(57)【要約】  イソフラボノイド化合物を中枢神経系に提供する方法であって、化合物を、それを必要としている個体に直腸投与するステップを含む方法。この方法は、多形神経膠芽腫を含む脳がんの処置において有用である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
個体の中枢神経系（ＣＮＳ）、特に脳組織に一般式（Ｉ）
【化１】
2019513827.tif 000047
（式中、
Ｒ１は、Ｈ、Ｃ１〜１０アルキル、アリール、アリールアルキルまたはＲＡＣＯ（式中、ＲＡは、Ｃ１〜１０アルキルまたはアミノ酸である）であり、
Ｒ２は、Ｈ、ＯＨまたはＯＲ６であり、
Ｒ３は、Ｈ、ＯＨまたはＲＢ（式中、ＲＢは、アミノ酸である）もしくはＣＯＲＡ（式中、ＲＡは、先に定義された通りである）であり、
ＡおよびＢは、これらの間の原子と一緒に、群
【化２】
2019513827.tif 000048
から選択される６員環を形成し、または
Ａは、−ＯＲ６であり、およびＢは、
【化３】
2019513827.tif 000049
であり、式中、
Ｒ４は、Ｈ、ＣＯＲＤ（式中、ＲＤは、Ｈ、ＯＨ、Ｃ１〜１０アルキルまたはアミノ酸である）、ＣＯ２ＲＣ（式中、ＲＣは、Ｃ１〜１０アルキルである）、ＣＯＲＥ（式中、ＲＥは、Ｈ、Ｃ１〜１０アルキルまたはアミノ酸である）、ＣＯＯＨ、ＣＯＲＣ（式中、ＲＣは、先に定義された通りである）またはＣＯＮＨＲＥ（式中、ＲＥは、先に定義された通りである）であり、
Ｒ５は、Ｈ、ＣＯ２ＲＣ（式中、ＲＣは、先に定義された通りである）またはＣＯＲＣＯＲＥ（式中、ＲＣおよびＲＥは、先に定義された通りである）であり、２個のＲ５基は、同じ基に付着されており、前記２個のＲ５基は、同じであるかまたは異なり、
Ｒ６は、Ｃ１〜１０アルキル、アリールまたはアリールアルキルであり、
Ｘは、Ｏ、ＮまたはＳであり、
Ｙは、
【化４】
2019513827.tif 000050
であり、
式中、Ｒ７ＡおよびＲ７Ｂは、それぞれ独立に、Ｈ、ＯＨまたはＯＲ７であり、ただし、Ｒ７ＡおよびＲ７Ｂの少なくとも１つは、ＯＨまたはＯＲ７であり、
Ｒ７は、Ｃ１〜１０アルキル、アリールまたはアリールアルキルであり、および
【化５】
2019513827.tif 000051
は、単結合または二重結合のいずれかを表す）
の化合物を提供する方法であって、前記一般式（Ｉ）の化合物を、前記ＣＮＳへの前記化合物の提供を必要としている個体に直腸投与し、それにより前記化合物を前記個体の前記ＣＮＳに提供するステップを含む方法。
【請求項２】
個体の中枢神経系（ＣＮＳ）、特に脳組織に一般式（ＩＩ）：
【化６】
2019513827.tif 000052
（式中、
Ｒ１は、ＨまたはＲＡＣＯ（式中、ＲＡは、Ｃ１〜１０アルキルまたはアミノ酸である）であり、
Ｒ２は、Ｈ、ＯＨまたはＲＢ（式中、ＲＢは、アミノ酸である）もしくはＣＯＲＡ（式中、ＲＡは、先に定義された通りである）であり、
ＡおよびＢは、これらの間の原子と一緒に、群
【化７】
2019513827.tif 000053
から選択される６員環を形成し、式中、
Ｒ４は、Ｈ、ＣＯＲＤ（式中、ＲＤは、Ｈ、ＯＨ、Ｃ１〜１０アルキルまたはアミノ酸である）、ＣＯ２ＲＣ（式中、ＲＣは、Ｃ１〜１０アルキルである）、ＣＯＲＥ（式中、ＲＥは、Ｈ、Ｃ１〜１０アルキルまたはアミノ酸である）、ＣＯＯＨ、ＣＯＲＣ（式中、ＲＣは、先に定義された通りである）またはＣＯＮＨＲＥ（式中、ＲＥは、先に定義された通りである）であり、
Ｒ５は、Ｈ、ＣＯ２ＲＣ（式中、ＲＣは、先に定義された通りである）またはＣＯＲＣＯＲＥ（式中、ＲＣおよびＲＥは、先に定義された通りである）であり、２個のＲ５基は、同じ基に付着されており、前記２個のＲ５基は、同じであるかまたは異なり、
Ｘは、Ｏ、ＮまたはＳであり、
Ｙは、
【化８】
2019513827.tif 000054
であり、
式中、Ｒ７は、ＨまたはＣ１〜１０アルキルであり、および
【化９】
2019513827.tif 000055
は、単結合または二重結合のいずれかを表す）
の化合物を提供する方法であって、前記一般式（ＩＩ）の化合物を、前記ＣＮＳへの前記化合物の提供を必要としている個体に直腸投与し、それにより前記化合物を前記個体の前記ＣＮＳに提供するステップを含む方法。
【請求項３】
前記化合物は、
【化１０】
2019513827.tif 000056
【化１１】
2019513827.tif 000057
【化１２】
2019513827.tif 000058
からなる群から選択され、式中、
Ｒ８は、ＨまたはＣＯＲＤ（式中、ＲＤは、先に定義された通りである）であり、
Ｒ９は、ＣＯ２ＲＣまたはＣＯＲＥ（式中、ＲＣおよびＲＥは、先に定義された通りである）であり、
Ｒ１０は、ＣＯＲＣまたはＣＯＲＣＯＲＥ（式中、ＲＣおよびＲＥは、先に定義された通りである）であり、
Ｒ１１は、ＨまたはＯＨであり、
Ｒ１２は、Ｈ、ＣＯＯＨ、ＣＯ２ＲＣ（式中、ＲＣは、先に定義された通りである）またはＣＯＮＨＲＥ（式中、ＲＥは、先に定義された通りである）であり、および
【化１３】
2019513827.tif 000059
は、単結合または二重結合のいずれかを表す、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記化合物は、
【化１４】
2019513827.tif 000060
から選択される、請求項１または２に記載の方法。
【請求項５】
前記化合物は、
【化１５】
2019513827.tif 000061
である、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
個体の中枢神経系（ＣＮＳ）、特に脳組織に一般式（ＩＩＩ）：
【化１６】
2019513827.tif 000062
（式中、Ｒ１およびＲ４は、ＯＲ７であり、Ｒ２およびＲ３は、ＨまたはＯＲ７であり、
Ｒ５、Ｒ６は、独立に、Ｈ、ＯＨまたはＯＲ７であり、
Ｒ７は、Ｃ１〜１０アルキル、アリールまたはアリールアルキルであり、
【化１７】
2019513827.tif 000063
は、単結合または二重結合のいずれかを表す）
の化合物を提供する方法であって、前記一般式（ＩＩＩ）の化合物を、前記ＣＮＳへの前記化合物の提供を必要としている個体に直腸投与し、それにより前記化合物を前記個体の前記ＣＮＳに提供するステップを含む方法。
【請求項７】
前記化合物は、
【化１８】
2019513827.tif 000064
からなる群から選択される、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
個体の中枢神経系（ＣＮＳ）、特に脳組織に一般式（ＩＶ）：
【化１９】
2019513827.tif 000065
（式中、
Ｒ１は、ＨまたはＲＡＣＯ（式中、ＲＡは、Ｃ１〜１０アルキルまたはアミノ酸である）であり、
Ｒ２は、Ｈ、ＯＨまたはＲＢ（式中、ＲＢは、アミノ酸である）もしくはＣＯＲＡ（式中、ＲＡは、先に定義された通りである）であり、
ＡおよびＢは、これらの間の原子と一緒に、基：
【化２０】
2019513827.tif 000066
を形成し、式中、
Ｒ４は、Ｈ、ＣＯＲＤ（式中、ＲＤは、Ｈ、ＯＨ、Ｃ１〜１０アルキルまたはアミノ酸である）、ＣＯ２ＲＣ（式中、ＲＣは、Ｃ１〜１０アルキルである）、ＣＯＲＥ（式中、ＲＥは、Ｈ、Ｃ１〜１０アルキルまたはアミノ酸である）、ＣＯＯＨ、ＣＯＲＣ（式中、ＲＣは、先に定義された通りである）またはＣＯＮＨＲＥ（式中、ＲＥは、先に定義された通りである）であり、
Ｒ５は、置換もしくは非置換アリールまたは置換もしくは非置換ヘテロアリールであり、
Ｘは、Ｏ、ＮまたはＳであり、
Ｙは、
【化２１】
2019513827.tif 000067
であり、
式中、Ｒ７は、ＨまたはＣ１〜１０アルキルであり、および
【化２２】
2019513827.tif 000068
は、単結合または二重結合のいずれかを表す）
の化合物を提供する方法であって、前記一般式（ＩＶ）の化合物を、前記ＣＮＳへの前記化合物の提供を必要としている個体に直腸投与し、それにより前記化合物を前記個体の前記ＣＮＳに提供するステップを含む方法。
【請求項９】
前記化合物は、
【化２３】
2019513827.tif 000069
から選択される、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
脳がんについて個体を処置する方法であって、直腸に、経膣的にまたは尿道適用を通して、親油性基剤と、一般式（Ｉ）〜（ＩＶ）のいずれか１つの化合物とを含む製剤を前記個体に投与するステップを含む方法。
【請求項１１】
前記脳がんは、多形神経膠芽腫である、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記化合物は、
【化２４】
2019513827.tif 000070
からなる群から選択される、請求項１０または１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記個体は、前記脳がんの処置のためのテモゾロミドを受けたかまたは受けている、請求項１０〜１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
一般式（Ｉ）〜（ＩＶ）のいずれか１つの前記化合物は、前記個体に提供されて、テモゾロミドの細胞毒性効果に対して前記個体のがん細胞を感作させる、請求項１０〜１３のいずれか一項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、イソフラボノイド、治療化合物の直腸、尿道または膣への送達のための製剤、薬物動態、および中枢神経系、特に脳実質への化合物の送達に関する。
【背景技術】
【０００２】
本明細書における任意の従来技術への言及は、この従来技術が任意の管轄権において一般知識の部分を形成するか、またはこの従来技術が関連のあるものとして見なされ、かつ／もしくは従来技術の他の一部と合わせて当業者によって理解されることが合理的に予想され得るという承認または示唆ではない。
【０００３】
植物由来のフェノールのイソフラボノイドは、１９８０年代末期から相当な科学的研究の対象であった。これらの化合物の多くは、植物においてオーキシンまたはホルモンの機能を有し、またヒト組織において生物活性を示す。最も広範に研究されている植物イソフラボンの１つは、発がん、炎症、心血管機能およびインスリン抵抗性にわたるその多面発現作用のために注目すべきものであるゲニステインである。
【０００４】
ゲニステインの抗がん活性は、タンパク質チロシンキナーゼのリン酸化をブロックするその能力から部分的に生じ、ヒトがん細胞の有糸分裂停止、最終分化およびアポトーシスをもたらすように思われる（Ｌａｍｂｅｒｔ  ｅｔ  ａｌ，２００５；Ｗｉｌｌｉａｍｓｏｎ  ａｎｄ  Ｍａｎａｃｈ，２００５）。ゲニステインは、抗血管新生でもある（Ｐｉａｏ  ｅｔ  ａｌ，２００６）。ゲニステインの抗がん効果は、ＤＮＡメチル化の調節、ｍｉＲＮＡによって媒介されるレギュレーションおよびヒストン修飾によるがん細胞の後成的修飾（Ａｄｊａｋｌｙ  ｅｔ  ａｌ，２０１５）、およびプロテアソーム活性の阻害（Ｋａｚｉ  ｅｔ  ａｌ，２００３）にも及ぶ。
【０００５】
重要なことに、イソフラボノイドは、細胞毒性剤として、および化学物質または放射線による侵襲からの細胞毒性シグナルに対してがん細胞を感作させるための感作剤として有用であることが見出されてきた。いくつかは、化学療法抵抗性を逆転させることも示されてきた。
【０００６】
特に、ゲニステインおよび一般に広範囲の他の関連する植物イソフラボノイドのこれらの潜在的に貴重な治療上の機会にも関わらず、これらの機会は、臨床へ転換されることについて現在まで失敗してきた。これにはいくつかの理由が存在する。１つは、効力およびバイオアベイラビリティーの結果的な減少に伴って、様々な程度の第１相および第２相代謝過程に対するそれらの影響を受けやすさについて問題が存在することであるが、これらのプロセスが治療可能性に影響を与える程度は完全に理解されていない。
【０００７】
一部の人々は、有望には、より大きい生物学的効力を有し、かつ／または代謝過程に対してより影響を受けやすくない新規な化学的実体を生じさせることにより、天然起源のイソフラボノイドの類似体の合成を介してこれらの不備に取り組むことを試みてきた。
【０００８】
イドロノキシルは、ゲニステインの類似体である。イドロノキシル（フェノキソジオール；デヒドロエコール；ハギニンＥ（２Ｈ−１−ベンゾピラン−７−０，１，３−（４−ヒドロキシフェニル）は、ゲニステインと比較して抗がん剤として約１０倍だけ強力であり、広範囲のがん細胞タイプにおいて細胞分裂停止および細胞毒性を誘発する。その生物学的効果は、アポトーシスの誘発、細胞周期停止、血管形成の阻害、免疫調節および神経保護を含む。
【０００９】
イドロノキシルは、その親イソフラボン化合物であるゲニステインと比較して、特により大きいインビトロでの抗がん活性を有することにおいて、および特に第１相代謝過程に対して影響を受けやすくないことにおいて、より良好な薬物様の質を有することが証明されてきた（Ｂｒｏｗｎ  ｅｔ  ａｌ，２００８）。しかし、イドロノキシルは、イソフラボンファミリーのメンバーと共通して、第２相代謝過程に対して恐らく影響を受けやすく、この現象は、このファミリーの化合物である程度観察される有意義な臨床的有効性の欠如を説明すると考えられる。
【００１０】
イソフラボノイド分子は、水中で高度に不溶性である。他の水不溶性生体異物ならびに水不溶性内部ホルモン（ステロイド性ホルモン、チロキシン）および胆汁酸と共通して、身体は、これらの化合物を、腎臓を介して排泄可能である水溶性形態へ変換することを求める（Ｇｕｙ  ｅｔ  ａｌ，２００８；Ｚｈａｎｇ  ｅｔ  ａｌ，２００３）。排泄は、胆汁を介して起こり得るが、胆汁中排泄の速度は尿中排泄と比較して遅く、その結果、身体は、できるだけ多くの生体異物を水溶性形態へ変換することを求める。
【００１１】
根底にあるフェノール構造を有するイドロノキシルなどの化合物は、この特徴を他のフェノール薬物（例えば、プロポフォール、パラセタモール、ナロキソン）と共有する。
【００１２】
解毒の１つのモードは、生体異物を糖であるグルクロン酸に付着させ、水溶性グルクロニドコンジュゲートを生成するＵＤＰ−グルクロニルトランスフェラーゼ酵素のファミリーを伴い得る。二次的であり、より一般でない解毒プロセスは、水溶性の硫酸化されたコンジュゲートを生じさせるスルホトランスフェラーゼ酵素活性を伴う。
【００１３】
解毒酵素のこれらの２つのファミリーは、肝臓および腸粘膜に主に位置している（Ｋｉｎｇ  ｅｔ  ａｌ，２０００；Ｇｕｉｌｌｅｍｅｔｔｅ，２００３；Ｍａｒｕｏ  ｅｔ  ａｌ，２００５；Ｗｕ  ｅｔ  ａｌ，２０１１）。
【００１４】
経口的に投与されたイドロノキシルは、腸粘膜におけるトランスフェラーゼ活性および初回通過肝臓代謝の複合効果として水溶性コンジュゲートへ完全に変換される。静脈内に投与されたイドロノキシルはまた、二次通過肝臓代謝の結果として完全にコンジュゲートされ、低レベルのコンジュゲートされていない薬物は、シクロデキストリン担体内に保持されている薬物である（Ｈｏｗｅｓ  ｅｔ  ａｌ，２０１１）。
【００１５】
第２相代謝のこのプロセスは、標的組織、特に脳および脊髄へのイソフラボノイド薬物のバイオアベイラビリティーに対して、特に血液脳関門のためにかなりの影響を有する。
【００１６】
中枢神経系は、血液脳関門として公知の有効な化学的関門によって保護されている。この関門は、主に脳内の毛細血管の内側を覆う内皮細胞間の通常のジャンクションよりタイトであることの結果である。その結果、限定された数の化合物のみ（水、気体および特定の低分子量化合物）が血流から脳へ受動的に拡散することができる。他の全ては、能動輸送に供され、専用の輸送体を必要とする。その結果、身体は、専用の輸送体を欠いているため、生体異物は、大部分が中枢神経系から排除される。
【００１７】
内因性フェノール化合物、例えばステロイドホルモンは、専用の輸送体のために血液脳関門を横切ることができる。例えば、有機アニオン輸送ポリペプチド（Ｏａｔｐ）１ｃ１は、血液脳関門を横切るエストラジオール−１７ｂ−グルクロニドを含むステロイドホルモンの流入を可能とすることに関与していると考えられる（Ｗｅｓｔｈｏｌｍ  ｅｔ  ａｌ，２００９）。
【００１８】
この輸送体の利用可能性は、イソフラボノイドを含む第２相代謝物として中枢神経系に提示される外因性フェノール類の大部分について利用可能でないように思われる。
【００１９】
インサイチューでの研究は、天然起源のフェノール類、例えばフラボノイドが血液脳関門を横切り得ることを示すが（Ｙｏｕｄｉｍ  ｅｔ  ａｌ，２００４）、これらの研究は、これらの第２相代謝物ではなく遊離化合物で行われ、インビボでの状況を考慮に入れることができなかった。
【００２０】
インビボでの研究が、食事による負荷に続く食物由来のイソフラボンであるゲニステインの脳レベルを観察して行われてきた場合、脳への浸透のレベルは、０．０４の脳対血液比を伴って非常に低い（Ｔｓａｉ  ２００５）。
【００２１】
特にイドロノキシルの場合、［１４Ｃ］イドロノキシルが経口的に２０ｍｇ／ｋｇの標的用量で与えられた研究において、低レベルの同位体（信頼できる測定の限界未満）が脳および脊髄において記録され、イドロノキシルが、損なわれていない血液脳関門を横切ることができないことを示唆する（Ｂｒｏｗｎ  ｅｔ  ａｌ．２００８）。
【００２２】
血液脳関門を乗り越えるのに利用可能である技術の大部分は、高度に侵襲的であり、多くの場合に新生物病変の除去の部位における脳組織への装置もしくは組成物の外科的埋込みを伴うかまたは脊髄ＣＳＦへの注射を伴う。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００２３】
中枢神経系、特に脳実質および関連する組織へのイソフラボノイドの送達のための新規な方法が必要とされている。
【００２４】
中枢神経系、特に脳実質および関連する組織へのイドロノキシルの送達のための新規な方法が必要とされている。
【課題を解決するための手段】
【００２５】
本発明は、上記で記述された必要性の１つまたは複数に取り組むことを探究し、一実施形態では、個体の中枢神経系（ＣＮＳ）、特に脳組織に一般式（Ｉ）
【化１】
2019513827.tif 000002
（式中、
Ｒ１は、Ｈ、Ｃ１〜１０アルキル、アリール、アリールアルキルまたはＲＡＣＯ（式中、ＲＡは、Ｃ１〜１０アルキルまたはアミノ酸である）であり、
Ｒ２は、Ｈ、ＯＨまたはＯＲ６であり、
Ｒ３は、Ｈ、ＯＨまたはＲＢ（式中、ＲＢは、アミノ酸である）もしくはＣＯＲＡ（式中、ＲＡは、先に定義された通りである）であり、
ＡおよびＢは、これらの間の原子と一緒に、群
【化２】
2019513827.tif 000003
から選択される６員環を形成し、または
Ａは、−ＯＲ６であり、およびＢは、
【化３】
2019513827.tif 000004
であり、式中、
Ｒ４は、Ｈ、ＣＯＲＤ（式中、ＲＤは、Ｈ、ＯＨ、Ｃ１〜１０アルキルまたはアミノ酸である）、ＣＯ２ＲＣ（式中、ＲＣは、Ｃ１〜１０アルキルである）、ＣＯＲＥ（式中、ＲＥは、Ｈ、Ｃ１〜１０アルキルまたはアミノ酸である）、ＣＯＯＨ、ＣＯＲＣ（式中、ＲＣは、先に定義された通りである）またはＣＯＮＨＲＥ（式中、ＲＥは、先に定義された通りである）であり、
Ｒ５は、Ｈ、ＣＯ２ＲＣ（式中、ＲＣは、先に定義された通りである）またはＣＯＲＣＯＲＥ（式中、ＲＣおよびＲＥは、先に定義された通りである）であり、２個のＲ５基は、同じ基に付着されており、これらは、同じであるかまたは異なり、
Ｒ６は、Ｃ１〜１０アルキル、アリールまたはアリールアルキルであり、
Ｘは、Ｏ、ＮまたはＳであり、
Ｙは、
【化４】
2019513827.tif 000005
であり、
式中、Ｒ７ＡおよびＲ７Ｂは、それぞれ独立に、Ｈ、ＯＨまたはＯＲ７であり、ただし、Ｒ７ＡおよびＲ７Ｂの少なくとも１つは、ＯＨまたはＯＲ７であり、
Ｒ７は、Ｃ１〜１０アルキル、アリールまたはアリールアルキルであり、および
【化５】
2019513827.tif 000006
は、単結合または二重結合のいずれかを表す）
の化合物を提供する方法であって、一般式（Ｉ）の化合物を、ＣＮＳへの化合物の提供を必要としている個体に投与し、それにより化合物を個体のＣＮＳに提供するステップを含む方法を提供する。化合物は、直腸、膣または尿道の投与によって投与される。
【００２６】
別の実施形態では、本発明は、個体の中枢神経系（ＣＮＳ）、特に脳組織に一般式（ＩＩ）：
【化６】
2019513827.tif 000007
（式中、
Ｒ１は、ＨまたはＲＡＣＯ（式中、ＲＡは、Ｃ１〜１０アルキルまたはアミノ酸である）であり、
Ｒ２は、Ｈ、ＯＨまたはＲＢ（式中、ＲＢは、アミノ酸である）もしくはＣＯＲＡ（式中、ＲＡは、先に定義された通りである）であり、
ＡおよびＢは、これらの間の原子と一緒に、群
【化７】
2019513827.tif 000008
から選択される６員環を形成し、式中、
Ｒ４は、Ｈ、ＣＯＲＤ（式中、ＲＤは、Ｈ、ＯＨ、Ｃ１〜１０アルキルまたはアミノ酸である）、ＣＯ２ＲＣ（式中、ＲＣは、Ｃ１〜１０アルキルである）、ＣＯＲＥ（式中、ＲＥは、Ｈ、Ｃ１〜１０アルキルまたはアミノ酸である）、ＣＯＯＨ、ＣＯＲＣ（式中、ＲＣは、先に定義された通りである）またはＣＯＮＨＲＥ（式中、ＲＥは、先に定義された通りである）であり、
Ｒ５は、Ｈ、ＣＯ２ＲＣ（式中、ＲＣは、先に定義された通りである）またはＣＯＲＣＯＲＥ（式中、ＲＣおよびＲＥは、先に定義された通りである）であり、２個のＲ５基は、同じ基に付着されており、これらは、同じであるかまたは異なり、
Ｘは、Ｏ、ＮまたはＳであり、
Ｙは、
【化８】
2019513827.tif 000009
であり、
式中、Ｒ７は、ＨまたはＣ１〜１０アルキルであり、および
【化９】
2019513827.tif 000010
は、単結合または二重結合のいずれかを表す）
の化合物を提供する方法であって、一般式（ＩＩ）の化合物を、ＣＮＳへの化合物の提供を必要としている個体に投与し、それにより化合物を個体のＣＮＳに提供するステップを含む方法を提供する。化合物は、直腸、膣または尿道の投与によって投与される。
【００２７】
別の実施形態では、本発明は、個体の中枢神経系（ＣＮＳ）、特に脳組織に一般式（ＩＩＩ）：
【化１０】
2019513827.tif 000011
（式中、Ｒ１およびＲ４は、ＯＲ７であり、Ｒ２およびＲ３は、ＨまたはＯＲ７であり、
Ｒ５、Ｒ６は、独立に、Ｈ、ＯＨまたはＯＲ７であり、
Ｒ７は、Ｃ１〜１０アルキル、アリールまたはアリールアルキルであり、
【化１１】
2019513827.tif 000012
は、単結合または二重結合のいずれかを表す）
の化合物を提供する方法であって、一般式（ＩＩＩ）の化合物を、ＣＮＳへの化合物の提供を必要としている個体に投与し、それにより化合物を個体のＣＮＳに提供するステップを含む方法を提供する。化合物は、直腸、膣または尿道の投与によって投与される。
【００２８】
別の実施形態では、本発明は、個体の中枢神経系（ＣＮＳ）、特に脳組織に一般式（ＩＶ）：
【化１２】
2019513827.tif 000013
（式中、
Ｒ１は、ＨまたはＲＡＣＯ（式中、ＲＡは、Ｃ１〜１０アルキルまたはアミノ酸である）であり、
Ｒ２は、Ｈ、ＯＨまたはＲＢ（式中、ＲＢは、アミノ酸である）もしくはＣＯＲＡ（式中、ＲＡは、先に定義された通りである）であり、
ＡおよびＢは、これらの間の原子と一緒に、基：
【化１３】
2019513827.tif 000014
を形成し、式中、
Ｒ４は、Ｈ、ＣＯＲＤ（式中、ＲＤは、Ｈ、ＯＨ、Ｃ１〜１０アルキルまたはアミノ酸である）、ＣＯ２ＲＣ（式中、ＲＣは、Ｃ１〜１０アルキルである）、ＣＯＲＥ（式中、ＲＥは、Ｈ、Ｃ１〜１０アルキルまたはアミノ酸である）、ＣＯＯＨ、ＣＯＲＣ（式中、ＲＣは、先に定義された通りである）またはＣＯＮＨＲＥ（式中、ＲＥは、先に定義された通りである）であり、
Ｒ５は、置換もしくは非置換アリールまたは置換もしくは非置換ヘテロアリールであり、
Ｘは、Ｏ、ＮまたはＳであり、
Ｙは、
【化１４】
2019513827.tif 000015
であり、
式中、Ｒ７は、ＨまたはＣ１〜１０アルキルであり、および
【化１５】
2019513827.tif 000016
は、単結合または二重結合のいずれかを表す）
の化合物を提供する方法であって、一般式（ＩＶ）の化合物を、ＣＮＳへの化合物の提供を必要としている個体に投与し、それにより化合物を個体のＣＮＳに提供するステップを含む方法を提供する。化合物は、直腸、膣または尿道の投与によって投与される。
【００２９】
別の実施形態では、個体において脳がんを処置または予防する方法であって、前記処置を必要としている個体に一般式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）または（ＩＶ）の化合物を投与し、それにより個体において脳がんを処置または予防することを含む方法が提供され、化合物は、直腸、膣または尿道の投与によって投与される。
【００３０】
別の実施形態では、脳がんの予防または処置において使用するための、上記の組成物から形成される坐剤、ペッサリー、尿道内装置または同様のものが提供される。
【００３１】
上記の実施形態では、一般式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）または（ＩＶ）の化合物は、化合物の直腸投与のための坐剤として典型的に製剤化または使用されるタイプの油脂性基剤中で直腸投与され得る。典型的には、油脂性基剤は、圧倒的に多い量の（＞４５％ｗ／ｗ基剤）飽和脂肪酸を含む。好ましくは、油脂性基剤は、カカオ脂（カカオバター）、またはカカオ脂の脂肪酸プロファイルと実質的に同じであるかもしくは同一の飽和脂肪酸プロファイルを有するその油留分、もしくは誘導体、もしくは合成バージョンである。
【００３２】
一般式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）または（ＩＶ）の化合物は、上記の方法において使用したとき、坐剤またはペッサリー基剤中に少なくとも部分的に含有または溶解され得、好ましくは完全に溶解され得る。この形態において、化合物は、疎水的相互作用によって親油性基剤の疎水性化合物に結合し得る。
【００３３】
本発明のさらなる態様および先行する段落において記載された態様のさらなる実施形態は、例としておよび添付図面を参照して示される以下の説明から明らかとなる。
【発明を実施するための形態】
【００３４】
ここで、本発明の特定の実施形態について詳細に言及する。本発明を実施形態と併せて記載する一方、本発明は、本発明をこれらの実施形態に限定することを意図されないことが理解される。むしろ、本発明は、全ての代替形態、修正形態および均等物を包含することが意図され、これらは、特許請求の範囲によって定義されるような本発明の範囲内に含まれ得る。
【００３５】
当業者は、本発明の実施において使用することができる、本明細書に記載されているものと同様のまたは均等な多くの方法および材料を認識する。本発明は、記載されている方法および材料に決して限定されない。
【００３６】
本明細書において開示および定義される本発明は、記述されるか、または文章から明らかな個々の特徴の２つ以上の全ての代替的な組合せまで及ぶことが理解される。これらの異なる組合せの全ては、本発明の様々な代替的な態様を構成する。
【００３７】
本明細書に記載のように、本発明者らは、イソフラボノイドを直腸投与し、同じ時点における血漿中の薬物の濃度が、急性的に処置された動物でのこの時点における脳内より概ね１０分の１少なく、５日間毎日投薬された動物でのこの時点における血漿中で検出不能であったことを観察した。脳組織および血漿における濃度間のこの有意差は、イソフラボノイドが血液脳関門を横切ることによって脳組織に入ったことを示す。驚くべきことに、結果は、イソフラボノイドが経口またはＩＶ投与後に脳または脊髄組織で検出されないことが以前に示されてきたため、直腸の粘膜を横切る送達によって決まるように思われる。
【００３８】
ＣＮＳおよび関連する脳組織への送達は、実質的に疎水性または親油性基剤を有する製剤の形態でイソフラボノイドまたは関連する化合物を提供することから生じるように思われる。さらに、製剤は、直腸または泌尿生殖器の粘膜との接触を可能とするために提供される。
【００３９】
仮説に束縛されることを望むものではないが、根底にある作用機序は、イソフラボノイドまたは関連する化合物と脂肪酸製剤化基剤との疎水性会合、ならびに直腸および泌尿生殖器の空間に投与された脂肪酸の粘膜取込みを伴うと考えられる。より詳細には、製剤の疎水性基剤が直腸または泌尿生殖器の空間において体温で液化されるとき、イソフラボノイドまたは関連する化合物は、脂肪酸／イソフラボノイドタイプの複合体の形態で疎水的に会合したままである（潜在的に、疎水性製剤化基剤の脂肪酸鎖と、イソフラボノイドまたは関連する化合物のフェノール化学反応との間の疎水的相互作用によって）。この条件において、脂肪酸鎖の取込みのための直腸または泌尿生殖器の粘膜において作動する機序により、粘膜を横切って脂肪酸／イソフラボノイドタイプの複合体を輸送し得、それにより、イソフラボノイドまたは関連する化合物は、治療効果のために利用可能である。
【００４０】
坐剤およびペッサリー製剤などの重大な特徴は、基剤および活性物質の分配を可能とするように選択された、医薬活性物質と会合した基剤の存在であることが一般に理解されてきた。活性物質が親水性である坐剤の例を使用して、坐剤基剤は、一般に、疎水性または親油性であり、基剤が溶融するまで活性物質が直腸において物理的に保持されることを可能とし、基剤の溶融によって活性物質は吸収のために粘膜を横切って放出され、基剤は、直腸の液体と混合され、直腸の空間から押し出されると理解される。これに関連して、基剤は、活性物質の物理的投与を可能とする担体として単に機能する。
【００４１】
活性物質および基剤の分配は、坐剤の機能にとって絶対必要であると非常によく理解されている。坐剤基剤中で高度に可溶性である医薬活性物質は、不溶性であるかまたは低い添加剤溶解度を有するそれらの活性物質より実際に非常に急速でなく基剤から拡散することが一般に受け入れられている。Ａｌｌｅｎ  Ｌ．Ｖ  ｉｎ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｉｎｇ  ｒｅｃｔａｌ  ｄｏｓａｇｅ  ｆｏｒｍｓ  −  Ｐａｒｔ  ＩＩ，Ｓｅｃｕｎｄｕｍ  Ａｒｔｅｍ  Ｖｏｌ  １４  Ｎｏ．４を参照されたい。したがって、活性物質および基剤の分配を伴わずに、基剤（親水性または疎水性）が溶融するかまたは他に粘膜の液体に溶解し、直腸または泌尿生殖器の空間から押し出されるとき、活性物質は、基剤と共に溶解し、押し出される。親水性活性物質は、一般に、疎水性基剤（典型的には脂肪酸、特に飽和脂肪酸を含有する）と一緒に製剤化され、疎水性活性物質は、一般に、親水性基剤（例えば、シクロデキストリンなど）と製剤化されることはこの理解に基づく。
【００４２】
特に、本明細書に記載されている本発明は、坐剤製剤のこれらの受け入れられている原理と対照をなし、それにより、少なくとも本明細書に記載されている特定のイソフラボノイドおよび関連する化合物が関与している限り、疎水性または親油性基剤を利用することに関して驚くべき利点が存在し、その中のイソフラボノイドおよび関連する化合物の溶解を可能とし、そこからこれらのイソフラボノイドおよび関連する化合物がより急速でなく拡散し、したがってより低い分配を示すと予想されることを本発明者は認識してきた。記述したように、本発明によると、活性物質が脂肪酸基剤から容易に拡散すべきでないことは重要であると考えられ、そうでなければ、これは、脂肪酸鎖の取込みによって直腸または泌尿生殖器の粘膜を横切るイソフラボノイドまたは関連する化合物の移入のより少ない可能性を意味するためである。
【００４３】
本明細書に記載されている知見に基づいて、本発明者は、イソフラボノイドおよび関連する化合物が油脂性基剤と共に製剤化され、直腸に、経膣的にまたは尿道適用によって投与されるとき、血液脳関門を横切って中枢神経系に達することを発見したが、以前にはそれらはできなかった。
【００４４】
これらの化合物が中枢神経系に提供されることを可能とする方法は、増強された有効性を一般に可能とし得るか、また疾患および状態、例えばがんおよび他の状態の処置を可能とし得る。
【００４５】
本発明者は、疎水性または親油性基剤を有する製剤の形態で直腸に与えられたとき、脳がんの処置または化学療法もしくは放射線療法に対する脳がん細胞の感作および他の条件について、イソフラボノイドおよび関連する化合物の可能性を認識してきた。
【００４６】
好ましい実施形態では、一般式（ＩＩ）の化合物は、
【化１６】
2019513827.tif 000017
【化１７】
2019513827.tif 000018
【化１８】
2019513827.tif 000019
からなる群から選択され、式中、
Ｒ８は、ＨまたはＣＯＲＤ（式中、ＲＤは、先に定義された通りである）であり、
Ｒ９は、ＣＯ２ＲＣまたはＣＯＲＥ（式中、ＲＣおよびＲＥは、先に定義された通りである）であり、
Ｒ１０は、ＣＯＲＣまたはＣＯＲＣＯＲＥ（式中、ＲＣおよびＲＥは、先に定義された通りである）であり、
Ｒ１１は、ＨまたはＯＨであり、
Ｒ１２は、Ｈ、ＣＯＯＨ、ＣＯ２ＲＣ（式中、ＲＣは、先に定義された通りである）またはＣＯＮＨＲＥ（式中、ＲＥは、先に定義された通りである）であり、
【化１９】
2019513827.tif 000020
は、単結合または二重結合のいずれかを表す。
【００４７】
さらにより好ましくは、化合物は、
【化２０】
2019513827.tif 000021
から選択される。
【００４８】
さらにより好ましくは、化合物は、
【化２１】
2019513827.tif 000022
である。
【００４９】
好ましい実施形態では、一般式（ＩＩＩ）の化合物は、
【化２２】
2019513827.tif 000023
からなる群から選択される。
【００５０】
好ましくは、化合物は、
【化２３】
2019513827.tif 000024
から選択される。
【００５１】
本明細書において使用する場合、用語「アルキル」は、１〜１０個の炭素原子またはその間の任意の範囲を有する直鎖または分岐鎖の炭化水素基を指し、すなわち、これは、１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個または１０個の炭素原子を含有する。アルキル基は、置換基で任意選択で置換されており、複数の置換の度合いが許容される。「アルキル」の例は、本明細書において使用する場合、これらに限定されないが、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、イソペンチルなどを含む。
【００５２】
本明細書において使用する場合、用語「Ｃ１〜１０アルキル」は、それぞれ少なくとも１個および最大で１０個の炭素原子またはその間の任意の範囲を含有する上記に定義されたようなアルキル基を指す（例えば、２〜５個の炭素原子を含有するアルキル基もＣ１〜１０の範囲内である）。
【００５３】
好ましくは、アルキル基は、１〜５個の炭素を含有し、より好ましくはメチル、エチルまたはプロピルである。
【００５４】
本明細書において使用する場合、用語「アリール」は、任意選択で置換されているベンゼン環を指す。アリール基は、置換基で任意選択で置換されており、複数の置換の度合いが許容される。
【００５５】
本明細書において使用する場合、用語「ヘテロアリール」は、１個または複数の窒素、硫黄および／または酸素ヘテロ原子を含有する、単環式の５員、６員または７員の芳香族環を指し、ここで、Ｎ−オキシドおよび酸化硫黄およびジオキシドは、許容できるヘテロ原子置換であり、３員までで任意選択で置換され得る。本明細書において使用される「ヘテロアリール」基の例は、フラニル、チオフェニル、ピロリル、イミダゾリル、ピラゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、チアゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、オキサジアゾリル、オキソピリジル、チアジアゾリル、イソチアゾリル、ピリジル、ピリダジル、ピラジニル、ピリミジルおよびその置換されたバージョンを含む。
【００５６】
「置換基」は、本明細書において使用する場合、目的分子内の原子に共有結合している分子の部分を指す。例えば、「環置換基」は、環員である原子、好ましくは炭素または窒素原子に共有結合している、ハロゲン、アルキル基、または本明細書に記載されている他の置換基などの部分であり得る。用語「置換されている」は、本明細書において使用する場合、指定された原子上の任意の１個または複数の水素が、示された置換基から選択されたもので置き換えられているが、ただし、指定された原子の通常の原子価を超えず、置換が、安定的な化合物、すなわち単離し、特性決定しかつ生物活性について試験することができる化合物をもたらすことを意味する。
【００５７】
用語「任意選択で置換されている」または「置換し得る」などは、本明細書を通して使用されるように、基が、１個または複数の水素ではない置換基でさらに置換されてもされなくてもよいことを示す。特定の官能基についての適切な化学的に実現可能な置換基は、当業者に明らかである。
【００５８】
置換基の例には、これらに限定されないが、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ３〜Ｃ７ヘテロシクリル、Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルスルファニル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルスルフェニル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルスルホニル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルスルホニルアミノ、アリールスルホノアミノ、アルキルカルボキシ、アルキルカルボキシアミド、オキソ、ヒドロキシ、メルカプト、アミノ、アシル、カルボキシ、カルバモイル、アミノスルホニル、アシルオキシ、アルコキシカルボニル、ニトロ、シアノまたはハロゲンが含まれる。
【００５９】
用語「イソフラボノイド」は、本明細書において使用する場合、広範に解釈され、イソフラボン、イソフラベン、イソフラバン、イソフラバノン、イソフラバノールおよび同様または関連する化合物を含む。イソフラボノイドのコア構造のいくつかの非限定的例を下記に示す。
【化２４】
2019513827.tif 000025
式中、
【化２５】
2019513827.tif 000026
は、単結合または二重結合のいずれかを表す。
【００６０】
上記で考察した化合物のいくつかは、名称ゲニステイン（化合物１、式中、Ｒ８は、Ｈである）ならびにエコールおよびデヒドロエコール（化合物１０、式中、Ｒ１１およびＲ１２は、Ｈである）によって言及し得る。デヒドロエコールは、イドロノキシルおよびフェノキソジオールとしても公知である。
【００６１】
語句「関連する化合物」は、イソフラボノイドと関連するとき、イソフラボノイドと同様の構造を有する化合物であり、イソフラボノイドの中央の環が開環していることにおいて異なる。このような化合物は、アリール二置換プロパノン化合物として公知であり、下記の構造：
【化２６】
2019513827.tif 000027
による全体的骨格を有する。
【００６２】
上記の化合物の合成のための方法は、それらの内容が全体として参照により本明細書に組み込まれる国際公開第１９９８／００８５０３号パンフレット、国際公開第２００５／０４９００８号パンフレット、国際公開第２００００６６５７６号パンフレットおよび国際公開第２０１００５４４３８号パンフレットならびに合成に対するその中に引用された参照文献において記載されている。
【００６３】
Ａ．坐剤、ペッサリーまたは尿道装置を形成するための基剤
下記の本開示において、「基剤」は、坐剤、ペッサリーまたは尿道内装置中の担体として一般に使用される物質を指し得る。
【００６４】
一般に、基剤は、基剤中のイソフラボノイドまたは関連する化合物の少なくとも部分的な、好ましくは完全な溶解を可能とする、イソフラボノイドまたは関連する化合物への溶解力を有する。
【００６５】
基剤は、油もしくは脂肪から構成されるかまたは油もしくは脂肪からなり得る。
【００６６】
一実施形態では、基剤は、５０〜６５％ｗ／ｗ基剤の量で飽和脂肪酸を含む。ステアリン酸は、２５〜４０％ｗ／ｗ基剤の量で含まれ得る。パルミチン酸は、２５〜３０％ｗ／ｗ基剤の量である。より長鎖の飽和脂肪酸、例えばミリスチン酸、アラキジン酸およびラウリン酸は、＜２％ｗ／ｗ基剤の量で含まれ得る。
【００６７】
さらに本明細書に記載されているように、不飽和脂肪酸が多い油脂性基剤は、本発明においてより有利でない傾向があることが見出されてきた。典型的には、油脂性基剤は、３５〜５０％ｗ／ｗ基剤の量で不飽和脂肪酸を含む。一不飽和脂肪酸は、３０〜４５％ｗ／ｗ基剤の量で含まれ得る。オレイン酸は、３０〜４０％ｗ／ｗ基剤の量で含まれ得る。多価不飽和脂肪酸、例えばリノール酸およびアルファリノレン酸は、０〜５％ｗ／ｗ基剤の量で含まれ得る。
【００６８】
カカオ脂（カカオバター）は、（ａ）その無毒性および非刺激性の性質、ならびに（ｂ）その低い融点のために坐剤における従来の基剤であり、それは、身体の空洞内に入れられたときに体温で容易に溶解することを意味する。しかし、それはいくつかの理由のために一層置き換えられている。１つの理由は、その天然起源の結果としての組成におけるその可変性である。カカオ脂は、多形でもある。これは、カカオ脂が複数の結晶形で存在する能力を有することを意味する。別の理由は、製剤化された生成物がその低い融点のために冷蔵保存する必要があり、これを熱帯地方において不適当なものとすることである。これは、カカオ脂を超える一連の利点、例えばより大きい稠性、酸敗についての可能性の減少、ならびに相転移（溶融および凝固）を特定の製剤、処理および貯蔵の必要条件に合うように調整するより大きい能力を提供するいくつかの代替生成物をもたらしてきた。
【００６９】
それにも関わらず、同様の組成および物理化学的特性を伴うカカオ脂または脂肪性基剤は、本発明の好ましい実施形態であることが見出されてきた。
【００７０】
典型的には、油脂性基剤は、圧倒的に多い量の（＞４５％ｗ／ｗ基剤）飽和脂肪酸を含む。好ましくは、油脂性基剤は、カカオ脂（カカオバター）、またはカカオ脂の脂肪酸プロファイルと実質的に同じであるかもしくは同一の飽和脂肪酸プロファイルを有するその油留分、もしくは誘導体、もしくは合成バージョンである。
【００７１】
基剤として有用な脂肪酸を提供するかまたは得るために使用し得る油の他の例は、自然源から得ることができるもの、例えばキャノーラ油、パーム油、大豆油、植物性油およびヒマシ油を含む。これらの源に由来する油を精留して、飽和脂肪酸を含有する油留分を得ることができる。
【００７２】
基剤は、ハードファット、バターまたは獣脂から形成するかまたはそれに由来し得る。
【００７３】
基剤は、エステル型または非エステル型脂肪酸鎖を含み得る。脂肪酸鎖は、好ましくは、Ｃ９〜２０鎖長の飽和脂肪酸鎖のモノグリセリド、ジグリセリドおよびトリグリセリドの形態であり得る。
【００７４】
坐剤基剤は、合成油または脂肪から形成し得、例は、Ｆａｔｔｉｂａｓｅ、Ｗｅｃｏｂｅｅ、Ｗｉｔｅｐｅｓｏｌｌ（Ｄｙｎａｍｉｔ  Ｎｏｂｅｌ、ドイツ）、Ｓｕｐｐｏｃｉｒｅ（Ｇａｔｅｆｏｓｓｅ、フランス、ＨｙｄｒｏｋｏｔｅおよびＤｅｈｙｄａｇを含む。
【００７５】
最終生成物中の油脂性坐剤基剤の割合は、活性医薬成分の投与量および他の医薬成分または不活性な成分（存在する場合）の存在の関数であるが、例として約１〜９９％ｗ／ｗ製剤の量で提供し得る。
【００７６】
一実施形態では、親油性坐剤基剤は、脂肪酸を含有し、基剤の脂肪酸の５０〜１００％は、飽和脂肪酸であり、好ましくは、基剤の脂肪酸の９０〜９９％は、飽和脂肪酸である。基剤の脂肪酸の３０〜６０％、好ましくは約４０％は、ステアリン酸であり得る。基剤の脂肪酸の２０〜３０％、好ましくは約２５％は、パルミチン酸であり得る。基剤の脂肪酸の１５〜２５％、好ましくは約２０％は、ラウリン酸であり得る。基剤の脂肪酸の５〜１０％、好ましくは約８％は、ミリスチン酸であり得る。
【００７７】
Ｂ．製造
イソフラボノイドまたは関連する化合物を含有する本発明の坐剤、ペッサリーおよび尿道適用のための装置は、下記のように調製し得る。イソフラボノイドまたは関連する化合物は、基剤中のイソフラボノイドまたは関連する化合物の少なくとも部分的な、好ましくは完全なまたは実質的に完全な溶解を可能とする条件において、溶融形態の坐剤基剤（上記のような）と接触する。次いで、この溶液を適切なモールド、例えばＰＶＣ、ポリエチレンまたはアルミニウムモールド中に注ぐ。例えば、イソフラボノイドまたは関連する化合物は、約３５℃〜約５０℃、好ましくは約４０℃〜約４４℃の温度で基剤と接触し得る。イソフラボノイドまたは関連する化合物は、基剤と接触させる前に粉砕またはふるいにかけることができる。
【００７８】
一実施形態では、製造のために提供される条件およびそれから形成される製剤または装置は、所与の投与量単位についてイソフラボノイドの少なくとも５０％、好ましくは６０％、好ましくは７０％、好ましくは８０％、好ましくは９０％、好ましくは９５％が投与量単位に溶解することを可能とするかまたはそれを提供する。これらの実施形態では、所与の投与量単位についてイソフラボノイドまたは関連する化合物の５０％以下、好ましくは所与の投与量単位についてイソフラボノイドまたは関連する化合物の４０％以下、好ましくは３０％以下、好ましくは２０％以下、好ましくは１０％以下、好ましくは５％以下は、投与量単位の坐剤基剤との混合物中にあり得る（すなわち坐剤基剤に溶解されていない）。
【００７９】
好ましい実施形態では、投与量単位に加えられるイソフラボノイドまたは関連する化合物の全ては、基剤に溶解する。この実施形態では、イソフラボノイドまたは関連する化合物は、坐剤基剤との混合物中に残らない。これは、投与量単位で与えられるイソフラボノイドまたは関連する化合物の全ての取込みの可能性を増加させると考えられる。
【００８０】
製造プロセスの目的は、構成要素を混合する薬局実務において一般に行われるように、坐剤基剤をイソフラボノイドまたは関連する化合物と混合するか、または混和するか、またはブレンドすることではないと理解される。これは、このように得られた混合物は、治療上の利点を提供する可能性がより低いと考えられるからである。これに関連して、任意の他の添加剤、担体または他の医薬活性物質が基剤中のイソフラボノイドまたは関連する化合物の溶解を妨げないことが特に重要であり、例えば、イソフラボノイドまたは関連する化合物が、電荷を帯びた分子種（他の医薬活性物質、担体または添加剤）と共に複合体を形成する場合に起こり得るように、その結果は、複合体、したがってその中に含有されるイソフラボノイドまたは関連する化合物が坐剤基剤に溶解する傾向を減少させる。
【００８１】
任意選択で、坐剤、ペッサリーまたは尿道内装置は、例えば、セチルアルコール、マクロゴールまたはポリビニルアルコールおよびポリソルベートでパッキング前にコーティングして、崩壊時間もしくは潤滑を増加させるか、または貯蔵による接着を低減し得る。
【００８２】
生成された各バッチからの１種または複数の試料坐剤、ペッサリーまたは尿道内装置を、好ましくは品質管理のために本発明の溶解方法によって試験する。好ましい一実施形態によれば、各バッチからの試料を試験して、基剤の少なくとも約７５重量％または８０重量％が２時間以内に溶解するかどうかを決定する。
【００８３】
典型的には、本発明による坐剤、ペッサリーまたは同様の装置は、全体にわたり実質的に疎水性または親油性であり、親水性物質、例えば親水性担体または医薬活性物質、あるいは別の医薬化合物、担体もしくは添加剤へのまたはこれらとのイソフラボノイドまたは関連する化合物の連結反応または複合体化から形成される親水性フォーカスまたは領域を含有しない。
【００８４】
好ましくは、坐剤、ペッサリーおよび尿道適用のための装置を形成するための製剤は、さらなる医薬活性物質、細胞毒性剤または化学療法剤を含まない。この実施形態では、唯一の活性物質は、イソフラボノイドまたは関連する化合物であり、製剤は、プラチン、タキサンまたは他の細胞毒性剤もしくは化学療法剤を含まない。
【００８５】
Ｃ．物理的特徴
坐剤の総重量は、好ましくは、約２２５０〜約２７００ｍｇ、より好ましくは約２２５０〜約２５００ｍｇの範囲である。一実施形態によれば、坐剤は、約２３００ｍｇ〜約２５００ｍｇの範囲の総重量を有する。
【００８６】
坐剤またはペッサリーは、好ましくは、滑らかな魚雷型である。
【００８７】
坐剤またはペッサリーの融点は、一般に、患者の身体において溶融するのに十分であり、典型的には約３７℃以下である。
【００８８】
１つの特に好ましい実施形態では、
−  個体に坐剤を１日１回または１日２回、３０〜９０日、好ましくは３０〜６０日、好ましくは３０日の期間にわたって提供するのに数が十分な複数の坐剤
を含むキットが提供され、各坐剤は、
４００ｍｇまたは８００ｍｇのイドロノキシル、
カカオバターの形態の坐剤基剤
を含み、
坐剤基剤は、坐剤の１〜９９％ｗ／ｗの量で提供され、
−  キットは、好ましくはがんの処置における使用のために、より好ましくは化学療法または放射線療法の細胞毒性効果に対してがん細胞を感作させるために、坐剤を１日１回または１日２回、３０〜９０日、好ましくは３０〜６０日、好ましくは３０日の期間にわたって提供するための説明書をさらに含み、好ましくは、がんは、前立腺がんである。
【００８９】
Ｄ．ＣＮＳへの化合物の提供
本明細書に記載のように、血液脳関門は、血液からＣＮＳへの多くの外因性または生体異物化合物の受動拡散を防止する。この関門は、限定された数の化合物（水、気体および特定の低分子量化合物）の受動拡散を可能とする一方、大部分の他の化合物は、能動輸送に供され、専用の輸送体を必要とする。全身的に与えられた多くの化合物は、血液脳関門を横切らないことが見出されてきており、それぞれの例において、推論は、関連性のある化合物が、血液脳関門を横切る化合物の移動を可能とする適切な輸送系を有さないことである。このように血液脳関門を横切ることができないことは、インビボで有用な多面発現効果を有することが他に見出されてきた、ＣＮＳ傷害、疾患または関連する状態の処置におけるこれらの化合物の価値を限定してきた。それは、脳および関連するＣＮＳ障害の処置のために全身的に与えることができる試薬の量を制限するため、これは、ヘルスケアについての重大およびかなりの問題である。例えば、テモゾロミドは、恐らく多形性神経膠芽腫の処置に有用である唯一の抗新生物剤であり、これは、テモゾロミドが、血液脳関門を横切ることが示された唯一の抗がん薬であるためである。この状況では、特定のフェノール化合物が本明細書における方法および組成物の実装によって脳組織を透過するように作製することができるという本発明者らによる知見は、高度に意味がある。それは、広範囲の有益な活性、例えば細胞毒性、アポトーシスシグナルまたは細胞生存シグナルが、この目的には不適当であると以前に考えられてきた分子によってＣＮＳに提供されることを可能とするためである。
【００９０】
本発明は、イソフラボノイドおよび関連する化合物に関する一方、直腸、膣または尿道適用のために同様の様式で製剤化された他の不溶性薬物（フェノール化合物およびベンゾピランを含む）の投与は、中枢神経系への改善されたアクセスを提供することも予想される。特に、薬物が基剤に実質的にまたは完全に溶解し、したがって坐剤が体温で溶融するとき、基剤から分配しないようにこれらの薬物を親油性基剤中で製剤化することにより、本明細書に記載されている作業において特定のイソフラボンについて観察されるように、これらの薬物が血液脳関門を横切って移入することが可能であることが予想される。本明細書に記載されている作業を適用し得るイソフラボノイドではないこのような化合物または薬物の一例は、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、例えばイブプロフェン、フルルビプロフェン、アスピリンおよびインドメタシンならびに他のフェノール薬物、例えばパラセタモールである。
【００９１】
上記を鑑みて、脳およびＣＮＳへイソフラボノイドをさらに送達するために、本発明は、ＣＮＳおよび脳への他の化合物、特に低い水溶解度を有し、経口的にまたはＩＶによって与えられたときに血液脳関門を横切ることができないことが示されており、かつ基剤が液化されるときに基剤から分配しないように親油性基剤中で一般に可溶性である化合物の送達に適用可能であると考えられることが予測される。このように別の実施形態では、その中で治療化合物が基剤に部分的または完全に溶解している、親油性基剤および治療化合物を含む組成物を提供することと、イソフラボノイド、例えばイドロノキシルの投与に関して、組成物を本明細書に記載のような直腸、膣または尿道の経路を介して投与することとを含む、脳またはＣＮＳへ治療化合物を提供する方法が提供される。好ましくは、治療化合物は、低い水溶解度を有する。より好ましくは、化合物は、１個もしくは複数のフェノール含有基を含む。またより好ましくは、化合物は、ベンゾピランである。
【００９２】
本明細書における研究は、血漿と比較して脳組織におけるイソフラボノイド含量の１０倍の増加を示す。これは、イソフラボノイドが本発明の方法によって製剤化および送達されるとき、血液脳関門を横切り得ることを明らかに示す。仮説に束縛されることを望むものではないが、これらの結果は、イソフラボノイドのＣＮＳ取込みの少なくとも一部が血液脳関門を横切る受動拡散から生じることを示すが、化合物の能動輸送は、イソフラボノイドの少なくとも一部が血液脳関門を横切ることをもたらし得ることが可能である。
【００９３】
重要なことに、本明細書における研究は、本発明によって製剤化および投与されるイソフラボノイドが、５日の期間のイソフラボノイドの毎日の投薬後、ＣＮＳおよび脳組織中に保持されることを示す。それは、所望の投薬スケジュールにわたりＣＮＳ組織をイソフラボノイドに曝露させることが可能であり、関連性のある疾患、障害または状態の処置または消散のために必要とされる期間、薬物が提示されることを可能とすることを示すため、これは重要である。血液脳関門を横切ることが示されてきたいくつかの薬物は、代謝されるかまたはＣＮＳから能動的に流出され、したがって相対的に短い半減期を有し、それらの薬物がＣＮＳ疾患または障害を処置する能力を妨げるため、この知見は重要である。
【００９４】
さらなる重要な知見は、本発明によって製剤化および投与されるイソフラボノイドがＣＮＳまたは脳組織において蓄積または累積されないことであり、イソフラボノイドが定常状態に達することを可能とする受動的または能動的機序を示唆する。この結果は、イソフラボノイドが５日間の期間にわたって毎日与えられる研究において見られ、１日目〜６日目でイソフラボノイドの量または蓄積における増加を伴わない。
【００９５】
いくつかのアッセイは、脳およびＣＮＳ組織への血液脳関門を横切るイソフラボノイドまたは他の水性不溶性フェノール化合物の移入を示すために利用可能である。液体クロマトグラフィー−質量分析法（ＬＣ−ＭＳ）実験手順は、下記の実施例に記載されている。
【００９６】
代替的なアプローチにおいて、目的の化合物は、１４Ｃ標識され得、血液脳関門の浸透は、定量的全身オートラジオグラフィーによって決定される。このアプローチは、１時間、６時間、２４時間、７２時間、１２０時間および１６８時間を含む様々な時点における薬物の位置の研究を可能とする。
【００９７】
いくつかのオプションは、脳への化合物の取込みの動力学的尺度および脳／血漿比の計算を提供し、見掛けの透過係数を計算するのに有用な脳および血漿中の薬物濃度の単純な比を提供する、インサイチューでの脳灌流のアセスメントを含む、脳浸透のエクスビボでのアセスメントについて記載されている。Ａｌａｖｉｊｅｈ  ｅｔ  ａｌ  ２００５を参照されたい。
【００９８】
Ｃｍａｘ、半減期およびＡＵＣを含む完全な薬物動態プロファイルを考慮する、脳浸透のインビボでのアセスメントのためのアプローチも記載されている（Ａｌａｖｉｊｅｈ  ｅｔ  ａｌ  ２００５）。例えば、脳室のＣＳＦは、脳間質内濃度と相関する遊離薬物濃度の良好な尺度を提供し得る。脳室のＣＳＦは、死後またはインビボでの試料であり得る。組織微小透析は、Ｃｍａｘ、半減期およびＡＵＣの計算のための、経時的な脳間質液中の化合物の濃度の測定を可能とする。
【００９９】
Ｅ．処置の方法
坐剤、ペッサリー、尿道内装置または同様の形態の本発明による製剤は、脳組織および実質、脊髄、脳室、くも膜下腔および関連する髄膜組織および脳脊髄液を含む中枢神経系におけるイソフラボノイドおよび関連する化合物のバイオアベイラビリティーを改善するのに有用である。
【０１００】
特に好ましい一実施形態では、組成物は、脳がんの処置のために有用であり、それにより、イソフラボノイドまたは関連する化合物は、細胞毒性単独療法としてまたは別の細胞毒性分子のための化学感作剤として使用される。
【０１０１】
このように、一実施形態では、個体において脳がんを処置または予防する方法であって、それを必要としている人に、式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）または（ＩＶ）の化合物を含む組成物から形成された坐剤、ペッサリーまたは尿道内装置を投与することを含む方法が提供される。
【０１０２】
一実施形態では、脳がんの予防または処置のための坐剤、ペッサリーまたは尿道内装置の調製における、式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）または（ＩＶ）の化合物の使用が提供される。
【０１０３】
別の実施形態では、脳がんの予防または処置において使用するための、式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）または（ＩＶ）の化合物を含む組成物から形成される坐剤、ペッサリーまたは尿道内装置が提供される。
【０１０４】
坐剤を適用するための方法は、当技術分野で周知である。一般に、方法は、坐剤を下痔静脈および中痔静脈と並んでいるあるポイントに挿入することを伴い、それにより下大静脈への薬物の放出を可能する。
【０１０５】
ペッサリーを適用するためのまたは医薬活性成分の尿道適用のための方法は、当技術分野で周知である。
【０１０６】
「処置」は、一般に、治療的処置および予防的措置または予防措置の両方を指す。
【０１０７】
がんの処置を必要としている対象は、良性、前がん性または非転移性腫瘍を既に有するもの、およびがんの発生または再発をこれから予防するものを含む。
【０１０８】
処置の目的または結果は、がん細胞の数を低減させ、原発性腫瘍のサイズを低減させ、末梢臓器へのがん細胞の浸潤を阻害し（すなわち、ある程度遅くし、好ましくは停止させ）、腫瘍転移を阻害し（すなわち、ある程度遅くし、好ましくは停止させ）、腫瘍成長をある程度阻害し、かつ／または障害と関連する症状の１つもしくは複数をある程度軽減することであり得る。
【０１０９】
処置の有効性は、生存の持続期間、疾患の進行までの時間、応答率（ＲＲ）、応答の持続期間および／または生活の質をアセスメントすることによって測定することができる。
【０１１０】
一実施形態では、方法は、疾患の進行を遅延させるのに特に有用である。
【０１１１】
一実施形態では、方法は、全生存期間および無進行生存期間を含むヒトの生存を延長するのに特に有用である。
【０１１２】
一実施形態では、方法は、治療に対する完全応答を提供するのに特に有用であり、それにより、処置に応答してがんの全ての徴候が消滅している。これは、がんが治癒したことを必ずしも意味しない。
【０１１３】
一実施形態では、方法は、治療に対する部分応答を提供するのに特に有用であり、それにより、処置に応答して身体における１つもしくは複数の腫瘍もしくは病変のサイズまたはがんの程度の減少が存在している。
【０１１４】
「前がん性」または「新生物発生前」は、一般に、典型的にはがんに先行するか、またはがんに発達する状態または成長を指す。「前がん性」成長は、細胞周期のマーカーによって決定することができる、異常な細胞周期調節、増殖または分化によって特性決定される細胞を有し得る。
【０１１５】
一実施形態では、がんは、前がん性または新生物発生前である。
【０１１６】
一実施形態では、がんは、二次性がんまたは転移である。
【０１１７】
「脳がん」または「脳腫瘍」は、頭蓋内または中央脊柱管中の全てのがんおよび腫瘍を含む。これらは、通常、脳自体（ニューロン、グリア細胞（アストロサイト、オリゴデンドロサイト、上衣細胞、ミエリン産生シュワン細胞、リンパ組織、血管）において、脳神経において、脳外被（髄膜）、頭蓋骨、下垂体および松果体において、または他の臓器に主に位置しているがんから広がって（転移性腫瘍）、異常および制御されない細胞分裂によって生じ得る。脳腫瘍の例には、これらに限定されないが、乏突起膠腫、髄膜腫、テント上上衣腫、松果体部腫瘍、髄芽細胞腫、小脳星状細胞腫、テント下上衣腫、脳幹神経膠腫、シュワン細胞腫、下垂体腫瘍、頭蓋咽頭腫、視神経膠腫および星状細胞腫（例えば、毛様細胞性星状細胞腫、未分化星状細胞腫）、極性海綿芽細胞腫、星状芽細胞腫、大脳神経膠腫症、下垂体腫瘍、脳の原発性リンパ腫、脳の原発性生殖細胞腫瘍、脈絡叢乳頭腫、聴神経腫、頭蓋咽頭腫、神経膠腫、原始神経外胚葉性腫瘍およびラブドイド腫瘍が含まれる。
【０１１８】
ある特定の実施形態では、脳またはＣＮＳのがんおよび新生物疾患は、ＥＧＦＲ、ＨＥＲ２、ＶＥＧＦＲ２またはＳｒｃファミリーキナーゼ阻害剤に潜在的に応答し得る。
【０１１９】
特に好ましい実施形態では、脳または中枢神経系腫瘍は、神経膠芽腫、例えば多形神経膠芽腫であり得る。
【０１２０】
一部の実施形態では、本発明は、不応性腫瘍、特に不応性悪性腫瘍を処置する方法を提供する。不応性腫瘍は、化学療法剤単独、放射線単独またはこれらの組合せによる処置に失敗するかまたは抵抗性である腫瘍を含む。本明細書の目的のために、不応性腫瘍は、化学療法剤および／または放射線による処置によっても阻害されるように思われるが、処置が中断した後、５年まで、ときに１０年またはそれを超えて再発する腫瘍を包含する。
【０１２１】
一部の実施形態では、中枢神経系または脳の腫瘍は、トラスツズマブによる処置に対して応答性である腫瘍である。一部の実施形態では、中枢神経系または脳腫瘍は、細胞内または細胞外ＨＥＲ２アンタゴニストによる処置に対して応答性である腫瘍である。一部の実施形態では、中枢神経系または脳腫瘍は、細胞内または細胞外ＥＧＦＲアンタゴニストによる処置に対して応答性である腫瘍である。ＥＧＦＲまたはＨＥＲ２の細胞外または細胞内のアンタゴニストに対する応答性は、例えば、ＢＢＢを横切らないアンタゴニストについてのインビトロでのアッセイにおける応答性を含む。
【０１２２】
上記の実施形態では、本発明による製剤は、腫瘍細胞に対する細胞毒性効果を通してまたは他に細胞複製を全体的に阻害することにより、がん細胞の倍増時間を妨げるか、または腫瘍成長を他に阻害するのに有用であり得る。これらの実施形態では、坐剤製剤は、抗新生物「単独療法」効果を提供すると理解される。
【０１２３】
別の実施形態では、上記の処置の方法は、細胞毒性を有する化学療法または放射線療法を個体に投与するステップをさらに含む。
【０１２４】
また別の実施形態では、化学療法または放射線療法に対して脳がんを感作させる方法であって、
−  化学療法または放射線療法を必要としている、脳がんを有する個体を提供するステップ、
−  本発明による製剤から形成される坐剤、ペッサリーまたは尿道内装置を個体に投与するステップ、
−  化学療法または放射線療法を個体に投与するステップ
を含む方法が提供される。
【０１２５】
別の実施形態では、処置は、放射線療法、特に定位放射線療法に対する脳腫瘍の感作を提供する。一実施形態では、処置は、最適未満の放射線量を利用して腫瘍サイズの低減を提供し得る。最適未満の放射線量は、イソフラボノイド製剤処置の非存在下で腫瘍サイズを低減させることができないものであることが理解される。
【０１２６】
別の実施形態では、処置は、化学療法に対する脳腫瘍の感作を提供する。一実施形態では、処置は、最適未満の化学療法用量を利用して腫瘍サイズの低減を提供する。最適未満の化学療法用量は、イソフラボノイド製剤処置の非存在下で腫瘍サイズを低減させることができないものであることが理解される。
【０１２７】
一実施形態では、イソフラボノイドまたは関連する化合物を含む処置は、細胞毒性単独療法として、あるいは放射線療法もしくは化学療法前のまたは放射線療法もしくは化学療法の時点での、可変の投薬計画による放射線もしくは化学感作治療として提供される。可変の投薬レジメンは、放射線療法もしくは化学療法前の期間におけるラン中のイソフラボノイド処置の増加する用量、および／または放射線療法もしくは化学療法中の増加する用量を含み得る。一例では、イソフラボノイドまたは関連する化合物は、約４００ｍｇの用量で１日１回、１〜２週間の期間にわたって提供され、８００ｍｇへ１日１回、１〜２週間、または１カ月、またはそれより長い期間にわたって増加させ、および１６００ｍｇ（２×８００ｍｇ）へ１日１回、１〜２週間、または１カ月、またはそれより長い期間にわたってさらに増加させる。実際の量は、疾患状態、年齢、体重、性別および他の薬理学的に関連性のある可変部分に影響を受ける。
【０１２８】
一部の実施形態では、式１〜ＩＶの化合物、特にイドロノキシルまたは下記の化合物：
【化２７】
2019513827.tif 000028
の１つは、テモゾロミドと共に上記の本発明の方法および組成物によって投与される。このように、脳がんについての個体の処置、特に多形神経膠芽腫の処置のための方法が提供され、個体は、テモゾロミドを受けたかまたは受けることになり、方法は、イドロノキシルまたは下記の化合物
【化２８】
2019513827.tif 000029
の１つを含む本明細書に記載されている坐剤製剤を個体に直腸投与するステップを含む。
【０１２９】
これらの実施形態では、これらの化合物は、新たに診断された多形神経膠芽腫を有する成人患者の処置のために、放射線療法、次いでテモゾロミドによる維持的処置と併用して投与し得る。そのような実施形態では、テモゾロミドは、焦点放射線療法（例えば、３０分割で投与する６０Ｇｙ）と併用して７５ｍｇ／ｍ２で４２日間投与し得、それに続いてテモゾロミドの２８日サイクルの１〜５日目について１日１回の１５０ｍｇ／ｍ２の最初の維持用量を６サイクルである。
【０１３０】
一部の実施形態では、式１〜ＩＶの化合物、特にイドロノキシルが、テモゾロミド、式Ａの化合物と共に投与される場合、投与は、不応性未分化星状細胞腫を有する成人患者、すなわちニトロソ尿素およびプロカルバジンを含有する薬物レジメンを受けていて疾患の進行を経験してきた患者の処置のためのものであり得る。そのような実施形態では、テモゾロミドは、２８日の処置サイクル毎に１５０ｍｇ／ｍ２の最初の用量で１日１回、連続５日間投与し得る。
【０１３１】
テモゾロミドは、例えば、５ｍｇ、２０ｍｇ、１００ｍｇ、１４０ｍｇ、１８０ｍｇもしくは２５０ｍｇのカプセルとして、または注射のための１００ｍｇの粉末（例えば、９０分にわたる静脈内注入として）として単位剤形で投与し得る。
【０１３２】
新たに診断された高悪性度神経膠腫を有する患者について、テモゾロミドは、併用相において焦点放射線療法（３０分割で投与する６０Ｇｙ）と併用して７５ｍｇ／ｍ２で４２日間毎日投与し得、それに続く維持テモゾロミドが６サイクルである。維持相について、テモゾロミドは、以下の通り投与し得る。サイクル１：テモゾロミドおよび放射線療法相が完了した４週間後、テモゾロミドは、さらなる６サイクルの維持処置のために投与される。サイクル１（維持）における投与量は、５日間１日１回の１５０ｍｇ／ｍ２、それに続く処置を伴わない２３日である。サイクル２〜６：サイクル２の開始において、サイクル１についてのＣＴＣ非血液学的毒性が２以下のグレード（脱毛症、悪心および嘔吐を除く）であり、絶対好中球数（ＡＮＣ）が１．５×１０９／Ｌ以上であり、血小板数が１００×１０９／Ｌ以上である場合、用量は、２００ｍｇ／ｍ２に増大され得る。用量は、毒性が起こる場合を除いて、それぞれのそれに続くサイクルの最初の５日間、１日当たり２００ｍｇ／ｍ２のままである。用量がサイクル２において増大しなかった場合、それに続くサイクルにおいて増大を行うべきではない。
【０１３３】
不応性未分化星状細胞腫を有する成人患者について、テモゾロミドの最初の用量は、２８日の処置サイクル毎に１日１回連続５日間、１５０ｍｇ／ｍ２である。
【０１３４】
テモゾロミドの投薬に関するさらなるガイダンスのために、ＴＥＭＯＤＡＲ（登録商標）（Ｍｅｒｃｋ＆Ｃｏ．，Ｉｎｃ．によって販売されているブランド名テモゾロミド）についての処方情報を参考にし得る。
【０１３５】
腫瘍細胞を死滅させるためのイソフラボノイド、特にインドロノキシル、ゲネスチエンなどの有効性は、文献において良好に確立されている（Ｂｒｏｗｎ  ｅｔ  ａｌ．２００８を参照されたい）。
【０１３６】
ＣＮＳおよび脳の腫瘍を死滅させるためのいくつかのリード化合物の有効性をアセスメントするための前臨床動物モデルも公知である。一例では、ヒトルシフェラーゼを発現している腫瘍細胞を頭蓋内に埋め込む。脳における腫瘍成長および腫瘍量のアセスメントは、バイオルミネセンスの検出に基づく。
【０１３７】
上記のモデルを利用して、式Ｉ〜ＩＶの化合物、特にイドロノキシルを、埋込み物を有するマウスに埋込みの約８日後に本発明によって直腸に与え得る。次いで、バイオルミネセンスは、その間にイソフラボノイドが本発明による研究によってＣＮＳおよび脳組織において見出されてきた時点で検出し得る。
【０１３８】
モデルは、イソフラボノイドが本発明の方法および組成物によってモデルにおいて送達されるとき、これらの薬物の効力の増加をアセスメントするテモゾロミドまたは他の化学療法剤の尾静脈処置も含み得る。
【０１３９】
モデルは、本発明の方法および組成物によるイソフラバノイドの送達から生じる、放射線に対する腫瘍細胞の感受性の増加をアセスメントするのに特異的な全身または全脳での照射をさらに含み得る。
【０１４０】
本明細書において開示および定義される本発明は、記述されるか、または文章もしくは図面から明らかな個々の特徴の２つ以上の全ての代替的な組合せまで及ぶことが理解される。これらの異なる組合せの全ては、本発明の様々な代替的な態様を構成する。
【実施例】
【０１４１】
実施例１
脳組織および血液における分布調査で観察するＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットにおける急性および５日の直腸の反復用量研究
この研究の目的は、ＳＰＦ  Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ雄性ラットにおける様々な脳組織および血液中の急性および反復投与に続いて、直腸投与によるイドロノキシルの吸収を決定することであった。
【０１４２】
７．０．方法
【０１４３】
【表１】
2019513827.tif 000030
【０１４４】
７．２．試験品目
【０１４５】
【表２】
2019513827.tif 000031
【０１４６】
７．３．標準の調製
較正標準をアセトニトリル中で調製した。全部で８つの非ゼロ標準を下記の濃度０．５〜１，０００ｎｇ／ｍＬで使用する。ストックを調製し、１日間まで２〜８℃で貯蔵した。中間体および処理用ストックは、ストック標準液から新たに調製する。内部標準溶液を調製し、１日間まで２〜８℃で貯蔵した。
【０１４７】
７．３．１．ストック標準液
ストック標準液は下記のように調製した。処理用および較正およびＱＣ標準の調製のためにストック溶液を調製する。
【０１４８】
【表３】
2019513827.tif 000032
【０１４９】
７．３．２．内部標準
内部標準
下記の希釈スキームを使用して「内部標準」をストック標準液（表３）から調製する。
【０１５０】
【表４】
2019513827.tif 000033
【０１５１】
７．３．３．処理用標準液
非マトリックス
下記の希釈スキームを使用して「非マトリックス処理用溶液」を調製した（表５）。
【０１５２】
【表５】
2019513827.tif 000034
【０１５３】
７．３．４．非マトリックス処理用品質管理標準液
下記の希釈スキームを使用してストック溶液（表３）から「非マトリックス処理用溶液」を調製する。
【０１５４】
【表６】
2019513827.tif 000035
【０１５５】
７．３．５．較正標準の調製
較正標準は、非マトリックス処理用標準（表５）と内部標準および水とを下記のように混合することによって調製した。
【０１５６】
【表７】
2019513827.tif 000036
【０１５７】
７．３．６．品質管理試料の調製
品質管理標準は、非マトリックス処理用ＱＣ標準（表６）と内部標準および水とを下記のように混合することによって調製した。
【０１５８】
【表８】
2019513827.tif 000037
【０１５９】
７．４．生存中実験
７．４．１．投薬およびサンプリングスケジュール
直腸：２ｇの坐剤のチップからの５０ｍｇ／ｍＬを各ラットに投与した。新規な坐剤を毎日使用した。
【０１６０】
群１の動物を対照として使用した。群２における動物に１回投薬し、尾静脈を使用して試験品目投与に続いて３０分および１２０分に出血させた。試験品目投与の２４時間後に血液を捕集し、動物を屠殺し、臓器を切開し、秤量し、抽出し、試験品目濃度を決定した。群３における動物に５回毎日投薬し、６日目に屠殺した。尾静脈を使用して試験品目投与に続いて３０分および１２０分、ならびに試験品目投与に続いて２４時間において動物を出血させ、血液を捕集し、動物を屠殺し、臓器を切開し、秤量し、抽出し、試験品目濃度を決定した。尿を２時間において１５〜３０分間捕集した。
【０１６１】
【表９】
2019513827.tif 000038
【０１６２】
【表１０】
2019513827.tif 000039
【０１６３】
【表１１】
2019513827.tif 000040
【０１６４】
７．４．２．出血／検屍
採血および処理：各時点で血液をリチウムヘパリン（血漿）チューブ中に捕集し、１２，０００ｒｐｍで３分間遠心した。分析前に血漿を−８０℃で貯蔵した。
【０１６５】
検屍：屠殺により、ホモジナイザーおよび既知の量のｍｉｌｌｉＱ水を使用したホモジナイゼーション前に脳および様々な組織を切開し、蒸留水ですすぎ、分析前に８０℃で貯蔵した。
【０１６６】
７．４．３．試料処理
７．４．３．１．血漿試料
血漿試料を、内部標準を含有するアセトニトリルを加えることによって処理した。５０μＬの血漿または尿試料を２００μＬの内部標準に加え、１０秒間ボルテックスにかけ、３分間１３４００ｒｐｍでスピンした。
【０１６７】
１５０μＬの上清をポリプロピレンバイアルに移した。２μＬのそれぞれの処理された試料をＬＣＭＳＭＳによって分析した。
【０１６８】
７．４．３．２．臓器抽出
屠殺により、脳および様々な組織を切開し、脳について０．５ｍＬ／ｇの比で水を加えることを伴って、ガラス／ＰＴＦＥ製組織ホモジナイザーにおいて個々にホモジナイズした。
【０１６９】
ホモジナイゼーション後、内部標準を含有するアセトニトリルで組織を抽出した。１部の水対４部のアセトニトリルの比でアセトニトリルを加え、１３４００ｒｐｍで３分間遠心した。２μＬのそれぞれの処理された組織試料をＬＣＭＳＭＳによって分析した。
【０１７０】
８．０．分析結果
【０１７１】
【表１２】
2019513827.tif 000041
【０１７２】
【表１３】
2019513827.tif 000042
【０１７３】
【表１４】
2019513827.tif 000043
【０１７４】
【表１５】
2019513827.tif 000044
【０１７５】
【表１６】
2019513827.tif 000045
【０１７６】
【表１７】
2019513827.tif 000046
【０１７７】
参考文献
Ｌａｍｂｅｒｔ  ｅｔ  ａｌ，２００５；Ｗｉｌｌｉａｍｓｏｎ  ａｎｄ  Ｍａｎａｃｈ，２００５
Ｐｉａｏ  Ｍ，Ｍｏｒｉ  Ｄ，Ｓａｔｏｈ  Ｔ，ｅｔ  ａｌ．（２００６）．Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ  ｃｅｌｌ  ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ，ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ，ａｎｄ  ｔｈｅ  ｄｏｗｎ−ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｃｅｌｌ  ａｄｈｅｓｉｏｎ−ｒｅｌａｔｅｄ  ｇｅｎｅｓ  ｂｙ  ｇｅｎｉｓｔｅｉｎ．Ｃｏｍｂｉｎｅｄ  ｗｉｔｈ  ａ  ｃＤＮＡ  ｍｉｃｒｏａｒｒａｙ  ａｎａｌｙｓｉｓ．Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｕｍ  １３（４）：２４９−６６
Ａｄｊａｋｌｙ  Ｍ，Ｎｇｏｌｌｏ  Ｍ，Ｄａｇｄｅｍｉｒ  Ａ，Ｊｕｄｅｓ  Ｇ，Ｐａｊｏｎ  Ａ，Ｋａｒｓｌｉ−Ｃｅｐｐｉｏｇｌｕ  Ｓ，Ｐｅｎａｕｌｔ−Ｌｌｏｒｃａ  Ｆ，Ｂｏｉｔｅｕｘ  ＪＰ，Ｂｉｇｎｏｎ  ＹＪ，Ｇｕｙ  Ｌ，Ｂｅｒｎａｒｄ−Ｇａｌｌｏｎ  Ｄ．（２０１５）．Ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｃａｎｃｅｒ：ｔｈｅ  ｍａｉｎ  ｒｉｓｋ  ａｎｄ  ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  ｆａｃｔｏｒｓ  −  ｅｐｉｇｅｎｅｔｉｃ  ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｓ．Ａｎｎ  Ｅｎｄｏｎｃｒｉｎｏｌ（Ｐａｒｉｓ）７６：２５−４１．
Ｋａｚｉ  Ａ，Ｄａｎｉｅｌ  ＫＧ，Ｓｍｉｔｈ  ＤＭ，ｅｔ  ａｌ．（２００３）．Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｐｒｏｔｅａｓｏｍｅ  ａｃｔｉｖｉｔｙ，ａ  ｎｏｖｅｌ  ｍｅｃｈａｎｉｓｍ  ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  ｔｈｅ  ｔｕｍｏｒ  ｃｅｌｌ  ａｐｏｐｔｏｓｉｓ−ｉｎｄｕｃｉｎｇ  ａｂｉｌｉｔｙ  ｏｆ  ｇｅｎｉｓｔｅｉｎ．Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  ６６（６）：９６５−７６．
Ｇｕｙ  Ｌ，Ｖｅｄｒｉｎｅ  Ｎ，Ｕｒｐｉ−Ｓａｒｄａ  Ｍ，Ｇｉｌ−Ｉｚｇｕｉｅｒｄｏ  Ａ，Ａｌ−Ｍａｈａｒｉｋ  Ｎ，Ｂｏｉｔｅａｕｘ  ＪＰ，Ｓｃａｌｂｅｒｔ  Ａ，Ｒｅｍｅｓｙ  Ｃ，Ｂｏｔｔｉｎｇ  ＮＰ，Ｍａｎａｃｈ  Ｃ．（２００８）．Ｏｒａｌｌｙ  ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｅｄ  ｉｓｏｆｌａｖｏｎｅｓ  ａｒｅ  ｐｒｅｓｅｎｔ  ａｓ  ｇｌｕｃｏｓｉｄｅｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｈｕｍａｎ  ｐｒｏｓｔａｔｅ．Ｊ  Ｎｕｔｒ  ６０：４６１−８．
Ｚｈａｎｇ  Ｙ，Ｈｅｎｄｒｉｃｈ  Ｓ，Ｍｕｒｐｈｙ  ＰＡ．（２００３）．Ｇｌｕｃｕｒｏｎｉｄｅｓ  ａｒｅ  ｔｈｅ  ｍａｉｎ  ｉｓｏｆｌａｖｏｎｅ  ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ  ｉｎ  ｗｏｍｅｎ．Ｊ  Ｎｕｔｒ  １３３：３９９−４０４．
Ｋｉｎｇ  ＣＤ，Ｒｉｏｓ  ＧＲ，Ｇｒｅｅｎ  ＭＤ，Ｔｅｐｈｌｙ  ＴＲ（２０００）．ＵＤＰ−ｇｌｕｃｕｒｏｎｏｓｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅｓ．Ｃｕｒｒ  Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂ  １：１４３−１６１．
Ｇｕｉｌｌｅｍｅｔｔｅ  Ｃ．（２００３）．Ｐｈａｒｍａｃｏｇｅｎｏｍｉｃｓ  ｏｆ  ｈｕｍａｎ  ＵＤＰ−ｇｌｕｃｕｒｏｎｏｓｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ  ｅｎｚｙｍｅｓ．Ｐｈａｒｍａｃｏｇｅｎｏｍｉｃｓ  Ｊ．３：１３６−１５８．
Ｍａｒｕｏ  Ｙ，Ｉｗａｉ  Ｍ，Ｍｏｒｉ  Ａ，Ｓａｔｏ  Ｈ，Ｔａｋｅｕｃｈｉ  Ｙ．（２００５）．Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ  ｏｆ  ＵＤＰ−ｇｌｕｃｕｒｏｎｏｓｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ  ａｎｄ  ｄｒｕｇ  ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ．Ｃｕｒｒ  Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂ  ６：９１−９９．
Ｗｕ  Ｂ，Ｋｕｌｋａｒｎｉ  Ｋ，Ｂａｓｕ  Ｓ，Ｚｈａｎｇ  Ｓ，Ｈｕ  Ｍ．（２０１１）．Ｆｉｒｓｔ−ｐａｓｓ  ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  ｖｉａ  ＵＤＰ−ｇｌｕｃｕｒｏｎｏｓｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ：ａ  ｂａｒｒｉｅｒ  ｔｏ  ｏｒａｌ  ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ  ｏｆ  ｐｈｅｎｏｌｉｃｓ．Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉ  １００：３６５５−３６８１．
Ｈｏｗｅｓ  ＪＢ，ｄｅ  Ｓｏｕｚａ  ＰＬ，Ｗｅｓｔ  Ｌ，Ｈｕａｎｇ  ＬＪ，Ｈｏｗｅｓ  ＬＧ．Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ  ｏｆ  ｐｈｅｎｏｘｏｄｉｏｌ，ａ  ｎｏｖｅｌ  ｉｓｏｆｌａｖｏｎｅ，ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ  ｉｎｔｒａｖｅｎｏｕｓ  ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ  ｔｏ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ａｄｖａｎｃｅｄ  ｃａｎｃｅｒ．ＢＭＣ  Ｃｌｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２０１１  Ｆｅｂ  ３；１１：１．
Ｂｒｏｗｎ  Ｄ，Ｈｅａｔｏｎ  Ａ，Ｈｕｓｂａｎｄ  Ａ（２００８）．Ｉｄｒｏｎｏｘｉｌ．Ｄｒｕｇｓ  Ｆｕｔ．３３（１０）：８４４−８６０．
Ｗｅｓｔｈｏｌｍ  ＤＥ  ｅｔ  ａｌ．Ｔｈｅ  ｂｌｏｏｄ−ｂｒａｉｎ  ｂａｒｒｉｅｒ  ｔｈｙｒｏｘｉｎｅ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ  ｏｒｇａｎｉｃ  ａｎｉｏｎ−ｔｒａｎｓｐｏｒｔｉｎｇ  ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ  １ｃ１  ｄｉｓｐｌａｙｓ  ａｔｙｐｉｃａｌ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔ  ｋｉｎｅｔｉｃｓ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ  １５０，５１５３−５１６２，２００９．
Ｙｏｕｄｉｍ  Ｋ  ｅｔ  ａｌ．Ｆｌａｖｏｎｏｉｄ  ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙ  ａｃｒｏｓｓ  ａｎ  ｉｎ  ｓｉｔｕ  ｍｏｄｅｌ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｂｌｏｏｄ−ｂｒａｉｎ  ｂａｒｒｉｅｒ．Ｆｒｅｅ  Ｒａｄ  Ｂｉｏｌ  Ｍｅｄ  ３６，５９２−６０４  ，２００４）
Ｔｓａｉ  ＴＨ．Ｃｏｎｃｕｒｒｅｎｔ  ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ  ｏｆ  ｕｎｂｏｕｎｄ  ｇｅｎｉｓｔｅｉｎ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｂｌｏｏｄ，ｂｒａｉｎ  ａｎｄ  ｂｉｌｅ  ｏｆ  ａｎａｅｓｔｈｅｔｉｚｅｄ  ｒａｔｓ  ｕｓｉｎｇ  ｍｉｃｒｏｄｉａｌｙｓｉｓ  ａｎｄ  ｉｔ  ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃ  ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ．Ｊ  Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ  Ａ  １０７３：３１７−３２２，２００５）．
【国際調査報告】
2019513827.tif 000071
2019513827.tif 000072
2019513827.tif 000073
2019513827.tif 000074
2019513827.tif 000075
2019513827.tif 000076
2019513827.tif 000077