(57)【要約】  本開示は、抗ＣＤ１９抗体の医薬製剤を記載する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
２０ｍｇ／ｍｌ〜１２５ｍｇ／ｍｌの濃度の抗ＣＤ１９抗体、緩衝液、０．００５％（ｗ／ｖ）〜０，０６％（ｗ／ｖ）の濃度のポリソルベート、及び６．０のｐＨを含む安定な凍結乾燥医薬製剤において、
ａ）１８０ｍＭ〜２４０ｍＭの濃度のトレハロース、又は
ｂ）１８０ｍＭ〜２４０ｍＭの濃度のマンニトール及び１０ｍＭ〜５０ｍＭの濃度のショ糖
を更に含み、前記抗ＣＤ１９抗体は、配列
2019524671.tif 000055
の重鎖定常ドメインと、配列
2019524671.tif 000056
の軽鎖定常ドメインとを含むことを特徴とする安定な凍結乾燥医薬製剤。
【請求項２】
請求項１に記載の製剤において、前記製剤中の前記抗ＣＤ１９抗体は、４０ｍｇ／ｍｌであることを特徴とする製剤。
【請求項３】
請求項１又は２に記載の製剤において、前記緩衝液は、クエン酸緩衝液又はリン酸緩衝液であることを特徴とする製剤。
【請求項４】
請求項３に記載の製剤において、前記クエン酸緩衝液又はリン酸緩衝液は、２０〜５０ｍＭの濃度であることを特徴とする製剤。
【請求項５】
請求項４に記載の製剤において、前記クエン酸緩衝液又はリン酸緩衝液は、２５ｍＭの濃度であることを特徴とする製剤。
【請求項６】
請求項１乃至５の何れか１項に記載の製剤において、前記製剤中の前記トレハロースは、２００ｍＭであることを特徴とする製剤。
【請求項７】
請求項１乃至５の何れか１項に記載の製剤において、前記製剤中の前記マンニトールは、２１９ｍＭであり、及び前記製剤中の前記ショ糖は、２９ｍＭであることを特徴とする製剤。
【請求項８】
請求項１乃至７の何れか１項に記載の製剤において、前記製剤中の前記ポリソルベートは、ポリソルベート２０であることを特徴とする製剤。
【請求項９】
請求項１乃至８の何れか１項に記載の製剤において、前記製剤中の前記ポリソルベートは、０．０２％であることを特徴とする製剤。
【請求項１０】
請求項１乃至９の何れか１項に記載の製剤において、前記抗ＣＤ１９抗体は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３又はＩｇＧ４抗体であることを特徴とする製剤。
【請求項１１】
請求項１乃至１０の何れか１項に記載の製剤において、２〜８℃で少なくとも６カ月間、少なくとも１２カ月間、少なくとも１８カ月間、少なくとも２４カ月間又は少なくとも３６カ月間にわたって安定であることを特徴とする製剤。
【請求項１２】
請求項１乃至５の何れか１項に記載の製剤において、前記抗ＣＤ１９抗体は、４０ｍｇ／ｍＬの量であり、前記クエン酸緩衝液は、２５ｍＭの濃度であり、前記トレハロースは、２００ｍＭの濃度であり、ポリソルベートは、０．０２％（ｗ／ｖ）の濃度であり、及び前記製剤は、６．０のｐＨを有することを特徴とする製剤。
【請求項１３】
請求項１乃至５の何れか１項に記載の製剤において、前記抗ＣＤ１９抗体は、４０ｍｇ／ｍＬの量であり、前記クエン酸緩衝液は、２５ｍＭの濃度であり、前記マンニトールは、２１９ｍＭの濃度であり、前記ショ糖は、２９ｍＭの濃度であり、ポリソルベートは、０．０２％（ｗ／ｖ）の濃度であり、及び前記製剤は、６．０のｐＨを有することを特徴とする製剤。
【請求項１４】
製品において、請求項１乃至１３の何れか１項に記載の安定な凍結乾燥医薬製剤を保持する容器を含むことを特徴とする製品。
【請求項１５】
対象における疾病又は疾患を処置する方法において、有効量の請求項１乃至１３の何れか１項に記載の製剤を前記対象に投与するステップを含み、前記疾病又は疾患は、癌であることを特徴とする方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本開示は、抗ＣＤ１９抗体の安定な凍結乾燥医薬製剤に関し、且つそのような製剤を作製する方法及び使用する方法を提供する。
【背景技術】
【０００２】
Ｂ細胞は、液性免疫応答に大きい役割を果たすリンパ球である。Ｂ細胞は、殆どの哺乳動物の骨髄内で産生され、循環リンパ球プールの５〜１５％を占める。Ｂ細胞の主な機能は、様々な抗原に対する抗体を作ることであり、適応免疫系の必須成分である。
【０００３】
免疫系の調節におけるＢ細胞の重大な役割に起因して、Ｂ細胞の調節不全は、リンパ腫及び白血病等の様々な疾患と関連している。リンパ腫及び白血病には、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）及び急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）が含まれる。
【０００４】
ヒトＣＤ１９分子は、プレＢ細胞、発生初期のＢ細胞｛即ち未熟Ｂ細胞）、最終分化を介して形質細胞となる成熟Ｂ細胞、及び悪性Ｂ細胞を含むが、これらに限定されないヒトＢ細胞の表面上に発現する構造的に異なる細胞表面受容体である。ＣＤ１９は、殆どのプレＢ急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、非ホジキンリンパ腫、Ｂ細胞慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、プロリンパ性白血病、ヘアリーセル白血病、一般的な急性リンパ性白血病、及びいくつかのヌル急性リンパ性白血病により発現される（Ｎａｄｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１３１：２４４−２５０（１９８３），Ｌｏｋｅｎ  ｅｔ  ａｌ，Ｂｌｏｏｄ，７０：１３１６−１３２４（１９８７），Ｕｃｋｕｎ  ｅｔ  ａｌ，Ｂｌｏｏｄ，７１：１３−２９（１９８８），Ａｎｄｅｒｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ，１９８４．Ｂｌｏｏｄ，６３：１４２４−１４３３（１９８４），Ｓｃｈｅｕｅｒｍａｎｎ，Ｌｅｕｋ．Ｌｙｍｐｈｏｍａ，１８：３８５−３９７（１９９５））。形質細胞上のＣＤ１９の発現は、これが、例えば、多発性骨髄腫、形質細胞腫、ワルデンストレーム腫瘍等の分化したＢ細胞腫瘍上に発現し得ることを更に示唆している（Ｇｒｏｓｓｂａｒｄ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｒ．Ｊ．Ｈａｅｍａｔｏｌ，１０２：５０９−１５（１９９８）；Ｔｒｅｏｎ  ｅｔ  ａｌ，Ｓｅｍｉｎ．Ｏｎｃｏｌ，３０：２４８−５２（２００３））。
【０００５】
従って、ＣＤ１９抗原は、非ホジキンリンパ腫（本明細書に記載される各サブタイプを含む）、慢性リンパ性白血病及び／又は急性リンパ性白血病の処置における免疫療法のための標的である。
【０００６】
ＭＯＲ２０８（以前にはＸｍＡｂ５５７４と命名）は、ＣＤ１９に結合するＦｃ操作されたヒト化モノクローナル抗体である。ＸｍＡｂ操作変異に起因したＦｃγＲに対するＭＯＲ２０８  Ｆｃの結合の増大は、非修飾抗体と比較して、腫瘍に対するインビトロ抗体依存性細胞介在性細胞傷害（ＡＤＣＣ）、抗体依存性細胞介在性食作用（ＡＤＣＰ）、及び直接細胞傷害作用（アポトーシス）を有意に向上させる。ＭＯＲ２０８は、補体依存性細胞傷害を仲介することが示されていない。
【０００７】
ＭＯＲ２０８は、ＣＬＬ、ＡＬＬ及びＮＨＬにおいて臨床試験で研究されたか又は現在研究されている。詳細には、慢性リンパ性白血病におけるＸｍＡｂ（登録商標）５５７４の安全性及び忍容性と題された第Ｉ相試験、並びにＢ細胞急性リンパ性白血病（Ｂ−ＡＬＬ）を処置するためのＦｃ−最適化抗ＣＤ１９抗体（ＭＯＲ２０８）の研究と題された第ＩＩａ相試験が完了している。非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）を処置するためのＦｃ−最適化抗ＣＤ１９抗体（ＭＯＲ２０８）の研究と題された第ＩＩａ相試験は、リクルートメントを完了した。また、以下の試験が進行中である：再発又は難治性びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）を有する成人患者におけるベンダムスチン（ＢＥＮ）を伴うＭＯＲ２０８対ＢＥＮを伴うリツキシマブ（ＲＴＸ）の有効性及び安全性を評価するための試験と題された第ＩＩ／ＩＩＩ相試験（Ｂ−ＭＩＮＤ）、ＢＴＫｉで前処置したＲ／Ｒ  ＣＬＬ／ＳＬＬ患者におけるイデラリシブを伴うＭＯＲ２０８の有効性及び安全性を評価するための試験と題された第ＩＩ相試験、Ｒ−Ｒ  ＤＬＢＣＬを有する患者におけるＭＯＲ２０８を伴うレナリドミドの安全性及び有効性を評価するための試験と題された第ＩＩ相試験、並びに再発又は難治性ＣＬＬ、ＳＬＬ若しくはＰＬＬを有する患者、又は未処置ＣＬＬ、ＳＬＬ若しくはＰＬＬを有する高齢患者のための、レナリドミドと組み合わせた第ＩＩ相ＭＯＲ２０８と題された第ＩＩ相試験。
【０００８】
治療抗体及び抗体断片は、大きく、且つ抗体が複雑な三次元構造に加えて複数の官能基を有するため、従来の有機及び無機薬物小分子と比較してより複雑な分子である。従って、そのようなタンパク質の製剤は、特別な課題を課すものである。タンパク質が生物学的に活性な状態に留まるために、製剤は、少なくともタンパク質のアミノ酸のコア配列の立体構造の完全性を保つと共に、タンパク質の複数の官能基を分解から保護する必要がある。抗体の製剤は、保存期間が短い場合があり、処方された抗体は、化学的及び物理的不安定性に起因して保管中に生物学的活性を失う場合がある。タンパク質分解の最も一般的な３つの経路は、タンパク質凝集、脱アミド及び酸化である（Ｃｌｅｌａｎｄ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｒｉｔｉｃａｌ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  ｉｎ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ｄｒｕｇ  Ｃａｒｒｉｅｒ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  １０（４）：３０７−３７７（１９９３））。特に、凝集は、潜在的に患者における免疫応答の増大をもたらす場合があり、これは、安全性への懸念に繋がり、最小限にするか又は防止する必要がある。
【発明の概要】
【０００９】
本発明の目的は、抗ＣＤ１９抗体の製剤、特に好適な保存期間を有する抗ＣＤ１９抗体の製剤を提供することである。
【００１０】
治療用抗体のための好適な製剤は、水性医薬組成物又は再構成されて患者への投与のための溶液を提供し得る凍結乾燥物（ｌｙｏｐｈｉｌｉｓａｔｅ）であり得る。
【００１１】
抗体を含む凍結乾燥医薬製剤が本明細書で提供される。一態様において、製剤は、抗ＣＤ１９抗体、緩衝液、ショ糖、及び界面活性剤を含み、製剤は、約６．０のｐＨを有し、前記抗ＣＤ１９抗体は、配列
2019524671.tif 000002
の重鎖定常ドメインと、配列
2019524671.tif 000003
の軽鎖定常ドメインとを含む。
【００１２】
一態様において、安定な凍結乾燥医薬製剤が本明細書で提供され、製剤は、約２０ｍｇ／ｍｌ〜約１２５ｍｇ／ｍｌの濃度の抗ＣＤ１９抗体、緩衝液、約０．００５％（ｗ／ｖ）〜約０．０６％（ｗ／ｖ）の濃度のポリソルベート、及び約６．０のｐＨを含み、製剤は、ａ）約１８０ｍＭ〜約２４０ｍＭの濃度のトレハロース、又は
ｂ）約１８０ｍＭ〜約２４０ｍＭの濃度のマンニトール及び約１０ｍＭ〜約５０ｍＭの濃度のショ糖
を更に含む。
【００１３】
いくつかの実施形態において、前記抗ＣＤ１９抗体は、配列ＳＹＶＭＨ（配列番号１）を含むＨＣＤＲ１領域、配列ＮＰＹＮＤＧ（配列番号２）を含むＨＣＤＲ２領域、配列ＧＴＹＹＹＧＴＲＶＦＤＹ（配列番号３）を含むＨＣＤＲ３領域、配列ＲＳＳＫＳＬＱＮＶＮＧＮＴＹＬＹ（配列番号４）を含むＬＣＤＲ１領域、配列ＲＭＳＮＬＮＳ（配列番号５）を含むＬＣＤＲ２領域、及び配列ＭＱＨＬＥＹＰＩＴ（配列番号６）を含むＬＣＤＲ３領域を含む。
【００１４】
いくつかの実施形態において、前記抗ＣＤ１９抗体は、配列ＳＹＶＭＨ（配列番号１）のＨＣＤＲ１領域、配列ＮＰＹＮＤＧ（配列番号２）のＨＣＤＲ２領域、配列ＧＴＹＹＹＧＴＲＶＦＤＹ（配列番号３）のＨＣＤＲ３領域、配列ＲＳＳＫＳＬＱＮＶＮＧＮＴＹＬＹ（配列番号４）のＬＣＤＲ１領域、配列ＲＭＳＮＬＮＳ（配列番号５）のＬＣＤＲ２領域、及び配列ＭＱＨＬＥＹＰＩＴ（配列番号６）のＬＣＤＲ３領域を含む。
【００１５】
いくつかの実施形態において、前記抗ＣＤ１９抗体は、配列
2019524671.tif 000004
の可変重鎖と、配列
2019524671.tif 000005
の可変軽鎖とを含む。
【００１６】
いくつかの実施形態において、前記抗ＣＤ１９抗体は、配列
2019524671.tif 000006
の重鎖定常ドメインと、配列
2019524671.tif 000007
の軽鎖定常ドメインとを含む。
【００１７】
いくつかの実施形態において、製剤中の抗ＣＤ１９抗体は、約２０ｍｇ／ｍｌ〜約８０ｍｇ／ｍｌの濃度を有する。いくつかの実施形態において、製剤中の抗ＣＤ１９抗体は、約４０ｍｇ／ｍｌの濃度を有する。
【００１８】
いくつかの実施形態において、製剤中の前記緩衝液は、クエン酸緩衝液又はリン酸緩衝液である。
【００１９】
いくつかの実施形態において、製剤中の前記トレハロースは、約２００ｍＭである。いくつかの実施形態において、製剤中の前記トレハロースは、２００ｍＭである。
【００２０】
いくつかの実施形態において、製剤中の前記マンニトールは、約２１９ｍＭであり、及び製剤中のショ糖は、約２９ｍＭである。いくつかの実施形態において、製剤中の前記マンニトールは、２１９ｍＭであり、及び製剤中のショ糖は、２９ｍＭである。
【００２１】
いくつかの実施形態において、製剤は、約６．０のｐＨを有する。いくつかの実施形態において、製剤は、６．０のｐＨを有する。
【００２２】
いくつかの実施形態において、製剤中の前記ポリソルベートは、ポリソルベート２０である。いくつかの実施形態において、製剤中の前記ポリソルベート（例えば、ポリソルベート２０）は、約０．００５％（ｗ／ｖ）〜約０．０６％（ｗ／ｖ）のものある。いくつかの実施形態において、製剤中の前記ポリソルベート（例えば、ポリソルベート２０）は、約０．０２％（ｗ／ｖ）である。いくつかの実施形態において、製剤中の前記ポリソルベート（例えば、ポリソルベート２０）は、０．０２％（ｗ／ｖ）である。
【００２３】
更なる態様において、安定な凍結乾燥医薬製剤が本明細書で提供され、製剤は、約４０ｍｇ／ｍｌの濃度の抗ＣＤ１９抗体、約２５ｍＭの濃度のクエン酸、約２００ｍＭの濃度のトレハロース、約０．０２％（ｗ／ｖ）の濃度のポリソルベート、及び約６．０のｐＨを含む。
【００２４】
更なる態様において、安定な凍結乾燥医薬製剤が本明細書で提供され、製剤は、４０ｍｇ／ｍｌの濃度の抗ＣＤ１９抗体、２５ｍＭの濃度のクエン酸、２００ｍＭの濃度のトレハロース、０．０２％（ｗ／ｖ）の濃度のポリソルベート、及び６．０のｐＨを含む。
【００２５】
更なる態様において、安定な凍結乾燥医薬製剤が本明細書で提供され、製剤は、約４０ｍｇ／ｍｌの濃度の抗ＣＤ１９抗体、約２５ｍＭの濃度のクエン酸、約２１９ｍＭの濃度のマンニトール、約２９ｍＭの濃度のショ糖、約０．０２％（ｗ／ｖ）の濃度のポリソルベート、及び約６．０のｐＨを含む。
【００２６】
更なる態様において、安定な凍結乾燥医薬製剤が本明細書で提供され、製剤は、４０ｍｇ／ｍｌの濃度の抗ＣＤ１９抗体、２５ｍＭの濃度のクエン酸、２１９ｍＭの濃度のマンニトール、２９ｍＭの濃度のショ糖、０．０２％（ｗ／ｖ）の濃度のポリソルベート、及び６．０のｐＨを含む。
【００２７】
いくつかの実施形態において、製剤中の前記抗ＣＤ１９抗体は、事前の凍結乾燥に供されず、例えば液体である。いくつかの実施形態において、製剤中の前記抗ＣＤ１９抗体は、モノクローナル抗体である。いくつかの実施形態において、製剤中の前記抗ＣＤ１９抗体は、完全長抗体である。いくつかの実施形態において、製剤中の前記抗ＣＤ１９抗体は、ＩｇＧ抗体である。いくつかの実施形態において、製剤中の前記抗ＣＤ１９抗体は、ヒト化又はヒト抗体である。いくつかの実施形態において、製剤中の前記抗ＣＤ１９抗体は、抗原結合領域を含む抗体断片である。いくつかの実施形態において、抗体断片は、Ｆａｂ又はＦ（ａｂ’）２断片である。
【図面の簡単な説明】
【００２８】
【図１】図１は、ＭＯＲ２０８のアミノ酸配列を提供する。
【図２】図２は、４０℃で３か月後のＭＯＲ２０８のサブビジブル（ｓｕｂｖｉｓｉｂｌｅ）粒子（ＳＶＰ）数である。製剤３及び製剤９が比較され、マンニトール／ショ糖製剤は、特に２μｍ〜１０００μｍの範囲内でより多くの粒子を経時的に生成した。
【発明を実施するための形態】
【００２９】
用語「抗体」は、任意のアイソタイプ、例えばＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＤ及びＩｇＥを含むモノクローナル抗体を意味する。ＩｇＧ抗体は、２つの同一の重鎖及び２つの同一の軽鎖から構成され、これらは、ジスルフィド結合により連結されている。重鎖及び軽鎖の各々は、定常領域及び可変領域を含む。各可変領域は、主として抗原のエピトープの結合の役割を担う「相補性決定領域」（「ＣＤＲｓ」）又は「超可変領域」と称される３つの区域を含む。それらは、Ｎ−末端から順に番号を付けてＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３と称される。ＣＤＲｓの外側のより高く保存された可変領域の部分は、「フレームワーク領域」と称される。「抗体断片」は、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、ｄｓＦｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’Ｆ（ａｂ’）２断片、又は少なくとも１つの可変重鎖若しくは可変軽鎖を含む他の断片を意味し、これらは、それぞれＣＤＲｓ及びフレームワーク領域を含む。
【００３０】
「ＶＨ」は、抗体又は抗体断片の免疫グロブリン重鎖の可変領域を指す。「ＶＬ」は、抗体又は抗体断片の免疫グロブリン軽鎖の可変領域を指す。
【００３１】
用語「ＣＤ１９」は、以下の同義語を有する、ＣＤ１９として既知のタンパク質を指す：Ｂ４、Ｂリンパ球抗原ＣＤ１９、Ｂリンパ球表面抗原Ｂ４、ＣＶＩＤ３、分化抗原ＣＤ１９、ＭＧＣ１２８０２、及びＴ細胞表面抗原Ｌｅｕ−１２。
【００３２】
ヒトＣＤ１９は、
2019524671.tif 000008
のアミノ酸配列を有する。
【００３３】
「ＭＯＲ２０８」は、抗ＣＤ１９抗体である。可変ドメインのアミノ酸配列は、図１に提供されている。ＭＯＲ２０８の重鎖及び軽鎖Ｆｃ領域のアミノ酸配列は、図１に提供されている。「ＭＯＲ２０８」及び「ＸｍＡｂ  ５５７４」は、図１に示す抗体を記載するために同義語として使用される。ＭＯＲ２０８抗体は、米国特許出願公開第１２／３７７，２５１号明細書（その全体が参照により組み込まれる）に記載されている。
【００３４】
ＣＤ１９に特異的な更なる抗体は、米国特許第７，１０９，３０４号明細書（Ｉｍｍｕｎｏｍｅｄｉｃｓ）（その全体が参照により組み込まれる）；米国特許出願公開第１１／９１７，７５０号明細書（Ｍｅｄａｒｅｘ）（その全体が参照により組み込まれる）；米国特許出願公開第１１／８５２，１０６号明細書（Ｍｅｄｉｍｍｕｎｅ）（その全体が参照により組み込まれる）；米国特許出願公開第１１／６４８，５０５号明細書（Ｍｅｒｃｋ  Ｐａｔｅｎｔ  ＧｍｂＨ）（その全体が参照により組み込まれる）；米国特許第７，９６８，６８７号明細書（Ｓｅａｔｔｌｅ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ）（その全体が参照により組み込まれる）；及び米国特許出願公開第１２／７１０，４４２号明細書（Ｇｌｅｎｍａｒｋ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）（その全体が参照により組み込まれる）に記載されている。
【００３５】
加えて、ＣＤ１９に特異的な更なる抗体は、国際公開第２００５０１２４９３号パンフレット（米国特許第７１０９３０４号明細書）、国際公開第２０１００５３７１６号パンフレット（米国特許出願公開第１２／２６６，９９９号明細書）（Ｉｍｍｕｎｏｍｅｄｉｃｓ）；国際公開第２００７００２２２３号パンフレット（米国特許第８０９７７０３号明細書）（Ｍｅｄａｒｅｘ）；国際公開第２００８０２２１５２号パンフレット（１２／３７７，２５１）及び国際公開第２００８１５０４９４号パンフレット（Ｘｅｎｃｏｒ）、国際公開第２００８０３１０５６号パンフレット（米国特許公開第１１／８５２，１０６号明細書）（Ｍｅｄｉｍｍｕｎｅ）；国際公開第２００７０７６９５０号パンフレット（米国特許出願公開第１１／６４８，５０５号明細書）（Ｍｅｒｃｋ  Ｐａｔｅｎｔ  ＧｍｂＨ）；国際公開第２００９／０５２４３１号パンフレット（米国特許出願公開第１２／２５３，８９５号明細書）（Ｓｅａｔｔｌｅ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓ）；及び国際公開第２０１００９５０３１（１２／７１０，４４２）号パンフレット（Ｇｌｅｎｍａｒｋ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、国際公開第２０１２０１０５６２号パンフレット及び国際公開第２０１２０１０５６１号パンフレット（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ）、国際公開第２０１１１４７８３４号パンフレット（Ｒｏｃｈｅ  Ｇｌｙｃａｒｔ）、並びに国際公開第２０１２／１５６４５５号パンフレット（Ｓａｎｏｆｉ）に記載されており、これらは、全てその全体が参照により組み込まれる。
【００３６】
用語「医薬製剤」は、対象に投与するための製剤を指す。そのような対象は、ヒトであり得る。
【００３７】
「安定な」製剤は、保管後に患者に投与することができるものである。態様において、製剤は、保管後にその物理的及び化学的特性、並びにその生物学的活性を本質的に保持している。タンパク質安定性を測定する様々な分析技術が当技術分野で利用可能であり、例えばＰｅｐｔｉｄｅ  ａｎｄ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ，２４７−３０１，Ｖｉｎｃｅｎｔ  Ｌｅｅ  Ｅｄ．，Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．，Ｐｕｂｓ．（１９９１）及びＪｏｎｅｓ，Ａ．Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖ．１０：２９−９０（１９９３）で概説されている。
【００３８】
安定性は、凝集体形成の評価（例えば、サイズ排除クロマトグラフィーを用いて濁度を測定することにより、及び／又は目視検査により）を含む様々な異なる方法において、イオン交換クロマトグラフィー（ＩＥＣ）、サイズ排除クロマトグラフィー（ＨＰ−ＳＥＣ）、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ分析を用いて電荷不均一性を評価して還元及びインタクト抗体を比較することにより、抗体の生物学的活性又は抗原結合機能を評価すること等により、定性的及び／又は定量的に評価することができる。不安定性は、凝集、脱アミド（例えば、Ａｓｎ脱アミド）、酸化（例えば、Ｍｅｔ酸化）、異性化（例えば、Ａｓｐ異性化）、クリッピング／加水分解／断片化（例えば、ヒンジ領域断片化）、スクシンイミド形成、不対システイン、Ｎ−末端延長、Ｃ−末端処理、グリコシル化相違等の任意の１つ以上を含むことができる。
【００３９】
本明細書で使用するとき、モノクローナル抗体の「生物学的活性」は、抗体が抗原に結合する能力を指す。これは、インビトロで又はインビボで測定することできる測定可能な生物学的応答をもたらす、抗原に対する抗体の結合を更に含むことができる。
【００４０】
本明細書で使用するとき、「緩衝液」は、その酸−塩基結合成分の作用によってｐＨの変化に抵抗する緩衝溶液を指す。本発明の緩衝液は、約４．５〜約７．０、好ましくは約５．６〜約７．０の範囲のｐＨを有することが好ましい。一実施形態において、緩衝液は、約６．０のｐＨ又は６．０のｐＨを有する。例えば、クエン酸緩衝液又はリン酸緩衝液は、それぞれｐＨをこの範囲内に調節する緩衝液の例である。
【００４１】
本明細書で使用するとき、「界面活性剤」は、表面−活性薬剤を指す。界面活性剤は、非イオン性界面活性剤が好ましい。本明細書の界面活性剤の例としては、ポリソルベート（例えば、ポリソルベート２０及びポリソルベート８０）；ポロキサマー（例えば、ポロキサマー１８８）；トリトン；ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）；ラウレル（ｌａｕｒｅｌ）硫酸ナトリウム；ナトリウムオクチルグリコシド；ラウリル−、ミリスチル−、リノレイル−、又はステアリル−スルホベタイン；ラウリル−、ミリスチル−、リノレイル−、又はステアリル−サルコシン；リノレイル−、ミリスチル−、又はセチル−ベタイン；ラウロアミドプロピル−、コカミドプロピル−、リノレアミドプロピル−、ミリスタミドプロピル−、パルミドプロピル−、又はイソステアラミドプロピル−ベタイン（例えば、ラウロアミドプロピル）；ミリスタミドプロピル−、パルミドプロピル−、又はイソステアラミドプロピル−ジメチルアミン；ナトリウムメチルココイル−、又は二ナトリウムメチルオレイル−タウレート；及びＭＯＮＡＱＵＡＴ（商標）シリーズ（Ｍｏｎａ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．，Ｐａｔｅｒｓｏｎ，Ｎ．Ｊ．）；ポリエチルグリコール、ポリプロピルグリコール、並びにエチレン及びプロピレングリコールのコポリマー（例えば、プルロニック、ＰＦ６８等）等が挙げられる。一実施形態において、本明細書の界面活性剤は、ポリソルベート２０である。
【００４２】
「Ｆｃ領域」は、ヒトではＩｇＧ１、２、３、４サブクラス又はその他であり得る抗体の定常領域を意味する。ヒトＦｃ領域の配列は、ＩＭＧＴ、Ｈｕｍａｎ  ＩＧＨ  Ｃ−ＲＥＧＩＯＮｓ、ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｉｍｇｔ．ｏｒｇ／ＩＭＧＴｒｅｐｅｒｔｏｉｒｅ／Ｐｒｏｔｅｉｎｓ／ｐｒｏｔｅｉｎ／ｈｕｍａｎ／ＩＧＨ／ＩＧＨＣ／Ｈｕ＿ＩＧＨＣａｌｌｇｅｎｅｓ．ｈｔｍｌ（２０１１年５月１６日に検索）で入手可能である。
【００４３】
「投与される」又は「投与」は、例えば、静脈内、筋内、皮内若しくは皮下経路等の注射可能な形態、又は例えば経鼻噴霧等の粘膜経路、又は吸入のためのエアロゾルによる送達、又は消化可能な溶液、カプセル剤若しくは錠剤としての送達が挙げられるが、これらに限定されない。
【００４４】
化合物又は組み合わせの「治療的有効量」は、所定の疾病又は疾患及びその合併症の臨床症状を少なくとも部分的に停止させるのに十分な量を指す。特定の治療目的に有効な量は、疾病又は傷害の重篤さ、並びに対象の体重及び全身状態に依存するであろう。適切な投与量の決定は、日常的な実験を用いて値のマトリクスを構成し、マトリクス内の異なる点を試験することにより達成され得ることが理解されるであろう。これらの全ては、訓練された医師又は臨床科学者の通常の技能の範疇にある。
【００４５】
本明細書の「ＣＤＲｓ」は、Ｃｈｏｔｈｉａ  ｅｔ  ａｌ又はＫａｂａｔ  ｅｔ  ａｌの何れかにより定義される。Ｃｈｏｔｈｉａ  Ｃ、Ｌｅｓｋ  ＡＭ．（１９８７）Ｃａｎｏｎｉｃａｌ  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｈｙｐｅｒｖａｒｉａｂｌｅ  ｒｅｇｉｏｎ  ｏｆ  ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎｓ．Ｊ  Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ．，１９６（４）：９０１−１７（その全体が参照により組み込まれる）を参照されたい。Ｋａｂａｔ  Ｅ．Ａ，Ｗｕ  Ｔ．Ｔ．，Ｐｅｒｒｙ  Ｈ．Ｍ．，Ｇｏｔｔｅｓｍａｎ  Ｋ．Ｓ．ａｎｄ  Ｆｏｅｌｌｅｒ  Ｃ．（１９９１）．Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ．５ｔｈ  ｅｄｉｔ．，ＮＩＨ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ  ｎｏ．９１−３２４２，ＵＳ  Ｄｅｐｔ．ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  Ｈｕｍａｎ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，ＤＣ（その全体が参照により組み込まれる）を参照されたい。
【００４６】
「交差競合（ｃｒｏｓｓ  ｃｏｍｐｅｔｅ）」は、標準的な競合結合アッセイにおいて、抗体又は他の結合剤がＣＤ１９に対する他の抗体又は結合剤の結合を妨げる能力を意味する。抗体又は他の結合剤がＣＤ１９に対する他の抗体又は結合分子の結合を妨げることができる能力又は程度、及び従って本発明に従って交差競合すると言うことができるか否かは、標準的な競合結合アッセイを用いて決定することができる。１つの好適なアッセイは、Ｂｉａｃｏｒｅ技術の使用（例えば、ＢＩＡｃｏｒｅ  ３０００機器（Ｂｉａｃｏｒｅ，Ｕｐｐｓａｌａ，Ｓｗｅｄｅｎ）を使用することによる）を含み、これは、表面プラズモン共鳴技術を用いて相互作用の程度を測定することができる。交差競合を測定する他のアッセイは、ＥＬＩＳＡベースの手法を用いる。交差競合に基づいた「エピトープ結合」抗体のためのハイスループットプロセスは、国際特許出願国際公開第２００３／４８７３１号パンフレットに記載されている。
【００４７】
用語「エピトープ」は、抗体に対する特異的結合が可能であるか又は別様に分子と相互作用する任意のタンパク質決定基を含む。エピトープ決定基は、一般に、アミノ酸又は炭水化物又は糖側鎖等の分子の化学的に活性な表面基群（ｓｕｒｆａｃｅ  ｇｒｏｕｐｉｎｇ）からなり、特定の三次元構造特性及び特定の荷電特性を有し得る。エピトープは、「線状」又は「立体構造的」であり得る。用語「線状エピトープ」は、タンパク質と相互作用分子（抗体等の）との相互作用地点の全てがタンパク質の一次アミノ酸配列に沿って線状に存在する（連続的）エピトープを指す。用語「立体構造的エピトープ」は、不連続アミノ酸が一緒になって三次元立体構造をとるエピトープを指す。立体構造的エピトープにおいて、相互作用地点は、互いに分離した、タンパク質上のアミノ酸残基の全域にわたって存在する。
【００４８】
「〜と同じエピトープに結合する」は、抗体又は他の結合剤がＣＤ１９に結合する能力、及び例示した抗体と同じエピトープを有することを意味する。ＣＤ１９に対する例示した抗体及び他の抗体のエピトープは、標準的なエピトープマッピング技術を用いて決定することができる。当技術分野で周知のエピトープマッピング技術としては、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．６６（Ｇｌｅｎｎ  Ｅ．Ｍｏｒｒｉｓ，Ｅｄ．，１９９６）Ｈｕｍａｎａ  Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，Ｎｅｗ  Ｊｅｒｓｅｙの方法におけるエピトープマッピングプロトコルが挙げられる。例えば、例として大多数のペプチド（タンパク質分子の一部に対応するペプチド）を固体担体上で同時に合成し、ペプチドが担体になおも結合している間、そのペプチドを抗体と反応させることにより、線状エピトープを決定することができる。そのような技術は、当技術分野で既知であり、例えば米国特許第４，７０８，８７１号明細書；Ｇｅｙｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ，（１９８４）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８：３９９８−４００２；Ｇｅｙｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ，（１９８５）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８２：７８−１８２；Ｇｅｙｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ，（１９８６）Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２３：７０９−７１５に記載されている。同様に、例えば水素／重水素交換、Ｘ線結晶構造解析法及び２次元核磁気共鳴法等によってアミノ酸の空間立体配座を決定することにより、立体構造的エピトープが容易に特定される。例えば、上記のエピトープマッピングプロトコルを参照されたい。タンパク質の抗原領域は、例えば、Ｏｘｆｏｒｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｇｒｏｕｐから入手可能なＯｍｉｇａバージョン１．０ソフトウエアプログラムを用いて計算されるもの等、標準的な抗原性及び疎水性プロットを用いて特定することもできる。このコンピュータープログラムは、抗原性プロファイルを決定するためにＨｏｐｐ／Ｗｏｏｄｓ法、Ｈｏｐｐ  ｅｔ  ａｌ，（１９８１）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ  ＵＳＡ  ７８：３８２４−３８２８；及び疎水性プロットのためにＫｙｔｅ−Ｄｏｏｌｉｔｔｌｅ技術、Ｋｙｔｅ  ｅｔ  ａｌ，（１９８２）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１５７：１０５−１３２を使用する。
【００４９】
実施形態
別の実施形態において、安定な凍結乾燥医薬製剤が本明細書で提供され、製剤は、約２０ｍｇ／ｍｌ〜約１２５ｍｇ／ｍｌの濃度の抗ＣＤ１９抗体、緩衝液、約０．００５％（ｗ／ｖ）〜約０．０６％（ｗ／ｖ）の濃度のポリソルベート、及び約６．０のｐＨを含み、製剤は、ａ）約１８０ｍＭ〜約２４０ｍＭの濃度のトレハロース、又は
ｂ）約１８０ｍＭ〜約２４０ｍＭの濃度のマンニトール及び約１０ｍＭ〜約５０ｍＭの濃度のショ糖
を更に含む。
【００５０】
別の実施形態において、安定な凍結乾燥医薬製剤が本明細書で提供され、製剤は、約２０ｍｇ／ｍｌ〜約１２５ｍｇ／ｍｌの濃度の抗ＣＤ１９抗体、クエン酸緩衝液又はリン酸緩衝液、約０．００５％（ｗ／ｖ）〜約０，０６％（ｗ／ｖ）の濃度のポリソルベート、及び約６．０のｐＨを含み、製剤は、ａ）約１８０ｍＭ〜約２４０ｍＭの濃度のトレハロース、又は
ｂ）約１８０ｍＭ〜約２４０ｍＭの濃度のマンニトール及び約１０ｍＭ〜約５０ｍＭの濃度のショ糖
を更に含む。
【００５１】
いくつかの実施形態において、製剤中の前記緩衝液は、１０〜７５ｍＭの濃度である。いくつかの実施形態において、製剤中の前記緩衝液は、２０〜５０ｍＭの濃度である。いくつかの実施形態において、製剤中の前記緩衝液は、２０〜４０ｍＭの濃度である。いくつかの実施形態において、製剤中の前記緩衝液は、２０〜３０ｍＭの濃度である。いくつかの実施形態において、製剤中の前記緩衝液は、約２５ｍＭの濃度である。いくつかの実施形態において、製剤中の前記緩衝液は、２５ｍＭの濃度である。いくつかの実施形態において、製剤中の前記緩衝液は、クエン酸緩衝液又はリン酸緩衝液である。
【００５２】
いくつかの実施形態において、製剤中の前記クエン酸緩衝液は、１０〜７５ｍＭの濃度である。いくつかの実施形態において、製剤中の前記クエン酸緩衝液は、２０〜５０ｍＭの濃度である。いくつかの実施形態において、製剤中の前記クエン酸緩衝液は、２０〜３０ｍＭの濃度である。いくつかの実施形態において、製剤中の前記クエン酸緩衝液は、約２５ｍＭの濃度である。いくつかの実施形態において、製剤中の前記クエン酸緩衝液は、２５ｍＭの濃度である。
【００５３】
いくつかの実施形態において、製剤中の前記リン酸緩衝液は、１０〜７５ｍＭの濃度である。いくつかの実施形態において、製剤中の前記リン酸緩衝液は、２０〜５０ｍＭの濃度である。いくつかの実施形態において、製剤中の前記リン酸緩衝液は、２０〜３０ｍＭの濃度である。いくつかの実施形態において、製剤中の前記リン酸緩衝液は、約２５ｍＭの濃度である。いくつかの実施形態において、製剤中の前記リン酸緩衝液は、２５ｍＭの濃度である。
【００５４】
別の実施形態において、安定な凍結乾燥医薬製剤が本明細書で提供され、製剤は、約２０ｍｇ／ｍｌ〜約１２５ｍｇ／ｍｌの濃度の抗ＣＤ１９抗体、２０〜５０ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液又はリン酸緩衝液、約０．００５％（ｗ／ｖ）〜約０，０６％（ｗ／ｖ）の濃度のポリソルベート、及び約６．０のｐＨを含み、製剤は、ａ）約１８０ｍＭ〜約２４０ｍＭの濃度のトレハロース、又は
ｂ）約１８０ｍＭ〜約２４０ｍＭの濃度のマンニトール及び約１０ｍＭ〜約５０ｍＭの濃度のショ糖
を更に含む。
【００５５】
別の実施形態において、安定な凍結乾燥医薬製剤が本明細書で提供され、製剤は、約２０ｍｇ／ｍｌ〜約１２５ｍｇ／ｍｌの濃度の抗ＣＤ１９抗体、約２５ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液又はリン酸緩衝液、約０．００５％（ｗ／ｖ）〜約０，０６％（ｗ／ｖ）の濃度のポリソルベート、及び約６．０のｐＨを含み、製剤は、ａ）約１８０ｍＭ〜約２４０ｍＭの濃度のトレハロース、又は
ｂ）約１８０ｍＭ〜約２４０ｍＭの濃度のマンニトール及び約１０ｍＭ〜約５０ｍＭの濃度のショ糖
を更に含む。
【００５６】
別の実施形態において、安定な凍結乾燥医薬製剤が本明細書で提供され、製剤は、約２０ｍｇ／ｍｌ〜約１２５ｍｇ／ｍｌの濃度の抗ＣＤ１９抗体、約２５ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液、約０．００５％（ｗ／ｖ）〜約０，０６％（ｗ／ｖ）の濃度のポリソルベート、及び約６．０のｐＨを含み、製剤は、ａ）約１８０ｍＭ〜約２４０ｍＭの濃度のトレハロース、又は
ｂ）約１８０ｍＭ〜約２４０ｍＭの濃度のマンニトール及び約１０ｍＭ〜約５０ｍＭの濃度のショ糖
を更に含む。
【００５７】
別の実施形態において、安定な凍結乾燥医薬製剤が本明細書で提供され、製剤は、約２０ｍｇ／ｍｌ〜約１２５ｍｇ／ｍｌの濃度の抗ＣＤ１９抗体、約２５ｍＭの濃度のリン酸緩衝液、約０．００５％（ｗ／ｖ）〜約０，０６％（ｗ／ｖ）の濃度のポリソルベート、及び約６．０のｐＨを含み、製剤は、ａ）約１８０ｍＭ〜約２４０ｍＭの濃度のトレハロース、又は
ｂ）約１８０ｍＭ〜約２４０ｍＭの濃度のマンニトール及び約１０ｍＭ〜約５０ｍＭの濃度のショ糖
を更に含む。
【００５８】
更なる実施形態において、前記抗ＣＤ１９抗体は、完全長抗体である。更なる実施形態において、前記抗ＣＤ１９抗体は、ＩｇＧＩ、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３又はＩｇＧ４抗体である。
【００５９】
別の実施形態において、前記抗ＣＤ１９抗体は、ヒト化又はヒト抗体である。更なる実施形態において、前記抗ＣＤ１９抗体は、抗原結合領域を含む抗体断片である。更なる実施形態において、前記抗体断片は、Ｆａｂ又はＦ（ａｂ’）２断片である。
【００６０】
別の実施形態において、前記安定な凍結乾燥医薬製剤は、２〜８℃で少なくとも６カ月間、少なくとも１２カ月間、少なくとも１８カ月間、少なくとも２４カ月間又は少なくとも３６カ月間にわたって安定である。
【００６１】
別の実施形態において、前記安定な凍結乾燥医薬製剤は、約４０℃で少なくとも約１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６週間又はそれを超えて安定である。特定の実施形態において、前記安定な凍結乾燥医薬製剤は、約４０℃で少なくとも約１、２、３、４、５カ月間又はそれを超えて安定である。特定の実施形態において、前記安定な凍結乾燥医薬製剤は、約２５℃で少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２カ月間又それを超えて安定である。特定の実施形態において、前記安定な凍結乾燥医薬製剤は、約５℃で少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８カ月間又はそれを超えて安定である。特定の実施形態において、前記安定な凍結乾燥医薬製剤は、約５＋／−３℃で少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８カ月間又はそれを超えて安定である。特定の実施形態において、前記安定な凍結乾燥医薬製剤は、約−２０℃で少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８カ月間又はそれを超えて安定である。特定の実施形態において、前記安定な凍結乾燥医薬製剤は、５℃又は−２０℃で少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８カ月間又はそれを超えて安定である。
【００６２】
更なる実施形態において、製剤中の抗ＣＤ１９抗体は、保管後、その生物学的活性の少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％を保持する。いくつかの実施形態において、生物学的活性は、ＣＤ１９に結合する抗体により測定される。いくつかの実施形態において、生物学的活性は、ＦＡＣＳ  ＣＤ１９結合アッセイにおいて、ＣＤ１９に結合する抗体により測定される。いくつかの実施形態において、生物学的活性は、前記抗ＣＤ１９抗体のＡＤＣＣ活性により測定される。いくつかの実施形態において、安定な凍結乾燥医薬製剤は、無菌である。
【００６３】
更なる実施形態において、前記安定な凍結乾燥医薬製剤は、対象に投与するのに好適である。更なる実施形態において、前記前記安定な凍結乾燥医薬製剤は、静脈内（ＩＶ）投与又は皮下投与に好適である。
【００６４】
別の態様において、本明細書に開示した安定な凍結乾燥医薬製剤を保持する容器を含む製品が本明細書に提供される。実施形態において、前記容器は、ガラス製バイアル又は金属合金容器である。更なる実施形態において、金属合金は、３１６Ｌステンレス鋼又はハステロイである。
【００６５】
別の態様において、有効量の本明細書に開示した製剤を対象に投与するステップを含む、対象における疾病又は疾患の処置方法が本明細書で提供され、疾病又は疾患は、癌である。別の態様において、有効量の前記製剤を対象に投与するステップを含む、対象における疾病又は疾患の処置のための、本明細書に開示した安定な凍結乾燥医薬製剤の使用が本明細書で提供され、疾病又は疾患は、癌である。更なる態様において、有効量の前記製剤を対象に投与するステップを含む、対象における疾病又は疾患の処置のための医薬の製造のための、本明細書に開示した安定な凍結乾燥医薬製剤の使用が本明細書で提供され、疾病又は疾患は、癌である。一実施形態において、疾病又は疾患は、非ホジキンリンパ腫（本明細書に記載される各サブタイプを含む）、慢性リンパ性白血病及び／又は急性リンパ性白血病ｓである。実施形態において、非ホジキンリンパ腫は、濾胞性リンパ腫、小リンパ球性リンパ腫、粘膜関連リンパ組織リンパ腫、周辺帯リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、及びマントル細胞リンパ腫からなる群から選択される。
【００６６】
いくつかの実施形態において、安定な凍結乾燥医薬製剤が本明細書で提供され、製剤は、約２０ｍｇ／ｍｌ〜約１２５ｍｇ／ｍｌの濃度の抗ＣＤ１９抗体、約２５ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液、約０．００５％（ｗ／ｖ）〜約０，０６％（ｗ／ｖ）の濃度のポリソルベート、及び約６．０のｐＨを含み、製剤は、ａ）約１８０ｍＭ〜約２４０ｍＭの濃度のトレハロース、又は
ｂ）約１８０ｍＭ〜約２４０ｍＭの濃度のマンニトール及び約１０ｍＭ〜約５０ｍＭの濃度のショ糖
を更に含み、前記抗ＣＤ１９抗体は、配列ＳＹＶＭＨ（配列番号１）のＨＣＤＲ１領域、配列ＮＰＹＮＤＧ（配列番号２）のＨＣＤＲ２領域、配列ＧＴＹＹＹＧＴＲＶＦＤＹ（配列番号３）のＨＣＤＲ３領域、配列ＲＳＳＫＳＬＱＮＶＮＧＮＴＹＬＹ（配列番号４）のＬＣＤＲ１領域、配列ＲＭＳＮＬＮＳ（配列番号５）のＬＣＤＲ２領域、及び配列ＭＱＨＬＥＹＰＩＴ（配列番号６）のＬＣＤＲ３領域を含む。
【００６７】
いくつかの実施形態において、安定な凍結乾燥医薬製剤が本明細書で提供され、製剤は、約２０ｍｇ／ｍｌ〜約１２５ｍｇ／ｍｌの濃度の抗ＣＤ１９抗体、約２５ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液、約０．００５％（ｗ／ｖ）〜約０，０６％（ｗ／ｖ）の濃度のポリソルベート、及び約６．０のｐＨを含み、製剤は、ａ）約１８０ｍＭ〜約２４０ｍＭの濃度のトレハロース、又は
ｂ）約１８０ｍＭ〜約２４０ｍＭの濃度のマンニトール及び約１０ｍＭ〜約５０ｍＭの濃度のショ糖
を更に含み、前記抗ＣＤ１９抗体は、配列
2019524671.tif 000009
の可変重鎖と、配列
2019524671.tif 000010
の可変軽鎖とを含む。
【００６８】
いくつかの実施形態において、安定な凍結乾燥医薬製剤が本明細書で提供され、製剤は、約２０ｍｇ／ｍｌ〜約１２５ｍｇ／ｍｌの濃度の抗ＣＤ１９抗体、約２５ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液、約０．００５％（ｗ／ｖ）〜約０，０６％（ｗ／ｖ）の濃度のポリソルベート、及び約６．０のｐＨを含み、製剤は、ａ）約１８０ｍＭ〜約２４０ｍＭの濃度のトレハロース、又は
ｂ）約１８０ｍＭ〜約２４０ｍＭの濃度のマンニトール及び約１０ｍＭ〜約５０ｍＭの濃度
のショ糖を更に含み、前記抗ＣＤ１９抗体は、配列
2019524671.tif 000011
の重鎖定常ドメインと、配列
2019524671.tif 000012
の軽鎖定常ドメインとを含む。
【００６９】
いくつかの実施形態において、安定な凍結乾燥医薬製剤が本明細書で提供され、製剤は、約４０ｍｇ／ｍｌの濃度の抗ＣＤ１９抗体、約２５ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液、約０．０２％（ｗ／ｖ）の濃度のポリソルベート、及び約６．０のｐＨを含み、製剤は、
ａ）約２００ｍＭの濃度のトレハロース、又は
ｂ）約２１９ｍＭの濃度のマンニトール及び約２９ｍＭの濃度のショ糖
を更に含み、前記抗ＣＤ１９抗体は、配列ＳＹＶＭＨ（配列番号１）のＨＣＤＲ１領域、配列ＮＰＹＮＤＧ（配列番号２）のＨＣＤＲ２領域、配列ＧＴＹＹＹＧＴＲＶＦＤＹ（配列番号３）のＨＣＤＲ３領域、配列ＲＳＳＫＳＬＱＮＶＮＧＮＴＹＬＹ（配列番号４）のＬＣＤＲ１領域、配列ＲＭＳＮＬＮＳ（配列番号５）のＬＣＤＲ２領域、及び配列ＭＱＨＬＥＹＰＩＴ（配列番号６）のＬＣＤＲ３領域を含む。
【００７０】
いくつかの実施形態において、安定な凍結乾燥医薬製剤が本明細書で提供され、製剤は、約４０ｍｇ／ｍｌの濃度の抗ＣＤ１９抗体、約２５ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液、約０．０２％（ｗ／ｖ）の濃度のポリソルベート、及び約６．０のｐＨを含み、製剤は、
ａ）約２００ｍＭの濃度のトレハロース、又は
ｂ）約２１９ｍＭの濃度のマンニトール及び約２９ｍＭの濃度のショ糖
を更に含み、前記抗ＣＤ１９抗体は、配列
2019524671.tif 000013
の可変重鎖と、配列
2019524671.tif 000014
の可変軽鎖とを含む。
【００７１】
いくつかの実施形態において、安定な凍結乾燥医薬製剤が本明細書で提供され、製剤は、約４０ｍｇ／ｍｌの濃度の抗ＣＤ１９抗体、約２５ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液、約０．０２％（ｗ／ｖ）の濃度のポリソルベート、及び約６．０のｐＨを含み、製剤は、
ａ）約２００ｍＭの濃度のトレハロース、又は
ｂ）約２１９ｍＭの濃度のマンニトール及び約２９ｍＭの濃度のショ糖
を更に含み、前記抗ＣＤ１９抗体は、配列
2019524671.tif 000015
の重鎖定常ドメインと、配列
2019524671.tif 000016
の軽鎖定常ドメインとを含む。
【００７２】
いくつかの実施形態において、安定な凍結乾燥医薬製剤が本明細書で提供され、製剤は、約４０ｍｇ／ｍｌの濃度の抗ＣＤ１９抗体、約２５ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液、約０．０２％（ｗ／ｖ）の濃度のポリソルベート、及び約６．０のｐＨを含み、製剤は、
ａ）約２００ｍＭの濃度のトレハロース、又は
ｂ）約２１９ｍＭの濃度のマンニトール及び約２９ｍＭの濃度のショ糖
を更に含み、前記抗ＣＤ１９抗体は、配列
2019524671.tif 000017
に対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％同一性を有する可変重鎖と、配列
2019524671.tif 000018
に対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％同一性を有する可変軽鎖とを含む。
【００７３】
いくつかの実施形態において、安定な凍結乾燥医薬製剤が本明細書で提供され、製剤は、約４０ｍｇ／ｍｌの濃度の抗ＣＤ１９抗体、約２５ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液、約０．０２％（ｗ／ｖ）の濃度のポリソルベート、及び約６．０のｐＨを含み、製剤は、
ａ）約２００ｍＭの濃度のトレハロース、又は
ｂ）約２１９ｍＭの濃度のマンニトール及び約２９ｍＭの濃度のショ糖
を更に含み、前記抗ＣＤ１９抗体は、配列
2019524671.tif 000019
に対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％同一性を有する重鎖定常ドメインと、配列
2019524671.tif 000020
に対して少なくとも８５％、８６％、８７％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％同一性を有する軽鎖定常ドメインとを含む。
【００７４】
いくつかの実施形態において、安定な凍結乾燥医薬製剤が本明細書で提供され、製剤は、約４０ｍｇ／ｍｌの濃度の抗ＣＤ１９抗体、約２５ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液、約０．０２％（ｗ／ｖ）の濃度のポリソルベート、及び約６．０のｐＨを含み、製剤は、約２００ｍＭの濃度のトレハロースを更に含み、前記抗ＣＤ１９抗体は、配列ＳＹＶＭＨ（配列番号１）のＨＣＤＲ１領域、配列ＮＰＹＮＤＧ（配列番号２）のＨＣＤＲ２領域、配列ＧＴＹＹＹＧＴＲＶＦＤＹ（配列番号３）のＨＣＤＲ３領域、配列ＲＳＳＫＳＬＱＮＶＮＧＮＴＹＬＹ（配列番号４）のＬＣＤＲ１領域、配列ＲＭＳＮＬＮＳ（配列番号５）のＬＣＤＲ２領域、及び配列ＭＱＨＬＥＹＰＩＴ（配列番号６）のＬＣＤＲ３領域を含む。
【００７５】
いくつかの実施形態において、安定な凍結乾燥医薬製剤が本明細書で提供され、製剤は、約４０ｍｇ／ｍｌの濃度の抗ＣＤ１９抗体、約２５ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液、約０．０２％（ｗ／ｖ）の濃度のポリソルベート、及び約６．０のｐＨを含み、製剤は、約２１９ｍＭの濃度のマンニトール及び約２９ｍＭの濃度のショ糖を更に含み、前記抗ＣＤ１９抗体は、配列ＳＹＶＭＨ（配列番号１）のＨＣＤＲ１領域、配列ＮＰＹＮＤＧ（配列番号２）のＨＣＤＲ２領域、配列ＧＴＹＹＹＧＴＲＶＦＤＹ（配列番号３）のＨＣＤＲ３領域、配列ＲＳＳＫＳＬＱＮＶＮＧＮＴＹＬＹ（配列番号４）のＬＣＤＲ１領域、配列ＲＭＳＮＬＮＳ（配列番号５）のＬＣＤＲ２領域、及び配列ＭＱＨＬＥＹＰＩＴ（配列番号６）のＬＣＤＲ３領域を含む。
【００７６】
いくつかの実施形態において、安定な凍結乾燥医薬製剤が本明細書で提供され、製剤は、約４０ｍｇ／ｍｌの濃度の抗ＣＤ１９抗体、約２５ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液、約０．０２％（ｗ／ｖ）の濃度のポリソルベート、及び約６．０のｐＨを含み、製剤は、約２００ｍＭの濃度のトレハロースを更に含み、前記抗ＣＤ１９抗体は、配列
2019524671.tif 000021
の可変重鎖と、配列
2019524671.tif 000022
の可変軽鎖とを含む。
【００７７】
いくつかの実施形態において、安定な凍結乾燥医薬製剤が本明細書で提供され、製剤は、約４０ｍｇ／ｍｌの濃度の抗ＣＤ１９抗体、約２５ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液、約０．０２％（ｗ／ｖ）の濃度のポリソルベート、及び約６．０のｐＨを含み、製剤は、約２１９ｍＭの濃度のマンニトール及び約２９ｍＭの濃度のショ糖を更に含み、前記抗ＣＤ１９抗体は、配列
2019524671.tif 000023
の可変重鎖と、配列
2019524671.tif 000024
の可変軽鎖とを含む。
【００７８】
いくつかの実施形態において、安定な凍結乾燥医薬製剤が本明細書で提供され、製剤は、約４０ｍｇ／ｍｌの濃度の抗ＣＤ１９抗体、約２５ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液、約０．０２％（ｗ／ｖ）の濃度のポリソルベート、及び約６．０のｐＨを含み、製剤は、約２００ｍＭの濃度のトレハロースを更に含み、前記抗ＣＤ１９抗体は、配列
2019524671.tif 000025
の重鎖定常ドメインと、配列
2019524671.tif 000026
の軽鎖定常ドメインとを含む。
【００７９】
いくつかの実施形態において、安定な凍結乾燥医薬製剤が本明細書で提供され、製剤は、約４０ｍｇ／ｍｌの濃度の抗ＣＤ１９抗体、約２５ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液、約０．０２％（ｗ／ｖ）の濃度のポリソルベート、及び約６．０のｐＨを含み、製剤は、約２１９ｍＭの濃度のマンニトール及び約２９ｍＭの濃度のショ糖を更に含み、前記抗ＣＤ１９抗体は、配列
2019524671.tif 000027
の重鎖定常ドメインと、配列
2019524671.tif 000028
の軽鎖定常ドメインとを含む。
【００８０】
いくつかの実施形態において、安定な凍結乾燥医薬製剤が本明細書で提供され、製剤は、約４０ｍｇ／ｍｌの濃度の抗ＣＤ１９抗体、２０〜４０ｍＭの濃度のリン酸緩衝液、約０．０２％（ｗ／ｖ）の濃度のポリソルベート、及び約６．０のｐＨを含み、製剤は、約２００ｍＭの濃度のトレハロースを更に含み、前記抗ＣＤ１９抗体は、配列
2019524671.tif 000029
の重鎖定常ドメインと、配列
2019524671.tif 000030
の軽鎖定常ドメインとを含む。
【００８１】
いくつかの実施形態において、安定な凍結乾燥医薬製剤が本明細書で提供され、製剤は、約４０ｍｇ／ｍｌの濃度の抗ＣＤ１９抗体、２０〜４０ｍＭの濃度のリン酸緩衝液、約０．０２％（ｗ／ｖ）の濃度のポリソルベート、及び約６．０のｐＨを含み、製剤は、約２１９ｍＭの濃度のマンニトール及び約２９ｍＭの濃度のショ糖を更に含み、前記抗ＣＤ１９抗体は、配列
2019524671.tif 000031
の重鎖定常ドメインと、配列
2019524671.tif 000032
の軽鎖定常ドメインとを含む。
【００８２】
いくつかの実施形態において、安定な凍結乾燥医薬製剤が本明細書で提供され、製剤は、約４０ｍｇ／ｍｌの濃度の抗ＣＤ１９抗体、約２５ｍＭの濃度のリン酸緩衝液、約０．０２％（ｗ／ｖ）の濃度のポリソルベート、及び約６．０のｐＨを含み、製剤は、約２００ｍＭの濃度のトレハロースを更に含み、前記抗ＣＤ１９抗体は、配列
2019524671.tif 000033
の重鎖定常ドメインと、配列
2019524671.tif 000034
の軽鎖定常ドメインとを含む。
【００８３】
いくつかの実施形態において、安定な凍結乾燥医薬製剤が本明細書で提供され、製剤は、約４０ｍｇ／ｍｌの濃度の抗ＣＤ１９抗体、約２５ｍＭの濃度のリン酸緩衝液、約０．０２％（ｗ／ｖ）の濃度のポリソルベート、及び約６．０のｐＨを含み、製剤は、約２１９ｍＭの濃度のマンニトール及び約２９ｍＭの濃度のショ糖を更に含み、前記抗ＣＤ１９抗体は、配列
2019524671.tif 000035
の重鎖定常ドメインと、配列
2019524671.tif 000036
の軽鎖定常ドメインとを含む。
【００８４】
いくつかの実施形態において、安定な凍結乾燥医薬製剤が本明細書で提供され、製剤は、４０ｍｇ／ｍｌの濃度の抗ＣＤ１９抗体、２５ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液、０．０２％（ｗ／ｖ）の濃度のポリソルベート、及び６．０のｐＨを含み、製剤は、２００ｍＭの濃度のトレハロースを更に含み、前記抗ＣＤ１９抗体は、配列ＳＹＶＭＨ（配列番号１）のＨＣＤＲ１領域、配列ＮＰＹＮＤＧ（配列番号２）のＨＣＤＲ２領域、配列ＧＴＹＹＹＧＴＲＶＦＤＹ（配列番号３）のＨＣＤＲ３領域、配列ＲＳＳＫＳＬＱＮＶＮＧＮＴＹＬＹ（配列番号４）のＬＣＤＲ１領域、配列ＲＭＳＮＬＮＳ（配列番号５）のＬＣＤＲ２領域、及び配列ＭＱＨＬＥＹＰＩＴ（配列番号６）のＬＣＤＲ３領域を含む。
【００８５】
いくつかの実施形態において、安定な凍結乾燥医薬製剤が本明細書で提供され、製剤は、４０ｍｇ／ｍｌの濃度の抗ＣＤ１９抗体、２５ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液、０．０２％（ｗ／ｖ）の濃度のポリソルベート、及び６．０のｐＨを含み、製剤は、２１９ｍＭの濃度のマンニトール及び２９ｍＭの濃度のショ糖を更に含み、前記抗ＣＤ１９抗体は、配列ＳＹＶＭＨ（配列番号１）のＨＣＤＲ１領域、配列ＮＰＹＮＤＧ（配列番号２）のＨＣＤＲ２領域、配列ＧＴＹＹＹＧＴＲＶＦＤＹ（配列番号３）のＨＣＤＲ３領域、配列ＲＳＳＫＳＬＱＮＶＮＧＮＴＹＬＹ（配列番号４）のＬＣＤＲ１領域、配列ＲＭＳＮＬＮＳ（配列番号５）のＬＣＤＲ２領域、及び配列ＭＱＨＬＥＹＰＩＴ（配列番号６）のＬＣＤＲ３領域を含む。
【００８６】
いくつかの実施形態において、安定な凍結乾燥医薬製剤が本明細書で提供され、製剤は、４０ｍｇ／ｍｌの濃度の抗ＣＤ１９抗体、２５ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液、０．０２％（ｗ／ｖ）の濃度のポリソルベート、及び６．０のｐＨを含み、製剤は、２００ｍＭの濃度のトレハロースを更に含み、前記抗ＣＤ１９抗体は、配列
2019524671.tif 000037
の可変重鎖及び配列
2019524671.tif 000038
の可変軽鎖を含む。
【００８７】
いくつかの実施形態において、安定な凍結乾燥医薬製剤が本明細書で提供され、製剤は、４０ｍｇ／ｍｌの濃度の抗ＣＤ１９抗体、２５ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液、０．０２％（ｗ／ｖ）の濃度のポリソルベート、及び６．０のｐＨを含み、製剤は、２１９ｍＭの濃度のマンニトール及び２９ｍＭの濃度のショ糖を更に含み、前記抗ＣＤ１９抗体は、配列
2019524671.tif 000039
の可変重鎖と、配列
2019524671.tif 000040
の可変軽鎖とを含む。
【００８８】
いくつかの実施形態において、安定な凍結乾燥医薬製剤が本明細書で提供され、製剤は、４０ｍｇ／ｍｌの濃度の抗ＣＤ１９抗体、２５ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液、０．０２％（ｗ／ｖ）の濃度のポリソルベート、及び６．０のｐＨを含み、製剤は、２００ｍＭの濃度のトレハロースを更に含み、前記抗ＣＤ１９抗体は、配列
2019524671.tif 000041
の重鎖定常ドメインと、配列
2019524671.tif 000042
の軽鎖定常ドメインとを含む。
【００８９】
いくつかの実施形態において、安定な凍結乾燥医薬製剤が本明細書で提供され、製剤は、４０ｍｇ／ｍｌの濃度の抗ＣＤ１９抗体、２５ｍＭの濃度のリン酸緩衝液、０．０２％（ｗ／ｖ）の濃度のポリソルベート、及び６．０のｐＨを含み、製剤は、２００ｍＭの濃度のトレハロースを更に含み、前記抗ＣＤ１９抗体は、配列
2019524671.tif 000043
の重鎖定常ドメインと、配列
2019524671.tif 000044
の軽鎖定常ドメインとを含む。
【００９０】
いくつかの実施形態において、安定な凍結乾燥医薬製剤が本明細書で提供され、製剤は、４０ｍｇ／ｍｌの濃度の抗ＣＤ１９抗体、２５ｍＭの濃度のクエン酸緩衝液、０．０２％（ｗ／ｖ）の濃度のポリソルベート、及び６．０のｐＨを含み、製剤は、２１９ｍＭの濃度のマンニトール及び２９ｍＭの濃度のショ糖を更に含み、前記抗ＣＤ１９抗体は、配列
2019524671.tif 000045
の重鎖定常ドメインと、配列
2019524671.tif 000046
の軽鎖定常ドメインとを含む。
【００９１】
いくつかの実施形態において、安定な凍結乾燥医薬製剤が本明細書で提供され、製剤は、４０ｍｇ／ｍｌの濃度の抗ＣＤ１９抗体、２５ｍＭの濃度のリン酸緩衝液、０．０２％（ｗ／ｖ）の濃度のポリソルベート、及び６．０のｐＨを含み、製剤は、２１９ｍＭの濃度のマンニトール及び２９ｍＭの濃度のショ糖を更に含み、前記抗ＣＤ１９抗体は、配列
2019524671.tif 000047
の重鎖定常ドメインと、配列
2019524671.tif 000048
の軽鎖定常ドメインとを含む。
【実施例】
【００９２】
作業実施例１：ＭＯＲ２０８の生物物理学的特徴付け
特徴付け、予備処方スクリーニング及び高濃度実現可能性を目的として、ＭＯＲ２０８の生物物理学的特性を分析した。
【００９３】
ＭＯＲ２０８の構造安定性を評価するために、ＤＳＦ（示差走査型蛍光定量法）及びＣＤ分光法を用いた熱融解実験を得た。ＭＯＲ２０８サンプルを１．１ｍｇ／ｍＬの濃度に希釈した。疎水性染料シプロオレンジを加えてタンパク質の変性を検出し、各融解曲線を生成した。サンプルは、４７℃という比較的低い融解温度を示し、これは、蛍光の段階的増大により示された。
【００９４】
ＭＯＲ２０８は、Ｂ細胞及びその前駆体上のＣＤ１９に結合するヒト化モノクローナル抗体である。Ｆｃ領域は、操作（Ｓ２３９Ｄ／Ｉ３３２Ｅ）されて、Ｂ細胞枯渇を支持するエフェクター機能が向上されている。現在有効な仮説によれば、このＦｃ領域の構成は、ＣＨ２ドメイン柔軟性をもたらし、それによりＡＤＣＣ効力が向上するが、Ｆｃドメインの融解温度の低下が不随し得る。
【００９５】
更に、ＤＳＣ、ＲＡＬＳ及びＩＴＦを使用してｐＨスクリーニング研究を行い、タンパク質の最も安定なｐＨ範囲を特定した。３．５〜８．０のｐＨ範囲がこの研究に含まれていた。所望のｐＨ範囲を含む混合緩衝液系中において測定を行った。ＭＯＲ２０８の最も安定なｐＨ範囲は、得られた結果に基づいてｐＨ６．０〜７．０と特定された。
【００９６】
従って、ｐＨ６．０〜７．０のｐＨ範囲で十分な緩衝能を提供し、非経口使用において薬学的に許容可能な２つの緩衝液系が特定された。
−  クエン酸（ｐＨ５．５；６．０）
−  ヒスチジン（ｐＨ６．０；６．５；７．０）
【００９７】
２５ｍＭクエン酸及び２５ｍＭヒスチジン緩衝液中でのＭＯＲ２０８の熱安定性を試験するために、更なるＤＳＣ、ＲＡＬＳ及びＩＴＦ測定を行った。５．５のｐＨのクエン酸のみが有意により低い遷移温度を示し、試験した他の全サンプルは、同等の熱安定性を示した。この結論は、ＲＡＬＳ及びＩＴＦ試験によっても確認された。
【００９８】
更に、ＭＯＲ２０８の熱安定性に対するイオン強度、糖、ポリオール及びポリソルベート２０の影響を試験した。ＮａＣｌ又は糖又はポリソルベート２０を含むサンプルの製剤に対し、ｐＨ６．０の２５ｍＭクエン酸緩衝液を基本緩衝液系として選択した。この測定は、５２℃の第１の遷移温度に基づいて、ＮａＣｌの添加がＭＯＲ２０８の熱安定性を増大させることを示した。この観察事項は、ＩＴＦ測定により確認された。ＲＡＬＳ試験の結果は、ＭＯＲ２０８の熱安定性に対するＮａＣｌのいかなる影響も特定しなかった。
【００９９】
ＭＯＲ２０８の熱安定性に対する糖（トレハロース及びショ糖）及びマンニトールの影響は、２００ｍＭトレハロース、２１０ｍＭショ糖、及び１８０ｍＭマンニトール／４５ｍＭショ糖混合物の濃度を用いて試験した。これらの濃度は、製剤を等張の範囲内にシフトするように選択した。ＤＳＣ、ＲＡＬＳ及びＩＴＦ試験の結果は、トレハロース及びショ糖がＭＯＲ２０８の熱安定性に対する同等の影響を有する一方、マンニトール／ショ糖混合物が第１の遷移温度を僅かにおよそ０．８℃だけ低下させることを示した。
【０１００】
０．０２％、０．０４％、０．０８％及び０．１２％の濃度を用いて、ＭＯＲ２０８の熱安定性に対するポリソルベート２０の影響を試験した。ＤＳＣ及びＲＡＬＳ測定の結果は、試験濃度において、ＭＯＲ２０８の熱安定性に対するポリソルベート２０の有意な影響を示さなかった。
【０１０１】
１、５及び１０ｍＭの濃度を用いて、ＭＯＲ２０８の熱安定性に対するＭｇＣｌ２の影響を試験した。ＤＳＣ及びＲＡＬＳ測定の結果は、試験濃度において、ＭＯＲ２０８の熱安定性に対するＭｇＣｌ２の有意な影響を示さなかった。
【０１０２】
作業実施例２：ＭＯＲ２０８の液体製剤の安定性研究
ＭＯＲ２０８の生物物理学的特徴付けに基づき、安定性研究において以下の６つの異なる液体製剤を試験した。
【０１０３】
安定性研究のために以下の製剤を選択した。
・製剤Ｆ１：１０ｍＭクエン酸、ｐＨ６．０＋０．０１％  ＰＳ  ２０＋１５０ｍＭ  ＮａＣｌ
・製剤Ｆ２：２５ｍＭクエン酸、ｐＨ６．０＋０．０２％  ＰＳ  ２０＋１２５ｍＭ  ＮａＣｌ
・製剤Ｆ３：２５ｍＭクエン酸、ｐＨ６．０＋０．０２％  ＰＳ  ２０＋２００ｍＭトレハロース
・製剤Ｆ４：２５ｍＭクエン酸、ｐＨ６．０＋０．０２％  ＰＳ  ２０＋２１０ｍＭショ糖
・製剤Ｆ５：２５ｍＭヒスチジン、ｐＨ６．０＋０．０２％  ＰＳ  ２０＋１４０ｍＭ  ＮａＣｌ
・製剤Ｆ６：２５ｍＭヒスチジン、ｐＨ６．０＋０．０２％  ＰＳ  ２０＋２３０ｍＭトレハロース
・製剤Ｆ７：２５ｍＭスクシナト（Ｓｕｃｃｉｎａｔ）、ｐＨ６．０＋０．０２％  ＰＳ  ２０＋２１５ｍＭトレハロース
・製剤Ｆ８：２５ｍＭヒスチジン、ｐＨ６．５＋０．０２％  ＰＳ  ２０＋２４０ｍＭトレハロース
【０１０４】
全製剤のタンパク質濃度は、２０ｍｇ／ｍＬであった。各製剤から１０ｍＬを１０ｍＬバイアルに満たし、被覆ゴム栓で閉鎖し、２５℃の管理温度で１２週間にわたり逆さまで保管した。保管前（ｔ０）、４、８及び１２週間後に分析試験を行った。
【０１０５】
製剤１、３、５及び７は、他の製剤と比較して、１２週間にわたってより少ないサブビジブル粒子を生成した。粒子は、ＭＦＩにより測定した。製剤５は、＞１０μｍ〜＞２５μｍの範囲内で最小のＳＶＰ数を示した。
【０１０６】
製剤の凝集体及びモノマーレベルをＨＰ  ＳＥＣにより試験した。製剤２、３、７及び８は、他の製剤と比較して、１２週間にわたって凝集体のより高い増加を示した。
【０１０７】
製剤４の重量オスモル濃度は、４週間の保管後に増大し、これは、製剤中に含まれるショ糖の分解を示す可能性が最も高い。
【０１０８】
ｐＨのシフトも製剤４中のショ糖の分解を示す。
【０１０９】
更なるＨＩＣ試験は、製剤６、７及び８が、他の製剤と比較して、ピーク３領域％のより強い低下を示すことを示した。特に製剤８は、１２週間後、６６．１％（初期値）から５２．２％への強い低下を示した。
【０１１０】
ＭＯＲ２０８の物理化学的特徴付けにより、ｐＨ６．０及び７．０の最も安定なｐＨ範囲が特定された。
【０１１１】
言及したｐＨ範囲内の薬学的に許容可能な緩衝液系としてクエン酸、ヒスチジン及びコハク酸緩衝液を選択した。全緩衝液系は、２０ｍｇ／ｍＬのタンパク質濃度において十分な緩衝能を提供する２５ｍＭの濃度で使用した。１２５ｍＭの最小濃度のＮａＣｌの添加は、ＭＯＲ２０８の熱安定性に対して弱い陽性作用を有した（ＤＳＣデータに基づく）。ショ糖、トレハロース、マンニトール／ショ糖及びポリソルベート２０の添加は、ＭＯＲ２０８の熱安定性を変化させなかった。
【０１１２】
分析結果に基づき、最も安定な製剤は、Ｆ１、Ｆ３及びＦ５であると特定された。
・製剤Ｆ１：１０ｍＭクエン酸、ｐＨ６．０＋０．０１％  ＰＳ  ２０＋１５０ｍＭ  ＮａＣｌ
・製剤Ｆ３：２５ｍＭクエン酸、ｐＨ６．０＋０．０２％  ＰＳ  ２０＋２００ｍＭトレハロース
・製剤Ｆ５：２５ｍＭヒスチジン、ｐＨ６．０＋０．０２％  ＰＳ  ２０＋１４０ｍＭ  ＮａＣｌ
【０１１３】
これらの３つの製剤のサンプルを更に２５℃で８カ月間まで保持し、再度試験した。製剤１及び５は、最も高い安定性を提供したが、全液体製剤は、８カ月後に薬局方規格を上回るサブビジブル粒子を生成した（１バイアル当たりＮＭＴ  ６０００粒子≧１０μｍ、及び１バイアル当たりＮＭＴ  ６００粒子≧２５μｍ）。従って、２〜８℃で少なくとも２４カ月間の所望の保存期間は、２０ｍｇ／ｍＬタンパク質を有する試験された液体製剤の１つにより達成されなかった。
【０１１４】
この事実は、凍結乾燥剤形の開発を開始する決定を推進した。
【０１１５】
作業実施例３：凍結乾燥実現可能性の研究
４０ｍｇ／ｍｌの濃度のＭＯＲ２０８を用いた凍結乾燥実現可能性研究には、製剤３及び新たな製剤９が含まれていた。
【０１１６】
製剤３：２５ｍＭクエン酸
２００ｍＭトレハロース二水和物
０．０２％ポリソルベート２０
ｐＨ６．０
【０１１７】
製剤９：２５ｍＭクエン酸
２１９ｍＭマンニトール
２９ｍＭショ糖
０．０２％ポリソルベート２０
ｐＨ６．０
【０１１８】
凍結乾燥薬物製品の外観
両方の製剤の凍結乾燥ケーキ（ｌｙｏ  ｃａｋｅ）の外観は、許容できるものであった。トレハロース含有製剤は、完全に非晶質であり、より高い収縮度を示したが、これは、単に見かけ上の観察事項であり、一般に製品の品質又は安定性と関連性がない。マンニトール含有製剤は、部分的に結晶質であり、収縮のない、より高い医薬的上質性のケーキを提供する。
【０１１９】
凍結乾燥ＭＯＲ２０８の品質を試験し、凍結乾燥前の製品品質と比較した。下記の表１に製剤３及び９の結果をまとめる。
2019524671.tif 000049
【０１２０】
凍結乾燥前及び後のサブビジブル粒子（ＳＶＰ）試験のみに焦点を当てた追加の凍結乾燥研究を行った。研究の結果は、表２に列挙され、凍結乾燥工程がＳＶＰ数を増大させなかったことを明確に示す。
2019524671.tif 000050
【０１２１】
試験結果に基づき、製品品質に対する凍結乾燥工程の負の影響は認められなかった。両方の製剤は、許容可能なケーキ外観を提供する。再構成時間は、１ｍＬ当たり４０ｍｇのタンパク質を含む製剤の場合、６０秒未満である。再構成は、５ｍＬの注射用蒸留水を加えることにより行われる。マンニトール／ショ糖製剤の水分レベルは、トレハロース含有製剤と比較して高く、これは、凍結乾燥ケーキのより高い密度に起因する。重量オスモル濃度及びタンパク質含有量（ＵＶスキャン）は、凍結乾燥後に低下し、これは、製品が再構成手順によって希釈されたためである。凝集レベルは、凍結乾燥中に増大せず、再構成後に少数のサブビジブル粒子が計数された。結果として、両方の製剤は、ＭＯＲ２０８の凍結乾燥に好適であり、凍結乾燥実現可能性研究は、問題なく完了した。この研究後、両方の製剤を用いた促進された安定性研究を４０℃で３カ月間にわたって行った。
【０１２２】
作業実施例４：促進された安定性研究
凍結乾燥実現可能性研究が問題なく終了した後、４０℃（７５％  ｒＨ）で３カ月間の第１の安定性研究を行って両方の製剤を比較した。安定性試験は、色及び可視粒子に関する試験を含んでいた。更に、製品をＨＰ−ＳＥＣ（凝集）、ＨＩＣ、ＩＥＣ、結合アッセイ（ＣＤ１６  Ｂｉａｃｏｒｅ）、ＭＦＩ（サブビジブル粒子）及びＳＤＳ−Ｐａｇｅで試験した。
【０１２３】
ＨＰ−ＳＥＣ試験は、３カ月間の保管後にＦ９の凝集体のより高い増加を示した（表３）。Ｆ３の凝集体レベルは、０．８％から１．７％に増大し、Ｆ９の凝集体レベルは、０．８％から２．６％に増大した。
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【０１２４】
ＭＦＩ方法を用いてサブビジブル粒子をｔ０、並びに４週、８週及び１２週後に試験した。両方の製剤を比較すると、マンニトール／ショ糖製剤は、特に２μｍ〜１０００μｍの範囲内でより多くの粒子を経時的に生成することが明らかであった（図２）。
【０１２５】
分析結果に基づき、トレハロースを含有する製剤３は、製剤９と比較して４０℃でより高い安定性を示した。安定性の相違は、ＳＶＰ（ＭＦＩ）及び凝集体レベル（ＨＰＳＥＣ）において見られた。
【０１２６】
結論：
凍結乾燥実現可能性研究により、両方の製剤及び４０ｍｇ／ｍＬのタンパク質濃度を用いて、製品品質に影響を与えずにＭＯＲ２０８を凍結乾燥できることが示された。安定性条件は、４０℃（７５％  ｒＨ）で３か月の期間であった。この安定性研究中、トレハロース含有製剤は、マンニトール／ショ糖製剤と比較して高い安定性を有するとして特定された。
【０１２７】
作業実施例５：保存期間割当て
長期安定性研究のために、製剤３中のＭＯＲ２０８を５℃±３℃でのリアルタイム保管及び２５℃±２℃での促進された保管試験に供した。
【０１２８】
行った安定性研究は、安定性指示と、保管中の濃度、活性、純度、医薬及び微生物学的パラメーターに関して薬物製品を監視する最先端方法とを含む。
【０１２９】
以下のパラメーター方法を用い、これらを主要な安定性指示試験と見なす。
【０１３０】
−  ＨＰ−ＳＥＣによる純度：
ＨＰ−ＳＥＣの安定性指示特性は、関連したストレスサンプルの分析により示された。また、凝集体検出の能力は、分析用超遠心分離法により検証された。
【０１３１】
−  ＩＥＣ及び還元／非還元ＣＧＥによる均一性及び純度：
断片の検出のために、非還元ＣＧＥを適用する。脱アミドのような荷電変異体をもたらす化学修飾をＩＥＣにより検出した。
【０１３２】
−  活性アッセイ：
製品特異的な活性アッセイ、ＣＤ１９結合アッセイ（ＦＡＣＳ）、ＣＤ１６結合アッセイ（ＳＰＲ）及びＡＤＣＣ効力アッセイは、関連したストレスサンプルに対する感受性を示した。
【０１３３】
５℃±３℃でのリアルタイム保管及び２５℃±３℃での促進された保管をそれぞれ表４及び表５にまとめる。
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【０１３４】
結果の考察：
含有量及び活性
３つの異なる活性アッセイ：ＣＤ１９結合アッセイ（ＦＡＣＳ）、ＣＤ１６結合アッセイ（ＳＰＲ）及びＡＤＣＣベースの効力アッセイを用いて、ＭＯＲ２０８の機能的活性を監視した。これらの３つのアッセイの組み合わせにより、抗原結合、関連エフェクター結合、及び主要な作用モード（ＡＤＣＣ）が包含される。
【０１３５】
両方の結合アッセイは、経時的に明らかな又は関連した傾向を示さない。ＡＤＣＣベースの効力アッセイは、経時的に幾分かの増大（リアルタイム及び促進された条件下の両方で）を示すが、アッセイは、より高い可変性も示すため、傾向は、依然として有意であると見なされない。要約すると、全ての含有量及び活性アッセイは、十分規格の範囲内であり、３６カ月間にわたって製品品質のいかなる重大な変化も示さない。
【０１３６】
純度
５±３℃の意図される保管温度での３６カ月の保管中、純度アッセイ（即ちＨＰ−ＳＥＣ、ＩＥＣ、還元及び非還元ＣＧＥ）の何れも製品純度における重大な変化を示さない。２５℃±２℃での促進された条件下において、ＨＰ−ＳＥＣは、最近の試験時点において唯一の値の変化を示す（一増分に関するモノマーの低下／断片値の増大）が、これは、長期データに反映されず、従って無視できると見なされる。ＩＥＣは、長期条件下の傾向を示さないが、促進された条件下での主要ピーク群の低下／塩基性ピーク群の増大の明らかな傾向を示す。
【０１３７】
要約すると、全ての純度アッセイは、十分に規格の範囲内であり、３６カ月間にわたって製品品質の重大な変化を示さない。
【０１３８】
医薬試験
５±３℃の意図される保管温度での３６カ月間の保管中、医薬試験の何れも経時的に重大な変化を示さなかった。要約すると、全医薬試験が十分に規格の範囲内であり、３６カ月間にわたって製品品質の重大な変化を示さない。
【図１】
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【図２】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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