(57)【要約】  保存安定性を有するベータ−ヒドロキシイソ吉草酸含有ソフトゲル組成物、及びそのような組成物の作製方法が開示される。特定の態様では、開示される組成物は、植物系カプセルシェル、並びにベータ−ヒドロキシイソ吉草酸及び少なくとも１つの賦形剤を含む液体製剤を含み、ソフトゲルカプセルは、保存安定性を有する。特定の態様では、賦形剤は、コリン塩、ベタイン、ホスファチジルコリン、アルファ−グリセロホスホコリン、カルニチン、アデノシン５’−三リン酸、又はこれらの組み合わせから選択される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
ａ．カプセルシェル、及び
ｂ．ベータ−ヒドロキシイソ吉草酸及び少なくとも１つの賦形剤を含む液体製剤、
を含み、保存安定性を有するソフトゲルカプセル。
【請求項２】
前記賦形剤が、コリン塩、ベタイン、ホスファチジルコリン、アルファ−グリセロホスホコリン、カルニチン、アデノシン５’−三リン酸、又はこれらの組み合わせから選択される、請求項１に記載のソフトゲルカプセル。
【請求項３】
前記カプセルシェルが、カラゲナン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、プルラン、又はこれらの組み合わせから選択される少なくとも１つのシェル材料を含む、請求項１に記載のソフトゲルカプセル。
【請求項４】
前記カプセルシェルが、ゼラチンを含まない、請求項１に記載のソフトゲルカプセル。
【請求項５】
前記液体製剤が、約４０重量％〜約８０重量％のベータ−ヒドロキシイソ吉草酸を含む、請求項１に記載のソフトゲルカプセル。
【請求項６】
前記液体製剤が、約１０重量％〜約６０重量％の賦形剤を含む、請求項１に記載のソフトゲルカプセル。
【請求項７】
前記液体製剤が、さらに、水を含む、請求項１に記載のソフトゲルカプセル。
【請求項８】
前記液体製剤が、約０．１重量％〜約５重量％の水を含む、請求項７に記載のソフトゲルカプセル。
【請求項９】
前記ソフトゲルカプセルが、少なくとも６ヶ月間の保存安定性を有する、請求項１に記載のソフトゲルカプセル。
【請求項１０】
ａ．カプセルシェル、及び
ｂ．ベータ−ヒドロキシイソ吉草酸及び無水ベタインを含む液体製剤、
を含み、保存安定性を有するソフトゲルカプセル。
【請求項１１】
前記カプセルシェルが、カラゲナン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、プルラン、又はこれらの組み合わせのうちの少なくとも１つを含む、請求項１０に記載のソフトゲルカプセル。
【請求項１２】
前記カプセルシェルが、動物由来の組成物を実質的に含まない、請求項１１に記載のソフトゲルカプセル。
【請求項１３】
前記液体製剤が、約５０重量％〜約８５重量％のベータ−ヒドロキシイソ吉草酸を含む、請求項１０に記載のソフトゲルカプセル。
【請求項１４】
前記液体製剤が、約１０重量％〜約２５重量％の無水ベタインを含む、請求項１０に記載のソフトゲルカプセル。
【請求項１５】
コリン塩、ホスファチジルコリン、アルファ−グリセロホスホコリン、カルニチン、アデノシン５’−三リン酸、又はこれらの組み合わせから選択される少なくとも１つの賦形剤をさらに含む、請求項１４に記載のソフトゲルカプセル。
【請求項１６】
前記少なくとも１つの賦形剤の濃度が、約５重量％〜約２０重量％である、請求項１５に記載のソフトゲルカプセル。
【請求項１７】
前記液体製剤が、さらに、水を含む、請求項１０に記載のソフトゲルカプセル。
【請求項１８】
前記水の濃度が、約０．１重量％〜約７重量％である、請求項１７に記載のソフトゲルカプセル。
【請求項１９】
前記ソフトゲルカプセルが、少なくとも６ヶ月間までの保存安定性を有する、請求項１０に記載のソフトゲルカプセル。
【請求項２０】
ａ．植物由来のカプセルシェルを提供する工程、
ｂ．ベータ−ヒドロキシイソ吉草酸及び少なくとも１つの賦形剤を含む液体製剤を混合する工程であって、前記ベータ−ヒドロキシイソ吉草酸及び前記少なくとも１つの賦形剤は、撹拌器を用いて、インラインミキサーを用いて、又はジェット混合によって混合される、工程、及び
ｃ．前記液体製剤を前記カプセルシェル中に組み込む工程、
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１６年５月２５日に出願された「Stabilization of Beta-HydroxyisovalericAcid Formulations In Soft Gel Capsules」と題する米国仮特許出願第６２／３４１，４６４号の優先権を主張するものであり、それを、その全内容について参照により本明細書に援用するものである。
【０００２】
技術分野
本開示は、カプセルシェル及びＨＭＢ−ＦＡと少なくとも１つの賦形剤との液体製剤を備えたソフトゲルカプセルのための組成物、並びに関連する製造方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
本明細書において交換可能に「ＨＭＢ−ＦＡ」とも称される遊離酸の形態のベータ−ヒドロキシイソ吉草酸は、３−ヒドロキシ−３−メチル酪酸、β−ヒドロキシ−β−メチル酪酸、３−ヒドロキシ−３−メチルブチレート、β−ヒドロキシ−β−メチルブチレート、β−ヒドロキシ−β−メチルブチレート、３−ヒドロキシ−３−メチルブタン酸、及びβ−ヒドロキシ−β−メチルブタン酸としても本技術分野で知られている。以下：
【０００４】
【化１】
2019517576.tif 000002
【０００５】
に示されるその分子は、（ＣＨ３）２Ｃ（ＯＨ）ＣＨ２ＣＯＯＨの構造式を有する。
ＨＭＢは、窒素保持及びタンパク質節約を改善すること、除脂肪体重を改善すること、筋肉機能及び／又は筋肉能力を改善すること、ストレス又は損傷を受けた筋肉の筋肉損傷を低減すること、筋肉がストレス又は損傷を受けた後の炎症反応を低減すること、ストレス又は損傷後の身体の免疫反応を改善すること、疾患に伴う消耗（癌、慢性肺疾患、加齢、慢性腎疾患、長期間の入院、又はＡＩＤＳに伴う消耗など）を治療すること、高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）に対する低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）などの脂質プロファイルを改善すること、並びに人の情動状態を改善することが知られている。
【０００６】
現在、ＨＭＢ−ＦＡは、ゲルカプセル中にその純液体の形態で組み込まれたソフトゲルカプセルとして投与されている。しかし、ＨＭＢ−ＦＡの吸湿特性により、ゲルカプセルの製造、乾燥、及び保存の過程で、カプセルシェルから、又はカプセルシェルを通しての水分の移動が引き起こされる。ゼラチン、カラゲナン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、プルラン、又はこれらの混合物及び可塑剤を含む多くのカプセルシェル材料は、ソフトゲルカプセルが完全性及び安定性を維持する限界含水率を有することから、この水分の移動は、ゲルカプセルの劣化をもたらす。水分の移動により、カプセルシェル及び充填物の両方の含水率が変化し、このことは、水分がカプセルシェルから充填物へ移動するに従って、クラック及び破損を引き起こすか、又は環境水分がゲルカプセル中に移動するに従って、カプセルシェルの軟化を引き起こす。
【発明の概要】
【０００７】
ＨＭＢ−ＦＡの高い吸湿性に起因する課題を克服することのできるゲルカプセル充填組成物が、本技術分野において求められている。ＨＭＢ−ＦＡ及び少なくとも１つの賦形剤の開示されるソフトゲルカプセル充填組成物は、驚くべきことに、及び予想外なことに、ＨＭＢ−ＦＡの高い吸湿性に起因する安定性の課題を解決することが見出された。
【０００８】
本明細書において、カプセルシェル及びベータ−ヒドロキシイソ吉草酸と少なくとも１つの賦形剤との液体製剤を備えたソフトゲルカプセルのための組成物、並びに関連する製造方法に関する様々な実施形態が記載される。
【０００９】
特定の態様では、賦形剤は、コリン塩、ベタイン、ホスファチジルコリン、アルファ−グリセロホスホコリン、カルニチン、アデノシン５’−三リン酸、又はこれらの組み合わせから選択される。さらなる態様では、カプセルシェルは、カラゲナン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、プルラン、又はこれらの組み合わせから選択される少なくとも１つのシェル材料を含む。
【００１０】
さらなる態様では、液体製剤は、約４０重量％〜約８０重量％のベータ−ヒドロキシイソ吉草酸を含む。なおさらなる態様では、液体製剤は、約１０重量％〜約６０重量％の賦形剤を含む。
【００１１】
特定のさらなる態様によると、液体製剤は、さらに、水を含む。例示的な態様では、液体製剤は、約０．１重量％〜約７重量％の水を含む。
さらに、本明細書において、カプセルシェル；並びにベータ−ヒドロキシイソ吉草酸及び無水ベタインを含む液体製剤を備えたソフトゲルカプセルが開示され、このソフトゲルカプセルは、保存安定性を有する。特定の態様では、カプセルシェルは、カラゲナン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、プルラン、又はこれらの組み合わせのうちの少なくとも１つを含む植物系組成物を含む。さらなる態様では、カプセルシェルは、動物由来の組成物を実質的に含まない。特定のさらなる態様では、液体製剤は、約５０重量％〜約８５重量％のベータ−ヒドロキシイソ吉草酸を含む。なおさらなる態様では、液体製剤は、約１０重量％〜約２５重量％の無水ベタインを含む。
【００１２】
特定のさらなる実施形態によると、ソフトゲルは、さらに、コリン塩、ホスファチジルコリン、アルファ−グリセロホスホコリン、カルニチン、アデノシン５’−三リン酸、又はこれらの組み合わせから選択される少なくとも１つの追加の賦形剤を含む。例示的な実施形態では、少なくとも１つの追加の賦形剤は、約５重量％〜約２０重量％である。
【００１３】
特定のさらなる態様では、液体製剤は、さらに、水を含む。例示的な態様では、水の濃度は、約０．１重量％〜約７重量％である。
本明細書において、植物由来のカプセルシェルを提供する工程；ベータ−ヒドロキシイソ吉草酸及び少なくとも１つの賦形剤を含む液体製剤を混合する工程であって、ベータ−ヒドロキシイソ吉草酸及び少なくとも１つの賦形剤は、撹拌器を用いて、インラインミキサーを用いて、又はジェット混合によって混合される、工程；並びに液体製剤をカプセルシェル中に組み込む工程、を含むソフトゲルカプセルの製造方法がさらに開示される。
【００１４】
複数の実施形態が開示されるが、当業者であれば、開示される装置、システム、及び方法の例示的な実施形態を示し、記載する以下の詳細な記述から、本開示のさらに他の実施形態が明らかとなるであろう。認識されるように、開示される装置、システム、及び方法は、すべて本開示の趣旨及び範囲から逸脱することなく、様々な明白な態様における改変が可能である。したがって、図面及び詳細な記述は、限定的ではなく、例示的な性質のものとして見なされるべきである。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
本開示は、好ましい実施形態を参照して記載されるが、当業者であれば、開示される本発明の趣旨及び範囲から逸脱することなく、形態及び詳細事項が改変されてもよいことは認識される。
【００１６】
本明細書における本発明の記述に用いられる専門用語は、単に特定の実施形態を記載するだけの目的であり、本発明を限定することを意図するものではない。本発明及び添付の請求項の記述に用いられる場合、単数形「１つの（a）」、「１つの（an）」、及び「その（the）」は、そうでないことが文脈から明らかに示されていない限り、複数形も含むことを意図している。特に定めのない限り、本明細書で用いられるすべての技術的及び科学的用語は、本発明が属する技術分野の当業者によって一般的に理解される意味と同じ意味を有する。
【００１７】
本明細書において、範囲は、「約」１つの特定の値から、及び／又は「約」別の特定の値までとして表され得る。そのような範囲が表される場合、さらなる態様は、その１つの特定の値から、及び／又は他の特定の値までを含む。同様に、値が、先行詞「約」を用いることによって近似値として表される場合、その特定の値がさらなる態様を形成することは理解される。さらに、各範囲の終点が、他方の終点に関連しても、他方の終点と独立しても、有意であることは理解される。また、本明細書において多くの値が開示されること、及び各値が、その値自体に加えて、「約」その特定の値、としても本明細書において開示されることも理解される。例えば、値「１０」が開示される場合、「約１０」も開示される。また、２つの特定の単位間の各単位も開示されることも理解される。例えば、１０及び１５が開示される場合、１１、１２、１３、及び１４も開示される。
【００１８】
「有効用量」又は「有効量」の用語は、必要な投与量で、及び必要な時間で所望される結果を実現するのに有効である量を意味する。
成分の重量パーセント（重量％）とは、そうでないことが具体的に示されていない限り、その成分が含まれている製剤又は組成物の総重量に基づいている。
【００１９】
本明細書で用いられる場合、「保存安定性を有する」の用語は、ＨＭＢ−ＦＡの実質的な分解及びカプセルの物理的特性の実質的な劣化を起こすことなく、室温で（例：約２０℃〜約２５℃）長期間にわたって（例：３か月以上）保存することができることを意味する。
【００２０】
本開示は、カプセルシェル及びＨＭＢ−ＦＡと少なくとも１つの賦形剤との液体製剤を備えたソフトゲルカプセルの組成物、並びに関連する製造方法に関し、このソフトゲルカプセルは、現在市販されている製品と比較して、保存安定性がプラスに向上されている。
【００２１】
特定の態様では、開示されるソフトゲルカプセルは、カプセルシェル及びＨＭＢ−ＦＡと少なくとも１つの賦形剤との液体製剤を備え、このソフトゲルカプセルは、保存安定性を有する。特定の態様では、賦形剤は、コリン塩、ベタイン、ホスファチジルコリン、アルファ−グリセロホスホコリン、カルニチン、アデノシン５’−三リン酸、又はこれらの組み合わせから選択される。さらなる態様では、賦形剤は、ベタインである。さらなる態様では、賦形剤は、Ｌ−カルニチンである。
【００２２】
特定の態様によると、カプセルシェルは、植物由来物質を含む。例示的な実施形態では、植物由来物質は、ポリサッカリドである。さらなる態様では、カプセルシェルは、カラゲナン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、プルラン、又はこれらの組み合わせから選択される。なおさらなる態様では、カプセルシェルは、実質的にゼラチンを含まない。なおさらなる態様では、カプセルシェルは、実質的に動物由来品を含まない。
【００２３】
特定の態様では、開示されるソフトゲルカプセルは、約４０重量％〜約８０重量％のＨＭＢ−ＦＡを含む液体製剤を備える。なおさらなる態様によると、ソフトゲルは、約５０重量％〜約８０重量％のＨＭＢ−ＦＡを含む
特定の例示的な実施形態では、液体製剤は、約１０重量％〜約６０重量％の賦形剤を含む。特定の別の選択肢としての実施形態によると、液体製剤は、約１０重量％〜約５０重量％の賦形剤を含む。なおさらなる実施形態では、液体製剤は、約１０重量％〜約４０重量％の賦形剤を含む。なおさらなる実施形態では、液体製剤は、約１０重量％〜約３０重量％の賦形剤を含む。なおさらなる実施形態では、液体製剤は、約１０重量％〜約２０重量％の賦形剤を含む。特定の実施形態によると、液体製剤は、約１８％の賦形剤を含む。
【００２４】
特定の態様によると、液体製剤は、さらに、水を含む。例示的な実施形態では、液体製剤は、約０．１重量％〜約７重量％の水を含む。
特定の態様では、ソフトゲルカプセルは、少なくとも３ヶ月間の保存安定性を有する。さらなる態様では、ソフトゲルカプセルは、少なくとも６ヶ月間の保存安定性を有する。なおさらなる態様では、ソフトゲルカプセルは、少なくとも約２年間の保存安定性を有する。
【００２５】
さらに、本明細書において、カプセルシェル；並びにベータ−ヒドロキシイソ吉草酸及び無水ベタインを含む液体製剤を備えたソフトゲルカプセルが開示され、このソフトゲルカプセルは、保存安定性を有する。特定の態様では、カプセルシェルは、カラゲナン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、プルラン、又はこれらの組み合わせのうちの少なくとも１つを含む。特定の例示的な態様では、カプセルシェルは、動物由来の組成物を実質的に含まない。
【００２６】
例示的な実施形態によると、液体製剤は、約５０重量％〜約８５重量％のＨＭＢ−ＦＡ、及び約１５重量％〜約２５重量％の無水ベタインを含む。特定の例示的な実施形態では、液体製剤は、約１０重量％〜約６０重量％の無水ベタインを含む。特定の別の選択肢としての実施形態によると、液体製剤は、約１０重量％〜約５０重量％の無水ベタインを含む。なおさらなる実施形態では、液体製剤は、約１０重量％〜約４０重量％の無水ベタインを含む。なおさらなる実施形態では、液体製剤は、約１０重量％〜約３０重量％の無水ベタインを含む。なおさらなる実施形態では、液体製剤は、約１０重量％〜約２０重量％の無水ベタインを含む。特定の実施形態によると、液体製剤は、約１８重量％の無水ベタインを含む。
【００２７】
さらなる例示的な実施形態によると、カプセルは、さらに、少なくとも１つの追加の賦形剤を含む。これらの例示的な実施形態の特定の態様では、少なくとも１つの追加の賦形剤は、コリン塩、ホスファチジルコリン、アルファ−グリセロホスホコリン、カルニチン、アデノシン５’−三リン酸、又はこれらの組み合わせから選択される。特定の態様では、少なくとも１つの追加の賦形剤は、約５重量％〜約２０重量％の量で存在する。
【００２８】
特定のさらなる実施形態によると、ソフトゲルカプセル中に含有される液体製剤は、さらに、水を含む。特定の態様では、水は、液体製剤の約０．１重量％〜約７重量％の量で存在する。特定の態様では、水は、精製水である。
【００２９】
好ましい実施形態では、ソフトゲルカプセル組成物の液体製剤は、有効量のＨＭＢ−ＦＡ、及びカプセルシェルの保存安定性評価及び完全性にプラスの影響を与えるための賦形剤を含有する。特定の実施形態では、液体製剤は、少なくとも４０重量％のベータ−ヒドロキシイソ吉草酸及び少なくとも２０重量％の賦形剤を含む。
【００３０】
特定の実施形態によると、開示されるソフトゲルカプセルは、対象に投与された場合に筋肉の成長を促進するのに有効である量のＨＭＢ−ＦＡを含有する。さらなる実施形態によると、開示されるソフトゲルカプセルは、損傷後の筋肉の治癒を高めるのに有効である量のＨＭＢ−ＦＡを含有する。なおさらなる実施形態によると、開示されるソフトゲルカプセルは、癌又はＨＩＶ／ＡＩＤＳの患者が罹患するものなどの悪液質を防止するのに有効である量のＨＭＢ−ＦＡを含有する。なおさらなる実施形態では、開示されるソフトゲルカプセルは、サルコペニアを防止するのに有効である量のＨＭＢ−ＦＡを含有する。特定の実施形態によると、開示されるソフトゲルカプセルは、約２００ｍｇ／カプセル〜約１０００ｍｇ／カプセルのＨＭＢ−ＦＡを含有する。なおさらなる実施形態では、開示されるソフトゲルカプセルは、約５００ｍｇ／カプセルのＨＭＢ−ＦＡを含有する。
【００３１】
さらに、本明細書において、カプセルシェルを提供する工程、ＨＭＢ−ＦＡ及び少なくとも１つの賦形剤を含む液体製剤を混合する工程、並びに液体製剤をカプセルシェル中に組み込む工程を含む、ソフトゲルカプセルの製造方法が開示される。
【００３２】
特定の態様によると、液体製剤の成分は、撹拌器を用いて、インラインミキサーを用いて、又はジェット混合によって混合される。特定のさらなる態様では、液体製剤は、プレートプロセス、ロータリーダイプロセス、往復ダイプロセス（reciprocating die process）、又はアコゲルマシンプロセス（accogel machine process）を用いてカプセルシェル中に組み込まれる。さらなる態様によると、混合は、バッチプロセスによって行われる。特定の別の選択肢としての実施形態では、混合は、連続プロセスによって実現される。
【００３３】
開示される方法の特定の実施形態では、カプセルシェルは、ゼラチン、カラゲナン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、プルラン、又はこれらの組み合わせのうちの少なくとも１つを含む。さらなる実施形態では、カプセルシェルは、さらに、グリセロール、ソルビトール、キシリトール、ソルビトール、ポリグリセロールが挙げられるがこれらに限定されない可塑剤を含む。当業者であれば、カプセルシェル製剤に他の材料が用いられてもよいことは理解されるであろう。
【００３４】
特定の実施形態では、賦形剤は、コリン塩、ベタイン、ホスファチジルコリン、アルファ−グリセロホスホコリン、カルニチン、アデノシン５’−三リン酸、又はこれらの組み合わせから選択される。さらなる実施形態では、少なくとも１つの賦形剤は、無水ベタインである。特定の例示的な実施形態では、１つ以上の追加の賦形剤が存在し、コリン塩、ホスファチジルコリン、アルファ−グリセロホスホコリン、カルニチン、アデノシン５’−三リン酸、又はこれらの組み合わせから選択される。
【００３５】
様々な実施形態では、液体製剤は、高速せん断ミキサーが挙げられるがこれに限定されない撹拌器、ジェット混合、又はインラインミキサーを用いて混合されてよい。混合は、バッチプロセス又は連続プロセスで完了されてよい。さらなる実施形態では、液体製剤は、プレートプロセス、ロータリーダイプロセス、往復ダイプロセス、アコゲルマシンプロセス、又は他のいずれかの類似のプロセスを用いることによってソフトゲルカプセル中に組み込まれてよい。
【００３６】
上記で開示される様々な実施形態によって、ソフトゲルカプセルの保存安定性の予想外で驚くべきプラスの向上が得られた。したがって、開示される本発明は、本技術分野におけるＨＭＢ−ＦＡ送達のための保存安定性ソフトゲルカプセルに対する必要性に対処するものである。
【００３７】
本発明の上記の及び他の態様について、ここで、本明細書で述べる他の実施形態に関連してより詳細に記載する。本発明が、異なる形態で具体化され得るものであり、本明細書で示される実施形態に限定されるものとして解釈されるべきではないことは理解されたい。そうではなく、これらの実施形態は、本開示を充分かつ完全とし、本発明の範囲が当業者に充分に伝えられるように提供されるものである。
【００３８】
実施例
以下の例は、本明細書で請求される化合物、組成物、物品、デバイス、及び／又は方法を作製し、評価する方法についての完全な開示及び記述を当業者に提供するように示されるものであり、本発明の単なる代表例であることを意図しており、本発明者らが本発明者らの発明として見なすものの範囲を限定することを意図するものではない。しかし、当業者であれば、本開示に照らして、開示される具体的な実施形態に多くの変更が成され得るものであり、それでも、本発明の趣旨及び範囲から逸脱することなく、同じ又は類似の結果が得られることは理解されたい。
【００３９】
数値（例：量、温度など）に関して正確性が確保されるように努めたが、ある程度の誤差及び偏差は考慮されたい。特に断りのない限り、部は、重量部であり、温度は、℃の単位であるか、又は周囲温度であり、圧力は、大気圧又は大気圧近辺である。
【００４０】
例１
充填製剤のブレンド又は混合手順．  表１に概略的に示した製剤を、高せん断ミキサーを用いることによって液体ベータ−ヒドロキシイソ吉草酸と混合した。表１の重量パーセントは、液体ベータ−ヒドロキシイソ吉草酸中の残りの量を意味し、例えば、無水ベタインを２０重量％の濃度で用いた場合、ベータ−ヒドロキシイソ吉草酸は、８０重量％の濃度で用いた。
【００４１】
【表１】
2019517576.tif 000003
【００４２】
結果：ＨＭＢ−ＦＡプラス賦形剤の製剤の残留含水率は、５％を決して超えなかった。
例２
ポリサッカリド系カプセルシェルを、例１からの様々な充填製剤と組み合わせて用いて、カプセル化試験を行った。市販のゼラチンを含まないカプセルシェルを用いた。ゼラチンを含まないソフトゲルカプセルを、市販のロータリーダイカプセル化プロセスを用いて作製した。
【００４３】
例３
保存安定性試験：例２からのソフトゲルカプセルに例１からの液体製剤を組込んだ後、保存安定性試験を行った。そのような物理的安定性試験のための試験条件は、室温での開放容器中であった。ソフトゲルカプセルを、柔軟性、粘着性、膨潤性、脆弱性、破損、及び漏れなどの効果について定期的に観察した。製造したすべてのソフトカプセルの完全性を、９０日間にわたって調べた。結果は、全体として見ると、市販のゼラチン系カプセルで作製したゲルカプセルと比較して、ポリサッカリド系カプセルで作製したゲルカプセルの方が保存安定性に優れていることを示した。
【００４４】
例４
植物系（ポリサッカリド）ソフトゲルが長期的保存安定性を維持する能力を試験するために、促進安定性試験を行った。以下の表２に示されるように、植物系ポリサッカリドソフトゲルは、促進安定性試験において、高度な安定性を維持した。
【００４５】
【表２】
2019517576.tif 000004
【００４６】
例５
促進安定性試験：本発明の開示される組成物の品質及び純度が、温度及び湿度の環境因子の影響下で経時でどのように変動するかを評価するために、促進安定性試験を行った。試験は、ＩＣＨ発行の新原薬及び新製剤の安定性試験、及びＮＳＦによる栄養補助食品の安定性試験ガイドライン、NSF Stability Testing Working Group, Stability testing guideline of dietary supplements, January 2011、に記載のガイドラインに従って行った。簡潔に述べると、サンプルは、本明細書で開示される方法に従って作製し、約４７５〜５２５ｍｇ／カプセルのＨＭＢ−ＦＡ含有量を有していた。ゲルカプセル組成は、ＨＭＢ−ＦＡ  ７５重量％、無水ベタイン  １８重量％、及び精製水  ７重量％であった。サンプルを、ＨＤＰＥボトル（サイズ：１８０個、３００ｒｎｌ）に詰め、アルミニウム箔で蓋をした。サンプルを高温多湿（４０±２℃；７５％ＲＨ±５％ＲＨ）に曝露し、１、２、及び３か月で評価した。結果を表３に示す。
【００４７】
【表３】
2019517576.tif 000005
【００４８】
上記の結果は、ＨＭＢ  ＦＡが、高温多湿環境であっても、３か月を超える期間にわたって非常に安定であることを示している。表４に示されるように、促進安定性試験後のソフトゲルの物理的特性は、３ヶ月間の高温多湿条件後、高いレベルの安定性を示した。この促進安定性試験から外挿すると、これらの結果は、本開示のソフトゲル組成物が、室温条件で保存された場合、２年間までの保存安定性を有することを示している。
【００４９】
【表４】
2019517576.tif 000006
【００５０】
以下の参考文献は、本明細書で示される内容に対して補助的である例示的な手順及び他の詳細事項を提供する範囲内で、参照により具体的に本明細書に援用される。β−ヒドロキシル−β−メチルブチレートの新規な製造方法に関する２０１３年１２月６日に出願された特許協力条約出願第ＰＣＴ／ＣＮ２０１３／０８８７６２号及び２０１３年４月１２日に出願された中国特許出願第２０１３１０１２７２６２号。
【国際調査報告】
2019517576.tif 000007