(57)【要約】  消費者の歯肉健康を促進するための、抗線維素溶解剤（例えば、トラネキサム酸）及び第一スズイオン源を含む、口腔ケア組成物が提供される。【特許請求の範囲】
【請求項１】
口腔ケア組成物であって、
ａ）前記組成物の０．０１重量％〜５重量％の第一スズイオン源と、
ｂ）前記組成物の０．０１重量％〜１０重量％の抗線維素溶解剤と、を含む、口腔ケア組成物。
【請求項２】
前記抗線維素溶解剤が、式（Ｉ）の化合物であり、
【化１】
2019532946.tif 000011
式中、Ｘが、分岐状若しくは非分岐状、飽和若しくは不飽和の脂肪族基、又は芳香族基である、請求項１に記載の口腔ケア組成物。
【請求項３】
前記抗線維素溶解剤が、前記組成物の５％未満、好ましくは３％未満、より好ましくは１％未満の量で存在し、かつ好ましくはトラネキサム酸、εアミノカプロン酸、ｐ−アミノメチル安息香酸又はこれらの組み合わせから選択される、請求項１又は請求項２に記載の口腔ケア組成物。
【請求項４】
前記抗線維素溶解剤が、トラネキサム酸であり、好ましくは前記組成物の０．１重量％〜１重量％未満、又はより好ましくは０．２重量％〜０．７重量％の量で存在する、請求項３に記載の口腔ケア組成物。
【請求項５】
口腔ケア組成物であって、
ａ）前記組成物の０．０１重量％〜５重量％の第一スズイオン源と、
ｂ）前記組成物の０．０１重量％〜１０重量％の、トラネキサム酸、εアミノカプロン酸、ｐ−アミノメチル安息香酸、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される１種以上の化合物を含む、口腔ケア組成物。
【請求項６】
前記第一スズイオン源が、前記組成物の０．０５重量％〜４重量％、又は好ましくは０．１重量％〜２重量％の量で存在し、かつ塩化第一スズ、フッ化第一スズ、酢酸第一スズ、グルコン酸第一スズ、シュウ酸第一スズ、硫酸第一スズ、乳酸第一スズ、酒石酸第一スズ、ヨウ化第一スズ、クロロフッ化第一スズ、ヘキサフルオロジルコン酸第一スズ、クエン酸第一スズ、リンゴ酸第一スズ、グリシン酸第一スズ、炭酸第一スズ、リン酸第一スズ、ピロリン酸第一スズ、メタリン酸スズ、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１〜５のいずれか一項に記載の口腔ケア組成物。
【請求項７】
前記組成物の０．０１重量％〜５重量％の増粘剤であって、
（ｉ）直鎖状硫酸化多糖類、
（ｉｉ）天然ガム、
（ｉｉｉ）非イオン性セルロース又はその誘導体、
（ｉｖ）ポリビニルピロリドン（polyvinyl pyrrolidone、ＰＶＰ）、
（ｖ）少なくともポリカルボキシル化エチレン骨格を含むポリマー、
（ｖｉ）ポリアクリルアミド、
（ｖｉｉ）アクリルアミドを含むコポリマー、
（ｖｉｉｉ）ペクチン、
（ｉｘ）タンパク質、
（ｘ）ポリエチレングリコール（polyethylene glycol、ＰＥＧ）、好ましくは高分子量ＰＥＧ、及び
（ｘｉ）これらの組み合わせからなる群から選択される、少なくとも１種の薬剤、好ましくは少なくとも２種の薬剤を含む、増粘剤を更に含む、請求項１〜６のいずれか一項に記載の口腔ケア組成物。
【請求項８】
前記増粘剤が、好ましくは、前記組成物の１重量％〜２．５重量％の量で存在し、
（ｉ）前記直鎖状硫酸化多糖類が、カラギーナンであり、
（ｉｉ）前記天然ガムが、キサンタンガム、カラヤガム、アラビアガム、トラガカントガム、及びこれらの組み合わせからなる群から選択され、
（ｉｉｉ）前記非イオン性セルロース又はその誘導体が、５０，０００〜１，３００，０００ダルトンの平均分子量範囲、及び好ましくは３００〜４，８００の平均重合度を有し、
（ｉｖ）前記ポリマーが、少なくともポリカルボキシル化エチレン骨格を含み、かつ３０，０００〜１，０００，０００ダルトンの分子量を有するメチルビニルエーテルと無水マレイン酸とのコポリマー、アクリル酸のホモポリマー、及びマレイン酸とアクリル酸又はメタクリルとのコポリマーからなる群から選択され、
（ｖ）これらの組み合わせである、請求項７に記載の口腔ケア組成物。
【請求項９】
（ｉ）前記カラギーナンが、κ−カラギーナン、ι−カラギーナン、λ−カラギーナン、及びこれらの組み合わせからなる群から選択され、
（ｉｉ）前記天然ガムが、キサンタンガムであり、
（ｉｉｉ）前記非イオン性セルロース又はその誘導体が、ヒドロキシエチルセルロース（hydroxyethyl cellulose、ＨＥＣ）であり、
（ｉｖ）少なくともポリカルボキシル化エチレン骨格を含む前記ポリマーが、マレイン酸又は無水物とメチルビニルエーテルとのコポリマーであり、
（ｖ）これらの組み合わせである、請求項８に記載の口腔ケア組成物。
【請求項１０】
前記組成物の０重量％〜０．００１重量％未満の葉酸を更に含むか、又は好ましくは葉酸を含まないか若しくは実質的に含まない、請求項１〜９のいずれか一項に記載の口腔ケア組成物。
【請求項１１】
前記組成物の０．０１重量％〜５重量％、好ましくは０．１重量％〜２重量％の風味組成物を更に含み、前記風味組成物が、
（ｉ）前記風味組成物の０重量％超〜５５重量％未満、若しくは６５重量％超〜９５重量％のメチルサリチレート、前記風味組成物の０重量％超〜３０重量％未満、若しくは３５重量％超〜６５重量％のメントール、前記風味組成物の０重量％超〜１重量％未満、若しくは５重量％超〜５０重量％のオイゲノール、及び前記風味組成物の０重量％超〜３重量％未満、若しくは８重量％超〜３０重量％のシネオールを含む、風味混合物、又は
（ｉｉ）メチルサリチレート、メントール、オイゲノール、及びシネオールを含まないか若しくは実質的に含まない風味混合物を更に含む、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の口腔ケア組成物。
【請求項１２】
前記組成物の０．００２５重量％〜２重量％又は好ましくは０．５重量％〜１．５重量％のフッ化物イオン源を更に含み、前記フッ化物イオン源が、好ましくは、フッ化ナトリウム、フッ化インジウム、フッ化アミン、モノフルオロリン酸ナトリウム（monofluorophosphate、ＭＦＰ）、フッ化カリウム、フッ化亜鉛、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の口腔ケア組成物。
【請求項１３】
前記組成物の１０重量％〜７０重量％又は好ましくは１５重量％〜３０重量％の総含水量を更に含み、より好ましくは、前記口腔ケア組成物が、歯磨剤組成物である、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の口腔ケア組成物。
【請求項１４】
前記組成物が、４．５〜１１のｐＨ、又は好ましくは５〜１０のｐＨを有する、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の口腔ケア組成物。
【請求項１５】
ヒト対象の歯肉健康を促進する方法であって、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の口腔ケア組成物を、好ましくは１日１回、より好ましくは１日２回、前記対象の口腔に投与することを含む、方法。
【請求項１６】
前記歯肉健康の促進が、
ａ）０時間〜７２時間の時間、
ｂ）０時間〜４８時間の時間、
ｃ）０時間〜２４時間の時間、
からなる群から選択される期間内で起こり、０時間の時間が、前記口腔ケア組成物の投与時である、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
歯肉健康が、
（ｉ）前記口腔内の歯肉創傷治癒を改善すること、
（ｉｉ）前記口腔内の細菌活性の低減を改善すること、又は
（ｉｉｉ）これらの組み合わせから選択される、請求項１５又は１６に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、消費者の歯肉健康を促進するための、第一スズイオン源と、抗線維素溶解剤と、を含む、口腔ケア組成物に関する。特に、このような口腔ケア組成物は、歯肉創傷治癒を改善し、消費者の口腔内の細菌活性の低減を改善するのに有用である。
【背景技術】
【０００２】
歯肉炎及び／又は歯周炎などの歯肉疾患は、口腔内で急性及び慢性の歯肉炎症を引き起こす。「歯肉炎」は、この疾患のより穏やかな形態である。歯肉炎の症状としては、歯肉出血、及び発赤、膨潤、又は圧痛歯肉を挙げることができる。未処置のままである場合、歯肉炎は、「歯周炎」に進行し得る。歯周炎により、歯肉は歯から引き離され、病原性細菌に感染し得る「歯周ポケット」と呼ばれる空間を形成する。細菌は、バイオフィルムとして歯根表面上に存在する。バイオフィルム内の細菌は、歯肉及び下層の歯槽骨支持歯を攻撃し得る。これらの攻撃は、歯を支持する軟組織及び骨に対する主要な損傷を引き起こす可能性がある。歯肉疾患の後期段階（すなわち、「進行した歯周炎」）では、歯の緩み及び最終的な歯の損失というより深刻な問題が生じ得る。
【０００３】
いくつかの市販の口腔ケア組成物は、主に、早期段階の歯肉疾患（すなわち、歯肉炎）の１つ以上の症状を緩和することを目的とし、これらとしては、発赤、膨潤した、若しくは圧痛歯肉の緩和、及び／又は茎部歯肉の出血を含む。典型的には、これらの組成物は、消費者に対する「歯肉ケア」、「口腔ケア」、「口腔衛生」、「歯科ケア」、又は「歯科衛生」などの利益を主張する。このような組成物の例は、「歯肉炎又は出血性歯肉」として定義される「歯肉疾患の第１段階の低減を助ける」ことを主張する、「Ｃｏｌｇａｔｅ（登録商標）Ｔｏｔａｌ」練り歯磨きである（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃｏｌｇａｔｅｔｏｔａｌ．ｃｏｍ／ｔｏｔａｌ−ｂｅｎｅｆｉｔｓ／ｗｈｏｌｅ−ｍｏｕｔｈ−ｈｅａｌｔｈ／ｇｉｎｇｉｖｉｔｉｓ−ｃｏｎｔｒｏｌを参照されたい）。本発明と比較して市販の口腔ケア組成物の利益を区別するのを助けるために、本発明者らは、本明細書では、これらの市販の口腔ケア組成物の前述の利益を総じて「歯肉ケア」と称する。これは、これらの市販の口腔ケア組成物が、主に歯肉をケアし、早期段階の歯肉疾患（すなわち、歯肉炎）に関連する症状（例えば、歯肉の出血、及び／又は発赤、膨潤、若しくは圧痛歯肉）を緩和するために配合されているからである。
【０００４】
しかしながら、全体的な「歯肉健康」効果を提供する必要性が存在し、これは、本明細書で使用するとき、より広範な用語であり、前述の歯肉ケア効果の少なくとも一部を包含すること、並びに歯肉炎、歯周炎、又はその両方を含む歯肉疾患に関連する細菌の有害な影響を軽減するための付加的な抗菌効果を提供することを意図する。
【０００５】
上記の従来の手法には、いくつかの欠点のうちの少なくとも１つが存在する。第１に、これらの市販の口腔ケア組成物は、歯肉ケアを促進し得るが、歯肉健康も促進するのに十分な程度にはならない。実際に、これらの市販の口腔ケア組成物は、一般に、歯肉ケア効果（例えば、抗出血及び／又は抗膨潤）に加えて、いずれの有意な抗菌効果も提供することができない。これは、バイオフィルム中の細菌が制御されない場合、歯周炎につながる歯周ポケットのサイズを増加させ得るため、問題である。第２に、歯肉健康は、全身の健康に相関し得る。換言すれば、個人の歯肉健康は、その人物の全身の健康の指標であり得る。研究は、全体的な歯肉健康が減少するにつれて、例えば、心臓疾患及び脳卒中、糖尿病、腎臓疾患、早産、並びに／又は骨粗鬆症などのこれらの潜在的な生命の脅威状態のうちのいずれか１つ（又は２つ以上）を発症する危険性が、増加し得ることを示唆している（米国特許第６，８４６，４７８号、Ｄｏｙｌｅ，Ｍ．Ｊ．、及び米国特許第８，２８３，１３５号、Ｄｏｙｌｅ，Ｍ．Ｊ．を参照されたい）。したがって、より良好な全体的な全身の健康を確実にするために、歯肉ケアだけでなく、全体的な歯肉の健康を改善することが望ましい。
【０００６】
他の市販の口腔ケア組成物は、バイオフィルム中の細菌の増殖を制御することを目的とした抗菌剤を含有し得る。いくつかの口腔組成物はまた、トラネキサム酸及びフッ化物源を含有し得る。トラネキサム酸は、歯肉創傷治癒に有用な抗出血剤として記載されている。これはまた、歯肉炎症を阻害する及び／又は抗膨潤剤として作用することも記載されている（米国特許第４，２７２，５１３号、Ｇａｆｆａｒ，Ａ．、及び同第４，２７２，５１２号、Ｇａｆｆａｒ，Ａ．を参照されたい）。フッ化物は、虫歯を予防及び制御することが十分に実証されている。トラネキサム酸を含有する口腔ケア組成物の１つの欠点は、トラネキサム酸が不安定になり得、老化時にその活性を失うことである。更に、不安定なトラネキサム酸は、口腔ケア組成物を変色させ得、これらを黄色にして暗褐色にし、これは、消費者にとって望ましくない。不安定性及び変色の問題を説明した以前の口腔ケア組成物は、１．５％〜２％のより高いレベルでトラネキサム酸と共に配合されている（米国特許第４，２７２，５１３号、Ｇａｆｆａｒ，Ａ．、及び同第４，２７２，５１２号、Ｇａｆｆａｒ，Ａ．における実施例を参照されたい）。これらの参考文献によれば、創傷治癒及び他の利益に十分なトラネキサム酸の有効性を提供するために、より高いレベルが必要とされる。問題を克服するために、これらの以前の試みは、例えば、ＴｉＯ２、葉酸、又は風味混合物（例えば、サリチル酸メチル、メントール、オイゲノール、及びシネオール）などの追加の成分を添加して、トラネキサム酸の安定性及び活性を著しく減少させることなく、保存における上記の変色を防止する。しかしながら、費用効果及び有効な練り歯磨き及び他の口腔ケア製剤を提供するために、配合及び加工ステップを単純化する必要性が引き続き存在する。
【０００７】
これらの他の市販の口腔ケア組成物に有用な抗菌剤としては、例えば、クエン酸亜鉛（例えば、Ｄａｒｌｉｅ（商標）Ｅｘｐｅｒｔ練り歯磨き）、ＩＰＭＰ（例えば、Ｌｉｏｎ（商標）Ｓｙｓｔｅｍａ練り歯磨き）、及び塩化セチルピリジニウム（ＣＰＣ）などを挙げることができる。残念ながら、これらの抗菌剤は、バイオフィルムへの浸透性が乏しい場合がある。結果として、これらの抗菌剤は、バイオフィルム深部の細菌と相互作用することができる前に、単純に化学的に分解し得る。代替的に、抗菌剤は、バイオフィルム中への著しく遅い浸透速度を示し得る。結果として、これらの抗菌剤は、バイオフィルム中に非効率的な浸透速度を有し得、細菌と係合して死滅させるためにより長い時間がかかる。これらの欠点のうちの１つ以上は、特に細菌活性の低減に関連するため、これらの口腔ケア組成物は、歯肉健康を促進するのに有効ではないと考えられる。
【０００８】
１つの解決策は、バイオフィルム中の分解及び／又は準最適若しくは非効率的な浸透速度に適応するために、より多量の抗菌剤を添加することである。しかしながら、有効性を提供するために口腔ケア製品において必要とされるこれらの抗菌剤の量は、比較的高い最小阻害濃度（Minimum Inhibitory Concentrations、ＭＩＣ）（データ不掲載）を考慮すると、不当に高い場合がある。ＭＩＣは、細菌増殖が観察されない抗菌剤１ミリリットル当たりのマイクログラムの最小濃度である。ＭＩＣよりも低い濃度では、抗菌剤は、細菌を死滅させる、又はその増殖及び繁殖を阻害するのに有効ではない。ＭＩＣよりも高い濃度では、抗菌剤は、細菌を死滅させる又はその増殖及び繁殖を阻害するのに有効である。
【０００９】
これは次に、これらの抗菌剤の増加し続ける量を使用することによる安全性の最大上限若しくは費用制限、及び／又はこれらの抗菌剤のより高い濃度に関連し得る有害な副作用による、口腔ケア製品の有効性に対する制限を含めて、いくつかの態様にとって不利であり得る。要するに、これらの抗菌剤の化学分解及び／又はバイオフィルム内への準最適若しくは非効率的な浸透速度により、歯肉健康上の利益を促進する改善された口腔ケア組成物が引き続き必要とされている。この新規口腔ケア組成物が、バイオフィルム中で改善された抗菌作用を有することが望ましい。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１０】
【特許文献１】米国特許第６，８４６，４７８号
【特許文献２】米国特許第８，２８３，１３５号
【特許文献３】米国特許第４，２７２，５１３号
【特許文献４】米国特許第４，２７２，５１２号
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
したがって、消費者に歯肉健康上の利益を提供するか、又は少なくとも、市販の組成物よりも良好な関連する歯肉健康上の利益（例えば、歯肉創傷治癒及び抗菌効果）を少なくとも提供する口腔ケア組成物を提供する必要性が存在する。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明は、少なくとも部分的に、トラネキサム酸などの抗線維素溶解剤と口腔ケア組成物中の第一スズイオン源との組み合わせが、少なくとも歯肉創傷治癒及び抗菌効果を含む、歯肉健康上の利益を促進するという驚くべき発見に基づいて、この必要性に対処しようとする。特に、口腔ケア組成物は、歯肉創傷治癒のためのトラネキサム酸と、口腔内の細菌活性の望ましくない効果に対抗するための抗菌剤としての第一スズイオン源と、を含む。
【００１３】
本発明の１つの利点は、「より深いバイオフィルム浸透及び／又は細菌死滅」である。この目的のために、更に驚くべきことに、トラネキサム酸と組み合わせて使用されるとき、バイオフィルムへの第一スズイオンの浸透深さ及び／又は浸透速度を増加させることができることが見出される。要するに、口腔ケア組成物中のトラネキサム酸と第一スズイオン源との相乗的な組み合わせは、歯肉健康上の利益の改善が達成されるようなものであり得る。更に、本発明の口腔ケア組成物の使用は、消費者に改善された歯肉健康上の利益を提供することができる。
【００１４】
本発明の別の利点は、歯肉炎、歯周炎又はその両方に関連する症状の全体性に関連するため、歯肉健康を促進するための口腔ケア組成物を提供することである。本発明の口腔ケア組成物が、改善された歯肉健康上の利益を有することは、なおも更なる利点である。本発明のなおも更なる利点は、バイオフィルム内への抗菌剤（複数可）の改善された浸透深さを有する口腔ケア組成物を提供することである。本発明のなおも更なる利点は、バイオフィルム内への抗菌剤（複数可）の改善された浸透速度を有する口腔ケア組成物を提供することである。本発明のなおも更なる利点は、歯肉健康を促進するための費用効果及び有効な口腔ケア組成物を提供することである。なおも更なる利点は、口腔ケア組成物が歯磨剤であり、好ましくは心地よい味及び口当たりの経験を提供することである。なおも更なる利点は、口腔ケア組成物が、製造、取り扱い、及び保管状態の範囲にわたって物理的及び化学的安定性を有することである。なおも更なる利点は、４０℃で３ヶ月保管した後でさえも、口腔ケア組成物が安定した品質の最終製品（例えば、一貫した視覚的外観及び変色なし、歯肉創傷治癒性能など）を有することである。またなおも更なる利点は、本発明の口腔ケア組成物が、抗菌剤の使用を最小限に抑えることである。またなおも更なる利点は、本発明の口腔用組成物が、上述の不安定性及び／又は変色問題を低減及び／又は排除するための抗線維素溶解剤の量を最小限に抑えることである。
【００１５】
一態様では、本発明は、ａ）組成物の０．０１重量％〜５重量％、好ましくは０．０５重量％〜４重量％の第一スズイオン源と、ｂ）組成物の０．０１重量％〜１０重量％、好ましくは５重量％未満、より好ましくは３重量％未満、更により好ましくは１重量％未満の抗線維素溶解剤を含む、口腔ケア組成物を対象とする。
【００１６】
別の態様では、本発明は、ａ）組成物の０．０１重量％〜５重量％、好ましくは０．０５重量％〜４重量％の第一スズイオン源と、ｂ）組成物の０．０１重量％〜１０重量％、好ましくは５重量％未満、より好ましくは３重量％未満、更により好ましくは１重量％未満の、トラネキサム酸、εアミノカプロン酸、ｐ−アミノメチル安息香酸及びこれらの組み合わせからなる群から選択される１つ以上の化合物を含む、口腔ケア組成物を対象とする。
【００１７】
本発明の別の態様では、上述の口腔ケア組成物は、ｃ）好ましくは組成物の０．０１重量％〜５重量％、好ましくは１重量％〜２．５重量％の増粘剤を更に含み、その増粘剤は、（ｉ）直鎖状硫酸化多糖類、（ｉｉ）天然ガム、（ｉｉｉ）非イオン性セルロース誘導体、（ｉｖ）ポリビニルピロリドン（polyvinyl pyrrolidone、ＰＶＰ）、（ｖ）少なくともポリカルボキシル化エチレン骨格を含むポリマー、（ｖｉ）ポリアクリルアミド、（ｖｉｉ）アクリルアミドを含むコポリマー、（ｖｉｉｉ）ペクチン、（ｉｘ）タンパク質、（ｘ）ポリエチレングリコール（polyethylene glycols、ＰＥＧ）、好ましくは高分子量ＰＥＧ、及び（ｘｉ）これらの組み合わせからなる群から選択される、少なくとも１種の薬剤、好ましくは少なくとも２種の薬剤を含む。
【００１８】
本発明の更に別の態様では、上述の口腔ケア組成物は、ｄ）組成物の０重量％〜０．００１重量％未満の葉酸を更に含むか、又は好ましくは葉酸を含まないか若しくは実質的に含まない。
【００１９】
本発明のなおも更なる別の態様では、本発明の口腔ケア組成物を、好ましくは１日１回、より好ましくは１日２回対象の口腔に投与することを含む、ヒト対象における歯肉健康を促進するための方法が提供される。
【００２０】
本発明のこれらの特徴及び他の特徴は、以下の詳細な説明を添付の特許請求の範囲と併せて検討することで当業者には明らかとなろう。
【図面の簡単な説明】
【００２１】
本明細書は、本発明を特定して指摘し明確に請求する特許請求の範囲をもって結論とするが、本発明は、添付図面の以下の説明からより良く理解されると考えられる。
【図１】歯肉創傷治癒の改善を測定するためのアッセイのためのＭａｚｚａ指数化した出血部位を評価するためのタイムラインである。
【図２】様々な時間間隔（ベースライン、３日目及び４週目）におけるＭａｚｚａ指数化した出血部位の数を、発明の組成物の実施例２（第一スズ及び抗線維素溶解剤を含む）、並びに陽性対照及び陰性対照について提供する棒グラフである。
【図３】ヒドロキシアパタイト（hydroxyapatite、ＨＡ）ディスクが取り付けられた口腔スプリントの斜視図である。
【図４】溝を内部に有するＨＡディスクの斜視図である。
【図５】内部にバイオフィルムを有する溝の断面図の概略図である。
【図６】発明の組成物の実施例２（第一スズ及びＴＡを含有する）又は対照組成物の実施例９（Ｓｎのみ）による処置から２４時間後のヒト歯肉線維芽球の創傷治癒の画像である。
【発明を実施するための形態】
【００２２】
用語の定義
本明細書で使用するとき、「ａ」及び「ａｎ」などの冠詞は、「特許請求の範囲」に使用するとき、請求又は記載されているもののうちの１種以上を意味するものと理解される。
【００２３】
「緩和する（alleviate）」及び「緩和する（alleviating）」という用語は、互換的に使用され、歯肉疾患の少なくとも１つの症状を最小化、予防、遅延及び／又は治療して、消費者に正の変化（すなわち、利益）をもたらすことを意味する。
【００２４】
本明細書で使用するとき、「バイオフィルム」という用語は、マトリックス封入された細菌集団が互いに接着性であり、及び／又は口腔内の表面若しくは界面を意味する。
【００２５】
本明細書で使用するとき、「含む（comprising）」という用語とは、特に言及したもの以外のステップ及び成分を付加することができることを意味する。この用語には、「〜からなる（consisting of）」及び「〜から本質的になる（consisting essentially of）」という用語が含まれる。本発明の組成物は、本明細書に記載される本発明の必須要素及び制限事項、並びに本明細書に記載されるあらゆる追加若しくは任意の成分、構成要素、ステップ、又は制限事項を含み、これらからなり、あるいは、これらから本質的になることができる。
【００２６】
本明細書で使用するとき、「歯磨剤」という用語は、特に指定されない限り、口腔表面を清掃するために使用されるペースト、ゲル、粉剤、錠剤、又は液体製剤を意味する。
【００２７】
本明細書で使用するとき、「含まない（free）」という用語は、その材料の量が組成物中に全く存在しないことを指す。
【００２８】
本明細書で使用するとき、「歯肉ケア」という用語は、主に、早期段階の歯肉疾患（すなわち、歯肉炎）に関連する１つ以上の症状を緩和することを対象とする、口腔ケア組成物の固有の又は促進された利益を指す。このような症状は、例えば、出血性歯肉、及び発赤、膨潤又は圧痛歯肉を含んでもよい。
【００２９】
本明細書で使用するとき、「歯肉健康」という用語は、歯肉創傷治癒を少なくとも改善することを含む「歯肉ケア」上の利益を提供する、並びに歯肉炎、歯周炎又はその両方を含む歯肉疾患に関することから、細菌の有害な影響を軽減するように細菌活性の低減の更なる改善を提供する、口腔ケア組成物の固有の又は促進された利益を指す。
【００３０】
本明細書で使用するとき、「歯肉創傷治癒を改善する」という用語は、任意の一般に受け入れられているインビトロ又はインビボ歯肉出血アッセイ若しくは試験又は実施例１１に記載のアッセイによって判定される、口腔内の歯肉の出血を低減することを意味する。
【００３１】
本明細書で使用するとき、「細菌活性の低減を改善する」という用語は、任意の一般に受け入れられているインビトロ若しくはインビボ抗菌アッセイ若しくは試験、又は好ましくは、実施例１２に記載のアッセイ及び実施例１３に記載のインビトロ創傷治癒アッセイによって判定される、口腔内の細菌活性を低減することを意味する。
【００３２】
本明細書で使用するとき、「口腔ケア組成物（「oral care composition」又は「oral care compositions」）」という用語は、通常の使用過程で、口腔作用の目的のために、一部又は全ての歯科表面及び／又は口腔組織に接触するのに十分な時間にわたって、口腔内で保持される製品を意味する。一実施形態では、組成物は、口腔内で使用される場合に利益を提供する。本発明の口腔用組成物は、練り歯磨き、歯磨剤、歯科用ゲル、歯磨き粉、錠剤、すすぎ剤、マウスウォッシュ、歯肉下用ゲル、発泡体、ムース、チューインガム、リップスティック、スポンジ、フロス、予防ペースト、ワセリンゲル、義歯用接着剤、又は義歯用製品を含む各種形態であってもよい。一実施形態では、口腔用組成物は、ペースト又はゲルの形態である。別の実施形態では、口腔用組成物は、歯磨剤の形態である。また、口腔用組成物は、口腔表面に直接塗布するか若しくは装着するために、又はフロス内に組み込むために、ストリップ片若しくはフィルム上に組み込まれてもよい。
【００３３】
本明細書で使用するとき、単語「好ましい」、「好ましくは」、及びその変形は、一定の条件下において一定の利益をもたらす本発明の実施形態に関する。しかしながら、同じ、又は他の状況下においては、他の実施形態が好ましい場合もある。更に、１つ以上の好ましい実施形態の詳細説明は、他の実施形態が有用でないことを示すものではなく、本発明の範囲から他の実施形態を排除することを意図するものでもない。
【００３４】
本明細書で使用するとき、「促進する」という用語は、口腔内で本発明の口腔ケア組成物を使用することに関連する歯肉健康上の利益を促進及び／又は増強することを意味する。
【００３５】
本明細書で使用するとき、「実質的に含まない」という用語は、意図的な量のその材料が組成物に添加されないか、又は組成物の０．０５％、０．０１％、若しくは０．００１％未満の材料の量を指す。
【００３６】
本明細書で使用するとき、「相乗的な歯肉健康上の利益」という用語は、少なくとも歯肉創傷治癒を改善し、口腔内の細菌活性の低減を改善することを含む、添加剤よりも多くの任意の２つの歯肉健康上の利益における分析的に測定可能な増加を意味する。
【００３７】
本明細書で使用するとき、「歯」という用語は、天然歯並びに人工歯、又は歯科補綴物を意味する。
【００３８】
本明細書で使用するとき、「総含水量」という用語は、遊離水及び口腔ケア組成物中の他の成分によって結合される水の両方を意味する。
【００３９】
全ての百分率、部及び比率は、特に指定されない限り、本発明の組成物の総重量を基準とする。列挙されている成分に関するとき、こうした重量は全て、活性レベルに基づき、このため、特に指定されない限り、市販の材料に含まれている可能性のある溶媒又は副生成物を含まない。
【００４０】
特に指定されない限り、本明細書で言及される全ての測定は、２５℃（すなわち、室温）で行われる。
【００４１】
口腔ケア組成物
驚くべきことに、口腔ケア組成物中の抗線維素溶解剤、好ましくはトラネキサム酸と、第一スズイオン（すなわち、抗菌剤）との組み合わせが、消費者に対する歯肉健康上の利益を促進するのに特に有用であることが見出された。特に、驚くべき発見は、トラネキサム酸と組み合わせたときに、バイオフィルムへの第一スズイオンの浸透が著しく改善されていることであった。理論に束縛されることを望むものではないが、トラネキサム酸は、カルボン酸基及びアミン基の両方を含有する。第一スズイオンは、トラネキサム酸上のこれらの化学部分に強く結合して、バイオフィルムへの第一スズイオンの浸透に正の影響を及ぼし得ると考えられる。
【００４２】
驚くべきことに、トラネキサム酸と共に配合されたときに、バイオフィルム中への第一スズイオンの浸透深さ及び／若しくは浸透速度を増加させるか、又は著しく増加させることができることも見出された。要するに、口腔ケア組成物中の第一スズイオン源と組み合わせたトラネキサム酸の存在は、歯肉上のバイオフィルム中の細菌の有害な効果を媒介する組成物の有効性を補助する。
【００４３】
一態様では、本発明は、ａ）組成物の０．０１重量％〜５重量％、好ましくは０．０５重量％〜４重量％の第一スズイオン源と、ｂ）組成物の０．０１重量％〜１０重量％、好ましくは１重量％未満の抗線維素溶解剤とを含む、口腔ケア組成物を対象とする。好ましくは、口腔ケア組成物は、組成物の０．０１重量％〜５重量％、好ましくは１重量％〜２．５重量％の増粘剤を更に含み、その増粘剤は、（ｉ）直鎖状硫酸化多糖類、（ｉｉ）天然ガム、（ｉｉｉ）非イオン性セルロース又はその誘導体、（ｉｖ）ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、（ｖ）少なくともポリカルボキシル化エチレン骨格を含むポリマー、（ｖｉ）ポリアクリルアミド、（ｖｉｉ）アクリルアミドを含むコポリマー、（ｖｉｉｉ）ペクチン、（ｉｘ）タンパク質、（ｘ）ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、好ましくは高分子量ＰＥＧ、及び（ｘｉ）これらの組み合わせからなる群から選択される、少なくとも１種の薬剤、好ましくは少なくとも２種の薬剤を含む。
【００４４】
抗菌剤
本発明は、好ましい実施形態において、抗菌効果を提供するために、組成物の０．０１重量％〜５重量％、好ましくは０．０５重量％〜４重量％又はより好ましくは０．１重量％〜２重量％の量で存在する第一スズイオン源を含む、上述の口腔ケア組成物に関する。本明細書で使用されるスズイオン源は、任意の安全かつ有効な第一スズ塩を含み得る。第一スズイオン源の好適な例は、塩化第一スズ、フッ化第一スズ、酢酸第一スズ、グルコン酸スズ、シュウ酸第一スズ、硫酸第一スズ、乳酸第一スズ、酒石酸第一スズ、ヨウ化第一スズ、フッ化第一スズ、ヘキサフルオロジルコン酸第一スズ、クエン酸第一スズ、リンゴ酸第一スズ、グリシン酸第一スズ、炭酸第一スズ、リン酸第一スズ、ピロリン酸第一スズ、メタリン酸第一スズ及びこれらの組み合わせからなる群から選択される。好ましくは、第一スズイオン源は、フッ化第一スズ、塩化第一スズ及びこれらの組み合わせから選択される。より好ましくは、第一スズイオン源は、塩化第一スズを含む。第一スズ塩の他の例は、米国特許第５，５７８，２９３号、Ｐｒｅｎｃｉｐｅ，Ｍ．及び同第５，２８１，４１０号、Ｌｕｋａｃｏｖｉｃ，Ｍ．Ｆに見出される。第一スズイオン源に加えて、第一スズイオンを安定化するために使用される他の成分、例えば米国特許第５，００４，５９７号、Ｍａｊｅｔｉ，Ｓ．及び同第５，５７８，２９３号、Ｐｒｅｎｃｉｐｅ，Ｍに記載の成分などが含まれてもよい。
【００４５】
本発明の口腔ケア組成物は、任意に、組成物の０．０３５重量％以上、０．０５重量％〜２重量％以上、０．１重量％〜１重量％の量で存在する他の抗菌剤を含んでもよい。これらの他の抗菌剤の例としては、例えば、ハロゲン化ジフェニルエーテル、フェノール及びその同族体を含むフェノール化合物、モノアルキル及びポリアルキル並びに芳香族ハロフェノール、レゾルシノール及びその誘導体、キシリトール、ビスフェノール化合物及びハロゲン化サルチルアニリド、安息香酸エステル並びにハロゲン化カルバニリドなどの非カチオン性抗菌剤を挙げることができる。エンドグリコシダーゼ、パパイン、デキストラナーゼ、ムタナーゼ及びこれらの組み合わせなどの酵素もまた、有用な抗菌剤である。これらの薬剤は、米国特許第２，９４６，７２５号、Ｎｏｒｒｉｓ，Ｐ．Ｅ．及び同第４，０５１，２３４号、Ｇｉｅｓｋｅ，Ｈ．Ａ．に開示されている。他の抗菌剤の例としては、クロルヘキシジン、及びチモールなどの風味油が挙げられる。別の例では、他の抗菌剤としては、トリクロサン（５−クロロ−２−（２，４−ジクロロフェノキシ）フェノール）を挙げることができる。
【００４６】
抗線維素溶解剤
本発明は更に、好ましい実施形態では、抗線維素溶解剤を含む上述の口腔ケア組成物に関する。好ましくは、抗線維素溶解剤は、式（Ｉ）の化合物であり、
【００４７】
【化１】
2019532946.tif 000002
式中、Ｘは、分岐状若しくは非分岐状、飽和若しくは不飽和の脂肪族基、又は芳香族基である。
【００４８】
本明細書で使用するとき、「脂肪族基」という用語は、１〜２０個の炭素原子を含有する、飽和及び不飽和、非分岐状（すなわち、直鎖）及び分岐状、非環式、環状又は多環式脂肪族炭化水素の両方を含み、これらは任意に置換されている。脂肪族基は、本明細書では、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルキレン、アルケニレン、アルキニレン及びシクロアルキル部分などの基を含むことが意図されるが、これらに限定されない。
【００４９】
本明細書で使用するとき、「芳香族基」という用語は、アリール環を指し、限定されないが、水素及び炭素のみからなり、６〜１８個の炭素原子を含有する単環式又は多環式炭化水素環系を含み、この環系は、部分的に飽和していてもよい。本明細書で特に明記しない限り、アリール環は、任意に置換される。芳香族基は、本明細書では、限定されないが、フェニル、ナフチル及びフルオレニルなどの基を含むことが意図される。
【００５０】
「シアノ」という用語は、−ＣＮ官能基を指す。
【００５１】
「ハロ」又はハロゲンという用語は、それ自体又は別の置換基の一部として、フッ素、塩素、臭素、又はヨウ素原子を指す。
【００５２】
「オキソ」という用語は、＝Ｏ置換基を指す。
【００５３】
「アルキル」は、炭素及び水素原子のみからなる直鎖又は分岐鎖炭化水素鎖を含有し、不飽和を含まず、１〜２０個の炭素原子、好ましくは１〜１２個の炭素原子、好ましくは１〜８個又は好ましくは１〜６個の炭素原子を有し、かつ単結合、例えば、メチル、エチル、プロピル、１−メチルエチル（イソ−プロピル）、ブチル、ペンチル等によって分子の残りの部分に結合される基を指す。アルキルは、任意に置換されてもよい。
【００５４】
「アルケニル」は、炭素及び水素原子のみからなる直鎖又は分岐鎖炭化水素鎖を含有し、少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を含み、２〜２０個の炭素原子、好ましくは２〜１２個の炭素原子又は好ましくは１〜８個の炭素原子、例えば、エテニル、プロパ−２−エニル、ブタ−１−エニル、ペンタ−１−エニル、ペンタ−１，４−ジエニル等を有する基を指す。アルケニルは、任意に置換されてもよい。
【００５５】
「アルキニル」は、炭素原子及び水素原子のみからなる直鎖又は分岐鎖炭化水素鎖を含有し、少なくとも１つの炭素−炭素三重結合を含有し、２〜２０個の炭素原子、好ましくは２〜１２個の炭素原子又は好ましくは１〜８個の炭素原子、例えば、エチニル、プロピニル、ブチニル、ペンチニル、ヘキシニル等を有する基を指す。アルキニルは、任意に置換されてもよい。
【００５６】
「アルキレン」又は「アルキレン鎖」は、分子の残りの部分を基に結合する直鎖又は分岐鎖炭化水素鎖を含有し、炭素及び水素のみからなり、不飽和を含まず、かつ１〜１２個の炭素原子、例えば、メチレン、エチレン、プロピレン、ブチレン等を有する基を指す。アルキレンは、任意に置換されてもよい。
【００５７】
「アルケニレン」又はアルケニレン鎖」は、分子の残りの部分を基に結合し、炭素及び水素のみからなり、少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を含み、かつ２〜２０個の炭素原子、好ましくは２〜１２個の炭素原子、例えば、エテンレン、プロペニレン、ブテニレン等を有する直鎖又は分岐鎖炭化水素鎖を指す。アルケニレンは、任意に置換されてもよい。
【００５８】
「アルキニレン」又は「アルキニレン鎖」は、分子の残りの部分を基に結合し、炭素及び水素のみからなり、少なくとも１つの炭素−炭素三重結合を含み、かつ２〜２０個の炭素原子、例えば、プロピニレン、ブチニレン等を有する直鎖又は分岐鎖炭化水素鎖を指す。アルキニレンは、任意に置換されてもよい。
【００５９】
「シクロアルキル」は、炭素原子及び水素原子のみからなる安定した飽和単環式又は多環式炭化水素基を指し、これは、３〜１５個の炭素原子、好ましくは３〜１０個の炭素原子又は好ましくは３〜７個の炭素原子、例えば、シクロヘキサンを有する、縮合又は架橋された環系を含み得る。シクロアルキルは、任意に置換されてもよい。
【００６０】
「ハロアルキル」は、１つ以上のハロゲン基、例えば、トリフルオロメチル、ジフルオロメチル、トリクロロメチル、２，２，２−トリフルオロエチル、１，２−ジフルオロエチル、３−ブロモ−２−フルオロプロピル、１，２−ジブロモエチル等で置換された上に定義したアルキルを指す。ハロアルキルは、任意に置換されてもよい。
【００６１】
「ヘテロシクリル」は、２〜２０個の炭素原子、及び窒素、酸素又は硫黄からなる原子から選択される１〜６個のヘテロ原子からなる、安定した３〜２４員の飽和環を指す。本明細書に特に別途記載されない限り、ヘテロシクリルは、縮合又は架橋された環系を含み得る、単環式、二環式、三環式又は四環式環系であってよく、ヘテロシクリル中の窒素、炭素又は硫黄原子は、任意に酸化されてもよく、窒素原子は、任意に四級化されてもよい。ヘテロシクリルは、任意に置換されてもよい。
【００６２】
「ヘテロシクロアルキル」は、式−Ｒａ−Ｒｅの官能基を指し、式中、Ｒａは、上に定義したアルキレンであり、Ｒｅは、上に定義したヘテロシクリルであり、ヘテロシクリルが窒素含有ヘテロシクリルである場合、ヘテロシクリルは、窒素原子でアルキレンに結合してもよい。ヘテロシクリルアルキルは、任意に置換されてもよい。
【００６３】
「ヘテロアリール」は、１〜１７個の炭素原子、並びに窒素、酸素及び硫黄からなる原子から選択される１〜３個のヘテロ原子からなる、５〜２０員芳香族環を指す。ヘテロアリールは、縮合又は架橋した環系を含み得る、単環式、二環式、三環式又は四環式環系であってもよい。ヘテロアリールは、任意に置換されてもよい。
【００６４】
「ヘテロアリールアルキル」は、式−Ｒａ−Ｒｆの官能基を指し、式中、Ｒａは、上に定義したアルキレンであり、Ｒｆは、上に定義したヘテロアリールである。ヘテロアリールアルキルは、任意に置換されてもよい。
【００６５】
「任意に置換された」とは、後に記載される状況の事象が発生しても、発生しなくてもよく、説明は、その事象又は状況が発生する事例、及びそれが発生しない事例を含むことを意味する。例えば、特に明記しない限り、「任意に置換された」は、化学部分が、以下の基、アルキル、アルケニル、ハロ、ハロアルケニル、シアノ、ニトロ、アリール、シクロアルキル、ヘテロシクリル、ヘテロアリール、オキソ、−ＯＲ１、−ＯＣ（Ｏ）−Ｒ１、−Ｎ（Ｒ１）２、−Ｃ（Ｏ）Ｒ１、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ１、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１）２、−Ｎ（Ｒ１）Ｃ（Ｏ）ＯＲ２、−Ｎ（Ｒ１）Ｃ（Ｏ）Ｒ２、−Ｎ（Ｒ１）Ｓ（Ｏ）ｔＲ２（式中、ｔは１〜２である）、−Ｓ（Ｏ）ｔＯＲ２（式中、ｔは１〜２である）、−Ｓ（Ｏ）ｘＲ２（式中、ｘは０〜２である）及び−Ｓ（Ｏ）ｔＮ（Ｒ１）２（式中、ｔは１〜２である）のうちの１つ以上によって置換されても、置換されなくてもよく、式中、各Ｒ１は、独立して、水素、アルキル、ハロアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、アリール（１つ以上のハロゲン基で任意に置換された）、アラルキル、ヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、ヘテロアリール又はヘテロアリールアルキルであり、各Ｒ２は、アルキル、ハロアルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、アリール、アラルキル、ヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、ヘテロアリール又はヘテロアリールアルキルであり、上記置換基の各々は、別途指示のない限り非置換である。
【００６６】
好ましくは、抗線維素溶解剤は、トラネキサム酸、εアミノカプロン酸、ｐ−アミノメチル安息香酸又はこれらの組み合わせから選択される。好ましくは、抗線維素溶解剤は、組成物の約０．１重量％〜１重量％未満、好ましくは０．２重量％〜０．７重量％又はより好ましくは０．２５重量％〜０．５５重量％の量で存在する。好ましくは、抗線維素溶解剤は、化学名トランス−４−アミノメチル−シクロヘキサンカルボン酸（ＣＡＳ番号１１９７−１８−８）及び以下の構造式（ＩＩ）を有するトラネキサム酸（tranexamic acid、ＴＡ）である。
【００６７】
【化２】
2019532946.tif 000003
【００６８】
トラネキサム酸は、フィブリン凝塊の溶解（「ｌｙｓｉｓ」又は「ｄｉｓｓｏｌｕｔｉｏｎ」）を防止するために使用される抗線維素溶解剤である。これは、フィブリン凝塊の安定化を補助し、これが凝固を維持し、出血の制御を補助する。トラネキサム酸は、非抗菌性として記載されており、歯肉炎症、出血及び／又は膨潤を阻害するのに非常に有効であると記載されている（米国特許第４，２７２，５１３号、Ｇａｆｆａｒ，Ａ．を参照されたい）。「トラネキサム酸」という用語は、所望の抗出血活性を有する酸自体、又はその生物前駆体若しくは塩を含む。好ましくは、トラネキサム酸は、遊離酸形態、又はその経口的に許容可能な塩の形態、好ましくは、例えば、アルカリ金属（例えば、Ｎａ又はＫ）、アンモニウム、又はＣ１〜Ｃ８単置換、二置換、若しくは三置換アンモニウム（例えば、アルカノール置換された、例えば、モノ−、ジ−、若しくはトリ−エタノールアンモニウム）カチオンと共に水溶性の形態で用いられてもよい。トラネキサム酸は、Ｃｙｃｌｏｋａｐｒｏｎ（登録商標）として市販されている。代替的に、トラネキサム酸は、そのシス−トランス混合物から合成又は単離されてもよい（米国特許第３，４９９，９２５号、Ｎａｉｔｏ，Ｔ．を参照されたい）。
【００６９】
上述のトラネキサム酸の安定性及び変色の問題は、組成物中のトラネキサム酸濃度を低下させることによって解決され得ることが発見された。驚くべきことに、組成物の１重量％未満のトラネキサム酸などの最小低減のみが、その安定性及び配合適合性の材料差を生じ得ることが見出された。トラネキサム酸濃度の低減は、本発明の好ましい口腔ケア組成物において、それを第一スズイオンと組み合わせるという効果、潜在的に相乗効果に起因して、歯肉創傷治癒の活性及び／又は有効性に悪影響を及ぼさない。理論に束縛されることを望むものではないが、第一スズイオンは、トラネキサム酸上のこれらの化学部分に強く結合して、より低い濃度で十分な有効性を維持するために浸透に正の影響を及ぼし得ると考えられる。
【００７０】
別の実施形態では、抗線維素溶解剤は、εアミノカプロン酸（epsilon aminocaproic acid、ＥＡＣＡ）である。好ましくは、ＥＡＣＡは、組成物の０．０１重量％〜５重量％、好ましくは０．１重量％〜１重量％又はより好ましくは１重量％未満の量で存在する。ＥＡＣＡは、化学名ヘキサン酸、６−アミノ−（ＣＡＳ番号６０−３２−２）及び以下の構造式（ＩＩＩ）を有する。
【００７１】
【化３】
2019532946.tif 000004
【００７２】
εアミノカプロン酸及びその類似体は、Ａｍｉｃａｒ（登録商標）の商標名で市販されている。「εアミノカプロン酸」という用語は、所望の抗出血活性を有する酸自体又は生物前駆体又はその塩を含む。それは、アミノ酸リジンの誘導体であり、抗プラスミン剤である。トラネキサム酸と同様に、εアミノカプロン酸の使用はまた、口腔ケア組成物に変色の問題をもたらし得る（米国特許第４，６４９，０４４号、Ｇｏｍｉ，Ｔ．を参照されたい）。不安定性及び変色の問題を説明した以前の口腔ケア組成物は、０．０５％〜１％のレベルでεアミノカプロン酸と共に配合されている（米国特許第４，２７２，５１３号、Ｇａｆｆａｒ，Ａ．及び同第４，２７２，５１２号、Ｇａｆｆａｒ，Ａ．を参照されたい）。理論に束縛されることを望むものではないが、変色は、εアミノカプロン酸と風味成分中のアルデヒド基との反応に起因すると考えられる。変色を回避するために、上記参照は、シクロデキストリンを導入すること、及びアルデヒド基を実質的に含まない風味成分の使用を提案している。しかしながら、この溶液は、製剤を複雑にし、使用することができる風味材料の種類を制限するため、望ましくない。代わりに、本発明は、上述の問題を克服するために、εアミノカプロン酸を第一スズイオンと組み合わせることを助言する。
【００７３】
更に別の実施形態では、抗線維素溶解剤は、ｐ−アミノメチル安息香酸（p-aminomethylbenzoic acid、ＰＡＭＢＡ）である。好ましくは、ＰＡＭＢＡは、組成物の０．０１重量％〜５重量％、好ましくは０．１重量％〜１重量％又はより好ましくは１重量％未満の量で存在する。ｐ−アミノメチル安息香酸（ＣＡＳ番号５６−９１−７）は、以下の構造式（ＩＶ）を有する。
【００７４】
【化４】
2019532946.tif 000005
【００７５】
「ｐ−アミノメチル安息香酸」という用語は、所望の抗出血活性を有する酸自体、又はその生物前駆体若しくは塩を含む。
【００７６】
増粘剤
好ましくは、本明細書における本発明の口腔ケア組成物は、１種以上の増粘剤、より好ましくは少なくとも２種の増粘剤を含んでもよい。好ましくは、増粘剤は、組成物の０．０１重量％〜１０重量％、好ましくは１重量％〜２．５重量％の量で存在する。特に、本発明は、好ましい実施形態では、以下からなる群から選択される増粘剤を含む、上述の口腔ケア組成物に更に関する。
（ｉ）直鎖状硫酸化多糖類が、カラギーナンである。
（ｉｉ）天然ガムが、キサンタンガム、カラヤガム、アラビアガム、トラガカントガム及びこれらの組み合わせからなる群から選択される。
（ｉｉｉ）非イオン性セルロース又はその誘導体が、５０，０００〜１，３００，０００ダルトンの平均分子量範囲、及び好ましくは３００〜４，８００の平均重合度を有する。
（ｉｖ）ポリマーが、少なくともポリカルボキシル化エチレン骨格を含み、３０，０００〜１，０００，０００ダルトンの分子量を有するメチルビニルエーテルと無水マレイン酸とのコポリマー、アクリル酸のホモポリマー、及びマレイン酸とアクリル酸又はメタクリル酸とのコポリマーからなる群から選択される。並びに
（ｖ）これらの組み合わせ。
【００７７】
好ましくは、本発明による口腔ケア組成物では、増粘剤は、以下からなる群から選択される。（ｉ）カラギーナンが、κ−カラギーナン、ι−カラギーナン、λ−カラギーナン及びこれらの組み合わせからなる群から選択される。（ｉｉ）天然ガムが、キサンタンガムである。（ｉｉｉ）非イオン性セルロース又はその誘導体が、ヒドロキシエチルセルロース（hydroxyethyl cellulose、ＨＥＣ）である。（ｉｖ）無水マレイン酸とメチルビニルエーテルとのコポリマーが、Ｇａｎｔｒｅｚ  ＡＮ１３９（Ｍ．Ｗ．５００，０００ダルトン）、Ｇａｎｔｒｅｚ  ＡＮ１１９（Ｍ．Ｗ．２５０，０００ダルトン）又はＳ−９７医薬品グレード（Ｍ．Ｗ．７０，０００ダルトン）のうちの少なくとも１つであり、アクリル酸のホモポリマー、及びマレイン酸とアクリル酸又はメタクリル酸とのコポリマーが、Ａｃｕｓｏｌ  ４４５、Ａｃｕｓｏｌ  ４４５Ｎ、Ａｃｃｕｓｏｌ  ５３１、Ａｃｕｓｏｌ  ４６３、Ａｃｕｓｏｌ  ４４８、Ａｃｕｓｏｌ  ４６０、Ａｃｕｓｏｌ  ４６５、Ａｃｕｓｏｌ  ４９０、Ｓｏｋａｌａｎ  ＣＰ５、Ｓｏｋａｌａｎ  ＣＰ７、Ｓｏｋａｌａｎ  ＣＰ４５、又はＳｏｋａｌａｎ  ＣＰ１２Ｓのうちの少なくとも１つである。並びに（ｖ）これらの組み合わせ。
【００７８】
実施例では、ＧＡＮＴＲＥＺ（商標）シリーズのポリマーは、３０，０００ダルトン〜１，０００，０００ダルトンの分子量（Ｍ．Ｗ．）を有する無水マレイン酸とメチルビニルエーテルとのコポリマーである。これらのコポリマーは、例えば、ＧＡＮＴＲＥＺ（商標）ＡＮ１３９（Ｍ．Ｗ．５００，０００ダルトン）、ＡＮ１１９（Ｍ．Ｗ．２５０，０００ダルトン）及びＳ−９７医薬品グレード（Ｍ．Ｗ．７０，０００ダルトン）として、Ａｓｈｌａｎｄ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ（Ｋｅｎｔｕｃｋｙ，ＵＳＡ）から入手可能である。
【００７９】
別の実施例では、ＡＣＵＳＯＬ（商標）及びＳＯＫＡＬＡＮシリーズのポリマーには、アクリル酸のホモポリマー、及びマレイン酸とアクリル酸又はメタクリル酸とのコポリマーが含まれる。その例は、約２，０００〜約１，０００，０００の分子量（Ｍ．Ｗ．）を有するマレイン酸とアクリル酸との０：１０００〜１０００：０コポリマーである。これらのコポリマーは、Ｄｏｗ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ（Ｍｉｃｈｉｇａｎ，ＵＳＡ）からＡＣＵＳＯＬ（商標）４４５及び４４５Ｎ、ＡＣＵＳＯＬ（商標）５３１、ＡＣＵＳＯＬ（商標）４６３、ＡＣＵＳＯＬ（商標）４４８、ＡＣＵＳＯＬ（商標）４６０、ＡＣＵＳＯＬ（商標）４６５、ＡＣＵＳＯＬ（商標）４９７、ＡＣＵＳＯＬ（商標）４９０として、またＢＡＳＦ（Ｎｅｗ  Ｊｅｒｓｅｙ，ＵＳＡ）からＳｏｋａｌａｎ（登録商標）ＣＰ５、Ｓｏｋａｌａｎ（登録商標）ＣＰ７、Ｓｏｋａｌａｎ（登録商標）ＣＰ４５、及びＳｏｋａｌａｎ（登録商標）ＣＰ１２  Ｓとして市販されている。
【００８０】
抗齲蝕剤
口腔ケア組成物は、有効量の抗齲蝕剤を含んでもよい。一態様では、抗齲蝕剤は、フッ化物イオン源である。フッ化物イオン源は、組成物中に２５℃でフッ化物イオン濃度を提供するのに十分な量で存在してもよく、及び／又は組成物の０．００２５重量％〜２重量％若しくは好ましくは０．５重量％〜１．５重量％の濃度で使用されて、抗齲蝕効果を提供することができる。多種多様なフッ化物イオン生成材料を、本発明の可溶性フッ化物の供給源として使用することができる。フッ化物イオンの例は、米国特許第３，５３５，４２１号、Ｂｒｉｎｅｒ，Ｗ．Ｗ．及び同第３，６７８，１５４号、Ｗｉｄｄｅｒ，Ｊ．Ｓ．に開示されている。フッ化物イオンの好適な例は、フッ化ナトリウム、フッ化インジウム、フッ化アミン、モノフルオロリン酸ナトリウム（「ＭＦＰ」）、フッ化カリウム、フッ化亜鉛及びこれらの混合物を含む供給源から選択され得る。
【００８１】
抗歯垢剤
口腔ケア組成物は、組成物の０．００１重量％〜２０重量％、又は０．１重量％〜５重量％の量で存在する抗歯垢剤又は抗歯石剤のうちの１種以上を含んでもよい。非限定例としては、ピロリン酸イオンの供給源としてピロリン酸塩を挙げることができる。他の例は、米国特許第８，６９１，１９０号、Ｈａｕｇｈｔ，Ｊ．Ｃ．、段落５５に開示されている。
【００８２】
ｐＨ
口腔ケア組成物のｐＨは、４．５〜１１又は好ましくは５〜１０であり得る。口腔ケア組成物中で使用される活性物質に応じて、異なるｐＨが望まれることがある。第一スズフッ化物を含有する製剤では、一般的な歯磨剤よりも若干低いｐＨを有することが望まれる場合がある。ｐＨは、典型的には、１：３のペースト：水の比を使用して測定され、これにより１グラムの口腔ケア組成物（例えば、練り歯磨き）を３グラムの脱イオン水に混合し、次いで、周囲条件下で較正された業界で受け入れられているｐＨプローブでｐＨを評価する。ｐＨは、自動温度補償（Automatic Temperature Compensating、ＡＴＣ）プローブを用いてｐＨメータによって測定される。ｐＨメータは、０．００１ｐＨ単位で読み取りが可能である。
【００８３】
各使用後、電極を試料溶液から水で洗浄しなくてはならない。キムワイプ又は同等物などのティッシュで拭き取ることによって、余分な水を除去する。電極が使用されていないときには、ｐＨ７の緩衝液又は電極保管液に電極の先端を浸漬させた状態を維持する。機器の詳細は以下のとおりである。
ｐＨメータ：０．０１又は０．００１ｐＨ単位で読み取りが可能なメータ。
電極：Ｏｒｉｏｎ  Ｒｏｓｓ  Ｓｕｒｅ−Ｆｌｏｗコンビネーション：ガラス体−ＶＷＲ＃３４１０４−８３４／Ｏｒｉｏｎ＃８１７２ＢＮ又はＶＷＲ＃１００１０−７７２／Ｏｒｉｏｎ＃８１７２ＢＮＷＰ。
エポキシ体−ＶＷＲ＃３４１０４−８３０／Ｏｒｉｏｎ＃８１６５ＢＮ又はＶＷＲ＃１００１０−７７０／Ｏｒｉｏｎ＃８１６５ＢＮＷＰ。
セミミクロエポキシ体−ＶＷＲ＃３４１０４−８３７／Ｏｒｉｏｎ＃８１７５ＢＮ又はＶＷＲ＃１００１０−７７４／Ｏｒｉｏｎ＃３１７５ＢＮＷＰ。
Ｏｒｉｏｎ  ＰｅｒｐＨｅｃｔコンビネーション：ＶＷＲ＃３４１０４−８４３／Ｏｒｉｏｎ＃８２０３ＢＮセミミクロガラス体。
ＡＴＣプローブ：Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｃａｔ．＃１３−６２０−１６。
【００８４】
ｐＨ緩衝剤
本明細書の口腔ケア組成物は、有効量の緩衝剤又はｐＨ調整剤を含んでもよく、本明細書で使用するとき、口腔ケア組成物のｐＨを上記で特定されたｐＨ範囲に調整するために使用することができる薬剤を指す。緩衝剤としては、アルカリ金属水酸化物、水酸化アンモニウム、有機アンモニウム化合物、炭酸塩、セスキ炭酸塩、ホウ酸塩、ケイ酸塩、リン酸塩、イミダゾール、及びこれらの混合物が挙げられる。
【００８５】
特定の緩衝剤としては、リン酸一ナトリウム（リン酸一塩基性ナトリウム）、リン酸三ナトリウム（リン酸三塩基性ナトリウム十二水和物又はＴＳＰ）、安息香酸ナトリウム、安息香酸、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、アルカリ金属炭酸塩、炭酸ナトリウム、イミダゾール、ピロリン酸塩、グルコン酸ナトリウム、乳酸、乳酸ナトリウム、クエン酸、クエン酸ナトリウム、又はリン酸が挙げられる。
【００８６】
一実施形態では、組成物の０．０１重量％〜３重量％、好ましくは０．１重量％〜１重量％のＴＳＰ、及び組成物の０．００１重量％〜２重量％、好ましくは０．０１重量％〜０．３重量％のリン酸一ナトリウムが使用される。理論に束縛されることを望むものではないが、ＴＳＰ及びリン酸一ナトリウムは、カルシウムイオンキレート活性を有してもよく、このため、（モノフルロリン酸塩を含有するこれらの製剤中に）若干のモノフルオロリン酸塩の安定化をもたらす。
【００８７】
水
水は、その多くの利点により、口腔ケア組成物中の担体材料として一般的に使用される。例えば、水は加工助剤として有用であり、口腔に対して害が無く、練り歯磨きの迅速な発泡を助ける。水は、それ自体で成分として添加されてもよく、又は例えば、ソルビトール及びラウリル硫酸ナトリウムなどの他の一般的な原料中の担体として存在してもよい。
【００８８】
本明細書の口腔ケア組成物は、組成物の１０重量％〜７０重量％、又は好ましくは１５重量％〜３０重量％の総含水量を含んでもよい。本明細書で使用するとき、「総含水量」という用語は、別個に添加された、又は、他の原材料のための溶媒若しくは担体として、口腔ケア組成物中に存在する水の総量を意味するが、ある特定の無機塩の結晶化の水として存在し得るものを除く。好ましくは、水は、ＵＳＰ水である。
【００８９】
風味組成物
本明細書の口腔ケア組成物は、口腔ケア組成物の０．０１重量％〜５重量％、好ましくは０．１重量％〜２重量％の風味組成物を含み得る。風味組成物中で使用され得る好適な風味剤の例としては、米国特許第８，６９１，１９０号、Ｈａｕｇｈｔ，Ｊ．Ｃ．、段落３９及び４０〜４５に記載されているものが挙げられる。好ましくは、風味組成物は、
（ｉ）風味組成物の０重量％超〜５５重量％未満、若しくは６５重量％超〜９５重量％のメチルサリチレート；風味組成物の０重量％超〜３０重量％未満、若しくは３５重量％超〜６５重量％のメントール；風味組成物の０重量％超〜１重量％未満、若しくは５重量％超〜５０重量％のオイゲノール；及び前記風味組成物の０重量％超〜３重量％未満、若しくは８重量％超〜３０重量％のシネオールを含む風味混合物；又は
（ｉｉ）メチルサリチレート、メントール、オイゲノール及びシネオールを含まないか、若しくは実質的に含まない風味混合物を含む。
【００９０】
甘味剤
本明細書の口腔ケア組成物は、甘味剤を含んでもよい。甘味剤は、一般に、組成物の０．００５重量％〜５重量％の濃度で口腔ケア組成物中に存在する。甘味剤の好適な例としては、サッカリン、デキストロース、スクロース、ラクトース、キシリトール、マルトース、果糖、アスパルテーム、シクラミン酸ナトリウム、Ｄ−トリプトファン、ジヒドロカルコン、アセスルファム、スクラロース、ネオテーム、及びこれらの混合物が挙げられる。甘味剤の他の好適な例は、米国特許第８，６９１，１９０号、Ｈａｕｇｈｔ，Ｊ．Ｃ．に記載されている。
【００９１】
着色剤
本明細書の口腔ケア組成物は、組成物の０．００１重量％〜０．０１重量％の量で存在する着色剤を含んでもよい。着色剤は、水性溶液、好ましくは１％の着色剤水溶液の形態であってよい。着色剤の好適な例としては、顔料、パール剤（pealing agent）、充填剤粉末、タルク、雲母、炭酸マグネシウム、炭酸カルシウム、オキシ塩化ビスマス、酸化亜鉛、及び口腔ケア組成物に視覚的変化を生みだすことができる他の物質を挙げることができる。他の好適な例としては、二酸化チタン（ＴｉＯ２）を挙げることができる。二酸化チタンは、組成物に不透明度を添加し、一般に組成物の０．２５重量％〜５重量％の濃度で口腔ケア組成物中に存在する白色粉末である。
【００９２】
界面活性剤
本明細書の口腔ケア組成物は、組成物の０．１重量％〜５０重量％、０．０２５重量％〜９重量％、０．０５重量％〜５重量％、０．１重量％〜２．５重量％、０．５重量％〜２重量％、又は０．１重量％〜１重量％の量で存在する界面活性剤を含んでもよい。界面活性剤は、アニオン性、非イオン性、両性、双極性、カチオン性界面活性剤、又はこれらの混合物から選択されてもよい。アニオン界面活性剤の好適な例としては、米国特許第８，６９１，１９０号、Ｈａｕｇｈｔ，Ｊ．Ｃ．、段落３２、３３、３４及び３５に記載されているものを挙げることができる。双性イオン性又は両性界面活性剤の好適な例は、米国特許第８，６９１，１９０号、Ｈａｕｇｈｔ，Ｊ．Ｃ．段落３６、カチオン性界面活性剤は段落３７、及び非イオン性界面活性剤は段落３８に記載されている。
【００９３】
湿潤剤
本明細書の口腔ケア組成物は、組成物の０重量％〜７０重量％、又は１５重量％〜５５重量％の量で存在する湿潤剤を含んでもよい。湿潤剤は、口腔ケア組成物の空気への曝露による硬化を回避し、ある特定の湿潤剤はまた、歯磨剤組成物に所望の甘味風味を付与することができる。湿潤剤の好適な例としては、グリセリン、ソルビトール、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、キシリトール、トリメチルグリシン、及びこれらの混合物を挙げることができる。他の例としては、他の食用多価アルコールを挙げることができる。
【００９４】
研磨剤
本明細書の口腔ケア組成物は、組成物の０．１重量％〜６０重量％、又は１重量％〜５０重量％、又は２重量％〜４０重量％、又は４重量％〜３０重量％の量で存在する１種以上の研磨剤を更に含んでもよい。好適な例としては、沈殿シリカ、溶融シリカ、炭酸カルシウム、ジカルシウムリン酸二和物、ホスフェート（オルトホスフェートを含む）、ピロホスフェート、パーライト、軽石、ナノダイヤモンド、表面処理脱水沈殿シリカ，籾殻シリカ、シリカゲル、アルミナ、ポリメタホスフェート、他の無機微粒子、及びこれらの混合物を挙げることができる。本明細書で有用な研磨剤材料の他の例としては、ジカルシウムオルトリン酸二水和物、ピロリン酸カルシウム、リン酸三カルシウム、ポリメタリン酸カルシウム、不溶性ポリメタリン酸ナトリウム、水和アルミナ、βピロリン酸カルシウム、炭酸カルシウム、並びに尿素及びホルムアルデヒドの粒子状縮合生成物などの樹脂性研磨剤材料、並びに米国特許第３，０７０，５１０号、Ｃｏｏｌｅｙ，Ｗ．Ｅ．に開示されるような他のものを挙げることができる。
【００９５】
抗感受性剤
本明細書の口腔ケア組成物は、組成物の０．００１重量％〜２０重量％、又は０．１重量％〜５重量％の量で存在する抗感受性剤を含んでもよい。抗感受性剤の好適な例としては、米国特許第８，９２６，９４９号、Ｄａｙａｎｉｍ，Ｒ．段落４１及び米国特許公開第２００９／０３１１２００号、Ｌａｍｂｅｒｔ，Ｐ．段落５９に記載されるものを挙げることができる。
【００９６】
ホワイトニング剤及び酸化剤
本明細書の口腔ケア組成物は、組成物の０．０１重量％〜３０重量％、又は０．１重量％〜１０重量％、又は０．５重量％〜５重量％の量で存在するホワイトニング剤又は酸化剤を含んでもよい。好適な例としては、過酸化水素、過酸化尿素、過酸化カルシウム、過酸化ナトリウム、過酸化亜鉛、又はこれらの組み合わせを挙げることができる。他の例は、米国特許第８，６９１，１９０号、Ｈａｕｇｈｔ，Ｊ．Ｃ．段落５６に記載されているものである。
【００９７】
抗炎症剤
本明細書の口腔ケア活性物質は、有効量の抗炎症剤を含んでもよい。好適な例としては、米国特許公開第２０１１／０１０４０８１、Ｓｃｏｔｔ，Ｄ．Ｃ．段落５５に記載されているものを挙げることができる。
【００９８】
抗歯石剤
本明細書の口腔ケア組成物は、組成物の０．０５重量％〜５０重量％、又は０．０５重量％〜２５重量％、又は０．１重量％〜１５重量％の量で存在する抗歯石剤を含んでもよい。好適な例としては、米国特許公開第２０１１／０１０４０８１号、Ｓｃｏｔｔ，Ｄ．Ｃ．段落６４及び米国特許公開第２０１２／００１４８８３号、Ｓｃｏｔｔ，Ｄ．Ｇ．段落６３〜６８に記載されているものを挙げることができる。
【００９９】
キレート化剤
本明細書の口腔ケア組成物は、有効量の、封鎖剤とも称されるキレート化剤を含んでもよく、これらの多くは、抗歯石活性又は歯牙実質活性（tooth substantive activity）も有する。口腔ケア製品中でのキレート化剤の使用は、細菌の細胞壁中に見出されるようなカルシウムを錯化する、歯垢を粉砕する及び金属イオンと錯化する能力のために有利である。鉄又は銅などのイオンのキレート化は、最終製品の酸化による変質を遅延させるのに役立つ。キレート化剤の好適な例としては、米国特許公開第２０１１／００２０２４６号、Ｓｔｒａｎｄ，Ｒ．段落２１〜２８に記載されているものを挙げることができる。
【０１００】
歯牙実質剤
本明細書の口腔ケア組成物は、有効量の歯牙実質剤を含んでもよい。本出願の目的のために、歯牙実質剤もまた、キレート化剤として同様に含まれる。好適な例としては、高分子電解質、より具体的にはアニオン性ポリマーを含めた、高分子界面活性剤（polymeric surface active agents、ＰＭＳＡｓ）を挙げることができる。他の例としては、米国特許公開第２０１２／００１４８８３号、Ｓｃｏｔｔ，Ｄ．Ｇ．段落７４〜８４に記載されているものを挙げることができる。
【０１０１】
鎮痛剤及び麻酔剤
本明細書の口腔ケア組成物は、有効量の鎮痛剤又は減感剤を含んでもよい。好適な例としては、米国特許第９，００５，５８５号、Ｄｅｃｋｎｅｒ，Ｇ．Ｅ．段落１１７に記載されるものを挙げることができる。
【０１０２】
他の成分
本発明の口腔ケア組成物は、当業者に既知の通常及び従来の補助成分を含むことができる。口腔ケア組成物のために選択された成分は、互いに、化学的かつ物理的に適合性でなければならないことが理解されよう。
【０１０３】
使用方法
一態様では、本発明は、ヒト対象の歯を清浄又は研磨するための方法に関する。本明細書の清浄又は研磨方法は、対象の歯を、本発明による口腔ケア組成物と接触させることを含む。
【０１０４】
別の態様では、本発明はまた、本発明による口腔ケア組成物を対象の口腔に投与することを含む、ヒト対象における歯肉健康を促進する方法に関する。好ましくは、歯肉健康を促進する方法は、少なくとも、以下からなる群から選択される期間内で行われる。
ａ）０時間〜７２時間の時間、
ｂ）０時間〜４８時間の時間、
ｃ）０時間〜２４時間の時間、
ここで０時間の時間は、本発明による口腔ケア組成物の投与時である。
【０１０５】
更に別の態様では、本発明はまた、歯肉健康を促進する方法にも関し、歯肉健康は、
（ｉ）口腔内の歯肉創傷治癒を改善すること、
（ｉｉ）口腔内の細菌活性の低減を改善すること、又は
（ｉｉｉ）これらの組み合わせから選択される。
【０１０６】
上記の方法は、口腔ケア組成物（例えば、歯磨剤）を用いたブラッシング（例えば、歯磨き）、又は口腔ケア組成物（例えば、歯磨剤スラリー若しくは口内洗浄剤）ですすぐことによるものであり得る。口腔ケア組成物は、未希釈で、又は例えば歯ブラシなどの送達装置を介して適用されてもよい。他の方法としては、局所口腔用ゲル、口中スプレー、練り歯磨き、歯磨剤、歯磨ゲル、歯磨き粉、タブレット、歯肉縁下用ゲル、フォーム、ムース、チューインガム、リップスティック、スポンジ、フロス、ペトロラタムゲル、若しくは義歯製品、又は他の形態物を、対象者の歯及び口腔粘膜に接触させることを含む。実施形態に応じて、口腔ケア組成物は、練り歯磨きと同じく頻繁に使用されてもよく、又はより少ない頻度、例えば週単位で使用されてもよく、又は歯面研磨ペースト若しくは他の集中治療の形態で、専門家により使用されてもよい。
【実施例】
【０１０７】
以下の実施例及び説明は、本発明の範囲内にある実施形態を更に明らかにする。これらの実施例は単に例示することが目的であり、これらの多くの変形例が発明の趣旨及び範囲から逸脱することなく可能であるので、本発明の制限として解釈されるべきではない。
【０１０８】
Ａ：実施例１〜１０
実施例１〜１０は、以下に示す歯磨剤組成物であり、成分の量は、重量％である。これらは、処方者によって選択される従来の方法によって好適に調製されてもよい。実施例１〜６は、それぞれ２つの濃度で、第一ズイオン源（例えば、塩化第一スズ）及び単一の抗線維素溶解剤（例えば、ＴＡ、ＥＡＣＡ、又はＰＡＭＢＡ）で作製した本発明による発明の製剤である。実施例７は、塩化第一スズ及び２つの抗線維素溶解剤（例えば、ＴＡ及びＥＡＣＡ）で作製された本発明の製剤である。並行して、対照製剤の実施例８〜１０が調製される。実施例８は、第一スズイオン源を含まずに作製され、実施例９は、抗線維素溶解剤を含まずに作製され、実施例１０は、いずれの成分も含まずに作製される。全ての組成物は、指示された比率の表１及び２の成分の混和によって調製される。
【０１０９】
【表１】
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【０１１０】
【表２】
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【０１１１】
実施例１１−口腔内の歯肉創傷治癒の改善を測定するためのアッセイ
以下のアッセイを使用して、本発明の口腔ケア組成物及び対照の口腔内での改善された歯肉創傷治癒を判定する。アッセイは、出血の有無を評価するために、歯肉の隙間の穏やかなプロービングを伴う。歯肉炎は、乳頭出血指数（Papillary Bleeding Index、ＰＢＩ、及びＭｕｈｌｅｍａｎｎ，Ｈ．Ｒ．：Ｊ．Ｐｒｅｖ．Ｄｅｎｔ．１９７７；４：６による）、そうでなければ「Ｍａｚｚａ指数」と称される、Ｍａｚｚａ修正により評価され、出血部位の数を判定する（Ｍａｚｚａ，１９８１により定義される）。この測定のために、各歯の近心面及び遠心面上で、最大５６箇所でプロービングを行う。プローブは、歯肉溝内におよそ０．５ｍｍ〜１．０ｍｍの深さまで配置され、その溝の軟組織態様に沿って、その挿入点から歯間乳頭の先端まで掃除される。各四分円の全ての顔面側表面又は舌側表面は、測定が行われる前に掃除される。測定は、第１の歯の掃除で開始される。
【０１１２】
Ｍａｚｚａ指数を使用した口腔軟組織及び歯肉炎検査は、ベースライン（すなわち、０時間）、３日目及び４週目に行われる。Ｍａｚｚａ指数は、表３のように定義される。
【０１１３】
【表３】
2019532946.tif 000008
【０１１４】
実験は、Ｐｒｏｃｔｅｒ＆Ｇａｍｂｌｅ（Ｂｅｉｊｉｎｇ）Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｃｏ．，Ｌｔｄ  Ｏｒａｌ  Ｃａｒｅ  Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔにおいて、Ｐ＆Ｇ  ＢｅＩｊｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ  Ｃｅｎｔｅｒ（Ｃｈｉｎａ）施設内審査委員会からの承認を得て、世界医師会ヘルシンキ宣言（１９９６補正）に従って行う。ＩＣＨ医薬品の臨床試験の実施基準（Good Clinical Practice、ＧＣＰ）に従う。
【０１１５】
始めに、研究参加要件を満たした対象は、ＳＡＳランダム化プログラムを使用してベースラインＭａｚｚａ指数評点でバランスのとれた処置群又は対照群に無作為に割り当てられる。以下の基準を満たす個人が含まれる：少なくとも１８歳である；最少１２本の天然前歯を有する；初期訪問時（すなわち、ベースライン）にＭａｚｚａ指数により測定して、少なくとも５箇所の出血部位を有する；歯肉炎を有するが、歯周炎ではない；研究に参加するための医療履歴／更新のレビューに基づいて、調査者／指示者によって判定される際、良好な健康全般である。個人の排除基準としては、以下が挙げられる。化膿性滲出物、広汎移動性及び／又は重度の退縮を特徴とする重篤な歯周病、歯科予防剤の投与のために抗生物質プレ薬剤を必要とする任意の条件、妊娠を自己報告した又は研究過程の間に妊娠する意図がある女性、また授乳中の女性、歯肉組織における非定型変色又は色素沈着、固定顔面矯正装置、歯肉組織における非定型変色又は色素沈着、研究中の任意の時間における抗生物質の使用、研究を安全に完了する対象を干渉することが予想され得る任意の疾患又は状態。各対象の臨床パラメータを、研究全体にわたって監視する。除外基準に当てはまる個人は、研究参加から除外される。
【０１１６】
研究は、４週間、二重盲検及び平行群である。対象は、陰性対照群、陽性対照群及び処置群（すなわち、発明の組成物）群からの製品で処置される。陰性対照群は、規則的なフッ化物練り歯磨き製品（例えば、０．３２１％フッ化ナトリウム−Ｃｒｅｓｔ（登録商標）口腔保護製品、ロット番号６０７７１８６４ＡＡ、２０１８．０３．１７）（「ＣＣＰ製品」）を受容する。正の対照群は、市販の伝統的な漢方薬及びＴＡ製剤Ｙｕｎ  Ｎａｎ  Ｂａｉ  Ｙａｏ  Ｌｉｕ  Ｌａｎ製品、ロット番号２０１９０４０８  Ｆ０５（ＹＮＢＹ製品）を受ける。処置群は、塩化第一スズ及び１種以上の抗線維素溶解剤（複数可）を含有する、実施例１〜７に開示される発明の組成物のうちのいずれか１つを受けた。対照又は処置脚部の各々は、４週間の期間にわたって１日２回、歯／歯肉面に局所的に適用される。Ｍａｚｚａ指数評価を対象に対して行い、図１に示されるように、ベースライン、３日目及び４週目（すなわち、研究の終了時）における出血部位の低減について評定する。統計分析システム（Statistical Analysis System、ＳＡＳ）を使用して、それぞれのベースラインをモデル共変量として用い、共分散（analysis of covariance、ＡＮＣＯＶＡ）の分析でデータを分析する。
【０１１７】
結果：１５０人の認定された対象が研究を完了した。処置群は、発明の組成物の実施例２を受けた。対照群及び処置群は、年齢及び性別に対して良好に平衡化される。ベースライン手段は、対照群と処置群との間で平衡化される（ｐ＞０．４３）。対照群及び処置群のＭａｚｚａ指数に基づく出血部位の数に関する結果（並びにそれらの信頼区間）を平均化し、次いで図２に示されるように、棒グラフとしてプロットして、対照群と処置群との間の比較を可能にする。製品の差のｐ値は、ｐ＜０．０１で得られる。
【０１１８】
図２は、発明の組成物の実施例２の歯肉出血の低減に対するＳｎ及びＴＡの効果を示す。図２を参照すると、発明の組成物の実施例２（ＴＡ及びＳｎの両方を含む）は、３日目に平均１０．７の出血部位、及び４週目に６．７３の出血部位を有するのに対して、陽性対照ＹＮＢＹ製品は、３日目に平均１１．６７の出血部位、及び４週目に８．４９日目の出血部位を有する。ＳｎもＴＡも含まない陰性対照ＣＣＰ製品は、３日目に平均１５．０１の出血部位、及び４週目に１３．４１の出血部位を有する。結果は、発明の組成物の実施例２におけるＴＡへのＳｎの添加が、ベースラインと４週目との間の出血部位の数の低減（すなわち、およそ−１０出血部位）がより大きく改善するが、ＴＡのみを有する陽性対照ＹＮＢＹ製品は、同じ時間枠にわたる出血部位の数の低減（すなわち、およそ−５出血部位）がより小さい。ＳｎもＴＡも含まない陰性対照ＣＣＰ製品は、４週間の研究にわたる出血部位の数のわずかな低減（すなわち、およそ−２出血部位）のみを示す。
【０１１９】
結果は、抗線維素溶解剤と抗菌剤（例えば、第一スズイオン源）との組み合わせが、強化された歯肉抗出血効果をもたらすことを実証する。実際には、発明の組成物の実施例２は、低濃度の抗線維素溶解剤（すなわち、０．５０％ＴＡ）における有効性を実証する。これは、ある特定の抗線維素溶解剤（例えば、ＴＡ、ＥＡＣＡ等）が、有効である一方で、特に有効性を提供するために用いられてきたより高い濃度で、口腔ケア組成物の変色及び不安定性の問題を引き起こすことが知られているため有利である。したがって、より低いレベルを使用することにより、変色及び不安定性は両方とも回避される。
【０１２０】
Ｂ：バイオフィルム中の抗菌剤の浸透改善を測定するためのアッセイ
バイオフィルム中の抗菌剤の浸透改善を判定するために、以下のアッセイを使用して、本発明の発明の口腔ケア組成物及び対照の、原位置歯垢バイオフィルムを介して、細菌と第一スズイオンの共局在パーセンテージを評価する。アッセイの詳細を以下に説明する。
【０１２１】
（ａ）バイオフィルム増殖のための基質
ヒドロキシアパタイト（hydroxyapatite、ＨＡ）ディスクは、バイオフィルムの原位置増殖に使用される。ＨＡディスクは、各ディスクに３つの平行な溝（すなわち、２つの側方溝の幅２００μｍ、深さ２００μｍ、中央溝の幅５００μｍ及び深さ５００μｍ）を有するように設計される。対象の口にディスクを取り付けるとき、一般に歯垢が蓄積する傾向がある清浄困難な領域である、歯間の隣接歯間間隙を模倣するように、これらの溝を垂直に維持する。このモデルは、溝からの円滑な歯垢の収集を可能にする。ＨＡディスクは、Ｓｈａｎｇｈａｉ  Ｂｅｉ’ｅｒｋａｎｇ  ｂｉｏｍｅｄｉｃｉｎｅ  ｌｉｍｉｔｅｄ  ｃｏｍｐａｎｙによって製造される。
【０１２２】
（ｂ）スプリントを着用する
ヒト対象は、スプリントを着用する。各対象は、少なくとも９ＨＡディスクが４８時間後に利用可能であることを確実にするために、スプリント上に最大１２ＨＡディスクを着用する。このようなスプリント及びＨＡディスクの非限定例を図３に示す。図３を参照すると、デバイス（１）は、複数のＨＡディスク（２ａ〜２ｄ）を保持する。特定の例では、図４を参照すると、ＨＡディスク（２０１）は、３つの平行な溝（２０３）を有する（２つの側方溝（２０３ａ及び２０３ｃ）は、幅３００μｍ及び深さ３００μｍであるが、中間溝（２０３ｂ）（２つの側面溝の間にある）は、幅５００μｍ及び深さ５００μｍである）。中間溝は、ＨＡディスクがヘッド対ヘッドの比較目的のために２つの同一の半ディスクに、より容易に分離することができるように、２つの側方溝よりも広くかつ深く設計されている。図５は、内部にバイオフィルム（２００５）を有する溝（２００３）の断面図の概略図である。ＨＡディスクの更なる詳細は、国際出願日が２０１５年９月９日であるＰＣＴ特許出願第ＰＣＴ／ＣＮ２０１５／０８９２３８号に記載されている。
【０１２３】
図５には示されていないが、ディスクは、歯間の歯間空間に後退が生じるように位置付けられ得る（この位置は歯垢を生じやすいため（清浄の困難さ等を考慮して））。対象は、食事中のみにスプリントを取り外し（不透明な容器内に湿った状態でスプリントを保存する）、口腔衛生処置を実施する。その後すぐに、スプリントを再び着用する。対象は、飲用時にストローを使用するように依頼される。
【０１２４】
（ｃ）ＨＡディスクからの原位置バイオフィルム放出
全てのＨＡディスクは、ピンセットによって４８時間でスプリントから除去される。ピンセットを使用して、ＨＡチップの縁部を保持し、ＨＡディスクをＰＢＳ（リン酸緩衝生理食塩水）溶液を含有する２ｍＬ遠心管に移す。毎回ディスクを移す前に、ピンセットを十分に洗浄する（水、７５％アルコール、次いで脱イオン水）。
【０１２５】
（ｄ）練り歯磨き上清の調製
１５グラムの脱イオン水は、５グラムの練り歯磨き（発明の組成物の実施例１〜７、対照組成物の実施例８〜１０又は市販の製剤（例えば、伝統的漢方薬及びＴＡ製剤、Ｙｕｎ  Ｎａｎ  Ｂａｉ  Ｙａｏ  Ｌｉｕ  Ｌａｎ製品、ロット番号２０１９０４０８  Ｆ０５（「ＹＮＢＹ製品」）に添加する。完全に撹拌した後、混合物を１２，０００ＲＰＭで２０分間遠心分離する。上清を使用の１日前に調製し、４℃で保管する。
【０１２６】
（ｅ）共焦点レーザー走査顕微鏡検査
ＨＡディスクをスプリントから除去した後。ＨＡディスクは、異なる発明の組成物及び対照組成物によるエクスビボ処置に使用される。対象の上清で処置し、微生物蛍光プローブ及び第一スズ蛍光プローブ（例えば、ＰＣＴ公開第２０１５／１３９２６３号、Ｓｈｉ  ｅｔ  ａｌ．に記載されている）で標識した後、溝内のバイオフィルムを、共焦点レーザー走査顕微鏡（confocal laser scanning microscopy、ＣＬＳＭ）（以下に記載される）によって測定する。好ましくは、第一スズ蛍光プローブは、ｔｅｒｔ−ブトキシ−カルボキサミド、Ｎ−［３’，６’−ビス（ジエチルアミノ）−３−オキソスピロ［１Ｈ−イソインドール−１，９’−［９Ｈ］キサンテン］−Ｈ）−イル］（Ｄｒ．Ｔａｏ  Ｙｕ、Ｆｕｄａｎ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ，Ｃｈｉｎａから入手可能）である。好ましくは、微生物蛍光プローブは、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ（商標）ＬＩＶＥ／ＤＥＡＤ（登録商標）ＢａｃＬｉｇｈｔ（商標）システム（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒから入手可能）である。
【０１２７】
（ｆ）ディスクの調製
ＨＡディスクをＰＢＳ溶液ですすぎ、各ＨＡディスクをピンセットで２つの半分に分割する。その後、各半ディスクを５００〜１０００μＬのＰＢＳ溶液に１分間静置する。各ディスクを、ＰＢＳ溶液又は練り歯磨き上清のいずれかによって２分間処理する。各ディスクをピンセットで保持することによって各ディスクを洗浄し、１ｍＬのＰＢＳ溶液中で前後に１０回振盪し、次いでこの洗浄サイクルを繰り返す。次いで、各ディスクを５００〜１０００μＬのＰＢＳ溶液に５分間静置する。
【０１２８】
（ｇ）蛍光染色及び顕微鏡検査
ＬＩＶＥ／ＤＥＡＤ（登録商標）ＢａｃＬｉｇｈｔ（商標）システムは、数種類の細菌が存在する天然歯垢バイオフィルムにおける細菌性活性を評価する際の信頼性のある代替物であることが報告されている。ＬＩＶＥ／ＤＥＡＤ（登録商標）ＢａｃＬｉｇｈｔ（商標）蛍光アッセイは、それらの膜の透過性に応じて、細菌を赤色又は緑色に染色する。緑色／赤色の比は、生／死の比とよく相関する。生／死染色方法は、抗菌剤活性を分析する際に信頼性が高いと考えられる。処理及び浸漬後、各半ディスクを、Ｓｙｔｏ−９プローブ（５μＭのＳｙｔｏ−９及び５μＭのＳｎプローブを含む）と一緒にＳｎプローブを用いて、暗所で３０分間染色し、他の半ディスクを暗所で１５分間、Ｌ７０１２  ＬＩＶＥ／ＤＥＡＤ（登録商標）染料溶液（５μＭのＳｙｔｏ−９＋３０μＭのヨウ化プロピジウムを含む）で染色する。染色後、各ディスクを、５００〜１０００μＬのＰＢＳ溶液に浸漬して、２分間静置する。各ディスクをピンセットで保持することによって再度洗浄し、１ｍＬのＰＢＳ溶液中で前後に５回振盪し、それを繰り返す。Ｌ７０１２  ＬＩＶＥ／ＤＥＡＤ（登録商標）染料染色した試料について、以下のパラメータを使用する：λｅｘ＝４８８ｎｍ、λｅｍ＝５００／６３５ｎｍ、２０倍対物レンズ、及び表面細菌の底部から６０μｍにわたってステップサイズ＝３μｍで走査する。ＳＹＴＯ−９／Ｓｎ染料染色した試料について、以下のパラメータを使用する：λｅｘ＝４８８ｎｍ／５４３ｎｍ、λｅｍ＝５００／５８０ｎｍ、２０倍対物レンズ、及び表面細菌の底部から６０μｍにわたってステップサイズ＝３μｍで走査する。
【０１２９】
（ｈ）共焦点レーザー走査顕微鏡検査
Ｌｅｉｃａ（商標）ＴＣＳ  ＳＰ８  ＡＯＢＳ分光共焦点顕微鏡を使用する。共焦点システムは、Ｌｅｉｃａ（商標）ＤＭ６０００Ｂ直立顕微鏡及びＬｅｉｃａ（商標）ＤＭＩＲＥ２反転顕微鏡からなる。直立スタンドは、スライド載置した標本を含む用途に使用されるが、３７℃のインキュベーションチャンバ及びＣＯ２富化付属品を有する反転スタンドは、生細胞用途を提供する。顕微鏡は、交換可能なレーザー走査ヘッド、及びそれ自体の電気モータ駆動段階に加えて、焦点（Ｚ）平面における急速撮像を容易にする、ガルバノメータ駆動型高精度Ｚステージを共有する。落射蛍光に加えて、顕微鏡は、明視野、偏光光及び差動干渉コントラストを含む様々な透過光コントラスト方法を支持し、５倍、２０倍、４０倍、６３倍（オイル及びドライ）並びに１００倍（オイル）Ｌｅｉｃａ（商標）対物レンズを装備している。
【０１３０】
レーザー走査及び検出システムについて説明する。ＴＣＳ  ＳＰ２  ＡＯＢＳ共焦点システムには、４つのレーザー（１つのダイオード、１つのアルゴン及び２つのヘリウムネオンレーザー）が供給され、それにより電磁スペクトルのＵＶ、可視及び遠隔赤色範囲内の広範な蛍光色素の励起を可能にする。音響光学的調整可能フィルタ（acousto-optical tunable filter、ＡＯＴＦ）、音響光学ビームスプリッタ（acousto-optical beam splitter、ＡＯＢＳ）及び４つのプリズム分光光度計検出器を組み込むレーザー走査ヘッドの設計は、３つの蛍光色素の同時励起及び検出を可能にする。直立型顕微鏡はまた、透過光検出器を有し、透過光画像を蛍光記録上に重ね合わせることが可能である。
【０１３１】
Ｌｅｉｃａ（商標）共焦点ソフトウェアが使用される。共焦点は、デュアルモニターを装備した標準Ｐｅｎｔｉｕｍ  ＰＣ及びＬｅｉｃａ（商標）共焦点ソフトウェアを介して制御される。Ｌｅｉｃａ共焦点ソフトウェアは、３Ｄ再構成及び測定、生理学的記録及び分析、時間経過、蛍光クロム共局在、ＦＲＡＰ及びＦＲＥＴなどの光漂白技術、スペクトル不混合及び多色回復を含む、多次元画像系列取得、処理及び分析のためのインターフェースを提供する。画像分析に関して、赤色及び緑色画素の比を定量化するために、Ｌ７０１２  ＬＩＶＥ／ＤＥＡＤ（登録商標）染料染色試料を選択し、赤色及び緑色画素の重なり効率を定量化するために、ＳＹＴＯ−９／Ｓｎ染料染色試料を選択する。ソフトウェアを使用して、「緑色」細菌プローブと「赤色」第一スズプローブとの画素重複が特定され、次いでこの値は、全ての非黒色画素（非重複第一スズプローブを含む）で除算されて、細菌中の第一スズの共局在百分率を提供する。一般に、この共局在化率が高いほど、口腔ケア製品は、細菌中に第一スズを送達するのに有効である。
【０１３２】
結果：対象を発明の組成物の実施例２（すなわち、Ｓｎ＋０．５０％ＴＡ）、対照組成物の実施例９（すなわち、Ｓｎのみ）及び市販のＹＮＢＹ製品で処置する。結果を表４に提供する。
【０１３３】
【表４】
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【０１３４】
結果は、抗線維素溶解剤（例えば、トラネキサム酸）及び抗菌剤（例えば、第一スズイオン源）を含有する発明の組成物の実施例２が、抗菌剤及び第一スズを含有するが、トラネキサム酸を含有しない対照組成物の実施例１０のより低い細菌死滅（４６．３９％）に対して、細菌活性の低減（５５．００％細菌死滅）を効果的に改善することを示す。市販のＹＮＢＹ製品は、対照組成物の実施例９と比較して、同等の細菌死滅（４７．８６％）を示す。
【０１３５】
結果は、発明の組成物の実施例２（８２．２９％）が、対照組成物の実施例９（６１．４８％）及びＹＮＢＹ製品（２．２５％）よりも著しく高い第一スズの共局在化率を有することを実証する。結果はまた、ＴＡが、Ｓｎ重複係数を介して測定したときの第一スズ放出効率を阻害しないことも示し、発明の組成物の実施例２（０．９３０１）及び対照組成物の実施例９（０．９２０６）のＳｎ重複係数は、実質的に同様である。実際には、このデータは、抗線維素溶解剤（例えば、トラネキサム酸）と組み合わせたときに、バイオフィルムへの第一スズイオンの浸透が、対照及び市販製剤よりも改善されることを支持する。
【０１３６】
Ｃ：ヒト歯肉線維芽細胞の改善された創傷治癒を測定するためのアッセイ
インビトロヒト歯肉線維芽細胞を使用して、発明の組成物及び対照組成物による処置の結果として、創傷治癒移行の効果を評価する。この方法は、３つの段階を含む。
【０１３７】
段階１−一次ヒト歯肉線維芽細胞（Human Gingival Fibroblast、ＨＧＦ）を培養する
ヒト歯肉線維芽細胞を、抜歯患者から採取し、５ｍＬのＰＢＳ（リン酸緩衝生理食塩水）で洗浄する。組織を小片に刻んで、１５ｍＬの遠心管に入れる。試料を、等量の１ｍＬ  ８％ディスパーゼ及び１ｍＬ  ６％コラゲナーゼで１時間、３７℃で消化し、その間、試料を１５分毎に振盪する必要がある。消化プロセスが完了すると、管を室温で６分間、１１００ＲＰＭで遠心分離する。遠心分離後、細胞のペレットが管の底に形成される。これらを上清溶液から分離する。次いで上清を廃棄し、細胞ペレットを３ｍＬの新鮮な最小必須培地（Minimum Essential Medium、ＭＥＭ、Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒから入手可能）培養培地に懸濁させた後、ペトリ皿に移す。細胞を有するペトリ皿を、３７℃、５％  ＣＯ２のインキュベータ内に約１０日間置く。ペトリ皿を、２日毎に培地の色の変化について確認する。培地の色の変化が生じた場合、新鮮な培養培地を交換する。
【０１３８】
段階２−ヒト歯肉線維芽細胞を継代培養する
ペトリ皿の８０〜９０％細胞単層被覆率が存在する場合、本培養培地を除去し、５ｍＬのＰＢＳで洗浄する。１ｍＬの０．２５％トリプシン−ＥＤＴＡ溶液を添加し、細胞が視覚的に丸い形状になるまで、細胞を３７℃で約１〜２分間静置する。ペトリ皿表面からいかなる粘着性の細胞も除去するために、ペトリ皿をタップすることが必要であり得る。少なくとも１ｍＬの新鮮なＭＥＭ培養培地を添加してトリプシンを不活性化し、細胞を１５ｍＬの遠心管に回収する。次いで管を１１００ＲＰＭで６分間室温で遠心分離する。上清を廃棄し、細胞ペレットを、同じ遠心管中の４ｍＬの新鮮なＭＥＭ培養培地に再懸濁させる。４つのペトリ皿をそれぞれ、ペトリ皿上の８０〜９０％細胞単層被覆が観察されるまで、１ｍＬの細胞懸濁液及び９ｍＬの新鮮なＭＥＭ培養培地と共に、３７℃、５％  ＣＯ２のインキュベータ内に約３〜５日間にわたって置く。この段階は、最も高い細胞生存率を達成するために創傷治癒アッセイ前に２〜４回繰り返されるべきである。
【０１３９】
段階３−創傷治癒アッセイ
ペトリ皿上に８０〜９０％細胞単層被覆が存在する場合、本培養培地を除去し、５ｍＬのＰＢＳで洗浄する。１ｍＬの０．２５％トリプシン−ＥＤＴＡ溶液を添加し、細胞が視覚的に丸い形状になるまで、細胞を３７℃で約１〜２分間静置する。ペトリ皿表面からいかなる粘着性細胞も除去するために、培養ペトリ皿をタップすることが必要であり得る。少なくとも１ｍＬの新鮮なＭＥＭ培養培地を添加してトリプシンを不活性化し、細胞を１５ｍＬの遠心管に回収する。次いで管を１１００ＲＰＭで６分間室温で遠心分離する。上清を廃棄し、細胞ペレットを、６ｍＬの新鮮なＭＥＭ培養培地に再懸濁させる。１ｍＬの細胞懸濁液及び１ｍＬの新鮮なＭＥＭ培地を、それぞれ６ウェルプレートの各ウェルに添加する。プレートを、５０〜７０％細胞単層被覆が形成されるまで、３７℃、５％  ＣＯ２でインキュベートする。次いで画像取得中に、ウェルの外側底部を、基準線として中間線でマーキングする。滅菌した１ｍＬのピペットチップでセル単層の右半分をこすり取ることによって、創傷が手作業で作製される。細胞を２ｍＬのＰＢＳで洗浄して、懸濁された細胞が見えなくなるまで、いかなる懸濁細胞も除去する。２ｍＬの培養培地、及び１％の対照組成物を含有する２ｍＬの培養培地又は１％の発明の組成物を含有する２ｍＬの培養培地をウェルに添加する。
【０１４０】
ＨＧＦの高密度デジタル画像は、Ｏｌｙｍｐｕｓ（登録商標）ＵＩＳ２  ＷＨＮ１０倍対物レンズを有するＯｌｙｍｐｕｓ（登録商標）ＩＸ７１デジタルＳＬＲカメラを用いて撮影する。第１の画像は、プレート上の中間線マーキングを基準線として使用することによって、時間０時間（すなわち、ベースライン）で取得される。次いでプレートを、以下に記載されるように、３７℃、５％  ＣＯ２で様々な時間間隔にわたってインキュベートする。一致した撮影領域は以前に取得され、画像は、ベースライン後の後の時間間隔（例えば、１６時間、２４時間、４８時間、６５時間、７２時間等）で取得され、異なる処置脚部の下での創傷治癒性能の指標として、細胞被覆率（％）を評価する。画像は、Ｗｉｍａｓｉｓ（登録商標）ＷｉｍＳｃｒａｔｃｈソフトウェア（Ｗｉｍａｓｉｓ  ＧｍｂＨ，Ｇｅｒｍａｎｙから入手可能）によって評価され、各試料のマッチングベースライン画像と比較して、点線で示されるように、ＨＧＦ細胞の被覆度（すなわち、創傷治癒）の程度（すなわち、割合）を判定する。ＷｉｍＳｃｒａｔｃｈソフトウェアは、高度なエッジ検出及びオーバーレイ技法を利用して、細胞及びブランク領域を認識し、すなわち、画像内の緑色オーバレイ（図６に灰色領域として示される）は、特定の画像の細胞被覆領域及び灰色領域（図６に黒い領域として示される）が創傷領域を表す。読み出しは、両方の領域に対して提示され、総面積のパーセントとして正規化される。
【０１４１】
結果：図６は、発明の組成物の実施例２（すなわち、Ｓｎ＋０．５０％ＴＡ）又は対照組成物の実施例９（すなわち、Ｓｎのみ）による処置から２４時間後のＨＧＦの画像を示す。図６を参照すると、結果は、抗線維素溶解剤及び抗菌剤（例えば、第一スズイオン源）を含有する発明の組成物の実施例２が、対照組成物の実施例９で処置したＨＧＦのより低い細胞被覆率（３．３％＝５３．３％全被覆率−５０％ベースライン）に対して、顕著な創傷（点線でマークされた）後の、増加した細胞被覆率（２２．４％＝７２．４％全被覆率−５０％ベースライン）を介して創傷治癒を効果的に改善する。
【０１４２】
Ｄ：マウスリンス組成物
本発明によるマウスリンス組成物を、下記にて表５の実施例１１〜１４として示す。これらの組成物は、第一スズイオン源及び抗線維素溶解剤を含有する。好ましくは、これらの組成物は、これらの成分を含まない市販の製剤と比較して改善された歯肉健康上の利益を示す。
【０１４３】
【表５】
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【０１４４】
本明細書で開示する寸法及び値は、列挙された正確な数値に厳密に限られるものとして理解されるべきではない。むしろ、特に指示がない限り、そのような各寸法は、記載された値及びその値の周辺の機能的に同等の範囲の両方を意味するものとする。例えば、「４０ｍｍ」と開示された寸法は、「約４０ｍｍ」を意味することが意図される。
【０１４５】
相互参照される又は関連する全ての特許又は特許出願、及び本願が優先権又はその利益を主張する任意の特許出願又は特許を含む、本願に引用される全ての文書は、除外又は限定することを明言しない限りにおいて、参照によりその全容が本願に援用される。いかなる文献の引用も、本明細書中で開示又は特許請求される任意の発明に対する先行技術であるとはみなされず、あるいはそれを単独で又は他の任意の参考文献（単数又は複数）と組み合わせたときに、そのような発明全てを教示、示唆又は開示するとはみなされない。更に、本文書における用語の任意の意味又は定義が、参照することによって組み込まれた文書内の同じ用語の意味又は定義と矛盾する場合、本文書におけるその用語に与えられた意味又は定義が適用されるものとする。
【０１４６】
相互参照される又は関連する全ての特許又は特許出願、及び本願が優先権又はその利益を主張する任意の特許出願又は特許を含む、本願に引用される全ての文書は、除外又は限定することを明言しない限りにおいて、参照によりその全容が本願に援用される。いかなる文献の引用も、本明細書中で開示又は特許請求される任意の発明に対する先行技術であるとはみなされず、あるいはそれを単独で又は他の任意の参考文献（単数又は複数）と組み合わせたときに、そのような発明全てを教示、示唆又は開示するとはみなされない。更に、本文書における用語の任意の意味又は定義が、参照することによって組み込まれた文書内の同じ用語の意味又は定義と矛盾する場合、本文書におけるその用語に与えられた意味又は定義が適用されるものとする。
【０１４７】
本発明の特定の実施形態を例示及び説明してきたが、本発明の趣旨及び範囲から逸脱することなく他の様々な変更及び修正を行うことができる点は当業者には明白であろう。したがって、本発明の範囲内に含まれるそのような全ての変更及び修正は、添付の特許請求の範囲にて網羅することを意図したものである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【国際調査報告】
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