(57)【要約】    本開示の態様は、例えば、癌を有する対象に、プログラム細胞死リガンド１（ＰＤ−Ｌ１）またはプログラム細胞死１（ＰＤ−１）のアンタゴニストと組み合わせて、および／または細胞傷害性Ｔリンパ球関連タンパク質４（ＣＴＬＡ−４）のアンタゴニストと組み合わせて複数のサイトカイン成分を伴う初代細胞由来生物製剤を投与することにより、癌を処置するための方法に関する。本開示の他の態様は、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１のアンタゴニストおよび／またはＣＴＬＡ−４のアンタゴニストでの処置のための対象を特定するか、または対象がＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１のアンタゴニストおよび／またはＣＴＬＡ−４のアンタゴニストに反応性である可能性を評価する方法に関する。
2019524887.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ）癌を有する対象にＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＴＮＦ−αおよびＩＦＮ−γを含む、有効量の初代細胞由来生物製剤を投与すること；および 
ｂ）前記対象に有効量の、プログラム細胞死リガンド１（ＰＤ−Ｌ１）またはプログラム細胞死１（ＰＤ−１）のアンタゴニストを投与すること、 
ここで、前記初代細胞由来生物製剤の投与および前記アンタゴニストの投与が、前記対象において異なる位置で、および／または異なる時間に行われる、 
を含む、対象において癌を処置する方法。 
【請求項２】
前記初代細胞由来生物製剤の少なくとも１回の投与が、前記アンタゴニストの少なくとも１回の投与の前に行われる、請求項１に記載の方法。 
【請求項３】
前記初代細胞由来生物製剤の少なくとも１回の投与が、前記アンタゴニストの少なくとも１回の投与の前に行われ、前記初代細胞由来生物製剤の少なくとも１回のさらなる投与が前記アンタゴニストの少なくとも１回の投与の後に行われる、請求項２に記載の方法。 
【請求項４】
前記アンタゴニストの少なくとも１回の投与が、前記初代細胞由来生物製剤の少なくとも１回の投与の前に行われる、請求項１に記載の方法。 
【請求項５】
前記アンタゴニストの少なくとも１回の投与が、前記初代細胞由来生物製剤の少なくとも１回の投与の前に行われ、前記アンタゴニストの少なくとも１回のさらなる投与が、前記初代細胞由来生物製剤の少なくとも１回の投与の後に行われる、請求項４に記載の方法。 
【請求項６】
前記初代細胞由来生物製剤が皮下投与されるかまたは外リンパ投与され、前記アンタゴニストが静脈内または経口投与される、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。 
【請求項７】
前記初代細胞由来生物製剤が１日１回最長１０日間投与され、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１の前記アンタゴニストが２〜４週間ごとに１回投与される、請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。 
【請求項８】
前記アンタゴニストが、アンチセンスオリゴヌクレオチド、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、低分子、ペプチドまたは抗体である、請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法。 
【請求項９】
前記アンタゴニストが抗体である、請求項８に記載の方法。 
【請求項１０】
前記抗体がヒトまたはヒト化抗体である、請求項９に記載の方法。 
【請求項１１】
前記抗体がＰＤ−Ｌ１に特異的である、請求項９または１０に記載の方法。 
【請求項１２】
前記抗体が、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、ＢＭＳ−９３６５５９およびアベルマブからなる群から選択される、請求項１１に記載の方法。 
【請求項１３】
前記アンタゴニストがＣＡ−１７０である、請求項８に記載の方法。 
【請求項１４】
前記抗体がＰＤ−１に特異的である、請求項９または１０に記載の方法。 
【請求項１５】
前記抗体が、ニボルマブ、ピジリズマブ、ペムブロリズマブ、ＭＥＤＩ−０６８０およびＲＥＧＮ２８１０からなる群から選択される、請求項１４に記載の方法。 
【請求項１６】
前記アンタゴニストがＡＭＰ−２２４である、請求項８に記載の方法。 
【請求項１７】
前記対象が、前記初代細胞由来生物製剤の投与前の前記アンタゴニストでの処置に反応しない、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の方法。 
【請求項１８】
前記対象の腫瘍におけるＰＤ−Ｌ１レベルが、前記初代細胞由来生物製剤の投与後に上昇する、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の方法。 
【請求項１９】
ａ）癌を有する対象に、ＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＴＮＦ−αおよびＩＦＮ−γを含む、有効量の初代細胞由来生物製剤を投与すること；および 
ｂ）前記対象に有効量の、プログラム細胞死リガンド１（ＰＤ−Ｌ１）またはプログラム細胞死１（ＰＤ−１）のアンタゴニスト投与すること、 
ここで、前記アンタゴニストが、ニボルマブ、ピジリズマブ、ペムブロリズマブ、ＭＥＤＩ−０６８０、ＲＥＧＮ２８１０、ＡＭＰ−２２４、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、ＢＭＳ−９３６５５９、アベルマブおよびＣＡ−１７０からなる群から選択される、 
を含む、対象において癌を処置する方法。 
【請求項２０】
前記対象に投与される前記初代細胞由来生物製剤の有効量が、０．４５〜１．３７のＩＬ−２国際単位（ＩＵ）に対するＩＬ−１β  ＩＵの比率、０．１９〜０．３９のＩＬ−２  ＩＵに対するＩＦＮ−γ  ＩＵの比率、０．５３〜１．２６のＩＬ−２  ＩＵに対するＴＮＦ−α  ＩＵの比率、１．１６〜６．０６のＩＬ−２  ＩＵに対するＩＬ−６  ＩＵの比率および０．１５〜０．５１のＩＬ−２  ＩＵに対するＩＬ−８  ＩＵの比率を含む、請求項１〜１９のいずれか一項に記載の方法。 
【請求項２１】
前記対象に投与される前記初代細胞由来生物製剤の有効量が、少なくとも１ＩＵのＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８およびＴＮＦ−αのそれぞれを含む、請求項１〜２０のいずれか一項に記載の方法。 
【請求項２２】
前記対象に投与される前記初代細胞由来生物製剤の有効量が、２２〜６５７国際単位（ＩＵ）または２２０〜６，７００ｐｃｇのＩＬ−１β、２９〜４７８ＩＵまたは１７３０〜２８，１００ｐｃｇのＩＬ−２、１０〜１８５ＩＵまたは５６０〜１０，９００ｐｃｇのＩＦＮ−γ、２９〜６００ＩＵまたは５８０〜１２，０００ｐｃｇのＴＮＦ−α、３４〜２，８９５ＩＵまたは２６０〜２２，１００ｐｃｇのＩＬ−６および５〜２４４ＩＵまたは４，６１０〜２４３，６００のＩＬ−８を含む、請求項１〜２１のいずれか一項に記載の方法。 
【請求項２３】
前記初代細胞由来生物製剤が、ＧＭ−ＣＳＦおよびＧ−ＣＳＦをさらに含む、請求項１〜２２のいずれか一項に記載の方法。 
【請求項２４】
前記対象に、アルキル化剤、代謝拮抗剤、抗生物質および免疫調整剤からなる群から選択される化学阻害剤を投与することをさらに含む、請求項１〜２３のいずれか一項に記載の方法。 
【請求項２５】
前記アルキル化剤がシクロホスファミドである、請求項２４に記載の方法。 
【請求項２６】
前記対象にインドメタシン、イブプロフェン、セレコキシブ、ロフェコキシブおよびそれらの組み合わせからなる群から選択されるＮＳＡＩＤを投与することをさらに含む、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。 
【請求項２７】
前記ＮＳＡＩＤがインドメタシンである、請求項２６に記載の方法。 
【請求項２８】
前記対象に、亜鉛を投与することをさらに含む、請求項１〜２７のいずれか一項に記載の方法。 
【請求項２９】
有効量の細胞傷害性Ｔリンパ球関連タンパク質４（ＣＴＬＡ−４）アンタゴニストを投与することをさらに含む、請求項１〜２８のいずれか一項に記載の方法。 
【請求項３０】
前記ＣＴＬＡ−４アンタゴニストが、アンチセンスオリゴヌクレオチド、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、低分子、ペプチドまたは抗体である、請求項２９に記載の方法。 
【請求項３１】
前記ＣＴＬＡ−４アンタゴニストが抗体である、請求項３０に記載の方法。 
【請求項３２】
前記抗体がヒトまたはヒト化抗体である、請求項３１に記載の方法。 
【請求項３３】
前記抗体が、イピリムマブおよびトレメリムマブからなる群から選択される、請求項３２に記載の方法。 
【請求項３４】
ａ）癌を有し、ＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＴＮＦ−αおよびＩＦＮ−γを含む初代細胞由来生物製剤が投与された対象から得られた腫瘍試料中のＰＤ−Ｌ１レベルを決定すること；および 
ｂ）前記腫瘍試料中の前記ＰＤ−Ｌ１レベルがＰＤ−Ｌ１閾値レベルよりも高い場合、前記対象に有効量のＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１のアンタゴニストを投与すること、 
を含む、処置のために対象を選択する方法。 
【請求項３５】
決定することが、前記ＰＤ−Ｌ１レベルを検出するためのアッセイを行うことを含む、請求項３４に記載の方法。 
【請求項３６】
前記アッセイが、インサイチューハイブリッド形成、ＲＴ−ｑＰＣＲ、マイクロアレイ分析、マルチプレックスＲＮＡ発現分析、ＲＮＡ−ｓｅｑ、免疫組織化学アッセイ、フローサイトメトリー、マルチプレックスタンパク質アッセイおよびウェスタンブロットアッセイからなる群から選択される、請求項３５に記載の方法。 
【請求項３７】
前記腫瘍試料中の前記ＰＤ−Ｌ１レベルが前記腫瘍試料中の細胞膜におけるＰＤ−Ｌ１レベルである、請求項３４〜３６のいずれか一項に記載の方法。 
【請求項３８】
決定することが、免疫組織化学アッセイを行うことを含み、前記ＰＤ−Ｌ１閾値レベルが、前記腫瘍試料中の生存可能な腫瘍細胞の４９％における部分的または完全な細胞膜染色である、請求項３７に記載の方法。 
【請求項３９】
前記決定ステップの前に前記初代細胞由来生物製剤を前記対象に投与することをさらに含む、請求項３４〜３８のいずれか一項に記載の方法。 
【請求項４０】
前記アンタゴニストが、アンチセンスオリゴヌクレオチド、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、低分子、ペプチドまたは抗体である、請求項３４〜３９のいずれか一項に記載の方法。 
【請求項４１】
前記アンタゴニストが抗体である、請求項４０に記載の方法。 
【請求項４２】
前記抗体がヒトまたはヒト化抗体である、請求項４１に記載の方法。 
【請求項４３】
前記抗体がＰＤ−Ｌ１に特異的である、請求項４１または４２に記載の方法。 
【請求項４４】
前記抗体が、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、ＢＭＳ−９３６５５９およびアベルマブからなる群から選択される、請求項４３に記載の方法。 
【請求項４５】
前記アンタゴニストがＣＡ−１７０である、請求項４０に記載の方法。 
【請求項４６】
前記抗体がＰＤ−１に特異的である、請求項４１または４２に記載の方法。 
【請求項４７】
前記抗体が、ニボルマブ、ピジリズマブ、ペムブロリズマブ、ＭＥＤＩ−０６８０およびＲＥＧＮ２８１０からなる群から選択される、請求項４６に記載の方法。 
【請求項４８】
前記アンタゴニストがＡＭＰ−２２４である、請求項４０に記載の方法。 
【請求項４９】
前記対象に投与される前記初代細胞由来生物製剤の有効量が、０．４５〜１．３７のＩＬ−２  ＩＵに対するＩＬ−１β国際単位（ＩＵ）の比率、０．１９〜０．３９のＩＬ−２  ＩＵに対するＩＦＮ−γ  ＩＵの比率、０．５３〜１．２６のＩＬ−２  ＩＵに対するＴＮＦ−α  ＩＵの比率、１．１６〜６．０６のＩＬ−２  ＩＵに対するＩＬ−６  ＩＵの比率および０．１５〜０．５１のＩＬ−２  ＩＵに対するＩＬ−８  ＩＵの比率を含む、請求項３４〜４８のいずれか一項に記載の方法。 
【請求項５０】
前記対象に投与される前記初代細胞由来生物製剤の有効量が、少なくとも１ＩＵのＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８およびＴＮＦ−αのそれぞれを含む、請求項３４〜４９のいずれか一項に記載の方法。 
【請求項５１】
前記初代細胞由来生物製剤が、２２〜６５７国際単位（ＩＵ）または２２０〜６，７００ｐｃｇのＩＬ−１β、２９〜４７８ＩＵまたは１７３０〜２８，１００ｐｃｇのＩＬ−２、１０〜１８５ＩＵまたは５６０〜１０，９００ｐｃｇのＩＦＮ−γ、２９〜６００ＩＵまたは５８０〜１２，０００ｐｃｇのＴＮＦ−α、３４〜２，８９５ＩＵまたは２６０〜２２，１００ｐｃｇのＩＬ−６および５〜２４４ＩＵまたは４，６１０〜２４３，６００のＩＬ−８を含む、請求項３４〜５０のいずれか一項に記載の方法。 
【請求項５２】
前記初代細胞由来生物製剤がＧＭ−ＣＳＦおよびＧ−ＣＳＦをさらに含む、請求項３４〜５１のいずれか一項に記載の方法。 
【請求項５３】
ａ）ＰＤ−Ｌ１閾値レベルを下回る第１のＰＤ−Ｌ１レベルを発現する癌を有する対象にＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＴＮＦ−αおよびＩＦＮ−γを含む初代細胞由来生物製剤を投与すること；および 
ｂ）前記初代細胞由来生物製剤の投与後に前記対象からの腫瘍試料中の第２のＰＤ−Ｌ１レベルを決定すること、 
ここで、前記ＰＤ−Ｌ１閾値レベルを上回る第２のＰＤ−Ｌ１レベルが、前記対象が前記ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１のアンタゴニストに対して反応性であることを示す、 
ことを含む、対象が、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１のアンタゴニストに反応性である可能性を評価する方法。 
【請求項５４】
決定することが、前記第２のＰＤ−Ｌ１レベルを検出するためのアッセイを行うことを含む、請求項５３に記載の方法。 
【請求項５５】
前記アッセイが、インサイチューハイブリッド形成、ＲＴ−ｑＰＣＲ、マイクロアレイ分析、マルチプレックスＲＮＡ発現分析、ＲＮＡ−ｓｅｑ、免疫組織化学アッセイ、フローサイトメトリー、マルチプレックスタンパク質アッセイおよびウェスタンブロットアッセイからなる群から選択される、請求項５４に記載の方法。 
【請求項５６】
前記第２のＰＤ−Ｌ１レベルが、前記腫瘍試料中の細胞膜におけるＰＤ−Ｌ１レベルである、請求項５３〜５５のいずれか一項に記載の方法。 
【請求項５７】
決定することが、免疫組織化学アッセイを行うことを含み、前記ＰＤ−Ｌ１閾値レベルが、前記腫瘍試料中の生存能力のある腫瘍細胞の少なくとも４９％の部分的または完全な細胞膜染色である、請求項５６に記載の方法。 
【請求項５８】
前記癌が、メラノーマ、肺癌（非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）など）、腎臓細胞癌（ＲＣＣ）、前立腺癌、卵巣癌、結直腸癌（ＣＲＣ）、腎臓癌、胃癌、乳癌、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、血液悪性腫瘍（例えば急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、多発性骨髄腫（ＭＭ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、皮膚Ｔ細胞リンパ腫）、膵臓癌、膀胱癌、頭頸部の扁平上皮癌（ＳＣＣＨＮとも呼ばれるＨ＆ＮＳＣＣ）、尿生殖器癌、進行皮膚扁平上皮癌、肝臓転移、中皮腫、胃食道癌、メルケル細胞癌および尿路上皮癌からなる群から選択される、請求項１〜５７のいずれか一項に記載の方法。 
【請求項５９】
ａ）癌を有する対象に、有効量の、ＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＴＮＦ−αおよびＩＦＮ−γを含む初代細胞由来生物製剤を投与すること；および 
ｂ）有効量の細胞傷害性Ｔリンパ球関連タンパク質４（ＣＴＬＡ−４）のアンタゴニストを前記対象に投与すること、 
ここで、前記初代細胞由来生物製剤の投与および前記アンタゴニストの投与が、前記対象の異なる位置でおよび／または異なる時間に行われる、 
を含む、対象において癌を処置する方法。 
【請求項６０】
前記初代細胞由来生物製剤の少なくとも１回の投与が、前記アンタゴニストの少なくとも１回の投与の前に行われる、請求項５９に記載の方法。 
【請求項６１】
前記初代細胞由来生物製剤の少なくとも１回の投与が前記アンタゴニストの少なくとも１回の投与の前に行われ、前記初代細胞由来生物製剤の少なくとも１回のさらなる投与が前記アンタゴニストの少なくとも１回の投与の後に行われる、請求項６０に記載の方法。 
【請求項６２】
前記アンタゴニストの少なくとも１回の投与が、前記初代細胞由来生物製剤の少なくとも１回の投与の前に行われる、請求項６１に記載の方法。 
【請求項６３】
前記アンタゴニストの少なくとも１回の投与が、前記初代細胞由来生物製剤の少なくとも１回の投与の前に行われ、前記アンタゴニストの少なくとも１回のさらなる投与が前記初代細胞由来生物製剤の少なくとも１回の投与の後に行われる、請求項６２に記載の方法。 
【請求項６４】
前記初代細胞由来生物製剤が皮下または外リンパ投与され、前記アンタゴニストが静脈内投与される、請求項５９〜６３のいずれか一項に記載の方法。 
【請求項６５】
前記初代細胞由来生物製剤が１日１回、最長１０日間投与され、前記アンタゴニストが３〜１２週間ごとに１回投与される、請求項５９〜６４のいずれか一項に記載の方法。 
【請求項６６】
前記アンタゴニストがアンチセンスオリゴヌクレオチド、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、低分子、ペプチドまたは抗体である、請求項５９〜６５のいずれか一項に記載の方法。 
【請求項６７】
前記アンタゴニストが抗体である、請求項６６に記載の方法。 
【請求項６８】
前記抗体がヒトまたはヒト化抗体である、請求項６７に記載の方法。 
【請求項６９】
前記抗体がイピリムマブおよびトレメリムマブからなる群から選択される、請求項６８に記載の方法。 
【請求項７０】
前記対象が、前記初代細胞由来生物製剤の投与前に前記アンタゴニストでの処置に反応しない、請求項６９〜６９のいずれか一項に記載の方法。 
【請求項７１】
前記対象の腫瘍中のＣＴＬＡ−４レベルが前記初代細胞由来生物製剤の投与後に上昇する、請求項５９〜７０のいずれか一項に記載の方法。 
【請求項７２】
ａ）癌を有する対象に、有効量の、ＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＴＮＦ−αおよびＩＦＮ−γを含む初代細胞由来生物製剤を投与すること；および 
ｂ）有効量の細胞傷害性Ｔリンパ球関連タンパク質４（ＣＴＬＡ−４）のアンタゴニストを前記対象に投与すること、 
ここで、前記アンタゴニストがイピリムマブおよびトレメリムマブからなる群から選択される、 
を含む、対象において癌を処置する方法。 
【請求項７３】
前記対象に投与される前記初代細胞由来生物製剤の有効量が、０．４５〜１．３７のＩＬ−２  ＩＵに対するＩＬ−１β国際単位（ＩＵ）の比率、０．１９〜０．３９のＩＬ−２  ＩＵに対するＩＦＮ−γ  ＩＵの比率、０．５３〜１．２６のＩＬ−２  ＩＵに対するＴＮＦ−α  ＩＵの比率、１．１６〜６．０６のＩＬ−２  ＩＵに対するＩＬ−６  ＩＵの比率および０．１５〜０．５１のＩＬ−２  ＩＵに対するＩＬ−８  ＩＵの比率を含む、請求項５９〜７２のいずれか一項に記載の方法。 
【請求項７４】
前記対象に投与される前記初代細胞由来生物製剤の有効量が、少なくとも１ＩＵのＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８およびＴＮＦ−αのそれぞれを含む、請求項５９〜７３のいずれか一項に記載の方法。 
【請求項７５】
前記対象に投与される前記初代細胞由来生物製剤の有効量が、２２〜６５７国際単位（ＩＵ）または２２０〜６，７００ｐｃｇのＩＬ−１β、２９〜４７８ＩＵまたは１７３０〜２８，１００ｐｃｇのＩＬ−２、１０〜１８５ＩＵまたは５６０〜１０，９００ｐｃｇのＩＦＮ−γ、２９〜６００ＩＵまたは５８０〜１２，０００ｐｃｇのＴＮＦ−α、３４〜２，８９５ＩＵまたは２６０〜２２，１００ｐｃｇのＩＬ−６および５〜２４４ＩＵまたは４，６１０〜２４３，６００のＩＬ−８を含む、請求項５９〜７４のいずれか一項に記載の方法。 
【請求項７６】
前記初代細胞由来生物製剤が、ＧＭ−ＣＳＦおよびＧ−ＣＳＦをさらに含む、請求項５９〜の７５いずれか一項に記載の方法。 
【請求項７７】
アルキル化剤、代謝拮抗剤、抗生物質および免疫調整剤からなる群から選択される化学阻害剤を前記対象に投与することをさらに含む、請求項５９〜７６のいずれか一項に記載の方法。 
【請求項７８】
前記アルキル化剤がシクロホスファミドである、請求項７７に記載の方法。 
【請求項７９】
インドメタシン、イブプロフェン、セレコキシブ、ロフェコキシブおよびそれらの組み合わせからなる群から選択されるＮＳＡＩＤを前記対象に投与することをさらに含む、請求項５９〜７８のいずれか一項に記載の方法。 
【請求項８０】
前記ＮＳＡＩＤがインドメタシンである、請求項７９に記載の方法。 
【請求項８１】
前記対象に亜鉛を投与することをさらに含む、請求項５９〜８０のいずれか一項に記載の方法。 
【請求項８２】
有効量のＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１アンタゴニストを投与することをさらに含む、請求項５９〜８１のいずれか一項に記載の方法。 
【請求項８３】
前記ＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１アンタゴニストが、アンチセンスオリゴヌクレオチド、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、低分子、ペプチドまたは抗体である、請求項８２に記載の方法。 
【請求項８４】
前記ＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１アンタゴニストが、抗体である、請求項８３に記載の方法。 
【請求項８５】
前記抗体が、ヒトまたはヒト化抗体である、請求項８４に記載の方法。 
【請求項８６】
前記ＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１アンタゴニストが、ニボルマブ、ピジリズマブ、ペムブロリズマブ、ＭＥＤＩ−０６８０、ＲＥＧＮ２８１０、ＡＭＰ−２２４、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、ＢＭＳ−９３６５５９、アベルマブおよびＣＡ−１７０からなる群から選択される、請求項８３に記載の方法。 
【請求項８７】
ａ）癌を有し、ＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＴＮＦ−αおよびＩＦＮ−γを含む初代細胞由来生物製剤が投与された対象から得た腫瘍試料中のＣＴＬＡ−４レベルを決定すること；および 
ｂ）前記腫瘍試料中のＣＴＬＡ−４レベルがＣＴＬＡ−４閾値レベルよりも高い場合、有効量のＣＴＬＡ−４のアンタゴニストを前記対象に投与すること、 
を含む、処置に対する対象を選択する方法。 
【請求項８８】
決定することが、前記ＣＴＬＡ−４レベルを検出するためにアッセイを行うことを含む、請求項８７に記載の方法。 
【請求項８９】
前記アッセイが、インサイチューハイブリッド形成、ＲＴ−ｑＰＣＲ、マイクロアレイ分析、マルチプレックスＲＮＡ発現分析、ＲＮＡ−ｓｅｑ、免疫組織化学アッセイ、フローサイトメトリー、マルチプレックスタンパク質アッセイおよびウェスタンブロットアッセイからなる群から選択される、請求項８８に記載の方法。 
【請求項９０】
前記決定ステップの前に前記対象に前記初代細胞由来生物製剤を投与することをさらに含む、請求項８７〜８９のいずれか一項に記載の方法。 
【請求項９１】
前記アンタゴニストが、アンチセンスオリゴヌクレオチド、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、低分子、ペプチドまたは抗体である、請求項８７〜８９のいずれか一項に記載の方法。 
【請求項９２】
前記アンタゴニストが抗体である、請求項９１に記載の方法。 
【請求項９３】
前記抗体が、ヒトまたはヒト化抗体である、請求項９２に記載の方法。 
【請求項９４】
前記抗体が、イピリムマブおよびトレメリムマブからなる群から選択される、請求項９３に記載の方法。 
【請求項９５】
前記対象に投与される前記初代細胞由来生物製剤の有効量が、０．４５〜１．３７のＩＬ−２  ＩＵに対するＩＬ−１β国際単位（ＩＵ）の比率、０．１９〜０．３９のＩＬ−２  ＩＵに対するＩＦＮ−γ  ＩＵの比率、０．５３〜１．２６のＩＬ−２  ＩＵに対するＴＮＦ−α  ＩＵの比率、１．１６〜６．０６のＩＬ−２  ＩＵに対するＩＬ−６  ＩＵの比率および０．１５〜０．５１のＩＬ−２  ＩＵに対するＩＬ−８  ＩＵの比率を含む、請求項８７〜９４のいずれか一項に記載の方法。 
【請求項９６】
前記対象に投与される前記初代細胞由来生物製剤の有効量が少なくとも１ＩＵのＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８およびＴＮＦ−αのそれぞれを含む、請求項８７〜９５のいずれか一項に記載の方法。 
【請求項９７】
前記初代細胞由来生物製剤が、２２〜６５７国際単位（ＩＵ）または２２０〜６，７００ｐｃｇのＩＬ−１β、２９〜４７８ＩＵまたは１７３０〜２８，１００ｐｃｇのＩＬ−２、１０〜１８５ＩＵまたは５６０〜１０，９００ｐｃｇのＩＦＮ−γ、２９〜６００ＩＵまたは５８０〜１２，０００ｐｃｇのＴＮＦ−α、３４〜２，８９５ＩＵまたは２６０〜２２，１００ｐｃｇのＩＬ−６および５〜２４４ＩＵまたは４，６１０〜２４３，６００のＩＬ−８を含む、請求項８７〜９６のいずれか一項に記載の方法。 
【請求項９８】
前記初代細胞由来生物製剤がＧＭ−ＣＳＦおよびＧ−ＣＳＦをさらに含む、請求項８７〜９７のいずれか一項に記載の方法。 
【請求項９９】
ａ）ＣＴＬＡ−４閾値レベルを下回る第１のＣＴＬＡ−４レベルを発現する癌を有する対象に、ＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＴＮＦ−αおよびＩＦＮ−γを含む初代細胞由来生物製剤を投与すること；および 
ｂ）前記初代細胞由来生物製剤の投与後に前記対象からの腫瘍試料中の第２のＣＴＬＡ−４レベルを決定すること、 
ここで、前記ＣＴＬＡ−４閾値レベルを上回る第２のＣＴＬＡ−４レベルが、前記対象が前記ＣＴＬＡ−４のアンタゴニストに対して反応性であることを示す、 
を含む、対象がＣＴＬＡ−４のアンタゴニストに対して反応性である可能性を評価する方法。 
【請求項１００】
決定することが、前記第２のＣＴＬＡ−４レベルを検出するためにアッセイを行うことを含む、請求項９９に記載の方法。 
【請求項１０１】
前記アッセイが、インサイチューハイブリッド形成、ＲＴ−ｑＰＣＲ、マイクロアレイ分析、マルチプレックスＲＮＡ発現分析、ＲＮＡ−ｓｅｑ、免疫組織化学アッセイ、フローサイトメトリー、マルチプレックスタンパク質アッセイおよびウェスタンブロットアッセイからなる群から選択される、請求項１００に記載の方法。 
【請求項１０２】
前記癌が、メラノーマ、肺癌（非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）など）、腎臓細胞癌（ＲＣＣ）、前立腺癌、卵巣癌、結直腸癌（ＣＲＣ）、腎臓癌、胃癌、乳癌、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、血液悪性腫瘍（例えば急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、多発性骨髄腫（ＭＭ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、皮膚Ｔ細胞リンパ腫）、膵臓癌、膀胱癌、頭頸部の扁平上皮癌、尿生殖器癌、進行皮膚扁平上皮癌、肝臓転移、中皮腫、胃食道癌、メルケル細胞癌および尿路上皮癌からなる群から選択される、請求項５９〜１０１のいずれか一項に記載の方法。 
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照 
本願は、３５Ｕ．Ｓ．Ｃ．§１１９（ｅ）のもと、その全体において参照により内容が本明細書中に組み込まれる２０１６年８月１９日提出の米国仮特許出願第６２／３７７，０５１号明細書の優先権を主張する。 
【背景技術】
【０００２】
ＰＤ−１およびＰＤ−Ｌ１阻害剤は、癌の様々な形態を処置するために使用されるチェックポイント阻害剤である。残念ながら、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤の有効性と相関し、そのために必要とさえされ得る重要なパラメーターの１つであり得る腫瘍微小環境中のＰＤ−Ｌ１発現は、腫瘍タイプにより、および個々の患者間で変動する（例えばＴａｕｂｅら、Ｃｌｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ；２０（１９）：５０６４−７４（２０１４）およびＳｕｎｓｈｉｎｅおよびＴａｕｂｅ，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，２３：３２−３８（２０１５）を参照）。ＣＴＬＡ−４阻害剤は、様々な癌の形態を処置するために開発されているチェックポイント阻害剤でもある。ＣＴＬＡ−４発現は、ＣＴＬＡ−４阻害剤の有効性と相関することも示されている。結果として、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１および／またはＣＴＬＡ−４阻害剤での処置から恩恵を受ける患者の割合を増加させるか、またはこのような阻害剤に対する反応の大きさを向上させることが依然として必要とされている。 
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００３】
本開示の態様は、癌の処置のためなど、プログラム細胞死リガンド１（ＰＤ−Ｌ１）、プログラム細胞死１（ＰＤ−１）および／または細胞傷害性Ｔリンパ球関連タンパク質４（ＣＴＬＡ−４）のアンタゴニストの治療的有効性を促進するために初代細胞由来生物製剤を利用する方法および組成物に関する。本明細書中に記載のように、驚くべきことに、癌患者のリンパ節へのＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＴＮＦ−αおよびＩＦＮ−γを含む初代細胞由来生物製剤の遠位投与の結果、腫瘍内でＰＤ−Ｌ１およびＣＴＬＡ−４の強力な局所的上方制御が起こることが分かった。腫瘍細胞上、浸潤性免疫細胞上および腫瘍微小環境中のＰＤ−Ｌ１発現は、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１アンタゴニスト有効性と強く相関し、そのために必要とされ得る（例えばＴａｕｂｅら、Ｃｌｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ；２０（１９）：５０６４−７４（２０１４）；ＳｕｎｓｈｉｎｅおよびＴａｕｂｅ，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，２３：３２−３８（２０１５）；Ｇａｒｏｎら、Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ，３７２：２０１８−２０２８（２０１５）；Ｓｃｈｍｉｄら、Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｏｎｇｒｅｓｓ，Ａｂｓｔｒａｃｔ  Ｎｕｍｂｅｒ  ３０１７（２０１５）；およびＣａｒｂｏｇｎｉｎら、ＰＬｏＳ  ＯＮＥ  １０（６）：ｅ０１３０１４２．（２０１５）を参照）。ＣＴＬＡ−４発現上昇は、ＣＴＬＡ−４アンタゴニスト有効性の向上と相関することも示されている（例えばＪａｍｉｅｓｏｎら、Ｇｅｎｅ−ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｐｒｏｆｉｌｉｎｇ  ｔｏ  ｐｒｅｄｉｃｔ  ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅｎｅｓｓ  ｔｏ  ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ．  Ｃａｎｃｅｒ  Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒａｐｙ（２０１７）２４：１３４−１４０およびＶａｎ  Ａｌｌｅｎら、Ｇｅｎｏｍｉｃ  ｃｏｒｒｅｌａｔｅｓ  ｏｆ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｔｏ  ＣＴＬＡ−４  ｂｌｏｃｋａｄｅ  ｉｎ  ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ  ｍｅｌａｎｏｍａ．Ｓｃｉｅｎｃｅ（２０１５）３５０（６２５７）：２０７−２１１を参照）。したがって、理論により縛られることを望むものではないが、本明細書中で示されるように、結果として腫瘍それ自身または腫瘍に浸潤する免疫細胞によるＰＤ−Ｌ１の上方制御を引き起こす初代細胞由来生物製剤の投与は、例えばアンタゴニストに反応する患者数を増加させることによって、および／またはアンタゴニスト性の反応をより頑強にすることによって、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１アンタゴニストの有効性を向上させることが予想される。同様に、再び理論により縛られることを望むものではないが、本明細書中で明らかにされるように、結果として腫瘍微小環境内（おそらく腫瘍に浸潤する免疫細胞上）でＣＴＬＡ−４が上方制御される初代細胞由来生物製剤の投与は、例えば、アンタゴニストに反応する患者数を増加させることにより、および／またはアンタゴニスト性反応をより頑強にすることにより、ＣＴＬＡ−４アンタゴニストの有効性を向上させることが予想される。 
【０００４】
いくつかの態様において、本開示は、対象（例えばヒト対象）において癌または前癌病変を処置する方法であって、（ａ）癌または前癌病変を有する対象に、有効量の、ＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＴＮＦ−αおよびＩＦＮ−γ（例えばヒトＩＬ−１β、ヒトＩＬ−２、ヒトＩＬ−６、ヒトＩＬ−８、ヒトＴＮＦ−αおよびヒトＩＦＮ−γ）を含む初代細胞由来生物製剤を投与することと；（ｂ）対象に有効量のプログラム細胞死リガンド１（ＰＤ−Ｌ１）またはプログラム細胞死１（ＰＤ−１）のアンタゴニスト投与することと、を含み、初代細胞由来生物製剤の投与およびアンタゴニストの投与が、対象の異なる位置で、および／または異なる時間に行われる、方法を提供する。 
【０００５】
いくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤の少なくとも１回の投与は、アンタゴニストの少なくとも１回の投与の前に行われる。いくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤の少なくとも１回の投与は、アンタゴニストの少なくとも１回の投与の前に行われ、初代細胞由来生物製剤の少なくとも１回のさらなる投与は、アンタゴニストの少なくとも１回の投与の後に行われる。いくつかの実施形態において、アンタゴニストの少なくとも１回の投与は、初代細胞由来生物製剤の少なくとも１回の投与の前に行われる。いくつかの実施形態において、アンタゴニストの少なくとも１回の投与は、初代細胞由来生物製剤の少なくとも１回の投与の前に行われ、アンタゴニストの少なくとも１回のさらなる投与は、初代細胞由来生物製剤の少なくとも１回の投与の後に行われる。 
【０００６】
いくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤は皮下または外リンパ投与され、アンタゴニストは静脈内または経口投与される。いくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤は、１日１回、１０日間投与され、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１のアンタゴニストは２〜４週間ごとに１回投与される。 
【０００７】
いくつかの実施形態において、アンタゴニストはアンチセンスオリゴヌクレオチド、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、低分子、ペプチドまたは抗体である。いくつかの実施形態において、アンタゴニストは抗体である。いくつかの実施形態において、抗体はヒトまたはヒト化抗体である。いくつかの実施形態において、抗体はＰＤ−Ｌ１に特異的である。いくつかの実施形態において、抗体はアテゾリズマブ、デュルバルマブ、ＢＭＳ−９３６５５９およびアベルマブからなる群から選択される。いくつかの実施形態において、アンタゴニストはＣＡ−１７０である。いくつかの実施形態において、抗体はＰＤ−１に特異的である。いくつかの実施形態において、抗体は、ニボルマブ、ピジリズマブ、ペムブロリズマブ、ＭＥＤＩ−０６８０およびＲＥＧＮ２８１０からなる群から選択される。いくつかの実施形態において、アンタゴニストはＡＭＰ−２２４である。 
【０００８】
いくつかの実施形態において、前記対象は、初代細胞由来生物製剤の投与前には、アンタゴニストでの処置に対して反応性がない。いくつかの実施形態において、対象の腫瘍中のＰＤ−Ｌ１レベルが初代細胞由来生物製剤の投与後に上昇する。 
【０００９】
いくつかの実施形態において、対象に投与される初代細胞由来生物製剤の有効量は、０．４５〜１．３７のＩＬ−２  ＩＵに対するＩＬ−１β国際単位（ＩＵ）の比率、０．１９〜０．３９のＩＬ−２  ＩＵに対するＩＦＮ−γ  ＩＵの比率、０．５３〜１．２６のＩＬ−２  ＩＵに対するＴＮＦ−α  ＩＵの比率、１．１６〜６．０６のＩＬ−２  ＩＵに対するＩＬ−６  ＩＵの比率および０．１５〜０．５１のＩＬ−２  ＩＵに対するＩＬ−８  ＩＵの比率を含む。いくつかの実施形態において、対象に投与される初代細胞由来生物製剤の有効量は、少なくとも１ＩＵのＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８およびＴＮＦ−αのそれぞれおよびＩＦＮ−γを含む。いくつかの実施形態において、対象に投与される初代細胞由来生物製剤の有効量は、少なくとも２ＩＵのＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８およびＴＮＦ−αのそれぞれおよびＩＦＮ−γを含む。いくつかの実施形態において、対象に投与される初代細胞由来生物製剤の有効量は、少なくとも３ＩＵのＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８およびＴＮＦ−αのそれぞれおよびＩＦＮ−γを含む。いくつかの実施形態において、対象に投与される初代細胞由来生物製剤の有効量は、２２〜６５７国際単位（ＩＵ）のＩＬ−１β、２９〜４７８ＩＵのＩＬ−２、１０〜１８５ＩＵのＩＦＮ−γ、２９〜６００ＩＵのＴＮＦ−α、３４〜２，８９５ＩＵのＩＬ−６および５〜２４４ＩＵのＩＬ−８を含む。ＩＵ値は本明細書中に記載のように計算され得る。いくつかの実施形態において、対象に投与される初代細胞由来生物製剤の有効量は、２２０〜６，７００ｐｃｇのＩＬ−１β、１７３０〜２８，１００ｐｃｇのＩＬ−２、５６０〜１０，９００ｐｃｇのＩＦＮ−γ、５８０〜１２，０００ｐｃｇのＴＮＦ−α、２６０〜２２，１００ｐｃｇのＩＬ−６および４，６１０〜２４３，６００ｐｃｇのＩＬ−８を含む。いくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤はＧＭ−ＣＳＦおよびＧ−ＣＳＦをさらに含む。 
【００１０】
いくつかの実施形態において、本方法は、アルキル化剤、代謝拮抗剤、抗生物質および免疫調整剤からなる群から選択される化学阻害剤を対象に投与することをさらに含む。いくつかの実施形態において、アルキル化剤はシクロホスファミドである。いくつかの実施形態において、本方法は、インドメタシン、イブプロフェン、セレコキシブ、ロフェコキシブおよびそれらの組み合わせからなる群から選択されるＮＳＡＩＤを対象に投与することをさらに含む。いくつかの実施形態において、ＮＳＡＩＤはインドメタシンである。本明細書中で提供される方法の何れかのいくつかの実施形態において、本方法は、対象に亜鉛を投与することをさらに含む。 
【００１１】
いくつかの実施形態において、本方法は、有効量の細胞傷害性Ｔリンパ球関連タンパク質４（ＣＴＬＡ−４）アンタゴニストを対象に投与することをさらに含む。いくつかの実施形態において、ＣＴＬＡ−４アンタゴニストは、アンチセンスオリゴヌクレオチド、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、低分子、ペプチドまたは抗体である。いくつかの実施形態において、ＣＴＬＡ−４アンタゴニストは抗体（例えばヒトまたはヒト化抗体）である。いくつかの実施形態において、ＣＴＬＡ−４アンタゴニストは、イピリムマブおよびトレメリムマブからなる群から選択される抗体である。 
【００１２】
いくつかの実施形態において、癌は、メラノーマ、肺癌（非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）またはＳＣＬＣなど）、腎臓細胞癌（ＲＣＣ）、前立腺癌、卵巣癌、結直腸癌（ＣＲＣ）、腎臓癌、胃癌、乳癌、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、血液悪性腫瘍（例えば急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、多発性骨髄腫（ＭＭ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、皮膚Ｔ細胞リンパ腫）、膵臓癌、膀胱癌、頭頸部の扁平上皮癌（ＳＣＣＨＮとも呼ばれるＨ＆ＮＳＣＣ）、尿生殖器癌、進行皮膚扁平上皮癌、肝臓転移、中皮腫、胃食道癌、メルケル細胞癌および尿路上皮癌からなる群から選択される。 
【００１３】
他の態様において、本開示は、対象（例えばヒト対象）において癌または前癌病変を処置する方法であって、（ａ）癌または前癌病変を有する対象に、有効量の、ＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＴＮＦ−αおよびＩＦＮ−γ（例えばヒトＩＬ−１β、ヒトＩＬ−２、ヒトＩＬ−６、ヒトＩＬ−８、ヒトＴＮＦ−αおよびヒトＩＦＮ−γ）を含む初代細胞由来生物製剤を投与することと；（ｂ）対象に有効量のプログラム細胞死リガンド１（ＰＤ−Ｌ１）またはプログラム細胞死１（ＰＤ−１）のアンタゴニストを投与することと、を含み、アンタゴニストが、ニボルマブ、ピジリズマブ、ペムブロリズマブ、ＭＥＤＩ−０６８０、ＲＥＧＮ２８１０、ＡＭＰ−２２４、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、ＢＭＳ−９３６５５９、アベルマブおよびＣＡ−１７０からなる群から選択される、方法を提供する。 
【００１４】
いくつかの実施形態において、対象に投与される初代細胞由来生物製剤の有効量は、０．４５〜１．３７のＩＬ−２国際単位（ＩＵ）に対するＩＬ−１β  ＩＵの比率、０．１９〜０．３９のＩＬ−２  ＩＵに対するＩＦＮ−γ  ＩＵの比率、０．５３〜１．２６のＩＬ−２  ＩＵに対するＴＮＦ−α  ＩＵの比率、１．１６〜６．０６のＩＬ−２  ＩＵに対するＩＬ−６  ＩＵの比率および０．１５〜０．５１のＩＬ−２  ＩＵに対するＩＬ−８  ＩＵの比率を含む。いくつかの実施形態において、対象に投与される初代細胞由来生物製剤の有効量は、少なくとも１ＩＵのＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８およびＴＮＦ−αのそれぞれおよびＩＦＮ−γを含む。いくつかの実施形態において、対象に投与される初代細胞由来生物製剤の有効量は、少なくとも２ＩＵのＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８およびＴＮＦ−αのそれぞれおよびＩＦＮ−γを含む。いくつかの実施形態において、対象に投与される初代細胞由来生物製剤の有効量は、少なくとも３ＩＵのＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８およびＴＮＦ−αのそれぞれおよびＩＦＮ−γを含む。いくつかの実施形態において、対象に投与される初代細胞由来生物製剤の有効量は、２２〜６５７国際単位（ＩＵ）のＩＬ−１β、２９〜４７８ＩＵのＩＬ−２、１０〜１８５ＩＵのＩＦＮ−γ、２９〜６００ＩＵのＴＮＦ−α、３４〜２，８９５ＩＵのＩＬ−６および５〜２４４ＩＵのＩＬ−８を含む。いくつかの実施形態において、対象に投与される初代細胞由来生物製剤の有効量は、２２０〜６，７００ｐｃｇのＩＬ−１β、１７３０〜２８，１００ｐｃｇのＩＬ−２、５６０〜１０，９００ｐｃｇのＩＦＮ−γ、５８０〜１２，０００ｐｃｇのＴＮＦ−α、２６０〜２２，１００ｐｃｇのＩＬ−６および４，６１０〜２４３，６００ｐｃｇのＩＬ−８を含む。いくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤はＧＭ−ＣＳＦおよびＧ−ＣＳＦをさらに含む。 
【００１５】
いくつかの実施形態において、本方法は、アルキル化剤、代謝拮抗剤、抗生物質および免疫調整剤からなる群から選択される化学阻害剤を対象に投与することをさらに含む。いくつかの実施形態において、アルキル化剤はシクロホスファミドである。いくつかの実施形態において、本方法は、インドメタシン、イブプロフェン、セレコキシブ、ロフェコキシブおよびそれらの組み合わせからなる群から選択されるＮＳＡＩＤを対象に投与することをさらに含む。いくつかの実施形態において、ＮＳＡＩＤはインドメタシンである。本明細書中で提供される方法の何れかのいくつかの実施形態において、本方法は、対象に亜鉛を投与することをさらに含む。 
【００１６】
いくつかの実施形態において、本方法は、有効量の細胞傷害性Ｔリンパ球関連タンパク質４（ＣＴＬＡ−４）アンタゴニストを対象に投与することをさらに含む。いくつかの実施形態において、ＣＴＬＡ−４アンタゴニストは、アンチセンスオリゴヌクレオチド、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、低分子、ペプチドまたは抗体である。いくつかの実施形態において、ＣＴＬＡ−４アンタゴニストは、抗体（例えばヒトまたはヒト化抗体）である。いくつかの実施形態において、ＣＴＬＡ−４アンタゴニストは、イピリムマブおよびトレメリムマブからなる群から選択される抗体である。 
【００１７】
いくつかの実施形態において、癌は、メラノーマ、肺癌（非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）または小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）など）、腎臓細胞癌（ＲＣＣ）、前立腺癌、卵巣癌、結直腸癌（ＣＲＣ）、腎臓癌、胃癌、乳癌、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、血液悪性腫瘍（例えば急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、多発性骨髄腫（ＭＭ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、皮膚Ｔ細胞リンパ腫）、膵臓癌、膀胱癌、頭頸部の扁平上皮癌（ＳＣＣＨＮとも呼ばれるＨ＆ＮＳＣＣ）、尿生殖器癌、進行皮膚扁平上皮癌、肝臓転移、中皮腫、胃食道癌、メルケル細胞癌および尿路上皮癌からなる群から選択される。 
【００１８】
また他の態様において、本開示は、処置に対する対象（例えばヒト対象）を選択する方法であって、（ａ）癌または前癌病変を有し、ＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＴＮＦ−αおよびＩＦＮ−γ（例えばヒトＩＬ−１β、ヒトＩＬ−２、ヒトＩＬ−６、ヒトＩＬ−８、ヒトＴＮＦ−αおよびヒトＩＦＮ−γ）を含む初代細胞由来生物製剤が投与された対象から得られた腫瘍試料中のＰＤ−Ｌ１レベルを決定することと；（ｂ）腫瘍試料中のＰＤ−Ｌ１レベルがＰＤ−Ｌ１閾値レベルより高い場合、有効量のＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１のアンタゴニストを対象に投与することと、を含む、方法を提供する。 
【００１９】
いくつかの実施形態において、決定することは、ＰＤ−Ｌ１レベルを検出するためにアッセイを行うことを含む。いくつかの実施形態において、本アッセイは、インサイチューハイブリッド形成、ＲＴ−ｑＰＣＲ、マイクロアレイ分析、マルチプレックスＲＮＡ発現分析、ＲＮＡ−ｓｅｑ、免疫組織化学アッセイ、フローサイトメトリー、マルチプレックスタンパク質アッセイおよびウェスタンブロットアッセイからなる群から選択される。いくつかの実施形態において、腫瘍試料中のＰＤ−Ｌ１レベルは、腫瘍試料中の細胞膜（例えば腫瘍細胞膜、免疫浸潤細胞膜および／または間質細胞膜）におけるＰＤ−Ｌ１レベルである。いくつかの実施形態において、決定することは、免疫組織化学アッセイを行うことを含み、ＰＤ−Ｌ１閾値レベルは、腫瘍試料中の生存能力のある腫瘍細胞の４９％における部分的または完全な細胞膜染色である。いくつかの実施形態において、本方法は、投与ステップ前に初代細胞由来生物製剤を対象に投与することをさらに含む。 
【００２０】
いくつかの実施形態において、アンタゴニストは、アンチセンスオリゴヌクレオチド、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、低分子、ペプチドまたは抗体である。いくつかの実施形態において、アンタゴニストは抗体である。いくつかの実施形態において、抗体はヒトまたはヒト化抗体である。いくつかの実施形態において、抗体はＰＤ−Ｌ１に特異的である。いくつかの実施形態において、抗体は、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、ＢＭＳ−９３６５５９およびアベルマブからなる群から選択される。いくつかの実施形態において、アンタゴニストはＣＡ−１７０である。いくつかの実施形態において、抗体はＰＤ−１に特異的である。いくつかの実施形態において、抗体は、ニボルマブ、ピジリズマブ、ペムブロリズマブ、ＭＥＤＩ−０６８０およびＲＥＧＮ２８１０からなる群から選択される。いくつかの実施形態において，アンタゴニストはＡＭＰ−２２４である。 
【００２１】
いくつかの実施形態において、対象に投与される初代細胞由来生物製剤の有効量は、０．４５〜１．３７のＩＬ−２  ＩＵに対するＩＬ−１β国際単位（ＩＵ）の比率、０．１９〜０．３９のＩＬ−２  ＩＵに対するＩＦＮ−γ  ＩＵの比率、０．５３〜１．２６のＩＬ−２  ＩＵに対するＴＮＦ−α  ＩＵの比率、１．１６〜６．０６のＩＬ−２  ＩＵに対するＩＬ−６  ＩＵの比率および０．１５〜０．５１のＩＬ−２  ＩＵに対するＩＬ−８  ＩＵの比率を含む。いくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤は、少なくとも１ＩＵのＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８およびＴＮＦ−αのそれぞれおよびＩＦＮ−γを含む。いくつかの実施形態において、対象に投与される初代細胞由来生物製剤の有効量は、少なくとも２ＩＵのＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８およびＴＮＦ−αのそれぞれおよびＩＦＮ−γを含む。いくつかの実施形態において、対象に投与される初代細胞由来生物製剤の有効量は、少なくとも３ＩＵのＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８およびＴＮＦ−αのそれぞれおよびＩＦＮ−γを含む。いくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤は、２２〜６５７国際単位（ＩＵ）のＩＬ−１β、２９〜４７８ＩＵのＩＬ−２、１０〜１８５ＩＵのＩＦＮ−γ、２９〜６００ＩＵのＴＮＦ−α、３４〜２，８９５ＩＵのＩＬ−６および５〜２４４ＩＵのＩＬ−８を含む。いくつかの実施形態において、対象に投与される初代細胞由来生物製剤の有効量は、２２０〜６，７００ｐｃｇのＩＬ−１β、１７３０〜２８，１００ｐｃｇのＩＬ−２、５６０〜１０，９００ｐｃｇのＩＦＮ−γ、５８０〜１２，０００ｐｃｇのＴＮＦ−α、２６０〜２２，１００ｐｃｇのＩＬ−６および４，６１０〜２４３，６００ｐｃｇのＩＬ−８を含む。いくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤はＧＭ−ＣＳＦおよびＧ−ＣＳＦをさらに含む。 
【００２２】
いくつかの実施形態において、癌は、メラノーマ、肺癌（非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）およびＳＣＬＣなど）、腎臓細胞癌（ＲＣＣ）、前立腺癌、卵巣癌、結直腸癌（ＣＲＣ）、腎臓癌、胃癌、乳癌、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、血液悪性腫瘍（例えば急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、多発性骨髄腫（ＭＭ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、皮膚Ｔ細胞リンパ腫）、膵臓癌、膀胱癌、頭頸部の扁平上皮癌（ＳＣＣＨＮとも呼ばれるＨ＆ＮＳＣＣ）、尿生殖器癌、進行皮膚扁平上皮癌、肝臓転移、中皮腫、胃食道癌、メルケル細胞癌および尿路上皮癌からなる群から選択される。 
【００２３】
他の態様において、本開示は、対象（例えばヒト対象）がＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１のアンタゴニストに反応性である可能性を評価する方法であって、（ａ）ＰＤ−Ｌ１閾値レベルを下回る第１のＰＤ−Ｌ１レベルを発現する癌または前癌病変を有する対象に、ＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＴＮＦ−αおよびＩＦＮ−γ（例えばヒトＩＬ−１β、ヒトＩＬ−２、ヒトＩＬ−６、ヒトＩＬ−８、ヒトＴＮＦ−αおよびヒトＩＦＮ−γ）を含む初代細胞由来生物製剤を投与することと；（ｂ）初代細胞由来生物製剤の投与後に対象からの腫瘍試料中の第２のＰＤ−Ｌ１レベルを決定することと、を含み、ＰＤ−Ｌ１閾値レベルを上回る第２のＰＤ−Ｌ１レベルが、対象がＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１のアンタゴニストに対して反応性であることを示す、方法を提供する。 
【００２４】
いくつかの実施形態において、決定することは、第２のＰＤ−Ｌ１レベルを検出するためにアッセイを行うことを含む。いくつかの実施形態において、アッセイは、インサイチューハイブリッド形成、ＲＴ−ｑＰＣＲ、マイクロアレイ分析、マルチプレックスＲＮＡ発現分析、ＲＮＡ−ｓｅｑ、免疫組織化学アッセイ、フローサイトメトリー、マルチプレックスタンパク質アッセイおよびウェスタンブロットアッセイからなる群から選択される。いくつかの実施形態において、第２のＰＤ−Ｌ１レベルは、腫瘍試料中の細胞膜（例えば腫瘍細胞膜、免疫浸潤細胞膜および／または間質細胞膜）におけるＰＤ−Ｌ１レベルである。いくつかの実施形態において、決定することは、免疫組織化学アッセイを行うことを含み、ＰＤ−Ｌ１閾値レベルは、腫瘍試料中の生存能力のある腫瘍細胞の少なくとも４９％の部分的または完全な細胞膜染色である。 
【００２５】
いくつかの実施形態において、癌は、メラノーマ、肺癌（非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）またはＳＣＬＣなど）、腎臓細胞癌（ＲＣＣ）、前立腺癌、卵巣癌、結直腸癌（ＣＲＣ）、腎臓癌、胃癌、乳癌、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、血液悪性腫瘍（例えば急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、多発性骨髄腫（ＭＭ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、皮膚Ｔ細胞リンパ腫）、膵臓癌、膀胱癌、頭頸部の扁平上皮癌（ＳＣＣＨＮとも呼ばれるＨ＆ＮＳＣＣ）、尿生殖器癌、進行皮膚扁平上皮癌、肝臓転移、中皮腫、胃食道癌、メルケル細胞癌および尿路上皮癌からなる群から選択される。 
【００２６】
また他の態様において、本開示は、対象（例えばヒト対象）において癌を処置する方法であって、癌を有する対象に、有効量の、ＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＴＮＦ−αおよびＩＦＮ−γ（例えばヒトＩＬ−１β、ヒトＩＬ−２、ヒトＩＬ−６、ヒトＩＬ−８、ヒトＴＮＦ−αおよびヒトＩＦＮ−γ）を含む初代細胞由来生物製剤を投与することと；有効量の細胞傷害性Ｔリンパ球関連タンパク質４（ＣＴＬＡ−４）のアンタゴニストを対象に投与することと、を含み、初代細胞由来生物製剤の投与およびアンタゴニストの投与が、対象の異なる位置で、および／または異なる時間に行われる、方法を提供する。 
【００２７】
いくつかの実施形態において、前記初代細胞由来生物製剤の少なくとも１回の投与は、アンタゴニストの少なくとも１回の投与の前に行われる。いくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤の少なくとも１回の投与は、アンタゴニストの少なくとも１回の投与の前に行われ、初代細胞由来生物製剤の少なくとも１回のさらなる投与は、アンタゴニストの少なくとも１回の投与の後に行われる。いくつかの実施形態において、アンタゴニストの少なくとも１回の投与は、初代細胞由来生物製剤の少なくとも１回の投与の前に行われる。いくつかの実施形態において、アンタゴニストの少なくとも１回の投与は、初代細胞由来生物製剤の少なくとも１回の投与の前に行われ、アンタゴニストの少なくとも１回のさらなる投与は、初代細胞由来生物製剤の少なくとも１回の投与の後に行われる。いくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤は皮下または外リンパ投与され、アンタゴニストは静脈内投与される。いくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤は、１日１回、最長１０日間投与され、アンタゴニストは３〜１２週間ごとに１回投与される。 
【００２８】
いくつかの実施形態において、ＣＴＬＡ−４アンタゴニストは、アンチセンスオリゴヌクレオチド、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、低分子、ペプチドまたは抗体である。いくつかの実施形態において、アンタゴニストは抗体である。いくつかの実施形態において、抗体はヒトまたはヒト化抗体である。いくつかの実施形態において、抗体はイピリムマブおよびトレメリムマブからなる群から選択される。 
【００２９】
いくつかの実施形態において、対象は、初代細胞由来生物製剤の投与前に、アンタゴニストでの処置に反応しない。いくつかの実施形態において、対象の腫瘍におけるＣＴＬＡ−４レベルが初代細胞由来生物製剤の投与後に上昇する。 
【００３０】
いくつかの実施形態において、対象に投与される初代細胞由来生物製剤の有効量は、０．４５〜１．３７のＩＬ−２  ＩＵに対するＩＬ−１β国際単位（ＩＵ）の比率、０．１９〜０．３９のＩＬ−２  ＩＵに対するＩＦＮ−γ  ＩＵの比率、０．５３〜１．２６のＩＬ−２  ＩＵに対するＴＮＦ−α  ＩＵの比率、１．１６〜６．０６のＩＬ−２  ＩＵに対するＩＬ−６  ＩＵの比率および０．１５〜０．５１のＩＬ−２  ＩＵに対するＩＬ−８  ＩＵの比率を含む。いくつかの実施形態において、対象に投与される初代細胞由来生物製剤の有効量は、少なくとも１ＩＵのＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８およびＴＮＦ−αのそれぞれを含む。いくつかの実施形態において、対象に投与される初代細胞由来生物製剤の有効量は、２２〜６５７国際単位（ＩＵ）または２２０〜６，７００ｐｃｇのＩＬ−１β、２９〜４７８ＩＵまたは１７３０〜２８，１００ｐｃｇのＩＬ−２、１０〜１８５ＩＵまたは５６０〜１０，９００ｐｃｇのＩＦＮ−γ、２９〜６００ＩＵまたは５８０〜１２，０００ｐｃｇのＴＮＦ−α、３４〜２，８９５ＩＵまたは２６０〜２２，１００ｐｃｇのＩＬ−６および５〜２４４ＩＵまたは４，６１０〜２４３，６００のＩＬ−８を含む。いくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤はＧＭ−ＣＳＦおよびＧ−ＣＳＦをさらに含む。 
【００３１】
いくつかの実施形態において、本方法は、アルキル化剤、代謝拮抗剤、抗生物質および免疫調整剤からなる群から選択される化学阻害剤を対象に投与することをさらに含む。いくつかの実施形態において、アルキル化剤はシクロホスファミドである。いくつかの実施形態において、本方法は、インドメタシン、イブプロフェン、セレコキシブ、ロフェコキシブおよびそれらの組み合わせからなる群から選択されるＮＳＡＩＤを対象に投与することをさらに含む。いくつかの実施形態において、ＮＳＡＩＤはインドメタシンである。いくつかの実施形態において、本方法は、対象に亜鉛を投与することをさらに含む。 
【００３２】
いくつかの実施形態において、本方法は、有効量のＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１アンタゴニストを投与することをさらに含む。いくつかの実施形態において、ＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１アンタゴニストは、アンチセンスオリゴヌクレオチド、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、低分子、ペプチドまたは抗体である。いくつかの実施形態において、ＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１アンタゴニストは抗体である。いくつかの実施形態において、抗体はヒトまたはヒト化抗体である。いくつかの実施形態において、ＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１アンタゴニストは、ニボルマブ、ピジリズマブ、ペムブロリズマブ、ＭＥＤＩ−０６８０、ＲＥＧＮ２８１０、ＡＭＰ−２２４、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、ＢＭＳ−９３６５５９、アベルマブおよびＣＡ−１７０からなる群から選択される。 
【００３３】
いくつかの実施形態において、癌は、メラノーマ、肺癌（非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）またはＳＣＬＣなど）、腎臓細胞癌（ＲＣＣ）、前立腺癌、卵巣癌、結直腸癌（ＣＲＣ）、腎臓癌、胃癌、乳癌、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、血液悪性腫瘍（例えば急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、多発性骨髄腫（ＭＭ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、皮膚Ｔ細胞リンパ腫）、膵臓癌、膀胱癌、頭頸部の扁平上皮癌、尿生殖器癌、進行皮膚扁平上皮癌、肝臓転移、中皮腫、胃食道癌、メルケル細胞癌および尿路上皮癌からなる群から選択される。 
【００３４】
別の態様において、本開示は、対象（例えばヒト対象）において癌を処置する方法であって、癌を有する対象にＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＴＮＦ−αおよびＩＦＮ−γ（例えばヒトＩＬ−１β、ヒトＩＬ−２、ヒトＩＬ−６、ヒトＩＬ−８、ヒトＴＮＦ−αおよびヒトＩＦＮ−γ）を含む有効量の初代細胞由来生物製剤を投与することと；有効量のＣＴＬＡ−４のアンタゴニストを対象に投与することとを含み、アンタゴニストがイピリムマブおよびトレメリムマブからなる群から選択される、方法を提供する。 
【００３５】
いくつかの実施形態において、対象に投与される初代細胞由来生物製剤の有効量は、０．４５〜１．３７のＩＬ−２  ＩＵに対するＩＬ−１β国際単位（ＩＵ）の比率、０．１９〜０．３９のＩＬ−２  ＩＵに対するＩＦＮ−γ  ＩＵの比率、０．５３〜１．２６のＩＬ−２  ＩＵに対するＴＮＦ−α  ＩＵの比率、１．１６〜６．０６のＩＬ−２  ＩＵに対するＩＬ−６  ＩＵの比率および０．１５〜０．５１のＩＬ−２  ＩＵに対するＩＬ−８  ＩＵの比率を含む。いくつかの実施形態において、対象に投与される初代細胞由来生物製剤の有効量は、少なくとも１ＩＵのＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８およびＴＮＦ−αのそれぞれを含む。いくつかの実施形態において、対象に投与される初代細胞由来生物製剤の有効量は、２２〜６５７国際単位（ＩＵ）または２２０〜６，７００ｐｃｇのＩＬ−１β、２９〜４７８ＩＵまたは１７３０〜２８，１００ｐｃｇのＩＬ−２、１０〜１８５ＩＵまたは５６０〜１０，９００ｐｃｇのＩＦＮ−γ、２９〜６００ＩＵまたは５８０〜１２，０００ｐｃｇのＴＮＦ−α、３４〜２，８９５ＩＵまたは２６０〜２２，１００ｐｃｇのＩＬ−６および５〜２４４ＩＵまたは４，６１０〜２４３，６００のＩＬ−８を含む。いくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤はＧＭ−ＣＳＦおよびＧ−ＣＳＦをさらに含む。 
【００３６】
いくつかの実施形態において、本方法は、アルキル化剤、代謝拮抗剤、抗生物質および免疫調整剤からなる群から選択される化学阻害剤を対象に投与することをさらに含む。いくつかの実施形態において、アルキル化剤はシクロホスファミドである。いくつかの実施形態において、本方法は、インドメタシン、イブプロフェン、セレコキシブ、ロフェコキシブおよびそれらの組み合わせからなる群から選択されるＮＳＡＩＤを対象に投与することをさらに含む。いくつかの実施形態において、ＮＳＡＩＤはインドメタシンである。いくつかの実施形態において、本方法は対象に亜鉛を投与することをさらに含む。 
【００３７】
いくつかの実施形態において、本方法は、有効量のＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１アンタゴニストを投与することをさらに含む。いくつかの実施形態において、ＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１アンタゴニストは、アンチセンスオリゴヌクレオチド、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、低分子、ペプチドまたは抗体である。いくつかの実施形態において、ＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１アンタゴニストは抗体である。いくつかの実施形態において、抗体はヒトまたはヒト化抗体である。いくつかの実施形態において、ＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１アンタゴニストは、ニボルマブ、ピジリズマブ、ペムブロリズマブ、ＭＥＤＩ−０６８０、ＲＥＧＮ２８１０、ＡＭＰ−２２４、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、ＢＭＳ−９３６５５９、アベルマブおよびＣＡ−１７０からなる群から選択される。 
【００３８】
いくつかの実施形態において、癌は、メラノーマ、肺癌（非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）またはＳＣＬＣなど）、腎臓細胞癌（ＲＣＣ）、前立腺癌、卵巣癌、結直腸癌（ＣＲＣ）、腎臓癌、胃癌、乳癌、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、血液悪性腫瘍（例えば急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、多発性骨髄腫（ＭＭ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、皮膚Ｔ細胞リンパ腫）、膵臓癌、膀胱癌、頭頸部の扁平上皮癌、尿生殖器癌、進行皮膚扁平上皮癌、肝臓転移、中皮腫、胃食道癌、メルケル細胞癌および尿路上皮癌からなる群から選択される。 
【００３９】
また他の態様において、本開示は、処置に対する対象（例えばヒト対象）を選択する方法であって、癌を有し、ＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＴＮＦ−αおよびＩＦＮ−γ（例えばヒトＩＬ−１β、ヒトＩＬ−２、ヒトＩＬ−６、ヒトＩＬ−８、ヒトＴＮＦ−αおよびヒトＩＦＮ−γ）を含む初代細胞由来生物製剤が投与された対象から得られた腫瘍試料中のＣＴＬＡ−４レベルを決定することと；腫瘍試料中のＣＴＬＡ−４レベルがＣＴＬＡ−４閾値レベルよりも高い場合、有効量のＣＴＬＡ−４のアンタゴニストを対象に投与することと、を含む方法を提供する。いくつかの実施形態において、決定することは、ＣＴＬＡ−４レベルを検出するためにアッセイを行うことを含む。いくつかの実施形態において、アッセイは、インサイチューハイブリッド形成、ＲＴ−ｑＰＣＲ、マイクロアレイ分析、マルチプレックスＲＮＡ発現分析、ＲＮＡ−ｓｅｑ、免疫組織化学アッセイ、フローサイトメトリー、マルチプレックスタンパク質アッセイおよびウェスタンブロットアッセイからなる群から選択される。 
【００４０】
いくつかの実施形態において、本方法は、決定ステップ前に初代細胞由来生物製剤を対象に投与することをさらに含む。いくつかの実施形態において、アンタゴニストはアンチセンスオリゴヌクレオチド、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、低分子、ペプチドまたは抗体である。いくつかの実施形態において、アンタゴニストは抗体である。いくつかの実施形態において、抗体はヒトまたはヒト化抗体である。いくつかの実施形態において、抗体はイピリムマブおよびトレメリムマブからなる群から選択される。 
【００４１】
いくつかの実施形態において、対象に投与される初代細胞由来生物製剤の有効量は、０．４５〜１．３７のＩＬ−２国際単位（ＩＵ）に対するＩＬ−１β  ＩＵの比率、０．１９〜０．３９のＩＬ−２  ＩＵに対するＩＦＮ−γ  ＩＵの比率、０．５３〜１．２６のＩＬ−２  ＩＵに対するＴＮＦ−α  ＩＵの比率、１．１６〜６．０６のＩＬ−２  ＩＵに対するＩＬ−６  ＩＵの比率および０．１５〜０．５１のＩＬ−２  ＩＵに対するＩＬ−８  ＩＵの比率を含む。いくつかの実施形態において、対象に投与される初代細胞由来生物製剤の有効量は、少なくとも１ＩＵのＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８およびＴＮＦ−αのそれぞれを含む。いくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤は、２２〜６５７国際単位（ＩＵ）または２２０〜６，７００ｐｃｇのＩＬ−１β、２９〜４７８ＩＵまたは１７３０〜２８，１００ｐｃｇのＩＬ−２、１０〜１８５ＩＵまたは５６０〜１０，９００ｐｃｇのＩＦＮ−γ、２９〜６００ＩＵまたは５８０〜１２，０００ｐｃｇのＴＮＦ−α、３４〜２，８９５ＩＵまたは２６０〜２２，１００ｐｃｇのＩＬ−６および５〜２４４ＩＵまたは４，６１０〜２４３，６００のＩＬ−８を含む。いくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤はＧＭ−ＣＳＦおよびＧ−ＣＳＦをさらに含む。 
【００４２】
いくつかの実施形態において、癌は、メラノーマ、肺癌（非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）またはＳＣＬＣなど）、腎臓細胞癌（ＲＣＣ）、前立腺癌、卵巣癌、結直腸癌（ＣＲＣ）、腎臓癌、胃癌、乳癌、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、血液悪性腫瘍（例えば急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、多発性骨髄腫（ＭＭ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、皮膚Ｔ細胞リンパ腫）、膵臓癌、膀胱癌、頭頸部の扁平上皮癌、尿生殖器癌、進行皮膚扁平上皮癌、肝臓転移、中皮腫、胃食道癌、メルケル細胞癌および尿路上皮癌からなる群から選択される。 
【００４３】
他の態様において、対象（例えばヒト対象）がＣＴＬＡ−４のアンタゴニストに対して反応性である可能性を評価する方法であって、ＣＴＬＡ−４閾値レベルを下回る第１のＣＴＬＡ−４レベルを発現する癌を有する対象にＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＴＮＦ−αおよびＩＦＮ−γ（例えばヒトＩＬ−１β、ヒトＩＬ−２、ヒトＩＬ−６、ヒトＩＬ−８、ヒトＴＮＦ−αおよびヒトＩＦＮ−γ）を含む初代細胞由来生物製剤を投与することと；初代細胞由来生物製剤の投与後に対象からの腫瘍試料中の第２のＣＴＬＡ−４レベルを決定することと、を含み、ＣＴＬＡ−４閾値レベルを上回る第２のＣＴＬＡ−４レベルが、対象がＣＴＬＡ−４のアンタゴニストに対して反応性であることを示す方法である。いくつかの実施形態において、決定することは、第２のＣＴＬＡ−４レベルを検出するためにアッセイを行うことを含む。いくつかの実施形態において、アッセイは、インサイチューハイブリッド形成、ＲＴ−ｑＰＣＲ、マイクロアレイ分析、マルチプレックスＲＮＡ発現分析、ＲＮＡ−ｓｅｑ、免疫組織化学アッセイ、フローサイトメトリー、マルチプレックスタンパク質アッセイおよびウェスタンブロットアッセイからなる群から選択される。いくつかの実施形態において、癌は、メラノーマ、肺癌（非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）またはＳＣＬＣなど）、腎臓細胞癌（ＲＣＣ）、前立腺癌、卵巣癌、結直腸癌（ＣＲＣ）、腎臓癌、胃癌、乳癌、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、血液悪性腫瘍（例えば急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、多発性骨髄腫（ＭＭ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、皮膚Ｔ細胞リンパ腫）、膵臓癌、膀胱癌、頭頸部の扁平上皮癌、尿生殖器癌、進行皮膚扁平上皮癌、肝臓転移、中皮腫、胃食道癌、メルケル細胞癌および尿路上皮癌からなる群から選択される。 
【００４４】
上記で提供される方法の何れかのいくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤は、本明細書中に記載のようなサイトカイン（例えばＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＴＮＦ−αおよびＩＦＮ−γを含む）の組み合わせで置き換えられ得、これらは、一緒に（サイトカイン混合物など）または別個に投与され得る。 
【００４５】
次の図面は、本明細書の一部を形成し、本開示のある一定の態様をさらに明らかにするために含まれ、本明細書中で与えられる具体的な実施形態の詳細の記載と組み合わせてこれらの図面の１つ以上を参照することによって、より良好に理解され得る。 
【図面の簡単な説明】
【００４６】
【図１】図１は、実施例１に記載の初代細胞由来生物製剤治療計画での処置前（生検）および初代細胞由来生物製剤治療計画での処置後（切除）の患者からの腫瘍切片の一連の写真である。ＣＤ６８、ＣＤ８、ＣＤ４、ＣＤ８／ＦＯＸＰ３およびＣＤ４／ＦＯＸＰ３を含むリンパ球バイオマーカーに対する抗体で腫瘍切片を染色する。図１は、切除試料中により多くの染色があることを示しており、このことから、処置後の腫瘍へのＣＤ４およびＣＤ８Ｔ細胞の両方のリンパ球浸潤が示唆される。
【図２】図２は、実施例１に記載の初代細胞由来生物製剤治療計画（手術前）で処置した７名の患者の処置後のＰＤ−Ｌ１発現の平均膜強度の差異を示すグラフである。各バーは１名の患者を示す。Ｙ軸は、初代細胞由来生物製剤での処置前後の平均ＰＤ−Ｌ１膜強度の変化を示す。図２は、４名の患者において初代細胞由来生物製剤での処置後にＰＤ−Ｌ１の発現が増加したことを示す。
【図３】図３は、実施例１に記載の初代細胞由来生物製剤治療計画（手術前）で処置した７名の患者の処置後のＣＴＬＡ−４のｍＲＮＡ発現レベルの変化を示すグラフである。各バーは１名の患者を示す。Ｙ軸は、初代細胞由来生物製剤での処置前後のＣＴＬＡ−４ｍＲＮＡ発現レベルの変化を示す。図３は、５名の患者において初代細胞由来生物製剤での処置後にＣＴＬＡ−４発現が増加したことを示す。
【発明を実施するための形態】
【００４７】
本開示は、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１アンタゴニストおよび／またはＣＴＬＡ−４アンタゴニストに対する治療反応を誘導および／または促進するために、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１アンタゴニストおよび／またはＣＴＬＡ−４アンタゴニストでの処置に対して対象を反応性にするために、またはＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１アンタゴニストおよび／またはＣＴＬＡ−４アンタゴニストでの処置に対する対象を選択するために、初代細胞由来生物製剤を利用する組成物および方法に関する。 
【００４８】
初代細胞由来生物製剤 
いくつかの態様において、本開示は、例えば本明細書中に記載のような方法または組成物における、初代細胞由来生物製剤の使用に関する。本明細書中で使用される場合、「初代細胞由来生物製剤」という用語は、初代細胞、例えばマイトジェンおよび４−アミノキノロン（ａｍｉｎｏｑｕｉｎｏｌｏｎｅ）抗生物質で刺激されたヒト単核細胞由来であるかまたはそこから得られる、複数のサイトカイン成分、好ましくは非組み換えサイトカインを含む生物製剤組成物である。代表的な初代細胞由来生物製剤はＩＲＸ−２である（例えば、それぞれがそれらの全体において参照により本明細書中で組み込まれる、表１におけるＩＲＸ−２の代表的なバッチおよび米国特許第８，４７０，５６２号明細書に記載のようなＩＲＸ−２を記載する、Ｅｇａｎら（２００７）Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ  ３０（６）：６２４−６３３を参照）。ＩＲＸ−２は、精製ヒト白血球細胞（単核細胞）をフィトヘマグルチニン（ＰＨＡ）およびシプロフロキサシンで刺激することにより産生される初代細胞由来生物製剤である。ＩＲＸ−２は、サイトカイン：ヒトＩＬ−１β、ヒトＩＬ−２、ヒトＩＬ−６、ヒトＩＬ−８、ヒトＴＮＦ−αおよびヒトＩＦＮ−γを含み、これらは生物製剤の殆どの活性成分ならびにヒトＧＭ−ＣＳＦおよびヒトＧ−ＣＳＦであると考えられる。いくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤は、インターロイキン−１ベータ（ＩＬ−１β）、インターロイキン−２（ＩＬ−２）、インターロイキン−６（ＩＬ−６）、インターロイキン−８（ＩＬ−８）、腫瘍壊死因子−アルファ（ＴＮＦ−α）およびインターフェロン−ガンマ（ＩＦＮ−γ）を含む。いくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤は、ヒトＩＬ−１β、ヒトＩＬ−２、ヒトＩＬ−６、ヒトＩＬ−８、ヒトＴＮＦ−αおよびヒトＩＦＮ−γを含む。いくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤は、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）および顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）をさらに含む。いくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤は、ヒトＧＭ−ＣＳＦおよびヒトＧ−ＣＳＦをさらに含む。 
【００４９】
いくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤は、例えばＰＤ−Ｌ１および／またはＣＴＬＡ−４発現を上昇させるのに有効な量で対象に送達される。いくつかの実施形態において、対象に送達される初代細胞由来生物製剤の量は、初代細胞由来生物製剤中に存在するサイトカインのうち１つ以上の国際単位（ＩＵ）またはＩＵ／ミリリットル（ＩＵ／ｍＬ）を使用して定められる。各サイトカインに対するＩＵおよびＩＵ／ｍＬは、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｏｆ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｓｔａｎｄａｒｄｓ  ａｎｄ  Ｃｏｎｔｒｏｌｓ（ＮＩＢＳＣ）により確立され、コードが割り当てられるが、それを以下の表で提供する。各コードに関する情報は、ＮＩＢＳＣウェブサイト（ｎｉｂｓｃ．ｏｒｇ）を参照することにより入手し得る。ＩＵおよびＩＵ／ｍＬは、下記表で提供される適切なＲ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ検査キットを使用してピコグラム（ｐｃｇ）またはｐｃｇ／ミリリットル（ｐｃｇ／ｍＬ）でのサイトカイン単位を測定することにより決定され得、これらは、下記表で提供される変換係数を用いてそれぞれＩＵまたはＩＵ／ｍＬに変換され、これらはＲ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ検査キットマニュアル由来の値である。 
【００５０】
【表１】
2019524887.tif 000003
【００５１】
いくつかの実施形態において、対象に送達される初代細胞由来生物製剤の量は、少なくとも１ＩＵ（例えば少なくとも１ＩＵ、少なくとも２ＩＵまたは少なくとも３ＩＵ）のＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８およびＴＮＦ−αのそれぞれおよびＩＦＮ−γ、例えばヒトＩＬ−１β、ヒトＩＬ−２、ヒトＩＬ−６、ヒトＩＬ−８、ヒトＴＮＦ−αおよびヒトＩＦＮ−γを含有する。いくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤はＧＭ−ＣＳＦおよびＧ−ＣＳＦ、例えばヒトＧＭ−ＣＳＦおよびヒトＧ−ＣＳＦをさらに含み、対象に送達される初代細胞由来生物製剤の量は、少なくとも０．０５ＩＵ（例えば少なくとも０．０５ＩＵ、少なくとも０．１ＩＵまたは少なくとも１ＩＵ）のＧＭ−ＣＳＦおよび少なくとも１ＩＵ（例えば少なくとも１ＩＵ、少なくとも２ＩＵまたは少なくとも３ＩＵ）のＧ−ＣＳＦを含有する。 
【００５２】
いくつかの実施形態において、対象に送達される初代細胞由来生物製剤の量は、２２〜６５７ＩＵ（例えば３０〜１４７ＩＵ）のＩＬ−１β、例えばヒトＩＬ−１β；２９〜４７８ＩＵ（例えば６７〜１５６ＩＵ）のＩＬ−２、例えばヒトＩＬ−２；１０〜１８５ＩＵ（例えば１３〜５３ＩＵ）のＩＦＮ−γ、例えばヒトＩＦＮ−γ；２９〜６００ＩＵ（例えば３６〜１５０ＩＵ）のＴＮＦ−α、例えばヒトＴＮＦ−α；３４〜２，８９５ＩＵ（例えば８９〜５２４ＩＵ）のＩＬ−６、例えばヒトＩＬ−６；および５〜２４４ＩＵ（例えば１０〜６４ＩＵ）のＩＬ−８、ヒトＩＬ−８を含有する。いくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤はＧＭ−ＣＳＦおよびＧ−ＣＳＦ、例えばヒトＧＭ−ＣＳＦおよびヒトＧ−ＣＳＦをさらに含み、対象に送達される初代細胞由来生物製剤の量は、７〜４５６ＩＵ（例えば７〜８４ＩＵ）のＧ−ＣＳＦおよび０．０８〜２８ＩＵ（例えば２〜６ＩＵ）のＧＭ−ＣＳＦを含有する。 
【００５３】
いくつかの実施形態において、対象に送達される初代細胞由来生物製剤の量は、２２〜６５７ＩＵ／ｍＬ（例えば３０〜１４７ＩＵ／ｍＬ）の範囲のＩＬ−１β、例えばヒトＩＬ−１βの濃度；２９〜４７８ＩＵ／ｍＬ（例えば６７〜１５６ＩＵ／ｍＬ）の濃度範囲のＩＬ−２、例えばヒトＩＬ−２の濃度；１０〜１８５ＩＵ／ｍＬ（例えば１３〜５３ＩＵ／ｍＬ）の範囲のＩＦＮ−γ、例えばヒトＩＦＮ−γの濃度；２９〜６００ＩＵ／ｍＬ（例えば３６〜１５０ＩＵ／ｍＬ）の範囲のＴＮＦ−α、例えばヒトＴＮＦ−αの濃度；３４〜２，８９５ＩＵ／ｍＬ（例えば８９〜５２４ＩＵ／ｍＬ）の範囲のＩＬ−６、例えばヒトＩＬ−６の濃度；および５〜２４４ＩＵ／ｍＬ（例えば１０〜６４ＩＵ／ｍＬ）の範囲のＩＬ−８、例えばヒトＩＬ−８の濃度を含有する。いくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤は、ＧＭ−ＣＳＦおよびＧ−ＣＳＦ、例えばヒトＧＭ−ＣＳＦおよびヒトＧ−ＣＳＦをさらに含み、対象に送達される初代細胞由来生物製剤の量は、７〜４５６ＩＵ／ｍＬ（例えば７〜８４ＩＵ／ｍＬ）の範囲のＧ−ＣＳＦ濃度および０．０８〜２８ＩＵ／ｍＬ（例えば２〜６ＩＵ／ｍＬ）の範囲のＧＭ−ＣＳＦ濃度を含有する。 
【００５４】
いくつかの実施形態において、対象に送達される初代細胞由来生物製剤の量は、初代細胞由来生物製剤中に存在するＩＬ−２の量に対する各サイトカインの比率を含有する。いくつかの実施形態において、特定のサイトカインに対する比率の下限は、特定のサイトカインに対する最小ＩＵ値（例えば本明細書中に記載の最小ＩＵ値）をとり、ＩＬ−２に対する最小ＩＵ値（例えば本明細書中に記載の最小ＩＵ値）によりそれを除することにより計算され得る。いくつかの実施形態において、特定のサイトカインに対する比率の上限は、特定のサイトカインに対する最小ＩＵ値（例えば本明細書中に記載の最大ＩＵ値）をとり、ＩＬ−２に対する最大ＩＵ値（例えば本明細書中に記載の最大ＩＵ値）によりそれを除することにより計算され得る。いくつかの実施形態において、対象に送達される初代細胞由来生物製剤の量は、０．４５〜１．３７（例えば０．４５〜０．９４）のＩＬ−２  ＩＵ（例えばヒトＩＬ−２  ＩＵ）に対するＩＬ−１β  ＩＵ（例えばヒトＩＬ−１β  ＩＵ）の比率；０．１９〜０．３９（例えば０．１９〜０．３４）のＩＬ−２  ＩＵ（例えばヒトＩＬ−２  ＩＵ）に対するＩＦＮ−γ  ＩＵ（例えばヒトＩＦＮ−γ  ＩＵ）の比率；０．５３〜１．２６（例えば０．５３〜０．９６）のＩＬ−２  ＩＵ（例えばヒトＩＬ−２  ＩＵ）に対するＴＮＦ−α  ＩＵ（例えばヒトＴＮＦ−α  ＩＵ）の比率；１．１６〜６．０６（例えば１．３２〜３．３５）のＩＬ−２  ＩＵ（例えばヒトＩＬ−２  ＩＵ）に対するＩＬ−６  ＩＵ（例えばヒトＩＬ−６  ＩＵ）の比率；および０．１５〜０．５１（例えば０．１５〜０．４１）のＩＬ−２  ＩＵ（例えばヒトＩＬ−２  ＩＵ）に対するＩＬ−８  ＩＵ（例えばヒトＩＬ−８  ＩＵ）の比率を含有する。いくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤は、ＧＭ−ＣＳＦおよびＧ−ＣＳＦ、例えばヒトＧＭ−ＣＳＦおよびヒトＧ−ＣＳＦをさらに含み、対象に送達される初代細胞由来生物製剤の量は、０．１１〜０．９５（例えば０．１１〜０．５４）のＩＬ−２  ＩＵ（例えばヒトＩＬ−２  ＩＵ）に対するＧ−ＣＳＦ  ＩＵ（例えばヒトＧ−ＣＳＦ  ＩＵ）の比率および０．００２〜０．０６（例えば０．０３〜０．０４）のＩＬ−２  ＩＵ（例えばヒトＩＬ−２  ＩＵ）に対するＧＭ−ＣＳＦ  ＩＵ（例えばヒトＧＭ−ＣＳＦ  ＩＵ）の比率を含有する。 
【００５５】
いくつかの実施形態において、対象に送達される初代細胞由来生物製剤の量は、初代細胞由来生物製剤中に存在するサイトカインのうち１つ以上のｐｃｇまたはｐｃｇ／ｍＬを使用して定められる。いくつかの実施形態において、対象に送達される初代細胞由来生物製剤の量は、２２０〜６，７００ｐｃｇ（例えば３１０〜１，５００ｐｃｇ）のＩＬ−１β、例えばヒトＩＬ−１β；１７３０〜２８，１００ｐｃｇ（例えば３，９６０〜９，２００ｐｃｇ）のＩＬ−２、例えばヒトＩＬ−２；５６０〜１０，９００ｐｃｇ（例えば７５０〜３，１００ｐｃｇ）のＩＦＮ−γ、例えばヒトＩＦＮ−γ；５８０〜１２，０００ｐｃｇ（例えば７２０〜３，０００ｐｃｇ）のＴＮＦ−α、例えばヒトＴＮＦ−α；２６０〜２２，１００ｐｃｇ（例えば６８０〜４，０００ｐｃｇ）のＩＬ−６、例えばヒトＩＬ−６；および４，６１０〜２４３，６００ｐｃｇ（例えば１０，３９０〜６３，８００ｐｃｇ）のＩＬ−８、例えばヒトＩＬ−８を含有する。いくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤はＧＭ−ＣＳＦおよびＧ−ＣＳＦ、例えばヒトＧＭ−ＣＳＦおよびヒトＧ−ＣＳＦをさらに含み、対象に送達される初代細胞由来生物製剤の量は、６０〜３，８００ｐｃｇ（例えば６０〜７００ｐｃｇ）のＧ−ＣＳＦおよび１０〜３，５００ｐｃｇ（例えば２５０〜８００ｐｃｇ）のＧＭ−ＣＳＦを含有する。 
【００５６】
いくつかの実施形態において、対象に送達される初代細胞由来生物製剤の量は、２２０〜６，７００ｐｃｇ／ｍＬ（例えば３１０〜１，５００ｐｃｇ／ｍＬ）の範囲であるＩＬ−１β、例えばヒトＩＬ−１βの濃度；１，７３０〜２８，１００ｐｃｇ／ｍＬ（例えば３，９６０〜９，２００ｐｃｇ／ｍＬ）の範囲であるＩＬ−２、例えばヒトＩＬ−２の濃度；５６０〜１０，９００ｐｃｇ／ｍＬ（例えば７５０〜３，１００ｐｃｇ／ｍＬ）の範囲であるＩＦＮ−γ、例えばヒトＩＦＮ−γの濃度；５８０〜１２，０００ｐｃｇ／ｍＬ（例えば７２０〜３，０００ｐｃｇ／ｍＬ）の範囲であるＴＮＦ−α、例えばヒトＴＮＦ−αの濃度；２６０〜２２，１００ｐｃｇ／ｍＬ（例えば６８０〜４，０００ｐｃｇ／ｍＬ）の範囲であるＩＬ−６、例えばヒトＩＬ−６の濃度；および４，６１０〜２４３，６００ｐｃｇ／ｍＬ（例えば１０，３９０〜６３，８００ｐｃｇ／ｍＬ）の範囲であるＩＬ−８、例えばヒトＩＬ−８の濃度を含有する。いくつかの実施形態において、対象に送達される初代細胞由来生物製剤の量は、３００〜１，４００ｐｃｇ／ｍＬの範囲であるＩＬ−１β、例えばヒトＩＬ−１βの濃度；４，０００〜８，０００ｐｃｇ／ｍＬの範囲であるＩＬ−２、例えばヒトＩＬ−２の濃度；１，０００〜３，８００ｐｃｇ／ｍＬの範囲であるＩＦＮ−γ、例えばヒトＩＦＮ−γの濃度および１，０００〜４，３００ｐｃｇ／ｍＬの範囲であるＴＮＦ−α、例えばヒトＴＮＦ−αの濃度を含有する。いくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤は、ＧＭ−ＣＳＦおよびＧ−ＣＳＦ、例えばヒトＧＭ−ＣＳＦおよびヒトＧ−ＣＳＦをさらに含み、対象に送達される初代細胞由来生物製剤の量は、６０〜３，８００ｐｃｇ／ｍＬ（例えば６０〜７００ｐｃｇ／ｍＬ）の範囲のＧ−ＣＳＦ濃度および１０〜３，５００ｐｃｇ／ｍＬ（例えば２５０〜８００ｐｃｇ／ｍＬ）の範囲のＧＭ−ＣＳＦ濃度を含有する。 
【００５７】
ＩＲＸ−２などの初代細胞由来生物製剤を産生させる代表的な方法は、全て参照により本明細書中に組み込まれる米国特許第８，４７０，５６２号明細書、同第５，６３２，９８３号明細書および同第５，６９８，１９４号明細書で開示される。例えば初代細胞由来生物製剤は、ヒトドナーから得られた単核細胞（ＭＮＣ）を精製し、ＭＮＣを一晩温置し、ＭＮＣをマイトジェン（例えばＰＨＡでの連続的または間欠的刺激）および４−アミノキノロン（ａｍｉｎｏｑｕｉｎｏｌｏｎｅ）抗生物質（例えばシプロフロキサシンでの連続的刺激）で刺激してサイトカインを産生させ、ろ過によってマイトジェンを除去し、ろ過によってサイトカインを浄化して、最初の初代細胞由来生物剤上清を得て、陰イオン交換クロマトグラフィーおよびウイルスろ過を使用してＤＮＡおよび外来性物質から最初の初代細胞由来生物剤上清を分離して、それにより、例えばヒトＩＬ−１β、ヒトＩＬ−２、ヒトＩＬ−６、ヒトＩＬ−８、ヒトＴＮＦ−αおよびヒトＩＦＮ−γを含む初代細胞由来生物製剤を生成させることによって、調製され得る。 
【００５８】
他の代表的な初代細胞由来生物製剤および初代細胞由来生物製剤を生成させる方法は、例えば参照により本明細書中で組み込まれる米国特許第６，８９６，８７９号明細書で開示される。 
【００５９】
ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１のアンタゴニスト 
いくつかの態様において、本開示は、プログラム細胞死リガンド１（ＰＤ−Ｌ１）またはプログラム細胞死１（ＰＤ−１）のアンタゴニストおよび本明細書中に記載の組成物および方法でのそれらの使用に関する。 
【００６０】
ＰＤ−１アンタゴニストは、本明細書中で使用される場合、例えばＰＤ−１への結合によって、ＰＤ−１活性を阻害または阻止する薬剤である。ＰＤ−１アンタゴニストは、ＰＤ−１アンタゴニストに曝露されていない細胞または生物と比較して、細胞または生物におけるＰＤ−１活性を、例えば５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または１００％低下させ得る。ＰＤ−１は、免疫グロブリンスーパーファミリーに属する細胞表面受容体であり、Ｔ細胞、Ｂ細胞およびマクロファージ上で発現される。ヒトＰＤ−１は、遺伝子ＰＤＣＤ１（Ｇｅｎｂａｎｋ  Ｅｎｔｒｅｚ  ＩＤ  ５１３３）によりコードされる。ＰＤ−１は、免疫チェックポイントとして機能し、例えば細胞死（アポトーシス）を開始させ、したがってＣＤ８＋Ｔ細胞および他の免疫細胞の活性化、増殖および／または機能を阻害することによって、免疫反応を負の方向に制御する。ＰＤ−１に対するリガンドであるＰＤ−Ｌ１は、いくつかの癌により高発現されることが分かっており、一部のＰＤ−１アンタゴニストが癌の処置について開発中であるかまたは承認されている。 
【００６１】
ＰＤ−１活性は、ＰＤ−１に選択的に結合し、その活性を阻止する抗体により妨害され得る。ＰＤ−１の活性は、ＰＤ−１に結合する抗体以外の分子によっても阻害または阻止され得る。このような分子は、タンパク質（融合タンパク質など）、低分子およびペプチド、例えばＰＤ−１に結合するがＰＤ−１を活性化しないＰＤ−Ｌ１およびＰＤ−Ｌ２のペプチド類似体を含む。ＰＤ−１をコードするＤＮＡまたはｍＲＮＡを分解または阻害するために結合する薬剤は、ＰＤ−１アンタゴニストとしても作用し得る。例としては、抗ＰＤ−１  ｓｉＲＮＡおよび抗ＰＤ−１アンチセンスオリゴヌクレオチドが挙げられる。 
【００６２】
代表的なＰＤ−１アンタゴニストとしては、その開示全体が参照により本明細書中で組み込まれる、米国特許出願公開第２０１３０２８０２６５号明細書、同第２０１３０２３７５８０号明細書、同第２０１３０２３０５１４号明細書、同第２０１３０１０９８４３号明細書、同第２０１３０１０８６５１号明細書、同第２０１３００１７１９９号明細書、同第２０１２０２５１５３７号明細書および同第２０１１０２７１３５８号明細書および欧州特許第ＥＰ２１７０９５９Ｂ１号明細書で開示されるものが挙げられる。他の代表的なＰＤ−１アンタゴニストは、Ｃｕｒｒａｎら、ＰＮＡＳ，１０７、４２７５（２０１０）；Ｔｏｐａｌｉａｎら、Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３６６，２４４３（２０１２）；Ｂｒａｈｍｅｒら、Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３６６，２４５５（２０１２）；Ｄｏｌａｎら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｏｎｔｒｏｌ  ２１，３（２０１４）；およびＳｕｎｓｈｉｎｅら、Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．ｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２３（２０１５）に記載されている。 
【００６３】
代表的なＰＤ−１アンタゴニストとしては、ニボルマブ（例えばＯＰＤＩＶＯ（登録商標）、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂより）、ＰＤ−１に結合する完全ヒトＩｇＧ４モノクローナル抗体；ピジリズマブ（例えばＣＴ−０１１、ＣｕｒｅＴｅｃｈより）、ＰＤ−１に結合するヒト化ＩｇＧ１モノクローナル抗体；ペムブロリズマブ（例えばＫＥＹＴＲＵＤＡ（登録商標）、Ｍｅｒｃｋより）、ＰＤ−１に結合するヒト化ＩｇＧ４−カッパモノクローナル抗体；ＭＥＤＩ−０６８０（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ／ＭｅｄＩｍｍｕｎｅ）、ＰＤ−１に結合するモノクローナル抗体；およびＲＥＧＮ２８１０（Ｒｅｇｅｎｅｒｏｎ／Ｓａｎｏｆｉ）、ＰＤ−１に結合するモノクローナル抗体が挙げられる。別の代表的なＰＤ−１アンタゴニストは、ＡＭＰ−２２４（Ｇｌａｘｏ  Ｓｍｉｔｈ  ＫｌｉｎｅおよびＡｍｐｌｉｍｍｕｎｅ）、プログラム細胞死リガンド２（ＰＤ−Ｌ２）の細胞外ドメインおよびＰＤ−１に結合するヒトＩｇＧ１のＦｃ領域から構成される組み換え融合タンパク質である。 
【００６４】
ＰＤ−Ｌ１アンタゴニストは、本明細書中で使用される場合、例えばＰＤ−Ｌ１への結合によってＰＤ−Ｌ１活性を阻害または妨げる薬剤である。ＰＤ−Ｌ１アンタゴニストは、ＰＤ−Ｌ１アンタゴニストに曝露されていない細胞または生物と比較して、細胞または生物におけるＰＤ−Ｌ１活性を例えば５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または１００％低下させ得る。 
【００６５】
ＰＤ−Ｌ１は、免疫グロブリンＶ様およびＣ様ドメインを有する１型膜貫通タンパク質である。ＰＤ−Ｌ１は、ＰＤ−１受容体に対するリガンドである。ヒトＰＤ−Ｌ１はＣＤ２７４遺伝子（Ｇｅｎｂａｎｋ  Ｅｎｔｒｅｚ  ＩＤ２９１２６）によりコードされる。ＰＤ−Ｌ１は、Ｂ細胞およびＴ細胞などの造血性および非造血性細胞の両方によって発現される。ＰＤ−１に対するＰＤ−Ｌ１の結合の結果、ＰＤ−１が活性化され、その結果、細胞死（アポトーシス）が開始され、上述の免疫反応の阻害、例えばＣＤ８＋Ｔ細胞および他の免疫細胞の活性化、増殖および／または機能の阻害が起こる。ＰＤ−Ｌ１は（Ｂ７−１としても知られる）ＣＤ８０にも結合する。 
【００６６】
ＰＤ−Ｌ１活性は、選択的にＰＤ−Ｌ１に結合し、その活性を阻止する分子により、例えばＰＤ−１および／またはＢ７−１との相互作用、およびＰＤ−１および／またはＢ７−１の活性化を阻止することにより、阻止され得る。ＰＤ−Ｌ１の活性は、ＰＤ−Ｌ１に結合する抗体以外の分子によっても阻害または阻止され得る。このような分子としては、タンパク質（融合タンパク質など）、低分子およびペプチドが挙げられる。ＰＤ−Ｌ１をコードするＤＮＡまたはｍＲＮＡに結合し、それを分解または阻害する薬剤は、ＰＤ−Ｌ１アンタゴニストとしても作用し得る。例としては、抗ＰＤ−Ｌ１  ｓｉＲＮＡおよび抗ＰＤ−Ｌ１アンチセンスオリゴヌクレオチドが挙げられる。 
【００６７】
代表的なＰＤ−Ｌ１アンタゴニストとしては、開示全体が参照により本明細書中に組み込まれる、米国特許出願公開第２００９００５５９４４号明細書、同第２０１００２０３０５６号明細書、同第２０１２００３９９０６号明細書、同第２０１３００４５２０２号明細書、２０１３０３０９２５０号明細書および同第２０１６０１０８１２３号明細書に記載のものが挙げられる。他の代表的なＰＤ−Ｌ１アンタゴニストは、Ｓｕｎｓｈｉｎｅら、Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．ｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２３（２０１５）に記載される。 
【００６８】
ＰＤ−Ｌ１アンタゴニストとしては、例えば：アテゾリズマブ（ＭＰＤＬ３２８０ＡまたはＴＥＣＥＮＴＲＩＱ（商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／Ｒｏｃｈｅ、とも呼ばれる）、ＰＤ−Ｌ１に結合するヒトモノクローナル抗体；デュルバルマブ（ＭＥＤＩ４７３６またはＩＭＦＩＮＺＩ（商標）、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ／ＭｅｄＩｍｍｕｎｅ、とも呼ばれる）、ＰＤ−Ｌ１に結合するヒト免疫グロブリンＩｇＧ１カッパモノクローナル抗体；ＢＭＳ−９３６５５９（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｅｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）、ＰＤ−Ｌ１に結合する完全ヒトＩｇＧ４モノクローナル抗体；アベルマブ（ＭＳＢ００１０７１８ＣまたはＢＡＶＥＮＣＩＯ（登録商標）、Ｍｅｒｃｋ  ＫＧａＡ／Ｐｆｉｚｅｒ、とも呼ばれる）、ＰＤ−Ｌ１に結合する完全ヒトＩｇＧ１モノクローナル抗体；およびＣＡ−１７０（Ａｕｒｉｇｅｎｅ／Ｃｕｒｉｓ）、ＰＤ−Ｌ１の低分子アンタゴニストが挙げられる。 
【００６９】
いくつかの実施形態において、ＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１アンタゴニストは、抗体、例えばヒト化またはヒト抗体などである。本明細書中で使用される場合、「抗体」という用語は、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１などの特定の抗原に特異的に結合する免疫グロブリン分子を指し、キメラ抗体、ヒト化抗体、完全ヒト抗体、ヘテロ複合（ｈｅｔｅｒｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ）抗体（例えば二特異性抗体、ダイアボディ、トリアボディおよびテトラボディ）を含むが限定されない、ポリクローナル、モノクローナル、抗体の遺伝子操作およびそうでなければ修飾形態および、例えば、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆａｂ、Ｆｖ、ｒｌｇＧおよびｓｃＦｖ断片を含む抗体の抗原結合断片を含む。さらに、別段の指示がない限り、「モノクローナル抗体」という用語は、抗原に特異的に結合可能である、インタクトな分子ならびに抗体断片（例えばＦａｂおよびＦ（ａｂ’）２断片など）の両方を含むものとする。抗体は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４サブタイプ、ＩｇＡ（ＩｇＡ１およびＩｇＡ２を含む）、ＩｇＥ、ＩｇＤまたはＩｇＭなど、何らかの免疫グロブリンからの免疫グロブリン定常ドメインを含み得る。 
【００７０】
ＣＴＬＡ−４のアンタゴニスト 
いくつかの態様において、本開示は、細胞傷害性Ｔリンパ球関連タンパク質４（ＣＴＬＡ−４）のアンタゴニストおよび本明細書中に記載の組成物および方法におけるそれらの使用に関する。 
【００７１】
ＣＴＬＡ−４アンタゴニストは、本明細書中で使用される場合、例えばＣＴＬＡ−４への結合によってＣＴＬＡ−４活性を阻害するかまたは妨げる薬剤である。ＣＴＬＡ−４アンタゴニストは、ＣＴＬＡ−４アンタゴニストに曝露されていない細胞または生物と比較して、細胞または生物におけるＣＴＬＡ−４活性を、例えば５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％または１００％低下させ得る。（ＣＴＬＡ４およびＣＤ１５２としても知られる）ＣＴＬＡ−４は、免疫グロブリンスーパーファミリーに属し、Ｔ細胞上で発現される細胞表面受容体である。ヒトＣＴＬＡ−４は遺伝子ＣＴＬＡ４（Ｇｅｎｂａｎｋ  Ｅｎｔｒｅｚ  ＩＤ１４９３）によりコードされる。ＣＴＬＡ−４は免疫チェックポイントとして機能し、例えば阻害シグナルをＴ細胞に伝達することによって免疫反応を負の方向に制御する。 
【００７２】
ＣＴＬＡ−４活性は、選択的にＣＴＬＡ−４に結合し、その活性を阻止する抗体により妨害され得る。ＣＴＬＡ−４の活性は、ＣＴＬＡ−４に結合する抗体以外の分子によっても阻害または阻止され得る。このような分子としては、タンパク質（融合タンパク質など）、低分子およびペプチド、例えば、ＣＴＬＡ−４に結合するがＣＴＬＡ−４を活性化しないＣＤ８０またはＣＤ８６のペプチド類似体が挙げられる。ＣＴＬＡ−４をコードするＤＮＡまたはｍＲＮＡに結合して、分解または阻害する薬剤は、ＣＴＬＡ−４アンタゴニストとしても作用し得る。例としては、抗ＣＴＬＡ−４ｓｉＲＮＡおよび抗ＣＴＬＡ−４アンチセンスオリゴヌクレオチドが挙げられる。 
【００７３】
代表的なＣＴＬＡ−４アンタゴニストとしては、開示全体が参照により本明細書中に組み込まれる国際公開第２００１／０１４４２４号パンフレット、同第２０１２／１１８７５０号パンフレット、欧州特許第ＥＰ１２１２４２２Ｂ１号明細書、米国特許第５，８１１，０９７号明細書、同第５，８５５，８８７号明細書、同第６，０５１，２２７号明細書、同第６，９８４，７２０号明細書、同第７，０３４，１２１号明細書、同第７，８２４，６７９号明細書、同第８，０１７，１１４号明細書、同第８，４７５，７９０号明細書、同第８，３１８，９１６号明細書、同第８，６８５，３９４号明細書、米国特許出願公開第２００２／００３９５８１号明細書、同第２００５／０２０１９９４号明細書および同第２００９／０１１７０３７号明細書に記載のものが挙げられる。他の代表的なＣＴＬＡ−４アンタゴニストは、全て、それらの全体において参照により本明細書中に組み込まれる、Ｈｕｒｗｉｔｚら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９５（１７）：１００６７−１００７１（１９９８）；Ｃａｍａｃｈｏら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，２２（１４５）：Ａｂｓｔｒａｃｔ  Ｎｏ．２５０５（２００４）（抗体ＣＰ−６７５２０６）；Ｍｏｋｙｒら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，５８：５３０１−５３０４（１９９８）およびＬｉｐｓｏｎおよびＤｒａｋｅ，Ｃｌｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ；１７（２２）Ｎｏｖｅｍｂｅｒ  １５，２０１１に記載される。 
【００７４】
代表的なＣＴＬＡ−４アンタゴニストとしては、ＣＴＬＡ−４に対する組み換えヒトＩｇＧ１モノクローナル抗体であるイピリムマブ（ＹＥＲＶＯＹ（登録商標）、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ）およびＣＴＬＡ−４に対するヒトＩｇＧ２モノクローナル抗体であるトレメリムマブ／ＣＰ−６７５，２０６（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ；ＭｅｄＩｍｍｕｎｅ；Ｐｆｉｚｅｒ）が挙げられる。 
【００７５】
いくつかの実施形態において、ＣＬＴＡ−４アンタゴニストは、抗体、例えばヒト化またはヒト抗体などである。ＣＴＬＡ−４抗体は、ポリクローナル、モノクローナル、キメラ抗体、ヒト化抗体、完全ヒト抗体、ヘテロ複合（ｈｅｔｅｒｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ）抗体（例えば二特異性抗体、ダイアボディ、トリアボディおよびテトラボディ）を含むが限定されない抗体の遺伝子操作およびそうでなければ修飾形態を含むあらゆるタイプの抗体および、例えばＦａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆａｂ、Ｆｖ、ｒＩｇＧおよびｓｃＦｖ断片を含む抗体の抗原結合断片であり得る。 
【００７６】
処置および医薬組成物の方法 
いくつかの態様において、本開示は、処置の方法、例えば癌または前癌病変の処置に関する。いくつかの実施形態において、本方法は、ａ）癌または前癌病変を有する対象に有効量の本明細書中に記載のような初代細胞由来生物製剤（例えばＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＴＮＦ−αおよびＩＦＮ−γを含む）を投与することと；ｂ）有効量の本明細書中に記載のようなＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１のアンタゴニストを対象に投与することと、を含む。いくつかの実施形態において、本方法は、ａ）癌または前癌病変を有する対象に有効量の本明細書中に記載のような初代細胞由来生物製剤（例えばＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＴＮＦ−αおよびＩＦＮ−γを含む）を投与することと；ｂ）有効量の本明細書中に記載のようなＣＴＬＡ−４のアンタゴニストを対象に投与することと、を含む。いくつかの実施形態において、本方法は、ａ）癌または前癌病変を有する対象に有効量の本明細書中に記載のような初代細胞由来生物製剤（例えばＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＴＮＦ−αおよびＩＦＮ−γを含む）を投与することと；ｂ）有効量の本明細書中に記載のようなＣＴＬＡ−４のアンタゴニストおよび有効量の本明細書中に記載のようなＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１のアンタゴニストを対象に投与することと、を含む。 
【００７７】
いくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤およびＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１アンタゴニストおよび／またはＣＴＬＡ−４アンタゴニストの投与は、別個の時間に行われ（例えば初代細胞由来生物製剤およびＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１アンタゴニストおよび／またはＣＴＬＡ−４アンタゴニストを別個の組成物として投与し、初代細胞由来生物製剤の少なくとも１回の投与を少なくとも１回のＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１アンタゴニストおよび／またはＣＴＬＡ−４アンタゴニストの投与とは異なる時間に行う）、および／または対象において異なる位置に投与される（例えば初代細胞由来生物製剤およびＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１アンタゴニストおよび／またはＣＴＬＡ−４アンタゴニストが別個の組成物として投与される、異なる投与経路によるもの）。本方法のいくつかの実施形態において、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１アンタゴニストおよびＣＴＬＡ−４アンタゴニストが併用される場合、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１アンタゴニストおよびＣＴＬＡ−４アンタゴニストが一緒に投与される。いくつかの実施形態において、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１アンタゴニストおよびＣＴＬＡ−４アンタゴニストは別個の時間に投与される。 
【００７８】
いくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤およびＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１アンタゴニストおよび／またはＣＴＬＡ−４アンタゴニストは同じ日であるが、対象の異なる位置に投与される（例えば初代細胞由来生物製剤およびＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１アンタゴニストおよび／またはＣＴＬＡ−４アンタゴニストが別個の組成物として投与される、異なる投与経路による）。いくつかの実施形態において、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１アンタゴニストは静脈内または経口投与される。いくつかの実施形態において、ＣＴＬＡ−４アンタゴニストは静脈内投与される。いくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤は皮下に、外リンパに（例えばリンパ節周辺組織への皮下注射またはカテーテルによる）、カテーテルにより、節内に（ｉｎｔｒａｎｏｄａｌｌｙ）、腫瘍周辺に、または腫瘍内に投与される。いくつかの実施形態において、初代細胞由来は、次のリンパ節ベッド（ｌｙｍｐｈ  ｎｏｄｅ  ｂｅｄ）の１つ以上に外リンパまたは節内（ｉｎｔｒａｎｏｄａｌｌｙ）投与される：腋下、頸部、鎖骨上、鎖骨下、三角筋、鼠径部、大腿、縦隔、胸筋下、内胸および／または後腹膜リンパ節ベッド（ｌｙｍｐｈ  ｎｏｄｅ  ｂｅｄ）。 
【００７９】
いくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤の少なくとも１回分は、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１アンタゴニストの少なくとも１回分の前に投与される。いくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤の少なくとも１回分は、ＣＴＬＡ−４アンタゴニストの少なくとも１回の投与の前に投与される。いくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤の少なくとも１回の投与は、ＣＴＬＡ−４アンタゴニストの少なくとも１回の投与およびＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１アンタゴニストの少なくとも１回の投与の前に投与される。いくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤の少なくとも１回の投与は、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１アンタゴニストの少なくとも１回の投与後に投与される。いくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤の少なくとも１回の投与は、ＣＴＬＡ−４アンタゴニストの少なくとも１回の投与後に投与される。いくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤の少なくとも１回の投与は、ＣＴＬＡ−４アンタゴニストの少なくとも１回の投与およびＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１アンタゴニストの少なくとも１回の投与後に投与される。いくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤の投与は、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１アンタゴニストの前後の両方で行われる。いくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤の投与は、ＣＴＬＡ−４アンタゴニストの前後の両方で行われる。いくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤の投与は、ＣＴＬＡ−４アンタゴニストおよびＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１アンタゴニストの前後の両方で行われる。いくつかの実施形態において、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１アンタゴニストの投与は、初代細胞由来生物製剤の前後の両方で行われる。いくつかの実施形態において、ＣＴＬＡ−４アンタゴニストの投与は、初代細胞由来生物製剤の前後の両方で行われる。いくつかの実施形態において、ＣＴＬＡ−４アンタゴニストおよびＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１アンタゴニストの投与は、初代細胞由来生物製剤の前後の両方で行われる。 
【００８０】
いくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤およびＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１アンタゴニストおよび／またはＣＴＬＡ−４アンタゴニストの投与は、複数サイクルにわたり行われる。いくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤は、１０日間にわたり１日１回の投与（例えば４、５または１０日間にわたり１日１回）など、最長１０日間（例えば４、５または１０日間）の１回以上のサイクルにわたり投与され、この日数は、連続であるか、または、週末の間など、生物製剤が送達されない１日以上（１、２、３、４または５日）を含み得る。いくつかの実施形態において、最長１０日間の１回以上のサイクルは、複数の薬剤を含む１回以上の２１日サイクルの一部である。いくつかの実施形態において、各２１日サイクルにわたり、シクロホスファミドが第１日に投与され（例えば静脈内で３００ｍｇ／ｍ２）；インドメタシン（例えば１日３回、経口で２５ｍｇ）、オメプラゾール（例えば経口で２０ｍｇ）および亜鉛（例えば経口で１５〜３０ｍｇ）を２１日間にわたり毎日投与し；各サイクルの第４日に開始して、本明細書中に記載のような初代細胞由来生物製剤（例えばＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＴＮＦ−αおよびＩＦＮ−γを含む）を４、５または１０日間にわたり毎日投与する（例えば継続的にまたは間に１日以上入れて２ブロックの連続日での何れか）。代表的な投与計画を以下の表で示す。 
【００８１】
【表２】
2019524887.tif 000004
【００８２】
いくつかの実施形態において、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１アンタゴニストは、１サイクル以上の２〜４週サイクルにわたり投与され、アンタゴニストの投与は、各サイクルにわたり２〜４週間ごとにまたは毎日１回行う（例えば２週間ごとに１回、３週間ごとに１回、４週間ごとに１回またはサイクルあたり毎日）。いくつかの実施形態において、ＣＴＬＡ−４アンタゴニストは、１回以上の３〜１２週サイクルにわたり投与され、アンタゴニストの投与は、３〜１２週ごとに１回（例えば３週間ごとに１回、４週間ごとに１回、８週間ごとに１回または１２週間ごとに１回）行われる。 
【００８３】
いくつかの実施形態において、本明細書中に記載の方法は、初代細胞由来生物製剤が上記のような最長１０日間のサイクルにわたり投与され（任意選択により、上記の２１日サイクルの一部として）、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１アンタゴニストが上記のように２〜４週サイクルにわたり投与される投与計画を利用し、この投与計画は少なくとも１回反復（例えば１年に１、２、３または４回反復）される。この計画のいくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤は、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１アンタゴニストの前に投与される。この計画の他の実施形態において、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１アンタゴニストは初代細胞由来生物製剤の前に投与される。 
【００８４】
いくつかの実施形態において、本明細書中に記載の方法は、初代細胞由来生物製剤が上記のように最長１０日のサイクルにわたり投与され（任意選択により上記の２１日サイクルの一部として）、ＣＴＬＡ−４アンタゴニストは上記のような３〜１２週サイクルにわたり投与される投与計画を利用し、この投与計画は少なくとも１回（例えば１年に１、２、３または４回）反復される。この計画のいくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤は、ＣＴＬＡ−４アンタゴニストの前に投与される。この計画の他の実施形態において、ＣＴＬＡ−４アンタゴニストは、初代細胞由来生物製剤の前に投与される。 
【００８５】
いくつかの実施形態において、本明細書中に記載の方法は、初代細胞由来生物製剤が、上記のように最長１０日間のサイクルにわたり投与され（任意選択により上記の２１日サイクルの一部として）、ＣＴＬＡ−４アンタゴニストが上記のように３〜１２週サイクルにわたり投与され、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１アンタゴニストが、上記のような２〜４週サイクルにわたり投与される投与計画を利用し、この投与計画は少なくとも１回反復（例えば１年に１、２、３または４回反復）される。この計画のいくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤は、ＣＴＬＡ−４アンタゴニストおよびＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１アンタゴニストの前に投与される。この計画の他の実施形態において、ＣＴＬＡ−４アンタゴニストおよびＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１アンタゴニストは、初代細胞由来生物製剤の前に投与される。 
【００８６】
本明細書中で提供される方法の何れかのいくつかの実施形態において、本方法は、さらなる薬剤を投与することをさらに含む。いくつかの実施形態において、さらなる薬剤は、アルキル化剤（例えばシクロホスファミド）、代謝拮抗剤、抗生物質および免疫調整剤からなる群から選択される化学阻害剤である。いくつかの実施形態において、さらなる薬剤は、インドメタシン、イブプロフェン、セレコキシブ、ロフェコキシブおよびそれらの組み合わせからなる群から選択されるＮＳＡＩＤである。いくつかの実施形態において、さらなる薬剤は亜鉛である。いくつかの実施形態において、さらなる薬剤は、シクロホスファミド、インドメタシンおよび亜鉛の組み合わせである。 
【００８７】
薬剤の「有効量」は一般に、所望の生物学的反応を誘発する、例えば状態を処置するのに十分な量を指す。この技術分野の熟練者により理解されるように、本明細書中に記載の薬剤の有効量は、処置される状態、投与方式および対象の年齢、身体組成および健康などの要因に依存して変動し得る。有効量は、治療全体を改善する、症状または状態の原因を軽減するかまたは回避する、または別の治療剤の治療的有効性を促進する量を包含し得る。 
【００８８】
癌の処置に対して、有効量は、癌の処置において治療的な利益を提供する、例えば癌細胞の増殖を減速させるか、停止させるかまたは逆転させる、および／または癌細胞を死滅させる、または癌に関連する１つ以上の症状を軽減するかもしくは除去するために十分な量である。 
【００８９】
いくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤の有効量は、対象の腫瘍におけるＰＤ−Ｌ１発現レベルを上昇させるのに十分な量および／または本明細書中に記載のようなＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１アンタゴニストの治療的有効性を可能にし、および／または促進するのに十分な量である。いくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤の有効量は、対象の腫瘍におけるＣＴＬＡ−４発現レベルを上昇させるのに十分な量および／または本明細書中に記載のようなＣＴＬＡ−４アンタゴニストの治療的有効性を可能にし、および／または促進するのに十分な量である。いくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤の有効量は、対象の腫瘍におけるＰＤ−Ｌ１およびＣＴＬＡ−４発現レベルを上昇させるのに十分な量および／または本明細書中に記載のようなＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１アンタゴニストおよびＣＴＬＡ−４アンタゴニストの治療的有効性を可能にし、および／または促進するのに十分な量である。 
【００９０】
抗ＰＤ−１および抗ＰＤ−Ｌ１抗体などの抗体に対する代表的な有効量は、１〜４週間ごとに０．０１ｍｇ／ｋｇ〜２０ｍｇ／ｋｇを含む。抗ＣＬＴＡ−４抗体などの抗体に対する他の代表的な有効量は、３〜１２週間ごとに３ｍｇ／ｋｇ〜１５ｍｇ／ｋｇを含む。実施形態において、このような投与は、疾患、例えば癌が持続する限り続く。代表的なＰＤ−１およびＰＤ−Ｌ１アンタゴニストおよびＣＬＴＡ−４の投与計画および投与経路の例は、以下の表で示し、本明細書中に記載の何れかの方法での使用について企図される。 
【００９１】
【表３】
2019524887.tif 000005
【００９２】
いくつかの実施形態において、対象に送達される初代細胞由来生物製剤の量は、少なくとも１ＩＵ（例えば少なくとも１ＩＵ、少なくとも２ＩＵまたは少なくとも３ＩＵ）のＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８およびＴＮＦ−αのそれぞれおよびＩＦＮ−γ、例えばヒトＩＬ−１β、ヒトＩＬ−２、ヒトＩＬ−６、ヒトＩＬ−８、ヒトＴＮＦ−αおよびヒトＩＦＮ−γを含有する。いくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤は、ＧＭ−ＣＳＦおよびＧ−ＣＳＦ、例えばヒトＧＭ−ＣＳＦおよびヒトＧ−ＣＳＦをさらに含み、対象に送達される初代細胞由来生物製剤の量は、少なくとも０．０５ＩＵ（例えば少なくとも０．０５ＩＵ、少なくとも０．１ＩＵまたは少なくとも１ＩＵ）のＧＭ−ＣＳＦおよび少なくとも１ＩＵ（例えば少なくとも１ＩＵ、少なくとも２ＩＵまたは少なくとも３ＩＵ）のＧ−ＣＳＦを含有する。いくつかの実施形態において、対象に送達される初代細胞由来生物製剤の量は、２２〜６５７ＩＵ（例えば３０〜１４７ＩＵ）のＩＬ−１β、例えばヒトＩＬ−１β；２９〜４７８ＩＵ（例えば６７〜１５６ＩＵ）のＩＬ−２、例えばヒトＩＬ−２；１０〜１８５ＩＵ（例えば１３〜５３ＩＵ）のＩＦＮ−γ、例えばヒトＩＦＮ−γ；２９〜６００ＩＵ（例えば３６〜１５０ＩＵ）のＴＮＦ−α、例えばヒトＴＮＦ−α；３４〜２，８９５ＩＵ（例えば８９〜５２４ＩＵ）のＩＬ−６、例えばヒトＩＬ−６；および５〜２４４ＩＵ（例えば１０〜６４ＩＵ）のＩＬ−８、例えばヒトＩＬ−８を含有する。いくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤は、ＧＭ−ＣＳＦおよびＧ−ＣＳＦ、例えばヒトＧＭ−ＣＳＦおよびヒトＧ−ＣＳＦをさらに含み、対象に送達される初代細胞由来生物製剤の量は、７〜４５６ＩＵ（例えば７〜８４ＩＵ）のＧ−ＣＳＦおよび０．０８〜２８ＩＵ（例えば２〜６ＩＵ）のＧＭ−ＣＳＦを含有する。 
【００９３】
いくつかの実施形態において、対象に送達される初代細胞由来生物製剤の量は、初代細胞由来生物製剤中に存在するＩＬ−２の量に対する各サイトカインの比率を含有する。いくつかの実施形態において、対象に送達される初代細胞由来生物製剤の量は、０．４５〜１．３７（例えば０．４５〜０．９４）のＩＬ−２  ＩＵ（例えばヒトＩＬ−２  ＩＵ）に対するＩＬ−１β  ＩＵ（例えばヒトＩＬ−１β  ＩＵ）の比率；０．１９〜０．３９（例えば０．１９〜０．３４）のＩＬ−２  ＩＵ（例えばヒトＩＬ−２  ＩＵ）に対するＩＦＮ−γ  ＩＵ（例えばヒトＩＦＮ−γ  ＩＵ）の比率；０．５３〜１．２６（例えば０．５３〜０．９６）のＩＬ−２  ＩＵ（例えばヒトＩＬ−２  ＩＵ）に対するＴＮＦ−α  ＩＵ（例えばヒトＴＮＦ−α  ＩＵ）の比率；１．１６〜６．０６（例えば１．３２〜３．３５）のＩＬ−２  ＩＵ（例えばヒトＩＬ−２  ＩＵ）に対するＩＬ−６  ＩＵ（例えばヒトＩＬ−６  ＩＵ）の比率；および０．１５〜０．５１（例えば０．１５〜０．４１）のＩＬ−２  ＩＵ（例えばヒトＩＬ−２  ＩＵ）に対するＩＬ−８  ＩＵ（例えばヒトＩＬ−８  ＩＵ）の比率を含有する。いくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤は、ＧＭ−ＣＳＦおよびＧ−ＣＳＦ、例えばヒトＧＭ−ＣＳＦおよびヒトＧ−ＣＳＦをさらに含み、対象に送達される初代細胞由来生物製剤の量は、０．１１〜０．９５（例えば０．１１〜０．５４）のＩＬ−２  ＩＵ（例えばヒトＩＬ−２  ＩＵ）に対するＧ−ＣＳＦ  ＩＵ（例えばヒトＧ−ＣＳＦ  ＩＵ）の比率および０．００２〜０．０６（例えば０．０３〜０．０４）のＩＬ−２  ＩＵ（例えばヒトＩＬ−２  ＩＵ）に対するＧＭ−ＣＳＦ  ＩＵ（例えばヒトＧＭ−ＣＳＦ  ＩＵ）の比率を含有する。 
【００９４】
いくつかの実施形態において、有効量の本明細書中に記載のような初代細胞由来生物製剤は、２２〜６５７ＩＵ／ｍＬ（例えば３０〜１４７ＩＵ／ｍＬ）の範囲のＩＬ−１β、例えばヒトＩＬ−１βの濃度；２９〜４７８ＩＵ／ｍＬ（例えば６７〜１５６ＩＵ／ｍＬ）の範囲のＩＬ−２、例えばヒトＩＬ−２の濃度、１０〜１８５ＩＵ／ｍＬ（例えば１３〜５３ＩＵ／ｍＬ）の範囲のＩＦＮ−γ、例えばヒトＩＦＮ−γの濃度；２９〜６００ＩＵ／ｍＬ（例えば３６〜１５０ＩＵ／ｍＬ）の範囲のＴＮＦ−α、例えばヒトＴＮＦ−αの濃度；３４〜２，８９５ＩＵ／ｍＬ（例えば８９〜５２４ＩＵ／ｍＬ）の範囲のＩＬ−６、例えばヒトＩＬ−６の濃度；および５〜２４４ＩＵ／ｍＬ（例えば１０〜６４ＩＵ／ｍＬ）の範囲のＩＬ−８、例えばヒトＩＬ−８の濃度を含む。いくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤は、ＧＭ−ＣＳＦおよびＧ−ＣＳＦ、例えばヒトＧＭ−ＣＳＦおよびヒトＧ−ＣＳＦをさらに含み、有効量の初代細胞由来生物製剤は、７〜４５６ＩＵ／ｍＬ（例えば７〜８４ＩＵ／ｍＬ）の範囲のＧ−ＣＳＦ濃度および０．０８〜２８ＩＵ／ｍＬ（例えば２〜６ＩＵ／ｍＬ）の範囲のＧＭ−ＣＳＦ濃度をさらに含む。いくつかの実施形態において、有効量の本明細書中に記載のような初代細胞由来生物製剤は、３００〜１，４００ｐｃｇ／ｍＬの範囲のＩＬ−１β、例えばヒトＩＬ−１βの濃度；４，０００〜８，０００ｐｃｇ／ｍＬの範囲のＩＬ−２、例えばヒトＩＬ−２の濃度；１，０００〜３，８００ｐｃｇ／ｍＬの範囲のＩＦＮ−γ、例えばヒトＩＦＮ−γの濃度および１，０００〜４，３００ｐｃｇ／ｍＬの範囲のＴＮＦ−α、例えばヒトＴＮＦ−αの濃度を含む。 
【００９５】
いくつかの実施形態において、対象に送達される初代細胞由来生物製剤の量は、２２０〜６，７００ｐｃｇ（例えば３１０〜１，５００ｐｃｇ）のＩＬ−１β、例えばヒトＩＬ−１β；１，７３０〜２８，１００ｐｃｇ（例えば３，９６０〜９，２００ｐｃｇ）のＩＬ−２、例えばヒトＩＬ−２；５６０〜１０，９００ｐｃｇ（例えば７５０〜３，１００ｐｃｇ）のＩＦＮ−γ、例えばヒトＩＦＮ−γ；５８０〜１２，０００ｐｃｇ（例えば７２０〜３，０００ｐｃｇ）のＴＮＦ−α、例えばヒトＴＮＦ−α；２６０〜２２，１００ｐｃｇ（例えば６８０〜４，０００ｐｃｇ）のＩＬ−６、例えばヒトＩＬ−６；および４，６１０〜２４３，６００ｐｃｇ（例えば１０，３９０〜６３，８００ｐｃｇ）のＩＬ−８、例えばヒトＩＬ−８を含有する。いくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤は、ＧＭ−ＣＳＦおよびＧ−ＣＳＦ、例えばヒトＧＭ−ＣＳＦおよびヒトＧ−ＣＳＦをさらに含み、対象に送達される初代細胞由来生物製剤の量は、６０〜３，８００ｐｃｇ（例えば６０〜７００ｐｃｇ）のＧ−ＣＳＦおよび１０〜３，５００ｐｃｇ（例えば２５０〜８００ｐｃｇ）のＧＭ−ＣＳＦを含有する。 
【００９６】
いくつかの実施形態において、有効量の本明細書中に記載のような初代細胞由来生物製剤は、２２０〜６，７００ｐｃｇ／ｍＬ（例えば３１０〜１，５００ｐｃｇ／ｍＬ）の範囲のＩＬ−１β、例えばヒトＩＬ−１βの濃度；１７３０〜２８，１００ｐｃｇ／ｍＬ（例えば３，９６０〜９，２００ｐｃｇ／ｍＬ）の範囲のＩＬ−２、例えばヒトＩＬ−２の濃度；５６０〜１０，９００ｐｃｇ／ｍＬ（例えば７５０〜３，１００ｐｃｇ／ｍＬ）の範囲のＩＦＮ−γ、例えばヒトＩＦＮ−γの濃度；５８０〜１２，０００ｐｃｇ／ｍＬ（例えば７２０〜３，０００ｐｃｇ／ｍＬ）の範囲のＴＮＦ−α、例えばヒトＴＮＦ−αの濃度；２６０〜２２，１００ｐｃｇ／ｍＬ（例えば６８０〜４，０００ｐｃｇ／ｍＬ）の範囲のＩＬ−６、例えばヒトＩＬ−６の濃度；および４，６１０〜２４３，６００ｐｃｇ／ｍＬ（例えば１０，３９０〜６３，８００ｐｃｇ／ｍＬ）の範囲のＩＬ−８、例えばヒトＩＬ−８の濃度を含む。いくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤は、ＧＭ−ＣＳＦおよびＧ−ＣＳＦ、例えばヒトＧＭ−ＣＳＦおよびヒトＧ−ＣＳＦをさらに含み、有効量の初代細胞由来生物製剤は、６０〜３，８００ｐｃｇ／ｍＬ（例えば６０〜７００ｐｃｇ／ｍＬ）の範囲のＧ−ＣＳＦ濃度および１０〜３，５００ｐｃｇ／ｍＬ（例えば２５０〜８００ｐｃｇ／ｍＬ）の範囲のＧＭ−ＣＳＦ濃度をさらに含む。 
【００９７】
本明細書中に記載の何れかの薬剤（例えば本明細書中に記載のような、初代細胞由来生物製剤、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１アンタゴニストまたはＣＴＬＡ−４アンタゴニスト）は医薬組成物として処方され得る。「医薬組成物」という用語は、活性成分の生物学的活性が有効となるような形態である製剤を指す。いくつかの実施形態において、医薬組成物は、本明細書中に記載のような薬剤（例えば本明細書中に記載のような初代細胞由来生物製剤、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１アンタゴニストまたはＣＴＬＡ−４アンタゴニスト）および薬学的に許容可能な担体を含む。本明細書中で使用される場合、「薬学的に許容可能な担体」は、活性成分と組み合わせた場合に、成分が生物学的活性を保持可能にし、対象の免疫系と非反応性である何らかの物質を含む。例としては、標準的な医薬担体、例えばリン酸緩衝生理食塩水、水、アルブミン、エマルション、例えば油／水エマルションおよび様々なタイプの湿潤剤の何れかが挙げられるが限定されない。エアロゾルまたは非経口投与のための好ましい希釈剤は、リン酸緩衝生理食塩水、通常の（０．９％）食塩水または５％デキストロースである。このような担体を含む組成物は、周知の従来法により処方される（例えばＲｅｍｉｎｇｔｏｎ，Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ  ２０ｔｈ  Ｅｄ．Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ，２０００を参照）。 
【００９８】
本明細書中に記載の何れかの薬剤（例えば初代細胞由来生物製剤、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１アンタゴニストまたはＣＴＬＡ−４アンタゴニスト）は、処置される特定の状態に必要とされるような何らかの適切な経路により投与され得る。例えば、本明細書中に記載の薬剤（例えば本明細書中に記載のような初代細胞由来生物製剤、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１アンタゴニストまたはＣＴＬＡ−４アンタゴニスト）は、非経口（例えば静脈内、動脈内、腹腔内、髄腔内、脳室内、尿道内、胸骨内、頭蓋内、筋肉内、イントラ−オシアル（ｉｎｔｒａ−ｏｓｓｉａｌ）、節内（ｉｎｔｒａｎｏｄａｌ）、皮内および皮下）、腫瘍の周囲、腫瘍内または経口投与され得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載のような初代細胞由来生物製剤は、対象における腫瘍に対する流入リンパ節領域を取り囲む組織への、外リンパ注射、例えば皮下注射またはカテーテル法などにより、リンパ節に、またはその付近に投与される。いくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤は、皮下に、カテーテルにより、節内に（ｉｎｔｒａｎｏｄａｌｌｙ）、腫瘍の周囲に、または外リンパに、皮下投与される。いくつかの実施形態において、初代細胞由来は、次のリンパ節床の１つ以上に、外リンパまたは節内（ｉｎｔｒａｎｏｄａｌｌｙ）投与される：腋下、頸部、鎖骨上、鎖骨下、三角筋、鼠径部、大腿、縦隔、胸筋下、内胸および／または後腹膜リンパ節床。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載のようなＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１アンタゴニストは、静脈内または経口投与される。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載のようなＣＴＬＡ−４アンタゴニストは静脈内投与される。しかし、本明細書中に記載の薬剤（例えば本明細書中に記載のような初代細胞由来生物製剤、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１アンタゴニストまたはＣＴＬＡ−４アンタゴニスト）に対する投与経路は、処置される対象のタイプ、処置される疾患（例えば癌のタイプ）および疾患重症度に依存して変動し得ることを理解されたい。 
【００９９】
本明細書中に記載の方法の何れか１つのいくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤および／またはＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１アンタゴニストは、ネオアジュバント療法（例えば術前）、アジュバント療法（例えば術後）として、または確定された再発性もしくは転移性疾患に対する処置として投与される。本明細書中に記載の方法の何れか１つのいくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤および／またはＣＴＬＡ−４アンタゴニストは、ネオアジュバント療法（例えば術前）、アジュバント療法（例えば術後）として、または確定された再発性もしくは転移性疾患に対する処置として投与される。本明細書中に記載の方法の何れか１つのいくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤、ＣＴＬＡ−４アンタゴニストおよびＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１アンタゴニストは、ネオアジュバント療法（例えば術前）、アジュバント療法（例えば術後）として、または確定された再発性もしくは転移性疾患に対する処置として投与される。 
【０１００】
対象選択または可能性評価の方法 
本開示の他の態様は、評価または選択の方法に関する。いくつかの実施形態において、処置に対する対象を選択する方法が提供される。いくつかの実施形態において、この方法は、ａ）癌または前癌病変を有し、本明細書中に記載のような初代細胞由来生物製剤（例えばＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＴＮＦ−αおよびＩＦＮ−γを含む）が投与された対象から得られた腫瘍試料中のＰＤ−Ｌ１および／またはＣＴＬＡ−４レベルを決定することと；ｂ）腫瘍試料中のＰＤ−Ｌ１レベルがＰＤ−Ｌ１閾値レベルより高い場合に、有効量の本明細書中に記載のようなＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１のアンタゴニストを対象に投与することおよび／または腫瘍試料中のＣＴＬＡ−４レベルがＣＴＬＡ−４閾値レベルよりも高い場合に、有効量の本明細書中に記載のようなＣＴＬＡ−４のアンタゴニストを対象に投与することと、を含む。いくつかの実施形態において、本方法は、決定ステップ前に初代細胞由来生物製剤を対象に投与することをさらに含む。いくつかの実施形態において、ＰＤ−Ｌ１および／またはＣＴＬＡ−４レベルはタンパク質レベルである。いくつかの実施形態において、ＰＤ−Ｌ１および／またはＣＴＬＡ−４レベルはｍＲＮＡレベルである。 
【０１０１】
いくつかの実施形態において、対象がＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１のアンタゴニストおよび／またはＣＴＬＡ−４のアンタゴニストに反応性がある可能性を評価する方法が提供される。いくつかの実施形態において、本方法は、ａ）ＰＤ−Ｌ１および／またはＣＴＬＡ−４の閾値レベルを下回る第１のＰＤ−Ｌ１および／またはＣＴＬＡ−４レベルを発現する癌または前癌病変を有する対象に、本明細書中に記載の初代細胞由来生物製剤（例えばＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＴＮＦ−αおよびＩＦＮ−γを含む）を投与することと；ｂ）初代細胞由来生物製剤投与後の対象からの腫瘍試料中の第２のＰＤ−Ｌ１および／またはＣＴＬＡ−４レベルを決定することと、を含み、ＰＤ−Ｌ１および／またはＣＴＬＡ−４の閾値レベルを上回る第２のＰＤ−Ｌ１および／またはＣＴＬＡ−４レベルは、対象が、ＰＤ−Ｌ１のアンタゴニストおよび／またはＣＴＬＡ−４のアンタゴニストに対して反応性であることを示す。 
【０１０２】
何らかの適切な閾値レベルが本明細書中で企図される。いくつかの実施形態において、閾値レベルは、ＰＤ−Ｌ１レベル（例えば腫瘍細胞膜、免疫浸潤細胞膜および／または間質細胞膜などの細胞膜上でのＰＤ−Ｌ１タンパク質レベル）および／または本明細書中に記載のような初代細胞由来生物製剤（例えばＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＴＮＦ−αおよびＩＦＮ−γを含む）の投与前の対象からの腫瘍試料中のＣＴＬＡ−４レベルである。したがって、いくつかの実施形態において、本方法は、本明細書中に記載のような初代細胞由来生物製剤（例えばＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＴＮＦ−αおよびＩＦＮ−γを含む）の投与前の対象からの腫瘍試料中のＰＤ−Ｌ１および／またはＣＴＬＡ−４レベル（例えば腫瘍試料中の腫瘍細胞により発現されるＰＤ−Ｌ１レベルおよび／または腫瘍試料中の浸潤免疫細胞により発現されるＰＤ−Ｌ１および／またはＣＴＬＡ−４レベル）を測定することにより閾値レベルを決定することをさらに含む。いくつかの実施形態において、閾値レベルは、予め定められたＰＤ−Ｌ１および／またはＣＴＬＡ−４レベルである。いくつかの実施形態において、閾値レベルは、対象の群、例えば、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１アンタゴニストおよび／またはＣＴＬＡ−４アンタゴニストに反応性ではない癌または前癌病変を有する対象の群におけるレベルである。いくつかの実施形態において、閾値レベルは、ＰＤ−Ｌ１および／またはＣＴＬＡ−４の不在、例えば腫瘍試料中のＰＤ−Ｌ１および／またはＣＴＬＡ−４の不在である。いくつかの実施形態において、閾値レベルは、ＰＤ−Ｌ１および／またはＣＴＬＡ−４レベルを測定するために使用されるアッセイに対する変動性の基本的な標準偏差である。いくつかの実施形態において、ＰＤ−Ｌ１閾値レベルは、腫瘍試料中の生存能力のある腫瘍細胞の４９％における部分的または完全な細胞膜染色である。このような閾値レベルは既に記載されており（Ｇａｒｏｎら、Ｎ  Ｅｎｇｌ  Ｊ  Ｍｅｄ．２０１５  Ｍａｙ  ２１；３７２（２１）：２０１８−２８）、例えば市販のＰＤ−Ｌ１  ＩＨＣ  ２２Ｃ３  ｐｈａｒｍＤｘキット（Ｄａｋｏ，Ｐｒｏｄｕｃｔ  Ｎｏ．ＳＫ００６２１）を使用して決定され得る。いくつかの実施形態において、閾値レベルは、ＰＤ−Ｌ１に対して陰性であることが知られている組織または細胞、例えば内皮、線維芽細胞および扁桃組織試料の表層上皮および／またはＣＴＬＡ−４に対して陰性であることが知られている組織または細胞、例えば非リンパ組織など、陰性対照試料中のＰＤ−Ｌ１および／またはＣＴＬＡ−４レベルである。 
【０１０３】
本明細書中に記載の何れかの方法のいくつかの実施形態において、ＰＤ−Ｌ１レベル（例えばＰＤ−Ｌ１のｍＲＮＡレベルまたはＰＤ−Ｌ１タンパク質レベル）および／またはＣＴＬＡ−４レベル（例えばＣＴＬＡ−４のｍＲＮＡレベルまたはＣＴＬＡ−４タンパク質レベル）はアッセイを使用して測定される。ＰＤ−Ｌ１レベルおよび／またはＣＴＬＡ−４を検出するための使用のために何らかの適切なアッセイが企図される。代表的なアッセイは、例えばＣｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｗｉｌｅｙ  Ｏｎｌｉｎｅ  Ｌｉｂｒａｒｙおよび他の類似のプロトコールのデータベースにおいて開示されている。ＰＤ−Ｌ１および／またはＣＴＬＡ−４  ｍＲＮＡレベルを検出するための代表的なアッセイとしては、ノーザンブロット、ヌクレアーゼ保護アッセイ、インサイチューハイブリッド形成、ＲＴ−ｑＰＣＲ、マイクロアレイ分析、マルチプレックスＲＮＡ発現分析（例えばＭｕｌｔｉＯｍｙｘ（商標）またはＮａｎｏｓｔｒｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（登録商標）またはＩｌｌｕｍｉｎａ（登録商標）から入手可能なバーコードに基づく製品を使用）およびＲＮＡ−シーケンシング（ＲＮＡ−ｓｅｑ）が挙げられる。ＰＤ−Ｌ１および／またはＣＴＬＡ−４タンパク質レベルを検出するための代表的なアッセイとしては、免疫組織化学アッセイ、フローサイトメトリー、マルチプレックスタンパク質アッセイ（例えばＭｕｌｔｉＯｍｙｘ（商標））または例えばＰＤ−Ｌ１に特異的な抗体（Ｄａｋｏから入手可能なモノクローナルマウス抗ＰＤ−Ｌ１、クローン２２Ｃ３など）またはＣＴＬＡ−４に特異的な抗体を利用するウェスタンブロットアッセイが挙げられる。いくつかの実施形態において、アッセイは、免疫組織化学アッセイであり、これはキット、例えばＰＤ−Ｌ１  ＩＨＣ  ２２Ｃ３  ｐｈａｒｍＤｘキット（Ｄａｋｏ，Ｐｒｏｄｕｃｔ  Ｎｏ．ＳＫ００６２１）を使用して行われ得る。選択または評価の方法の何れかのいくつかの実施形態において、腫瘍試料は、ホルマリン固定試料である。例えば、腫瘍試料をホルマリン固定し、パラフィン包埋し、試料を切片化し、切片をＰＤ−Ｌ１に対するモノクローナル抗体（例えば２２Ｃ３マウスモノクローナル抗体）および／またはＣＴＬＡ−４に対するモノクローナル抗体を用いてＤＡＢ（３，３’−ジアミノベンジジン）染色し、ヘマトキシリンで対比染色し、切片を評価のためにスライド上に載せる。別の例において、腫瘍試料をホルマリン固定し、パラフィン包埋し、試料を切片化し、ＰＤ−Ｌ１および／またはＣＴＬＡ−４に対するモノクローナル抗体を用いて切片を蛍光染色し、例えばＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ  ＯＰＡＬ（商標）システムを使用して切片を分析する。別の例において、腫瘍試料をホルマリン固定し、パラフィン包埋し、試料を切片化し、任意選択により他のバイオマーカーの染色と組み合わせて、ＰＤ−Ｌ１および／またはＣＴＬＡ−４に対するモノクローナル抗体を用いて切片を蛍光染色し、例えばＮｅｏＧｅｎｏｍｉｃｓ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓから入手可能なＭｕｌｔｉＯｍｙｘ（商標）システムを使用して切片を分析する。 
【０１０４】
選択または評価の方法の何れかのいくつかの実施形態において、対象が選択されるか、または評価から、本明細書中に記載のようなＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１アンタゴニストに対して対象が反応すると思われることが示される場合、本明細書中に記載のようなＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１アンタゴニストで対象を処置する。選択または評価の方法の何れかのいくつかの実施形態において、対象が選択されるか、または評価から、本明細書中に記載のようなＣＴＬＡ−４アンタゴニストに対して対象が反応すると思われることが示される場合、対象を本明細書中に記載のようなＣＴＬＡ−４アンタゴニストで処置する。 
【０１０５】
対象 
本明細書中に記載の方法は、癌または前癌状態病変を有するかまたは有する疑いがある対象など、対象を利用する。いくつかの実施形態において、対象は、癌または前癌病変を有するかまたは有する疑いがあるヒト対象などの哺乳動物対象である。他の代表的な対象としては、非ヒト霊長類、ブタ、ウマ、ヒツジ、ウシ、ウサギ、イヌ、ネコ、ラットおよびマウスが挙げられる。 
【０１０６】
いくつかの実施形態において、対象は、ある一定のＰＤ−Ｌ１レベルを発現する腫瘍を有する。いくつかの実施形態において、腫瘍はＰＤ−Ｌ１を発現しない。いくつかの実施形態において、腫瘍は、本明細書中に記載のような閾値レベル（例えば腫瘍試料中の生存能のある腫瘍細胞のうち４９％での部分的または完全な細胞膜染色）を下回るＰＤ−Ｌ１レベルを発現する。 
【０１０７】
いくつかの実施形態において、対象は、ある一定のＰＤ−Ｌ１および／またはＣＴＬＡ−４レベルを発現する浸潤免疫細胞を含有する腫瘍を有する。いくつかの実施形態において、浸潤免疫細胞は、ＰＤ−Ｌ１および／またはＣＴＬＡ−４を発現しない。 
【０１０８】
いくつかの実施形態において、対象は、癌を有する対象、例えば癌を有するヒト対象などである。いくつかの実施形態において、癌は、メラノーマ、肺癌（非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）または小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）など）、腎臓細胞癌（ＲＣＣ）、前立腺癌、卵巣癌、結直腸癌（ＣＲＣ）、腎臓癌、胃癌、乳癌、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、血液悪性腫瘍（例えば急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、多発性骨髄腫（ＭＭ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、皮膚Ｔ細胞リンパ腫）、膵臓癌、膀胱癌、頭頸部の扁平上皮癌（ＳＣＣＨＮとも呼ばれるＨ＆ＮＳＣＣ）、尿生殖器癌、進行皮膚扁平上皮癌、肝臓転移、中皮腫、胃食道癌、メルケル細胞癌および尿路上皮癌からなる群から選択される。いくつかの実施形態において、ＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１アンタゴニストは、以下の表から選択され、癌は、選択されるＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１アンタゴニストに対する以下の表中の癌である。いくつかの実施形態において、ＣＴＬＡ−４アンタゴニストは、以下の表から選択され、癌は、選択されるＣＴＬＡ−４アンタゴニストに対する以下の表中の癌である。 
【０１０９】
【表４】
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【０１１０】
いくつかの実施形態において、対象は、前癌病変を有する対象、例えば前癌病変を有するヒト対象などである。いくつかの実施形態において、前癌病変は、子宮頸部上皮内腫瘍（ＣＩＮ、例えばＣＩＮグレードＩＩＩ）および外陰上皮内腫瘍（ＶＩＮ、例えばＶＩＮグレードＩＩＩ）からなる群から選択される。 
【０１１１】
いくつかの実施形態において、対象は、処置、例えば本明細書中に記載のようなＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１アンタゴニストおよび／または本明細書中に記載のようなＣＴＬＡ−４アンタゴニストでの処置に反応しない。対象は、状態、例えば癌が処置に耐性があるかまたは時間経過とともに処置に耐性となる（例えば対象が本明細書中に記載のようなＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１アンタゴニストおよび／またはＣＴＬＡ−４アンタゴニストに反応性であり得、時間経過とともにそれらのアンタゴニストに対して耐性となっている）場合、処置に反応し得ない。いくつかの実施形態において、対象は、本明細書中に記載のような初代細胞由来生物製剤の投与後に処置に対して反応性となる。 
【０１１２】
キット 
本開示の他の態様は、本明細書中に記載の方法を行う、例えば癌または前癌病変を処置するのに適切なキットなどのキットに関する。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載のような初代細胞由来生物製剤（例えばＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＴＮＦ−αおよびＩＦＮ−γを含む）および本明細書中に記載のようなＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１のアンタゴニスト（例えばニボルマブ、ピジリズマブ、ペムブロリズマブ、ＭＥＤＩ−０６８０、ＲＥＧＮ２８１０、ＡＭＰ−２２４、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、ＢＭＳ−９３６５５９、アベルマブまたはＣＡ−１７０）を含むキットが提供される。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載のような初代細胞由来生物製剤（例えばＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＴＮＦ−αおよびＩＦＮ−γを含む）および本明細書中に記載のようなＣＴＬＡ−４のアンタゴニスト（例えばイピリムマブまたはトレメリムマブ）を含むキットが提供される。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載のような初代細胞由来生物製剤（例えばＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＴＮＦ−αおよびＩＦＮ−γを含む）、本明細書中に記載のようなＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１のアンタゴニスト（例えばニボルマブ、ピジリズマブ、ペムブロリズマブ、ＭＥＤＩ−０６８０、ＲＥＧＮ２８１０、ＡＭＰ−２２４、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、ＢＭＳ−９３６５５９、アベルマブまたはＣＡ−１７０）および本明細書中に記載のようなＣＴＬＡ−４のアンタゴニスト（例えばイピリムマブまたはトレメリムマブ）を含むキットが提供される。いくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤は、１つ以上の容器の第１のセット中で提供され、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１のアンタゴニストおよび／またはＣＴＬＡ−４のアンタゴニストは、１つ以上の容器の第２のセット中で提供される。いくつかの実施形態において、１つ以上の容器の第１のセットは、癌または前癌病変を処置するための治療的有効量の初代細胞由来生物製剤を含有し、１つ以上の容器の第２のセットは、癌または前癌病変を処置するための治療的有効量のＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１のアンタゴニストおよび／またはＣＴＬＡ−４のアンタゴニストを含有する。いくつかの実施形態において、１つ以上の容器の第１のセットは、対象に対する投与のための部位で希釈され得る初代細胞由来生物製剤の濃縮量を含有するか、または対象に投与しようとする初代細胞由来生物製剤をより小さな体積にすることを可能にし得る（例えば治療的有効量の本明細書中に記載の初代細胞由来生物製剤は、２倍、３倍、４倍、５倍、１０倍、１００倍、１０００倍またはそれ以上に濃縮）。いくつかの実施形態において、初代細胞由来生物製剤、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１のアンタゴニストおよび／またはＣＴＬＡ−４のアンタゴニストは凍結または凍結乾燥される。いくつかの実施形態において、本キットは、例えば対象において癌または前癌病変を処置するために、本明細書中に記載のような方法を行うための説明書をさらに含む。いくつかの実施形態において、本キットは、初代細胞由来生物製剤、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１のアンタゴニストおよび／またはＣＴＬＡ−４のアンタゴニストを投与するための１つ以上の送達装置、例えばシリンジまたはカテーテルなどをさらに含む。 
【０１１３】
サイトカインの組み合わせ 
いくつかの態様において、本開示は、例えば本明細書中に記載のような方法または組成物における、サイトカインの組み合わせの使用（個別に、または例えばサイトカイン混合物の形態で一緒に投与される）に関する。サイトカインの組み合わせは、ＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＩＦＮ−γおよびＴＮＦ−α（例えばヒトＩＬ−１β、ヒトＩＬ−２、ヒトＩＬ−６、ヒトＩＬ−８、ヒトＩＦＮ−γおよびヒトＴＮＦ−α）を含み得、これは、天然、組み換えもしくはペグ化サイトカインまたは天然、組み換えもしくはペグ化サイトカインの混合物を含み得る。いくつかの実施形態において、サイトカインの組み合わせは、他の天然、組み換えまたはペグ化サイトカイン、例えばＧＭ−ＣＳＦおよびＧ−ＣＳＦ（例えばヒトＧＭ−ＣＳＦおよびＧ−ＣＳＦ）をさらに含み得る。いくつかの実施形態において、サイトカインは、インビボでサイトカインの半減期を延長させるために、および／またはインビボでのサイトカインタンパク質の免疫原性または毒性を低下させるために、ペグ付加され得る（例えば米国特許出願公開第２００４／０１３６９５２号明細書を参照）。 
【０１１４】
サイトカインの組み合わせ中に含めるため、組み換えまたはペグ化サイトカインなどのサイトカインを生成させるために使用され得る代表的な成熟ヒトサイトカインタンパク質配列を以下で提供する。天然、組み換えおよび／またはペグ付加サイトカインを含むサイトカイン混合物などのサイトカインの組み合わせを作製するための方法は、当技術分野で公知である（例えば、米国特許第４，７３８，９２７号明細書、同第４，９９２，３６７号明細書、米国特許出願公開第２００４／０１３６９５２Ａ１号明細書およびＭｅｈｖａｒ，Ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ  ａｎｄ  Ｐｈａｒｍａｃｏｄｙｎａｍｉｃｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｂｙ  Ｐｏｌｙｅｔｈｙｌｅｎｅ  Ｇｌｙｃｏｌ  Ｃｏｎｊｕｇａｔｉｏｎ，Ｊ  Ｐｈａｒｍ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔ  Ｓｃｉ  ３（１）：１２５−１３６（２０００）を参照）。 
【０１１５】
ヒトＩＬ−１β 
APVRSLNCTLRDSQQKSLVMSGPYELKALHLQGQDMEQQVVFSMSFVQGEESNDKIPVALGLKEKNLYLSCVLKDDKPTLQLESVDPKNYPKKKMEKRFVFNKIEINNKLEFESAQFPNWYISTSQAENMPVFLGGTKGGQDITDFTMQFVSS（配列番号１）
【０１１６】
ヒトＩＬ−２ 
LSCIALSLALVTNSAPTSSSTKKTQLQLEHLLLDLQMILNGINNYKNPKLTRMLTFKFYMPKKATELKHLQCLEEELKPLEEVLNLAQSKNFHLRPRDLISNINVIVLELKGSETTFMCEYADETATIVEFLNRWITFCQSIIS（配列番号２）
【０１１７】
ヒトＩＬ−６ 
VPPGEDSKDVAAPHRQPLTSSERIDKQIRYILDGISALRKETCNKSNMCESSKEALAENNLNLPKMAEKDGCFQSGFNEETCLVKIITGLLEFEVYLEYLQNRFESSEEQARAVQMSTKVLIQFLQKKAKNLDAITTPDPTTNASLLTKLQAQNQWLQDMTTHLILRSFKEFLQSSLRALRQM（配列番号３）
【０１１８】
ヒトＩＬ−８ 
EGAVLPRSAKELRCQCIKTYSKPFHPKFIKELRVIESGPHCANTEIIVKLSDGRELCLDPKENWVQRVVEKFLKRAENS（配列番号４）
【０１１９】
ヒトＩＦＮ−γ 
QDPYVKEAENLKKYFNAGHSDVADNGTLFLGILKNWKEESDRKIMQSQIVSFYFKLFKNFKDDQSIQKSVETIKEDMNVKFFNSNKKKRDDFEKLTNYSVTDLNVQRKAIHELIQVMAELSPAAKTGKRKRSQMLFRG（配列番号５）
【０１２０】
ヒトＴＮＦ−α 
PVAHVVANPQAEGQLQWLNRRANALLANGVELRDNQLVVPSEGLYLIYSQVLFKGQGCPSTHVLLTHTISRIAVSYQTKVNLLSAIKSPCQRETPEGAEAKPWYEPIYLGGVFQLEKGDRLSAEINRPDYLDFAESGQVYFGII（配列番号６）
【０１２１】
いくつかの実施形態において、サイトカインの組み合わせ（これらは別個にまたは一緒に送達され得る）は、少なくとも１ＩＵ（例えば少なくとも１ＩＵ、少なくとも２ＩＵまたは少なくとも３ＩＵ）のＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８およびＴＮＦ−αのそれぞれおよびＩＦＮ−γ、例えばヒトＩＬ−１β、ヒトＩＬ−２、ヒトＩＬ−６、ヒトＩＬ−８、ヒトＴＮＦ−αおよびヒトＩＦＮ−γを含有する。いくつかの実施形態において、サイトカインの組み合わせ（これらは別個にまたは一緒に送達され得る）は、ＧＭ−ＣＳＦおよびＧ−ＣＳＦ、例えばヒトＧＭ−ＣＳＦおよびヒトＧ−ＣＳＦをさらに含み、サイトカインの組み合わせは、少なくとも０．０５ＩＵ（例えば少なくとも０．０５ＩＵ、少なくとも０．１ＩＵまたは少なくとも１ＩＵ）のＧＭ−ＣＳＦおよび少なくとも１ＩＵ（例えば少なくとも１ＩＵ、少なくとも２ＩＵまたは少なくとも３ＩＵ）のＧ−ＣＳＦを含有する。 
【０１２２】
いくつかの実施形態において、サイトカインの組み合わせ（これらは別個にまたは一緒に送達され得る）は、送達されるＩＬ−２の量に対する各サイトカインの比率を含有する。いくつかの実施形態において、サイトカインの組み合わせ（これらは別個にまたは一緒に送達され得る）は、０．４５〜１．３７（例えば０．４５〜０．９４）のＩＬ−２  ＩＵ（例えばヒトＩＬ−２  ＩＵ）に対するＩＬ−１β  ＩＵ（例えばヒトＩＬ−１β  ＩＵ）の比率；０．１９〜０．３９（例えば０．１９〜０．３４）のＩＬ−２  ＩＵ（例えばヒトＩＬ−２  ＩＵ）に対するＩＦＮ−γ  ＩＵ（例えばヒトＩＦＮ−γ  ＩＵ）の比率；０．５３〜１．２６（例えば０．５３〜０．９６）のＩＬ−２  ＩＵ（例えばヒトＩＬ−２  ＩＵ）に対するＴＮＦ−α  ＩＵ（例えばヒトＴＮＦ−α  ＩＵ）の比率；１．１６〜６．０６（例えば１．３２〜３．３５）のＩＬ−２  ＩＵ（例えばヒトＩＬ−２  ＩＵ）に対するＩＬ−６  ＩＵ（例えばヒトＩＬ−６  ＩＵ）の比率；および０．１５〜０．５１（例えば０．１５〜０．４１）のＩＬ−２  ＩＵ（例えばヒトＩＬ−２  ＩＵ）に対するＩＬ−８  ＩＵ（例えばヒトＩＬ−８  ＩＵ）の比率を含有する。いくつかの実施形態において、サイトカインの組み合わせ（これらは別個にまたは一緒に送達され得る）は、ＧＭ−ＣＳＦおよびＧ−ＣＳＦ、例えばヒトＧＭ−ＣＳＦおよびヒトＧ−ＣＳＦをさらに含み、対象に送達されるサイトカインの組み合わせの量は、０．１１〜０．９５（例えば０．１１〜０．５４）のＩＬ−２  ＩＵ（例えばヒトＩＬ−２  ＩＵ）に対するＧ−ＣＳＦ  ＩＵ（例えばヒトＧ−ＣＳＦ  ＩＵ）の比率および０．００２〜０．０６（例えば０．０３〜０．０４）のＩＬ−２  ＩＵ（例えばヒトＩＬ−２  ＩＵ）に対するＧＭ−ＣＳＦ  ＩＵ（例えばヒトＧＭ−ＣＳＦ  ＩＵ）の比率を含有する。 
【０１２３】
いくつかの実施形態において、サイトカインの組み合わせ（これらは別個にまたは一緒に送達され得る）は、２２〜６５７ＩＵ（例えば３０〜１４７ＩＵ）のＩＬ−１β、例えばヒトＩＬ−１β；２９〜４７８ＩＵ（例えば６７〜１５６ＩＵ）のＩＬ−２、例えばヒトＩＬ−２；１０〜１８５ＩＵ（例えば１３〜５３ＩＵ）のＩＦＮ−γ、例えばヒトＩＦＮ−γ；２９〜６００ＩＵ（例えば３６〜１５０ＩＵ）のＴＮＦ−α、例えばヒトＴＮＦ−α；３４〜２，８９５ＩＵ（例えば８９〜５２４ＩＵ）のＩＬ−６、例えばヒトＩＬ−６；および５〜２４４ＩＵ（例えば１０〜６４ＩＵ）のＩＬ−８、例えばヒトＩＬ−８を含有する。いくつかの実施形態において、サイトカインの組み合わせ（これらは別個にまたは一緒に送達され得る）は、ＧＭ−ＣＳＦおよびＧ−ＣＳＦ、例えばヒトＧＭ−ＣＳＦおよびヒトＧ−ＣＳＦをさらに含み、サイトカインの組み合わせは、７〜４５６ＩＵ（例えば７〜８４ＩＵ）のＧ−ＣＳＦおよび０．０８〜２８ＩＵ（例えば２〜６ＩＵ）のＧＭ−ＣＳＦを含有する。いくつかの実施形態において、サイトカインの組み合わせ（これらは別個にまたは一緒に送達され得る）は、２２〜６５７ＩＵ／ｍＬ（例えば３０〜１４７ＩＵ／ｍＬ）の範囲のＩＬ−１β、例えばヒトＩＬ−１βの濃度；２９〜４７８ＩＵ／ｍＬ（例えば６７〜１５６ＩＵ／ｍＬ）の範囲のＩＬ−２、例えばヒトＩＬ−２の濃度、１０〜１８５ＩＵ／ｍＬ（例えば１３〜５３ＩＵ／ｍＬ）の範囲のＩＦＮ−γ、例えばヒトＩＦＮ−γの濃度；２９〜６００ＩＵ／ｍＬ（例えば３６〜１５０ＩＵ／ｍＬ）の範囲のＴＮＦ−α、例えばヒトＴＮＦ−αの濃度；３４〜２，８９５ＩＵ／ｍＬ（例えば８９〜５２４ＩＵ／ｍＬ）の範囲のＩＬ−６、例えばヒトＩＬ−６の濃度；および５〜２４４ＩＵ／ｍＬ（例えば１０〜６４ＩＵ／ｍＬ）の範囲のＩＬ−８、例えばヒトＩＬ−８の濃度を含有する。いくつかの実施形態において、サイトカインの組み合わせ（これらは別個にまたは一緒に送達され得る）は、ＧＭ−ＣＳＦおよびＧ−ＣＳＦ、例えばヒトＧＭ−ＣＳＦおよびヒトＧ−ＣＳＦをさらに含み、サイトカインの組み合わせは、７〜４５６ＩＵ／ｍＬ（例えば７〜８４ＩＵ／ｍＬ）の範囲のＧ−ＣＳＦ濃度および０．０８〜２８ＩＵ／ｍＬ（例えば２〜６ＩＵ／ｍＬ）の範囲のＧＭ−ＣＳＦ濃度を含有する。 
【０１２４】
いくつかの実施形態において、サイトカインの組み合わせ（これらは別個にまたは一緒に送達され得る）は、２２０〜６，７００ｐｃｇ（例えば３１０〜１，５００ｐｃｇ）のＩＬ−１β、例えばヒトＩＬ−１β；１７３０〜２８，１００ｐｃｇ（例えば３，９６０〜９，２００ｐｃｇ）のＩＬ−２、例えばヒトＩＬ−２；５６０〜１０，９００ｐｃｇ（例えば７５０〜３，１００ｐｃｇ）のＩＦＮ−γ、例えばヒトＩＦＮ−γ；５８０〜１２，０００ｐｃｇ（例えば７２０〜３，０００ｐｃｇ）のＴＮＦ−α、例えばヒトＴＮＦ−α；２６０〜２２，１００ｐｃｇ（例えば６８０〜４，０００ｐｃｇ）のＩＬ−６、例えばヒトＩＬ−６；および４，６１０〜２４３，６００ｐｃｇ（例えば１０，３９０〜６３，８００ｐｃｇ）のＩＬ−８、例えばヒトＩＬ−８を含有する。いくつかの実施形態において、サイトカインの組み合わせ（これらは別個にまたは一緒に送達され得る）は、ＧＭ−ＣＳＦおよびＧ−ＣＳＦ、例えばヒトＧＭ−ＣＳＦおよびヒトＧ−ＣＳＦをさらに含み、サイトカインの組み合わせは、６０〜３，８００ｐｃｇ（例えば６０〜７００ｐｃｇ）のＧ−ＣＳＦおよび１０〜３，５００ｐｃｇ（例えば２５０〜８００ｐｃｇ）のＧＭ−ＣＳＦを含有する。いくつかの実施形態において、サイトカインの組み合わせ（これらは別個にまたは一緒に送達され得る）は、３００〜１，４００ｐｃｇ／ｍＬの範囲のＩＬ−１β、例えばヒトＩＬ−１βの濃度；４，０００〜８，０００ｐｃｇ／ｍＬの範囲のＩＬ−２、例えばヒトＩＬ−２の濃度；１，０００〜３，８００ｐｃｇ／ｍＬの範囲のＩＦＮ−γ、例えばヒトＩＦＮ−γの濃度および１，０００〜４，３００ｐｃｇ／ｍＬの範囲のＴＮＦ−α、例えばヒトＴＮＦ−αの濃度を含有する。 
【０１２５】
いくつかの実施形態において、サイトカインの組み合わせ（これらは別個にまたは一緒に送達され得る）は、２２０〜６，７００ｐｃｇ／ｍＬ（例えば３１０〜１，５００ｐｃｇ／ｍＬ）の範囲のＩＬ−１β、例えばヒトＩＬ−１βの濃度；１７３０〜２８，１００ｐｃｇ／ｍＬ（例えば３，９６０〜９，２００ｐｃｇ／ｍＬ）の範囲のＩＬ−２、例えばヒトＩＬ−２の濃度；５６０〜１０，９００ｐｃｇ／ｍＬ（例えば７５０〜３，１００ｐｃｇ／ｍＬ）の範囲のＩＦＮ−γ、例えばヒトＩＦＮ−γの濃度；５８０〜１２，０００ｐｃｇ／ｍＬ（例えば７２０〜３，０００ｐｃｇ／ｍＬ）の範囲のＴＮＦ−α、例えばヒトＴＮＦ−αの濃度；２６０〜２２，１００ｐｃｇ／ｍＬ（例えば６８０〜４，０００ｐｃｇ／ｍＬ）の範囲のＩＬ−６、例えばヒトＩＬ−６の濃度；および４，６１０〜２４３，６００ｐｃｇ／ｍＬ（例えば１０，３９０〜６３，８００ｐｃｇ／ｍＬ）の範囲のＩＬ−８、例えばヒトＩＬ−８の濃度を含有する。いくつかの実施形態において、サイトカインの組み合わせ（これらは別個にまたは一緒に送達され得る）は、ＧＭ−ＣＳＦおよびＧ−ＣＳＦ、例えばヒトＧＭ−ＣＳＦおよびヒトＧ−ＣＳＦをさらに含み、サイトカインの組み合わせは、６０〜３，８００ｐｃｇ／ｍＬ（例えば６０〜７００ｐｃｇ／ｍＬ）の範囲のＧ−ＣＳＦ濃度および１０〜３，５００ｐｃｇ／ｍＬ（例えば２５０〜８００ｐｃｇ／ｍＬ）の範囲のＧＭ−ＣＳＦ濃度を含有する。 
【０１２６】
いくつかの態様において、本開示は、本明細書中に記載のようなサイトカインの組み合わせを利用した、処置、例えば癌または前癌病変の処置の方法に関する。いくつかの実施形態において、本方法は、ａ）有効量の本明細書中に記載のようなサイトカイン（例えばＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＴＮＦ−αおよびＩＦＮ−γを含む）の組み合わせを癌または前癌病変を有する対象に投与することと；ｂ）有効量の本明細書中に記載のようなＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１のアンタゴニストを対象に投与することと、を含む。いくつかの実施形態において、本方法は、ａ）有効量の本明細書中に記載のようなサイトカインの組み合わせ（例えばＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＴＮＦ−αおよびＩＦＮ−γを含む）を癌または前癌病変を有する対象に投与することと；ｂ）有効量の本明細書中に記載のようなＣＴＬＡ−４のアンタゴニストを対象に投与することとを含む。いくつかの実施形態において、本方法は、ａ）癌または前癌病変を有する対象に、有効量の本明細書中に記載のようなサイトカインの組み合わせ（例えばＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＴＮＦ−αおよびＩＦＮ−γを含む）を投与することと；ｂ）有効量の本明細書中に記載のようなＣＴＬＡ−４のアンタゴニストおよび有効量の本明細書中に記載のようなＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１のアンタゴニストを対象に投与することと、を含む。 
【０１２７】
いくつかの実施形態において、サイトカインの組み合わせおよびＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１アンタゴニストおよび／またはＣＴＬＡ−４アンタゴニストの投与は別個の時間に行われ、および／または（例えば異なる投与経路により）対象の異なる位置に投与される。本方法のいくつかの実施形態において、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１アンタゴニストおよびＣＴＬＡ−４アンタゴニストが併用される場合、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１アンタゴニストおよびＣＴＬＡ−４アンタゴニストは一緒に投与される。いくつかの実施形態において、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１アンタゴニストおよびＣＴＬＡ−４アンタゴニストは別個の時間に投与される。 
【０１２８】
いくつかの実施形態において、サイトカインの組み合わせおよびＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１アンタゴニストおよび／またはＣＴＬＡ−４アンタゴニストは、同じ日であるが、（例えば異なる投与経路により）対象における異なる位置に投与される。いくつかの実施形態において、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１アンタゴニストは静脈内または経口投与される。いくつかの実施形態において、ＣＴＬＡ−４アンタゴニストは静脈内投与される。いくつかの実施形態において、サイトカインの組み合わせは、皮下に、カテーテルにより、節内に（ｉｎｔｒａｎｏｄａｌｌｙ）、腫瘍の周囲に、腫瘍内に、または外リンパに（例えば皮下注射またはリンパ節を取り囲む組織へのカテーテル留置により）投与される。 
【０１２９】
いくつかの実施形態において、サイトカインの組み合わせの少なくとも１回の投与（別個にまたは一緒に、の何れか、例えばサイトカイン混合物として）は、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１アンタゴニストの少なくとも１回の投与の前に投与される。いくつかの実施形態において、サイトカインの組み合わせの少なくとも１回の投与は、ＣＴＬＡ−４アンタゴニストの少なくとも１回の投与の前に投与される。いくつかの実施形態において、サイトカインの組み合わせの少なくとも１回の投与は、ＣＴＬＡ−４アンタゴニストの少なくとも１回の投与およびＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１アンタゴニストの少なくとも１回の投与の前に投与される。いくつかの実施形態において、サイトカインの組み合わせの少なくとも１回の投与（別個にまたは一緒に、の何れか、例えばサイトカイン混合物として）は、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１アンタゴニストの少なくとも１回の投与後に投与される。いくつかの実施形態において、サイトカインの組み合わせの少なくとも１回の投与は、ＣＴＬＡ−４アンタゴニストの少なくとも１回の投与後に投与される。いくつかの実施形態において、サイトカインの組み合わせの少なくとも１回の投与は、ＣＴＬＡ−４アンタゴニストの少なくとも１回の投与およびＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１アンタゴニストの少なくとも１回の投与後に投与される。いくつかの実施形態において、サイトカインの組み合わせの投与（別個にまたは一緒に、の何れか、例えばサイトカイン混合物として）は、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１アンタゴニストの前後の両方で行われる。いくつかの実施形態において、サイトカインの組み合わせの投与は、ＣＴＬＡ−４アンタゴニストの前後の両方で行われる。いくつかの実施形態において、サイトカインの組み合わせの投与は、ＣＴＬＡ−４アンタゴニストおよびＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１アンタゴニストの前後の両方で行われる。いくつかの実施形態において、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１アンタゴニストの投与は、サイトカインの組み合わせ（別個にまたは一緒に、の何れか、例えばサイトカイン混合物として）の前後の両方で行われる。いくつかの実施形態において、ＣＴＬＡ−４アンタゴニストの投与は、サイトカインの組み合わせの前後の両方で行われる。いくつかの実施形態において、ＣＴＬＡ−４アンタゴニストおよびＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１アンタゴニストの投与は、サイトカインの組み合わせの前後の両方で行われる。 
【０１３０】
いくつかの実施形態において、サイトカインの組み合わせ（別個にまたは一緒に、の何れか、例えばサイトカイン混合物として）およびＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１アンタゴニストおよび／またはＣＴＬＡ−４アンタゴニストの投与は、複数サイクルにわたり行われる。いくつかの実施形態において、サイトカインの組み合わせ（別個にまたは一緒に、の何れか、例えばサイトカイン混合物として）は、１日１回１０日間の投与など、１サイクル以上の１０日サイクルにわたり投与され、この１０日間は、連続であるか、または週末の間など、生物製剤が送達されない１日以上（１、２、３、４または５日）を含み得る。いくつかの実施形態において、１サイクル以上の１０日サイクルは、複数の薬剤を含む、１サイクル以上の２１日サイクルの一部である。いくつかの実施形態において、各２１日サイクルに対して、第１日にシクロホスファミドが投与され（例えば静脈内で３００ｍｇ／ｍ２）；インドメタシン（例えば１日３回経口で２５ｍｇ）、オメプラゾール（例えば２０ｍｇ経口）および亜鉛（例えば１５〜３０ｍｇ経口）が２１日間にわたり毎日投与され；各サイクルの第４日に開始して、本明細書中に記載のようなサイトカインの組み合わせ（別個にまたは一緒に、の何れか、例えばサイトカイン混合物として）（例えばＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＴＮＦ−αおよびＩＦＮ−γを含む）が１０日間にわたり毎日投与される（例えば継続的にまたは間に１日以上を挟んで５日のブロックを２ブロックで、の何れか）。 
【０１３１】
いくつかの実施形態において、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１アンタゴニストは、１サイクル以上の２〜４週サイクルにわたり投与され、アンタゴニストの投与は、各サイクルに対して２〜４週間ごとに１回行われる（例えばサイクルあたり、２週間ごとに１回、３週間ごとに１回、または４週間ごとに１回）。いくつかの実施形態において、ＣＴＬＡ−４アンタゴニストは、アンタゴニストの投与が３〜１２週間ごとに１回行われる１サイクル以上の３〜１２週サイクルにわたり投与される（例えば３週間ごとに１回、４週間ごとに１回、８週間ごとに１回、または１２週間ごとに１回）。 
【０１３２】
いくつかの実施形態において、本明細書中に記載の方法は、サイトカインの組み合わせ（別個にまたは一緒に、の何れか、例えばサイトカイン混合物として）が上記のように１０日サイクルにわたり投与され（任意選択により上記の２１日サイクルの一部として）、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１アンタゴニストが、上記のように２〜４週サイクルにわたり投与される投与計画を利用し、この投与計画は少なくとも１回反復（例えば１年あたり１、２、３または４回反復）される。この計画のいくつかの実施形態において、サイトカインの組み合わせ（別個にまたは一緒に、の何れか、例えばサイトカイン混合物として）は、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１アンタゴニストの前に投与される。この計画の他の実施形態において、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１アンタゴニストは、サイトカインの組み合わせ（別個にまたは一緒に、の何れか、例えばサイトカイン混合物として）の前に投与される。 
【０１３３】
いくつかの実施形態において、本明細書中に記載の方法は、サイトカインの組み合わせ（別個にまたは一緒に、の何れか、例えばサイトカイン混合物として）が、上記のように最長１０日間のサイクルにわたり投与され（任意選択により上記の２１日サイクルの一部として）、ＣＴＬＡ−４アンタゴニストが上記のような３〜１２週サイクルにわたり投与される投与計画を利用し、この投与計画は少なくとも１回反復（例えば１年あたり１、２、３または４回反復）される。この計画のいくつかの実施形態において、サイトカインの組み合わせは、ＣＴＬＡ−４アンタゴニストの前に投与される。この計画の他の実施形態において、ＣＴＬＡ−４アンタゴニストは、初代細胞由来生物製剤の前に投与される。 
【０１３４】
いくつかの実施形態において、本明細書中に記載の方法は、サイトカインの組み合わせ（別個にまたは一緒に、の何れか、例えばサイトカイン混合物として）が、上記のような最長１０日間のサイクルにわたり投与され（任意選択により上記の２１日サイクルの一部として）、ＣＴＬＡ−４アンタゴニストが上記のような３〜１２週サイクルにわたり投与され、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１アンタゴニストが、上記のような２〜４週間サイクルにわたり投与される投与計画を利用し、この投与計画は少なくとも１回反復（例えば１年あたり１、２、３または４回反復）される。この計画のいくつかの実施形態において、サイトカインの組み合わせは、ＣＴＬＡ−４アンタゴニストおよびＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１アンタゴニストの前に投与される。この計画の他の実施形態において、ＣＴＬＡ−４アンタゴニストおよびＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１アンタゴニストは、サイトカインの組み合わせの前に投与される。 
【０１３５】
いくつかの実施形態において、本明細書中に記載のようなサイトカインの組み合わせ（例えばＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＴＮＦ−αおよびＩＦＮ−γを含む）（別個にまたは一緒に、の何れか、例えばサイトカイン混合物として）および本明細書中に記載のようなＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１のアンタゴニスト（例えばニボルマブ、ピジリズマブ、ペムブロリズマブ、ＭＥＤＩ−０６８０、ＲＥＧＮ２８１０、ＡＭＰ−２２４、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、ＢＭＳ−９３６５５９、アベルマブまたはＣＡ−１７０）を含むキットが提供される。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載のようなサイトカインの組み合わせ（例えばＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＴＮＦ−αおよびＩＦＮ−γを含む）（別個にまたは一緒に、の何れか、例えばサイトカイン混合物として）および本明細書中に記載のようなＣＴＬＡ−４のアンタゴニスト（例えばイピリムマブまたはトレメリムマブ）を含むキットが提供される。いくつかの実施形態において、サイトカインの組み合わせ（別個にまたは一緒に、の何れか、例えばサイトカイン混合物として）、本明細書中に記載のようなＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１のアンタゴニスト（例えばニボルマブ、ピジリズマブ、ペムブロリズマブ、ＭＥＤＩ−０６８０、ＲＥＧＮ２８１０、ＡＭＰ−２２４、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、ＢＭＳ−９３６５５９、アベルマブまたはＣＡ−１７０）および本明細書中に記載のようなＣＴＬＡ−４のアンタゴニスト（例えばイピリムマブまたはトレメリムマブ）を含むキットが提供される。いくつかの実施形態において、サイトカインの組み合わせ（別個にまたは一緒に、の何れか、例えばサイトカイン混合物として）は、１つ以上の容器の第１のセット中で提供され、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１のアンタゴニストおよび／またはＣＴＬＡ−４のアンタゴニストは、１つ以上の容器の第２のセット中で提供される。いくつかの実施形態において、１つ以上の容器の第１のセットは、癌または前癌病変を処置するための治療的有効量のサイトカインの組み合わせ（別個にまたは一緒に、の何れか、例えばサイトカイン混合物として）を含有し、１つ以上の容器の第２のセットは、治療的有効量の癌または前癌病変を処置するためのＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１のアンタゴニストおよび／またはＣＴＬＡ−４のアンタゴニストを含有する。いくつかの実施形態において、サイトカインの組み合わせ（別個にまたは一緒に、の何れか、例えばサイトカイン混合物として）、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１のアンタゴニストおよび／またはＣＴＬＡ−４のアンタゴニストは、凍結または凍結乾燥される。いくつかの実施形態において、本キットは、本明細書中に記載のような方法を行うための、例えば対象において癌または前癌病変を処置するための、説明書をさらに含む。いくつかの実施形態において、本キットは、サイトカインの組み合わせ（別個にまたは一緒に、の何れか、例えばサイトカイン混合物として）、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１のアンタゴニストおよび／またはＣＴＬＡ−４のアンタゴニストを投与するための１つ以上の送達装置、例えばシリンジまたはカテーテルなど、をさらに含む。 
【０１３６】
詳述されていなくても、当業者は、上記の説明に基づいて、本開示をその最大範囲まで利用し得ると考えられる。したがって、次の具体的な実施形態は、単なる実例であり、本開示の残りの部分を限定するものでは一切ないと解釈されるべきである。本明細書中で引用される刊行物は全て、本明細書中で言及される目的または主題に対する参照により本明細書中に組み込まれる。 
【実施例】
【０１３７】
実施例１．初代細胞由来生物製剤はリンパ球浸潤およびＰＤ−Ｌ１発現を増加させる。 
癌の処置は最近、癌免疫療法の出現に伴って進歩してきた。現在、チェックポイント阻害剤（ＣＩ）は、外科手術、放射線療法および化学療法のより確立されたモダリティとともに癌を処置するための根本的な新しいモダリティであり、多くの患者に対して新しい治療の希望を与える。ペムブロリズマブおよびニボルマブは、転移性メラノーマ、Ｂ−ｒａｆ阻害剤またはイピリムマブでの治療が奏功しなかった転移性メラノーマの第１選択薬および白金ベースの治療が奏功しなかった非小細胞肺癌の処置として承認された。最近、ペムブロリズマブが腎臓癌の第２の選択治療薬として承認され、アテゾリズマブ（ＴＥＣＥＮＴＲＩＱ（商標））は、膀胱癌に対して承認された最初のＰＤ−Ｌ１阻害剤となった。デュルバルマブはまた、手術不能または再発性の転移性膀胱癌に対するブレークスルーであるという指摘を受けた。 
【０１３８】
ＩＲＸ−２は、強力な免疫原（ＰＨＡ）で刺激されたドナー末梢血単核細胞から産生される複数のサイトカイン成分を伴う初代細胞由来生物製剤である。ＩＲＸ−２生物製剤は、強力な免疫反応を生じさせるために相乗的に一緒に働くＩＬ−１β、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８、ＴＮＦ−αおよびＩＦＮ−γを含む複数のサイトカインを含有する。ＩＲＸ−２は、抗原提示細胞による抗原提示を活性化し、促進することを含め、免疫系の様々な細胞において複数の効果を有し、Ｔ細胞の増殖および細胞溶解能を向上させ、それらをアポトーシスから保護し、ＮＫ細胞の数を増加させ活性を上昇させる（Ｅｇａｎら（２００７）Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ  ３０（６）：６２４−６３３；Ｃｚｙｓｔｏｗｓｋａら（２００９）Ｃｅｌｌ  Ｄｅａｔｈ  Ｄｉｆｆｅｒ  １６（５）：７０８−７１８；Ｃｚｙｓｔｏｗｓｋａら（２０１１）Ｃａｎｃｅｒ  ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ：ＣＩＩ６０（４）：４９５−５０６；Ｓｃｈｉｌｌｉｎｇら（２０１２）Ｃａｎｃｅｒ  ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ：ＣＩＩ６１（９）：１３９５−１４０５；Ｓｃｈｉｌｌｉｎｇら（２０１３）ＰＬｏＳ  Ｏｎｅ  ８（２）：ｅ４７２３４；およびＳｃｈｉｌｌｉｎｇら（２０１２）Ｊ  Ｍｏｌ  Ｍｅｄ（Ｂｅｒｌ）９０（２）：１３９−１４７））。臨床において、（ＩＲＸ−２、シクロホスファミド、インドメタシンおよび亜鉛を利用する）ＩＲＸ−２治療計画は、好ましい毒性プロファイルにより安全であることが示されている（Ｆｒｅｅｍａｎら（２０１１）Ａｍ  Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｏｎｃｏｌ  ３４（２）：１７３−１７８）。概念の重要な臨床プルーフは、多施設第２ａ相試験からの処置前および処置後の腫瘍検体の詳細な分析を通じて得られ、ここでは、ＩＲＸ−２治療計画後のリンパ球浸潤の増加が、２５名の評価可能な患者のうち２１名で見られた（Ｂｅｒｉｎｓｔｅｉｎら（２０１２）Ｃａｎｃｅｒ  ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ．Ｉｎｃｒｅａｓｅｄ  ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ  ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ｈｅａｄ  ａｎｄ  ｎｅｃｋ  ｃａｎｃｅｒ  ｔｒｅａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  ｔｈｅ  ＩＲＸ−２  ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ  ｒｅｇｉｍｅｎ．６１（６）：７７１−７８２）。 
【０１３９】
さらなるバイオマーカーの発現について上記第２ａ相試験で処置された７名の対象を遡って分析して、浸潤物の特徴を調べ、腫瘍特異的な免疫反応を増強させ得る免疫介入を知らせ得る腫瘍微小環境内の抑制機序を解明する。対象に与えられる（以下の表で示されるような）ＩＲＸ−２治療計画は、第４〜１５日の１０日間にわたる毎日のＩＲＸ−２、第１日のシクロホスファミド、第１〜２１日のインドメタシン、亜鉛およびプロトンポンプ阻害剤を含む２１日治療計画であった。 
【０１４０】
【表５】
2019524887.tif 000007
【０１４１】
ＩＲＸ−２投与量は、各注射において対象に送達される用量中の１１５  ＩＬ−２国際単位（ＩＵ）の存在により定めた。 
【０１４２】
患者の生検試料（ＩＲＸ−２での処置前）のホルマリン固定パラフィン包埋（ＦＦＰＥ）試料を原発腫瘍摘出試料（ＩＲＸ−２での処置後）と比較し、ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ  ＯＰＡＬ（商標）システムを使用してＣＤ４、ＣＤ８、ＰＤ−Ｌ１、ＣＤ６８、ＦｏｘＰ３およびサイトケラチンを含むマーカーに対して染色した。ＰＤ−Ｌ１発現に対して、Ｓｐｒｉｎｇ  Ｂｉｏからのウサギモノクローナル抗体クローンＳＰ１４２を染色のために使用した。細胞膜上でＰＤ−Ｌ１発現を測定し、平均正規化蛍光として報告した。ＰＤ−Ｌ１細胞集団に対する膜蛍光の４つのレベル（値域）の同定のためのゲーティング設定を腫瘍組織内で確立した。これらのゲーティング設定を使用して、腫瘍中の細胞を４つのＰＤ−Ｌ１発現値域（０〜３＋）のうち１つに割り当てた。結果をヒストグラムとして与え、これを使用して、腫瘍中のＰＤ−Ｌ１に対するＨ−スコアを計算した。腫瘍および非腫瘍組織セグメントにおけるＣＤ６８＋細胞に対して、平均膜ＰＤ−Ｌ１強度も報告した。 
【０１４３】
多重免疫組織化学（ＩＨＣ）による７名の対応患者の分析によって、Ｈ＆Ｅ染色を使用して、ＩＲＸ−２処置の結果、リンパ球浸潤（ＬＩ）が増加し、マクロファージ浸潤が増加したという以前の結果が確認された（図１は１名の代表的な患者を示す）。 
【０１４４】
次に、この系を使用して、ＰＤ−Ｌ１チェックポイント経路の発現および発現変化を評価した。４〜７名の患者において、ＩＲＸ−２処置後にＰＤ−Ｌ１の意義のある増加があった（図２）。したがって、ＩＲＸ−２はリンパ球浸潤およびＰＤ−Ｌ１発現を増加させ、このことから、ＩＲＸ−２治療計画が腫瘍特異的な免疫反応を開始させている可能性があることが示唆される。 
【０１４５】
多くの異なる腫瘍タイプにおけるチェックポイント阻害剤での結果は有望であり、免疫療法アプローチに対する概念実証を与えているものの、停滞した状態になっており、それによって、チェックポイント阻害からの恩恵を受けるのは、処置を受けた患者の２０〜３０％前後のみとなっている。異なるチェックポイント阻害剤を組み合わせることによりその恩恵がさらに改善されているが、残念ながらこのアプローチには毒性プロファイルの上昇が伴う（Ｐｏｓｔｏｗら（２０１５）Ｔｈｅ  Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  ３７２（２１）：２００６−２０１７）。より反応しそうな患者について選択するために、反応のバイオマーカー、例えばＬＩ、ＰＤ−Ｌ１発現、突然変異荷重およびミスマッチ修復酵素の状態が使用されている（Ｒｉｚｖｉら（２０１５）Ｃａｎｃｅｒ  ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ．Ｓｃｉｅｎｃｅ  ３４８（６２３０）：１２４−１２８；Ｇａｒｏｎら（２０１５）Ｔｈｅ  Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  ３７２（２１）：２０１８−２０２８；およびＬｅら（２０１５）Ｔｈｅ  Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  ３７２（２６）：２５０９−２５２０）。しかし、腫瘍中のＰＤ−Ｌ１発現は、このような阻害剤で処置される患者の臨床転帰に対する唯一の最重要因子であると思われるので、基礎的な難題は、腫瘍においてＰＤ−Ｌ１発現を上昇させるためのストラテジーを開発することである（例えば、Ｔａｕｂｅら、Ｃｌｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ；２０（１９）：５０６４−７４（２０１４）；ＳｕｎｓｈｉｎｅおよびＴａｕｂｅ，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，２３：３２−３８（２０１５）；およびＣａｒｂｏｇｎｉｎら、ＰＬｏＳ  ＯＮＥ  １０（６）：ｅ０１３０１４２（２０１５）を参照）。本明細書中のデータは、ＩＲＸ−２投与後、一部の患者においてＰＤ−Ｌ１の発現が上昇したことを示す。このことから、ＩＲＸ−２処置後のＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤の適用により、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害剤の治療活性が向上し、および／またはＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害に反応可能である患者集団を増加させ得ることが示唆される。 
【０１４６】
実施例２．初代細胞由来生物製剤はＣＴＬＡ−４発現を上昇させる。 
上記実施例１に記載の第２ａ相試験で処置された７名の対象をＣＴＬＡ−４発現についても遡って分析した。 
【０１４７】
患者の生検試料（ＩＲＸ−２での処置前）のホルマリン固定パラフィン包埋（ＦＦＰＥ）試料を原発腫瘍摘出試料（ＩＲＸ−２での処置後）と比較した。１枚のＦＦＰＥ組織スライドをヘマトキシリンおよびエオシン（ＨＥ）で染色し、腫瘍領域の輪郭を明らかにするために病理学者が再評価した。平均腫瘍細胞含量は６０％（最小３０％）であった。製造者のプロトコールに従い、Ｈｉｇｈ  Ｐｕｒｅ  ｍｉｃｒｏＲＮＡ  ＦＦＰＥ  Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ  Ｋｉｔ（Ｒｏｃｈｅ，Ｂａｓｅｌ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）またはＨｉｇｈ  Ｐｕｒｅ  ＦＦＰＥ  ＲＮＡ  Ｍｉｃｒｏ  Ｋｉｔ（Ｒｏｃｈｅ）によって、ＭｉＲＮＡまたはトータルＲＮＡを５μｍスライドの腫瘍領域から単離した。簡潔に述べると、最初にキシレンで組織切片の脱パラフィン処理を行い、エタノールで洗浄した。次に組織を溶解させ、プロテイナーゼＫで５５℃にて３時間処理した。その後、溶解物をスピンカラムに載せ、洗浄ステップ後、ｍｉＲＮＡを５０μＬ溶出緩衝液中で溶出させた。４０μＬの溶出緩衝液中でトータルＲＮＡを２回溶出させた。その後、ＲＮＡを精製し、製造者のプロトコールに従い、Ｃｌｅａｎ＆Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｏｒ−５（商標）Ｋｉｔ（Ｚｙｍｏ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，Ｉｒｖｉｎｅ，ＣＡ，ＵＳＡ）を使用して濃縮した。Ｑｕｂｉｔ（登録商標）３．０蛍光光度計（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）上で、ＮａｎｏＤｒｏｐ（商標）２０００（Ｉｍｐｌｅｎ  ＧｍｂＨ，Ｍｕｎｉｃｈ，Ｇｅｒｍａｎｙ）またはＱｕｂｉｔ（登録商標）ＲＮＡ  ＢＲＡｓｓａｙ  Ｋｉｔ（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ，ＵＳＡ）によりＲＮＡ収量を測定した。Ｌａｂ−ｏｎ−ａ−Ｃｈｉｐ  ２１００  Ｂｉｏａｎａｌｙｚｅｒ（Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｓａｎｔａ  Ｃｌａｒａ，ＣＡ，ＵＳＡ）上でＲＮＡの質を調べた。ＦＦＰＥ物質からのＲＮＡが低質であり得る場合（ＲＩＮ値＜２）、ＲＩＮ（ＲＮＡインテグリティーナンバー（ＲＮＡ  Ｉｎｔｅｇｒｉｔｙ  Ｎｕｍｂｅｒ））値のみに基づいて試料を排除しなかった。製造者の仕様書に従い、ｎＣｏｕｎｔｅｒ（登録商標）ＰａｎＣａｎｃｅｒ  Ｉｍｍｕｎｅ  Ｐｒｏｆｉｌｉｎｇ  Ｐａｎｅｌ（Ｎａｎｏｓｔｒｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｓｅａｔｔｌｅ，ＷＡ，ＵＳＡ）を使用して、トータルＲＮＡからのＣＴＬＡ−４ｍＲＮＡレベルを測定した。 
【０１４８】
次に、この系を使用して、ＣＴＬＡ−４チェックポイント経路の発現および発現変化を評価した。７名の患者のうち５名において、ＩＲＸ−２処置後にＣＴＬＡ−４遺伝子発現の意義のある上昇があった（図３）。このように、ＩＲＸ−２はＣＴＬＡ−４発現を増加させ、このことから、ＩＲＸ−２治療計画が、機能的な腫瘍特異的免疫反応およびＣＴＬＡ４免疫制御経路の生理的誘導を開始させている可能性があることがさらに示唆される。 
【０１４９】
ＣＴＬＡ−４の処理前レベルの上昇が、ＣＴＬＡ４遮断に対する陽性臨床反応を予測することが以前示された（例えば、Ｊａｍｉｅｓｏｎら、Ｇｅｎｅ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｐｒｏｆｉｌｉｎｇ  ｔｏ  ｐｒｅｄｉｃｔ  ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅｎｅｓｓ  ｔｏ  ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｇｅｎｅ  Ｔｈｅｒａｐｙ（２０１７）２４：１３４−１４０およびＶａｎ  Ａｌｌｅｎら、Ｇｅｎｏｍｉｃ  ｃｏｒｒｅｌａｔｅｓ  ｏｆ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｔｏ  ＣＴＬＡ−４  ｂｌｏｃｋａｄｅ  ｉｎ  ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ  ｍｅｌａｎｏｍａ．Ｓｃｉｅｎｃｅ（２０１５）３５０（６２５７）：２０７−２１１を参照）。本明細書中のデータは、ＩＲＸ−２投与後に一部の患者においてＣＴＬＡ−４の発現が上昇したことを示す。これにより、ＩＲＸ−２処置後のＣＴＬＡ−４阻害剤の適用によって、ＣＴＬＡ−４阻害剤の治療活性が上昇し得、および／またはＣＴＬＡ−４阻害に反応可能である患者集団を増加させ得ることが示唆される。 
【０１５０】
他の実施形態 
本明細書中で開示される特性は全て、あらゆる組み合わせで組み合わせられ得る。本明細書中で開示される各特性は、同じ、同等または同様の目的を果たす代替的な特性により置き換えられ得る。したがって、別段の明らかな断りがない限り、開示される各特性は、単なる包括的な一連の同等または同様の特性の例である。 
【０１５１】
上記の説明から、当業者は、本開示の本質的な特徴を容易に解明し得、その精神および範囲から逸脱することなく、様々な使用および状態にそれを適応させるために本開示の様々な変更および改変を行い得る。したがって、他の実施形態も特許請求の範囲内である。 
【０１５２】
同等物 
いくつかの本発明の実施形態を本明細書中で記載し、例示してきたが、当業者は、機能を発揮させるために、および／または本明細書中に記載の結果および／または長所のうち１つ以上を得るために、様々な他の手段および／または構造を容易に想定し、このような変更および／または改変のそれぞれは、本明細書中に記載の本発明の実施形態の範囲内にあるとみなされる。より一般的に、当業者は、本明細書中に記載の全てのパラメーター、寸法、材料および配置が代表的なものであることが意図され、実際のパラメーター、寸法、材料および／または配置は、本発明の教示が使用される具体的な適用に依存することを容易に認めよう。当業者は、通常の実験のみを使用し、本明細書中に記載の本発明の具体的な実施形態に対する多くの同等物を認識するかまたは確認可能である。したがって、単なる例として前述の実施形態が与えられ、添付の特許請求の範囲およびそれに対する同等物内で、本発明の実施形態が、具体的に記載され、主張されるようなもの以外に実施され得ることを理解されたい。本開示の本発明の実施形態は、本明細書中に記載の各個々の特性、系、物品、材料、キットおよび／または方法を対象とする。さらに、２つ以上のこのような特性、系、物品、材料、キットおよび／または方法の何れの組み合わせも、このような特性、系、物品、材料、キットおよび／または方法が相互に相反しない場合、本開示の本発明の範囲内に含まれる。 
【０１５３】
本明細書中で定義され、使用される場合、全ての定義が、辞書の定義、参照により組み込まれる文書中の定義および／または定義される用語の通常の意味よりも優先されることを理解されたい。 
【０１５４】
本明細書中で開示される全ての参考文献、特許および特許出願は、それぞれが引用される主題に関して参照により組み込まれ、これは、いくつかの場合において、文書の全体を包含し得る。 
【０１５５】
不定冠詞「ａ」および「ａｎ」は、明細書および特許請求の範囲において本明細書中で使用される場合、明らかに逆の指示がない限り、「少なくとも１つ」を意味するものと理解されたい。 
【０１５６】
「および／または」という句は、明細書および特許請求の範囲において本明細書中で使用される場合、このように結合される要素、すなわちいくつかの場合において接続的に存在し、他の場合において離接的に存在する要素の「何れかまたは両方」を意味すると理解されたい。「および／または」とともに挙げられる複数の要素は、同じ方式で、すなわちこのように結合される要素の「１つ以上」と解釈されるべきである。他の要素は、具体的に特定される要素に関連するにせよ、または関連しないにせよ、任意選択により「および／または」という節により具体的に特定される要素以外に存在し得る。したがって、非限定例として、「Ａおよび／またはＢ」に対する言及は、「含む」などのオープンエンドの語と組み合わせて使用される場合、ある実施形態においてはＡのみ（任意選択によりＢ以外の要素を含む）；別の実施形態においてはＢのみ（任意選択によりＡ以外の要素を含む）；また別の実施形態においてはＡおよびＢの両方（任意選択により他の要素を含む）；などを指し得る。 
【０１５７】
明細書および特許請求の範囲において本明細書中で使用される場合、「または」は、上記で定義されるような「および／または」と同じ意味を有するものと理解されたい。例えば、一覧において項目を分離する場合、「または」または「および／または」は、包括的なもの、すなわち、要素の数または一覧のうち少なくとも１つを含むが、そのうち複数のものも含み、任意選択により、挙げられていないさらなる項目も含むものと解釈される。「そのうち１つだけ」または「そのうちちょうど１つ」または特許請求の範囲で使用される場合、「からなる」など、明らかに反対に示される唯一の用語は、多くの要素または要素の一覧のうちちょうど１つの要素を包含することを指す。一般に、「または」という用語は、本明細書中で使用される場合、「何れか」、「そのうち１つ」、「そのうち１つのみ」または「そのうちちょうど１つ」など、排他性の用語が前に来るとき、排他的な選択肢を示すもの（すなわち「一方または他方であるが、「両方」ではない）としてのみ解釈されるべきである。特許請求の範囲で使用される場合、「基本的に〜からなる」は、特許法の分野で使用される場合、その通常の意義を有するものとする。 
【０１５８】
明細書および特許請求の範囲において本明細書中で使用される場合、「少なくとも１つ」という句は、１つ以上の要素の一覧に関して、要素の一覧中の要素のうち何れか１つ以上から選択される少なくとも１つの要素を意味するが、要素の一覧内で具体的に挙げられる各要素および全要素のうち少なくとも１つを必ずしも含まず、要素の一覧中の要素のあらゆる組み合わせを排除しないものと理解されたい。この定義は、具体的に特定される要素に関連するにせよ、または関連しないにせよ、「少なくとも１つ」という句が指す要素の一覧内で具体的に特定される要素以外に要素が任意選択により存在し得ることも可能とする。したがって、非限定例として、「ＡおよびＢのうち少なくとも１つ」（または、同等に、「ＡまたはＢのうち少なくとも１つ」または同等に「Ａおよび／またはＢのうち少なくとも１つ」）は、ある実施形態において、任意選択により複数を含め、少なくとも１つのＡを指し得、Ｂが存在しない（および任意選択によりＢ以外の要素を含む）；別の実施形態においては、任意選択により複数を含め、少なくとも１つのＢを指し得、Ａが存在しない（および任意選択によりＡ以外の要素を含む）；また別の実施形態においては、任意選択により複数を含め、少なくとも１つのＡおよび、任意選択により複数を含め、少なくとも１つのＢを指し得る（および任意選択により他の要素を含む）などである。 
【０１５９】
明らかに反対の指示がない限り、複数のステップまたは作用を含む本明細書中で主張されるあらゆる方法において、本方法のステップまたは作用の順序は、本方法のステップまたは作用が引用される順序に必ずしも限定されないことも理解されたい。 
【０１６０】
特許請求の範囲において、ならびに上記の明細書において、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」、「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」、「保有する（ｃａｒｒｙｉｎｇ）」、「有する（ｈａｖｉｎｇ）」、「含有する（ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ）」、「含む（ｉｎｖｏｌｖｉｎｇ）」、「保持する（ｈｏｌｄｉｎｇ）」、「から構成される（ｃｏｍｐｏｓｅｄ  ｏｆ）」などの全ての移行句は、オープンエンドであること、すなわち、含むが限定されないことを意味すると理解されたい。Ｕｎｉｔｅｄ  Ｓｔａｔｅｓ  Ｐａｔｅｎｔ  Ｏｆｆｉｃｅ  Ｍａｎｕａｌ  ｏｆ  Ｐａｔｅｎｔ  Ｅｘａｍｉｎｉｎｇ  ＰｒｏｃｅｄｕｒｅｓのＳｅｃｔｉｏｎ  ２１１１．０３で示されるように、移行句「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｏｆ）」および「基本的にからなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ  ｏｆ）」のみがそれぞれクローズまたは半クローズの移行句であるものとする。 
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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