(57)【要約】集学的方法によってＴＮＢＣに罹患した患者を治療する方法であって、以下の治療：ｉ）１以上のチェックポイント阻害剤；ｉｉ）ハイパーサーミア治療；ｉｉｉ）低用量化学療法；ｉｖ）インターロイキン−２（ＩＬ−２）；並びにｖ）タウロリジン、タウルルタム、オキサチアジン様化合物、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される化合物の複数で患者を治療することを含む、方法。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
トリプルネガティブ乳癌（ＴＮＢＣ）に罹患している患者を治療する方法であって、
タウロリジン、タウルルタム、１以上のオキサチアジン様化合物、若しくはこれらの組み合わせで患者を治療すること、又は、
１以上のチェックポイント阻害剤、ハイパーサーミア、低用量化学療法、並びにタウロリジン、タウルルタム、１以上のオキサチアジン様化合物、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される化合物とのインターロイキン−２（ＩＬ−２）の併用療法からなる群から選択される複数の治療で患者を治療すること、
を含む、方法。
【請求項２】
前記患者が、静脈内、経口、又はこれらの組み合わせで投与されるタウロリジン、タウルルタム、１以上のオキサチアジン様化合物、又はこれらの組み合わせで治療される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記患者が、手術前及び／又は手術中の期間に静脈内、経口、又はこれらの組み合わせで投与されるタウロリジン、タウルルタム、１以上のオキサチアジン様化合物、又はこれらの組み合わせで、並びに手術後にタウロリジン、タウルルタム、１以上のオキサチアジン様化合物、又はこれらの組み合わせで治療される、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記患者が、静脈内、経口、又はこれらの組み合わせで投与されるＣ−２２５０：
【化１】
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で治療される、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記患者が、手術前及び／又は手術中の期間に静脈内、経口、又はこれらの組み合わせで投与されるＣ−２２５０で、並びに手術後に経口で投与されるＣ−２２５０で治療される、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記Ｃ−２２５０の経口投与剤形が、経口で摂取された場合、２μｇ／ｍｌ以上の血中濃度Ｃｍａｘを達成するカプセル剤である、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記Ｃ−２２５０の経口投与剤形が、経口で摂取された場合、５μｇ／ｍｌ以上の血中濃度Ｃｍａｘを達成するカプセル剤である、請求項５に記載の方法。
【請求項８】
前記Ｃ−２２５０の経口投与剤形が、経口で摂取された場合、１５μｇ／ｍｌ以上の血中濃度Ｃｍａｘを達成するカプセル剤である、請求項５に記載の方法。
【請求項９】
ＩＬ−２単独療法と関連する毒性の副作用を誘導することなく、有効量のＣ−２２５０及びＩＬ−２を患者に投与することを含む複数の治療で患者を治療することを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
少なくとも２つの前記治療が、同時に又は前後に行われる、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
前記複数の治療の全てで前記患者を治療することを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
前記患者に１以上のチェックポイント阻害剤を順次に投与することと、前記患者をハイパーサーミア治療に供することと、前記患者に低用量化学療法を適用することと、タウロリジン、タウルルタム、オキサチアジン様化合物、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される化合物とＩＬ−２とを同時投与することとを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
ＩＬ−２が生物学的有効用量、最大耐用量、又は生物学的有効用量と最大耐用量の間の用量で投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
ＩＬ−２が、２５Ｍｉｏ  Ｉ．Ｕ．／ｍ２〜６０Ｍｉｏ  Ｉ．Ｕ．／ｍ２の用量で投与される、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
ＩＬ−２がタウロリジン、タウルルタム、又はこれらの組み合わせと同時投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項１６】
ＩＬ−２が、１以上の以下の化合物：
【化２】
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と同時投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項１７】
ＩＬ−２がＣ−２２５０：
【化３】
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と同時投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項１８】
前記患者にハイパーサーミア治療を適用する、請求項１に記載の方法。
【請求項１９】
前記患者に局所領域的ハイパーサーミア治療を適用する、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記患者に全身ハイパーサーミア（ＷＢＨＴ）を適用する、請求項１８に記載の方法。
【請求項２１】
前記患者に局所領域的ハイパーサーミア治療と全身ハイパーサーミア治療とを連続的に組み合わせて適用する、請求項１８に記載の方法。
【請求項２２】
前記患者に１以上のチェックポイント阻害剤を投与する、請求項１に記載の方法。
【請求項２３】
前記患者に２種類又は３種類のチェックポイント阻害剤を投与する、請求項１に記載の方法。
【請求項２４】
前記患者に２種類のチェックポイント阻害剤を同時投与する、請求項１に記載の方法。
【請求項２５】
前記１以上のチェックポイント阻害剤が、該１以上のチェックポイント阻害剤に対して食品医薬品局（ＦＤＡ）が承認した投薬量を下回る投薬量で投与される、請求項２２に記載の方法。
【請求項２６】
前記１以上のチェックポイント阻害剤が、ヒトプログラム死受容体−１（ＰＤ−１）阻止抗体及び／又はヒト細胞傷害性Ｔリンパ球抗原４（ＣＴＬＡ−４）阻止抗体ではない、請求項２２に記載の方法。
【請求項２７】
前記１以上のチェックポイント阻害剤が、ニボルマブ、イピリムマブ、ペンブロリズマブ、トレメリムマブ、及びピディリズマブからなる群から選択される、請求項２２に記載の方法。
【請求項２８】
前記１以上のチェックポイント阻害剤がニボルマブ及びイピリムマブである、請求項２４に記載の方法。
【請求項２９】
前記１以上のチェックポイント阻害剤が、週１回、２週間毎に１回、又は３週間毎に１回、０．１ｍｇ／ｋｇ〜１．８ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、請求項２２に記載の方法。
【請求項３０】
前記１以上のチェックポイント阻害剤が、週１回、２週間毎に１回、又は３週間毎に１回、０．３ｍｇ／ｋｇ〜０．６ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、請求項２２に記載の方法。
【請求項３１】
前記患者に低用量化学療法を適用する、請求項１に記載の方法。
【請求項３２】
前記患者に、シクロホスファミド、ゲムシタビン、５−フルオロウラシル、パクリタキセル、シスプラチン、及びカルボプラチンを投与する、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
前記低用量化学療法が、１００ｍｇ／ｍ２〜８００ｍｇ／ｍ２の抗腫瘍剤を投与することを含む、請求項３１に記載の方法。
【請求項３４】
前記低用量化学療法が、ＴＲｅｇ細胞の下方制御に有効な抗腫瘍剤を、下方制御に対して有効であるが細胞傷害性レベル未満の量で投与することを含む、請求項３１に記載の方法。
【請求項３５】
前記複数の治療が、従来の化学療法及びＩＬ−２投与の耐えられない副作用を誘導しない、請求項１に記載の方法。
【請求項３６】
前記患者において血管漏出症候群を誘導することなく、前記患者にＩＬ−２を投与することを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３７】
前記患者において低血圧及び／又は腎機能障害を誘導することなく、前記患者にＩＬ−２を投与することを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３８】
前記複数の治療が行われた後に、前記患者のカルノフスキースコアが２０％以上改善される、請求項１に記載の方法。
【請求項３９】
前記患者における神経障害及び／又は神経障害性疼痛を軽減させることを更に含む、請求項１に記載の方法。
【請求項４０】
前記複数の治療が行われた後に、前記患者の食欲が亢進する、請求項１に記載の方法。
【請求項４１】
前記患者において不眠症を軽減させることを更に含む、請求項１に記載の方法。
【請求項４２】
前記患者において悪液質及び／又は疲労を軽減させることを更に含む、請求項１に記載の方法。
【請求項４３】
前記患者にビタミンを投与することを更に含む、請求項１に記載の方法。
【請求項４４】
前記患者にビタミンＣを投与することを更に含む、請求項１に記載の方法。
【請求項４５】
前記患者にアルファリポ酸を投与することを更に含む、請求項１に記載の方法。
【請求項４６】
前記患者にタウロリジンと組み合わせてＩＬ−２を５日間〜７日間投与することを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項４７】
前記患者にＰＤ−１チェックポイント阻害剤及びＣＴＬＡ−４チェックポイント阻害剤を週１回投与することを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項４８】
前記ＰＤ−１チェックポイント阻害剤及びＣＴＬＡ−４チェックポイント阻害剤を３週間〜５週間前記患者に投与する、請求項４７に記載の方法。
【請求項４９】
前記患者にＰＤ−１チェックポイント阻害剤及びＣＴＬＡ−４チェックポイント阻害剤を投与し、並行して前記患者をハイパーサーミア治療で治療することを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項５０】
前記ハイパーサーミア治療が、３週間〜５週間患者に適用される、請求項４９に記載の方法。
【請求項５１】
前記ハイパーサーミア治療が、局所領域的ハイパーサーミア治療である、請求項４９に記載の方法。
【請求項５２】
前記患者に低用量化学療法を適用し、並行して前記患者をハイパーサーミア治療で治療することを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項５３】
前記ハイパーサーミア治療が全身ハイパーサーミア治療である、請求項４９に記載の方法。
【請求項５４】
前記患者が、１以上のホルモン療法剤と組み合わせて、タウロリジン、タウルルタム、１以上のオキサチアジン様化合物、又はこれらの組み合わせで治療される、請求項１に記載の方法。
【請求項５５】
前記ホルモン療法剤がアナストロゾール、レトロゾール、及び／又はタモキシフェンである、請求項５４に記載の方法。
【請求項５６】
前記患者が閉経後であり、タウロリジン、タウルルタム、１以上のオキサチアジン様化合物、又はこれらの組み合わせと組み合わせて、アナストロゾール及び／又はレトロゾールで治療される、請求項１に記載の方法。
【請求項５７】
前記患者が閉経後であり、前記患者が、タウロリジン、タウルルタム、１以上のオキサチアジン様化合物、又はこれらの組み合わせと組み合わせて、タモキシフェンで治療される、請求項１に記載の方法。
【請求項５８】
ホルモン療法剤と、タウロリジン、タウルルタム、１以上のオキサチアジン様化合物、又はこれらの組み合わせとの組み合わせが、抗癌剤を投与することを更に含む、請求項５４に記載の方法。
【請求項５９】
前記抗癌剤が、ＩＬ−２、シクロホスファミド、ゲムシタビン、５−フルオロウラシル、パクリタキセル、シスプラチン、及びカルボプラチンの１以上である、請求項５８に記載の方法。
【請求項６０】
前記オキサチアジン様化合物がＣ−２２５０である、請求項５４に記載の方法。
【請求項６１】
前記患者に１以上のサイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫ）阻害剤を投与する、請求項１の方法。
【請求項６２】
前記ＣＤＫ阻害剤がＣＤＫ４／６阻害剤である、請求項６１に記載の方法。
【請求項６３】
前記ＣＤＫ阻害剤が、パルボシクリブ、リボシクリブ、アベマシクリブ、ディナシクリブ、又はこれらの組み合わせである、請求項６１に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、トリプルネガティブ乳癌と診断された患者を治療する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
乳癌は女性において最も一般的な癌である。乳癌は種々の生理学的特徴及び臨床反応を有する不均質な疾患（heterogeneous disease：異種疾患）である。乳癌の種類は、受容体の発現に基づいて分けられる。
【０００３】
多くの乳癌を促進すると同定された３つの分子、すなわち、エストロゲン受容体（ＥＲ）、プロゲステロン受容体（ＰＲ）及びヒト上皮増殖因子受容体２（ＨＥＲ２）が存在する。
【０００４】
トリプルネガティブ乳癌（「ＴＮＢＣ」：Triple-negative breast cancer）は、エストロゲン受容体（ＥＲ）、プロゲステロン受容体（ＰＲ）又はＨｅｒ２／ｎｅｕ（ＨＥＲ２）に対する遺伝子を発現しない任意の乳癌を指し、乳癌の約１５％を占める。ＥＲ及びＰＲを発現する腫瘍は、ホルモンの産生又は作用を妨げる薬剤で治療される。ＨＥＲ−２／Ｎｅｕを増幅した腫瘍は、ＨＥＲ−２／Ｎｅｕを阻害する薬剤で治療される。ほとんどの化学療法が、３つの受容体のうちの１つを標的とすることから、これがＴＮＢＣの治療をより困難にしている。トリプルネガティブ乳癌には、ホルモン陽性乳癌とは非常に異なる再発パターンがあり、すなわち再発のリスクが、最初の３年〜５年の間はるかに高いが、その後、急激に低下してホルモン陽性乳癌の再発リスクを実質的に下回る。したがって、ＴＮＢＣは非常に攻撃的で、予後が最も悪いタイプの乳癌である。この再発パターンは、絶対的な再発率及び生存率はサブタイプによって異なるものの、全種類のトリプルネガティブ癌について認められ、それに関する十分なデータが存在する。ＴＮＢＣは、典型的にはグレードが高く（分化が不十分）、急速に進行し、他のサブタイプの乳癌より高い再発リスク及びより低い生存を伴う。
【０００５】
従来の治療は、不十分な治療反応、高い毒性及び耐性の発現によって制限される。例えば化学療法、放射線照射及び免疫療法を伴う従来の全身療法及び併用療法による臨床的に意味のある結果の欠如は、それらの腫瘍抗原特異的Ｔ細胞を刺激し、増殖する能力にもかかわらず、治療誘導性Ｔ細胞応答が、かかる三者併用療法（triple therapy）後にＴ細胞のクローン増殖を制限する腫瘍の免疫逃避（immune escape）機構を克服することができないことに少なくとも部分的に起因している可能性がある。腫瘍圧力（tumoral pressure）の増加、抗原提示の減少、抗原性の喪失、サイトカイン、免疫抑制細胞、及び免疫チェックポイントを含む多くのかかる機構が認められている。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
これらの問題を考慮して、本開示の目的は、ＴＮＢＣに罹患した患者を治療するための安全で許容可能で有効な方法を提供することである。これらの及び他の目的は、本開示に従って達成された。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本開示によれば、ＴＮＢＣに罹患した患者を治療する方法及びそれに対する組成物が開示される。本開示によれば、原発性乳癌及び転移性乳癌を含む乳癌の治療に対し、タウロリジン及びＣ−２２５０が周術期にネオアジュバント治療として使用され得る。これらの化合物は、単独で及び他の（併用）治療、特にホルモンと組み合わせて使用され得て、例えば少なくとも５年間〜１０年間のＴＮＢＣ手術後の長期使用に特に有利である。Ｃ−２２５０は、ＴＮＢＣと診断された患者に対する経口療法として特に有用であるとされている。Ｃ−２２５０は、複数のＴＮＢＣ細胞株に対して有効であり、ヒトにおいて半減期が長く、許容可能で安全である。
【０００８】
本開示の一態様は、トリプルネガティブ乳癌（ＴＮＢＣ）に罹患した患者を治療する方法であって、タウロリジン、タウルルタム、１以上のオキサチアジン様化合物、若しくはこれらの組み合わせで患者を治療すること、又は、１以上のチェックポイント阻害剤、ハイパーサーミア（hyperthermia：温熱療法）、低用量化学療法、並びにタウロリジン、タウルルタム、１以上のオキサチアジン様化合物、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される化合物とのインターロイキン−２（ＩＬ−２）の併用療法からなる群から選択される複数の治療で患者を治療することを含む、方法である。
【０００９】
一態様では、患者は、静脈内、経口、又はこれらの組み合わせで投与されるタウロリジン、タウルルタム、１以上のオキサチアジン様化合物、又はこれらの組み合わせで治療される。
【００１０】
一態様では、患者は、手術前及び／又は手術中の期間に静脈内、経口、又はこれらの組み合わせで投与されるタウロリジン、タウルルタム、１以上のオキサチアジン様化合物、又はこれらの組み合わせで、並びに手術後に経口で投与されるタウロリジン、タウルルタム、１以上のオキサチアジン様化合物、又はこれらの組み合わせで治療される。
【００１１】
一態様では、患者は、静脈内、経口、又はこれらの組み合わせで投与されるＣ−２２５０で治療される。
【００１２】
一態様では、患者は、手術前及び／又は手術中の期間に静脈内、経口、又はこれらの組み合わせで投与されるＣ−２２５０、並びに手術後に経口で投与されるＣ−２２５０で治療される。
【００１３】
一態様では、患者は、１以上のサイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫ）阻害剤と組み合わせて、タウロリジン、タウルルタム、１以上のオキサチアジン様化合物又はこれらの組み合わせで治療される。当該技術分野で既知の任意のＣＤＫ阻害剤が併用療法で使用され得る。一実施の形態では、ＣＤＫ４／６阻害剤が特に有用となり得る。例えば、パルボシクリブ（ＰＤ−０３３２９９１）、リボシクリブ（ＬＥＥ０１１）、及び／又はアベマシクリブ（ＬＹ２８３５２１９）が使用され得る。他の実施の形態では、他のＣＤＫの阻害剤が使用され得て、例えばＣＤＫ１／５阻害剤であるディナシクリブ（ＳＣＨ−７２７９６５）が使用され得る。
【００１４】
一態様では、患者は、アナストロゾール、レトロゾール及びタモキシフェンを含む１以上のホルモン療法剤と組み合わせて、タウロリジン、タウルルタム、１以上のオキサチアジン様化合物、又はこれらの組み合わせで治療される。幾つかの態様では、患者が閉経後の患者である場合、患者は、タウロリジン、タウルルタム、１以上のオキサチアジン様化合物、又はこれらの組み合わせと組み合わせて、アナストロゾール及び／又はレトロゾールで治療される。幾つかの態様では、患者が閉経前の患者である場合、患者は、タウロリジン、タウルルタム、１以上のオキサチアジン様化合物、又はこれらの組み合わせと組み合わせて、タモキシフェンで治療される。
【００１５】
また、本開示は、以下の治療：ｉ）１以上のチェックポイント阻害剤；ｉｉ）ハイパーサーミア治療；ｉｉｉ）低用量化学療法；ｉｖ）インターロイキン−２（ＩＬ−２）；並びにｖ）タウロリジン、タウルルタム、オキサチアジン様化合物、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される化合物の複数によって患者を治療することを含む集学的方法によってＴＮＢＣに罹患した患者を治療する方法に関する。
【００１６】
一態様では、ＴＮＢＣに罹患した患者は、以下の治療：ｉ）１以上のチェックポイント阻害剤；ｉｉ）ハイパーサーミア治療；ｉｉｉ）低用量化学療法；ｉｖ）インターロイキン−２（ＩＬ−２）；並びにｖ）タウロリジン、タウルルタム、オキサチアジン様化合物、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される化合物で治療される。
【００１７】
一態様では、ＴＮＢＣに罹患した患者は、以下の治療：ｉ）１以上のチェックポイント阻害剤；ｉｉ）ハイパーサーミア治療；ｉｉｉ）低用量化学療法；ｉｖ）インターロイキン−２（ＩＬ−２）；並びにｖ）タウロリジン、タウルルタム、オキサチアジン様化合物、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される化合物の複数で順次に治療される。
【００１８】
一態様では、ＴＮＢＣに罹患した患者は、以下の治療：ｉ）１以上のチェックポイント阻害剤；ｉｉ）ハイパーサーミア治療；ｉｉｉ）低用量化学療法；ｉｖ）インターロイキン−２（ＩＬ−２）；並びにｖ）タウロリジン、タウルルタム、オキサチアジン様化合物、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される化合物で順次に治療される。
【００１９】
一態様では、ＴＮＢＣに罹患した患者は、以下の治療：ｉ）１以上のチェックポイント阻害剤；ｉｉ）ハイパーサーミア治療；ｉｉｉ）低用量化学療法；ｉｖ）インターロイキン−２（ＩＬ−２）；並びにｖ）タウロリジン、タウルルタム、オキサチアジン様化合物、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される化合物で治療され、ここで、上記治療の少なくとも２つが同時に又は前後に（in tandem）行われる。
【００２０】
一態様では、１以上のチェックポイント阻害剤は低用量で投与される。
【００２１】
一態様では、ＩＬ−２は生物学的有効用量、最大耐用量、又は生物学的有効用量と最大耐用量の間の用量で投与される。
【００２２】
従来の化学療法は、３つの受容体（エストロゲン受容体（ＥＲ）、プロゲステロン受容体（ＰＲ）又はＨｅｒ２／ｎｅｕ（ＨＥＲ２））のうち１つを標的とする。対照的に、本開示は、タウロリジン、タウルルタム、オキサチアジン様化合物、及びこれらの組み合わせが、それらの不均質な性質にもかかわらず、癌幹細胞と同様にＴＮＢＣ細胞を殺傷することができる予想外に広域スペクトルの治療薬であることから、これらの化合物を使用してＴＮＢＣを治療することを含む。
【００２３】
図中、＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１、＊＊＊ｐ＜０．００５、＊＊＊＊ｐ＜０．００１である。
【図面の簡単な説明】
【００２４】
【図１】ＢＴ−２０細胞株の細胞生存率に対する種々の濃度のタウロリジンの２４時間後の効果をグラフで示す図である（図１Ａ）。ＢＴ−２０細胞株の細胞生存率に対する種々の濃度のタウロリジンの４８時間後の効果をグラフで示す図である（図１Ｂ）。
【図２】ＢＴ−２０細胞株の細胞生存率に対する種々の濃度のＣ−２２５０の２４時間後の効果をグラフで示す図である（図２Ａ）。ＢＴ−２０細胞株の細胞生存率に対する種々の濃度のＣ−２２５０の４８時間後の効果をグラフで示す図である（図２Ｂ）。
【図３】ＭＣＦ−７細胞株の細胞生存率に対する種々の濃度のタウロリジンの２４時間後の効果をグラフで示す図である（図３Ａ）。ＭＣＦ−７細胞株の細胞生存率に対する種々の濃度のタウロリジンの４８時間後の効果をグラフで示す図である（図３Ｂ）。
【図４】ＭＣＦ−７細胞株の細胞生存率に対する種々の濃度のＣ−２２５０の２４時間後の効果をグラフで示す図である（図４Ａ）。ＭＣＦ−７細胞株の細胞生存率に対する種々の濃度のＣ−２２５０の４８時間後の効果をグラフで示す図である（図４Ｂ）。
【図５】ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞株の細胞生存率に対する種々の濃度のタウロリジンの２４時間後の効果をグラフで示す図である（図５Ａ）。ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞株の細胞生存率に対する種々の濃度のタウロリジンの４８時間後の効果をグラフで示す図である（図５Ｂ）。
【図６】ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞株の細胞生存率に対する種々の濃度のＣ−２２５０の２４時間後の効果をグラフで示す図である（図６Ａ）。ＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞株の細胞生存率に対する種々の濃度のＣ−２２５０の４８時間後の効果をグラフで示す図である（図６Ｂ）。
【図７】ＴＮＢＣ細胞のネクローシス及びアポトーシスに対する種々の濃度のタウロリジンの１２時間後の効果をグラフで示す図である（図７Ａ）。高用量のタウロリジン及びＣ−２２５０（５ｍＭ）が、２４時間後に末梢由来ヒト単球に対して顕著な効果を有しなかったことをグラフで示す図である（図７Ｂ）。
【図８】ＴＮＢＣ細胞のネクローシス及びアポトーシスに対する種々の濃度のＣ−２２５０の１２時間後の効果をグラフで示す図である。
【図９】ＴＮＢＣと診断された被験体のペリアジュバント（peri-adjuvant）治療としてのタウロリジン及び／又はＣ−２２５０の使用を概略的に示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００２５】
本明細書を通して、記載される全ての範囲は、別段の定めがない限り、そこにある全ての値及び部分範囲を含む。さらに、数量を特定していない単数形（"a" 又は"an"）は、別段の定めがない限り、本明細書を通して「１以上」の意味を持つ。
【００２６】
本開示の一態様は、トリプルネガティブ乳癌（ＴＮＢＣ）に罹患した患者を治療する方法であって、タウロリジン、タウルルタム、１以上のオキサチアジン様化合物、若しくはこれらの組み合わせで患者を治療すること、又は、１以上のチェックポイント阻害剤、ハイパーサーミア、低用量化学療法、並びにタウロリジン、タウルルタム、１以上のオキサチアジン様化合物、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される化合物とのインターロイキン−２（ＩＬ−２）の併用療法からなる群から選択される複数の治療で患者を治療することを含む、方法である。
【００２７】
一態様では、患者は、静脈内、経口、又はこれらの組み合わせで投与されるタウロリジン、タウルルタム、１以上のオキサチアジン様化合物、又はこれらの組み合わせで治療される。
【００２８】
一態様では、患者は、手術前及び／又は手術中の期間に静脈内、経口、又はこれらの組み合わせで投与されるタウロリジン、タウルルタム、１以上のオキサチアジン様化合物、又はこれらの組み合わせ、並びに手術後に経口で投与されるタウロリジン、タウルルタム、１以上のオキサチアジン様化合物、又はこれらの組み合わせで治療される。
【００２９】
一態様では、患者は、静脈内、経口、又はこれらの組み合わせで投与されるＣ−２２５０で治療される。
【００３０】
一態様では、患者は、手術前及び／又は手術中の期間に静脈内、経口、又はこれらの組み合わせで投与されるＣ−２２５０、並びに手術後に経口で投与されるＣ−２２５０で治療される。
【００３１】
一態様では、患者は、アナストロゾール、レトロゾール及びタモキシフェンを含む１以上のホルモン療法剤と組み合わせて、タウロリジン、タウルルタム、１以上のオキサチアジン様化合物、又はこれらの組み合わせで治療される。幾つかの態様では、患者が閉経後の患者である場合、患者は、タウロリジン、タウルルタム、１以上のオキサチアジン様化合物、又はこれらの組み合わせと組み合わせて、アナストロゾール及び／又はレトロゾールで治療される。幾つかの態様では、患者が閉経前の患者である場合、患者は、タウロリジン、タウルルタム、１以上のオキサチアジン様化合物、又はこれらの組み合わせと組み合わせて、タモキシフェンで治療される。特定の実施形態では、タウロリジン、タウルルタム、１以上のオキサチアジン様化合物、又はこれらの組み合わせとホルモン療法剤との組み合わせは、抗癌剤、例えばＩＬ−２、シクロホスファミド、ゲムシタビン、５−フルオロウラシル、パクリタキセル、シスプラチン、及びカルボプラチンの１以上との更なる組み合わせを含む。
【００３２】
特定の実施形態によれば、本開示は、１以上のチェックポイント阻害剤、ハイパーサーミア、インターロイキン−２（ＩＬ−２）、並びにタウロリジン、タウルルタム、オキサチアジン様化合物、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される化合物で患者を治療することを含む集学的方法によってＴＮＢＣに罹患した患者を治療する方法に関する。特定の実施形態では、図９に示されるように、ＴＮＢＣと診断された被験体のペリアジュバント治療としてタウロリジン及び／又はＣ−２２５０を使用することができる。
【００３３】
オキサチアジン様化合物は、２０１５年１２月１７日付出願の国際出願ＰＣＴ／ＩＢ２０１５／０５９７４１号に記載され、その全体が引用することによって本明細書の一部をなす。
【００３４】
本開示の一態様は、以下の治療：ｉ）１以上のチェックポイント阻害剤；ｉｉ）ハイパーサーミア治療；ｉｉｉ）低用量化学療法；ｉｖ）インターロイキン−２（ＩＬ−２）；並びにｖ）タウロリジン、タウルルタム、オキサチアジン様化合物、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される化合物の複数によって患者を治療することを含む集学的方法によってＴＮＢＣに罹患した患者を治療する方法に関する。
【００３５】
一態様では、ＴＮＢＣに罹患した患者は、以下の治療：ｉ）１以上のチェックポイント阻害剤；ｉｉ）ハイパーサーミア治療；ｉｉｉ）低用量化学療法；ｉｖ）インターロイキン−２（ＩＬ−２）；並びにｖ）タウロリジン、タウルルタム、オキサチアジン様化合物、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される化合物で治療される。
【００３６】
一態様では、ＴＮＢＣに罹患した患者は、以下の治療：ｉ）１以上のチェックポイント阻害剤；ｉｉ）ハイパーサーミア治療；ｉｉｉ）低用量化学療法；ｉｖ）インターロイキン−２（ＩＬ−２）；並びにｖ）タウロリジン、タウルルタム、オキサチアジン様化合物、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される化合物の複数で順次に治療される。
【００３７】
一態様では、ＴＮＢＣに罹患した患者は、以下の治療：ｉ）１以上のチェックポイント阻害剤；ｉｉ）ハイパーサーミア治療；ｉｉｉ）低用量化学療法；ｉｖ）インターロイキン−２（ＩＬ−２）；並びにｖ）タウロリジン、タウルルタム、オキサチアジン様化合物、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される化合物で順次に治療される。
【００３８】
一態様では、ＴＮＢＣに罹患した患者は、以下の治療：ｉ）１以上のチェックポイント阻害剤；ｉｉ）ハイパーサーミア治療；ｉｉｉ）低用量化学療法；ｉｖ）インターロイキン−２（ＩＬ−２）；並びにｖ）タウロリジン、タウルルタム、オキサチアジン様化合物、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される化合物で治療され、ここで、上記治療の少なくとも２つが同時に又は前後に行われる。
【００３９】
一態様では、患者にＩＬ−２と、タウロリジン、タウルルタム、オキサチアジン様化合物、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される化合物とを同時投与する。特定の実施形態では、ＩＬ−２はタウロリジンと同時投与される。特定の実施形態では、ＩＬ−２はＣ−２２５０と同時投与される。
【００４０】
一態様では、ハイパーサーミア治療は、例えば、４０℃〜４５℃の温度範囲、例えば４０℃、４０．５℃、４１℃、４１．５℃、４２℃、４２．５℃、４３℃、４３．５℃、４４℃、４４．５℃又は４５℃での局所領域的ハイパーサーミア、全身ハイパーサーミア（ＷＢＨＴ）、又はそれらの連続的な組み合わせを含む。特定の実施形態では、ハイパーサーミア治療は、選択的ハイパーサーミア治療用の高周波装置を使用することを含む。
【００４１】
一態様では、本開示の方法は、ＴＮＢＣ細胞又は癌幹細胞の増殖能を減少させる又は抑制する。
【００４２】
一実施形態では、１以上のチェックポイント阻害剤は、低用量で投与される。例えば、治療の間、２種類又は３種類の異なるチェックポイント阻害剤が同時に又は順次に患者に投与される。一態様では、１以上のチェックポイント阻害剤は、食品医薬品局（ＦＤＡ）が承認した投薬量を下回る用量で投与される。チェックポイント阻害剤として、限定されないが、ヒトプログラム死受容体−１（ＰＤ−１）阻止抗体、及びヒト細胞傷害性Ｔリンパ球抗原４（ＣＴＬＡ−４）阻止抗体が挙げられる。チェックポイント阻害剤として、限定されないが、ニボルマブ、イピリムマブ、ペンブロリズマブ、トレメリムマブ及びピディリズマブが挙げられる。
【００４３】
低用量のチェックポイント阻害剤として、週１回、２週毎に１回、又は３週間毎に１回の０．１ｍｇ／ｋｇ〜１．８ｍｇ／ｋｇ、０．２ｍｇ／ｋｇ〜１．５ｍｇ／ｋｇ、０．４ｍｇ／ｋｇ〜１ｍｇ／ｋｇ、又は０．５ｍｇ／ｋｇが挙げられる。低用量のニボルマブは、週１回、２週毎に１回、又は３週間毎に１回の０．１ｍｇ／ｋｇ〜１．８ｍｇ／ｋｇ、０．２ｍｇ／ｋｇ〜１．５ｍｇ／ｋｇ、０．４ｍｇ／ｋｇ〜１ｍｇ／ｋｇ、又は０．５ｍｇ／ｋｇである。低用量のイピリムマブは、週１回、２週毎に１回、又は３週間毎に１回の０．１ｍｇ／ｋｇ〜１．８ｍｇ／ｋｇ、０．２ｍｇ／ｋｇ〜１．５ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇ〜１ｍｇ／ｋｇ、又は０．３ｍｇ／ｋｇである。低用量のペンブロリズマブは、週１回、２週毎に１回、又は３週間毎に１回の０．０５ｍｇ／ｋｇ〜１．５ｍｇ／ｋｇ、０．１ｍｇ／ｋｇ〜１ｍｇ／ｋｇ、０．２ｍｇ／ｋｇ〜０．８ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇ〜０．５ｍｇ／ｋｇ、又は０．２ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇ若しくは０．４ｍｇ／ｋｇである。
【００４４】
特定の実施形態では、本開示の方法は、循環腫瘍細胞（ＣＴＣ：circulating tumor cells）の測定によるフォローアップモニタリングを含む。ＣＴＣは、原発性癌部位に由来し、血液中に循環する腫瘍細胞の部分集団である。本開示の方法は、ＰＣＲ、例えばリアルタイムＰＣＲ（ＲＴ−ＰＣＲ）、マルチプレックスＰＣＲ、血液からのＲＮＡの精製、抗体に基づく捕捉方法（主要なマーカーであるＣＫ、ＥｐＣＡＭ、ＢｅｒＥＰ４を使用する）、及び精密濾過法を含む、これらの細胞を濃縮、検出、及び分析するための様々な戦略を含む。ＣＴＣの計数は、本開示の方法のいずれかの工程の間、その前又はその後に組み込まれ得る。幾つかの実施形態では、ＣＴＣ数が所定の閾値を上回る場合、上記方法は、１．５倍〜２倍増量させた１以上の抗癌剤の投薬を含む。ＣＴＣ数が所定の閾値未満である場合、上記方法は、０．１倍量〜０．８倍量の１以上の抗癌剤の投薬を含むか、又はＩＬ−２及び他の抗癌剤のいずれも投与しない。
【００４５】
化学療法は、癌細胞が増加し、侵入し、転移するのを予防するため、抗腫瘍剤を利用する。本明細書で使用される「低用量化学療法」は、治療的用量以下、すなわち、医薬化合物が従来の手段によって投与される場合に癌の治療に対して従来許容される用量よりも少ない用量の抗癌医薬化合物の投与を指す。ドキソルビシン、シクロホスファミド、メトトレキサート、パクリタキセル、チオテパ、ミトキサントロン、ビンクリスチン、又はこれらの組み合わせ等の細胞傷害性の薬物を含む幾つかの薬物が、乳癌の治療に利用可能である。残った乳房組織が内分泌感受性を保持している場合、内分泌療法は有効な治療となり得る。この治療法に対して投与される薬剤として、タモキシフェン、酢酸メゲストロール、アミノグルテチミド、フルオキシメステロン、リュープロリド、ゴセレリン（goserelin）、及びプレドニゾンが挙げられる。特定の実施形態では、上記方法は、ＴＲｅｇ細胞を下方制御する抗癌医薬化合物を使用することを含む。かかる化合物として、限定されないが、シクロホスファミド、ゲムシタビン、５−フルオロウラシル、パクリタキセル、シスプラチン、及びカルボプラチンが挙げられる。低用量化学療法として、限定されないが、１００ｍｇ／ｍ２〜８００ｍｇ／ｍ２、２００ｍｇ／ｍ２〜５００ｍｇ／ｍ２、又は３００ｍｇ／ｍ２の用量の抗腫瘍薬、例えばシクロホスファミドの投与が挙げられる。
【００４６】
一態様では、ＩＬ−２は有効用量、最大耐用量、又は有効用量と最大耐用量の間の用量で投与される。ＩＬ−２の有効な一日投与量は、体表面積１ｍ２当たり１０００００００００単位（Ｕ）の範囲のＩＬ−２に含まれる薬学的投薬単位を含み得る。また、ＩＬ−２の投薬量は、体重１キログラム当たり１０００００Ｕ〜１００００００Ｕの範囲に含まれるとわかるであろう。ＩＬ−２の投薬量は、体重１キログラム当たり０．１マイクログラム〜１００マイクログラムのＩＬ−２の範囲に含まれることが更にわかるであろう。
【００４７】
特定の実施形態では、ＩＬ−２は、１０Ｍｉｏ  Ｉ．Ｕ．／ｍ２〜１００Ｍｉｏ  Ｉ．Ｕ．／ｍ２の用量で投与される。特定の実施形態では、ＩＬ−２は、１８Ｍｉｏ  Ｉ．Ｕ．／ｍ２〜７５Ｍｉｏ  Ｉ．Ｕ．／ｍ２の用量で投与される。特定の実施形態では、ＩＬ−２は、２５Ｍｉｏ  Ｉ．Ｕ．／ｍ２〜６０Ｍｉｏ  Ｉ．Ｕ．／ｍ２の用量で投与される。特定の実施形態では、ＩＬ−２は、５４Ｍｉｏ  Ｉ．Ｕ．／ｍ２の用量で投与される。
【００４８】
インターロイキン−２（ＩＬ−２）は、腫瘍細胞の成長を阻害すると示唆されている薬剤である。しかしながら、患者へのＩＬ−２の投与は、ＩＬ−２が患者において非常に強い全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ：systemic inflammatory response syndrome）の反応を誘発することから、重篤な毒性の問題を提示する。ＩＬ−２の毒性は非常に重篤で、およそ７０％の患者が治療を許容することができない。本明細書で使用される「ＩＬ−２」は、天然若しくは組み換えのインターロイキン−２、又はその生物学的に活性な誘導体若しくは実質的な等価物を含む。
【００４９】
その全体が引用することにより本明細書の一部をなす米国特許第７，８９２，５３０号（Redmond及びPfirrmann）に記載されるように、タウロリジン及びタウルルタム等のメチロール移行剤（methylol transfer agents）が、患者における腫瘍の転移を阻害するため及び癌を治療するための併用療法においてＩＬ−２の重篤な毒性及び副作用を減少させる又は実質的に排除する一方で、予想外なことに、本発明の併用療法ではメチロール移行剤によってＩＬ−２の効能が実際に増強されることがわかった。
【００５０】
特定の実施形態では、式Ｉ：
【化１】
2019508476.tif 000003
（式中、ＲはＨ、メチル、エチル、プロピル（例えばイソプロピル）、ベンジル等のアルキル等である）によるオキサチアジン様化合物が本発明により利用される。
【００５１】
特定の実施形態では、Ｃ−２２５０（テトラヒドロ１，４，５−オキサチアジン−４−ジオキサイド又は１，４，５−オキサチアジン−４−ジオキサイド）が使用される。
【００５２】
必要とされる化合物の量は腫瘍サイズに依存する。一実施形態では、本発明は、外科的に腫瘍サイズを減少させることと、１以上の上記化合物で治療することとを含む。上記化合物は、腫瘍を減少させるため、手術前、手術中又は手術後に投与され得る。本発明による化合物は、限定されず、ゲル剤、カプセル剤、錠剤による、静脈内、腹腔内及び／又は腫瘍に対して直接的なものを含む任意の好適な方法によって投与され得る。
【００５３】
ゲル剤は、例えば２％〜４％（例えば３％）の化合物２２５０等の本発明の活性化合物を単独で含んでもよく、又は同様に単独で投与され得る、また単独で存在し得るタウロリジン／タウルルタムと組み合わせて含んでもよく、また局所投与用であってもよい。かかるゲル剤を、口及び皮膚の扁平上皮細胞腫瘍を含む皮膚及び口の腫瘍を治療するために使用することができる。また、かかるゲル剤を、膣へと坐剤で、又はシリンジによって投与されることにより、子宮頸癌又は子宮頸部異形成を治療するために使用することができる。本発明は、活性化合物を運ぶ坐剤の組み合わせを含み得る。
【００５４】
経口投与用の固体剤形として、カプセル剤、錠剤、丸剤、散剤及び顆粒剤が挙げられる。かかる固体剤形において、提供される組成物は、少なくとも１つの不活性で薬学的に許容可能な賦形剤及び／又は充填剤又は増量剤（例えばデンプン、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトール及びケイ酸）、結合剤（例えばカルボキシメチルセルロース、アルギン酸塩、ゼラチン、ポリビニルピロリジノン、スクロース及びアラビアゴム（acacia：アカシア））、湿潤剤（例えばグリセロール）、崩壊剤（例えば寒天、炭酸カルシウム、ジャガイモデンプン、タピオカデンプン、アルギン酸、特定のケイ酸塩及び炭酸ナトリウム）、溶解遅延剤（solution retarding agents）（例えばパラフィン）、吸収促進剤（例えば四級アンモニウム化合物）、湿潤剤（例えばセチルアルコール及びグリセロールモノステアレート）、吸収剤（例えばカオリン及びベントナイト粘土）、及び滑沢剤（例えばタルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウム）、並びにそれらの混合物と混合される。カプセル剤、錠剤及び丸剤の場合、上記剤形は緩衝剤を含み得る。
【００５５】
本開示の化合物、特に化合物２２５０は、非常に水溶性であることがわかった。特定の実施形態では、可溶性を増すためにＰＶＰは必要ない。例えば、２２５０の３．２％溶液は等張である。これは、タウロリジンに対して予想外の利点である。
【００５６】
化合物２２５０（タウロリジン及び／又はタウルルタムを含む又は含まない）等の本発明の化合物は、該化合物が創傷治癒を妨げないことから、外科的腫瘍学に特に有用である。他の抗新生物薬は創傷治癒を妨げ、縫合不全を促進することから、手術後５週以降まで他のかかる抗新生物薬の投与を遅らせなくてはならない。かかる問題は、手術中及びその直後に投与することが可能な、創傷治癒の問題又は縫合不全の問題を伴わない化合物２２５０等の本発明の化合物によって回避され得る。
【００５７】
高分子量のポリエチレングリコール等と並んでラクトースすなわち乳糖等の賦形剤を使用する軟質及び／又は硬質充填ゼラチンカプセル剤において、同様のタイプの固体組成物が充填剤として利用され得る。腸溶性コーティング剤及び医薬製剤の分野でよく知られている他のコーティング剤等のコーティング剤及びシェルを用いて、錠剤、ドラジェ（dragees）、カプセル剤、丸剤、及び顆粒剤の固体剤形を調製することができる。それらの剤形は、任意に、不透明化剤を含んでもよく、任意に遅延方式で腸管の特定の部分においてのみ又はそこで優先的に提供される組成（複数の場合もある）を放出する組成物であってもよい。使用され得る包埋組成物の例として、高分子物質及びワックスが挙げられる。高分子量ポリエチレングリコール等と並んでラクトースすなわち乳糖等の賦形剤を使用する軟質及び硬質充填ゼラチンカプセル剤において、同様のタイプの固体組成物が充填剤として利用され得る。
【００５８】
特定の実施形態では、カプセル剤は、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、ゼラチン及び魚ゼラチンの１以上を含む賦形剤製剤を含み得る。特定の実施形態では、カプセル剤は、タウロリジン及び／又はタウルルタムと組み合わせて化合物２２５０を含み得る。カプセル剤は、任意に、リコピン、エラグ酸（ポリフェノール）、クルクミン、ピペリン、デルフィニジン、レスベラトロール、スルフォラファン等のイソチオシアネート、カプサイシン、及びピペルロングミンの１以上を更に含み得る。
【００５９】
化合物２２５０等の本発明の活性化合物は、ゲムシタビン等の化合物と組み合わせられ得る。この組み合わせを使用して、膵臓癌等の癌を治療することができる。タウロリジン及び／又はタウルルタムもまた、例えば膵臓癌を治療するためゲムシタビンと組み合わせられ得る。
【００６０】
幾つかの実施形態では、栄養学的な癌の予防及び治療の製品は、１００ｍｇ〜５００ｍｇの化合物２２５０を単独で、又は１００ｍｇ〜５００ｍｇのタウロリジン及び／又はタウルルタムと、リコピン、例えば２０ｍｇ〜２００ｍｇ、エラグ酸（ポリフェノール）、クルクミン、ピペリン（２０ｍｇ〜２００ｍｇ）、デルフィニジン、レスベラトロール、スルフォラファン等のイソチオシアネート、カプサイシン、及びピペルロングミンの１以上とを組み合わせて含み得る。
【００６１】
上記化合物は他の化学療法剤のように創傷治癒を阻害しないことから、予想外に、手術中及び手術直後に該化合物を投与することが可能であることがわかった。
【００６２】
タウロリジン、タウルルタム、並びにオキサチアジン様化合物及びその誘導体が、予想外に腫瘍幹細胞を殺傷することがわかり、それは化学療法剤では非常に稀であり、おそらく知られていない。典型的な化学療法剤は、腫瘍幹細胞に対して有効である場合、一般的には、非常に高用量でのみ有効であって、ヒト患者にとって非常に毒性である。
【００６３】
予想外なことに、腫瘍細胞を殺傷するために必要であった量よりも低用量のタウロリジン及び／又はタウルルタムが、腫瘍幹細胞を殺傷したことがわかった。
【００６４】
オキサチアジン様化合物及びその誘導体は、タウロリジン及びタウルルタムの半減期より著しく長いヒト血液中での半減期を有する。したがって、これらの化合物は、患者の血流からそれほど急速に取り除かれず、その結果、身体のクリアランス機構によって引き起こされる薬物効力の喪失を効果的に遅延させる。
【００６５】
オキサチアジン様化合物は、タウロリジンで治療された患者で観察される灼熱感（burning sensation）の作用とは異なり、組織に直接適用された場合にこの灼熱感は軽減される。
【００６６】
オキサチアジン様化合物は、高い水溶性、経口及び静脈内を含む多目的な投与経路、安定性及び半減期の延長、並びに灼熱感の副作用の著しい軽減を含む、特に有利な特性の組み合わせを有する。灼熱感の軽減は、２２５０を含むオキサチアジン様化合物を、経口、末梢、静脈内、腹腔内、及び患者が灼熱感に悩まされ得る他の投与方法を含む薬学的使用に非常に好適なものとする。
【００６７】
別の顕著な利点は、化合物２２５０の半減期がヒト血液において２４時間超であるということであり、それは、同じ試験を使用して、約３０分であることがわかったタウロリジンの半減期よりも著しく長い。
【００６８】
一日投与量は、約０．１ｇ〜約１００ｇ、例えば約５ｇ〜約３０ｇであってもよい。一日投与量は、経口投与用組成物の形態で投与され得る。一日投与量は、カプセル剤、錠剤又は薬学的に許容可能な溶液の形態で投与され得る。一日投与量は、約０．０１重量／体積％〜約３重量／体積％の濃度で化合物２２５０を含む形態で投与され得る。一日投与量は、約０．０１μｇ／ｍｌ〜約１０００μｇ／ｍｌの濃度で化合物２２５０を含む形態で投与され得る。一日投与量は、１以上の可溶化剤、例えばポリオールを含む形態で投与され得る。
【００６９】
幾つかの実施形態では、上記化合物は約０．０１μｇ／ｍｌ〜約１０００μｇ／ｍｌの濃度で組成物において投与される。幾つかの実施形態では、上記化合物は約１μｇ／ｍｌ〜約１００μｇ／ｍｌの濃度で組成物において投与される。幾つかの実施形態では、上記化合物は約１０μｇ／ｍｌ〜約５０μｇ／ｍｌの濃度で組成物において投与される。また、上記組成物は、約０．０１μｇ／ｍｌ〜１０００μｇ／ｍｌ、約１μｇ／ｍｌ〜約１００μｇ／ｍｌ、又は約１０μｇ／ｍｌ〜約５０μｇ／ｍｌのタウロリジン及び／又はタウルルタムを含み得る。
【００７０】
幾つかの実施形態では、上記化合物は約０．０１％〜約３％の濃度で組成物において投与される。幾つかの実施形態では、上記化合物は約０．１％〜約２．５％の濃度で組成物において投与される。幾つかの実施形態では、上記化合物は約１％〜約２％の濃度で組成物において投与される。また、上記組成物は、約０．０１％〜約３％、約０．１％〜約２．５％、又は約１％〜約２％のタウロリジン及び／又はタウルルタムを含み得る。
【００７１】
一実施形態では、オキサチアジン様化合物及びその誘導体は、腫瘍幹細胞を殺傷するため、タウロリジン及び／又はタウルルタムとの併用療法として適用され得る。かかる実施形態によれば、併用療法は、予想外なことに、腫瘍幹細胞を殺傷するには、通常の腫瘍細胞を殺傷するために必要な量よりも少ない投薬量の薬物を必要とすることがわかった。
【００７２】
特定の実施形態では、オキサチアジン様化合物及びその誘導体はビタミンＤ３と共に投与され得て、該化合物の抗腫瘍効果の増加をもたらす。
【００７３】
特定の実施形態では、ハイパーサーミア療法は、ビタミンＣと同時に適用され得る。特定の実施形態では、ビタミンＣは、例えば０．３ｇ／ｋｇ〜１ｇ／ｋｇ又は０．５ｇ／ｋｇの高用量である。
【００７４】
特定の実施形態では、ハイパーサーミア療法は、例えば５００ｍｇ〜１０００ｍｇ、６００ｍｇ、又は８００ｍｇの用量のアルファリポ酸と同時に適用され得る。
【００７５】
一実施形態では、タウロリジン、タウルルタム又はオキサチアジン様化合物は、約０．１ｇ〜約１００ｇ、約１ｇ〜約８０ｇ、約２ｇ〜約５０ｇ、又は約５ｇ〜約３０ｇの合計一日用量で被験体に投与され得る。
【００７６】
タウロリジン、タウルルタム又はオキサチアジン様化合物の有効な投薬量は、約０．１ｍｇ／ｋｇ〜１０００ｍｇ／ｋｇ、好ましくは１日当たり１５０ｍｇ／ｋｇ〜４５０ｍｇ／ｋｇ、最も好ましくは１日当たり３００ｍｇ／ｋｇ〜４５０ｍｇ／ｋｇの範囲に含まれる投薬単位である。好ましい投薬量は、１回の投与当たり約１０グラム〜２０グラムのタウロリジン、タウルルタム又はそれらの混合物の範囲に含まれ得る。
【００７７】
タウロリジン、タウルルタム、又はオキサチアジン様化合物を使用する他の利点として、従来の治療法を許容できないものとする、かかる治療法の毒性の回避が挙げられる。ＴＮＢＣの治療にタウロリジン、タウルルタム又はオキサチアジン様化合物を使用することは、脱毛、鵞口瘡、放射線による熱傷、食欲不振、感染症、吐き気、閉経、皮疹、手足のうずくような痛み又はしびれ、聴覚の問題、平衡感覚喪失、関節痛、並びに脚及び足のむくみを含む既存の治療法の副作用を回避するのに有利である。
【００７８】
幾つかの実施形態では、治療期間中の静注による１日当たり約１０００００００ユニットｍ２〜４０００００００ユニットｍ２のＩＬ−２の投与と並行して、治療期間中に静注によって１日当たり約１回〜６回、より好ましくは１日当たり約２回〜４回、２％タウロリジン溶液が投与される。
【００７９】
本明細書で使用される、「純粋な」の用語は少なくとも約８０％不純物及び汚染物質のない純粋な物質を指す。幾つかの実施形態では、「純粋な」の用語は少なくとも約９０％不純物及び汚染物質のない純粋な物質を指す。特定の実施形態では、「純粋な」の用語は少なくとも約９５％不純物及び汚染物質のない純粋な物質を指す。幾つかの実施形態では、「純粋な」の用語は少なくとも約９９％不純物及び汚染物質のない純粋な物質を指す。幾つかの実施形態では、「純粋な」の用語は少なくとも約９９．５％不純物及び汚染物質のない純粋な物質を指す。
【００８０】
特定の実施形態では、本発明の化合物、組成物及び方法は、微粒子化された化合物の使用を包含する。幾つかの実施形態では、本明細書で使用される「微粒子化された」の用語は、約０．００５ミクロン〜１００ミクロンの範囲の粒子径を指す。特定の実施形態では、本明細書で使用される「微粒子化された」の用語は、約０．５ミクロン〜５０ミクロンの範囲の粒子径を指す。特定の実施形態では、本明細書で使用される「微粒子化された」の用語は、約１ミクロン〜２５ミクロンの範囲の粒子径を指す。例えば、薬物の粒子径は、約１ミクロン、５ミクロン、１０ミクロン、１５ミクロン、２０ミクロン、又は２５ミクロンであってもよい。
【００８１】
特定の実施形態では、本発明の化合物、組成物及び方法は、ナノ粒子の使用を包含する。本明細書で使用される「ナノ粒子」の用語は、直径が１０００ナノメートル（ｎｍ）未満である任意の粒子を指す。幾つかの実施形態では、ナノ粒子の直径は３００ｎｍ未満である。幾つかの実施形態では、ナノ粒子の直径は１００ｎｍ未満である。幾つかの実施形態では、ナノ粒子の直径は５０ｎｍ未満、例えば約１ｎｍ〜５０ｎｍである。
【００８２】
注射又は点滴に適した製剤は、化合物濃度が増加した溶液を提供するため、１以上の可溶化剤、例えば多価アルコールを含むグルコース等の等張液を含み得る。かかる溶液は欧州特許第２５３６６２号に記載される。上記溶液は、リンガー溶液又はリンガー乳酸塩溶液で等張にされ得る。かかる溶液中の化合物の濃度は、１ｇ／リットル〜６０ｇ／リットルの範囲にあってもよい。
【００８３】
上記化合物は、例えば、アルコール、ケトン、エステル又はこれらの組み合わせにおける結晶化後及び／又は再結晶後の結晶形態であってもよい。例えば、本発明の化合物は、エタノール等のアルコールから結晶化及び／又は再結晶化され得る。
【００８４】
例示的なオキサチアジン様化合物として、以下が挙げられる。
【００８５】
【化２】
2019508476.tif 000004
【００８６】
ナノ粒子の形態で使用される場合、特許請求の範囲に記載される発明の化合物は、より高い血中濃度を達成することが分かった。一実施形態では、本発明は、化合物２２５０を単独で、又はタウロリジン及び／又はタウルルタムと組み合わせて含む。例えば、本発明は、カプセル剤に封入された本発明の化合物のナノ粒子を含む。
【００８７】
また特定の実施形態では、本発明は、例えば、上記化合物の本明細書に記載される活性を有する、例えば、少なくとも２５％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、１００％以上の上記活性を有する上記化合物の誘導体に関する。
【００８８】
また特定の実施形態では、本発明は、上記化合物の薬学的に許容可能な溶液を含む、本明細書に記載される化合物を含む組成物、並びに上記組成物を含むカプセル剤及び錠剤等の経口投与用組成物に関する。
【００８９】
特定の実施形態では、本開示は、患者にオキサチアジン様化合物を経口投与することに関する。幾つかの実施形態では、オキサチアジン様化合物はカプセル剤に製剤化される。特定の実施形態では、カプセル剤は５０ｍｇ〜１０００ｍｇのオキサチアジン様化合物を含む。特定の実施形態では、カプセル剤は１００ｍｇ〜５００ｍｇのオキサチアジン様化合物を含む。特定の実施形態では、カプセル剤は２００ｍｇ〜４００ｍｇのオキサチアジン様化合物を含む。特定の実施形態では、カプセル剤は２５０ｍｇ〜３５０ｍｇのオキサチアジン様化合物を含む。特定の実施形態では、オキサチアジン様化合物はＣ−２２５０である。
【００９０】
特定の実施形態では、本開示は、ＩＬ−２及びＣ−２２５０を含む配合薬製剤（combined drug formulations）を含むＩＬ−２とＣ−２２５０の相乗的組み合わせ、並びにＩＬ−２とＣ−２２５０を、例えば別々の剤形又は合剤の形態で同時に及び／又は並行して投与することを含む方法に関する。この併用治療によれば、患者は、ＩＬ−２とＣ−２２５０の両方の抗ＴＮＢＣの効能による利益を受けながら、ＩＬ−２単独療法の毒性の副作用から保護される。併用療法は、ＩＬ−２とＣ−２２５０の相加効果と比較して上記治療法の効能を予想外に増加させた結果、相乗的に増加された効能を提供する。さらに、ＩＬ−２単独療法と比較した有害作用の減少は予想外に相乗効果をより一層増強させる。特定の実施形態では、本発明の化合物は、任意の好適な手段によって、例えば溶液で、例えば局所的に、静注等によって全身的に、被験体又は患者に投与され得る。
【００９１】
一実施形態では、本開示は、腫瘍幹細胞を殺傷するのに有効な量のタウロリジン、タウルルタム又はそれらの混合物を、それを必要とする被験体に投与することによって腫瘍幹細胞を殺傷する方法を含む。腫瘍幹細胞を殺傷するのに有効な量のタウロリジン及び／又はタウルルタムは、腫瘍細胞を殺傷するのに必要なタウロリジン及び／又はタウルルタムの量未満である。
【００９２】
幾つかの実施形態では、腫瘍幹細胞を殺傷する組成物中、約０．０１μｇ／ｍｌ〜約５００μｇ／ｍｌの濃度でタウロリジン、タウルルタム又はそれらの混合物が投与される。幾つかの実施形態では、腫瘍幹細胞を殺傷する組成物中、約０．１μｇ／ｍｌ〜約１００μｇ／ｍｌの濃度でタウロリジン、タウルルタム又はそれらの混合物が投与される。幾つかの実施形態では、腫瘍幹細胞を殺傷するのに有効な組成物中、約１０μｇ／ｍｌ〜約５０μｇ／ｍｌの濃度でタウロリジン、タウルルタム又はそれらの混合物が投与される。タウロリジンは、０．０１μｇ／ｍｌでｉｎ  ｖｉｔｒｏでの組織培養において腫瘍幹細胞を殺傷するのに有効である。
【００９３】
幾つかの実施形態では、腫瘍幹細胞を殺傷する組成物中、約０．００１％〜約２％の濃度でタウロリジン、タウルルタム又はそれらの混合物が投与される。幾つかの実施形態では、腫瘍幹細胞を殺傷する組成物中、約０．０１％〜約１．５％の濃度でタウロリジン、タウルルタム又はそれらの混合物が投与される。幾つかの実施形態では、腫瘍幹細胞を殺傷する組成物中、約０．１％〜約１％の濃度でタウロリジン、タウルルタム又はそれらの混合物が投与される。
【００９４】
一実施形態では、タウロリジン、タウルルタム又はそれらの混合物を、腫瘍幹細胞を殺傷するため、約０．０１ｇ〜約５０ｇ、約０．１ｇ〜約３０ｇ、約０．５ｇ〜約１０ｇ、又は約１ｇ〜約５ｇの合計一日用量でそれを必要とする被験体に投与する。
【００９５】
腫瘍幹細胞を殺傷するのに有効な投薬量のタウロリジン、タウルルタム又はそれらの混合物は、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜５００ｍｇ／ｋｇ、好ましくは１日当たり１ｍｇ／ｋｇ〜１００ｍｇ／ｋｇ、最も好ましくは１日当たり５ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇの範囲に含まれる投薬単位である。
【００９６】
別の実施形態では、本開示は、タウロリジン及び／又はタウルルタムと組み合わせて使用され得る以下の化合物：
【化３】
2019508476.tif 000005
（式中、各Ｒは、独立してＨ、アルキル、又はアリールである）、
【化４】
2019508476.tif 000006
から選択される化合物を、腫瘍幹細胞の殺傷を必要とする被験体に投与することによる、腫瘍幹細胞を殺傷する方法を含む。かかる技術は、異なる半減期を有する少なくとも２種類の化合物を使用することにより、それによって得られる薬物動態学的効果を広げる、腫瘍幹細胞を殺傷する方法を提供する。一実施形態では、化合物２２５０は、タウロリジン及び／又はタウルルタムと組み合わせて使用され得る。
【００９７】
本開示は、以下に記載される項目に関する。
【００９８】
項目１．トリプルネガティブ乳癌（ＴＮＢＣ）に罹患した患者を治療する方法であって、タウロリジン、タウルルタム、１以上のオキサチアジン様化合物、若しくはこれらの組み合わせで患者を治療すること、又は、１以上のチェックポイント阻害剤、ハイパーサーミア、低用量化学療法、並びにタウロリジン、タウルルタム、１以上のオキサチアジン様化合物、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される化合物とのインターロイキン−２（ＩＬ−２）の併用療法からなる群から選択される複数の治療で患者を治療することを含む、方法。
【００９９】
項目２．患者が、静脈内、経口、又はこれらの組み合わせで投与されるタウロリジン、タウルルタム、１以上のオキサチアジン様化合物、又はこれらの組み合わせで治療される、項目１に記載の方法。
【０１００】
項目３．患者が、手術前及び／又は手術中の期間に静脈内、経口、又はこれらの組み合わせで投与されるタウロリジン、タウルルタム、１以上のオキサチアジン様化合物、又はこれらの組み合わせで、並びに手術後に経口で投与されるタウロリジン、タウルルタム、１以上のオキサチアジン様化合物、又はこれらの組み合わせで治療される、項目１又は２に記載の方法。
【０１０１】
項目４．患者が、静脈内、経口、又はこれらの組み合わせで投与されるＣ−２２５０で治療される、項目１〜３に記載の方法。
【０１０２】
項目５．患者が、手術前及び／又は手術中の期間に静脈内、経口、又はこれらの組み合わせで投与されるＣ−２２５０で、並びに手術後に経口で投与されるＣ−２２５０で治療される、項目１〜４に記載の方法。
【０１０３】
項目６．Ｃ−２２５０の経口投与剤形が、経口で摂取された場合、２μｇ／ｍｌ以上の血中濃度Ｃｍａｘを達成するカプセル剤である、項目１〜５に記載の方法。
【０１０４】
項目７．Ｃ−２２５０の経口投与剤形が、経口で摂取された場合、５μｇ／ｍｌ以上の血中濃度Ｃｍａｘを達成するカプセル剤である、項目１〜６に記載の方法。
【０１０５】
項目８．Ｃ−２２５０の経口投与剤形が、経口で摂取された場合、１５μｇ／ｍｌ以上の血中濃度Ｃｍａｘを達成するカプセル剤である、項目１〜７に記載の方法。
【０１０６】
項目９．ＩＬ−２単独療法と関連する毒性の副作用を誘導することなく、有効量のＣ−２２５０及びＩＬ−２を患者に投与することを含む複数の治療で患者を治療することを含む、項目１〜８に記載の方法。
【０１０７】
項目１０．少なくとも２つの治療が、同時に又は前後に行われる、項目１〜９に記載の方法。
【０１０８】
項目１１．複数の治療の全てで患者を治療することを含む、項目１〜１０に記載の方法。
【０１０９】
項目１２．患者に１以上のチェックポイント阻害剤を順次に投与することと、患者をハイパーサーミア治療に供することと、患者に低用量化学療法を適用することと、タウロリジン、タウルルタム、オキサチアジン様化合物、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される化合物とＩＬ−２とを同時投与することとを含む、項目１〜１１に記載の方法。
【０１１０】
項目１３．ＩＬ−２が生物学的有効用量、最大耐用量、又は生物学的有効用量と最大耐用量の間の用量で投与される、項目１〜１２に記載の方法。
【０１１１】
項目１４．ＩＬ−２が、２５Ｍｉｏ  Ｉ．Ｕ．／ｍ２〜６０Ｍｉｏ  Ｉ．Ｕ．／ｍ２の用量で投与される、項目１〜１３に記載の方法。
【０１１２】
項目１５．ＩＬ−２がタウロリジン、タウルルタム、又はこれらの組み合わせと同時投与される、項目１〜１４に記載の方法。
【０１１３】
項目１６．ＩＬ−２が、１以上の以下の化合物：
【化５】
2019508476.tif 000007
と同時投与される、項目１〜１５に記載の方法。
【０１１４】
項目１７．ＩＬ−２がＣ−２２５０：
【化６】
2019508476.tif 000008
と同時投与される、項目１〜１６に記載の方法。
【０１１５】
項目１８.患者にハイパーサーミア治療を適用する、項目１〜１７に記載の方法。
【０１１６】
項目１９．患者に局所領域的ハイパーサーミア治療を適用する、項目１〜１８に記載の方法。
【０１１７】
項目２０．患者に全身ハイパーサーミア（ＷＢＨＴ）を適用する、項目１〜１９に記載の方法。
【０１１８】
項目２１．患者に局所領域的ハイパーサーミア治療と全身ハイパーサーミア治療とを連続的に組み合わせて適用する、項目１〜２０に記載の方法。
【０１１９】
項目２２．患者に１以上のチェックポイント阻害剤を投与する、項目１〜２１に記載の方法。
【０１２０】
項目２３．患者に２種類又は３種類のチェックポイント阻害剤を投与する、項目１〜２２に記載の方法。
【０１２１】
項目２４．患者に２種類のチェックポイント阻害剤を同時投与する、項目１〜２３に記載の方法。
【０１２２】
項目２５．１以上のチェックポイント阻害剤が、該１以上のチェックポイント阻害剤に対して食品医薬品局（ＦＤＡ）が承認した投薬量を下回る投薬量で投与される、項目１〜２４に記載の方法。
【０１２３】
項目２６．１以上のチェックポイント阻害剤が、ヒトプログラム死受容体−１（ＰＤ−１）阻止抗体及び／又はヒト細胞傷害性Ｔリンパ球抗原４（ＣＴＬＡ−４）阻止抗体ではない、項目１〜２５に記載の方法。
【０１２４】
項目２７．１以上のチェックポイント阻害剤が、ニボルマブ、イピリムマブ、ペンブロリズマブ、トレメリムマブ、及びピディリズマブからなる群から選択される、項目１〜２６に記載の方法。
【０１２５】
項目２８．１以上のチェックポイント阻害剤がニボルマブ及びイピリムマブである、項目１〜２７に記載の方法。
【０１２６】
項目２９．１以上のチェックポイント阻害剤が、週１回、２週間毎に１回、又は３週間毎に１回、０．１ｍｇ／ｋｇ〜１．８ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、項目１〜２８に記載の方法。
【０１２７】
項目３０．１以上のチェックポイント阻害剤が、週１回、２週間毎に１回、又は３週間毎に１回、０．３ｍｇ／ｋｇ〜０．６ｍｇ／ｋｇの用量で投与される、項目１〜２９に記載の方法。
【０１２８】
項目３１．患者に低用量化学療法を適用する、項目１〜３０に記載の方法。
【０１２９】
項目３２．患者に、シクロホスファミド、ゲムシタビン、５−フルオロウラシル、パクリタキセル、シスプラチン、及びカルボプラチンを投与する、項目１〜３１に記載の方法。
【０１３０】
項目３３．低用量化学療法が、１００ｍｇ／ｍ２〜８００ｍｇ／ｍ２の抗腫瘍剤を投与することを含む、項目１〜３２に記載の方法。
【０１３１】
項目３４．低用量化学療法が、ＴＲｅｇ細胞の下方制御に有効な抗腫瘍剤を、下方制御に対して有効であるが細胞傷害性レベル未満の量で投与することを含む、項目１〜３３に記載の方法。
【０１３２】
項目３５．上記複数の治療が、従来の化学療法及びＩＬ−２投与の許容できない副作用を誘導しない、項目１〜３４に記載の方法。
【０１３３】
項目３６．患者において血管漏出症候群を誘導することなく、患者にＩＬ−２を投与することを含む、項目１〜３５に記載の方法。
【０１３４】
項目３７．患者において低血圧及び／又は腎機能障害を誘導することなく、患者にＩＬ−２を投与することを含む、項目１〜３６に記載の方法。
【０１３５】
項目３８．複数の治療が行われた後に、患者のカルノフスキースコアが２０％以上改善される、項目１〜３７に記載の方法。
【０１３６】
項目３９．患者における神経障害及び／又は神経障害性疼痛を軽減させることを更に含む、項目１〜３８に記載の方法。
【０１３７】
項目４０．複数の治療が行われた後に、患者の食欲が亢進する、項目１〜３９に記載の方法。
【０１３８】
項目４１．患者において不眠症を軽減させることを更に含む、項目１〜４０に記載の方法。
【０１３９】
項目４２．患者において悪液質及び／又は疲労を軽減させることを更に含む、項目１〜４１に記載の方法。
【０１４０】
項目４３．患者にビタミンを投与することを更に含む、項目１〜４２に記載の方法。
【０１４１】
項目４４．患者にビタミンＣを投与することを更に含む、項目１〜４３に記載の方法。
【０１４２】
項目４５．患者にアルファリポ酸を投与することを更に含む、項目１〜４４に記載の方法。
【０１４３】
項目４６．患者にタウロリジンと組み合わせてＩＬ−２を５日間〜７日間投与することを含む、項目１〜４５に記載の方法。
【０１４４】
項目４７．患者にＰＤ−１チェックポイント阻害剤及びＣＴＬＡ−４チェックポイント阻害剤を週１回投与することを含む、項目１〜４６に記載の方法。
【０１４５】
項目４８．ＰＤ−１チェックポイント阻害剤及びＣＴＬＡ−４チェックポイント阻害剤を３週間〜５週間患者に投与する、項目１〜４７に記載の方法。
【０１４６】
項目４９．患者にＰＤ−１チェックポイント阻害剤及びＣＴＬＡ−４チェックポイント阻害剤を投与し、並行して患者をハイパーサーミア治療で治療することを含む、項目１〜４８に記載の方法。
【０１４７】
項目５０．ハイパーサーミア治療が、３週間〜５週間患者に適用される、項目１〜４９に記載の方法。
【０１４８】
項目５１．ハイパーサーミア治療が、局所領域的ハイパーサーミア治療である、項目１〜５０に記載の方法。
【０１４９】
項目５２．患者に低用量化学療法を適用し、並行して患者をハイパーサーミア治療で治療することを含む、項目１〜５１に記載の方法。
【０１５０】
項目５３．ハイパーサーミア治療が全身ハイパーサーミア治療である、項目１〜５２に記載の方法。
【０１５１】
項目５４．患者が、１以上のホルモン療法剤と組み合わせて、タウロリジン、タウルルタム、１以上のオキサチアジン様化合物、又はこれらの組み合わせで治療される、項目１〜５３に記載の方法。
【０１５２】
項目５５．ホルモン療法剤がアナストロゾール、レトロゾール、及び／又はタモキシフェンである、項目１〜５４に記載の方法。
【０１５３】
項目５６．患者が閉経後であり、タウロリジン、タウルルタム、１以上のオキサチアジン様化合物、又はこれらの組み合わせと組み合わせて、アナストロゾール及び／又はレトロゾールで治療される、項目１〜５５に記載の方法。
【０１５４】
項目５７．患者が閉経後であり、患者が、タウロリジン、タウルルタム、１以上のオキサチアジン様化合物、又はこれらの組み合わせと組み合わせて、タモキシフェンで治療される、項目１〜５６に記載の方法。
【０１５５】
項目５８．ホルモン療法剤と、タウロリジン、タウルルタム、１以上のオキサチアジン様化合物、又はこれらの組み合わせとの組み合わせが、抗癌剤を投与することを更に含む、項目１〜５７に記載の方法。
【０１５６】
項目５９．抗癌剤が、ＩＬ−２、シクロホスファミド、ゲムシタビン、５−フルオロウラシル、パクリタキセル、シスプラチン、及びカルボプラチンの１以上である、項目１〜５８に記載の方法。
【０１５７】
項目６０．オキサチアジン様化合物がＣ−２２５０である、項目１〜５９に記載の方法。
【０１５８】
項目６１．患者に１以上のサイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫ）阻害剤を投与する、項目１〜６０に記載の方法。
【０１５９】
項目６２．ＣＤＫ阻害剤がＣＤＫ４／６阻害剤である、項目１〜６１に記載の方法。
【０１６０】
項目６３．ＣＤＫ阻害剤が、パルボシクリブ、リボシクリブ、アベマシクリブ、ディナシクリブ、又はこれらの組み合わせである、項目１〜６１に記載の方法。
【実施例】
【０１６１】
実施例１：乳癌細胞の生存率の研究
緒言
強力な抗新生物薬としてのタウロリジン及びＣ−２２５０の認識に基づいて、これらの薬剤を以下の乳癌細胞株：ＢＴ−２０（原発性乳癌、ＨＲ陰性）、ＭＤＡ−ＭＢ−２３１（転移性、ＨＲ陰性）及びＭＣＦ−７（転移性、ＨＲ陽性）に対して試験した。ＢＴ−２０及びＭＤＡ−ＭＢ−２３１はＴＮＢＣ細胞株であるが、ＭＣＦ−７はＴＮＢＣ細胞株ではない。
【０１６２】
材料及び方法
１０％ウシ胎児血清（ＦＢＳ）及び１％ペニシリン−ストレプトマイシン（ｐｅｎ−ｓｔｒｅｐ）で補足したＥＭＥＭ中でＢＴ−２０細胞株を培養した。１０％ＦＢＳ、１％ｐｅｎ−ｓｔｒｅｐ及び０．１％インスリンで補足したＤＭＥＭ中でＭＣＦ−７を培養した。１０％ＦＢＳ及び１％ｐｅｎ−ｓｔｒｅｐを含むＤＭＥＭ中でＭＤＡ−ＭＢ−２３１を培養した。全ての細胞を５％ＣＯ２の加湿雰囲気において３７℃で培養した。
【０１６３】
化学物質：タウロリジンの２％溶液及びＣ−２２５０超高純度粉体は本発明の譲受人であるヴォルフーゼンのGeistlich Pharma AGによって提供された。Ｃ−２２５０を最終濃度までＰＢＳ溶液に溶解することによってＣ−２２５０溶液を作製した。試薬を１０μΜ、１００μΜ、２５０μΜ、５００μΜ及び１０００μΜのタウロリジンを含む、５つの異なる濃度に更に希釈し、一方、Ｃ−２２５０を１００μΜ、２５０μΜ、５００μΜ、７５０μΜ及び１０００μΜに希釈した。
【０１６４】
コロニー形成アッセイ：１００μｌの乳癌細胞株を、それぞれの最適密度（ＢＴ−２０及びＭＤＡ−ＭＢ−２３１：１．０×１０５細胞／ｍｌ；ＢＴ−４７４：５．０×１０５細胞／ｍｌ；及びＭＣＦ−７：０．５×１０５細胞／ｍｌ）で９６ウェルプレートに蒔いた。細胞を培養条件下で１２時間インキュベートし、細胞を付着させた。その後、細胞培地を除去し、新たな培養培地のみ（対照）、又は種々の濃度のタウロリジン（１０μΜ、１００μΜ、２５０μΜ、５００μΜ、及び１０００μΜ）及びＣ−２２５０（１００μΜ、２５０μΜ、５００μΜ、７５０μΜ、及び１０００μΜ）を含む培養培地を添加した。
【０１６５】
細胞生存率アッセイ：２４時間後、１０μｌのＭＴＴ溶液を各ウェルに添加し、更に２時間インキュベーションを延長した。その後、上清を除去し、１００μｌのＰＢＳで洗浄してから、１００μｌのＤＭＳＯを添加した。５７０ｎｍの波長でＭｉｃｒｏｔｉｔｒｅ  Ｐｌａｔｅ  Ｒｅａｄｅｒ（バージニア州シャンティリーのDynex Technologies Inc.）を使用して吸光度を測定した。また、実験を４８時間で行い、全体の手順を３回繰り返した。
【０１６６】
結果
データは平均±ＳＥＭとして表わされ、３回の別々の実験の代表である。
【０１６７】
２４時間後及び４８時間後のタウロリジンのＢＴ−２０細胞株の細胞生存率に関する細胞生存研究の結果を図１Ａ及び図１Ｂに示す。
【０１６８】
２４時間後及び４８時間後のＣ−２２５０のＢＴ−２０細胞株の細胞生存率に関する細胞生存研究の結果を図２Ａ及び図２Ｂに示す。
【０１６９】
２４時間後及び４８時間後のタウロリジンのＭＣＦ−７細胞株の細胞生存率に関する細胞生存研究の結果を図３Ａ及び図３Ｂに示す。
【０１７０】
２４時間後及び４８時間後のＣ−２２５０のＭＣＦ−７細胞株の細胞生存率に関する細胞生存研究の結果を図４Ａ及び図４Ｂに示す。
【０１７１】
２４時間後及び４８時間後のタウロリジンのＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞株の細胞生存率に関する細胞生存研究の結果を図５Ａ及び図５Ｂに示す。
【０１７２】
２４時間後及び４８時間後のＣ−２２５０のＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞株の細胞生存率に関する細胞生存研究の結果を図６Ａ及び図６Ｂに示す。
【０１７３】
要約
タウロリジン及びＣ−２２５０は、ＴＮＢＣ株に対して、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで強力な抗新生物性活性を示す。２５０μＭ（３４μｇ／ｍｌ）のＣ−２２５０は、４８時間後、ＴＮＢＣ細胞株に対して５０％超の細胞死を誘導した。１００μＭ（２８μｇ／ｍｌ）のタウロリジンは、４８時間後、ＴＮＢＣ細胞株に対して５０％超の細胞死を誘導した。
【０１７４】
実施例２：ヒト治療症例研究
研究前の患者の診断及び既往：
１年目９月：右胸３ｃｍ、Ｇ３、ＣＳ腋窩のトリプルネガティブ乳癌（組織学的に髄質の共有（medullary shares）を伴うＧ３、ＥＲ、ＰＲ及びＨｅｒ  ２−ｎｅｗ陰性）の組織学的診断を有する５０歳の白人女性。播種性肺転移。
【０１７５】
Ｋｉ−６７：６１％が非常に高い乳癌細胞分裂を示す。
【０１７６】
局所的な血管浸潤を伴う非浸潤性乳管癌（ＤＣＩＳ：ductal carcinoma in situ）の追加的エビデンス；ＢＲＣＡ１陰性。
【０１７７】
研究に入る以前、上記患者は、毎週のネオアジュバントタキソール化学療法、広範囲局所切除術による乳腺腫瘍摘出術、及び右胸壁の補助放射線療法を含む、数多くの腫瘍学及び化学療法の治療によって治療されていた。これらの治療は効果がなく、患者は転移性播種及び好中球減少症を発症し、末期（ステージＩＶ）の患者であった。
【０１７８】
研究プロトコル：
上記患者は、研究を開始する際に、カルノフスキースコア８０％、四肢全てにおいて末梢で強調される軽度神経障害を有し、また、吸気の間、左外側胸壁の激痛、例えば、非常に痛みを伴うくしゃみ、労作時の重篤な息切れ（ＳＯＳ：severe shortness of breath）、食欲不振、不眠症及び極度の疲労に悩まされた。
【０１７９】
診断：
乳癌  ＩＣＤ１０：Ｃ５０．９
肺癌  ＩＣＤ１０：Ｃ７８．６
リンパ節腫脹  ＩＣＤ１０：Ｒ５９．１
【０１８０】
上記患者は、以下の通り、４週間の治療プロトコルを経た：
１．３週に亘るニボルマブ（nivolumab）（０．５ｍｇ／ｋｇ）によるＰＤ１／ＰＤＬ−１阻害及びイピリムマブ（０．３ｍｇ／ｋｇ）によるＣＴＬ−４阻害による、毎週の低用量チェックポイント阻害剤療法、
２．３週に亘る高用量のビタミンＣ（０．５ｇ／ｋｇ）及びアルファリポ酸（６００ｍｇ）と組み合わせて、胸部領域に対して１週間当たり３回のＳｙｎｃｒｏｔｈｅｒｍ装置を使用する高周波場（１３．５６ＭＨｚ）による局所領域的ハイパーサーミア、続いて、
３．ＴＲｅｇ細胞を下方制御するためのシクロホスファミド３００ｍｇ／ｍ２を使用する低用量化学療法と組み合わせた、長期（６時間〜８時間）の発熱範囲（約４２℃）の全身ハイパーサーミア、続いて、
４．タウロリジン（２５０ｍｌの２％タウロリジン、静脈内）と組み合わせた５日間の高用量ＩＬ−２（５４Ｍｉｏ  Ｉ．Ｕ．／ｍ２漸減レジーム）療法。
【０１８１】
本発明者らは、ＩＬ−２とタウロリジンの組み合わせが、他の治療では失敗した、患者のＴＮＢＣ及びその転移における寛解の誘導に有効であることを見出した。
【０１８２】
集学的療法が完了した次の日、胸部Ｘ線検査は、更に進行した両側性肺転移を実証した。免疫療法後の細胞傷害性Ｔ細胞応答の誘導は、１ヶ月〜２ヶ月から最長６ヶ月までかかる場合がある。したがって、２ヶ月後、患者は、２回目の胸部Ｘ線検査を受けて、早くも肺転移の軽減において２０％の改善を実証した。更に２ヶ月後の胸部Ｘ線検査は、著しい部分寛解を実証した。
【０１８３】
さらに、上記患者は、１００％のカルノフスキースコアを伴う優れた臨床症状を示し、息切れ又はいかなる他の癌関連の症状もなかった。
【０１８４】
両方の種類のチェックポイント阻害剤（ＰＤ１／ＰＤＬ−１及びＣＴＬ−４の阻害）を使用して、チェックポイント阻害剤療法後の自己免疫を回避した。具体的には、ニボルマブ及びイピリムマブを適用外のより低い投薬で使用し、そして規則的により高い投薬（毎週）の順序で使用した。
【０１８５】
考察
低用量のシクロホスファミド又はゲムシタビン療法は、選択的に制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）を枯渇させることができる。免疫に基づく治療法の成功のため、化学療法剤（及び放射線）を組み合わせて免疫寛容を壊し、腫瘍微小環境を作り出してもよい。穏やかな熱範囲（４０℃〜４２℃）の長期全身ハイパーサーミアは、腫瘍微小環境中の間質圧（interstitial pressure）を減少させる。さらに、ハイパーサーミアは、癌細胞の免疫原性及びリンパ球のトラフィッキング（trafficking：移動）を改善する。高用量のＩＬ−２は重篤な副作用を有することが知られており、その結果、ＩＬ−２の使用は広く普及したことがない。高用量のＩＬ−２療法の主な副作用は、体重の増加、全身浮腫、低血圧、及び腎機能障害を主な特徴とする血管漏出症候群によって誘導される。血管漏出症候群（ＶＬＳ：Vascular leak syndrome）は、癌患者のＩＬ−２治療中に誘導される生命を脅かす毒性である。タウロリジン、タウルルタム、オキサチアジン様化合物、及びこれらの組み合わせの同時投与は、これらの血管漏出によって誘導される副作用を縮小する。
【０１８６】
要約すると、本開示は、他の治療では失敗した患者のＴＮＢＣ及びその転移における寛解の誘導にＩＬ−２及びタウロリジンの組み合わせの安全性及び有効性の実証を記載する。
【０１８７】
実施例３：乳癌細胞株の効力
方法：図７Ａ及び図８Ａに示されるように、原発性及び転移性のＥＲ陰性乳癌細胞（ＢＴ−２０及びＭＤＡ−ＭＢ−２３１）及びＥＲ陽性細胞（ＢＴ−４７４及びＭＣＦ−７）を、漸増する濃度のタウロリジン及び２２５０で別々に処理した。アネキシンＶ及びヨウ化プロピジウム（ＰＩ）を使用して、ホスファチジルセリン外在化に基づいてアポトーシス及びネクローシスを評価した。アポトーシス及びオートファジーに対するカスパーゼ３、８及び９の寄与をフローサイトメトリーとウェスタンブロッティングの両方によって評価した。ラジカルスカベンジャー剤であるｎ−アセチルシステイン（ＮＡＣ：n-acetylcysteine）、及びグルタチオン枯渇剤であるブチオニンスルホキシミン（ＢＳＯ：buthionine-sulfoximine）を使用して活性酸素種（ＲＯＳ）の影響を評価した。ネクロトーシスを、該プロセスの強力な阻害剤であるネクロスタチン（necrostatin）−１を使用して評価した。
【０１８８】
結果：細胞死の用量依存的増加は、タウロリジン及び２２５０で別々に処理したＥＲ陽性及びＥＲ陰性の乳癌細胞で観察された。１００μΜ以上（２８４．７マイクログラム以上）のタウロリジン及び２５０μΜ以上（３４２マイクログラム超）の２２５０の濃度は、４８時間後に５０％超の細胞死を誘導した（ｐ＜０．０５〜０．０１）。細胞死は、ＴＮＢＣ細胞で最も顕著であった。オートファジーの関与のエビデンスはなかった。また、タウロリジン及び２２５０は、ＲＯＳの生成を誘導し、ＲＯＳはラジカルスカベンジャー剤であるＮＡＣによって実質的に減少され、グルタチオン枯渇剤であるＢＳＯによって有意に増加された。
【０１８９】
実施例４：タウロリジン及びＣ−２２５０の安全性
図７Ｂに示されるように、ヒト末梢血単核球を、１００マイクロモルから最高５０００マイクロモルの濃度のタウロリジン及び２２５０で処理し、いかなる顕著な細胞死も誘導することなく、非新生物性細胞におけるタウロリジン及び２２５０の安全性を実証した。
【０１９０】
実施例５：２２５０の半減期
ヒト新鮮血において３７℃で２２５０の半減期を測定した。
【０１９１】
【表１】
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【０１９２】
半減期をおよそ４０時間と計算した。
【０１９３】
本明細書で使用される、「約」及び「およそ」の用語は、列挙される値の５％以内にある任意の値を含むと判断されるべきである。さらに、値の範囲に関する「約」及び「およそ」の用語の列挙は、列挙される範囲の上限と下限の両方を含むと判断されるべきである。本明細書で使用される、「第１」、「第２」、「第３」等の用語は、独自に要素を識別するものであって、要素又は工程のいかなる特定の順序を意味するものでもなく、それらに限定されることもないと判断されるべきである。
【０１９４】
濃度、量及び他の数値データは、範囲形式（例えば約５％〜約２０％）で本明細書において提示され得る。かかる範囲形式は便宜上、また簡潔さのため使用されるにすぎず、範囲の限定として明示的に列挙される数値を含むのみならず、別段の指示がない限り、各数値及び部分範囲が明示的に列挙されるかのように、その範囲内に包含される個々の数値又は部分範囲を全て含むように柔軟に判断されるべきであることが理解される。例えば、約５％〜約２０％の範囲には、限定されないが、５％、５．５％、９．７％、１０．３％、１５％等の数値、及び限定されないが５％〜１０％、１０％〜１５％、８．９％〜１８．９％等の部分範囲が含まれると判断されるべきである。
【０１９５】
本発明は、その幾つかの実施形態においてのみ示され、説明されたが、本発明はそのように限定されるのではなく、本発明の趣旨及び範囲から逸脱することなく様々な変更を受けることができることが当業者に明らかであろう。さらに、示され、記載される本発明の形態は、現在好ましい実施形態として捉えられることが理解される。本開示の利益を有する当業者に明らかとなり得るように、様々な修飾及び変更があらゆる処理工程に対して行われ得る。添付の特許請求の範囲は、かかる修飾及び変更の全てを包含すると解釈され、したがって本明細書は限定的な意味ではなく解説の意味と見なされることが意図される。本明細書における教示の任意の容易に識別可能な変種を含む本開示は、部分的には、何らの発明の主題も公衆に献呈されないように、前述の特許請求の範囲の用語の範囲を定義する。さらに、添付の特許請求の範囲は、代替的な実施形態を含めて解釈されることが意図される。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【国際調査報告】
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