(57)【要約】  本発明は、オピオイド受容体拮抗薬の複合体及びその応用に関する。具体的に、本発明は、親水性ポリマーとオピオイド受容体拮抗薬の共有結合的カップリングによる複合体、及びその応用に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）で表される複合体、又はそれの薬学的に許容される塩。
P-（W）m （Ｉ）
（ここで、Pは、親水性ポリマーであり、Wは、ナロキソン以外のオピオイド受容体拮抗薬であり、mは、1〜10の自然数である。）
【請求項２】
前記親水性ポリマーは、ポリエチレングリコールである、請求項1に記載の複合体。
【請求項３】
前記親水性ポリマーは、2〜45個の-CH2CH2O-構造単位を持つポリエチレングリコール、好ましくは、2〜40個の-CH2CH2O-構造単位を持つポリエチレングリコール、好ましくは、2〜30個の-CH2CH2O-構造単位を持つポリエチレングリコール、好ましくは、2〜20個の-CH2CH2O-構造単位を持つポリエチレングリコール、好ましくは、2〜10個の-CH2CH2O-構造単位を持つポリエチレングリコール、より好ましくは、2〜8個の-CH2CH2O-構造単位を持つポリエチレングリコールである、請求項1に記載の複合体。
【請求項４】
前記ポリエチレングリコールは、単分散ポリエチレングリコールである、請求項3に記載の複合体。
【請求項５】
前記ナロキソン以外のオピオイド受容体拮抗薬は、６−アミノ−１４−ヒドロキシ−１７−アリルノルデソモルフィン、ナルトレンドール、ナルトレキソン、ナルトレキソン、N-メチルナルトレキソン、ナルメフェン、ナブフェン、ブトルファノール、シクラゾシン、ペンタゾシン、ナロルフィン、ナルトリンドール、ノルビナルトルフィミン、オキシロルファン、レバロルファン、メチルナルトレキソン、ブプレノルフィン、シクロルファン、及びオキシモルホン、コデイン、オキシコドン、モルヒネ、エチルモルヒネ塩酸塩、ジアセチルモルヒネ、ヒドロモルフォン、ジヒドロコデイン、ジヒドロモルヒネ、並びにメチルジヒドロモルヒネから選ばれる化合物に由来し、若しくは、前記ナロキソン以外のオピオイド受容体拮抗薬は、６−アミノ−１４−ヒドロキシ−１７−アリルノルデソモルフィン、ナルトレンドール、ナルトレキソン、ナルトレキソン、N-メチルナルトレキソン、ナルメフェン、ナブフェン、ブトルファノール、シクラゾシン、ペンタゾシン、ナロルフィン、ナルトリンドール、ノルビナルトルフィミン、オキシロルファン、レバロルファン、メチルナルトレキソン、ブプレノルフィン、シクロルファン、及びオキシモルホン、コデイン、オキシコドン、モルヒネ、エチルモルヒネ塩酸塩、ジアセチルモルヒネ、ヒドロモルフォン、ジヒドロコデイン、ジヒドロモルヒネ、並びにメチルジヒドロモルヒネの活性化形態から選ばれる、請求項1に記載の複合体。
【請求項６】
前記ナロキソン以外のオピオイド受容体拮抗薬は、ナルトレキソン、N-メチルナルトレキソン、ナルメフェン、又はナブフェンに由来し、若しくは、前記ナロキソン以外のオピオイド受容体拮抗薬は、ナルトレキソン、N-メチルナルトレキソン、ナルメフェン、又はナブフェンの活性化形態である、請求項5に記載の複合体。
【請求項７】
mは、1〜4の自然数、例えば、2である、請求項1に記載の複合体。
【請求項８】
式（V）で表される複合体又はそれの薬学的に許容される塩。
W1-P-W2 （V）
（ここで、Pは、2〜10個の-CH2CH2O-の構造単位を持つポリエチレングリコールであり、W1及びW2は、それぞれ独立に、ナルトレキソン、N-メチルナルトレキソン、ナルメフェン、及びナブフェンの活性化形態から選ばれる。）
【請求項９】
W1及びW2は、それぞれ独立に、以下の構造を持つ、請求項8に記載の複合体。
【化１】
2019510742.tif 000027
（ここで、Yは、
【化２】
2019510742.tif 000028
又は
【化３】
2019510742.tif 000029
であり、
Zは、-OHであり、
Xは、アミド基、アミン基、カルバメート基、スルフィド基、エーテル基、ウレイド基、又はメチレン基である。）
【請求項１０】
W1及びW2は、それぞれ独立に、
【化４】
2019510742.tif 000030
であり、特に、W1及びW2は、それぞれ独立に、
【化５】
2019510742.tif 000031
又は
【化６】
2019510742.tif 000032
である、請求項8又は9に記載の複合体。
【請求項１１】
式（II）で表される複合体、又はそれの薬学的に許容される塩。
【化７】
2019510742.tif 000033
（ここで、nは、2〜20の自然数である。）
【請求項１２】
式（III）で表される複合体、又はそれの薬学的に許容される塩。
【化８】
2019510742.tif 000034
（ここで、nは、2〜20の自然数である。）
【請求項１３】
式（IV）で表される複合体、又はそれの薬学的に許容される塩。
【化９】
2019510742.tif 000035
（ここで、nは、2〜20の自然数である。）
【請求項１４】
nは、3、4、6、8、又は10である、請求項11〜13のいずれか1項に記載の複合体。
【請求項１５】
前記親水性ポリマーは、2〜10個の-CH2CH2O-の構造単位を持つ単分散ポリエチレングリコールであり、複合前の前記オピオイド受容体拮抗薬は、ナルトレキソンである、親水性ポリマーとオピオイド受容体拮抗薬とが複合された複合体。
【請求項１６】
PEG3-（6-α-ナルトレキソール）2-エーテル、PEG4-（6-α-ナルトレキソール）2-エーテル、PEG6-（6-α-ナルトレキソール）2-エーテル、PEG8-（6-α-ナルトレキソール）2-エーテル、PEG10-（6-α-ナルトレキソール）2-エーテル、PEG4-（6-β-ナルトレキソール）2-エーテル、PEG6-（6-β-ナルトレキソール）2-エーテル、PEG8-（6-β-ナルトレキソール）2-エーテル、mPEG6-（6-α-ナルトレキソール）エーテル、mPEG8-（6-α-ナルトレキソール）エーテル、及びmPEG6-（6-β-ナルトレキソール）エーテルから選ばれる、親水性ポリマーとオピオイド受容体拮抗薬とを含む複合体。
【請求項１７】
請求項1〜16のいずれか1項に記載の複合体、及び任意に含まれてもよい薬学的に許容される担体を含有する、医薬組成物。
【請求項１８】
請求項1〜16のいずれか1項に記載の複合体又は請求項17に記載の医薬組成物の、オピオイド受容体に起因する腸機能障害、例えば、便秘を治療するための薬物の製造における用途。
【請求項１９】
請求項1〜16のいずれか1項に記載の複合体又は請求項17に記載の医薬組成物の、オピオイド系薬物と併用して痛みを治療するための薬物の製造における用途。
【請求項２０】
請求項1〜16のいずれか1項に記載の複合体又は請求項17に記載の医薬組成物の、オピオイド系薬物の副作用を減らすための薬物の製造における用途。
【請求項２１】
請求項1〜16のいずれか1項に記載の複合体又は請求項17に記載の医薬組成物の、オピオイド系薬物の乱用を防止するための薬物の製造における用途。
【請求項２２】
請求項1〜16のいずれか1項に記載の複合体又は請求項17に記載の医薬組成物、及び任意に含まれてもよい取扱説明書を含む、キット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
相互参照
本願は、2016年2月2日に中国特許庁へ提出された、発明の名称が「オピオイド受容体拮抗薬の複合体及びその応用」である中国特許出願201610072859.2に基づき優先権を主張し、その全内容は、援用により全体で本明細書に組み込まれる。
技術分野
本発明は、オピオイド受容体拮抗薬の複合体及びその応用に関する。具体的には、本発明は、親水性ポリマーとオピオイド受容体拮抗薬の共有結合的カップリングによる複合体、及びその応用に関する。
【背景技術】
【０００２】
疼痛は最も一般的な人間の苦しみの一つであり、患者にとっても最も耐え難い症状の一つである。癌性疼痛だけでは、統計によると、毎日全世界で少なくとも500万人のかん患者が痛みに苦しんでいる。中国では毎年新規かん患者180万人、死者数約140万人である。これらの患者のうち、50％は中等度から重度の疼痛を有し、中でも、30％は耐え難い重度の疼痛である。2020年までには、世界の毎年の新規かん患者は2000万人に達し、死亡数は毎年1600万人に達し、中でも、70％のかん患者は発展途上国に分布すると推定される。しかしながら、発展途上国では、病院に通うかん患者の大部分は末期がんであり、末期かん患者の疼痛発生率は75％以上と高い。癌性疼痛に起因するがん患者、家族、及び社会に対する害は莫大です。
オピオイド系薬物は最も古い鎮痛薬であり、また、最も効果的な鎮痛薬である。オピオイド系鎮痛薬は、鎮痛効果が強く、長期投薬による臓器毒性がなく、腫瘍の進行により患者の疼痛が悪化した場合、薬物の投与量を増やすことにより鎮痛治療の効果が改善されることができる。WHOは2000年に「中等度および重度のがん疼痛患者にとっては、オピオイド系鎮痛剤は置き換えられない立場をとっている」と提案した。
【０００３】
オピオイド系薬物は中等度・重度の痛みの治療に最も重要な薬物であるが、これらの薬物は吐き気、嘔吐、嗜眠および諸多の有害反応を引き起こす可能性がある。しかしながら、上記の有害反応は、通常、1週間以内に多数の患者によって耐えられ、比較的重度の低換気でも患者によって非常に容易に耐えられる。しかしながら、便秘だけは、発生率が90％〜100％に高くなるだけでなく、最も耐えられ難い。
オピオイド系薬物に起因する便秘は、患者が長期投薬によりオピオイド系薬物に起因する便秘に耐えなく、便秘は投与初期に発生するだけでなく、オピオイド系鎮痛薬による治療の全過程においても持続することを特徴とする。便秘は、タイムリーに制御されなければ、重篤な合併症を引き起こす可能であり、効果的な鎮痛に最も大きな障害となります。同時に、便秘は、病気の治療に深刻な影響を与え、治療を中断し、患者の入院時間を大幅に延長し、患者の生活の質に大きく影響する可能性がある。したがって、有害反応である便秘に対する予防・治療は、常にオピオイド系薬物の鎮痛治療における無視できない問題である。
【０００４】
最も早期に発表された便秘の評価基準には、腹部膨満感、胃部膨満感、排ガス量の減少、腸蠕動の低下、下痢様または水様便、直腸に内容が充満して抑圧されている感じ、腸蠕動時の直腸痛、便の量の減少、排便後の残便感・裏急後重という8つの特徴的な症状を含む（McMillan SC、Williams FA.1989）。一般的に用いられる臨床評価基準は、排便してもスッキリしない、排便回数が減少し、排便量が減少し、且つ糞便が硬い塊状となるものである。オピオイド系薬物は、以下のメカニズムにより腸機能障害を引き起こす（Galligan JJ、Vanner S.2005）、即ち、(1)オピオイド系薬物は、腸管のオピオイド受容体と結合し、腸の蠕動運動を低下させ、腸液の分泌を低減させ、吸収を増加させること；(2)腸管の筋層間神経叢中の興奮性・抑制性ニューロンの活性を低下させること；(3)腸管平滑筋の筋緊張を高めながら、協調的蠕動運動を阻害するために、非蠕動性の収縮を増加させること、である。人体においてオピオイド系薬物による腸管の作用への耐性が生じるのは非常に遅いために、腸機能障害は腸の障害は治療中も持続する。
一般的な便秘予防対策は、オピオイド系薬物の服用を始める場合に、患者は体液摂取量を増やしたり、活動量を増やしたり、セルロースを含む食事を食べたり、定期的な排便習慣を確立・維持したり、静かな排便環境と適切な時間に協力することがある。しかしながら、これらの対策は、毎日にオピオイド系薬物を服用する患者に対する効果が僅かであり、最もよい方法はこれらの方法を採用する同時に、適当な薬物を用いて治療する。
【０００５】
便秘の治療方法では、緩下剤を採用し、適当なオピオイド系薬物とオピオイド受容体拮抗薬を選択して、オピオイド鎮痛薬の長期使用による便秘を緩和または治療し、単一の緩下剤の使用は一般に無効であり、刺激性下剤を通常に使用する必要があるが、緩下剤の作用は非特異的ではなく、その効果を予測することができなく、また、常に下痢と有痛性チックを引き起こす。さらに、臨床的には、ある患者は大量の緩下剤を使用しても、便秘も持続する。異なるオピオイド系薬物は、中枢および消化管における薬物分布の割合が異なる分配比を有するため、便秘の重症度も異なるので、適当なオピオイド鎮痛薬を選択するのは便秘を避けるまたは軽減する方法である。末梢性μ受容体を遮断できるとともに、オピオイドの中枢性鎮痛効果に影響を与えない薬物を求めるのは、人々が追求する目標になる。オピオイド受容体拮抗薬は、それ自体がオピオイド受容体に対する活性化の作用を持たないが、μ受容体に対して強い親和性を持ち、κ受容体、δ受容体、及びσ受容体に対しても一定の親和性を持ち、これらの受容体と結合するオピオイド鎮痛薬を除去することにより拮抗作用を生じることができる。現在の研究によれば、オピオイド受容体は、脳および脊髄を含む中枢神経系に存在するだけでなく、末梢神経などの部位にも広く存在することが示されている。一般的なオピオイド受容体拮抗薬の全身適用は中枢および末梢オピオイド受容体に効果があり、オピオイド薬の末梢作用を拮抗しながら、中枢鎮痛効果も減弱され、例えば、ナロキソン（Naloxone）、ナルトレキソン（Naltrexone）、及びナルメフェン（Nalmefene）が挙げられる。
【０００６】
従って、中枢神経系に毒性・副作用を有するオピオイド受容体拮抗薬を減少させ、同時にオピオイド系薬物の鎮痛効果は影響を受けない必要がある。
PEG（ポリエチレングリコール）化修飾技術は、ポリエチレングリコール誘導体を薬物分子の表面に結合することにより薬物分子の一部の性質を変化させる技術である。現在、中国国内および国外なPEG化小分子医薬品は、代表的な薬物として、臨床的および商業的に入手可能であるものは、NektarのNKTR-102、及びNKTR-118がある。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明者は、親水性ポリマー（例えば、ポリエチレングリコール）で修飾されたオピオイド受容体拮抗薬は、それの体内の組織分布を顕著に改善でき、基本的に中枢神経系に影響を及ぼしなく、末梢神経系にのみ作用することにより、中枢神経系に対するオピオイド受容体拮抗薬の毒性・副作用を低減することを意外に見出し、臨床応用のための多様で柔軟な治療方案を提供する。
特に、本発明者は、また、PEGとナロキソンとの複合体に比べて、PEGとナルトレキソン類オピオイド受容体拮抗薬とが複合して形成した複合体は、より高い活性を示し、より低い割合で血液脳関門を通過することを意外に見出した。特に、本発明者は、さらに、二重オピオイド受容体拮抗薬のコンジュゲートは、1つのオピオイド受容体拮抗薬のコンジュゲートよりも血液脳関門を通過し難しいために、末梢神経系により良く標的に作用することで、オピオイド系薬物の毒性・副作用をより良く拮抗するとともに、オピオイド系薬物の鎮痛効果に影響を与えないことを意外に見出した。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
一側面では、本発明は、式（Ｉ）で表される複合体、及びその薬学的に許容される塩を提供する。
P-(W)m
（Ｉ）
（ここで、Pは親水性ポリマーであり、Wはナロキソン以外のオピオイド受容体拮抗薬であり、mは1〜10の自然数である。）
幾つかの実施形態において、前記親水性ポリマーはポリエチレングリコールである。
【０００９】
幾つかの実施形態において、前記親水性ポリマーは、2〜45個の-CH2CH2O-の構造単位を持つポリエチレングリコールである。好ましくは、前記ポリエチレングリコールは、2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20、25、30、35、40個、又は上記数値のいずれか2つの間の-CH2CH2O-の構造単位を有する。
幾つかの実施形態において、前記ポリエチレングリコールは単分散ポリエチレングリコールである。
【００１０】
幾つかの実施形態において、前記ナロキソン以外のオピオイド受容体拮抗薬は、6-アミノ-14-ヒドロキシ-17-アリルノルデソモルフィン（6-amino-14-hydroxy-17-allylnordesomorphine）、ナルトレンドール（naltrendol）、ナルトレキソン、ナルトレキソン、N-メチルナルトレキソン、ナルメフェン、ナブフェン、ブトルファノール、シクラゾシン、ペンタゾシン、ナロルフィン、ナルトリンドール、ノルビナルトルフィミン、オキシロルファン（oxilorphan）、レバロルファン、メチルナルトレキソン、ブプレノルフィン、シクロルファン（cyclorphan）、及びオキシモルホン、コデイン、オキシコドン、モルヒネ、エチルモルヒネ塩酸塩、ジアセチルモルヒネ、ヒドロモルフォン、ジヒドロコデイン、ジヒドロモルヒネ、並びにメチルジヒドロモルヒネから選ばれる化合物に由来する。特に、前記ナロキソン以外のオピオイド受容体拮抗薬は、ナルトレキソン、N-メチルナルトレキソン、ナルメフェン、又はナブフェン（Nalbuphine）に由来する。
【００１１】
他の幾つかの実施形態において、前記ナロキソン以外のオピオイド受容体拮抗薬は、6-アミノ-14-ヒドロキシ-17-アリルノルデソモルフィン、ナルトレンドール、ナルトレキソン、ナルトレキソン、N-メチルナルトレキソン、ナルメフェン、ナブフェン、ブトルファノール、シクラゾシン、ペンタゾシン、ナロルフィン、ナルトリンドール、ノルビナルトルフィミン、オキシロルファン、レバロルファン、メチルナルトレキソン、ブプレノルフィン、シクロルファン、及びオキシモルホン、コデイン、オキシコドン、モルヒネ、エチルモルヒネ塩酸塩、ジアセチルモルヒネ、ヒドロモルフォン、ジヒドロコデイン、ジヒドロモルヒネ、並びにメチルジヒドロモルヒネの活性化形態又は誘導形態から選ばれる。特に、前記ナロキソン以外のオピオイド受容体拮抗薬は、ナルトレキソン、N-メチルナルトレキソン、ナルメフェン、又はナブフェン（Nalbuphine）の活性化形態である。本発明で使用された用語の「活性化形態」又は「誘導形態」（両方は互換可能に使用できる）とは、親水性ポリマーと共有結合で連結するために、本発明におけるオピオイド受容体拮抗薬化合物が修飾された形態である。好ましくは、前記活性化形態は基本的にオピオイド受容体拮抗薬の活性を保持する。
【００１２】
他の幾つかの実施形態において、親水性ポリマーと複合する前のナロキソン以外のオピオイド受容体拮抗薬は、６−アミノ−１４−ヒドロキシ−１７−アリルノルデソモルフィン、ナルトレンドール、ナルトレキソン、ナルトレキソン、N-メチルナルトレキソン、ナルメフェン、ナブフェン、ブトルファノール、シクラゾシン、ペンタゾシン、ナロルフィン、ナルトリンドール、ノルビナルトルフィミン、オキシロルファン、レバロルファン、メチルナルトレキソン、ブプレノルフィン、シクロルファン、及びオキシモルホン、コデイン、オキシコドン、モルヒネ、エチルモルヒネ塩酸塩、ジアセチルモルヒネ、ヒドロモルフォン、ジヒドロコデイン、ジヒドロモルヒネ、並びにメチルジヒドロモルヒネから選ばれる。特に、親水性ポリマーと複合する前のナロキソン以外のオピオイド受容体拮抗薬は、ナルトレキソン、N-メチルナルトレキソン、ナルメフェン、又はナブフェンである。
【００１３】
幾つかの実施形態において、mは、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、又は前記数値のいずれか2つの間の整数である。好ましくは、mは、2である。即ち、2個のナロキソン以外のオピオイド受容体拮抗薬がある。
他の側面において、本発明は、下式（II）で表される複合体又はその薬学的に許容される塩から選ばれるものを提供する。
【化１】
2019510742.tif 000002
（ここで、nは、2〜20の自然数である。）
他の側面において、本発明は、下式（III）で表される複合体又はその薬学的に許容される塩から選ばれるものを提供する。
【化２】
2019510742.tif 000003
（ここで、nは、2〜20の自然数である。）
他の側面において、本発明は、下式（IV） で表される複合体又はその薬学的に許容される塩から選ばれるものを提供する。
【化３】
2019510742.tif 000004
（ここで、nは、2〜20の自然数である。）
【００１４】
幾つかの実施形態において、nは、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、又は前記数値のいずれか2つの間の整数である。
ある実施形態において、前記親水性ポリマーは、8個の-CH2CH2O-の構造単位を持つ単分散ポリエチレングリコールであり、且つ複合前の前記ナロキソン以外のオピオイド受容体拮抗薬は2個のナルトレキソンである。
【００１５】
更に他の側面において、本発明は、PEG3-(6-α-ナルトレキソール)2-エーテル、PEG4-(6-α-ナルトレキソール)2-エーテル、PEG6-(6-α-ナルトレキソール)2-エーテル、PEG8-(6-α-ナルトレキソール)2-エーテル、PEG10-(6-α-ナルトレキソール)2-エーテル、PEG4-(6-β-ナルトレキソール)2-エーテル、PEG6-(6-β-ナルトレキソール)2-エーテル、PEG8-(6-β-ナルトレキソール)2-エーテル、mPEG6-(6-α-ナルトレキソール)エーテル、mPEG8-(6-α-ナルトレキソール)エーテル、及びmPEG6-(6-β-ナルトレキソール)エーテルから選ばれる複合体を提供する。
【００１６】
他の側面において、本発明は、式（V）で表される複合体、又はその薬学的に許容される塩を提供する。
W1-P-W2（V）
（ここで、Pは、2〜10個（例えば、2、3、4、5、6、7、8、9、10個または前記数値のいずれか2つの間の整数である）の-CH2CH2O-の構造単位を持つポリエチレングリコールであり、W1及びW2は、それぞれ独立に、ナルトレキソン、N-メチルナルトレキソン、ナルメフェン、及びナブフェン（Nalbuphine）の活性化体の又は誘導形態から選ばれる。）
幾つかの実施形態において、W1及びW2は、それぞれ独立に、以下の構造を持つ。
【化４】
2019510742.tif 000005
（ここで、
Yは、
【化５】
2019510742.tif 000006
又は
【化６】
2019510742.tif 000007
であり、
Zは、-OHであり、
Xは、アミド基、アミン基、カルバメート基、スルフィド基、エーテル基、ウレイド基、又はメチレン基である。）
【００１７】
幾つかの実施形態において、W1及びW2の立体配置は、それぞれ独立に、αとβから選ばれる。例えば、W1及びW2の立体配置は、（α、α）、（β、β）、（α、β）、又はそれらの混合物である。
他の具体的な実施形態において、W1及びW2は、それぞれ独立に、
【化７】
2019510742.tif 000008
である。
他の具体的な実施形態において、W1及びW2は、それぞれ独立に、
【化８】
2019510742.tif 000009
又は
【化９】
2019510742.tif 000010
である。
【００１８】
他の実施形態において、本発明は、本発明の複合体及び任意に含まれてもよい薬学的に許容されるを含む医薬組成物を提供する。
幾つかの実施形態において、前記医薬組成物は錠剤、注射剤、坐剤、丸剤、ソフト・ハードゼラチンカプセル剤、散剤、液剤、懸濁剤、又はエアロゾル剤として調製することができる。
さらに他の側面において、本発明は、本発明にかかる複合体又は医薬組成物の、オピオイド受容体に起因する腸機能障害、例えば、便秘を治療するための薬物の製造における用途を提供する。
さらに他の側面において、本発明は、本発明にかかる複合体又は医薬組成物の、オピオイド系薬物と併用して痛みを治療するための薬物の製造における用途を提供する。
さらに他の側面において、本発明は、本発明にかかる複合体又は医薬組成物の、オピオイド系薬物の副作用を減らすための薬物の製造における用途を提供する。
さらに他の側面において、本発明は、本発明にかかる複合体又は医薬組成物の、オピオイド系薬物の乱用を防止するための薬物の製造における用途を提供する。
さらに他の側面において、本発明は、本発明にかかる複合体又は医薬組成物、及び任意に含まれてもよい取扱説明書を含むキットを提供する。
【００１９】
さらに他の側面において、本発明は、オピオイド受容体に起因する腸機能障害、例えば、便秘を治療するための複合体及び/又は医薬組成物を提供する。
さらに他の側面において、本発明は、オピオイド系薬物と併用して痛みを治療するための複合体及び/又は医薬組成物を提供する。
さらに他の側面において、本発明は、オピオイド系薬物の副作用を減らすための複合体及び/又は医薬組成物を提供する。
さらに他の側面において、本発明は、オピオイド系薬物の乱用を防止するための複合体及び/又は医薬組成物を提供する。
さらに他の側面において、本発明は、オピオイド受容体に起因する腸機能障害、例えば、便秘を治療するための方法において、それを必要とする対象に有効な量の本発明にかかる複合体及び/又は医薬組成物を投与することを含む方法を提供する。
さらに他の側面において、本発明は、オピオイド系薬物と併用して痛みを治療するための方法において、それを必要とする対象に有効な量の本発明にかかる複合体及び/又は医薬組成物を投与することを含む方法を提供する。
さらに他の側面において、本発明は、オピオイド系薬物の副作用を減らすための方法において、それを必要とする対象に有効な量の本発明にかかる複合体及び/又は医薬組成物を投与することを含む方法を提供する。
【発明の効果】
【００２０】
本発明の利点は、水溶性ポリマーであるポリエチレングリコールの変性により、ナルトレキソンを保護し、薬物の吸收を改善し、薬物の体内分布を変更し、血液脳関門通過率を低減し、並びに毒性・副作用を避けることができる。
【図面の簡単な説明】
【００２１】
以下、本発明に対する詳しい説明及び図面により本発明の前記の側面及び他の側面を説明する。例が挙げられて本発明を説明するために、図面の実施形態が現在で好ましいものであるが、本発明は開示された特定の実施形態に限定されないことが理解される。
【図１】図1は、Nal029がロペラミド塩酸塩の下痢止めの効果を拮抗させる線量効果曲線である。
【発明を実施するための形態】
【００２２】
本明細書で使用される用語「活性化形態」又は「誘導形態」（両方は互換可能に使用できる）とは、カップリングされたものの特定の位置に1個の活性基が導入されて、又は1個の活性官能基を持つように修飾されて、水可溶物とカップリングしやすい化合物である。
本明細書にかかる「オピオイド受容体拮抗薬」は、オピオイドと類似の構造の化合物であるが、それ自身はオピオイド受容体を活性化する作用を持たず、オピオイド鎮痛薬に対して拮抗作用を示し、受容体に結合するオピオイド鎮痛薬を除去し、または鎮痛薬と競合的に結合し、幾つかのオピオイド鎮痛薬による胃腸障害、呼吸抑制などの副作用を除去する。
【００２３】
本明細書にかかる「ポリエチレングリコール」は、当業者によって一般的に理解されている意味を有し、特に断らない限り、ポリエチレングリコール（異なる構造の、直鎖状、分枝鎖状、星状などの分岐構造を含む）自身を含むのみならず、その末端に修飾された誘導体も含まれる。例えば、上記PEGは、メトキシポリエチレングリコール（mPEG）である。本明細書において、特に断らない限り、上記ポリエチレングリコール（PEG）は、末端基がヒドロキシル基であるタイプを含み、さらに末端が他の基であるタイプも含む。上記他の基はアルコキシ基、シクロアルコキシ基、シクロアルキルオキシ基、アルケニル基、アリールオキシ基、又はアラルキルオキシ基を含むが、これらに限定されない。これらのPEG分子タイプは、いずれも従来技術で公知であり、且つポリペプチド修飾に一般的に使用されるものである。PEG側鎖は、直鎖状、分枝鎖状、分岐状、または複数のアームからなるものであってもよく、異なるポリエチレングリコールは異なる高分子鎖の長さおよび重合構造を有することができる。本発明の好ましい実施形態において、本発明にかかるポリエチレングリコールは、オリゴエチレングリコールであり、例えば、繰り返し単位が、20、15、10より少ないものなどである。より好ましくは、本発明にかかるポリエチレングリコールは、単分散のものである。
本明細書にかかる“複合体”とは、生物活性を持つ分子（例えば、オピオイド受容体拮抗薬）が親水性ポリマー（例えば、ポリエチレングリコール）と直接、若しくはリンカーを介して共有結合した生成物をいう。
【００２４】
本明細書にかかる「薬学的に許容される塩」は、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩、マレイン酸塩、乳酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、パントテン酸塩、アスコルビン酸塩など、及びそれらの組み合わせであってもよい。好ましくは、かかる薬学的に許容される塩は、塩酸塩である。
本明細書にかかる「単分散」とは、本発明にかかるポリマー（例えば、ポリエチレングリコール）は、均一性を持ち、例えば、非目的生成物は、モル％で、10％、8％、5％、3％、2％、1％、0.5％、0.1％、0.01％、又は0.001％未満である。
例えば、「含む」、「含有」及び「持つ」という用語は、限定することを意図するものではない。なお、特に断らない限り、「又は」、「若しくは」とは、「及び/又は」を意味する。
【００２５】
なお、本明細書で使用された単数形は、明らかに1個の対象に限定されない限り、その対応する対象の複数形を含むことに留意すべきである。特定の数値が記載されている場合には、特に断らない限り、少なくともこの数値を含むことになる。
数値が近似値を示す場合には、特定の数値は別の実施形態を構成することが理解されるべきである。例えば、使用された「約X」（ここで、Xは、数値である）とは、例示されている値±10％（含む）である。存在すれば、すべての範囲はいずれも含まれ、並びに組み合わせられることができる。
【００２６】
本明細書に用いられる「医薬組成物」の用語とは、ある特定の目的を達成するために一緒に組み合わされ、少なくとも1種の薬物と、任意に含まれてもよい薬学的に許容される担体または賦形剤との組み合わせを意味する。ある実施形態において、かかる医薬組成物は、本発明の目的を達成するために一緒に働くことができる限り、時間上および/または空間上の別々の組み合わせを含む。例えば、かかる医薬組成物に含まれる成分（例えば、本発明にかかる複合体）は全体として対象に投与し、若しくは別々に対象に投与することができる。かかる医薬組成物に含まれる成分が別々に対象に投与する場合には、かかる成分は、同時又は順に対象に投与することができる。好ましくは、かかる薬学的に許容される担体が水、緩衝溶液、例えばPBS（リン酸塩緩衝液）のような等張塩溶液、グルコース、マンニトール、D-グルコース、乳糖、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、セルロース、炭酸マグネシウム、0.3％グリセリン、ヒアルロン酸、エタノール、又は例えばポリプロピレングリコールのようなポリアルキレングリコール、トリグリセリドのようなポリアルキレングリコールなどである。用いられた薬学的に許容される担体のタイプは、特に、本発明にかかる組成物が経口、経鼻、皮内、皮下、筋肉内、又は静脈内投与のために製剤化されているか否かに依存する。本発明にかかる組成物は、添加剤として、潤滑剤、防腐剤、安定剤、湿潤剤、乳化剤、浸透圧に影響を与える塩、緩衝剤、着色物質、矯味物質及び/又は芳香物質を含んでもよい。
【００２７】
本発明の医薬組成物は、いずれかの適当な投与経路、例えば、経口、経鼻、皮内、皮下、筋肉内、または静脈内で投与することができる。
“投与”とは、薬理学的に使用可能な手段で対象に物質を提供することをいう。
本明細書に用いられる「有効な薬物量」、「有効な量」とは、投与された対象に対する有益な効果を示すのに十分な投与量を意味する。投与される実際量、投与の速度及び時間経過は、治療される患者自身の状態、及び重症度に依存する。治療の処方（例えば、投与量の決定など）は、最終的に一般開業医および他の医師の責任であり、彼らの決定に依存し、治療される疾患、個々の患者の状態、送達部位、投与方法、および医者に知られている他の因子を一般に考慮する。
【００２８】
本明細書に用いられる「対象」の用語とは、動物であり、例えば、ヒト、及び霊長類動物の温血哺乳動物；鳥類；例えば、猫、犬、羊、ヤギ、牛、馬、及び豚の飼い慣らされる動物、家畜又は農場動物；例えば、ラット、マウス、及びモルモットの実験動物；魚；爬虫類動物；動物園の動物；及び野生動物などを含む。
別途定義されない限り、本明細書で使用される全ての科学・技術用語は、当業者によって一般に理解されるのと同じ意味を有する。
特に断らない限り、本方法および製品に関する一実施形態に開示される任意の組成、要素、属性またはステップは、ここで本明細書に開示されるいずれかの他の方法および製品に適用され得る。
【００２９】
本開示の各項特許、特許出願、引用された刊行物、または本文書における説明は、その全体が参考として本明細書に組み込まれる。
本発明は、以下の実施例でさらに定義される。これらの実施例は、ただ例示として説明され、本発明の範囲を限定するものではないことを理解すべきである。上記の検討およびこれらの例から、当業者は本発明の本質的な特徴を確定することができ、本発明の本質および範囲から逸脱することなく、本発明を様々に変更・修飾することにより、さまざまな用途と条件に適用させる。
【実施例】
【００３０】
実施例1：ポリエチレングリコールメシレート（PEG-mesylate）の調製
【化１０】
2019510742.tif 000011
反応瓶に50mlのジクロロメタン、7.18mlのトリエチルアミン、206mgの4-（ジメチルアミノ）ピリジン、及び10.0gのCH3-（OCH2CH2）6-OH（単にmPEG6-OHと表記する）（嘉興博美、M006110503）を順に加えた。0℃で、撹拌条件下、3.28mlのメタンスルホニルクロリドのジクロロメタン溶液50mlを滴下した。滴下終了後、室温で一晩撹拌しながら反応させた。反応液を分液ロートに移し、希塩酸及び食塩水で順に洗浄した。有機層を分離し、30gの無水硫酸ナトリウムで乾燥し、乾燥剤を濾別した後、ロータリーエバポレーターで濃縮して13.6gの粗生成物を得た。かかる粗生成物をクロマトグラフィーにより精製し、mPEG6-OMs（CH3-（OCH2CH2）6-OSO2CH3）13.0gを得た。1H-NMR（400MHz，CDCl3）、δppm4.35-4.41（2H，m）、3.74-3.80（2H，m）、3.60-3.70（18H，m）、3.52-3.58（2H，m）、3.38（3H，s）、3.08（3H，s）。
類似のプロセスにより、異なるポリエチレングリコールを出発物質として、下表に示すような多種のポリエチレングリコールメシレートを調製する。
【表１】
2019510742.tif 000012
具体的な製造プロセスは以下の通りである。
PEG3-（OMs）2：反応瓶に50mlのジクロロメタン、17.0mlのトリエチルアミン、244mgの4-（ジメチルアミノ）ピリジン、及び6.00gのH-（OCH2CH2）3-OH（単にH-PEG3-OHと表記する）（Sinopharm試薬、20130125）を順に加えた。5〜10℃で、撹拌条件下、7.8mlのメタンスルホニルクロリドのジクロロメタン溶液20mlを滴下した。滴下終了後、室温で一晩撹拌しながら反応させた。反応液を分液ロートに移し、希塩酸及び食塩水で順に洗浄した。有機層を分離し、30gの無水硫酸ナトリウムで乾燥し、乾燥剤を濾別した後、ロータリーエバポレーターで濃縮して粗生成物12.6gを得た。かかる粗生成物をクロマトグラフィーにより精製し、純品11.2gを得た。1H-NMR（400MHz，CDCl3）、δppm 4.34-4.41（4H，m）、 3.74-3.80（4H，m）、3.68（4H，s）、3.07（6H，s）。
PEG4-（OMs）2：反応瓶に50mlのジクロロメタン、17.0mlのトリエチルアミン、244mgの4-（ジメチルアミノ）ピリジン、及び7.76gのH-（OCH2CH2）4-OH（単にH-PEG4-OHと表記する）（aladdin試薬、J1218031）を順に加えた。0℃で、撹拌条件下、7.8mlのメタンスルホニルクロリドのジクロロメタン溶液50mlを滴下した。滴下終了後、室温で一晩撹拌しながら反応させた。反応液を分液ロートに移し、希塩酸及び食塩水で順に洗浄した。有機層を分離し、30gの無水硫酸ナトリウムで乾燥し、乾燥剤を濾別した後ロータリーエバポレーターで濃縮して14.7gの粗生成物を得た。かかる粗生成物をクロマトグラフィーにより精製し、純品13.90gを得た。1H-NMR（400MHz，CDCl3）、δppm 4.34-4.41（4H，m）、3.73-3.81（4H，m）、3.60-3.71（8H，m）、3.07（6H，s）。
PEG6-（OMs）2：反応瓶に50mlのジクロロメタン、10.625mlのトリエチルアミン、152.5mgの4-（ジメチルアミノ）ピリジン、及び7.05gのH-（OCH2CH2）6-OH（単にH-PEG6-OHと表記する）（嘉興博美生物、DH06141230）を順に加えた。5〜8℃で、撹拌条件下、4.875mlのメタンスルホニルクロリドのジクロロメタン溶液40mlを滴下した。滴下終了後、室温で一晩撹拌しながら反応させた。反応液を分液ロートに移し、希塩酸及び食塩水で順に洗浄した。有機層を分離し、30gの無水硫酸ナトリウムで乾燥し、乾燥剤を濾別した後、ロータリーエバポレーターで濃縮して12.5gの粗生成物を得た。かかる粗生成物をクロマトグラフィーにより精製し、純品10.5gを得た。1H-NMR（400MHz，CDCl3）、δppm 4.34-4.41（4H，m）、3.73-3.81（4H，m）、3.60-3.71（16H，m）、3.08（6H，s）。
PEG8-（OMs）2：反応瓶に50mlのジクロロメタン、5.74mlのトリエチルアミン、83mgの4-（ジメチルアミノ）ピリジン、及び5.0gのH-（OCH2CH2）8-OH（単にH-PEG8-OHと表記する）（嘉興博美生物、DH08150114）を順に加えた。0℃で、撹拌条件下、2.64mlのメタンスルホニルクロリドのジクロロメタン溶液50mlを滴下した。滴下終了後、室温で一晩撹拌しながら反応させた。反応液を分液ロートに移し、希塩酸及び食塩水で順に洗浄した。有機層を分離し、30gの無水硫酸ナトリウムで乾燥し、乾燥剤を濾別した後、ロータリーエバポレーターで濃縮して8.17gの粗生成物を得た。かかる粗生成物をクロマトグラフィーにより精製し、純品6.7gを得た。1H-NMR（400MHz，CDCl3）、δppm 4.34-4.41（4H，m）、3.73-3.81（4H，m）、3.60-3.71（24H，m）、3.08（6H，s）。
PEG10-（OMs）2：反応瓶に50mlのジクロロメタン、4.63mlのトリエチルアミン、66.5mgの4-（ジメチルアミノ）ピリジン、及び5.0gのH-（OCH2CH2）10-OH（単にH-PEG10-OHと表記する）（嘉興博美生物、DH10140509）を順に加えた。0℃で、撹拌条件下、2.13mlのメタンスルホニルクロリドのジクロロメタン溶液50mlを滴下した。滴下終了後、室温で一晩撹拌しながら反応させた。反応液を分液ロートに移し、希塩酸及び食塩水で順に洗浄した。有機層を分離し、30gの無水硫酸ナトリウムで乾燥し、乾燥剤を濾別した後、ロータリーエバポレーターで濃縮して8.0g粗生成物を得た。かかる粗生成物をクロマトグラフィーにより精製し、純品5.5gを得た。1H-NMR（400MHz，CDCl3）、δppm 4.34-4.41（4H，m）、3.73-3.81（4H，m）、3.60-3.71（32H，m）、3.08（6H，s）。
mPEG8-OMs：反応瓶に50mlのジクロロメタン、2.763mlのトリエチルアミン、80mgの4-（ジメチルアミノ）ピリジン、及び5.0gのCH3-（OCH2CH2）8-OH（単にmPEG8-OHと表記する）（嘉興博美生物、M008131031）を順に加えた。0℃で、撹拌条件下、1.27mlのメタンスルホニルクロリドのジクロロメタン溶液50mlを滴下した。滴下終了後、室温で一晩撹拌しながら反応させた。反応液を分液ロートに移し、希塩酸及び食塩水で順に洗浄した。有機層を分離し、30gの無水硫酸ナトリウムで乾燥し、乾燥剤を濾別した後、ロータリーエバポレーターで濃縮して7.0gの粗生成物を得た。かかる粗生成物をクロマトグラフィーにより精製し、純品5.44gを得た。1H-NMR（400MHz，CDCl3）、δppm 4.35-4.41（2H，m）、3.74-3.80（2H，m）、3.60-3.70（26H，m）、3.52-3.58（2H，m）、3.38（3H，s）、3.08（3H，s）。
【００３１】
実施例2：3-MOM-ナルトレキソンと3-MOM-ナロキソンの調製
【化１１】
2019510742.tif 000013
反応瓶に200mlのジクロロメタン、41.7gのジイソプロピルエチルアミン、及び19.83gのナルトレキソン塩酸塩（済南浩化実業有限公司、FR00007）を順に加えた。0℃で、撹拌条件下、17.7gのクロロメチルメチルエーテルのジクロロメタン溶液200mlを滴下した。滴下終了後、一晩撹拌しながら反応させた。反応液を分液ロートに移し、アルカリ溶液（400mlの水+40gの無水炭酸ナトリウム+10.0gの水酸化ナトリウム+30gの塩化ナトリウムから均一に混合されたものである）で洗浄した。有機層を分離し、30gの無水硫酸ナトリウムで乾燥し、乾燥剤を濾別した後、ロータリーエバポレーターで濃縮して、21.3gの生成物である3-MOM-ナルトレキソンを得た。1H-NMR（400MHz，CDCl3）、δppm 6.85-6.92（1H，d，J＝8.0Hz）、6.58-6.65（1H，d，J＝8.4Hz）、5.20-5.30（2H，m）、4.68（1H，s）、3.52（3H，s）、3.15-3.22（1H，d，J＝6.0Hz）、2.97-3.12（2H，m）、2.66-2.75（1H，m）、2.54-2.64（1H，m）、2.37-2.50（3H，m）、2.26-2.35（1H，m）、2.10-2.20（1H，m）、1.83-1.93（1H，m）、1.54-1.71（2H，m）、0.81-0.92（1H，m）、0.52-0.62（2H，m）、0.11-0.19（2H，m）。LC/MS（ESI）m/z 386.5[M+H]+。
反応瓶に50mlのジクロロメタン、13.51gのジイソプロピルエチルアミン、及び5.00gのナロキソン塩酸塩（済南浩化実業有限公司、GR00037）を順に加えた。0℃で、撹拌条件下、5.55gのクロロメチルメチルエーテルのジクロロメタン溶液50mlを滴下した。滴下終了後、一晩撹拌しながら反応させた。反応液を分液ロートに移し、アルカリ溶液（100ml水+10g無水炭酸ナトリウム+3.0g水酸化ナトリウム+7g塩化ナトリウムから均一に混合されたものである）で洗浄した。有機層を分離し、10gの無水硫酸ナトリウムで乾燥し、乾燥剤を濾別した後、ロータリーエバポレーターで濃縮して、5.14gの生成物である3-MOM-ナロキソンを得た。1H-NMR（400MHz，CDCl3）、δppm 6.86-6.92（1H，d，J＝8.4Hz）、6.59-6.66（1H，d，J＝8.4Hz）、5.76-5.90（1H，m）、5.15-5.30（4H，m）、5.02（1H，s）、4.67（1H，s）、3.52（3H，s）、3.14-3.19（2H，m）、3.06-3.14（1H，d，J＝18.4Hz）、2.96-3.07（2H，m）、2.53-2.64（2H，m）、2.34-2.44（1H，m）、2.25-2.33（1H，m）、2.10-2.20（1H，m）、1.82-1.92（1H，m）、1.54-1.68（2H，m）。LC/MS（ESI）m/z 372.5[M+H]+。
【００３２】
実施例3：3-MOM-6-α-ナルトレキソールと3-MOM-6-α-ナロキソールの調製
【化１２】
2019510742.tif 000014
アルゴンガスの雰囲気保護下、反応瓶に100mlのテトラヒドロフラン、16.8gの3-MOM-ナルトレキソンを加えた。−10℃で、撹拌条件下、水素化トリ-sec-ブチルほう素カリウムのテトラヒドロフラン溶液を45ml加えた。薄層クロマトグラフィー（TLC）により反応の進行状況をチェックした。反応終了後、希塩酸でpH2〜4になるまで調整した。反応液を分液ロートに移し、ジクロロメタンで4回（150、100、100、100ml）抽出した。有機層を分離し、水層に10.0gの水酸化ナトリウムの水溶液150mlを加え、均一に混合し、ジクロロメタンで3回（100ml×3）抽出した。有機層を合わせ、20gの無水硫酸ナトリウムで乾燥し、乾燥剤を濾別し、ロータリーエバポレーターで濃縮して、生成物である3-MOM-6-α-ナルトレキソールを16.5g得た。1H-NMR（400MHz，CDCl3）、δppm 6.78-6.88（1H，d，J＝8.0Hz）、6.54-6.64（1H，d，J＝8.4Hz）、5.53-5.62（1H，d，J＝6.4Hz）、5.29（1H，s）、5.05（1H，s）、4.96-5.02（1H，d，J＝6.4Hz）、4.58-4.68（1H，d，J＝5.2Hz）、4.12-4.24（1H，m）、3.48（3H，s）、2.98-3.12（3H，m）、2.55-2.70（2H，m）、2.33-2.42（2H，d，J＝6.8Hz）、2.15-2.31（2H，m）、1.48-1.60（3H，m）、1.28-1.42（1H，m）、0.78-0.91（1H，m）、0.49-0.60（2H，m）、0.09-0.18（2H，m）。LC/MS（ESI）m/z 388.5[M+H]+。
アルゴンガス保護下、反応瓶に20mlのテトラヒドロフラン、3.48gの3-MOM-ナロキソンを加えた。−15℃で、撹拌条件下、水素化トリ-sec-ブチルほう素カリウムのテトラヒドロフラン溶液を13ml加えた。薄層クロマトグラフィー（TLC）により反応の進行状況をチェックした。反応終了後、希塩酸でpH3〜5になるまで調整した。反応液を分液ロートに移し、ジクロロメタンで4回（50ml×4）抽出した。有機層を分離し、水層に1.0gの水酸化ナトリウムの水溶液50mlを加え、均一に混合し、ジクロロメタンで3回（50ml×3）抽出した。有機層を合わせ、10gの無水硫酸ナトリウムで乾燥し、乾燥剤を濾別し、ロータリーエバポレーターで濃縮して、生成物である3-MOM-6-α-ナロキソールを2.97g得た。1H-NMR（400MHz，CDCl3）、δppm 6.80-6.86（1H，d，J＝8.4Hz）、6.57-6.63（1H，d，J＝8.4Hz）、5.73-5.87（1H，m）、5.53-6.58（1H，d，J＝6.4Hz）、5.12-5.24（2H，m）、4.96-5.02（1H，d，J＝6.4Hz）、4.88（1H，s）、4.59-4.64（1H，d，J＝5.2Hz）、4.13-4.21（1H，m）、3.48（3H，s）、3.02-3.14（4H，m）、2.87-2.93（1H，d，J＝6.4Hz）、2.48-2.66（2H，m）、2.19-2.25（2H，d，J＝7.6Hz）、1.82-1.95（1H，m）、1.44-1.60（3H，m）、1.27-1.39（1H，m）。LC/MS（ESI）m/z 374.5[M+H]+。
【００３３】
実施例4：3-MOM-6-β-ナルトレキソールと3-MOM-6-β-ナロキソールの調製
【化１３】
2019510742.tif 000015
アルゴンガス保護下、反応瓶に30mlのエタノール、1.64gの3-MOM-ナロキソンとアミノイミノメタンスルフィン酸とのアルカリ溶液（1.74gのアミノイミノメタンスルフィン酸+0.85gの水酸化ナトリウム+30mlの水）を加えた。80℃で撹拌しながら反応させ、TLCにより反応の進行状況をチェックした。反応終了後、加熱を停止し、120mlの食塩水（10％）を加え、均一に混合した後、分液ロートに移し、ジクロロメタンで3回（50、25、25ml）抽出した。有機層を合わせ、10％の食塩水で洗浄した。有機層を分離し、10gの無水硫酸ナトリウムで乾燥し、乾燥剤を濾別した後、ロータリーエバポレーターで濃縮して、生成物である3-MOM-6-β-ナロキソールを1.29g得た。1H-NMR（400MHz，CDCl3）、δppm 6.87-6.93（1H，d，J＝8.4Hz）、6.58-6.64（1H，d，J＝8.4Hz）、5.73-5.87（1H，m）、5.10-5.26（4H，m）、4.96-5.02（1H，d，J＝6.4Hz）、4.46-4.52（1H，d，J＝5.6Hz）、3.54-3.64（1H，m）、3.50（3H，s）、3.03-3.16（3H，m）、2.90-2.96（1H，d，J＝5.6Hz）、2.50-2.66（2H，m）、2.10-2.28（2H，m）、1.86-2.02（1H，m）、1.54-1.68（2H，m）、1.46-1.54（1H，m）、1.30-1.40（1H，m）。LC/MS（ESI）m/z 374.5[M+H]+。
アルゴンガス保護下、反応瓶に80mlのエタノール、4.51gの3-MOM-ナルトレキソンとアミノイミノメタンスルフィン酸とのアルカリ溶液（4.33gのアミノイミノメタンスルフィン酸+2.06gの水酸化ナトリウム+80mlの水）。80℃で撹拌しながら反応させ、TLCにより反応の進行状況をチェックした。反応終了後、加熱を停止し、300mlの食塩水（10％）を加え、均一に混合した後、分液ロートに移し、ジクロロメタンで3回（100、50、50ml）抽出した。有機層を合わせ、10％の食塩水で洗浄した。有機層を分離し、20gの無水硫酸ナトリウムで乾燥し、乾燥剤を濾別した後ロータリーエバポレーターで濃縮して、生成物である3-MOM-6-β-ナルトレキソールを4.10g得た。1H-NMR（400MHz，CDCl3）、δppm 6.87-6.93（1H，d，J＝8.4Hz）、6.57-6.63（1H，d，J＝8.0Hz）、5.15-5.26（2H，m）、5.29（1H，s）、4.46-4.53（1H，d，J＝5.6Hz）、3.54-3.64（1H，m）、3.50（3H，s）、3.00-3.14（2H，m）、2.86-2.98（1H，m）、2.55-2.70（2H，m）、2.33-2.40（2H，d，J＝6.4Hz）、2.19-2.30（1H，m）、2.09-2.20（1H，m）、1.88-2.04（1H，m）、1.55-1.70（2H，m）、1.47-1.54（1H，m）、1.32-1.43（1H，m）、0.78-0.91（1H，m）、0.48-0.60（2H，m）、0.05-0.18（2H，m）。LC/MS（ESI）m/z 388.6[M+H]+。
【００３４】
実施例5：PEG化ナルトレキソール及びナロキソール、及びそれらの塩酸塩の調製
【化１４】
2019510742.tif 000016
アルゴンガス保護下、反応瓶に1.00gの水素化ナトリウムと20mlのジメチルホルムアミドとを加え、懸濁液となるように撹拌した。続いて、2.02gの3-MOM-6-α-ナルトレキソールのテトラヒドロフラン溶液12mlと661mgのPEG3-（OMs）2のテトラヒドロフラン溶液12mlとを順に加えた。60℃まで昇温し、撹拌しながら反応させ、TLCにより反応の進行状況をチェックした。反応終了後、水を加えて過剰の水素化ナトリウムをクエンチした。反応液をロータリーエバポレーターにより濃縮して、残留物をジクロロメタンと水との系で抽出し、有機層を分離した。有機層を5％の炭酸ナトリウム水溶液で5回洗浄し、有機層を分離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。乾燥剤を除去した後、ロータリーエバポレーターで濃縮して、残留物を2.45g得た。次いで、かかる残留物を15mlの塩酸（4.0M）で処理し、室温で一晩撹拌した。反応終了後、4Mのアンモニア水で反応液をpH3〜5に調整した。最後に、クロマトグラフィーにより精製し、生成物であるPEG3-（6-α-ナルトレキソール）2-エーテル（単にNal053という）を0.55g得た。
かかる生成物を20mlのエタノールで溶解し、その後、2.5mlの塩化水素エタノール溶液（1.0M）を加え、均一に混合し後、ロータリーエバポレーターで濃縮して残留物0.65gを得た。かかる残留物を20mlの水で溶解し、凍結乾燥し、Nal053の二塩酸塩である、白に近い粉末固体0.45gを得た。1H-NMR（400MHz，D2O）、δppm 6.72-6.77（2H，d，J＝8.4Hz）、6.62-6.68（2H，d，J＝8.4Hz）、4.81-4.86（2H，d，J＝4.8Hz）、3.90-4.00（4H，m）、3.66-3.74（2H，m）、3.59-3.66（2H，m）、3.46-3.59（4H，m）、3.45（4H，s）、3.25-3.34（2H，d，J＝19.6Hz）、3.17-3.25（2H，m）、3.03-3.14（4H，m）、2.87-2.97（2H，m）、2.73-2.87（2H，m）、2.35-2.47（2H，m）、1.68-1.79（2H，m）、1.47-1.69（6H，m）、1.16-1.30（2H，m）、0.92-1.04（2H，m）、0.67-0.77（2H，m）、0.57-0.67（2H，m）、0.28-0.43（4H，m）。LC/MS（ESI）m/z 802.1[M+H]+および401.8[M+2H]++。
類似のプロセスにより、異なる出発物質（表3に示す）から、表2に示す多種のPEG化ナルトレキソール及びナロキソール、並びにそれらの塩酸塩を調製した。
【００３５】
【表２】
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【表３】
2019510742.tif 000018
【００３６】
Nal021：アルゴンガス保護下、反応瓶に1.10gの水素化ナトリウムと20mlのジメチルホルムアミドを加え、懸濁液となるように撹拌した。続いて、3.0gの3-MOM-6-α-ナルトレキソールのテトラヒドロフラン溶液12mlと1.15gのPEG4-（OMs）2のテトラヒドロフラン溶液12mlを順に加えた。60℃まで昇温し、撹拌しながら反応させ、TLCにより反応の進行状況をチェックした。反応終了後、水を加えて過剰の水素化ナトリウムをクエンチした。反応液をロータリーエバポレーターで濃縮し、残留物をジクロロメタンと水との系で抽出し、有機層を分離し。有機層を5％の炭酸ナトリウム水溶液で5回洗浄し、有機層を分離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。乾燥剤を除去した後、ロータリーエバポレーターで濃縮して、残留物を得た。次いで、かかる残留物を15mlの塩酸（4.0M）で処理し、室温で一晩撹拌した。反応終了後、4Mのアンモニア水で反応液をpH3〜5に調整した。最後に、クロマトグラフィーにより精製し、生成物であるPEG4-（6-α-ナルトレキソール）2-エーテルを得た。かかる生成物を20mlのエタノールで溶解し、その後、3.0mlの塩化水素エタノール溶液（1.0M）を加え、均一に混合し後、ロータリーエバポレーターで濃縮して残留物1.43gを得た。かかる残留物を20mlの水で溶解し、凍結乾燥し、Nal021の二塩酸塩である、白に近い粉末固体0.97gを得た。1H-NMR（400MHz，D2O）、δppm 6.72-6.77（2H， d，J＝8.0Hz）、6.62-6.68（2H，d，J＝8.0Hz）、4.81-4.86（2H，d，J＝4.8Hz）、3.90-4.00（4H，m）、3.66-3.74（2H，m）、3.59-3.66（2H，m）、3.45-3.59（12H，m）、3.24-3.34（2H，d，J＝19.6Hz）、3.16-3.24（2H，m）、3.03-3.14（4H，m）、2.86-2.97（2H，m）、2.72-2.84（2H，m）、2.35-2.47（2H，m）、1.68-1.79（2H，m）、1.47-1.68（6H，m）、1.16-1.30（2H，m）、0.91-1.04（2H，m）、0.67-0.77（2H，m）、0.57-0.67（2H，m）、0.28-0.43（4H，m）。LC/MS（ESI）m/z 846.0[M+H]+および423.8[M+2H]++。
Nal025：アルゴンガス保護下、反応瓶に0.73gの水素化ナトリウムと20mlのジメチルホルムアミドを加え、懸濁液となるように撹拌した。続いて、2.92gの3-MOM-6-α-ナルトレキソールのテトラヒドロフラン溶液12mlと1.38gのPEG6-（OMs）2のテトラヒドロフラン溶液12mlを順に加えた。60℃まで昇温し、撹拌しながら反応させ、TLCにより反応の進行状況をチェックした。反応終了後、水を加えて過剰の水素化ナトリウムをクエンチした。反応液をロータリーエバポレーターで濃縮し、残留物をジクロロメタンと水との系で抽出し、有機層を分離し。有機層を5％の炭酸ナトリウム水溶液で5回洗浄し、有機層を分離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。乾燥剤を除去した後、ロータリーエバポレーターで濃縮して、残留物を4.18g得た。次いで、かかる残留物を15mlの塩酸（4.0M）で処理し、室温で一晩撹拌した。反応終了後、4Mのアンモニア水で反応液をpH3〜5に調整した。最後に、クロマトグラフィーにより精製し、生成物であるPEG6-（6-α-ナルトレキソール）2-エーテルを得た。かかる生成物を20mlのエタノールで溶解し、その後、3.0mlの塩化水素エタノール溶液（1.0M）を加え、均一に混合し後、ロータリーエバポレーターで濃縮して残留物1.1gを得た。かかる残留物を20mlの水で溶解し、凍結乾燥し、Nal025の二塩酸塩である、白に近い粉末固体0.71gを得た。1H-NMR（400MHz，D2O）、δppm6.72-6.77（2H，d，J＝8.0Hz）、6.62-6.68（2H，d，J＝8.0Hz）、4.81-4.86（2H，d，J＝4.8Hz）、3.90-4.00（4H，m）、3.66-3.74（2H，m）、3.59-3.66（2H，m）、3.45-3.59（20H，m）、3.24-3.34（2H，d，J＝20.0Hz）、3.16-3.24（2H，m）、3.03-3.14（4H，m）、2.86-2.97（2H，m）、2.72-2.84（2H，m）、2.35-2.47（2H，m）、1.68-1.79（2H，m）、1.47-1.68（6H，m）、1.16-1.30（2H，m）、0.91-1.04（2H，m）、0.67-0.77（2H，m）、0.57-0.67（2H，m）、0.28-0.43（4H，m）。LC/MS（ESI）m/z 934.1[M+H]+および467.8[M+2H]++。
【００３７】
Nal029：アルゴンガス保護下、反応瓶に0.92gの水素化ナトリウムと20mlのジメチルホルムアミドを加え、懸濁液となるように撹拌した。続いて、2.99gの3-MOM-6-α-ナルトレキソールのテトラヒドロフラン溶液12mlと1.74gのPEG8-（OMs）2のテトラヒドロフラン溶液12mlを順に加えた。60℃まで昇温し、撹拌しながら反応させ、TLCにより反応の進行状況をチェックした。反応終了後、水を加えて過剰の水素化ナトリウムをクエンチした。反応液をロータリーエバポレーターで濃縮し、残留物をジクロロメタンと水との系で抽出し、有機層を分離し。有機層を5％の炭酸ナトリウム水溶液で5回洗浄し、有機層を分離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。乾燥剤を除去した後、ロータリーエバポレーターで濃縮して、残存物残留物を4.07g得た。次いで、かかる残留物を15mlの塩酸（4.0M）で処理し、室温で一晩撹拌した。反応終了後、4Mのアンモニア水で反応液をpH3〜5に調整した。最後に、クロマトグラフィーにより精製し、生成物であるPEG8-（6-α-ナルトレキソール）2-エーテルを得た。かかる生成物を20mlのエタノールで溶解し、その後、2.5mlの塩化水素エタノール溶液（1.0M）を加え、均一に混合し後、ロータリーエバポレーターで濃縮して残留物1.0gを得た。かかる残留物を20mlの水で溶解し、凍結乾燥し、Nal029の二塩酸塩である、白に近い粉末固体0.84gを得た。1H-NMR（400MHz，D2O）、δppm6.72-6.77（2H，d，J＝8.0Hz）、6.62-6.68（2H，d，J＝8.0Hz）、4.81-4.88（2H，d，J＝4.8Hz）、3.90-4.02（4H，m）、3.66-3.74（2H，m）、3.44-3.66（30H，m）、3.24-3.34（2H，d，J＝20.0Hz）、3.16-3.24（2H，m）、3.03-3.14（4H，m）、2.86-2.97（2H，m）、2.72-2.84（2H，m）、2.35-2.47（2H，m）、1.68-1.79（2H，m）、1.47-1.68（6H，m）、1.16-1.30（2H，m）、0.91-1.04（2H，m）、0.67-0.77（2H，m）、0.57-0.67（2H，m）、0.28-0.43（4H，m）。LC/MS（ESI）m/z 1022.2[M+H]+および511.9[M+2H]++。
Nal033：アルゴンガス保護下、反応瓶に0.92gの水素化ナトリウムと20mlのジメチルホルムアミドを加え、懸濁液となるように撹拌した。続いて、3.00gの3-MOM-6-α-ナルトレキソールのテトラヒドロフラン溶液12mlと2.00gのPEG10-（OMs）2のテトラヒドロフラン溶液12mlを順に加えた。60℃まで昇温し、撹拌しながら反応させ、TLCにより反応の進行状況をチェックした。反応終了後、水を加えて過剰の水素化ナトリウムをクエンチした。反応液をロータリーエバポレーターで濃縮し、残留物をジクロロメタンと水との系で抽出し、有機層を分離し。有機層を5％の炭酸ナトリウム水溶液で5回洗浄し、有機層を分離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。乾燥剤を除去した後、ロータリーエバポレーターで濃縮して、残留物を4.18g得た。次いで、かかる残留物を15mlの塩酸（4.0M）で処理し、室温で一晩撹拌した。反応終了後、4Mのアンモニア水で反応液をpH3〜5に調整した。最後に、クロマトグラフィーにより精製し、生成物であるPEG10-（6-α-ナルトレキソール）2-エーテルを得た。かかる生成物を20mlのエタノールで溶解し、その後、2.5mlの塩化水素エタノール溶液（1.0M）を加え、均一に混合し後、ロータリーエバポレーターで濃縮して残留物を1.3g得た。かかる残留物を20mlの水で溶解し、凍結乾燥し、Nal033の二塩酸塩である、白に近い粉末固体1.00gを得た。1H-NMR（400MHz，D2O）、δppm6.72-6.77（2H，d，J＝8.0Hz）、6.62-6.68（2H，d，J＝8.0Hz）、4.81-4.88（2H，d，J＝4.8Hz）、3.90-4.02（4H，m）、3.67-3.74（2H，m）、3.44-3.67（38H，m）、3.24-3.34（2H，d，J＝20.0Hz）、3.16-3.24（2H，m）、3.03-3.14（4H，m）、2.86-2.97（2H，m）、2.72-2.84（2H，m）、2.35-2.47（2H，m）、1.68-1.79（2H，m）、1.47-1.68（6H，m）、1.16-1.30（2H，m）、0.91-1.04（2H，m）、0.67-0.77（2H，m）、0.57-0.67（2H，m）、0.28-0.43（4H，m）。LC/MS（ESI）m/z 1110.2[M+H]+および555.9[M+2H]++。
【００３８】
Nal022：アルゴンガス保護下、反応瓶に1.05gの水素化ナトリウムと20mlのジメチルホルムアミドを加え、懸濁液となるように撹拌した。続いて、2.70gの3-MOM-6-β-ナルトレキソールのテトラヒドロフラン溶液12mlと1.25gのPEG4-（OMs）2のテトラヒドロフラン溶液12mlを順に加えた。60℃まで昇温し、撹拌しながら反応させ、TLCにより反応の進行状況をチェックした。反応終了後、水を加えて過剰の水素化ナトリウムをクエンチした。反応液をロータリーエバポレーターで濃縮し、残留物をジクロロメタンと水との系で抽出し、有機層を分離し。有機層を5％の炭酸ナトリウム水溶液で5回洗浄し、有機層を分離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。乾燥剤を除去した後ロータリーエバポレーターで濃縮して、残留物を3.05g得た。次いで、かかる残留物を15mlの塩酸（4.0M）で処理し、室温で一晩撹拌した。反応終了後、4Mのアンモニア水で反応液をpH3〜5に調整した。最後に、クロマトグラフィーにより精製し、生成物であるPEG4-（6-β-ナルトレキソール）2-エーテルを得た。かかる生成物を20mlのエタノールで溶解し、その後、2.5mlの塩化水素エタノール溶液（1.0M）を加え、均一に混合し後、ロータリーエバポレーターで濃縮して残留物0.96gを得た。かかる残留物を20mlの水で溶解し、凍結乾燥し、Nal022の二塩酸塩である、白に近い粉末固体0.56gを得た。1H-NMR（400MHz，D2O）、δppm 6.69-6.74（2H，d，J＝8.0Hz）、6.63-6.69（2H，d，J＝8.0Hz）、4.49-4.56（2H，d，J＝6.4Hz）、3.90-3.96（2H，d，J＝5.6Hz）、3.64-3.71（4H，m）、3.48-3.63（12H，m）、3.18-3.32（6H，m）、2.99-3.11（4H，m）、2.78-2.88（2H，m）、2.54-2.68（2H，m）、2.28-2.41（2H，m）、1.73-1.85（2H，m）、1.59-1.70（4H，m）、1.46-1.59（2H，m）、1.30-1.44（2H，m）、0.88-1.02（2H，m）、0.64-0.75（2H，m）、0.54-0.64（2H，m）、0.25-0.41（4H，m）。LC/MS（ESI）m/z 845.8[M+H]+および423.9[M+2H]++。
Nal026：アルゴンガス保護下、反応瓶に1.10gの水素化ナトリウムと20mlのジメチルホルムアミドを加え、懸濁液となるように撹拌した。続いて、2.80gの3-MOM-6-β-ナルトレキソールのテトラヒドロフラン溶液12mlと1.36gのPEG6-（OMs）2のテトラヒドロフラン溶液12mlを順に加えた。60℃まで昇温し、撹拌しながら反応させ、TLCにより反応の進行状況をチェックした。反応終了後、水を加えて過剰の水素化ナトリウムをクエンチした。反応液をロータリーエバポレーターで濃縮し、残留物をジクロロメタンと水との系で抽出し、有機層を分離し。有機層を5％の炭酸ナトリウム水溶液で5回洗浄し、有機層を分離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。乾燥剤を除去した後、ロータリーエバポレーターで濃縮して、残留物3.60gを得た。次いで、かかる残留物を15mlの塩酸（4.0M）で処理し、室温で一晩撹拌した。反応終了後、4Mのアンモニア水で反応液をpH3〜5に調整した。最後に、クロマトグラフィーにより精製し、生成物であるPEG6-（6-β-ナルトレキソール）2-エーテルを得た。上記生成物を20mlのエタノールで溶解し、その後、2.5mlの塩化水素エタノール溶液（1.0M）を加え、均一に混合し後、ロータリーエバポレーターで濃縮して残留物1.05gを得た。かかる残留物を20mlの水で溶解し、凍結乾燥し、Nal026の二塩酸塩である、白に近い粉末固体0.61gを得た。1H-NMR（400MHz，D2O）、δppm 6.73-6.78（2H，d，J＝8.4Hz）、6.67-6.72（2H，d，J＝8.0Hz）、4.52-4.58（2H，d，J＝6.4Hz）、3.92-3.99（2H，d，J＝6.0Hz）、3.66-3.74（4H，m）、3.50-3.65（20H，m）、3.20-3.34（6H，m）、3.02-3.15（4H，m）、2.81-2.91（2H，m）、2.57-2.71（2H，m）、2.31-2.45（2H，m）、1.76-1.88（2H，m）、1.61-1.73（4H，m）、1.51-1.62（2H，m）、1.34-1.48（2H，m）、0.91-1.04（2H，m）、0.67-0.77（2H，m）、0.57-0.67（2H，m）、0.28-0.43（4H， m）。LC/MS（ESI）m/z 934.1[M+H]+および467.8[M+2H]++。
【００３９】
Nal030：アルゴンガス保護下、反応瓶に1.10gの水素化ナトリウムと20mlのジメチルホルムアミドを加え、懸濁液となるように撹拌した。続いて、2.85gの3-MOM-6-β-ナルトレキソールのテトラヒドロフラン溶液12mlと1.45gのPEG8-（OMs）2のテトラヒドロフラン溶液12mlを順に加えた。60℃まで昇温し、撹拌しながら反応させ、TLCにより反応の進行状況をチェックした。反応終了後、水を加えて過剰の水素化ナトリウムをクエンチした。反応液をロータリーエバポレーターで濃縮し、残留物をジクロロメタンと水との系で抽出し、有機層を分離し。有機層を5％の炭酸ナトリウム水溶液で5回洗浄し、有機層を分離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。乾燥剤を除去した後、ロータリーエバポレーターで濃縮して、残留物3.80gを得た。次いで、かかる残留物を15mlの塩酸（4.0M）で処理し、室温で一晩撹拌した。反応終了後、4Mのアンモニア水で反応液をpH3〜5に調整した。最後に、クロマトグラフィーにより精製し、生成物であるPEG8-（6-β-ナルトレキソール）2-エーテルを得た。かかる生成物を20mlのエタノールで溶解し、その後、2.5mlの塩化水素エタノール溶液（1.0M）を加え、均一に混合し後、ロータリーエバポレーターで濃縮して残留物1.0gを得た。かかる残留物を20mlの水で溶解し、凍結乾燥し、Nal030の二塩酸塩である、白に近い粉末固体0.51gを得た。1H-NMR（400MHz，D2O）、δppm6.71-6.77（2H，d，J＝8.0Hz）、6.65-6.71（2H，d，J＝8.0Hz）、4.50-4.56（2H，d，J＝6.4Hz）、3.91-3.97（2H，d，J＝6.0Hz）、3.64-3.71（4H，m）、3.48-3.63（28H，m）、3.18-3.32（6H，m）、2.99-3.11（4H，m）、2.78-2.88（2H，m）、2.54-2.68（2H，m）、2.28-2.41（2H，m）、1.73-1.85（2H，m）、1.59-1.70（4H，m）、1.48-1.59（2H，m）、1.32-1.44（2H，m）、0.88-1.02（2H，m）、0.64-0.75（2H，m）、0.54-0.64（2H，m）、0.25-0.41（4H，m）。LC/MS（ESI）m/z 512.0[M+2H]++。
Nal037：アルゴンガス保護下、反応瓶に0.37gの水素化ナトリウムと20mlのジメチルホルムアミドを加え、懸濁液となるように撹拌した。続いて、0.92gの3-MOM-6-α-ナルトレキソールのテトラヒドロフラン溶液12mlと0.823gのmPEG6-OMsのテトラヒドロフラン溶液12mlを順に加えた。60℃まで昇温し、撹拌しながら反応させ、TLCにより反応の進行状況をチェックした。反応終了後、水を加えて過剰の水素化ナトリウムをクエンチした。反応液をロータリーエバポレーターで濃縮し、残留物をジクロロメタンと水との系で抽出し、有機層を分離し。有機層を5％の炭酸ナトリウム水溶液で5回洗浄し、有機層を分離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。乾燥剤を除去した後、ロータリーエバポレーターで濃縮して、残留物1.64gを得た。次いで、かかる残留物を15mlの塩酸（4.0M）で処理し、室温で一晩撹拌した。反応終了後、4Mのアンモニア水で反応液をpH3〜5に調整した。最後に、クロマトグラフィーにより精製し、生成物であるmPEG6-（6-α-ナルトレキソール）エーテルを得た。かかる生成物を20mlのエタノールで溶解し、その後、3.5mlの塩化水素エタノール溶液（1.0M）を加え、均一に混合し後、ロータリーエバポレーターで濃縮して残留物0.65gを得た。かかる残留物を20mlの水で溶解し、凍結乾燥し、Nal037の塩酸塩である、白に近い粉末固体0.42gを得た。1H-NMR（400MHz，D2O）、δppm6.72-6.78（1H，d，J＝8.0Hz）、6.62-6.69（1H，d，J＝8.4Hz）、4.82-4.88（1H，d，J＝4.8Hz）、3.91-4.01（2H，m）、3.67-3.75（1H，m）、3.43-3.67（23H，m）、3.16-3.34（5H，m）、3.03-3.15（2H，m）、2.86-2.97（1H，m）、2.72-2.85（1H，m）、2.35-2.48（1H，m）、1.70-1.82（1H，m）、1.48-1.70（3H，m）、1.20-1.35（1H，m）、0.91-1.04（1H，m）、0.67-0.77（1H，m）、0.57-0.67（1H，m）、0.28-0.43（2H，m）。LC/MS（ESI）m/z 623.1[M+H]+。
【００４０】
Nal041：アルゴンガス保護下、反応瓶に0.44gの水素化ナトリウムと20mlのジメチルホルムアミドを加え、懸濁液となるように撹拌した。続いて、1.00gの3-MOM-6-α-ナルトレキソールのテトラヒドロフラン溶液12mlと1.05gのmPEG8-OMsのテトラヒドロフラン溶液12mlを順に加えた。60℃まで昇温し、撹拌しながら反応させ、TLCにより反応の進行状況をチェックした。反応終了後、水を加えて過剰の水素化ナトリウムをクエンチした。反応液をロータリーエバポレーターで濃縮し、残留物をジクロロメタンと水との系で抽出し、有機層を分離し。有機層を5％の炭酸ナトリウム水溶液で5回洗浄し、有機層を分離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。乾燥剤を除去した後ロータリーエバポレーターで濃縮して、残留物1.76gを得た。次いで、かかる残留物を15mlの塩酸（4.0M）で処理し、室温で一晩撹拌した。反応終了後、4Mのアンモニア水で反応液をpH3〜5に調整した。最後に、クロマトグラフィーにより精製し、生成物であるmPEG8-（6-α-ナルトレキソール）エーテルを得た。かかる生成物を20mlのエタノールで溶解し、その後、3.0mlの塩化水素エタノール溶液（1.0M）を加え、均一に混合し後ロータリーエバポレーターで濃縮して残留物0.95gを得た。かかる残留物を20mlの水で溶解し、凍結乾燥し、Nal041の塩酸塩である、白に近い粉末固体0.67gを得た。1H-NMR（400MHz，D2O）、δppm6.72-6.78（1H，d，J＝8.0Hz）、6.62-6.69（1H，d，J＝8.4Hz）、4.82-4.88（1H，d，J＝4.8Hz）、3.91-4.01（2H，m）、3.67-3.75（1H，m）、3.43-3.67（31H，m）、3.16-3.34（5H，m）、3.03-3.15（2H，m）、2.86-2.97（1H，m）、2.72-2.85（1H，m）、2.35-2.48（1H，m）、1.70-1.82（1H，m）、1.48-1.70（3H，m）、1.20-1.35（1H，m）、0.91-1.04（1H，m）、0.67-0.77（1H，m）、0.57-0.67（1H，m）、0.28-0.43（2H，m）。LC/MS（ESI）m/z 711.1[M+H]+。
Nal038：アルゴンガス保護下、反応瓶に0.55gの水素化ナトリウムと20mlのジメチルホルムアミドを加え、懸濁液となるように撹拌した。続いて、1.20gの3-MOM-6-β-ナルトレキソールのテトラヒドロフラン溶液12mlと1.05gのmPEG6-OMsのテトラヒドロフラン溶液12mlを順に加えた。60℃まで昇温し、撹拌しながら反応させ、TLCにより反応の進行状況をチェックした。反応終了後、水を加えて過剰の水素化ナトリウムをクエンチした。反応液をロータリーエバポレーターで濃縮し、残留物をジクロロメタンと水との系で抽出し、有機層を分離し。有機層を5％の炭酸ナトリウム水溶液で5回洗浄し、有機層を分離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。乾燥剤を除去した後ロータリーエバポレーターで濃縮して、残留物1.90gを得た。次いで、かかる残留物を15mlの塩酸（4.0M）で処理し、室温で一晩撹拌した。反応終了後、4Mのアンモニア水で反応液をpH3〜5に調整した。最後に、クロマトグラフィーにより精製し、生成物であるmPEG6-（6-β-ナルトレキソール）エーテルを得た。かかる生成物を20mlのエタノールで溶解し、その後、2.5mlの塩化水素エタノール溶液（1.0M）を加え、均一に混合し後、ロータリーエバポレーターで濃縮して残留物1.0gを得た。かかる残留物を20mlの水で溶解し、凍結乾燥し、Nal038の塩酸塩である、白に近い粉末固体0.71gを得た。1H-NMR（400MHz，D2O）、δppm6.75-6.80（1H，d，J＝8.0Hz）、6.68-6.75（1H，d，J＝8.4Hz）、4.52-4.60（1H，d，J＝6.4Hz）、3.92-4.01（1H，d，J＝6.0Hz）、3.68-3.76（2H，t）、3.54-3.67（20H，m）、3.47-3.54（2H，m）、3.20-3.36（6H，m）、3.02-3.17（2H，m）、2.81-2.91（1H，m）、2.59-2.73（1H，m）、2.32-2.46（1H，m）、1.78-1.89（1H，m）、1.52-1.74（3H，m）、1.36-1.50（1H，m）、0.91-1.04（1H，m）、0.67-0.77（1H，m）、0.57-0.67（1H，m）、0.28-0.43（2H，m）。LC/MS（ESI）m/z 623.1[M+H]+。
【００４１】
Nal045：アルゴンガス保護下、反応瓶に0.60gの水素化ナトリウムと20mlのジメチルホルムアミドを加え、懸濁液となるように撹拌した。続いて、1.40gの3-MOM-6-α-ナロキソールのテトラヒドロフラン溶液12mlと1.38gのmPEG6-OMsのテトラヒドロフラン溶液12mlを順に加えた。60℃まで昇温し、撹拌しながら反応させ、TLCにより反応の進行状況をチェックした。反応終了後、水を加えて過剰の水素化ナトリウムをクエンチした。反応液をロータリーエバポレーターで濃縮し、残留物をジクロロメタンと水との系で抽出し、有機層を分離し。有機層を5％の炭酸ナトリウム水溶液で5回洗浄し、有機層を分離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。乾燥剤を除去した後ロータリーエバポレーターで濃縮して、残留物2.47gを得た。次いで、かかる残留物を15mlの塩酸（4.0M）で処理し、室温で一晩撹拌した。反応終了後、4Mのアンモニア水で反応液をpH3〜5に調整した。最後に、クロマトグラフィーにより精製し、生成物であるmPEG6-（6-α-ナロキソール）エーテルを得た。かかる生成物を20mlのエタノールで溶解し、その後、2.5mlの塩化水素エタノール溶液（1.0M）を加え、均一に混合し後、ロータリーエバポレーターで濃縮して残留物1.5gを得た。かかる残留物を20mlの水で溶解し、凍結乾燥し、Nal045的塩酸塩である白に近い粉末固体1.11gを得た。1H-NMR（400MHz，D2O）、δppm6.72-6.79（1H，d，J＝8.4Hz）、6.62-6.70（1H，d，J＝8.0Hz）、5.72-5.88（1H，m）、5.48-5.60（2H，t）、4.81-4.88（1H，d，J＝5.2Hz）、3.89-3.99（1H，m）、3.40-3.85（27H，m）、3.27-3.37（1H，d，J＝20.0Hz）、3.28（3H，s）、3.10-3.21（1H，m）、2.95-3.08（1H，m）、2.76-2.90（1H，m）、2.34-2.48（1H，m）、1.62-1.80（2H，m）、1.45-1.62（2H，m）、1.21-1.35（1H，m）。LC/MS（ESI）m/z 609.1[M+H]+。
Nal049：アルゴンガス保護下、反応瓶に0.60gの水素化ナトリウム及び20mlのジメチルホルムアミドを加え、懸濁液となるように撹拌した。続いて、1.50gの3-MOM-6-α-ナロキソールのテトラヒドロフラン溶液12ml及び1.81gのmPEG8-OMsのテトラヒドロフラン溶液12mlを順に加えた。60℃まで昇温し、撹拌しながら反応させ、TLCにより反応の進行状況をチェックした。反応終了後、水を加えて過剰の水素化ナトリウムをクエンチした。反応液をロータリーエバポレーターで濃縮し、残留物をジクロロメタンと水との系で抽出し、有機層を分離し。有機層を5％の炭酸ナトリウム水溶液で5回洗浄し、有機層を分離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。乾燥剤を除去した後、ロータリーエバポレーターで濃縮して、残留物2.93gを得た。次いで、かかる残留物を15mlの塩酸（4.0M）で処理し、室温で一晩撹拌した。反応終了後、4Mのアンモニア水で反応液をpH3〜5に調整した。最後に、クロマトグラフィーにより精製し、生成物であるmPEG8-（6-α-ナロキソール）エーテルを得た。かかる生成物を20mlのエタノールで溶解し、その後、塩化水素エタノール溶液（1.0M）でpH1〜2に調整し、均一に混合し後、ロータリーエバポレーターで濃縮して残留物1.6gを得た。かかる残留物を20mlの水で溶解し、凍結乾燥し、Nal049の塩酸塩である、白に近い粉末固体1.33gを得た。1H-NMR（400MHz，D2O）、δppm6.72-6.79（1H，d，J＝8.4Hz）、6.62-6.70（1H，d，J＝8.4Hz）、5.72-5.88（1H，m）、5.48-5.60（2H，t）、4.81-4.88（1H，d，J＝5.2Hz）、3.89-3.99（1H，m）、3.40-3.85（35H，m）、3.27-3.37（1H，d，J＝20.0Hz）、3.28（3H，s）、3.10-3.21（1H，m）、2.95-3.08（1H，m）、2.76-2.90（1H，m）、2.34-2.48（1H，m）、1.62-1.80（2H，m）、1.45-1.62（2H，m）、1.21-1.35（1H，m）。LC/MS（ESI）m/z 697.1[M+H]+。
【００４２】
Nal046：アルゴンガス保護下、反応瓶に0.55gの水素化ナトリウムと20mlのジメチルホルムアミドを加え、懸濁液となるように撹拌した。続いて、1.26gの3-MOM-6-β-ナロキソールのテトラヒドロフラン溶液12mlと1.24gのmPEG6-OMsのテトラヒドロフラン溶液12mlを順に加えた。60℃まで昇温し、撹拌しながら反応させ、TLCにより反応の進行状況をチェックした。反応終了後、水を加えて過剰の水素化ナトリウムをクエンチした。反応液をロータリーエバポレーターで濃縮し、残留物をジクロロメタンと水との系で抽出し、有機層を分離し。有機層を5％の炭酸ナトリウム水溶液で5回洗浄し、有機層を分離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。乾燥剤を除去した後、ロータリーエバポレーターで濃縮して、残留物2.08gを得た。次いで、かかる残留物を15mlの塩酸（4.0M）で処理し、室温で一晩撹拌した。反応終了後、4Mのアンモニア水で反応液をpH3〜5に調整した。最後に、クロマトグラフィーにより精製し、生成物であるmPEG6-（6-β-ナロキソール）エーテルを得た。かかる生成物を20mlのエタノールで溶解し、その後、2.5mlの塩化水素エタノール溶液（1.0M）を加え、均一に混合し後、ロータリーエバポレーターで濃縮して残留物1.1gを得た。かかる残留物を20mlの水で溶解し、凍結乾燥し、Nal046の塩酸塩である、白に近い粉末固体0.85gを得た。1H-NMR（400MHz，D2O）、δppm6.75-6.81（1H，d，J＝8.0Hz）、6.69-6.75（1H，d，J＝8.4Hz）、5.73-5.88（1H，m）、5.49-5.59（2H，m）、4.52-4.59（1H，d，J＝6.8Hz）、3.45-3.85（27H，m）、3.23-3.37（5H，m）、3.10-3.20（1H，m）、2.96-3.08（1H，m）、2.62-2.76（1H，m）、2.32-2.45（1H，m）、1.76-1.88（1H，m）、1.54-1.72（3H，m）、1.33-1.47（1H，m）。LC/MS（ESI）m/z 609.2[M+H]+。
【００４３】
実施例6：in vitro活性測定
OPRM1（Mμオピオイド受容体遺伝子）受容体を安定に発現するCHO-K1/Gα15/OPRM1細胞（南京金斯瑞生物科技有限公司）を10cmのシャーレで培養し、37℃/5％CO2のインキュベーターで培養し、細胞が80％〜85％コンフルエントになったら、消化処理を行い、集めた細胞懸濁液を15，000細胞/ウェルの密度で384-ウェルプレートに播種し、その後、37℃/5％CO2インキュベーターに入れ、少なくとも18時間培養し続けた後、実験に適用した。
測定前に、測定する複合体をHBSS buffer（20mMのHEPESを含有する）で希釈し、測定濃度の5倍相当する濃度の溶液を調製した。複合体の最終測定濃度は、0.128nM、0.64nM、3.2nM、1.6nM、80nM、400nM、2000nM、10000nM（ダブル）、対応するDMSO対照の濃度は、0.1％である。
作動薬測定の準備手段は、細胞を384-ウェルプレートに播種し、ウェルごとに15，000細胞を含有する20μlの細胞懸濁液を播種し、その後、37℃/5％CO2インキュベーターに入れて培養し続け、18時間後、細胞を取り出し、ウェルごとに20μの染料を加え、次いで、セルプレートを37℃/5％CO2インキュベーターに入れて1時間インキュベートし、最後に、室温で15分間平衡化した。測定時に、10μlの5x測定濃度の作動薬を加えてRFU値を測定した。
抑制剤測定の準備手段は、細胞を384-ウェルプレートに播種し、ウェルごとに15，000細胞を含有する20μlの細胞懸濁液を播種し、その後、37℃/5％CO2インキュベーターに入れて培養し続け、18時間後、細胞を取り出した。抑制剤の測定時に、20μlの染料を加え、さらに10μlの調製された複合体溶液を追加し、その後、セルプレートを37℃/5％CO2インキュベーターに入れて1時間インキュベートし、最後に、室温で15分間平衡した。測定時に、12.5μlの5xEC80濃度の陽性作動薬を加えてRFU値を測定した。
複合体溶液（5x測定濃度）をセットした384-ウェルプレート、セルプレート、及びチップボックスをFLIPR（Molecule Devices）に入れ、作動薬測定プログラムを実行し、機器の全測定時間は、120秒であり、21秒目の時点で自動的に10μlの作動薬をセルプレートに加えた。5x EC80濃度の陽性作動薬をセットした384-ウェルプレート、セルプレート、及びチップボックスをFLIPRTETRA（Molecule Devices）に入れ、拮抗薬測定プログラムを実行し、機器の全測定時間は、120秒であり、21秒目の時点で自動的に12.5μlの陽性作動薬をセルプレートに加えた。13個の複合体のOPRM1受容体に対する作用を表4に示した。
【００４４】
【表４】
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上表のデータにより、2個のナルトレキソンとPEGとの複合体（即ち、Nal053、Nal021、Nal025、Nal026、Nal029、及びNal033）はナロキソン-PEG複合体、又はモノナルトレキソン-PEG複合体よりも良いIC50を示すが、中でもポリエチレングリコールの繰り返し単位の数は特定値（例えば、6、8、10）であると、本発明の複合体はより良いIC50を意外に示したことが明らかになった。
【００４５】
実施例7：血液脳関門の実験研究
マウスのホットプレート式鎮痛実験により複合体実験群が血液脳関門を通過できるか否かという実験研究を完成した。モルヒネは、鎮痛作用があり、測定する複合体はモルヒネの鎮痛作用を拮抗できれば、それが血液脳関門を通過できることを示す。
6個の複合体であるNal021、Nal029、Nal045、Nal037、Nal041、Nal049は、順にマウスのホットプレート式鎮痛実験を4回行った。毎回実験にマウス（昭衍（蘇州）新薬研究中心有限公司）を無作為に4群に分け、1群あたり8匹とした。中でも、1群は空白対照群であり、1群はモルヒネ対照群であり、他の2群は、まず、モルヒネを胃内投与し、その後、それぞれ低用量と高用量の複合体を皮下注射した。投与前にマウスを（55±0.1）℃のホットプレートにセットし、直ちに時間を計り、ホットプレートに置いた時から第一回に後足を舐めるまでの時間を記録し、得られた時間は、熱刺激の痛みによる反応時間（即ち、痛み閾値であり、単位は、秒/sである。）である。60秒で後足を舐めない場合には、鎮痛100％とし、時間が長すぎて足に火傷をしないように、時間が60秒を超えると、60秒とする。投与後60分間で再度マウスを（55±0.1）℃のホットプレートに置き、熱刺激の痛みによる反応時間を記録した。実験結果は下表に示した。空白対照群の痛み閾値は投与前後で有意差が認められなく（P>0.05）、モルヒネ対照群の痛み閾値は投与前後で有意差があり（P<0.01）、Nal037とNal041との高用量群の痛み閾値は投与前後で有意差が認められなく（P>0.05）、他の各投与群の投与前後の痛み閾値は有意差がある（P<0.05）ことが明らかになる。これから分かるように、複合体であるNal037とNal041は、モルヒネの鎮痛作用を拮抗し、血液脳関門を通過することができる。Nal021、Nal029、Nal045、及びNal049は血液脳関門を通過することができない。投与前後の痛み閾値の大きさを比較して、下式により痛み閾値上昇の百分率を計算することにより、薬物のモルヒネの鎮痛作用に対する拮抗作用を判定した。
痛み閾値上昇の百分率＝[（投与後の熱刺激による痛み閾値の平均値−投与前の痛み閾値の平均値）/投与前の痛み閾値の平均値]×100％
【００４６】
【表５】
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【表６】
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【表７】
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【表８】
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【表９】
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【００４７】
実施例8：便秘改善の実験研究
ロペラミド塩酸塩の下痢止めの効果を拮抗する実験によりこの便秘改善の研究実験を完成した。具体的な実験過程は、マウスを無作為に群分けをし、1群あたり8匹とした。中でも、1群は0.5mLのヒマシ油を胃内投与し、1群は2mg/kgのロペラミド塩酸塩及び0.5mLのヒマシ油を胃内投与し、他の各複合物の実験群は、それぞれ、まず、測定する複合体Nal021（300nmol/kg）、Nal029（300nmol/kg）、Nal033（300nmol/kg）、Nal045（600nmol/kg）を胃内投与し、また、2mg/kgのロペラミド塩酸塩及び0.5mLのヒマシ油を胃内投与した。投与後6時間以内のマウス累積下痢回数を観察し、泥状便の点数をカウントして下痢の状況を確定した。結果により、ヒマシ油の対照群は、ロペラミド塩酸塩+ヒマシ油の対照群よりも投与後6時間以内の下痢便の合計点数がほぼ倍増したことが示され、下痢モデルが有效であることを示した。Nal029は、投与後6時間以内の下痢便の合計点数が比較的に多く、ロペラミド塩酸塩の下痢止めの効果に対する拮抗作用が強く、便秘改善の薬効がよいことを示した。具体的なデータは表10に示した。
【００４８】
【表１０】
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【００４９】
実施例9：複合体Nal029による便秘改善の薬力学的な実験研究
マウスを無作為に群分けをし、1群あたり8匹とした。中でも、1群は0.5mLのヒマシ油を胃内投与し、1群は2mg/kgのロペラミド塩酸塩及び0.5mLのヒマシ油を胃内投与し、他の各群は、それぞれ、まず、異なる用量の複合体Nal029を胃内投与し、また、2mg/kgのロペラミド塩酸塩及び0.5mLのヒマシ油を胃内投与した。
実験結果から分かるように、模型対照群と比較して、複合体Nal029は、ロペラミド塩酸塩の下痢止めの効果に有意に拮抗することができ、薬効が同等の用量のナルトレキソンよりも優れ、且つある用量依存性があり、EC50が約0.086mg/kgである。詳しい結果は表11、図1に示した。
【００５０】
【表１１】
2019510742.tif 000026
【００５１】
上記の説明は好ましい実施形態だけであり、単なる例示として、本発明を実施するために必要な特徴の組み合わせを限定するものではない。提供されているタイトルは、本発明の様々な実施形態を限定することを意味するものではない。
本出願で言及された全ての刊行物・特許は、参照により本明細書に組み込まれる。本発明の範囲および精神から逸脱することなく、本発明で述べた方法および組成物の様々な修飾及び変更が当業者にとって明らかである。本発明を具体的な好ましい実施形態で述べたが、保護を要求する発明は、そのような特定の実施形態に不適切に限定されるべきではないことが理解される。実際に、関連分野の当業者にとっては自明である、本発明に記載される態様を実施するための様々な変更は、添付の特許請求の範囲に含まれることが意図されている。
【図１】
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【国際調査報告】
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