(57)【要約】  本発明は、複数の細孔がある少なくとも１つのポリマー吸着剤を含んでなる生体適合性ポリマー系に関し、前記ポリマーは、病原体関連分子パターン分子と傷害関連分子パターン分子を吸着するように設計される。本明細書にまた開示されるのは、該毒素を吸着することが可能な有効量の吸着剤と生体物質を接触させることによって、１以上の病原体関連分子パターン分子及び傷害関連分子パターン分子による生体物質中の汚染を低下させるための方法と、それらによる被験者中の汚染を治療するための方法である。
2019513034.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも１つのポリマーを含んでなる生体適合性ポリマー系であって、約０．５ｋＤａ未満〜約１，０００ｋＤａの分子量を有する（ｉ）病原体関連分子パターン分子（ＰＡＭＰＳ）及び（ｉｉ）傷害関連分子パターン分子（ＤＡＭＰＳ）を吸着することが可能な前記ポリマー系。
【請求項２】
ポリマーが複数の細孔を含んで、ポリマーの細孔構造が５０Ａ（オングストローム）〜４０，０００Ａの範囲にある孔径の全容積を１ｇの乾燥ポリマーにつき０．５ｃｃより多くて５．０ｃｃ未満に有する、請求項１の生体適合性ポリマー系。
【請求項３】
ポリマーが血液適合性である、請求項１の生体適合性ポリマー系。
【請求項４】
そのジオメトリーが球状ビーズである、請求項１の生体適合性ポリマー系。
【請求項５】
毒素が、フラジェリン、リポペプチド、ホルミルペプチド、マイコトキシン、エクソトキシン、エンドトキシン、リポタイコ酸、細胞溶解素、スーパー抗原、プロテアーゼ、リパーゼ、アミラーゼ、酵素、ブラジキニンが含まれるペプチド、活性化補体、可溶性受容体、可溶性ＣＤ４０リガンド、生物活性脂質、酸化脂質、細胞ＤＮＡ、ミトコンドリアＤＮＡ、病原体又は宿主由来ＲＮＡ、無細胞ヘモグロビン、無細胞ミオグロビン、成長因子、ペプチドグリカン、糖タンパク質、放出される細胞内成分、細胞壁又はウイルスエンベロープの成分、ポリイノシン酸：ポリシチジル酸（ポリＩ：Ｃ）、プリオン、毒素、細菌及びウイルスの毒素、薬物、血管作用物質、及び異種抗原の１以上から構成される、ＰＡＭＰＳ及びＤＡＭＰＳを含む、請求項１の生体適合性ポリマー系。
【請求項６】
前記ポリマーが懸濁重合を使用して作製される、請求項１の生体適合性ポリマー系。
【請求項７】
前記ポリマーが超架橋ポリマーである、請求項１の生体適合性ポリマー系。
【請求項８】
球状ビーズが生体適合性ヒドロゲルコーティングを有する、請求項４の生体適合性ポリマー系。
【請求項９】
ポリマーが生成された後に生体適合性であるように修飾される、請求項１の生体適合性ポリマー系。
【請求項１０】
請求項１〜請求項９のいずれか１項の生体適合性ポリマー系を含んでなるデバイスに、又は好適な体外回路を経由して該デバイスに生理液を単回又は複数回通過させる工程を含んでなる、灌流の方法。
【請求項１１】
請求項１〜請求項９のいずれか１項の生体適合性ポリマー系を含んでなる、０．５ｋＤａ未満〜１，０００ｋＤａの（ｉ）病原体関連分子パターン分子及び／又は（ｉｉ）傷害関連分子パターン分子を生理液より除去するためのデバイス。
【請求項１２】
それを保持するのに適して、全血、濃厚赤血球、血小板、アルブミン、血漿、又はこれらのいずれかの組合せの輸血用の容器に収容される、請求項１におけるポリマー。
【請求項１３】
それを保持して体外回路へ組み込まれるのに適したデバイス中にある、請求項１におけるポリマー。
【請求項１４】
生理液を処理するために遊離（即ち、含有されていない）ポリマーが使用される、請求項１におけるポリマー。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願への相互参照
[0001]  本出願は、その開示がその全体において本明細書に組み込まれる、米国特許出願番号：６２／３０５，３８２（２０１６年３月８日出願）の利益を主張する。
【０００２】
政府の権利
[0002]  本明細書に開示される内容は、国防高等研究計画局（ＤＡＲＰＡ）によって授与された、契約番号：Ｎ６６００１−１２−Ｃ−４１９９の下での政府支援でなされた。米国政府は、本明細書に開示される内容に一定の権利を有し得る。
【０００３】
技術分野
[0003]  開示される発明は、多孔性ポリマー吸着剤の技術分野にある。開示される発明はまた、血液、血液製品、及び他の生理液中の病原体関連分子パターン分子及び傷害関連分子パターン分子を広範に低下させることの技術分野にある。追加的に、開示される発明は、病原体関連分子パターン分子及び傷害関連分子パターン分子を静的吸着、灌流、又は血液灌流によって広範に除去することの技術分野にある。
【背景技術】
【０００４】
[0004]  長期化して上方制御される炎症反応は、敗血症又は全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）をもたらす場合があって、このいずれも潜在的に致命的な敗血症ショックや多臓器不全症候群（ＭＯＤＳ）へ進行する可能性がある。敗血症と敗血症ショックは、侵入する病原体や直接の組織侵襲に対する、生命を脅かす全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）より生じる。敗血症は、重症度と進行が無数の相互反応因子に依存する、きわめて異質性の疾患であって、その因子には、細菌（グラム陽性菌とグラム陰性菌）、ウイルス、真菌、又は寄生虫を起源とし得る、微生物侵襲；病原体負荷、毒素産生、病毒性；年齢、遺伝子構成、及び併存疾患のような宿主因子；感染の部位、並びに初期感染以降の経過時間が含まれる。この複雑性が、特定の因子を標的とした治療努力を混乱させてきたきわめて動的で不安定な状況を生むのである。
【０００５】
[0005]  敗血症の進展によく関連する病原体の例は、黄色ブドウ球菌（S. aureus）が含まれるブドウ球菌種、肺炎連鎖球菌、化膿連鎖球菌（S. pyogenes）のような連鎖球菌種、クレブシエラ菌種、大腸菌（E. coli）、緑膿菌（P. aureginosa）のようなシュードモナス菌種、リステリア菌種、いくつかの真菌種（例、アスペルギルス、フザリウム、及びカンジダ亜種）、並びにウイルス（デングウイルス及びインフルエンザウイルスのような）、及び寄生虫である。これらの病原体は、免疫応答を調節して疾患の重症度に影響を及ぼす、滅入らせるほど多くの病毒性因子を放出するか又はその放出の原因となる。病原体の侵襲に対する宿主の応答には、過度の炎症と免疫抑制をともにもたらす、多数の連続的及び同時的なプロセスが関与する。リポ多糖、リポペプチド、リポタイコ酸、ペプチドグリカン、二本鎖ＲＮＡのような核酸、毒素、及びフラジェリンのような病原体関連分子パターン分子（ＰＡＭＰＳ）は、感染に対抗する宿主の免疫応答（例、自然免疫系）を始動させて、高レベルの炎症性及び抗炎症性メディエーター（サイトカインのような）の産生をもたらす。ＰＡＭＰＳと高レベルのサイトカインは、直接的な組織損傷（外傷、熱傷、等）と同様に、組織を傷害して、傷害関連分子パターン分子（ＤＡＭＰＳ）の血流中への細胞外放出を引き起こす可能性がある。ＤＡＭＰＳは、広範な内因性分子の群であって、ＰＡＭＰＳのように、Ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）のようなパターン認識受容体（ＰＲＰ）を介して免疫応答を始動させる。
【０００６】
[0006]  ＤＡＭＰＳはまた、無数の症候群及び疾患と関連付けられてきた。これらには、外傷、熱傷、外傷性脳損傷、及び侵襲手術に由来する合併症と、肝疾患、腎透析合併症、及び自己免疫疾患のような臓器特異的な病気も含まれる。ＤＡＭＰＳは、非感染性のＳＩＲＳを始動させて継続させて、感染性のＳＩＲＳを増悪させる可能性がある宿主分子である。ＤＡＭＰＳは、生理学的条件においては細胞内にある多様な分子のファミリーであって、多くは核内又は細胞質のタンパク質である。ＤＡＭＰＳは、２つの群へ分けることができる：（１）（ＨＭＧＢ１のように）生存細胞中では非炎症性の機能を発揮して、細胞のストレス、傷害、又は損傷の間に放出、分泌、修飾、又は細胞表面上に曝露されると、免疫調節性の特性を獲得する分子、又は（２）アラーミン、即ち、細胞中に保存されて細胞溶解時に放出される可能性があり、そこで炎症反応に寄与する、サイトカイン様の機能を保有する分子（β−デフェンシンやカテリシジンのような）。組織損傷に続いて細胞の外へ放出されるか又は細胞の表面上に曝露されると、それらは、還元環境から酸化環境へ移動して、そのことがその活性に影響を及ぼす。また、壊死の後では、ミトコンドリアと核内のＤＮＡ断片が細胞の外へ放出されて、ＤＡＭＰＳになる。
【０００７】
[0007]  ＨＭＧＢ−１、熱ショックタンパク質、及びＳ１００タンパク質のようなＤＡＭＰＳは、通常は細胞の内側に見出されて、組織損傷によって放出される。ＤＡＭＰＳは、炎症反応を促進して悪化させる内因性の危険シグナルとして作用する。ＨＭＧＢ−１は、ストレス状況下に放出される非ヒストン核内タンパク質である。細胞外のＨＭＧＢ−１は、組織壊死の指標であって、敗血症や多臓器不全症候群（ＭＯＤＳ）のリスク増加に関連付けられてきた。Ｓ１００  Ａ８（グラニュリンＡ、ＭＲＰ８）及びＡ９（グラニュリンＢ、ＭＲＰ１４）のホモ及びヘテロ二量体は、ＴＬＲ４／リポ多糖受容体複合体へ結合してそれを介して直接シグナル伝達して、そこで免疫細胞と血管内皮を活性化する危険シグナルになる。プロカルシトニンは、細菌に起因する重症敗血症のマーカーであって、循環中へのその放出は、敗血症の度合いの指標となる。急性期タンパク質である血清アミロイドＡ（ＳＡＡ）は、主に肝細胞によって、損傷、感染、及び炎症に応答して産生される。急性炎症の間には、血清ＳＡＡレベルが１０００倍上昇する場合がある。ＳＡＡは、好中球の走化性因子であって、好炎症性サイトカインの産生を誘導する。熱ショックタンパク質（ＨＳＰ）は、ストレス環境への曝露に応答して細胞によって産生されるタンパク質のファミリーであって、それらの分子量に従って命名される（１０、２０〜３０、４０、６０、７０、９０）。小さな８キロダルトンのタンパク質であるユビキチンは、タンパク質の分解の印となるが、熱ショックタンパク質の特徴も有する。肝癌由来増殖因子（ＨＤＧＦ）は、その名称にもかかわらず、ニューロンによって発現されるタンパク質である。ＨＤＧＦは、ニューロンによって非典型的な経路を介して能動的に、そして壊死細胞によって受動的に放出され得る。補体因子３及び５のような他の因子は、病原体に抗する宿主防御の一部として活性化されるが、敗血症においては、有害転帰に寄与する可能性もある。サイトカイン及びＤＡＭＰＳの過剰で持続的な循環レベルは、臓器損傷に寄与するので、それによって、市中肺炎及び敗血症における多臓器不全（ＭＯＤ）と死の最高リスクを有する患者が確定される。
【０００８】
[0008]  黄色ブドウ球菌（Staphylococcus aureus）は、グラム陽性菌血症の主因であって、主にメチシリン耐性黄色ブドウ球菌（ＭＲＳＡ）の増加による、より高い罹患率及び死亡率に関連する。黄色ブドウ球菌（S. aureus）は、パントン・バレンタイン（Panton-Valentine）ロイコシジン（ＰＶＬ）［多くの黄色ブドウ球菌臨床単離株によって産生される細胞溶解素であって、細胞膜に細孔を形成することによって重要な病毒性因子として機能する］のような多様なＰＡＭＰＳにより、血流に侵入して宿主の免疫応答を回避するのに有効である。肺炎連鎖球菌（Streptococcus pneumoniae）とリステリア・モノサイトゲネス（Listeria monocytogenes）もまた、宿主細胞を傷害して宿主の免疫応答に干渉することによって感染を容易にする孔形成毒素のニューモリシン、ストレプトリシン、及びリステリオリシンを産生する、グラム陽性菌である。
【０００９】
[0009]  スーパー抗原は、ポリクローナルＴ細胞活性化と大量のサイトカイン放出を生じる、Ｔ細胞の非特異的活性化を引き起こす抗原の群である。スーパー抗原は一部の病原性ウイルス及び細菌によって、多分には免疫系に抗する防御機序として産生される。ブドウ球菌属と連鎖球菌属のスーパー抗原は、いずれも単一の原初スーパー抗原より進化した大きなタンパク質ファミリーを形成する。特に、連鎖球菌の発熱性エクソトキシン（Streptococcus pyrogenic exotoxin）（ＳＰＥ）Ａ、Ｃ、Ｇ−Ｍ、黄色ブドウ球菌のＴＳＳＴ−１毒素、及びエルシニア・シュードツベルクロ―シス（Y. pseudotuberculosis）のＹＰＭ−ａ及びＹＰＭ−ｂは、スーパー抗原である。狂犬病ウイルスのヌクレオカプシド（Ｎ）タンパク質もヒトにおけるスーパー抗原であって、Ｖｂ８Ｔリンパ球を刺激すると報告されている。
【００１０】
[0010]  ブドウ球菌性熱傷様皮膚症候群（ＳＳＳＳ）を産生するブドウ球菌Ａ及びＢ（ＥＴＡ及びＥＴＢ）は、表皮剥奪毒素の群に属するセリンプロテアーゼである。著しい体液損失又は二次感染生物を伴う露出皮膚の広範な領域があるＳＳＳＳの重症例では、低血圧とあり得る臓器不全が見出される可能性がある。
【００１１】
[0011]  化膿連鎖球菌（Streptococcus pyogenes）は、数種の病毒性因子、ＳｐｅＡ〜Ｇを利用して感染を確立させる、Ａ群連鎖球菌（ＧＡＳ）である。これらの中で、連鎖球菌の発熱性エクソトキシンＢ（ＳｐｅＢ）は、宿主の免疫グロブリンと補体成分を切断又は分解して、貪食活性を阻害することによって免疫応答を回避する（Kuo 2008）。
【００１２】
[0012]  細菌性フラジェリンは、ｔｏｌｌ様受容体５、ＰＲＲを介して免疫応答を誘発する、細菌の構造タンパク質である。フラジェリンは、敗血症の間に、肺における異常に強力な好炎症性の刺激となる。フラジェリンは、好炎症サイトカインの局所放出、炎症細胞の蓄積、そして肺の透過性亢進の発現を誘導する。数多の形態のフラジェリンが細菌によって産生されて、大腸菌では、３７〜６９ｋＤａの大きさに及ぶフラジェリンが産生される。
【００１３】
[0013]  ２０種を超えるアスペルギルス菌種がヒト疾患を引き起こすことが知られている。侵入性アスペルギルス症は、危篤状態の患者や免疫不全患者に主に影響を及ぼす壊滅的な感染症である。アスペルギルス・フミガーツス（Aspergillus fumigatus）は、最も蔓延していて、免疫不全患者集団において侵入性アスペルギルス症（ＩＡ）の発生率を高める主因である。ＩＡは、壊滅的な病気であって、死亡率が９０％ほどの高さに達する患者群もある。アスペルギルス菌種は、宿主の免疫抑制によって病原性に寄与するグリオトキシンや、急性の肝損傷及び肝不全を引き起こし得るアフラトキシンのような、多様なマイコトキシンを産生する。フザリウム属（Fusarium）菌種は、ヒトにおいて、表在性、局所侵襲性、及び播種性の感染症が含まれる、広範囲の感染症を引き起こす。フザリウム属菌種は、体液性免疫と細胞性免疫を抑制して組織破壊も引き起こし得る、Ｔ−２毒素（トリコテセンマイコトキシン）のようなマイコトキシンが含まれる、数種の病毒性因子を保有する。
【発明の概要】
【００１４】
[0014]  いくつかの側面において、本発明は、少なくとも１つのポリマーを含んでなる生体適合性ポリマー系に関し；該ポリマー系は、約０．５ｋＤａ未満〜約１，０００ｋＤａ（又は、いくつかの態様では、約１ｋＤａ〜約１，０００ｋＤａ、又は約０．１ｋＤａ〜約１，０００ｋＤａ）の分子量を有する（ｉ）病原体関連分子パターン分子と（ｉｉ）傷害関連分子パターン分子を吸着することが可能である。いくつかの好ましいポリマーは、血液適合性である。ある好ましいポリマー系は、球状ビーズのジオメトリーを有する。
【００１５】
[0015]  いくつかのポリマー系は、５０Ａ（オングストローム）〜４０，０００Ａの範囲にある孔径の全容積を１ｇの乾燥ポリマーにつき０．５ｃｃより多くて５．０ｃｃ未満に有するポリマー細孔構造を有する。
【００１６】
[0016]  いくつかの態様において、吸着される毒素は、フラジェリン、リポペプチド、ホルミルペプチド、マイコトキシン、エクソトキシン、エンドトキシン、リポタイコ酸、細胞溶解素、スーパー抗原、プロテアーゼ、リパーゼ、アミラーゼ、酵素、ブラジキニンが含まれるペプチド、活性化補体、可溶性受容体、可溶性ＣＤ４０リガンド、生物活性脂質、酸化脂質、細胞ＤＮＡ、ミトコンドリアＤＮＡ、病原体又は宿主由来ＲＮＡ、無細胞ヘモグロビン、無細胞ミオグロビン、成長因子、ペプチドグリカン、糖タンパク質、放出される細胞内成分、細胞壁又はウイルスエンベロープの成分、ポリイノシン酸：ポリシチジル酸（ポリＩ：Ｃ）、プリオン、毒素、細菌及びウイルスの毒素、薬物、血管作用物質、及び異種抗原の１以上から構成されるＰＡＭＰＳ及びＤＡＭＰＳの１以上を含む。
【００１７】
[0017]  該ポリマーは、好適な多孔性ポリマーを生成するための当該技術分野で知られたどの手段によっても作製することができる。いくつかの態様において、該ポリマーは、懸濁重合を使用して作製される。いくつかのポリマーは、超架橋ポリマーを含む。ある球状ビーズは、生体適合性ヒドロゲルコーティングを有する。
【００１８】
[0018]  あるポリマーは、生成された後に生体適合性であるように修飾される。いくつかの修飾は、生体適合性の表面コーティング又は層を形成する工程を含む。
[0019]  他の側面には、本明細書に記載の生体適合性ポリマー系を含んでなるデバイスに、又は好適な体外回路を経由して該デバイスに生理液を単回又は複数回通過させる工程を含んでなる、灌流の方法が含まれる。
【００１９】
[0020]  なお別の側面は、本明細書に記載の生体適合性ポリマー系を含んでなる、０．５ｋＤａ未満〜１，０００ｋＤａの（ｉ）病原体関連分子パターン分子及び（ｉｉ）傷害関連分子パターン分子を生理液より除去するためのデバイスに関する。
【図面の簡単な説明】
【００２０】
[0021]  付帯の図面は、本開示のさらなる理解を提供するために含まれるものであって、本明細書に組み込まれてその一部を構成し、本開示の種々の側面を図解し、詳細な説明と一緒に、本開示の原理を説明するのに役立つ。本開示とそれが実践され得る様々なやり方についての基本的な理解に必要であり得るより以上に詳しく本開示の構造上の詳細を示そうとする試みは、なされていない。以下の図面において：
【図１】[0022]  図面１と図面２は、修飾ポリマーＣＹ１５０６５について、循環前濃度に比較した残存百分率として表される、全血を使用する試験管内（in vitro）動的モデルからのＤＡＭＰＳ及びＰＡＭＰＳ除去データを提示する。
【図２】[0022]  図面１と図面２は、修飾ポリマーＣＹ１５０６５について、循環前濃度に比較した残存百分率として表される、全血を使用する試験管内（in vitro）動的モデルからのＤＡＭＰＳ及びＰＡＭＰＳ除去データを提示する。
【図３】[0023]  図面３と図面４は、ポリマーＣＹ１５０７７について、循環前濃度に比較した残存百分率として表される、全血を使用する試験管内（in vitro）動的モデルからのＤＡＭＰＳ及びＰＡＭＰＳ除去データを提示する。
【図４】[0023]  図面３と図面４は、ポリマーＣＹ１５０７７について、循環前濃度に比較した残存百分率として表される、全血を使用する試験管内（in vitro）動的モデルからのＤＡＭＰＳ及びＰＡＭＰＳ除去データを提示する。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
[0024]  要求事項として、本発明の詳しい態様を本明細書に開示するが、この開示態様は、様々な形態で具体化され得る本発明の例示にすぎないと理解されたい。故に、本明細書において開示される具体的な構造及び機能上の詳細は、制限として解釈してはならず、当業者に本発明を利用することを教示するための基礎でしかないと解釈されたい。下記の具体的な実施例は、本発明がよりよく理解されることを可能にしよう。しかしながら、それらは単にガイダンスとして示されるのであって、いかなる制限も含意しない。
【００２２】
[0025]  本発明は、本開示の一部を形成する、付帯の図面と実施例に関連して取り上げられる、以下の詳細な説明を参照することによってより容易に理解されよう。本明細書に記載される、及び／又は示される、特定の素材、デバイス、方法、応用、条件、又は変数に本発明が限定されないこと、そして本明細書に使用される用語法が例としてのみ挙げられる特別な態様について記載する目的のものであって、特許請求される本発明を制限することを企図しないことを理解されたい。本明細書に使用される「複数」という用語は、１より多いことを意味する。ある数値範囲が表される場合、別の態様には、１つの特別な数値から、及び／又は他の特別な数値までが含まれる。同様に、数値が「約」という先行詞の使用によって概数として表される場合、その特別な数値が別の態様を形成すると理解されよう。すべての範囲が包括的で組合せ可能である。
【００２３】
[0026]  明確性のために別々の態様の文脈で本明細書に記載される、本発明のある特徴が単一の態様において組み合わせて提供される場合もあることを理解されたい。逆に、簡潔性のために単一の態様の文脈で本明細書に記載される、本発明の様々な特徴が別々に、又はあらゆる副組合せで提供される場合もある。範囲で述べられる数値へのさらなる言及には、その範囲内のありとあらゆる数値が含まれる。
【００２４】
[0027]  以下の定義は、本発明を理解するのに役立つことを企図している：
[0028]  病原体関連分子パターン分子（ＰＡＭＰＳ）は、自然免疫系の細胞によって認識される、微生物由来の分子である。これらの分子には、一群の微生物内に保存された小さな分子モチーフがあって、それらがｔｏｌｌ様受容体やパターン認識受容体によって認識されると、病原体誘導性の炎症反応を始動させて継続させる。
【００２５】
[0029]  傷害関連分子パターン分子（ＤＡＭＰＳ）は、病原体感染の非存在又は存在時に、外傷、虚血、及び組織傷害に反応して炎症を始動させて継続させる、ストレス状態の細胞によって放出される、宿主の生体分子である。
【００２６】
[0030]  「生体適合性」という用語は、生理液、生組織、又は生物体と吸着剤が接触状態にある時間の間に許容されない臨床変化を生じること無く、該生理液、生組織、又は生物体と該吸着剤が接触することが可能であることを意味すると定義される。
【００２７】
[0031]  「血液適合性」という用語は、生体適合性素材が、全血又は血漿と接触状態に置かれる場合に、臨床的に許容される生理学的変化を生じる状態として定義される。
[0032]  本明細書に使用されるように、「吸着剤（sorbent）」という用語には、吸着剤（adsorbents）と吸収剤（absorbents）が含まれる。
【００２８】
[0033]  本発明の目的では、、「収着（sorb）」という用語は、「吸収と吸着によって吸収して結合すること」と定義される。
[0034]  本発明の目的では、「灌流」という用語は、多孔性ポリマー吸着剤を含有するデバイスに、又は好適な体外回路を経由して該デバイスに生理液を単回通過させて、毒性分子を該液より除去することと定義される。
【００２９】
[0035]  「血液灌流」という用語は、生理液が血液である場合の特例の灌流である。
[0036]  「分散剤（dispersant）」又は「分散剤（dispersing agent）」という用語は、流動媒体に懸濁した多数の微細化された非混和液滴に対して安定化効果を付与する物質として定義される。
【００３０】
[0037]  「マクロ網状合成」という用語は、（成長中のポリマー分子を相平衡によって決定される一定の分子サイズでモノマー液の外に追い出す）不活性沈殿剤の存在下でのモノマーのポリマーへの重合と定義され、これにより球状又はほとんど球状の対称性の固体でナノサイズのミクロゲル粒子が得られ、それが密に詰まって、オープンセル構造の物理的細孔があるビーズとなる［米国特許第４，２９７，２２０号、Meitzner and Oline（1981年10月27日）；R. L. Albright, Reactive Polymers, 4, 155-174 (1986)］。
【００３１】
[0038]  「超架橋」という用語は、単一の反復単位が２より多い連結性を有するポリマーについて記載する。超架橋ポリマーは、モノマーの共重合というより、膨潤又は溶解したポリマー鎖を多数の堅架橋スペーサーと架橋結合させることによって製造される。架橋結合剤には、芳香族炭化水素のビス（クロロメチル）誘導体、メチラール、モノクロロジメチルエーテル、及びフリーデル・クラフツ（Friedel-Crafts）触媒の存在下でポリマーと反応する他の二官能性化合物が含まれ得る［Tsyurupa, M. P., Z. K. Blinnikova, N. A. Proskurina, A. V. Pastukhov, L. A. Pavlova, and V. A. Davankov.「Hypercrosslinked Polystyrene: The First Nanoporous Polymeric Material（超架橋ポリスチレン：初めてのナノ多孔性ポリマー素材）」 Nanotechnologies in Russia 4 (2009): 665-75］。
【００３２】
[0039]  いくつかの好ましいポリマーは、アクリロニトリル、アリルエーテル、アリルグリシジルエーテル、アクリル酸ブチル、メタクリル酸ブチル、アクリル酸セチル、メタクリル酸セチル、３，４−ジヒドロキシ−１−ブテン、ジペンタエリスリトールジアクリレート、ジペンタエリスリトールジメタクリレート、ジペンタエリスリトールテトラアクリレート、ジペンタエリスリトールテトラメタクリレート、ジペンタエリスリトールトリアクリレート、ジペンタエリスリトールトリメタクリレート、ジビニルベンゼン、ジビニルホルムアミド、ジビニルナフタレン、ジビニルスルホン、３，４−エポキシ−１−ブテン、１，２−エポキシ−９−デセン、１，２−エポキシ−５−へキセン、アクリル酸エチル、メタクリル酸エチル、エチルスチレン、エチルビニルベンゼン、グリシジルメタクリレート、アクリル酸メチル、メタクリル酸メチル、アクリル酸オクチル、メタクリル酸オクチル、ペンタエリスリトールジアクリレート、ペンタエリスリトールジメタクリレート、ペンタエリスリトールテトラアクリレート、ペンタエリスリトールテトラメタクリレート、ペンタエリスリトールトリアクリレート、ペンタエリスリトールトリメタクリレート、スチレン、トリメチロールプロパンジアクリレート、トリメチロールプロパンジメタクリレート、トリメチロールプロパントリアクリレート、トリメチロールプロパントリメタクリレート、トリビニルベンゼン、トリビニルシクロヘキサン、酢酸ビニル、ビニルベンジルアルコール、４−ビニル−１−シクロへキセン１，２−エポキシド、ビニルホルムアミド、ビニルナフタレン、２−ビニルオキシラン、及びビニルトルエンより選択される、１以上のモノマー由来の残基、又はモノマーを含有する残基、又はこれらの混合物を含む。
【００３３】
[0040]  本発明のいくつかの態様は、有機溶媒及び／又は高分子ポロゲンをポロゲン又は細孔形成剤（pore-former）として使用して、重合の間に誘導されて生じる相分離により多孔性ポリマーを生じる。いくつかの好ましいポロゲンは、ベンジルアルコール、シクロヘキサン、シクロヘキサノール、シクロヘキサノン、デカン、ジブチルフタレート、ジ２−エチルヘキシルフタレート、ジ２−エチルヘキシルリン酸、酢酸エチル、２−エチル−１−ヘキサン酸、２−エチル−１−ヘキサノール、ｎ−ヘプタン、ｎ−ヘキサン、イソアミルアセテート、イソアミルアルコール、ｎ−オクタン、ペンタノール、ポリ（プロピレングリコール）、ポリスチレン、ポリ（スチレン−ｃｏ−メチルメタクリレート）、テトラリン、トルエン、リン酸トリｎ−ブチル、１，２，３−トリクロロプロパン、２，２，４−トリメチルペンタン、及びキシレンより選択されるか又はそれらの任意の組合せより構成される混合物である。
【００３４】
[0041]  なお別の態様において、分散剤は、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリ（ジエチルアミノエチルアクリレート）、ポリ（ジエチルアミノエチルメタクリレート）、ポリ（ジメチルアミノエチルアクリレート）、ポリ（ジメチルアミノエチルメタクリレート）、ポリ（ヒドロキシエチルアクリレート）、ポリ（ヒドロキシエチルメタクリレート）、ポリ（ヒドロキシプロピルアクリレート）、ポリ（ヒドロキシプロピルメタクリレート）、ポリ（ビニルアルコール）、ポリ（アクリル酸）の塩、ポリ（メタクリル酸）の塩、及びこれらの混合物からなる群より選択される。
【００３５】
[0042]  好ましい吸着剤は、生体適合性である。別のさらなる態様において、ポリマーは、生体適合性である。なお別の態様において、ポリマーは、血液適合性である。なおさらなる態様において、生体適合性ポリマーは、血液適合性である。なおさらなる態様において、ポリマーのジオメトリーは、球状ビーズである。
【００３６】
[0043]  別の態様において、生体適合性ポリマーは、ポリ（Ｎ−ビニルピロリドン）を含む。
[0044]  ポリ（スチレン−ｃｏ−ジビニルベンゼン）樹脂上のコーティング／分散剤は、改善された生体適合性を該素材に浸透させる。
【００３７】
[0045]  さらになお別の態様では、ジペンタエリスリトールジアクリレート、ジペンタエリスリトールジメタクリレート、ジペンタエリスリトールテトラアクリレート、ジペンタエリスリトールテトラメタクリレート、ジペンタエリスリトールトリアクリレート、ジペンタエリスリトールトリメタクリレート、ジビニルベンゼン、ジビニルホルムアミド、ジビニルナフタレン、ジビニルスルホン、ペンタエリスリトールジアクリレート、ペンタエリスリトールジメタクリレート、ペンタエリスリトールテトラアクリレート、ペンタエリスリトールテトラメタクリレート、ペンタエリスリトールトリアクリレート、ペンタエリスリトールトリメタクリレート、トリメチロールプロパンジアクリレート、トリメチロールプロパンジメタクリレート、トリメチロールプロパントリアクリレート、トリメチロールプロパントリメタクリレート、トリビニルベンゼン、トリビニルシクロヘキサン、及びこれらの混合物からなる架橋剤の群を血液適合性ヒドロゲルコーティングの形成に使用することができる。
【００３８】
[0046]  いくつかの態様において、該ポリマーは、少なくとも１つの架橋結合剤と少なくとも１つの分散剤を含んでなるポリマーである。分散剤は、生体適合性であり得る。分散剤は、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリ（ジエチルアミノエチルアクリレート）、ポリ（ジエチルアミノエチルメタクリレート）、ポリ（ジメチルアミノエチルアクリレート）、ポリ（ジメチルアミノエチルメタクリレート）、ポリ（ヒドロキシエチルアクリレート）、ポリ（ヒドロキシエチルメタクリレート）、ポリ（ヒドロキシプロピルアクリレート）、ポリ（ヒドロキシプロピルメタクリレート）、ポリ（ビニルアルコール）、ポリ（アクリル酸）の塩、ポリ（メタクリル酸）の塩、及びこれらの混合物のような化学品、化合物、又は素材より選択することができて、架橋結合剤は、ジペンタエリスリトールジアクリレート、ジペンタエリスリトールジメタクリレート、ジペンタエリスリトールテトラアクリレート、ジペンタエリスリトールテトラメタクリレート、ジペンタエリスリトールトリアクリレート、ジペンタエリスリトールトリメタクリレート、ジビニルベンゼン、ジビニルホルムアミド、ジビニルナフタレン、ジビニルスルホン、ペンタエリスリトールジアクリレート、ペンタエリスリトールジメタクリレート、ペンタエリスリトールテトラアクリレート、ペンタエリスリトールテトラメタクリレート、ペンタエリスリトールトリアクリレート、ペンタエリスリトールトリメタクリレート、トリメチロールプロパンジアクリレート、トリメチロールプロパンジメタクリレート、トリメチロールプロパントリアクリレート、トリメチロールプロパントリメタクリレート、トリビニルベンゼン、トリビニルシクロヘキサン、及びこれらの混合物からなる群より選択することができる。好ましくは、該ポリマーは、コーティングの形成と同時に成長し、ここで分散剤は、該ポリマーの表面上で化学的に結合しているか又は絡まっている。
【００３９】
[0047]  なお別の態様において、生体適合性ポリマーコーティングは、ポリ（ジエチルアミノエチルメタクリレート）、ポリ（ジメチルアミノエチルメタクリレート）、ポリ（ヒドロキシエチルアクリレート）、ポリ（ヒドロキシエチルメタクリレート）、ポリ（ヒドロキシプロピルアクリレート）、ポリ（ヒドロキシプロピルメタクリレート）、ポリ（Ｎ−ビニルピロリドン）、ポリ（ビニルアルコール）、ポリ（アクリル酸）の塩、ポリ（メタクリル酸）の塩、及びこれらの混合物からなる群より選択される。
【００４０】
[0048]  なお別の態様において、生体適合性オリゴマーコーティングは、ポリ（ジエチルアミノエチルメタクリレート）、ポリ（ジメチルアミノエチルメタクリレート）、ポリ（ヒドロキシエチルアクリレート）、ポリ（ヒドロキシエチルメタクリレート）、ポリ（ヒドロキシプロピルアクリレート）、ポリ（ヒドロキシプロピルメタクリレート）、ポリ（Ｎ−ビニルピロリドン）、ポリ（ビニルアルコール）、ポリ（アクリル酸）の塩、ポリ（メタクリル酸）の塩、及びこれらの混合物からなる群より選択される。
【００４１】
[0049]  いくつかの本発明の生体適合性吸着剤の組成物は、複数の細孔から構成される。この生体適合性吸着剤は、０．５ｋＤ未満〜１，０００ｋＤａの広範囲の毒素を吸着するように設計される。理論によって束縛されることを企図しないが、該吸着剤は、所定の分子量の分子を細孔の内部に捕捉することによって作用すると考えられる。該ポリマーによって吸着され得る分子のサイズは、ポリマーの孔径が増加するにつれて増加するものである。逆に、その孔径が所与の分子の吸着に最適な孔径を超えて増加すれば、前記タンパク質の吸着は、減少し得るか又は減少するものである。
【００４２】
[0050]  ある方法において、その固体形態は、多孔性である。いくつかの固体形態は、５０Ａ（オングストローム）〜４０，０００Ａの範囲にある孔径の全容積を１ｇの乾燥ポリマーにつき０．５ｃｃより多くて５．０ｃｃ未満に有する細孔構造を有することを特徴とする。
【００４３】
[0051]  １つの態様において、吸着剤は、５０Ａと４０，０００Ａの間の直径を有する細孔中の細孔容積の少なくとも１／３が１００Ａと１，０００Ａの間の直径を有する細孔中にある細孔構造を有する。
【００４４】
[0052]  別の態様において、吸着剤は、５０Ａと４０，０００Ａの間の直径を有する細孔中の細孔容積の少なくとも１／２が１０００Ａと１，０００Ａの間の直径を有する細孔中にある細孔構造を有する。
【００４５】
[0053]  なお別の態様において、吸着剤は、５０Ａと４０，０００Ａの間の直径を有する細孔中の細孔容積の少なくとも１／３が１０，０００Ａと４０，０００Ａの間の直径を有する細孔中にある細孔構造を有する。
【００４６】
[0054]  ある態様において、該ポリマーは、０．１マイクロメートル〜２センチメートルの範囲に直径を有するビーズ形態で作製することができる。あるポリマーは、粉末、ビーズ、又は他の規則形状又は不規則形状の粒子の形態である。
【００４７】
[0055]  いくつかの態様において、複数の固体形態は、０．１マイクロメートル〜２センチメートルの範囲に直径を有する粒子を含む。
[0056]  いくつかの方法において、望まれない分子には、フラジェリン、リポペプチド、ホルミルペプチド、マイコトキシン、エクソトキシン、細胞溶解素、スーパー抗原、プロテアーゼ、リパーゼ、アミラーゼ、酵素、ブラジキニンが含まれるペプチド、活性化補体、可溶性受容体、可溶性ＣＤ４０リガンド、生物活性脂質、酸化脂質、無細胞ヘモグロビン、無細胞ミオグロビン、成長因子、糖タンパク質、プリオン、毒素、細菌及びウイルスの毒素、薬物、血管作用物質、異種抗原、及び抗体の１以上から構成される、ＰＡＭＰＳ及びＤＡＭＰＳが含まれる。
【００４８】
[0057]  １つの態様において、本発明のポリマーは、生成されるポリマービーズへ生体適合性で血液適合性の外面を提供するように選択される水相分散剤の存在下での、規定の水相におけるフリーラジカル開始での懸濁重合によって作製される。いくつかの態様において、該ビーズは、適切な細孔構造を成長させるために適正に選択されるポロゲン（細孔形成剤）と重合に適した時間−温度プロフィールでのマクロ網状合成によって多孔性になる。
【００４９】
[0058]  別の態様では、懸濁重合によって作製されるポリマーを生体適合性で血液適合性のモノマー又は低分子量オリゴマーのさらなるグラフティングによって生体適合性で血液適合性にすることができる。ラジカル重合法では、共重合へ導入されるＤＶＢのビニル基がすべて消費されるわけではないことが示されている。平均して、ＤＶＢ分子種の約３０％が架橋結合の架橋として役立つことができず、２つのビニル基の１つだけによってそのネットワークに関与するままである。故に、比較的高い量のペンダントビニル基の存在は、その吸着剤の特質的な特徴である。好ましくは、これらのペンダントビニル基がポリマービーズの表面へ曝露されて、それらのマクロ細孔が（存在するならば）化学修飾へ容易に利用可能になるべきであると期待され得る。ＤＶＢ−共重合体の表面の化学修飾は、表面曝露されたペンダントビニル基の化学反応に依存して、これらの基をより親水性の官能基へ変換することを目的とする。モノマー及び/又は架橋剤又は低分子量オリゴマーのフリーラジカルグラフティングを介した変換は、血液適合性の特性がある、初期の疎水性の吸着素材を提供する。
【００５０】
[0059]  なお別の態様において、ラジカル重合開始剤は、懸濁重合において典型的であるような水性分散媒ではなく、分散した有機相へ初めに加えられる。重合の間、多くの成長するポリマー鎖がその鎖端ラジカルとともに相界面に出現して、分散媒中で重合を開始させることができる。さらに、ラジカル開始剤は、過酸化ベンゾイルのように、ラジカルを比較的ゆっくり発生させる。この開始剤は、ビーズの形成の間に、数時間の重合の後でも、ごく一部しか消費されない。この開始剤は、ビーズの表面に向かって容易に移動して、ビーズのジビニルベンゼン部分の表面曝露されたペンダントビニル基を活性化して、それによってこの反応が一定期間進行した後で付加される他のモノマーのグラフト重合を開始させる。故に、フリーラジカルグラフティングは、モノマー液滴のポリマービーズへの変換の間に起きて、それによって生体適合性又は血液適合性を付与するモノマー及び／又は架橋剤又は低分子量オリゴマーを表面コーティングとして取り込むことを可能にする。      
【００５１】
[0060]  血液灌流デバイスと灌流デバイスは、ビーズ層を容器の内側に維持するための出口端と入口端の両方で固定スクリーン、又は混合後にビーズを回収するための後続の固定スクリーンのいずれかを取り付けたフロースルー容器中のポリマービーズの充填ビーズ層からなる。血液灌流操作と灌流操作は、全血，血漿、又は生理液をこの充填ビーズ層に通過させることによって実施される。ビーズ層を通過させる灌流の間に、吸着、屈曲路、及び／又は細孔捕捉によって毒性分子が保持される一方で、その流体成分とインタクト細胞成分の残りは、本質的に濃度を変えないで通過する。
【００５２】
[0061]  いくつかの他の態様では、インラインフィルターが、ビーズ層を容器の内側に維持するための出口端と入口端の両方で固定スクリーンを取り付けたフロースルー容器中のポリマービーズの充填ビーズ層から構成される。この充填ビーズ層に保存バッグからの生体液を重力により１回通過させると、この間に毒性分子が吸着、屈曲路、及び／又は細孔捕捉によって保持される一方で、その流体成分とインタクト細胞成分の残りは、本質的に濃度を変えないで通過する。
【００５３】
[0062]  本発明において（そのままで、又はさらなる修飾後に）有用なあるポリマーは、製造業者ごとに下記に収載するような、スチレン、ジビニルベンゼン、エチルビニルベンゼンの重合性モノマーと、アクリレート及びメタクリレートのモノマーより製造される、マクロ多孔性ポリマである。ローム・アンド・ハース・カンパニー（現在、ダウ・ケミカル・カンパニーの一部）：ＡｍｂｅｒｌｉｔｅＴＭ  ＸＡＤ−１、ＡｍｂｅｒｌｉｔｅＴＭ  ＸＡＤ−２、ＡｍｂｅｒｌｉｔｅＴＭ  ＸＡＤ−４、ＡｍｂｅｒｌｉｔｅＴＭ  ＸＡＤ−７、ＡｍｂｅｒｌｉｔｅＴＭ  ＸＡＤ−７ＨＰ、ＡｍｂｅｒｌｉｔｅＴＭ  ＸＡＤ−８、ＡｍｂｅｒｌｉｔｅＴＭ  ＸＡＤ−１６、ＡｍｂｅｒｌｉｔｅＴＭ  ＸＡＤ−１６ＨＰ、ＡｍｂｅｒｌｉｔｅＴＭ  ＸＡＤ−１８、ＡｍｂｅｒｌｉｔｅＴＭ  ＸＡＤ−２００、ＡｍｂｅｒｌｉｔｅＴＭ  ＸＡＤ−１１８０、ＡｍｂｅｒｌｉｔｅＴＭ  ＸＡＤ−２０００、ＡｍｂｅｒｌｉｔｅＴＭ  ＸＡＤ−２００５、ＡｍｂｅｒｌｉｔｅＴＭ  ＸＡＤ−２０１０、ＡｍｂｅｒｌｉｔｅＴＭ  ＸＡＤ−７６１、及びＡｍｂｅｒｌｉｔｅＴＭ  ＸＥ−３０５のようなマクロ多孔性ポリマー吸着剤と、ＡｍｂｅｒｃｈｒｏｍＴＭ  ＣＧ７１，ｓ，ｍ，ｃ、ＡｍｂｅｒｃｈｒｏｍＴＭ  ＣＧ１６１，ｓ，ｍ，ｃ、ＡｍｂｅｒｃｈｒｏｍＴＭ  ＣＧ３００，ｓ，ｍ，ｃ、及びＡｍｂｅｒｃｈｒｏｍＴＭ  ＣＧ１０００，ｓ，ｍ，ｃのようなクロマトグラフィーグレードの吸着剤。ダウ・ケミカル・カンパニー：ＤｏｗｅｘＴＭ  ＯｐｔｉｐｏｒｅＴＭ  Ｌ−４９３、ＤｏｗｅｘＴＭ  ＯｐｔｉｐｏｒｅＴＭ  Ｖ−４９３、ＤｏｗｅｘＴＭ  ＯｐｔｉｐｏｒｅＴＭ  Ｖ−５０２、ＤｏｗｅｘＴＭ  ＯｐｔｉｐｏｒｅＴＭ  Ｌ−２８５、ＤｏｗｅｘＴＭ  ＯｐｔｉｐｏｒｅＴＭ  Ｌ−３２３、及びＤｏｗｅｘＴＭ  ＯｐｔｉｐｏｒｅＴＭ  Ｖ−５０３。ランクセス（以前は、バイエルとシブロン）：ＬｅｗａｔｉｔＴＭ  ＶＰＯＣ  １０６４  ＭＤ  ＰＨ、ＬｅｗａｔｉｔＴＭ  ＶＰＯＣ  １１６３、ＬｅｗａｔｉｔＴＭ  ＯＣ  ＥＰ  ６３、ＬｅｗａｔｉｔＴＭ  Ｓ  ６３２８Ａ、ＬｅｗａｔｉｔＴＭ  ＯＣ  １０６６、及びＬｅｗａｔｉｔＴＭ  ６０／１５０  ＭＩＢＫ。三菱ケミカル株式会社：ＤｉａｉｏｎＴＭ  ＨＰ  １０、ＤｉａｉｏｎＴＭ  ＨＰ  ２０、ＤｉａｉｏｎＴＭ  ＨＰ  ２１、ＤｉａｉｏｎＴＭ  ＨＰ  ３０、ＤｉａｉｏｎＴＭ  ＨＰ  ４０、ＤｉａｉｏｎＴＭ  ＨＰ  ５０、ＤｉａｉｏｎＴＭ  ＳＰ  ７０、ＤｉａｉｏｎＴＭ  ＳＰ  ２０５、ＤｉａｉｏｎＴＭ  ＳＰ  ２０６、ＤｉａｉｏｎＴＭ  ＳＰ  ２０７、ＤｉａｉｏｎＴＭ  ＳＰ  ７００、ＤｉａｉｏｎＴＭ  ＳＰ  ８００、ＤｉａｉｏｎＴＭ  ＳＰ  ８２５、ＤｉａｉｏｎＴＭ  ＳＰ  ８５０、ＤｉａｉｏｎＴＭ  ＳＰ  ８７５、ＤｉａｉｏｎＴＭ  ＨＰ  １ＭＧ、ＤｉａｉｏｎＴＭ  ＨＰ  ２ＭＧ、ＤｉａｉｏｎＴＭ  ＣＨＰ  ５５Ａ、ＤｉａｉｏｎＴＭ  ＣＨＰ  ５５Ｙ、ＤｉａｉｏｎＴＭ  ＣＨＰ  ２０Ａ、ＤｉａｉｏｎＴＭ  ＣＨＰ  ２０Ｙ、ＤｉａｉｏｎＴＭ  ＣＨＰ  ２ＭＧＹ、ＤｉａｉｏｎＴＭ  ＣＨＰ  ２０Ｐ、ＤｉａｉｏｎＴＭ  ＨＰ  ２０ＳＳ、ＤｉａｉｏｎＴＭ  ＳＰ  ２０ＳＳ、ＤｉａｉｏｎＴＭ  ＳＰ  ２０７ＳＳ。ピュロライト社：ＰｕｒｏｓｏｒｂＴＭ  ＡＰ  ２５０とＰｕｒｏｓｏｒｂＴＭ  ＡＰ  ４００、及び株式会社カネカ：リクセル（Lixelle）及びＣＴＲビーズ、及びＢｉｏＳＫＹＴＭ  ＭＧ  血液灌流カラム（Blood Perfusion Column）とその内部のポリマー、ＢｉｏＳＫＹＴＭ  ＤＸ  ビリルビン灌流カラム（Bilirubin Perfusion Column）とその内部のポリマー、Jafron カラム／カートリッジとその内部のポリマー（ＢＳ３３０、ＤＮＡ２３０、ＨＡ１３０、ＨＡ２３０、ＨＡ２８０、ＨＡ３３０、及びＨＡ３３０−ＩＩのような）。
【００５４】
[0063]  本開示の組成物によって、様々なＤＡＭＰＳ及びＰＡＭＰＳが吸着され得る。これらのタンパク質のいくつかとそれらの分子量を下記の表に示す。
【００５５】
【表１】
2019513034.tif 000003
【実施例】
【００５６】
[0064]  以下の実施例は、例示であって非限定的であることを企図する。
実施例１：基本吸着剤（ＣＹ１４１７５及びＣＹ１５０７７）の合成
[0061]  反応器設定；ステンレス鋼フランジクランプとＰＦＴＥガスケットを使用して、３Ｌのジャケット付き円筒ガラス反応容器へ４つ首ガラス蓋を固定した。この蓋に、ＰＦＴＥスターラーベアリング、ＲＴＤアダプター、及び水冷式還流冷却器を取り付けた。５個の６０°撹拌子を有するステンレス鋼撹拌シャフトをスターラーベアリングに通して取り付けて、デジタル式のオーバーヘッドスターラーへ挿入した。ＲＴＤを対応アダプターに通して取り付けて、PolyStat 循環加熱及び冷却ユニットへ接続した。適合性のある配管を使用して、反応容器ジャケットの入口及び出口を PolyStat 上の適正なポートへ接続した。この蓋中の未使用ポートは、反応器を満たすために使用して、他のすべての時間では閉栓した。
【００５７】
[0062]  重合；水相と有機相の組成を下記の表Ｉと表ＩＩにそれぞれ示す。超純水をほぼ等量に分けて、ＰＦＴＥコート化磁気撹拌棒をそれぞれ含有する、２つの別々の三角フラスコへ入れた。４％水溶液において２０℃で８５．０〜８９．０モル百分率の加水分解度と２３．０〜２７．０ｃＰの粘度を有するポリ（ビニルアルコール）（ＰＶＡ）を第一フラスコ中の水へ分散させて、ホットプレート上で撹拌しながら８０℃まで加熱した。塩類（表１を参照のこと、ＭＳＰ、ＤＳＰ、ＴＳＰ、及び亜硝酸ナトリウム）を第二フラスコ中の水へ分散させて、ホットプレート上で撹拌しながら８０℃まで加熱した。PolyStat から反応容器ジャケットを通す熱伝導液の循環を開始して、液温を６０℃まで加熱した。ＰＶＡと塩類が溶けたらすぐに、ガラス漏斗を使用して、両方の溶液を同時に反応器へ入れた。デジタル式オーバーヘッドスターラーの電源をオンにして、有機相の添加時に適正な液滴サイズを形成する数値へｒｐｍを設定した。ケトル中の水相の温度を７０℃へ設定した。有機相は、２Ｌ三角フラスコ中のジビニルベンゼン（ＤＶＢ）へ過酸化ベンゾイル（ＢＰＯ）を加えて、完全に溶けるまで渦状に撹拌することによって製造した。このフラスコへ２，２，４−トリメチルペンタンとトルエンを加え、これを渦状に撹拌してよく混合した。反応器中の水相の温度が７０℃へ達したらすぐに、細口ガラス漏斗を使用して、先の有機相を反応器の中へ入れた。有機相の添加時に、反応容積の温度が低下した。PolyStat の温度プログラムを開始して、この反応容積を３０分にわたって６０℃から７７℃、３０分にわたって７７℃から８０℃へ加熱し、その温度を８０℃で９６０分間維持して、６０分にわたって２０℃へ冷やした。
【００５８】
【表２】
2019513034.tif 000004
【００５９】
【表３】
2019513034.tif 000005
【００６０】
[0063]  後処理；反応器中の反応容積レベルに印を付けた。オーバーヘッドスターラー撹拌を止め、残留液体を反応器からサイホンで取り出して、室温で、この反応器をその印まで超純水で充たした。オーバーヘッドスターラー撹拌を再開して、このスラリーを可能な限り速やかに７０℃まで加熱した。３０分後、撹拌を止めて、残留液体をサイホンで取り出した。このやり方でポリマービーズを５回洗浄した。最終洗浄の間に、スラリー温度を室温へ冷やした。最終の水洗浄の後で、ポリマービーズを同じやり方で９９％イソプロピルアルコール（ＩＰＡ）で洗浄した。９９％  ＩＰＡをサイホンで取り出して、７０％  ＩＰＡに交換した後で、このスラリーをきれいな４Ｌガラス容器へ移した。特に断らなければ、必要に応じて、このポリマーをステンレス鋼チューブにおいて８時間蒸気ストリッピングし、７０％  ＩＰＡに再び湿らせ、ＤＩ水へ移し、篩にかけて、３００μｍと６００μｍの間の直径を有するビーズの分画だけを入手して、乾燥時のさらなる重量損失が観測されなくなるまで、１００℃で乾燥させた。
【００６１】
[0064]  ポリマーのＣＹ１４１７５とＣＹ１５０７７について、窒素脱着等温線と水銀圧入ポロシメトリーによってそれぞれ測定した累積細孔容積データを下記の表ＩＩＩと表ＩＶにそれぞれ示す。
【００６２】
【表４】
2019513034.tif 000006
【００６３】
【表５】
2019513034.tif 000007
【００６４】
実施例２：ＣＹ１５０６５のポリマー修飾
[0065]  ＤＩ水に湿らせた２５０ｍＬの基本ポリマーＣＹ１４１７５を、テフロン（登録商標）コート化撹拌器とＲＴＤプローブを取り付けた５００ｍＬのジャケット付きガラス反応器へ加えた。この反応器へ９０ｍＬの過剰ＤＩ水を加えて、このスラリーを９０ＲＰＭで混合した。反応温度を２０℃へ設定した。３種の別々の添加材料を調製した；１４ｍＬ  ＤＩ水中１．４ｇの過硫酸アンモニウム、２１ｍＬ  ＤＩ水中０．７ｇのＮ−ビニルピロリドン、及び７ｍＬ  ＤＩ水中１．５ｇのＮ，Ｎ，Ｎ，Ｎ−テトラメチルエチレンジアミン。反応温度の設定点を４０℃へ高めて、入念にモニターした。反応温度が３０℃に達したらすぐに過硫酸アンモニウム溶液を加えた。反応温度が３５℃に達したらすぐにＮ，Ｎ，Ｎ，Ｎ−テトラメチルエチレンジアミン溶液を加えた。反応温度が３９℃に達したらすぐにＮ−ビニルピロリドン溶液を加えた。次いで、この反応物を４０℃で２時間維持した後で、温度を２５℃へ低下させた。
【００６５】
[0066]  後処理；反応器中の反応容積レベルに印を付けた。オーバーヘッドスターラー撹拌を止め、残留液体を反応器からサイホンで取り出して、室温で、この反応器をその印まで超純水で充たした。オーバーヘッドスターラー撹拌を再開した。３０分後、撹拌を止めて、残留液体をサイホンで取り出した。このやり方でポリマービーズを３回洗浄した。このポリマーをステンレス鋼チューブにおいて８時間蒸気ストリッピングし、７０％  ＩＰＡに再び湿らせてから、ＤＩ水へ移した。
【００６６】
[0067]  ポリマーのＣＹ１５０６５について、窒素脱着等温線によって測定した累積細孔容積データを下記の表Ｖに示す。
【００６７】
【表６】
2019513034.tif 000008
【００６８】
実施例３：再循環モデルにおけるウシ全血からの除去
[0068]  ３００ｍＬの３．８％クエン酸添加ウシ全血（Lampire Biologicals）へ精製タンパク質を予測臨床濃度で加えて、２０ｍＬのポリマー充填デバイス又は対照（ビーズ無し）デバイスを通して１４０ｍＬ／分の流速で５時間再循環させた。タンパク質と初期濃度は、Ｓ１００Ａ８（５０ｎｇ／ｍＬ）、補体Ｃ５ａ（２５ｎｇ／ｍＬ）、プロカルシトニン（１６ｎｇ／ｍＬ）、ＨＭＧＢ−１（１００ｎｇ／ｍＬ）、及びＳＰＥ  Ｂ（１００ｎｇ／ｍＬ）であった。製造業者の説明書（Ｓ１００及びＣ５ａ，duosets（R&D Systems）；プロカルシトニン（シグマ）、ＨＭＧＢ−１（Chondrex ELISA）；及び毒素（Toxin Technologies））に従って、酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）によって血漿について分析した。ポリマーのＣＹ１５０６５を使用する実験からの除去データをＤＡＭＰＳとＰＡＭＰＳについてそれぞれ下記の図面１と図面２に示す。簡潔さのために、図面の註では、ＣＹ１５０６５を「ＣＳ」と示す。ポリマーのＣＹ１５０７７を使用する実験からの除去データをＤＡＭＰＳとＰＡＭＰＳについてそれぞれ下記の図面３と図面４に示す。
【図１】
2019513034.tif 000009
【図２】
2019513034.tif 000010
【図３】
2019513034.tif 000011
【図４】
2019513034.tif 000012
【国際調査報告】
2019513034.tif 000013