(57)【要約】  アデノ随伴ウイルスの液体および凍結乾燥医薬組成物をここに提供する。例示的態様では、医薬組成物は、約５ｍＭ〜約２５ｍＭのＬ−ヒスチジン、約０ｍＭ〜約１５０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．００１％（ｗ／ｖ）〜約０．０１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、および約１％〜約１０％（ｗ／ｖ）のショ糖、トレハロースまたはそれらの組合せ、ならびにＡＡＶを含む。例示的態様では、医薬組成物は、グリシンまたはマンニトールをさらに含む。ＡＡＶを含む医薬組成物を調製する方法、対象において出血性疾患を治療する方法、およびＡＡＶ組成物を保管する方法も提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）；ならびに
（ｉ）約５ｍＭ〜約２５ｍＭの緩衝剤；
（ｉｉ）約５０ｍＭ〜約１５０ｍＭの薬学的に許容される塩；
（ｉｉｉ）約０．００１％（ｗ／ｖ）〜約０．０１％（ｗ／ｖ）の非イオン性界面活性剤；および
（ｉｖ）約１％〜約１０％（ｗ／ｖ）の糖、糖アルコールまたはそれらの組合せ
を含む、医薬組成物。
【請求項２】
アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）；ならびに
（ｉ）約５ｍＭ〜約２５ｍＭの緩衝剤；
（ｉｉ）約１００ｍＭ未満の薬学的に許容される塩；
（ｉｉｉ）約０．００１％（ｗ／ｖ）〜約０．０１％（ｗ／ｖ）の非イオン性界面活性剤；および
（ｉｖ）約１％〜約１０％（ｗ／ｖ）の糖、糖アルコールまたはそれらの組合せ
を含む、医薬組成物。
【請求項３】
約６．９〜約７．７のｐＨ、任意選択で約７．０または約７．５のｐＨを有する、請求項１または２に記載の医薬組成物。
【請求項４】
前記緩衝剤がＬ−ヒスチジンである、請求項１〜３のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項５】
約５ｍＭ〜約２５ｍＭまたは約１０ｍＭ〜約２０ｍＭのＬ−ヒスチジンを含む、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項６】
前記薬学的に許容される塩が、ナトリウム塩、アンモニウム塩、またはカリウム塩である、請求項１〜５のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項７】
約５０ｍＭ〜約１２０ｍＭの塩化ナトリウムを含む、請求項６に記載の医薬組成物。
【請求項８】
約０ｍＭ〜約１００ｍＭ、約０ｍＭ〜約６０ｍＭ、３０ｍＭ〜約１００ｍＭ、３０ｍＭ〜約８０ｍＭ、または３０ｍＭ〜約６０ｍＭの塩化ナトリウムを含む、請求項６または７に記載の医薬組成物。
【請求項９】
約６０ｍＭ〜約１００ｍＭまたは約６０ｍＭ〜約８０ｍＭの塩化ナトリウムを含む、請求項６〜８のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
前記非イオン性界面活性剤がＰＳ８０である、請求項１〜９のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
約０．００２５％〜約０．００７５％（ｗ／ｖ）のＰＳ８０を含む、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
前記糖が、ショ糖、トレハロースまたはそれらの組合せである、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
約１％（ｗ／ｖ）〜約５％（ｗ／ｖ）のショ糖、トレハロースまたはそれらの組合せを含む、請求項１２に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
トレハロースはトレハロース二水和物である、請求項１２または１３に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
グリシンをさらに含む、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
約３５ｍＭ〜約６５ｍＭのグリシンを含む、請求項１５に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
マンニトールをさらに含む、請求項１〜１６のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
約８０ｍＭ〜約１２０ｍＭのマンニトールを含む、請求項１７に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
デキストランを含まない、請求項１〜１８のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項２０】
グリシンまたはマンニトールを含む、請求項１〜１９のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項２１】
ＰＳ８０がＳｕｐｅｒ  Ｒｅｆｉｎｅｄ（商標）ＰＳ８０である、請求項１０〜２０のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項２２】
アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）、ならびに
（ｉ）約２０ｍＭのＬ−ヒスチジン、
（ｉｉ）約７０ｍＭの塩化ナトリウム、
（ｉｉｉ）約０．００５％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、および
（ｉｖ）約５％（ｗ／ｖ）のショ糖
を含む、医薬組成物。
【請求項２３】
アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）、ならびに
（ｉ）約１０ｍＭのＬ−ヒスチジン、
（ｉｉ）約１００ｍＭの塩化ナトリウム、
（ｉｉｉ）約０．００５％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、
（ｉｖ）約５％（ｗ／ｖ）のトレハロース、および
（ｖ）約５０ｍＭのグリシン
を含む、医薬組成物。
【請求項２４】
アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）、ならびに
（ｉ）約１０ｍＭのＬ−ヒスチジン、
（ｉｉ）約１００ｍＭ未満の塩化ナトリウム、
（ｉｉｉ）約０．００５％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、
（ｉｖ）約５％（ｗ／ｖ）のトレハロース、および
（ｖ）約５０ｍＭのグリシン
を含む、医薬組成物。
【請求項２５】
約８０ｍＭの塩化ナトリウムを含む、請求項１〜２１および２４のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項２６】
約７０ｍＭの塩化ナトリウムを含む、請求項１〜２１および２４のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項２７】
約６０ｍＭの塩化ナトリウムを含む、請求項１〜２１および２４のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項２８】
約５０ｍＭの塩化ナトリウムを含む、請求項１〜２１および２４のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項２９】
約４０ｍＭの塩化ナトリウムを含む、請求項１〜２１および２４のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項３０】
約３０ｍＭの塩化ナトリウムを含む、請求項１〜２１および２４のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項３１】
約０ｍＭの塩化ナトリウムを含む、請求項１〜２１および２４のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項３２】
アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）、ならびに
（ｉ）約２０ｍＭのＬ−ヒスチジン、
（ｉｉ）約６０ｍＭの塩化ナトリウム、
（ｉｉｉ）約０．００５％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、
（ｉｖ）約３５ｍＭのトレハロース、および
（ｖ）約１１０ｍＭのマンニトール
を含む、医薬組成物。
【請求項３３】
ＡＡＶを含む、請求項１〜３２のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項３４】
ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、またはＡＡＶ１０含む、請求項１〜３３のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項３５】
ＡＡＶ８含む、請求項１〜３４のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項３６】
液体である、請求項１〜３５のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項３７】
凍結乾燥されている、請求項１〜３６のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項３８】
単位用量容器中に存在する、請求項１〜３７のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項３９】
前記単位用量容器がバイアルである、請求項３８に記載の医薬組成物。
【請求項４０】
前記バイアルが密封ガラスバイアルである、請求項３９に記載の医薬組成物。
【請求項４１】
アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）を含む医薬組成物を調製する方法であって、請求項１〜４０のいずれか１項に記載の医薬組成物の緩衝剤、薬学的に許容される塩、非イオン性界面活性剤、および糖、糖アルコールまたはそれらの組合せを配合して、ＡＡＶを含む医薬組成物を得ることを含む、方法。
【請求項４２】
アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）を含む医薬組成物を調製する方法であって、約５ｍＭ〜約２５ｍＭのＬ−ヒスチジン、約０ｍＭ〜約１５０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．００１％（ｗ／ｖ）〜約０．０１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、約１％（ｗ／ｖ）〜約１０％（ｗ／ｖ）のショ糖、トレハロースまたはそれらの組合せ、およびＡＡＶを配合して、ＡＡＶを含む医薬組成物を得ることを含む、方法。
【請求項４３】
対象において出血性疾患を治療する方法であって、疾患または疾病を治療するのに有効な量で請求項１〜４０のいずれか１項に記載の医薬組成物を対象に投与することを含む、方法。
【請求項４４】
疾患または疾病が出血性疾患である、請求項４３に記載の方法。
【請求項４５】
ＡＡＶを含む組成物を保管する方法であって、請求項１〜４０のいずれか１項に記載の医薬組成物の緩衝剤、薬学的に許容される塩、非イオン性界面活性剤、および糖、糖アルコールまたはそれらの組合せを配合することを含む、方法。
【請求項４６】
ＡＡＶを含む組成物を保管する方法であって、約５ｍＭ〜約２５ｍＭのＬ−ヒスチジン、約０ｍＭ〜約１５０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．００１％（ｗ／ｖ）〜約０．０１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、約１％〜約１０％（ｗ／ｖ）のショ糖、トレハロースまたはそれらの組合せ、およびＡＡＶを配合することを含む、方法。
【請求項４７】
約５０ｍＭ〜約１５０ｍＭの塩化ナトリウムを含む、請求項４２または４６に記載の方法。
【請求項４８】
約３０ｍＭ〜約１００ｍＭ未満の塩化ナトリウムを含む、請求項４２または４６に記載の方法。
【請求項４９】
約０ｍＭ〜約１００ｍＭ未満の塩化ナトリウムを含む、請求項４２および４６〜４８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５０】
約３０ｍＭの塩化ナトリウムを含む、請求項４２および４６〜４９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５１】
約６０ｍＭの塩化ナトリウムを含む、請求項４２および４６〜４９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５２】
約０ｍＭの塩化ナトリウムを含む、請求項４２および４６〜４９のいずれか１項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【関連出願の相互参照】
【０００１】
本出願は、参照することによってその全てが本願に援用される、２０１６年１１月４日出願の米国仮特許出願第６２／４１７，７５０号に基づく優先権を主張する。
【背景技術】
【０００２】
アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）は、線状一本鎖ＤＮＡゲノムをパッケージングする小型の非エンベロープウイルスである。ＡＡＶによる増殖感染は、例えばアデノウイルスまたはヘルペスウイルスなどのヘルパーウイルスの存在下でのみ生じるため、ＡＡＶはパルボウイルス科、ディペンドウイルス属に属する。ヘルパーウイルスの不在下ですら、ＡＡＶ（血清型２）は宿主ヒトゲノムの染色体１９ｑ１３．４中に組み込まれることにより潜伏を達成することができる。それは、部位特異的組込みができることが分かっている唯一の哺乳動物ＤＮＡウイルスである（非特許文献１）。
【０００３】
ＡＡＶを臨床で安全に使用するために、ＡＡＶはそのゲノム内のいくつかの位置で遺伝子改変されている。例えば、ウイルス複製に必要なＲｅｐ遺伝子、および部位特異的組込みに必要な因子が、多くのウイルスベクターにおいてＡＡＶゲノムから除去されている。この組換えＡＡＶ（ｒＡＡＶ）は、染色体外状態で存在し、ゲノムＤＮＡへの非常に低い組込み効率を有する。従って、ｒＡＡＶが宿主細胞においてランダム変異導入を生じさせる可能性は、全くなくなるとまではいかないとしても、低減される。これら特性および病原性欠如のため、ｒＡＡＶは前臨床および臨床適用の多様な態様で遺伝子治療ベクターとして大きな見込みを示している。新たな血清型および自己相補的ベクターが臨床で試験されている。これら進行中のベクター開発と並行して、高タイター量の高い純度および力価（potency）を有するｒＡＡＶベクターを効率的に生成できるスケーラブルな製造プロセスに対する継続的な取組みに力が入れられている。
【０００４】
ＡＡＶの研究は、ヒトへの投与用のＡＡＶ製剤にも注力されている。そのようなＡＡＶ製剤は、安全で、無菌で、かつ適正製造基準（ＧＭＰ）グレードであることのみならず、これら製剤は、ＡＡＶの長期安定性を示しまたそれを高めて、製造、パッケージ、および保管プロセス中におけるＡＡＶ力価の損失を最小限にすべきであると理解される。製剤はさらに、ＡＡＶがその中にパッケージおよび保管される容器の表面、ならびに製造中に用いられる機械類の表面への吸着を防がなければならない。そのようなＡＡＶ製剤を設計するために多大な努力がなされてきたが、改良されたＡＡＶ製剤への要求が依然としてある。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Daya and Berns, Clinical Microbiology Reviews, pages 583-593 (2008)
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本開示は、上記の満たされていない要求に対処するヒト投与に適合する製剤を提供する。有利なことに、ある実施形態では、製剤はＡＡＶの長期保管に適し、ＡＡＶ力価の損失を最小限にし、さらに好都合に、目に見える粒子形成を防ぎ、かつＡＡＶがその中にパッケージおよび保管される容器の表面、ならびに製造中に用いられる機械類の表面への吸着を防ぐ。例示的態様では、本開示の医薬組成物は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）、ならびに約５ｍＭ〜約２５ｍＭの緩衝剤、約０ｍＭ〜約１５０ｍＭの薬学的に許容される塩、約０．００１％（ｗ／ｖ）〜約０．０１％（ｗ／ｖ）の非イオン性界面活性剤、および約１％（ｗ／ｖ）〜約１０％（ｗ／ｖ）の糖または糖アルコールを含む。ある実施形態では、製剤は、約５０ｍＭ〜約１５０ｍＭの薬学的に許容される塩を含む。ある実施形態では、製剤は、約０ｍＭ〜約１００ｍＭ未満の薬学的に許容される塩を含む。ある実施形態では、製剤は、約３０ｍＭ〜約１００ｍＭ未満の薬学的に許容される塩を含む。ある実施形態では、製剤は、約２０ｍＭ〜約４０ｍＭの薬学的に許容される塩を含む。
【０００７】
例示的態様では、本開示の医薬組成物は、ＡＡＶ（例えばＡＡＶ８）、約５ｍＭ〜約２５ｍＭのＬ−ヒスチジン、約０ｍＭ〜約１５０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．００１％（ｗ／ｖ）〜約０．０１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、および約１％〜約１０％（ｗ／ｖ）のショ糖、トレハロース、マンニトールまたはそれらの組合せを含む。ある実施形態では、製剤は約５０ｍＭ〜約１５０ｍＭの塩化ナトリウムを含む。ある実施形態では、製剤は約０ｍＭ〜約１００ｍＭ未満の塩化ナトリウムを含む。ある実施形態では、製剤は約３０ｍＭ〜約１００ｍＭ未満の塩化ナトリウムを含む。ある実施形態では、製剤は約２０ｍＭ〜約４０ｍＭの塩化ナトリウムを含む。
【０００８】
一部の実施形態では、本発明は液体製剤を提供する。ある実施形態では、製剤は液体製剤から凍結乾燥される。
【０００９】
ある態様では、本開示の凍結乾燥医薬組成物は、ＡＡＶ（例えばＡＡＶ８）、約５ｍＭ〜約２５ｍＭのＬ−ヒスチジン、約０ｍＭ〜約１５０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．００１％（ｗ／ｖ）〜約０．０１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、約３０ｍＭ〜約７０ｍＭのグリシン、および約１％〜約１０％（ｗ／ｖ）のショ糖、トレハロース、マンニトールまたはそれらの組合せを含む液体製剤から凍結乾燥される。ある実施形態では、製剤は約５０ｍＭ〜約１５０ｍＭの塩化ナトリウムを含む。ある実施形態では、製剤は約０ｍＭ〜約１００ｍＭ未満の塩化ナトリウムを含む。ある実施形態では、製剤は約３０ｍＭ〜約１００ｍＭ未満の塩化ナトリウムを含む。ある実施形態では、製剤は約２０ｍＭ〜約４０ｍＭの塩化ナトリウムを含む。
【００１０】
ＡＡＶを含む医薬組成物を調製する方法をここにさらに提供する。例示的態様では、その方法は、約５ｍＭ〜約２５ｍＭのＬ−ヒスチジン、約０ｍＭ〜約１５０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．００１％（ｗ／ｖ）〜約０．０１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、約１％（ｗ／ｖ）〜約１０％（ｗ／ｖ）のショ糖、トレハロース、マンニトールまたはそれらの組合せ、およびＡＡＶを配合し、それによってＡＡＶを含む医薬組成物を得ることを含む。ある実施形態では、製剤は約５０ｍＭ〜約１５０ｍＭの塩化ナトリウムを含む。ある実施形態では、製剤は約０ｍＭ〜約１００ｍＭ未満の塩化ナトリウムを含む。ある実施形態では、製剤は約３０ｍＭ〜約１００ｍＭ未満の塩化ナトリウムを含む。ある実施形態では、製剤は約２０ｍＭ〜約４０ｍＭの塩化ナトリウムを含む。
【００１１】
遺伝子治療により治療可能な疾患に関して対象を治療する方法を本開示により提供する。例示的態様では、その方法は、疾患を治療するのに有効な量で本明細書に記載の医薬組成物を対象に投与することを含む。
【００１２】
さらに、ＡＡＶを含む組成物を保管する方法をここに提供する。例示的態様では、その方法は、約５ｍＭ〜約２５ｍＭのＬ−ヒスチジン、約０ｍＭ〜約１５０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．００１％（ｗ／ｖ）〜約０．０１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、約１％（ｗ／ｖ）〜約１０％（ｗ／ｖ）のショ糖、トレハロース、マンニトールまたはそれらの組合せ、およびＡＡＶを配合することを含む。ある実施形態では、製剤は約５０ｍＭ〜約１５０ｍＭの塩化ナトリウムを含む。ある実施形態では、製剤は約０ｍＭ〜約１００ｍＭ未満の塩化ナトリウムを含む。ある実施形態では、製剤は約３０ｍＭ〜約１００ｍＭ未満の塩化ナトリウムを含む。ある実施形態では、製剤は約２０ｍＭ〜約４０ｍＭの塩化ナトリウムを含む。
【００１３】
ある実施形態では、本開示の医薬組成物は、ＡＡＶ、ならびに約２０ｍＭのＬ−ヒスチジン、約７０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．００５％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、および約５％（ｗ／ｖ）のショ糖を含む。一部の実施形態では、本発明は液体製剤を提供する。ある実施形態では、製剤は液体製剤から凍結乾燥される。
【００１４】
ある実施形態では、本開示の医薬組成物は、ＡＡＶ、ならびに約２０ｍＭのＬ−ヒスチジン、約６０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．００５％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、約３５ｍＭのトレハロース、および約１１０ｍＭのマンニトールを含む。一部の実施形態では、本発明は液体製剤を提供する。ある実施形態では、製剤は液体製剤から凍結乾燥される。
【００１５】
ある実施形態では、本開示の医薬組成物は、ＡＡＶ、ならびに約１０ｍＭのＬ−ヒスチジン、約１００ｍＭの塩化ナトリウム、約０．００５％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、約５％（ｗ／ｖ）のトレハロース、および約５０ｍＭのグリシンを含む。一部の実施形態では、本発明は液体製剤を提供する。ある実施形態では、製剤は液体製剤から凍結乾燥される。
【００１６】
ある実施形態では、本開示の医薬組成物は、ＡＡＶ、ならびに約１０ｍＭのＬ−ヒスチジン、約８０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．００５％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、約５％（ｗ／ｖ）のトレハロース、および約５０ｍＭのグリシンを含む。一部の実施形態では、本発明は液体製剤を提供する。ある実施形態では、製剤は液体製剤から凍結乾燥される。
【００１７】
ある実施形態では、本開示の医薬組成物は、ＡＡＶ、ならびに約１０ｍＭのＬ−ヒスチジン、約７０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．００５％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、約５％（ｗ／ｖ）のトレハロース、および約５０ｍＭのグリシンを含む。一部の実施形態では、本発明は液体製剤を提供する。ある実施形態では、製剤は液体製剤から凍結乾燥される。
【００１８】
ある実施形態では、本開示の医薬組成物は、ＡＡＶ、ならびに約１０ｍＭのＬ−ヒスチジン、約６０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．００５％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、約５％（ｗ／ｖ）のトレハロース、および約５０ｍＭのグリシンを含む。一部の実施形態では、本発明は液体製剤を提供する。ある実施形態では、製剤は液体製剤から凍結乾燥される。
【００１９】
ある実施形態では、本開示の医薬組成物は、ＡＡＶ、ならびに約１０ｍＭのＬ−ヒスチジン、約５０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．００５％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、約５％（ｗ／ｖ）のトレハロース、および約５０ｍＭのグリシンを含む。一部の実施形態では、本発明は液体製剤を提供する。ある実施形態では、製剤は液体製剤から凍結乾燥される。
【００２０】
ある実施形態では、本開示の医薬組成物は、ＡＡＶ、ならびに約１０ｍＭのＬ−ヒスチジン、約４０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．００５％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、約５％（ｗ／ｖ）のトレハロース、および約５０ｍＭのグリシンを含む。一部の実施形態では、本発明は液体製剤を提供する。ある実施形態では、製剤は液体製剤から凍結乾燥される。
【００２１】
ある実施形態では、本開示の医薬組成物は、ＡＡＶ、ならびに約１０ｍＭのＬ−ヒスチジン、約３０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．００５％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、約５％（ｗ／ｖ）のトレハロース、および約５０ｍＭのグリシンを含む。一部の実施形態では、本発明は液体製剤を提供する。ある実施形態では、製剤は液体製剤から凍結乾燥される。
【００２２】
ある実施形態では、本開示の医薬組成物は、ＡＡＶ、ならびに約１０ｍＭのＬ−ヒスチジン、約２０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．００５％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、約５％（ｗ／ｖ）のトレハロース、および約５０ｍＭのグリシンを含む。一部の実施形態では、本発明は液体製剤を提供する。ある実施形態では、製剤は液体製剤から凍結乾燥される。
【００２３】
ある実施形態では、本開示の医薬組成物は、ＡＡＶ、ならびに約１０ｍＭのＬ−ヒスチジン、約１０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．００５％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、約５％（ｗ／ｖ）のトレハロース、および約５０ｍＭのグリシンを含む。一部の実施形態では、本発明は液体製剤を提供する。ある実施形態では、製剤は液体製剤から凍結乾燥される。
【００２４】
ある実施形態では、本開示の医薬組成物は、ＡＡＶ、ならびに約１０ｍＭのＬ−ヒスチジン、約０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．００５％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、約５％（ｗ／ｖ）のトレハロース、および約５０ｍＭのグリシンを含む。一部の実施形態では、本発明は液体製剤を提供する。ある実施形態では、製剤は液体製剤から凍結乾燥される。
【００２５】
概して、本明細書に提供されるＡＡＶ製剤は医薬投与に適している。ある実施形態では、ＡＡＶは、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、またはＡＡＶ１０である。ある実施形態では、ＡＡＶは、ＡＡＶ２、ＡＡＶ５、ＡＡＶ８、またはＡＡＶ９である。ある実施形態では、ＡＡＶはＡＡＶ８である。
【発明を実施するための形態】
【００２６】
本開示は、ＡＡＶの長期保管にも適し、ＡＡＶ力価の損失を最小限にする、ヒトまたは獣医投与に適合する製剤、例えば医薬組成物を提供する。本明細書に提供される製剤は、目に見える粒子の形成を防ぎ、またＡＡＶがその中でパッケージおよび保管される容器の表面への吸着を防ぎ、さらには製造中に用いられる機械類の表面への吸着を防ぐため、好都合である。ある実施形態では、本明細書に提供される医薬組成物は、長期間保管したときに有意なＡＡＶ活性を保持する。ある実施形態では、本明細書に提供される医薬組成物は、分解（degradation）および／または凝集を減少または遅延させる。
【００２７】
ある実施形態では、本発明は、治療有効量または用量のＡＡＶ、生理的濃度未満から生理的濃度までの薬学的に許容される塩、安定化濃度の１つ以上の糖および／または糖アルコール、非イオン性界面活性剤、製剤に中性のｐＨを提供する１つ以上の緩衝剤、ならびに任意選択で、精製および／または処理中のＡＡＶの安定性および回収に役立つアミノ酸を含む、ＡＡＶの製剤を提供する。概して、本明細書に提供されるＡＡＶ製剤は医薬投与に適している。ある実施形態では、ＡＡＶはＡＡＶ８である。
【００２８】
ある実施形態では、ＡＡＶを含む組成物は脱水（dehydrated）組成物である。本明細書で用いられる場合、脱水組成物は、カールフィッシャー（ＫＦ）滴定法により測定した場合に、２５％以下、または２０％以下、または１５％以下、または１０％以下、または９％以下、または８％以下、または７％以下、または６％以下、または５％以下、または４％以下、または３％以下、または２％以下、または１％以下の水のような、少量で水を含む組成物である。ある実施形態では、脱水組成物は、カールフィッシャー滴定法で測定した場合に３％以下の水を有する。ある実施形態では、脱水組成物は、カールフィッシャー滴定法で測定した場合に２％以下の水を有する。ある実施形態では、脱水組成物は、カールフィッシャー滴定法で測定した場合に１％以下の水を有する。ある実施形態では、脱水組成物は、カールフィッシャー滴定法で測定した場合に０．９％以下の水を有する。ある実施形態では、脱水組成物は、カールフィッシャー滴定法で測定した場合に０．８％以下の水を有する。ある実施形態では、脱水組成物は、カールフィッシャー滴定法で測定した場合に０．７％以下の水を有する。ある実施形態では、脱水組成物は、カールフィッシャー滴定法で測定した場合に０．６％以下の水を有する。ある実施形態では、脱水組成物は、カールフィッシャー滴定法で測定した場合に０．５％以下の水を有する。ある実施形態では、脱水組成物は、カールフィッシャー滴定法で測定した場合に０．４％以下の水を有する。ある実施形態では、脱水組成物は、カールフィッシャー滴定法で測定した場合に０．３％以下の水を有する。ある実施形態では、脱水組成物は、カールフィッシャー滴定法で測定した場合に０．２％以下の水を有する。組成物の温度を高める（例えば加熱）、圧力を下げる、凍結乾燥（フリーズドライとしても知られている）等、およびそれらの組合せなどのいずれの便利なプロトコルを用いて脱水組成物を作成してもよい。組成物の含水量を決定する他の方法として、限定はされないが、乾燥減量（ＬＯＤ）（特定条件下で試料を乾燥させるときに試料中の水および揮発性物質の量を測定する）、電解センサ（例えばＰ２Ｏ５センサを用いる）、ピエゾ電気収着法、酸化物センサ、酸化アルミニウムセンサ、吸収分光法、および近赤外線（ＮＩＲ）が挙げられる。
【００２９】
さらに、凍結乾燥製剤中の塩濃度を下げると、凍結乾燥ケーキ（lyocake）中の残留水分が減少し、改良された凍結乾燥ケーキの形成を助けることが分かった。
【００３０】
上記の凍結乾燥組成物は低含水量であるため、凍結乾燥組成物は固体状となりうる。一部の例では、固体凍結乾燥組成物は粉末である。一部の例では、凍結乾燥組成物は、（例えば、同じ組成の液体製剤と比較して）組成物の長期間の保管を容易にしうる。例えば、凍結乾燥組成物は、組成物が長期間実質的に安定である保管安定組成物（例えば、凍結乾燥した保管安定組成物）であってよい。「安定」または「保管安定」または「実質的に安定」とは、長期間にわたり有意に活性を低下および／または損なわせない組成物を意味する。例えば、保管安定組成物は、例えば、長期間にわたり、１０％以下の不純物、あるいは９％以下、または８％以下、または７％以下、または６％以下、または５％以下、または４％以下、または３％以下、または２％以下、または１％以下の分解生成物であるなど、長期間にわたり組成物の分解による有意な不純物を有さないであろう。ある例では、保管安定組成物は、長期間にわたり５％以下の不純物を有する。一部の例では、保管安定組成物は、例えば、長期間にわたり、その活性の１００％、あるいはその活性の９９％以上、または９８％以上、または９７％以上、または９６％以上、または９５％以上、または９４％以上、または９３％以上、または９２％以上、または９１％以上、または９０％以上、または８５％以上、または８０％以上、または７５％以上を保持するなど、長期間にわたりその活性を実質的に保持する。例えば、保管安定組成物は、長期間にわたりその活性の９０％以上を保持しうる。一部の例では、保管安定組成物は、長期間にわたりその活性の９５％以上を保持する。長期間とは、例えば、１週間以上、または２週間以上、または３週間以上、または１ヶ月以上、または２ヶ月以上、または３ヶ月以上、または４ヶ月以上、または６ヶ月以上、または９ヶ月以上、または１年以上、または１．５年（例えば１８ヶ月）以上、または２年以上、または２．５年（例えば３０ヶ月）以上、または３年以上、または３．５年（例えば４２ヶ月）以上、または４年以上、または４．５年（例えば５４ヶ月）以上、または５年以上などの期間である。例えば、長期間は６ヶ月以上であってよい。一部の例では、長期間は９ヶ月以上である。一部の例では、長期間は１年（例えば１２ヶ月）以上である。一部の例では、長期間は１．５年（例えば１８ヶ月）以上である。一部の例では、長期間は２年（例えば２４ヶ月）以上である。一部の実施形態では、保管安定組成物は、例えば、２０〜４０℃、または２５〜３５℃、または２５〜３０℃の温度など、周囲温度で長期間実質的に安定である。一部の例では、保管安定組成物は、０〜２０℃、または０〜１５℃、または０〜１０℃、または２〜８℃の温度など、周囲温度より低い温度で長期間実質的に安定である。
【００３１】
定義
本明細書で用いられる場合、用語「ＡＡＶ」は、自然発生および組換え形態（ｒＡＡＶ）の両方のアデノ随伴ウイルスを意味し、ＡＡＶの突然変異型も包含する。用語ＡＡＶはさらに、それらに限定はされないが、ＡＡＶ１型、ＡＡＶ２型、ＡＡＶ３型、ＡＡＶ４型、ＡＡＶ５型、ＡＡＶ６型、ＡＡＶ７型、ＡＡＶ８型、ＡＡＶ９型、ＡＡＶ１０型、トリＡＡＶ、ウシＡＡＶ、イヌＡＡＶ、ウマＡＡＶ、ヒツジＡＡＶ、霊長類ＡＡＶ、および非霊長類ＡＡＶを含む。ある実施形態では、ＡＡＶはＡＡＶ８である。
【００３２】
本明細書に記載の組成物に関連して用いられる場合、語句「薬学的に許容される」は、生理学的に許容できかつ対象に投与したときに通常は有害反応を生じさせないそのような組成物の分子種および他の成分を意味する。好ましくは、用語「薬学的に許容される」は、連邦政府または州政府の規制当局により認可されている、あるいは米国薬局方、または他の哺乳動物および特にヒトでの使用に関して一般的に認められている薬局方に載せられていることを意味する。「薬学的に許容される塩」は、医薬用途の化合物またはコンジュゲートに配合されうる塩であり、例えば、薬物製剤において対象（例えばヒト）に投与するのに安全である、金属塩（ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウムなど）およびアンモニアまたは有機アミンの塩が挙げられる（例えば、Berge, et al. “Pharmaceutical Salts” J. Pharm. Sci. 1977; 66:1（その全てがおよび全ての目的のために参照により本明細書に組み込まれる）を参照のこと）。適切な「薬学的に許容される塩」として、限定はされないが、ナトリウム、カリウムおよびセシウム塩などの金属塩；カルシウムおよびマグネシウム塩などのアルカリ土類金属塩；トリエチルアミン、グアニジンおよびＮ−置換グアニジン塩、アセトアミジンおよびＮ−置換アセトアミジン、ピリジン、ピコリン、エタノールアミン、トリエタノールアミン、ジシクロヘキシルアミン、およびＮ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン塩などの有機アミン塩が挙げられる。（塩基性窒素中心の）「薬学的に許容される塩」として、限定はされないが、塩酸塩、臭化水素塩、硫酸塩、リン酸塩などの無機酸塩；トリフルオロ酢酸塩およびマレイン酸塩などの有機酸塩；メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、カンファースルホン酸塩およびナフタレンスルホン酸塩などのスルホン酸塩；アルギニン酸塩、アラニン酸塩、アスパラギン酸塩およびグルタミン酸塩などのアミノ酸塩；ならびにグルクロン酸塩およびガラクチュロン酸塩などの炭化水素塩が挙げられる。薬学的に許容される塩の選択および使用は当業界でよく知られており、例えば、Stahl and Wermuth, Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use, 2nd Revised edition, Wiley, Hoboken, N.J.,（その全てがおよび全ての目的のために参照により本明細書に組み込まれる）を参照のこと。薬学的に許容される塩の非限定的な例として、限定はされないが、ナトリウム塩、アンモニウム塩、カリウム塩（例えば、塩化ナトリウム、塩化アンモニウム、および塩化カリウム；酢酸ナトリウム、酢酸アンモニウム、および酢酸カリウム；クエン酸ナトリウム、クエン酸アンモニウム、およびクエン酸カリウム；リン酸ナトリウム、リン酸アンモニウム、およびリン酸カリウム；フッ化ナトリウム、フッ化アンモニウム、およびフッ化カリウム；臭化ナトリウム、臭化アンモニウム、および臭化カリウム；ならびにヨウ化ナトリウム、ヨウ化アンモニウム、およびヨウ化カリウム）が挙げられる。
【００３３】
本明細書で用いられる場合、「生理的濃度」の塩とは、約１００ｍＭと約２００ｍＭの間の塩濃度の薬学的に許容される塩を意味する。
【００３４】
本明細書で用いられる場合、「生理的濃度未満」の塩とは、約１００ｍＭ未満の塩濃度の薬学的に許容される塩を意味する。ある実施形態では、生理的濃度未満の塩は、約８０ｍＭ未満の薬学的に許容される塩である。別の実施形態では、生理的濃度未満の塩は、約７０ｍＭ未満、約６０ｍＭ未満、約５０ｍＭ未満、約４０ｍＭ未満、約３０ｍＭ未満、約２０ｍＭ未満、または約１０ｍＭ未満の薬学的に許容される塩である。
【００３５】
本明細書で用いられる場合、状況、疾患または状態を「治療する」または「治療」には、（１）状況、疾患または状態を患っているかまたは罹患しやすくなっているが、その状況、疾患または状態の臨床的または準臨床的症状をまだ経験していないまたは表していない対象において発達している状況、疾患または状態の少なくとも１つの臨床的または準臨床的症状の発現の発症および／または可能性を予防、遅延、または低減すること；（２）状況、疾患または状態を抑制すること、すなわち、疾病またはその再発またはその少なくとも１つの臨床的または準臨床的症状の発症／進行を停止、低減または遅延させること；および（３）疾病を軽減すること、すなわち、状況、疾患または状態、あるいは少なくとも１つのその臨床的または準臨床的症状の退行を引き起こすこと；が含まれる。これら用語を用いる場合、必ずしも１００％または完全な治療を意味しない。むしろ、当業者が潜在的利益または治療効果を有すると認識する様々な治療の程度がある。治療すべき対象への利益は、統計学的に有意であるか、あるいは少なくとも対象または臨床医に感じられるかのいずれかである。これに関して、本開示の疾患（例えば出血性疾患）を治療する方法は、任意の量または任意のレベルの治療を提供することができる。さらには、本開示の方法により提供される治療は、その疾患の１つまたは複数の状態または症状または兆候を治療することを包含しうる。
【００３６】
「治療有効量または用量」あるいは「十分量または用量」とは、それが投与されて効果を生じさせる用量を意味する。正確な用量は、治療の目的に依存し、公知の技術を用いて当業者が確かめることができる（例えば、Lieberman, Pharmaceutical Dosage Forms (vols. 1-3, 1992); Lloyd, The Art, Science and Technology of Pharmaceutical Compounding (1999); Pickar, Dosage Calculations (1999); およびRemington: The Science and Practice of Pharmacy, 20th Edition, 2003, Gennaro, Ed., Lippincott, Williams & Wilkinsを参照のこと）。
【００３７】
用語「患者」および「対象」は交換可能に用いられ、本開示の組成物の投与により予防または治療されうる状態を患っているまたは罹患しやすい生物を指すためにその通常の意味で用いられ、ヒトおよび非ヒト動物の両方を含む。対象の例として、限定はされないが、ヒト、チンパンジー、ならびに他の類人猿およびサル種；ウシ、ヒツジ、ブタ、ヤギおよびウマなどの家畜；イヌおよびネコなどの飼育哺乳動物；マウス、ラットおよびモルモットなどの齧歯動物を含む実験動物；ニワトリ、シチメンチョウおよび他のキジ科鳥類、カモ、ガチョウなどの、飼育鳥、野鳥および狩猟鳥を含む鳥類が挙げられる。この用語は、特定の年齢を意味しない。従って、成人、若年者、および新生児の個体も対象となる。
【００３８】
本明細書で用いられる場合、「保管」は、製剤を調製して直ぐには対象に投与せず、使用前に特定条件（例えば、特定温度など）下で一定期間維持することを意味する。例えば、液体または凍結乾燥製剤を、対象に投与する前に、冷蔵（０℃〜１０℃）または室温（例えば、３２℃までの温度）のような様々な温度下で、数日間、数週間、数ヶ月間または数年間維持してよい。
【００３９】
本明細書で用いられる場合、用語「約」は、特定数値±１０％の近似範囲を表す。例えば、「約２０％」という語句は、１８〜２２％の範囲を包含する。また本明細書で用いられる場合、「約」は正確な量も包含する。従って、「約２０％」は「約２０％」および「２０％」も意味する。
【００４０】
本明細書で用いられる場合、用語「および／または」は、関連して記載されているものの１つまたは複数の任意のおよび全ての可能性のある組合せ、ならびに代替（「または」）で解釈される場合は組合せなしを意味しおよび包含する。
【００４１】
本明細書で用いられる場合、用語「または」は、特定のリストの中の任意の１メンバーを意味し、またそのそのリストのメンバーの任意の組合せも包含する。
【００４２】
本開示を説明する文脈（特に添付の特許請求の範囲の文脈）において使用される用語「ａ」、「ａｎ」、「ｔｈｅ」および同様の指示対象の用語は、本明細書に別段の指示がない限り、または文脈において明らかに矛盾しない限り、単数形および複数形の両方を含むと解釈される。用語「含む」、「有する」、「包含する」および「含有する」は、特に断りのない限り、開放型用語（すなわち、「含むがそれに限定はされない」ことを意味する）として解釈される。
【００４３】
本明細書における数値範囲の列挙は、別段の指示がない限り、単にその範囲内に含まれる各個別の値および各終点の値に対して個々に言及する省略方法としての役割を果たすことが意図され、各個別の値および各終点の値は、それが本明細書に個々に列挙されているかのように本明細書内に組み込まれる。
【００４４】
ＡＡＶ組成物および製剤
例示的態様では、本開示の医薬組成物は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）、ならびに約５ｍＭ〜約２５ｍＭの緩衝剤、約０ｍＭ〜約１５０ｍＭの薬学的に許容される塩、約０．００１％（ｗ／ｖ）〜約０．０１％（ｗ／ｖ）の非イオン性界面活性剤、および約１％（ｗ／ｖ）〜約１０％（ｗ／ｖ）の糖または糖アルコールを含む。
【００４５】
例示的態様では、本開示の医薬組成物は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）、ならびに約５ｍＭ〜約２５ｍＭの緩衝剤、約５０ｍＭ〜約１５０ｍＭの薬学的に許容される塩、約０．００１％（ｗ／ｖ）〜約０．０１％（ｗ／ｖ）の非イオン性界面活性剤、および約１％（ｗ／ｖ）〜約１０％（ｗ／ｖ）の糖または糖アルコールを含む。
【００４６】
例示的態様では、本開示の医薬組成物は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）、ならびに約５ｍＭ〜約２５ｍＭの緩衝剤、約０ｍＭ〜１００ｍＭ未満の薬学的に許容される塩、約０．００１％（ｗ／ｖ）〜約０．０１％（ｗ／ｖ）の非イオン性界面活性剤、および約１％（ｗ／ｖ）〜約１０％（ｗ／ｖ）の糖または糖アルコールを含む。
【００４７】
例示的態様では、本開示の医薬組成物は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）、ならびに約５ｍＭ〜約２５ｍＭの緩衝剤、約３０ｍＭ〜１００ｍＭ未満の薬学的に許容される塩、約０．００１％（ｗ／ｖ）〜約０．０１％（ｗ／ｖ）の非イオン性界面活性剤、および約１％（ｗ／ｖ）〜約１０％（ｗ／ｖ）の糖または糖アルコールを含む。
【００４８】
ある例では、組成物は無菌組成物である。「無菌(sterile)」とは、例えば実質的に微生物（例えば、菌類、細菌、ウイルス、胞子形態など）がいないなど、組成物中に実質的に免疫原性成分がないことを意味する。
【００４９】
一部の実施形態では、本開示は液体製剤を提供する。ある実施形態では、製剤は液体製剤から凍結乾燥される。
【００５０】
例示的態様では、本開示の医薬組成物は、約５ｍＭ〜約２５ｍＭ、約５ｍＭ〜約１５ｍＭ、約１０ｍＭ〜約２０ｍＭ、または約１５ｍＭ〜約２５ｍＭの緩衝剤を含む。例示的態様では、医薬組成物は、約５ｍＭ、約６ｍＭ、約７ｍＭ、約８ｍＭ、約９ｍＭ、約１０ｍＭ、約１１ｍＭ、約１２ｍＭ、約１３ｍＭ、約１４ｍＭ、約１５ｍＭ、約１６ｍＭ、約１７ｍＭ、約１８ｍＭ、約１９ｍＭ、約２０ｍＭ、約２１ｍＭ、約２２ｍＭ、約２３ｍＭ、約２４ｍＭ、または約２５ｍＭの緩衝剤を含む。
【００５１】
薬学的に許容される緩衝剤は当業界でよく知られており、限定はされないが、リン酸バッファー、ヒスチジン、クエン酸ナトリウム、ＨＥＰＥＳ、Ｔｒｉｓ、ビシン、グリシン、Ｎ−グリシルグリシン、酢酸ナトリウム、炭酸ナトリウム、グリシルグリシン、リシン、アルギニン、リン酸ナトリウム、およびそれらの混合物が含まれる。ある実施形態では、バッファーはヒスチジン（例えばＬ−ヒスチジン）である。
【００５２】
例示的態様では、本開示の医薬組成物は、約５ｍＭ〜約２５ｍＭ、約５ｍＭ〜約１５ｍＭ、約１０ｍＭ〜約２０ｍＭ、または約１５ｍＭ〜約２５ｍＭのＬ−ヒスチジンを含む。例示的態様では、医薬組成物は、約５ｍＭ、約６ｍＭ、約７ｍＭ、約８ｍＭ、約９ｍＭ、約１０ｍＭ、約１１ｍＭ、約１２ｍＭ、約１３ｍＭ、約１４ｍＭ、約１５ｍＭ、約１６ｍＭ、約１７ｍＭ、約１８ｍＭ、約１９ｍＭ、約２０ｍＭ、約２１ｍＭ、約２２ｍＭ、約２３ｍＭ、約２４ｍＭ、または約２５ｍＭのＬ−ヒスチジンを含む。ある実施形態では、医薬組成物は約１０ｍＭのＬ−ヒスチジンを含む。ある実施形態では、医薬組成物は約２０ｍＭのＬ−ヒスチジンを含む。
【００５３】
例示的態様では、本開示の医薬組成物は、約０ｍＭ〜約１５０ｍＭ、約５ｍＭ〜約１５０ｍＭ、約５ｍＭ〜約１００ｍＭ、約５ｍＭ〜約９０ｍＭ、約５ｍＭ〜約８０ｍＭ、約５ｍＭ〜約７０ｍＭ、約５ｍＭ〜約６０ｍＭ、約５ｍＭ〜約５０ｍＭ、約５ｍＭ〜約４０ｍＭ、約５ｍＭ〜約３０ｍＭ、約３０ｍＭ〜約１００ｍＭ、約３０ｍＭ〜約９０ｍＭ、約３０ｍＭ〜約８０ｍＭ、約３０ｍＭ〜約７０ｍＭ、約３０ｍＭ〜約６０ｍＭ、約３０ｍＭ〜約５０ｍＭ、約３０ｍＭ〜約４０ｍＭ、約５０ｍＭ〜約１５０ｍＭ、約５０ｍＭ〜約１２０ｍＭ、約５５ｍＭ〜約１００ｍＭ、約６０ｍＭ〜約１００ｍＭ、約６０ｍＭ〜約８０ｍＭ、約７０ｍＭ〜約１００ｍＭ、または約７０ｍＭ〜約８０ｍＭの薬学的に許容される塩（上記で定義したような）を含む。ある実施形態では、本開示の医薬組成物は、約８０ｍＭ〜約１２０ｍＭ、約７０ｍＭ〜約９０ｍＭ、約５０ｍＭ〜約７０ｍＭ、または約２０ｍＭ〜約４０ｍＭの薬学的に許容される塩を含む。例示的態様では、本開示の医薬組成物は、約０ｍＭ〜約１００ｍＭ、約０ｍＭ〜約８０ｍＭ、約０ｍＭ〜約７０ｍＭ、約０ｍＭ〜約６０ｍＭ、約０ｍＭ〜約５０ｍＭ、約０ｍＭ〜約４０ｍＭ、約０ｍＭ〜約３０ｍＭ、約０ｍＭ〜約２０ｍＭ、約０ｍＭ〜約１０ｍＭ、約０ｍＭ〜約５ｍＭの薬学的に許容される塩を含む。例示的態様では、医薬組成物は、約０ｍＭ、約５ｍＭ、約１０ｍＭ、約１５ｍＭ、約２０ｍＭ、約２５ｍＭ、約３０ｍＭ、約３５ｍＭ、約４０ｍＭ、約４５ｍＭ、約５０ｍＭ、約５５ｍＭ、約６０ｍＭ、約６５ｍＭ、約７０ｍＭ、約７５ｍＭ、約８０ｍＭ、約８５ｍＭ、約９０ｍＭ、約９５ｍＭ、約１００ｍＭ、約１０５ｍＭ、約１１０ｍＭ、約１１５ｍＭ、約１２０ｍＭ、約１２５ｍＭ、約１３０ｍＭ、約１３５ｍＭ、約１４０ｍＭ、約１４５ｍＭ、または約１５０ｍＭの薬学的に許容される塩を含む。他の実施形態では、医薬組成物は、約０ｍＭ〜約１００ｍＭ未満、約５ｍＭ〜約１００ｍＭ未満、約１０ｍＭ〜約１００ｍＭ未満、約２０ｍＭ〜約１００ｍＭ未満、約３０ｍＭ〜約１００ｍＭ未満、約４０ｍＭ〜約１００ｍＭ未満、約５０ｍＭ〜約１００ｍＭ未満、約６０ｍＭ〜約１００ｍＭ未満、または約７０ｍＭ〜約１００ｍＭ未満の薬学的に許容される塩を含む。ある実施形態では、本開示の医薬組成物は、約０ｍＭの薬学的に許容される塩を含む。ある実施形態では、本開示の医薬組成物は、約３０ｍＭの薬学的に許容される塩を含む。ある実施形態では、本開示の医薬組成物は、約４０ｍＭの薬学的に許容される塩を含む。ある実施形態では、本開示の医薬組成物は、約５０ｍＭの薬学的に許容される塩を含む。ある実施形態では、本開示の医薬組成物は、約６０ｍＭの薬学的に許容される塩を含む。ある実施形態では、本開示の医薬組成物は、約７０ｍＭの薬学的に許容される塩を含む。ある実施形態では、本開示の医薬組成物は、約８０ｍＭの薬学的に許容される塩を含む。ある実施形態では、本開示の医薬組成物は、約１００ｍＭの薬学的に許容される塩を含む。ある実施形態では、薬学的に許容される塩はナトリウム塩（例えば塩化ナトリウム）である。
【００５４】
有利なことに、生理的濃度未満の薬学的に許容される塩を含有する医薬組成物は、より低い含水量を有する密（compact）な凍結乾燥ケーキを形成し、改良された凍結乾燥ケーキの形成を助けることが分かった。ある実施形態では、生理的濃度未満の薬学的に許容される塩は、白い密で均質な凍結乾燥ケーキをもたらす、従って、ある実施形態では、本開示は、例えば約１００ｍＭ未満の薬学的に許容される塩といった、生理的濃度未満の薬学的に許容される塩を含む低塩医薬組成物を提供する。一実施形態では、本明細書に提供される低塩製剤は、約１００ｍＭ未満の薬学的塩を含む。ある実施形態では、本明細書に提供される低塩医薬組成物は、約８０ｍＭ未満の薬学的塩を含む。ある実施形態では、本明細書に提供される低塩医薬組成物は、約７０ｍＭ未満の薬学的塩を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される低塩医薬組成物は、約６０ｍＭ未満の薬学的塩を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される低塩医薬組成物は、約５０ｍＭ未満の薬学的塩を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される低塩医薬組成物は、約４０ｍＭ未満の薬学的塩を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される低塩医薬組成物は、約３０ｍＭ未満の薬学的塩を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される低塩医薬組成物は、約２０ｍＭ未満の薬学的塩を含む。別の実施形態では、本明細書に提供される低塩医薬組成物は、約１０ｍＭ未満の薬学的塩を含む。別の実施形態では、低塩医薬組成物は、約３０ｍＭと約６０ｍＭの間の薬学的に許容される塩を含む。さらに他の実施形態では、低塩医薬組成物は、約０ｍＭ、約５ｍＭ、約１０ｍＭ、約１５ｍＭ、約２０ｍＭ、約２５ｍＭ、約３０ｍＭ、約３５ｍＭ、約４０ｍＭ、約４５ｍＭ、約５０ｍＭ、約５５ｍＭ、約６０ｍＭ、約６５ｍＭ、約７０ｍＭ、約７５ｍＭ、約８０ｍＭ、約８５ｍＭ、約９０ｍＭ、約９５ｍＭ、または約１００ｍＭの薬学的に許容される塩を含む。ある実施形態では、本開示の医薬組成物は約０ｍＭの薬学的に許容される塩を含む。ある実施形態では、本開示の医薬組成物は約３０ｍＭの薬学的に許容される塩を含む。ある実施形態では、本開示の医薬組成物は約４０ｍＭの薬学的に許容される塩を含む。ある実施形態では、本開示の医薬組成物は約５０ｍＭの薬学的に許容される塩を含む。ある実施形態では、本開示の医薬組成物は約６０ｍＭの薬学的に許容される塩を含む。ある実施形態では、本開示の医薬組成物は約７０ｍＭの薬学的に許容される塩を含む。ある実施形態では、本開示の医薬組成物は約８０ｍＭの薬学的に許容される塩を含む。好ましい実施形態では、低塩医薬組成物は凍結乾燥製剤である。好ましい実施形態では、塩はナトリウム塩（例えば塩化ナトリウム）である。
【００５５】
例示的態様では、本開示の医薬組成物は、約０ｍＭ〜約１５０ｍＭ、約５ｍＭ〜約１５０ｍＭ、約５ｍＭ〜約１００ｍＭ、約５ｍＭ〜約９０ｍＭ、約５ｍＭ〜約８０ｍＭ、約５ｍＭ〜約７０ｍＭ、約５ｍＭ〜約６０ｍＭ、約５ｍＭ〜約５０ｍＭ、約５ｍＭ〜約４０ｍＭ、約５ｍＭ〜約３０ｍＭ、約３０ｍＭ〜約１００ｍＭ、約３０ｍＭ〜約９０ｍＭ、約３０ｍＭ〜約８０ｍＭ、約３０ｍＭ〜約７０ｍＭ、約３０ｍＭ〜約６０ｍＭ、約３０ｍＭ〜約５０ｍＭ、約３０ｍＭ〜約４０ｍＭ、約５０ｍＭ〜約１５０ｍＭ、約５０ｍＭ〜約１２０ｍＭ、約５５ｍＭ〜約１００ｍＭ、約６０ｍＭ〜約１００ｍＭ、約６０ｍＭ〜約８０ｍＭ、約７０ｍＭ〜約１００ｍＭ、または約７０ｍＭ〜約８０ｍＭの塩化ナトリウムを含む。ある実施形態では、本開示の医薬組成物は、約８０ｍＭ〜約１２０ｍＭ、約７０ｍＭ〜約９０ｍＭ、約５０ｍＭ〜約７０ｍＭ、または約２０ｍＭ〜約４０ｍＭの塩化ナトリウムを含む。例示的態様では、本開示の医薬組成物は、約０ｍＭ〜約１００ｍＭ、約０ｍＭ〜約８０ｍＭ、約０ｍＭ〜約７０ｍＭ、約０ｍＭ〜約６０ｍＭ、約０ｍＭ〜約５０ｍＭ、約０ｍＭ〜約４０ｍＭ、約０ｍＭ〜約３０ｍＭ、約０ｍＭ〜約２０ｍＭ、約０ｍＭ〜約１０ｍＭ、約０ｍＭ〜約５ｍＭの塩化ナトリウムを含む。ある実施形態では、医薬組成物は、約１００ｍＭ未満、約８０ｍＭ未満、約７０ｍＭ未満、約６０ｍＭ未満の塩化ナトリウムを含む。他の実施形態では、医薬組成物は、約０ｍＭ〜約１００ｍＭ未満、約５ｍＭ〜約１００ｍＭ未満、約１０ｍＭ〜約１００ｍＭ未満、約２０ｍＭ〜約１００ｍＭ未満、約３０ｍＭ〜約１００ｍＭ未満、約４０ｍＭ〜約１００ｍＭ未満、約５０ｍＭ〜約１００ｍＭ未満、約６０ｍＭ〜約１００ｍＭ未満、または約７０ｍＭ〜約１００ｍＭ未満の塩化ナトリウムを含む。例示的態様では、医薬組成物は、約０ｍＭ、約５ｍＭ、約１０ｍＭ、約１５ｍＭ、約２０ｍＭ、約２５ｍＭ、約３０ｍＭ、約３５ｍＭ、約４０ｍＭ、約４５ｍＭ、約５０ｍＭ、約５５ｍＭ、約６０ｍＭ、約６５ｍＭ、約７０ｍＭ、約７５ｍＭ、約８０ｍＭ、約８５ｍＭ、約９０ｍＭ、約９５ｍＭ、約１００ｍＭ、約１０５ｍＭ、約１１０ｍＭ、約１１５ｍＭ、約１２０ｍＭ、約１２５ｍＭ、約１３０ｍＭ、約１３５ｍＭ、約１４０ｍＭ、約１４５ｍＭ、または約１５０ｍＭの塩化ナトリウムを含む。ある実施形態では、本開示の医薬組成物は約０ｍＭの塩化ナトリウムを含む。ある実施形態では、本開示の医薬組成物は約１０ｍＭの塩化ナトリウムを含む。ある実施形態では、本開示の医薬組成物は約２０ｍＭの塩化ナトリウムを含む。ある実施形態では、本開示の医薬組成物は約３０ｍＭの塩化ナトリウムを含む。ある実施形態では、本開示の医薬組成物は約４０ｍＭの塩化ナトリウムを含む。ある実施形態では、本開示の医薬組成物は約５０ｍＭの塩化ナトリウムを含む。ある実施形態では、本開示の医薬組成物は約６０ｍＭの塩化ナトリウムを含む。ある実施形態では、本開示の医薬組成物は約７０ｍＭの塩化ナトリウムを含む。ある実施形態では、本開示の医薬組成物は約８０ｍＭの塩化ナトリウムを含む。ある実施形態では、本開示の医薬組成物は約１００ｍＭの塩化ナトリウムを含む。
【００５６】
有利なことに、非イオン性界面活性剤を含めると、表面でのＡＡＶの損失を実質的に低減し、さらに医薬組成物の目に見える粒子の形成を防ぐことも見出された。従って、ある実施形態では、安定化濃度の非イオン性界面活性剤を含有する医薬組成物を提供する。本明細書に記載の製剤で使用されうる薬学的に許容される非イオン性界面活性剤は薬学分野で公知であり、限定はされないが、プルロニックＦ−６８およびＢＲＩＪ３５を含めて、ポリソルベート８０（Ｔｗｅｅｎ８０；ＰＳ８０）、ポリソルベート２０（Ｔｗｅｅｎ２０；ＰＳ２０）、および種々のポロキサマーもしくはプルロニック、またはそれらの混合物が挙げられる。好ましい実施形態では、本発明の医薬組成物において使用される非イオン性界面活性剤はポリソルベート８０である。例示的態様では、本開示の医薬組成物は、Ｃｒｏｄａ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｃａｒｅ（Ｓｎａｉｔｈ，ＵＫ）から市販されているＳｕｐｅｒ  Ｒｅｆｉｎｅｄ（商標）ＰＳ８０を含む。
【００５７】
ある実施形態では、本開示の医薬組成物は、約０．００１％（ｗ／ｖ）〜約０．０１％（ｗ／ｖ）または約０．００２５％（ｗ／ｖ）〜約０．００７５％（ｗ／ｖ）の非イオン性界面活性剤を含む。例示的態様では、医薬組成物は、約０．００１％（ｗ／ｖ）、約０．００１５％（ｗ／ｖ）、約０．００２％（ｗ／ｖ）、約０．００２５％（ｗ／ｖ）、約０．００３％（ｗ／ｖ）、約０．００３５％（ｗ／ｖ）、約０．００４％（ｗ／ｖ）、約０．００４５％（ｗ／ｖ）、約０．００５％（ｗ／ｖ）、約０．００５５％（ｗ／ｖ）、約０．００６％（ｗ／ｖ）、約０．００６５％（ｗ／ｖ）、約０．００７％（ｗ／ｖ）、約０．００７５％（ｗ／ｖ）、約０．００８％（ｗ／ｖ）、約０．００８５％（ｗ／ｖ）、約０．００９％（ｗ／ｖ）、約０．００９５％（ｗ／ｖ）、約０．００１％（ｗ／ｖ）の非イオン性界面活性剤を含む。ある実施形態では、本開示の医薬組成物は約０．００５％（ｗ／ｖ）の非イオン性界面活性剤を含む。
【００５８】
例示的態様では、本開示の医薬組成物は、約０．００１％（ｗ／ｖ）〜約０．０１％（ｗ／ｖ）または約０．００２５％（ｗ／ｖ）〜約０．００７５％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（例えばＳｕｐｅｒ  Ｒｅｆｉｎｅｄ（商標）ＰＳ８０）を含む。例示的態様では、医薬組成物は、約０．００１％（ｗ／ｖ）、約０．００１５％（ｗ／ｖ）、約０．００２％（ｗ／ｖ）、約０．００２５％（ｗ／ｖ）、約０．００３％（ｗ／ｖ）、約０．００３５％（ｗ／ｖ）、約０．００４％（ｗ／ｖ）、約０．００４５％（ｗ／ｖ）、約０．００５％（ｗ／ｖ）、約０．００５５％（ｗ／ｖ）、約０．００６％（ｗ／ｖ）、約０．００６５％（ｗ／ｖ）、約０．００７％（ｗ／ｖ）、約０．００７５％（ｗ／ｖ）、約０．００８％（ｗ／ｖ）、約０．００８５％（ｗ／ｖ）、約０．００９％（ｗ／ｖ）、約０．００９５％（ｗ／ｖ）、約０．００１％（ｗ／ｖ）のＰＳ８０を含む。ある実施形態では、本開示の医薬組成物は約０．００５％（ｗ／ｖ）のＰＳ８０を含む。
【００５９】
中程度のレベル（すなわち、約１％〜約１０％の間）の１つ以上の糖および／または糖アルコールを含めると、液体および／または凍結乾燥製剤の安定性に役立つことも見出された。例えば、糖および／または糖アルコールは、凍結／融解サイクル中のより良好な特性を可能にする。従って、ある実施形態では、本発明は、約２％〜約１０％の間の１つ以上の糖および／または糖アルコールを含有する医薬組成物を提供する。単糖、二糖または多糖、あるいは水溶性グルカンなどの任意の糖を用いてよく、そのような糖には、例えば、フルクトース、グルコース、マンノース、ソルボース、キシロース、マルトース、ラクトース、ショ糖、デキストラン、トレハロース、プルラン、デキストリン、シクロデキストリン、可溶性デンプン、ヒドロキシエチルデンプンおよびカルボキシメチルセルロースが含まれる。特定の実施形態では、糖は、ショ糖、トレハロースまたはそれらの組合せである。ある実施形態では、トレハロースはトレハロース二水和物である。糖アルコールは、約４個〜約８個の間の炭素原子と、ヒドロキシル基とを有する炭化水素として定義される。本明細書に提供される医薬組成物で使用されうる糖アルコールの非限定的な例として、マンニトール、ソルビトール、イノシトール、ガラクチトール、ズルシトール、キシリトールおよびアラビトールが挙げられる。ある実施形態では、マンニトールを糖アルコール添加物として使用する。ある実施形態では、医薬組成物は糖および糖アルコール添加物の両方を含有する。
【００６０】
糖および糖アルコールは、個々に使用してもまたは組み合わせて使用してもよい。一部の実施形態では、糖、糖アルコールまたはそれらの組合せは、約１％〜約１０％（ｗ／ｖ）、約１％（ｗ／ｖ）〜約１．５％（ｗ／ｖ）、約２．５％〜約７．５％（ｗ／ｖ）、または約１％〜約５％（ｗ／ｖ）の濃度で製剤中に存在する。例示的態様では、本開示の医薬組成物は、約１．０％（ｗ／ｖ）、約１．１％（ｗ／ｖ）、約１．２％（ｗ／ｖ）、約１．３％（ｗ／ｖ）、約１．４％（ｗ／ｖ）、約１．５％（ｗ／ｖ）、約１．６％（ｗ／ｖ）、約１．７％（ｗ／ｖ）、約１．８％（ｗ／ｖ）、約１．９％（ｗ／ｖ）、約２．０％（ｗ／ｖ）、約２．５％（ｗ／ｖ）、約３．０％（ｗ／ｖ）、約３．５％（ｗ／ｖ）、約４．０％（ｗ／ｖ）、約４．５％（ｗ／ｖ）、約５．０％（ｗ／ｖ）、約５．５％（ｗ／ｖ）、約６．０％（ｗ／ｖ）、約６．５％（ｗ／ｖ）、約７．０％（ｗ／ｖ）、約７．５％（ｗ／ｖ）、約８．０％（ｗ／ｖ）、約８．５％（ｗ／ｖ）、約９．０％（ｗ／ｖ）、約９．５％（ｗ／ｖ）、または約１０％（ｗ／ｖ）の糖、糖アルコールまたはそれらの組合せを含む。ある実施形態では、糖は、ショ糖、トレハロースまたはそれらの組合せである。ある実施形態では、トレハロースはトレハロース二水和物である。
【００６１】
ある実施形態では、本開示の医薬組成物は、約１％〜約１０％（ｗ／ｖ）、約１％（ｗ／ｖ）〜約１．５％（ｗ／ｖ）、約２．５％〜約７．５％（ｗ／ｖ）、または約１％〜約５％（ｗ／ｖ）のショ糖、トレハロースまたはそれらの組合せを含む。例示的態様では、本開示の医薬組成物は、約１．０％（ｗ／ｖ）、約１．１％（ｗ／ｖ）、約１．２％（ｗ／ｖ）、約１．３％（ｗ／ｖ）、約１．４％（ｗ／ｖ）、約１．５％（ｗ／ｖ）、約１．６％（ｗ／ｖ）、約１．７％（ｗ／ｖ）、約１．８％（ｗ／ｖ）、約１．９％（ｗ／ｖ）、約２．０％（ｗ／ｖ）、約２．５％（ｗ／ｖ）、約３．０％（ｗ／ｖ）、約３．５％（ｗ／ｖ）、約４．０％（ｗ／ｖ）、約４．５％（ｗ／ｖ）、約５．０％（ｗ／ｖ）、約５．５％（ｗ／ｖ）、約６．０％（ｗ／ｖ）、約６．５％（ｗ／ｖ）、約７．０％（ｗ／ｖ）、約７．５％（ｗ／ｖ）、約８．０％（ｗ／ｖ）、約８．５％（ｗ／ｖ）、約９．０％（ｗ／ｖ）、約９．５％（ｗ／ｖ）、または約１０％（ｗ／ｖ）のショ糖、トレハロースまたはそれらの組合せを含む。ある実施形態では、本開示の医薬組成物は、約１．３％（ｗ／ｖ）のショ糖、トレハロースまたはそれらの組合せを含む。ある実施形態では、本開示の医薬組成物は、約５％（ｗ／ｖ）のショ糖、トレハロースまたはそれらの組合せを含む。例示的態様では、本開示の医薬組成物は、１０ｍＭ〜約１５０ｍＭ、約３０ｍＭ〜約４０ｍＭ、または約３５ｍＭ〜約１３２ｍＭのショ糖、トレハロースまたはそれらの組合せを含む。例示的態様では、本開示の医薬組成物は、約１０ｍＭ、約１５ｍＭ、約２０ｍＭ、約２５ｍＭ、約３０ｍＭ、約３５ｍＭ、約４０ｍＭ、約４５ｍＭ、約５０ｍＭ、約５５ｍＭ、約６０ｍＭ、約６５ｍＭ、約７０ｍＭ、約７５ｍＭ、約８０ｍＭ、約８５ｍＭ、約９０ｍＭ、約９５ｍＭ、約１００ｍＭ、約１１０ｍＭ、約１２０ｍＭ、約１３０ｍＭ、約１４０ｍＭ、または約１５０ｍＭのショ糖、トレハロースまたはそれらの組合せを含む。ある実施形態では、本開示の医薬組成物は、約３５ｍＭのショ糖、トレハロースまたはそれらの組合せを含む。ある実施形態では、本開示の医薬組成物は、約１３２ｍＭのショ糖、トレハロースまたはそれらの組合せを含む。例示的態様では、トレハロースはトレハロース二水和物である。
【００６２】
例示的態様では、本開示の医薬組成物は：アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）、ならびに約５ｍＭ〜約２５ｍＭのＬ−ヒスチジン、約０ｍＭ〜約１５０ｍＭの薬学的に許容される塩、約０．００１％（ｗ／ｖ）〜約０．０１％（ｗ／ｖ）の非イオン性界面活性剤、および約１％（ｗ／ｖ）〜約１０％（ｗ／ｖ）の糖および／または糖アルコールを含む。ある実施形態では、薬学的に許容される塩は約０ｎＭ〜約１００ｍＭである。ある実施形態では、薬学的に許容される塩は約３０ｎＭ〜約１００ｍＭである。ある実施形態では、薬学的に許容される塩は約５ｎＭ〜約１５０ｍＭである。ある実施形態では、薬学的に許容される塩は約５０ｎＭ〜約１５０ｍＭである。ある実施形態では、薬学的に許容される塩は塩化ナトリウムである。
【００６３】
例示的態様では、本開示の医薬組成物はグリシンをさらに含む。例示的態様では、本開示の医薬組成物は、約３０ｍＭ〜約７０ｍＭ、約３５ｍＭ〜約６５ｍＭのグリシン、約４０ｍＭ〜約６０ｍＭ、または約４５ｍＭ〜約５５ｍＭのグリシンを含む。例示的態様では、本開示の医薬組成物は、約３０ｍＭ、約３５ｍＭ、約４０ｍＭ、約４５ｍＭ、約５０ｍＭ、約５５ｍＭ、約６０ｍＭ、約６５ｍＭ、または約７０ｍＭのグリシンを含む。ある実施形態では、本開示の医薬組成物は、約５０ｍＭのグリシンをさらに含む。
【００６４】
例示的態様では、本開示の医薬組成物はマンニトールをさらに含む。例示的態様では、本開示の医薬組成物は、約５０ｍＭ〜約１５０ｍＭ、約６０ｍＭ〜約１４０ｍＭ、約７０ｍＭ〜約１３０ｍＭ、約８０ｍＭ〜約１２０ｍＭ、または約９０ｍＭ〜約１１０ｍＭのマンニトールを含む。ある実施形態では、本開示の医薬組成物は約１１０ｍＭのマンニトールを含む。例示的態様では、本開示の医薬組成物は、グリシンまたはマンニトールを含むが、グリシンおよびマンニトールの両方は含まない。
【００６５】
他の実施形態では、本開示の医薬組成物は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）、ならびに約５ｍＭ〜約２５ｍＭのＬ−ヒスチジン、約０ｍＭ〜約１５０ｍＭの薬学的に許容される塩、約０．００１％（ｗ／ｖ）〜約０．０１％（ｗ／ｖ）の非イオン性界面活性剤、および約１％（ｗ／ｖ）〜約１０％（ｗ／ｖ）の糖および／または糖アルコールを含む。ある実施形態では、薬学的に許容される塩は約０ｎＭ〜約１００ｍＭである。ある実施形態では、薬学的に許容される塩は約３０ｎＭ〜約１００ｍＭである。ある実施形態では、薬学的に許容される塩は約５ｎＭ〜約１５０ｍＭである。ある実施形態では、薬学的に許容される塩は約５０ｎＭ〜約１５０ｍＭである。ある実施形態では、糖および／または糖アルコールは、ショ糖、トレハロース、マンニトール、およびそれらの組合せである。ある実施形態では、薬学的に許容される塩は塩化ナトリウムである。
【００６６】
他の実施形態では、本開示の医薬組成物は：アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）、ならびに約５ｍＭ〜約２５ｍＭのＬ−ヒスチジン、約０ｍＭ〜約１５０ｍＭの薬学的に許容される塩、約０．００１％（ｗ／ｖ）〜約０．０１％（ｗ／ｖ）の非イオン性界面活性剤、および約１％（ｗ／ｖ）〜約１０％（ｗ／ｖ）の糖および／または糖アルコールを含む。ある実施形態では、薬学的に許容される塩は約０ｎＭ〜約１００ｍＭである。ある実施形態では、薬学的に許容される塩は約３０ｎＭ〜約１００ｍＭである。ある実施形態では、薬学的に許容される塩は約５ｎＭ〜約１５０ｍＭである。ある実施形態では、薬学的に許容される塩は約５０ｎＭ〜約１５０ｍＭである。ある実施形態では、非イオン性界面活性剤は、ポリソルベート２０、ポリソルベート８０、プルロニックＦ−６８、ＢＲＩＪ３５、およびそれらの組合せである。ある実施形態では、糖および／または糖アルコールは、ショ糖、トレハロース、マンニトール、およびそれらの組合せである。ある実施形態では、非イオン性界面活性剤はＰＳ８０である。ある実施形態では、薬学的に許容される塩は塩化ナトリウムである。
【００６７】
例示的態様では、本開示の医薬組成物は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）、ならびに約５ｍＭ〜約２５ｍＭのＬ−ヒスチジン、約１００ｍＭ未満の薬学的に許容される塩、約０．００１％（ｗ／ｖ）〜約０．０１％（ｗ／ｖ）の非イオン性界面活性剤、および約１％（ｗ／ｖ）〜約１０％（ｗ／ｖ）の糖および／または糖アルコールを含む。ある実施形態では、薬学的に許容される塩は約０ｎＭ〜約１００ｍＭ未満である。ある実施形態では、薬学的に許容される塩は、約０ｎＭ〜約８０ｍＭ、約０ｎＭ〜約７０ｍＭ、約０ｍＭ〜約６０ｍＭ、約０ｍＭ〜約５０ｍＭ、約０ｍＭ〜約４０ｍＭ、約０ｍＭ〜約３０ｍＭ、約０ｍＭ〜約２０ｍＭ、または約０ｍＭ〜約１０ｍＭである。ある実施形態では、薬学的に許容される塩は約３０ｎＭ〜約１００ｍＭ未満である。ある実施形態では、薬学的に許容される塩は約３０ｎＭ〜約８０ｍＭ、約３０ｎＭ〜約７０ｍＭ、約３０ｍＭ〜約６０ｍＭ、約３０ｍＭ〜約５０ｍＭ、または約３０ｍＭ〜約４０ｍＭである。ある実施形態では、薬学的に許容される塩は塩化ナトリウムである。ある実施形態では、本開示の医薬組成物は、グリシンまたはマンニトールを含むが、グリシンおよび／またはマンニトールの両方は含まない。ある実施形態では、本開示の医薬組成物は、グリシンまたはマンニトールを含むが、グリシンおよびマンニトールの両方は含まない。ある実施形態では、製剤は液体製剤である。ある実施形態では、製剤は凍結乾燥製剤である。ある実施形態では、低塩医薬組成物は凍結乾燥製剤である。
【００６８】
他の実施形態では、本開示の医薬組成物は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）、ならびに約５ｍＭ〜約２５ｍＭのＬ−ヒスチジン、約１００ｍＭ未満の薬学的に許容される塩、約０．００１％（ｗ／ｖ）〜約０．０１％（ｗ／ｖ）の非イオン性界面活性剤、および約１％（ｗ／ｖ）〜約１０％（ｗ／ｖ）の糖および／または糖アルコールを含む。ある実施形態では、薬学的に許容される塩は約０ｎＭ〜約１００ｍＭ未満である。ある実施形態では、薬学的に許容される塩は、約０ｎＭ〜約８０ｍＭ、約０ｎＭ〜約７０ｍＭ、約０ｍＭ〜約６０ｍＭ、約０ｍＭ〜約５０ｍＭ、約０ｍＭ〜約４０ｍＭ、約０ｍＭ〜約３０ｍＭ、約０ｍＭ〜約２０ｍＭ、または約０ｍＭ〜約１０ｍＭである。ある実施形態では、薬学的に許容される塩は約３０ｎＭ〜約１００ｍＭ未満である。ある実施形態では、薬学的に許容される塩は、約３０ｎＭ〜約８０ｍＭ、約３０ｎＭ〜約７０ｍＭ、約３０ｍＭ〜約６０ｍＭ、約３０ｍＭ〜約５０ｍＭ、または約３０ｍＭ〜約４０ｍＭである。ある実施形態では、糖および／または糖アルコールは、ショ糖、トレハロース、マンニトール、およびそれらの組合せである。ある実施形態では、薬学的に許容される塩は塩化ナトリウムである。ある実施形態では、製剤は液体製剤である。ある実施形態では、製剤は凍結乾燥製剤である。ある実施形態では、低塩医薬組成物は凍結乾燥製剤である。
【００６９】
他の実施形態では、本開示の医薬組成物は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）、ならびに約５ｍＭ〜約２５ｍＭのＬ−ヒスチジン、約１００ｍＭ未満の薬学的に許容される塩、約０．００１％（ｗ／ｖ）〜約０．０１％（ｗ／ｖ）の非イオン性界面活性剤、および約１％（ｗ／ｖ）〜約１０％（ｗ／ｖ）の糖および／または糖アルコールを含む。ある実施形態では、薬学的に許容される塩は約０ｎＭ〜約１００ｍＭ未満である。ある実施形態では、薬学的に許容される塩は、約０ｎＭ〜約８０ｍＭ、約０ｎＭ〜約７０ｍＭ、約０ｍＭ〜約６０ｍＭ、約０ｍＭ〜約５０ｍＭ、約０ｍＭ〜約４０ｍＭ、約０ｍＭ〜約３０ｍＭ、約０ｍＭ〜約２０ｍＭ、または約０ｍＭ〜約１０ｍＭである。ある実施形態では、薬学的に許容される塩は約３０ｎＭ〜約１００ｍＭ未満である。ある実施形態では、薬学的に許容される塩は、約３０ｎＭ〜約８０ｍＭ、約３０ｎＭ〜約７０ｍＭ、約３０ｍＭ〜約６０ｍＭ、約３０ｍＭ〜約５０ｍＭ、または約３０ｍＭ〜約４０ｍＭである。ある実施形態では、非イオン性界面活性剤は、ポリソルベート２０、ポリソルベート８０、プルロニックＦ−６８、ＢＲＩＪ３５、およびそれらの組合せである。ある実施形態では、糖および／または糖アルコールは、ショ糖、トレハロース、マンニトール、およびそれらの組合せである。ある実施形態では、非イオン性界面活性剤はＰＳ８０である。ある実施形態では、薬学的に許容される塩は塩化ナトリウムである。ある実施形態では、製剤は液体製剤である。ある実施形態では、製剤は凍結乾燥製剤である。ある実施形態では、低塩医薬組成物は凍結乾燥製剤である。
【００７０】
例示的態様では、本開示の医薬組成物は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）、ならびに約５ｍＭ〜約２５ｍＭのＬ−ヒスチジン、約５０ｍＭ〜約１５０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．００１％（ｗ／ｖ）〜約０．０１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、および約１％（ｗ／ｖ）〜約１０％（ｗ／ｖ）のショ糖またはトレハロースを含む。
【００７１】
例示的態様では、本開示の医薬組成物は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）、ならびに約５ｍＭ〜約２５ｍＭのＬ−ヒスチジン、約０ｍＭ〜約１００ｍＭ未満の塩化ナトリウム、約０．００１％（ｗ／ｖ）〜約０．０１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、および約１％（ｗ／ｖ）〜約１０％（ｗ／ｖ）のショ糖またはトレハロースを含む。ある実施形態では、製剤は液体製剤である。ある実施形態では、製剤は凍結乾燥製剤である。ある実施形態では、低塩医薬組成物は凍結乾燥製剤である。
【００７２】
例示的態様では、本開示の医薬組成物は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）、ならびに約５ｍＭ〜約２５ｍＭのＬ−ヒスチジン、約３０ｍＭ〜約８０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．００１％（ｗ／ｖ）〜約０．０１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、および約１％（ｗ／ｖ）〜約１０％（ｗ／ｖ）のショ糖またはトレハロースを含む。ある実施形態では、製剤は液体製剤である。ある実施形態では、製剤は凍結乾燥製剤である。ある実施形態では、低塩医薬組成物は凍結乾燥製剤である。
【００７３】
ある実施形態では、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）、ならびに約５ｍＭ〜約２５ｍＭのＬ−ヒスチジン、約５０ｍＭ〜約１５０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．００１％（ｗ／ｖ）〜約０．０１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、および約１％（ｗ／ｖ）〜約１０％（ｗ／ｖ）のショ糖またはトレハロースを含む低塩医薬組成物を提供する。ある実施形態では、本開示の医薬組成物は、約３０ｍＭ〜約７０ｍＭのグリシンをさらに含む。ある実施形態では、製剤は液体製剤である。ある実施形態では、製剤は凍結乾燥製剤である。ある実施形態では、低塩医薬組成物は凍結乾燥製剤である。
【００７４】
ある実施形態では、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）、ならびに約５ｍＭ〜約２５ｍＭのＬ−ヒスチジン、約０ｍＭ〜約１００ｍＭ未満の塩化ナトリウム、約０．００１％（ｗ／ｖ）〜約０．０１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、および約１％（ｗ／ｖ）〜約１０％（ｗ／ｖ）のショ糖またはトレハロースを含む低塩医薬組成物を提供する。ある実施形態では、本開示の医薬組成物は、約３０ｍＭ〜約７０ｍＭのグリシンをさらに含む。ある実施形態では、医薬組成物は約８０ｍＭ未満の塩化ナトリウムを含む。ある実施形態では、医薬組成物は約７０ｍＭ未満の塩化ナトリウムを含む。ある実施形態では、医薬組成物は約６０ｍＭ未満の塩化ナトリウムを含む。ある実施形態では、医薬組成物は約５０ｍＭ未満の塩化ナトリウムを含む。ある実施形態では、医薬組成物は約４０ｍＭ未満の塩化ナトリウムを含む。ある実施形態では、医薬組成物は約３０ｍＭ未満の塩化ナトリウムを含む。ある実施形態では、医薬組成物は約０ｍＭ〜約８０ｍＭの塩化ナトリウムを含む。ある実施形態では、医薬組成物は、約０ｍＭ〜約７０ｍＭの塩化ナトリウムを含む。ある実施形態では、医薬組成物は約０ｍＭ〜約６０ｍＭの塩化ナトリウムを含む。ある実施形態では、医薬組成物は約０ｍＭ〜約５０ｍＭの塩化ナトリウムを含む。ある実施形態では、医薬組成物は約０ｍＭ〜約４０ｍＭの塩化ナトリウムを含む。ある実施形態では、医薬組成物は約０ｍＭ〜約３０ｍＭの塩化ナトリウムを含む。ある実施形態では、医薬組成物は約３０ｍＭ〜約８０ｍＭの塩化ナトリウムを含む。ある実施形態では、医薬組成物は約３０ｍＭ〜約７０ｍＭの塩化ナトリウムを含む。ある実施形態では、医薬組成物は約３０ｍＭ〜約６０ｍＭの塩化ナトリウムを含む。ある実施形態では、医薬組成物は約３０ｍＭ〜約５０ｍＭの塩化ナトリウムを含む。ある実施形態では、医薬組成物は約３０ｍＭ〜約４０ｍＭの塩化ナトリウムを含む。ある実施形態では、製剤は液体製剤である。ある実施形態では、製剤は凍結乾燥製剤である。ある実施形態では、低塩医薬組成物は凍結乾燥製剤である。
【００７５】
本開示は、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）、ならびに約２０ｍＭのＬ−ヒスチジン、約７０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．００５％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、および約５％（ｗ／ｖ）のショ糖を含む医薬組成物も提供する。ある実施形態では、医薬組成物のｐＨは約７．５±０．２でありおよび／またはオスモル濃度（osmolality）は３００±１０ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇである。
【００７６】
本開示はさらに、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）、ならびに約２０ｍＭのＬ−ヒスチジン、約６０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．００５％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、約３５ｍＭのトレハロース、および約１１０ｍＭのマンニトールを含む医薬組成物を提供する。ある実施形態では、医薬組成物のｐＨは約７．０±０．２でありおよび／またはオスモル濃度は３９０±１０ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇである。ある実施形態では、医薬組成物のｐＨは約７．０±０．２でありおよび／またはオスモル濃度は２９０±１０ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇである。
【００７７】
本開示はさらに、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）、ならびに約１０ｍＭのＬ−ヒスチジン、約１００ｍＭの塩化ナトリウム、約０．００５％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、約５％（ｗ／ｖ）のトレハロース、および約５０ｍＭのグリシンを含む医薬組成物を提供する。ある実施形態では、医薬組成物のｐＨは約７．０±０．２でありおよび／またはオスモル濃度は４００±１０ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇである。
【００７８】
本開示はさらに、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）、ならびに約１０ｍＭのＬ−ヒスチジン、約８０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．００５％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、約５％（ｗ／ｖ）のトレハロース、および約５０ｍＭのグリシンを含む、液体であってもまたは凍結乾燥（例えば、液体製剤から凍結乾燥）されてもよい医薬組成物を提供する。ある実施形態では、医薬組成物のｐＨは約７．０±０．２である。
【００７９】
本開示はさらに、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）、ならびに約１０ｍＭのＬ−ヒスチジン、約７０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．００５％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、約５％（ｗ／ｖ）のトレハロース、および約５０ｍＭのグリシンを含む、液体であってもまたは凍結乾燥（例えば、液体製剤から凍結乾燥）されてもよい医薬組成物を提供する。ある実施形態では、医薬組成物のｐＨは約７．０±０．２である。
【００８０】
本開示はさらに、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）、ならびに約１０ｍＭのＬ−ヒスチジン、約６０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．００５％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、約５％（ｗ／ｖ）のトレハロース、および約５０ｍＭのグリシンを含む、液体であってもまたは凍結乾燥（例えば、液体製剤から凍結乾燥）されてもよい医薬組成物を提供する。ある実施形態では、医薬組成物のｐＨは約７．０±０．２である。
【００８１】
本開示はさらに、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）、ならびに約１０ｍＭのＬ−ヒスチジン、約５０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．００５％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、約５％（ｗ／ｖ）のトレハロース、および約５０ｍＭのグリシンを含む、液体であってもまたは凍結乾燥（例えば、液体製剤から凍結乾燥）されてもよい医薬組成物を提供する。ある実施形態では、医薬組成物のｐＨは約７．０±０．２である。
【００８２】
本開示はさらに、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）、ならびに約１０ｍＭのＬ−ヒスチジン、約４０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．００５％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、約５％（ｗ／ｖ）のトレハロース、および約５０ｍＭのグリシンを含む、液体であってもまたは凍結乾燥（例えば、液体製剤から凍結乾燥）されてもよい医薬組成物を提供する。ある実施形態では、医薬組成物のｐＨは約７．０±０．２である。
【００８３】
本開示はさらに、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）、ならびに約１０ｍＭのＬ−ヒスチジン、約３０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．００５％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、約５％（ｗ／ｖ）のトレハロース、および約５０ｍＭのグリシンを含む、液体であってもまたは凍結乾燥（例えば、液体製剤から凍結乾燥）されてもよい医薬組成物を提供する。ある実施形態では、医薬組成物のｐＨは約７．０±０．２である。
【００８４】
本開示はさらに、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）、ならびに約１０ｍＭのＬ−ヒスチジン、約２０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．００５％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、約５％（ｗ／ｖ）のトレハロース、および約５０ｍＭのグリシンを含む、液体であってもまたは凍結乾燥（例えば、液体製剤から凍結乾燥）されてもよい医薬組成物を提供する。ある実施形態では、医薬組成物のｐＨは約７．０±０．２である。
【００８５】
本開示はさらに、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）、ならびに約１０ｍＭのＬ−ヒスチジン、約１０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．００５％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、約５％（ｗ／ｖ）のトレハロース、および約５０ｍＭのグリシンを含む、液体であってもまたは凍結乾燥（例えば、液体製剤から凍結乾燥）されてもよい医薬組成物を提供する。ある実施形態では、医薬組成物のｐＨは約７．０±０．２である。
【００８６】
本開示はさらに、アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）、ならびに約１０ｍＭのＬ−ヒスチジン、約０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．００５％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、約５％（ｗ／ｖ）のトレハロース、および約５０ｍＭのグリシンを含む、液体であってもまたは凍結乾燥（例えば、液体製剤から凍結乾燥）されてもよい医薬組成物を提供する。ある実施形態では、医薬組成物のｐＨは約７．０±０．２である。
【００８７】
追加成分
例示的実施形態では、本開示の製剤または医薬組成物は、追加の薬学的に許容される成分を含む。例示的態様では、製剤または医薬組成物は下記の内のいずれか１つまたはそれらの組合せを含む：酸性化剤、添加剤、吸着剤、エアロゾル噴射剤、空気置換剤、アルカリ化剤、固化防止剤、抗凝固剤、抗菌防腐剤、抗酸化剤、抗腐食剤、基剤、結合剤、緩衝剤、キレート剤、コーティング剤、着色剤、乾燥剤、洗浄剤、希釈剤、殺菌消毒剤、崩壊剤、分散剤、溶解促進剤、色素、軟化剤、乳化剤、乳化安定剤、充填剤、成膜剤、風味増強剤、香味剤、流動促進剤、ゲル化剤、造粒剤、保湿剤、潤滑剤、粘着付与剤、軟膏基剤、軟膏、油性ビヒクル、有機塩基、トローチ基剤、顔料、可塑剤、研磨剤、防腐剤、金属イオン封鎖剤、皮膚浸透剤、可溶化剤、溶媒、安定化剤、坐剤の基剤、表面活性剤、界面活性剤、懸濁剤、甘味剤、治療剤、粘度付与剤、等張化剤、毒性剤、増粘剤、吸水剤、水混和性共溶媒、軟水化剤または湿潤剤など。一部の実施形態では、本開示の製剤または医薬組成物は下記の成分の内のいずれか１つまたはそれらの組合せを含む：アカシア、アセスルファムカリウム、アセチルクエン酸トリブチル、アセチルクエン酸トリエチル、寒天、アルブミン、アルコール、脱水アルコール、変性アルコール、希アルコール、アロイリット酸、アルギン酸、脂肪族ポリエステル、アルミナ、水酸化アルミニウム、ステアリン酸アルミニウム、アミロペクチン、α−アミロース、アスコルビン酸、アスコルビルパルミタート、アスパルテーム、注射用静菌水、ベントナイト、マグマベントナイト、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、安息香酸、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、ブロノポール、ブチル化ヒドロキシアニソール、ブチル化ヒドロキシトルエン、ブチルパラベン、ブチルパラベンナトリウム、アルギン酸カルシウム、アスコルビン酸カルシウム、炭酸カルシウム、シクラミン酸カルシウム、無水リン酸水素カルシウム、脱水リン酸水素カルシウム、リン酸三カルシウム、プロピオン酸カルシウム、ケイ酸カルシウム、ソルビン酸カルシウム、ステアリン酸カルシウム、硫酸カルシウム、硫酸カルシウム半水和物、キャノーラ油、カルボマー、二酸化炭素、カルボキシメチルセルロースカルシウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム、β−カロテン、カラギーナン、ひまし油、硬化ひまし油、カチオン性乳化ワックス、酢酸セルロース、酢酸フタル酸セルロース、エチルセルロース、微結晶セルロース、粉末セルロース、ケイ化微結晶セルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、セトステアリルアルコール、セトリミド、セチルアルコール、クロルヘキシジン、クロロブタノール、クロロクレゾール、コレステロール、酢酸クロルヘキシジン、グルコン酸クロルヘキシジン、塩酸クロルヘキシジン、クロロジフルオロエタン（ＨＣＦＣ）、クロロジフルオロメタン、クロロフロオロカーボン（ＣＦＣ）クロロフェノキシエタノール、クロロキシレノール、コーンシロップ固体、無水クエン酸、クエン酸一水和物、カカオバター、着色剤、コーン油、綿実油、クレゾール、ｍ−クレゾール、ｏ−クレゾール、ｐ−クレゾール、クロスカルメロースナトリウム、クロスポビドン、シクラ��ン酸、シクロデキストリン、デキストレート、デキストリン、ブドウ糖、ブドウ糖（無水）、ジアゾリジニル尿素、フタル酸ジブチル、セバシン酸ジブチル、ジエタノールアミン、フタル酸ジエチル、ジフルオロエタン（ＨＦＣ）、ジメチル−β−シクロデキストリン、Ｃａｐｔｉｓｏｌ（登録商標）などのシクロデキストリンタイプの化合物、ジメチルエーテル、フタル酸ジメチル、エデト酸二カリウム、エデト酸二ナトリウム、リン酸水素二ナトリウム、ドクサートカルシウム、ドクサートカリウム、ドクサートナトリウム、没食子酸ドデシル、ドデシルトリメチルアンモニウムブロミド、エデト酸カルシウム二ナトリウム、エデト酸、エグルミン、エチルアルコール、エチルセルロース、没食子酸エチル、ラウリン酸エチル、エチルマルトール、オレイン酸エチル、エチルパラベン、エチルパラベンカリウム、エチルパラベンナトリウム、エチルバニリン、フルクトース、フルクトース液、粉砕フルクトース、フルクトース（パイロジェンフリー）、粉末フルクトース、フマル酸、ゼラチン、グルコース、液体グルコース、飽和植物脂肪酸のグリセリド混合物、グリセリン、ベヘン酸グリセリル、モノオレイン酸グリセリル、モノステアリン酸グリセリル、自己乳化型モノステアリン酸グリセリル、パルミトステアリン酸グリセリル、グリシン、グリコール、グリコフロール、グアーガム、ヘプタフルオロプロパン（ＨＦＣ）、ヘキサデシルトリメチルアンモニウムブロミド、高フルクトースシロップ、ヒト血清アルブミン、炭化水素（ＨＣ）、希塩酸、硬化植物油タイプＩＩ、ヒドロキシエチルセルロース、２−ヒドロキシエチル−β−シクロデキストリン、ヒドロキシプロピルセルロース、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、２−ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、イミド尿素、インジゴカルミン、イオン交換体、酸化鉄、イソプロピルアルコール、ミリスチン酸イソプロピル、パルミチン酸イソプロピル、等張食塩水、カオリン、乳酸、ラクチトール、ラクトース、ラノリン、ラノリンアルコール、無水ラノリン、レシチン、ケイ酸アルミニウムマグネシウム、炭酸マグネシウム、正炭酸マグネシウム、炭酸マグネシウム（無水）、炭酸水酸化マグネシウム、水酸化マグネシウム、ラウリル硫酸マグネシウム、酸化マグネシウム、ケイ酸マグネシウム、ステアリン酸マグネシウム、三ケイ酸マグネシウム、三ケイ酸マグネシウム（無水）、リンゴ酸、麦芽、マルチトール、マルチトール溶液、マルトデキストリン、マルトール、マルトース、マンニトール、中鎖トリグリセリド、メグルミン、メントール、メチルセルロース、メチルメタクリラート、オレイン酸メチル、メチルパラベン、メチルパラベンカリウム、メチルパラベンナトリウム、微結晶セルロースおよびカルボキシメチルセルロースナトリウム、鉱物油、軽鉱物油、鉱物油およびラノリンアルコール、油、オリーブ油、モノエタノールアミン、モンモリロナイト、没食子酸オクチル、オレイン酸、パルミチン酸、パラフィン、ピーナッツ油、ワセリン、ワセリンおよびラノリンアルコール、医薬用グレーズ、フェノール、液状フェノール、フェノ��シエタノール、フェノキシプロパノール、フェニルエチルアルコール、酢酸フェニル水銀、ホウ酸フェニル水銀、硝酸フェニル水銀、ポラクリリン、ポラクリリンカリウム、ポロキサマー、ポリデキストロース、ポリエチレングリコール、ポリエチレンオキシド、ポリアクリラート、ポリエチレン−ポリオキシプロピレン−ブロックポリマー、ポリメタクリラート、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンひまし油誘導体、ポリオキシエチレンソルビトール脂肪酸エステル、ステアリン酸ポリオキシエチレン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、アルギン酸カリウム、安息香酸カリウム、炭酸水素カリウム、亜硫酸水素カリウム、塩化カリウム、クエン酸カリウム、クエン酸カリウム（無水）、リン酸水素カリウム、ピロ亜硫酸カリウム、リン酸二水素カリウム、プロピオン酸カリウム、ソルビン酸カリウム、ポビドン、プロパノール、プロピオン酸、炭酸プロピレン、プロピレングリコール、アルギン酸プロピレングリコール、没食子酸プロピル、プロピルパラベン、プロピルパラベンカリウム、プロピルパラベンナトリウム、硫酸プロタミン、ナタネ油、リンゲル液、サッカリン、サッカリンアンモニウム、サッカリンカルシウム、サッカリンナトリウム、ベニバナ油、サポナイト、血清タンパク質、ゴマ油、コロイドシリカ、コロイド状二酸化ケイ素、アルギン酸ナトリウム、アスコルビン酸ナトリウム、安息香酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、亜硫酸水素ナトリウム、塩化ナトリウム、クエン酸ナトリウム（無水）、クエン酸ナトリウム（脱水）、塩化ナトリウム、シクラミン酸ナトリウム、エデト酸ナトリウム、ドデシル硫酸ナトリウム、ラウリル硫酸ナトリウム、ピロ亜硫酸ナトリウム、リン酸水素二ナトリウム、リン酸ナトリウム、リン酸二水素ナトリウム、プロピオン酸ナトリウム（無水）、プロピオン酸ナトリウム、ソルビン酸ナトリウム、デンプングリコール酸ナトリウム、フマル酸ステアリルナトリウム、亜硫酸ナトリウム、ソルビン酸、ソルビタンエステル（ソルビタン脂肪酸エステル）、ソルビトール、ソルビトール液７０％、ダイズ油、鯨蝋、デンプン、トウモロコシデンプン、ジャガイモデンプン、アルファ化デンプン、滅菌可能なトウモロコシデンプン、ステアリン酸、精製ステアリン酸、ステアリルアルコール、ショ糖、糖、圧縮用砂糖、粉砂糖、製菓用砂糖、白糖球状顆粒、転化糖、Ｓｕｇａｒｔａｂ、サンセットイエローＦＣＦ、合成パラフィン、タルク、酒石酸、タートラジン、テトラフルオロエタン（ＨＦＣ）、カカオ油、チメロサール、二酸化チタン、アルファトコフェロール、酢酸トコフェロール、α−トコフェロールコハク酸エステル、β−トコフェロール、δ−トコフェロール、γ−トコフェロール、トラガカント、トリアセチン、クエン酸トリブチル、トリエタノールアミン、クエン酸トリエチル、トリメチル−β−シクロデキストリン、臭化トリメチルテトラデシルアンモニウム、トリスバッファー、エデト酸三ナトリウム、バニリン、タイプＩの硬化植物油、水、軟水、硬水、二酸化炭素を含まない水、発熱性物質除去水、注射用水、吸入用滅菌水、注射用滅菌水、灌水用滅菌水、ワックス、アニオン性乳剤ワックス、カルナバロウ、カ���オン性乳化ワックス、セチルエステルワックス、マイクロクリスタリンワックス、非イオン性乳剤ワックス、坐剤用蝋、白蝋、黄蝋、白色ワセリン、羊毛蝋、キサンタンガム、キシリトール、ゼイン、プロピオン酸亜鉛、亜鉛塩、ステアリン酸亜鉛、あるいは、Remington’s Pharmaceutical Sciences, Sixteenth Edition, E. W. Martin (Mack Publishing Co., Easton, Pa., 1980)Handbook of Pharmaceutical Excipients, Third Edition, A. H. Kibbe (Pharmaceutical Press, London, UK, 2000)（参照によりその全体が組み込まれる）に記載の任意の賦形剤。Remington’s Pharmaceutical Sciences, Sixteenth Edition, E. W. Martin (Mack Publishing Co., Easton, Pa., 1980)（あらゆる意図される目的のために参照によりその全てが本明細書に組み込まれる）は、薬学的に許容される組成物を調製するのに用いられるさまざまな成分、ならびにそれを調製するための公知技術を開示する。あらゆる従来の薬剤について、それが本医薬組成物と不適合である場合を除いて、医薬組成物におけるその使用が企図されている。例示的実施形態では、本開示の製剤または医薬組成物は、上記の成分の１つまたは組合せを含まない。例示的実施形態では、本開示の製剤または医薬組成物は、これら成分のいずれも含まない。例示的態様では、本開示の医薬組成物はデキストランを含まない。例示的態様では、本開示の医薬組成物は塩化カルシウムを含まない。
【００８８】
ｐＨ
例示的実施形態では、本開示の医薬組成物は生理学的に適合するｐＨを有する。従って、ある実施形態では、製剤を中性ｐＨに維持するのに適した緩衝剤を含有するＡＡＶ製剤を提供する。
【００８９】
例示的態様では、医薬組成物のｐＨは、約６．５〜約９．０、約６．５〜約８．０、約６．９〜約７．７、または約７．０〜約７．５である。ある実施形態では、製剤のｐＨは、約６．５または約６．６、約６．７、約６．８、約６．９、約７．０、約７．１、約７．２、約７．３、約７．４、約７．５、約７．６、約７．７、約７．８、約７．９、約８．０、約８．１、約８．２、約８．３、約８．４、約８．５、約８．６、約８．７、約８．８、約８．９、または約９．０である。例示的態様では、医薬組成物のｐＨは約７．０または約７．５である。ある実施形態では、医薬組成物のｐＨは約７．０である。ある実施形態では、医薬組成物のｐＨは約７．５である。
【００９０】
オスモル濃度
例示的実施形態では、本開示の医薬組成物は、約２００〜約４００ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ、約２５０〜約４００ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ、または約２９０〜約３９０ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇのオスモル濃度を有する。ある実施形態では、本明細書に提供されるＡＡＶ製剤は、例えば、約２００ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、約２１０ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、約２２０ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、約２３０ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、約２４０ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、約２５０ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、約２６０ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、約２７０ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、約２８０ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、約２９０ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、約３００ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、約３１０ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、約３２０ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、約３３０ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、約３４０ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、約３５０ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、約３６０ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、約３７０ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、約３８０ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、約３９０ｍＯｓｍｏｌ／Ｌ、または約４００ｍＯｓｍｏｌ／Ｌのオスモル濃度を有する。例示的態様では、本開示の医薬組成物は、約２５０ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇ〜約４００ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇのオスモル濃度を有する。例示的態様では、本開示の医薬組成物は約３００±１０ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇまたは約３８０±１０ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇのオスモル濃度を有する。ある実施形態では、本開示の医薬組成物は約３００±１０ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇのオスモル濃度を有する。ある実施形態では、本開示の医薬組成物は約３８０±１０ｍＯｓｍｏｌ／ｋｇのオスモル濃度を有する。
【００９１】
本明細書に提供される製剤で使用されうる等張化剤の例として、限定はされないが、塩化ナトリウム、ブドウ糖、ショ糖、キシリトール、フルクトース、グリセロール、ソルビトール、マンニトール、トレハロース、塩化カリウム、マンノース、塩化カルシウム、塩化マグネシウム、他の無機塩、他の糖、他の糖アルコール、およびそれらの組合せが挙げられる。ある実施形態では、ＡＡＶ製剤は、少なくとも１つの等張化剤、または少なくとも２つ、３つ、４つ、５つ、またはそれ以上の等張化剤を含みうる。
【００９２】
ＡＡＶ
例示的実施形態では、本開示の医薬組成物はＡＡＶを含む。ＡＡＶは任意のＡＡＶ血清型であってよい。例示的態様では、ＡＡＶは、ＡＡＶ１血清型、ＡＡＶ２血清型、ＡＡＶ３血清型、ＡＡＶ４血清型、ＡＡＶ５血清型、ＡＡＶ６血清型、ＡＡＶ７血清型、ＡＡＶ８血清型、ＡＡＶ９血清型、またはＡＡＶ１０血清型であってよい。例示的態様では、ＡＡＶはＡＡＶ８血清型である。
【００９３】
本明細書に提供される製剤のある実施形態では、ＡＡＶは、米国特許出願公開第２０１７／０２３３４５５号および米国仮特許出願第６２／５０９，６１６号（その両方は、その全てがおよび全ての目的のために参照により本明細書に組み込まれる）に記載されているようなｒＡＡＶである。
【００９４】
例示的態様では、医薬組成物は高タイターのＡＡＶ生成物を含む。例示的態様では、医薬組成物は少なくとも約１０１０ウイルス粒子（ｖｐ）、または少なくとも約１０１１ウイルス粒子（ｖｐ）、または少なくとも約１０１２ウイルス粒子（ｖｐ）、または少なくとも約１０１３ウイルス粒子（ｖｐ）を含む。例示的態様では、医薬組成物は、少なくとも約１０１４ウイルス粒子（ｖｐ）または少なくとも約１０１５ウイルス粒子（ｖｐ）、例えば少なくとも約２ｘ１０１５ウイルス粒子（ｖｐ）、少なくとも約５ｘ１０１５ウイルス粒子（ｖｐ）を含む。医薬組成物は、約１０１０ベクターゲノム（ｖｇ）、または少なくとも約１０１１ベクターゲノム（ｖｇ）、または少なくとも約１０１２ベクターゲノム（ｖｇ）、または少なくとも約１０１３ベクターゲノム（ｖｇ）も含む。例示的態様では、医薬組成物は、少なくとも約１０１４ベクターゲノム（ｖｇ）、または少なくとも約１０１５ベクターゲノム（ｖｇ）、例えば少なくとも約２ｘ１０１５ベクターゲノム（ｖｇ）、少なくとも約５ｘ１０１５ベクターゲノム（ｖｇ）を含む。
【００９５】
製造方法および使用
ＡＡＶを含む医薬組成物を調製する方法をここにさらに提供する。例示的態様では、その方法は、約５ｍＭ〜約２５ｍＭの緩衝剤、約５０ｍＭ〜約１５０ｍＭまたは約１００ｍＭ未満の薬学的に許容される塩、約０．００１％（ｗ／ｖ）〜約０．０１％（ｗ／ｖ）の非イオン性界面活性剤、約１％（ｗ／ｖ）〜約１０％（ｗ／ｖ）の糖および／または糖アルコール、ならびにＡＡＶを配合し、それによってＡＡＶを含む医薬組成物を得ることを含む。例示的態様では、その方法は、約５ｍＭ〜約２５ｍＭの緩衝剤、約５０ｍＭ〜約１５０ｍＭまたは約１００ｍＭ未満の薬学的に許容される塩、約０．００１％（ｗ／ｖ）〜約０．０１％（ｗ／ｖ）の非イオン性界面活性剤、約１％（ｗ／ｖ）〜約１０％（ｗ／ｖ）の糖および／または糖アルコールを含む組成物、例えば水溶液を調製し、さらにその組成物にＡＡＶを添加することを含む。例示的態様では、その方法は、約２０ｍＭの緩衝剤、約７０ｍＭの薬学的に許容される塩、約０．００５％（ｗ／ｖ）の非イオン性界面活性剤、および約５％（ｗ／ｖ）の糖および／または糖アルコールを含む組成物、例えば水溶液を調製し、さらにその組成物にＡＡＶを添加することを含む。例示的態様では、その方法は、約１０ｍＭの緩衝剤、約１００ｍＭの薬学的に許容される塩、約０．００５％（ｗ／ｖ）の非イオン性界面活性剤、約５％（ｗ／ｖ）の糖および／または糖アルコール、および約５０ｍＭのグリシンを含む組成物、例えば水溶液を調製し、さらにその組成物にＡＡＶを添加することを含む。例示的態様では、その方法は、約１０ｍＭの緩衝剤、約８０ｍＭの薬学的に許容される塩、約０．００５％（ｗ／ｖ）の非イオン性界面活性剤、約５％（ｗ／ｖ）の糖および／または糖アルコール、および約５０ｍＭのグリシンを含む組成物、例えば水溶液を調製し、さらにその組成物にＡＡＶを添加することを含む。例示的態様では、その方法は、約１０ｍＭの緩衝剤、約７０ｍＭの薬学的に許容される塩、約０．００５％（ｗ／ｖ）の非イオン性界面活性剤、約５％（ｗ／ｖ）の糖および／または糖アルコール、および約５０ｍＭのグリシンを含む組成物、例えば水溶液を調製し、さらにその組成物にＡＡＶを添加することを含む。例示的態様では、その方法は、約１０ｍＭの緩衝剤、約６０ｍＭの薬学的に許容される塩、約０．００５％（ｗ／ｖ）の非イオン性界面活性剤、約５％（ｗ／ｖ）の糖および／または糖アルコール、および約５０ｍＭのグリシンを含む組成物、例えば水溶液を調製し、さらにその組成物にＡＡＶを添加することを含む。例示的態様では、その方法は、約１０ｍＭの緩衝剤、約５０ｍＭの薬学的に許容される塩、約０．００５％（ｗ／ｖ）の非イオン性界面活性剤、約５％（ｗ／ｖ）の糖および／または糖アルコール、および約５０ｍＭのグリシンを含む組成物、例えば水溶液を調製し、さらにその組成物にＡＡＶを添加することを含む。例示的態様では、その方法は、約１０ｍＭの緩衝剤、約４０ｍＭの薬学的に許容される塩、約０．００５％（ｗ／ｖ）の非イオン性界面活性剤、約５％（ｗ／ｖ）の糖および／または糖アルコール、および約５０ｍＭのグリシンを含む組成物、例えば水溶液を調製し、さらにその組成物にＡＡＶを添加することを含む。例示的態様では、その方法は、約１０ｍＭの緩衝剤、約３０ｍＭの薬学的に許容される塩、約０．００５％（ｗ／ｖ）の非イオン性界面活性剤、約５％（ｗ／ｖ）の糖および／または糖アルコール、および約５０ｍＭのグリシンを含む組成物、例えば水溶液を調製し、さらにその組成物にＡＡＶを添加することを含む。例示的態様では、その方法は、約１０ｍＭの緩衝剤、約２０ｍＭの薬学的に許容される塩、約０．００５％（ｗ／ｖ）の非イオン性界面活性剤、約５％（ｗ／ｖ）の糖および／または糖アルコール、および約５０ｍＭのグリシンを含む組成物、例えば水溶液を調製し、さらにその組成物にＡＡＶを添加することを含む。例示的態様では、その方法は、約１０ｍＭの緩衝剤、約１０ｍＭの薬学的に許容される塩、約０．００５％（ｗ／ｖ）の非イオン性界面活性剤、約５％（ｗ／ｖ）の糖および／または糖アルコール、および約５０ｍＭのグリシンを含む組成物、例えば水溶液を調製し、さらにその組成物にＡＡＶを添加することを含む。例示的態様では、その方法は、約１０ｍＭの緩衝剤、約０ｍＭの薬学的に許容される塩、約０．００５％（ｗ／ｖ）の非イオン性界面活性剤、約５％（ｗ／ｖ）の糖および／または糖アルコール、および約５０ｍＭのグリシンを含む組成物、例えば水溶液を調製し、さらにその組成物にＡＡＶを添加することを含む。例示的態様では、その方法は、約２０ｍＭの緩衝剤、約６０ｍＭの薬学的に許容される塩、約０．００５％（ｗ／ｖ）の非イオン性界面活性剤、約３５ｍＭの糖および／または糖アルコール、および約１１０ｍＭのマンニトールを含む組成物、例えば水溶液を調製し、さらにその組成物にＡＡＶを添加することを含む。ある実施形態では、水溶液は凍結乾燥される。
【００９６】
ＡＡＶを含む医薬組成物を調製する方法をここにさらに提供する。例示的態様では、その方法は、約５ｍＭ〜約２５ｍＭのＬ−ヒスチジン、約５０ｍＭ〜約１５０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．００１％（ｗ／ｖ）〜約０．０１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、約１％（ｗ／ｖ）〜約１０％（ｗ／ｖ）のショ糖またはトレハロース、ならびにＡＡＶを配合し、それによってＡＡＶを含む医薬組成物を得ることを含む。例示的態様では、その方法は、約５ｍＭ〜約２５ｍＭのＬ−ヒスチジン、約５０ｍＭ〜約１５０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．００１％（ｗ／ｖ）〜約０．０１％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、および約１％（ｗ／ｖ）〜約１０％（ｗ／ｖ）のショ糖またはトレハロースを含む組成物、例えば水溶液を調製し、さらにその組成物にＡＡＶを添加することを含む。例示的態様では、その方法は、約２０ｍＭのＬ−ヒスチジン、約７０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．００５％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、および約５％（ｗ／ｖ）のショ糖を含む組成物、例えば水溶液を調製し、さらにその組成物にＡＡＶを添加することを含む。例示的態様では、その方法は、約１０ｍＭのＬ−ヒスチジン、約１００ｍＭの塩化ナトリウム、約０．００５％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、約５％（ｗ／ｖ）のトレハロース、および約５０ｍＭのグリシンを含む組成物、例えば水溶液を調製し、さらにその組成物にＡＡＶを添加することを含む。例示的態様では、その方法は、約１０ｍＭのＬ−ヒスチジン、約８０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．００５％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、約５％（ｗ／ｖ）のトレハロース、および約５０ｍＭのグリシンを含む組成物、例えば水溶液を調製し、さらにその組成物にＡＡＶを添加することを含む。例示的態様では、その方法は、約１０ｍＭのＬ−ヒスチジン、約７０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．００５％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、約５％（ｗ／ｖ）のトレハロース、および約５０ｍＭのグリシンを含む組成物、例えば水溶液を調製し、さらにその組成物にＡＡＶを添加することを含む。例示的態様では、その方法は、約１０ｍＭのＬ−ヒスチジン、約６０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．００５％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、約５％（ｗ／ｖ）のトレハロース、および約５０ｍＭのグリシンを含む組成物、例えば水溶液を調製し、さらにその組成物にＡＡＶを添加することを含む。例示的態様では、その方法は、約１０ｍＭのＬ−ヒスチジン、約５０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．００５％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、約５％（ｗ／ｖ）のトレハロース、および約５０ｍＭのグリシンを含む組成物、例えば水溶液を調製し、さらにその組成物にＡＡＶを添加することを含む。例示的態様では、その方法は、約１０ｍＭのＬ−ヒスチジン、約４０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．００５％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、約５％（ｗ／ｖ）のトレハロース、および約５０ｍＭのグリシンを含む組成物、例えば水溶液を調製し、さらにその組成物にＡＡＶを添加することを含む。例示的態様では、その方法は、約１０ｍＭのＬ−ヒスチジン、約３０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．００５％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、約５％（ｗ／ｖ）のトレハロース、および約５０ｍＭのグリシンを含む組成物、例えば水溶液を調製し、さらにその組成物にＡＡＶを添加することを含む。例示的態様では、その方法は、約１０ｍＭのＬ−ヒスチジン、約２０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．００５％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、約５％（ｗ／ｖ）のトレハロース、および約５０ｍＭのグリシンを含む組成物、例えば水溶液を調製し、さらにその組成物にＡＡＶを添加することを含む。例示的態様では、その方法は、約１０ｍＭのＬ−ヒスチジン、約１０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．００５％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、約５％（ｗ／ｖ）のトレハロース、および約５０ｍＭのグリシンを含む組成物、例えば水溶液を調製し、さらにその組成物にＡＡＶを添加することを含む。例示的態様では、その方法は、約１０ｍＭのＬ−ヒスチジン、約０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．００５％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、約５％（ｗ／ｖ）のトレハロース、および約５０ｍＭのグリシンを含む組成物、例えば水溶液を調製し、さらにその組成物にＡＡＶを添加することを含む。例示的態様では、その方法は、約２０ｍＭのＬ−ヒスチジン、約６０ｍＭの塩化ナトリウム、約０．００５％（ｗ／ｖ）のポリソルベート８０（ＰＳ８０）、約３５ｍＭのトレハロース、および約１１０ｍＭのマンニトールを含む組成物、例えば水溶液を調製し、さらにその組成物にＡＡＶを添加することを含む。ある実施形態では、水溶液は凍結乾燥される。
【００９７】
ある実施形態では、凍結乾燥を用いて脱水組成物を作成し、従って組成物（例えばＡＡＶを含有する組成物）は凍結乾燥組成物である。一部の例では、凍結乾燥組成物は、組成物中の水が気体から固体へと相転移する昇華により組成物から水が除去された組成物である。例えば、凍結乾燥組成物は、組成物を凍結（すなわち、組成物中の水を凍結）し、さらにその後、組成物中の水が昇華するように組成物周囲の圧力を低下させることにより、組成物から水が除去された組成物であってよい。上述したように、凍結乾燥組成物は、カールフィッシャー（ＫＦ）滴定法により測定したときに、２５％以下、または２０％以下、または１５％以下、または１０％以下、または９％以下、または８％以下、または７％以下、または６％以下、または５％以下、または４％以下、または３％以下、または２％以下、または１％以下、または０．５％以下、または０．２５％以下、または０．１％以下の水のように、少量で水を含む組成物であってよい。ある実施形態では、凍結乾燥組成物は、カールフィッシャー滴定法で測定したときに３％以下の水を有する。ある実施形態では、凍結乾燥組成物は、カールフィッシャー滴定法で測定したときに２％以下の水を有する。ある実施形態では、凍結乾燥組成物は、カールフィッシャー滴定法で測定したときに１％以下の水を有する。ある実施形態では、凍結乾燥組成物は、カールフィッシャー滴定法で測定したときに０．５％以下の水を有する。
【００９８】
凍結乾燥中、例えば組成物中の水の凝固点（氷点）より低い温度まで、組成物の温度を低下させてよい。例えば、０℃以下、または−５℃以下、または−１０℃以下、または−１５℃以下、または−２０℃以下、または−２５℃以下、または３０℃以下、または−３５℃以下、または−４０℃以下、または−４５℃以下、または−５０℃以下、または５５℃以下、または−６０℃以下、または−６５℃以下、または−７５℃以下まで、組成物の温度を低下させてよい。一部の例では、組成物の温度を−２０℃まで低下させる。一部の例では、組成物の温度を≦−６０℃（設定値−８０℃）まで低下させる。
【００９９】
ある実施形態では、組成物の周囲の圧力を標準大気圧より低い圧力に低下させる。例えば、組成物の周囲の圧力を５００トル（約６６．７ｋＰａ）以下、例えば、２５０トル（約３３．３ｋＰａ）以下、または１００トル（約１３．３ｋＰａ）以下、または５０トル（約６．６７ｋＰａ）以下、または１０トル（約１．３３ｋＰａ）以下、または１トル（約０．１３３ｋＰａ）以下、または５００ミリトル（約６６．７Ｐａ）以下、または４００ミリトル（約５３．３Ｐａ）以下、または３００ミリトル（約４０Ｐａ）以下、または２００ミリトル（約２６．７Ｐａ）以下、または１００ミリトル（約１３．３Ｐａ）以下、または９０ミリトル（約１２Ｐａ）以下、または８０ミリトル（約１０．７Ｐａ）以下、または７０ミリトル（約９．３３Ｐａ）以下、または６０ミリトル（約８Ｐａ）以下、または５０ミリトル（約６．６７Ｐａ）以下、または４０ミリトル（約５．３３Ｐａ）以下、または３０ミリトル（約４Ｐａ）以下、または２０ミリトル（約２．６７Ｐａ）以下、または１０ミリトル（約１．３３Ｐａ）以下、または５ミリトル（約０．６６７Ｐａ）以下、または１ミリトル（約０．１３３Ｐａ）以下に低下させてよい。一部の例では、組成物の周囲の圧力を４０〜５０ミリトル（約５．３３Ｐａ〜約６．６７Ｐａ）以下、および例えば１．５〜２ミリトル（約０．２Ｐａ〜約０．２６７Ｐａ）に低下させる。
【０１００】
一部の実施形態では、凍結乾燥することは、組成物の周囲の圧力を低下させながら組成物の温度を上昇させることも含む。例えば、組成物の温度を、上記の最低温度からその最低温度よりも高い温度まで上昇させてよい。一部の例では、低下した周囲圧力で組成物中の水の昇華を促進させるために温度を高める。
【０１０１】
凍結乾燥ＡＡＶ組成物を作成する方法の実施形態は、水性濃縮組成物を作成することも含んでいてよく、その後その組成物を凍結乾燥する。
【０１０２】
例示的態様では、その方法は、例えばガラスバイアルまたはプラスチックチューブなどのガラスまたはプラスチック容器内にＡＡＶを含む組成物を入れることを含む。例示的態様では、ガラスまたはプラスチック容器は、当業界で知られている、市販されている、および／または本明細書に記載されている（例えば、実施例３を参照のこと）もののいずれかである。例示的態様では、その方法は、約０．１ｍＬ〜約１０ｍｌのＡＡＶを含む組成物をガラスまたはプラスチック容器内に入れることを含む。例示的態様では、その方法は、約０．２ｍＬ〜約６ｍｌ（例えば、約０．２ｍｌ、約０．３ｍｌ、約０．５ｍｌ、約５．６ｍｌ）のＡＡＶを含む組成物をガラスまたはプラスチック容器内に入れることを含む。医薬組成物を調製する方法は本明細書に記載されている（例えば実施例１および２を参照のこと）。
【０１０３】
容器中に組成物を提供すると、無菌組成物として組成物を維持することを容易にできる。例えば、無菌環境で容器中に封入された組成物を維持するように容器を構成してよい。従って、容器は密封容器であってよく、例えば、容器は、水密および／または気密シールなどの、シールを含んでいてよい。使用者が容器の内容物を利用できるように、シールは容器から取り外し可能であってよい。一部の例では、シールは脆弱なシールであってよく、あるいは他の例では、シールを容器から取り外すことなく針、カニューレまたはシリンジを容器の内部に挿入できるようにシールを構成してもよい。一部の例では、シールを容器から取り外すことなく容器の内部に接近できるように構成されたシールは、対象への組成物の投与の前に無菌環境に容器の内容物（例えば容器中の組成物）を維持することを容易にできる。シールの適切な材料として、例えば、限定はされないが、シリコンゴム、天然ゴム、スチレンブタジエンゴム、エチレン−プロピレンコポリマー、ポリクロロプレン、ポリアクリラート、ポリブタジエン、ポリウレタン、スチレンブタジエン等、およびそれらの組合せなどのゴムまたはポリマーシールが挙げられる。例えば、ある実施形態では、シールは、針、シリンジ、またはカニューレにより貫通可能な隔膜である。シールは、容器中の試料への便利なアクセス、ならびに容器の開口部を覆う保護バリアも提供することができる。一部の例では、シールは、ねじ込み型キャップまたはスナップオンキャップ、あるいは容器の開口部に適用できる他の適切なシール要素などの、取り外し可能なシールである。例えば、容器に試料を添加する前または後に、ねじ込み型キャップを開口部にねじ込むことができる。
【０１０４】
一部の例では、容器は単位用量容器(unit dosage container)である。単位用量容器は、対象への投与のための１または複数の単位用量を含む容器を意味する。一部の実施形態では、単位用量容器は、対象において所望の効果をもたらすのに十分な量で計算された所定量の対象組成物を含む。組成物のある実施形態は、正確な投薬量の個別投与に適した単位用量容器中に提供されうる。対象に投与される活性組成物の量は、治療されている対象、苦痛の重篤性、および投与方法によって異なりうる。例えば、単位用量容器は、治療されている対象において所望の効果を達成するのに有効な量で本明細書に開示される投与すべき組成物の量を含みうる。ある例では、単位用量容器は、治療有効量でＡＡＶを有する組成物を含む。ある実施形態では、単位用量容器はバイアルである。一部の例では、バイアルは、（例えば密封容器に関して上述したような）密封されたバイアルである。
【０１０５】
容器は、ＡＡＶおよび組成物の他の成分と適合する任意の都合のよい材料からなるものでよい。例えば、容器は、固体（例えば凍結乾燥組成物）を含むように構成された固体適合性容器であってよい。一部の例では、容器は、液体を含むように構成された液体適合性容器である。容器は、固体および液体を含むように構成された固体および液体に適合性の容器であってもよい。一部の例では、容器中の液体は水性液体であってよく、その場合、容器は水性組成物に適合性のものであってよい。「適合性」とは、容器が液体および／または組成物あるいは容器と接触する他の成分と実質的に不活性である（例えば、有意には反応しない）ことを意味する。適切な容器材料の例として、限定はされないが、ガラスおよびプラスチックが挙げられる。例えば、容器は、限定はされないが、ケイ酸塩ガラス、ホウケイ酸塩ガラス、ホウケイ酸ナトリウムガラス（例えばＰＹＲＥＸ（登録商標））、溶融石英ガラス、溶融シリカガラスなどのガラスでできていてよい。容器のための適切な容器材料の他の例として、限定はされないが、ポリプロピレン、ポリメチルペンテン、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）、パーフルオロエーテル（ＰＦＥ）、フッ素化エチレンプロピレン（ＦＥＰ）、パーフルオロアルコキシアルカン（ＰＦＡ）、ポリエチレンテレフタラート（ＰＥＴ）、ポリエチレン（ＰＥ）、ポリエーテルエーテルケトン（ＰＥＥＫ）、ポリスチレン等などのプラスチックが挙げられる。ある例では、上記のように、容器はバイアルであってよく、従ってガラスバイアルであってよい。上記のように、容器は密封容器であってよく、従って密封ガラスバイアルであってよい。
【０１０６】
例示的態様では、ガラスまたはプラスチック容器中に入れられるＡＡＶを含む組成物の体積は、約０．１ｍｌ〜約１０ｍｌ、約０．１ｍｌ〜約５ｍｌ、約０．２ｍｌ〜約６ｍｌ、約０．２ｍｌ〜約５ｍｌ、約０．２５ｍｌ〜約５ｍｌ、約２ｍｌ〜約５ｍｌ、約２．５ｍｌ〜約５ｍｌ、約３ｍｌ〜約５ｍｌ、約４ｍｌ〜約５ｍｌ、約５ｍｌ〜約１０ｍｌ、約６ｍｌ〜約９ｍｌ、または約７ｍｌ〜約８ｍｌである。例示的態様では、その体積は、約０．１ｍｌ、約０．２ｍｌ、約０．２５ｍｌ、約０．３ｍｌ、約０．４、約０．５ｍｌ、約０．６ｍｌ、約０．７ｍｌ．約０．７５ｍｌ、約０．８ｍｌ、約０．９ｍｌ、約１ｍｌ、約２ｍｌ、約２．５ｍｌ、約３ｍｌ、約４ｍｌ、約５ｍｌ、約５．５ｍｌ、約５．６ｍｌ、約６ｍｌ、約７ｍｌ、約７．５ｍｌ、約８ｍｌ、約９ｍｌ、または約１０ｍｌである。
【０１０７】
例示的態様では、ＡＡＶを含む組成物は、約−８０℃〜約−１０℃の温度で少なくとも１ヶ月（例えば少なくとも２ヶ月、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月）保管される。例示的態様では、ＡＡＶを含む組成物は、約−６０℃〜約−２０℃の温度で少なくとも１ヶ月（例えば少なくとも２ヶ月、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月）保管される。例示的態様では、ＡＡＶを含む組成物は、３、４、５、６ヶ月またはそれ以上保管される。組成物を保管する方法は本明細書に記載されている（例えば実施例１〜３を参照のこと）。例示的態様では、最初のＡＡＶの量（例えば保管前の組成物中のＡＡＶの量）の８０％超が、保管期間（例えば、約３ヶ月、約４ヶ月、約５ヶ月、約６ヶ月またはそれ以上の保管期間）後に効力を有する。例示的態様では、最初のＡＡＶの量の９０％超が、保管期間（例えば、約３ヶ月、約４ヶ月、約５ヶ月、約６ヶ月またはそれ以上の保管期間）後に効力を有する。例示的態様では、最初のＡＡＶの量の９５％超が、保管期間（例えば、約３ヶ月、約４ヶ月、約５ヶ月、約６ヶ月またはそれ以上の保管期間）後に効力を有する。例示的態様では、保管期間の終わりにおけるＡＡＶの生物力価は、保管期間の初めにおけるＡＡＶの生物力価と実質的に同じである。例示的態様では、保管期間の終わりにおけるＡＡＶの生物力価は、保管期間の初めにおけるＡＡＶの生物力価よりも上昇する。例示的態様では、保管期間の終わりにおける組成物の外観は、保管期間の初めにおける組成物と実質的に同じである。例示的態様では、保管期間の終わりにおける組成物の外観は、目に見える粒子がないことにより特徴づけられる。例示的態様では、保管期間の終わりにおける組成物の粒子濃度は、保管期間の初めにおける組成物の粒子濃度と実質的に同じである。例示的態様では、保管期間の終わりにおける組成物の粒子濃度は、マイクロフローイメージング（ＭＦＩ）により決定される。
【０１０８】
遺伝子治療により治療可能な疾患に関して対象を治療する方法を本開示により提供する。例示的態様では、その方法は、疾患を治療するのに有効な量で本明細書に記載の医薬組成物を対象に投与することを含む。例示的態様では、疾患は出血性疾患（例えば血友病ＡまたはＢ）であり、その方法は、出血性疾患を治療するのに有効な量で本開示の医薬組成物を対象に投与することを含む。
【０１０９】
例示的態様では、その方法は、非経口投与により医薬組成物を投与することを含む。用語「非経口」は、消化管を通さないで、いずれか他の経路によることを意味する。例えば、本明細書に開示される製剤は、例えば、静脈内投与（例えば、ボーラスとして、または長時間にわたる持続注入による）、筋肉内、腹腔内、脳脊髄内、皮下、関節内、滑液嚢内、髄腔内、経口、局所または吸入経路によるなど、既知の方法を介した投与のために製剤化されうる。ある実施形態では、本明細書に提供されるＡＡＶ製剤は、全身的または局所的のいずれで投与してもよい。全身投与としては、限定はされないが、経口、真皮下、腹腔内、皮下、経鼻、舌下または直腸内の投与経路が挙げられる。局所投与としては、限定はされないが、局所、皮下、筋肉内および腹腔内の投与経路が挙げられる。
【０１１０】
目的の遺伝子治療のためにＡＡＶを投与する方法は当業界で公知である。例えば、Monahan, Gene therapy in an era of emerging treatment options for hemophilia B, J Thromb Haemost. 2015 Jun; 13(0 1): S151-S160を参照のこと。
【０１１１】
本開示の再構成組成物は、例えば注射または静脈内投与により対象に投与することができる。これら実施形態では、再構成組成物を対象に投与する前に、例えば上記のような固体組成物を液体と配合して、例えば注射または静脈内投与によるなどの投与に適した液体組成物を提供してよい。一部の例では、組成物を対象に投与する前に、固体組成物を水（例えば注射用水、ＷＦＩ）またはバッファー／緩衝剤（例えば上記のような）と配合して、例えば注射または静脈内投与によるなどの投与に適した水性組成物を提供してよい。例えば、水（例えば注射用水、ＷＦＩ）またはバッファー／緩衝剤（例えば上記のような）を用いて凍結乾燥組成物を再構成し、例えば注射または静脈内投与によるなどの、対象への投与に適した再構成投薬単位（reconstituted dosage unit）を作成してよい。
【０１１２】
ある実施形態では、再構成投薬単位は生理的条件に適合するｐＨを有する。一部の例では、再構成投薬単位のｐＨは６〜８の範囲である。一部の例では、再構成投薬単位のｐＨは７〜８の範囲である。例えば、再構成投薬単位のｐＨは７〜７．５の範囲であってよい。一部の例では、再構成投薬単位のｐＨは７．０である。一部の例では、再構成投薬単位のｐＨは７．１である。一部の例では、再構成投薬単位のｐＨは７．２である。一部の例では、再構成投薬単位のｐＨは７．３である。一部の例では、再構成投薬単位のｐＨは７．４である。
【０１１３】
再構成投薬単位は、対象において所望の治療効果をもたらすのに十分な量で計算された所定量の本開示の組成物を含んでいてよい。対象に投与される再構成投薬単位中の組成物の量は、治療されている対象、苦痛の重篤性、および投与方法によって異なりうる。例えば、再構成投薬単位は、治療有効量で、本明細書に開示される投与すべき組成物の量を含みうる。
【０１１４】
対象に投与されるとき、液体または再構成投薬単位は、再構成投薬単位が１Ｅ＋１０ｖｐ／ｍｌ〜５Ｅ＋１５ｖｐ／ｍｌまたは１Ｅ＋１０ｃｐ／ｍｌ〜５Ｅ＋１５ｃｐ／ｍｌを送達するように、治療有効量のＡＡＶを含んでいてよい。
【０１１５】
ある実施形態では、方法は、治療レジメンに従い対象に液体または再構成投薬単位を投与することを含む。例えば、一部の例では、治療すべき対象は、医療供給者から治療レジメンを指示されていてよい。一部の例では、治療レジメンにとして、必ずしもそれらに限定されるわけではないが、１日５回、１日４回、１日３回、１日２回、１日１回、１週間に３回、１週間に２回、１週間に１回、２週間に１回、３週間に１回、１ヶ月に１回、５週間に１回、６週間に１回、７週間に１回、隔月に１回、およびそれらの組合せが挙げられる。
【０１１６】
一部の実施形態では、治療レジメンは、長期間にわたり１または複数用量を投与することを含む。ある例では、単回投与（例えば１投薬単位）を対象に与え、その最初の投与の後に、１または複数用量を後の時間に対象に投与してよい。一部の例では、１用量より多く（例えば、１投与単位より多く）を対象に投与し、その最初の投与の後に、１または複数用量を後の時間に対象に投与してよい。例えば、単回投与（例えば１投薬単位）を対象に与え、その単回投与の後に、単回投与を後の時間に対象に与えてよい。追加の単回投与を後の時間に対象に与えてよい。他の例では、単回投与（例えば１投薬単位）を対象に与え、その単回投与の後に、２用量を後の時間に対象に投与してよい。追加の単回または複数回投与を後の時間に与えてもよい。
【０１１７】
ある実施形態では、例えば併用療法において、関連するまたは無関係な状態を治療するための他の活性物質の前に、それと同時に、またはその後に、本開示の再構成投薬単位を投与してよい。そのような追加治療の例として、放射線治療、外科的治療、および化学療法が挙げられる。他の活性物質と同時に提供される場合、本開示の再構成投薬単位は、同じ製剤中に提供してもまたは異なる製剤中に提供してもよい。例えば、同時治療は、特定の治療レジメンに従い、組み合わせて治療有効用量を提供する、再構成投薬単位と、少なくとも１つの他の活性物質（例えば、化学療法剤など）を有する医薬組成物とを投与することにより達成することができる。別個の医薬組成物の投与は、これら物質の組合せの治療有効効果が治療を受けている対象で生じる限りは、同時に行っても、または異なる時に（例えば、後で、いずれかの順序で、同日に、または異なる日に）行ってもよい。
【０１１８】
従って、本開示の態様は、併用療法をさらに含む。ある実施形態では、その方法は、治療有効量の１つ以上の追加の活性物質を投与することを含む。併用療法とは、ＡＡＶ組成物（例えば本明細書に記載のような）が、単一の疾病または状態を治療するために別の治療物質と組み合わせて使用されうることを意味する。ある実施形態では、本開示の化合物は、別の治療物質と同時に投与され、その別の治療物質は、本開示の化合物を含む組成物の成分として投与しても、あるいは異なる組成物の成分として投与してもよい。ある実施形態では、本開示の化合物を含む組成物は、別の治療物質の投与の前または後に投与される。
【０１１９】
以下の実施例は、単に本発明を説明するためのものであり、決してその範囲を限定するためのものではない。
【実施例】
【０１２０】
実施例１
この実施例は、更なる開発のための３つの製剤の選択につながる最初の試験を示す。
【０１２１】
６つの異なる製剤を製造した。簡単に説明すると、主に空カプシド材料を含む単一ロットをＰＢＳ／ＮａＣｌ／ソルビトールバッファーで希釈して１８０．８ｇを生成した。その溶液に０．００５％のＣｒｏｄａ  ｓｕｐｅｒ  ｒｅｆｉｎｅｄ  Ｔｗｅｅｎ８０を添加して吸着による過剰な材料損失を防いだ。この溶液を、それぞれが３０ｇの材料を含むように６分割した。次に、Ｓｌｉｄｅ−Ａ−Ｌｙｚｅｒ透析カセットを用いて６つのバッファーのうちの１つに交換し、このステップを１００倍体積で３回実施した。３回の透析ステップの後、透析した溶液の各々を２ｍｌのＳｉＯ２バイアル（注入容量＝０．２５ｍｌ）に注入し、その後−２０±２℃および≦−６０℃（設定値：−８０℃）で６か月までの間および５±３℃で４ヶ月までの間保管した。表１〜６はそれぞれ、製剤１〜６（バッファー１〜６、および試料１〜６とも称する）について記載する。
【０１２２】
【表１】
2019537578.tif 000002
【０１２３】
【表２】
2019537578.tif 000003
【０１２４】
【表３】
2019537578.tif 000004
【０１２５】
【表４】
2019537578.tif 000005
【０１２６】
【表５】
2019537578.tif 000006
【０１２７】
【表６】
2019537578.tif 000007
【０１２８】
全粒子タイター（空＋完全）をｒＡＡＶ粒子ＥＬＩＳＡにより試験した。ＡＡＶ純度および化学的分解をＳＤＳ−ＰＡＧＥ（蛍光染色、４−１２％ＢｉｓＴｒｉｓゲル／Ｆｌａｍｉｎｇｏゲルステイン）により試験した。物理的劣化（損傷カプシドまたは断片）をＳＥＣおよびＭＦＩにより試験した。外観およびｐＨも試験した。
【０１２９】
−２０±２℃および≦−６０℃（設定値：−８０℃）で保管した製剤を、ＭＦＩ、外観、ｐＨ、全ｒＡＡＶ８粒子ＥＬＩＳＡ、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ、およびＳＥＣに関して、表７に指示する試験時点に試験した。「−」は試料が取得されなかったことを示す。
【表７】
2019537578.tif 000008
【０１３０】
５±３℃で保管した製剤を、ＭＦＩ、外観、ｐＨ、全ｒＡＡＶ８粒子ＥＬＩＳＡ、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ、およびＳＥＣに関して、表８に指示する試験時点に試験した「−」は試料が取得されなかったことを示す。
【表８】
2019537578.tif 000009
【０１３１】
外観試験の結果を表９に示しており、肉眼での粒子検査の分類は以下のとおりである：レベルＡ＝粒子が見えない；レベルＢ＝小さな単一粒子がわずかに見える；レベルＣ＝小さな単一粒子が容易に見える；レベルＤ＝多くの小さな粒子が容易に見える；およびレベルＥ＝１ｍｍ以上の粒子が見える。
【表９】
2019537578.tif 000010
【０１３２】
ｐＨアッセイの結果を表１０に示す。それらを融解した後、５±３℃で４ヶ月までの間、ならびに−２０±２℃および≦−６０℃で６ヶ月までの間保管した後のｐＨに関して有意なシフトは見られない。
【表１０】
2019537578.tif 000011
【０１３３】
ＡＡＶ８滴定ＥＬＩＳＡの結果を表１１に示す。５±３℃、−２０±２℃、および≦−６０℃で保管中の全ての結果は、調べた６つの製剤間での有意差を全く示さない。調和させた結果（０．４４で計算した）を示す。
【表１１】
2019537578.tif 000012
【０１３４】
表１２に示すように凝集体のパーセンテージを測定した。０か月目、ならびに５±３℃および≦−６０℃で保管後の製剤３に関してより高い凝集体値が見られた。他の全てのバッファーは変動する値を示す。
【表１２】
2019537578.tif 000013
【０１３５】
ＳＤＳ−ＰＡＧＥアッセイの結果を表１３〜１８に示しており、０、１、２、３、４、および６ヶ月目の測定値を示す。５±３℃で４か月の保管後に１６３ｋＤａの位置に余計なバンドを示すバッファー１を除いて、全試料が全ての温度に関して保管期間中安定性を示す。
【０１３６】
【表１３】
2019537578.tif 000014
【０１３７】
【表１４】
2019537578.tif 000015
【０１３８】
【表１５】
2019537578.tif 000016
【０１３９】
【表１６】
2019537578.tif 000017
【０１４０】
【表１７】
2019537578.tif 000018
【０１４１】
【表１８】
2019537578.tif 000019
【０１４２】
ＭＦＩを用いて測定した材料のサブビジブル粒子濃度の結果を表１９〜２３に示す。このアッセイは、５±３℃で４ヶ月間、ならびに−２０±２℃および≦−６０℃で６ヶ月間のＡＡＶ材料の保管中におけるサブビジブル粒子の生成を観察するために実施した。
【０１４３】
【表１９】
2019537578.tif 000020
【０１４４】
【表２０】
2019537578.tif 000021
【０１４５】
【表２１】
2019537578.tif 000022
【０１４６】
【表２２】
2019537578.tif 000023
【０１４７】
【表２３】
2019537578.tif 000024
【０１４８】
オスモル濃度測定の結果を表２４に示す。
【表２４】
2019537578.tif 000025
【０１４９】
結論として、５±３℃で４ヶ月後、ならびに−２０±２℃および≦−６０℃で６ヶ月後のＡＡＶ８滴定ＥＬＩＳＡに関して、６つの製剤間で有意差はなかった。外観は、製剤２〜５に関して適合するが、製剤１に関して少量の粒子が形成し、また製剤６においてわずかに黄色が観察された。製剤６および対照を除いて全ての製剤が、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ（デンシトメトリー法）により試験して、全ての温度に関して保管期間中の安定性を示した。外観、サブビジブル粒子アッセイ（ＭＦＩ）データ、およびオスモル濃度値に基づき、更なる開発のために製剤２、３、および４を選択した。
【０１５０】
実施例２
この実施例は、３つの製剤の追加試験および更なる開発を実証する。
【０１５１】
製剤２、３、および４（バッファー２、３、および４、試料２、３、および４）を本質的に実施例１に記載のように製造した。簡単に説明すると、単一ロットをＰＢＳ／ＮａＣｌ／ソルビトールバッファーで全９０ｍｌに希釈した。その溶液に０．００５％のＣｒｏｄａ  ｓｕｐｅｒ  ｒｅｆｉｎｅｄ  ＰＳ８０を添加し、それを３等分した。Ｓｌｉｄｅ−Ａ−Ｌｙｚｅｒ透析カセットにより３つの異なるバッファーのうちの１つまたは対照バッファーに交換し、このステップを試料の１００倍体積で全３回繰り返した。３つの異なる溶液を、ＳｉＯ２層を有する２ｍＬのＳｃｈｏｔｔ  Ｔｙｐｅ  Ｉガラスバイアルに注入し、下記の温度で間保管した。
【０１５２】
この実施例では、「バッファー１」は、実施例１の製剤／バッファー／試料２を指し、「バッファー２」は、実施例１の製剤／バッファー／試料４を指し、「バッファー３」は、実施例１の製剤／バッファー／試料３を指し、また「バッファー４」はＰＢＳ／ＮａＣｌ／ソルビトールバッファー対照を指す。明確にするため、表２５〜２８は、この実施例のバッファー１〜３およびＰＢＳ／ＮａＣｌ／ソルビトールバッファー対照を説明する。
【０１５３】
【表２５】
2019537578.tif 000026
【０１５４】
【表２６】
2019537578.tif 000027
【０１５５】
【表２７】
2019537578.tif 000028
【０１５６】
【表２８】
2019537578.tif 000029
【０１５７】
≦−６０℃（設定値：−８０℃）および−２０±２℃で５ヶ月まで（０、１、２、３、および５ヶ月）の間、ならびに５±３℃で４ヶ月まで（０、１、２、および４ヶ月）の間、中長期安定性試験を実施した。製剤はＳｉＯ２層を有する２ｍＬのＳｃｈｏｔｔ  Ｔｙｐｅ  Ｉガラスバイアル中で保管した。各バイアルに０．３ｍＬの製剤を注入した。表２９に記載する分析試験を実施し、指示される保管温度での各アッセイの試験時点を表３０および３１に示す。表３０または３１における「−」は試料が取得されなかったことを示す。
【０１５８】
【表２９】
2019537578.tif 000030
【０１５９】
【表３０】
2019537578.tif 000031
【０１６０】
【表３１】
2019537578.tif 000032
【０１６１】
ＥＬＩＳＡの結果を表３２に示す。ＡＡＶ８滴定ＥＬＩＳＡは、５±３℃での保管中のバッファー４（対照）における大量の材料損失を示した。０ヶ月での５．６１ｘ１０１２［ｃｐ／ｍｌ］を４か月後の２．７１ｘ１０１２と比較のこと。−２０±２℃および≦−６０℃で保存した同じ材料に関して、追加損失は観察されなかった。バッファー１および２は材料損失を全く示さなかった。バッファー３はより少ない開始材料の量を示したが、それは保管期間中に減少しない。
【表３２】
2019537578.tif 000033
【０１６２】
ｑＰＣＲの結果を表３３に示す。このアッセイを用いて得られた全てのデータは、ＥＬＩＳＡおよびｉｎ  ｖｉｔｒｏ生物力価アッセイを確認する。バッファー４は高い試験変動量を示す。
【表３３】
2019537578.tif 000034
【０１６３】
％凝集体測定の結果を表３４に示す。５±３℃で４か月間保管した後、凝集体値の逓減が見られた。バッファー４は、３か月後に１．５５％から３．３９％への増加を示し、４か月後には全く凝集体を示さなかった。バッファー３は、≦−６０℃で２か月後に６．６４％の高値に達し、それは３か月後に３．２５％および５か月後に３．９４％に下がった。
【表３４】
2019537578.tif 000035
【０１６４】
完全カプシドを測定する弱陰イオン交換（ＷＡＸ）アッセイの結果は、全ての試験時点および保管温度に関して何ら意義のある差を示さなかった（表３５）。
【表３５】
2019537578.tif 000036
【０１６５】
ｉｎ  ｖｉｔｒｏ生物力価アッセイの結果を表３６に示す。試験変動の範囲において、バッファー１、バッファー２、およびバッファー３に関して同様の変動する値が示される。バッファー４は、５±３℃で４か月間保管した後、大きな低下を示す。他の全てのバッファー、試験時点、および温度に関して同程度の結果が検出された。
【表３６】
2019537578.tif 000037
【０１６６】
ｉｎ  ｖｉｖｏ生物力価アッセイの結果を表３７に示す。バッファー１〜３の結果は、試験変動の範囲において変動する結果を示す。バッファー４では、５±３℃で０ヶ月における３．７０［ＩＵ／ｍｌ］から４か月後における１．３３［ＩＵ／ｍｌ］に低下し、また≦−６０℃では０ヶ月における３．７０［ＩＵ／ｍｌ］から４か月後における６．７３［ＩＵ／ｍｌ］に上昇する。７日目の結果は、１４日目の結果と同様であった。≦−６０℃で１ヶ月保管した後の結果を、全ての保管温度に関する０ヶ月を表す基準値とした。
【０１６７】
【表３７】
2019537578.tif 000038
【０１６８】
【表３８】
2019537578.tif 000039
【０１６９】
ＳＤＳ  ＰＡＧＥデンシトメトリーアッセイの結果を表３９〜４４に示す。５±３℃で４か月までの間の保管中、ならびに−２０±２℃および≦−６０℃で５か月までの間の保管中に余計なバンドは観察されなかった。
【０１７０】
【表３９】
2019537578.tif 000040
【０１７１】
【表４０】
2019537578.tif 000041
【０１７２】
【表４１】
2019537578.tif 000042
【０１７３】
【表４２】
2019537578.tif 000043
【０１７４】
【表４３】
2019537578.tif 000044
【０１７５】
【表４４】
2019537578.tif 000045
【０１７６】
外観試験の結果を表４５〜４８に示しており、肉眼での粒子検査の分類は以下のとおりである：レベルＡ＝粒子が見えない；レベルＢ＝小さな単一粒子がわずかに見える；レベルＣ＝小さな単一粒子が容易に見える；レベルＤ＝多くの小さな粒子が容易に見える；およびレベルＥ＝１ｍｍ以上の粒子が見える。５±３℃、−２０±２℃、および≦−６０℃（設定値：−８０℃）での１か月後の全ての試料の外観は、目に見える粒子のない澄明で無色の溶液（下記においておよび明細書を通して「適合する」と表示される）を示した。
【０１７７】
【表４５】
2019537578.tif 000046
【０１７８】
【表４６】
2019537578.tif 000047
【０１７９】
【表４７】
2019537578.tif 000048
【０１８０】
【表４８】
2019537578.tif 000049
【０１８１】
０ヶ月および指示温度で１ヶ月保管後のバッファー／製剤に関するｐＨ値を表４９に示す。
【表４９】
2019537578.tif 000050
【０１８２】
≦−６０℃で５ヶ月間保管後にポリソルベート８０（ＰＳ８０）測定を実施した。その結果（表５０に示される）は、≦−６０℃で５ヶ月間保管後にＰＳ８０の量が減少しなかったことを確認する。
【表５０】
2019537578.tif 000051
【０１８３】
この試験でのデータに基づき、試験した３つのバッファー／製剤のいずれか１つにおいて製剤化したときに、ＡＡＶ８の安定性プロファイルに有意差は見られなかった。従って、３つ全てがＡＡＶ８遺伝子治療製品の保管に適していると考えることができる。
【０１８４】
実施例３
この実施例は、異なるバイアルおよびチューブの内部表面への吸着に関する２つの製剤の追加検査を実証する。
【０１８５】
実施例２に記載のバッファー１（製剤２）および２（製剤４）を、異なるバイアルおよびチューブの内部表面への吸着に関して試験した。バッファー１（１７１７．３７ｘ１０１１ｃｐ／ｍｌ）およびバッファー２（１４３１．９４ｘ１０１１ｃｐ／ｍｌ）を１．１ｘ１０１３ｃｐ／ｍｌの目標濃度まで希釈し、さらにＰＡＬＬ  ＥＫＶフィルターを用いて滅菌ろ過した。後の参照のために、試料を２ｍｌガラスバイアルに入れて凍結した。次いで、材料を表５１に記載のようにバイアルおよびチューブに入れた。
【表５１】
2019537578.tif 000052
【０１８６】
試料を２５±２℃で８時間保管し、その後ＰＤＴＳ／ＡＡＶ８滴定ＥＬＩＳＡにより試験した。アッセイの結果を表５２に示す。
【表５２】
2019537578.tif 000053
【０１８７】
これら結果は、開始遺伝子治療材料の９０％超が２ｍｌのＳｉＯ２バイアルから回収可能であることを実証する。吸着は全く見られず、２つの試験バッファー間で有意差は見られなかった。
【０１８８】
実施例４
この実施例は、製剤４における様々なＡＡＶサブタイプの安定性を実証する。
【０１８９】
ＡＡＶサブタイプ、ＡＡＶ２、ＡＡＶ５、ＡＡＶ８、およびＡＡＶ９を作成し（マサチューセッツ大学医学部（ウースター校）、Ｖｅｃｔｏｒ  Ｃｏｒｅ  Ｆａｃｉｌｉｔｙ）、（実施例１〜３に記載のような）製剤４において保管し、その後、目に見える粒子が生じないことを確認するため外観に関して試験し、またｉｎ  ｖｉｔｒｏ生物力価アッセイでの投薬用にベクターゲノムを定量化するためにＩＴＲ−ｑＰＣＲにより試験した。これらのサブタイプはそれぞれ、緑色蛍光タンパク質（Ｇｒｅｅｎ  Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎ）をコードするｅＧＦＰパッケージインサート（ＣＢ６−Ｐｌ−ｅＧＦＰ）を含んでいた。試験は、時点０に実施し、さらに＋５±３℃で保管の６週間後に再度実施した。
【０１９０】
＞５Ｅ＋１２ｖｇ／ｍＩＡＡＶ粒子の濃度でＰＢＳ系バッファー（１ｘＰＢＳ＋０．００１％プルロニックＦ−６８）中に提供された２ｍＬの試料を周囲温度で融解し、製剤４を用いて４ｍｌ（およそ＞２．５Ｅ＋１２ｖｇ／ｍｌ）に希釈した。製剤４からのおよそ０．００２５％のポリソルベート８０は、吸着（例えば、装置の内部表面への）による過度の材料損失を防いだ。各試料の全バッファーをＳｌｉｄｅ−Ａ−Ｌｙｚｅｒ（登録商標）１０Ｋ透析カセットを用いて製剤４に交換し、１００倍体積でこのステップを３回実施し、各ステップについて最低４時間透析が行われた。バッファーを製剤４に交換した後、最初の０週の試験時点用の試料を採取し、その後＋５±３℃で６週間保管した。
【０１９１】
６週間の保管後でさえ、製剤４において保管された様々なＡＡＶサブタイプについて、目に見える粒子は観察されなかった（表５３）。従って、時点０で観察された賦形剤が６週までに消失した可能性がある。
【表５３】
2019537578.tif 000054
【０１９２】
ＩＴＲ−ｑＰＣＲアッセイの変動性（ＩＴＲ−ｑＰＣＲアッセイは±０．５ｌｏｇの試験変動を有する）のせいかもしれないがＡＡＶ２の回収率は低かったが、他のＡＡＶサブタイプは試験した６週間安定である。製剤４の使用は、ＡＡＶ８サブタイプの驚くべき安定性をもたらした。
【表５４】
2019537578.tif 000055
【０１９３】
実施例５
この実施例は、ＡＡＶ製剤を凍結乾燥すること、特に製剤４におけるＡＡＶの凍結乾燥の、実施可能性を実証する。
【０１９４】
ＡＡＶ製剤４を凍結乾燥し、＋５±３℃で１０か月までの間保管した。簡単に説明すると、ＡＡＶ８含有遺伝子治療材料を製造および凍結乾燥し、その後で凍結乾燥材料を含むバイアルを＋５±３℃で保管した（ＳＩＺに連結したＥｕｒｏｔｈｅｒｍ  Ｓｙｓｔｅｍで制御）。各試験時点（１、２、３、６および１０）に、１つのバイアルを５．５ｍｌの精製水で再構成し、その液体を表５５に従い分注した。バッファー「製剤４」のみを用いて凍結乾燥を２回実施し、それら実験の後に、製剤４に含まれる活性遺伝子治療材料を用いて凍結乾燥を実施した。活性遺伝子治療材料を含むバイアルを棚の前方、中央、または後方に置いた。ＡＡＶを含まない製剤４を入れた同じＳｉＯ２ガラスバイアルで隙間を閉じた。
【表５５】
2019537578.tif 000056
【０１９５】
凍結乾燥の前後に異なるパラメータについて測定をおこなった。各測定に関して、３つの測定値（前方、中央および後方の試料）の平均を表５６に報告する。残留水分を除いて、試験したパラメータに関して有意差は見られなかった。残留水分は、前方の試料に関して０．７％であり、前方では後方（３．６％が検出された）よりも速い乾燥が生じる。中央のバイアルは３．７％の残留水分であった。
【０１９６】
【表５６】
2019537578.tif 000057
【０１９７】
【表５７】
2019537578.tif 000058
【０１９８】
結論として、１０ヶ月の時点で８５％の回収率が得られた。ｉｎ  ｖｉｔｒｏ生物力価（１０ヶ月後に７０％の回収率）、ならびにｉｎ  ｖｉｖｏ生物力価（６ヶ月後に６５％の回収率）は、凍結乾燥の直後には損失を示さなかったが、保管の１ヶ月後にわずかな低下があった。しかしながら、１０ヶ月の時点までに更なる活性の低下は見られなかった。完全カプシドのパーセンテージ、ならびに凝集体の結果は安定であった。
【０１９９】
実施例６
この実施例は、凍結乾燥製剤の追加試験および更なる開発を実証する。
【０２００】
異なるＮａＣｌ濃度を有する４つの異なる製剤を、２つの異なる凍結乾燥速度を用いて試験した（表５８〜６１）。簡単に説明すると、凍結乾燥プログラムは、一次乾燥中−５５℃〜＋２℃の間の温度勾配において異なっていた。一方のサイクルでは温度は１．５時間（プログラム１）の時間にわたり上昇したが、他方のサイクルでは温度は１２時間（プログラム２）にわたり上昇した。
【０２０１】
【表５８】
2019537578.tif 000059
【０２０２】
【表５９】
2019537578.tif 000060
【０２０３】
【表６０】
2019537578.tif 000061
【０２０４】
【表６１】
2019537578.tif 000062
【０２０５】
遺伝子治療材料を融解およびプールし、２９．２ｍｌのプールした材料をＳｌｉｄｅ−Ａ−Ｌｙｚｅｒ（登録商標）１０Ｋ透析カセットに充填した。バッファーを上記の製剤４、７、８、または９のいずれかに交換した。全ての試料を、最低３時間、１００倍体積で３回透析した。透析後、５．５ｍｌの各材料を１０ｍｌのＳｉＯ２バイアルに入れた。凍結乾燥前に、凍結乾燥ストッパーを閉じないでガラスバイアルにセットした。凍結乾燥生成物を＋５±３℃で１２か月までの間保管した。
【０２０６】
ＮａＣｌ濃度が低くなるにつれ、残留水分が少なくなった（表６２）。
【表６２】
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【０２０７】
凍結乾燥生成物を＋５±３℃で１２ヶ月までの間保管し、活性、全粒子タイター（空＋完全）、純度、分解、およびｐＨに関して試験した（表６３および６４）。各試験時点（０、１、３、６、および１２ヶ月）において、１つのバイアルを５．５ｍｌの精製水で再構成し、その液体を表６３に従い分注した。試料を≦−６０℃（設定値：−８０℃）で凍結し、試験した。凍結乾燥後、値の意義のある差は全く検出されず、全てのデータがアッセイ変動内であることが分かった。
【０２０８】
【表６３】
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【０２０９】
【表６４】
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【０２１０】
要約すると、プログラム１はより挑戦的なプログラムであったが、より密でかつ均質な凍結乾燥ケーキをもたらした。ＮａＣｌ濃度が低くなると、残留水分の値が低くなった。外観は、開始材料、ならびに透析、凍結乾燥および再構成後の各ＮａＣｌ濃度に関して、「目に見える粒子のない澄明で無色の溶液」に適合した。ｐＨ測定、ＡＡＶ８粒子ＥＬＩＳＡ、ＦＩＸ−ｑＰＣＲおよびｉｎ  ｖｉｔｒｏ生物力価アッセイの結果は、各ＮａＣｌ濃度に関して同様の値を示した。ＷＡＸアッセイ（完全カプシドのパーセンテージ）は、５４％〜６３％の範囲内の試験変動を示した（表６９）。凝集体は、未処置開始材料の２．３％から、透析および凍結乾燥した遺伝子治療材料における３．５％および４．１％への増加を示した。各ＮａＣｌ濃度に関して凍結乾燥ケーキは白く、密でかつ均質である。
【０２１１】
実施例７
この実施例は更なる製剤を実証する。
【０２１２】
製剤１０および１１を本質的に実施例１に記載のように製造した。
【０２１３】
【表６５】
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【０２１４】
【表６６】
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【０２１５】
実施例８
この実施例は更なる製剤を実証する。
【０２１６】
製剤１２〜１５を本質的に実施例１に記載のように製造した。
【０２１７】
【表６７】
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【０２１８】
【表６８】
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【０２１９】
【表６９】
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【０２２０】
【表７０】
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【０２２１】
本明細書で引用される、出版物、特許出願および特許を含むあらゆる参考文献は、各参考文献が個別におよび具体的にその全体が参照により組み込まれることが指摘されているかのように、参照により本明細書に組み込まれる。
【０２２２】
本明細書に記載される全ての方法は、本明細書に別段の指示がない限り、または文脈において明らかに矛盾しない限り、任意の適切な順序で実施されうる。本明細書に提供される任意のおよび全ての例、または例示的な言語（例えば、「など」）の使用は、単に本開示をより明確に説明することを意図しており、別段に特許請求の範囲に記載されていない限り、本開示の範囲に限定を課すものではない。本明細書における言語は、特許請求の範囲に記載されていないいずれの要素も本開示の実施に必須であるとして指示すると解釈されるべきではない。
【０２２３】
本開示を実施するために発明者に分かっているベストモードを含む、本開示の好ましい実施形態を明細書中に記載する。それら好ましい実施形態の変形は、上記の説明を読むことにより当業者に明らかになるであろう。発明者は、当業者がそのような変形が適切であるとして利用することを予測し、さらに発明者は、具体的に明細書中に記載されているものとは別のやり方でその発明が実施されることを意図している。従って、本開示は、適用法に容認される、添付の特許請求の範囲に記載の主題の全ての変形および等価物を包含する。さらには、本明細書に別段の指示がない限り、または文脈において明らかに矛盾しない限り、上記の要素のあらゆる組合せもその全ての可能な変形において本開示に包含される。
【国際調査報告】
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