇのアルミニウム元素、
塩化ナトリウム；および
Ｌ−ヒスチジン緩衝剤；
前記請求項のいずれか１項に記載の肺炎球菌ワクチン組成物。
【請求項３６】
肺炎球菌ワクチン組成物が血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１０Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆ、３４、３５Ｂおよび３８から選択される肺炎球菌多糖類を含む２２価肺炎球菌ワクチン組成物であり、その際、少なくとも血清型３、６Ａおよび６ＢはＰｓａＡにコンジュゲートしており、１種類以上の血清型１、４、５、７Ｆ、９Ｖ、１０Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆ、３４、３５Ｂおよび３８はＣＲＭ１９７にコンジュゲートしており、
その際、肺炎球菌ワクチン組成物が下記のものを含む無菌液剤として配合された約０．５ｍＬ量である：
約２．２μｇ〜約４．４μｇのそれぞれの肺炎球菌多糖類；
約５μｇ〜約２０μｇのＰｓａＡ；
約２０μｇ〜約５０μｇのＣＲＭ１９７；
約０．５ｍｇのリン酸アルミニウムとしての約０．１２５ｍｇのアルミニウム元素；
塩化ナトリウム；および
Ｌ−ヒスチジン緩衝剤；
前記請求項のいずれか１項に記載の肺炎球菌ワクチン組成物。
【請求項３７】
肺炎球菌ワクチン組成物が血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１６Ｆ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆ、３４、３５Ｂおよび３８から選択される肺炎球菌多糖類を含む２４価肺炎球菌ワクチン組成物であり、その際、少なくとも血清型３、６Ａおよび６ＢはＰｓａＡにコンジュゲートしており、１種類以上の血清型１、４、５、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１６Ｆ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆおよび３５ＢはＣＲＭ１９７にコンジュゲートしており、
その際、肺炎球菌ワクチン組成物が下記のものを含む無菌液剤として配合された約０．５ｍＬ量である：
約２．２μｇ〜約４．４μｇのそれぞれの肺炎球菌多糖類；
約５μｇ〜約２０μｇのＰｓａＡ；
約２０μｇ〜約５０μｇのＣＲＭ１９７；
約０．５ｍｇのリン酸アルミニウムとしての約０．１２５ｍｇのアルミニウム元素；
塩化ナトリウム；および
Ｌ−ヒスチジン緩衝剤；
前記請求項のいずれか１項に記載の肺炎球菌ワクチン組成物。
【請求項３８】
前記請求項のいずれか１項に記載の肺炎球菌ワクチン組成物をその必要がある対象に投与することを含む、その必要がある対象を処置する方法。
【請求項３９】
対象が肺炎連鎖球菌(streptococcus pneumoniae)により媒介される疾患を伴なう、請求項３８に記載の方法。
【請求項４０】
肺炎連鎖球菌(streptococcus pneumoniae)により媒介される疾患が侵襲性肺炎球菌感染症（ＩＰＤ）である、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
対象がヒトである、請求項３８〜４０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４２】
ヒトが乳児（約１歳未満）、幼児（約１２か月齢〜約２４か月齢）、小児（約２歳〜約５歳）、より年上の子供（約５歳〜約１３歳）、青少年（約１３歳〜約１８歳）、成人（約１８歳〜約６５歳）、または高齢者（約６５歳を超える）である、請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】
免疫学的有効量の請求項１〜３７のいずれか１項に記載の肺炎球菌ワクチン組成物を、その必要がある対象に投与することを含む、肺炎連鎖球菌(S. pneumoniae）莢膜多糖類コンジュゲートに対する免疫応答を誘導する方法。
【請求項４４】
さらに、多糖類−タンパク質コンジュゲートを配合して、アジュバント、賦形剤および緩衝剤を含有する肺炎球菌ワクチン組成物にすることを含む、請求項４３に記載の方法。
【請求項４５】
アジュバントがリン酸アルミニウムである、請求項４４に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
[0001]  本出願はIndian Provisional Application No. 201641033563, 2016年9月30日出願に基づく優先権を主張し、それの全体を本明細書に援用する。
【０００２】
[0002]  本開示は、１種類以上のキャリヤータンパク質にコンジュゲートしている１種類以上の肺炎連鎖球菌(Streptococcus pneumoniae)血清型の肺炎球菌莢膜多糖類を含む、多価肺炎球菌ワクチン組成物に関する。コンジュゲートした状態で、肺炎球菌莢膜多糖類とキャリヤーを本明細書中で多糖類−タンパク質コンジュゲートと呼ぶ。
【背景技術】
【０００３】
[0003]  肺炎連鎖球菌（“肺炎球菌”）は、侵襲性疾患、たとえば肺炎、菌血症および髄膜炎、ならびにコロニー形成に関連する疾患、たとえば急性中耳炎（たとえば、中耳におけるコロニー形成）を引き起こす、グラム陽性細菌である。これらの肺炎球菌誘発性疾患は、特に２４か月未満の者および６０歳を超える者において罹患および死亡を生じる。米国における６０歳を超える者についての肺炎球菌性肺炎の割合は１００，０００人当たり３〜８人と推定される。２０％の症例で肺炎球菌性肺炎は菌血症および髄膜炎に至り、合わせると抗生物質治療にもかかわらず３０％近い死亡率をもつ。
【０００４】
[0004]  ニューモリシン(pneumolysin)および肺炎球菌表面タンパク質Ａ(pneumococcal surface protein A)（ＰｓｐＡ）などのタンパク質が、肺炎球菌ワクチンにおけるキャリヤータンパク質候補としてのそれらの適性について評価がなされた。両方ともマウスにおいて部分的に保護性がある(Paton et al. “Effect of immunization with pneumolysin on survival time of mice challenged with Streptococcus pneumoniae.” Infect Immun. 1983 May; 40(2): 548-552 およびMcDaniel et al. “PspA, a surface protein of Streptococcus pneumoniae, is capable of eliciting protection against pneumococci of more than one capsular type” Infect Immun. 1991 Jan; 59(1): 222-228)が、ワクチンにおいて免疫原としてそれらを使用するのには欠点がある。ニューモリシンは肺炎球菌間で良好に保存されているが、それの自然状態では毒性がある(AlonsoDeVelasco et al. “Streptococcus pneumoniae: Virulence factors, pathogenesis, and vaccines.” Microbiol Rev. 1995 Dec; 59(4): 591-603.)。他方で、ＰｓｐＡは血清学的および構造的に不均質である(Crain et al. “Pneumococcal surface protein A) is serologically highly variable and is expressed by all clinically important capsular serotypes of Streptococcus pneumoniae.” Infect Immun. 1990 Oct; 58(10): 3293-3299)。それをワクチン配合物中に使用するには多数のＰｓｐＡタイプが必要であり、よってワクチン製造の複雑さが増す。
【０００５】
[0005]  肺炎球菌表面接着Ａ(Pneumococcal surface adhesion A)（“ＰｓａＡ”）は多官能性リポタンパク質であり、宿主細胞接着およびコロニー形成に関与する。それは高度に保存された表面タンパク質であり、肺炎連鎖球菌の既知の血清型にわたって９７％相同である。ＰｓａＡは免疫原であり、肺炎球菌の自然の鼻咽頭コロニー形成に際して抗−ＰｓａＡ抗体が増加することが知られている。
【０００６】
[0006]  肺炎球菌ワクチンを投与して感染を防ぐことができる。現在のワクチンには、多価肺炎球菌多糖類ワクチン（２種類以上の血清型に由来する肺炎球菌多糖類を含む）および肺炎球菌コンジュゲートワクチンが含まれる。肺炎球菌多糖類ワクチンの防御効果は莢膜多糖類に対して産生される抗体の濃度に関係することが知られている。肺炎球菌細胞は、９０種類を超える肺炎球菌血清型を生じる多糖類で被包されている。この莢膜が肺炎球菌の主要な病原性決定因子である−それは細胞の内面を補体仲介による細胞溶解から保護するだけでなく、それは免疫原性にも乏しい。
【０００７】
[0007]  ＭｅｒｃｋのＰｎｅｕｍｏｖａｘ（登録商標）２３は多価肺炎球菌多糖類ワクチンであり、血清型１、２、３、４、５、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｎ、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ｂ、１７Ｆ、１８Ｃ、１９Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆを含む２３の肺炎球菌血清型に由来するコンジュゲートしていない莢膜多糖類を含有する。Ｐｎｅｕｍｏｖａｘ（登録商標）２３のほかに、これまでに認可された多価肺炎球菌多糖類ワクチンは、成人、特に高齢者、および高リスクの者において肺炎球菌疾患を阻止するのに有用であることが証明された。しかし、乳児および小児はこれらの非コンジュゲート肺炎球菌多糖類ワクチンに対する応答が乏しい。
【０００８】
[0008]  Ｐｒｅｖｎａｒ（登録商標）−７は肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲートワクチンであり、７種類の最も頻繁に分離される多糖類血清型（たとえば、４、６Ｂ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ｆ、および２３Ｆ；ＣＲＭ１９７にコンジュゲートしたもの）を含有する。Ｐｒｅｖｎａｒ（登録商標）−７の使用が米国で２０００年に開始されて以来、小児における侵襲性肺炎球菌感染症(invasive pneumococcal disease)（ＩＰＤ）が著しく低減した。世界の特定地域でＰｒｅｖｎａｒ（登録商標）−７による血清型網羅範囲に限界があるため、ＣＲＭ１９７にコンジュゲートした１３種類の血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆおよび２３Ｆを含有する１３価コンジュゲートワクチンＰｒｅｖｅｎａｒ−１３（登録商標）が開発され、承認された。
【０００９】
[0009]  Ｓｙｎｆｌｏｒｉｘ（登録商標）は１０種類の血清型を含有する肺炎球菌ワクチンである−プロテインＤ(protein D)（ＰＤ）にコンジュゲートした血清型１、４、５、６Ｂ、７、９、１４、２３Ｆ、破傷風トキソイド(tetanus toxoid)（ＴＴ）にコンジュゲートした血清型１８Ｃ、およびジフテリアトキソイド(diphtheria toxoid)（ＤＴ）にコンジュゲートした血清型１９Ｆ。それぞれの血清型の多糖類は、１−シアノ−４−ジメチルアミノ−ピリジニウム  テトラフルオロボレート（ＣＤＡＰ）を用いてｐＨ制御下でカップリングされる。
【００１０】
[0010]  これらのワクチンにもかかわらず、別の多糖類血清型およびキャリヤータンパク質を含むさらに他の多価肺炎球菌ワクチン、ならびにその簡単かつ効率的な製造に対するニーズがある。
【００１１】
[0011]  肺炎球菌ワクチンはさらに他の文献に記載されている。たとえば、U.S. Patent No. 5,360,897には、細菌性病原体である肺炎連鎖球菌の少なくとも２つのカルボニル基をもつ無傷の莢膜高分子の還元アミノ化生成物、および細菌性トキシンまたはトキソイドを含む、免疫原コンジュゲートが開示され、そのコンジュゲートは莢膜高分子とトキシンまたはトキソイドとの間に直接共有結合がある架橋コンジュゲートを含む。
【００１２】
[0012]  U.S. Patent No. 5,693,326は、コンジュゲートワクチンを製造するための一般法を提供し、その際、ウイルス、真菌または細菌の多糖類を活性化するために１−シアノ−４−（ジメチルアミノ）−ピリジニウム  テトラフルオロボレート、Ｎ−シアノトリエチル−アンモニウム  テトラフルオロボレート、およびｐ−ニトロフェニルシアネートの群から選択される有機シアニル化剤を用いて活性化された炭水化物を形成し、その後、タンパク質またはキャリヤータンパク質にカップリングさせている。
【００１３】
[0013]  U.S. Patent No. 5,854,416には、ＰｓａＡ（肺炎球菌表面接着Ａ）として知られる肺炎連鎖球菌由来の３７−ｋＤａのタンパク質のアミノ酸およびＤＮＡの配列が開示され、U.S. Patent No. 7,862,823には、肺炎球菌莢膜多糖類を少なくとも２種類の異なるキャリヤータンパク質、たとえばＤＴおよびＴＴと共に含む多価コンジュゲートワクチン組成物が開示されている。
【００１４】
[0014]  U.S. Patent No. 7,955,605には、１９Ａから構成される免疫原コンジュゲートを作製する方法が記載され、その際、活性化された血清型１９Ａ多糖類およびキャリヤータンパク質をジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に共懸濁してコンジュゲートを形成している。
【００１５】
[0015]  U.S. Patent No. 8,192,746には、ＣＲＭ１９７にコンジュゲートした血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、および３３Ｆに由来する莢膜多糖類を含む１５価の肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲートワクチン組成物が開示されている。
【００１６】
[0016]  U.S. Patent No. 8,465,749は、特定のｐＨ範囲で多糖類をＣＤＡＰと反応させ、タンパク質をヒドラジンまたはアジピン酸ジヒドラジドと反応させることにより、コンジュゲートワクチンを製造するための方法を提供する。
【００１７】
[0017]  U.S. Patent No. 8,557,250 B2には、複数のシアネート活性化した免疫原性の異なる多糖類の混合物を少なくとも１種類のヒドラジド活性化タンパク質と接触させることを含む方法が開示されている。
【００１８】
[0018]  U.S. Patent No. 8,808,708、7,955,605およびU.S. Patent No. 8,603,484には、多糖類−タンパク質コンジュゲートから構成される１３価の免疫原組成物が記載され、その際、血清型は１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆおよび２３Ｆからなり、キャリヤータンパク質はＣＲＭ１９７である。
【００１９】
[0019]  U.S. Patent Publication No. 2009/0017059 A1には、血清型１９Ａおよび１９Ｆを、破傷風トキソイド、ジフテリアトキソイド、百日咳トキソイド、細菌サイトリシン(cytolysin)および／またはニューモリシンを含めた種々の細菌トキソイドにコンジュゲートさせた免疫原組成物が開示されている。
【００２０】
[0020]  U.S. Patent Publication No. 2010/0074922 A1には、１０種類以上の血清型を含有する免疫原組成物が開示され、その際、１９Ｆ莢膜多糖類はＤＴにコンジュゲートし、血清型１８Ｃ莢膜多糖類は破傷風トキソイドにコンジュゲートし、血清型１、４、５、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４および２３Ｆ莢膜多糖類はインフルエンザ菌(Haemophilus influenzae)から分離したプロテインＤにコンジュゲートしている。
【００２１】
[0021]  U.S. Patent Publication No. 2010/0239604には、血清型１９Ａおよび１９Ｆに由来する多価肺炎連鎖球菌莢膜多糖類コンジュゲートを含む免疫原組成物が記載され、その際、血清型１９Ａは第１の細菌トキソイドにコンジュゲートし、１９Ｆは第２の細菌トキソイドにコンジュゲートし、２〜９種類の肺炎連鎖球菌莢膜多糖類がプロテインＤにコンジュゲートしている。
【００２２】
[0022]  U.S. Patent Publication No. 2012/321658 A1には、免疫原組成物が開示され、その際、血清型１、３、１９Ａおよび１９Ｆはタンパク質キャリヤー（類）に直接に、または還元アミノ化以外の化学的様式で間接的に連結し、１種類以上の異なる糖類は血清型４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃおよび２３Ｆからなる第２グループから選択され、それ（それら）は還元アミノ化によりタンパク質キャリヤー（類）に連結している。
【００２３】
[0023]  IN 140/DEL/2011は、ＤＴ、ジフテリアトキソイド、ＣＲＭ１９７、および破傷風トキソイドからなる群から選択される少なくとも２種類またはそれより多いキャリヤータンパク質にコンジュゲートした、異なる血清型に由来する（ａ）７種類以上、（ｂ）１０種類以上のいずれかの多糖類を含む肺炎連鎖球菌ワクチンを提供する。
【００２４】
[0024]  WO Publication No. 2013/191459 A1には、ＣＲＭ１９７にコンジュゲートした莢膜多糖類１、２、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｎ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆおよび２３Ｆに由来する肺炎連鎖球菌の異なる血清型を含むコンジュゲート１５価組成物が開示されている。
【００２５】
[0025]  WO Publication No. 2014/092377 A1には、１３価組成物が開示され、その際、１２種類の血清型は１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆおよび２３Ｆから選択され、最後の血清型はＣＲＭ１９７にコンジュゲートした１２または９Ｎのいずれかである。
【００２６】
[0026]  WO Publication No. 2014/092378 A1には、免疫原コンジュゲート組成物が開示され、その際、１２の血清型はは１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆおよび２３Ｆから選択され、残りの１種類はＣＲＭ１９７にコンジュゲートした２２Ｆまたは３３Ｆから選択される。
【００２７】
[0027]  WO 2016207905 A2には、下記のものを含む多価肺炎球菌コンジュゲートワクチン(Pneumococcal conjugate vaccine)（ＰＣＶ）組成物が開示されている：１）ＣＤＡＰで活性化され、キャリヤータンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲートした、肺炎連鎖球菌の血清型１、３、４、５、６Ｂ、７Ｆ、９Ｎ、９Ｖ、１５Ｂ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆから選択される少なくとも１２種類の莢膜多糖類、ならびに２）医薬的に許容できるキャリヤー；その際、組成物は血清型６Ａに由来する莢膜多糖類を含有しない。
【００２８】
[0028]  Chinese Patent Application Publication No. CN 101590224には、ＣＲＭ１９７にコンジュゲートした血清型１、２、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｎ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆおよび２３Ｆを含有する１４価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲートワクチンが記載されている。
【００２９】
[0029]  Chinese Patent Application Publication No. CN 103623401には、１４多価肺炎球菌莢膜多糖類−タンパク質コンジュゲート組成物が開示され、その際、それら１４種類の異なる血清型はＣＲＭ１９７にコンジュゲートした１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、９Ｖ、１４，１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆである。
【００３０】
[0030]  Chinese Patent Application Publication No. CN 103656632には、血清型６Ａ、ならびにＣＲＭ１９７にコンジュゲートした１、２、３、４、５、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ｂ、１７Ｆ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２０、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆからなる群から選択される少なくとも１種類の他の血清型を含有する多価肺炎球菌莢膜多糖類組成物が開示されている。
【００３１】
[0031]  Chinese Patent Application Publication No. CN 103656631は、多価肺炎球菌莢膜多糖類−タンパク質コンジュゲート組成物およびその製造方法を提供する。そのコンジュゲート組成物は、２４種類の異なる血清型の肺炎球菌の莢膜多糖類およびキャリヤータンパク質から共有結合様式で製造され、その際、２４種類の異なる血清型はＣＲＭ１９７にコンジュゲートした１、２、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｎ、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ｂ、１７Ｆ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２０、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆである。
【００３２】
[0032]  Chinese Patent Application Publication No. CN 104069488には、１４種類の異なる血清型の多価肺炎球菌莢膜多糖類およびキャリヤータンパク質が開示され、その際、１４種類の血清型にはＣＲＭ１９７にコンジュゲートした１、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆが含まれる。
【００３３】
[0033]  Deborah et al, (1996, Volume 21, Issue 1, Pages 17-22)には、ＰｓａＡが線毛接着タンパク質(fimbrial adhesion protein)との著しい相同性をもつものとして記載されている。ＣＢＡ／ＣａＨＮＪ  Ｘｉｄマウスを、完全フロイントまたはＴｉｔｅｒＭａｘ（商標）のいずれかのアジュバントを用いてＰｓａＡで免疫化すると、マウスはＬＤ５０の４５倍に及ぶ用量の３型肺炎球菌株ＷＵ２によるヘテロロガス静脈内攻撃に対して有意に保護された。
【００３４】
[0034]  Miyaji E N et al, (2001, Vaccine; 20 (5-6): 805-12)には、肺炎連鎖球菌が最も重要なヒト病原体のひとつとして開示されている。全長ＰｓａＡまたはトランケート型ＰｓｐＡのいずれかの遺伝子を収容したＤＮＡワクチンベクターが構築された。両方の構築体が脊椎動物細胞において抗原の一過性発現を示し、ＢＡＬＢ／ｃマウスにおいて筋肉内注射した肺炎球菌抗原に対する有意の抗体応答を誘導した。
【００３５】
[0035]  Wuorimaa et al. (2001, The Paediatric Infectious Disease Journal, Volume 20(3), pp 272-277)には、健康な幼児(toddler)におけるＴＴおよびＤＴの両方をキャリヤーとして用いる１１価肺炎球菌コンジュゲートワクチンの耐容性および免疫原性を査定する研究が開示されている。
【００３６】
[0036]  Gatchalian et al. (2001, 17th Annual Meeting of the Eur. Soc. Paed. Inf. Dis (ESPID), poster number 4, P1A Poster Session 1, Istanbul Turkey)には、１１価ワクチンの投与を受けた乳児からのオプソニン食作用アッセイ(opsanophagocytic assay)（ＯＰＡ）結果が開示され、血清型３については他の被験血清型に匹敵するレベルの抗体応答を示すことができなかった。
【００３７】
[0037]  Anderson P et al, (2003, Vaccine; 21 (13-14):1554-9)には、それぞれの多糖類型６Ａ、１４、１９Ｆ、および２３Ｆが別個に破傷風トキソイドまたはジフテリアＣＲＭ１９７にカップリングし、あるいは半量の多糖類型６Ａ、１４、１９Ｆ、および２３Ｆの混合物が別個に破傷風トキソイドおよびジフテリアＣＲＭ１９７にカップリングした４価コンジュゲートワクチンの比較試験が開示されている。
【００３８】
[0038]  Nurkka et al. (2004, Ped. Inf. Dis. J., 23:1008-1014)には、１１価肺炎球菌−プロテインＤコンジュゲートワクチンの免疫原性および安全性の試験が開示され、その際、そのワクチンの投与を３回受けた後に同じワクチンまたは肺炎球菌多糖類ワクチンのいずれかのブースター投与を受けた乳児において血清型３についてはプライミング効果は観察されなかった。
【００３９】
[0039]  前記に述べた参考文献には、他の組成物、方法などのうち特に、１種類以上の血清型に由来する多糖類およびこれらの多糖類がキャリヤータンパク質、たとえばＣＲＭ１９７、プロテインＤ、ＤＴ、およびＴＴとコンジュゲーションしたものを含む、多価肺炎球菌ワクチンが開示されている。種々の血清型が様々な地域に存在することからみて、多糖類血清型の新規コンジュゲートを含む、改善された免疫応答を備えた、さらに他の多価肺炎球菌ワクチン、およびその簡単かつ効率的な製造に対するニーズがある。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００４０】
【特許文献１】U.S. Patent No. 5,360,897
【特許文献２】U.S. Patent No. 5,693,326
【特許文献３】U.S. Patent No. 5,854,416
【特許文献４】U.S. Patent No. 7,862,823
【特許文献５】U.S. Patent No. 7,955,605
【特許文献６】U.S. Patent No. 8,192,746
【特許文献７】U.S. Patent No. 8,465,749
【特許文献８】U.S. Patent No. 8,557,250 B2
【特許文献９】U.S. Patent No. 8,808,708
【特許文献１０】U.S. Patent No. 8,603,484
【特許文献１１】U.S. Patent Publication No. 2009/0017059 A1
【特許文献１２】U.S. Patent Publication No. 2010/0074922 A1
【特許文献１３】U.S. Patent Publication No. 2010/0239604
【特許文献１４】U.S. Patent Publication No. 2012/321658 A1
【特許文献１５】IN 140/DEL/2011
【特許文献１６】WO Publication No. 2013/191459 A1
【特許文献１７】WO Publication No. 2014/092377 A1
【特許文献１８】WO Publication No. 2014/092378 A1
【特許文献１９】WO 2016207905 A2
【特許文献２０】Chinese Patent Application Publication No. CN 101590224
【特許文献２１】Chinese Patent Application Publication No. CN 103623401
【特許文献２２】Chinese Patent Application Publication No. CN 103656632
【特許文献２３】Chinese Patent Application Publication No. CN 103656631
【特許文献２４】Chinese Patent Application Publication No. CN 104069488
【非特許文献】
【００４１】
【非特許文献１】Paton et al. “Effect of immunization with pneumolysin on survival time of mice challenged with Streptococcus pneumoniae.” Infect Immun. 1983 May; 40(2): 548-552
【非特許文献２】McDaniel et al. “PspA, a surface protein of Streptococcus pneumoniae, is capable of eliciting protection against 肺炎球菌 of more than one capsular type” Infect Immun. 1991 Jan; 59(1): 222-228
【非特許文献３】AlonsoDeVelasco et al. “Streptococcus pneumoniae: Virulence factors, pathogenesis, andワクチンs.”Microbiol Rev. 1995 Dec; 59(4): 591-603
【非特許文献４】Crain et al. “Pneumococcal surface protein A) is serologically highly variable and is expressed by all clinically important capsular serotypes of Streptococcus pneumoniae.” Infect Immun. 1990 Oct; 58(10): 3293-3299
【非特許文献５】Deborah et al, (1996, Volume 21, Issue 1, Pages 17-22)
【非特許文献６】Miyaji E N et al, (2001, Vaccine; 20 (5-6): 805-12)
【非特許文献７】Wuorimaa et al. (2001, The Paediatric Infectious Disease Journal, Volume 20(3), pp 272-277)
【非特許文献８】Gatchalian et al. (2001, 17th Annual Meeting of the Eur. Soc. Paed. Inf. Dis (ESPID), poster number 4, P1A Poster Session 1, Istanbul Turkey)
【非特許文献９】Anderson P et al, (2003, Vaccine; 21 (13-14):1554-9)
【非特許文献１０】Nurkka et al. (2004, Ped. Inf. Dis. J., 23:1008-1014)
【発明の概要】
【００４２】
[0040]  幾つかの態様において、本開示は肺炎球菌ワクチン組成物を提供し、その組成物はそれぞれ個別にキャリヤータンパク質としての肺炎球菌表面接着タンパク質Ａ(pneumococcal surface adhesion protein A)（ＰｓａＡ）、またはＰｓａＡとＣＲＭ１９７の組合わせにコンジュゲートした２種類以上の肺炎球菌莢膜多糖類血清型を含む。
【００４３】
[0041]  一態様において、本開示は１０価、１４価、１５価、１７価、１８価、１９価、２０価、２２価、２３価、２４価、または２５価の肺炎球菌ワクチン組成物である肺炎球菌ワクチン組成物を提供する。
【００４４】
[0042]  他の態様において、本開示は、それぞれ肺炎球菌血清型１、２、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、６Ｃ、７Ｆ、８、９Ｎ、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１８Ｃ、１９Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆ、３４、３５Ｂ、３５Ｆ、３８、３９、および４５から選択される血清型である肺炎球菌多糖類を含む肺炎球菌ワクチン組成物を提供する。
【００４５】
[0043]  他の態様において、本開示は、キャリヤータンパク質としての肺炎球菌表面接着タンパク質Ａ（ＰｓａＡ）とコンジュゲートした肺炎球菌血清型１、２、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、６Ｃ、７Ｆ、８、９Ｎ、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１８Ｃ、１９Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆ、３４、３５Ｂ、３５Ｆ、３８、３９、および４５から選択されるそれぞれの血清型に由来する肺炎球菌多糖類を含む肺炎球菌ワクチン組成物を提供する。
【００４６】
[0044]  他の態様において、本開示は、キャリヤータンパク質としての肺炎球菌表面接着タンパク質Ａ（ＰｓａＡ）、またはＰｓａＡとＣＲＭ１９７の組合わせにコンジュゲートした１、２、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、６Ｃ、７Ｆ、８、９Ｎ、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１８Ｃ、１９Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆ、３４、３５Ｂ、３５Ｆ、３８、３９、および４５から選択される血清型に由来する肺炎球菌多糖類を含む肺炎球菌ワクチン組成物を提供する。
【００４７】
[0045]  他の態様において、本開示は、１、２、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、６Ｃ、７Ｆ、８、９Ｎ、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１８Ｃ、１９Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆ、３４、３５Ｂ、３５Ｆ、３８、３９、および４５から選択される血清型に由来する肺炎球菌多糖類を含み、その際、少なくとも３種類の肺炎球菌多糖類は肺炎球菌表面接着タンパク質Ａ（ＰｓａＡ）とコンジュゲートしている、肺炎球菌ワクチン組成物を提供する。
【００４８】
[0046]  他の態様において、本開示は、肺炎球菌表面接着タンパク質Ａ（ＰｓａＡ）とコンジュゲートした血清型３、６Ａ、６Ｂに由来する肺炎球菌多糖類を含む肺炎球菌ワクチン組成物を提供する。
【００４９】
[0047]  他の態様において、本開示は、血清型１、２、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、６Ｃ、７Ｆ、８、９Ｎ、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１８Ｃ、１９Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆ、３４、３５Ｂ、３５Ｆ、３８、３９および４５から選択される少なくとも１０種類の肺炎球菌多糖類を含み、キャリヤータンパク質がＰｓａＡ、またはＰｓａＡとＣＲＭ１９７の組合わせを含む、肺炎球菌ワクチン組成物を提供する。
【００５０】
[0048]  他の態様において、本開示は少なくとも１４種類の肺炎球菌多糖類コンジュゲートを含む肺炎球菌ワクチン組成物を提供する。
[0049]  他の態様において、本開示は少なくとも１７種類の肺炎球菌多糖類コンジュゲートを含む肺炎球菌ワクチン組成物を提供する。
【００５１】
[0050]  他の態様において、本開示は少なくとも１９種類の肺炎球菌多糖類コンジュゲートを含む肺炎球菌ワクチン組成物を提供する。
[0051]  他の態様において、本開示は少なくとも２０種類の肺炎球菌多糖類コンジュゲートを含む肺炎球菌ワクチン組成物を提供する。
【００５２】
[0052]  他の態様において、本開示は少なくとも２２種類の肺炎球菌多糖類コンジュゲートを含む肺炎球菌ワクチン組成物を提供する。
[0053]  他の態様において、本開示は少なくとも２４種類の肺炎球菌多糖類コンジュゲートを含む肺炎球菌ワクチン組成物を提供する。
【００５３】
[0054]  他の態様において、本開示は２種類以上の血清型の肺炎球菌多糖類およびキャリヤータンパク質を含む肺炎球菌ワクチン組成物を提供し、その際、血清型は３、５、６Ａ、６Ｂ、９Ｖおよび１８Ｃから選択され、キャリヤータンパク質はＰｓａＡである。
【００５４】
[0055]  他の態様において、本開示は２種類以上の血清型の肺炎球菌多糖類およびキャリヤータンパク質を含む肺炎球菌ワクチン組成物を提供し、その際、血清型は１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ｆ、１９Ａおよび２２Ｆから選択され、キャリヤータンパク質はＰｓａＡである。
【００５５】
[0056]  他の態様において、本開示は２種類以上の血清型の肺炎球菌多糖類およびキャリヤータンパク質を含む肺炎球菌ワクチン組成物を提供し、その際、血清型は１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１０Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ｆ、１９Ａ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆ、３４、３５、３８および４５から選択され、キャリヤータンパク質はＰｓａＡである。
【００５６】
[0057]  他の態様において、本開示は１種類以上の血清型の肺炎球菌多糖類およびキャリヤータンパク質を含む肺炎球菌ワクチン組成物を提供し、その際、血清型は１、２、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、６Ｃ、７Ｆ、８、９Ｎ、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１８Ｃ、１９Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆ、３４、３５Ｂ、３５Ｆ、３８、３９および４５であり、キャリヤータンパク質はＰｓＡである。
【００５７】
[0058]  他の態様において、本開示は１種類以上の血清型の肺炎球菌多糖類およびキャリヤータンパク質を含む肺炎球菌ワクチン組成物を提供し、その際、肺炎球菌多糖類はそれぞれ個別にＰｓａＡ、またはＰｓａＡとＣＲＭ１９７の組合わせにコンジュゲートしている。
【００５８】
[0059]  他の態様において、本開示は、それぞれ個別にＰｓａＡにコンジュゲートした少なくとも６種類の肺炎球菌多糖類、およびそれぞれ個別にＣＲＭ１９７にコンジュゲートした１種類以上の肺炎球菌多糖類を含む、肺炎球菌ワクチン組成物を提供する。
【００５９】
[0060]  他の態様において、本開示は、それぞれ個別にＰｓａＡにコンジュゲートした少なくとも５種類の肺炎球菌多糖類、およびそれぞれ個別にＣＲＭ１９７にコンジュゲートした少なくとも５種類の肺炎球菌多糖類を含む、肺炎球菌ワクチン組成物を提供する。
【００６０】
[0061]  他の態様において、本開示は、それぞれ個別にＰｓａＡにコンジュゲートした少なくとも５種類の肺炎球菌多糖類、およびそれぞれ個別にＣＲＭ１９７にコンジュゲートした少なくとも５種類の肺炎球菌多糖類を含む、１４価肺炎球菌ワクチン組成物を提供する。
【００６１】
[0062]  他の態様において、本開示は、それぞれ個別にＰｓａＡにコンジュゲートした少なくとも５種類の血清型の肺炎球菌多糖類、およびそれぞれ個別にＣＲＭ１９７にコンジュゲートした少なくとも５種類の血清型の肺炎球菌多糖類を含む、１７価肺炎球菌ワクチン組成物を提供する。
【００６２】
[0063]  他の態様において、本開示は、それぞれ個別にＰｓａＡにコンジュゲートした少なくとも５種類の血清型の肺炎球菌多糖類、およびそれぞれ個別にＣＲＭ１９７にコンジュゲートした少なくとも５種類の血清型の肺炎球菌多糖類を含む、２０価肺炎球菌ワクチン組成物を提供する。
【００６３】
[0064]  他の態様において、本開示は、それぞれ個別にＰｓａＡにコンジュゲートした少なくとも５種類の血清型の肺炎球菌多糖類、およびそれぞれ個別にＣＲＭ１９７にコンジュゲートした少なくとも５種類の血清型の肺炎球菌多糖類を含む、２２価肺炎球菌ワクチン組成物を提供する。
【００６４】
[0065]  他の態様において、本開示は、それぞれ個別にＰｓａＡにコンジュゲートした少なくとも５種類の血清型の肺炎球菌多糖類、およびそれぞれ個別にＣＲＭ１９７にコンジュゲートした少なくとも５種類の血清型の肺炎球菌多糖類を含む、２４価肺炎球菌ワクチン組成物を提供する。
【００６５】
[0066]  他の態様において、本開示は肺炎球菌多糖類血清型１、３、４、５、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆを含む１４価肺炎球菌ワクチンを提供し、その際、少なくとも血清型３および６ＢはＰｓａＡにコンジュゲートしており、１種類以上の血清型１、４、５、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３ＦはＣＲＭ１９７にコンジュゲートしている。
【００６６】
[0067]  他の態様において、本開示は肺炎球菌多糖類血清型１、３、４、５、６Ａ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆを含む１４価肺炎球菌ワクチンを提供し、その際、少なくとも血清型３および６ＡはＰｓａＡにコンジュゲートしており、１種類以上の血清型１、４、５、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３ＦはＣＲＭ１９７にコンジュゲートしている。
【００６７】
[0068]  他の態様において、本開示は肺炎球菌多糖類血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆを含む１５価肺炎球菌ワクチンを提供し、その際、少なくとも血清型３、６Ａおよび６ＢはＰｓａＡにコンジュゲートしており、１種類以上の血清型１、４、５、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３ＦはＣＲＭ１９７にコンジュゲートしている。
【００６８】
[0069]  他の態様において、本開示は肺炎球菌多糖類血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１２Ｆ，１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂを含む１７価肺炎球菌ワクチンを提供し、その際、少なくとも血清型３、６Ａおよび６ＢはＰｓａＡにコンジュゲートしており、１種類以上の血清型１、４、５、７Ｆ、９Ｖ、１２Ｆ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆおよび３５ＢはＣＲＭ１９７にコンジュゲートしている。
【００６９】
[0070]  他の態様において、本開示は肺炎球菌多糖類血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆ、３５Ｂおよび４５を含む２０価肺炎球菌ワクチンを提供し、その際、少なくとも血清型３、６Ａおよび６ＢはＰｓａＡにコンジュゲートしており、１種類以上の血清型１、４、５、７Ｆ、９Ｖ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆ、３５Ｂおよび４５はＣＲＭ１９７にコンジュゲートしている。
【００７０】
[0071]  他の態様において、本開示は肺炎球菌多糖類血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１０Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆ、３４、３５Ｂおよび３８を含む２２価肺炎球菌ワクチンを提供し、その際、少なくとも血清型３、６Ａおよび６ＢはＰｓａＡにコンジュゲートしており、１種類以上の血清型１、４、５、７Ｆ、９Ｖ、１０Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆ、３４、３５Ｂおよび３８はＣＲＭ１９７にコンジュゲートしている。
【００７１】
[0072]  他の態様において、本開示は肺炎球菌多糖類血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１０Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆ、３４、３５Ｂおよび３８を含む２２価肺炎球菌ワクチンを提供し、その際、血清型１、３、６Ａ、１０Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｂ、２２Ｆ、３４、３５Ｂ、３８はＰｓａＡにコンジュゲートしており、血清型１４、５、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２３Ｆおよび３３ＦはＣＲＭ１９７にコンジュゲートしている。
【００７２】
[0073]  他の態様において、本開示は肺炎球菌多糖類血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１６Ｆ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆ、３４、３５Ｂおよび３８を含む２４価肺炎球菌ワクチンを提供し、その際、少なくとも血清型３、６Ａおよび６ＢはＰｓａＡにコンジュゲートしており、１種類以上の血清型１、４、５、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１６Ｆ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆ、３４、３５Ｂおよび３８はＣＲＭ１９７にコンジュゲートしている。
【００７３】
[0074]  他の態様において、本開示は肺炎球菌多糖類血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１６Ｆ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆ、３４、３５Ｂおよび３８を含む２４価肺炎球菌ワクチンを提供し、その際、血清型１、３、６Ａ、８、１０Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｂ、１６Ｆ、２２Ｆ、３４、３５、３８はＰｓａＡにコンジュゲートしており、１種類以上の血清型１４、５、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２３Ｆおよび３３ＦはＣＲＭ１９７にコンジュゲートしている。
【００７４】
[0075]  他の態様において、本開示は投与単位に配合された肺炎球菌ワクチン組成物を提供する。
[0076]  他の態様において、本開示は投与単位に配合された肺炎球菌ワクチン組成物を提供し、その際、投与単位は約０．１μｇ〜約５０μｇのそれぞれの多糖類、約０．１μｇ〜約１０μｇ、または約１μｇ〜約５μｇのそれぞれの多糖類を含み、その際、それぞれの多糖類はそれぞれ個別にキャリヤータンパク質、すなわち約１．５μｇから約５μｇまでのキャリヤータンパク質にコンジュゲートしている。
【００７５】
[0077]  他の態様において、本開示は、医薬的に許容できる希釈剤、緩衝剤、保存剤、安定剤、アジュバント、および／または凍結乾燥用賦形剤を含む肺炎球菌ワクチン組成物を提供する。
【００７６】
[0078]  他の態様において、本開示は投与単位に配合された肺炎球菌ワクチン組成物を提供し、それは単回量バイアル、多数回量バイアル、またはプレフィルドシリンジとして供給される。
【００７７】
[0079]  他の態様において、本開示は肺炎球菌ワクチン組成物を０．５ｍＬの単回量として提供し、その単回量は約２．２〜４．４μｇの１種類以上の肺炎球菌多糖類；１種類以上の肺炎球菌多糖類のそれぞれにコンジュゲートした約１μｇ〜約１０μｇのＰｓａＡ；１種類以上の肺炎球菌多糖類のそれぞれにコンジュゲートした約１μｇ〜約１０μｇのＣＲＭ１９７；約０．２ｍｇ〜約１ｍｇのリン酸アルミニウムアジュバント；および賦形剤を含む。
【００７８】
[0080]  他の態様において、本開示はそれぞれ個別にＰｓａＡ、またはＰｓａＡとＣＲＭ１９７の組合わせにコンジュゲートした肺炎球菌多糖類血清型１、３、４、５、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆおよび３３Ｆを含む１３価肺炎球菌ワクチンを提供し、その際、肺炎球菌ワクチン組成物は、約２．２μｇ〜約４．４μｇのそれぞれの多糖類、約２５μｇ〜約３０μｇのＰｓａＡおよびＣＲＭ１９７、約０．５ｍｇのリン酸アルミニウムとしての約０．１２５ｍｇのアルミニウム元素、塩化ナトリウム、およびＬ−ヒスチジン緩衝剤を含む無菌液剤として配合された約０．５ｍＬ量である。
【００７９】
[0081]  他の態様において、本開示はそれぞれ個別にＰｓａＡ、またはＰｓａＡとＣＲＭ１９７の組合わせにコンジュゲートした肺炎球菌多糖類血清型１、３、４、５、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆを含む１４価肺炎球菌ワクチンを提供し、その際、肺炎球菌ワクチン組成物は、約２．２μｇ〜約４．４μｇのそれぞれの多糖類、約３０μｇ〜約３５μｇのＰｓａＡおよびＣＲＭ１９７、約０．５ｍｇのリン酸アルミニウムとしての約０．１２５ｍｇのアルミニウム元素、塩化ナトリウム、およびＬ−ヒスチジン緩衝剤を含む無菌液剤として配合された約０．５ｍＬ量である。
【００８０】
[0082]  他の態様において、本開示はそれぞれ個別にＰｓａＡ、またはＰｓａＡとＣＲＭ１９７の組合わせにコンジュゲートした肺炎球菌多糖類血清型１、３、４、５、６Ａ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆを含む１４価肺炎球菌ワクチンを提供し、その際、肺炎球菌ワクチン組成物は、約２．２〜４．４μｇのそれぞれの多糖類、約３０μｇ〜約３５μｇのＰｓａＡおよびＣＲＭ１９７、約０．５ｍｇのリン酸アルミニウムとしての約０．１２５ｍｇのアルミニウム元素、塩化ナトリウム、およびＬ−ヒスチジン緩衝剤を含む無菌液剤として配合された約０．５ｍＬ量である。
【００８１】
[0083]  他の態様において、本開示は肺炎球菌多糖類血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ，１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆを含む１５価肺炎球菌ワクチンを提供し、その際、少なくとも血清型３、６Ａおよび６ＢはＰｓａＡにコンジュゲートしており、１種類以上の血清型１、４、５、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３ＦはＣＲＭ１９７にコンジュゲートしており、その際、肺炎球菌ワクチン組成物は、約２．２μｇ〜約４．４μｇのそれぞれの多糖類、約５μｇ〜約２０μｇのＰｓａＡ、約２０μｇ〜約４０μｇのＣＲＭ１９７、約０．５ｍｇのリン酸アルミニウムとしての約０．１２５ｍｇのアルミニウム元素、塩化ナトリウム、およびＬ−ヒスチジン緩衝剤を含む無菌液剤として配合された約０．５ｍＬ量である。
【００８２】
[0084]  他の態様において、本開示は肺炎球菌多糖類血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１２Ｆ，１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂを含む１７価肺炎球菌ワクチンを提供し、その際、少なくとも血清型３、６Ａおよび６ＢはＰｓａＡにコンジュゲートしており、１種類以上の血清型１、４、５、７Ｆ、９Ｖ、１２Ｆ，１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆおよび３５ＢはＣＲＭ１９７にコンジュゲートしており、その際、肺炎球菌ワクチン組成物は、約２．２μｇ〜約４．４μｇのそれぞれの多糖類、約５μｇ〜約２０μｇのＰｓａＡ、約２０μｇ〜約４０μｇのＣＲＭ１９７、約０．５ｍｇのリン酸アルミニウムとしての約０．１２５ｍｇのアルミニウム元素、塩化ナトリウム、およびＬ−ヒスチジン緩衝剤を含む無菌液剤として配合された約０．５ｍＬ量である。
【００８３】
[0085]  他の態様において、本開示は肺炎球菌多糖類血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆ、３５Ｂおよび４５を含む２０価肺炎球菌ワクチンを提供し、その際、少なくとも血清型３、６Ａおよび６ＢはＰｓａＡにコンジュゲートしており、１種類以上の血清型１、４、５、７Ｆ、９Ｖ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆ、３５Ｂおよび４５はＣＲＭ１９７にコンジュゲートしており、その際、肺炎球菌ワクチン組成物は、約２．２μｇ〜約４．４μｇのそれぞれの多糖類、約５μｇ〜約２０μｇのＰｓａＡ、約２０μｇ〜約５０μｇのＣＲＭ１９７、約０．５ｍｇのリン酸アルミニウムとしての約０．１２５ｍｇのアルミニウム元素、塩化ナトリウム、およびＬ−ヒスチジン緩衝剤を含む無菌液剤として配合された約０．５ｍＬ量である。
【００８４】
[0086]  他の態様において、本開示は肺炎球菌多糖類血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１０Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆ、３４、３５Ｂおよび３８を含む２２価肺炎球菌ワクチンを提供し、その際、少なくとも血清型３、６Ａおよび６ＢはＰｓａＡにコンジュゲートしており、１種類以上の血清型１、４、５、７Ｆ、９Ｖ、１０Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆ、３４、３５Ｂおよび３８はＣＲＭ１９７にコンジュゲートしており、その際、肺炎球菌ワクチン組成物は、約２．２μｇ〜約４．４μｇのそれぞれの多糖類、約５μｇ〜約２０μｇのＰｓａＡ、約２０μｇ〜約５０μｇのＣＲＭ１９７、約０．５ｍｇのリン酸アルミニウムとしての約０．１２５ｍｇのアルミニウム元素、塩化ナトリウム、およびＬ−ヒスチジン緩衝剤を含む無菌液剤として配合された約０．５ｍＬ量である。
【００８５】
[0087]  他の態様において、本開示は肺炎球菌多糖類血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１０Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆ、３４、３５Ｂおよび３８を含む２２価肺炎球菌ワクチンを提供し、その際、血清型１、３、６Ａ、１０Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｂ、２２Ｆ、３４、３５Ｂ、３８はＰｓａＡにコンジュゲートしており、血清型１４、５、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２３Ｆおよび３３ＦはＣＲＭ１９７にコンジュゲートしており、その際、肺炎球菌ワクチン組成物は、約２．２μｇ〜約４．４μｇのそれぞれの多糖類、約２０μｇ〜約４０μｇのＰｓａＡ、約２０μｇ〜約４０μｇのＣＲＭ１９７、約０．５ｍｇのリン酸アルミニウムとしての約０．１２５ｍｇのアルミニウム元素、塩化ナトリウム、およびＬ−ヒスチジン緩衝剤を含む無菌液剤として配合された約０．５ｍＬ量である。
【００８６】
[0088]  他の態様において、本開示は肺炎球菌多糖類血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１６Ｆ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆ、３４、３５Ｂおよび３８を含む２４価肺炎球菌ワクチンを提供し、その際、少なくとも血清型３、６Ａおよび６ＢはＰｓａＡにコンジュゲートしており、１種類以上の血清型１、４、５、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１６Ｆ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆ、３４、３５Ｂおよび３８はＣＲＭ１９７にコンジュゲートしており、その際、肺炎球菌ワクチン組成物はり、約２．２μｇ〜約４．４μｇのそれぞれの多糖類、約５μｇ〜約２０μｇのＰｓａＡ、約２０μｇ〜約５０μｇのＣＲＭ１９７、約０．５ｍｇのリン酸アルミニウムとしての約０．１２５ｍｇのアルミニウム元素、塩化ナトリウム、およびＬ−ヒスチジン緩衝剤を含む無菌液剤として配合された約０．５ｍＬ量である。
【図面の簡単な説明】
【００８７】
【図１−１】[0089]  図１：ＳＥＣ−ＨＰＬＣクロマトグラムは、血清型７Ｆ（Ａ）、血清型１４（Ｂ）、血清型１９Ｆ（Ｃ）、血清型３（Ｄ）、血清型６Ａ（Ｅ）、および血清型６Ｂ（Ｆ）のコンジュゲーション反応動態を示す。
【図１−２】[0089]  図１：ＳＥＣ−ＨＰＬＣクロマトグラムは、血清型７Ｆ（Ａ）、血清型１４（Ｂ）、血清型１９Ｆ（Ｃ）、血清型３（Ｄ）、血清型６Ａ（Ｅ）、および血清型６Ｂ（Ｆ）のコンジュゲーション反応動態を示す。
【図２−１】[0090]  図２：ＳＥＣ−ＨＰＬＣクロマトグラムは、血清型５（Ａ）、血清型９Ｖ（Ｂ）、血清型１８Ｃ（Ｃ）、血清型３（Ｄ）、血清型６Ａ（Ｅ）、および血清型６Ｂ（Ｆ）のコンジュゲーション反応動態を示す。
【図２−２】[0090]  図２：ＳＥＣ−ＨＰＬＣクロマトグラムは、血清型５（Ａ）、血清型９Ｖ（Ｂ）、血清型１８Ｃ（Ｃ）、血清型３（Ｄ）、血清型６Ａ（Ｅ）、および血清型６Ｂ（Ｆ）のコンジュゲーション反応動態を示す。
【図３】[0091]  図３：実施例３に記載する本開示の組成物で免疫化したウサギにおける種々の血清型に対する免疫応答。
【図４】[0092]  図４：Ｐｒｅｖｎａｒ  １３（登録商標）で免疫化したウサギにおける種々の血清型に対する免疫応答。
【図５】[0093]  図５：実施例４に記載する本開示の他の組成物で免疫化したウサギにおける種々の血清型に対する免疫応答。
【発明を実施するための形態】
【００８８】
[0094]  ある態様において、本開示は肺炎球菌多糖類を含む肺炎球菌ワクチン組成物を提供し、その際、１種類以上の肺炎球菌多糖類が天然の肺炎球菌多糖類である。
[0095]  他の態様において、本開示は、肺炎球菌多糖類を含む肺炎球菌ワクチン組成物を提供し、その際、１種類以上の肺炎球菌多糖類がフラグメント化され、それぞれのフラグメント化された肺炎球菌多糖類は天然の肺炎球菌多糖類のものより小さい平均分子量をもつ。
【００８９】
[0096]  他の態様において、本開示は、肺炎球菌多糖類を含む肺炎球菌ワクチン組成物を提供し、その際、それぞれの肺炎球菌多糖類がキャリヤータンパク質へのコンジュゲーションの前に１−シアノ−４−ジメチルアミノ−ピリジニウム  テトラフルオロボレート（ＣＤＡＰ）で活性化されてシアネートエステルを形成している。
【００９０】
[0097]  他の態様において、本開示は、肺炎球菌多糖類を含む肺炎球菌ワクチン組成物を提供し、その際、１種類以上の肺炎球菌多糖類がキャリヤータンパク質のアミノ基に直接カップリングするかまたはスペーサーによりアミノ基にカップリングしている。
【００９１】
[0098]  他の態様において、本開示は、肺炎球菌多糖類を含む肺炎球菌ワクチン組成物を提供し、その際、スペーサーはシスタミン、システアミン、ヘキサンジアミン、アジピン酸ジヒドラジド（ＡＤＨ）、ＥＤＡＣまたはＥＤＣである。
【００９２】
[0099]  他の態様において、本開示は、１種類以上の血清型の肺炎球菌多糖類およびキャリヤータンパク質を含む肺炎球菌ワクチン組成物を提供し、その際、ＰｓａＡキャリヤータンパク質は修飾されたＰｓａＡであり、野生型の疎水性Ｎ末端リーダーペプチドを含まない。
【００９３】
[0100]  他の態様において、本開示は、１種類以上の血清型の肺炎球菌多糖類およびキャリヤータンパク質を含む肺炎球菌ワクチン組成物を提供し、その際、ＰｓａＡキャリヤータンパク質は２９０のアミノ酸を含む。
【００９４】
[0101]  本開示は、それぞれ個別にキャリヤータンパク質にコンジュゲートした２種類以上の肺炎球菌莢膜多糖類血清型（本明細書中で、多糖類−タンパク質コンジュゲートおよび／またはコンジュゲート類と呼ばれる）を含む肺炎球菌ワクチン組成物を提供する。本明細書に記載する肺炎球菌ワクチン組成物に含有される際、肺炎球菌ワクチンは多価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲートワクチンである（本明細書中で、多価コンジュゲートワクチン、コンジュゲートワクチン、および／または多糖類−タンパク質コンジュゲートワクチンとも呼ばれる）。多価コンジュゲートワクチンのほかに、本開示はそれを製造するための方法、および／またはその必要がある対象にそれを投与するための方法を提供する。
【００９５】
[0102]  ある態様において、肺炎球菌ワクチン組成物は１種類以上のコンジュゲートを含む多価免疫原組成物である。たとえば、コンジュゲートは２種類以上の肺炎球菌多糖類を含むことができ、それぞれの肺炎球菌多糖類は血清型１、２、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、６Ｃ、７Ｆ、８、９Ｎ、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１８Ｃ、１９Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆ、３４、３５Ｂ、３５Ｆ、３８、３９、および４５の肺炎球菌多糖類から選択される。
【００９６】
[0103]  ある態様において、肺炎球菌ワクチン組成物は多価であり、５種類の肺炎球菌多糖類（５価）、１０種類の肺炎球菌多糖類（１０価）、１１種類の肺炎球菌多糖類（１１価）、１２種類の肺炎球菌多糖類（１２価）、１３種類の肺炎球菌多糖類（１３価）、１４種類の肺炎球菌多糖類（１４価）、１５種類の肺炎球菌多糖類（１５価）、１６種類の肺炎球菌多糖類（１６価）、１７種類の肺炎球菌多糖類（１７価）、１８種類の肺炎球菌多糖類（１８価）、１９種類の肺炎球菌多糖類（１９価）、２０種類の肺炎球菌多糖類（２０価）、２１種類の肺炎球菌多糖類（２１価）、２２種類の肺炎球菌多糖類（２２価）、２３種類の肺炎球菌多糖類（２３価）、２４種類の肺炎球菌多糖類（２４価）、２５種類の肺炎球菌多糖類（２５価）、２６種類の肺炎球菌多糖類（２６価）、２７種類の肺炎球菌多糖類（２７価）、２８種類の肺炎球菌多糖類（２８価）、２９種類の肺炎球菌多糖類（２９価）、または３０種類の肺炎球菌多糖類（３０価）を含む。他の態様において、肺炎球菌ワクチン組成物は１０価、１４価、１５価、１７価、１８価、１９価、２０価、２２価、２３価、２４価または２５価の肺炎球菌ワクチン組成物である。
【００９７】
[0104]  意外にも、本開示の多価肺炎球菌コンジュゲートワクチン組成物は、キャリヤータンパク質にコンジュゲートしていない肺炎球菌多糖類を含む多価肺炎球菌ワクチンと比較して改良された免疫応答をもたらす。より具体的には、本開示の多価肺炎球菌コンジュゲートワクチン組成物は意外にも、肺炎連鎖球菌の１種類以上の血清型に由来する肺炎球菌多糖類がＰｓａＡおよび／またはＣＲＭ１９７にコンジュゲートしている場合に最も有効であった。
【００９８】
[0105]  キャリヤータンパク質は、十分な量および純度で入手できる無毒性かつ非−反応原性のタンパク質である。ある態様において、本開示は、１種類以上の肺炎連鎖球菌多糖類（本明細書中で“肺炎球菌多糖類”とも呼ばれる）にコンジュゲートした１種類以上のキャリヤータンパク質を含む肺炎球菌コンジュゲートワクチン組成物を提供する。肺炎球菌多糖類をキャリヤータンパク質にコンジュゲートさせることにより、肺炎球菌多糖類はコンジュゲートしていない肺炎球菌多糖類と比較して増大した免疫原性をもつ。本開示に有用なキャリヤータンパク質は標準的なコンジュゲーション法に適応できるべきである。
【００９９】
[0106]  ＣＲＭ１９７はジフテリアトキシンのバリアントであり、ワクチンにおける使用について無毒性である。ＣＲＭ１９７は、カザミノ酸(casamino acid)および酵母エキスをベースとする培地で増殖させたジフテリア菌(Corynebacterium diphtheriae)株Ｃ７（β１９７）の培養物から単離することができる。ＣＲＭ１９７は、U.S. Pat. No. 5,614,382に記載された方法に従って組換え製造できる。あるいは、ＣＲＭ１９７は文献中に知られている方法に従って、またはPCT publication WO 2016/079755に開示された方法に従って、組換え製造できる。ＣＲＭ１９７は、限外濾過、硫酸アンモニウム沈殿、およびイオン交換クロマトグラフィー、または当技術分野で周知である他の方法によって精製できる。
【０１００】
[0107]  ある態様において、本開示の肺炎球菌多糖類は１種類以上のキャリヤータンパク質にコンジュゲートしている。たとえば、肺炎球菌多糖類はそれぞれ個別にキャリヤータンパク質にコンジュゲートしている。他の態様において、１種類より多い肺炎球菌多糖類がキャリヤータンパク質にコンジュゲートしている。たとえば、２種類の肺炎球菌多糖類、３種類の肺炎球菌多糖類、４種類の肺炎球菌多糖類、５種類の肺炎球菌多糖類、６種類の肺炎球菌多糖類、７種類の肺炎球菌多糖類、８種類の肺炎球菌多糖類、９種類の肺炎球菌多糖類、または１０種類の肺炎球菌多糖類がキャリヤータンパク質にコンジュゲートしている。ある態様において、肺炎球菌多糖類は１種類より多いキャリヤータンパク質にコンジュゲートしている。たとえば、肺炎球菌多糖類は１種類のキャリヤータンパク質、２種類のキャリヤータンパク質、３種類のキャリヤータンパク質、および／または４種類のキャリヤータンパク質にコンジュゲートしている。
【０１０１】
[0108]  ある態様において、キャリヤータンパク質はＰｓａＡである。さらに他の態様において、キャリヤータンパク質の組合わせを使用し、それは２種類以上のキャリヤータンパク質、たとえばＰｓａおよびＣＲＭ１９７を含み、それらはそれぞれ個別にそれぞれの肺炎球菌多糖類にコンジュゲートしている。さらなる態様において、キャリヤータンパク質は２種類のキャリヤータンパク質であり、ＰｓａＡおよびＣＲＭ１９７を含む。
【０１０２】
[0109]  ある態様において、キャリヤータンパク質は下記のキャリヤータンパク質のうち１種類以上から選択される：ＰｓａＡ、ＣＲＭ１９７、不活化した細菌トキシン、たとえば破傷風トキソイド、百日咳トキソイド、コレラトキソイド、緑膿菌(Pseudomonas aeruginosa)由来のエキソトキシンＡ、細菌外膜タンパク質、たとえば外膜複合体ｃ(outer membrane complex c)（ＯＭＰＣ）、ポーリン(porin)、トランスフェリン(transferrin)結合タンパク質、ニューモリシン(pneumolysin)、ＰｓｐＡ、Ａ群もしくはＢ群連鎖球菌に由来するＣ５ａペプチダーゼ、またはインフルエンザ菌プロテインＤ、オボアルブミン、キーホールリンペットヘモシニアン(keyhole limpet hemocyanin)（ＫＬＨ）、ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）、およびツベルクリンの精製タンパク質誘導体(purified protein derivative)（ＰＰＤ）。
【０１０３】
[0110]  さらに、１種類以上のコンジュゲートが天然（たとえば、野生型）キャリヤータンパク質を含むことができ、および／または１種類以上のコンジュゲートがそれらの天然形態から非−天然形態に修飾された（たとえば、１以上のアミノ酸を欠失するように工学操作された）キャリヤータンパク質を含むことができる。ある態様において、キャリヤータンパク質を工学操作して、本開示のコンジュゲートに望ましくない特性をもつ可能性がある１以上のタンパク質ドメイン、たとえばリーダーペプチドまたは他のドメインを排除することができる。たとえば、ＰｓａＡはハイドロパシーインデックス(hydropathy index)２．０５２をもつ疎水性Ｎ末端リーダーペプチドを欠如するように工学操作された２９０アミノ酸のキャリヤータンパク質であってもよい。
【０１０４】
[0111]  ある態様において、本開示は、血清型１、２、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、６Ｃ、７Ｆ、８、９Ｎ、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１８Ｃ、１９Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆ、３４、３５Ｂ、３５Ｆ、３８、３９および４５から選択される肺炎球菌多糖類（たとえば、肺炎球菌莢膜多糖類）を含む肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲートワクチン組成物を提供する。選択された肺炎球菌多糖類はそれぞれ個別にキャリヤータンパク質ＰｓａＡにコンジュゲートしており、あるいは選択された肺炎球菌多糖類のうち第１部分はＰｓａＡにコンジュゲートしており、選択された肺炎球菌多糖類のうち第２部分はＣＲＭ１９７にコンジュゲートしている。これらのいずれかの態様において、肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲートワクチン組成物は免疫原性多価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲート組成物、たとえば１０価、１３価、１４価、１５価、１７価、１８価、１９価、２０価、２２価、２３価、２４価または２５価の免疫原性多価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲート組成物である。
【０１０５】
[0112]  ある態様において、本開示は、血清型１、２、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、６Ｃ、７Ｆ、８、９Ｎ、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１８Ｃ、１９Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆ、３４、３５Ｂ、３５Ｆ、３８、３９および４５から選択される肺炎球菌多糖類（たとえば、肺炎球菌莢膜多糖類）を含む肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲートワクチン組成物を提供する。選択された肺炎球菌多糖類はそれぞれ個別にキャリヤータンパク質ＰｓａＡにコンジュゲートしている。他の態様において、選択された肺炎球菌多糖類のうち第１部分はＰｓａＡにコンジュゲートしており、選択された肺炎球菌多糖類のうち第２部分はＣＲＭ１９７にコンジュゲートしている。これらのいずれかの態様において、肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲートワクチン組成物は免疫原性多価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲート組成物、たとえば１０価、１３価、１４価、１５価、１７価、１８価、１９価、２０価、２２価、２３価、２４価または２５価の免疫原性多価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲート組成物である。
【０１０６】
[0113]  さらなる態様において、本開示は、血清型１、２、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、６Ｃ、７Ｆ、８、９Ｎ、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１８Ｃ、１９Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆ、３４、３５Ｂ、３５Ｆ、３８、３９および４５から選択される肺炎球菌多糖類（たとえば、肺炎球菌莢膜多糖類）を含む肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲートワクチン組成物を提供する。これらの態様において、選択された肺炎球菌多糖類のうち少なくとも３種類はそれぞれ個別にキャリヤータンパク質ＰｓａＡにコンジュゲートしており、さらに他の肺炎球菌多糖類はそれぞれ個別にキャリヤータンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲートしている。これらのいずれかの態様において、肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲートワクチン組成物は免疫原性多価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲート組成物、たとえば１０価、１３価、１４価、１５価、１７価、１８価、１９価、２０価、２２価、２３価、２４価または２５価の免疫原性多価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲート組成物である。
【０１０７】
[0114]  さらなる態様において、本開示は、血清型１、２、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、６Ｃ、７Ｆ、８、９Ｎ、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１８Ｃ、１９Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆ、３４、３５Ｂ、３５Ｆ、３８、３９および４５から選択される肺炎球菌多糖類（たとえば、肺炎球菌莢膜多糖類）を含む肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲートワクチン組成物を提供する。これらの態様において、選択された肺炎球菌多糖類のうち少なくとも第１の５種類はそれぞれ個別にキャリヤータンパク質ＰｓａＡにコンジュゲートしており、第２の５種類の多糖類はそれぞれ個別にキャリヤータンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲートしている。第１の５種類の選択された肺炎球菌多糖類は、血清型１、２、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、６Ｃ、７Ｆ、８、９Ｎ、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１８Ｃ、１９Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆ、３４、３５Ｂ、３５Ｆ、３８、３９および４５から選択され、第２の５種類は血清型１、２、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、６Ｃ、７Ｆ、８、９Ｎ、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１８Ｃ、１９Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆ、３４、３５Ｂ、３５Ｆ、３８、３９および４５から選択される。他の態様において、選択された肺炎球菌多糖類のうち第１部分はＰｓａＡにコンジュゲートしており、選択された肺炎球菌多糖類のうち第２部分はＣＲＭ１９７にコンジュゲートしている。これらのいずれかの態様において、肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲートワクチン組成物は免疫原性多価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲート組成物、たとえば１０価、１４価、１５価、１７価、１８価、１９価、２０価、２２価、２３価、２４価または２５価の免疫原性多価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲート組成物である。
【０１０８】
[0115]  さらなる態様において、本開示は、血清型１、２、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、６Ｃ、７Ｆ、８、９Ｎ、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１８Ｃ、１９Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆ、３４、３５Ｂ、３５Ｆ、３８、３９および４５から選択され、ＰｓａＡにコンジュゲートしている、少なくとも３種類の肺炎球菌多糖類（たとえば、肺炎球菌莢膜多糖類）を含む、１４価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲートワクチン組成物を提供する。その上、その１４価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲートワクチン組成物は、血清型１、２、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、６Ｃ、７Ｆ、８、９Ｎ、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１８Ｃ、１９Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆ、３４、３５Ｂ、３５Ｆ、３８、３９および４５から選択され、ＣＲＭ１９７にコンジュゲートしている、少なくとも５種類の肺炎球菌多糖類をさらに含む。
【０１０９】
[0116]  さらなる態様において、本開示は、血清型１、２、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、６Ｃ、７Ｆ、８、９Ｎ、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１８Ｃ、１９Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆ、３４、３５Ｂ、３５Ｆ、３８、３９および４５から選択され、ＰｓａＡにコンジュゲートしている、少なくとも３種類の肺炎球菌多糖類（たとえば、肺炎球菌莢膜多糖類）を含む、１５価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲートワクチン組成物を提供する。その上、その１５価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲートワクチン組成物は、血清型１、２、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、６Ｃ、７Ｆ、８、９Ｎ、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１８Ｃ、１９Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆ、３４、３５Ｂ、３５Ｆ、３８、３９および４５から選択され、ＣＲＭ１９７にコンジュゲートしている、少なくとも５種類の肺炎球菌多糖類をさらに含む。
【０１１０】
[0117]  ある態様において、本開示は、血清型１、２、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、６Ｃ、７Ｆ、８、９Ｎ、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１８Ｃ、１９Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆ、３４、３５Ｂ、３５Ｆ、３８、３９および４５から選択され、ＰｓａＡにコンジュゲートしている、少なくとも３種類の肺炎球菌多糖類（たとえば、肺炎球菌莢膜多糖類）を含む、１７価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲートワクチン組成物を提供する。その上、その１７価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲートワクチン組成物は、血清型１、２、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、６Ｃ、７Ｆ、８、９Ｎ、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１８Ｃ、１９Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆ、３４、３５Ｂ、３５Ｆ、３８、３９および４５から選択され、ＣＲＭ１９７にコンジュゲートしている、少なくとも５種類の肺炎球菌多糖類をさらに含む。
【０１１１】
[0118]  他の態様において、本開示は、血清型１、２、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、６Ｃ、７Ｆ、８、９Ｎ、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１８Ｃ、１９Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆ、３４、３５Ｂ、３５Ｆ、３８、３９および４５から選択され、ＰｓａＡにコンジュゲートしている、少なくとも３種類の肺炎球菌多糖類（たとえば、肺炎球菌莢膜多糖類）を含む、２０価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲートワクチン組成物を提供する。その上、その２０価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲートワクチン組成物は、血清型１、２、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、６Ｃ、７Ｆ、８、９Ｎ、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１８Ｃ、１９Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆ、３４、３５Ｂ、３５Ｆ、３８、３９および４５から選択され、ＣＲＭ１９７にコンジュゲートしている、少なくとも５種類の肺炎球菌多糖類をさらに含む。
【０１１２】
[0119]  さらに他の態様において、本開示は、血清型１、２、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、６Ｃ、７Ｆ、８、９Ｎ、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１８Ｃ、１９Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆ、３４、３５Ｂ、３５Ｆ、３８、３９および４５から選択され、ＰｓａＡにコンジュゲートしている、少なくとも５種類の肺炎球菌多糖類（たとえば、肺炎球菌莢膜多糖類）を含む、２２価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲートワクチン組成物を提供する。その上、その２２価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲートワクチン組成物は、血清型１、２、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、６Ｃ、７Ｆ、８、９Ｎ、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１８Ｃ、１９Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆ、３４、３５Ｂ、３５Ｆ、３８、３９および４５から選択され、ＣＲＭ１９７にコンジュゲートしている、少なくとも５種類の肺炎球菌多糖類をさらに含む。
【０１１３】
[0120]  ある態様において、本開示は、血清型１、２、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、６Ｃ、７Ｆ、８、９Ｎ、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１８Ｃ、１９Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆ、３４、３５Ｂ、３５Ｆ、３８、３９および４５から選択され、ＰｓａＡにコンジュゲートしている、少なくとも５種類の肺炎球菌多糖類（たとえば、肺炎球菌莢膜多糖類）を含む、２４価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲートワクチン組成物を提供する。その上、その２４価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲートワクチン組成物は、血清型１、２、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、６Ｃ、７Ｆ、８、９Ｎ、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１８Ｃ、１９Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆ、３４、３５Ｂ、３５Ｆ、３８、３９および４５から選択され、ＣＲＭ１９７にコンジュゲートしている、少なくとも５種類の肺炎球菌多糖類をさらに含む。
【０１１４】
[0121]  さらなる態様において、本開示は、血清型１、２、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、６Ｃ、７Ｆ、８、９Ｎ、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１８Ｃ、１９Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆ、３４、３５Ｂ、３５Ｆ、３８、３９および４５から選択され、ＰｓａＡにコンジュゲートしている、少なくとも５種類の肺炎球菌多糖類（たとえば、肺炎球菌莢膜多糖類）を含む、２５価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲートワクチン組成物を提供する。その上、その２５価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲートワクチン組成物は、血清型１、２、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、６Ｃ、７Ｆ、８、９Ｎ、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１８Ｃ、１９Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆ、３４、３５Ｂ、３５Ｆ、３８、３９および４５から選択され、ＣＲＭ１９７にコンジュゲートしている、少なくとも５種類の肺炎球菌多糖類をさらに含む。
【０１１５】
[0122]  他の態様において、本開示は、血清型１、３、４、５、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆから選択される肺炎球菌多糖類（たとえば、肺炎球菌莢膜多糖類）を含む１４価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲートワクチン組成物を提供する。選択された血清型のうち、少なくとも血清型３および血清型６ＢはＰｓａＡにコンジュゲートしており、１種類以上の血清型１、４、５、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３ＦはそれぞれＣＲＭ１９７にコンジュゲートしている。
【０１１６】
[0123]  他の態様において、本開示は、血清型１、３、４、５、６Ａ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆから選択される肺炎球菌多糖類（たとえば、肺炎球菌莢膜多糖類）を含む１４価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲートワクチン組成物を提供する。選択された血清型のうち、少なくとも血清型３および血清型６ＡはＰｓａＡにコンジュゲートしており、１種類以上の血清型１、４、５、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３ＦはそれぞれＣＲＭ１９７にコンジュゲートしている。
【０１１７】
[0124]  さらに他の態様において、本開示は、血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ，１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆから選択される肺炎球菌多糖類（たとえば、肺炎球菌莢膜多糖類）を含む１５価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲートワクチン組成物を提供する。選択された血清型のうち、少なくとも血清型３、６Ａ、および６ＢはＰｓａＡにコンジュゲートしており、１種類以上の血清型１、４、５、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３ＦはそれぞれＣＲＭ１９７にコンジュゲートしている。
【０１１８】
[0125]  ある態様において、本開示は、血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１２Ｆ，１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂから選択される肺炎球菌多糖類（たとえば、肺炎球菌莢膜多糖類）を含む１７価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲートワクチン組成物を提供する。選択された血清型のうち、少なくとも血清型３、６Ａ、および６ＢはＰｓａＡにコンジュゲートしており、１種類以上の血清型１、４、５、７Ｆ、９Ｖ、１２Ｆ，１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆおよび３５ＢはそれぞれＣＲＭ１９７にコンジュゲートしている。
【０１１９】
[0126]  ある態様において、本開示は、血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆ、３５Ｂおよび４５から選択される肺炎球菌多糖類（たとえば、肺炎球菌莢膜多糖類）を含む２０価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲートワクチン組成物を提供する。選択された血清型のうち、少なくとも血清型３、６Ａ、および６ＢはＰｓａＡにコンジュゲートしており、１種類以上の血清型１、４、５、７Ｆ、９Ｖ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆ、３５Ｂおよび４５はそれぞれＣＲＭ１９７にコンジュゲートしている。
【０１２０】
[0127]  他の態様において、本開示は、血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１０Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆ、３４，３５Ｂおよび３８から選択される肺炎球菌多糖類（たとえば、肺炎球菌莢膜多糖類）を含む２２価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲートワクチン組成物を提供する。選択された血清型のうち、少なくとも血清型３、６Ａ、および６ＢはＰｓａＡにコンジュゲートしており、１種類以上の血清型１、４、５、７Ｆ、９Ｖ、１０Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆ、３４、３５Ｂおよび３８はそれぞれＣＲＭ１９７にコンジュゲートしている。
【０１２１】
[0128]  他の態様において、本開示は、血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１０Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆ、３４、３５Ｂおよび３８から選択される肺炎球菌多糖類（たとえば、肺炎球菌莢膜多糖類）を含む２２価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲートワクチン組成物を提供する。選択された血清型のうち、血清型１、３、６Ａ、１０Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｂ、２２Ｆ、３４、３５、および３８はＰｓａＡにコンジュゲートしており、 血清型１４、５、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２３Ｆおよび３３ＦはそれぞれＣＲＭ１９７にコンジュゲートしている。
【０１２２】
[0129]  他の態様において、本開示は、血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１６Ｆ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆ、３４、３５Ｂおよび３８から選択される肺炎球菌多糖類（たとえば、肺炎球菌莢膜多糖類）を含む２４価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲートワクチン組成物を提供する。選択された血清型のうち、血清型１、３、６Ａ、８、１０Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｂ、１６Ｆ、２２Ｆ、３４、３５、および３８はＰｓａＡにコンジュゲートしており、血清型１４、５、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２３Ｆおよび３３ＦはそれぞれＣＲＭ１９７にコンジュゲートしている。
【０１２３】
[0130]  本開示の肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲート組成物は、さらに下記のうち１種類以上を含む：医薬的に許容できるキャリヤー、医薬的に許容できる希釈剤、緩衝剤、保存剤、安定剤、アジュバント、および／または凍結乾燥用賦形剤。たとえば、本開示の肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲート組成物は医薬的に許容できるキャリヤーを含むことができる。ある態様において、本開示の肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲート組成物は、血清型１、２、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、６Ｃ、７Ｆ、８、９Ｎ、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１８Ｃ、１９Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆ、３４、３５Ｂ、３５Ｆ、３８、３９および４５から選択される少なくとも１０種類の肺炎球菌多糖類を含む。選択された血清型はそれぞれ個別に、ＰｓａＡ、またはＰｓａＡとＣＲＭ１９７の組合わせ、および医薬的に許容できるキャリヤーにコンジュゲートしている。
【０１２４】
[0131]  ある態様において、本開示の組成物に有用な肺炎球菌多糖類は、一般法に従って１種類以上の微生物（たとえば、肺炎連鎖球菌）から抽出できる。たとえば、肺炎球菌多糖類は既知の方法に従って調製できる。さらに、肺炎球菌多糖類の精製はPCT publication WO 2016/174683 A1に記載された方法に従って実施できる。
【０１２５】
[0132]  抽出した肺炎球菌多糖類を一般法に従って精製することができ、それの天然形態で使用できる。他の態様において、抽出および精製した肺炎球菌多糖類をフラグメント化して肺炎球菌多糖類の１以上の部分を得ることができ、肺炎球菌多糖類のそれぞれの部分は抽出および精製した肺炎球菌多糖類のものより小さい平均分子量をもつ。
【０１２６】
[0133]  他の態様において、本開示は、それぞれの肺炎球菌多糖類が約１５０ｋＤａ〜４５０ｋＤａの分子量をもつ肺炎球菌多糖類を含む、肺炎球菌ワクチン組成物を提供する。
【０１２７】
[0134]  他の態様において、本開示は、それぞれ個別にキャリヤータンパク質にコンジュゲートした１種類以上の肺炎球菌莢膜多糖類血清型、たとえば多糖類−タンパク質コンジュゲートを含む、肺炎球菌ワクチン組成物を提供し、その際、それぞれの多糖類−タンパク質コンジュゲートは約１，５００ｋＤａ〜約１５，０００ｋＤａの分子量をもつ。
【０１２８】
[0135]  他の態様において、抽出および精製した肺炎球菌多糖類を１種類以上のキャリヤータンパク質へのコンジュゲーションの前に活性化することができる。たとえば、抽出および精製した肺炎球菌多糖類を１種類以上のキャリヤータンパク質へのコンジュゲーションの前に活性化することができる（たとえば、化学的に）。それぞれの活性化された肺炎球菌多糖類をそれぞれ個別にキャリヤータンパク質にコンジュゲートさせて、多糖類−タンパク質コンジュゲート（たとえば、糖コンジュゲート（複合糖質）(glycoconjugate))を形成することができる。他の態様において、１種類以上の活性化された肺炎球菌多糖類を個別のキャリヤータンパク質にコンジュゲートさせることができ、および／または活性化された肺炎球菌多糖類を個別のキャリヤータンパク質にコンジュゲートさせることができる。コンジュゲートは既知の手法により製造できる。
【０１２９】
[0136]  ある態様において、肺炎球菌多糖類を化学的に活性化し、その後、既知の手法、たとえばU.S. Pat. No. 4,365,170、4,673,574および4,902,506に記載された手法に従ってキャリヤータンパク質にコンジュゲートさせることができる。たとえば、下記により肺炎球菌多糖類を活性化することができる：酸化剤、たとえばペルアイオデート（たとえば、過ヨウ素酸ナトリウム、過ヨウ素酸カリウム、または過ヨウ素酸）で末端ヒドロキシル基を酸化してアルデヒドにする；炭水化物の１以上のビシナルヒドロキシル基のランダムな酸化的開裂および１以上の反応性アルデヒド基の形成。
【０１３０】
[0137]  肺炎球菌多糖類をＣＤＡＰ（１−シアノ−４−ジメチルアミノ−ピリジニウム  テトラフルオロボレート）によって活性化し、その後、１種類以上のキャリヤータンパク質、たとえばＰｓａＡ、ＣＲＭ１９７、ＰｓｐＡ、またはその組み合わせにコンジュゲートさせることもできる。他の態様において、ＣＤＡＰで活性化してシアネートエステルを形成した肺炎球菌多糖類を１種類以上のキャリヤータンパク質に直接コンジュゲートさせるか、あるいはスペーサー（たとえば、リンカー）を用いてコンジュゲートさせることができる。スペーサーをキャリヤータンパク質上のアミノ基にカップリングさせることができる。ある態様において、スペーサーはシスタミンまたはシステアミンであってもよく、それはチオール化された多糖類を生成し、それをマレイミド活性化キャリヤータンパク質（たとえば、ＧＭＢＳを使用）またはハロアセチル化キャリヤータンパク質（たとえば、ヨードアセトイミド(iodoacetimide)、エチルヨードアセトイミドＨＣｌ、ＳＩＡＢ、ＳＩＡ、ＳＢＡＰ、および／またはＮ−スクシンイミジルブロモアセテートを使用）へのチオエーテル結合により、キャリヤータンパク質にカップリングさせることができる。他の態様において、ヘキサンジアミンまたはアジピン酸ジヒドラジド（ＡＤＨ）を用いてシアネートエステルをカップリングさせ、カルボジイミド（たとえば、ＥＤＡＣまたはＥＤＣ）化学を用いてタンパク質キャリヤー上のカルボキシル基を介してアミノ誘導体化した糖をキャリヤータンパク質にカップリングさせる。そのようなコンジュゲートは、International Patent Application Publication No. WO 93/15760、International Patent Application Publication No. WO 95/08348、International Patent Application Publication No. WO 96/29094、およびChu et al., 1983, Infect. Immunity 40:245-256に記載されている。
【０１３１】
[0138]  本開示の多糖類−タンパク質コンジュゲートおよびワクチン組成物について使用するための他の適切な活性化および／またはカップリングの手法には、カルボジイミド類、ヒドラジド類、活性エステル、ノルボラン、ｐ−ニトロ安息香酸、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、Ｓ-ＮＨＳ、ＥＤＣ、ＴＳＴＵの使用、およびInternational Patent Application Publication No. WO 98/42721に記載されている他の方法が含まれる。たとえば、コンジュゲーションは糖の遊離ヒドロキシル基とＣＤＩの反応により形成できるカルボニルリンカーを伴ない(参照：Bethell et al., 1979, J. Biol. Chem. 254:2572-4; Hearn et al., 1981, J. Chromatogr. 218:509-18)、続いてタンパク質とカップリングさせてカルバメート結合を形成することができる。ある態様において、アノマー末端を還元して第一級ヒドロキシル基にし、場合によりその第一級ヒドロキシル基を保護／脱保護し、第一級ヒドロキシル基をＣＤＩと反応させてＣＤＩカルバメート中間体を形成し、そのＣＤＩカルバメート中間体をタンパク質上のアミノ基と反応させることができる。
【０１３２】
[0139]  たとえば、本開示の多糖類−タンパク質コンジュゲートおよびワクチン組成物について使用するための他の適切な活性化および／またはカップリングの手法には、下記の方法が含まれる：サイズ調整した(sized)肺炎球菌多糖類（たとえば、約６ｍＬのサイズ調整した多糖類；約１０ｍｇ／ｍＬの濃度のもの）およびＣＤＡＰ（たとえば、アセトニトリル中、約１００ｍｇ／ｍＬ（ｗ／ｖ））をガラスバイアル内において約１：約１の比で混合することができる（たとえば、約１分間の攪拌による）。必要に応じて多糖類溶液のｐＨを調整することができる（たとえば、約０．２Ｍのトリエチルアミンで約９．２５にし、室温で３分間攪拌する）。さらに、ＰｓａＡ（たとえば、約１５ｍｇ／ｍＬの濃度をもつ約４ｍＬの溶液）を活性化した肺炎球菌多糖類（たとえば、約１：約１の比（Ｐｓ：キャリヤータンパク質））に徐々に添加することができる。反応のｐＨを調整し（たとえば、０．２Ｍのトリメチルアミンを用いて約９．０５にする）、反応を継続することができる（たとえば、室温で５時間攪拌することによる）。反応混合物を反応停止することができる（たとえば、過剰濃度のグリシンの添加による）。
【０１３３】
[0140]  ある態様において、メンブレン（たとえば、１００  Ｋ  ＭＷＣＯメンブレン）を用いて反応混合物を透析濾過し、サイズ排除クロマトグラフィーによって精製することができる。透析濾過および精製した画分を、ＳＥＣ−ＭＡＬＬＳおよびアンスロン法(anthrone method)を用いて分析することができる。分析したコンジュゲート含有画分をプールし、滅菌濾過することができる（たとえば、０．２μｍフィルターを使用）。
【０１３４】
[0141]  肺炎球菌多糖類を１種類以上のキャリヤータンパク質にコンジュゲートさせた後、多糖類−タンパク質コンジュゲートを多様な手法によって精製することができる（たとえば、多糖類−タンパク質コンジュゲートの量に関して富化する）。これらの手法には濃縮／透析濾過操作、沈殿／溶離、カラムクロマトグラフィー、および深層濾過(depth filtration)が含まれるが、これらに限定されない。たとえば、コンジュゲートを精製した後、コンジュゲートを調合して本開示の肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲート組成物を配合し、それをワクチンとして使用することができる。
【０１３５】
[0142]  ある態様において、本開示は、本明細書に記載する肺炎球菌ワクチン組成物の多糖類−タンパク質コンジュゲートを調製する方法を提供し、その方法はさらにその多糖類−タンパク質コンジュゲートを配合してアジュバント、賦形剤および緩衝剤を含有する肺炎球菌ワクチン組成物にすることを含む。
【０１３６】
[0143]  ある態様において、本開示は、アジュバントがリン酸アルミニウムである本明細書に記載する肺炎球菌ワクチン組成物の多糖類−タンパク質コンジュゲートを調製する方法を提供する。
【０１３７】
[0144]  ある態様において、本開示は、本明細書に記載する肺炎球菌ワクチン組成物をその必要がある対象に投与することを含む、その必要がある対象を処置する方法を提供する。
【０１３８】
[0145]  ある態様において、対象は肺炎連鎖球菌により媒介される疾患、たとえば侵襲性肺炎球菌感染症（ＩＰＤ）を伴なう。
[0146]  一態様において、対象はヒト、たとえば乳児（約１歳未満）、幼児（約１２か月齢〜約２４か月齢）、小児（約２歳〜約５歳）、より年上の子供（約５歳〜約１３歳）、青少年(adolescent)（約１３歳〜約１８歳）、成人（約１８歳〜約６５歳）、または高齢者（約６５歳を超える）である。
【０１３９】
[0147]  ある態様において、本開示は、免疫学的有効量の本明細書に記載する肺炎球菌ワクチン組成物を対象に投与することを含む、肺炎連鎖球菌莢膜多糖類コンジュゲートに対する免疫応答を誘導する方法を提供する。
【０１４０】
[0148]  一態様において、肺炎連鎖球菌莢膜多糖類コンジュゲートに対する免疫応答を誘導する方法は、本明細書に記載する肺炎球菌ワクチン組成物を対象に全身、皮下、および／または粘膜投与することを含む。
【０１４１】
[0149]  ある態様において、本開示のワクチン組成物の投与量中の各コンジュゲートの量は、免疫防御応答、たとえば著しい有害作用を伴なわない免疫防御応答を誘導するのに十分な量である。各コンジュゲートの量は肺炎球菌血清型に応じて異なる可能性があるが、それぞれの用量のワクチン組成物は、約１．５μｇ〜約５μｇのキャリヤータンパク質を含む各キャリヤータンパク質にコンジュゲートした、約０．１μｇ〜約５０μｇのそれぞれの肺炎球菌多糖類、約０．１μｇ〜約１０μｇ、または約１μｇ〜約５μｇのそれぞれの肺炎球菌多糖類を含むことができる。
【０１４２】
[0150]  他の態様において、本開示は、肺炎球菌多糖類およびキャリヤータンパク質を含む肺炎球菌ワクチン組成物、すなわち約０．５〜約２．０のタンパク質−対−多糖類のパーセント比（タンパク質／ＰＳ）、好ましくは０．７〜１．２のタンパク質／ＰＳをもつ肺炎球菌ワクチン組成物を提供する。
【０１４３】
[0151]  ある態様において、本開示は、約１００ｋＤａ〜約４００ｋＤａ、約１２５ｋＤａ〜約４２５ｋＤａ、約１５０ｋＤａ〜約４５０ｋＤａ、約１７５ｋＤａ〜約４７５ｋＤａ、約２００ｋＤａ〜約５００ｋＤａ、約２５０ｋＤａ〜約５５０ｋＤａ、または約３００ｋＤａ〜約６００ｋＤａの範囲の分子量をもつ肺炎球菌多糖類を含む肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲートワクチン組成物を提供する。
【０１４４】
[0152]  他の態様において、本開示は、約１，０００ｋＤａ〜約１０，０００ｋＤａ、約１，５００ｋＤａ〜約１５，０００ｋＤａ、約２，０００ｋＤａ〜約２０，０００ｋＤａ、約２，５００ｋＤａ〜約２５，０００ｋＤａ、または約３，０００ｋＤａ〜約３０，０００ｋＤａの範囲の分子量をもつ１種類以上の多糖類−タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲートワクチン組成物を提供する。
【０１４５】
[0153]  本開示の肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲートワクチン組成物は既知の方法を用いて製造できる。たとえば、肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲートワクチン組成物に医薬的に許容できる希釈剤またはビヒクル、たとえば水または塩類溶液を配合することができる。そのほか、肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲートワクチン組成物はさらに下記のうち１種類以上を含有することができる：緩衝剤、保存剤または安定剤、ポリソルベート、アジュバント、たとえばアルミニウム化合物、たとえば水酸化アルミニウム、リン酸アルミニウムまたはアルミニウムヒドロキシホスフェート、および／または凍結乾燥用賦形剤。本開示の肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲートワクチン組成物中における上記化合物のいずれかの含有は、その必要がある対象への投与の様式および経路に相関するものとして選択することができ、さらに標準的な医薬実施に基づくことができる。
【０１４６】
[0154]  ある態様において、本開示は、血清型１、３、４、５、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆから選択される肺炎球菌多糖類を含む１４価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲート組成物を製造するための方法を提供し、その際、少なくとも血清型３および６ＢはＰｓａＡにコンジュゲートしており、１種類以上の血清型１、４、５、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３ＦはＣＲＭ１９７にコンジュゲートしている。その１４価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲート組成物を製造するための方法は下記の工程を含む；
（ａ）１４種類の肺炎球菌多糖類のうち１種類以上（たとえば、ＣＤＡＰを用いて活性化したもの）を個別に、免疫原性キャリヤータンパク質、たとえばＰｓａＡおよび／またはＣＲＭ１９７にコンジュゲートさせる；
（ｂ）コンジュゲートを透析濾過し、サイズ排除クロマトグラフィーを用いて精製する；
（ｃ）精製した画分をＳＥＣ−ＭＡＬＬＳを用いて分析し、１４種類のコンジュゲートそれぞれを含有する画分をプールし、それらの一価コンジュゲート画分を濾過滅菌する；そして
（ｄ）１４種類のコンジュゲート（たとえば、それぞれの血清型について約２．２〜４．４μｇ、約５μｇ〜約１０μｇのＰｓａＡ、および約１５μｇ〜約３６μｇのＣＲＭ１９７）、アジュバント（たとえば、リン酸アルミニウム）、賦形剤、および緩衝剤を配合して、１４価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲート組成物にする。
ある態様において、１４価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲート組成物を濾過（たとえば、無菌的に）することができる。
【０１４７】
[0155]  ある態様において、本開示は、血清型１、３、４、５、６Ａ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆから選択される肺炎球菌多糖類を含む１４価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲート組成物を製造するための方法を提供し、その際、少なくとも血清型３および６ＡはＰｓａＡにコンジュゲートしており、１種類以上の血清型１、４、５、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３ＦはＣＲＭ１９７にコンジュゲートしている。その１４価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲート組成物を製造するための方法は下記の工程を含む；
（ａ）１４種類の肺炎球菌多糖類のうち１種類以上（たとえば、ＣＤＡＰを用いて活性化したもの）を個別に、免疫原性キャリヤータンパク質、たとえばＰｓａＡおよび／またはＣＲＭ１９７にコンジュゲートさせる；
（ｂ）コンジュゲートを透析濾過し、サイズ排除クロマトグラフィーを用いて精製する；
（ｃ）精製した画分をＳＥＣ−ＭＡＬＬＳを用いて分析し、１４種類のコンジュゲートそれぞれを含有する画分をプールし、それらの一価コンジュゲート画分を濾過滅菌する；そして
（ｄ）１４種類のコンジュゲート（たとえば、それぞれの血清型について約２．２〜４．４μｇ、約５μｇ〜約１０μｇのＰｓａＡ、および約１５μｇ〜約３６μｇのＣＲＭ１９７）、アジュバント（たとえば、リン酸アルミニウム）、賦形剤、および緩衝剤を配合して、１４価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲート組成物にする。
ある態様において、１４価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲート組成物を濾過（たとえば、無菌的に）することができる。
【０１４８】
[0156]  ある態様において、本開示は、血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ，１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆから選択される肺炎球菌多糖類を含む１５価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲート組成物を製造するための方法を提供し、その際、少なくとも血清型３、６Ａおよび６ＢはＰｓａＡにコンジュゲートしており、１種類以上の血清型１、４、５、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３ＦはＣＲＭ１９７にコンジュゲートしている。その１５価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲート組成物を製造するための方法は下記の工程を含む；
（ａ）１５種類の肺炎球菌多糖類のうち１種類以上（たとえば、ＣＤＡＰを用いて活性化したもの）を個別に、免疫原性キャリヤータンパク質、たとえばＰｓａＡおよび／またはＣＲＭ１９７にコンジュゲートさせる；
（ｂ）コンジュゲートを透析濾過し、サイズ排除クロマトグラフィーを用いて精製する；
（ｃ）精製した画分をＳＥＣ−ＭＡＬＬＳを用いて分析し、１５種類のコンジュゲートそれぞれを含有する画分をプールし、それらの一価コンジュゲート画分を濾過滅菌する；そして
（ｄ）１５種類のコンジュゲート（たとえば、それぞれの血清型について約２．２〜４．４μｇ、約５μｇ〜約２０μｇのＰｓａＡ、および約２０μｇ〜約４０μｇのＣＲＭ１９７）、アジュバント（たとえば、リン酸アルミニウム）、賦形剤、および緩衝剤を配合して、１５価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲート組成物にする。
ある態様において、１５価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲート組成物を濾過（たとえば、無菌的に）することができる。
【０１４９】
[0157]  ある態様において、本開示は、血清型1、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１２Ｆ，１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂから選択される肺炎球菌多糖類を含む１７価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲート組成物を製造するための方法を提供し、その際、少なくとも血清型３、６Ａおよび６ＢはＰｓａＡにコンジュゲートしており、１種類以上の血清型１、４、５、７Ｆ、９Ｖ、１２Ｆ，１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆおよび３５ＢはＣＲＭ１９７にコンジュゲートしている。その１７価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲート組成物を製造するための方法は下記の工程を含む；
（ａ）１７種類の肺炎球菌多糖類のうち１種類以上（たとえば、ＣＤＡＰを用いて活性化したもの）を個別に、免疫原性キャリヤータンパク質、たとえばＰｓａＡおよび／またはＣＲＭ１９７にコンジュゲートさせる；
（ｂ）コンジュゲートを透析濾過し、サイズ排除クロマトグラフィーを用いて精製する；
（ｃ）精製した画分をＳＥＣ−ＭＡＬＬＳを用いて分析し、１７種類のコンジュゲートそれぞれを含有する画分をプールし、それらの一価コンジュゲート画分を濾過滅菌する；そして
（ｄ）１７種類のコンジュゲート（たとえば、それぞれの血清型について約２．２〜４．４μｇ、約５μｇ〜約２０μｇのＰｓａＡ、および約２０μｇ〜約４０μｇのＣＲＭ１９７）、アジュバント（たとえば、リン酸アルミニウム）、賦形剤、および緩衝剤を配合して、１７価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲート組成物にする。
ある態様において、１７価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲート組成物を濾過（たとえば、無菌的に）することができる。
【０１５０】
[0158]  ある態様において、本開示は、血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆ、３５Ｂおよび４５から選択される肺炎球菌多糖類を含む２０価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲート組成物を製造するための方法を提供し、その際、少なくとも血清型３、６Ａおよび６ＢはＰｓａＡにコンジュゲートしており、１種類以上の血清型１、４、５、７Ｆ、９Ｖ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆ、３５Ｂおよび４５はＣＲＭ１９７にコンジュゲートしている。その２０価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲート組成物を製造するための方法は下記の工程を含む；
（ａ）２０種類の肺炎球菌多糖類のうち１種類以上（たとえば、ＣＤＡＰを用いて活性化したもの）を個別に、免疫原性キャリヤータンパク質、たとえばＰｓａＡおよび／またはＣＲＭ１９７にコンジュゲートさせる；
（ｂ）コンジュゲートを透析濾過し、サイズ排除クロマトグラフィーを用いて精製する；
（ｃ）精製した画分をＳＥＣ−ＭＡＬＬＳを用いて分析し、２０種類のコンジュゲートそれぞれを含有する画分をプールし、それらの一価コンジュゲート画分を濾過滅菌する；そして
（ｄ）２０種類のコンジュゲート（たとえば、それぞれの血清型について約２．２〜４．４μｇ、約５μｇ〜約２０μｇのＰｓａＡ、および約２０μｇ〜約５０μｇのＣＲＭ１９７）、アジュバント（たとえば、リン酸アルミニウム）、賦形剤、および緩衝剤を配合して、２０価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲート組成物にする。
ある態様において、２０価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲート組成物を濾過（たとえば、無菌的に）することができる。
【０１５１】
[0159]  ある態様において、本開示は、血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１０Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆ、３４、３５Ｂおよび３８から選択される肺炎球菌多糖類を含む２２価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲート組成物を製造するための方法を提供し、その際、少なくとも血清型３、６Ａおよび６ＢはＰｓａＡにコンジュゲートしており、１種類以上の血清型１、４、５、７Ｆ、９Ｖ、１０Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆ、３４、３５Ｂおよび３８はＣＲＭ１９７にコンジュゲートしている。その２２価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲート組成物を製造するための方法は下記の工程を含む；
（ａ）２２種類の肺炎球菌多糖類のうち１種類以上（たとえば、ＣＤＡＰを用いて活性化したもの）を個別に、免疫原性キャリヤータンパク質、たとえばＰｓａＡおよび／またはＣＲＭ１９７にコンジュゲートさせる；
（ｂ）コンジュゲートを透析濾過し、サイズ排除クロマトグラフィーを用いて精製する；
（ｃ）精製した画分をＳＥＣ−ＭＡＬＬＳを用いて分析し、２２種類のコンジュゲートそれぞれを含有する画分をプールし、それらの一価コンジュゲート画分を濾過滅菌する；そして
（ｄ）２２種類のコンジュゲート（たとえば、それぞれの血清型について約２．２〜４．４μｇ、約５μｇ〜約２０μｇのＰｓａＡ、および約２０μｇ〜約５０μｇのＣＲＭ１９７）、アジュバント（たとえば、リン酸アルミニウム）、賦形剤、および緩衝剤を配合して、２２価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲート組成物にする。
ある態様において、２２価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲート組成物を濾過（たとえば、無菌的に）することができる。
【０１５２】
[0160]  本開示の組成物を、単回量、たとえば単回量バイアル、多数回量、たとえば多数回量バイアル、またはプレフィルドシリンジ中に配合することができる。本開示の組成物は、さらにチオメルサール、２−フェノキシエタノールなどから選択される１種類以上の保存剤を含むことができ、それは約４ｍｇ／ｍＬから約２０ｍｇ／ｍＬまでの範囲の量であってもよい。
【０１５３】
[0161]  ある態様において、本開示は、少なくとも下記のものを含有するように配合された約０．５ｍＬの単回量として投与される免疫原組成物（たとえば、ワクチン）、たとえば肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲート組成物をも提供する：約２．２〜４．４μｇの２種類以上の肺炎球菌多糖類血清型、血清型当たり約１μｇ〜約１０μｇのＰｓａＡ、血清型当たり約１μｇ〜約１０μｇのＣＲＭ１９７、約０．２ｍｇ〜約１ｍｇのアジュバント（たとえば、リン酸アルミニウム）、および１種類以上の賦形剤（たとえば、塩化ナトリウム、および／または緩衝剤）。
【０１５４】
[0162]  他の態様において、本開示は、少なくとも下記のものを含有するように配合された約０．５ｍＬの単回量として投与される無菌液剤配合物中の１３価免疫原組成物（たとえば、ワクチン）、たとえば１３価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲート組成物をも提供する：それぞれ個別にＰｓａＡ、またはＰｓａＡとＣＲＭ１９７の組合わせにコンジュゲートした肺炎球菌多糖類血清型１、３、４、５、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆおよび３３Ｆ。
【０１５５】
[0163]  その１３価ワクチンをさらに１回量以上の約０．５ｍＬ量中に配合することができ、各０．５ｍＬ量は約２．２μｇ〜約４．４μｇの１３種類の血清型それぞれ、約２５μｇ〜約３０μｇのＰｓａＡおよびＣＲＭ１９７、約０．１２５ｍｇのアジュバント（たとえば、アルミニウム元素、たとえば約０．５ｍｇのリン酸アルミニウム）、塩化ナトリウム、およびＬ−ヒスチジン緩衝剤を含む。
【０１５６】
[0164]  ある態様において、本開示は、少なくとも下記のものを含有するように配合された約０．５ｍＬの単回量として投与される無菌液剤配合物中の１４価免疫原組成物（たとえば、ワクチン）、たとえば１４価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲート組成物をも提供する：それぞれ個別にＰｓａＡ、またはＰｓａＡとＣＲＭ１９７の組合わせにコンジュゲートした肺炎球菌多糖類血清型１、３、４、５、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆ。
【０１５７】
[0165]  ある態様において、本開示は、少なくとも下記のものを含有するように配合された約０．５ｍＬの単回量として投与される無菌液剤配合物中の１４価免疫原組成物（たとえば、ワクチン）、たとえば１４価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲート組成物をも提供する：それぞれ個別にＰｓａＡ、またはＰｓａＡとＣＲＭ１９７の組合わせにコンジュゲートした肺炎球菌多糖類血清型１、３、４、５、６Ａ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆ。
【０１５８】
[0166]  その１４価ワクチンをさらに１回量以上の約０．５ｍＬ量中に配合することができ、各０．５ｍＬ量は約２．２μｇ〜約４．４μｇの１４種類の血清型それぞれ、約２０μｇ〜約３５μｇのＰｓａＡおよびＣＲＭ１９７、約０．１２５ｍｇのアジュバント（たとえば、アルミニウム元素、たとえば約０．５ｍｇのリン酸アルミニウム）、塩化ナトリウム、およびＬ−ヒスチジン緩衝剤を含む。
【０１５９】
[0167]  他の態様において、本開示は、少なくとも下記のものを含有するように配合された約０．５ｍＬの単回量として投与される無菌液剤配合物中の１５価免疫原組成物（たとえば、ワクチン）、たとえば１５価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲート組成物をも提供する：肺炎球菌多糖類血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ，１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆ、その際、少なくとも血清型３、６Ａおよび６Ｂはそれぞれ個別にＰｓａＡにコンジュゲートしており、１種類以上の血清型１、４、５、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆはそれぞれ個別にＣＲＭ１９７にコンジュゲートしている。
【０１６０】
[0168]  その１５価ワクチンをさらに１回量以上の約０．５ｍＬ量中に配合することができ、各０．５ｍＬ量は約２．２μｇ〜約４．４μｇの１５種類の血清型それぞれ、約５μｇ〜約２０μｇのＰｓａＡ、約２０μｇ〜４０μｇのＣＲＭ１９７、約０．１２５ｍｇのアジュバント（たとえば、アルミニウム元素、たとえば約０．５ｍｇのリン酸アルミニウム）、塩化ナトリウム、およびＬ−ヒスチジン緩衝剤を含む。
【０１６１】
[0169]  さらに他の態様において、本開示は、少なくとも下記のものを含有するように配合された約０．５ｍＬの単回量として投与される無菌液剤配合物中の１７価免疫原組成物（たとえば、ワクチン）、たとえば１７価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲート組成物をも提供する：肺炎球菌多糖類血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１２Ｆ，１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂ、その際、少なくとも血清型３、６Ａおよび６Ｂはそれぞれ個別にＰｓａＡにコンジュゲートしており、１種類以上の血清型１、４、５、７Ｆ、９Ｖ、１２Ｆ，１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂはそれぞれ個別にＣＲＭ１９７にコンジュゲートしている。
【０１６２】
[0170]  その１７価ワクチンをさらに１回量以上の約０．５ｍＬ量中に配合することができ、各０．５ｍＬ量は約２．２μｇ〜約４．４μｇの１７種類の血清型それぞれ、約５μｇ〜約２０μｇのＰｓａＡ、約２０μｇ〜４０μｇのＣＲＭ１９７、約０．１２５ｍｇのアジュバント（たとえば、アルミニウム元素、たとえば約０．５ｍｇのリン酸アルミニウム）、塩化ナトリウム、およびＬ−ヒスチジン緩衝剤を含む。
【０１６３】
[0171]  ある態様において、本開示は、少なくとも下記のものを含有するように配合された約０．５ｍＬの単回量として投与される無菌液剤配合物中の２０価免疫原組成物（たとえば、ワクチン）、たとえば２０価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲート組成物をも提供する：肺炎球菌多糖類血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆ、３５Ｂおよび４５、その際、少なくとも血清型３、６Ａおよび６Ｂはそれぞれ個別にＰｓａＡにコンジュゲートしており、１種類以上の血清型１、４、５、７Ｆ、９Ｖ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆ、３５Ｂおよび４５はそれぞれ個別にＣＲＭ１９７にコンジュゲートしている。
【０１６４】
[0172]  その２０価ワクチンをさらに１回量以上の約０．５ｍＬ量中に配合することができ、各０．５ｍＬ量は約２．２μｇ〜約４．４μｇの２０種類の血清型それぞれ、約５μｇ〜約２０μｇのＰｓａＡ、約２０μｇ〜５０μｇのＣＲＭ１９７、約０．１２５ｍｇのアジュバント（たとえば、アルミニウム元素、たとえば約０．５ｍｇのリン酸アルミニウム）、塩化ナトリウム、およびＬ−ヒスチジン緩衝剤を含む。
【０１６５】
[0173]  ある態様において、本開示は、少なくとも下記のものを含有するように配合された約０．５ｍＬの単回量として投与される無菌液剤配合物中の２２価免疫原組成物（たとえば、ワクチン）、たとえば２２価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲート組成物をも提供する：肺炎球菌多糖類血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１０Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆ、３４、３５Ｂおよび３８、その際、少なくとも血清型３、６Ａおよび６Ｂはそれぞれ個別にＰｓａＡにコンジュゲートしており、１種類以上の血清型１、４、５、７Ｆ、９Ｖ、１０Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆ、３４、３５Ｂおよび３８はそれぞれ個別にＣＲＭ１９７にコンジュゲートしている。
【０１６６】
[0174]  その２２価ワクチンをさらに１回量以上の約０．５ｍＬ量中に配合することができ、各０．５ｍＬ量は約２．２μｇ〜約４．４μｇの２２種類の血清型それぞれ、約５μｇ〜約２０μｇのＰｓａＡ、約２０μｇ〜５０μｇのＣＲＭ１９７、約０．１２５ｍｇのアジュバント（たとえば、アルミニウム元素、たとえば約０．５ｍｇのリン酸アルミニウム）、塩化ナトリウム、およびＬ−ヒスチジン緩衝剤を含む。
【０１６７】
[0175]  ある態様において、本開示は、少なくとも下記のものを含有するように配合された約０．５ｍＬの単回量として投与される無菌液剤配合物中の２４価免疫原組成物（たとえば、ワクチン）、たとえば２４価肺炎球菌多糖類−タンパク質コンジュゲート組成物をも提供する：肺炎球菌多糖類血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１６Ｆ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆ、３４、３５Ｂおよび３８、その際、少なくとも血清型３、６Ａおよび６Ｂはそれぞれ個別にＰｓａＡにコンジュゲートしており、１種類以上の血清型１、４、５、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１６Ｆ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆ、３３Ｆ、３４、３５Ｂおよび３８はそれぞれ個別にＣＲＭ１９７にコンジュゲートしている。
【０１６８】
[0176]  その２４価ワクチンをさらに１回量以上の約０．５ｍＬ量中に配合することができ、各０．５ｍＬ量は約２．２μｇ〜約４．４μｇの２４種類の血清型それぞれ、約５μｇ〜約２０μｇのＰｓａＡ、約２０μｇ〜５０μｇのＣＲＭ１９７、約０．１２５ｍｇのアジュバント（たとえば、アルミニウム元素、たとえば約０．５ｍｇのリン酸アルミニウム）、塩化ナトリウム、およびＬ−ヒスチジン緩衝剤を含む。
【０１６９】
[0177]  本開示の組成物をその必要がある対象にワクチンの分野で用いられる多数の一般的経路のいずれかにより投与することができる。たとえば、本開示の組成物を全身に、たとえば非経口的（たとえば、皮下、筋肉内、皮内および／または静脈内）または粘膜（たとえば、口腔および／または鼻腔）に投与することができる。
【０１７０】
[0178]  ある態様において、本開示はその必要がある対象において１種類以上のキャリヤータンパク質にコンジュゲートした１種類以上の肺炎連鎖球菌莢膜多糖類に対する免疫応答を誘導する方法をも提供する。免疫応答を誘導するための方法は、免疫学的有効量の本明細書に記載する組成物をその必要がある対象に投与することを含む。
【０１７１】
[0179]  本開示の方法によれば、本明細書に記載する組成物を投与する対象はヒト、たとえば乳児（約１歳未満）、幼児（約１２か月齢〜約２４か月齢）、小児（約２歳〜約５歳）、より年上の子供（約５歳〜約１３歳）、青少年（約１３歳〜約１８歳）、成人（約１８歳〜約６５歳）、または高齢者（約６５歳を超える）である。
【０１７２】
[0180]  本明細書中で用いる、本明細書に記載する組成物の“有効量”は、その組成物を投与した対象において免疫応答を誘導するために必要な量を表わす。免疫応答は、その後の攻撃に際して肺炎連鎖球菌の感染の可能性または重症度を有意に軽減する１種類以上の肺炎連鎖球菌抗原特異的な抗体が宿主に存在することを特徴とする。
【実施例】
【０１７３】
[0181]  以下の例は本開示を具体的に示すために提示され、説明のためのものにすぎず、本開示の範囲を限定するものと解釈すべきではない。
実施例１：多糖類−ＰｓａＡコンジュゲートを形成するためのキャリヤータンパク質への個別の肺炎球菌多糖類のコンジュゲーション
Ａ）ＰｓａＡ調製：
[0182]  ＰｓａＡ遺伝子を、それの疎水性リーダーペプチド配列を含まない状態で肺炎連鎖球菌血清型４からＰＣＲ増幅した。遺伝子配列を確認し、より高い発現を得るために自社構築したベクター（ｐＢＥ６６）を用いて大腸菌(E. coli)内へクローニングした。
【０１７４】
[0183]  ＰＳａＡ遺伝子をコードするグリセロール保存培養物を、１５０ｍＬコニカルフラスコ内において１ｍＬのグリセロール保存培養物を含有する２０ｍＬのＬＢ培地で復活させた。培養物を３７℃で２００ｒｐｍ下に約６時間、最終ＯＤ６００ｎｍが３．５  ＯＤになるまでインキュベートした。復活した培養物を５Ｌコニカルフラスコ内での１Ｌの種培養に移した。培養物を３７℃で２００ｒｐｍ下に約１０時間、最終ＯＤ６００ｎｍが３になるまで増殖させた。
【０１７５】
[0184]  種培養物を、下記の培地成分を入れた２０Ｌ発酵槽へ無菌的に移した：ＨｙＰｅｐｔｏｎｅ  ６ｇ／Ｌ、酵母エキス１２／Ｌ、オルトリン酸水素二カリウム１３．５ｇ／Ｌ、二塩基性リン酸アンモニウム４ｇ／Ｌ、クエン酸１．７ｇ／Ｌ、ＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ  １．２ｇ／Ｌ、グルコース４ｇ／Ｌ、チアミンＨＣＬ  １０ｍｇ／Ｌ、および１ｍＬ／Ｌの微量成分（たとえば、組成物１００ｍＬについて微量成分ＦｅＣｌ３  ２．７ｇ、ＺｎＣｌ２  ０．２ｇ、ＣｏＣｌ２・６Ｈ２Ｏ  ０．２ｇ、Ｎａ２ＭｏＯ４・２Ｈ２Ｏ  ０．２ｇ、ＣｕＳＯ４・５Ｈ２Ｏ  ０．１ｇ、ホウ酸０．０５ｇ、ＣａＣｌ２・２Ｈ２Ｏ  ０．１ｇ、濃ＨＣＬ  １０ｍＬ）。最初の発酵をＯＤ６００ｎｍ  ０．２  ＯＤで開始した。発酵全体を通して２０％オルトリン酸および１２．５％水酸化アンモニウムでｐＨを７±０．２に維持した。
【０１７６】
[0185]グルコースレベルが０．５ｇ／Ｌ未満に低下した時点で３〜４ｇ／Ｌ／時の定常速度で供給バッチを開始し、発酵全体を通して酸素富化によりＤＯ％を＞２０％に維持した。
【０１７７】
[0186]  細胞を発酵槽内で増殖させ、遠心により細胞ペレットを採集した。細胞破壊デバイス（Ｐａｎｄａ）を用いて細胞を溶解した。溶解物を１００００ｇで遠心し、澄明化した上清を精製した。
【０１７８】
[0187]  Larentis et.al, 2011 (Protein expression and Purification 78 (2011) 38)に記載された方法と同様にしてＰｓａＡ精製を実施した。より高い純度のＰｓａＡを得るために、ＤＥＡＥ後に混合モードクロマトグラフィー（セラミックヒドロキシアパタイト  タイプ−ＩＩ）を用いて精製をさらに最適化した。
【０１７９】
[0188]  アニオン交換クロマトグラフィー：３０ｍＬのＤＥＡＥセファロース（ＧＥ）樹脂をＸＫ１６／２０カラムに充填した。樹脂を５カラム体積の滅菌蒸留水、続いて１０カラム体積の２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ、１ｍＭ  ＥＤＴＡ、ｐＨ８．０（平衡化緩衝液）で洗浄した。３０ｍＬの上清を平衡化緩衝液で１００ｍＬに希釈し、カラムに装填し、フロースルーを採集した。カラムを５体積の平衡化緩衝液で洗浄した。ＰｓａＡを１２体積の直線勾配（０−１００％Ｂ）で溶離した（緩衝液Ａは２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ、１ｍＭ  ＥＤＴＡを含有，ｐＨ８．０；緩衝液Ｂ−２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ、１ｍＭ  ＥＤＴＡ、２５０ｍＭ  ＮａＣｌ，ｐＨ８．０）。これに続いてカラムを２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ、１ｍＭ  ＥＤＴＡ、１Ｍ  ＮａＣｌ，ｐＨ８．０で洗浄した。
【０１８０】
[0189]  混合モードクロマトグラフィー：２５ｍｌのセラミックヒドロキシアパタイト  タイプＩＩ(Ceramic Hydroxyapatite Type II)（ＣＨＴ−ＩＩ）をカラムに充填した。樹脂を  体積の滅菌蒸留水、続いて１０体積の２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ，ｐＨ６．８で洗浄した。ＳＤＳ  ＰＡＧＥでおおよそ３７ＫＤの良好な濃度のＰｓａＡの明瞭な主要可視バンドを示したＤＥＡＥ樹脂からの溶出画分をプールし、ＣＨＴ−ＩＩ樹脂に装填した。フロースルーを採集し、カラムを５カラム体積の平衡化緩衝液で洗浄した。タンパク質を５カラム体積のステップ勾配（１５％Ｂ、２０％Ｂ、５０％Ｂおよび１００％Ｂ）で溶離した。緩衝液Ａは２０ｍＭ  Ｔｒｉｓ，ｐＨ６．８を含有し、一方、緩衝液Ｂは２５０ｍＭリン酸緩衝液ｐＨ６．８を含有する。
【０１８１】
[0190]  ＰｓａＡの予想サイズに明瞭なバンドを示すすべての溶出画分をプールし、１０ｋＤａ  ＭＷＣＯカセットで濃縮し、２０ｍＭリン酸緩衝液，ｐＨ７．５に対して透析濾過した。精製したタンパク質をＳＤＳ−ＰＡＧＥゲルに装填して純度を査定した。
【０１８２】
Ｂ）肺炎球菌多糖類血清型３の活性化およびＰｓａＡへのコンジュゲーション
[0191]  サイズ縮小した血清型３の多糖類（濃度５ｍｇ／ｍＬ）および１．５ｍＬのＣＤＡＰ（アセトニトリル中、１００ｍｇ／ｍＬ（ｗ／ｖ））をガラスボトル内において１：０．５（ＰＳ：ＣＤＡＰ）の比で混合し、１分間攪拌した。多糖類溶液のｐＨを３．５ｍＬの０．２Ｍトリエチルアミンで９．０に調整し、室温（ＲＴ）で１分間攪拌した。２１０ｍｇのＰｓａＡ（１５．０ｍｇ／ｍＬ濃度のもの１４．０ｍＬ）を、活性化した多糖類に１：０．７（Ｐｓ：キャリヤータンパク質）の比で徐々に添加した。
【０１８３】
[0192]  反応のｐＨを０．７ｍＬの０．２Ｍトリエチルアミンで約９．０１に調整し、攪拌下に室温で５時間、反応を継続し、続いて過剰濃度のグリシン（１００ｍＭ）の添加により反応を停止した。ＳＥＣ−ＨＰＬＣを用いて反応１時間毎に反応のコンジュゲーション動態をモニターした。
【０１８４】
[0193]  １００ｋＤａ  ＭＷＣＯ  ＴＦＦメンブレンを用いて反応混合物を透析濾過および濃縮した。濃縮物をサイズ排除クロマトグラフィーによって精製した。画分をＳＥＣ−ＭＡＬＬＳ、アンスロン法により分析し、コンジュゲートを含有する画分をプールし、０．２μｍフィルターで滅菌濾過した。
【０１８５】
Ｃ）肺炎球菌多糖類血清型６Ａの活性化およびＰｓａＡへのコンジュゲーション
[0194]  サイズ縮小した６Ａ型の多糖類（濃度１４．６ｍｇ／ｍＬ）および４００μＬのＣＤＡＰ（アセトニトリル中、１００ｍｇ／ｍＬ（ｗ／ｖ））をガラスボトル内において１：１（ＰＳ：ＣＤＡＰ）の比で混合し、１分間攪拌した。多糖類溶液のｐＨを８００μＬの０．２Ｍトリエチルアミンで９．５に調整し、室温（ＲＴ）で１分間攪拌した。４０ｍｇのＰｓａＡ（１１．０ｍｇ／ｍＬ濃度のもの３．７８ｍＬ）を、活性化した多糖類に１：１（Ｐｓ：キャリヤータンパク質）の比で徐々に添加した。
【０１８６】
[0195]  反応のｐＨを０．７ｍＬの０．２Ｍトリエチルアミンで約９．０１に調整し、攪拌下に室温で５時間、反応を継続し、続いて過剰濃度のグリシン（１００ｍＭ）の添加により反応を停止した。ＳＥＣ−ＨＰＬＣを用いて反応１時間毎に反応のコンジュゲーション動態をモニターした。
【０１８７】
[0196]  １００ｋＤａ  ＭＷＣＯ  ＴＦＦメンブレンを用いて反応混合物を透析濾過および濃縮した。濃縮物をサイズ排除クロマトグラフィーによって精製した。画分をＳＥＣ−ＭＡＬＬＳ、アンスロン法により分析し、コンジュゲートを含有する画分をプールし、０．２μｍフィルターで滅菌濾過した。
【０１８８】
Ｄ）肺炎球菌多糖類血清型６Ｂの活性化およびＰｓａＡへのコンジュゲーション
[0197]  サイズ縮小した６Ｂ型の多糖類（濃度１４．９７ｍｇ／ｍＬ）および４．０ｍＬのＣＤＡＰ（アセトニトリル中、１００ｍｇ／ｍＬ（ｗ／ｖ））をガラスボトル内において１：２（ＰＳ：ＣＤＡＰ）の比で混合し、１分間攪拌した。多糖類溶液のｐＨを８．０ｍＬの０．２Ｍトリエチルアミンで９．１に調整し、室温（ＲＴ）で１分間攪拌した。３４０ｍｇのＰｓａＡ（１５．０ｍｇ／ｍＬ濃度のもの２２．６６ｍＬ）を、活性化した多糖類に１：１．７（Ｐｓ：キャリヤータンパク質）の比で徐々に添加した。
【０１８９】
[0198]  反応のｐＨを０．７ｍＬの０．２Ｍトリエチルアミンで約９．０１に調整し、攪拌下に室温で５時間、反応を継続し、続いて過剰濃度のグリシン（１００ｍＭ）の添加により反応を停止した。ＳＥＣ−ＨＰＬＣを用いて反応１時間毎に反応のコンジュゲーション動態をモニターした。
【０１９０】
[0199]  １００ｋＤａ  ＭＷＣＯ  ＴＦＦメンブレンを用いて反応混合物を透析濾過および濃縮した。濃縮物をサイズ排除クロマトグラフィーによって精製した。画分をＳＥＣ−ＭＡＬＬＳ、アンスロン法により分析し、コンジュゲートを含有する画分をプールし、０．２μｍフィルターで滅菌濾過した。
【０１９１】
[0200]  血清型３（Ｄ）、６Ａ（Ｅ）および６Ｂ（Ｆ）のコンジュゲーション反応動態についてのＳＥＣ−ＨＰＬＣクロマトグラムを作成した。３つすべてのクロマトグラムについて下記の記号を用いた；多糖類（実線）、ＰｓａＡ（破線）、３または５時間の反応（点線）。すべてのクロマトグラムについて図２に示すように、ＰｓａＡに属する約１９分の保持時間におけるピークの低減または消失に基づいてＰｓａＡの消費が示される。コンジュゲーションは約１３．５分〜約１４分における新たなピークの形成に基づいて確認される。
【０１９２】
[0201]  前記のものと同様な方法を用いて血清型 ５、９Ｖ、１２Ｆ、１０Ａ、１５Ｂ、１８Ｃおよび４５に由来する肺炎球菌多糖類とＰｓａＡのコンジュゲートを調製した。血清型５（Ａ）、９Ｖ（Ｂ）および１８Ｃ（Ｃ）のコンジュゲーション反応動態についてのＳＥＣ−ＨＰＬＣクロマトグラムを作成した。図２に示すように、３つすべてのクロマトグラムが多糖類（実線）、ＰｓａＡ（破線）、３または５時間の反応（点線）である。すべてのクロマトグラムにおいて、ＰｓａＡに属する約１９分の保持時間におけるピークの低減または消失に基づいてＰｓａＡの消費が示される。コンジュゲーションは約１３．５分〜約１４分における新たなピークの形成に基づいて確認される。
【０１９３】
実施例２：肺炎球菌莢膜多糖類−ＣＲＭ１９７コンジュゲートの製造
Ａ）多糖類の活性化およびキャリヤータンパク質とのコンジュゲーション：
[0202]  サイズ調整した多糖類（６．０ｍＬのＰｓ，１０ｍｇ／ｍＬの濃度）およびＣＤＡＰ（アセトニトリル中、１００ｍｇ／ｍＬ（ｗ／ｖ））をガラスバイアル内において１：１の比で混合し、１分間攪拌した。多糖類溶液のｐＨを０．２Ｍトリエチルアミンで９．２５に調整し、室温（ＲＴ）で３分間攪拌した。ＣＲＭ１９７（濃度１５．０ｍｇ／ｍＬのもの４．０ｍＬ）を、活性化した多糖類に１：１（Ｐｓ：キャリヤータンパク質）の比で徐々に添加した。
【０１９４】
[0203]  反応のｐＨを０．２Ｍトリエチルアミンで約９．０５に調整し、攪拌下に室温で５時間、反応を継続し、最後に過剰濃度のグリシン（１００ｍＭ）の添加により反応を停止した。
【０１９５】
[0204]  １００  Ｋ  ＭＷＣＯ  ＴＦＦメンブレンを用いて反応混合物を透析濾過し、サイズ排除クロマトグラフィーによって精製した。画分をＳＥＣ−ＭＡＬＬＳ、アンスロン法により分析し、コンジュゲートを含有する画分をプールし、０．２μｍフィルターで滅菌濾過した。この材料を１価コンジュゲートバルクと呼ぶ。
【０１９６】
[0205]  血清型７Ｆ（Ａ）、１４（Ｂ）および１９Ｆ（Ｃ）とＣＲＭ１９７から製造したコンジュゲートの反応動態を作成し、図１に示す。３つすべてのクロマトグラムにおいて多糖類（実線）、ＣＲＭ１９７（破線）、５時間の反応（点線）である。すべてのクロマトグラムにおいて、ＣＲＭ１９７に属する約１９分の保持時間におけるピークの低減または消失に基づいてＣＲＭ１９７の消費が示される。コンジュゲーションは約１３．５分〜約１４分における新たなピークの形成に基づいて確認される。
【０１９７】
[0206]  血清型３（Ｄ）、６Ａ（Ｅ）および６Ｂ（Ｆ）とＣＲＭ１９７から製造したコンジュゲートの反応動態を作成し、その反応動態を図１に示す。３つすべてのクロマトグラムにおいて多糖類（実線）、ＣＲＭ１９７（破線）、５時間の反応（点線）である。すべてのクロマトグラムにおいて、ＣＲＭ１９７に属する約１９分の保持時間におけるピークの低減または消失に基づいてＣＲＭ１９７の消費が示される。コンジュゲーションは約１３．５分〜約１４分における新たなピークの形成に基づいて確認される。
【０１９８】
実施例３：肺炎球菌莢膜多糖類−タンパク質コンジュゲートワクチンの配合
[0207]  １５価コンジュゲートワクチンを、約２８μｇのＣＲＭ１９７タンパク質にコンジュゲートした血清型１、４、５、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆ由来のそれぞれの肺炎球菌多糖類２．２μｇ、ならびに約７μｇのＰｓａＡタンパク質にコンジュゲートした血清型３、６Ａおよび６Ｂ由来のそれぞれの肺炎球菌多糖類２．２μｇを含有する０．５ｍＬ量として配合した。すべてのコンジュゲートを、０．５ｍＬ量当たり０．５ｍｇのＡｌ３＋に相当するリン酸アルミニウムゲルに吸着させた。０．９％  Ｗ／Ｖの生理食塩水を配合用の希釈剤およびビヒクルとして用い、１Ｎ塩酸を用いて最終配合物ｐＨをｐＨ６に調整した。ｐＨ調整後の効率的な吸着のために、配合物を定常攪拌下で２時間混合した。２時間のブレンディングの後、配合したブレンドを無菌的にバイアル当たり０．５８ｍＬの充填体積で３ｍＬの滅菌した非シリコン処理バイアルに充填し、滅菌した１３ｍｍゴム栓で閉じ、１３ｍｍの滅菌したピンク色フリップオフ(flip off)アルミニウムシールでシールし、続いて充填バイアルの光学検査およびラベリングを行なった。このロットからランダムにピックアップした幾つかのバイアルを、外観、ｐＨ、モル浸透圧濃度、ポリおよびタンパク質の総含量（μｇ／ＳＨＤ）、吸着率％、アルミニウム含量（ｍｇ／ＳＨＤ）の分析へ送った。
【０１９９】
実施例４：肺炎球菌莢膜多糖類−タンパク質コンジュゲートワクチンの配合
[0208]  １５価コンジュゲートワクチンを、約２８μｇのＣＲＭ１９７タンパク質にコンジュゲートした血清型１、４、５、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆ由来のそれぞれの肺炎球菌多糖類２．２μｇ、ならびに約１４μｇのＰｓａＡタンパク質にコンジュゲートした血清型３、６Ａおよび６Ｂ由来のそれぞれの肺炎球菌多糖類４．４μｇを含有する０．５ｍＬ量として配合した。すべてのコンジュゲートを、０．５ｍＬ量当たり０．５ｍｇのＡｌ３＋に相当するリン酸アルミニウムゲルに吸着させた。０．９％  Ｗ／Ｖの生理食塩水を配合用の希釈剤およびビヒクルとして用い、１Ｎ塩酸を用いて最終配合物ｐＨをｐＨ６に調整した。ｐＨ調整後の効率的な吸着のために、配合物を定常攪拌下で２時間混合した。２時間のブレンディングの後、配合したブレンドを無菌的にバイアル当たり０．５８ｍＬの充填体積で３ｍＬの滅菌した非シリコン処理バイアルに充填し、滅菌した１３ｍｍゴム栓で閉じ、１３ｍｍの滅菌したピンク色フリップオフアルミニウムシールでシールし、続いて充填バイアルの光学検査およびラベリングを行なった。このロットからランダムにピックアップした幾つかのバイアルを、外観、ｐＨ、モル浸透圧濃度、ポリおよびタンパク質の総含量（μｇ／ＳＨＤ）、吸着率％、アルミニウム含量（ｍｇ／ＳＨＤ）の分析へ送った。
【０２００】
Ａ）配合したワクチンによるウサギの免疫化
[0209]  それぞれ１．５〜２ｋｇの健康なウサギを特定の病原体を含まない収容施設で繁殖および飼育した。ウサギを前記の配合物で下記の計画により免疫化した。
【０２０１】
[0210]  グループ１は、１５価コンジュゲートワクチン（実施例３）で免疫化した７匹のウサギで構成されていた。その１５価ワクチンは、ＣＲＭ１９７タンパク質にコンジュゲートした血清型１、４、５、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆの肺炎球菌多糖類それぞれ２．２μｇ、ならびにのＰｓａＡタンパク質にコンジュゲートした血清型３、６Ａおよび６Ｂの肺炎球菌多糖類それぞれ２．２μｇを含んでいた。ウサギを１、１５および２９日目に免疫化した；０、１５および３６日目に血液試料を採集した。血液試料から血清を分離し、−８０℃で保存した。
【０２０２】
[0211]  グループ２は、１３価コンジュゲートワクチン−Ｐｒｅｖｎａｒ１３（登録商標）で免疫化した７匹のウサギで構成されていた。ウサギを１、１５および２９日目に免疫化した；０、１２、２６、４０日目に血液試料を採集した。１２日目および４０日目のデータを用いてＰｓａＡ試験との比較のためにプロットした（図４）。血液試料から血清を分離し、−８０℃で保存した。
【０２０３】
[0212]  グループ３は、１５価コンジュゲートワクチン（実施例４）で免疫化した７匹のウサギで構成されていた。その１５価ワクチンは、約２８μｇのＣＲＭ１９７タンパク質にコンジュゲートした血清型１、４、５、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆそれぞれの多糖類２．２μｇ、ならびに約１４μｇのＰｓａＡタンパク質にコンジュゲートした血清型３、６Ａおよび６Ｂそれぞれの多糖類４．４μｇを含んでいた。ウサギを１、１５および２９日目に免疫化した；０、１５および３６日目に血液試料を採集した。血液試料から血清を分離し、−８０℃で保存した。免疫化したウサギから得た血清を血清型特異的免疫応答についてＥＬＩＳＡを用いて分析した。
【０２０４】
[0213]  ＷＨＯが提唱するプロトコルに従ってＥＬＩＳＡを実施した。要約すると、Ｍａｘｉｓｏｒｐ（商標）  ＥＬＩＳＡプレートを特定の血清型のＰｎＣＰＳでコーティングした（１μｇ／５０μＬ／ウェル，ＰＢＳを使用；無菌、エンドトキシン不含、０．０２％のナトリウムアジドを含有）。プレートを加湿のために湿ったペーパータオルと共に箱に入れ、３７℃±２℃で５時間インキュベートし、プレートを使用時まで５℃±３℃で保存した。
【０２０５】
[0214]  細胞壁多糖類に由来するバックグラウンド反応性を排除するために、被験血清をＣＷＰＳ  Ｍｌｔｉ（商標）に予備吸着させた。これを行なうために、２μＬの被験血清および陽性対照血清を、９９８μＬの予備吸着溶液（１ｍＬ  −  １μＬのＣＷＰＳ  Ｍｕｌｔｉ（商標），ＰＢＳＴ中の１０％  ＳｕｐｅｒＢｌｏｃｋ（商標）９９９μＬ）を用いて希釈して、１：５００の最終希釈度にした。希釈した試料を室温（２５℃±５℃）で１時間、連続振とうしながらインキュベートした。プレートを軽く叩くことにより結合していないＰｎＣＰＳを除去し、ウェル内の空の部位を２００μＬのブロッカー（２０％  ＳｕｐｅｒＢｌｏｃｋ（商標），ＰＢＳ中）の添加によりブロックした。プレートを室温（２５℃±５℃）で１時間、振とうせずにインキュベートした。
【０２０６】
Ｂ）被験試料および対照の添加
[0215]  ５０μＬの希釈剤（１０％  ＳｕｐｅｒＢｌｏｃｋ（商標），ＰＢＳＴ中）をＡ１〜Ａ１２以外のすべてのウェルに添加した。これに続いて、１００μＬ／ウェルの予備吸着済み被験血清試料をＡ１〜Ａ１０に添加し、対照血清試料をＡ１１およびＡ１２に添加した。５０μＬを第１から第２へ移すなど、すなわちＡ１〜Ａ１０からＨ１〜Ｈ１０へ移すことにより、被験試料の２倍系列希釈を実施した。同様に、Ａ１１および１２からＥ１１およびＥ１２へ対照試料（００７ＳＰ）の系列希釈を実施した。Ｆ１１およびＦ１２からＨ１１およびＨ１２へ、希釈せずにブランクとして設定した。
【０２０７】
[0216]  プレートを室温（２５℃±５℃）で２時間、振とうせずにインキュベートした。インキュベーション工程に続いて、内容物を廃棄し、プレートをＰＢＳＴ（約２５０μＬ／ウェル）で３回、手動またはプレート洗浄器で洗浄した。
【０２０８】
Ｃ）一次抗体の添加
[0217]  ５０μＬ／ウェルの組換えタンパク質Ａ／Ｇペルオキシダーゼ（ＰＢＳＴ中の１０％  ＳｕｐｅｒＢｌｏｃｋ（商標）を用いて１：２００００希釈）をすべてのウェルに添加し、プレートを室温（２５℃±５℃）で１時間、振とうせずにインキュベートした。これに続いて、プレートをＰＢＳＴ（２５０μＬ／ウェル）で３回、手動またはプレート洗浄器で洗浄した。
【０２０９】
Ｄ）顕色および読取り
[0218]  ５０μＬ／ウェルのＴＭＢ基質を添加し、室温（２５℃±５℃）で１５分間、振とうせずにインキュベートすることにより、発色反応を顕色させた。５０μＬ／ウェルの１．２５Ｍ硫酸の添加により反応を停止した。４５０ｎｍにおけるＯＤを測定した。
【０２１０】
Ｅ）力価推定
[0219]  免疫化した動物の抗体価を希釈係数の逆関数として査定した。免疫前力価（おおよそ０．２）の２倍のＯＤ４５０ｎｍを示す最高希釈度を力価としてレポートした。それぞれの血清型に対する血清抗体の力価をプロットし、種々の処理グループと比較した。
【０２１１】
[0220]  グループ１からの動物の免疫応答データは、血清型特異的な血清抗体価の上昇において用量依存性上昇を示す；すなわち、抗体価のレベルはワクチン接種動物においてそれぞれの後続用量に伴なって上昇した。動物を４．４μｇの多糖類を含有するＰｓａＡコンジュゲートで免疫化した場合（グループ３）、血清型３に対する免疫応答（図５）は約１：１００００であった。さらに、血清型３、６Ａおよび６Ｂに対する血清抗体価は、Ｐｒｅｖｎａｒ（登録商標）１３免疫化ウサギから得られた免疫応答と比較した場合、少なくとも２倍大きかった。ウサギにおいてＰｒｅｖｎａｒ（登録商標）１３で初回免疫化した後の血清ＩｇＧ力価は、本開示の１５価配合物についてみられたのと同程度の上昇を示さない（図３および４）。ＰｓａＡにコンジュゲートした血清型３の多糖類濃度（図３）と比較した場合、Ｐｒｅｖｎａｒ（登録商標）１３における血清型６Ｂについての多糖類濃度は２倍（４．４μｇ）であるけれども、ＩｇＧ応答のレベルは２倍である。ＣＲＭ１９７にコンジュゲートした２．２μｇの血清型３を含有する配合物においては、血清型３抗体の力価はかろうじて８０００に達する。４．４μｇのＰｓａＡにコンジュゲートした場合、この力価は顕著な改善（１６０００）を示す。これは、血清型３、６Ａおよび６Ｂ多糖類をＰｓａＡにコンジュゲートさせたことによる免疫応答の改善である。Ｐｒｅｖｎａｒ（登録商標）１３ワクチン接種動物における血清型１４に対する血清抗体価は、本開示の配合物と比較した場合、より低かった。他の血清型に達するＩｇＧ応答は、本開示のワクチン配合物またはＰｒｅｖｎａｒ（登録商標）１３のいずれかを接種した動物において類似していた。血清型３、６Ａおよび６Ｂの力価は２．２μｇ濃度ですらＰｓａＡにコンジュゲートした際に改善された。
【０２１２】
[0221]  本出願において特定した数値の使用は、そうではないと明確に指示しない限り、その表記範囲内の最小値から最大値までの概数として表記され、“約”という語が前置される。範囲の開示は、引用した最小値と最大値の間のあらゆる数値を含む連続範囲およびそのような数値により形成される可能性があるいずれかの範囲を意図したものである。本出願に提示する数値は本開示の種々の態様を表わす。
【０２１３】
[0222]  本開示全体を通して、単数用語“a”、“an”、および“the”は、そうではないことが状況から明確に指示されない限り複数の指示物を含む。同様に、“または(or)”という語は明らかに、２以上の項目のリストに関して他の項目から除かれた単一項目のみを意味することに限定され、よってそのようなリストにおける“または”の使用は下記を含むと解釈すべきである：（ａ）リスト中のいずれかの単一項目、（ｂ）リスト中のすべての項目、または（ｃ）リスト中のいずれかの項目の組合せ、さらに、用語“含む(comprising)”などは、本開示全体を通して少なくとも引用した特色（単数または複数）を含むことを意味するために用いられ、したがっていずれかのより多い数の同じ特色（単数または複数）および／または１以上の追加タイプの特色が除外されることはない。本明細書中で“一態様”、“ある態様”、またはこれらに類する記述は、その態様と関連して記載された組成物の特定の特色、組成物、方法、または特徴が本技術の少なくとも１つの態様に含まれる可能性があることを意味する。よって、そのような句または記述の出現は必ずしもすべてがその同じ態様を表わすわけではない。さらに、種々の特定の特色、組成物、方法、または特徴を１以上の態様においていずれか適切な様式で組み合わせることができる。
【０２１４】
[0223]  本開示は、網羅的であること、あるいは本技術を本明細書に開示する厳密な形態に限定することを意図したものではない。説明の目的で具体的態様を本明細書に開示するが、当業者が認識するように、本技術から逸脱することなく種々の均等な改変が可能である。ある場合には、本技術の態様の記載を不必要に不明瞭にするのを避けるために、周知の構造および機能を詳細には提示および／または記載しなかった。方法の工程を本明細書中で特定の順序で提示している場合があるが、別の態様においてそれらの工程は他の適切な順序をもつことができる。同様に、特定の態様に関して開示した本技術の特定の態様を他の態様において結合または除外することができる。さらに、特定の態様に関連する利点がそれらの態様に関して開示されている場合があるけれども、他の態様もそのような利点を示す可能性があり、本技術の範囲に含まれるために必ずしもすべての態様がそのような利点または本明細書に開示する他の利点を示す必要があるわけではない。したがって、この開示および関連技術は、本明細書に明瞭に提示および／または記載していない他の態様を含む可能性がある。
【０２１５】
[0224]  以上のことから、説明の目的で本開示の特定の態様を本明細書に記載したけれども本開示の範囲から逸脱することなく多様な改変をなしうることは認識されるであろう。したがって、本開示は特許請求の範囲による以外に限定されることはない。
【図１−１】
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【図１−２】
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【図２−１】
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【図２−２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【国際調査報告】
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