(57)【要約】  本発明は、Ａｅｒｖａ属の植物の地上部分から得られる植物抽出物に関する。植物抽出物は、該地上部分を少なくとも１つの生理学的に許容される抽出溶媒と接触させるステップを含む抽出法によって、変種Ａｅｒｖａ  ｊａｖａｎｉｃａ（Ｂｕｒｍ．ｆ．）Ｊｕｓｓ．ｅｘ  Ｓｃｈｕｌｔから有利に得られる。この種類の植物抽出物は、特に化粧品、栄養補助食品、薬学的、または食品の種類の組成物の構成成分として対象となる。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ａｅｒｖａ属の植物の地上部分から得られるか、またはそれから得ることができる、植物抽出物。
【請求項２】
前記Ａｅｒｖａ属の前記植物が、Ａｅｒｖａ  ｊａｖａｎｉｃａ（Ｂｕｒｍ．ｆ．）Ｊｕｓｓ．ｅｘ  Ｓｃｈｕｌｔである、請求項１に記載の植物抽出物。
【請求項３】
前記抽出物が、約０．１〜約０．３％のケルセチンジ−ラムノシルグルコシド、約０．０５〜約０．１％のケンフェロールクマロイルラムノシルガラクトシド異性体、約０．０４〜約０．０８％のイソラムネチンラムノシルルチノシド、約０．５〜約０．１５％のルチン、約０．０５〜約０．１％のケンフェロールクマロイルラムノシルガラクトシド、及び約０．１〜約０．３％のケンフェロールジ−クマロイルラムノシルガラクトシドを含む、請求項１または２に記載の植物抽出物。
【請求項４】
前記植物抽出物が、Ａｅｒｖａ属の植物の前記地上部分を少なくとも１つの生理学的に許容される抽出溶媒と接触させるステップを含み、任意でその後、前記溶媒を除去するステップが続く抽出法によって得られるか、またはそれによって得ることができることを特徴とする、請求項１〜３のいずれか１項に記載の植物抽出物。
【請求項５】
前記抽出溶媒が、極性溶媒、共融溶媒、超臨界ＣＯ２、またはそれらの混合物から選択されることを特徴とする、請求項４に記載の植物抽出物。
【請求項６】
前記抽出法が、前記接触ステップの後に脱色ステップ及び／または脱臭ステップを含むことを特徴とする、請求項４または請求項５に記載の植物抽出物。
【請求項７】
前記抽出溶媒が、アルコール溶媒または水性アルコール溶媒である、請求項４〜６のいずれか１項に記載の植物抽出物。
【請求項８】
薬物としての使用のための、請求項１〜７のいずれかに記載の植物抽出物。
【請求項９】
（ｉ）請求項１〜７のいずれかに記載の植物抽出物と、
（ｉｉ）少なくとも１つの生理学的に許容される賦形剤と、を含む、組成物。
【請求項１０】
前記組成物が、化粧品組成物、薬学的組成物、または食品組成物である、請求項９に記載の組成物。
【請求項１１】
前記生理学的に許容される賦形剤が、皮膚科学的に許容される賦形剤である、請求項９または１０に記載の組成物。
【請求項１２】
炎症の予防及び／または治療における使用のための、請求項１〜８に記載の植物抽出物または請求項９〜１１に記載の組成物。
【請求項１３】
前記炎症が、慢性炎症である、請求項１２に記載の使用のための植物抽出物または組成物。
【請求項１４】
前記慢性炎症が、皮膚障害に関連する、請求項１３に記載の使用のための植物抽出物または組成物。
【請求項１５】
ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体（ＰＰＡＲ）の活性化剤としての使用のための、請求項１〜８に記載の植物抽出物または請求項９〜１１に記載の組成物。
【請求項１６】
ＰＰＡＲの前記活性化が、炎症性刺激の後に続く、請求項１５に記載の使用のための植物抽出物または組成物。
【請求項１７】
皮膚障害及び病態の治療、ならびに／または脳外傷の範囲内で作用するニューロンレベルでの酸化ストレスの制御、ならびに／または治癒現象の促進、ならびに／または細胞接着の改善、ならびに／または体重及び／もしくは関連する障害の管理における使用のための、請求項１５または１６に記載の使用のための植物抽出物または組成物。
【請求項１８】
前記皮膚障害が、慢性炎症に関連する、請求項１７に記載の使用のための植物抽出物または組成物。
【請求項１９】
前記皮膚障害及び病態が、乾癬またはアトピー性皮膚炎から選択される、請求項１８に記載の使用のための植物抽出物または組成物。
【請求項２０】
サーチュインの活性化剤としての使用のための、請求項１〜８に記載の植物抽出物または請求項９〜１１に記載の組成物。
【請求項２１】
前記サーチュインが、ＳＩＲＴ１である、請求項２０に記載の使用のための植物抽出物または組成物。
【請求項２２】
サーチュインまたはＳＩＲＴ１の前記活性化が、炎症性刺激の後に続く、請求項２１に記載の使用のための植物抽出物または組成物。
【請求項２３】
皮膚のバリア機能、及び皮膚の水和を改善するための薬剤、ならびに／または抗老化活性剤、ならびに／または代謝症候群及び関連する疾患の治療のための薬剤、ならびに／または変性疾患及び／もしくは関連する障害の治療のための薬剤としての使用のための、請求項２０〜２２のいずれか１項に記載の使用のための植物抽出物または組成物。
【請求項２４】
炎症を予防及び／または治療するための薬物の製造における、請求項１〜８に記載の植物抽出物または請求項９〜１１に記載の組成物の使用。
【請求項２５】
前記炎症が、慢性炎症である、請求項２４に記載の使用。
【請求項２６】
前記慢性炎症が、皮膚障害に関連する、請求項２５に記載の使用。
【請求項２７】
ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体（ＰＰＡＲ）を活性化するための薬物の製造における、請求項１〜８に記載の植物抽出物または請求項９〜１１に記載の組成物の使用。
【請求項２８】
ＰＰＡＲの前記活性化が、炎症性刺激の後に続く、請求項２７に記載の使用。
【請求項２９】
皮膚障害及び病態の治療、ならびに／または脳外傷の範囲内で作用するニューロンレベルでの酸化ストレスの制御、ならびに／または治癒現象の促進、ならびに／または細胞接着の改善、ならびに／または体重及び／もしくは関連する障害の管理のための薬物の製造における、請求項２７または２８に記載の植物抽出物または組成物の使用。
【請求項３０】
前記皮膚障害が、慢性炎症に関連する、請求項２９に記載の使用。
【請求項３１】
前記皮膚障害及び病態が、乾癬またはアトピー性皮膚炎から選択される、請求項３０に記載の使用。
【請求項３２】
サーチュインを活性化するための薬物の製造における、請求項１〜８に記載の植物抽出物または請求項９〜１１に記載の組成物の使用。
【請求項３３】
前記サーチュインが、ＳＩＲＴ１である、請求項３２に記載の使用。
【請求項３４】
サーチュインまたはＳＩＲＴ１の前記活性化が、炎症性刺激の後に続く、請求項３２または３３に記載の使用。
【請求項３５】
皮膚のバリア機能、及び、したがって皮膚の水和を改善するための薬物、ならびに／または抗老化活性剤としての薬物、ならびに／または代謝症候群及び関連する疾患の治療のための薬物、ならびに／または変性疾患及び／もしくは関連する障害の治療のための薬物の製造における、請求項３２〜３４のいずれか１項に記載の使用。
【請求項３６】
炎症を予防及び／または治療する方法であって、請求項１〜８に記載の植物抽出物または請求項９〜１１に記載の組成物の、それを必要とする対象への投与を含む、方法。
【請求項３７】
前記炎症が、慢性炎症である、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
前記慢性炎症が、皮膚障害に関連する、請求項３７に記載の方法。
【請求項３９】
ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体（ＰＰＡＲ）を活性化する方法であって、請求項１〜８に記載の植物抽出物または請求項９〜１１に記載の組成物の、それを必要とする対象への投与を含む、方法。
【請求項４０】
ＰＰＡＲの前記活性化が、炎症性刺激の後に続く、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
皮膚障害及び病態の治療、ならびに／または脳外傷の範囲内で作用するニューロンレベルでの酸化ストレスの制御、ならびに／または治癒現象の促進、ならびに／または細胞接着の改善、ならびに／または体重及び／もしくは関連する障害の管理のための、請求項３９または４０に記載の方法。
【請求項４２】
前記皮膚障害が、慢性炎症に関連する、請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】
前記皮膚障害及び病態が、乾癬またはアトピー性皮膚炎から選択される、請求項４２に記載の方法。
【請求項４４】
サーチュインを活性化する方法であって、請求項１〜８に記載の植物抽出物または請求項９〜１１に記載の組成物の、それを必要とする患者への投与を含む、方法。
【請求項４５】
前記サーチュインが、ＳＩＲＴ１である、請求項４４に記載の方法。
【請求項４６】
サーチュインまたはＳＩＲＴ１の前記活性化が、炎症性刺激の後に続く、請求項４４または４５に記載の方法。
【請求項４７】
皮膚のバリア機能、及び、したがって皮膚の水和を改善するための、ならびに／または抗老化活性剤としての、ならびに／または代謝症候群及び関連する疾患の治療のための、ならびに／または変性疾患及び／もしくは関連する障害の治療のための、請求項４４〜４６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４８】
−ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体（ＰＰＡＲ）の活性化剤、及び／または
−サーチュイン、特にＳＩＲＴ１の活性化剤、及び／または
−特に炎症性刺激後の皮膚のバリア機能を改善するための薬剤としての、請求項１〜７のいずれかに記載の植物抽出物の非治療的使用。
【請求項４９】
Ａｅｒｖａ属の前記地上植物部分を少なくとも１つの生理学的に許容される抽出溶媒と接触させるステップを含み、任意でその後、前記溶媒の少なくとも一部を除去するステップが続く、請求項１〜７のいずれかに記載の植物抽出物を生成するための方法。
【請求項５０】
前記抽出溶媒が、極性溶媒、共融溶媒、超臨界ＣＯ２、またはそれらの混合物から選択されることを特徴とする、請求項４９に記載の方法。
【請求項５１】
前記抽出法が、接触ステップの後に脱色ステップ及び／または脱臭ステップを含むことを特徴とする、請求項４９または請求項５０に記載の方法。
【請求項５２】
請求項４９〜５１のいずれか１項に記載の、植物抽出物を生成するための方法であって、
以下の連続ステップ、
ａ）Ａｅｒｖａ属の植物の前記地上部分を調製／提供するステップと、
ｂ）前記地上部分を前記抽出溶媒と接触させるステップと、
ｃ）前記混合物を濾過して対象となる濾液を得、任意で前記地上部分の前記固体残渣を更なる接触ステップに供し、その後濾過ステップが続く、ステップと、
ｄ）任意で、対象となる前記濾液を脱色及び／または脱臭するステップと、
ｅ）任意で、前記植物抽出物を固体支持体上または液体支持体上に製剤化するステップと、を含む、方法。
【請求項５３】
ステップｃ）の後及び／またはステップｄ）の後に濃縮ステップを更に含む、請求項５２に記載の方法。
【請求項５４】
前記抽出溶媒が、アルコール溶媒または水性アルコール溶媒である、請求項４９〜５３のいずれか１項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は概して、植物抽出物の分野に関する。より具体的には、それは、Ａｅｒｖａ属の植物、特にＡｅｒｖａ  ｊａｖａｎｉｃａ（ｂｕｒｍ．ｆ．）Ｊｕｓｓ  ｅｘ．Ｓｃｈｕｌｔから得られるか、またはそれから得ることができる植物抽出物、そのような抽出物を提供するためのプロセス、及びそのような抽出物の使用に関する。特に、本発明は、炎症の治療もしくは予防における使用のための抽出物、またはそのような抽出物を含む組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
本明細書における明らかに以前に公開された文書の一覧または考察は必ずしも、その文書が最先端技術の一部であるか、または共通の一般知識であるという認識として理解されるべきではない。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
炎症は、生物への攻撃に続く正常な防御現象であり、開始相、増幅相、及び消散相を有する。炎症反応は、その目的を超えることがあり、慢性炎症の症例において観察されるような有害効果の原因となり得る。
【０００４】
炎症には、感染性病原体、不活性異物、物理的病原体、外傷後細胞組織性病変などの多くの原因が存在する。
【０００５】
２種類の炎症、つまり急性炎症と慢性炎症とを区別することが可能である。認識相において起こる同様の作用及び免疫系の動員相の発達に関与する作用機構にも関わらず、これらの２種類の炎症は、炎症の消散または非消散の最終的な予後において非常に異なる。
【０００６】
急性炎症は、外傷、物理的病原体、内因性もしくは外因性刺激物、または感染症などの様々な原因に対する自然応答である。
【０００７】
それは、血管相または開始相、細胞相または増幅相、及び消散相の３つの相において発展する。
【０００８】
炎症の第１相は、造血幹細胞（ＨＳＣ）、つまり、リンパ球、単球、及びマクロファージの分化から、または抗体、補体タンパク質（血清中に存在し、自然免疫を形成する）、及び血液凝固に関与するヘゲマン（Ｈａｇｅｍａｎ）因子などの循環タンパク質によって生じる「認識」反応で開始する。
【０００９】
認識相には、炎症の強度及び位置の関数として変化する細胞及びメディエーターの群に関与する多数の連鎖反応が先行する。
【００１０】
最終相は、多核細胞のアポトーシスに対応し、炎症の停止を可能にし、これは、炎症の消散と称される。免疫系は、急性炎症にはほとんど関与しない。
【００１１】
したがって、急性炎症の症例において、消散相は、恒常性への復帰、治癒の成功、及び組織機能の完全な回復によって特徴付けられる。
【００１２】
消散相が発生しない場合、炎症応答は持続し得、炎症は慢性となる。その後、それは、その慢性のために、瘢痕もしくは線維症の形成または組織改変さえももたらす。
【００１３】
慢性炎症の場合、炎症応答の第１段階は、急性炎症について記載したものと同様である。
【００１４】
しかしながら、急性炎症とは異なり、慢性炎症は、生物体内の病原体の存在または不在によって永続する限局性の炎症持続に起因する。
【００１５】
この炎症の持続は、全身性エリテマトーデス、関節リウマチ、ゴーゴット・シェーグレン病、またはクローン病などの自己免疫疾患として記載されることが多い、多くの慢性炎症性疾患の原因となる。
【００１６】
したがって、慢性炎症は、関節（関節症）、血管壁（動脈硬化症）、及び膵臓（糖尿病）などの細胞及び組織の変性を促進する。長期的には、それは、免疫防御の低下を引き起こし、炎症性構成要素を有する疾患（心血管疾患、関節炎、喘息、アルツハイマー病、過敏性腸症候群、がん、自己免疫疾患など）への道を開く。それは、フリーラジカルのレベルを増加させ、したがって、身体の酸化を増加させる。特に、慢性炎症は、老化を促進する。
【００１７】
慢性炎症は、心臓病、がん、及びＩＩ型糖尿病を含むいくつかの他の疾患の主要な危険因子である。したがって、生物体全体が、この潜状性であるが存在する炎症状態を患う。
【００１８】
慢性的な炎症は、３つの事柄、つまり、わずかしかない明らかな症状、生物レベルでの全身作用、及び経時的に続く潜状的及び進行的作用によって区別される。
【００１９】
老化自体が、炎症を促進する。高齢の対象者には、炎症のより多くの生物学的マーカーが見出される。この理由は未知であるが、それは、抗酸化機能、ホルモン機能、及び解毒機能の一般的な緩徐化、ミトコンドリアの変化及び不適切な機能、より多くのフリーラジカルの放出、及び体内の毒素または汚染物質の蓄積などによって特徴付けられる。
【００２０】
近年、炎症性エピソードの消散は、炎症促進性メディエーターの単なる消失から生じる受動的機構ではないことが示されている。
【００２１】
それは、異なる細胞型間のシクロオキシゲナーゼ（ＣＯＸ）、リポキシゲナーゼ（ＬＯＸ）、またはシトクロムＰ４５０の協調作用を動員する。これは、アラキドン酸（ＡＲＡ）、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）、またはドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）などの多価不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡ）に由来する生物活性脂質の合成を可能にする。これらの新たなメディエーターは、リポキシン、リゾルビン、マレシン、またはプロテクチンと称される。
【００２２】
それらの合成経路は、科学文献に広く記載されており、以下に簡潔に提示される。
【００２３】
ａ）アラキドン酸（ＡＲＡ）依存性生物活性メディエーターの合成経路
ＡＲＡは、細胞膜の膜リン脂質内に組み込まれる、ω６ファミリーの非必須脂肪酸である。ホスホリパーゼＡ２によるその放出、グルココルチコイドの影響下でのその活性は、炎症プロセスに関与する誘導体の形成を可能にする。
【００２４】
炎症中、酵素１２−及び１５−ＬＯＸは、中間産生物の産生を可能にし、これらはそれぞれ、１２−（Ｓ）−ＨＥＴＥ及び１５−（Ｓ）−ＨＥＴＥである。５−ＬＯＸは、ＡＲＡ分解経路において二重機能を有する。５−ＬＯＸは、ＡＲＡを５−（Ｓ）−ＨＥＴＥに直接分解する（これはその後、ＬＴＡ４ヒドロラーゼによってロイコトリエンＢ４（ＬＴＢ４）に代謝される）か、またはそれは、１５−（Ｓ）−ＨＥＴＥをリポキシンＡ４またはＢ４（ＬＸＡ４及びＬＸＢ４）に変換するかのいずれかある。ＬＸＡ４及びＬＸＢ４は、特殊化消散促進性脂質メディエーター（ＳＰＭ）のファミリーに属する、最初に記載されたメディエーターである。
【００２５】
ＡＲＡから開始して、ＣＯＸの作用下で、プロスタグランジンＥ２（ＰＧＥ２）またはトロンボキサンＢ２（ＴＢＸ２）も同様に合成されるだろう。５−ＬＯＸの作用下で、ＡＲＡの変換はまた、中間体（５−（Ｓ）−ＨＥＴＥ）も産生し、これは、ＬＴＡ４ヒドロラーゼによってロイコトリエンＢ４（ＬＴＢ４）に変換される。
【００２６】
ＰＧ及びＬＴＢ４の特定の望ましくない効果、炎症の慢性化及び非消散を低減するためにＡＲＡの代謝経路を阻害することは、炎症により良好に反応するために有効な薬理学的方向であるようであり、これは、ＣＯＸを阻害するアスピリンの場合に真である。
【００２７】
ｂ）ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）依存性生物活性メディエーターの合成経路
ＤＨＡは、α−リノレン酸（ＡＬＡ）の分解から得られるか、または食品によって直接供給されるω３型の必須多価不飽和脂肪酸である。
【００２８】
ＤＨＡ及び１２−ＬＯＸの作用から開始して、１４−ＨＤｏＨＥが合成され、これはマレシン（７−Ｍａｒ１）などの産生物を生じさせる。繰り返すが、ＤＨＡから開始して、１５−ＬＯＸの作用は、ニューロプロテクチンＤ１（ＰＤ１）の前駆体である中間体（１７−ＨＤｏＨＥ）ならびにＤ型リゾルビン（ＲｖＤ１及びＲｖＤ２）の産生を誘導する。アスピリンの存在下で、Ｄ型リゾルビンのエピマーも同様に得ることができ、これらは、アスピリン誘発リゾルビン（ＡＴ−ＲｖＤ）である。
【００２９】
ｃ）エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）依存性生物活性メディエーターの合成経路
ＤＨＡと同様に、ＥＰＡは、ＡＬＡの分解から形成されるが、食品中にもまた存在するω３型の多価不飽和脂肪酸である。
【００３０】
ＥＰＡから開始して、かつＣＯＸの存在下で、中間体が合成され、中間体は、ＬＯＸによって変換されたときにリゾルビンＥ１及びＥ２（ＲｖＥ１及びＲｖＥ２）の産生を可能にする１８−ＨＥＰＥである。
【００３１】
これらの生物活性分子の作用機構は、以下により詳細に記載される。
【００３２】
別々に考慮すると、レポキシンＡ４もしくはＢ４（またはそれらのアスピリン依存性エピマー）、リゾルビンＤ１、マレシン１、リゾルビンＥ１及びＥ２、ならびにニューロプロテクチンＤ１は、オータコイド活性を有するが、これは、それらがその消散を可能にするための炎症応答中に、我々の生物体によって自然に合成された薬物として作用するためである。したがって、それらは、ＴＮＦ−αなどの炎症性サイトカインの合成及び転写因子ＮＦ−ＫＢの動員を低減することによって、ＰＭＮの浸潤を低減することによる炎症エピソードの消散を促進する活性を有する。ＲｖＥ１及びＲｖＥ２はまた、損傷した角質層の再上皮形成を誘導する能力も有する。ＲｖＤ１は更に、ＴＲＰＡ１、ＴＲＰＶ３、及びＴＲＰＶ４の動員のために抗侵害受容能力を有する。
【００３３】
急性炎症の最終的な予後（すなわち、それが消散されるか、または慢性になるか）は、損傷の強度及び性質ならびにその位置などのいくつかの因子によって影響されるが、宿主の潜在的な過剰応答によってもまた影響される。炎症から恒常性への移行（完全な消散）は、組織レベルで高度に制御されたプログラムである。プロスタグランジン（ＰＧＥ２及びＰＧＤ２）ならびにロイコトリエンＢ４は、急性炎症の開始及び増幅相に特に関与する。実際、ＰＧＥ２及びＰＧＤ２は、ＬＴＢ４のリポキシンＡ４への変換を促進し、リゾルビンＤ及びＥならびにプロテクチンの産生をもたらす。同様に、ＰＧＥ２、ＰＧＤ２、及びＬＴＢ４もまた、炎症過程を促進し得、不適切（例えば、過剰）で慢性になり得る応答を誘導し得る。線維症は、結合組織の実質的な破壊のために発生し得、その置換は機能性の喪失をもたらすだろう。
【００３４】
いずれの場合も、消散分子の測定は、炎症に、及びより具体的には修復に正の効果を有する分子の検証における選択のモデルとなる。
【００３５】
健康的／薬学的製品において合成または人工成分を使用することは、消費者の健康及び管理に及ぼす可能性のある負の効果のために懸念となっている。
【００３６】
これは、健康的／薬学的／化粧製品における人工成分に対する天然の代替物に対する公共需要の増加をもたらしている。
【００３７】
したがって、抗炎症性効能、及びより正確には慢性炎症に対する抗炎症効能を有する植物抽出物を提供することが対象となる。
【００３８】
ペルオキシソームは、酸素化水（カタラーゼ、尿酸オキシダーゼ、Ｄ−アミノ酸オキシダーゼ）の代謝に関与する一連の酵素及び脂肪酸のβ−酸化の酵素を含有するミトコンドリアと同様の小さなオルガネラである。
【００３９】
ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体（ＰＰＡＲとも称される）は、特に生物体内の脂質、グルコース、及びアミノ酸の合成を制御する核内受容体のスーパーファミリーのメンバーである。
【００４０】
近年、例えば、肝臓、腎臓、心臓、筋肉、脳、及び脂肪組織などの皮膚及び他の器官に存在するＰＰＡＲが、細胞増殖及び分化などの細胞機能、免疫応答、ならびにアポトーシスの制御において重要な役割を果たすことが見出されている。ＰＰＡＲが炎症の消散を助けることもまた、見出されている。
【００４１】
これらの受容体は、ペルオキシソーム増殖因子によって活性化され得るか、または天然脂肪酸によっても活性化され得る。したがって、それらは、ペルオキシソーム及びミトコンドリアβ−酸化に関与する酵素をコードする遺伝子の発現を刺激する。この制御的役割は、様々な病態のレベルで重要な生物体内での多面的な効果を引き起こし、したがって、これらのマーカーを新たな治療法の探索における優先的な標的とする。
【００４２】
特定のＰＰＡＲ−α、−β／σ、−γ受容体に対して作用し得る、様々な合成分子が現時点で存在する。しかしながら、残念なことに、これらの分子は、望まれない副作用をもたらし得る。例えば、チアゾリジンジオン型の薬物には、心不全の危険性の増加及び脂肪生成の増加。
【００４３】
したがって、チアゾリジンジオン以外の二次代謝産物に基づく天然の代替物が見出されなければならない。
【００４４】
したがって、ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体（ＰＰＡＲ）の活性化因子として作用することができる新たな植物抽出物を提供することもまた対象となる。
【００４５】
近年の科学的研究は、栄養、特にカロリー制限を健康な老化に結び付けている。動物研究において、カロリー制限によって寿命の延長が改善されることさえあり得る。
【００４６】
ＳＩＲＴ１は、サーチュインＳＩＲＴ１−７ファミリーのメンバーであり、エネルギー及び代謝プロセスの利用可能性を検出するための細胞センサーとして作用する、ＮＡＤ＋に連結した高度に保存された脱アセチル化酵素のファミリーである。ＳＩＲＴ１は、広範囲の組織及び器官内で発現され、肝臓、膵臓心、筋肉、脳、皮膚及び脂肪組織内で検出されている。ＳＩＲＴ１は、例えば、カロリー制限または身体運動によって引き起こされる低細胞エネルギーの状態によって引き起こされる障害である、高いＮＡＤ＋レベルによって活性化される。ＳＩＲＴ１の活性化は、アポトーシス、細胞周期、概日リズム、ミトコンドリア機能及び活性代謝（グルコース管理、脂質代謝、及びエネルギー恒常性を含む）、ならびに細胞保護に対する正の効果にとって重要な標的タンパク質の脱アセチル化をもたらす。いくつかのマウスモデルを使用して、ＳＩＲＴ１の代謝機能が研究されている。ＳＩＲＴ１の過剰発現が、代謝症候群及び肥満によって誘導されるグルコース不耐性及びインスリン抵抗性に対する耐性の増加を示す一方で、脂肪細胞、血清コレステロール、及びインスリンの低減を引き起こすことを示すことが可能となっている。
【００４７】
更に、ＳＩＲＴ１タンパク質は、特にＤＮＡ転写及び修復における、ならびにアポトーシス及び細胞老化のプロセスにおける多数の生物学的プロセスにも関与している。それらは、細胞生存の重要な制御因子である。より古い線維芽細胞内では、ＳＩＲＴ１の内因性発現は次第に減少する。古い細胞は、若い細胞よりも少ないサーチュインを産生する。ヒト皮膚細胞における遺伝子サーチュインの発現を刺激することにより、その老化を緩徐化することができることが、試験によって示されている。したがって、ＳＩＲＴ１の維持及び活性化は、皮膚の老化の徴候に対抗するため、及び皮膚のバリア機能を維持するための鍵である。実際、近年の研究では、バリア機能の統合性を維持し、したがって皮膚の水和を維持する主要な役割及び外部の攻撃に対する保護の役割を果たす上でのＳＩＲＴ１の主要な役割が示されている。
【００４８】
したがって、ＳＩＲＴ１の活性化は、慢性炎症などの慢性疾患に関連する予防だけでなく、生物体の恒常性、酸化ストレスレベル、インスリン抵抗性及び／または脂質代謝、エネルギー収支、体力、筋肉量、細胞老化を維持または改善するための有益な効果を主に有する。
【００４９】
したがって、サーチュイン活性化因子としての効能を有する新たな植物抽出物を提供することもまた、対象となる。
【課題を解決するための手段】
【００５０】
本発明者らは、驚くべきことにかつ意外にも、Ａｅｒｖａ属の植物、特にＡｅｒｖａ  ｊａｖａｎｉｃａ（ｂｕｒｍ．ｆ．）Ｊｕｓｓ．ｅｘ．Ｓｃｈｕｌｔの地上部分（植物の葉など）から得られるか、またはそれから得ることができる抽出物が、特にヒトにおいて生物学的活性を有することを見出した。
【００５１】
例えば、本発明者らは、Ａｅｒｖａ属の植物、特にＡｅｒｖａ  ｊａｖａｎｉｃａ（ｂｕｒｍ．ｆ．）Ｊｕｓｓ．ｅｘ．Ｓｃｈｕｌｔの地上部分から得られるか、またはそれから得ることができる抽出物が、アラキドン酸、エイコサペンタエン酸、及び／またはドコサヘキサエン酸に由来するものなどの特殊化消散促進性メディエーターのレベルを増加させる活性を含む抗炎症活性を有することを示した。
【００５２】
したがって、植物Ａｅｒｖａ、特にＡｅｒｖａ  ｊａｖａｎｉｃａ（ｂｕｒｍ．ｆ．）Ｊｕｓｓ．ｅｘ．Ｓｃｈｕｌｔの地上部分から得られる抽出物は、炎症の治療または予防のなどの多くの治療的及び非治療的用途（例えば、化粧的用途）を有し得る。
【００５３】
本発明の抽出物は、医学的病態の治療において有用であり得る。
【００５４】
植物抽出物
本発明は、Ａｅｒｖａ属の植物の地上部分から得られるか、またはそれから得ることができる植物抽出物に関し、これは、以下「本発明の抽出物」と称し得る。
【００５５】
「植物抽出物」は特に、固体／液体抽出（これによって、植物部分（固形物）に含有される植物化学化合物が溶媒によって可溶化される）から得られる産生物を意味すると理解される。
【００５６】
当業者によって理解されるように、本明細書で使用される場合、「から得ることができる」という用語は、抽出物が、植物から得られ得るか、もしくは植物から単離され得るか、または例えば、化学的合成もしくは酵素的産生によって代替の供給源から得られ得ることを意味する。本明細書で使用される場合、「得られる」という用語は、抽出物が、植物供給源に直接由来することを意味する。
【００５７】
Ａｅｒｖａ属の植物は、Ａｍａｒａｎｔｈａｃｅａｅの科に属する。
【００５８】
Ａｅｒｖａ属は特に、主にアフリカ大陸（特にマダガスカル）の熱帯地域に見られるが、南西及び南アジアにも見られる。
【００５９】
「Ａｅｒｖａ属」としては特に、以下の変種、Ａｅｒｖａ  ａｒｔｅｍｉｓｉｏｉｄｅｓ、Ａｅｒｖａ  ｃｏｎｇｅｓｔａ、Ａｅｒｖａ  ｃｏｒｉａｃｅａ  Ｓｃｈｉｎｚ、Ａｅｒｖａ  ｈｕｍｂｅｒｔｉｉ  Ｃａｖａｃｏ、Ａｅｒｖａ  ｊａｖａｎｉｃａ（Ｂｕｒｍａｎ  ｆ．）Ａ．Ｌ．Ｊｕｓｓ．ｅｘ  Ｓｃｈｕｌｔｅｓ、Ａｅｒｖａ  ｌａｎａｔａ（Ｌ．）Ａ．Ｌ．Ｊｕｓｓ．ｅｘ  Ｓｃｈｕｌｔｅｓ、Ａｅｒｖａ  ｌｅｕｃｕｒａ  Ｍｏｑ．、Ａｅｒｖａ  ｍａｄａｇａｓｓｉｃａ  Ｓｕｅｓｓ．、Ａｅｒｖａ  ｍｉｃｒｏｐｈｙｌｌａ  Ｍｏｑ．、Ａｅｒｖａ  ｒｅｖｏｌｕｔａ  Ｂａｌｆ．ｆ．、Ａｅｒｖａ  ｓｅｒｉｃｅａ  Ｍｏｑ．−ｉｓｌａｎｄ  ｐｕｚｚｌｅ、Ａｅｒｖａ  ｓａｎｇｕｉｎｏｌｅｎｔａ（Ｌ．）Ｂｌｕｍｅ、Ａｅｒｖａ  ｔｒａｎｓｖａａｌｅｎｓｉｓ  Ｇａｎｄ．、Ａｅｒｖａ  ｔｒｉａｎｇｕｌａｒｉｆｏｌｉａ  Ｃａｖａｃｏが挙げられる。
【００６０】
本発明の主題である好ましい植物抽出物は、Ａｅｒｖａ  ｊａｖａｎｉｃａ（Ｂｕｒｍ．ｆ．）Ｊｕｓｓ．ｅｘ  Ｓｃｈｕｌｔ．（異名：Ａｅｒｖａ  ｔｏｍｅｎｔｏｓａ  Ｆｏｒｓｋ．、Ａｅｒｖａ  ｐｅｒｓｉｃａ（Ｂｕｒｍ．ｆ．）Ｍｅｒｒｉｌｌ）種の地上部分から得られるか、またはそれから得ることができる植物抽出物である。
【００６１】
この種は、直立した草本植物（１．６メートルの高さに達し得る）である。これは、交互の直線状〜ほぼ状球の葉を含む多年生かつ亜低木であると考えられている。その花は、単性であり、末端で群化し、円筒形の穂（長さ１０ｃｍ）の綿毛がある長方形〜卵円形の花被片を有する。それは、最大１５００メートルの高度の、熱帯及び亜熱帯アフリカ、インド洋、ならびに熱帯及び亜熱帯アジアにおいて、荒廃地、低木地帯、岩場、または森林の端で育つ。
【００６２】
本明細書で使用される場合、「地上部分」という用語は、それが育っている土壌内にないＡｅｒｖａ植物の任意の部分を指す。例えば、「地上部分」という用語は、植物の根は含まないが、葉、茎、種子、花、果実などの部分を含み得る。これらの地上部分は、個々にまたは組み合わせて考慮され得る。典型的には、本発明で使用される場合、「地上部分」は、Ａｅｒｖａ植物、特にＡｅｒｖａ  ｊａｖａｎｉｃａ植物の葉を含むか、またはそれからなる。
【００６３】
本発明の抽出物は、水性抽出物、アルコール抽出物（ヒドロアルコール抽出物を含む）、または有機抽出物であり得る。場合によっては、本発明の水性抽出物及び本発明のアルコール抽出物を組み合わせて、本発明の混合抽出物を形成してもよい。混合抽出物中の水性抽出物対アルコール抽出物の比は、１：１０〜１０：１（１：５〜５：１など）であり得る。
【００６４】
本明細書で使用される場合、「水性抽出物」という用語は、水を唯一の溶媒として使用して植物の地上部分（例えば、葉）から抽出を実行した場合の、本発明の抽出物を指す。
【００６５】
本明細書で使用される場合、「アルコール抽出物」という用語は、アルコールを溶媒として使用して植物の地上部分（例えば、葉）から抽出を実行した場合の、本発明の抽出物を指す。アルコール溶媒は、アルコールのみ（例えば、１００％のアルコール）、例えば、１００％のエタノールからなっても、またはアルコールと水との混合物（すなわち、ヒドロ−アルコール溶媒）、例えば、エタノールと水との混合物（ヒドロ−エタノール溶媒）、例えば、水中約１％〜約９９％のアルコール（例えば、エタノール）であってもよく、例えば、水対アルコールの比は、１０／９０体積％〜９０／１０体積％または３０／７０体積％〜７０／３０体積％（５０／５０体積％など）である。
【００６６】
好ましい一態様において、本発明の抽出物は、アルコール抽出物である。特に、ヒドロ−エタノール抽出物などのヒドロ−アルコール抽出物である。
【００６７】
本明細書で使用される場合、「有機抽出物」という用語は、アルコールではない有機溶媒を使用して植物の地上部分（例えば、葉）から抽出を実行した場合の、本発明の抽出物を指す。例えば、有機溶媒は、酢酸、アセトン、アセトニトリル、ベンゼン、２−ブタノン、四塩化炭素、クロロベンゼン、クロロホルム、シクロヘキサン、１，２−ジクロロエタン、ジエチレングリコール、ジエチルエーテル、ジグリム（ジエチレングリコール、ジメチルエーテル）、１，２−ジメトキシ−エタン（グリム、ＤＭＥ）、ジメチル−ホルムアミド（ＤＭＦ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、１，４−ジオキサン、酢酸エチル、エチレングリコール、グリセリン、ヘプタン、ヘキサメチルホスホラミド（ＨＭＰＡ）、ヘキサメチル亜リン酸トリアミド（ＨＭＰＴ）、ヘキサン、メチルｔ−ブチルエーテル（ＭＴＢＥ）、塩化メチレン、Ｎ−メチル−２−ピロリジノン（ＮＭＰ）、ニトロメタン、ペンタン、石油エーテル（リグロイン）、ピリジン、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、トルエン、トリエチルアミン、ｏ−キシレン、ｍ−キシレン、及びｐ−キシレンからなる群から選択され得る。
【００６８】
本発明のアルコール抽出物（ヒドロ−アルコール抽出物、例えば、ヒドロ−エタノール抽出物など）は、ケルセチンジ−ラムノシルグルコシド、ケンフェロールクマロイルラムノシルガラクトシド異性体、イソラムネチンラムノシルルチノシド、ルチン、ケンフェロールクマロイルラムノシルガラクトシド、及び／またはケンフェロールジ−クマロイルラムノシルガラクトシドを含むか、それから本質的になるか、またはそれからなり得る。
【００６９】
例えば、アルコール抽出物（例えば、ヒドロ−アルコール抽出物）は、約０．１〜約０．３乾燥重量％の抽出物ケルセチンジ−ラムノシルグルコシド、約０．０５〜約０．１乾燥重量％の抽出物ケンフェロールクマロイルラムノシルガラクトシド異性体、約０．０４〜約０．０８乾燥重量％の抽出物イソラムネチンラムノシルルチノシド、約０．５〜約０．１５乾燥重量％の抽出物ルチン、約０．０５〜約０．１乾燥重量％の抽出物ケンフェロールクマロイルラムノシルガラクトシド、及び／または約０．１〜約０．３乾燥重量％の抽出物ケンフェロールジ−クマロイルラムノシルガラクトシドを含むか、それから本質的になるか、またはそれからなり得る。
【００７０】
疑念を回避するために、本発明の所与の態様、特徴、またはパラメータについて示される嗜好性、選択肢、及び具体的な特徴などは、別段脈絡が示さない限り、同じまたは他の本発明の態様、特徴、またはパラメータについて示されるあらゆる全ての嗜好性、選択肢、及び具体的な特徴と組み合わせて開示されているものとみなされるべきである。
【００７１】
本明細書で使用される場合、「約」という用語は、測定可能な値（反応混合物中の特定の構成成分の量または重量など）を指す場合、±２０％、±１０％、±５％、±１％、±０．５％、または特に±０．１％の変動を指す。
【００７２】
当業者であれば、本発明の抽出物が固体形態または液体形態で提供され得ることを理解するだろう。固体形態には、抽出物が非晶質固体として、または結晶性もしくは部分結晶性固体として提供され得ることが含まれる。
【００７３】
抽出法
本発明の植物抽出物は、Ａｅｒｖａ属の地上植物部分を少なくとも１つの生理学的に許容される抽出溶媒と接触させるステップを含み、有利に該溶媒を除去するステップが続く方法を実行することによって、Ａｅｒｖａ属の植物の地上部分から有利に得られるか、またはそれから得ることができ得る。
【００７４】
典型的には、本発明の抽出物は、以下に一般に記載されるような抽出法及び単離法、またはそれらを慣習的に修正したものによって得られ得る。
【００７５】
抽出法は、以下、接触ステップ、脱色ステップ（「漂白ステップ」と呼ばれることもある）、及び／もしくは脱臭ステップを含むか、またはそれらからなり得る。脱色ステップ及び脱臭ステップは、単一ステップでともに実行しても、別個に実行してもよい。脱色ステップ及び脱臭ステップを別個に実行する場合、脱色ステップは、脱臭ステップの前または後に実行することができる。
【００７６】
例えば、本発明の抽出物を提供するための方法は、以下の連続的なステップ、
ａ）Ａｅｒｖａ属の植物の地上部分を調製／提供するステップと、
ｂ）該地上部分を抽出溶媒と接触させるステップと、
ｃ）混合物を濾過して対象となる濾液を得、任意で地上部分の固体残渣を更なる接触ステップに供し、その後濾過ステップが続く、ステップと、
ｄ）任意で、対象となる該濾液を脱色及び／もしくは脱臭するステップと、
ｅ）任意で、該植物抽出物を固体支持体上もしくは液体支持体上に製剤化するステップと、を含むか、またはそれらからなる。
【００７７】
植物抽出物を生成するための方法の非限定的な例が、以下に記載され、
ａ）任意で粉砕ステップ及び任意で乾燥ステップを含む、Ａｅｒｖａ属の植物の地上部分を調製／提供するステップと、
ｂ）動的または静的な様式で１〜８時間、好ましくは周囲温度、還流下または４５〜５５℃の範囲の温度で、地上部分を抽出溶媒と接触させるステップと、
ｃ）混合物を濾過して対象となる濾液を得、任意で地上部分の固体残渣を更なる接触ステップに供し、その後濾過ステップが続く、ステップと、
ｄ）任意で、対象となる濾液を脱色及び／または脱臭するステップと、
ｅ）植物抽出物を固体支持体上または液体支持体上での製剤化によって製剤化するステップと、を含み得る。
【００７８】
本発明の方法中、処理される抽出溶媒または濾液の体積を低減することを目的として、かつ濃縮された溶液または固体を得るために、ステップｃ）の後及び／またはステップｄ）の後に濃縮ステップが任意で実行されてもよい。濃縮ステップは、抽出溶媒を完全に除去しても、抽出溶媒を部分的に除去してもよい。例えば、全ての溶媒が除去され、固体抽出物のみが残るまで、溶媒を濃縮してもよい。典型的には、溶媒（濾液）は、（例えば、回転蒸発によって）約３０％〜約７０％のＤＭ（約５０％のＤＭなど）（乾燥材料、乾燥された物質、または乾燥物質）まで濃縮される。
【００７９】
その後、抽出物は、約９０％〜約９９％（約９７％など）のＤＭ％まで更に乾燥され得る。使用され得る乾燥プロセスとしては、噴霧、空気乾燥、オーブン乾燥、及び天日乾燥が挙げられるが、これらに限定されない。乾燥は、担体ありまたはなしで行われ得る。
【００８０】
調製ステップａ）
植物抽出物は、Ａｅｒｖａ属の植物の地上部分から調製または提供される。例えば、本発明の植物抽出物は、Ａｅｒｖａ植物の葉、茎、種子、花、及び／または果実から得られるか、またはそれらから得ることができ得る。
【００８１】
Ａｅｒｖａ属の植物は、例えば、変種Ａｅｒｖａ  ｊａｖａｎｉｃａ（Ｂｕｒｍ．ｆ．）Ｊｕｓｓ．ｅｘ  Ｓｃｈｕｌｔの植物であり得る。
【００８２】
地上部分は、好ましくは、乾燥後に粉砕または粉砕後に乾燥されてから、抽出溶媒と接触される。しかしながら、新鮮な植物の使用も考えられる。
【００８３】
使用する場合、粉砕は、平均粒径０．５〜５ｍｍ（例えば１ｍｍ）で１００μm〜５０ｍｍの粒径を有する粉砕材料が得られるように調整される。当技術分野において既知の任意の好適な粉砕技術が、使用され得る。
【００８４】
使用する場合、乾燥は、植物材料のその保存中の劣化を回避するように調整され、好ましくは、残留水のパーセンテージは１０％未満である。例えば、粉砕された粒子は、約９０％〜約９９％（約９７％など）のＤＭ％（乾燥材料、乾燥された物質、または乾燥物質）まで乾燥され得る。使用され得る乾燥プロセスとしては、噴霧、空気乾燥、オーブン乾燥、及び天日乾燥が挙げられるが、これらに限定されない。
【００８５】
接触ステップｂ）
（任意で粉砕し、乾燥させた）地上部分は、抽出溶媒と接触される。
【００８６】
抽出溶媒は、
−極性溶媒、例えば、水、亜臨界水、酢酸エチル、アセトン、アルコール（メタノール及びエタノールなど）、
−共融溶媒、ならびに
−超臨界ＣＯ２から有利に選択され得る。
【００８７】
抽出溶媒はまた、上記の溶媒のうちの少なくとも２つの混合物も含み得る。
【００８８】
抽出溶媒は、アルコール溶媒であっても、水と少なくとも１つのアルコールとの混合物を含む水性アルコール溶媒（ヒドロ−アルコール溶媒）であってもよい。
【００８９】
水性アルコール溶媒は、水／アルコール比が、好ましくは１０／９０体積％〜９０／１０体積％（体積／体積）及び好ましくは３０／７０体積％〜７０／３０体積％である、水とアルコールとの混合物であり得る。より具体的には、使用される水／アルコール比は、有利に約５０／５０体積％であり得る。
【００９０】
例えば、水性アルコール溶媒は、水／エタノール比が、好ましくは１０／９０体積％〜９０／１０体積％（体積／体積）及び好ましくは３０／７０体積％〜７０／３０体積％である、水とエタノールとの混合物であり得る。より具体的には、使用される水／アルコール比は、有利に約５０／５０体積％であり得る。
【００９１】
本明細書で使用される場合、「共融溶媒」という用語は、有機塩（アンモニウムまたはホスホニウム）と、またはそれらの対イオンの存在なく、水素結合供与体との混合物を含む、深共融溶媒（ＤＥＳ）を含む。
【００９２】
超臨界ＣＯ２（二酸化炭素）は、適用される温度が臨界温度（Ｔｃ）よりも高く（例えば、３５℃〜８０℃の範囲の温度）、適用される圧力が臨界圧力（Ｐｃ）よりも大きい（例えば、７．４×１０６Ｐａよりも大きい）、温度及び圧力状態に置かれる流体である。
【００９３】
Ａｅｒｖａ属の植物の地上部分を抽出溶媒と接触させるステップは、任意で浸軟ステップを含むか、またはそれからなり得る、固体−液体抽出技術に基づく。
【００９４】
この接触または浸軟は、動的（撹拌下）または静的であり得る。
【００９５】
植物／溶媒接触は、１〜８時間（１．５〜４時間など）、好ましくは約２時間にわたって有利に行われる。
【００９６】
この接触は、周囲温度、還流温度、または４５〜５５℃の範囲の温度（約５０℃など）で行うことができる。
【００９７】
「周囲温度」は、１５℃〜３５℃、好ましくは２０℃〜３０℃の範囲の温度で実行される抽出を意味する。
【００９８】
典型的には、植物／溶媒比（植物の重量（ｇ）／溶媒の体積（ｍｌ））は、１対５〜１対２０の範囲内、及び好ましくは１対１０である（つまり、１リットルの溶媒当たり１００ｇの地上部分）。
【００９９】
任意の好適な抽出装置が、使用され得る。例えば、本発明の抽出物は、ソックスレー装置を使用して抽出され得る。
【０１００】
あらゆる未溶解の植物材料が、例えば、濾過、及び抽出溶媒と再接触させることによって溶媒から除去され得る。このステップは、１回実行しても、例えば、１〜５回反復してもよい。
【０１０１】
濾過ステップｃ）
ステップｂ）の終了時に得られた抽出産生物は、植物繊維及び不溶性構成成分を有さない抽出塊を得るために濾過される。
【０１０２】
この濾過は一般に、典型的には、植物繊維の残渣の除去を確実にするために、空隙率が減少するフィルター（例えば、１０００μｍ〜５μｍ）を使用する連続濾過操作によって実行される。例えば、濾過は、１〜１０回（１〜５回など）の連続濾過操作によって実行され得る。
【０１０３】
この濾過ステップｃ）の終了時に残余分及び濾液が得られ、濾液は、本発明の「粗」植物抽出物を形成する。
【０１０４】
上記に指摘したように、第２の接触ステップｂ）は、植物材料から植物化学化合物の全てまたはより多くを除去するために、残余分に対して実行され得る。その後、上記のものと同じ条件下で、ステップｂ）及びｃ）が再度実行される。
【０１０５】
その後、「粗」植物抽出物が得られるまで、２つの抽出流路を組み合わせて、本発明の抽出物を生成するプロセスを続ける。
【０１０６】
前述の濃縮ステップは、濾過ステップｃ）の後に実行され得る。
【０１０７】
任意の脱色及び／または脱臭ステップｄ）
「粗」植物抽出物は、その最終用途における抽出物の影響を最小限にするために、任意で脱色及び／または精製及び／または脱臭されてもよい。したがって、脱色及び／または精製及び／または脱臭された植物抽出物が得られる。このステップはまた、精製ステップであると考えてもよい。
【０１０８】
抽出物を脱色及び／または精製及び／または脱臭するために、抽出物は、例えば、漂白土、活性炭素、活性炭、または粘土（ベントナイトなど）から選択される活性材料と有利に接触される。好ましくは、活性材料は、活性炭（１０％の活性炭など）である。
【０１０９】
より具体的には、抽出物の乾燥重量に基づいて、活性材料の１重量％〜２０重量％（及び好ましくは５重量％〜１０重量％）の範囲の比が、有利に使用される。乾燥重量によるパーセンテージは、抽出溶媒を含まないか、または抽出溶媒を微量で含む抽出物の重量に基づいて表される。
【０１１０】
活性材料との接触は、１５分〜２時間の範囲の期間、より具体的には約１時間有利に維持される。
【０１１１】
この接触は、周囲温度〜約５０℃で行われる。
【０１１２】
その後、この混合物は、活性材料（脱色／脱臭材料）を除去するために有利に濾過される。
【０１１３】
この脱色及び／または精製及び／または脱臭ステップは、イオン交換樹脂または吸着樹脂によって代替的に実行され得る。
【０１１４】
前述の濃縮ステップは、脱色及び／または脱臭ステップｄ）の後に実行され得る。
【０１１５】
植物抽出物を製剤化する任意のステップｅ）
製剤化ステップは、（濃縮及び／または漂白及び／または脱臭されていてもよい）粗植物抽出物を生理学的に許容される支持体（賦形剤）と組み合わせることを有利に含むか、またはそれからなる。
【０１１６】
支持体は、有利に天然に存在する天然起源の化合物であり得るか、または支持体は、支持体構造が、それが由来する天然産生物とは異なり、したがって天然には見出されないように改変されている天然起源の化合物であり得る。
【０１１７】
製剤化ステップは、例えば、固体支持体上での乾燥、及び一方で液体支持体中での製剤化から選択され得る。
【０１１８】
乾燥は、植物抽出物の濃縮を可能にする。
【０１１９】
乾燥は、固体支持体の存在下で、好適な乾燥装置（例えば、噴霧器、真空オーブン、またはドラム乾燥機）によって実行され得る。
【０１２０】
固体支持体が使用される場合、固体支持体は、有利に多糖類（例えば、マルトデキストリン）、デンプン、またはアカシアガムの種類の天然多糖類からなる。
【０１２１】
典型的には、マルトデキストリンが、本発明において使用され得る。マルトデキストリンは、一般的に使用される賦形剤または担体である。
【０１２２】
マルトデキストリンは、２０未満のデキストロース当量を有するデンプン加水分解産生物として定義される。デキストロース当量（ＤＥ値）は、加水分解物の乾燥物質上のＤ−グルコースのパーセンテージとして表されるデンプン由来のオリゴ糖の還元力の尺度であり、無水グルコース単位の平均重合度（ＤＰ）の逆値である。デンプン加水分解の産生物として、マルトデキストリンは、直鎖アミロース及び分岐鎖アミロペクチン分解産生物を含有し、したがって、それらは、−（１，４）及び−（１，６）結合によって連結されたＤ−グルコースポリマーであるとみなされる。
【０１２３】
マルトデキストリンは、天然化合物（デンプン）に由来するが、それらの構造は、それらが由来する天然分子（デンプン）の初期構造とは異なる。この差異は、加水分解プロセスによって誘導される。したがって、マルトデキストリン構造は、天然に存在しない。
【０１２４】
他の可能な賦形剤または担体としては、アラビアゴム、デキストロース、及び塩が挙げられる。
【０１２５】
そこで、本発明の植物抽出物または固体支持された抽出物は、粉末の形態であってもよい。
【０１２６】
液体支持体が使用される場合、様々な粘度の液体支持体は、所望される分野でのその用途の点から本発明の抽出物の製剤化を改善するために、可溶化剤、乳化剤、界面活性剤、軟化剤、またはそれらの混合物であり得る。
【０１２７】
例えば、液体支持体は、グリコール（グリセロール、プロピレングリコール、ブチレングリコール、ペンチレングリコール、プロパンジオールなど）に由来する化合物、または界面活性剤を含む油性支持体からなり得る。
【０１２８】
「液体支持体」はまた、
−ポリオール、
−保存剤を含むか、または含まない水、
−エタノール及びアルキルアルコール型の任意の化合物（脂肪アルコールなど）、
−有機酸（クエン酸、リンゴ酸、アスコルビン酸、乳酸、グリコール酸など）及び／または糖（スクロース、フルクトース、イノシトールなど）及び／またはアミノ酸（グリシン、プロリン、アルギニン、ベタイン、コリン誘導体など）を含有する共融溶媒、
−アルキルグルコシド、アルキルポリグルコシド、
−モノグリセリド及びその誘導体をも含む。
他の可能な賦形剤または担体としては、脂肪酸のモノ及びジグリセリド、ＭＰＧ、ポリソルベート８０、植物油、脂肪酸のモノ及びジグリセリド、グルコースシロップ、グリセリン、水、及びアルコールが挙げられる。
【０１２９】
ポリオールはまた、グリコールとも呼ばれ、非限定的に、１，２−プロパンジオール、エチレングリコール、ジエチレングリコール、プロピレングリコール、ジプロピレングリコール、ブチレングリコール、ペンチレングリコール、またはそれらの混合物を含む、可変的な置換を有するジオールなどの少なくとも２つのアルコール官能基（−ＯＨ基）を含む有機化合物に対応し、有機化合物はまた、グリセロールもしくはカプリリルグリコール、またはそれらの混合物などのトリオールをも含む。
【０１３０】
モノグリセリドとしては、非限定的に、グリセロールモノラウレート、グリセロールモノカプレート、グリセロールモノカプリレート、グリセロールモノオレエート、グリセロールモノミリステート、グリセロールモノパルミテート、グリセロールモノステアレート、またはそれらの混合物が挙げられる。
【０１３１】
アルキルグルコシド及びアルキルポリグルコシドとしては、非限定的に、デシルグルコシド、アラキジルグルコシド、ブチルグルコシド、カプリルル／カプリルグルコシド、カプリリルグルコシド、セテアリルグルコシド、ココ−グルコシド、エチルグルコシド、イソステアリルグルコシド、ヘプチルグルコシド、ラウリルグルコシド、ミリスチルグルコシド、ヘキサデシルグルコシド、オクタデシルグルコシド、オクチルドデシルグルコシド、ウンデシルグルコシド、またはそれらの混合物が挙げられる。
【０１３２】
そこで、本発明の植物抽出物または液体支持された植物抽出物は、液体の形態であってもよい。
【０１３３】
本発明の組成物
本発明の抽出物はまた、前述の本発明の抽出物を含む、組成物、有利には化粧品組成物、栄養補助食品組成物、薬学的組成物、または食品組成物の形態で提供されてもよい。
【０１３４】
そのような組成物は、特にヒトにおける、またはヒトに対する使用が意図される。
【０１３５】
本明細書で使用される場合、「化粧品組成物」という用語は、皮膚、毛髪、または頬側粘膜を洗浄するため、またはそれらを保護するためもしくは良好な状態に保つため、及び／または外観を改善するために、皮膚、毛髪、または頬側粘膜に適用される調製物であるものと特に理解される。
【０１３６】
本明細書で使用される場合、「栄養補助食品組成物」という用語は、薬学的形態で入手可能であり、従来食品に関連せず、例えば、慢性疾患に対して有益または保護的な生理学的効果を有する植物抽出物であると特に理解される。
【０１３７】
「薬学的に許容される」とは、組成物の追加の構成成分が一般に安全で無毒であり、生物学的にもその他の点でも望ましくないものではないことを意味する。例えば、追加の構成成分は一般に滅菌され、発熱物質を含まない。そのような構成成分は、本発明の抽出物と適合性があり、そのレシピエントに対して有害でないという意味において「許容される」ものでなければならない。したがって、「薬学的に許容される賦形剤」は、単に賦形剤として作用することが意図される、すなわち、生物学的活性自体を有することが意図されない、製剤の一部分を形成するのに使用される任意の化合物（複数可）を含む。
【０１３８】
したがって、本発明に従う組成物は、本発明に従う植物抽出物を活性成分として有利に含有する。
【０１３９】
薬学的組成物、化粧品組成物、栄養補助食品組成物、または食品組成物は、治療有効量の本発明の抽出物を含み得る。本明細書で使用される場合、「有効量」という用語は、「治療有効量」、「有効用量」、または「治療有効用量」と同義であり、炎症の治療に関して使用される場合、所望される治療効果を達成するのに必要とされる本発明の抽出物の最小用量を指し、炎症に関連する症状を低減するのに十分な用量を含む。炎症を治療する上での有効性は、１つ以上の臨床症状及び／またはその病態に関連する生理学的指標に基づいて個体の改善を観察することによって決定され得る。炎症の改善は、併存治療法の必要性の低減によっても示され得る。
【０１４０】
特定の炎症のために個体に投与される本発明の抽出物または組成物の適切な有効量は、炎症の種類、炎症の位置、炎症の原因、炎症の重症度、所望される軽減の程度、所望される軽減の持続時間、使用される本発明の抽出物の特定の投与量、使用される本発明の抽出物の排泄速度、使用される本発明の抽出物の薬力学、組成物に含まれ得る他の化合物の性質、特定の製剤、特定の投与経路、患者の特定の特徴、病歴、ならびに危険因子（例えば、年齢、体重、及び全体的な健康状態など）、またはそれらの組み合わせを非限定的に含む因子を考慮することによって、当業者によって決定され得る。
【０１４１】
更に、本発明の抽出物または組成物の反復投与が使用される場合、本発明の抽出物の有効量は、投与の頻度、本発明の抽出物の半減期、またはそれらの任意の組み合わせを非限定的に含む因子に更に依存するだろう。
【０１４２】
本発明の組成物（例えば、薬学的組成物、化粧品組成物、栄養補助食品組成物、または食品組成物）は、最終組成物の総重量に基づいて、（抽出物が乾燥されるか、または液体支持体上に製剤化されるかどうかによって）植物抽出物の０．００１重量％〜２０重量％及びより具体的には０．０１重量％〜１０重量％を有利に構成する。
【０１４３】
本発明に従う組成物は、本発明の植物抽出物と組み合わせて、少なくとも１つの他の活性成分を含有してもよい。
【０１４４】
本発明に従う組成物は、特に組成物の意図される形態及び所望される投与経路に従って適応した、生理学的に許容される賦形剤を更に含んでもよい。
【０１４５】
本明細書で使用される場合、薬学的に許容される賦形剤への言及は、当業者にとって既知である薬学的に許容されるアジュバント、希釈剤、及び／または担体を指し得る。
【０１４６】
生理学的に許容される賦形剤は、化粧的または皮膚科学的に許容される賦形剤であり得る。
【０１４７】
化粧品、皮膚科学的、及び／または食品に許容される成分／賦形剤としては、当該分野において既知であるもの（本明細書において薬学的に許容される賦形剤とも称されるものを含む）が挙げられ、天然であっても非天然であってもよく、すなわち、それらの構造は、天然に存在しても、しなくてもよい。特定の例において、それらは、天然化合物に起源を持ち、後にそれが起源を持つ天然産生物（例えば、マルトデキストリン）とは異なるように改変され得る。
【０１４８】
適切な担体としては、不活性固体希釈剤または充填剤、滅菌水溶液、及び様々な有機溶媒が挙げられるが、これらに限定されない。固体担体の例は、乳糖、白土、スクロース、シクロデキストリン、マルトデキストリン、デキストリン、タルク、ゼラチン、寒天、ペクチン、アカシア、ステアリン酸マグネシウム、水酸化マグネシウム、ステアリン酸、アラビアゴム、加工デンプン、及びセルロース、サッカロース、二酸化ケイ素の低級アルキルエーテルが挙げられる。液体担体の例は、シロップ、植物油、リン脂質、脂肪酸、脂肪酸アミン、ポリオキシエチレン、及び水である。更に、担体または希釈剤は、単独またはワックスと混合されたモノステアリン酸グリセリルまたはジステアリン酸グリセリルなどの、当該技術分野において既知である任意の徐放性材料を含んでもよい。
【０１４９】
本発明者で使用され得る生理学的に許容される担体の例としては、緩衝剤（リン酸、クエン酸、及び他の有機酸など）、アスコルビン酸を含む抗酸化剤、低分子量（約１０残基未満）のポリペプチド、タンパク質（血清アルブミン、ゼラチン、もしくは免疫グロブリンなど）、親水性ポリマー（ポリビニルピロリドンなど）、アミノ酸（グリシン、グルタミン、アスパラギン、アルギニン、もしくはリジンなど）、グルコース、マンノース、もしくはデキストリンを含む単糖、二糖、及び他の炭水化物、キレート剤（ＥＤＴＡなど）、糖アルコール（マンニトールもしくはソルビトールなど）、塩形成対イオン（ナトリウムなど）、ならびに／または非イオン界面活性剤（ＴＷＥＥＮ（例えば、ポリソルベート２０、４０、６０、もしくは８０などのポリソルベート系乳化剤）、及びＰＬＵＲＯＮＩＣ（例えば、エチレンオキシド及びプロピレンオキシドに基づくブロックコポリマーなど）など）が挙げられる。
【０１５０】
当業者であれば、（例えば、薬学的組成物、化粧品組成物、栄養補助食品組成物、または食品組成物などの組成物の形態の）本発明の抽出物が、経腸、局所、経口、直腸、経鼻、肺、頬側、舌下、経皮、嚢内、腹腔内、ならびに非経口（皮下、筋肉内、くも膜下腔内、静脈内、及び皮内を含む）などの経路によって、患者または対象（例えば、ヒトまたは動物の患者または対象）に投与され得ることを理解するだろう。
【０１５１】
経腸経路の場合、組成物（より具体的には栄養補助食品組成物、食品組成物、及び／または薬学的組成物）は、徐放を可能にする、錠剤、ゼラチンカプセル、糖衣錠、シロップ、懸濁液、溶液、粉末、顆粒、エマルジョン、マイクロスフェアもしくはナノスフェア、または脂質もしくはポリマー小胞の形態であり得る。
【０１５２】
非経口経路の場合、組成物は、灌流または注射のための溶液または懸濁液の形態であり得る。
【０１５３】
経腸または非経口経路によって本発明に従って使用される本発明の化合物または抽出物は、１〜３回の投与で約０．００１ｍｇ／体重ｋｇ〜１０００ｍｇ／体重ｋｇ、より具体的には１〜３回の投与で０．０１ｍｇ／体重ｋｇ〜１００ｍｇ／体重ｋｇの１日量で投与され得る。
【０１５４】
典型的には、本発明の抽出物は、約１００ｍｇ／日〜約２０００ｍｇ／日、または約５００ｍｇ／日〜約１５００ｍｇ／日、または約１０００ｍｇ／日の量で投与され得る。抽出物が、薬学剤または獣医学剤または食品、飼料またはペットフード補助栄養食品もしくは食品、抽出物を含む飼料またはペットフード組成物の形態で投与される場合、抽出物は、上記の抽出物の投与量を提供する量で存在する。例えば、食品組成物は、約１００ｍｇ〜約２０００ｍｇもしくは約５００ｍｇ〜約１５００ｍｇ、または約１０００ｍｇ／日の本発明の抽出物を含み得、薬学的組成物は、約１００ｍｇ〜約２０００ｍｇまたは約５００ｍｇ〜約１５００ｍｇ、または約１０００ｍｇの本発明の抽出物を提供するために１日１回以上投与され得るように、薬学的組成物は、１０ｍｇ、２０ｍｇ、３０ｍｇ、４０ｍｇ、５０ｍｇ、６０ｍｇ、７０ｍｇ、８０ｍｇ、１００ｍｇ、２５０ｍｇ、５００ｍｇ、１０００ｍｇ、１５００ｍｇ、または２０００ｍｇ／日の本発明の抽出物を含み得る。
【０１５５】
本発明の薬学的組成物、化粧品組成物、栄養補助食品組成物、または食品組成物は、本発明の抽出物と、薬学的もしくは食品／栄養補給食品組成物とからなるか、またはそれらから本質的になり得る。
【０１５６】
疑念を回避するために、本明細書において、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」または「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」という用語を使用する場合、記載されている抽出物または組成物が、列挙された成分（複数可）を含有しなければならないが、任意で追加の成分を含有してもよいことを意味する。「から本質的になる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ  ｏｆ）」または「から本質的になる（ｃｏｎｓｉｓｔｓ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ  ｏｆ）」という用語を使用する場合、記載されている抽出物または組成物が、列挙された成分（複数可）を含有しなければならず、かつ少量（例えば、最大５重量％、または最大１重量％もしくは０．１重量％）の他の成分を含有してもよいが、但し、いかなる追加の成分も抽出物または組成物の本質的な特性に影響を与えないことを条件とすることを意味する。「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｏｆ）」または「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｓ  ｏｆ）」という用語を使用する場合、記載されている抽出物または組成物が、列挙された成分（複数可）のみを含有しなければならないことを意味する。
【０１５７】
好ましくは、組成物（より具体的には、化粧品組成物、皮膚科学的組成物、または薬学的組成物）は、局所経路による適用に好適な形態で包装され得る。
【０１５８】
この種類の局所経路の場合、本発明に従う組成物は、より具体的には、皮膚及び粘膜の治療のために意図され得る。
【０１５９】
本発明に従う組成物は、膏剤、クリーム、乳液、軟膏、粉末、含浸パッド、溶液、ゲル、スプレー、ローション、または懸濁液の形態であってもよい。本発明に従う組成物はまた、徐放を可能にする、マイクロスフェアもしくはナノスフェア、または脂質もしくはポリマー小胞もしくはポリマーパッチ、及びヒドロゲルの形態であってもよい。局所経路によって投与される組成物は、無水形態または水性形態のいずれであってもよい。
【０１６０】
繰り返すが、一般に、組成物は、いかなる限定も暗示することなく、粉末、エマルジョン、マイクロエマルジョン、ナノエマルジョン、懸濁液、溶液、ローション、クリーム、ゲルクリーム、水性またはエタノールゲル、血清、エアロゾル、脂質小胞の分散物の形態であり得る。
【０１６１】
「エマルジョン」は、油中水型もしくは水中油型、または二重エマルジョン（油中水中油型もしくは水中油中水型）のエマルジョンであると特に理解される。
【０１６２】
本発明に従う化粧品組成物または薬学的組成物は、最終用途及び所望される投与に従って選択された溶媒を含有し得る。例えば、溶媒は、水、エタノール、グリセロール、及びプロピレングリコールから選択され得る。
【０１６３】
組成物はまた、軟化剤もしくは湿潤剤、ゲル化剤、界面活性剤、抗凝集剤、油、活性剤、着色剤、顔料、香料、香味剤、または日焼け止め剤から選択される、化粧品、薬学的、栄養補助食品、または食品分野で慣習的に使用される少なくとも１つの添加剤も含有し得る。
【０１６４】
一般に、組成物は、不活性もしくは同様に活性である添加剤、またはそのような添加剤の組み合わせ、すなわち、例えば、以下の添加剤の少なくとも１つを更に含有し得る。
−１つ以上の軟化剤、湿潤剤、または水和剤（グリセロールまたは他のグリコール）。これらの添加剤は、組成物の総重量に基づいて、約０．１％〜４０％、好ましくは１％〜１０％の割合で組成物中に存在し得る。
−この一覧は網羅的なものではないが、例えば、セルロース誘導体、天然起源のゴム（グアー、アカシア、イナゴマメ、アルギン酸、カラギーナン、ペクチン、トラガント）または生物工学起源のゴム（キサンタン）、粘土（ラポナイト、ベントナイト、モンモリロナイト、カオリン）、アクリレートコポリマー（アクリレート／Ｃ１０−３０アルキルアクリレートなど）から選択される、１つ以上のゲル化剤または調質剤。これらの添加剤は、組成物の総重量に基づいて、約０．１％〜１５％の割合で組成物中に存在し得る。
−組成物の総重量に基づいて、約０．１％〜１０％、好ましくは０．５％〜８％の割合で存在する、様々な極性及びイオン性の１つ以上の界面活性剤。
−いかなる限定も暗示することなく、好ましくは約０．１％〜３０％、より具体的には０．５％〜１５％の割合の、植物油（ホホバ油、ヒマワリ油、ゴマ油、茶油、椿油、アルガン油、クランベリー油、シアバター、マンゴーバター）、イソドデカン、オクチルドデカノール、スクワラン、ジメチコーンなどの、一般的に油と呼ばれる、１つ以上の揮発性もしくは不揮発性系、石油化学系、シリコーン系、または植物系の脂肪性物質。
−いかなる限定も暗示することなく、例えば、組成物の総重量に基づいて、約０．００１％〜１０％の割合及びより具体的には０．１％〜５％の割合で使用され得る、ビタミン、ヒアルロン酸、脱色剤、または植物抽出物などの、生物学的活性を有する１つ以上の天然または合成起源の活性剤。
−組成物の総重量に基づいて、約０．０１％〜１０％の割合の、天然、動物、または合成起源の１つ以上の着色剤。
−組成物の総重量に基づいて、約０．１％〜２０％の割合の、ステアリン酸マグネシウム、シリカ、マルトデキストリン、またはセルロース及びその誘導体などの、１つ以上の抗凝集剤または圧縮剤。
−香料、抗酸化剤、保存剤、または例えば、風味改善剤。
【０１６５】
治療的使用
本発明の抽出物または組成物は、医学的病態の治療において有用であり得る。
【０１６６】
本発明において、本発明の抽出物または組成物が、以下のような使用に好適であることが特に示される。
−炎症の予防及び／もしくは治療（治癒を含み得る）のための薬剤、有利には、慢性炎症の予防及び／もしくは治療（治癒を含み得る）のための薬剤、更により有利には、皮膚障害に関連する慢性炎症の予防及び／もしくは治療（治癒を含み得る）のための薬剤、ならびに／または
−有利に炎症性刺激後の、ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体（ＰＰＡＲ）の活性化剤、ならびに／または
−皮膚障害、特に慢性炎症に関連する皮膚障害の治療のための薬剤、ならびに／または
−有利に炎症性刺激後の、サーチュイン、より具体的にはＳＩＲＴ１の活性化剤。
【０１６７】
したがって、本発明に従うと、薬物としての使用のための本発明の抽出物または組成物が提供される。
【０１６８】
本発明はまた、炎症の予防及び／または治療における使用のための本発明の抽出物または組成物も提供する。
【０１６９】
本発明はまた、慢性炎症の予防及び／または治療における使用のための本発明の抽出物または組成物も提供する。
【０１７０】
本発明は更に、皮膚障害に関連する慢性炎症の予防及び／または治療における本発明の抽出物または組成物を提供する。
【０１７１】
本発明の抽出物または組成物は、ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体（ＰＰＡＲ）を活性化し得る。したがって、本発明はまた、ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体（ＰＰＡＲ）アゴニストとしての使用のための本発明の抽出物または組成物も提供する。例えば、本発明は、炎症性刺激後のペルオキシソーム増殖因子活性化受容体（ＰＰＡＲ）アゴニストとしての使用のための本発明の抽出物または組成物を提供する。
【０１７２】
したがって、本発明はまた、皮膚障害及び病態の治療、ならびに／または脳外傷の範囲内で作用するニューロンレベルでの酸化ストレスの制御、ならびに／または治癒現象の促進、ならびに／または細胞凝集の改善、ならびに／または体重及び関連する障害の管理における使用のための、ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体（ＰＰＡＲ）アゴニストとしての本発明の植物抽出物または組成物も提供する。
【０１７３】
皮膚障害は典型的には、慢性炎症に関連し、アトピー性皮膚炎、脂漏性皮膚炎、ざ瘡、乾癬、クーパーローズ、紅皮症、毛細血管拡張症、もしくは酒さ、または頭部粃糠疹、特に乾癬またはアトピー性皮膚炎から選択され得る。
【０１７４】
本発明の抽出物または組成物は、ＳＩＲＴ１などのサーチュインを活性化し得る。したがって、本発明はまた、サーチュイン活性化因子、特にＳＩＲＴ１活性化因子としての使用のための本発明の抽出物または組成物も提供する。例えば、本発明は、炎症刺激後のサーチュイン活性化因子、特にＳＩＲＴ１活性化因子としての使用のための本発明の抽出物または組成物を提供する。
【０１７５】
したがって、本発明はまた、皮膚のバリア機能、及びそれ故に皮膚の水和の改善における使用のためのサーチュイン活性化剤、ならびに／または抗老化活性剤、ならびに／または代謝症候群及び関連する疾患の治療のための薬剤、ならびに／または変性疾患及び／もしくは関連する障害の治療のための薬剤としての本発明の植物抽出物または組成物も提供する。疾患／病態としては、自己免疫疾患（全身性エリテマトーデス、関節リウマチ、ゴーゴット・シェーグレン病、もしくはクローン病など）、心血管疾患（心臓病など）、喘息、アルツハイマー病、ハンチントン病、過敏性腸症候群、がん、ＩＩ型糖尿病、アトピー性皮膚炎、骨粗鬆症、またはＣＯＰＤ（慢性閉塞性肺疾患）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１７６】
炎症を治療もしくは予防するため、ＰＰＡＲを活性化するため、及び／または上記に定義したＳＩＲＴ１などのサーチュインを活性化するための薬物の製造における本発明の抽出物または組成物の使用もまた、提供される。
【０１７７】
炎症を治療もしくは予防する方法、ＰＰＡＲを活性化するための方法、及び／または上記に定義したサーチュイン（ＳＩＲＴ１など）の活性化ための方法であって、治療有効量の本発明の抽出物または組成物の、それを必要とする対象への投与を含む、方法もまた、提供される。
【０１７８】
炎症の予防剤及び／または治療剤
本出願に示されるように、本発明に従う植物抽出物は、炎症、ならびにより具体的には慢性炎症及び全ての関連する障害の治療に好適である。
【０１７９】
したがって、本発明に従う植物抽出物は、抗炎症剤、つまり、炎症と戦うための薬物、特に炎症反応及びそれから生じる病態／疾患を治療するための薬物であり得る。
【０１８０】
本発明に従う植物抽出物は、有利に慢性炎症または慢性炎症疾患の治療のための薬剤であり得る。
【０１８１】
より好ましくは、本発明に従う植物抽出物は、皮膚障害（すなわち、例えば、アトピー性皮膚炎、脂漏性皮膚炎、ざ傷、乾癬、クーパーローズ、紅皮症、毛細血管拡張症、もしくは酒さ、または頭部粃糠疹）に関連する慢性炎症の治療のための薬剤であり得る。
【０１８２】
本明細書で使用される場合、「治療または治療する」は、
−疾患の重篤度を低減すること、
−疾患の症状を治療すること、
−疾患の発症を予防するための予防的治療、及び
−疾患を治癒させるための治癒的治療を含む。
【０１８３】
特に、この用語は、当業者（例えば、医師）にとって既知である技術を使用して決定され得る疾患または障害（例えば、真菌症）に関連する１つ以上の臨床症状の重症度の低減を達成すること、及び／または疾患または障害の進行を緩徐化する（そのように治療されていない患者において予想される時間と比較して、疾患または障害がより重度の状態へと進行する時間を増加させる）ことを指し得る。
【０１８４】
本明細書で使用する場合、「予防」（及び同様に「予防する」）という用語は、疾患または障害の予防への言及（及びその逆）を含む。特に、この用語は、患者（または健康な対象者）がその病態を発症する可能性の低減（例えば、少なくとも１０％の低減（少なくとも２０％、３０％、または４０％の低減など）、例えば、少なくとも５０％の低減）を指し得る。
【０１８５】
疑念を回避するために、本発明の脈絡において、「治療する」及び「予防する」という用語は、治療を必要とする対象／患者の治療的または対症的な治療、ならびに関連疾患状態になりやすい患者の予防的治療及び／または診断を含む。
【０１８６】
医学的病態に関連して本明細書で使用する場合、「低減する」という用語は、観察される量をより小さくするか、またはサイズを減少させることを指し得る。
【０１８７】
本明細書で使用する場合、「対象」及び「患者」という用語は、互換的に使用され得、哺乳動物種（特にヒト）を含む。
【０１８８】
本発明に従う植物抽出物は、消散分子の合成に必要な酵素系の活性化因子であり得る。
【０１８９】
特に、本発明に従う植物抽出物は、消散分子をもたらす脂質メディエーターの合成において重要である、リポキシゲナーゼのファミリー（ＬＯＸ）の酵素系（有利には、５−ＬＯＸ及び／または１２−ＬＯＸ及び／または１５−ＬＯＸ）に関して促進活性を有利に有し得る。
【０１９０】
本発明の抽出物は、アラキドン酸、エイコサペンタエン酸、及び／またはドコサヘキサエン酸に由来する特殊化消散促進性メディエーター、すなわち、以下の分子のうちの少なくとも１つのレベルを増加させ得る。
−ＡＲＡ由来：ＬＴＢ４、５−ＨＥＴＥ、１２−ＨＥＴＥ、１５−ＨＥＴＥ、
−ＤＨＡ由来：１４−ＨＤｏＨＥ、１７−ＨＤｏＨＥ、ＲｖＤ１、ＲｖＤ２、７−Ｍａｒ１、ＰＤ１、ＰＤｘ、
−ＥＰＡ由来：１８−ＨＥＰＥ。
【０１９１】
植物抽出物は、同様に、最終消散メディエーター（すなわち、以下のメディエーター、ＲＶＤ１、ＲＶＤ２、７−Ｍａｒ１、及びＰＤ１のうちの少なくとも１つ）の産生を刺激することができ得る薬剤である。
【０１９２】
ＰＰＡＲの活性化剤
本発明に従う植物抽出物は、有利に炎症性刺激の後に、ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体（ＰＰＡＲ）の活性化剤（アゴニスト）として使用され得る。
【０１９３】
したがって、本発明に従う植物抽出物は、生物体内のＰＰＡＲ関連経路を活性化し、したがってそれらの代謝経路に関連する障害を改善及び治療する能力を有する活性成分であり得る。
【０１９４】
ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体（ＰＰＡＲとも称される）は、特に生物体内の脂質、グルコース、及びアミノ酸の合成を制御する核内受容体のスーパーファミリーのメンバーである。
【０１９５】
本発明に従う植物抽出物は、ＰＰＡＲ−α、−β／σ、−γから有利に選択される、ＰＰＡＲのうちの少なくとも１つのアゴニストであり得る。
【０１９６】
特に、本発明に従う植物抽出物は、特に炎症性刺激後にＰＰＡＲアルファ及びＰＰＡＲベータのｍＲＮＡの発現を増強するのに好適であり得る。
【０１９７】
したがって、そのような植物抽出物は、特に、
−乾癬もしくはアトピー性皮膚炎などの皮膚障害及び病態の治療のための薬剤、及び／または
−脳外傷の脈絡において作用するニューロンレベルでの酸化ストレスの制御のための薬剤、及び／または
−治癒現象を促進するための薬剤、及び／または
−細胞凝集を改善することによる、皮膚のバリア機能における薬剤、及び／または
−体重及び関連する障害を管理するための薬剤として、ＰＰＡＲ関連経路に関連する病態に関して効能を有し得る。
【０１９８】
より一般には、そのような抽出物はまた、神経変性疾患、疼痛、がん、免疫系、皮膚障害、及び皮脂の過剰産生に関連する病態の治療にも好適であり得、それはまた、酸化ストレスに対する保護のためにも使用されることも意図される。
【０１９９】
したがって、ＰＰＡＲは、多くの生物学的過程に関与している。
【０２００】
したがって、本発明に従う植物抽出物は、ＰＰＡＲに関与する代謝障害、及びその長期的な結果（すなわち、以下）の治療において薬理学的に対象となり得る。
【０２０１】
ａ）代謝症候群
ＰＰＡＲα活性化因子は、脂肪酸の肝臓酸化を増加させ、脂肪細胞の肥大化及び過形成の原因となる循環トリグリセリドのレベルを低減することによって、それらがげっ歯類において肥満を制御することができることを証明している。ＰＰＡＲγリガンドに関して、それらは、脂肪組織中のレプチンの発現の制御に関与している。レプチンは、その主な効果が食欲を低減することであるタンパク質である。
【０２０２】
ｂ）免疫応答
ＰＰＡＲγは、サイトカインの発現を阻害し、免疫細胞の分化を抗炎症性表現型へと指向するその能力によって、免疫応答において基本的な役割を果たしているものと認識されている。近年の臨床試験の結果は、食品中に存在する天然ＰＰＡＲγアゴニストが、ヒトの健康にとって有益であり得ることを示唆している。
【０２０３】
ｃ）治癒／バリア機能
治癒現象は、炎症相、ケラチノサイト遊走相、及び再上皮形成相（創傷の閉鎖）の３相に分けられるプロセスである。ＰＰＡＲβ／σは、ケラチノサイトの遊走及び接着に関与する。ＰＰＡＲβ／σによって誘発される最初の炎症促進性シグナルと、治癒する創傷の最終段階における負の制御経路と間には、微妙なバランスが存在する。このようにして、例えば、ケロイド瘢痕の形成、及びいかなる異常な瘢痕形成も回避して、治癒プロセスの微調整が得られる。この後者の点は同様に、ＰＰＡＲγ経路を使用する。したがって、ＰＰＡＲに対する作用は、細胞接着及び凝集に作用することによって、バリア機能レベルで有益な効果を有する。
【０２０４】
ｄ）鎮痛剤
合成ＰＰＡＲαアゴニストは、用量依存的に作用する広域鎮痛剤として作用する。パーフルオロオクタン酸などのＰＰＡＲαリガンドの脊髄上位投与が、末梢浮腫及び／または炎症性痛覚過敏を低減することが報告されている。一方、ロシグリタゾンなどのＰＰＡＲγリガンドのくも膜下腔内投与は、神経因性疼痛に関連する臨床徴候を低減する。これは、これらの薬剤、つまりＰＰＡＲリガンドが、鎮痛剤として使用され得ることを示す。
【０２０５】
ｅ）皮膚障害及び病態
ＰＰＡＲα及びγ経路の活性化は、細胞分化を活性化し、アポトーシスを制御し、細胞増殖を阻害し、したがってアレルギー起源または非起源の乾癬及びアトピー性皮膚炎などの皮膚病態の脈絡において正の効果を有する。実際、特許ＥＰ１０４１９７７において、ＰＰＡＲ活性化因子が、上皮細胞分化異常に関連する皮膚障害に作用し得ることが記載されている。したがって、以下の皮膚障害、つまり乾癬、湿疹、皮膚炎、尋常性ざ瘡、魚鱗癬を含む角化症、及び皮膚癌などが例として言及され得る。上皮細胞分化におけるこの異常は一般に、上皮細胞の過剰増殖を伴う。
【０２０６】
更に、特許ＦＲ２００４／００３０６９において、ＰＰＡＲ活性化因子が、皮脂腺のサイズを制御することによって皮脂の産生を阻害することができることが記載されている。過剰な皮脂は、細菌叢の無秩序な発達のための支持体としての役割を果たし、コメドン及び／またはざ瘡病変、または頭皮領域において頭部粃糠疹の産生を担う酵母Ｍａｌａｓｓｅｚｉａの存在に関連する異常落屑を引き起こし得る。皮脂機能に関連する障害は同様に、皮膚科学的障害、特に口囲皮膚炎、皮脂腺の遺伝的過形成などの皮脂腺の過形成に関連する病態、または内分泌起源の高アンドロゲンなどのホルモン障害に関連する皮脂の過剰産生をもたらし得る。
【０２０７】
皮膚障害の治療のための薬剤
本発明に従う植物抽出物は、皮膚障害、特に慢性炎症に関連するものの治療のための薬剤として使用され得る。
【０２０８】
当該の皮膚障害としては、乾癬、湿疹、扁平苔癬、狼瘡に関連する皮膚病変、皮膚炎（アトピー性、脂漏性、または太陽性皮膚炎など）、角化症（脂漏性、老人性、光線性、光誘発性、または濾胞性角化症など）、尋常性ざ瘡、ケロイド、母斑、疣贅、魚鱗癬、及び皮膚癌が特に挙げられる。
【０２０９】
この点において、本発明に従う抽出物は、皮膚の構造タンパク質または角質化タンパク質（すなわち、例えば、ＬＡＭＣ２、ＦＮ１、ＩＴＧＡ２、ＩＶＬ、ＫＲＴ１９、ＧＢＡ、ＨＡＳ２）のｍＲＮＡの発現を誘導することができ得る。
【０２１０】
更に、本発明に従う抽出物は、炎症性刺激後のｍＲＮＡ  ＦＮ１、ＬＡＭＣ２、ＩＶＬ、及びＩＴＧＡ２の発現に相乗効果を引き起こし得ることが示されている。
【０２１１】
サーチュインの活性化剤
本発明に従う植物抽出物は、有利に炎症性刺激の後に、サーチュイン、より具体的にはＳＩＲＴ１の活性化剤として使用され得る。
【０２１２】
したがって、本発明に従う植物抽出物は、生物体内でＳＩＲＴ１経路を活性化する能力、及びそれ故により一般にその代謝経路に関連する障害を改善する能力を有する活性成分であり得る。
【０２１３】
したがって、本発明に従う植物抽出物は、皮膚のバリア機能、及びそれ故に皮膚の水和を改善するための薬剤として、抗酸化剤、ＤＮＡ修復剤、または老化防止剤としての適用のための活性成分であり得る。
【０２１４】
本発明に従う植物抽出物はまた、老化、細胞老化、酸化ストレスの有害効果、バリア機能の統合性及びそれに関連する病態の改善（アトピー性皮膚炎など）の喪失に関連する変性疾患の予防及び治療のための活性成分でもあり得る。
【０２１５】
したがって、本発明は、健康な身体組成を改善及び／もしくは維持するため、グルコースもしくはインスリン管理を改善及び／もしくは維持するため、健康な脂質レベルもしくは脂肪の代謝を改善及び／もしくは維持するため、過剰体重を予防及び／もしくは治療するため、健康なエネルギー恒常性を改善及び／もしくは維持するため、細胞を保護するため、ＤＮＡを修復するため、ならびに／または老化中の体力及び／もしくは筋肉量を維持するためのＳＩＲＴ１の新たな活性化剤に関する。
【０２１６】
この点において、本発明に従う組成物または抽出物は、老化プロセスを緩徐化すること、及び慢性老化関連疾患を予防することができ得る。
【０２１７】
したがって、本発明は、ＩＩ型糖尿病を発症する危険性を低減するか、血中脂質レベルの上昇の危険性を低減するか、またはアテローム性動脈硬化症及び／もしくは心血管疾患を発症する危険性を低減する、肥満を発症する危険性を低減するためのＳＩＲＴ１の新たな活性化剤に関する。
【０２１８】
非治療的活性剤としての植物抽出物
本発明はまた、非治療的な化粧的または皮膚科学的活性成分としての本発明に従う植物抽出物にも関する。
【０２１９】
この非治療的使用には、皮脂の過剰産生の治療が含まれる。
【０２２０】
この非治療的使用にはまた、鎮静剤として、頭部粃糠疹防止剤として、または老化防止剤としての抽出物の使用も含まれる。
【０２２１】
本発明に従う植物抽出物はまた、非治療的用途、例えば、
−ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体（ＰＰＡＲ）の活性化剤（アゴニスト）、及び／または
−サーチュイン、特にＳＩＲＴ１の活性化剤、及び／または
−特に炎症刺激後の皮膚のバリア機能を改善するための薬剤などの化粧的用途においても使用され得る。
【図面の簡単な説明】
【０２２２】
【図１】Ａｖｅｒａ  ｊａｖａｎｉｃａまたは本発明の抽出物の水浸出液による刺激後の脂質メディエーターの濃度の増加を示す。
【実施例】
【０２２３】
本発明を、以下の非限定的な実施例を参照して更に説明する。
【０２２４】
実施例１：Ａｅｒｖａ植物抽出物を取得するための方法
以下の方法を実行することによって、Ａｅｒｖａ植物抽出物を得た。
ａ）Ａｅｒｖａ  ｊａｖａｎｉｃａ（Ｂｕｒｍ．ｆ．）Ｊｕｓｓ．ｅｘ  Ｓｃｈｕｌｔ．からの植物原材料を、１００μｍ〜５０ｍｍの粒径に粉砕した。
ｂ）その後、原材料を５０％のエタノール／５０％の水と接触させ、動的抽出を５０℃で２時間実行した。
ｃ）濾過を実行してから、植物材料を抽出溶媒と再度接触させた。
ｄ）必要に応じて、存在する乾燥抽出物に基づいて１０％の活性炭素を添加して、脱色／脱臭ステップを実行した。接触は、３０分〜１時間実行した。
ｅ）濾過及び濃縮後、抽出物をマルトデキストリン型の固体支持体上で乾燥させるか、またはグリセロールなどの液体支持体上に製剤化した。
【０２２５】
ＵＶもしくはＤＡＤ検出器による古典的ＨＰＬＣ法、ならびに／または化合物の特定及び定量化のためのＭＳを使用して、ケルセチンジ−ラムノシルグルコシド、ケンフェロールクマロイルラムノシルガラクトシド異性体、イソラムネチンラムノシルルチノシド、ルチン、ケンフェロールクマロイルラムノシルガラクトシド、及び／またはケンフェロールジ−クマロイルラムノシルガラクトシドを含む様々な化合物の量を決定した。
【０２２６】
ＵＶ監視を３３０ｎｍで実行し、試料のピーク面積を既知の濃度の基準化合物のピーク面積と比較することによって、標的化合物の量を定量化した。
【０２２７】
結果を表１に示す。
【０２２８】
【表１】
2019513763.tif 000003
【０２２９】
実施例２：細胞モデルに対する脂質消散メディエーターの刺激
装置及び方法
ＰＵＦＡ（多価不飽和脂肪酸：アラキドン酸（ＡＲＡ）、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）、ＡＲＡ（５−ＨＥＴＥ、１２−ＨＥＴＥ、１５−ＨＥＴＥ）、ＤＨＡ（１４−ＨＤｏＨＥ、１７−ＨＤｏＨＥ）、ＥＰＡ（１８−ＥＰＥ））の代謝の戦略的交差に位置する７つの脂質の合成に対して、実施例１に従う抽出物の作用を評価した。
【０２３０】
したがって、これらの７つの脂質の評価は、慢性炎症の脈絡において重要な役割を果たす消散メディエーターの合成に関与する酵素経路が、実施例１に従う抽出物によって動員されているか否かを確立することを可能にした。したがって、ＰＵＦＡに由来する最終代謝産物を、同じ細胞モデルにおいて評価した。
【０２３１】
実行した全ての実験について、非細胞毒性用量のみを評価した。
【０２３２】
０．００６４〜５００μｇ／ｍｌで試験した後、１１、３３、１００、及び２００μｇ／ｍｌの非細胞毒性用量を残りの作業のために保持した。正常ヒト上皮ケラチノサイト（ＮＨＥＫ、Ｐｒｏｍｏｃｅｌｌ）に対して細胞毒性試験を実行し、樹状細胞（ＤＣ）とＮＨＥＫとの共培養物に対して消散分子の合成についての試験を実行した。
【０２３３】
細胞毒性試験を実行するために、９６ウェルの皿に２５０個の細胞／ｃｍ２の密度の培養培地中、０．００６４〜５００μｇ／ｍｌの範囲の用量の活性剤の存在下でＮＨＥＫを２４時間培養した。最後の６時間、Ａｌａｍａｒ  Ｂｌｕｅ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ：ＤＡＬ１０２５）を培地に導入した。この試薬は、代謝的に活性な細胞によって蛍光指示薬であるレゾルフィンに還元される、非蛍光指示薬であるレサズリンを含有する。したがって、産生される蛍光のレベルは、生細胞の数に比例する。励起は５３０ｎｍで実行し、読み取りは５９０ｎｍで実行する。この実験の終了時に、脂質メディエーターの合成の評価のために、各活性剤の非細胞毒性濃度を選択した。
【０２３４】
消散経路の活性化を実証する試験を実行するために、初代ヒト単球をＧＭ−ＣＳＦ（１０ｎｇ／ｍｌ）及びＩＬ−４（１０ｎｇ／ｍｌ）によって播種し、分化させ、並行して、ケラチノサイト初代培養細胞（ＮＨＥＫ）を調製した。１週間培養した後、ＮＨＥＫを挿入物中に沈着させ、樹状細胞（ＤＣ）となった細胞と接触させることなく培養した。ＤＣ／ＮＨＥＫ共培養系を、２００μｇ／ｍｌの濃度の活性剤の存在下で４時間プレインキュベートした。その後、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ−１μｇ／ｍｌ）とドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ−１μｇ／ｍｌ）との混合物（１／１の比）の存在下で、ミリスチン酸ホルボール（ＰＭＡ−０．０５μＭ）とカルシウムイオン透過孔（Ａ２３１８７−１μＭ）との会合によって炎症反応を誘発させた。ＥＰＡ及びＤＨＡの添加は、感受性閾値を低下させるために必要であり、したがって消散分子の測定を可能にする。質量分析による分析のため、ならびにアラキドン酸（５−ＨＥＴＥ、１２−ＨＥＴＥ、１５−ＨＥＴＥ）、ＤＨＡ（１４−ＨＤｏＨＥ、１７−ＨＤｏＨＥ）、及びＥＰＡ（１８−ＨＥＰＥ）に由来する分子の定量化のために、上清を２時間後及び４時間後に回収した。
【０２３５】
実験は、各実験条件について３連で実行した。
【０２３６】
脂質メディエーターをアッセイするために、上清を氷上で解凍し、脂質化合物を固相抽出（ＳＰＥ）によって濃縮し、分析前にメタノール中に取り込んだ。使用される分析方法は、高圧液体クロマトグラフィーによって異なる分析物をそれらの保持時間の関数として分離し、質量分析によってそれらを定量化することからなる。分析は、ネガティブモードで動作するエレクトロスプレーイオン化源（Ｊｅｔ  ｓｔｒｅａｍ  ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）を備えるＴｒｉｐｌｅ  Ｑｕａｄ  ＬＣ／ＭＳ質量分析計（Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）に連結したＬＣ１２９０  Ｉｎｆｉｎｉｔｙチェーン（Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）で実行した。クロマトグラフィー分離は、ＺｏｒＢＡＸ  ＳＢ−Ｃ１８カラムで実行した。
【０２３７】
その後、各マーカーの用量を計算によって変換して、プレートのＰＵＦＡで刺激した対照との比較での活性化パーセンテージを、以下の計算を使用して得た。
活性化％＝１００×（活性剤の値−ＰＵＦＡ対照の値）／ＰＵＦＡ対照の値
【０２３８】
質量分析によるバイオマーカーの評価結果
炎症性刺激時間の終了時に、質量分析による分析のため、及び以下に由来する分子の定量化のために、上清を回収した。
−アラキドン酸由来：ＬＴＢ４、５−ＨＥＴＥ、１２−ＨＥＴＥ、１５−ＨＥＴＥ、
−ＤＨＡ由来：１４−ＨＤｏＨＥ、１７−ＨＤｏＨＥ、ＲｖＤ１、ＲｖＤ２，７−Ｍａｒ１、ＰＤ１、ＰＤｘ、
−ＥＰＡ由来：１８−ＨＥＰＥ。
【０２３９】
これらの結果を以下の表２及び３に要約する。
【０２４０】
【表２−１】
2019513763.tif 000004
【０２４１】
【表２−２】
2019513763.tif 000005
【０２４２】
【表３−１】
2019513763.tif 000006
【０２４３】
【表３−２】
2019513763.tif 000007
【０２４４】
ＰＵＦＡの存在下でのＰＭＡ／Ａ２３１８７刺激は、消散分子の合成に必要な酵素系を活性化することが観察される。
【０２４５】
それぞれ５−リポキシゲナーゼ、１２−リポキシゲナーゼ、及び１５−リポキシゲナーゼ酵素活性の指標である、５−ＨＥＴＥ、１２−ＨＥＴＥ、及び１５−ＨＥＴＥの増加が観察される。
【０２４６】
最後に、消散分子の前駆体である１４−ＨＤＯＨＥ、１７−ＨＤＯＨＥ、及び１８−ＨＥＰＥの分泌もまた観察される。これらの結果は、予想されるものと一致する。
【０２４７】
実施例１に従う抽出物の効果の下で、炎症の消散に関与する合成中間体の分泌の増加が観察される。この増加は、全ての中間体において有意であり、活性化のパーセンテージは、刺激時間中に増加する傾向がある（１５−ＨＥＴＥを除く）。
【０２４８】
最終的な消散メディエーターに関して、ＲＶＤ１及びＲＶＤ２の分泌を増加させる傾向が観察された。他の２つの代謝産物（７（ｓ）マレシン及びＰＤ１）の分泌の有意な増加もまた観察される。
【０２４９】
したがって、これらの要素は、Ａｅｒｖａ抽出物の消散促進性の役割を支持する。
【０２５０】
実施例３：再構築した皮膚モデルでの消散経路及び受容体の活性化
再構築したヒト表皮（ＲＨＥ）モジュールを実験に使用し、実験を３連（３ウェル）で実行した。
【０２５１】
モジュールは、Ｓｋｉｎｅｔｈｉｃによって１２日の発達段階で供給され、空気と接触している角質化した表面、及びその後に培養培地と接触している非角質化細胞の深部表面を呈する。
【０２５２】
それらを培養物中で更に４日間維持してから、活性剤の局所適用によって、かつ培養培地中で刺激した。
【０２５３】
局所刺激は、活性剤を培養培地中に希釈し、その溶液をＲＨＥモジュールの表面に２４時間適用することによって可能であった。
【０２５４】
これらの２４時間の終了時に、角質化した細胞と接触している培地を慎重に吸引して、空気−液体培養を再度可能にした。成長及び刺激培地は、ＲＨＥの維持に特異的な、製造業者によって直接供給される培地である。
【０２５５】
実施例１に従う抽出物に関するＲＨＥの生存率を試験するために、ＲＨＥを、局所適用した活性剤の存在下で、かつ前述の培養培地中で２４時間インキュベートした。
【０２５６】
これらの２４時間の終了時に、局所適用した刺激を取り除いて、Ａｌａｍａｒ  ｂｌｕｅの存在下、２４時間、４８時間、または７２時間の空気−液体培養を可能にし、それらの時間のそれぞれで蛍光を読み取った。この試験の後、残りの研究のために５００μｇ／ｍｌの試験濃度を選択した。
【０２５７】
ＲＨＥモジュールを、生存率試験中に選択した２つの用量で、活性剤の存在下でインキュベートした。活性剤を、局所的に、かつ前述の細胞培養培地中で２４時間適用した。これらの２４時間の終了時に、局所的に適用した刺激を取り除いて、更に２４時間の空気−液体培養を可能にした。
【０２５８】
その後、各々１０ｎｇ／ｍｌのＯＳＭ、ＴＮＦ−α、及びＩＬ−１７のカクテルに対応する炎症性刺激（Ｍｉｘ  ＣＴＫ）（Ｂｏｎｉｆａｃｅ  Ｋ  ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２００７，１７８：４６１５の論文に従って選択）を、２４時間の空気−液体培養の間にＲＨＥの下の培地中に添加するか、または添加しなかった。活性剤の溶媒を対照ウェルに導入した。
【０２５９】
刺激ステップの終了時に、細胞を、ディスパーゼによってそれらの支持体から分離し、その後回収し、ｑｉａｚｏｌの存在下でプレセリズ（ｐｒｅｃｅｌｌｙｓ）によって溶解させた。フェノール／クロロホルム抽出及び洗浄カラム通過後、ＲＮＡをｍｉｌｌｉＱ水中に取り込んでから、ｎａｎｏｄｒｏｐでアッセイし、その後の使用のために凍結させた。その後、Ｍａｘｉｍａ  Ｆｉｒｓｔ鎖ｃＤＮＡ合成キット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ）によって逆転写を実行し、その後、ＦｌｕｉｄｉｇｍプロトコルバージョンＰＮ１００−１２０１Ｂ１に従ってチップ（９６×９６）の調製の特定のステップを実行した。
【０２６０】
ｍＲＮＡの発現レベルを、以下の基準遺伝子、ＹＷＨＡＺ、ＧＡＰＤＨ、ＨＰＲＴ１、及びＡＣＴＢで正規化した。
【０２６１】
結果は一般に、ＤＤＣｔ（デルタデルタＣｔ）と一般に呼ばれるＬｉｖａｋ法を使用して、１０−５ＭのＤＭＳＯ対照との比較での誘導時間の数として表される。Ｃｔは、所定の閾値を超える蛍光シグナルを生成するのに必要なサイクル数に対応する。各遺伝子について、値は対照との比較で表され、これは１に等しい。
【０２６２】
炎症性刺激下で、以下の遺伝子の発現を監視した（表４）。
【０２６３】
【表４】
2019513763.tif 000008
【０２６４】
炎症性カクテルの存在下で、Ａｅｒｖａ抽出物がＬＴＢ４の合成に関与する酵素であるＬＴＡ４加水分解酵素遺伝子（ＬＴＡ４Ｈ  ｐ＝０．０４０２８）の発現の増加を誘導することを示すことが可能であった。
【０２６５】
これらの結果は、炎症条件下で活性剤がＬＴＢ４の発現を増加させることが観察された、ＤＣ／ＮＨＥＫモデルで実行した実験と完全に一致している。
【０２６６】
更に、その５−リポキシゲナーゼ活性のために消散分子の合成に潜在的に関与する酵素であるｅＬＯＸ−３のｍＲＮＡを増加させる傾向もまた、指摘されている。同様に、１５ＬＯＸ１の発現は、非常にわずかに増加する。これらの結果もまた、それぞれ１５−リポキシゲナーゼ活性及び５−リポキシゲナーゼ活性の指標である１５−ＨＥＴＥ及び５−ＨＥＴＥの増加が観察された、ＤＣ／ＮＨＥＫモデルで得られた結果と一致する。プロテイナーゼＤ１の合成には１５−ＬＯＸ酵素活性が特に必要であり、したがってＡｅｒｖａ抽出物の効果の下でＰＤ１の実施例２に観察される合成が強化される。
【０２６７】
ケラチノサイト−樹状細胞モデルで得られた結果を考慮して、これらの誘導は、これらの酵素に依存する消散分子の前駆体の誘導のために、炎症の陽性対照ループの確立を可能にする。これらの結果は、Ａｅｒｖａ抽出物が慢性炎症の制御及び消散のレベルで作用する能力と完全に一致する。
【０２６８】
更に、Ａｅｒｖａ抽出物によるＲＨＥの刺激後に、消散受容体に関連する遺伝子を監視した（表５）。
【０２６９】
【表５】
2019513763.tif 000009
【０２７０】
Ａｅｒｖａ抽出物によって、リゾルビンＥ１受容体ＣＭＫＲＬ１及びＧＰＲ３２、リゾルビンＤ１受容体及びＦＰＲ２、リポキシンＡ４受容体などの消散に直接関連する受容体の発現が活性化された。
【０２７１】
炎症性刺激後、同一の監視を実行した（表６）。
【０２７２】
【表６−１】
2019513763.tif 000010
【０２７３】
【表６−２】
2019513763.tif 000011
【０２７４】
サイトカインの混合物によって表される炎症性刺激の存在下で、Ａｅｒｖａ抽出物が前節に記載した受容体のｍＲＮＡの発現を増強すること（特に、リポキシンＡ４受容体であるＦＰＲ２（ｐ＝０．０１２３８）、リゾルビンＥ１受容体であるＣＭＫＲＬ１（ｐ＝０．０７８５８）、及びリゾルビンＤ１受容体であるＧＰＲ３２（ｐ＝０．０５３３２）の有意な誘導）を測定することが可能であった。
【０２７５】
実施例４：再構築した皮膚モデルでの皮膚保護経路の活性化
実施例３に記載したように、Ａｅｒｖａ抽出物を、再構築した皮膚モデルにおいて５００μｇ／ｍｌの濃度で接触させた。
【０２７６】
２４時間のインキュベーション後、以下の遺伝子を刺激した（表７）。
【０２７７】
【表７】
2019513763.tif 000012
【０２７８】
皮膚防御系の動員、抗菌ペプチド（ＲＮＡＳＥ７（ｐ＝０．０１３７４））に関連するｍＲＮＡの誘導に直接関与する、ＩＬ１Ｂ（ｐ＝０．００５０４）、ＩＬ１Ａ（ｐ＝０．００６８５）、ＩＬ１７Ａ（ｐ＝０．０１９３２）、及びＩＬ１２Ａ（ｐ＝０．０１９４１）のｍＲＮＡの有意な増加の測定が可能であったため、Ａｅｒｖａ抽出物は、皮膚保護機構を誘導する。
【０２７９】
実施例５：再構築した皮膚モデルでの炎症制御経路の活性化
実施例３に記載したように、Ａｅｒｖａ抽出物を、炎症促進性刺激の存在下で、再構築した皮膚モデルにおいて５００μｇ／ｍｌの濃度で接触させた。
【０２８０】
２４時間のインキュベーション後、以下の遺伝子を刺激した（表８）。
【０２８１】
【表８−１】
2019513763.tif 000013
【０２８２】
【表８−２】
2019513763.tif 000014
【０２８３】
Ａｅｒｖａ抽出物は、それが炎症性刺激の増強の誘導に成功するよりも大きな程度まで、炎症性刺激の効果を逆転させる傾向を有することが見出された。したがって、それは、炎症反応を完全に麻痺させることなく炎症反応を抑制し、それ故に防衛活性などの重要な活性の発現を可能にする有益な効果を有する（ＤＥＦＢ４  ｐ＝０．１４７０）。これらの結果は、持続性かつ潜伏性である傾向がある慢性炎症状態を制御する作用と完全に一致している。
【０２８４】
実施例６：一般代謝の制御及び酸化的ストレスに対する防御の経路の活性化−ＰＰＡＲ活性化
実施例３に記載したように、Ａｅｒｖａ抽出物を、再構築した皮膚モデルにおいて５００μｇ／ｍｌの濃度で接触させた。
【０２８５】
２４時間のインキュベーション後、以下の遺伝子を刺激した（表９）。
【０２８６】
【表９】
2019513763.tif 000015
【０２８７】
Ａｅｒｖａ抽出物は、例えば、脂肪酸代謝、炎症の制御、または治癒現象などの広い生理学的制御に関与する、転写因子ＰＰＡＲベータ（ｐ＝０．００００６）、ＰＰＡＲアルファ（ｐ＝０．０２７２３）、及びＰＰＡＲガンマ（ｐ＝０．１２３５６）のｍＲＮＡの発現の増加を誘導する。
【０２８８】
これらの経路の活性化は、Ａｅｒｖａ抽出物が慢性炎症現象のレベルでだけでなく、酸化ストレスに対する生物体の応答を刺激するための両方において制御的な役割を果たすことを明らかに示している。
【０２８９】
ＰＰＡＲは、生物体の一般的なホメオスタシスにおいて役割を果たし、皮膚障害、及び特に慢性炎症（例えば、アトピー性皮膚炎、乾癬）などの病態において作用し、体重管理、神経変性疾患、またはがんを治癒することで、様々なドメインにおける治療標的である（Ｓｅｒｔｚｎｉｇ  ｅｔ  ａｌ．，２００８、Ｙｅｓｓｏｕｆｏｕ  ｅｔ  ａｌ．，２０１０）。
【０２９０】
炎症刺激後、同じ遺伝子を監視した（表１０）。
【０２９１】
【表１０】
2019513763.tif 000016
【０２９２】
炎症性刺激の存在下で、Ａｅｒｖａ抽出物がＰＰＡＲベータ（ｐ＝０．０１８４５）及びアルファ（ｐ＝０．０４０１５）のｍＲＮＡの発現を増強することを示すことが可能であった。
【０２９３】
実施例７：バリア機能において役割を果たす真皮−表皮細胞凝集経路の活性化
実施例３に記載したように、Ａｅｒｖａ抽出物を、再構築した皮膚モデルにおいて５００μｇ／ｍｌの濃度で接触させた。
【０２９４】
２４時間のインキュベーション後、以下の遺伝子を刺激した（表１１）。
【０２９５】
【表１１】
2019513763.tif 000017
【０２９６】
Ａｅｒｖａ抽出物が、基底膜を構成するラミニンＬＡＭＣ２（ｐ＝０．０１５２３）、表皮と真皮との間の接合を可能にするフィブロネクチンＦＮ１（ｐ＝０．０１５６９）、細胞外マトリックスへの細胞の結合に関与するインテグリンＩＴＧＡ２（ｐ＝０．０４７８２）、保護及び角質層に関与するインボルクリンＩＶＬ（ｐ＝０．０６２２０）、サイトケラチンＫＲＴ１９  ｐ＝０．２２７７４）などの皮膚の構造タンパク質または角質化タンパク質のｍＲＮＡの発現、ならびに皮膚のバリア機能に関与するＧＢＡのｍＲＮＡの有意な過剰発現（ｐ＝０．０００７５）を誘導することを実証することが可能であった。ヒアルロン酸ＨＡＳ２（ｐ＝０．１１２０１）の合成に関与する酵素のｍＲＮＡが誘導されることもまた、示されている。
【０２９７】
これらの改変は、皮膚水分の喪失を誘導する皮膚障害において重要である、真皮マトリックスの再モデル化及びバリア機能の改善に対する活性剤の効果を示す。バリア機能の喪失は実際、知覚不能な水分喪失の増加を引き起こすだろう。
【０２９８】
炎症刺激後、以下の遺伝子を監視した（表１２）。
【０２９９】
【表１２】
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【０３００】
炎症性刺激後、Ａｅｒｖａ抽出物は、その炎症性刺激自体と相対的に増加させることによって、ＦＮ１、ＬＡＭＣ２、ＩＶＬ、ＩＴＧＡ２のｍＲＮＡの発現に対する相乗効果を誘導する。
【０３０１】
上皮成長因子ＥＧＦ及びＣＯＬ１Ａ１のｍＲＮＡの発現は、炎症性刺激の存在下で阻害された。Ａｅｒｖａ抽出物の添加は、その基礎レベルでの発現を部分的に回復することによって、この低減を制御するだろう。
【０３０２】
実施例８：酸化的ストレス及び皮膚老化に対する保護の経路の活性化
実施例３に記載したように、Ａｅｒｖａ抽出物を、再構築した皮膚モデルにおいて５００μｇ／ｍｌの濃度で接触させた。
【０３０３】
２４時間のインキュベーション後、以下の遺伝子を刺激した（表１３）。
【０３０４】
【表１３】
2019513763.tif 000019
【０３０５】
Ａｅｒｖａ抽出物は、ＨＢＥＧＦ（ｐ＝０．０１７０１）及びＳＩＲＴ１（ｐ＝０．０２７９４）のヘムオキシゲナーゼＨＭＯＸ１（ｐ＝０．００４１７）の有意な過剰発現を誘導し、これら全ては、皮膚の抗酸化防御を増加させ、細胞老化を制限することによる皮膚の保護に関与する。
【０３０６】
炎症刺激後、以下の遺伝子を監視した（表１４）。
【０３０７】
【表１４】
2019513763.tif 000020
【０３０８】
炎症性刺激後、活性剤は、ＳＩＲＴ１の発現の増加（ｐ＝０．０４７３９）ならびにＨＭＯＸ１及びＳＦＮを増加させる傾向に対して有意な相乗効果を有していることが観察される。
【０３０９】
実施例９：Ａｖｅｒａ  ｊａｖａｎｉｃの水浸出液または本発明の抽出物のいずれかでの刺激後の、脂質メディエーター合成の比較。
実施例１に記載したように、本発明の抽出物を調製した。
【０３１０】
Ａｅｒｖａ  ｊａｖａｎｉｃａ（Ｂｕｒｍ．ｆ．）Ｊｕｓｓ．Ｅｘ  Ｓｃｈｕｌｔに由来する植物原材料を２時間５０℃の水と接触させてから、実施例１に前述の技術を使用して濾過及び乾燥することによって、浸出液を調製した。
【０３１１】
実施例２に記載した方法を使用して、刺激を実行した。
【０３１２】
刺激後の結果を図１に示す。
【図１】
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【国際調査報告】
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