(57)【要約】  式Iのように表されるイソクエン酸脱水素酵素（IDH1）阻害活性を有するスルタム化合物、又はその薬学上受け入れ可能な塩、溶媒和物、もしくは水和物、及び、その調製方法、それを含む薬用組成物を提供すること。前記化合物、又はその薬学上受け入れ可能な塩、溶媒和物、もしくは水和物、及びそれを含む薬用組成物は、IDH1突然変異より誘導される癌を治療することができる。【化１】2019513819.tif 000124【選択図】なし
2019513819.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Iの化合物、又はその薬学上受け入れ可能な塩、溶媒和物、もしくは水和物：
【化１】
2019513819.tif 000108
式中、
Xは、CH2又はNR5から選択され；
R1は、C3〜6シクロアルキル又はC3〜6ヘテロシクロアルキルから選択され、ここで、それが独立して選択される1つ以上のR6の基で任意に置換されてもよく；
R2は、フェニル、又は、N又はO又はSから選択される1〜2個のヘテロ原子を有する5〜6員のヘテロアリールから選択され、ここで、それが独立して選択される1つ以上のR7の基で任意に置換されてもよく；
R3は、フェニル、N又はO又はSから選択される1〜2個のヘテロ原子を有する5〜6員のヘテロアリール、フェニルCH2-、又は、N又はO又はSから選択される1〜2個のヘテロ原子を有する5〜6員のヘテロアリールCH2-から選択され、ここで、それが独立して選択される1つ以上のR8の基で任意に置換されてもよく；
R4は、ハロゲン、アミノ、ヒドロキシ、ハロゲノC1〜3アルキル、又はC1〜6アルキルから選択され；
R5は、水素又はC1〜6アルキルから選択され；
R6は、ハロゲン、アミノ、ヒドロキシ、シアノ、ハロゲノC1〜3アルキル、C1〜6アルキル、又はC3〜6シクロアルキルから選択され；
R7はハロゲン、アミノ、ヒドロキシ、シアノ、ハロゲノC1〜3アルキル、オキソ、
【化２】
2019513819.tif 000109
C1〜6アルキル、又はC3〜6シクロアルキルから選択され；
R8は、ハロゲン、アミノ、ヒドロキシ、シアノ、ハロゲノC1〜3アルキル、C1〜6アルキル、C3〜6シクロアルキル、C2〜6アルケニル、又はC2〜6アルキニルから選択され；
R9は、H、C1〜6アルキル、C3〜6シクロアルキル、C3〜6ヘテロシクロアルキル、フェニル、又は、N又はO又はSから選択される1〜2個のヘテロ原子を有する5〜6員のヘテロアリールから選択され、ここで、それが独立して選択される1つ以上のR10の基で任意に置換されてもよく；
R10は、ハロゲン、アミノ、ヒドロキシ、シアノ、ハロゲノC1〜3アルキル、C1〜6アルキル、又はC3〜6シクロアルキルから選択され；
mは0又は1である。
【請求項２】
Xは、CH2又はNR5から選択され；
R1は、C3〜6シクロアルキル又はC3〜6ヘテロシクロアルキルから選択され、ここで、それが独立して選択される1つ以上のR6の基で任意に置換されてもよく；
R2は、フェニル、又は、N又はO又はSから選択される1〜2個のヘテロ原子を有する5〜6員のヘテロアリールから選択され、ここで、それが独立して選択される1つ以上のR7の基で任意に置換されてもよく；
R3は、フェニル、N又はO又はSから選択される1〜2個のヘテロ原子を有する5〜6員のヘテロアリール、フェニルCH2-、又は、N又はO又はSから選択される1〜2個のヘテロ原子を有する5〜6員のヘテロアリールCH2-から選択され、ここで、それが独立して選択される1つ以上のR8の基で任意に置換されてもよく；
R4は、ハロゲン、アミノ、ヒドロキシ、ハロゲノC1〜3アルキル、又はC 1〜6アルキルから選択され；
R5は、水素又はC1〜6アルキルから選択され；
R6は、ハロゲン、アミノ、ヒドロキシ、シアノ、ハロゲノC1〜3アルキル、C1〜6アルキル、又はC3〜6シクロアルキルから選択され；
R7は、ハロゲン、アミノ、ヒドロキシ、シアノ、ハロゲノC1〜3アルキル、スルファモイル、N置換スルファモイル、C1〜6アルキル、又はC3〜6シクロアルキルから選択され；
R8は、ハロゲン、アミノ、ヒドロキシ、シアノ、ハロゲノC1〜3アルキル、C1〜6アルキル、C3〜6シクロアルキル、C2〜6アルケニル、又はC2〜6アルキニルから選択され；
mは0又は1である、
請求項1に記載の式Iの化合物、又はその薬学上受け入れ可能な塩、溶媒和物、もしくは水和物。
【請求項３】
式IIの化合物、又はその薬学上受け入れ可能な塩、溶媒和物、もしくは水和物：
【化３】
2019513819.tif 000110
式中、
Xは、CH2又はNR5から選択され；
R1は、C3〜6シクロアルキル又はC3〜6ヘテロシクロアルキルから選択され、ここで、それが独立して選択される1つ以上のR6の基で任意に置換されてもよく；
R2は、フェニル、又は、N又はO又はSから選択される1〜2個のヘテロ原子を有する5〜6員のヘテロアリールから選択され、ここで、それが独立して選択される1つ以上のR7の基で任意に置換されてもよく；
R3は、フェニル、N又はO又はSから選択される1〜2個のヘテロ原子を有する5〜6員のヘテロアリール、フェニルCH2-、又は、N又はO又はSから選択される1〜2個のヘテロ原子を有する5〜6員のヘテロアリールCH2-から選択され、ここで、それが独立して選択される1つ以上のR8の基で任意に置換されてもよく；
R5は、水素又はC1〜6アルキルから選択され；
R6は、ハロゲン、アミノ、ヒドロキシ、シアノ、ハロゲノC1〜3アルキル、C1〜6アルキル、又はC3〜6シクロアルキルから選択され；
R7は、ハロゲン、アミノ、ヒドロキシ、シアノ、ハロゲノC1〜3アルキル、オキソ、
【化４】
2019513819.tif 000111
C1〜6アルキル、又はC3〜6シクロアルキルから選択され；
R8は、ハロゲン、アミノ、ヒドロキシ、シアノ、ハロゲノC1〜3アルキル、C1〜6アルキル、C3〜6シクロアルキル、C2〜6アルケニル、又はC2〜6アルキニルから選択され；
R9は、H、C1〜6アルキル、C3〜6シクロアルキル、C3〜6ヘテロシクロアルキル、フェニル、又は、N又はO又はSから選択される1〜2個のヘテロ原子を有する5〜6員ヘテロアリールから選択され、ここで、それが独立して選択される1つ以上のR10の基で任意に置換されてもよく；
R10は、ハロゲン、アミノ、ヒドロキシ、シアノ、ハロゲノC1〜3アルキル、C1〜6アルキル、又はC3〜6シクロアルキルから選択される。
【請求項４】
Xは、CH2又はNR5から選択され；
R1は、C3〜6シクロアルキル又はC3〜6ヘテロシクロアルキルから選択され、ここで、それが独立して選択される1つ以上のR6の基で任意に置換されてもよく；
R2は、フェニル、又は、N又はO又はSから選択される1〜2個のヘテロ原子を有する5〜6員のヘテロアリールから選択され、ここで、それが独立して選択される1つ以上のR7の基で任意に置換されてもよく；
R3は、フェニル、N又はO又はSから選択される1〜2個のヘテロ原子を有する5〜6員のヘテロアリール、フェニルCH2-、又は、N又はO又はSから選択される1〜2個のヘテロ原子を有する5〜6員のヘテロアリールCH2-から選択され、ここで、それが独立して選択される1つ以上のR8の基で任意に置換されてもよく；
R5は、水素又はC1〜6アルキルから選択され；
R6は、ハロゲン、アミノ、ヒドロキシ、シアノ、ハロゲノC1〜3アルキル、C1〜6アルキル、又はC3〜6シクロアルキルから選択され；
R7は、ハロゲン、アミノ、ヒドロキシ、シアノ、ハロゲノC1〜3アルキル、スルファモイル、N置換スルファモイル、C1〜6アルキル、又はC3〜6シクロアルキルから選択され；
R8は、ハロゲン、アミノ、ヒドロキシ、シアノ、ハロゲノC1〜3アルキル、C1〜6アルキル、C3〜6シクロアルキル、C2〜6アルケニル、又はC2〜6アルキニルから選択される、
請求項3に記載の式IIの化合物、又はその薬学上受け入れ可能な塩、溶媒和物、もしくは水和物。
【請求項５】
Xは、CH2、NH又はN(CH3)から選択される、請求項1〜4のいずれか一項に記載の化合物、又はその薬学上受け入れ可能な塩、溶媒和物、もしくは水和物。
【請求項６】
R5は、水素、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル又はt-ブチルから選択され；好ましくは、R5は水素又はメチルから選択される、請求項1〜5のいずれか一項に記載の化合物、又はその薬学上受け入れ可能な塩、溶媒和物、もしくは水和物。
【請求項７】
R1はシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、ピロリジニル又はピペリジニルから選択され、ここで、それが独立して選択される1つ以上のR6の基で任意に置換されてもよく；好ましくは、R1は、シクロブチル又はシクロヘキシルから選択され、ここで、それが任意に1又は2個のフルオロで置換されてもよく；更に好ましくは、R1は、
【化５】
2019513819.tif 000112
から選択される、請求項1〜6のいずれか一項に記載の化合物、又はその薬学上受け入れ可能な塩、溶媒和物、もしくは水和物。
【請求項８】
R6は、フルオロ、クロロ又はブロモから選択される、請求項1〜7のいずれか一項に記載の化合物、又はその薬学上受け入れ可能な塩、溶媒和物、もしくは水和物。
【請求項９】
R2は、フェニル、フリル、チエニル、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、ピリジル、ピリミジニル、ピリダジニル、ピラジニル、チアゾリル、イソチアゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、テトラゾリル又はトリアジニルから選択され、ここで、それが独立して選択される1つ以上のR7の基で任意に置換されてもよく；好ましくは、R2はフェニル又はピリジルから選択され、ここで、それが独立して選択される1つ以上のR7の基で任意に置換されてもよく；更に好ましくは、R2は、
【化６】
2019513819.tif 000113
から選択される、請求項1〜8のいずれか一項に記載の化合物、又はその薬学上受け入れ可能な塩、溶媒和物、もしくは水和物。
【請求項１０】
R2は、フェニル、フリル、チエニル、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、ピリジル、ピリミジニル、ピリダジニル、ピラジニル、チアゾリル、イソチアゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、テトラゾリル又はトリアジニルから選択され、ここで、それが独立して選択される1つ以上のR7の基で任意に置換されてもよく；R7は、フルオロ、クロロ、ブロモ、シアノ、モノフルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、モノフルオロエチル、ジフルオロエチル、トリフルオロエチル、テトラフルオロエチル、ペンタフルオロエチル、モノクロロメチル、ジクロロメチル、トリクロロメチル、スルファモイル又はN置換スルファモイルから選択され；更に、R2はフェニル又はピリジルから選択され、ここで、それが独立して選択される1つ以上のR7の基で任意に置換されてもよく；R7は、フルオロ、シアノ、トリフルオロメチル、-SO2NH2又は4-シアノピリジル-2-スルファモイルから選択される、請求項1〜9のいずれか一項に記載の化合物、又はその薬学上受け入れ可能な塩、溶媒和物、もしくは水和物。
【請求項１１】
R7は、フルオロ、クロロ、ブロモ、シアノ、モノフルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、モノフルオロエチル、ジフルオロエチル、トリフルオロエチル、テトラフルオロエチル、ペンタフルオロエチル、モノクロロメチル、ジクロロメチル、トリクロロメチル、オキソ又は
【化７】
2019513819.tif 000114
から選択され；好ましくは、R7は、フルオロ、シアノ、トリクロロメチル、オキソ、
【化８】
2019513819.tif 000115
から選択される、請求項1〜10のいずれか一項に記載の化合物、又はその薬学上受け入れ可能な塩、溶媒和物、もしくは水和物。
【請求項１２】
R9は、H、フリル、チエニル、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、ピリジル、ピリミジニル、ピリダジニル、ピラジニル、チアゾリル、イソチアゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、テトラゾリル又はトリアジニルから選択され、ここで、それが独立して選択される1つ以上のR10の基で任意に置換されてもよく；好ましくは、R9はピリジルであり、ここで、それが独立して選択される1つ以上のR10の基で任意に置換されてもよい、請求項1〜11のいずれか一項に記載の化合物、又はその薬学上受け入れ可能な塩、溶媒和物、もしくは水和物。
【請求項１３】
R10はシアノである、請求項1〜12のいずれか一項に記載の化合物、又はその薬学上受け入れ可能な塩、溶媒和物、もしくは水和物。
【請求項１４】
【化９】
2019513819.tif 000116
は、
【化１０】
2019513819.tif 000117
から選択される、請求項1〜13のいずれか一項に記載の化合物、又はその薬学上受け入れ可能な塩、溶媒和物、もしくは水和物。
【請求項１５】
R3は、フェニル、フリル、チエニル、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、ピリジル、ピリミジニル、ピリダジニル、ピラジニル、チアゾリル、イソチアゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、テトラゾリル、トリアジニル、ベンジル、フリルメチレン、チエニルメチレン、ピロリルメチレン、ピラゾリルメチレン、イミダゾリルメチレン、ピリジルメチレン、ピリミジニルメチレン、ピリダジニルメチレン、ピラジニルメチレン、チアゾリルメチレン、イソチアゾリルメチレン、オキサゾリルメチレン、イソオキサゾリルメチレン、テトラゾリルメチレン又はトリアジニルメチレンから選択され、ここで、それが独立して選択される1つ以上のR8の基で任意に置換されてもよく；好ましくは、R3は、ピリジル、ピリミジニル又はベンジルから選択され、ここで、それが独立して選択される1つ以上のR8の基で任意に置換されてもよく；更に好ましくは、R3は、
【化１１】
2019513819.tif 000118
から選択される、請求項1〜14のいずれか一項に記載の化合物、又はその薬学上受け入れ可能な塩、溶媒和物、もしくは水和物。
【請求項１６】
R8は、フルオロ、クロロ、ブロモ、シアノ、エチニル、1-プロピニル又は1-ブチニルから選択され；好ましくは、R8は、フルオロ、シアノ又はエチニルから選択される、請求項1〜15のいずれか一項に記載の化合物、又はその薬学上受け入れ可能な塩、溶媒和物、もしくは水和物。
【請求項１７】
前記化合物が好ましくは：
【化１２】
2019513819.tif 000119
2019513819.tif 000120
2019513819.tif 000121
2019513819.tif 000122
2019513819.tif 000123
である、請求項1〜16のいずれか一項に記載の化合物、又はその薬学上受け入れ可能な塩、溶媒和物、もしくは水和物。
【請求項１８】
請求項1〜17のいずれか一項に記載の化合物、又はその薬学上受け入れ可能な塩、溶媒和物、もしくは水和物により、IDH1突然変異より誘導される癌を治療するための方法であって、前記IDH1突然変異はR132X突然変異を持つ、また、必要である患者に治療有効量の式I又は式IIの化合物、又はその薬学上受け入れ可能な塩、溶媒和物、もしくは水和物を投与することを含む、方法。
【請求項１９】
IDH1突然変異より誘導される癌を治療するための薬物の調製における、請求項1〜17のいずれか一項に記載の化合物、又はその薬学上受け入れ可能な塩、溶媒和物、もしくは水和物の使用。
【請求項２０】
IDH1突然変異より誘導される癌は、神経膠芽腫、骨髄異形成症候群、骨髄増殖性腫瘍、急性骨髄性白血病、肉腫（好ましくは、軟骨肉腫、繊維肉腫）、黒色腫、非小細胞肺癌、胆管癌又は血管免疫芽球性非ホジキンリンパ腫から選択される、請求項19に記載の使用。
【請求項２１】
治療有効量の式I又は式IIの化合物、又はその薬学上受け入れ可能な塩、溶媒和物、もしくは水和物、及び一種以上の薬学上受け入れ可能な担体又は賦形剤を含む、薬用組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願
本出願は、2016年03月22日に中華人民共和国国家知識産権局へ提出された中国特許出願第201610165138.6号の関連出願であり、この出願に基づく優先権を主張し、その全内容は参照により本明細書に組み込まれる。
【０００２】
本出願は、癌を治療するためのスルタム化合物及びその使用方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
IDH（isocitrate dehydrogenase）はイソクエン酸脱水素酵素であり、細胞内のTCAサイクル過程における最主要な鍵酵素であり、それらは、イソクエン酸の2-オキソグルタル酸（即ち、α-ケトグルタル酸）への酸化的脱炭酸を触媒することができる。IDHは、2つの異なるサブクラスに属し、これらのうちの１つサブクラスは電子受容体としてNAD(+)を利用し、もう1つサブクラスは電子受容体としてNADP(+)を利用する。5種のIDHが報告されており: 3種のNAD(+)依存性イソクエン酸脱水素酵素はミトコンドリア基質に局在し；また、2種のNADP(+)依存性イソクエン酸脱水素酵素の1種がミトコンドリアに局在し、もう1種が細胞質に局在する。
【０００４】
多種の腫瘍（例えば、神経膠腫、肉腫、急性顆粒球白血病等）にIDH突然変異が存在し、突然変異部位は触媒中心のアルギニン残基（IDH1/R132H、IDH2/R140Q、IDH2/R172K）に位置することは、研究で発見された。2009年、Bleekerらは、672例の異なる由来の腫瘍と84個の異なる腫瘍細胞系について、IDH1突然変異の検出を行い、このような突然変異特異性は脳神経膠腫中に集中発生することを見出した[Bleekerら、2009. IDH1 mutations at residue p.R132(IDH1(R132)) occur frequently in high-grade gliomas but not in other solid tumers. Hum Mutat. 30: 7-11.]。しかし、以後の文献報告には、急性骨髄性白血病、前立腺癌、傍神経節腫等にもIDH1の突然変異が存在することを示した[Greenら、2010, Somatic mutations of IDH1 and IDH2 in the leukemic transformation of myeloproliferative neoplasms. N Engl J Med. 362: 369-370.]。Bleekerらは、IDH1突然変異の症例の中に、R132Hが86.9%を占めることを見出した。その他のタイプ、例えばR132C、R132G、R132L、R132V、R132Sは、より小さな割合を占めている[Bleekerら、2009]。突然変異後のIDHは、α-ケトグルタル酸（α-KG）から2-ヒドロキシグルタル酸（2-HG）への触媒能という新しい能力を得た。α-ケトグルタル酸と2-ヒドロキシグルタル酸とは構造上に類似していて、2-HGとα-KGとが競争するため、α-KG依存性酵素の活性を低下させ、クロマチンの高メチル化を引き起こすことが、研究で発見され、このような過剰メチル化は、正常の細胞分化を妨害し、未熟細胞の過剰増殖をもたらすため、癌を引き起こしたと考えられている。
【０００５】
Agios Pharmaceuticalsが開発したIDH1m阻害剤AG-120（即ち、ivosidenib）は、急性骨髄性紅細胞白血病に有意な薬物有効性を示し、同時に、胆管癌、軟骨肉腫、神経膠腫等他の固形悪性腫瘍についても研究が行われている。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Bleeker et cal., 2009. IDH1 mutations at residue p.R132(IDH1(R132)) occur frequently in high-grade gliomas but not in other solid tumers. Hum Mutat. 30: 7-11
【非特許文献２】Green et cal., 2010, Somatic mutations of IDH1 and IDH2 in the leukemic transformation of myeloproliferative neoplasms. N Engl J Med. 362: 369-370
【発明の概要】
【０００７】
一の局面において、本出願は一般式Iで表される化合物、又はその薬学上受け入れ可能な塩、溶媒和物、もしくは水和物を提供する：
【０００８】
【化１】
2019513819.tif 000003
式中、
Xは、CH2又はNR5から選択され；
R1は、C3〜6シクロアルキル又はC3〜6ヘテロシクロアルキルから選択され、ここで、それが独立して任意に1つ以上のR6の基で置換されてもよく；
R2は、フェニル、又は、N又はO又はSから選択される1〜2個のヘテロ原子を有する5〜6員のヘテロアリールから選択され、ここで、それが独立して任意に1つ以上のR7の基で置換されてもよく；
R3は、フェニル、N又はO又はSから選択される1〜2個のヘテロ原子を有する5〜6員のヘテロアリール、フェニルCH2-、又は、N又はO又はSから選択される1〜2個のヘテロ原子を有する5〜6員のヘテロアリールCH2-から選択され、ここで、それが独立して任意に1つ以上のR8の基で置換されてもよく；
R4は、ハロゲン、アミノ、ヒドロキシ、ハロゲノC1〜3アルキル、又はC1〜6アルキルから選択され；
R5は、水素又はC1〜6アルキルから選択され；
R6は、ハロゲン、アミノ、ヒドロキシ、シアノ、ハロゲノC1〜3アルキル、C1〜6アルキル、又はC3〜6シクロアルキルから選択され；
R7は、ハロゲン、アミノ、ヒドロキシ、シアノ、ハロゲノC1〜3アルキル、オキソ、        
【０００９】
【化２】
2019513819.tif 000004
C1〜6アルキル、又はC3〜6シクロアルキルから選択され；
R8は、ハロゲン、アミノ、ヒドロキシ、シアノ、ハロゲノC1〜3アルキル、C1〜6アルキル、C3〜6シクロアルキル、C2〜6アルケニル、又はC2〜6アルキニルから選択され；
R9は、H、C1〜6アルキル、C3〜6シクロアルキル、C3〜6ヘテロシクロアルキル、フェニル、又は、N又はO又はSから選択される1〜2個のヘテロ原子を有する5〜6員ヘテロアリールから選択され、ここで、それが独立して任意に1つ以上のR10の基で置換されてもよく；
R10は、ハロゲン、アミノ、ヒドロキシ、シアノ、ハロゲノC1〜3アルキル、C1〜6アルキル、又はC3〜6シクロアルキルから選択され；
mは0又は1である。
【００１０】
本出願の好ましい実施形態として、式Iで表される化合物、又はその薬学上受け入れ可能な塩、溶媒和物、もしくは水和物の中に、置換基は以下のように定義される：
Xは、CH2又はNR5から選択され；
R1は、C3〜6シクロアルキル又はC3〜6ヘテロシクロアルキルから選択され、ここで、それが独立して任意に1つ以上のR6の基で置換されてもよく；
R2は、フェニル、又は、N又はO又はSから選択される1〜2個のヘテロ原子を有する5〜6員のヘテロアリールから選択され、ここで、それが独立して任意に1つ以上のR7の基で置換されてもよく；
R3は、フェニル、N又はO又はSから選択される1〜2個のヘテロ原子を有する5〜6員のヘテロアリール、フェニルCH2-、又は、N又はO又はSから選択される1〜2個のヘテロ原子を有する5〜6員のヘテロアリールCH2-から選択され、ここで、それが独立して任意に1つ以上のR8の基で置換されてもよく；
R4は、ハロゲン、アミノ、ヒドロキシ、ハロゲノC1〜3アルキル、又はC1〜6アルキルから選択され；
R5は、水素又はC1〜6アルキルから選択され；
R6は、ハロゲン、アミノ、ヒドロキシ、シアノ、ハロゲノC1〜3アルキル、C1〜6アルキル、又はC3〜6シクロアルキルから選択され；
R7は、ハロゲン、アミノ、ヒドロキシ、シアノ、ハロゲノC1〜3アルキル、スルファモイル、N-置換スルファモイル、C1〜6アルキル又はC3〜6シクロアルキルから選択され；
R8は、ハロゲン、アミノ、ヒドロキシ、シアノ、ハロゲノC1〜3アルキル、C1〜6アルキル、C3〜6シクロアルキル、C2〜6アルケニル、又はC2〜6アルキニルから選択され；
mは0又は1である。
【００１１】
本出願の式Iの化合物の一の実施形態において、R4は、フルオロ、クロロ、ブロモ又はトリフルオロメチルから選択される。
【００１２】
別の局面において、本出願は一般式I-1で表される化合物、又はその薬学上受け入れ可能な塩、溶媒和物、もしくは水和物を提供する：
【００１３】
【化３】
2019513819.tif 000005
式中、置換基は一般式Iの化合物で定義された通りである。
【００１４】
別の局面において、本出願は一般式I-2で表される化合物、又はその薬学上受け入れ可能な塩、溶媒和物、もしくは水和物を提供する：
【００１５】
【化４】
2019513819.tif 000006
式中、置換基は一般式Iの化合物で定義された通りである。
【００１６】
本出願の一の実施形態として、一般式IIで表される化合物、又はその薬学上受け入れ可能な塩、溶媒和物、もしくは水和物を提供する：
【００１７】
【化５】
2019513819.tif 000007
式中、
Xは、CH2又はNR5から選択され；
R1は、C3〜6シクロアルキル又はC3〜6ヘテロシクロアルキルから選択され、ここで、それが独立して任意に1つ以上のR6の基で置換されてもよく；
R2は、フェニル、又は、N又はO又はSから選択される1〜2個のヘテロ原子を有する5〜6員のヘテロアリールから選択され、ここで、それが独立して任意に1つ以上のR7の基で置換されてもよく；
R3は、フェニル、N又はO又はSから選択される1〜2個のヘテロ原子を有する5〜6員のヘテロアリール、フェニルCH2-、又は、N又はO又はSから選択される1〜2個のヘテロ原子を有する5〜6員のヘテロアリールCH2-から選択され、ここで、それが独立して任意に1つ以上のR8の基で置換されてもよく；
R5は、水素又はC1〜6アルキルから選択され；
R6は、ハロゲン、アミノ、ヒドロキシ、シアノ、ハロゲノC1〜3アルキル、C1〜6アルキル、又はC3〜6シクロアルキルから選択され；
R7は、ハロゲン、アミノ、ヒドロキシ、シアノ、ハロゲノC1〜3アルキル、オキソ、        
【００１８】
【化６】
2019513819.tif 000008
C1〜6アルキル、又はC3〜6シクロアルキルから選択され；
R8は、ハロゲン、アミノ、ヒドロキシ、シアノ、ハロゲノC1〜3アルキル、C1〜6アルキル、C3〜6シクロアルキル、C2〜6アルケニル、又はC2〜6アルキニルから選択され；
R9は、H、C1〜6アルキル、C3〜6シクロアルキル、C3〜6ヘテロシクロアルキル、フェニル、又は、N又はO又はSから選択される1〜2個のヘテロ原子を有する5〜6員ヘテロアリールから選択され、ここで、それが独立して任意に1つ以上のR10の基で置換されてもよく；
R10は、ハロゲン、アミノ、ヒドロキシ、シアノ、ハロゲノC1〜3アルキル、C1〜6アルキル、又はC3〜6シクロアルキルから選択される。
【００１９】
本出願の一の好ましい実施形態として、式IIで表される化合物、又はその薬学上受け入れ可能な塩、溶媒和物、もしくは水和物の中に、置換基は以下のように定義される：
Xは、CH2又はNR5から選択され；
R1は、C3〜6シクロアルキル又はC3〜6ヘテロシクロアルキルから選択され、ここで、それが独立して任意に1つ以上のR6の基で置換されてもよく；
R2は、フェニル、又は、N又はO又はSから選択される1〜2個のヘテロ原子を有する5〜6員のヘテロアリールから選択され、ここで、それが独立して任意に1つ以上のR7の基で置換されてもよく；
R3は、フェニル、N又はO又はSから選択される1〜2個のヘテロ原子を有する5〜6員のヘテロアリール、フェニルCH2-、又は、N又はO又はSから選択される1〜2個のヘテロ原子を有する5〜6員のヘテロアリールCH2-から選択され、ここで、それが独立して任意に1つ以上のR8の基で置換されてもよく；
R5は、水素又はC1〜6アルキルから選択され；
R6は、ハロゲン、アミノ、ヒドロキシ、シアノ、ハロゲノC1〜3アルキル、C1〜6アルキル、又はC3〜6シクロアルキルから選択され；
R7は、ハロゲン、アミノ、ヒドロキシ、シアノ、ハロゲノC1〜3アルキル、スルファモイル、N置換スルファモイル、C1〜6アルキル、又はC3〜6シクロアルキルから選択され；
R8は、ハロゲン、アミノ、ヒドロキシ、シアノ、ハロゲノC1〜3アルキル、C1〜6アルキル、C3〜6シクロアルキル、C2〜6アルケニル、又はC2〜6アルキニルから選択される。
【００２０】
本出願の式IIの化合物の一の実施方案において、Xは、CH2、NH又はN(CH3)から選択される。
【００２１】
本出願の式IIの化合物の一の実施方案において、R5は、水素、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル又はt-ブチルから選択される。
【００２２】
本出願の式IIの化合物の一の実施方案において、R5は、水素又はメチルから選択される。
【００２３】
本出願の式IIの化合物の一の実施方案において、R1は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、ピロリジニル（ピロリジノ）又はピペリジニル（ピペリジノ）から選択され、ここで、それが独立して任意に1つ以上のR6の基で置換されてもよい。
【００２４】
本出願の式IIの化合物の一の実施方案において、R1は、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、ピロリジニル（ピロリジノ）又はピペリジニル（ピペリジノ）から選択され、ここで、それが独立して任意に1つ以上のR6の基で置換されてもよく；R6は、フルオロ、クロロ又はブロモから選択される。
【００２５】
本出願の式IIの化合物の一の実施方案において、R6は、フルオロ、クロロ又はブロモから選択される。
【００２６】
本出願の式IIの化合物の一の実施方案において、R1は、シクロブチル又はシクロヘキシルから選択され、ここで、それが任意に1又は2個のフルオロで置換されてもよい。
【００２７】
本出願の式IIの化合物の一の実施方案において、R1は
【００２８】
【化７】
2019513819.tif 000009
から選択される。
【００２９】
本出願の一の好ましい特定の実施形態として、式IIで表される化合物、又はその薬学上受け入れ可能な塩、溶媒和物、もしくは水和物の中に、R2は、フェニル、フリル、チエニル、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、ピリジル、ピリミジニル、ピリダジニル、ピラジニル、チアゾリル、イソチアゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、テトラゾリル又はトリアジニルから選択され、ここで、それが独立して任意に1つ以上のR7の基で置換されてもよく；R7は、フルオロ、クロロ、ブロモ、シアノ、モノフルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、モノフルオロエチル、ジフルオロエチル、トリフルオロエチル、テトラフルオロエチル、ペンタフルオロエチル、モノクロロメチル、ジクロロメチル、トリクロロメチル、スルファモイル又はN置換スルファモイルから選択される。更に、R2は、フェニル又はピリジルから選択され、ここで、それが独立して任意に1つ以上のR7の基で置換されてもよく；R7は、フルオロ、シアノ、トリフルオロメチル、-SO2NH2、又は4-シアノピリジル-2-スルファモイルから選択される。
【００３０】
本出願の式IIの化合物の一の実施方案において、R2は、フェニル、フリル、チエニル、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、ピリジル、ピリミジニル、ピリダジニル、ピラジニル、チアゾリル、イソチアゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、テトラゾリル又はトリアジニルから選択され、ここで、それが独立して任意に1つ以上のR7の基で置換されてもよい。
【００３１】
本出願の式IIの化合物の一の実施方案において、R2は、フェニル又はピリジルから選択され、ここで、それが独立して任意に1つ以上のR7の基で置換されてもよい。
【００３２】
本出願の式IIの化合物の一の実施方案において、R7は、フルオロ、クロロ、ブロモ、シアノ、モノフルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、モノフルオロエチル、ジフルオロエチル、トリフルオロエチル、テトラフルオロエチル、ペンタフルオロエチル、モノクロロメチル、ジクロロメチル、トリクロロメチル、オキソ又は
【００３３】
【化８】
2019513819.tif 000010
から選択される。
【００３４】
本出願の式IIの化合物の一の実施方案において、R7は、フルオロ、シアノ、トリクロロメチル、オキソ、
【００３５】
【化９】
2019513819.tif 000011
から選択される。
【００３６】
本出願の式IIの化合物の一の実施方案において、R9は、H、フリル、チエニル、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、ピリジル、ピリミジニル、ピリダジニル、ピラジニル、チアゾリル、イソチアゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、テトラゾリル又はトリアジニルから選択され、ここで、それが任意に1つ以上のR10の基で置換されてもよい。
【００３７】
本出願の式IIの化合物の一の実施方案において、R9はピリジルであり、ここで、それが独立して任意に1つ以上のR10の基で置換されてもよい。
【００３８】
本出願の式IIの化合物の一の実施方案において、R10はシアノである。
【００３９】
本出願の式IIの化合物の一の実施方案において、
【００４０】
【化１０】
2019513819.tif 000012
は、
【００４１】
【化１１】
2019513819.tif 000013
から選択される。
【００４２】
本出願の式IIの化合物の一の実施方案において、R2は、
【００４３】
【化１２】
2019513819.tif 000014
から選択される。
【００４４】
本発明の一の特定の好ましい実施形態として、式IIで表される化合物、又はその薬学上受け入れ可能な塩、溶媒和物、もしくは水和物の中に、R3は、フェニル、フリル、チエニル、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、ピリジル、ピリミジニル、ピリダジニル、ピラジニル、チアゾリル、イソチアゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、テトラゾリル、トリアジニル、ベンジル、フリルメチレン、チエニルメチレン、ピロリルメチレン、ピラゾリルメチレン、イミダゾリルメチレン、ピリジルメチレン、ピリミジニルメチレン、ピリダジニルメチレン、ピラジニルメチレン、チアゾリルメチレン、イソチアゾリルメチレン、オキサゾリルメチレン、イソオキサゾリルメチレン、テトラゾリルメチレン又はトリアジニルメチレンから選択され、ここで、それが独立して任意に1つ以上のR8の基で置換されてもよく；R8は、水素、フルオロ、クロロ、ブロモ、シアノ、エチニル、1-プロピニル又は1-ブチニルから選択され、更に、R3は、ピリジル、ピリミジニル又はベンジルから選択され、ここで、それが独立して任意に1つ以上のR8の基で置換されてもよく；R8は、フルオロ、シアノ又はエチニルから選択される。
【００４５】
本出願の式IIの化合物の一の実施方案において、R3は、フェニル、フリル、チエニル、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、ピリジル、ピリミジニル、ピリダジニル、ピラジニル、チアゾリル、イソチアゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、テトラゾリル、トリアジニル、ベンジル、フリルメチレン、チエニルメチレン、ピロリルメチレン、ピラゾリルメチレン、イミダゾリルメチレン、ピリジルメチレン、ピリミジニルメチレン、ピリダジニルメチレン、ピラジニルメチレン、チアゾリルメチレン、イソチアゾリルメチレン、オキサゾリルメチレン、イソオキサゾリルメチレン、テトラゾリルメチレン又はトリアジニルメチレンから選択され、ここで、それが独立して任意に1つ以上のR8の基で置換されてもよい。
【００４６】
本出願の式IIの化合物の一の実施方案において、R3は、ピリジル、ピリミジニル又はベンジルから選択され、ここで、それが独立して任意に1つ以上のR8の基で置換されてもよい。
【００４７】
本出願の式IIの化合物の一の実施方案において、R8は、フルオロ、クロロ、ブロモ、シアノ、エチニル、1-プロピニル又は1-ブチニルから選択される。
【００４８】
本出願の式IIの化合物の一の実施方案において、R8は、フルオロ、シアノ又はエチニルから選択される。
【００４９】
本出願の式IIの化合物の一の実施方案において、R3は、
【００５０】
【化１３】
2019513819.tif 000015
から選択される。
【００５１】
本出願の一の実施形態として、一般式II-1で表される化合物、又はその薬学上受け入れ可能な塩、溶媒和物、もしくは水和物を提供する：
【００５２】
【化１４】
2019513819.tif 000016
式中、置換基は一般式IIの化合物のように定義される。
【００５３】
本出願の一の実施形態として、一般式II-2で表される化合物、又はその薬学上受け入れ可能な塩、溶媒和物、もしくは水和物を提供する：
【００５４】
【化１５】
2019513819.tif 000017
式中、置換基は一般式IIの化合物のように定義される。
【００５５】
本出願は、下記化合物及びその薬学上受け入れ可能な塩、溶媒和物、もしくは水和物が好ましい：
【００５６】
【化１６】
2019513819.tif 000018
2019513819.tif 000019
2019513819.tif 000020
2019513819.tif 000021
【００５７】
本出願の別の局面において、治療有効量の式Iの化合物、又はその薬学上受け入れ可能な塩、溶媒和物、もしくは水和物及び一種以上の薬学上受け入れ可能な担体又は賦形剤を含む薬用組成物を提供する。本出願の薬用組成物は、更に一種以上の他の治療剤を含められる。
【００５８】
本出願の別の局面において、IDH1突然変異より誘導される癌を治療する方法を提供し、前記IDH1突然変異はR132X突然変異を持ち；一部の実施形態において、R132X突然変異は、R132H、R132C、R132L、R132V、R132SとR132Gから選択され；一部の好ましいの実施形態において、R132X突然変異は、R132HとR132Cから選択され；前記方法は、必要である患者に治療有効量の式I又は式IIの化合物、又はその薬学上受け入れ可能な塩、溶媒和物、もしくは水和物、又はその薬用組成物を投与することを含む。
【００５９】
本出願の別の局面において、IDH1突然変異より誘導される癌を治療するための薬物の調製における、式Iの化合物、又はその薬学上受け入れ可能な塩、溶媒和物、もしくは水和物、又はそれを含む薬用組成物の用途を提供する。
【００６０】
本出願の別の局面において、IDH1突然変異より誘導される癌を治療するための式Iの化合物、又はその薬学上受け入れ可能な塩、溶媒和物、もしくは水和物、又はそれを含む薬用組成物を提供する。
【００６１】
本出願の一部の実施形態において、前記のIDH1突然変異より誘導される癌は、神経膠芽腫（神経膠腫）、骨髄異形成症候群（MDS）、骨髄増殖性腫瘍（MPN）、急性骨髄性白血病（AML）、肉腫（軟骨肉腫、繊維肉腫が好ましい）、黒色腫、非小細胞肺癌、胆管癌又は血管免疫芽球性非ホジキンリンパ腫（NHL）から選択される。より具体の実施形態において、治療したい癌は、神経膠腫、骨髄異形成症候群（MDS）、骨髄増殖性腫瘍（MPN）、急性骨髄性白血病（AML）、胆管癌、軟骨肉腫、又は血管免疫芽球性非ホジキンリンパ腫（NHL）等であり、好ましくは急性骨髄性白血病（AML）、骨髄異形成症候群（MDS）、神経膠腫、胆管癌又は軟骨肉腫を含む。
【００６２】
本出願が提供する式Iの化合物、又はその薬学上受け入れ可能な塩、溶媒和物、もしくは水和物は、非常によいIDH1酵素阻害活性を有し、その活性はAG-120の活性と相当する又は更に高く、且つ、非常によい体内代謝レベル及び非常に長い体内半減期を有し、IDH1突然変異より誘導される癌を治療するためのより適する薬物になることを期待される。
【００６３】
本出願の薬用組成物は、本出願の化合物、又はその薬学上受け入れ可能な塩、溶媒和物、又は水和物と、適切な薬学上受け入れ可能な担体と組み合わせて調製されことができ、例えば、固体、半固体、液体又は気体製剤として製剤化することができ、タブレット、丸剤、カプセル剤、粉剤、顆粒剤、軟膏剤、乳剤、懸濁剤、溶液剤、坐剤、注射剤、吸入剤、ゲル剤、マイクロスフェア及びエアロゾル等が挙げられる。
【００６４】
本出願の化合物、又はその薬学上受け入れ可能な塩、溶媒和物、もしくは水和物、又はそれを含む薬用組成物を投与する典型な経路として、経口、直腸、経粘膜、腸内投与、又は局所、経皮、吸入、腸管外、舌下、膣内、鼻腔内、眼内、腹腔内、筋内、皮下、静脈内投与が挙げられるが、これらに限られない。
【００６５】
本出願の薬用組成物は、慣用の混合法、溶解法、造粒法、糖衣丸剤作製方法、研磨法、乳化法、凍結乾燥法等本分野に周知の方法により調製され得る。
【００６６】
経口投与の場合、薬用組成物は、活性化合物と、本分野に周知の薬学上受け入れ可能な担体とを混合することによって製剤化され得る。患者への経口投与のために、これらの担体は、本出願の化合物が、タブレット剤、丸剤、錠剤、糖衣錠、カプセル剤、液体、ゲル剤、スラリー剤、懸濁剤等として製剤化され得る。
【００６７】
固体経口組成物は、慣用の混合、充填又は打錠法によって調製され得る。例えば、前記活性化合物と、固体賦形剤とを混合し、任意に、得られた混合物をローラーでひきつぶし、必要であれば、他の適当な助剤を加え、当該混合物を顆粒に加工する方法によって、タブレット剤又は糖衣錠のコアを得られることにより獲得され得る。適当な助剤としては、結合剤、希釈剤、崩壊剤、滑沢剤、流動化剤、甘味剤又は矯味剤が挙げられるが、これらに限られない。前記助剤としては、例えば、微結晶性セルロース、グルコース溶液、アラビアガムスラリー、ゼラチン溶液、ショ糖及び澱粉糊；タルク、澱粉、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム又はステアリン酸；乳糖、ショ糖、澱粉、マンニトール、ソルビトール又はリン酸二カルシウム；シリカ；架橋カルボキシメチルセルロースナトリウム、アルファー化澱粉、澱粉グリコール酸ナトリウム、アルギン酸、トウモロコシ澱粉、ジャガイモ澱粉、メチルセルロース、寒天、カルボキシメチルセルロース、架橋ポリビニルピロリドン等が挙げられるが、これらに限られない。糖衣錠のコアは、任意に薬学実践において周知の方法よりコーティングされることができ、特に腸溶性コーティングを用いられる。
【００６８】
薬用組成物は、また、適切な単位投与剤形の無菌溶液剤、懸濁剤又は凍結乾燥製品のような腸管外投与に適用されえる。充填剤、緩衝剤、又は界面活性剤等の適切な賦形剤を用いられる。
【００６９】
本書に記載の式Iの化合物、又はその薬学上受け入れ可能な塩、溶媒和物、又は水和物は、経口又は腸管外（例えば、静脈内）投与のような任意の適切な経路及び方法によって投与されえる。式I又は式IIの化合物の治療有効量は、約0.0001〜20mg/Kg体重/日であり、例えば、0.001〜10mg/kg体重/日である。
【００７０】
式Iの化合物の投与頻度は、患者個体の必要によって決定され、例えば、1日当たり1回又は2回、又は1日当たりより多い回数で投与される。断続的に投与することができ、例えば、ある日数の期間に、患者は式I又は式IIの化合物の毎日の投与用量を受けた後、ある日数又はより多い日数の期間に、患者は式I又は式IIの化合物の毎日の投与用量を受けない。
【００７１】
定義について：
【００７２】
別途説明がない限り、本書で使用される以下の用語及び語句は、以下の意味を有する。一つの特定の用語又は語句は、特定の定義がない限り、不確定又は不明瞭であると見なされるべきではなく、一般の意味で理解されるべきである。本書に商品名が記載される際に、その商品又はその活性成分を意味することを意図される。
【００７３】
用語「任意の」又は「任意に」とは、続いて記載される事象又は状況が発生しても発生しなくてもよいことを意味し、当該表現が、前記事象又は状況が発生する及び前記事象又は状況が発生しないの両面が含まれる。例えば、エチルが「任意に」ハロゲンより置換されることとは、置換されていないエチル (CH2CH3)、単一置換されたエチル (例えば、CH2CH2F)、多置換されたエチル (例えば、CHFCH2F、CH2CHF2等)、又は完全に置換されたエチル (CF2CF3) であり得ることを意味する。1つ以上の置換基を含む任意の基に対し、空間的に存在できない及び/又は合成できない置換又は置換モードを導入できないことを、当業者が理解すべきであろう。
【００７４】
本書で使用されたCm-nとは、当該部分にm-n個の炭素原子を有することを意味する。例えば、「C3〜10シクロアルキル」とは、当該シクロアルキル基が3〜10個の炭素原子を有することを意味する。「C0〜6アルキレン」とは、当該アルキレン基が0〜6個の炭素原子を有することを意味し、当該アルキレン基が0個の炭素原子を有する場合、その基は結合である。
【００７５】
本書の数字範囲は、指定の範囲内の各整数を意味する。例えば、「C1〜10」とは、当該基が1個の炭素原子、2個の炭素原子、3個の炭素原子、4個の炭素原子、5個の炭素原子、6個の炭素原子、7個の炭素原子、8個の炭素原子、9個の炭素原子、又は10個の炭素原子を有することを意味する。
【００７６】
用語「置換される」とは、特定の原子位置に、任意の1つ以上の水素原子が置換基より置換される、又は特定の原子が電子対を供与又は受容して他の原子と配位結合を形成することを意味するが、この時、特定の原子の原子価状態が正常であり且つ置換された化合物が安定である限り、当該原子が他の原子で置換されたとみなされる。置換基がケト基 (即ち、=O)である場合、2個の水素原子が置換されることを意味するが、芳香基にはケト置換を発生できない。
【００７７】
任意の変量 (例えば、R) が化合物の組成又は構造の中に一度以上現す場合、それぞれの場合の定義は独立している。従って、例えば、一つの基が0〜2個のRより置換される場合、前記基は任意的に2個までのRより置換され、且つ、それぞれの場合のRが独立した選択肢がある。また、置換基及び/又はその変体の組み合わせは、このような組み合わせが安定な化合物を生成する場合のみ許容される。
【００７８】
別途に規定がない限り、用語「ヘテロ」とは、ヘテロ原子又はヘテロ原子団 (即ち、ヘテロ原子を有する原子団)、即ち、炭素と水素以外の原子、又はこれらの原子を含む原子団を意味し、ヘテロ原子は、酸素、窒素、硫黄、リン、珪素、ゲルマニウム、アルミニウム、ホウ素から独立して選択される。2つ以上のヘテロ原子を有する実施形態には、前記2つ以上のヘテロ原子は同一であってもよく、又は前記2つ以上のヘテロ原子の一部又は全部はお互いに異なっていてもよい。
【００７９】
用語「ハロゲン」又は「ハロゲノ」とは、任意のフッ素、塩素、臭素又は沃素の基を意味する。
【００８０】
用語「ヒドロキシ」とは、-OHを意味する。
【００８１】
用語「シアノ」とは、-CNを意味する。
【００８２】
用語「アミノ」とは、-NH2、-NH(アルキル) 及び-N(アルキル)2を意味し、アミノ基の具体の例としては、-NH2、-NHCH3、-NHCH(CH3)2、-N(CH3)2、-NHC2H5、-N(CH3)C2H5等が含まれるが、これらに限られない。
【００８３】
用語「オキソ」とは、C原子の置換基はケト基 (即ち、=O) であるか、N原子の置換基はO (即ちN→O) であるかを意味する。
【００８４】
用語「アルキル」とは、炭素原子と水素原子からなる直鎖又は分岐鎖の飽和脂肪族炭化水素基を意味し、例えば、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシル等が挙げられる。前記特定のアルキル基はその全ての構造異性体形態を含み、例えばプロピル基は-CH2CH2CH3、-CH(CH3)2を含み、例えばブチル基は-CH2CH2CH2CH3、-CH(CH3)(CH2CH3)、-C(CH3)3、-CH2CH(CH3)2を含む。用語「C1〜6アルキル」とは、1〜6個の炭素原子を有するアルキル基を意味する。用語「C1〜4アルキル」とは、1〜4個の炭素原子を有するアルキル基を意味する。用語「C1〜3アルキル」とは、1〜3個の炭素原子を有するアルキル基を意味する。前記「アルキル」、「C1〜8アルキル」、「C1〜6アルキル」又は「C1〜3アルキル」は、置換されなくてもよく、また、一つ以上のヒドロキシ、ハロゲン又はアミノから選択された置換基で置換されてもよい。
【００８５】
用語「ハロゲノアルキル」とは、モノハロゲノアルキル基とポリハロゲノアルキル基を含むことを意味し；例えば、用語「ハロゲノC1〜3アルキル」は、トリフルオロメチル、2,2,2-トリフルオロエチル、及び3-ブロモプロピル等を含むが、これらに限られないことを意味する。ハロゲノアルキル基の実例として、トリフルオロメチル、トリクロロメチル、ペンタフルオロエチル、及びペンタクロロエチルが挙げられるが、これらに限られない。
【００８６】
用語「アルケニル」とは、2〜12個の炭素原子を含む且つ一つ以上の二重結合を有する、直鎖又は分岐鎖の炭化水素鎖を意味する。アルケニルの実例としては、アリル、プロペニル、2-ブテニル及び3-ヘキセニルが含まれるが、これらに限られない。二重結合炭素の一つは、任意に、アルケニル置換基の連結点であってもよい。
【００８７】
用語「アルキニル」とは、2〜12個の炭素原子を含む且つ一つ以上の三重結合を有することを特徴とする、直鎖又は分岐鎖の炭化水素鎖を意味する。アルキニル基の実例としては、エチニル、プロピニル、プロパルギル及び3-ヘキシニルが含まれるが、これらに限られない。三重結合炭素の一つは、任意に、アルキニル置換基の連結点であってもよい。
【００８８】
用語「シクロアルキル」とは、炭素原子と水素原子からなる全炭素単環式の飽和脂肪族炭化水素基を意味し、例えばC3〜20シクロアルキル基であり、C3〜6シクロアルキル基が好ましく、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル等である。前記シクロアルキル基は置換されなくてもよく、置換されてもよい。前記置換基は、アルキル、アルキルオキシ、シアノ、カルボキシ、アリール、ヘテロアリール、アミノ、ハロゲン、スルフォニル、スルフィニル、ホスホリル及びヒドロキシ等が含まれるが、これらに限られない。
【００８９】
用語「アリール」とは、共役π電子系を持つ全炭素の単環式又は縮合多環式の芳香族環基を意味し、6〜14個の炭素原子を有することが好ましく、6〜12個の炭素原子を有することがより好ましく、6個の炭素原子を有することが最も好ましい。例えば、単環式アリール基は、例としてフェニールであり；二環式縮合アリール基は、4〜6員の芳香族又は非芳香族の炭素環と縮合したフェニルからなり、ナフチルが含まれる。
【００９０】
用語「ヘテロ芳香環」とは、5〜12個の環原子の単環又は縮合多環を意味し、5、6、7、8、9、10、11又は12個の環原子を有し、ここで、1、2、3又は4個のN、O、Sから選択される環原子を有し、他の環原子はCであり、且つ、完全に共役したπ電子系を有する。
【００９１】
用語「ヘテロアリール」とは、「ヘテロ芳香環」分子から1個の水素原子が除かれた後の基を意味し、ヘテロアリールは、非置換であっても置換されていてもよく、前記置換基としては、アルキル、アルキルオキシ、アリール、アリールアルキル、アミノ、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、カルボニル及びヘテロ脂肪環基が含まれるが、これらに限られない。非置換アリール基の非限定的な実例としては、ピロリル、フリル、チエニル、イミダゾリル、オキサゾリル、ピラゾリル、ピリジル、ピリミジニル、ピラジニル、キノリニル、イソキノリニル、テトラゾリル、トリアジニルが含まれるが、これらに限られない。
【００９２】
用語「ヘテロ脂肪環」とは、3〜12個の環原子を有する単環又は縮合環を意味し、3、4、5、6、7、8、9、10、11又は12個の環原子を有し、ここで、1又は2個の環原子はN、O、S、S(O)n (ここで、nは0、1又は2であり) から選択されるヘテロ原子であり、他の環原子はCである。このような環は飽和環であっても不飽和環 (例えば、一つ以上の二重結合を有する) であってもよいが、完全に共役のπ電子系を有しない。3員環の飽和ヘテロ脂肪環の実例としては、
【００９３】
【化１７】
2019513819.tif 000022
が含まれるが、これらに限られず、4員環の飽和ヘテロ脂肪環の実例としては、
【００９４】
【化１８】
2019513819.tif 000023
が含まれるが、これらに限られず、5員環の飽和ヘテロ脂肪環の実例としては、
【００９５】
【化１９】
2019513819.tif 000024
が含まれるが、これらに限られず、6員環の飽和ヘテロ脂肪環の実例としては、
【００９６】
【化２０】
2019513819.tif 000025
が含まれるが、これらに限られず、7員環の飽和ヘテロ脂肪環の実例としては、
【００９７】
【化２１】
2019513819.tif 000026
が含まれるが、これらに限られず、5員環の不飽和ヘテロ脂肪環の実例としては、
【００９８】
【化２２】
2019513819.tif 000027
が含まれるが、これらに限られず、6員環の不飽和ヘテロ脂肪環の実例としては、
【００９９】
【化２３】
2019513819.tif 000028
が含まれるが、これらに限られない。
【０１００】
用語「ヘテロシクロアルキル」とは、「ヘテロ脂肪環」分子から1個の水素原子を除去した後に残した基を意味し、ヘテロシクロアルキルは置換されなくてもよく、又は、その中の水素原子が任意に置換基で置換されてもよく、前記置換基は、アルキル、アルコキシ、
【０１０１】
【化２４】
2019513819.tif 000029
アリール、アラルキル、-COOH、-CN、アミノ、ハロゲン又はヒドロキシが含まれるが、これらに限られない。
【０１０２】
「DMF」とは、N,N-ジメチルホルムアミドを意味する。
【０１０３】
「DIAD」とは、アゾジカルボン酸ジイソプロピルを意味する。
【０１０４】
「Boc-」とは、t-ブトキシカルボニルを意味する。
【０１０５】
「TFA」とは、トリフルオロ酢酸を意味する。
【０１０６】
「DCM」とは、ジクロロメタンを意味する。
【０１０７】
「PE」とは、石油エーテルを意味する。
【０１０８】
「EA」とは、酢酸エチルを意味する。
【０１０９】
「DCM」とは、ジクロロメタンを意味する。
【０１１０】
「0.5% MC」とは、製剤の処方に0.5%メチルセルロースを含まれることを意味する。
【０１１１】
「0.2% Tween80」とは、製剤の処方に0.2%モノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン80を含まれることを意味する。
【０１１２】
「Pd2(dba)3」とは、トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウムを意味する。
【０１１３】
「Xantphos」とは、4,5-ビス(ジフェニルホスフィノ)-9,9-ジメチルキサンテンを意味する。
【０１１４】
用語「Ugi反応」とは、1分子のアルデヒド又はケトン、1分子のアミン、1分子のイソニトリルと1分子のカルボン酸より縮合してα-アミドアミドを生成する多成分反応を意味する。
【０１１５】
用語「Goldbergカップリング反応」とは、銅触媒を用いたアリールC原子と、N、O、C原子との結合生成反応を意味する。
【０１１６】
用語「Mitsunobu反応」とは、アゾジカルボン酸ジエチル（DEAD）とトリフェニルフォスフィンの作用下でヒドロキシ基が求核剤より置換されると同時に、ヒドロキシと連結する炭素原子の立体配置が反転されることを意味し、いわゆる求核剤は電子対供与体であり、即ちルイス塩基である。
【０１１７】
用語「薬学上受け入れ可能な」とは、以下のような化合物、材料、組成物及び/又は剤形に対し、それらは信頼される医学的判断の範囲内であり、過度の毒性、刺激、アレルギー反応、又は他の問題及び合併症を伴わずにヒト及び動物の組織と接触して使用するのに好適であり、且つ、合理的な利益/リスク比に釣り合うことを意味する。
【０１１８】
薬学上受け入れ可能な塩としては、例えば、金属塩、アンモニウム塩、有機塩基と形成する塩、無機酸と形成する塩、有機酸と形成する塩、及び塩基性又は酸性のアミノ酸と形成する塩等が挙げられる。
【０１１９】
本出願の薬学上受け入れ可能な塩は、従来の化学的方法によって、酸基又は塩基性基を含む親化合物から合成し得る。一般の場合に、このような塩の調製方法は、水又は有機溶媒又は両者の混合物の中に、遊離の酸又は塩基形態のこれらの化合物と化学量論量の適切な塩基又は酸との反応により調製される。一般に、エーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノール又はアセトニトリル等の非水性媒体は好ましい。
【０１２０】
本出願の一部の化合物は、非溶媒和形態又は溶媒和形態で存在してもよく、水和形態も含まれる。一般に、溶媒和形態は非溶媒和形態と相当であり、いずれも本出願の範囲内に含まれる。本出願の一部の化合物は、多結晶体又は不定形形態で存在し得る。
【０１２１】
本出願の一部の化合物は、不斉炭素原子 (光学センター) 又は二重結合を有してもよい。ラセミ体、ジアステレオマー、幾何異性体及び単一の異性体は、いずれも本出願の範囲内に含まれる。
【０１２２】
本書において、ラセミ体、ambiscalemic及びscalemic、又は対掌体の純化合物の描画方法は、Maehr, J. Chem. Ed. 1985年、62：114-120に従う。別途説明がない限り、楔形表記と破線表記は、一つのステレオ中心の絶対的な立体配置を示している。本書に記載する化合物がエチレン性二重結合又は他の幾何学的な不斉中心を含む場合、他に規定がない限り、それらは、E、Z幾何異性体を含む。同様に、すべての互変異性形態は、いずれも本出願の範囲内に含まれる。
【０１２３】
本出願の化合物は、特定の幾何異性体形態又は立体異性体形態として存在し得る。本出願において、このような化合物は、シス型異性体とトランス型異性体、(-)-と(+)-対掌体、(R)-と(S)-対掌体、ジアステレオマー、(D)-異性体、(L)-異性体、並びにそれらのラセミ混合物及び他の混合物、例えば、エナンチオマー又はジアステレオマー富化の混合物をいずれも含み、これらの混合物は、いずれも本出願の範囲内に属すると想定される。アルキル等置換基には、他の不斉炭素原子が存在し得る。これらの異性体及びそれらの混合物は、いずれも本出願の範囲内に含まれる。
【０１２４】
キラル合成又はキラル試薬又は他の一般な技術より、光学活性的な (R)-と (S)-異性体及びDとL異性体を調製し得る。本出願のある化合物の一つの対掌体を獲得したい場合、不斉合成又は不斉補助剤の誘導作用より調製することができ、ここで、得られたジアステレオマー混合物を分離し、且つ、補助基が分裂し、所望の純エナンチオマーを提供し得る。又は、分子内に塩基性官能基 (例えば、アミノ基) 又は酸性官能基 (例えば、カルボキシル基) を含む場合、適切の光学活性の酸又は塩基とをジアステレオマーの塩を形成した後、本分野に周知される分別結晶法又はクロマトグラフィー法より、ジアステレオマーを分割させた後回収し、純対掌体が得られる。また、エナンチオマーとジアステレオマーの分離は、一般に、クロマトグラフィー法を用いて完成させ、前記クロマトグラフィー法は、キラル固定相を用い、また、任意的に化学誘導法 (例えば、ラミンからカルバミン酸塩を生成する) と組み合わせる。
【０１２５】
本出願の化合物は、当該化合物を構成する一つ以上の原子に、天然存在比でない原子同位体が含めることができる。例えば、放射性同位体より化合物を標記することができ、例えば、トリ重水素 (3H)、沃素-125 (125I)、又はC-14 (14C) を用いられる。本出願の化合物の全ての同位体組成の変換は、放射性があるかどうかに係らず、いずれも本出願の範囲内に含まれている。
【０１２６】
用語「薬学上受け入れ可能な担体」とは、当該担体を摂取する有機体に対して明らかな刺激効果を有さず、活性化合物の生物学的活性及び性能を損なわない担体を意味する。「薬学上受け入れ可能な担体」とは、活性成分と一緒に投与され、活性成分の投与に有利な不活性物質を意味し、中華人民共和国国家食品薬品監督管理局より許可された、ヒト又は動物 （例えば、家畜） に対するの使用に受け入れ可能な任意の流動化剤、甘味質改善剤、希釈剤、防腐剤、染料/着色剤、矯味剤、界面活性剤、湿潤剤、分散剤、崩壊剤、懸濁化剤、安定剤、等張化剤、溶媒又は乳化剤が含まれるが、これらに限られない。前記担体の非限定的な実例として、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、様々な糖及び様々な澱粉、セルロース誘導体、ゼラチン、植物油及びポリエチレングリコール等が挙げられる。担体についての追加情報は、Remington: The ScienceとPractice of Pharmacy, 21st Ed., Lippincott, Williams & Wilkins(2005) を参照することができ、その文献の内容は参照により本書に組み込まれる。
【０１２７】
用語「賦形剤」は、一般に、有効な薬用組成物を製剤化するために必要とされる担体、希釈剤及び/又は媒介を意味する。
【０１２８】
薬物又は薬理学的活性剤に対し、用語「有効量」又は「治療有効量」とは、薬物又は薬剤の所望の効果を達成するのに非毒性である十分な量を意味する。本出願の経口剤形に対して、組成物における一種の活性物質の「有効量」とは、当該組成物の別の活性物質と協同使用される際に、所望の効果を達成するための必要な量を意味する。有効量の確定は、個体により異なり、被験体の年齢及び全般的な状態に依存して変化するや、具体の活性物質にも依存するため、個体に適する有効量は、当業者が一般的な試験から確定され得る。
【０１２９】
用語「活性成分」、「治療剤」、「活性物質」又は「活性剤」とは、一種の化学実体を意味し、それは、目標異常、疾患又は症状を有効的に治療し得る。
【０１３０】
本出願の化合物は、当業者によく知られた多種の合成方法より調製でき、ここで、以下に挙げられた具体の実施様態や、それと他の化学合成方法との組み合わせより形成された実施様態、及び当業者によく知られた同等の取り替えた様態を含み、好ましい実施様態は、本出願の実施例を含むが、これらに限られない。
【０１３１】
本出願の具体の実施形態における化学反応は適切な溶媒中で完成させ、前記溶媒は、本出願の化学的変化並ぶにそれに必要とされる試薬及び材料に適すべきである。本出願の化合物を獲得するために、当業者は、既存の実施形態に基づいて合成工程又は反応プロセスを改変する又は選択する必要がある場合がある。
【０１３２】
本出願の式IIの化合物は、有機合成分野の技術者により、以下の経路によって本分野の標準的な方法を用いて調製し得る：
【０１３３】
【化２５】
2019513819.tif 000030
式中、
X、R1、R2、R3の定義は、式IIの化合物についての上記の定義と同一である。
【０１３４】
【化２６】
2019513819.tif 000031
【０１３５】
イソニトリル化合物1、2-クロロベンズアルデヒド2、アミノ化合物3とカルボン酸スルタム4は、適切な溶媒（例えば、メタノール等）中で直接にUgi反応を行い、式IIの化合物を得られる。
【０１３６】
本出願の式IIの化合物は、また、有機合成分野の技術者により、以下の経路によって本分野の標準的な方法を用いて調製し得る：
【０１３７】
【化２７】
2019513819.tif 000032
【０１３８】
R3がHである場合、上記Ugi反応より化合物5を得ることができ；化合物5とハロゲノ化合物6をGoldbergカップリング反応することより、式IIの化合物を得て、ここで、反応条件は：適する銅塩（例えば、CuI等）を触媒として、適切な配位子（例えば、N,N’-ジメチルエチレンジアミン等）と塩基（例えば、炭酸セシウム等）を加え、適切な溶媒（例えば、1,4-ジオキサン等）中に加熱反応することである。化合物5とハロゲノ化合物6もパラジウム触媒によるアリールアミノ化反応することより、式IIの化合物を得て、ここで、反応条件は：適切なパラジウム（例えば、Pd2(dba)3）を触媒として、適切な配位子（例えば、Xantphos等）と塩基（例えば、炭酸セシウム等）を加え、適切な溶媒（例えば、1,4-ジオキサン等）中に加熱反応することである。
【０１３９】
本出願の中間体1-6と1-7は、有機合成分野の技術者により、以下の経路によって本分野の標準的な方法を用いて調製し得る：
【０１４０】
【化２８】
2019513819.tif 000033
【０１４１】
メタノール溶液に、L-ホモシスチン1-1と塩化チオニルと反応することより、L-ホモシスチンジメチル二塩酸塩1-2を得て；1-2に窒素ガスで通気して、(S)-2-アミノ-4-クロロスルホニルブチレートメチル塩酸塩1-3を得て；トリエチルアミンの作用下で1-3を環化することより、(S)-イソチアゾリジン-3-カルボン酸メチル1,1-二酸化物1-4を得て；水を加えて1-4を分解させ、中間体(S)-イソチアゾリジン-3-カルボン酸1,1-二酸化物1-7を得た。1-4と2-ブロモ-4-シアノピリジルをCuI又はPd2(dba)3触媒によるカップリングすることより、化合物1-5を得て；水を加えて1-5を分解させ、中間体1-6を得た。
【０１４２】
本出願の中間体2-6と2-10は、有機合成分野の技術者により、以下の経路によって本分野の標準的な方法を用いて調製し得る：
【０１４３】
【化２９】
2019513819.tif 000034
【０１４４】
L-セリンメチル塩酸塩2-1を還元的アミノ化することより、ベンジル保護の化合物2-2を得て；2-2をスルホニル化することより、化合物2-3を得て；2-3をMistunobu反応より、分子内環化され、化合物2-4を得て；2-4を水素化して脱ベンジル化することより、化合物2-5を得て；2-5を水を加えて分解させ、中間体2-6を得た。2-4を脱Boc保護基することより、化合物2-7を得て；2-7がN-メチル化反応を行い、化合物2-8を得て；2-8を水素化して脱ベンジル化することより、化合物2-9を得て；2-9を水を加えて分解させ、中間体2-10を得た。
【図面の簡単な説明】
【０１４５】
【図１】図１は、IDH1突然変異HT-1080細胞内の2-HGに対する、実施例2の化合物及び対照AG-120の阻害効果である。
【図２】図2は、IDH1突然変異HT-1080細胞外の2-HGに対する、実施例2の化合物及び対照AG-120の阻害効果である。
【図３】図3は、IDH1突然変異U87の2-HGに対する、実施例2の化合物及び対照AG-120の阻害効果である。
【発明を実施するための形態】
【０１４６】
以下の具体の実施例は、当業者が本出願をより明確に理解し実施することを可能にすることを目的とする。それらは、本出願の範囲を制限するものとみなすべきではなく、ただ本出願の例示的な説明及び典型な代表例である。本出願の化合物を形成するための他の合成経路が存在することについて、当業者は理解すべきであり、以下に提供されるものは非制限的な実施例である。
【０１４７】
別途説明がない限り、温度は摂氏温度である。試薬は中国国薬集団化学試剤北京有限公司、アルファエイサー（Alfa Aesar）、又は北京百霊威科技有限公司等商業供給者より購入され、且つ、別途説明がない限り、これらの試薬は、更に精製する必要がなく直ちに使える。
【０１４８】
別途説明がない限り、下記反応は、無水溶媒中に、窒素ガス又はアルゴンガスの陽圧下で又は乾燥管を用いて行い；反応瓶の上には、注射器より基質と試薬を加えるために、ゴムダイアフラムを設置し；ガラス器具を乾かす及び/又は加熱乾燥する。
【０１４９】
別途説明がない限り、カラムクロマトグラフィー精製は、中国青島海洋化工廠の200〜300メッシュシリカゲルを使用し；精製用薄層クロマトグラフィー分離は、中国煙台市化学工業研究所が生産する薄層クロマトグラフィーシリカゲルプレコートプレート（HSGF254）を使用し；MSの測定は、Thermo LCQ Fleet型（ESI）液体クロマトグラフィー-質量分析装置を使用し；旋光測定は中国上海申光儀機儀表有限公司のSGW-3自動旋光計を使用した。
【０１５０】
別途説明がない限り、核磁気データ（1H-NMR）はVarian装置を使用して400 MHzで運行した。核磁気データに用いる溶媒は、CDCl3、CD3OD、D2O、DMSO-d6等であり、テトラメチルシラン（0.00 ppm）を基準とした又は残留溶媒を基準とした(CDCl3：7.26 ppm；CD3OD：3.31 ppm；D2O：4.79 ppm；DMSO-d6：2.50 ppm)。ピーク型の多様性を標示する際に、以下の略写は異なるピーク型：s（一重線）、d（二重線）、t（三重線）、q（四重線）、m（多重線）、br（幅広）、dd（複合二重線）、dt（複合三重線）を表示した。結合定数を挙げた場合、単位はHertz（Hz）とする。
【０１５１】
別途説明がない限り、本出願の一部の実施例の標題の化合物が不斉中心の絶対立体配置が表示されないが、調製過程に得られたこの一部の化合物は、全ての鏡像異性体の混合物であり、一般のカラムクロマトグラフィー法が鏡像異性体を分離できないが、当該一部の化合物が鏡像異性体を存在しないことを意味することではない。
【実施例】
【０１５２】
実施例1：(S)-N-((R)-1-(2-クロロフェニル)-2-((3,3-ジフルオロシクロブチル)アミノ)-2-オキソエチル)-2-(4-シアノピリジン-2-イル)-N-(5-フルオロピリジン-3-イル)-イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物
【０１５３】
【化３０】
2019513819.tif 000035
【０１５４】
ステップA：L-ホモシスチンジメチル二塩酸塩
【０１５５】
【化３１】
2019513819.tif 000036
【０１５６】
氷浴攪拌下で、L-ホモシスチン（8.0 g, 29.8 mmol）のメタノール懸濁液に塩化チオニル（10.64 g, 89.4 mmol）を滴下添加し、溶液を段々に澄ませって、添加終了後、10 min攪拌して氷浴を去り、室温で一晩攪拌し、溶媒を除去し、L-ホモシスチンジメチル二塩酸塩（10.6 g、収率100%）を得た。
【０１５７】
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 8.79 (s, 6H), 3.75 (s, 6H), 2.95-2.80 (m, 4H), 2.52-2.47 (m, 2H), 2.20-2.10 (m, 4H)。
【０１５８】
ステップB：(S)-2-アミノ-4-クロロスルホニルブチレートメチル塩酸塩
【０１５９】
【化３２】
2019513819.tif 000037
【０１６０】
氷浴攪拌下で、L-ホモシスチンジメチル二塩酸塩（10.6 g, 29.8 mmol）のエタノール（40 mL）とクロロホルム（80 mL）混合溶液に窒素ガスで20分間通気し、白色固体を生成し、濾過し、クロロホルムで洗浄し、(S)-2-アミノ-4-クロロスルホニルブチレートメチル塩酸塩（7.5 g、収率100%）を得た。
【０１６１】
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 13.46 (s, 1H), 8.57 (s, 2H), 3.66 (s, 3H), 3.18-2.95 (m,2H), 2.52-2.45 (m, 1H), 2.22-1.97 (m, 2H)。
【０１６２】
ステップC：(S)-イソチアゾリジン-3-カルボン酸メチル1,1-二酸化物
【０１６３】
【化３３】
2019513819.tif 000038
【０１６４】
氷塩浴攪拌下で、(S)-2-アミノ-4-クロロスルホニルブチレートメチル塩酸塩（4.5 g、17.85 mmol）のクロロホルム懸濁液に、トリエチルアミンのクロロホルム溶液を滴下添加し、添加終了後氷塩浴を去り、室温で一晩攪拌し、溶媒を除去し、硅藻土で濾過し、酢酸エチルで洗浄し、溶媒を除去して、浅黄色油状物を得て、即ち(S)-イソチアゾリジン-3-カルボン酸メチル1,1-二酸化物（3.2 g、収率100%）であった。
【０１６５】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 4.98 (s, 1H), 4.21 (dd, J = 8.3, 4.6 Hz, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.30-3.11 (m, 1H), 3.09-2.90 (m, 1H), 2.90-2.73 (m, 1H), 2.60 (ddd, J = 18.4, 8.9, 4.7 Hz, 1H)。
【０１６６】
ステップD：(S)-イソチアゾリジン-3-カルボン酸1,1-二酸化物
【０１６７】
【化３４】
2019513819.tif 000039
【０１６８】
氷浴攪拌下で、S-イソチアゾリジン-3-カルボン酸メチル1,1-二酸化物（2.4 g、13.4 mmol）のテトラヒドロフルフリルアルコール溶液に、水酸化リチウムの懸濁液を滴下添加し、一晩反応させ、pHを5より小さくなるまで1N塩酸を滴下添加し、溶媒を除去し、濾過し、メタノールで洗浄し、溶媒を除去して(S)-イソチアゾリジン-3-カルボン酸1,1-二酸化物（2.2 g、収率100%）を得た。
【０１６９】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 3.85-3.75 (m, 1H), 3.10-2.85 (m, 2H), 2.55-2.30 (m, 2H)。
【０１７０】
ステップE：(3S)-N-(1-(2-クロロフェニル)-2-((3,3-ジフルオロシクロブチル)アミノ)-2-オキソエチル)-N-(5-フルオロピリジン-3-イル)-イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物
【０１７１】
【化３５】
2019513819.tif 000040
【０１７２】
室温下で、3-アミノ-5-フルオロピリジン（57 mg、0.508 mmol）と2-クロロベンズアルデヒド（72 mg、0.512 mmol）をメタノールに溶かし、30分間攪拌し、混合液に(S)-イソチアゾリジン-3-カルボン酸1,1-二酸化物（84 mg、0.508 mmol）を加入し、10分間攪拌し、1,1-ジフルオロ-3-イソシアノシクロブタン（特許CN103097340に記載した方法を参照して調製し、60 mg、0.508 mmol）を加入し、一晩攪拌し、溶媒を除去し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（PE：EA = 1：1）で分離し、目的生成物（60 mg、収率22%）を得た。
【０１７３】
m/z = 517[M+H]+。
【０１７４】
ステップF：(S)-N-((R)-1-(2-クロロフェニル)-2-((3,3-ジフルオロシクロブチル)アミノ)-2-オキソエチル)-2-(4-シアノピリジン-2-イル)-N-(5-フルオロピリジン-3-イル)-イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物
【０１７５】
【化３６】
2019513819.tif 000041
【０１７６】
封管反応装置に (3S)-N-(1-(2-クロロフェニル)-2-((3,3-ジフルオロシクロブチル)アミノ)-2-オキソエチル)-N-(5-フルオロピリジン-3-イル)-イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物（60 mg、0.116 mmol）、2-ブロモ-4-シアノピリジン（22 mg、0.139 mmol）、ヨウ化第1銅（28 mg、0.147 mmol）、N,N’-ジメチルエチレンジアミン（13 mg、0.147 mmol）と炭酸セシウム（95 mg、0.29 mmol）を加入し、ジオキサン（8 mL）を加入し、窒素ガスで5分間通気し、封管し、80℃で一晩反応させ、原料反応終了後、溶媒を除去した後カラムクロマトグラフィー（PE：EA = 1：1）を行い、ラセミ生成物を得て、ラセミ生成物を薄層クロマトグラフィー（DCM：EA = 8：1）を行い、(S)-N-((R)-1-(2-クロロフェニル)-2-((3,3-ジフルオロシクロブチル)アミノ)-2-オキソエチル)-2-(4-シアノピリジン-2-イル)-N-(5-フルオロピリジン-3-イル)-イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物（7 mg、収率10%）を得た。
【０１７７】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 8.56 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 8.37 (s, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.43 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.30-7.05 (m, 6H), 6.35(s, 1H), 6.20 (s, 1H), 4.65-4.55 (m, 1H), 4.22-4.10 (m, 1H), 3.70-3.60 (m, 1H), 3.42-3.33 (m, 1H), 2.95-2.75 (m, 2H), 2.60-2.50 (m, 2H), 2.35-2.15 (m, 2H)。
【０１７８】
m/z = 619[M+H]+。
【０１７９】
HPLC条件：不斉カラム：CHIRALPAK（登録商標）IC-3カラム（25 cm）；移動相：ｎ-ヘキサン/エタノール=85/15；流速：0.8 mL/min；カラム温度：40℃；波長/時間：210 nm、20 min；滞留時間：実施例1の標題の化合物は17.60 minであった。
【０１８０】
実施例2：(S)-N-((S)-1-(2-クロロフェニル)-2-((3,3-ジフルオロシクロブチル)アミノ)-2-オキソエチル)-2-(4-シアノピリジン-2-イル)-N-(5-フルオロピリジン-3-イル)-イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物
【０１８１】
【化３７】
2019513819.tif 000042
【０１８２】
実施例1のステップFに、薄層クロマトグラフィー分離より、(S)-N-((S)-1-(2-クロロフェニル)-2-((3,3-ジフルオロシクロブチル)アミノ)-2-オキソエチル)-2-(4-シアノピリジン-2-イル)-N-(5-フルオロピリジン-3-イル)-イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物を得た。
【０１８３】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 8.47 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 8.31 (s, 1H), 8.08 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.30-6.75 (m, 6H), 6.56 (s, 1H), 6.22 (s, 1H), 4.80-4.70 (m, 1H), 4.40-4.30 (m, 1H), 3.75-3.65 (m, 1H), 3.40-3.33 (m, 1H),3.10-2.98(m, 2H), 2.60-2.40 (m, 4H)。
【０１８４】
m/z = 619[M+H]+。
【０１８５】
HPLC条件：不斉カラム：CHIRALPAK（登録商標）IC-3カラム（25 cm）；移動相：ｎ-ヘキサン/エタノール=85/15；流速：0.8 mL/min；カラム温度：40℃；波長/時間：210 nm、20 min；滞留時間：実施例2の標題の化合物は17.91minであった。
【０１８６】
実施例3：(S)-N-((R)-1-(2-クロロフェニル)-2-((3,3-ジフルオロシクロブチル)アミノ)-2-オキソエチル)-2-(4-シアノピリジン-2-イル)-N-(3,5-ジフルオロフェニル)-イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物
【０１８７】
【化３８】
2019513819.tif 000043
【０１８８】
ステップA：(3S)-N-(1-(2-クロロフェニル)-2-((3,3-ジフルオロシクロブチル)アミノ)-2-オキソエチル)-N-(3,5-ジフルオロフェニル)-イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物
【０１８９】
【化３９】
2019513819.tif 000044
【０１９０】
実施例1の中のステップEを参照し、反応原料3-アミノ-5-フルオロピリジンを3,5-ジフルオロアニリンに替え、目的生成物(3S)-N-(1-(2-クロロフェニル)-2-((3,3-ジフルオロシクロブチル)アミノ)-2-オキソエチル)-N-(3,5-ジフルオロフェニル)-イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物（収率13%）を得た。
【０１９１】
m/z = 619[M+H]+。
【０１９２】
ステップB：(S)-N-((R)-1-(2-クロロフェニル)-2-((3,3-ジフルオロシクロブチル)アミノ)-2-オキソエチル)-2-(4-シアノピリジン-2-イル)-N-(3,5-ジフルオロフェニル)-イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物
【０１９３】
【化４０】
2019513819.tif 000045
【０１９４】
実施例1の中のステップFを参照し、(S)-N-((R)-1-(2-クロロフェニル)-2-((3,3-ジフルオロシクロブチル)アミノ)-2-オキソエチル)-2-(4-シアノピリジン-2-イル)-N-(3,5-ジフルオロフェニル)-イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物を得て、収率が35%であった。
【０１９５】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 8.54 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.43〜6.76 (m, 8H), 6.11 (s, 1H), 6.01 (s, 1H), 4.80-4.72 (m, 1H), 4.16-4.2 (m, 1H), 3.68-3.65(m, 1H), 3.38-3.34(m, 1H), 2.80-2.98 (m, 2H), 2.58-2.54 (m, 2H), 2.28-2.30 (m, 2H)。
【０１９６】
m/z = 636[M+H]+。
【０１９７】
実施例4：(S)-N-((S)-1-(2-クロロフェニル)-2-((3,3-ジフルオロシクロブチル)アミノ)-2-オキソエチル)-2-(4-シアノピリジン-2-イル)-N-(3,5-ジフルオロフェニル)-イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物
【０１９８】
【化４１】
2019513819.tif 000046
【０１９９】
実施例3のステップBに、薄層クロマトグラフィー分離より、標題の化合物を得て、収率が40%であった。
【０２００】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 8.45 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.35-6.66 (m, 8H), 6.46 (s, 1H), 5.93 (d, J = 6.8, 1H), 4.85-4.83 (m, 1H), 4.40-4.23 (m, 1H), 3.72-3.69(m, 1H), 3.37-3.34(m, 1H), 3.03-2.99 (m, 2H), 2.60-2.20 (m, 4H)。
【０２０１】
m/z = 636[M+H]+。
【０２０２】
実施例5：(S)-N-((R)-1-(2-クロロフェニル)-2-((3,3-ジフルオロシクロブチル)アミノ)-2-オキソエチル)-2-(4-シアノピリジン-2-イル)-N-(3-トリフルオロメチルフェニル)-イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物
【０２０３】
【化４２】
2019513819.tif 000047
【０２０４】
ステップA：(3S)-N-(1-(2-クロロフェニル)-2-((3,3-ジフルオロシクロブチル)アミノ)-2-オキソエチル)-N-(3-トリフルオロメチルフェニル)-イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物
【０２０５】
【化４３】
2019513819.tif 000048
【０２０６】
実施例1の中のステップEを参照し、反応原料3-アミノ-5-フルオロピリジンを3-トリフルオロメチルアニリンに替えて、目的生成物(3S)-N-(1-(2-クロロフェニル)-2-((3,3-ジフルオロシクロブチル)アミノ)-2-オキソエチル)-N-(3-トリフルオロメチルフェニル)-イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物を得て、収率が50%であった。
【０２０７】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 8.10 and 8.00 (s, 0.5 and 0.5 H), 7.58-6.60 (m, 7H), 6.55 and 6.39 (s, 0.5 and 0.5H), 5.90 (s, 1H), 5.23 and 5.18 (d, J = 7.2, 0.5 and 0.5H), 4.40-4.30 (m, 1H), 4.00-3.90 (m, 1H), 3.11-2.96 (m, 4H), 2.59-2.26 (m, 4H)。
【０２０８】
m/z = 566[M+H]+。
【０２０９】
ステップB：(S)-N-((R)-1-(2-クロロフェニル)-2-((3,3-ジフルオロシクロブチル)アミノ)-2-オキソエチル)-2-(4-シアノピリジン-2-イル)-N-(3-トリフルオロメチルフェニル)-イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物
【０２１０】
【化４４】
2019513819.tif 000049
【０２１１】
実施例1の中のステップFを参照し、(S)-N-((R)-1-(2-クロロフェニル)-2-((3,3-ジフルオロシクロブチル)アミノ)-2-オキソエチル)-2-(4-シアノピリジン-2-イル)-N-(3-トリフルオロメチルフェニル)-イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物を得て、収率が16%であった。
【０２１２】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 8.54 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.40 (brs, 1H), 7.64-7.05 (m, 9H), 6.32 (m, 2H), 4.68-4.65 (m, 1H), 4.22-4.04 (m, 1H), 3.64-3.59 (m, 1H), 3.34-3.28(m, 1H), 2.98-2.65(m, 2H), 2.60-2.43 (m, 2H), 2.38-2.15 (m, 2H)。
【０２１３】
m/z = 668[M+H]+。
【０２１４】
実施例6：(S)-N-((S)-1-(2-クロロフェニル)-2-((3,3-ジフルオロシクロブチル)アミノ)-2-オキソエチル)-2-(4-シアノピリジン-2-イル)-N-(3-トリフルオロメチルフェニル)-イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物
【０２１５】
【化４５】
2019513819.tif 000050
【０２１６】
実施例5のステップBに、薄層クロマトグラフィー分離より、(S)-N-((S)-1-(2-クロロフェニル)-2-((3,3-ジフルオロシクロブチル)アミノ)-2-オキソエチル)-2-(4-シアノピリジン-2-イル)-N-(3-トリフルオロメチルフェニル)-イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物を得て、収率が23%であった。
【０２１７】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 8.46 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.69-6.81 (m, 9H), 6.45 (s, 1H), 5.88-5.80 (m, 1H), 4.80-4.65 (m, 1H), 4.40-4.25 (m, 1H), 3.82-3.65(m, 1H), 3.40-3.25(m, 1H), 3.10-2.90 (m, 2H), 2.70-2.40 (m, 4H)。
【０２１８】
m/z = 668[M+H]+。
【０２１９】
実施例7：(S)-N-((R)-1-(2-クロロフェニル)-2-((3,3-ジフルオロシクロブチル)アミノ)-2-オキソエチル)-2-(4-シアノピリジン-2-イル)-N-(3-シアノ-5-フルオロフェニル)-イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物
【０２２０】
【化４６】
2019513819.tif 000051
【０２２１】
ステップA：(3S)-N-(1-(2-クロロフェニル)-2-((3,3-ジフルオロシクロブチル)アミノ)-2-オキソエチル)-N-(3-シアノ-5-フルオロフェニル)-イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物
【０２２２】
【化４７】
2019513819.tif 000052
【０２２３】
実施例1の中のステップEを参照し、原料3-アミノ-5-フルオロピリジンを3-フルオロ-5-シアノアニリンに替え、目的生成物を得て、収率が17%であった。
【０２２４】
m/z = 541[M+H]+。
【０２２５】
ステップB：(S)-N-((R)-1-(2-クロロフェニル)-2-((3,3-ジフルオロシクロブチル)アミノ)-2-オキソエチル)-2-(4-シアノピリジン-2-イル)-N-(3-シアノ-5-フルオロフェニル)-イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物
【０２２６】
【化４８】
2019513819.tif 000053
【０２２７】
実施例1の中のステップFを参照し、(S)-N-((R)-1-(2-クロロフェニル)-2-((3,3-ジフルオロシクロブチル)アミノ)-2-オキソエチル)-2-(4-シアノピリジン-2-イル)-N-(3-シアノ-5-フルオロフェニル)-イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物を得て、収率が15%であった。
【０２２８】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 8.83 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 8.57 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.66-7.12 (m, 8H), 6.29 (s, 1H), 6.16 (s, 1H), 4.63-4.61 (m, 1H), 4.21-4.10 (m, 1H), ,3.70-3.60(m, 1H), 3.40-3.25(m, 1H), 3.30-2.82 (m, 2H), 2.61-2.42 (m, 2H), 2.40-2.20 (m, 2H)。
【０２２９】
m/z = 643[M+H]+。
【０２３０】
実施例8：(S)-N-((S)-1-(2-クロロフェニル)-2-((3,3-ジフルオロシクロブチル)アミノ)-2-オキソエチル)-2-(4-シアノピリジン-2-イル)-N-(3-シアノ-5-フルオロフェニル)-イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物
【０２３１】
【化４９】
2019513819.tif 000054
【０２３２】
実施例7のステップBに、薄層クロマトグラフィー分離より、標題の化合物を得て、収率が20%であった。
【０２３３】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 8.47-6.85 (m, 10H), 6.50 (d, J = 9.77 Hz, 1H), 5.97 (s, 1H), 4.75-4.73 (m, 1H), 4.40-4.30 (m, 1H), 3.80-3.65(m, 1H), 3.42-3.27(m, 1H), 3.15-2.30 (m, 6H)。
【０２３４】
m/z = 643[M+H]+。
【０２３５】
実施例9：(S)-N-((R)-1-(2-クロロフェニル)-2-((3,3-ジフルオロシクロブチル)アミノ)-2-オキソエチル)-2-(4-シアノピリジン-2-イル)-N-(3,4-ジフルオロフェニル)-イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物
【０２３６】
【化５０】
2019513819.tif 000055
【０２３７】
ステップA：(3S)-N-(1-(2-クロロフェニル)-2-((3,3-ジフルオロシクロブチル)アミノ)-2-オキソエチル)-N-(3,4-ジフルオロフェニル)-イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物
【０２３８】
【化５１】
2019513819.tif 000056
【０２３９】
実施例1の中のステップEを参照し、原料3-アミノ-5-フルオロピリジンを3,4-ジフルオロアニリンに替え、目的生成物を得て、収率が18%であった。
【０２４０】
m/z = 534[M+H]+。
【０２４１】
ステップB：(S)-N-((R)-1-(2-クロロフェニル)-2-((3,3-ジフルオロシクロブチル)アミノ)-2-オキソエチル)-2-(4-シアノピリジン-2-イル)-N-(3,4-ジフルオロフェニル)-イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物
【０２４２】
【化５２】
2019513819.tif 000057
【０２４３】
実施例1の中のステップFを参照し、(S)-N-((R)-1-(2-クロロフェニル)-2-((3,3-ジフルオロシクロブチル)アミノ)-2-オキソエチル)-2-(4-シアノピリジン-2-イル)-N-(3,4-ジフルオロフェニル)-イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物を得て、収率が30%であった。
【０２４４】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 8.55 (s, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.40-7.15 (m, 8H), 6.43 (s, 1H), 6.27 (s, 1H), 4.70-4.68 (m, 1H), 4.15-4.11 (m, 1H), 3.61-3.53 (m, 1H), 3.32-3.26 (m, 1H), 2.89-2.69 (m, 2H), 2.57-2.53 (m, 2H), 2.28-2.11 (m, 2H)。
【０２４５】
m/z = 636[M+H]+。
【０２４６】
実施例10：(S)-N-((S)-1-(2-クロロフェニル)-2-((3,3-ジフルオロシクロブチル)アミノ)-2-オキソエチル)-2-(4-シアノピリジン-2-イル)-N-(3,4-ジフルオロフェニル)-イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物
【０２４７】
【化５３】
2019513819.tif 000058
【０２４８】
実施例9のステップBに、薄層クロマトグラフィー分離より、標題の化合物を得て、収率が35%であった。
【０２４９】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 8.47-8.43 (m, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.35-6.82 (m, 8H), 6.44 (d, J = 5.78, 1H), 5.97 (d, J = 6.57, 1H), 4.81-4.79 (m, 1H), 4.33-4.32 (m, 1H), 3.73-3.69 (m, 1H), 3.36-3.33 (m, 1H), 3.02-2.99 (m, 2H), 2.61-2.40 (m, 4H)。
【０２５０】
m/z = 636[M+H]+。
【０２５１】
実施例11：(S)-N-((R)-1-(2-クロロフェニル)-2-((3,3-ジフルオロシクロブチル)アミノ)-2-オキソエチル)-2-(4-シアノピリジン-2-イル)-N-(3-フルオロフェニル)-イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物
【０２５２】
【化５４】
2019513819.tif 000059
【０２５３】
ステップA：(S)-2-(4-シアノピリジン-2-イル)イソチアゾリジン-3-カルボン酸メチル1,1-二酸化物
【０２５４】
【化５５】
2019513819.tif 000060
【０２５５】
封管反応装置に(S)-イソチアゾリジン-3-カルボン酸メチル1,1-二酸化物（実施例1のステップCより調製され、200 mg、1.11 mmol）、2-ブロモ-4-シアノピリジン（204 mg、1.11 mmol）、ヨウ化第1銅（105 mg、0.55 mmol）、N,N’-ジメチルエチレンジアミン（98 mg、1.11 mmol）と炭酸セシウム（723 mg、2.22 mmol）を加入し、ジオキサン（8 mL）を加入し、窒素ガスで5分間通気し、封管し、80℃で一晩反応させ、原料反応終了後、溶媒を除去した後カラムクロマトグラフィー（PE：EA = 1：1）分離を行い、目的生成物(S)-2-(4-シアノピリジン-2-イル)イソチアゾリジン-3-カルボン酸メチル1,1-二酸化物（230 mg、収率74%）を得た。
【０２５６】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 8.40 (dd, J = 5.2, 0.8 Hz, 1H), 7.69 (t, J = 1.0 Hz, 1H), 7.19 (dd, J = 5.2, 1.0 Hz, 1H), 5.01 (dd, J = 8.0, 3.6 Hz, 1H), 3.78 (s, 3H), 3.64-3.55 (m, 1H), 3.48-3.42 (m、1H), 2.95-2.84 (m, 1H), 2.65-2.52 (m, 1H)。
【０２５７】
ステップB: (S)-2-(4-シアノピリジン-2-イル)イソチアゾリジン-3-カルボン酸1,1-二酸化物
【０２５８】
【化５６】
2019513819.tif 000061
【０２５９】
氷浴攪拌下で、(S)-2-(4-シアノピリジン-2-イル)イソチアゾリジン-3-カルボン酸メチル1,1-二酸化物（116 mg、0.41 mmol）のテトラヒドロフルフリルアルコール溶液に、水酸化リチウムの懸濁液を滴下添加し、一晩反応させ、反応終了後、10 mL水を加えて希釈し、酢酸エチルで抽出して雑質を除き、水相に、pHを5より小さくなるまで1N塩酸を滴下添加し、酢酸エチルで抽出し、溶媒を除去して(S)-2-(4-シアノピリジン-2-イル)イソチアゾリジン-3-カルボン酸1,1-二酸化物（103 mg, 収率94%）を得た。
【０２６０】
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 13.5 (s, 1H), 8.54 (d, J = 5.0, 1H), 7.51 (dd, J = 3.74, 4.76 Hz, 1H), 7.45 (s, 1H), 4.95-4.90 (m, 1H), 3.75-3.60 (m, 2H), 2.85-2.72 (m, 1H), 2.46-2.38 (m, 1H)。
【０２６１】
ステップC：(S)-N-((R)-1-(2-クロロフェニル)-2-((3,3-ジフルオロシクロブチル)アミノ)-2-オキソエチル)-2-(4-シアノピリジン-2-イル)-N-(3-フルオロフェニル)-イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物
【０２６２】
【化５７】
2019513819.tif 000062
【０２６３】
実施例1の中のステップEを参照し、原料(S)-イソチアゾリジン-3-カルボン酸1,1-二酸化物を(S)-2-(4-シアノピリジン-2-イル)イソチアゾリジン-3-カルボン酸1,1-二酸化物に替え、目的生成物(S)-N-((R)-1-(2-クロロフェニル)-2-((3,3-ジフルオロシクロブチル)アミノ)-2-オキソエチル)-2-(4-シアノピリジン-2-イル)-N-(3-フルオロフェニル)-イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物を得て、収率が30%であった。
【０２６４】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 8.56 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.39 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.21〜6.99 (m, 8H), 6.43 (s, 1H), 6.23 (s, 1H), 4.73 (dd, J = 6.5, 3.1 Hz, 1H), 4.20-4.05 (m, 1H), 3.57 (dd, J = 20.0, 11.9 Hz, 1H), 3.27 (dd, J = 11.9, 3.5 Hz, 1H), 2.84-2.72 (m, 2H), 2.55 (dd, J = 14.9, 9.3 Hz, 2H), 2.28-2.13 (m, 2H)。
【０２６５】
m/z = 618[M+H]+。
【０２６６】
実施例12：(S)-N-((S)-1-(2-クロロフェニル)-2-((3,3-ジフルオロシクロブチル)アミノ)-2-オキソエチル)-2-(4-シアノピリジン-2-イル)-N-(3-フルオロフェニル)-イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物
【０２６７】
【化５８】
2019513819.tif 000063
【０２６８】
実施例11のステップCに、薄層クロマトグラフィー分離より、標題の化合物を得て、収率が33%であった。
【０２６９】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 8.46 (m, 1H), 7.67 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.22〜6.84 (m, 8H), 6.47 (d, J = 3.6, 1H), 6.08 (s, 1H), 4.82 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 4.33 (m, 1H), 3.68-3.60 (m, 1H), 3.40-3.28 (m, 1H), 3.10-2.98 (m, 2H), 2.68-2.38 (m, 4H)。
【０２７０】
m/z = 618[M+H]+。
【０２７１】
実施例13：(S)-N-((R)-1-(2-クロロフェニル)-2-(シクロヘキシルアミノ)-2-オキソエチル)-2-(ピリミジン-2-イル)-N-(3-フルオロフェニル)-イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物
【０２７２】
【化５９】
2019513819.tif 000064
【０２７３】
ステップA：(S)-N-(1-(2-クロロフェニル)-2-(シクロヘキシルアミノ)-2-オキソエチル)-N-(3-フルオロフェニル)-イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物
【０２７４】
【化６０】
2019513819.tif 000065
【０２７５】
実施例1の中のステップEを参照し、反応原料2,2-ジフルオロシクロブチルイソシアニドと3-アミノ-5-フルオロピリジンをシクロヘキシルイソシアニドと3-フルオロアニリンに替え、目的生成物を得て、収率が81%であった。
【０２７６】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 7.70-6.86 (m, 8H), 6.50-6.25 (m, 1H), 5.41-5.35 (m, 1H), 5.25-5.10 (m, 1H), 4.05-4.95 (m, 1H), 3.90-3.80 (m, 1H), 3.12-2.90 (m, 2H), 2.65-1.00 (m, 12H)。
【０２７７】
m/z = 508[M+H]+。
【０２７８】
ステップB: (S)-N-((R)-1-(2-クロロフェニル)-2-(シクロヘキシルアミノ)-2-オキソエチル)-2-(ピリミジン-2-イル)-N-(3-フルオロフェニル)-イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物
【０２７９】
【化６１】
2019513819.tif 000066
【０２８０】
実施例1の中のステップFを参照し、(S)-N-((R)-1-(2-クロロフェニル)-2-(シクロヘキシルアミノ)-2-オキソエチル)-2-(ピリミジン-2-イル)-N-(3-フルオロフェニル)-イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物を得て、収率が26%であった。
【０２８１】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 8.61 (d, J = 4.9 Hz, 2H), 7.75 (brs, 1H), 7.42-7.37 (m, 2H), 7.26-7.21 (m, 2H), 7.01-7.07 (m, 1H), 7.02〜6.96 (m, 2H), 6.85 (brs, 1H), 6.12 (s, 1H), 5.71 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.75 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 3.76-3.68 (m, 2H), 3.34-3.30(m, 1H), 2.53-2.46 (m, 2H), 1.86-1.78 (m, 2H), 1.52-1.62 (m, 4H), 1.24-1.30 (m, 2H), 1.12-0.73 (m, 2H)。
【０２８２】
m/z = 586[M+H]+。
【０２８３】
実施例14：(S)-N-((S)-1-(2-クロロフェニル)-2-(シクロヘキシルアミノ)-2-オキソエチル)-2-(ピリミジン-2-イル)-N-(3-フルオロフェニル)-イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物
【０２８４】
【化６２】
2019513819.tif 000067
【０２８５】
実施例13のステップBに、薄層クロマトグラフィー分離より、標題の化合物を得て、収率が30%であった。
【０２８６】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 8.57 (d, J = 4.9 Hz, 2H), 7.74 (s, 1H), 7.43〜6.88 (m, 7H), 6.49 (s, 1H), 5.40 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 4.79 (s, 1H), 3.84-3.75 (m, 2H), 3.33-3.30 (m, 1H), 2.62-2.37 (m, 2H), 1.86-1.78 (m, 2H), 1.52-1.62 (m, 4H), 1.24-1.30 (m, 2H), 1.12-0.73 (m, 2H)。
【０２８７】
m/z = 586[M+H]+。
【０２８８】
実施例15：(S)-N-((R)-1-(2-クロロフェニル)-2-(シクロヘキシルアミノ)-2-オキソエチル)-2-(4-シアノピリジン-2-イル)-N-(3-フルオロフェニル)-イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物
【０２８９】
【化６３】
2019513819.tif 000068
【０２９０】
実施例1の中のステップFを参照し、(S)-N-(1-(2-クロロフェニル)-2-(シクロヘキシルアミノ)-2-オキソエチル)-N-(3-フルオロフェニル)-イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物（実施例13ステップAより調製され）より目的生成物を得て、収率が39%であった。
【０２９１】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 8.56 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.35-6.99 (m, 8H), 6.12 (s, 1H), 5.70 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 4.75-4.74 (m, 1H), 3.76-3.56 (m, 2H), 3.34-3.36 (m , 1H), 2.66-2.43 (m, 2H), 1.85-1.71 (m, 2H), 1.62-1.56 (m, 4H), 1.28-1.24 (m, 2H), 1.12-0.85 (m, 2H)。
【０２９２】
m/z = 610[M+H]+。
【０２９３】
実施例16：(S)-N-((S)-1-(2-クロロフェニル)-2-(シクロヘキシルアミノ)-2-オキソエチル)-2-(4-シアノピリジン-2-イル)-N-(3-フルオロフェニル)-イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物
【０２９４】
【化６４】
2019513819.tif 000069
【０２９５】
実施例15のステップBに、薄層クロマトグラフィー分離より、標題の化合物を得て、収率が39%であった。
【０２９６】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 8.46 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.75-6.88 (m, 10H), 6.45 (s, 1H), 5.36-5.30 (m, 1H), 4.82-4.81 (m, 1H), 3.82-3.74 (m, 2H), 3.34-3.32 (m, 1H), 2.67-2.65 (m, 1H), 2.45-2.40 (m, 1H), 1.97-1.94 (m, 2H), 1.74-1.59 (m, 4H), 1.38-1.24 (m, 2H), 1.17-1.01 (m, 2H)。
【０２９７】
m/z = 610[M+H]+。
【０２９８】
実施例17：(S)-N-((R)-1-(2-クロロフェニル)-2-(シクロヘキシルアミノ)-2-オキソエチル)-2-(4-フルオロピリジン-2-イル)-N-(3-フルオロフェニル)-イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物
【０２９９】
【化６５】
2019513819.tif 000070
【０３００】
実施例1の中のステップFを参照し、(S)-N-(1-(2-クロロフェニル)-2-(シクロヘキシルアミノ)-2-オキソエチル)-N-(3-フルオロフェニル)-イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物（実施例13のステップAより調製され）と2-ブロモ-4-フルオロピリジンをカップリングより目的生成物を得て、収率が25%であった。
【０３０１】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 8.32 (dd, J = 8.4, 5.9 Hz, 1H), 7.45-6.73 (m, 10H), 6.03 (s, 1H), 5.73 (s, 1H), 4.88-4.68 (m, 1H), 3.76-3.62 (m, 2H), 3.29 (ddd, J = 12.0, 6.7, 2.6 Hz, 1H), 2.67-2.39 (m, 2H), 1.85-1.75 (m, 2H), 1.62-1.56 (m, 2H), 1.32-1.25 (m, 3H), 1.05-0.91 (m, 3H)。
【０３０２】
m/z = 603[M+H]+。
【０３０３】
実施例18：(S)-N-((S)-1-(2-クロロフェニル)-2-(シクロヘキシルアミノ)-2-オキソエチル)-2-(4-フルオロピリジン-2-イル)-N-(3-フルオロフェニル)-イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物
【０３０４】
【化６６】
2019513819.tif 000071
【０３０５】
実施例17のステップBに、薄層クロマトグラフィー分離より、標題の化合物を得て、収率が25%であった。
【０３０６】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 8.26 (s, 1H), 7.37-6.72 (m, 10H), 6.45 (s, 1H), 5.37 (d, J = 8.1, 1H), 4.83 (d, J = 7.7, 1H), 3.83-3.70 (m, 2H), 3.29 (ddd, J = 12.0, 6.7, 2.6 Hz, 1H), 2.65-2.62 (m, 1H), 2.42-2.25(m, 1H), 1.94-1.91 (m, 2H), 1.68-1.56 (m, 2H), 1.32-1.25 (m, 3H), 1.05-0.91 (m, 3H)。
【０３０７】
m/z = 603[M+H]+。
【０３０８】
実施例19：(3S)-N-(1-(2-クロロフェニル)-2-(シクロヘキシルアミノ)-2-オキソエチル)-N-(3-フルオロフェニル)-2-(4-アルキニルピリジン-2-イル)イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物
【０３０９】
【化６７】
2019513819.tif 000072
【０３１０】
ステップA：2-ブロモ-4-(2,2-ジブロモビニル)ピリジン
【０３１１】
【化６８】
2019513819.tif 000073
【０３１２】
0℃下で、四臭化炭素（2.68g、8.08 mmol）のジクロロメタン溶液にトリフェニルフォスフィン（4.23g、16.13 mmol）を加入し、5分間攪拌した後、メタノール中の2-ブロモ-4-ピリジンカルボキシアルデヒド（0.50g、2.69 mmol）を加入し、室温に升温して引続き30分間攪拌した。完全に反応させた後、水を加えて反応を停止させ、酢酸エチル（30 mL×3）で抽出し、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（PE：EA = 10：1）で分離して生成物（140 mg、収率15%）を得た。
【０３１３】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 8.39-8.38 (m, 1H), 7.63-7.62 (m, 1H), 7.40-7.38 (m, 2H)。
【０３１４】
ステップB：2-ブロモ-4-((トリメチルシリル)エチニル)ピリジン
【０３１５】
【化６９】
2019513819.tif 000074
【０３１６】
-78℃下、2-ブロモ-4-(2,2-ジブロモビニル)ピリジン（140 mg、0.41 mmol）のテトラヒドロフラン溶液に2.4Mのn-ブチルリチウム（358 μL、0.86 mmol）を滴下添加し、30分間攪拌した後、引続きクロロトリメチルシラン（53 μL、0.61 mmol）を加入し、-78℃下で1時間攪拌した後、室温に升温して引続き30分間攪拌した。完全に反応させた後、水を加えて反応を停止させ、酢酸エチル（30 mL×3）で抽出し、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（PE：EA = 20：1）で分離して生成物（30 mg、収率29%）を得た。
【０３１７】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 8.32-8.30 (m, 1H), 7.52-7.51 (m, 1H), 7.27-7.24 (m, 1H), 0.28-0.25 (m, 9H)。
【０３１８】
ステップC：(3S)-N-(1-(2-クロロフェニル)-2-(シクロヘキシルアミノ)-2-オキソエチル)-N-(3-フルオロフェニル)-2-(4-アルキニルピリジン-2-イル)イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物
【０３１９】
【化７０】
2019513819.tif 000075
【０３２０】
80℃下で、(S)-N-(1-(2-クロロフェニル)-2-(シクロヘキシルアミノ)-2-オキソエチル)-N-(3-フルオロフェニル)-イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物（実施例13のステップAより調製され、60 mg、0.12 mmol）、2-ブロモ-4-[(トリメチルシリル)エチニル]ピリジン（30 mg、0.12 mmol）、ヨウ化第1銅(（12 mg、0.06 mmol）、N,N'-ジメチルエチレンジアミン（13 μL、0.12 mmol）と炭酸セシウム（77 mg、0.24 mmol）を1,4-ジオキサン（8 mL）の中に一晩攪拌した。反応終了後、混合物を濾過し、母液を濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（PE：EA = 1：1）で分離して標題の化合物（5 mg、収率7%）を得た。
【０３２１】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 8.36-8.30 (m, 1H), 7.73 (m, 1H), 7.55 (m, 1H), 7.46-7.30 (m, 2H), 7.24-6.88 (m, 6H), 6.46 and 6.03 (s, 1H), 5.74 and 5.39 (d, J = 6.4Hz, 1H), 4.80 and 4.75 (m, 1H), 3.81〜3.66 (m, 3H), 3.31〜3.28 (m, 1H), 2.62-2.49 (m, 2H), 2.05-1.55 (m, 6H), 1.15-0.84 (m, 4H)。
【０３２２】
m/z = 609[M+H]+。
【０３２３】
実施例20：(3S)-N-(1-(2-クロロフェニル)-2-(シクロヘキシルアミノ)-2-オキソエチル)-2-(4-シアノピリジン-2-イル)-N-(3-(N-(4-シアノピリジン-2-イル)スルファモイル)フェニル)-イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物
【０３２４】
【化７１】
2019513819.tif 000076
【０３２５】
ステップA：(3S)-N-(1-(2-クロロフェニル)-2-(シクロヘキシルアミノ)-2-オキソエチル)-2-N-(3-スルファモイル)-イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物
【０３２６】
【化７２】
2019513819.tif 000077
【０３２７】
実施例1の中のステップEを参照し、原料3-フルオロ-5-アミノピリジンを3-アミノベンゼンスルホンアミドに替えて、目的生成物を得て、収率が53%であった。
【０３２８】
m/z = 569[M+H]+。
【０３２９】
ステップB：(3S)-N-(1-(2-クロロフェニル)-2-(シクロヘキシルアミノ)-2-オキソエチル)-2-(4-シアノピリジン-2-イル)-N-(3-(N-(4-シアノピリジン-2-イル)スルファモイル)フェニル)-イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物
【０３３０】
【化７３】
2019513819.tif 000078
【０３３１】
実施例1の中のステップFを参照し、標題の化合物を得て、収率が25%であった。
【０３３２】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 8.60-6.60 (m, 14H), 6.41〜6.39 (s, 1H), 6.18-5.56(s, 1H), 5.44-5.36 (m, 1H), 4.62-4.59 (m, 1H), 3.90-3.61 (m, 2H), 3.40-3.33 (m, 1H), 2.60-2.24 (m, 2H), 2.00-0.80 (m, 10H)。
【０３３３】
m/z = 773[M+H]+。
【０３３４】
実施例21：(S)-N-(1-(2-クロロフェニル)-2-(シクロヘキシルアミノ)-2-オキソエチル)-2-(3-シアノフェニルエチル)-N-(3-フルオロフェニル)-イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物
【０３３５】
【化７４】
2019513819.tif 000079
【０３３６】
ステップA：(S)-2-(3-シアノフェニルエタン-2-イル)イソチアゾリジン-3-カルボン酸メチル1,1-二酸化物
【０３３７】
【化７５】
2019513819.tif 000080
【０３３８】
(S)-イソチアゾリジン-3-カルボン酸メチル1,1-二酸化物（179 mg、1.0 mmol）、3-シアノベンジルブロミド（392 mg、2.0 mmol）、テトラブチルアンモニウムヨージド（37 mg、0.1 mmol）をDMF（3 mL）に溶かし、室温下で反応液を一晩攪拌し、水を加えて希釈し、酢酸エチルで抽出し、乾燥して濾過し、濃縮し、粗製品をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで分離して目的生成物（260 mg、収率88%）を得た。
【０３３９】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 7.66 (s, 1H), 7.65-7.59 (m, 2H), 7.47 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 4.41 (q, J = 15.6 Hz, 2H), 3.85-3.82 (m, 1H), 3.63(s, 3H) 3.40-3.25 (m, 1H), 3.23-3.16 (m, 1H), 2.66-2.42(m, 2H)。
【０３４０】
ステップB：(S)-メチル-2-(3-シアノフェニルエタン-2-イル)イソチアゾリジン-3-カルボン酸1,1-二酸化物
【０３４１】
【化７６】
2019513819.tif 000081
【０３４２】
実施例11中のステップBを参照し、目的生成物を得て、収率が75%であった。
【０３４３】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 7.81 (s, 1H), 7.77-7.54 (m, 3H), 4.35 (s, 2H), 3.98-3.96 (m, 1H), 3.38-3.26(m, 2H), 2.66-2.50 (m, 1H), 2.49-2.26 (m, 1H)。
【０３４４】
ステップC：(S)-N-{(RS)-1-(2-クロロフェニル)-2-(シクロヘキシルアミノ)-2-オキソエチル}-2-(3-シアノフェニルエチル)-N-(3-フルオロフェニル)-イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物
【０３４５】
【化７７】
2019513819.tif 000082
【０３４６】
実施例1の中のステップEを参照し、標題の化合物を得て、収率が79%であった。
【０３４７】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 7.80-6.75 (m, 12H), 6.41 and 6.37 (s, 0.5 and 0.5H), 5.41 and 5.35 (m, 0.5 and 0.5H), 4.62 and 4.53 (d, J = 16, 0.5 and 0.5H), 4.15 and 4.04 (d, J = 15.2, 16, 0.5 and 0.5H), 3.96-3.78 (m, 1H), 3.65-3.60 (m, 1H), 3.45-3.40 (m, 1H), 3.18-3.02 (m, 1H), 2.40-2.20 (m, 2H), 2.02-1.80 (m, 2H), 1.79-1.45 (m, 4H), 1.40-1.02 (m 4H)。
【０３４８】
m/z = 623[M+H]+。
【０３４９】
実施例22：(S)-N-((R)-1-(2-クロロフェニル)-2-((4,4-ジフルオロシクロヘキシル)アミノ))-2-オキソエチル)-2-(4-シアノピリジン-2-イル)-N-(3-フルオロフェニル)-イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物
【０３５０】
【化７８】
2019513819.tif 000083
【０３５１】
ステップA：(3S)-N-(1-(2-クロロフェニル)-2-((4,4-ジフルオロシクロヘキシル)アミノ)-2-オキソエチル)-N-(3-フルオロフェニル)イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物
【０３５２】
【化７９】
2019513819.tif 000084
【０３５３】
室温攪拌下で、2-クロロベンズアルデヒド（85 mg、0.605 mmol）と3-フルオロアニリン（67 mg、0.605 mmol）をMeOH（6.0 mL）に30分間混合した。(S)-3-イソチアゾールカルボン酸1,1-二酸化物（150 mg、0.908 mmol）を添加して反応混合物を10分間攪拌した後、1,1-ジフルオロ-4-イソシアニドシクロヘキサン（88 mg、0.605 mmol）を添加し、室温下で一晩攪拌した。真空で溶媒を除去し、シリカゲルカラムクロマトグラフィーで分離して (3S)-N-(1-(2-クロロフェニル)-2-((4,4-ジフルオロシクロヘキシル)アミノ)-2-オキソエチル)-N-(3-フルオロフェニル)イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物（114 mg、収率34.7%）を得て、直ちに次にステップの反応に供した。
【０３５４】
m/z = 544[M+H]+。
【０３５５】
ステップB：(S)-N-((R)-1-(2-クロロフェニル)-2-((4,4-ジフルオロシクロヘキシル)アミノ))-2-オキソエチル)-2-(4-シアノピリジン-2-イル)-N-(3-フルオロフェニル)-イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物
【０３５６】
【化８０】
2019513819.tif 000085
【０３５７】
封管反応装置に、(3S)-N-(1-(2-クロロフェニル)-2-((4,4-ジフルオロシクロヘキシル)アミノ)-2-オキソエチル)-N-(3-フルオロフェニル)イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物（114 mg、0.210 mmol）、2-ブロモ-4-シアノピリジン（47 mg、0.252 mmol）、ヨウ化第1銅（21 mg、0.11 mmol）、N,N’-ジメチルエチレンジアミン（19 mg, 0.21 mmol）と炭酸セシウム（206 mg、0.63 mmol）を加入し、ジオキサン（8 mL）を加入し、窒素ガスで5分間通気し、封管して80℃で一晩反応させ、溶媒を除去した後カラムクロマトグラフィー（PE：EA = 1：1）を行い、ラセミ生成物を得て、ラセミ体は薄層クロマトグラフィー（DCM：EA = 8：1）を行い、不斉純化合物(S)-N-((R)-1-(2-クロロフェニル)-2-((4,4-ジフルオロシクロヘキシル)アミノ))-2-オキソエチル)-2-(4-シアノピリジン-2-イル)-N-(3-フルオロフェニル)-イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物（39 mg、収率28.7%）を得た。
【０３５８】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 8.55 (d, J = 4.7 Hz, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.39 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.33-7.18 (m, 5H), 7.07 (dd, J = 24.5, 16.7 Hz, 2H), 6.95-6.69 (m, 1H), 6.10 (s, 1H), 5.70 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 4.76 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 3.72-3.70 (m, 2H), 3.36-3.31 (m, 1H), 2.58-2.54 (m, 2H), 2.07-1.64 (m, 5H), 1.41-1.17 (m, 3H)。
【０３５９】
m/z = 646[M+H]+。
【０３６０】
実施例23：(S)-N-((S)-1-(2-クロロフェニル)-2-((4,4-ジフルオロシクロヘキシル)アミノ))-2-オキソエチル)-2-(4-シアノピリジン-2-イル)-N-(3-フルオロフェニル)-イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物
【０３６１】
【化８１】
2019513819.tif 000086
【０３６２】
実施例22のステップBに、薄層クロマトグラフィーで分離して (S)-N-((R)-1-(2-クロロフェニル)-2-((4,4-ジフルオロシクロヘキシル)アミノ))-2-オキソエチル)-2-(4-シアノピリジン-2-イル)-N-(3-フルオロフェニル)-イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物（40 mg、収率29.4%）を得た。
【０３６３】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 8.46 (s, 1H), 7.71-7.68 (m, 2H), 7.33 (d, J = 13.3 Hz, 1H), 7.08-7.01 (m, 6H), 6.45 (s, 1H), 5.43 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 4.81 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 3.98-3.93 (m, 1H), 3.75-3.70 (m, 1H), 3.34 (s, 1H), 2.63 (s, 1H), 2.46 (s, 1H), 2.11-2.05 (m, 4H), 1.89-1.81 (m, 2H), 1.63-1.35 (m, 2H), 0.88 (s, 1H)。
【０３６４】
m/z = 646[M+H]+。
【０３６５】
実施例24：(S)-N-((S)-1-(2-クロロフェニル)-2-((3,3-ジフルオロシクロブチル)アミノ)-2-オキソエチル)-2-(4-シアノピリジン-2-イル)-N-(3-フルオロフェニル)-1,2,5-チアジアゾール-3-ホルムアミド1,1-二酸化物
【０３６６】
【化８２】
2019513819.tif 000087
【０３６７】
ステップA：(S)-2-(ベンジルアミノ)-3-ヒドロキシプロピオン酸メチル
【０３６８】
【化８３】
2019513819.tif 000088
【０３６９】
室温攪拌下で、L-セリンメチル塩酸塩（20 g、128.6 mmol）とトリエチルアミン（13 g、128.6 mmol）の混合物のジクロロメタン溶液を入れた500ｍL丸底フラスコ中にベンズアルデヒド（13.6 g、128.6 mmol）と無水硫酸ナトリウム（6.0 g）を加入し、室温下で一晩攪拌して反応させた。反応終了後、濾過し、濃縮した。濃縮残留物にメタノールを加入して溶解し、氷浴下で注意しながら水素化ほう素ナトリウム（4.86 g、128.6 mmol）を数回分けて加入し、室温下で1時間反応させた。メタノールを除去し、ジクロロメタンで希釈し、飽和重炭酸ナトリウム水溶液で洗浄し、ジクロロメタンで三回抽出し、合併した有機相を塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過して真空で濃縮し、(S)-2-(ベンジルアミノ)-3-ヒドロキシプロピオン酸メチル（20.6 g、収率77%）を得た。
【０３７０】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 7.38-7.26 (m, 5H), 4.48 (d, J = 12.8 Hz, 1H), 3.8-3.72 (m, 6H), 3.61 (dd, J = 10.8, 10.8 Hz, 1H), 3.54 (dd, J = 6.8, 6.4 Hz, 1H)。
【０３７１】
ステップB：(S)-2-(ベンジル(N-(t-ブトキシカルボニル)スルホニル)アミノ)-3-ヒドロキシプロピオン酸メチル
【０３７２】
【化８４】
2019513819.tif 000089
【０３７３】
氷浴攪拌下で、(S)-2-(ベンジルアミノ)-3-ヒドロキシプロピオン酸メチル（10.0 g、47.79 mmol）のジクロロメタン溶液を入れた中にトリエチルアミン（7.25 g、71.69 mmol）とt-ブチルクロロアミノスルホニルカルボン酸（10.3 g、47.79 mmol）を加入し、室温下で一晩攪拌して反応させた。反応終了後、ジクロロメタンを加入して希釈し、水を加えて反応を停止させ、ジクロロメタンで三回抽出し、合併した有機相を塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過して真空で濃縮し、カラムクロマトグラフィーで分離して (S)-2-(ベンジル(N-(t-ブトキシカルボニル)スルホニル)アミノ)-3-ヒドロキシプロピオン酸メチル（6.43 g、収率35%）を得た。
【０３７４】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 7.44-7.28 (m, 6H), 4.67 (dd, J = 14.3, 6.1 Hz, 2H), 4.56 (d, J = 15.6 Hz, 1H), 4.00 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 3.69 (s, 3H), 2.84 (s, 1H), 1.48 (s, 9H)。
【０３７５】
ステップC：(S)-2-t-ブチル-4-メチル-5-ベンジル-1,2,5-チアジアゾール-2,4-ジカルボン酸1,1-二酸化物
【０３７６】
【化８５】
2019513819.tif 000090
【０３７７】
氷浴攪拌下で、(S)-2-(ベンジル(N-(t-ブトキシカルボニル)スルホニル)アミノ)-3-ヒドロキシプロピオン酸メチル（6.42 g、16.54 mmol）とトリフェニルフォスフィン（5.2 g、19.84 mmol）のジクロロメタン溶液を入れた中にDIAD（4.0 g、19.84 mmol）を加入し、室温下で2時間反応させた。反応終了後、ジクロロメタンを加入して希釈し、水を加えて反応を停止させ、ジクロロメタンで三回抽出し、合併した有機相を塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過して真空で濃縮し、カラムクロマトグラフィーで分離して目的化合物（5.77 g、収率94.3%）を得た。
【０３７８】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 7.43-7.28 (m, 5H), 4.54 (d, J = 14.4 Hz, 1H), 4.44 (d, J = 14.4 Hz, 1H), 4.07-4.00 (m, 1H), 3.89 (t, J = 2.9 Hz, 2H), 3.72 (s, 3H), 1.55 (s, 9H)。
【０３７９】
ステップD：(S)-2-t-ブチル-4-メチル-1,2,5-チアジアゾール-2,4-ジカルボン酸1,1-二酸化物
【０３８０】
【化８６】
2019513819.tif 000091
【０３８１】
室温攪拌下で、(S)-2-t-ブチル-4-メチル-5-ベンジル-1,2,5-チアジアゾール-2,4-ジカルボン酸1,1-二酸化物（2.97 g、8.02 mmol）のジクロロメタン溶液を入れた中に質量含量10%のパラジウムカーボン（1.0 g）を加入し、循環ポンプで10回換気し、水素ガス保護下で室温下で一晩反応させた。反応終了後、濾過し、濃縮し、カラムクロマトグラフィーで分離して (S)-2-t-ブチル-4-メチル-1,2,5-チアジアゾール-2,4-ジカルボン酸1,1-二酸化物（1.49 g、収率66%）を得た。
【０３８２】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 5.17 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.39 (dd, J = 16, 7.6 Hz, 1H), 4.18 (dd, J = 10.0, 2.4 Hz, 1H), 3.88-3.83 (m, 4H), 1.52 (s, 9H)。
【０３８３】
ステップE：(S)-5-(t-ブトキシカルボニル)-1,2,5-チアジアゾール-3-カルボン酸1,1-二酸化物
【０３８４】
【化８７】
2019513819.tif 000092
【０３８５】
氷浴攪拌下で、(S)-2-t-ブチル-4-メチル-1,2,5-チアジアゾール-2,4-ジカルボン酸1,1-二酸化物（800 mg、2.854 mmol）の10ｍLメタノール/水（体積比が5/1であり）溶液を入れた中に水酸化リチウム一水合物（342 mg、14.27 mmol）を加入し、室温下で一晩反応させた。反応終了後、回転蒸発してメタノールを除去し、反応系pHを4N HClで3より小さくなるまで調整し、酢酸エチルで三回抽出し、合併した有機相を塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過して真空で濃縮し、カラムクロマトグラフィーで分離して (S)-5-(t-ブトキシカルボニル)-1,2,5-チアジアゾール-3-カルボン酸1,1-二酸化物（759 mg、収率100%）を得た。
【０３８６】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 5.39-5.33 (m, 1H), 4.46 (s, 1H), 4.23 (dd, J = 10, 5.6 Hz, 1H), 3.98 (dd, J = 9.6, 7.6 Hz, 1H), 1.50 (s, 9H)。
【０３８７】
ステップF：(3S)-N-(1-(2-クロロフェニル)-2-((3,3-ジフルオロシクロブチル)アミノ)-2-オキソエチル)-N-(3-フルオロフェニル)-5-t-ブトキシカルボニル-1,2,5-チアジアゾール-3-ホルムアミド1,1-二酸化物
【０３８８】
【化８８】
2019513819.tif 000093
【０３８９】
室温攪拌下で、2-クロロベンズアルデヒド（400 mg、2.85 mmol）と3-フルオロアニリン（317 mg, 2.85 mmol）をMeOH（6.0 mL）に30分間混合して攪拌した。(S)-5-(t-ブトキシカルボニル)-1,2,5-チアジアゾール-3-カルボン酸1,1-二酸化物（759 mg、2.85 mmol）を添加して反応混合物を10分間攪拌した。その後、1,1-ジフルオロ-4-イソシアニドシクロブタン（333 mg、2.85 mmol）を添加して、室温下で反応混合物を一晩攪拌した。真空で溶媒を除去し、シリカゲルカラムクロマトグラフィーで分離して (3S)-N-(1-(2-クロロフェニル)-2-((3,3-ジフルオロシクロブチル)アミノ)-2-オキソエチル)-N-(3-フルオロフェニル)-5-t-ブトキシカルボニル-1,2,5-チアジアゾール-3-ホルムアミド1,1-二酸化物（578 mg、収率32.9%）を得た。
【０３９０】
m/z = 617[M+H]+。
【０３９１】
ステップG：(3S)-N-(1-(2-クロロフェニル)-2-((3,3-ジフルオロシクロブチル)アミノ)-2-オキソエチル)-2-(4-シアノピリジン-2-イル)-N-(3-フルオロフェニル)-5-t-ブトキシカルボニル-1,2,5-チアジアゾール-3-ホルムアミド1,1-二酸化物
【０３９２】
【化８９】
2019513819.tif 000094
【０３９３】
封管反応装置に (3S)-N-(1-(2-クロロフェニル)-2-((3,3-ジフルオロシクロブチル)アミノ)-2-オキソエチル)-N-(3-フルオロフェニル)-5-t-ブトキシカルボニル-1,2,5-チアジアゾール-3-ホルムアミド1,1-二酸化物（570 mg、0.924 mmol）、2-ブロモ-4-シアノピリジン（186 mg、1.10 mmol）、ヨウ化第1銅（88 mg、0.462 mmol）、N,N’-ジメチルエチレンジアミン（82 mg、0.924 mmol）と炭酸セシウム（903 mg、2.772 mmol）を加入し、ジオキサン(（8 mL）) を加入し、窒素ガスで5分間通気し、封管して80℃で一晩反応させ、溶媒を除去し、カラムクロマトグラフィー（PE：EA = 1：1）で (3S)-N-(1-(2-クロロフェニル)-2-((3,3-ジフルオロシクロブチル)アミノ)-2-オキソエチル)-2-(4-シアノピリジン-2-イル)-N-(3-フルオロフェニル)-5-t-ブトキシカルボニル-1,2,5-チアジアゾール-3-ホルムアミド1,1-二酸化物（190 mg、収率28.6%）を得た。
【０３９４】
m/z = 719[M+H]+。
【０３９５】
ステップH：(S)-N-((S)-1-(2-クロロフェニル)-2-((3,3-ジフルオロシクロブチル)アミノ)-2-オキソエチル)-2-(4-シアノピリジン-2-イル)-N-(3-フルオロフェニル)-1,2,5-チアジアゾール-3-ホルムアミド1,1-二酸化物
【０３９６】
【化９０】
2019513819.tif 000095
【０３９７】
氷浴攪拌下で、(3S)-N-(1-(2-クロロフェニル)-2-((3,3-ジフルオロシクロブチル)アミノ)-2-オキソエチル)-2-(4-シアノピリジン-2-イル)-N-(3-フルオロフェニル)-5-t-ブトキシカルボニル-1,2,5-チアジアゾール-3-ホルムアミド1,1-二酸化物（190 mg、0.264 mmol）のジクロロメタン溶液を入れた中にトリフルオロ酢酸（2.0 mL）を加入し、窒素ガス保護で室温下で一晩反応させた。反応終了後、濃縮し、カラムクロマトグラフィーで分離して (S)-N-((S)-1-(2-クロロフェニル)-2-((3,3-ジフルオロシクロブチル)アミノ)-2-オキソエチル)-2-(4-シアノピリジン-2-イル)-N-(3-フルオロフェニル)-1,2,5-チアジアゾール-3-ホルムアミド1,1-二酸化物（7 mg、収率4.3%）を得た。
【０３９８】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 8.43 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 7.63 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.40-7.27 (m, 2H), 7.18 (d, J = 6.1 Hz, 2H), 7.10-6.83 (m, 4H), 6.47 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 6.04 (d, J = 6.3 Hz, 1H), 5.74 (d, J = 28.7 Hz, 1H), 4.83 (s, 1H), 4.25 (d, J = 39.4 Hz, 1H), 3.77 (d, J = 9.7 Hz, 1H), 3.68-3.46 (m, 1H), 3.17-2.90 (m, 2H), 2.45 (m, 2H)。
【０３９９】
m/z = 619[M+H]+。
【０４００】
実施例25：(3S)-N-(1-(2-クロロフェニル)-2-((3,3-ジフルオロシクロブチル)アミノ)-2-オキソエチル)-2-(4-シアノピリジン-2-イル)-N-(3-フルオロフェニル)-5-メチル-1,2,5-チアジアゾール-3-ホルムアミド1,1-二酸化物
【０４０１】
【化９１】
2019513819.tif 000096
【０４０２】
ステップA：(S)-2-ベンジル-1,2,5-チアジアゾール-3-カルボン酸メチル1,1-二酸化物
【０４０３】
【化９２】
2019513819.tif 000097
【０４０４】
氷浴攪拌下で、(S)-2-t-ブチル-4-メチル-5-ベンジル-1,2,5-チアジアゾール-2,4-ジカルボン酸1,1-二酸化物（2.8 g、7.559 mmol） のジクロロメタン溶液を入れた中にトリフルオロ酢酸（15.0 mL）を加入し、窒素ガス保護下室温下で一晩反応させた。反応終了後、濃縮し、カラムクロマトグラフィーで分離して (S)-2-ベンジル-1,2,5-チアジアゾール-3-カルボン酸メチル1,1-二酸化物（1.54 g、収率75.5%）を得た。
【０４０５】
ステップB：(S)-2-ベンジル-5-メチル-1,2,5-チアジアゾール-3-カルボン酸メチル1,1-二酸化物
【０４０６】
【化９３】
2019513819.tif 000098
【０４０７】
室温攪拌下で、(S)-2-ベンジル-1,2,5-チアジアゾール-3-カルボン酸メチル1,1-二酸化物（600 mg、2.22 mmol）と炭酸カリウム（920 mg、6.66 mmol）のDMF（6.0 mL）溶液を入れた中にヨードメタン（629 mg、4.44 mmol）を加入し、窒素ガス保護で室温下で一晩反応させた。反応終了後、酢酸エチル希釈し、水を加えて反応を停止させ、酢酸エチルで三回抽出し、合併した有機相を塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過して真空で濃縮し、カラムクロマトグラフィーで分離して (S)-2-ベンジル-5-メチル-1,2,5-チアジアゾール-3-カルボン酸メチル1,1-二酸化物（616 mg、収率97.6%）を得た。
【０４０８】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 7.40-7.31 (m, 5H), 4.48 (d, J = 1.2 Hz, 2H), 3.86 (dd, J = 8, 7.6 Hz, 1H), 3.66 (s, 3H), 3.54 (dd, J = 10, 9.6 Hz, 1H), 3.35 (dd, J = 10, 10 Hz, 1H), 2.77 (s, 3H)。
【０４０９】
ステップC：(S)-5-メチル-1,2,5-チアジアゾール-3-カルボン酸メチル1,1-二酸化物
【０４１０】
【化９４】
2019513819.tif 000099
【０４１１】
室温攪拌下で、(S)-2-ベンジル-5-メチル-1,2,5-チアジアゾール-3-カルボン酸メチル1,1-二酸化物（616 mg、2.166 mmol）のジクロロメタン溶液を入れた中に質量含量10%的パラジウムカーボン（300 mg）を加入し、循環水ポンプで10回換気し、水素ガス保護下で室温下で一晩反応させた。反応終了後、濾過し、濃縮し、カラムクロマトグラフィーで分離して (S)-5-メチル-1,2,5-チアジアゾール-3-カルボン酸メチル1,1-二酸化物（342 mg、収率81.4%）を得た。
【０４１２】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 5.19-5.13 (m, 1H), 4.26-4.20 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.63 (dd, J = 10.4, 10.0 Hz, 1H) , 3.55 (dd, J = 10.0, 10.0 Hz, 1H), 2.72 (s, 3H)。
【０４１３】
ステップD：(S)-5-メチル-1,2,5-チアジアゾール-3-カルボン酸1,1-二酸化物
【０４１４】
【化９５】
2019513819.tif 000100
【０４１５】
氷浴攪拌下で、(S)-5-メチル-1,2,5-チアジアゾール-3-カルボン酸メチル1,1-二酸化物（340 mg、1.751 mmol）の10ｍLメタノール/水（体積比が5/1であり）溶液を入れた中に水酸化リチウム一水合物（210 mg、8.755 mmol）を加入し、室温下で一晩反応させた。反応終了後、回転蒸発してメタノールを除去し、4N HClで反応系pHを3より小さくなるまで調整し、酢酸エチルで三回抽出し、合併した有機相を塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過して真空で濃縮し、カラムクロマトグラフィーで分離して (S)-5-メチル-1,2,5-チアジアゾール-3-カルボン酸1,1-二酸化物（315 mg、収率100%）を得た。
【０４１６】
ステップE：(3S)-N-(1-(2-クロロフェニル)-2-((3,3-ジフルオロシクロブチル)アミノ)-2-オキソエチル)-N-(3-フルオロフェニル)-5-メチル-1,2,5-チアジアゾール-3-ホルムアミド1,1-二酸化物
【０４１７】
【化９６】
2019513819.tif 000101
【０４１８】
室温攪拌下で2-クロロベンズアルデヒド（156 mg、1.11 mmol）と3-フルオロアニリン（124 mg、1.11 mmol）をMeOH（6.0 mL）中に30分間混合した。(S)-5-メチル-1,2,5-チアジアゾール-3-カルボン酸1,1-二酸化物（200 mg、1.11 mmol）を添加して反応混合物を10分間攪拌した。その後、1,1-ジフルオロ-4-イソシアニドシクロブタン（130 mg、1.11 mmol）を添加し、室温下で反応混合物を一晩攪拌した。真空で溶媒を除去し、シリカゲルカラムクロマトグラフィーで分離して (3S)-N-(1-(2-クロロフェニル)-2-((3,3-ジフルオロシクロブチル)アミノ)-2-オキソエチル)-N-(3-フルオロフェニル)-5-メチル-1,2,5-チアジアゾール-3-ホルムアミド1,1-二酸化物（240 mg、収率41.0%）を得た。
【０４１９】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 7.63-7.57 (m, 1H), 7.42 (d, J = 8.0 Hz, 0.5H), 7.32 (d, J =7.6 Hz, 0.5H), 7.29-7.20 (m, 1H), 7.14-6.92 (m, 4H), 6.78-6.6 (m, 1H), 6.55 (s, 0.5H), 6.34 (s, 0.5H), 6.14 (d, J = 6.4 Hz, 0.5H), 6.01 (d, J = 6.4 Hz, 0.5H), 5.72-5.52 (m, 1H), 4.35-4.29 (m, 1H), 4.20-4.06 (m, 1H), 3.56-3.41(m, 1H), 3.09-2.80 (m, 3H), 2.66 (s, 3H), 2.61-2.31(m, 2H)。
【０４２０】
m/z = 531[M+H]+。
【０４２１】
ステップF：(3S)-N-(1-(2-クロロフェニル)-2-((3,3-ジフルオロシクロブチル)アミノ)-2-オキソエチル)-2-(4-シアノピリジン-2-イル)-N-(3-フルオロフェニル)-5-メチル-1,2,5-チアジアゾール-3-ホルムアミド1,1-二酸化物
【０４２２】
【化９７】
2019513819.tif 000102
【０４２３】
封管反応装置に (3S)-N-(1-(2-クロロフェニル)-2-((3,3-ジフルオロシクロブチル)アミノ)-2-オキソエチル)-N-(3-フルオロフェニル)-5-メチル-1,2,5-チアジアゾール-3-ホルムアミド1,1-二酸化物（140 mg、0.264 mmol）、2-ブロモ-4-シアノピリジン（91 mg、0.291 mmol）、ヨウ化第1銅（50 mg、0.132 mmol）、N,N’-ジメチルエチレンジアミン（42 mg, 0.264 mmol）と炭酸セシウム（441 mg、0.792 mmol）を加入し、ジオキサン（8 mL）を加入し、窒素ガスで5分間通気し、封管して80℃で一晩反応させ、溶媒を除去し、カラムクロマトグラフィー（PE：EA = 1：1）より (3S)-N-(1-(2-クロロフェニル)-2-((3,3-ジフルオロシクロブチル)アミノ)-2-オキソエチル)-2-(4-シアノピリジン-2-イル)-N-(3-フルオロフェニル)-5-メチル-1,2,5-チアジアゾール-3-ホルムアミド1,1-二酸化物（81 mg、収率48.5%）を得た。
【０４２４】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ = 8.55-8.47 (m, 1H), 7.90-7.65 (m, 1H), 7.51 (d, J = 5.2 Hz, 0.5H), 7.34 (d, J = 6.4 Hz, 0.5H), 7.29-7.16 (m, 4H), 7.14 (m, 4H), 6.75-6.70 (m, 1H), 6.55 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 6.16 (d, J = 12 Hz, 1H), 4.95-4.73 (m, 1H), 4.19-4.11 (m, 1H), 3.53-3.44 (m, 1H), 3.34 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 3.0-2.81 (m, 4H), 2.41-2.31(m, 2H)。
【０４２５】
m/z = 633[M+H]+。
【０４２６】
実施例26：(3S)-N-(1-(2-クロロフェニル)-2-(シクロヘキシルアミノ)-2-オキソエチル)-2-(4-シアノピリジン-2-イル)-N-(3-スルファモイルフェニル)-イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物
【０４２７】
【化９８】
2019513819.tif 000103
【０４２８】
実施例1の中のステップEを参照し、反応原料2,2-ジフルオロシクロブチルイソシアニド、3-アミノ-5-フルオロピリジルと(S)-イソチアゾリジン-3-カルボン酸1,1-二酸化物をそれぞれにシクロヘキシルイソシアニド、3-アミノベンゼンスルホンアミドと(S)-2-(4-シアノピリジン-2-イル)イソチアゾリジン-3-カルボン酸1,1-二酸化物（実施例11のステップBで調製され）に替えて、標題の化合物を得て、収率が36%であった。
【０４２９】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ =8.58 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.14-6.84 (m, 12H), 6.52 (s, 1H), 5.53 (m, 1H), 4.76 (m, 1H), 3.88-3.78 (m, 1H), 3.80-3.65 (m, 1H), 3.39-3.36 (m , 1H), 2.69-2.63 (m, 1H), 2.50-2.42 (m, 1H), 1.95-1.90 (m, 2H), 1.74-1.59 (m, 4H), 1.38-1.24 (m, 2H), 1.17-0.94 (m, 2H)。
【０４３０】
m/z = 671[M+H]+。
【０４３１】
実施例27: 3-((S)-N-((S)-1-(2-クロロフェニル)-2-((3,3-ジフルオロシクロブチル)アミノ)-2-オキソエチル)-2-(4-シアノピリジン-2-イル)-1,1-二酸化イソチアゾリジン-3-ホルムアミド)-5-フルオロピリジル-1-酸化物
【０４３２】
【化９９】
2019513819.tif 000104
【０４３３】
(S)-N-((S)-1-(2-クロロフェニル)-2-((3,3-ジフルオロシクロブチル)アミノ)-2-オキソエチル)-2-(4-シアノピリジン-2-イル)-N-(5-フルオロピリジン-3-イル)-イソチアゾリジン-3-ホルムアミド1,1-二酸化物（50 mg、0.081 mmol、実施例2に調製され）とm-クロロ過安息香酸（28 mg、0.16 mmol）をジクロロメタン（10 mL）に加入し、室温で一晩攪拌した。減圧濃縮して溶媒を除去し、残留物をシリカゲル薄層クロマトグラフィー（EA）で分離し、3-((S)-N-((S)-1-(2-クロロフェニル)-2-((3,3-ジフルオロシクロブチル)アミノ)-2-オキソエチル)-2-(4-シアノピリジン-2-イル)-1,1-二酸化イソチアゾリジン-3-ホルムアミド)-5-フルオロピリジル-1-酸化物（22 mg, 収率43%）を得た。
【０４３４】
1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.72 (s, 0.5H), 8.13 (s, 0.5H), 8.48-8.41 (m, 1H ), 7.94 (s, 1H), 7.80-7.68 (m, 1H), 7.41 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.26-7.15 (m, 4H), 7.05-6.95 (m, 1H), 6.49 (s, 1H), 6.01 (s, 0.5H), 5.90 (s, 0.5H), 4.86-4.82 (m, 1H), 4.34 (s, 1H), 3.78-3.68 (m, 1H), 3.45-3.35 (m, 1H), 3.10-3.00 (m, 2H), 2.61-2.38 (m, 4H)。
【０４３５】
m/z = 635[M+H]+。
【０４３６】
生物活性実験
酵素測定：
【０４３７】
レサズリンは伝統的なレドックス染料であり、酸化還元作用より、蛍光を伴わない青レサズリンからピンク色の蛍光物質であるレソルフィンに還元することができ、レソルフィンは蛍光光度計（Ex=530〜570 nm、Em=590〜620 nm）の相対蛍光単位（RFU）で測定して量化され得る。現在、レサズリンは、細菌、細胞等の生存能力測定及び酸化還元酵素の酵素活性検出に広く使用されている。我々は、補因子NADPHの減少を検出してIDH1mに対する化合物の阻害活性を測定し、補因子NADPHの生成を検出してIDH WTに対する化合物の阻害活性を測定した。化合物をIDH1m及びNADPHとプレインキュベートした後、α-KGを添加して反応を開始させ、線状条件下一定時間で反応させた後、Diaphorase（ジアホラーゼ）及び対応基質Resazurin（レサズリン）を添加して検出した。ジアホラーゼは利用可能な補因子NADPHを減少させることによってIDH1m反応を停止させ、NADPHをNADPに酸化し、レサズリンを高蛍光であるレソルフィンに還元させ、特定の反応時間後に残った補因子NADPHの量を、容易に検出可能な発蛍光団より量化させた。
【０４３８】
化合物をIDH-WTとNADPとをプレインキュベートした後、イソクエン酸、Diaphorase（ジアホラーゼ）及び対応基質Resazurin（レサズリン）を添加して反応を開始させ、線状条件下一定時間で反応させた後、蛍光物質の量を検出した。この実験は、NADPをNADPHに還元させ、NADPHはジアホラーゼの作用下でレサズリンを高蛍光であるレソルフィンに還元させ、検出した発蛍光団より特定の反応時間後に生成した補因子NADPHの量を量化させることで、IDH-WTに対する化合物の阻害効果を計算した。
【０４３９】
具体的な操作方法は次の通りである：2.5 μLの3×勾配で希釈した化合物を384ウェルプレートに加えた後、40 nM IDH1（R132H/R132C）と20 μM NADPHを含有する5 μL反応緩衝液（20 mM Tris-HCl、pH7.5；150 mM NaCl；10 mM MgCl2；0.4 mg/mL BSA（ウシ血清アルブミン）と2 mM DTT（ジチオトレイトール））を添加した。その後、上記測定混合物を23℃で16時間インキュベートした後、2.5 μLの4 mM α-KGを含有する反応緩衝液を添加して反応を開始させた。室温で60分間インキュベートした後、反応緩衝液より調製した停止液混合物（0.4U/ml Diaphoraseと20 μM Resazurin）を5 μL加入し、レサズリンをレソルフィンに転化させ、残りのNADPHの量を測定した。23℃で10分間インキュベートした後、Flexstation 3よりEx535/Em595下で蛍光値を測定した。各化合物が12つの濃度下で、それぞれの酵素活性を測定し、GraFit6.0ソフトウェア(Erithacus Software) を使用してデータを計算し、当該化合物のIC50値を求めた。
【０４４０】
2-HG測定：
【０４４１】
ホスホグリセリン酸デヒドロゲナーゼPHGDHは、2-HGの存在下で、NADをNADPHに還元することができ、NADPHは、ジアホラーゼ及びその基質であるResazurin（レサズリン）によって定量的に測定し得る。
【０４４２】
HT-1080細胞は、IDH1（R132C）突然変異のヒト線維肉腫細胞系であり、U87細胞は、IDH1（R132H）突然変異のヒト神経膠芽腫系であり、10%ウシ胎仔血清、100 units/mLペニシリン、0.1 mg/mLストレプトマイシンを補充したRPMI-1640培地で培養された。
【０４４３】
細胞をトリプシンで消化し、5×105の密度で6ウェルプレートに接種し、37℃のインキュベーターで一晩培養した。翌日、試験化合物（DMSOの最終濃度が0.1%であり）を加入し、引続き24時間培養した。各試料の培養液を吸い取り、1000 rpmで10分間遠心した後、上清を吸い取り、その中の2-HG含量を検出した。更に、細胞をPBS（リン酸緩衝塩溶液）で洗浄した後、トリプシンで消化して細胞を収集し、PBSで1回洗浄した後、細胞内の2-HG含量の測定を行った。
【０４４４】
細胞内の2-HG測定方法は次の通りであり：300 μL反応緩衝液（40 mM Tris-HCl, pH8.5；150 mM NaCl）で細胞を再懸濁し、超音波処理により細胞を破壊処理する。12,000 rpm、4℃で10分間遠心して不溶性物質を除去する。25 μL上清を吸い取り、BCAキットによるタンパク質濃度を測定し、別の200 μL上清を一組の新たな遠心管に移し、各管に4 μLの3M HClを加入し、室温で5分間置き、室温に12,000 rpmで5分間遠心した。100 μL上清を吸い取り、96ウェル「V」底プレートに移し、各ウェルに3.6 μLの2 M Tris base（トリスヒドロキシメチルアミノメタン）を加入し、室温で5分間放置する。12,000 rpmで2分間遠心した。pH試験紙検出により、pHは約8.0に等した。
【０４４５】
2-HGの標準曲線の作成：2-HGストック溶液を反応緩衝液で500 μMに希釈した後、200 μLを吸い取り、2倍の勾配で希釈し、合計10濃度を作製した。以下の操作は上記と同じであり、酸処理及び塩基中和工程を含めていた。
【０４４６】
上記試料、測定細胞試料又は標準品を5×希釈した後、5 μLを取り出し、384ウェルプレートに加え、各ウェルに10 μL測定混合物（8 μM PHGDH（ホスホグリセリン酸デヒドロゲナーゼ）；0.5 mM NAD；0.1U/ml Diaphoraseと10 μM Resazurin）を加入し、23℃で60分間反応させ、Flexstation 3よりEx535/Em595下で蛍光値を測定した。
【０４４７】
相応サンプルのタンパク質濃度を用いて、測定した蛍光値を校正した後に比較した。
【０４４８】
細胞外2-HGの測定方法は以下の通りである：それぞれ 500 μL培養上清を取り出し、各管に10 μLの3M HClを加入し、室温で5分間放置した後、各管ウェルに18 μLの2 M Tris baseを加入し、室温で5分間放置した。12,000 rpmで2分間遠心した。pH試験紙で検出されたpHは約8.0に等した。2-HG標準曲線の作成：2-HGストック溶液を完全培地で500 μMに希釈した後、500 μLを取り出し、2倍の勾配で希釈し、合計10濃度を作製した。以下の操作は上記と同じであり、酸処理及び塩基中和工程を含めていた。上記試料、測定培養上清試料又は標準品を5×希釈した後、5 μLを取り出し、384ウェルプレートに加え、各ウェルに10 μL測定混合物（8 μM PHGDH；0.5 mM NAD；0.1U/mL Diaphoraseと10 μM Resazurin）を加入し、23℃で60分間反応させ、Flexstation 3よりEx535/Em595下で蛍光値を測定した。
【０４４９】
上記に調製したの選択される化合物を、本書に記載した生物学的方法に従って分析し、その結果は以下の通りである：
1. IDH1突然変異体（R132HとR132C）に対する化合物の阻害活性（IC50）を表1に示す。
【０４５０】
【表１】
2019513819.tif 000105
【０４５１】
2. IDH1突然変異を現したHT-1080細胞内の2-HGに対する実施例2の化合物の阻害効果を図1に示す。IDH1突然変異を現したHT-1080細胞外の2-HGに対する実施例2の化合物の阻害効果を図2に示す。
3. IDH1突然変異を現したU87細胞の2-HGに対する実施例2の化合物の阻害効果を図3に示す。
4. IDH1突然変異を現したU87細胞に対する実施例2の化合物の抑制活性（IC50）を表2に示す。
【０４５２】
【表２】
2019513819.tif 000106
【０４５３】
薬物代謝薬物動態実験
【０４５４】
雄性SDラットは、北京維通利華実験動物技術有限公司より提供され、ラットを、グループあたり3匹のグループに分けられ、それぞれ1回の経口投与で測定試料懸濁液（5mg/kg）を胃内投与した。実験の前に動物を一晩禁食させ、禁食時間は、投与前10時間から投与後4時間まででした。投与後0.25、0.5、1、2、4、6、8及び24時間に採血した。小動物用麻酔機を使用してイソフルランで麻酔した後、0.3mLの全血試料を眼底静脈叢から採取し、ヘパリン抗凝固剤チューブに入れ、4℃、4000rpmで5min遠心し、血漿を遠心チューブに移し、分析まで-80℃で保存した。血漿中の試料はタンパク質沈殿法によって抽出され、抽出液をLC-MS/MSにより分析し、HPLC条件は以下の通りである、流速：0.4mL/min；移動相A：水/ギ酸（99.9/0.1,v/v）；移動相B：アセトニトリル/ギ酸（99.9/0.1,v/v）；注入量：5μL；カラム温度：室温；オートサンプラー温度：室温；運行時間：2.5分間。
【０４５５】
実施例12の化合物とAG-120のPKデータを表3に示す：
【０４５６】
【表３】
2019513819.tif 000107
【０４５７】
PKデータから、同じ経口投与量で、実施例12の化合物はAG-120よりも血漿薬物暴露量がはるかに高く、半減期は10.7時間に達し、その薬物動態特性はAG-120よりも著しく優れていることが分かる。
【図１】
2019513819.tif 000125
【図２】
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【図３】
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【国際調査報告】
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