(57)【要約】  メチルオナプリストンによりプロゲステロン受容体の活性を阻害するための方法及び医薬組成物。態様は、少なくとも約１００ｎＭの血液または組織の濃度を達成するのに十分な量でメチルオナプリストンを患者へ投与する方法を含む。【選択図】図５
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
メチルオナプリストンの患者への投与及び細胞のメチルオナプリストンへの曝露を含む、プロゲステロン受容体を発現する前記患者の細胞におけるプロゲステロン受容体の活性を阻害する方法。
【請求項２】
前記細胞が、乳腺細胞、血液細胞、前立腺細胞、脳細胞、髄膜腫細胞、前立腺細胞、卵巣細胞、子宮内膜細胞、子宮平滑筋腫細胞、肺細胞、胆管細胞、肺細胞、骨細胞、食道細胞、腎臓細胞、膵臓細胞、腸細胞、胃細胞、尿路細胞、皮膚細胞、肝細胞、甲状腺細胞、及び子宮細胞から選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
メチルオナプリストンの患者への投与を含む、プロゲステロン受容体陽性腫瘍に罹患する前記患者におけるプロゲステロン活性を阻害する方法。
【請求項４】
前記患者へ投与されるメチルオナプリストンの量が約１〜約１０ｍｇである、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記患者へ投与されるメチルオナプリストンの量が、少なくとも約１００ｎＭの血液または組織の濃度を達成するのに十分なものである、請求項３に記載の方法。
【請求項６】
メチルオナプリストンによる治療に応答して産生される代謝物質の数が、約４以下である、請求項３に記載の方法。
【請求項７】
メチルオナプリストンが前記患者において避妊効果を有する、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
エベロリムス、トラスツズマブ、ＴＭ１−Ｄ、抗ＨＥＲ２薬、ベバシズマブ、パクリタキセル、ドセタキセル、タキサン、ドキソルビシン、リポソーム型ドキソルビシン、ＰＥＧ化リポソーム型ドキソルビシン、アントラサイクリン、アントラセンジオン、アビラテロン、エンズルタミド（ｅｎｚｕｌｕｔａｍｉｄｅ）、カルボプラチン、シスプラチン、５−ＦＵ、ゲムシタビン及びシクロホスファミドからなる群から選択される抗腫瘍化合物を、前記患者へ投与することをさらに含む、請求項３に記載の方法。
【請求項９】
メチルオナプリストン、及び薬学的に許容される賦形剤、担体または希釈剤を含む、医薬組成物。
【請求項１０】
単位投薬形態での、請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
前記単位投薬形態が、錠剤、ピル、カプセル剤及びトローチからなる群から選択される、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
前記メチルオナプリストンが約２〜約２００ｍｇの量で存在する、請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
前記メチルオナプリストンが約１〜約１０ｍｇの量で存在する、請求項１２に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
少なくとも１つの追加の活性のある医薬用薬剤をさらに含む、請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
前記追加の活性のある医薬用薬剤が、抗腫瘍剤、ホルモン、ステロイドまたはレチノイドからなる群から選択される、請求項１４に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
前記追加の活性成分が、エベロリムス、トラスツズマブ、ＴＭ１−Ｄ、抗ＨＥＲ２薬、ベバシズマブ、パクリタキセル、ドセタキセル、タキサン、ドキソルビシン、リポソーム型ドキソルビシン、ＰＥＧ化リポソーム型ドキソルビシン、アントラサイクリン、アントラセンジオン、アビラテロン、エンズルタミド（ｅｎｚｕｌｕｔａｍｉｄｅ）、カルボプラチン、シスプラチン、５−ＦＵ、ゲムシタビン及びシクロホスファミドからなる群から選択される、請求項１４に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、２０１６年３月２１日に出願された米国仮特許出願シリアル番号６２／３１０，９４４の優先権を主張する。上記の参照された出願は、完全に書き換えられたものとして、参照により本明細書に援用される。
【０００２】
本明細書において引用されるすべての参照文献（特許及び特許出願が挙げられるがこれらに限定されない）は、それらの全体が参照により援用される。
【背景技術】
【０００３】
オナプリストン（ＯＮＡ）は、もともと避妊用の使用のために開発されていた、抗プロゲスチン薬及びプロゲステロン受容体アンタゴニストである。しかしながら、それは、進行した乳癌において実質的な活性を示した。ＯＮＡはプロゲステロン受容体（ＰＲ）へ結合し、ＰＲがＤＮＡへ結合することを防止し、それによって、ＰＲに誘導される転写を阻害または消失させると考えられる。例えば非特許文献１；非特許文献２を参照されたい。
【０００４】
患者への投与後、薬物は、それらの化学構造、投与ルート、ならびに患者の遺伝因子及び非遺伝因子に従って身体によって代謝される。非特許文献３。身体中で産生された代謝物質は、所望される効果または所望されない副作用を発揮する薬物活性化合物であり得る。非特許文献４。代謝物質によって引き起こされる所望されない副作用（例えば肝臓毒性、自己免疫作用、特異体質性の相互作用、または他の薬物との相互作用等）は、全身循環中の薬物濃度、及び薬物が身体からどのくらい容易に除去されるかに依存して変動する。
【０００５】
オナプリストンの臨床開発は、最初は上昇用量での肝臓毒性に起因して中止された。肝臓毒性のメカニズムは決定されなかったが、現在の臨床上の取り組みは、オナプリストンの副作用の低減に向けられている。オナプリストンの抗プロゲスチンの活性及びより少ない負の副作用の代謝プロフィールを備えた化合物が必要とされる。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Ｋｌｉｊｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｇｅｓｔｅｒｏｎｅ  ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ  ａｎｄ  ｐｒｏｇｅｓｔｅｒｏｎｅ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  ｂｒｅａｓｔ  ｃａｎｃｅｒ，Ｓｔｅｒｏｉｄｓ，ｖ．６５，ｐｐ．８２５−８３０（２０００）
【非特許文献２】Ｊｏｎａｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｈｅ  ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｅｆｆｉｃａｃｙ  ｏｆ  ｐｒｏｇｅｓｔｅｒｏｎｅ  ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ  ｉｎ  ｂｒｅａｓｔ  ｃａｎｃｅｒ，Ｅｎｄｏｃｒｉｎｅ  Ｔｈｅｒａｐｙ  ｏｆ  Ｂｒｅａｓｔ  Ｃａｎｃｅｒ，ｐｐ．１１７−１２４
【非特許文献３】Ｙａｎｎｉ，Ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ  ＡＤＭＥＴ  ｆｏｒ  Ｄｒｕｇ  Ｔｈｅｒａｐｙ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ，Ｍｅｔｈｏｄｓ，ａｎｄ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ．Ｗｉｌｅｙ  ＩＳＢＮ−１３：９７８−１１１８８３８２７３（２０１５），ｐｐ６３−１０９
【非特許文献４】Ｂａｉｌｌｉｅ  ａｎｄ  Ｒｅｔｔｉｅ  Ｒｏｌｅ  ｏｆ  ｂｉｏｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｄｒｕｇ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｔｏｘｉｃｉｔｙ：ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ  ｏｆ  ｉｎｔｒａ  ａｎｄ  ｉｎｔｅｒ−ｓｐｅｃｉｅｓ  ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ  ｉｎ  ｄｒｕｇ  ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ．Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂ  Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔ（２０１０）；２６：ｐｐ１５−２９
【発明の概要】
【０００７】
一態様において、オナプリストンの代謝物質が提供される（例えばモノ−Ｎ−デスメチルオナプリストン）。モノ−Ｎ−デスメチルオナプリストン（本明細書においてメチルオナプリストン、またはＮ−デスメチルオナプリストン、（８Ｓ，１１Ｒ，１３Ｒ，１４Ｓ，１７Ｓ）−１７−ヒドロキシ−１７−（３−ヒドロキシプロピル）−１３−メチル−１１−（４−（メチルアミノ）フェニル）−６，７，８，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−デカヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３（２Ｈ）−オンもしくはＭ１とも称される）は、以下の構造：
【化１】
2019513706.tif 000003
を有する。
【０００８】
代謝
本明細書において記載されるように、２７の代謝物質が、オナプリストンの投与後ヒト化肝臓を備えたキメラマウス中で産生される（インビボで）一方で、９つの代謝物質が、オナプリストンの酸化的代謝後にヒト肝ミクロソーム画分（ＨＬＭ）中でインビトロで形成される。ここで記載されることとは対照的に、Ｍ１の投与後、１つの代謝物質（Ｎ−ジデスメチルオナプリストン（Ｍ２））が、ＨＬＭ中でインビトロで産生される。
【０００９】
本明細書において記載される態様は、プロゲステロン受容体を発現する細胞へのメチルオナプリストンの投与によって、プロゲステロン活性を阻害する方法を提供する。さらなる態様は、メチルオナプリストンの患者への投与によってプロゲステロン受容体陽性腫瘍を有する患者におけるプロゲステロン活性を阻害する方法を提供する。別の態様において、メチルオナプリストン及び薬学的に許容される担体を含む医薬組成物が提供される。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】キメラマウスからの対照サンプルの例示的なＬＣ−ＭＳ（液体クロマトグラフィー−質量分析）クロマトグラムを示す。
【図２】１日あたり１０ｍｇ／ｋｇでのオナプリストンの反復用量後のキメラマウスからのサンプルの例示的なＬＣ−ＭＳクロマトグラムを示す。
【図３】３０ｍｇ／ｋｇ／日でのオナプリストンの反復用量後のキメラマウスからのサンプルの例示的なＬＣ−ＭＳクロマトグラムを示す。
【図４】オナプリストンによる投薬後のキメラマウスについての尿中の例示的な排泄経路を示す。
【図５】ＰＲ及びＰＲＥルシフェラーゼレポーターコンストラクトによりトランスフェクションされた２９３Ｔ細胞（ヒト胎児腎臓細胞）及びＷＭＰＹ細胞（前立腺の間質細胞株）における転写に対するメチルオナプリストンの効果を測定するルシフェラーゼアッセイの例示的な結果を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
本明細書において記載される複数の例示的な態様を記載する前に、本発明は以下の記載において説明される構築物またはプロセスステップの詳細に限定されていないことが理解される。本明細書において記載される態様は、様々な手法において実践または実行することが可能である。
【００１２】
本明細書において記載されるように、オナプリストン代謝物質Ｍ１は、オナプリストンに比較して改善された代謝プロフィールを有する。例えば、オナプリストンの代謝（例えば肝酵素ＣＹＰ３Ａの活性を介する）は、Ｍ１の代謝速度（例えば肝酵素ＣＹＰ３Ａ及びＣＹＰ２Ｃの活性を介してＭ２を形成する）よりも約１０倍速い。したがって、負の副作用のより高いリスクが付随するオナプリストンのより高い用量が、より低い用量でのＭ１によって提供されるのと同じ治療有効性を産生するために必要であり得る。
【００１３】
オナプリストン代謝は２７の代謝物質を産生し、これとは対照的に、Ｍ１代謝は１つの酸化代謝物質（Ｍ２）を産生する。したがって、より少ない代謝物質が産生されるため、Ｍ１投与からの毒性のリスクはオナプリストンと比較して低減される。加えて、Ｍ１薬物療法は、ＯＮＡと比較したその代謝プロフィールに起因して、薬物間相互作用のリスクを低減した。
【００１４】
ＯＮＡ代謝速度がＭ１代謝速度よりも１０倍高いので、ＯＮＡは、同じ全身暴露を得るために、Ｍ１よりも１０倍高い濃度で患者へ投与される必要があり得る。したがって、Ｍ１は、毒性のリスクを増加させずに、より高い濃度で投薬することができ、より高い治療有効性の可能性をもたらすか、または実質的により低い用量で等しい治療有効性の可能性が得られる。
【００１５】
さらに、上記のように、ＯＮＡ投与はＭ１を含む多くの代謝物質の産生をもたらす。Ｍ１もプロゲステロン受容体（ＰＲ）を結合する。それゆえ、Ｍ１はＰＲ受容体を競合し、ＰＲ受容体に対するＯＮＡの効果を低減させる。これとは対照的に、Ｍ１投与は、ＰＲ受容体への結合についての薬物競合をもたらさない。
【００１６】
Ｍ１は以前にＯＮＡの代謝物質として同定されたが、その生物学的活性、代謝プロフィール及び薬物としての適合性は評価されなかった。Ｊａｎｇ  ａｎｄ  Ｂｅｎｅｔ  Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  ｄｉｓｐｏｓｉｔｉｏｎ  １９９７；２５：１１１９−１１２２  Ｃｙｔｏｃｈｒｏｍｅ  Ｐ４５０  ３Ａ４−ｍｅｄｉａｔｅｄ  Ｎ−ｄｅｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ａｎｔｉｐｒｏｇｅｓｔｉｎｓ  ｌｉｌｏｐｒｉｓｔｏｎｅ  ａｎｄ  ｏｎａｐｒｉｓｔｏｎｅ。
【００１７】
本明細書において記載されるように、動態解析は、Ｍ１を形成するＯＮＡの代謝速度がＭ１からＭ２への代謝速度よりも約１０倍速いことを指摘する。Ｍ１へのＯＮＡの代謝はＰ４５０酵素（ＣＹＰ３Ａ）によって触媒される一方で、Ｍ１からＭ２への代謝はＣＹＰ３Ａ及びＣＹＰ２Ｃによって触媒される。
【００１８】
一態様において、ＯＮＡは自己薬物間相互作用（ＤＤＩ）に関与し得る。例えば、ＯＮＡは、臨床上及びインビトロのデータから指摘されるように、それ自身の代謝及びＭ１代謝を阻害し得る。したがって、血液循環中でのＯＮＡ及びＭ１の蓄積は、望まれないＤＤＩ副作用を引き起こし得る。これとは対照的に、Ｍ１代謝が１つの代謝物質（Ｍ２）を産生するので、Ｍ１の投与はかかる望まれない副作用を避けることができる。
【００１９】
Ｎ−モノデスメチルオナプリストンを形成するオナプリストンの代謝速度（Ｖｍａｘ１及びＶｍａｘ２）は、以下に表１中で示されるように、Ｎ−モノデスメチルオナプリストンからＮ−ジ脱メチル化オナプリストンへの代謝速度の１０倍である。
【００２０】
【表１】
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【００２１】
表１中で示されるように、女性におけるＯＮＡ代謝についてのＶｍａｘは１５１７であり、女性におけるＭ１代謝についてのＶｍａｘは１０６ｐｍｏｌ／分／ｍｇミクロソームタンパク質である。男性におけるＯＮＡ代謝についてのＶｍａｘは１２９２ｐｍｏｌ／分／ｍｇミクロソームタンパク質であり、男性におけるＭ１代謝についてのＶｍａｘは７２ｐｍｏｌ／分／ｍｇミクロソームタンパク質である。したがって、女性及び男性の両方において、全身暴露及び同じ有効性を達成するために、Ｍ１よりも約１０倍高い用量のオナプリストンが必要とされる。それゆえ、Ｍ１の安全性プロフィールはより高く、オナプリストンよりも少ない副作用であるだろう。この態様において、Ｍ１は、より高い用量、かつオナプリストンよりもおそらく高い有効性だが低減した副作用で、患者へ提供され得る。
【００２２】
本明細書において記載される態様は、メチルオナプリストンの患者への投与及び細胞のメチルオナプリストンへの曝露によって、プロゲステロン受容体を発現する患者の細胞におけるプロゲステロン受容体の活性を阻害する方法を提供する。
【００２３】
別の態様において、細胞は、乳腺細胞、血液細胞、前立腺細胞、脳細胞、髄膜腫細胞、前立腺細胞、卵巣細胞、子宮内膜細胞、子宮平滑筋腫細胞、肺細胞、胆管細胞、肺細胞、骨細胞、食道細胞、腎臓細胞、膵臓細胞、腸細胞、胃細胞、尿路細胞、皮膚細胞、肝細胞、甲状腺細胞、及び子宮細胞から選択される。
【００２４】
さらなる態様は、メチルオナプリストンの患者への投与によってプロゲステロン受容体陽性腫瘍に罹患する患者におけるプロゲステロン活性を阻害する方法を提供する。一態様において、患者へ投与されるメチルオナプリストンの量は約１〜約１０ｍｇである。さらに別の態様において、患者へ投与されるメチルオナプリストンの量は、少なくとも約１００ｎＭの血液または組織の濃度を達成するのに十分なものである。別の態様において、Ｍ１は避妊薬として使用することができる。
【００２５】
別の態様において、メチルオナプリストンによる治療に応答して産生される代謝物質の数は、約４以下である。
【００２６】
さらなる態様は、抗腫瘍化合物（例えばエベロリムス、トラスツズマブ、ＴＭ１−Ｄ、抗ＨＥＲ２薬、ベバシズマブ、パクリタキセル、ドセタキセル、タキサン、ドキソルビシン、リポソーム型ドキソルビシン、ＰＥＧ化リポソーム型ドキソルビシン、アントラサイクリン、アントラセンジオン、アビラテロン、エンズルタミド（ｅｎｚｕｌｕｔａｍｉｄｅ）、カルボプラチン、シスプラチン、５−ＦＵ、ゲムシタビン及びシクロホスファミド）を、メチルオナプリストンを投与されている患者へ投与する方法を提供する。
【００２７】
本明細書において記載される態様は、メチルオナプリストン及び薬学的に許容される賦形剤、担体または希釈剤（例えばヒドロキシプロイル（ｈｙｄｒｏｘｙｐｒｏｙｌ）メチルセルロース、微結晶性セルロース、ラクトースまたはマンニトール）を含む医薬組成物を提供する。医薬組成物は、例えば単位投薬形態（例えば錠剤、ピル、カプセル及びトローチ）で提供することができる。別の態様において、メチルオナプリストンは、約２〜約２００ｍｇまたは約１〜約１０ｍｇの量で存在する。
【００２８】
さらに別の態様において、追加の活性のある医薬用薬剤（例えば抗腫瘍剤、ホルモン、ステロイドまたはレチノイド）が提供され得る。追加の活性成分としては、例えばエベロリムス、トラスツズマブ、ＴＭ１−Ｄ、抗ＨＥＲ２薬、ベバシズマブ、パクリタキセル、ドセタキセル、タキサン、ドキソルビシン、リポソーム型ドキソルビシン、ＰＥＧ化リポソーム型ドキソルビシン、アントラサイクリン、アントラセンジオン、アビラテロン、エンズルタミド（ｅｎｚｕｌｕｔａｍｉｄｅ）、カルボプラチン、シスプラチン、５−ＦＵ、ゲムシタビン及びシクロホスファミドが挙げられ得る。
【００２９】
オナプリストンの代謝物質プロファイル
要約
オナプリストンの代謝物質プロファイルを、１０及び３０ｍｇ／ｋｇ／日でのオナプリストンの経口投与後、ヒト化肝臓モデルを備えたキメラマウスにおいて決定した。プールされた血漿、尿及び肝臓のサンプルについて、液体クロマトグラフィー−質量分析（ＬＣ−ＭＳ）及び質量分光法を使用して、代謝物質を同定した。用量及びサンプリング時間（例えば各々のタイムポイントについて投薬の０〜２４時間）にわたって、尿サンプル中で、２７の代謝物質を同定した。
【００３０】
代謝物質のうちの２１は、第Ｉ相反応（例えば酸化、Ｎ−脱メチル化、脱水素化、及びこれらの経路の組み合わせ）から生じた。６つの代謝物質は、第ＩＩ相反応から生じた。
【００３１】
ＬＣ−ＭＳプロファイルは、第Ｉ相酸化反応によってＭ１から生成された４つの代謝物質（Ｍ２、Ｍ３１、Ｍ８）、及び第ＩＩ相グルクロン酸抱合反応によるもの１つ（Ｍ２２）を、同定する。１０及び３０ｍｇ／ｋｇ／日の標的用量での３２日間のオナプリストン投与後の尿サンプル中で、これらの代謝物質を検出した。
【００３２】
参照スタンダード
オナプリストン（ＡＲ−１８）及びモノ−メチルオナプリストン（ＡＲ−１９）を参照スタンダードとして使用した。
オナプリストン（ＡＲ−１８）
【化２】
2019513706.tif 000005
モノ−メチルオナプリストン（ＡＲ−１９）
【化３】
2019513706.tif 000006
【００３３】
方法
ヒト肝ミクロソームを使用するオナプリストンの酸化的代謝の研究
ヒト肝ミクロソーム（ＨＬＭ）は、薬物の酸化的代謝をインビトロで研究するために頻繁に使用されている。Ｍｏｈｕｔｓｋｙ  Ｍ，Ｗｒｉｇｈｔｏｎ  Ｓ，Ｒｉｎｇ  Ｂ．Ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ：ｓｕｂｃｅｌｌｕｌａｒ  ｆｒａｃｔｉｏｎｓ．Ｉｎ：Ｐｅａｒｓｏｎ  Ｐ，  Ｗｉｅｎｋｅｒｓ  Ｌ，ｅｄｉｔｏｒｓ．Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  ｄｒｕｇ  ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ．Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ：Ｉｎｆｏｒｍａ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ；２００９．ｐｐ．４４５−４６４。本明細書において記載されるように、オナプリストン（例えば５μＭの濃度で、コファクターとしてのＮＡＤＰＨ再生系の存在下においてインキュベーションされた）を、５０名のドナーからの０．５ｍｇ／ｍＬのヒト肝ミクロソームプール（ＢＤ−Ｇｅｎｅｔｅｓｔから購入された）により、インキュベーションした。インキュベーションを、３７℃で様々なタイムポイントで０〜６０分間遂行した。インキュベーションの終了時で、反応物をクエンチングし、プロセシングし、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳによって分析した。
【００３４】
代謝プロフィールの決定のためのキメラマウスモデル
Ｍｅｕｌｅｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ  ２００５，４１（４）：８４７−８５６によって記載されるように、ヒト化肝臓を備えたマウスを生成した。このヒト化肝臓モデルは、薬物の代謝及び毒性の評価にルーチンに使用される。Ｋａｍｉｍｕｒａ  Ｈ，Ｎａｋａｄａ  Ｎ，Ｓｕｚｕｋｉ  Ｋ，ｅｔ  ａｌ．Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ  ｏｆ  ｃｈｉｍｅｒｉｃ  ｍｉｃｅ  ｗｉｔｈ  ｈｕｍａｎｉｚｅｄ  ｌｉｖｅｒ  ａｓ  ａ  ｔｏｏｌ  ｆｏｒ  ｐｒｅｄｉｃｔｉｎｇ  ｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇ  ｈｕｍａｎ  ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ．Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂ  Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔ  ２０１０；２５（３）：２２３−２３５。誕生の２週間後に、マウスに、２７歳の女性の白人ドナーの肝臓から単離された初代肝細胞（ＢＤ  Ｇｅｎｅｔｅｓｔから購入した）を移植した。すべての動物を、標準的な動物プロトコール下で収容し維持した。実験の間に、病気の徴候、異常な行動及び外観ならびに毒性の任意の徴候または死亡率についても、動物を観察した。動物を、３１日目まで１日１回、０、１０及び３０ｍｇ／ｋｇの薬物の強制投与によって経口的に処理した。治療の終了時で、血液サンプル、尿及び肝臓を、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ代謝物質同定及びプロファイリングのために収集及びプロセシングした。
【００３５】
生物学的サンプル
酸性化されていない尿、血漿及び肝臓のサンプルを、１０及び３０ｍｇ／ｋｇ／日の標的用量でのキメラマウスにおけるオナプリストンの複数の経口投与後に、以下に記載されるように得た。
【００３６】
実験デザイン
各々のタイムポイントについて同じ用量で以下に示すように処理した動物からプールされたサンプルに対して、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳを、６つの血漿サンプル、６つの尿サンプル及び２つの肝臓サンプルについて、実行した。ここで、尿サンプル中の代謝物質を示す。
【００３７】
【表２】
2019513706.tif 000007
【００３８】
ＬＣ−ＭＳクロマトグラム
図１は、ベヒクルを投与されたキメラマウスからのブランクの尿サンプルのＬＣ−ＭＳの再構築されたイオンクロマトグラムである。有意なピークは示されない。
【００３９】
図２は、１０ｍｇ／ｋｇ／日でのオナプリストンの反復用量後の３２日目のキメラマウスからのプールされた尿サンプルのＬＣ−ＭＳの再構築されたイオンクロマトグラムである。代謝物質Ｍ１及びＭ２についての有意なピークが示される。代謝物質Ｍ８及びＭ３１についての有意でないピークも示される。
【００４０】
図３は、３０ｍｇ／ｋｇ／日でのオナプリストンの反復用量後の２８／３２日目のキメラマウスからのプールされた尿サンプルのＬＣ−ＭＳの再構築されたイオンクロマトグラムである。代謝物質Ｍ１３、Ｍ１４、Ｍ１５、Ｍ２３、Ｍ２、Ｍ６、Ｍ１、Ｍ７、Ｍ３０、Ｍ８、Ｍ３１及びＭ３２についてのピークが示される。
【００４１】
メチルオナプリストンの活性
メチルオナプリストンの陽性細胞の阻害活性を、２９３Ｔ及びＷＭＰＹ（前立腺の間質）のルシフェラーゼレポーター細胞株において実証した。
【００４２】
ＡＲ−１９（メチル−オナプリストン）に対するルシフェラーゼアッセイ
２９３Ｔ細胞及びＷＭＰＹ細胞を、プロゲステロン受容体（ＰＲ）及びＰＲＥルシフェラーゼレポーターによりトランスフェクションした。次いで細胞を、Ｐ４、Ｐ４＋ＲＵ４８６、またはＰ４＋増加用量のオナプリストンもしくはメチルオナプリストン（ＡＲ−１９）により処理した。実験は三重で反復した。図５中で示されるように、オナプリストン及びメチルオナプリストンは、ＰＲ転写活性の阻害に関して類似する効果を有する。一態様において、１００ｎＭのオナプリストン及びＭ１は完全にＰＲ転写活性を阻害することができる。この態様において、１００ｎＭのオナプリストン（及び１０ｎＭのＭ１）の濃度は、１０ｍｇの１日１回のオナプリストンの投与後の血液循環中で達成された。Ｍ１はＯＮＡと比較して代謝安定性があるので、１００ｎＭのＭ１の血液循環は、Ｍ１の１ｍｇでの投薬後に達成することができる。
【００４３】
メチルオナプリストン、及びメチルオナプリストンを含む医薬組成物を使用して、本明細書において記載されるような治療を必要とする患者を治療することができる。「治療」、「予防」という用語、または類似する用語は、本明細書において使用される時、必ずしも１００％または完全な治療または予防を意味しない。むしろ、これらの用語は、当技術分野において有益であるとして認識されるような、特定の疾患の治療または予防の様々な程度（例えば１００％、９０％、８０％、７０％、６０％、５０％、４０％、３０％、２０％、１０％、５％または１％）を指す。
【００４４】
「治療」または「予防」という用語は、ある期間について疾患の発症を遅延させることまたは発症を無期限に遅延させることも指す。
【００４５】
「治療」または「治療すること」という用語は、薬物もしくは治療を患者へ投与すること、または、患者または薬物もしくは治療を投与する第三者（例えば保護者、家族または健康管理専門家）へ薬物を処方することを指す。
【００４６】
メチルオナプリストン、及びメチルオナプリストンを含む医薬組成物は、ＯＮＡの多形形態または結晶形態の水和物または溶媒和物（例えば半水和物、一水和物、二水和物、三水和物等）も包含する。ＯＮＡの水和物または溶媒和物は、好適な条件下で水または溶媒とＯＮＡを接触させることによって調製されて、選択の水和物または溶媒和物を産生することができる。
【００４７】
本明細書において記載される、メチルオナプリストン、及びメチルオナプリストンを含む医薬組成物のうちの任意のものは、経口的、非経口的（静脈内、筋肉内、デポー筋肉内、皮下及びデポー皮下）、舌下、鼻腔内（吸入）、鞘内、局所的、もしくは経直腸的に投与され得るか、またはそのように投与される出発材料として使用され得る。当業者に既知の投薬形態は、本明細書において記載される、メチルオナプリストン、及びメチルオナプリストンを含む医薬組成物の送達のために好適である。
【００４８】
メチルオナプリストン、及びメチルオナプリストンを含む医薬組成物は、好適な薬学的調製物（錠剤、カプセル、または経口投与のためのエリキシルまたは非経口投与のための滅菌された溶液もしくは懸濁物等）へと製剤化され得る。メチルオナプリストン、及びメチルオナプリストンを含む医薬組成物は、当技術分野において周知の技法及び手順を使用して、医薬組成物へと製剤化され得る。
【００４９】
一態様において、約２〜約２００ｍｇのメチルオナプリストン、及びメチルオナプリストンを含む医薬組成物、またはその生理学的に許容される塩、プロドラッグもしくは共結晶は、許容される薬学的実践によって要求されるような単位投薬形態で、生理学的に許容されるベヒクル、担体、賦形剤、結合剤、防腐剤、安定剤、香料等と調合され得るか、またはそれらとの調合のための出発材料として使用され得る。メチルオナプリストン、及びメチルオナプリストンを含む医薬組成物を含む、組成物または調製物中の活性物質の量は、指摘された範囲中の好適な投薬量が得られるようなものである。
【００５０】
別の態様において、組成物は単位投薬形態で製剤化することができ、各々の投薬量は約１ｍｇ〜約１２００ｍｇ、２．５ｍｇ〜約２００ｍｇ、及び１〜１０ｍｇの活性成分を含有する。「単位投薬形態」という用語は、ヒト被験体及び他の哺乳動物のために一体型投薬量として適切な物理的に分離した単位を指し、各々の単位は、１つまたは複数の適切な医薬賦形剤と共同して、所望される治療効果を産生することが意図される既定の量の活性材料を含有する。
【００５１】
一態様において、メチルオナプリストン、及びメチルオナプリストンを含む医薬組成物のうちの１つまたは複数は、組成物の形成に好適な薬学的に許容される担体と混合されるか、またはそれらと混合される出発材料として使用される。化合物（複数可）の混合または添加に際して、結果として得られる混合物は、溶液、懸濁物、エマルション等であり得る。リポソーム懸濁物も薬学的に許容される担体として使用され得る。これらは当業者に既知の方法に従って調製され得る。結果として得られる混合物の形態は、多くの因子（意図される投与方法、及び選択された担体またはベヒクル中の化合物の可溶性が挙げられる）に依存する。一態様において、有効濃度は、治療される疾患、障害、または病態のうちの少なくとも１つの症状の軽減または寛解のために十分であり、経験的に決定され得る。
【００５２】
本明細書において記載される、メチルオナプリストン、及びメチルオナプリストンを含む医薬組成物の投与のために好適な薬学的担体またはベヒクルとしては、特定の投与モードのために好適な任意のかかる担体が挙げられる。加えて、活性材料は、所望される作用を損なわない他の活性材料と、または所望される作用を補足するかもしくは別の作用を有する材料とも、混合され得る。化合物は、組成物中の唯一の薬学的活性のある成分として製剤化され得るか、または他の活性成分と組み合わせられ得る。
【００５３】
別の態様において、メチルオナプリストン、及びメチルオナプリストンを含む医薬組成物が不十分な可溶性を示す場合、可溶化するための方法が使用され得る。かかる方法が知られており、共溶媒（ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）等）の使用、界面活性剤（ＴＷＥＥＮ等）の使用、及び重炭酸ナトリウム水溶液中での溶解が挙げられるがこれらに限定されない。化合物の誘導体（塩またはプロドラッグ等）も、有効な医薬組成物の製剤化において使用され得る。
【００５４】
化合物の濃度は、投与に際して、化合物が投与される障害の少なくとも１つの症状を軽減または寛解する量の送達のために有効である。典型的には、組成物は単一投薬量投与のために製剤化される。
【００５５】
別の態様において、本明細書において記載される、メチルオナプリストン、及びメチルオナプリストンを含む医薬組成物は、身体からの迅速排泄に対してそれらを保護する担体（徐放性製剤またはコーティング等）により調製され得る。かかる担体としては、制御放出製剤（マイクロカプセル化送達系等であるがこれらに限定されない）が挙げられる。活性化合物は、治療される患者に対する所望されない副作用の非存在下において治療的に有用な効果を発揮するのに十分な量で、薬学的に許容される担体中に含まれ得る。治療有効濃度は、治療される障害について既知のインビトロ及びインビボのモデル系における化合物の試験によって経験的に決定され得る。
【００５６】
別の態様において、本明細書において記載される、メチルオナプリストン、及びメチルオナプリストンを含む医薬組成物は、複数用量容器または単一用量容器中で封入され得る。封入された化合物及び組成物は、キット（例えば、使用のために組み立てることができるパーツが含まれる）において提供され得る。例えば、メチルオナプリストン多形化合物は凍結乾燥形態のための出発材料として使用することができ、好適な希釈剤は使用の前の組み合わせのための分離した構成要素として提供され得る。キットはメチルオナプリストン及び共投与のための第２の治療剤を含み得る。メチルオナプリストン化合物及び第２の治療剤は分離したパーツとして提供され得る。キットは複数の容器を含むことができ、各々の容器は本明細書において記載されるメチルオナプリストン化合物の１つまたは複数の単位用量を保持する。一態様において、容器は、所望の投与方法（錠剤、ゲルカプセル、徐放性カプセル等経口投与用；デポー製品、充填済みシリンジ、アンプル、バイアル等非経口投与用；ならびにパッチ、メディパッド、クリーム等局所投与用が挙げられるがこれらに限定されない）のために適合され得る。
【００５７】
医薬組成物中のメチルオナプリストン化合物の濃度は、活性化合物の溶解、吸収、代謝及び排出率、投薬スケジュール、ならびに投与される量に加えて、当業者に既知の他の因子に依存するだろう。
【００５８】
別の態様において、活性成分は一度に投与され得るか、または時間間隔で投与される多くのより低い用量へと分割され得る。正確な投薬量及び治療の継続時間は治療されている疾患の関数であり、既知の試験プロトコールを経験的に使用して、またはインビボのデータもしくはインビトロの試験データからの推定によって、決定され得ることが理解される。濃度及び投薬量値が緩和される病態の重症度によりさらに変動し得ることが指摘される。任意の特定の被験体について、具体的な投薬量レジメンは、個別の必要性、及び組成物を投与する人または組成物の投与を監督する人の専門的判断に従って時間とともに調整されるべきであること、ならびに本明細書において説明された濃度範囲は例示のみであり、特許請求される組成物の範囲または実践の限定を意図しないことが、さらに理解される。
【００５９】
経口投与が所望される場合、化合物は、胃または任意の沈殿の可能性のある酸性環境から保護する組成物中で提供され得る。例えば、組成物は、胃中でその完全性を維持し、腸で活性化合物を放出する腸溶コーティング中で製剤化され得る。組成物は、制酸剤または他のかかる成分と組み合わせても製剤化され得る。
【００６０】
経口組成物は一般的には不活性希釈剤または食用担体を含み、錠剤へと圧縮され得るか、またはゼラチンカプセル中に封入され得る。経口治療投与の目的のために、活性化合物または化合物は賦形剤と共に取り込まれ、錠剤、カプセルまたはトローチの形態で使用され得る。薬学的適合性のある結合剤及びアジュバント材は、組成物の一部として含まれ得る。
【００６１】
錠剤、ピル、カプセル、トローチ等は、以下の成分または類似する性質の化合物のうちの任意のものを含有することができ、それらは結合剤（トラガカントゴム、アカシア、トウモロコシデンプンまたはゼラチン等であるがこれらに限定されない）；賦形剤（微結晶性セルロース、デンプンまたはラクトース等）；崩壊剤（アルギン酸及びトウモロコシデンプン等であるがこれらに限定されない）；滑沢剤（ステアリン酸マグネシウム等であるがこれらに限定されない）；流動促進剤（コロイド状二酸化ケイ素等であるがこれらに限定されない）；甘味剤（スクロースまたはサッカリン等）；及び着香剤（ペパーミント、サリチル酸メチルまたは果実香味料等）である。
【００６２】
投薬量単位形態がカプセルである場合に、上記のタイプの材料に加えて、液体担体（脂肪油等）を含有できる。加えて、投薬量単位形態は様々な他の材料を含有でき、それは、投薬量単位の物理的形態を修飾する（例えば糖のコーティング及び他の腸溶剤）。化合物は、エリキシル、懸濁物、シロップ、ウエファース、チューインガム等の構成要素としても投与され得る。シロップは、活性化合物に加えて、甘味剤としてのスクロース、ならびに特定の防腐剤、色素及び着色料及び香料を含有し得る。
【００６３】
活性材料は、所望される作用を損なわない他の活性材料と、または所望される作用を補足する材料とも、混合され得る。ＯＮＡ多形化合物は、例えば抗腫瘍剤、ホルモン、ステロイドまたはレチノイドと組み合わせて使用され得る。抗腫瘍剤は、多数の化学療法剤（例えばエベロリムス、トラスツズマブ、ＴＭ１−Ｄ、抗ＨＥＲ２薬、ベバシズマブ、パクリタキセル、ドセタキセル、タキサン、ドキソルビシン、リポソーム型ドキソルビシン、ＰＥＧ化リポソーム型ドキソルビシン、アントラサイクリン、アントラセンジオン、カルボプラチン、シスプラチン、５−ＦＵ、ゲムシタビン及びシクロホスファミド）のうちの１つであり得る。一態様において、抗腫瘍剤はメチルオナプリストンに関して薬物間相互作用を示さない。
【００６４】
一態様において、非経口、皮内、皮下、または局所用の適用のために使用される溶液または懸濁物は、以下の構成要素のうちの任意のものを含むことができ、それらは、滅菌済み希釈剤（注射用水、塩類溶液、固定油、天然に存在する植物油（ゴマ油、ココナッツ油、落花生油、綿実油等）もしくは合成脂肪ベヒクル（オレイン酸エチル等）、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコール、または他の合成溶媒）；抗微生物剤（ベンジルアルコール及びメチルパラベン等）；抗酸化物質（アスコルビン酸及び亜硫酸ナトリウム等）；キレート剤（エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）等）；緩衝物質（酢酸塩、クエン酸塩及びリン酸塩等）；及び等張性の調整のための薬剤（塩化ナトリウム及びデキストロース等）である。非経口調製物は、ガラス、プラスチック、または他の好適な材料から作製されるアンプル、ディスポーザブルシリンジ、または複数用量バイアル中に封入され得る。緩衝物質、防腐剤、抗酸化物質等は、必要に応じて取り込まれ得る。
【００６５】
静脈内に投与される場合には、好適な担体としては、生理的塩類液、リン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）、ならびに増粘剤及び可溶化剤（グルコース、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、及びその混合物等）を含有する溶液が挙げられるがこれらに限定されない。リポソーム懸濁物（組織標的化リポソームが含まれる）も、薬学的に許容される担体として好適であり得る。これらは当技術分野において既知の方法に従って調製され得る。
【００６６】
別の態様において、メチルオナプリストン化合物は、身体からの迅速排泄に対して化合物を保護する担体（徐放性製剤またはコーティング等）により調製され得る。かかる担体としては、制御放出製剤（インプラント及びマイクロカプセル化送達系等であるがこれらに限定されない）及び生物分解性の生体適合性ポリマー（コラーゲン、エチレン酢酸ビニル、ポリ無水物、ポリグリコール酸、ポリオルトエステル、ポリ乳酸、ヒドロキシルプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、他のセルロース誘導体等）が挙げられる。かかる製剤の調製物のための方法は当業者に既知である。
【００６７】
さらに別の態様において、本開示の方法において用いられる化合物は、腸内または非経口的に投与され得る。経口で投与された場合に、本開示の方法において用いられる化合物は、当業者に周知であるように経口投与のための通常の投薬形態で投与され得る。これらの投薬形態としては、錠剤及びカプセルの通常の固体単位投薬形態に加えて、液体投薬形態（溶液、懸濁物及びエリキシル等）が挙げられる。固体投薬形態が使用される場合に、本明細書において記載される方法において用いられる化合物を１日１回のみまたは２回投与する必要があるように、それらは持続放出タイプであり得る。
【００６８】
経口投薬形態は、１日１回、２回、３回または４回、患者へ投与され得る。本明細書において記載されるメチルオナプリストン化合物は、１日３回以下または場合によって１回もしくは２回のいずれかで投与され得る。したがって、本開示の方法において用いられるメチルオナプリストンは、経口投薬形態で投与される。いかなる経口投薬形態が使用されても、それらは本明細書において記載される方法において用いられる化合物を胃の酸性環境から保護するようにデザインされ得る。腸溶性コーティング錠剤は当業者に周知である。加えて、各々がコーティングされた小さな球体により満たされて酸性の胃から保護するカプセルも、当業者に周知である。
【００６９】
「治療有効量」及び「治療有効期間」という用語は、新生物性細胞増殖を低減するのに有効な投薬量及び期間の治療を表わすように使用される。上で指摘されるように、かかる投与は、非経口、経口、舌下、経皮、局所、鼻腔内、または直腸内であり得る。一態様において、全身で投与された場合に、治療組成物は、約０．０１μＭ〜約２０μＭの化合物の血中レベルを達成するのに十分な投薬量で投与され得る。局在化投与については、これよりもはるかに低い濃度が有効であり得、はるかに高い濃度が忍容され得る。当業者は、ＯＮＡ多形化合物のより低い有効濃度でもたらされるかかる治療有効性が、治療される組織、器官、または特定の動物もしくは患者にかなり依存して変動し得ることを認識するだろう。患者は１つの用量で開始されていてもよいが、その用量が患者の病態変化に応じて時間にわたって変動され得ることも理解される。一態様において、ＯＮＡ多形化合物を使用して、組織（乳房組織、脳組織、髄膜腫組織、前立腺組織、卵巣組織、子宮内膜組織、子宮平滑筋腫組織、肺組織及び子宮組織が挙げられるがこれらに限定されない）に由来する腫瘍の増殖を阻害することができる。
【００７０】
投与の正確な投薬量及び頻度が、本開示の方法において用いられた投与される特定の化合物、治療されている特定の病態、治療されている病態の重症度、特定の患者の年齢、体重、一般的な身体条件、及び投与している当業者の内科医に周知である、個体が服用し得る他の医薬物に依存するであろうことは、当業者には明らかである。
【００７１】
上の記載は特定の態様を指すが、これらの態様が単に例示的であることを理解すべきである。多形形態及び本明細書において記載される方法に様々な修正及び変形を行えることは、当業者に明らかであろう。したがって、本記載は、添付の請求項及びそれらの等価物の範囲内の修正及び変形を含むことが意図される。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【国際調査報告】
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