(57)【要約】  本発明は、容易に入手可能な出発物質から、２’−フルオロ−６’−メチレン−炭素環アデノシン（ＦＭＣＡ）及び２’−フルオロ−６’−メチレン−炭素環グアノシン（ＦＭＣＧ）を８ステップで合成するための新規の収斂的な手法を提供する。多目的に利用可能な炭素環の重要な中間体、（１Ｓ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ｔｅｒｔ−ブトキシ−４−（ｔｅｒｔ−ブトキシメチル）−２−フルオロ−５−メチレンシクロペンタノール（スキーム１Ａ及び１の化合物８）の、わずか６ステップでの立体特異的調製のための効率的かつ実用的な方法も提供される。これらの化合物のプロドラッグもまた、調製される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
化合物８
【化１】
2019513718.tif 000047
を、置換済みペンタノン誘導体１
【化２】
2019513718.tif 000048
から合成するためのプロセスであって、該プロセスは、
化合物１を溶媒中の強塩基と低温で反応させることによって、化合物１のケト基にα位のメチレン基を導入した後、エッシェンモーザー塩と、それに続いてヨードメタンとを添加して、以下の化合物２Ａ
【化３】
2019513718.tif 000049
を生成し、化合物２Ａのケト基を、低温のルイス酸（好ましくはＣｅＣｌ3）の存在下で、水素化ホウ素ナトリウムを用いて立体選択的に還元して、化合物２
【化４】
2019513718.tif 000050
を生成するステップ、
あるいは、化合物１を、溶媒中のジイソプロピルアンモニウムトリフルオロ酢酸塩及びジイソプロピルアミンの存在下で、パラホルムアルデヒドと反応させて化合物２Ａを生成した後に、化合物２Ａのケト基を、低温の溶媒中のルイス酸の存在下で、水素化ホウ素ナトリウムを用いて立体選択的に還元して化合物２を生成することによって、化合物１から化合物２を生成するステップと、
化合物２を溶媒中のＡｌＭｅ3と反応させて、化合物３
【化５】
2019513718.tif 000051
を生成するステップと、
化合物３を、弱塩基中の塩化ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリルと反応させて、化合物４
【化６】
2019513718.tif 000052
を生成するステップと、
化合物４を、フッ素化剤（好ましくは三フッ化ジエチルアミノ硫黄ＤＡＳＴ）でフッ素化して２’位を立体選択的にフッ素化することにより、化合物７
【化７】
2019513718.tif 000053
を生成し、化合物７をフッ化テトラブチルアンモニウムを用いて脱保護してシリル保護基を除去することにより、化合物８
【化８】
2019513718.tif 000054
を生成するステップと
を含み、化合物８の合成は、ワンポットで、又は化合物２Ａ、２、３、４、７及び８のいずれか１つ以上を生成するためのいずれか１つ以上のステップでの任意の分離及び／又は精製を伴う複数のステップで行われることができる、プロセス。
【請求項２】
化合物８
【化９】
2019513718.tif 000055
を、置換済みペンタノン誘導体１
【化１０】
2019513718.tif 000056
から合成するためのプロセスであって、該プロセスは、
化合物１を、溶媒中のジイソプロピルアンモニウムトリフルオロ酢酸塩及びジイソプロピルアミンの存在下で、パラホルムアルデヒドと反応させて、化合物２Ａ
【化１１】
2019513718.tif 000057
を生成し、それに続いて化合物２Ａのケト基を、低温の溶媒中のルイス酸の存在下で、水素化ホウ素ナトリウムを用いて立体選択的に還元して、化合物２
【化１２】
2019513718.tif 000058
を生成するステップと、
化合物２を溶媒中のＡｌＭｅ3と反応させて、化合物３
【化１３】
2019513718.tif 000059
を生成するステップと、
化合物３を、弱塩基中の塩化ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリルと反応させて、化合物４
【化１４】
2019513718.tif 000060
を生成するステップと、
化合物４を三フッ化ジエチルアミノ硫黄（ＤＡＳＴ）でフッ素化して、化合物４の２’位を立体選択的にフッ素化することにより、化合物７
【化１５】
2019513718.tif 000061
を生成し、化合物７を脱保護してシリル保護基を除去することにより、化合物８
【化１６】
2019513718.tif 000062
を生成するステップと
を含み、化合物８の合成は、ワンポットで、又は化合物２Ａ、２、３、４、７及び／又は８を生成するためのいずれか１つ以上のステップでの任意の分離及び／又は精製を伴う複数のステップで行われることができる、プロセス。
【請求項３】
化合物２は化合物１から、精製及び／又は分離を行わずにワンポットで調製される、請求項２に記載のプロセス。
【請求項４】
化合物８
【化１７】
2019513718.tif 000063
から、２’−フルオロ−６’−メチレン−炭素環アデノシン（ＦＭＣＡ）化合物１０を調製するプロセスであって、該プロセスは、
化学構造
【化１８】
2019513718.tif 000064
（Ｐは１つ又は２つのアミン保護基（好ましくは２つのＢＯＣ基）を表す）のアミンが保護された６−アミノプリン化合物を、溶媒中のトリフェニルホスフィン及びジイソプロピルアジドカルボキシレート（ＤＩＡＤ）の存在下で化合物８に縮合して、化合物８Ｐ
【化１９】
2019513718.tif 000065
（Ｐは１つ又は２つのアミン保護基（好ましくは２つのＢＯＣ基）を表す）を生成するステップと、
化合物８Ｐを脱保護して、化合物１０（ＦＭＣＡ）
【化２０】
2019513718.tif 000066
を生成するステップと
を含み、上記の合成は、ワンポットで、又は化合物８Ｐ及び化合物１０のいずれかの生成について分離及び／又は精製を伴う複数のステップで行われることができる、プロセス。
【請求項５】
化合物８Ｐは、
【化２１】
2019513718.tif 000067
である、請求項４に記載のプロセス。
【請求項６】
化合物８
【化２２】
2019513718.tif 000068
から、２’−フルオロ−６’−メチレン−炭素環アデノシン（ＦＭＣＡ）化合物１０を調製するプロセスであって、該プロセスは、
化学構造
【化２３】
2019513718.tif 000069
のｄｉ−Ｂｏｃ保護６−アミノプリン化合物を、溶媒中のトリフェニルホスフィン及びジイソプロピルアジドカルボキシレート（ＤＩＡＤ）の存在下で化合物８に縮合して、化合物９
【化２４】
2019513718.tif 000070
を生成するステップと、
化合物９を脱保護して、化合物１０（ＦＭＣＡ）
【化２５】
2019513718.tif 000071
を生成するステップと
を含み、上記の合成は、ワンポットで、又は化合物９及び／又は化合物１０の生成について分離及び／又は精製を伴う複数のステップで行われることができる、プロセス。
【請求項７】
少なくとも化合物１０は精製及び単離される、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
化合物８
【化２６】
2019513718.tif 000072
から、２’−フルオロ−６’−メチレン−炭素環グアノシン（ＦＭＣＧ）化合物１１を調製するプロセスであって、該プロセスは、
化学構造
【化２７】
2019513718.tif 000073
（Ｐは１つ又は２つのアミン保護基を表す）のアミンが保護された６−アミノプリン化合物を、溶媒中のトリフェニルホスフィン及びジイソプロピルアジドカルボキシレート（ＤＩＡＤ）の存在下で化合物８に縮合して、化合物９Ｐ
【化２８】
2019513718.tif 000074
（Ｐは１つ又は２つのアミン保護基を表す）を生成するステップと、
化合物９Ｐを脱保護し、６−クロロ基をケトン基へ変換して、化合物１１（ＦＭＣＧ）
【化２９】
2019513718.tif 000075
を生成するステップと
を含み、上記の合成は、ワンポットで、又は化合物９Ｐ及び／又は化合物１１の生成について分離及び／又は精製を伴う複数のステップで行われることができる、プロセス。
【請求項９】
化合物９Ｐは、
【化３０】
2019513718.tif 000076
である、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
各中間体及び最終生成物（化合物２Ａ、２、３、４、７及び８）は、分離及び精製される、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
化合物２Ａ、２、３、４、７及び８のいずれか１つ以上が分離及び／又は精製される、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
化合物８のみが分離及び／又は精製される、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
化合物２、３、４、７及び８が分離及び精製される、請求項２に記載の方法。
【請求項１４】
化合物２、３、４、７及び８のいずれか１つ以上が分離及び／又は精製される、請求項２に記載の方法。
【請求項１５】
化合物８Ｐが分離及び精製される、請求項４又は５に記載の方法。
【請求項１６】
化合物９が分離及び精製される、請求項６に記載の方法。
【請求項１７】
化合物８Ｐ及び化合物１０の両方が分離及び精製される、請求項４又は５に記載の方法。
【請求項１８】
化合物１０が分離及び精製される、請求項４又は５に記載の方法。
【請求項１９】
化合物９及び化合物１０の両方が分離及び精製される、請求項６に記載の方法。
【請求項２０】
化合物９Ｐ及び／又は化合物１１が分離及び精製される、請求項８又は９に記載の方法。
【請求項２１】
化合物９Ｐ及び化合物１１の両方が分離及び精製される、請求項８又は９に記載の方法。
【請求項２２】
前記脱保護のステップは、高温の溶媒中のトリフルオロ酢酸及び水の存在下で行われる、請求項４〜１１のいずれかに記載の方法。
【請求項２３】
ＦＭＣＡ（化合物１０）又はＦＭＣＧ（化合物１１）を、化学構造
【化３１】
2019513718.tif 000077
（ＲはＣ1−Ｃ20アルキル基であり、フェニル基は任意で置換される）のクロロフェニルホスホリル−Ｌ−アラニン酸反応物と、溶媒中の弱塩基の存在下で更に反応させて、ＦＭＣＡ及びＦＭＣＧの５’−０−ホスホロアミダイトプロドラッグ形態
【化３２】
2019513718.tif 000078
（ＲはＣ1−Ｃ20アルキル基である）又はその薬学的に許容可能な塩若しくは立体異性体を生成する、請求項４〜９のいずれかに記載の方法。
【請求項２４】
ＦＭＣＡ化合物１０又はＦＭＣＧ化合物１１のプロドラッグ形態を生成する方法であって、
化合物１０又は化合物１１を、化学構造
【化３３】
2019513718.tif 000079
（ＲはＣ1−Ｃ20アルキル基である）のクロロフェニルホスホリル−Ｌ−アラニン酸反応物と、溶媒中の弱塩基の存在下で反応させて、ＦＭＣＡ及びＦＭＣＧの５’−０−ホスホロアミダイトプロドラッグ形態
【化３４】
2019513718.tif 000080
（ＲはＣ1−Ｃ20アルキル基である）又はその薬学的に許容可能な塩を生成する、方法。
【請求項２５】
Ｒはメチル又はイソプロピルである、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記化合物２Ａ、２、３、４、５、６、７、８、８Ｐ、９、９Ｐ、９Ｇ、１０、１１、１２若しくは１２Ｇ、１０Ｐ又はそれらの塩のいずれか１つ以上。
【請求項２７】
化合物２Ａ、２、３、４、５、６、７、８、８Ｐ、９、９Ｐ又は９Ｇのいずれか１つ以上。
【請求項２８】
化合物２
【化３５】
2019513718.tif 000081
を、置換済みペンタノン誘導体１
【化３６】
2019513718.tif 000082
から生成する方法であって、該方法は、第１のステップにおいて、化合物１を、溶媒中のジイソプロピルアンモニウムトリフルオロ酢酸塩及びジイソプロピルアミンの存在下でパラホルムアルデヒドと反応させることによって、化合物１のケト基にα位のメチレン基を導入し、それに続いて前記第１のステップから得られた化合物を、低温のルイス酸の存在下で還元剤を用いて還元して、化合物２
【化３９】
2019513718.tif 000083
を生成するステップを含む、方法。
【請求項２９】
請求項２８に記載の方法であって、
【発明の詳細な説明】
【関連出願】
【０００１】
本出願は、２０１６年４月７日出願の、同一の発明の名称である米国仮特許出願第６２／３１９，６９４号の優先権の利益を主張するものであり、その出願の全内容は、参照により本出願に援用される。
【技術分野】
【０００２】
本発明は、容易に入手可能な出発物質から、２’−フルオロ−６’−メチレン−炭素環アデノシン（ＦＭＣＡ）及び２’−フルオロ−６’−メチレン−炭素環グアノシン（ＦＭＣＧ）を、各化合物についてわずか８ステップで合成するための新規の手法を提供する。多目的に利用可能な炭素環の重要な中間体、（１Ｓ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ｔｅｒｔ−ブトキシ−４−（ｔｅｒｔ−ブトキシメチル）−２−フルオロ−５−メチレンシクロペンタノール（スキーム１Ａ及び１の化合物８）の、わずか６ステップでの立体特異的調製のための効率的かつ実用的な方法も提供される。化合物７は、それぞれの場合において、２ステップを追加するだけで容易にＦＭＣＡ又はＦＭＣＧに変換されることができる。
【背景技術】
【０００３】
Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）は、世界中の人々の病的状態及び死亡の主要な原因の１つである。ＷＨＯによると、２０億人の人々がこれまでにＨＢＶに感染しており、そのうちおよそ３５０万人の人々が慢性ＨＢＶ感染に罹患している1。このウイルスの重症の感染症により、世界で年間５０〜１２０万人の死亡が報告されている。未治療のＨＢＶ感染は、肝不全、肝硬変、そして最終的には肝細胞がんへと進行する可能性があり、これらは緊急の肝移植が必要となる。しかしながら、様々な薬剤及びワクチンがＨＢＶ感染の治療に導入されているものの、そのいずれもがこのウイルスの完全な根絶のための良好な候補とはならなかった2。特定の種類のヌクレオシ（チ）ドが、ＨＢＶ感染の治療のために利用できる3。これらのヌクレオシ（チ）ドは、ウイルス内でのＤＮＡ合成に必須の酵素であるウイルス逆転写酵素（ＲＴ）／ＤＮＡポリメラーゼを阻害する。同様の機序に基づいて、まずラミブジンがＨＢＶ治療に導入された。ある期間の治療後、ラミブジン耐性ＨＢＶ（ＬＶＤｒ）がかなりの数の患者において観察された4。今日では、エンテカビル及びテノフォビルが、ＨＢＶ治療のために最も処方される薬剤である5。これらの薬剤による長期間の治療は、ウイルスの二重及び三重変異を促進し、ウイルスは薬剤耐性ＨＢＶとなる6。近年、ウイルスの三重変異（Ｌ１８０Ｍ＋Ｍ２０４Ｖ＋Ｓ２０２Ｇ）がエンテカビル／ラミブジンの使用を制限することが報告されている7。これらのウイルスの二重及び三重変異は、ＨＢＶの治療に関する主要な課題となっている8。ウイルスの耐性を抑制することができる薬剤は存在せず、これらの難問により耐性ＨＢＶの治療が制限される。従って、これらの変異に対抗できかつＨＢＶの良好かつ完全な治療を提供することができる新規の分子を発見することが、研究者に強く要求されている。
【化１】
2019513718.tif 000002
ＦＭＣＡ及びそのホスホロアミダイトプロドラッグＦＭＣＡＰの構造
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
過去２０年間、抗ウイルス剤の新規の成分を探し求め、本発明者らのグループは、フルオロ含有ヌクレオチドの発見に関わった。ＨＢＶの薬剤耐性の問題を克服するために、本発明者らは、２’−フルオロ−６’−メチレン−炭素環アデノシン（ＦＭＣＡ）及びその一リン酸塩プロドラッグ（ＦＭＣＡＰ、上の図）を発明した。ＦＭＣＡは、野生型、並びにラミブジン、アデフォビル及びラミブジン／エンテカビル二重耐性変異体に対する有意な活性を示した9。更に、ＦＭＣＡは、ＨＢＶの治療のために現在使用されている薬剤の中心的な課題となっているラミブジン／エンテカビル耐性クローン（Ｌ１８０Ｍ＋Ｍ２０４Ｖ＋Ｓ２０２Ｇ）に対して試験された。幸運なことに、ＦＭＣＡは、野生型及びラミブジン／エンテカビル耐性ＨＢＶに対する潜在的な抗ウイルス活性を示した。多くの場合、一リン酸化が親ヌクレオシドの活性についての律速段階であることが十分に観察され、文献で報告されている10、11。そのため、ＦＭＣＡの一リン酸塩プロドラッグが合成され、そして驚くべきことにこのプロドラッグ（ＦＭＣＡＰ）は、エンテカビル／ラミブジン耐性ＨＢＶの三重変異体核（Ｌ１８０Ｍ＋Ｍ２０４Ｖ＋Ｓ２０２Ｇ）に対する抗ＨＢＶ活性での１２倍の増大を示した12。ＦＭＣＡのミトコンドリアの調査及び細胞毒性研究も行われ、１００μＭまでは有意な毒性は観察されなかった。上記成果の発見により、薬剤耐性ＨＢＶに対するＦＭＣＡの幅広いインビボ活性を検査することが、大きな関心の対象となっている。そのため、更なる生物学的スクリーニングのために大量のＦＭＣＡが必要となった。その結果、非常に実施可能かつ現実的でコスト効率の高いＦＭＣＡの合成の開発が急務となった。
【０００５】
一方、本発明者らは、過去の文書において、Ｖｉｎｃｅラクタムによる１４ステップでのＦＭＣＡの合成を報告している13。しかしながら、特定のいくつかのステップの収率の低さにより、このプロセスは大規模合成に関しては制限されている。更に、炭素環糖１が商業的に入手できないことも、これらの種類の炭素環系ヌクレオシ（チ）ドの合成に関する主要な課題であった。本発明者らのグループは、Ｄリボースからの炭素環ヌクレオシドの合成に焦点を当てて、利便性の高い方法を報告している14。多くの市販業者はこの合成を採用し、現在では炭素環ケトン１の供給は要求に応じて容易に得られる。従って本明細書では、本発明者らは、炭素環糖１を用いることによる７ステップでのＦＭＣＡの極めて実用的な合成を報告する。少ないステップの手法及び安価な試薬の使用を含むその反応の簡単な扱いは、この合成を、ＦＭＣＡのスケーラブルな合成についてより便利なものとする。この合成は、ＦＭＣＡ及びそのプロドラッグＦＭＣＡＰの大規模合成に容易に使用されることができる。この合成の標準化中に、興味深い２’−デオキシ−炭素環糖５及び６が得られた。注目すべきは、２−デオキシ炭素環糖の合成が極めて重要であることである。２−デオキシ炭素環糖の調製には、この種の糖の構築のための安定した費用の掛かる合成が必要とされる。このプロセスは、２−デオキシ糖の合成のために使用することができる。更に化合物６は、エンテカビルのスケーラブルな合成15、16、及び他の２’−デオキシ−炭素環ヌクレオシ（チ）ドの合成において利用することができる、魅力的な炭素環糖中間体である。化合物５は、ヒトの生命にとっての大きな脅威である様々な有害ウイルスに関して試験されることができる様々なヌクレオシ（チ）ドの構築のための中心となる炭素環糖としても役立ち得る。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明は、一般的な容易に入手できる出発物質から、ＦＭＣＡ及びＦＭＣＧをわずか８ステップで高い収率で合成するための新規の収斂的な手法を提供する。８ステップでのＦＭＣＡの効率的かつスケーラブルな合成のためのこの新規の収斂的な手法は、重要な抗ＨＢＶ剤であるＦＭＣＡ及び関連するＦＭＣＧ（これもまた抗ウイルス活性を示す）を作るための極めて効率的かつ実用的な方法を構成する。更なる実施形態では、合成の第１のステップ（化合物２を形成するための）を修正して合成方法の効率の上昇をもたらし、化合物１からの化合物２の合成をより容易で遥かに問題が少ない、高収率（化合物１から７０％以上）なものとしている。
【０００７】
一実施形態では、本発明は、式７
【化２】
2019513718.tif 000003
の化合物を、置換済みペンタノン誘導体１
【化３】
2019513718.tif 000004
から合成するためのプロセスを提供し、そのプロセスは、化合物１を溶媒中の強塩基と低温（例えば−７８℃）で反応させることによって化合物１のケト基にα位のメチレン基を導入した後、エッシェンモーザー塩と、それに続いてヨードメタンとを添加して、以下の化合物２Ａをもたらすことを含み、化合物２Ａは単離されてもよいが、好ましくは水素化ホウ素ナトリウムを用いてその場で還元されて、化合物２
【化４】
2019513718.tif 000005
をもたらす。
【０００８】
あるいは、好ましくは化合物１
【化５】
2019513718.tif 000006
を、高温の溶媒（例えばＴＨＦ）中でのジイソプロピルアンモニウムトリフルオロ酢酸塩及びジイソプロピルアミンの存在下（好ましくは還流）でパラホルムアルデヒド（ＨＣＨＯ）4を用いて処理して、化合物１のシクロペンタン環の５位に二重結合（オレフィン基）を導入し、化合物２Ａ
【化６】
2019513718.tif 000007
を高収率（化合物１から少なくとも６０％、より多くの場合には化合物１から少なくとも７０％）でもたらす。これは任意でクロマトグラフィ（例えば、シリカゲルカラム５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）で精製されるが、好ましくは更なる精製を行うことなく、溶媒（例えばメタノール）中の還元剤（例えば水素化ホウ素ナトリウム）及びルイス酸（例えばＣｅＣｌ3．７Ｈ2Ｏ）を用いてその場で還元され、好ましくは化合物２Ａのケト基が、低温の溶媒（例えばＤＣＭ）中でのＣｅＣｌ3の存在下で水素化ホウ素ナトリウムを用いて立体選択的に還元されて、化合物２
【化７】
2019513718.tif 000008
を生成する。化合物２は、任意であるが好ましくは、２ステップに亘ってワンポットで、高収率（少なくとも約５０％、好ましくは５２％以上）で単離（例えば、シリカゲルカラムクロマトグラフィ）される。
【０００９】
次に化合物２を、溶媒（例えばＴＨＦ、ＤＣＭ／ヘキサン）中のトリアルキルアルミニウム（好ましくはＡｌＭｅ3）と、室温（初めはトリアルキルアルミニウムを化合物２に添加するために低温であり、反応混合物を加熱する）で２４時間〜数日／７２時間の期間に亘って反応させて化合物３を生成し、これは任意で７０％超の収率で単離される（以下の化合物３で示されるような保護されている２−ヒドロキシル基を取り除き、イソプロピリデン基の加水分解によって形成されたエーテルをメチル化し、それによりｔ−ブチルエーテル基を形成する）。
【化８】
2019513718.tif 000009
【００１０】
化合物３を、溶媒（例えばＤＣＭ）中の立体障害のシリル保護基前駆体（好ましくは塩化ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）と反応させて、化合物４
【化９】
2019513718.tif 000010
を生成し、これは任意で精製及び単離される（７０％超の収率で）。
【００１１】
化合物４を、無水溶媒（例えば塩化メチレン）中のフッ素化剤（例えば三フッ化ジエチルアミノ硫黄ＤＡＳＴ）と反応させて、２’位を立体選択的にフッ素化して以下の化合物７を生成し（化合物７を生成するための反応は、副生成物として化合物５及び化合物６も生成する。図１のスキーム１Ａ、及び図２のスキーム１を参照）、
【化１０】
2019513718.tif 000011
続いてこの化合物７を、溶媒（例えばＴＨＦ）中のフッ化テトラブチルアンモニウム（ＴＢＡＦ）を用いてシリル保護基を除去するために反応させて、以下の化合物８
【化１１】
2019513718.tif 000012
を生成する。上記合成の１つ以上のステップ又は合成全体は、ワンポットで、又は化合物２Ａ、２、３、４、７及び８のいずれか１つ以上の生成について各化合物の分離及び／又は精製（副生成物である化合物５及び６も分離／精製され得る）を伴う複数のステップで行われてもよい。なお、ｔ−ブチルエーテル保護基以外の別の保護基を用いて、糖シントン（化合物８）を生成してもよい。
【００１２】
更なる実施形態では、化合物８をＦＭＣＡ（化合物１０）又はＦＭＣＧ（化合物１１）に、それぞれ化合物８からわずか２つの合成ステップで変換してもよい。図１のスキーム１Ａ又は図３のスキーム２参照。
【００１３】
ＦＭＣＡ（化合物１０）は、図１のスキーム１Ａ又は図３のスキーム２に示されているように、アミンが保護されたアデニン化合物（好ましくはアミン保護基はＢＯＣ基であるが、特段の記載がない限りは他のアミン保護基であってもよい。好ましくは、アミン基は２つの保護Ｂｏｃ基を含有し、１つだけの保護されたアミン基が縮合反応に関与することで縮合収率を大幅に低下させる可能性を最小限に抑える。）
【化１２】
2019513718.tif 000013
を、溶媒（例えばＴＨＦ、ＤＣＭ）中でのトリフェニルホスフィン及びジイソプロピルアジドカルボキシレート（ＤＩＡＤ）の存在下で化合物８に縮合して、化合物８Ｐ又は化合物９を生成し、ここでＰは少なくとも１つのアミン保護基であり、保護基が１つしか存在しない場合、他方の基はＨであり、好ましくはＰは２つの保護基、最も好ましくは図１のスキーム１Ａ若しくは図３のスキーム２での化合物９によって示され、更に以下に示されるように２つのＢＯＣ基を表し、
【化１３】
2019513718.tif 000014
その後にこれらの化合物のいずれかを脱保護して（好ましい複数のＢＯＣ保護基の場合、好ましくは、複数のＢＯＣ基及びエーテル基の両方を除去するために溶媒中のトリフルオロ酢酸／水を用いて）、化合物１０（ＦＭＣＡ）
【化１４】
2019513718.tif 000015
を生成することによって、化合物８から調製される。上記合成は、ワンポットで、又は化合物８Ｐ、化合物９及び／又は化合物１０の生成について分離及び／又は精製（カラムクロマトグラフィ／シリカゲルを用いることが多い）を伴う複数のステップで行われてもよい。好ましくは、少なくとも化合物１０は最終生成物として精製される（例えば、シリカゲルカラムクロマトグラフィＥｔＯＡｃ／ヘキサンを用いて）。
【００１４】
別の実施形態では、ＦＭＣＧ（化合物１１）は、アミンが保護された６−クロロプリン化合物（好ましくは、アミン保護基は１つ又は２つの保護基、好ましくは１つのＢＯＣ基、好ましくは２つのＢＯＣ基であるが、特段の記載がない限りは他のアミン保護基であってもよい。好ましくは、アミン基は２つの保護基を含有し、だた１つの保護されたアミン基が縮合反応で関与して、縮合収率を大幅に低下させる可能性を最小限に抑える。なお、別のブロッキング基の使用は可能であるものの、最終生成物を生成するためのステップの数を増加させる場合がある。）
【化１５】
2019513718.tif 000016
（ここでＰは１つ又は２つの保護基（好ましくは２つのＢＯＣ基）を表す）を、溶媒中でのトリフェニルホスフィン及びジイソプロピルアジドカルボキシレート（ＤＩＡＤ）の存在下で化合物８に縮合して、化合物９Ｐ（好ましくは化合物９Ｇ、図１のスキーム１Ａ参照）
【化１６】
2019513718.tif 000017
（ここでＰは１つ又は２つの保護基（好ましくは２つのＢＯＣ基）を表す）を生成し、これを脱保護し、６−クロロ位をケト基に単一ステップで変換して（好ましくは溶媒中のトリフルオロ酢酸／水を用いて）、化合物１１（ＦＭＣＧ）
【化１７】
2019513718.tif 000018
を生成することによって、化合物８から調製される。上記合成は、ワンポットで、又は化合物９Ｐ、９Ｇ及び／又は化合物１１の生成について分離及び／又は精製を伴う複数のステップで行われてもよい。好ましくは、少なくとも化合物１１は最終生成物として精製される（カラムクロマトグラフィ）。
【００１５】
本発明はまた、上記合成スキームに沿った個々の合成ステップ及び／又は個々の化合物（中間体）のいずれの組み合わせも対象とする。従って本発明はまた、個別又はいずれかの組み合わせでの化合物２、３、４、５、６、７、８、８Ｐ、９、９Ｐ、９Ｇ、１０及び／若しくは１１並びに化合物１２及び１２Ｇのいずれかについて、本明細書に記載された合成ステップのいかなる数をも対象とする。更に、本発明の方法を用いて合成される化合物をもたらすために使用される合成ステップのうちの１つ以上は、ワンポットで、又は１つ以上の合成ステップの後に化合物を精製及び／又は単離することにより段階的に行われてもよい。
【００１６】
ＦＭＣＡ（化合物１０）及びＦＭＣＧ（化合物１１）はそれぞれ、ＦＭＣＡ又はＦＭＣＧを、適切なクロロフェニルホスホリル−Ｌ−アラニン酸反応物（例えば、ＦＭＣＡに関しては図３のスキーム２に示すように化合物１１Ａを用いて、又はフェニル基が任意で置換されている試薬を用いて）
【化１８】
2019513718.tif 000019
（ここでＲはＣ1−Ｃ20アルキル基、好ましくはメチル又はイソプロピル基である）（フェニル基は任意で置換されている）と、溶媒（例えばＴＨＦ）中のメチルイミダゾール又は他の弱塩基の存在下で反応させて、ＦＭＣＡ及びＦＭＣＧの５’−０−ホスホロアミダイトプロドラッグ形態
【化１９】
2019513718.tif 000020
（ここでＲはＣ1−Ｃ20アルキル、好ましくはメチル又はイソプロピルである）を生成することによって、ホスホロアミダイトプロドラッグ形態に変換されてもよい。
【００１７】
ＦＭＣＡ及びＦＭＣＧ又はこれらのプロドラッグ形態は、抗ウイルス剤、特に抗ＨＢＶ剤として特に有用である。
【００１８】
本発明の上記及び他の態様について、「発明を実施するための形態」において更に説明する。
【図面の簡単な説明】
【００１９】
【図１】図１のスキーム１Ａは、溶媒中のエッシェンモーザー塩、強塩基（ＬＤＡ）及びヨウ化メチルを用いて、化合物１から２’−フルオロ−６’−メチレン−炭素環アデノシン（ＦＭＣＡ）及び２’−フルオロ−６’−メチレン−炭素環グアノシン（ＦＭＣＧ）を調製するための合成化学スキームを示す。
【図２】図２のスキーム１は、化合物１から化合物８を調製するための合成化学スキームを示す。第１のステップは、ＴＨＦ中のパラホルムアルデヒド、ジイソプロピルアンモニウムトリフルオロ酢酸塩及びジイソプロピルアミンを用いて、シクロヘプチル環の６位（非置換炭素位置）にオレフィン基を導入する。残りの全てのステップは、図１のスキーム１Ａの化学ステップと同様である。試薬及び条件：（ｂ）Ａｌ（Ｍｅ）3（ヘキサン中、２．０Ｍ）、ＴＨＦ；（ｃ）ＴＢＤＰＳＣｌ、イミダゾール、ＤＣＭ；（ｄ）ＤＡＳＴ、ＤＣＭ；及び（ｅ）ＴＢＡＦ、ＴＨＦ。
【図３】図３のスキーム２は、中間化合物８からのＦＭＣＡ（化合物１０）及びＦＭＣＡＰ（化合物１１）の合成を示し、第１のステップにおいて、ジブロック（Ｂｏｃ）アデニンを化合物８に縮合させた化合物９を提供し、続いてアミン及びヒドロキシル基を脱保護してＦＭＣＡをもたらす。これを中間体１１Ａと反応させてプロドラッグＦＭＣＡＰ（化合物１２）としてもよい。反応及び条件：（ａ）ｄｉＢｏｃ−アデニン、ＤＩＡＤ、ＴＰＰ、ＴＨＦ；（ｂ）ＴＦＡ、ＤＣＭ；（ｃ）化合物１１Ａ、ＮＭＩ、ＴＨＦ。
【図４】図４のスキーム３は、化合物４から開始して化合物５及び化合物６を形成するための提案される機序を示す。
【発明を実施するための形態】
【００２０】
以下の用語は、本発明を記載するために使用される。用語が定義されない場合、その用語にはその分野で認識される意味が与えられる。本発明に従って、当技術分野における従来の化学合成方法並びに他の生物学的及び薬学的技法を用い得る。このような技法は公知であり、さもなければ文献で十分に説明されている。
【００２１】
ある範囲の値が与えられる場合は、文脈上そうでないことが明らかでない限り（例えば多数の炭素原子を含有する基の場合、この場合はその範囲内の各炭素原子数が与えられる）、その範囲の上限と下限との間の、下限の単位の１０分の１までの各中間値、及びその明記された範囲でのいずれかの他の明記された値又は中間値が本発明に含まれるものと理解される。これらのより小さい範囲の上限及び下限は、独立してそのより小さい範囲内に含まれることができ、その明記された範囲でいずれかの特に除外される限界を条件として、そのより小さい範囲もまた本発明の範囲内に包含される。その明記された範囲が限界の一方又は両方を含む場合、それらの含まれる限界のいずれか又は両方を除外した範囲もまた本発明に含まれる。
【００２２】
別段定義されない限り、本明細書において用いられる全ての技術及び科学的用語は、本発明が属する技術分野の当業者によって通常理解されるのと同じ意味を有する。本明細書に記載される方法及び材料と同様又は同等であるいずれの方法及び材料もまた、本発明の実施又は試験において用いられ得るが、好ましい方法及び材料がここに記載される。
【００２３】
本明細書及び添付の特許請求の範囲で用いる場合、単数形（「ａ」、「ａｎ」、及び「ｔｈｅ」）は、その状況が明らかに他を示さない限り、複数についての言及を包含することに留意されたい。用語「約」が使用される場合、具体的に記載された量又は数の±５％以内を意味する。
【００２４】
本明細書において、用語「化合物」とは、特に断りのない限り、本明細書に開示されるいずれかの具体的な化合物又は中間体を指し、通常は本明細書に記載の合成ステップを用いてこれらのヌクレオシド化合物を生成するためのβ−Ｄヌクレオシド類似体又は中間体を指すが、状況に合わせて、これらの化合物の互変異性体、位置異性体、幾何異性体、アノマー、当てはまる場合には鏡像異性体（エナンチオマー）若しくはジアステレオマー（２つのキラル中心）、並びにそれらの薬学的に許容される塩、溶媒和物、及び／又は多形体を含む。本明細書中での使用において、用語「化合物」は、通常は単一の化合物を指すが、その他の化合物、例えば、開示される化合物の立体異性体、位置異性体及び／又は鏡像異性体（本明細書に記載されるラセミ混合物及び／又はジアステレオマーを含む）並びに特定の鏡像異性体、鏡像異性的に濃縮された若しくは個々のジアステレオマー又は混合物を含む場合もある。化合物に対して炭素数の範囲が与えられる場合には、この範囲は、あらゆる炭素のそれぞれが範囲の一部と考えられることを示す。例えば、Ｃ1−Ｃ20基は、１つの炭素原子、２つの炭素原子、３つの炭素原子、４つの炭素原子など、２０までの炭素原子を備えた基を表す。
【００２５】
用語「薬学的に許容される塩」又は「塩」は、適用可能な場合には、投与が行われたある実施形態において、化合物の溶解及び生物学的利用能を促進するために、患者消化管の胃液中における化合物の可溶性を増大させる本明細書に記載の化合物の１つ以上の塩形態を記載するために本明細書を通して使用される。「薬学的に許容される塩」は、適用可能な場合には、薬学的に許容される無機又は有機の塩基及び酸の塩を含む。好適な塩は、薬理学分野で公知の種々の酸の中でも特に、カリウム及びナトリウムなどのアルカリ金属、カルシウムなどのアルカリ土類金属、マグネシウム及びアンモニウム塩によるものなどである。ナトリウム塩及びカリウム塩は、本発明のリン酸塩の中和塩として特に好ましい。
【００２６】
用語「薬学的に許容される誘導体」は、患者への投与時に、直接的若しくは間接的に本発明の化合物又は本発明の化合物の活性代謝物を生ずる、薬学的に許容されるいずれかのプロドラッグ形態（例えばエステル、エーテル、アミド、ホスホロアミダイト又はその他のプロドラッグ基）を表わすために本明細書を通して使用される。
【００２７】
用語「アルキル」は、その状況に合わせて、Ｃ1−Ｃ20、好ましくはＣ1−Ｃ10の直鎖、分岐鎖、又は環状の完全飽和炭化水素ラジカルを意味し、それらは任意で置換されてもよい。炭素範囲が提供される場合には、その範囲は、あらゆる炭素がその範囲の一部と見なされることを意味する。例えば、Ｃ1−Ｃ20基は、１つの炭素原子、２つの炭素原子、３つの炭素原子、４つの炭素原子などを備えた基を表す。用語「エーテル」は、任意で置換されたＣ1−Ｃ20エーテル基を意味し、１つの酸素と１つのアルキル基とから形成され、あるいは、アルキル鎖中又はアルキレン鎖中に少なくとも１つの酸素を含んでもよい。
【００２８】
用語「芳香族」又は「アリール」は、その状況に合わせて、単環（例えばフェニル）又は縮合多環（例えばナフチル、アントラセン、フェナントレン）を有する置換された若しくは非置換の１価の炭素環芳香族ラジカルを意味する。他の例は、１つ以上の窒素原子、酸素原子、又は硫黄原子を環内に有する任意で置換されたヘテロ環式芳香族基（「ヘテロ芳香族」若しくは「ヘテロアリール」）であり、好ましくは、特にイミダゾール、フリル、ピロール、フラニル、チエン、チアゾール、ピリジン、ピラジン、トリアゾール、オキサゾールなどの５又は６員環ヘテロアリール基を含むが、特にインドール基などの縮合環式ヘテロアリール基も含むことができる。本発明の化合物での好ましいアリール基は、フェニル基又は置換フェニル基である。
【００２９】
用語「ヘテロ環」は、窒素原子、硫黄原子又は酸素原子などの炭素原子以外の少なくとも１つの原子を含む任意で置換された環状部分を意味し、それは飽和環及び／又は不飽和環であり得る。
【００３０】
用語「非置換」は、水素原子のみで置換されたことを意味する。用語「置換」は、定義された化合物の化学的な状況において、ヒドロカルビル（これ自体が置換されてもよく、好ましくは、任意で特にアルキル基又はフルオロ基で置換され得る。）、好ましくはＣＦ3などのアルキル（通常は、長さが約３炭素単位以下のもの）、任意で置換されたアリール、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、チオール、ヒドロキシル、カルボキシル、Ｃ1−Ｃ3アルコキシ、アルコキシカルボニル、ＣＮ、ニトロ、又は任意で置換されたアミン（例えばアルキレンアミン、Ｃ1−Ｃ3モノアル若しくはジアルキルアミン）から選択された置換基を意味する（各置換基自体も置換され得る）。任意で置換される部分は、３つ以上の置換基で置換されてもよいが、好ましくは置換基は３つ以下であって、１つ又は２つであることが好ましい。
【００３１】
用語「アシル」は、ヌクレオシド類似体の５’位若しくは３’位（すなわち炭素環部分における遊離ヒドロキシル基の位置）における基、又はＣ1−Ｃ20直鎖、分岐若しくは環状アルキル鎖を含有するヌクレオシド塩基の環外アミン上にある基を表わすために、本明細書を通して使用される。アシル基とヒドロキシル基との組み合わせはエステルをもたらし、アシル基と環外アミン基との組み合わせはアミドをもたらし、これらは投与後に開裂して、本発明の遊離ヌクレオシドの形態を生じる。本発明のアシル基は次の構造式で示される。
【化２０】
2019513718.tif 000021
ここで、Ｒ4はＣ1−Ｃ20直鎖、分岐若しくは環状アルキル基（任意で置換され、好ましくは、例えば１つから３つのヒドロキシル基、１つから３つのハロ基（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）又はアミン基（それ自体が、任意で１つから３つのヒドロキシル基を有する１つ若しくは２つのＣ１〜Ｃ６アルキル基で任意で置換されていてもよい））、アルコキシアルキル（遊離ヒドロキシル基若しくはＣ1−Ｃ10アルキル基で終わり、分子量が約５０から約４０，０００若しく約２００から約５，０００の範囲であるエチレンオキシド鎖を含む）であり、特にフェノキシメチル基、アリール基、アルコキシ基、アルコキシカルボニルオキシ基（例えば［（イソプロポキシカルボニル）オキシ］−メトキシ）、アリールオキシアルキルであり、これらは上述のようにそれぞれ任意で置換されてもよい。好ましいアシル基は、Ｒ4がＣ1−Ｃ12アルキル基である。本発明のアシル基はまた、例えば多くのものの中でも特に、安息香酸及び関連する酸、３−クロロ安息香酸、コハク酸、カプリン酸、カプロン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、及びオレイン酸から得られるアシル基を含み、メシラート基などのスルホン基のような関連基が含まれてもよい。本明細書で別に記載されるように、状況に合わせて、すべての基は適切に置換されてもよい。当業者は、本発明による目標の医薬化合物を合成するために又はヌクレオシドのプロドラッグとして、本発明において有用なアシル基を認識するであろう。
【００３２】
用語「アミノ酸」又は「アミノ酸残基」は、状況に合わせて、アミノ酸のカルボン酸部分によって、シトシン塩基の４’環外アミンの位置又は糖シントンの５’−ＯＨ若しくは３’−ＯＨの位置（Ｒ2、Ｒ1、あるいはＲla）でヌクレオシド類似体に共有結合したＤ−アミノ酸のラジカル若しくはＬ−アミノ酸のラジカルを意味し、これによりそれぞれ、ヌクレオシドをアミノ酸と連結するアミド基又はエステル基を形成する。また、本明細書で別に記載するように、本発明のヌクレオシド化合物中にホスホルアミダート基をもたらすために、アミノ酸を用いることができる。代表的なアミノ酸は、天然アミノ酸及び非天然アミノ酸の両方を含み、好ましくは、例えば特に、アラニン、β−アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、シスチン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、フェニルアラニン、ヒスチジン、イソロイシン、リジン、ロイシン、メチオニン、プロリン、セリン、スレオニン、バリン、トリプトファン、又はチロシンなどである。
【００３３】
用語「リン酸エステル」又は「ホスホジエステル」（この用語は、状況において、ホスホトリエステル基及びホスホルアミダート基を含む。）は、リン酸基が負に帯電し、若しくは中性を与えられる、すなわち中性電荷を有するように、モノエステル化又はジエステル化された（又はホスホルアミダートの場合に、アミド化及び任意でエステル化された）、炭素環糖シントンの５’位にある一リン酸基を記載するために、本明細書を通して使用される。本発明で用いられるリン酸エステル、ホスホジエステル、及び／又はホスホルアミダート基は、次の構造式を有するものを含む。
【化２１】
2019513718.tif 000022
ここで、Ｒ5及びＲ6は、特に、それぞれ独立にＨ、Ｃ1−Ｃ20直鎖、分岐若しくは環状アルキル基、アルコキシアルキル基、フェノキシメチルなどのアリールオキシアルキル基、アルコキシカルボニルオキシ基（例えば［（イソプロポキシカルボニル）オキシ］−メトキシ）などの任意で置換されたアリール（特に、任意で置換されたフェニル基）及びアルコキシから選択される。これらの基はそれぞれ、少なくとも１つのＲ5がＨでない場合に任意で置換されてもよく（例えば、フェニル基又は他の基が、本明細書に別に記載のように任意で置換されてもよく、あるいは、好ましくは１つから３つのＣ1−Ｃ6アルキル基、ハロゲン（好ましくはＦ、Ｃｌ若しくはＢｒ）、ニトロ、シアノ、又はＣ2−Ｃ6カルボキシエステル基で置換されてもよい）。または、２つのＲ5基は一緒になって、ヘテロ５員環基又はへテロ６員環基を形成する。
Ｂ’は、
【化２２】
2019513718.tif 000023
基又はアミノ酸（天然アミノ酸又は非天然アミノ酸であって、例えば特に、アラニン、β−アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、シスチン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、フェニルアラニン、ヒスチジン、イソロイシン、リジン、ロイシン、メチオニン、プロリン、セリン、スレオニン、バリン、トリプトファン、又はチロシンなど）から得られた基であって、好ましくは次の構造式の基を提供する。
【化２３】
2019513718.tif 000024
ここで、ｉは、０、１、２、又は３（好ましくは０）である。
Ｒ7は、特に、Ｃ1−Ｃ20直鎖、分岐若しくは環状アルキル基、Ｃ1−Ｃ20直鎖、分岐若しくは環状アシル基、アルコキシアルキル基、フェノキシメチルなどのアリールオキシアルキル基、任意で置換されたアリール基（上述のような）及びアルコキシであって、これらはそれぞれ任意で置換されてもよい。
Ｒ8は、アミノ酸側鎖であり、好ましくは、アラニン、β−アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、シスチン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、フェニルアラニン、ヒスチジン、イソロイシン、リジン、ロイシン、メチオニン、プロリン、セリン、スレオニン、バリン、トリプトファン、又はチロシンから選択されるアミノ酸の側鎖である（好ましくは、Ｒ8は、アラニン、ロイシン、イソロイシン、又はスレオニンから得られ、より好ましくはアラニン−Ｒ8は、メチルである）。
Ｒ”は、Ｃ1−Ｃ20直鎖、分岐若しくは環状アルキル基、フェニル基、又はヘテロアリール基であって、それぞれ任意で置換されてもよい。
【００３４】
本発明のプロドラッグ形態に使用される好ましい一リン酸エステルは、Ｒ5がＣ1−Ｃ20直鎖又は分岐鎖のアルキル基であり、より好ましくはＣ1−Ｃ3アルキル基であり、これらのすべての基は、任意で置換されてもよい。好ましい他の化合物は、本明細書中の他の箇所に記載された通りであり、特にＲ1は、本明細書中の他の箇所に記載された通りホスホロアミダイト基である。好ましいホスホロアミダイト基は、
【化２４】
2019513718.tif 000025
であり、ここでＲp1は、任意で置換された（ＯＨ、ハロ）Ｃ1−Ｃ20アルキル基、好ましくはＣ1−Ｃ4アルキル基、更に好ましくはメチル、エチル、イソプロピル基又はイソブチル基であり、
ＲPは、Ｈ、ニトロ、シアノ、メトキシ、又は任意で１つから３つのハロゲン置換基（好ましくはＦ）で置換されたＣ1−Ｃ3アルキル基である。
【００３５】
Ｒ1のための好ましいホスホロアミダイト基は、化学構造
【化２５】
2019513718.tif 000026
によるものを含み、ここでＲPはＨ又はＣ1−Ｃ3アルキル基（好ましくはＨ）であり、Ｒp1はメチル、エチル、イソプロピル又はイソブチル基、より好ましくはメチル又はイソプロピル基である。
【００３６】
他の実施形態では、Ｒ1は
【化２６】
2019513718.tif 000027
基である。
【００３７】
用語「有効量」は、阻害、予防及び／又は治療であり得る投与又は使用の状況の中で、有効な本発明の化合物の量又は濃度を意味する。状況に合わせて、本発明で用いられるすべての活性化合物は、有効量で使用される。本発明の化合物は、使用される化合物のそれぞれの有効量を含有する、化合物の組み合わせにも関する。その組み合わせの効果は、相加的で又は相乗的であり、その化合物の組み合わせの全体的な効果は、本明細書で別に記載されるように、患者体内のウイルス感染の増大を阻害し、その確率を低下し、又はそれを治療するものである。
【００３８】
本発明の文脈において使用される用語「Ｄ配置」は、非天然ヌクレオシド類又は「Ｌ」配置と対照的な、天然の糖部分が持つ構造に類似する本発明のヌクレオシド化合物の構造を指す。用語「β」又は「βアノマー」は、ヌクレオシド塩基が化合物の炭素環部分の平面上側に構成（配置）された本発明のヌクレオシド類似体を表すために使用される。
【００３９】
用語「鏡像異性的に濃縮」は、少なくとも約９５％以上、好ましくは少なくとも約９６％以上、より好ましくは少なくとも約９７％以上、さらにより好ましくは少なくとも約９８％以上、そしてさらにより好ましくは少なくとも約１００％以上の１種類のエナンチオマーを含むヌクレオシドを表わすために本明細書を通して使用される。本発明の炭素環ヌクレオシド化合物は、通常はβ−Ｄ−ヌクレオシド化合物である。本発明の化合物が本明細書で言及される場合、特に断らない限りは、それはＤ−ヌクレオシド配置であって鏡像異性的に濃縮されたもの（好ましくはＤ−ヌクレオシドが約１００％）とみなされる。用語「ジアステレオマーとして純粋な」は、他の可能性のあるジアステレオマーの含有に対して、１つのジアステレオマーを少なくとも９５重量％、９６重量％、９７重量％、９８重量％、９９重量％、９９．５重量％又は１００重量％含有する、本発明の化合物の１つのジアステレオマーを記載するために使用される。
【００４０】
用語「立体選択的」は、単一の反応物がある特定の異性体を（可能性のある少なくとも２つの異性体の中で）、その反応物にあり得る１つ以上の異性体よりも多量に生成する、１つの合成ステップ又は一連の複数のステップを記載するために使用される。場合によっては、反応の立体選択性は１００％に近いことがある。
【００４１】
用語「保護基」又は「ブロッキング基」は、その後の化学反応において化学選択性を得るために、官能基の化学修飾によって分子内に導入される、化学基又は部分を記載するために使用される。これは、本発明の化合物をもたらす化学成分の前駆体をもたらす際に重要な役割を果たす。ブロッキング基は、本発明の化合物を形成するために糖シントンのヒドロキシル基又はプリン塩基のヒドロキシル基を保護するために使用されることができる。典型的なブロッキング基は、本発明ではアルコール基及びアミン基に対して使用される。
【００４２】
例示のアルコール／ヒドロキシル保護基としては、アセチル（酸又は塩基によって除去）、ベンゾイル（酸又は塩基によって除去）、ベンジル（加水分解によって除去）、β−メトキシエトキシメチルエーテル（ＭＥＭ；酸によって除去）、ジメトキシトリチル［ビス−（４−メトキシフェニル）フェニルメチル］（ＤＭＴ；弱酸によって除去）、メトキシメチルエーテル（ＭＯＭ；酸によって除去）、メトキシトリチル［（４−メトキシフェニル）ジフェニルメチル］、（ＭＭＴ；酸及び加水分解によって除去）、ｐ−メトキシルベンジルエーテル（ＰＭＢ；酸、加水分解又は酸化によって除去）、イソプロピリデン（酸によって除去）、メチルチオメチルエーテル（酸によって除去）、ピバロイル（Ｐｉｖ；酸、塩基又は還元剤によって除去）などである。他のアクリル保護基より安定なのは、テトラヒドロピラニル（ＴＨＰ；酸によって除去）、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ；酸によって除去）、トリチル、トリフェニルメチル（Ｔｒ；酸によって除去）、シリルエーテル（例えばトリメチルシリル、ＴＭＳ、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル又はＴＢＤＭＳ、ｔｒｉ−イソ−プロピルシリルオキシメチル又はＴＯＭ、トリイソプロピルシリル又はＴＩＰＳ、及びｔ−ブチルジフェニルシリル（これらは全て酸、又はＮａＦ、ＴＢＡＦ（フッ化テトラ−ｎ−ブチルアンモニウム、ＨＦ−Ｐｙ若しくはＨＦ−ＮＥｔ3）などのフッ化物イオンによって除去））；メチル又はｔ−ブチルエーテル（強酸、又はＤＣＭ、ＭｅＣＮ若しくはクロロホルム中のＴＭＳＩ、又はＤＣＭ中のＢＢｒ3によって除去）又はエトキシエチルエーテル（強酸によって除去）を含むアルキルエーテルである。本発明の好ましい態様では、ｔ−ブチルエーテルの使用が多くの場合に好まれる。好ましい態様では、糖シントン中で使用されるヒドロキシル保護基は、本明細書中の他の箇所で開示されているように、ｔ−ブチルエーテル、イソプロピリデン及びｔ−ブチルジフェニルシリル保護基である。
【００４３】
例示のアミン保護基としては、カルボベンジルオキシ（Ｃｂｚ基；加水分解によって除去）、ｐ−メトキシルベンジル炭素（Ｍｏｚ又はＭｅＯＺ基；加水分解によって除去）、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル（ＢＯＣ基；濃縮強酸によって又は高温での加熱によって除去）、９−フルオレニルメチルオキシカルボニル（ＦＭＯＣ基；ピペリジン又はピリジンなどの弱塩基によって除去）、アシル基（アセチル、ベンゾイル、ピバロイル；塩基で処理）、ベンジル（Ｂｎ基；加水分解によって除去）、カルバメート（酸及び緩やかな加熱によって除去）、ｐ−メトキシベンジル（ＰＭＢ；加水分解によって除去）、３，４−ジメトキシベンジル（ＤＭＰＭ；加水分解によって除去）、ｐ−メトキシフェニル（ＰＭＰ基；硝酸アンモニウムセリウムＩＶ又はＣＡＮによって除去）；トシル（Ｔｓ基；濃縮酸及び還元剤によって除去）、他のスルホンアミド、メシル、ノシル及びＮｐｓ基（ヨウ化サマリウム、水素化トリブチルスズによって除去）が挙げられる。本発明の好ましい態様では、２つのＢＯＣ基を用いて、本発明によりＦＭＣＡ及びＦＭＣＧを生成するために糖シントンと縮合される環外プリン（アデニン又はグアニン）アミンを保護する。好ましい態様では、糖シントン中で使用されるヒドロキシル保護基は、本明細書中の他の箇所で開示されているように、ｔ−ブチルエーテル、イソプロピリデン及びｔ−ブチルジフェニルシリル保護基である。
【００４４】
化学合成
中間体８の好ましい合成
一実施形態では、本発明は、式８
【化２７】
2019513718.tif 000028
の化合物を、置換済みペンタノン誘導体１
【化２８】
2019513718.tif 000029
から合成するためのプロセスを提供し、このプロセスは、化合物１を溶媒中の強塩基（例えばＬＤＡ又は他の強塩基）と低温（例えば−７８℃）で反応させることによって、化合物１のケト基にα位のメチレン基を導入し、続いてエッシェンモーザー塩を添加して混合物を生成し、これを数時間（約２〜４時間、好ましくは３時間）低温で、続いてより長い期間（例えば４〜１０時間以上）室温で撹拌し、その時点でヨードメタンを添加して、周囲温度（好ましくは室温）で約４〜６時間、好ましくは約４時間の期間に亘って撹拌し、その溶液を弱塩基（例えば１０％の重炭酸ナトリウム水溶液）で急冷し、抽出（有機溶媒、好ましくは塩化メチレン）し、洗浄し、任意で精製して（例えばシリカゲルカラム、フラッシュシリカ）、以下の化合物２Ａ
【化２９】
2019513718.tif 000030
を得ることを含む。
【００４５】
化合物２は、化合物２Ａを低温（−７８℃）の溶媒（例えば無水メタノール）に溶解し、ＣｅＣｌ3又は他のルイス酸を添加し、短期間に亘って撹拌した後で水素化ホウ素ナトリウムを添加し、更なる期間（例えば約３０分〜１時間）に亘って撹拌することによってケト基を還元し、溶液の温度を約０℃まで上昇させ、ここで塩化アンモニウムを添加して更に１時間撹拌した後、溶媒を除去し（好ましくは減圧下で）、得られた残渣を溶媒（例えば塩化メチレン）で抽出し、得られた有機抽出物を混合し、洗浄し（例えば塩水で）、乾燥させ、真空下で濃縮した後に更に精製して（例えばシリカゲルカラム又はフラッシュシリカ）、以下の化合物２
【化３０】
2019513718.tif 000031
を生成することによって、化合物２Ａから調製される。
【００４６】
あるいは、好ましくは２ステップで化合物２を生成し（好ましくは精製せずに）、化合物１
【化３１】
2019513718.tif 000032
を、高温（好ましくは還流）の溶媒（例えばＴＨＦ）中でのジイソプロピルアンモニウムトリフルオロ酢酸塩及びジイソプロピルアミンの存在下でパラホルムアルデヒド（ＨＣＨＯ）4を用いて処理して、化合物１の６位に二重結合（オレフィン基）を導入し、化合物２Ａ
【化３２】
2019513718.tif 000033
を高収率（化合物１から少なくとも６０％、より多くの場合には化合物１から少なくとも７０％）でもたらし、これは任意でクロマトグラフィ（例えば、シリカゲルカラム５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）で精製され、その後に溶媒（例えばメタノール）中の還元剤（例えば水素化ホウ素ナトリウム）及びルイス酸（例えばＣｅＣｌ3．７Ｈ2Ｏ）を用いてその場で（好ましくは更なる精製を行うことなく）還元される。好ましくは、化合物２Ａのケト基が、低温の溶媒（例えばＤＣＭ）中でのＣｅＣｌ3の存在下で水素化ホウ素ナトリウムを用いて立体選択的に還元されて、化合物２
【化３３】
2019513718.tif 000034
を生成し、任意であるが好ましくは、２ステップに亘ってワンポットであり、化合物２は高収率（少なくとも約５０％、好ましくは５２％以上）で単離（例えば、シリカゲルカラムクロマトグラフィ）される。
【００４７】
次に化合物２を、溶媒（例えばＴＨＦ又は他の溶媒）中のＡｌＭｅ３と周囲温度で反応させた後、低温（例えば約−２０℃〜−５０℃、好ましくは−３０℃）のアルコール（メタノール）／塩化アンモニウム溶液で急冷し、精製（例えばカラムクロマトグラフィなど）して、以下の化合物３
【化３４】
2019513718.tif 000035
を生成する。
【００４８】
次に化合物３を、塩基を含有する溶媒（例えば無水塩化メチレン）中のシリル保護基試薬（好ましくは、塩化ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリルなどの立体障害シリル基試薬）と反応させ、低温（例えば０℃）でＨＣｌ酸（例えばイミダゾール）をある期間に亘って除去して、化合物３の比較的障害が少ないヒドロキシル基を選択的に保護し、次にこれを分離（例えば反応混合物を水で希釈し、乾燥によって有機層を分離することによって）した後、有機層を精製（例えばカラムクロマトグラフィ、他の分離方法）して、以下の化合物４
【化３５】
2019513718.tif 000036
を生成する。
【００４９】
次に化合物４を、無水溶媒（例えば塩化メチレン）中のフッ素化剤（例えば三フッ化ジエチルアミノ硫黄ＤＡＳＴ）と反応させて、２’位を立体選択的にフッ素化し、急冷し（−２０℃の氷水）、有機層を分離、抽出（例えば塩化メチレン）及び精製して、以下の化合物７
【化３６】
2019513718.tif 000037
を生成する（図２のスキーム１の化合物５及び６もこの反応中に生成される）。
【００５０】
次に化合物８を、ＴＨＦ（溶媒）中でシリル保護基を除去するために反応させ（好ましくはフッ化テトラブチルアンモニウムを用いて）、分離し、回収し、精製して、以下の化合物８
【化３７】
2019513718.tif 000038
を生成する。
【００５１】
化合物８からのＦＭＣＡの合成
ＦＭＣＡは、化合物８
【化３８】
2019513718.tif 000039
から、２つのステップで高収率で合成される。化合物８を、化学構造
【化３９】
2019513718.tif 000040
の好ましい保護されたアデニン誘導体と反応させる。ここでは、トリフェニルホスフィン及びジイソプロピルアジドカルボキシレート（ＤＩＡＤ）を低温（例えば約−１０℃）の溶媒（好ましくはＴＨＦ）中で約２０〜４５分の期間に亘って混合する。保護されたアデニン誘導体を添加して、低温（例えば０℃）で更なる期間（例えば２０〜４５分、好ましくは約３０分）に亘って混合する。その後に化合物８を添加して十分な期間（例えば約１．５時間）に亘って撹拌して、保護されたアデニン化合物を糖シントン（化合物８）に結合させ、精製（カラムクロマトグラフィ）後に以下の化合物９
【化４０】
2019513718.tif 000041
を生成する。
【００５２】
化合物９を脱保護し（好ましくは水中のトリフルオロ酢酸を用いて、約６０℃で、保護基を除去するために十分な時間、約２時間程度に亘って）、精製して、化合物１０（ＦＭＣＡ）
【化４１】
2019513718.tif 000042
を生成する。
【００５３】
化合物８からのＦＭＣＧの合成
ＦＭＣＧは、化合物８
【化４２】
2019513718.tif 000043
から、２つのステップで高収率で合成される。化合物８を、好ましい化学構造
【化４３】
2019513718.tif 000044
の２−アミノが保護された６−クロロプリン誘導体と反応させる。ここでは、トリフェニルホスフィン及びジイソプロピルアジドカルボキシレート（ＤＩＡＤ）を低温（例えば約−１０℃）の溶媒（好ましくはＴＨＦ）中で約２０〜４５分の期間に亘って混合し、２−アミノが保護された６−クロロプリン誘導体を添加して、低温（例えば０℃）で更なる期間（例えば２０〜４５分、好ましくは約３０分）に亘って混合する。その後に化合物７を添加して十分な期間（例えば約１．５時間）に亘って撹拌して、保護された６−クロロプリン化合物を糖シントン（化合物７）に結合させ、精製（カラムクロマトグラフィ）後に以下の化合物９Ｇ
【化４４】
2019513718.tif 000045
を生成する。
【００５４】
化合物９Ｇを、水中でトリフルオロ酢酸を用いて（好ましくは約６０℃で、保護基を除去するために十分な時間、約２時間程度に亘って）脱保護して、６−クロロ位をケト基に変換し、精製して、化合物１１（ＦＭＣＧ）
【化４５】
2019513718.tif 000046
を生成する。
【００５５】
ＦＭＣＡ（化合物１０）及びＦＭＣＧ（化合物１１）の化学合成を詳述する実験セクションを、以下に詳細に記載する。
【実施例】
【００５６】
実施例の第１のセット（図１のスキーム１Ａと関連）
（３ａＲ，６Ｒ，６ａＲ）−６−（ｔｅｒｔ−ブトキシメチル）−２，２−ジメチル−５−メチレンジヒドロ−３ａＨ−シクロペンタ［ｄ］［１，３］ジオキソール−４（５Ｈ）−オン（２Ａ）：−７８℃のＴＨＦ中の化合物１（１５ｇ、６１．９ｍｍｏｌ）の撹拌済み溶液に、滴下漏斗を用いてＴＨＦ中のＬＤＡ溶液（５３．６ｍｌ、８０ｍｍｏｌ）を添加した。この溶液を−７８℃で３時間撹拌し、エッシェンモーザー塩（４５．８ｇ、２４８ｍｍｏｌ）を一度に添加した。この混合物を同じ温度で更に３時間、そして室温で８時間撹拌した。次にヨードメタン（１３１ｍＬ）を添加し、室温で更に４時間撹拌した。この混合物を、１０％ＮａＨＣＯ3水溶液（１００ｍＬ）で急冷して１時間撹拌し、塩化メチレン（２×３００ｍＬ）を用いて抽出した。混ざり合った有機抽出物を１０％ＮａＨＣＯ3水溶液（２００ｍＬ）、それに続いて塩水（８０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、真空下で濃縮した。残渣をフラッシュシリカ（５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）で精製して、化合物２を淡黄色の油として得た。収率（１１．４ｇ、７２．４％）；1H NMR [500 MHz, CDCl3]: δ 6.22 (d, J = 2 Hz, 1 H), 5.52 (d, J = 1.5 Hz, 1 H), 4.59 (d, J = 5 Hz, 1 H), 4.48 (d, J = 4.5 Hz, 1 H), 3.64 (dd, J = 3.5, 8.5 Hz, 1 H), 3.46 (dd, J = 3.5, 8.5 Hz, 1 H), 3.09 (m, 1 H), 1.37 (s, 3 H), 1.35 (s, 3 H), 1.08 (s, 9 H);  
MS (ESI) m/z: 255 [M+H]+
【００５７】
（３ａＳ，４Ｓ，６Ｒ，６ａＲ）−６−（ｔｅｒｔ−ブトキシメチル）−２，２−ジメチル−５−メチレンテトラヒドロ−３ａＨ−シクロペンタ［ｄ］［１，３］ジオキソール−４−オール（２）：無水メタノール（１５０ｍＬ）中の化合物２（１１．４ｇ、４４．８ｍｍｏｌ）の溶液に−７８℃のＣｅＣｌ3．７Ｈ2Ｏ（１８．３７ｇ、４９．３ｍｍｏｌ）を添加して、１０分間撹拌した。次にＮａＢＨ4（１．８６ｇ、４９．３ｍｍｏｌ）をこの混合物に一度に添加した。３０分後、反応混合物を０℃にし、飽和ＮＨ4Ｃｌ（２０ｍＬ）を添加した。これを更に１時間撹拌した後、減圧下で溶媒を除去した。残渣を塩化メチレン（２×２００ｍＬ）で抽出した。混ざり合った有機抽出物を塩水で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、真空下で濃縮した。これにより得られた残渣をフラッシュシリカ（５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）で精製して、化合物３を白色固体として得た。収率（９．１ｇ、７９％）；1H NMR [500 MHz, CDCl3]: δ 5.25 (s, 1 H), 5.11 (s, 1 H), 4.50-4.53 (m, 3 H), 3.46 (dd, J = 3.5, 8.5 Hz, 1 H), 3.27 (dd, J = 3.5, 8.5 Hz, 1 H), 2.63 (t, J = 3.5 Hz, 1 H), 2.25 (d, J = 11 Hz, 1 H), 1.40 (s, 3 H), 1.34 (s, 3 H), 1.12 (s, 9 H);
MS (ESI) m/z: 257 [M+H]+
【００５８】
（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ｔｅｒｔ−ブトキシ−４−（ｔｅｒｔ−ブトキシメチル）−５−メチレンシクロペンタン−１，２−ジオール（３）：化合物３（２．２ｇ、８．５８ｍｍｏｌ）を２０ｍｌのＴＨＦに溶解し、氷浴で０℃まで冷却した後、トリメチルアルミニウム溶液（１７２ｍｍｏｌ、８６ｍｌ）を添加した。この反応混合物を周囲温度で７２時間撹拌した。次に反応混合物を−３０℃まで冷却し、２ｍｌのメタノール及び飽和塩化アンモニウム溶液で急冷した。酢酸エチル及びヘキサンを溶離液として用いるカラムクロマトグラフィによって、化合物３を灰色がかった白色の固体として得た。収率（１．８ｇ、７７％）。1H-NMR [500 MHz, CDCl3] δ 5.32 (s, 1H), 5.11 (s, 1H), 4.24 (s, 1H), 4.07-4.05 (m, 1H), 3.94-3.92 (m, 1H), 3.44 (dd, J = 4.5 & 8.5 Hz, 1 H), 3.35 (dd, J = 5.0 & 8.5 Hz, 1H), 2.80 (bs, 1H), 2.64-2.62 (m, 1H), 2.51 (bs, 1H), 1.25 (s, 9H), 1.15 (s, 9H)
MS (ESI) m/z: 258 [M+H]+
【００５９】
（１Ｒ，２Ｒ，３Ｒ，５Ｓ）−２−ｔｅｒｔ−ブトキシ−３−（ｔｅｒｔ−ブトキシメチル）−５−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリルオキシ）−４−メチレンシクロペンタノール（４）：０℃の無水塩化メチレン（２５ｍｌ）中の化合物４（１．７６．２４ｍｍｏｌｇ、ｍｍｏｌ）の溶液に、イミダゾール（０．８５ｇ、１２．４８ｍｍｏｌ）を添加し、５分間撹拌した。この溶液に塩化ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル（２．０６ｇ、７．４９ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を２時間撹拌した。反応混合物を水（２０ｍｌ）で希釈して有機層を分離し、水（２×２０ｍｌ）で洗浄し、硫化ナトリウムで乾燥させた。有機層を真空下で乾燥させて粗生成物を得て、これをカラムクロマトグラフィ（酢酸エチル：ヘキサン、１：９）で精製して、化合物５を油として得た。収率（２．５２ｇ、７９％）；1H-NMR [500 MHz, CDCl3] δ 7.80-7.78 (m, 2H), 7.74-7.71 (m, 3H), 7.43-7.35 (m, 5H), 5.19 (s, 1H), 5.00 (s, 1H), 4.36 (s, 1H), 3.82-3.79 (m, 1H), 3.56 (s, 1H), 3.36-3.33 (m, 2H), 2.70 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 2.57 (s, 1H), 1.13 (s, 9H), 1.10 (s, 9H), 1.05 (s, 9H);  
MS (ESI) m/z: 512 [M+H]+
【００６０】
（（１Ｓ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ｔｅｒｔ−ブトキシ−４−（ｔｅｒｔ−ブトキシメチル）−２−フルオロ−５−メチレンシクロペンチルオキシ）（ｔｅｒｔ−ブチル）ジフェニルシラン（７）：無水ジクロロメタン（ＤＣＭ）中の化合物５（２．５ｇ、４．８９ｍｍｏｌ）の溶液に、三フッ化ジエチルアミノ硫黄（ＤＡＳＴ；３．２３ｍＬ、２４．４７ｍｍｏｌ）を−２０℃でゆっくりと添加し、この混合物を３０分間撹拌しながら室温まで温めた。この反応混合物を−２０℃の氷水を用いて急冷し、有機層を回収し、水性相をＤＣＭ（２０ｍＬ×２）で抽出した。混ざり合った有機層をＮａ2ＳＯ4で乾燥させ、減圧下で溶媒を除去した。粗残渣をフラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィ（１％ＥｔＯＡｃ／９９％ヘキサン）で精製して、化合物７を黄色がかかった油として得た。収率（９００ｍｇ、３６％）；1H-NMR [500 MHz, CDCl3] δ 7.75-7.73 (m, 4H), 7.45-7.37 (m, 6H), 5.11 (s, 1H), 4.94 (s, 1H), 4.74-4.71 (m, 0.5 H), 4.64-4.60 (m, 1.5 H), 4.03-3.97 (m, 1H), 3.42 (dd, J = 4.0 & 8.0 Hz, 1H), 3.32 (dd, J = 4.0 & 8.5 Hz, 1H), 2.50 (s, 1H), 1.14 (s, 9H), 1.12 (s, 9H), 1.08 (s, 9H);  19F-NMR [500 MHz, CDCl3]: δ -188.98 (s, 1F);
MS (ESI) m/z: 514 [M+H]+
【００６１】
（１Ｓ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ｔｅｒｔ−ブトキシ−４−（ｔｅｒｔ−ブトキシメチル）−２−フルオロ−５−メチレンシクロペンタノール（８）：ＴＨＦ中の化合物７（０．９ｇ、１．８０ｍｍｏｌ）の溶液に、フッ化テトラブチルアンモニウム（ＴＢＡＦ、ＴＨＦ中の１Ｍ溶液）（３．６１ｍＬ、３．６１ｍｍｏｌ）を添加し、この混合物を室温で３時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、残渣を酢酸エチル（５０ｍＬ）に取り、水（２×２０ｍＬ）で洗浄した。有機層を回収し、乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、ろ過し、減圧下で濃縮した。残渣を、溶離液としてヘキサン中の酢酸エチルを用いたシリカゲルでのカラムクロマトグラフィによって精製して、化合物８を泡状物質として得た。収率（０．３５ｇ、７５％）；1H-NMR [500 MHz, CDCl3] δ 5.33 (s, 1H), 5.16 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 4.64-4.62 (m, 0.5 H), 4.54-4.47 (m, 1.5 H), 4.21-4.16 (m, 1H), 3.50-3.48 (m, 1H), 3.43-3.40 (m, 1H), 2.64 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 2.28 (d, J = 8.0 Hz, 1H) 1.26 (s, 9H), 1.19 (s, 9H);  19F-NMR [500 MHz, CDCl3]: δ -189.2 (s, 1F); MS (ESI) m/z: 275 [M+H]+
【００６２】
９−（（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ｔｅｒｔ−ブトキシ−４−（ｔｅｒｔ−ブトキシメチル）−２−フルオロ−５−メチレンシクロペンチル）−Ｎ，Ｎ−ｄｉｂｏｃ−９Ｈ−プリン−６−アミン（９）：−１０℃のＴＨＦ（１５ｍＬ）中のトリフェニルホスフィン（１１５ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）の撹拌済み溶液に、ＤＩＡＤ（８８ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）を滴下して添加し、反応混合物をこの温度で３０分間撹拌した後、ＴＨＦ（２ｍＬ）中のＮ，Ｎ−ｄｉＢｏｃ保護アデニン（１１０ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）の溶液を添加し、この混合物を０℃で３０分間撹拌した。続いてＴＨＦ（１ｍＬ）中の化合物７（６０ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温で１．５時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン  １／２０〜１／１０）で精製して、化合物９を白色の泡状物質として得た。収率（９５ｍｇ、６０％）；1H-NMR [500 MHz, CDCl3] δ 8.92 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 5.98 (d, J = 28.5 Hz, 1H), 5.32 (s, 1H), 4.92 (s, 0.5 H), 4.81-4.72 (m, 1.5 H), 4.34 (d, J = 14 Hz, 1H), 3.64-3.61 (m, 1H), 3.56-3.52 (m, 1H), 2.87 (m, 1H), 1.48 (s, 18H), 1.29 (s, 9H), 1.28 (s, 9H);  19F-NMR [500 MHz, CDCl3]: δ -188.14 (s, 1F); MS (ESI) m/z: 421 [M+H]+
【００６３】
（１Ｒ，３Ｒ，５Ｒ）−３−（６−アミノ−９Ｈ−プリン−９−イル）−２−フルオロ−５−（ヒドロキシメチル）−４−メチレンシクロペンタノール（ＦＭＣＡ、１０）：化合物９（８０ｍｇ、０．１１６ｍｍｏｌ）をトリフルオロ酢酸と水との混合物（５ｍＬ、３：２）に溶解し、混合物を６０℃で２時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をシリカゲルでのカラムクロマトグラフィ（メタノール／ＤＣＭ  ０．２／１０〜０．６／１０）によって精製して、化合物９（２６ｍｇ、８０％）を白色固体として得た。mp 215-218 ℃; [α] 25D = +152.10° (c 0.5, MeOH); 1H-NMR [500 MHz, CD3OD]: δ 8.26 (s, 1H), 8.10 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 5.90 (d, J = 25.0 Hz, 1H), 5.46 (s, 1H), 4.96 (dt, J = 2.5, 52.5 Hz, 1H), 4.95 (s, 1H), 4.44 (dt, J = 3.0, 14.0 Hz, 1H), 3.81-3.91 (m, 2H), 2.81 (s, 1H); 19F NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ -192.93 (ddd, J = 14.0, 28.0, 及び 56.0 Hz, 1F); 13C{1 H} NMR [125 MHz, CD3OD]: δ 51.0, 57.5 (d, J = 17.4 Hz), 61.7, 72.9 (d, J = 23.6 Hz), 95.9 (d, J = 184.0 Hz), 111.7, 117.9, 141.1, (d, J = 5.3 Hz), 146.0, 149.9, 152.5, 156.0
【００６４】
９−（（１Ｒ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ｔｅｒｔ−ブトキシ−４−（ｔｅｒｔ−ブトキシメチル）−２−フルオロ−５−メチレンシクロペンチル）−６−クロロ−Ｎ，Ｎ−ｄｉｂｏｃ−９Ｈ−プリン−２−アミン（９Ｇ）：−１０℃のＴＨＦ（１５ｍＬ）中のトリフェニルホスフィン（８６ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）の撹拌済み溶液に、ＤＩＡＤ（６７ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）を滴下して添加し、反応混合物をこの温度で３０分間撹拌した後、ＴＨＦ（２ｍＬ）中の２−Ｎ，Ｎ−ｄｉＢｏｃ保護−６−Ｃｌ−プリン（１２１ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）の溶液を添加し、この混合物を０℃で３０分間撹拌した。続いてＴＨＦ（１ｍＬ）中の化合物７（６０ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を室温で１．５時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ（ＥｔＯＡｃ／ヘキサン  １／２０〜１／１０）で精製して、化合物９Ｇを白色の泡状物質として得た。収率（９５ｍｇ、６０％）；1H-NMR [500 MHz, CDCl3] δ 8.35 (s, 1H), 5.87 (d, J = 25 Hz, 1H), 5.37 (s, 1H), 4.92 (s, 0.5 H), 4.88 (s, 1.5 H), 4.78 (s, 0.5 H) 4.34 (d, J = 13.5 Hz, 1H), 3.64-3.62 (m, 1H), 3.57-3.54 (m, 1H), 2.84 (m, 1H), 1.48 (s, 18H), 1.28 (s, 18H);  19F-NMR [500 MHz, CDCl3]: δ -187.12 (s, 1F); MS (ESI) m/z: 627 [M+H]+
【００６５】
２−アミノ−９−（（１Ｒ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−２−フルオロ−３−ヒドロキシ−４−（ヒドロキシメチル）−５−メチレンシクロペンチル）−１Ｈ−プリン−６（９Ｈ）−オン（ＦＭＣＧ、１１）：化合物９Ｇ（７０ｍｇ、０．１１６ｍｍｏｌ）を、トリフルオロ酢酸と水との混合物（５ｍＬ、３：２）中に溶解し、混合物を６０℃で２時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、残渣をシリカゲルでのカラムクロマトグラフィ（メタノール／ＤＣＭ  ０．２／１０〜０．６／１０）によって精製して、化合物１１（２３ｍｇ、７０％）を灰色がかった白色の固体として得た。[α] 25D = +140 (c 0.5, MeOH); 1H-NMR [500 MHz, CD3OD]: δ 7.67 (s, 1H), 5.73 (d, J = 25.0 Hz, 1H), 5.41 (s, 1H), 51.6 (s, 0.5 H), 4.83 (s, 1H), 4.39 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 3.84-2.83 (m, 1H), 3.77-3.73 (m, 1H), 2.78 (s, 1H); 19F NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ -190.21 (ddd, J = 14.0, 28.0, 及び 56.0 Hz, 1F);  MS (ESI) m/z: 296.2 [M+H]+
【００６６】
参考文献の第１のセット
(1) http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs204/en/
(2) Bhattacharya, D.; Thio, C. L. Clinical Infectious Diseases 2010, 51, 1201
(3) Kim, K. H.; Kim, N. D.; Seong, B. L. Molecules 2010, 15, 5878
(4) Mukaide, M.; Tanaka, Y.; Shin-I, T.; Yuen, M. F.; Kurbanov, F.; Yokosuka, O.; Sata, M.; Karino, Y.; Yamada, G.; Sakaguchi, K.; Orito, E.; Inoue, M.; Baqai, S.; Lai, C. L.; Mizokami, M. Antimicrob. Agents Ch 2010, 54, 882
(5) Bartholomeusz, A.; Locarnini, S. Journal of Medical Virology 2006, 78, S52
(6) Wang, J. N.; Singh, U. S.; Rawal, R. K.; Sugiyama, M.; Yoo, J.; Jha, A. K.; Scroggin, M.; Huang, Z. H.; Murray, M. G.; Govindarajan, R.; Tanaka, Y.; Korba, B.; Chu, C. K. Bioorg. Med. Chem. Lett. 2011, 21, 6328
(7) Rawal, R. K.; Singh, U. S.; Chavre, S. N.; Wang, J. N.; Sugiyama, M.; Hung, W.; Govindarajan, R.; Korba, B.; Tanaka, Y.; Chu, C. K. Bioorg. Med. Chem. Lett. 2013, 23, 503
(8) Walsh, A. W.; Langley, D. R.; Colonno, R. J.; Tenney, D. J. PLoS. One 2010, 5
(9) Jin, Y. H.; Liu, P.; Wang, J. N.; Baker, R.; Huggins, J.; Chu, C. K. J. Org. Chem. 2003, 68, 9012
(10) Jin, Y. H.; Chu, C. K. Nucleos. Nucleot. Nucl. 2003, 22, 771
(11) Gadthula, S.; Rawal, R. K.; Sharon, A.; Wu, D.; Korba, B.; Chu, C. K. Bioorg. Med. Chem. Lett. 2011, 21, 3982
【００６７】
実施例の続き
実施例の第２のセット（図２及び３のスキーム１及び２と関連）
参考文献の第２のセットが適用される。
本発明者らは、ＶｉｎｃｅラクタムによるＦＭＣＡの効率的かつ立体選択的な合成を発表している13。しかしながら、Ｖｉｎｃｅラクタムによる過去に説明された合成における、ヒドロキシ基の配置の反転を含めたアミノ基のジアゾ化−脱離ステップの低い収率は、その合成経路をＦＭＣＡの大規模合成について不可能とする。ＦＭＣＡの合成のための新しい現実的な手法の探求において、本発明者らの研究グループは、このヌクレオシドの相当量の合成のために利用できる全ての合成の可能性を再検討した。この実施例のセットでは、本発明者らは、工業規模の合成で用いられることができる、中間体８を介したＦＭＣＡの実行可能かつ極めて実用的な合成を報告する。ここで説明する経路は、収率がより良好であり、中間体形成に関するステップが少なく、更にいくつかのステップにおいて高価なカラムクロマトグラフィによる精製を効率的に回避している。これらの改善により、ＦＭＣＡの大規模合成のためのより要求にかなう合成経路が提供される。過去の文書で明らかにされているように13、Ｂｏｃ保護アデニンによる縮合の前に、重要な中間体（フッ化糖）のヒドロキシル基の配置の反転が必要であったが、本発明の合成ではこのステップが排除される。光延結合の標的のヌクレオシドを良好な収率で生成する条件下で、供給された中間体８をｄｉ−Ｂｏｃアデニンと直接結合させる。以前の合成経路からこれらの問題を排除することによって、本発明の合成は遥かに実用的となり、７ステップでのＦＭＣＡの大規模合成を実現可能とする。
【００６８】
化合物１は市販されている。その化合物のケトン１の６位（シクロペンタン部分の５位）に環外メチレン基を導入することによって、化合物２の合成を行った。１つの方法では、環外二重結合の導入を、ＬＤＡの存在下でケトン１をエッシェンモーザー塩で処理した後、ヨウ化メチルを用いてホフマン脱離させることによって行った。このステップは極めて困難かつ面倒であり、更に大規模合成でヨウ化メチルを過剰に使用するとコスト効率が悪かった。新しい合成では、これらの有害かつ高価な試薬を避けるために、環外二重結合の導入を、塩としてのＴＦＡを伴うジイソプロピルアミンの存在下で、パラホルムアルデヒドを用いて行った17。この手法により、ケトン１を、ＴＨＦ中の触媒ジイソプロピルアンモニウムトリフルオロ酢酸塩の存在下でパラホルムアルデヒドで処理することによって、ケトンの６位に二重結合を導入し、エノン２Ａを７３％の収率で得た。このエノンのその場での選択的還元を、水素化ホウ素ナトリウム／塩化セリウム水和物複合体（ＮａＢＨ4／ＣｅＣｌ3．７Ｈ2Ｏ）を用いて、ルーシェ還元によって行い18、α−ヒドロキシル化合物２だけを９０％の収率で得た。化合物２のイソプロピリデンの位置選択的な開環は、Ｏｇａｓａｗａｒａらによって報告されているプロトコルによってなされた19。化合物２をトリメチルアルミニウム（ヘキサン中の２Ｍ溶液）で処理することによって、ヒドロキシル基のα配置を保持したジオール化合物３を、７６〜７７％の収率で生成した。化合物３のアリルアルコールの選択的保護を、テトラ−ブチル−ジフェニルシリル（ＴＢＤＰＳ）を用いて行った。ジオール３を、０℃〜室温のＤＣＭ中のイミダゾールの存在下でＴＢＤＰＳＣｌを用いて処理し、保護された化合物４を最高９２％の収率で得た。アリルアルコール及び嵩高い保護ＴＢＤＰＳ基のより高い反応性により、化合物３の３−ヒドロキシ基保護は不要であり、アリル基のヒドロキシが保護された化合物４のみが得られる。
【００６９】
次のステップは、中間体４の２位へのフッ素の組み込みであった。２−α−ヒドロキシの２−βフルオロ中間体７への変換を、中間体４を−２０℃〜室温で４０分間に亘って三フッ化ジエチルアミノ硫黄（ＤＡＳＴ）で処理することによって行い、化合物７を３６％の収率で生成した。このフッ素化反応の過程で興味深い観察が得られ、これは報告に値する。化合物４のフッ素化をＤＣＭ中のＤＡＳＴによって行って出発物質の消費を完了し、反応を継続して、所望の化合物７と共に、ＴＬＣに同時に２つの極性のスポットも良好な収率で現れることを観察した。これらの結果は、本発明者らにフッ素化の過程で生成される極性のスポットを単離及び同定することを促した。これらの極性のスポットを両方とも精製し、様々な分析技法でこれらの構造の解明を行った。全ての分析データにより、化合物５及び６の形成が確認された。図２のスキーム１を参照。興味深いことに、中間体６は、医薬化学の関心の観点から極めて価値の高い炭素環糖である。過去２０年間、２−デオキシ炭素環糖の調製が極めて困難であることは、文献に十分に記載されてきた。化合物６は２−デオキシ炭素環糖であり、これは医薬で重要であるヌクレオシ（チ）ドの様々な誘導体の合成に利用することができる。例えば、化合物６の選択的還元後に、よく知られた抗肝炎薬であるエンテカビルの合成に適用することができる、重要な２−デオキシ炭素環糖が得られる15、16。
【００７０】
化合物６の構造が、1Ｈ  ＮＭＲ、1Ｈ−1Ｈ  ＣＯＳＹ、炭素ＤＥＰＴ及びＨＳＱＣ分光法によって確認された。化合物６の1Ｈ  ＮＭＲスペクトルは、δ２．７２における２つのＨ−２プロトンのダブルダブレットと、δ４．１７ｐｐｍにおけるＨ−３プロトンのカルテットとを示し、Ｈ−１プロトンは全く存在しなかった。化合物６の1Ｈ−1Ｈ  ＣＯＳＹスペクトルは、Ｈ−２プロトンのダブルダブレットとＨ−３プロトンのカルテットとの相関を示した。化合物６の19Ｆ−ＮＭＲは、フッ素原子の完全な消失を示したが、これによりフッ素の脱離が確認され、またＨ−２プロトンのダブルダブレットは２−デオキシ糖６の形成を証明する。更なる確認のために炭素ＤＥＰＴ実験を行い、これは１１８．４、６１．１、４７．５におけるＣＨ2炭素の３つのピークと、６８．１及び５０．４におけるＣＨ炭素の２つのピークを示した。ＨＳＱＣスペクトルはまた、δ２．７２における２つのＨ−２プロトンのダブルダブレットが４７．５でＣＨ2炭素と相関を示したことを明らかにし、これによりケトン６の構造が確認される。
【００７１】
化合物５も、同様の分析技法で確認された。化合物５の1Ｈ  ＮＭＲは、δ７．７０及びδ６．４４におけるＨ−２及びＨ−３プロトンの２つのダブレットを示し、これはオレフィンのプロトンの形成を明らかにする。３−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチルプロトンが完全に存在しないことが、1Ｈ−ＮＭＲによって明らかとなった。おそらく３−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチル基の酸性媒体の脱離が起こっており、これは共役オレフィン化合物５の形成に肯定的な力を与える。1Ｈ−1Ｈ  ＣＯＳＹスペクトルでは、このオレフィンのＨ−２及びＨ−３プロトンは明らかな相関を示し、これによりこれらのプロトンが互いに隣接した位置にあることも確認される。更に、化合物５の構造を確認するために、炭素ＤＥＰＴ及びＨＳＱＣ実験を行った。ここでＤＥＰＴ実験では、２つのＣＨ2はδ１１７．７、６４．０に曝され、２７．５ｐｐｍにおける単一のＣＨ3と共に、３つのＣＨをδ１６０．９、１３５．７及び４５．８で得た。ＨＳＱＣスペクトルでは、１１６０．９における炭素が、δ７．７０におけるＨ−３プロトンのダブレットとの相関を示し、１３５．７における炭素が、δ６．４４におけるＨ−２のダブレットプロトンとの相関を示し、これはケトン５の共役アルケンの形成による３−Ｏ−ｔｅｒｔ−ブチル基の脱離を証明している。化合物５及び６の形成の妥当な機序がスキーム３に示されている。化合物５はまた、誘導されるヌクレオ（チ）シドの合成のための糖シントンとしても使用することができる。
【００７２】
化合物７のＴＢＤＰＳ脱保護を、フッ化テトラブチルアンモニウム（ＴＢＡＦ）によって行った。化合物７を室温のＴＨＦ中のＴＢＡＦの２Ｍ溶液で処理して、化合物８を８７％の収率で得た。この合成に関して、化合物８は重要な中間体としての役割を果たした。これをＴＨＦ中のジイソプロピルアゾジカルボキシレート（ＤＩＡＤ）及びトリフェニルホスフィン（ＴＰＰ）を用いて、光延結合条件下でＮ，Ｎ−ｄｉＢｏｃ保護アデニンと縮合し、化合物９を７４％の収率で生成した（スキーム２）。化合物９のｔｅｒｔ−ブチル及びＢｏｃ保護基を、室温のＤＣＭ中の２モルのトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）を用いて除去し、標的化合物１０（ＦＭＣＡ）を８０％の収率で得た。ＦＭＣＡを化合物１１Ａと縮合することによって、ホスホロアミダイトプロドラッグ（ＦＭＣＡＰ）を合成した。化合物１１Ａは、反応物１１を生成するために、−７８℃のＤＣＭ中で塩化フェニルホスホリルとＬ−アラニンイソプロピルエステルとを反応させることによって供給された。このプロドラッグ形態を得るために、室温のＴＨＦ中のＮ−メチルイミダゾール（ＮＭＩ）の存在下においてＦＭＣＡを化合物１１で処理し、標的化合物１２を６１％の収率で生成する。
【００７３】
結論
薬剤耐性変異体ＨＢＶに対するＦＭＣＡ及びＦＭＣＡＰ、あるいはＦＭＣＧ及びＦＭＣＧＰの更に保証されるインビボの生物学的スクリーニングのために、要求にかなうスケーラブルなＦＭＣＡの合成が必要とされており、これは本明細書では市販のケトン１を用いて記載される。化合物２の保護基の選択的な開環及びこれに続く化合物３のアリル保護により、化合物４が良好な収率で得られる。ＴＢＤＰＳの脱保護を含む化合物４のフッ素化により、重要な中間体８が得られる。この中間体にＢｏｃ保護アデニンとの光延結合を用い、それに続く脱保護によって、標的化合物１０（ＦＭＣＡ）が７ステップで、およそ６．７％の全収率で得られる。クロロリン酸１１ＡとＦＭＣＡとの更なる結合により、ホスホロアミダイトプロドラッグ１２（ＦＭＣＡＰ）が良好な収率で生成される。この合成におけるステップの削減及び安価な試薬の使用は、この合成が代替的な既知の手法よりもＦＭＣＡの大規模調製に関してはるかに都合が良いことを実証する。この合成の熟練した尽力の間に、重要な２’−デオキシ糖６が単離された。化合物６は、現在使用されている抗ＨＢＶ薬のエンテカビルの合成を含む、多様な２’−デオキシヌクレオシ（チ）ドの合成に使用されることができる。
【００７４】
実験セクション
一般的な分析方法
試薬及び無水溶媒を購入し、更に精製することなく使用した。反応を薄層クロマトグラフィプレート（ＴＬＣシリカゲルＧＦ２５０ミクロン）で監視し、これはＵＶランプ（２５４ｎｍ）を用いて可視化され、メタノール中の硫酸の１５％溶液を用いて展開した。融点をデジタル融点測定装置で記録し、これは補正されない。核磁気共鳴スペクトルを、テトラメチルシランを内部標準として用いて、1Ｈ  ＮＭＲ、19Ｆ  ＮＭＲに関しては５００ＭＨｚで、13Ｃ  ＮＭＲに関しては１２５ＭＨｚで記録した。ＣＦＣｌ3（トリクロロ−フルオロメタン）を、19Ｆ−ＮＭＲのための内部標準（基準）として使用した。化学シフト（δ）は、ｓ（シングレット）、ｂｓ（ブロードシングレット）、ｄ（ダブレット）、ｔ（トリプレット）、ｑ（カルテット）、ｍ（マルチプレット）、ｄｄ（ダブルダブレット）及びｄｔ（ダブルトリプレット）として示される。旋光度をデジタル旋光計で測定した。ＥＳＩ高分解能質量スペクトルをＱ−ＴＯＦ質量分析計で記録した。シリカゲルでコーティングしたガラス上で薄層クロマトグラフィを行った。以下の合成ステップは、添付の図２のスキーム１及び図３のスキーム２に示される。
【００７５】
（３ａＳ，４Ｓ，６Ｒ，６ａＲ）−６−（ｔｅｒｔ−ブトキシメチル）−２，２−ジメチル−５−メチレンテトラヒドロ−３ａＨ−シクロペンタ［ｄ］［１，３］ジオキソール−４−オール（２）：乾燥ＴＨＦ中の化合物１（５０．０ｇ、２０６．６ｍｍｏｌ）及びパラホルムアルデヒド（１２．４ｇ、４１３．２ｍｍｏｌ）の撹拌済み懸濁液に、ジイソプロピルアンモニウムトリフルオロ酢酸塩（４４．０ｇ、２０６．６ｍｍｏｌ）及びジイソプロピルアミン（２９．０ｍＬ、２０６．６ｍｍｏｌ）を添加した。この濁りを帯びた懸濁液を２時間還流すると、混合物は透明になった。続いて反応混合物を室温に冷却し、更にパラホルムアルデヒド（１２．４ｇ、４１３．２ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を再び１２時間還流した。混合物を減圧下で濃縮し、残渣を１Ｌの酢酸エチルで希釈した。有機層を水（４００ｍＬ×３）で洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させ、真空下で濃縮した。得られた粗材料を、更に精製することなくそのまま次のステップに使用した。その粗材料（５２．０ｇ、２００．７ｍｍｏｌ）を無水メタノール（５００ｍＬ）に溶解し、−７８℃のＣｅＣｌ3．７Ｈ2Ｏ（９８．７ｇ、２６５．０ｍｍｏｌ）を添加し、２０分間撹拌した。その後、ＮａＢＨ4（９．７ｇ、２５６．９ｍｍｏｌ）を、−７８℃でこの混合物に一度に添加した。同一の温度で２０分間撹拌した後、反応混合物を０℃にし、３０分間撹拌した。ＮＨ4Ｃｌ（２００ｍＬ）の飽和溶液を添加し、更に１時間撹拌した。過剰な有機溶媒を減圧下で除去し、１０％酢酸水溶液（１００ｍＬ）を添加した。混ざり合った水性層を酢酸エチル（２００ｍＬ×２）で抽出した。混ざり合った有機抽出物を塩水（２００ｍＬ×２）で洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させ、減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ（５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）で精製して、化合物２を白色固体として得た。収率（２７ｇ、２ステップでの全収率５２％）；1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 5.25 (s, 1H), 5.11 (s, 1H), 4.50-4.53 (m, 3H), 3.46 (dd, J = 3.5 & 8.5 Hz, 1H), 3.27 (dd, J = 3.5 & 8.5 Hz, 1H), 2.63 (t, J = 3.5 Hz, 1H), 2.25 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 1.40 (s, 3H), 1.34 (s, 3H), 1.12 (s, 9H); 13C{1H} NMR (125 MHz, CDCl3) δ 153.9, 110.2, 109.3, 81.6, 79.3, 73.8, 72.7, 64.3, 49.9, 27.3, 26.5, 24.7;  HRMS (EI) Calcd for (C14H24O4+Na) + 279.1572, found 279.1577
【００７６】
（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ｔｅｒｔ−ブトキシ−４−（ｔｅｒｔ−ブトキシメチル）−５−メチレンシクロペンタン−１，２−ジオール（３）：化合物２（４０．０ｇ、１５６．２ｍｍｏｌ）を５００ｍｌのＤＣＭに溶解し、氷浴で−７８℃まで冷却した後、トリメチルアルミニウム溶液（ヘキサン中の２Ｍ溶液、９８６．０ｍＬ、１５６２．５ｍｍｏｌ）を添加した。この反応混合物を室温まで温め、７２時間撹拌した。この反応混合物を再び−７８℃まで冷却し、２００ｍＬの飽和塩化アンモニウム溶液で急冷した。その後、反応混合物をセライトベッドに通し、ベッドをジクロロメタン（２５０ｍＬ×２）で完全に洗浄した。ろ液をＮａ2ＳＯ4で乾燥させ、減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィ（１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）で精製して、化合物３を灰色がかった白色の固体として得た。収率（３２．４ｇ、７６％）。[α] 24D = -70.24 (c 1.0, CHCl3); 1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 5.34 (s, 1H), 5.12 (s, 1H), 4.26 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 4.07-4.05 (m, 1H), 3.95-3.92 (m, 1H), 3.46 (dd, J = 4.0 & 8.5 Hz, 1 H), 3.37 (dd, J = 5.0 & 8.0 Hz, 1H), 2.88 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 2.65 (bs, 1H), 2.50 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 1.27 (s, 9H), 1.17 (s, 9H); 13C{1H} NMR (125 MHz, CDCl3) δ 152.4, 150.0, 109.9, 75.8, 74.9, 72.4, 62.2, 48.8, 28.5, 27.5; HRMS (EI) Calcd for (C15H28O4+Na) + 295.1885, found 295.1882
【００７７】
（１Ｒ，２Ｒ，３Ｒ，５Ｓ）−２−ｔｅｒｔ−ブトキシ−３−（ｔｅｒｔ−ブトキシメチル）−５−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリルオキシ）−４−メチレンシクロペンタノール（４）：０℃の無水塩化メチレン（２５０ｍＬ）中の化合物３（２０．０ｇ、７３．５ｍｍｏｌ）の溶液にイミダゾール（２０．０ｇ、２９４．１ｍｍｏｌ）を添加し、１５分間撹拌した。この溶液に塩化ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル（２８．７ｍＬ、１１０．２ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を室温で２時間撹拌した。反応混合物を水（３００ｍＬ）で希釈し、分離した有機層を水（２００ｍＬ×２）で洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させ、減圧下で濃縮した。粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィ（３％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）で精製して、化合物４を油として得た。収率（３４．６ｇ、９２％）。[α] 24D = -16.42 (c 1.0, CHCl3); 1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.80-7.78 (m, 2H), 7.74-7.71 (m, 3H), 7.43-7.35 (m, 5H), 5.19 (s, 1H), 5.00 (s, 1H), 4.36 (s, 1H), 3.82-3.79 (m, 1H), 3.56 (s, 1H), 3.36-3.33 (m, 2H), 2.70 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 2.57 (s, 1H), 1.13 (s, 9H), 1.10 (s, 9H), 1.05 (s, 9H); 13C{1H} NMR (125 MHz, CDCl3) δ 151.6, 135.9, 135.8, 135.3, 134.8, 134.1, 133.6, 129.6, 127.7, 127.5, 74.1, 72.0, 61.8, 28.4, 27.4, 26.9, 26.6, 19.4, 19.0, 14.1;  HRMS (EI) Calcd for (C31H46O4 Si+Na) + 533.3063, found 533.3059
【００７８】
（（１Ｓ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ｔｅｒｔ−ブトキシ−４−（ｔｅｒｔ−ブトキシメチル）−２−フルオロ−５−メチレンシクロペンチルオキシ）（ｔｅｒｔ−ブチル）ジフェニルシラン（７）：無水ジクロロメタン（ＤＣＭ）中の化合物４（２０．０ｇ、３９．２ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＡＳＴ（３６．４ｍＬ、２７４．４ｍｍｏｌ）を−３０℃でゆっくりと添加し、混合物を３０分間に亘って撹拌しながら室温まで温めた。反応混合物を−３０℃の氷水で急冷し、有機層を回収し、水性相をＤＣＭ（２００ｍＬ×２）で抽出した。混ざり合った有機層をＮａ2ＳＯ4で乾燥させ、溶媒を減圧下で除去した。粗残渣をフラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィ（１％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）で精製して、化合物７を黄色がかかった油として得た。収率（７．２ｇ、３６％）。２つの優れた極性化合物５及び６もこの反応で形成された。生成された化合物５及び６の極性のスポットをカラムクロマトグラフィで単離した。高い極性の溶離液での化合物７の１０〜２０％までの精製中、ＥｔＯＡｃ／ヘキサンは、精製された化合物５を２５％の収率で、及び化合物６を３０％の収率で、油としてもたらした。[α] 24D = -30.17 (c 1.0, CHCl3); 1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.75-7.73 (m, 4H), 7.46-7.38 (m, 6H), 5.12 (s, 1H), 4.94 (s, 1H), 4.68 (dt, J = 50.0 & 75.0 Hz, 1H), 4.64-4.60 (m, 1H), 4.02-3.99 (m, 1H), 3.42 (dd, J = 4.0 & 8.0 Hz, 1H), 3.32 (dd, J = 4.0 & 8.5 Hz, 1H), 2.50 (bs, 1H), 1.22 (s, 9H), 1.15 (s, 9H), 1.06 (s, 9H);  19F-NMR (500 MHz, CDCl3) d -188.8 (dt, J = 17.5 & 56.5 Hz, 1F); 13C{1H} NMR (125 MHz, CDCl3) δ 148.1, 136.0, 135.9, 134.1, 133.6, 129.5, 127.4, 109.1, 103.3 (d, J =191.0 Hz), 73.9, 72.2, 61.9, 48.3, 31.6, 28.8, 27.3, 27.0, 22.6, 19.5; HRMS (EI) Calcd for (C31H45FO3Si+Na) + 535.3020, found 535.3017
【００７９】
（Ｒ）−４−（ｔｅｒｔ−ブトキシメチル）−５−メチレンシクロペント−２−エン−１−オン（５）。1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.70 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 6.44 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 6.44 (s, 1H), 5.59 (s, 1H), 3.56 (bs, 2H), 3.37 (bs, 1H), 1.22 (s, 9H); 13C{1H} NMR (125 MHz, CDCl3) δ 196.7, 160.9, 135.7, 117.7, 72.9, 64.0, 45.8, 27.5; HRMS (EI) Calcd for (C11H17O2+H) + 181.1229, found 181.1224
【００８０】
（３Ｒ）−４−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−３−（ｔｅｒｔ−ブトキシメチル）−２−メチレンシクロペンタン−１−オン（６）。1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 6.12 (s, 1H), 5.43 (s, 1H), 4.17 (q, J = 6.0 &12.0 Hz, 1H), 3.55 (d, J = 5.0 Hz, 1 H), 2.89-2.86 (m, 1H), 2.72 (dd, J = 7.0 &18.5 Hz, 1H), 2.36 (dd, J = 6.0 & 18.0 Hz, 1H), 1.24 (s, 9H), 1.20 (s, 9H); 13C{1H} NMR (125 MHz, CDCl3) δ 205.1, 1.45.4, 118.4, 74.2, 72.8, 68.3, 61.1, 50.4, 47.5, 28.6, 27.5; HRMS (EI) Calcd for (C15H27O3+H) + 255.1960, found 255.1956
【００８１】
（１Ｓ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ｔｅｒｔ−ブトキシ−４−（ｔｅｒｔ−ブトキシメチル）−２−フルオロ−５−メチレンシクロペンタノール（８）：ＴＨＦ中の化合物７（９．２ｇ、１７．９ｍｍｏｌ）の溶液に、フッ化テトラブチルアンモニウム（ＴＢＡＦ、ＴＨＦ中の１Ｍ溶液）（２７．０ｍＬ、２６．９５ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を室温で３時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、得られた粗生成物を酢酸エチル（２５０ｍＬ）に溶解した。有機層を水（２００ｍＬ×２）で洗浄し、最後に塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ（４％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）で精製して、化合物８を白色の泡状物質として得た。収率（４．３ｇ、８７％）。[α] 24D = -76.69 (c 1.0, CHCl3); 1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 5.33 (s, 1H), 5.15 (s,  1H), 4.55 (dt, J = 5.5 & 53.5 Hz, 1H), 4.53-4.51 (m, 1H), 4.19-4.16 (m, 1H), 3.49-3.47 (m, 1H), 3.42-3.40 (m, 1H), 2.64 (bs, 1H), 2.28 (d, J = 8.0 Hz, 1H) 1.26 (s, 9H), 1.19 (s, 9H);  19F-NMR (500 MHz, CDCl3) d -190.6 (dt J = 14.0 & 56.5 Hz, 1F); 13C{1H} NMR (125 MHz, CDCl3) δ 150.0, 149.0, 102.2 (d, J =189.2 Hz), 74.7, 72.59, 62.0, 48.9, 28.6, 27.4; HRMS (EI) Calcd for (C15H27FO3+Na) + 297.1842, found 297.1839
【００８２】
９−（（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−ｔｅｒｔ−ブトキシ−４−（ｔｅｒｔ−ブトキシメチル）−２−フルオロ−５−メチレンシクロペンチル）−Ｎ，Ｎ−ｄｉｂｏｃ−９Ｈ−プリン−６−アミン（９）：−１０℃のＴＨＦ（５０ｍＬ）中のトリフェニルホスフィン（４．７８ｇ、１８．２４ｍｍｏｌ）の撹拌済み溶液に、ＤＩＡＤ（３．６８ｇ、１８．２４ｍｍｏｌ）を滴下して添加し、反応混合物をこの温度で３０分間撹拌した後、ＴＨＦ（２０ｍＬ）中のＮ，Ｎ−ｄｉＢｏｃ保護アデニン（３．６ｇ、１０．９ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。この混合物を０℃で３０分間撹拌した。次に反応混合物を再び−２０℃まで冷却し、ＴＨＦ（１０ｍＬ）中の化合物８（２．０ｇ、２．２９ｍｍｏｌ）を滴下して添加した。反応温度を室温まで上昇させて、１．５時間撹拌した。反応をメタノールで急冷し、溶媒を減圧下で除去し、粗残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ（５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）で精製して、化合物９を白色の泡状物質として得た。収率（３．２ｇ、７４％）。[α] 24D = -51.47 (c 1.0, CHCl3); 1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.91 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 5.97 (d, J = 30.5 Hz, 1H), 5.32 (s, 1H), 4.90 (dd, J = 9.0 & 52.5 Hz, 1H), 4.49-4.77 (m, 1H), 4.33 (d, J = 14.0 Hz, 1H), 3.62-3.60 (m, 1H), 3.54-3.50 (m, 1H), 2.85 (bs, 1H), 1.47 (s, 18H), 1.28 (s, 9H), 1.27 (s, 9H);  19F-NMR (500 MHz, CDCl3) d -191.1 (ddd, J = 17.5, 35.0 & 49.0 Hz, 1F); 13C{1H} NMR (125 MHz, CDCl3) δ 153.9, 152.0, 150.4, 150.2, 150.0, 146.4, 145.3, 128.1, 111.7, 109.9, 83.7, 75.7, 73.2, 62.6, 49.8, 28.2, 27.8, 27.5 ; HRMS (EI) Calcd for (C30H47FN5O6+H) + 592.3510, found 592.3509
【００８３】
（＋）−９−［（１’Ｒ、２’Ｒ、３’Ｒ、４’Ｒ）−２’−フルオロ−３’−ヒドロキシ−４’−（ヒドロキシメチル）−５’−メチレン−シクロペンタン−１’−イル］アデニン（ＦＭＣＡ、１０）：化合物９（３．３ｇ、５．５８ｍｍｏｌ）を３０ｍＬのＤＣＭに溶解した。この溶液にトリフルオロ酢酸（６ｍＬ）を添加し、混合物を室温で１６時間撹拌した。ＴＦＡを過剰な溶媒と共に減圧下で除去し、残渣をメタノールと一緒に３回蒸発させて、残留トリフルオロ酢酸を除去し、２８％アンモニア水溶液で中和し、減圧下で濃縮した。得られた粗生成物をシリカゲルでのカラムクロマトグラフィ（６％メタノール／ＤＣＭ）で精製して、化合物１０を白色固体として得た。収率（１．２ｇ、８０％）。Mp 215-218 ℃; [α] 24D = +152.10° (c 0.5, MeOH); 1H-NMR (500 MHz, CD3OD) δ 8.26 (s, 1H), 8.10 (d, 1H), 5.90 (d, J = 26.0 Hz, 1H), 5.46 (s, 1H), 4.96 (dt, J = 2.5 & 52.5 Hz, 1H), 4.95 (s, 1H), 4.44 (dd, J = 13.5 Hz, 1H), 3.88-3.82 (m, 2H), 2.81 (bs, 1H); 19F NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ -192.93 (ddd, J = 14.0, 28.0 & 56.0 Hz, 1F); 13C{1H} NMR [125 MHz, CD3OD]: δ 51.0, 57.5 (d, J = 17.4 Hz), 61.7, 72.9 (d, J = 23.6 Hz), 95.9 (d, J = 184.0 Hz), 111.7, 117.9, 141.1, (d, J = 5.3 Hz), 146.0, 149.9, 152.5, 156.0; HRMS (EI) Calcd for (C12H15FN5O2+H) + 280.1210, found 280.1216
【００８４】
｛［（１Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）−３−（６−アミノ−９Ｈ−プリン−９−イル）−４−フルオロ−５−ヒドロキシ−２−メチレンシクロペンチル）メトキシ］（フェノキシホスホリルアミノ｝プロピオン酸イソプロピルエステル（１２）：ジクロロリン酸フェニル（１．０ｍｏｌ当量）及びＬ−アラニンイソプロピルエステル塩酸塩（１．０ｍｏｌ）を無水ジクロロメタン中に取り、−７８℃まで冷却した。トリエチルアミン（２．０ｍｏｌ）を−７８℃で滴下して添加し、１時間撹拌した。１時間後、反応混合物をゆっくりと室温まで温め、撹拌を２時間継続した。溶媒を減圧下で除去し、粗残渣を無水エーテル中に再懸濁し、窒素下でセライトベッドを通してろ過した。ろ液を濃縮して化合物１１を得て、これを次のステップにそのまま使用した。０℃のアルゴン雰囲気下で、Ｎ−メチルイミダゾール、ＮＭＩ（０．９ｍＬ、１０．７ｍｍｏｌ）を、乾燥ＴＨＦ中の化合物１０（０．５ｇ、１．７９ｍｍｏｌ）の撹拌懸濁液に添加した。クロロリン酸１１（２．２ｇ、７．１ｍｍｏｌ）をＴＨＦ中に溶解して、滴下して添加した。反応混合物を室温まで温め、撹拌を一晩継続した。次に揮発性物質を減圧下で蒸発させ、粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィ（２％メタノール／ＤＣＭ）で精製して、化合物１２を灰色がかった白色の固体として得た。収率（０．５５ｇ、６１％）。1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ d 8.36 (s, 1H), 7.84 (d, J =  24.5 Hz, 1H), 7.28-7.10 (m, 5H), 5.88 (d, J = 30.0 Hz, 1H), 5.80 (bs, 2H), 5.18 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 4.96-4.76 (m, 3H), 4.39-4.34 (m, 2H), 4.17- 4.04 (m, 2H), 3.90-3.88 (m, 2H), 3.00 (bs, 1H), 1.31 (d, J =  6.5 Hz, 3H), 1.16 (dd, J = 6.0, & 14.0 Hz, 6H); 19F NMR (500 MHz, CDCl3) δ -192.81 (ddd, J = 17.5, 31.5 & 53.0 Hz, 1F); 31P NMR (CDCl3, 202 MHz): δ 2.84, 2.37; 13C{1H} NMR [125 MHz, CDCl3]: δ 187.7, 173.3, 155.4, 153.1, 150.5, 144.5, 142.4, 140.9, 129.8, 125.2, 120.3, 118.7, 112.3, 95.9, 73.7, 50.5, 49.6, 21.6, 20.8; HRMS (EI) Calcd for (C24H31FN6O6P+H) + 549.2027, found 549.2026
【００８５】
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【図１】
2019513718.tif 000084
【図２】
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【図３】
2019513718.tif 000086
【図４】
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【国際調査報告】
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2019513718.tif 000089
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