(57)【要約】  本開示は、縮合Ｎ−アリ−ルスルホンアミジル−チエノイソキノリン化合物、その誘導体、および医薬組成物、ならびに抗癌剤を補足的に使用した癌細胞成長を抑制する方法および使用に関する。中心体タ−ゲティングおよび微小管解重合は、本発明の化学療法化合物の設計において魅力的である。処置される種々の疾患および状態には、種々のタイプの細胞癌およびｉｎ  ｖｉｔｒｏ阻害が含まれる。【化１】2019536797.tif 000073【選択図】なし
2019536797.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
癌細胞の成長を選択的に抑制する方法であって、前記癌細胞を、式Ｉ：
【化１】
2019536797.tif 000046
の化合物であって、式中、
Ａは、Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ルまたは３〜７員の芳香族ヘテロ環であり；
Ｚは、ＳＯ、ＳＯ２、ＣＯ、またはＣＨ２であり；
ＲＡおよびＲＢは、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ａｌｋｙ）チオ、Ｃ１〜Ｃ６チオアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６スルホニルアルキル（ａｋｙｌ）、Ｃ１〜Ｃ６アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、ＣＮ、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ル、または３〜７員の芳香族ヘテロ環であり；
Ｒ１は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ａｌｋｙ）チオ、Ｃ１〜Ｃ６チオアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６スルホニルアルキル（ａｋｙｌ）、Ｃ１〜Ｃ６アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、ＣＮ、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ル、または３〜７員の芳香族ヘテロ環であり；
Ｒ２およびＲ３が相互に連結して、Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ルまたは３〜７員の芳香族ヘテロ環を形成し；
Ｒ４およびＲ５が相互に連結して、Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ルまたは３〜７員の芳香族ヘテロ環を形成し、
Ｒ１、ＲＡ、ＲＢ、前記Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ル、および前記３〜７員の芳香族ヘテロ環は、それぞれ独立して、非置換であるか、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ル、３〜７員の芳香族ヘテロ環、Ｃ１〜Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ａｌｋｙ）チオ、Ｃ１〜Ｃ６チオアルキル、Ｃ１〜Ｃ６スルホニルアルキル（ａｋｙｌ）、Ｃ１〜Ｃ６アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、ＣＮ、ＮＯ２、４，５−ジオキソイル、ＮＨ２  ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、およびＩ、ＣＨＯ、ＯＨから選択される少なくとも１つの置換基と置換されている、
化合物またはその薬学的に許容され得る塩、溶媒和物、もしくはプロドラッグに曝露することを含む、方法。
【請求項２】
成長の抑制が、前記癌細胞における有糸分裂停止の誘導を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
癌細胞を式Ｉの化合物に曝露することを含む、前記癌細胞において中心体の完全性を破壊し、中心体クラスタリングを阻止および／または減少させ、中心体をデクラスタリングし、中心体クラスタリングを制御し、そして／または微小管脱重合を誘導する方法。
【請求項４】
癌細胞の成長を選択的に抑制する方法であって、前記癌細胞を式Ｉの化合物と抗癌剤および／または有糸分裂阻害剤との組み合わせに曝露することを含む、方法。
【請求項５】
癌細胞の成長を抑制する方法であって、前記癌細胞を式Ｉの化合物と抗癌剤および／または有糸分裂阻害剤との相乗的組み合わせに曝露することを含み、前記組み合わせが、前記癌細胞の成長を、相加性を超えて抑制する、方法。
【請求項６】
抗癌剤および／または有糸分裂阻害剤の癌細胞に対する選択性を増加させる方法であって、前記癌細胞を式Ｉの化合物ならびに前記抗癌剤および／または前記有糸分裂阻害剤に曝露することを含む、方法。
【請求項７】
前記癌細胞を、濃度が約１ｎＭ、約５ｎＭ、約１００ｎＭ、約１５０ｎＭ、約２００ｎＭ、約２５０ｎＭ、約３００ｎＭ、約３５０ｎＭ、約４００ｎＭ、約４５０ｎＭ、約５００ｎＭ、約５５０ｎＭ、約６００ｎＭ、約１０００ｎＭ、約５０００ｎＭ、または約１００００ｎＭの前記化合物に曝露することを含む、請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
前記癌細胞を前記化合物に少なくとも１分間、２分間、３分間、４分間、５分間、１０分間、１５分間、２０分間、３０分間、少なくとも４５分間、少なくとも１時間、少なくとも２時間、少なくとも３時間、少なくとも４時間、少なくとも５時間、少なくとも６時間、少なくとも７時間、少なくとも８時間、少なくとも９時間、少なくとも１０時間、少なくとも１１時間、少なくとも１２時間、少なくとも１３時間、少なくとも１４時間、少なくとも１５時間、少なくとも１６時間、少なくとも１７時間、少なくとも１８時間、少なくとも１９時間、少なくとも２０時間、少なくとも２４時間、少なくとも３０時間、または少なくとも３６時間曝露することを含む、請求項１〜７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９】
前記癌細胞が異常な中心体を有する癌細胞である、請求項１〜８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
該癌細胞が、乳癌細胞、子宮頸癌細胞、非小細胞肺癌細胞、膵臓癌細胞、結腸癌細胞、神経芽細胞腫癌細胞、または卵巣癌細胞である、請求項１〜９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
該癌細胞が肺癌細胞または結腸直腸癌細胞である、請求項１〜９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
前記癌細胞が哺乳動物癌細胞である、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
前記哺乳動物癌細胞がヒト癌細胞である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記方法をｉｎ  ｖｉｔｒｏで行う、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】
前記方法をｉｎ  ｖｉｖｏで行う、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１６】
前記癌細胞が被験体内に存在する、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１７】
前記被験体が哺乳動物である、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記哺乳動物がヒトである、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
被験体における癌を処置する方法であって、有効量の式Ｉの化合物を前記被験体に投与することを含む、方法。
【請求項２０】
被験体における癌を処置する方法であって、有効量の式Ｉの化合物と抗癌剤および／または有糸分裂阻害剤との組み合わせを前記被験体に投与することを含む、方法。
【請求項２１】
前記癌が異常な中心体を生じる癌である、請求項１９または２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記癌が、乳癌、子宮頸癌、非小細胞肺癌、膵臓癌、結腸癌、神経芽細胞腫癌、または卵巣癌である、請求項１９〜２１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２３】
該癌が肺癌または結腸直腸癌である、請求項１９〜２１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２４】
前記被験体が哺乳動物である、請求項１９〜２３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２５】
前記哺乳動物がヒトである、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記式Ｉの化合物ならびに抗癌剤および／または有糸分裂阻害剤を順次または同時に投与する、請求項４〜２５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２７】
前記抗癌剤が、タキサン、ビンカアルカロイド、またはコルヒチン部位結合剤である、請求項４〜２６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２８】
前記抗癌剤が非有糸分裂抗癌剤である、請求項４〜２６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２９】
該有糸分裂阻害剤がノコダゾ−ルである、請求項４〜２６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３０】
前記タキサンが、パクリタキセル、カバジタキセル、またはドセタキセルである、請求項２７に記載の方法。
【請求項３１】
前記ビンカアルカロイドが、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、およびビノレルビンである、請求項２７に記載の方法。
【請求項３２】
前記コルヒチン部位結合剤が、コルヒチン、コンブレスタチン、またはポドフィロトキシンである、請求項２７に記載の方法。
【請求項３３】
前記非有糸分裂抗癌剤が、ドキソルビシン、アントラサイクリン、アルキル化薬、または代謝拮抗物質である、請求項２８に記載の方法。
【請求項３４】
Ｒ１、ＲＡ、ＲＢ、前記Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ル、および前記３〜７員の芳香族ヘテロ環は、それぞれ独立して、非置換であるか、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ａｌｋｙ）チオ、Ｃ１〜Ｃ６チオアルキル、Ｃ１〜Ｃ６スルホニルアルキル（ａｋｙｌ）、Ｃ１〜Ｃ６アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、ＣＮ、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、およびＩから選択される少なくとも１つの置換基と置換されている、請求項１〜３３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３５】
前記式Ｉの化合物が、式ＩＡ：
【化２】
2019536797.tif 000047
の化合物であって、式中、
Ｌは、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ａｌｋｙ）チオ、Ｃ１〜Ｃ６チオアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６スルホニルアルキル（ａｋｙｌ）、Ｃ１〜Ｃ６アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、ＣＮ、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ル、または３〜７員の芳香族ヘテロ環であり；
Ｘは、Ｓ、Ｏ、ＮＨ、ＣＨ−ＣＨ、ＣＨ−Ｎ、Ｎ−ＣＨ、またはＮＲ７であり；
Ｙは、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ａｌｋｙ）チオ、Ｃ１〜Ｃ６チオアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６スルホニルアルキル（ａｋｙｌ）、Ｃ１〜Ｃ６アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、ＣＮ、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ル、または３〜７員の芳香族ヘテロ環であり；
Ｚは、ＳＯ、ＳＯ２、ＣＯ、またはＣＨ２であり；
ＲＡおよびＲＢは、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ａｌｋｙ）チオ、Ｃ１〜Ｃ６チオアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６スルホニルアルキル（ａｋｙｌ）、Ｃ１〜Ｃ６アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、ＣＮ、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ル、または３〜７員の芳香族ヘテロ環であり；
Ｒ１は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ａｌｋｙ）チオ、Ｃ１〜Ｃ６チオアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６スルホニルアルキル（ａｋｙｌ）、Ｃ１〜Ｃ６アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、ＣＮ、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ル、または３〜７員の芳香族ヘテロ環であり；
Ｒ６は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ａｌｋｙ）チオ、Ｃ１〜Ｃ６チオアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｆ、Ｃ１〜Ｃ６スルホニルアルキル（ａｋｙｌ）、Ｃ１〜Ｃ６アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、ＣＮ、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ル、または３〜７員の芳香族ヘテロ環であり；
Ｒ７は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６スルホニルアルキル（ａｋｙｌ）、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ル、または３〜７員の芳香族ヘテロ環であり、
Ｌ、ＲＡ、ＲＢ、Ｒ１、Ｒ６、Ｒ７、前記Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ル、および前記３〜７員の芳香族ヘテロ環は、それぞれ独立して、非置換であるか、可能であれば、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ル、３〜７員の芳香族ヘテロ環、Ｃ１〜Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ａｌｋｙ）チオ、Ｃ１〜Ｃ６チオアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６スルホニルアルキル（ａｋｙｌ）、ＣＮ、ＮＯ２、４，５−ジオキソイル、ＮＨ２、Ｃ１〜Ｃ６アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、およびＩ、ＯＨ、ＣＨＯから選択される少なくとも１つの置換基と置換されている、
化合物またはその薬学的に許容され得る塩、溶媒和物、もしくはプロドラッグである、請求項１〜３３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３６】
前記式Ｉの化合物が、式ＩＡ：
【化３】
2019536797.tif 000048
の化合物であって、式中、
Ｌは、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ３ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ３アルキル（ａｌｋｙ）チオ、Ｃ１〜Ｃ３チオアルキル、Ｃ１〜Ｃ３スルホニルアルキル（ａｋｙｌ）、Ｃ１〜Ｃ３アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、ＣＮ、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉであり；
Ｘは、Ｓ、Ｏ、ＮＲ７、またはＮＨであり；
Ｙは、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｈ、ＣＨ３、ＣＦ３、ＣＨＦ２、ＣＦ２Ｈ、またはＣＮであり；
Ｚは、ＳＯ２、ＣＯ、またはＣＨ２であり；
ＲＡおよびＲＢは、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、Ｃ１〜Ｃ３ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ３スルホニルアルキル（ａｋｙｌ）、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｆであり；
Ｒ１は、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ３ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ３スルホニルアルキル（ａｋｙｌ）、Ｃ１〜Ｃ３アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、ＣＮ、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩであり；
Ｒ６は、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ３ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ３スルホニルアルキル（ａｋｙｌ）、Ｃ１〜Ｃ３アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、ＣＮ、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩであり；
Ｒ７は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６スルホニルアルキル（ａｋｙｌ）、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ル、または３〜７員の芳香族ヘテロ環であり；
Ｌ、ＲＡ、ＲＢ、Ｒ１、Ｒ６、前記Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ル、および前記３〜７員の芳香族ヘテロ環は、それぞれ独立して、非置換であるか、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ａｌｋｙ）チオ、Ｃ１〜Ｃ６チオアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、およびＩから選択される少なくとも１つの置換基と置換されている、
化合物またはその薬学的に許容され得る塩、溶媒和物、もしくはプロドラッグである、請求項１〜３３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３７】
前記式Ｉの化合物が、式ＩＡ：
【化４】
2019536797.tif 000049
の化合物であって、式中、
ＬはＨであり；
ＸはＳであり；
Ｚは、ＳＯ２、ＣＯ、またはＣＨ２であり；
Ｙは、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩであり；
ＲＡはＨであり；
ＲＢはＨであり；
Ｒ１は、Ｚに対してパラ位にあり、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ３ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ３スルホニルアルキル（ａｋｙｌ）、Ｃ１〜Ｃ３アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、ＣＮ、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、およびＩから選択され；
Ｒ６は、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ３ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ３スルホニルアルキル（ａｋｙｌ）、Ｃ１〜Ｃ３アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、ＣＮ、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩであり、
Ｒ１、Ｒ６、前記Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ル、および前記３〜７員の芳香族ヘテロ環は、それぞれ独立して、非置換であるか、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ａｌｋｙ）チオ、Ｃ１〜Ｃ６チオアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、およびＩから選択される少なくとも１つの置換基と置換されている、
化合物またはその薬学的に許容され得る塩、溶媒和物、もしくはプロドラッグである、請求項１〜３３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３８】
ＬはＨであり；
ＺはＳＯ２であり；
Ｙは、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、またはＣ６〜Ｃ１２アリ−ルであり；
ＲＡはＨであり；
ＲＢはＨであり；
Ｒ１は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ３ハロアルキル、またはＣ１〜Ｃ３アルコキシであり；
Ｒ６はＨである、請求項３７に記載の方法。
【請求項３９】
ＬはＨであり；
ＺはＳＯ２であり；
Ｙは、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、またはフェニルであり；
ＲＡはＨであり；
ＲＢはＨであり；
Ｒ１は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、ＣＦ３、またはメトキシであり；
Ｒ６はＨである、請求項３７に記載の方法。
【請求項４０】
前記化合物が、
【化５】
2019536797.tif 000050
2019536797.tif 000051
2019536797.tif 000052
から選択される、請求項１〜３３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４１】
前記化合物が、
【化６】
2019536797.tif 000053
である、請求項１〜３３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４２】
前記化合物が、
【化７】
2019536797.tif 000054
から選択される、請求項１〜３３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４３】
前記化合物が、
【化８】
2019536797.tif 000055
である、請求項１〜３３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４４】
前記化合物が、式ＩＢ：
【化９】
2019536797.tif 000056
の化合物であって、式中、
【表１】
2019536797.tif 000057
の化合物である、請求項１〜３３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４５】
前記化合物が、式ＩＣ：
【化１０】
2019536797.tif 000058
の化合物であって、式中、
【表２】
2019536797.tif 000059
2019536797.tif 000060
の化合物である、請求項１〜３３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４６】
癌細胞の成長を選択的に抑制するための式Ｉの化合物の使用。
【請求項４７】
癌細胞において中心体の完全性を破壊し、中心体クラスタリングを阻止および／または減少させ、中心体をデクラスタリングし、中心体クラスタリングを制御し、そして／または微小管脱重合を誘導するための式Ｉの化合物の使用。
【請求項４８】
癌細胞の成長を選択的に抑制するための式Ｉの化合物と抗癌剤および／または有糸分裂阻害剤の組み合わせの使用。
【請求項４９】
前記癌細胞の成長の抑制が選択的である、請求項４６に記載の使用。
【請求項５０】
成長の抑制が、前記癌細胞における有糸分裂停止の誘導を含む、請求項４６に記載の使用。
【請求項５１】
該癌細胞が、乳癌細胞、子宮頸癌細胞、肺癌細胞、非小細胞肺癌細胞、膵臓癌細胞、結腸直腸癌細胞、結腸癌細胞、神経芽細胞腫癌細胞、または卵巣癌細胞である、請求項４６〜５０のいずれか１項に記載の使用。
【請求項５２】
被験体における癌の処置のための式Ｉの化合物の使用。
【請求項５３】
被験体における癌の処置のための式Ｉと抗癌剤および／または有糸分裂阻害剤の組み合わせの使用。
【請求項５４】
該癌が、乳癌、子宮頸癌、肺癌、非小細胞肺癌、膵臓癌、結腸直腸癌、結腸癌、神経芽細胞腫癌、または卵巣癌である、請求項５２または５３に記載の使用。
【請求項５５】
抗癌剤および／または有糸分裂阻害剤の癌細胞に対する選択性を増加させるための、前記抗癌剤および／または前記有糸分裂阻害剤と組み合わせた式Ｉの化合物の使用。
【請求項５６】
式ＩＡ：
【化１１】
2019536797.tif 000061
の化合物であって、式中、
Ｌは、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ３チオアルキル、Ｃ１〜Ｃ３ハロアルキル、ＣＮ、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩであり；
Ｘは、Ｓ、Ｏ、ＮＲ７、またはＮＨであり；
Ｙは、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｈ、ＣＨ３、ＣＦ３、ＣＨＦ２、ＣＦ２Ｈ、またはＣＮであり；
Ｚは、ＳＯ２、ＣＯ、またはＣＨ２であり；
ＲＡおよびＲＢは、それぞれ独立して、Ｈ、Ｍｅ、Ｅｔ、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｆ、またはＣｌであり；
Ｒ１は、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ３ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ３スルホニルアルキル（ａｋｙｌ）、Ｃ１〜Ｃ３アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、ＣＮ、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩであり；
Ｒ６は、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ３ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ３スルホニルアルキル（ａｋｙｌ）、Ｃ１〜Ｃ３アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、ＣＮ、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩであり；
Ｒ７は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６スルホニルアルキル（ａｋｙｌ）、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ル、または３〜７員の芳香族ヘテロ環であり、
Ｌ、ＲＡ、ＲＢ、Ｒ１、Ｒ６、前記Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ル、および前記３〜７員の芳香族ヘテロ環は、それぞれ独立して、非置換であるか、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ル、前記３〜７員の芳香族ヘテロ環、Ｃ１〜Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ａｌｋｙ）チオ、Ｃ１〜Ｃ６チオアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、ＮＯ２、４，５−ジオキソイル、ＮＨ２  Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、およびＩ、ＣＨＯ、ＯＨから選択される少なくとも１つの置換基と置換されている、
化合物またはその薬学的に許容され得る塩、溶媒和物、もしくはプロドラッグ。
【請求項５７】
Ｌ、ＲＡ、ＲＢ、Ｒ１、Ｒ６、前記Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ル、前記３〜７員の芳香族ヘテロ環は、それぞれ独立して、非置換であるか、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ａｌｋｙ）チオ、Ｃ１〜Ｃ６チオアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、およびＩから選択される少なくとも１つの置換基と置換されている、請求項５６に記載の化合物。
【請求項５８】
ＬはＨであり；
ＸはＳであり；
Ｚは、ＳＯ２、ＣＯ、またはＣＨ２であり；
Ｙは、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩであり；
ＲＡはＨであり；
ＲＢはＨであり；
Ｒ１は、Ｚに対してパラ位にあり、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ３ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ３スルホニルアルキル（ａｋｙｌ）、Ｃ１〜Ｃ３アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、ＣＮ、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、およびＩから選択され；
Ｒ６は、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ３ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ３スルホニルアルキル（ａｋｙｌ）、Ｃ１〜Ｃ３アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、ＣＮ、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩであり、
Ｒ１、Ｒ６、前記Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ル、および前記３〜７員の芳香族ヘテロ環は、それぞれ独立して、非置換であるか、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ａｌｋｙ）チオ、Ｃ１〜Ｃ６チオアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、およびＩから選択される少なくとも１つの置換基と置換されている、請求項５６に記載の化合物またはその薬学的に許容され得る塩、溶媒和物、もしくはプロドラッグ。
【請求項５９】
ＬはＨであり；
ＺはＳＯ２であり；
Ｙは、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、またはＣ６〜Ｃ１２アリ−ルであり；
ＲＡはＨであり；
ＲＢはＨであり；
Ｒ１は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ３ハロアルキル、またはＣ１〜Ｃ３アルコキシであり；
Ｒ６はＨである、請求項５６に記載の化合物。
【請求項６０】
ＬはＨであり；
ＺはＳＯ２であり；
Ｙは、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、またはフェニルであり；
ＲＡはＨであり；
ＲＢはＨであり；
Ｒ１は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、ＣＦ３、またはメトキシであり；
Ｒ６はＨである、請求項５６に記載の化合物。
【請求項６１】
前記化合物が、
【化１２】
2019536797.tif 000062
から選択される、請求項５６に記載の化合物。
【請求項６２】
前記化合物が、
【化１３】
2019536797.tif 000063
である、請求項５６に記載の化合物。
【請求項６３】
前記化合物が、式ＩＢ：
【化１４】
2019536797.tif 000064
の化合物であって、式中、
【表３】
2019536797.tif 000065
の化合物である、請求項５６に記載の化合物。
【請求項６４】
前記化合物が、式ＩＣ：
【化１５】
2019536797.tif 000066
の化合物であって、式中、
【表４】
2019536797.tif 000067
2019536797.tif 000068
の化合物である、請求項５６に記載の化合物。
【請求項６５】
前記化合物が、
【化１６】
2019536797.tif 000069
である、請求項５６に記載の化合物。
【請求項６６】
【化１７】
2019536797.tif 000070
2019536797.tif 000071
2019536797.tif 000072
から選択される化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１６年１２月６日出願の米国仮特許出願第６２／４３０，３８７号の優先権を主張する。その開示は、その全体が本明細書中で参照により援用される。
【０００２】
本開示は、チエノイソキノリン化合物およびその誘導体、より詳細には、チエノイソキノリン化合物を使用して癌の成長を選択的に抑制する方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
癌は、現在、カナダにおける主な死因である。カナダ対がん協会の統計によると、カナダ人の４人に１人がこの疾患で死亡し、カナダ人の５人に２人がその一生のうちに癌を発症するであろう。癌の発生率は５０歳以上でより高くなるので、これらの数値はカナダの高齢者数が増加するにつれて急上昇すると予想される。いくつかの癌（例えば、乳癌および前立腺癌）による死亡率は、クリニックにおける成果または予防によって減少しているが、侵襲性の治療困難な癌（例えば、肺癌、膵臓癌、および脳腫瘍）が依然として多く存在する。癌を処置するために使用される主な方法のうちの１つは、化学療法の使用であるが、ほとんどの化学療法薬が健康な細胞も標的にするため、化学療法はしばしば重篤な副作用を患者に引き起こす。さらに、種々の機序によって患者はしばしば薬物耐性を生じる。副作用および耐性を軽減するために、現在、併用療法が使用されている。併用療法は、２つ以上の薬物をより低い用量で同時または共に投与するものである。さらに、個別の腫瘍の遺伝子プロファイリングを使用して処置を各患者により特異的に合わせる個別化医療がより最近の別の処置選択肢としてある。したがって、効果的に処置することができる癌の数を増加させるために、薬物のレパ−トリ−を広げることが重要である。しかし、新規の抗癌化合物を検索するために使用されている現在の方法は、しばしば、上手くいっていない（１）。これらの方法は、最適でないかもしれない特定の分子標的を有する化合物を検索するか、その薬らしい品質および合成の容易さを考慮していないので、非常に限定的であり得る。例えば、低品質の化合物は溶解性に問題がある可能性があり、凝集する可能性があり、ｉｎ  ｖｉｖｏで有効にするには濃度を高くする必要があり得る（２〜６）。
【０００４】
広範な癌を処置するために使用される結果の良い抗癌薬のうちの一部は、細胞分裂に重要な有糸分裂を標的にする（１２、１３）。癌細胞が共有する顕著な特徴のうちの１つは、無制御の様式で急速に分裂することである。有糸分裂紡錘体は、染色体を整列および分離させ、確実に各娘細胞が分裂中に適切な遺伝的内容を受け継ぐように形成される構造物である（１４）。有糸分裂紡錘体が染色体に適切に付着できない場合、紡錘体形成チェックポイント（ＳＡＣ）が満たされず、細胞周期は停止され、アポト−シスを受けるであろう（１４〜１７）。あるいは、染色体が誤分離し、それにより、その後の分裂において異数性および分裂期細胞死を生じ得る（１８）。健康な体細胞が有糸分裂に入るにつれて、２つの中心体が離れるように移動し、微小管形成中心として機能して双極紡錘体を形成し、次いで、染色体を捕捉する（１９）。多くの転移性癌細胞は異常な中心体を有し、この異常な中心体は構造的または機能的に欠陥がある（２０〜２２）。中心体は主な微小管形成の核となる部位であるので、異常な中心体を有する細胞は、しばしば、染色体付着に欠陥のある欠損有糸分裂紡錘体（多極紡錘体など）を有する（２３）。したがって、癌細胞は、断片化したか増幅した中心体をクラスタリングして、２つの極を形成する機序に依存する（１６、１７、２０〜２２）。癌細胞が異常な中心体をクラスタリングするために使用する機序は十分に理解されていないが、その要件が癌細胞選択性を示すので、化学療法の標的にするのに魅力的である。この裏付けとして、いくつかの刊行物では、中心体クラスタリングを特異的に標的にする化合物の探索について記載されている（２４〜２９）。しかし、これらの論文に記載の化合物は、高い有効性が達成されておらず、臨床試験には理想的ではない。
【０００５】
チエノイソキノリン−フェニルスルホンアミド化合物は、米国特許第７，６９６，２２１号（その全体が本明細書中で参照により援用される）中にＥＲ−ＮＦκＢ受容体としての使用が記載されている。パラジウム触媒脱炭酸クロスカップリングおよび一連の官能化を使用した５段階直線型合成によるチエノイソキノリンの合成がＣｈｅｎら（１１）（その全体が本明細書中で参照により援用される）によって報告されている。
【発明の概要】
【０００６】
１つの態様によれば、癌細胞の成長を選択的に抑制する方法であって、癌細胞を、式Ｉ：
【化１】
2019536797.tif 000003
の化合物であって、式中、
Ａは、Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ルまたは３〜７員の芳香族ヘテロ環であり；
Ｚは、ＳＯ、ＳＯ２、ＣＯ、またはＣＨ２であり；
ＲＡおよびＲＢは、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ａｌｋｙ）チオ、Ｃ１〜Ｃ６チオアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６スルホニルアルキル（ａｋｙｌ）、Ｃ１〜Ｃ６アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、ＣＮ、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ル、または３〜７員の芳香族ヘテロ環であり；
Ｒ１は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ａｌｋｙ）チオ、Ｃ１〜Ｃ６チオアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６スルホニルアルキル（ａｋｙｌ）、Ｃ１〜Ｃ６アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、ＣＮ、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ル、または３〜７員の芳香族ヘテロ環であり；
Ｒ２およびＲ３が相互に連結して、Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ルまたは３〜７員の芳香族ヘテロ環を形成し；
Ｒ４およびＲ５が相互に連結して、Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ルまたは３〜７員の芳香族ヘテロ環を形成し、
Ｒ１、ＲＡ、ＲＢ、Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ル、および３〜７員の芳香族ヘテロ環は、それぞれ独立して、非置換であるか、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ル、３〜７員の芳香族ヘテロ環、Ｃ１〜Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ａｌｋｙ）チオ、Ｃ１〜Ｃ６チオアルキル、Ｃ１〜Ｃ６スルホニルアルキル（ａｋｙｌ）、Ｃ１〜Ｃ６アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、ＣＮ、ＮＯ２、４，５−ジオキソイル、ＮＨ２  ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、およびＩ、ＯＨ、ＣＨＯから選択される少なくとも１つの置換基と置換されている、
化合物またはその薬学的に許容され得る塩、溶媒和物、もしくはプロドラッグに曝露することを含む方法を本明細書中に提供する。
【０００７】
別の態様によれば、癌細胞を式Ｉの化合物に曝露することを含む、癌細胞において中心体の完全性を破壊し、中心体クラスタリングを阻止および／または減少させ、中心体をデクラスタリングし、中心体クラスタリングを制御し、そして／または微小管脱重合を誘導する方法を本明細書中に提供する。
【０００８】
さらに別の態様によれば、癌細胞の成長を選択的に抑制する方法であって、癌細胞を式Ｉの化合物と抗癌剤および／または有糸分裂阻害剤との組み合わせに曝露することを含む方法を本明細書中に提供する。
【０００９】
別の態様によれば、癌細胞の成長を抑制する方法であって、癌細胞を式Ｉの化合物と抗癌剤および／または有糸分裂阻害剤との相乗的組み合わせに曝露することを含み、前述の組み合わせが、癌細胞の成長を、相加性を超えて抑制する方法を本明細書中に提供する。
【００１０】
別の態様によれば、抗癌剤および／または有糸分裂阻害剤の癌細胞に対する選択性を増加させる方法であって、癌細胞を式Ｉの化合物ならびに抗癌剤および／または有糸分裂阻害剤に曝露することを含む方法を本明細書中に提供する。
【００１１】
別の態様によれば、被験体における癌を処置する方法であって、有効量の式Ｉの化合物を被験体に投与することを含む方法を本明細書中に提供する。
【００１２】
別の態様によれば、被験体における癌を処置する方法であって、有効量の式Ｉの化合物と抗癌剤および／または有糸分裂阻害剤との組み合わせを被験体に投与することを含む方法を本明細書中に提供する。
【００１３】
１つのさらなる態様によれば、癌細胞の成長を選択的に抑制するための式Ｉの化合物の使用を本明細書中に提供する。
【００１４】
別の態様によれば、癌細胞において中心体の完全性を破壊し、中心体クラスタリングを阻止および／または減少させ、中心体をデクラスタリングし、中心体クラスタリングを制御し、そして／または微小管脱重合を誘導するための式Ｉの化合物の使用を本明細書中に提供する。
【００１５】
さらに別の態様によれば、癌細胞の成長を選択的に抑制するための式Ｉの化合物と抗癌剤および／または有糸分裂阻害剤との組み合わせの使用を本明細書中に提供する。
【００１６】
別の態様によれば、被験体における癌の処置のための式Ｉの化合物の使用を本明細書中に提供する。
【００１７】
別の態様によれば、被験体における癌の処置のための式Ｉと抗癌剤および／または有糸分裂阻害剤の組み合わせの使用を本明細書中に提供する。
【００１８】
別の態様によれば、抗癌剤および／または有糸分裂阻害剤の癌細胞に対する選択性を増加させるための、抗癌剤および／または有糸分裂阻害剤と組み合わせた式Ｉの化合物の使用を本明細書中に提供する。
【００１９】
１つのさらなる態様によれば、式Ｉ：
【化２】
2019536797.tif 000004
の化合物であって、式中、
Ａは、Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ルまたは３〜７員の芳香族ヘテロ環であり；
Ｚは、ＳＯ、ＳＯ２、ＣＯ、またはＣＨ２であり；
ＲＡおよびＲＢは、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ａｌｋｙ）チオ、Ｃ１〜Ｃ６チオアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６スルホニルアルキル（ａｋｙｌ）、Ｃ１〜Ｃ６アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、ＣＮ、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ル、または３〜７員の芳香族ヘテロ環であり；
Ｒ１は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ａｌｋｙ）チオ、Ｃ１〜Ｃ６チオアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６スルホニルアルキル（ａｋｙｌ）、Ｃ１〜Ｃ６アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、ＣＮ、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ル、または３〜７員の芳香族ヘテロ環であり；
Ｒ２およびＲ３が相互に連結して、Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ルまたは３〜７員の芳香族ヘテロ環を形成し；
Ｒ４およびＲ５が相互に連結して、Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ルまたは３〜７員の芳香族ヘテロ環を形成し、
Ｒ１、ＲＡ、ＲＢ、Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ル、および３〜７員の芳香族ヘテロ環は、それぞれ独立して、非置換であるか、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ル、３〜７員の芳香族ヘテロ環、Ｃ１〜Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ａｌｋｙ）チオ、Ｃ１〜Ｃ６チオアルキル、Ｃ１〜Ｃ６スルホニルアルキル（ａｋｙｌ）、Ｃ１〜Ｃ６アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、ＣＮ、ＮＯ２、４，５−ジオキソイル、ＮＨ２  ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、およびＩ、ＯＨ、ＣＨＯから選択される少なくとも１つの置換基と置換されている、
化合物またはその薬学的に許容され得る塩、溶媒和物、もしくはプロドラッグを本明細書中に提供する。
【００２０】
１つのさらなる態様によれば、式ＩＡ：
【化３】
2019536797.tif 000005
の化合物であって、式中、
Ｌは、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ３チオアルキル、Ｃ１〜Ｃ３ハロアルキル、ＣＮ、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩであり；
Ｘは、Ｓ、Ｏ、ＮＲ７、またはＮＨであり；
Ｙは、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｈ、ＣＨ３、ＣＦ３、ＣＨＦ２、ＣＦ２Ｈ、またはＣＮであり；
Ｚは、ＳＯ２、ＣＯ、またはＣＨ２であり；
ＲＡおよびＲＢは、それぞれ独立して、Ｈ、Ｍｅ、Ｅｔ、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｆ、またはＣｌであり；
Ｒ１は、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ３ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ３スルホニルアルキル（ａｋｙｌ）、Ｃ１〜Ｃ３アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、ＣＮ、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩであり；
Ｒ６は、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ３ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ３スルホニルアルキル（ａｋｙｌ）、Ｃ１〜Ｃ３アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、ＣＮ、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩであり；
Ｒ７は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６スルホニルアルキル（ａｋｙｌ）、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ル、または３〜７員の芳香族ヘテロ環であり、
Ｌ、ＲＡ、ＲＢ、Ｒ１、Ｒ６、Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ル、および３〜７員の芳香族ヘテロ環は、それぞれ独立して、非置換であるか、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ａｌｋｙ）チオ、Ｃ１〜Ｃ６チオアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、およびＩから選択される少なくとも１つの置換基と置換されている、
化合物またはその薬学的に許容され得る塩、溶媒和物、もしくはプロドラッグを本明細書中に提供する。
【００２１】
１つのさらなる態様によれば、
【化４】
2019536797.tif 000006
2019536797.tif 000007
2019536797.tif 000008
から選択される化合物を本明細書中に提供する。
【００２２】
１つのさらなる態様によれば、式ＩＢ：
【化５】
2019536797.tif 000009
の化合物であって、式中、
【００２３】
【表１】
2019536797.tif 000010
の化合物を本明細書中に提供する。
【００２４】
１つのさらなる態様によれば、式ＩＣ：
【化６】
2019536797.tif 000011
の化合物であって、式中、
【００２５】
【表２】
2019536797.tif 000012
2019536797.tif 000013
の化合物を本明細書中に提供する。
【００２６】
本開示のさらなる特徴および利点は、添付の図面中に例示として示した特定の実施形態の以下の説明からより容易に明らかとなるであろう：
【図面の簡単な説明】
【００２７】
【図１−１】化合物７５（Ｃ７５）が癌細胞において有糸分裂を選択的に停止させ、紡錘体の形態を破壊していることを示す。図１Ａは、ＤＭＳＯまたは５００ｎＭのＣ７５で８時間処置したＨｅＬａ細胞の視野のうちの明視野像を示す。コントロ−ルと比較して、Ｃ７５処置後の有糸分裂細胞はより丸かった。図１Ｂは、種々の濃度のＣ７５での８時間の処置後の有糸分裂期のＨｅＬａ細胞およびＨＦＦ１細胞の百分率を示す折れ線グラフである。バ−は、標準偏差を示す。図１Ｃは、固定し、チュ−ブリン（微小管）およびＤＡＰＩ（ＤＮＡ）で共染色した細胞を示す一連の画像である。３００ｎＭのＣ７５でのＨｅＬａ細胞の処置により有糸分裂紡錘体が組織崩壊し、一方で、ＨＦＦ１細胞における有糸分裂紡錘体は影響を受けなかった。７５０ｎＭのＣ７５での処置により、ＨｅＬａ細胞における有糸分裂紡錘体は完全に断片化し、一方で、ＨＦＦ１細胞における有糸分裂紡錘体は組織崩壊した。細胞のスケ−ルバ−は１０μｍである。図１Ｄは、中期細胞の重要な特徴を示すイラストである。
【図１−２】化合物７５（Ｃ７５）が癌細胞において有糸分裂を選択的に停止させ、紡錘体の形態を破壊していることを示す。図１Ａは、ＤＭＳＯまたは５００ｎＭのＣ７５で８時間処置したＨｅＬａ細胞の視野のうちの明視野像を示す。コントロ−ルと比較して、Ｃ７５処置後の有糸分裂細胞はより丸かった。図１Ｂは、種々の濃度のＣ７５での８時間の処置後の有糸分裂期のＨｅＬａ細胞およびＨＦＦ１細胞の百分率を示す折れ線グラフである。バ−は、標準偏差を示す。図１Ｃは、固定し、チュ−ブリン（微小管）およびＤＡＰＩ（ＤＮＡ）で共染色した細胞を示す一連の画像である。３００ｎＭのＣ７５でのＨｅＬａ細胞の処置により有糸分裂紡錘体が組織崩壊し、一方で、ＨＦＦ１細胞における有糸分裂紡錘体は影響を受けなかった。７５０ｎＭのＣ７５での処置により、ＨｅＬａ細胞における有糸分裂紡錘体は完全に断片化し、一方で、ＨＦＦ１細胞における有糸分裂紡錘体は組織崩壊した。細胞のスケ−ルバ−は１０μｍである。図１Ｄは、中期細胞の重要な特徴を示すイラストである。
【図１−３】化合物７５（Ｃ７５）が癌細胞において有糸分裂を選択的に停止させ、紡錘体の形態を破壊していることを示す。図１Ａは、ＤＭＳＯまたは５００ｎＭのＣ７５で８時間処置したＨｅＬａ細胞の視野のうちの明視野像を示す。コントロ−ルと比較して、Ｃ７５処置後の有糸分裂細胞はより丸かった。図１Ｂは、種々の濃度のＣ７５での８時間の処置後の有糸分裂期のＨｅＬａ細胞およびＨＦＦ１細胞の百分率を示す折れ線グラフである。バ−は、標準偏差を示す。図１Ｃは、固定し、チュ−ブリン（微小管）およびＤＡＰＩ（ＤＮＡ）で共染色した細胞を示す一連の画像である。３００ｎＭのＣ７５でのＨｅＬａ細胞の処置により有糸分裂紡錘体が組織崩壊し、一方で、ＨＦＦ１細胞における有糸分裂紡錘体は影響を受けなかった。７５０ｎＭのＣ７５での処置により、ＨｅＬａ細胞における有糸分裂紡錘体は完全に断片化し、一方で、ＨＦＦ１細胞における有糸分裂紡錘体は組織崩壊した。細胞のスケ−ルバ−は１０μｍである。図１Ｄは、中期細胞の重要な特徴を示すイラストである。
【図１−４】化合物７５（Ｃ７５）が癌細胞において有糸分裂を選択的に停止させ、紡錘体の形態を破壊していることを示す。図１Ａは、ＤＭＳＯまたは５００ｎＭのＣ７５で８時間処置したＨｅＬａ細胞の視野のうちの明視野像を示す。コントロ−ルと比較して、Ｃ７５処置後の有糸分裂細胞はより丸かった。図１Ｂは、種々の濃度のＣ７５での８時間の処置後の有糸分裂期のＨｅＬａ細胞およびＨＦＦ１細胞の百分率を示す折れ線グラフである。バ−は、標準偏差を示す。図１Ｃは、固定し、チュ−ブリン（微小管）およびＤＡＰＩ（ＤＮＡ）で共染色した細胞を示す一連の画像である。３００ｎＭのＣ７５でのＨｅＬａ細胞の処置により有糸分裂紡錘体が組織崩壊し、一方で、ＨＦＦ１細胞における有糸分裂紡錘体は影響を受けなかった。７５０ｎＭのＣ７５での処置により、ＨｅＬａ細胞における有糸分裂紡錘体は完全に断片化し、一方で、ＨＦＦ１細胞における有糸分裂紡錘体は組織崩壊した。細胞のスケ−ルバ−は１０μｍである。図１Ｄは、中期細胞の重要な特徴を示すイラストである。
【図２−１】Ｃ７５が癌細胞において有糸分裂を選択的に停止させ、中心体を標的にすることを示す。図２Ａは、種々の濃度のＣ７５で１集団倍加時間処置した後の有糸分裂期のＨＣＴ１１６（ｐ５３−／−）細胞、Ａ５４９細胞、ＨｅＬａ細胞、およびＨ１２９９細胞の百分率を示す折れ線グラフである。全ての細胞株は、２００ｎＭのＣ７５での処置後に有糸分裂細胞の比率が増加する。バ−は標準偏差を示す。図２Ｂは、表示のように３００ｎＭのＣ８７（不活性誘導体）またはＣ７５での処置の６〜８時間後に固定し、チュ−ブリン（微小管）およびＤＡＰＩ（ＤＮＡ）で共染色したＨＦＦ１細胞、Ｈ１２９９細胞、ＭＣＦ−１０Ａ細胞、およびＭＣＦ−７細胞を示す一連の画像である。有糸分裂紡錘体は、ＨＦＦ１細胞においてはＣ７５によって劇的に変化しなかったが、他の細胞型では単極（表示のように）または断片化した。図２Ｃは、表示のように３００ｎＭのＣ８７（より活性が低い誘導体）またはＣ７５での処置の６〜８時間後に固定し、チュ−ブリン（微小管）およびＤＡＰＩ（ＤＮＡ）で共染色した固定したＨｅＬａ細胞、ＢＴ−５４９細胞、Ａ５４９細胞、およびＨＣＴ１１６（ｐ５３−／−）細胞を示す画像である。有糸分裂紡錘体は、Ｃ７５処置後に図２Ｂ中の細胞と比較してこれらの細胞においてより強く断片化された。図２Ｄは、中期のＨｅＬａ細胞をＣ７５またはチュ−ブリンタ−ゲティング薬のノコダゾ−ルで５分間処置し、次いで、Ｃ７５およびノコダゾ−ル薬を休薬し、４０分後に細胞を撮像した方法の略図を示す。図２Ｅは、２Ｄに示すように処置し、チュ−ブリン（微小管）およびＤＡＰＩ（ＤＮＡ）で共染色した固定ＨｅＬａ細胞の画像を示す。有糸分裂紡錘体はノコダゾ−ルの除去後に双極性を回復し、一方で、Ｃ７５の除去後に多極性を保持した。図２Ｆは、２Ｄおよび２Ｅに示すようにＣ７５での処置後にＧＦＰ：チュ−ブリンを発現している生ＨｅＬａ細胞の一連の低速度撮影画像である。全細胞のスケ−ルバ−は１０μｍである。図２Ｇは、Ｃ７５の推定上の標的を示す略図である。健康な細胞は２つの中心体を有し、これらが分離して双極紡錘体を形成し、一方で、癌細胞は異常な中心体を有し、この中心体がクラスタリングして「偽」双極紡錘体を形成する。Ｃ７５はこのプロセスおよびその完全性を標的にし得る。
【図２−２】Ｃ７５が癌細胞において有糸分裂を選択的に停止させ、中心体を標的にすることを示す。図２Ａは、種々の濃度のＣ７５で１集団倍加時間処置した後の有糸分裂期のＨＣＴ１１６（ｐ５３−／−）細胞、Ａ５４９細胞、ＨｅＬａ細胞、およびＨ１２９９細胞の百分率を示す折れ線グラフである。全ての細胞株は、２００ｎＭのＣ７５での処置後に有糸分裂細胞の比率が増加する。バ−は標準偏差を示す。図２Ｂは、表示のように３００ｎＭのＣ８７（不活性誘導体）またはＣ７５での処置の６〜８時間後に固定し、チュ−ブリン（微小管）およびＤＡＰＩ（ＤＮＡ）で共染色したＨＦＦ１細胞、Ｈ１２９９細胞、ＭＣＦ−１０Ａ細胞、およびＭＣＦ−７細胞を示す一連の画像である。有糸分裂紡錘体は、ＨＦＦ１細胞においてはＣ７５によって劇的に変化しなかったが、他の細胞型では単極（表示のように）または断片化した。図２Ｃは、表示のように３００ｎＭのＣ８７（より活性が低い誘導体）またはＣ７５での処置の６〜８時間後に固定し、チュ−ブリン（微小管）およびＤＡＰＩ（ＤＮＡ）で共染色した固定したＨｅＬａ細胞、ＢＴ−５４９細胞、Ａ５４９細胞、およびＨＣＴ１１６（ｐ５３−／−）細胞を示す画像である。有糸分裂紡錘体は、Ｃ７５処置後に図２Ｂ中の細胞と比較してこれらの細胞においてより強く断片化された。図２Ｄは、中期のＨｅＬａ細胞をＣ７５またはチュ−ブリンタ−ゲティング薬のノコダゾ−ルで５分間処置し、次いで、Ｃ７５およびノコダゾ−ル薬を休薬し、４０分後に細胞を撮像した方法の略図を示す。図２Ｅは、２Ｄに示すように処置し、チュ−ブリン（微小管）およびＤＡＰＩ（ＤＮＡ）で共染色した固定ＨｅＬａ細胞の画像を示す。有糸分裂紡錘体はノコダゾ−ルの除去後に双極性を回復し、一方で、Ｃ７５の除去後に多極性を保持した。図２Ｆは、２Ｄおよび２Ｅに示すようにＣ７５での処置後にＧＦＰ：チュ−ブリンを発現している生ＨｅＬａ細胞の一連の低速度撮影画像である。全細胞のスケ−ルバ−は１０μｍである。図２Ｇは、Ｃ７５の推定上の標的を示す略図である。健康な細胞は２つの中心体を有し、これらが分離して双極紡錘体を形成し、一方で、癌細胞は異常な中心体を有し、この中心体がクラスタリングして「偽」双極紡錘体を形成する。Ｃ７５はこのプロセスおよびその完全性を標的にし得る。
【図２−３】Ｃ７５が癌細胞において有糸分裂を選択的に停止させ、中心体を標的にすることを示す。図２Ａは、種々の濃度のＣ７５で１集団倍加時間処置した後の有糸分裂期のＨＣＴ１１６（ｐ５３−／−）細胞、Ａ５４９細胞、ＨｅＬａ細胞、およびＨ１２９９細胞の百分率を示す折れ線グラフである。全ての細胞株は、２００ｎＭのＣ７５での処置後に有糸分裂細胞の比率が増加する。バ−は標準偏差を示す。図２Ｂは、表示のように３００ｎＭのＣ８７（不活性誘導体）またはＣ７５での処置の６〜８時間後に固定し、チュ−ブリン（微小管）およびＤＡＰＩ（ＤＮＡ）で共染色したＨＦＦ１細胞、Ｈ１２９９細胞、ＭＣＦ−１０Ａ細胞、およびＭＣＦ−７細胞を示す一連の画像である。有糸分裂紡錘体は、ＨＦＦ１細胞においてはＣ７５によって劇的に変化しなかったが、他の細胞型では単極（表示のように）または断片化した。図２Ｃは、表示のように３００ｎＭのＣ８７（より活性が低い誘導体）またはＣ７５での処置の６〜８時間後に固定し、チュ−ブリン（微小管）およびＤＡＰＩ（ＤＮＡ）で共染色した固定したＨｅＬａ細胞、ＢＴ−５４９細胞、Ａ５４９細胞、およびＨＣＴ１１６（ｐ５３−／−）細胞を示す画像である。有糸分裂紡錘体は、Ｃ７５処置後に図２Ｂ中の細胞と比較してこれらの細胞においてより強く断片化された。図２Ｄは、中期のＨｅＬａ細胞をＣ７５またはチュ−ブリンタ−ゲティング薬のノコダゾ−ルで５分間処置し、次いで、Ｃ７５およびノコダゾ−ル薬を休薬し、４０分後に細胞を撮像した方法の略図を示す。図２Ｅは、２Ｄに示すように処置し、チュ−ブリン（微小管）およびＤＡＰＩ（ＤＮＡ）で共染色した固定ＨｅＬａ細胞の画像を示す。有糸分裂紡錘体はノコダゾ−ルの除去後に双極性を回復し、一方で、Ｃ７５の除去後に多極性を保持した。図２Ｆは、２Ｄおよび２Ｅに示すようにＣ７５での処置後にＧＦＰ：チュ−ブリンを発現している生ＨｅＬａ細胞の一連の低速度撮影画像である。全細胞のスケ−ルバ−は１０μｍである。図２Ｇは、Ｃ７５の推定上の標的を示す略図である。健康な細胞は２つの中心体を有し、これらが分離して双極紡錘体を形成し、一方で、癌細胞は異常な中心体を有し、この中心体がクラスタリングして「偽」双極紡錘体を形成する。Ｃ７５はこのプロセスおよびその完全性を標的にし得る。
【図２−４】Ｃ７５が癌細胞において有糸分裂を選択的に停止させ、中心体を標的にすることを示す。図２Ａは、種々の濃度のＣ７５で１集団倍加時間処置した後の有糸分裂期のＨＣＴ１１６（ｐ５３−／−）細胞、Ａ５４９細胞、ＨｅＬａ細胞、およびＨ１２９９細胞の百分率を示す折れ線グラフである。全ての細胞株は、２００ｎＭのＣ７５での処置後に有糸分裂細胞の比率が増加する。バ−は標準偏差を示す。図２Ｂは、表示のように３００ｎＭのＣ８７（不活性誘導体）またはＣ７５での処置の６〜８時間後に固定し、チュ−ブリン（微小管）およびＤＡＰＩ（ＤＮＡ）で共染色したＨＦＦ１細胞、Ｈ１２９９細胞、ＭＣＦ−１０Ａ細胞、およびＭＣＦ−７細胞を示す一連の画像である。有糸分裂紡錘体は、ＨＦＦ１細胞においてはＣ７５によって劇的に変化しなかったが、他の細胞型では単極（表示のように）または断片化した。図２Ｃは、表示のように３００ｎＭのＣ８７（より活性が低い誘導体）またはＣ７５での処置の６〜８時間後に固定し、チュ−ブリン（微小管）およびＤＡＰＩ（ＤＮＡ）で共染色した固定したＨｅＬａ細胞、ＢＴ−５４９細胞、Ａ５４９細胞、およびＨＣＴ１１６（ｐ５３−／−）細胞を示す画像である。有糸分裂紡錘体は、Ｃ７５処置後に図２Ｂ中の細胞と比較してこれらの細胞においてより強く断片化された。図２Ｄは、中期のＨｅＬａ細胞をＣ７５またはチュ−ブリンタ−ゲティング薬のノコダゾ−ルで５分間処置し、次いで、Ｃ７５およびノコダゾ−ル薬を休薬し、４０分後に細胞を撮像した方法の略図を示す。図２Ｅは、２Ｄに示すように処置し、チュ−ブリン（微小管）およびＤＡＰＩ（ＤＮＡ）で共染色した固定ＨｅＬａ細胞の画像を示す。有糸分裂紡錘体はノコダゾ−ルの除去後に双極性を回復し、一方で、Ｃ７５の除去後に多極性を保持した。図２Ｆは、２Ｄおよび２Ｅに示すようにＣ７５での処置後にＧＦＰ：チュ−ブリンを発現している生ＨｅＬａ細胞の一連の低速度撮影画像である。全細胞のスケ−ルバ−は１０μｍである。図２Ｇは、Ｃ７５の推定上の標的を示す略図である。健康な細胞は２つの中心体を有し、これらが分離して双極紡錘体を形成し、一方で、癌細胞は異常な中心体を有し、この中心体がクラスタリングして「偽」双極紡錘体を形成する。Ｃ７５はこのプロセスおよびその完全性を標的にし得る。
【図２−５】Ｃ７５が癌細胞において有糸分裂を選択的に停止させ、中心体を標的にすることを示す。図２Ａは、種々の濃度のＣ７５で１集団倍加時間処置した後の有糸分裂期のＨＣＴ１１６（ｐ５３−／−）細胞、Ａ５４９細胞、ＨｅＬａ細胞、およびＨ１２９９細胞の百分率を示す折れ線グラフである。全ての細胞株は、２００ｎＭのＣ７５での処置後に有糸分裂細胞の比率が増加する。バ−は標準偏差を示す。図２Ｂは、表示のように３００ｎＭのＣ８７（不活性誘導体）またはＣ７５での処置の６〜８時間後に固定し、チュ−ブリン（微小管）およびＤＡＰＩ（ＤＮＡ）で共染色したＨＦＦ１細胞、Ｈ１２９９細胞、ＭＣＦ−１０Ａ細胞、およびＭＣＦ−７細胞を示す一連の画像である。有糸分裂紡錘体は、ＨＦＦ１細胞においてはＣ７５によって劇的に変化しなかったが、他の細胞型では単極（表示のように）または断片化した。図２Ｃは、表示のように３００ｎＭのＣ８７（より活性が低い誘導体）またはＣ７５での処置の６〜８時間後に固定し、チュ−ブリン（微小管）およびＤＡＰＩ（ＤＮＡ）で共染色した固定したＨｅＬａ細胞、ＢＴ−５４９細胞、Ａ５４９細胞、およびＨＣＴ１１６（ｐ５３−／−）細胞を示す画像である。有糸分裂紡錘体は、Ｃ７５処置後に図２Ｂ中の細胞と比較してこれらの細胞においてより強く断片化された。図２Ｄは、中期のＨｅＬａ細胞をＣ７５またはチュ−ブリンタ−ゲティング薬のノコダゾ−ルで５分間処置し、次いで、Ｃ７５およびノコダゾ−ル薬を休薬し、４０分後に細胞を撮像した方法の略図を示す。図２Ｅは、２Ｄに示すように処置し、チュ−ブリン（微小管）およびＤＡＰＩ（ＤＮＡ）で共染色した固定ＨｅＬａ細胞の画像を示す。有糸分裂紡錘体はノコダゾ−ルの除去後に双極性を回復し、一方で、Ｃ７５の除去後に多極性を保持した。図２Ｆは、２Ｄおよび２Ｅに示すようにＣ７５での処置後にＧＦＰ：チュ−ブリンを発現している生ＨｅＬａ細胞の一連の低速度撮影画像である。全細胞のスケ−ルバ−は１０μｍである。図２Ｇは、Ｃ７５の推定上の標的を示す略図である。健康な細胞は２つの中心体を有し、これらが分離して双極紡錘体を形成し、一方で、癌細胞は異常な中心体を有し、この中心体がクラスタリングして「偽」双極紡錘体を形成する。Ｃ７５はこのプロセスおよびその完全性を標的にし得る。
【図２−６】Ｃ７５が癌細胞において有糸分裂を選択的に停止させ、中心体を標的にすることを示す。図２Ａは、種々の濃度のＣ７５で１集団倍加時間処置した後の有糸分裂期のＨＣＴ１１６（ｐ５３−／−）細胞、Ａ５４９細胞、ＨｅＬａ細胞、およびＨ１２９９細胞の百分率を示す折れ線グラフである。全ての細胞株は、２００ｎＭのＣ７５での処置後に有糸分裂細胞の比率が増加する。バ−は標準偏差を示す。図２Ｂは、表示のように３００ｎＭのＣ８７（不活性誘導体）またはＣ７５での処置の６〜８時間後に固定し、チュ−ブリン（微小管）およびＤＡＰＩ（ＤＮＡ）で共染色したＨＦＦ１細胞、Ｈ１２９９細胞、ＭＣＦ−１０Ａ細胞、およびＭＣＦ−７細胞を示す一連の画像である。有糸分裂紡錘体は、ＨＦＦ１細胞においてはＣ７５によって劇的に変化しなかったが、他の細胞型では単極（表示のように）または断片化した。図２Ｃは、表示のように３００ｎＭのＣ８７（より活性が低い誘導体）またはＣ７５での処置の６〜８時間後に固定し、チュ−ブリン（微小管）およびＤＡＰＩ（ＤＮＡ）で共染色した固定したＨｅＬａ細胞、ＢＴ−５４９細胞、Ａ５４９細胞、およびＨＣＴ１１６（ｐ５３−／−）細胞を示す画像である。有糸分裂紡錘体は、Ｃ７５処置後に図２Ｂ中の細胞と比較してこれらの細胞においてより強く断片化された。図２Ｄは、中期のＨｅＬａ細胞をＣ７５またはチュ−ブリンタ−ゲティング薬のノコダゾ−ルで５分間処置し、次いで、Ｃ７５およびノコダゾ−ル薬を休薬し、４０分後に細胞を撮像した方法の略図を示す。図２Ｅは、２Ｄに示すように処置し、チュ−ブリン（微小管）およびＤＡＰＩ（ＤＮＡ）で共染色した固定ＨｅＬａ細胞の画像を示す。有糸分裂紡錘体はノコダゾ−ルの除去後に双極性を回復し、一方で、Ｃ７５の除去後に多極性を保持した。図２Ｆは、２Ｄおよび２Ｅに示すようにＣ７５での処置後にＧＦＰ：チュ−ブリンを発現している生ＨｅＬａ細胞の一連の低速度撮影画像である。全細胞のスケ−ルバ−は１０μｍである。図２Ｇは、Ｃ７５の推定上の標的を示す略図である。健康な細胞は２つの中心体を有し、これらが分離して双極紡錘体を形成し、一方で、癌細胞は異常な中心体を有し、この中心体がクラスタリングして「偽」双極紡錘体を形成する。Ｃ７５はこのプロセスおよびその完全性を標的にし得る。
【図２−７】Ｃ７５が癌細胞において有糸分裂を選択的に停止させ、中心体を標的にすることを示す。図２Ａは、種々の濃度のＣ７５で１集団倍加時間処置した後の有糸分裂期のＨＣＴ１１６（ｐ５３−／−）細胞、Ａ５４９細胞、ＨｅＬａ細胞、およびＨ１２９９細胞の百分率を示す折れ線グラフである。全ての細胞株は、２００ｎＭのＣ７５での処置後に有糸分裂細胞の比率が増加する。バ−は標準偏差を示す。図２Ｂは、表示のように３００ｎＭのＣ８７（不活性誘導体）またはＣ７５での処置の６〜８時間後に固定し、チュ−ブリン（微小管）およびＤＡＰＩ（ＤＮＡ）で共染色したＨＦＦ１細胞、Ｈ１２９９細胞、ＭＣＦ−１０Ａ細胞、およびＭＣＦ−７細胞を示す一連の画像である。有糸分裂紡錘体は、ＨＦＦ１細胞においてはＣ７５によって劇的に変化しなかったが、他の細胞型では単極（表示のように）または断片化した。図２Ｃは、表示のように３００ｎＭのＣ８７（より活性が低い誘導体）またはＣ７５での処置の６〜８時間後に固定し、チュ−ブリン（微小管）およびＤＡＰＩ（ＤＮＡ）で共染色した固定したＨｅＬａ細胞、ＢＴ−５４９細胞、Ａ５４９細胞、およびＨＣＴ１１６（ｐ５３−／−）細胞を示す画像である。有糸分裂紡錘体は、Ｃ７５処置後に図２Ｂ中の細胞と比較してこれらの細胞においてより強く断片化された。図２Ｄは、中期のＨｅＬａ細胞をＣ７５またはチュ−ブリンタ−ゲティング薬のノコダゾ−ルで５分間処置し、次いで、Ｃ７５およびノコダゾ−ル薬を休薬し、４０分後に細胞を撮像した方法の略図を示す。図２Ｅは、２Ｄに示すように処置し、チュ−ブリン（微小管）およびＤＡＰＩ（ＤＮＡ）で共染色した固定ＨｅＬａ細胞の画像を示す。有糸分裂紡錘体はノコダゾ−ルの除去後に双極性を回復し、一方で、Ｃ７５の除去後に多極性を保持した。図２Ｆは、２Ｄおよび２Ｅに示すようにＣ７５での処置後にＧＦＰ：チュ−ブリンを発現している生ＨｅＬａ細胞の一連の低速度撮影画像である。全細胞のスケ−ルバ−は１０μｍである。図２Ｇは、Ｃ７５の推定上の標的を示す略図である。健康な細胞は２つの中心体を有し、これらが分離して双極紡錘体を形成し、一方で、癌細胞は異常な中心体を有し、この中心体がクラスタリングして「偽」双極紡錘体を形成する。Ｃ７５はこのプロセスおよびその完全性を標的にし得る。
【図３−１】Ｃ７５が癌細胞に対するチュ−ブリンタ−ゲティング薬の選択性を増強することを示す。図３Ａは、表示の濃度範囲のパクリタキセル（タキソ−ル（商標）；チュ−ブリンタ−ゲティング薬）＋／−Ｃ７５で処置した有糸分裂期のＨｅＬａ細胞またはＨＦＦ１細胞の百分率を示す折れ線グラフである。バ−は標準偏差を示す。図３Ｂは、示すように処置した後の単極紡錘体、染色体が整列した双極紡錘体、染色体が誤整列した双極紡錘体、および多極／断片化紡錘体を有するＨＣＴ１１６細胞の比率を示す一連の棒グラフである。処置には、７時間後のＤＭＳＯ（コントロ−ル）、種々の濃度のパクリタキセル、および／または種々の濃度のＣ７５での処置が含まれる。ＨＣＴ１１６細胞の２．５ｎＭパクリタキセルでの処置により有糸分裂紡錘体の表現型の閾値が得られ、一方で、２．５ｎＭパクリタキセルと組み合わせた漸増濃度のＣ７５の添加により表現型が次第に悪化した。図３Ｃは、表示の処置後のＨＣＴ１１６細胞における中心体断片間の平均距離を示す棒グラフである。中心体断片はパクリタキセル濃度を増加させると相互に近づき、一方で、Ｃ７５濃度を増加させると離れていった。図３Ｄは、チュ−ブリン（微小管）およびＤＡＰＩ（ＤＮＡ）で染色した固定ＨＣＴ１１６細胞の一連の画像であり、紡錘体断片間の距離の相違を示す。図３Ｅは、表示の濃度範囲のノコダゾ−ル＋／−Ｃ７５で処置した有糸分裂期のＨｅＬａ細胞またはＨＦＦ１細胞の百分率を示す折れ線グラフである。バ−は標準偏差を示す。図３Ｆは、チュ−ブリン、γ−チュ−ブリン、およびＤＮＡ（ＤＡＰＩ）で共染色したＣ７５＋／−ノコダゾ−ルでの処置後の固定ＨｅＬａ細胞を示す一連の画像である。点線は、細胞の輪郭を示す。３００ｎＭのＣ７５で処置した細胞にノコダゾ−ルを添加すると有糸分裂紡錘体の表現型が悪化し、６００ｎＭのＣ７５での処置後の表現型により類似するようである。全細胞についてのスケ−ルバ−は１０μｍである。図３Ｇは、ノコダゾ−ルもしくはＣ７５またはその両方で２０分間処置した中期ＨｅＬａ細胞について観察した表現型の百分率を示す棒グラフである（ｎ＞１５／処置）。
【図３−２】Ｃ７５が癌細胞に対するチュ−ブリンタ−ゲティング薬の選択性を増強することを示す。図３Ａは、表示の濃度範囲のパクリタキセル（タキソ−ル（商標）；チュ−ブリンタ−ゲティング薬）＋／−Ｃ７５で処置した有糸分裂期のＨｅＬａ細胞またはＨＦＦ１細胞の百分率を示す折れ線グラフである。バ−は標準偏差を示す。図３Ｂは、示すように処置した後の単極紡錘体、染色体が整列した双極紡錘体、染色体が誤整列した双極紡錘体、および多極／断片化紡錘体を有するＨＣＴ１１６細胞の比率を示す一連の棒グラフである。処置には、７時間後のＤＭＳＯ（コントロ−ル）、種々の濃度のパクリタキセル、および／または種々の濃度のＣ７５での処置が含まれる。ＨＣＴ１１６細胞の２．５ｎＭパクリタキセルでの処置により有糸分裂紡錘体の表現型の閾値が得られ、一方で、２．５ｎＭパクリタキセルと組み合わせた漸増濃度のＣ７５の添加により表現型が次第に悪化した。図３Ｃは、表示の処置後のＨＣＴ１１６細胞における中心体断片間の平均距離を示す棒グラフである。中心体断片はパクリタキセル濃度を増加させると相互に近づき、一方で、Ｃ７５濃度を増加させると離れていった。図３Ｄは、チュ−ブリン（微小管）およびＤＡＰＩ（ＤＮＡ）で染色した固定ＨＣＴ１１６細胞の一連の画像であり、紡錘体断片間の距離の相違を示す。図３Ｅは、表示の濃度範囲のノコダゾ−ル＋／−Ｃ７５で処置した有糸分裂期のＨｅＬａ細胞またはＨＦＦ１細胞の百分率を示す折れ線グラフである。バ−は標準偏差を示す。図３Ｆは、チュ−ブリン、γ−チュ−ブリン、およびＤＮＡ（ＤＡＰＩ）で共染色したＣ７５＋／−ノコダゾ−ルでの処置後の固定ＨｅＬａ細胞を示す一連の画像である。点線は、細胞の輪郭を示す。３００ｎＭのＣ７５で処置した細胞にノコダゾ−ルを添加すると有糸分裂紡錘体の表現型が悪化し、６００ｎＭのＣ７５での処置後の表現型により類似するようである。全細胞についてのスケ−ルバ−は１０μｍである。図３Ｇは、ノコダゾ−ルもしくはＣ７５またはその両方で２０分間処置した中期ＨｅＬａ細胞について観察した表現型の百分率を示す棒グラフである（ｎ＞１５／処置）。
【図３−３】Ｃ７５が癌細胞に対するチュ−ブリンタ−ゲティング薬の選択性を増強することを示す。図３Ａは、表示の濃度範囲のパクリタキセル（タキソ−ル（商標）；チュ−ブリンタ−ゲティング薬）＋／−Ｃ７５で処置した有糸分裂期のＨｅＬａ細胞またはＨＦＦ１細胞の百分率を示す折れ線グラフである。バ−は標準偏差を示す。図３Ｂは、示すように処置した後の単極紡錘体、染色体が整列した双極紡錘体、染色体が誤整列した双極紡錘体、および多極／断片化紡錘体を有するＨＣＴ１１６細胞の比率を示す一連の棒グラフである。処置には、７時間後のＤＭＳＯ（コントロ−ル）、種々の濃度のパクリタキセル、および／または種々の濃度のＣ７５での処置が含まれる。ＨＣＴ１１６細胞の２．５ｎＭパクリタキセルでの処置により有糸分裂紡錘体の表現型の閾値が得られ、一方で、２．５ｎＭパクリタキセルと組み合わせた漸増濃度のＣ７５の添加により表現型が次第に悪化した。図３Ｃは、表示の処置後のＨＣＴ１１６細胞における中心体断片間の平均距離を示す棒グラフである。中心体断片はパクリタキセル濃度を増加させると相互に近づき、一方で、Ｃ７５濃度を増加させると離れていった。図３Ｄは、チュ−ブリン（微小管）およびＤＡＰＩ（ＤＮＡ）で染色した固定ＨＣＴ１１６細胞の一連の画像であり、紡錘体断片間の距離の相違を示す。図３Ｅは、表示の濃度範囲のノコダゾ−ル＋／−Ｃ７５で処置した有糸分裂期のＨｅＬａ細胞またはＨＦＦ１細胞の百分率を示す折れ線グラフである。バ−は標準偏差を示す。図３Ｆは、チュ−ブリン、γ−チュ−ブリン、およびＤＮＡ（ＤＡＰＩ）で共染色したＣ７５＋／−ノコダゾ−ルでの処置後の固定ＨｅＬａ細胞を示す一連の画像である。点線は、細胞の輪郭を示す。３００ｎＭのＣ７５で処置した細胞にノコダゾ−ルを添加すると有糸分裂紡錘体の表現型が悪化し、６００ｎＭのＣ７５での処置後の表現型により類似するようである。全細胞についてのスケ−ルバ−は１０μｍである。図３Ｇは、ノコダゾ−ルもしくはＣ７５またはその両方で２０分間処置した中期ＨｅＬａ細胞について観察した表現型の百分率を示す棒グラフである（ｎ＞１５／処置）。
【図３−４】Ｃ７５が癌細胞に対するチュ−ブリンタ−ゲティング薬の選択性を増強することを示す。図３Ａは、表示の濃度範囲のパクリタキセル（タキソ−ル（商標）；チュ−ブリンタ−ゲティング薬）＋／−Ｃ７５で処置した有糸分裂期のＨｅＬａ細胞またはＨＦＦ１細胞の百分率を示す折れ線グラフである。バ−は標準偏差を示す。図３Ｂは、示すように処置した後の単極紡錘体、染色体が整列した双極紡錘体、染色体が誤整列した双極紡錘体、および多極／断片化紡錘体を有するＨＣＴ１１６細胞の比率を示す一連の棒グラフである。処置には、７時間後のＤＭＳＯ（コントロ−ル）、種々の濃度のパクリタキセル、および／または種々の濃度のＣ７５での処置が含まれる。ＨＣＴ１１６細胞の２．５ｎＭパクリタキセルでの処置により有糸分裂紡錘体の表現型の閾値が得られ、一方で、２．５ｎＭパクリタキセルと組み合わせた漸増濃度のＣ７５の添加により表現型が次第に悪化した。図３Ｃは、表示の処置後のＨＣＴ１１６細胞における中心体断片間の平均距離を示す棒グラフである。中心体断片はパクリタキセル濃度を増加させると相互に近づき、一方で、Ｃ７５濃度を増加させると離れていった。図３Ｄは、チュ−ブリン（微小管）およびＤＡＰＩ（ＤＮＡ）で染色した固定ＨＣＴ１１６細胞の一連の画像であり、紡錘体断片間の距離の相違を示す。図３Ｅは、表示の濃度範囲のノコダゾ−ル＋／−Ｃ７５で処置した有糸分裂期のＨｅＬａ細胞またはＨＦＦ１細胞の百分率を示す折れ線グラフである。バ−は標準偏差を示す。図３Ｆは、チュ−ブリン、γ−チュ−ブリン、およびＤＮＡ（ＤＡＰＩ）で共染色したＣ７５＋／−ノコダゾ−ルでの処置後の固定ＨｅＬａ細胞を示す一連の画像である。点線は、細胞の輪郭を示す。３００ｎＭのＣ７５で処置した細胞にノコダゾ−ルを添加すると有糸分裂紡錘体の表現型が悪化し、６００ｎＭのＣ７５での処置後の表現型により類似するようである。全細胞についてのスケ−ルバ−は１０μｍである。図３Ｇは、ノコダゾ−ルもしくはＣ７５またはその両方で２０分間処置した中期ＨｅＬａ細胞について観察した表現型の百分率を示す棒グラフである（ｎ＞１５／処置）。
【図３−５】Ｃ７５が癌細胞に対するチュ−ブリンタ−ゲティング薬の選択性を増強することを示す。図３Ａは、表示の濃度範囲のパクリタキセル（タキソ−ル（商標）；チュ−ブリンタ−ゲティング薬）＋／−Ｃ７５で処置した有糸分裂期のＨｅＬａ細胞またはＨＦＦ１細胞の百分率を示す折れ線グラフである。バ−は標準偏差を示す。図３Ｂは、示すように処置した後の単極紡錘体、染色体が整列した双極紡錘体、染色体が誤整列した双極紡錘体、および多極／断片化紡錘体を有するＨＣＴ１１６細胞の比率を示す一連の棒グラフである。処置には、７時間後のＤＭＳＯ（コントロ−ル）、種々の濃度のパクリタキセル、および／または種々の濃度のＣ７５での処置が含まれる。ＨＣＴ１１６細胞の２．５ｎＭパクリタキセルでの処置により有糸分裂紡錘体の表現型の閾値が得られ、一方で、２．５ｎＭパクリタキセルと組み合わせた漸増濃度のＣ７５の添加により表現型が次第に悪化した。図３Ｃは、表示の処置後のＨＣＴ１１６細胞における中心体断片間の平均距離を示す棒グラフである。中心体断片はパクリタキセル濃度を増加させると相互に近づき、一方で、Ｃ７５濃度を増加させると離れていった。図３Ｄは、チュ−ブリン（微小管）およびＤＡＰＩ（ＤＮＡ）で染色した固定ＨＣＴ１１６細胞の一連の画像であり、紡錘体断片間の距離の相違を示す。図３Ｅは、表示の濃度範囲のノコダゾ−ル＋／−Ｃ７５で処置した有糸分裂期のＨｅＬａ細胞またはＨＦＦ１細胞の百分率を示す折れ線グラフである。バ−は標準偏差を示す。図３Ｆは、チュ−ブリン、γ−チュ−ブリン、およびＤＮＡ（ＤＡＰＩ）で共染色したＣ７５＋／−ノコダゾ−ルでの処置後の固定ＨｅＬａ細胞を示す一連の画像である。点線は、細胞の輪郭を示す。３００ｎＭのＣ７５で処置した細胞にノコダゾ−ルを添加すると有糸分裂紡錘体の表現型が悪化し、６００ｎＭのＣ７５での処置後の表現型により類似するようである。全細胞についてのスケ−ルバ−は１０μｍである。図３Ｇは、ノコダゾ−ルもしくはＣ７５またはその両方で２０分間処置した中期ＨｅＬａ細胞について観察した表現型の百分率を示す棒グラフである（ｎ＞１５／処置）。
【図３−６】Ｃ７５が癌細胞に対するチュ−ブリンタ−ゲティング薬の選択性を増強することを示す。図３Ａは、表示の濃度範囲のパクリタキセル（タキソ−ル（商標）；チュ−ブリンタ−ゲティング薬）＋／−Ｃ７５で処置した有糸分裂期のＨｅＬａ細胞またはＨＦＦ１細胞の百分率を示す折れ線グラフである。バ−は標準偏差を示す。図３Ｂは、示すように処置した後の単極紡錘体、染色体が整列した双極紡錘体、染色体が誤整列した双極紡錘体、および多極／断片化紡錘体を有するＨＣＴ１１６細胞の比率を示す一連の棒グラフである。処置には、７時間後のＤＭＳＯ（コントロ−ル）、種々の濃度のパクリタキセル、および／または種々の濃度のＣ７５での処置が含まれる。ＨＣＴ１１６細胞の２．５ｎＭパクリタキセルでの処置により有糸分裂紡錘体の表現型の閾値が得られ、一方で、２．５ｎＭパクリタキセルと組み合わせた漸増濃度のＣ７５の添加により表現型が次第に悪化した。図３Ｃは、表示の処置後のＨＣＴ１１６細胞における中心体断片間の平均距離を示す棒グラフである。中心体断片はパクリタキセル濃度を増加させると相互に近づき、一方で、Ｃ７５濃度を増加させると離れていった。図３Ｄは、チュ−ブリン（微小管）およびＤＡＰＩ（ＤＮＡ）で染色した固定ＨＣＴ１１６細胞の一連の画像であり、紡錘体断片間の距離の相違を示す。図３Ｅは、表示の濃度範囲のノコダゾ−ル＋／−Ｃ７５で処置した有糸分裂期のＨｅＬａ細胞またはＨＦＦ１細胞の百分率を示す折れ線グラフである。バ−は標準偏差を示す。図３Ｆは、チュ−ブリン、γ−チュ−ブリン、およびＤＮＡ（ＤＡＰＩ）で共染色したＣ７５＋／−ノコダゾ−ルでの処置後の固定ＨｅＬａ細胞を示す一連の画像である。点線は、細胞の輪郭を示す。３００ｎＭのＣ７５で処置した細胞にノコダゾ−ルを添加すると有糸分裂紡錘体の表現型が悪化し、６００ｎＭのＣ７５での処置後の表現型により類似するようである。全細胞についてのスケ−ルバ−は１０μｍである。図３Ｇは、ノコダゾ−ルもしくはＣ７５またはその両方で２０分間処置した中期ＨｅＬａ細胞について観察した表現型の百分率を示す棒グラフである（ｎ＞１５／処置）。
【図３−７】Ｃ７５が癌細胞に対するチュ−ブリンタ−ゲティング薬の選択性を増強することを示す。図３Ａは、表示の濃度範囲のパクリタキセル（タキソ−ル（商標）；チュ−ブリンタ−ゲティング薬）＋／−Ｃ７５で処置した有糸分裂期のＨｅＬａ細胞またはＨＦＦ１細胞の百分率を示す折れ線グラフである。バ−は標準偏差を示す。図３Ｂは、示すように処置した後の単極紡錘体、染色体が整列した双極紡錘体、染色体が誤整列した双極紡錘体、および多極／断片化紡錘体を有するＨＣＴ１１６細胞の比率を示す一連の棒グラフである。処置には、７時間後のＤＭＳＯ（コントロ−ル）、種々の濃度のパクリタキセル、および／または種々の濃度のＣ７５での処置が含まれる。ＨＣＴ１１６細胞の２．５ｎＭパクリタキセルでの処置により有糸分裂紡錘体の表現型の閾値が得られ、一方で、２．５ｎＭパクリタキセルと組み合わせた漸増濃度のＣ７５の添加により表現型が次第に悪化した。図３Ｃは、表示の処置後のＨＣＴ１１６細胞における中心体断片間の平均距離を示す棒グラフである。中心体断片はパクリタキセル濃度を増加させると相互に近づき、一方で、Ｃ７５濃度を増加させると離れていった。図３Ｄは、チュ−ブリン（微小管）およびＤＡＰＩ（ＤＮＡ）で染色した固定ＨＣＴ１１６細胞の一連の画像であり、紡錘体断片間の距離の相違を示す。図３Ｅは、表示の濃度範囲のノコダゾ−ル＋／−Ｃ７５で処置した有糸分裂期のＨｅＬａ細胞またはＨＦＦ１細胞の百分率を示す折れ線グラフである。バ−は標準偏差を示す。図３Ｆは、チュ−ブリン、γ−チュ−ブリン、およびＤＮＡ（ＤＡＰＩ）で共染色したＣ７５＋／−ノコダゾ−ルでの処置後の固定ＨｅＬａ細胞を示す一連の画像である。点線は、細胞の輪郭を示す。３００ｎＭのＣ７５で処置した細胞にノコダゾ−ルを添加すると有糸分裂紡錘体の表現型が悪化し、６００ｎＭのＣ７５での処置後の表現型により類似するようである。全細胞についてのスケ−ルバ−は１０μｍである。図３Ｇは、ノコダゾ−ルもしくはＣ７５またはその両方で２０分間処置した中期ＨｅＬａ細胞について観察した表現型の百分率を示す棒グラフである（ｎ＞１５／処置）。
【図４−１】８時間後に示すようにＤＭＳＯ（コントロ−ル）および種々の濃度のコルヒチンまたはＣ７５で処置した後の単極紡錘体、染色体が整列した双極紡錘体、染色体が誤整列した双極紡錘体、および多極／断片化紡錘体を有するＨｅＬａ細胞の比率を示す一連の棒グラフである。
【図４−２】ＤＭＳＯ、コルヒチン、またはＣ７５でそれぞれ処置した後に認められる異なる表現型を示すためにチュ−ブリン（微小管）およびＤＡＰＩ（ＤＮＡ）で染色した固定ＨｅＬａ細胞の一連の画像である。コルヒチン処置細胞における大規模な微小管脱重合後に紡錘体断片化のみが起こり、一方で、Ｃ７５処置後の微小管の変化前に紡錘体極が断片化した。全細胞についてのスケ−ルバ−は１０μｍである。
【図５−１】コントロ−ル（５００ｎＭ  Ｃ８７）、空のナノ粒子、５００ｎＭ  Ｃ７５、および２５０ｎＭ  Ｃ７５負荷ナノ粒子で３日間にわたって処置したＨｅＬａ多細胞腫瘍スフェロイド（スフェロイド）の一連の画像である。認められるように、Ｃ７５はたった２日後にＨｅＬａスフェロイドを破壊し、一方で、コントロ−ルスフェロイドは成長し続けた。全画像のスケ−ルバ−は１００μｍである。
【図５−２】コントロ−ル（５００ｎＭ  Ｃ８７）または５００ｎＭ  Ｃ７５での処置から３日後のＨｅＬａスフェロイドの一連の画像である。スフェロイドを、フルオレセイン二酢酸（生細胞を検出するため）およびヨウ化プロピジウム（死細胞を検出するため）で染色した。大部分のＨｅＬａ細胞は、Ｃ７５処置後に死滅した。全画像のスケ−ルバ−は１００μｍである。
【図５−３】コントロ−ル（１μＭ  Ｃ８７）、５００ｎＭ  Ｃ７５、１μＭ  Ｃ７５、および５００ｎＭ  Ｃ７５負荷ナノ粒子で５日間にわたって処置したＨＣＴ１１６スフェロイドの一連の画像である。認められるように、Ｃ７５は、成長し続けたコントロ−ルスフェロイドと比較してＨＣＴ１１６スフェロイドの成長を退行させた。１μＭ  Ｃ７５または５００ｎＭ  Ｃ７５負荷ナノ粒子で処置したスフェロイドの境界は非常に不規則になり、これは、スフェロイド完全性の喪失を示していた。
【図５−４】コントロ−ル（１μＭ  Ｃ８７）または１μＭ  Ｃ７５での処置から６日後のＨＣＴ１１６スフェロイドの一連の画像である。スフェロイドを、フルオレセイン二酢酸（生細胞）およびヨウ化プロピジウム（死細胞）で染色した。ＨＣＴ１１６スフェロイドは、Ｃ７５処置後に遥かに小さくなったが、依然として生細胞を含んでいた。
【図５−５】６日後にコントロ−ル（１μＭ  Ｃ８７）、５００ｎＭ  Ｃ７５、および１μＭ  Ｃ７５で処置したＨＣＴ１１６スフェロイドの成長を表面積（％）で示した折れ線グラフである。
【図５−６】コントロ−ル（７５０ｎＭ  Ｃ８７）、５００ｎＭ  Ｃ７５、１μＭ  Ｃ７５、および５００ｎＭ  Ｃ７５負荷ナノ粒子で５日間にわたって処置したＡ５４９スフェロイドの一連の画像である。認められるように、Ｃ７５はＡ５４９スフェロイドの成長を退行させた。Ｃ７５負荷ナノ粒子自体は成長を退行させいないようであったが、スフェロイドの境界は非常に不規則になり、その破壊を支持していた。全画像のスケ−ルバ−は１００μｍである。
【図５−７】コントロ−ル（７５０ｎＭ  Ｃ８７）または１μＭ  Ｃ７５でｎ処置の６日後のＡ５４９スフェロイドの一連の画像である。スフェロイドを、フルオレセイン二酢酸（生細胞）およびヨウ化プロピジウム（死細胞）で染色した。認められるように、コントロ−ルと比較して、Ｃ７５はＡ５４９スフェロイドの成長を退行させ、Ｃ７５処置スフェロイド内の生細胞はより少なかった。
【発明を実施するための形態】
【００２８】
したがって、臨床用途の見込みがある抗癌化合物クラスを同定した。首尾の良い薬らしい性質を有することが既に証明されているキノリン足場を有する化合物の合成により（７〜１１）、品質に関連する制限を克服できるようになった。これらの化合物は、公知の抗癌薬と比較して癌細胞で独自に起こるプロセスを標的にし、それにより、これらの化合物が癌細胞に対する選択性を示すことによって固有の作用機序を有するようである。さらに、これらの化合物は他の抗癌薬の選択性を増強し、それにより、併用療法での使用に適切である。
【００２９】
Ｉ．定義
本文書で使用される表現「本開示の化合物（複数可）」は、本開示で示した式ＩおよびＩＡの化合物、その異性体（立体異性体（例えば、鏡像異性体、ジアステレオ異性体（ラセミ混合物が含まれる））または互変異性体など）をいうか、これらの化合物の薬学的に許容され得る塩、溶媒和物、水和物、および／またはプロドラッグ、これらの後者の化合物の異性体、またはこれらの後者の化合物のラセミ混合物をいう。表現「本開示の化合物（複数可）」はまた、本段落で述べた種々の化合物またはバリアントの混合物をいう。
【００３０】
本開示には本明細書中に記載の化合物の異性体、ラセミ混合物、薬学的に許容され得る塩、溶媒和物、水和物、およびプロドラッグ、ならびに２つ以上のそのような化合物を含む混合物が含まれると理解すべきである。
【００３１】
本開示の化合物は、少なくとも１つの不斉中心を有し得る。本明細書中に開示の化合物が１つを超える不斉中心を保有する場合、これらの化合物はジアステレオマ−として存在し得る。任意の比率でのすべてのそのような異性体およびその混合物が本開示の範囲内に含まれると理解すべきである。本開示の化合物の立体化学的性質は本明細書中に列挙した任意の所与の化合物において提供される通りであり得るが、本開示のそのような化合物が代替的な立体化学的性質を有する本開示の化合物も一定量（例えば、３０％未満、２０％未満、１０％未満、または５％未満）含み得ると理解すべきである。
【００３２】
本明細書中で使用される用語「アルキル」は、１〜ｎ個の炭素原子を含む直鎖および／または分枝鎖の飽和アルキル基を意味し、（ｎがどのような値であるかに応じて）メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｓ−ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、２，２−ジメチルブチル、ｎ−ペンチル、２−メチルペンチル、３−メチルペンチル、４−メチルペンチル、およびｎ−ヘキシルなど（式中、ｎは基内の炭素原子の最大数である）が含まれる。
【００３３】
本明細書中で使用される用語「アリ−ル」は、単環式または多環式の芳香環をいう。例えば、アリ−ル基は、フェニルまたはナフチル（ｎａｐｔｈｙｌ）であり得る。
【００３４】
本明細書中で使用される表現「芳香族ヘテロ環」は、Ｎ、Ｏ、Ｓ、およびＰからなる群から選択される少なくとも１つのヘテロ原子を有する芳香環系または縮合多環系をいう。ヘテロアリ−ル基の非限定的な例には、フリル、チエニル、ピリジル、キノリニル、イソキノリニル、インドリル、イソインドリル、トリアゾリル、ピロリル、テトラゾリル、イミダゾリル、ピラゾリル、オキサゾリル、チアゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾチオフェニル、カルバゾリル、ベンゾオキサゾリル、ピリミジニル、ベンズイミダゾリル、キノキサリニル、ベンゾチアゾリル、ナフチリジニル、イソオキサゾリル、イソチアゾリル、プリニル、およびキナゾリニルなどが含まれる。
【００３５】
表現「非芳香族ヘテロ環」には、Ｎ、Ｏ、Ｓ、およびＰからなる群から選択される少なくとも１つのヘテロ原子を少なくとも有する少なくとも１つの環を含む非芳香環または非芳香環系が含まれる。この用語には、非限定的な様式で、上記芳香族ヘテロ環基の完全飽和および部分飽和の誘導体の全てが含まれる。非芳香族ヘテロ環基の例には、非限定的な様式で、ピロリジニル、テトラヒドロフラニル、モルホリニル、チオモルホリニル、ピペリジニル、ピペラジニル、チアゾリジニル、イソチアゾリジニル、およびイミダゾリジニルが含まれる。
【００３６】
例えば、「適切な対アニオン」または「適切な反応条件」において見られるような用語「適切な」は、特定の基または条件の選択が実施すべき特定の合成操作および分子の同一性に依存するであろうが、その選択は十分に当業者の技能の範囲内であることを意味する。本明細書中に記載の全ての工程段階は、示した生成物を提供するのに適切な条件下で行われるべきである。当業者は、全ての反応条件（例えば、反応溶媒、反応時間、反応温度、反応圧力、反応比、および反応が無水または不活性雰囲気下のいずれで行われるべきであるかどうかが含まれる）を所望の生成物の収量を最適化するために変動させることができ、変動させることが当業者の技能の範囲内であることを理解するであろう。
【００３７】
表現「薬学的に許容され得る」は、動物またはヒトなどの被験体の処置に適合することを意味する。
【００３８】
表現「薬学的に許容され得る塩」は、動物またはヒトなどの被験体の処置に適切であるか適合する酸付加塩または塩基付加塩を意味する。
【００３９】
本明細書中で使用される表現「薬学的に許容され得る酸付加塩」は、本開示の任意の化合物または任意のその中間体の任意の無毒の有機塩または無機塩を意味する。適切な塩を形成する実例となる無機酸には、塩酸、臭化水素酸、硫酸、およびリン酸、ならびに金属塩（オルトリン酸一水素ナトリウムおよび硫酸水素カリウムなど）が含まれる。適切な塩を形成する実例となる有機酸には、モノカルボン酸、ジカルボン酸、およびトリカルボン酸（グリコ−ル酸、乳酸、ピルビン酸、マロン酸、コハク酸、グルタル酸、フマル酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、マレイン酸、安息香酸、フェニル酢酸、桂皮酸、およびサリチル酸、ならびにスルホン酸（ｐ−トルエンスルホン酸およびメタンスルホン酸など）が含まれる。一酸塩または二酸塩のいずれかを形成することができ、そのような塩は、水和形態、溶媒和形態、または実質的に無水の形態のいずれかで存在し得る。一般に、本開示の化合物の酸付加塩は、その遊離塩基形態と比較して、水および種々の親水性有機溶媒により高い溶解性を示し、一般に、より高い融点を示す。適当な塩の選択は、当業者に公知であろう。他の薬学的に許容することができない塩（例えば、シュウ酸塩）を、例えば、本開示の化合物の単離において、実験において、またはその後の薬学的に許容され得る酸付加塩への変換のために使用することができる。
【００４０】
本明細書中で使用される用語「薬学的に許容され得る塩基付加塩」は、本開示の任意の酸化合物または任意のその中間体の任意の無毒の有機または無機の塩基付加塩を意味する。塩基付加塩を形成することができる本開示の酸性化合物には、例えば、ＣＯ２Ｈが官能基であるものが含まれる。適切な塩を形成する実例となる無機塩基には、水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、水酸化マグネシウム、または水酸化バリウムが含まれる。適切な塩を形成する実例となる有機塩基には、脂肪族、脂環式、または芳香族の有機アミン（メチルアミン、トリメチルアミン、およびピコリンなど）またはアンモニアが含まれる。適当な塩の選択は、当業者に公知であろう。他の薬学的に許容することができない塩基付加塩を、例えば、本開示の化合物の単離において、実験において、またはその後の薬学的に許容され得る酸付加塩への変換のために使用することができる。
【００４１】
所望の化合物塩を、標準的な技術を使用して形成する。例えば、中性化合物を適切な溶媒中で酸または塩基にて処置し、形成された塩を濾過、抽出、または任意の他の適切な方法によって単離する。
【００４２】
本明細書中で使用される用語「溶媒和物」は、適切な溶媒の分子が結晶格子内に組み込まれた化合物あまたはその薬学的に許容され得る塩を意味する。適切な溶媒は、投与した投薬量で生理学的に忍容性がある。適切な溶媒の例は、エタノ−ルおよび水などである。水が溶媒である場合、分子は「水和物」と呼ばれる。溶媒和物の形成は、化合物および溶媒和物に応じて変動するであろう。一般に、溶媒和物を、適切な溶媒に化合物を溶解し、冷却または貧溶媒の使用によって溶媒和物を単離することによって形成する。溶媒和物を、典型的には、周囲条件下で乾燥させるか、共沸混合する。
【００４３】
本開示の化合物には、プロドラッグが含まれる。一般に、そのようなプロドラッグは、理論上誘導される化合物にｉｎ  ｖｉｖｏで容易に変換可能なこれらの化合物の機能的誘導体であろう。本開示の化合物のプロドラッグは、利用可能なヒドロキシ基、またはアミノ基を用いて形成された従来のエステルであり得る。例えば、本開示の化合物内の利用可能なＯＨまたは窒素を、塩基の存在下で、任意選択的に不活性溶媒中にて（例えば、ピリジン中の酸塩化物）活性化された酸を使用してアシル化することができる。プロドラッグとして利用されているいくつかの一般的なエステルは、フェニルエステル、脂肪族（Ｃ８〜Ｃ２４）エステル、アシルオキシメチルエステル、カルバマ−ト、およびアミノ酸エステルである。場合によっては、本開示の化合物のプロドラッグは、化合物内の１つ以上のヒドロキシ基がｉｎ  ｖｉｖｏでヒドロキシ基に変換することができる基としてマスキングされているプロドラッグである。適切なプロドラッグの従来の選択および調製手順は、例えば、「Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ”ｅｄ．Ｈ．Ｂｕｎｄｇａａｒｄ，Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，１９８５」に記載されている。
【００４４】
本明細書中で使用される用語「癌」は、原発性および続発性の癌を意味し、非転移性癌および／または転移性癌が含まれる。癌の言及には、癌細胞の言及が含まれる。例えば、癌は、子宮頸癌、乳癌、卵巣癌、脳癌、黒色腫、結腸直腸癌、膠芽細胞腫、肝臓癌、肺癌、前立腺癌、頭部癌、胃癌、腎臓癌、子宮内膜癌、精巣癌、尿路上皮癌、急性リンパ芽球性白血病、急性骨髄性白血病、ホジキンリンパ腫、神経芽細胞腫、非ホジキンリンパ腫、軟部組織癌、骨肉腫、甲状腺癌、移行細胞膀胱癌、ウィルムス腫瘍、神経膠腫、膵臓癌、または脾臓癌である。例えば、癌には、癌細胞において中心体異常を生じる任意の癌が含まれる。
【００４５】
本明細書中で使用される用語「癌細胞」は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ癌細胞をいうが、ｉｎ  ｖｉｖｏ癌細胞（例えば、哺乳動物またはヒトなどの被験体内に存在する癌細胞）もいう。例えば、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ癌細胞には、ヒト乳癌細胞（例えば、ＢＴ−５４９細胞およびＭＣＦ−７細胞）、マウス神経芽細胞腫細胞（例えば、Ｎ１Ｅ−１１５細胞）、ヒト肺癌（例えば、Ａ５４９細胞）、ヒト非小細胞肺癌細胞（例えば、Ｈ１２９９細胞）、結腸直腸癌細胞（例えば、ＨＣＴ１１６細胞）、またはヒト子宮頸癌細胞（例えば、ＨｅＬａ）が含まれ得る。
【００４６】
本明細書中で使用される用語「抗癌剤」は、コントロ−ルと比較して被験体において癌を抑制、抑止、または軽減する（例えば、臨床症状または癌性細胞量によって決定した場合）ことによって治療効果を得ることができる薬剤を意味する。抗癌剤の例には、例えば、非チュ−ブリンタ−ゲティング薬（ドキソルビシンなど）およびチュ−ブリンタ−ゲティング薬（タキサン（例えば、パクリタキセル）、ビンカアルカロイド（例えば、ビンブラスチン）など）が含まれる。
【００４７】
本明細書中で使用される用語「有糸分裂阻害剤」は、癌細胞増殖の遮断のために使用することができる薬剤を意味する。例えば、有糸分裂阻害剤は、微小管脱重合を引き起こす薬剤（例えば、ノコダゾ−ルまたはコルヒチンなど）であり得る。
【００４８】
本明細書中で使用される用語「混合物」は、２つ以上の化合物を含む組成物を意味する。１つの実施形態では、混合物は、２つ以上の異なる化合物の混合物（例えば、本明細書中に開示の化合物および抗癌剤（例えば、タキサンなど）を含む混合物）である。１つのさらなる実施形態では、化合物を「混合物」という場合、混合物は、化合物の２つ以上の形態（塩、溶媒和物、プロドラッグ、または、適用可能な場合、任意の比での化合物の立体異性体など）を含み得る。当業者は、混合物中の化合物は複数の形態の混合物として存在することもできると理解するであろう。例えば、化合物は、化合物の塩の水和物または化合物のプロドラッグの塩の水和物として存在し得る。本明細書中に開示の化合物の全ての形態は、本出願の範囲内である。
【００４９】
本明細書中で使用される用語「被験体」には、哺乳動物をはじめとする、動物界の全てのメンバ−が含まれる。１つの実施形態では、哺乳動物はマウスである。別の実施形態では、哺乳動物はヒトである。
【００５０】
用語「適切な」および「適当な」は、例えば、実施すべき特定の合成操作および分子の同一性に依存するであろうが、その選択は依然として十分に当業者の技能の範囲内である特定の基または条件の選択をいう。本明細書中に記載の全ての方法段階は、記載の生成物を提供するのに適切な条件下で行われるべきである。当業者は、全ての反応条件（例えば、反応溶媒、反応時間、反応温度、反応圧力、反応比、および反応が無水または不活性雰囲気下のいずれで行われるべきであるかどうかが含まれる）を所望の生成物の収量を最適化するために変動させることができ、変動させることが当業者の技能の範囲内であることを理解するであろう。
【００５１】
本開示の化合物または組成物の「有効量」という表現は、哺乳動物（例えば、ヒト）などの被験体に投与した場合に、有利な結果または所望の結果（臨床結果が含まれる）をもたらすのに十分な量であり、そのようなものとして、「有効量」は、適用される文脈に依存する。例えば、癌処置の文脈では、例えば、有効量は、化合物または組成物を投与しないか、単独で投与するか、抗癌剤および／または有糸分裂阻害剤と組み合わせて投与した場合の応答と比較して、癌を処置するのに十分な化合物または組成物の単独の量または抗癌剤および／もしくは有糸分裂阻害剤と組み合わせた量である。有効量に対応する本開示の所与の化合物または組成物の量は、種々の要因（例えば、所与の薬物または化合物、医薬処方物、投与経路、疾患または障害のタイプ、および処置される被験体または宿主の同一性など）に応じて変動するであろうが、それにもかかわらず、この量を、当業者はル−ティン的に決定することができる。また、本明細書中で使用する場合、本開示の化合物の「有効量」は、コントロ−ルと比較して被験体において癌を抑制、抑止、または軽減する（例えば、臨床症状または癌性細胞量によって決定した場合）量である。本明細書中でさらに使用する場合、「有効量」は、癌細胞における有糸分裂停止を誘導し、中心体の完全性を破壊し、中心体クラスタリングを阻止および／または減少させ、中心体をデクラスタリングし、そして／または微小管脱重合を誘導するのに十分な量である。
【００５２】
本明細書中で使用する場合、そして、当該分野で十分に理解されるように、「処置（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」または「処置（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」は、有利または所望の結果（臨床結果が含まれる）を得るためのアプロ−チである。有利または所望の臨床結果には、１つまたは複数の症状または状態の緩和または回復、疾患範囲の縮小、病態の安定化（すなわち、悪化しない）、疾患の拡大の防止、疾患の進行の遅延または緩慢化、病状の回復または一時的軽減、および寛解（部分的または全体のいずれか）（検出可能または検出不可能のいずれか）が含まれ得るが、これらに限定されない。「処置（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」または「処置（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」はまた、処置を受けない場合に予想される生存期間と比較した生存期間の延長を意味し得る。疾患または障害の「一時的軽減」は、処置されていない障害と比較して、障害または病状の範囲および／または望ましくない臨床症状が減少し、そして／または進行の時間的経過が遅延または延長されることを意味する。
【００５３】
本明細書中で使用される用語「投与した」は、治療有効用量の本出願の組成物を細胞培養物内または患者内の細胞に投与することを意味する。
【００５４】
本開示の範囲の理解において、用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」およびその派生語は、本明細書中で使用する場合、記述した特徴、要素、構成要素、群、整数、および／または工程の存在を特定するが、他の記述していない特徴、要素、構成要素、群、整数、および／または工程の存在を排除しない非限定用語であることが意図される。上記では類似の意味を有する用語（用語「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」、「有する（ｈａｖｉｎｇ）」、およびこれらの派生語など）も適用している。最後に、本明細書中で使用される程度の用語（「実質的に」、「約」、および「およそ」など）は、最終結果が有意に変化しないような修飾された用語の妥当な逸脱量を意味する。これらの程度の用語は、修飾された用語の意味を否定しない限り、修飾された用語の少なくとも±１０％の逸脱を含むと解釈すべきである。
【００５５】
本明細書および添付の特許請求の範囲で使用される場合、単数形「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」には、文脈において別段の明確な指示がない限り、複数形が含まれる。したがって、例えば、「１つの化合物」を含む組成物には、２つ以上の化合物の混合物が含まれる。用語「または」を、一般に、文脈において別段の明確な指示がない限り、「および／または」が含まれる意味で使用することにも留意すべきである。
【００５６】
「さらなる」または「第２の」構成要素を含む組成物において、本明細書中で使用される第２の構成要素は、他の構成要素または第１の構成要素と化学的に異なる。「第３の」構成要素は、他の要素、第１の要素、および第２の要素と異なり、さらに列挙したか、「さらなる」構成要素が同様に異なる。
【００５７】
当業者によって理解されるように、特定の節に記載の定義および実施形態は、これらが適切である本明細書中に記載の他の実施形態に適用可能であることが意図される。
【００５８】
ＩＩ．方法および化合物
本開示の化合物がいくつかの癌細胞の死滅を誘導するのに有用であり、他の薬物（有糸分裂阻害剤または抗癌剤など）と組み合わせた場合にさらに有用であることを本明細書中に証明する。
【００５９】
したがって、第１の態様では、癌細胞の成長を選択的に抑制する方法であって、癌細胞を、式Ｉ：
【化７】
2019536797.tif 000014
の化合物であって、式中、
Ａは、Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ルまたは３〜７員の芳香族ヘテロ環であり；
Ｚは、ＳＯ、ＳＯ２、ＣＯ、またはＣＨ２であり；
ＲＡおよびＲＢは、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ａｌｋｙ）チオ、Ｃ１〜Ｃ６チオアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６スルホニルアルキル（ａｋｙｌ）、Ｃ１〜Ｃ６アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、ＣＮ、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ル、または３〜７員の芳香族ヘテロ環であり；
Ｒ１は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ａｌｋｙ）チオ、Ｃ１〜Ｃ６チオアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６スルホニルアルキル（ａｋｙｌ）、Ｃ１〜Ｃ６アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、ＣＮ、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ル、または３〜７員の芳香族ヘテロ環であり；
Ｒ２およびＲ３が相互に連結して、Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ルまたは３〜７員の芳香族ヘテロ環を形成し；
Ｒ４およびＲ５が相互に連結して、Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ルまたは３〜７員の芳香族ヘテロ環を形成し、
Ｒ１、ＲＡ、ＲＢ、Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ル、および３〜７員の芳香族ヘテロ環は、それぞれ独立して、非置換であるか、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ａｌｋｙ）チオ、Ｃ１〜Ｃ６チオアルキル、Ｃ１〜Ｃ６スルホニルアルキル（ａｋｙｌ）、Ｃ１〜Ｃ６アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、ＣＮ、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、およびＩから選択される少なくとも１つの置換基と置換されている、
化合物またはその薬学的に許容され得る塩、溶媒和物、もしくはプロドラッグに曝露することを含む方法を提供する。
【００６０】
例えば、成長の抑制は、癌細胞の有糸分裂停止の誘導を含む。
【００６１】
別の態様によれば、癌細胞を式Ｉの化合物に曝露することを含む、癌細胞において中心体の完全性を破壊し、中心体クラスタリングを阻止および／または減少させ、中心体をデクラスタリングし、中心体クラスタリングを制御し、そして／または微小管脱重合を誘導する方法を本明細書中に提供する。
【００６２】
さらに別の態様によれば、癌細胞の成長を選択的に抑制する方法であって、癌細胞を式Ｉの化合物と抗癌剤および／または有糸分裂阻害剤との組み合わせに曝露することを含む方法を本明細書中に提供する。
【００６３】
別の態様によれば、癌細胞の成長を抑制する方法であって、癌細胞を式Ｉの化合物と抗癌剤および／または有糸分裂阻害剤との相乗的組み合わせに曝露することを含み、前述の組み合わせが、癌細胞の成長を、相加性を超えて抑制する方法を本明細書中に提供する。
【００６４】
別の態様によれば、抗癌剤および／または有糸分裂阻害剤の癌細胞に対する選択性を増加させる方法であって、癌細胞を式Ｉの化合物ならびに抗癌剤および／または有糸分裂阻害剤に曝露することを含む方法を本明細書中に提供する。
【００６５】
例えば、癌細胞を、ナノモル範囲の濃度の本明細書中に開示のチエノイソキノリン化合物と接触させる。例えば、本方法は、癌細胞を濃度が約１ｎＭ、約５ｎＭ、約１００ｎＭ、約１５０ｎＭ、約２００ｎＭ、約２５０ｎＭ、約３００ｎＭ、約３５０ｎＭ、約４００ｎＭ、約４５０ｎＭ、約５００ｎＭ、約５５０ｎＭ、約６００ｎＭ、約１０００ｎＭ、約５０００ｎＭ、または約１００００ｎＭの化合物に曝露することを含む。
【００６６】
例えば、本方法は、癌細胞を化合物に、少なくとも１分間、２分間、３分間、４分間、５分間、１０分間、１５分間、２０分間、３０分間、少なくとも４５分間、少なくとも１時間、少なくとも２時間、少なくとも３時間、少なくとも４時間、少なくとも５時間、少なくとも６時間、少なくとも７時間、少なくとも８時間、少なくとも９時間、少なくとも１０時間、少なくとも１１時間、少なくとも１２時間、少なくとも１３時間、少なくとも１４時間、少なくとも１５時間、少なくとも１６時間、少なくとも１７時間、少なくとも１８時間、少なくとも１９時間、少なくとも２０時間、少なくとも２４時間、少なくとも３０時間、少なくとも３６時間、少なくとも４２時間、少なくとも４８時間、少なくとも６０時間、少なくとも７２時間、または少なくとも８０時間曝露することを含む。例えば、癌細胞を、本明細書中に開示のチエノイソキノリン化合物と１集団倍加時間接触させることもできる。用語「集団倍加時間」は、細胞集団が倍加するのに必要な時間と理解すべきである。
【００６７】
例えば、癌細胞は、異常な中心体を有する癌細胞である。
【００６８】
例えば、癌細胞は、乳癌細胞、子宮頸癌細胞、肺癌細胞、非小細胞肺癌細胞、膵臓癌細胞、結腸直腸癌細胞、結腸癌細胞、神経芽細胞腫癌細胞、または卵巣癌細胞である。
【００６９】
例えば、癌細胞は哺乳動物癌細胞である。
【００７０】
例えば、哺乳動物癌細胞はヒト癌細胞である。
【００７１】
例えば、本方法をｉｎ  ｖｉｔｒｏで行う。
【００７２】
例えば、本方法をｉｎ  ｖｉｖｏで行う。
【００７３】
例えば、癌細胞は被験体内に存在する。
【００７４】
例えば、被験体は哺乳動物である。
【００７５】
例えば、哺乳動物はヒトである。
【００７６】
別の態様によれば、被験体における癌を処置する方法であって、有効量の式Ｉの化合物を被験体に投与することを含む方法を本明細書中に提供する。
【００７７】
別の態様によれば、被験体における癌を処置する方法であって、有効量の式Ｉの化合物と抗癌剤および／または有糸分裂阻害剤との組み合わせを被験体に投与することを含む方法を本明細書中に提供する。
【００７８】
例えば、癌は、異常な中心体を生じる癌である。
【００７９】
例えば、癌は、乳癌、子宮頸癌、肺癌、非小細胞肺癌、膵臓癌、結腸直腸癌、結腸癌、神経芽細胞腫癌、または卵巣癌である。
【００８０】
例えば、被験体は哺乳動物である。
【００８１】
例えば、哺乳動物はヒトである。
【００８２】
例えば、式Ｉの化合物ならびに抗癌剤および／または有糸分裂阻害剤を順次または同時に投与する。
【００８３】
例えば、抗癌剤は、タキサン、ビンカアルカロイド、またはコルヒチン部位結合剤である。
【００８４】
例えば、抗癌剤は非有糸分裂抗癌剤である。
【００８５】
例えば、有糸分裂阻害剤はノコダゾ−ルである。
【００８６】
例えば、癌細胞を、濃度が約５ｎＭ、約１０ｎＭ、約１５ｎＭ、約２０ｎＭ、約２５ｎＭ、約３０ｎＭ、約３３ｎＭ、約３５ｎＭ、約４０ｎＭ、約４５ｎＭ、約５０ｎＭ、約５５ｎＭ、約６０ｎＭ、約６６ｎＭ、約７０ｎＭ、約７５ｎＭ、約１００ｎＭ、約１２５ｎＭ、または約１３５ｎＭのノコダゾ−ルとさらに接触させる。
【００８７】
例えば、タキサンは、パクリタキセル、カバジタキセル、またはドセタキセルである。
【００８８】
例えば、癌細胞を、濃度が約１ｎＭ、約２ｎＭ、約３ｎＭ、約４ｎＭ、約５ｎＭ、約６ｎＭ、約７ｎＭ、約８ｎＭ、約９ｎＭ、約１０ｎＭ、約１１ｎＭ、約１２ｎＭ、約１３ｎＭ、約１４ｎＭ、約１５ｎＭ、約１６ｎＭ、約１７ｎＭ、約１８ｎＭ、約１９ｎＭ、約２０ｎＭ、約２５ｎＭ、約３０ｎＭ、約３５ｎＭ、約４０ｎＭ、約４５ｎＭ、約５０ｎＭ、約６０ｎＭ、約７０ｎＭ、約８０ｎＭ、約９０ｎＭ、または約１００ｎＭのタキサンとさらに接触させる。
【００８９】
例えば、ビンカアルカロイドは、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、およびビノレルビンである。
【００９０】
例えば、コルヒチン部位結合剤は、コルヒチン、コンブレスタチン、またはポドフィロトキシンである。
【００９１】
例えば、非有糸分裂抗癌剤は、ドキソルビシン、アントラサイクリン、アルキル化薬、または代謝拮抗物質である。
【００９２】
例えば、式Ｉの化合物は、式ＩＡ：
【化８】
2019536797.tif 000015
の化合物であって、式中、
Ｌは、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ａｌｋｙ）チオ、Ｃ１〜Ｃ６チオアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６スルホニルアルキル（ａｋｙｌ）、Ｃ１〜Ｃ６アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、ＣＮ、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ル、または３〜７員の芳香族ヘテロ環であり；
Ｘは、Ｓ、Ｏ、ＮＨ、ＣＨ−ＣＨ、ＣＨ−Ｎ、Ｎ−ＣＨ、またはＮＲ７であり；
Ｙは、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ａｌｋｙ）チオ、Ｃ１〜Ｃ６チオアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６スルホニルアルキル（ａｋｙｌ）、Ｃ１〜Ｃ６アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、ＣＮ、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ル、または３〜７員の芳香族ヘテロ環であり；
Ｚは、ＳＯ、ＳＯ２、ＣＯ、またはＣＨ２であり；
ＲＡおよびＲＢは、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ａｌｋｙ）チオ、Ｃ１〜Ｃ６チオアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６スルホニルアルキル（ａｋｙｌ）、Ｃ１〜Ｃ６アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、ＣＮ、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ル、または３〜７員の芳香族ヘテロ環であり；
Ｒ１は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ａｌｋｙ）チオ、Ｃ１〜Ｃ６チオアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６スルホニルアルキル（ａｋｙｌ）、Ｃ１〜Ｃ６アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、ＣＮ、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ル、または３〜７員の芳香族ヘテロ環であり；
Ｒ６は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ａｌｋｙ）チオ、Ｃ１〜Ｃ６チオアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｆ、Ｃ１〜Ｃ６スルホニルアルキル（ａｋｙｌ）、Ｃ１〜Ｃ６アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、ＣＮ、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ル、または３〜７員の芳香族ヘテロ環であり；
Ｒ７は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６スルホニルアルキル（ａｋｙｌ）、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ル、または３〜７員の芳香族ヘテロ環であり、
Ｌ、ＲＡ、ＲＢ、Ｒ１、Ｒ６、Ｒ７、Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ル、および３〜７員の芳香族ヘテロ環は、それぞれ独立して、非置換であるか、可能であれば、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ａｌｋｙ）チオ、Ｃ１〜Ｃ６チオアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６スルホニルアルキル（ａｋｙｌ）、ＣＮ、Ｃ１〜Ｃ６アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、およびＩから選択される少なくとも１つの置換基と置換されている、
化合物またはその薬学的に許容され得る塩、溶媒和物、もしくはプロドラッグである。
【００９３】
例えば、式Ｉの化合物は、式ＩＡ：
【化９】
2019536797.tif 000016
の化合物であって、式中、
Ｌは、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ３ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ３アルキル（ａｌｋｙ）チオ、Ｃ１〜Ｃ３チオアルキル、Ｃ１〜Ｃ３スルホニルアルキル（ａｋｙｌ）、Ｃ１〜Ｃ３アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、ＣＮ、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉであり；
Ｘは、Ｓ、Ｏ、ＮＲ７、またはＮＨであり；
Ｙは、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｈ、ＣＨ３、ＣＦ３、ＣＨＦ２、ＣＦ２Ｈ、またはＣＮであり；
Ｚは、ＳＯ２、ＣＯ、またはＣＨ２であり；
ＲＡおよびＲＢは、それぞれ独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、Ｃ１〜Ｃ３ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ３スルホニルアルキル（ａｋｙｌ）、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｆであり；
Ｒ１は、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ３ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ３スルホニルアルキル（ａｋｙｌ）、Ｃ１〜Ｃ３アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、ＣＮ、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩであり；
Ｒ６は、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ３ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ３スルホニルアルキル（ａｋｙｌ）、Ｃ１〜Ｃ３アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、ＣＮ、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩであり；
Ｒ７は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６スルホニルアルキル（ａｋｙｌ）、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ル、または３〜７員の芳香族ヘテロ環であり；
Ｌ、ＲＡ、ＲＢ、Ｒ１、Ｒ６、Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ル、および３〜７員の芳香族ヘテロ環は、それぞれ独立して、非置換であるか、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ａｌｋｙ）チオ、Ｃ１〜Ｃ６チオアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、およびＩから選択される少なくとも１つの置換基と置換されている、
化合物またはその薬学的に許容され得る塩、溶媒和物、もしくはプロドラッグである。
【００９４】
例えば、式Ｉの化合物は、式ＩＡ：
【化１０】
2019536797.tif 000017
の化合物であって、式中、
ＬはＨであり；
ＸはＳであり；
Ｚは、ＳＯ２、ＣＯ、またはＣＨ２であり；
Ｙは、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩであり；
ＲＡはＨであり；
ＲＢはＨであり；
Ｒ１は、Ｚに対してパラ位にあり、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ３ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ３スルホニルアルキル（ａｋｙｌ）、Ｃ１〜Ｃ３アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、ＣＮ、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、およびＩから選択され；
Ｒ６は、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ３ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ３スルホニルアルキル（ａｋｙｌ）、Ｃ１〜Ｃ３アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、ＣＮ、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩであり、
Ｒ１、Ｒ６、Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ル、および３〜７員の芳香族ヘテロ環は、それぞれ独立して、非置換であるか、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ａｌｋｙ）チオ、Ｃ１〜Ｃ６チオアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、およびＩから選択される少なくとも１つの置換基と置換されている、
化合物またはその薬学的に許容され得る塩、溶媒和物、もしくはプロドラッグである。
【００９５】
例えば、
ＬはＨであり；
ＺはＳＯ２であり；
Ｙは、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、またはＣ６〜Ｃ１２アリ−ルであり；
ＲＡはＨであり；
ＲＢはＨであり；
Ｒ１は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ３ハロアルキル、またはＣ１〜Ｃ３アルコキシであり；
Ｒ６はＨである。
【００９６】
例えば、
ＬはＨであり；
ＺはＳＯ２であり；
Ｙは、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、またはフェニルであり；
ＲＡはＨであり；
ＲＢはＨであり；
Ｒ１は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、ＣＦ３、またはメトキシであり；
Ｒ６はＨである。
【００９７】
例えば、化合物は、
【化１１】
2019536797.tif 000018
2019536797.tif 000019
から選択される。
【００９８】
例えば、化合物は、
【化１２】
2019536797.tif 000020
である。
【００９９】
例えば、化合物は、
【化１３】
2019536797.tif 000021
から選択される。
【０１００】
例えば、化合物は、
【化１４】
2019536797.tif 000022
である。
【０１０１】
１つのさらなる態様によれば、癌細胞の成長を選択的に抑制するための式Ｉの化合物の使用を本明細書中に提供する。
【０１０２】
別の態様によれば、癌細胞において中心体の完全性を破壊し、中心体クラスタリングを阻止および／または減少させ、中心体をデクラスタリングし、中心体クラスタリングを制御し、そして／または微小管脱重合を誘導するための式Ｉの化合物の使用を本明細書中に提供する。
【０１０３】
さらに別の態様によれば、癌細胞の成長を選択的に抑制するための式Ｉの化合物と抗癌剤および／または有糸分裂阻害剤との組み合わせの使用を本明細書中に提供する。
【０１０４】
例えば、癌細胞の成長の抑制は選択的である。
【０１０５】
例えば、成長の抑制は、癌細胞における有糸分裂停止の誘導を含む。
【０１０６】
別の態様によれば、被験体における癌の処置のための式Ｉの化合物の使用を本明細書中に提供する。
【０１０７】
別の態様によれば、被験体における癌の処置のための式Ｉと抗癌剤および／または有糸分裂阻害剤の組み合わせの使用を本明細書中に提供する。
【０１０８】
別の態様によれば、抗癌剤および／または有糸分裂阻害剤の癌細胞に対する選択性を増加させるための、抗癌剤および／または有糸分裂阻害剤と組み合わせた式Ｉの化合物の使用を本明細書中に提供する。
【０１０９】
例えば、本明細書中に開示の化合物ならびに／または本明細書中に開示の化合物ならびに抗癌剤および／もしくは有糸分裂阻害剤を含む組み合わせは、注射可能な投薬形態を含む組成物中に含まれる。例えば、組成物を、腫瘍内注射によって投与する。
【０１１０】
例えば、本明細書中に開示の化合物ならびに／または本明細書中に開示の化合物ならびに抗癌剤および／もしくは有糸分裂阻害剤を含む組み合わせは、非経口、静脈内、皮下、筋肉内、頭蓋内、脊髄内、槽内、腹腔内、鼻腔内、エアロゾル、または経口への投与によって投与される組成物中に含まれる。
【０１１１】
１つのさらなる態様によれば、式ＩＡ：
【化１５】
2019536797.tif 000023
の化合物であって、式中、
Ｌは、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ３チオアルキル、Ｃ１〜Ｃ３ハロアルキル、ＣＮ、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩであり；
Ｘは、Ｓ、Ｏ、ＮＲ７、またはＮＨであり；
Ｙは、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、Ｈ、ＣＨ３、ＣＦ３、ＣＨＦ２、ＣＦ２Ｈ、またはＣＮであり；
Ｚは、ＳＯ２、ＣＯ、またはＣＨ２であり；
ＲＡおよびＲＢは、それぞれ独立して、Ｈ、Ｍｅ、Ｅｔ、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｆ、またはＣｌであり；
Ｒ１は、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ３ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ３スルホニルアルキル（ａｋｙｌ）、Ｃ１〜Ｃ３アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、ＣＮ、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩであり；
Ｒ６は、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ３ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ３スルホニルアルキル（ａｋｙｌ）、Ｃ１〜Ｃ３アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、ＣＮ、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩであり；
Ｒ７は、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｃ１〜Ｃ６スルホニルアルキル（ａｋｙｌ）、Ｃ１〜Ｃ６アルキルアミノ、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ル、または３〜７員の芳香族ヘテロ環であり、
Ｌ、ＲＡ、ＲＢ、Ｒ１、Ｒ６、Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ル、および３〜７員の芳香族ヘテロ環は、それぞれ独立して、非置換であるか、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ａｌｋｙ）チオ、Ｃ１〜Ｃ６チオアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、およびＩから選択される少なくとも１つの置換基と置換されている、
化合物またはその薬学的に許容され得る塩、溶媒和物、もしくはプロドラッグを本明細書中に提供する。
【０１１２】
例えば、
ＬはＨであり；
ＸはＳであり；
Ｚは、ＳＯ２、ＣＯ、またはＣＨ２であり；
Ｙは、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩであり；
ＲＡはＨであり；
ＲＢはＨであり；
Ｒ１は、Ｚに対してパラ位にあり、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ３ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ３スルホニルアルキル（ａｋｙｌ）、Ｃ１〜Ｃ３アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、ＣＮ、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、およびＩから選択され；
Ｒ６は、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、Ｃ１〜Ｃ３アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ３ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ３スルホニルアルキル（ａｋｙｌ）、Ｃ１〜Ｃ３アミノアルキル、Ｃ１〜Ｃ３アルキルアミノ、ＣＮ、ＣＦ３、ＣＦ２Ｈ、ＣＦＨ２、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩであり、
Ｒ１、Ｒ６、Ｃ６〜Ｃ１２アリ−ル、および３〜７員の芳香族ヘテロ環は、それぞれ独立して、非置換であるか、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシ、Ｃ１〜Ｃ６ヒドロキシアルキル、Ｃ１〜Ｃ６アルキル（ａｌｋｙ）チオ、Ｃ１〜Ｃ６チオアルキル、Ｃ１〜Ｃ６ハロアルキル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、およびＩから選択される少なくとも１つの置換基と置換され、またはその薬学的に許容され得る塩、溶媒和物、もしくはプロドラッグ。
【０１１３】
例えば、
ＬはＨであり；
ＺはＳＯ２であり；
Ｙは、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、またはＣ６〜Ｃ１２アリ−ルであり；
ＲＡはＨであり；
ＲＢはＨであり；
Ｒ１は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ３ハロアルキル、またはＣ１〜Ｃ３アルコキシであり；
Ｒ６はＨである。
【０１１４】
例えば、
ＬはＨであり；
ＺはＳＯ２であり；
Ｙは、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、またはフェニルであり；
ＲＡはＨであり；
ＲＢはＨであり；
Ｒ１は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ３アルキル、ＣＦ３、またはメトキシであり；
Ｒ６はＨである。
【０１１５】
例えば、化合物は、
【化１６】
2019536797.tif 000024
から選択される。
【０１１６】
例えば、化合物は、
【化１７】
2019536797.tif 000025
である。
【０１１７】
１つのさらなる態様によれば、
【化１８】
2019536797.tif 000026
2019536797.tif 000027
2019536797.tif 000028
から選択される化合物を本明細書中に提供する。
【０１１８】
実施例
これらの実施例は、本開示の範囲を制限すると決して解釈すべきではない。
【０１１９】
実施例１
薬らしい性質および医薬用途の可能性のある高品質の化合物ファミリ−を同定した。対費用効果の高い様式でこれらの化合物の収量を改善するように新規の合成を設計し、これらの化合物の癌を処置する能力を評価した。より具体的には、高品質で低分子量のチエノイソキノリン足場の新規の合成を設計した（１０、１１）。
【０１２０】
異なる構造に改変された１９種のバリアントを作製した。以下の表３は、ＨｅＬａ細胞（子宮頸部腺癌）、ＢＴ５４９細胞（乳管癌）、Ａ５４９細胞（肺癌腫）、およびＭＣＦ−７細胞（乳腺癌腫）ならびにＨＦＦ１非癌細胞（線維芽細胞）およびＭＣＦ−１０Ａ非癌細胞（乳腺線維嚢胞症）におけるチエノイソキノリン化合物のサブセットについてのＩＣ５０値を示す。いくつかのチエノイソキノリン誘導体（例えば、Ｃ７５、Ｃ９１、およびＣ２０７）は、非癌細胞と比較して癌細胞においてより高い有効性を示す（すなわち、生存率により強く影響を及ぼす）。特に、Ｃ７５はＨｅＬａ細胞（子宮頸癌）に加えて、１００ｎＭ範囲のＩＣ５０値で複数の癌細胞（乳癌（ＭＣＦ７、ＢＴ５４９）、肺癌（Ａ５４９）、結腸直腸癌（ＨＣＴ１１６）が含まれる）を死滅させることが示されている。
表３
【化１９】
2019536797.tif 000029
【０１２１】
【表３】
2019536797.tif 000030
【０１２２】
Ｃ７５をさらに試験し、ＨｅＬａ細胞を有糸分裂停止させることが見出された。図１Ａ中の明視野像は、（ジメチルスルホキシド）ＤＭＳＯまたは５００ｎＭのＣ７５で処置したＨｅＬａ細胞の視野を示す。Ｃ７５のさらなる試験により、ナノモル範囲の濃度でＨＦＦ１細胞（非癌性線維芽細胞）と比較してＨｅＬａ細胞の有糸分裂を選択的に停止させることが明らかとなった（図１Ｂ、表３）。ＤＭＳＯで処置したＨｅＬａ細胞またはＤＭＳＯもしくは３００ｎＭのＣ７５で処置したＨＦＦ１細胞においては有糸分裂紡錘体に影響はなかったが、３００ｎＭのＣ７５で処置したＨｅＬａ細胞において紡錘体組織が乱された。７５０ｎＭのＣ７５で処置したＨｅＬａ細胞において、中心体は断片化またはデクラスタリングし、微小管は完全に存在しなかった（図１Ｃ）。より高濃度のＣ７５によりＨＦＦ−１細胞において紡錘体表現型が生じたが、この表現型はＨｅＬａ細胞と比較して非常に異なっていた（図１Ｃ）。
【０１２３】
Ｃ７５を異なる癌細胞株における有効性についても試験した。ＨＣＴ１１６細胞（結腸直腸癌）、ＨｅＬａ細胞（子宮頸癌）細胞、Ａ５４９細胞（肺癌）、およびＨ１２９９細胞（非小細胞肺癌）において、１００〜２００ｎＭのＣ７５により、１集団倍加時間内に有糸分裂が停止した（図２Ａ）。ＨＣＴ１１６細胞は最も反応性が高いようであり（１００ｎＭで増加）、一方で、Ｈ１２９９は最も反応性が低いようであった（２００ｎＭで小さな増加）。さらに、Ｃ７５は紡錘体表現型を生じることが見出され、この表現型は細胞のタイプに応じて変動した。大部分のＨＦＦ１細胞がＣ７５処置後に双極紡錘体を有しており、一方で、Ｈ１２９９細胞、ＭＣＦ−１０Ａ細胞、およびＭＣＦ−７細胞は、Ｃ７５処置後に単極紡錘体、双極紡錘体、および多極紡錘体の混合物を示した（図２Ｂ）。Ｃ７５処置後に、ＨｅＬａ細胞、ＢＴ−５４９細胞、Ａ５４９細胞、およびＨＣＴ１１６細胞において、より重篤な紡錘体表現型（ほとんどの紡錘体が重篤に断片化した）が認められた（図２Ｃ）。中心体への影響におけるＣ７５の役割をさらに評価するために、ＨｅＬａ細胞をＣ７５で短時間（５分間）処置し、次いで、Ｃ７５を除去し、細胞を紡錘体表現型について分析した（図２Ｄ中の略図）。ノコダゾ−ル（微小管を脱重合させる薬物）で処置した細胞において双極紡錘体が再形成され、一方で、Ｃ７５で処置した細胞において、三極紡錘体または多極紡錘体が形成された（図２Ｅ）。さらに、ライブイメ−ジングにより、Ｃ７５の曝露後４〜６分間以内に、中心体が断片化したかデクラスタリングし、微小管は目視可能なポリマ−が残存することなく急速に崩壊したことが明らかとなった。微小管ポリマ−は約２０〜３０分内に成長したが、紡錘体は三極または多極であった（図２Ｆ）。これは、チュ−ブリンを標的にすることによって有糸分裂に影響を及ぼす他の化合物と比較して、チエノイソキノリン化合物が中心体に影響を及ぼす能力を強調している（図２Ｇ）。
【０１２４】
実施例３
チエノイソキノリン化合物は、併用療法での利用可能性も有し得る。いくつかの公知の抗癌薬（パクリタキセルおよびビンブラスチンが含まれる）は、微小管動態を崩壊することによって有糸分裂を停止させ、これらの抗癌薬は、ある範囲の癌と戦うために使用されてきた（１２、１３）。タキサン（例えば、パクリタキセル）、ビンカアルカロイド（例えば、ビンブラスチン）、および他の薬物（コルヒチンおよびノコダゾ−ルなど）は、β−チュ−ブリンまたはα−β−チュ−ブリン界面に結合する。
【０１２５】
典型的には、α−チュ−ブリンはβ−チュ−ブリンと二量体を形成し、次いで、ポリマ−に組み立てられて微小管を作製する（３０）。低濃度では、これらの薬物は、そのポリマ−質量を変化させずに微小管を安定化し、有糸分裂紡錘体を有効に「凍結する」。Ｃ７５はこれを行わないようであり、ＨＦＦ１細胞と比較したＨｅＬａ細胞においてパクリタキセルおよびノコダゾ−ルの選択性を強化する（例えば、図３Ａ、Ｅ）。さらに、Ｃ７５はパクリタキセルで処置した非癌性ＨＦＦ１細胞に保護作用を付与することが見出された（図３Ａ）。Ｃ７５は、ＨＣＴ１１６細胞においてパクリタキセルによって生じた表現型を増強する（図３Ｂ〜Ｄ）。有糸分裂紡錘体の表現型の比率は２．５ｎＭパクリタキセルで閾値となり、これにもかかわらず、Ｃ７５の添加量を増加させると表現型が悪化し、パクリタキセルと比較してＣ７５が固有の分子標的を有することが示唆された（図３Ｂ）。また、パクリタキセル濃度の増加に伴って断片の距離が有意に減少したが、パクリタキセルをＣ７５と組み合わせた場合に断片の距離が有意に増加した（図３Ｃおよび３Ｄ）。
【０１２６】
Ｃ７５およびノコダゾ−ルの両方で処置したＨｅＬａ細胞の詳細な分析により、ＨｅＬａ細胞は単独で処置した場合と比較して共に処置した場合により極端な表現型を有することが明らかとなった（図３Ｅ〜Ｆ）。例えば、ノコダゾ−ルのみで処置したＨｅＬａ細胞は脆弱な微小管を有する双極紡錘体を示し、Ｃ７５のみで処置したＨｅＬａ細胞は組織崩壊し、そして／または断片化された有糸分裂紡錘体を有するのに対して、両方の薬物で処置した細胞は、断片化が増加し、微小管を喪失する（図３Ｇ）。したがって、これらのチエノイソキノリン化合物（Ｃ７５など）は、併用療法での利用可能性を有し得る。
【０１２７】
さらに、本明細書中に開示のチエノイソキノリン化合物は、非有糸分裂抗癌薬（非チュ−ブリンタ−ゲティング薬）（ドキソルビシン、アントラサイクリン、アルキル化薬、または代謝拮抗物質など）を使用した併用療法での利用可能性を有し得る。具体的には、チュ−ブリンを標的にしないが、有糸分裂を破壊することにより、チエノイソキノリン化合物を、タキサンなどのチュ−ブリンタ−ゲティング薬に耐性を示す（例えば、代替のβ−チュ−ブリンイソ型の上方制御に起因する）細胞における有糸分裂阻害剤として使用することができる。これを評価するために、チュ−ブリンタ−ゲティング薬に耐性を示すか、チュ−ブリンタ−ゲティング薬により高い耐性を有する癌細胞株を、非有糸分裂抗癌薬（例えば、ドキソルビシン）と組み合わせたチエノイソキノリン化合物で処置することができる。例えば、有糸分裂停止に関する有効性を、実施例２に記載の方法を使用して評価することができる。
【０１２８】
実施例４
チエノイソキノリン化合物の抗有糸分裂活性を、げっ歯類における皮下異種移植片を使用してｉｎ  ｖｉｖｏで評価することができる。例えば、患者および／または癌細胞株から得たヒト癌細胞を、ヌ−ドラットまたはＳＣＩＤマウスの各下肢（コントロ−ルとして）に注射する。化合物を試験するための動物モデルにおける他の移植タイプ（例えば、転移が異なる結腸直腸癌）も考慮する。異なる処置レジメンを、腫瘍形成前または腫瘍が触知可能な（例えば、５０ｍｍ３）約２周間後に注射によって試験するであろう。特に安全性および生物学的利用能を試験するために、経口投与で処置することもできる。げっ歯類を、適切な条件下で所定の期間、有効量のチエノイソキノリン化合物または生理食塩水（コントロ−ル）で毎日、２〜３日毎、または毎週処置する。腫瘍を、成長の変化（処置％対コントロ−ル）について毎日モニタリングするであろう。研究終了時に、より詳細な腫瘍形態分析のために腫瘍を回収し、固定するであろう。毒性を、体重減少および／または死亡によってモニタリングするであろう（３１〜３３）。
【０１２９】
実施例５
抗癌剤（例えば、タキサン化合物またはビンカアルカロイドなど）と組み合わせたチエノイソキノリン化合物の抗有糸分裂効果ならびに相乗効果および保護効果を、実施例４に記載の類似の方法を使用してｉｎ  ｖｉｖｏで評価することもできる。
【０１３０】
実施例６
Ｃ７５が微小管脱重合剤と比較して有糸分裂紡錘体に異なる影響を及ぼすことを示すために、Ｃ７５またはコルヒチン（チュ−ブリンを標的にし、微小管脱重合を誘導する）での処置後のＨｅＬａ細胞における紡錘体表現型を比較した。図４Ａおよび図４Ｂに示すように、より低濃度の各薬物（３０ｎＭコルヒチンまたは３００ｎＭのＣ７５）では、コルヒチンで処置した細胞は微小管の頑強さがより低い双極紡錘体を有し、一方で、Ｃ７５処置細胞は紡錘体極が破壊された。より高濃度のコルヒチン（４０または５０ｎＭ）で処置した細胞は微小管が広範に喪失した後にのみ紡錘体が断片化していたのに対して、Ｃ７５（４００または５００ｎＭ）では微小管が広範に喪失する前に紡錘体が断片化した。
【０１３１】
実施例７−腫瘍スフェロイドでの試験
Ｃ７５を、ｉｎ  ｖｉｖｏ腫瘍をより忠実に代表する多細胞腫瘍スフェロイドでさらに試験した。これらのスフェロイドを、Ｆｒｉｅｄｒｉｃｈら、２００９（３４）の方法に従って生成した。簡潔に述べれば、１．５％アガロ−スでコ−ティングした９６ウェルプレ−トを、液体重層技術について概要が述べられているように５００〜１０００個のＨｅＬａ細胞またはＨＣＴ１１６細胞で播種した。これらの細胞を最適な成長条件において静置して重力で凝集させ、個別のスフェロイドをさらに成長および処置するために２４ウェルディッシュに移した。Ｆｒｏｅｈｌｉｃｈら（３５）によって概要が述べられているハンギングドロップ法を使用してＡ５４９スフェロイド形成を開始させ、さらに成長および処置するために２４ウェルディッシュに移した。ＨｅＬａ、ＨＣＴ１１６、およびＡ５４９のスフェロイドを、Ｃ７５のみまたはポリマ−ナノ粒子中に負荷したＣ７５で処置した。ナノ粒子を、例えば、Ｚｈａｎｇら、２０１２（３６）に概説した方法にしたがって生成することができる。Ｃ７５のみおよびＣ７５負荷ナノ粒子の両方は、ＨｅＬａスフェロイド（図５Ａおよび５Ｂ）を破壊し、ＨＣＴ１１６スフェロイド（図５Ｃ、５Ｄ、および５Ｅ）およびＡ５４９スフェロイド（図５Ｆおよび５Ｇ）の成長を退行させることを示した。
【０１３２】
実施例８−新規の合成経路
チエノイソキノリン足場誘導体についての別の新規の合成を設計した。
Ｃ−７５誘導体合成実験
スキ−ム１．Ｃ７５メタアミンハンドルの合成経路
【化２０】
2019536797.tif 000031
【化２１】
2019536797.tif 000032
【０１３３】
ニトロトルエンの一般的な臭素化手順
２−ブロモ−１−メチル−３−ニトロベンゼン（１当量）およびＮＢＳ（１．１当量）を、オ−ブン乾燥させた容器中の０．８Ｍの無水ＣＣｌ４中で混合する。混合物にアルゴンガスをパ−ジし、７時間加熱還流する。混合物を室温に冷却し、ＤＣＭで希釈し、その後に蒸留水で洗浄する。水層をＤＣＭで抽出する。合わせた有機層を蒸留水で３回洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させる。化合物をカラムクロマトグラフィで精製する。生成物は白色固体である。単離収率７２％。
【０１３４】
【化２２】
2019536797.tif 000033
一般的なベンジル化手順
メチル３−（（４−メトキシフェニル）スルホンアミド）チオフェン−２−カルボキシラ−ト（１当量）、２−ブロモ−１−（ブロモメチル）−３−ニトロベンゼン（１．２当量）、およびＫ２ＣＯ３（３当量）を、０．３ＭのＤＭＦ中で混合する。溶液を５０℃まで１８時間加熱する。１８時間後に反応混合物を室温まで冷却する。混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、蒸留水で洗浄し、水層をＥｔＯＡｃで抽出する。合わせた有機層を蒸留水（ｄｉｓｔｉｌｌ  ｗａｔｅｒ）で３回洗浄し、飽和塩溶液で３回洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させる。溶媒を減圧下で蒸発させ、固体残渣をＥｔＯＡｃおよびヘキサンで再結晶する。最終生成物は、淡黄色結晶である。単離収率：９２％
【０１３５】
【化２３】
2019536797.tif 000034
一般的な鹸化（ｓｐｏｎｉｆｉｃａｔｉｏｎ）手順
メチル３−（（Ｎ−（２−ブロモ−３−ニトロベンジル）−４−メトキシフェニル）スルホンアミド）チオフェン−２−カルボキシラ−ト（１当量）およびＮａＯＨ粉末（５当量）を混合し、ＴＨＦ、水、およびＭｅＯＨ（それぞれ、２：１：１、全部で０．１Ｍ）で溶解する。混合物を加熱還流し、次いで、１．５時間後に完了させるために室温まで冷却し、ＴＬＣを使用して反応をモニタリングする。混合物を、ｐＨ１に到達するまで１ＭのＨＣｌ溶液で処理する。混合物を蒸留水で希釈し、ＤＣＭで２回抽出する。合わせた有機層を水で３回洗浄し、飽和塩溶液で２回洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させる。溶媒を減圧下で蒸発させ、残渣をＥｔＯＡｃおよびヘキサンで再結晶する。最終生成物は黄色固体である。単離収率：９５％
【０１３６】
【化２４】
2019536797.tif 000035
一般的な脱炭酸クロスカップリング手順
３−（（Ｎ−（２−ブロモ−３−ニトロベンジル）−４−メトキシフェニル）スルホンアミド）チオフェン−２−カルボン酸（１当量）を含むＤＭＡ（０．１Ｍ）を、ＰｄＣｌ２（０．１当量）、Ｐ（ｔＢｕ）３・ＨＢＦ４（０．２当量）、Ｃｓ２ＣＯ３（３当量）を含むオ−ブン乾燥させたマイクロ波バイアルに添加した。混合物をマイクロ波放射下にて１７０℃で８分間加熱し、次いで、室温まで冷却し、ＥｔＯＡｃで希釈する。混合物を蒸留水で洗浄し、水層をＥｔＯＡｃで抽出する。合わせた層を、飽和ＮａＨＣＯ３、蒸留水、飽和ＮａＣｌ溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させる。溶媒を減圧下で蒸発させる。生成物をカラムクロマトグラフィによって精製し、ＣＨＣｌ３およびＭｅＯＨから再結晶する。最終生成物は黄色結晶である。単離収率：４１％。
【０１３７】
【化２５】
2019536797.tif 000036
一般的な還元手順
４−（（４−メトキシフェニル）スルホニル）−９−ニトロ−４，５−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］イソキノリン（１当量）およびＰｄ／Ｃ（０．１当量１０ｍｏｌ％）を、ＴＨＦおよびＭｅＯＨ（１：１の比、全部で０．２Ｍ）と混合する。ヒドラジン水和物（１０当量）を、混合物にゆっくり添加する。混合物を、完了させるために２０分間加熱還流する。ＴＬＣを使用して反応をモニタリングする。混合物をセライトパッドで濾過し、ＥｔＯＡｃで洗浄する。混合物を蒸留水で洗浄し、水層をＥｔＯＡｃで抽出し、合わせた有機層を蒸留水で１回洗浄し、飽和塩溶液で１回洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させる。溶媒を減圧下で蒸発させる。残渣を、ＣＨＣｌ３およびＭｅＯＨで再結晶する。単離収率：７０％。
【０１３８】
【化２６】
2019536797.tif 000037
一般的なアミン保護手順
４−（（４−メトキシフェニル）スルホニル）−４，５−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］イソキノリン−９−アミン（１当量）およびジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカルボナ−ト（２当量）をＥｔ３Ｎ（０．４Ｍ）に溶解し、ＤＭＡＰ（１当量）を混合物に添加する。混合物を、室温下に４８時間置く。混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、蒸留水で洗浄する。水層をＥｔＯＡｃで抽出する。合わせた有機層を、１ＭのＨＣｌで１回洗浄し、蒸留水で３回洗浄し、飽和塩溶液で１回洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させる。溶媒を減圧下で蒸発させる。生成物をカラムクロマトグラフィによって精製する。生成物は無色固体である。単離収率：６０％
【０１３９】
【化２７】
2019536797.tif 000038
一般的な臭素化手順
ｔｅｒｔ−ブチル（４−（（４−メトキシフェニル）スルホニル）−４，５−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］イソキノリン−９−イル）カルバマ−ト（１当量）およびＮＢＳ（１．１当量）を、ｅｍｂｅｒバイアル中のＣＨＣｌ３（０．１Ｍ）と混合し、混合物を氷浴に入れ、その後に２ｖ／ｖ％ＡｃＯＨと混合する。反応物をゆっくりと室温まで戻し、１８時間反応させる。混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、次いで、蒸留水で洗浄し、水層をＥｔＯＡｃで抽出する。合わせた有機層を、蒸留水で１回洗浄し、飽和塩溶液で１回洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させる。溶媒を減圧下で蒸発させる。生成物をカラムクロマトグラフィによって精製する。生成物は淡褐色固体である。単離収率：３０％
【０１４０】
【化２８】
2019536797.tif 000039
一般的なＢｏｃ基脱保護手順
ｔｅｒｔ−ブチル（２−ブロモ−４−（（４−メトキシフェニル）スルホニル）−４，５−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］イソキノリン−９−イル）カルバマ−ト（１当量）をＤＣＭ（０．１Ｍ）に溶解し、氷浴に入れる。５０ｖ／ｖ％ＴＦＡを、混合物にゆっくり添加する。反応物をＴＬＣによってモニタリングし、５時間後に反応停止させた。混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、次いで、蒸留水で洗浄し、水層をＥｔＯＡｃで抽出する。合わせた有機層を、飽和ＮａＨＣＯ３で１回洗浄し、蒸留水で１回洗浄し、飽和ＮａＣｌ溶液で１回洗浄し、ＮａｓＳＯ４で乾燥させた。溶媒を減圧下で蒸発させる。生成物をカラムクロマトグラフィによって精製する。生成物は褐色固体である。単離収率：２５％
スキ−ム２．Ｃ７５Ｂ環誘導体の合成経路
【化２９】
2019536797.tif 000040
【０１４１】
【化３０】
2019536797.tif 000041
一般的なスルホニル化手順
メチル３−アミノ−４−メチルチオフェン−２−カルボキシラ−ト（１当量）および４−メトキシベンゼンスルホニルクロリド（１．５当量）を、０．８Ｍのピリジン中で混合する。溶液を５０℃まで１．５時間加熱し、室温まで冷却する。混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、蒸留水で洗浄し、水層をＥｔＯＡｃで抽出する。合わせた有機層を、蒸留水（ｄｉｓｔｉｌｌ  ｗａｔｅｒ）で３回洗浄し、飽和塩溶液で３回洗浄する。溶媒を減圧下で蒸発させ、固体残渣をＥｔＯＡｃおよびヘキサンで再結晶する。生成物は無色結晶である。単離収率：７４％
【０１４２】
【化３１】
2019536797.tif 000042
一般的なベンジル化手順
メチル３−（（４−メトキシフェニル）スルホンアミド）チオフェン−２−カルボキシラ−ト（１当量）、１−ブロモ−２−（ブロモメチル）ベンゼン（１．２当量）、およびＫ２ＣＯ３（３当量）を、０．３ＭのＤＭＦ中で混合する。溶液を５０℃まで１６時間加熱する。１８時間後に反応混合物を室温まで冷却する。混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、蒸留水で洗浄し、水層をＥｔＯＡｃで抽出する。合わせた有機層を蒸留水（ｄｉｓｔｉｌｌ  ｗａｔｅｒ）で３回洗浄し、飽和塩溶液で３回洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させる。溶媒を減圧下で蒸発させ、固体残渣をＥｔＯＡｃおよびヘキサンで再結晶する。最終生成物は無色結晶である。単離収率：７３％
【０１４３】
【化３２】
2019536797.tif 000043
一般的な鹸化（ｓｐｏｎｉｆｉｃａｔｉｏｎ）手順
メチル３−（（Ｎ−（２−ブロモベンジル）−４−メトキシフェニル）スルホンアミド）−４−メチルチオフェン−２−カルボキシラ−ト（１当量）およびＮａＯＨ粉末（５当量）を混合し、ＴＨＦ、水、およびＭｅＯＨ（それぞれ、２：１：１、全部で０．１Ｍ）で溶解する。混合物を加熱還流し、次いで、２時間後に完了させるために室温まで冷却し、ＴＬＣを使用して反応をモニタリングする。混合物を、ｐＨ１に到達するまで１ＭのＨＣｌ溶液で処理する。混合物を蒸留水で希釈し、ＤＣＭで２回抽出する。合わせた有機層を水で３回洗浄し、飽和塩溶液で２回洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させる。溶媒を減圧下で蒸発させ、残渣をＥｔＯＡｃおよびヘキサンで再結晶する。最終生成物は無色固体である。単離収率：８４％
【０１４４】
【化３３】
2019536797.tif 000044
一般的な脱炭酸クロスカップリング手順
３−（（Ｎ−（２−ブロモベンジル）−４−メトキシフェニル）スルホンアミド）−４−メチルチオフェン−２−カルボン酸（１当量）を含むＤＭＡ（０．１Ｍ）を、ＰｄＣｌ２（０．１当量）、Ｐ（ｔＢｕ）３・ＨＢＦ４（０．２当量）、ｎＢｕ４ＮＢｒ（０．１５当量）、およびＣｓ２ＣＯ３（３当量）を含むオ−ブン乾燥させたマイクロ波バイアルに添加した。混合物をマイクロ波放射下にて１７０℃で８分間加熱し、次いで、室温まで冷却し、ＥｔＯＡｃで希釈する。混合物を蒸留水で洗浄し、水層をＥｔＯＡｃで抽出する。合わせた層を、飽和ＮａＨＣＯ３、蒸留水、飽和ＮａＣｌ溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させる。溶媒を減圧下で蒸発させる。生成物をカラムクロマトグラフィによって精製し、ＣＨＣｌ３およびＭｅＯＨから再結晶する。最終生成物は無色結晶である。単離収率：７６％。
【０１４５】
【化３４】
2019536797.tif 000045
一般的な臭素化手順
４−（（４−メトキシフェニル）スルホニル）−３−メチル−４，５−ジヒドロチエノ［３，２−ｃ］イソキノリン（１当量）およびＮＢＳ（１．１当量）を、ｅｍｂｅｒバイアル中のＣＨＣｌ３（０．１Ｍ）と混合し、混合物を氷浴に入れ、その後に１ｖ／ｖ％ＡｃＯＨと混合する。反応物をゆっくりと室温まで戻し、１８時間反応させる。混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、次いで、蒸留水で洗浄し、水層をＥｔＯＡｃで抽出する。合わせた有機層を、蒸留水で１回洗浄し、飽和塩溶液で１回洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させる。溶媒を減圧下で蒸発させる。生成物をカラムクロマトグラフィによって精製する。生成物は無色固体である。単離収率：７１％
【０１４６】
本開示の段落番号００２５〜０１５９の実施形態を、適用可能であれば実施形態のあらゆる組み合わせを行うことができることを証明するような様式で本開示に示している。したがって、これらの実施形態は、先行する特許請求の範囲（前述の実施形態を包含する）のいずれかに従属するすべての実施形態について従属請求項を作成することと同等の様式で説明に示されており、それにより、実施形態をすべての可能な様式で組み合わせることができることを証明している。例えば、これにより、適用可能であれば、段落番号００２５〜０１５９の実施形態と段落番号０００６〜００２３のプロセスの全ての可能な組み合わせは、本開示に包含される。
ＲＥＦＥＲＥＮＣＥＳ
１．  Ｈａｙ，  Ｍ．，  Ｔｈｏｍａｓ  Ｄ．Ｗ．，  Ｃｒａｉｇｈｅａｄ  Ｊ．Ｌ．，  Ｅｃｏｎｏｍｉｄｅｓ  Ｃ．，  ａｎｄ  Ｒｏｓｅｎｔｈａｌ，  Ｊ．  ２０１４．  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｓｕｃｃｅｓｓ  ｒａｔｅｓ  ｆｏｒ  ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎａｌ  ｄｒｕｇｓ．  Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈ．  ３２：  ４０−５１．
２．  Ｐｅａｒｃｅ，  Ｂ．Ｃ．，  Ｓｏｆｉａ，  Ｍ．Ｊ．，  Ｇｏｏｄ，  Ａ．Ｃ．，  Ｄｒｅｘｌｅｒ，  Ｄ．Ｍ．，  ａｎｄ  Ｓｔｏｃｋ，  Ｄ．Ａ．  ２００６．  Ａｎ  ｅｍｐｉｒｉｃａｌ  ｐｒｏｃｅｓｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  ｈｉｇｈ−ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔ  ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ  ｄｅｃｋ  ｆｉｌｔｅｒｓ．  Ｊ．  Ｃｈｅｍ．  Ｉｎｆ．  Ｍｏｄｅｌ．  ４６：  １０６０−１０６８．
３．  Ｂａｅｌｌ，  Ｊ．Ｂ．，  ａｎｄ  Ｈｏｌｌｏｗａｙ，  Ｇ．Ａ．  ２０１０．  Ｎｅｗ  ｓｕｂｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ｆｉｌｔｅｒｓ  ｆｏｒ  ｒｅｍｏｖａｌ  ｏｆ  ｐａｎ  ａｓｓａｙ  ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ  ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ  （ＰＡＩＮＳ）  ｆｒｏｍ  ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ  ｌｉｂｒａｒｉｅｓ  ａｎｄ  ｆｏｒ  ｔｈｅｉｒ  ｅｘｃｌｕｓｉｏｎ  ｉｎ  ｂｉｏａｓｓａｙｓ．  Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  ５３：  ２７１９−２７４０．
４．  Ｌａｇｏｒｃｅ，  Ｄ．，  Ｓｐｅｒａｎｄｉｏ，  Ｏ．，  Ｇａｌｏｎｓ，  Ｈ．，  Ｍｉｔｅｖａ，  Ｍ．Ａ．，  ａｎｄ  Ｖｉｌｌｏｕｔｒｅｉｘ，  Ｂ．Ｏ．    ２００８．  ＦＡＦ−Ｄｒｕｇｓ２：  Ｆｒｅｅ  ＡＤＭＥ／ｔｏｘ  ｆｉｌｔｅｒｉｎｇ  ｔｏｏｌ  ｔｏ  ａｓｓｉｓｔ  ｄｒｕｇ  ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ａｎｄ  ｃｈｅｍｉｃａｌ  ｂｉｏｌｏｇｙ  ｐｒｏｊｅｃｔｓ．  ＢＭＣ  Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ  ９：  ３９６．
５．  Ｋａｚｉｕｓ，  Ｊ．，  ＭｃＧｕｉｒｅ，  Ｒ．，  ａｎｄ  Ｂｕｒｓｉ，  Ｒ．  ２００５．  Ｄｅｒｉｖａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｖａｌｉｄａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｏｘｉｃｏｐｈｏｒｅｓ  ｆｏｒ  ｍｕｔａｇｅｎｉｃｉｔｙ  ｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎ．  Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  ４８：  ３１２−３２０．
６．  Ｂｒｕｎｓ，  Ｒ．Ｆ．，  ａｎｄ  Ｗａｔｓｏｎ，  Ｉ．Ａ．  ２０１２．  Ｒｕｌｅｓ  ｆｏｒ  ｉｄｅｎｔｉｆｙｉｎｇ  ｐｏｔｅｎｔｉａｌｌｙ  ｒｅａｃｔｉｖｅ  ｏｒ  ｐｒｏｍｉｓｃｕｏｕｓ  ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ．  Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  ５５：  ９７６３−９７７２．
７．  Ｍｕｋｈｅｒｊｅｅ，  Ｓ．，  ａｎｄ  Ｐａｌ．，  Ｍ．  ２０１３．  Ｑｕｉｎｏｌｉｎｅｓ：  ａ  ｎｅｗ  ｈｏｐｅ  ａｇａｉｎｓｔ  ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ．  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｔｏｄａｙ  １８：  ３８９−３９８．
８．  Ｍｕｋｈｅｒｊｅｅ，  Ｓ．，  ａｎｄ  Ｐａｌ．，  Ｍ．  ２０１３．  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  ｑｕｉｎｏｌｉｎｅｓ  ａｓ  ｅｍｅｒｇｉｎｇ  ａｎｔｉ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ａｇｅｎｔｓ：  ａｎ  ｏｖｅｒｖｉｅｗ．  Ｃｕｒｒ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ．  ２０：  ４３８６−４４１０．
９．  Ｂｅｃｃａｌｌｉ，  Ｅ．Ｍ．  Ｂｒｏｇｇｉｎｉ，  Ｇ．  Ｍａｒｔｉｎｅｌｌｉ，  Ｍ．，  ａｎｄ  Ｓｏｔｔｏｃｏｒｎｏｌａ，  Ｓ．  ２００８．  Ｍｉｃｒｏｗａｖｅ−ａｓｓｉｓｔｅｄ  ｉｎｔｒａｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｃｙｃｌｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｅｌｅｃｔｒｏｎ−ｒｉｃｈ  ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｅ  ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ  ｂｙ  ａ  ｐａｌｌａｄｉｕｍ−ｃａｔａｌｙｚｅｄ  ｃｏｕｐｌｉｎｇ  ｒｅａｃｔｉｏｎ．  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  １：  １３６−１４０．
１０．  Ｗｏｎｇ，  Ｎ．Ｗ．Ｙ，  ａｎｄ  Ｆｏｒｇｉｏｎｅ，  Ｐ．  ２０１２．  Ａ  ｏｎｅ−ｐｏｔ  ｄｏｕｂｌｅ  Ｃ−Ｈ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｐａｌｌａｄｉｕｍ−ｃａｔａｌｙｚｅｄ  ｒｏｕｔｅ  ｔｏ  ａ  ｕｎｉｑｕｅ  ｃｌａｓｓ  ｏｆ  ｈｉｇｈｌｙ  ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｉｚｅｄ  ｔｈｉｅｎｏｉｓｏｑｕｉｎｏｌｉｎｅｓ  Ｏｒｇ．  Ｌｅｔｔ．  １４：  ２７３８−２７４１．
１１．  Ｃｈｅｎ，  Ｆ．  Ｗｏｎｇ，  Ｎ．Ｗ．Ｙ．，  ａｎｄ  Ｆｏｒｇｉｏｎｅ，  Ｐ．  ２０１４．  Ｏｎｅ−ｐｏｔ  ｔａｎｄｅｍ  ｐａｌｌａｄｉｕｍ−ｃａｔａｌｙｚｅｄ  ｄｅｃａｒｂｏｘｙｌａｔｉｖｅ  ｃｒｏｓｓ−ｃｏｕｐｌｉｎｇ  ａｎｄ  Ｃ−Ｈ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｒｏｕｔｅ  ｔｏ  ｔｈｉｅｎｏｉｓｏｑｕｉｎｏｌｉｎｅｓ．  Ａｄｖ  Ｓｙｎｔｈ  Ｃａｔ．  ３６５：  １７２５−１７３０．
１２．  Ｃｈａｎ，  Ｋ．Ｓ．，  Ｋｏｈ，  Ｃ．Ｇ．，  ａｎｄ  Ｌｉ，  Ｈ．Ｙ．  ２０１２．  Ｍｉｔｏｓｉｓ−ｔａｒｇｅｔｅｄ  ａｎｔｉ−ｃａｎｃｅｒ  ｔｈｅｒａｐｉｅｓ：  ｗｈｅｒｅ  ｔｈｅｙ  ｓｔａｎｄ．  Ｃｅｌｌ  Ｄｅａｔｈ  Ｄｉｓ．  ３：  ｅ４１１；  ｄｏｉ：１０．１０３８／ｃｄｄｉｓ．２０１２．１４８．
１３．  Ｐａｒｋｅｒ，  Ａ．Ｌ．，  Ｋａｖａｌｌａｒｉｓ，  Ｍ．，  ａｎｄ  ＭｃＣａｒｒｏｌｌ，  Ｊ．Ａ．  ２０１４．  Ｍｉｃｒｏｔｕｂｕｌｅｓ  ａｎｄ  ｔｈｅｉｒ  ｒｏｌｅ  ｉｎ  ｃｅｌｌｕｌａｒ  ｓｔｒｅｓｓ  ｉｎ  ｃａｎｃｅｒ．  Ｆｒｏｎｔ．  Ｏｎｃｏｌ．  ４：  １−１９．
１４．  Ｍｏｇｉｌｎｅｒ，  Ａ．，  ａｎｄ  Ｃｒａｉｇ，  Ｅ．  ２０１０．  Ｔｏｗａｒｄｓ  ａ  ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ  ｕｎｄｅｒｓｔａｎｄｉｎｇ  ｏｆ  ｍｉｔｏｔｉｃ  ｓｐｉｎｄｌｅ  ａｓｓｅｍｂｌｙ  ａｎｄ  ｍｅｃｈａｎｉｃｓ．  Ｊ．  Ｃｅｌｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  １２３：  ３４３５−３４４５．
１５．  Ｓａｃｒｉｓｔａｎ，  Ｃ．，  ａｎｄ  Ｋｏｐｓ，  Ｇ．Ｊ．  ２０１５．  Ｊｏｉｎｅｄ  ａｔ  ｔｈｅ  ｈｉｐ：  ｋｉｎｅｔｏｃｈｏｒｅｓ，  ｍｉｃｒｏｔｕｂｕｌｅｓ，  ａｎｄ  ｓｐｉｎｄｌｅ  ａｓｓｅｍｂｌｙ  ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔ  ｓｉｇｎａｌｉｎｇ．  Ｔｒｅｎｄｓ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．  ２５：  ２１−２８．
１６．  Ｔｏｐｈａｍ，  Ｃ．Ｈ．，  ａｎｄ  Ｔａｙｌｏｒ，  Ｓ．Ｓ．  ２０１３．  Ｍｉｔｏｓｉｓ  ａｎｄ  ａｐｏｐｔｏｓｉｓ：  ｈｏｗ  ｉｓ  ｔｈｅ  ｂａｌａｎｃｅ  ｓｅｔ？  Ｃｕｒｒ．  Ｏｐｉｎ．  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．  ２５：  ７８０−７８５．  
１７．  Ｂｕｒｇｅｓｓ，  Ａ．，  Ｒａｓｏｕｌｉ，  Ｍ．，  ａｎｄ  Ｒｏｇｅｒｓ，  Ｓ．  ２０１４．  Ｓｔｒｅｓｓｉｎｇ  ｍｉｔｏｓｉｓ  ｔｏ  ｄｅａｔｈ．  Ｆｒｏｎｔ．  Ｏｎｃｏｌ．  ４：  １４０．  Ｄｏｉ：  １０．３３８９／ｆｏｎｃ．２０１４．００１４０．
１８．  Ｚａｓａｄｉｌ，  Ｌ．Ｍ．，  Ａｎｄｅｒｓｅｎ，  Ｋ．Ａ．，  Ｙｅｕｍ，  Ｄ．，  Ｒｏｃｑｕｅ，  Ｇ．Ｂ．，  Ｗｉｌｋｅ，  Ｌ．Ｇ．，  Ｔｅｖａａｒｗｅｒｋ，  Ａ．Ｊ．，  Ｒａｉｎｅｓ，  Ｒ．Ｔ．，  Ｂｕｒｋａｒｄ，  Ｍ．Ｅ．，  ａｎｄ  Ｗｅａｖｅｒ，  Ｂ．Ａ．  ２０１４．  Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ  ｏｆ  ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ  ｉｎ  ｂｒｅａｓｔ  ｃａｎｃｅｒ  ｉｓ  ｄｕｅ  ｔｏ  ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ  ｍｉｓｓｅｇｒｅｇａｔｉｏｎ  ｏｎ  ｍｕｌｔｉｐｏｌａｒ  ｓｐｉｎｄｌｅｓ．  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  ６：２２９ｒａ４３．
１９．  Ｈｉｎｃｈｃｌｉｆｆｅ，  Ｅ．Ｈ．  ２０１４．  Ｃｅｎｔｒｏｓｏｍｅｓ  ａｎｄ  ｔｈｅ  ａｒｔ  ｏｆ  ｍｉｔｏｔｉｃ  ｓｐｉｎｄｌｅ  ｍａｉｎｔｅｎａｎｃｅ．  Ｉｎｔ．  Ｒｅｖ．  Ｍｏｌ．  Ｃｅｌｌ  Ｍｏｌ．  Ｂｉｏｌ．  ３１３：  １７９−２１７．
２０．  Ｇｅｒｇｅｌｙ，  Ｆ．，  ａｎｄ  Ｂａｓｔｏ，  Ｒ．  ２００８．  Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｃｅｎｔｒｏｓｏｍｅｓ：  ｔｏｇｅｔｈｅｒ  ｔｈｅｙ  ｓｔａｎｄ，  ｄｉｖｉｄｅｄ  ｔｈｅｙ  ｆａｌｌ．  Ｇｅｎｅｓ  Ｄｅｖ．  ２２：  ２２９１−２２９６．
２１．  Ｇｏｄｉｎｈｏ，  Ｓ．Ａ．，  ａｎｄ  Ｐｅｌｌｍａｎ，  Ｄ．  ２０１４．  Ｃａｕｓｅｓ  ａｎｄ  ｃｏｎｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  ｃｅｎｔｒｏｓｏｍｅ  ａｂｎｏｒｍａｌｉｔｉｅｓ  ｉｎ  ｃａｎｃｅｒ．  Ｐｈｉｌｏｓ．  Ｔｒａｎｓ．  Ｒ．  Ｓｏｃ．  Ｌｏｎｄ．  Ｂ  Ｂｉｏｌ．  Ｓｃｉ．  ３６９：  ２０１３０４６７．
２２．  Ｏｇｄｅｎ，  Ａ．，  Ｒｉｄａ，  Ｐ．Ｃ．，  ａｎｄ  Ａｎｅｊａ，  Ｒ．  ２０１２．  Ｌｅｔ’ｓ  ｈｕｄｄｌｅ  ｔｏ  ｐｒｅｖｅｎｔ  ａ  ｍｕｄｄｌｅ：  ｃｅｎｔｒｏｓｏｍｅ  ｄｅｃｌｕｓｔｅｒｉｎｇ  ａｓ  ａｎ  ａｔｔｒａｃｔｉｖｅ  ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  ｓｔｒａｔｅｇｙ．  Ｃｅｌｌ  Ｄｅａｔｈ  Ｄｉｆｆｅｒ．  １９：  １２５５−１２６７．
２３．  Ｃｈａｎ，  Ｊ．Ｙ．  ２０１１．  Ａ  ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｏｖｅｒｖｉｅｗ  ｏｆ  ｃｅｎｔｒｏｓｏｍｅ  ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｈｕｍａｎ  ｃａｎｃｅｒｓ．  Ｉｎｔ．  Ｊ．  Ｂｉｏｌ．  Ｓｃｉ．  ７：  １１２２−１１４４．  
２４．  Ｋａｗａｍｕｒａ，  Ｅ．，  Ｆｉｅｌｄｉｎｇ，  Ａ．Ｂ．，  Ｋａｎｎａｎ，  Ｎ．，  Ｂａｌｇｉ，  Ａ．，  Ｅａｖｅｓ，  Ｃ．Ｊ．，  Ｒｏｂｅｒｇｅ，  Ｍ．，  ａｎｄ  Ｄｅｄｈａｒ，  Ｓ．  ２０１３．  Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｎｏｖｅｌ  ｓｍａｌｌ  ｍｏｌｅｃｕｌｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｏｆ  ｃｅｎｔｒｏｓｏｍｅ  ｃｌｕｓｔｅｒｉｎｇ  ｉｎ  ｃａｎｃｅｒ  ｃｅｌｌｓ．  Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ  ４：  １７６３−１７７６．
２５．  Ｅｋｅ，  Ｉ．，  Ｌｅｏｎｈａｒｄｔ，  Ｆ．，  Ｓｔｏｒｃｈ，  Ｋ．，  Ｈｅｈｌｇａｎｓ，  Ｓ．，  ａｎｄ  Ｃｏｒｄｅｓ，  Ｎ．  ２００９．  Ｔｈｅ  ｓｍａｌｌ  ｍｏｌｅｃｕｌｅ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ＱＬＴ０２６７  ｒａｄｉｏｓｅｎｓｉｔｉｚｅｓ  ｓｑｕａｍｏｕｓ  ｃｅｌｌ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｃｅｌｌｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｈｅａｄ  ａｎｄ  ｎｅｃｋ．  ＰＬｏＳ  Ｏｎｅ  ４：  ｅ６４３４．
２６．  Ｆｉｅｌｄｉｎｇ，  Ａ．Ｂ．，  Ｌｉｍ，  Ｓ．，  Ｍｏｎｔｇｏｍｅｒｙ，  Ｋ．，  Ｄｏｂｒｅｖａ，  Ｉ．，  ａｎｄ  Ｄｅｄｈａｒ，  Ｓ．  ２０１１．  Ａ  ｃｒｉｔｉｃａｌ  ｒｏｌｅ  ｏｆ  ｉｎｔｅｇｒｉｎ−ｌｉｎｋｅｄ  ｋｉｎａｓｅ，  ｃｈ−ＴＯＧ  ａｎｄ  ＴＡＣＣ３  ｉｎ  ｃｅｎｔｒｏｓｏｍｅ  ｃｌｕｓｔｅｒｉｎｇ  ｉｎ  ｃａｎｃｅｒ  ｃｅｌｌｓ．  Ｏｎｃｏｇｅｎｅ  ３０：  ５２１−５３４．
２７．  Ｙａｎｇ，  Ｂ．  ｅｔ  ａｌ．  ２０１４．  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ｏｆ  ｐｏｔｅｎｔ  ＫＩＦＣ１  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｕｓｉｎｇ  ａ  ｍｅｔｈｏｄ  ｏｆ  ｈｉｇｈ−ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ａｎｄ  ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ．  Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  ５７：  ９９５８−９９７０．
２８．    Ｌｉ，  Ｙ．，  Ｌｕ，  Ｗ．，  Ｃｈｅｎ，  Ｄ．，  Ｂｏｏｈａｋｅｒ，  Ｒ．Ｊ．，  Ｚｈａｉ，  Ｌ．，  Ｐａｄｍａｌａｙａｍ，  Ｉ．，  Ｗｅｎｎｅｒｂｅｒｇ，  Ｋ．，  Ｘｕ，  Ｂ．，  ａｎｄ  Ｚｈａｎｇ，  Ｗ．  ２０１５．  ＫＩＦＣ１  ｉｓ  ａ  ｎｏｖｅｌ  ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ｔａｒｇｅｔ  ｆｏｒ  ｂｒｅａｓｔ  ｃａｎｃｅｒ．  Ｃａｎｃｅｒ  Ｂｉｏｌ．  Ｔｈｅｒ．  １６：  １３１６−１３２２．
２９．  Ｚｈａｎｇ，  Ｗ．  ｅｔ  ａｌ．  ２０１６．  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ｏｆ  ａ  ｎｏｖｅｌ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｏｆ  ｋｉｎｅｓｉｎ−ｌｉｋｅ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ＫＩＦＣ１．  Ｂｉｏｃｈｅｍ．  Ｊ．  ４７３：  １０２７−１０３５．
３０．  Ａｋｈｍａｎｏｖａ，  Ａ．，  ａｎｄ  Ｓｔｅｉｎｍｅｔｚ，  Ｍ．Ｏ．  ２０１５．  Ｃｏｎｔｒｏｌ  ｏｆ  ｍｉｃｒｏｔｕｂｕｌｅ  ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｄｙｎａｍｉｃｓ：  ｔｗｏ  ｅｎｄｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｌｉｍｅｌｉｇｈｔ．  Ｎａｔ．  Ｒｅｖ．  Ｍｏｌ．  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．  １６：  ７１１−７２６．
３１．  Ｌｕｃｏｎｉ，  Ｍ．  ａｎｄ  Ｍａｎｎｅｌｌｉ，  Ｍ．  ２０１２．  Ｘｅｎｏｇｒａｆｔ  ｍｏｄｅｌｓ  ｆｏｒ  ｐｒｅｃｌｉｎｉｃａｌ  ｄｒｕｇ  ｔｅｓｔｉｎｇ：  Ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｆｏｒ  ａｄｒｅｎｏｃｏｒｔｉｃａｌ  ｃａｎｃｅｒ．  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ａｎｄ  Ｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ  ３５１：  ７１−７７．
３２．  Ｈｏｌｌｉｎｇｓｈｅａｄ，  Ｍ．Ｇ．  ２００８．  Ａｎｔｉｔｕｍｏｒ  ｅｆｆｉｃａｃｙ  ｔｅｓｔｉｎｇ  ｉｎ  ｒｏｄｅｎｔｓ．  Ｊ．  Ｎａｔｌ．  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔ．  １００：  １５００−１５１０．
３３．  Ｆｉｅｂｉｇ，  Ｈ．Ｈ．，  Ｍａｉｅｒ，  Ａ．，  Ｂｕｒｇｅｒ  Ａ．Ｍ．  ２００４．  Ｃｌｏｎｏｇｅｎｉｃ  ａｓｓａｙ  ｗｉｔｈ  ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ  ｈｕｍａｎ  ｔｕｍｏｕｒ  ｘｅｎｏｇｒａｆｔｓ：  ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ｔｏ  ｉｎ  ｖｉｖｏ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ａｓ  ａ  ｂａｓｉｓ  ｆｏｒ  ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  ｄｒｕｇ  ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ．  Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｊ．  Ｃａｎｃｅｒ  ４０：  ８０２−８２０．
３４．  Ｆｒｉｅｄｒｉｃｈ，  Ｊ．，  Ｓｅｉｄｅｌ，  Ｃ．，  Ｅｂｎｅｒ，  Ｒ．  ａｎｄ  Ｋｕｎｚ−Ｓｃｈｕｇｈａｒｔ，  Ｌ．Ａ．  ２００９．  Ｓｐｈｅｒｏｉｄ−ｂａｓｅｄ  ｄｒｕｇ  ｓｃｒｅｅｎ：  ｃｏｎｓｉｄｅｒａｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  ｐｒａｃｔｉｃａｌ  ａｐｐｒｏａｃｈ．  Ｎａｔｕｒｅ  ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ．  ４：  ３０９−３２４．
３５．  Ｆｒｏｅｈｌｉｃｈ，  Ｋ．，  Ｈａｅｇｅｒ，  Ｊ．，  Ｈｅｇｅｒ，  Ｊ．，  Ｐａｓｔｕｓｃｈｅｋ，  Ｊ．，  Ｐｈｏｔｉｎｉ，  Ｓ．Ｍ．，  Ｙａｎ，  Ｙ．，  Ｌｕｐｐ，  Ａ．，  Ｐｆａｒｒｅｒ，  Ｃ．，  Ｍｒｏｗｋａ，  Ｒ．，  Ｓｃｈｌｅｕｓｓｎｅｒ，  Ｅ．，  Ｍａｒｋｅｒｔ，  Ｕ．Ｒ．  ａｎｄ  Ｓｃｈｍｉｄｔ，  Ａ．  ２０１６．  Ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｍｕｌｔｉｃｅｌｌｕｌａｒ  ｂｒｅａｓｔ  ｃａｎｃｅｒ  ｔｕｍｏｒ  ｓｐｈｅｒｏｉｄｓ：  ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ  ｏｆ  ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ  ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ．  Ｊ．  Ｍａｍｍａｒｙ  Ｇｌａｎｄ  Ｂｉｏｌ．  Ｎｅｏｐｌａｓｉａ  ２１：８９−９８．
３６．  Ｚｈａｎｇ，  Ｑ．，  Ｒｅ，  Ｋｏ，  Ｎ．，  Ｋｗｏｎ，  Ｏｈ，  Ｊ．  Ｒｅｃｅｎｔ  ａｄｖａｎｃｅｓ  ｉｎ  ｓｔｉｍｕｌｉ−ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅ  ｄｅｇｒａｄａｂｌｅ  ｂｌｏｃｋ  ｃｏｐｏｌｙｍｅｒ  ｍｉｃｅｌｌｅｓ：  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ａｎｄ  ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  ｄｒｕｇ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ．  Ｃｈｅｍ．  Ｃｏｍｍｕｎ．  ４８，  ７５４２−７５５２．
【図１−１】
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【図１−２】
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【図１−３】
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【図１−４】
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【図２−１】
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【図２−２】
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【図２−３】
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【図２−４】
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【図２−５】
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【図２−６】
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【図２−７】
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【図３−１】
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【図３−２】
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【図３−３】
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【図３−４】
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【図３−５】
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【図３−６】
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【図３−７】
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【図４−１】
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【図４−２】
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【図５−１】
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【図５−２】
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【図５−３】
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【図５−４】
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【図５−５】
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【図５−６】
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【図５−７】
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【国際調査報告】
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