(57)【要約】  本発明は、新規なタンパク質製剤に関する。特に、本発明は、トシリズマブの液体医薬組成物、組成物を製造するための方法、組成物を含むキット、組成物を含むパッケージ、並びに組成物及び／又はパッケージを使用する治療の方法に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
液体医薬組成物であって、
（ａ）トシリズマブ抗体；
（ｂ）ヒスチジンバッファー；
（ｃ）乳酸又はその塩から選択される安定剤；
（ｄ）遊離アミノ酸；
（ｅ）界面活性剤；
（ｆ）注射用水；及び
（ｇ）任意選択で塩
を含み、
５．５〜７．０のｐＨを有する、液体医薬組成物。
【請求項２】
５．８〜６．２のｐＨを有する、請求項１に記載の液体医薬品。
【請求項３】
前記安定剤が、乳酸又は乳酸ナトリウムである、請求項１又は２に記載の液体医薬組成物。
【請求項４】
前記遊離アミノ酸が、アルギニンである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の液体医薬組成物。
【請求項５】
前記界面活性剤が、ポリソルベートである、請求項１〜４のいずれか一項に記載の液体医薬組成物。
【請求項６】
前記ポリソルベートが、ポリソルベート８０である、請求項５に記載の液体医薬組成物。
【請求項７】
前記任意選択の塩が、塩化ナトリウムである、請求項１〜６のいずれか一項に記載の液体医薬組成物。
【請求項８】
−  １５〜２００ｍｇ／ｍｌのトシリズマブ抗体；
−  １０及び２５ｍＭのヒスチジン；
−  ５〜１５ｍＭの乳酸ナトリウム又は乳酸；
−  ５０〜１５０ｍＭのアルギニン
−  ０．１〜０．２ｍＭのポリソルベート８０
−  注射用水；及び
−  任意選択で５〜５０ｍＭの塩化ナトリウム
を含む、請求項１〜７のいずれか一項に記載の液体医薬組成物。
【請求項９】
−  １５〜２００ｍｇ／ｍｌのトシリズマブ抗体；
−  １０及び２５ｍＭのヒスチジン；
−  ５〜１５ｍＭの乳酸ナトリウム又は乳酸；
−  ５０〜１５０ｍＭのアルギニン
−  ０．１〜０．２ｍＭのポリソルベート８０
−  注射用水；及び
−  ５〜５０ｍＭの塩化ナトリウム
を含む、請求項１〜７のいずれか一項に記載の液体医薬組成物。
【請求項１０】
請求項１〜９のいずれか一項に記載の液体医薬組成物を含む薬剤送達デバイス。
【請求項１１】
関節リウマチ、若年性特発性関節炎、巨細胞性動脈炎、又は全身性硬化症の治療において使用するための、請求項１〜９のいずれか一項に記載の液体医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
序論
本発明は、新規なタンパク質製剤に関する。特に、本発明は、トシリズマブの液体医薬組成物、組成物、組成物を含むキット、組成物を含むパッケージを製造するための方法、並びに組成物及び／又はパッケージを使用する治療の方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
背景
いくつかの生物製剤は、関節リウマチ、若年性関節炎、及び他の自己免疫疾患などの自己免疫疾患を治療するために９０年代以来承認されてきた。とりわけ、腫瘍壊死因子−α（エタネルセプト（Enbrel（登録商標）として売買される）、アダリムマブ（Humira（登録商標）として売買される）、又はインフリキシマブ（Remicade（登録商標）として売買される）並びにインターロイキン−６受容体（ＩＬ−６Ｒ）（トシリズマブ（ROACTEMRA（登録商標）又はActemra（登録商標）として売買される）等）を標的にする薬剤がある。これらの障害の治療のためのＩＬ−６Ｒを標的にする他の薬剤は、開発中である又はサペリズマブ（sapelizumab）、ヴォバリリズマブ（vobarilizumab）、若しくはサリルマブ（sarilumab）等のように既に、保健機関を前に予備登録されている。
【０００３】
例えば、トシリズマブは、一般に、静脈内注射又は皮下注射のいずれかを介して患者に送達され、バイアル、充填済みの注射器、又は充填済みのペンデバイスなどのように、液体形態で、典型的にパッケージで提供される。トシリズマブの市販の製剤（ACTEMRA（登録商標））は、以下の成分を含む。
【０００４】
【表１】
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【０００５】
これらの製剤は、国際公開第０３／０６８２６０号及び国際公開第２００９／０８４６５９号においてそれぞれ記載された。抗ＩＬ−６Ｒ抗体に特異的な他の製剤は、国際公開第０２／１３８６０号、国際公開第２０１１／０８５１５８号、又はさらに国際公開第２０１３／０６３５１０号の製剤などのように記載された。
【０００６】
抗体等の生理活性タンパク質を含む医薬組成物を調製する場合、前記組成物は、タンパク質の活性が適切な期間維持されるように製剤されなければならない。タンパク質の活性／安定性の損失は、特に変性、凝集、又は酸化によるタンパク質の化学的な又は物理的な不安定性に起因し得る。結果として生じる産物は、したがって、とりわけ長い間の保存の後となると、薬学的に容認できない可能性がある。添加剤の使用により、ある特定のタンパク質の安定性が増加することが知られているが、これらの添加剤の安定効果は、添加剤及び生理活性タンパク質自体の性質に非常に依存する。
【０００７】
トシリズマブにより明らかに示されるように、一般に、抗体は、それらが異なる強さ（例えば、２０ｍｇ／ｍＬ対１８０ｍｇ／ｍＬ）で又は異なる投薬法（例えば、静脈内対皮下）で売買される場合、異なる添加剤により製剤される。
【０００８】
活性成分として、トシリズマブ含有するさらなる製剤の必要性が残っており、前記製剤は、適切な期間、安定しており、注射での、好ましくは任意のタイプの注射のための使用に適している。前記製剤は、関節リウマチ及び若年性特発性関節炎等の自己免疫疾患の治療での投与に有用になり得る。市販の製剤の総合的効能を越えることができなくても、効能は相対的であるが有用である代替の製剤は、抗体の濃度が何であれ又はその投薬法が何であれ、市販の製剤の非常に望ましい代替品に相当するであろう。望ましくは、先行技術の問題は、製剤の複雑さを低下させる間に解決されてもよい。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００９】
発明の概要
本発明の第１の態様によれば、トシリズマブ（抗ＩＬ−６Ｒ抗体）と、ヒスチジンバッファーと、乳酸又はその塩から選択される安定剤とを含む液体医薬組成物を提供する。前記組成物は、遊離アミノ酸、界面活性剤及び任意選択で塩をさらに含む。前記組成物は、メチオニン（適切にはＬ−メチオニン）を（実質的に又は全く）含まない。
【００１０】
本発明の第２の態様によれば、液体医薬組成物を製造する方法を提供し、この方法は、トシリズマブと、ヒスチジンバッファーと、乳酸又はその塩から選択される安定剤と、遊離アミノ酸と、界面活性剤と、任意選択で塩とを一緒に混合することを含む。本明細書に定義されているような液体医薬組成物を製造する方法によって入手可能であるか、この方法によって得られるか、又はこの方法によって直接得られる、液体医薬組成物をまた提供する。
【００１１】
本発明の第３の態様によれば、本明細書において定義される液体医薬組成物を含む薬剤送達デバイス（例えば、あらかじめ充填された注射器若しくはペン又は静脈内バッグ）が提供される。
【００１２】
本発明の第４の態様によれば、薬剤送達デバイス、本明細書において定義される液体医薬組成物（任意選択で、パッケージ又は容器に含有される）、及び任意選択で、液体医薬組成物の投与（例えば、静脈内又は皮下）に関する指示を有する一式の説明書を含む要素のキットが提供される。
【００１３】
本発明の第５の態様では、本明細書において定義される液体医薬組成物を含むパッケージ（例えば、あらかじめ充填された注射器、ペン、静脈内バッグ、又は前述のもののいずれかを含有するパッケージ／容器）が記載される。
【００１４】
本発明の第６の態様によれば、パッケージ又は薬剤送達デバイスを製造するための方法であって、パッケージ又は薬剤送達デバイス内に本明細書において定義される液体医薬組成物を組み込むことを含む方法が提供される。本明細書において定義されるパッケージ又は薬剤送達デバイスを製造するための方法によって入手可能な、その方法によって得られる、又はその方法によって直接得られるパッケージ又は薬剤送達デバイスもまた、提供される。
【００１５】
本発明の第７の態様によれば、療法での使用のための本明細書において定義する液体医薬組成物が記載される。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
定義
本発明の任意の特定の態様に関して記載される任意選択の適した好ましい特徴を含む任意の特徴はまた、本発明の任意の他の態様の任意選択の適した好ましい特徴を含む特徴であってもよい。
【００１７】
特に指定のない限り、本明細書及び請求項において使用される以下の用語は、下記に説明される以下の意味を有する。
【００１８】
本明細書において使用される用語「抗体（antibody）」及びその複数形「抗体（antibodies）」は、特に、ポリクローナル抗体、アフィニティー精製ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、並びにナノボディ（nanobody）、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆａｂタンパク分解性断片、及び単鎖可変領域断片（ｓｃＦｖ）等の抗原結合性断片を含む。それは、一本腕の（一価）又は二本腕の（二価）抗体の両方を指す。
【００１９】
用語「組換え抗体」は、組換え方法を使用して調製される、発現される、産生される、又は単離される抗体を含むことが意図される。
【００２０】
用語「抗ＩＬ−６Ｒ抗体」は、インターロイキン６受容体（すなわちＩＬ−６Ｒ）に特異的な抗体を指す。好ましくは、抗ＩＬ−６Ｒ抗体は、その標的、すなわちＩＬ−６Ｒに結合するだけではなく、それを中和する（それを阻害するか、又はそれに拮抗する）抗体である。
【００２１】
用語「トシリズマブ」は、国際公開第９２１９７５９号（特に、その中のｈＰＭ−１）及び当技術分野で他のところで定義されるような、発案者による活性医薬成分（商品名Actemra（登録商標）又はRoActemra（登録商標）として市販されているような）、並びにまたそのバイオシミラーを含む。トシリズマブは、配列番号１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）、及び配列番号２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）を有する。トシリズマブは、約１４５ｋＤａの分子量を有する。
【００２２】
用語「バイオシミラー」は、所与の活性医薬成分（すなわち、保健機関によって承認された）と完全なタンパク質配列同一性を共有する原薬を指す。バイオシミラーは、たとえタンパク質配列が上記で特定した程度まで実質的に同じ又は異なっても、（僅かに）異なるグリコシル化フロファイルを有し得ることが留意される。このような「バイオシミラー」は、前記「バイオシミラー」が市場で販売される前に、売買のために「バイオシミラー」として公式に承認される必要がある。
【００２３】
用語「バッファー」は、本明細書において使用する場合、医薬的又は獣医学的使用のための製剤において安全であることが公知であり、かつ製剤のために望ましいｐＨ範囲における製剤のｐＨを維持又は制御する効果を有する、化合物の溶液を指す。適度に酸性のｐＨから適度に塩基性のｐＨにてｐＨを制御するための許容し得るバッファーには、これらに限定されないが、リン酸、酢酸、クエン酸、ＴＲＩＳ、及びヒスチジン、その塩及び／又は酸性形態、及び／又は任意のこれらの組合せが含まれる。「ＴＲＩＳ」は、２−アミノ−２−ヒドロキシメチル−１，３−プロパンジオール、及び任意の薬理学的に許容されるその塩を指す。本発明による好ましいバッファーは、ヒスチジンバッファーである。
【００２４】
バッファーを作製する化合物はまた、「緩衝剤」と称される。バッファーのｐＨは、緩衝剤によって与えられる緩衝効果により、少量の強い酸又は塩基の追加に際して僅かにのみ変化する。ヒスチジンバッファーの所与の濃度は、例えば一般に、ヒスチジンの共役塩基形態（すなわち、プロトン化されていないイミダゾール形態）及びヒスチジンの共役酸形態（すなわち、プロトン化されたイミダゾリウム形態；又はヒスチジン塩）の合わせた濃度に関することが留意される。このような濃度は、ヒスチジン又はその塩の投入量への参照によって計算することが通常容易である。組成物の全体的なｐＨは一般に、関連する緩衝種のそれぞれの平衡濃度の反映されたものである（すなわち、緩衝剤のその酸／塩基共役に対するバランス）。
【００２５】
本明細書において、用語「緩衝剤」は、バッファー又はバッファー溶液の酸又は塩基の構成成分（通常弱酸又は弱塩基）を指す。緩衝剤は、あらかじめ決定された値に又はその付近に、ある特定の溶液のｐＨを維持するのを助け、緩衝剤は、一般に、あらかじめ決定された値を補完するために選ばれる。緩衝剤は、適切には、所望の緩衝効果をもたらす単一の化合物であり、とりわけ前記緩衝剤が、適切な量（所望のあらかじめ決定されたｐＨに依存）のその対応する酸／塩基共役と混合される（且つ、と適切にプロトン交換をすることができる）場合に又はその必要とされる量の対応する酸／塩基共役がインサイチューで形成されるのであれば、これは、必要とされるｐＨに達するまで、強酸又は強塩基を追加することによって実現されてもよい。
【００２６】
特に指定のない限り、アミノ酸が存在する状況での又は他の場合には組成物（とりわけ本発明の医薬液体組成物）内での「アミノ酸」に対する本明細書における言及は、特定のもの（例えば、アルギニン、ヒスチジン）にしても、全般的なもの（例えば、任意のアミノ酸）にしても、対応する遊離アミノ酸に関する（一貫性のために、量は、それ自体、適切には遊離アミノ酸への参照によって計算されるが、その／それらのプロトン化状態及び／又は塩形態に関係ない）。これは、適切には、天然及び／又は人工アミノ酸を含んでいてもよい。異なる指定のない限り、そのような言及は、ペプチド又はタンパク質（そのようなアミノ酸残基がペプチド結合を介して連結される）等の、より大きな化合物（複数の化合物を含む組成物ではなく）の一部分として共有結合で組み込まれたアミノ酸残基に関することを意図するものではない。そのため、例えば、トシリズマブは、タンパク質としてアミノ酸残基を含有するが、トシリズマブは、いかなる「遊離アミノ酸」も含むと見なされない。例として、「メチオニンを含まない」と定義される組成物は、いかなる遊離メチオニンも含有しないが、組成物は、なお、タンパク質自体がメチオニン残基を含む１つ以上のタンパク質（例えば、トシリズマブ）を含んでいてもよい。特に指定のない限り、任意の１つ以上の「アミノ酸」に対する本明細書における言及は、特定のものにしても、全般的なものにしても、適切には、そのＬ−立体異性体又はラセミ化合物、最も適切にはＬ−アミノ酸に関する。その特性によって、前記遊離アミノ酸は、安定剤であり得る。
【００２７】
用語「実質的に含まない」は、組成物（例えば「メチオニンを実質的に含まない液体医薬組成物」）のある特定の構成成分に関して使用される場合、本質的に前記構成成分のどれも添加されていない組成物を指す。上記に説明されるように、そのような言及は、タンパク質構造内のアミノ酸残基の存在と関係がない。組成物に、ある特定の構成成分が「実質的に含まない」場合、前記組成物は、適切には０．００１重量％以下の前記構成成分、適切には０．０００１重量％以下の前記構成成分、適切には０．００００１重量％以下、より適切には０．０００００１重量％以下を含む。
【００２８】
用語「全く含まない」は、組成物（例えば「メチオニンを全く含まない液体医薬組成物」）のある特定の構成成分に関して使用される場合、前記構成成分のどれも含有していない組成物を指す。上記に説明されるように、そのような言及は、タンパク質構造内のアミノ酸残基の存在と関係がない。
【００２９】
用語「安定性」は、本明細書において使用されるように、本発明による製剤におけるトシリズマブの物理的、化学的、及び立体構造的な安定性を指す（及び生物学的な効力の維持を含む）。タンパク質製剤の不安定性は、化学的な分解若しくはより高次のポリマーを形成するタンパク質分子の凝集、脱グリコシル、グリコシル化の修飾、酸化、又は本発明の抗体の少なくとも１つの生物学的活性を低下させる任意の他の構造的な修飾によって引き起こされてもよい。
【００３０】
用語「安定している」溶液又は製剤は、本明細書において使用されるように、その中のタンパク質の分解、修飾、凝集の程度、生物学的活性の損失、及びその他同種のものが、ある程度コントロールされ、時間とともに容認できないほど増加しない１つの溶液又は製剤である。それは、したがって、一般に、保存／保管の間の構成成分、典型的にその活性剤又は組成物の物理的な安定性及び／又は化学的な安定性及び／又は生物学的な安定性を指す。好ましくは、製剤は、例えば２〜８℃で少なくとも１２か月の期間にわたって抗体活性の少なくとも８０％超を保持する。本発明の安定化抗体製剤は、好ましくは、例えば２〜８℃で保存された場合、少なくとも約１２か月、１８か月、より好ましくは少なくとも２０か月、さらにより好ましくは約２４か月の有効期間を有する。本発明の抗体製剤の安定性をモニターするための方法は、当技術分野において利用可能であり、本明細書において開示される実施例に記載される方法を含む。
【００３１】
用語「安定化剤」、又は「安定剤」は、本明細書において使用する場合、活性成分（例えば、トシリズマブ）の溶解度を改善させ、かつ凝集物形成に対して前記活性成分を安定化させる化合物である。これはまた、製剤中の他の化合物との活性成分の反応速度を阻害又は低減させることができる。製剤のための安定剤の例は、アミノ酸又はタンパク質（例えば、グリシン、アルギニン、アルブミン）、有機酸（例えば、乳酸若しくはその塩である乳酸塩）、又は糖（例えば、デキストロース、マンニトール、スクロース若しくはラクトース）である。本発明によれば、好ましい安定化剤は、乳酸塩、乳酸及び／又はアルギニンである。
【００３２】
用語「等張剤」又は「等張化剤（tonicifier）」は、本明細書において使用する場合、生理学的に耐性があり、かつ製剤に適した張性を与える化合物である。これは、製剤と接触している細胞膜を横切る正味の水の流れを特に防止する。化合物、例えば、グリセリンは、このような目的のために一般に使用される。本発明によれば、好ましい等張剤は、塩、さらにより好ましくは、塩化ナトリウム（ＮａＣｌ）である。
【００３３】
用語「界面活性剤」は、本明細書において使用されるように、特に、疎水性の油性物質の水溶解度を増加させるために使用することができる又は他の場合には、異なる疎水性を有する２つの物質の混和性を増加させることができる可溶性の化合物を指す。この理由で、これらのポリマーは、産業上の利用、化粧品、及び医薬品において共通して使用される。それらはまた、薬剤送達への利用のためのモデル系として、特に、標的組織への薬剤の吸収又はその送達を修飾するために使用される。よく知られている界面活性剤は、ポリソルベート（Tween（登録商標）としても知られているポリオキシエチレン誘導体）並びにポロキサマー（すなわち、Pluronics（登録商標）としても知られているエチレンオキシド及びプロピレンオキシドをベースとするコポリマー）を含む。本発明によれば、好ましい界面活性剤は、ポリソルベート界面活性剤、さらにより好ましい界面活性剤はポリソルベート８０である。
【００３４】
本明細書において、組成物、とりわけ緩衝剤のある特定の構成成分の特定の量に対する言及は、組成物を形成する場合に、そのような構成成分が非無水形態で使用されてもよいが、関連する構成成分の純粋な無水形態（又は前記量の純粋な無水形態を使用することによって形成される組成物）の量に適切には関する。任意の対応する非無水形態（例えば、一水和物、二水和物など）の量は、単に適切な乗数を使用することによって容易に計算されてもよい。例えば、特に指定のない限り（実施例に従う、数量はヒスチジンに関する）、ヒスチジンに関して明記される量は、約１５５ｇ／モルの分子量を有するヒスチジンの無水形態を指す。当業者は、目標濃度を得るために、使用される構成成分の形態に依存して、希釈剤／水の数量をうまく調節する方法を容易に理解するのは現実的だろう。
【００３５】
「治療すること」又は「治療」に対する言及が、予防処置及び状態について確立した症状の軽減を含むことが十分に理解されるべきである。状況、障害、又は状態を「治療すること」又はそれらの「治療」は、（１）状況、障害、若しくは状態により苦しむ可能性があり若しくはそれにかかりやすい可能性があるが、状況、障害、若しくは状態の臨床的若しくは準臨床的な症状をまだ経験していない若しくは表していないヒトにおいて発症する状況、障害、若しくは状態の臨床症状の出現を予防する若しくは遅延させること、（２）状況、障害、若しくは状態を阻害すること、すなわち、疾患の発症若しくはその再発（維持療法の場合）又はその少なくとも１つの臨床的な若しくは準臨床的な症状を阻止する、低下させる、又は遅延させること、又は（３）疾患を緩和させる若しくは減弱させること、すなわち状況、障害、若しくは状態又はその臨床的な若しくは準臨床的な症状の少なくとも１つの後退を引き起こすことを含む。
【００３６】
組成物が、複数の成分を含むと言われる場合（任意に選択される特定の量の濃度で又は特定の範囲の濃度で）、前記組成物は、任意選択で、詳細に述べられるもの以外のさらなる成分を含んでいてもよい。
【００３７】
発明の詳細な説明
本発明の主な目的は、抗体トシリズマブを含む液体医薬組成物であり、前記抗体は、ＩＬ−６Ｒ活性を中和させる（阻害するか、又は拮抗させる）ことができる。前記トシリズマブ医薬組成物は好ましくは、５．５〜７．０の範囲のｐＨを保つ緩衝剤としてヒスチジンと、乳酸又はその塩から選択される安定剤とを含む。組成物は好ましくは、メチオニンを（実質的に又は全く）含有しない。さらに、組成物は、任意選択で、本明細書において明記した任意の量、濃度、又は形態の、液体医薬組成物に関して本明細書において定義される任意の１つ若しくは複数のさらなる構成成分（例えば、等張化剤、界面活性剤などを含めた）を含んでもよく、組成物は、任意選択で、液体医薬組成物に関して本明細書において示される任意の１つ若しくは複数のパラメーター又は特性を示す（例えば、ｐＨ、重量オスモル濃度）。好ましくは、本発明による液体医薬組成物は、トシリズマブと、５．５〜７．０の範囲のｐＨに保つ緩衝剤としてのヒスチジンと、乳酸又はその塩から選択される安定剤と、ポリソルベート界面活性剤と、遊離アミノ酸と、任意選択で等張剤として塩とを含む。遊離アミノ酸はまた、さらなる安定剤として使用することができる。
【００３８】
本発明によれば、全体として、液体医薬組成物は、メチオニン（例えば、Ｌ−メチオニン）を（実質的に又は全く）含まない。
【００３９】
本発明による液体医薬組成物は、全体として、１０〜２５０ｍｇ／ｍｌ又は約１０〜約２５０ｍｇ／ｍｌ、好ましくは、１５〜２００ｍｇ／ｍＬ又は約１５〜約２００ｍｇ／ｍＬの濃度でトシリズマブを含む。例えば、トシリズマブは、１５、２０、３０、４０、５０、６０、８０、１００、１２０，１４０、１６０、１８０若しくは２００ｍｇ／ｍｌ、又は約１５、約２０、約３０、約４０、約５０、約６０、約８０、約１００、約１２０、約１４０、約１６０、約１８０若しくは約２００ｍｇ／ｍｌの濃度で製剤中に存在し得る。
【００４０】
好ましくは、本発明の製剤は、少なくとも１２カ月の期間にわたって（最初の使用の前）、製剤及び／又はパッケージングの時の抗ＩＬ−６Ｒ生物活性の少なくとも８０％を保持する。抗ＩＬ−６Ｒ活性は、任意の公知の方法によって測定し得る。
【００４１】
本発明による液体医薬組成物は、全体として、５．５〜７．０又は約５．５〜約７．０の範囲のｐＨを有する。好ましくは、液体医薬組成物は、５．５〜６．５又は約５．５〜約６．５の範囲のｐＨを有する。適切には、液体医薬組成物は、５．８又は約５．８〜６．２、例えば、約６．０のｐＨを有する。
【００４２】
本発明による緩衝剤は、ヒスチジンであり、１０〜２５ｍＭ又は約１０〜約２５ｍＭの濃度である。一実施形態では、ヒスチジンは、１５〜２５ｍＭ又は約１５〜約２５ｍＭの濃度で、好ましくは、２０〜２５ｍＭの濃度で、さらに好ましくは、２１ｍＭ又は約２１ｍＭの濃度で存在する。
【００４３】
別の態様では、液体医薬組成物は、０．１〜１０ｍｇ／ｍＬ又は約０．１〜約１０ｍｇ／ｍＬの濃度で緩衝剤（適切にはヒスチジン緩衝種−例えば、ヒスチジン自体）を含む。一実施形態では、緩衝剤は、０．５〜５ｍｇ／ｍＬ又は約０．５〜約５ｍｇ／ｍＬ、より好ましくは、２〜４ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する。例えば、緩衝剤は、２．０、２．２５、２．５、２．７５、３．０、３．２５、３．５、３．７５若しくは４．０ｍｇ／ｍＬ、又は約２．０、約２．２５、約２．５、約２．７５、約３．０、約３．２５、約３．５、約３．７５若しくは約４．０ｍｇ／ｍＬの濃度で製剤中に存在し得る。一実施形態では、緩衝剤は、ヒスチジン（例えば、Ｌ−ヒスチジン）であり、３．２５ｍｇ／ｍＬ又は約３．２５ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する。
【００４４】
別の態様では、液体医薬組成物は、約５：１〜約２００：１の、緩衝剤とトシリズマブのモル比で緩衝剤（適切にはヒスチジン緩衝種−例えば、ヒスチジン自体）を含み、製剤中のトシリズマブの濃度によって主に決まる。例えば、トシリズマブが２０ｍｇ／ｍＬであるとき、モル比は、最も適切には約１４５：１であり、トシリズマブが１８０ｍｇ／ｍＬであるとき、モル比は、最も適切には約１７：１である。
【００４５】
本発明による液体医薬組成物は、全体として、安定化剤、最も好ましくは、乳酸ナトリウム又は乳酸を含む。乳酸ナトリウム及び乳酸は両方とも、液体トシリズマブ製剤中のヒスチジンと一緒に使用するための特に有利な安定化剤として本発明者らによって実際に同定された。
【００４６】
液体医薬組成物は、１〜２０ｍＭ又は約１〜約２０ｍＭ、好ましくは、５〜１５ｍＭ又は約５〜約１５ｍＭ、より好ましくは、８〜１２ｍＭ又は約８〜約１２ｍＭの濃度で安定化剤（例えば、乳酸ナトリウム又は乳酸）を含む。特定の実施形態では、安定化剤は、乳酸ナトリウム又は乳酸であり、１０ｍＭ又は約１０ｍＭの濃度で液体医薬組成物中に存在する。
【００４７】
別の態様では、液体医薬組成物は、０．５ｍｇ／ｍＬ〜５ｍｇ／ｍＬ又は約０．５ｍｇ／ｍＬ〜約５ｍｇ／ｍＬ、より好ましくは、１ｍｇ／ｍＬ〜２ｍｇ／ｍＬ又は約１ｍｇ／ｍＬ〜約２ｍｇ／ｍＬ、さらにより好ましくは、１．１５ｍｇ／ｍＬ又は約１．１５ｍｇ／ｍＬの濃度で安定化剤（例えば、乳酸ナトリウム又は乳酸）を含む。特定の実施形態では、安定化剤は、乳酸ナトリウム又は乳酸であり、１．１２ｍｇ／ｍＬ又は約１．１２ｍｇ／ｍＬの濃度で液体医薬組成物中に存在する。
【００４８】
別の態様では、液体医薬組成物は、約５：１〜約１００：１の安定化剤とトシリズマブのモル比で安定化剤（例えば、乳酸ナトリウム又は乳酸）を含み、製剤中のトシリズマブの濃度によって主に決まる。例えば、２０ｍｇ／ｍＬのトシリズマブを含む組成物において、モル比は、最も適切には約７２：１であり、１８０ｍｇ／ｍＬのトシリズマブを含む組成物において、モル比は、最も適切には約８：１である。
【００４９】
本発明による液体医薬組成物は、全体として、ヒスチジン及びメチオニン以外の少なくとも１つの遊離アミノ酸を含む。好ましくは、前記遊離アミノ酸は、アルギニンである。前記構成成分はまた、良好な安定剤であることが示されてきた。
【００５０】
液体医薬組成物は、５０〜１５０ｍＭ又は約５０〜約１５０ｍＭ、好ましくは、７５〜１２５ｍＭ又は約７５〜約１２５ｍＭ、より好ましくは、９０〜１１０ｍＭ又は約９０〜約１１０ｍＭの濃度で少なくとも１つの遊離アミノ酸（例えば、アルギニン）を含む。例えば、遊離アミノ酸は、９０、９５、１００、１０５若しくは１１０ｍＭ、又は約９０、約９５、約１００、約１０５若しくは約１１０ｍＭの濃度で存在する。特定の実施形態では、少なくとも１つの遊離アミノ酸は、アルギニン（例えば、Ｌ−アルギニン）であり、１００ｍＭ又は約１００ｍＭの濃度で液体医薬組成物中に存在する。
【００５１】
別の態様では、液体医薬組成物は、１０ｍｇ／ｍＬ〜２５ｍｇ／ｍＬ又は約１０ｍｇ／ｍＬ〜約２５ｍｇ／ｍＬ、好ましくは、１５ｍｇ／ｍＬ〜２０ｍｇ／ｍＬ又は約１５ｍｇ／ｍＬ〜約２０ｍｇ／ｍＬ、より好ましくは、１６ｍｇ／ｍＬ〜１８ｍｇ／ｍＬ又は約１６ｍｇ／ｍＬ〜約１８ｍｇ／ｍＬの濃度で少なくとも１つの遊離アミノ酸（例えば、アルギニン）を含む。例えば、少なくとも１つの遊離アミノ酸は、１６．０、１６．５、１７．０、１７．５若しくは１８．０ｍｇ／ｍＬ、又は約１６．０、約１６．５、約１７．０、約１７．５若しくは約１８．０ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する。特定の実施形態では、少なくとも１つの遊離アミノ酸は、アルギニン（例えば、Ｌ−アルギニン）であり、１７．４ｍｇ／ｍＬ又は約１７．４ｍｇ／ｍＬの濃度で液体医薬組成物中に存在する。
【００５２】
別の態様では、液体医薬組成物は、約５０：１〜約８００：１の遊離アミノ酸とトシリズマブのモル比で少なくとも１つの遊離アミノ酸（例えば、アルギニン）を含み、製剤中の抗体の濃度によって主に決まる。例えば、２０ｍｇ／ｍＬのトシリズマブを含む組成物において、モル比は、好ましくは、約７２５：１であり、１８０ｍｇ／ｍＬのトシリズマブを含む組成物において、モル比は、最も適切には約８０：１である。
【００５３】
本発明による液体医薬組成物は、全体として、界面活性剤を含有する。好ましい界面活性剤は、ポリソルベート、例えば、ポリソルベート２０（代替の名称：ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウレート）、ポリソルベート４０（代替の名称：ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノパルミテート）、ポリソルベート６０（代替の名称：ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノステアレート）又はポリソルベート８０（代替の名称：ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート、又はTween80（登録商標））である。好ましくは、界面活性剤は、ポリソルベート８０である。
【００５４】
液体医薬組成物は、０．０５〜０．５ｍＭ又は約０．０５〜約０．５ｍＭ、好ましくは、０．０７５〜０．３ｍＭ又は約０．０７５〜約０．３ｍＭ、より好ましくは、０．１〜０．２ｍＭ又は約０．１〜約０．２ｍＭの濃度で、界面活性剤、例えば、ポリソルベート８０を含む。例えば、界面活性剤は、約０．１０、０．１１、０．１２、０．１３、０．１４、０．１５、０．１６、０．１７、０．１８、０．１９若しくは０．２ｍＭ、又は約０．１０、約０．１１、約０．１２、約０．１３、約０．１４、約０．１５、約０．１６、約０．１７、約０．１８、約０．１９若しくは約０．２ｍＭの濃度で存在する。特定の実施形態では、界面活性剤はポリソルベート８０であり、０．１５２ｍＭ又は約０．１５２ｍＭの濃度で液体医薬組成物中に存在する。
【００５５】
別の態様では、液体医薬組成物は、０．０５〜１ｍｇ／ｍＬ又は約０．０５〜約１ｍｇ／ｍＬ、好ましくは、０．１〜１ｍｇ／ｍＬ又は約０．１〜約１ｍｇ／ｍＬ、より好ましくは、０．１５〜０．３ｍｇ／ｍＬ又は約０．１５〜約０．３ｍｇ／ｍＬの濃度で、界面活性剤、例えば、ポリソルベート８０を含む。例えば、界面活性剤は、０．１５、０．１６、０．１７、０．１８、０．１９、０．２０、０．２１、０．２２、０．２３、０．２４、０．２５若しくは０．３ｍｇ／ｍＬ、又は約０．１５、約０．１６、約０．１７、約０．１８、約０．１９、約０．２０、約０．２１、約０．２２、約０．２３、約０．２４、約０．２５若しくは約０．３ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する。特定の実施形態では、界面活性剤はポリソルベート８０であり、０．２ｍｇ／ｍＬ又は約０．２ｍｇ／ｍＬの濃度で液体医薬組成物中に存在する。
【００５６】
別の態様では、液体医薬組成物は、約１：１５〜約１５：１０の界面活性剤とトシリズマブのモル比で界面活性剤（例えば、ポリソルベート８０）を含み、製剤中の抗体の濃度によって主に決まる。例えば、２０ｍｇ／ｍＬのトシリズマブを含む組成物において、モル比は、好ましくは、約１１：１０であり、１８０ｍｇ／ｍＬのトシリズマブを含む組成物において、モル比は、最も適切には約１：８である。
【００５７】
本発明の液体医薬組成物は、任意の１つ以上の薬学的に許容され得る希釈剤又はその混合物を含んでいてもよい。しかしながら、最も適切には、液体医薬組成物は、水性医薬組成物である。最も適切には、希釈剤は水であり、適切には水のみである。水は、適切には注射用水（ＷＦＩ）である。希釈剤は、例えば、重量百分率が１００％になるように、任意の液体医薬組成物中の成分のバランスを取ってもよい。液体医薬組成物の任意の構成成分に関して本明細書において示される任意の濃度は、任意の他の構成成分と混和した希釈剤における（適切には溶解された）前記構成成分の濃度に相当する。
【００５８】
本発明の液体医薬組成物は、適切には溶液であり、好ましくは粒子又は沈殿物を（実質的に又は全く）含まない。
【００５９】
本発明による液体医薬組成物は、全体として、１種若しくは複数の添加剤、例えば、塩（等張剤として作用する）をさらに含み得る。特定の実施形態では、等張剤は、塩化ナトリウム（ＮａＣｌ）であるか、又は塩化ナトリウム（ＮａＣｌ）を含む。特定の実施形態では、等張剤は、塩化ナトリウムである。塩化ナトリウムは、液体トシリズマブ製剤中のヒスチジンバッファーと一緒に使用するために特に有利な等張剤である。
【００６０】
適切には、液体医薬組成物は、５〜５０ｍＭ又は約５〜約５０ｍＭ、好ましくは、１０〜３０ｍＭ又は約１０〜約３０ｍＭ、例えば、約１０ｍＭ、約１２．５ｍＭ、約１５ｍＭ、約１７．５ｍＭ、約２０ｍＭ、約２２．５ｍＭ、約２５ｍＭ、約２７．５ｍＭ、又は約３０．２５ｍＭの濃度で塩（例えば、塩化ナトリウム）を含む。一実施形態では、塩は、１０ｍＭ又は約１０ｍＭの濃度で存在する。特定の実施形態では、塩は、塩化ナトリウムであり、１０ｍＭ又は約１０ｍＭの濃度で存在する。
【００６１】
別の態様では、液体医薬組成物は、０．１ｍｇ／ｍＬ〜５ｍｇ／ｍＬ又は約０．１ｍｇ／ｍＬ〜約５ｍｇ／ｍＬ、好ましくは、０．２５ｍｇ／ｍＬ〜２．５ｍｇ／ｍＬ又は約０．２５ｍｇ／ｍＬ〜約２．５ｍｇ／ｍＬ、より適切には、０．４ｍｇ／ｍＬ〜２ｍｇ／ｍＬ又は約０．４ｍｇ／ｍＬ〜約２ｍｇ／ｍＬの濃度で塩（例えば、ＮａＣｌ）を含む。一実施形態では、塩は、０．５ｍｇ／ｍＬ〜１．２ｍｇ／ｍＬ又は約０．５ｍｇ／ｍＬ〜約１．２ｍｇ／ｍＬ、最も適切には約０．５８ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する。特定の実施形態では、塩は塩化ナトリウムであり、約０．５８ｍｇ／ｍＬの濃度で存在する。
【００６２】
別の態様では、液体医薬組成物は、約２：１〜約１００：１の塩とトシリズマブのモル比で塩（例えば、ＮａＣｌ）を含み、製剤中のトシリズマブの濃度によって主に決まる。例えば、２０ｍｇ／ｍＬのトシリズマブを含む組成物において、モル比は、好ましくは、約７２：１であり、１８０ｍｇ／ｍＬのトシリズマブを含む組成物において、モル比は、最も適切には約８：１である。
【００６３】
さらなる態様において、本発明はまた、トシリズマブと、本明細書に定義されているような液体医薬組成物を形成するのに必要とされる任意の関連性のある構成成分とを混合することを含む、液体トシリズマブ組成物を安定化させる方法を提供する。したがって、本明細書において提供するのは、液体医薬組成物を製造する方法であり、この方法は、トシリズマブ、ヒスチジンバッファー、及び乳酸又はその塩、ポリソルベート界面活性剤、遊離アミノ酸及び任意選択で塩（例えば、ＮａＣｌ、等張剤として）を一緒に混合することを含む。これらの化合物のそれぞれ（すなわち、トシリズマブ、ヒスチジンバッファー、乳酸又はその塩、界面活性剤、少なくとも１つの遊離アミノ酸、及び／又は塩）は、本明細書に記載されている濃度、ｐＨ、及び／又は比によって使用することができる。必要に応じて、当業者は、下記の実施例セクション、又は液体医薬組成物（特に、注射器を介した注射のためのもの）を形成するための当技術分野で周知の技術を参照し得る。
【００６４】
一実施形態では、方法は、希釈剤（例えば、水）において関連する構成成分を一緒に混合することを含み、構成成分はすべて、希釈剤に（実質的に又は完全に）溶解される。
【００６５】
本明細書において定義される液体医薬組成物を製造するための方法によって入手可能な、その方法によって得られる、又はその方法によって直接得られる液体医薬組成物もまた提供される。
【００６６】
適切には、本発明の液体医薬組成物は、少なくとも６か月、適切には少なくとも１２か月、適切には少なくとも１８か月、より適切には少なくとも２４か月の有効期間を有する。適切には、本発明の液体医薬組成物は、２〜８℃の温度で、少なくとも６か月、適切には少なくとも１２か月、適切には少なくとも１８か月、より適切には少なくとも２４か月の有効期間を有する。
【００６７】
最終液体医薬組成物を濾過して、適切には微粒子状物質を除去し得る。適切には濾過は、１μｍの、又は１μｍ未満の、適切には０．２２μｍのサイズのフィルターを通す。例えば、濾過は、０．２２μｍのＰＥＳフィルター又はＰＶＤＦフィルターを通して行われる。
【００６８】
さらなる態様において、本発明は、本明細書に定義されているような液体医薬組成物を含む薬物送達デバイスを提供する。好ましくは、薬物送達デバイスは、その中に医薬組成物が存在するチャンバーを含む。より好ましくは、薬物送達デバイスは、滅菌されている。
【００６９】
薬物送達デバイスは、バイアル、アンプル、注射器、注射ペン（例えば、注射器を本質的に組み込んでいる）、又は静脈内バッグであり得る。薬物送達デバイスが注射器であるとき、これは好ましくは、注射ペンである。適切には、注射器は、ガラス製の注射器である。
【００７０】
さらなる態様では、本発明は、薬剤送達デバイス、（液体医薬組成物はそこに組み込まれていない）、本明細書において定義される液体医薬組成物（任意選択で、別々のパッケージ又は容器に含有される）、及び任意選択で、液体医薬組成物の投与（例えば、皮下又は静脈内）に関する指示を有する一式の説明書を含む要素のキットを提供する。次いで、使用者は、投与前に、液体医薬組成物（バイアル又はアンプルなどで提供されてもよい）により薬剤送達デバイスを充填してもよい。
【００７１】
本明細書において定義される液体医薬組成物を含むパッケージもまた、記載される。適切には、パッケージは、本明細書において定義される薬剤送達デバイス、適切には、複数の薬剤送達デバイスを含む。パッケージは、１つ以上の薬剤送達デバイスを含有するための任意の適切な容器を含んでいてもよい。
【００７２】
本発明は、適切には本明細書において定義される薬剤送達デバイスを製造するための方法であって、薬剤送達デバイス内に、本明細書において定義される液体医薬組成物を組み込むことを含む方法をさらに提供する。そのような製造は、典型的に、本明細書において定義される液体医薬組成物を、注射器に、適切にはそれに添付される針を介して装填することを含む。針は、その後、除去されてもよく、交換されてもよく、残しておいてもよい。本明細書において定義される製造の方法によって入手可能な、その方法によって得られる、又はその方法によって直接得られる薬剤送達デバイスもまた、開示される。
【００７３】
パッケージを製造するための方法であって、パッケージ内に本明細書において定義される液体医薬組成物を組み込むことを含む方法もまた、記載される。適切には、これは、１つ以上の薬剤送達デバイス内に前記液体医薬組成物を組み込み、その後、パッケージ内に存在する容器の中に、１つ以上のあらかじめ充填された薬剤送達デバイスを組み込むことによって実現される。本発明は、そのうえ、本明細書において定義される製造の方法によって入手可能な、その方法によって得られる、又はその方法によって直接得られるパッケージを提供する。
【００７４】
本明細書において定義される液体医薬組成物は、任意の１つ以上の前述の疾患又は医学的障害を治療するために使用されてもよい。特定の一実施形態では、液体医薬組成物は、関節リウマチ及び／又は若年性特発性関節炎を治療するために使用される。別の態様では、液体医薬組成物は、巨細胞性動脈炎又は全身性硬化症等の他の疾患を治療するために使用される。
【００７５】
液体医薬組成物は、適切には、静脈内注射又は皮下注射を介して、非経口的に投与される。
【００７６】
特定の実施形態
一実施形態では、液体医薬組成物は、
−  トシリズマブ；
−  ｐＨを約５．５〜７．０に保つヒスチジンバッファー；
−  乳酸又はその塩から選択される安定剤；
−  遊離アミノ酸（例えば、アルギニン）；
−  界面活性剤（例えば、ポリソルベート８０）；
−  注射用水；及び
−  任意選択で塩（例えば、ＮａＣｌ）
を含む。
【００７７】
一実施形態では、液体医薬組成物は、
−  １０〜２５０ｍｇ／ｍＬの濃度のトシリズマブ；
−  ｐＨを約５．５〜７．０に保つヒスチジンバッファー；
−  乳酸又はその塩から選択される安定剤；
−  遊離アミノ酸（例えば、アルギニン）；
−  界面活性剤（例えば、ポリソルベート８０）；
−  注射用水；及び
−  任意選択で塩（例えば、ＮａＣｌ）
を含む。
【００７８】
一実施形態では、液体医薬組成物は、
−  トシリズマブ；
−  ｐＨを約５．５〜７．０に保つヒスチジンバッファーであって、１０〜２５ｍＭの濃度の、又は、０．５〜５ｍｇ／ｍＬの濃度の、又は、５：１〜２００：１のバッファーと抗体のモル比のバッファー；
−  乳酸又はその塩から選択される安定剤；
−  遊離アミノ酸（例えば、アルギニン）；
−  界面活性剤（例えば、ポリソルベート８０）；
−  注射用水；及び
−  任意選択で塩（例えば、ＮａＣｌ）
を含む。
【００７９】
一実施形態では、液体医薬組成物は、
−  トシリズマブ；
−  ｐＨを約５．５〜７．０に保つヒスチジンバッファー；
−  乳酸又はその塩から選択される安定剤であって、５〜１５ｍＭの濃度の、又は、０．５〜５ｍｇ／ｍＬの濃度の、又は、５：１〜１００：１の安定剤と抗体のモル比の安定剤；
−  遊離アミノ酸（例えば、アルギニン）；
−  界面活性剤（例えば、ポリソルベート８０）；
−  注射用水；及び
−  任意選択で塩（例えば、ＮａＣｌ）
を含む。
【００８０】
一実施形態では、液体医薬組成物は、
−  トシリズマブ；
−  ｐＨを約５．５〜７．０に保つヒスチジンバッファー；
−  乳酸又はその塩から選択される安定剤；
−  遊離アミノ酸（例えば、アルギニン）であって、５０〜１５０ｍＭの濃度の、又は、１０〜２５ｍｇ／ｍＬの濃度の、又は、５０：１〜８００：１の遊離アミノ酸と抗体のモル比の遊離アミノ酸；
−  界面活性剤（例えば、ポリソルベート８０）；
−  注射用水；及び
−  任意選択で塩（例えば、ＮａＣｌ）
を含む。
【００８１】
一実施形態では、液体医薬組成物は、
−  トシリズマブ；
−  ｐＨを約５．５〜７．０に保つヒスチジンバッファー；
−  乳酸又はその塩から選択される安定剤；
−  遊離アミノ酸（例えば、アルギニン）；
−  界面活性剤（例えば、ポリソルベート８０）であって、０．０５〜０．５５ｍＭの濃度の、又は、０．０５〜１ｍｇ／ｍＬの濃度の、又は、１：１５〜１５：１０の界面活性剤と抗体のモル比の界面活性剤；
−  注射用水；及び
−  任意選択で塩（例えば、ＮａＣｌ）
を含む。
【００８２】
一実施形態では、液体医薬組成物は、
−  トシリズマブ；
−  ｐＨを約５．５〜７．０に保つヒスチジンバッファー；
−  乳酸又はその塩から選択される安定剤；
−  遊離アミノ酸（例えば、アルギニン）；
−  界面活性剤（例えば、ポリソルベート８０）；
−  注射用水；及び
−  任意選択で塩（例えば、ＮａＣｌ）であって、５〜５０ｍＭの濃度の、又は、０．１〜５ｍｇ／ｍＬの濃度の、又は、２：１〜１００：１の塩と抗体のモル比の塩
を含む。
【００８３】
一実施形態では、液体医薬組成物は、
−  １０〜２５０ｍｇ／ｍＬの濃度のトシリズマブ；
−  ｐＨを約５．５〜７．０に保つヒスチジンバッファーであって、１０〜２５ｍＭの濃度の、又は、０．５〜５ｍｇ／ｍＬの濃度の、又は、５：１〜２００：１のバッファーと抗体のモル比のバッファー
−  乳酸又はその塩から選択される安定剤であって、５〜１５ｍＭの濃度の、又は、０．５〜５ｍｇ／ｍＬの濃度の、又は、５：１〜１００：１の安定剤と抗体のモル比の安定剤；
−  遊離アミノ酸（例えば、アルギニン）であって、５０〜１５０ｍＭの濃度の、又は、１０〜２５ｍｇ／ｍＬの濃度の、又は、５０：１〜８００：１の遊離アミノ酸と抗体のモル比の遊離アミノ酸；
−  界面活性剤（例えば、ポリソルベート８０）であって、０．０５〜０．５５ｍＭの濃度の、又は、０．０５〜１ｍｇ／ｍＬの濃度の、又は、１：１５〜１５：１０の界面活性剤と抗体のモル比の界面活性剤；
−  注射用水；及び
−  任意選択で塩（例えば、ＮａＣｌ）であって、５〜５０ｍＭの濃度の、又は
、０．１〜５ｍｇ／ｍＬの濃度の、又は、２：１〜１００：１の塩と抗体のモル比の塩
を含む。
【実施例】
【００８４】
材料及び機器
下記の材料を、実施例において記載する製剤の調製において使用した。
【００８５】
【表２】
2019536761.tif 000003
【００８６】
分析技術及びプロトコル
プロトコルの下記の分析法は、下記の表において記述する理由によって、以下実施例及びスクリーニング実験において用いた。
【００８７】
【表３】
2019536761.tif 000004
【００８８】
上記の分析方法のそれぞれについての個々のプロトコールを、下記に順番に記載し、実施例及びスクリーニング実験において任意のそのような分析方法に言及し、これらのプロトコールを使用した。
【００８９】
サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）
トシリズマブ調製物の高速サイズ排除クロマトグラフィーは、３００ｍｍ×７．８ｍｍのカラム中に５μｍの相ジオールシリカ２５０Å細孔パッキング材料を有する、Dionex Ultimate3000ＵＨＰＬＣ（登録商標）focusedシステムを使用して行った。カラムを、２００ｍＭのリン酸ナトリウムバッファー、２５０ｍＭのＮａＣｌ、ｐＨ７．０移動相中で平衡化させた。流量は０．５ｍＬ／分であり、ＵＶ検出（２８０ｎｍ）を使用した。注入量は２０μＬであった。全ての分析は、周囲温度にて行った。
【００９０】
イオン交換クロマトグラフィー（ＩＥＸ−ＨＰＬＣ）
トシリズマブ調製物の高速イオン交換クロマトグラフィーは、１００ｍｍ×４．６ｍｍのカラム中に７μｍの粒子を有する、Agilent technologies1200シリーズＨＰＬＣ（登録商標）システムを使用して行った。カラムを、２０ｍＭのリン酸ナトリウムバッファー、ｐＨ７、２５０ｍＭのＮａＣｌ、ｐＨ７．０移動相中で平衡化させ、溶出は２０ｍＭのリン酸ナトリウムバッファー、１ＭのＮａＣｌ、ｐＨ７．０による勾配方法で行った。流量は０．３ｍＬ／分であり、ＵＶ検出（２１４ｎｍ及び２８０ｎｍ）を使用した。注入量は１０μＬであった。全ての分析は、４０℃にて行った。
【００９１】
目視検差
目に見える粒子は、ヨーロッパ薬局方モノグラフ２．９．２０．（徴粒子汚染：目に見える粒子）を使用して適切には検出した。装置は、下記を含む目視ステーションからなる。
・垂直の位置で保持された適切なサイズの無光沢の黒色パネル
・黒色パネルの隣に垂直の位置で保持された適切なサイズのつや消しの白色パネル
・適切なシェードのついた白色光源及び適した光ディフューザー（それぞれ長さが５２５ｍｍである２個の１３Ｗの蛍光灯を含有する目視照明器が適している）が装着されている調節可能なランプホルダー。目視ポイントにおける照明の強度は、２０００ルクス〜３７５０ルクスに維持する。
【００９２】
粘着性ラベルを容器から除去し、外側を洗浄及び乾燥させた。気泡が導入されないことを確実にしながら容器を穏やかに回転又は反転させ、白色パネルの前で約５秒間観察した。手順を、黒色パネルの前で繰り返した。粒子の存在を記録した。
【００９３】
実施例１
トシリズマブの凝集に対する代替の抗酸化剤の効果の試験
トシリズマブの市販の皮下（ｓｃ）製剤（ACTEMRA（登録商標））は、下記の成分を含む。
【００９４】
【表４】
2019536761.tif 000005
【００９５】
メチオニンは、ゲル浸透クロマトグラフィー（サイズ排除クロマトグラフィー、ＳＥＣとしてもまた公知である）によって測定して、貯蔵の間にトシリズマブの高分子種（ＨＭＷＳ）の形成を相当に阻害することが示された。（二量体の形態の）ＨＭＷＳの形成の速度は、アルギニンのみを含有する組成物と比較して、アルギニン及びメチオニンを含有する組成物において相当により低いことが示された。例えば、欧州特許第２２３８９８５号の実施例１を参照されたい。しかし、メチオニンは、承認された医薬製品における承認された不活性成分である一方、特に、冷蔵温度超で急速に酸化するその性向によってメチオニンを使用する特定のマイナス面が存在し、加工及び貯蔵の間のその安定性、並びに酸化したメチオニン種による悪臭の発生についての懸念がもたらされる。したがって、この化合物を可能ならいつでも回避することが望ましい。公知の抗酸化活性を有するメチオニン、代替の抗酸化剤の効果を、４５℃での貯蔵の間のトシリズマブ（１８０ｍｇ／ｍｌ）の高分子量種（ＨＭＷＳ）の形成に対して試験した。効果は、
・Ｌ−ヒスチジン（２１ｍＭ）
・Ｌ−アルギニン（１００ｍＭ）
・ポリソルベート８０（０．２ｍｇ／ｍｌ）
・注射用水
・ｐＨ６．０
を含むバックグラウンド製剤において試験した。
【００９６】
トシリズマブの凝集は、４５℃での２週間の貯蔵の前に及びそれに続いて、ＳＥＣ及び視覚的アセスメントによってアセスメントした。
【００９７】
結果を表１において示す。試験した抗酸化剤の２つ、亜硫酸水素ナトリウム及びアスコルビン酸ナトリウムは、ＨＭＷＳの非常に急速な形成をもたらした。さらに、アスコルビン酸ナトリウムの使用は、４５℃にて２週間後に目に見える沈殿をもたらした。乳酸ナトリウム及びトリプトファンの両方の使用が、ＨＭＷＳ形成の有意により低い速度をもたらした一方で、メチオニンの存在下で達成されるもの（たとえそれでも僅かにより高くはあるが）と同等であったＨＭＷＳ形成をもたらしたのは乳酸ナトリウムのみであった。重要なことに、他の抗酸化剤、例えば、メチオニンとは異なり、乳酸ナトリウムはまた、貯蔵の間に非常に安定であることが公知である。結果的に、乳酸ナトリウムが、実施例において記載するさらなる最適化を行って重要な安定化種として選択された。
【００９８】
【表５】
2019536761.tif 000006
【００９９】
実施例２
トシリズマブの凝集に対する乳酸塩濃度の効果の研究
４０℃及び２５℃での貯蔵の間のトシリズマブ（１８０ｍｇ／ｍｌ）のＨＭＷＳの形成に対する乳酸ナトリウム濃度の効果をアセスメントした。効果を、メチオニン（３０ｍＭ）のものと、及びまた抗酸化剤を含有しない組成物と比較した。効果を、
・Ｌ−ヒスチジン（２１ｍＭ）
・Ｌ−アルギニン（１００ｍＭ）
・ポリソルベート８０（０．２ｍｇ／ｍｌ）
・注射用水（ＷＦＩ）
・ｐＨ６．０
を含むバックグラウンド製剤において試験した。
【０１００】
トシリズマブの凝集は、４０℃での４週間及び２５℃での８週間の貯蔵の前に及びそれに続いた、ＳＥＣ及び視覚的アセスメントによってアセスメントした。
【０１０１】
結果を表２において示す。ＨＭＷＳにおける増加の速度は、メチオニンの非存在下で、メチオニン（３０ｍＭ）を含有した同一の組成物と比較してより高かったことが示されてたが、他の者によって従前に報告されたメチオニンの安定効果（欧州特許第２２３８９８５号）を確認した。乳酸ナトリウムが、ＨＭＷＳの形成を阻害したことがまた示された。乳酸ナトリウムの安定効果は、より高い濃度（２５ｍＭ及び５０ｍＭ）と比較して１０ｍＭの濃度でいくぶんより顕著であるように思えた。１０ｍＭの乳酸ナトリウムを使用して、ＨＭＷＳ形成の阻害は、メチオニン（３０ｍＭ）を使用して観察したものと同等であった。
【０１０２】
【表６】
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【０１０３】
実施例３
乳酸塩をベースとする製剤のさらなる安定性試験
トシリズマブの安定性を、選択した乳酸塩をベースとする製剤と一緒に、皮下様製剤（１８０ｍｇ／ｍｌ）及びACTEMRA（登録商標）の静脈内様製剤（２０ｍｇ／ｍｌ）の両方において試験した。
【０１０４】
ACTEMRA（登録商標）の皮下（ｓｃ）様製剤は、トシリズマブ（１８０ｍｇ／ｍｌ）、Ｌ−ヒスチジン（２０ｍＭ）、Ｌ−アルギニン（１００ｍＭ）、Ｌ−メチオニン（３０ｍＭ）、ポリソルベート８０（０．２ｍｇ／ｍｌ）及び注射用水（ＷＦＩ）を含有し、ｐＨ６．０に調節した。
【０１０５】
ACTEMRA（登録商標）の静脈内（ｉｖ）様製剤は、トシリズマブ（２０ｍｇ／ｍｌ）、リン酸二ナトリウム十二水化物及びリン酸二水素ナトリウム脱水物（１５ｍＭのリン酸バッファーとして）、ポリソルベート８０（０．５ｍｇ／ｍｌ）、スクロース（５０ｍｇ／ｍｌ）及びＷＦＩを含有し、ｐＨ６．５に調節した。
【０１０６】
同じ乳酸塩をベースとする組成物を、１８０ｍｇ／ｍｌ及び２０ｍｇ／ｍｌのトシリズマブ試料の両方のために使用した。組成物は、Ｌ−ヒスチジン（２１ｍＭ）、Ｌ−アルギニン（１００ｍＭ）、Ｌ−乳酸ナトリウム（１０ｍＭ）、ポリソルベート８０（０．２ｍｇ／ｍｌ）及びＷＦＩを含有し、ｐＨ６．０に調節した。
【０１０７】
ＨＭＷＳ形成の速度は、サイズ排除クロマトグラフィーによってアセスメントした。イオン交換クロマトグラフィーを使用して、酸性種及び塩基性種の形成の速度をアセスメントした。
【０１０８】
１８０ｍｇ／ｍｌのトシリズマブ組成物に関する結果を、表３及び４において示す。両方の試料は、４０℃での４週間のインキュベーションの後で視覚的アセスメント試験を合格した（表３）。ＨＭＷＳ形成の速度は、ACTEMRA（登録商標）の製剤及び乳酸塩をベースとする製剤の間で同等であった（表３）。同様に、酸性種及び塩基性種の形成の速度は、ACTEMRA（登録商標）の製剤及び乳酸塩をベースとする製剤の間で同等であった（表４）。
【０１０９】
【表７】
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【０１１０】
【表８】
2019536761.tif 000009
【０１１１】
２０ｍｇ／ｍｌのトシリズマブ組成物に関する結果を、表５及び６において示す。両方の試料は、４０℃での４週間のインキュベーションの後の視覚的アセスメント試験を合格した（表５）。４０℃での４週間のインキュベーションに続いてＨＭＷＳにおける僅かな減少が存在するように思われたが、減少は、乳酸塩をベースとする製剤においてより顕著である（表５）。減少についての原因は完全に明らかでなく、ある程度のＨＭＷＳ解離が起こるかどうか、又は変化が分析誤差内であるかどうかについては確実ではない。どんな場合でも、４０℃でのインキュベーションは、試験した２つの製剤のどちらでもＨＭＷＳにおける増加をもたらさなかった。乳酸塩をベースとする製剤は、静脈内様製剤と比較して、酸性種形成の有意により低い速度を示すように思われた（表６）。これは、乳酸塩をベースとする製剤のｐＨ（ｐＨ６．０）及び静脈内様製剤のｐＨ（ｐＨ６．５）における差異によるものである可能性が最も高い。ｐＨにおける差異はまた、静脈内様製剤と比較して、乳酸塩をベースとする製剤における塩基性種形成の僅かにより高い速度を説明することができる。全体的に、全電荷不純物（すなわち、酸性種及び塩基性種の合計）における増加は、４０℃でのインキュベーションに続いて、静脈内様製剤と比較して、乳酸塩をベースとする製剤において相当により低かった（表６）。
【０１１２】
【表９】
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【０１１３】
【表１０】
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【０１１４】
実施例４
乳酸をベースとする製剤のさらなる安定性試験
トシリズマブの安定性は、選択した乳酸をベースとする製剤と一緒に、ACTEMRA（登録商標）の皮下様（１８０ｍｇ／ｍｌ）製剤において試験した。
【０１１５】
ACTEMRA（登録商標）のｓｃ様製剤及びｉｖ様製剤は、実施例３のものと同一であった。ＨＭＷＳ、酸性種及び塩基性種のアセスメントは、実施例３におけるように行った。
【０１１６】
同じ乳酸をベースとする組成物は、１８０ｍｇ／ｍｌ及び２０ｍｇ／ｍｌのトシリズマブ試料の両方のために使用した。組成物は、Ｌ−ヒスチジン（２１ｍＭ）、Ｌ−アルギニン（１００ｍＭ）、Ｌ−乳酸（１０ｍＭ）、塩化ナトリウム（１０ｍＭ）、ポリソルベート８０（０．２ｍｇ／ｍｌ）、ＷＦＩを含有し、ｐＨ６．０に調節した。
【０１１７】
１８０ｍｇ／ｍＬのトシリズマブを含む製剤についての結果を、表７〜１２において示す。試料を、４０℃での８週間までのインキュベーション（表７及び１０）、２５℃での２６週間までのインキュベーション（表８及び１１）、並びに５℃での２６週間までのインキュベーション（表９及び１２）の後に評価した。全ての製剤は、どのようなインキュベーションの長さ／温度でも視覚的アセスメント試験を合格した。ＨＭＷＳ形成の速度は、２５℃（表８）及び５℃（表９）にてACTEMRA（登録商標）の製剤及び乳酸をベースとする製剤の間で同等であり、乳酸をベースとする製剤について、４０℃での８週間の後に僅かにより高かった（表７）。酸性種の形成の速度は、全ての温度（表１０〜１２）及び塩基性種の全体的なレベルにおいて、ACTEMRA（登録商標）の製剤及び乳酸をベースとする製剤の間で同等であった。
【０１１８】
【表１１】
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【０１１９】
【表１２】
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【０１２０】
【表１３】
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【０１２１】
【表１４】
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【０１２２】
【表１５】
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【０１２３】
【表１６】
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【０１２４】
２０ｍｇ／ｍＬのトシリズマブを含む製剤についての結果を、表１３〜１８において示す。試料を、１８０ｍｇ／ｍＬのトシリズマブを含む製剤と同じ条件において評価した。
【０１２５】
全ての製剤は、どのようなインキュベーションの長さ／温度でも視覚的アセスメント試験を合格した。ＨＭＷＳ形成の速度は、５℃にてACTEMRA（登録商標）の製剤及び乳酸をベースとする製剤の間で同等であり（表１５）、乳酸をベースとする製剤について４０℃での８週間後に僅かに高かった（表１３）。それとは反対に、２５℃にて（表１４）、ＨＭＷのレベルは、ACTEMRA（登録商標）の製剤と比較したとき、第４週から第２６週までに安定レベルに達する前に、４週間後に乳酸をベースとする製剤においてより有意に減少した。減少についての原因は完全に明らかでなく、ある程度のＨＭＷＳ解離が起こるかどうか、又は差異が分析誤差内であるかどうかについては確実ではない。乳酸をベースとする製剤は、４０℃及び２５℃でのACTEMRA（登録商標）の製剤と比較して、酸性種形成の有意により低い速度を示すように思われた（表１６〜１７）。これは、乳酸をベースとする製剤のｐＨ（ｐＨ６．０）及びACTEMRA（登録商標）の製剤のｐＨ（ｐＨ６．５）における差異によるものである可能性が最も高い。ｐＨにおける差異はまた、静脈内様製剤と比較して、乳酸塩をベースとする製剤における塩基性種形成の僅かにより高い速度を説明することができる。それとは反対に、５℃にて、酸性種及び塩基性種のレベルは、両方の製剤について時間と共に全体的に安定である。
【０１２６】
【表１７】
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【０１２７】
【表１８】
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【０１２８】
【表１９】
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【０１２９】
【表２０】
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【０１３０】
【表２１】
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【０１３１】
【表２２】
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【０１３２】
参考文献
１）国際公開第０３／０６８２６０号
２）国際公開第２００９／０８４６５９号
３）国際公開第０２／１３８６０号
４）国際公開第２０１１／０８５１５８号
５）国際公開第２０１３／０６３５１０号
６）欧州特許第２２３８９８５号
【配列表】
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【国際調査報告】
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