(57)【要約】本明細書は、トリパノソーマ抗原、当該トリパノソーマ抗原を含む免疫原性組成物および薬物、ならびにトリパノソーマ系疾患を治療するための当該トリパノソーマ抗原および免疫原性組成物に関する方法および使用に関する。【選択図】図１２
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
配列番号６、配列番号９、配列番号５、配列番号７、配列番号８、配列番号１１、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号１０、もしくは配列番号１２、または配列番号６、配列番号９、配列番号５、配列番号７、配列番号８、配列番号１１、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号１０、もしくは配列番号１２と７５％のアミノ酸同一性を有するペプチド、または配列番号６、配列番号９、配列番号５、配列番号７、配列番号８、配列番号１１、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号１０、もしくは配列番号１２由来の少なくとも７個の連続したアミノ酸を有するペプチドである、トリパノソーマ抗原。
【請求項２】
前記ペプチドが、配列番号６、配列番号９、配列番号５、配列番号７、配列番号８、配列番号１１、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号１０、または配列番号１２と７５％のアミノ酸同一性を有し、配列番号６、配列番号９、配列番号５、配列番号７、配列番号８、配列番号１１、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号１０、または配列番号１２と比較して、少なくとも１つの連続したアミノ酸の欠失、付加、および／または置換を含む、請求項１に記載のトリパノソーマ抗原。
【請求項３】
前記ペプチドが、配列番号６、配列番号９、配列番号５、配列番号７、配列番号８、配列番号１１、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号１０、または配列番号１２と７５％のアミノ酸同一性を有し、配列番号６、配列番号９、配列番号５、配列番号７、配列番号８、配列番号１１、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号１０、または配列番号１２と比較して、少なくとも１つの連続していないアミノ酸の欠失、付加、および／または置換を含む、請求項１に記載のトリパノソーマ抗原。
【請求項４】
前記ペプチドが、配列番号６、配列番号９、配列番号５、配列番号７、配列番号８、配列番号１１、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号１０、または配列番号１２と７５％のアミノ酸同一性を有し、配列番号６、配列番号９、配列番号５、配列番号７、配列番号８、配列番号１１、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号１０、または配列番号１２と比較して最大１１個の連続したアミノ酸の欠失、付加、および／または置換を含む、請求項１に記載のトリパノソーマ抗原。
【請求項５】
前記ペプチドが、配列番号６、配列番号９、配列番号５、配列番号７、配列番号８、配列番号１１、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号１０、または配列番号１２と７５％のアミノ酸同一性を有し、配列番号６、配列番号９、配列番号５、配列番号７、配列番号８、配列番号１１、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号１０、または配列番号１２と比較して、最大１１個の連続していないアミノ酸の欠失、付加、および／または置換を含む、請求項１に記載のトリパノソーマ抗原。
【請求項６】
請求項１〜５のいずれか１項に定義されている１つまたは複数のトリパノソーマ抗原を含む免疫原性組成物。
【請求項７】
前記１つまたは複数のトリパノソーマ抗原が、配列番号６を含む、請求項６に記載の免疫原性組成物。
【請求項８】
前記１つまたは複数のトリパノソーマ抗原が、配列番号９を含む、請求項６または７に記載の免疫原性組成物。
【請求項９】
前記１つまたは複数のトリパノソーマ抗原が、配列番号５を含む、請求項６〜８のいずれか１項に記載の免疫原性組成物。
【請求項１０】
前記１つまたは複数のトリパノソーマ抗原が、配列番号５および配列番号９を含む、請求項６に記載の免疫原性組成物。
【請求項１１】
前記１つまたは複数のトリパノソーマ抗原が、配列番号５、配列番号６、および配列番号９を含む、請求項６に記載の免疫原性組成物。
【請求項１２】
前記１つまたは複数のトリパノソーマ抗原が、配列番号７、配列番号８、および配列番号１１を含む、請求項６〜１１のいずれか１項に記載の免疫原性組成物。
【請求項１３】
前記１つまたは複数のトリパノソーマ抗原が、配列番号２、配列番号７、配列番号８、配列番号９、および配列番号１１を含む、請求項６または７に記載の免疫原性組成物。
【請求項１４】
前記１つまたは複数のトリパノソーマ抗原が、配列番号２、配列番号５、配列番号７、配列番号８、配列番号９、および配列番号１１を含む、請求項６または７に記載の免疫原性組成物。
【請求項１５】
前記１つまたは複数のトリパノソーマ抗原が、配列番号２、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、および配列番号１１を含む、請求項６に記載の免疫原性組成物。
【請求項１６】
前記１つまたは複数のトリパノソーマ抗原が、それぞれ、約１ｍｇ〜約１，０００ｍｇの量で存在する、請求項６〜１５のいずれか１項に記載の免疫原性組成物。
【請求項１７】
前記免疫原性組成物が、１つまたは複数のアジュバントをさらに含む、請求項６〜１６のいずれか１項に記載の免疫原性組成物。
【請求項１８】
前記１つまたは複数のアジュバントが、それぞれ、約１００μｇ／ｍＬ〜約１，５００μｇ／ｍｌの量で存在する、請求項１７に記載の免疫原性組成物。
【請求項１９】
１つまたは複数の薬学的に許容可能な担体をさらに含む、請求項６〜１８のいずれか１項に記載の免疫原性組成物。
【請求項２０】
トリパノソーマ系疾患を治療する方法であって、請求項６〜１８のいずれか１項に定義されている免疫原性組成物を、トリパノソーマ系の感染症または病態に関連する１つまたは複数の生理的な状態または症状を低減することにより、トリパノソーマ系疾患を治療するために十分な量で、その必要がある個体に投与するステップを含む、方法。
【請求項２１】
前記免疫原性組成物の投与を、トリパノソーマのクリアランスもしくは除去を増大、誘導、強化、増強、促進、もしくは刺激するため、またはトリパノソーマの別の個体への伝染を減少、低減、阻害、抑制、予防、制御、もしくは限定するために十分な量で行う、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記免疫原性組成物の投与を、トリパノソーマ病原体の数もしくは力価を低減、減少、抑制、限定、制御、もしくは阻害するため；トリパノソーマ病原体の増殖もしくは複製を低減、減少、抑制、限定、制御、もしくは阻害するため；トリパノソーマのタンパク質の合成量を低下、減少、抑制、限定、制御、もしくは阻害するため；または複製されるトリパノソーマ病原体の核酸の量を低下、減少、抑制、限定、制御、もしくは阻害するために十分な量で行う、請求項２０または２１に記載の方法。
【請求項２３】
前記免疫原性組成物の投与が、トリパノソーマ系の感染症または病態に関連する１つまたは複数の生理的な状態または症状を、少なくとも１０％低減する、請求項２０〜２２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２４】
前記免疫原性組成物の投与が、トリパノソーマ系の感染症または病態に関連する１つまたは複数の生理的な状態または症状を、少なくとも１週間低減する、請求項２０〜２３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２５】
トリパノソーマ系疾患が、シャーガス病またはアフリカ睡眠病である、請求項２０〜２４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２６】
トリパノソーマ系疾患を治療するための、請求項１〜５のいずれか１項に定義されているα―トリパノソーマ抗原、または請求項６〜１８のいずれか１項に定義されている免疫原性組成物の使用。
【請求項２７】
トリパノソーマ系疾患を治療する方法であって、請求項１〜５のいずれか１項に定義されているトリパノソーマ抗原、または請求項６〜１９のいずれか１項に定義されている免疫原性組成物を、トリパノソーマ系の感染症または病態に対してそれを必要とする個体に免疫化またはワクチン接種を行うことにより、前記トリパノソーマ系疾患を治療するために十分な量で、前記個体に投与するステップを含む、方法。
【請求項２８】
トリパノソーマ系疾患を治療する方法であって、請求項１〜５のいずれか１項に定義されているトリパノソーマ抗原、または請求項６〜１９のいずれか１項に定義されている免疫原性組成物を、トリパノソーマ系の感染症または病態からそれを必要とする個体を保護するために十分な量で、前記個体に投与するステップを含む、方法。
【請求項２９】
前記トリパノソーマ抗原または前記免疫原性組成物の投与を、トリパノソーマに対する免疫応答を増大、誘導、強化、増強、促進、または刺激するために十分な量で行う、請求項２７または２８に記載の方法。
【請求項３０】
前記トリパノソーマ抗原または前記免疫原性組成物の投与を、前記トリパノソーマ系の感染症または病態に対して前記個体に免疫化またはワクチン接種を行うために十分な量で行う、請求項２７〜２９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３１】
前記トリパノソーマ抗原または前記免疫原性組成物の投与を、トリパノソーマ系の感染症または病態に対する易罹患性を低減、減少、限定、制御、または阻害するために十分な量で行う、請求項２７〜３０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３２】
前記トリパノソーマ抗原または前記免疫原性組成物の投与を、トリパノソーマのクリアランスもしくは除去を増大、誘導、強化、増強、促進、もしくは刺激するため、またはトリパノソーマの別の個体への伝染を減少、低減、阻害、抑制、予防、制御、もしくは限定するために十分な量で行う、請求項２７〜３１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３３】
前記トリパノソーマ系疾患が、シャーガス病またはアフリカ睡眠病である、請求項２７〜３２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３４】
薬物を製造するための、請求項１〜５のいずれか１項に定義されているトリパノソーマ抗原の使用。
【請求項３５】
薬物を製造するための、請求項６〜１８のいずれか１項に定義されている免疫原性組成物の使用。
【請求項３６】
前記トリパノソーマ系疾患が、シャーガス病またはアフリカ睡眠病である、請求項３４または３５のいずれか１項に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本願は、２０１６年４月１４日に出願した米国仮特許出願第６２／３２２，７７０号の優先権および出願日の利益を主張するものであり、この内容全体は本明細書中参照として援用されている。
【背景技術】
【０００２】
トリパノソーマは、キネトプラスト類（キネトプラスト網）の属であり、単細胞の寄生型鞭毛性の原生生物の単系統群である。大部分のトリパノソーマは、多宿主性（生活環を完成させるために１超の必須の宿主を必要とする）であり、大部分は、ベクターを介して伝染する。この種の大部分は、吸血性無脊椎動物により伝染するが、様々な種において異なる機構が存在する。無脊椎動物の宿主では、これらは一般的に腸で見いだされているが、通常、哺乳類の宿主では血流または細胞内環境に存在する。
【０００３】
ステルコラリア類種（糞棲類）およびサリバリア類種（唾棲類）という２種類の異なるトリパノソーマが存在しており、これらの生活環は異なっている。ステルコラリア類のトリパノソーマは昆虫、ほとんどの場合オオサシガメ亜科のサシガメに感染し、この後腸で発育し、感染性生物が、糞便に排出され、宿主の皮膚に蓄積する。次に、この生物が浸透し、体内全体に散在する可能性がある。吸血する際に昆虫は感染する。サリバリア類のトリパノソーマは、昆虫、最も重要な事例ではツェツェバエの前腸で発育し、感染性生物は、昆虫の刺咬により宿主に播種された後、供給される。トリパノソーマは、自身の生活環を介して発育する際に、トリパノソーマ類の典型例である一連の形態的な変化を経る。この生活環は、多くの場合、脊椎動物の宿主では錐鞭毛型、および無脊椎動物の腸では錐鞭毛型もしくは前鞭毛型からなる。細胞内の生活環の段階は、通常、無鞭毛型で見いだされる。錐鞭毛型の形態は、トリパノソーマ属の種に固有である。
【０００４】
トリパノソーマは、様々な宿主に感染し、クルーズトリパノソーマ（Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ  ｃｒｕｚｉ）により引き起こされる致死性のヒトの疾患のシャーガス病、およびブルーストリパノソーマ（Ｔ．ｂｒｕｃｅｉ）により引き起こされるアフリカ睡眠病を含む様々な疾患を引き起こす。
【０００５】
何年もの間、トリパノソーマ系の感染症は、治療の影響を受けやすい病態ではなかった。本明細書では、１つまたは複数のトリパノソーマ菌株に対する保護に有効な免疫応答を誘導する、トリパノソーマ抗原、免疫原性組成物、および抗体を開示する。
【発明の概要】
【０００６】
よって、本明細書中開示の態様は、トリパノソーマ抗原を提供する。本明細書中開示のトリパノソーマ抗原は、トリパノソーマに感染した細胞の表面に存在するエピトープに結合できるα―トリパノソーマ抗体を産生する免疫応答を引き起こし得る。
【０００７】
本明細書中開示の他の態様は、本明細書中開示の１つまたは複数のトリパノソーマ抗原を含む免疫原性組成物を提供する。さらに組成物はアジュバントを含むことができる。
【０００８】
本明細書中開示の他の態様は、トリパノソーマ病原体に感染した個体またはトリパノソーマ系疾患を有する個体を治療する方法を提供する。開示される方法は、トリパノソーマ病原体に感染した個体またはトリパノソーマ系疾患を有する個体に、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原または免疫原性組成物を投与することを含む。
【０００９】
本明細書中に開示の他の態様は、薬物の製造のための、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原または免疫原性組成物の使用を提供する。
【００１０】
本明細書中開示の他の態様は、トリパノソーマ病原体に感染した個体の治療のための、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原または免疫原性組成物の使用を提供する。
【００１１】
本明細書中開示の他の態様は、トリパノソーマ病原体に感染した個体の治療に使用するための、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原または免疫原性組成物を提供する。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】図１Ａ〜Ｄは、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで単一のペプチドへ４８時間曝露した後の脾細胞によるＩＬ−４およびＩＮＦ−γの産生を示しており、ここで図１Ａは、グループＡの動物におけるＩＬ−４の産生を示しており、図１Ｂは、グループＢの動物におけるＩＬ−４の産生を示しており、図１Ｃは、グループＡの動物におけるＩＮＦ−γの産生を示しており、図１Ｄは、グループＢの動物におけるＩＮＦ−γの産生を示している。
【図２】図２Ａ〜Ｂは、ワクチン接種したマウスの血清における個々のペプチドに特異的な総イムノグロブリンの応答を示しており、ここで図２Ａは、雄性の動物における総イムノグロブリンの応答を示しており、図２Ｂは、雌性の動物における総イムノグロブリンの応答を示している。
【図３】図３Ａ〜Ｄは、ワクチン接種したマウスの血清における個々のペプチドに特異的なＩｇＧ１およびＩｇＧ２の応答を示しており、ここで図３Ａは、雄性の動物におけるＩｇＧ２の応答を示しており、図３Ｂは、雌性の動物におけるＩｇＧ２の応答を示しており、図３Ｃは、雄性の動物におけるＩｇＧ１の応答を示しており、図３Ｄは、雌性の動物におけるＩｇＧ１の応答を示している。
【図４】図４Ａ〜Ｂは、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで単一のペプチドへ４８時間曝露した後の脾細胞によるＩＬ−４およびＩＮＦ−γの産生を示しており、ここで図４Ａは、ＩＬ−４の産生を示しており、図４ＢはＩＮＦ−γの産生を示している。
【図５】図５は、単一のペプチドへ曝露した無処置のマウス由来の脾細胞によるＩＮＦ−γの産生を示す。
【図６】図６Ａ〜Ｆは、ワクチン接種したマウスの血清における個々のペプチドに特異的な総イムノグロブリン応答を示しており、ここで図６Ａは、動物におけるＣＨ４７に対する総イムノグロブリン応答を示しており、図６Ｂは、動物におけるＣＨ６９に対する総イムノグロブリン応答を示しており、図６Ｃは、動物におけるＣＨ７２に対する総イムノグロブリン応答を示しており、図６Ｄは、動物におけるＣＨ７７に対する総イムノグロブリン応答を示しており、図６Ｅは、動物におけるＣＨ８４に対する総イムノグロブリン応答を示しており、図６Ｆは、動物におけるＣＨ９３に対する総イムノグロブリン応答を示している。
【図７】図７Ａ〜Ｆは、ワクチン接種したマウスの血清における個々のペプチドに特異的なＩｇＧ１およびＩｇＧ２の応答を示しており、ここで図７Ａは、動物におけるＣＨ７７に対するＩｇＧ１の応答を示しており、図７Ｂは、動物におけるＣＨ４７に対するＩｇＧ１の応答を示しており、図７Ｃは、動物におけるＣＨ７７に対するＩｇＧ２ａの応答を示しており、図７Ｄは、動物におけるＣＨ４７に対するＩｇＧ２ａの応答を示している。
【図８】図８Ａ〜Ｆは、ワクチン接種したマウスの血清における個々のペプチドに特異的なＩｇＧ１およびＩｇＧ２の応答を示しており、ここで図８Ａは動物におけるＣＨ３７に対するＩｇＧ１の応答を示しており、図８Ｂは、動物におけるＣＨ７７に対するＩｇＧ１の応答を示しており、図８Ｃは、動物におけるＣＨ３７に対するＩｇＧ２ａの応答を示しており、図８Ｄは、動物におけるＣＨ７７に対するＩｇＧ２ａの応答を示している。
【図９】図９Ａ〜Ｈは、ワクチン接種したマウスの血清における個々のペプチドに特異的な総イムノグロブリンの応答を示しており、ここで図９Ａは、動物におけるＣＨ３０に対する総イムノグロブリンの応答を示しており、図９Ｂは、動物におけるＣＨ３７に対する総イムノグロブリンの応答を示しており、図９Ｃは、動物におけるＣＨ４７に対する総イムノグロブリンの応答を示しており、図９Ｄは、動物におけるＣＨ６９に対する総イムノグロブリンの応答を示しており、図９Ｅは、動物におけるＣＨ７２に対する総イムノグロブリンの応答を示しており、図９Ｆは、動物におけるＣＨ７７に対する総イムノグロブリンの応答を示しており、図９Ｇは、動物におけるＣＨ８４に対する総イムノグロブリンの応答を示しており、図９Ｈは、動物におけるペプチド混合物に対する総イムノグロブリンの応答を示している。
【図１０】グループＡ、Ｂ、Ｃ、およびＤに関する投与レジメンを示す。
【図１１】トリパノソーマ感染後の対照（Ａ＋Ｃ）、およびワクチン接種した（ＢおよびＤ）動物のグループにおける寄生虫血を示す（ｐｉ＝感染後）。
【図１２】トリパノソーマ感染後の対照（Ａ＋Ｃ）、およびワクチン接種した（ＢおよびＤ）動物のグループにおける死亡率を示す（ｐｉ＝感染後）。
【図１３】グループＡ、Ｂ、およびＣに関する投与レジメンを示す。
【図１４】トリパノソーマ感染後の対照（Ｃ）、およびワクチン接種した（ＡおよびＢ）動物のグループにおける死亡率を示す（ｐｉ＝感染後）。
【図１５】チャレンジ後１７日目および２２日目での、全てのグループにおける寄生虫血濃度の平均値および標準誤差を示す。単位は、寄生生物の数×１０５／ｍｌ血液である。
【図１６】チャレンジ後少なくとも２５日目で生存していた動物における、感染後１７日目および２２日目の全てのグループの寄生虫血濃度の平均値および標準誤差を示す。単位は、寄生生物の数×１０５／ｍｌ血液である。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
トリパノソーマの生活環は、トリパノソーマが感染型の寄生生物をもたらすためにベクター内で増殖および分化するベクター段階と、トリパノソーマがヒトの宿主で分化および増殖するヒトの段階に分けることができる。ヒトの段階の間、ベクターは、ヒトの宿主に寄生し、発育終末型の錐鞭毛型と呼ばれている感染型のトリパノソーマを循環系へと移行させる。発育終末型の錐鞭毛型は、宿主細胞に侵入し、次に、無鞭毛型に分化し、細胞内で増殖を開始する。細胞内の無鞭毛型は錐鞭毛型に分化し、最終的に宿主細胞を破壊し、血流に入り、よって寄生生物は新たな宿主細胞に感染でき、かつ／または新規のベクターに移行することができる。
【００１４】
細胞内の無鞭毛型が宿主細胞に感染する際に、これら寄生生物由来の様々なタンパク質が細胞質に蓄積する。これらタンパク質は、プロテアソームという、細胞質のプロテアーゼ複合体により処理されることにより、概して８〜１１個の長さのアミノ酸の小さなタンパク質フラグメントまたはペプチドがもたらされ得る。次に、これらペプチドは、小胞体の組織適合遺伝子複合体クラスＩ（ＭＨＣ−Ｉ）の糖タンパク質の間隙に結合し、感染した細胞の細胞膜に輸送される。また、これらペプチドは、これらの配列に膜アンカーを含む場合、細胞膜の中に隆起または静置し得る。また、抗原提示細胞は、トリパノソーマまたはトリパノソーマに感染した細胞を貪食することができ、寄生生物のタンパク質を、ＭＨＣクラスＩＩ分子に結合する免疫系にも提示され得る１２〜３５個のアミノ酸のより大きなペプチドフラグメントに処理することができる。
【００１５】
本明細書は、感染した細胞の表面に発現したこれらペプチドフラグメントを、クラスＩおよびＩＩのＭＨＣ複合体の中でこれらペプチドフラグメントを認識できるＣＤ８＋Ｔ細胞およびＣＤ４＋Ｔ細胞、ならびに、細胞膜およびクラスＩＩのＭＨＣ分子の中でこれらペプチドを認識できるＢ細胞を含む免疫原性組成物を提供することにより、利用する。本免疫原性組成物は、これら抗原に対するＴ細胞および抗体の産生を誘発し、次に、これら抗体は、感染した細胞の細胞表面に位置するトリパノソーマペプチドフラグメントを認識する。Ｔ細胞および／または抗体によるこれら細胞表面のペプチドフラグメントの認識により、細胞膜が破壊され、最終的に、これら感染した細胞の破壊、トリパノソーマの増殖の妨害、および細胞内無鞭毛型の死滅がもたらされる。
【００１６】
本明細書の重要な発見の１つは、免疫応答をもたらすために使用される開示のトリパノソーマ抗原が、寄生生物の細胞内タンパク質に由来している点である。このことは、結果として得られる免疫応答が、トリパノソーマ自体をどんな度合でも直接攻撃しないため、重要である。別の重要な発見は、免疫応答が、寄生生物が増殖している感染した細胞を標的とする際に、開示の治療がトリパノソーマの集団をより有効に制御できることである。
【００１７】
本開示の態様は、部分的に、トリパノソーマ抗原を含む。抗原は、免疫応答を誘発し、限定するものではないが、ペプチド、多糖、および脂質のコンジュゲート、たとえばリポタンパク質および糖脂質を含む分子である。トリパノソーマ抗原は、トリパノソーマ病原体またはトリパノソーマ病原体を含む成分に対する免疫応答を誘発できるいずれかの抗原である。トリパノソーマ病原体を含む成分として、限定するものではないが、トリパノソーマのゲノム、トリパノソーマのゲノムによりコードされるタンパク質、およびトリパノソーマ病原体の脂質膜の成分が挙げられる。この実施形態の一態様では、トリパノソーマ抗原は、単一のトリパノソーマ菌株またはトリパノソーマ菌株を含む成分に対する免疫応答を誘発できるいずれかの抗原である。この実施形態の別の態様では、トリパノソーマ抗原は、２つ以上のトリパノソーマ菌株または２つ以上のトリパノソーマ菌株を含む成分に対する免疫応答を誘発できるいずれかの抗原である。
【００１８】
トリパノソーマ抗原は、配列に実質的に固有であるように十分大きくなければならず、よって、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原以外の抗原に対して公差反応性である抗体を産生する可能性を下げなければならない。概して、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原は、約５〜約１００個のアミノ酸の長さを有する。
【００１９】
この実施形態の態様では、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原は、たとえば約５、約６、約７、約８、約９、約１０、約１１、約１２、約１３、約１４、約１５、約１６、約１７、約１８、約１９、約２０、約２５、約３０、約３５、約４０、約４５、約５０、約５５、約６０、約６５、約７０、または約７５個のアミノ酸の長さを有し得る。この実施形態の他の態様では、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原は、たとえば少なくとも５、少なくとも６、少なくとも７、少なくとも８、少なくとも９、少なくとも１０、少なくとも１１、少なくとも１２、少なくとも１３、少なくとも１４、少なくとも１５、少なくとも１６、少なくとも１７、少なくとも１８、少なくとも１９、少なくとも２０、少なくとも２５、少なくとも３０、少なくとも３５、少なくとも４０、少なくとも４５、少なくとも５０、少なくとも５５、少なくとも６０、少なくとも６５、少なくとも７０、または少なくとも７５個のアミノ酸の長さを有し得る。この実施形態のさらなる他の態様では、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原は、たとえば最大５、最大６、最大７、最大８、最大９、最大１０、最大１１、最大１２、最大１３、最大１４、最大１５、最大１６、最大１７、最大１８、最大１９、最大２０、最大２５、最大３０、最大３５、最大４０、最大４５、最大５０、最大５５、最大６０、最大６５、最大７０、または最大７５個のアミノ酸の長さを有し得る。
【００２０】
この実施形態のさらなる他の態様では、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原は、たとえば約７〜約１０個のアミノ酸、約７〜約１２個のアミノ酸、約７〜約１５個のアミノ酸、約７〜約１８個のアミノ酸、約７〜約２０個のアミノ酸、約７〜約２５個のアミノ酸、約７〜約３０個のアミノ酸、約７〜約３５個のアミノ酸、約７〜約４０個のアミノ酸、約７〜約４５個のアミノ酸、約７〜約５０個のアミノ酸、約７〜約５５個のアミノ酸、約７〜約６０個のアミノ酸、約７〜約６５個のアミノ酸、約７〜約７０個のアミノ酸、約７〜約７５個のアミノ酸、約１０〜約１２個のアミノ酸、約１０〜約１５個のアミノ酸、約１０〜約１８個のアミノ酸、約１０〜約２０個のアミノ酸、約１０〜約２５個のアミノ酸、約１０〜約３０個のアミノ酸、約１０〜約３５個のアミノ酸、約１０〜約４０個のアミノ酸、約１０〜約４５個のアミノ酸、約１０〜約５０個のアミノ酸、約１０〜約５５個のアミノ酸、約１０〜約６０個のアミノ酸、約１０〜約６５個のアミノ酸、約１０〜約７０個のアミノ酸、約１０〜約７５個のアミノ酸、約１２〜約１５個のアミノ酸、約１２〜約１８個のアミノ酸、約１２〜約２０個のアミノ酸、約１２〜約２５個のアミノ酸、約１２〜約３０個のアミノ酸、約１２〜約３５個のアミノ酸、約１２〜約４０個のアミノ酸、約１２〜約４５個のアミノ酸、約１２〜約５０個のアミノ酸、約１２〜約５５個のアミノ酸、約１２〜約６０個のアミノ酸、約１２〜約６５個のアミノ酸、約１２〜約７０個のアミノ酸、約１２〜約７５個のアミノ酸、約１５〜約１８個のアミノ酸、約１５〜約２０個のアミノ酸、約１５〜約２５個のアミノ酸、約１５〜約３０個のアミノ酸、約１５〜約３５個のアミノ酸、約１５〜約４０個のアミノ酸、約１５〜約４５個のアミノ酸、約１５〜約５０個のアミノ酸、約１５〜約５５個のアミノ酸、約１５〜約６０個のアミノ酸、約１５〜約６５個のアミノ酸、約１５〜約７０個のアミノ酸、約１５〜約７５個のアミノ酸、約１８〜約２０個のアミノ酸、約１８〜約２５個のアミノ酸、約１８〜約３０個のアミノ酸、約１８〜約３５個のアミノ酸、約１８〜約４０個のアミノ酸、約１８〜約４５個のアミノ酸、約１８〜約５０個のアミノ酸、約１８〜約５５個のアミノ酸、約１８〜約６０個のアミノ酸、約１８〜約６５個のアミノ酸、約１８〜約７０個のアミノ酸、約１８〜約７５個のアミノ酸、約２０〜約２５個のアミノ酸、約２０〜約３０個のアミノ酸、約２０〜約３５個のアミノ酸、約２０〜約４０個のアミノ酸、約２０〜約４５個のアミノ酸、約２０〜約５０個のアミノ酸、約２０〜約５５個のアミノ酸、約２０〜約６０個のアミノ酸、約２０〜約６５個のアミノ酸、約２０〜約７０個のアミノ酸、約２０〜約７５個のアミノ酸、約２５〜約３０個のアミノ酸、約２５〜約３５個のアミノ酸、約２５〜約４０個のアミノ酸、約２５〜約４５個のアミノ酸、約２５〜約５０個のアミノ酸、約２５〜約５５個のアミノ酸、約２５〜約６０個のアミノ酸、約２５〜約６５個のアミノ酸、約２５〜約７０個のアミノ酸、約２５〜約７５個のアミノ酸、約３０〜約３５個のアミノ酸、約３０〜約４０個のアミノ酸、約３０〜約４５個のアミノ酸、約３０〜約５０個のアミノ酸、約３０〜約５５個のアミノ酸、約３０〜約６０個のアミノ酸、約３０〜約６５個のアミノ酸、約３０〜約７０個のアミノ酸、約３０〜約７５個のアミノ酸、約３５〜約４０個のアミノ酸、約３５〜約４５個のアミノ酸、約３５〜約５０個のアミノ酸、約３５〜約５５個のアミノ酸、約３５〜約６０個のアミノ酸、約３５〜約６５個のアミノ酸、約３５〜約７０個のアミノ酸、約３５〜約７５個のアミノ酸、約４０〜約４５個のアミノ酸、約４０〜約５０個のアミノ酸、約４０〜約５５個のアミノ酸、約４０〜約６０個のアミノ酸、約４０〜約６５個のアミノ酸、約４０〜約７０個のアミノ酸、約４０〜約７５個のアミノ酸、約４５〜約５０個のアミノ酸、約４５〜約５５個のアミノ酸、約４５〜約６０個のアミノ酸、約４５〜約６５個のアミノ酸、約４５〜約７０個のアミノ酸、約４５〜約７５個のアミノ酸、約５０〜約５５個のアミノ酸、約５０〜約６０個のアミノ酸、約５０〜約６５個のアミノ酸、約５０〜約７０個のアミノ酸、または約５０〜約７５個のアミノ酸の長さを有し得る。
【００２１】
別の実施形態では、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原は、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、または配列番号１２を含む。この実施形態の態様では、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原は、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、または配列番号１２と、たとえば少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％のアミノ酸同一性を有する。この実施形態のさらなる他の態様では、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原は、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、または配列番号１２と、たとえば約７５％〜約１００％、約８０％〜約１００％、約８５％〜約１００％、約９０％〜約１００％、約９５％〜約１００％、約７５％〜約９９％、約８０％〜約９９％、約８５％〜約９９％、約９０％〜約９９％、約９５％〜約９９％、約７５％〜約９７％、約８０％〜約９７％、約８５％〜約９７％、約９０％〜約９７％、または約９５％〜約９７％の範囲のアミノ酸同一性を有する。
【００２２】
この実施形態の他の態様では、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原は、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、または配列番号１２のうちの連続したアミノ酸の部分配列からとられた、たとえば、少なくとも５個のアミノ酸、少なくとも６個のアミノ酸、少なくとも７個のアミノ酸、少なくとも８個のアミノ酸、少なくとも９個のアミノ酸、少なくとも１０個のアミノ酸、少なくとも１１個のアミノ酸、少なくとも１２個のアミノ酸、少なくとも１３個のアミノ酸、少なくとも１４個のアミノ酸、少なくとも１５個のアミノ酸、少なくとも１６個のアミノ酸、少なくとも１７個のアミノ酸、少なくとも１８個のアミノ酸、少なくとも１９個のアミノ酸、少なくとも２０個のアミノ酸、少なくとも２１個のアミノ酸、少なくとも２２個のアミノ酸、少なくとも２３個のアミノ酸、少なくとも２４個のアミノ酸、少なくとも２５個のアミノ酸、少なくとも２６個のアミノ酸、少なくとも２７個のアミノ酸、少なくとも２８個のアミノ酸、少なくとも２９個のアミノ酸、少なくとも３０個のアミノ酸、少なくとも３１個のアミノ酸、少なくとも３２個のアミノ酸、少なくとも３３個のアミノ酸、少なくとも３４個のアミノ酸、少なくとも３５個のアミノ酸、少なくとも３６個のアミノ酸、少なくとも３７個のアミノ酸、少なくとも３８個のアミノ酸、少なくとも３９個のアミノ酸、または少なくとも４０個のアミノ酸の長さを有するアミノ酸配列を含む。この実施形態のさらなる他の態様では、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原は、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、または配列番号１２のうちの連続したアミノ酸の部分配列からとられた、たとえば、最大５個のアミノ酸、最大６個のアミノ酸、最大７個のアミノ酸、最大８個のアミノ酸、最大９個のアミノ酸、最大１０個のアミノ酸、最大１１個のアミノ酸、最大１２個のアミノ酸、最大１３個のアミノ酸、最大１４個のアミノ酸、最大１５個のアミノ酸、最大１６個のアミノ酸、最大１７個のアミノ酸、最大１８個のアミノ酸、最大１９個のアミノ酸、最大２０個のアミノ酸、最大２１個のアミノ酸、最大２２個のアミノ酸、最大２３個のアミノ酸、最大２４個のアミノ酸、最大２５個のアミノ酸、最大２６個のアミノ酸、最大２７個のアミノ酸、最大２８個のアミノ酸、最大２９個のアミノ酸、最大３０個のアミノ酸、最大３１個のアミノ酸、最大３２個のアミノ酸、最大３３個のアミノ酸、最大３４個のアミノ酸、最大３５個のアミノ酸、最大３６個のアミノ酸、最大３７個のアミノ酸、最大３８個のアミノ酸、最大３９個のアミノ酸、または最大４０個のアミノ酸の長さを有するアミノ酸配列を含む。
【００２３】
この実施形態の他の態様では、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原は、たとえば、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、もしくは配列番号１２と比較して、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、もしくは１５個の連続したアミノ酸の欠失、付加、および／もしくは置換；または、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、もしくは配列番号１２と比較して、最大１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、もしくは１５個の連続したアミノ酸の欠失、付加、および／もしくは置換を有する。この実施形態のさらなる他の態様では、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原は、たとえば、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、もしくは配列番号１２と比較して、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、もしくは１５個の連続していないアミノ酸の欠失、付加、および／もしくは置換；または、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、もしくは配列番号１２と比較して、最大１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、もしくは１５個の連続していないアミノ酸の欠失、付加、および／もしくは置換を有する。
【００２４】
限定するものではないが、グローバルな方法、ローカルな方法、およびハイブリッドの方法、たとえばセグメントアプローチ法などを含む、様々な配列アライメント法のいずれかを使用して、パーセント同一性を決定することができる。パーセント同一性を決定するためのプロトコルは、当業者の範囲内にあり、本明細書中の教示由来の既定の手順である。
【００２５】
グローバルな方法は、分子の配列を最初から最後までアライメントし、個々の残基の対のスコアをまとめ、ギャップペナルティを課すことにより最良のアライメントを決定する。非限定的な方法として、たとえばＣＬＵＳＴＡＬ  Ｗ（たとえばＪｕｌｉｅ  Ｄ．  Ｔｈｏｍｐｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，  ＣＬＵＳＴＡＬ  Ｗ：  Ｉｍｐｒｏｖｉｎｇ  ｔｈｅ  Ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  Ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｖｅ  Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  Ａｌｉｇｎｍｅｎｔ  Ｔｈｒｏｕｇｈ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  Ｗｅｉｇｈｔｉｎｇ，  Ｐｏｓｉｔｉｏｎ−Ｓｐｅｃｉｆｉｃ  Ｇａｐ  Ｐｅｎａｌｔｉｅｓ  ａｎｄ  Ｗｅｉｇｈｔ  Ｍａｔｒｉｘ  Ｃｈｏｉｃｅ，  ２２（２２）  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ４６７３−４６８０  （１９９４）参照）；およびｉｔｅｒａｔｉｖｅ  ｒｅｆｉｎｅｍｅｎｔ（たとえばＯｓａｍｕ  Ｇｏｔｏｈ，  Ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ  Ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔ  ｉｎ  Ａｃｃｕｒａｃｙ  ｏｆ  Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  Ａｌｉｇｎｍｅｎｔｓ  ｂｙ  Ｉｔｅｒａｔｉｖｅ  Ｒｅｆｉｎｅｍｅｎｔ  ａｓ  Ａｓｓｅｓｓｅｄ  ｂｙ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ  ｔｏ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ  Ａｌｉｇｎｍｅｎｔｓ，  ２６４（４）  Ｊ．  Ｍｏｌ．  Ｂｉｏｌ．  ８２３−８３８  （１９９６）参照）が、挙げられる。
【００２６】
ローカルな方法は、入力した配列の全てが共有する１つまたは複数の保存されているモチーフを同定することにより配列をアライメントする。非限定的な方法として、たとえばＭａｔｃｈ−ｂｏｘ（たとえばＥｒｉｃ  Ｄｅｐｉｅｒｅｕｘ  ａｎｄ  Ｅｒｎｅｓｔ  Ｆｅｙｔｍａｎｓ，  Ｍａｔｃｈ−Ｂｏｘ：  Ａ  Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌｌｙ  Ｎｅｗ  Ａｌｇｏｒｉｔｈｍ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ  Ａｌｉｇｎｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｓｅｖｅｒａｌ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ，  ８（５）  ＣＡＢＩＯＳ  ５０１−５０９  （１９９２）参照）；ギブスサンプリング（たとえばＣ．  Ｅ．  Ｌａｗｒｅｎｃｅ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｄｅｔｅｃｔｉｎｇ  Ｓｕｂｔｌｅ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  Ｓｉｇｎａｌｓ：  Ａ  Ｇｉｂｂｓ  Ｓａｍｐｌｉｎｇ  Ｓｔｒａｔｅｇｙ  ｆｏｒ  Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ａｌｉｇｎｍｅｎｔ，  ２６２（５１３１）  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２０８−２１４  （１９９３）参照）；Ａｌｉｇｎ−Ｍ（たとえばＩｖｏ  Ｖａｎ  Ｗａｌｌｅ  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｌｉｇｎ−Ｍ  −  Ａ  Ｎｅｗ  Ａｌｇｏｒｉｔｈｍ  ｆｏｒ  Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ａｌｉｇｎｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｈｉｇｈｌｙ  Ｄｉｖｅｒｇｅｎｔ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ，  ２０（９）  Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ，：１４２８−１４３５  （２００４）参照）が、挙げられる。
【００２７】
ハイブリッドな方法は、グローバルアライメント法およびローカルアライメント法の機能的な側面を組み合わせている。非限定的な例として、たとえばセグメント―セグメント比較（たとえばＢｕｒｋｈａｒｄ  Ｍｏｒｇｅｎｓｔｅｒｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ＤＮＡ  ａｎｄ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  Ａｌｉｇｎｍｅｎｔ  Ｂａｓｅｄ  ０ｎ  Ｓｅｇｍｅｎｔ−Ｔｏ−Ｓｅｇｍｅｎｔ  Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ，  ９３（２２）  Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  Ｕ．Ｓ．Ａ．  １２０９８−１２１０３  （１９９６）参照）；Ｔ−Ｃｏｆｆｅｅ（たとえばＣｅｄｒｉｃ  Ｎｏｔｒｅｄａｍｅ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｔ−Ｃｏｆｆｅｅ：  Ａ  Ｎｏｖｅｌ  Ａｌｇｏｒｉｔｈｍ  ｆｏｒ  Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  Ａｌｉｇｎｍｅｎｔ，  ３０２（１）  Ｊ．  Ｍｏｌ．  Ｂｉｏｌ．  ２０５−２１７  （２０００）参照）；ＭＵＳＣＬＥ（たとえばＲｏｂｅｒｔ  Ｃ．  Ｅｄｇａｒ，  ＭＵＳＣＬＥ：  Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  Ａｌｉｇｎｍｅｎｔ  Ｗｉｔｈ  Ｈｉｇｈ  Ｓｃｏｒｅ  Ａｃｃｕｒａｃｙ  ａｎｄ  Ｈｉｇｈ  Ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔ，  ３２（５）  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．  １７９２−１７９７  （２００４）参照）；およびＤＩＡＬＩＧＮ−Ｔ（たとえばＡｍａｒｅｎｄｒａｎ  Ｒ  Ｓｕｂｒａｍａｎｉａｎ  ｅｔ  ａｌ．，  ＤＩＡＬＩＧＮ−Ｔ：Ａｎ  Ｉｍｐｒｏｖｅｄ  Ａｌｇｏｒｉｔｈｍ  ｆｏｒ  Ｓｅｇｍｅｎｔ−Ｂａｓｅｄ  Ｍｕｌｔｉｐｌｅ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  Ａｌｉｇｎｍｅｎｔ，  ６（１）  ＢＭＣ  Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ  ６６（２００５）参照）が、挙げられる。
【００２８】
本明細書は、１つのアミノ酸が別のものと置換されている様々なポリペプチド変異体、たとえば本明細書中開示のトリパノソーマ抗原などを記載する。置換は、たとえば置換されるアミノ酸の物理的な（ｐｈｙｓｉｃ）な特性（表１）、または元のアミノ酸がどのように置換を許容するか（表２）などの様々な要因により評価することができる。ポリペプチドにおいてどのアミノ酸を別のアミノ酸と置換できるかを選択することは、当業者に知られている。
【表１】
2019513797.tif 000003
【表２】
2019513797.tif 000004
【００２９】
この実施形態の態様では、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原における１つの特定の位置にある親水性（ｈｙｄｒｏｐｈｉｃ）アミノ酸は、別の親水性アミノ酸と置換することができる。親水性アミノ酸の例として、たとえばＣ、Ｆ、Ｉ、Ｌ、Ｍ、Ｖ、およびＷが挙げられる。この実施形態の別の態様では、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原における１つの特定の位置にある脂肪族アミノ酸は、別の脂肪族アミノ酸と置換することができる。脂肪族アミノ酸の例として、たとえばＡ、Ｉ、Ｌ、Ｐ、およびＶが挙げられる。この実施形態のさらなる別の態様では、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原における１つの特定の位置にある芳香族アミノ酸は、別の芳香族アミノ酸と置換することができる。芳香族アミノ酸の例として、たとえばＦ、Ｈ、Ｗ、およびＹが挙げられる。この実施形態のさらなる別の態様では、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原における１つの特定の位置にあるスタッキングしたアミノ酸は、別のスタッキングしたアミノ酸と置換することができる。スタッキングしたアミノ酸の例として、たとえばＦ、Ｈ、Ｗ、およびＹが挙げられる。この実施形態のさらなる態様では、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原における１つの特定の位置にある極性アミノ酸は、別の極性アミノ酸と置換することができる。極性アミノ酸の例として、たとえばＤ、Ｅ、Ｋ、Ｎ、Ｑ、およびＲが挙げられる。この実施形態のさらなる態様では、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原における１つの特定の位置にある極性の少ないまたは中性のアミノ酸は、別の極性の少ないまたは中性のアミノ酸と置換することができる。極性の少ないまたは中性のアミノ酸の例として、たとえばＡ、Ｈ、Ｇ、Ｐ、Ｓ、Ｔ、およびＹが挙げられる。この実施形態のさらなる態様では、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原における１つの特定の位置にある正に荷電したアミノ酸は、別の正に荷電したアミノ酸と置換することができる。正に荷電したアミノ酸の例として、たとえばＫ、Ｒ、およびＨが挙げられる。この実施形態のさらなる態様では、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原における１つの特定の位置にある負に荷電したアミノ酸は、別の負に荷電したアミノ酸と置換することができる。負に荷電したアミノ酸の例として、たとえばＤおよびＥが挙げられる。この実施形態の別の態様では、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原における１つの特定の位置にある小分子のアミノ酸は、別の小分子のアミノ酸と置換することができる。小分子のアミノ酸の例として、たとえばＡ、Ｄ、Ｇ、Ｎ、Ｐ、Ｓ、およびＴが挙げられる。この実施形態のさらなる別の態様では、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原における１つの特定の位置にあるＣ−β分岐型アミノ酸は、別のＣ−β分岐型アミノ酸と置換することができる。Ｃ−β分岐型アミノ酸の例として、たとえばＩ、Ｔ、およびＶが挙げられる。
【００３０】
担体と結合しない場合に免疫原性、非免疫原性、または弱い免疫原性であるトリパノソーマ抗原の免疫原性を強化するために、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原に、１つまたは複数の担体を結合させてもよい。非限定的な例として、たとえばキーホールリンペットヘモシアニン（ＫＬＨ）、卵白アルブミン（ＯＶＡ）、サイログロブリン（ＴＨＹ）、ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）、ダイズトリプシンインヒビター（ＳＴＩ）、多重結合タンパク質（（ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ａｔｔａｃｈｍｅｎｔ  ｐｅｐｔｉｄｅ：ＭＡＰ）が挙げられる。非抗原性または弱い抗原性の抗原は、担体に抗原を結合させることにより抗原性を課すことができる。担体に抗原を結合させるための様々な他の担体および方法が、たとえばＨａｒｌｏｗ  ａｎｄ  Ｌａｎｅ，  ｓｕｐｒａ，  １９９８ａ；  Ｈａｒｌｏｗ  ａｎｄ  Ｌａｎｅ，  ｓｕｐｒａ，  １９９８ｂ；およびＤａｖｉｄ  Ｗ．  Ｗａｇｇｏｎｅｒ，  Ｊｒ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃｉｔｙ−ｅｎｈａｎｃｉｎｇ  ｃａｒｒｉｅｒｓ  ａｎｄ  ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ  ｔｈｅｒｅｏｆ  ａｎｄ  ｍｅｔｈｏｄｓ  ｏｆ  ｕｓｉｎｇ  ｔｈｅ  ｓａｍｅの米国特許公開公報第２００４００５７９５８号に記載されており、これら文献全体は、それぞれが参照として援用されている。本明細書中開示のトリパノソーマ抗原はまた、融合タンパク質として抗原を発現させることにより作製してもよい。ポリペプチドの融合物を発現させるための方法は、たとえばＡｕｓｕｂｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  （Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ  ４７），  Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ  （１９９９）に記載されており、文献全体は、それぞれが参照として援用されている。
【００３１】
本開示の態様は、部分的に、免疫原性組成物を含む。本明細書中開示の免疫原性組成物は、本明細書中開示の１つまたは複数のトリパノソーマ抗原と、任意に１つまたは複数のアジュバントとを含む。本明細書中開示の１つまたは複数のトリパノソーマ抗原を含む免疫原性組成物は、個体に投与する際に、１つまたは複数のトリパノソーマ菌株に対する免疫応答を刺激し、これによりα―トリパノソーマ抗体が産生される。免疫応答は、本明細書中開示の免疫原性組成物に対する、個体の免疫系によるいずれかの応答である。例示的な免疫応答として、限定するものではないが、たとえば、Ｃ８＋ＣＴＬの抗原特異的な誘導を含むＣＴＬ応答、Ｔ細胞の増殖応答およびサイトカインの放出を含むヘルパーＴ細胞応答、ならびにたとえば抗体産生応答を含むＢ細胞応答などの、細胞性免疫、ならびに局所性および全身性の液性免疫が挙げられる。この実施形態の一態様では、免疫原性組成物はワクチンである。この実施形態の別の態様では、本明細書中開示の１つのトリパノソーマ抗原を含む免疫原性組成物は、個体に投与する際に、１つのトリパノソーマ菌株に対する免疫応答を刺激し、これによりα―トリパノソーマ抗体が産生される。この実施形態の別の態様では、本明細書中開示の１つのトリパノソーマ抗原を含む免疫原性組成物は、個体に投与する際に、２つ以上のトリパノソーマ菌株に対する免疫応答を刺激し、これにより、各菌株に対するα―トリパノソーマ抗体が産生される。この実施形態の別の態様では、本明細書中開示の１つまたは複数のトリパノソーマ抗原を含む免疫原性組成物は、個体に投与する際に、１つのトリパノソーマ菌株に対する免疫応答を刺激し、これにより、α―トリパノソーマ抗体が産生される。この実施形態の別の態様では、本明細書中開示の１つまたは複数のトリパノソーマ抗原を含む免疫原性組成物は、個体に投与する際に、２つ以上のトリパノソーマ菌株に対する免疫応答を刺激し、これにより、各菌株に対するα―トリパノソーマ抗体が産生される。
【００３２】
この実施形態の一態様では、本明細書中開示の免疫原性組成物は、配列番号６（ＣＨ４７）、配列番号９（ＣＨ７７）、配列番号５（ＣＨ３７）、またはそれらのいずれかの組み合わせを含む１つまたは複数のトリパノソーマ抗原を含む。この実施形態の好ましい態様では、本明細書中開示の免疫原性組成物は、配列番号５（ＣＨ３７）、および配列番号９（ＣＨ７７）を含む１つまたは複数のトリパノソーマ抗原を含む。別の好ましい実施形態では、本明細書中開示の免疫原性組成物は、配列番号５（ＣＨ３７）、配列番号６（ＣＨ４７）、および配列番号９（ＣＨ７７）を含む１つまたは複数のトリパノソーマ抗原を含む。最も好ましい実施形態では、本明細書中開示の免疫原性組成物は、配列番号６（ＣＨ４７）を含む１つまたは複数のトリパノソーマ抗原を含む。
【００３３】
この実施形態の一態様では、本明細書中開示の免疫原性組成物は、配列番号２（ＣＨ３０）、配列番号５（ＣＨ３７）、配列番号６（ＣＨ４７）、配列番号７（ＣＨ６９）、配列番号８（ＣＨ７２）、配列番号９（ＣＨ７７）、配列番号１１（ＣＨ８４）、またはそれらのいずれかの組み合わせを含む１つまたは複数のトリパノソーマ抗原を含む。この実施形態のこの態様のうち好ましい態様では、本明細書中開示の免疫原性組成物は、配列番号２（ＣＨ３０）、配列番号６（ＣＨ４７）、配列番号７（ＣＨ６９）、配列番号８（ＣＨ７２）、配列番号９（ＣＨ７７）、および配列番号１１（ＣＨ８４）を含む１つまたは複数のトリパノソーマ抗原を含む。この実施形態のこの態様のうち好ましい態様では、本明細書中開示の免疫原性組成物は、配列番号２（ＣＨ３０）、配列番号５（ＣＨ３７）、配列番号６（ＣＨ４７）、配列番号７（ＣＨ６９）、配列番号８（ＣＨ７２）、配列番号９（ＣＨ７７）、および配列番号１１（ＣＨ８４）を含む１つまたは複数のトリパノソーマ抗原を含む。この実施形態の好ましい態様では、本明細書中開示の免疫原性組成物は、配列番号２（ＣＨ３０）、配列番号５（ＣＨ３７）、配列番号６（ＣＨ４７）、配列番号７（ＣＨ６９）、配列番号８（ＣＨ７２）、配列番号９（ＣＨ７７）、および配列番号１１（ＣＨ８４）を含む１つまたは複数のトリパノソーマ抗原を含む。
【００３４】
この実施形態の別の態様では、免疫原性組成物は、トリパノソーマ系疾患の治療のための薬物である。この実施形態の態様では、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原は、トリパノソーマ系疾患の治療のための薬物の製造に使用される。この実施形態の態様では、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原の使用は、トリパノソーマ系の感染症または病態に関連する１つまたは複数の生理的な状態または症状を低減することによりトリパノソーマ系疾患を治療するために十分な量で行われる。この実施形態の他の態様では、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原の使用は、トリパノソーマ系の感染症または病態に対して個体に免疫化またはワクチン接種を行うために十分な量で行われる。
【００３５】
一実施形態では、本明細書中開示の免疫原性組成物は、単一の、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原を含む。一実施形態では、本明細書中開示の免疫原性組成物は、複数の、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原を含む。この実施形態の態様では、本明細書中開示の免疫原性組成物は、たとえば１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、または１５個の、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原を含む。この実施形態の他の態様では、本明細書中開示の免疫原性組成物は、たとえば少なくとも１、少なくとも２、少なくとも３、少なくとも４、少なくとも５、少なくとも６、少なくとも７、少なくとも８、少なくとも９、少なくとも１０、少なくとも１１、少なくとも１２、少なくとも１３、少なくとも１４、または少なくとも１５個の、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原を含む。この実施形態のさらなる他の態様では、本明細書中開示の免疫原性組成物は、たとえば、最大１、最大２、最大３、最大４、最大５、最大６、最大７、最大８、最大９、最大１０、最大１１、最大１２、最大１３、最大１４、または最大１５個の、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原を含む。この実施形態のさらなる他の態様では、本明細書中開示の免疫原性組成物は、たとえば、１〜２、１〜３、１〜４、１〜５、１〜６、１〜７、１〜８、１〜９、１〜１０、１〜１１、１〜１２、１〜１３、１〜１４、１〜１５、２〜３、２〜４、２〜５、２〜６、２〜７、２〜８、２〜９、２〜１０、２〜１１、２〜１２、２〜１３、２〜１４、２〜１５、３〜４、３〜５、３〜６、３〜７、３〜８、３〜９、３〜１０、３〜１１、３〜１２、３〜１３、３〜１４、３〜１５、４〜５、４〜６、４〜７、４〜８、４〜９、４〜１０、４〜１１、４〜１２、４〜１３、４〜１４、４〜１５、５〜６、５〜７、５〜８、５〜９、５〜１０、５〜１１、５〜１２、５〜１３、５〜１４、５〜１５、６〜７、６〜８、６〜９、６〜１０、６〜１１、６〜１２、６〜１３、６〜１４、６〜１５、７〜８、７〜９、７〜１０、７〜１１、７〜１２、７〜１３、７〜１４、７〜１５、８〜９、８〜１０、８〜１１、８〜１２、８〜１３、８〜１４、８〜１５、９〜１０、９〜１１、９〜１２、９〜１３、９〜１４、９〜１５、１０〜１１、１０〜１２、１０〜１３、１０〜１４、１０〜１５、１１〜１２、１１〜１３、１１〜１４、１１〜１５、１２〜１３、１２〜１４、１２〜１５、１３〜１４、１３〜１５、または１４〜１５個の、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原を含む。
【００３６】
免疫原性組成物に含まれている本明細書中開示のトリパノソーマ抗原の量は、個体において適切な免疫応答を誘発するために十分な量である。概してこの量は、有意で有害な副作用を引き起こさない量でもある。このような量は、特定のトリパノソーマ抗原または複数の抗原のどれが使用されるかに応じて変動する。特定の免疫原性組成物に最適な量は、抗体の力価および個体における他の応答の観察を含む標準的な試験により解明することができる。基本的な免疫原性組成物の治療過程は、免疫保護性の応答を提供するために最適な間隔で提供される、免疫原性組成物の１回、２回、または３回の用量を含んでもよい。
【００３７】
一般的に、免疫原性組成物に含まれている本明細書中開示のトリパノソーマ抗原の有効かつ安全な量は、約１μｇ〜１，０００ｍｇで変動する。この実施形態の態様では、免疫原性組成物に含まれている本明細書中開示のトリパノソーマ抗原の量は、たとえば約１μｇ、約２μｇ、約３μｇ、約４μｇ、約５μｇ、約６μｇ、約７μｇ、約８μｇ、約９μｇ、約１０μｇ、約１５μｇ、約２０μｇ、約２５μｇ、約３０μｇ、約３５μｇ、約４０μｇ、約４５μｇ、約５０μｇ、約５５μｇ、約６０μｇ、約６５μｇ、約７０μｇ、約７５μｇ、約８０μｇ、約８５μｇ、約９０μｇ、約９５μｇ、約１００μｇ、約１１０μｇ、約１２０μｇ、約１３０μｇ、約１４０μｇ、約１５０μｇ、約１６０μｇ、約１７０μｇ、約１８０μｇ、約１９０μｇ、約２００μｇ、約２１０μｇ、約２２０μｇ、約２３０μｇ、約２４０μｇ、約２５０μｇ、２６０μｇ、約２７０μｇ、約２８０μｇ、約２９０μｇ、約３００μｇ、約３１０μｇ、約３２０μｇ、約３３０μｇ、約３４０μｇ、約３５０μｇ、３６０μｇ、約３７０μｇ、約３８０μｇ、約３９０μｇ、約４００μｇ、約４１０μｇ、約４２０μｇ、約４３０μｇ、約４４０μｇ、約４５０μｇ、４６０μｇ、約４７０μｇ、約４８０μｇ、約４９０μｇ、約５００μｇ、約５１０μｇ、約５２０μｇ、約５３０μｇ、約５４０μｇ、約５５０μｇ、５６０μｇ、約５７０μｇ、約５８０μｇ、約５９０μｇ、約６００μｇ、約６１０μｇ、約６２０μｇ、約６３０μｇ、約６４０μｇ、約６５０μｇ、６６０μｇ、約６７０μｇ、約６８０μｇ、約６９０μｇ、約７００μｇ、約７１０μｇ、約７２０μｇ、約７３０μｇ、約７４０μｇ、約７５０μｇ、７６０μｇ、約７７０μｇ、約７８０μｇ、約７９０μｇ、約８００μｇ、約８１０μｇ、約８２０μｇ、約８３０μｇ、約８４０μｇ、約８５０μｇ、８６０μｇ、約８７０μｇ、約８８０μｇ、約８９０μｇ、約９００μｇ、約９１０μｇ、約９２０μｇ、約９３０μｇ、約９４０μｇ、約９５０μｇ、９６０μｇ、約９７０μｇ、約９８０μｇ、約９９０μｇ、または約１，０００μｇであってもよい。
【００３８】
この実施形態の他の態様では、免疫原性組成物に含まれている本明細書中開示のトリパノソーマ抗原の量は、たとえば、少なくとも１μｇ、少なくとも２μｇ、少なくとも３μｇ、少なくとも４μｇ、少なくとも５μｇ、少なくとも６μｇ、少なくとも７μｇ、少なくとも８μｇ、少なくとも９μｇ、少なくとも１０μｇ、少なくとも１５μｇ、少なくとも２０μｇ、少なくとも２５μｇ、少なくとも３０μｇ、少なくとも３５μｇ、少なくとも４０μｇ、少なくとも４５μｇ、少なくとも５０μｇ、少なくとも５５μｇ、少なくとも６０μｇ、少なくとも６５μｇ、少なくとも７０μｇ、少なくとも７５μｇ、少なくとも８０μｇ、少なくとも８５μｇ、少なくとも９０μｇ、少なくとも９５μｇ、少なくとも１００μｇ、少なくとも１１０μｇ、少なくとも１２０μｇ、少なくとも１３０μｇ、少なくとも１４０μｇ、少なくとも１５０μｇ、少なくとも１６０μｇ、少なくとも１７０μｇ、少なくとも１８０μｇ、少なくとも１９０μｇ、少なくとも２００μｇ、少なくとも２１０μｇ、少なくとも２２０μｇ、少なくとも２３０μｇ、少なくとも２４０μｇ、少なくとも２５０μｇ、２６０μｇ、少なくとも２７０μｇ、少なくとも２８０μｇ、少なくとも２９０μｇ、少なくとも３００μｇ、少なくとも３１０μｇ、少なくとも３２０μｇ、少なくとも３３０μｇ、少なくとも３４０μｇ、少なくとも３５０μｇ、３６０μｇ、少なくとも３７０μｇ、少なくとも３８０μｇ、少なくとも３９０μｇ、少なくとも４００μｇ、少なくとも４１０μｇ、少なくとも４２０μｇ、少なくとも４３０μｇ、少なくとも４４０μｇ、少なくとも４５０μｇ、４６０μｇ、少なくとも４７０μｇ、少なくとも４８０μｇ、少なくとも４９０μｇ、少なくとも５００μｇ、少なくとも５１０μｇ、少なくとも５２０μｇ、少なくとも５３０μｇ、少なくとも５４０μｇ、少なくとも５５０μｇ、５６０μｇ、少なくとも５７０μｇ、少なくとも５８０μｇ、少なくとも５９０μｇ、少なくとも６００μｇ、少なくとも６１０μｇ、少なくとも６２０μｇ、少なくとも６３０μｇ、少なくとも６４０μｇ、少なくとも６５０μｇ、６６０μｇ、少なくとも６７０μｇ、少なくとも６８０μｇ、少なくとも６９０μｇ、少なくとも７００μｇ、少なくとも７１０μｇ、少なくとも７２０μｇ、少なくとも７３０μｇ、少なくとも７４０μｇ、少なくとも７５０μｇ、７６０μｇ、少なくとも７７０μｇ、少なくとも７８０μｇ、少なくとも７９０μｇ、少なくとも８００μｇ、少なくとも８１０μｇ、少なくとも８２０μｇ、少なくとも８３０μｇ、少なくとも８４０μｇ、少なくとも８５０μｇ、８６０μｇ、少なくとも８７０μｇ、少なくとも８８０μｇ、少なくとも８９０μｇ、少なくとも９００μｇ、少なくとも９１０μｇ、少なくとも９２０μｇ、少なくとも９３０μｇ、少なくとも９４０μｇ、少なくとも９５０μｇ、９６０μｇ、少なくとも９７０μｇ、少なくとも９８０μｇ、少なくとも９９０μｇ、または少なくとも１，０００μｇであってもよい。
【００３９】
この実施形態のさらなる他の態様では、免疫原性組成物に含まれている本明細書中開示のトリパノソーマ抗原の量は、たとえば、最大１μｇ、最大２μｇ、最大３μｇ、最大４μｇ、最大５μｇ、最大６μｇ、最大７μｇ、最大８μｇ、最大９μｇ、最大１０μｇ、最大１５μｇ、最大２０μｇ、最大２５μｇ、最大３０μｇ、最大３５μｇ、最大４０μｇ、最大４５μｇ、最大５０μｇ、最大５５μｇ、最大６０μｇ、最大６５μｇ、最大７０μｇ、最大７５μｇ、最大８０μｇ、最大８５μｇ、最大９０μｇ、最大９５μｇ、最大１００μｇ、最大１１０μｇ、最大１２０μｇ、最大１３０μｇ、最大１４０μｇ、最大１５０μｇ、最大１６０μｇ、最大１７０μｇ、最大１８０μｇ、最大１９０μｇ、最大２００μｇ、最大２１０μｇ、最大２２０μｇ、最大２３０μｇ、最大２４０μｇ、最大２５０μｇ、２６０μｇ、最大２７０μｇ、最大２８０μｇ、最大２９０μｇ、最大３００μｇ、最大３１０μｇ、最大３２０μｇ、最大３３０μｇ、最大３４０μｇ、最大３５０μｇ、３６０μｇ、最大３７０μｇ、最大３８０μｇ、最大３９０μｇ、最大４００μｇ、最大４１０μｇ、最大４２０μｇ、最大４３０μｇ、最大４４０μｇ、最大４５０μｇ、４６０μｇ、最大４７０μｇ、最大４８０μｇ、最大４９０μｇ、最大５００μｇ、最大５１０μｇ、最大５２０μｇ、最大５３０μｇ、最大５４０μｇ、最大５５０μｇ、５６０μｇ、最大５７０μｇ、最大５８０μｇ、最大５９０μｇ、最大６００μｇ、最大６１０μｇ、最大６２０μｇ、最大６３０μｇ、最大６４０μｇ、最大６５０μｇ、６６０μｇ、最大６７０μｇ、最大６８０μｇ、最大６９０μｇ、最大７００μｇ、最大７１０μｇ、最大７２０μｇ、最大７３０μｇ、最大７４０μｇ、最大７５０μｇ、７６０μｇ、最大７７０μｇ、最大７８０μｇ、最大７９０μｇ、最大８００μｇ、最大８１０μｇ、最大８２０μｇ、最大８３０μｇ、最大８４０μｇ、最大８５０μｇ、８６０μｇ、最大８７０μｇ、最大８８０μｇ、最大８９０μｇ、最大９００μｇ、最大９１０μｇ、最大９２０μｇ、最大９３０μｇ、最大９４０μｇ、最大９５０μｇ、９６０μｇ、最大９７０μｇ、最大９８０μｇ、最大９９０μｇ、または最大１０００μｇであってもよい。
【００４０】
この実施形態のさらなる他の態様では、免疫原性組成物に含まれている本明細書中開示のトリパノソーマ抗原の量は、たとえば約１μｇ〜約１０μｇ、約１μｇ〜約２０μｇ、約１μｇ〜約３０μｇ、約１μｇ〜約４０μｇ、約１μｇ〜約５０μｇ、約１μｇ〜約６０μｇ、約１μｇ〜約７０μｇ、約１μｇ〜約８０μｇ、約１μｇ〜約９０μｇ、約１μｇ〜約１００μｇ、約１μｇ〜約１１０μｇ、約１μｇ〜約１２０μｇ、約１μｇ〜約１３０μｇ、約１μｇ〜約１４０μｇ、約１μｇ〜約１５０μｇ、約５μｇ〜約１０μｇ、約５μｇ〜約２０μｇ、約５μｇ〜約３０μｇ、約５μｇ〜約４０μｇ、約５μｇ〜約５０μｇ、約５μｇ〜約６０μｇ、約５μｇ〜約７０μｇ、約５μｇ〜約８０μｇ、約５μｇ〜約９０μｇ、約５μｇ〜約１００μｇ、約５μｇ〜約１１０μｇ、約５μｇ〜約１２０μｇ、約５μｇ〜約１３０μｇ、約５μｇ〜約１４０μｇ、約５μｇ〜約１５０μｇ、約１０μｇ〜約２０μｇ、約１０μｇ〜約３０μｇ、約１０μｇ〜約４０μｇ、約１０μｇ〜約５０μｇ、約１０μｇ〜約６０μｇ、約１０μｇ〜約７０μｇ、約１０μｇ〜約８０μｇ、約１０μｇ〜約９０μｇ、約１０μｇ〜約１００μｇ、約１０μｇ〜約１１０μｇ、約１０μｇ〜約１２０μｇ、約１０μｇ〜約１３０μｇ、約１０μｇ〜約１４０μｇ、約１０μｇ〜約１５０μｇ、約１０μｇ〜約１７５μｇ、約１０μｇ〜約２００μｇ、約１０μｇ〜約２２５μｇ、約１０μｇ〜約２５０μｇ、約２５μｇ〜約５０μｇ、約２５μｇ〜約７５μｇ、約２５μｇ〜約１００μｇ、約２５μｇ〜約１２５μｇ、約２５μｇ〜約１５０μｇ、約２５μｇ〜約１７５μｇ、約２５μｇ〜約２００μｇ、約２５μｇ〜約２２５μｇ、約２５μｇ〜約２５０μｇ、約５０μｇ〜約７５μｇ、約５０μｇ〜約１００μｇ、約５０μｇ〜約１２５μｇ、約５０μｇ〜約１５０μｇ、約５０μｇ〜約１７５μｇ、約５０μｇ〜約２００μｇ、約５０μｇ〜約２２５μｇ、約５０μｇ〜約２５０μｇ、約７５μｇ〜約１００μｇ、約７５μｇ〜約１２５μｇ、約７５μｇ〜約１５０μｇ、約７５μｇ〜約１７５μｇ、約７５μｇ〜約２００μｇ、約７５μｇ〜約２２５μｇ、または約７５μｇ〜約２５０μｇの範囲であってもよい。
【００４１】
この実施形態のさらなる他の態様では、免疫原性組成物に含まれている本明細書中開示のトリパノソーマ抗原の量は、たとえば、約１００μｇ〜約１２５μｇ、約１００μｇ〜約１５０μｇ、約１００μｇ〜約１７５μｇ、約１００μｇ〜約２００μｇ、約１００μｇ〜約２２５μｇ、約１００μｇ〜約２５０μｇ、約１００μｇ〜約２７５μｇ、約１００μｇ〜約３００μｇ、約１００μｇ〜約３２５μｇ、約１００μｇ〜約３５０μｇ、約１００μｇ〜約３７５μｇ、約１００μｇ〜約４００μｇ、約１００μｇ〜約４２５μｇ、約１００μｇ〜約４５０μｇ、約１００μｇ〜約４７５μｇ、約１００μｇ〜約５００μｇ、約１００μｇ〜約５２５μｇ、約１００μｇ〜約５５０μｇ、約１００μｇ〜約５７５μｇ、約１００μｇ〜約６００μｇ、約１２５μｇ〜約１５０μｇ、約１２５μｇ〜約１７５μｇ、約１２５μｇ〜約２００μｇ、約１２５μｇ〜約２２５μｇ、約１２５μｇ〜約２５０μｇ、約１２５μｇ〜約２７５μｇ、約１２５μｇ〜約３００μｇ、約１２５μｇ〜約３２５μｇ、約１２５μｇ〜約３５０μｇ、約１２５μｇ〜約３７５μｇ、約１２５μｇ〜約４００μｇ、約１２５μｇ〜約４２５μｇ、約１２５μｇ〜約４５０μｇ、約１２５μｇ〜約４７５μｇ、約１２５μｇ〜約５００μｇ、約１２５μｇ〜約５２５μｇ、約１２５μｇ〜約５５０μｇ、約１２５μｇ〜約５７５μｇ、約１２５μｇ〜約６００μｇ、約１５０μｇ〜約１７５μｇ、約１５０μｇ〜約２００μｇ、約１５０μｇ〜約２２５μｇ、約１５０μｇ〜約２５０μｇ、約１５０μｇ〜約２７５μｇ、約１５０μｇ〜約３００μｇ、約１５０μｇ〜約３２５μｇ、約１５０μｇ〜約３５０μｇ、約１５０μｇ〜約３７５μｇ、約１５０μｇ〜約４００μｇ、約１５０μｇ〜約４２５μｇ、約１５０μｇ〜約４５０μｇ、約１５０μｇ〜約４７５μｇ、約１５０μｇ〜約５００μｇ、約１５０μｇ〜約５２５μｇ、約１５０μｇ〜約５５０μｇ、約１５０μｇ〜約５７５μｇ、約１５０μｇ〜約６００μｇ、約２００μｇ〜約２２５μｇ、約２００μｇ〜約２５０μｇ、約２００μｇ〜約２７５μｇ、約２００μｇ〜約３００μｇ、約２００μｇ〜約３２５μｇ、約２００μｇ〜約３５０μｇ、約２００μｇ〜約３７５μｇ、約２００μｇ〜約４００μｇ、約２００μｇ〜約４２５μｇ、約２００μｇ〜約４５０μｇ、約２００μｇ〜約４７５μｇ、約２００μｇ〜約５００μｇ、約２００μｇ〜約５２５μｇ、約２００μｇ〜約５５０μｇ、約２００μｇ〜約５７５μｇ、約２００μｇ〜約６００μｇ、約２００μｇ〜約６２５μｇ、約２００μｇ〜約６５０μｇ、約２００μｇ〜約６７５μｇ、約２００μｇ〜約７００μｇ、約２００μｇ〜約７２５μｇ、約２００μｇ〜約７５０μｇ、約２００μｇ〜約７７５μｇ、約２００μｇ〜約８００μｇ、約２００μｇ〜約８２５μｇ、約２００μｇ〜約８５０μｇ、約２００μｇ〜約８７５μｇ、約２００μｇ〜約９００μｇ、約２００μｇ〜約９２５μｇ、約２００μｇ〜約９５０μｇ、約２００μｇ〜約９７５μｇ、または約２００μｇ〜約１，０００μｇの範囲であってもよい。
【００４２】
この実施形態のさらなる他の態様では、免疫原性組成物に含まれている本明細書中開示のトリパノソーマ抗原の量は、たとえば、約２５０μｇ〜約２７５μｇ、約２５０μｇ〜約３００μｇ、約２５０μｇ〜約３２５μｇ、約２５０μｇ〜約３５０μｇ、約２５０μｇ〜約３７５μｇ、約２５０μｇ〜約４００μｇ、約２５０μｇ〜約４２５μｇ、約２５０μｇ〜約４５０μｇ、約２５０μｇ〜約４７５μｇ、約２５０μｇ〜約５００μｇ、約２５０μｇ〜約５２５μｇ、約２５０μｇ〜約５５０μｇ、約２５０μｇ〜約５７５μｇ、約２５０μｇ〜約６００μｇ、約２５０μｇ〜約６２５μｇ、約２５０μｇ〜約６５０μｇ、約２５０μｇ〜約６７５μｇ、約２５０μｇ〜約７００μｇ、約２５０μｇ〜約７２５μｇ、約２５０μｇ〜約７５０μｇ、約２５０μｇ〜約７７５μｇ、約２５０μｇ〜約８００μｇ、約２５０μｇ〜約８２５μｇ、約２５０μｇ〜約８５０μｇ、約２５０μｇ〜約８７５μｇ、約２５０μｇ〜約９００μｇ、約２５０μｇ〜約９２５μｇ、約２５０μｇ〜約９５０μｇ、約２５０μｇ〜約９７５μｇ、約２５０μｇ〜約１，０００μｇ、約３００μｇ〜約３２５μｇ、約３００μｇ〜約３５０μｇ、約３００μｇ〜約３７５μｇ、約３００μｇ〜約４００μｇ、約３００μｇ〜約４２５μｇ、約３００μｇ〜約４５０μｇ、約３００μｇ〜約４７５μｇ、約３００μｇ〜約５００μｇ、約３００μｇ〜約５２５μｇ、約３００μｇ〜約５５０μｇ、約３００μｇ〜約５７５μｇ、約３００μｇ〜約６００μｇ、約３００μｇ〜約６２５μｇ、約３００μｇ〜約６５０μｇ、約３００μｇ〜約６７５μｇ、約３００μｇ〜約７００μｇ、約３００μｇ〜約７２５μｇ、約３００μｇ〜約７５０μｇ、約３００μｇ〜約７７５μｇ、約３００μｇ〜約８００μｇ、約３００μｇ〜約８２５μｇ、約３００μｇ〜約８５０μｇ、約３００μｇ〜約８７５μｇ、約３００μｇ〜約９００μｇ、約３００μｇ〜約９２５μｇ、約３００μｇ〜約９５０μｇ、約３００μｇ〜約９７５μｇ、約３００μｇ〜約１，０００μｇ、約４００μｇ〜約４２５μｇ、約４００μｇ〜約４５０μｇ、約４００μｇ〜約４７５μｇ、約４００μｇ〜約５００μｇ、約４００μｇ〜約５２５μｇ、約４００μｇ〜約５５０μｇ、約４００μｇ〜約５７５μｇ、約４００μｇ〜約６００μｇ、約４００μｇ〜約６２５μｇ、約４００μｇ〜約６５０μｇ、約４００μｇ〜約６７５μｇ、約４００μｇ〜約７００μｇ、約４００μｇ〜約７２５μｇ、約４００μｇ〜約７５０μｇ、約４００μｇ〜約７７５μｇ、約４００μｇ〜約８００μｇ、約４００μｇ〜約８２５μｇ、約４００μｇ〜約８５０μｇ、約４００μｇ〜約８７５μｇ、約４００μｇ〜約９００μｇ、約４００μｇ〜約９２５μｇ、約４００μｇ〜約９５０μｇ、約４００μｇ〜約９７５μｇ、または約４００μｇ〜約１，０００μｇの範囲であってもよい。
【００４３】
この実施形態のさらなる他の態様では、免疫原性組成物に含まれている本明細書中開示のトリパノソーマ抗原の量は、たとえば、約５００μｇ〜約５２５μｇ、約５００μｇ〜約５５０μｇ、約５００μｇ〜約５７５μｇ、約５００μｇ〜約６００μｇ、約５００μｇ〜約６２５μｇ、約５００μｇ〜約６５０μｇ、約５００μｇ〜約６７５μｇ、約５００μｇ〜約７００μｇ、約５００μｇ〜約７２５μｇ、約５００μｇ〜約７５０μｇ、約５００μｇ〜約７７５μｇ、約５００μｇ〜約８００μｇ、約５００μｇ〜約８２５μｇ、約５００μｇ〜約８５０μｇ、約５００μｇ〜約８７５μｇ、約５００μｇ〜約９００μｇ、約５００μｇ〜約９２５μｇ、約５００μｇ〜約９５０μｇ、約５００μｇ〜約９７５μｇ、約５００μｇ〜約１，０００μｇ、約６００μｇ〜約６２５μｇ、約６００μｇ〜約６５０μｇ、約６００μｇ〜約６７５μｇ、約６００μｇ〜約７００μｇ、約６００μｇ〜約７２５μｇ、約６００μｇ〜約７５０μｇ、約６００μｇ〜約７７５μｇ、約６００μｇ〜約８００μｇ、約６００μｇ〜約８２５μｇ、約６００μｇ〜約８５０μｇ、約６００μｇ〜約８７５μｇ、約６００μｇ〜約９００μｇ、約６００μｇ〜約９２５μｇ、約６００μｇ〜約９５０μｇ、約６００μｇ〜約９７５μｇ、約６００μｇ〜約１，０００μｇ、約７００μｇ〜約７２５μｇ、約７００μｇ〜約７５０μｇ、約７００μｇ〜約７７５μｇ、約７００μｇ〜約８００μｇ、約７００μｇ〜約８２５μｇ、約７００μｇ〜約８５０μｇ、約７００μｇ〜約８７５μｇ、約７００μｇ〜約９００μｇ、約７００μｇ〜約９２５μｇ、約７００μｇ〜約９５０μｇ、約７００μｇ〜約９７５μｇ、約７００μｇ〜約１，０００μｇ、約８００μｇ〜約８２５μｇ、約８００μｇ〜約８５０μｇ、約８００μｇ〜約８７５μｇ、約８００μｇ〜約９００μｇ、約８００μｇ〜約９２５μｇ、約８００μｇ〜約９５０μｇ、約８００μｇ〜約９７５μｇ、または約８００μｇ〜約１，０００μｇの範囲であってもよい。
【００４４】
この実施形態の態様では、免疫原性組成物に含まれている本明細書中開示のトリパノソーマ抗原の量は、たとえば、約１ｍｇ、約２ｍｇ、約３ｍｇ、約４ｍｇ、約５ｍｇ、約６ｍｇ、約７ｍｇ、約８ｍｇ、約９ｍｇ、約１０ｍｇ、約１５ｍｇ、約２０ｍｇ、約２５ｍｇ、約３０ｍｇ、約３５ｍｇ、約４０ｍｇ、約４５ｍｇ、約５０ｍｇ、約５５ｍｇ、約６０ｍｇ、約６５ｍｇ、約７０ｍｇ、約７５ｍｇ、約８０ｍｇ、約８５ｍｇ、約９０ｍｇ、約９５ｍｇ、約１００ｍｇ、約１１０ｍｇ、約１２０ｍｇ、約１３０ｍｇ、約１４０ｍｇ、約１５０ｍｇ、約１６０ｍｇ、約１７０ｍｇ、約１８０ｍｇ、約１９０ｍｇ、約２００ｍｇ、約２１０ｍｇ、約２２０ｍｇ、約２３０ｍｇ、約２４０ｍｇ、約２５０ｍｇ、２６０ｍｇ、約２７０ｍｇ、約２８０ｍｇ、約２９０ｍｇ、約３００ｍｇ、約３１０ｍｇ、約３２０ｍｇ、約３３０ｍｇ、約３４０ｍｇ、約３５０ｍｇ、３６０ｍｇ、約３７０ｍｇ、約３８０ｍｇ、約３９０ｍｇ、約４００ｍｇ、約４１０ｍｇ、約４２０ｍｇ、約４３０ｍｇ、約４４０ｍｇ、約４５０ｍｇ、４６０ｍｇ、約４７０ｍｇ、約４８０ｍｇ、約４９０ｍｇ、約５００ｍｇ、約５１０ｍｇ、約５２０ｍｇ、約５３０ｍｇ、約５４０ｍｇ、約５５０ｍｇ、５６０ｍｇ、約５７０ｍｇ、約５８０ｍｇ、約５９０ｍｇ、約６００ｍｇ、約６１０ｍｇ、約６２０ｍｇ、約６３０ｍｇ、約６４０ｍｇ、約６５０ｍｇ、６６０ｍｇ、約６７０ｍｇ、約６８０ｍｇ、約６９０ｍｇ、約７００ｍｇ、約７１０ｍｇ、約７２０ｍｇ、約７３０ｍｇ、約７４０ｍｇ、約７５０ｍｇ、７６０ｍｇ、約７７０ｍｇ、約７８０ｍｇ、約７９０ｍｇ、約８００ｍｇ、約８１０ｍｇ、約８２０ｍｇ、約８３０ｍｇ、約８４０ｍｇ、約８５０ｍｇ、８６０ｍｇ、約８７０ｍｇ、約８８０ｍｇ、約８９０ｍｇ、約９００ｍｇ、約９１０ｍｇ、約９２０ｍｇ、約９３０ｍｇ、約９４０ｍｇ、約９５０ｍｇ、９６０ｍｇ、約９７０ｍｇ、約９８０ｍｇ、約９９０ｍｇ、または約１，０００ｍｇであってもよい。
【００４５】
この実施形態の他の態様では、免疫原性組成物に含まれている本明細書中開示のトリパノソーマ抗原の量は、たとえば、少なくとも１ｍｇ、少なくとも２ｍｇ、少なくとも３ｍｇ、少なくとも４ｍｇ、少なくとも５ｍｇ、少なくとも６ｍｇ、少なくとも７ｍｇ、少なくとも８ｍｇ、少なくとも９ｍｇ、少なくとも１０ｍｇ、少なくとも１５ｍｇ、少なくとも２０ｍｇ、少なくとも２５ｍｇ、少なくとも３０ｍｇ、少なくとも３５ｍｇ、少なくとも４０ｍｇ、少なくとも４５ｍｇ、少なくとも５０ｍｇ、少なくとも５５ｍｇ、少なくとも６０ｍｇ、少なくとも６５ｍｇ、少なくとも７０ｍｇ、少なくとも７５ｍｇ、少なくとも８０ｍｇ、少なくとも８５ｍｇ、少なくとも９０ｍｇ、少なくとも９５ｍｇ、少なくとも１００ｍｇ、少なくとも１１０ｍｇ、少なくとも１２０ｍｇ、少なくとも１３０ｍｇ、少なくとも１４０ｍｇ、少なくとも１５０ｍｇ、少なくとも１６０ｍｇ、少なくとも１７０ｍｇ、少なくとも１８０ｍｇ、少なくとも１９０ｍｇ、少なくとも２００ｍｇ、少なくとも２１０ｍｇ、少なくとも２２０ｍｇ、少なくとも２３０ｍｇ、少なくとも２４０ｍｇ、少なくとも２５０ｍｇ、２６０ｍｇ、少なくとも２７０ｍｇ、少なくとも２８０ｍｇ、少なくとも２９０ｍｇ、少なくとも３００ｍｇ、少なくとも３１０ｍｇ、少なくとも３２０ｍｇ、少なくとも３３０ｍｇ、少なくとも３４０ｍｇ、少なくとも３５０ｍｇ、３６０ｍｇ、少なくとも３７０ｍｇ、少なくとも３８０ｍｇ、少なくとも３９０ｍｇ、少なくとも４００ｍｇ、少なくとも４１０ｍｇ、少なくとも４２０ｍｇ、少なくとも４３０ｍｇ、少なくとも４４０ｍｇ、少なくとも４５０ｍｇ、４６０ｍｇ、少なくとも４７０ｍｇ、少なくとも４８０ｍｇ、少なくとも４９０ｍｇ、少なくとも５００ｍｇ、少なくとも５１０ｍｇ、少なくとも５２０ｍｇ、少なくとも５３０ｍｇ、少なくとも５４０ｍｇ、少なくとも５５０ｍｇ、５６０ｍｇ、少なくとも５７０ｍｇ、少なくとも５８０ｍｇ、少なくとも５９０ｍｇ、少なくとも６００ｍｇ、少なくとも６１０ｍｇ、少なくとも６２０ｍｇ、少なくとも６３０ｍｇ、少なくとも６４０ｍｇ、少なくとも６５０ｍｇ、６６０ｍｇ、少なくとも６７０ｍｇ、少なくとも６８０ｍｇ、少なくとも６９０ｍｇ、少なくとも７００ｍｇ、少なくとも７１０ｍｇ、少なくとも７２０ｍｇ、少なくとも７３０ｍｇ、少なくとも７４０ｍｇ、少なくとも７５０ｍｇ、７６０ｍｇ、少なくとも７７０ｍｇ、少なくとも７８０ｍｇ、少なくとも７９０ｍｇ、少なくとも８００ｍｇ、少なくとも８１０ｍｇ、少なくとも８２０ｍｇ、少なくとも８３０ｍｇ、少なくとも８４０ｍｇ、少なくとも８５０ｍｇ、８６０ｍｇ、少なくとも８７０ｍｇ、少なくとも８８０ｍｇ、少なくとも８９０ｍｇ、少なくとも９００ｍｇ、少なくとも９１０ｍｇ、少なくとも９２０ｍｇ、少なくとも９３０ｍｇ、少なくとも９４０ｍｇ、少なくとも９５０ｍｇ、９６０ｍｇ、少なくとも９７０ｍｇ、少なくとも９８０ｍｇ、少なくとも９９０ｍｇ、または少なくとも１，０００ｍｇであってもよい。
【００４６】
この実施形態のさらなる他の態様では、免疫原性組成物に含まれている本明細書中開示のトリパノソーマ抗原の量は、たとえば、最大１ｍｇ、最大２ｍｇ、最大３ｍｇ、最大４ｍｇ、最大５ｍｇ、最大６ｍｇ、最大７ｍｇ、最大８ｍｇ、最大９ｍｇ、最大１０ｍｇ、最大１５ｍｇ、最大２０ｍｇ、最大２５ｍｇ、最大３０ｍｇ、最大３５ｍｇ、最大４０ｍｇ、最大４５ｍｇ、最大５０ｍｇ、最大５５ｍｇ、最大６０ｍｇ、最大６５ｍｇ、最大７０ｍｇ、最大７５ｍｇ、最大８０ｍｇ、最大８５ｍｇ、最大９０ｍｇ、最大９５ｍｇ、最大１００ｍｇ、最大１１０ｍｇ、最大１２０ｍｇ、最大１３０ｍｇ、最大１４０ｍｇ、最大１５０ｍｇ、最大１６０ｍｇ、最大１７０ｍｇ、最大１８０ｍｇ、最大１９０ｍｇ、最大２００ｍｇ、最大２１０ｍｇ、最大２２０ｍｇ、最大２３０ｍｇ、最大２４０ｍｇ、最大２５０ｍｇ、２６０ｍｇ、最大２７０ｍｇ、最大２８０ｍｇ、最大２９０ｍｇ、最大３００ｍｇ、最大３１０ｍｇ、最大３２０ｍｇ、最大３３０ｍｇ、最大３４０ｍｇ、最大３５０ｍｇ、３６０ｍｇ、最大３７０ｍｇ、最大３８０ｍｇ、最大３９０ｍｇ、最大４００ｍｇ、最大４１０ｍｇ、最大４２０ｍｇ、最大４３０ｍｇ、最大４４０ｍｇ、最大４５０ｍｇ、４６０ｍｇ、最大４７０ｍｇ、最大４８０ｍｇ、最大４９０ｍｇ、最大５００ｍｇ、最大５１０ｍｇ、最大５２０ｍｇ、最大５３０ｍｇ、最大５４０ｍｇ、最大５５０ｍｇ、５６０ｍｇ、最大５７０ｍｇ、最大５８０ｍｇ、最大５９０ｍｇ、最大６００ｍｇ、最大６１０ｍｇ、最大６２０ｍｇ、最大６３０ｍｇ、最大６４０ｍｇ、最大６５０ｍｇ、６６０ｍｇ、最大６７０ｍｇ、最大６８０ｍｇ、最大６９０ｍｇ、最大７００ｍｇ、最大７１０ｍｇ、最大７２０ｍｇ、最大７３０ｍｇ、最大７４０ｍｇ、最大７５０ｍｇ、７６０ｍｇ、最大７７０ｍｇ、最大７８０ｍｇ、最大７９０ｍｇ、最大８００ｍｇ、最大８１０ｍｇ、最大８２０ｍｇ、最大８３０ｍｇ、最大８４０ｍｇ、最大８５０ｍｇ、８６０ｍｇ、最大８７０ｍｇ、最大８８０ｍｇ、最大８９０ｍｇ、最大９００ｍｇ、最大９１０ｍｇ、最大９２０ｍｇ、最大９３０ｍｇ、最大９４０ｍｇ、最大９５０ｍｇ、９６０ｍｇ、最大９７０ｍｇ、最大９８０ｍｇ、最大９９０ｍｇ、または最大１０００ｍｇであってもよい。
【００４７】
この実施形態のさらなる他の態様では、免疫原性組成物に含まれている本明細書中開示のトリパノソーマ抗原の量は、たとえば、約１ｍｇ〜約１０ｍｇ、約１ｍｇ〜約２０ｍｇ、約１ｍｇ〜約３０ｍｇ、約１ｍｇ〜約４０ｍｇ、約１ｍｇ〜約５０ｍｇ、約１ｍｇ〜約６０ｍｇ、約１ｍｇ〜約７０ｍｇ、約１ｍｇ〜約８０ｍｇ、約１ｍｇ〜約９０ｍｇ、約１ｍｇ〜約１００ｍｇ、約１ｍｇ〜約１１０ｍｇ、約１ｍｇ〜約１２０ｍｇ、約１ｍｇ〜約１３０ｍｇ、約１ｍｇ〜約１４０ｍｇ、約１ｍｇ〜約１５０ｍｇ、約５ｍｇ〜約１０ｍｇ、約５ｍｇ〜約２０ｍｇ、約５ｍｇ〜約３０ｍｇ、約５ｍｇ〜約４０ｍｇ、約５ｍｇ〜約５０ｍｇ、約５ｍｇ〜約６０ｍｇ、約５ｍｇ〜約７０ｍｇ、約５ｍｇ〜約８０ｍｇ、約５ｍｇ〜約９０ｍｇ、約５ｍｇ〜約１００ｍｇ、約５ｍｇ〜約１１０ｍｇ、約５ｍｇ〜約１２０ｍｇ、約５ｍｇ〜約１３０ｍｇ、約５ｍｇ〜約１４０ｍｇ、約５ｍｇ〜約１５０ｍｇ、約１０ｍｇ〜約２０ｍｇ、約１０ｍｇ〜約３０ｍｇ、約１０ｍｇ〜約４０ｍｇ、約１０ｍｇ〜約５０ｍｇ、約１０ｍｇ〜約６０ｍｇ、約１０ｍｇ〜約７０ｍｇ、約１０ｍｇ〜約８０ｍｇ、約１０ｍｇ〜約９０ｍｇ、約１０ｍｇ〜約１００ｍｇ、約１０ｍｇ〜約１１０ｍｇ、約１０ｍｇ〜約１２０ｍｇ、約１０ｍｇ〜約１３０ｍｇ、約１０ｍｇ〜約１４０ｍｇ、約１０ｍｇ〜約１５０ｍｇ、約１０ｍｇ〜約１７５ｍｇ、約１０ｍｇ〜約２００ｍｇ、約１０ｍｇ〜約２２５ｍｇ、約１０ｍｇ〜約２５０ｍｇ、約２５ｍｇ〜約５０ｍｇ、約２５ｍｇ〜約７５ｍｇ、約２５ｍｇ〜約１００ｍｇ、約２５ｍｇ〜約１２５ｍｇ、約２５ｍｇ〜約１５０ｍｇ、約２５ｍｇ〜約１７５ｍｇ、約２５ｍｇ〜約２００ｍｇ、約２５ｍｇ〜約２２５ｍｇ、約２５ｍｇ〜約２５０ｍｇ、約５０ｍｇ〜約７５ｍｇ、約５０ｍｇ〜約１００ｍｇ、約５０ｍｇ〜約１２５ｍｇ、約５０ｍｇ〜約１５０ｍｇ、約５０ｍｇ〜約１７５ｍｇ、約５０ｍｇ〜約２００ｍｇ、約５０ｍｇ〜約２２５ｍｇ、約５０ｍｇ〜約２５０ｍｇ、約７５ｍｇ〜約１００ｍｇ、約７５ｍｇ〜約１２５ｍｇ、約７５ｍｇ〜約１５０ｍｇ、約７５ｍｇ〜約１７５ｍｇ、約７５ｍｇ〜約２００ｍｇ、約７５ｍｇ〜約２２５ｍｇ、または約７５ｍｇ〜約２５０ｍｇの範囲であってもよい。
【００４８】
この実施形態のさらなる他の態様では、免疫原性組成物に含まれている本明細書中開示のトリパノソーマ抗原の量は、たとえば、約１００ｍｇ〜約１２５ｍｇ、約１００ｍｇ〜約１５０ｍｇ、約１００ｍｇ〜約１７５ｍｇ、約１００ｍｇ〜約２００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約２２５ｍｇ、約１００ｍｇ〜約２５０ｍｇ、約１００ｍｇ〜約２７５ｍｇ、約１００ｍｇ〜約３００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約３２５ｍｇ、約１００ｍｇ〜約３５０ｍｇ、約１００ｍｇ〜約３７５ｍｇ、約１００ｍｇ〜約４００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約４２５ｍｇ、約１００ｍｇ〜約４５０ｍｇ、約１００ｍｇ〜約４７５ｍｇ、約１００ｍｇ〜約５００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約５２５ｍｇ、約１００ｍｇ〜約５５０ｍｇ、約１００ｍｇ〜約５７５ｍｇ、約１００ｍｇ〜約６００ｍｇ、約１２５ｍｇ〜約１５０ｍｇ、約１２５ｍｇ〜約１７５ｍｇ、約１２５ｍｇ〜約２００ｍｇ、約１２５ｍｇ〜約２２５ｍｇ、約１２５ｍｇ〜約２５０ｍｇ、約１２５ｍｇ〜約２７５ｍｇ、約１２５ｍｇ〜約３００ｍｇ、約１２５ｍｇ〜約３２５ｍｇ、約１２５ｍｇ〜約３５０ｍｇ、約１２５ｍｇ〜約３７５ｍｇ、約１２５ｍｇ〜約４００ｍｇ、約１２５ｍｇ〜約４２５ｍｇ、約１２５ｍｇ〜約４５０ｍｇ、約１２５ｍｇ〜約４７５ｍｇ、約１２５ｍｇ〜約５００ｍｇ、約１２５ｍｇ〜約５２５ｍｇ、約１２５ｍｇ〜約５５０ｍｇ、約１２５ｍｇ〜約５７５ｍｇ、約１２５ｍｇ〜約６００ｍｇ、約１５０ｍｇ〜約１７５ｍｇ、約１５０ｍｇ〜約２００ｍｇ、約１５０ｍｇ〜約２２５ｍｇ、約１５０ｍｇ〜約２５０ｍｇ、約１５０ｍｇ〜約２７５ｍｇ、約１５０ｍｇ〜約３００ｍｇ、約１５０ｍｇ〜約３２５ｍｇ、約１５０ｍｇ〜約３５０ｍｇ、約１５０ｍｇ〜約３７５ｍｇ、約１５０ｍｇ〜約４００ｍｇ、約１５０ｍｇ〜約４２５ｍｇ、約１５０ｍｇ〜約４５０ｍｇ、約１５０ｍｇ〜約４７５ｍｇ、約１５０ｍｇ〜約５００ｍｇ、約１５０ｍｇ〜約５２５ｍｇ、約１５０ｍｇ〜約５５０ｍｇ、約１５０ｍｇ〜約５７５ｍｇ、約１５０ｍｇ〜約６００ｍｇ、約２００ｍｇ〜約２２５ｍｇ、約２００ｍｇ〜約２５０ｍｇ、約２００ｍｇ〜約２７５ｍｇ、約２００ｍｇ〜約３００ｍｇ、約２００ｍｇ〜約３２５ｍｇ、約２００ｍｇ〜約３５０ｍｇ、約２００ｍｇ〜約３７５ｍｇ、約２００ｍｇ〜約４００ｍｇ、約２００ｍｇ〜約４２５ｍｇ、約２００ｍｇ〜約４５０ｍｇ、約２００ｍｇ〜約４７５ｍｇ、約２００ｍｇ〜約５００ｍｇ、約２００ｍｇ〜約５２５ｍｇ、約２００ｍｇ〜約５５０ｍｇ、約２００ｍｇ〜約５７５ｍｇ、約２００ｍｇ〜約６００ｍｇ、約２００ｍｇ〜約６２５ｍｇ、約２００ｍｇ〜約６５０ｍｇ、約２００ｍｇ〜約６７５ｍｇ、約２００ｍｇ〜約７００ｍｇ、約２００ｍｇ〜約７２５ｍｇ、約２００ｍｇ〜約７５０ｍｇ、約２００ｍｇ〜約７７５ｍｇ、約２００ｍｇ〜約８００ｍｇ、約２００ｍｇ〜約８２５ｍｇ、約２００ｍｇ〜約８５０ｍｇ、約２００ｍｇ〜約８７５ｍｇ、約２００ｍｇ〜約９００ｍｇ、約２００ｍｇ〜約９２５ｍｇ、約２００ｍｇ〜約９５０ｍｇ、約２００ｍｇ〜約９７５ｍｇ、または約２００ｍｇ〜約１，０００ｍｇの範囲であってもよい。
【００４９】
この実施形態のさらなる他の態様では、免疫原性組成物に含まれている本明細書中開示のトリパノソーマ抗原の量は、たとえば約２５０ｍｇ〜約２７５ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約３００ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約３２５ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約３５０ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約３７５ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約４００ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約４２５ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約４５０ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約４７５ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約５００ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約５２５ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約５５０ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約５７５ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約６００ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約６２５ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約６５０ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約６７５ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約７００ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約７２５ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約７５０ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約７７５ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約８００ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約８２５ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約８５０ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約８７５ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約９００ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約９２５ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約９５０ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約９７５ｍｇ、約２５０ｍｇ〜約１，０００ｍｇ、約３００ｍｇ〜約３２５ｍｇ、約３００ｍｇ〜約３５０ｍｇ、約３００ｍｇ〜約３７５ｍｇ、約３００ｍｇ〜約４００ｍｇ、約３００ｍｇ〜約４２５ｍｇ、約３００ｍｇ〜約４５０ｍｇ、約３００ｍｇ〜約４７５ｍｇ、約３００ｍｇ〜約５００ｍｇ、約３００ｍｇ〜約５２５ｍｇ、約３００ｍｇ〜約５５０ｍｇ、約３００ｍｇ〜約５７５ｍｇ、約３００ｍｇ〜約６００ｍｇ、約３００ｍｇ〜約６２５ｍｇ、約３００ｍｇ〜約６５０ｍｇ、約３００ｍｇ〜約６７５ｍｇ、約３００ｍｇ〜約７００ｍｇ、約３００ｍｇ〜約７２５ｍｇ、約３００ｍｇ〜約７５０ｍｇ、約３００ｍｇ〜約７７５ｍｇ、約３００ｍｇ〜約８００ｍｇ、約３００ｍｇ〜約８２５ｍｇ、約３００ｍｇ〜約８５０ｍｇ、約３００ｍｇ〜約８７５ｍｇ、約３００ｍｇ〜約９００ｍｇ、約３００ｍｇ〜約９２５ｍｇ、約３００ｍｇ〜約９５０ｍｇ、約３００ｍｇ〜約９７５ｍｇ、約３００ｍｇ〜約１，０００ｍｇ、約４００ｍｇ〜約４２５ｍｇ、約４００ｍｇ〜約４５０ｍｇ、約４００ｍｇ〜約４７５ｍｇ、約４００ｍｇ〜約５００ｍｇ、約４００ｍｇ〜約５２５ｍｇ、約４００ｍｇ〜約５５０ｍｇ、約４００ｍｇ〜約５７５ｍｇ、約４００ｍｇ〜約６００ｍｇ、約４００ｍｇ〜約６２５ｍｇ、約４００ｍｇ〜約６５０ｍｇ、約４００ｍｇ〜約６７５ｍｇ、約４００ｍｇ〜約７００ｍｇ、約４００ｍｇ〜約７２５ｍｇ、約４００ｍｇ〜約７５０ｍｇ、約４００ｍｇ〜約７７５ｍｇ、約４００ｍｇ〜約８００ｍｇ、約４００ｍｇ〜約８２５ｍｇ、約４００ｍｇ〜約８５０ｍｇ、約４００ｍｇ〜約８７５ｍｇ、約４００ｍｇ〜約９００ｍｇ、約４００ｍｇ〜約９２５ｍｇ、約４００ｍｇ〜約９５０ｍｇ、約４００ｍｇ〜約９７５ｍｇ、または約４００ｍｇ〜約１，０００ｍｇの範囲であってもよい。
【００５０】
この実施形態のさらなる他の態様では、免疫原性組成物に含まれている本明細書中開示のトリパノソーマ抗原の量は、たとえば約５００ｍｇ〜約５２５ｍｇ、約５００ｍｇ〜約５５０ｍｇ、約５００ｍｇ〜約５７５ｍｇ、約５００ｍｇ〜約６００ｍｇ、約５００ｍｇ〜約６２５ｍｇ、約５００ｍｇ〜約６５０ｍｇ、約５００ｍｇ〜約６７５ｍｇ、約５００ｍｇ〜約７００ｍｇ、約５００ｍｇ〜約７２５ｍｇ、約５００ｍｇ〜約７５０ｍｇ、約５００ｍｇ〜約７７５ｍｇ、約５００ｍｇ〜約８００ｍｇ、約５００ｍｇ〜約８２５ｍｇ、約５００ｍｇ〜約８５０ｍｇ、約５００ｍｇ〜約８７５ｍｇ、約５００ｍｇ〜約９００ｍｇ、約５００ｍｇ〜約９２５ｍｇ、約５００ｍｇ〜約９５０ｍｇ、約５００ｍｇ〜約９７５ｍｇ、約５００ｍｇ〜約１，０００ｍｇ、約６００ｍｇ〜約６２５ｍｇ、約６００ｍｇ〜約６５０ｍｇ、約６００ｍｇ〜約６７５ｍｇ、約６００ｍｇ〜約７００ｍｇ、約６００ｍｇ〜約７２５ｍｇ、約６００ｍｇ〜約７５０ｍｇ、約６００ｍｇ〜約７７５ｍｇ、約６００ｍｇ〜約８００ｍｇ、約６００ｍｇ〜約８２５ｍｇ、約６００ｍｇ〜約８５０ｍｇ、約６００ｍｇ〜約８７５ｍｇ、約６００ｍｇ〜約９００ｍｇ、約６００ｍｇ〜約９２５ｍｇ、約６００ｍｇ〜約９５０ｍｇ、約６００ｍｇ〜約９７５ｍｇ、約６００ｍｇ〜約１，０００ｍｇ、約７００ｍｇ〜約７２５ｍｇ、約７００ｍｇ〜約７５０ｍｇ、約７００ｍｇ〜約７７５ｍｇ、約７００ｍｇ〜約８００ｍｇ、約７００ｍｇ〜約８２５ｍｇ、約７００ｍｇ〜約８５０ｍｇ、約７００ｍｇ〜約８７５ｍｇ、約７００ｍｇ〜約９００ｍｇ、約７００ｍｇ〜約９２５ｍｇ、約７００ｍｇ〜約９５０ｍｇ、約７００ｍｇ〜約９７５ｍｇ、約７００ｍｇ〜約１，０００ｍｇ、約８００ｍｇ〜約８２５ｍｇ、約８００ｍｇ〜約８５０ｍｇ、約８００ｍｇ〜約８７５ｍｇ、約８００ｍｇ〜約９００ｍｇ、約８００ｍｇ〜約９２５ｍｇ、約８００ｍｇ〜約９５０ｍｇ、約８００ｍｇ〜約９７５ｍｇ、または約８００ｍｇ〜約１，０００ｍｇの範囲であってもよい。
【００５１】
本明細書中開示の免疫原性組成物は、任意におよびさらに、１つまたは複数のアジュバントを含んでもよい。アジュバントは、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原に対する免疫応答を増大または多様化するいずれかの物質または物質の混合物である。アジュバントは、保護的免疫化に必要とされる免疫化の回数または抗原の量を低下させるように作用し得る。非限定的なアジュバントとして、たとえば、限定するものではないが、フロイント型アジュバント、たとえば完全フロイントアジュバント（ＦＣＡ）；不完全フロイントアジュバント（ＦＩＡ）；たとえばサポニンなどのサポゲニングリコシド；カーボポール（ｃａｒｂｏｐｏｌ）；Ｎ−アセチルムラミル−Ｌ−アラニル−Ｄ−イソグルタミン（一般的に、ムラミルジペプチドまたは「ＭＤＰ」として知られている）；およびリポ多糖（ＬＰＳ）を含む、リポソーム、ウイルス様粒子（ＶＬＰ）、ナノ粒子、油相が、挙げられる。このようなアジュバントは、一般に、水相、またはより一般的には水に不溶性の無機塩を含むエマルジョンの形態で使用されている。これらの無機塩として、水酸化アルミニウム、硫酸亜鉛、水酸化鉄コロイド、リン酸カルシウム、または塩化カルシウムが挙げられる。
【００５２】
アジュバントの別の例として、アルミニウムベースのアジュバント（またはミョウバンベースのアジュバント）がある。アルミニウムベースのアジュバントは、「デポ剤」を形成するために抗原を沈殿させることにより、共投与した抗原に対する免疫応答を刺激する。アルミニウムベースのアジュバントは、主にＴＨ２免疫応答を刺激する。一般的に使用されるミョウバンベースのアジュバントとして、水酸化アルミニウム（Ａｌ（ＯＨ）３）、リン酸アルミニウム（ＡｌＰＯ４）、ヒドロキシリン酸アルミニウム、非晶質水酸化リン酸硫酸アルミニウム（ＡＡＨＳ）、およびいわゆる「ミョウバン」ＫＡｌ（ＳＯ４）・１２Ｈ２Ｏが、挙げられる。
【００５３】
特定のアジュバントならびに作製方法および使用方法は、たとえばＧｕｐｔａ  ｅｔ  ａｌ．  Ｖａｃｃｉｎｅ，  １１：  ９９３−３０６，  １９９３；  Ａｒｎｏｎ，  Ｒ．  （Ｅｄ．）  Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ  Ｖａｃｃｉｎｅｓ  １：８３−９２，  ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ，  Ｉｎｃ．，  Ｂｏｃａ  Ｒａｔｏｎ，  Ｆｌａ．，  １９８７；およびＤａｖｉｄ  Ｗ．  Ｗａｇｇｏｎｅｒ，  Ｊｒ．  ｅｔ  ａｌ．，  Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃｉｔｙ−Ｅｎｈａｎｃｉｎｇ  Ｃａｒｒｉｅｒｓ  ａｎｄ  Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ  Ｔｈｅｒｅｏｆ  ａｎｄ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｏｆ  Ｕｓｉｎｇ  ｔｈｅ  Ｓａｍｅ、米国特許公開公報第２００４００５７９５８号（２００４年３月２５日）に記載されている。さらなるアジュバントとして、”Ｖａｃｃｉｎｅ  Ｄｅｓｉｇｎ，  Ｔｈｅ  Ｓｕｂｕｎｉｔ  ａｎｄ  Ａｄｊｕｖａｎｔ  Ａｐｐｒｏａｃｈ”（ｅｄｓ．  Ｐｏｗｅｌｌ，  Ｍ．  Ｆ．  ａｎｄ  Ｎｅｗｍａｎ，  Ｍ．  Ｊ．）  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，  Ｖｏｌｕｍｅ  ６，  Ｐｌｅｎｕｍ  Ｐｒｅｓｓ（Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ）の第７章（ｐｐ  １４１−２２７）に記載されているいずれかの化合物が挙げられる。この一覧からの例として、ムラミルジペプチド（ＭＤＰ）およびモンタニド７２０が挙げられる。ポリイノシン：シトシン（Ｐｏｌｙ  Ｉ：Ｃ）またはプラスミドＤＮＡ含有ＣｐＧモチーフなどの分子もまた、微粒子に包有されている抗原と組み合わせたアジュバントとして投与することができる。別の例では、アジュバントは、リステリオシン、ストレプトリジン、またはそれらの混合物などの、抗原性化合物の細胞の細胞質へのエントリを促進する薬剤である。
【００５４】
一実施形態では、本明細書中開示の免疫原性組成物は、単一の、本明細書中開示のアジュバントを含む。一実施形態では、本明細書中開示の免疫原性組成物は、複数の、本明細書中開示のアジュバントを含む。この実施形態の態様では、本明細書中開示の免疫原性組成物は、たとえば１、２、３、４、または５個の、本明細書中開示のアジュバントを含む。この実施形態の他の態様では、本明細書中開示の免疫原性組成物は、たとえば少なくとも１、少なくとも２、少なくとも３、少なくとも４、または少なくとも５個の、本明細書中開示のアジュバントを含む。この実施形態のさらなる他の態様では、本明細書中開示の免疫原性組成物は、たとえば最大１、最大２、最大３、最大４、または最大５個の、本明細書中開示のアジュバントを含む。この実施形態のさらなる他の態様では、本明細書中開示の免疫原性組成物は、たとえば１〜２、１〜３、１〜４、１〜５、２〜３、２〜４、２〜５、３〜４、３〜５、または４〜５個の、本明細書中開示のアジュバントを含む。
【００５５】
アジュバントは、概して、投与される用量の半分の容量を含む。概して、アジュバントを含む免疫原性組成物は、約０．２５ｍＬ〜約１ｍｌの用量で投与する。よって、免疫原性組成物が約１ｍｌの用量で投与される場合、この組成物の約０．５ｍｌがアジュバントである。同様に、免疫原性組成物が約０．５ｍｌの用量で投与される場合、この組成物の約０．２５ｍｌがアジュバントである。
【００５６】
免疫原性組成物に含まれている本明細書中開示のアジュバントの量は、個体において標的化されたトリパノソーマ抗原の適切な免疫応答を増大させるのに有効な量である。概して、この量は、有意に有害な副作用を引き起こさない量でもある。このような量は、どのアジュバントまたは複数のアジュバントを使用するかに応じて変動する。特定の免疫原性組成物に最適なアジュバントの量は、個体における抗体の力価および他の応答の観察を含む標準的な試験により、解明することができる。
【００５７】
一般的に、本明細書中開示のアジュバントの有効かつ安全な用量は、約１００μｇ／ｍＬ〜約１，５００μｇ／ｍｌの濃度で変動する。この実施形態の態様では、免疫原性組成物に含まれている本明細書中開示のアジュバントの量は、たとえば、約１００μｇ／ｍＬ、約２００μｇ／ｍＬ、約３００μｇ／ｍＬ、約４００μｇ／ｍＬ、約５００μｇ／ｍＬ、約６００μｇ／ｍＬ、約７００μｇ／ｍＬ、約８００μｇ／ｍＬ、約９００μｇ／ｍＬ、約１，０００μｇ／ｍＬ、約１，１００μｇ／ｍＬ、約１，２００μｇ／ｍＬ、約１，３００μｇ／ｍＬ、約１，４００μｇ／ｍＬ、または約１，５００μｇ／ｍＬであってもよい。この実施形態の他の態様では、免疫原性組成物に含まれている本明細書中開示のアジュバントの量は、たとえば、少なくとも１００μｇ／ｍＬ、少なくとも２００μｇ／ｍＬ、少なくとも３００μｇ／ｍＬ、少なくとも４００μｇ／ｍＬ、少なくとも５００μｇ／ｍＬ、少なくとも６００μｇ／ｍＬ、少なくとも７００μｇ／ｍＬ、少なくとも８００μｇ／ｍＬ、少なくとも９００μｇ／ｍＬ、少なくとも１，０００μｇ／ｍＬ、少なくとも１，１００μｇ／ｍＬ、少なくとも１，２００μｇ／ｍＬ、少なくとも１，３００μｇ／ｍＬ、少なくとも１，４００μｇ／ｍＬ、または少なくとも１，５００μｇ／ｍＬであってもよい。この実施形態のさらなる他の態様では、免疫原性組成物に含まれている本明細書中開示のアジュバントの量は、たとえば、最大１００μｇ／ｍＬ、最大２００μｇ／ｍＬ、最大３００μｇ／ｍＬ、最大４００μｇ／ｍＬ、最大５００μｇ／ｍＬ、最大６００μｇ／ｍＬ、最大７００μｇ／ｍＬ、最大８００μｇ／ｍＬ、最大９００μｇ／ｍＬ、最大１，０００μｇ／ｍＬ、最大１，１００μｇ／ｍＬ、最大１，２００μｇ／ｍＬ、最大１，３００μｇ／ｍＬ、最大１，４００μｇ／ｍＬ、または最大１，５００μｇ／ｍＬであってもよい。
【００５８】
この実施形態のさらなる他の態様では、免疫原性組成物に含まれている本明細書中開示のアジュバントの量は、たとえば、約１００μｇ／ｍＬ〜約２００μｇ／ｍＬ、約１００μｇ／ｍＬ〜約３００μｇ／ｍＬ、約１００μｇ／ｍＬ〜約４００μｇ／ｍＬ、約１００μｇ／ｍＬ〜約５００μｇ／ｍＬ、約１００μｇ／ｍＬ〜約６００μｇ／ｍＬ、約１００μｇ／ｍＬ〜約７００μｇ／ｍＬ、約１００μｇ／ｍＬ〜約８００μｇ／ｍＬ、約１００μｇ／ｍＬ〜約９００μｇ／ｍＬ、約１００μｇ／ｍＬ〜約１，０００μｇ／ｍＬ、約１００μｇ／ｍＬ〜約１，２００μｇ／ｍＬ、約１００μｇ／ｍＬ〜約１，３００μｇ／ｍＬ、約１００μｇ／ｍＬ〜約１，４００μｇ／ｍＬ、約１００μｇ／ｍＬ〜約１，５００μｇ／ｍＬ、約２００μｇ／ｍＬ〜約３００μｇ／ｍＬ、約２００μｇ／ｍＬ〜約４００μｇ／ｍＬ、約２００μｇ／ｍＬ〜約５００μｇ／ｍＬ、約２００μｇ／ｍＬ〜約６００μｇ／ｍＬ、約２００μｇ／ｍＬ〜約７００μｇ／ｍＬ、約２００μｇ／ｍＬ〜約８００μｇ／ｍＬ、約２００μｇ／ｍＬ〜約９００μｇ／ｍＬ、約２００μｇ／ｍＬ〜約１，０００μｇ／ｍＬ、約２００μｇ／ｍＬ〜約１，２００μｇ／ｍＬ、約２００μｇ／ｍＬ〜約１，３００μｇ／ｍＬ、約２００μｇ／ｍＬ〜約１，４００μｇ／ｍＬ、約２００μｇ／ｍＬ〜約１，５００μｇ／ｍＬ、約３００μｇ／ｍＬ〜約４００μｇ／ｍＬ、約３００μｇ／ｍＬ〜約５００μｇ／ｍＬ、約３００μｇ／ｍＬ〜約６００μｇ／ｍＬ、約３００μｇ／ｍＬ〜約７００μｇ／ｍＬ、約３００μｇ／ｍＬ〜約８００μｇ／ｍＬ、約３００μｇ／ｍＬ〜約９００μｇ／ｍＬ、約３００μｇ／ｍＬ〜約１，０００μｇ／ｍＬ、約３００μｇ／ｍＬ〜約１，２００μｇ／ｍＬ、約３００μｇ／ｍＬ〜約１，３００μｇ／ｍＬ、約３００μｇ／ｍＬ〜約１，４００μｇ／ｍＬ、約３００μｇ／ｍＬ〜約１，５００μｇ／ｍＬ、約４００μｇ／ｍＬ〜約５００μｇ／ｍＬ、約４００μｇ／ｍＬ〜約６００μｇ／ｍＬ、約４００μｇ／ｍＬ〜約７００μｇ／ｍＬ、約４００μｇ／ｍＬ〜約８００μｇ／ｍＬ、約４００μｇ／ｍＬ〜約９００μｇ／ｍＬ、約４００μｇ／ｍＬ〜約１，０００μｇ／ｍＬ、約４００μｇ／ｍＬ〜約１，２００μｇ／ｍＬ、約４００μｇ／ｍＬ〜約１，３００μｇ／ｍＬ、約４００μｇ／ｍＬ〜約１，４００μｇ／ｍＬ、約４００μｇ／ｍＬ〜約１，５００μｇ／ｍＬ、約５００μｇ／ｍＬ〜約６００μｇ／ｍＬ、約５００μｇ／ｍＬ〜約７００μｇ／ｍＬ、約５００μｇ／ｍＬ〜約８００μｇ／ｍＬ、約５００μｇ／ｍＬ〜約９００μｇ／ｍＬ、約５００μｇ／ｍＬ〜約１，０００μｇ／ｍＬ、約５００μｇ／ｍＬ〜約１，２００μｇ／ｍＬ、約５００μｇ／ｍＬ〜約１，３００μｇ／ｍＬ、約５００μｇ／ｍＬ〜約１，４００μｇ／ｍＬ、約５００μｇ／ｍＬ〜約１，５００μｇ／ｍＬ、約６００μｇ／ｍＬ〜約７００μｇ／ｍＬ、約６００μｇ／ｍＬ〜約８００μｇ／ｍＬ、約６００μｇ／ｍＬ〜約９００μｇ／ｍＬ、約６００μｇ／ｍＬ〜約１，０００μｇ／ｍＬ、約６００μｇ／ｍＬ〜約１，２００μｇ／ｍＬ、約６００μｇ／ｍＬ〜約１，３００μｇ／ｍＬ、約６００μｇ／ｍＬ〜約１，４００μｇ／ｍＬ、約６００μｇ／ｍＬ〜約１，５００μｇ／ｍＬ、約７００μｇ／ｍＬ〜約８００μｇ／ｍＬ、約７００μｇ／ｍＬ〜約９００μｇ／ｍＬ、約７００μｇ／ｍＬ〜約１，０００μｇ／ｍＬ、約７００μｇ／ｍＬ〜約１，２００μｇ／ｍＬ、約７００μｇ／ｍＬ〜約１，３００μｇ／ｍＬ、約７００μｇ／ｍＬ〜約１，４００μｇ／ｍＬ、約７００μｇ／ｍＬ〜約１，５００μｇ／ｍＬ、約８００μｇ／ｍＬ〜約９００μｇ／ｍＬ、約８００μｇ／ｍＬ〜約１，０００μｇ／ｍＬ、約８００μｇ／ｍＬ〜約１，２００μｇ／ｍＬ、約８００μｇ／ｍＬ〜約１，３００μｇ／ｍＬ、約８００μｇ／ｍＬ〜約１，４００μｇ／ｍＬ、約８００μｇ／ｍＬ〜約１，５００μｇ／ｍＬ、約９００μｇ／ｍＬ〜約１，０００μｇ／ｍＬ、約９００μｇ／ｍＬ〜約１，２００μｇ／ｍＬ、約９００μｇ／ｍＬ〜約１，３００μｇ／ｍＬ、約９００μｇ／ｍＬ〜約１，４００μｇ／ｍＬ、約９００μｇ／ｍＬ〜約１，５００μｇ／ｍＬ、約１，０００μｇ／ｍＬ〜約１，２００μｇ／ｍＬ、約１，０００μｇ／ｍＬ〜約１，３００μｇ／ｍＬ、約１，０００μｇ／ｍＬ〜約１，４００μｇ／ｍＬ、約１，０００μｇ／ｍＬ〜約１，５００μｇ／ｍＬ、約１，１００μｇ／ｍＬ〜約１，２００μｇ／ｍＬ、約１，１００μｇ／ｍＬ〜約１，３００μｇ／ｍＬ、約１，１００μｇ／ｍＬ〜約１，４００μｇ／ｍＬ、約１，１００μｇ／ｍＬ〜約１，５００μｇ／ｍＬ、約１，２００μｇ／ｍＬ〜約１，３００μｇ／ｍＬ、約１，２００μｇ／ｍＬ〜約１，４００μｇ／ｍＬ、約１，２００μｇ／ｍＬ〜約１，５００μｇ／ｍＬ、約１，３００μｇ／ｍＬ〜約１，４００μｇ／ｍＬ、約１，３００μｇ／ｍＬ〜約１，５００μｇ／ｍＬ、または約１，４００μｇ／ｍＬ〜約１，５００μｇ／ｍＬであってもよい。
【００５９】
本明細書中開示の免疫原性組成物は、１つまたは複数の薬学的に許容可能な担体をさらに含んでもよい。本明細書中開示の免疫原性組成物に有用な薬学的に許容可能な担体は、使用される用量および濃度で個体に無毒であるいずれかの適合可能な薬剤を含み、投与される際に長期間のまたは永久的な有害作用を実質的に有さず、薬理学的に許容可能なビヒクル、安定剤、可溶化剤、希釈剤、添加剤、補助剤、または賦形剤などの用語を包有する。このような担体は、一般的に、有効な化合物と混合され、または、有効な化合物を希釈または封入することができ、固体、半固体、または液体の薬剤とすることができる。有効成分は可溶性とすることができ、または望ましい担体もしくは希釈剤の懸濁剤として送達できることが理解されている。また本明細書中開示の担体は、アジュバントとして作用してもよい。限定するものではないが、たとえば水、生理食塩水、グリシン、ヒアルロン酸などの水性媒体；たとえばマンニトール、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、サッカリンナトリウム、滑石、セルロース、グルコース、スクロース、炭酸マグネシウムなどの固体の担体；溶媒；分散媒体；コーティング剤；抗菌剤および抗真菌剤；等張剤および吸収遅延剤；または他のいずれかの不活性成分を含む、様々な薬学的に許容可能な担体のいずれかを使用することができる。薬理学的に許容可能な担体の選択は、投与形式に応じて変更することができる。いずれかの薬理学的に許容可能な担体が有効成分に不適合である場合を除き、薬学的に許容可能な組成物における担体の使用が考慮されている。このような薬学的な担体の特定の使用の非限定的な例は、ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬ  ＤＯＳＡＧＥ  ＦＯＲＭＳ  ＡＮＤ  ＤＲＵＧ  ＤＥＬＩＶＥＲＹ  ＳＹＳＴＥＭＳ  （Ｈｏｗａｒｄ  Ｃ．  Ａｎｓｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，  ｅｄｓ．，  Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，  ７ｔｈ  ｅｄ．  １９９９）；ＲＥＭＩＮＧＴＯＮ：  ＴＨＥ  ＳＣＩＥＮＣＥ  ＡＮＤ  ＰＲＡＣＴＩＣＥ  ＯＦ  ＰＨＡＲＭＡＣＹ  （Ａｌｆｏｎｓｏ  Ｒ．  Ｇｅｎｎａｒｏ  ｅｄ．，  Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ，  ２０ｔｈ  ｅｄ．  ２０００）；ＧＯＯＤＭＡＮ  ＆  ＧＩＬＭＡＮ’Ｓ  ＴＨＥ  ＰＨＡＲＭＡＣＯＬＯＧＩＣＡＬ  ＢＡＳＩＳ  ＯＦ  ＴＨＥＲＡＰＥＵＴＩＣＳ  （Ｊｏｅｌ  Ｇ．  Ｈａｒｄｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，  ｅｄｓ．，  ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ  Ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌ，  １０ｔｈ  ｅｄ．  ２００１）；およびＨＡＮＤＢＯＯＫ  ＯＦ  ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬ  ＥＸＣＩＰＩＥＮＴＳ  （Ｒａｙｍｏｎｄ  Ｃ．  Ｒｏｗｅ  ｅｔ  ａｌ．，    ＡＰｈＡ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎｓ，  ４ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ  ２００３）で見出すことができる。
【００６０】
本明細書中開示の免疫原性組成物は、限定するものではないが、バッファー、保存剤、浸透圧調節剤、塩、抗酸化剤、浸透圧調節剤、生理的物質、薬理学的物質、増量剤、乳化剤、湿潤剤、甘味剤、または香料などを含む、１つまたは複数の薬学的に許容可能な成分（または複数の薬学的な成分）をさらに含んでもよい。ｐＨを調節するための様々なバッファーおよび手段は、結果として得られる調製物が薬学的に許容可能であれば、本明細書中開示の医薬組成物を調製するために使用することができる。このようなバッファーとして、限定するものではないが、酢酸塩のバッファー、クエン酸塩のバッファー、リン酸塩のバッファー、中性緩衝生理食塩水、リン酸塩緩衝生理食塩水、およびホウ酸塩のバッファーが挙げられる。酸または塩基が、必要に応じて組成物のｐＨを調節するために使用できることが理解されている。薬学的に許容可能な抗酸化剤として、限定するものではないが、二亜硫酸ナトリウム、チオ硫酸ナトリウム、アセチルシステイン、ブチルヒドロキシアニソール、およびブチルヒドロキシトルエンが挙げられる。有用な保存剤として、限定するものではないが、塩化ベンザルコニウム、クロロブタノール、チメロサール、酢酸フェニル水銀、硝酸フェニル水銀、たとえばＰＵＲＩＴＥ（登録商標）などの安定化したオキシクロロ組成物、ならびにキレート剤、たとえばＤＴＰＡまたはＤＴＰＡ−ビスアミド、カルシウムＤＴＰＡ、およびＣａＮａＤＴＰＡ−ビスアミドなどが挙げられる。医薬組成物に有用な浸透圧調節剤として、限定するものではないが、たとえば塩化ナトリウム、塩化カリウム、マンニトールまたはグリセリンなどの塩、および他の薬学的に許容可能な浸透圧調節剤が挙げられる。医薬組成物は、塩として提供されてもよく、限定するものではないが、塩酸、硫酸、酢酸、乳酸、酒石酸、リンゴ酸、コハク酸などを含む多くの酸と共に形成することができる。塩は、対応する遊離塩基形態よりも、水性溶媒または他のプロトン酸の溶媒により可溶である傾向がある。薬理学の分野で知られているこれらおよび他の物質は、医薬組成物に含まれ得ることが理解されている。
【００６１】
本明細書の態様は、トリパノソーマ系疾患を治療する方法を部分的に開示する。このような方法は、治療的方法（トリパノソーマ感染後）および予防的方法（トリパノソーマへの曝露、感染、または病態の前）を含む。たとえば、トリパノソーマ系感染症に関して個体を治療する治療的方法および予防的方法は、個体のトリパノソーマ系感染症の可能性を低下、抑制、もしくは排除するため、トリパノソーマ系感染症に対する個体の易罹患性を低下、抑制、もしくは排除するため、個体のトリパノソーマ系感染症を低減、抑制、もしくは排除するため、症候、罹患率、および／もしくは死亡率を低下、抑制、もしくは排除するため、または感染した個体から感染していない個体へのトリパノソーマの伝染を低減、抑制、もしくは排除するための、トリパノソーマ系の感染症または病態を有するもしくは有するリスクのある個体の治療、トリパノソーマ系感染症を伴う個体を治療すること、およびトリパノソーマ系感染症から個体を保護する方法を含む。このような方法は、トリパノソーマ系の感染症または病態を有するまたは有するリスクのある個体を治療的または予防的に治療（ワクチン接種または免疫化）するために、本明細書中開示の免疫原性組成物を投与することを含む。よって、方法は、トリパノソーマ系の感染症もしくは病態を治療することができ、または感染症からの保護（たとえば予防上の保護）を個体に提供することができる。
【００６２】
一実施形態では、トリパノソーマ系疾患を治療する方法は、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原または免疫原性組成物を、トリパノソーマ系の感染症または病態に関連する１つまたは複数の生理学的な状態または症状を低減することにより、トリパノソーマ系疾患を治療するために十分な量で、それを必要とする個体に投与することを含む。この実施形態の態様では、免疫原性組成物は、本明細書中開示の１つまたは複数のトリパノソーマ抗原を含む。
【００６３】
一実施形態では、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原または免疫原性組成物は、トリパノソーマ系疾患を治療するために使用される。本明細書中開示のトリパノソーマ抗原または免疫原性組成物の使用は、トリパノソーマ系の感染症または病態に関連する１つまたは複数の生理学的な状態または症状を低減することにより、トリパノソーマ系疾患を治療する。この実施形態の態様では、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原または免疫原性組成物の投与は、トリパノソーマ系の感染症または病態に関連する１つまたは複数の生理学的な状態または症状を低減することにより、トリパノソーマ系疾患を治療するために十分な量で行われる。この実施形態の他の態様では、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原または免疫原性組成物の投与は、トリパノソーマのクリアランスもしくは除去の増大、誘導、強化、増強、促進、もしくは刺激；またはトリパノソーマの別の個体への伝染の減少、低減、阻害、抑制、予防、制御、もしくは限定のために十分な量で行われる。
【００６４】
一実施形態では、トリパノソーマ系疾患を治療する方法は、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原または免疫原性組成物を、トリパノソーマ系の感染症または病態に対して個体に免疫化またはワクチン接種を行うことにより、トリパノソーマ系疾患を治療するために十分な量で、それを必要とする個体に投与することを含む。この実施形態の態様では、免疫原性組成物は、１つまたは複数の、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原を含む。この実施形態の他の態様では、本明細書中開示の免疫原性組成物の投与は、トリパノソーマに対する免疫応答を増大、誘導、強化、増強、促進、または刺激するために十分な量で行われる。この実施形態のさらなる他の態様では、本明細書中開示の免疫原性組成物の投与は、トリパノソーマのクリアランスもしくは除去の増大、誘導、強化、増強、促進、もしくは刺激；またはトリパノソーマの別の個体への伝染の減少、低減、阻害、抑制、予防、制御、もしくは限定のために十分な量で行われる。
【００６５】
一実施形態では、トリパノソーマ系疾患を治療する方法は、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原または免疫原性組成物を、トリパノソーマ系の感染症または病態から個体を保護することにより、トリパノソーマ系疾患を治療するために十分な量で、それを必要とする個体に投与することを含む。この実施形態の態様では、免疫原性組成物は、１つまたは複数の、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原を含む。この実施形態の他の態様では、本明細書中開示の免疫原性組成物の投与は、トリパノソーマ系の感染症もしくは病態に対して個体に免疫化もしくはワクチン接種を行うため、またはトリパノソーマ系の感染症もしくは病態に対する易罹患性を低減、減少、限定、制御、もしくは阻害するために十分な量で行われる。
【００６６】
一実施形態では、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原または免疫原性組成物は、トリパノソーマ系疾患を治療するために使用される。この実施形態の態様では、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原または免疫原性組成物の使用は、トリパノソーマ系の感染症または病態に対して個体に免疫化またはワクチン接種を行うために十分な量で行われる。
【００６７】
トリパノソーマ系疾患は、病態生理学の作用がトリパノソーマの存在によるものであるいずれかの病態、疾患、または障害を表す。２種類の異なるトリパノソーマ：ステルコラリア類種およびサリバリア類種が存在しており、それらの生活環は異なっている。ステルコラリア類種は、オオサシガメ亜科由来の昆虫（最も重要なものはブラジルサシガメ（Ｔｒｉａｔｏｍａ  ｉｎｆｅｓｔａｎｓ））の糞便においてレシピエントに伝染するトリパノソーマである。この群は、クルーズトリパノソーマ（Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ  ｃｒｕｚｉ）、ルイストリパノソーマ（Ｔ．ｌｅｗｉｓｉ）、羊トリパノソーマ（Ｔ．ｍｅｌｏｐｈａｇｉｕｍ）、ナビアシトリパノソーマ（Ｔ．ｎａｂｉａｓｉ）、ランゲルトリパノソーマ（Ｔ．ｒａｎｇｅｌｉ）、テイレリトリパノソーマ（Ｔ．ｔｈｅｉｌｅｒｉ）、テオドリトリパノソーマ（Ｔ．ｔｈｅｏｄｏｒｉ）を含む。Ｈｅｒｐｅｔｏｓｏｍａ亜属として、ルイストリパノソーマ（Ｔ．ｌｅｗｉｓｉ）種が挙げられ、Ｓｃｈｉｚｏｔｒｙｐａｎｕｍ亜属として、クルーズトリパノソーマ（Ｔ．ｃｒｕｚｉ）が挙げられる。サリバリア類は、Ｄｕｔｔｏｎｅｌｌａ亜属、Ｔｒｙｐａｎｏｚｏｏｎ亜属、Ｐｙｃｎｏｍｏｎａｓ亜属、およびＮａｎｎｏｍｏｎａｓ亜属のトリパノソーマである。これらのトリパノソーマは、ツェツェバエ（Ｇｌｏｓｓｉｎａ属種）の唾液において、レシピエントに伝染する。抗原性のバリエーションは、サリバリア類に共通する特徴であり、特にブルーストリパノソーマ（Ｔ．ｂｒｕｃｅｉ）において良好に研究されている。Ｔｒｙｐａｎｏｚｏｏｎ亜属として、ブルーストリパノソーマ（Ｔ．ｂｒｕｃｅｉ）、ローデシアトリパノソーマ（Ｔ．ｒｈｏｄｅｓｉｅｎｓｅ）および媾疫トリパノソーマ（Ｔ．ｅｑｕｉｐｅｒｄｕｍ）の種が挙げられる。Ｄｕｔｔｏｎｅｌｌａ亜属として、Ｔ．ｖｉｖａｘ種が挙げられる。Ｎａｎｎｏｍｏｎａｓ亜属として、Ｔ．ｃｏｎｇｏｌｅｎｓｅが挙げられる。
【００６８】
この実施形態の一態様では、トリパノソーマ系疾患はシャーガス病である。この実施形態の別の態様では、トリパノソーマ系疾患は、限定するものではないが、東アフリカ睡眠病および西アフリカ睡眠病を含む、アフリカ睡眠病である。
【００６９】
シャーガス病またはアメリカトリパノソーマ病は、南北アメリカ大陸でのみ見いだされている昆虫のベクターにより動物および人々に伝染する、寄生生物クルーズトリパノソーマ（Ｔ．ｃｒｕｚｉ）により引き起こされる。治療されていない場合、感染症は生涯にわたり、命に関わる可能性がある。田舎のメキシコ、中央アメリカ、および南アメリカにおいて、８００万人もの人々がシャーガス病を有しており、そのうちの多くが、自分たちが感染していることを知らないと、推定されている。さらに、ラテンアメリカの田舎から都市部への大規模な集団移動、および世界の他の領域への大規模な集団移動が、この地域分布を増やしており、シャーガス病の疫学を変えている。たとえば、米国においてシャーガス病を有する人々の大部分が、エピデミックな国で当該感染症となっており、現在、３００，０００人超のクルーズトリパノソーマ（Ｔ．ｃｒｕｚｉ）感染症を有する人々が、米国で生活していると推定されている。
【００７０】
クルーズトリパノソーマ（Ｔ．ｃｒｕｚｉ）は、吸血性のオオサシガメ亜科のサシガメによりヒトへ伝染し得る、動物由来感染性疾患である。トリパノソーマ症でよくみられるオオサシガメ亜科のベクター種は、Ｔｒｉａｔｏｍａ属、Ｒｈｏｄｎｉｕｓ属、およびＰａｎｓｔｒｏｎｇｙｌｕｓ属に属している。オオサシガメ亜科のサシガメは、クルーズトリパノソーマ（Ｔ．ｃｒｕｚｉ）寄生生物の循環する錐鞭毛型を含むヒトまたは動物の血液を常食とすることにより、感染する。摂取した錐鞭毛型は、ベクターの中腸で上鞭毛型に形質転換し、ここで寄生生物は増殖および分化し、次に後腸に移動して、感染性の発育終末型の錐鞭毛型に分化する。ヒトまたは動物の宿主は、感染したオオサシガメ亜科のベクターが吸血を行った後に、咬創の近くで糞便し、その糞便に錐鞭毛型を放出する際に、クルーズトリパノソーマ（Ｔ．ｃｒｕｚｉ）に感染する可能性がある。錐鞭毛型は、皮膚の傷または他の破損部分を介して、または摂取により、または結膜などの無処置の粘膜を介して、宿主に入る。宿主の中で、錐鞭毛型は、播種部位の近くの細胞に侵入し、ここで細胞内無鞭毛型に分化する。この無鞭毛型は、二分裂で増殖し、錐鞭毛型に分化し、次に血流の錐鞭毛型として循環に放出される。錐鞭毛型は、様々な組織から細胞に感染し、新規の感染部位で細胞内無鞭毛型に形質転換する。臨床症状は、この感染サイクルからもたらされ得る。血流の錐鞭毛型は、複製しない（アフリカ型トリパノソーマとは異なる）。寄生生物が別の細胞に入るか、または別のベクターにより摂取される場合にのみ、複製が再開する。シャーガス病をもたらす主な手段は動物媒介型（ｖｅｃｔｏｒ−ｂｏｒｎｅ）の伝染であるが、クルーズトリパノソーマ（Ｔ．ｃｒｕｚｉ）は、感染したドナーからの輸血、臓器移植を介した混入している血液製剤を通して、母から子への経胎盤（先天性）を通して、混入している食品もしくは飲料の摂取を介して、および／または偶発的な曝露により、伝染する可能性もある。
【００７１】
シャーガス病は、急性期および慢性期を有する。急性シャーガス病は、感染直後に発症し、最大数週間または数カ月間持続し得、寄生生物は、循環血液中で見出すことが可能である。感染症は、軽度または無症候性であり得る。播種部位（寄生生物が皮膚または粘膜に入った場所）の周辺で発熱または腫脹が起こり得る。まれに、急性感染症は、心筋または脳および脳周辺の裏層の重篤な炎症をもたらし得る。急性期の後、感染した人々の多くは、血液中に寄生生物がほとんどまたは全くいない、長期間の無症候性型疾患（「慢性不定期（ｃｈｒｏｎｉｃ  ｉｎｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｅ）と呼ばれる」に入る。この期間の間、大部分の人々は、自身の感染症に気づいていない。多くの人々が、生涯にわたり無症候性のままであり得、シャーガス関連の症状を発症しない場合がある。しかしながら、感染した人々のうち推定２０〜３０％が、生涯の中で、衰弱し、場合により命に関わる医学的な問題を発症する。慢性シャーガス病の合併症は、１）肥大心（心筋症）、血液のくみ出しが不十分である拡張した心臓、心不全、心拍リズムの異常、心拍の異常、および心停止（突然死）を含む心臓の合併症、ならびに／または、２）食道の拡大（巨大食道症）、食道結腸（ｅｓｏｐｈａｇｕｓ  ｃｏｌｏｎ）の拡大（巨大結腸症）、摂食困難、もしくは便の通過の困難を含む消化器系の合併症を、含み得る。（たとえばＡＩＤＳまたは化学療法により）免疫系が抑制された人々では、循環血液中で見いだされる寄生生物によりシャーガス病が復活する場合がある。この発症は、潜在的に重篤な疾患を引き起こし得る。
【００７２】
アフリカ睡眠病またはアフリカトリパノソーマ症は、形態的に区別がつかない、寄生生物ブルーストリパノソーマ（Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ  ｂｒｕｃｅｉ）のうちの２つの亜種により引き起こされる。しかしながら、この疾患の臨床的な特性は、関与する亜種に応じて変化する。ローデシアトリパノソーマ（Ｔ．ｂ．ｒｈｏｄｅｓｉｅｎｓｅ）（東アフリカ睡眠病）は、東アフリカおよび南東アフリカの領域で見いだされている。毎年、数百もの東アフリカ睡眠病の症例が、世界保健機関に報告されている。ヒト感染症の症例のうち９５％超が、タンザニア、ウガンダ、マラウイ、およびザンビアで起こっている。野生動物および家畜の動物が、感染症の主なリザーバー（保虫宿主）である。ウシは、新規領域への疾患の拡大および局所的なアウトブレイクに関与しており、野生動物のリザーバーは、自然保護公園への狩猟者および訪問者への孤発性の伝染に関与していると考えられている。ローデシアトリパノソーマ（Ｔ．ｂ．ｒｈｏｄｅｓｉｅｎｓｅ）の国際旅行者への感染は、まれではあるが場合により起こる。米国では、平均して１年あたり１症例診断されている。米国に移入した睡眠病の大部分の症例が、東アフリカへ狩猟旅行に行った旅行者で起こっている。
【００７３】
ガンビアトリパノソーマ（Ｔ．ｂ．ｇａｍｂｉｅｎｓｅ）（西アフリカ睡眠病）は、主に中央アフリカおよび西アフリカの限定した領域で見いだされている。アフリカにおける睡眠病の大部分は、この形態の寄生生物により引き起こされている。睡眠病のエピデミックは、従来は、重要な公共上の健康問題であったが、この疾患は、現在は合理的に良好に制御されており、近年では毎年７，０００〜１０，０００の症例が報告されている。ヒトの感染症の症例のうち９０％超が、コンゴ民主共和国、アンゴラ、スーダン、中央アフリカ共和国、チャド、およびウガンダ北部で見いだされている。寄生生物は場合によっては家畜で見いだされる場合があるが、ヒトが、重要な感染リザーバーである。米国に流入した感染は、非常にまれであり、大部分の症例は、帰国した米国の旅行者よりは、移住してきたアフリカ国民で起こっている。
【００７４】
両ブルーストリパノソーマ（Ｔ．ｂｒｕｃｅｉ）亜種は、ツェツェバエ（Ｇｌｏｓｓｉｎａ属種）に咬まれることにより伝染する。ツェツェバエは、ブルーストリパノソーマ（Ｔ．ｂｒｕｃｅｉ）寄生生物の循環する錐鞭毛型を含むヒトまたは動物の血液を常食とすることにより、感染する。ツェツェバエの中腸では、摂取した錐鞭毛型は、循環型（ｐｒｏｃｙｃｌｉｃ）の錐鞭毛型に形質転換し、二分裂で増殖し、中腸を離れ、上鞭毛型に形質転換する。上鞭毛型は、ツェツェバエの唾液腺に到達し、二分裂に増殖し続け、ここで発育終末型の錐鞭毛型に形質転換する。ツェツェバエにおけるこのサイクルは、およそ３週間である。感染したツェツェバエが、宿主で吸血している間、ブルーストリパノソーマ（Ｔ．ｂｒｕｃｅｉ）の発育終末型の錐鞭毛型を含む唾液を皮膚組織内に注入する際に、ヒトまたは動物の宿主が感染する可能性がある。この寄生生物はリンパ系に入り、血流へと移行する。宿主の中でこれらは、血流の錐鞭毛型に形質転換し、体内のあらゆる他の場所に運ばれ、他の血液系体液（ｂｌｏｏｄ  ｆｌｕｉｄ）（たとえばリンパ液、脊髄液）に到達し、二分裂で複製し続ける。感染する主な手段は動物媒介型（ｖｅｃｔｏｒｂｏｕｒｎｅ）の伝染ではあるが、ブルーストリパノソーマ（Ｔ．ｂｒｕｃｅｉ）はまた、感染したドナーからの輸血、臓器移植を介した混入している血液製剤を通して、母から子への経胎盤（先天性）を通して、混入している食品もしくは飲料の摂取を介して、性交を通して、および／または偶発的な曝露により、伝染する可能性もある。
【００７５】
ヒトのアフリカ睡眠病の臨床経過は、２つの段階を有する。第１の段階では、寄生生物は、末梢の循環で見いだされるが、まだ中枢神経系を侵してはいない。寄生生物が血液脳関門を通り中枢神経系に感染すると、この疾患は第２の段階に入る。これら亜種は異なる疾患進行の速度を有し、臨床的な特徴は、どの寄生生物の形態：ローデシアトリパノソーマ（Ｔ．ｂ．ｒｈｏｄｅｓｉｅｎｓｅ）またはガンビアトリパノソーマ（Ｔ．ｂ．ｇａｍｂｉｅｎｓｅ）が感染症を引き起こしているかどうかに応じて変動する。しかしながら、いずれの形態の感染症も、治療されない場合は結果的に昏睡および死をもたらす。ローデシアトリパノソーマ（Ｔ．ｂ．ｒｈｏｄｅｓｉｅｎｓｅ）感染症（東アフリカ睡眠病）は急激に進行する。一部の患者では、ツェツェバエが咬んだ場所で激しい痛み（下疳）が発症する。大部分の患者は、咬まれて感染してから１〜２週間以内に、発熱、頭痛、筋肉痛および関節痛、ならびにリンパ節の拡大を発症する。一部の人々は発疹を発症する。感染から数週間後に、寄生生物は中枢神経系に侵入し、結果的に、精神機能低下および他の神経的な問題を引き起こす。後に、通常数ケ月以内に死亡する。ガンビアトリパノソーマ（Ｔ．ｂ．ｇａｍｂｉｅｎｓｅ）感染症（西アフリカ睡眠病）は、よりゆっくりと進行する。最初に、軽度の症状のみが起こり得る。感染した人々は、断続的な発熱、頭痛、筋肉痛および関節痛、ならびに倦怠感を有し得る。皮膚のかゆみ、リンパ節の腫脹、および体重減少が起こり得る。通常、１〜２年後に、人格の変化、夜間の睡眠障害を伴う日中での睡眠、および進行性の錯乱を伴う、中枢神経系への介入のエビデンスが認められる。他の神経性の兆候、たとえば部分的な麻痺、またはバランスもしくは歩行の問題が起こる場合があり、同様にホルモンのバランスの乱れが起こり得る。未処置の感染症の過程が、６〜７年超持続することは稀であり、たいていの場合は約３年以内に死亡する。
【００７６】
本発明の態様は、部分的に、個体を提供する。個体は、ヒトを含むいずれかの哺乳類を含み、ヒトは患者であり得る。
【００７７】
本明細書中開示の方法は、トリパノソーマ系疾患に関する治療を含む。治療は、特定の個体に提供される、いずれかの客観的または個々に測定可能なまたは検出可能な改善または利益を含む、いずれかの治療効果または有益な効果を含む。しかしながら、治療効果または有益な効果は、トリパノソーマの感染症、増殖、複製、または病態により引き起こされる、またはこれに関連するあらゆる特定の有害な状態、症状、障害、疾病、疾患、または合併症の完全な消失を必要とするものではない場合がある。よって、短期間または長期間にわたり、トリパノソーマの感染症、増殖、複製、もしくは病態により引き起こされるもしくはこれに関連する有害な状態、症状、障害、疾病、疾患、もしくは合併症の改善の増加もしくは部分的な低減、または、トリパノソーマの感染症、増殖、複製、もしくは病態により引き起こされるもしくはこれに関連する１つもしくは複数の状態、有害な症状、障害、疾病、疾患、もしくは合併症の悪化もしくは進行の阻害、減少、低減、抑制、予防、限定、もしくは制御が存在する場合に、良好な臨床上のエンドポイントは達成されている。
【００７８】
この実施形態の態様では、本明細書中開示の治療方法または使用は、トリパノソーマの感染症、増殖、複製、または病態を低減、減少、阻害、限定、遅延、または予防し得る。この実施形態の他の態様では、本明細書中開示の治療方法または使用は、トリパノソーマ病原体の数もしくは力価を低減、減少、抑制、限定、制御、もしく阻害してもよく；トリパノソーマ病原体の増殖もしくは複製を低減、減少、抑制、限定、制御、制御、もしくは阻害してもよく；合成されるトリパノソーマのタンパク質量を低減、減少、抑制、限定、制御、もしくは阻害してもよく；または、複製されるトリパノソーマ病原体の核酸の量を低減、減少、抑制、限定、制御、もしくは阻害してもよい。この実施形態のさらなる他の態様では、本明細書中開示の治療方法または使用は、トリパノソーマの感染症、増殖、または複製、または病態により引き起こされる、またはこれに関連する１つまたは複数の有害な状態、症状、障害、疾病、疾患、または合併症を減少、低減、阻害、抑制、予防、制御、または限定し得る。この実施形態のさらなる他の態様では、本明細書中開示の治療方法または使用は、トリパノソーマ系の感染症もしくは病態、またはトリパノソーマの感染症、増殖、もしくは複製、もしくは病態により引き起こされるもしくはこれに関連する１つもしくは複数の有害な症状、障害、疾病、疾患、もしくは合併症からの個体の回復を向上、加速、促進、強化、増強、または促進（ｈａｓｔｅｎ）し得る。
【００７９】
この実施形態の他の態様では、本明細書中開示の治療方法または使用は、トリパノソーマの感染症、病態、または、トリパノソーマの感染症、増殖、複製、もしくは病態により引き起こされるもしくはこれに関連する有害な状態、症状、障害、疾病、疾患、もしくは合併症を安定させることができる。この実施形態のさらなる他の態様では、本明細書中開示の治療方法または使用は、感染した個体から感染していない個体へのトリパノソーマ病原体の伝染を減少、低減、阻害、抑制、限定、または制御し得る。この実施形態のさらなる他の態様では、本明細書中開示の治療方法または使用は、トリパノソーマ系の感染症または病態を有する個体、または有するリスクのある個体を治療するために使用される別の薬物または他の薬剤などの併用治療またはその後の治療の必要性、投与頻度、または量を低減または排除し得る。たとえば、補助治療の量の低下、たとえばトリパノソーマ系の感染症もしくは病態に関する治療の低減もしくは減少、またはワクチン接種もしくは免疫化のプロトコルの低減もしくは減少が、有益な効果とみなされている。さらに、個体に保護を提供するための個体のワクチン接種または免疫化に使用されるトリパノソーマ抗原の量を低下または減少することは、有益な効果とみなされている。
【００８０】
本明細書の態様は、部分的に、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原または免疫原性組成物を投与することを提供する。本明細書中使用される用語「投与する」は、臨床的、治療的、または実験的に有益な結果をもたらす可能性のある、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原または免疫原性組成物を個体に提供するいずれかの送達機構を表す。本明細書中開示の組成物を個体に投与するために使用される実際の送達機構は、限定するものではないが、トリパノソーマ系疾患の種類、トリパノソーマ系疾患の位置、トリパノソーマ系疾患の原因、トリパノソーマ系疾患の重症度、トリパノソーマ系疾患に関して望まれている軽減度合、トリパノソーマ系疾患に関して望まれている軽減の持続期間、使用される特定のトリパノソーマ抗原および／もしくは免疫原性組成物、使用される特定のトリパノソーマ抗原および／もしくは免疫原性組成物の排泄速度、使用される特定のトリパノソーマ抗原および／もしくは免疫原性組成物の薬力学、免疫原性組成物に含まれている他の化合物の性質、特定の投与経路、個体の特定の特徴、病歴、およびリスク因子、たとえば年齢、体重、一般的な健康状態など、またはそれらのいずれかの組み合わせを含む要因を考慮して、当業者により決定することができる。
【００８１】
本明細書中開示の組成物は、細胞取り込み手法を使用して個体に投与することができる。細胞取り込み手法を使用した本明細書中開示の組成物の投与は、限定するものではないが、たとえば錠剤、液剤、カプセル剤、散剤、吸入可能な形態などのいずれかの許容可能な形態での経口投与；たとえば点滴剤、スプレー剤、クリーム、ゲル、もしくは軟膏などのいずれかの許容可能な形態での局所投与；たとえば静脈内注射、静脈内点滴、動脈内注射、動脈内点滴、および血管系へのカテーテルによる注入などのいずれかの許容可能な形態での血管内投与；たとえば腹腔内注射、筋肉内注射、皮下注射、皮下点滴、眼内注射、網膜注射もしくは網膜下注射、または硬膜外注射などのいずれかの許容可能な形態での組織周辺および組織内への投与；たとえばカテーテルによる注入などのいずれかの許容可能な形態の小胞内投与；ならびに、たとえばインプラント、パッチ、ペレット、カテーテル、浸透圧ポンプ、坐薬、生体内分解性送達システム、非生体内分解性送達システム、または別の埋め込み型押出システムもしくは放出遅延システムなどの配置デバイスによるものを含む、様々な経腸性または非経口的な手法を含む。生物分解ポリマーおよび使用方法の例示的な列挙は、たとえばＨａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｂｉｏｄｅｇｒａｄａｂｌｅ  Ｐｏｌｙｍｅｒｓ（Ａｂｒａｈａｍ  Ｊ．  Ｄｏｍｂ  ｅｔ  ａｌ．，  ｅｄｓ．，  Ｏｖｅｒｓｅａｓ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ，  １９９７）に記載されている。
【００８２】
本明細書中開示のトリパノソーマ抗原および／または免疫原性組成物は、トリパノソーマ系疾患を治療するために十分な量で投与される。この実施形態の態様では、投与されるトリパノソーマ抗原および／または免疫原性組成物の量は、トリパノソーマ系の感染症もしくは病態に関連する１つもしくは複数の生理的な状態もしくは症状を低減するために十分な量、トリパノソーマ系の感染症もしくは病態に対して個体に免疫化もしくはワクチン接種を行うために十分な量、またはトリパノソーマ系の感染症もしくは病態から個体を保護するために十分な量である。本明細書中で使用される用語「十分な量」は、「有効量」、「有効な用量」、「治療上有効量」、または「治療上有効な用量」を含み、かつ、望ましい治療効果を達成するために必要なトリパノソーマ抗原および／または免疫原性組成物の最少量を表し、かつ、トリパノソーマ系の感染症または病態に関連する１つまたは複数の生理的な状態または症状を低減または阻害するために十分な量を含む。
【００８３】
この実施形態の態様では、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原および／または免疫原性組成物の有効量は、トリパノソーマ系の感染症または病態に関連する１つまたは複数の生理的な状態または症状を、たとえば少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、または少なくとも１００％、低減または阻害する。この実施形態の他の態様では、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原および／または免疫原性組成物の有効量は、トリパノソーマ系の感染症または病態に関連する１つまたは複数の生理的な状態または症状を、たとえば、最大１０％、最大２０％、最大３０％、最大４０％、最大５０％、最大６０％、最大７０％、最大８０％、最大９０％、または最大１００％、低減または阻害する。この実施形態のさらなる他の態様では、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原および／または免疫原性組成物の有効量は、トリパノソーマ系の感染症または病態に関連する１つまたは複数の生理的な状態または症状を、たとえば約１０％〜約１００％、約１０％〜約９０％、約１０％〜約８０％、約１０％〜約７０％、約１０％〜約６０％、約１０％〜約５０％、約１０％〜約４０％、約２０％〜約１００％、約２０％〜約９０％、約２０％〜約８０％、約２０％〜約２０％、約２０％〜約６０％、約２０％〜約５０％、約２０％〜約４０％、約３０％〜約１００％、約３０％〜約９０％、約３０％〜約８０％、約３０％〜約７０％、約３０％〜約６０％、または約３０％〜約５０％、低減または阻害する。この実施形態のさらなる他の態様では、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原および／または免疫原性組成物の有効量は、トリパノソーマ系の感染症または病態に関連する１つまたは複数の生理的な状態または症状を、たとえば少なくとも１週間、少なくとも１ケ月、少なくとも２ケ月、少なくとも３ケ月、少なくとも４ケ月、少なくとも５ケ月、少なくとも６ケ月、少なくとも７ケ月、少なくとも８ケ月、少なくとも９ケ月、少なくとも１０ケ月、少なくとも１１ケ月、または少なくとも１２ケ月の間、低減または阻害する。
【００８４】
個体に投与される本明細書中開示のトリパノソーマ抗原および／または免疫原性組成物の実際の有効量は、限定するものではないが、トリパノソーマ系疾患の種類、トリパノソーマ系疾患の位置、トリパノソーマ系疾患の原因、トリパノソーマ系疾患の重症度、トリパノソーマ系疾患に関して望まれている軽減度合、トリパノソーマ系疾患に関して望まれている軽減の持続期間、使用される特定のトリパノソーマ抗原および／もしくは免疫原性組成物、使用される特定のトリパノソーマ抗原および／もしくは免疫原性組成物の排泄速度、使用される特定のトリパノソーマ抗原および／もしくは免疫原性組成物の薬力学、免疫原性組成物に含まれている他の化合物の性質、使用される特定の投与経路、個体の特定の特徴、病歴、およびリスク因子、たとえば年齢、体重、一般的な健康状態など、またはそれらのいずれかの組み合わせを含む要因を考慮して、当業者が決定することができる。さらに、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原および／または免疫原性組成物の反復投与を使用する場合、実際の治療上有効量は、限定するものではないが、さらに、投与頻度、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原および／もしくは免疫原性組成物の半減期、またはそれらのいずれかの組み合わせを含む要因に応じて変動する。本明細書中開示のトリパノソーマ抗原および／または免疫原性組成物の有効量は、ヒトに投与する前に、ｉｎ  ｖｉｔｒｏでのアッセイおよび動物モデルを使用したｉｎ  ｖｉｖｏでの投与試験から推定できることが、当業者に知られている。必要な有効量の幅広いバリエーションが、様々な投与経路の異なる効率の観点から予測されるべきである。たとえば、経口投与は、概して、静脈内注射または硝子体内注射により投与されるレベルよりも高い用量レベルを必要とすることが予測される。これら用量レベルのバリエーションは、当業者によく知られている最適な標準的な実験手順を使用して調節することができる。正確な治療上有効用量のレベルおよびパターンは、好ましくは、上記の同定された要因を考慮して担当医が決定する。
【００８５】
この実施形態の他の態様では、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原および／または免疫原性組成物の有効量は、概して、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日〜約１００ｍｇ／ｋｇ／日の範囲である。この実施形態の態様では、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原および／または免疫原性組成物の有効量は、たとえば少なくとも０．００１ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも０．０１ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも０．１ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも１．０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも５．０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも１０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも１５ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも２０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも２５ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも３０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも３５ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも４０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも４５ｍｇ／ｋｇ／日、または少なくとも５０ｍｇ／ｋｇ／日であってもよい。
【００８６】
この実施形態の他の態様では、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原および／または免疫原性組成物の有効量は、たとえば約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日〜約１０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日〜約１５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日〜約２０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日〜約２５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日〜約３０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日〜約３５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日〜約４０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日〜約４５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日〜約５０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日〜約７５ｍｇ／ｋｇ／日、または約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日〜約１００ｍｇ／ｋｇ／日の範囲であってもよい。この実施形態のさらなる他の態様では、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原および／または免疫原性組成物の有効量は、たとえば約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日〜約１０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日〜約１５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日〜約２０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日〜約２５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日〜約３０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日〜約３５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日〜約４０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日〜約４５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日〜約５０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日〜約７５ｍｇ／ｋｇ／日、または約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日〜約１００ｍｇ／ｋｇ／日の範囲であってもよい。この実施形態のさらなる他の態様では、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原および／または免疫原性組成物の有効量は、たとえば約０．１ｍｇ／ｋｇ／日〜約１０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．１ｍｇ／ｋｇ／日〜約１５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．１ｍｇ／ｋｇ／日〜約２０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．１ｍｇ／ｋｇ／日〜約２５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．１ｍｇ／ｋｇ／日〜約３０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．１ｍｇ／ｋｇ／日〜約３５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．１ｍｇ／ｋｇ／日〜約４０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．１ｍｇ／ｋｇ／日〜約４５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．１ｍｇ／ｋｇ／日〜約５０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．１ｍｇ／ｋｇ／日〜約７５ｍｇ／ｋｇ／日、または約０．１ｍｇ／ｋｇ／日〜約１００ｍｇ／ｋｇ／日の範囲であってもよい。
【００８７】
この実施形態の他の態様では、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原および／または免疫原性組成物の有効量は、たとえば約１ｍｇ／ｋｇ／日〜約１０ｍｇ／ｋｇ／日、約１ｍｇ／ｋｇ／日〜約１５ｍｇ／ｋｇ／日、約１ｍｇ／ｋｇ／日〜約２０ｍｇ／ｋｇ／日、約１ｍｇ／ｋｇ／日〜約２５ｍｇ／ｋｇ／日、約１ｍｇ／ｋｇ／日〜約３０ｍｇ／ｋｇ／日、約１ｍｇ／ｋｇ／日〜約３５ｍｇ／ｋｇ／日、約１ｍｇ／ｋｇ／日〜約４０ｍｇ／ｋｇ／日、約１ｍｇ／ｋｇ／日〜約４５ｍｇ／ｋｇ／日、約１ｍｇ／ｋｇ／日〜約５０ｍｇ／ｋｇ／日、約１ｍｇ／ｋｇ／日〜約７５ｍｇ／ｋｇ／日、または約１ｍｇ／ｋｇ／日〜約１００ｍｇ／ｋｇ／日の範囲であってもよい。この実施形態のさらなる他の態様では、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原および／または免疫原性組成物の有効量は、たとえば約５ｍｇ／ｋｇ／日〜約１０ｍｇ／ｋｇ／日、約５ｍｇ／ｋｇ／日〜約１５ｍｇ／ｋｇ／日、約５ｍｇ／ｋｇ／日〜約２０ｍｇ／ｋｇ／日、約５ｍｇ／ｋｇ／日〜約２５ｍｇ／ｋｇ／日、約５ｍｇ／ｋｇ／日〜約３０ｍｇ／ｋｇ／日、約５ｍｇ／ｋｇ／日〜約３５ｍｇ／ｋｇ／日、約５ｍｇ／ｋｇ／日〜約４０ｍｇ／ｋｇ／日、約５ｍｇ／ｋｇ／日〜約４５ｍｇ／ｋｇ／日、約５ｍｇ／ｋｇ／日〜約５０ｍｇ／ｋｇ／日、約５ｍｇ／ｋｇ／日〜約７５ｍｇ／ｋｇ／日、または約５ｍｇ／ｋｇ／日〜約１００ｍｇ／ｋｇ／日の範囲であってもよい。
【００８８】
この実施形態の他の態様では、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原および／または免疫原性組成物の有効量は、概して、約０．００１ｍｇ／日〜約１００ｍｇ／日の範囲にある。この実施形態の態様では、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原および／または免疫原性組成物の有効量は、たとえば少なくとも０．００１ｍｇ／日、少なくとも０．０１ｍｇ／日、少なくとも０．１ｍｇ／日、少なくとも１．０ｍｇ／日、少なくとも５．０ｍｇ／日、少なくとも１０ｍｇ／日、少なくとも１５ｍｇ／日、少なくとも２０ｍｇ／日、少なくとも２５ｍｇ／日、少なくとも３０ｍｇ／日、少なくとも３５ｍｇ／日、少なくとも４０ｍｇ／日、少なくとも４５ｍｇ／日、または少なくとも５０ｍｇ／日であってもよい。
【００８９】
この実施形態の他の態様では、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原および／または免疫原性組成物の有効量は、たとえば約０．００１ｍｇ／日〜約１０ｍｇ／日、約０．００１ｍｇ／日〜約１５ｍｇ／日、約０．００１ｍｇ／日〜約２０ｍｇ／日、約０．００１ｍｇ／日〜約２５ｍｇ／日、約０．００１ｍｇ／日〜約３０ｍｇ／日、約０．００１ｍｇ／日〜約３５ｍｇ／日、約０．００１ｍｇ／日〜約４０ｍｇ／日、約０．００１ｍｇ／日〜約４５ｍｇ／日、約０．００１ｍｇ／日〜約５０ｍｇ／日、約０．００１ｍｇ／日〜約７５ｍｇ／日、または約０．００１ｍｇ／日〜約１００ｍｇ／日の範囲であってもよい。この実施形態のさらなる他の態様では、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原および／または免疫原性組成物の有効量は、たとえば約０．０１ｍｇ／日〜約１０ｍｇ／日、約０．０１ｍｇ／日〜約１５ｍｇ／日、約０．０１ｍｇ／日〜約２０ｍｇ／日、約０．０１ｍｇ／日〜約２５ｍｇ／日、約０．０１ｍｇ／日〜約３０ｍｇ／日、約０．０１ｍｇ／日〜約３５ｍｇ／日、約０．０１ｍｇ／日〜約４０ｍｇ／日、約０．０１ｍｇ／日〜約４５ｍｇ／日、約０．０１ｍｇ／日〜約５０ｍｇ／日、約０．０１ｍｇ／日〜約７５ｍｇ／日、または約０．０１ｍｇ／日〜約１００ｍｇ／日の範囲であってもよい。この実施形態のさらなる他の態様では、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原および／または免疫原性組成物の有効量は、たとえば約０．１ｍｇ／日〜約１０ｍｇ／日、約０．１ｍｇ／日〜約１５ｍｇ／日、約０．１ｍｇ／日〜約２０ｍｇ／日、約０．１ｍｇ／日〜約２５ｍｇ／日、約０．１ｍｇ／日〜約３０ｍｇ／日、約０．１ｍｇ／日〜約３５ｍｇ／日、約０．１ｍｇ／日〜約４０ｍｇ／日、約０．１ｍｇ／日〜約４５ｍｇ／日、約０．１ｍｇ／日〜約５０ｍｇ／日、約０．１ｍｇ／日〜約７５ｍｇ／日、または約０．１ｍｇ／日〜約１００ｍｇ／日の範囲であってもよい。
【００９０】
この実施形態の他の態様では、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原および／または免疫原性組成物の有効量は、たとえば約１ｍｇ／日〜約１０ｍｇ／日、約１ｍｇ／日〜約１５ｍｇ／日、約１ｍｇ／日〜約２０ｍｇ／日、約１ｍｇ／日〜約２５ｍｇ／日、約１ｍｇ／日〜約３０ｍｇ／日、約１ｍｇ／日〜約３５ｍｇ／日、約１ｍｇ／日〜約４０ｍｇ／日、約１ｍｇ／日〜約４５ｍｇ／日、約１ｍｇ／日〜約５０ｍｇ／日、約１ｍｇ／日〜約７５ｍｇ／日、または約１ｍｇ／日〜約１００ｍｇ／日の範囲であってもよい。この実施形態のさらなる他の態様では、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原および／または免疫原性組成物の有効量は、たとえば約５ｍｇ／日〜約１０ｍｇ／日、約５ｍｇ／日〜約１５ｍｇ／日、約５ｍｇ／日〜約２０ｍｇ／日、約５ｍｇ／日〜約２５ｍｇ／日、約５ｍｇ／日〜約３０ｍｇ／日、約５ｍｇ／日〜約３５ｍｇ／日、約５ｍｇ／日〜約４０ｍｇ／日、約５ｍｇ／日〜約４５ｍｇ／日、約５ｍｇ／日〜約５０ｍｇ／日、約５ｍｇ／日〜約７５ｍｇ／日、または約５ｍｇ／日〜約１００ｍｇ／日の範囲であってもよい。
【００９１】
投与は単回投与または累積的（段階投与）とすることができ、当業者が容易に決定することができる。たとえば、トリパノソーマ系疾患の治療は、本明細書中のトリパノソーマ抗原および／または免疫原性組成物の有効量の１回の投与を含んでもよい。非限定的な例として、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原および／または免疫原性組成物の有効量は、たとえば単回の注射またはデポ剤として個体に一度投与することができる。あるいは、トリパノソーマ系疾患の治療は、たとえば毎日、数日ごとに１回、週に１回、月に１回、または年に１回などの、ある範囲の期間にわたり行われる、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原および／または免疫原性組成物の有効量の複数回投与を含んでもよい。非限定的な例として、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原および／または免疫原性組成物を、１年に１回、２回、３回、４回、５回、または６回、個体に投与することができる。投与のタイミングは、個体の症状の重症度などの要因に応じて個体間で変動し得る。たとえば、本明細書中開示のトリパノソーマ抗原および／または免疫原性組成物の有効量は、決められていない期間の間、または個体が治療を必要としなくなるまで、３ケ月ごとに１回個体に投与することができる。個体の状態は、治療過程の間モニタリングすることができ、これに応じて投与される本明細書中開示のトリパノソーマ抗原および／または免疫原性組成物の有効量を調節できることが、当業者に認識されている。
【００９２】
本明細書中開示のトリパノソーマ抗原および／または免疫原性組成物を含む組成物はまた、治療の総合的な治療効果を高めるために、他の治療化合物と併用して個体に投与することもできる。症状を治療するために複数の化合物を使用することは、副作用の存在を低減しつつ有益な効果を増大させることができる。
【００９３】
本明細書の態様は、以下の通りに記載することができる。
１．配列番号６、配列番号９、配列番号５、配列番号７、配列番号８、配列番号１１、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号１０、もしくは配列番号１２、または配列番号６、配列番号９、配列番号５、配列番号７、配列番号８、配列番号１１、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号１０、もしくは配列番号１２と７５％のアミノ酸同一性を有するペプチド、または配列番号６、配列番号９、配列番号５、配列番号７、配列番号８、配列番号１１、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号１０、もしくは配列番号１２由来の少なくとも７個の連続したアミノ酸を含む、から本質的になる、またはからなる、トリパノソーマ抗原。
２．前記ペプチドが、配列番号６、配列番号９、配列番号５、配列番号７、配列番号８、配列番号１１、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号１０、または配列番号１２と７５％のアミノ酸同一性を有し、配列番号６、配列番号９、配列番号５、配列番号７、配列番号８、配列番号１１、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号１０、または配列番号１２と比較して、少なくとも１つの連続したアミノ酸の欠失、付加、および／または置換を含む、実施形態１に記載のトリパノソーマ抗原。
３．前記ペプチドが、配列番号６、配列番号９、配列番号５、配列番号７、配列番号８、配列番号１１、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号１０、または配列番号１２と７５％のアミノ酸同一性を有し、配列番号６、配列番号９、配列番号５、配列番号７、配列番号８、配列番号１１、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号１０、または配列番号１２と比較して、少なくとも１つの連続していないアミノ酸の欠失、付加、および／または置換を含む、実施形態１に記載のトリパノソーマ抗原。
４．前記ペプチドが、配列番号６、配列番号９、配列番号５、配列番号７、配列番号８、配列番号１１、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号１０、または配列番号１２と７５％のアミノ酸同一性を有し、配列番号６、配列番号９、配列番号５、配列番号７、配列番号８、配列番号１１、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号１０、または配列番号１２と比較して最大１１個の連続したアミノ酸の欠失、付加、および／または置換を含む、実施形態１に記載のトリパノソーマ抗原。
５．前記ペプチドが、配列番号６、配列番号９、配列番号５、配列番号７、配列番号８、配列番号１１、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号１０、または配列番号１２と７５％のアミノ酸同一性を有し、配列番号６、配列番号９、配列番号５、配列番号７、配列番号８、配列番号１１、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号１０、または配列番号１２と比較して、最大１１個の連続していないアミノ酸の欠失、付加、および／または置換を含む、実施形態１に記載のトリパノソーマ抗原。
６．実施形態１〜５のいずれか１項に定義されている１つまたは複数のトリパノソーマ抗原を含む、から本質的になる、またはからなる免疫原性組成物。
７．前記１つまたは複数のトリパノソーマ抗原が、配列番号６（ＣＨ４７）を含む、から本質的になる、またはからなる、実施形態６に記載の免疫原性組成物。
８．前記１つまたは複数のトリパノソーマ抗原が、配列番号９（ＣＨ７７）を含む、から本質的になる、またはからなる、実施形態６または７に記載の免疫原性組成物
９．前記１つまたは複数のトリパノソーマ抗原が、配列番号５（ＣＨ３７）を含む、から本質的になる、またはからなる、実施形態６〜８のいずれか１項に記載の免疫原性組成物。
１０．前記１つまたは複数のトリパノソーマ抗原が、配列番号５（ＣＨ３７）および配列番号９（ＣＨ７７）を含む、から本質的になる、またはからなる、実施形態６に記載の免疫原性組成物。
１１．前記１つまたは複数のトリパノソーマ抗原が、配列番号５（ＣＨ３７）、配列番号６（ＣＨ４７）、および配列番号９（ＣＨ７７）を含む、から本質的になる、またはからなる、実施形態６に記載の免疫原性組成物。
１２．前記１つまたは複数のトリパノソーマ抗原が、配列番号７（ＣＨ６９）、配列番号８（ＣＨ７２）、および配列番号１１（ＣＨ８４）を含む、から本質的になる、またはからなる、実施形態６〜１１のいずれか１項に記載の免疫原性組成物。
１３．前記１つまたは複数のトリパノソーマ抗原が、配列番号２（ＣＨ３０）、配列番号７（ＣＨ６９）、配列番号８（ＣＨ７２）、配列番号９（ＣＨ７７）、および配列番号１１（ＣＨ８４）を含む、から本質的になる、またはからなる、実施形態６または７に記載の免疫原性組成物。
１４．前記１つまたは複数のトリパノソーマ抗原が、配列番号２（ＣＨ３０）、配列番号５（ＣＨ３７）、配列番号７（ＣＨ６９）、配列番号８（ＣＨ７２）、配列番号９（ＣＨ７７）、および配列番号１１（ＣＨ８４）を含む、から本質的になる、またはからなる、実施形態６または７に記載の免疫原性組成物。
１５．前記１つまたは複数のトリパノソーマ抗原が、配列番号２（ＣＨ３０）、配列番号５（ＣＨ３７）、配列番号６（ＣＨ４７）、配列番号７（ＣＨ６９）、配列番号８（ＣＨ７２）、配列番号９（ＣＨ７７）、および配列番号１１（ＣＨ８４）を含む、から本質的になる、またはからなる、実施形態６に記載の免疫原性組成物。
１６．前記１つまたは複数のトリパノソーマ抗原が、それぞれ、約１ｍｇ〜約１，０００ｍｇの量で存在する、実施形態６〜１５のいずれか１項に記載の免疫原性組成物。
１７．前記免疫原性組成物が、１つまたは複数のアジュバントをさらに含む、から本質的になる、またはからなる、実施形態６〜１６のいずれか１項に記載の免疫原性組成物。
１８．前記１つまたは複数のアジュバントが、それぞれ、約１００μｇ／ｍＬ〜約１，５００μｇ／ｍｌの量で存在する、実施形態１７に記載の免疫原性組成物。
１９．さらに、１つまたは複数の薬学的に許容可能な担体を含む、から本質的になる、またはからなる、実施形態６〜１８のいずれか１項に記載の免疫原性組成物。
２０．トリパノソーマ系疾患を治療する方法であって、実施形態６〜１８のいずれか１項に定義されている免疫原性組成物を、トリパノソーマ系の感染症または病態に関連する１つまたは複数の生理的な状態または症状を低減することにより、トリパノソーマ系疾患を治療するために十分な量で、その必要がある個体に投与するステップを含む、から本質的になる、またはからなる、方法。
２１．前記免疫原性組成物の投与を、トリパノソーマのクリアランスもしくは除去を増大、誘導、強化、増強、促進、もしくは刺激するため、またはトリパノソーマの別の個体への伝染を減少、低減、阻害、抑制、予防、制御、もしくは限定するために十分な量で行う、実施形態２０に記載の方法。
２２．前記免疫原性組成物の投与を、トリパノソーマ病原体の数もしくは力価を低減、減少、抑制、限定、制御、もしくは阻害するため；トリパノソーマ病原体の増殖もしくは複製を低減、減少、抑制、限定、制御、もしくは阻害するため；合成されるトリパノソーマのタンパク質の量を低下、減少、抑制、限定、制御、もしくは阻害するため；または複製されるトリパノソーマ病原体の核酸の量を低下、減少、抑制、限定、制御、もしくは阻害するために十分な量で行う、実施形態２０または２１に記載の方法。
２３．前記免疫原性組成物の投与が、トリパノソーマ系の感染症または病態に関連する１つまたは複数の生理的な状態または症状を、少なくとも１０％低減する、実施形態２０〜２２のいずれか１項に記載の方法。
２４．前記免疫原性組成物の投与が、トリパノソーマ系の感染症または病態に関連する１つまたは複数の生理的な状態または症状を、少なくとも１週間低減する、実施形態２０〜２３のいずれか１項に記載の方法。
２５．トリパノソーマ系疾患が、シャーガス病またはアフリカ睡眠病である、実施形態２０〜２４のいずれか１項に記載の方法。
２６．トリパノソーマ系疾患を治療するための、実施形態１〜５のいずれか１項に定義されているα―トリパノソーマ抗原、または実施形態６〜１８のいずれか１項に定義されている免疫原性組成物の使用。
２７．トリパノソーマ系疾患を治療する方法であって、実施形態１〜５のいずれか１項に定義されているトリパノソーマ抗原、または実施形態６〜１９のいずれか１項に定義されている免疫原性組成物を、トリパノソーマ系の感染症または病態に対して個体に免疫化またはワクチン接種を行うことにより、前記トリパノソーマ系疾患を治療するために十分な量で、それを必要とする個体に投与するステップを含む、から本質的になる、またはからなる、方法。
２８．トリパノソーマ系疾患を治療する方法であって、実施形態１〜５のいずれか１項に定義されているトリパノソーマ抗原、または実施形態６〜１９のいずれか１項に定義されている免疫原性組成物を、トリパノソーマ系の感染症または病態から個体を保護するために十分な量で、それを必要とする個体に投与するステップを含む、から本質的になる、またはからなる、方法。
２９．前記トリパノソーマ抗原または前記免疫原性組成物の投与を、トリパノソーマに対する免疫応答を増大、誘導、強化、増強、促進、または刺激するために十分な量で行う、実施形態２７または２８に記載の方法。
３０．前記トリパノソーマ抗原または前記免疫原性組成物の投与を、前記トリパノソーマ系の感染症または病態に対して前記個体に免疫化またはワクチン接種を行うために十分な量で行う、実施形態２７〜２９のいずれか１項に記載の方法。
３１．前記トリパノソーマ抗原または前記免疫原性組成物の投与を、トリパノソーマ系の感染症または病態に対する易罹患性を低減、減少、限定、制御、または阻害するために十分な量で行う、実施形態２７〜３０のいずれか１項に記載の方法。
３２．前記トリパノソーマ抗原または前記免疫原性組成物の投与を、トリパノソーマのクリアランスもしくは除去を増大、誘導、強化、増強、促進、もしくは刺激するため、またはトリパノソーマの別の個体への伝染を減少、低減、阻害、抑制、予防、制御、もしくは限定するために十分な量で行う、実施形態２７〜３１のいずれか１項に記載の方法。
３３．前記トリパノソーマ系疾患が、シャーガス病またはアフリカ睡眠病である、実施形態２７〜３２のいずれか１項に記載の方法。
３４．薬物を製造するための、実施形態１〜５のいずれか１項に定義されているトリパノソーマ抗原の使用。
３５．薬物を製造するための、実施形態６〜１８のいずれか１項に定義されている免疫原性組成物の使用。
３６．前記トリパノソーマ系疾患が、シャーガス病またはアフリカ睡眠病である、実施形態３４〜３５のいずれか１項に記載の使用。
【００９４】
実施例
以下の非限定的な実施例は、本開示の主題のより完全な理解を容易にするためにのみ、説明のため提供されている。これらの実施例は、トリパノソーマ系疾患を治療するためのトリパノソーマ抗原および／もしくは免疫原性組成物、または方法および使用に関連するものを含む、本明細書中に記載されている実施形態のいずれをも限定すると解釈するべきではない。
【００９５】
実施例１
トリパノソーマペプチドの同定
タンパク質配列のペプチドの中にあるＴ細胞反応性エピトープを予測できるコンピュータアルゴリズムを使用して、トリパノソーマ抗原を同定した。このｉｎ  ｓｉｌｉｃｏモデルで、できるだけ多くの異なる菌株由来のタンパク質配列を、トリパノソーマ病原体から集めた。次に、特定のタンパク質に利用可能な配列を、Ｃｌｕｓｔａｌを使用してアライメントし、コンセンサス配列を、Ｊａｌｖｉｅｗを使用して作製した。次に、この配列を、可能性のある全てのＴ細胞反応性エピトープを予測するアルゴリズムへとアップロードした。多数のエピトープを含む領域からペプチド配列を同定し、これらのＴ細胞免疫原性の高い領域を、異なる菌株間での保存に関してさらに解析した。見いだされた他の全ての配列の中で、連続したアミノ酸が少なくとも７０％の配列同一性を共有する２０〜４０個の長さのアミノ酸である保存されたペプチド配列を選択し、さらに解析した。たとえば、ワクチン接種後の自己免疫性反応の誘導を回避するために、これらの保存されたペプチド配列を、これら配列が他のヒトおよびマウスのタンパク質配列と有意な同一性を共有しないことを確認するために評価した。さらに、これら保存されたペプチド配列を、これら配列がＦ−ｍｏｃ化学により合成的に製造できることを確認するために評価した。
【００９６】
この手法を使用して、異なる抗原由来の合計４５２個のペプチドを同定した。これらペプチドを、予測したエピトープの数に基づきランク付けし、この解析から上位１００個のペプチドを、製造の実現可能性に関して評価した。最終的に、これらが含まれている予測したエピトープの数およびこれらの製造の実現可能性により、１２個の候補ペプチドを同定した。配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１２のアミノ酸配列を有するペプチドを、それぞれ、ＧＭＰ（Ｇｏｏｄ  Ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｉｎｇ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ）にしたがいＦ−ｍｏｃ化学（Ｂａｃｈｅｍ  ＡＧ，  Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）により製造した。配列番号１（ＣＨ９）は、クルーズトリパノソーマ（Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ  ｃｒｕｚｉ）由来の副鞭毛桿（ｐａｒａｆｌａｇｅｌａｒ  ｒｏｄ）の残基６０〜９９に対応する４０個のアミノ酸ペプチドである。配列番号２（ＣＨ３０）は、クルーズトリパノソーマ（Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ  ｃｒｕｚｉ）由来のＡＤＰリボシル化因子１の残基１〜３０に対応する３０個のアミノ酸ペプチドである。配列番号３（ＣＨ３２）は、クルーズトリパノソーマ（Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ  ｃｒｕｚｉ）由来のトリパレドキシンタンパク質の残基１〜３２に対応する３２個のアミノ酸ペプチドである。配列番号４（ＣＨ３６）は、クルーズトリパノソーマ（Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ  ｃｒｕｚｉ）由来のグルコース６リン酸イソメラーゼタンパク質の残基５６４〜５８８に対応する２５個のアミノ酸ペプチドである。配列番号５（ＣＨ３７）は、クルーズトリパノソーマ（Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ  ｃｒｕｚｉ）由来のピルビン酸リン酸ジキナーゼタンパク質の残基５６４〜５８８に対応する３９個のアミノ酸ペプチドである。配列番号６（ＣＨ４７）は、クルーズトリパノソーマ（Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ  ｃｒｕｚｉ）由来のＴｃｐ２ｂタンパク質の残基１〜３４に対応する３４個のアミノ酸ペプチドである。配列番号７（ＣＨ６９）は、クルーズトリパノソーマ（Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ  ｃｒｕｚｉ）由来のＤＮＡトポイソメラーゼ２タンパク質の残基４４１〜４７５に対応する３５個のアミノ酸ペプチドである。配列番号８（ＣＨ７２）は、クルーズトリパノソーマ（Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ  ｃｒｕｚｉ）由来のホスホイノシチドに特異的なホスホリパーゼＣタンパク質の残基１１６〜１４５に対応する３０個のアミノ酸ペプチドである。配列番号９（ＣＨ７７）は、クルーズトリパノソーマ（Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ  ｃｒｕｚｉ）由来のジヒドロオロト酸デヒドロゲナーゼタンパク質の残基１０８〜１４０に対応する３３個のアミノ酸ペプチドである。配列番号１０（ＣＨ８２）は、クルーズトリパノソーマ（Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ  ｃｒｕｚｉ）由来のヒストンＨ３タンパク質の残基４３〜７８に対応する３６個のアミノ酸ペプチドである。配列番号１１（ＣＨ８４）は、クルーズトリパノソーマ（Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ  ｃｒｕｚｉ）由来のＡＧＰ２ｂ２タンパク質の残基３６〜６８に対応する３３個のアミノ酸ペプチドである。配列番号１２（ＣＨ９３）は、クルーズトリパノ���ーマ（Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ  ｃｒｕｚｉ）由来のポリＡ結合タンパク質の残基５１４〜５４４に対応する３１個のアミノ酸ペプチドである。これら配列は、複数の配列（ＣｌｕｓｔａｌＷ）、および国立生物工学情報センター（ＮＣＢＩ）データベースで利用可能な全てのトリパノソーマタンパク質配列の免疫原性解析を介して、ｉｎ  ｓｉｌｉｃｏで同定した（２００６年１月）。各ポリペプチドは、５超の、ヒトのＴ細胞のエピトープを含む配列保存性の高い（７０％以上）短い領域を表す。
【００９７】
実施例２
個々のトリパノソーマペプチドに対するサイトカインの応答
同定したペプチドのｉｎ  ｖｉｖｏでの免疫原性を、配列に対するｉｎ  ｖｉｔｒｏでの曝露の後にワクチン接種した動物の脾細胞におけるＩＦＮγ、またはＩｇＧ２ａの高い力価を誘導するペプチドの産生により評価した。１日目に各ペプチド１０ｎｍｏｌでＢＡＬＢ／ｃマウスを免疫化し、１５日目に追加免疫を行い、２１日目に脾臓を単離し、末端で出血させた。
【００９８】
試験開始時に７〜９週齢のバリア育ち（ｂａｒｒｉｅｒ  ｂｒｅｄ）（すなわち病原体フリー）のＢＡＬＢ／ｃマウスを、それぞれ６匹（３匹の雄性／３匹の雌性）を含む３つのグループに分割した。ＢＡＬＢ／ｃマウスは急性シャーガス病に関するモデルを提供するため、これらマウスをこの試験に選択した。グループＡのマウスに、以下のペプチド：ＣＨ９（配列番号１）、ＣＨ３０（配列番号２）、ＣＨ３２（配列番号３）、ＣＨ３６（配列番号４）、ＣＨ３７（配列番号５）およびＣＨ４７（配列番号６）の、１０ｎｍｏｌ／ペプチドの等モル混合物を投与した。グループＢのマウスに、以下のペプチド：ＣＨ６９（配列番号７）、ＣＨ７２（配列番号８）、ＣＨ７７（配列番号９）、ＣＨ８２（配列番号１０）およびＣＨ８４（配列番号１１）の、１０ｎｍｏｌ／ペプチドの等モル混合物を投与した。グループＣのマウスに、対照として関連しないペプチドの１０ｎｍｏｌ／ペプチドの等モル混合物を投与した。１日目に、全ての動物の尾の基底部にて皮下的に免疫化を行い、１５日目に追加免疫を行った。２１日目に、全ての動物を処分し、脾臓および血清を解析のために回収した。
【００９９】
Ｔ細胞の応答を、サイトカインＥＬＩＳＡにより以下の通り評価した。マウスの脾臓をやさしく細胞濾過器を介して押圧し、赤血球を、赤血球溶解バッファー（９部、０．１６ＭのＮＨ４Ｃｌ、および１部、０．１７Ｍのトリス、ｐＨ７．２）で除去した。各実験グループからの脾細胞の懸濁物を、５０ＩＵ／５０μｇ／ｍＬのペニシリン／ストレプトマイシンおよび１０％のＦＣＳを補充したＲＰＭＩ−１６４０培地中４×１０６細胞／ウェルの密度で、培地単独、コンカナバリンＡ（ＣｏｎＡ）（５μｇ／ｍＬ）、２μＭの単一のポリエピトープペプチドのいずれかを含む９６ウェルプレートにプレーティングした。４８時間のインキュベートの後、上清を回収し、免疫応答の誘導を評価するためにマウスのサイトカインＥＬＩＳＡキット（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を使用してＩＦＮ−γおよびＩＬ−４の産生に関して解析した。このアッセイの検出閾値は、ＩＦＮ−γで３１．２５ｐｇ／ｍＬおよびＩＬ−４で７．８１ｐｇ／ｍＬであった。応答を、シャーガスペプチドおよびそれらの応答性の対照で免疫化したグループ間のサイトカイン産生の差（ｐｇ／ｍＬ）としてプロットした。全てのグループの動物が、１０００ｐｇ／ｍＬ超のＩＦＮ−γレベルおよび２００ｐｇ／ｍＬ超のＩＬ−４レベルでＣｏｎＡに反応した。動物は自発的な増殖を示さず、ここですべての培地単独の読み取りは、ＩＦＮ−γおよびＩＬ−４の両方に関して検出閾値未満またはおおよそ検出閾値であった。
【０１００】
予測されるように、脾細胞のＣｏｎＡの非特異的な刺激で観察された分泌と比較して、ＩＬ−４は、様々なペプチドに応答して、ほとんど分泌しないまたは全く分泌しなかった（図１Ａおよび１Ｂ）。ＩＦＮ−γの分泌では、この結果は、雌性が、雄性で行うよりも、ＩＦＮ−γの量を多く分泌することにより応答するという事実を強調している。ペプチドＣＨ９、ＣＨ４７、ＣＨ７７、ＣＨ８２、およびＣＨ８４は、雌性ではＩＦＮ−γの分泌を誘導するが、雄性では誘導しなかった（図１Ｃおよび１Ｄ）。他方で、ＣＨ７２は、雌性と比較して雄性において同様の適度なＩＦＮ−γの分泌を誘導し、ＣＨ６９のみが、両方の性別で同様の強力な応答を誘導した（図１Ｄ）。雄性および雌性の間での異なる免疫応答およびクルーズトリパノソーマ（Ｔ．ｃｒｕｚｉ）感染症に対する性別の異なる易罹患性を考慮すると、これらの結果は非常に興味深い。ＩＬ−４産生の非存在下でのリコール抗原に対するｉｎ  ｖｉｔｒｏでの曝露の後にワクチン接種したＢＡＬＢ／ｃマウスの脾細胞によるＩＦＮ−γの産生は、シャーガスペプチドでの免疫化がＴｈ１応答を誘導すること明確に表している。ＢＡＬＢ／ｃマウスにおけるＣＨ３０、ＣＨ３２、ＣＨ３６、およびＣＨ３７に対する応答の非存在は、この配列からのエピトープ産生の割合の有意な低下を反映している可能性がある（すなわちこの配列は分解に耐性がある）。
【０１０１】
これらのペプチドでのワクチン接種により誘導された免疫応答をさらに解析するために、各ペプチドに特異的な総Ｉｇの力価を、全てのグループの動物の血清で測定した。ＥＬＩＳＡの９６ウェルプレートを、単一のシャーガスペプチド２μＭで、＋４℃で一晩コーティングした。プレートをＰＢＳＴ（０．０５％のＴＷＥＥＮ  ２０を含むＰＢＳ）で２回洗浄し、ＰＢＳ中１％のＢＳＡ  Ｆｒａｃｔｉｏｎ  Ｖで１時間ブロッキングした。プレートを、ＰＢＳＴで３回洗浄した後、１：１００〜１：３，２００の２倍減少希釈（ｄｏｕｂｌｅ  ｄｅｃｒｅａｓｉｎｇ  ｄｉｌｕｔｉｏｎｓ）で試験血清試料を添加し、２時間インキュベートした。ＰＢＳＴで６回洗浄した後、ウェルに、ＨＲＰコンジュゲート型ヤギ抗マウスＩｇ血清を充填した。１時間インキュベートした後、プレートをＰＢＳＴで８回洗浄し、ＴＭＢ基質を添加した。この反応を０．５ＭのＨ２ＳＯ４で停止させ、各ウェルの吸光度を４５０ｎｍで読み取った。
【０１０２】
この結果は、ワクチン接種した雄性と比較してワクチン接種した雌性でのより良好な抗体応答を示している。ペプチドＣＨ４７およびＣＨ７７は、両方の性別で最良の抗体応答を示しており、次に、ＣＨ６９は、両方の性別で低い値ではあるが同様の抗体力価を誘導している（図２Ａおよび２Ｂ）。
【０１０３】
さらに抗体応答を詳細に分析するために、強力な抗体応答を示したペプチドに特異的なＩｇＧ１およびＩｇＧ２ａ抗体を測定した。この目的のため、ＥＬＩＳＡの９６ウェルプレートを、２μＭの単一のシャーガスペプチドで、＋４℃で一晩コーティングした。プレートをＰＢＳＴで２回洗浄し、ＰＢＳ中１％のＢＳＡ  Ｆｒａｃｔｉｏｎ  Ｖで１時間ブロッキングした。プレートをＰＢＳＴで３回洗浄した後、試験血清試料を２時間添加した。ＰＢＳＴで６回洗浄した後、ウェルに、ヤギ抗マウスＩｇＧ１または抗マウスＩｇＧ２ａのいずれかを充填した。１時間インキュベートした後、ＨＲＰコンジュゲート型抗ヤギＩｇＧを添加し、さらに１時間インキュベートした。次に、プレートを、ＰＢＳＴで８回洗浄し、ＴＭＢ基質を３０分間添加した。この反応を、０．５ＭのＨ２ＳＯ４で停止し、各ウェルの吸光度を４５０ｎｍで読み取った。
【０１０４】
グラフでわかるように、ペプチドＣＨ４７およびＣＨ７７は、ＩｇＧ２ａおよびＩｇＧ１の両方の強力な抗体応答を呈した（図３Ａ〜Ｄ）。これらＥＬＩＳＡは定量的ではなく、定性的であるため、本発明者らは、抗体がＴｈ１応答（高いＩｇＧ２ａ）またはＴｈ２応答（高いＩｇＧ１）に向かう傾向があるかどうかを推定できなかった。
【０１０５】
よって、この実施例の結果は、新規に合成したシャーガスに関するペプチドのｉｎ  ｖｉｖｏでの試験が、良好なｉｎ  ｖｉｖｏでの免疫原性および有意なＴｈ１応答の誘導を表した６個のペプチドのグループを同定したことを示している。たとえば、ＣＨ９、ＣＨ４７、ＣＨ６９、ＣＨ７２、ＣＨ７７、およびＣＨ８４は、配列に対するｉｎ  ｖｉｔｒｏでの曝露の後にワクチン接種した動物の脾細胞におけるＩＮＦ−γの強力な産生を示し、ＣＨ４７およびＣＨ７７はまた、高いＩｇＧ１およびＩｇＧ２ａの力価により示されるように良好な抗体応答を誘導した。
【０１０６】
実施例３
トリパノソーマペプチドに対するサイトカインの応答
ＣＨ４７（配列番号６）、ＣＨ６９（配列番号７）、ＣＨ７２（配列番号８）、ＣＨ７７（配列番号９）、ＣＨ８４（配列番号１１）、およびさらなるペプチドＣＨ９３（配列番号１２）をさらに試験するために、さらなるｉｎ  ｖｉｖｏでの免疫原性の試験を行った。試験開始時に７〜９週齢のバリア育ち（すなわち病原体フリー）のＢＡＬＢ／ｃマウスを、それぞれ６匹（３匹の雄性／３匹の雌性）を含む４つのグループに分割した。１日目および１５日目に、０．１ｍｌのＭｏｎｔａｎｉｄｅ  ＩＳＡ−５１アジュバントで乳化したＣＨ４７、ＣＨ６９、ＣＨ７２、ＣＨ７７、ＣＨ８４、およびＣＨ９３のペプチド混合物水溶液０．１ｍｌを含む０．２ｍｌの組成物を、皮下注射として動物に投与した。グループ１は、各ペプチドに関して２．５ｎｍｏｌの等モル濃度を投与された３匹の雌性のマウスから構成されており、グループ２は、各ペプチドに関して２．５ｎｍｏｌの等モル濃度を投与された３匹の雄性のマウスから構成されており、グループ３は、各ペプチドに関して１０ｎｍｏｌの等モル濃度を投与された３匹の雌性のマウスから構成されており、グループ４は、各ペプチドに関して１０ｎｍｏｌの等モル濃度を投与された３匹の雄性のマウスから構成されていた。最後の投与から７日後に、全ての動物を処分し、末端で出血させ、脾臓を回収した。
【０１０７】
Ｔ細胞の応答を、サイトカインＥＬＩＳＡにより評価した。同一の性別およびグループの脾臓をまとめて集め、やさしく細胞濾過器を介して押圧し、赤血球を、赤血球溶解バッファー（９部、０．１６ＭのＮＨ４Ｃｌ、および１部、０．１７Ｍのトリス、ｐＨ７．２）で除去した。各実験グループから単離した脾細胞の懸濁物を、５０ＩＵ／５０μｇ／ｍＬのペニシリン／ストレプトマイシンおよび１０％のＦＣＳを補充したＲＰＭＩ−１６４０培地中４×１０５細胞／ウェルの密度で、培地単独、コンカナバリンＡ（ＣｏｎＡ）（５μｇ／ｍＬ）、２μＭの単一のポリエピトープペプチドのいずれかを含む９６ウェルプレートに、プレーティングした。４８時間のインキュベートの後、上清を回収し、免疫応答の誘導を評価するためにマウスのサイトカインＥＬＩＳＡキット（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を使用してＩＦＮ−γおよびＩＬ−４の産生に関して解析した。このアッセイにより決定されるサイトカインの検出閾値は、ＩＦＮ−γで３１．２５ｐｇ／ｍＬおよびＩＬ−４で７．８１ｐｇ／ｍＬであった。
【０１０８】
投与した用量および性別によるＩＦＮ−γおよびＩＬ−４の分泌に関する結果は、図４Ａおよび４Ｂに示されている。予測されるように、ＩＬ−４は、脾細胞のＣｏｎＡの非特異的な刺激で観察された分泌と比較して、様々なペプチドに応答してほとんど分泌しない、または全く分泌しなかった（図４Ａ）。ＩＦＮ−γの分泌では、２つの高いレスポンダーは、ペプチドＣＨ４７およびＣＨ９３であった（図４Ｂ）。ＣＨ６９、ＣＨ７７、およびＣＨ８４に対するＩＦＮ−γの応答は、以前の試験（たとえば実施例２）と比較してこの試験では少ない。この理由は、ペプチドＣＨ４７およびＣＨ９３が免疫優性であり、基本的に全てのペプチドが等モル量で投与される場合であっても、ＣＨ４７およびＣＨ９３は、ＭＨＣに対する結合でより効率的であり、よって、残りのペプチドと比較して多く表されているためであり得る。実施例２では、ペプチドＣＨ６９、ＣＨ７７、およびＣＨ８４は、ＣＨ４７およびＣＨ９３に対して異なるグループであり、よって影響しなかった。２．５ｎｍｏｌ用量または１０ｎｍｏｌ用量を投与した動物間では、サイトカイン発現の観点からの大きな差異は存在しなかった。ＣＨ９３のみが、２．５ｎｍｏｌ対１０ｎｍｏｌでワクチン接種した両性別においてＩＦＮ−γの産生の明らかな増加を示した（図４Ｂ）。
【０１０９】
観察されたＩＦＮ−γの応答が特異的であるかどうかを解明するために、本発明者らは、ワクチン接種していない（無処置）異なるマウス系統（Ｃ５７ＢＬＫ６）由来の脾細胞において単一のペプチドを試験した。合計１０個の脾臓（５匹の雄性／５匹の雌性）を、上述したように処理し、単一の脾細胞の懸濁物として集めた。細胞を、５０ＩＵ／５０μｇ／ｍＬのペニシリン／ストレプトマイシンおよび１０％のＦＣＳを補充したＲＰＭＩ−１６４０培地中４×１０５細胞／ウェルで、培地単独、コンカナバリンＡ（ＣｏｎＡ）（５μｇ／ｍＬ）、２μＭの単一のポリエピトープペプチドのいずれかを含む９６ウェルプレートに播種した。４８時間のインキュベートの後、上清を回収し、免疫応答の誘導を評価するためにマウスのサイトカインＥＬＩＳＡキット（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を使用してＩＦＮ−γの産生に関して解析した。ＩＦＮ−γに関する、アッセイにより決定されるサイトカインの検出閾値は３１．２５ｐｇ／ｍＬであった。
【０１１０】
この結果は、ＣＨ９３で得た応答が、ＣＨ９３に曝露した無処置の動物由来の脾細胞が、４８時間のインキュベート後に非常に高レベルのＩＦＮ−γを分泌するため、非特異的であることを示している（図５）。ＣＨ９３は、おそらくは、ＴＬＲなどのパターン認識受容体への結合を介した自然免疫を刺激する。
【０１１１】
これらペプチドでのワクチン接種により誘導される免疫応答をさらに解析するために、総Ｉｇの力価を、異なるグループ由来の血清試料でＥＬＩＳＡにより以下のように測定した。ＥＬＩＳＡの９６ウェルプレートを、２μＭの単一のシャーガスペプチドで、＋４℃で一晩コーティングした。プレートをＰＢＳＴで２回洗浄し、ＰＢＳ中１％のＢＳＡ  Ｆｒａｃｔｉｏｎ  Ｖで１時間ブロッキングした。プレートをＰＢＳＴで３回洗浄した後、１：１００〜１：３，２００の２倍減少希釈での試験血清試料を添加し、２時間インキュベートした。ＰＢＳＴで６回洗浄した後、ウェルに、ＨＲＰコンジュゲート型ヤギ抗マウスＩｇ血清を充填した。１時間インキュベートした後、プレートをＰＢＳＴで８回洗浄し、ＴＭＢ基質を添加した。反応を０．５ＭのＨ２ＳＯ４で停止し、各ウェルの吸光度を、４５０ｎｍで読み取った。
【０１１２】
ＥＬＩＳＡの結果を解析した後、ＣＨ４７は、雄性および雌性において優れた応答を示している（図６Ａ）。しかしながらこの高い応答は、実施例２において顕著な抗体応答を示したペプチドＣＨ６９およびＣＨ７７（図６Ｂおよび６Ｄ）の抗体応答を弱めている。ＣＨ９３は、抗体応答を誘導しなかった。
【０１１３】
ＣＨ４７およびＣＨ７７によりもたらされる抗体応答をさらに詳しく分析するために、各単一のペプチドに特異的なＩｇＧ１およびＩｇＧ２ａの抗体を測定した。この目的のため、ＥＬＩＳＡの９６ウェルプレートを、２μＭの単一のペプチドで、＋４℃で一晩コーティングした。プレートをＰＢＳＴで２回洗浄し、ＰＢＳ中１％のＢＳＡ  Ｆｒａｃｔｉｏｎ  Ｖで１時間ブロッキングした。プレートを、ＰＢＳＴで３回洗浄した後、試験血清試料を２時間添加した。ＰＢＳＴで６回洗浄した後、ウェルにヤギ抗マウスＩｇＧ１または抗マウスＩｇＧ２ａのいずれかを充填した。１時間インキュベートした後、ＨＲＰコンジュゲート型抗ヤギＩｇＧを添加し、さらに１時間インキュベートした。次にプレートをＰＢＳＴで８回洗浄し、ＴＭＢ基質を３０分間添加した。この反応を、０．５ＭのＨ２ＳＯ４で停止し、各ウェルの吸光度を４５０ｎｍで読み取った。
【０１１４】
図７Ａ〜Ｄでわかるように、ペプチドＣＨ４７およびＣＨ７７は、Ｔｈ２応答に特有の強力なＩｇＧ１抗体応答を呈している（図７Ａおよび７Ｂ）。興味深いことに、ＣＨ４７のみが、強力なＩｇＧ２ａの応答を誘導でき、マウスにおけるＴｈ１応答を表している（図７Ｄ）。
【０１１５】
実施例４
ＣＨ４７の免疫優性
他のペプチドの免疫原性に及ぼすＣＨ４７の作用を試験するために、ＣＨ４７と共に試験した他のペプチド（実施例２および３に開示）を、２つのグループに分割し、１日目に、グループ１またはグループ２のペプチドで、マウスにワクチン接種を行った。次に各グループをＡおよびＢに分け、１４日目に、下位グループＡに、１日目に投与したものと同一のペプチドの用量を投与し、下位グループＢに、１日目に投与したペプチド＋ＣＨ４７を投与した。投与レジメンは以下の通りである。グループ１Ａ、１日目および１４日目にＣＨ９、ＣＨ３０、ＣＨ３２、ＣＨ３６、およびＣＨ３７をそれぞれ１０ｎｍｏｌ；グループ１Ｂ、１日目にＣＨ９、ＣＨ３０、ＣＨ３２、ＣＨ３６、およびＣＨ３７をそれぞれ１０ｎｍｏｌ、および１４日目に、同一のペプチドの組み合わせ＋１０ｎｍｏｌのＣＨ４７；グループ２Ａ、１日目および１４日目にＣＨ６９、ＣＨ７２、ＣＨ７７、ＣＨ８２、およびＣＨ８４をそれぞれ１０ｎｍｏｌ；ならびにグループ２Ｂ、１日目にＣＨ６９、ＣＨ７２、ＣＨ７７、ＣＨ８２、およびＣＨ８４をそれぞれ１０ｎｍｏｌ、１４日目に同一のペプチドの組み合わせ＋１０ｎｍｏｌのＣＨ４７。
【０１１６】
この試験を、試験開始時に７〜９週齢のバリア育ち（すなわち病原体フリー）のＢＡＬＢ／ｃマウスで行った。４グループは、それぞれ、４匹の動物（２匹の雄性／２匹の雌性）を含んでいた。全ての動物に、０．２ｍｌの組成物（０．１ｍｌのＭｏｎｔａｎｉｄｅ  ＩＳＡ−５１アジュバントで乳化したペプチド混合物水溶液０．１ｍｌ）の２回用量を、１日目および１４日目に皮下注射として投与した。脾臓および血清の試料を、実施例２および３に記載されるように解析した。
【０１１７】
表３は、投与した用量および性別による、脾細胞培養物の上清におけるＩＬ―４の産生（ｐｇ／ｍｌ）を表している。ＩＬ―４は、コンカナバリンＡ（ＣｏｎＡ）で得た応答と比較して、試験されるペプチドのいずれに対しての応答でもほとんど産生しなかった。
【表３】
2019513797.tif 000005
【０１１８】
表４は、投与した用量および性別による、脾細胞培養物の上清におけるＩＮＦ−γの産生（ｐｇ／ｍｌ）を表している。ペプチドＣＨ３０、ＣＨ６９、ＣＨ７２、ＣＨ７７、およびＣＨ８４（ブラックボックスでマークされている）は、追加免疫のワクチンの調製においてＣＨ４７を有することにより増大した適度〜良好なＩＦＮ−γの応答を誘導した。ＣＨ９およびＣＨ３２は、ＩＦＮ−γの強力な産生を誘導したが、ペプチドでワクチン接種していない動物由来の脾細胞であっても高かったため、非特異的であった。この非特異的な応答は、おそらくはこれらの溶解度の低さおよび微粒子化した（ｐａｒｔｉｃｕｌａｔｅｄ）性質によるものである。
【表４】
2019513797.tif 000006
【０１１９】
抗体応答に関して、ＣＨ３７およびＣＨ７７は、両方とも、抗体応答を誘導することができる（表５）。表５は、血清の１：４００の希釈での抗体の力価（ａｂｓ  ４５０ｎｍ−５７０ｎｍ）を示している。ＣＨ７７は、実行した全ての試験において一貫して高いレベルの抗体応答を示した。本発明者らは、ＣＨ３７に関するこのような強い抗体応答をいままで測定していなかった。これは、過去の試験でＣＨ３７が常にＣＨ４７を含むペプチドの組み合わせで使用されており、よってこの抗体応答がＣＨ４７により発現停止されていたためであった。
【表５】
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【０１２０】
ＣＨ３７およびＣＨ７７によりもたらされる抗体の応答をさらに詳細に分析するために、各単一のペプチドに特異的なＩｇＧ１およびＩｇＧ２ａの抗体を測定した（図８Ａ〜Ｄ）。結果は、対照グループの吸光度が試験グループから減算された相対的な吸光度として表されている。図８Ａ〜Ｄでわかるように、ＩｇＧ１の力価は、ＣＨ３７およびＣＨ７７の両方に関してＩｇＧ２ａの力価よりも高い。ＩｇＧ２ａの応答は、感染した細胞に対する補体の応答およびＡＤＣＣの応答の活性化に関連する傾向があり、ＩｇＧ１抗体は、中和応答を誘導する細胞外トリパノソーマの表面上で利用可能な抗原に結合し得る。
【０１２１】
まとめると、この結果は、追加免疫におけるＣＨ４７の単回投与が、サイトカインおよび抗体の応答の両方を増大させることを表している。試験したペプチドの列挙から、本発明者らは、ワクチンが、これらの抗体の応答に関しては、ＣＨ３７およびＣＨ７７からなるべきであり、これらのＩＦＮ−γ応答に関してはＣＨ３０、ＣＨ６９、ＣＨ７２、およびＣＨ８４からなるべきであり、他のペプチドの効果を増強するための追加免疫ワクチン接種においては、ＣＨ４７を加えるべきであると考えている。
【０１２２】
実施例５
ウサギの抗血清
ウサギにおける開示のシャーガスペプチドに対する抗体を作製するために、それぞれ体重約３ｋｇの２匹の雄性のウサギ（Ｎｅｗ  Ｚｅａｌａｎｄ）を使用した。陰性対照として使用する血液を回収するため、試験開始時に１匹の末端を出血させた。もう１匹の雄性に、以下のスケジュールを使用して免疫化を行った。０日目に、動物に、免疫原性組成物６００μｌを皮下注射した。０日目の免疫原性組成物を、３００μＬのＭｏｎｔａｎｉｄｅ  ＩＳＡ−５１アジュバント（Ｓｅｐｐｉｃ）を伴い、水に溶解したＣＨ３０、ＣＨ３７、ＣＨ６９、ＣＨ７２、ＣＨ７７、およびＣＨ８４をそれぞれ３０ｎｍｏｌ含む３００μＬのペプチド混合物を乳化することにより作製した。１４日目に、別の免疫原性組成物６００μｌを皮下注射した。１４日目の免疫原性組成物を、３００μＬのＭｏｎｔａｎｉｄｅ  ＩＳＡ−５１アジュバント（Ｓｅｐｐｉｃ）を伴い、水に溶解したＣＨ３０、ＣＨ３７、ＣＨ６９、ＣＨ７２、ＣＨ７７、ＣＨ８４、およびＣＨ４７をそれぞれ３０ｎｍｏｌ含む３００μＬのペプチド混合物を乳化することにより作製した。２８日目に、第３の免疫原性組成物６００μｌの皮下注射を行った。１４日目の免疫原性組成物を、３００μＬのＭｏｎｔａｎｉｄｅ  ＩＳＡ−５１アジュバント（Ｓｅｐｐｉｃ）を伴い、水に溶解したＣＨ３０、ＣＨ３７、ＣＨ６９、ＣＨ７２、ＣＨ７７、およびＣＨ８４をそれぞれ３０ｎｍｏｌ含む３００μＬのペプチド混合物を乳化することにより作製した。４２日目に、動物に、第４の免疫原性組成物６００μｌの皮下注射を行った。４２日目の免疫原性組成物を、３００μＬのＭｏｎｔａｎｉｄｅ  ＩＳＡ−５１アジュバント（Ｓｅｐｐｉｃ）を伴い、水に溶解したＣＨ３０、ＣＨ３７、ＣＨ６９、ＣＨ７２、ＣＨ７７、ＣＨ８４、およびＣＨ４７をそれぞれ３０ｎｍｏｌ含む３００μＬのペプチド混合物を乳化することにより作製した。０．５ｍｌの血液の試料を、０日目（ワクチン接種前）、１４日目、２５日目（第２の免疫化から１１日後）、３９日目（第３の免疫化から７日後）、および６７日目（処分日の第４の免疫化から２５日後）に、動物から得た。血液を室温で凝血させ、血清を回収し、抗体応答に関して解析した。
【０１２３】
これらの免疫原性組成物により誘導される免疫応答を評価するために、総Ｉｇの力価を、異なるグループ由来の血清試料でＥＬＩＳＡにより以下のように測定した。ＥＬＩＳＡの９６ウェルプレートのウェルを、個別に、２μＭのシャーガスペプチドのうちの１つで、＋４℃で一晩コーティングした。プレートをＰＢＳＴで２回洗浄し、ＰＢＳ中１％のＢＳＡ  Ｆｒａｃｔｉｏｎ  Ｖで１時間ブロッキングした。プレートを、ＰＢＳＴで３回洗浄した後、１：１００〜１：３，２００の２倍減少希釈の血清試料１８０μｌを添加し、２時間インキュベートした。ＰＢＳＴで４回洗浄した後、ウェルに、ＨＲＰコンジュゲート型ヤギ抗ウサギＩｇ血清を充填した。暗室で１時間インキュベートした後、プレートをＰＢＳＴで６回洗浄し、ＴＭＢ基質１００μｌを添加し、プレートを周囲温度、暗室で３０分間インキュベートした。この反応を、０．５ＭのＨ２ＳＯ４５０μｌで停止した。各ウェルの吸光度を４５０ｎｍで読み取り、５７０ｎｍで吸光度を読み取ることによりバックグラウンド減算を行った。
【０１２４】
図９Ａ〜Ｈは、第４の免疫化を投与してから２５日後の、６７日目のＩｇＧのレベルを示している。ペプチドＣＨ３０、ＣＨ３７、ＣＨ４７、およびＣＨ７７は、それぞれ個々に、陰性対照の血清および総ペプチド混合物の両方と比較して、強い免疫原性応答を誘発した。ペプチドＣＨ６９およびＣＨ７２もまた、個々に、良好な免疫原性応答を誘発した。
【０１２５】
実施例６
トリパノソーマのマウスチャレンジにおけるワクチンの有効性
シャーガスに対する予防ワクチンとしての本明細書中開示のトリパノソーマ抗原の使用を評価するために、ワクチン組成物を、月齢２ケ月のＢＡＬＢ／ｃＪマウスで試験した。組成物である指定されたＣＨ−ｖは、アジュバントのＭｏｎｔａｎｉｄｅ  ＩＳＡ−５１（Ｓｅｐｐｉｃ）および以下のペプチド：ＣＨ３０、ＣＨ３７、ＣＨ６９、ＣＨ７２、ＣＨ７７、およびＣＨ８４を含んでいた。ＣＨ−ｖ＋ＣＨ４７からなるさらなる組成物も同様に使用した。免疫化を、月齢２ケ月の雄性のＢＡＬＢ／ｃＪマウスで行った。最初に、動物を、ＢＳＬ−３の研究室の設備に順化させた後、免疫化を行った。免疫化は、図１０に表されるように行った。
【０１２６】
免疫化した動物を、クルーズトリパノソーマ（Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ  ｃｒｕｚｉ）の血流の錐鞭毛型のＲＡ菌株（進化系統／種類の単位（ｔｙｐｉｎｇ  ｕｎｉｔ）＝ＴｃＶＩ）（Ｒｉｓｓｏ，  ｅｔ  ａｌ，  Ｊ  Ｉｎｆｅｃｔ  Ｄｉｓ  １８９：２２５０，２００４）でチャレンジするために、動物に、腹腔内注射（ＩＰ）を介して５０個の錐鞭毛型を投与した。ＲＡ菌株は、機関の動物施設で雄性のＣＦ１マウスの連続継代により維持されている。別の血漿試料を、免疫化した後およびチャレンジ前の各マウスから入手し保存した。循環する寄生生物の存在を、感染後１０日目、１３日目、および４０日目（ｄｐｉ）に、１滴の血液（光学顕微鏡下４００倍での３０個の領域）から寄生生物を計測することにより評価した。１６ｄｐｉから、寄生虫血を、溶解性溶液（赤血球を溶解するため）４５μｌと混合した末梢血５μｌから開始して、血球計数器（Ｎｅｕｂａｕｅｒ）で寄生生物を計測することにより判定した。値は、ｍｌあたりの寄生生物の数として表されている。死亡率は、毎日追跡調査した。
【０１２７】
全てのグループに関する寄生虫血のデータを決定した。有意差が、寄生生物の数において、グループＢ対対照（Ａ＋Ｃ）において１８ｄｐｉで観察された（ｐ＜０．０００１４）（図１１）。驚くべきことに、ＣＨ−ｖ単独でワクチン接種した動物（グループＢ）における寄生生物の数は、対照グループにおける寄生生物の数を上回った。
【０１２８】
全てのグループに関する死亡率のデータを決定した（図１２）。興味深いことに、グループＤ（ＣＨ４７を併用したＣＨ−ｖ）における動物の４０％は、チャレンジから２５日後でこのチャレンジを生き抜いており、３３％が５０日目まで生存し続けた。この解析は、スチューデントｔ検定（寄生虫血の値）、ＡＮＯＶＡ、次いでボンフェローニおよびＧｅｈａｎ−Ｂｒｅｓｌｏｗ−Ｗｉｌｃｏｘｏｎ（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ）を使用して行った。また、死亡率の有意差を同定した：Ｂ対対照（Ａ＋Ｃ）、ｐ＜０．０００５；Ｄ対対照（Ａ＋Ｃ）、ｐ＜０．０３９４（図１１）。得られた結果は、ＣＨ−ｖで免疫化した動物（グループＢ）が多くの寄生虫血を発達させており、このことが、このグループで観察される早期の死亡率と相関していることを示した。このことは、この混合物またはその成分のうちの１つが、宿主の応答の結果に陰性的に影響することにより、観察される早期死亡率をもたらすこととなる調節因子として作用し得ることを示唆している。グループＤ（ＣＨ４７と併用したＣＨ−ｖ）由来の動物の寄生虫血の値は、対照のマウスで観察された値と同様であるが、これにも関わらず、２７ｄｐｉでの死亡率は、５８．３％に減少し、４０ｄｐｉまででは６６．７％に減少し、対して対照は、２４ｄｐｉで１００％の死亡率に達した。総合的にみて、この結果は、ＣＨ―ｖでワクチン接種した動物に投与した追加免疫にペプチドＣＨ４７が含まれていることが、保護的な免疫応答を誘発するのに重要であることを示唆している。また、このペプチドの効果が、免疫応答におけるＣＨ−ｖ混合物により誘導される陰性的な作用を中和し得ることに留意することも重要である。
【０１２９】
クルーズトリパノソーマ（Ｔ．ｃｒｕｚｉ）のＲＡ菌株を用いた感染モデルは、評価されるワクチン候補物にとって難問を呈している。この理由は、１００％の死亡率を引き起こし、膵臓、胸腺、および神経節の組織構造の変質および破壊を引き起こすためである。マウスにおける連続継代によるこの菌株の維持は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで培養する際に弱毒化する、その病原性などのこの菌株の生物学的な特徴の保存を支援している。
【０１３０】
実施例７
トリパノソーマのマウスチャレンジにおけるワクチンの有効性
シャーガスに対する予防ワクチンとしての、ＣＨ４７と併用したＣＨ−ｖまたはＣＨ４７単独（２回用量）の有効性を評価するために、ワクチン組成物を、月齢２ケ月のＢＡＬＢ／ｃＪマウスで試験した。この試験は、それぞれ月齢２ケ月の雄性ＢＡＬＢ／ｃＪマウス１２匹を含む３つのグループ（Ａ、Ｂ、およびＣ）からなるものであった。図１３に表されているように、グループＡの動物に、１日目および１４日目に、アジュバント処理したＣＨ４７単独を２回用量で投与した。グループＢの動物に、１日目にアジュバント処理したＣＨ−ｖ（ＣＨ３０、ＣＨ３７、ＣＨ６９、ＣＨ７２、ＣＨ７７、ＣＨ８４）、次いで１４日目にアジュバント処理したＣＨ−ｖをＣＨ４７と併用して投与した。グループＣ（対照）に、１日目および１４日目に、水およびＭｏｎｔａｎｉｄｅ  ＩＳＡ−５１アジュバントのエマルジョンを皮下投与として投与した。
【０１３１】
免疫化した動物を、クルーズトリパノソーマ（Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ  ｃｒｕｚｉ）の血流の錐鞭毛型のＲＡ菌株（進化系統／種類の単位（ｔｙｐｉｎｇ  ｕｎｉｔ）＝ＴｃＶＩ）（Ｒｉｓｓｏ，  ｅｔ  ａｌ，  Ｊ  Ｉｎｆｅｃｔ  Ｄｉｓ  １８９：２２５０，  ２００４）でチャレンジするために、動物に、腹腔内注射（ＩＰ）を介して５０個の錐鞭毛型を投与した。ＲＡ菌株は、機関の動物施設で雄性のＣＦ１マウスの連続継代により維持されている。寄生虫血を、溶解性溶液（赤血球を溶解するため）４５μｌと混合した末梢血５μｌから開始して、血球計数器（Ｎｅｕｂａｕｅｒ）で寄生生物を計測することにより判定した。値は、ｍｌあたりの寄生生物の数として表されている。死亡率を、毎日追跡調査した。
【０１３２】
図１４でわかるように、ＣＨ４７と併用したＣＨ−ｖで得られた生存率は、試験１で得られた値と非常に類似している（３３．３％）。驚くべきことに、ＣＨ４７でのみ免疫化したグループの生存は、致死性のトリパノソーマチャレンジから６０日後で、対照グループの８３．５％と比較して、感染症に屈した動物が５０％のみといった、高い生存を示した。
【０１３３】
１７日目の寄生虫血は、対照グループと比較してワクチン接種した両方のグループで低減した。グループＣＨ−ｖ＋ＣＨ４７で生存している動物は、さらに２２日目で、寄生虫血のさらなる低減を経た（図１５）。しかしながら、２５日を経過して生存した動物のチャレンジ後１７日目および２２日目の寄生虫血を観察すると、寄生虫血は、対照のグループと比較してワクチン接種したグループの両方で低減している（図１６）。最も可能性のある説明は、対照グループで急性感染を生き残った動物が、明らかな感染症よりは慢性的な感染に入ったとの説明である。
【０１３４】
最後に、本明細書の態様は特定の実施形態を表すことにより強調されているが、当業者は、これら開示された実施形態が、単に本明細書中開示の主題の原則を表していることを容易に認識することが理解されている。よって、そのように明示されていない限り、開示の主題が、本明細書中記載の特定の化合物、組成物、物品、装置、方法、プロトコル、および／または試薬などに全く限定されないことを理解すべきである。さらに、それらの特定の変化、修正、再配列、変動、追加、減算、および部分的な組み合わせを、本明細書の趣旨から逸脱することなく本明細書中の教示にしたがい行うことができることを、当業者は認識するであろう。よって、以下の添付の特許請求の範囲およびその後に導入される特許請求の範囲が、本明細書の趣旨および範囲の中にあるように、このような変化、修正、再配列、変動、追加、減算、および部分的な組み合わせのすべてを含むと解釈されることが意図されている。
【０１３５】
本発明を実施するために本発明者に知られているベストモードを含む本発明の特定の実施形態が本明細書中に記載されている。当然、記載されているこれら実施形態のバリエーションは、上記の説明を読むことにより当業者に明らかとなるであろう。本発明者らは、当業者が、このようなバリエーションを適宜使用することを予測しており、本発明者らは、本発明が、本明細書中特に記載されているもの以外で実施されることを意図している。よって本発明は、本明細書中添付の特許請求の範囲に列挙されている主題の全ての修正および均等物を、適用可能な法に準拠している限り含む。さらに、それらの見込みのあるバリエーションすべてにおける上述の実施形態のいずれかの組み合わせは、本明細書中特段他の記載がない限り、または文脈と明らかに矛盾していない限り、本発明に包有されている。
【０１３６】
本発明の代替的な実施形態、要素、またはステップのグループ分けは、限定と解釈されるべきではない。各グループのメンバーは、個々に、または本明細書中開示の他のグループのメンバーとのいずれかの組み合わせで、表されてもよく、請求されてもよい。グループのうち１つまたは複数のメンバーが、簡便性および／または特許性の理由のため、グループに含まれてもよく、グループから削除されてもよいことが予想されている。このような何等かの包有または削除が起こる場合、本明細書は、修正したグループを含み、よって、添付の特許請求の範囲に使用されている全てのマーカッシュ群の記載を満たしていると、みなされている。
【０１３７】
他の記載がない限り、本明細書および特許請求の範囲で使用されている特徴、項目、量、パラメータ、特性、用語などを表す全ての数は、用語「約」により全ての例で修正されることが理解されている。よって、本明細書中使用される用語「約」は、定量化した特徴、項目、量、パラメータ、特性、または用語が、記載した特徴、項目、量、パラメータ、特性、または用語の値の±１０パーセント超および未満の範囲を含むことを意味している。よって、反対の意味が指摘されない限り、本明細書および添付の特許請求の範囲に記載されている数字のパラメータは、変動し得る近似値である。たとえば、質量分析の器具が、所定の解析物の質量を決定する際にわずかに変動し得るため、イオンの質量、またはイオンの質量／電荷比の文脈での用語「約」は、＋／−０．５０原子質量単位を表す。少なくとも、ならびに特許請求の範囲の均等物の教義の使用を限定する試みとしてではなく、各数字表示は、少なくとも、記録されている有意な桁の数の観点から、通常の丸め技術を使用することにより解釈されるべきである。
【０１３８】
実施形態または実施形態の態様に関する用語「ｍａｙ」または「ｃａｎ」の使用はまた、この用語を、別の意味の「ｍａｙ  ｎｏｔ」または「ｃａｎｎｏｔ」で用いることをも含む。同様に、本明細書は、実施形態または実施形態の態様が、本発明の主題の一部として含まれてもよく、または含むことができることを開示している場合、よって除くクレーム（ｎｅｇａｔｉｖｅ  ｌｉｍｉｔａｔｉｏｎ）または排他的条件（ｅｘｃｌｕｓｉｏｎａｒｙ  ｐｒｏｖｉｓｏ）も明示的に意味されており、実施形態または実施形態の態様が本発明の主題の一部として含まれていなくてもよく、含むことができないことも意味している。同様に、実施形態または実施形態の態様に関連した用語「任意に」の使用は、当該実施形態または実施形態の態様が、本発明の主題の一部として含まれていてもよく、または本発明の主題の一部として含まれていなくてもよいことを意味する。当該除くクレームまたは排他的な条件の適用は、除くクレームまたは排他的な条件が請求される主題に記載されているかどうかに基づく。
【０１３９】
本発明の広い範囲を記載している数字の範囲および値は近似値ではあるが、特定の実施例に記載される数字の範囲および値は、可能な限り正確に記録されている。しかしながら、いずれかの数字の範囲または値は、本質的に、それぞれの試験の測定値で見いだされる標準偏差から必然的にもたらされる特定の誤差を含む。本明細書中の値の数字の範囲の記載は、単に、範囲内にあるそれぞれ別々の数字の範囲を個々に表す簡潔な方法として作用すると意図されている。本明細書中特段の記載がない限り、ある数字の範囲のうちのそれぞれ個々の値は、本明細書中個別に記載されているかのように本明細書に組み込まれている。
【０１４０】
本発明を記載している文脈（特に以下の特許請求の範囲の文脈）で使用されている用語「ａ」、「ａｎ」、「ｔｈｅ」、および同様の言及は、本明細書中他の記載がない限り、または文脈と明確に矛盾していない限り、単数形および複数形の両方を含むと解釈すべきである。さらに、同定した要素に関する順序の指標―たとえば「第１の」、「第２の」、「第３の」などは、要素間を区別するために使用されており、当該要素の必要数または限定数を表すまたは暗示するものではなく、特段明記されていない限り、当該要素の特定の位置または順序を表すものではない。本明細書中記載の全ての方法は、本明細書中特段記載されていない限り、または文脈と明確に矛盾していない限り、任意の適切な順序で行うことができる。本明細書中提供されているあらゆる例、または例示的な言語（たとえば「など」）の使用は、単に、本発明をより良く明らかにすることを意図しており、別の箇所で請求されている本発明の範囲に限定を課すものではない。本明細書中のいかなる言語も、本発明の実施に重要な請求されていない要素を表すと解釈するべきではない。
【０１４１】
特許請求の範囲に使用される場合、出願されるかまたは補正で追加されるかどうかに関わらず、オープンエンドの移行句の用語「ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ」（およびｉｎｃｌｕｄｉｎｇ、ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ、およびｈａｖｉｎｇなどのこれと均等なオープンエンドの移行句）は、明記された要素、限定、ステップ、および／または特性のすべてを、単独、または記載されていない主題と組み合わせて含み；明記された要素、限定、および／または特性は重要ではあるが、他の明記されてない要素、限定、および／または特性を追加してもよく、さらに、特許請求の範囲内の構成を形成し得る。本明細書中開示の特定の実施形態は、「ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ」の代わりに、または「ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ」の補正として、クローズエンドの移行句「ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｏｆ」または「ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ  ｏｆ」を使用して、特許請求の範囲でさらに限定され得る。特許請求の範囲で使用される場合、出願されるかまたは補正で追加されるかどうかに関わらず、クローズエンドの移行句「ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｏｆ」は、特許請求の範囲に明記されていないいずれの要素、限定、ステップ、または特性をも排除する。クローズエンドの移行句「ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ  ｏｆ」は、明記された要素、限定、ステップ、および／または特性、ならびに請求される主題の基本的かつ新規な特徴（複数可）に実質的に影響しない他のいずれかの要素、限定、ステップ、および／または特徴に、特許請求の範囲を限定する。よって、オープンエンドの移行句「ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ」の意味は、特に記載されている全ての要素、限定、ステップ、および／または特性、ならびに何等かの任意の追加的な記載されていないものを含むと定義されている。クローズエンドの移行句「ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｏｆ」の意味は、特許請求の範囲に特に記載されている要素、限定、ステップ、および／または特性のみを含むと定義されており、クローズエンドの移行句「ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ  ｏｆ」の意味は、特許請求の範囲に特に記載されている要素、限定、ステップ、および／または特性、ならびに請求される主題の基本的かつ新規な特徴（複数可）に実質的に影響しない要素、限定、ステップ、および／または特性のみを含むと定義されている。よって、オープンエンドの移行句「ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ」（およびこれと均等なオープンエンドの移行句）は、この意味の中に、限定した場合として、クローズエンドの移行句「ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｏｆ」または「ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ  ｏｆ」により特定されている、請求される主題を含む。本明細書中に記載されている、または移行句「ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ」で請求されているこのような実施形態が、明らかにまたは本質的に明確に記載されている場合、文言「ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｏｆ」および「ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ  ｏｆ」は有効であり、立証されている。
【０１４２】
本明細書中参照かつ同定されている全ての特許、特許公報、および他の刊行物は、個々におよび明らかに、たとえば本発明と関連して使用され得る当該刊行物に記載されている組成物および方法を説明および開示する目的のために、それら全体が参照として本明細書中に援用されている。これらの刊行物は、単に、本願の出願日より前のそれらの開示に関して提供されている。このことに関して、本発明者らが、従来の発明の効力または他のいずれかの理由により当該開示に先行する権利はないとの承認として解釈するべきではない。
これら文書の内容に関する日付または表明に関する全ての供述は、本出願人に利用可能な情報に基づくものであり、これら文書の日付または内容の正確性に関する承認を構成するものではない。
【０１４３】
最後に、本明細書中使用される用語は、単に、特定の実施形態を説明する目的のためのものであり、特許請求の範囲によってのみ定義される本発明の範囲を限定するように意図されてはいない。よって、本発明は、正確に示され記載されている通りに限定されるものではない。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【配列表】
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【手続補正書】
【提出日】平成31年1月16日(2019.1.16)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】配列表
【補正方法】追加
【補正の内容】
【配列表】
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【国際調査報告】
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