(57)【要約】  本明細書では、ｉｎ  ｖｉｖｏにおける、改変エフェクター細胞の拡大増殖を誘導する方法であって、ステロイドおよび改変エフェクター細胞の投与を含む方法が開示される。本明細書ではまた、ｉｎ  ｖｉｖｏにおける、改変Ｔ細胞（例えば、ＣＡＲ−Ｔ細胞またはＴＣＲ細胞）の拡大増殖を誘導する方法であって、ステロイドおよび改変Ｔ細胞の投与を含む方法も記載される。
2019536786.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
それを必要とする対象へと、
ａ）改変エフェクター細胞；ならびに
ｂ）前記対象における前記改変エフェクター細胞の集団の拡大増殖を誘導および／または維持するのに有効な量のステロイド
を投与するステップを含む方法。
【請求項２】
前記改変エフェクター細胞が、キメラ受容体を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記改変エフェクター細胞が、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）Ｔ細胞である、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記ＣＡＲが、ＣＤ１９上のエピトープに結合する、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記ＣＡＲが、ＣＤ３３上のエピトープに結合する、請求項３に記載の方法。
【請求項６】
前記ＣＡＲが、ＢＣＭＡ、ＣＤ４４、α−葉酸受容体、ＣＡＩＸ、ＣＤ３０、ＲＯＲ１、ＣＥＡ、ＥＧＰ−２、ＥＧＰ−４０、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、葉酸結合性タンパク質、ＧＤ２、ＧＤ３、ＩＬ−１３Ｒ−ａ２、ＫＤＲ、ＥＤＢ−Ｆ、メソテリン、ＣＤ２２、ＥＧＦＲ、ＭＵＣ−１、ＭＵＣ−１６、ＭＡＧＥ−Ａ１、ｈ５Ｔ４、ＰＳＭＡ、ＴＡＧ−７２、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＣＤ１２３、およびＶＥＧＦ−Ｒ２のうちの少なくとも１つにおけるエピトープに結合する、請求項３に記載の方法。
【請求項７】
前記ＣＡＲが、少なくとも１つの共刺激シグナル伝達ドメインをさらに含む、請求項３から６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
前記少なくとも１つの共刺激シグナル伝達ドメインが、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４−１ＢＢ、ＩＣＯＳ、ＯＸ４０、ＣＤ３ゼータ、またはこれらの断片もしくは組合せに由来するシグナル伝達ドメインを含む、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記少なくとも１つの共刺激シグナル伝達ドメインが、４−１ＢＢ、ＣＤ２８、またはこれらの組合せに由来するシグナル伝達ドメインを含む、請求項７または８に記載の方法。
【請求項１０】
前記ＣＡＲが、ＣＤ２８共刺激シグナル伝達ドメインおよびＣＤ３ゼータをさらに含む、請求項６から８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
前記ＣＡＲが、ＣＤ２８共刺激シグナル伝達ドメインをさらに含む、請求項６から８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
前記改変エフェクター細胞が、改変ナチュラルキラーＴ細胞である、請求項１または２に記載の方法。
【請求項１３】
前記改変ナチュラルキラーＴ細胞が、改変インバリアントナチュラルキラーＴ細胞である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記改変エフェクター細胞が、操作Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）Ｔ細胞である、請求項１または２に記載の方法。
【請求項１５】
前記改変エフェクター細胞が、改変ナチュラルキラー細胞である、請求項１または２に記載の方法。
【請求項１６】
前記ステロイドを、前記改変エフェクター細胞と同時に投与する、請求項１に記載の方法。
【請求項１７】
前記ステロイドを、前記改変エフェクター細胞との間で逐次的に投与する、請求項１に記載の方法。
【請求項１８】
前記ステロイドを、前記対象へと、前記改変エフェクター細胞を投与する前に投与する、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記ステロイドを、前記対象へと、前記改変エフェクター細胞を投与した後で投与する、請求項１７に記載の方法。
【請求項２０】
前記ステロイドを、前記改変エフェクター細胞を投与する少なくとも０．５、１、２、３、４、５、６、８、１０、１２、１５、１８、２０、または２４時間前に投与する、請求項１８に記載の方法。
【請求項２１】
前記ステロイドを、前記改変エフェクター細胞を投与する少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１２、１４、１５、２１、２８、または３０日前に投与する、請求項１８に記載の方法。
【請求項２２】
前記ステロイドを、前記改変エフェクター細胞を投与した少なくとも０．５、１、２、３、４、５、６、８、１０、１２、１５、１８、２０、２４、３６、４８、６０、７２、８４、９６、１０８、または１２０時間後に投与する、請求項１９に記載の方法。
【請求項２３】
前記ステロイドを、前記改変エフェクター細胞を投与した少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日間、またはこれを超える期間の後に投与する、請求項１９に記載の方法。
【請求項２４】
前記ステロイドを、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日間、またはこれを超える期間にわたり、連続的に投与する、請求項１または１６から２３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２５】
前記ステロイドを、所定の時間間隔で、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日間、またはこれを超える期間にわたり投与する、請求項１または１６から２３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２６】
前記ステロイドを、１０日ごとに投与する、請求項１または１６から２３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２７】
前記ステロイドを、１回、２回、３回、４回、５回の投与、またはこれを超える回数の投与により投与する、請求項１または１６から２６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２８】
第１の量のステロイドを、前記対象へと、第１の期間にわたり投与し、第２の量のステロイドを、前記対象へと、第２の期間にわたり投与する、請求項１から２７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２９】
前記第１の量のステロイドを、前記対象へと、１回、２回、３回、４回、５回の投与、またはこれを超える回数の投与により、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日間、またはこれを超える期間にわたり投与する、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
ステロイドの前記第１の量が、状態を処置するために十分な量である、請求項２８または２９に記載の方法。
【請求項３１】
前記状態が、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）である、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
前記状態が、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）である、請求項３０に記載の方法。
【請求項３３】
前記状態から回復または改善したら、前記第２の量のステロイドを、前記対象へと投与する、請求項２８から３２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３４】
前記第２の量のステロイドを、前記対象へと、１回、２回、３回、４回、５回の投与、またはこれを超える回数の投与により、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日間、またはこれを超える期間にわたり投与する、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
前記第１の量のステロイドを、前記対象へと、前記改変エフェクター細胞と同時に投与する、請求項２８から３４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３６】
前記第１の量のステロイドを、前記対象へと、前記改変エフェクター細胞を投与した後で投与する、請求項２８から３４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３７】
前記第１の量のステロイドを、前記対象へと、前記改変エフェクター細胞を投与する前に投与する、請求項２８から３４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３８】
前記第１の量のステロイドを、前記対象へと、前記改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１２、１３、１４、または１５日後に投与する、請求項２８から３４または３６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３９】
前記第１の量のステロイドを、前記対象へと、前記改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも１５日間、またはこれを超える期間の後に投与する、請求項２８から３４または３６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４０】
前記第１の量のステロイドを、前記対象へと、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日間、またはこれを超える期間にわたり、連続的に、または間欠的に投与する、請求項２８から３９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４１】
前記第１の量のステロイドを、前記対象へと、所定の時間間隔で、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日間、またはこれを超える期間にわたり投与する、請求項２８から３９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４２】
前記第２の量のステロイドを、前記対象へと、前記改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日間、またはこれを超える期間の後に、かつ、前記第１の量のステロイドの投与が完了した後で投与する、請求項２８から４１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４３】
前記第２の量のステロイドを、前記対象へと、前記改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも４９日間、またはこれを超える期間の後に、かつ、前記第１の量のステロイドの投与が完了した後で投与する、請求項２８から４１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４４】
前記第２の量のステロイドを、前記対象へと、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日間、またはこれを超える期間にわたり、連続的に、または間欠的に投与する、請求項２８から４３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４５】
前記第２の量のステロイドを、前記対象へと、所定の時間間隔で、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日間、またはこれを超える期間にわたり投与する、請求項２８から４３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４６】
ステロイドの前記第１の量が、約１ｍｇ／ｋｇである、請求項２８から４５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４７】
ステロイドの前記第２の量が、約０．９ｍｇ／ｋｇ〜約０．５ｍｇ／ｋｇである、請求項２８から４５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４８】
ステロイドの前記第２の量が、約０．５ｍｇ／ｋｇである、請求項２８から４５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４９】
前記第２の量のステロイドを、逐次用量で投与する、請求項２８から４５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５０】
各逐次用量を、０．１ｍｇ／ｋｇずつ低減する、請求項４９に記載の方法。
【請求項５１】
前記ステロイドが、フルオキシメステロン、メステロロン、メタンドロステノロン、ナンドロロンウンデカノエート、ナンドロロンシピオネート、オキサンドロロン、オキシメトロン、ナンドロロンヘキシルオキシフェニルプロピオネート、テストステロン、プレドニゾン、コルチゾール、コルチゾン、プレドニゾロン、デキサメタゾン、ベタメタゾン、トリアムシノロン、ベクロメタゾン、フルドロコルチゾン、デオキシコルチコステロン、アルドステロン、およびスタノゾロールのうちの少なくとも１つを含む、請求項１または１６から４８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５２】
サイトカインを投与するステップをさらに含む、請求項１から５１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５３】
前記サイトカインが、インターフェロン、インターロイキン、ケモカイン、コロニー刺激因子、または腫瘍壊死因子を含む、請求項５２に記載の方法。
【請求項５４】
前記サイトカインを、前記改変エフェクター細胞と共に共発現する、請求項５２または５３に記載の方法。
【請求項５５】
前記サイトカインが、ＩＬ−２、ＩＬ−７、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−２１、ＩＦＮγ、ＴＮＦ−αの変異体、断片、またはこれらの融合タンパク質を含む、請求項５２から５４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５６】
前記サイトカインが、ｍｂＩＬ−１５またはＩＬ−１５とＩＬ−１５Ｒαとの融合体を含む、請求項５２から５４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５７】
前記サイトカインを、前記ステロイドまたは前記改変エフェクター細胞と同時に投与する、請求項５２から５６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５８】
前記サイトカインを、前記ステロイドおよび前記改変エフェクター細胞と同時に投与する、請求項５２から５６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５９】
前記サイトカインを、前記ステロイドおよび／または前記改変エフェクター細胞との間で逐次的に投与する、請求項５２から５６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６０】
前記ステロイドを、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）、脳症、およびＢ細胞無形成から選択されるサイトカイン関連毒性の、少なくとも１つの症状の発現時に投与する、請求項１から５９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６１】
前記ステロイドを、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）、脳症、およびＢ細胞無形成から選択されるサイトカイン関連毒性の、少なくとも１つの症状の発現の前に投与する、請求項１から５９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６２】
前記サイトカイン関連毒性が、サイトカインストームの、少なくとも１つの症状を誘導する、請求項６０または６１に記載の方法。
【請求項６３】
前記ステロイドを、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）、脳症、およびＢ細胞無形成から選択されるサイトカイン関連毒性の、少なくとも１つの症状の軽減に必要とされるステロイドの量未満の量で投与する、請求項１から６２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６４】
前記ステロイドを、約１ｍｇ／ｋｇの量で投与する、請求項６３に記載の方法。
【請求項６５】
前記ステロイドを、約０．５ｍｇ／ｋｇの量で投与する、請求項６３に記載の方法。
【請求項６６】
前記ステロイドおよび／または前記改変エフェクター細胞を、非経口投与、皮下投与、舌下投与、鼻腔内投与、および経口投与のうちの少なくとも１つのために製剤化する、請求項１から６５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６７】
ある量の前記改変エフェクター細胞を、前記対象へと投与する、請求項１から６５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６８】
前記量が、１ｋｇ当たりの改変エフェクター細胞約１０５〜約１０９個である、請求項６７に記載の方法。
【請求項６９】
前記量が、１ｋｇ当たりの改変エフェクター細胞約１０５〜約１０６個である、請求項６７に記載の方法。
【請求項７０】
前記量が、１ｋｇ当たりの改変エフェクター細胞約１０６〜約１０７個である、請求項６７に記載の方法。
【請求項７１】
前記量が、１ｋｇ当たりの改変エフェクター細胞約１０７〜約１０８個である、請求項６７に記載の方法。
【請求項７２】
前記量が、１ｋｇ当たりの改変エフェクター細胞約１０８〜約１０９個である、請求項６７に記載の方法。
【請求項７３】
前記量が、１ｋｇ当たりの改変エフェクター細胞約１０５個である、請求項６７に記載の方法。
【請求項７４】
前記対象が、がんを有する、請求項１に記載の方法。
【請求項７５】
前記がんが、充実性腫瘍である、請求項７４に記載の方法。
【請求項７６】
前記充実性腫瘍が、乳がん、子宮頸がん、結腸直腸がん、腎臓がん、肝臓がん、肺がん、卵巣がん、膵臓がん、前立腺がん、または尿路上皮がんを含む、請求項７５に記載の方法。
【請求項７７】
前記がんが、血液悪性腫瘍である、請求項７４に記載の方法。
【請求項７８】
前記血液悪性腫瘍が、白血病、リンパ腫、または骨髄腫を含む、請求項７７に記載の方法。
【請求項７９】
前記血液悪性腫瘍が、Ｂ細胞性悪性腫瘍を含む、請求項７７または７８に記載の方法。
【請求項８０】
前記Ｂ細胞性悪性腫瘍が、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）、高危険性ＣＬＬ、非ＣＬＬ／ＳＬＬ性リンパ腫、前リンパ球性白血病（ＰＬＬ）、濾胞性リンパ腫（ＦＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、ワルデンシュトロームマクログロブリン血症、多発性骨髄腫、節外性辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、節性辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、非バーキット高悪性度Ｂ細胞リンパ腫、縦隔原発Ｂ細胞リンパ腫（ＰＭＢＬ）、免疫芽球性大細胞型リンパ腫、前駆Ｂリンパ芽球性リンパ腫、Ｂ細胞前リンパ球性白血病、リンパ形質細胞性リンパ腫、脾辺縁帯リンパ腫、形質細胞骨髄腫、形質細胞腫、縦隔（胸腺）大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、血管内大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、原発性滲出性リンパ腫、またはリンパ腫様肉芽腫症を含む、請求項７９に記載の方法。
【請求項８１】
前記血液悪性腫瘍が、骨髄性白血病を含む、請求項７７から７９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８２】
前記血液悪性腫瘍が、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）または慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）を含む、請求項７７から７９または８１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８３】
前記がんが、転移性がんである、請求項７４から８２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８４】
前記がんが、再発性がんまたは不応性がんである、請求項７４から８２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８５】
ＡＭＬが、再発性ＡＭＬである、請求項７７から７９、８１から８２、または８４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８６】
ＡＭＬが、不応性ＡＭＬである、請求項７７から７９、８１から８２、または８４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８７】
前記対象が、ヒトである、請求項１から８６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８８】
対象へと、
ａ）ＣＤ１９上のエピトープに結合するＣＡＲ−Ｔ細胞；ならびに
ｂ）ステロイド
を投与するステップを含み、前記ステロイドが、前記ＣＡＲ−Ｔ細胞と共時的に、または逐次的に投与され、前記ステロイドが、前記対象へと、前記対象における前記ＣＡＲ−Ｔ細胞の集団の拡大増殖を誘導および／または維持するのに有効な量で投与される、方法。
【請求項８９】
それを必要とする対象における、Ｔ細胞の生着および／または拡大増殖を誘導する方法であって、
ａ）ｅｘ  ｖｉｖｏにおいて、Ｔ細胞を、キメラ受容体をコードするベクターと接触させて、改変Ｔ細胞を作出するステップと；
ｂ）前記対象へと、ある量の前記改変Ｔ細胞を投与するステップと；
ｃ）前記対象へと、前記対象における前記改変Ｔ細胞の集団の拡大増殖を誘導および／または維持するのに有効な量のステロイドを投与するステップと
を含む方法。
【請求項９０】
前記ベクターが、レンチウイルスベクター、レトロウイルスベクター、Ｓｌｅｅｐｉｎｇ  Ｂｅａｕｔｙトランスポゾン、または非ウイルスベクターである、請求項８９に記載の方法。
【請求項９１】
前記ベクターが、Ｓｌｅｅｐｉｎｇ  Ｂｅａｕｔｙトランスポゾンである、請求項８９または９０に記載の方法。
【請求項９２】
前記改変Ｔ細胞が、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）Ｔ細胞である、請求項８９から９１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９３】
前記改変Ｔ細胞が、操作Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）Ｔ細胞である、請求項８９から９１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９４】
前記Ｔ細胞を、ポイントオブケア施設において改変し、前記対象へと、繁殖および活性化を経ずに投与する、請求項８９から９３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９５】
前記改変Ｔ細胞を、少なくとも０、１、２、４、６、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２２、２４、２６、２８、３０日間、またはこれを超える期間にわたり刺激する、請求項８９から９４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９６】
前記改変Ｔ細胞を、少なくとも５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０日間、またはこれを超える期間にわたり刺激する、請求項８９から９２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９７】
前記改変Ｔ細胞を、少なくとも７、１４、２１、２８、３５、４２、４９、５６、６３日間、またはこれを超える期間にわたり刺激する、請求項８９から９２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９８】
前記キメラ受容体が、ＣＤ１９、ＣＤ３３、ＢＣＭＡ、ＣＤ４４、α−葉酸受容体、ＣＡＩＸ、ＣＤ３０、ＲＯＲ１、ＣＥＡ、ＥＧＰ−２、ＥＧＰ−４０、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、葉酸結合性タンパク質、ＧＤ２、ＧＤ３、ＩＬ−１３Ｒ−ａ２、ＫＤＲ、ＥＤＢ−Ｆ、メソテリン、ＣＤ２２、ＥＧＦＲ、ＭＵＣ−１、ＭＡＧＥ−Ａ１、ｈ５Ｔ４、ＰＳＭＡ、ＴＡＧ−７２、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＣＤ１２３、およびＶＥＧＦ−Ｒ２のうちの少なくとも１つにおけるエピトープに結合する、請求項８９に記載の方法。
【請求項９９】
前記改変Ｔ細胞が、少なくとも１つの共刺激シグナル伝達ドメインをさらに含む、請求項８９から９８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１００】
前記少なくとも１つの共刺激シグナル伝達ドメインが、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４−１ＢＢ、ＩＣＯＳ、ＯＸ４０、ＣＤ３ゼータ、またはこれらの断片もしくは組合せに由来するシグナル伝達ドメインを含む、請求項９９に記載の方法。
【請求項１０１】
前記少なくとも１つの共刺激シグナル伝達ドメインが、４−１ＢＢ、ＣＤ２８、またはこれらの組合せに由来するシグナル伝達ドメインを含む、請求項９９または１００に記載の方法。
【請求項１０２】
前記改変Ｔ細胞が、ＣＤ２８共刺激シグナル伝達ドメインおよびＣＤ３ゼータをさらに含む、請求項９９から１０１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０３】
前記改変Ｔ細胞が、ＣＤ２８共刺激シグナル伝達ドメインをさらに含む、請求項９９から１０１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０４】
前記改変Ｔ細胞が、改変ナチュラルキラーＴ細胞である、請求項８９に記載の方法。
【請求項１０５】
前記改変ナチュラルキラーＴ細胞が、改変インバリアントナチュラルキラーＴ細胞である、請求項８９に記載の方法。
【請求項１０６】
前記ステロイドを、前記改変Ｔ細胞と同時に投与する、請求項８９から１０５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０７】
前記ステロイドを、前記改変Ｔ細胞との間で逐次的に投与する、請求項８９から１０５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０８】
前記ステロイドを、前記対象へと、前記改変Ｔ細胞を投与する前に投与する、請求項１０７に記載の方法。
【請求項１０９】
前記ステロイドを、前記対象へと、前記改変Ｔ細胞を投与した後で投与する、請求項１０７に記載の方法。
【請求項１１０】
前記ステロイドを、前記改変Ｔ細胞の投与の、少なくとも０．５、１、２、３、４、５、６、８、１０、１２、１５、１８、２０、または２４時間前に投与する、請求項１０８に記載の方法。
【請求項１１１】
前記ステロイドを、前記改変Ｔ細胞の投与の、少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１２、１４、１５、２８、または３０日前に投与する、請求項１０８に記載の方法。
【請求項１１２】
前記ステロイドを、前記改変Ｔ細胞の投与の、少なくとも約０．５、１、２、３、４、５、６、８、１０、１２、１５、１８、２０、２４、３６、４８、７２、８０、９０、１００、１０８、１２０、１３０、１４０、１５０、または１６０時間後に投与する、請求項１０９に記載の方法。
【請求項１１３】
前記ステロイドを、前記改変Ｔ細胞の投与の、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日間、またはこれを超える期間の後に投与する、請求項１０９に記載の方法。
【請求項１１４】
前記ステロイドを、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日間、またはこれを超える期間にわたり、連続的に投与する、請求項８９から１１３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１５】
前記ステロイドを、所定の間隔で、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日間、またはこれを超える期間にわたり、任意選択で、前記改変Ｔ細胞と組み合わせて投与する、請求項８９から１１３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１６】
前記ステロイドを、１０日ごとに投与する、請求項８９から１１３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１７】
前記量のステロイドを、１回、２回、３回、４回、５回の投与、またはこれを超える回数の投与により投与する、請求項８９から１１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１８】
第１の量のステロイドを、前記対象へと投与する、請求項８９から１１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１９】
前記第１の量のステロイドを、前記対象へと、１回、２回、３回、４回、５回の投与、またはこれを超える回数の投与により投与する、請求項１１８に記載の方法。
【請求項１２０】
前記第１の量のステロイドを、前記対象へと、状態を処置するために投与する、請求項１１８または１１９に記載の方法。
【請求項１２１】
前記状態が、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）である、請求項１２０に記載の方法。
【請求項１２２】
前記状態が、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）である、請求項１２０に記載の方法。
【請求項１２３】
前記状態から回復または改善したら、第２の量のステロイドを、前記対象へと投与する、請求項１１８から１２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２４】
前記第２の量のステロイドを、１回、２回、３回、４回、５回の投与、またはこれを超える回数の投与により投与する、請求項１２３に記載の方法。
【請求項１２５】
前記第１の量のステロイドを、前記対象へと、前記改変Ｔ細胞と同時に投与する、請求項１１８から１２４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２６】
前記第１の量のステロイドを、前記対象へと、前記改変Ｔ細胞を投与した後で投与する、請求項１１８から１２４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２７】
前記第１の量のステロイドを、前記対象へと、前記改変Ｔ細胞を投与する前に投与する、請求項１１８から１２４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２８】
前記第１の量のステロイドを、前記対象へと、前記改変Ｔ細胞の投与の、少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１２、１４、１５、２８、３０、４５、６０、９０日間、またはこれを超える期間の後に投与する、請求項１１８から１２４または１２６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２９】
前記第１の量のステロイドを、前記対象へと、前記改変Ｔ細胞の投与の、少なくとも１５日間、またはこれを超える期間の後に投与する、請求項１１８から１２４または１２６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３０】
前記第１の量のステロイドを、前記対象へと、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日間、またはこれを超える期間にわたり、連続的に投与する、請求項１１８から１２９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３１】
前記第１の量のステロイドを、前記対象へと、所定の時間間隔で、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日間、またはこれを超える期間にわたり投与する、請求項１１８から１２９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３２】
前記第２の量のステロイドを、前記対象へと、前記改変Ｔ細胞の投与の、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日間、またはこれを超える期間の後に、かつ、前記第１の量のステロイドの投与が完了した後で投与する、請求項１１８から１３１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３３】
前記第２の量のステロイドを、前記対象へと、前記改変Ｔ細胞の投与の、少なくとも４９日間、またはこれを超える期間の後に、かつ、前記第１の量のステロイドの投与が完了した後で投与する、請求項１１８から１３１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３４】
前記第２の量のステロイドを、前記対象へと、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日間、またはこれを超える期間にわたり、連続的に投与する、請求項１１８から１３３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３５】
前記第２の量のステロイドを、前記対象へと、所定の時間間隔で、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日間、またはこれを超える期間にわたり投与する、請求項１１８から１３３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３６】
ステロイドの前記第１の量が、１ｍｇ／ｋｇである、請求項１１８から１３５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３７】
ステロイドの前記第２の量が、約０．９ｍｇ／ｋｇ〜約０．５ｍｇ／ｋｇである、請求項１１８から１３６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３８】
ステロイドの前記第２の量が、０．５ｍｇ／ｋｇである、請求項１１８から１３６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３９】
前記第２の量のステロイドを、逐次用量で投与する、請求項１１８から１３６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４０】
各逐次用量を、０．１ｍｇ／ｋｇずつ低減する、請求項１３９に記載の方法。
【請求項１４１】
前記ステロイドが、フルオキシメステロン、メステロロン、メタンドロステノロン、ナンドロロンウンデカノエート、ナンドロロンシピオネート、オキサンドロロン、オキシメトロン、ナンドロロンヘキシルオキシフェニルプロピオネート、テストステロン、プレドニゾン、コルチゾール、コルチゾン、プレドニゾロン、デキサメタゾン、ベタメタゾン、トリアムシノロン、ベクロメタゾン、フルドロコルチゾン、デオキシコルチコステロン、アルドステロン、またはスタノゾロールを含む、請求項８９から１４０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４２】
前記ステロイドを、サイトカイン関連毒性の、少なくとも１つの症状の軽減に必要とされるステロイドの量未満の量で投与する、請求項８９から１４１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４３】
前記ステロイドを、サイトカイン関連毒性の、少なくとも１つの症状の軽減に十分な量で投与する、請求項８９から１４１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４４】
前記サイトカイン関連毒性の、少なくとも１つの症状は、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）、脳症、およびＢ細胞無形成から選択される、請求項１４２から１４３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４５】
前記ステロイドを、約１ｍｇ／ｋｇの量で投与する、請求項１４２または１４３に記載の方法。
【請求項１４６】
前記ステロイドを、約０．５ｍｇ／ｋｇの量で投与する、請求項１４２または１４３に記載の方法。
【請求項１４７】
前記改変Ｔ細胞の前記量が、１ｋｇ当たりの改変Ｔ細胞約１０５〜約１０９個である、請求項８９に記載の方法。
【請求項１４８】
前記改変Ｔ細胞の前記量が、１ｋｇ当たりの改変Ｔ細胞約１０５〜約１０６個である、請求項８９に記載の方法。
【請求項１４９】
前記改変Ｔ細胞の前記量が、１ｋｇ当たりの改変Ｔ細胞約１０６〜約１０７個である、請求項８９に記載の方法。
【請求項１５０】
前記改変Ｔ細胞の前記量が、１ｋｇ当たりの改変Ｔ細胞約１０７〜約１０８個である、請求項８９に記載の方法。
【請求項１５１】
前記改変Ｔ細胞の前記量が、１ｋｇ当たりの改変Ｔ細胞約１０８〜約１０９個である、請求項８９に記載の方法。
【請求項１５２】
前記改変Ｔ細胞の前記量が、１ｋｇ当たりの改変Ｔ細胞約１０５個である、請求項８９に記載の方法。
【請求項１５３】
サイトカインを投与するステップをさらに含む、請求項８９から１５２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５４】
前記サイトカインが、インターフェロン、インターロイキン、ケモカイン、コロニー刺激因子、または腫瘍壊死因子を含む、請求項１５３に記載の方法。
【請求項１５５】
前記サイトカインを、前記改変Ｔ細胞と共に共発現する、請求項１５３または１５４に記載の方法。
【請求項１５６】
前記サイトカインが、ＩＬ−２、ＩＬ−７、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−２１、ＩＦＮγ、またはＴＮＦ−αを含む、請求項１５３から１５５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５７】
前記サイトカインが、ｍｂＩＬ−１５を含む、請求項１５３から１５５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５８】
前記サイトカインを、前記ステロイドまたは前記改変Ｔ細胞と同時に投与する、請求項８９から１５７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５９】
前記サイトカインを、前記ステロイドおよび前記改変Ｔ細胞と同時に投与する、請求項８９から１５７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６０】
前記サイトカインを、前記ステロイドおよび／または前記改変Ｔ細胞との間で逐次的に投与する、請求項８９から１５７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６１】
前記ステロイドおよび／または前記改変Ｔ細胞を、非経口投与のために製剤化する、請求項８９から１６０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６２】
前記ステロイドおよび／または前記改変Ｔ細胞を、経口投与のために製剤化する、請求項８９から１６０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６３】
前記対象が、ヒトである、請求項８９から１６２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６４】
それを必要とする対象における、Ｔ細胞の拡大増殖を誘導する方法であって、
ａ）ｅｘ  ｖｉｖｏにおいて、Ｔ細胞を、ＣＤ１９上のエピトープを認識するキメラ受容体をコードする核酸を含むベクターと接触させて、ＣＤ１９特異的Ｔ細胞を作出するステップと；
ｂ）前記対象へと、ＣＤ１９特異的Ｔ細胞の集団と、前記対象における前記ＣＤ１９特異的Ｔ細胞の拡大増殖を誘導および／または維持するのに有効な量のステロイドとの組合せを投与するステップと
を含む方法。
【請求項１６５】
前記ベクターが、レンチウイルスベクター、レトロウイルスベクター、Ｓｌｅｅｐｉｎｇ  Ｂｅａｕｔｙトランスポゾン、または非ウイルスベクターである、請求項１６４に記載の方法。
【請求項１６６】
前記ベクターが、Ｓｌｅｅｐｉｎｇ  Ｂｅａｕｔｙトランスポゾンである、請求項１６４または１６５に記載の方法。
【請求項１６７】
前記キメラ受容体が、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）である、請求項１６４から１６６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６８】
前記キメラ受容体が、抗原特異的な操作Ｔ細胞受容体である、請求項１６４から１６６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６９】
前記Ｔ細胞を、サイトカインをコードするベクターとさらに接触させる、請求項１６４から１６８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７０】
前記サイトカインが、ｍｂＩＬ−１５またはこの融合タンパク質を含む、請求項１６９に記載の方法。
【請求項１７１】
ｉｎ  ｖｉｖｏにおけるＴ細胞の拡大増殖を誘導する方法であって、
ｉｎ  ｖｉｖｏにおいて、改変Ｔ細胞の集団を、前記改変Ｔ細胞の前記集団の拡大増殖を誘導および／または維持するのに有効な、第１の量のステロイドと接触させるステップであって、前記改変Ｔ細胞が、前記細胞表面上に発現した、少なくとも１つのキメラ受容体を含む、ステップ
を含む方法。
【請求項１７２】
前記改変Ｔ細胞の集団を、それを必要とする対象へと投与するステップをさらに含む、請求項１７１に記載の方法。
【請求項１７３】
前記改変Ｔ細胞の集団が、１ｋｇ当たりの改変Ｔ細胞約１０５〜約１０９個である、請求項１７１または１７２に記載の方法。
【請求項１７４】
前記改変Ｔ細胞の集団が、１ｋｇ当たりの改変Ｔ細胞約１０５〜約１０６個である、請求項１７１または１７２に記載の方法。
【請求項１７５】
前記改変Ｔ細胞の集団が、１ｋｇ当たりの改変Ｔ細胞約１０６〜約１０７個である、請求項１７１または１７２に記載の方法。
【請求項１７６】
前記改変Ｔ細胞の集団が、１ｋｇ当たりの改変Ｔ細胞約１０７〜約１０８個である、請求項１７１または１７２に記載の方法。
【請求項１７７】
前記改変Ｔ細胞の集団が、１ｋｇ当たりの改変Ｔ細胞約１０８〜約１０９個である、請求項１７１または１７２に記載の方法。
【請求項１７８】
前記改変Ｔ細胞の集団が、１ｋｇ当たりの改変Ｔ細胞約１０５個である、請求項１７１または１７２に記載の方法。
【請求項１７９】
前記第１の量のステロイドを、前記改変Ｔ細胞の投与の、少なくとも０．５、１、２、３、４、５、６、８、１０、１２、１５、１８、２０、２４、３６、４８、６０、７２、８４、９６、１０８、または１２０時間後に投与する、請求項１７１に記載の方法。
【請求項１８０】
前記第１の量のステロイドを、前記改変Ｔ細胞の投与の、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日間、またはこれを超える期間の後に投与する、請求項１７１に記載の方法。
【請求項１８１】
ｅｘ  ｖｉｖｏにおいて、Ｔ細胞を、前記キメラ受容体をコードするベクターと接触させて、前記改変Ｔ細胞を作出するステップであって、前記接触させることを、ｉｎ  ｖｉｖｏにおいて、前記Ｔ細胞を、前記第１の量のステロイドと接触させる前に実施するステップをさらに含む、請求項１７１に記載の方法。
【請求項１８２】
前記ベクターが、レンチウイルスベクター、レトロウイルスベクター、またはＳｌｅｅｐｉｎｇ  Ｂｅａｕｔｙトランスポゾンベクターである、請求項１８１に記載の方法。
【請求項１８３】
前記ベクターが、Ｓｌｅｅｐｉｎｇ  Ｂｅａｕｔｙトランスポゾンである、請求項１８１または１８２に記載の方法。
【請求項１８４】
前記Ｔ細胞を、ポイントオブケア施設において改変し、前記対象へと、繁殖および活性化を経ずに投与する、請求項１８１から１８３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８５】
前記少なくとも１つのキメラ受容体が、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）である、請求項１７１から１８４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８６】
前記少なくとも１つのキメラ受容体が、抗原特異的な操作Ｔ細胞受容体である、請求項１７１から１８４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８７】
前記改変Ｔ細胞を、少なくとも０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０日間、またはこれを超える期間にわたり刺激する、請求項１７１から１８６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８８】
前記改変Ｔ細胞を、少なくとも５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０日間、またはこれを超える期間にわたり刺激する、請求項１７１から１８６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８９】
前記改変Ｔ細胞を、少なくとも７、１４、２１、２８、３５、４２、４９、５６、６３日間、またはこれを超える期間にわたり刺激する、請求項１７１から１８６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９０】
前記少なくとも１つのキメラ受容体が、ＣＤ１９、ＣＤ３３、ＢＣＭＡ、ＣＤ４４、α−葉酸受容体、ＣＡＩＸ、ＣＤ３０、ＲＯＲ１、ＣＥＡ、ＥＧＰ−２、ＥＧＰ−４０、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、葉酸結合性タンパク質、ＧＤ２、ＧＤ３、ＩＬ−１３Ｒ−ａ２、ＫＤＲ、ＥＤＢ−Ｆ、メソテリン、ＣＤ２２、ＥＧＦＲ、ＭＵＣ−１、ＭＡＧＥ−Ａ１、ｈ５Ｔ４、ＰＳＭＡ、ＴＡＧ−７２、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＣＤ１２３、およびＶＥＧＦ−Ｒ２のうちの少なくとも１つにおけるエピトープに結合する、請求項１７１に記載の方法。
【請求項１９１】
前記改変Ｔ細胞が、少なくとも１つの共刺激シグナル伝達ドメインをさらに含む、請求項１７１から１９０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９２】
前記少なくとも１つの共刺激シグナル伝達ドメインが、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４−１ＢＢ、ＩＣＯＳ、ＯＸ４０、またはこれらの断片もしくは組合せに由来するシグナル伝達ドメインを含む、請求項１９１に記載の方法。
【請求項１９３】
前記少なくとも１つの共刺激シグナル伝達ドメインが、４−１ＢＢ、ＣＤ２８、またはこれらの組合せに由来するシグナル伝達ドメインを含む、請求項１９１または１９２に記載の方法。
【請求項１９４】
前記改変Ｔ細胞が、ＣＤ２８共刺激シグナル伝達ドメインおよびＣＤ３ゼータをさらに含む、請求項１９１から１９３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９５】
前記改変Ｔ細胞が、ＣＤ２８共刺激シグナル伝達ドメインをさらに含む、請求項１９１から１９３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９６】
前記第１の量のステロイドを、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日間、またはこれを超える期間にわたり、連続的に投与する、請求項１７１から１９４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９７】
前記第１の量のステロイドを、所定の時間間隔で、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日間、またはこれを超える期間にわたり投与する、請求項１７１から１９４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９８】
前記第１の量のステロイドを、１０日ごとに投与する、請求項１７１から１９４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９９】
前記第１の量のステロイドを、１回、２回、３回、４回、５回の投与、またはこれを超える回数の投与により投与する、請求項１７１から１９７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２００】
ステロイドの前記第１の量が、サイトカイン関連毒性の、少なくとも１つの症状の軽減に必要とされるステロイドの量未満である、請求項１７１から１９９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０１】
ステロイドの前記第１の量が、約１ｍｇ／ｋｇである、請求項１７１から２００のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０２】
ｉｎ  ｖｉｖｏにおける、前記改変Ｔ細胞の集団を、前記第１の量のステロイドと接触させた後で、第２の量のステロイドとさらに接触させる、請求項１７１から２０１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０３】
前記第２の量のステロイドを、前記第１の量のステロイドと接触させた少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日間、またはこれを超える期間の後に施す、請求項２０２に記載の方法。
【請求項２０４】
第２の量のステロイドとの前記接触が、前記第１の量のステロイドとの前記接触の、少なくとも３０日間、またはこれを超える期間の後である、請求項２０２に記載の方法。
【請求項２０５】
ステロイドの前記第２の量が、ステロイドの前記第１の量より低量である、請求項２０２に記載の方法。
【請求項２０６】
ステロイドの前記第２の量が、約０．９ｍｇ／ｋｇ〜約０．５ｍｇ／ｋｇである、請求項２０２から２０５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０７】
ステロイドの前記第２の量が、約０．５ｍｇ／ｋｇである、請求項２０２から２０５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０８】
前記第２の量のステロイドを、逐次用量で投与する、請求項２０２から２０５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０９】
各逐次用量を、０．１ｍｇ／ｋｇずつ低減する、請求項２０８に記載の方法。
【請求項２１０】
前記第２の量のステロイドを、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日間、またはこれを超える期間にわたり、連続的に投与する、請求項２０２から２０９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１１】
さらなる量のステロイドを、所定の時間間隔で、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日間、またはこれを超える期間にわたり投与する、請求項２０２から２０９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１２】
前記さらなる量のステロイドを、１０日ごとに投与する、請求項２０２から２０９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１３】
前記さらなる量のステロイドを、１回、２回、３回、４回、５回の投与、またはこれを超える回数の投与により投与する、請求項２０２から２１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１４】
前記ステロイドが、フルオキシメステロン、メステロロン、メタンドロステノロン、ナンドロロンウンデカノエート、ナンドロロンシピオネート、オキサンドロロン、オキシメトロン、ナンドロロンヘキシルオキシフェニルプロピオネート、テストステロン、プレドニゾン、コルチゾール、コルチゾン、プレドニゾロン、デキサメタゾン、ベタメタゾン、トリアムシノロン、ベクロメタゾン、フルドロコルチゾン、デオキシコルチコステロン、アルドステロン、またはスタノゾロールを含む、請求項１７１から２１３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１５】
請求項１から２１４に記載の方法による使用のための、改変エフェクター細胞と、任意選択で、ステロイドとを含むキット。
【請求項２１６】
ｉｎ  ｖｉｖｏにおいて、改変エフェクター細胞集団の拡大増殖を誘導するためのシステムであって、
改変エフェクター細胞の集団と、ある量の、少なくとも１つのステロイドと
を含み、
ｉｎ  ｖｉｖｏにおいて、前記改変エフェクター細胞の集団を、有効量の、前記少なくとも１つのステロイドと接触させる結果として、前記改変エフェクター細胞の集団の拡大増殖がもたらされる、
システム。
【請求項２１７】
前記少なくとも１つのステロイドの前記量が、サイトカイン関連毒性の、少なくとも１つの症状の軽減に必要とされるステロイドの量未満である、請求項２１６に記載のシステム。
【請求項２１８】
前記改変エフェクター細胞が、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）Ｔ細胞である、請求項２１６または２１７に記載のシステム。
【請求項２１９】
前記少なくとも１つのステロイドが、フルオキシメステロン、メステロロン、メタンドロステノロン、ナンドロロンウンデカノエート、ナンドロロンシピオネート、オキサンドロロン、オキシメトロン、ナンドロロンヘキシルオキシフェニルプロピオネート、テストステロン、プレドニゾン、コルチゾール、コルチゾン、プレドニゾロン、デキサメタゾン、ベタメタゾン、トリアムシノロン、ベクロメタゾン、フルドロコルチゾン、デオキシコルチコステロン、アルドステロン、およびスタノゾロールのうちの少なくとも１つを含む、請求項２１６から２１８のいずれか一項に記載のシステム。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、その内容全体が、参照により本明細書に組み込まれる、２０１６年１１月３０日に出願された、米国特許仮出願第６２／４２８，４７４号の利益を主張する。
【背景技術】
【０００２】
がんとは、処置応答および処置転帰が、悪性腫瘍の特異的種類に依存することが多い、異質で大きな疾患群である。腫瘍抗原とは、診断およびがん治療に有用なマーカーである。一部の場合には、１または複数の腫瘍抗原に結合しうる、外因性ポリペプチドを発現するように、エフェクター細胞を、改変することができる。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００３】
本明細書の、ある特定の実施形態では、それを必要とする対象における改変エフェクター細胞の拡大増殖（expansion）を誘導する方法が開示される。さらなる場合には、本明細書では、改変Ｔ細胞（例えば、ＣＡＲ−Ｔ細胞またはＴＣＲ−Ｔ細胞）の拡大増殖を誘導する方法が記載される。
【０００４】
本明細書の、ある特定の実施形態では、それを必要とする対象へと、（ａ）改変エフェクター細胞；ならびに（ｂ）対象における改変エフェクター細胞の集団の拡大増殖を誘導および／または維持するのに有効な量の、コルチコステロイドなどのステロイドを投与するステップを含む方法が開示される。一部の実施形態では、量は、対象における改変エフェクター細胞の集団の生着および／または拡大増殖の維持に、臨床的に干渉しない。一部の実施形態では、改変エフェクター細胞は、キメラ受容体を含む。一部の実施形態では、改変エフェクター細胞は、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）Ｔ細胞である。一部の実施形態では、ＣＡＲは、ＣＤ１９上のエピトープに結合する。一部の実施形態では、ＣＡＲは、ＣＤ３３上のエピトープに結合する。一部の実施形態では、ＣＡＲは、ＢＣＭＡ、ＣＤ４４、α−葉酸（folate）受容体、ＣＡＩＸ、ＣＤ３０、ＲＯＲ１、ＣＥＡ、ＥＧＰ−２、ＥＧＰ−４０、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、葉酸結合性タンパク質、ＧＤ２、ＧＤ３、ＩＬ−１３Ｒ−ａ２、ＫＤＲ、ＥＤＢ−Ｆ、メソテリン、ＣＤ２２、ＥＧＦＲ、ＭＵＣ−１またはＭＵＣ−１６などのムチン、ＭＡＧＥ−Ａ１、ｈ５Ｔ４、ＥＧＦＲ、ＰＳＭＡ、ＴＡＧ−７２、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＣＤ１２３、およびＶＥＧＦ−Ｒ２のうちの少なくとも１つにおけるエピトープに結合する。一部の実施形態では、ＣＡＲは、少なくとも１つの共刺激シグナル伝達ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、少なくとも１つの共刺激シグナル伝達ドメインは、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４−１ＢＢ、ＩＣＯＳ、ＯＸ４０、ＣＤ３ゼータ、またはこれらの断片もしくは組合せに由来するシグナル伝達ドメインを含む。一部の実施形態では、少なくとも１つの共刺激シグナル伝達ドメインは、４−１ＢＢ、ＣＤ２８、またはこれらの組合せに由来するシグナル伝達ドメインを含む。一部の実施形態では、ＣＡＲは、ＣＤ２８共刺激シグナル伝達ドメインおよびＣＤ３ゼータをさらに含む。一部の実施形態では、ＣＡＲは、ＣＤ２８共刺激シグナル伝達ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、改変エフェクター細胞は、改変ナチュラルキラーＴ細胞である。一部の実施形態では、改変ナチュラルキラーＴ細胞は、改変インバリアントナチュラルキラーＴ細胞である。一部の実施形態では、改変エフェクターは、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）操作（engineered）Ｔ細胞である。一部の実施形態では、改変エフェクター細胞は、改変ナチュラルキラー細胞である。一部の実施形態では、ステロイドを、改変エフェクター細胞と同時に投与する。一部の実施形態では、ステロイドは、コルチコステロイドである。一部の実施形態では、ステロイドは、フルオキシメステロン、メステロロン、メタンドロステノロン、ナンドロロンウンデカノエート、ナンドロロンシピオネート（cyplonate）、オキサンドロロン、オキシメトロン、ナンドロロンヘキシルオキシフェニルプロピオネート、テストステロン、プレドニゾン、コルチゾール、コルチゾン、プレドニゾロン、デキサメタゾン、ベタメタゾン、トリアムシノロン、ベクロメタゾン、フルドロコルチゾン、デオキシコルチコステロン、アルドステロン、またはスタノゾロールを含む。一部の実施形態では、ステロイドを、改変エフェクター細胞との間で逐次的に（sequentially with）投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、対象へと、改変エフェクター細胞を投与する前に投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、対象へと、改変エフェクター細胞を投与した後で投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも０．５、１、２、３、４、５、６、８、１０、１２、１５、１８、２０、または２４時間前に投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日前に投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも０．５、１、２、３、４、５、６、８、１０、１２、１５、１８、２０、２４、３６、４８、６０、７２、８４、９６、１０８、または１２０時間後に投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日間、またはこれを超える期間の後に投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日間、またはこれを超える期間にわたり、連続的に投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、所定の時間間隔で、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日間、またはこれを超える期間にわたり投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、１０日ごとに投与する。一部の実施形態では、ある量のステロイドを、１回、２回、３回、４回、５回の投与、またはこれを超える回数の投与により投与する。一部の実施形態では、第１の量のステロイドを、１回、２回、３回、４回、５回の投与、またはこれを超える回数の投与により、第１の所定量の時間にわたり投与し、第２の量のステロイドを、１回、２回、３回、４回、５回の投与、またはこれを超える回数の投与により、第２の所定量の時間にわたり投与する。一部の実施形態では、第１の所定量の時間は、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日間である。一部の実施形態では、第２の所定量の時間は、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日間である。一部の実施形態では、第１の量のステロイドを、対象へと、第１の期間にわたり投与し、第２の量のステロイドを、対象へと、第２の期間にわたり投与する。一部の実施形態では、第１の量のステロイドを、対象へと、１回、２回、３回、４回、５回の投与、またはこれを超える回数の投与により、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日間、またはこれを超える期間にわたり投与する。一部の実施形態では、ステロイドの第１の量は、状態を処置するために十分な量である。一部の実施形態では、状態は、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）である。一部の実施形態では、状態は、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）である。一部の実施形態では、状態から回復または改善したら、前記第２の量のステロイドを、対象へと投与する。一部の実施形態では、第２の量のステロイドを、対象へと、１回、２回、３回、４回、５回の投与、またはこれを超える回数の投与により、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日間、またはこれを超える期間にわたり投与する。一部の実施形態では、第１の量のステロイドを、対象へと、改変エフェクター細胞と同時に投与する。一部の実施形態では、第１の量のステロイドを、対象へと、改変エフェクター細胞を投与した後で投与する。一部の実施形態では、第１の量のステロイドを、対象へと、改変エフェクター細胞を投与する前��投与する。一部の実施形態では、第１の量のステロイドを、対象へと、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１２、１３、１４、または１５日後に投与する。一部の実施形態では、第１の量のステロイドを、対象へと、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも１５日間、またはこれを超える期間の後に投与する。一部の実施形態では、第１の量のステロイドを、対象へと、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日間、またはこれを超える期間にわたり、連続的に、または間欠的に投与する。一部の実施形態では、第１の量のステロイドを、対象へと、所定の時間間隔で、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日間、またはこれを超える期間にわたり投与する。一部の実施形態では、第２の量のステロイドを、対象へと、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日間、またはこれを超える期間の後に、かつ、第１の量のステロイドの投与が完了した後で投与する。一部の実施形態では、第２の量のステロイドを、対象へと、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも４９日間、またはこれを超える期間の後に、かつ、第１の量のステロイドの投与が完了した後で投与する。一部の
実施形態では、ステロイドの第１の量は、１ｍｇ／ｋｇである。一部の実施形態では、ステロイドの第２の量は、約０．９ｍｇ／ｋｇ〜約０．５ｍｇ／ｋｇである。一部の実施形態では、ステロイドの第２の量は、０．５ｍｇ／ｋｇである。一部の実施形態では、第２の量のステロイドを、逐次用量で投与する。一部の実施形態では、各逐次用量を、０．１ｍｇ／ｋｇずつ低減する。一部の実施形態では、方法は、サイトカインを投与するステップをさらに含む。一部の実施形態では、サイトカインは、インターフェロン、インターロイキン、ケモカイン、コロニー刺激因子、または腫瘍壊死因子を含む。一部の実施形態では、サイトカインを、改変エフェクター細胞と共に共発現する（co-expressed）。一部の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−２、ＩＬ−７、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−２１、ＩＦＮγ、またはＴＮＦ−αを含む。一部の実施形態では、サイトカインは、膜結合型ＩＬ−１５（ｍｂＩＬ−１５）を含む。一部の実施形態では、サイトカインを、ステロイドまたは改変エフェクター細胞と同時に投与する。一部の実施形態では、サイトカインを、ステロイドおよび改変エフェクター細胞のうちの少なくとも１つと同時に投与する。一部の実施形態では、サイトカインおよび改変エフェクター細胞を、同時に、または逐次的に投与し、ステロイドを、サイトカインおよび改変エフェクター細胞の投与の前、またはサイトカインおよび改変エフェクター細胞の投与の後であるが、サイトカインストームと関連する、任意の症状の前に投与する。一部の実施形態では、サイトカインを、ステロイドおよび／または改変エフェクター細胞との間で逐次的に投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）、脳症、およびＢ細胞無形成から選択されるサイトカイン関連毒性の、少なくとも１つの症状の発現時に投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、ＣＲＳ、脳症、およびＢ細胞無形成の発現の前に投与する。一部の実施形態では、サイトカイン関連毒性は、サイトカインストームを誘導する。一部の実施形態では、ステロイドを、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）、脳症、およびＢ細胞無形成から選択されるサイトカイン関連毒性の、少なくとも１つの症状の軽減に必要とされるステロイドの量未満の量で投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、約１ｍｇ／ｋｇの量で投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、約０．５ｍｇ／ｋｇの量で投与する。一部の実施形態では、ステロイドおよび／または改変エフェクター細胞を、非経口投与、皮下投与、舌下投与、鼻腔内投与、および経口投与のうちの少なくとも１つのために製剤化する。一部の実施形態では、ある量の改変エフェクター細胞を、対象へと投与する。一部の実施形態では、量は、１ｋｇ当たりの改変エフェクター細胞約１０５〜約１０９個である。一部の実施形態では、量は、１ｋｇ当たりの改変エフェクター細胞約１０５〜約１０６個である。一部の実施形態では、量は、１ｋｇ当たりの改変エフェクター細胞約１０６〜約１０７個である。一部の実施形態では、量は、１ｋｇ当たりの改変エフェクター細胞約１０７〜約１０８個である。一部の実施形態では、量は、１ｋｇ当たりの改変エフ��クター細胞約１０８〜約１０９個である。一部の実施形態では、量は、１ｋｇ当たりの改変エフェクター細胞約１０５個である。一部の実施形態では、対象は、がんを有する。一部の実施形態では、がんは、充実性腫瘍である。一部の実施形態では、充実性腫瘍は、乳がん、子宮頸がん、結腸直腸がん、腎臓がん、肝臓がん、肺がん、卵巣がん、膵臓がん、前立腺がん、または尿路上皮がんを含む。一部の実施形態では、がんは、血液悪性腫瘍である。一部の実施形態では、血液悪性腫瘍は、白血病、リンパ腫、または骨髄腫を含む。一部の実施形態では、血液悪性腫瘍は、Ｂ細胞性悪性腫瘍を含む。一部の実施形態では、Ｂ細胞性悪性腫瘍は、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）、高危険性ＣＬＬ、非ＣＬＬ／ＳＬＬ性リンパ腫、前リンパ球性白血病（ＰＬＬ）、濾胞性リンパ腫（ＦＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、ワルデンシュトロームマクログロブリン血症、多発性骨髄腫、節外性辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、節性辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、非バーキット高悪性度Ｂ細胞リンパ腫、縦隔原発Ｂ細胞リンパ腫（ＰＭＢＬ）、免疫芽球性大細胞型リンパ腫、前駆Ｂリンパ芽球性リンパ腫、Ｂ細胞前リンパ球性白血病、リンパ形質細胞性リンパ腫、脾辺縁帯リンパ腫、形質細胞骨髄腫、形質細胞腫、縦隔（胸腺）大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、血管内大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、原発性滲出性リンパ腫、またはリンパ腫様肉芽腫症を含む。一部の実施形態では、血液悪性腫瘍は、骨髄性白血病を含む。一部の実施形態では、血液悪性腫瘍は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）または慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）を含む。一部の実施形態では、がんは、転移性がんである。一部の実施形態では、ＡＭＬは、再発性ＡＭＬである。一部の実施形態では、ＡＭＬは、不応性（refractory）ＡＭＬである。一部の実施形態では、がんは、再発性がんまたは不応性がんである。一部の実施形態では、レシピエントは、明白な悪性疾患を有する。一部の実施形態では、レシピエントは、最小限の遺残悪性疾患を有する。一部の実施形態では、対象は、ヒトである。一部の場合には、対象は、１８歳またはこれを超える年齢のヒトである。他の場合には、対象は、１７歳またはこれより若い年齢のヒトである。一部の場合には、対象は、乳児または若年のヒトである。
【０００５】
本明細書の、ある特定の実施形態では、対象へと、（ａ）ＣＤ１９上のエピトープに結合するＣＡＲ−Ｔ細胞；ならびに（ｂ）ステロイドを投与するステップを含み、ステロイドが、ＣＡＲ−Ｔ細胞と共時的に、または逐次的に投与され、ステロイドが、対象へと、対象におけるＣＡＲ−Ｔ細胞の集団の拡大増殖を誘導および／または維持するのに有効な量で投与される、方法が開示される。一部の実施形態では、量は、対象におけるＣＡＲ−Ｔ細胞の集団の、生着および／または拡大増殖の維持に、有害な影響を与えない。一部の実施形態では、ステロイドを、サイトカインストームの、少なくとも１つの症状の発現の前に投与する。場合によって、ステロイドを、サイトカインストームの、少なくとも１つの症状を処置するのに十分な量より低量で投与する。一部の実施形態では、ＣＡＲ−Ｔ細胞は、少なくとも１つの共刺激シグナル伝達ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、少なくとも１つの共刺激シグナル伝達ドメインは、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４−１ＢＢ、ＩＣＯＳ、ＯＸ４０、ＣＤ３ゼータ、またはこれらの断片もしくは組合せに由来するシグナル伝達ドメインを含む。一部の実施形態では、少なくとも１つの共刺激シグナル伝達ドメインは、４−１ＢＢ、ＣＤ２８、またはこれらの組合せに由来するシグナル伝達ドメインを含む。一部の実施形態では、ＣＡＲ−Ｔ細胞は、ＣＤ２８共刺激シグナル伝達ドメインおよびＣＤ３ゼータをさらに含む。一部の実施形態では、ＣＡＲは、ＣＤ２８共刺激シグナル伝達ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、改変エフェクター細胞は、改変ナチュラルキラーＴ細胞である。一部の実施形態では、改変ナチュラルキラーＴ細胞は、改変インバリアントナチュラルキラーＴ細胞である。一部の実施形態では、改変エフェクターは、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）操作Ｔ細胞である。一部の実施形態では、改変エフェクター細胞は、改変ナチュラルキラー細胞である。一部の実施形態では、ステロイドを、改変エフェクター細胞と同時に投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、改変エフェクター細胞との間で逐次的に投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、対象へと、改変エフェクター細胞を投与する前に投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、対象へと、改変エフェクター細胞を投与した後で投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも０．５、１、２、３、４、５、６、８、１０、１２、１５、１８、２０、または２４時間前に投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１２、１４、１５、２８、または３０日前に投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも０．５、１、２、３、４、５、６、８、１０、１２、１５、１８、２０、２４、３６、４８、６０、７２、８４、９６、１０８、または１２０時間後に投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１２、１４、１５、２８、３０、４５、６０、９０日間、またはこれを超える期間の後に投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１２、１５、２０、２５、３０、４５、６０、９０日間、またはこれを超える期間にわたり、連続的に投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、所定の時間間隔で、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１２、１５、２０、２５、３０、４５、６０、９０日間、またはこれを超える期間にわたり投与する。一部の実施形態では、ある量のステロイドを、１回、２回、３回、４回、５回の投与、またはこれを超える回数の投与により投与する。一部の実施形態では、第１の量のステロイドを、１回、２回、３回、４回、５回の投与、またはこれを超える回数の投与により、状態を処置するために投与し、状態から回復または改善したら、第２の量のステロイドを、１回、２回、３回、４回、５回の投与、またはこれを超える回数の投与により投与する。一部の実施形態では、ステロイドの第１の量は、１ｍｇ／ｋｇである。一部の実施形態では、ステロイドの第２の量は、０．５ｍｇ／ｋｇである。一部の実施形態では、ステロイドは、フルオキシメステロン、メステロロン、メタンドロステノロン、ナンドロロンウンデカノエート、ナンドロロンシピオネート、オキサンドロロン、オキシメトロン、ナンドロロンヘキシルオキシフェニルプロピオネート、テストステロン、プレドニゾン、コルチゾール、コルチゾン、プレドニゾロン、デキサメタゾン、ベタメタゾン、トリアムシノロン、ベクロメタゾン、フルドロコルチゾン、デオキシコルチコステロン、アルドステロン、またはスタノゾロールを含む。一部の実施形態では、方法は、サイトカインを投与するステップをさらに含む。一部の実施形態では、サイトカインは、インターフェロン、インターロイキン、ケモカイン、コロニー刺激因子、または腫瘍壊死因子を含む。一部の実施形態では、サイトカインを、改変エフェクター細胞と共に共発現する。一部の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−２、ＩＬ−７、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−２１、ＩＦＮγ、またはＴＮＦ−αを含む。一部の実施形態では、サイトカインは、ｍｂＩＬ−１５を含む。一部の実施形態では、サイトカインを、ステロイドまたは改変エフェクター細胞と同時に投与する。一部の実施形態では、サイトカインを、ステロイドおよび改変エフェクター細胞と同時に投与する。一部の実施形態では、サイトカインを、ステロイドおよび／または改変エフェクター細胞との間で逐次的に投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）、脳症、およびＢ細胞無形成から選択されるサイトカイン関連毒性の、少なくとも１つの症状の発現時に投与する。一部の実施形態では、サイトカイン関連毒性は、サイトカインストームを誘導する。一部の実施形態では、ステロイドを、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）、脳症、およびＢ細胞無形成から選択されるサイトカイン関連毒性の、少なくとも１つの症状の軽減に必要とされるステロイドの量未満の量で投与する。一部の実施形態では、ステロイドおよび／または改変エフェクター細胞を、非経口投与、皮下投与、舌下投与、鼻腔内投与、および経口投与のうちの少なくとも１つのために製剤化する。一部の実施形態では、対��は、がんを有する。一部の実施形態では、がんは、充実性腫瘍である。一部の実施形態では、充実性腫瘍は、乳がん、子宮頸がん、結腸直腸がん、腎臓がん、肝臓がん、肺がん、卵巣がん、膵臓がん、前立腺がん、または尿路上皮がんを含む。一部の実施形態では、がんは、血液悪性腫瘍である。一部の実施形態では、血液悪性腫瘍は、白血病、リンパ腫、または骨髄腫を含む。一部の実施形態では、血液悪性腫瘍は、Ｂ細胞性悪性腫瘍を含む。一部の実施形態では、Ｂ細胞性悪性腫瘍は、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）、高危険性ＣＬＬ、非ＣＬＬ／ＳＬＬ性リンパ腫、前リンパ球性白血病（ＰＬＬ）、濾胞性リンパ腫（ＦＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、ワルデンシュトロームマクログロブリン血症、多発性骨髄腫、節外性辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、節性辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、非バーキット高悪性度Ｂ細胞リンパ腫、縦隔原発Ｂ細胞リンパ腫（ＰＭＢＬ）、免疫芽球性大細胞型リンパ腫、前駆Ｂリンパ芽球性リンパ腫、Ｂ細胞前リンパ球性白血病、リンパ形質細胞性リンパ腫、脾辺縁帯リンパ腫、形質細胞骨髄腫、形質細胞腫、縦隔（胸腺）大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、血管内大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、原発性滲出性リンパ腫、またはリンパ腫様肉芽腫症を含む。一部の実施形態では、血液悪性腫瘍は、骨髄性白血病を含む。一部の実施形態では、血液悪性腫瘍は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）または慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）を含む。一部の実施形態では、がんは、転移性がんである。一部の実施形態では、がんは、再発性がんまたは不応性がんである。一部の実施形態では、対象は、ヒトである。一部の場合には、対象は、１８歳またはこれを超える年齢のヒトである。他の場合には、対象は、１７歳またはこれより若い年齢のヒトである。一部の場合には、対象は、乳児または若年のヒトである。
【０００６】
本明細書の、ある特定の実施形態では、それを必要とする対象における、Ｔ細胞の生着および／または拡大増殖を誘導する方法であって、（ａ）ｅｘ  ｖｉｖｏにおいて、Ｔ細胞を、キメラ抗原受容体をコードするベクターと接触させて、改変Ｔ細胞を作出するステップと；（ｂ）対象へと、ある量の改変Ｔ細胞を投与するステップと；（ｃ）対象へと、対象における改変Ｔ細胞の集団の拡大増殖を誘導および／または維持するのに有効な量のステロイドを投与するステップとを含む方法が開示される。一部の実施形態では、量は、対象における改変エフェクター細胞の集団の生着および／または拡大増殖の維持に、臨床的に干渉しない。一部の実施形態では、ベクターは、レンチウイルスベクター、レトロウイルスベクター、Ｓｌｅｅｐｉｎｇ  Ｂｅａｕｔｙトランスポゾン、または非ウイルスベクターである。一部の実施形態では、ベクターは、Ｓｌｅｅｐｉｎｇ  Ｂｅａｕｔｙトランスポゾンである。一部の実施形態では、改変Ｔ細胞は、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）Ｔ細胞である。一部の実施形態では、改変Ｔ細胞は、操作Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）Ｔ細胞である。一部の実施形態では、Ｔ細胞を、ポイントオブケア施設において改変し、対象へと、繁殖（propagation）および活性化を経ずに投与する。一部の実施形態では、改変Ｔ細胞を、少なくとも０、２、４、６、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２２、２４、２６、２８、３０日間、またはこれを超える期間にわたり刺激する。一部の実施形態では、改変Ｔ細胞を、少なくとも５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０日間、またはこれを超える期間にわたり刺激する。一部の実施形態では、改変Ｔ細胞を、少なくとも７、１４、２１、２８、３５、４２、４９、５６、６３日間、またはこれを超える期間にわたり刺激する。一部の実施形態では、キメラ抗原受容体は、ＣＤ１９、ＣＤ３３、ＢＣＭＡ、ＣＤ４４、α−葉酸受容体、ＣＡＩＸ、ＣＤ３０、ＲＯＲ１、ＣＥＡ、ＥＧＰ−２、ＥＧＰ−４０、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、葉酸結合性タンパク質、ＧＤ２、ＧＤ３、ＩＬ−１３Ｒ−ａ２、ＫＤＲ、ＥＤＢ−Ｆ、メソテリン、ＣＤ２２、ＥＧＦＲ、ＭＵＣ−１、ＭＡＧＥ−Ａ１、ｈ５Ｔ４、ＰＳＭＡ、ＴＡＧ−７２、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＣＤ１２３、およびＶＥＧＦ−Ｒ２のうちの少なくとも１つにおけるエピトープに結合する。一部の実施形態では、ＣＡＲ−Ｔ細胞は、少なくとも１つの共刺激シグナル伝達ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、少なくとも１つの共刺激シグナル伝達ドメインは、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４−１ＢＢ、ＩＣＯＳ、ＯＸ４０、ＣＤ３ゼータ、またはこれらの断片もしくは組合せに由来するシグナル伝達ドメインを含む。一部の実施形態では、少なくとも１つの共刺激シグナル伝達ドメインは、４−１ＢＢ、ＣＤ２８、またはこれらの組合せに由来するシグナル伝達ドメインを含む。一部の実施形態では、改変Ｔ細胞は、ＣＤ２８共刺激シグナル伝達ドメインおよびＣＤ３ゼータをさらに含む。一部の実施形態では、改変Ｔ細胞は、共刺激シグナル伝達ドメインであるＣＤ２８をさらに含む。一部の実施形態では、改変エフェクター細胞は、改変ナチュラルキラーＴ細胞である。一部の実施形��では、改変ナチュラルキラーＴ細胞は、改変インバリアントナチュラルキラーＴ細胞である。一部の実施形態では、ステロイドを、改変Ｔ細胞と同時に投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、改変Ｔ細胞との間で逐次的に投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、対象へと、改変Ｔ細胞を投与する前に投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、対象へと、改変Ｔ細胞を投与した後で投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、改変Ｔ細胞の投与の、少なくとも０．５、１、２、３、４、５、６、８、１０、１２、１５、１８、２０、または２４時間前に投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１２、１４、１５、２８、または３０日前に投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、改変Ｔ細胞の投与の、少なくとも約０．５、１、２、３、４、５、６、８、１０、１２、１５、１８、２０、２４、３６、４８、７２、８０、９０、１００、１０８、１２０、１３０、１４０、１５０、または１６０時間後に投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日間、またはこれを超える期間の後に投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日間、またはこれを超える期間にわたり、連続的に投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、所定の間隔で、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日間、またはこれを超える期間にわたり、任意選択で、改変Ｔ細胞と組み合わせて投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、１０日ごとに投与する。一部の実施形態では、ある量のステロイドを、１回、２回、３回、４回、５回の投与、またはこれを超える回数の投与により投与する。一部の実施形態では、第１の量のステロイドを、対象へと投与する。一部の実施形態では、第１の量のステロイドを、対象へと、１回、２回、３回、４回、５回の投与、またはこれを超える回数の投与により投与する。一部の実施形態では、第１��量のステロイドを、対象へと、状態を処置するために投与する。一部の実施形態では、状態は、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）である。一部の実施形態では、状態は、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）である。一部の実施形態では、状態から回復または改善したら、第２の量のステロイドを、対象へと投与する。一部の実施形態では、第２の量のステロイドを、１回、２回、３回、４回、５回の投与、またはこれを超える回数の投与により投与する。一部の実施形態では、第１の量のステロイドを、対象へと、改変Ｔ細胞と同時に投与する。一部の実施形態では、第１の量のステロイドを、対象へと、改変Ｔ細胞を投与した後で投与する。一部の実施形態では、第１の量のステロイドを、対象へと、改変Ｔ細胞を投与する前に投与する。一部の実施形態では、第１の量のステロイドを、対象へと、改変Ｔ細胞の投与の、少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１２、１４、１５、２８、３０、４５、６０、９０日間、またはこれを超える期間の後に投与する。一部の実施形態では、第１の量のステロイドを、対象へと、改変Ｔ細胞の投与の、少なくとも１５日間、またはこれを超える期間の後に投与する。一部の実施形態では、第１の量のステロイドを、対象へと、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日間、またはこれを超える期間にわたり、連続的に投与する。一部の実施形態では、第１の量のステロイドを、対象へと、所定の時間間隔で、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日間、またはこれを超える期間にわたり投与する。一部の実施形態では、第２の量のステロイドを、対象へと、改変Ｔ細胞の投与の、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日間、またはこれを超える期間の後に、かつ、第１の量のステロイドの投与が完了した後で投与する。一部の実施形態では、第２の量のステロイドを、対象へと、改変Ｔ細胞の投与の、少なくとも４９日間、またはこれを超える期間の後に、かつ、第１の量のステロイドの投与が完了した後で投与する。一部の実施形態では、第２の量のステロイドを、対象へと、少なくとも１��２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日間、またはこれを超える期間にわたり、連続的に投与する。一部の実施形態では、第２の量のステロイドを、対象へと、所定の時間間隔で、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日間、またはこれを超える期間にわたり投与する。一部の実施形態では、ステロイドの第１の量は、１ｍｇ／ｋｇである。一部の実施形態では、ステロイドの第２の量は、約０．９ｍｇ／ｋｇ〜約０．５ｍｇ／ｋｇである。一部の実施形態では、ステロイドの第２の量は、０．５ｍｇ／ｋｇである。一部の実施形態では、第２の量のステロイドを、逐次用量で投与する。一部の実施形態では、各逐次用量を、０．１ｍｇ／ｋｇずつ低減する。一部の実施形態では、ステロイドは、フルオキシメステロン、メステロロン、メタンドロステノロン、ナンドロロンウンデカノエート、ナンドロロンシピオネート、オキサンドロロン、オキシメトロン、ナンドロロンヘキシルオキシフェニルプロピオネート、テストステロン、プレドニゾン、コルチゾール、コルチゾン、プレドニゾロン、デキサメタゾン、ベタメタゾン、トリアムシノロン、ベクロメタゾン、フルドロコルチゾン、デオキシコルチコステロン、アルドステロン、またはスタノゾロールを含む。一部の実施形態では、ステロイドを、サイトカイン関連毒性の、少なくとも１つの症状の軽減に必要とされるステロイドの量未満の量で投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、サイトカイン関連毒性の、少なくとも１つの症状の軽減に十分な量で投与する。一部の実施形態では、前記サイトカイン関連毒性の、少なくとも１つの症状は、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）、脳症、
およびＢ細胞無形成から選択される。一部の実施形態では、ステロイドを、約１ｍｇ／ｋｇの量で投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、約０．５ｍｇ／ｋｇの量で投与する。一部の実施形態では、改変Ｔ細胞の量は、１ｋｇ当たりの改変Ｔ細胞約１０５〜約１０９個である。一部の実施形態では、改変Ｔ細胞の量は、１ｋｇ当たりの改変Ｔ細胞約１０５〜約１０６個である。一部の実施形態では、改変Ｔ細胞の量は、１ｋｇ当たりの改変Ｔ細胞約１０６〜約１０７個である。一部の実施形態では、改変Ｔ細胞の量は、１ｋｇ当たりの改変Ｔ細胞約１０７〜約１０８個である。一部の実施形態では、改変Ｔ細胞の量は、１ｋｇ当たりの改変Ｔ細胞約１０８〜約１０９個である。一部の実施形態では、改変Ｔ細胞の量は、１ｋｇ当たりの改変Ｔ細胞約１０５個である。一部の実施形態では、方法は、サイトカインを投与するステップをさらに含む。一部の実施形態では、サイトカインは、インターフェロン、インターロイキン、ケモカイン、コロニー刺激因子、または腫瘍壊死因子を含む。一部の実施形態では、サイトカインを、改変Ｔ細胞と共に共発現する。一部の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−２、ＩＬ−７、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−２１、ＩＦＮγ、またはＴＮＦ−αを含む。一部の実施形態では、サイトカインは、ｍｂＩＬ−１５を含む。一部の実施形態では、サイトカインを、ステロイドまたはＣＡＲ−Ｔ改変Ｔ細胞と同時に投与する。一部の実施形態では、サイトカインを、ステロイドおよび改変Ｔ細胞と同時に投与する。一部の実施形態では、サイトカインを、ステロイドおよび／または改変Ｔ細胞との間で逐次的に投与する。一部の実施形態では、ステロイドおよび／または改変Ｔ細胞を、非経口投与のために製剤化する。一部の実施形態では、ステロイドおよび／または改変Ｔ細胞を、経口投与のために製剤化する。一部の実施形態では、対象は、ヒトである。一部の場合には、対象は、１８歳またはこれを超える年齢のヒトである。他の場合には、対象は、１７歳またはこれより若い年齢のヒトである。一部の場合には、対象は、乳児または若年のヒトである。
【０００７】
本明細書の、ある特定の実施形態では、それを必要とする対象におけるＴ細胞の拡大増殖を誘導する方法であって、（ａ）ｅｘ  ｖｉｖｏにおいて、Ｔ細胞を、ＣＤ１９上のエピトープを認識するキメラ抗原受容体をコードする核酸を含むベクターと接触させて、ＣＤ１９ＣＡＲ−Ｔ細胞を作出するステップと；（ｂ）対象へと、ＣＤ１９特異的Ｔ細胞の集団と、対象におけるＣＤ１９特異的Ｔ細胞の拡大増殖を誘導および／または維持するのに有効な量のステロイドとの組合せを投与するステップとを含む方法が開示される。一部の実施形態では、量は、対象における改変エフェクター細胞の集団の生着および／または拡大増殖の維持に、臨床的に干渉しない。一部の実施形態では、ベクターは、レンチウイルスベクター、レトロウイルスベクター、Ｓｌｅｅｐｉｎｇ  Ｂｅａｕｔｙトランスポゾン、または非ウイルスベクターである。一部の実施形態では、ベクターは、Ｓｌｅｅｐｉｎｇ  Ｂｅａｕｔｙトランスポゾンである。一部の実施形態では、ＣＡＲ−Ｔ細胞を、少なくとも０、２、４、６、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２２、２４、２６、２８、３０日間、またはこれを超える期間にわたり刺激する。一部の実施形態では、ＣＡＲ−Ｔ細胞を、少なくとも５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０日間、またはこれを超える期間にわたり刺激する。一部の実施形態では、ＣＡＲ−Ｔ細胞を、少なくとも７、１４、２１、２８、３５、４２、４９、５６、６３日間、またはこれを超える期間にわたり刺激する。一部の実施形態では、ＣＡＲ−Ｔ細胞は、少なくとも１つの共刺激シグナル伝達ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、少なくとも１つの共刺激シグナル伝達ドメインは、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４−１ＢＢ、ＩＣＯＳ、ＯＸ４０、ＣＤ３ゼータ、またはこれらの断片もしくは組合せに由来するシグナル伝達ドメインを含む。一部の実施形態では、少なくとも１つの共刺激シグナル伝達ドメインは、４−１ＢＢ、ＣＤ２８、またはこれらの組合せに由来するシグナル伝達ドメインを含む。一部の実施形態では、ＣＡＲ−Ｔ細胞は、ＣＤ２８共刺激シグナル伝達ドメインおよびＣＤ３ゼータをさらに含む。一部の実施形態では、ＣＡＲ−Ｔは、ＣＤ２８共刺激シグナル伝達ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、改変エフェクター細胞は、改変ナチュラルキラーＴ細胞である。一部の実施形態では、改変ナチュラルキラーＴ細胞は、改変インバリアントナチュラルキラーＴ細胞である。一部の実施形態では、ステロイドを、ＣＡＲ−Ｔ細胞と同時に投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、ＣＡＲ−Ｔ細胞との間で逐次的に投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、対象へと、ＣＡＲ−Ｔ細胞を投与する前に投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、対象へと、ＣＡＲ−Ｔ細胞を投与した後で投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、ＣＡＲ−Ｔ細胞の投与の、少なくとも０．５、１、２、３、４、５、６、８、１０、１２、１５、１８、２０、または２４時間前に投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１２、１４、１５、２８、または３０日前に投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、ＣＡＲ−Ｔ細胞の投与の、少なくとも約０．５、１、２、３、４、５、６、８、１０、１２、１５、１８、２０、２４、３６、４８、７２、８０、９０、１００、１０８、１２０、１３０、１４０、１５０、または１６０時間後に投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１２、１４、１５、２８、３０、４５、６０、９０日間、またはこれを超える期間の後に投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１２、１５、２０、２５、３０、４５、６０、９０日間、またはこれを超える期間にわたり、連続的に投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、所定の間隔で、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１２、１５、２０、２５、３０、４５、６０、９０日間、またはこれを超える期間にわたり、任意選択で、改変ＣＡＲ−Ｔ細胞と組み合わせて投与する。一部の実施形態では、ある量のステロイドを、１回、２回、３回、４回、５回の投与、またはこれを超える回数の投与により投与する。一部の実施形態では、第１の量のステロイドを、１回、２回、３回、４回、５回の投与、またはこれを超える回数の投与により、状態を処置するために投与し、状態から回復または改善したら、第２の量のステロイドを、１回、２回、３回、４回、５回の投与、またはこれを超える回数の投与により投与する。一部の実施形態では、ステロイドの第１の量は、１ｍｇ／ｋｇである。一部の実施形態では、ステロイドの第２の量は、０．５ｍｇ／ｋｇである。一部の実施形態では、ステロイドは、フルオキシメステロン、メステロロン、メタンドロステノロン、ナンドロロンウンデカノエート、ナンドロロンシピオネート、オキサンドロロン、オキシメトロン、ナンドロロンヘキシルオキシフェニルプロピオネート、テストステロン、プレドニゾン、コルチゾール、コルチゾン、プレドニゾロン、デキサメタゾン、ベタメタゾン、トリアムシノロン、ベクロメタゾン、フルドロコルチゾン、デオキシコルチコステロン、アルドステロン、またはスタノゾロールを含む。一部の実施形態では、ステロイドを、サイトカイン関連毒性の、少なくとも１つの症状の軽減に必要とされるステロイドの量未満の量で投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、サイトカイン関連毒性の、少なくとも１つの症状の軽減に十分な量で投与する。一部の実施形態では、前記サイトカイン関連毒性の、少なくとも１つの症状は、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）、脳症、およびＢ細胞無形成から選択される。一部の実施形態では、方法は、サイトカインを投与するステップをさらに含む。一部の実施形態では、サイトカインは、インターフェロン、インターロイキン、ケモカイン、コロニー刺激因子、または腫瘍壊死因子を含む。一部の実施形態では、サイトカインを、ＣＡＲ−Ｔ細胞と共に共発現する。一部の実施形態では、サイトカインは、ＩＬ−２、ＩＬ−７、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−２１、ＩＦＮγ、またはＴＮＦ−αを含む。一部の実施形態では、サイトカインは、ｍｂＩＬ−１５を含む。一部の実施形態では、サイ��カインを、ステロイドまたはＣＡＲ−Ｔ細胞と同時に投与する。一部の実施形態では、サイトカインを、ステロイドおよびＣＡＲ−Ｔ細胞と同時に投与する。一部の実施形態では、サイトカインを、ステロイドおよび／またはＣＡＲ−Ｔ細胞との間で逐次的に投与する。一部の実施形態では、ステロイドおよび／またはＣＡＲ−Ｔ細胞を、非経口投与のために製剤化する。一部の実施形態では、ステロイドおよび／またはＣＡＲ−Ｔ細胞を、経口投与のために製剤化する。一部の実施形態では、キメラ受容体は、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）である。一部の実施形態では、キメラ受容体は、抗原特異的な操作Ｔ細胞受容体である。一部の実施形態では、Ｔ細胞を、サイトカインをコードするベクターとさらに接触させる。一部の実施形態では、サイトカインは、ｍｂＩＬ−１５またはこの融合タンパク質を含む。
【０００８】
本明細書の、ある特定の実施形態では、ｉｎ  ｖｉｖｏにおけるＴ細胞の拡大増殖を誘導する方法であって、ｉｎ  ｖｉｖｏにおいて、改変Ｔ細胞の集団を、改変Ｔ細胞の集団の拡大増殖を誘導および／または維持するのに十分な、第１の量のステロイドと接触させるステップであって、前記改変Ｔ細胞が、細胞表面上に発現した、少なくとも１つのキメラ受容体を含む、ステップを含む方法が開示される。一部の実施形態では、方法は、改変Ｔ細胞の集団を、それを必要とする対象へと投与するステップをさらに含む。一部の実施形態では、改変Ｔ細胞の集団は、１ｋｇ当たりの改変Ｔ細胞約１０５〜約１０９個である。一部の実施形態では、改変Ｔ細胞の集団は、１ｋｇ当たりの改変Ｔ細胞約１０５〜約１０６個である。一部の実施形態では、改変Ｔ細胞の集団は、１ｋｇ当たりの改変Ｔ細胞約１０６〜約１０７個である。一部の実施形態では、改変Ｔ細胞の集団は、１ｋｇ当たりの改変Ｔ細胞約１０７〜約１０８個である。一部の実施形態では、改変Ｔ細胞の集団は、１ｋｇ当たりの改変Ｔ細胞約１０８〜約１０９個である。一部の実施形態では、改変Ｔ細胞の集団は、１ｋｇ当たりの改変Ｔ細胞約１０５個である。一部の実施形態では、第１の量のステロイドを、改変Ｔ細胞の投与の、少なくとも０．５、１、２、３、４、５、６、８、１０、１２、１５、１８、２０、２４、３６、４８、６０、７２、８４、９６、１０８、または１２０時間後に投与する。一部の実施形態では、第１の量のステロイドを、改変Ｔ細胞の投与の、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日間、またはこれを超える期間の後に投与する。一部の実施形態では、方法は、ｅｘ  ｖｉｖｏにおいて、Ｔ細胞を、キメラ受容体をコードするベクターと接触させて、改変Ｔ細胞を作出するステップであって、前記接触させることを、ｉｎ  ｖｉｖｏにおいて、前記Ｔ細胞を、前記第１の量のステロイドと接触させる前に実施するステップをさらに含む。一部の実施形態では、ベクターは、レンチウイルスベクター、レトロウイルスベクター、またはＳｌｅｅｐｉｎｇ  Ｂｅａｕｔｙトランスポゾンベクターである。一部の実施形態では、ベクターは、Ｓｌｅｅｐｉｎｇ  Ｂｅａｕｔｙトランスポゾンである。一部の実施形態では、Ｔ細胞を、ポイントオブケア施設において改変し、対象へと、繁殖および活性化を経ずに投与する。一部の実施形態では、前記少なくとも１つのキメラ受容体は、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）である。一部の実施形態では、少なくとも１つのキメラ受容体は、抗原特異的な操作Ｔ細胞受容体である。一部の実施形態では、改変Ｔ細胞を、少なくとも０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０日間、またはこれを超える期間にわ��り刺激する。一部の実施形態では、改変Ｔ細胞を、少なくとも５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０日間、またはこれを超える期間にわたり刺激する。一部の実施形態では、改変Ｔ細胞を、少なくとも７、１４、２１、２８、３５、４２、４９、５６、６３日間、またはこれを超える期間にわたり刺激する。一部の実施形態では、少なくとも１つのキメラ受容体は、ＣＤ１９、ＣＤ３３、ＢＣＭＡ、ＣＤ４４、α−葉酸受容体、ＣＡＩＸ、ＣＤ３０、ＲＯＲ１、ＣＥＡ、ＥＧＰ−２、ＥＧＰ−４０、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、葉酸結合性タンパク質、ＧＤ２、ＧＤ３、ＩＬ−１３Ｒ−ａ２、ＫＤＲ、ＥＤＢ−Ｆ、メソテリン、ＣＤ２２、ＥＧＦＲ、ＭＵＣ−１、ＭＡＧＥ−Ａ１、ｈ５Ｔ４、ＰＳＭＡ、ＴＡＧ−７２、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＣＤ１２３、およびＶＥＧＦ−Ｒ２のうちの少なくとも１つにおけるエピトープに結合する。一部の実施形態では、改変Ｔ細胞は、少なくとも１つの共刺激シグナル伝達ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、少なくとも１つの共刺激シグナル伝達ドメインは、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４−１ＢＢ、ＩＣＯＳ、ＯＸ４０、またはこれらの断片もしくは組合せに由来するシグナル伝達ドメインを含む。一部の実施形態では、少なくとも１つの共刺激シグナル伝達ドメインは、４−１ＢＢ、ＣＤ２８、またはこれらの組合せに由来するシグナル伝達ドメインを含む。一部の実施形態では、改変Ｔ細胞は、ＣＤ２８共刺激シグナル伝達ドメインおよびＣＤ３ゼータをさらに含む。一部の実施形態では、改変Ｔ細胞は、ＣＤ２８共刺激シグナル伝達ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、第１の量のステロイドを、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日間、またはこれを超える期間にわたり、連続的に投与する。一部の実施形態では、第１の量のステロイドを、所定の時間間隔で、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日間、またはこれを超える期間にわたり投与する。一部の実施形態では、第１の量のステロイドを、１０日ごとに投与する。一部の実施形態では、第１の量のステロイドを、１回、２回、３回、４回、５回の投与、またはこれを超える回数の投与により投与する。一部の実施形態では、第１の量のステロイドは、サイトカイン関連毒性の、少なくとも１つの症状の軽減に必要とされるステロイドの量未満である。一部の実施形態では、ステロイドの第１の量は、約１ｍｇ／ｋｇである。一部の実施形態では、ｉｎ  ｖｉｖｏにおける改変Ｔ��胞の集団を、前記第１の量のステロイドと接触させた後で、第２の量のステロイドとさらに接触させる。一部の実施形態では、前記第２の量のステロイドを、前記第１の量のステロイドと接触させた少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日間、またはこれを超える期間の後に施す。一部の実施形態では、第２の量のステロイドとの接触は、前記第１の量のステロイドとの前記接触の、少なくとも３０日間、またはこれを超える期間の後である。一部の実施形態では、ステロイドの第２の量は、ステロイドの第１の量より低量である。一部の実施形態では、ステロイドの第２の量は、約０．９ｍｇ／ｋｇ〜約０．５ｍｇ／ｋｇである。一部の実施形態では、ステロイドの第２の量は、約０．５ｍｇ／ｋｇである。一部の実施形態では、第２の量のステロイドを、逐次用量で投与する。一部の実施形態では、各逐次用量を、０．１ｍｇ／ｋｇずつ低減する。一部の実施形態では、第２の量のステロイドを、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日間、またはこれを超える期間にわたり、連続的に投与する。一部の実施形態では、さらなる量のステロイドを、所定の時間間隔で、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日間、またはこれを超える期間にわたり投与する。一部の実施形態では、さらなる量のステロイドを、１０日ごとに投与する。一部の実施形態では、さらなる量のステロイドを、１回、２回、３回、４回、５回の投与、またはこれを超える回数の投与により投与する。一部の実施形態では、ステロイドは、フルオキシメステロン、メステロロン、メタンドロステノロン、ナンドロロンウンデカノエート、ナンドロロンシピオネート、オキサンドロロン、オキシメトロン、ナンドロロンヘキシルオキシフェニルプロピオネート、テストステロン、プレドニゾン、コルチゾール、コルチゾン、プレドニゾロン、デキサメタゾン、ベタメタゾン、トリアムシノロン、ベクロメタゾン、フルドロコルチゾン、デオキシコルチコステロン、アルドステロン、またはスタノゾロールを含む。
【０００９】
本明細書の、ある特定の実施形態では、本明細書で記載される方法による使用のための、改変エフェクター細胞と、任意選択で、ステロイドとを含むキットが開示される。
【００１０】
本明細書の、ある特定の実施形態では、ｉｎ  ｖｉｖｏにおいて、改変エフェクター細胞集団の拡大増殖を誘導するためのシステムであって、改変Ｔ細胞の集団と、ある量の、少なくとも１つのステロイドとを含み、ｉｎ  ｖｉｖｏにおいて、前記改変エフェクター細胞の集団を、有効量の、前記少なくとも１つのステロイドと接触させる結果として、前記改変エフェクター細胞の集団の拡大増殖がもたらされる、システムが開示される。一部の実施形態では、量は、拡大増殖を誘導および／または維持するのに有効である。一部の実施形態では、前記少なくとも１つのステロイドの前記量は、サイトカイン関連毒性の、少なくとも１つの症状の軽減に必要とされるステロイドの量未満である。一部の実施形態では、改変エフェクター細胞は、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）Ｔ細胞である。一部の実施形態では、少なくとも１つのステロイドは、フルオキシメステロン、メステロロン、メタンドロステノロン、ナンドロロンウンデカノエート、ナンドロロンシピオネート、オキサンドロロン、オキシメトロン、ナンドロロンヘキシルオキシフェニルプロピオネート、テストステロン、プレドニゾン、コルチゾール、コルチゾン、プレドニゾロン、デキサメタゾン、ベタメタゾン、トリアムシノロン、ベクロメタゾン、フルドロコルチゾン、デオキシコルチコステロン、アルドステロン、およびスタノゾロールのうちの少なくとも１つを含む。
【００１１】
参照による組込み
本明細書で言及される、全ての刊行物、特許、および特許出願は、各個別の刊行物、特許、または特許出願が、参照により具体的かつ個別に組み込まれることが指し示された場合と同じ程度に、参照により本明細書に組み込まれる。
【００１２】
本発明の新規の特徴は、特に、付属の特許請求の範囲において明示されている。本発明の特徴および利点についてのよりよい理解は、本発明の原理が用いられる、例示的な実施形態を明示する、以下の詳細な記載および付属の図面を参照することにより得られるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】ＣＡＲ−Ｔ細胞の投与の前における、１８Ｆ−フルオロデオキシグルコース（１８Ｆ−ＦＤＧ）によるＰＥＴ−ＣＴ走査を例示する図である。
【図２】ＣＡＲ−Ｔ細胞およびプレドニゾンの投与の後における、１８Ｆ−フルオロデオキシグルコース（１８Ｆ−ＦＤＧ）によるＰＥＴ−ＣＴ走査を示す図である。
【図３】輸注後日数に基づき、ＣＡＲ−Ｔ細胞のトランス遺伝子コピーを示す図である。
【図４】輸注後日数に基づき、１ｍＬ当たりの細胞数を示す図である。
【図５Ａ】プレドニゾンによる処置時における、ＣＡＲ−Ｔ拡大増殖のモジュレーションを示す図である。ＣＡＲ−Ｔ細胞のトランス遺伝子コピー数およびＣＡＲコピー数を、輸注後日数に基づいて示す。
【図５Ｂ】輸注の最大９０日後における、ＣＡＲトランス遺伝子コピー数を描示する図である。トランス遺伝子コピー数は、２つの異なる解析法：デジタルドロップレットＰＣＲ（ｄｄＰＣＲ）および定量的ＰＣＲを使用して検出する。
【図６】図６Ａは、サンプリング時点の血液中で検出される、特異的細胞集団についての定量的フローサイトメトリー解析を描示する図である。図６Ｂは、サンプリング時点の血液中で検出される、特異的細胞集団についての定量的フローサイトメトリー解析を描示する図である。
【図７】図７Ａは、ＣＡＲ−Ｔ細胞輸注後の異なる時点における、血清サイトカインレベルを示す図である。図７Ｂは、ＣＡＲ−Ｔ細胞輸注後の異なる時点における、血清サイトカインレベルを描示する図である。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
標的特異的抗原に対する、改変エフェクター細胞を含み、少なくとも１つのステロイドを、前記改変エフェクター細胞の集団の生着および／または拡大増殖の維持に干渉しない十分量で施す方法および組成物が提供される。場合によって、ステロイドを、サイトカインストームの任意の症状の発現の前に施す。場合によって、ステロイドを、改変エフェクター細胞の、それを必要とする対象への投与の前に施す。
【００１５】
キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）療法は、標的特異的腫瘍抗原に対する、改変エフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞）を含む。一部の場合には、ＣＡＲ療法を使用して、大半のＢ細胞悪性腫瘍内で発現する、汎Ｂ細胞抗原であるＣＤ１９をターゲティングした。ＣＤ１９特異的ＣＡＲ療法は、例えば、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、またはＢ細胞非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）をターゲティングするいくつかの臨床試験において、有効性を示している。しかし、ｉｎ  ｖｉｖｏにおける、改変エフェクター細胞の、限定的な拡大増殖、および投与後における、これらの改変細胞の、低レベルの存続もまた、観察された。
【００１６】
本明細書の、ある特定の実施形態では、それを必要とする対象における改変エフェクター細胞の集団の拡大増殖を誘導する方法が開示される。一部の場合には、対象へと、改変エフェクター細胞およびステロイドを投与する方法であって、ステロイドが、対象における改変エフェクター細胞の集団の生着および／または拡大増殖に、有害な影響を与えない有効量である、方法が本明細書で開示される。
【００１７】
一部の場合には、本明細書ではまた、対象におけるＴ細胞の拡大増殖を誘導する方法であって、ｅｘ  ｖｉｖｏにおいて、Ｔ細胞を、キメラ抗原受容体をコードするベクターと接触させて、ＣＡＲ−Ｔ細胞を作出するステップと、対象へと、ＣＡＲ−Ｔ細胞の量を投与するステップと、対象へと、ステロイドを、対象におけるＣＡＲ−Ｔ細胞の集団の拡大増殖を誘導するのに十分な量で投与するステップとを含む方法も開示される。
【００１８】
一部の場合には、本明細書では加えて、ｉｎ  ｖｉｖｏにおけるＴ細胞の拡大増殖を誘導する方法であって、改変Ｔ細胞の生着および／または拡大増殖に有害な影響を与えないように、ｉｎ  ｖｉｖｏにおいて、改変Ｔ細胞の集団を、第１の量のステロイドと、第１の時点において接触させるステップを含み、各改変Ｔ細胞が、細胞表面上で発現したキメラ受容体を含む、方法も開示される。
【００１９】
一部の場合には、本明細書で記載される方法は、プレコンディショニングステップ（例えば、リンパ枯渇）の省略を可能とする。このような場合、本明細書で記載される改変エフェクター細胞およびステロイドを、リンパ球減少を誘導する、化学療法剤の事前の投与を必要とせずに、対象へと投与する。一部の場合には、プレコンディショニングステップは、対象への、改変エフェクター細胞の投与の、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、または４５日間前である。
【００２０】
さらなる場合には、本明細書で記載される方法は、低用量のステロイドの投与を含む。一部の場合には、低用量は、サイトカイン関連毒性の、少なくとも１つの症状の軽減に必要とされる用量未満の用量を含む。場合によって、サイトカイン関連毒性は、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）、脳症、またはＢ細胞無形成を含む。さらなる場合に、ステロイドをまず、ある特定の用量で投与し、これを、その後、逐次的に低減する、例えば、第１の用量は、１ｍｇ／ｋｇであり、後続の用量は、０．９ｍｇ／ｋｇ、０．８ｍｇ／ｋｇ、０．７ｍｇ／ｋｇ、０．６ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ／ｋｇ、０．４ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇ、０．２ｍｇ／ｋｇ、または０．１ｍｇ／ｋｇである。
【００２１】
改変エフェクター細胞
一部の実施形態では、改変エフェクター細胞は、Ｔ細胞および／またはナチュラルキラー細胞を含む改変免疫細胞である。Ｔ細胞またはＴリンパ球は、細胞媒介性免疫に関与する白血球の亜型である。例示的なＴ細胞は、ヘルパーＴ細胞、細胞傷害性Ｔ細胞、ＴＨ１７細胞、ステムセルメモリーＴ細胞（ＴＳＣＭ）、ナイーブＴ細胞、メモリーＴ細胞、エフェクターＴ細胞、調節性Ｔ細胞、またはナチュラルキラーＴ細胞を含む。
【００２２】
ヘルパーＴ細胞（ＴＨ細胞）は、Ｂ細胞の、血漿細胞およびメモリーＢ細胞への成熟、ならびに細胞傷害性Ｔ細胞およびマクロファージの活性化を含む免疫過程において、他の白血球を支援する。場合によって、ＴＨ細胞は、細胞表面上のＣＤ４糖タンパク質の発現のために、ＣＤ４＋  Ｔ細胞として公知である。ヘルパーＴ細胞は、抗原提示細胞（ＡＰＣ）の表面上で発現する、ＭＨＣクラスＩＩ分子により、ペプチド抗原を提示されると、活性化する。活性化すると、ヘルパーＴ細胞は、急速に分裂し、活性の免疫応答を調節するか、またはこれらを支援する、サイトカインと呼ばれる、小型のタンパク質を分泌する。これらの細胞は、ＴＨ１、ＴＨ２、ＴＨ３、ＴＨ１７、Ｔｈ９、またはＴＦＨを含む、いくつかの亜型であって、異なるサイトカインを分泌して、異なる種類の免疫応答を容易とする、いくつかの亜型のうちの１つへと分化しうる。ＡＰＣからのシグナル伝達は、Ｔ細胞を、特定の亜型へと方向付ける。
【００２３】
細胞傷害性Ｔ細胞（ＴＣ細胞またはＣＴＬ）は、ウイルス感染細胞および腫瘍細胞を破壊し、また、移植片拒絶にも関与している。これらの細胞はまた、それらの表面上において、ＣＤ８糖タンパク質を発現するので、ＣＤ８＋  Ｔ細胞としても公知である。これらの細胞は、全ての有核細胞の表面上に存在する、ＭＨＣクラスＩ分子と会合する抗原に結合することにより、それらの標的を認識する。調節性Ｔ細胞により分泌される、ＩＬ−１０、アデノシン、および他の分子を介して、ＣＤ８＋細胞は、アネルギー状態へと不活化される場合があり、これにより、自己免疫疾患を防止する。
【００２４】
メモリーＴ細胞は、感染が消失した後で、長期にわたり存続する、抗原特異的Ｔ細胞のサブセットである。メモリーＴ細胞は、それらのコグネイト抗原へと再曝露されると、多数のエフェクターＴ細胞へと急速に拡大増殖し、これにより、免疫系に、過去の感染に対する「メモリー」をもたらす。メモリーＴ細胞は、亜型：ステムセルメモリーＴ細胞（ＴＳＣＭ）、セントラルメモリーＴ細胞（ＴＣＭ細胞）および２種類のエフェクターメモリーＴ細胞（ＴＥＭ細胞およびＴＥＭＲＡ細胞）を含む。メモリー細胞は、ＣＤ４＋細胞の場合もあり、ＣＤ８＋細胞の場合もある。メモリーＴ細胞は、細胞表面タンパク質である、ＣＤ４５ＲＯ、ＣＤ４５ＲＡ、および／またはＣＣＲ７を発現しうる。
【００２５】
かつては、サプレッサーＴ細胞として公知であった、調節性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ細胞）は、免疫寛容の維持において役割を果たす。調節性Ｔ細胞の主要な役割は、Ｔ細胞媒介性免疫を遮断して、免疫反応を終了させ、胸腺内の陰性選択過程を回避した自己反応性Ｔ細胞を抑制することである。
【００２６】
ナチュラルキラーＴ細胞（ＮＫＴ細胞）は、獲得免疫系を、自然免疫系と橋渡しする。主要組織適合性複合体（ＭＨＣ）分子により提示されるペプチド抗原を認識する従来のＴ細胞と異なり、ＮＫＴ細胞は、ＣＤ１ｄと呼ばれる分子により提示される糖脂質抗原を認識する。活性化すると、これらの細胞は、Ｔｈ細胞およびＴｃ細胞の両方に帰せられた機能（すなわち、サイトカインの産生および細胞溶解性／細胞殺滅分子の放出）を果たしうる。ＮＫＴ細胞はまた、一部の腫瘍細胞およびヘルペスウイルスに感染した細胞を認識し、これらを消失させることも可能である。
【００２７】
ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞とは、自然免疫系の、細胞傷害性リンパ球の種類である。場合によって、ＮＫ細胞は、ウイルス感染および／または腫瘍形成に対する、最前線の防御をもたらす。ＮＫ細胞は、感染細胞上またはがん性細胞上に提示されたＭＨＣを検出することが可能であり、サイトカイン放出を誘発し、その後、溶解およびアポトーシスを誘導する。ＮＫ細胞はさらに、抗体および／またはＭＨＣの非存在下で、ストレス細胞を検出することが可能であり、これにより、迅速な免疫応答を可能とする。
【００２８】
キメラ受容体
一部の実施形態では、本明細書では、細胞表面上で発現したキメラ受容体を含む、改変エフェクター細胞が記載される。一部の場合には、キメラ受容体は、腫瘍抗原、例えば、腫瘍関連抗原または腫瘍特異的抗原の認識およびこれへの結合を可能とする抗原結合性領域を含む。一部の場合には、抗原結合性領域は、抗体または結合性断片、例えば、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆ（ａｂ’）３、ｓｃＦｖ、ｓｃ（Ｆｖ）２、ｄｓＦｖ、ダイアボディー、ミニボディー、およびナノボディーまたはこれらの結合性断片を含む。場合によって、抗原結合性領域は、ｓｃＦｖを含む。場合によって、キメラ受容体は、ｓｃＦｖ（例えば、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ））を含む。一部の場合には、キメラ抗原受容体は、パターン認識受容体を含む。他の場合には、キメラ受容体は、操作Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）を含む。
【００２９】
キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）
キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）とは、外因性特異基を、免疫エフェクター細胞へとグラフトする操作受容体である。一部の場合には、ＣＡＲは、抗原結合性ドメイン、ストーク領域、膜貫通ドメイン、および細胞内ドメイン（エンドドメイン）を含む細胞外ドメイン（エクトドメイン）を含む。一部の場合には、細胞内ドメインは、１または複数の細胞内シグナル伝達ドメインをさらに含む。一部の場合には、本明細書で記載されるＣＡＲは、Ｔ細胞活性化のための、抗原結合性ドメイン、ストーク領域、膜貫通ドメイン、１または複数の共刺激ドメイン、およびシグナル伝達ドメインを含む。
【００３０】
抗原結合性ドメインは、モノクローナル抗体の相補性決定領域、モノクローナル抗体の可変領域、および／またはこれらの抗原結合性断片を含みうる。相補性決定領域（ＣＤＲ）とは、抗原と相補的であり、したがって、受容体に、この特定の抗原に対するその特異性をもたらす、抗原受容体（例えば、免疫グロブリンおよびＴ細胞受容体）タンパク質の可変ドメイン内に見出される、短いアミノ酸配列である。抗原受容体の各ポリペプチド鎖は、３つのＣＤＲ（ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３）を含有しうる。一部の場合には、抗原結合性ドメインは、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆａｂ’、Ｆａｂ、Ｆｖ、またはｓｃＦｖを含む。場合によって、抗原結合性ドメインは、ｓｃＦｖである。場合によって、抗原結合性ドメインは、Ｆａｂである。場合によって、抗原結合性ドメインは、Ｆａｂ’である。場合によって、抗原結合性ドメインは、Ｆ（ａｂ’）２である。場合によって、抗原結合性ドメインは、Ｆｖである。
【００３１】
一部の実施形態では、本明細書で記載されるＣＡＲは、ＣＤ１９、ＢＣＭＡ、ＣＤ４４、α−葉酸受容体、ＣＡＩＸ、ＣＤ３０、ＲＯＲ１、ＣＥＡ、ＥＧＰ−２、ＥＧＰ−４０、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、葉酸結合性タンパク質、ＧＤ２、ＧＤ３、ＩＬ−１３Ｒ−ａ２、ＫＤＲ、ＥＤＢ−Ｆ、メソテリン、ＣＤ２２、ＥＧＦＲ、葉酸受容体α、ＭＵＣ−１またはＭＵＣ−１６などのムチン、ＭＡＧＥ−Ａ１、ｈ５Ｔ４、ＰＳＭＡ、ＴＡＧ−７２、ＥＧＦＲ、ＣＤ２０、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＣＤ１２３、またはＶＥＧＦ−Ｒ２におけるエピトープに結合する抗原結合性ドメインを含む。一部の実施形態では、本明細書で記載されるＣＡＲは、ＣＤ１９上またはＣＤ３３上のエピトープに結合する抗原結合性ドメインを含む。一部の場合には、本明細書で記載されるＣＡＲは、ＣＤ１９上のエピトープに結合する抗原結合性ドメインを含む。場合によって、本明細書で記載されるＣＡＲは、ＣＤ３３上のエピトープに結合する抗原結合性ドメインを含む。さらなる実施形態では、本明細書で記載されるＣＡＲは、ＨＬＡ−Ａ２、ミエリン希突起膠細胞糖タンパク質（ＭＯＧ）、因子ＶＩＩＩ（ＦＶＩＩＩ）、ＭＡｄＣＡＭ１、ＳＤＦ１、またはＩＩ型コラーゲンにおけるエピトープに結合する、自己抗原または抗原結合性領域を含む。
【００３２】
一部の実施形態では、本明細書で記載されるＣＡＲおよび方法を、がんなどの過剰増殖性疾患、自己免疫疾患の処置、またはウイルス感染、細菌感染、または寄生虫感染など、感染の処置のために使用することができる。一部の態様では、ＣＡＲは、がん細胞内、自己免疫細胞内、またはウイルス、細菌、もしくは寄生虫に感染した細胞内で増大する抗原をターゲティングする。ターゲティングされうる病原体は、限定せずに述べると、マラリア原虫（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ）属、トリパノソーム、アスペルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）属、カンジダ（Ｃａｎｄｉｄａ）属、Ａ型肝炎ウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、ＨＳＶ、ＨＰＶ、ＲＳＶ、ＥＢＶ、ＣＭＶ、ＪＣウイルス、ＢＫウイルス、またはエボラ病原体を含む。自己免疫疾患は、移植片対宿主病、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、セリアック病、クローン病、シェーグレン症候群、リウマチ性多発筋痛症、多発性硬化症、視神経脊髄炎、強直性脊椎炎、１型糖尿病、円形脱毛症、血管炎、側頭動脈炎、水疱性類天疱瘡、乾癬、尋常性天疱瘡、または自己免疫性ブドウ膜炎を含みうる。
【００３３】
ＣＡＲにより本質的に認識される病原体は、任意の種類の病原体でありうるが、一部の実施形態では、病原体は、真菌、細菌、またはウイルスである。例示的なウイルス性病原体は、アデノウイルス科（Adenoviridae）、エプスタイン−バーウイルス（ＥＢＶ）、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、ＲＳ（Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ  Ｓｙｎｃｙｔｉａｌ）ウイルス（ＲＳＶ）、ＪＣウイルス、ＢＫウイルス、ＨＰＶ、ＨＳＶ、ＨＨＶファミリーのウイルス、肝炎ファミリーのウイルス、ピコルナウイルス科（Picornaviridae）、ヘルペスウイルス科（Herpesviridae）、ヘパドナウイルス科（Hepadnaviridae）、フラビウイルス科（Flaviviridae）、レトロウイルス科（Retroviridae）、オルトミクソウイルス科（Orthomyxoviridae）、パラミクソウイルス科（Paramyxoviridae）、パポバウイルス科（Papovaviridae）、ポリオーマウイルス属（Polyomavirus）、ラブドウイルス科（Rhabdoviridae）、およびトガウイルス科（Togaviridae）の病原体を含む。例示的な病原性ウイルスは、天然痘、インフルエンザ、耳下腺炎、麻疹、水痘、エボラ、および風疹を引き起こす。例示的な病原性真菌は、カンジダ属（Candida）、アスペルギルス属（Aspergillus）、クリプトコッカス属（Cryptococcus）、ヒストプラズマ属（Histoplasma）、ニューモシスチス属（Pneumocystis）、およびスタキボトリス属（Stachybotrys）を含む。例示的な病原性細菌は、ストレプトコッカス属（Streptococcus）、シュードモナス属（Pseudomonas）、赤痢菌属（Shigella)、カンピロバクター属（Campylobacter）、スタフィロコッカス属（Staphylococcus）、ヘリコバクター属（Helicobacter）、大腸菌（E. coli）、リケッチア属（Rickettsia）、バチルス属（Bacillus）、ボルデテラ属（Bordetella）、クラミジア属（Chlamydia）、スピロヘータ門（Spirochetes）、およびサルモネラ属（Salmonella）を含む。一部の実施形態では、病原体受容体であるデクチン１を使用して、アスペルギルス（Aspergillus）属など、真菌の細胞壁上の炭水化物構造を認識するＣＡＲを作出することができる。別の実施形態では、ウイルス決定基（例えば、ＣＭＶおよびエボラに由来する糖タンパク質）を認識する抗体に基づき、ウイルス感染およびウイルス病態を阻止するＣＡＲを作ることができる。
【００３４】
一部の実施形態では、「ストーク」領域または「スペーサー」領域または「ヒンジ」領域を使用して、抗原結合性ドメインを、膜貫通ドメインへと連結する。一部の場合には、「ストークドメイン」または「ストーク領域」は、ポリペプチド鎖内で、膜貫通ドメインを、細胞外ドメインまたは細胞質ドメインへと連結するように機能する、任意のオリゴヌクレオチドまたはポリペプチドを含む。一部の実施形態では、ストークドメインは、抗原結合性ドメインが、抗原認識を容易とするように、異なる方向を向くことを可能とするのに十分な程度に可撓性である。場合によって、ストーク領域は、ＩｇＧ１に由来するヒンジ領域を含む。代替的な場合に、ストーク領域は、免疫グロブリンのＣＨ２ＣＨ３領域と、任意選択で、ＣＤ３の一部とを含む。場合によって、ストーク領域は、国際公開第２０１６／０７３７５５号パンフレットにおいて記載されている、ＣＤ８αヒンジ領域、ＩｇＧ４−Ｆｃの１２アミノ酸のヒンジ領域（ＥＳＫＹＧＰＰＣＰＰＣＰ）、またはＩｇＧ４ヒンジ領域を含む。
【００３５】
膜貫通ドメインは、天然供給源に由来する場合もあり、組換え供給源に由来する場合もある。供給源が天然である場合、ドメインは、任意の膜結合性タンパク質または膜貫通タンパク質に由来しうる。適切な膜貫通ドメインは、Ｔ細胞受容体の、アルファ鎖、ベータ鎖、またはゼータ鎖の膜貫通領域を含む場合もあり、ＣＤ２８、ＣＤ３イプシロン、ＣＤ３ζ、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８アルファ、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、またはＣＤ１５４に由来する膜貫通領域を含む場合もある。代替的に、膜貫通ドメインは、合成の場合もあり、ロイシンおよびバリンなどの疎水性残基を含みうる。一部の実施形態では、合成膜貫通ドメインの、一方または両方の末端では、フェニルアラニン、トリプトファン、およびバリンのトリプレットが見出される。任意選択で、一部の実施形態では、２〜１０アミノ酸の間の長さである、短いオリゴヌクレオチドリンカーまたはポリペプチドリンカーは、ＣＡＲの膜貫通ドメインと、細胞質シグナル伝達ドメインとの間の連結を形成しうる。一部の実施形態では、リンカーは、グリシン−セリンリンカーである。
【００３６】
一部の実施形態では、膜貫通ドメインは、ＣＤ８α膜貫通ドメインまたはＣＤ３ζ膜貫通ドメインを含む。一部の実施形態では、膜貫通ドメインは、ＣＤ８α膜貫通ドメインを含む。他の実施形態では、膜貫通ドメインは、ＣＤ３ζ膜貫通ドメインを含む。
【００３７】
細胞内ドメインは、１または複数の共刺激ドメインを含みうる。例示的な共刺激ドメインは、ＣＤ８、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４−１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＩＣＯＳ、ＤＡＰ１０、ＤＡＰ１２、ＯＸ４０（ＣＤ１３４）、またはこれらの断片もしくは組合せを含むがこれらに限定されない。場合によって、本明細書で記載されるＣＡＲは、ＣＤ８、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４−１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＩＣＯＳ、ＤＡＰ１０、ＤＡＰ１２、ＯＸ４０（ＣＤ１３４）、またはこれらの断片もしくは組合せから選択される共刺激ドメインのうちの１もしくは複数、または２つもしくはこれを超えるものを含む。場合によって、本明細書で記載されるＣＡＲは、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４−１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＩＣＯＳ、ＯＸ４０（ＣＤ１３４）、またはこれらの断片もしくは組合せから選択される共刺激ドメインのうちの１もしくは複数、または２つもしくはこれを超えるものを含む。場合によって、本明細書で記載されるＣＡＲは、ＣＤ８、ＣＤ２８、４−１ＢＢ（ＣＤ１３７）、またはこれらの断片もしくは組合せから選択される共刺激ドメインのうちの１もしくは複数、または２つもしくはこれを超えるものを含む。場合によって、本明細書で記載されるＣＡＲは、ＣＤ２８、４−１ＢＢ（ＣＤ１３７）、またはこれらの断片もしくは組合せから選択される共刺激ドメインのうちの１もしくは複数、または２つもしくはこれを超えるものを含む。場合によって、本明細書で記載されるＣＡＲは、共刺激ドメインであるＣＤ２８および４−１ＢＢ（ＣＤ１３７）、またはこれらのそれぞれの断片を含む。場合によって、本明細書で記載されるＣＡＲは、共刺激ドメインであるＣＤ２８およびＯＸ４０（ＣＤ１３４）、またはこれらのそれぞれの断片を含む。場合によって、本明細書で記載されるＣＡＲは、共刺激ドメインであるＣＤ８およびＣＤ２８、またはこれらのそれぞれの断片を含む。場合によって、本明細書で記載されるＣＡＲは、共刺激ドメインであるＣＤ２８、またはこの断片を含む。場合によって、本明細書で記載されるＣＡＲは、共刺激ドメインである４−１ＢＢ（ＣＤ１３７）、またはこの断片を含む。場合によって、本明細書で記載されるＣＡＲは、共刺激ドメインであるＯＸ４０（ＣＤ１３４）、またはこの断片を含む。場合によって、本明細書で記載されるＣＡＲは、共刺激ドメインであるＣＤ８、またはこの断片を含む。場合によって、本明細書で記載されるＣＡＲは、少なくとも１つの共刺激ドメインであるＤＡＰ１０、またはこの断片を含む。
【００３８】
一部の実施形態では、細胞内ドメインは、Ｔ細胞活性化のためのシグナル伝達ドメインをさらに含む。場合によって、Ｔ細胞活性化のためのシグナル伝達ドメインは、ＴＣＲゼータ、ＦｃＲガンマ、ＦｃＲベータ、ＣＤ３ガンマ、ＣＤ３デルタ、ＣＤ３イプシロン、ＣＤ５、ＣＤ２２、ＣＤ７９ａ、ＣＤ７９ｂ、またはＣＤ６６ｄに由来するドメインを含む。場合によって、Ｔ細胞活性化のためのシグナル伝達ドメインは、ＣＤ３ζに由来するドメインを含む。
【００３９】
ＣＤ１９特異的ＣＡＲ
ＣＤ１９とは、免疫グロブリンスーパーファミリーの細胞表面糖タンパク質であり、主に、悪性Ｂ系列細胞内で見出される。一部の場合には、ＣＤ１９はまた、膵臓がん、肝臓がん、および前立腺がんなど、充実性腫瘍内でも検出されている。
【００４０】
一部の実施形態では、本明細書では、抗原結合性ドメインが、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆａｂ’、Ｆａｂ、Ｆｖ、またはｓｃＦｖを含む、ＣＤ１９特異的ＣＡＲが記載される。一部の場合には、抗原結合性ドメインは、ＣＤ１９上のエピトープを認識する。
【００４１】
一部の実施形態では、抗原結合性ドメインは、ＪＣＡＲ０１４、ＪＣＡＲ０１５、ＪＣＡＲ０１７、または１９−２８ｚ  ＣＡＲ（Ｊｕｎｏ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）によってもまた認識される、ＣＤ１９上のエピトープを認識する。一部の実施形態では、本明細書では、抗原結合性ドメインが、ＪＣＡＲ０１４、ＪＣＡＲ０１５、ＪＣＡＲ０１７、または１９−２８ｚ  ＣＡＲ（Ｊｕｎｏ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）によってもまた認識される、ＣＤ１９上のエピトープを認識する、ＣＤ１９特異的ＣＡＲ−Ｔ細胞が記載される。一部の場合には、ＣＤ１９特異的ＣＡＲ−Ｔ細胞は、ＣＤ８アルファ膜貫通ドメインまたはＣＤ３ζ膜貫通ドメインから選択される膜貫通ドメイン；ＣＤ２７、ＣＤ２８、４−１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＩＣＯＳ、ＤＡＰ１０、ＯＸ４０（ＣＤ１３４）、またはこれらの断片もしくは組合せから選択される、１または複数の共刺激ドメイン；およびＣＤ３ζに由来するシグナル伝達ドメインをさらに含む。
【００４２】
一部の実施形態では、本明細書で記載されるＣＤ１９特異的ＣＡＲ−Ｔ細胞は、ｓｃＦｖの抗原結合性ドメインを含み、抗原結合性ドメインは、ＪＣＡＲ０１４、ＪＣＡＲ０１５、ＪＣＡＲ０１７、または１９−２８ｚ  ＣＡＲ（Ｊｕｎｏ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）によってもまた認識される、ＣＤ１９上のエピトープを認識する。一部の場合には、ＣＤ１９特異的ＣＡＲ−Ｔ細胞は、ＣＤ８アルファ膜貫通ドメインまたはＣＤ３ζ膜貫通ドメインから選択される膜貫通ドメイン；ＣＤ２７、ＣＤ２８、４−１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＩＣＯＳ、ＤＡＰ１０、ＯＸ４０（ＣＤ１３４）、またはこれらの断片もしくは組合せから選択される、１または複数の共刺激ドメイン；およびＣＤ３ζに由来するシグナル伝達ドメインをさらに含む。
【００４３】
一部の実施形態では、本明細書で記載されるＣＤ１９特異的ＣＡＲ−Ｔ細胞は、米国特許出願公開第２０１６０１５２７２３号明細書において記載されている抗ＣＤ１９抗体を含む。
【００４４】
一部の実施形態では、抗原結合性ドメインは、ＫＴＥ−Ｃ１９（Ｋｉｔｅ  Ｐｈａｒｍａ，Ｉｎｃ．）によってもまた認識される、ＣＤ１９上のエピトープを認識する。一部の実施形態では、本明細書では、抗原結合性ドメインが、ＫＴＥ−Ｃ１９によってもまた認識される、ＣＤ１９上のエピトープを認識する、ＣＤ１９特異的ＣＡＲ−Ｔ細胞が記載される。一部の場合には、ＣＤ１９特異的ＣＡＲ−Ｔ細胞は、ＣＤ８アルファ膜貫通ドメインまたはＣＤ３ζ膜貫通ドメインから選択される膜貫通ドメイン；ＣＤ２７、ＣＤ２８、４−１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＩＣＯＳ、ＤＡＰ１０、ＯＸ４０（ＣＤ１３４）、またはこれらの断片もしくは組合せから選択される、１または複数の共刺激ドメイン；およびＣＤ３ζに由来するシグナル伝達ドメインをさらに含む。
【００４５】
一部の実施形態では、本明細書で記載されるＣＤ１９特異的ＣＡＲ−Ｔ細胞は、ｓｃＦｖの抗原結合性ドメインを含み、抗原結合性ドメインは、ＫＴＥ−Ｃ１９によってもまた認識される、ＣＤ１９上のエピトープを認識する。一部の場合には、ＣＤ１９特異的ＣＡＲ−Ｔ細胞は、ＣＤ８アルファ膜貫通ドメインまたはＣＤ３ζ膜貫通ドメインから選択される膜貫通ドメイン；ＣＤ２７、ＣＤ２８、４−１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＩＣＯＳ、ＤＡＰ１０、ＤＡＰ１２、ＯＸ４０（ＣＤ１３４）、またはこれらの断片もしくは組合せから選択される、１または複数の共刺激ドメイン；およびＣＤ３ζに由来するシグナル伝達ドメインをさらに含む。
【００４６】
一部の実施形態では、本明細書で記載されるＣＤ１９特異的ＣＡＲ−Ｔ細胞は、国際公開第２０１５１８７５２８号パンフレットにおいて記載されている抗ＣＤ１９抗体、またはこの断片もしくは誘導体を含む。
【００４７】
一部の実施形態では、抗原結合性ドメインは、ＣＴＬ０１９（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）によってもまた認識される、ＣＤ１９上のエピトープを認識する。一部の実施形態では、本明細書では、抗原結合性ドメインが、ＣＴＬ０１９によってもまた認識される、ＣＤ１９上のエピトープを認識する、ＣＤ１９特異的ＣＡＲ−Ｔ細胞が記載される。一部の場合には、ＣＤ１９特異的ＣＡＲ−Ｔ細胞は、ＣＤ８アルファ膜貫通ドメインまたはＣＤ３ζ膜貫通ドメインから選択される膜貫通ドメイン；ＣＤ２７、ＣＤ２８、４−１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＩＣＯＳ、ＤＡＰ１０、ＤＡＰ１２、ＯＸ４０（ＣＤ１３４）、またはこれらの断片もしくは組合せから選択される、１または複数の共刺激ドメイン；およびＣＤ３ζに由来するシグナル伝達ドメインをさらに含む。
【００４８】
一部の実施形態では、本明細書で記載されるＣＤ１９特異的ＣＡＲ−Ｔ細胞は、ｓｃＦｖの抗原結合性ドメインを含み、抗原結合性ドメインは、ＣＴＬ０１９によってもまた認識される、ＣＤ１９上のエピトープを認識する。一部の場合には、ＣＤ１９特異的ＣＡＲ−Ｔ細胞は、ＣＤ８アルファ膜貫通ドメインまたはＣＤ３ζ膜貫通ドメインから選択される膜貫通ドメイン；ＣＤ２７、ＣＤ２８、４−１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＩＣＯＳ、ＤＡＰ１０、ＤＡＰ１２、ＯＸ４０（ＣＤ１３４）、またはこれらの断片もしくは組合せから選択される、１または複数の共刺激ドメイン；およびＣＤ３ζに由来するシグナル伝達ドメインをさらに含む。
【００４９】
一部の実施形態では、抗原結合性ドメインは、ＵＣＡＲＴ１９（Ｃｅｌｌｅｃｔｉｓ）によってもまた認識される、ＣＤ１９上のエピトープを認識する。一部の実施形態では、本明細書では、抗原結合性ドメインが、ＵＣＡＲＴ１９によってもまた認識される、ＣＤ１９上のエピトープを認識する、ＣＤ１９特異的ＣＡＲ−Ｔ細胞が記載される。一部の場合には、ＣＤ１９特異的ＣＡＲ−Ｔ細胞は、ＣＤ８アルファ膜貫通ドメインまたはＣＤ３ζ膜貫通ドメインから選択される膜貫通ドメイン；ＣＤ２７、ＣＤ２８、４−１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＩＣＯＳ、ＤＡＰ１０、ＤＡＰ１２、ＯＸ４０（ＣＤ１３４）、またはこれらの断片もしくは組合せから選択される、１または複数の共刺激ドメイン；およびＣＤ３ζに由来するシグナル伝達ドメインをさらに含む。
【００５０】
一部の実施形態では、本明細書で記載されるＣＤ１９特異的ＣＡＲ−Ｔ細胞は、ｓｃＦｖの抗原結合性ドメインを含み、抗原結合性ドメインは、ＵＣＡＲＴ１９によってもまた認識される、ＣＤ１９上のエピトープを認識する。一部の場合には、ＣＤ１９特異的ＣＡＲ−Ｔ細胞は、ＣＤ８アルファ膜貫通ドメインまたはＣＤ３ζ膜貫通ドメインから選択される膜貫通ドメイン；ＣＤ２７、ＣＤ２８、４−１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＩＣＯＳ、ＤＡＰ１０、ＤＡＰ１２、ＯＸ４０（ＣＤ１３４）、またはこれらの断片もしくは組合せから選択される、１または複数の共刺激ドメイン；およびＣＤ３ζに由来するシグナル伝達ドメインをさらに含む。
【００５１】
一部の実施形態では、抗原結合性ドメインは、ＢＰＸ−４０１（Ｂｅｌｌｉｃｕｍ）によってもまた認識される、ＣＤ１９上のエピトープを認識する。一部の実施形態では、本明細書では、抗原結合性ドメインが、ＢＰＸ−４０１によってもまた認識される、ＣＤ１９上のエピトープを認識する、ＣＤ１９特異的ＣＡＲ−Ｔ細胞が記載される。一部の場合には、ＣＤ１９特異的ＣＡＲ−Ｔ細胞は、ＣＤ８アルファ膜貫通ドメインまたはＣＤ３ζ膜貫通ドメインから選択される膜貫通ドメイン；ＣＤ２７、ＣＤ２８、４−１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＩＣＯＳ、ＤＡＰ１０、ＤＡＰ１２、ＯＸ４０（ＣＤ１３４）、またはこれらの断片もしくは組合せから選択される、１または複数の共刺激ドメイン；およびＣＤ３ζに由来するシグナル伝達ドメインをさらに含む。
【００５２】
一部の実施形態では、本明細書で記載されるＣＤ１９特異的ＣＡＲ−Ｔ細胞は、ｓｃＦｖの抗原結合性ドメインを含み、抗原結合性ドメインは、ＢＰＸ−４０１によってもまた認識される、ＣＤ１９上のエピトープを認識する。一部の場合には、ＣＤ１９特異的ＣＡＲ−Ｔ細胞は、ＣＤ８アルファ膜貫通ドメインまたはＣＤ３ζ膜貫通ドメインから選択される膜貫通ドメイン；ＣＤ２７、ＣＤ２８、４−１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＩＣＯＳ、ＤＡＰ１０、ＤＡＰ１２、ＯＸ４０（ＣＤ１３４）、またはこれらの断片もしくは組合せから選択される、１または複数の共刺激ドメイン；およびＣＤ３ζに由来するシグナル伝達ドメインをさらに含む。
【００５３】
場合によって、抗原結合性ドメインは、ブリナツモマブ（Ａｍｇｅｎ）、コルツキシマブラブタンシン（ＩｍｍｕｎｏＧｅｎ  Ｉｎｃ．／Ｓａｎｏｆｉ−ａｖｅｎｔｉｓ）、ＭＯＲ２０８（Ｍｏｒｐｈｏｓｙｓ  ＡＧ／Ｘｅｎｃｏｒ  Ｉｎｃ．）、ＭＥＤＩ−５５１（Ｍｅｄｉｍｍｕｎｅ）、デニンツズマブマホドチン（Ｓｅａｔｔｌｅ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ）、Ｂ４（またはＤＩ−Ｂ４）（Ｍｅｒｃｋ  Ｓｅｒｏｎｏ）、タプリツモマブパプトックス（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ）、ＸｍＡｂ  ５８７１（Ａｍｇｅｎ／Ｘｅｎｃｏｒ，Ｉｎｃ．）、ＭＤＸ−１３４２（Ｍｅｄａｒｅｘ）またはＡＦＭ１１（Ａｆｆｉｍｅｄ）によってもまた認識される、ＣＤ１９上のエピトープを認識する。一部の場合には、ＣＤ１９特異的ＣＡＲは、ＣＤ８アルファ膜貫通ドメインまたはＣＤ３ζ膜貫通ドメインから選択される膜貫通ドメイン；ＣＤ２７、ＣＤ２８、４−１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＩＣＯＳ、ＤＡＰ１０、ＯＸ４０（ＣＤ１３４）、またはこれらの断片もしくは組合せから選択される、１または複数の共刺激ドメイン；およびＣＤ３ζに由来するシグナル伝達ドメインをさらに含む。
【００５４】
一部の実施形態では、本明細書では、抗原結合性ドメインが、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆａｂ’、Ｆａｂ、Ｆｖ、またはｓｃＦｖを含む、ＣＤ１９特異的ＣＡＲ−Ｔ細胞が記載される。一部の場合には、抗原結合性ドメインは、ＣＤ１９上のエピトープを認識する。場合によって、抗原結合性ドメインは、ブリナツモマブ（Ａｍｇｅｎ）、コルツキシマブラブタンシン（ＩｍｍｕｎｏＧｅｎ  Ｉｎｃ．／Ｓａｎｏｆｉ−ａｖｅｎｔｉｓ）、ＭＯＲ２０８（Ｍｏｒｐｈｏｓｙｓ  ＡＧ／Ｘｅｎｃｏｒ  Ｉｎｃ．）、ＭＥＤＩ−５５１（Ｍｅｄｉｍｍｕｎｅ）、デニンツズマブマホドチン（Ｓｅａｔｔｌｅ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ）、Ｂ４（またはＤＩ−Ｂ４）（Ｍｅｒｃｋ  Ｓｅｒｏｎｏ）、タプリツモマブパプトックス（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ）、ＸｍＡｂ  ５８７１（Ａｍｇｅｎ／Ｘｅｎｃｏｒ，Ｉｎｃ．）、ＭＤＸ−１３４２（Ｍｅｄａｒｅｘ）またはＡＦＭ１１（Ａｆｆｉｍｅｄ）によってもまた認識される、ＣＤ１９上のエピトープを認識する。一部の場合には、ＣＤ１９特異的ＣＡＲ−Ｔ細胞は、ＣＤ８アルファ膜貫通ドメインまたはＣＤ３ζ膜貫通ドメインから選択される膜貫通ドメイン；ＣＤ２７、ＣＤ２８、４−１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＩＣＯＳ、ＤＡＰ１０、ＤＡＰ１２、ＯＸ４０（ＣＤ１３４）、またはこれらの断片もしくは組合せから選択される、１または複数の共刺激ドメイン；およびＣＤ３ζに由来するシグナル伝達ドメインをさらに含む。
【００５５】
場合によって、本明細書で記載されるＣＤ１９特異的ＣＡＲ−Ｔ細胞は、ｓｃＦｖの抗原結合性ドメインを含み、抗原結合性ドメインは、ブリナツモマブ（Ａｍｇｅｎ）、コルツキシマブラブタンシン（ＩｍｍｕｎｏＧｅｎ  Ｉｎｃ．／Ｓａｎｏｆｉ−ａｖｅｎｔｉｓ）、ＭＯＲ２０８（Ｍｏｒｐｈｏｓｙｓ  ＡＧ／Ｘｅｎｃｏｒ  Ｉｎｃ．）、ＭＥＤＩ−５５１（Ｍｅｄｉｍｍｕｎｅ）、デニンツズマブマホドチン（Ｓｅａｔｔｌｅ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ）、Ｂ４（またはＤＩ−Ｂ４）（Ｍｅｒｃｋ  Ｓｅｒｏｎｏ）、タプリツモマブパプトックス（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ）、ＸｍＡｂ  ５８７１（Ａｍｇｅｎ／Ｘｅｎｃｏｒ，Ｉｎｃ．）、ＭＤＸ−１３４２（Ｍｅｄａｒｅｘ）またはＡＦＭ１１（Ａｆｆｉｍｅｄ）によってもまた認識される、ＣＤ１９上のエピトープを認識する。一部の場合には、ＣＤ１９特異的ＣＡＲ−Ｔ細胞は、ＣＤ８アルファ膜貫通ドメインまたはＣＤ３ζ膜貫通ドメインから選択される膜貫通ドメイン；ＣＤ２７、ＣＤ２８、４−１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＩＣＯＳ、ＤＡＰ１０、ＤＡＰ１２、ＯＸ４０（ＣＤ１３４）、またはこれらの断片もしくは組合せから選択される、１または複数の共刺激ドメイン；およびＣＤ３ζに由来するシグナル伝達ドメインをさらに含む。
【００５６】
操作Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）
一部の実施形態では、キメラ受容体は、操作Ｔ細胞受容体を含む。Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）は、Ｔ細胞の表面上で対合して、ヘテロ二量体の受容体を形成する、２つの鎖（αβまたはγδ）から構成される。一部の場合には、αβ  ＴＣＲは、体内の大半のＴ細胞上で発現し、特異的ＭＨＣ拘束抗原の認識に関与することが公知である。α鎖およびβ鎖の各々は、２つのドメイン：タンパク質を、細胞膜へとアンカリングし、ＣＤ３シグナル伝達装置の不変サブユニットと関連する定常ドメイン（Ｃ）と；相補性決定領域（ＣＤＲ）と称する、６回ループを介して、抗原認識を付与する可変ドメイン（Ｖ）とから構成される。一部の場合には、各Ｖドメインは、３つのＣＤＲ、例えば、ＣＤＲ３を超可変領域とする、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含む。これらのＣＤＲは、主要組織適合性複合体によりコードされるタンパク質に結合した抗原性ペプチドで形成される複合体（ｐｅｐＭＨＣ）（例えば、ＨＬＡ−Ａ複合体、ＨＬＡ−Ｂ複合体、ＨＬＡ−Ｃ複合体、ＨＬＡ−ＤＰＡ１複合体、ＨＬＡ−ＤＰＢ１複合体、ＨＬＡ−ＤＱＡ１複合体、ＨＬＡ−ＤＱＢ１複合体、ＨＬＡ−ＤＲＡ複合体、またはＨＬＡ−ＤＲＢ１複合体）と相互作用する。一部の場合には、定常ドメインは、定常ドメインを、可変ドメインへと接続する接合領域をさらに含む。場合によって、ベータ鎖は、接合領域の一部を構成する、短い多様性領域をさらに含む。
【００５７】
場合によって、このようなＴＣＲは、特異的腫瘍抗原、例えば、ＮＹ−ＥＳＯ、ＭａｇｅＡ３、Ｔｉｔｉｎと反応性である。他の場合には、このようなＴＣＲは、患者の腫瘍内で発現する、特異的ネオ抗原（すなわち、腫瘍が発現する、患者特異的な、体細胞性の、非同義突然変異）と反応性である。場合によって、操作ＴＣＲは、アフィニティー増強されうる。
【００５８】
一部の実施形態では、ＴＣＲは、Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓ（ＩＭＧＴ）によるＴＣＲ命名法を使用して記載され、ＩＭＧＴによる、ＴＣＲ配列についての公開データベースへとリンクする。例えば、それらのフレームワーク配列、ＣＤＲ１配列、ＣＤＲ２配列、およびＣＤＲ３配列により識別される、いくつかの種類のアルファ鎖可変（Ｖα）領域と、いくつかの種類のベータ鎖可変（Ｖβ）領域とが存在しうる。このようにして、Ｖαの種類は、ＩＭＧＴ命名法では、固有のＴＲＡＶ数により言及されうる。例えば、「ＴＲＡＶ２１」は、固有のフレームワーク配列およびＣＤＲ１配列およびＣＤＲ２配列、ならびにＴＣＲから、ＴＣＲへと保存されるアミノ酸配列により、部分的に規定されるが、また、ＴＣＲから、ＴＣＲへと変動するアミノ酸配列も含むＣＤＲ３配列を有するＴＣＲＶα領域を規定する。同様に、「ＴＲＢＶ５−１」は、固有のフレームワーク配列およびＣＤＲ１配列およびＣＤＲ２配列を有するが、ＣＤＲ３配列は、部分的に規定されているに過ぎない、ＴＣＲＶβ領域を規定する。
【００５９】
場合によって、ベータ鎖多様性領域は、ＩＭＧＴ命名法では、ＴＲＢＤという略号で言及される。
【００６０】
一部の場合には、ＩＭＧＴ命名法により規定される固有の配列は、広く公知であり、ＴＣＲの分野に携わる者に閲覧可能である。例えば、これらは、ＩＭＧＴによる公開データベースおよび“T cell Receptor Factsbook”, (2001) LeFranc and LeFranc, Academic Press, ISBN 0-12-441352-8において見出すことができる。
【００６１】
一部の実施形態では、αβヘテロ二量体ＴＣＲは、例えば、細胞質ドメインおよび膜貫通ドメインの両方を有する全長鎖としてトランスフェクトされる。場合によって、ＴＣＲは、例えば、国際公開第２００６／０００８３０号パンフレットにおいて記載されている、それぞれの定常ドメインの残基の間に導入されたジスルフィド結合を含有する。
【００６２】
一部の場合には、本明細書で記載されるＴＣＲは、単鎖フォーマットである（例えば、国際公開第２００４／０３３６８５号パンフレットを参照されたい）。単鎖フォーマットは、Ｖα−Ｌ−Ｖβ型、Ｖβ−Ｌ−Ｖα型、Ｖα−Ｃα−Ｌ−Ｖβ型、Ｖα−Ｌ−Ｖβ−Ｃβ型、Ｖα−Ｃα−Ｌ−Ｖβ−Ｃβ型のαβ  ＴＣＲポリペプチド［フォーマット中、ＶαおよびＶβは、それぞれ、ＴＣＲα可変領域およびＴＣＲβ可変領域であり、ＣαおよびＣβは、それぞれ、ＴＣＲα定常領域およびＴＣＲβ定常領域であり、Ｌは、リンカー配列である］を含む。ある特定の実施形態では、本発明の単鎖ＴＣＲは、国際公開第２００４／０３３６８５号パンフレットにおいて記載されている、それぞれの定常ドメインの残基の間に導入されたジスルフィド結合を有しうる。
【００６３】
本明細書で記載されるＴＣＲは、検出用標識、治療剤、またはＰＫ修飾部分と会合させることができる。
【００６４】
診断を目的とする、例示的な検出用標識は、蛍光標識、放射性標識、酵素、核酸プローブ、および造影試薬を含むがこれらに限定されない。
【００６５】
本明細書で記載されるＴＣＲと関連しうる治療剤は、免疫調節剤、放射性化合物、酵素（例えば、パーフォリン）、または化学療法剤を含む。毒性効果が、所望の場所に及ぼされることを確保するために、化合物が、制御された形で放出されるように、毒素を、リポソーム内で、ＴＣＲへと連結しうるであろう。場合によって、制御放出は、体内移動時の損傷作用を最小化し、ＴＣＲの、関連する抗原提示細胞への結合後において、毒素が、最大の効果を及ぼすことを確保する。
【００６６】
一部の実施形態では、さらなる適切な治療剤は、例えば、
ａ．低分子細胞傷害剤、例えば、哺乳動物細胞を死滅させる能力を伴う化合物であって、分子量が７００ドルトン未満である化合物。このような化合物はまた、細胞傷害作用を有しうる毒性金属も含有しうるであろう。さらに、これらの低分子細胞傷害剤はまた、プロドラッグ、すなわち、生理学的条件下で、分解するか、または転換されて、細胞傷害剤を放出する化合物も含むことを理解されたい。このような薬剤の例は、シスプラチン、メイタンシン誘導体、ラケルマイシン、カリケアミシン、ドセタキセル、エトポシド、ゲムシタビン、イホスファミド、イリノテカン、メルファラン、ミトキサントロン、ポルフィマーナトリウムであるＰｈｏｔｏｆｒｉｎ  ＩＩ（sorfilmer sodiumphotofrin II）、テモゾロミド、トポテカン、グルクロン酸トリメトレキサート（trimetrexate）、アウリスチンＥ、ビンクリスチン、およびドキソルビシンを含む；
ｂ．ペプチドである細胞毒素、すなわち、哺乳動物細胞を死滅させる能力を伴うタンパク質またはこれらの断片。例えば、リシン、ジフテリア毒素、シュードモナス菌外毒素Ａ、ＤＮアーゼ、およびＲＮアーゼ；
ｃ．放射性核種、すなわち、α粒子もしくはβ粒子、またはγ線のうちの１または複数の共時的な放射を伴って崩壊する、元素の不安定な同位体。例えば、ヨウ素１３１、レニウム１８６、インジウム１１１、イットリウム９０、ビスマス２１０および２１３、アクチニウム２２５、ならびにアスタチン２１３；キレート剤を使用して、これらの放射性核種の、高アフィニティーＴＣＲまたはこれらの多量体への会合を容易とすることができる；
ｄ．免疫刺激剤、すなわち、免疫応答を刺激する免疫エフェクター分子。例えば、ＩＬ−２およびＩＦＮ−γなどのサイトカイン；
ｅ．スーパー抗原およびこれらの突然変異体；
ｆ．ＴＣＲ−ＨＬＡ融合体；
ｇ．ＩＬ−８、血小板因子４、黒色腫増殖刺激タンパク質などのケモカイン；
ｈ．抗Ｔ細胞決定基抗体またはＮＫ細胞決定基抗体（例えば、抗ＣＤ３、抗ＣＤ２８、または抗ＣＤ１６）を含む、抗体またはこれらの断片；
ｉ．抗体様の結合特徴を伴う、代替的タンパク質足場；
ｊ．補体活性化因子；ならびに
ｋ．異種タンパク質ドメイン、同種タンパク質ドメイン、ウイルス／細菌タンパク質ドメイン、ウイルス／細菌ペプチドを含む。
【００６７】
改変エフェクター細胞の用量
一部の実施形態では、ある量の改変エフェクター細胞を、それを必要とする対象へと投与するが、量は、サイトカインと関連する傷害作用を誘導する有効性および潜在的可能性に基づき決定する。場合によって、改変エフェクター細胞の量は、１ｋｇ当たりの改変エフェクター細胞約１０５〜約１０９個を含む。場合によって、改変エフェクター細胞の量は、１ｋｇ当たりの改変エフェクター細胞約１０５〜約１０８個を含む。場合によって、改変エフェクター細胞の量は、１ｋｇ当たりの改変エフェクター細胞約１０５〜約１０７個を含む。場合によって、改変エフェクター細胞の量は、１ｋｇ当たりの改変エフェクター細胞約１０６〜約１０９個を含む。場合によって、改変エフェクター細胞の量は、１ｋｇ当たりの改変エフェクター細胞約１０６〜約１０８個を含む。場合によって、改変エフェクター細胞の量は、１ｋｇ当たりの改変エフェクター細胞約１０７〜約１０９個を含む。場合によって、改変エフェクター細胞の量は、１ｋｇ当たりの改変エフェクター細胞約１０５〜約１０６個を含む。場合によって、改変エフェクター細胞の量は、１ｋｇ当たりの改変エフェクター細胞約１０６〜約１０７個を含む。場合によって、改変エフェクター細胞の量は、１ｋｇ当たりの改変エフェクター細胞約１０７〜約１０８個を含む。場合によって、改変エフェクター細胞の量は、１ｋｇ当たりの改変エフェクター細胞約１０８〜約１０９個を含む。場合によって、改変エフェクター細胞の量は、１ｋｇ当たりの改変エフェクター細胞約１０９個を含む。場合によって、改変エフェクター細胞の量は、１ｋｇ当たりの改変エフェクター細胞約１０８個を含む。場合によって、改変エフェクター細胞の量は、１ｋｇ当たりの改変エフェクター細胞約１０７個を含む。場合によって、改変エフェクター細胞の量は、１ｋｇ当たりの改変エフェクター細胞約１０６個を含む。場合によって、改変エフェクター細胞の量は、１ｋｇ当たりの改変エフェクター細胞約１０５個を含む。
【００６８】
一部の実施形態では、改変エフェクター細胞は、改変Ｔ細胞である。一部の場合には、改変Ｔ細胞は、ＣＡＲ−Ｔ細胞である。場合によって、ＣＡＲ−Ｔ細胞の量は、１ｋｇ当たりのＣＡＲ−Ｔ細胞約１０５〜約１０９個を含む。場合によって、ＣＡＲ−Ｔ細胞の量は、１ｋｇ当たりのＣＡＲ−Ｔ細胞約１０５〜約１０８個を含む。場合によって、ＣＡＲ−Ｔ細胞の量は、１ｋｇ当たりのＣＡＲ−Ｔ細胞約１０５〜約１０７個を含む。場合によって、ＣＡＲ−Ｔ細胞の量は、１ｋｇ当たりのＣＡＲ−Ｔ細胞約１０６〜約１０９個を含む。場合によって、ＣＡＲ−Ｔ細胞の量は、１ｋｇ当たりのＣＡＲ−Ｔ細胞約１０６〜約１０８個を含む。場合によって、ＣＡＲ−Ｔ細胞の量は、１ｋｇ当たりのＣＡＲ−Ｔ細胞約１０７〜約１０９個を含む。場合によって、ＣＡＲ−Ｔ細胞の量は、１ｋｇ当たりのＣＡＲ−Ｔ細胞約１０５〜約１０６個を含む。場合によって、ＣＡＲ−Ｔ細胞の量は、１ｋｇ当たりのＣＡＲ−Ｔ細胞約１０６〜約１０７個を含む。場合によって、ＣＡＲ−Ｔ細胞の量は、１ｋｇ当たりのＣＡＲ−Ｔ細胞約１０７〜約１０８個を含む。場合によって、ＣＡＲ−Ｔ細胞の量は、１ｋｇ当たりのＣＡＲ−Ｔ細胞約１０８〜約１０９個を含む。一部の場合には、ＣＡＲ−Ｔ細胞の量は、１ｋｇ当たりのＣＡＲ−Ｔ細胞約１０９個を含む。一部の場合には、ＣＡＲ−Ｔ細胞の量は、１ｋｇ当たりのＣＡＲ−Ｔ細胞約１０８個を含む。一部の場合には、ＣＡＲ−Ｔ細胞の量は、１ｋｇ当たりのＣＡＲ−Ｔ細胞約１０７個を含む。一部の場合には、ＣＡＲ−Ｔ細胞の量は、１ｋｇ当たりのＣＡＲ−Ｔ細胞約１０６個を含む。一部の場合には、ＣＡＲ−Ｔ細胞の量は、１ｋｇ当たりのＣＡＲ−Ｔ細胞約１０５個を含む。
【００６９】
一部の実施形態では、ＣＡＲ−Ｔ細胞は、ＣＤ１９特異的ＣＡＲ−Ｔ細胞である。場合によって、ＣＤ１９特異的ＣＡＲ−Ｔ細胞の量は、１ｋｇ当たりのＣＡＲ−Ｔ細胞約１０５〜約１０９個を含む。場合によって、ＣＤ１９特異的ＣＡＲ−Ｔ細胞の量は、１ｋｇ当たりのＣＡＲ−Ｔ細胞約１０５〜約１０８個を含む。場合によって、ＣＤ１９特異的ＣＡＲ−Ｔ細胞の量は、１ｋｇ当たりのＣＡＲ−Ｔ細胞約１０５〜約１０７個を含む。場合によって、ＣＤ１９特異的ＣＡＲ−Ｔ細胞の量は、１ｋｇ当たりのＣＡＲ−Ｔ細胞約１０６〜約１０９個を含む。場合によって、ＣＤ１９特異的ＣＡＲ−Ｔ細胞の量は、１ｋｇ当たりのＣＡＲ−Ｔ細胞約１０６〜約１０８個を含む。場合によって、ＣＤ１９特異的ＣＡＲ−Ｔ細胞の量は、１ｋｇ当たりのＣＡＲ−Ｔ細胞約１０７〜約１０９個を含む。場合によって、ＣＤ１９特異的ＣＡＲ−Ｔ細胞の量は、１ｋｇ当たりのＣＡＲ−Ｔ細胞約１０５〜約１０６個を含む。場合によって、ＣＤ１９特異的ＣＡＲ−Ｔ細胞の量は、１ｋｇ当たりのＣＡＲ−Ｔ細胞約１０６〜約１０７個を含む。場合によって、ＣＤ１９特異的ＣＡＲ−Ｔ細胞の量は、１ｋｇ当たりのＣＡＲ−Ｔ細胞約１０７〜約１０８個を含む。場合によって、ＣＤ１９特異的ＣＡＲ−Ｔ細胞の量は、１ｋｇ当たりのＣＡＲ−Ｔ細胞約１０８〜約１０９個を含む。場合によって、ＣＤ１９特異的ＣＡＲ−Ｔ細胞の量は、１ｋｇ当たりのＣＡＲ−Ｔ細胞約１０９個を含む。場合によって、ＣＤ１９特異的ＣＡＲ−Ｔ細胞の量は、１ｋｇ当たりのＣＡＲ−Ｔ細胞約１０８個を含む。場合によって、ＣＤ１９特異的ＣＡＲ−Ｔ細胞の量は、１ｋｇ当たりのＣＡＲ−Ｔ細胞約１０７個を含む。場合によって、ＣＤ１９特異的ＣＡＲ−Ｔ細胞の量は、１ｋｇ当たりのＣＡＲ−Ｔ細胞約１０６個を含む。場合によって、ＣＤ１９特異的ＣＡＲ−Ｔ細胞の量は、１ｋｇ当たりのＣＡＲ−Ｔ細胞約１０５個を含む。
【００７０】
一部の実施形態では、改変Ｔ細胞は、操作ＴＣＲ  Ｔ−細胞である。場合によって、操作ＴＣＲ  Ｔ−細胞の量は、１ｋｇ当たりのＴＣＲ細胞約１０５〜約１０９個を含む。場合によって、操作ＴＣＲ細胞の量は、１ｋｇ当たりのＴＣＲ細胞約１０５〜約１０８個を含む。場合によって、操作ＴＣＲ細胞の量は、１ｋｇ当たりのＴＣＲ細胞約１０５〜約１０７個を含む。場合によって、操作ＴＣＲ細胞の量は、１ｋｇ当たりのＴＣＲ細胞約１０６〜約１０９個を含む。場合によって、操作ＴＣＲ細胞の量は、１ｋｇ当たりのＴＣＲ細胞約１０６〜約１０８個を含む。場合によって、操作ＴＣＲ細胞の量は、１ｋｇ当たりのＴＣＲ細胞約１０７〜約１０９個を含む。場合によって、操作ＴＣＲ細胞の量は、１ｋｇ当たりのＴＣＲ細胞約１０５〜約１０６個を含む。場合によって、操作ＴＣＲ細胞の量は、１ｋｇ当たりのＴＣＲ細胞約１０６〜約１０７個を含む。場合によって、操作ＴＣＲ細胞の量は、１ｋｇ当たりのＴＣＲ細胞約１０７〜約１０８個を含む。場合によって、操作ＴＣＲ細胞の量は、１ｋｇ当たりのＴＣＲ細胞約１０８〜約１０９個を含む。一部の場合には、操作ＴＣＲ細胞の量は、１ｋｇ当たりのＴＣＲ細胞約１０９個を含む。一部の場合には、操作ＴＣＲ細胞の量は、１ｋｇ当たりのＴＣＲ細胞約１０８個を含む。一部の場合には、操作ＴＣＲ細胞の量は、１ｋｇ当たりのＴＣＲ細胞約１０７個を含む。一部の場合には、操作ＴＣＲ細胞の量は、１ｋｇ当たりのＴＣＲ細胞約１０６個を含む。一部の場合には、操作ＴＣＲ細胞の量は、１ｋｇ当たりのＴＣＲ細胞約１０５個を含む。
【００７１】
ステロイド
アンドロゲン、コルチコステロイド、エストロゲン、およびプロゲストゲンなどのステロイドは、生殖、第二次性徴、成熟、遺伝子発現、心筋の健常、および神経機能を含む、ヒトにおける、多くの生理学的過程を制御する。一部の場合には、ステロイドは、構造的分類または機能的分類に基づき、さらに分けられる。構造的分類により、ステロイドを、６つのクラス：ゴナン（１７個の炭素を有する）、エストラン（１８個の炭素を有する）、アンドロスタン（１９個の炭素を有する）、プレグナン（２１個の炭素を有する）、コラン（２４個の炭素を有する）、およびコレスタン（２７個の炭素を有する）へと分けることができる。機能的分類により、ステロイドを、５つのクラス：エストロゲン（１８個の炭素を有する）、アンドロゲン（１９個の炭素を有する）、コルチコステロイド（２１個の炭素を有する）、プロゲステロン（２１個の炭素を有する）、およびステロール（２７個の炭素を有する）へと分けることができる。
【００７２】
例示的なステロイドは、１７−ヒドロキシプレグネノロン；アンドロステノロン（ＤＨＥＡ）；５−アンドロステンジオール；プロゲステロン；１７−ヒドロキシプロゲステロン；コルテキソロン（eortexolone）；コルチゾール；コルテキソン（eortexone）；コルチコステロン；アルドステロン；アンドロステンジオン；テストステロン；アロジヒドロテストステロン；エストロンＥ１；エストラジオールＥ２；１１ａ−ヒドロキシエストロン；１１ｂ−ヒドロキシエストロン；１１ａ−ヒドロキシエストラジオール；１１ｂ−ヒドロキシエストラジオール；９（１１）−デヒドロエストラジオール；９（１１）−デヒドロエストロン；１１−ケトエストロン；エストラジオール−３−ＳＯ４；エストロン−ＳＯ４；エストラジオール−１７−ＳＯ４；エストラジオール−３、１７−ジ−ＳＯ４；３−ＯＭエストロン；エストラジオール−３−Ｇｌｕ；エストロン−Ｇｌｕ；エストラジオール−１７−Ｇｌｕ；エストラジオール−３、１７−ジ−Ｇｌｕ；４−ＯＨエストロン；４−ＯＨエストラジオール；４−ＯＭｅエストン；４−ＯＭｅエストラジオール；４−ＯＭｅエストリオール；２−ＯＨエストロン；２−ヒドロキシエストラジオール；２−ＧＨエストリオール（eslril）；３−メトキシ−２−ＯＨ−エストロン；２−メトキシ−２−ＱＨ−エストロン；２−メトキシ−３−ＯＨ−エストラジオール；２，３−ジメトキシエストロン；２，３−ジメトキシ（dimethox） エストラジオール；６ａ−ヒドロキシエストラジオール；６ｂ−ヒドロキシエストラジオール；６−ケトストロン；６−ケトエストラジオール；６−デヒドロエストラジオール；６−デヒドロエストロン；１６ａ−ヒドロキシエストロン；１７−エピエストリオール；エストリオールＥ３；１６，１７−エピエストリオール；１６−エピエストリオール；エストリオール−３−スルフェート（sulfate）；エストリオール−１７−Ｇｌｕ（estrioL-17-Ghi）；３−メトキシエストリオール（methoxystriol）；１６−ケト−１７ｂ−エストラジオール（16-keto-1.7b-estrad.iol）；６−ケトエストリオール（6-ketoestrioi）；７−デヒドロ−１７ｂ−エストラジオール；エキリン；ジヒドロエキリン−３−ＳＯ４；エキリン−３−ＳＯ４；３ａ−ヒドロキシ−５ａ−プレグナン−２０−オン；５ａ−ジヒドロプロゲステロン（diiiydroprogesterone）；アロプレグナンジオール；１１ａ−ヒドロキシ−４−プレグネン−３，２０−ジオン；１１ｂ−ヒドロキシ−４−プレグネン−３，２０−ジオン；１７−ヒドロキシプレグネノロン；１７−ヒドロキシプロゲステロン；２１−ヒドロキシプレグナノロン（hydroxypregnanolone）；２０−ヒドロキシプレグネノロン（hydroxypregneiiolone）；７ａ−ヒドロキシプレグネノロン（hydroxypregnenoione）；２−ＧＨ−テストステロン；２０ａ−ヒドロキシ−５ａ−プレグナン−３−オン；２０ａ−ジヒドロプロゲステロン；１７ａ，２０ａ−ジヒドロキシプロゲステロン；３ｂ−ヒドロキシ−５−プレグネン−２０−オン−３−ＳＯ４；エルタノロン；プレグナンジオール；５ｂ−ジヒドロプロゲステロン；５ａ−ジヒドロテストステロン；１７ｂ−ジヒドロアンドロステロン；１７ｂ−ジヒドロエピアンドロステロン；７ａ−ヒドロキシテストステロン；７ａ−ヒドロキシアンドロステンジオン；６ａ−ＯＨ−テストステロン；６ｂ−ＯＨ−テストステロン；エチオコラノロングルクロニド；ＤＨＥＡ  ＧＬＵＣ；１６ａ−ヒドロキシＤＨＥＡ；テストステロンスルフェート（sulfate）；デソキシテストステロン；４−アンドロステン−３−オール−１７−オン；２ａ−ヒドロキシアンドロステンジオン（liydroxyandrostenedione）；１１ａ−ヒドロキシアンドロステンジオン；６−ケトテストステロン（ketotesteroiie）；１１−ケトテストステロン（N11-ketotestosterone）；９−デヒドロテストステロン；アロテトラヒドロコルテキソン；アドレノステロン；エチオコラノロン；４−アンドロステンジオール；１６ａ−ケトテストステロン；１９−ヒドロキシアンドロステンジオン；４−アンドロステン−３，６−１７−トリオン；７ｂ−ヒドロキシＤＨＥＡ；７ａ−ヒドロキシＤＨＥＡ；７−ケトＤＨＥＡ；９−デヒドロエピアンドロステロン（deiiydroepiaiidrosterone）；アロコレステロール（aliochoiesterol）；９−デヒドロプロゲステロン；１１−デヒドロテトラヒドロコルチコステロン；テトラヒドロコルチコステロン；６ｂ−ヒドロキシＤＯＣ；ウロコルチゾール；プレグナントリオール；１６ａ−ヒドロキシプロゲステロン；１７ａ−ヒドロキシプレグネノロン；６−デヒドロテストステロン；９（１１）−デヒドロＤＨＥＡ；１１ｂ−ヒドロキシエピアンドロステロン；１６ａ−ヒドロキシエピアンドロステロン；アンドロステロン；エピアンドロステロン；７ａ−ヒドロキシアンドロステンジオール（ＤＨＥＡ）；７ｂ−ヒドロキシアンドロステンジオール（ＤＨＥＡ）；４−コレステン−３ａ−オール；４−プレグネン−３ｂ−オール−２０−オン；５−アンドロステン−３ｂ，１７−ジオール−１６−オン；１９−ヒドロキシＤＨＥＡ；１６ａ−ＯＨ−プレグネノロン；５ａ−ジヒドロコルテキソン（５ａ−ＤＨ−ＤＯＣ）；エピテストステロン；５ｂ−アンドロスタンジオン（androstandione）；１１ｂ−ＯＨ−アンドロステンジオン；１１−ケト−エチオコラノロン；５ａ−プレグナン−１１ａ−ＯＨ−３，２０−ジオン；５ａ−エポキシプレグネノロン；５ａ−ジヒドロ-１１−ケト−プロゲステロン；１１−ケトプロゲステロン；コレステロール；４ｂ−ＯＨコレステロール；７ａ−ＯＨコレステロール；７ｂ−ＯＨコレステロール；２５−ＯＨコレステロール；５ａ，６ａ−エポキシコレステロール；７−ケト−コレステロール；７−ケト−２５−ＯＨコレステロール；６，７−デヒドロコレステロール；６−デヒドロコレステノン；６−ケトコレステノン；エチオコラン−３−ＯＨ−１７−オン；７−デヒドロコレステロール；ジヒドロコレステロール；コレステロール−３−ＳＯ４；コプロスタン３−７，１２−ジオール；２０ａ−ＯＨ−コレステロール；２２ｂ−ＯＨ−コレステロール；２７−ＯＨ−コレステロール（27-OH-cb.cholrdrtol）；２４−ケト−コレステロール；２４−ヒドロキシコレステロール；Ｍｅ−３ＯＨ−コール−５−ｎ−２４−オエート；ケノデオキシコール酸；ウルソデオキシコール酸；ムリコール酸（murocliolic acid）；リトデオキシコール酸（livodeoxycholic acid）；アロリトコール酸；リトコール酸；タウロコラン酸；タウロヒヨデオキシコール酸；コール酸；タウロケノデオキ��コール酸（taurochenodeoxycholic acid）；デソキシコール酸；タウロリトコール酸；糖リトコール酸；６−ケト−アロリトコール酸；糖デオキシコール酸；糖ケノデオキシコール酸；タウロウルソデオキシコール酸；タウロデオキシコール酸；糖デオキシコール酸；ａ−ムリコール酸；ｂ−ムリコール酸；タウロ−ｂ−ムリコール酸；タウロコール酸；タウロデヒドロコール酸（iaurodehydrocholic acid）；グリコデヒドロコール酸（giycodehydrocholic acid）；アンドロスタンジオール（androstandiol）−３−Ｇｌｕ；１１−ケト−エチオコラノロン−３−Ｇｌｕ；エチオコラノロン−３−Ｇｌｕ；デヒドロエピアンドロステロンスルフェート（debydroepiandrosterone sulfate）（ＤＨＥＡＳ）；エピテストステロン−１７−ＳＯ４；テストステロン−１７−Ｇｌｕ；プレグナンジオール−３−Ｇｌｕ；１７−ＯＨ−プレグナノロン−３−Ｇｌｕ−Ｎａ；プレグナノロン−３−ＳＯ４；１７，２０−ジ−ＯＨ−プロゲステロン−２０−Ｇｌｕ；コルチゾール−２１−ＳＯ４；プレグネノロン−３−Ｇｌｕ；コレステロール−３−Ｇｌｕ；アロプレグナノロン−ＳＯ４；エピアロプレグナノロン−ＳＯ４；エストリオール−３−Ｇｌｕ−Ｎａ；２４−デヒドロコレステロール；コプロステロール；カンペステロール；ｂ−シトステロール；ブラシカステロール（brassicateroi）；スティグマステロール；エピアロコレステロール；２４，２５−エポキシコレステロール；チモステロール；ラノステロール；ラトステロール；１７β−エストラジオール；これらの類似体；またはこれらの誘導体を含むがこれらに限定されない。
【００７３】
一部の実施形態では、ステロイドは、同化ステロイド（または同化アンドロゲン性ステロイド；ＡＡＳ）、テストステロンと構造的に類縁であり、テストステロンと類似の効果もさらに有する、合成ステロイドである。例示的な同化ステロイドは、テストステロンプロピオネート、テストステロンエナンセート、テストステロンシピオネート、ナンドロロン（例えば、ナンドロロンデカノエートまたはナンドロロンフェニルプロピオネート）、スタノゾロール、メタンジエノン（メタンドロステノロン）、メチルテストステロン、オキサンドロロン、メステロロン、オキシメトロン、ドロスタノロン、メテノロン（メチルアンドロステノロン）、フルオキシメステロン、またはこれらの誘導体を含むがこれらに限定されない。
【００７４】
一部の実施形態では、ステロイドは、コルチコステロイドである。コルチコステロイドは、グルココルチコイドおよびミネラロコルチコイドへと、さらに分けることができる。例示的なコルチコステロイドは、アルドステロン、アルクロメタゾンジプロピオネート、アムシノニド、ベタメタゾン、ベタメタゾンバレレート、ベタメタゾンジプロピオネート、ブデソニド、クロベタゾン−１７−ブチレート（butyrate）、クロベタゾール−１７−プロピオネート（propionate）、コルチゾール（ヒドロコルチゾン）、コルチゾン、コルチゾンアセテート、デキサメタゾン、デソニド、フルドロコルチゾン、フルオシノニド、フルオシノロンアセトニド、フルオコルトロン、カプロン酸フルオコルトロン、ピバル酸フルオコルトロン、酢酸フルプレドニデン、ハルシノニド、ハロメタゾン、ヒドロコルチゾンアセテート、ヒドロコルチゾン−１７−バレレート（valerate）、メチルプレドニゾロン、モメタゾン、プレドニカルベート（prednicarbate）、プレドニゾロン、プレドニゾン、チクソコルトールピバレート、トリアムシノロンアセトニド、トリアムシノロンアルコール、またはこれらの誘導体を含むがこれらに限定されない。
【００７５】
一部の実施形態では、コルチコステロイドは、プロドラッグ形態を含む。一部の実施形態では、コルチコステロイドのプロドラッグは、ヒドロコルチゾン−１７−ブチレート（butyrate）、ヒドロコルチゾン−１７−アセポネート（aceponate）、ヒドロコルチゾン−１７−ブテプレート（buteprate）、シクレソニド、またはプレドニカルベート（prednicarbate）を含む。
【００７６】
一部の実施形態では、対象へと、上記で記載した改変エフェクター細胞およびステロイドを投与する方法が本明細書で開示される。場合によって、ステロイドを、ｉｎ  ｖｉｖｏにおける改変エフェクター細胞の集団の拡大増殖を誘導するのに有効な量で投与する。一部の場合には、テストステロンプロピオネート、テストステロンエナンセート、テストステロンシピオネート、ナンドロロン（例えば、ナンドロロンデカノエートまたはナンドロロンフェニルプロピオネート）、スタノゾロール、メタンジエノン（メタンドロステノロン）、メチルテストステロン、オキサンドロロン、メステロロン、オキシメトロン、ドロスタノロン、メテノロン（メチルアンドロステノロン）、フルオキシメステロン、アルドステロン、アルクロメタゾンジプロピオネート、アムシノニド、ベタメタゾン、ベタメタゾンバレレート、ベタメタゾンジプロピオネート、ブデソニド、クロベタゾン−１７−ブチレート（butyrate）、クロベタゾール−１７−プロピオネート（propionate）、コルチゾール（ヒドロコルチゾン）、コルチゾン、コルチゾンアセテート、デキサメタゾン、デソニド、フルドロコルチゾン、フルオシノニド、フルオシノロンアセトニド、フルオコルトロン、カプロン酸フルオコルトロン、ピバル酸フルオコルトロン、酢酸フルプレドニデン、ハルシノニド、ハロメタゾン、ヒドロコルチゾンアセテート、ヒドロコルチゾン−１７−バレレート（valerate）、メチルプレドニゾロン、モメタゾン、プレドニカルベート（prednicarbate）、プレドニゾロン、プレドニゾン、チクソコルトールピバレート、トリアムシノロンアセトニド、トリアムシノロンアルコール、ヒドロコルチゾン−１７−ブチレート（butyrate）、ヒドロコルチゾン−１７−アセポネート（aceponate）、ヒドロコルチゾン−１７−ブテプレート（buteprate）、シクレソニド、またはプレドニカルベート（prednicarbate）から選択されるステロイドを、本明細書で記載される改変エフェクター細胞と共に、それを必要とする対象へと投与するが、この場合、ステロイドを、対象における改変エフェクター細胞の集団の拡大増殖を誘導するのに有効な量で投与する。一部の場合には、テストステロンプロピオネート、テストステロンエナンセート、テストステロンシピオネート、ナンドロロン（例えば、ナンドロロンデカノエートまたはナンドロロンフェニルプロピオネート）、スタノゾロール、メタンジエノン（メタンドロステノロン）、メチルテストステロン、オキサンドロロン、メステロロン、オキシメトロン、ドロスタノロン、メテノロン（メチルアンドロステノロン）、フルオキシメステロンから選択されるステロイドを、本明細書で記載される改変エフェクター細胞と共に、それを必要とする対象へと投与するが、この場合、ステロイドを、対象における改変エフェクター細胞の集団の拡大増殖を誘導するのに有効な量で投与する。一部の場合には、アルドステロン、アルクロメタゾンジプロピオネート、アムシノニド、ベタメタゾン、ベタメタゾンバレレート、ベタメタゾンジプロピオネート、ブデソニド、クロベタゾン−１７−ブチレート（butyrate）、クロベタゾール−１７−プロピオネート（propionate）、コルチゾール（ヒドロコルチゾン）、コルチゾン、コルチゾンア���テート、デキサメタゾン、デソニド、フルドロコルチゾン、フルオシノニド、フルオシノロンアセトニド、フルオコルトロン、カプロン酸フルオコルトロン、ピバル酸フルオコルトロン、酢酸フルプレドニデン、ハルシノニド、ハロメタゾン、ヒドロコルチゾンアセテート、ヒドロコルチゾン−１７−バレレート（valerate）、メチルプレドニゾロン、モメタゾン、プレドニカルベート（prednicarbate）、プレドニゾロン、プレドニゾン、チクソコルトールピバレート、トリアムシノロンアセトニド、トリアムシノロンアルコールから選択されるステロイドを、本明細書で記載される改変エフェクター細胞と共に、それを必要とする対象へと投与するが、この場合、ステロイドを、対象における改変エフェクター細胞の集団の拡大増殖を誘導するのに有効な量で投与する。一部の場合には、ヒドロコルチゾン−１７−ブチレート（butyrate）、ヒドロコルチゾン−１７−アセポネート（aceponate）、ヒドロコルチゾン−１７−ブテプレート（buteprate）、シクレソニド、またはプレドニカルベート（prednicarbate）から選択されるステロイドを、本明細書で記載される改変エフェクター細胞と共に、それを必要とする対象へと投与するが、この場合、ステロイドを、対象における改変エフェクター細胞の集団の拡大増殖を誘導するのに有効な量で投与する。一部の場合には、フルオキシメステロン、メステロロン、メタンドロステノロン、ナンドロロンウンデカノエート、ナンドロロンシピオネート、オキサンドロロン、オキシメトロン、ナンドロロンヘキシルオキシフェニルプロピオネート、テストステロン、またはスタノゾロールから選択されるステロイドを、本明細書で記載される改変エフェクター細胞と共に、それを必要とする対象へと投与するが、この場合、ステロイドを、対象における改変エフェクター細胞の集団の拡大増殖を誘導するのに有効な量で投与する。一部の場合には、フルオキシメステロン、メステロロン、メタンドロステノロン、ナンドロロンウンデカノエート、ナンドロロンシピオネート、オキサンドロロン、オキシメトロン、ナンドロロンヘキシルオキシフェニルプロピオネート、テストステロン、プレドニゾン、コルチゾール、コルチゾン、プレドニゾロン、デキサメタゾン、ベタメタゾン、トリアムシノロン、ベクロメタゾン、フルドロコルチゾン、デオキシコルチコステロン、アルドステロン、またはスタノゾロールから選択されるステロイドを、本明細書で記載される改変エフェクター細胞と共に、それを必要とする対象へと投与するが、この場合、ステロイドを、対象における改変エフェクター細胞の集団の拡大増殖を誘導するのに有効な量で投与する。
【００７７】
一部の場合には、本明細書で記載される方法は、プレコンディショニングステップ（例えば、リンパ枯渇）の省略を可能とする。このような場合、本明細書で記載される改変エフェクター細胞およびステロイドを、リンパ球減少を誘導する、化学療法剤の事前の投与を必要とせずに、対象へと投与する。
【００７８】
投与レジメン
一部の場合には、改変エフェクター細胞の拡大増殖は、ステロイドの投与タイミングに依存する。一部の実施形態では、ステロイドを、本明細書で記載される改変エフェクター細胞と同時に投与する。他の実施形態では、ステロイドを、本明細書で記載される改変エフェクター細胞との間で逐次的に投与する。場合によって、ステロイドを、対象へと、改変エフェクター細胞を投与する前に投与する。他の場合には、ステロイドを、対象へと、改変エフェクター細胞を投与した後で投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、対象へと、対象における改変エフェクター細胞の集団の拡大増殖を誘導および／または維持するのに有効な量で投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、対象へと、対象における改変エフェクター細胞の集団の生着および／または拡大増殖の維持に、臨床的に干渉しない有効量で投与する。一部の実施形態では、量は、対象における改変エフェクター細胞の集団の、生着および／または拡大増殖の維持に、有害な影響を与えない。
【００７９】
場合によって、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも０．５、１、１．５、２、２．５、３、３．５、４、４．５、５、５．５、６、６．５、７、７．５、８、８．５、９、９．５、１０、１０．５、１１、１１．５、１２、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、または２４時間前に投与する。場合によって、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも０．５、１、２、３、４、５、６、８、１０、１１、１２、１５、１８、２０、または２４時間前に投与する。場合によって、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも０．５時間前に投与する。場合によって、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも１時間前に投与する。場合によって、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも１．５時間前に投与する。場合によって、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも２時間前に投与する。場合によって、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも３時間前に投与する。場合によって、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも４時間前に投与する。場合によって、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも５時間前に投与する。場合によって、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも６時間前に投与する。場合によって、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも７時間前に投与する。場合によって、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも８時間前に投与する。場合によって、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも９時間前に投与する。場合によって、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも１０時間前に投与する。場合によって、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも１２時間前に投与する。場合によって、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも１５時間前に投与する。場合によって、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも１８時間前に投与する。場合によって、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも２０時間前に投与する。場合によって、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも２４時間前に投与する。
【００８０】
一部の実施形態では、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１２、１４、１５、２１、２８、または３０日前に投与する。一部の場合には、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも２日前に投与する。一部の場合には、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも３日前に投与する。一部の場合には、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも４日前に投与する。一部の場合には、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも５日前に投与する。一部の場合には、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも６日前に投与する。一部の場合には、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも７日前に投与する。一部の場合には、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも８日前に投与する。一部の場合には、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも９日前に投与する。一部の場合には、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも１０日前に投与する。一部の場合には、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも１２日前に投与する。一部の場合には、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも１４日前に投与する。一部の場合には、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも１５日前に投与する。一部の場合には、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも２８日前に投与する。一部の場合には、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも３０日前に投与する。
【００８１】
場合によって、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも０．５、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１２、１５、１８、２０、２４、３６、４８、６０、７２、８４、９６、１０８、または１２０時間後に投与する。場合によって、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも０．５、１、２、３、４、５、６、８、１０、１２、１５、１８、２０、２４、３６、４８、６０、７２、８４、９６、１０８、または１２０時間後に投与する。場合によって、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも０．５時間後に投与する。場合によって、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも１時間後に投与する。場合によって、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも１．５時間後に投与する。場合によって、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも２時間後に投与する。場合によって、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも３時間後に投与する。場合によって、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも４時間後に投与する。場合によって、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも５時間後に投与する。場合によって、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも６時間後に投与する。場合によって、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも７時間後に投与する。場合によって、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも８時間後に投与する。場合によって、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも９時間後に投与する。場合によって、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも１０時間後に投与する。場合によって、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも１２時間後に投与する。場合によって、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも１５時間後に投与する。場合によって、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも１８時間後に投与する。場合によって、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも２０時間後に投与する。場合によって、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも２４時間後に投与する。場合によって、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも３６時間後に投与する。場合によって、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも４８時間後に投与する。場合によって、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも６０時間後に投与する。場合によって、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも７２時間後に投与する。場合によって、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも８４時間後に投与する。場合によって、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも９６時間後に投与する。場合によって、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも１０８時間後に投与する。場合によって、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも１２０時間後に投与する。
【００８２】
一部の実施形態では、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日間、またはこれを超える期間の後に投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１２、１４、１５、２８、３０、４５、６０、９０日間、またはこれを超える期間の後に投与する。一部の場合には、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも２日後に投与する。一部の場合には、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも３日後に投与する。一部の場合には、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも４日後に投与する。一部の場合には、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも５日後に投与する。一部の場合には、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも６日後に投与する。一部の場合には、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも７日後に投与する。一部の場合には、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも８日後に投与する。一部の場合には、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも９日後に投与する。一部の場合には、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも１０日後に投与する。一部の場合には、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも１２日後に投与する。一部の場合には、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも１４日後に投与する。一部の場合には、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも１５日後に投与する。一部の場合には、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも２８日後に投与する。一部の場合には、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも３０日後に投与する。一部の場合には、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも４５日後に投与する。一部の場合には、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも６０日後に投与する。一部の場合には、ステロイドを、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも９０日後に投与する。
【００８３】
一部の実施形態では、ステロイドを、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日間、またはこれを超える期間にわたり、連続的に投与する。一部の場合には、ステロイドを、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１２、１５、２０、２５、３０、４５、６０、９０日間、またはこれを超える期間にわたり、連続的に投与する。一部の場合には、ステロイドを、１日間、またはこれを超える期間にわたり、連続的に投与する。一部の場合には、ステロイドを、２日間、またはこれを超える期間にわたり、連続的に投与する。一部の場合には、ステロイドを、３日間、またはこれを超える期間にわたり、連続的に投与する。一部の場合には、ステロイドを、４日間、またはこれを超える期間にわたり、連続的に投与する。一部の場合には、ステロイドを、５日間、またはこれを超える期間にわたり、連続的に投与する。一部の場合には、ステロイドを、６日間、またはこれを超える期間にわたり、連続的に投与する。一部の場合には、ステロイドを、７日間、またはこれを超える期間にわたり、連続的に投与する。一部の場合には、ステロイドを、８日間、またはこれを超える期間にわたり、連続的に投与する。一部の場合には、ステロイドを、９日間、またはこれを超える期間にわたり、連続的に投与する。一部の場合には、ステロイドを、１０日間、またはこれを超える期間にわたり、連続的に投与する。一部の場合には、ステロイドを、１２日間、またはこれを超える期間にわたり、連続的に投与する。一部の場合には、ステロイドを、１５日間、またはこれを超える期間にわたり、連続的に投与する。一部の場合には、ステロイドを、２０日間、またはこれを超える期間にわたり、連続的に投与する。一部の場合には、ステロイドを、２５日間、またはこれを超える期間にわたり、連続的に投与する。一部の場合には、ステロイドを、３０日間、またはこれを超える期間にわたり、連続的に投与する。一部の場合には、ステロイドを、４５日間、またはこれを超える期間にわたり、連続的に投与する。一部の場合には、ステロイドを、６０日間、またはこれを超える期間にわたり、連続的に投与する。一部の場合には、ステロイドを、９０日間、またはこれを超える期間にわたり、連続的に投与する。
【００８４】
場合によって、ステロイドを、所定の時間間隔で、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日間、またはこれを超える期間にわたり投与する。場合によって、ステロイドを、所定の時間間隔で、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１２、１５、２０、２５、３０、４５、６０、９０日間、またはこれを超える期間にわたり投与する。場合によって、ステロイドを、所定の時間間隔で、１日間、またはこれを超える期間にわたり投与する。場合によって、ステロイドを、所定の時間間隔で、２日間、またはこれを超える期間にわたり投与する。場合によって、ステロイドを、所定の時間間隔で、３日間、またはこれを超える期間にわたり投与する。場合によって、ステロイドを、所定の時間間隔で、４日間、またはこれを超える期間にわたり投与する。場合によって、ステロイドを、所定の時間間隔で、５日間、またはこれを超える期間にわたり投与する。場合によって、ステロイドを、所定の時間間隔で、６日間、またはこれを超える期間にわたり投与する。場合によって、ステロイドを、所定の時間間隔で、７日間、またはこれを超える期間にわたり投与する。場合によって、ステロイドを、所定の時間間隔で、８日間、またはこれを超える期間にわたり投与する。場合によって、ステロイドを、所定の時間間隔で、９日間、またはこれを超える期間にわたり投与する。場合によって、ステロイドを、所定の時間間隔で、１０日間、またはこれを超える期間にわたり投与する。場合によって、ステロイドを、所定の時間間隔で、１２日間、またはこれを超える期間にわたり投与する。場合によって、ステロイドを、所定の時間間隔で、１５日間、またはこれを超える期間にわたり投与する。場合によって、ステロイドを、所定の時間間隔で、２０日間、またはこれを超える期間にわたり投与する。場合によって、ステロイドを、所定の時間間隔で、２５日間、またはこれを超える期間にわたり投与する。場合によって、ステロイドを、所定の時間間隔で、３０日間、またはこれを超える期間にわたり投与する。場合によって、ステロイドを、所定の時間間隔で、４５日間、またはこれを超える期間にわたり投与する。場合によって、ステロイドを、所定の時間間隔で、６０日間、またはこれを超える期間にわたり投与する。場合によって、ステロイドを、所定の時間間隔で、９０日間、またはこれを超える期間にわたり投与する。
【００８５】
一部の実施形態では、ステロイドを、２、５、７、１０、１４、１５、２８、または３０日ごとに投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、２日ごとに投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、５日ごとに投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、７日ごとに投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、１０日ごとに投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、１４日ごとに投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、１５日ごとに投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、２８日ごとに投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、３０日ごとに投与する。
【００８６】
一部の場合には、ステロイドを、毎日１回、毎日２回、毎日３回、毎日、隔日１回、毎週３回、毎週４回、毎週５回、毎週１回、隔週、毎月１回、毎月２回、毎月３回、毎月４回、毎月５回、またはこれらの組合せの回数投与する。
【００８７】
場合によって、ある量のステロイドを、１回、２回、３回、４回、５回の投与、またはこれを超える回数の投与により投与する。場合によって、その量のステロイドを、１回、またはこれを超える回数の投与により投与する。場合によって、その量のステロイドを、２回、またはこれを超える回数の投与により投与する。場合によって、その量のステロイドを、３回、またはこれを超える回数の投与により投与する。場合によって、その量のステロイドを、４回、またはこれを超える回数の投与により投与する。場合によって、その量のステロイドを、５回、またはこれを超える回数の投与により投与する。
【００８８】
一部の実施形態では、ステロイドを、第１の量で、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１２、１４、１５、２８、３０日間、またはこれを超える期間の後に投与し、次いで、第２の量で、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、４９、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０日間、またはこれを超える期間の後に投与する。一部の場合には、ステロイドを、第１の量で、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１２、１４、１５、２１、２８、３０日間、またはこれを超える期間の後に、状態の処置のために投与する。場合によって、対象における状態から改善または回復したら、第２の量のステロイドを、対象へと、改変エフェクター細胞の初回投与の、少なくとも１５、３０、３１、３２、３３、３４、３５、４０、４５、４９、５０、５５、６０、６５、７０、８０、９０日間、またはこれを超える期間の後に投与する。
【００８９】
一部の実施形態では、第１の量のステロイドを、対象へと、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日間、またはこれを超える期間の後に投与する。一部の実施形態では、第１の量のステロイドを、対象へと、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１２、１４、１５、２８、３０、４５、６０、９０日間、またはこれを超える期間の後に投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、第１の量で、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１２、１４、１５、２１、２８、３０日間、またはこれを超える期間の後に投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、第１の量で、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１２、１３、１４、または１５日後に投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、第１の量で、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも１４日後に投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、第１の量で、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも１５日後に投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、第１の量で、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも２１日後に投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、第１の量で、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも２８日後に投与する。
【００９０】
一部の実施形態では、第１の量のステロイドを、対象へと、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日間、またはこれを超える期間にわたり、連続的に投与する。一部の実施形態では、第１の量のステロイドを、対象へと、少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１２、１４、１５、２１、２８、３０、４５、６０、９０日間、またはこれを超える期間にわたり、連続的に投与する。一部の実施形態では、第１の量のステロイドを、対象へと、改変エフェクター細胞の投与後少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１２、１３、１４、または１５日間にわたり、連続的に投与する。一部の実施形態では、第１の量のステロイドを、対象へと、改変エフェクター細胞の投与後少なくとも１４日間にわたり、連続的に投与する。一部の実施形態では、第１の量のステロイドを、対象へと、改変エフェクター細胞の投与後少なくとも１５日間にわたり、連続的に投与する。一部の実施形態では、第１の量のステロイドを、対象へと、改変エフェクター細胞の投与後少なくとも２１日間にわたり、連続的に投与する。一部の実施形態では、第１の量のステロイドを、対象へと、改変エフェクター細胞の投与後少なくとも２８日間にわたり、連続的に投与する。
【００９１】
一部の実施形態では、第１の量のステロイドを、対象へと、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日間、またはこれを超える期間にわたり、間欠的に投与する。一部の実施形態では、第１の量のステロイドを、対象へと、少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１２、１４、１５、２１、２８、３０、４５、６０、９０日間、またはこれを超える期間にわたり、間欠的に投与する。一部の実施形態では、第１の量のステロイドを、対象へと、改変エフェクター細胞の投与後少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１２、１３、１４、または１５日間にわたり、間欠的に投与する。一部の実施形態では、第１の量のステロイドを、対象へと、改変エフェクター細胞の投与後少なくとも１４日間にわたり、間欠的に投与する。一部の実施形態では、第１の量のステロイドを、対象へと、改変エフェクター細胞の投与後少なくとも１５日間にわたり、間欠的に投与する。一部の実施形態では、第１の量のステロイドを、対象へと、改変エフェクター細胞の投与後少なくとも２１日間にわたり、間欠的に投与する。一部の実施形態では、第１の量のステロイドを、対象へと、改変エフェクター細胞の投与後少なくとも２８日間にわたり、間欠的に投与する。
【００９２】
場合によって、第１の量のステロイドを、対象へと、所定の時間間隔で、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日間、またはこれを超える期間にわたり投与する。場合によって、第１の量のステロイドを、対象へと、所定の時間間隔で、少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１２、１４、１５、２１、２８、３０、４５、６０、９０日間、またはこれを超える期間にわたり投与する。場合によって、第１の量のステロイドを、対象へと、所定の時間間隔で、改変エフェクター細胞の投与後少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１２、１３、１４、または１５日間にわたり投与する。場合によって、第１の量のステロイドを、対象へと、所定の時間間隔で、改変エフェクター細胞の投与後少なくとも１４日間にわたり投与する。場合によって、第１の量のステロイドを、対象へと、所定の時間間隔で、改変エフェクター細胞の投与後少なくとも１５日間にわたり投与する。場合によって、第１の量のステロイドを、対象へと、所定の時間間隔で、改変エフェクター細胞の投与後少なくとも２１日間にわたり投与する。場合によって、第１の量のステロイドを、対象へと、所定の時間間隔で、改変エフェクター細胞の投与後少なくとも２８日間にわたり投与する。
【００９３】
一部の実施形態では、第１の量のステロイドを、２、５、７、１０、１４、１５、２８、または３０日ごとに投与する。一部の実施形態では、第１の量のステロイドを、２日ごとに投与する。一部の実施形態では、第１の量のステロイドを、５日ごとに投与する。一部の実施形態では、第１の量のステロイドを、７日ごとに投与する。一部の実施形態では、第１の量のステロイドを、１０日ごとに投与する。一部の実施形態では、第１の量のステロイドを、１４日ごとに投与する。一部の実施形態では、第１の量のステロイドを、１５日ごとに投与する。一部の実施形態では、第１の量のステロイドを、２８日ごとに投与する。一部の実施形態では、第１の量のステロイドを、３０日ごとに投与する。
【００９４】
一部の実施形態では、状態から回復または改善したら、第２の量のステロイドを、対象へと投与する。場合によって、第２の量のステロイドを、対象へと、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１２、１４、１５、２８、３０、４５、４９、５０、６０、９０日間、またはこれを超える期間の後に、かつ、第１の量のステロイドの投与が完了した後で投与する。一部の実施形態では、第２の量のステロイドを、対象へと、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも４９日間、またはこれを超える期間の後に、かつ、第１の量のステロイドの投与が完了した後で投与する。
【００９５】
場合によって、第２の量のステロイドを、対象へと、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日間、またはこれを超える期間にわたり、連続的に投与する。場合によって、第２の量のステロイドを、対象へと、少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１２、１４、１５、２８、３０、４５、６０、９０日間、またはこれを超える期間にわたり、連続的に投与する。場合によって、第２の量のステロイドを、対象へと、少なくとも１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、４９、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０日間、またはこれを超える期間にわたり、連続的に投与する。
【００９６】
場合によって、第２の量のステロイドを、対象へと、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日間、またはこれを超える期間にわたり、間欠的に投与する。場合によって、第２の量のステロイドを、対象へと、少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１２、１４、１５、２８、３０、４５、６０、９０日間、またはこれを超える期間にわたり、間欠的に投与する。場合によって、第２の量のステロイドを、対象へと、少なくとも１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、４９、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０日間、またはこれを超える期間にわたり、間欠的に投与する。
【００９７】
場合によって、第２の量のステロイドを、対象へと、所定の時間間隔で、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６ ２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、７５、９０日間、またはこれを超える期間にわたり投与する。場合によって、第２の量のステロイドを、対象へと、所定の時間間隔で、少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１２、１４、１５、２８、３０、４５、６０、９０日間、またはこれを超える期間にわたり投与する。場合によって、第２の量のステロイドを、対象へと、所定の時間間隔で、少なくとも１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、４９、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０日間、またはこれを超える期間にわたり投与する。
【００９８】
一部の実施形態では、第２の量のステロイドを、２、５、７、１０、１４、１５、２８、または３０日ごとに投与する。一部の実施形態では、第２の量のステロイドを、２日ごとに投与する。一部の実施形態では、第２の量のステロイドを、５日ごとに投与する。一部の実施形態では、第２の量のステロイドを、７日ごとに投与する。一部の実施形態では、第２の量のステロイドを、１０日ごとに投与する。一部の実施形態では、第２の量のステロイドを、１４日ごとに投与する。一部の実施形態では、第２の量のステロイドを、１５日ごとに投与する。一部の実施形態では、第２の量のステロイドを、２８日ごとに投与する。一部の実施形態では、第２の量のステロイドを、３０日ごとに投与する。
【００９９】
一部の場合には、第１の量のステロイドを、１回、２回、３回、４回、５回の投与、またはこれを超える回数の投与により、状態を処置するために投与する。
【０１００】
場合によって、第２の量のステロイドを、１回、２回、３回、４回、５回の投与、またはこれを超える回数の投与により投与する。
【０１０１】
一部の実施形態では、ステロイドの第１の量は、約１ｍｇ／ｋｇ、１．５ｍｇ／ｋｇ、２ｍｇ／ｋｇ、２．５ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、またはこれを超える量である。一部の場合には、ステロイドの第１の量は、約１ｍｇ／ｋｇである。一部の場合には、ステロイドの第１の量は、約１．５ｍｇ／ｋｇである。一部の場合には、ステロイドの第１の量は、約２ｍｇ／ｋｇである。
【０１０２】
場合によって、ステロイドの第２の量は、約０．１ｍｇ／ｋｇ、０．２ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇ、０．４ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ／ｋｇ、０．６ｍｇ／ｋｇ、０．７ｍｇ／ｋｇ、０．８ｍｇ／ｋｇ、または０．９ｍｇ／ｋｇである。場合によって、ステロイドの第２の量は、約０．９ｍｇ／ｋｇである。場合によって、ステロイドの第２の量は、約０．８ｍｇ／ｋｇである。場合によって、ステロイドの第２の量は、約０．７ｍｇ／ｋｇである。場合によって、ステロイドの第２の量は、約０．６ｍｇ／ｋｇである。場合によって、ステロイドの第２の量は、約０．５ｍｇ／ｋｇである。場合によって、ステロイドの第２の量は、約０．９ｍｇ／ｋｇ、０．８ｍｇ／ｋｇ、０．７ｍｇ／ｋｇ、０．６ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ／ｋｇ、０．４ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇ、０．２ｍｇ／ｋｇ、または０．１ｍｇ／ｋｇである。
【０１０３】
場合によって、第２の量のステロイドを、逐次的に投与する。場合によって、各逐次用量を、０．１ｍｇ／ｋｇ、０．２ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇ、０．４ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ／ｋｇ、０．６ｍｇ／ｋｇ、０．７ｍｇ／ｋｇ、０．８ｍｇ／ｋｇ、または０．９ｍｇ／ｋｇずつ低減する。場合によって、各逐次用量を、少なくとも２、５、７、１０、１２、１４、１５、２０、２１、２８、３０日間、またはこれを超える期間隔てて投与する。場合によって、各逐次用量を、２日間隔てて投与する。場合によって、各逐次用量を、５日間隔てて投与する。場合によって、各逐次用量を、７日間隔てて投与する。場合によって、各逐次用量を、１０日間隔てて投与する。場合によって、各逐次用量を、１２日間隔てて投与する。場合によって、各逐次用量を、１４日間隔てて投与する。場合によって、各逐次用量を、１５日間隔てて投与する。場合によって、各逐次用量を、２０日間隔てて投与する。場合によって、各逐次用量を、２１日間隔てて投与する。場合によって、各逐次用量を、２８日間隔てて投与する。場合によって、各逐次用量を、３０日間隔てて投与する。
【０１０４】
一部の実施形態では、ステロイドを、１ｍｇ／ｋｇで、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１２、１４、１５、２８、３０日間、またはこれを超える期間の後に投与し、次いで、０．５ｍｇ／ｋｇで、改変エフェクター細胞の初回投与の、少なくとも３０、３５、４０、４５、４９、５０、５５、６０、６５、７０、８０、９０日間、またはこれを超える期間の後に投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、１ｍｇ／ｋｇで、改変エフェクター細胞の投与の、少なくとも１５日後に投与し、次いで、０．５ｍｇ／ｋｇで、改変エフェクター細胞の初回投与の、少なくとも４９日後に投与する。一部の実施形態では、ステロイドを、１ｍｇ／ｋｇで、改変エフェクター細胞の投与後１４日目に投与し、次いで、０．５ｍｇ／ｋｇで、改変エフェクター細胞の投与後４８日目に投与する。
【０１０５】
一部の実施形態では、ステロイドを、サイトカイン関連毒性の、少なくとも１つの症状の発現時に投与する。場合によって、サイトカイン関連毒性は、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）、脳症、またはＢ細胞無形成を含む。場合によって、サイトカイン関連毒性は、サイトカインストームを誘導する。
【０１０６】
場合によって、第１の量のステロイドを、対象へと、状態を処置するために投与する。一部の実施形態では、状態は、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）である。一部の実施形態では、状態は、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）である。
【０１０７】
一部の場合には、ステロイドを、サイトカイン関連毒性の、少なくとも１つの症状の軽減に必要とされるステロイドの量未満の量で投与する。
【０１０８】
サイトカイン
一部の実施形態では、１または複数の本明細書で記載される方法は、サイトカインの投与をさらに含む。サイトカインとは、細胞のシグナル伝達に関与する、約５〜２０ｋＤａの間の、小型タンパク質の類別である。一部の場合には、サイトカインは、ケモカイン、インターフェロン、インターロイキン、コロニー刺激因子、または腫瘍壊死因子を含む。一部の実施形態では、ケモカインは、細胞の遊走を導く、化学誘引物質としての役割を果たし、４つのサブファミリー：ＣＸＣ、ＣＣ、ＣＸ３Ｃ、およびＸＣへと分類される。例示的なケモカインは、ＣＣサブファミリー：ＣＣＬ１、ＣＣＬ２（ＭＣＰ−１）、ＣＣＬ３、ＣＣＬ４、ＣＣＬ５（ＲＡＮＴＥＳ）、ＣＣＬ６、ＣＣＬ７、ＣＣＬ８、ＣＣＬ９（またはＣＣＬ１０）、ＣＣＬ１１、ＣＣＬ１２、ＣＣＬ１３、ＣＣＬ１４、ＣＣＬ１５、ＣＣＬ１６、ＣＣＬ１７、ＣＣＬ１８、ＣＣＬ１９、ＣＣＬ２０、ＣＣＬ２１、ＣＣＬ２２、ＣＣＬ２３、ＣＣＬ２４、ＣＣＬ２５、ＣＣＬ２６、ＣＣＬ２７、およびＣＣＬ２８；ＣＸＣサブファミリー：ＣＸＣＬ１、ＣＸＣＬ２、ＣＸＣＬ３、ＣＸＣＬ４、ＣＸＣＬ５、ＣＸＣＬ６、ＣＸＣＬ７、ＣＸＣＬ８、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、ＣＸＣＬ１２、ＣＸＣＬ１３、ＣＸＣＬ１４、ＣＸＣＬ１５、ＣＸＣＬ１６、およびＣＸＣＬ１７；ＸＣサブファミリー：ＸＣＬ１およびＸＣＬ２；ならびにＣＸ３ＣサブファミリーであるＣＸ３ＣＬ１に由来するケモカインを含む。
【０１０９】
インターフェロン（ＩＦＮ）は、Ｉ型インターフェロン（例えば、ＩＦＮ−α、ＩＦＮ−β、ＩＦＮ−ε、ＩＦＮ−κ、およびＩＦＮ−ω）、ＩＩ型インターフェロン（例えば、ＩＦＮ−γ）、およびＩＩＩ型インターフェロンを含む。一部の実施形態では、ＩＦＮ−αは、ＩＦＮＡ１、ＩＦＮＡ２、ＩＦＮＡ４、ＩＦＮＡ５、ＩＦＮＡ６、ＩＦＮＡ７、ＩＦＮＡ８、ＩＦＮＡ１０、ＩＦＮＡ１３、ＩＦＮＡ１４、ＩＦＮＡ１６、ＩＦＮＡ１７、およびＩＦＮＡ２１を含む、約１３の亜型へとさらに分類される。
【０１１０】
インターロイキンは、白血球（leukocyte）または白血球（white blood cell）により発現され、Ｔリンパ球およびＢリンパ球ならびに造血細胞の発生および分化を促進する。例示的なインターロイキンは、ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８（ＣＸＣＬ８）、ＩＬ−９、ＩＬ−１０、ＩＬ−１１、ＩＬ−１２、ＩＬ−１３、ＩＬ−１４、ＩＬ−１５、ＩＬ−１６、ＩＬ−１７、ＩＬ−１８、ＩＬ−１９、ＩＬ−２０、ＩＬ−２１、ＩＬ−２２、ＩＬ−２３、ＩＬ−２４、ＩＬ−２５、ＩＬ−２６、ＩＬ−２７、ＩＬ−２８、ＩＬ−２９、ＩＬ−３０、ＩＬ−３１、ＩＬ−３２、ＩＬ−３３、ＩＬ−３５、およびＩＬ−３６を含む。
【０１１１】
一部の実施形態では、インターロイキンは、ｍｂＩＬ−１５を含む。一部の実施形態では、ｍｂＩＬ−１５は、本明細書で記載される改変エフェクター細胞と共に共供与させることができる、膜結合型キメラＩＬ−１５である。一部の実施形態では、ｍｂＩＬ−１５は、全長ＩＬ−１５Ｒα、またはこれらの機能的な断片もしくは変異体とインフレームで融合させた、全長ＩＬ−１５（例えば、天然ＩＬ−１５ポリペプチド）、またはこれらの断片もしくは変異体を含む。場合によって、ＩＬ−１５を、ＩＬ−１５Ｒαへと、リンカーを介して、間接的に連結する。場合によって、ｍｂＩＬ−１５は、Hurton et al., “Tethered IL-15 augments antitumor activity and promotes a stem-cell memory subset in tumor-specific T cells,” PNAS 2016において記載されている通りである。
【０１１２】
腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）とは、アポトーシスをモジュレートするサイトカインの群である。一部の場合には、ＴＮＦファミリー内には、ＴＮＦα、リンホトキシンアルファ（ＬＴ−アルファ）、リンホトキシンベータ（ＬＴ−ベータ）、Ｔ細胞抗原であるｇｐ３９（ＣＤ４０Ｌ）、ＣＤ２７Ｌ、ＣＤ３０Ｌ、ＦＡＳＬ、４−１ＢＢＬ、ＯＸ４０Ｌ、およびＴＮＦ放出型アポトーシス誘導リガンド（ＴＲＡＩＬ）を含むがこれらに限定されない、約１９のメンバーが存在する。
【０１１３】
コロニー刺激因子（ＣＳＦ）とは、造血幹細胞の表面上の受容体タンパク質と相互作用する、分泌糖タンパク質であって、その後、細胞の増殖および特異的種類の血液細胞への分化をモジュレートする分泌糖タンパク質である。一部の場合には、ＣＳＦは、マクロファージコロニー刺激因子、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）、またはプロメガポエチンを含む。
【０１１４】
一部の実施形態では、サイトカインは、本明細書で記載されるキメラ抗原受容体と共に共発現される膜結合型サイトカインである。
【０１１５】
一部の実施形態では、１または複数の本明細書で記載される方法は、サイトカインの投与をさらに含む。一部の場合には、サイトカインは、ケモカイン、インターフェロン、インターロイキン、コロニー刺激因子、または腫瘍壊死因子を含む。一部の場合には、１または複数の本明細書で記載される方法は、ケモカイン、インターフェロン、インターロイキン、コロニー刺激因子、または腫瘍壊死因子から選択されるサイトカインの投与をさらに含む。一部の場合には、１または複数の本明細書で記載される方法は、ＩＬ−２、ＩＬ−７、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−２１、ＩＦＮγ、またはＴＮＦ−αから選択されるサイトカインの投与をさらに含む。
【０１１６】
一部の場合には、サイトカインを、ステロイドまたは改変エフェクター細胞と同時に投与する。場合によって、サイトカインを、ステロイドおよび改変エフェクター細胞と同時に投与する。
【０１１７】
場合によって、サイトカインを、ステロイドおよび／または改変エフェクター細胞との間で逐次的に投与する。
【０１１８】
さらなる治療剤
一部の実施形態では、１または複数のさらなる治療剤を、本明細書で記載される方法と共に投与する。一部の場合には、１または複数のさらなる治療剤は、化学療法剤を含む。例示的な化学療法剤は、
・シクロホスファミド、メクロレタミン、クロランブシル、メルファラン、またはニトロソウレアなどのアルキル化剤；
・ダウノルビシン、ドキソルビシン、エピルビシン、イダルビシン、ミトキサントロン、またはバルルビシンなどのアントラサイクリン；
・パクリタキセル、ドセタキセル、ａｂｒａｘａｎｅ、またはｔａｘｏｔｅｒｅなどのタキサン；
・エポチロン；
・ボリノスタットまたはロミデプシンなどの、ヒストンデアセチラーゼ阻害剤；
・イリノテカン、トポテカン、エトポシド、テニポシド、またはタフルポシドなどの、トポイソメラーゼ阻害剤；
・ボルテゾミブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、イマチニブ、ベムラフェニブ、またはビスモデギブなどのキナーゼ阻害剤；
・アザシチジン、アザチオプリン、カペシタビン、クラドリビン、クロファラビン、シタラビン、デシタビン、ドキシフルリジン、フルダラビン、フルオロウラシル、フロクスウリジン、ゲムシタビン、ヒドロキシウレア、メルカプトプリン、メトトレキサート（methotrexate）、ネララビン、ペメトレキセド、プララトレキサート（pralatrexate）、またはチオグアニンなどのヌクレオチド類似体および前駆体類似体；
・ブレオマイシンまたはアクチノマイシンなどの抗微生物剤；
・カルボプラチン、シスプラチン、またはオキサリプラチンなどの、白金ベースの薬剤；
・トレチノイン、アリトレチノイン、もしくはベキサロテンなどのレチノイド；または
・ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、またはビノレルビンなどのビンカアルカロイドおよび誘導体
を含む。
【０１１９】
一部の実施形態では、さらなる治療剤は、多剤治療レジメンである。一部の実施形態では、さらなる治療剤は、ＨｙｐｅｒＣＶＡＤレジメン（メトトレキサート（methotrexate）およびシタラビンと交互の、シクロホスファミド、ビンクリスチン、ドキソルビシン、デキサメタゾン）を含む。
【０１２０】
一部の実施形態では、さらなる治療剤は、Ｒ−ＣＨＯＰレジメン（リツキシマブ、シクロホスファミド、ドキソルビシン、ビンクリスチン、およびプレドニゾン）を含む。
【０１２１】
一部の実施形態では、さらなる治療剤は、ＦＣＲレジメン（ＦＣＲ（フルダラビン、シクロホスファミド、リツキシマブ）を含む。
【０１２２】
一部の実施形態では、さらなる治療剤は、ＦＣＭＲレジメン（フルダラビン、シクロホスファミド、ミトキサントロン、リツキシマブ）を含む。
【０１２３】
一部の実施形態では、さらなる治療剤は、ＦＭＲレジメン（フルダラビン、ミトキサントロン、リツキシマブ）を含む。
【０１２４】
一部の実施形態では、さらなる治療剤は、ＰＣＲレジメン（ペントスタチン、シクロホスファミド、リツキシマブ）を含む。
【０１２５】
一部の実施形態では、さらなる治療剤は、ＰＥＰＣレジメン（プレドニゾン、エトポシド、プロカルバジン、シクロホスファミド）を含む。
【０１２６】
一部の実施形態では、さらなる治療剤は、シクロホスファミドおよびフルダラビンによるレジメンを含む。
【０１２７】
一部の場合には、さらなる治療剤を、ステロイド、改変エフェクター細胞、サイトカイン、またはこれらの組合せと同時に投与する。場合によって、さらなる治療剤を、ステロイドおよび改変エフェクター細胞と同時に投与する。場合によって、さらなる治療剤を、ステロイド、改変エフェクター細胞、および／またはサイトカインとの間で逐次的に投与する。
【０１２８】
一部の場合には、さらなる治療剤を、低用量レジメンとして投与する。場合によって、低用量レジメンは、シクロホスファミドおよびフルダラビンによるレジメンを含む。場合によって、低用量レジメンは、シクロホスファミドのための、約２５０ｍｇ／ｍ２の用量、およびフルダラビンのための、約２５ｍｇ／ｍ２の用量を含む。場合によって、投与レジメンは、約１、２、３日間、またはこれを超える期間を含む。
【０１２９】
他の場合には、さらなる治療剤を、高用量レジメンとして投与する。場合によって、高用量レジメンは、シクロホスファミドおよびフルダラビンによるレジメンを含む。場合によって、高用量レジメンは、シクロホスファミドのための、約１、２日間、またはこれを超える期間にわたる、約６０ｍｇ／ｍ２の用量、およびフルダラビンのための、約１、２、３、４、５日間、またはこれを超える期間にわたる、約２５ｍｇ／ｍ２の用量を含む。
【０１３０】
場合によって、さらなる治療剤は、約１、２、３日間、またはこれを超える期間にわたる、約２５０ｍｇ／ｍ２のシクロホスファミド、および約２５ｍｇ／ｍ２のフルダラビンを含む投与レジメンを含む。場合によって、フルダラビンを、約３日間にわたり投与する。
【０１３１】
場合によって、さらなる治療剤は、約１、２、３、４、５、６日間、またはこれを超える期間にわたる、約３００ｍｇ／ｍ２のシクロホスファミドを含む投与レジメンを含む。場合によって、シクロホスファミドを、約６日間にわたり投与する。
【０１３２】
場合によって、さらなる治療剤は、約１、２、３日間、またはこれを超える期間にわたる、約５００ｍｇ／ｍ２のシクロホスファミドおよび約３０ｍｇ／ｍ２のフルダラビンを含む投与レジメンを含む。場合によって、フルダラビンを、約３日間にわたり投与する。
【０１３３】
一部の場合には、上記で記載された、任意の１または複数の化学療法剤の投与は、リンパ球減少症を誘導する。
【０１３４】
適応
一部の実施形態では、本明細書では、改変エフェクター細胞およびステロイドを、がんを有する対象へと投与する方法が開示される。場合によって、がんは、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ３３、ＣＤ４４、ＢＣＭＡ、ＣＤ１２３、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、α−葉酸受容体、ＣＡＩＸ、ＣＤ３０、ＲＯＲ１、ＣＥＡ、ＥＧＰ−２、ＥＧＰ−４０、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、葉酸結合性タンパク質、ＧＤ２、ＧＤ３、ＩＬ−１３Ｒ−ａ２、ＫＤＲ、ＥＤＢ−Ｆ、メソテリン、ＣＤ２２、ＥＧＦＲ、ＭＵＣ−１、ＭＵＣ−１６、ＭＡＧＥ−Ａ１、ｈ５Ｔ４、ＰＳＭＡ、ＴＡＧ−７２、またはＶＥＧＦ−Ｒ２の過剰発現と関連するがんである。場合によって、がんは、ＣＤ１９、ＣＤ３３、ＢＣＭＡ、ＣＤ４４、α−葉酸受容体、ＣＡＩＸ、ＣＤ３０、ＲＯＲ１、ＣＥＡ、ＥＧＰ−２、ＥＧＰ−４０、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、葉酸結合性タンパク質、ＧＤ２、ＧＤ３、ＩＬ−１３Ｒ−ａ２、ＫＤＲ、ＥＤＢ−Ｆ、メソテリン、ＣＤ２２、ＥＧＦＲ、ＭＵＣ−１、ＭＵＣ−１６、ＭＡＧＥ−Ａ１、ｈ５Ｔ４、ＰＳＭＡ、ＴＡＧ−７２、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＣＤ１２３、およびＶＥＧＦ−Ｒ２の過剰発現と関連するがんである。
【０１３５】
一部の実施形態では、本明細書では、改変エフェクター細胞およびステロイドを、ＣＤ１９の過剰発現と関連するがんを有する対象へと投与する方法が開示される。一部の実施形態では、本明細書では、改変エフェクター細胞およびステロイドを、ＣＤ３３の過剰発現と関連するがんを有する対象へと投与する方法が開示される。一部の実施形態では、本明細書では、改変エフェクター細胞およびステロイドを、ＣＤ４４、ＢＣＭＡ、ＣＤ１２３、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、α−葉酸受容体、ＣＡＩＸ、ＣＤ３０、ＲＯＲ１、ＣＥＡ、ＥＧＰ−２、ＥＧＰ−４０、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、葉酸結合性タンパク質、ＧＤ２、ＧＤ３、ＩＬ−１３Ｒ−ａ２、ＫＤＲ、ＥＤＢ−Ｆ、メソテリン、ＣＤ２２、ＥＧＦＲ、ＭＵＣ−１、ＭＡＧＥ−Ａ１、ｈ５Ｔ４、ＰＳＭＡ、ＴＡＧ−７２、またはＶＥＧＦ−Ｒ２の過剰発現と関連するがんを有する対象へと投与する方法が開示される。場合によって、がんは、転移性がんである。他の場合には、がんは、再発性がんまたは不応性がんである。
【０１３６】
場合によって、がんは、充実性腫瘍または血液悪性腫瘍である。一部の場合には、がんは、充実性腫瘍である。他の場合には、がんは、血液悪性腫瘍である。場合によって、がんは、転移性がんである。場合によって、がんは、再発性がんまたは不応性がんである。
【０１３７】
一部の場合には、がんは、充実性腫瘍である。例示的な充実性腫瘍は、肛門がん；虫垂がん；胆管がん（すなわち、胆管癌）；膀胱がん；脳腫瘍；乳がん；子宮頸がん；結腸がん；原発不明がん（ＣＵＰ）；食道がん；眼がん；卵管がん；消化器がん；腎臓がん；肝臓がん；肺がん；髄芽腫；黒色腫；口腔がん；卵巣がん；膵臓がん；上皮小体疾患；陰茎がん；下垂体腫瘍；前立腺がん；直腸がん；皮膚がん；胃がん；精巣がん；咽頭がん；甲状腺がん；子宮がん；膣がん；または外陰がんを含むがこれらに限定されない。
【０１３８】
一部の場合には、本明細書では、充実性腫瘍を有する対象へと、改変エフェクター細胞およびステロイドを、対象における改変エフェクター細胞の集団の拡大増殖を誘導するのに有効な量で投与する方法が開示される。場合によって、本明細書では、肛門がん；虫垂がん；胆管がん（すなわち、胆管癌）；膀胱がん；脳腫瘍；乳がん；子宮頸がん；結腸がん；原発不明がん（ＣＵＰ）；食道がん；眼がん；卵管がん；消化器がん；腎臓がん；肝臓がん；肺がん；髄芽腫；黒色腫；口腔がん；卵巣がん；膵臓がん；上皮小体疾患；陰茎がん；下垂体腫瘍；前立腺がん；直腸がん；皮膚がん；胃がん；精巣がん；咽頭がん；甲状腺がん；子宮がん；膣がん；または外陰がんから選択される充実性腫瘍を有する対象へと、改変エフェクター細胞およびステロイドを、対象における改変エフェクター細胞の集団の拡大増殖を誘導するのに有効な量で投与する方法が開示される。場合によって、充実性腫瘍は、転移性充実性腫瘍である。他の場合には、充実性腫瘍は、再発性腫瘍または不応性腫瘍である。
【０１３９】
一部の場合には、がんは、血液悪性腫瘍である。場合によって、血液悪性腫瘍は、リンパ腫、白血病、骨髄腫、またはＢ細胞性悪性腫瘍を含む。場合によって、血液悪性腫瘍は、リンパ腫、白血病、または骨髄腫を含む。一部の場合には、例示的な血液悪性腫瘍は、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）、高危険性ＣＬＬ、非ＣＬＬ／ＳＬＬ性リンパ腫、前リンパ球性白血病（ＰＬＬ）、濾胞性リンパ腫（ＦＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、ワルデンシュトロームマクログロブリン血症、多発性骨髄腫、節外性辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、節性辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、非バーキット高悪性度Ｂ細胞リンパ腫、縦隔原発Ｂ細胞リンパ腫（ＰＭＢＬ）、免疫芽球性大細胞型リンパ腫、前駆Ｂリンパ芽球性リンパ腫、Ｂ細胞前リンパ球性白血病、リンパ形質細胞性リンパ腫、脾辺縁帯リンパ腫、形質細胞骨髄腫、形質細胞腫、縦隔（胸腺）大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、血管内大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、原発性滲出性リンパ腫、またはリンパ腫様肉芽腫症を含む。一部の実施形態では、血液悪性腫瘍は、骨髄性白血病を含む。一部の実施形態では、血液悪性腫瘍は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）または慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）を含む。
【０１４０】
一部の場合には、本明細書では、血液悪性腫瘍を有する対象へと、改変エフェクター細胞およびステロイドを、対象における改変エフェクター細胞の集団の拡大増殖を誘導するのに有効な量で投与する方法が開示される。一部の場合には、本明細書では、リンパ腫、白血病、骨髄腫、またはＢ細胞性悪性腫瘍を有する対象へと、改変エフェクター細胞およびステロイドを、対象における改変エフェクター細胞の集団の拡大増殖を誘導するのに有効な量で投与する方法が開示される。一部の場合には、本明細書では、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）、高危険性ＣＬＬ、非ＣＬＬ／ＳＬＬ性リンパ腫、前リンパ球性白血病（ＰＬＬ）、濾胞性リンパ腫（ＦＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、ワルデンシュトロームマクログロブリン血症、多発性骨髄腫、節外性辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、節性辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、非バーキット高悪性度Ｂ細胞リンパ腫、縦隔原発Ｂ細胞リンパ腫（ＰＭＢＬ）、免疫芽球性大細胞型リンパ腫、前駆Ｂリンパ芽球性リンパ腫、Ｂ細胞前リンパ球性白血病、リンパ形質細胞性リンパ腫、脾辺縁帯リンパ腫、形質細胞骨髄腫、形質細胞腫、縦隔（胸腺）大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、血管内大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、原発性滲出性リンパ腫、またはリンパ腫様肉芽腫症から選択される血液悪性腫瘍を有する対象へと、改変エフェクター細胞およびステロイドを、対象における改変エフェクター細胞の集団の拡大増殖を誘導するのに有効な量で投与する方法が開示される。一部の場合には、本明細書では、ＡＭＬまたはＣＭＬから選択される血液悪性腫瘍を有する対象へと、改変エフェクター細胞およびステロイドを、対象における改変エフェクター細胞の集団の拡大増殖を誘導するのに有効な量で投与する方法が開示される。一部の場合には、本明細書では、大細胞型Ｂ細胞リンパ腫を有する対象へと、改変エフェクター細胞およびステロイドを、対象における改変エフェクター細胞の集団の拡大増殖を誘導するのに有効な量で投与する方法が開示される。一部の場合には、本明細書では、ＣＬＬを有する対象へと、改変エフェクター細胞およびステロイドを、対象における改変エフェクター細胞の集団の拡大増殖を誘導するのに有効な量で投与する方法が開示される。一部の場合には、本明細書では、濾胞性リンパ腫を有する対象へと、改変エフェクター細胞およびステロイドを、対象における改変エフェクター細胞の集団の拡大増殖を誘導するのに有効な量で投与する方法が開示される。一部の場合には、本明細書では、ＡＬＬを有する対象へと、改変エフェクター細胞およびステロイドを、対象における改変エフェクター細胞の集団の拡大増殖を誘導するのに有効な量で投与する方法が開示される。一部の場合には、本明細書では、ＡＭＬを有する対象へと、改変エフェクター細胞およびステロイドを、対象における改変エフェクター細胞の集団の拡大増殖を誘導するのに有効な量で投与する方法が開示される。一部の場合には、本明細書では、ＣＭＬを有する対象へと、改変エフェクター細胞およびステロイドを、対象における改変エフェクター細胞の集団の拡大増殖を誘導するのに有効な量で投与する方法が開示される。一部の場合には、血液悪性腫瘍は、転移性血液悪性腫瘍である。他の場合には、血液悪性腫瘍は、再発性血液悪性腫瘍または不応性血液悪性腫瘍である。
【０１４１】
ウイルスのベースの送達系
本発明はまた、本明細書で記載される核酸を挿入したウイルスのベースの系などの送達系も提供する。代表的なウイルス発現ベクターは、アデノ随伴ウイルスベクター、アデノウイルスベースのベクター（例えば、Ｃｒｕｃｅｌｌ，Ｉｎｃ．（Ｌｅｉｄｅｎ、Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ）から市販されている、アデノウイルスベースのＰｅｒ．Ｃ６系）、レンチウイルスベースのベクター（例えば、Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（Ｃａｒｌｓｂａｄ、Ｃａｌｉｆ．）製の、レンチウイルスベースのｐＬＰＩ）、レトロウイルスベクター（例えば、ｐＣＦＢ−ＥＧＳＨを付加したｐＦＢ−ＥＲＶ）、およびヘルペスウイルスベースのベクターを含むがこれらに限定されない。ある実施形態では、ウイルスベクターは、レンチウイルスベクターである。レンチウイルスなどのレトロウイルスに由来するベクターは、トランス遺伝子の、娘細胞における、長期にわたる、安定的な組込みおよびその繁殖を可能とするので、長期にわたる遺伝子導入を達成するのに適するツールである。レンチウイルスベクターは、肝細胞などの非増殖性細胞に形質導入しうるという点で、マウス白血病ウイルスなど、がんレトロウイルスに由来するベクターに優る追加の利点を有する。レンチウイルスベクターはまた、低免疫原性という追加の利点も有する。さらなる実施形態では、ウイルスベクターは、アデノ随伴ウイルスベクターである。さらなる実施形態では、ウイルスベクターは、レトロウイルスベクターである。一般に、かつ、複数の実施形態では、適切なベクターは、少なくとも１つの生物において機能的な複製起点、プロモーター配列、好都合な制限エンドヌクレアーゼ部位、および１または複数の選択用マーカー（例えば、国際公開第０１／９６５８４号パンフレット、国際公開第０１／２９０５８号パンフレット、および米国特許第６，３２６，１９３号明細書）を含有する。
【０１４２】
さらなる適切なベクターは、宿主細胞のＤＮＡへと、ランダムに組み込まれる場合もあり、発現ベクターと、宿主細胞の染色体との特異的組換えを可能とする組換え部位を含む場合もある、組込み用発現ベクターを含む。このような組込み用発現ベクターは、宿主細胞の染色体の内因性発現制御配列を用いて、所望のタンパク質の発現をもたらしうる。部位特異的に組み込むベクターの例は、例えば、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ（Ｃａｒｌｓｂａｄ、Ｃａｌｉｆ．）（例えば、ｐｃＤＮＡ（商標）５／ＦＲＴ）製のｆｌｐ−ｉｎ系、またはＳｔｒａｔａｇｅｎｅ（ＬａＪｏｌｌａ、Ｃａｌｉｆ．）製のｐＥｘｃｈａｎｇｅ−６  Ｃｏｒｅ  Ｖｅｃｔｏｒｓにおいて見出されうるｃｒｅ−ｌｏｘ系などのｃｒｅ−ｌｏｘ系の構成要素を含む。宿主細胞染色体へとランダムに組み込まれるベクターの例は、例えば、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ（Ｃａｒｌｓｂａｄ、Ｃａｌｉｆ．）製のｐｃＤＮＡ３．１（Ｔ抗原の非存在下で導入される場合）、およびＰｒｏｍｅｇａ（Ｍａｄｉｓｏｎ、Ｗｉｓ．）製のｐＣＩまたはｐＦＮ１０Ａ（ＡＣＴ）ＦＬＥＸＩ（商標）を含む。さらなるプロモーターエレメント、例えば、エンハンサーは、転写開始の頻度を調節する。典型的に、プロモーターエレメントは、開始部位の３０〜１１０ｂｐ上流の領域内に位置するが、多数のプロモーターは、開始部位の下流にも、機能的なエレメントを含有することが近年示されている。エレメントが、互いに対して逆位であるか、または移動している場合にも、プロモーター機能が保存されるように、プロモーターエレメントの間のスペーシングは、柔軟であることが多い。チミジンキナーゼ（ｔｋ）プロモーターでは、活性が減衰し始める前に、プロモーターエレメントの間のスペーシングが、５０ｂｐの距離まで増大する場合がある。個別のエレメントは、転写を活性化させるように、プロモーターに応じて、共作動的に機能する場合もあり、独立に機能する場合もあると考えられる。
【０１４３】
適切なプロモーターの１つの例は、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）即初期プロモーター配列である。このプロモーター配列は、それへと作動的に連結された、任意のポリヌクレオチド配列の、高レベルの発現を駆動することが可能である、強力な構成的プロモーター配列である。
【０１４４】
適切なプロモーターの別の例は、ヒト伸長成長因子１アルファ１（ｈＥＦ１ａ１）である。複数の実施形態では、本発明のＣＡＲおよび／またはＴＣＲを含むベクター構築物は、ｈＥＦ１ａ１機能的変異体を含む。
【０１４５】
しかし、サルウイルス４０（ＳＶ４０）初期プロモーター、マウス乳腺腫瘍ウイルス（ＭＭＴＶ）、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）ＬＴＲ（ｌｏｎｇ  ｔｅｒｍｉｎａｌ  ｒｅｐｅａｔ）プロモーター、ＭｏＭｕＬＶプロモーター、トリ白血病ウイルスプロモーター、エプスタイン−バーウイルス即初期プロモーター、ラウス肉腫ウイルスプロモーターのほか、アクチンプロモーター、ミオシンプロモーター、ヘモグロビンプロモーター、およびクレアチンキナーゼプロモーターなどであるがこれらに限定されない、ヒト遺伝子プロモーターを含むがこれらに限定されない、他の構成的プロモーター配列もまた、使用することができる。さらに、本発明は、構成的プロモーターの使用に限定されないものとする。誘導性プロモーターもまた、本発明の一部として想定される。誘導性プロモーターの使用は、このような発現が所望される場合に、それが作動的に連結されたポリヌクレオチド配列の発現をオンにするか、または発現が所望されない場合に、発現をオフにすることが可能な分子スイッチをもたらす。誘導性プロモーターの例は、メタロチオネインプロモーター、グルココルチコイドプロモーター、プロゲステロンプロモーター、およびテトラサイクリンプロモーターを含むがこれらに限定されない。
【０１４６】
ＣＡＲもしくはＴＣＲポリペプチドまたはこの部分の発現を評価するために、細胞へと導入される発現ベクターはまた、ウイルスベクターを介してトランスフェクトまたは感染させることが求められる細胞集団からの、発現細胞の同定および選択を容易とする、選択用マーカー遺伝子もしくはレポーター遺伝子またはこれらの両方も含有しうる。他の態様では、選択用マーカーは、別個のＤＮＡ片上に保有され、共トランスフェクション手順で使用さる場合もある。選択用マーカーおよびレポーター遺伝子のいずれも、宿主細胞内の発現を可能とするように、適切な調節配列で挟むことができる。有用な選択用マーカーは、例えば、ネオマイシン耐性遺伝子（ｎｅｏ）およびアンピシリン耐性遺伝子などの抗生剤耐性遺伝子を含む。一部の実施形態では、切断型表皮増殖因子受容体（ＨＥＲ１ｔ）タグを、選択用マーカー遺伝子として使用することができる。
【０１４７】
レポーター遺伝子を、トランスフェクトされた可能性がある細胞を同定し、調節配列の機能性について査定するために使用することができる。一般に、レポーター遺伝子は、レシピエントの生物または組織において存在しないか、またはこれらにより発現せず、その発現が、何らかの、容易に検出可能な特性、例えば、酵素活性により顕在化されるポリペプチドをコードする遺伝子である。ＤＮＡを、レシピエント細胞へと導入した後の適切な時点において、レポーター遺伝子の発現についてアッセイする。適切なレポーター遺伝子は、ルシフェラーゼ、ベータ−ガラクトシダーゼ、クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ、分泌型アルカリホスファターゼをコードする遺伝子、または緑色蛍光タンパク質遺伝子（例えば、Ui-Tei et al., FEBS Letters 479: 79-82 (2000)）を含むことができる。適切な発現系が周知であり、公知の技法を使用して調製することもでき、市販品を購入することもできる。一般に、最高レベルのレポーター遺伝子の発現を示す、最小の５’側フランキング領域を伴う構築物は、プロモーターとして同定される。このようなプロモーター領域は、レポーター遺伝子へと連結することができ、薬剤を、プロモーター駆動型転写をモジュレートする能力について査定するのに使用することができる。
【０１４８】
いくつかの実施形態では、ベクターは、トランス遺伝子の発現を駆動するｈＥＦ１ａ１プロモーター、転写を増強するウシ成長ホルモンポリＡ配列、ウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメント（ＷＰＲＥ）のほか、ｐＦＵＧＷプラスミドに由来するＬＴＲ配列を含む。
【０１４９】
当技術分野では、遺伝子を細胞へと導入し発現させる方法が公知である。発現ベクターの文脈では、ベクターを、当技術分野における任意の方法により、宿主細胞、例えば、哺乳動物細胞、細菌細胞、酵母細胞、または昆虫細胞へと、たやすく導入することができる。例えば、発現ベクターは、宿主細胞へと、物理的手段により導入することもでき、化学的手段により導入することもでき、生物学的手段により導入することもできる。
【０１５０】
ポリヌクレオチドを、宿主細胞へと導入するための物理的方法は、リン酸カルシウム沈殿法、リポフェクション法、遺伝子銃法、マイクロインジェクション法、電気穿孔法などを含む。当技術分野では、ベクターおよび／または外因性核酸を含む細胞を作製するための方法が周知である。例えば、Sambrook et al. (Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory, New York (2001))を参照されたい。複数の実施形態では、ポリヌクレオチドを、宿主細胞へと導入するための方法は、リン酸カルシウムトランスフェクションまたはポリエチレンイミン（ＰＥＩ）トランスフェクションである。
【０１５１】
目的のポリヌクレオチドを、宿主細胞へと導入するための生物学的方法は、ＤＮＡベクターおよびＲＮＡベクターの使用を含む。ウイルスベクターと、とりわけ、レトロウイルスベクターとは、遺伝子を、哺乳動物細胞、例えば、ヒト細胞へと挿入するための、最も広く使用される方法となっている。他のウイルスベクターは、レンチウイルス、ポックスウイルス、単純ヘルペスウイルスＩ、アデノウイルス、およびアデノ随伴ウイルスなどに由来しうる。例えば、米国特許第５，３５０，６７４号明細書および同第５，５８５，３６２号明細書を参照されたい。
【０１５２】
ポリヌクレオチドを、宿主細胞へと導入するための化学的手段は、高分子複合体、ナノカプセル、マイクロスフェア、ビーズ、ならびに水中油エマルジョン、ミセル、混合型ミセル、およびリポソームを含む脂質ベースの系などのコロイド分散系を含む。ｉｎ  ｖｉｔｒｏおよびｉｎ  ｖｉｖｏにおける、送達媒体としての使用のための、例示的なコロイド状系は、リポソーム（例えば、人工膜小胞）である。
【０１５３】
ウイルス送達系を用いる場合、例示的な送達媒体は、リポソームである。核酸の、宿主細胞への導入（ｉｎ  ｖｉｔｒｏ、ｅｘ  ｖｉｖｏ、またはｉｎ  ｖｉｖｏにおける）のために、脂質製剤の使用が想定される。別の態様では、核酸は、脂質と会合させることができる。脂質と会合させた核酸は、リポソームの脂質二重層内に散在する、水性のリポソーム内部に封入することもでき、リポソームおよびオリゴヌクレオチドのいずれとも会合する連結分子を介して、リポソームへと接合させることもでき、リポソーム内に取り込むこともでき、リポソームと複合体化させることもでき、脂質を含有する溶液中に分散させることもでき、脂質と混合することもでき、脂質と組み合わせることもでき、脂質中の懸濁液として含有することもでき、ミセルと共に含有するかもしくは複合体化させることもでき、または他の形で脂質と会合させることもできる。脂質、脂質／ＤＮＡ、または脂質／発現ベクターに関連する組成物は、溶液中の、任意の特定の構造に限定されない。例えば、組成物は、ミセルとしての二重層構造内に存在する場合もあり、「コラプシング」構造を伴う二重層構造内に存在する場合もある。組成物はまた、単に、溶液中に散在させることもでき、おそらく、サイズまたは形状が均質ではない凝集物を形成しうる。脂質とは、天然脂質の場合もあり、合成脂質の場合もある、脂肪性物質である。例えば、脂質は、天然では、細胞質内で発生する脂肪性液滴のほか、長鎖脂肪族炭化水素、ならびに脂肪酸、アルコール、アミン、アミノアルコール、およびアルデヒドなど、それらの誘導体を含有する化合物のクラスを含む。
【０１５４】
使用に適する脂質は、市販元から購入することができる。例えば、ジミリスチルホスファチジルコリン（「ＤＭＰＣ」）は、Ｓｉｇｍａ、Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、Ｍｏ．から購入することができ、ジセチルリン酸（「ＤＣＰ」）は、Ｋ  ＆  Ｋ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（Ｐｌａｉｎｖｉｅｗ、Ｎ．Ｙ．）から購入することができ、コレステロール（「Ｃｈｏｉ」）は、Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍ−Ｂｅｈｒｉｎｇから購入することができ、ジミリスチルホスファチジルグリセロール（「ＤＭＰＧ」）および他の脂質は、Ａｖａｎｔｉ  Ｐｏｌａｒ  Ｌｉｐｉｄｓ，Ｉｎｃ．（Ｂｉｒｍｉｎｇｈａｍ、Ａｌａ．）から購入することができる。クロロホルムまたはクロロホルム／メタノール中の脂質原液は、約−２０℃で保存することができる。クロロホルムは、メタノールよりたやすく蒸発するので、唯一の溶媒として使用される。「リポソーム」とは、封入された脂質の二重層または脂凝集物の作出により形成される、様々な単一の脂質媒体および多層性脂質媒体を包含する、一般的な用語である。リポソームは、リン脂質二重層膜および内部の水性媒質を伴う小胞構造を有するものとして特徴づけることができる。多層性リポソームは、水性媒質により分離された複数の脂質層を有する。多層性リポソームは、リン脂質を、過剰量の水溶液中に懸濁させると、自発的に形成される。脂質成分は、閉止構造を形成する前に、自己転移を経、脂質二重層の間に、水および溶解させた溶質を取り込む（Ghosh et al., Glycobiology 5: 505-10 (1991)）。しかし、溶液中に通常の小胞構造と異なる構造を有する組成物もまた、包含される。例えば、脂質は、ミセル構造を取る場合もあり、脂質分子による不均質の凝集物として存在する場合もある。また、リポフェクタミン−核酸複合体も想定される。
【０１５５】
非ウイルスベースの送達系
一部の場合には、本明細書で記載されるＣＡＲおよび／またはＴＣＲはまた、ＤＮＡ配列を、脊椎動物の染色体へと導入する合成ＤＮＡトランスポゾン系を指す、「Ｓｌｅｅｐｉｎｇ  Ｂｅａｕｔｙ（ＳＢ）トランスポゾン系」など、非ウイルス性ベースの送達系を使用して、Ｔ細胞へと導入することもできる。系については、例えば、米国特許第６，４８９，４５８号明細書において記載されている。Ｓｌｅｅｐｉｎｇ  Ｂｅａｕｔｙトランスポゾン系は、Ｓｌｅｅｐｉｎｇ  Ｂｅａｕｔｙ（ＳＢ）トランスポザーゼおよびＳＢトランスポゾンから構成される。ＤＮＡトランスポゾンは、１つのＤＮＡ部位から、別のＤＮＡ部位へと、単純なカットアンドペースト方式で転座する。転移は、規定されたＤＮＡセグメントを、１つのＤＮＡ分子から切り出し、同じＤＮＡ分子内もしくはゲノム内、または異なるＤＮＡ分子内もしくはゲノム内の別の部位へと移動させる、正確な過程である。他のＴｃ１／ｍａｒｉｎｅｒ型トランスポザーゼと同様、ＳＢトランスポザーゼも、トランスポゾンを、レシピエントＤＮＡ配列内の、ＴＡジヌクレオチド塩基対へと挿入する。挿入部位は、同じＤＮＡ分子内の別の部位の場合もあり、別のＤＮＡ分子（または染色体）内の場合もある。ヒトゲノムを含む哺乳動物ゲノムには、約２億カ所のＴＡ部位が存在する。ＴＡ挿入部位は、トランスポゾン組込みの過程において、重複される。このＴＡ配列の重複は、転移の顕著な特徴であり、一部の実験では、機構を確認するのに使用される。トランスポザーゼは、トランスポゾン内でコードされる場合もあり、トランスポザーゼは、別の供給源により供給される場合もあり、この場合、トランスポゾンは、非自律型エレメントとなる。非自律型トランスポゾンは、挿入の後、独立では切出しおよび再挿入を行いえないため、遺伝子ツールとして最も有用である。ＳＢトランスポゾンは、脊椎動物のゲノムへの遺伝子の導入および遺伝子治療のための非ウイルスベクターとして使用することが想定されている。略述すると、Ｔ細胞を遺伝子改変するように、Ｓｌｅｅｐｉｎｇ  Ｂｅａｕｔｙ（ＳＢ）系（Hackett et al., Mol Ther 18:674-83, (2010)）を適合させた（Cooper et al., Blood 105:1622-31, (2005)）。これは、２つのステップ：（ｉ）Ｔ細胞の特異性をリダイレクトするためのＳＢトランスポゾン［すなわち、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）およびＳＢトランスポザーゼを発現するＤＮＡプラスミドのエレクトロトランスファー（Jin et al., Gene Ther 18:849-56, (2011)、Kebriaei et al., Hum Gene Ther 23:444-50, (2012)）、ならびに（ｉｉ）Ｋ５６２細胞株に由来するデザイナー人工抗原提示細胞（ＡａＰＣ）（ＡａＰＣ（Ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ  ａｎｄ  Ｐｒｏｐａｇａｔｉｎｇ  Ｃｅｌｌ）としてもまた公知である）に接する形での、組込み配列を安定的に発現するＴ細胞の繁殖および拡大増殖を伴った。一実施形態では、ＳＢトランスポゾン系は、ｔｄＩＬ−１５、ＩＬ−２１、および／またはキメラ抗原受容体をコードするコード配列を含む。このような系については、例えば、参照によりそれらの全体において本明細書に組み込まれる、Singh et al., Cancer Res (8):68 (2008). April 15, 2008およびMaiti et al., J Immunother. 36(2): 112-123 (2013)において記載されている。
【０１５６】
本明細書で記載される改変エフェクター細胞（例えば、ＣＡＲエフェクター細胞またはＴＣＲエフェクター細胞）の一部の実施形態では、ｍｂＩＬ−１５は、トランスポゾンＤＮＡプラスミドベクター内でコードされ、ＳＢトランスポザーゼは、別個のベクター内でコードされる。複数の実施形態では、ＣＤ１９  ＣＡＲは、トランスポゾンＤＮＡプラスミドベクター内でコードされ、ｍｂ−ＩＬ１５は、第２のトランスポゾンＤＮＡプラスミドベクター内でコードされ、ＳＢトランスポザーゼは、第３のＤＮＡプラスミドベクター内でコードされる。一部の実施形態では、ｍｂＩＬ−１５は、切断型表皮増殖因子受容体タグによりコードされる。
【０１５７】
外因性核酸を、宿主細胞へと導入するか、または細胞を、本発明の阻害剤へと、他の形で曝露するのに使用される方法にかかわらず、宿主細胞内の組換えＤＮＡ配列の存在を確認するために、様々なアッセイを実施することができる。このようなアッセイは、例えば、サザンブロット法およびノーザンブロット法、ＲＴ−ＰＣＲおよびＰＣＲなど、当業者に周知の分子アッセイ；例えば、免疫学的手段（ＥＬＩＳＡおよびウェスタンブロット）、または薬剤を同定するための、本明細書で記載されるアッセイであって、本発明の範囲内に収まるアッセイにより、特定のペプチドの有無を検出するアッセイなどの「生化学的」アッセイを含む。
【０１５８】
複数の実施形態では、ＳＢ１１トランスポゾン系、ＳＢ１００Ｘトランスポゾン系、ＳＢ１１０トランスポゾン系、ｐｉｇｇｙＢａｃトランスポゾン系（例えば、参照によりその全体において本明細書に組み込まれる、Wilson et al, “PiggyBac Transposon-mediated Gene Transfer in Human Cells,” Molecular Therapy 15:139-145 (2007)を参照されたい）、および／またはｐｉｇｇｙＢａｔトランスポゾン系（例えば、Mitra et al., “Functional characterization of piggyBat from the bat Myotis lucifugus unveils an active mammalian DNA transposon,” Proc. Natl. Acad. Sci USA 110:234-239 (2013)を参照されたい）を使用して、本明細書で説明される改変エフェクター細胞および他の遺伝子エレメントを、細胞へと送達する。さらなるトランスポザーゼおよびトランスポゾン系については、それらの各々が、参照によりその全体において本明細書に組み込まれる、米国特許第７，１４８，２０３号明細書、同第８，２２７，４３２号明細書、米国特許公開第２０１１／０１１７０７２号明細書、Mates et al., Nat Genet, 41(6):753-61 (2009). doi: 10.1038/ng.343. Epub 2009 May 3, Gene Ther., 18(9):849-56 (2011). doi: 10.1038/gt.2011.40. Epub 2011 Mar 31 およびIvics et al., Cell. 91(4):501-10, (1997)において提示されている。
【０１５９】
Ｔ細胞の供給源
ある特定の態様では、本明細書で記載される実施形態は、リダイレクトされた、抗原特異的免疫エフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞、ＮＫ細胞、またはＮＫ  Ｔ細胞）を作り出し、かつ／またはこれを拡大増殖させる方法であって、細胞に、ＣＡＲをコードするＤＮＡ（またはＲＮＡ）構築物を含有する発現ベクターによりトランスフェクトし、次いで、任意選択で、細胞を、フィーダー細胞、組換え抗原、または受容体に対する抗体で刺激して、細胞を増殖させるステップを含む方法を含む。ある特定の態様では、ＣＡＲまたはＴＣＲを発現するように操作された細胞（または細胞集団）は、幹細胞、ｉＰＳ細胞、免疫エフェクター細胞、またはこれらの細胞の前駆細胞である。
【０１６０】
免疫エフェクター細胞の供給源は、同種供給源および自家供給源の両方を含みうる。場合によって、免疫エフェクター細胞は、幹細胞または人工多能性幹細胞（ｉＰＳＣ）から分化させることもできる。したがって、実施形態に従い操作するための細胞は、臍帯血、末梢血、ヒト胚性幹細胞、汎Ｔ細胞、またはｉＰＳＣから単離することができる。例えば、同種Ｔ細胞は、キメラ抗原受容体を含むように（そして、任意選択で、機能的なＴＣＲを欠くように）改変することができる。一部の態様では、免疫エフェクター細胞は、ヒト末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）に由来するＴ細胞などの初代ヒトＴ細胞である。ＰＢＭＣは、末梢血から回収することもでき、Ｇ−ＣＳＦ（顆粒球コロニー刺激因子）による刺激の後で、骨髄または臍帯血から回収することもできる。一部の態様では、遺伝子導入の前に、Ｔ細胞を、ＰＢＭＣから精製することができる。トランスフェクションまたは形質導入（例えば、ＣＡＲ発現構築物の）の後、細胞を、速やかに輸注することもでき、凍結保存することもできる。一部の態様では、トランスフェクションの後、細胞を、ＩＬ−２および／またはＩＬ−２１を含みうる、サイトカイン浴中で維持することができる。ある特定の態様では、トランスフェクションの後、細胞は、細胞への遺伝子導入後、約１、２、３、４、５日間またはこれを超える日数以内に、ｅｘ  ｖｉｖｏにおいて、バルク集団として、数日間、数週間、または数カ月間にわたり繁殖させることができる。さらなる態様では、トランスフェクションの後、トランスフェクト細胞を、クローニングし、組み込まれるか、またはエピソーム内に維持された、単一の発現カセットまたはプラスミドの存在、およびキメラ抗原受容体の発現を裏付けるクローンを、ｅｘ  ｖｉｖｏにおいて拡大増殖させる。拡大増殖のために選択されたクローンは、抗原を発現する標的細胞を特異的に認識し、溶解させる能力を裏付ける。組換えＴ細胞は、ＩＬ−２または共通のガンマ鎖に結合する他のサイトカイン（例えば、ＩＬ−７、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＩＬ−２１、および他のサイトカイン）を伴う刺激により拡大増殖させることができる。組換えＴ細胞は、人工抗原提示細胞を伴う刺激により拡大増殖させることができる。組換えＴ細胞は、人工抗原提示細胞に接する形で拡大増殖させることもでき、Ｔ細胞表面上のＣＤ３を架橋する、ＯＫＴ３などの抗体により拡大増殖させることもできる。組換えＴ細胞のサブセットは、磁気ビーズベースの単離法および／または蛍光活性化細胞分取技術の使用により、さらに選択することができ、ＡａＰＣと共にさらに培養することができる。さらなる態様では、遺伝子改変細胞は、凍結保存することができる。
【０１６１】
Ｔ細胞はまた、末梢血、骨髄、リンパ節組織、臍帯血、胸腺組織、感染部位に由来する組織、腹水、胸水、脾臓組織、および腫瘍（腫瘍浸潤リンパ球）を含む、多数の供給源からも得ることができる。本発明の、ある特定の実施形態では、当技術分野において入手可能な、任意の数のＴ細胞株を使用することができる。本発明の、ある特定の実施形態では、Ｔ細胞は、Ｆｉｃｏｌｌ（登録商標）分離など、当業者に公知の、任意の数の技法を使用して、対象から回収された血液単位から得ることができる。複数の実施形態では、個体の循環血液に由来する細胞は、アフェレーシスにより得る。アフェレーシス生成物は、典型的に、Ｔ細胞、単球、顆粒球、Ｂ細胞、他の有核白血球、赤血球、および血小板を含むリンパ球を含有する。一実施形態では、アフェレーシスにより回収された細胞を洗浄して、血漿画分を除去し、細胞を、その語における加工ステップのために、適切な緩衝液中または培地中に入れる。本発明の一実施形態では、細胞を、リン酸緩衝生理食塩液（ＰＢＳ）で洗浄する。代替的な実施形態では、洗浄液は、カルシウムを欠き、マグネシウムを欠く場合もあり、全てではないが、多くの二価カチオンを欠く場合もある。カルシウムの非存在下における初期活性化ステップは、活性化の強化をもたらす。当業者がたやすく理解する通り、洗浄ステップは、製造元の指示書に従い、半自動式「フロースルー」型遠心分離機（例えば、Ｃｏｂｅ  ２９９１細胞プロセッサー、Ｂａｘｔｅｒ  ＣｙｔｏＭａｔｅ、またはＨａｅｍｏｎｅｔｉｃｓ  Ｃｅｌｌ  Ｓａｖｅｒ  ５）を使用することなど、当業者に公知の方法により達することができる。洗浄の後、細胞を、例えば、Ｃａ２＋非含有ＰＢＳ、Ｍｇ２＋非含有ＰＢＳ、Ｐｌａｓｍａｌｙｔｅ  Ａ、または緩衝液を伴うかもしくは伴わない、他の生理食塩液溶液など、様々な生体適合性の緩衝液中に再懸濁させることができる。代替的に、アフェレーシス試料の、所望されない構成要素を除去し、細胞を、培養培地中に、直接再懸濁させることもできる。
【０１６２】
別の実施形態では、例えば、ＰＥＲＣＯＬＬ（登録商標）勾配を介する遠心分離、または対向流遠心溶出により、赤血球を溶解させ、単球を枯渇させることにより、Ｔ細胞を、末梢血リンパ球から単離する。ＣＤ３＋、ＣＤ２８＋、ＣＤ４＋、ＣＤ８＋、ＣＤ４５ＲＡ＋、およびＣＤ４５ＲＯ＋Ｔ細胞など、Ｔ細胞の特異的亜集団も、陽性選択法または陰性選択法により、さらに単離することができる。例えば、一実施形態では、Ｔ細胞を、ＤＹＮＡＢＥＡＤＳ（登録商標）Ｍ−４５０  ＣＤ３／ＣＤ２８  Ｔなどの、抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８（すなわち、３×２８）コンジュゲートビーズを伴う、所望のＴ細胞陽性選択に十分な時間にわたるインキュベーションにより単離する。一実施形態では、時間は、約３０分間である。さらなる実施形態では、時間は、３０分間〜３６時間、またはこれより長い時間、およびこれらの間の任意の整数値の時間の範囲である。さらなる実施形態では、時間は、少なくとも１、２、３、４、５、または６時間である。さらに別の実施形態では、時間は、１０〜２４時間である。一実施形態では、インキュベーション時間は、２４時間である。白血病を伴う患者からのＴ細胞の単離ための、２４時間など、長いインキュベーション時間の使用は、細胞収率を増大させうる。腫瘍組織または免疫障害個体から、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）を単離する状況など、Ｔ細胞が、他の細胞型と比較して少数である、任意の状況においては、より長いインキュベーション時間を使用してＴ細胞を単離することができる。さらに、長いインキュベーション時間の使用は、ＣＤ８＋  Ｔ細胞の捕捉効率も増加させうる。したがって、単に、時間を短くするかまたは長くすることにより、Ｔ細胞を、ＣＤ３／ＣＤ２８ビーズに結合させることが可能となり、かつ／またはビーズの、Ｔ細胞に対する比（本明細書で、さらに記載される通り）を増加もしくは減少させることにより、Ｔ細胞の亜集団を、培養の開始時、もしくは工程中の他の時点において、優先的に、陽性もしくは陰性に選択することができる。加えて、ビーズ上または他の表面上の、抗ＣＤ３および／または抗ＣＤ２８抗体の比を増加または減少させることにより、Ｔ細胞の亜集団を、培養の開始時、または他の所望の時点において、優先的に、陽性または陰性に選択することができる。当業者は、本発明の文脈では、複数ラウンドにわたる選択もまた、使用しうることを認識するであろう。ある特定の実施形態では、選択手順を実施し、「選択されなかった」細胞を、活性化工程および拡大増殖工程において使用することも所望でありうる。「選択されなかった」細胞はまた、さらなるラウンドにわたる選択にかけることもできる。
【０１６３】
陰性選択によるＴ細胞集団の濃縮は、陰性選択された細胞に固有の表面マーカーを指向する抗体の組合せにより達することができる。１つの方法は、陰性選択された細胞上に存在する細胞表面マーカーを指向する、モノクローナル抗体のカクテルを使用する、細胞分取および／または陰性の磁気免疫接着もしくはフローサイトメトリーを介する選択である。例えば、ＣＤ４＋細胞を、陰性選択により濃縮するために、モノクローナル抗体カクテルは、典型的に、ＣＤ１４、ＣＤ２０、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１６、ＨＬＡ−ＤＲ、およびＣＤ８に対する抗体を含む。ある特定の実施形態では、典型的に、ＣＤ４＋、ＣＤ２５＋、ＣＤ６２Ｌｈｉ、ＧＩＴＲ＋、およびＦｏｘＰ３＋を発現する調節性Ｔ細胞を、濃縮または陽性選択することが所望でありうる。代替的に、ある特定の実施形態では、調節性Ｔ細胞を、抗ＣＤ２５コンジュゲートビーズまたは他の同様の選択法により枯渇させることができる。
【０１６４】
陽性選択または陰性選択により、所望の細胞集団を単離するために、細胞の濃度および表面（例えば、ビーズなどの粒子）を変動させることができる。ある特定の実施形態では、ビーズと細胞とを、併せて混合する容量を著明に減少させて（すなわち、細胞の濃度を増加させて）、細胞とビーズとの最大の接触を確保することが所望でありうる。例えば、一実施形態では、１ｍｌ当たりの細胞２０億個の濃度を使用する。一実施形態では、１ｍｌ当たりの細胞１０億個の濃度を使用する。さらなる実施形態では、１億個細胞／ｍｌ超を使用する。さらなる実施形態では、１ｍｌ当たりの細胞１０００万、１５００万、２０００万、２５００万、３０００万、３５００万、４０００万、４５００万、または５０００万個の細胞濃度を使用する。さらに別の実施形態では、１ｍｌ当たりの細胞７５００万、８０００万、８５００万、９０００万、９５００万、または１億個の細胞濃度を使用する。さらなる実施形態では、１ｍｌ当たりの細胞１億２５００万または１億５０００万個の濃度を使用しうる。高濃度の使用は、細胞の収量、細胞の活性化、および細胞の拡大増殖の増大を結果としてもたらしうる。さらに、高細胞濃度の使用は、ＣＤ２８陰性Ｔ細胞、または多くの腫瘍細胞（すなわち、白血病性血液、腫瘍組織など）が存在する試料に由来する細胞など、目的の標的抗原の発現が低度でありうる細胞の、より効率的な捕捉を可能とする。このような細胞集団は、治療的価値を有する可能性があり、得ることが所望であろう。例えば、高細胞濃度の使用は、ＣＤ２８の発現が通常低度である、ＣＤ８＋Ｔ細胞の、より効率的な選択を可能とする。
【０１６５】
関連する実施形態では、低濃度の細胞を使用することが所望でありうる。Ｔ細胞と表面（例えば、ビーズなどの粒子）との混合物を、著明に希釈することにより、粒子と細胞との相互作用を最小化する。これは、粒子に結合する、高量の所望の抗原を発現する細胞を選択する。例えば、ＣＤ４＋Ｔ細胞は、高レベルのＣＤ２８を発現し、希釈濃度のＣＤ８＋Ｔ細胞より効率的に捕捉される。一実施形態では、使用される細胞濃度は、１ｍｌ当たりの細胞５×１０６個である。他の実施形態では、使用される濃度は、１ｍｌ当たりの細胞約１×１０５個〜１ｍｌ当たりの細胞１×１０６個、およびこれらの間の任意の整数値でありうる。
【０１６６】
他の実施形態では、細胞は、速度を変動させて、２〜１０℃または室温で、長さを変動させる時間にわたり、ロテーター上でインキュベートすることができる。
【０１６７】
刺激されるＴ細胞はまた、洗浄ステップの後で、凍結させることもできる。血漿および血小板を除去する洗浄ステップの後で、細胞を、凍結用溶液中に懸濁させることができる。当技術分野では、多くの凍結用溶液および凍結パラメータが公知であり、この文脈でも有用であろうが、１つの方法は、２０％のＤＭＳＯおよび８％のヒト血清アルブミンを含有するＰＢＳ、もしくは１０％のデキストラン４０および５％のデキストロース、２０％のヒト血清アルブミン、ならびに７．５％のＤＭＳＯを含有する培養培地、もしくは３１．２５％のＰｌａｓｍａｌｙｔｅ−Ａ、３１．２５％のデキストロース５％、０．４５％のＮａＣｌ、１０％のデキストラン４０および５％のデキストロース、２０％のヒト血清アルブミン、ならびに７．５％のＤＭＳＯ、または例えば、ＨｅｓｐａｎおよびＰｌａｓｍａｌｙｔｅ  Ａを含有する、他の適切な細胞凍結用培地の使用を伴い、次いで、細胞を、１分間当たり１℃の速度で、−８０℃へと凍結させ、液体窒素保管タンクの蒸気相中で保存する。制御型凍結の他の方法を使用しうるほか、−２０℃または液体窒素中における速やかな非制御型凍結も使用しうる。
【０１６８】
ある特定の実施形態では、凍結保存された細胞を、本明細書で記載される通りに、融解させ、洗浄し、本発明の方法を使用する活性化の前に、室温で、１時間にわたり休眠させる。
【０１６９】
本発明の文脈ではまた、本明細書で記載される、拡張細胞が必要とされうる時点より前の時期における、血液試料またはアフェレーシス生成物の、対象からの回収も想定される。したがって、拡大増殖させる細胞の供給源は、任意の必要な時点において回収することができ、Ｔ細胞など、所望の細胞を、本明細書で記載されるＴ細胞療法などのＴ細胞療法から利益を得る、任意の数の疾患または状態のためのＴ細胞療法におけるその後の使用のために、単離し、凍結させることができる。一実施形態では、血液試料またはアフェレーシスを、一般に、健常対象から採取する。ある特定の実施形態では、血液試料またはアフェレーシスを、一般に、疾患を発症する危険性があるが、疾患をいまだ発症していない健常対象から採取し、目的の細胞を、その後の使用のために単離し、凍結させる。ある特定の実施形態では、Ｔ細胞を、その後の時点において、拡大増殖させ、凍結させ、使用することができる。ある特定の実施形態では、試料を、患者から、本明細書で記載される特定の疾患についての診断の直後であるが、任意の処置の前において回収する。さらなる実施形態では、細胞を、ナタリズマブ、エファリズマブ、抗ウイルス剤、化学療法、放射線、シクロスポリン、アザチオプリン、メトトレキサート、ミコフェノール酸塩、およびＦＫ５０６などの免疫抑制剤、抗体、またはＣＡＭＰＡＴＨ、抗ＣＤ３抗体、シトキサン、フルダラビン、シクロスポリン、ＦＫ５０６、ラパマイシン、ミコフェノール酸、ステロイド、ＦＲ９０１２２８、および照射など、他の免疫除去剤などの薬剤による処置を含むがこれらに限定されない、任意の数の妥当な処置モダリティーの前に、対象に由来する血液試料またはアフェレーシスから単離する。これらの薬物は、カルシウム依存性ホスファターゼである、カルシニューリン（シクロスポリンおよびＦＫ５０６）を阻害するか、または、増殖因子誘導性シグナル伝達に重要なｐ７０Ｓ６キナーゼを阻害する（ラパマイシン）（Liu et al., Cell 66:807-815, (1991)、Henderson et al., Immun 73:316-321, (1991)、Bierer et al., Curr. Opin. Immun 5:763-773, (1993)）。さらなる実施形態では、細胞を、患者のために単離し、骨髄移植または幹細胞移植、フルダラビンなどの化学療法剤、外部ビーム放射線療法（ＸＲＴ）、シクロホスファミド、またはＯＫＴ３もしくはＣＡＭＰＡＴＨなどの抗体を使用するＴ細胞除去療法を伴う（例えば、この前に、これと同時に、またはこの後で）その後の使用のために凍結させる。別の実施形態では、細胞を、あらかじめ単離し、ＣＤ２０と反応する薬剤、例えば、ＲｉｔｕｘａｎなどのＢ細胞除去療法の後における処置のためのその後の使用のために凍結させることができる。
【０１７０】
本発明の、さらなる実施形態では、Ｔ細胞を、処置後における患者から直接得る。この点で、ある特定のがん処置、特に、免疫系を損なう薬物による処置の後であって、患者が通常、処置から回復する期間中の、処置の直後である、処置の後において、得られるＴ細胞お品質は、最適でありうるか、またはｅｘ  ｖｉｖｏにおいて拡大増殖するそれらの能力について改善されうることが観察されている。同様に、本明細書で記載される方法を使用する、ｅｘ  ｖｉｖｏにおける操作の後、これらの細胞は、生着の延長、およびｉｎ  ｖｉｖｏにおける拡大増殖に好ましい状態でありうる。したがって、本発明の文脈内では、この回復期において、Ｔ細胞、樹状細胞、または他の造血系列の細胞を含む血液細胞を回収することが想定される。さらに、ある特定の実施形態では、動員（例えば、ＧＭ−ＣＳＦによる動員）レジメンおよびコンディショニングレジメンを使用して、対象において、とりわけ、治療後における規定された時間窓において、特定の細胞型の再増殖、再循環、再生、および／またはぞうが好適となる条件を創出することができる。例示的な細胞型は、Ｔ細胞、Ｂ細胞、樹状細胞、および免疫系の他の細胞を含む。
【０１７１】
Ｔ細胞の活性化および拡大増殖
所望のＣＡＲを発現するように、Ｔ細胞の遺伝子組換え前であれ、この後であれ、Ｔ細胞は、例えば、米国特許第６，３５２，６９４号明細書、同第６，５３４，０５５号明細書、同第６，９０５，６８０号明細書、同第６，６９２，９６４号明細書、同第５，８５８，３５８号明細書、同第６，８８７，４６６号明細書、同第６，９０５，６８１号明細書、同第７，１４４，５７５号明細書、同第７，０６７，３１８号明細書、同第７，１７２，８６９号明細書、同第７，２３２，５６６号明細書、同第７，１７５，８４３号明細書、同第５，８８３，２２３号明細書、同第６，９０５，８７４号明細書、同第６，７９７，５１４号明細書、同第６，８６７，０４１号明細書、および米国特許出願公開第２００６０１２１００５号明細書において記載されている方法を一般に使用して、活性化させ、拡大増殖させることができる。
【０１７２】
一般に、本明細書のＴ細胞は、ＣＤ３／ＴＣＲ複合体関連シグナルを刺激する薬剤、およびＴ細胞表面上の共刺激分子を刺激するリガンドをそれへと接合させた表面との接触により拡大増殖する。特に、Ｔ細胞集団は、本明細書で記載される通り、表面上に固定化させた、抗ＣＤ３抗体、もしくはこの抗原結合性断片、または抗ＣＤ２抗体との接触、あるいはカルシウムイオノフォアを伴う、タンパク質キナーゼＣ活性化因子（例えば、ブリオスタチン）との接触などにより刺激することができる。Ｔ細胞表面上のアクセサリー分子を共刺激するために、アクセサリー分子に結合するリガンドを使用する。例えば、Ｔ細胞の集団は、Ｔ細胞の増殖を刺激するために適切な条件下で、抗ＣＤ３抗体および抗ＣＤ２８抗体と接触させることができる。ＣＤ４＋Ｔ細胞またはＣＤ８＋Ｔ細胞の増殖を刺激するには、抗ＣＤ３抗体および抗ＣＤ２８抗体と接触させることができる。抗ＣＤ２８抗体の例は、９．３、Ｂ−Ｔ３、ＸＲ−ＣＤ２８（Ｄｉａｃｌｏｎｅ、Ｂｅｓａｎｃｏｎ、Ｆｒａｎｃｅ）を含み、当技術分野で一般に公知の他の方法と同様に使用することができる（Berg et al., Transplant Proc. 30(8):3975-3977, (1998)、Haanen et al., J. Exp. Med. 190(9):13191328, (1999)、Garland et al., J. Immunol Meth. 227(1-2):53-63, (1999)）。
【０１７３】
ある特定の実施形態では、Ｔ細胞のための一次刺激シグナルおよび共刺激シグナルは、異なるプロトコールによりもたらされる。例えば、各シグナルをもたらす薬剤は、溶液中とする場合もあり、表面へとカップリングさせる場合もある。表面へとカップリングさせる場合、薬剤は、同じ表面へとカップリングさせることもでき（すなわち、「シス」構成）、別個の表面へとカップリングさせることもできる（すなわち、「トランス」構成）。代替的に、１つの薬剤を、表面へとカップリングさせ、他の薬剤を、溶液中とすることもできる。一実施形態では、共刺激シグナルをもたらす薬剤を、細胞表面に結合させ、一次活性化シグナルをもたらす薬剤を、溶液とするか、または表面へとカップリングさせる。ある特定の実施形態では、いずれの薬剤も、溶液中とする。別の実施形態では、薬剤は、可溶性形態であることが可能であり、次いで、Ｆｃ受容体もしくは抗体、または薬剤に結合する他の結合剤を発現する細胞などの表面へと架橋される。この点で、本発明における、Ｔ細胞の活性化および拡大増殖における使用のために想定される人工抗原提示細胞（ａＡＰＣ）については、例えば、米国特許出願公開第２００４０１０１５１９号明細書および同２００６００３４８１０号明細書を参照されたい。
【０１７４】
一実施形態では、２つの薬剤を、同じビーズ上に、すなわち、「シス」であるか、または別個のビーズへと、すなわち、「トランス」である、ビーズ上に固定化させる。例を目的として述べると、一次活性化シグナルをもたらす薬剤は、抗ＣＤ３抗体またはこの抗原結合性断片であり、共刺激シグナルをもたらす薬剤は、抗ＣＤ２８抗体またはこの抗原結合性断片であり、両方の薬剤を、等分子量で、同じビーズへと、共固定化させる。一実施形態では、ＣＤ４＋Ｔ細胞の拡大増殖およびＴ細胞の増殖のために、ビーズへと結合させた各抗体の、１：１の比を使用する。本発明のある特定の態様では、ビーズへと結合させた抗ＣＤ３：ＣＤ２８抗体の比を、１：１の比を使用して観察される拡大増殖と比較した、Ｔ細胞の拡大増殖の増大が観察されるように使用する。特定の一実施形態では、１：１の比を使用して観察される拡大増殖と比較した、約１〜約３倍の増大が観察される。一実施形態では、ビーズへと結合させたＣＤ３：ＣＤ２８抗体の比は、１００：１〜１：１００、およびこれらの間の全ての整数値の範囲である。本発明の一態様では、抗ＣＤ３抗体より多くの抗ＣＤ２８抗体を、粒子へと結合させる、すなわち、ＣＤ３：ＣＤ２８の比は、１未満である。本発明のある特定の実施形態では、抗ＣＤ２８抗体の、ビーズへと結合させた抗ＣＤ３に対する比は、２：１を超える。特定の一実施形態では、ビーズへと結合させたＣＤ３：ＣＤ２８の、１：１００の比を使用する。別の実施形態では、ビーズへと結合させたＣＤ３：ＣＤ２８の、１：７５の比を使用する。さらなる実施形態では、ビーズへと結合させたＣＤ３：ＣＤ２８の、１：５０の比を使用する。別の実施形態では、ビーズへと結合させたＣＤ３：ＣＤ２８の、１：３０の比を使用する。複数の実施形態では、ビーズへと結合させたＣＤ３：ＣＤ２８の、１：１０の比を使用する。別の実施形態では、ビーズへと結合させたＣＤ３：ＣＤ２８の、１：３の比を使用する。さらに別の実施形態では、ビーズへと結合させたＣＤ３：ＣＤ２８の、３：１の比を使用する。
【０１７５】
１：５００〜５００：１、およびこれらの間の任意の整数値である、粒子の、細胞に対する比を使用して、Ｔ細胞または他の標的細胞を刺激することができる。当業者がたやすく理解しうる通り、粒子の、細胞に対する比は、標的細胞と比べた粒子サイズに依存しうる。例えば、小型サイズのビーズが、少数の細胞だけに結合しうるのに対し、大型のビーズは、多くの細胞に結合しうるであろう。ある特定の実施形態では、細胞の、粒子に対する比は、１：１００〜１００：１、およびこれらの間の任意の整数値の範囲であり、さらなる実施形態では、比は、１：９〜９：１、およびこれらの間の任意の整数値を含み、これらもまた、Ｔ細胞を刺激するのに使用しうる。抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８カップリング粒子の、Ｔ細胞に対する比であって、Ｔ細胞の刺激を結果としてもたらす比は、上記で言及した通り、変動しうるが、ある特定の値は、１：１００、１：５０、１：４０、１：３０、１：２０、１：１０、１：９、１：８、１：７、１：６、１：５、１：４、１：３、１：２、１：１、２：１、３：１、４：１、５：１、６：１、７：１、８：１、９：１、１０：１、および１５：１を含み、１つの比は、少なくとも１：１のＴ細胞あたりの粒子の比である。一実施形態では、１：１またはこれ未満の、粒子の、細胞に対する比を使用する。特定の一実施形態では、粒子：細胞比は、１：５である。さらなる実施形態では、粒子の、細胞に対する比は、刺激日に応じて変動しうる。例えば、一実施形態では、粒子の、細胞に対する比は、１日目には、１：１〜１０：１であり、さらなる粒子を、細胞へと、その後、最長１０日間にわたり、毎日または隔日で追加し、最終的な比を１：１〜１：１０とする（追加日における細胞カウントに基づく）。特定の一実施形態では、粒子の、細胞に対する比は、第１の刺激日には、１：１であり、第３の刺激日および第５の刺激日には、１：５へと調整される。別の実施形態では、粒子を、１日目における、１：１の最終比、ならびに第３の刺激日および第５の刺激日における１：５へと、毎日または隔日で追加する。別の実施形態では、粒子の、細胞に対する比は、第１の刺激日には、２：１であり、第３の刺激日および第５の刺激日には、１：１０へと調整される。別の実施形態では、粒子を、１日目における、１：１の最終比、ならびに第３の刺激日および第５の刺激日における１：１０へと、毎日または隔日で追加する。当業者は、様々な他の比も、本発明における使用に適しうることを理解するであろう。特に、比は、粒子のサイズ、ならびに細胞のサイズおよび種類に応じて変動するであろう。
【０１７６】
本明細書のさらなる実施形態では、Ｔ細胞などの細胞を、薬剤コーティングビーズと組み合わせ、その後、ビーズと細胞とを分離し、次いで、細胞を培養する。代替的な実施形態では、培養の前に、薬剤コーティングビーズと、細胞とを分離せず、併せて培養する。さらなる実施形態では、ビーズおよび細胞を、まず、磁力などの力を適用することにより濃縮する結果として、細胞表面マーカーのライゲーションの増加をもたらし、これにより、細胞の刺激を誘導する
【０１７７】
例を目的として述べると、抗ＣＤ３および抗ＣＤ２８を接合させた常磁性ビーズ（３×２８ビーズ）を、Ｔ細胞に接触させることにより、細胞表面タンパク質をライゲーションさせることができる。一実施形態では、細胞（例えば、Ｔ細胞１０４〜１０９個）と、ビーズ（例えば、比を１：１とする、ＤＹＮＡＢＥＡＤＳ（登録商標）Ｍ−４５０  ＣＤ３／ＣＤ２８  Ｔ常磁性ビーズ、またはＭｉｌｔｅｎｙｉ  Ｂｉｏｔｅｃ製のＭＡＣＳ（登録商標）ＭｉｃｒｏＢｅａｄｓ）とを、緩衝液中、例えば、ＰＢＳ（カルシウムおよびマグネシウムなどの二価カチオンを伴わない）中で組み合わせる。ここでもまた、当業者は、任意の細胞濃度を使用しうることをたやすく理解することができる。例えば、標的細胞は、試料中で極めて稀であり、試料のうちの０．０１％だけを含む場合もあり、全試料（すなわち、１００％）が、目的の標的細胞を含む場合もある。したがって、任意の細胞数が、本発明の文脈内にある。ある特定の実施形態では、粒子と細胞とを、併せて混合する容量を著明に減少させて（すなわち、細胞の濃度を増大させて）、細胞と粒子との最大の接触を確保することが所望でありうる。例えば、一実施形態では、約１ｍｌ当たりの細胞２０億個の濃度を使用する。別の実施形態では、１億個細胞／ｍｌ超を使用する。さらなる実施形態では、１ｍｌ当たりの細胞１０００万、１５００万、２０００万、２５００万、３０００万、３５００万、４０００万、４５００万、または５０００万個の細胞濃度を使用する。さらに別の実施形態では、１ｍｌ当たりの細胞７５００万、８０００万、８５００万、９０００万、９５００万、または１億個の細胞濃度を使用する。さらなる実施形態では、１ｍｌ当たりの細胞１億２５００万または１億５０００万個の濃度を使用しうる。高濃度の使用は、細胞の収量、細胞の活性化、および細胞の拡大増殖の増大を結果としてもたらしうる。さらに、高細胞濃度の使用は、ＣＤ２８陰性Ｔ細胞など、目的の標的抗原の発現が低度でありうる細胞の、より効率的な捕捉を可能とする。ある特定の実施形態では、このような細胞集団は、治療的価値を有する可能性があり、得ることが所望であろう。例えば、高細胞濃度の使用は、ＣＤ２８の発現が通常低度である、ＣＤ８＋Ｔ細胞の、より効率的な選択を可能とする。
【０１７８】
本明細書の一実施形態では、混合物を、数時間（約３時間）〜約１４日間またはこれらの間の任意の整数値時間にわたり培養することができる。別の実施形態では、混合物を、２１日間にわたり培養することができる。本発明の一実施形態では、ビーズおよびＴ細胞を、併せて、約８日間にわたり培養する。別の実施形態では、ビーズおよびＴ細胞を、併せて、２〜３日間にわたり培養する。Ｔ細胞の培養期間が、６０日間またはこれを超えるように、数サイクルにわたる刺激もまた、所望でありうる。Ｔ細胞の培養に適切な条件は、増殖および生存に必要な因子であって、血清（例えば、ウシ胎仔血清またはヒト血清）、インターロイキン２（ＩＬ−２）、インスリン、ＩＦＮ−ガンマ、ＩＬ−４、ＩＬ−７、ＧＭ−ＣＳＦ、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２、ＩＬ−１５、ＴＧＦβ、およびＴＮＦ−アルファ、または当業者に公知である、細胞の増殖のための、他の任意の添加剤を含む因子を含有しうる、適切な培地（例えば、最小必須培地またはＲＰＭＩ培地１６４０、またはＸ−ｖｉｖｏ  １５（Ｌｏｎｚａ））を含む。細胞の増殖のための、他の添加剤は、界面活性剤、プラズマネート、およびＮ−アセチルシステインおよび２−メルカプトエタノールなどの還元剤を含むがこれらに限定されない。培地は、ＲＰＭＩ  １６４０、ＡＩＭ−Ｖ、ＤＭＥＭ、ＭＥＭ、アルファ−ＭＥＭ、Ｆ−１２、Ｘ−Ｖｉｖｏ  １５およびＸ−Ｖｉｖｏ  ２０、Ｏｐｔｉｍｉｚｅｒ、アミノ酸の添加、ピルビン酸ナトリウム、ならびにビタミン、無血清もしくは適量の血清（または血漿）の補充、または規定されたセットのホルモン、ならびに／あるいはＴ細胞の増殖および拡大増殖に十分な量のサイトカインを含みうる。抗生剤、例えば、ペニシリンおよびストレプトマイシンは、実験培養物に限り組み入れ、対象へと輸注される細胞培養物には組み入れない。標的細胞は、増殖を支援するのに必要な条件、例えば、適切な温度（例えば、３７℃）および雰囲気（例えば、空気＋５％のＣＯ２）下で維持する。
【０１７９】
変動させる刺激時間へと曝露されたＴ細胞は、異なる特徴を呈しうる。例えば、典型的な血液生成物またはアファレーシスされた末梢血単核細胞生成物は、細胞傷害性Ｔ細胞集団またはサプレッサーＴ細胞集団（ＴＣ、ＣＤ８＋）より多くのヘルパーＴ細胞集団（ＴＨ、ＣＤ４＋）を有する。ＣＤ３受容体およびＣＤ２８受容体を刺激することによる、ｅｘ  ｖｉｖｏにおけるＴ細胞の拡大増殖は、約８〜９日目の前には、主にＴＨ細胞からなるが、約８〜９日目の後では、ますます多くのＴＣ細胞の集団を含むＴ細胞の集団をもたらす。したがって、処置の目的に応じて、対象に、主にＴＨ細胞を含むＴ細胞集団を輸注することも、有利でありうる。同様に、ＴＣ細胞の抗原特異的サブセットを単離した場合、このサブセットを、より大きな程度で拡大増殖させることが有益でありうる。
【０１８０】
さらに、ＣＤ４マーカーおよびＣＤ８マーカーに加えて、他の表現型マーカーも、著明に変動するが、大部分は、細胞拡大増殖工程の経過中において、再現可能な形で変動する。したがって、このような再現性は、特殊な目的のためのＴ細胞生成物の活性化を調整する能力を可能とする。
【０１８１】
場合によって、実施形態の免疫エフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞）を、ＡａＰＣ  （ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ  ａｎｄ  ｐｒｏｐａｇａｔｉｎｇ  ｃｅｌｌ）と共に共培養して、細胞の拡大増殖を支援する。ＡａＰＣはまた、人工抗原提示細胞（ａＡＰＣ）と称することもできる。例えば、抗原提示細胞（ＡＰＣ）は、実施形態の治療用組成物および細胞療法用生成物の調製において有用である。一態様では、ＡａＰＣは、トランスジェニックＫ５６２細胞でありうる。抗原提示系の調製および使用に関する、一般的な指針については、例えば、それらの各々が参照により組み込まれる、米国特許第６，２２５，０４２号明細書、同第６，３５５，４７９号明細書、同第６，３６２，００１号明細書、および同第６，７９０，６６２号明細書、米国特許出願公開第２００９／００１７０００号明細書および同第２００９／０００４１４２号明細書、ならびに国際公開第２００７／１０３００９号パンフレットを参照されたい。実施形態についてのなおさらなる態様では、トランスジェニックＣＡＲ細胞の培養は、ＣＡＲを発現する免疫エフェクター細胞の拡大増殖を刺激する、樹状細胞またはＡａＰＣ  （ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ  ａｎｄ  ｐｒｏｐａｇａｔｉｎｇ  ｃｅｌｌ）の存在下で、トランスジェニックＣＡＲ細胞を培養することを含む。なおさらなる態様では、ＡａＰＣは、ＡａＰＣの表面上で発現したＣＡＲ結合性抗体またはこの断片を含む。ＡａＰＣは、場合によって、Ｔ細胞を活性化させるかまたは共刺激する、さらなる分子を含みうる。さらなる分子は、場合によって、膜結合型Ｃγサイトカインを含みうる。なおまださらなる態様では、ＡａＰＣは、不活化させているかもしくは照射されているか、または感染性物質について調べられ、これを含まないことが確認されている。なおさらなる態様では、ＡａＰＣの存在下におけるトランスジェニックＣＡＲ細胞の培養は、ＩＬ−１５、ＩＬ−２１、および／またはＩＬ−２などの可溶性サイトカインを含む培地中で、トランスジェニックＣＡＲ細胞を培養することを含む。細胞を、約１０：１〜約１：１０、約３：１〜約１：５、約１：１〜約１：３（免疫エフェクター細胞対ＡａＰＣ）、またはこの中で導出可能な任意の範囲の比で培養することができる。例えば、Ｔ細胞およびＡａＰＣの共培養は、約１：１、約１：２または約１：３の比でありうる。
【０１８２】
一態様では、ＡａＰＣは、ＣＤ１３７Ｌを発現しうる。他の態様では、ＡａＰＣは、ＣＤ１９、ＣＤ６４、ＣＤ８６、またはｍｂＩＬ−１５をさらに発現しうる。ある特定の態様では、ＡａＰＣは、例えば、ＯＫＴ３および／またはＵＣＨＴ１など、少なくとも１つの抗ＣＤ３抗体クローンを発現しうる。一態様では、ＡａＰＣは、不活化させる（例えば、照射する）ことができる。一態様では、ＡａＰＣは、感染性物質について調べられ、これを含まないことが確認されている場合がある。当技術分野では、このようなＡａＰＣを作製するための方法が公知である。一態様では、ＡａＰＣを伴うＣＡＲ改変Ｔ細胞集団の培養は、細胞を、約１０：１〜約１：１０、約３：１〜約１：５、約１：１〜約１：３（Ｔ細胞対ＡａＰＣ）、またはこの中で導出可能な任意の範囲の比で培養することを含みうる。例えば、Ｔ細胞およびＡａＰＣの共培養は、約１：１、約１：２または約１：３の比でありうる。一態様では、培養するステップは、アミノビスホスホネート（例えば、ゾレドロン酸）と共に培養することをさらに含みうる。
【０１８３】
さらなる態様では、ＣＡＲ−Ｔ細胞の集団を、７、１４、２１、２８、３５ ４２日間、４９、５６、６３、または７０日間を超えない日数にわたり培養および／または刺激する。一部の実施形態では、ＣＡＲ−Ｔ細胞の集団を、少なくとも０、２、４、６、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２２、２４、２６、２８、３０日間、またはこれを超える期間にわたり培養および／または刺激する。一部の実施形態では、ＣＡＲ−Ｔ細胞の集団を、少なくとも５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０日間、またはこれを超える期間にわたり培養および／または刺激する。一部の実施形態では、ＣＡＲ−Ｔ細胞の集団を、少なくとも７、１４、２１、２８、３５、４２、４９、５６、６３日間、またはこれを超える期間にわたり培養および／または刺激する。他の実施形態では、刺激は、ＣＡＲ−Ｔ細胞の、ＡａＰＣとの共培養であって、ＣＡＲ陽性Ｔ細胞の増殖を促進する共培養を含む。別の態様では、トランスジェニックＣＡＲ細胞の集団を、刺激１回、刺激２回、刺激３回、刺激４回、刺激５回、刺激５回、刺激６回、刺激７回、刺激８回、刺激９回、または刺激１０回を超えない回数にわたり刺激する。場合によって、トランスジェニック細胞を、ＡａＰＣの存在下にあるｅｘ  ｖｉｖｏでは培養しない。一部の特殊な場合には、実施形態の方法は、トランスフェクションステップおよび／または培養するステップの後で、細胞集団を、ＣＡＲを発現する免疫エフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞）について濃縮するステップをさらに含む。濃縮するステップは、蛍光活性化細胞分取（ＦＡＣＳ）と、ＣＡＲを発現する細胞について分取することとを含みうる。さらなる態様では、ＣＡＲを発現する細胞について分取することは、ＣＡＲ結合性抗体の使用を含む。濃縮するステップはまた、ＣＤ５６＋細胞の枯渇も含みうる。実施形態についての、なおまださらなる態様では、方法は、トランスジェニックＣＡＲ細胞の集団についての凍結保存試料をさらに含む。
【０１８４】
場合によって、ＡａＰＣを、さらなるプロセシングを伴わずに、ペプチドの、ＭＨＣ分子との直接的な結合を可能とする、最適な長さのペプチドと共にインキュベートする。代替的に、細胞は、目的の抗原（すなわち、ＭＨＣ非依存型の抗原認識の場合）を発現しうる。さらに、場合によって、ＡＰＣは、特異的なＣＡＲポリペプチドまたは一般的なＣＡＲポリペプチド（例えば、ｕＡａＰＣ（ｕｎｉｖｅｒｓａｌ  ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ  ａｎｄ  ｐｒｏｐａｇａｔｉｎｇ  ｃｅｌｌ）に結合する抗体を発現しうる。このような方法については、参照により本明細書に組み込まれる、国際公開第２０１４／１９０２７３号パンフレットにおいて開示されている。ペプチド−ＭＨＣ分子または目的の抗原に加えて、ＡａＰＣ系はまた、少なくとも１つの外因性支援分子も含みうる。任意の適切な数および組合せの支援分子を利用することができる。支援分子は、共刺激分子および接着分子などの支援分子から選択することができる。例示的な共刺激分子は、ＣＤ７０およびＢ７．１（Ｂ７．１は、かつては、Ｂ７として公知であり、また、ＣＤ８０としても公知であった）を含み、これらは、とりわけ、Ｔ細胞の表面上のＣＤ２８分子および／またはＣＴＬＡ−４分子に結合し、これにより、例えば、Ｔ細胞の拡大増殖、Ｔｈ１の分化、短期的なＴ細胞の生存、およびインターロイキン（ＩＬ）２など、サイトカインの分泌に影響を及ぼす。接着分子は、セレクチンなどの炭水化物結合性糖タンパク質、インテグリンなどの膜貫通結合生糖タンパク質、カドヘリンなどのカルシウム依存性タンパク質、および例えば、細胞間または細胞−マトリックス間の接触を促進する、細胞間接着分子（ＩＣＡＭ）などの、１回膜貫通免疫グロブリン（Ｉｇ）スーパーファミリータンパク質を含みうる。例示的な接着分子は、ＬＦＡ−３およびＩＣＡＭ−１などのＩＣＡＭ、を含む。共刺激分子および接着分子を含む、例示的な支援分子の選択、クローニング、調製、および発現に有用な技法、方法、および試薬については、例えば、参照により本明細書に組み込まれる、米国特許第６，２２５，０４２号明細書、同第６，３５５，４７９号明細書、および同第６，３６２，００１号明細書において例示されている。
【０１８５】
ＡａＰＣとなるように選択される細胞は、好ましくは、細胞内抗原プロセシング、細胞内ペプチドトラフィッキング、および／またはＭＨＣクラスＩ分子もしくはクラスＩＩ分子の細胞内ペプチドローディングを欠損させているか、あるいは。変温性（すなわち、哺乳動物細胞株より、温度刺激に対する感受性が小さい）であるか、あるいは欠損および変温特性の両方を有する。好ましくは、ＡａＰＣとなるように選択される細胞はまた、細胞へと導入される、外因性のＭＨＣクラスＩ分子またはクラスＩＩ分子、および支援分子の構成要素に対する、少なくとも１つの内因性対応物（例えば、内因性のＭＨＣクラスＩ分子もしくはクラスＩＩ分子、および／または上記で記載した内因性支援分子）を発現する能力も欠く。さらに、ＡａＰＣは、ＡａＰＣを作出するための、それらの改変の前に、細胞が保有していた欠損および変温特性を保持することが好ましい。例示的なＡａＰＣは、昆虫細胞株など、ＴＡＰ（ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ  ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  ａｎｔｉｇｅｎ  ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ）欠損細胞株を構成するか、またはこれに由来する。例示的な変温性昆虫細胞株は、Ｓｃｈｎｅｉｄｅｒ  ２細胞株などのショウジョウバエ（Drosophila）属細胞株（例えば、Schneider 1972を参照されたい）である。Ｓｃｈｎｅｉｄｅｒ  ２細胞の調製、増殖、および培養のための例示的な方法は、米国特許第６，２２５，０４２号明細書、同第６，３５５，４７９号明細書、および同第６，３６２，００１号明細書において提示されている。
【０１８６】
一実施形態ではまた、ＡａＰＣを、凍結融解サイクルにもかける。例示的な凍結融解サイクルでは、凍結が、迅速に生じるように、ＡａＰＣを含有する、適切なレセプタクルを、適量の液体窒素、固体二酸化炭素（すなわち、ドライアイス）、または同様の低温材料と接触させることにより、ＡａＰＣを凍結させることができる。次いで、凍結させたＡＰＣを、ＡａＰＣの、低温材料からの摘出、および周囲の室温条件への曝露により、または微温水浴もしくは手の温熱を利用して、融解時間の短縮を促進する、促進融解工程により融解させる。加えて、融解の前に、ＡａＰＣを、凍結させ、長ｆ時間にわたり保存することができる。凍結させたＡａＰＣはまた、融解させ、次いで、さらなる使用の前に、凍結乾燥させることもできる。好ましくは、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、および他の保存剤など、凍結融解手順に有害な影響を及ぼしうる保存剤は、凍結融解サイクルを経るＡａＰＣを含有する培地には非含有とするか、またはこのような保存剤を本質的に欠く培地へのＡａＰＣの導入などにより、本質的に除去する。
【０１８７】
さらなる実施形態では、不活化の後で、細胞の増殖、複製、または核酸の発現が本質的に生じないように、異種核酸およびＡａＰＣに内因性の核酸を、架橋により不活化させることができる。一実施形態では、ＡａＰＣを、外因性ＭＨＣおよび支援分子の発現、このような分子の、ＡａＰＣ表面上の提示、ならびに提示されたＭＨＣ分子への、選択された、１または複数のペプチドのローディングの後の時点において不活化させる。したがって、このような、選択されたペプチドをロードした不活化ＡａＰＣは、増殖または複製が本質的に不可能とされているが、選択されたペプチドの提示機能は保持する。好ましくは、架橋はまた、ＡａＰＣの抗原提示細胞機能を、実質的に低下させずに、細菌およびウイルスなどの汚染微生物を本質的に含まない、ＡａＰＣももたらす。したがって、架橋は、ＡａＰＣを使用して開発される細胞療法製品の安全性に関する懸念を軽減する一助となる一方、重要なＡａＰＣ機能を維持する。架橋およびＡａＰＣに関する方法については、例えば、参照により本明細書に組み込まれる、米国特許出願公開第２００９００１７０００号明細書を参照されたい。
【０１８８】
ある特定の実施形態では、操作抗原提示細胞（ＡＰＣ）がさらに提供される。ｅｘ  ｖｉｖｏにおいて、免疫エフェクター細胞を繁殖させるのに、このような細胞を、例えば、上記で記載した通りに使用することができる。さらなる態様では、操作ＡＰＣ自体を、患者へと投与し、これにより、ｉｎ  ｖｉｖｏにおける免疫エフェクター細胞の拡大増殖を刺激することができる。実施形態の操作ＡＰＣ自体を、治療剤として使用することができる。他の実施形態では、操作ＡＰＣを、標的抗原に特異的な内因性免疫エフェクター細胞の活性化を刺激し、かつ／または標的抗原に特異的な、養子導入された免疫エフェクター細胞の活性を増加させるか、もしくは存続を延長しうる治療剤として使用することができる。
【０１８９】
本明細書で使用される「操作ＡＰＣ」という用語は、少なくとも第１のトランス遺伝子を含み、第１のトランス遺伝子が、ＨＬＡをコードする細胞を指す。このような操作ＡＰＣは、抗原が、ＨＬＡと複合したＡＰＣの表面上に提示されるように、抗原の発現のための第２のトランス遺伝子をさらに含みうる。一部の態様では、操作ＡＰＣは、抗原を提示した細胞型（例えば、樹状細胞）でありうる。さらなる態様では、操作ＡＰＣは、Ｔ細胞またはＴ細胞の前駆細胞など、通常、抗原を提示しない細胞型（「Ｔ−ＡＰＣ」と称する）から作製することができる。したがって、一部の態様では、実施形態の操作ＡＰＣは、ＨＬＡが、標的抗原のエピトープと複合した操作ＡＰＣの表面上で発現するように、標的抗原をコードする第１のトランス遺伝子と、ヒト白血球抗原（ＨＬＡ）をコードする第２のトランス遺伝子とを含む。ある特定の具体的な態様では、操作ＡＰＣ内で発現するＨＬＡは、ＨＬＡ−Ａ２である。
【０１９０】
一部の態様では、実施形態の操作ＡＰＣは、共刺激分子をコードする、少なくとも第３のトランス遺伝子をさらに含みうる。共刺激分子は、膜結合型Ｃγサイトカインでありうる、共刺激サイトカインでありうる。ある特定の態様では、共刺激サイトカインは、膜結合型ＩＬ−１５などのＩＬ−１５である。一部のさらなる態様では、操作ＡＰＣは、編集（または欠失）遺伝子を含みうる。例えば、ＰＤ−１、ＬＩＭ−３、ＣＴＬＡ−４、またはＴＣＲなどの阻害性遺伝子は、遺伝子の発現を低減するかまたは消失させるように編集することができる。実施形態の操作ＡＰＣは、任意の目的の標的抗原をコードするトランス遺伝子をさらに含みうる。例えば、標的抗原は、感染性疾患抗原または腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）でありうる。
【０１９１】
本発明の一実施形態では、本明細書で記載されるＴ細胞を、ポイントオブケア施設において改変する。場合によって、ポイントオブケア施設は、対象の近傍の病院または機関（例えば、医療機関）にある。場合によって、Ｔ細胞を、キメラ受容体を、Ｔ細胞へと操作／導入することにより改変し、次いで、対象へと、迅速に輸注する。場合によって、改変Ｔ細胞は、繁殖ステップおよび活性化ステップを経ない。場合によって、改変Ｔ細胞は、インキュベーションステップを経ない。他の場合には、キメラ受容体およびサイトカインを、Ｔ細胞へと操作／導入することにより、Ｔ細胞を改変し、次いで、対象へと、迅速に輸注する。ある場合には、サイトカインは、ｍｂＩＬ−１５でありうる。
【０１９２】
医薬組成物および剤形
一部の実施形態では、本明細書では、対象における投与のための、改変エフェクター細胞組成物が開示される。一部の場合には、改変エフェクター細胞組成物は、ステロイドと、任意選択で、サイトカインおよび／またはさらなる治療剤とをさらに含む。一部の場合には、本明細書にはまた、エフェクター細胞を改変するための、キメラ抗原受容体をコードするベクターも含まれる。
【０１９３】
一部の場合には、改変エフェクター細胞またはキメラ抗原受容体をコードするベクターによる医薬組成物を、活性化合物の、薬学的に使用されうる調製物への加工を容易とする、賦形剤および補助剤を含む、１または複数の生理学的に許容される担体を使用する、常套的な形で製剤化する。適正な製剤は、選択される投与経路に依存する。本明細書で記載される医薬組成物の概要については、例えば、Remington: The Science and Practice ofPharmacy, Nineteenth Ed (Easton, Pa.: Mack Publishing Company, 1995); Hoover, John E., Remington’s Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co., Easton, Pennsylvania 1975; Liberman, H.A. and Lachman, L., Eds., Pharmaceutical Dosage Forms, Marcel Decker, New York, N.Y., 1980; and Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, Seventh Ed. (Lippincott Williams & Wilkins 1999)において見出される。
【０１９４】
医薬組成物は、任意選択で、例だけを目的として述べると、常套的な、混合工程、溶解工程、顆粒化工程、糖衣錠作製工程、微粒化工程、乳化工程、カプセル化工程、封入工程、または圧縮工程などによる、常套的な形で製造される。
【０１９５】
ある特定の実施形態では、組成物はまた、酢酸、ホウ酸、クエン酸、乳酸、リン酸、および塩酸などの酸；水酸化ナトリウム、リン酸ナトリウム、ホウ酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、乳酸ナトリウム、およびトリス−ヒドロキシメチルアミノメタンなどの塩基を含む、１または複数のｐＨ調整剤または緩衝剤；ならびにクエン酸塩／デキストロース、炭酸水素ナトリウム、および塩化アンモニウムなどの緩衝液も含みうる。このような酸、塩基、および緩衝剤は、組成物のｐＨを、許容可能な範囲で維持するのに必要とされる量で組み入れられる。
【０１９６】
他の実施形態では、組成物はまた、組成物のオスモル濃度を、許容可能な範囲に収めるのに必要とされる量の、１または複数の塩も含みうる。このような塩は、ナトリウムカチオン、カリウムカチオン、またはアンモニウムカチオンと、塩化物アニオン、クエン酸アニオン、アスコルビン酸アニオン、ホウ酸アニオン、リン酸アニオン、重炭酸アニオン、硫酸アニオン、チオ硫酸アニオン、または亜硫酸水素アニオンとを有する塩を含み、適切な塩は、塩化ナトリウム塩、塩化カリウム塩、チオ硫酸ナトリウム塩、亜硫酸水素ナトリウム塩、および硫酸アンモニウム塩を含む。
【０１９７】
本明細書で記載される医薬組成物は、経口投与経路、非経口（例えば、静脈内、皮下、筋内、脳内、脳室内、関節内、腹腔内、または頭蓋内）投与経路、鼻腔内投与経路、口腔内投与経路、舌下投与経路、または直腸内投与経路を含むがこれらに限定されない、任意の適切な投与経路により投与される。一部の場合には、医薬組成物を、非経口（例えば、静脈内、皮下、筋内、脳内、脳室内、関節内、腹腔内、または頭蓋内）投与のために製剤化する。
【０１９８】
本明細書で記載される医薬組成物を、処置される個体による経口の服用のための、水性経口分散液、液体、ゲル、シロップ、エリキシル、スラリー、懸濁液など、固体経口剤形、エアゾール剤、制御放出製剤、即時融解製剤、発泡製剤、凍結乾燥製剤、錠剤、粉剤、丸剤、糖衣錠剤、カプセル剤、遅延放出製剤、持続放出製剤、パルス放出製剤、多粒子製剤、即時放出製剤と制御放出製剤との混合剤を含むがこれらに限定されない、任意の適切な剤形へと製剤化する。一部の実施形態では、医薬組成物を、カプセル剤へと製剤化する。一部の実施形態では、医薬組成物を、溶液（例えば、静脈内投与のための）へと製剤化する。場合によって、医薬組成物を、輸注液として製剤化する。場合によって、医薬組成物を、注射液として製剤化する。
【０１９９】
本明細書で記載される、固体の医薬の剤形は、任意選択で、本明細書で記載される化合物と、適合性の担体、結合剤、充填剤、懸濁剤、香味剤、甘味剤、崩壊剤、分散剤、界面活性剤、滑沢剤、着色剤、希釈剤、可溶化剤、湿潤剤、可塑化剤、安定化剤、浸透増強剤、保湿剤、消泡剤、抗酸化剤、防腐剤、または１もしくは複数のこれらの組合せなど、１または複数の薬学的に許容される添加剤とを含む。
【０２００】
さらなる他の態様では、Remington's Pharmaceutical Sciences, 20th Edition (2000)において記載されている手順など、標準的なコーティング手順を使用して、組成物の周囲に、薄膜コーティングを施す。一部の実施形態では、組成物を、粒子（例えば、カプセルによる投与のための）へと製剤化し、粒子の一部または全部をコーティングする。一部の実施形態では、組成物を、粒子（例えば、カプセルによる投与のための）へと製剤化し、粒子の一部または全部をマイクロカプセル化する。一部の実施形態では、組成物を、粒子（例えば、カプセルによる投与のための）へと製剤化し、粒子の一部または全部をマイクロカプセル化せず、アンコーティングする。
【０２０１】
ある特定の実施形態では、本明細書で提示される組成物はまた、微生物活性を阻害する、１または複数の保存剤も含みうる。適切な保存剤は、メルフェンおよびチオメルサールなどの水銀含有物質；安定化二酸化塩素；ならびに塩化ベンザルコニウム、臭化セチルトリメチルアンモニウム、および塩化セチルピリジニウムなどの四級アンモニウム化合物を含む。
【０２０２】
「消泡剤」は、加工時における発泡であって、水性分散液の凝固、薄膜完成品中の気泡を結果としてもたらすか、または、一般に、加工を損なう発泡を低減する。例示的な抗発泡剤は、シリコンエマルジョン（ｓｉｌｉｃｏｎ  ｅｍｕｌｓｉｏｎ）またはセスキオレイン酸（sesquoleate）ソルビタンを含む。
【０２０３】
「抗酸化剤」は、例えば、ブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、アスコルビン酸ナトリウム、アスコルビン酸、メタ重亜硫酸ナトリウム、およびトコフェロールを含む。ある特定の実施形態では、抗酸化剤は、必要とされる場合、化学的安定性を増強する。
【０２０４】
本明細書で記載される製剤は、抗酸化剤、金属キレート化剤、チオールを含有する化合物、および他の一般的な安定化剤から利益を得る場合がある。このような安定化剤の例は、（ａ）約０．５％〜約２％ｗ／ｖのグリセロール、（ｂ）約０．１％〜約１％ｗ／ｖのメチオニン、（ｃ）約０．１％〜約２％ｗ／ｖのモノチオグリセロール、（ｄ）約１ｍＭ〜約１０ｍＭのＥＤＴＡ、（ｅ）約０．０１％〜約２％ｗ／ｖのアスコルビン酸、（ｆ）０．００３％〜約０．０２％ｗ／ｖのポリソルベート８０、（ｇ）０．００１％〜約０．０５％ｗ／ｖのポリソルベート２０、（ｈ）アルギニン、（ｉ）ヘパリン、（ｊ）硫酸デキストラン、（ｋ）シクロデキストリン、（ｌ）ポリ硫酸ペントサン、および他のヘパリノイド、（ｍ）マグネシウムおよび亜鉛などの二価カチオン、または（ｎ）これらの組合せを含むがこれらに限定されない。
【０２０５】
「結合剤」は、凝集性の性質を付与し、例えば、アルギン酸およびその塩；カルボキシメチルセルロース、メチルセルロース（例えば、Ｍｅｔｈｏｃｅｌ（登録商標））、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース（例えば、Ｋｌｕｃｅｌ（登録商標））、エチルセルロース（例えば、Ｅｔｈｏｃｅｌ（登録商標））、および結晶セルロース（例えば、Ａｖｉｃｅｌ（登録商標））などのセルロース誘導体；微晶質デキストロース；アミロース；ケイ酸マグネシウムアルミニウム；多糖酸；ベントナイト；ゼラチン；ポリビニルピロリドン／酢酸ビニルコポリマー；クロスポビドン；ポビドン；デンプン；アルファデンプン；トラガント、デキストリン、スクロース（例えば、Ｄｉｐａｃ（登録商標））、グルコース、デキストロース、糖蜜、マンニトール、ソルビトール、キシリトール（例えば、Ｘｙｌｉｔａｂ（登録商標））、およびラクトースなどの糖；アカシア、トラガント、ガッティガム、イサポールハスクの粘液、ポリビニルピロリドン（例えば、Ｐｏｌｙｖｉｄｏｎｅ（登録商標）ＣＬ、Ｋｏｌｌｉｄｏｎ（登録商標）ＣＬ、Ｐｏｌｙｐｌａｓｄｏｎｅ（登録商標）ＸＬ−１０）、カラマツ由来のアラビノガラクタン（larch arabogalactan）、Ｖｅｅｇｕｍ商標）、ポリエチレングリコール、蝋、アルギン酸ナトリウムなどの天然ガムまたは合成ガムを含む。
【０２０６】
「担体」または「担体材料」は、医薬中で一般に使用される任意の賦形剤を含み、イブルチニブおよび抗がん剤の化合物など、本明細書で開示される化合物との適合性、ならびに所望の剤形の放出プロファイル特性に基づき選択されるものとする。例示的な担体材料は、例えば、結合剤、懸濁剤、崩壊剤、充填剤、界面活性剤、可溶化剤、安定化剤、滑沢剤、保湿剤、希釈剤などを含む。「薬学的に適合性の担体材料」は、アカシア、ゼラチン、コロイド状二酸化ケイ素、グリセロリン酸カルシウム、カルシウム乳酸、マルトデキストリン、グリセリン、ケイ酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、コレステロール、コレステロールエステル、カゼイン酸ナトリウム、ダイズレシチン、タウロコール酸、ホスファチジルコリン、塩化ナトリウム、リン酸三カルシウム、リン酸二カリウム、セルロースおよびセルロースコンジュゲート、糖、ステアロイル乳酸ナトリウム、カラギーナン、モノグリセリド、ジグリセリド、アルファデンプンなどを含みうるがこれらに限定されない。例えば、Remington: The Science and Practice of Pharmacy, Nineteenth Ed (Easton, Pa.: Mack Publishing Company, 1995)、Hoover, John E., Remington’s Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co., Easton, Pennsylvania 1975、Liberman, H.A. and Lachman, L., Eds., Pharmaceutical Dosage Forms, Marcel Decker, New York, N.Y., 1980、およびPharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, Seventh Ed. (Lippincott Williams & Wilkins1999)を参照されたい。
【０２０７】
「分散剤」および／または「粘性モジュレーティング剤」は、液体培地または顆粒化法またブレンド法を介して、薬物の拡散および均質性を制御する材料を含む。一部の実施形態では、これらの薬剤はまた、コーティングマトリックスまたはエローディングマトリックスの有効性も促進する。例示的な拡散促進剤／分散剤は、例えば、親水性ポリマー、電解質、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）６０またはＴｗｅｅｎ（登録商標）８０、ＰＥＧ、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ；市販品では、Ｐｌａｓｄｏｎｅ（登録商標）として公知である）、ａｎｄ例えば、ヒドロキシプロピルセルロース（例えば、ＨＰＣ、ＨＰＣ−ＳＬ、およびＨＰＣ−Ｌ）、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（例えば、ＨＰＭＣ  Ｋ１００、ＨＰＭＣ  Ｋ４Ｍ、ＨＰＭＣ  Ｋ１５Ｍ、およびＨＰＭＣ  Ｋ１００Ｍ）、カルボキシメチルセルロースナトリウム（carboxymethylcellulose sodium）、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、フタル酸ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ステアリン酸酢酸ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣＡＳ）、非晶質セルロースなど、炭水化物ベースの分散剤、ケイ酸マグネシウムアルミニウム、トリエタノールアミン、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、ビニルピロリドン／酢酸ビニルコポリマー（Ｓ６３０）、酸化エチレンおよびホルムアルデヒドを伴う、４−（１，１，３，３−テトラメチルブチル）−フェノールポリマー（チロキサポールとしてもまた公知である）、ポロキサマー（例えば、酸化エチレンと、酸化プロピレンとのブロックコポリマーである、Ｐｌｕｒｏｎｉｃｓ  Ｆ６８（登録商標）、Ｐｌｕｒｏｎｉｃｓ  Ｆ８８（登録商標）、およびＰｌｕｒｏｎｉｃｓ  Ｆ１０８（登録商標））；およびポロキサミン（例えば、酸化プロピレンおよび酸化エチレンの、エチレンジアミンへの逐次的付加から導出される四官能性ブロックコポリマーである、Ｐｏｌｏｘａｍｉｎｅ  ９０８（登録商標）（ＢＡＳＦ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、Ｐａｒｓｉｐｐａｎｙ、Ｎ．Ｊ．）としてもまた公知のＴｅｔｒｏｎｉｃ  ９０８（登録商標））、ポリビニルピロリドンＫ１２、ポリビニルピロリドンＫ１７、ポリビニルピロリドンＫ２５、またはポリビニルピロリドンＫ３０、ポリビニルピロリドン／酢酸ビニルコポリマー（Ｓ−６３０）、ポリエチレングリコール（例えば、ポリエチレングリコールは、約３００〜約６０００、または約３３５０〜約４０００、または約７０００〜約５４００の分子量を有しうる）、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ポリソルベート８０、アルギン酸ナトリウム、例えば、トラガントガムおよびアカシアガム、グアルガムなどのガム、キサンタンガムを含むキサンタン、糖、例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウムなどのセルロース誘導体、ポリソルベート８０、アルギン酸ナトリウム、モノラウリン酸ポリエトキシル化ソルビタン、モノラウリン酸ポリエトキシル化ソルビタン、ポビドン、カルボマー、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、アルギン酸塩、キトサン、およびこれらの組合せを含む。セルロースまたはトリエチルセルロースな��の可塑化剤もまた、分散剤として使用することができる。特に、リポソーム分散液中および自己乳化分散液中で有用な分散剤は、ジミリストイルホスファチジルコリン、鶏卵に由来する天然ホスファチジルコリン、鶏卵に由来する天然ホスファチジルグリセロール、コレステロール、およびイソプロピルミリスチン酸である。
【０２０８】
１または複数のエロージョン促進剤の、１または複数の拡散促進剤との組合せもまた、本組成物中で使用することができる。
【０２０９】
「希釈剤」という用語は、送達の前に、目的の化合物を希釈するのに使用される化合物を指す。希釈剤はまた、より安定的な環境をもたらしうるため、化合物を安定化させるのにも使用することができる。当技術分野では、緩衝液中に溶解させた塩（これはまた、ｐＨの制御または維持ももたらしうる）を、リン酸緩衝生理食塩液溶液を含むがこれらに限定されない希釈剤として用いる。ある特定の実施形態では、希釈剤は、組成物のバルクを増大させて、圧縮を容易とするか、またはカプセルの充填のための均質なブレンドに十分なバルクを創出する。このような化合物は、例えば、ラクトース、デンプン、マンニトール、ソルビトール、デキストロース、Ａｖｉｃｅｌ（登録商標）などの結晶セルロース；二塩基性リン酸カルシウム、リン酸二カルシウム二水和物；リン酸三カルシウム、リン酸カルシウム；無水ラクトース、噴霧乾燥ラクトース；アルファデンプン、Ｄｉ−Ｐａｃ（登録商標）（Ａｍｓｔａｒ）などの圧縮糖；マンニトール、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ステアリン酸酢酸ヒドロキシプロピルメチルセルロース、スクロースベースの希釈剤、粉砂糖；一塩基性硫酸カルシウム一水和物、硫酸カルシウム二水和物；乳酸カルシウム三水和物、デキストレート（dextrate）；加水分解シリアル固形、アミロース；粉末セルロース、炭酸カルシウム；グリシン、カオリン；マンニトール、塩化ナトリウム；イノシトール、ベントナイトなどを含む。
【０２１０】
「充填剤」は、ラクトース、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、二塩基性リン酸カルシウム、硫酸カルシウム、結晶セルロース、セルロース  粉末、デキストロース、デキストレート（dextrate）、デキストラン、デンプン、アルファデンプン、スクロース、キシリトール、ラクチトール、マンニトール、ソルビトール、塩化ナトリウム、ポリエチレングリコールなどの化合物を含む。
【０２１１】
「滑沢剤」および「流動促進剤」とは、材料の接着または摩擦を防止、低減、または阻害する化合物である。例示的な滑沢剤は、例えば、ステアリン酸、水酸化カルシウム、滑石、フマル酸ステアリルナトリウム、鉱物油などの炭化水素、または水素化ダイズ油（Ｓｔｅｒｏｔｅｘ（登録商標））などの水素化植物油、高脂肪酸、ならびにアルミニウム、カルシウム、マグネシウム、亜鉛など、それらのアルカリ金属塩およびアルカリ土類金属塩、ステアリン酸、ステアリン酸ナトリウム、グリセロール、滑石、蝋、Ｓｔｅａｒｏｗｅｔ（登録商標）、ホウ酸、安息香酸ナトリウム、ナトリウム酢酸、塩化ナトリウム、ロイシン、ポリエチレングリコール（例えば、ＰＥＧ−４０００）、またはＣａｒｂｏｗａｘ（商標）などのメトキシポリエチレングリコール、ナトリウムオレイン酸、安息香酸ナトリウム、ベヘン酸グリセリル、ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸マグネシウムまたはラウリル硫酸ナトリウム、Ｓｙｌｏｉｄ（商標）、Ｃａｂ−Ｏ−Ｓｉｌ（登録商標）などのコロイド状シリカ、トウモロコシデンプンなどのデンプン、シリコーン油、界面活性剤などを含む。
【０２１２】
「可塑化剤」とは、マイクロカプセル化材料を軟化させるのに使用される化合物、またはマイクロカプセル化材料の脆性を低下させるフィルムコーティングである。適切な可塑化剤は、例えば、ＰＥＧ  ３００、ＰＥＧ  ４００、ＰＥＧ  ６００、ＰＥＧ  １４５０、ＰＥＧ  ３３５０、およびＰＥＧ  ８００などのポリエチレングリコール、ステアリン酸、プロピレングリコール、オレイン酸、トリエチルセルロース、およびトリアセチンを含む。一部の実施形態では、可塑化剤はまた、分散剤または保湿剤としても機能しうる。
【０２１３】
「可溶化剤」は、トリアセチン、クエン酸トリエチル、オレイン酸エチル、カプリル酸エチル、ラウリル硫酸ナトリウム、ナトリウムドクセート（doccusate）、ビタミンＥ  ＴＰＧＳ、ジメチルアセトアミド、Ｎ−メチルピロリドン、Ｎ−ヒドロキシエチルピロリドン、ポリビニルピロリドン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルシクロデキストリン、エタノール、ｎ−ブタノール、イソプロピルアルコール、コレステロール、胆汁塩、ポリエチレングリコール２００〜６００、グリコフロール、トランスクトール、プロピレングリコール、およびジメチルイソソルビドなどの化合物を含む。
【０２１４】
「安定化剤」は、任意の抗酸化薬剤、緩衝液、酸、保存剤などの化合物を含む。
【０２１５】
「懸濁剤」は、ポリビニルピロリドン、例えば、ポリビニルピロリドンＫ１２、ポリビニルピロリドンＫ１７、ポリビニルピロリドンＫ２５、またはポリビニルピロリドンＫ３０、ビニルピロリドン／酢酸ビニルコポリマー（Ｓ６３０）、ポリエチレングリコール（例えば、ポリエチレングリコールは、約３００〜約６０００、または約３３５０〜約４０００、または約７０００〜約５４００の分子量を有しうる）、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ステアリン酸酢酸ヒドロキシメチルセルロース、ポリソルベート８０、ヒドロキシエチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、例えば、トラガントガムおよびアカシアガム、グアルガムなどのガム、キサンタンガムを含むキサンタン、糖、例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロースなどのセルロース誘導体、ポリソルベート８０、アルギン酸ナトリウム、モノラウリン酸ポリエトキシル化ソルビタン、モノラウリン酸ポリエトキシル化ソルビタン、ポビドンなどの化合物を含む。
【０２１６】
「界面活性剤」は、ラウリル硫酸ナトリウム、ナトリウムドクセート（docusate）、Ｔｗｅｅｎ  ６０またはＴｗｅｅｎ  ８０、トリアセチン、ビタミンＥ  ＴＰＧＳ、モノオレイン酸ソルビタン、モノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン、ポリソルベート（ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ）、ポロキサマー、胆汁塩、モノステアリン酸グリセリン、酸化エチレンと酸化プロピレンとのコポリマー、例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商標）（ＢＡＳＦ）などの化合物を含む。他の一部の界面活性剤は、ポリオキシエチレングリセリン脂肪酸エステルおよび植物油、例えば、ポリオキシエチレン（６０）水素化ヒマシ油；ならびにポリオキシエチレンアルキルエーテルおよびアルキルフェニルエーテル、例えば、オクトキシノール１０、オクトキシノール４０を含む。一部の実施形態では、界面活性剤は、物理的安定性を増強するか、または他の目的で、組み入れることができる。
【０２１７】
「粘性増強剤」は、例えば、メチルセルロース、キサンタンガム、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ステアリン酸酢酸ヒドロキシプロピルメチルセルロース、フタル酸ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボマー、ポリビニルアルコール、アルギン酸塩、アカシア、キトサン、およびこれらの組合せを含む。
【０２１８】
「保湿剤」は、オレイン酸、モノステアリン酸グリセリン、ソルビタンモノオレイン酸、モノラウリン酸ソルビタン、オレイン酸トリエタノールアミン、モノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン、モノラウリン酸ポリオキシエチレンソルビタン、ナトリウムドクセート（docusate）、オレイン酸ナトリウム、ラウリル硫酸ナトリウム、ナトリウムドクセート（doccusate）、トリアセチン、Ｔｗｅｅｎ  ８０、ビタミンＥ  ＴＰＧＳ、アンモニウム塩などの化合物を含む。
【０２１９】
キット／製品
本明細書の、ある特定の実施形態では、本明細書で記載される、１または複数の方法による使用のためのキットおよび製品が開示される。このようなキットは、バイアル、試験管など、１または複数の容器であって、容器の各々が、本明細書で記載される方法において使用される個別のエレメントのうち１つを含む容器を受容するように区画化されたキャリングケース、パッケージ、または容器を含む。適切な容器は、例えば、ボトル、バイアル、シリンジ、および試験管を含む。一実施形態では、容器は、ガラスまたはプラスチックなど、様々な材料から形成されている。
【０２２０】
本明細書で提示される製品は、パッケージング材料を含有する。医薬パッケージング材料の例は、ブリスターパック、ボトル、試験管、バッグ、容器、ボトル、ならびに選択される製剤と、意図される投与方式および処置方式とに適する、任意のパッケージング材料を含むがこれらに限定されない。
【０２２１】
例えば、容器は、本明細書で記載されるＣＡＲ−Ｔ細胞（例えば、ＣＤ１９ＣＡＲ−Ｔ細胞）およびステロイドと、任意選択で、加えて、本明細書で開示されるサイトカインおよび／または化学療法剤とを含む。このようなキットは、任意選択で、本明細書で記載される方法におけるその使用に関する記載または表示または指示書の内容確認を含む。
【０２２２】
キットは、典型的に、内容物を列挙する表示、および／または使用のための指示書、ならびに使用のための指示書を伴う添付文書を含む。典型的に、指示書のセットもまた、組み入れられると予想される。
【０２２３】
一部の実施形態では、表示は、容器上に貼付されているか、または容器に付随する。一実施形態では、表示を形成する文字、数、または他の記号が、容器自体へと接着されているか、鋳造されているか、またはエッチングされている場合、表示は容器上に貼付されており、表示はまた、容器を保持する、レセプタクルまたはキャリングケース内に、例えば、パッケージ添付文書として存在する場合、容器に付随する。一実施形態では、表示は、内容物が、具体的な治療適用に使用されるものであることを指し示すのに使用される。表示はまた、内容物の、本明細書で記載される方法などにおける使用のための指示も指し示す。
【０２２４】
ある特定の用語法
そうでないことが規定されない限りにおいて、本明細書で使用される技術用語および科学用語は、特許請求される主題が属する技術分野の当業者により一般に理解される意味と同じ意味を有する。詳細な記載は、例示的なものであり、説明的なものであるに過ぎず、特許請求される任意の主題に対して制限的ではないことを理解されたい。本出願では、そうでないことが別段に言明されない限りにおいて、単数形の使用は、複数形を含む。本明細書で使用される通り、そうでないことが文脈により明確に指示されない限りにおいて、単数形の「ある（a）」、「ある（an）」、および「その」は、複数の指示対象を含むことに注意しなければならない。本出願では、そうでないことが言明されない限りにおいて、「または」の使用は、「および／または」を意味する。さらに、「〜を含むこと」という用語のほか、「〜を含む（include）」、「〜を含む（includes）」、および「含まれた」など、他の形態の使用は、限定的ではない。
【０２２５】
本明細書で使用される節の小見出しは、構成上の目的だけのものであり、記載される主題を限定するものと見なすべきではない。
【０２２６】
本発明の多様な特色は、単一の実施形態の文脈で記載しうるが、特色はまた、個別に提示される場合もあり、任意の適切な組合せで提示される場合もある。逆に、本明細書では、明確さのために、本発明を、個別の実施形態の文脈で記載しうるが、本発明はまた、単一の実施形態でも、実施することができる。
【０２２７】
本明細書における、「一部の実施形態」、「ある実施形態」、「一実施形態」、または「他の実施形態」への言及は、実施形態との関連で記載される、特定の特色、構造、または特徴が、本発明の、少なくとも一部の実施形態には含まれるが、全ての実施形態には、必ずしも含まれないことを意味する。
【０２２８】
本明細書および特許請求の範囲で使用される「〜を含むこと（comprising）」（「〜を含む（comprise）」および「〜を含む（comprises）」など、「〜を含むこと（comprising）」の任意の形態）、「〜を有すること」（「〜を有する（have）」および「〜を有する（has）」など、「〜を有すること」の任意の形態）、「〜を含むこと（including）」（「〜を含む（include）」および「〜を含む（includes）」など、「〜を含むこと（including）」の任意の形態）、または「〜を含有すること」（「〜を含有する（contain）」および「〜を含有する（contains）」など、「〜を含有すること」の任意の形態）という語は、包含的またはオープンエンドであり、さらなる、列挙されていない要素または方法ステップを除外しない。本明細書で論じられる任意の実施形態は、本発明の任意の方法または組成物に関して実施することが可能であり、この逆も成り立つことが想定される。さらに、本発明の組成物を使用して、本発明の方法を達成することができる。
【０２２９】
本明細書で使用される範囲および量は、「約」特定の値または範囲として表すことができる。「約」はまた、ちょうどの量も含む。よって、「約５μＬ」とは、「約５μＬ」を意味するが、また、「５μＬ」も意味する。一般に、「約」という用語は、実験の誤差以内であることが予測される量を含む。
【０２３０】
「単離」とは、その天然環境からの核酸の摘出を意味する。「精製」とは、所与の核酸が、天然から摘出されたもの（ゲノムＤＮＡおよびｍＲＮＡを含む）であれ、合成されたもの（ｃＤＮＡを含む）であれ、かつ／または検査室条件下で増幅されたのであれ、純度が増大しており、この場合、「純度」とは、相対的用語であり、「絶対純度」ではないことを意味する。一方、核酸およびタンパク質は、希釈剤またはアジュバントと共に製剤化される場合があるが、実際的な目的では、単離されているものとしうることを理解されたい。例えば、核酸は、細胞への導入のために使用する場合、許容可能な担体または希釈剤と混合することが典型的である。
【０２３１】
本明細書で使用される「ポリヌクレオチド」または「オリゴヌクレオチド」とは、リボヌクレオチドまたはデオキシリボヌクレオチドである、任意の長さのヌクレオチドのポリマー形態を指す。この用語は、分子の一次構造だけを指す。したがって、この用語は、二本鎖ＤＮＡおよび一本鎖ＤＮＡ、三重鎖ＤＮＡのほか、二本鎖ＲＮＡおよび一本鎖ＲＮＡも含む。この用語はまた、例えば、ポリヌクレオチドのメチル化および／またはキャッピングによる修飾形態、ならびにポリヌクレオチドの非修飾形態も含みうる。用語はまた、天然のものではないヌクレオチドまたは合成ヌクレオチドのほか、ヌクレオチド類似体を含む分子を含むことも意図する。
【０２３２】
「ポリペプチド」は、「ポリペプチド」および「タンパク質」という用語と互換的に使用され、アミノ酸残基のポリマーを指す。「成熟タンパク質」とは、全長タンパク質であり、任意選択で、グリコシル化または所与の細胞内環境内のタンパク質に典型的な他の修飾を含むタンパク質である。
【０２３３】
核酸および／または核酸配列は、天然または人工で、共通の先祖核酸または先祖核酸配列に由来する場合、「相同」である。タンパク質および／またはタンパク質配列は、それらのコードＤＮＡが、天然または人工で、共通の先祖核酸または先祖核酸配列に由来する場合、相同である。相同な分子は、相同体と称する場合がある。例えば、本明細書で記載される、任意の天然タンパク質は、任意の利用可能な突然変異誘発法により修飾することができる。発現させると、この突然変異核酸は、元の核酸によりコードされるタンパク質と相同なポリペプチドをコードする。相同性は一般に、２つまたはこれを超える核酸またはタンパク質（またはこれらの配列）の間の配列同一性から推定される。相同性を確立するのに有用な配列の間の同一性の、正確な百分率は、問題の核酸およびタンパク質と共に変動するが、少なくとも２５％の配列同一性を使用して、相同性を確立する。高レベルの配列同一性、例えば、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、もしくは９９％、またはこれを超える配列同一性もまた、相同性を確立するのに使用することができる。
【０２３４】
ポリペプチドの、２つの核酸配列またはアミノ酸配列の文脈における、「同一」または「配列同一性」という用語は、指定された比較域にわたり、最大の照応関係についてアライメントされた場合に同じである、２つの配列内の残基を指す。
【０２３５】
実施形態の１つのクラスでは、本明細書のポリペプチドは、例えば、デフォルトパラメータを使用する、ＢＬＡＳＴＰ（もしくはＣＬＵＳＴＡＬ、または他の任意の利用可能なアライメントソフトウェア）により測定される通り、基準ポリペプチドまたはこの断片と少なくとも８０％、８５％、９０％、９８％の９９％、または１００％同一である。同様に、核酸はまた、出発核酸に照らして記載することもでき、例えば、それらは、例えば、デフォルトパラメータを使用する、ＢＬＡＳＴＮ（もしくはＣＬＵＳＴＡＬ、または他の任意の利用可能なアライメントソフトウェア）により測定される通り、基準核酸またはこの断片と５０％、６０％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９８％、９９％、または１００％同一でありうる。１つの分子が、大型の分子に対して、ある特定の百分率の配列同一性を有するという場合、これは、２つの分子が最適にアライメントされれば、小型の分子内の、前記百分率の残基は、２つの分子が最適にアライメントされた順序に従い、大型の分子内にマッチ残基を見出すことを意味する。
【０２３６】
本明細書で開示されるタンパク質（これらの機能的部分および機能的変異体を含む）は、１または複数の、天然アミノ酸の代わりに、合成アミノ酸を含みうる。当技術分野では、このような合成アミノ酸が公知であり、例えば、アミノシクロヘキサンカルボン酸、ノルロイシン、α−アミノｎ−デカン酸、ホモセリン、Ｓ−アセチルアミノメチル−システイン、ｔｒａｎｓ−３−ヒドロキシプロリンおよびｔｒａｎｓ−４−ヒドロキシプロリン、４−アミノフェニルアラニン、４−ニトロフェニルアラニン、４−クロロフェニルアラニン、４−カルボキシフェニルアラニン、β−フェニルセリンβ−ヒドロキシフェニルアラニン、フェニルグリシン、α−ナフチルアラニン、シクロヘキシルアラニン、シクロヘキシルグリシン、インドリン−２−カルボン酸、１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−３−カルボン酸、アミノマロン酸、アミノマロン酸モノアミド、Ｎ’−ベンジル−Ｎ’−メチル−リシン、Ｎ’，Ｎ’−ジベンジル−リシン、６−ヒドロキシリシン、オルニチン、α−アミノシクロペンタンカルボン酸、α−アミノシクロヘキサンカルボン酸、α−アミノシクロヘプタンカルボン酸、α−（２−アミノ−２−ノルボルナン）−カルボン酸、α，γ−ジアミノ酪酸、α，β−ジアミノプロピオン酸、ホモフェニルアラニン、およびα−ｔｅｒｔ−ブチルグリシンを含む。
【０２３７】
「トランスポゾン」または「転移性エレメント」（ＴＥ）とは、ゲノム内のその位置を変化させ、場合によって、突然変異を創出または保存し、細胞のゲノムサイズを変更する、ベクターＤＮＡ配列である。転移は、ＴＥの重複を結果としてもたらすことが多い。クラスＩのＴＥは、２段階でコピーされる：まず、クラスＩのＴＥは、ＤＮＡからＲＮＡへと転写され、次いで、産生されたＲＮＡは、ＤＮＡへと逆転写される。次いで、この、コピーされたＤＮＡは、ゲノム内の新たな位置へと挿入される。逆転写ステップは、ＴＥ自身によりコードされうる、逆転写酵素により触媒される。レトロトランスポゾンの特徴は、ＨＩＶなどのレトロウイルスと同様である。クラスＩＩのＴＥによるカットアンドペースト転移機構は、ＲＮＡ中間体を伴わない。転移は、いくつかのトランスポザーゼ酵素により触媒される。あるトランスポザーゼは、ＤＮＡ内の任意の標的部位に非特異的に結合するのに対し、他のトランスポザーゼは、特異的ＤＮＡ配列標的に結合する。トランスポザーゼは、標的部位において、互い違いの（staggered）切断をもたらす結果として、５’側または３’側における、一本鎖のＤＮＡ突出（粘着（sticky）末端）をもたらす。このステップは、ＤＮＡトランスポゾンを切り出し、次いで、ＤＮＡトランスポゾンは、新たな標的部位へとライゲーションされるが、この過程は、ギャップを埋めるＤＮＡポリメラーゼの活性と、糖リン酸骨格をつなぎ合わせるＤＮＡリガーゼの活性とを伴う。これは、標的部位の重複を結果としてもたらす。ＤＮＡトランスポゾンの挿入部位は、標的ＤＮＡ内が互い違いに切断され、ＤＮＡポリメラーゼにより埋められることにより創出されうる短い直接的なリピート、ならびにそれらに続く、トランスポザーゼによるＴＥの切出しに重要な一連の逆位リピートにより同定されうる。細胞周期のＳ期において、ドナー部位は既に複製されているが、標的部位はまだ複製されていない場合に転移が生じるとカットアンドペーストＴＥは重複される。転移は、クラスＩ  ＴＥおよびクラスＩＩ  ＴＥのいずれにおいても、「自律型」または「非自律型」として分類することができる。自律型ＴＥが、それ自身で移動しうるのに対し、非自律型ＴＥは、移動するのに、別のＴＥの存在を必要とする。これは、非自律型ＴＥが、トランスポザーゼ（クラスＩＩの場合）または逆転写酵素（クラスＩの場合）を欠くためであることが多い。
【０２３８】
「トランスポザーゼ」とは、トランスポゾンの末端に結合し、カットアンドペースト機構または複製性転移機構による、トランスポゾンの、ゲノムの別の部分への移動を触媒する酵素を指す。
【０２３９】
「Ｓｌｅｅｐｉｎｇ  Ｂｅａｕｔｙ（ＳＢ）トランスポゾン系」とは、ＤＮＡ配列を、脊椎動物の染色体へと導入するための合成ＤＮＡトランスポゾン系を指す。系については、例えば、米国特許第６，４８９，４５８号明細書および同第８，２２７，４３２号明細書において記載されている。
【０２４０】
本明細書で開示または想定される核酸配列およびベクターは、細胞へと、「トランスフェクション」、「形質転換」、または「形質導入」により導入することができる。本明細書で使用される「トランスフェクション」、「形質転換」、または「形質導入」とは、物理的方法または化学的方法を使用することによる、１または複数の外因性ポリヌクレオチドの、宿主細胞への導入を指す。当技術分野では、多くのトランスフェクション法が公知であり、例えば、リン酸カルシウムＤＮＡ共沈殿法（例えば、Murray E. J. (ed.), Methods in Molecular Biology, Vol. 7, Gene Transfer and Expression Protocols, Humana Press (1991)を参照されたい）；ＤＥＡＥ−デキストラン法；電気穿孔法；カチオン性リポソーム媒介性トランスフェクション法；タングステン粒子促進型遺伝子銃法（Johnston, Nature, 346: 776-777 (1990)); and strontium phosphate DNA co-precipitation (Brash et al., Mol. Cell Biol., 7: 2031-2034 (1987)）を含む。ファージベクターまたはウイルスベクターは、それらの多くが市販されている、適切なパッケージング細胞内で、感染性粒子を増殖させた後で、宿主細胞へと導入することができる。
【０２４１】
「プロモーター」とは、コード配列の転写を誘発する、ポリヌクレオチドの領域を指す。プロモーターは、ＤＮＡの、同じ鎖上の、遺伝子の転写開始部位の近傍であり、かつ、上流に（センス鎖の５’側領域に向かって）位置する。あるプロモーターが、細胞内の全ての状況において活性であるので、構成的であるのに対し、他のプロモーター、例えば、誘導性プロモーターは、特異的刺激に応答して調節され、活性となる。
【０２４２】
「プロモーター活性」という用語は、その活性が測定されるプロモーターに作動可能に連結されているヌクレオチド配列の発現の程度を指す。プロモーター活性は、例えば、ノーザンブロット解析により、産生されるＲＮＡ転写物の量を決定することにより、直接的に測定することもでき、プロモーターに連結されたレポーター核酸配列など、連結された核酸配列によりコードされる産物の量を決定することにより、間接的に測定することもできる。
【０２４３】
本明細書で使用される「誘導性プロモーター」とは、転写調節因子、例えば、生物因子または非生物因子の存在または非存在により、活性へと誘導されるプロモーターを指す。誘導性プロモーターは、それらに作動可能に連結した遺伝子の発現が、生物または特に、組織の発生の、ある特定の段階において、オンまたはオフにされうるため、有用である。誘導性プロモーターの例は、アルコール調節性プロモーター、テトラサイクリン調節性プロモーター、ステロイド調節性プロモーター、金属調節性プロモーター、発症機序調節性プロモーター、温度調節性プロモーター、および光調節性プロモーターである。一実施形態では、誘導性プロモーターは、遺伝子スイッチの一部である。
【０２４４】
本明細書で使用される「エンハンサー」という用語は、例えば、それが作動可能に連結された核酸配列の転写を増大させるＤＮＡ配列を指す。エンハンサーは、核酸配列のコード領域から、何キロベースも離れて位置することが可能であり、調節因子の結合、ＤＮＡのメチル化パターン、またはＤＮＡ構造の変化を媒介しうる。当技術分野では、様々な異なる供給源に由来する、多数のエンハンサーが周知であり、クローニングされたポリヌクレオチドとして、またはクローニングされたポリヌクレオチド内で利用可能である（例えば、ＡＴＣＣなどの寄託先のほか、他の商業的供給源または個人的供給源から）。プロモーター（一般に使用されるＣＭＶプロモーターなど）を含む、多数のポリヌクレオチドはまた、エンハンサー配列も含む。エンハンサーは、コード配列の上流に位置する場合もあり、この中に位置する場合もあり、この下流に位置する場合もある。「Ｉｇエンハンサー」という用語は、免疫グロブリン（Ｉｇ）遺伝子座内にマップされるエンハンサー領域に由来するエンハンサーエレメント（このようなエンハンサーは、例えば、重鎖（ミュー）５’側エンハンサー、軽鎖（カッパ）５’側エンハンサー、カッパイントロンエンハンサーおよびミューイントロンエンハンサー、ならびに３’側エンハンサーを含む）を指す（一般に、Paul W. E. (ed), Fundamental Immunology, 3rd Edition, Raven Press, New York (1993), pages 353-363、および米国特許第５，８８５，８２７号明細書を参照されたい）。
【０２４５】
「発現ベクター」または「ベクター」とは、細胞内のポリヌクレオチドの複製の自律的単位として挙動する（すなわち、それ自身の制御下における複製が可能である）か、または宿主細胞の染色体への挿入により複製が可能となる、任意の遺伝子エレメント、例えば、プラスミド、染色体、ウイルス、トランスポゾンであって、接合させたセグメントの複製および／または発現をもたらすように、それへと、別のポリヌクレオチドセグメントを接合させた遺伝子エレメントである。適切なベクターは、プラスミド、トランスポゾン、バクテリオファージ、およびコスミドを含むがこれらに限定されない。ベクターは、所望の宿主細胞中へのベクターのライゲーションまたは挿入を実施し、接合させたセグメントの発現を実施するのに必要なポリヌクレオチド配列を含有しうる。このような配列は、宿主生物に応じて異なり、転写を実施するプロモーター配列、転写を増加させるエンハンサー配列、リボソーム結合性部位の配列、および転写翻訳終結配列を含む。代替的に、発現ベクターは、ベクターの、宿主細胞のＤＮＡ配列へのライゲーションまたは組込みを伴わずに、その中でコードされる核酸配列の産物を、直接発現させることが可能でありうる。
【０２４６】
ベクターはまた、「選択用マーカー遺伝子」も含みうる。本明細書で使用される「選択用マーカー遺伝子」という用語は、核酸配列を発現する細胞を、対応する選択用薬剤の存在下で、これと順方向または逆方向に、特異的に選択することを可能とする核酸配列を指す。当技術分野では、適切な選択用マーカー遺伝子が公知であり、例えば、国際特許出願公開第１９９２／０８７９６号パンフレットおよび同第１９９４／２８１４３号パンフレット、Wigler et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 77: 3567 (1980)、O’Hare et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 78: 1527 (1981)、Mulligan & Berg, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 78: 2072 (1981)、Colberre-Garapin et al., J. Mol. Biol., 150:1 (1981)、Santerre et al., Gene, 30: 147 (1984)、Kent et al., Science, 237: 901-903 (1987)、Wigler et al., Cell, 11: 223 (1977)、Szybalska & Szybalski, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 48: 2026 (1962)、Lowy et al., Cell, 22: 817 (1980)、ならびに米国特許第５，１２２，４６４号明細書および同第５，７７０，３５９号明細書において記載されている。
【０２４７】
一部の実施形態では、ベクターは、宿主細胞内で複製することが可能であり、適切な選択的圧の存在下で、宿主細胞内のＤＮＡの染色体外セグメントとして存続する、「エピソーム発現ベクター」または「エピソーム」である（例えば、Conese et al., Gene Therapy, 11:1735-1742 (2004)を参照されたい）。代表的な、市販のエピソーム発現ベクターは、エプスタイン−バー核抗原１（ＥＢＮＡ１）およびエプスタイン−バーウイルス（ＥＢＶ）複製起点（ｏｒｉＰ）を用いるエピソームプラスミドを含むがこれらに限定されない。ベクターである、ｐＲＥＰ４、ｐＣＥＰ４、ｐＲＥＰ７、ならびにＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎ（Ｃａｒｌｓｂａｄ、Ｃａｌｉｆ．）製のｐｃＤＮＡ３．１およびＳｔｒａｔａｇｅｎｅ（ＬａＪｏｌｌａ、Ｃａｌｉｆ．）製のｐＢＫ−ＣＭＶは、ＥＢＮＡ１およびｏｒｉＰの代わりに、Ｔ抗原およびＳＶ４０の複製起点を使用する、エピソームベクターの非限定的な例を表す。
【０２４８】
本明細書で使用される「抗体」とは、モノクローナル抗体またはポリクローナル抗体を指す。本明細書で使用される「モノクローナル抗体」という用語は、Ｂ細胞の単一のクローンにより産生され、同じエピトープに結合する抗体を指す。これに対し、「ポリクローナル抗体」とは、異なるＢ細胞により産生され、同じ抗原の異なるエピトープに結合する抗体の集団を指す。全抗体は、典型的に、４つのポリペプチド：重（Ｈ）鎖ポリペプチドの２つの同一なコピー、および軽（Ｌ）鎖ポリペプチドの２つの同一なコピーからなる。重鎖の各々は、１つのＮ末端の可変（ＶＨ）領域と、３つのＣ末端の定常（ＣＨ１、ＣＨ２、およびＣＨ３）領域とを含有し、各軽鎖は、１つのＮ末端の可変（ＶＬ）領域と、１つのＣ末端の定常（ＣＬ）領域とを含有する。軽鎖および重鎖の各対の可変領域は、抗体の抗原結合性部位を形成する。ＶＨ領域と、ＶＬ領域とは、各領域が、それらの配列が比較的保存されている、４つのフレームワーク領域を含む、共通の一般的な構造を有する。フレームワーク領域は、３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）により接続されている。ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３として公知である、３つのＣＤＲは、抗原への結合の一因となる、抗体の「超可変領域」を形成する。
【０２４９】
本明細書では、「抗体の断片」、「抗体断片」、「抗体の機能的断片」、および「抗原結合性部分」という用語を、抗原に特異的に結合する能力を保持する抗体の、１または複数の断片または部分を意味するように、互換的に使用する（一般に、Holliger et al., Nat. Biotech., 23(9):1126-1129 (2005)を参照されたい）。抗体断片は、例えば、１もしくは複数のＣＤＲ、可変領域（またはこの部分）、定常領域（またはこの部分）、またはこれらの組合せを含むことが所望される。抗体断片の例は、（ｉ）ＶＬドメイン、ＶＨドメイン、ＣＬドメイン、およびＣＨ１ドメインからなる一価断片である、Ｆａｂ断片；（ｉｉ）ストーク領域におけるジスルフィド架橋により連結された２つのＦａｂ断片を含む二価断片である、Ｆ（ａｂ’）２断片；（ｉｉｉ）抗体の単一のアームのＶＬドメインおよびＶＨドメインからなる、Ｆｖ断片；（ｉｖ）２つのドメインを、単一のポリペプチド鎖として合成することを可能とする合成リンカーにより接合された、Ｆｖ断片の２つのドメイン（すなわち、ＶＬおよびＶＨ）からなる一価分子である、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）（例えば、Bird et al., Science, 242: 423-426 (1988); Huston et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 85: 5879-5883 (1988); and Osbourn et al., Nat. Biotechnol., 16: 778 (1998)を参照されたい）；ならびに（ｖ）各ポリペプチド鎖が、同じポリペプチド鎖上のＶＨとＶＬとの間の対合を可能とするには短すぎるペプチドリンカーにより、ＶＬへと接続されたＶＨを含み、これにより、２つの機能的な抗原結合性部位を有する二量体分子を作出するように、異なるＶＨ−ＶＬポリペプチド鎖上の相補的ドメインの間の対合を駆動する、ポリペプチド鎖の二量体である、ダイアボディーを含むがこれらに限定されない。当技術分野では、抗体断片が公知であり、例えば、米国特許出願公開第２００９／００９３０２４Ａ１号明細書において、より詳細に記載されている。
【０２５０】
ＣＡＲに関して使用される場合の「機能的部分」という用語は、本発明のＣＡＲの、任意の部分または断片であって、機能的部分がその一部であるＣＡＲ（親ＣＡＲ）の生物学的活性を保持する部分または断片を指す。親ＣＡＲをコードする核酸配列に関して、ＣＡＲの機能的部分をコードする核酸配列は、親ＣＡＲのうちの、例えば、約１０％、２５％、３０％、５０％、６８％、８０％、９０％、９５％、またはこれを超える親ＣＡＲを含むタンパク質をコードしうる。
【０２５１】
本明細書で使用される「機能的変異体」という用語は、基準ポリペプチドに対する、実質的または著明な配列同一性または配列類似性を有するポリペプチドまたはタンパク質を指し、それがその変異体である、基準ポリペプチドの生物学的活性を保持する。機能的変異体は、例えば、本明細書で記載されるＣＡＲ（親ＣＡＲ）の変異体であって、標的細胞を、親ＣＡＲと同様の程度、これと同程度、またはこれより高い程度に認識する能力を保持する変異体を包含する。親ＣＡＲをコードする核酸配列に照らして、ＣＡＲの機能的変異体をコードする核酸配列は、親ＣＡＲをコードする核酸配列と、例えば、約１０％同一、約２５％同一、約３０％同一、約５０％同一、約６５％同一、約８０％同一、約９０％同一、約９５％同一、または約９９％同一でありうる。
【０２５２】
本明細書で言及される「増殖性疾患」とは、細胞の過剰な増殖および細胞内マトリックスの過剰な代謝回転が、がんを含むいくつかの疾患の発症機序に著明に寄与する、という統一的概念が提示されていることを意味する。
【０２５３】
本明細書では、「〜を投与すること」とは、本発明の組成物を、患者に施すことを指す。例を目的として、限定せずに述べると、組成物の投与、例えば、注射は、静脈内（ｉ．ｖ．）注射、皮下（ｓ．ｃ．）注射、皮内（ｉ．ｄ．）注射、腹腔内（ｉ．ｐ．）注射、または筋内（ｉ．ｍ．）注射により実施することができる。１または複数のこのような経路を利用することができる。非経口投与は、例えば、ボーラス注射による場合もあり、時間経過にわたる、漸次的な灌流による場合もある。代替的に、または共時的に、投与は、経口経路による投与でありうる。加えて、投与はまた、ボーラスまたは細胞ペレットのデポ手術による場合もあり、医療用デバイスの設置による場合もある。
【０２５４】
本明細書で記載される改変エフェクター細胞組成物は、本明細書で記載される、１もしくは複数の核酸配列、または本明細書で記載される、１もしくは複数の核酸配列を含むベクターを発現する宿主細胞を、増殖性障害を処置または防止するのに有効な量で含みうる。本明細書で使用される「処置」、「〜を処置すること」などの用語は、所望の薬理学的効果および／または生理学的効果を得ることを指す。複数の実施形態では、効果は、治療的である、すなわち、効果は、疾患および／または疾患に帰せられうる有害症状を、部分的または完全に治癒させる。この目的で、本発明の方法は、本発明の核酸配列、または本発明の核酸配列を含むベクターを発現する宿主細胞を含む、「量」の組成物を投与するステップを含む。
【０２５５】
「量」または「用量」とは、所望の治療結果を達成するのに有効な量であって、これに必要な投与量で、これに必要な時間にわたる量を指す。量は、個体の疾患状態、年齢、性別、および体重、ならびに本発明の核酸配列が、個体において、所望の応答を誘発する能力などの因子に従い変動しうる。
【０２５６】
代替的に、薬理学的効果および／または生理学的効果は、「予防的」な場合もある、すなわち、効果は、疾患またはその症状を、完全に、または部分的に予防する。
【０２５７】
「予防有効量」とは、所望の予防結果（例えば、疾患の発症の防止）を達成するのに必要な投与量において、必要な期間にわたり有効な量を指す。
【０２５８】
本明細書で使用された、「個体」、「対象」、および「患者」という用語は、任意の哺乳動物を意味する。一部の実施形態では、哺乳動物は、ヒトである。一部の実施形態では、哺乳動物は、ヒト以外である。用語のうちのいずれも、医療従事者（例えば、医師、正看護師、看護者、主治医の助手、用務職員、またはホスピス職員）の監督（例えば、定期的または間欠的な）により特徴づけられることが必要となることも、限定されることもない。
【実施例】
【０２５９】
これらの例は、例示的な目的だけで提示されるものであり、本明細書で提示される特許請求の範囲を限定しようとするものではない。
【０２６０】
［実施例１］
ＣＤ１９特異的ＣＡＲ−Ｔ細胞の作製
ＳＢトランスポゾンである、ＣｏＯｐＣＤ１９ＲＣＤ２８／ｐＳＢＳＯは、伸長因子１α（ＥＦ−１α）と、ヒトＴ細胞白血病ウイルス（ＨＴＬＶ）の５’側非翻訳領域とから構成されるＥＦ−１／ＨＴＬＶハイブリッド複合プロモーター（ＩｎｖｉｖｏＧｅｎ）下で、ヒトコドン最適化（ＣｏＯｐ）第２世代ＣｏＯｐＣＤ１９ＲＣＤ２８  ＣＡＲを発現させる。サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）プロモーター下で、ＳＢトランスポザーゼであるＳＢ１１は、ＤＮＡプラスミドｐＣＭＶ−ＳＢ１１からシスに発現する。
【０２６１】
ＣＡＲを導入する、ＳＢによる転移に続く、ＣＡＲ依存的な形で、Ｔ細胞数を拡大増殖させる、ａＡＰＣの添加を使用して、ＣＤ１９特異的Ｔ細胞を、ＰＢまたはＵＣＢに由来する単核細胞（ＭＮＣ）から作出することができる。トランスポゾン（ＣＡＲ）をコードする、１５μｇのＤＮＡプラスミド（ＣＤ１９ＲＣＤ２８／ｐＳＢＳＯ）と、トランスポザーゼ（ＳＢ１１）をコードする、５μｇのＤＮＡプラスミド（ｐＣＭＶ−ＳＢ１１）とを使用して、各レシピエントのために、１０のキュベット（キュベット１つ当たりのＭＮＣ  ２×１０７個）を電気穿孔にかける。電気穿孔日を、刺激サイクル１の「０日目」として規定する。フローサイトメトリー条件および培養条件についての対照として、自家Ｔ細胞を、モック電気穿孔し（ＤＮＡプラスミドを伴わずに）、Ｔ細胞の増殖を維持するように、ＣＤ３を架橋するＯＫＴ３をあらかじめロードされたγ−照射ａＡＰＣ（クローン４）により、これらの数を拡大した。エレクトロトランスファーの効率と、電気穿孔後におけるＴ細胞の生存率とを、規定により評価する。この初期時点における、対照ＤＮＡプラスミド（ｐｍａｘＧＦＰと称する）からのＥＧＦＰの発現、およびＣＡＲの発現は、組み込まれたプラスミドおよびエピソーム内のプラスミドからのタンパク質の発現を反映する。ＥＧＦＰの発現は、電気穿孔の翌日に、６０％であり、ＣＡＲの発現は、約４０％であり、Ｔ細胞の生存率は、４０％〜５０％の間であることが典型的である。可溶性組換えヒトＩＬ−２およびＩＬ−２１の存在下における、γ−照射ａＡＰＣの反復的な添加により、ＣＡＲ（ＣＤ１９ＲＣＤ２８）を安定的に発現するＴ細胞を回収する。これらのＮＫ細胞の百分率が、≧１０％であり、とりわけ、Ｔ細胞上で発現するＣＡＲの百分率が、低率である場合は、ＣＤ５６特異的常磁性ビーズを使用して、ＣＤ３ｎｅｇＣＤ５６＋ＮＫ細胞を、培養物から枯渇させることができる。この枯渇は、ＡａＰＣ（ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ  ａｎｄ  ｐｒｏｐａｇａｔｉｎｇ  ｃｅｌｌ）が、ＣＡＲ＋Ｔ細胞の増殖を維持する能力に干渉するＮＫ細胞の急速な過剰増殖を防止する。状況により、ＣＡＲ＋Ｔ細胞からのＮＫ細胞の枯渇を、最後の２つの刺激サイクルにおいて企図するが、これは、一部のＣＡＲ＋Ｔ細胞上の、ＣＤ５６の共発現のために、所望の細胞の喪失を導入する。Ｔ細胞は、１４日目を過ぎたら、ＶｕｅＬｉｆｅ培養バッグを使用して、機能的閉鎖系内で増殖させる。遺伝子改変し、繁殖させたＴ細胞のサブセットは、典型的に、ａＡＰＣによる共培養の、１４日目または２１〜２３日目（刺激サイクル２または３の終了時）に凍結保存して、将来の解析のためのアーカイブ材料の供給源として用いられ、その後の製造過程において、予測外の問題が生じた場合に融解させる。Ｔ細胞は、培養の２１日目〜２８日目、例えば、２３日目において、またはほぼこれらの時期に採取することができる。このようなＴ細胞は、ＣＡＲを発現することが可能であり、＞８０％が生存可能でありうる。
【０２６２】
［実施例２］
ｉｎ  ｖｉｖｏにおける、ＣＡＲ−Ｔ細胞の拡大増殖
４０歳の男性は、Ｂ細胞急性リンパ芽球性白血病（Ｂ−ＡＬＬ）を伴うと診断された。患者は、核型４７ＸＹおよび＋Ｘを呈したが、ＣＮＳ病変を呈さなかった。第１選択治療である、ｈｙｐｅｒＣＶＡＤを投与したところ、初回の完全寛解がもたらされた。患者は、再発し、バイオマーカーである、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＲＬＦ２、核型４７ＸＹ、＋Ｘ、およびｉｎｖ１７を呈した。複数回にわたるサルベージ療法を施した。その後、ＰＯＭＰ維持療法を開始した。患者は、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）をさらに発症し、プレドニゾンおよびタクロリムスで処置された。さらなる放射線療法（ＸＲＴ）、免疫療法、ｈｙｐｅｒＣＡＶＤ、およびＯ−ＥＰＯＣＨを、患者へとさらに投与した。さらに、患者において、５００ｍｇ／ｍ２のシクロホスファミドおよび３０ｍｇ／ｍ２のフルダラビンにより、３日間にわたり、リンパ枯渇を誘導した。リンパ枯渇の後、０日目に、１ｋｇ当たりのＣＡＲ−Ｔ細胞１０６個を、患者へと輸注した。１４日目に、患者は、ＧＶＨＤを発症した。１４日目から、約１ｍｇ／ｋｇのプレドニゾンを投与した。１８日目（またはＣＡＲ−Ｔ細胞の投与から４８日目）に、ＧＶＨＤは、消失し、プレドニゾンを、約０．５ｍｇ／ｋｇへと低減した。白血球カウント（ＷＢＣ）は、２．７であり、絶対リンパ球カウント（ＡＬＣ）は、２００であった。
【０２６３】
本明細書では、本発明の好ましい実施形態を示し、それらについて記載してきたが、当業者には、このような実施形態が、例だけを目的として提示されていることが明らかであろう。今や、本発明から逸脱しない限りにおいて、当業者は、多数の変更、変化、および代用に想到するであろう。本明細書で記載される実施形態、またはこれらの実施形態、もしくはその中で記載される態様のうちの１または複数の組合せに対する、多様な代替物を、本発明の実施において利用しうることを理解されたい。以下の特許請求の範囲は、本発明の範囲を規定するものであり、これらの特許請求の範囲の範囲内にある方法および構造、ならびにそれらの均等物は、その対象となることが意図される。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図６】
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【図７】
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【国際調査報告】
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