(57)【要約】  本発明は、組成物の１２〜２０重量％の量でタンパク質供給源を含み、このタンパク質供給源は、乳清タンパク質ミセルを含有する乳清タンパク質及びカゼイン供給源からなる、液体加熱殺菌された経腸組成物に関する。本発明の加熱殺菌された経腸組成物は、好ましくは組成物の１．２〜２．４重量％の含有量でシステインを有する。本発明は更に、組成物の重量を基準として１２〜２０重量％の量でタンパク質を含む加熱殺菌された経腸組成物の調製方法に関し、このタンパク質は、乳清タンパク質ミセルを含有する乳清タンパク質及びカゼインからなり、この方法は、（ｉ）乳清タンパク質ミセルを含有する乳清タンパク質からなるタンパク質供給源の水溶液を提供するステップと、（ｉｉ）カゼインを含有するタンパク質供給源を添加するステップと、（ｉｉｉ）任意で均質化処理ステップを実施するステップと、（ｉｖ）加熱処理ステップを実施するステップと、（ｖ）任意で均質化処理ステップを実施するステップと、を含む。最後に、本発明は、経腸組成物の調製及び／又は液体経腸組成物の粘度の制御のための、乳清タンパク質ミセルを含有する乳清タンパク質及びカゼイン供給源からなるタンパク質供給源の使用に関し、経腸組成物は、１２〜２０重量％の総タンパク質を含む。また、本発明は、本発明の加熱殺菌された経腸組成物を適用又は使用する医学的使用及び治療に関する。【選択図】  図４
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
液体加熱殺菌された経腸組成物であって、
前記組成物の１２〜２０重量％の量でタンパク質供給源を含み、
前記タンパク質供給源は、乳清タンパク質ミセルを含有する乳清タンパク質及びカゼイン供給源からなり、
前記加熱殺菌された経腸組成物は、前記タンパク質供給源の１．２〜２．４重量％の量でシステインを含有する、液体加熱殺菌された経腸組成物。
【請求項２】
乳清タンパク質は、前記組成物の４．５〜９重量％の量で存在する、請求項１に記載の経腸組成物。
【請求項３】
カゼインは、前記組成物の３．５〜１３重量％の量で存在する、請求項１又は２に記載の経腸組成物。
【請求項４】
液体組成物であり、１００ｓ−１の剪断速度で測定された２０℃での粘度が好ましくは２００ｍＰａ．ｓ未満である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の経腸組成物。
【請求項５】
タンパク質濃度が前記組成物中で最大２０ｇ／１００ｇである、請求項１〜４のいずれか一項に記載の経腸組成物。
【請求項６】
栄養組成物、栄養補助食品、乳児用フォーミュラ、フォローアップフォーミュラ、ベビーフードフォーミュラ、乳児用シリアルフォーミュラ若しくはグローイングアップミルク、乳児用若しくは児童用栄養補助食品、児童用フォーミュラ、成人用栄養組成物、妊婦用栄養補助食品、肥満用フォーミュラ、高齢者用栄養組成物、又はヘルスケアフォーミュラである、請求項１〜５のいずれか一項に記載の経腸組成物。
【請求項７】
栄養が必要な人に栄養を提供するのに使用し、前記人は好ましくは、高齢者、疾患状態にある人、疾患状態から回復中の人、栄養失調の人、又はスポーツマン若しくはスポーツウーマン若しくは活動的な高齢者などの健康な人である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の経腸組成物。
【請求項８】
１２〜２０重量％の総タンパク質を含む液体経腸組成物の調製のための、乳清タンパク質ミセルを含有する乳清タンパク質及びカゼイン供給源を含むタンパク質供給源の使用であって、前記組成物は、前記タンパク質供給源の１．２〜２．４重量％の量でシステインを含有する、タンパク質供給源の使用。
【請求項９】
１２〜２０重量％の総タンパク質を含む液体経腸組成物の粘度の制御のための、カゼイン供給源と組み合わされた乳清タンパク質ミセルの使用であって、前記組成物は、好ましくは、ｐＨ６〜８を有し、前記組成物は、前記タンパク質供給源の１．２〜２．４重量％の量でシステインを含有する、乳清タンパク質ミセルの使用。
【請求項１０】
組成物の重量を基準として１２〜２０重量％の量でタンパク質供給源を含む液体加熱殺菌された経腸組成物の調製方法であって、前記タンパク質供給源は、乳清タンパク質ミセルを含有する乳清タンパク質及びカゼインを含み、前記方法は、
（ｉ）乳清タンパク質ミセルを含有する乳清タンパク質を含むタンパク質供給源の水溶液を提供するステップと、
（ｉｉ）カゼインを含有するタンパク質供給源を添加するステップと、
（ｉｉｉ）任意で均質化処理ステップを実施するステップと、
（ｉｖ）１４０℃超でＵＨＴ加熱処理ステップを実施するステップと、
（ｖ）任意で均質化処理ステップを実施するステップと、を含み、
前記得られた加熱殺菌された経腸組成物は、前記タンパク質供給源の１．２〜２．４重量％の量でシステインを含有する、調製方法。
【請求項１１】
乳清タンパク質は、前記組成物の４．５〜９重量％で存在する、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
カゼインは、前記組成物の３．５〜１３重量％の量で存在する、請求項１０又は１１に記載の方法。
【請求項１３】
ステップ（ｉ）〜（ｖ）の後に、１００ｓ−１の剪断速度で測定された２０℃での粘度が２００ｍＰａ．ｓ未満である加熱殺菌された液体経腸組成物が得られる、請求項１０〜１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
ステップ（ｉ）〜（ｖ）の後に、前記加熱殺菌された経腸組成物を好ましくは噴霧乾燥によって乾燥し、粉末を形成する、請求項１０〜１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
請求項１０〜１４のいずれか一項に記載の方法によって得ることができる経腸組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、組成物の１２〜２０重量％の量でタンパク質供給源を含み、このタンパク質供給源は、乳清タンパク質ミセルを含有する乳清タンパク質及びカゼイン供給源からなる、液体加熱殺菌された経腸組成物に関する。本発明の加熱殺菌された経腸組成物は、好ましくは組成物の１．２〜２．４重量％の含有量でシステインを有する。本発明は更に、組成物の重量を基準として１２〜２０重量％の量でタンパク質を含む加熱殺菌された経腸組成物の調製方法に関し、このタンパク質は、乳清タンパク質ミセルを含有する乳清タンパク質及びカゼインからなり、この方法は、（ｉ）乳清タンパク質ミセルを含有する乳清タンパク質からなるタンパク質供給源の水溶液を提供するステップと、（ｉｉ）カゼインを含有するタンパク質供給源を添加するステップと、（ｉｉｉ）任意で均質化処理ステップを実施するステップと、（ｉｖ）加熱処理ステップを実施するステップと、（ｖ）任意で均質化処理ステップを実施するステップと、を含む。最後に、本発明は、経腸組成物の調製及び／又は液体経腸組成物の粘度の制御のための、乳清タンパク質ミセルを含有する乳清タンパク質及びカゼイン供給源からなるタンパク質供給源の使用に関し、経腸組成物は、１２〜２０重量％の総タンパク質を含む。また、本発明は、本発明の加熱殺菌された経腸組成物を適用又は使用する医学的使用及び治療に関する。
【背景技術】
【０００２】
多くの場合、高タンパク質含有量を含有する経腸組成物を提供することは有利である。これは、例えば、高齢者は、製品を摂取する能力が次第に低下する場合があるためである。一方、運動中のスポーツマン又はスポーツウーマンは、栄養が必要な場合があるが、この栄養を摂取するのにかかる時間により、彼らのパフォーマンスが妨げられてはならない。
【０００３】
しかし、栄養液体経腸組成物中のカロリー及び／又はタンパク質濃度を増加させると、全体の製品の粘度が増加し、安定性は減少し（例えば、加工中又は保存時にゲル化又は沈殿が起こる）、また、組成物の嗜好性に悪影響を及ぼす。粘度が高まると、液体栄養組成物の摂取又は投与が困難になる可能性があり、また組成物の味が落ちる可能性がある。更に、このようなタンパク質及びエネルギー密度の高い液体製品の安定性が、問題となり得る。
【０００４】
タンパク質を含有する栄養製品の粘度を低下させる１つの方法は、その中のタンパク質供給源を加水分解すること、又は加水分解されたタンパク質供給源をその調製に用いることである。しかし、このような方法は粘度を低減できるが、一般に、加水分解の結果として苦味のある製品が提供されるという不利益を被る。
【０００５】
従来のタンパク質加水分解プロセスは、加熱ユニットへの製品の移動による加水分解時間後の酵素不活性化を含む、単純なバッチプロセスなどのバッチプロセスに基づく。工業規模のバッチプロセスでは、多くの場合、かなりの時間（典型的には、少なくとも１〜３時間）が必要である。更に、このようなプロセスは、タンパク質供給源の加水分解度に関してほとんど制御することができないため、結果として、実質的に苦味のある製品を提供する。このようなバッチプロセスの一例は、例えば、国際公開第２０１２／０４２０１３（Ａ１）号に記載されている。
【０００６】
これらのプロセスにおいて、多くの要因が加水分解プロセスに影響するので、これらのプロセスの制御が難しくなり、苦味が強いか又は過度に粘稠であるため不適切であるかのいずれかである製品が得られるリスクが高くなる。
【０００７】
タンパク質を含有する栄養製品の粘度を低下させる別の方法は、それぞれ欧州特許第２２３０９４０（Ｂ１）号及び国際公開第２０１５／１５６６７２号に記載されているように、ミセラーカゼイン又は架橋ミセラーカゼインを含むことであるが、どちらも本発明のように乳清タンパク質ミセルを利用するものではない。架橋によるミセラーカゼインの変性が必要ということは、このような製品が「すべて天然」ではないとみなされる場合があり、消費者にとって短所として見られる場合があることを意味する。また、この方法では、苦味のある、ミセラーカゼイン又は架橋ミセラーカゼインによって得られる製品を完全に防げない。
【０００８】
最後に、乳清タンパク質は、必須アミノ酸（ＡＡ）（４５％）の優れた供給源である。カゼイン（０．２５ｇシステイン／１００ｇタンパク質を含有）と比較して、スイート乳清タンパク質は７倍のシステインを含有し、酸乳清は１０倍のシステインを含有する。システインは、グルタチオン（ＧＳＨ）合成における律速アミノ酸である。グルタチオンは、ストレスを受けた際の体の防御において第一に重要な機能を有するグルタミン酸システイン、及びグリシンでできているトリペプチドである。これらのアミノ酸は、ストレスを受けた際及び高齢者にますます必要とされ得る。
【０００９】
また、乳清タンパク質を伴うグルタチオンの経口補給により、ＨＩＶ感染患者の血漿ＧＳＨレベルが増加することがわかった（Ｅｕｒ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．２００１；３１，１７１〜１７８）。
【００１０】
乳清タンパク質によりもたらされる他の健康上の利点としては、筋肉の発達及び構築の強化、並びに児童、成人、又は高齢者の筋肉維持、免疫機能の強化、認識機能の向上、糖尿病患者に適した血糖の調節、体重管理及び満腹感、抗炎症効果、創傷治癒及び皮膚修復、血圧の低下などが挙げられる。
【００１１】
乳清タンパク質は、例えば、カゼイン（ＰＥＲ＝１００）と比較して、より良好なタンパク質効率比（ＰＥＲ＝１１８）を有する。ＰＥＲは、このようなタンパク質が体重増加をいかに良好に支持するかを判定することにより評価されたタンパク質の品質の評価基準である。これは次の式によって算出できる：
ＰＥＲ＝体重増加（ｇ）／タンパク質摂取量（ｇ）。
【００１２】
【表１】
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【００１３】
従って、上記を考慮して、本発明の根本となる問題は、苦味が少ないか又は好ましくは苦味がない高タンパク質含有量を有する経腸組成物を提供することである。更に、このような経腸組成物は、低粘度でなければならない。加えて、このような経腸組成物は、必須アミノ酸（ＡＡ）、特にシステインの含有量が豊富でなければならない。最後に、本発明は、このような経腸組成物の調製を可能にする方法を提供するという問題に直面する。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
本発明者らは驚くべきことに、乳清タンパク質及びカゼインからなるタンパク質供給源を用いることにより、好ましくは乳清タンパク質ミセルを含有する乳清タンパク質が、苦味のない低粘度組成物を調製可能にすることを見出した。更に、この組成物は、低粘度であると同時に、組成物の８〜２０重量％、好ましくは１０〜２０重量％、より好ましくは１２〜２０重量％の高タンパク質含有量を有し得る。
【００１５】
従って、本発明によれば、根本となる問題は、独立請求項に記載されている加熱殺菌された経腸組成物、並びに更に、本明細書に記載された独立請求項に従った、このような加熱殺菌された経腸組成物の調製方法及び使用によって解決されるのが好ましい。従属請求項は、本発明の実施形態の好ましい態様について更に有利に例示する。
【００１６】
より好ましくは、本発明の根本となる問題は、第１の実施形態に従って、組成物の１２〜２０重量％の量でタンパク質供給源を含む加熱殺菌された経腸組成物によって解決され、ここで、タンパク質供給源は、乳清タンパク質（乳清タンパク質は好ましくは乳清タンパク質ミセルを含有する）及びカゼイン供給源からなる。
【００１７】
好ましい態様によれば、加熱殺菌された経腸組成物は液体組成物である。このような液体組成物は、１００ｓ−１の剪断速度で測定された２０℃での粘度が好ましくは２００ｍＰａ．ｓ未満であり、１００ｓ−１の剪断速度で測定された２０℃での粘度が好ましくは１０〜１８０ｍＰａ．ｓであり、１００ｓ−１の剪断速度で測定された粘度が好ましくは、２０℃で２０〜５０ｍＰａ．ｓ、又は２０℃で４４〜１２０ｍＰａ．ｓ、又は２０℃で５０〜１６０ｍＰａ．ｓ、又は２０℃で９０〜１４０ｍＰａ．ｓ、又は２０℃で１００〜１５０ｍＰａ．ｓ、又は２０℃で１１０〜１３０ｍＰａ．ｓ、又は２０℃で１２５〜１６０ｍＰａ．ｓである。粘度は、例えば、プレート／プレートジオメトリ（直径６０ｍｍ）及び１ｍｍのギャップを装備したレオメーター（ＵＭＴＣと一体となったＨａａｋｅ  Ｒｈｅｏｓｔｒｅｓｓ  ６０００）を使用することなど、当業者に既知の方法によって測定してよい。０〜３００ｓ−１の制御された剪断速度勾配（線形増加）の流動曲線を２０℃±０．１にて得ることができる。
【００１８】
好ましい態様によれば、本発明の経腸組成物は、組成物の２５〜５０重量％の量で、好ましくは組成物の３１〜４４重量％の量で、全固形分を有する。
【００１９】
１つの更なる好ましい態様によれば、加熱殺菌された経腸組成物は、組成物の少なくとも１．５ｋｃａｌ／ｍＬ、好ましくは少なくとも１．８ｋｃａｌ／ｍＬ、好ましくは少なくとも２．０ｋｃａｌ／ｍＬ、好ましくは組成物の少なくとも２．２ｋｃａｌ／ｍＬのカロリー密度を有することができ、好ましくはカロリー密度は、典型的には、１．５ｋｃａｌ／ｍＬ〜６ｋｃａｌ／ｍＬ、又は１．５ｋｃａｌ／ｍＬ〜３．５ｋｃａｌ／ｍＬ、又は１．８ｋｃａｌ／ｍＬ〜２．４ｋｃａｌ／ｍＬ、又は２．３ｋｃａｌ／ｍＬ〜２．８ｋｃａｌ／ｍＬ、又は２．６ｋｃａｌ／ｍＬ〜３．２ｋｃａｌ／ｍＬである。
【００２０】
いくつかの態様では、本発明の加熱殺菌された経腸組成物は、ｐＨ５．５〜８．０、好ましくはｐＨ６．０〜７．０、最も好ましくはｐＨ６．０〜６．５を有することができる。本発明の加熱殺菌された経腸組成物は、ｐＨ６．５〜７．２、最も好ましくはｐＨ６．７〜６．９を有すると特に有利である。
【００２１】
タンパク質供給源
本発明の加熱殺菌された経腸組成物の一態様によれば、その中に含有されるタンパク質供給源は、乳清タンパク質及びカゼイン供給源からなり、乳清タンパク質は、好ましくは乳清タンパク質ミセルを含む。換言すれば、乳清タンパク質及びカゼイン供給源以外の他のタンパク質は、タンパク質供給源中に含有されない。
【００２２】
乳清タンパク質
本発明の加熱殺菌された経腸組成物中に含有される乳清タンパク質は、例えば、乳清タンパク質分離物、酸性化乳清タンパク質分離物、乳清タンパク質濃縮物、乳清粉末、又は更なる乳清タンパク質供給源から選択されてもよい。好ましくは、乳清タンパク質供給源は脱塩される。
【００２３】
この観点から、任意の市販の乳清タンパク質分離物又は濃縮物、すなわち当該技術分野において既知の乳清タンパク質の任意の調製方法によって得られた乳清タンパク質、並びにそれから調製された乳清タンパク質画分、又はβ−ラクトグロブリン（ＢＬＧ）、α−ラクトアルブミン、及び血清アルブミンなどのタンパク質を使用することができる。特に、チーズ製造における副生成物として得られるスイート乳清、酸カゼイン製造における副生成物として得られる酸乳清、牛乳の精密ろ過により得られる天然乳清、又はレンネットカゼイン製造における副生成物として得られるレンネット乳清を乳清タンパク質として使用することができる。乳清タンパク質は、単一供給源からであってもよく、又は任意の供給源の混合物からであってもよい。乳清タンパク質は、ミセル形成の前に、任意の変性又は加水分解ステップを受けないのが好ましい。従って、乳清タンパク質は、典型的には、乳清タンパク質ミセル形成の前に、酵素処理、加熱変性、又は他の加水分解プロセスを受けない、すなわち、天然乳清タンパク質であることが好ましい。本発明によれば、天然乳清タンパク質は、ミセル形成プロセスにおいて使用され、その加水分解物ではないことが非常に好ましい。
【００２４】
本発明は、ウシ由来の乳清分離物に制限されず、ヒツジ、ヤギ、ウマ、及びラクダなどの全哺乳類動物種からの乳清分離物に関する。
【００２５】
また、本発明による本発明の加熱殺菌された経腸組成物及びまた本発明の方法は、ミネラル化された、脱塩された、又はわずかにミネラル化された乳清の調製に適用される。「わずかにミネラル化された」とは、透析可能な又はダイアフィルトレーション可能な（diafiltrable）遊離ミネラルを除去した後の任意の乳清の調製を意味するが、これは例えば、乳清タンパク質濃縮物又は分離物の調製後、天然ミネラル化により乳清の調製に付随したミネラルを保持する。これらの「わずかにミネラル化された」乳清の調製では、特定のミネラル強化はされていない。
【００２６】
乳清タンパク質中に含まれてもよい乳清タンパク質ミセルは、当業者によく知られた加工及び抽出技術によって乳清タンパク質から得ることができる。乳清タンパク質ミセルを形成するためのこのような方法は、
ａ）乳清タンパク質水溶液のｐＨをｐＨ３．０〜８．０、好ましくはｐＨ５．８〜７．０、より好ましくはｐＨ６．０〜６．５の値に調整するステップと、ここで、乳清タンパク質水溶液のｐＨがｐＨ６．０〜６．５、最も好ましくはｐＨ６．２〜６．４、最も好ましくはｐＨ６．２〜６．３の値に調整される場合、特に有利である、
ｂ）７０〜９５℃未満の温度に水溶液をさらすステップと、
ｃ）任意でステップｂで得られた分散体を濃縮するステップと、を含んでいてもよい。
【００２７】
乳清タンパク質水溶液が脱塩された乳清タンパク質を含有する場合、ミセルを形成する上述のステップ（ｂ）の前に、好ましくはカルシウムを添加する。
【００２８】
最も好ましくは、本発明の加熱殺菌された経腸組成物に用いることができる乳清タンパク質ミセルは、上記の任意のステップｃ）などの濃縮ステップに供されていない。
【００２９】
好ましくは、本発明の加熱殺菌された経腸組成物中に含有されてもよい乳清タンパク質ミセルは、本明細書に記載された本発明の方法によって調製される。
【００３０】
本発明の加熱殺菌された経腸組成物について上記で定義されたとおり、乳清タンパク質ミセルを含有する乳清タンパク質は、当業者によく知られた技術によって提供又は調製される。好ましくは、本発明の加熱殺菌された経腸組成物中に含有されてもよい乳清タンパク質ミセルは、本明細書で上述された乳清タンパク質ミセルの形成方法によって調製される。
【００３１】
本明細書に記載された乳清タンパク質ミセルの形成方法により得ることができる乳清タンパク質ミセルは、形成中に粒子サイズの減少をもたらすあらゆる機械的ストレスにさらされていない。この方法は、剪断なしの加熱処理中に乳清タンパク質ミセルの形成を生じさせる。
【００３２】
本発明で使用されてもよい乳清タンパク質ミセルは、本明細書に記載された方法により製造されてもよいが、これらに限定されるものではない。また、乳清タンパク質ミセルはこれに関連して、例えば、液体として又は粉末形態として提供されてよい。次いで、このような乳清タンパク質ミセル調製物を乳清タンパク質供給源に添加し、本明細書で定義される乳清タンパク質ミセルを含有する乳清タンパク質供給源を提供することができる。
【００３３】
乳清タンパク質ミセル（ＷＰＭ）は、天然乳清タンパク質の加熱処理中における非常に限定されたｐＨでの自己組織化（auto assembling）により得られる、球形（天然カゼインミセルに近い規則的な形状）の単分散ミクロゲルである。
【００３４】
ＷＰＭは、次の特有の特徴及び特性を有する。
直径が１００〜９００ｎｍの狭いサイズ分布及び０．２未満の多分散指数
１０分間安定させた５００ｎｍで測定された濁度値（４％タンパク質溶液で２０〜５０吸光度単位）
ＴＥＭ顕微鏡検査によって撮像されたとおりの球形。
【００３５】
ＷＰＭ凝集体の最終構造は、乳化、ミセラーカゼイン置換、白色化、発泡、テキスチャー化のような特性及び／又は充填剤の特性を付与する。ＷＰＭは、例外的な性質、すなわち、塩添加に対して安定であり、高濃度で低粘度であり、ｐＨ４〜５でゲル化し、かつ低温殺菌又は殺菌に使用される加熱処理に対して高い安定性を有する性質を付与する特有の物理的特性（サイズ、電荷、密度、サイズ分布）を有する、２０〜４５％の乳清タンパク質濃度のミクロゲルである。
【００３６】
ＷＰＭは、正味の（負又は正）電荷が自己組織化によるこの特異的な凝集を生じさせる、非常に限定された厳密なｐＨに調整された天然乳清タンパク質溶液の加熱処理により得られる。これらの凝集体は、疎水性相互作用及びタンパク質表面に存在する電荷の非対称再分配に付随する静電斥力及び静電引力間のバランスによりもたらされる、特定の組織化された状態である。この現象は、純粋なβ−ラクトグロブリンの等電点のｐＨ単位が０．７未満及び超（すなわちＩＥＰが５．１においてｐＨ４．３及び５．８）で発生する。
【００３７】
乳清タンパク質の疎水性が天然タンパク質構造に埋め込まれるため、乳清タンパク質ミセルの形成は室温では起こらない。
【００３８】
乳清タンパク質ミセル形成（自己組織化による球形単分散タンパク質ミクロゲルの形成）を生じさせるために、タンパク質立体配座の変更が必要である。この変更は加熱処理によりミセル形成の最初の初期段階の間に生じる。この自己組織化現象は、最適な温度に達した（すなわち８５℃）直後のｐＨ２．０での酸性化により可逆である。この非常に酸性のｐＨブロックチオール／ジスルフィドは相互交換し、非安定化ミセル構造が急速に分解される。標準状態では、ｐＨ２．０での事後酸性化なしで、加熱処理によるチオール活性化によって、一定温度（８５℃にて１５分間）でのインキュベーション中における高速な架橋によりミセルを安定化させたが、このインキュベーション時間は、最長４５分又は１２０分まで延長してもよい。このインキュベーション後、乳清タンパク質ミセル形成は、自然に可逆でなくなる。タンパク質ユニットを回復するには、解離剤及び還元剤が必要である。
【００３９】
乳清タンパク質ミセルは、本発明の方法のステップ（ｉ）において、ｉｎ  ｓｉｔｕプロセスにより形成されてよく、より好ましくは、上述の本発明の方法のステップ（ｉ）のプロセスパラメータを使用して形成されてよく、これは、また上述の乳清タンパク質ミセルの形成方法に組み込むことができる。一方、ｉｎ  ｓｉｔｕで乳清タンパク質ミセルを製造する代わりに、本発明の方法のステップ（ｉ）における乳清タンパク質ミセルは、例えば、液体として又は粉末の形態で、ステップａ）の組成物にその乳清タンパク質ミセルを添加するステップによって用いることができる。
【００４０】
好ましくは、本発明の加熱殺菌された経腸組成物の乳清タンパク質中に好ましくは含有される乳清タンパク質ミセルは、その中に含有されたミセルのうちの８０％超が１ミクロンより小さいサイズを有する粒子サイズ分布を示すことができる。最も好ましくは、本発明の加熱殺菌された経腸組成物のタンパク質供給源の乳清タンパク質中に含まれ得るミセルは、１００ｎｍ〜１２００ｎｍ又は４００ｎｍ〜９００ｎｍ、より好ましくは５００〜７７０ｎｍ、最も好ましくは２００〜３５０ｎｍのサイズを有する。乳清タンパク質ミセルは、典型的には、透過電子顕微鏡（ＴＥＭ）により球形として撮像される。ミセルの平均直径は、当業者によく知られた方法によって透過電子顕微鏡（ＴＥＭ）により測定できる。理論に束縛されることを望むものではないが、ミセル形成中に、ミセルは「最大」サイズに達し、あらゆる追加のタンパク質分子をはねかえすミセルの全体的な帯電により、ミセルはこれ以上成長できなくなると考えられている。これにより、狭いサイズ分布が観察されることを説明できる。
【００４１】
更に、本発明の加熱殺菌された経腸組成物の乳清タンパク質中に好ましくは含有される乳清タンパク質ミセルは、その中に含まれる乳清タンパク質中、若しくはそれの代わりに使用された乳清タンパク質中、又は最終製品（すなわち本発明の加熱殺菌された経腸組成物）中で、当業者によく知られた様々な技術によって検出され得る。好ましくは、乳清タンパク質ミセルの分離の後に、例えば、そのζ電位を、国際公開第２００７／１１０４２１号の例えば１９〜２０頁に記載のとおり測定してもよい。この観点から、好ましくは乳清タンパク質ミセルを含有する乳清タンパク質の測定されたζ電位が、ミセルを有さない乳清タンパク質供給源（乳清タンパク質ミセルを含有しない「未処理」乳清タンパク質）よりも負である場合、これは、乳清タンパク質ミセルの存在を示すエビデンスとなる。
【００４２】
乳清タンパク質ミセルの存在を示すために使用することができる別の方法は、例えば、５００ｎｍでの吸光度などによる濁度測定である。濁度の増加は、例えば、国際公開第２００７／１１０４２１号の１９頁の第２段落及び図２に記載のように、当該技術分野において既知である乳清タンパク質ミセル形成と関係している。
【００４３】
更に、乳清タンパク質ミセルの存在はまた、例えば、本発明の加熱殺菌された経腸組成物中に含有された乳清タンパク質ミセルを分離し、例えば前述で概略を述べた方法によって、任意で乳清タンパク質ミセルを特徴付けることにより分析することができる。同様に、乳清タンパク質ミセルは、本発明の加熱殺菌された経腸組成物の調製に用いられたタンパク質供給源から、又は最終製品から分離することができ、任意で同様に特徴付ける。
【００４４】
この観点から、本明細書に記載された本発明の加熱殺菌された経腸組成物において、乳清タンパク質ミセルの存在は、乳清タンパク質ミセル形成に続く組成物調製の任意のステップにおける、乳清タンパク質ミセルの分離、及び／又はその測定によって検出することができる。
【００４５】
例えば、本発明の加熱殺菌された組成物において利用される乳清タンパク質ミセルの純度は、残留可溶性乳清タンパク質の量を測定することにより得ることができる。乳清タンパク質ミセル及びカゼインミセルは（存在する場合）、例えば、２０℃にて２６９００ｇを１５分間遠心分離することにより排除される。上清を使用して、Ｂｏｒｄｉｎ  ｅｔ  ａｌ．２００１（Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ  Ａ，９２８，６３〜７６）の方法に従って逆相ＨＰＬＣを使用することにより乳清タンパク質量を判定する。値は通常、加熱処理前の初期値の百分率として表される。ミセル比率は、具体的には、次のとおり算出可能である。
【００４６】
【数１】
2019517245.tif 000004
【００４７】
カゼイン
本発明の加熱殺菌された組成物に用いられるカゼインは、任意の好適なカゼイン供給源から選択されてもよい。
【００４８】
好ましくは、タンパク質供給源中のカゼイン供給源は、ミセラーカゼイン、カゼイン塩、乳タンパク質濃縮物、乳タンパク質分離物、又は乳粉末のうちの少なくとも１つから選択され、存在する場合、乳粉末は、スキムミルク又は全脂肪であってもよい。カゼイン又はカゼイン供給源はミセラーカゼインを含有してもよい。
【００４９】
タンパク質供給源量
第１の定義された実施形態によれば、本発明の加熱殺菌された経腸組成物は、組成物の少なくとも８重量％の量でタンパク質供給源、好ましくは本明細書で定義されるタンパク質供給源を含有する。
【００５０】
より好ましくは、タンパク質供給源は、組成物の少なくとも１０重量％、少なくとも１２重量％、少なくとも１４重量％、又は組成物の少なくとも１６重量％の量で含有されてもよい。特に好ましい態様によれば、タンパク質供給源は、８〜２０重量％、好ましくは組成物の１１〜２０重量％又は１３〜２０重量％又は１５〜２０重量％の量で、あるいは組成物の８〜１５重量％又は１５〜２０重量％の量で存在する。
【００５１】
更に好ましい態様によれば、タンパク質供給源は、本発明の加熱殺菌された経腸組成物中に組成物中で最大２０ｇ／１００ｇ、好ましくは組成物中で１１ｇ／１００ｇ〜２０ｇ／１００ｇ、好ましくは１２ｇ／１００ｇ〜１６ｇ／１００ｇ、好ましくは組成物中で１３ｇ／１００ｇ〜１５ｇ／１００ｇのタンパク質濃度で存在することができる。
【００５２】
乳清タンパク質量
好ましい態様によれば、本発明の加熱殺菌された経腸組成物は、典型的には、組成物の４．２〜１４重量％の量で、好ましくは組成物の４．５〜１３重量％の量で、より好ましくは組成物の４．５〜１０重量％、又は４．５〜９．５重量％、又は４．５〜９．０重量％、又は４．５〜８．５重量％の量で、最も好ましくは組成物の５．０〜７．５重量％で乳清タンパク質を含有する。上記のとおり、乳清タンパク質及びカゼインに加えて、本明細書に用いられるタンパク質供給源中、及び最終的な加熱殺菌がされている経腸組成物中に、更なるタンパク質は存在しない。
【００５３】
最も好ましくは、本発明の加熱殺菌された経腸組成物において、乳清タンパク質を含むタンパク質供給源は、乳清タンパク質を基準として少なくとも３５％、好ましくは少なくとも４０％、又は更には４５％、又は５０％の量で乳清タンパク質ミセルを含有する。最も好ましくは、乳清タンパク質を含むタンパク質供給源は、乳清タンパク質を基準として４０〜６０％、乳清タンパク質を基準としてより好ましくは少なくとも８０％の量で乳清タンパク質ミセルを含有し、残留可溶性凝集体又は可溶性タンパク質含有量は、乳清タンパク質を基準として好ましくは２０％未満である。平均ミセルサイズの特徴は、多分散指数が０．２６０未満、好ましくは０．２００未満である。
【００５４】
好ましくは、本発明の加熱殺菌された経腸組成物は、組成物の１．０〜５重量％の量で乳清タンパク質ミセルを含有し、最も好ましくは、本発明の加熱殺菌された経腸組成物は、組成物の２．０〜３重量％、最も好ましくは２．５〜３．５重量％の量で乳清タンパク質ミセルを含有する。
【００５５】
カゼイン量
好ましい態様によれば、本発明の加熱殺菌された経腸組成物は、好ましくは組成物の３．５〜１３重量％の量で、最も好ましくは組成物の５〜１１重量％の量で、好ましくは８〜９重量％、又は８．５〜１０重量％、又は９．５〜１０．５重量％、又はこのような上限と下限の範囲の任意の組み合わせでカゼインを含む。上記のとおり、カゼイン及び乳清タンパク質に加えて、本明細書に用いられるタンパク質供給源中に、及び最終的な加熱殺菌がされている経腸組成物中に、更なるタンパク質は存在しない。
【００５６】
最も好ましくは、加熱殺菌された経腸組成物及び／又は本明細書に用いられるタンパク質供給源は、乳清タンパク質：カゼインを３５：６５〜６５：３５、好ましくは４０：６０〜６０：４０、好ましくは４５：５５〜５５：４５の重量比で含む。特に好ましい態様では、カゼインは、乳清タンパク質：カゼイン重量比が５０：５０で存在する。
【００５７】
システイン
加熱殺菌された経腸組成物は、システインの豊富な供給源を提供することが特に有利である。これに関連して、好ましくはタンパク質供給源は、本明細書で定義されるとおり乳清タンパク質及びカゼインを含有する。タンパク質供給源は、「他のタンパク質」乳清タンパク質及びカゼインを含まない場合がある。
【００５８】
システイン量
従って、好ましくは、加熱殺菌された経腸組成物は、タンパク質供給源の少なくとも１．２重量％の量でシステインを含む。好ましくは、加熱殺菌された経腸組成物は、タンパク質供給源の１．２〜２．４重量％の量で、より好ましくはタンパク質供給源の１．２〜１．３２重量％及び１．８〜２．２重量％の範囲でシステインを含み、このような範囲には明示的に１．２〜１．３２重量％及び１．９〜２．２重量％の量、例えば、タンパク質供給源の１．２〜２．２重量％、又は１．２〜２．４重量％、又は１．３〜２．４重量％、又は１．５〜２．４重量％、又は１．８〜２．４重量％の量が含まれる。
【００５９】
上記で定義されたとおり、システイン含有量は、好ましくはタンパク質供給源の全タンパク質含有量を考慮して定義される。この点に関して、組成物を調製する際又は最終的な加熱殺菌がされている経腸組成物を分析する際、当業者は、まず第一に別々に添加することにより、異なる原材料、特にカゼイン及び乳清タンパク質などの乳タンパク質量を容易に区別でき、これにより本明細書で定義されるとおり乳清タンパク質及び／若しくはカゼイン単独で由来する、又は両方から由来するシステイン量を特定することができることに注意する。
【００６０】
本明細書で使用するタンパク質供給源は、特に乳清及びカゼインを形成する乳タンパク質からのみ選択されるので、Ｎｉｃｏｌａｉ  Ｚ．Ｂａｌｌｉｎ  ｅｔ．ａｌ．のＪ．Ａｇｒｉｃ．Ｆｏｏｄ  Ｃｈｅｍ．２００１６，５４，ｐａｇｅｓ  ４１３１  ｔｏ  ４１３５（これは参考として本明細書に組み込まれる）に記載されたシステインを定量することにより、乳清タンパク質量とカゼイン量の関係も容易に判定できる。
【００６１】
この観点から、Ｂａｌｌｉｎは、カゼイン共沈物及び乳粉末中の乳清タンパク質含有量を次の式を使用して算出したことについて記載している。
【００６２】
％乳清タンパク質＝（Ｘ−０．２５）／（３．０−０．２５）×１００
乳清及びカゼインなどの乳タンパク質のみが存在するので、このような計算により、好ましくは、本発明の加熱殺菌された経腸組成物中のシステイン量を算出することが可能になる。
【００６３】
システインを定量することは、乳清タンパク質を判定する目的で測定するのに有利なパラメータである。その理由は、カゼイン及び乳清タンパク質中のシステイン含有量は１０倍以上異なり、かつシステイン変性を含有しない限り、システイン含有量はタンパク質構造に依存しないという事実のためである。
【００６４】
別の可能なシステイン含有量の測定は、欧州連合（ＥＵ）の法規制（ＥＣＣ２９２１／９０  ｏｆ  １０ｔｈ  Ｏｃｔｏｂｅｒ  １９９０；Ｏｆｆ．Ｊ．Ｅｕｒ．Ｃｏｍｍｕｎ．１９９０，２２−２７）に従い、これは、「カゼイン以外の乳タンパク質含有量」（実際には、乳清タンパク質）を、タンパク質と結合する−ＳＨ基及び−Ｓ−Ｓ−基を測定することにより判定することについて定義している。
【００６５】
これに関連して、カゼイン以外の乳タンパク質含有量は、タンパク質と結合する−ＳＨ基及び−Ｓ−Ｓ−基を測定することにより判定された含有量を意味し、参照値は、純粋なカゼイン及び乳清タンパク質についてそれぞれ０．２５％及び３％である（１９９０年１０月１０日のＥＣＣ２９２１／９０）。同様に、上記のように、システイン及び乳清タンパク質のみが含有されるので、システイン含有量は、好ましくはタンパク質供給源の全タンパク質含有量を考慮していずれかで判定される。
【００６６】
その他の成分
次の更なる態様では、本発明の加熱殺菌された経腸組成物はまた、ビタミン、ミネラル、塩、及び微量元素から選択される微量栄養素を含み、これらの微量栄養素は、単独で又は組み合わせてのいずれかで、好ましくは、場合によりタンパク質供給源によって既に提供された微量栄養素に加えて存在してもよい。
【００６７】
一方、いくつかの態様では、本発明の加熱殺菌された経腸組成物はまた、微量栄養素を全く含有していなくてもよい。
【００６８】
本明細書で使用するとき、用語「微量栄養素」は、ヒトの食事に極微量が必要とされるビタミン、（栄養素としての）ミネラル、及び／又は塩を指す。このような微量栄養素は、典型的にはタンパク質を含まない。
【００６９】
本明細書で使用するとき、用語「ビタミン」は、ほとんどの動物の栄養に微量が必須とされる、特に代謝プロセスの制御において補酵素及び補酵素前駆体として機能する任意の様々な有機的な物質を指す。ビタミンは、ホルモン（例えばビタミンＤ）、抗酸化剤（例えばビタミンＣ及びビタミンＥ）、並びに細胞のシグナル伝達、細胞増殖の制御、組織成長及び分化（例えばビタミンＡ）のメディエーターとしての機能などといった様々な生化学的機能を有する。数の最も大きいビタミンＢ群は、代謝において触媒及び基質としての機能を補助する生体分子の酵素補因子（補酵素）の前駆体として機能する。例えば、ビタミンＢ６及びビタミンＢ１２である。存在させることができるその他のビタミンとしては、ビタミンＫ、チアミン、リボフラビン、ナイアシン、葉酸、ビオチン、及びパントテン酸が挙げられる。
【００７０】
これに関連して、ミネラルは、好ましくは栄養素としてのミネラルであり、例えば、カルシウム、マグネシウム、リン、カリウム、ナトリウム、塩化物、及び硫黄、並びにそれらの塩などである。好ましくは、本発明の加熱殺菌された経腸組成物にはミネラルとしてカルシウムが含有され、任意で、前述の栄養素としてのミネラルのうち少なくとも１種が更に含有される。
【００７１】
本発明の加熱殺菌された経腸組成物中に必要かつ用いられ得る更なるミネラルは、微量元素であってよい。このような微量元素は、典型的には、比較的少量で必要なミネラルであり、例えば、クロム、コバルト、銅、塩化物、フッ素、ヨウ素、マンガン、モリブデン、セレン、及び亜鉛である。
【００７２】
従って、いくつかの態様では、本発明の加熱殺菌された経腸組成物は、患者に適切な栄養を提供するのに有用なビタミン、ミネラル、及び微量元素の任意の組み合わせを含むことができる。ビタミン、ミネラル、及び微量元素は、混合物又は製剤の形態で使用できる。本発明の加熱殺菌された経腸組成物において、具体的なビタミン及びミネラルの量は、当業者により決定され得る。
【００７３】
本発明者らは驚くべきことに、本発明の加熱殺菌された経腸組成物中の少量の一価の金属イオンが、本明細書で定義されるこの組成物の低い粘度及び安定性を更に高くし得ることを見出した。
【００７４】
好ましい態様によれば、本発明の加熱殺菌された経腸組成物は、典型的には、好ましくはタンパク質供給源の最大４０ｍｇ／ｇ、好ましくはタンパク質供給源の２５ｍｇ／ｇ未満、最も好ましくはタンパク質供給源の０〜５ｍｇ／ｇ、又はタンパク質供給源の２〜１０ｍｇ／ｇ、又は８〜１５ｍｇ／ｇ、又は１３〜２０ｍｇ／ｇ、又は１８〜２５ｍｇ／ｇ、又は２３〜３０ｍｇ／ｇ、又は２８〜３５ｍｇ／ｇ、又は３３〜４０ｍｇ／ｇのＮａ、Ｋ、更なる少量のナトリウム及びカリウムの和（Ｎａ＋Ｋ）から選択される一価の金属イオンの総量を含む。
【００７５】
いくつかの態様では、本発明の加熱殺菌された経腸組成物中のカリウムの量は、典型的には、タンパク質供給源の最大４０ｍｇ／ｇ、好ましくはタンパク質供給源の２５ｍｇ／ｇ未満、最も好ましくはタンパク質供給源の０〜５ｍｇ／ｇ、又はタンパク質供給源の２〜１０ｍｇ／ｇ、又は８〜１５ｍｇ／ｇ、又は１３〜２０ｍｇ／ｇ、又は１８〜２５ｍｇ／ｇ、又は２３〜３０ｍｇ／ｇ、又は２８〜３５ｍｇ／ｇ、又は３３〜４０ｍｇ／ｇである。
【００７６】
更なる態様では、本発明の加熱殺菌された経腸組成物中のナトリウムの量は、典型的には、タンパク質供給源の最大４０ｍｇ／ｇ、好ましくはタンパク質供給源の２５ｍｇ／ｇ未満、最も好ましくはタンパク質供給源の０〜５ｍｇ／ｇ、又はタンパク質供給源の２〜１０ｍｇ／ｇ、又は８〜１５ｍｇ／ｇ、又は１３〜２０ｍｇ／ｇ、又は１８〜２５ｍｇ／ｇ、又は２３〜３０ｍｇ／ｇ、又は２８〜３５ｍｇ／ｇ、又は３３〜４０ｍｇ／ｇである。
【００７７】
上記の段落における一価の金属イオンの濃度は、本発明の経腸組成物中のタンパク質供給源中のタンパク質の総量を基準としており、好ましくはカゼインの総量、乳清タンパク質ミセルの総量、又は乳清タンパク質の総量を基準とし、より好ましくは本発明の加熱殺菌された経腸組成物中に存在する、乳清タンパク質ミセル、カゼイン供給源を含む乳清タンパク質の総量を基準とする。
【００７８】
一態様によれば、１つ以上のクエン酸塩がまた、本発明の経腸組成物中に含有されてもよい。好ましくは、クエン酸塩はクエン酸三カリウムである。最も好ましくは、本発明の経腸組成物は、組成物の０．１〜１重量％、又は加熱殺菌された経腸組成物の０．３〜０．７重量％でクエン酸塩を含む。最も有利には、本発明の経腸組成物は、組成物の０．２〜０．５重量％でクエン酸塩を含む。
【００７９】
更なる態様によれば、本発明の加熱殺菌された経腸組成物はまた、食品マトリックスとして提供されてよい。食品マトリックスとは、本明細書では液体又は粉末形態の任意の種類の食品として定義され、例えば、飲料、栄養補助食品などである。この食品マトリックスは、本明細書で定義される本発明の加熱殺菌された経腸組成物、並びに任意で追加の脂肪及び／又は炭水化物を含有してもよい。
【００８０】
好ましくは、本発明の加熱殺菌された経腸組成物は、液体であり、より好ましくは飲料として提供される。
【００８１】
特に好ましい態様によれば、本発明の加熱殺菌された経腸組成物は、栄養組成物、栄養補助食品、乳児用フォーミュラ、フォローアップフォーミュラ、ベビーフードフォーミュラ、乳児用シリアルフォーミュラ若しくはグローイングアップミルク、乳児用若しくは児童用栄養補助食品、児童用フォーミュラ、成人用栄養組成物、妊婦用栄養補助食品、肥満用フォーミュラ、高齢者用栄養組成物、又はヘルスケアフォーミュラである。更に、いくつかの態様では、本発明の加熱殺菌された経腸組成物は、栄養補助食品の形態であってよく、あるいは例えば十分な食事として提供される、栄養の唯一の供給源として使用するものであってもよい。本明細書で使用するとき、用語「栄養補助食品」は、食物又は食事又は飲料に添加することのできる栄養素を指す。
【００８２】
上記に関連して、乳児は１歳齢までとして定義され、児童は少なくとも１歳齢から７歳齢までとして定義される。
【００８３】
更に、これに関連して、フォローアップフォーミュラは、好ましくは成長した乳児の食事の変化を補完し、常乳よりもこの年齢の子供に必要な栄養により良く適合する、よりバランスのとれた完全食を提供するように設計されている。グローイングアップミルク（ＧＵＭ）は、フォローアップフォーミュラのサブグループと考えることができ、また上述の説明された定義に含まれる。このようなＧＵＭは、より詳細には１歳以上、例えば１〜６歳の児童に必要な栄養に適合されている。一般に、ＧＵＭは、特定の年齢の児童に必要な栄養に特異的に適合されている。例えば、１〜３歳、３〜５歳、及び５歳以上の児童用のＧＵＭが存在する。
【００８４】
最後に、妊婦用の栄養は、典型的に、妊婦及び授乳中の女性用のものとして定義され、妊娠を希望している女性への妊娠前ケアとしての投与も更に包含する。
【００８５】
１つの好ましい態様によれば、食品マトリックスは、任意で、本明細書に記載された加熱殺菌された経腸組成物に加え、炭水化物、プロバイオティクス、プレバイオティクス、ミネラル、増粘剤、ｐＨ調整のための緩衝剤又は試剤、キレート剤、着色剤、乳化剤、賦形剤、風味剤、浸透剤、防腐剤、安定剤、糖、甘味料、食感改良剤（texturizer）、及び／又はビタミンのうちのいずれかを含有してもよい。例えば、栄養組成物には、大豆レシチン、モノ及びジグリセリドのクエン酸エステルなどの乳化剤及び安定剤を含有させることもできる。任意の原材料を、任意の好適な量で添加し得る。
【００８６】
特定の実施形態によれば、本発明の加熱殺菌された経腸組成物を使用して、上記定義の食品マトリックス、好ましくは飲料、栄養補助食品、より好ましくは栄養組成物、栄養補助食品、乳児用フォーミュラ、フォローアップフォーミュラ、ベビーフードフォーミュラ、乳児用シリアルフォーミュラ若しくはグローイングアップミルク、乳児用若しくは児童用栄養補助食品、児童用フォーミュラ、成人用栄養組成物、妊婦用栄養補助食品、肥満用フォーミュラ、高齢者用栄養組成物、又はヘルスケアフォーミュラを調製することができる。
【００８７】
更なる実施形態では、本発明の液体加熱殺菌された経腸組成物はまた、好ましくは後述のような、医薬品及び／又はニュートラシューティカルズ製品として使用することができる。
【００８８】
更なる実施形態は、本明細書に記載された本発明の加熱殺菌された経腸組成物（上述されたようなもの、又は後述の本発明の方法により得られた若しくは得ることができるようなもののいずれか）の使用が考えられることに関する。一実施形態では、本発明の加熱殺菌された経腸組成物は、栄養が必要な人に栄養を提供するのに使用することができ、人は好ましくは、高齢者、疾患状態にある人、疾患状態から回復中の人、栄養失調の人、又はスポーツマン若しくはスポーツウーマン若しくは活動的な高齢者などの健康な人である。
【００８９】
本発明において、上記で定義されたとおり食品マトリックスとして提供される場合、液体加熱殺菌された経腸組成物の栄養成分は、典型的には、タンパク質、脂肪、及び炭水化物を含み、これは製品タイプに応じて選択される。
【００９０】
好ましくは、上記で定義されたとおり食品マトリックスとして提供される場合、脂肪は、組成物の１〜１５重量％、好ましくは組成物の３〜８重量％、又は５〜１０％、又は７〜１２重量％で加熱殺菌された経腸組成物中に含有される。
【００９１】
好ましくは、上記で定義されたとおり食品マトリックスとして提供される場合、炭水化物は、組成物の１〜３０重量％、好ましくは５〜１０重量％、又は８〜１５％、又は１３〜２０％、又は１８〜２５重量％で加熱殺菌された経腸組成物中に含有される。
【００９２】
タンパク質は、上記定義の量で加熱殺菌された経腸組成物中に含有される。
【００９３】
更なる実施形態は、１２〜２０重量％の総タンパク質を含む、本明細書で定義される経腸組成物の調製のための、乳清タンパク質及びカゼイン供給源からなるタンパク質供給源の使用に関し、乳清タンパク質は、本明細書で定義されるとおり、好ましくは乳清タンパク質ミセルを含有し、この組成物は、タンパク質供給源の１．２〜２．４重量％の量でシステインを含有する。
【００９４】
別の実施形態では、本発明は、好ましくは本明細書で定義されるとおり乳清タンパク質及びカゼイン供給源からなる、１２〜２０重量％の総タンパク質を含む液体経腸組成物の粘度の制御のための、好ましくは本明細書で定義されるとおりカゼイン供給源と組み合わされた、好ましくは乳清タンパク質ミセルを含有する乳清タンパク質の使用に関し、この組成物は、タンパク質供給源の１．２〜２．４重量％の量でシステインを含有する。この組成物は、好ましくはｐＨ５．５〜８、好ましくはｐＨ６〜７、好ましくはｐＨ６．０〜６．５を有し、最も有利には、この組成物は、ｐＨ６．５〜７．２、最も好ましくはｐＨ６．７〜６．９を有する。
【００９５】
好ましくは、本発明の加熱殺菌された経腸組成物は、当業者に適した任意の方法により得ることができる。より好ましくは、本発明の加熱殺菌された経腸組成物は、以下に更に詳細に定義される方法により得ることができる。
【００９６】
従って、更なる実施形態によれば、本発明の根本となる目的はまた、加熱殺菌された経腸組成物、好ましくは本明細書で定義される加熱殺菌された経腸組成物の調製方法によって解決されることが好ましい。従って、本発明はまた、上述の加熱殺菌された経腸組成物、好ましくは本明細書で定義される、このような組成物の調製方法により得られた又は得ることができる加熱殺菌された経腸組成物について記載している。この点に関して、この方法は、本発明の加熱殺菌された経腸組成物のために定義された量及び原材料のいずれかを含有又は適用できる。
【００９７】
方法
従って、特定の好ましい実施形態によれば、本発明の根本となる問題は、組成物の重量を基準として１２〜２０重量％の量でタンパク質供給源を含む加熱殺菌された経腸組成物の調製方法によって解決される。このタンパク質供給源は、乳清タンパク質及びカゼイン供給源からなり、乳清タンパク質は、好ましくは乳清タンパク質ミセルを含有する。この方法は、
（ｉ）好ましくは乳清タンパク質ミセルを含有する乳清タンパク質の水溶液を提供するステップと、
（ｉｉ）カゼイン供給源を添加するステップと、
（ｉｉｉ）任意で均質化処理ステップを実施するステップと、
（ｉｖ）好ましくは１４０℃超で、本明細書で定義されるとおり加熱処理ステップを実施するステップと、
（ｖ）任意で均質化処理ステップを実施するステップと、を含む。
【００９８】
好ましくは、ステップは記載された順で実施される。
【００９９】
本発明の方法のステップ（ｉ）
本発明の方法のステップ（ｉ）によれば、好ましくは乳清タンパク質ミセルを含有する乳清タンパク質からなるタンパク質供給源の水溶液を提供する。
【０１００】
好ましくは、本発明の方法において提供される乳清タンパク質供給源又は乳清タンパク質は、例えば、乳清タンパク質分離物、酸性化乳清タンパク質分離物、乳清タンパク質濃縮物、乳清粉末、又は更なる乳清タンパク質供給源から選択されてもよい。好ましくは、乳清タンパク質供給源は脱塩される。
【０１０１】
この観点から、任意の市販の乳清タンパク質分離物又は濃縮物、すなわち当該技術分野において既知の乳清タンパク質の任意の調製方法によって得られた乳清タンパク質、並びにそれから調製された乳清タンパク質画分、又はβ−ラクトグロブリン（ＢＬＧ）、α−ラクトアルブミン、及び血清アルブミンなどのタンパク質を使用することができる。特に、チーズ製造における副生成物として得られるスイート乳清、酸カゼイン製造における副生成物として得られる酸乳清、牛乳の精密ろ過により得られる天然乳清、又はレンネットカゼイン製造における副生成物として得られるレンネット乳清を乳清タンパク質として使用することができる。乳清タンパク質は、単一供給源からか又は任意の供給源の混合からであってよい。乳清タンパク質は、ミセル形成の前に、任意の加水分解ステップを受けないのが好ましい。従って、乳清タンパク質は、典型的には、乳清タンパク質ミセル形成の前に、酵素処理、又は加水分解プロセスを受けず、すなわち、天然乳清タンパク質であることが好ましい。本発明によれば、天然乳清タンパク質の加水分解物ではなく、天然乳清タンパク質がミセル形成プロセスに使用されることが非常に好ましい。
【０１０２】
本発明は、ウシ由来の乳清分離物に制限されず、ヒツジ、ヤギ、ウマ、及びラクダなどの全哺乳類動物種からの乳清分離物に関する。また、本発明による本発明の加熱殺菌された経腸組成物及びまた本発明の方法は、ミネラル化された、脱塩された、又はわずかにミネラル化された乳清の調製に適用される。「わずかにミネラル化された」とは、透析可能な又はダイアフィルトレーション可能な遊離ミネラルを除去した後の任意の乳清の調製を意味するが、これは例えば、乳清タンパク質濃縮物又は分離物の調製後、天然ミネラル化により乳清の調製に付随したミネラルを保持する。これらの「わずかにミネラル化された」乳清の調製では、特定のミネラル強化はされていない。
【０１０３】
ステップ（ｉ）で乳清タンパク質中に含有されてもよい乳清タンパク質ミセルは、当業者によく知られた加工及び抽出技術によって提供されてよい。
【０１０４】
本発明の方法によって調製できる乳清タンパク質ミセルは、好ましくは本発明の加熱殺菌された経腸組成物のために定義された乳清タンパク質ミセルである。
【０１０５】
好ましくは、本発明の方法のステップ（ｉ）において用いることができる乳清タンパク質ミセルは、
ａ）乳清タンパク質水溶液のｐＨをｐＨ３．０〜８．０、最も好ましくはｐＨ５．８〜７．０、好ましくはｐＨ６．０〜６．５の値に調整するステップと、ここで、より好ましくは、ｐＨは、ｐＨ６．０〜６．４、更により好ましくはｐＨ６．０〜６．３に調整される、
ｂ）７０〜９５℃未満、好ましくは８０〜８５℃の温度にステップａ）の水溶液をさらすステップと、
ｃ）任意でステップｂで得られた分散体を濃縮するステップと、を含む乳清タンパク質ミセルの形成方法によって生成される。
【０１０６】
乳清タンパク質水溶液が脱塩された乳清タンパク質を含有する場合、ミセルを形成する上述のステップｂ）の前に、好ましくはカルシウムを添加する。
【０１０７】
乳清タンパク質ミセルの形成方法は、ステップ（ｉ）の一部であるサブステップを形成してもよい。
【０１０８】
最も好ましくは、例えば、本発明の方法のステップ（ｉ）及び（ｉｉ）において用いることができる乳清タンパク質ミセルは、上記の乳清タンパク質ミセルの形成方法の任意のステップｃ）などの濃縮ステップに供されていない。
【０１０９】
典型的には、ステップｂ）において、７０〜９５℃未満、好ましくは８０〜８５℃での加熱は、例えば１０秒〜２時間実施され、好ましくは、加熱は、１０〜２０分間実施される。
【０１１０】
最も好ましくは、乳清タンパク質ミセルの形成方法のステップｂ）の後に、このようにして得た、好ましくはミセラー乳清タンパク質を含有する組成物を、２０℃未満の温度まで、最も好ましくは１０〜１５℃に冷却する。次いで、この温度にて、本発明の方法のステップ（ｉｉ）が、好ましくは実施される。
【０１１１】
上で詳細に記載された乳清タンパク質ミセルの形成方法により得ることができる乳清タンパク質ミセルは、最も好ましくは、形成中に生成された乳清タンパク質ミセルの粒子サイズ分布の減少をもたらすあらゆる機械的ストレスにさらされていない。この本発明の方法では、好ましくは、剪断なしの加熱処理中に自然な乳清タンパク質ミセルの形成が生じる。
【０１１２】
最も好ましくは、本発明の方法のステップ（ｉ）は、乳清タンパク質中に含有されたミセルのうちの８０％超が１ミクロンより小さいサイズを有する粒子サイズ分布を有する乳清タンパク質ミセルを含有する乳清タンパク質を提供する。最も好ましくは、本発明の方法のステップ（ｉ）において提供することができるミセルは、１００ｎｍ〜１２００ｎｍ又は４００ｎｍ〜９００ｎｍ、より好ましくは５００〜７７０ｎｍ、最も好ましくは２００〜３５０ｎｍのサイズを有する。
【０１１３】
乳清タンパク質ミセルは、本発明の組成物のために本明細書で上述された当業者によく知られた多数の方法により、本発明の方法のステップ（ｉ）及びステップ（ｉｉ）〜（ｖ）のいずれかにおいて検出することができる。更に、乳清タンパク質ミセルの存在は、乳清タンパク質ミセル形成に続く本発明の方法の任意のステップにおける、好ましくは上記定義の方法を使用する乳清タンパク質ミセルの分離及びその測定によって検出することができる。
【０１１４】
本発明の方法のステップ（ｉｉ）
本発明の方法のステップ（ｉｉ）では、カゼイン供給源をステップ（ｉ）の水溶液へ添加する。これに関連して、本発明の方法に用いられるカゼイン供給源は、任意の好適なカゼイン供給源から選択されてもよい。
【０１１５】
好ましくは、カゼインを含有するタンパク質供給源は、ミセラーカゼイン、天然カゼイン、乳タンパク質濃縮物、乳タンパク質分離物、乳粉末のうちの少なくとも１つから選択されてもよく、存在する場合、乳粉末は、スキムミルク又は全脂肪であってもよい。
【０１１６】
いくつかの態様では、本発明の方法のステップ（ｉ）及び（ｉｉ）において提供されるタンパク質供給源又はその成分は、例えば、上述のような当業者によく知られた加工及び抽出技術によって、対応する原材料から得ることができる。
【０１１７】
１つの好ましい態様によれば、ステップ（ｉ）又は（ｉｉ）の各々に続いて、水和ステップがあってもよい。乳清タンパク質供給源又はカゼインタンパク質供給源を、例えば粉末として添加する場合に、これは有利であり得る。
【０１１８】
上記で定義された本発明の方法によれば、本発明の方法のステップ（ｉ）及び／又は（ｉｉ）に用いられるタンパク質供給源は、好ましくは、全量が最終的な加熱殺菌がされている経腸組成物の少なくとも８重量％の量で提供される。より好ましくは、タンパク質供給源は、全量が最終的な加熱殺菌がされている経腸組成物の少なくとも１０重量％、最終的な加熱殺菌がされている経腸組成物の少なくとも１２重量％、少なくとも１４重量％、又は少なくとも１６重量％の量で提供されてもよく、最終的な加熱殺菌がされている経腸組成物は本発明の方法により得ることができる。特に好ましい態様によれば、タンパク質供給源は、全量が８〜２０重量％の量で、あるいは最終的な加熱殺菌がされている経腸組成物の１０〜１５重量％、又は１５〜２０重量％の量で提供されてもよい。
【０１１９】
更に好ましい態様によれば、タンパク質供給源は、本発明の方法により得ることができる最終的な加熱殺菌がされている経腸組成物の最大２０ｇ／１００ｇ、本発明の方法により得ることができる最終的な加熱殺菌がされている経腸組成物の好ましくは１１ｇ／１００ｇ〜２０ｇ／１００ｇ、好ましくは本発明の方法により得ることができる最終的な加熱殺菌がされている経腸組成物の好ましくは１２ｇ／１００ｇ〜１６ｇ／１００ｇ、好ましくは１３ｇ／１００ｇ〜１５ｇ／１００ｇのタンパク質濃度で、本発明の方法において提供されてもよい。
【０１２０】
乳清タンパク質量
好ましい態様によれば、タンパク質供給源は、最終的な加熱殺菌がされている経腸組成物が、最終的な加熱殺菌がされている経腸組成物の好ましくは４．５〜１３重量％の量で、最終的な加熱殺菌がされている経腸組成物の最も好ましくは４．５〜１０重量％、又は最終的な加熱殺菌がされている経腸組成物の４．５〜９．５重量％、又は４．５〜９重量％、又は４．５〜８．５重量％、最も好ましくは５．０〜７．５重量％の量で、乳清タンパク質を含有するように、本発明の方法において提供されてもよく、最終的な加熱殺菌がされている経腸組成物は本発明の方法により得ることができる。
【０１２１】
特に好ましい態様によれば、タンパク質供給源は、本発明の方法により得ることができる加熱殺菌された経腸組成物が、乳清タンパク質の量を基準として少なくとも３５％、好ましくは少なくとも５０％の量で乳清タンパク質ミセルを含有するように、本発明の方法のステップ（ｉ）において提供されてもよい。最も好ましくは、乳清タンパク質を含むタンパク質供給源は、乳清タンパク質の量を基準として４０〜６０％、より好ましくは乳清タンパク質の量を基準として少なくとも８０％の量で、乳清タンパク質ミセルを含有する。典型的には、残留可溶性凝集体又は可溶性タンパク質含有量は、好ましくは乳清タンパク質の量を基準として２０％未満である。平均ミセルサイズの特徴は、多分散指数が０．２６０未満、好ましくは０．２００未満である。
【０１２２】
いくつかの態様では、タンパク質供給源は、本発明の方法により得ることができる加熱殺菌された経腸組成物が、組成物の１．０〜５重量％の量で乳清タンパク質ミセルを含有するように、本発明の方法のステップ（ｉ）において提供されてもよい。最も好ましくは、本発明の方法は、組成物の２．０〜３重量％、最も好ましくは組成物の２．５〜３．５重量％の量で乳清タンパク質ミセルを含有する、加熱殺菌された経腸組成物を提供する。
【０１２３】
カゼイン量
更なる好ましい態様によれば、カゼイン供給源は、加熱殺菌された経腸組成物が、好ましくは組成物の３．５〜１３重量％の量で、最も好ましくは本発明の方法により得ることができる組成物の５〜１１重量％の量で、好ましくは８〜９重量％、若しくは８．５〜１０重量％、若しくは９．５〜１０．５重量％の量で、又はこのような上限と下限の範囲の任意の組み合わせでカゼインを含有するように、本発明の方法のステップ（ｉｉ）において提供されてもよい。好ましくは、本明細書で定義される「カゼイン供給源」はカゼインである。
【０１２４】
最も好ましくは、カゼイン供給源は、加熱殺菌された経腸組成物が、好ましくは３５：６５〜６５：３５、好ましくは４０：６０〜６０：４０、好ましくは４５：５５〜５５：４５の重量比でカゼインを含有するように、本発明の方法のステップ（ｉｉ）において提供されてもよい。特に好ましい態様では、カゼインは、乳清タンパク質／カゼイン重量比が５０：５０で存在する。
【０１２５】
システイン
本発明の方法により提供された加熱殺菌された経腸組成物は、システインの豊富な供給源を提供することが特に有利である。これに関連して、タンパク質供給源は、単独で、本明細書で定義されるとおり乳清タンパク質及びカゼインを含有する。タンパク質供給源は、他のタンパク質を含まなくてもよい。
【０１２６】
システイン量
この目的のために、加えて又は代替的に、本発明の方法のステップ（ｉｉ）において、タンパク質供給源の好ましくは少なくとも１．２重量％の量でシステインを含有するように、ステップ（ｉ）からの好ましくは乳清タンパク質ミセルを含有する乳清タンパク質を含む水溶液とカゼイン供給源とを混合する。
【０１２７】
最も好ましくは、加えて又は代替的に、本発明の方法のステップ（ｉｉ）において、タンパク質供給源の１．２〜２．４重量％の量で、好ましくはタンパク質供給源の１．２〜１．３２重量％及び１．８〜２．２重量％の範囲でシステインを含有するように（このような範囲には明示的に１．２〜１．３２重量％及び１．９〜２．２重量％の量、例えば、好ましくはタンパク質供給源の１．２〜２．２重量％、又は１．２〜２．４重量％、又は１．３〜２．４重量％、又は１．５〜２．４重量％、又は１．８〜２．４重量％の量が含まれる）、ステップ（ｉ）からの好ましくは乳清タンパク質ミセルを含有する乳清タンパク質を含む水溶液とカゼインを含有するタンパク質供給源とを混合する。
【０１２８】
上記で定義されたとおり、システイン含有量は、好ましくはタンパク質供給源の全タンパク質含有量を考慮して定義することができる。これに関連して、乳清タンパク質及びカゼインに加えて、「その他のタンパク質」は存在しない。この点に関して、本発明の方法により組成物を調製する際、当業者は、前述の方法のステップにおいて別々に添加することにより、簡単に異なる原材料、特にカゼイン及び乳清タンパク質などの乳タンパク質量、及びまたその他のタンパク質量も区別でき、これにより本明細書で定義されるとおり乳清タンパク質及び／又はカゼイン単独で由来するシステイン量を特定することができることに注意する。
【０１２９】
Ｎｉｃｏｌａｉ  Ｚ．Ｂａｌｌｉｎ  ｅｔ．ａｌ．のＪ．Ａｇｒｉｃ．Ｆｏｏｄ  Ｃｈｅｍ．２００１６，５４，ｐａｇｅｓ  ４１３１  ｔｏ  ４１３５（これは参考として本明細書に組み込まれる）に記載されたシステインを定量することにより、乳清タンパク質量とカゼイン量の関係は判定できる。
【０１３０】
この観点から、Ｂａｌｌｉｎは、カゼイン共沈物及び乳粉末中の乳清タンパク質含有量を次の式を使用して算出したことについて記載している。
【０１３１】
％乳清タンパク質＝（Ｘ−０．２５）／（３．０−０．２５）×１００
乳清及びカゼインなどの乳タンパク質のみが存在するので、このような計算により、好ましくは、本発明の加熱殺菌された経腸組成物中のシステイン量を算出することが可能になる。
【０１３２】
システインを定量することは、乳清タンパク質を判定する目的で測定するのに有利なパラメータである。その理由は、カゼイン及び乳清タンパク質中のシステイン含有量は１０倍以上異なり、かつシステイン変性を含有しない限り、システイン含有量はタンパク質構造に依存しないという事実のためである。
【０１３３】
別の可能なシステイン含有量の測定は、欧州連合（ＥＵ）の法規制（ＥＣＣ２９２１／９０  ｏｆ  １０ｔｈ  Ｏｃｔｏｂｅｒ  １９９０；Ｏｆｆ．Ｊ．Ｅｕｒ．Ｃｏｍｍｕｎ．１９９０，２２〜２７）に従い、これは、「カゼイン以外の乳タンパク質含有量（milk protein content other than casein）」（実際には、乳清タンパク質）を、タンパク質と結合する−ＳＨ基及び−Ｓ−Ｓ−基を測定することにより判定することについて定義している。
【０１３４】
これに関連して、カゼイン以外のこのような乳タンパク質含有量は、タンパク質と結合する−ＳＨ基及び−Ｓ−Ｓ−基を測定することにより判定された含有量を意味し、参照値は、純粋なカゼイン及び乳清タンパク質についてそれぞれ０．２５％及び３％である（１９９０年１０月１０日のＥＣＣ２９２１／９０）。同様に、上記のように、好ましくはシステイン及び乳清タンパク質のみが含有されるだけでなく、その他のタンパク質も含有される場合、システイン含有量は、タンパク質供給源の全タンパク質含有量を考慮していずれかで判定することができる。
【０１３５】
本発明の方法のステップ（ｉｉｉ）及び（ｖ）
加えて、本発明の方法の１つの他の好ましい態様によれば、ステップ（ｉｉｉ）の後及び均質化処理（ｖ）の前に、混合物を５０〜６０℃の温度に予熱する。
【０１３６】
本発明の方法の１つの好ましい態様によれば、任意の均質化ステップ（ｉｉｉ）及び（ｖ）は、５０バール超、好ましくは５０〜４００バール、好ましくは１００〜４００バール、より好ましくは２００〜３５０バール、更により好ましくは２５０〜３５０バールで実施される。
【０１３７】
本発明の方法の更に好ましい態様によれば、ステップ（ｉｉｉ）の後に、好ましくは混合物を１５℃未満、好ましくは１〜５℃又は３〜８℃又は６〜１２℃に冷却する。最も好ましくは、この冷却は、本明細書で定義されるとおり任意のｐＨ調整の実施前に実施し、この任意のｐＨ調整は、例えば、本発明の方法のステップ（ｉｖ）の前に実施してもよい。この任意の均質化は、２ステップ均質化又は１ステップ均質化として実施してもよい。この任意の均質化の条件は、好ましくは上記で定義されたとおり、例えば、好ましくは１００〜４００バール、より好ましくは２００〜３５０バール、更により好ましくは２５０〜３５０バールである。
【０１３８】
本発明の方法のステップ（ｉｖ）
本発明の方法の１つの好ましい態様によれば、加熱処理ステップ（ｉｖ）は、ＵＨＴ条件下で、好ましくは１４０℃超、好ましくは１４１〜１６０℃、好ましくは１４１〜１４８℃、又は１４１〜１５２℃、又は１４１〜１５５℃で、好ましくは１秒〜１５秒の時間、より好ましくは１秒〜１０秒の時間、及び最も好ましくは２．５秒〜７．５秒の時間、例えば、３秒、４秒、５秒、６秒、若しくは７秒、又はこれらの時間の間の任意の値若しくはこれらの時間で形成される任意の範囲で実施される。
【０１３９】
最も好ましくは、本発明の方法のステップ（ｉｖ）の後及び任意のステップ（ｖ）の前に、得られた混合物を９５℃未満、好ましくは８０℃未満又は７０℃未満まで冷却し、最も好ましくは冷却は、４０〜９０℃、又は４５〜５５℃、又は５０〜６５℃、又は６０〜７５℃、又は７０〜８５℃、又は８０〜９０℃まで実施される。最も好ましくは、この冷却はフラッシュ冷却である。
【０１４０】
その他の成分
本発明の方法のステップ（ｉｉ）における１つの好ましい態様では、脂肪、炭水化物、水、又はそれらの混合物から選択される少なくとも１つの更なる成分が添加されてもよく、これらは、一緒か又は好ましくは別々かのいずれか一方で添加されてもよい。本明細書で使用するとき、脂肪という用語は、油という用語と同じ意味で用いられてよい。
【０１４１】
好ましくは、脂肪は、本発明の方法により得ることができる加熱殺菌された経腸組成物の１〜１５重量％、ステップ（ｉ）〜（ｖ）の後に得られる最終経腸組成物の好ましくは３〜８重量％、又は５〜１０重量％、又は７〜１２重量％の脂肪量で存在するように、本発明の方法において添加される。
【０１４２】
好ましくは、炭水化物は、本発明の方法により得ることができる加熱殺菌された経腸組成物の１〜２０重量％、ステップ（ｉ）〜（ｖ）の後に得られる最終経腸組成物の好ましくは３〜８重量％、又は５〜１０重量％、又は７〜１２重量％の炭水化物量で存在するように、本発明の方法において添加される。
【０１４３】
最も好ましくは、脂肪を、ステップ（ｉ）で提供された、好ましくは乳清タンパク質ミセルを含有する乳清タンパク質を含むタンパク質供給源の水溶液に最初に添加する。次いで、続いて炭水化物などのその他の成分を添加してもよく、その他の成分は、好ましくはステップ（ｉｉ）でカゼインを含有するタンパク質供給源と別々に又は一緒に添加してもよい。
【０１４４】
次いで、有利には、好ましくは５〜２５℃の温度で、最も好ましくは１０〜１５℃又は１２〜２０℃で撹拌することにより混合してもよい。
【０１４５】
一方、撹拌機を使用して混合する代わりに、本発明の方法のステップ（ｉ）で提供された乳清タンパク質ミセルを含有する乳清タンパク質を含有する水溶液へ脂肪を添加した後に、得られた混合物を、好ましくは５０〜４００バール、好ましくは１００〜４００バール、より好ましくは２００〜３５０バール、更により好ましくは２５０〜３５０バールで均質化してもよい。均質化は、最も好ましくは３０〜６０℃、好ましくは３５〜４５℃、又は４０〜５５℃、又は５０〜６０℃で実施される。この均質化は、２ステップ均質化又は１ステップ均質化として実施してもよい。
【０１４６】
加えて、１つの他の好ましい態様によれば、本発明の方法のステップ（ｉ）〜（ｖ）のいずれかにおいて、最も好ましくはステップ（ｉｉ）の後又は最中に、微量栄養素をタンパク質供給源に添加してもよい。
【０１４７】
このような微量栄養素は、ビタミン、ミネラル、及び微量元素から選択されてもよく、これらは単独で又は組み合わせてのいずれかで存在させることができる。一方、本発明の方法に用いられるタンパク質供給源は、微量栄養素を全く含有しない、又は微量栄養素は、本発明の方法に添加されない場合がある。
【０１４８】
特に好ましい態様によれば、ミネラル及び／又は塩含有量を、好ましくは本発明の方法のステップ（ｉ）又はステップ（ｉｉ）のいずれかにおいて、（全）量がタンパク質供給源を基準として１．５〜５重量％、好ましくはタンパク質供給源を基準として３．５〜７．５重量％又は同等、最も好ましくはタンパク質供給源を基準として６．２５〜７．２５重量％の量で添加してもよい。
【０１４９】
本発明の方法の更なる態様では、ステップ（ｉ）において、好ましくはまたステップ（ｉｉ）において、タンパク質供給源の水溶液のミネラル及び／又は塩含有量は、２．５重量％未満の量で、好ましくは最終経腸組成物の０．２重量％未満の量である。
【０１５０】
本発明の方法に用いられる具体的なビタミン及びミネラルの量は、当業者により決定され得る。より好ましくは、このような具体的なビタミン、ミネラル、及び／又はそれらの塩は、本発明の加熱殺菌経腸組成物のために上記で定義されたとおりである。
【０１５１】
好ましくは本発明の方法のステップ（ｉ）又はステップ（ｉｉ）のいずれかにおいて、タンパク質供給源に添加されてもよい更なるミネラル及び／又は塩は、微量元素であり得る。このような微量元素としては、例えば、クロム、コバルト、銅、塩化物、フッ素、ヨウ素、マンガン、モリブデン、セレン、及び亜鉛、並びに／又はこれらの塩が挙げられてもよい。
【０１５２】
従って、いくつかの態様では、任意の組み合わせのビタミン、特に、患者に適切な栄養を提供するのに有用なミネラル及び微量元素を本発明の方法において添加することができる。ビタミン、ミネラル、及び微量元素は、溶液として又は粉末若しくは固体としてのいずれかで、混合物又は製剤の形態で添加することができる。
【０１５３】
更に、特に好ましい態様によれば、本発明の方法のステップ（ｉ）〜（ｖ）の後で得られた加熱殺菌された経腸組成物は、苦味を有さない。
【０１５４】
本発明の方法のいくつかの態様では、ステップ（ｉ）〜（ｉｉ）、好ましくはまたステップ（ｉｉｉ）〜（ｖ）は、ｐＨ５．５〜８、又はｐＨ６〜７、又はｐＨ６．０〜６．５、又はｐＨで実施され、最も有利には、ステップ（ｉｉｉ）〜（ｖ）は、ｐＨ６．５〜７．２、最も好ましくはｐＨ６．７〜６．９で実施される。この観点から、ｐＨが、ｐＨ５．５〜８、好ましくはｐＨ６〜７、最も好ましくはｐＨ６．０〜６．５で維持されるように、ステップ（ｉ）〜（ｖ）のいずれかの後又は最中にｐＨ調整を実施してもよい。最も有利には、ステップ（ｉ）〜（ｖ）のいずれかの最中に、ｐＨは、６．５〜７．２、最も好ましくはｐＨ６．７〜６．９で維持される。
【０１５５】
本発明の方法の好ましい態様によれば、一般に、任意の酸又は塩基を使用して、ｐＨを調整してもよい。好ましくは、ＫＯＨなどの塩基を用いてｐＨを調整するが、ＮａＯＨ、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、水酸化アンモニウム、又は水酸化カルシウムを含む他の塩基もまた、ｐＨ５．５〜８、又はｐＨ６〜７、又はｐＨ６．０〜６．５、最も有利にはｐＨ６．５〜７．２、最も好ましくはｐＨ６．７〜６．９へとｐＨを調整するのに用いられてもよい。当業者は、ｐＨ調整に好適な他の手段を認識するだろう。好適な酸としては、例えば、クエン酸、酢酸、及び塩酸が挙げられる。
【０１５６】
この目的のために、本発明の方法において、前述の理由でタンパク質の４０ｍｇ／ｇを超えて一価の金属イオン含有量を増加させない添加物のみが好ましくは使用される。例えば、ｐＨ調整のためのクエン酸カリウム若しくは水酸化カリウム使用、又はＮａＣｌの使用は、好ましくは限定されるか、又は最も好ましくは避けるべきである。
【０１５７】
本発明者らは驚くべきことに、本発明の方法における少量の一価の金属イオンは、本発明の方法から得られた加熱殺菌された経腸組成物の低い粘度及び安定性を更に高めるため、特に有利であることを見出した。
【０１５８】
好ましい態様によれば、好ましくは乳清タンパク質ミセルを含有する、乳清タンパク質及びカゼインを含むタンパク質供給源、すなわちステップ（ｉ）及び（ｉｉ）において結合したタンパク質供給源は、本発明の方法により得ることができる加熱殺菌された経腸組成物が、典型的には、Ｎａ及びＫ、また少量のナトリウム及びカリウム（Ｎａ＋Ｋ）から選択される一価の金属イオンの総量、好ましくはタンパク質供給源の最大４０ｍｇ／ｇ、好ましくはタンパク質供給源の２５ｍｇ／ｇ未満、最も好ましくはタンパク質供給源の０〜５ｍｇ／ｇ、又はタンパク質供給源の２〜１０ｍｇ／ｇ、又は８〜１５ｍｇ／ｇ、又は１３〜２０ｍｇ／ｇ、又は１８〜２５ｍｇ／ｇ、又は２３〜３０ｍｇ／ｇ、又は２８〜３５ｍｇ／ｇ、又は３３〜４０ｍｇ／ｇを含有するように、本発明の方法において提供されてもよい。
【０１５９】
いくつかの態様では、好ましくは乳清タンパク質ミセルも含有する、乳清タンパク質及びカゼインを含むタンパク質供給源、すなわちステップ（ｉ）及び（ｉｉ）において結合したタンパク質供給源は、加熱殺菌された経腸組成物が、典型的には、タンパク質供給源の最大４０ｍｇ／ｇ、好ましくはタンパク質供給源の２５ｍｇ／ｇ未満、最も好ましくはタンパク質供給源の０〜５ｍｇ／ｇ、又はタンパク質供給源の２〜１０ｍｇ／ｇ、又は８〜１５ｍｇ／ｇ、又は１３〜２０ｍｇ／ｇ、又は１８〜２５ｍｇ／ｇ、又は２３〜３０ｍｇ／ｇ、又は２８〜３５ｍｇ／ｇ、又は３３〜４０ｍｇ／ｇでカリウムを含有するように、本発明の方法において提供されてもよい。
【０１６０】
更なる態様では、好ましくは乳清タンパク質ミセルを含有する、乳清タンパク質及びカゼインを含むタンパク質供給源は、本発明の方法により得ることができる加熱殺菌された経腸組成物が、典型的には、タンパク質供給源の最大４０ｍｇ／ｇ、好ましくはタンパク質供給源の２５ｍｇ／ｇ未満、最も好ましくはタンパク質供給源の０〜５ｍｇ／ｇ、又はタンパク質供給源の２〜１０ｍｇ／ｇ、又は８〜１５ｍｇ／ｇ、又は１３〜２０ｍｇ／ｇ、又は１８〜２５ｍｇ／ｇ、又は２３〜３０ｍｇ／ｇ、又は２８〜３５ｍｇ／ｇ、又は３３〜４０ｍｇ／ｇでナトリウムを含有するように、本発明の方法において提供されてもよい。
【０１６１】
上記の段落における一価の金属イオンの濃度は、好ましくは得られた／調製された加熱殺菌された経腸組成物のタンパク質供給源中のタンパク質の総量を基準としており、好ましくはカゼインの総量、乳清タンパク質の総量を基準とし、典型的には、乳清タンパク質の総量を含む。
【０１６２】
好ましい態様によれば、好ましくは乳清タンパク質ミセルを含有する、乳清タンパク質及びカゼインを含むタンパク質供給源、すなわちステップ（ｉ）及び（ｉｉ）において結合したタンパク質供給源は、本発明の方法により得ることができる加熱殺菌された経腸組成物が１つ以上のクエン酸塩を含有するように、本発明の方法において提供されてもよい。好ましくは、クエン酸塩はクエン酸三カリウムである。最も好ましくは、クエン酸塩は、本発明の方法により得ることができる加熱殺菌された経腸組成物が、組成物の０．１〜１重量％、好ましくは加熱殺菌された経腸組成物の０．２〜０．５重量％又は０．３〜０．７重量％でクエン酸塩を含有するように、本発明の方法のステップ（ｉ）及び／又は（ｉｉ）において添加される。
【０１６３】
本発明の方法の更なる態様では、ステップ（ｉ）〜（ｖ）の後に、本発明の方法の生成物として加熱殺菌された液体経腸組成物が得られ、この加熱殺菌された液体経腸組成物は、好ましくは本明細書で以前に定義されており、より好ましくはこの液体組成物は、１００ｓ−１の剪断速度で測定された２０℃での粘度が好ましくは２００ｍＰａ．ｓ未満であり、１００ｓ−１の剪断速度で測定された２０℃での粘度が好ましくは１０〜１８０ｍＰａ．ｓであり、１００ｓ−１の剪断速度で測定された粘度が好ましくは、２０℃で２０〜５０ｍＰａ．ｓ、又は２０℃で４４〜１２０ｍＰａ．ｓ、又は２０℃で５０〜１６０ｍＰａ．ｓ、又は２０℃で９０〜１４０ｍＰａ．ｓ、又は２０℃で１００〜１５０ｍＰａ．ｓ、又は２０℃で１１０〜１３０ｍＰａ．ｓ、又は２０℃で１２５〜１６０ｍＰａ．ｓである。
【０１６４】
本発明の方法のいくつかの態様では、ステップ（ｉ）〜（ｖ）の後に、加熱殺菌された経腸組成物は、任意のステップ（ｖｉ）において、好ましくは噴霧乾燥、に凍結乾燥、リョフィリゼーション又は流動床凝集によって、乾燥され粉末を形成する。
【０１６５】
本発明の方法の特に好ましい態様によれば、均質化処理ステップ（ｉｉｉ）の後及び加熱処理ステップ（ｉｖ）の前に、混合物を０〜５℃に冷却してもよい。この冷却は、好ましくはｐＨ５．５〜８、又はｐＨ６〜７、又はｐＨ６．０〜６．５への任意のｐＨ調整ステップの前にのみ実施される。ｐＨ調整ステップは、ｐＨ６．５〜７．２、最も好ましくはｐＨ６．７〜６．９であるのが特に有利である。
【０１６６】
好ましい態様によれば、本発明の方法のステップ（ｉ）〜（ｖ）の後に得られた加熱殺菌された経腸組成物は全て、保存安定である。本発明の方法のいくつかの態様では、品質保持期間は、好ましくはいずれかの最終加工ステップ、より好ましくは最終加工ステップ（ｖ）後から開始して少なくとも９か月間、好ましくは少なくとも１年間である。好ましくは、加熱殺菌された液体経腸組成物は、室温にて保存安定である。
【０１６７】
更に、いくつかの態様では、本発明の方法のステップ（ｉ）〜（ｖ）の後に得られた加熱殺菌された経腸組成物は全て、ほぼ苦味がなく、得られた液体経腸組成物は、比較的低粘度で、低重量オスモル濃度であり、ゼリー状ではなく及び／又は凝集していない。
【０１６８】
更なる態様では、本発明の方法のステップ（ｉ）〜（ｖ）の後に得られた経腸組成物は全て、改善された安定性を有し、好ましくは長期にわたる品質保持期間を有する。
【０１６９】
更なる実施形態によれば、本明細書に記載された本発明の加熱殺菌された経腸組成物（上述されたようなもの、又は本発明の方法により得られた若しくは得ることができるようなもののいずれか）の使用が考えられる。一態様では、本発明の方法により得ることができる本発明の経腸組成物は、飲料組成物である。
【０１７０】
一実施形態によれば、本発明の経腸組成物は、疾患状態にある人、又は疾患状態から回復中の人、又は栄養失調の人に栄養を提供するのに使用するために特に好適である。
【０１７１】
本明細書で使用するとき、用語「疾患」は、機能の撹乱又は異常；身体的又は精神的に病的な状態のいずれかを指す。
【０１７２】
いくつかの態様では、このような疾患又は栄養不良の治療は、好ましくは、本発明によって定義された、治療有効量の加熱殺菌された経腸組成物を、その治療を必要とする対象に投与することによって行う。特に好ましい態様によれば、このような加熱殺菌された経腸組成物は、１日１回、好ましくは１日２回、より好ましくは１日３回投与され、本明細書で定義されるとおり、投与中に、好ましくは少なくとも１単位又は１投与量が投与される。投与において、１日当たりに投与されるエネルギーの総量は、上記で定義されたとおりであるのが好ましい。本明細書で使用するとき、用語「対象」は動物を指す。好ましくは動物は哺乳動物である。対象は、例えば霊長類（例えば、ヒト）、乳牛、ヒツジ、ヤギ、ウマ、イヌ、ネコ、ウサギ、ラット、マウス、魚、及び鳥など指す。いくつかの態様では、好ましくは、対象は、ヒトである。
【０１７３】
本発明の加熱殺菌された経腸組成物の「治療有効量」という用語は、対象の生物学的若しくは医学的反応を引き出す、又は症状を改善する、疾患の進行を伸ばす若しくは遅らせる、又は疾患を防ぐなどの本発明の化合物の量を指す。更なる態様では、このような「治療有効量」は、得られたとおりにパッケージ化された投与量又は単位である。
【０１７４】
一実施形態によれば、本明細書に記載された本発明の加熱殺菌された経腸組成物（上述されたようなもの、又は本発明の方法により得られた若しくは得ることができるようなもののいずれか）は、乳児（１歳以下の児童）への使用に好適であるのが好ましい。いくつかの態様では、本発明の経腸組成物は、成人及び児童による使用にも好適である。
【０１７５】
一態様によれば、本明細書に記載された加熱殺菌された経腸組成物（上述されたようなもの、又は本発明の方法により得られた若しくは得ることができるようなもののいずれか）は、栄養組成物、栄養補助食品、乳児用フォーミュラ、フォローオンフォーミュラ、ベビーフードフォーミュラ、乳児用シリアルフォーミュラ若しくはグローイングアップミルク、乳児用若しくは児童用栄養補助食品、児童用フォーミュラ、成人用栄養組成物、妊婦用栄養補助食品、肥満用フォーミュラ、高齢者用栄養組成物、又はヘルスケアフォーミュラである。
【０１７６】
いくつかの態様では、本明細書に記載された加熱殺菌された経腸組成物（上述されたようなもの、又は本発明の方法により得られた若しくは得ることができるようなもののいずれか）は、栄養が必要な人に栄養を提供するのに使用することができ、人は好ましくは、高齢者、疾患状態にある人、疾患状態から回復中の人、栄養失調の人、又はスポーツマン若しくはスポーツウーマン若しくは活動的な高齢者などの健康な人である。
【０１７７】
本発明の様々な実施形態を上記した。これらの記載は例示を意図するものであり、限定を意図するものではない。従って、以下に示す特許請求の範囲を逸脱することなく、記載された本発明に特定の変更を行ってもよいことは当業者にとって明らかである。
【０１７８】
例えば、本明細書に記載されているように、「好ましい実施形態」は、「本発明の好ましい実施形態」を意味する。同様に、本明細書に記載されているように、「様々な実施形態」及び「別の実施形態」は、それぞれ「本発明の様々な実施形態」及び「本発明の別の実施形態」を意味する。
【０１７９】
別途記載のない限り、本発明において、用語「少なくとも」は、典型的には、一連の要素のうち最低限のものを意味するものであり、一連の要素に含まれるすべての要素を指すものであることは理解されたい。当業者であれば、本明細書に記載の本発明の特定の実施形態に対する多くの均等物を認識するであろうし、又は通常の実験を超えない実験を用い調査可能であるだろう。このような均等物は、本発明に包含されるものと意図される。
【０１８０】
本明細書及び添付の特許請求の範囲を通して、別途記載のない限り、用語「含む」及び「含んでいる」などのその変形は、記載の整数又はステップ又は整数群又は複数のステップを包含するものであり、任意の他の整数又はステップ又は整数若しくはステップ群を除外することを意味するものと理解される。本明細書で使用するとき、用語「含む」は、用語「含有する」で可換であり、本明細書で使用するとき、場合によっては用語「有する」で可換である。本明細書で使用するとき、「からなる」は、特許請求の範囲において明記されていない任意の要素、ステップ、又は原材料を排除する。本明細書で使用するとき、「本質的に〜からなる」は、特許請求の範囲の基本的及び新規特性に顕著に作用しない物質又はステップを排除しない。本明細書に記載のそれぞれの例において、用語「含む」、「から本質的になる」、及び「からなる」は、その他の２つの用語のいずれかにより可換な場合もある。
【０１８１】
更に、本発明に記載された百分率は、特に別途指示しない限り、重量／重量％（ｗ／ｗ）又は重量／体積％（ｗ／ｖ）のいずれかと相互交換可能である。
【０１８２】
最終的に、本開示で引用したすべての刊行物及び特許文献は、参照によりその全体が援用される。参照により本明細書の記載と矛盾する又は一致する文献が組み込まれるとき、本明細書の記載は任意のこのような文献の記載よりも優先される。
【０１８３】
図：
以降の図は、本発明を更に例示することを意図する。それらの図は、本発明の主題を制限することを意図するものではない。
【図面の簡単な説明】
【０１８４】
【図１】本発明による乳清タンパク質ミセルの概略構造を示す。乳清タンパク質は、水素結合領域及び疎水結合領域があるように配置される。  物理的相互作用及び化学的相互作用の両方が乳清タンパク質ミセルに関与する：  Ｓ＊：システインが有する接触可能なチオール／活性チオール。  −Ｓ−Ｓ−：乳清タンパク質ミセルを安定させるジスルフィド架橋。
【図２】本発明の方法によるその他の原材料の添加前の乳清ミセル分散体の顕微鏡写真を示す。（Ａ）スケールバー：２μｍ。（Ｂ）スケールバー：１μｍ。
【図３】その他の原材料（Ａ）、実施例１（Ｂ）、実施例２（Ｃ）、及び実施例３（Ｄ）の添加前の乳清ミセル分散体の顕微鏡写真を示す。（Ｂ）、（Ｃ）、及び（Ｄ）では、ＢＬＧタンパク質は、免疫金標識によって局所化される（裏ドット）。スケールバー：１μｍ。
【図４】例示的な本発明の方法の概略図である。見てわかるとおり、本発明の方法は、（ｉ）乳清タンパク質溶液を加熱することによって、乳清タンパク質ミセルを含有する乳清タンパク質を含む水溶液を提供することができる。次いでこれを冷却し、任意で脂肪を添加し、続いて混合してよい。次いで（ｉｉ）カゼインを含有するタンパク質供給源を塩及びＣＨＯなどの他の任意の原材料と共に添加し、次いで（ｉｉｉ）任意で均質化し、次いで（ｉｖ）加熱処理し、次いで（ｖ）任意で均質化してよい。
【実施例】
【０１８５】
以降の例は、本発明を更に例示することを意図する。それらの例は、本発明の主題を制限することを意図するものではない。
【０１８６】
実施例１：本発明による例示的な方法
【０１８７】
【表２】
2019517245.tif 000005
【０１８８】
上記の原材料を含有する本発明による本発明の加熱殺菌された経腸組成物を、上記定義の量を使用して以下のとおり調製した。脱塩水及び乳清タンパク質分離物を５０℃にて混合し、続いて３０分間水和した。クエン酸５％を使用してｐＨ６．２へｐＨ調整を行い、続いて混合物を８５℃にて１５分間加熱して、乳清タンパク質ミセルを形成し、次いで１５℃まで冷却した。
【０１８９】
次いで大豆油を添加し、続いて１５℃にて混合し、その後、グルコースシロップ（ＤＥ２９）、クエン酸三カリウム一水和物、スクロース、塩化ナトリウム、及び乳タンパク質濃縮物（８５％タンパク質含有量（カゼイン供給源））を混合しながら添加し、４０分間水和した。
【０１９０】
次いで混合物を５０℃まで予熱し、続いて２５０＋５０バールにて均質化し、８０℃まで予熱し、続いて１４８℃にて５秒間直接蒸気注入によりＵＨＴ処理をした。次いでこれを７８℃までフラッシュ冷却し、混合物を２００＋５０バールにて均質化した。
【０１９１】
このようにして、上述のとおり、以下のプロファイルを有する、タンパク質を１４．１重量％含有した本発明による加熱殺菌された経腸組成物を調製した。
【０１９２】
【表３】
2019517245.tif 000006
注意：
Ｎａ＋＋ｋ＋ｍｇ／ｇタンパク質＝１１．４
２５℃でのｐＨ＝６．７
２０℃での密度ｇ／ｃｍ３＝１．０８６８
全固形分＝３１．３ｇ／１００ｇ
【０１９３】
更に、アミノ酸プロファイルは以下のとおりであった。
【０１９４】
【表４】
2019517245.tif 000007
注意：
シスチン＋メチオニン合計［ｇ／１００ｇ］＝０．６１５
メチオニン／シスチン（比率）＝１．５４
【０１９５】
等式に基づいて算出された乳清／カゼイン比が、Ｂａｌｌｉｎ，２００６：４８／６２で報告された。
％乳清タンパク質＝（Ｃ−０．２５）／（３．０−０．２５）×１００＝４８％
Ｃ＝１００％タンパク質に対するシスチンの百分率＝１．５８％
【０１９６】
この加熱殺菌された液体経腸組成物には、あらゆる味／苦味がなかった。更に、これは、プレート／プレートジオメトリ（直径６０ｍｍ）及び１ｍｍのギャップを装備したレオメーター（ＵＭＴＣと一体となったＨａａｋｅ  Ｒｈｅｏｓｔｒｅｓｓ  ６０００）を使用して測定された２０℃／１００ｓ−１での粘度が４４ｍＰａ．ｓであった。０〜３００ｓ−１の制御された剪断速度勾配（線形増加）の流動曲線を２０℃±０．１にて得た。
【０１９７】
更に、得られた液体経腸組成物は１年間保存安定であった。
【０１９８】
実施例２：本発明による例示的な方法
【０１９９】
【表５】
2019517245.tif 000008
【０２００】
上記の原材料を含有する本発明による本発明の加熱殺菌された経腸組成物を上記定義の量を使用して以下のとおり調製した。脱塩水及び乳清タンパク質分離物を５０℃にて混合し、続いて３０分間水和した。クエン酸５％を使用してｐＨ６．２へｐＨ調整を行い、続いて混合物を８５℃にて１５分間加熱して、乳清タンパク質ミセルを形成し、次いで１５℃まで冷却した。
【０２０１】
次いで大豆油を添加し、続いて１５℃にて混合し、その後、グルコースシロップ（ＤＥ２９）、クエン酸三カリウム一水和物、スクロース、及び乳タンパク質濃縮物（８５％タンパク質含有量（カゼイン供給源））を混合しながら添加し、４０分間水和した。
【０２０２】
次いで混合物を８０℃まで予熱し、続いて１４８℃にて５秒間直接蒸気注入によりＵＨＴ処理をした。次いでこれを７８℃までフラッシュ冷却し、混合物を２００＋５０バールにて均質化した。
【０２０３】
このようにして、以下のプロファイルを有する、タンパク質を１４．２重量％含有した本発明による加熱殺菌された経腸組成物を調製した。
【０２０４】
【表６】
2019517245.tif 000009
注意：
Ｎａ＋＋ｋ＋ｍｇ／ｇタンパク質＝９．５
２５℃でのｐＨ＝６．８
２０℃での密度ｇ／ｃｍ３＝１．１１８４
全固形分＝４１．５ｇ／１００ｇ
【０２０５】
更に、アミノ酸プロファイルは以下のとおりであった。
【０２０６】
【表７】
2019517245.tif 000010
シスチン＋メチオニン合計［ｇ／１００ｇ］＝０．６１４
メチオニン／シスチン（比率）＝１．５６。
【０２０７】
等式に基づいて算出された乳清／カゼイン比が、Ｂａｌｌｉｎ，２００６：４７／５３で報告された。
％乳清タンパク質＝（Ｃ−０．２５）／（３．０−０．２５）×１００＝４７％
Ｃ＝１００％タンパク質に対するシスチンの百分率＝１．５４％
【０２０８】
この加熱殺菌された液体経腸組成物には、あらゆる味／苦味がなかった。更に、これは、プレート／プレートジオメトリ（直径６０ｍｍ）及び１ｍｍのギャップを装備したレオメーター（ＵＭＴＣと一体となったＨａａｋｅ  Ｒｈｅｏｓｔｒｅｓｓ  ６０００）を使用して測定された２０℃／１００ｓ−１での粘度が１１６ｍＰａ．ｓであった。０〜３００ｓ−１の制御された剪断速度勾配（線形増加）の流動曲線を２０℃±０．１にて得た。
【０２０９】
更に、得られた液体経腸組成物は１年間保存安定であった。
【０２１０】
実施例３：本発明による例示的な方法
【０２１１】
【表８】
2019517245.tif 000011
【０２１２】
上記の原材料を含有する本発明による本発明の加熱殺菌された経腸組成物を上記定義の量を使用して以下のとおり調製した。脱塩水及び乳清タンパク質分離物を５０℃にて混合し、続いて３０分間水和した。クエン酸５％を使用してｐＨ６．２へｐＨ調整を行い、続いて混合物を８５℃にて１５分間加熱して、乳清タンパク質ミセルを形成し、次いで１５℃まで冷却した。
【０２１３】
次いで大豆油を添加し、続いて１５℃にて混合し、その後、グルコースシロップ（ＤＥ２９）、クエン酸三カリウム一水和物、スクロース、及び乳タンパク質濃縮物（８５％タンパク質含有量（カゼイン供給源））を混合しながら添加し、４０分間水和した。
【０２１４】
次いで混合物を５０℃まで予熱し、続いて２５０＋５０バールにて均質化し、８０℃まで予熱し、続いて１４８℃にて５秒間直接蒸気注入によりＵＨＴ処理をした。次いでこれを７８℃までフラッシュ冷却し、混合物を２００＋５０バールにて均質化した。
【０２１５】
このようにして、上述のとおり、以下のプロファイルを有する、タンパク質を１２．９重量％含有した本発明による加熱殺菌された経腸組成物を調製した。
【０２１６】
【表９】
2019517245.tif 000012
注意：
Ｎａ＋＋ｋ＋ｍｇ／ｇタンパク質＝１０．６
２５℃でのｐＨ＝６．７
２０℃での密度ｇ／ｃｍ３＝１．１２６８
全固形分＝４３．６ｇ／１００ｇ
【０２１７】
更に、アミノ酸プロファイルは以下のとおりであった。
【０２１８】
【表１０】
2019517245.tif 000013
シスチン＋メチオニン合計［ｇ／１００ｇ］＝０．５７３
メチオニン／シスチン（比率）＝１．５２。
【０２１９】
等式に基づいて算出された乳清／カゼイン比が、Ｂａｌｌｉｎ，２００６：５１／４９で報告された。
％乳清タンパク質＝（Ｃ−０．２５）／（３．０−０．２５）×１００＝５１％
Ｃ＝１００％タンパク質に対するシスチンの百分率＝１．６４％
【０２２０】
この加熱殺菌された液体経腸組成物には、あらゆる味／苦味がなかった。更に、これは、プレート／プレートジオメトリ（直径６０ｍｍ）及び１ｍｍのギャップを装備したレオメーター（ＵＭＴＣと一体となったＨａａｋｅ  Ｒｈｅｏｓｔｒｅｓｓ  ６０００）を使用して測定された２０℃／１００ｓ−１での粘度が１２５ｍＰａ．ｓであった。０〜３００ｓ−１の制御された剪断速度勾配（線形増加）の流動曲線を２０℃±０．１にて得た。
【０２２１】
更に、得られた液体経腸組成物は１年間保存安定であった。
【０２２２】
実施例４：透過電子顕微鏡
プロトコル：
上記の実施例１、２、及び３（「レシピ１、２、及び３」とも称される）に従って調製した試料を受け取り後、３．７％パラホルムアルデヒドを含むＰＢＳ緩衝液（ｐＨ：７．３）中に固定する。固定した試料を４％水性寒天溶液内に埋め込み、氷上で固化させた。１ｍｍ３の小立方体に切断し、次いで試料を３０％〜１００％の段階的な一連のエタノール溶液で脱水（各浴３０分）し、及び１００％エタノール溶液で３回１時間脱水する。次いで純粋な樹脂による３回それぞれ１時間ずつの最終浸透の前に、段階的な一連のＬＲホワイト樹脂を試料に徐々に浸透させる。重合は６０℃にて４８時間実施される。重合後、７０ｎｍの超薄切片を薄く切り取り、１００メッシュニッケルグリッド上に収集する。
【０２２３】
ＢＬＧ免疫標識のために、２．５％ＢＳＡ（ｗ／ｖ）溶液を含むｐＨ７．４のトリスの滴上にグリッドを１５分間置く。次いで、グリッドを４℃にて一晩、１／２００の抗ＢＬＧを含有するトリスの滴上に移動する。１／３０に希釈されたプロテインＡ金１５ｎｍの滴上で３０分間インキュベーションする前に、これらをトリスで３回すすぐ。次いで、水による３回の最終すすぎステップの前に、グリッドをトリスで３回すすぐ。
【０２２４】
試料は、８０ｋＶ電子顕微鏡（ＦＥＩ、オランダ）でＬａＢ６フィラメントを使用するＴｅｃｎａｉ  Ｓｐｉｒｉｔ  ＢｉｏＴＷＩＮを用いて撮像された。
【０２２５】
結果を図３に示す。図３は、その他の原材料（Ａ）の添加前の乳清ミセル分散体、及び本明細書に前述された実施例１（Ｂ）、実施例２（Ｃ）、及び実施例３（Ｄ）による最終的な加熱殺菌がされている経腸組成物の顕微鏡写真を示す。
【０２２６】
３つの試料（図３のＢ、Ｃ、及びＤ）すべてにおいて、多くのタンパク質凝集体（矢印）が観察された。これらは通常、脂肪小球と密着しており、これらは一般に非常に小さい。タンパク質凝集体は部分的にのみ球形で、特に脂肪小球を安定させる際に（この場合だけではないが）変形する（図３のｂ、Ｃ、及びＤの矢印）。ＢＬＧの存在は、凝集体における免疫金標識により示される。これは凝集体外のＢＬＧの存在は明らかにしない。これらのデータは、乳清タンパク質ミセルが最終的な加熱殺菌がされている経腸組成物中に含有されており、検出可能であったことの明確なエビデンスである。
【図１】
2019517245.tif 000014
【図２】
2019517245.tif 000015
【図３−１】
2019517245.tif 000016
【図３−２】
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【図４】
2019517245.tif 000018
【国際調査報告】
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2019517245.tif 000021
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