(57)【要約】  本開示は、可溶性アルカリホスファターゼ（ｓＡＬＰ）を患者に投与することにより、低ホスファターゼ症（ＨＰＰ）患者たとえば乳児において気管気管支軟化症（ＴＢＭ）を治療する方法を特徴とする。【選択図】図２Ａ
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
低ホスファターゼ症（ＨＰＰ）患者において気管気管支軟化症（ＴＢＭ）を治療する方法であって、前記患者に６ｍｇ／ｋｇ／週以上の可溶性アルカリホスファターゼ（ｓＡＬＰ）を提供する投与レジメンで前記患者に前記ｓＡＬＰを投与することを含み、前記ｓＡＬＰが、アスホターゼアルファ（配列番号１）を含むかまたは配列番号１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、かつ前記ｓＡＬＰの投与が前記患者においてＴＢＭの改善をもたらす、方法。
【請求項２】
前記ｓＡＬＰが週２回、週３回、週４回、週５回、週６回、または週７回投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記投与レジメンが前記患者に約６．５ｍｇ／ｋｇ／週〜約２５ｍｇ／ｋｇ／週の前記ｓＡＬＰを提供する、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記投与レジメンが前記患者に約６．５ｍｇ／ｋｇ／週の前記ｓＡＬＰ、約７ｍｇ／ｋｇ／週の前記ｓＡＬＰ、約７．５ｍｇ／ｋｇ／週の前記ｓＡＬＰ、約７．８ｍｇ／ｋｇ／週の前記ｓＡＬＰ、約８ｍｇ／ｋｇ／週の前記ｓＡＬＰ、約８．５ｍｇ／ｋｇ／週の前記ｓＡＬＰ、約９ｍｇ／ｋｇ／週の前記ｓＡＬＰ、約１０ｍｇ／ｋｇ／週の前記ｓＡＬＰ、約１０．５ｍｇ／ｋｇ／週の前記ｓＡＬＰ、約１１ｍｇ／ｋｇ／週の前記ｓＡＬＰ、約１１．５ｍｇ／ｋｇ／週の前記ｓＡＬＰ、約１２ｍｇ／ｋｇ／週の前記ｓＡＬＰ、約１２．５ｍｇ／ｋｇ／週の前記ｓＡＬＰ、約１３ｍｇ／ｋｇ／週の前記ｓＡＬＰ、約１３．５ｍｇ／ｋｇ／週の前記ｓＡＬＰ、約１４ｍｇ／ｋｇ／週の前記ｓＡＬＰ、約１４．５ｍｇ／ｋｇ／週の前記ｓＡＬＰ、約１５ｍｇ／ｋｇ／週の前記ｓＡＬＰ、約１６ｍｇ／ｋｇ／週の前記ｓＡＬＰ、約１７ｍｇ／ｋｇ／週の前記ｓＡＬＰ、約１８ｍｇ／ｋｇ／週の前記ｓＡＬＰ、約１９ｍｇ／ｋｇ／週の前記ｓＡＬＰ、約２０ｍｇ／ｋｇ／週の前記ｓＡＬＰ、約２１ｍｇ／ｋｇ／週の前記ｓＡＬＰ、約２２ｍｇ／ｋｇ／週の前記ｓＡＬＰ、約２３ｍｇ／ｋｇ／週の前記ｓＡＬＰ、約２４ｍｇ／ｋｇ／週の前記ｓＡＬＰ、または約２５ｍｇ／ｋｇ／週の前記ｓＡＬＰを提供する、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
前記投与レジメンが、約３ｍｇ／ｋｇの前記ｓＡＬＰを週３回、約２．５ｍｇ／ｋｇの前記ｓＡＬＰを週３回、約１．３ｍｇ／ｋｇの前記ｓＡＬＰを週６回、または約５ｍｇ／ｋｇの前記ｓＡＬＰを週３回投与することを含む、請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
前記ＴＢＭが、心肺停止、気管切開、心停止、呼吸窮迫、痰貯留、喘鳴、咳嗽、無酸素発作、チアノーゼ、徐脈、頻脈性不整脈、頸部自然過伸展、長時間呼気相、成長不全、胸骨陥没、胸骨下陥没、肋間陥没、間欠性呼吸困難、持続性呼吸困難、反復性気管支炎、および反復性肺炎を含む群から選択されるＴＢＭの１つ以上の症状を含む、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
前記患者が前記ｓＡＬＰの投与後にＴＢＭの前記１つ以上の症状の改善を呈する、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
少なくとも２週間、３週間、１ヶ月間、２ヵ月間、３ヵ月間、４ヵ月間、５ヵ月間、または６ヶ月間の治療期間にわたる前記ｓＡＬＰの投与後に前記患者がＴＢＭの前記１つ以上の症状の改善を呈さない場合、前記方法が、前記ｓＡＬＰの投与量を増加させることをさらに含む、請求項６に記載の方法。
【請求項９】
前記患者が増加投与量の前記ｓＡＬＰの投与後にＴＢＭの前記１つ以上の症状の改善を呈する、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
前記患者が、約１週間、約２週間、約３週間、約１ヶ月間、約２ヵ月間、約３ヵ月間、約４ヵ月間、約５ヵ月間、約６ヶ月間、約７ヶ月間、約８ヶ月間、約９ヶ月間、約１０ヶ月間、約１１ヵ月間、または約１年間の治療期間の後にＴＢＭの前記１つ以上の症状の改善を呈する、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
ＴＢＭの前記１つ以上の症状が出生時の前記患者に存在する、請求項６〜１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
ＴＢＭの前記１つ以上の症状が出生後の前記患者に発生する、請求項６〜１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
前記患者が前記ｓＡＬＰの投与前に人工呼吸器サポートを必要とする、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
前記患者が、前記ｓＡＬＰの投与後に、人工呼吸器サポートへの依存度の減少を呈するかまたはもはや人工呼吸器サポートを必要としない、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記患者が前記ｓＡＬＰの投与前にＴＢＭと診断される、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】
ＴＢＭの前記改善が、少なくとも１年間、少なくとも２年間、少なくとも３年間、少なくとも４年間、少なくとも５年間、少なくとも６年間、少なくとも７年間、少なくとも８年間、少なくとも９年間、少なくとも１０年間、またはそれ以上の治療期間にわたる前記ｓＡＬＰの投与全体を通じて持続される、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
前記患者への前記ｓＡＬＰの投与の前または後に、前記方法が、前記患者に対して気管切開を実施することをさらに含む、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８】
ＴＢＭの前記改善が、ＴＢＭを有する未治療ＨＰＰ患者と対比したものである、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
前記患者への前記ｓＡＬＰの投与の前または後に、前記方法が、前記患者に対して気管支鏡検査を実施することをさらに含む、請求項１〜１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０】
前記患者が、前記ｓＡＬＰの投与の前および／またはそれと同時に、高頻度振動換気、呼気終末陽圧（ＰＥＥＰ）、持続気道陽圧（ＣＰＡＰ）、バイレベル気道陽圧または二相性気道陽圧（ＢｉＰＡＰ）、および間欠陽圧換気（ＩＰＰＶ）の少なくとも１つを必要とする、請求項１〜１９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１】
前記ＰＥＥＰが約５ｃｍＨ２Ｏ〜約１５ｃｍＨ２Ｏである、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記ＰＥＥＰが約５ｃｍＨ２Ｏ、約６ｃｍＨ２Ｏ、約７ｃｍＨ２Ｏ、約８ｃｍＨ２Ｏ、約９ｃｍＨ２Ｏ、約１０ｃｍＨ２Ｏ、約１１ｃｍＨ２Ｏ、約１２ｃｍＨ２Ｏ、約１３ｃｍＨ２Ｏ、約１４ｃｍＨ２Ｏ、または約１５ｃｍＨ２Ｏである、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
前記ｓＡＬＰの投与が、前記患者により必要とされる前記ＰＥＥＰの減少をもたらす、請求項２０〜２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２４】
前記患者により必要とされる前記ＰＥＥＰが、約１ｃｍＨ２Ｏ、約２ｃｍＨ２Ｏ、約３ｃｍＨ２Ｏ、約４ｃｍＨ２Ｏ、約５ｃｍＨ２Ｏ、約６ｃｍＨ２Ｏ、約７ｃｍＨ２Ｏ、約８ｃｍＨ２Ｏ、約９ｃｍＨ２Ｏ、または約１０ｃｍＨ２Ｏ減少する、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
前記ｓＡＬＰが、約１ヶ月間、約２ヵ月間、約３ヵ月間、約４ヵ月間、約５ヵ月間、約６ヶ月間、約７ヶ月間、約８ヶ月間、約９ヶ月間、約１０ヶ月間、またはそれ以上の治療期間にわたり投与される、請求項２３または２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記患者に以前に前記ｓＡＬＰが投与されていない、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２７】
前記患者が乳児である、請求項１〜２６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２８】
前記ｓＡＬＰの投与が、出生の約１ヶ月後、約２ヵ月後、約３ヵ月後、約４ヵ月後、約５ヵ月後、または約６ヶ月後に行われる、請求項１〜２７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２９】
前記患者が周産期発症ＨＰＰおよび乳児期発症ＨＰＰの少なくとも１つを有する、請求項１〜２８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３０】
前記患者がヒトである、請求項１〜２９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３１】
前記患者が、骨格変形、緊張低下、運動障害、骨変形、関節痛、骨痛、筋肉痛、骨折、筋力低下、くる病、乳歯早期喪失、不完全骨ミネラル化、ホスホエタノールアミン（ＰＥＡ）の血中レベルおよび／または尿中レベルの上昇、無機ピロリン酸（ＰＰｉ）の血中レベルおよび／または尿中レベルの上昇、ピリドキサール５’−リン酸（ＰＬＰ）の血中レベルおよび／または尿中レベルの上昇、低ミネラル化、くる病肋骨、高カルシウム尿症、低身長症、動揺性歩行、ＨＰＰ関連発作、不適正体重増加、頭蓋骨癒合症、およびピロリン酸カルシウム二水和物結晶沈着からなる群から選択されるＨＰＰの１つ以上の症状を呈する、請求項１〜３０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３２】
ＨＰＰの前記１つ以上の症状が出生時の前記患者に存在する、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
ＨＰＰの前記１つ以上の症状が出生後の前記患者に発生する、請求項３１に記載の方法。
【請求項３４】
前記患者が、前記ｓＡＬＰの投与後にＨＰＰの前記１つ以上の症状の改善を呈する、請求項３１〜３３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３５】
前記ｓＡＬＰの投与が前記患者の生存性を向上させる、請求項１〜３４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３６】
前記方法が、前記患者が前記患者の組織非特異的アルカリホスファターゼ（ＴＮＡＬＰ）遺伝子に突然変異を有するかを決定することをさらに含む、請求項１〜３５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３７】
前記ＴＮＡＬＰ遺伝子の突然変異がＨＰＰに関連する、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
前記ｓＡＬＰが、薬学的に許容可能な賦形剤、担体、または希釈剤を含む組成物に入れて前記患者に投与される、請求項１〜３７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３９】
前記薬学的に許容可能な賦形剤、担体、または希釈剤が生理食塩水を含む、請求項３８に記載の方法。
【請求項４０】
前記薬学的に許容可能な賦形剤、担体、または希釈剤が塩化ナトリウムおよびリン酸ナトリウムを含む、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
前記薬学的に許容可能な賦形剤、担体、または希釈剤が１５０ｍＭ塩化ナトリウムおよび２５ｍＭリン酸ナトリウムを含む、請求項４０に記載の方法。
【請求項４２】
前記組成物が前記患者に非経口的、経腸的、または外用的に投与される、請求項３８〜４１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４３】
前記組成物が前記患者の皮下、静脈内、筋肉内、動脈内、髄腔内、または腹腔内に投与される、請求項４２に記載の方法。
【請求項４４】
前記組成物が前記患者に皮下注射により投与される、請求項４３に記載の方法。
【請求項４５】
前記ｓＡＬＰが連日または隔日で投与される、請求項１〜４４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４６】
前記ｓＡＬＰがＰＥＡ、ＰＰｉ、およびＰＬＰに対して生理活性である、請求項１〜４５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４７】
前記ｓＡＬＰに骨の骨格ミネラル化を改善する触媒能がある、請求項１〜４６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４８】
前記ｓＡＬＰがＡＬＰの可溶性細胞外ドメインである、請求項１〜４７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４９】
前記方法が、前記患者に由来する血清サンプルおよび／または血液サンプルにおいてｓＡＬＰ活性を決定することをさらに含む、請求項１〜４８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５０】
前記ｓＡＬＰ活性を決定することが、前記血清サンプルおよび／または血液サンプルにおいてホスホエタノールアミン（ＰＥＡ）、無機ピロリン酸（ＰＰｉ）、およびピリドキサール５’−リン酸（ＰＬＰ）の少なくとも１つの濃度を測定することを含む、請求項４９に記載の方法。
【請求項５１】
前記ｓＡＬＰが、配列番号１のアミノ酸配列に対して少なくとも９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項１〜５０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５２】
前記ｓＡＬＰが、配列番号１のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる、請求項１〜５１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５３】
投与レジメンに従って患者において気管気管支軟化症（ＴＢＭ）を治療するための医薬の製造における、配列番号１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む可溶性アルカリホスファターゼ（ｓＡＬＰ）の使用であって、前記投与レジメンが前記患者に６ｍｇ／ｋｇ／週以上の前記ｓＡＬＰを提供するものである、使用。
【請求項５４】
低ホスファターゼ症（ＨＰＰ）患者において気管気管支軟化症（ＴＢＭ）を治療するための、配列番号１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む可溶性アルカリホスファターゼ（ｓＡＬＰ）であって、前記ｓＡＬＰが、前記患者に６ｍｇ／ｋｇ／週以上の前記ｓＡＬＰを提供する投与レジメンで前記患者に投与され、かつ前記ｓＡＬＰが前記患者においてＴＢＭの改善を促進するものである、前記可溶性アルカリホスファターゼ（ｓＡＬＰ）。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
配列リストの組込み
本出願は、ＡＳＣＩＩ形式で電子申請されたかつ全体が本出願をもって参照により組み込まれる配列リストを含有する。２０１７年８月１５日作成のＡＳＣＩＩコピーは、５０６９４−０５８ＷＯ２＿Ｓｅｑｕｅｎｃｅ＿Ｌｉｓｔｉｎｇ＿８．１５．１７＿ＳＴ２５．ＴＸＴという名称でありかつ８４ＫＢのサイズである。
【０００２】
分野
本開示は、気管気管支軟化症の治療方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
低ホスファターゼ症（ＨＰＰ）は、最重篤度の疾患形態であるが出生数１００，０００人当たり１人の発生率を有する稀な遺伝性骨格疾患である。この障害は、組織非特異的アルカリホスファターゼ（ＴＮＳＡＬＰ）をコードする遺伝子の機能喪失突然変異から生じる。ＨＰＰ患者は、歯喪失または骨軟化症（くる病）からほぼ完全な子宮内骨ミネラル化欠如に至るまできわめて広範にわたる症状を呈する。多くのＨＰＰ患者は、骨格変形、低身長症、筋肉痛および骨痛、運動障害、ならびに早期歯喪失の特徴を呈する。周産期発症または乳児期発症のＨＰＰは、くる病性胸部変形、ビタミンＢ６依存発作、および成長不全の存在によっても特徴付けることができる。とくに、生後６ヶ月未満で発症するＨＰＰは、呼吸不全が原因で致死的であることが多く、年齢１歳の生存率は低い。
【０００４】
ＨＰＰ乳児は、気管気管支軟化症（ＴＢＭ）およびミネラル化不良肋骨が原因で呼吸機能障害を呈することがある。ＴＢＭは、筋弾性要素の緊張低下および支持軟骨の軟化により引き起こされる気道の気管壁および気管支壁の衰弱により特徴付けられる病態である。ＴＢＭの主形態は先天性である。重篤なＴＢＭは、呼吸不全および合併肺感染症による切迫した死のリスクをもたらす。そのため、ＴＢＭを有する乳児は積極的療法を必要とする。とくに、ＴＢＭを有するＨＰＰ患者は、典型的には、生き続けるために補助換気サポートを必要とする（Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，ＲＪ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｉｔｉｇａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｒａｃｈｅｏｂｒｏｎｃｈｏｍａｌａｃｉａ  ｗｉｔｈ  ３Ｄ−ｐｒｉｎｔｅｄ  ｐｅｒｓｏｎａｌｉｚｅｄ  ｍｅｄｉｃａｌ  ｄｅｖｉｃｅｓ  ｉｎ  ｐｅｄｉａｔｒｉｃ  ｐａｔｉｅｎｔｓ．Ｓｃｉ  Ｔｒａｎｓｌ  Ｍｅｄ．；７（２８５）：２８５ｒａ２６４（２０１５））。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
ＨＰＰ乳児などのＨＰＰ患者において気管気管支軟化症を治療する方法の必要性が存在する。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
低ホスファターゼ症（ＨＰＰ）患者（たとえばヒト）においてアスホターゼアルファなどの可溶性アルカリホスファターゼ（ｓＡＬＰ）（たとえば配列番号１）を投与することにより気管気管支軟化症（ＴＢＭ）を治療する方法が開示される。とくに、ｓＡＬＰは、それを必要とする患者に６ｍｇ／ｋｇ／週以上のｓＡＬＰを提供する投与レジメンで投与したとき、周産期発症ＨＰＰ乳児などのＨＰＰ患者においてＴＢＭおよびその症状の治療に有効でありうる。例示的な投与レジメンは、限定されるものではないが、約３ｍｇ／ｋｇのｓＡＬＰの週３回投与、約２．５ｍｇ／ｋｇのｓＡＬＰの週３回投与、約１．３ｍｇ／ｋｇのｓＡＬＰの週６回投与、または約５ｍｇ／ｋｇのｓＡＬＰの週３回投与を含みうる。そのほか、本方法は、ＨＰＰ患者においてＴＢＭおよびその症状を治療するのに有効なｓＡＬＰ量を決定するためにｓＡＬＰの投与量および／または投与頻度を変化させることを含みうる。たとえば、ｓＡＬＰの投与量は、治療期間後、たとえば、少なくとも２週間後、３週間後、１ヶ月後、２ヵ月後、３ヵ月後、４ヵ月後、５ヵ月後、または６ヶ月後、ＨＰＰ患者がＴＢＭの１つ以上の症状の改善を呈さない場合、６ｍｇ／ｋｇ／週以上を提供するように増加させうる。
【０００７】
第１の態様は、患者に６ｍｇ／ｋｇ／週以上のｓＡＬＰ（たとえば、アスホターゼアルファ、配列番号１）を提供する投与レジメンで患者にｓＡＬＰを投与することを含む、ＨＰＰ患者（たとえば、乳児期発症および周産期発症のＨＰＰ患者）におけるＴＢＭの治療方法を特徴とする。とくに、ｓＡＬＰは、アスホターゼアルファ（配列番号１）または配列番号１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。ｓＡＬＰの投与は、患者におけるＴＢＭの改善、たとえば、約１ヶ月間、約２ヵ月間、約３ヵ月間、約４ヵ月間、約の５ヵ月間の、約６ヶ月間、約７ヶ月間、約８ヶ月間、約９ヶ月間、約１０ヶ月間、またはそれ以上の治療期間にわたるｓＡＬＰ投与の後のＴＢＭの改善をもたらしうる。
【０００８】
たとえば、ｓＡＬＰ（たとえば配列番号１）は、週２回、週３回、週６回、週４回、週５回、または週７回投与可能である。とくに、ｓＡＬＰは、連日または隔日投与可能である。投与レジメンは、患者に約６．５ｍｇ／ｋｇ／週〜約２５ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰを提供可能である（たとえば、投与レジメンは、患者に約６．５ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約７ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約７．５ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約７．８ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約８ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約８．５ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約９ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約１０ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約１０．５ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約１１ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約１１．５ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約１２ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約１２．５ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約１３ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約１３．５ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約１４ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約１４．５ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約１５ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約１６ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約１７ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約１８ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約１９ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約２０ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約２１ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約２２ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約２３ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約２４ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、または約２５ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰを提供する）。とくに、投与レジメンは、約３ｍｇ／ｋｇのｓＡＬＰを週３回、約２．５ｍｇ／ｋｇのｓＡＬＰを週３回、約１．３ｍｇ／ｋｇのｓＡＬＰを週６回、または約５ｍｇ／ｋｇのｓＡＬＰを週３回投与することを含む。
【０００９】
たとえば、ＨＰＰ患者のＴＢＭは、限定されるものではないが心肺停止、気管開口、心停止、呼吸窮迫、痰貯留、喘鳴、咳嗽、無酸素発作、チアノーゼ、徐脈、頻脈性不整脈、頸部自然過伸展、長時間呼気相、成長不全、胸骨陥没、胸骨下陥没、肋間陥没、間欠性呼吸困難、持続性呼吸困難、反復性気管支炎、および反復性肺炎をはじめとするＴＢＭの１つ以上の症状により特徴付け可能である。患者（たとえば、乳児期発症および周産期発症のＨＰＰ患者）は、ｓＡＬＰ（たとえば配列番号１）の投与後にＴＢＭの１つ以上の症状の改善を呈しうる。
【００１０】
本方法は、患者（たとえば、乳児期発症および周産期発症のＨＰＰ患者）が少なくとも２週間、３週間、１ヶ月間、２ヵ月間、３ヵ月間、４ヵ月間、５ヵ月間、または６ヶ月間の治療期間にわたるｓＡＬＰ投与の後にＴＢＭの１つ以上の症状の改善を呈さない場合、ｓＡＬＰ（たとえば配列番号１）の投与量を増加させることをさらに含みうる。たとえば、患者は、増加投与量のｓＡＬＰの投与後にＴＢＭの１つ以上の症状（たとえば、心肺停止、気管開口、心停止、呼吸窮迫、痰貯留、喘鳴、咳嗽、無酸素発作、チアノーゼ、徐脈、頻脈性不整脈、頸部自然過伸展、長時間呼気相、成長不全、胸骨陥没、胸骨下陥没、肋間陥没、間欠性呼吸困難、持続性呼吸困難、反復性気管支炎、および反復性肺炎）の改善を呈する。とくに、患者は、約１週間、約２週間、約３週間、約１ヶ月間、約２ヵ月間、約３ヵ月間、約４ヵ月間、約５ヵ月間、約６ヶ月間、約７ヶ月間、約８ヶ月間、約９ヶ月間、約１０ヶ月間、約１１ヵ月間、または約１年間の治療期間の後にＴＢＭの１つ以上の症状の改善を呈する。
【００１１】
以上の態様では、ＴＢＭの症状（たとえば、心肺停止、気管開口、心停止、呼吸窮迫、痰貯留、喘鳴、咳嗽、無酸素発作、チアノーゼ、徐脈、頻脈性不整脈、頸部自然過伸展、長時間呼気相、成長不全、胸骨陥没、胸骨下陥没、肋間陥没、間欠性呼吸困難、持続性呼吸困難、反復性気管支炎、および反復性肺炎）は、出生時に患者（たとえば、乳児期発症および周産期発症のＨＰＰ患者）に存在しうるかまたは出生後に患者に発生しうる。そのほか、患者は、ｓＡＬＰ（たとえば配列番号１）の投与前にＴＢＭと診断されうる。
【００１２】
患者は、ｓＡＬＰ（たとえば配列番号１）の投与前に人工呼吸器サポートを必要としうる。本方法の結果として、患者（たとえば、乳児期発症および周産期発症のＨＰＰ患者）は、ｓＡＬＰの投与後、人工呼吸器サポートへの依存度の減少を呈しうるかまたはもはや人工呼吸器サポートを必要としない。さらに、ＴＢＭの改善は、少なくとも１年間、少なくとも２年間、少なくとも３年間、少なくとも４年間、少なくとも５年間、少なくとも６年間、少なくとも７年間、少なくとも８年間、少なくとも９年間、少なくとも１０年間、またはそれ以上の治療期間にわたるｓＡＬＰの投与全体を通じて持続可能である。とくに、ＴＢＭの改善は、ＴＢＭを有する未治療ＨＰＰ患者（たとえば乳児）に対するものでありうる。
【００１３】
本方法は、患者へのｓＡＬＰの投与前または投与後、患者（たとえば、乳児期発症および周産期発症のＨＰＰ患者）に対して気管切開を実施することをさらに含みうる。そのほか、本方法は、患者へのｓＡＬＰの投与前または投与後、患者に対して気管支鏡法（たとえば、軟性気管支鏡法および／またはマイクロ喉頭気管支鏡法）を実施することを含みうる。
【００１４】
以上の態様では、患者（たとえば、乳児期発症および周産期発症のＨＰＰ患者）は、ｓＡＬＰの投与前および／または投与と同時に、高頻度振動換気、呼気終末陽圧（ＰＥＥＰ）、持続気道陽圧（ＣＰＡＰ）、バイレベル気道陽圧または二相性気道陽圧（ＢｉＰＡＰ）、および間欠陽圧換気（ＩＰＰＶ）の少なくとも１つを必要としうる。とくに、患者は、約５ｃｍＨ２Ｏ〜約１５ｃｍＨ２ＯのＰＥＥＰを必要としうる（たとえば、ＰＥＥＰは、約５ｃｍＨ２Ｏ、約６ｃｍＨ２Ｏ、約７ｃｍＨ２Ｏ、約８ｃｍＨ２Ｏ、約９ｃｍＨ２Ｏ、約１０ｃｍＨ２Ｏ、約１１ｃｍＨ２Ｏ、約１２ｃｍＨ２Ｏ、約１３ｃｍＨ２Ｏ、約１４ｃｍＨ２Ｏ、または約１５ｃｍＨ２Ｏである）。本方法の結果として、ｓＡＬＰの投与は、患者により必要とされるＰＥＥＰの減少をもたらしうる。たとえば、患者により必要とされるＰＥＥＰは、約１ｃｍＨ２Ｏ、約２ｃｍＨ２Ｏ、約３ｃｍＨ２Ｏ、約４ｃｍＨ２Ｏ、約５ｃｍＨ２Ｏ、約６ｃｍＨ２Ｏ、約７ｃｍＨ２Ｏ、約８ｃｍＨ２Ｏ、約９ｃｍＨ２Ｏ、または約１０ｃｍＨ２Ｏ減少する。
【００１５】
以上の態様では、ＨＰＰ患者は、周産期発症ＨＰＰおよび乳児期発症ＨＰＰの少なくとも１つを有しうる。ＨＰＰ患者は、以前にｓＡＬＰ（たとえば配列番号１）が投与されていない患者でありうる。そのほか、患者へのｓＡＬＰの投与は、生後約１ヶ月、約２ヵ月、約３ヵ月、約４ヵ月、約５ヵ月、または約６ヶ月に行いうる。とくに、患者はヒトでありうる。
【００１６】
患者（たとえば、乳児期発症および周産期発症のＨＰＰ患者）は、限定されるものではないが骨格変形、緊張低下、運動障害、骨変形、関節痛、骨痛、筋肉痛、骨折、筋力低下、くる病、乳歯早期喪失、不完全骨ミネラル化、ホスホエタノールアミン（ＰＥＡ）の血中レベルおよび／または尿中レベルの上昇、無機ピロリン酸（ＰＰｉ）の血中レベルおよび／または尿中レベルの上昇、ピリドキサール５’−リン酸（ＰＬＰ）の血中レベルおよび／または尿中レベルの上昇、低ミネラル化、くる病肋骨、高カルシウム尿症、低身長症、動揺性歩行、ＨＰＰ関連発作、不適正体重増加、頭蓋骨癒合症、ならびにピロリン酸カルシウム二水和物結晶沈着を含みうるＨＰＰの１つ以上の症状を呈しうる。ＨＰＰの１つ以上の症状は、出生時に患者に存在しうるかまたは出生後に患者に発生しうる。本方法の結果として、患者は、ｓＡＬＰ（たとえば配列番号１）の投与後、ＨＰＰの１つ以上の症状の改善を呈しうる。さらに、ｓＡＬＰの投与は、患者の生存性を向上させうる。
【００１７】
本方法は、患者（たとえば、乳児期発症および周産期発症のＨＰＰ患者）が患者の組織非特異的アルカリホスファターゼ（ＴＮＡＬＰ）遺伝子に突然変異を有するか、とくに、ＴＮＡＬＰ遺伝子の突然変異がＨＰＰに関連するかを決定することをさらに含みうる。
【００１８】
ｓＡＬＰ（たとえば配列番号１）は、薬学的に許容可能な賦形剤、担体、または希釈剤、たとえば、生理食塩水（たとえば、塩化ナトリウムおよびリン酸ナトリウム）を含む組成物に入れて、ＨＰＰ患者（たとえば、乳児期発症および周産期発症のＨＰＰ患者）においてＴＢＭおよびその症状を治療するために投与可能である。たとえば、薬学的に許容可能な賦形剤、担体、または希釈剤は、１５０ｍＭ塩化ナトリウムおよび２５ｍＭリン酸ナトリウムを含む。さらに、医薬組成物は、非経口的（たとえば、皮下、静脈内、筋肉内、動脈内、髄腔内、または腹腔内）、経腸的、または外用的に患者に投与可能である。とくに、医薬組成物は、患者に皮下投与可能である。
【００１９】
以上の態様では、ｓＡＬＰ（たとえば配列番号１）は、ＰＥＡ、ＰＰｉ、およびＰＬＰに対する生理活性があり、骨の骨格ミネラル化を改善する触媒能があり、かつ／またはアルカリホスファターゼの可溶性細胞外ドメインである。たとえば、ｓＡＬＰは、配列番号１のアミノ酸配列に対して少なくとも９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。たとえば、ｓＡＬＰは、配列番号１のアミノ酸配列を含むかまたはそれからなる。
【００２０】
そのほか、本方法は、患者（たとえば、乳児期発症および周産期発症のＨＰＰ患者）に由来する血清サンプルおよび血液サンプルの少なくとも１つにおいてｓＡＬＰ活性を決定することをさらに含みうる。とくに、ｓＡＬＰ活性は、患者に由来する血清サンプルおよび／または血液サンプルでＰＥＡ、ＰＰｉ、および／またはＰＬＰの少なくとも１つを測定することを含む。
【００２１】
第２の態様は、患者（たとえば、乳児期発症および周産期発症のＨＰＰ患者）において投与レジメンに従ってＴＢＭを治療するための医薬の製造における、配列番号１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性（たとえば、少なくとも９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性）を有するアミノ酸配列を含むｓＡＬＰの使用を特徴とする。投与レジメンは、患者に６ｍｇ／ｋｇ／週以上のｓＡＬＰ（たとえば、アスホターゼアルファ、配列番号１）を提供する。
【００２２】
第３の態様は、ＨＰＰ患者（たとえば、乳児期発症および周産期発症のＨＰＰ患者）においてＴＢＭを治療するための、配列番号１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性（たとえば、少なくとも９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性）を有するアミノ酸配列を含むｓＡＬＰを特徴とする。ｓＡＬＰは、患者に６ｍｇ／ｋｇ／週以上のｓＡＬＰを提供する投与レジメンで患者に投与され、この場合、ｓＡＬＰ（たとえば、アスホターゼアルファ、配列番号１）は、患者においてＴＢＭの改善を促進する。
【００２３】
定義
本明細書で用いられる場合、「ａ」または「ａｎ」は、とくに指定がない限り、「ａｔ  ｌｅａｓｔ  ｏｎｅ（少なくとも１つ）」または「ｏｎｅ  ｏｒ  ｍｏｒｅ（１つ以上）」を意味する。そのほか、単数形の「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」は、とくに文脈上明確な規定がない限り、複数の参照対象を含む。
【００２４】
本明細書で用いられる場合、「ａｂｏｕｔ（約）」とは、列挙された値の±１０％、好ましくは列挙された値の±５％、より好ましくは列挙された値の±２％の量を意味する。たとえば、「ａｂｏｕｔ（約）」という用語は、本明細書に列挙されたすべての投与量または範囲を列挙された値または範囲端点の±１０％変化させて用いることが可能である。
【００２５】
「アスホターゼアルファ」とは、ＨＰＰの治療に供すべく製剤化されたヒトＴＮＳＡＬＰ（ｈＴＮＳＡＬＰ）融合タンパク質を意味する。アスホターゼアルファ（ＳＴＲＥＮＳＩＱ（登録商標）、Ａｌｅｘｉｏｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．）は、２つの同一ポリペプチド鎖の可溶性糖タンパク質を含む融合タンパク質であり、各ポリペプチド鎖は、配列番号１のアミノ酸残基１〜７２６を含む。各ポリペプチド鎖の構造は、ｈＴＮＳＡＬＰの触媒ドメインと、ヒト免疫グロブリンＧ１のＦｃドメインと、骨標的化ドメインとして使用されるデカアスパラギン酸ペプチドと、を含む（構造ｈＴＮＳＡＬＰ−Ｆｃ−Ｄ１０）。２つのポリペプチド鎖は、２つのジスルフィド結合により共有結合される。アスホターゼアルファは、米国、欧州、日本、カナダ、イスラエル、オーストラリア、および韓国でＳＴＲＥＮＳＩＱ（登録商標）という商品名で承認されている。
【００２６】
本明細書で用いられる「気管支鏡検査」という用語は、気管気管支軟化症（ＴＢＭ）などの肺の疾患または病態を診断または治療するためにＨＰＰ患者（たとえば、周産期発症ＨＰＰ乳児などのＨＰＰ乳児）などの患者の気道を可視化すべく実施される方法を意味する。気管支鏡検査は、通常は鼻もしくは口を介してまたはときには気管開口を介して気管支鏡というデバイスを気道内に挿入することを含む。気管支鏡は、典型的には約２．５ｃｍ未満の幅および約６５ｃｍ未満の長さの可撓性または剛性のチューブでありうる。
【００２７】
本明細書で用いられる「骨標的化部分」という用語は、骨標的化部分が単独で骨マトリックスに対して約１０−６Ｍ〜約１０−１５Ｍ（たとえば、１０−７Ｍ、１０−８Ｍ、１０−９Ｍ、１０−１０Ｍ、１０−１１Ｍ、１０−１２Ｍ、１０−１３Ｍ、１０−１４Ｍ、または１０−１５Ｍ）のｉｎ  ｖｉｖｏ結合親和性を有するように骨マトリックスに対して親和性を有する１〜５０アミノ酸残基（たとえば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１２、１４、１５、１６、１８、２０、２２、２４、２５、２６、２８、３０、３２、３４、３５、３６、３８、４０、４２、４４、４５、４６、４８、または５０アミノ酸残基）の長さのアミノ酸配列を意味する。たとえば、骨標的化部分は、個数「ｎ」の一連の連続したアスパラギン酸（Ｄ）残基および／またはグルタミン酸（Ｅ）残基を含むことができ、ここで、ｎ＝１〜５０、たとえば、ｎ＝３〜３０、たとえば、５〜１５、たとえば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３６、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、または５０である。
【００２８】
本明細書で用いられる「触媒能がある」という用語は、骨ミネラル化阻害剤の無機ピロリン酸（ＰＰｉ）を加水分解して無機リン酸（Ｐｉ）を提供することによりＰＰｉの細胞外濃度を減少させるｓＡＬＰを意味する。触媒能があるｓＡＬＰは、ＰＰｉの濃度を調節することにより骨の骨格ミネラル化を改善する。
【００２９】
「投与レジメン」という用語は、特定の頻度で所望の治療効果（たとえば、ＴＢＭの治療、たとえば、ＴＢＭの１つまたは多くの症状の低減）を生じるように計算された決定量の活性剤（たとえば、配列番号１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むｓＡＬＰたとえばアスホターゼアルファ）の投与を意味する。ｓＡＬＰたとえばアスホターゼアルファは、任意の好適な医薬用の賦形剤、担体、または希釈剤を併用した投与レジメンで投与可能である。ｓＡＬＰは、患者に約６ｍｇ／ｋｇ／週以上の投与レジメンで、たとえば、患者に約６．５ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約７ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約７．５ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約７．８ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約８ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約８．５ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約９ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約１０ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約１０．５ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約１１ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約１１．５ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約１２ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約１２．５ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約１３ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約１３．５ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約１４ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約１４．５ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約１５ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約１６ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約１７ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約１８ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約１９ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約２０ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約２１ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約２２ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約２３ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約２４ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、または約２５ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰで投与可能である。とくに、ｓＡＬＰは、連日や隔日などの投与レジメンで週複数回（たとえば、週２回、週３回、週４回、週５回、週６回、または週７回）投与可能である。
【００３０】
「細胞外ドメイン」とは、天然タンパク質たとえばアルカリホスファターゼの任意の機能性細胞外部分を意味する。とくに、細胞外ドメインは、シグナルペプチドを欠如している。
【００３１】
「Ｆｃ」とは、免疫グロブリン重鎖のＣＨ２ドメインおよびＣＨ３ドメインを含む、免疫グロブリン、たとえば、ＩｇＧ−１、ＩｇＧ−２、ＩｇＧ−３、ＩｇＧ−３、またはＩｇＧ−４の結晶性フラグメント領域を意味する。Ｆｃはまた、Ｆａｂ領域とＦｃ領域とを連結するヒンジ領域の任意の部分をも含みうる。Ｆｃは、ヒトを含む任意の哺乳動物のものが可能であり、かつ（たとえばグリコシル化により）翻訳後修飾が可能である。限定されるものではないが例として、Ｆｃは、配列番号２０で示されるアミノ酸配列を有するヒトＩｇＧ−１の結晶性フラグメント領域でありうる。
【００３２】
「フラグメント」とは、好ましくは、参照の核酸分子またはポリペプチドの全長の少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、またはそれ以上を含有する、ただし、全長未満である、ポリペプチドまたは核酸分子の一部を意味する。たとえば、ポリペプチドフラグメントは、参照ポリペプチドの１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、２００、２１０、２２０、２３０、２４０、２５０、２６０、２７０、２８０、２９０、３００、４００、５００、６００、７００アミノ酸残基、またはそれ以上を含有しうる。例示的なｓＡＬＰフラグメントは、ＡＬＰのアミノ酸残基１８〜４９８、１８〜４９９、１８〜５００、１８〜５０１、１８〜５０２、１８〜５０３、１８〜５０４、１８〜５０５、１８〜５０６、１８〜５０７、１８〜５０８、１８〜５０９、１８〜５１０、１８〜５１１、または１８〜５１２を有し（たとえば配列番号２〜６）、かつ追加のＣ末端部分および／またはＮ末端部分を含みうる。かかるフラグメントの生物学的活性は、当技術分野で公知の標準的アッセイにより、たとえば、ノンコンパートメント解析（ＮＣＡ）でｓＡＬＰフラグメントの薬動学的パラメーターを計算することにより試験可能である。
【００３３】
本明細書で用いられる「低ホスファターゼ症」および「ＨＰＰ」という用語は、たとえば、組織非特異的アルカリホスファターゼ（ＴＮＳＡＬＰ）をコードするＡＬＰＬ（アルカリホスファターゼ、肝臓／骨／腎臓）遺伝子の１つ以上の機能喪失突然変異により引き起こされる、稀な遺伝性骨格障害を意味する。ＨＰＰは、たとえば、乳児ＨＰＰまたは周産期ＨＰＰ（たとえば、良性周産期ＨＰＰもしくは致死性周産期ＨＰＰ）としてさらに特徴付け可能である。たとえば、「乳児ＨＰＰ」とは、年齢約３歳以下のＨＰＰ患者を意味し、これに対して、「周産期ＨＰＰ」とは、出生直前または出生後（たとえば出生後１〜４週間）のＨＰＰ患者を意味する。ＨＰＰの発症年齢、たとえば、被験者がＨＰＰの症状を呈する年齢は、たとえば、周産期発症ＨＰＰおよび乳児期発症ＨＰＰとしてカテゴリー化可能である。ＨＰＰ患者は、限定されるものではないが骨格変形、緊張低下、運動障害、歩行障害、骨変形、関節痛、骨痛、骨折、筋力低下、筋肉痛、くる病（たとえば成長板軟骨欠損）、乳歯早期喪失、不完全骨ミネラル化、ホスホエタノールアミン（ＰＥＡ）、ＰＰｉ、ピリドキサール５’−リン酸（ＰＬＰ）の血中レベルおよび／もしくは尿中レベルの上昇、低ミネラル化、くる病肋骨、高カルシウム尿症、低身長症、ＨＰＰ関連発作、不適正体重増加、頭蓋骨癒合症、ならびに／またはたとえば軟骨石灰化および早期死亡をもたらす関節内ピロリン酸カルシウム二水和物結晶沈着（ＣＰＰＤ）をはじめとするＨＰＰの症状を呈しうる。ＨＰＰの症状はまた、ＴＢＭおよびＴＢＭの症状、たとえば、心肺停止、気管開口、心停止、呼吸窮迫、痰貯留、喘鳴、咳嗽、無酸素発作、チアノーゼ、徐脈、頻脈性不整脈、頸部自然過伸展、長時間呼気相、成長不全、胸骨陥没、胸骨下陥没、肋間陥没、間欠性または持続性の呼吸困難、および反復性の気管支炎または肺炎を含みうる。
【００３４】
「患者」または「被験者」という用語は、限定されるものではないがヒトをはじめとする哺乳動物（たとえば、ＨＰＰを有するヒトたとえば乳児）または非ヒト哺乳動物を意味する。
【００３５】
本明細書で用いられる「非経口投与」、「非経口投与される」、および他の文法上等価な語句は、経腸投与や外用投与以外の通常は注射による投与形態を意味し、限定されるものではないが皮下、真皮内、静脈内、鼻腔内、眼内、経肺、筋肉内、動脈内、髄腔内、嚢内、眼窩内、心臓内、真皮内、肺内、腹腔内、経気管、角質下、関節内、嚢下、クモ膜下、脊髄内、硬膜外、大脳内、頭蓋内、頸動脈内、および胸骨内への注射および注入を含む。
【００３６】
「薬学的に許容可能な賦形剤、担体、または希釈剤」とは、治療患者に生理学的に許容可能である、かつ一緒に投与される活性剤（たとえば、配列番号１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むｓＡＬＰたとえばアスホターゼアルファ）の治療性を変化させない、それぞれ少なくとも１種の賦形剤、担体、または希釈剤を意味する。例示的な薬学的に許容可能な担体物質の１つは、生理食塩水である。たとえば、薬学的に許容可能な担体は、塩化ナトリウム（たとえば１５０ｍＭ塩化ナトリウム）およびリン酸ナトリウム（たとえば２５ｍＭリン酸ナトリウム）を含みうる。他の生理学的に許容可能な賦形剤、担体、および希釈剤ならびにそれらの製剤は、当業者に公知であり、たとえば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ（２２ｎｄ  Ｅｄ），Ａｌｌｅｎ（２０１２）に記載されている。たとえば、薬学的に許容可能な賦形剤、担体、または希釈剤は、７．２〜７．６のｐＨで第二リン酸ナトリウム七水和物、第一リン酸ナトリウム一水和物、および塩化ナトリウムを含みうる。
【００３７】
「医薬組成物」とは、少なくとも１種の薬学的に許容可能な賦形剤、担体、または希釈剤を用いて製剤化された、本明細書に記載の活性剤たとえばｓＡＬＰ（たとえば、配列番号１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むｓＡＬＰたとえばアスホターゼアルファ）を含有する組成物を意味する。医薬組成物は、患者（たとえば、ＨＰＰ乳児、たとえば、周産期発症ＨＰＰ乳児、または乳児期発症ＨＰＰ乳児、または若年発症ＨＰＰ、または小児期発症ＨＰＰ患者）において疾患またはイベント（たとえばＴＢＭ）を治療または予防するために治療レジメンの一部として政府規制機関の承認を得て製造または販売が可能である。医薬組成物は、たとえば、皮下投与、静脈内投与（たとえば、粒状塞栓フリーの無菌溶液としておよび静脈内使用に好適な溶媒系で）、経口投与（たとえば、錠剤、カプセル剤、カプレット剤、ゲルキャップ剤、もしくはシロップ剤）に供すべく製剤化可能であるか、または本明細書に記載の任意の他の製剤、たとえば、ユニット剤形の製剤でありうる。たとえば、ｓＡＬＰ（たとえば、配列番号１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むｓＡＬＰたとえばアスホターゼアルファ）は、約７．２〜７．６のｐＨで第二リン酸ナトリウム七水和物、第一リン酸ナトリウム一水和物、および塩化ナトリウムを含む医薬組成物として製剤化可能である。
【００３８】
本明細書で用いられる「生理活性」という用語は、ホスホエタノールアミン（ＰＥＡ）、無機ピロリン酸（ＰＰｉ）、およびピリドキサール５’−リン酸（ＰＬＰ）を加水分解してＰｉを提供することによりＰＥＡ、ＰＰｉ、およびＰＬＰの細胞外濃度を減少させるｓＡＬＰ（たとえば、配列番号１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むｓＡＬＰたとえばアスホターゼアルファ）を意味する。
【００３９】
「ｓＡＬＰ」、「可溶性アルカリホスファターゼ」、および「アルカリホスファターゼの細胞外ドメイン」という用語は、同義的に用いられ、可溶性非膜結合ＡＬＰまたは可溶性非膜結合ＡＬＰのドメインもしくは生物学的活性フラグメントを意味する。ｓＡＬＰは、たとえば、Ｃ末端グリコ脂質アンカーの欠如したアルカリホスファターゼを含む（ＧＰＩシグナル配列、たとえば、ヒトＴＮＳＡＬＰ（配列番号２、３、４、５、または６）のアミノ酸残基１８〜５０２を含むまたはそれからなるポリペプチド）。とくに、ＴＮＳＡＬＰは、たとえば、配列番号１のアミノ酸残基１〜４８５を含むもしくはそれからなるポリペプチドたとえばアスホターゼアルファまたは配列番号１のアミノ酸残基１〜４８５に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体を含みうる。ｓＡＬＰは、たとえば、ヒトＴＮＳＡＬＰの哺乳動物オルソログ、たとえば、アカゲザルＴＮＳＡＬＰ（配列番号７）、ラットＴＮＳＡＬＰ（配列番号８）、イヌＴＮＳＡＬＰ（配列番号９）、ブタＴＮＳＡＬＰ（配列番号１０）、ネズミＴＮＳＡＬＰ（配列番号１１）、ウシＴＮＳＡＬＰ（配列番号１２〜１４）、またはネコＴＮＳＡＬＰ（配列番号１５）をさらに含む。ｓＡＬＰはまた、ヒトＰＡＬＰの可溶性非膜結合形態（たとえば、配列番号１６または１７のアミノ酸残基１８〜５０２を含むまたはそれからなるポリペプチド）、ＧＣＡＬＰの可溶性非膜結合形態（たとえば、配列番号１８のアミノ酸残基１８〜５０２を含むまたはそれからなるポリペプチド）、およびＩＡＬＰの可溶性非膜結合形態（たとえば、配列番号１９のアミノ酸残基１８〜５０２を含むまたはそれからなるポリペプチド）、ならびにアルカリホスファターゼ活性たとえばＰＰｉ加水分解能を保持する追加のそれらの変異体およびアナログ、たとえば、配列番号７〜１９のいずれか１つに対して少なくとも９０、９５、９７、または９９％の配列同一性を有する変異体を含む。ｓＡＬＰは、とくに、Ｎ末端シグナルペプチド（たとえば、配列番号２〜６、８、１１〜１３、もしくは１５のａａ１〜１７または配列番号７のａａ１〜２５）を欠如している。
【００４０】
「ｓＡＬＰ融合ポリペプチド」とは、構造Ｚ−ｓＡＬＰ−Ｙ−スペーサー−Ｘ−Ｗｎ−Ｖ、Ｚ−Ｗｎ−Ｘ−スペーサー−Ｙ−ｓＡＬＰ−Ｖ、Ｚ−ｓＡＬＰ−Ｙ−Ｗｎ−Ｘ−スペーサー−Ｖ、およびＺ−Ｗｎ−Ｘ−ｓＡＬＰ−Ｙ−スペーサー−Ｖを有するポリペプチドを意味する。とくに、ｓＡＬＰ融合ポリペプチドは、Ｚ−ｓＡＬＰ−Ｙ−スペーサー−Ｘ−Ｗｎ−ＶまたはＺ−Ｗｎ−Ｘ−スペーサー−Ｙ−ｓＡＬＰ−Ｖ、たとえば、ｈＴＮＳＡＬＰ−Ｆｃ−Ｄ１０（たとえば、アスホターゼアルファ、配列番号１）でありうる。Ｘ、Ｙ、Ｚ、Ｖ、スペーサー、および／またはＷｎのいずれか１つは、不在でありうるかまたは少なくとも１アミノ酸のアミノ酸配列でありうる。たとえば、Ｘ、Ｙ、Ｚ、およびＶは、ジペプチド配列（たとえば、ロイシン−リシンまたはアスパラギン酸−イソロイシン）、たとえば、Ｙ位置が２残基リンカー（たとえばロイシン−リシン）およびＸ位置が２残基リンカー（たとえばアスパラギン酸−イソロイシン）でありうる。スペーサーは、たとえば、免疫グロブリンのＦｃ領域、たとえば、配列番号２０のアミノ酸配列を含む。Ｗｎは、本明細書に定義される骨標的化部分、たとえば、一連の連続したアスパラギン酸（Ｄ）残基またはグルタミン酸（Ｅ）残基を有するものでありうる。ただし、ｎ＝１〜５０、たとえば、ｎ＝３〜３０、たとえば、５〜１５、たとえば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３６、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、または５０。
【００４１】
本明細書で用いられる場合、「配列同一性」という用語は、配列をアライメントした後かつ必要であれば最大同一性パーセントが達成されるようにギャップを導入した後における、参照配列のアミノ酸（または核酸）残基、たとえば、アスホターゼアルファのアミノ酸配列（配列番号１）と同一の候補配列たとえばｓＡＬＰのアミノ酸（または核酸）残基のパーセントを意味する（たとえば、ギャップは、最適アライメントになるように候補配列および参照配列の一方または両方に導入可能であり、かつ非相同配列は、比較目的では無視可能である）。同一性パーセントを決定する目的でのアライメントは、当該技術の範囲内の種々の方法により、たとえば、ＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ−２、ＢＬＡＳＴ−Ｐ、ＢＬＡＳＴ−Ｎ、ＢＬＡＳＴ−Ｘ、ＷＵ−ＢＬＡＳＴ−２、ＡＬＩＧＮ、ＡＬＩＧＮ−２、ＣＬＵＳＴＡＬ、またはＭｅｇａｌｉｇｎ（ＤＮＡＳＴＡＲ）ソフトウェアなどの公的に利用可能なコンピューターソフトウェアを用いて、達成可能である。当業者であれば、比較される配列の長さ全体にわたる最大アライメントの達成に必要とされる任意のアルゴリズムを含めて、アライメントの評価に適したパラメーターを決定可能である。たとえば、所与の参照配列（所与の参照配列と対比してある特定のアミノ酸（または核酸）配列同一性パーセントを有するまたは含む所与の候補配列として代替的に表現可能である）と対比して所与の候補配列のアミノ酸（または核酸）配列同一性パーセントは、以下のように計算される。
１００×（Ａ／Ｂの比率）
式中、Ａは、候補配列と参照配列とのアライメントで同一であると評価されたアミノ酸（または核酸）残基の数であり、かつＢは、参照配列のアミノ酸（または核酸）残基の全数である。とくに、候補配列との比較のためにアライメントされる参照配列は、候補配列が候補配列の全長または候補配列の隣接アミノ酸（または核酸）残基の選択された部分にわたりたとえば５０％〜１００％の同一性を呈することを示しうるものである。比較目的でアライメントされる候補配列の長さは、参照配列の長さの少なくとも３０％、たとえば、少なくとも４０％、たとえば、少なくとも５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または１００％である。候補配列中の位置が参照配列中の対応する位置と同一のアミノ酸（または核酸）残基により占有される場合、分子はその位置で同一である。
【００４２】
「シグナルペプチド」とは、ポリペプチドを分泌経路（たとえば細胞外空間）に方向付けるポリペプチドのＮ末端短鎖ペプチド（５〜３０アミノ酸長）を意味する。シグナルペプチドは、典型的にはポリペプチドの分泌時に切断される。シグナル配列は、ポリペプチドを細胞内区画またはオルガネラたとえばゴルジ装置に方向付けうる。シグナル配列は、ポリペプチドを細胞の特定の領域に標的化する既知の機能を有するペプチドとの相同性または生物学的活性により同定しうる。当業者であれば、容易に入手可能なソフトウェア（たとえば、ウィスコンシン大学バイオテクノロジーセンター遺伝学コンピューターグループ（Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  Ｃｏｍｐｕｔｅｒ  Ｇｒｏｕｐ，Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｃｅｎｔｅｒ）（１７１０  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ａｖｅｎｕｅ，Ｍａｄｉｓｏｎ，Ｗｉｓ．５３７０５）のシーケンス解析ソフトウェアパッケージ、ＢＬＡＳＴ、またはＰＩＬＥＵＰ／ＰＲＥＴＴＹＢＯＸプログラム）を用いてシグナルペプチドを同定可能である。シグナルペプチドは、たとえば、配列番号２〜６のアミノ酸残基１〜１７または配列番号７のアミノ酸残基１〜２５と実質的に同一のものでありうる。
【００４３】
本明細書で用いられる「気管気管支軟化症」および「ＴＢＭ」という用語（限定されるものではないが気管支軟化症、喉頭軟骨軟化症、気管軟骨軟化症、喉頭軟化症（ｌａｒａｎｇｏｍａｌａｃｉａ）、喉頭気管気管支軟化症、および気管軟化症を含む）は、気管および気管支の気道壁の軟骨構造の軟化または損傷により特徴付けられる稀な病態を意味する。とくに、ＴＢＭとは、ＨＰＰ患者の周産期や乳児期などに発生する可能性がある病態の先天性形態を意味する。ＴＢＭは、限定されるものではないが心肺停止、気管開口、心停止、呼吸窮迫、痰貯留、喘鳴、咳嗽、無酸素発作、チアノーゼ、徐脈、頻脈性不整脈、頸部自然過伸展、長時間呼気相、成長不全、胸骨陥没、胸骨下陥没、肋間陥没、間欠性または持続性の呼吸困難、および反復性の気管支炎または肺炎をはじめとする症状により特徴付けられる。
【００４４】
本明細書で用いられる「気管切開」という用語は、頸部を介して患者（たとえば、ＴＢＭを有するＨＰＰ患者）の気管に開口を設けるべく実施される外科手順を意味する。通常、気道を提供するためにおよび患者の肺から粘液を除去するために開口を介してチューブが配置される。
【００４５】
「治療有効量」とは、ＨＰＰ患者（たとえば、周産期発症ＨＰＰ乳児などのＨＰＰ乳児）においてＴＢＭの少なくとも１つの症状、たとえば、心肺停止、気管開口、心停止、呼吸窮迫、痰貯留、喘鳴、咳嗽、無酸素発作、チアノーゼ、徐脈、頻脈性不整脈、頸部自然過伸展、長時間呼気相、成長不全、胸骨陥没、胸骨下陥没、肋間陥没、間欠性または持続性の呼吸困難、および反復性の気管支炎または肺炎の実質的な改善、治療、予防、遅延、抑制、または停止を行うのに十分なｓＡＬＰ（たとえば、配列番号１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むｓＡＬＰたとえばアスホターゼアルファ）の量を意味する。本明細書に記載のｓＡＬＰの治療有効量は、ＴＢＭの重症度ならびに患者の病態、体重、および全身状態に依存しうるとともに、かかる因子を考慮して当業者により決定しうる。治療有効量のｓＡＬＰは、ある期間（たとえば、少なくとも１〜６ヶ月間、たとえば、少なくとも１年間、少なくとも２年間、少なくとも３年間、少なくとも４年間、少なくとも５年間、少なくとも６年間、少なくとも７年間、少なくとも８年間、少なくとも９年間、少なくとも１０年間、またはそれ以上）にわたり、本明細書に記載の投与レジメンで、ＴＢＭを有するＨＰＰ患者に投与可能である。
【００４６】
「ｔｒｅａｔｉｎｇ（治療すること）」、「ｔｒｅａｔ（治療する）」、または「ｔｒｅａｔｍｅｎｔ（治療）」とは、たとえば、ｓＡＬＰ（たとえば、配列番号１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むｓＡＬＰたとえばアスホターゼアルファ）を投与することにより、ＴＢＭの治癒、寛解、安定化、可能性減少、または予防を行う目的でＨＰＰ患者（たとえば、乳児期発症および周産期発症のＨＰＰ患者）の医療管理を行うことを意味する。治療は、治療期間にわたり行いうる。この場合、ＴＢＭを有するＨＰＰ患者を治療するために、ある期間（たとえば、何日か、何ヵ月か、何年か、またはそれ以上）にわたりｓＡＬＰが投与される。この用語は、ＨＰＰ患者においてＴＢＭの改善を目指す積極治療、ＨＰＰ患者においてＴＢＭの症状に対処する対症治療、ＨＰＰ患者において、たとえば、まだＴＢＭを有していないがＴＢＭに罹患しやすいまたはＴＢＭを発症するリスクを有するＨＰＰ患者においてＴＢＭの発症を最小限に抑えることを目指す予防療法、およびＨＰＰ患者においてＴＢＭの改善を目指す他の特異療法を補うために利用される支持治療を含む。
【００４７】
本明細書で用いられる「人工呼吸器サポート」という用語は、ＴＢＭを有するＨＰＰ患者（たとえば、乳児期発症および周産期発症のＨＰＰ患者）の人工通気を意味する。この場合、自発呼吸を支援するためにまたは置き換えるために機械的手段とくに人工呼吸器が使用される。たとえば、ＴＢＭの症状を呈するまたはＴＢＭの可能性を有するＨＰＰ患者の人工呼吸器サポートは、ｓＡＬＰ（たとえば、配列番号１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むｓＡＬＰたとえばアスホターゼアルファ）で治療する前に、たとえば、患者に約６ｍｇ／ｋｇ／週以上のｓＡＬＰを提供する投与レジメンでｓＡＬＰを投与する前に必要となりうる。たとえば、ＴＢＭの症状を呈するまたはＴＢＭの可能性を有するＨＰＰ患者の人工呼吸器サポートは、ｓＡＬＰによる治療時に必要とされうるとともに、人工呼吸器サポートは、ＨＰＰ患者の気道の開存の維持に役立ちうる。ＨＰＰ患者は、ｓＡＬＰの投与後、たとえば、少なくとも１年間、少なくとも２年間、少なくとも３年間、少なくとも４年間、少なくとも５年間、少なくとも６年間、少なくとも７年間、少なくとも８年間、少なくとも９年間、少なくとも１０年間、またはそれ以上の治療期間にわたるｓＡＬＰの投与後、人工呼吸器サポートへの依存度の減少を呈しうるか、人工呼吸器サポートを用いることなく気道の開存を維持しうるか、またはもはや人工呼吸器サポートを必要としないこともありうる。
【図面の簡単な説明】
【００４８】
【図１】図１は、アスホターゼアルファ（ＳＴＲＥＮＳＩＱ（登録商標）、Ａｌｅｘｉｏｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．、配列番号１）のアミノ酸配列を示す。
【図２Ａ】図２Ａ〜２Ｄは、出生時（図２Ａ）、１６日間（図２Ｂ）、９ヶ月間（図２Ｃ）、および１２ヶ月間（図２Ｄ）における気管気管支軟化症（ＴＢＭ）を有する低ホスファターゼ症（ＨＰＰ）患者の胸部のラジオグラフ像である。図２Ａ〜２Ｂは、アスホターゼアルファで治療する前のＨＰＰ患者の胸部のラジオグラフ像を示す。図２Ｃは、１．３ｍｇ／ｋｇ（７．８ｍｇ／ｋｇ／週）の用量のアスホターゼアルファで治療した後のＨＰＰ患者の胸部のラジオグラフ像を示す。図２Ｄは、２．５ｍｇ／ｋｇ（７．５ｍｇ／ｋｇ／週）の用量のアスホターゼアルファで治療した後のＨＰＰ患者の胸部のラジオグラフ像を示す。
【図２Ｂ】図２Ａの続きである。
【図２Ｃ】図２Ｂの続きである。
【図２Ｄ】図２Ｃの続きである。
【発明を実施するための形態】
【００４９】
低ホスファターゼ症（ＨＰＰ）患者とくに乳児は、気管気管支軟化症（ＴＢＭ）に起因する呼吸機能障害を呈しうるとともに、生き続けるために補助人工呼吸器サポートおよび気道陽圧を必要とすることが多い。我々は、ＨＰＰ患者（たとえば、ＨＰＰを有するヒト）においてＴＢＭ、その症状、およびそれに伴う呼吸機能低下の治療および／または寛解のためにアスホターゼアルファ（配列番号１、ＳＴＲＥＮＳＩＱ（登録商標）、Ａｌｅｘｉｏｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．）を効果的に使用可能であることを発見した。とくに、アスホターゼアルファは、それを必要とする乳児に約６ｍｇ／ｋｇ／週以上のアスホターゼアルファを提供する投与レジメンで投与したとき、周産期発症ＨＰＰ乳児および／または乳児期発症ＨＰＰ乳児などのＨＰＰ乳児においてＴＢＭおよびその症状の治療に有効である。
【００５０】
必要とするＨＰＰ患者（たとえば、乳児期発症ＨＰＰ患者および周産期発症ＨＰＰ患者）にアスホターゼアルファ（配列番号１）を投与してＴＢＭの改善をもたらす方法が記載されている。たとえば、アスホターゼアルファは、限定されるものではないが心肺停止、気管開口、心停止、呼吸窮迫、痰貯留、喘鳴、咳嗽、無酸素発作、チアノーゼ、徐脈、頻脈性不整脈、頸部自然過伸展、長時間呼気相、成長不全、胸骨陥没、胸骨下陥没、肋間陥没、間欠性または持続性の呼吸困難、および反復性の気管支炎または肺炎をはじめとするＴＢＭの１つ以上の症状を呈するＨＰＰ患者に投与可能である。
【００５１】
ＨＰＰ患者は、たとえば、約１週間、約２週間、約３週間、約１ヶ月間、約２ヵ月間、約３ヵ月間、約４ヵ月間、約５ヵ月間、約６ヶ月間、約７ヶ月間、約８ヶ月間、約９ヶ月間、約１０ヶ月間、約１１ヵ月間、または約１年間の治療期間にわたりアスホターゼアルファを投与した後、ＴＢＭの１つ以上の症状の改善を呈しうる。したがって、アスホターゼアルファの投与により、人工呼吸器サポートへのＨＰＰ患者の依存度を減少可能であるか、または人工呼吸器サポートの必要性を完全に回避可能である。さらに、アスホターゼアルファを用いた治療により、ＴＢＭを有するＨＰＰ患者の生存性を向上可能である。
【００５２】
治療方法はまた、医療手順（たとえば、気管切開または気管支鏡検査）と組み合わせてＨＰＰ患者にアスホターゼアルファを投与することを含みうる。アスホターゼアルファは、医療手順（たとえば、気管切開または気管支鏡検査）の前または後に患者に投与可能である。
【００５３】
アスホターゼアルファを用いた本明細書に記載の結果から判断して、ＨＰＰ患者（たとえば、乳児期発症および周産期発症のＨＰＰ患者）においてＴＢＭまたはその１つ以上の症状を治療するために他のｓＡＬＰ（たとえば、配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体）を使用可能である。
【００５４】
治療方法、アルカリホスファターゼ、および医薬組成物が本明細書に記載されている。
【００５５】
治療方法
本明細書に記載の方法は、ＨＰＰ患者たとえばＨＰＰ乳児（たとえば周産期発症ＨＰＰ患者）においてＴＢＭまたはＴＢＭの１つ以上の症状を治療するために使用可能である。したがって、ｓＡＬＰは、出生時または出生後にＴＢＭの１つ以上の症状を提示するＨＰＰ患者に投与可能である。とくに、ＴＢＭの治療を受けるＨＰＰ患者（たとえば、乳児期発症および周産期発症のＨＰＰ患者）は、以前にｓＡＬＰで治療されていない患者でありうる。
【００５６】
たとえば、ＴＢＭまたはＴＢＭの１つ以上の症状は、たとえば、約１日齢〜約１ヵ月齢、約５日齢〜約６ヵ月齢、約１０日齢〜約８ヵ月齢、約１０日齢〜約１歳、約１ヵ月齢〜約６ヵ月齢、約２週齢〜約４ヵ月齢、約３ヵ月齢〜約９ヵ月齢、約３週齢〜約１０ヵ月齢、約３ヵ月齢〜約１６ヵ月齢、約２ヵ月齢〜約２２ヵ月齢、約７週齢〜約１歳、約５週齢〜約１５ヵ月齢、約５ヵ月齢〜約１７ヵ月齢、約６ヵ月齢〜約１８ヵ月齢、または約２ヵ月齢〜約３歳の年齢範囲にわたるＨＰＰ乳児にｓＡＬＰを投与することにより治療可能である。
【００５７】
ＴＢＭの症状
治療を必要とするＨＰＰ患者は、たとえば、ほぼ同一の年齢および／または性別の健常被験者と対比して、ｓＡＬＰの投与前にＴＢＭの１つ以上の症状を呈しうる。ｓＡＬＰで治療する前にＴＢＭを診断するために使用可能な症状または治療を必要とするＨＰＰ患者の指標となる症状としては、限定されるものではないが心肺停止、気管開口、心停止、呼吸窮迫（たとえば、呼吸困難）、痰貯留（たとえば、気管下気道および気管支の粘液）、喘鳴、咳嗽、無酸素発作、チアノーゼ（たとえば、皮膚および粘膜の異常青色変色）、徐脈（たとえば、低心拍数）、頻脈性不整脈（たとえば、健常被験者の安静時レートを超える心拍数）、頸部自然過伸展、長時間呼気相、成長不全、胸骨陥没（たとえば、胸骨位置の腹部陥凹）、胸骨下陥没（たとえば、胸骨直下の腹部陥凹）、肋間陥没（たとえば、各肋骨間の皮膚陥凹）、間欠性または持続性の呼吸困難（たとえば、困難なまたは努力を要する呼吸）、および反復性の気管支炎または肺炎が挙げられうる。約６ｍｇ／ｋｇ／週以上を提供する投与レジメンなどでｓＡＬＰを投与した後、ＨＰＰ患者は、ＴＢＭの１つ以上の症状の改善を呈しうる。
【００５８】
ｓＡＬＰの投与
治療方法は、患者に約６ｍｇ／ｋｇ／週以上のｓＡＬＰ（たとえば、約７ｍｇ／ｋｇ／週〜約２５ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ）を提供する投与レジメンでＨＰＰ患者（たとえば、乳児期発症および周産期発症のＨＰＰ患者）においてＴＢＭまたはその１つ以上の症状を治療するためにｓＡＬＰを投与することを含む。とくに、ＨＰＰ患者においてＴＢＭを治療する投与レジメンは、たとえば、約６．５ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約７ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約７．５ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約７．８ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約８ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約８．５ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約９ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約１０ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約１０．５ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約１１ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約１１．５ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約１２ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約１２．５ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約１３ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約１３．５ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約１４ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約１４．５ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約１５ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約１６ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約１７ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約１８ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約１９ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約２０ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約２１ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約２２ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約２３ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、約２４ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰ、または約２５ｍｇ／ｋｇ／週のｓＡＬＰを患者に提供可能である。
【００５９】
たとえば、投与レジメンは、約３ｍｇ／ｋｇのｓＡＬＰを週３回、約２．５ｍｇ／ｋｇのｓＡＬＰを週３回、約１．３ｍｇ／ｋｇのｓＡＬＰを週６回、または約５ｍｇ／ｋｇのｓＡＬＰを週３回投与することを含みうる。さらに、ｓＡＬＰは、少なくとも１年間（たとえば、少なくとも２年間、少なくとも３年間、少なくとも４年間、少なくとも５年間、少なくとも６年間、少なくとも７年間、少なくとも８年間、少なくとも９年間、少なくとも１０年間、または１０年間超、たとえば、患者の寿命）の治療期間にわたり、本明細書に記載の投与レジメンのいずれかで、ＨＰＰ患者においてＴＢＭまたはＴＢＭの１つ以上の症状を治療するために投与可能である。
【００６０】
ｓＡＬＰの投与がＴＢＭの１つ以上の症状の改善をもたらさない場合、ＨＰＰ患者（たとえば、乳児期発症および周産期発症のＨＰＰ患者）においてＴＢＭまたはＴＢＭの１つ以上の症状を治療するのに有効なｓＡＬＰ量が同定されるまで、投与レジメンの変更（たとえば、増加または減少）が可能である。たとえば、少なくとも２週間、３週間、１ヶ月間、２ヵ月間、３ヵ月間、４ヵ月間、５ヵ月間、６ヶ月間などの治療期間の後にＨＰＰ患者（たとえば、乳児期発症および周産期発症のＨＰＰ患者）がＴＢＭの１つ以上の症状の改善を呈さない場合、以上で考察したように約６ｍｇ／ｋｇ／週以上を提供するようにｓＡＬＰの投与量を増加可能である。
【００６１】
ｓＡＬＰはまた、第２の活性剤の投与の前、それと同時、またはその後に投与可能である。とくに、治療方法に使用される第２の活性剤としては、限定されるものではないがオピオイド（たとえば、メタドン、コデイン、ヒドロコドン（ｌｙｄｒｏｃｏｄｏｎｅ）、フェンタニル、ヒドロモルフォン、モルフィン、およびオキシコドン）、抗不安薬剤（たとえば、アルプラゾラム、ミダゾラム、クロバザム、クロナゼパム、クロラゼペート、ジアゼパム、デュロキセチン、フルオキセチン、エスシタロプラム、ロラゼパム、ニトラゼパム、テマゼパム、およびニメタゼパム）、抗鬱剤（たとえば、デシプラミン、アミトリプチリン、アゴメラチン、エトペリドン、およびフェネルジン）、抗痙攣剤薬剤（たとえば、炭酸リチウム、クエン酸リチウム、トピラマート、オクスカルバゼピン、およびバルプロ酸）、抗精神病剤（たとえば、アリピプラゾール、クロザピン、リスペリドン、アセナピン（ａｓｅｎａｐｈｉｎｅ）、およびオランザピン）、非ステロイド系抗炎症薬剤（たとえば、アスピリン、イブプロフェン、ケトプロフェン、ケトロラクトロメタミン、およびナプロキセン）、コルチコステロイド（たとえば、プレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、ヒドロコルチゾン、アムシノニド、フルオシノニド、フルニソリド、プレドニカルベート、ベタメタゾン、およびトリアムシノロンアセトニド）、ならびに筋弛緩剤（たとえば、カリソプロドール、シクロベンザプリン、およびジアゼパム）が挙げられる。第２の活性剤の投与は中断可能であるか、またはその投与量は、ＨＰＰ患者がｓＡＬＰの投与後にＴＢＭの１つ以上の症状の改善を呈した後に低減可能である。
【００６２】
追加の医療手順
治療を必要とするＨＰＰ患者は、ＴＢＭを治療するためにｓＡＬＰ（たとえば、配列番号１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むｓＡＬＰたとえばアスホターゼアルファ）の投与前に換気を必要としうる。とくに、ＨＰＰ患者は、補助換気、たとえば、限定されるものではないが高頻度振動、持続気道陽圧（ＣＰＡＰ）換気、呼気終末陽圧（ＰＥＥＰ）換気、バイレベル気道陽圧または二相性気道陽圧（ＢｉＰＡＰ）、および間欠陽圧換気（ＩＰＰＶ）の１つ以上を必要としうる。補助換気は、ｓＡＬＰによる治療時に気道開存性を維持するために必要とされうるとともに、治療時に十分な気道開存性を維持するために強度およびタイプが調整されうる。ＰＥＥＰは、より高いＴＢＭ重症度を呈するＨＰＰ患者において必要とされうる。たとえば、ＴＢＭを有するＨＰＰ患者は、約５ｃｍＨ２Ｏ〜約１５ｃｍＨ２Ｏ、たとえば、５ｃｍＨ２Ｏ、６ｃｍＨ２Ｏ、７ｃｍＨ２Ｏ、８ｃｍＨ２Ｏ、９ｃｍＨ２Ｏ、１０ｃｍＨ２Ｏ、１１ｃｍＨ２Ｏ、１２ｃｍＨ２Ｏ、１３ｃｍＨ２Ｏ、１４ｃｍＨ２Ｏ、または１５ｃｍＨ２ＯのＰＥＥＰ換気を必要としうる。
【００６３】
ＨＰＰ患者において本明細書に記載の投与レジメンでｓＡＬＰを投与してＴＢＭを治療すると、患者は、人工呼吸器サポートへの依存度の減少を呈するようになりうる。たとえば、約１ヶ月間、約２ヵ月間、約３ヵ月間、約４ヵ月間、約５ヵ月間、約６ヶ月間、約７ヶ月間、約８ヶ月間、約９ヶ月間、約１０ヶ月間、またはそれ以上の治療期間にわたり６ｍｇ／ｋｇ／週以上を提供する投与レジメンでアスホターゼアルファを投与すると、サポートの必要性の低減または回避が可能になりうる。たとえば、ｓＡＬＰを投与すると、ＨＰＰ患者により必要とされるＰＥＥＰは、たとえば、約１ｃｍＨ２Ｏ、約２ｃｍＨ２Ｏ、約３ｃｍＨ２Ｏ、約４ｃｍＨ２Ｏ、約５ｃｍＨ２Ｏ、約６ｃｍＨ２Ｏ、約７ｃｍＨ２Ｏ、約８ｃｍＨ２Ｏ、約９ｃｍＨ２Ｏ、約１０ｃｍＨ２Ｏ、またはそれ以上の減少が可能になりうる。そのほか、６ｍｇ／ｋｇ／週以上を提供する投与レジメンでｓＡＬＰを投与した後、それを必要とするＨＰＰ患者は、呼気終末陽圧（ＰＥＥＰ）換気またはバイレベル気道陽圧または二相性気道陽圧（ＢｉＰＡＰ）の代わりに持続気道陽圧（ＣＰＡＰ）換気を受けることが可能になりうるか、またはもはや人工呼吸器サポートをまったく必要としないこともありうる。
【００６４】
ＨＰＰ患者（たとえば、乳児期発症および周産期発症のＨＰＰ患者）は、気管支鏡検査（たとえば、マイクロ喉頭気管支鏡検査および／または軟性気管支鏡検査）を用いてｓＡＬＰの投与前にＴＢＭと診断されうる。たとえば、気管支鏡検査は、１日齢、２日齢、３日齢、４日齢、５日齢、６日齢、１週齢、２週齢、３週齢、１ヶ月齢、２ヵ月齢、３ヵ月齢、４ヵ月齢、５ヵ月齢、６ヶ月齢、７ヶ月齢、８ヶ月齢、９ヶ月齢、１０ヶ月齢、１１ヵ月齢、１歳、またはそれ以上の年齢のＨＰＰ患者に対して実施可能である。とくに、ＨＰＰ患者の気管支鏡検査は、たとえば、軟化気道、気管気管支虚脱、安静時呼吸時動的気管支虚脱、声門下腔狭窄、頸部気管軟化症、喉頭気管気管支軟化症、および／または気管切開孔上部虚脱を示しうる。気管支鏡検査はまた、投与されたｓＡＬＰ量が治療上有効であるか決定するために、約１週間、約２週間、約３週間、約１ヶ月間、約、２ヵ月間、約３ヵ月間、約４ヵ月間、約５ヵ月間、約６ヶ月間、約７ヶ月間、約８ヶ月間、約９ヶ月間、約１０ヶ月間、約１１ヵ月間、約１年間などの治療期間の後の患者に対して実施可能である。
【００６５】
治療方法は、ＨＰＰ患者（たとえば、乳児期発症および周産期発症のＨＰＰ患者）においてＴＢＭまたはＴＢＭの１つ以上の症状を治療するために６ｍｇ／ｋｇ／週以上のｓＡＬＰを提供する投与レジメンでｓＡＬＰを投与することと組み合わせて気管切開を実施することをさらに含みうる。気管切開は、たとえば、約１週齢、約２週齢、約３週齢、約１ヶ月齢、約２ヵ月齢、約３ヵ月齢、約４ヵ月齢、約５ヵ月齢、約６ヶ月齢、約７ヶ月齢、約８ヶ月齢、約９ヶ月齢、約１０ヶ月齢、約１１ヵ月齢、または約１歳のＨＰＰ患者においてＴＢＭを治療するためにｓＡＬＰを投与することと組み合わせて実施可能である。
【００６６】
本方法は、気道への長期換気の提供および／またはＨＰＰ患者の肺からの粘液の除去などのために気管切開を実施する前または実施した後、ＨＰＰ患者にｓＡＬＰを投与することを含みうる。たとえば、治療方法は、少なくとも２週間、３週間、１ヶ月間、２ヵ月間、３ヵ月間、４ヵ月間、５ヵ月間、６ヶ月間などの治療期間にわたりｓＡＬＰを投与した後に患者がＴＢＭの１つ以上の症状の改善を呈さない場合、気管切開の実施後にｓＡＬＰの投与量を増加させることを含みうる。
【００６７】
そのほか、本方法は、ＨＰＰ患者（たとえば、乳児期発症および周産期発症のＨＰＰ患者）においてＴＢＭまたはＴＢＭの１つ以上の症状を治療するために６ｍｇ／ｋｇ／週以上のｓＡＬＰを提供する投与レジメンでｓＡＬＰを投与することと組み合わせて胃瘻造設を実施することを含みうる。胃瘻造設は、約１週齢、約２週齢、約３週齢、約１ヶ月齢、約２ヵ月齢、約３ヵ月齢、約４ヵ月齢、約５ヵ月齢、約６ヶ月齢、約７ヶ月齢、約８ヶ月齢、約９ヶ月齢、約１０ヶ月齢、約１１ヵ月齢、約１歳などのＨＰＰ患者においてＴＢＭを治療するためにｓＡＬＰを投与することと組み合わせて実施可能である。
【００６８】
アルカリホスファターゼ
アスホターゼアルファは、ＨＰＰの治療に供すべく製剤化されたヒト組織非特異的アルカリホスファターゼ（ＴＮＳＡＬＰ、配列番号１）融合ポリペプチドである。とくに、アスホターゼアルファは、ＨＰＰ患者（たとえば、乳児期発症および周産期発症のＨＰＰ患者）において患者に６ｍｇ／ｋｇ／週以上のｓＡＬＰを提供する投与レジメンでＴＢＭおよびそれに伴う症状を治療するために効果的に使用可能である。
【００６９】
治療方法は、特定のアルカリホスファターゼ（ＡＬＰ）の投与にもＡＬＰをコードする核酸配列にも限定されない。アルカリホスファターゼは、リン酸部分の切断（たとえば、ピロリン酸ＰＰｉの加水分解）を触媒する一群の酵素を包含する。４つの既知の哺乳動物アルカリホスファターゼ（ＡＬＰ）アイソザイム、すなわち、組織非特異的アルカリホスファターゼ（ＴＮＳＡＬＰ、以下でさらに説明する）、胎盤アルカリホスファターゼ（ＰＬＡＬＰ、たとえば、受託番号Ｐ０５１８７、ＮＰ＿１１２６０３、およびＮＰ＿００１６２３）、生殖細胞アルカリホスファターゼ（ＧＡＬＰ、たとえば、受託番号Ｐ１０６９６）、ならびに小腸アルカリホスファターゼ（ＩＡＬＰ、たとえば、受託番号Ｐ０９９２３およびＮＰ＿００１６２２）が存在する。これらのアイソザイムはいずれも、本明細書に記載の方法に従ってＴＢＭを治療するために潜在的に使用可能である。
【００７０】
以上で考察した例示的なＡＬＰに加えて、ＨＰＰ乳児などのＨＰＰ患者においてＴＢＭまたはＴＢＭの症状を治療するためにＡＬＰの同一または類似の触媒部位構造および／または酵素活性を有する任意のポリペプチドを使用可能である（たとえば、本明細書に定義されるｓＡＬＰまたはｓＡＬＰ融合ポリペプチドとして）。たとえば、ＨＰＰ患者においてＴＢＭの治療に使用可能なｓＡＬＰ構築物としては、ＰＣＴの国際公開第２００５／１０３２６３号パンフレットおよび国際公開第２００８／１３８１３１号パンフレット（参照により本明細書に組み込まれる）に記載の骨送達コンジュゲートが挙げられる。
【００７１】
本明細書に記載の方法に従って投与可能なＴＮＳＡＬＰとしては、たとえば、ヒトＴＮＳＡＬＰ（受託番号ＮＰ＿０００４６９、ＡＡＩ１０９１０、ＡＡＨ９０８６１、ＡＡＨ６６１１６、ＡＡＨ２１２８９、およびＡＡＩ２６１６６）、アカゲザルＴＮＳＡＬＰ（受託番号ＸＰ＿０１１０９７１７）、ラットＴＮＳＡＬＰ（受託番号ＮＰ＿０３７１９１）、イヌＴＮＳＡＬＰ（受託番号ＡＡＦ６４５１６）、ブタＴＮＳＡＬＰ（受託番号ＡＡＮ６４２７３）、マウス（受託番号ＮＰ＿０３１４５７）、ウシＴＮＳＡＬＰ（受託番号ＮＰ＿７８９８２８、ＮＰ＿７７６４１２、ＡＡＭ８２０９、およびＡＡＣ３３８５８）、ネコＴＮＳＡＬＰ（受託番号ＮＰ＿００１０３６０２８）、ならびに配列番号７〜１９のいずれか１つに対して９０、９５、９７、または９９％の配列同一性を有するそれらの変異体が挙げられる。とくに、ＴＮＳＡＬＰは、ＨＰＰ患者（たとえば、乳児期発症または周産期発症のＨＰＰ患者）においてＴＢＭまたはＴＢＭの１つ以上の症状の治療に使用される組換えヒトＴＮＳＡＬＰ（たとえば、配列番号１、アスホターゼアルファ、米国特許第７，７６３，７１２号明細書および同第７，９６０，５２９号明細書（その全体が参照により本明細書に組み込まれる）を参照されたい）でありうる。ＴＮＳＡＬＰはまた、上記のＴＮＳＡＬＰのポリペプチド配列または核酸配列に対して少なくとも約９５％の配列同一性を呈するものでありうる。
【００７２】
可溶性アルカリホスファターゼ
本明細書に記載の方法に使用可能なＡＬＰは、本明細書に記載のいずれかのＡＬＰの可溶性（たとえば、細胞外または非膜結合）形態を含む。本方法は、特定のｓＡＬＰに限定されるものではなく、ホスホエタノールアミン（ＰＥＡ）、無機ピロリン酸（ＰＰｉ）、ピリドキサール５’−リン酸（ＰＬＰ）などに対して生理活性である任意のｓＡＬＰを含みうる。とくに、ｓＡＬＰは、骨の骨格ミネラル化を改善する触媒能があるものである。本明細書に記載のｓＡＬＰをコードする核酸はまた、ＨＰＰ患者（たとえば、乳児期発症または周産期発症のＨＰＰ患者）においてＴＢＭまたはＴＢＭの１つ以上の症状を治療する方法に使用可能である。
【００７３】
ｓＡＬＰとして生成可能なＡＬＰの例は、ＴＮＳＡＬＰ（たとえばヒトＴＮＳＡＬＰ（ｈＴＮＳＡＬＰ））である。ＴＮＳＡＬＰは、Ｃ末端がグリコ脂質部分によりアンカーされた膜結合タンパク質である（Ｓｗｉｓｓ−Ｐｒｏｔ、Ｐ０５１８６）。このグリコ脂質アンカー（ＧＰＩ）は、翻訳後、一時的膜アンカーとしての役割およびＧＰＩ付加のシグナルとしての役割の両方を担う疎水性Ｃ末端が除去された後に付加される。ＧＰＩアンカーは細胞膜に位置するが、ＴＮＳＡＬＰの残りの部分は細胞外である。
【００７４】
とくに、ＴＮＳＡＬＰは、疎水性Ｃ末端配列の最初のアミノ酸（アラニン）を停止コドンで置き換えるように工学操作することにより、天然のアンカーされた形態のＴＮＳＡＬＰのすべてのアミノ酸残基を含有するかつＧＰＩ膜アンカーを欠如している工学操作ｈＴＮＳＡＬＰを生成するようにしうる。異なるＡＬＰではＧＰＩ膜アンカーの位置が変化し、たとえば、ポリペプチドのＣ末端の最後の１０、１２、１４、１６、１８、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３２、３４、３６、３８、４０、４５、５０アミノ酸残基、またはそれ以上を含みうることは、当業者であれば分かるであろう。組換えｓＴＮＳＡＬＰは、たとえば、アミノ酸１〜５０２（分泌時は１８〜５０２）、アミノ酸１〜５０１（分泌時は１８〜５０１）、アミノ酸１〜５０４（分泌時は１８〜５０４）、アミノ酸１〜５０５（分泌時は１８〜５０５）、またはアミノ酸１〜５０２を含みうる。そのため、天然ＡＬＰのＣ末端は、ＡＬＰ活性に影響を及ぼすことなくある特定のアミノ酸によりトランケート可能である。
【００７５】
Ｃ末端ＧＰＩアンカーに加えて、ＴＮＳＡＬＰはまた、Ｎ末端シグナルペプチド配列も有する。Ｎ末端シグナルペプチドは、合成時に合成タンパク質上に存在するが、ＥＲ内への移行後にＴＮＳＡＬＰから切断される。ｓＡＬＰは、その分泌（すなわち、Ｎ末端シグナルを欠如している）形態および非分泌（すなわち、Ｎ末端シグナルを有している）形態の両方を含む。異なるアルカリホスファターゼではＮ末端シグナルペプチドの位置が変化し、たとえば、ポリペプチドのＮ末端の最初５、８、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２７、３０アミノ酸残基、またはそれ以上を含みうることは、当業者であれば分かるであろう。当業者であれば、たとえば、Ｂｅｎｄｔｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．（Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３４０（４）：７８３−７９５，２００４）および／またはｗｗｗ．ｃｂｓ．ｄｔｕ．ｄｋ／ｓｅｒｖｉｃｅｓ／ＳｉｇｎａｌＰ／に記載されるような適切なコンピューターアルゴリズムにより、シグナル配列切断部位の位置を予測可能である。
【００７６】
ＡＬＰアイソザイム（たとえば、ＴＮＳＡＬＰ、ＰＡＬＰ、ＧＣＡＬＰ、またはＩＡＬＰ）の細胞外ドメインに由来するｓＡＬＰコンセンサス配列もまた、本明細書に記載の方法に従ってＴＢＭを治療のためのｓＡＬＰの生成に使用可能である。そのため、以上で考察したｓＴＮＳＡＬＰと同様に、他の可溶性ヒトＡＬＰアイソザイム、すなわち、ペプチドシグナルを含まないかつ好ましくはＡＬＰの細胞外ドメインを含むものを本方法に使用可能である。ｓＡＬＰはまた、ヒトＡＬＰアイソザイムおよび哺乳動物ＴＮＳＡＬＰオルソログ（ヒト、マウス、ラット、ウシ、ネコ、およびイヌ）のＡＬＰ細胞外ドメインに由来するコンセンサス配列または哺乳動物ＴＮＳＡＬＰオルソログ（ヒト、マウス、ラット、ウシ、ネコ、およびイヌ）のみのＡＬＰ細胞外ドメインに由来するコンセンサスを満足するポリペプチド配列を含む。ｓＡＬＰはまた、これらのＴＮＳＡＬＰオルソログまたはヒトＡＬＰアイソザイムの種々の組合せに由来する類似のコンセンサス配列を満足するものを含む。かかるコンセンサス配列は、たとえば、国際公開第２００８／１３８１３１号パンフレットに記載されている。
【００７７】
本方法のｓＡＬＰは、以上に記載のｓＡＬＰの野生型配列だけでなく、これらのアルカリホスファターゼに対して少なくとも５０％（たとえば、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、またはそれ以上）の配列同一性を有する任意のポリペプチドを含みうる（たとえば、配列番号１〜２４、たとえば、配列番号１のｓＡＬＰ融合ポリペプチドまたは配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、たとえば、アスホターゼアルファ）。ＡＬＰ配列に導入可能な突然変異の例は、米国特許出願公開第２０１３／０３２３２４４号明細書（その全体が本出願をもって参照により組み込まれる）に記載されている。ｓＡＬＰは、任意の適切な１以上のアミノ酸残基で任意選択的にグリコシル化可能である。ｓＡＬＰは、本明細書に記載のｓＡＬＰのいずれかに対して１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、またはそれ以上の付加、欠失、または置換を有しうる（たとえば、ＴＮＳＡＬＰ、たとえば、配列番号１のｓＡＬＰ融合ポリペプチドまたは配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチド変異体、たとえば、アスホターゼアルファ）。
【００７８】
ｓＡＬＰ融合ポリペプチド
本明細書に記載のｓＡＬＰ、リンカー、スペーサー（たとえばＦｃ領域）、および骨標的化部分はいずれも、構造Ｚ−ｓＡＬＰ−Ｙ−スペーサー−Ｘ−Ｗｎ−Ｖ、Ｚ−Ｗｎ−Ｘ−スペーサー−Ｙ−ｓＡＬＰ−Ｖ、Ｚ−ｓＡＬＰ−Ｙ−Ｗｎ−Ｘ−スペーサー−Ｖ、およびＺ−Ｗｎ−Ｘ−ｓＡＬＰ−Ｙ−スペーサー−Ｖを含む融合ポリペプチド中で組合せ可能である。とくに、ｓＡＬＰ融合ポリペプチドの構造は、Ｚ−ｓＡＬＰ−Ｙ−スペーサー−Ｘ−Ｗｎ−ＶまたはＺ−Ｗｎ−Ｘ−スペーサー−Ｙ−ｓＡＬＰ−Ｖでありうる。ｓＡＬＰ融合ポリペプチドのｓＡＬＰは、全長ＡＬＰまたはＡＬＰの機能性フラグメント、たとえば、本明細書に記載のＡＬＰ（たとえば、ＴＮＳＡＬＰ、ＰＡＬＰ、ＧＣＡＬＰ、およびＩＡＬＰ）の可溶性細胞外ドメインでありうる。
【００７９】
Ｘ、Ｙ、Ｚ、およびＶ、ならびに／またはスペーサーはいずれも、不在でありうるかまたは少なくとも１アミノ酸のアミノ酸配列を含むリンカー領域でありうる。たとえば、Ｘ、Ｙ、Ｚ、およびＶは、ジペプチド配列（たとえば、ロイシン−リシンまたはアスパラギン酸−イソロイシン）、たとえば、Ｙ位置が２残基リンカー（たとえばロイシン−リシン）またはＸ位置が２残基リンカー（たとえばアスパラギン酸−イソロイシン）でありうる。たとえば、ｓＡＬＰ融合ポリペプチドは、構造ｈＴＮＳＡＬＰ−Ｆｃ−Ｄ１０を有しうる（たとえば、配列番号１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むｓＡＬＰたとえばアスホターゼアルファ）。
【００８０】
リンカー領域は、ｓＡＬＰが生物学的活性を維持する、たとえば、立体障害を受けない、任意の配列および長さでありうる。例示的なリンカー長は、１〜２００アミノ酸残基、たとえば、１〜５、６〜１０、１１〜１５、１６〜２０、２１〜２５、２６〜３０、３１〜３５、３６〜４０、４１〜４５、４６〜５０、５１〜５５、５６〜６０、６１〜６５、６６〜７０、７１〜７５、７６〜８０、８１〜８５、８６〜９０、９１〜９５、９６〜１００、１０１〜１１０、１１１〜１２０、１２１〜１３０、１３１〜１４０、１４１〜１５０、１５１〜１６０、１６１〜１７０、１７１〜１８０、１８１〜１９０、または１９１〜２００アミノ酸残基である。たとえば、リンカーは、フレキシブル部分、たとえば、有意な固定された二次構造や三次構造をとらない領域を含むかまたはそれからなる。例示的フレキシブルリンカーは、高グリシンリンカー、たとえば、少なくとも５０％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、さらには１００％グリシン残基を含有するリンカーである。リンカーはまた、たとえば、セリン残基を含有しうる。いくつかの場合には、リンカーのアミノ酸配列は、グリシン残基およびセリン残基のみからなる。リンカーは、１以上のアミノ酸残基で任意選択的にグリコシル化されうる。そのほか、本明細書に記載のリンカーは、共有結合または非共有結合された任意の他の配列または部分を含みうる。リンカーはまた不在でありうる。この場合、スペーサー（たとえばＦｃ領域）およびｓＡＬＰは、介在残基を用いることなく直接融合一体化される。
【００８１】
有用なスペーサーとしては、限定されるものではないがＦｃ領域を含むポリペプチドが挙げられる。たとえば、ｓＡＬＰは、Ｎ末端またはＣ末端ドメインに免疫グロブリンのＦｃ領域を含む融合ポリペプチドでありうる。免疫グロブリン分子は、当技術分野で周知の構造を有する。それは、２本の軽鎖（それぞれ約２３ｋＤ）と、鎖間ジスルフィド結合により連結された２本の重鎖（それぞれ約５０〜７０ｋＤ）と、を含む。免疫グロブリンは、タンパク質分解により（たとえば、パパイン切断により）、Ｆａｂ（軽鎖と重鎖のＶＨドメインおよびＣＨ１ドメインとを含有する）フラグメントとＦｃ（隣接配列と一緒に重鎖のＣＨ２ドメインおよびＣＨ３ドメインを含有する）フラグメントとに容易に切断される。本明細書に記載の有用なＦｃフラグメントは、ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、またはＩｇＥ、およびそれらの種々のサブクラス（たとえば、ＩｇＧ−１、ＩｇＧ−２、ＩｇＧ−３、ＩｇＧ−４、ＩｇＡ−１、ＩｇＡ−２）を含めて、任意の哺乳動物（たとえばヒト）に由来する任意の免疫グロブリン分子のＦｃフラグメントを含む。
【００８２】
たとえば、ＦｃフラグメントはヒトＩｇＧ−１である。Ｆｃフラグメントは、たとえば、重鎖のＣＨ２ドメインおよびＣＨ３ドメインならびにヒンジ領域の任意の部分を含みうる。Ｆｃ領域は、当業者に公知の任意の適切な１以上のアミノ酸残基が任意選択的にグリコシル化されうる。とくに、融合ポリペプチドのＦｃフラグメントは、配列番号２０のアミノ酸配列を有するか、または配列番号２０に対して少なくとも５０％（たとえば、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８１％、８２％、８３％、８４％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、またはそれ以上）の配列同一性を有する。工学操作された、たとえば、天然に存在しないＦｃ領域は、本明細書に記載のｓＡＬＰ融合ポリペプチドに取込み可能である。工学操作Ｆｃ領域の例は、たとえば、国際公開第２００５／００７８０９号パンフレット（本出願をもって参照により組み込まれる）に記載されている。本明細書に記載のＦｃフラグメントは、本明細書に記載のＦｃフラグメントのいずれかに対して、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２５、３０、３５、４０、５０、またはそれ以上の付加、欠失、または置換を有しうる。
【００８３】
Ｗｎは、骨標的化部分、たとえば、一連の連続したアスパラギン酸（Ｄ）残基またはグルタミン酸（Ｅ）残基を有するものでありうる。ただし、ｎ＝１〜５０、たとえば、ｎ＝３〜３０、たとえば、５〜１５、たとえば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３６、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、または５０。骨標的化部分は、存在する場合、融合ポリペプチドの任意の位置、たとえば、Ｎ末端もしくはＣ末端またはその近傍ならびに／あるいはリンカー領域に位置しうる。たとえば、骨標的化部分は、ｓＡＬＰ融合ポリペプチドのＣ末端に存在しうる。ｓＡＬＰ融合ポリペプチドはまた、骨標的化部分を欠如しうる。
【００８４】
ｓＡＬＰ融合ポリペプチド（たとえば、配列番号１の配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するｓＡＬＰ変異体たとえばアスホターゼアルファを含む）は、ダイマーまたはテトラマーとして会合可能である。たとえば、２つのｓＡＬＰ−Ｆｃモノマーは、Ｆｃフラグメントのヒンジ領域に位置する２つのジスルフィド結合を介して共有結合可能である。そのほか、ｓＡＬＰ融合ポリペプチドは、グリコシル化またはＰＥＧ化が可能である。
【００８５】
核酸およびポリペプチドの生成
ｓＡＬＰ（たとえば、配列番号１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むｓＡＬＰたとえばアスホターゼアルファ）をコードする核酸は、当技術分野で公知の任意の方法により生成可能である。典型的には、所望のポリペプチドをコードする核酸は、分子クローニング法を用いて生成され、一般的には、プラスミドやウイルスなどのベクター内に配置される。ベクターは、たとえば、融合ポリペプチドの発現に適した宿主細胞内に核酸をトランスフォームするために使用可能である。代表的な方法は、たとえば、Ｍａｎｉａｔｉｓ  ｅｔ  ａｌ．（Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇｓ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，１９８９）に開示されている。
【００８６】
多くの細胞型を適切な宿主細胞として使用可能であるが、適切な翻訳後修飾を付与可能であることから哺乳動物細胞が好ましい。宿主細胞としては、たとえば、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、Ｌ細胞、Ｃ１２７細胞、３Ｔ３細胞、ＢＨＫ細胞、ＣＯＳ−７細胞、または当技術分野で公知の任意の他の好適な宿主細胞が挙げられうる。たとえば、宿主細胞は、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞（たとえばＣＨＯ−ＤＧ４４細胞）である。
【００８７】
ｓＡＬＰは、宿主細胞内でｓＡＬＰポリペプチドの発現を行うのに好適な任意の条件下で生成可能である。かかる条件は、緩衝剤、重炭酸塩、および／またはＨＥＰＥＳ、塩化物イオン、リン酸イオン、カルシウムイオン、ナトリウムイオン、カリウムイオン、マグネシウムイオン、鉄イオンのようなイオン、単糖のような炭素源、アミノ酸、場合により脂質、ヌクレオチド、ビタミン、ならびにインスリンのような成長因子などの成分を用いて調製された培地、２〜４ｍＭ  Ｌ−グルタミンおよび５％ウシ胎仔血清が追加された、α−ＭＥＭ、ＤＭＥＭ、ハムＦ１２、およびＩＭＤＭのような通常の市販の培地、通常の市販の動物性タンパク質フリー培地（すなわち、ＨＹＣＬＯＮＥ（商標）（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）、ＳＦＭ４ＣＨＯ、Ｓｉｇｍａ  ＣＨＯ  ＤＨＦＲ−、２〜４ｍＭ  Ｌ−グルタミンが追加されたＣａｍｂｒｅｘ  ＰＯＷＥＲ（商標）ＣＨＯ  ＣＤなど）の適切な選択を含む。これらの培地は、望ましくは、選択圧を維持して安定なタンパク質産物発現を可能にすべく、チミジン、ヒポキサンチン、およびＬ−グリシンを用いずに調製される。
【００８８】
医薬組成物
本方法に使用可能なｓＡＬＰ（たとえば、配列番号１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むｓＡＬＰたとえばアスホターゼアルファ）を含む組成物は、当技術分野で公知のさまざまな方法により投与可能である。たとえば、アスホターゼアルファ（配列番号１）は、ある範囲内の投与量で、さまざまな製剤で、かつ薬学的に許容可能な賦形剤、担体、または媒体と組み合わせて、投与可能である。とくに、アスホターゼアルファは、皮下投与などに供すべく製剤化された、無菌の、保存剤フリーの、非発熱の、透明、わずかに乳白色、または乳白色の、無色〜微黄色の、小さな半透明または白色の粒子をほとんど含まない、水性溶液である。アスホターゼアルファは、ｐＨ７．２〜７．６で第二リン酸ナトリウム七水和物、第一リン酸ナトリウム一水和物、および塩化ナトリウムと組み合わせてアスホターゼアルファを含有するガラス製単回使用バイアルで供給可能である。
【００８９】
投与量
ｓＡＬＰを含む医薬組成物は、ある範囲内の投与量でＴＢＭまたはＴＢＭの１つ以上の症状を有するＨＰＰ患者（たとえば、乳児期発症および周産期発症のＨＰＰ患者）への投与に供すべく製剤化可能である。投与量は、投与形態および患者の年齢（たとえば３歳以下）をはじめとする多くの因子に依存するであろう。典型的には、単回用量に含有されるｓＡＬＰを含む組成物の量は、有意な毒性を誘発することなく本明細書に記載のＴＢＭまたはＴＢＭの症状を治療するのに有効な量であろう。
【００９０】
たとえば、ｓＡＬＰは、たとえば、０．０１ｍｇ／ｋｇ〜５００ｍｇ／ｋｇ（たとえば、０．０５ｍｇ／ｋｇ〜５００ｍｇ／ｋｇ、０．１ｍｇ／ｋｇ〜２０ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ〜５００ｍｇ／ｋｇ、０．１ｍｇ／ｋｇ〜１００ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ〜１００ｍｇ／ｋｇ、０．１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ／ｋｇ〜２５ｍｇ／ｋｇ、１．０ｍｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ、１．５ｍｇ／ｋｇ〜５ｍｇ／ｋｇ、もしくは２．０ｍｇ／ｋｇ〜３．０ｍｇ／ｋｇ）または１μｇ／ｋｇ〜１，０００μｇ／ｋｇ（たとえば、５μｇ／ｋｇ〜１，０００μｇ／ｋｇ、１μｇ／ｋｇ〜７５０μｇ／ｋｇ、５μｇ／ｋｇ〜７５０μｇ／ｋｇ、１０μｇ／ｋｇ〜７５０μｇ／ｋｇ、１μｇ／ｋｇ〜５００μｇ／ｋｇ、５μｇ／ｋｇ〜５００μｇ／ｋｇ、１０μｇ／ｋｇ〜５００μｇ／ｋｇ、１μｇ／ｋｇ〜１００μｇ／ｋｇ、５μｇ／ｋｇ〜１００μｇ／ｋｇ、１０μｇ／ｋｇ〜１００μｇ／ｋｇ、１μｇ／ｋｇ〜５０μｇ／ｋｇ、５μｇ／ｋｇ〜５０μｇ／ｋｇ、もしくは１０μｇ／ｋｇ〜５０μｇ／ｋｇ）の範囲内の個別用量でＴＢＭまたはＴＢＭの１つ以上の症状を有するＨＰＰ患者への投与に供すべく製剤化可能である。
【００９１】
ｓＡＬＰの例示的な用量としては、限定されるものではないが０．０１、０．０５、０．１、０．５、１、２、２．５、５、１０、２０、２５、５０、１００、１２５、１５０、２００、２５０、もしくは５００ｍｇ／ｋｇ、または１、２、２．５、５、１０、２０、２５、５０、１００、１２５、１５０、２００、２５０、５００、７５０、９００、もしくは１，０００μｇ／ｋｇが挙げられる。ｓＡＬＰを含む組成物の投与量は、単回または複数回の投与レジメンのいずれかで提供可能である。用量は、たとえば、１時間に１回、２時間に１回、１日１回、２日に１回、週２回、週３回、週４回、週５回、週６回、週１回、２週間に１回、月１回、２ヶ月に１回、または年１回投与可能である。代替的に、用量は、たとえば、１日２回、３回、４回、５回、６回、７回、８回、９回、１０回、１１回、または１２回の投与に供すべく製剤化可能である。とくに、投与レジメンは週１回である。投与レジメンの継続期間は、たとえば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０日間、週間、またはヵ月間、さらにはＴＢＭまたはＴＢＭの１つ以上の症状を有するＨＰＰ患者（たとえば、乳児期発症または周産期発症のＨＰＰ患者）の残りの寿命でありうる。
【００９２】
ｓＡＬＰは、透明な無色〜微黄色の水性溶液ｐＨ７．４である注射用溶液として製剤化可能である。ｓＡＬＰは、１２ｍｇ／０．３ｍＬ、１８ｍｇ／０．４５ｍＬ、２８ｍｇ／０．７ｍＬ、４０ｍｇ／１ｍｌ、または８０ｍｇ／０．８ｍＬの濃度で製剤化しうる。たとえば、組成物は、４０ｍｇ／ｍｌ注射用溶液として製剤化可能であり、この場合、各１ｍｌの溶液は４０ｍｇのｓＡＬＰを含有する（たとえば、各バイアルは０．３ｍｌの溶液と１２ｍｇのｓＡＬＰとを含有するか（４０ｍｇ／ｍｌ）、各バイアルは０．４５ｍｌの溶液と１８ｍｇのｓＡＬＰとを含有するか（４０ｍｇ／ｍｌ）、各バイアルは０．７ｍｌの溶液と２８ｍｇのｓＡＬＰとを含有するか（４０ｍｇ／ｍｌ）、または各バイアルは１．０ｍｌの溶液と４０ｍｇのアスホターゼアルファとを含有する（４０ｍｇ／ｍｌ））。そのほか、ｓＡＬＰは、１００ｍｇ／ｍｌの濃度の注射用溶液として製剤化可能であり、この場合、各１ｍｌの溶液は１００ｍｇのｓＡＬＰを含有する（たとえば、各バイアルは０．８ｍｌの溶液と８０ｍｇのアスホターゼアルファとを含有する（１００ｍｇ／ｍｌ））。
【００９３】
たとえば、ｓＡＬＰの投与量は、週３回の皮下投与で２ｍｇ／ｋｇ体重または週６回の皮下投与で１ｍｇ／ｋｇ体重でありうる。追加の投与情報は以下に提供される（表１）。
【００９４】
【表１】
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【００９５】
製剤
ｓＡＬＰ（たとえば、配列番号１のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むｓＡＬＰたとえばアスホターゼアルファ）を含む組成物は、さまざまな形態でありうる。これらの形態としては、たとえば、液体製剤、半固体製剤、および固体製剤、たとえば、液体溶液剤（たとえば、注射用および注入用の溶液剤）、ディスパージョン剤またはサスペンジョン剤、錠剤、丸剤、粉末剤、リポソーム剤、および坐剤が挙げられる。たとえば、全身送達または局所送達が意図される組成物は、注射用または注入用の溶液剤の形態でありうる。したがって、ｓＡＬＰ組成物は、非経口形態（たとえば、皮下、静脈内、腹腔内、または筋肉内の注射）による投与に供すべく製剤化可能である。
【００９６】
ｓＡＬＰ組成物は、溶液剤、マイクロエマルジョン剤、ディスパージョン剤、リポソーム剤、または高濃度での安定貯蔵に好適な他の秩序構造剤として製剤化可能である。無菌注射用溶液剤は、必要に応じて、以上に列挙した成分の１つまたは組合せと共に、必要量の本明細書に記載の組成物を適切な溶媒中に組み込んでから濾過滅菌を行うことにより調製可能である。一般に、ディスパージョン剤は、ベース分散媒と以上に列挙されたものから選ばれる所要の他の成分とを含有する無菌媒体中に本明細書に記載の組成物を組み込むことにより調製される。無菌注射用溶液剤を調製するための滅菌粉末剤の場合には、調製方法は、本明細書に記載の組成物と任意の追加の所望の成分（以下を参照されたい）とからなる粉末を事前に無菌濾過されたその溶液から生成する真空乾燥および凍結乾燥を含む。溶液剤の適正な流動性は、たとえば、レシチンなどのコーティング剤を用いることにより、ディスパージョン剤の場合には所要の粒子サイズを維持することにより、および界面活性剤を用いることにより、維持可能である。吸収を遅らせる試薬、たとえば、モノステアリン酸塩およびゼラチンを組成物中に組み込むことにより、注射用組成物を長期間にわたり吸収させるようにすることが可能である。
【００９７】
ｓＡＬＰを含有する調製物は、薬学的に許容可能な賦形剤、担体、または希釈剤と組み合わせて、ＴＢＭまたはＴＢＭの１つ以上の症状を有するＨＰＰ患者（たとえば、周産期発症ＨＰＰ乳児などのＨＰＰ乳児）に提供可能である。非水性の賦形剤、担体、または希釈剤の例は、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、植物油、魚油、および注射可能な有機エステルである。水性の賦形剤、担体、または希釈剤としては、水溶液、水−アルコール溶液、エマルジョン、またはサスペンジョン、たとえば、生理食塩水および緩衝化医療用非経口媒体、たとえば、塩化ナトリウム溶液、リンゲルデキストロース溶液、デキストロース＋塩化ナトリウム溶液、ラクトース含有リンゲル液、または固定油が挙げられる。
【００９８】
薬学的に許容可能な塩、たとえば、塩酸塩、臭化水素酸塩、リン酸塩、硫酸塩などの鉱酸塩、および有機酸塩（たとえば、酢酸塩、プロピオン酸塩、マロン酸塩、および安息香酸塩）もまた、ｓＡＬＰ組成物に含まれうる。たとえば、薬学的に許容可能な担体は、塩化ナトリウムおよび／またはリン酸ナトリウムを含みうる。この場合、組成物は、たとえば、約１５０ｍＭ塩化ナトリウムおよび／または約２５ｍＭリン酸ナトリウム、ｐＨ７．４を含む。
【００９９】
ｓＡＬＰを含む組成物はまた、迅速放出からｓＡＬＰ組成物を保護する薬学的に許容可能な賦形剤、担体、または希釈剤、たとえば、植込み剤およびマイクロカプセル化送達系をはじめとする制御放出製剤を用いて製剤化可能である。生分解性生体適合性ポリマー、たとえば、エチレンビニルアセテート、ポリアンヒドリド、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオルトエステル、およびポリ乳酸を使用可能である。かかる製剤を調製するための多くの方法が当技術分野で公知である。たとえば、Ｊ．Ｒ．Ｒｏｂｉｎｓｏｎ（１９７８）Ｓｕｓｔａｉｎｅｄ  ａｎｄ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋを参照されたい。
【０１００】
以下の実施例は、本開示を限定するものではなく例示することを意図したものである。これらの試験は、ＨＰＰ患者において気管気管支軟化症（ＴＢＭ）およびその症状を治療するために、たとえば６ｍｇ／ｋｇ／週以上の投与レジメンで、アスホターゼアルファ（配列番号１）を投与することを特徴とする、
【実施例】
【０１０１】
実施例１．気管気管支軟化症（ＴＢＭ）症例の概要
臨床試験の一部としておよびコンパッショネートユースプログラム下で低ホスファターゼ症（ＨＰＰ）乳児３名においてアスホターゼアルファによる気管気管支軟化症（ＴＢＭ）の治療を開始した。ＴＢＭを有するＨＰＰ患者４名（女性２名および男性２名）を同定し、可溶性アルカリホスファターゼ（ｓＡＬＰ）組成物（ＳＴＲＥＮＳＩＱ（商標）（アスホターゼアルファ）、図１に示される配列番号１）により治療した。臨床試験の主要な選択基準は、６ヵ月齢未満でＨＰＰ症状を発症し、アルカリホスファターゼ（ＡＬＰ）レベルが低く、ピリドキサール５’−リン酸（ＰＬＰ）レベルが高く、かつラジオグラフィーでＨＰＰが確認された５歳以下の患者を含むものであった
【０１０２】
臨床試験の追加の選択基準は、次の基準、すなわち、出生後非外傷性骨折または遷延性骨折治癒、腎石灰化症または血清中高カルシウム病歴、機能性頭蓋骨癒合症、呼吸機能障害またはくる病性胸部変形、ピリドキシン（ビタミンＢ６）反応性発作、および成長不全の２つ以上を含むものであった。主要な除外基準は、正常範囲未満の血清中カルシウムまたはリン酸レベル、２０ｎｇ／ｍＬ未満の血清中２５−ヒドロキシビタミンＤレベル、およびビスホスホン酸による前治療を含むものであった。各患者のＨＰＰ診断は、理学的検査および骨格検査を加えて血清バイオ化学分析（たとえばＡＬＰレベル）により確認した。ＡＬＰＬ遺伝子の突然変異は、本明細書に記載の４名の患者全員に見いだされた。
【０１０３】
これらの４名の患者においてＨＰＰに関連する初期の医療上の問題は、呼吸サポートを必要とする呼吸窮迫を含むことであった。ＴＢＭは、２〜５ヵ月齢で直接的な咽頭気管気管支鏡検査または軟性気管支鏡検査により同定した。呼吸サポートの必要性は、挿管または気管切開を介する機械的換気および持続気道陽圧（ＣＰＡＰ）換気または間欠陽圧（ＩＰＰ）換気により定義した。呼気終末陽圧（ＰＥＥＰ）の必要性にも留意した。ピーク吸気圧（ＰＩＰ）も測定した。
【０１０４】
患者はすべて、６ｍｇ／ｋｇ／週〜１５ｍｇ／ｋｇ／週の投与量で２ヵ月齢以下でアスホターゼアルファにより治療した。出生時、４名の患者はすべて、換気を必要とし、続いてＰＥＥＰで長期換気を行うために気管切開を受けた。患者はすべて、高度脱飽和および徐脈の頻繁なエピソードに遭遇し、３名の患者は心肺停止に遭遇した。患者が１５〜２４ヶ月齢の時、ＴＢＭは、２名の患者で消散し（人工呼吸器サポートなし）、１名の患者で部分的に消散し（２７ヵ月齢、人工呼吸器サポート）、１名の患者で有意に残った（２３ヵ月齢、ｉｎ  ｓｉｔｕ気管切開）。アスホターゼアルファ治療を行わなければ、これらの乳児は、おそらく１歳まで生き残っていなかったであろう。また、それらの気道が成熟する可能性はほとんどなかったであろう。治療した４名の患者のうち、２名の患者は、ＴＢＭの完全消散に遭遇し、１名の患者は、出生後２年間以内にＴＢＭの部分消散に遭遇した。アスホターゼアルファによる治療を特徴とするこれらの試験に基づいて治療および患者のアウトカムの概要を表２に示す。
【０１０５】
【表２】
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【０１０６】
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【０１０７】
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【０１０８】
実施例２．ＴＢＭ患者１
患者１は、非血縁の親から生まれた満期出産の乳児であった（出生時体重２，８９０ｇ）。出生直後、患者は、哺乳不良、著しい緊張低下、および呼吸窮迫を呈した。出生前スキャンにより長骨の短縮が示された。呼吸窮迫のため、出生後初日にＣＰＡＰ換気を必要とした。母親がＢ群連鎖球菌陽性であったので、静脈内（ＩＶ）抗生物質（アンピシリンおよびゲンタマイシン）を５日間投与した。９日齢の患者の骨格検査により、重篤なくる病を伴うＨＰＰの骨格発現ならびに末端に骨棘を伴う上肢および下肢の長骨短縮が明らかにされた。患者の頭蓋骨ならびに患者の手および足の短骨には、骨化中心が不在であった。また、出生後のバイオ化学特性によりＨＰＰが示唆され、血清中カルシウムは、２．２５〜２．７４ｍｍｏｌ／Ｌの参照範囲に対して３．０４ｍｍｏｌ／Ｌに上昇し、血清アルカリホスファターゼ（ＡＬＰ）活性は、検出できないほど低かった。
【０１０９】
患者１を三次病院に移し、４週齢でＥＮＢ−０１０−１０臨床試験に登録した。ＨＰＰの診断に合致して、ピリドキサール５’−リン酸（ＰＬＰ）および無機ピロリン酸（ＰＰｉ）のレベルは、治療前、高かった。ＰＬＰ濃度は、１１．８ｎｇ／ｍＬ〜６８．３ｎｇ／ｍＬの参照範囲と比較して４，７４０ｎｇ／ｍＬであり、ＰＰｉ濃度は、１．３３μＭ〜５．７μＭの参照範囲と比較して９．４７μＭであった。
【０１１０】
２ｍｇ／ｋｇ（６ｍｇ／ｋｇ／週）の用量のアスホターゼアルファによる患者１の治療は、生後１ヶ月１日に開始した。全身麻酔下で患者にチューブを挿入し、人工呼吸を施し、静脈アクセスのために中心静脈カテーテルを挿入した。呼吸機能が徐々に悪化したので、患者は人工呼吸器を離脱できなかった。継続して脱飽和エピソードを有していたので、ＰＥＥＰを５ｃｍＨ２Ｏから８ｃｍＨ２Ｏに増加させる必要があった。
【０１１１】
２ヵ月齢（アスホターゼアルファの開始１ヶ月後）で実施した直接咽頭気管気管支鏡検査（ＤＬＴＢ）により、重篤な喉頭気管気管支軟化症が明らかにされたことから、気道の開存性を維持するために１２ｃｍＨ２ＯのＰＥＥＰを必要とした。次いで、アスホターゼアルファの用量を３ｍｇ／ｋｇ／回（９ｍｇ／ｋｇ／週）に増加させた。患者の呼吸機能が徐々に改善されたので、人工呼吸器の圧力を６ｃｍＨ２ＯのＰＥＥＰに低減した。９ヶ月齢（アスホターゼアルファの開始８ヶ月後）で実施した軟性ＤＬＴＢにより、喉頭、気管、および左主気管支の正常開存性が示されたが、左気管支軟化症が残存することから、気道の開存性を維持するために６ｃｍＨ２ＯのＰＥＥＰを必要とした。
【０１１２】
１２ヶ月齢で麻酔下にＤＬＴＢを繰り返したところ、軽度の左気管支軟化症を伴って喉頭気管気管支軟化症の消散が明らかにされた。患者は、ＰＥＥＰをＣＰＡＰに変更した。呼吸機能は徐々に改善され、１５ヶ月齢までに喉頭気管気管支軟化症が臨床的に完全に消散し、室内空気で自己換気するようになった。遺伝子解析により患者がＡＬＰＬ遺伝子の常染色体劣性突然変異に対して陽性であることが明らかにされるとともに、それは片親性ダイソミーに続発することが見いだされた（Ｈａｎｃａｒｏｖａ  ｅｔ  ａｌ．Ｂｏｎｅ  ８１：７６５−６，２０１５（その全体が本出願をもって参照により組み込まれる）を参照されたい）。患者１の主要イベントのタイムラインを表３に示す。
【０１１３】
【表３】
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【０１１４】
実施例３．ＴＢＭ患者２
患者２は、非血縁の親から妊娠３７週５日で自然経腟分娩により生まれた男性乳児であり（出生時体重３，４６０ｇ）、アプガースコアは、１分および５分で２ならびに１０分で５であった。患者にチューブを挿入し、人工呼吸器を配置した。１日齢のラジオグラフにより、患者は頭蓋骨の骨化が顕著に減少し頭蓋石灰化がほぼ完全に失われていることが明らかにされた。また、椎体の骨化および高さが減少し、上腕骨、橈骨、および尺骨の骨幹端の骨化が見られず、骨幹端の顕著な不規則性、断片化、およびフレイングが見られた。患者の胸部は小さく、患者の骨は異常であり、内側肋骨の骨化が見られず肋骨の外観がか細かった（図２Ａ）。ＰＬＰ（ビタミンＢ６）レベルは、＞２０００ｎｇ／ｍＬであった。患者の気道のＨＰＰ症状もまた、胸部ラジオグラフにより１６日齢で明らかになった（図２Ｂ）。２７日齢で患者を三次ケア小児病院に移し、臨床試験に登録した。ＡＬＰは１４Ｕ／Ｌであった。８ｃｍＨ２ＯのＰＥＥＰを必要とした。
【０１１５】
アスホターゼアルファによる治療は、５週齢で１ｍｇ／ｋｇの用量で週６回で開始し、その間、患者は８ｃｍＨ２ＯのＰＥＥＰを必要とした。６週齢で気管切開を実施した。患者は、初期に４０ｂｐｍに維持されたレートで絶えず人工呼吸器サポートを必要とした。有意な胸部コンプライアンスを有し、１２ｃｍＨ２Ｏまでの高いＰＥＥＰを維持した。
【０１１６】
４ヶ月齢で胃瘻造設を実施した。持続人工呼吸器サポートの必要性ならびに呼吸停止および心停止のイベントを生じたため、５ヶ月齢でマイクロ喉頭気管支鏡検査（ＭＬＢ）および軟性気管支鏡検査を実施した。ＭＬＢにより、正常な声門上、ＩＩ型喉頭裂、正常な外観の声門、およびＩＩＩ型声門下狭窄が示された。軟性気管支鏡検査により、正常な気管支分岐パターン、顕著な声門下腔狭窄、重篤な頸部気管軟化症、軽度の気管切開孔上部虚脱、および安静呼吸時の軽度の動的気管支虚脱が示されたことから、動揺時または激しい呼吸時にはより重篤になると予測された。患者は、４および６ヶ月齢で心停止に遭遇した。
【０１１７】
６ヶ月齢でアスホターゼアルファの投与用量を１．３ｍｇ／ｋｇ（７．８ｍｇ／ｋｇ／週）に増加させた。次いで、９ヶ月齢でアスホターゼアルファの用量を２．５ｍｇ／ｋｇ（７．５ｍｇ／ｋｇ／週）に変化させた。アスホターゼアルファによる治療後、９ヶ月齢および１２ヶ月齢で患者の胸部ラジオグラフにＨＰＰの改善が見られた（図２Ｃ〜２Ｄ）。１０ヶ月齢で安静呼吸時に軽度の動的虚脱を伴って患者のＴＢＭが改善された。気管支鏡検査により、１２ヶ月齢で軽度のＴＢＭを伴って有意な改善が示された。心肺停止エピソードは消散し、ロラゼパムは離脱可能であり、その後、中断可能であった。１３ヶ月齢で三次ケアセンターへの移行を行い、続いて、患者は退院して帰宅した。患者は人工呼吸器に依存したままであり、ウイルス感染および再入院を伴う呼吸上の問題に遭遇した。
【０１１８】
１７ヶ月齢で下気道は正常な外観を呈し、安静呼吸時に認知可能な動的虚脱はなかったが、患者の咳嗽時または努責時にのみＴＢＭが現れた。
【０１１９】
ＡＬＰＬ遺伝子の遺伝子解析により、患者は次の突然変異：ｃ．６６８Ｇ＞Ａおよびｃ．１１７１Ｃ＞Ｔの複合ヘテロ接合体であることが明らかされた。主要イベントのタイムラインを表４に示す。
【０１２０】
【表４】
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【０１２１】
実施例４．ＴＢＭ患者３
患者３は、非血縁の親から生まれた女性乳児であった。出生時の体重は３．０６ｋｇ、身長は４５ｃｍ、かつ頭囲は３２ｃｍであった。自然破水後に計画的反復帝王切開により生まれた。胎児超音波が異常であったことから、骨格異形成症、ＨＰＰまたは骨形成不全症のいずれかが疑われた。胎児心エコー図は正常であった。アプガースコアは、１分で６、５分で７、および１０分で８であった。
【０１２２】
患者は、初期に最初の５分間の陽圧換気（バッグ）を必要とし、その後、それに続く５分間は間欠的に必要とした。チューブを挿入し、人工呼吸器に配置した。初期検査により、非常に大きな大泉門、頭蓋成形、肋骨下陥没を伴う小さな胸部、および湾曲を有する短い四肢変形（内反尖足）が示された。足は角張ってばち状であり、膝下に陥凹を有する。診断および管理のために三次ケア小児病院に移した。ラジオグラフにより、重度のミネラル化減少、瀰漫性骨減少症、骨化不良肋骨、骨折および無気肺に合致する右近位上腕骨の不規則性、ならびに両側上腕骨骨折が明らかにされた。１日齢での腎臓超音波は正常であったが、１ヶ月齢では両腎臓に腎石灰化症に合致する皮質エコー輝度の中心領域が存在した。８日齢でイオン化カルシウムは１．３１ｍｍｏｌ／Ｌであり、リンは６．８ｍｍｏｌ／Ｌであった。人工呼吸器の設定は、６ｃｍＨ２ＯのＰＥＥＰおよび２０ｂｐｍの呼吸数を有していた。患者を試験センタープライマリーケア病院に移した。ＡＬＰレベルは、５週齢で１８Ｕ／Ｌであった。補助換気を必要とし、動揺に対処するために６時間ごとにロラゼパム（０．０５ｍｇ／ｋｇ）で治療した。
【０１２３】
７週齢で患者に気管切開を施した。気管支鏡検査も行ったところ、チューブを挿入して陽圧を施したとしても、咳嗽時または激しい呼吸時に気管および気管支の重度の動的虚脱を生じることが明らかにされた。非常に弱い間欠吸引を行ったところ、外向きの弾性胸壁反動の欠如が最大の原因と考えられる気管後壁の中等度の虚脱を生じた。ＰＥＥＰを６ｃｍＨ２Ｏに維持した。患者は、８週齢で非侵襲的部分的二酸化炭素再呼吸システム（ＮＩＣＯ）を用いたが、過剰の胸部コンプライアンス、弾性反動の欠如、および重篤な気道軟化が原因で結果不良であった。ＰＥＥＰを１０ｃｍＨ２Ｏに増加させることが推奨された。
【０１２４】
１ｍｇ／ｋｇ（６ｍｇ／ｋｇ／週）のアスホターゼアルファを投与するために、生後７週４日で患者を臨床試験に登録した。２ヵ月齢で心拍数の低下および酸素脱飽和を伴って呼吸停止を起こしたため、胸部圧迫による回復を必要とした。患者は、２．５ヶ月齢でマイクロ喉頭鏡検査、気管支鏡検査、および軟性気管鏡検査を受けた。有意な知見は、ラテラルシェルフ、動的虚脱、および中等度〜重度の気管軟化を伴う声門下狭窄であった。
【０１２５】
３ヵ月齢で患者に胃瘻造設を施した。また、陽圧換気（バッグ）の増加を必要とする重篤な酸素脱飽和を伴う呼吸エピソードを有することが注目された。１つのエピソードは、胸部圧迫を必要とする心拍数の低下を伴った。呼吸不全が存続したので、ＣＯ２レベルを高い状態に維持した。鎮静および疼痛の問題に対処するためにメタドンによる治療を開始した。
【０１２６】
主要な介入を必要とする重篤な呼吸停止がほとんど毎週起こった。４ヵ月齢でメタドンと共にロラゼパムによる治療を開始した。５ヵ月齢で気管支鏡検査を行ったところ、咳嗽または激しい呼吸と共に気道管腔の完全な消失を伴う重度の気管支軟化症が示された。６ヶ月齢でメタドンから離脱した。また、動揺に対処するために必要に応じて患者にミダゾラムを投与した。
【０１２７】
重篤な心肺エピソードの頻度は減少した。１２ヶ月齢で軟性気管支鏡検査を行ったところ、前の評価（６ヶ月）から改善されたように思われるが依然として有意である中等度の気管気管支軟化症が明らかにされた。重篤な心肺エピソードは１２ヶ月齢で消散した。１５ヶ月齢で患者をプライマリーケア病院に移し、続いて、退院して在宅ケアを行うことが可能であった。
【０１２８】
軟性気管支鏡検査により１８ヶ月齢で有意なＴＢＭが明らかにされた。長いカスタム気管切開チューブが非常に良好に遠位気管に位置決めされていたので、気管軟化症の重症度の評価は困難であった。
【０１２９】
ＡＬＰＬ遺伝子の遺伝子解析により、患者は次の突然変異：ｃ．８７６＿８７２ｄｅｌＡＧＧＧＧＡＣｉｎｓＴおよびｃ．６５０Ｔ＞Ｃ（ｐ．Ｖ２１７Ａ）を含む複合ヘテロ接合体であることが明らかにされた。患者３の主要イベントのタイムラインを表５に示す。
【０１３０】
【表５】
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【０１３１】
実施例５．ＴＢＭ患者４
患者４は、血縁の親から前期破水後に正常経腟分娩により生まれた３４週早産女性乳児であった（出生時体重は１．６９ｋｇであった）。出生直後、顕著な胸部陥没を有して弱々しかった。患者は、ただちに挿管および換気を行って呼吸をサポートする必要があった。呼吸窮迫症候群が疑われたので、サーファクタント療法を施した。人工呼吸器の必要性が低いにもかかわらず、継続して有意な呼吸窮迫を示したので、換気を継続した。
【０１３２】
患者は、短肢、頭蓋癆、および有意な緊張低下を伴う異形症の特徴を有することが分かった。検出できないほど低いＡＬＰ活性レベルを有する高カルシウム血症を有していたので、三次代謝性骨疾患チームと議論した。骨格検査によりＨＰＰに特有の特徴が明らかにされた。コンパッショネートユースプログラム下でアスホターゼアルファを用いたさらなる管理を行うために三次新生児室に移した。バイオ化学の結果は、血清中カルシウムレベルの低下を伴ってアスホターゼアルファの開始７日以内に改善した。引き続き徐脈および脱飽和の顕著なエピソードを生じて人工呼吸器の必要性が増加したため、ピーク吸気圧（ＰＩＰ）を３０ｃｍＨ２ＯにかつＰＥＥＰを６ｃｍＨ２Ｏにするように人工呼吸器の設定値を増加させる必要があった。適正な換気にもかかわらず、引き続き脱飽和および徐脈のエピソードを生じ、結果的に、生後２ヶ月９日で重度の脱飽和、徐脈を伴って急性悪化したため、胸部圧迫および心停止用変力剤が必要となった。続いて、患者は、高頻度振動換気、一酸化窒素、１００％酸素要求、および心機能サポート用変力剤を必要とした。急性エピソードに耐えられないかもしれないという心配があったため、心肺蘇生の中止について親と議論した。
【０１３３】
臨床研究チームと議論した後、生後３ヶ月１３日でアスホターゼアルファの用量を週３回５ｍｇ／ｋｇ（１５ｍｇ／ｋｇ／週）に増加させた。１５ｍｇ／ｋｇ／週のアスホターゼアルファによる治療の２週間以内に改善が見られ、従来の換気を施すことが可能になった。しかしながら、引き続き徐脈および脱飽和のエピソードを生じたため、ＥＮＴおよび呼吸チームにより徹底的な再検討を計画した。５ヶ月齢で実施したＤＬＴＢにより、有意な喉頭気管気管支軟化症が実証されたため、気道の開存性を維持するために１２ｃｍＨ２ＯのＰＥＥＰを必要とした。ＰＥＥＰの増加に伴って８ヶ月齢までに呼吸機能が有意に改善されたため、ＰＥＥＰを９ｃｍＨ２Ｏに低下させた。
【０１３４】
１１ヶ月齢で第２のＤＬＴＢを実施したところ、４ｃｍＨ２Ｏに低減された開放圧を有して喉頭気管気管支軟化症の完全な消散が示された。次いで、人工呼吸器の圧力を１０ｃｍＨ２ＯのＰＩＰおよび５ｃｍＨ２ＯのＰＥＥＰに離脱した。１２ヶ月齢までに水４〜５ｃｍのＰＥＥＰを用いて間欠ＣＰＡＰ換気を導入した。１６ヶ月齢までに１日のうち１２時間は室内空気で自己換気していた。２３ヶ月齢で退院帰宅してＣＰＡＰを週１晩行った。２歳で換気を完全に中断した。
【０１３５】
遺伝子解析によりＡＬＰＬ遺伝子にＣ．１３３６Ｇ７Ａ（ＰＡ４４６Ｔ）のホモ接合の突然変異が示され、両親とも突然変異の保有者であった。主要イベントのタイムラインを表６に示す。
【０１３６】
【表６】
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【０１３７】
実施例６．アスホターゼアルファにより治療された乳児および小児における呼吸機能の改善の持続
周産期発症ＨＰＰ患者または乳児期発症ＨＰＰ患者の大きなコホートにおいて約１６８週間にわたる治療によりアスホターゼアルファの有効性および安全性を評価するために、オープンラベル多国間試験を行った。参加者には、６ヶ月齢前にＨＰＰの最初の徴候および症状を示した５歳以下の５９名の患者（２７名の男性患者および３２名の女性患者）が含まれていた。周産期発症ＨＰＰまたは乳児期発症ＨＰＰのこれらの乳児および小児に、週６回１ｍｇ／ｋｇまたは週３回２〜３ｍｇ／ｋｇのいずれかの投与レジメンで、６〜９ｍｇ／ｋｇ／週のアスホターゼアルファを皮下投与した。
【０１３８】
周産期発症ＨＰＰまたは乳児期発症ＨＰＰのこれらの乳児および小児をアスホターゼアルファにより３年間以上にわたり治療したところ、換気または酸素補給の使用の低減により示唆されるように呼吸状態が有意に改善された。ベースライン呼吸サポートを必要とした１９名のＨＰＰ患者のうち１１名の患者（５８％）では、この呼吸サポートが治療期間全体を通じて排除または低減された。呼吸サポートが低減されなかった８名の患者のうち５名は酸素補給を受け、３名は非侵襲的人工呼吸器サポートを受けた。ベースライン呼吸サポートを受けなかった４０名の患者のうちほとんどの患者（４０名中３５名、８８％）は、試験全体を通じてそのままの状態を維持した。合計で５名の患者は、ベースライン後に呼吸サポートの必要性が発生し、これらの患者のうち２名はその後にサポートから離脱したが、１名の患者は最後のアセスメントまで侵襲的サポートを必要とした。合計で２名の患者は、ＨＰＰで死亡するまで人工呼吸器サポートを必要としたが、ＴＢＭ状態は分かっていない。これらの患者は、呼吸状態の改善（たとえば、換気または酸素補給の使用低減）およびＨＰＰの骨格発現の改善により実証されるように、依然としてアスホターゼアルファ治療に反応した。
【０１３９】
アスホターゼアルファによる治療に起因する、周産期発症ＨＰＰ、若年発症、または乳児期発症ＨＰＰの乳児および小児の呼吸状態の改善は、長期治療期間（たとえば３年間以上）にわたり継続したことが、これらの結果から実証される。
【０１４０】
実施例７．後になって推定で気管気管支軟化症と診断された患者の呼吸状態
以下の実施例は、機械的換気時に記録された人工呼吸器の圧力を精査することにより後になって推定でＴＢＭと診断されたＳＴＲＥＮＳＩＱによる治療試験に登録された患者の呼吸状態に関する情報を提供する。
【０１４１】
試験設計
試験は、周産期発症ＨＰＰまたは乳児期発症ＨＰＰの５歳（５歳を含む）までの乳児および小児におけるアスホターゼアルファ（ＳＴＲＥＮＳＩＱ（登録商標））の安全性、有効性、および薬動学（ＰＫ）の多施設オープンラベル多国間試験であった。周産期発症ＨＰＰおよび乳児期発症ＨＰＰは、子宮内から６ヶ月齢までの最初の徴候／症状の発症として定義された。
【０１４２】
試験には、６ヶ月齢以下で症状が発症してＨＰＰの診断が確認された、試験登録時に年齢≦５歳である患者が含まれていた。この中間解析には、１９ヶ所で登録された５９名の患者が含まれていた。治験医師の自由裁量により週６回１ｍｇ／ｋｇのアスホターゼアルファまたは週３回２ｍｇ／ｋｇのアスホターゼアルファのいずれかで、合計で６ｍｇ／ｋｇ／週のアスホターゼアルファを皮下（ＳＣ）注射により患者に投与した。体重の変化に対処するためにならびに／または有効性および／もしくは安全性を改善するために、用量調整を行うことが可能であった。
【０１４３】
ベースライン
試験の中間解析でＴＢＭを呈するとして評価されたのは５９名中３名の患者（患者１１〜１３）であった。そのほか、機械的換気時に記録された人工呼吸器の圧力を精査することにより後になって推定でＴＢＭと診断されたのは合計で５９名中１０名の患者（患者１〜１０）であった。
【０１４４】
１３名の患者（男性７名、女性６名）はすべて、０．１週齢〜２６９．９週齢の年齢の範囲内であり、すべて異常形状の胸部を示した。ベースライン時、患者１は呼吸サポートを必要とせず、患者２〜５および１２は気管内の機械的換気を必要とし、患者６は酸素補給を必要とし、患者７〜１０および１３は気管切開による機械的換気を必要とし、そして患者１１は持続気道陽圧（ＣＰＡＰ）を必要とした。
【０１４５】
患者１は、試験登録時は呼吸サポートを使用しなかったが、１２週直後から２６週までは呼吸窮迫が原因で間欠サポート（フェイスマスクを介する酸素、バイレベル気道陽圧または二相性気道陽圧（ＢｉＰＡＰ）、および持続気道陽圧（ＣＰＡＰ））を必要とした。ＢｉＰＡＰ時の吸気圧および呼気圧は、それぞれ、１８および８ｃｍＨ２Ｏであった。３６週から２１６週までは呼吸サポートを使用しなかった。
【０１４６】
患者２は、試験登録時から２４週まで呼吸サポートのために気管内チューブを介して持続機械的換気を必要とした。そして人工呼吸器から離脱し、鼻カニューレを介して追加のＯ２が施された。３６週まで呼吸サポートを使用せず、１９２週に至るまでサポートを使用しない状態を維持した。ベースライン時、機械的換気の吸気圧は０．３５ｃｍＨ２Ｏかつ呼気圧は１０ｃｍＨ２Ｏであった。３週では、機械的換気の吸気圧は１８ｃｍＨ２Ｏかつ呼気圧は１３ｃｍＨ２Ｏであった。６週では、機械的換気の吸気圧は３３ｃｍＨ２Ｏかつ呼気圧は１２ｃｍＨ２Ｏであった。１２週では、機械的換気の吸気圧は２４ｃｍＨ２Ｏかつ呼気圧は７ｃｍＨ２Ｏであった。
【０１４７】
患者３は、出生時に挿管を必要とし、ベースライン時から本試験で評価される期間を通じて持続機械的換気の呼吸サポートを使用した。２４週で気管内チューブを気管切開で交換し、６０週の患者の最後の記録された訪問時に所定の位置に保持されていた。患者は、無気肺および肺高血圧症の病歴があり何度か急性呼吸不全に遭遇した後に死亡した。ベースライン時ならびに３、６、１２、２４、３６、４８、および６０週の吸気圧／呼気圧は、それぞれ、−／１０ｃｍＨ２Ｏ、２９／１２ｃｍＨ２Ｏ、２４／９ｃｍＨ２Ｏ、２６／１０ｃｍＨ２Ｏ、３２／１１ｃｍＨ２Ｏ、４０／１０ｃｍＨ２Ｏ、２９／１２ｃｍＨ２Ｏ、および３３／１４ｃｍＨ２Ｏであった。
【０１４８】
患者４は、ベースライン時から４８週まで呼吸サポートのために気管内チューブ／気管切開チューブを介して機械的換気を必要とした。６０週では、患者は、持続気道陽圧（ＣＰＡＰ）を受けており、７２週から１６８週まで、患者は気管切開を介してもう一度機械的換気を受けた。ベースライン時ならびに３、６、１２、２４、３６、４８、６０、７２、９６、１２０、１４４、および１６８週の機械的換気の吸気圧／呼気圧は、それぞれ、２６／７ｃｍＨ２Ｏ、３０／７．５ｃｍＨ２Ｏ、３０／９ｃｍＨ２Ｏ、２９／８．７ｃｍＨ２Ｏ、２７／６ｃｍＨ２Ｏ、１３／４ｃｍＨ２Ｏ、１４／５ｃｍＨ２Ｏ、５／５ｃｍＨ２Ｏ（６０週、ＣＰＡＰにより測定）、２４／５ｃｍＨ２Ｏ、１２／５ｃｍＨ２Ｏ、１２／５ｃｍＨ２Ｏ、１３／５ｃｍＨ２Ｏ、および１５／５ｃｍＨ２Ｏであった。
【０１４９】
患者５は、本試験の開始前に気管内チューブを介して機械的換気が施されたが、複数回の発作および重篤な低酸素エピソードが報告されたため、酸素飽和増加および陽圧換気を必要とした。患者は、継続してベースライン時および最後の節目の３週の訪問時に呼吸サポートを必要とし、それから患者は、試験を中断した。試験薬剤を２回投与した後、この患者は家族／医療コンセンサスによる試験を中断した。その時、脳磁気共鳴イメージング（ＭＲＩ）により低酸素誘導病変および脳症が示された（関連重篤有害イベント（ＳＡＥ）でない可能性があるとして評価された）。患者は、その後１週間未満で「呼吸不全および脳死」で死亡した。これもまた、試験薬剤に関連しない可能性があり発作の合併症が原因である可能性が高いとして評価された。ベースライン時および３週の機械的換気の吸気圧／呼気圧は、それぞれ、１７／７ｃｍＨ２Ｏおよび２２／７ｃｍＨ２Ｏであった。
【０１５０】
患者６は、ベースライン時に呼吸困難が原因で２４時間の追加酸素を必要とし、６週（７週の用量増加の直前）から３６週まで肺炎、呼吸困難、および／または呼吸悪化が原因で機械的換気（気管内またはＣＰＡＰ）を受けた。４８週では、患者は、間欠追加酸素のみが施され、６０週から９６週までは、呼吸サポートを受けなかった。機械的吸気圧／呼気圧は、ベースライン時は１６／６ｃｍＨ２Ｏであった。６週の気管内吸気圧／呼気圧は、１６／６ｃｍＨ２Ｏであった。１２、２４、および３６週のＣＰＡＰ吸気圧／呼気圧は、それぞれ、１７／６ｃｍＨ２Ｏ、８／６ｃｍＨ２Ｏ、および−／６であった。
【０１５１】
患者７は、登録前にチューブが挿入され、ベースライン訪問の１日前に気管内機械的換気サポートから離脱した。試験治療の開始１日前および開始時に経鼻ＣＰＡＰ（非侵襲的換気）を使用した。患者は、ベースライン時に２４時間酸素サポート（３０Ｌ／ｍｉｎ）を使用した。酸素サポートの必要性は、試験全体を通じて変化し、たとえば、６週でＢｉＰＡＰ、約９週でバッグマスクを介する手動蘇生、１２週および４８週から７２週まで気管切開を介する機械的換気であった。患者は、９６週で換気サポートを使用しなかった。ベースライン時ならびに３、６、１２、２４、３６、および４８週で換気サポート時の吸気圧／呼気圧は、それぞれ、３１／７ｃｍＨ２Ｏ、２５／７ｃｍＨ２Ｏ、１８／１０ｃｍＨ２Ｏ、２１／８ｃｍＨ２Ｏ、２５／５ｃｍＨ２Ｏ、２５／５ｃｍＨ２Ｏ、および２５／５ｃｍＨ２Ｏであった。
【０１５２】
患者８は、ベースライン時の気管切開を介して夜間に毎分１０回で間欠強制換気を含む機械的換気を使用した（吸気圧２０．０ｃｍＨ２Ｏ、呼気圧５．０ｃｍＨ２Ｏ）。機械的換気のこのレベルは、２４週まで継続させた。３６週以降では、呼吸サポートは必要なかった。
【０１５３】
患者９は、ベースライン時に気管切開を介して２４時間の機械的換気を必要とし（吸気圧３２．０ｃｍＨ２Ｏ、呼気圧６．０ｃｍＨ２Ｏ、ＦｉＯ２  ３５．０％、３５．０Ｌ  Ｏ２／ｍｉｎ）、これを７２週まで継続したところ、より低い吸気圧および呼気圧、換気回数、ならびにＦｉＯ２でいくらかの改善が観測された。ベースライン時ならびに３６、４８、および６０〜７２週の機械的換気の吸気圧／呼気圧は、それぞれ、３２／６ｃｍＨ２Ｏ、２６／６ｃｍＨ２Ｏ、２２／５ｃｍＨ２Ｏ、および２２／５ｃｍＨ２Ｏであった。
【０１５４】
患者１０は、ベースライン時に気管切開を介して２４時間の機械的換気を必要とした。機械的換気の吸気圧を時間と共に低減させたところ、２４週以降（７２週まで）では患者は呼吸サポートを必要としなかった。ベースライン時ならびに３〜６および１２週の機械的換気の吸気圧／呼気圧は、それぞれ、２５／−ｃｍＨ２Ｏ、１７／−ｃｍＨ２Ｏ、および１１／−ｃｍＨ２Ｏであった。
【０１５５】
患者１１は、ベースライン時にＣＰＡＰ（ＦｉＯ２  ３０％、１日間２４時間）により換気を受けた。３、６、および１２週では、患者は、気管切開を介して機械的換気を受けた。２４週では、患者は、継続して換気サポートを受けた。ベースライン時のＣＰＡＰの吸気圧／呼気圧は、−／５ｃｍＨ２Ｏであった。３、６、１２、および２４週の機械的換気の吸気圧／呼気圧は、それぞれ、１８／１０ｃｍＨ２Ｏ、２０／１２ｃｍＨ２Ｏ、１／３．４ｃｍＨ２Ｏ、および１５／１０ｃｍＨ２Ｏであった。
【０１５６】
患者１２は、ベースライン時からデータカットオフ前の最後の試験訪問時の３６週までの試験観測期間にわたり、２４時間の機械的呼吸サポート（気管内および気管切開）を受けた。ベースライン時ならびに３、６、１２、２４、および３６週の機械的換気の吸気圧／呼気圧は、それぞれ、３２／８ｃｍＨ２Ｏ、３５／１１ｃｍＨ２Ｏ、２８／１２ｃｍＨ２Ｏ、３１／１０ｃｍＨ２Ｏ、３０／１２ｃｍＨ２Ｏ、および３４／１３ｃｍＨ２Ｏであった。
【０１５７】
患者１３は、ベースライン時から１２週まで機械的換気（気管切開）を受けた。ベースライン時、３〜６週、および１２週の機械的換気の吸気圧／呼気圧は、それぞれ、２４／６ｃｍＨ２Ｏ、３０／８ｃｍＨ２Ｏ、および３２／１２ｃｍＨ２Ｏであった。
【０１５８】
試験した１３名の患者のうち８名の患者では、吸気／呼気比は、アスホターゼアルファ治療の期間にわたり減少し、３名の患者では増加した。残りの２名の患者では不十分なデータが収集された。１１名中６名の患者では吸気圧が増加し、患者のうち７名では呼気圧が減少したかまたは同一に維持されたことから、肺活量の増加が示唆された。さらに、１３名中６名の患者は、試験期間の終了までに換気サポートを必要としなくなったことから、ＴＢＭを有する患者においてアスホターゼアルファ治療後の呼吸機能の有意な改善が示唆される。
【０１５９】
他の実施形態
以上の明細書に挙げた出版物、特許、および特許出願はすべて、あたかも個々の出版物、特許、または特許出願が具体的かつ個別的に明示されてその全体が参照により組み込まれたのと同程度まで、本出願をもって参照により組み込まれる。記載された本発明の方法、医薬組成物、およびキットの種々の修正形態および変形形態は、特許請求された本発明の範囲および趣旨から逸脱することなく当業者に自明なものであろう。特定の実施形態との関連では本開示を説明してきたが、さらなる修正が可能であることおよび特許請求された本発明がかかる特定の実施形態に不当に限定されるべきでないことは理解されよう。
【図１】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図２Ｃ】
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【図２Ｄ】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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