(57)【要約】  本発明は、医薬として使用するための式（Ｉ）のラクタム誘導体、ならびに特にブロモドメイン含有タンパク質ＴＡＦ１（すなわち、転写開始因子ＴＦＩＩＤサブユニット１）の阻害剤として使用するための、および癌の治療または予防に使用するための、これらの化合物を含む医薬組成物に関する。2019508496.tif 000104
2019508496.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
癌の治療または予防における使用のための、式（Ｉ）の化合物、または医薬的に許容されるその塩、溶媒和物もしくはプロドラッグ：
【化１】
2019508496.tif 000081
｛式中：
環Ｂは、以下の構造を有する基であり：
【化２】
2019508496.tif 000082
環原子Ｘ2およびＸ3の一方がＮ（ＲX1）であり、そして、前記環原子Ｘ2およびＸ3のもう一方がＣ（＝Ｏ）であり；
環原子Ｘ1は、Ｎ（ＲX1）、Ｃ（ＲX2）、およびＣ（＝Ｏ）から選択され、そして、環原子Ｘ4およびＸ5は、Ｎ（ＲX1）、Ｃ（ＲX3）、およびＣ（＝Ｏ）からそれぞれ独立に選択され；ここで、前記環原子Ｘ1、Ｘ4、およびＸ5の少なくとも１つが、Ｎ（ＲX1）およびＣ（＝Ｏ）と異なり；そして、さらにここで、Ｘ3およびＸ5がＣ（＝Ｏ）であり、Ｘ4がＮ（ＲX1）であり、かつ、Ｘ1がＣ（ＲX2）である場合、Ｘ2はＮ（Ｈ）であり；
それぞれの
【化３】
2019508496.tif 000083
は独立に、単結合または二重結合であり；ここで、任意の２つの隣接した結合
【化４】
2019508496.tif 000084
のうちの少なくとも１つは単結合であり；
各ＲX1は、水素、Ｃ1-5アルキル、−ＣＯ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−アリール、およびヘテロアリールから独立に選択され、ここで、前記−（Ｃ0-3アルキレン）−アリール中に含まれるアリールおよび前記ヘテロアリールは、それぞれ任意選択で１もしくは複数の基ＲX11で置換され；
ＲX2は、水素、Ｃ1-5アルキル、Ｃ2-5アルケニル、Ｃ2-5アルキニル、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＯＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−ＯＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｓ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ハロゲン、−（Ｃ0-3アルキレン）−（Ｃ1-5ハロアルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ−（Ｃ1-5ハロアルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＦ3、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＮ、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＯ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＨＯ、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯＯＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−Ｏ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−ＮＨ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＯ2−ＮＨ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＯ2−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＯ2−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ−ＳＯ2−（Ｃ1-5アルキル）、および−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）−ＳＯ2−（Ｃ1-5アルキル）から選択され；
２つの基ＲX3は、互いに連結されて、それらが取り付けられた環炭素原子と一緒に、１もしくは複数の基ＲX31で任意選択で置換される５または６員シクリル基を形成するか、または２つの基ＲX3は、水素、Ｃ1-5アルキル、Ｃ2-5アルケニル、Ｃ2-5アルキニル、−ＯＨ、−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−ＯＨ、−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−ＳＨ、−Ｓ（Ｃ1-5アルキル）、−ＮＨ2、−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、ハロゲン、Ｃ1-5ハロアルキル、−Ｏ−（Ｃ1-5ハロアルキル）、−ＣＦ3、−ＣＮ、−ＮＯ2、−ＣＨＯ、−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−ＣＯＯＨ、−ＣＯ−Ｏ−（Ｃ1-5アルキル）、−Ｏ−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−ＣＯ−ＮＨ2、−ＣＯ−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−ＣＯ−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−ＮＨ−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−ＳＯ2−ＮＨ2、−ＳＯ2−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−ＳＯ2−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−ＮＨ−ＳＯ2−（Ｃ1-5アルキル）、および−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）−ＳＯ2−（Ｃ1-5アルキル）からそれぞれ独立に選択され；
各ＲX11は、Ｃ1-5アルキル、Ｃ2-5アルケニル、Ｃ2-5アルキニル、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＯＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−ＯＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｓ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ハロゲン、−（Ｃ0-3アルキレン）−（Ｃ1-5ハロアルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ−（Ｃ1-5ハロアルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＦ3、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＮ、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＯ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＨＯ、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯＯＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−Ｏ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−ＮＨ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＯ2−ＮＨ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＯ2−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＯ2−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ−ＳＯ2−（Ｃ1-5アルキル）、および−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）−ＳＯ2−（Ｃ1-5アルキル）から独立に選択され；
各ＲX31は、Ｃ1-5アルキル、Ｃ2-5アルケニル、Ｃ2-5アルキニル、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＯＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−ＯＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｓ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ハロゲン、−（Ｃ0-3アルキレン）−（Ｃ1-5ハロアルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ−（Ｃ1-5ハロアルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＦ3、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＮ、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＯ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＨＯ、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯＯＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−Ｏ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−ＮＨ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＯ2−ＮＨ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＯ2−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＯ2−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ−ＳＯ2−（Ｃ1-5アルキル）、および−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）−ＳＯ2−（Ｃ1-5アルキル）から独立に選択され；
環Ｂは、アスタリスク（*）で印を付した環炭素原子を介して式（Ｉ）の化合物の残りの部分に取り付けられるか、またはＸ4およびＸ5は、それぞれＣ（ＲX3）であり、かつ、２つの基ＲX3が、互いに連結されて、それらが取り付けられた環炭素原子と一緒に１もしくは複数の基ＲX31で任意選択で置換される５または６員シクリル基を形成する場合、環Ｂはまた、前記５または６員シクリル基の任意の炭素環原子を介して、式（Ｉ）の化合物の残りの部分に取り付けられてもよく；
環Ａは、アリールまたはヘテロアリールであり、ここで、前記アリールおよび前記ヘテロアリールは、１もしくは複数の基ＲAで任意選択で置換され、そしてここで、前記ヘテロアリールは、１，４−ベンゾジオキサニル、ベンゾキサニル、１，３−ベンゾジオキソラニル、ベンゾキソラニル、および１，５−ベンゾジオキセパニルから選択され；
各ＲAは、Ｃ1-5アルキル、Ｃ2-5アルケニル、Ｃ2-5アルキニル、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＯＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−ＯＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｓ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ハロゲン、−（Ｃ0-3アルキレン）−（Ｃ1-5ハロアルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ−（Ｃ1-5ハロアルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＦ3、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＮ、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＯ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＨＯ、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯＯＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−Ｏ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−ＮＨ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＯ2−ＮＨ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＯ2−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＯ2−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ−ＳＯ2−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）−ＳＯ2−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−シクロアルキル、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ−シクロアルキル、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−シクロアルキル、−（Ｃ0-3アルキレン）−ヘテロシクロアルキル、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ−ヘテロシクロアルキル、および−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−ヘテロシクロアルキルから独立に選択され；
Ｌは、−ＣＯ−Ｎ（ＲL1）−、−Ｎ（ＲL1）−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−Ｃ（＝Ｎ−ＲL2）−Ｎ（ＲL1）−、−Ｎ（ＲL1）−Ｃ（＝Ｎ−ＲL2）−、−Ｃ（＝Ｓ）−Ｎ（ＲL1）−、−Ｎ（ＲL1）−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｎ（ＲL1）−ＣＯ−Ｎ（ＲL1）−、−Ｏ−ＣＯ−Ｎ（ＲL1）−、−Ｎ（ＲL1）−ＣＯ−Ｏ−、−Ｎ（ＲL1）−Ｃ（＝Ｎ−ＲL2）−Ｎ（ＲL1）−、−Ｏ−Ｃ（＝Ｎ−ＲL2）−Ｎ（ＲL1）−、−Ｎ（ＲL1）−Ｃ（＝Ｎ−ＲL2）−Ｏ−、−Ｓ−Ｃ（＝Ｎ−ＲL2）−Ｎ（ＲL1）−、−Ｎ（ＲL1）−Ｃ（＝Ｎ−ＲL2）−Ｓ−、−Ｎ（ＲL1）−Ｃ（＝Ｓ）−Ｎ（ＲL1）−、−Ｏ−Ｃ（＝Ｓ）−Ｎ（ＲL1）−、−Ｎ（ＲL1）−Ｃ（＝Ｓ）−Ｏ−、−Ｓ−ＣＯ−Ｎ（ＲL1）−、および−Ｎ（ＲL1）−ＣＯ−Ｓ−から選択され；
各ＲL1は、水素およびＣ1-5アルキルから独立に選択され；
各ＲL2は、水素、Ｃ1-5アルキル、−ＣＮ、および−ＮＯ2から独立に選択され；
ｎは、０または１であり；そして
ｍは、０または１である｝。
【請求項２】
前記Ｘ1が、Ｃ（ＲX2）であり、前記Ｘ4およびＸ5がそれぞれＣ（ＲX3）であり、そしてさらに、前記部分−（ＣＨ2）n−Ｌ−（ＣＨ2）m−に結合する環原子Ｘ1と環炭素原子との間の結合
【化５】
2019508496.tif 000085
が二重結合であり、部分−（ＣＨ2）n−Ｌ−（ＣＨ2）m−に結合する前記環炭素原子と環原子Ｘ5との間の結合
【化６】
2019508496.tif 000086
は単結合であり、かつ、環原子Ｘ4とＸ5との間の結合
【化７】
2019508496.tif 000087
が二重結合である、請求項１に記載の使用のための化合物。
【請求項３】
前記環Ｂが以下の構造を有する、請求項１または２に記載の使用のための化合物：
【化８】
2019508496.tif 000088
｛式中、
環原子Ｘ1がＣ（ＲX2）であり；
環原子Ｘ4およびＸ5がそれぞれＣ（ＲX3）であり；そして
２つの基ＲX3が、互いに連結されて、それらが取り付けられた環炭素原子と一緒に、１もしくは複数の基ＲX31で任意選択で置換される５または６員シクリル基を形成する｝。
【請求項４】
前記環Ｂが、アスタリスクで印を付した環炭素原子を介して式（Ｉ）の化合物の残りの部分に取り付けられる、請求項１〜３のいずれか１項に記載の使用のための化合物。
【請求項５】
Ｘ4およびＸ5がそれぞれＣ（ＲX3）であり、かつ、前記２つの基ＲX3が、互いに連結されて、それらが取り付けられた環炭素原子と一緒に、５または６員シクリル基を形成し、そして、前記環Ｂが、５または６員シクリル基の任意の炭素環原子を介して、式（Ｉ）の化合物の残りの部分に取り付けられる、請求項１〜３のいずれか１項に記載の使用のための化合物。
【請求項６】
前記２つの基ＲX3が、互いに連結されて、それらが取り付けられた環炭素原子と一緒に、５または６員シクロアルキル基、５または６員シクロアルケニル基、あるいは、フェニル基を形成し、ここで、前記シクロアルキル基、前記シクロアルケニル基および前記フェニル基が、１もしくは複数の基ＲX31で任意選択で置換される、請求項１〜５のいずれか１項に記載の使用のための化合物。
【請求項７】
前記２つの基ＲX3が、互いに連結されて、それらが取り付けられた環炭素原子と一緒にフェニル基を形成し、ここで前記フェニル基は、１もしくは複数のＲX31で任意選択で置換される、請求項１〜６のいずれか１項に記載の使用のための化合物。
【請求項８】
前記式（Ｉ）の化合物が以下の構造を有する、請求項１〜３または５〜７のいずれか１項に記載の使用のための化合物。
【化９】
2019508496.tif 000089
【請求項９】
前記Ｘ2がＣ（＝Ｏ）であり、かつ、Ｘ3がＮ（ＲX1）である、請求項１〜８のいずれか１項に記載の使用のための化合物。
【請求項１０】
前記各ＲX1が、水素およびＣ1-5アルキルから独立に選択される、請求項１〜９のいずれか１項に記載の使用のための化合物。
【請求項１１】
前記環Ａが、フェニル、１，４−ベンゾジオキサニル、ベンゾキサニル、１，３−ベンゾジオキソラニル、ベンゾキソラニル、および１，５−ベンゾジオキセパニルから選択され、ここで、前記フェニル、前記１，４−ベンゾジオキサニル、前記ベンゾキサニル、前記１，３−ベンゾジオキソラニル、前記ベンゾキソラニル、および前記１，５−ベンゾジオキセパニルが、１もしくは複数の基ＲAで任意選択でそれぞれ置換される、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の使用のための化合物。
【請求項１２】
前記環Ａが、４−（Ｃ1-5アルコキシ）−フェニル、１，４−ベンゾジオキサン−６−イル、および１−ベンゾキサン−６−イルから選択され、ここで、前記１，４−ベンゾジオキサン−６−イルまたは前記１−ベンゾキサン−６−イルに含まれるフェニル部分が、１もしくは複数の基ＲAで任意選択で置換される、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の使用のための化合物。
【請求項１３】
前記Ｌが、−ＣＯ−Ｎ（ＲL1）−または−Ｎ（ＲL1）−ＣＯ−である、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の使用のための化合物。
【請求項１４】
前記部分−（ＣＨ2）n−Ｌ−（ＣＨ2）m−が、−（ＣＨ2）n−Ｎ（ＲL1）−ＣＯ−（ＣＨ2）m−であり、ｎが０であり、かつ、ｍが０である、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の使用のための化合物。
【請求項１５】
前記化合物が、以下の式のいずれか１つの化合物、または医薬的に許容されるその塩、溶媒和物もしくはプロドラッグである、請求項１に記載の使用のための化合物。
【化１０】
2019508496.tif 000090
【化１１】
2019508496.tif 000091
【化１２】
2019508496.tif 000092
【化１３】
2019508496.tif 000093
【化１４】
2019508496.tif 000094
【請求項１６】
請求項１〜１５のいずれか１項に記載の化合物と医薬的に許容される賦形剤とを含む、癌の治療または予防において使用するための医薬組成物。
【請求項１７】
前記癌が、前立腺癌腫、乳癌、急性骨髄性白血病、多発性骨髄腫、神経膠芽腫、およびＮＵＴ正中線癌腫から選択される、請求項１〜１５のいずれか１項に記載の使用のための化合物または請求項１６に記載の使用のための医薬組成物。
【請求項１８】
医薬として使用するための、請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物、または医薬的に許容されるその塩、溶媒和物もしくはプロドラッグ：
｛式中、
環Ｂは、以下の構造を有する基であり：
【化１５】
2019508496.tif 000095
前記環原子Ｘ2およびＸ3の一方がＮ（ＲX1）であり、そして、前記環原子Ｘ2およびＸ3のもう一方がＣ（＝Ｏ）であり；
環原子Ｘ1がＣ（ＲX2）であり；
環原子Ｘ4およびＸ5がそれぞれＣ（ＲX3）であり；そして、該２つの基ＲX3が、互いに連結されて、それらが取り付けられた環炭素原子と一緒に（１もしくは複数の基ＲX31で任意選択で置換される）５または６員シクリル基を形成し；
各ＲX31は、Ｃ1-5アルキル、Ｃ2-5アルケニル、Ｃ2-5アルキニル、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＯＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−ＯＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｓ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ハロゲン、−（Ｃ0-3アルキレン）−（Ｃ1-5ハロアルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＦ3、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＮ、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＯ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＨＯ、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯＯＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−Ｏ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−ＮＨ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＯ2−ＮＨ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＯ2−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＯ2−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ−ＳＯ2−（Ｃ1-5アルキル）、および−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）−ＳＯ2−（Ｃ1-5アルキル）から独立に選択され；そして
環Ｂは、アスタリスク（*）で印を付した環炭素原子を介して式（Ｉ）の化合物の残りの部分に取り付けられるか、あるいは、環Ｂは、（２つの互いに連結された基ＲX3から形成される）前記５または６員シクリル基の任意の炭素環原子を介して式（Ｉ）の化合物の残りの部分に取り付けられる｝。
【請求項１９】
前記環Ｂが、アスタリスクで印を付した環炭素原子を介して式（Ｉ）の化合物の残りの部分に取り付けられる、請求項１８に記載の使用のための化合物。
【請求項２０】
前記環Ｂが、５または６員シクリル基の任意の環炭素原子を介して式（Ｉ）の化合物の残りの部分に取り付けられ、ここで前記５または６員シクリル基は、２つの互いに連結された基ＲX3から形成される、請求項１８に記載の使用のための化合物。
【請求項２１】
前記２つの基ＲX3が、互いに連結されて、それらが取り付けられた環炭素原子と一緒に、５または６員シクロアルキル基、５または６員シクロアルケニル基、あるいは、フェニル基を形成し、ここで、前記シクロアルキル基、前記シクロアルケニル基および前記フェニル基が、１もしくは複数の基ＲX31で任意選択で置換される、請求項１８〜２０のいずれか１項に記載の使用のための化合物。
【請求項２２】
前記２つの基ＲX3が、互いに連結されて、それらが取り付けられた環炭素原子と一緒にフェニル基を形成し、ここで前記フェニル基は、１もしくは複数のＲX31で任意選択で置換される、請求項１８〜２１のいずれか１項に記載の使用のための化合物。
【請求項２３】
前記各ＲX31が、Ｃ1-5アルキル、Ｃ2-5アルケニル、Ｃ2-5アルキニル、−ＯＨ、−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−ＯＨ、−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−ＳＨ、−Ｓ（Ｃ1-5アルキル）、−ＮＨ2、−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、ハロゲン、Ｃ1-5ハロアルキル、−ＣＦ3、および−ＣＮから、好ましくはＣ1-4アルキル、−ＯＨ、−ＮＨ2、−ＮＨ（Ｃ1-4アルキル）、−Ｎ（Ｃ1-4アルキル）（Ｃ1-4アルキル）、ハロゲン、−ＣＦ3、および−ＣＮから独立に選択される、請求項１８〜２２のいずれか１項に記載の使用のための化合物。
【請求項２４】
前記式（Ｉ）の化合物が以下の構造を有する、請求項１８に記載の使用のための化合物。
【化１６】
2019508496.tif 000096
【請求項２５】
前記Ｘ2がＣ（＝Ｏ）であり、かつ、Ｘ3がＮ（ＲX1）である、請求項１８〜２４のいずれか１項に記載の使用のための化合物。
【請求項２６】
前記ＲX1が、水素およびＣ1-5アルキルから選択される、請求項１８〜２５のいずれか１項に記載の使用のための化合物。
【請求項２７】
前記環Ａが、フェニル、１，４−ベンゾジオキサニル、ベンゾキサニル、１，３−ベンゾジオキソラニル、ベンゾキソラニル、および１，５−ベンゾジオキセパニルから選択され、ここで、前記フェニル、前記１，４−ベンゾジオキサニル、前記ベンゾキサニル、前記１，３−ベンゾジオキソラニル、前記ベンゾキソラニル、および前記１，５−ベンゾジオキセパニルが、１もしくは複数の基ＲAで任意選択でそれぞれ置換される、請求項１８〜２６のいずれか１項に記載の使用のための化合物。
【請求項２８】
前記環Ａが、４−（Ｃ1-5アルコキシ）−フェニル、１，４−ベンゾジオキサン−６−イル、および１−ベンゾキサン−６−イルから選択され、ここで、前記１，４−ベンゾジオキサン−６−イルまたは前記１−ベンゾキサン−６−イルに含まれるフェニル部分が、１もしくは複数の基ＲAで任意選択で置換される、請求項１８〜２７のいずれか１項に記載の使用のための化合物。
【請求項２９】
前記Ｌが、−ＣＯ−Ｎ（ＲL1）−または−Ｎ（ＲL1）−ＣＯ−である、請求項１８〜２８のいずれか１項に記載の使用のための化合物。
【請求項３０】
前記部分−（ＣＨ2）n−Ｌ−（ＣＨ2）m−が、−（ＣＨ2）n−Ｎ（ＲL1）−ＣＯ−（ＣＨ2）m−であり、ｎが０であり、かつ、ｍが０である、請求項１８〜２９のいずれか１項に記載の使用のための化合物。
【請求項３１】
前記化合物が、以下の式のいずれか１つの化合物、または医薬的に許容されるその塩、溶媒和物もしくはプロドラッグである、請求項１８に記載の使用のための化合物。
【化１７】
2019508496.tif 000097
【化１８】
2019508496.tif 000098
【化１９】
2019508496.tif 000099
【化２０】
2019508496.tif 000100
【請求項３２】
請求項１８〜３１のいずれか１項に記載の化合物と医薬的に許容される賦形剤とを含む医薬組成物。
【請求項３３】
前記化合物が、ＢＲＤ４阻害剤と組み合わせて投与される、請求項１〜１５または１７〜３１のいずれか１項に記載の使用のための化合物。
【請求項３４】
前記ＢＲＤ４阻害剤が、ＣｅＭＭＥＣ２、（Ｓ）−ＪＱ１、Ｉ−ＢＥＴ１５１、Ｉ−ＢＥＴ７６２、ＰＦ−１、ブロモスポリン、ＯＴＸ−０１５、ＴＥＮ−０１０、ＣＰＩ−２０３、ＣＰＩ−０６１０、ＲＶＸ−２０８、ＢＩ２５３６、ＴＧ１０１３４８、ＬＹ２９４００２、またはこれらの剤のいずれか１つの医薬的に許容される塩、溶媒和物もしくはプロドラッグである、請求項３３に記載の使用のための化合物。
【請求項３５】
前記ＢＲＤ４阻害剤が（Ｓ）−ＪＱ１である、請求項３３に記載の使用のための化合物。
【請求項３６】
ＴＡＦ１阻害剤としての、請求項１〜１５のいずれか１項に記載の化合物のインビトロにおける使用。
【請求項３７】
ＴＡＦ１阻害剤としての、請求項１３に記載の化合物のインビトロにおける使用。
【請求項３８】
以下の式のいずれか１つを有する化合物、または医薬的に許容されるその塩、溶媒和物もしくはプロドラッグ。
【化２１】
2019508496.tif 000101
【化２２】
2019508496.tif 000102
【化２３】
2019508496.tif 000103
【請求項３９】
治療法において使用するためのＴＡＦ１阻害剤であって、ＢＲＤ４阻害剤と組み合わせて投与される、ＴＡＦ１阻害剤。
【請求項４０】
癌の治療または予防において使用するためのＴＡＦ１阻害剤であって、ＢＲＤ４阻害剤と組み合わせて投与される、ＴＡＦ１阻害剤。
【請求項４１】
ＴＡＦ１阻害剤およびＢＲＤ４阻害剤を含む医薬組成物。
【請求項４２】
癌の治療または予防において使用するための、請求項４１に記載の医薬組成物。
【請求項４３】
前記癌が、前立腺癌腫、乳癌、急性骨髄性白血病、多発性骨髄腫、神経膠芽腫、およびＮＵＴ正中線癌腫から選択される、請求項４０に記載の使用のためのＴＡＦ１阻害剤または請求項４２に記載の使用のための医薬組成物。
【請求項４４】
前記ＴＡＦ１阻害剤が、請求項１〜１５のいずれか１項に記載の化合物である、請求項３９、４０または４３に記載の使用のためのＴＡＦ１阻害剤、請求項４１に記載の医薬組成物、あるいは、請求項４２または４３に記載の使用のための医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、医薬として使用するための式（Ｉ）のラクタム誘導体、ならびに特にブロモドメイン含有タンパク質ＴＡＦ１（すなわち、転写開始因子ＴＦＩＩＤサブユニット１）の阻害剤として使用するための、および癌の治療または予防に使用するための、これらの化合物を含む医薬組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
ＢＥＴ（ブロモドメインおよびエキストラ末端ドメイン）ファミリーのブロモドメインタンパク質は、ヒストンリジンアセチル化を認識し、ｃ−ＭＹＣ癌遺伝子などの標的遺伝子の転写活性化を媒介する。薬理学的なＢＥＴドメイン阻害剤は、さまざまな癌において治療効果が期待できる。特に、ＢＲＤ４（ブロモドメイン含有タンパク質４）は、ＢＥＴファミリーのアセチル−リジンリーダーである（Wang, R. et al., 2012; Dey et al., 2003; Filippakopoulos et al., Cell, 2012）。このタンパク質は、プロモーターおよびエンハンサー領域のアセチル化ヒストンに結合し、そして、転写因子、補因子およびＲＮＡポリメラーゼＩＩ（ＲＮＡｐｏｌ ＩＩ）を動員し、それにより、高度に状況に依存した様式で遺伝子の一部の転写を調節する。標的遺伝子発現に対するその効果を通じて（Zuber et al., 2011; Wyce et al., 2013）、ブロモドメイン−ヒストン相互作用が、細胞周期の進行（Dey et al., 2003; Devaiah et al., 2013; Yang et al., 2008; Wu et al., 2007）、ゲノム構造および安定性（Wu et al., 2007; Floyd et al., 2013）、ならびに癌を含めたいくつかの病状の発症（Zuber et al., 2011; Yang et al., 2008; Nagarajan et al., 2014; Wu et al., 2015）を調整する重要な役割を担っている。ｐａｎ−ＢＥＴ阻害剤であるＪＱ１（Filippakopoulos et al., 2010）およびＩ−ＢＥＴ−１５１（Seal et al., 2012）などの、ＢＲＤ４の２つのブロモドメインを標的化する化学プローブ化合物のデザイン、ならびに癌モデルにおけるそれらの無視できない有効性は、臨床試験を現在受けているこれらのタンパク質相互作用モジュール向けの候補医薬の開発に拍車をかけた（Filippakopoulos et al., 2014）。
【０００３】
多数の競合している臨床プログラムにもかかわらず、現在利用可能なＢＲＤ４阻害剤の機構および化学的多様性は限られている（Filippakopoulos et al., Cell, 2012; Filippakopoulos et al., 2014）。さらに、ＢＲＤ４機能に影響を及ぼす因子群に関する詳細な理解を欠いており、かつ、ＢＲＤ４のドラッガブル（draggable）標的上流または下流は、よく分からないままである。
【０００４】
本発明との関連において、本発明者らは、ＢＲＤ４依存性の不活性クロマチン状態のモジュレーター向けの高度に多様な化合物空間（chemical space）の不偏な探索を可能にするストラテジーを設計することを目指す。明白な単一対立遺伝子の遺伝的構造を可能にする、ヒト一倍体細胞株ＫＢＭ７（Andersson et al., 1995）のバックグラウンドにおいて、ＲＦＰ（赤色蛍光タンパク質）遺伝子は、ＢＲＤ４阻害によって特異的に活性化されるヘテロクロマチン遺伝子座に組み込まれた。次に、実施例１に記載のように、８９，３５５個の小分子に関する高度に多様な化合物ライブラリーが選択され、そして、化合物が、ＲＦＰ発現に応答するそれらの能力について選択された。このライブラリー中のすべてのＢＥＴ阻害剤を含めた、多くのＢＲＤ４阻害剤の効率的な同定が、その実験ストラテジーの正当性を立証した。重要なことには、その設定は、ＲＦＰ発現を効率的に誘発するが、ＢＲＤ４に結合しない小分子の識別を可能にし、そして、直接的な関与なしにＢＲＤ４阻害を模倣する作用の新規機序を示した。本発明者らは、驚いたことに、転写開始因子ＴＡＦ１の第二のブロモドメインに結合し、強力に阻害することによって機能した斯かる化合物の１つ、ＣｅＭＭＥＣ１を見出した。さらに、この新しい治療薬およびその誘導体の特性を調査することによって、本発明者らは、驚いたことに、ＴＡＦ１とＢＲＤ４の標的化の間の強い相乗効果を見出し、そしてそれは、実施例１にも記載のように、ＢＲＤ４依存性癌細胞の効果的な殺滅をもたらした。
【０００５】
ＴＡＦ１は、ＴＦＩＩＤコアに含まれるＴＡＦサブユニットのうちの最も大きい成分であり、そしてそれは、前開始複合体（ＰＩＣ）の一部であって、転写開始のためにＴＡＴＡボックスを認識して、ＲＮＡＰｏｌ ＩＩを正しく配置する役割を果たす（Lee et al., 2005; Kloet et al., 2012; Kandiah et al., 2014）。それによって、ＴＡＦ１は、転写機構の構築において基本的な役割を担っている。ＢＲＤ４と同様に、ＴＡＦ１は、多くの異種細胞株の生存能力（Wang et al., 2015; Blomen et al., 2015）、および転写の調節においてだけでなく、免疫共沈降実験において物理的にも、２種類のタンパク質の相互作用にとって不可欠である。ＴＡＦ１ノックダウンがＢＲＤ４阻害に対する感受性を増強するので、ＢＲＤ４阻害剤が（本明細書中に提供する式（Ｉ）の化合物などの）ＴＡＦ１阻害剤とＢＲＤ４依存性癌細胞株の生存能力を低減するような相乗作用を示すことが、本発明との関連において実証された。よって、ＴＡＦ１のブロモドメインの特異的機能がよく分からないままである一方で、本明細書中に提供する結果は、ＴＡＦ１の第二のブロモドメインがＢＲＤ４駆動癌において関連標的であることを示す。ブロモスポリンや特定の３，５−ジメチルイソキサゾール誘導体（McKeown et al., 2014）を含めた、特定のＢＲＤ４阻害剤がＴＡＦ１に結合することは知られているが、現在、このブロモドメイン含有タンパク質向けに利用可能な特異的阻害剤が存在していない。
【０００６】
本発明者らはまた、新規かつ強力で、直接的なＢＲＤ４阻害剤、すなわち、ＣｅＭＭＥＣ２も見出した。他のブロモドメイン阻害剤は、例えば、ＷＯ２０１２／１７４４８７、ＷＯ２０１３／０２７１６８、ＷＯ２０１４／０７６１４６、ＵＳ２０１４／０１３５３３６、ＷＯ２０１４／１３４５８３、ＷＯ２０１４／１９１８９４、ＷＯ２０１４／１９１８９６、ＵＳ２０１４／０３４９９９０、ＷＯ２０１４／１９１９０６、およびＷＯ２０１６／０１６３１６において既に記載されている。さらに、特定のラクタム誘導体が、例えば、ＷＯ２０１０／０７２５９７、ＷＯ２０１３／０６８４８９、ＷＯ２０１４／１２０８０８、ＷＯ２０１５／１０６２７２、およびＷＯ２０１６／００４４１７において、他の薬理活性を有すると開示された。
【発明の概要】
【０００７】
本発明は、治療法において、特に癌の治療または予防において有利に使用できる新規の強力なＴＡＦ１阻害剤を提供するという問題を解決する。本発明はまた、他のブロモドメイン含有タンパク質、特にＢＲＤ４超える、ＴＡＦ１に対して高度に選択的であるＴＡＦ１阻害剤も提供する。
【０００８】
したがって、本発明は、医薬として使用するため、特に癌の治療または予防において使用するための、以下の式（Ｉ）の化合物
【化１】
2019508496.tif 000003
あるいは、医薬的に許容され塩、溶媒和物もしくはプロドラッグを提供する。
【０００９】
式（Ｉ）において、環Ｂは、以下の構造：
【化２】
2019508496.tif 000004
を有する基である。
【００１０】
環Ｂにおいて、該環原子Ｘ2およびＸ3の一方がＮ（ＲX1）であり、そして前記環原子Ｘ2およびＸ3のもう一方がＣ（＝Ｏ）である。
【００１１】
環原子Ｘ1は、Ｎ（ＲX1）、Ｃ（ＲX2）、およびＣ（＝Ｏ）から選択され、そして環原子Ｘ4およびＸ5は、Ｎ（ＲX1）、Ｃ（ＲX3）およびＣ（＝Ｏ）からそれぞれ独立に選択され、ここで、前記環原子Ｘ1、Ｘ4、Ｘ5の少なくとも１つが、Ｎ（ＲX1）およびＣ（＝Ｏ）と異なる。
【００１２】
式（Ｉ）の化合物において、Ｘ3およびＸ5がＣ（＝Ｏ）であり、Ｘ4がＮ（ＲX1）であり、かつ、Ｘ1がＣ（ＲX2）である場合、Ｘ2はＮ（Ｈ）である。
【００１３】
それぞれの
【化３】
2019508496.tif 000005
は独立に、単結合または二重結合であり、ここで、任意の２つの隣接した結合
【化４】
2019508496.tif 000006
のうちの少なくとも１つは、単結合である。
【００１４】
各ＲX1は、水素、Ｃ1-5アルキル、−ＣＯ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−アリール、および−（Ｃ0-3アルキレン）−ヘテロアリールから独立に選択され、ここで、前記−（Ｃ0-3アルキレン）−アリール中に含まれるアリールおよび前記−（Ｃ0-3アルキレン）−ヘテロアリール中に含まれるヘテロアリールは、それぞれ任意選択で１もしくは複数の基ＲX11で置換される。
【００１５】
ＲX2は、水素、Ｃ1-5アルキル、Ｃ2-5アルケニル、Ｃ2-5アルキニル、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＯＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−ＯＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｓ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ハロゲン、−（Ｃ0-3アルキレン）−（Ｃ1-5ハロアルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ−（Ｃ1-5ハロアルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＦ3、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＮ、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＯ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＨＯ、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯＯＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−Ｏ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−ＮＨ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＯ2−ＮＨ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＯ2−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＯ2−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ−ＳＯ2−（Ｃ1-5アルキル）、および−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）−ＳＯ2−（Ｃ1-5アルキル）から選択される。
【００１６】
２つの基ＲX3は、互いに連結されて、それらが取り付けられた環炭素原子と一緒に、１もしくは複数の基ＲX31で任意選択で置換される５または６員シクリル基を形成するか、または２つの基ＲX3は、水素、Ｃ1-5アルキル、Ｃ2-5アルケニル、Ｃ2-5アルキニル、−ＯＨ、−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−ＯＨ、−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−ＳＨ、−Ｓ（Ｃ1-5アルキル）、−ＮＨ2、−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、ハロゲン、Ｃ1-5ハロアルキル、−Ｏ−（Ｃ1-5ハロアルキル）、−ＣＦ3、−ＣＮ、−ＮＯ2、−ＣＨＯ、−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−ＣＯＯＨ、−ＣＯ−Ｏ−（Ｃ1-5アルキル）、−Ｏ−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−ＣＯ−ＮＨ2、−ＣＯ−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−ＣＯ−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−ＮＨ−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−ＳＯ2−ＮＨ2、−ＳＯ2−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−ＳＯ2−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−ＮＨ−ＳＯ2−（Ｃ1-5アルキル）、および−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）−ＳＯ2−（Ｃ1-5アルキル）からそれぞれ独立に選択される。
【００１７】
各ＲX11は、Ｃ1-5アルキル、Ｃ2-5アルケニル、Ｃ2-5アルキニル、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＯＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−ＯＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｓ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ハロゲン、−（Ｃ0-3アルキレン）−（Ｃ1-5ハロアルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ−（Ｃ1-5ハロアルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＦ3、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＮ、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＯ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＨＯ、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯＯＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−Ｏ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−ＮＨ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＯ2−ＮＨ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＯ2−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＯ2−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ−ＳＯ2−（Ｃ1-5アルキル）、および−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）−ＳＯ2−（Ｃ1-5アルキル）から独立に選択される。
【００１８】
各ＲX31は、Ｃ1-5アルキル、Ｃ2-5アルケニル、Ｃ2-5アルキニル、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＯＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−ＯＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｓ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ハロゲン、−（Ｃ0-3アルキレン）−（Ｃ1-5ハロアルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ−（Ｃ1-5ハロアルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＦ3、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＮ、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＯ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＨＯ、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯＯＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−Ｏ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−ＮＨ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＯ2−ＮＨ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＯ2−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＯ2−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ−ＳＯ2−（Ｃ1-5アルキル）、および−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）−ＳＯ2−（Ｃ1-5アルキル）から独立に選択される。
【００１９】
環Ｂは、アスタリスク（*）で印を付した環炭素原子を介して式（Ｉ）の化合物の残りの部分に取り付けられるか、またはＸ4およびＸ5がそれぞれＣ（ＲX3）であり、かつ、２つの基ＲX3が、互いに連結されて、それらが取り付けられた環炭素原子と一緒に、１もしくは複数の基ＲX31で任意選択で置換される５または６員シクリル基を形成する場合、環Ｂはまた、前記５または６員シクリル基の任意の環炭素原子を介して、式（Ｉ）の化合物の残りの部分に取り付けられてもよい。
【００２０】
環Ａは、アリールまたはヘテロアリールであり、ここで、前記アリールおよび前記ヘテロアリールは、１もしくは複数の基ＲAでそれぞれ任意選択で置換される。
【００２１】
各ＲAは、Ｃ1-5アルキル、Ｃ2-5アルケニル、Ｃ2-5アルキニル、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＯＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−ＯＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｓ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ハロゲン、−（Ｃ0-3アルキレン）−（Ｃ1-5ハロアルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ−（Ｃ1-5ハロアルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＦ3、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＮ、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＯ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＨＯ、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯＯＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−Ｏ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−ＮＨ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＯ2−ＮＨ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＯ2−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＯ2−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ−ＳＯ2−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）−ＳＯ2−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−シクロアルキル、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ−シクロアルキル、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−シクロアルキル、−（Ｃ0-3アルキレン）−ヘテロシクロアルキル、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ−ヘテロシクロアルキル、および−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−ヘテロシクロアルキルから独立に選択される。
【００２２】
Ｌは、−ＣＯ−Ｎ（ＲL1）−、−Ｎ（ＲL1）−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−Ｃ（＝Ｎ−ＲL2）−Ｎ（ＲL1）−、−Ｎ（ＲL1）−Ｃ（＝Ｎ−ＲL2）−、−Ｃ（＝Ｓ）−Ｎ（ＲL1）−、−Ｎ（ＲL1）−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｎ（ＲL1）−ＣＯ−Ｎ（ＲL1）−、−Ｏ−ＣＯ−Ｎ（ＲL1）−、−Ｎ（ＲL1）−ＣＯ−Ｏ−、−Ｎ（ＲL1）−Ｃ（＝Ｎ−ＲL2）−Ｎ（ＲL1）−、−Ｏ−Ｃ（＝Ｎ−ＲL2）−Ｎ（ＲL1）−、−Ｎ（ＲL1）−Ｃ（＝Ｎ−ＲL2）−Ｏ−、−Ｓ−Ｃ（＝Ｎ−ＲL2）−Ｎ（ＲL1）−、−Ｎ（ＲL1）−Ｃ（＝Ｎ−ＲL2）−Ｓ−、−Ｎ（ＲL1）−Ｃ（＝Ｓ）−Ｎ（ＲL1）−、−Ｏ−Ｃ（＝Ｓ）−Ｎ（ＲL1）−、−Ｎ（ＲL1）−Ｃ（＝Ｓ）−Ｏ−、−Ｓ−ＣＯ−Ｎ（ＲL1）−、および−Ｎ（ＲL1）−ＣＯ−Ｓ−から選択される。
【００２３】
各ＲL1は、水素およびＣ1-5アルキルから独立に選択される。
【００２４】
各ＲL2は、水素、Ｃ1-5アルキル、−ＣＮ、および−ＮＯ2から独立に選択される。
【００２５】
ｎは、０または１である。
【００２６】
ｍは、０または１である。
【００２７】
本発明はまた、医薬的に許容される賦形剤と組み合わせて、本明細書中に記載および規定の式（Ｉ）の化合物、または医薬的に許容されるその塩、溶媒和物もしくはプロドラッグを含む医薬組成物を提供する。
【００２８】
さらに、本発明は、特に、例えば、癌などの疾患／障害の治療または予防のための、医薬の調製における式（Ｉ）の化合物、または医薬的に許容されるその塩、溶媒和物もしくはプロドラッグの使用に関する。
【００２９】
式（Ｉ）の化合物は、添付の実施例でも実証されるように、ＴＡＦ１の、具体的にはＴＡＦ１の第二のブロモドメインの強力な阻害剤であることが見出され、それにより、癌、特にＢＲＤ４駆動癌および／またはｃ−ＭＹＣ駆動癌、ならびにＴＡＦ１および／またはＢＲＤ４に関連する他の疾患／障害の治療あるいは予防に使用できる。
【００３０】
それにより、本発明は、特に、癌の治療または予防における使用のための、本明細書中に記載および規定の式（Ｉ）の化合物、または医薬的に許容されるその塩、溶媒和物もしくはプロドラッグに関する。
【００３１】
本発明はまた、癌の治療または予防において使用するための、医薬的に許容される賦形剤と組み合わせて、式（Ｉ）の化合物、または医薬的に許容されるその塩、溶媒和物もしくはプロドラッグを含む医薬組成物を提供する。
【００３２】
本発明はさらに、癌の治療または予防のための医薬の調製における式（Ｉ）の化合物、または医薬的に許容されるその塩、溶媒和物もしくはプロドラッグの使用に関する。
【００３３】
本発明は同様に、癌を治療するかまたは予防する方法も提供し、該方法は、式（Ｉ）の化合物、または医薬的に許容されるその塩、溶媒和物もしくはプロドラッグ、または前述の物質のいずれかおよび医薬的に許容される賦形剤を含む医薬組成物を、前記疾患の治療を必要とする対象（例えば、ヒト）に投与することを含む。
【００３４】
さらに、本発明は、ＴＡＦ１を阻害する際に使用するため、またはＴＡＦ１を阻害することによって癌を治療するかまたは予防する際に使用するための、式（Ｉ）の化合物、または医薬的に許容されるその塩、溶媒和物もしくはプロドラッグ、または前述の物質のいずれかおよび医薬的に許容される賦形剤を含む医薬組成物に関する。
【００３５】
本発明はさらに、ＴＡＦ１を阻害するための、またはＴＡＦ１を阻害することによって癌を治療するかまたは予防するための医薬の調製における、式（Ｉ）の化合物、または医薬的に許容されるその塩、溶媒和物もしくはプロドラッグの使用に関する。
【００３６】
それに加えて、本発明は、ＴＡＦ１を阻害する方法を提供し、該方法は、式（Ｉ）の化合物、または医薬的に許容されるその塩、溶媒和物もしくはプロドラッグ、あるいは、前述の物質のいずれかおよび医薬的に許容される賦形剤を含む医薬組成物を、前記疾患の治療を必要とする対象（例えば、ヒト）に投与することを含む。本発明はまた、ＴＡＦ１を阻害することによって癌を治療するかまたは予防する方法を提供し、該方法は、式（Ｉ）の化合物、または医薬的に許容されるその塩、溶媒和物もしくはプロドラッグ、あるいは、前述の物質のいずれかおよび医薬的に許容される賦形剤を含む医薬組成物を、前記疾患の治療を必要とする対象（例えば、ヒト）に投与することを含む。
【００３７】
本発明はさらに、式（Ｉ）によって含まれた新規の化合物、特に、化合物１、３、４、５、６、８、１０、１２、１３、１５、１６、２４、２５、２６、２７、２９、３０、３３、３６、３７、３８、および３９（以下により詳細に示す）、ならびにこれらの化合物のいずれかの医薬的に許容される塩、溶媒和物、およびプロドラッグを提供する。
【００３８】
本発明はまた、治療法における使用のための、特に癌の治療または予防における使用のためのＴＡＦ１阻害剤（好ましくは式（Ｉ）の化合物、または医薬的に許容されるその塩、溶媒和物もしくはプロドラッグである）にも関し、ここで、該ＴＡＦ１阻害剤は、ＢＲＤ４阻害剤と組み合わせて投与される。本発明は同様に、治療法における使用のための、特に癌の治療または予防における使用のためのＢＲＤ４阻害剤に関し、ここで、該ＢＲＤ４阻害剤は、ＴＡＦ１阻害剤と組み合わせて投与される。さらに、本発明は、ＴＡＦ１阻害剤およびＢＲＤ４阻害剤を含む医薬組成物、および治療法における、特に癌の治療または予防における使用のためのその使用を提供する。本発明はさらに、癌を治療するかまたは予防する方法を提供し、該方法は、前記疾患の治療を必要とする対象（例えば、ヒト）に、ＢＲＤ４阻害剤と組み合わせてＴＡＦ１阻害剤を投与することを含む。ＴＡＦ１阻害剤は、好ましくは、本明細書中に記載および規定の式（Ｉ）の化合物、または医薬的に許容されるその塩、溶媒和物もしくはプロドラッグである。ＢＲＤ４阻害剤は、好ましくは、直接的なＢＲＤ４阻害剤であり、例えば以下に示す化合物ＣｅＭＭＥＣ２、または医薬的に許容されるその塩、溶媒和物もしくはプロドラッグ、あるいは、化合物ＪＱ１（（Ｓ）−ＪＱ１とも呼ばれる）、Ｉ−ＢＥＴ１５１（または、ＧＳＫ１２１０１５１Ａ）、Ｉ−ＢＥＴ７６２（または、ＧＳＫ５２５７６２）、ＰＦ−１、ブロモスポリン、ＯＴＸ−０１５、ＴＥＮ−０１０、ＣＰＩ−２０３、ＣＰＩ−０６１０、ＲＶＸ−２０８、ＢＩ２５３６、ＴＧ１０１３４８、ＬＹ２９４００２のいずれか１つ、またはこれらの剤のいずれかの医薬的に許容される塩、溶媒和物もしくはプロドラッグ、あるいは、ＷＯ２０１２／１７４４８７、ＷＯ２０１４／０７６１４６、ＵＳ２０１４／０１３５３３６、ＷＯ２０１４／１３４５８３、ＷＯ２０１４／１９１８９４、ＷＯ２０１４／１９１８９６、ＵＳ２０１４／０３４９９９０、またはＷＯ２０１４／１９１９０６に開示された化合物のいずれか１つであり得る。
【００３９】
【化５】
2019508496.tif 000007
【化６】
2019508496.tif 000008
【００４０】
本発明はさらに、治療における使用のための、特に、（本明細書中で言及した特定のタイプの癌のいずれか１つを含む）癌の治療または予防における使用のための、化合物ＣｅＭＭＥＣ２、または医薬的に許容されるその塩、溶媒和物もしくはプロドラッグ、あるいは、前述の物質のいずれかおよび医薬的に許容される賦形剤を含む医薬組成物の使用に関する。本発明はまた、特に機能的なＢＲＤ４阻害剤としての、治療法における使用のための、あるいは、特に癌の治療または予防における使用のための、図１１に描かれた化合物、特にＣｅＭＭＥＣ３、ＣｅＭＭＥＣ４、ＣｅＭＭＥＣ５、ＣｅＭＭＥＣ６、ＣｅＭＭＥＣ７、ＣｅＭＭＥＣ８、ＣｅＭＭＥＣ９、ＣｅＭＭＥＣ１０、ＣｅＭＭＥＣ１１、ＣｅＭＭＥＣ１２、の各々、またはこれらの化合物のいずれかの医薬的に許容される塩、溶媒和物もしくはプロドラッグ、あるいは、前述の物質のいずれかおよび医薬的に許容される賦形剤を含む医薬組成物に言及する。
【００４１】
本発明は、任意選択でＢＲＤ４阻害剤（例えば、ＣｅＭＭＥＣ２など）と組み合わせて、本明細書中に記載および規定の、式（Ｉ）の化合物を使用した、癌、特にＢＲＤ４依存性癌および／またはｃ−ＭＹＣ依存性癌、の治療および予防に関する。本発明によって治療または予防されるべき癌は、前立腺癌腫、乳癌、急性骨髄性白血病、多発性骨髄腫、神経膠芽腫、およびＮＵＴ正中線癌腫から好ましくは選択される。
【００４２】
本発明はさらに、研究におけるＴＡＦ１阻害剤としての、特に研究ツール化合物としての、式（Ｉ）の化合物、または医薬的に許容されるその塩、溶媒和物もしくはプロドラッグの使用に関する。したがって、本発明は、ＴＡＦ１阻害剤としての、式（Ｉ）の化合物、または医薬的に許容されるその塩、溶媒和物もしくはプロドラッグのインビトロにおける使用、および、特にＴＡＦ１阻害剤として作用する研究ツール化合物としての、式（Ｉ）の化合物、または医薬的に許容されるその塩、溶媒和物もしくはプロドラッグのインビトロにおける使用に言及する。「インビトロ」という用語が、「生きているヒトまたは動物体の外側」といった意味でこの明細書の文脈で使用され、そしてそれが、特に、例えば、フラスコ、試験管、ペトリ皿、マイクロタイタープレートなどの中に提供され得る水溶液または培地などの人工環境内の細胞、細胞抽出物もしくは亜細胞抽出物、および／または生物学的分子を用いて実施される実験を含む、ことを理解すべきである。本発明は同様に、ＴＡＦ１阻害剤としての式（Ｉ）の化合物、または医薬的に許容されるその塩、溶媒和物もしくはプロドラッグの使用を含む、ＴＡＦ１を阻害するインビトロにおける方法に関する。本発明はさらに、サンプル中のＴＡＦ１を阻害する方法（特にインビトロにおける方法）を提供し、該方法は、式（Ｉ）の化合物、または医薬的に許容されるその塩、溶媒和物もしくはプロドラッグをサンプルに適用することを含む。
【００４３】
式（Ｉ）の化合物は、次のものでより詳細に説明される。
【化７】
2019508496.tif 000009
【００４４】
式（Ｉ）において、環Ｂは、以下の構造を有する基である：
【化８】
2019508496.tif 000010
【００４５】
環Ｂにおいて、環原子Ｘ2およびＸ3のいずれか一方がＮ（ＲX1）であり、そして前記環原子Ｘ2およびＸ3のもう一方がＣ（＝Ｏ）である。
【００４６】
好ましくは、Ｘ2はＣ（＝Ｏ）であり、そして、Ｘ3はＮ（ＲX1）である。
【００４７】
環原子Ｘ1は、Ｎ（ＲX1）、Ｃ（ＲX2）、およびＣ（＝Ｏ）から選択され、そして、環原子Ｘ4およびＸ5は、Ｎ（ＲX1）、Ｃ（ＲX3）およびＣ（＝Ｏ）からそれぞれ独立に選択され、ここで、前記環原子Ｘ1、Ｘ4およびＸ5のうちの少なくとも１つが、Ｎ（ＲX1）およびＣ（＝Ｏ）と異なる。環原子Ｘ1、Ｘ4、およびＸ5のうちの少なくとも１つがＮ（ＲX1）およびＣ（＝Ｏ）と異なるという要件はまた、これらの環原子のうちの少なくとも１つがＣ（ＲX2）またはＣ（ＲX3）でなければならないという要件としても表現できる。
【００４８】
好ましくは、（もしあれば）環原子Ｘ1、Ｘ4、およびＸ5のうちの多くとも１つがＮ（ＲX1）であり、かつ、（もしあれば）前記環原子のＸ1、Ｘ4、およびＸ5のうちの多くとも１つがＣ（＝Ｏ）である。より好ましくは、環原子Ｘ1はＣ（ＲX2）であり、かつ、環原子Ｘ4およびＸ5はそれぞれＣ（ＲX3）である。
【００４９】
式（Ｉ）の化合物において、Ｘ3およびＸ5がＣ（＝Ｏ）であり、Ｘ4がＮ（ＲX1）であり、かつ、Ｘ1がＣ（ＲX2）である場合、Ｘ2はＮ（Ｈ）である。
【００５０】
それぞれの
【化９】
2019508496.tif 000011
は独立に、単結合または二重結合であり、ここで、任意の２つの隣接した結合
【化１０】
2019508496.tif 000012
のうちの少なくとも１つが単結合である（すなわち、同じ環原子に取り付けられた任意の２つの結合
【化１１】
2019508496.tif 000013
のうちの少なくとも１つは単結合である）。
【００５１】
好ましくは、式（Ｉ）における結合
【化１２】
2019508496.tif 000014
のうちの少なくとも１つが二重結合である。より好ましくは、部分−（ＣＨ2）n−Ｌ−（ＣＨ2）m−に結合される環原子Ｘ1と環炭素原子との間の結合
【化１３】
2019508496.tif 000015
は二重結合であり、部分−（ＣＨ2）n−Ｌ−（ＣＨ2）m−に結合される前記環炭素原子と、環原子Ｘ5との間の結合
【化１４】
2019508496.tif 000016
は単結合であり、そして、環原子Ｘ4とＸ5との間の結合
【化１５】
2019508496.tif 000017
は、単結合または二重結合（好ましくは二重結合）である。
【００５２】
環原子Ｘ1がＣ（ＲX2）であり、環原子Ｘ4およびＸ5がそれぞれＣ（ＲX3）であり、部分−（ＣＨ2）n−Ｌ−（ＣＨ2）m−に結合される環原子Ｘ1と環炭素原子との間の結合
【化１６】
2019508496.tif 000018
は二重結合であり、部分−（ＣＨ2）n−Ｌ−（ＣＨ2）m−に結合される前記環炭素原子と環原子Ｘ5との間の結合
【化１７】
2019508496.tif 000019
が単結合であり、そして、環原子Ｘ4とＸ5との間の結合
【化１８】
2019508496.tif 000020
が二重結合であることが特に好ましい。
【００５３】
したがって、環Ｂが、以下の構造を有することが特に好ましい：
【化１９】
2019508496.tif 000021
｛式中、環原子Ｘ1はＣ（ＲX2）であり、および環原子Ｘ4およびＸ5はそれぞれＣ（ＲX3）である｝。
【００５４】
各ＲX1は、水素、Ｃ1-5アルキル、−ＣＯ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−アリール、および−（Ｃ0-3アルキレン）−ヘテロアリールから独立に選択され、ここで、前記−（Ｃ0-3アルキレン）−アリール中に含まれるアリールおよび前記−（Ｃ0-3アルキレン）−ヘテロアリール中に含まれるヘテロアリールは、それぞれ任意選択で、１もしくは複数の（例えば、１、２、または３の）基ＲX11で置換される。
【００５５】
好ましくは、各ＲX1は、水素、Ｃ1-5アルキル、−（Ｃ0-3アルキレン）−アリール、および−（Ｃ0-3アルキレン）−ヘテロアリールから独立に選択され、ここで、前記−（Ｃ0-3アルキレン）−アリール中に含まれるアリールおよび前記−（Ｃ0-3アルキレン）−ヘテロアリール中に含まれるヘテロアリールは、それぞれ任意選択で、１もしくは複数の（例えば、１、２、または３の）基ＲX11で置換される。より好ましくは、各ＲX1は、水素、Ｃ1-5アルキル、および−（Ｃ0-3アルキレン）−フェニルから独立に選択され、ここで、前記−（Ｃ0-3アルキレン）−フェニル中に含まれるフェニルは、任意選択で、１もしくは複数の（例えば、１、２、または３の）基ＲX11で置換される。より一層好ましくは、各ＲX1は、水素およびＣ1-5アルキルから独立に選択される。さらにより一層好ましくは、各ＲX1は、水素、メチルおよびエチルから独立に選択される。さらにより好ましくは、各ＲX1は、メチルおよびエチルから独立に選択される。最も好ましくは、各ＲX1はメチルである。
【００５６】
ＲX2は、水素、Ｃ1-5アルキル、Ｃ2-5アルケニル、Ｃ2-5アルキニル、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＯＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−ＯＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｓ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ハロゲン、−（Ｃ0-3アルキレン）−（Ｃ1-5ハロアルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ−（Ｃ1-5ハロアルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＦ3、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＮ、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＯ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＨＯ、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯＯＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−Ｏ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−ＮＨ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＯ2−ＮＨ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＯ2−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＯ2−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ−ＳＯ2−（Ｃ1-5アルキル）、および−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）−ＳＯ2−（Ｃ1-5アルキル）から選択される。
【００５７】
好ましくは、ＲX2は、水素、Ｃ1-5アルキル、Ｃ2-5アルケニル、Ｃ2-5アルキニル、−ＯＨ、−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−ＯＨ、−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−ＳＨ、−Ｓ（Ｃ1-5アルキル）、−ＮＨ2、−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、ハロゲン、Ｃ1-5ハロアルキル、−Ｏ−（Ｃ1-5ハロアルキル）、−ＣＦ3、−ＣＮ、−ＮＯ2、−ＣＨＯ、−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−ＣＯＯＨ、−ＣＯ−Ｏ−（Ｃ1-5アルキル）、−Ｏ−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−ＣＯ−ＮＨ2、−ＣＯ−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−ＣＯ−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−ＮＨ−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−ＳＯ2−ＮＨ2、−ＳＯ2−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−ＳＯ2−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−ＮＨ−ＳＯ2−（Ｃ1-5アルキル）、および−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）−ＳＯ2−（Ｃ1-5アルキル）から選択される。より好ましくは、ＲX2は、水素、Ｃ1-5アルキル、Ｃ2-5アルケニル、Ｃ2-5アルキニル、−ＯＨ、−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−ＯＨ、−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−ＳＨ、−Ｓ（Ｃ1-5アルキル）、−ＮＨ2、−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、ハロゲン、Ｃ1-5ハロアルキル、−ＣＦ3、および−ＣＮから選択される。より一層好ましくは、ＲX2は、水素、Ｃ1-4アルキル、−ＯＨ、−Ｏ（Ｃ1-4アルキル）、−ＮＨ2、−ＮＨ（Ｃ1-4アルキル）、−Ｎ（Ｃ1-4アルキル）（Ｃ1-4アルキル）、ハロゲン、−ＣＦ3、および−ＣＮから選択される。最も好ましくは、ＲX2は水素である。
【００５８】
２つの基ＲX3（Ｘ4およびＸ5がそれぞれＣ（ＲX3）であれば存在する）は、互いに連結されて（すなわち、繋ぎ合わせられて）、それらが取り付けられた環炭素原子（すなわち、位置Ｘ4およびＸ5の環炭素原子）と一緒に、任意選択で１もしくは複数の（例えば、１、２、または３の）基ＲX31で置換される５または６員シクリル基を形成するか、あるいは、２つの基ＲX3は、水素、Ｃ1-5アルキル、Ｃ2-5アルケニル、Ｃ2-5アルキニル、−ＯＨ、−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−ＯＨ、−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−ＳＨ、−Ｓ（Ｃ1-5アルキル）、−ＮＨ2、−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、ハロゲン、Ｃ1-5ハロアルキル、−Ｏ−（Ｃ1-5ハロアルキル）、−ＣＦ3、−ＣＮ、−ＮＯ2、−ＣＨＯ、−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−ＣＯＯＨ、−ＣＯ−Ｏ−（Ｃ1-5アルキル）、−Ｏ−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−ＣＯ−ＮＨ2、−ＣＯ−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−ＣＯ−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−ＮＨ−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−ＳＯ2−ＮＨ2、−ＳＯ2−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−ＳＯ2−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−ＮＨ−ＳＯ2−（Ｃ1-5アルキル）、および−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）−ＳＯ2−（Ｃ1-5アルキル）からそれぞれ独立に選択される。２つの基ＲX3が互いに連結されるのが好ましい。
【００５９】
２つの基ＲX3が互いに連結されない場合、それらが、水素、Ｃ1-5アルキル、Ｃ2-5アルケニル、Ｃ2-5アルキニル、−ＯＨ、−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−ＯＨ、−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−ＳＨ、−Ｓ（Ｃ1-5アルキル）、−ＮＨ2、−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、ハロゲン、Ｃ1-5ハロアルキル、−Ｏ−（Ｃ1-5ハロアルキル）、−ＣＦ3、−ＣＮ、−ＮＯ2、−ＣＨＯ、−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−ＣＯＯＨ、−ＣＯ−Ｏ−（Ｃ1-5アルキル）、−Ｏ−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−ＣＯ−ＮＨ2、−ＣＯ−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−ＣＯ−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−ＮＨ−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−ＳＯ2−ＮＨ2、−ＳＯ2−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−ＳＯ2−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−ＮＨ−ＳＯ2−（Ｃ1-5アルキル）、および−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）−ＳＯ2−（Ｃ1-5アルキル）から、より好ましくは、水素、Ｃ1-5アルキル、Ｃ2-5アルケニル、Ｃ2-5アルキニル、−ＯＨ、−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−ＯＨ、−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−ＳＨ、−Ｓ（Ｃ1-5アルキル）、−ＮＨ2、−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、ハロゲン、Ｃ1-5ハロアルキル、−ＣＦ3、および−ＣＮから、より一層好ましくは、水素、Ｃ1-4アルキル、−ＯＨ、−Ｏ（Ｃ1-4アルキル）、−ＮＨ2、−ＮＨ（Ｃ1-4アルキル）、−Ｎ（Ｃ1-4アルキル）（Ｃ1-4アルキル）、ハロゲン、−ＣＦ3、および−ＣＮから、それぞれ独立に選択されるのが好ましい。
【００６０】
２つの基ＲX3が、互いに連結されて、それらが取り付けられた環炭素原子と一緒に、任意選択で１もしくは複数の基ＲX31で置換される５または６員シクリル基を形成する場合、前記シクリル基が、５または６員シクロアルキル基（例えば、シクロペンチルまたはシクロヘキシル）、５または６員シクロアルケニル基（例えば、シクロペンテニル、シクロペンタジエニル、シクロヘキセニル、またはシクロヘキサジエニル）、フェニル基、５または６員ヘテロシクロアルキル基、５または６員ヘテロシクロアルケニル基、または５または６員ヘテロアリール基あることが好ましく、ここで、前述の基の各々が、任意選択で、１もしくは複数の（例えば、１、２、または３の）基ＲX31で置換される。より好ましくは、前記シクリル基は、５または６員シクロアルキル基（例えば、シクロペンチルまたはシクロヘキシル）、５または６員シクロアルケニル基（例えば、シクロペンテニル、シクロペンタジエニル、シクロヘキセニル、またはシクロヘキサジエニル）、またはフェニル基であり、ここで、前述の基の各々が、任意選択で、１もしくは複数の（例えば、１、２、または３の）基ＲX31で置換される。より一層好ましくは、前記シクリル基はフェニル基であり、ここで、前記フェニル基が、任意選択で、１もしくは複数の（例えば、１、２、または３の）基ＲX31で置換される。当然のことながら、（前述の好ましいシクリル基のすべてを含めた）シクリル基は、２つの基ＲX3とそれらの基ＲX3が取り付けられた（位置Ｘ4およびＸ5の）環炭素原子から形成される、すなわち、対応するシクリル基は、環原子Ｘ1およびＸ5を含む環に融合される。
【００６１】
２つの基ＲX3は、互いに連結して、それらが取り付けられた環炭素原子と一緒に、５または６員シクロアルキル基、５または６員シクロアルケニル基、またはフェニル基を形成することが、特に好ましく、ここで、前記シクロアルキル基、前記シクロアルケニル基、または前記フェニル基は、それぞれ任意選択で、１もしくは複数の（例えば、１、２、または３の）基ＲX31で置換される。環原子Ｘ4およびＸ5がそれぞれＣ（ＲX3）であり、かつ、二重結合によって接続され、それにより、部分−Ｃ（ＲX3）＝Ｃ（ＲX3）−を形成し、かつ、２つの基ＲX3が互いに連結して、それらが取り付けられた環炭素原子と一緒に、シクロペンテニル基、シクロヘキセニル基、またはフェニル基を形成することがより一層好ましく、ここで、前記シクロペンテニル基、前記シクロヘキセニル基または前記フェニル基は、それぞれ任意選択で、１もしくは複数の（例えば、１、２、または３の）基ＲX31で置換される。環原子Ｘ4およびＸ5は、それぞれＣ（ＲX3）であり、二重結合によって接続され、それにより部分−Ｃ（ＲX3）＝Ｃ（ＲX3）−を形成し、かつ、２つの基ＲX3は、互いに連結されて、それらが取り付けられた環炭素原子と一緒に、フェニル基を形成することは、さらにより好ましく、ここで、前記フェニル基は、任意選択で、１もしくは複数の（例えば、１、２、または３の）基ＲX31で置換される。
【００６２】
各ＲX11は、Ｃ1-5アルキル、Ｃ2-5アルケニル、Ｃ2-5アルキニル、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＯＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−ＯＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｓ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ハロゲン、−（Ｃ0-3アルキレン）−（Ｃ1-5ハロアルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ−（Ｃ1-5ハロアルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＦ3、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＮ、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＯ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＨＯ、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯＯＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−Ｏ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−ＮＨ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＯ2−ＮＨ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＯ2−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＯ2−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ−ＳＯ2−（Ｃ1-5アルキル）、および−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）−ＳＯ2−（Ｃ1-5アルキル）から独立に選択される。
【００６３】
好ましくは、各ＲX11は、Ｃ1-5アルキル、Ｃ2-5アルケニル、Ｃ2-5アルキニル、−ＯＨ、−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−ＯＨ、−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−ＳＨ、−Ｓ（Ｃ1-5アルキル）、−ＮＨ2、−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、ハロゲン、Ｃ1-5ハロアルキル、−Ｏ−（Ｃ1-5ハロアルキル）、−ＣＦ3、−ＣＮ、−ＮＯ2、−ＣＨＯ、−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−ＣＯＯＨ、−ＣＯ−Ｏ−（Ｃ1-5アルキル）、−Ｏ−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−ＣＯ−ＮＨ2、−ＣＯ−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−ＣＯ−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−ＮＨ−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−ＳＯ2−ＮＨ2、−ＳＯ2−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−ＳＯ2−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−ＮＨ−ＳＯ2−（Ｃ1-5アルキル）、および−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）−ＳＯ2−（Ｃ1-5アルキル）から独立に選択される。より好ましくは、各ＲX11は、Ｃ1-5アルキル、Ｃ2-5アルケニル、Ｃ2-5アルキニル、−ＯＨ、−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−ＯＨ、−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−ＳＨ、−Ｓ（Ｃ1-5アルキル）、−ＮＨ2、−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、ハロゲン、Ｃ1-5ハロアルキル、−ＣＦ3、および−ＣＮから独立に選択される。より一層好ましくは、各ＲX11は、Ｃ1-4アルキル、−ＯＨ、−Ｏ（Ｃ1-4アルキル）、−ＮＨ2、−ＮＨ（Ｃ1-4アルキル）、−Ｎ（Ｃ1-4アルキル）（Ｃ1-4アルキル）、ハロゲン、−ＣＦ3、および−ＣＮから独立に選択される。
【００６４】
各ＲX31は、Ｃ1-5アルキル、Ｃ2-5アルケニル、Ｃ2-5アルキニル、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＯＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−ＯＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｓ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ハロゲン、−（Ｃ0-3アルキレン）−（Ｃ1-5ハロアルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ−（Ｃ1-5ハロアルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＦ3、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＮ、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＯ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＨＯ、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯＯＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−Ｏ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−ＮＨ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＯ2−ＮＨ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＯ2−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＯ2−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ−ＳＯ2−（Ｃ1-5アルキル）、および−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）−ＳＯ2−（Ｃ1-5アルキル）から独立に選択される。
【００６５】
好ましくは、各ＲX31は、Ｃ1-5アルキル、Ｃ2-5アルケニル、Ｃ2-5アルキニル、−ＯＨ、−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−ＯＨ、−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−ＳＨ、−Ｓ（Ｃ1-5アルキル）、−ＮＨ2、−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、ハロゲン、Ｃ1-5ハロアルキル、−Ｏ−（Ｃ1-5ハロアルキル）、−ＣＦ3、−ＣＮ、−ＮＯ2、−ＣＨＯ、−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−ＣＯＯＨ、−ＣＯ−Ｏ−（Ｃ1-5アルキル）、−Ｏ−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−ＣＯ−ＮＨ2、−ＣＯ−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−ＣＯ−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−ＮＨ−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−ＳＯ2−ＮＨ2、−ＳＯ2−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−ＳＯ2−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−ＮＨ−ＳＯ2−（Ｃ1-5アルキル）、および−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）−ＳＯ2−（Ｃ1-5アルキル）から独立に選択される。より好ましくは、各ＲX31は、Ｃ1-5アルキル、Ｃ2-5アルケニル、Ｃ2-5アルキニル、−ＯＨ、−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−ＯＨ、−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−ＳＨ、−Ｓ（Ｃ1-5アルキル）、−ＮＨ2、−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、ハロゲン、Ｃ1-5ハロアルキル、−ＣＦ3、および−ＣＮから独立に選択される。より一層好ましくは、各ＲX31は、Ｃ1-4アルキル、−ＯＨ、−Ｏ（Ｃ1-4アルキル）、−ＮＨ2、−ＮＨ（Ｃ1-4アルキル）、−Ｎ（Ｃ1-4アルキル）（Ｃ1-4アルキル）、ハロゲン、−ＣＦ3、および−ＣＮから独立に選択される。
【００６６】
環Ｂは、アスタリスク（*）で印を付した環炭素原子を介して式（Ｉ）の化合物の残りの部分に、すなわち、式（Ｉ）の化合物に含まれる部分−（ＣＨ2）n−Ｌ−（ＣＨ2）m−に取り付けられるか、またはＸ4およびＸ5がそれぞれＣ（ＲX3）であり、かつ、２つの基ＲX3が、互いに連結されて、それらが取り付けられた環炭素原子と一緒に、（１もしくは複数の基ＲX31で任意選択で置換される）５または６員シクリル基を形成する場合、環Ｂはまた、前記５または６員シクリル基の任意の環炭素原子を介して、式（Ｉ）の化合物の残りの部分に取り付けられてもよい。
【００６７】
Ｘ4およびＸ5がそれぞれＣ（ＲX3）であり、かつ、２つの基ＲX3が、互いに連結されて、それらが取り付けられた環炭素原子と一緒に、任意選択で１もしくは複数の基ＲX31で置換される６員シクリル基（フェニルまたはシクロヘキセニルなどの、本明細書中に記載の特定のまたは好ましい６員基のいずれか１つを含む）を形成する場合、環Ｂは、アスタリスクで印を付した環炭素原子を介して、または化合物３０の６員シクリル基の同じ位の環炭素原子を介して、取り付けられることが好ましい。
【００６８】
環Ｂは、アスタリスク（*）で印を付した環炭素原子を介して取り付けられるのが特に好ましい。この場合、式（Ｉ）の化合物は、以下の構造を有する：
【化２０】
2019508496.tif 000022
【００６９】
Ｘ4およびＸ5がそれぞれＣ（ＲX3）であり、かつ、２つの基ＲX3が、互いに連結されて、それらが取り付けられた環炭素原子と一緒に、任意選択で１もしくは複数の群ＲX31で置換される６員シクリル基（フェニルまたはシクロヘキセニルなどの、本明細書中に先で記載の特定のまたは好ましい６員基のいずれか１つを含む）を形成する場合、環Ｂは、化合物３０の６員シクリル基の同じ位置の環炭素原子を介して取り付けられるのが特に好ましい。式（Ｉ）の化合物の対応する好ましい例は、次のもので例示される：
【化２１】
2019508496.tif 000023
【００７０】
環Ａは、アリールまたはヘテロアリールであり、ここで、前記アリールおよび前記ヘテロアリールは、それぞれ任意選択で、１もしくは複数の（例えば、１、２、または３個の）基ＲAで置換される。
環Ａが（任意選択で１もしくは複数の基ＲAで置換される）アリールである場合、前記アリールはフェニルであることが好ましい。
【００７１】
環Ａが（任意選択で１もしくは複数の基ＲAで置換される）ヘテロアリールである場合、前記ヘテロアリールは、次の段落で指定されるヘテロアリール基から選択されるのが好ましく、より好ましくは、１，４−ベンゾジオキサニル（特に１，４−ベンゾジオキサン−６−イル）、ベンゾキサニル（特に１−ベンゾキサン−６−イル）、１，３−ベンゾジオキソラニル（特に１，３−ベンゾジオキソラン−５−イル）、ベンゾキソラニル（特に１−ベンゾキソラン−５−イル）、１，５−ベンゾジオキセパニル（特に１，５−ベンゾジオキセパン−７−イル）、およびベンゾキセパニル（特に１−ベンゾキセパン−７−イル）から選択され、そして、より一層好ましくは、１，４−ベンゾジオキサニル（特に１，４−ベンゾジオキサン−６−イル）、ベンゾキサニル（特に１−ベンゾキサン−６−イル）、１，３−ベンゾジオキソラニル（特に１，３−ベンゾジオキソラン−５−イル）、ベンゾキソラニル（特に１−ベンゾキソラン−５−イル）、および１，５−ベンゾジオキセパニル（特に１，５−ベンゾジオキセパン−７−イル）から選択される。
【００７２】
好ましくは、環Ａは、１，４−ベンゾジオキサニル（特に１，４−ベンゾジオキサン−６−イル）、ベンゾキサニル（特に１−ベンゾキサン−６−イル）、１，３−ベンゾジオキソラニル（特に１，３−ベンゾジオキソラン−５−イル）、ベンゾキソラニル（特に１−ベンゾキソラン−５−イル）、１，５−ベンゾジオキセパニル（特に１，５−ベンゾジオキセパン−７−イル）、ベンゾジオキセパニル（特に１−ベンゾジオキセパン−７−イル）、フェニル、および５または６員単環式ヘテロアリール（例えば、ピリジニル（特にピリジン−３−イル）またはオキサジアゾリル（特に１，２，４−オキサジアゾリルまたは１，３，４−オキサジアゾリル）など）から選択され、ここで、前述の基のそれぞれは、任意選択で、１もしくは複数（例えば、１、２、または３）の基ＲAで置換される。より好ましくは、環Ａは、１，４−ベンゾジオキサニル（特に１，４−ベンゾジオキサン−６−イル）、ベンゾキサニル（特に１−ベンゾキサン−６−イル）、１，３−ベンゾジオキソラニル（特に１，３−ベンゾジオキソラン−５−イル）、ベンゾキソラニル（特に１−ベンゾキソラン−５−イル）、１，５−ベンゾジオキセパニル（特に１，５−ベンゾジオキセパン−７−イル）、およびフェニルから選択され、ここで、前述の基のそれぞれは、任意選択で１もしくは複数（例えば、１、２、または３）の基ＲAで置換される。より一層好ましくは、環Ａは、１，４−ベンゾジオキサン−６−イル、１−ベンゾキサン−６−イル、および４−（Ｃ1-5アルコキシ）−フェニル（特に４−メトキシフェニル）から選択され、ここで、前記１，４−ベンゾジオキサン−６−イルまたは前記１−ベンゾキサン−６−イルに含まれるフェニル部分は、任意選択で１もしくは複数の（例えば、１または２の）基ＲAで置換される。さらにより一層好ましくは、環Ａは、１，４−ベンゾジオキサン−６−イル、１−ベンゾキサン−６−イル、および４−メトキシフェニルから選択される。
【００７３】
各ＲAは、Ｃ1-5アルキル、Ｃ2-5アルケニル、Ｃ2-5アルキニル、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＯＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−ＯＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｓ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ハロゲン、−（Ｃ0-3アルキレン）−（Ｃ1-5ハロアルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ−（Ｃ1-5ハロアルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＦ3、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＮ、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＯ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＨＯ、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯＯＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−Ｏ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−ＮＨ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＯ2−ＮＨ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＯ2−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＯ2−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ−ＳＯ2−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）−ＳＯ2−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−シクロアルキル、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ−シクロアルキル、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−シクロアルキル、−（Ｃ0-3アルキレン）−ヘテロシクロアルキル、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ−ヘテロシクロアルキル、および−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−ヘテロシクロアルキルから独立に選択される。
【００７４】
好ましくは、各ＲAは、Ｃ1-5アルキル、Ｃ2-5アルケニル、Ｃ2-5アルキニル、−ＯＨ、−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−ＯＨ、−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−ＳＨ、−Ｓ（Ｃ1-5アルキル）、−ＮＨ2、−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、ハロゲン、Ｃ1-5ハロアルキル、−Ｏ−（Ｃ1-5ハロアルキル）、−ＣＦ3、−ＣＮ、−ＮＯ2、−ＣＨＯ、−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−ＣＯＯＨ、−ＣＯ−Ｏ−（Ｃ1-5アルキル）、−Ｏ−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−ＣＯ−ＮＨ2、−ＣＯ−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−ＣＯ−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−ＮＨ−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−ＳＯ2−ＮＨ2、−ＳＯ2−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−ＳＯ2−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−ＮＨ−ＳＯ2−（Ｃ1-5アルキル）、−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）−ＳＯ2−（Ｃ1-5アルキル）、シクロアルキル、−Ｏ−シクロアルキル、−Ｏ−（Ｃ1-5アルキレン）−シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、−Ｏ−ヘテロシクロアルキル、および−Ｏ−（Ｃ1-5アルキレン）−ヘテロシクロアルキルから独立に選択される。より好ましくは、各ＲAは、Ｃ1-5アルキル、Ｃ2-5アルケニル、Ｃ2-5アルキニル、−ＯＨ、−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−ＯＨ、−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−ＳＨ、−Ｓ（Ｃ1-5アルキル）、−ＮＨ2、−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、ハロゲン、Ｃ1-5ハロアルキル、−ＣＦ3、および−ＣＮから独立に選択される。より一層好ましくは、各ＲAは、Ｃ1-4アルキル、−ＯＨ、−Ｏ（Ｃ1-4アルキル）（特に−ＯＣＨ3）、−ＮＨ2、−ＮＨ（Ｃ1-4アルキル）、−Ｎ（Ｃ1-4アルキル）（Ｃ1-4アルキル）、ハロゲン、−ＣＦ3、および−ＣＮから独立に選択される。
【００７５】
Ｌは、−ＣＯ−Ｎ（ＲL1）−、−Ｎ（ＲL1）−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−Ｃ（＝Ｎ−ＲL2）−Ｎ（ＲL1）−、−Ｎ（ＲL1）−Ｃ（＝Ｎ−ＲL2）−、−Ｃ（＝Ｓ）−Ｎ（ＲL1）−、−Ｎ（ＲL1）−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｎ（ＲL1）−ＣＯ−Ｎ（ＲL1）−、−Ｏ−ＣＯ−Ｎ（ＲL1）−、−Ｎ（ＲL1）−ＣＯ−Ｏ−、−Ｎ（ＲL1）−Ｃ（＝Ｎ−ＲL2）−Ｎ（ＲL1）−、−Ｏ−Ｃ（＝Ｎ−ＲL2）−Ｎ（ＲL1）−、−Ｎ（ＲL1）−Ｃ（＝Ｎ−ＲL2）−Ｏ−、−Ｓ−Ｃ（＝Ｎ−ＲL2）−Ｎ（ＲL1）−、−Ｎ（ＲL1）−Ｃ（＝Ｎ−ＲL2）−Ｓ−、−Ｎ（ＲL1）−Ｃ（＝Ｓ）−Ｎ（ＲL1）−、−Ｏ−Ｃ（＝Ｓ）−Ｎ（ＲL1）−、−Ｎ（ＲL1）−Ｃ（＝Ｓ）−Ｏ−、−Ｓ−ＣＯ−Ｎ（ＲL1）−、および−Ｎ（ＲL1）−ＣＯ−Ｓ−から選択される。
【００７６】
好ましくは、Ｌは、−ＣＯ−Ｎ（ＲL1）−、−Ｎ（ＲL1）−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−Ｎ（ＲL1）−ＣＯ−Ｎ（ＲL1）−、−Ｏ−ＣＯ−Ｎ（ＲL1）−、および−Ｎ（ＲL1）−ＣＯ−Ｏ−から選択される。より好ましくは、Ｌは、−ＣＯ−Ｎ（ＲL1）−、−Ｎ（ＲL1）−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、および−Ｏ−ＣＯ−から選択される。より一層好ましくは、Ｌは、−ＣＯ−Ｎ（ＲL1）（−Ｎ（ＲL1）−ＣＯ−）である；したがって、式（Ｉ）の化合物に含まれる部分−（ＣＨ2）n−Ｌ−（ＣＨ2）m−は、−（ＣＨ2）n−ＣＯ−Ｎ（ＲL1）−（ＣＨ2）m−および−（ＣＨ2）n−Ｎ（ＲL1）−ＣＯ−（ＣＨ2）m−から選択されることが特に好ましい。最も好ましくは、Ｌは、−Ｎ（ＲL1）−ＣＯ−であり、ここで、前記−Ｎ（ＲL1）−ＣＯ−は、その−Ｎ（ＲL1）−基を介して、式（Ｉ）の化合物に含まれる部分−（ＣＨ2）n−に結合し、および、ここで、前記−Ｎ（ＲL1）−ＣＯ−は、その−ＣＯ−基を介して、式（Ｉ）の化合物に含まれる部分−（ＣＨ2）m−に結合する；したがって、式（Ｉ）の化合物に含まれる部分−（ＣＨ2）n−Ｌ−（ＣＨ2）m−が−（ＣＨ2）n−Ｎ（ＲL1）−ＣＯ−（ＣＨ2）m−であることが最も好ましい。
【００７７】
各ＲL1は、水素およびＣ1-5アルキルから独立に選択される。好ましくは、各ＲL1は、水素、メチル、およびエチルから独立に選択される。より好ましくは、各ＲL1は水素である。
【００７８】
各ＲL2は、水素、Ｃ1-5アルキル、−ＣＮ、および−ＮＯ2から独立に選択される。好ましくは、各ＲL2は、水素、メチル、エチル、−ＣＮ、および−ＮＯ2から独立に選択される。より好ましくは、各ＲL2は、水素、メチル、エチル、および−ＣＮから独立に選択される。より一層好ましくは、各ＲL2は、水素、メチル、およびエチルから独立に選択される。
【００７９】
ｎは、０または１である。好ましくは、ｎは０である。
【００８０】
ｍは、０または１である。好ましくは、ｍは０である。
【００８１】
ｎが、基Ｌと環原子Ｘ1〜Ｘ5を含む環との間に存在するメチレン基−（ＣＨ2）n−の数を示すことは、理解されるべきである。ｎが０である場合、基Ｌは、Ｘ1〜Ｘ5を含む環に直接結合される（すなわち、共有結合による単結合を介する結合される）。同様に、ｍは、基Ｌと環式基Ａとの間に存在するメチレン基−（ＣＨ2）m−の数を示す。ｍが０である場合、基Ｌは、環式基Ａに直接結合される（すなわち、共有結合による単結合を介して結合される）。
【００８２】
先に記載したＬ、ＲL1、ＲL2、ｍ、およびｎの好ましい意味によると、Ｌは−ＣＯ−Ｎ（ＲL1）または−Ｎ（ＲL1）−ＣＯ−であり（ここで、ＲL1は、水素、メチル、およびエチルから選択される）、そして、ｎおよびｍはそれぞれ０であることが特に好ましい。さらにより好ましくは、Ｌは−Ｎ（ＲL1）−ＣＯ−であり（ここで、ＲL1は、水素、メチル、およびエチルから選択される）、そして、ｎおよびｍはそれぞれ０である。最も好ましくは、Ｌは−ＮＨ−ＣＯ−であり、ｎは０であり、そして、ｍは０である。したがって、式（Ｉ）の化合物に含まれる部分−（ＣＨ2）n−Ｌ−（ＣＨ2）m−が、−（ＣＨ2）n−ＮＨ−ＣＯ−（ＣＨ2）m−（ここで、ｎおよびｍはそれぞれ０である）であることが最も好ましい。
【００８３】
式（Ｉ）の化合物は、例えば、以下の化合物、または医薬的に許容されるその塩、溶媒和物もしくはプロドラッグのいずれか１つであり得る：
【化２２】
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【化２３】
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【化２４】
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【化２５】
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【化２６】
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【００８４】
先に描いた化合物４−２６、４−１、２９、３０、ＣｅＭＭＥＣ１、３８、３３、３７、Ａ１、２７および６、ならびに医薬的に許容されるその塩、溶媒和物およびプロドラッグは、式（Ｉ）の化合物の特に好ましい例である。化合物４−２６、４−１、２９および３０（特に化合物４−２６）、ならびに医薬的に許容されるその塩、溶媒和物およびプロドラッグは、より一層好ましい。
【００８５】
当然のことながら、先に描いた化合物３６、４−１、４−２、４−３、４−４、４−１０、４−１３、４−１４、４−１６、４−１７、４−２４、４−２５、４−２６、４−２８、４−３１、４−３２および４−３３において、リンカー基Ｌ（−Ｎ−と示される）内の窒素原子は、水素原子（すなわち、−ＮＨと表される）で置換される。
【００８６】
式（Ｉ）の化合物の一実施形態において、Ｘ2がＣ（＝Ｏ）であり、Ｘ3がＮ（ＲX1）であり、部分−（ＣＨ2）n−Ｌ−（ＣＨ2）m−が−（ＣＨ2）n−ＣＯ−Ｎ（ＲL1）−（ＣＨ2）m−であり、そして、式（Ｉ）に含まれるさらなる基／変数が、同じ好ましい意味も含めて、本明細書中で先に記載および規定したのと同じ意味を有する。
【００８７】
式（Ｉ）の化合物のさらなる実施形態において、Ｘ2がＣ（＝Ｏ）であり、Ｘ3がＮ（ＲX1）であり、部分−（ＣＨ2）n−Ｌ−（ＣＨ2）m−が−（ＣＨ2）n−Ｎ（ＲL1）−ＣＯ−（ＣＨ2）mであり、そして、式（Ｉ）に含まれるさらなる基／変数が、同じ好ましい意味も含めて、本明細書中で先に記載および規定したのと同じ意味を有する。
【００８８】
式（Ｉ）の化合物のさらなる実施形態において、Ｘ2がＮ（ＲX1）であり、Ｘ3がＣ（＝Ｏ）であり、部分−（ＣＨ2）n−Ｌ−（ＣＨ2）m−が−（ＣＨ2）n−ＣＯ−Ｎ（ＲL1）−（ＣＨ2）m−であり、そして、式（Ｉ）に含まれるさらなる基／変数が、同じ好ましい意味も含めて、本明細書中で先に記載および規定したのと同じ意味を有する。
【００８９】
式（Ｉ）の化合物のさらなる実施形態において、Ｘ2がＮ（ＲX1）であり、Ｘ3がＣ（＝Ｏ）であり、部分−（ＣＨ2）n−Ｌ−（ＣＨ2）m−が−（ＣＨ2）n−Ｎ（ＲL1）−ＣＯ−（ＣＨ2）m−であり、そして、式（Ｉ）に含まれるさらなる基／変数が、同じ好ましい意味も含めて、本明細書中で先に記載および規定したのと同じ意味を有する。
【００９０】
式（Ｉ）の化合物は、合成化学の分野で知られている方法によって調製できる。例えば、これらの化合物は、実施例１に記載の合成経路によってまたはそれ等と同様に調製できる。
【００９１】
以下の定義は、特定の指示がない限り、本明細書を通して適用される。
【００９２】
「炭化水素基」という用語は、炭素原子および水素原子から成る基を指す。
【００９３】
「脂環式」という用語は、環式基に関して使用され、対応する環式基が非芳香族であることを意味する。
【００９４】
本明細書中に使用される場合、「アルキル」という用語は、直鎖であってもまたは分岐であってもよい、一価の飽和非環式（acyclic）（すなわち、非環式（non-cyclic））炭化水素基を指す。したがって、「アルキル」基は、１つの炭素−炭素二重結合も、または１つの炭素−炭素三重結合も含まない。「Ｃ1-5アルキル」は、１〜５の炭素原子を有するアルキル基を意味する。好ましい代表的なアルキル基は、メチル、エチル、プロピル（例えば、ｎ−プロピルまたはイソプロピル）、またはブチル（例えば、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、またはｔｅｒｔ−ブチル）である。別段の規定がない限り、「アルキル」という用語は、好ましくはＣ1-4アルキルを指し、より好ましくはメチルまたはエチルを指し、そして、より一層好ましくはメチルを指す。
【００９５】
本明細書中に使用される場合、「アルケニル」という用語は、直鎖であっても、または分岐であってもよく、かつ、１もしくは複数（例えば、１または２）の炭素−炭素二重結合を含む一方で、１つの炭素−炭素三重結合も含まない、一価の不飽和非環式炭化水素基を指す。「Ｃ2-5アルケニル」という用語は、２〜５の炭素原子を有するアルケニル基を意味する。好ましい代表的なアルケニル基は、エテニル、プロペニル（例えば、プロプ−１−エン−１−イル、プロプ−１−エン−２−イル、またはプロプ−２−エン−１−イル）、ブテニル、ブタジエニル（例えば、ブタ−１，３−ジエン−１−イルまたはブタ−１，３−ジエン−２−イル）、ペンテニル、またはペンタジエニル（例えば、イソプレニル）である。別段の規定がない限り、「アルケニル」という用語は、好ましくはＣ2-4アルケニルを指す。
【００９６】
本明細書中に使用される場合、「アルキニル」という用語は、直鎖であっても、または分岐であってもよく、かつ、１もしくは複数（例えば、１または２）の炭素−炭素三重結合を含み、そして任意選択で１もしくは複数の炭素−炭素二重結合を含む、一価の不飽和非環式炭化水素基を指す。「Ｃ2-5アルキニル」という用語は、２〜５の炭素原子を有するアルキニル基を意味する。好ましい代表的なアルキニル基は、エチニル、プロピニル（例えば、プロパルギル）、またはブチニルである。別段の規定がない限り、「アルキニル」という用語は、好ましくはＣ2-4アルキニルを指す。
【００９７】
本明細書中に使用される場合、「アルキレン」という用語は、直鎖であっても、または分岐であってもよい、アルカンジイル基、すなわち、二価の飽和非環式炭化水素基を指す。「Ｃ1-5アルキレン」は、１〜５の炭素原子を有するアルキレン基を意味し、そして、「Ｃ0-3アルキレン」という用語は、共有結合（選択肢「Ｃ0アルキレン」に相当する）またはＣ1-3アルキレンが存在することを示す。好ましい代表的なアルキレン基は、メチレン（−ＣＨ2−）、エチレン（例えば、−ＣＨ2−ＣＨ2−または−ＣＨ（−ＣＨ3）−）、プロピレン（例えば、−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ2−、−ＣＨ（−ＣＨ2−ＣＨ3）−、−ＣＨ2−ＣＨ（−ＣＨ3）−、または−ＣＨ（−ＣＨ3）−ＣＨ2−）、あるいは、ブチレン（例えば、−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ2−ＣＨ2−）である。別段の規定がない限り、「アルキレン」という用語は、好ましくはＣ1-4アルキレン（特に、直鎖Ｃ1-4アルキレンを含む）、より好ましくはメチレンまたはエチレン、そして、より一層好ましくはメチレンを指す。
【００９８】
本明細書中に使用される場合、「アルコキシ」という用語は、−Ｏ−アルキル基を指し、ここで、この基に含まれるアルキル部分は、先に規定されるとおりのものである。
【００９９】
本明細書中に使用される場合、「カルボシクリル」という用語は、単環式環、ならびに架橋環、スピロ環、および／または縮合環系（例えば、２または３の環で構成され得る）を含めた炭化水素環式基を指し、ここで、前記環式基は、飽和であっても、部分的不飽和（すなわち、不飽和だが、芳香族でない）であっても、または芳香族であってもよい。別段の規定がない限り、「カルボシクリル」は、好ましくは、アリール、シクロアルキルまたはシクロアルケニルを指す。
【０１００】
本明細書中に使用される場合、「ヘテロシクリル」という用語は、単環式環、ならびに架橋環、スピロ環、および／または縮合環系（例えば、２または３の環で構成され得る）を含めた環式基を指し、ここで、前記環式基は、Ｏ、ＳおよびＮから独立に選択された１もしくは複数の（例えば、１、２、３、または４などの）環ヘテロ原子を含み、かつ、残った環原子は炭素原子であり、ここで、１もしくは複数のＳ環原子（存在する場合）および／または１もしくは複数のＮ環原子（存在する場合）は、任意選択で酸化されてもよく、ここで、１もしくは複数の炭素環原子は、任意選択で（すなわち、オキソ基を形成するように）酸化されてもよく、さらにここで、前記環式基は、飽和であっても、部分的不飽和（すなわち、不飽和であるが、芳香族でない）または芳香族であってもよい。例えば、前記環式基に含まれるそれぞれのヘテロ原子含有環は、１または２のＯ原子および／または１または２のＳ原子（任意選択で酸化されてもよい）、および／または１、２、３または４のＮ原子（任意選択で酸化されてもよい）を含んでもよいが、ただし、対応するヘテロ原子含有環内のヘテロ原子の総数が１〜４であり、かつ、少なくとも１つの炭素環原子（任意選択で酸化されてもよい）が対応するヘテロ原子含有環内に存在することを条件とする。別段の規定がない限り、「ヘテロシクリル」は、好ましくは、ヘテロアリール、ヘテロシクロアルキルまたはヘテロシクロアルケニルを指す。
【０１０１】
本明細書中に使用される場合、「シクリル」という用語は、本明細書中で先に規定されるとおり、カルボシクリルまたはヘテロシクリルを指す。
【０１０２】
本明細書中に使用される場合、「アリール」という用語は、少なくとも１つの芳香族環を含む、単環式芳香族環、ならびに架橋環および／または縮合環系を含めた芳香族炭化水素環式基を指す（例えば、２または３の縮合環で構成された環系、ここで、これらの融合環のうちの少なくとも１つが芳香族であるか；または、２または３の環で構成された架橋環系、ここで、これらの架橋環のうちの少なくとも１つが芳香族である）。「アリール」は、例えば、フェニル、ナフチル、ジアリニル（すなわち、１，２−ジヒドロナフチル）がテトラリニルテトラリニルされる、（すなわち、１，４−テトラヒドロナフチル）、インダニル、インデニル（例えば、１Ｈ−インデニル）、アントラセニル、フェナントレニル、９Ｈ−フルオレニル、またはアズレニルを指してもよい。別段の規定がない限り、「アリール」は、好ましくは６〜１４の環原子を有し、より好ましくは６〜１０の環原子を有し、より一層好ましくはフェニルまたはナフチルを指し、そして、最も好ましくはフェニルを指す。
【０１０３】
本明細書中に使用される場合、「ヘテロアリール」という用語は、単環式芳香族環、ならびに架橋環および／または縮合環系（例えば、２または３の縮合環で構成された環系、ここで、これらの融合環系のうちの少なくとも１つが芳香族であるか；または２または３の環で構成された架橋環系、ここで、これらの架橋環系のうちの少なくとも１つが芳香族である）を含めた芳香族環式基を指し、ここで、前記芳香族環式基は、Ｏ、ＳおよびＮから独立に選択された１もしくは複数の（例えば、１、２、３、または４などの）環ヘテロ原子を含み、かつ、残った環原子は炭素原子であり、ここで、１もしくは複数のＳ環原子（存在する場合）および／または１もしくは複数のＮ環原子（存在する場合）は、任意選択で酸化されてもよく、さらにここで、１もしくは複数の炭素環原子は、任意選択で（すなわち、オキソ基を形成するように）酸化されてもよい。例えば、前記環式基に含まれるそれぞれのヘテロ原子含有環は、１または２のＯ原子および／または１または２のＳ原子（任意選択で酸化されてもよい）、および／または１、２、３または４のＮ原子（任意選択で酸化されてもよい）を含んでもよいが、ただし、対応するヘテロ原子含有環内のヘテロ原子の総数が１〜４であり、かつ、少なくとも１つの炭素環原子（任意選択で酸化されてもよい）が対応するヘテロ原子含有環内に存在することを条件とする。「ヘテロアリール」は、例えば、チエニル（すなわち、チオフェニル）、ベンゾ［ｂ］チエニル、ナフト［２，３−ｂ］チエニル、チアントレニル、フリル（すなわち、フラニル）、ベンゾフラニル、イソベンゾフラニル、クロマニル、クロメニル（例えば、２Ｈ−１−ベンゾピラニルまたは４Ｈ−１−ベンゾピラニル）、イソクロメニル（例えば、１Ｈ−２−ベンゾピラニル）、クロモニル、キサンテニル、フェノキサチイニル、ピロリル（例えば、１Ｈ−ピロリル）、イミダゾリル、ピラゾリル、ピリジル（すなわち、ピリジニル；例えば、２−ピリジル、３−ピリジル、または４−ピリジル）、ピラジニル、ピリミジニル、ピリダジニル、インドリル（例えば、３Ｈ−インドリル）、イソインドリル、インダゾリル、インドリジニル、プリニル、キノリル、イソキノリル、フタラジニル、ナフチリジニル、キノキサリニル、シンノリニル、プテリジニル、カルバゾリル、β−カルボリニル、フェナントリジニル、アクリジニル、ペリミジニル、フェナントロリニル（例えば［１，１０］フェナントロリニル、［１，７］フェナントロリニル、または［４，７］フェナントロリニル）、フェナジニル、チアゾリル、イソチアゾリル、フェノチアジニル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、またはオキサジアゾリル（例えば、１，２，４−オキサジアゾリル、１，２，５−オキサジアゾリル（すなわち、フラザニル）、または１，３，４−オキサジアゾリル）、チアジアゾリル（例えば、１，２，４−チアジアゾリル、１，２，５−チアジアゾリル、または１，３，４−チアジアゾリル）、フェノキサジニル、ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジニル（例えば、ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−３−イル）、１，２−ベンゾイソキサゾール−３−イル、ベンゾチアゾリル、ベンゾチアジアゾリル、ベンゾオキサゾリ���、ベンズイソキサゾリル、ベンズイミダゾリル、ベンゾ［ｂ］チオフェニル（すなわち、ベンゾチエニル）、トリアゾリル（例えば、１Ｈ−１，２，３−トリアゾリル、２Ｈ−１、２，３−トリアゾリル、１Ｈ−１，２，４−トリアゾリル、または４Ｈ−１，２，４−トリアゾリル）、ベンゾトリアゾリル、１Ｈ−テトラゾリル、２Ｈ−テトラゾリル、トリアジニル（例えば、１，２，３−トリアゾリル、１，２，４−トリアゾリル、または１，３，５−トリアゾリル）、フロ［２，３−ｃ］ピリジニル、ジヒドロフロピリジニル（例えば、２，３−ジヒドロフロ［２，３−ｃ］ピリジニルまたは１，３−ジヒドロフロ［３，４−ｃ］ピリジニル）、イミダゾピリジニル（例えば、イミダゾ［１，２−ａ］ピリジニルまたはイミダゾ［３、２−ａ］ピリジニル）、キナゾリニル、チエノピリジニル、テトラヒドロチエノピリジニル（例えば、４，５，６，７−テトラヒドロチエノ［３，２−ｃ］ピリジニル）、ジベンゾフラニル、１，３−ベンゾジオキソニル、ベンゾジオキサニル（例えば、１，３−ベンゾジオキサニルまたは１，４−ベンゾジオキサニル）、またはクマリニルを指してもよい。別段の規定がない限り、「ヘテロアリール」という用語は、好ましくは、５〜１４員（より好ましくは５〜１０員）単環式環、あるいは、Ｏ、Ｓ、およびＮから独立に選択される１もしくは複数（例えば、１、２、３または４）の環ヘテロ原子を含む縮合環系を指し、ここで、１もしくは複数のＳ環原子（存在する場合）および／または１もしくは複数のＮ環原子（存在する場合）は任意選択で酸化されてもよく、そしてここで、１もしくは複数の炭素環原子は任意選択で酸化されてもよく；より一層好ましくは、「ヘテロアリール」は、Ｏ、Ｓ、およびＮから独立に選択される１もしくは複数（例えば、１、２または３）の環ヘテロ原子を含む５または６員単環式環を指し、ここで、１もしくは複数のＳ環原子（存在する場合）および／または１もしくは複数のＮ環原子（存在する場合）は任意選択で酸化され；そしてここで、１もしくは複数の炭素環原子は任意選択で酸化される。さらに、別段の規定がない限り、「ヘテロアリール」という用語は、特に好ましくはピリジニル（例えば、２−ピリジル、３−ピリジル、または４−ピリジル）、イミダゾリル、チアゾリル、１Ｈ−テトラゾリル、２Ｈ−テトラゾリル、チエニル（すなわち、チオフェニル）、またはピリミジニルを指す。
【０１０４】
本明細書中に使用される場合、「シクロアルキル」という用語は、単環式環、架橋環、スピロ環、および／または縮合環系（例えば、２または３の縮合環で構成され得る；例えば２または３の環で構成された縮合環系）を含めた飽和炭化水素環式基を指す。「シクロアルキル」は、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、デカリニル（すなわち、デカヒドロナフチル）、またはアダマンチルを指してもよい。別段の規定がない限り、「シクロアルキル」は、好ましくはＣ3-11シクロアルキルを指し、そして、より好ましくはＣ3-7シクロアルキルを指す。特に好ましい「シクロアルキル」は、３〜７の環員を有する単環式飽和炭化水素環である。さらに、別段の規定がない限り、「シクロアルキル」という用語は、より一層好ましくは、シクロヘキシルまたはシクロプロピルを指し、そして、さらにより一層好ましくはシクロヘキシルを指す。
【０１０５】
本明細書中に使用される場合、「ヘテロシクロアルキル」という用語は、単環式環、ならびに架橋環、スピロ環、および／または縮合環系（例えば、２または３の環で構成され得る；例えば、２または３の縮合環で構成される縮合環系）を含めた飽和環式基を指し、ここで、前記環式基は、Ｏ、ＳおよびＮから独立に選択された１もしくは複数の（例えば、１、２、３、または４などの）環ヘテロ原子を含み、かつ、残った環原子は炭素原子であり、ここで、１もしくは複数のＳ環原子（存在する場合）および／または１もしくは複数のＮ環原子（存在する場合）は、任意選択で酸化されてもよく、さらにここで、１もしくは複数の炭素環原子は、任意選択で（すなわち、オキソ基を形成するように）酸化されてもよい。例えば、前記飽和環式基に含まれるそれぞれのヘテロ原子含有環は、１または２のＯ原子および／または１または２のＳ原子（任意選択で酸化されてもよい）、および／または１、２、３または４のＮ原子（任意選択で酸化されてもよい）を含んでもよいが、ただし、対応するヘテロ原子含有環内のヘテロ原子の総数が１〜４であり、かつ、少なくとも１つの炭素環原子（任意選択で酸化されてもよい）が対応するヘテロ原子含有環内に存在することを条件とする。「ヘテロシクロアルキル」は、例えば、アジリジニル、アゼチジニル、ピロリジニル、イミダゾリジニル、ピラゾリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、アゼパニル、ジアゼパニル（例えば、１，４−ジアゼパニル）、オキサゾリジニル、イソキサゾリジニル、チアゾリジニル、イソチアゾリジニル、モルホリニル（例えば、モルホリン−４−イル）、チオモルホリニル（例えば、チオモルホリン−４−イル）、オキサゼパニル、オキシラニル、オキセタニル、テトラヒドロフラニル、１，３−ジオキソラニル、テトラヒドロピラニル、１，４−ジオキサニル、オキセパニル、チイラニル、チエタニル、テトラヒドロチオフェニル（すなわち、チオラニル）、１，３−ジチオラニル、チアニル、チエパニル、デカヒドロキノリニル、デカヒドロイソキノリニル、または２−オキサ−５−アザ−ビシクロ［２．２．１］ヘプト−５−イルを指してもよい。別段の規定がない限り、「ヘテロシクロアルキル」は、好ましくは、（単環式環または縮合環系である）３〜１１員飽和環式環（例えば、２つの縮合環で構成された縮合環系）を指し、ここで、前記環式基は、Ｏ、Ｓ、およびＮから独立に選択される１もしくは複数（例えば、１、２、３または４）の環ヘテロ原子を含み、ここで、１もしくは複数のＳ環原子（存在する場合）および／または１もしくは複数のＮ環原子（存在する場合）は任意選択で酸化されてもよく、そしてここで、１もしくは複数の炭素環原子は任意選択で酸化されてもよく；より一層好ましくは、「ヘテロシクロアルキル」は、Ｏ、Ｓ、およびＮから独立に選択される１もしくは複数（例えば、１、２または３）の環ヘテロ原子を含む５または７員単環式環式基を指し、ここで、１もしくは複数のＳ環原子（存在する場合）および／または１もしくは複数のＮ環原子（存在する場合）は任意選択で酸化され；そしてここで、１もしくは複数の炭素環原子は任意選択で酸化される。さらに、別段の規定がない限り、「シクロアルケニル」は、より一層好ましくはテトラヒドロピラニル、ピペリジニル、ピペラジニル、モルホリニル、ピロリジニル、またはテトラヒドロフラニルを指す。
【０１０６】
本明細書中に使用される場合、「ヘテロシクロアルキル」という用語は、単環式環、架橋環、スピロ環、および／または縮合環系（例えば、２または３の縮合環で構成され得る；例えば２または３の環で構成された縮合環系）を含めた不飽和脂環式（非芳香族）炭化水素環式基を指し、ここで、前記炭化水素環式基は、１もしくは複数（例えば、１または２）の炭素−炭素の二重結合を含み、かつ、１つの炭素−炭素三重結合も含まない。「シクロアルケニル」は、例えば、シクロプロペニル、シクロブテニル、シクロペンテニル、シクロヘキセニル、シクロヘキサジエニル、シクロヘプテニル、またはシクロヘプタジエニルを指してもよい。別段の規定がない限り、「シクロアルケニル」は、好ましくはＣ3-11シクロアルケニルを指し、そして、より好ましくはＣ3-7シクロアルケニルを指す。特に好ましい「シクロアルケニル」は、３〜７の環員を有し、かつ、１もしくは複数（例えば、１または２、好ましくは１つ）の炭素−炭素二重結合を含む単環式不飽和脂環式炭化水素環である。
【０１０７】
本明細書中に使用される場合、「ヘテロシクロアルケニル」という用語は、単環式環、ならびに架橋環、スピロ環、および／または縮合環系（例えば、２または３の環で構成され得る；例えば、２または３の縮合環で構成される縮合環系）を含めた不飽和脂環式（非芳香族）環式基を指し、ここで、前記環式基は、Ｏ、ＳおよびＮから独立に選択された１もしくは複数の（例えば、１、２、３、または４などの）環ヘテロ原子を含み、かつ、残った環原子は炭素原子であり、ここで、１もしくは複数のＳ環原子（存在する場合）および／または１もしくは複数のＮ環原子（存在する場合）は、任意選択で酸化されてもよく、ここで、１もしくは複数の炭素環原子は、任意選択で（すなわち、オキソ基を形成するように）酸化されてもよく、さらにここで、前記環式基は、隣接した環原子の間に少なくとも１つの二重結合を含み、かつ、隣接した環原子の間に１つの三重結合も含まない。例えば、前記不飽和脂環式環式基に含まれるそれぞれのヘテロ原子含有環は、１または２のＯ原子および／または１または２のＳ原子（任意選択で酸化されてもよい）、および／または１、２、３または４のＮ原子（任意選択で酸化されてもよい）を含んでもよいが、ただし、対応するヘテロ原子含有環内のヘテロ原子の総数が１〜４であり、かつ、少なくとも１つの炭素環原子（任意選択で酸化されてもよい）が対応するヘテロ原子含有環内に存在することを条件とする。「ヘテロシクロアルケニル」は、例えば、イミダゾリニル（例えば、２−イミダゾリニル（すなわち、４，５−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾリル）、３−イミダゾリニル、または４−イミダゾリニル）、テトラヒドロピリジニル、（例えば、１，２，３，６−テトラヒドロピリジニル）、ジヒドロピリジニル（例えば、１，２−ジヒドロピリジニルまたは２，３−ジヒドロピリジニル）、ピラニル（例えば、２Ｈ−ピラニルまたは４Ｈ−ピラニル）、チオピラニル（例えば、２Ｈ−チオピラニルまたは４Ｈ−チオピラニル）、ジヒドロピラニル、ジヒドロフラニル、ジヒドロピラゾリル、ジヒドロピラゾリル、ジヒドロイソインドリル、オクタヒドロキノリニル、（例えば、１，２，３，４，４ａ，５，６，７−オクタヒドロキノリニル）、オクタヒドロイソキノリニル、（例えば、１，２，３，４，５，６，７、８−オクタヒドロイソキノリニル）を指してもよい。別段の規定がない限り、「ヘテロシクロアルケニル」は、好ましくは、（単環式環または縮合環系である）３〜１１員不飽和脂環式環式環（例えば、２つの縮合環で構成された縮合環系）を指し、ここで、前記環式基は、Ｏ、Ｓ、およびＮから独立に選択される１もしくは複数（例えば、１、２、３または４）の環ヘテロ原子を含み、ここで、１もしくは複数のＳ環原子（存在する場合）および／または１もしくは複数のＮ環原子（存在する場合）は任意選択で酸化されてもよく、ここで、１もしくは複数の炭素環原子は任意選択で酸化されてもよく、さらにここで、前記環式基は、隣接した環原子の間に少なくとも１つの二重結合を含み、かつ、隣接した環原子の間に１つの三重結合も含まず；より一層好ましくは、「ヘテロシクロアルケニル」は、Ｏ、Ｓ、およびＮから独立に選択される１もしくは複数（例えば、１、２または３）の環ヘテロ原子を含む５または７員単環式不飽和非芳香族環式基を指し、ここで、１もしくは複数のＳ環原子（存在する場合）および／または１もしくは複数のＮ環原子（存在する場合）は任意選択で酸化され、ここで、１もしくは複数の炭素環原子は任意選択で酸化され、さらにここで、前記環式基は、隣接した環原子の間に少なくとも１つの二重結合を含み、かつ、隣接した環原子の間に１つの三重結合も含まない。
【０１０８】
本明細書中に使用される場合、「ハロゲン」という用語は、フルオロ（−Ｆ）、クロロ（−Ｃｌ）、ブロモ（−Ｂｒ）、またはヨード（−Ｉ）を指す。
【０１０９】
本明細書中に使用される場合、「ハロアルキル」という用語は、フルオロ、クロロ、ブロモ、およびヨードから独立に選択される、そして、好ましくはすべてフルオロ原子である１もしくは複数（好ましくは１〜６、そして、より好ましくは１〜３）のハロゲン原子で置換されたアルキル基を指す。当然のことながら、ハロゲン原子の最大数は、利用可能な付着部位の数によって制限され、要するに、ハロアルキル基のアルキル部分に含まれる炭素原子数に依存する。「ハロアルキル」は、例えば、−ＣＦ3、−ＣＨＦ2、−ＣＨ2Ｆ、−ＣＦ2−ＣＨ3、−ＣＨ2−ＣＦ3、−ＣＨ2−ＣＨＦ2、−ＣＨ2−ＣＦ2−ＣＨ3、−ＣＨ2−ＣＦ2−ＣＦ3、または−ＣＨ（ＣＦ3）2を指してもよい。特に好ましい「ハロアルキル」基は−ＣＦ3である。
【０１１０】
本明細書中に使用される場合、「任意選択の」、「任意選択で」および「であり得る」という用語は、示した特徴が存在し得るが、不存在である可能性もあることを意味する。「任意選択の」、「任意選択で」または「であり得る」という用語が使用されるときはいつも、本発明は具体的に、両方の可能性、すなわち、対応する特徴が存在するか、または選択的に、対応する特徴が不存在である可能性に関する。例えば、「Ｘは任意選択でＹで置換される」（または「ＸはＹで置換され得る」）という表現は、意味する発現は、ＸがＹで置換されるか、または非置換であることを意味する。同様に、組成物の成分が「任意選択」であると示されている場合、本発明は具体的には、両方の可能性、すなわち、対応する成分が存在する（組成物中に含まれる）か、または対応する成分が該組成物に不存在である可能性に関する。
【０１１１】
様々な基が、当該明細書において「任意選択で置換される」と言及される。一般的に、これらの基は、１もしくは複数の置換基、例えば、１、２、３または４つの置換基などを担持し得る。当然のことながら、置換基の最大数は、置換される部分において利用可能な付着部位の数によって制限される。別段の規定がない限り、当該明細書中に言及される「任意選択で置換される」基は、好ましくは２以下の置換基を担持し、そして、特に１つの置換基だけを担持し得る。さらに、別段の規定がない限り、任意選択の置換基が不存在であること、すなわち、対応する基が非置換であることが好ましい。
【０１１２】
当業者は、式（Ｉ）の化合物に含まれる置換基が、対応する特定の置換基の多くの異なった位置を介してそれぞれの化合物の残りの部分に取り付けられ得ることを理解する。別段の規定がない限り、実施例に図示しているように、様々な特定の置換基の好ましい取り付け位置が存在する。
【０１１３】
本明細書中に使用される場合、別段の明確な指示がないかまたは文脈に矛盾しない限り、「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」という用語は、「１もしくは複数の」および「少なくとも１つ」と互換的に使用される。よって、例えば、式（Ｉ）の化合物（「a」 compound）を含む組成物は、式（Ｉ）の「１もしくは複数」の化合物を含む組成物を指すと解釈できる。
【０１１４】
本明細書中に使用される場合、「含む（comprising）」（または、「含む（comprise）」、「含む（comprises）」、「含有する（contain）」、「含有する（contains）」もしくは「含有する（containing）」）という用語は、別段の明確な指示がないかまたは文脈に矛盾しない限り、「とりわけ含有すること」、すなわち、「さらなる任意の要素の中に、．．．を含有すること」を意味する。それに加えて、この用語はまた、「から実質的に成る」および「から成る」といったより狭い意味も含む。例えば、「ＢとＣを含むＡ」という用語は、「ＢとＣをとりわけ含有する」という意味があり、ここで、Ａはさらなる任意の要素を含む可能性があるが（例えば、「Ｂ、ＣおよびＤを含有するＡ」が包含されるであろう）、この用語はまた、「ＢとＣから実質的に成るＡ」といった意味および「ＢとＣから成るＡ」といった意味も含む（すなわち、ＢとＣ以外の成分はＡに含まれない）。
【０１１５】
さらに、別段の指示がない限り、業界基準、薬局方、または製造業者のマニュアルへの言及はすべて、当該明細書の優先日（すなわち、最も早い出願日）にて利用可能であった対応する最新版を指す。
【０１１６】
本発明の範囲は、本明細書中に提供する化合物、特に、式（Ｉ）の化合物のすべての医薬に許容される塩型を含み、これらの塩は、例えばプロトン化に感受性である孤立電子対を所持する原子、例えばアミノ基の、無機酸または有機酸でのプロトン化によって、あるいは生理学的に許容されるカチオン（カルボン酸基など）の塩として、形成されることも可能である。例示的な塩基付加塩は、例えばアルカリ金属塩、例えばナトリウムまたはカリウム塩；アルカリ土類金属塩、例えばカルシウムまたはマグネシウム塩；亜鉛塩；アンモニウム塩；脂肪族アミン塩、例えばトリメチルアミン、トリエチルアミン、ジシクロヘキシルアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、プロカイン塩、メグルミン塩、エチレンジアミン塩、またはコリン塩；アラルキルアミン塩、例えばＮ，Ｎ−ジベンジルエチレンジアミン塩、ベンザチン塩、ベネタミン塩；複素環芳香族アミン塩、例えばピリジン塩、ピコリン塩、キノリン塩またはイソキノリン塩；四級アンモニウム塩、例えばテトラメチルアンモニウム塩、テトラエチルアンモニウム塩、ベンジルトリメチルアンモニウム塩、ベンジルトリエチルアンモニウム塩、ベンジルトリブチルアンモニウム塩、メチルトリオクチルアンモニウム塩またはテトラブチルアンモニウム塩；ならびに塩基性アミノ酸塩、例えばアルギニン塩、リジン塩またはヒスチジン塩を含む。例示的な酸付加塩は、例えば：鉱酸塩、例えば塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、硫酸塩（例えば、硫酸塩または硫酸水素塩）、硝酸塩、リン酸塩（例えばリン酸塩、リン酸水素塩、またはリン酸二水素塩）、炭酸塩、炭酸水素酸塩、過塩素酸塩、ホウ酸塩、またはチオシアン酸塩；有機酸塩、例えば酢酸塩、プロピオン酸塩、酪酸塩、ペンタン酸塩、ヘキサン酸塩、ヘプタン酸塩、オクタン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、デカン酸塩、ウンデカン酸塩、オレイン酸塩、ステアリン酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、シュウ酸塩、フマル酸塩、酒石酸塩、リンゴ酸塩、クエン酸塩、コハク酸塩、アジピン酸塩、グルコン酸、グリコール酸塩、ニコチン酸塩、安息香酸塩、サリチル酸塩、アスコルビン酸塩、パモ酸塩（エンボナート）、ショウノウ酸塩、グルコヘプタン酸塩、またはピバル酸塩；スルホン酸塩、例えばメタンスルホン酸塩（メシレート）、エタンスルホン酸塩（エシレート）、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩（イセチオレート）、ベンゼンスルホン酸塩（ベシレート）、ｐ−トルエンスルホン酸塩（トシレート）、２−ナフタレンスルホン酸塩（ナプシレート）、３−フェニルスルホン酸塩、またはカンファースルホン酸塩；グリセロリン酸塩；ならびに酸性アミノ酸塩、例えばアスパラギン酸塩またはグルタミン酸塩を含む。
【０１１７】
さらに、本発明の範囲は、本明細書中に提供する化合物、特に、任意の溶媒和型の式（Ｉ）の化合物を含み、例えば水との溶媒和物（すなわち、水和物など）、あるいは有機溶媒、例えばメタノール、エタノールまたはアセトニトリルなどとの溶媒和物（すなわち、メタノレート、エタノレートまたはアセトニトリレート）；あるいは任意の結晶形態のものが含まれる。本明細書中に提供する化合物の斯かる溶媒和物、特に式（Ｉ）の化合物はまた、対応する化合物の医薬的に許容される塩の溶媒和物を含むこともまた、理解されるすべきである。
【０１１８】
さらに、本明細書中に提供する化合物、特に式（Ｉ）の化合物は、異なった異性体、特に立体異性体（例えば、幾何異性体（またはｃｉｓ／ｔｒａｎｓ異性体）、鏡像異性体およびジアステレオマーを含む）または互変異性体の形態で存在し得る。本明細書中に提供する化合物の斯かるすべての異性体は、混合物または純粋もしくは実質的に純粋な形態のいずれかで、本発明の一部として企図される。立体異性体に関して、本発明は、本発明による化合物の単離された光学異性体、ならびに任意のその混合物（特にラセミ混合物／ラセミ体を含む）を含む。
【０１１９】
ラセミ体は、物理的方法、例えばジアステレオマー誘導体の分別再結晶、分離または結晶化、あるいはキラルカラムクロマトグラフィーによる分離などによって分離可能である。光学活性酸との塩形成、その後、結晶化を介して、個々の光学異性体をラセミ体から得ることも可能である。本発明はさらに、本明細書中に提供する化合物の任意の互変異性体も包含する。
【０１２０】
本発明の範囲はまた、本明細書中に提供する化合物、特に式（Ｉ）の化合物を含み、そしてそこで、１もしくは複数の原子が、対応する原子の特定の同位体によって置換される。例えば、本発明は、式（Ｉ）の化合物を包含し、そしてそこで、１もしくは複数の水素原子（または、例えばすべての水素原子）が、重水素原子（すなわち、2Ｈ；「Ｄ」とも呼ばれる）で置換される。したがって、本発明はまた、重水素が豊富な式（Ｉ）の化合物も含む。天然に存在する水素は、約９９．９８ｍｏｌ−％の水素−１（1Ｈ）および約０．０１５６ｍｏｌ−％の重水素（2ＨまたはＤ）を含む同位体混合物である。式（Ｉ）の化合物の１もしくは複数の水素位置における重水素の含有量は、当該技術分野で知られている重水素化技術を使用して増強できる。例えば、式（Ｉ）の化合物、または式（Ｉ）の化合物の合成に使用されるべき反応物もしくは前駆体は、例えば、重水（Ｄ2Ｏ）を使用したＨ／Ｄ交換反応に供され得る。さらなる好適な重水素化技術は：Atzrodt J et al., Bioorg Med Chem, 20(18), 5658-5667, 2012; William JS et al., Journal of Labelled Compounds and Radiopharmaceuticals, 53(11-12), 635-644, 2010; or Modvig A et al., J Org Chem, 79, 5861-5868, 2014に記載されている。重水素の含有量は、例えば質量分析法またはＮＭＲ分光法を使用して測定できる。別段の特定の指示がない限り、式（Ｉ）の化合物が重水素に富んでいないことが好ましい。したがって、式（Ｉ）の化合物内の水素原子または1Ｈ水素原子の存在が好まれる。
【０１２１】
本発明はまた、本明細書中に提供する化合物、特に式（Ｉ）の化合物も含み、そしてそこで、１もしくは複数の原子が、例えば、18Ｆ、11Ｃ、13Ｎ、15Ｏ、76Ｂｒ、77Ｂｒ、120Ｉおよび／または124Ｉなどの対応する原子の陽電子を放つ同位体によって置換される。斯かる化合物は、陽電子断層撮影（ＰＥＴ）のトレーサーまたはイメージングプローブとして使用できる。それにより、本発明は、（ｉ）式（Ｉ）の化合物、そこで、１もしくは複数のフッ素原子（または、例えばすべてのフッ素原子）が18Ｆ原子によって置換され、（ｉｉ）式（Ｉ）の化合物、そこで、１もしくは複数の炭素原子（または、例えばすべての炭素原子）が11Ｃ原子によって置換され、（ｉｉｉ）式（Ｉ）の化合物、そこで、１もしくは複数の窒素原子（または、例えばすべての窒素原子）が13Ｎ原子によって置換され、（ｉｖ）式（Ｉ）の化合物、そこで、１もしくは複数の酸素原子（または、例えばすべての酸素原子）が15Ｏ原子によって置換され、（ｖ）式（Ｉ）の化合物、そこで、１もしくは複数の臭素原子（または、例えばすべての臭素原子）が76Ｂｒ原子によって置換され、（ｖｉ）式（Ｉ）の化合物、そこで、１もしくは複数の臭素原子（または、例えばすべての臭素原子）が77Ｂｒ原子によって置換され、（ｖｉｉ）式（Ｉ）の化合物、そこで、１もしくは複数のヨード原子（または、例えばすべてのヨード原子）が120Ｉ原子によって置換され、ならびに（ｖｉｉｉ）式（Ｉ）の化合物、そこで、１もしくは複数のヨード原子（または、例えばすべてのヨード原子）が124Ｉ原子によって置換される、を含む。一般に、式（Ｉ）の化合物の中の原子が特定の同位体で置換されることが好ましい。
【０１２２】
本明細書中に提供する化合物、特に式（Ｉ）の化合物の医薬に許容されるプロドラッグは、化学的にまたは代謝的に切断可能な基を有し、そして加溶媒分解によってまたは生理学的条件下で、インビトロにおいて医薬に活性である本発明の化合物になる、誘導体である。本発明による化合物のプロドラッグは、慣用的な方式で、化合物の官能基を用いて、例えばアミノ、ヒドロキシ、またはカルボキシ基などを用いて形成され得る。プロドラッグ型は、哺乳動物生物において、しばしば、溶解性、組織適合性、または遅延放出に関する利点を提供する（Bundgaard, H., Design of Prodrugs, pp. 7-9, 21-24, Elsevier, Amsterdam 1985を参照）。プロドラッグは、例えば、適切なアルコールを用いた親酸性化合物の反応によって調製されるエステル、または好適なアミンを用いた親酸化合物の反応によって調製されるアミドなどの酸誘導体を含む。本発明の化合物がカルボキシル基を有する場合、カルボキシル基を好適なアルコールと反応させることによって調製されたエステル誘導体、または好適なアミンとカルボキシル基を反応させることによって調製されたアミド誘導体が、プロドラッグとして例示される。プロドラッグとしての特に好ましいエステル誘導体は、メチルエステル、エチルエステル、ｎ−プロピルエステル、イソプロピルエステル、ｎ−ブチルエステル、イソブチルエステル、ｔｅｒｔ−ブチルエステル、モルホリノエチルエステル、Ｎ，Ｎ−ジエチルグリコールアミドエステルまたはα−アセトキシエチルエステルである。本発明で使用する化合物がヒドロキシル基を有する場合、適切なアシルハライドまたは適切な酸無水物とヒドロキシル基を反応させることによって調製されるアシルオキシ誘導体が、プロドラッグとして例示される。プロドラッグとして特に好ましいアシルオキシ誘導体は、−ＯＣ（＝Ｏ）−ＣＨ3、−ＯＣ（＝Ｏ）−Ｃ2Ｈ5、−ＯＣ（＝Ｏ）−（ｔｅｒｔ−Ｂｕ）、−ＯＣ（＝Ｏ）−Ｃ15Ｈ31、−ＯＣ（＝Ｏ）−（ｍ−ＣＯＯＮａ−Ｐｈ）、−ＯＣ（＝Ｏ）−ＣＨ2ＣＨ2ＣＯＯＮａ、−Ｏ（Ｃ＝Ｏ）−ＣＨ（ＮＨ2）ＣＨ3または−ＯＣ（＝Ｏ）−ＣＨ2−Ｎ（ＣＨ3）2である。本発明で使用する化合物がアミノ基を有する場合、適切な酸ハライドまたは適切な混合無水物とアミノ基を反応させることによって調製されるアミド誘導体が、プロドラッグとして例示される。プロドラッグとして特に好ましいアミド誘導体は、−ＮＨＣ（＝Ｏ）−（ＣＨ2）2ＯＣＨ3または−ＮＨＣ（＝Ｏ）−ＣＨ（ＮＨ2）ＣＨ3である。
【０１２３】
本明細書中に提供する化合物、特に式（Ｉ）の化合物を、化合物自体として投与してもよいし、または医薬品として配合してもよい。医薬品／医薬組成物は、場合によって、１またはそれより多い医薬に許容される賦形剤、例えばキャリアー、希釈剤、充填剤、崩壊剤、潤滑剤、結合剤、着色剤、色素、安定化剤、保存剤、酸化予防剤、または溶解性増進剤を含んでもよい。
【０１２４】
医薬組成物は、１またはそれより多い溶解性増進剤、例えば約２００〜約５，０００Ｄａの範囲の分子量を有するポリ（エチレングリコール）を含むポリ（エチレングリコール）（例えば、ＰＥＧ２００、ＰＥＧ３００、ＰＥＧ４００、またはＰＥＧ６００）、エチレングリコール、プロピレングリコール、グリセロール、非イオン性界面活性剤、チロキサポール、ポリソルベート８０、マクロゴール−１５−ヒドロキシステアレート、（例えば、Kolliphor（登録商標）HS15、CAS70142-34-6）、リン脂質、レシチン、ジミリストイルホスファチジルコリン、ジパルミトイルホスファチジルコリン、ジステアロイルホスファチジルコリン、シクロデキストリン、α−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、γ−シクロデキストリン、ヒドロキシエチル−β−シクロデキストリン、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、ヒドロキシエチル−γ−シクロデキストリン、ヒドロキシプロピル−γ−シクロデキストリン、ジヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、スルホブチルエチル−β−シクロデキストリン、スルホブチルエチル−γ−シクロデキストリン、グルコシル−α−シクロデキストリン、グルコシル−β−シクロデキストリン、ジグルコシル−β−シクロデキストリン、マルトシル−α−シクロデキストリン、マルトシル−β−シクロデキストリン、マルトシル−γ−シクロデキストリン、マルトトリオシル−β−シクロデキストリン、マルトトリオシル−γ−シクロデキストリン、ジマルトシル−β−シクロデキストリン、メチル−β−シクロデキストリン、カルボキシアルキルチオエーテル、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリビニルピロリドン、酢酸ビニルコポリマー、ビニルピロリドン、ラウリル硫酸ナトリウム、ジオクチルスルホコハク酸ナトリウム、またはその組み合わせいずれかを含んでもよい。
【０１２５】
医薬組成物を、当業者に知られる技術、例えば“Remington: The Science and Practice of Pharmacy”, Pharmaceutical Press, 22nd editionに公表される技術によって配合してもよい。医薬組成物を、経口、非経口、例えば筋内、静脈内、皮下、皮内、動脈内、心腔内、結腸、鼻、局所、エアロゾルまたは膣投与のための投薬型として配合してもよい。経口投与のための投薬型には、コーティングおよび非コーティング錠剤、軟ゼラチンカプセル、硬ゼラチンカプセル、ロゼンジ、トローチ、溶液、エマルジョン、懸濁物、シロップ、エリキシル剤、再構成用の粉末および顆粒、分散性粉末および顆粒、薬用ガム、咀嚼錠剤および発泡錠が含まれる。非経口投与用の投薬型には、溶液、エマルジョン、懸濁物、分散物、ならびに再構成用の粉末および顆粒が含まれる。非経口投与には、エマルジョンが好ましい投薬型である。結腸および膣投与のための投薬型には、座薬および膣座薬が含まれる。鼻投与のための投薬型を、吸入および吹送法によって、例えば計測吸入装置によって、投与してもよい。局所投与のための投薬型には、クリーム、ジェル、軟膏、膏薬、パッチおよび経皮送達系が含まれる。
【０１２６】
式（Ｉ）の化合物、あるいは斯かる化合物を含む上記の医薬組成物を、全身性／末梢性のいずれかで、または所望の作用部位で、任意の慣用的な投与経路によって対象に投与してもよく、限定されるわけではないが：経口（例えば錠剤、カプセルとして、または摂取可能溶液として）、局所（例えば経皮、鼻内、目、頬、および舌下）、非経口（例えば注射技術または注入技術を用いて、そして例えば、注射、例えば皮下、皮内、筋内、静脈内、動脈内、心内、クモ膜下腔内、脊髄内、嚢内、嚢下、眼内、腹腔内、気管内、表皮下、関節内、クモ膜下、または胸骨内によるもの、例えば皮下または筋内へのデポーの移植によるものを含む）、肺（例えば口または鼻を通じた、例えばエアロゾルを用いた吸入または吹送療法による）、胃腸、子宮内、眼内、皮下、目（ガラス体内または前房内を含む）、結腸、または膣投与のうちの１もしくは複数が含まれる。
【０１２７】
化合物または医薬組成物を非経口投与する場合、こうした投与の例には：化合物または医薬組成物の静脈内、動脈内、腹腔内、クモ膜下腔内、心室内、尿道内、胸骨内、心臓内、頭蓋内、筋内または皮下投与、および／または注入技術を用いることによる投与のうちの１もしくは複数が含まれる。非経口投与のため、化合物は、溶液を血液と等張にするため、他の物質、例えば十分な塩またはグルコースを含有してもよい無菌水溶液の形で、最適に用いられる。水溶液は、必要であれば、適切に緩衝しなければならない（好ましくは３〜９のｐＨに）。無菌条件下での適切な非経口配合物の調製は、当業者に周知の標準的医薬技術によって容易に達成される。
【０１２８】
また、前記化合物または医薬組成物を、フレーバー剤または着色剤を含有してもよい、即時、遅延、修飾、持続、断続または調節放出適用のための、錠剤、カプセル、膣座薬、エリキシル剤、溶液または懸濁物の形で、経口投与してもよい。
【０１２９】
錠剤は、賦形剤、例えば微結晶性セルロース、ラクトース、クエン酸ナトリウム、炭酸カルシウム、リン酸水素カルシウムおよびグリシン、崩壊剤、例えばデンプン（好ましくはトウモロコシ、ジャガイモまたはタピオカデンプン）、デンプングリコール酸ナトリウム、クロスカルメロースナトリウムおよび特定の複合ケイ酸、ならびに顆粒化結合剤、例えばポリビニルピロリドン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、ヒドロキシプロピルセルロース（ＨＰＣ）、スクロース、ゼラチンおよびアカシアを含有してもよい。さらに、潤滑剤、例えばステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、ベヘン酸グリセリルおよびタルクが含まれてもよい。また、類似のタイプの固形組成物をゼラチンカプセル中の充填剤として用いてもよい。これに関連して好ましい賦形剤には、ラクトース、デンプン、セルロース、または高分子量ポリエチレングリコールが含まれる。水性懸濁物および／またはエリキシル剤には、剤を、多様な甘味剤またはフレーバー剤、着色物質または色素と、乳化剤および／または懸濁剤と、そして希釈剤、例えば水、エタノール、プロピレングリコールおよびグリセリン、ならびにその組み合わせと組み合わせてもよい。
【０１３０】
あるいは、前記化合物または医薬組成物を座薬またはペッサリーの形で投与してもよいし、あるいはジェル、ヒドロゲル、ローション、溶液、クリーム、軟膏または散布剤の形で局所適用してもよい。また、本発明の化合物を、例えば皮膚パッチの使用によって、皮膚または経皮投与することも可能である。
【０１３１】
また、前記化合物または医薬組成物は、徐放性システムによって投与されてもよい。徐放性組成物の好適な例は、造形品の形態での半透過性重合体マトリックス、例えば、フィルム、またはマイクロカプセルを含む。徐放性マトリックスとしては、例えば、ポリラクチド（例えばＵＳ３，７７３，９１９を参照）、Ｌ−グルタミン酸およびγ−エチル−Ｌ−グルタミン酸のコポリマー（Sidman, U. et al., Biopolymers 22:547-556 (1983)）、ポリ（２−ヒドロキシエチルメタクリレート）（R. Langer et al., J. Biomed. Mater. Res. 15:167-277 (1981)およびR. Langer, Chem. Tech. 12:98-105 (1982)）、エチレン酢酸ビニル（Ｒ．ランガーら、同上）またはポリ−Ｄ−（−）−３−ヒドロキシブチル酸（ＥＰ１３３９８８）が挙げられる。徐放性医薬組成物としては、リポソーム封入型化合物も挙げられる。本発明の化合物を含むリポソームは、例えば：ＤＥ３２１８１２１；Epstein et al., Proc. Natl. Acad. Sci. (USA) 82:3688-3692 (1985)；Hwang et al., Proc. Natl. Acad. Sci. (USA) 77:4030-4034 (1980)；ＥＰ００５２３２２；ＥＰ００３６６７６；ＥＰ０８８０４６；ＥＰ０１４３９４９；ＥＰ０１４２６４１；ＪＰ８３−１１８００８；ＵＳ４，４８５，０４５；ＵＳ４，５４４，５４５；およびＥＰ０１０２３２４のうちのいずれか１つに記載の方法など、当該技術分野で知られている方法によって調製される。
【０１３２】
また、前記化合物または医薬組成物を、肺経路、直腸経路、または目の経路によって投与することも可能である。目への使用のため、これらを、等張ｐＨ調整無菌生理食塩水中の微粒子化懸濁物として、または好ましくは等張ｐＨ調整無菌生理食塩水中の溶液として、場合によって塩化ベンジルアルコニウムなどの保存剤と組み合わせて配合してもよい。あるいは、これらをペトロラタムなどの軟膏中に配合してもよい。
【０１３３】
肺内投与、特に吸入法のための、本明細書中に提供する化合物、特に式（Ｉ）の化合物の乾燥粉末配合物を調製することも想定される。斯かる乾燥粉末は、実質的に非結晶性ガラス質または実質的に結晶性の生理活性粉末をもたらす条件下での噴霧乾燥法によって調製され得る。したがって、本発明の化合物の乾燥粉末は、ＷＯ９９／１６４１９またはＷＯ０１／８５１３６に開示された乳化／噴霧乾燥法によって作製できる。本発明の化合物の溶液製剤の噴霧乾燥が、例えば、"Spray Drying Handbook", 5th ed., K. Masters, John Wiley & Sons, Inc., NY (1991)、ＷＯ９７／４１８３３、またはＷＯ０３／０５３４１１に一般に記載されているように実施できる。
【０１３４】
皮膚への局所適用のため、例えば、１またはそれより多い以下：ミネラルオイル、流動ワセリン、白色ワセリン、プロピレングリコール、乳化ろうおよび水の混合物中に懸濁または溶解された活性化合物を含有する適切な軟膏として、前記化合物または医薬組成物を配合してもよい。あるいは、これらを、例えば、１またはそれより多い以下：ミネラルオイル、モノステアリン酸ソルビタン、ポリエチレングリコール、流動パラフィン、ポリソルベート６０、セチルエステルワックス、２−オクチルドデカノール、ベンジルアルコールおよび水の混合物中に懸濁または溶解された適切なローションまたはクリームとして配合してもよい。
【０１３５】
それにより、本発明は、本明細書中に提供する化合物または医薬組成物に関し、ここで、対応する化合物または医薬組成物は：経口経路；経皮、鼻腔内、眼、頬側、または舌下経路を含めた局所経路；皮下、皮内、筋肉内、静脈内、動脈内、心臓内、くも膜下腔内、脊髄内、嚢内、被膜下、眼窩内、腹腔内、気管内、表皮下、関節内、くも膜下、胸骨内、心室内、尿管内、または頭蓋内経路を含めた、注入技術または輸液技術を使用した腸管外経路；吸入法または吹送治療法によるものを含めた肺経路；胃腸経路；子宮内経路；眼内経路；皮下経路；硝子体内または前房内経路によるものを含めた眼経路；直腸経路；あるいは膣経路、のいずれかによって投与される。特に好ましい投与経路は、経口投与または非経口投与である。
【０１３６】
典型的には、医師が、個々の対象に最も適しているであろう実際の投薬量を決定するであろう。任意の特定の個々の対象のための特定の用量レベルおよび投薬頻度は多様である可能性もあり、そして使用する特定の化合物、その化合物の代謝安定性および作用の長さ、年齢、体重、全身の健康状態、性別、食餌、投与様式および時間、排出速度、薬剤の組み合わせ、特定の状態の重症度、ならびに療法を受けている個々の対象を含む、多様な要因に応じるであろう。
【０１３７】
（約７０ｋｇ体重の）ヒトに経口投与するための、提唱されるが、しかし限定しない用量の本発明による化合物は、単位用量あたり活性成分０．０５〜８０００ｍｇ、好ましくは０．１ｍｇ〜４０００ｍｇであり得る。単位用量を、例えば週１〜３回投与してもよい。単位用量はまた、例えば、１日あたり１回以下の投与で、週１〜７回投与してもよい。ヒトへの経口投与のための式（Ｉ）の化合物のさらなる代表的な用量は、５０〜２００ｍｇ／ｋｇ体重／日、特に１００ｍｇ／ｋｇ／日である。患者／対象の年齢および体重、ならびに治療しようとする状態の重症度に応じて、投薬量にルーチンの変動を行うことが必要でありうることが認識されるであろう。正確な用量および投与経路もまた、最終的に、主治医または獣医師の判断で決定されるであろう。
【０１３８】
本明細書中に提供した化合物、特に式（Ｉ）の化合物、または斯かる化合物を含む医薬組成物は、（任意のさらなる治療薬を同時投与することなく、または、例えば、式（Ｉ）の化合物で治療または予防されるべき同じ疾患に対する任意のさらなる治療薬を同時投与することなく）単独療法で投与できる。しかしながら、式（Ｉ）の化合物または式（Ｉ）の化合物を含む医薬組成物はまた、１もしくは複数のさらなる治療薬と組み合わせて投与されることもできる。式（Ｉ）の化合物が同じ疾患または病状に対して作用する第二の治療薬と組み合わせて使用される場合、それぞれの化合物の用量は、対応する化合物が単独で使用されるときと異なっていてもよく、特に、それぞれの化合物のより少ない用量が使用されてもよい。１もしくは複数のさらなる治療薬（例えば、ＢＲＤ４阻害剤、好ましくは直接的なＢＲＤ４阻害剤など）と式（Ｉ）の化合物との組み合わせは、式（Ｉ）の化合物と（単数もしくは複数の）さらなる治療薬（単一の医薬製剤または別々の医薬製剤のいずれかでの）同時の／併用の投与、あるいは、式（Ｉ）の化合物とさらなる治療薬との連続した／別々の投与を含んでもよい。投与が連続する場合、本発明による式（Ｉ）の化合物または１もしくは複数のさらなる治療薬のいずれを、最初に投与してもよい。投与が同時である場合、１もしくは複数のさらなる治療薬は、式（Ｉ）の化合物と同じ医薬製剤に含まれてもよく、またはそれらは、１もしくは複数の異なった（別々の）医薬製剤で投与されてもよい。
【０１３９】
好ましくは、本発明の化合物と組み合わせて投与しようとする、さらなる１もしくは複数の治療薬は、抗癌薬剤である。本発明による式（Ｉ）の化合物と組み合わせて投与すべき（単数もしくは複数の）抗癌薬剤は：例えば、腫瘍血管新生阻害剤（例えばプロテアーゼ阻害剤、上皮増殖因子受容体キナーゼ阻害剤、または血管内皮増殖因子受容体キナーゼ阻害剤）；細胞傷害性薬剤（例えば代謝拮抗剤、例えばプリンおよびピリミジン類似体代謝拮抗剤）；有糸分裂阻害剤（例えば微小管安定化薬剤または抗有糸分裂アルカロイド）；白金配位錯体；抗腫瘍抗生物質；アルキル化剤（例えばナイトロジェンマスタードまたはニトロソ尿素）；内分泌剤（例えば副腎皮質ステロイド、アンドロゲン、抗アンドロゲン、エストロゲン、抗エストロゲン、アロマターゼ阻害剤、ゴナドトロピン放出ホルモンアゴニスト、またはソマトスタチン類似体）；あるいは腫瘍細胞において過剰発現される、および／または誤って制御されている特定の代謝経路に別の方式で関与する、酵素または受容体をターゲットとする化合物（例えばＡＴＰおよびＧＴＰホスホジエステラーゼ阻害剤、ヒストンデアセチラーゼ阻害剤、プロテインキナーゼ阻害剤（例えばセリン、スレオニンおよびチロシンキナーゼ阻害剤（例えばAbelsonプロテインチロシンキナーゼ阻害剤など））ならびに多様な増殖因子、対応する受容体およびキナーゼ阻害剤（例えば上皮増殖因子受容体キナーゼ阻害剤、血管内皮増殖因子受容体キナーゼ阻害剤、線維芽細胞増殖因子阻害剤、インスリン様増殖因子受容体阻害剤および血小板由来増殖因子受容体キナーゼ阻害剤））；メチオニン；アミノペプチダーゼ阻害剤；プロテアソーム阻害剤；シクロオキシゲナーゼ阻害剤（例えばシクロオキシゲナーゼ−１またはシクロオキシゲナーゼ−２阻害剤）；トポイソメラーゼ阻害剤（例えばトポイソメラーゼＩ阻害剤またはトポイソメラーゼＩＩ阻害剤）、ポリＡＤＰリボースポリメラーゼ阻害剤（ＰＡＲＰ阻害剤）、ならびに上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）阻害剤／拮抗薬から選択されてもよい。
【０１４０】
本発明の化合物と組み合わせて抗癌薬剤として使用可能なアルキル化剤は、例えばナイトロジェンマスタード（例えばシクロホスファミド、メクロレタミン（クロルメチン）、ウラムスチン、メルファラン、クロラムブシル、イホスファミド、ベンダムスチン、またはトロホスファミド）、ニトロソ尿素（例えばカルムスチン、ストレプトゾシン、ホテムスチン、ロムスチン、ニムスチン、プレドニムスチン、ラニムスチン、またはセムスチン）、アルキルスルホネート（例えば、ブスルファン、マンノスルファン、またはトレオスルファン）、アジリジン（例えばヘキサメチルメラミン（アルトレタミン）、トリエチレンメラミン、チオテパ（Ｎ，Ｎ’Ｎ’−トリエチレンチオホスホラミド）、カルボクオン、またはトリアジクオン）、ヒドラジン（例えばプロカルバジン）、トリアゼン（例えばダカルバジン）、またはイミダゾテトラジン（例えばテモゾロミド）であってもよい。
【０１４１】
本発明の化合物と組み合わせて、抗癌薬剤として使用可能な白金配位錯体は、例えば、シスプラチン、カルボプラチン、ネダプラチン、オキサリプラチン、サトラプラチン、または四硝酸トリプラチンであってもよい。
【０１４２】
本発明の化合物と組み合わせて抗癌薬剤として使用可能な細胞傷害性薬剤は、例えば、葉酸類似体代謝拮抗剤（例えばアミノプテリン、メトトレキセート、ペメトレキセド、またはラルチトレキセド）、プリン類似体代謝拮抗剤（例えばクラドリビン、クロファラビン、フルダラビン、６−メルカプトプリン（そのプロドラッグ型アザチオプリンを含む）、ペントスタチン、または６−チオグアニン）、およびピリミジン類似体代謝拮抗剤（例えばシタラビン、デシタビン、５−フルオロウラシル（そのプロドラッグ型カペシタビンおよびテガファーを含む）、フロクスウリジン、ゲムシタビン、エノシタビン、またはサパシタビン）を含む、代謝拮抗剤であってもよい。
【０１４３】
本発明の化合物と組み合わせて抗癌薬剤として使用可能な有糸分裂阻害剤は、例えば、タキサン（例えばドセタキセル、ラロタキセル、オルタタキセル、パクリタキセル／タキソール、テセタキセル、またはｎａｂ−パクリタキセル（例えば、Abraxane（登録商標）など）、ビンカアルカロイド（例えばビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンフルニン、ビンデシン、またはビノレルビン）、エポチロン（例えばエポチロンＡ、エポチロンＢ、エポチロンＣ、エポチロンＤ、エポチロンＥ、またはエポチロンＦ）あるいはエポチロンＢ類似体（例えばイキサベピロン／アザエポチロンＢ）であってもよい。
【０１４４】
本発明の化合物と組み合わせた抗癌薬剤として使用可能な抗腫瘍抗生物質は、例えばアントラサイクリン（例えばアクラルビシン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、エピルビシン、イダルビシン、アムルビシン、ピラルビシン、バルルビシン、またはゾルビシン）、アントラセンジオン（例えばミトキサントロン、またはピキサントロン）またはストレプトミセス属（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）から単離された抗腫瘍抗生物質（例えばアクチノマイシン（アクチノマイシンＤを含む）、ブレオマイシン、マイトマイシン（マイトマイシンＣを含む）、またはプリカマイシン）であってもよい。
【０１４５】
本発明の化合物と組み合わせて抗癌薬剤として使用可能なチロシンキナーゼ阻害剤は、例えば、アキシチニブ、ボスチニブ、セディラニブ、ダサチニブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、イマチニブ、ラパチニブ、レスタウルチニブ、ニロチニブ、セマキサニブ、ソラフェニブ、スニチニブ、アキシチニブ、ニンテダニブ、ポナチニブ、またはバンデタニブであってもよい。
【０１４６】
本発明の化合物と組み合わせて抗癌薬剤として使用可能なトポイソメラーゼ阻害剤は、例えば、トポイソメラーゼＩ阻害剤（例えばイリノテカン、トポテカン、カンプトテシン、ベロテカン、ルビテカン、またはラメラリンＤ）またはトポイソメラーゼＩＩ阻害剤（例えばアムサクリン、エトポシド、リン酸エトポシド、テニポシド、またはドキソルビシン）であってもよい。
【０１４７】
本発明の化合物と組み合わせて抗癌剤として使用できるＰＡＲＰ阻害剤は、例えば、ＢＭＮ−６７３、オラパリブ、ルカパリブ、ベリパリブ、ＣＥＰ９７２２、ＭＫ４８２７、ＢＧＢ−２９０、または３−アミノベンズアミドであってもよい。
【０１４８】
本発明の化合物と組み合わせて抗癌剤として使用できるＥＧＦＲ阻害剤／拮抗薬は、例えば、ゲフィチニブ、エルロチニブ、ラパチニブ、アファチニブ、ネラチニブ、ＡＢＴ−４１４、ダコミチニブ、ＡＶ−４１２、ＰＤ１５３０３５、バンデタニブ、ＰＫＩ−１６６、ペリチニブ、カネルチニブ、イコチニブ、ポジオチニブ、ＢＭＳ−６９０５１４、ＣＵＤＣ−１０１、ＡＰ２６１１３、ＸＬ６４７、セツキシマブ、パニツムマブ、ザルツムマブ、ニモツズマブ、またはマツズマブであってもよい。
【０１４９】
さらなる抗癌薬剤を、本発明の化合物と組み合わせて用いてもよい。抗癌薬剤は、ＴＮＦ関連アポトーシス誘導リガンド（ＴＲＡＩＬ）、タモキシフェン、アムサクリン、ベキサロテン、エストラムスチン、イロフルベン、トラベクテジン、セツキシマブ、パニツムマブ、トシツモマブ、アレムツズマブ、ベバシズマブ、エドレコロマブ、ゲムツズマブ、アルボシジブ、セリシクリブ、アミノレブリン酸、アミノレブリン酸メチル、エファプロキシラル、ポルフィマーナトリウム、タラポルフィン、テモポルフィン、ベルテポルフィン、アリトレチノイン、トレチノイン、アナグレリド、亜ヒ酸、アトラセンタン、ボルテゾミブ、カルモフール、セレコキシブ、デメコルシン、エレスクロモル、エルサミトルシン、エトグルシド、ロニダミン、ルカントン、マソプロコール、ミトブロニトール、ミトグアゾン、ミトタン、オブリメルセン、オマセタキシン、シチマジーン、セラデノベック、テガファー、テストラクトン、チアゾフリン、チピファルニブ、ボリノスタット、またはイニパリブのような生物学的または化学的分子を含んでもよい。
【０１５０】
また、増殖性疾患に関与する癌または腫瘍マーカー／因子／サイトカインに対して向けられる、抗体、抗体断片、抗体構築物（例えば一本鎖構築物）、および／または修飾抗体（ＣＤＲ移植抗体、ヒト化抗体、「完全ヒト化」抗体などのようなもの）のような生物学的薬剤を、本発明の化合物との併用療法アプローチで使用してもよい。こうした生物学的分子の例は、抗ＨＥＲ２抗体（例えばトラスツズマブ、ハーセプチン（登録商標））、抗ＣＤ２０抗体（例えばリツキシマブ、リツキサン（登録商標）、マブテラ（登録商標）、レディタクス（登録商標））、抗ＣＤ１９／ＣＤ３構築物（例えばＥＰ１０７１７５２を参照）および抗ＴＮＦ抗体（例えばTaylor PC. Antibody therapy for rheumatoid arthritis. Curr Opin Pharmacol. 2003. 3(3):323-328を参照）である。本発明の化合物との併用療法アプローチにおいて使用されるさらなる抗体、抗体断片、抗体構築物および／または修飾抗体は：Taylor PC. Curr Opin Pharmacol. 2003. 3(3):323-328;またはRoxana A. Maedica. 2006. 1(1):63-65に見出され得る。
【０１５１】
本発明の化合物と組み合わせて使用できる抗癌剤は、特に、ＣＴＬＡ−４、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１、ＴＩＭ３、ＬＡＧ３、ＯＸ４、ＣＳＦ１Ｒ、ＩＤＯ、またはＣＤ４０を標的化する、癌免疫治療薬（抗体（例えば、モノクローナル抗体またはポリクローナル抗体）など）、抗体フラグメント、抗体構築物（例えば、一本鎖構築物）、または修飾抗体（例えば、ＣＤＲグラフト抗体、ヒト化抗体、または「完全ヒト化」抗体）などであってもよい。斯かる癌免疫治療薬としては、例えば、抗ＣＴＬＡ−４抗体（特に拮抗性または経路遮断型抗ＣＴＬＡ−４抗体；例えば、イピリムバブまたはトレメリムマブ）、抗ＰＤ−１抗体（特に拮抗性または経路遮断型抗ＰＤ−１抗体；例えば、ニボルマブ（ＢＭＳ−９３６５５８）、ペムブロリズマブ（ＭＫ−３４７５）、ピジリズマブ（ＣＴ−０１１）、ＡＭＰ−２２４、またはＡＰＥ０２０５８）、抗ＰＤ−Ｌ１抗体（特に経路遮断型抗ＰＤ−Ｌ１抗体；例えば、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＥＤＩ４７３６、ＭＰＤＬ３２８０Ａ（ＲＧ７４４６）、ＭＤＸ−１１０５、またはＭＥＤＩ６４６９）、抗ＴＩＭ３抗体（特に経路遮断型抗ＴＩＭ３抗体）、抗ＬＡＧ３抗体（特に拮抗性または経路遮断型抗ＬＡＧ３抗体；例えば、ＢＭＳ−９８６０１６、ＩＭＰ７０１、またはＩＭＰ７３１）、抗ＯＸ４抗体（特に作動性抗ＯＸ４抗体；例えば、ＭＥＤＩ０５６２）、抗ＣＳＦ１Ｒ抗体（特に経路遮断型抗ＣＳＦ１Ｒ抗体；例えば、ＩＭＣ−ＣＳ４またはＲＧ７１５５）、抗ＩＤＯ抗体（特に経路遮断型抗ＩＤＯ抗体）、あるいは、抗ＣＤ４０抗体（特に作動性抗ＣＤ４０抗体；例えば、ＣＰ−８７０，８９３またはＣｈｉ Ｌｏｂ７／４）が挙げられる。さらなる癌免疫治療薬が、当該技術分野で知られており、例えば：Kyi C et al., FEBS Lett, 2014, 588(2):368-76; Intlekofer AM et al., J Leukoc Biol, 2013, 94(1):25-39; Callahan MK et al., J Leukoc Biol, 2013, 94(1):41-53; Ngiow SF et al., Cancer Res, 2011, 71(21):6567-71;およびBlattman JN et al., Science, 2004, 305(5681):200-5に記載されている。
【０１５２】
ＣｅＭＭＥＣ２などのＢＲＤ４阻害剤（好ましくは直接的ＢＲＤ４阻害剤）もまた、式（Ｉ）の化合物と組み合わせたさらなる治療薬として使用され得る。
【０１５３】
上記の組み合わせは、医薬製剤の形で使用するために好適に提示され得る。こうした組み合わせの個々の構成要素を、連続してまたは同時に／相伴ってのいずれかで、別個のまたは組み合わせた医薬製剤中で、任意の好適な経路によって、投与してもよい。投与が連続である場合、本発明の化合物（特に式（Ｉ）の化合物、または医薬的に許容されるその塩、溶媒和物もしくはプロドラッグ）、あるいは、（単数もしくは複数の）さらなる治療薬のいずれが、最初に投与されてもよい。投与が同時である場合、組み合わせを同じ医薬組成物または異なる医薬組成物のいずれで投与されてもよい。同じ配合物中で組み合わせる場合、２つの化合物は安定で、そして互いにおよび配合物中の他の構成要素と適合しなければならないことが認識されるであろう。別個に配合される場合、これらは任意の好適な配合で提供されてもよい。
【０１５４】
本明細書中に提供する化合物、特に式（Ｉ）の化合物を、物理的療法、例えば放射線療法と組み合わせて投与する。放射線療法は、本発明の化合物投与の前に、その後に、またはそれと同時に開始されてもよい。例えば、放射線療法は、化合物投与の１〜１０分後、１〜１０時間後または２４〜７２時間後に開始されてもよい。なお、これらの時間枠は、限定として解釈されないものとする。対象は放射線、好ましくはガンマ線に曝露され、それによって放射線は、単回線量、あるいは数時間、数日および／または数週にわたって投与される多数回線量を提供されてもよい。ガンマ線は、標準被曝量および措置を用いた標準放射線療法プロトコールにしたがって、送達されてもよい。
【０１５５】
よって、本発明は、化合物または医薬組成物は、癌の治療または予防において使用するための、式（Ｉ）の化合物またはその医薬に許容される塩、溶媒和物もしくはプロドラッグ、あるいは医薬に許容される賦形剤と組み合わされた前述の物質いずれかを含む医薬組成物に関し、ここで、前記化合物または医薬組成物は、１もしくは複数の抗癌剤と組み合わせて、および／または放射線療法と組み合わせて投与される。
【０１５６】
しかし、式（Ｉ）の化合物はまた、単独療法、特に単独治療薬による癌の治療または予防（すなわち、式（Ｉ）の化合物を用いた治療が終了するまで、いかなる他の抗癌剤も投与することがない）にも使用できる。したがって、本発明はまた、単独治療薬による癌の治療または予防において使用するための、式（Ｉ）の化合物、または、医薬的に許容されるその塩、溶媒和物、もしくはプロドラッグ、あるいは、医薬的に許容される賦形剤と組み合わせた前述の物質のいずれかを含む医薬組成物に関する。
【０１５７】
本発明により治療される対象または患者は、動物（例えば、ヒト以外の動物）、脊椎動物、哺乳動物、げっ歯類（例えばモルモット、ハムスター、ラット、マウス）、ネズミ（例えばマウス）、イヌ科動物（canine）（例えばイヌ）、ネコ科動物（feline）（例えばネコ）、ブタの仲間（porcine）（例えば、ブタ（pig））、ウマの仲間（equine）（例えばウマ）、霊長類もしくはサルの仲間（simian）（例えばサル（monkey）または類人猿（ape））もしくはサル、例えばマーモセット、ヒヒ、ゴリラ、チンパンジー、オランウータン、テナガザルなど）、あるいは、ヒトであってもよい。本発明によると、経済的に、農学的に、または科学的に重要である動物が、治療されることが想定される。科学的に重要な生物には、限定されるわけではないが、マウス、ラット、およびウサギが含まれる。下等生物、例えばキイロショウジョウバエ（Drosophila melanogaster）のようなショウジョウバエ、およびエレガンス線虫（Caenorhabditis elegans）のような線虫もまた、科学的なアプローチに使用され得る。農学的に重要な動物の限定されない例は、ヒツジ、ウシおよびブタであり、一方、例えばネコおよびイヌは、経済的に重要な動物と見なされ得る。好ましくは、対象／患者は哺乳動物である。より好ましくは、対象／患者はヒト、あるいは、ヒト以外の哺乳類（例えば、モルモット、ハムスター、ラット、マウス、ウサギ、イヌ、ネコ、ウマ、サル、類人猿、マーモセット、ヒヒ、ゴリラ、チンパンジー、オランウータン、テナガザル、ヒツジ、ウシ、またはブタなど）である。最も好ましくは、対象／患者はヒトである。
【０１５８】
障害または疾患の「治療」という用語は、本明細書において（例えば、癌の「治療」）、当該技術分野において周知である。障害または疾患の「治療」は、障害または疾患が患者／対象で疑われるか、または診断されたことを暗示する。障害または疾患を患うと推測される患者／対象は、典型的には、当業者が特定の病的状態に容易に起因させうる（すなわち障害または疾患の診断）、特定の臨床および／または病的症状を示す。
【０１５９】
障害または疾患の「治療」は、例えば、障害または疾患の進行の停止（例えば症状の悪化がまったくない）あるいは障害または疾患の進行の遅延（進行の停止が一過性の性質のもののみである場合）を導くことも可能である。障害または疾患の「治療」はまた、障害または疾患を患う対象／患者の部分的反応（例えば症状の寛解）または完全反応（例えば症状の消失）を導くことも可能である。したがって、障害または疾患の「治療」はまた、例えば、障害または疾患の寛解も指し、そしてそれは、例えば、障害または疾患の進行の停止、あるいは障害または疾患の進行の遅延を導くことも可能である。こうした部分的または完全反応の後には、再発が続くこともありうる。対象／患者が、治療に対して広い範囲の反応（例えば、本明細書において上述するような、例示的な反応など）を経験しうることを理解すべきである。
【０１６０】
障害または疾患の治療は、とりわけ、治療処置（好ましくは、完全反応を導き、そして最終的に障害または疾患の治癒を導く）および緩和治療（症状軽減を含む）を含んでもよい。
【０１６１】
障害または疾患の「予防」という用語は、本明細書において（例えば、癌の「予防」）、当該技術分野に周知である。例えば、障害または疾患を患う傾向があると推測される患者／対象は、特に、障害または疾患の予防から利益を受けうる。対象／患者は、限定されるわけではないが、遺伝的素因を含む、障害または疾患に対する感受性または素因を有する可能性もある。こうした素因は、例えば遺伝子マーカーまたは表現型指標を用いた標準的方法またはアッセイによって決定可能である。本発明にしたがって予防しようとする障害または疾患は、患者／対象において、診断されていないか、あるいは診断不能である（例えば患者／対象がいかなる臨床的または病的症状も示さない）ことが理解されるものとする。したがって、用語「予防」は、任意の臨床および／または病的症状が診断されるかまたは決定される、あるいは主治医によって診断されるかまたは決定されることが可能であるより前の、本発明の化合物の使用を含む。
【０１６２】
本発明は具体的に、全体的なおよび／または好ましい特徴／実施形態のあらゆる組み合わせを含めた、本明細書中に記載した特徴および実施形態のありとあらゆる組み合わせに関することは、理解されるべきである。特に、本発明は具体的には、式（Ｉ）に含まれる様々な基および変数に関する意味（全体的なおよび／または好ましい意味を含む）のそれぞれの組み合わせに関する。
【０１６３】
本明細書において、特許出願、科学文献、および製造者のマニュアルを含む多くの文書が引用される。これらの文書の開示は、本発明の特許可能性に対して関連するとは見なされないが、その全体が本明細書に援用される。より具体的には、すべての言及される文書は、各個々の文書が具体的にそして個々に、援用されると示されるのと同じ度合いに、援用される。
【０１６４】
本発明はまた、以下の例示的な図面によっても説明される。添付した図面を以下に示す。
【図面の簡単な説明】
【０１６５】
【図１−１】ＢＲＤ４の阻害のためのレポーター細胞株の作出  （ａ）実験的アプローチのグラフ表示。ＷＴ−ＫＢＭ７細胞を、０．５のμＭの（Ｓ）−ＪＱ１で１８時間処理し、次に、ＬＺＲＳ−ＲＦＰ−ｉｒｅｓ−ＺＥＯレトロウイルスベクターを感染させた。ＲＦＰ陽性細胞を、０．５μＭの（Ｓ）−ＪＱ１存在下で選別した。（Ｓ）−ＪＱ１を培地から取り除き、そして、ＲＦＰ陰性集団を単細胞クローンへと選別した。すべてのクローンを（Ｓ）−ＪＱ１で数回処理して、処理が安定的にＲＦＰ発現を誘導するかどうかチェックした。（ｂ）ＷＴ−ＫＢＭ７集団（感染していない）、感染し、かつ、選別された集団（赤色の正方形：ＲＦＰ陽性、かつ、選別された細胞）、および二重選別された集団（黒色の正方形：ＲＦＰ陰性、かつ、二重選別された細胞）を表す選別パネル。（ｃ）０．５μＭの（Ｒ）−ＪＱ１または（Ｓ）−ＪＱ１で１８時間処理した；等体積のＤＭＳＯを対照として使用した、ＲＥＤＳ３細胞の代表的なＦＡＣＳパネル。各実験条件について、少なくとも３回の生物学的な反復実験をおこなった。
【図１−２】ＢＲＤ４の阻害のためのレポーター細胞株の作出（ｄ）ＲＥＤＳ３細胞における表示のブロモドメインタンパク質の下方制御後の、ＦＡＣＳによるＲＦＰ陽性細胞の定量化（ＢＲＤＷ１およびＢＲＤ１を陰性対照として使用した）；各実験条件について、３回の生物学的な反復実験をおこない、その都度、少なくとも３０，０００個の細胞について分析した（平均±ＳＴＤ）。（ｅ）ＢＲＤ３またはＢＲＤ４（これらのブロモドメインの両方のヘアピン番号２）について下方制御したＲＥＤＳ３細胞の代表的な画像。
【図２−１】ＢＲＤ４標的遺伝子の転写抑制が、フランキング領域の上方制御を引き起こす。  （ａ）ＲＥＤＳ３細胞でおこなったＦＩＳＨアッセイの代表的な画像。ＲＦＰプローブ（紫色のドット）はＲＦＰ挿入を染色する。Ｈｏｅｃｈｓｔ（青色のシグナル）は核を染色する。黄色の破線は核の外辺部を示す。スケールバーは１０μＭである。（ｂ）核膜に関するＲＦＰプローブ局在性の定量化。近いおよび遠いとは、ＲＦＰ ＦＩＳＨプローブと核膜との間の距離を示す（０＜近い＜２μＭ；遠い＞２μＭ）。二連をおこない、少なくとも８０個の細胞を各実験条件に関してカウントした（平均±ＳＴＤ）。
【図２−２】ＢＲＤ４標的遺伝子の転写抑制が、フランキング領域の上方制御を引き起こす。（ｃ）ＲＦＰ遺伝子座の表示。ＲＦＰ（赤色の矢印）は、ＳＴＸ２（逆方向、シアン色の矢印）とＲＡＮ（センス方向、シアン色の矢印）との間の１２染色体（ｃｈｒ１２：１３１、３２３、９１２−１３１、３２４、４５０）にてセンス方向で挿入される；ｄで使用されるプライマーを表示で示す（ＷＴゲノム：緑色の線；ＲＥＤＳ３ゲノム：紫色の線）。ＳＴＸ２とＲＡＮとの間の領域は、エンハンサー豊富であり（明るいオレンジ色の破線）、それに対して、ＳＴＸ２の下流領域はヘテロクロマチン（灰色の破線ループ）である。ボックス内：ＥＮＣＯＤＥ／Ｂｒｏａｄ instituteクロマチン状態の分断およびＣｈｉｐ−ｓｅｑ（Ｈ３Ｋ４ｍ１、Ｈ３Ｋ４ｍ３、Ｈ３Ｋ２７ａｃ、Ｈ３Ｋ２７ｍ３、およびＨ３Ｈ３６ｍ３）データ（Ｋ−５６２細胞株）の表示。
【図２−３】ＢＲＤ４標的遺伝子の転写抑制が、フランキング領域の上方制御を引き起こす。（ｄ）ＲＦＰ挿入の遺伝子座に特異的なプライマーを使用したＷＴおよびＲＥＤＳ３ ＤＮＡのＰＣＲ；インスリンプロモーター（Ｉｎｓ＿Ｐ）を増幅するプライマーを対照として使用した。（ｅ）ＤＭＳＯ処理と比較した、１μＭの（Ｓ）−ＪＱ１で２４時間処理したときのＫＢＭ７細胞における遺伝子発現変化を表すＶｏｌｃａｎｏプロット（ＲＮＡｓｅｑデータ分析；灰色のドット、有意差なし（ｑ値＞０．０５）／赤色のドット、有意（ｑ値＜０．０５））。（ｆ）ＷＴ−ＫＢＭ７（Ｓ）−ＪＱ１上方制御遺伝子のＤＡＶＩＤ機能注解分析。（ｇ）ＫＢＭ７細胞における、１μＭの（Ｓ）−ＪＱ１での２４時間処理によるＳＴＸ２とＲＡＮの倍率変化を示すＲＴ−ＰＣＲ。値は、アクチン発現およびＤＭＳＯ処理細胞に対して正規化した。各条件について３回の生物学的な反復実験をおこなった（平均±ＳＴＤ）。
【図３−１】機能性ＢＲＤ４阻害剤に関するはスクリーニング。  （ａ）１、５および１０μＭにて２４時間、示した化合物で処理したＲＥＤＳ３クローンにおけるＲＦＰ陽性核の増加を示すＨｅａｔマップ（三連、対照に対する％、ＤＭＳＯを陰性対照として、および２０μＭの（Ｓ）−ＪＱ１を陽性対照として使用する）。
【図３−２】機能性ＢＲＤ４阻害剤に関するはスクリーニング。  （ｂ）スクリーニングの最後の部分（バリデーション部分）からのヒット分散を表す散布図。可変ＲＥＤを、ｒｅｄ強度の中央値を掛けた赤血球数の結果として計算した。自家蛍光化合物は、ＷＴ−ＫＢＭ７細胞においてＲＥＤを増強するが、その一方で、ｈｉｔ化合物はＲＥＤ３細胞においてのみ作用する。（ｃ）選択された化合物によって処理したＷＴ−ＫＢＭ７のｃ−ＭＹＣ発現のパーセンテージを、ＲＴ−ＰＣＲによって評価した。１、１０、および２０μＭのそれぞれの化合物を、２４時間の細胞処理に使用した；ＤＭＳＯを陰性対照として使用し、および陽性対照として（Ｓ）−ＪＱ１を使用した。３回の生物学的な反復実験をおこなった（平均±ＳＴＤ）。（ｄ）（Ｓ）−ＪＱ１、ＣｅＭＭＥＣ１、およびＣｅＭＭＥＣ２の化学構造。（ｅ）ＰＩで核を染色し、ＦＡＣＳによってＤＮＡ含量を分析することによるＳ期の細胞の定量化。ＴＨＰ１細胞を、ＤＭＳＯまたは示した濃度の（Ｓ）−ＪＱ１、ＣｅＭＭＥＣ１またはＣｅＭＭＥＣ２で４８時間処理した。３回の異なる生物学的な反復実験をおこない、その都度、３０，０００個の細胞を分析した（平均±ＳＴＤ）。（ｆ）免疫蛍光法画像からのＡｎｎｅｘｉｎＶ陽性細胞の定量化。細胞を、ＤＭＳＯまたは示した濃度の（Ｓ）−ＪＱ１、ＣｅＭＭＥＣ１またはＣｅＭＭＥＣ２で７２時間処理した。少なくとも３回の生物学的な反復実験をおこない、各ポイントについて１，５００個超の細胞を定量化した（平均±ＳＴＤ）。
【図４−１】ＣｅＭＭＥＣ１およびＣｅＭＭＥＣ２の分子的および細胞的特徴づけ  （ａ）ＣｅＭＭＥＣ１およびＣｅＭＭＥＣ２と共にインキュベートしたＢＲＤ４の第一（黒色の柱、ＢＤ１）および第二の（灰色の柱、ＢＤ２）ブロモドメインに関するαＬＩＳＡアッセイ。（Ｓ）−ＪＱ１およびＲＶＸ−２０８を陽性対照として使用した。アッセイを二連でおこない（平均±ＳＴＤ）；すべての化合物を１０μＭにて使用した。（ｂ）（Ｓ）−ＪＱ１またはＣｅＭＭＥＣ２と共にインキュベートした完全長ＢＲＤ４（ＧＳＴタグ付与）に関するαＬＩＳＡ用量応答（１２の希釈物、２０〜０．０２μＭ）。（ｃ）ＣｅＭＭＥＣ１（赤色のバブル）およびＣｅＭＭＥＣ２（ピンクのバブル）（１０μＭ）に関するＢｒｏｍｏＳｃａｎプロフィール。バブルは、アセチル化基質への分析ブロモドメインの結合の阻害率（パーセンテージ）を示す。
【図４−２】ＣｅＭＭＥＣ１およびＣｅＭＭＥＣ２の分子的および細胞的特徴づけ  （ｄ）２種類の異なるｓｈＲＮＡｓ（ｓｈＲＮＡＣ＝対照＿ｓｈ；ｓｈＲＮＡ１＝ヘアピンｎ．１；ｓｈＲＮＡ２＝ヘアピンｎ．２）を使用して下方制御した、示したブロモドメインのノックダウンレベルを示す代表的なウエスタンブロット。（ｅ）生細胞のイメージング画像からの示したブロモドメインの下方制御時のＲＦＰ陽性ＲＥＤＳ３細胞の定量化。３回の反復実験をおこない、各ポイントについて、１，５００個超の細胞を定量化した（対照に対する％、陽性対照はＤＭＳＯで処理したｓｈＣｏｎｔｒｏｌであり、陽性対照は（Ｓ）−ＪＱ１で処理したｓｈＣｏｎｔｒｏｌである；平均±ＳＴＤ）。（ｆ）示した濃度にて示した化合物で２４時間処理したＲＥＤＳ３クローンの生細胞イメージング画像から定量化したＲＦＰ陽性細胞の倍率変化（ＤＭＳＯ正規化；二連、少なくとも１５００個の細胞をそれぞれの反復実験で定量化した）。（ｇ）ＴＡＦ１（２）に対するＣｅＭＭＥＣ１に関するＢｒｏｍｏＫｄＥＬＥＣＴアッセイ。
【図４−３】ＣｅＭＭＥＣ１およびＣｅＭＭＥＣ２の分子的および細胞的特徴づけ  （ｈ）ＢＲＤ４の第一のブロモドメインへのＣｅＭＭＥＣ２の結合。
【図４−４】ＣｅＭＭＥＣ１およびＣｅＭＭＥＣ２の分子的および細胞的特徴づけ  （ｉ）ＴＡＦ１の第二のブロモドメインへのＣｅＭＭＥＣ１の結合。３Ｄモデル（上のパネル）および２Ｄリガンド相互作用図（下のパネル）。３Ｄモデル内の赤色のドットは水分子を示す。
【図５−１】ＴＡＦ１はＢＲＤ４と相乗作用して、転写調節を媒介する。  （ａ）（対照細胞と比較した）ＴＡＦ１またはＢＲＤ４ノックダウンを伴ったＷＴ−ＫＢＭ７における、ＲＴ−ＰＣＲによって評価したｃ−ＭＹＣ発現の倍率変化；３回の生物学的な反復実験をおこなった（平均±ＳＴＤ）。（ｂ、ｃ）対照、および示した濃度の（ｂ）（Ｓ）−ＪＱ１または（ｃ）ＣｅＭＭＥＣ２で処理したＴＡＦ１下方制御ＷＴ−ＫＢＭ７のＣｅｌｌＴｉｔｅｒＧｌｏアッセイ（各ポイントを少なくとも三連で実施し、等量のＤＭＳＯを対照として加えた）。（ｄ）示したＣｅＭＭＥＣ１類似体の化学構造。（ｅ）示した濃度にて示した化合物で２４時間処理したＲＥＤＳ３クローンの生細胞イメージング画像から定量化したＲＦＰ陽性細胞の倍率変化（ＤＭＳＯ正規化；二連、少なくとも１５００個の細胞をそれぞれの反復実験で定量化した）。
【図５−２】ＴＡＦ１はＢＲＤ４と相乗作用して、転写調節を媒介する。  （ｆ）示した濃度の（Ｓ）−ＪＱ１、ＣｅＭＭＥＣ１、類似体２９、類似体３０、類似体３２、および類似体３５単独または組み合わせで処理したＲＥＤＳ３ ＲＦＰ陽性細胞の倍率変化を表示するマトリクス（各ポイントとも少なくとも三連）。
【図５−３】ＴＡＦ１はＢＲＤ４と相乗作用して、転写調節を媒介する。  （ｇ）示した濃度の（Ｓ）−ＪＱ１、ＣｅＭＭＥＣ１、類似体２９、類似体３０、類似体３２、および類似体３５単独または組み合わせで処理したＨ２３細胞の細胞生存率の低減を表示するマトリクス（各ポイントとも少なくとも二連でおこなった、コピーする、等量のＤＭＳＯを対照として加えた）。統計（スチューデントｔ−検定、両側）：*は０．０５＜ｐ値＜０．０１を示し；**は０．０１＜ｐ値＜０．００１を示し；***はｐ値＜０．００１を示す。
【図６】ＲＥＤ３細胞の特徴づけ  （ａ）０．５μＭの（Ｓ）−ＪＱ１で１８時間処理したＷＴ−ＫＢＭ７のｃ−ＭＹＣ下方制御を示すウエスタンブロット分析；等体積ＯＤＭＳを対照として使用した。（ｂ）ＰＩ染色およびＦＡＣＳによるＤＮＡ含量分析によって評価した細胞周期プロファイルからのＳ期の定量化。ＷＴ−ＫＢＭ７細胞を、０．５μＭの（Ｓ）−ＪＱ１または（Ｒ）−ＪＱ１で２４時間処理した；等量のＤＭＳＯを対照として加えた。４回の生物学的な反復実験をおこなった（平均）。（ｃ）０．５μＭの（Ｓ）−ＪＱ１または（Ｒ）−ＪＱ１で処理したＲＥＤＳ１、ＲＥＤＳ２、およびＲＥＤＳ３細胞の生細胞イメージング画像の例；等量のＤＭＳＯを対照として加えた。（ｄ）ＲＦＰおよび（ｅ）ゼオシン発現は、０．５μＭの（Ｓ）−ＪＱ１または（Ｒ）−ＪＱ１で１８時間処理したＲＥＤＳ３細胞において、ＲＴ−ＰＣＲによっておこなった；等体積のＤＭＳＯを対照として使用した。３回の生物学的な反復実験を各実験条件についておこなった（平均±ＳＴＤ）。（ｆ）左のパネル：ＲＥＤＳ３未処理細胞、あるいは、チミジン（２ｍＭ）、ＲＯ３３０６（９μＭ）またはノコダゾール（１μＭ）で２０時間処理したＲＥＤＳ３細胞の細胞周期プロファイル。核をＰＩで染色し、ＤＮＡ含量をＦＡＣＳによって定量化した；おこなった２つの実験（各実験において、３０，０００個の細胞をＦＡＣＳ分析した）のうちの一方からの代表的な細胞周期プロファイル。右のパネル：上述のとおりに処理した、および０．５μＭの（Ｓ）−ＪＱ１で処理したＲＥＤＳ３細胞の生細胞イメージング画像に関する例；等体積のＤＭＳＯを対照として使用した。３回の反復実験のうちの１つからの代表的な画像。（ｇ）ＰＭＡ（２００ｎＭ）、ＰＨＡ（５μｇ／ｍｌ）、（Ｓ）−ＪＱ１（１μＭ）、またはＰＭＡもしくはＰＨＡと（Ｓ）−ＪＱ１との組み合わせで２４時間処理したＲＥＤＳ３細胞の生細胞イメージング画像によるＲＦＰ陽性細胞の定量化。等量のＤＭＳＯを対照として加えた；３回の反復実験をおこない、少なくとも１，５００個の細胞を定量化した。（ｈ）ＢＲＤ３またはＢＲＤ４下方制御ＲＥＤＳ３細胞においてＲＴ−ＰＣＲによって評価したＢＲＤ３、ＢＲＤ４、およびＲＦＰ発現；３回の生物学的な反復実験を、各実験条件についておこなった（平均±ＳＴＤ）。
【図７−１】スクリーニングヒットの特徴づけ（ａ）バリデート済みヒットの選択のためのパイプライン。化合物ライブラリー：８９，３５５種類の小分子の収集物。ＤＲ：用量応答；ＴＣ：タイムコース。（ｂ）（生細胞イメージング画像の定量化、二連からの）ＲＦＰ蛍光増加に関するスクリーニングの際に適用する陽性対照濃度（（Ｓ）−ＪＱ１ ０．５μＭ）の選択に使用する基準の表示、および（ｃ）その関連Ｚ値。（ｄ）１０μＭの（Ｓ）−ＪＱ１、ＣｅＭＭＥＣ１またはＣｅＭＭＥＣ２で２４時間処理したＲＥＤＳ３細胞の生細胞イメージング画像の例。等体積のＤＭＳＯを対照として使用した。（ｅ）生細胞イメージング画像からの、０．５、１、２．５、５、１０および２０μＭの（Ｓ）−ＪＱ１、ＣｅＭＭＥＣ１、およびＣｅＭＭＥＣ２で処理したＲＥＤＳ３細胞のＲＦＰ陽性核の定量化。等量のＤＭＳＯを対照として加えた；３回の反復実験をおこない、少なくとも１，５００個の細胞を各実験について定量化した（平均±ＳＴＤ）。
【図７−２】スクリーニングヒットの特徴づけ（ｆ）ＲＮＡ−ｓｅｑ分析：（Ｓ）−ＪＱ１ １μＭ（灰色）、ＣｅＭＭＥＣ１ １０μＭ（赤色）、およびＣｅＭＭＥＣ２ １０μＭ（ピンク色）、ならびにこれらの基の重複で２４時間処理したＷＴ−ＫＢＭ７細胞において上方および下方制御される遺伝子数を示すベン図。（ｇ）Ｄのように処理した細胞における、遺伝子発現変動の相関関係を表す散布図。
【図８−１】ブロモドメインタンパク質へのＣｅＭＭＥＣ１とＣｅＭＭＥＣ２の結合の特徴づけ  （ａ）（Ｓ）−ＪＱ１およびＣｅＭＭＥＣ２と共にインキュベートしたＢＲＤ４の第一の（ＢＤ１）および第二の（ＢＤ２）ブロモドメインに関する用量応答（１２の希釈物、２０〜０．０２μＭ）αＬＩＳＡアッセイ。アッセイを二連でおこなった（平均±ＳＴＤ）。（ｂ）ＴＡＦ１（２）、ＢＲＤ９、ＣＲＥＢＢＰ、およびＥＰ３００ブロモドメイン（１１の希釈物、１０〜０．０１７μＭ）に対するＣｅＭＭＥＣ１に関するＢｒｏｍｏＫｄＥＬＥＣＴアッセイ。（ｃ）使用しなかった。
【図８−２】ブロモドメインタンパク質へのＣｅＭＭＥＣ１とＣｅＭＭＥＣ２の結合の特徴づけ  （ｄ）ＣｅＭＭＥＣ１（１０μＭ）に関するＫｉｎｏｍｅＳｃａｎプロフィール。バブルは、固定化リガンドへの分析キナーゼ結合の阻害のパーセンテージを示す。（ｅ）ＢＲＤ４（１）、ＢＲＤ４（２）、ＢＲＤ９、ＣＲＥＢＢＰ、ＥＰ３００およびＴＡＦ１（２）に対するＣｅＭＭＥＣ１、類似体Ａ１、Ａ２、０５、１０、１３、２４、２５、２６、２７、２９、３３および３９（１０μＭ）に関するＢｒｏｍｏＥＬＥＣＴアッセイ。
【図８−３】ブロモドメインタンパク質へのＣｅＭＭＥＣ１とＣｅＭＭＥＣ２の結合の特徴づけ  （ｆ、ｇ）ＴＡＦ１（緑色）およびＢＲＤ４（マゼンタ色）に対する類似体３０の結合姿勢。（ｈ）ＴＡＦ１への化合物２９の結合、ＢＲＤ４に関して、好適な姿勢を同定できなかった。（ｉ）ＢＲＤ４（１）、ＢＲＤ９、ＣＲＥＢＢＰ、ＥＰ３００、およびＴＡＦ１（２）に対する類似体２９（１０μＭ）に関するＢｒｏｍｏＥＬＥＣＴアッセイ。
【図９−１】ＢＲＤ４とＴＡＦ１との相互作用  （ａ）（対照細胞と比較した）ＴＡＦ１またはＢＲＤ４のｓｈＲＮＡ下方制御を伴ったＲＥＤＳ３細胞における、ＲＴ−ＰＣＲによって評価したＲＦＰ発現の倍率変化；３回の生物学的な反復実験をおこなった（平均±ＳＴＤ）。（ｂ）フラグ−ＢＲＤ４（完全長）を過剰発現するＨＥＫ２９３Ｔまたはフラグ単独からのタンパク質抽出物を使用したフラグ引落し；３回の実験のうちの１つからの代表的な画像。（ｃ）対照、および示した濃度のＣｅＭＭＥＣ１で処理したＴＡＦ１下方制御ＷＴ−ＫＢＭ７のＣｅｌｌＴｉｔｅｒＧｌｏアッセイ（各ポイントを少なくとも三連で実施し、等量のＤＭＳＯを対照として加えた）。
【図９−２】ＢＲＤ４とＴＡＦ１との相互作用（ｄ）示した濃度の（Ｓ）−ＪＱ１、ＣｅＭＭＥＣ１、類似体２９、類似体３０、類似体３２、および類似体３５単独または組み合わせで処理したＴＨＰ１の細胞生存率の低減を表示するマトリクス（各ポイントとも少なくとも二連でおこなった、コピーする、等量のＤＭＳＯを対照として加えた）。
【図９−３】ＢＲＤ４とＴＡＦ１との相互作用  （ｅ）ｄおよび図５ｇのマトリックスに表した処理からの、（Ｓ）−ＪＱ１とＣｅＭＭＥＣ１または示した類似体との間の相乗効果の測定としての微分体積値。
【図１０−１】小分子スクリーニングデータ  この図の補足表１に対する言及は、図１１を指す。
【図１０−２】小分子スクリーニングデータ  この図の補足表１に対する言及は、図１１を指す。
【図１１−１】ヒット化合物に関する生理活性データの概要  Ｒｅｄｎｅｓｓ：２４時間処理後のＲＦＰ陽性細胞の倍率変化。すべての化合物が１０μＭ（値をＤＭＳＯ正規化する）。  αＬＩＳＡ：ＢＲＤ４＿ＢＤ１（第一のブロモドメイン）結合のＰＯＣ（対照に対するパーセンテージ）。すべての化合物が１０μＭ。  「真のヒット」：真のヒットキット（PerkinElmer）を使用したαＬＩＳＡ偽陽性（クエンチング化合物）の識別；「Ｙ」はクエンチング化合物でないことを意味し（真のヒット＝Ｙｅｓ）；「Ｎ」はクエンチング化合物を意味する（真のヒット＝Ｎｏ）。  ＡｎｎＶ＋：４８時間処理後のＡｎｎｅｘｉｎＶ陽性細胞の％。すべての化合物が１０μＭ（値をＤＭＳＯ正規化）。  細胞周期：７２時間処理後の細胞周期表現型。すべての化合物が１０μＭ。  Ｍｙｃ：２４時間処理後のＭｙｃ発現の維持％。すべての化合物が１０μＭ（値をＤＭＳＯ正規化）。  ＮＤ＝測定せず。
【図１１−２】ヒット化合物に関する生理活性データの概要  Ｒｅｄｎｅｓｓ：２４時間処理後のＲＦＰ陽性細胞の倍率変化。すべての化合物が１０μＭ（値をＤＭＳＯ正規化する）。  αＬＩＳＡ：ＢＲＤ４＿ＢＤ１（第一のブロモドメイン）結合のＰＯＣ（対照に対するパーセンテージ）。すべての化合物が１０μＭ。  「真のヒット」：真のヒットキット（PerkinElmer）を使用したαＬＩＳＡ偽陽性（クエンチング化合物）の識別；「Ｙ」はクエンチング化合物でないことを意味し（真のヒット＝Ｙｅｓ）；「Ｎ」はクエンチング化合物を意味する（真のヒット＝Ｎｏ）。  ＡｎｎＶ＋：４８時間処理後のＡｎｎｅｘｉｎＶ陽性細胞の％。すべての化合物が１０μＭ（値をＤＭＳＯ正規化）。  細胞周期：７２時間処理後の細胞周期表現型。すべての化合物が１０μＭ。  Ｍｙｃ：２４時間処理後のＭｙｃ発現の維持％。すべての化合物が１０μＭ（値をＤＭＳＯ正規化）。  ＮＤ＝測定せず。
【図１１−３】ヒット化合物に関する生理活性データの概要  Ｒｅｄｎｅｓｓ：２４時間処理後のＲＦＰ陽性細胞の倍率変化。すべての化合物が１０μＭ（値をＤＭＳＯ正規化する）。  αＬＩＳＡ：ＢＲＤ４＿ＢＤ１（第一のブロモドメイン）結合のＰＯＣ（対照に対するパーセンテージ）。すべての化合物が１０μＭ。  「真のヒット」：真のヒットキット（PerkinElmer）を使用したαＬＩＳＡ偽陽性（クエンチング化合物）の識別；「Ｙ」はクエンチング化合物でないことを意味し（真のヒット＝Ｙｅｓ）；「Ｎ」はクエンチング化合物を意味する（真のヒット＝Ｎｏ）。  ＡｎｎＶ＋：４８時間処理後のＡｎｎｅｘｉｎＶ陽性細胞の％。すべての化合物が１０μＭ（値をＤＭＳＯ正規化）。  細胞周期：７２時間処理後の細胞周期表現型。すべての化合物が１０μＭ。  Ｍｙｃ：２４時間処理後のＭｙｃ発現の維持％。すべての化合物が１０μＭ（値をＤＭＳＯ正規化）。  ＮＤ＝測定せず。
【図１２−１】ＣｅＭＭＥＣ１およびその誘導体に関する生理活性データ  Ｒｅｄｎｅｓｓ（１０μＭにおける％誘導）、ＢＲＤ４＿ＢＤ１（１０μＭにおける％阻害）、ＢＲＤ４＿ＢＤ２（１０μＭにおける％阻害）、ＢＲＤ９（１０μｍにおける％阻害）、ＣＲＥＢＢＰ（１０μＭにおける％阻害）、ＥＰ３００（１０μＭにおける％阻害）、およびＴＡＦ１＿ＢＤ２（１０μＭにおける％阻害）を、ＣｅＭＭＥＣ１およびその誘導体に関して示す。
【図１２−２】ＣｅＭＭＥＣ１およびその誘導体に関する生理活性データ  Ｒｅｄｎｅｓｓ（１０μＭにおける％誘導）、ＢＲＤ４＿ＢＤ１（１０μＭにおける％阻害）、ＢＲＤ４＿ＢＤ２（１０μＭにおける％阻害）、ＢＲＤ９（１０μｍにおける％阻害）、ＣＲＥＢＢＰ（１０μＭにおける％阻害）、ＥＰ３００（１０μＭにおける％阻害）、およびＴＡＦ１＿ＢＤ２（１０μＭにおける％阻害）を、ＣｅＭＭＥＣ１およびその誘導体に関して示す。
【発明を実施するための形態】
【０１６６】
本発明の詳細な説明
本発明は、特に以下の項目に関する：
項目１．
医薬として使用するための、式（Ｉ）の化合物、または医薬的に許容されるその塩、溶媒和物もしくはプロドラッグを提供する。
【化２７】
2019508496.tif 000029
｛式中：
環Ｂは、以下の構造を有する基であり：
【化２８】
2019508496.tif 000030
環原子Ｘ2およびＸ3の一方がＮ（ＲX1）であり、そして、前記環原子Ｘ2およびＸ3のもう一方がＣ（＝Ｏ）であり；
環原子Ｘ1は、Ｎ（ＲX1）、Ｃ（ＲX2）、およびＣ（＝Ｏ）から選択され、そして環原子Ｘ4およびＸ5は、Ｎ（ＲX1）、Ｃ（ＲX3）、およびＣ（＝Ｏ）からそれぞれ独立に選択され；ここで、前記環原子Ｘ1、Ｘ4、およびＸ5の少なくとも１つが、Ｎ（ＲX1）およびＣ（＝Ｏ）と異なり；そして、さらにここで、Ｘ3およびＸ5がＣ（＝Ｏ）であり、Ｘ4がＮ（ＲX1）であり、かつ、Ｘ1がＣ（ＲX2）である場合、Ｘ2はＮ（Ｈ）であり；
それぞれの
【化２９】
2019508496.tif 000031
は独立に、単結合または二重結合であり；ここで、任意の２つの隣接した結合
【化３０】
2019508496.tif 000032
のうちの少なくとも１つは、単結合であり；
各ＲX1は、水素、Ｃ1-5アルキル、−ＣＯ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−アリール、および−（Ｃ0-3アルキレン）−ヘテロアリールから独立に選択され、ここで、前記−（Ｃ0-3アルキレン）−アリール中に含まれるアリール、および前記−（Ｃ0-3アルキレン）−ヘテロアリール中に含まれるヘテロアリールは、それぞれ任意選択で１もしくは複数の基ＲX11で置換され；
ＲX2は、水素、Ｃ1-5アルキル、Ｃ2-5アルケニル、Ｃ2-5アルキニル、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＯＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−ＯＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｓ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ハロゲン、−（Ｃ0-3アルキレン）−（Ｃ1-5ハロアルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ−（Ｃ1-5ハロアルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＦ3、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＮ、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＯ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＨＯ、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯＯＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−Ｏ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−ＮＨ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＯ2−ＮＨ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＯ2−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＯ2−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ−ＳＯ2−（Ｃ1-5アルキル）、および−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）−ＳＯ2−（Ｃ1-5アルキル）から選択され；
２つの基ＲX3は、互いに連結されて、それらが取り付けられた環炭素原子と一緒に、１もしくは複数の基ＲX31で任意選択で置換される５または６員シクリル基を形成するか、または２つの基ＲX3は、水素、Ｃ1-5アルキル、Ｃ2-5アルケニル、Ｃ2-5アルキニル、−ＯＨ、−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−ＯＨ、−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−ＳＨ、−Ｓ（Ｃ1-5アルキル）、−ＮＨ2、−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、ハロゲン、Ｃ1-5ハロアルキル、−Ｏ−（Ｃ1-5ハロアルキル）、−ＣＦ3、−ＣＮ、−ＮＯ2、−ＣＨＯ、−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−ＣＯＯＨ、−ＣＯ−Ｏ−（Ｃ1-5アルキル）、−Ｏ−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−ＣＯ−ＮＨ2、−ＣＯ−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−ＣＯ−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−ＮＨ−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−ＳＯ2−ＮＨ2、−ＳＯ2−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−ＳＯ2−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−ＮＨ−ＳＯ2−（Ｃ1-5アルキル）、および−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）−ＳＯ2−（Ｃ1-5アルキル）からそれぞれ独立に選択され；
各ＲX11は、Ｃ1-5アルキル、Ｃ2-5アルケニル、Ｃ2-5アルキニル、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＯＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−ＯＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｓ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ハロゲン、−（Ｃ0-3アルキレン）−（Ｃ1-5ハロアルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ−（Ｃ1-5ハロアルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＦ3、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＮ、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＯ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＨＯ、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯＯＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−Ｏ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−ＮＨ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＯ2−ＮＨ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＯ2−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＯ2−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ−ＳＯ2−（Ｃ1-5アルキル）、および−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）−ＳＯ2−（Ｃ1-5アルキル）から独立に選択され；
各ＲX31は、Ｃ1-5アルキル、Ｃ2-5アルケニル、Ｃ2-5アルキニル、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＯＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−ＯＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｓ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ハロゲン、−（Ｃ0-3アルキレン）−（Ｃ1-5ハロアルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ−（Ｃ1-5ハロアルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＦ3、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＮ、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＯ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＨＯ、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯＯＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−Ｏ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−ＮＨ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＯ2−ＮＨ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＯ2−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＯ2−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ−ＳＯ2−（Ｃ1-5アルキル）、および−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）−ＳＯ2−（Ｃ1-5アルキル）から独立に選択され；
環Ｂが、アスタリスク（*）で印を付した環炭素原子を介して式（Ｉ）の化合物の残りの部分に取り付けられるか、またはＸ4およびＸ5がそれぞれＣ（ＲX3）であり、かつ、２つの基ＲX3が、互いに連結されて、それらが取り付けられた環炭素原子と一緒に１もしくは複数の基ＲX31で任意選択で置換される５または６員シクリル基を形成する場合、環Ｂはまた、前記５または６員シクリル基の任意の炭素環原子を介して、式（Ｉ）の化合物の残りの部分に取り付けられてもよく；
環Ａは、アリールまたはヘテロアリールであり、ここで、前記アリールと前記ヘテロアリールは、１もしくは複数の基ＲAでそれぞれ任意選択で置換され；
各ＲAは、Ｃ1-5アルキル、Ｃ2-5アルケニル、Ｃ2-5アルキニル、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＯＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−ＯＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｓ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ハロゲン、−（Ｃ0-3アルキレン）−（Ｃ1-5ハロアルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ−（Ｃ1-5ハロアルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＦ3、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＮ、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＯ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＨＯ、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯＯＨ、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−Ｏ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−ＮＨ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＣＯ−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）−ＣＯ−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＯ2−ＮＨ2、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＯ2−ＮＨ（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＳＯ2−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−ＮＨ−ＳＯ2−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｎ（Ｃ1-5アルキル）−ＳＯ2−（Ｃ1-5アルキル）、−（Ｃ0-3アルキレン）−シクロアルキル、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ−シクロアルキル、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−シクロアルキル、−（Ｃ0-3アルキレン）−ヘテロシクロアルキル、−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ−ヘテロシクロアルキル、および−（Ｃ0-3アルキレン）−Ｏ（Ｃ1-5アルキレン）−ヘテロシクロアルキルから独立に選択され；
Ｌは、−ＣＯ−Ｎ（ＲL1）−、−Ｎ（ＲL1）−ＣＯ−、−ＣＯ−Ｏ−、−Ｏ−ＣＯ−、−Ｃ（＝Ｎ−ＲL2）−Ｎ（ＲL1）−、−Ｎ（ＲL1）−Ｃ（＝Ｎ−ＲL2）−、−Ｃ（＝Ｓ）−Ｎ（ＲL1）−、−Ｎ（ＲL1）−Ｃ（＝Ｓ）−、−Ｎ（ＲL1）−ＣＯ−Ｎ（ＲL1）−、−Ｏ−ＣＯ−Ｎ（ＲL1）−、−Ｎ（ＲL1）−ＣＯ−Ｏ−、−Ｎ（ＲL1）−Ｃ（＝Ｎ−ＲL2）−Ｎ（ＲL1）−、−Ｏ−Ｃ（＝Ｎ−ＲL2）−Ｎ（ＲL1）−、−Ｎ（ＲL1）−Ｃ（＝Ｎ−ＲL2）−Ｏ−、−Ｓ−Ｃ（＝Ｎ−ＲL2）−Ｎ（ＲL1）−、−Ｎ（ＲL1）−Ｃ（＝Ｎ−ＲL2）−Ｓ−、−Ｎ（ＲL1）−Ｃ（＝Ｓ）−Ｎ（ＲL1）−、−Ｏ−Ｃ（＝Ｓ）−Ｎ（ＲL1）−、−Ｎ（ＲL1）−Ｃ（＝Ｓ）−Ｏ−、−Ｓ−ＣＯ−Ｎ（ＲL1）−、および−Ｎ（ＲL1）−ＣＯ−Ｓ−から選択され；
各ＲL1は、水素およびＣ1-5アルキルから独立に選択され；
各ＲL2は、水素、Ｃ1-5アルキル、−ＣＮ、および−ＮＯ2から独立に選択され；
ｎは、０または１であり；そして
ｍは、０または１である｝。
【０１６７】
項目２．
前記Ｘ2がＣ（＝Ｏ）であり、かつ、前記Ｘ3がＮ（ＲX1）である、項目１に記載の使用のための化合物。
【０１６８】
項目３．
前記Ｘ2がＮ（ＲX1）であり、かつ、前記Ｘ3がＣ（＝Ｏ）である、項目１に記載の使用のための化合物。
【０１６９】
項目４．
前記Ｘ1がＣ（ＲX2）であり、かつ、前記Ｘ4およびＸ5がそれぞれＣ（ＲX3）である、項目１〜３のいずれか１項に記載の使用のための化合物。
【０１７０】
項目５．
前記部分−（ＣＨ2）n−Ｌ−（ＣＨ2）m−に結合する環原子Ｘ1と環炭素原子との間の結合
【化３１】
2019508496.tif 000033
が二重結合であり、部分−（ＣＨ2）n−Ｌ−（ＣＨ2）m−に結合する前記環炭素原子と環原子Ｘ5との間の結合
【化３２】
2019508496.tif 000034
が単結合であり、かつ、環原子Ｘ4とＸ5との間の結合
【化３３】
2019508496.tif 000035
が二重結合である、項目４に記載の使用のための化合物。
【０１７１】
項目６．
前記各ＲX1が、水素およびＣ1-5アルキルから独立に選択される、項目１〜５のいずれか１項に記載の使用のための化合物。
【０１７２】
項目７．
前記各ＲX1がメチルである、項目１〜６のいずれか１項に記載の使用のための化合物。
【０１７３】
項目８．
前記ＲX2が、水素、Ｃ1-4アルキル、−ＯＨ、−Ｏ（Ｃ1-4アルキル）、−ＮＨ2、−ＮＨ（Ｃ1-4アルキル）、−Ｎ（Ｃ1-4アルキル）（Ｃ1-4アルキル）、ハロゲン、−ＣＦ3、および−ＣＮから選択される、項目１〜７のいずれか１項に記載の使用のための化合物。
【０１７４】
項目９．
前記環Ｂが、アスタリスクで印を付した環炭素原子を介して式（Ｉ）の化合物の残りの部分に取り付けられる、項目１〜８のいずれか１項に記載の使用のための化合物。
【０１７５】
項目１０．
前記Ｘ4およびＸ5がそれぞれＣ（ＲX3）であり、かつ、前記２つの基ＲX3が、互いに連結されて、それらが取り付けられた環炭素原子と一緒に、５または６員シクリル基を形成し、そして、前記環Ｂが、前記５または６員シクリル基の任意の炭素環原子を介して、式（Ｉ）の化合物の残りの部分に取り付けられる、項目１〜８のいずれか１項に記載の使用のための化合物。
【０１７６】
項目１１．
前記２つの基ＲX3が、互いに連結されて、それらが取り付けられた環炭素原子と一緒に、５または６員シクロアルキル基、５または６員シクロアルケニル基、またはフェニル基を形成し、ここで、前記シクロアルキル基、前記シクロアルケニル基および前記フェニル基が、１もしくは複数の基ＲX31で任意選択で置換される、項目１〜１０のいずれか１項に記載の使用のための化合物。
【０１７７】
項目１２．
前記環Ａが、１，４−ベンゾジオキサニル、ベンゾキサニル、１，３−ベンゾジオキソラニル、ベンゾキソラニル、１，５−ベンゾジオキセパニル、ベンゾジオキセパニル、フェニル、および５または６員の単環式ヘテロアリールから選択され、ここで、前記１，４−ベンゾジオキサニル、前記ベンゾキサニル、前記１，３−ベンゾジオキソラニル、前記ベンゾキソラニル、前記１，５−ベンゾジオキセパニル、前記ベンゾジオキセパニル、前記フェニル、および前記ヘテロアリールが、１もしくは複数の基ＲAで任意選択で置換される、項目１〜１１のいずれか１項に記載の使用のための化合物。
【０１７８】
項目１３．
前記環Ａが、１，４−ベンゾジオキサン−６−イル、１−ベンゾキサン−６−イル、および４−メトキシフェニルから選択される、項目１〜１２のいずれか１項に記載の使用のための化合物。
【０１７９】
項目１４．
前記Ｌが、−ＣＯ−Ｎ（ＲL1）−または−Ｎ（ＲL1）−ＣＯ−である、項目１〜１３のいずれか１項に記載の使用のための化合物。
【０１８０】
項目１５．
前記Ｌが−Ｎ（ＲL1）−ＣＯ−であり、ここで、前記−Ｎ（ＲL1）−ＣＯ−基が、その−Ｎ（ＲL1）−基を介して、部分−（ＣＨ2）n−に結合され、およびその−ＣＯ−基を介して、部分−（ＣＨ2）m−に結合される、項目１〜１４のいずれか１項に記載の使用のための化合物。
【０１８１】
項目１６．
前記Ｌが−ＣＯ−Ｎ（ＲL1）−であり、ここで、前記−ＣＯ−Ｎ（ＲL1）−が、その−ＣＯ−を介して、部分−（ＣＨ2）n−に結合され、およびその−Ｎ（ＲL1）−を介して、部分−（ＣＨ2）m−に結合される、項目１〜１４のいずれか１項に記載の使用のための化合物。
【０１８２】
項目１７．
前記ＲL1が水素である、項目１４〜１６のいずれか１項に記載の使用のための化合物。
【０１８３】
項目１８．
前記ｎが０である、項目１４〜１７のいずれか１項に記載の使用のための化合物。
【０１８４】
項目１９．
前記ｍが０である、項目１４〜１８のいずれか１項に記載の使用のための化合物。
【０１８５】
項目２０．
前記化合物が、以下の式のいずれか１つの化合物、または医薬的に許容されるその塩、溶媒和物もしくはプロドラッグである、項目１に記載の使用のための化合物：
【化３４】
2019508496.tif 000036
【化３５】
2019508496.tif 000037
【化３６】
2019508496.tif 000038
【化３７】
2019508496.tif 000039
【化３８】
2019508496.tif 000040
【０１８６】
項目２１．
項目１〜２０のいずれか１項に記載の化合物および医薬的に許容される賦形剤を含む医薬組成物。
項目２２．
癌の治療または予防における使用のための、項目１〜２０のいずれか１項に記載の化合物または項目２１に記載の医薬組成物。
項目２３．
癌の治療または予防のための治療薬の調製における、項目１〜２０のいずれか１項に記載の化合物の使用。
【０１８７】
項目２４．
癌を治療または予防する方法であって、項目１〜２０のいずれか１項に記載の化合物または項目２１に記載の医薬組成物を、前記疾患の治療を必要としている対象に投与することを含む方法。
【０１８８】
項目２５．
項目２２に記載の使用のための化合物、または項目２２に記載の使用のための医薬組成物、または項目２３に記載の使用、または項目２４に記載の方法、ここで、前記癌が、前立腺癌腫、乳癌、急性骨髄性白血病、多発性骨髄腫、神経膠芽腫、およびＮＵＴ正中線癌腫から選択される。
【０１８９】
項目２６．
項目１〜２０、２２または２５のいずれか１項に記載の使用のための化合物、または項目２２〜２５のいずれか１項に記載の使用のための医薬組成物、または項目２３または２５に記載の使用、または項目２４または２５に記載の方法、ここで、治療すべき対象がヒトである。
【０１９０】
項目２７．
項目１〜２０、２２、２５または２６のいずれか１項に記載の使用のための化合物、または項目２２、２５または２６のいずれか１項に記載の使用のための医薬組成物、または
項目２３、２５または２６のいずれか１項に記載の使用、または項目２４〜２６のいずれか１項に記載の方法；ここで、前記式（Ｉ）の化合物が、ＢＲＤ４阻害剤と組み合わせて投与される。
【０１９１】
項目２８．
項目２７に記載の使用のための化合物、または項目２７に記載の使用のための医薬組成物、または項目２７に記載の使用、または項目２７に記載の方法、ここで、前記ＢＲＤ４阻害剤が、ＣｅＭＭＥＣ２、（Ｓ）−ＪＱ１、Ｉ−ＢＥＴ１５１、Ｉ−ＢＥＴ７６２、ＰＦ−１、ブロモスポリン、ＯＴＸ−０１５、ＴＥＮ−０１０、ＣＰＩ−２０３、ＣＰＩ−０６１０、ＲＶＸ−２０８、ＢＩ２５３６、ＴＧ１０１３４８、ＬＹ２９４００２、またはこれらの剤のいずれか１つの医薬的に許容される塩、溶媒和物もしくはプロドラッグである。
【０１９２】
項目２９．
項目２７に記載の使用のための化合物、または項目２７に記載の使用のための医薬組成物、または項目２７に記載の使用、または項目２７に記載の方法、ここで、前記ＢＲＤ４阻害剤が、以下の構造を有する化合物、または医薬的に許容されるその塩、溶媒和物もしくはプロドラッグである：
【化３９】
2019508496.tif 000041
【０１９３】
項目３０．
ＴＡＦ１阻害剤としての、項目１〜２０のいずれか１項に記載の化合物のインビトロにおける使用。
【０１９４】
項目３１．
以下の式のいずれか１つを有する化合物、または医薬的に許容されるその塩、溶媒和物もしくはプロドラッグ：
【化４０】
2019508496.tif 000042
【化４１】
2019508496.tif 000043
【化４２】
2019508496.tif 000044
【０１９５】
項目３２．
治療法において使用するためのＴＡＦ１阻害剤であって、ＢＲＤ４阻害剤と組み合わせて投与される、前記ＴＡＦ１阻害剤。
項目３３．
治療法において使用するためのＢＲＤ４阻害剤であって、ＴＡＦ１阻害剤と組み合わせて投与される、前記ＢＲＤ４阻害剤。
項目３４．
癌の治療または予防において使用するためのＴＡＦ１阻害剤であって、ＢＲＤ４阻害剤と組み合わせて投与される、前記ＴＡＦ１阻害剤。
【０１９６】
項目３５．
癌の治療または予防において使用するためのＢＲＤ４阻害剤であって、、ＴＡＦ１阻害剤と組み合わせて投与される、前記ＢＲＤ４阻害剤。
項目３６．
ＴＡＦ１阻害剤およびＢＲＤ４阻害剤を含む医薬組成物。
項目３７．
治療法において使用するための、項目３６に記載の医薬組成物。
項目３８．
癌の治療または予防において使用するための、項目３６に記載の医薬組成物。
【０１９７】
項目３９．
癌の治療または予防のための医薬の調製におけるＴＡＦ１阻害剤およびＢＲＤ４阻害剤の使用。
【０１９８】
項目４０．
癌を治療または予防する方法であって、ＴＡＦ１阻害剤をＢＲＤ４阻害剤と組み合わせて、前記疾患の治療を必要とするの対象に投与することを含む、方法。
項目４１．
項目３２または３４に記載の使用のためのＴＡＦ１阻害剤、または項目３３または３５に記載の使用のためのＢＲＤ４阻害剤、または項目３６に記載の医薬組成物、項目３７または３８に記載の使用のための医薬組成物、または項目３９に記載の使用、または項目４０に記載の方法；ここで、前記ＴＡＦ１阻害剤は、項目１〜２０のいずれか１項に記載の化合物である。
【０１９９】
項目４２．
項目３２、３４または４１のいずれか１項に記載の使用のためのＴＡＦ１阻害剤、項目３３、３５または４１のいずれか１項に記載の使用のためのＢＲＤ４阻害剤、または項目３６または４１に記載の医薬組成物、または項目３７、３８または４１のいずれか１項に記載の使用のための医薬組成物、または項目３９または４１に記載の使用、または項目４０または４１に記載の方法、前記ＢＲＤ４阻害剤は、ＣｅＭＭＥＣ２、（Ｓ）−ＪＱ１、Ｉ−ＢＥＴ１５１、Ｉ−ＢＥＴ７６２、ＰＦ−１、ブロモスポリン、ＯＴＸ−０１５、ＴＥＮ−０１０、ＣＰＩ−２０３、ＣＰＩ−０６１０、ＲＶＸ−２０８、ＢＩ２５３６、ＴＧ１０１３４８、ＬＹ２９４００２、またはこれらの剤のいずれか１つの医薬的に許容される塩、溶媒和物もしくはプロドラッグである。
【０２００】
項目４３．
項目３４、４１または４２のいずれか１項に記載の使用のためのＴＡＦ１阻害剤、または項目３５、４１または４２のいずれか１項に記載の使用のためのＢＲＤ４阻害剤、または項目３８、４１または４２のいずれか１項に記載の使用のための医薬組成物、または項目３９、４１または４２のいずれか１項に記載の使用、または項目４０〜４２のいずれか１項に記載の方法、ここで、前記癌は、前立腺癌腫、乳癌、急性骨髄性白血病、多発性骨髄腫、神経膠芽腫、およびＮＵＴ正中線癌腫から選択される。
【０２０１】
本発明をこれから、以下の実施例を参照して説明する。これらの実施例は単に説明のためだけのものであり、本発明の範囲を限定するものと解釈されるものではない。
【実施例】
【０２０２】
実施例１
序論
ｐａｎ−ＢＥＴ阻害剤であるＪＱ１（Filippakopoulos et al., 2010）およびＩ−ＢＥＴ−１５１（Seal et al., 2012）などの、癌モデルにおけるＢＲＤ４の２つのブロモドメインを標的化するように設計された化合物の無視できない有効性は、臨床試験を現在受けているこれらのタンパク質相互作用モジュール向けの候補医薬の開発に拍車をかけた（Filippakopoulos et al., 2014）。多数の競合している臨床プログラムにもかかわらず、現在利用可能なＢＲＤ４阻害剤の機構および化学的多様性は限られている（Filippakopoulos et al., Cell, 2012; Filippakopoulos et al., 2014）。さらに、ＢＲＤ４機能に影響を及ぼす因子群に関する詳細な理解を欠いている。
【０２０３】
本発明者らは、ＢＲＤ４依存性の不活性クロマチン状態のモジュレーター向けの高度に多様な化合物空間（chemical space）の不偏な探索を可能にするストラテジーを設計することを目指す。明白な単一対立遺伝子の遺伝的構造を可能にする、ヒト一倍体細胞株ＫＢＭ７（Andersson et al., 1995）のバックグラウンドにおいて、ＲＦＰ（赤色蛍光タンパク質）遺伝子は、ＢＲＤ４阻害によって特異的に活性化されるヘテロクロマチン遺伝子座に組み込まれた。次に、８９，３５５個の小分子に関する高度に多様な化合物ライブラリーが選択され、そして、化合物が、ＲＦＰ発現に応答するそれらの能力について選択された。このライブラリー中のすべてのＢＥＴ阻害剤を含めた、多くのＢＲＤ４阻害剤の効率的な同定が、その実験ストラテジーの正当性を立証した。重要なことには、その設定は、ＲＦＰ発現を効率的に誘発するが、ＢＲＤ４に結合しない小分子の識別を可能にし、そして、作用の新規機序を示した。以下で詳細に述べるように、本発明者らは、転写開始因子ＴＡＦ１の第二のブロモドメインに結合することによって機能した斯かる化合物の１つ、ＣｅＭＭＥＣ１を示すことができた。この新しい治療薬およびその誘導体の特性の調査は、本発明者らが（実施例１にも記載のように、ＢＲＤ４依存性癌細胞の効果的な殺滅をもたらす）ＴＡＦ１とＢＲＤ４の標的化の間の強い相乗効果を実証することを可能にした。
【０２０４】
材料と方法
細胞培養とトランスフェクション
ヒト慢性骨髄性白血病細胞株ＫＢＭ７を、１０％のウシ胎仔血清（ＦＢＳ；Gibco）、１００単位／ｍｌのストレプトマイシン、およびペニシリン（両方ともGibco製）を補ったIscove’s変法ダルベッコ培地（ＩＭＤＭ、Gibco）中で培養した。ヒト胎児腎臓細胞株ＨＥＫ２９３Ｔを、１０％のＦＢＳ、１００単位／ｍｌのストレプトマイシン、およびペニシリンを補ったダルベッコ変法イーグル培地（ＤＭＥＭ、Gibco）中で培養した。末梢血ヒト急性単球性白血病細胞株ＴＨＰ１および腺癌（非小肺癌）細胞株Ｈ２３を、１０％のＦＢＳ、１００単位／ｍｌのストレプトマイシン、およびペニシリンを補ったＲＰＭＩ−１６４０（Roswell Park Memorial Institute、Gibco）中で培養した。言及した細胞株はすべて、３７℃にて、５％のＣＯ2雰囲気中でインキュベートした。
【０２０５】
ＨＥＫ２９３Ｔ細胞を、製造業者の取扱説明書にしたがって、Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ２０００（Invitrogen）で形質移入した。
【０２０６】
使用したプラスミドは、以下のとおりであった：
ＬＺＲＳ−ＲＦＰ−ｉｒｅｓ−ＺＥＯ
ｐＦｌａｇ−ＣＭＶ２−Ｂｒｄ４（Addgene plasmid # 22304）。
【０２０７】
生細胞イメージングと画像定量化
細胞を、透明な平底９６ウェルまたは３８４ウェルプレート（Corning）上に播種し、特定条件のために示した化合物によって処理した。生細胞イメージング画像を、Operetta High Content Screening System（PerkinElmer）、２０×対物レンズ、および非共焦モードで撮影した。
【０２０８】
ＲＦＰ定量化を、使用した特定の細胞株の核直径範囲（例えば、ＫＢＭ７の核直径１３μｍ）に合わせた、核検出および分析のためのHarmonyソフトウェア（PerkinElmer）を使用しておこなった。ＲＦＰ陽性核だけを検出し、カウントした。
【０２０９】
アポトーシス細胞を、製造業者の取扱説明書にしたがってAnnexin V-FITC Apoptosis検出キット（Abcam）を使用して検出した。アポトーシス定量化を、私用した特定の細胞株の細胞形状および核直径範囲に合わせた、核および細胞質の検出および分析のためのHarmonyソフトウェア（PerkinElmer）でおこなった。
【０２１０】
ウエスタンブロット法
タンパク質を、ＳＤＳ泳動バッファー（５０ｍＭのＴｒｉｓ、３８０ｍＭのグリシン、７ｍＭのＳＤＳ）を用いてポリアクリルアミドゲルで分離し、ニトロセルロースブロッティング膜に移した。すべての膜を、ブロッキングバッファー（ＴＢＳＴ（Ｔｗｅｅｎを伴ったＴｒｉｓ緩衝生理食塩水：５０ｍＭのＴｒｉｓ（トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン）、１５０ｍＭのＮａＣｌ、０．０５％（ｖ／ｖ）のＴｗｅｅｎ２０）、ｐＨ７．６に調整）中の５％（ｍ／ｖ）の粉ミルク（BioRad））でブロッキングした。タンパク質を、ＢＲＤ４（ab128874、１：１０００、Abcam）、アクチン（ab16039、１：１０００、Abcam）、ｃ−ＭＹＣ（ab32072、１：１０００、Abcam）、Ｆｌａｇ（F1804、１：１０００、Sigma）、ＢＲＤ９（ab49313、１：１０００、Abcam）、およびＴａｆ１（sc-735、１：１０００、Santa Cruz）に対する抗体で探査し、ＨＲＰ（西洋ワサビペルオキシダーゼ）複合ロバ抗ウサギＩｇＧ抗体（ab16284、１：５０００、Abcam）またはロバ抗マウスＩｇＧ抗体（Pierce）によって検出し、そして、提供したプロトコールにしたがって、Pierce ECLウエスタンブロッティング基質（Amersham）を用いて可視化した。
【０２１１】
ＲＮＡ抽出ＰＣＲとＱＰＣＲ
ＲＮＡ抽出を、製造業者のプロトコールにしたがって、TRIzol試薬（Life Technologies）を用いておこない、そして、逆転写（ＲＴ）を、標準プロトコールに従って、High Capacity cDNA Reverse Transcription Kit（Applied Biosystems）を使用しておこなった。
【０２１２】
標準的なＰＣＲを、標準的な条件にしたがって、Pfu DNAポリメラーゼ（Fermenta）を使用しておこなった。
【０２１３】
使用した標準ＰＣＲプライマー：
ＷＴ−ＫＢＭ７ゲノム（Sigma；フォワード５’−ＣＡＧＴＴＣＣＧＣＴＡＣＡＣＧＴＧＣＴＧ、リバース５’−ＣＧＴＧＧＡＣＣＣＴＴＡＡＡＧＡＧＡＡＧＧＴ）
ＲＥＤＳ３ゲノム（Sigma；フォワード５’−ＣＡＧＴＴＣＣＧＣＴＡＣＡＣＧＴＧＣＴＧ、リバース５’−ＧＣＧＣＡＴＧＡＡＣＴＣＣＴＴＧＡＴＧＡＣ）
インスリン＿プロモーター（Sigma；フォワード５’−ＣＴＣＴＣＣＴＴＧＡＧＡＴＧＴＴＡＡＴＧＴＧＧＣＴ、リバース５’−ＣＡＣＡＣＧＧＡＡＧＡＴＧＡＧＧＴＣＣＧＡＧＴＧＧ）
【０２１４】
ＱＰＣＲを、製造業者のプロトコールに記載のPower SYBR Green Masterミックス（Invitrogen）を使用しておこなった。
【０２１５】
使用したＱＰＣＲプライマー：
ＢＲＤ４（Sigma；フォワード５’−ＣＡＧＧＡＧＧＧＴＴＧＴＡＣＴＴＡＴＡＧＣＡ、リバース５’−ＣＴＡＣＴＧＴＧＡＣＡＴＣＡＴＣＡＡＧＣＡＣ）
ｃ−ＭＹＣ（Sigma；フォワード５’−ＧＡＡＧＧＴＧＡＴＣＣＡＧＡＣＴＣＴＧＡＣＣＴ、リバース５’−ＣＴＴＣＴＣＴＣＣＧＴＣＣＴＣＧＧＡＴＴＣＴ）
アクチン（Sigma；フォワード５’−ＡＴＧＡＴＧＡＴＡＴＣＧＣＣＧＣＧＣＴＣ、リバース５’−ＣＣＡＣＣＡＴＣＡＣＧＣＣＣＴＧＧ）
ＢＲＤ３（Sigma；フォワード５’−ＡＡＧＡＡＧＡＡＧＧＡＣＡＡＧＧＡＧＡＡＧＧ、リバース５’−ＣＴＴＣＴＴＧＧＣＡＧＧＡＧＣＣＴＴＣＴ）
ＴＡＦ１（Sigma；フォワード５’−ＴＧＣＣＣＡＧＧＡＧＡＴＴＧＴＧＡＡＣＧ、リバース５’−ＧＧＣＴＴＡＧＣＣＴＧＡＧＧＣＧＴＧ）
ＣＲＥＢＰ（Sigma；フォワード５’−ＡＧＣＡＧＣＡＧＣＴＧＧＴＴＣＴＡＣＴＧ、リバース５’−ＣＡＣＡＡＴＧＧＧＣＡＡＣＴＴＧＧＣＡＧ）
ＥＰ３００（Sigma；フォワード５’−ＧＣＡＧＴＧＴＧＣＣＡＡＡＣＣＡＧＡＴＧ、リバース５’−ＣＡＴＡＧＣＣＣＡＴＡＧＧＣＧＧＧＴＴＧ）
ＳＴＸ２（Sigma；フォワード５’−ＧＧＣＡＡＧＡＡＧＧＡＡＡＴＴＧＡＴＧＴＴＣＡ、リバース５’−ＡＧＡＣＧＴＴＣＧＧＴＴＧＴＧＣＴＴＣＴ）
ＲＡＮ（Sigma；フォワード５’−ＧＡＧＡＡＧＡＡＣＣＡＣＣＴＴＧＧＧＴＧＴ、リバース５’−ＴＣＣＡＣＣＧＡＡＴＴＴＣＴＣＣＴＧＧＣ）
ＲＦＰ（Sigma；フォワード５’−ＧＧＧＡＧＣＧＣＧＴＧＡＴＧＡＡＣＴＴＣ、リバース５’−ＧＧＡＡＧＴＴＣＡＣＧＣＣＧＡＴＧＡＡＣ）
【０２１６】
リアルタイム増幅の結果物を、内因性ハウスキーピング遺伝子であるアクチンまたはＧＡＰＤＨに対して正規化した。相対量を、比較ＣＴ（サイクル閾値）法（ΔΔＣＴ法）を使用して計算した。
【０２１７】
細胞周期アッセイとセルソーティング
細胞周期アッセイのために、細胞を、７０％のエタノールで２４時間固定し、ＰＢＳ／０．１％Ｔｗｅｅｎで洗浄し、そして、リボヌクレアーゼと共に２０分間インキュベートした。核を、５μｇ／ｍｌのＰＩ（ヨウ化プロピジウム、Sigma）で１０分間染色し、その後、ＦＡＣＳ分析（BD FACSCalibur Flow Cytometer）した。
【０２１８】
ＲＦＰ陽性／陰性セルソーティングを、FACSAria（BD Biosciences）ソーターを使用しておこなった。陽性／陰性ＲＦＰ集団のためのゲートを、適当なＲＦＰ陽性／陰性対照を使用しておこなった。ＲＦＰ陽性細胞（１％、強陽性集団）を、感染の４８時間後に０．５μＭの（Ｓ）−ＪＱ１の存在下で選別した。陰性集団を、第一のソーティングの７２時間後に（Ｓ）−ＪＱ１の不存在で選別した（０．７％、陰性、二重選別単一クローン）。処理の時のみＲＦＰを発現するそれらの能力を立証するために、ＲＦＰ陰性の二重選別クローンを培養し、そして、０．５μＭの（Ｓ）−ＪＱ１で数回処理した。
【０２１９】
ＦＩＳＨアッセイ
ＲＦＰ特異的プローブ（ＲＦＰプローブ）を、ＲＦＰ特異的プライマー（Sigma；フォワード５’−ＣＧＧＴＴＡＡＡＧＧＴＧＣＣＧＴＣＴＣＧ、リバース５’−ＡＧＧＣＴＴＣＣＣＡＧＧＴＣＡＣＧＡＴＧ）を使用して実施したＰＣＲにかけ、そして、ｄｉｇ−ｄＵＴＰ（DIG Nick Translation Mix、Roche）を使用して標識した。
【０２２０】
簡単に言えば、ハイブリダイゼーション前に、スライドを、ＰＢＳ中の３％ パラホルムアルデヒド（Merck）で１０分間固定し、ＰＢＳ中の０．５％トリトン（Sigma）で５分間透過処理し、その後すぐに、エタノール系列（７０％、８５％、および１００％）に通した。変性を、８０℃にて３０分間、核とプローブに対して同時に、２×ＳＳＣバッファー（クエン酸ナトリウム塩類バッファー：０．３ＭのＮａＣｌ、３０ｍＭのクエン酸ナトリウム）中の５０％ホルムアミド（Sigma）でおこなった。ハイブリダイゼーションを、３７℃にて湿度暗室内で一晩おこなった。スライドを、５０％ホルムアミド／２×ＳＳＣバッファリングで３回、そして、５０％ ２×ＳＳＣバッファー（ともに室温）であと３回洗浄し、Anti Digoxigenin Fluorescein（Ｆａｂフラグメント、Roche）と共に室温にて１時間インキュベートし、そして、AlexaFluor488 IgG Fraction Monoclonal Mouse Anti-fluorescein（Jackson Laboratory）を用いて検出した。最終的に、核を、４’，６−ジアミジノ−２−フェビル−インドール（ＤＡＰＩ、Sigma）を用いて対比染色した。画像を、Leica DMI6000b倒立型共焦点システムおよび６３×１．３０ACS Apoレンズを使用して撮影し、Leica LAS AFソフトウェア（Leica Microsystems）およびFiji（ImageJ）を使用して編集した。
【０２２１】
ＧＳＴタグ付与ＢＲＤ４のタンパク質発現
ＧＳＴ−ＢＲＤ４を抽出し、ＢＬ２１（ＤＥ３）Ｅ．コリ（E.coli）細胞（New England BioLabs）から精製し、そして、p5068 pGEX-6P-1（ＧＳＴタグを伴った完全長ＢＲＤ４；Addgene）を用いてヒートショック形質転換した。形質転換細胞を、アンピシリン１００ｍｇ／ｍｌが入ったＬＢ寒天プレートに植え付けた。１つのコロニーを選択し、３７℃にて振盪機（２５０ｇ）内のＬＢ培地（アンピシリン１００ｍｇ／ｍｌ）中で、ＯＤ（光学濃度）値が６００ｎｍにて０．８に達するまで培養した。イソプロピル−β−Ｄ−チオガラクトピラノシド（ＩＰＴＧ；Sigma）を０．３ｍＭの終濃度まで加え、培養物を３７℃にてさらに３時間培養した。細胞を、遠心分離（４℃にて１５分間６０００ｇ）によって採収し、２．５ｍｇ／ｍｌのリゾチーム（Fluka）、０．１ｍｇ／ｍｌのＤＮａｓｅＩ（Roche）、５ｍＭのβ−メルカプトエタノール、および適当な量のプロテアーゼ阻害剤カクテル（Roche）を含有する冷たい溶解バッファー（２０ｍＭのＴｒｉｓ ＨＣｌ ｐＨ７．５、０．５ＭのＮａＣｌ、５ｍＭのＥＤＴＡ、１％のＩｇｅｐａｌ）中に再懸濁した。細胞を、氷上でのゆるやかな超音波処理（２サイクル、１０秒間）によって破壊し、遠心分離した（間９０００ｇ、４℃にて２０分）。ＧＳＴタグを担持するＢＲＤ４タンパク質を、グルタチオンセファロース４Ｂビーズ（GE Healthcare）を使用して天然条件下で精製した。ＧＳＴタグ付与タンパク質を、溶出バッファー（１０ｍＭのグルタチオン、５０ｍＭのＴｒｉｓ、ｐＨ８．０、および適当な量のプロテアーゼ阻害剤カクテル）で溶出した。タンパク質調製物の純度を、還元条件下、１０％のポリアクリルアミドゲルでのＳＤＳ−ＰＡＧＥによって評価した。
【０２２２】
αＬＩＳＡアッセイ
Amplified Luminescent Proximity Homogenousアッセイ（αＬＩＳＡｃ）を、ＢＲＤ４と同定された小分子との直接相互作用を調査するのに使用される均質、かつ、化学発光ベースの方法であり、その結果、直接的ＢＲＤ４阻害剤のＩＣ50を測定する。
【０２２３】
簡単に言えば、このアッセイでは、ビオチン化ヒストンペプチド基質を、ストレプトアビジン結合ドナービーズによって捕獲した。ＧＳＴタグ付与ブロモドメインは、アクセプタビーズと複合化した抗ＧＳＴ抗体によって認識され、そして、結合される。阻害剤の不存在下、ブロモドメインはヒストンペプチド基質に結合する。ドナービーズの励起（６８０ｎｍの波長）は、アクセプタビーズのエネルギー移動カスケードを引き起こす一重項酸素分子（1Ｏ2）の放出を引き起こし、６１５ｎｍにおける発光の鋭いピークをもたらす。シグナル（αカウント）の事象は、相互作用パートナーが近接（＜２００ｎｍ）状態にあるときにだけ起こり得る。ヒストン結合部位をブロックする化合物（阻害剤）の存在が、発光の低下をもたらす。
【０２２４】
αＬＩＳＡを、製造業者のプロトコールに従って、ＢＲＤ４（ＢＤ１）阻害剤スクリーニングキット（BPS Bioscience）とＢＲＤ４（ＢＤ２）阻害剤スクリーニングキット（BPS Bioscience）を使用してＢＲＤ４の両方のブロモドメインについておこなった。ＢＬ２１細胞から精製したＧＳＴ完全長ＢＲＤ４のために、先に報告したＢＤ１およびＢＤ２阻害剤スクリーニングキットからのアセチル化基質の混合物を使用した。
【０２２５】
化合物を、二連で１０μＭの最終的なアッセイ濃度にて試験した。ＩＣ50値を決定するために、試験阻害剤の二倍の段階希釈（１２ポイント；５０μＭ〜０．０２μＭ）を調製した。反応を、２種類のブロモドメイン（ＢＤ１またはＢＤ２）の一方、またはＧＳＴ完全長ＢＲＤ４を付加することによって開始した。３０分後、ＧＳＨ（グルタチオン）アクセプタビーズ（PerkinElmer）を加え、３０分間のさらなるインキュベーション時間後に、ストレプトアビジン複合化ドナービーズ（PerkinElmer）を加えた。αカウントを、EnVision2104Multilabel Reader（PerkinElmer）によって読み取った。
【０２２６】
化合物スクリーニング
ＲＥＤＳ３細胞を、化合物ライブラリー（８９，３５５種類のさまざまな化合物）で処理した。Operetta High Content Screening System（PerkinElmer）、２０×対物レンズ、および非共焦モードで検出したＲＦＰ蛍光の増大を、読み出す場合に使用した。
【０２２７】
簡単に言えば、スクリーニングを、それぞれ１）一次スクリーニング、２）追跡調査、および３）バリデーションと呼ばれる３つのパートに分割した。一次スクリーニングの間に、ＲＥＤＳ３細胞を、１０μＭのすべての化合物で処理し、そして、２４時間後のＲＦＰ発現を誘導するそれらの能力を評価するために、生細胞イメージング写真を撮影した。この一次スクリーニングから、１，２８６種類の小分子をヒットとして選択し、そして、自発蛍光または毒性の化合物を除外するために、ＲＥＤＳ３およびＷＴ−ＫＢＭ７を、３点の用量応答で処理する追跡調査パートにおいて再スクリーニングした。８０種類の小分子をヒットとして選択し、そして、最良の真のヒット（時間および用量依存的ＲＦＰ発現／自発螢光なし）を慎重に選択するために、８点の用量（２倍希釈、１００μＭから開始）応答および３点のタイムコース（２４／４８／７２時間）でＷＴ−ＫＢＭ７およびＲＥＤＳ３を処理するのに使用した。ＵＰＬＣ−ＭＳ分析法を実施して、選択した小分子の純度および正確な質量を確認した；最終的に、２２種類の小分子をスクリーニングヒットとして選択した。
【０２２８】
化合物の合成
化合物ＣｅＭＭＥＣ１およびＣｅＭＭＥＣ２をAKos GmbH（Steinen, Germany）から購入した。化合物Ａ１をInterBioScreen Ltd.（Chernogolovka, Russia）から購入した。化合物Ａ２、Ａ３、Ａ４およびＡ５をChemDiv（San Diego, USA）から購入した。他のすべての類似体の合成は、以下のスキームにしたがって、Enamine Ltd.（Kiev, Ukraine）によっておこなわれた：
【化４３】
2019508496.tif 000045
【０２２９】
ＤＭＦ（１ｍｌ）中の酸１（１．１ｍｍｏｌ）、アミン２（１．０ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ（１．１ｍｍｏｌ）、およびＨＯＢｔ（１．６ｍｍｏｌ）の混合物を、室温にて２４時間撹拌した。クロロホルム（６ｍｌ）と水（８ｍｌ）を加え、有機層を分離し、水（８ｍｌ）で洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、そして、留去した。未精製の残渣を、勾配溶出（メタノール−水）を用いた逆相（С−１８）クロマトグラフィーで精製して、純粋な３を得た。
【０２３０】
すべての化合物を、ＬＣ−ＭＳによって品質管理し、９０％の最低純度を必要とした。
【化４４】
2019508496.tif 000046
【０２３１】
ＭＳ（ｍ／ｚ）：Ｃ19Ｈ15ＣｌＮ2Ｏ4の［Ｍ＋Ｈ］＋計算値３７１．０８０４、実測値３７１．１
収率：３％
【０２３２】
【化４５】
2019508496.tif 000047
【０２３３】
1H NMR (400 MHz, DMSO_d6) δ ppm 2.50 (br s, 12 H) 3.39 (br s, 5 H) 3.59 (s, 3 H) 3.66 (s, 1 H) 6.01 (s, 2 H) 6.91 (br d, J=8.39 Hz, 1 H) 7.13 (br d, J=8.39 Hz, 1 H) 7.43 (s, 1 H) 7.57 (br t, J=7.46 Hz, 1 H) 7.76 (br t, J=7.46 Hz, 1 H) 8.06 (s, 1 H) 8.15 (br d, J=7.93 Hz, 1 H) 8.29 (br d, J=7.93 Hz, 1 H) 10.26 (br s, 1 H)；ＭＳ（ｍ／ｚ）：Ｃ18Ｈ14Ｎ2Ｏ4の［Ｍ＋Ｈ］＋計算値３２３．１０２６、実測値３２３．２
収率：１０％
【０２３４】
【化４６】
2019508496.tif 000048
ＭＳ（ｍ／ｚ）：Ｃ20Ｈ17ＣｌＮ2Ｏ4の［Ｍ＋Ｈ］＋計算値３８５．０９４９６１、実測値３８５．０
収率：３％
【０２３５】
【化４７】
2019508496.tif 000049
【０２３６】
1H NMR (400 MHz, DMSO_d6) δ ppm 2.10 (br s, 2 H) 2.50 (br s, 24 H) 3.33 (s, 9 H) 3.59 (s, 3 H) 4.10 (dt, J=17.60, 4.72 Hz, 4 H) 6.93 - 7.00 (m, 1 H) 7.23 - 7.30 (m, 1 H) 7.44 (br s, 1 H) 7.52 - 7.61 (m, 1 H) 7.76 (br t, J=7.46 Hz, 1 H) 8.05 (s, 1 H) 8.13 (br d, J=7.93 Hz, 1 H) 8.29 (br d, J=7.93 Hz, 1 H) 10.25 (s, 1 H)；ＭＳ（ｍ／ｚ）：Ｃ20Ｈ18Ｎ2Ｏ4の［Ｍ＋Ｈ］＋計算値３５１．１３３９、実測値３５１．２
収率：３９％
【０２３７】
【化４８】
2019508496.tif 000050
【０２３８】
1H NMR (400 MHz, DMSO_d6) δ ppm 2.50 (br s, 13 H) 3.33 (br s, 7 H) 3.59 (s, 3 H) 3.75 (s, 3 H) 6.94 (br d, J=8.39 Hz, 2 H) 7.57 (br t, J=7.46 Hz, 1 H) 7.64 (br d, J=8.39 Hz, 2 H) 7.76 (br t, J=7.69 Hz, 1 H) 8.06 (s, 1 H) 8.16 (br d, J=7.93 Hz, 1 H) 8.29 (br d, J=7.93 Hz, 1 H) 10.21 (s, 1 H)；ＭＳ（ｍ／ｚ）：Ｃ18Ｈ16Ｎ2Ｏ3の［Ｍ＋Ｈ］＋計算値３０９．１２３４、実測値３０９．２
収率：２０％
【０２３９】
【化４９】
2019508496.tif 000051
【０２４０】
1H NMR (400 MHz, DMSO_d6+CCl4) δ ppm 2.49 (br s, 4 H) 3.01 (s, 6 H) 3.62 (s, 3 H) 7.21 (br d, J=8.53 Hz, 2 H) 7.50 (br t, J=7.28 Hz, 1 H) 7.69 (br t, J=7.03 Hz, 1 H) 7.85 (br d, J=9.03 Hz, 2 H) 7.98 (s, 1 H) 8.17 - 8.36 (m, 2 H) 10.28 (s, 1 H)；ＭＳ（ｍ／ｚ）：Ｃ18Ｈ13Ｆ3Ｎ2Ｏ3の［Ｍ＋Ｈ］＋計算値３６３．０９５１、実測値３６３．２
収率：８％
【０２４１】
【化５０】
2019508496.tif 000052
【０２４２】
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 2.53 - 2.55 (m, 1 H) 3.28 - 3.34 (m, 2 H) 3.60 (s, 3 H) 3.76 (s, 3 H) 6.69 (br d, J=6.86 Hz, 1 H) 7.23 - 7.34 (m, 2 H) 7.43 (br s, 1 H) 7.57 (br t, J=7.55 Hz, 1 H) 7.77 (br t, J=7.55 Hz, 1 H) 8.08 (s, 1 H) 8.16 (br d, J=8.23 Hz, 1 H) 8.30 (br d, J=8.23 Hz, 1 H) 10.31 (br s, 1 H)；ＭＳ（ｍ／ｚ）：Ｃ18Ｈ16Ｎ2Ｏ3の［Ｍ＋Ｈ］＋計算値３０９．１２３４、実測値３０９．２
収率：２９％
【０２４３】
【化５１】
2019508496.tif 000053
【０２４４】
1H NMR (400 MHz, DMSO_d6+CCl4) δ ppm 1.21 (s, 1 H) 2.46 (br s, 3 H) 2.99 (s, 5 H) 3.59 (s, 3 H) 7.16 - 7.35 (m, 1 H) 7.47 (br t, J=7.53 Hz, 1 H) 7.66 (br t, J=7.65 Hz, 1 H) 8.01 (s, 1 H) 8.15 - 8.30 (m, 4 H) 8.76 (br s, 1 H) 10.27 (br s, 1 H)；ＭＳ（ｍ／ｚ）：Ｃ16Ｈ13Ｎ3Ｏ2の［Ｍ＋Ｈ］＋計算値２８０．１０８１、実測値２８０．２
収率：４％
【０２４５】
【化５２】
2019508496.tif 000054
【０２４６】
1H NMR (400 MHz, DMSO_d6+CCl4) δ ppm 1.25 (br s, 1 H) 1.32 (br d, J=8.86 Hz, 1 H) 2.41 - 2.58 (m, 4 H) 3.03 (br s, 7 H) 3.63 (s, 3 H) 3.78 (s, 6 H) 6.17 (br s, 1 H) 7.00 (br d, J=1.87 Hz, 2 H) 7.51 (br t, J=7.46 Hz, 1 H) 7.70 (br t, J=7.23 Hz, 1 H) 7.97 (s, 1 H) 8.20 - 8.37 (m, 2 H) 10.02 (s, 1 H)；ＭＳ（ｍ／ｚ）：Ｃ19Ｈ18Ｎ2Ｏ4の［Ｍ＋Ｈ］＋計算値３３９．１３３９、実測値３３９．２
収率：３７％
【０２４７】
【化５３】
2019508496.tif 000055
【０２４８】
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 2.34 - 2.66 (m, 5 H) 3.30 - 3.34 (m, 1 H) 3.59 (s, 3 H) 5.36 (s, 2 H) 7.20 (br s, 1 H) 7.57 (br t, J=7.41 Hz, 1 H) 7.81 (br t, J=7.68 Hz, 1 H) 8.27 (br d, J=7.68 Hz, 1 H) 8.47 (s, 1 H) 8.69 (br d, J=8.51 Hz, 1 H)；ＭＳ（ｍ／ｚ）：Ｃ14Ｈ12Ｎ4Ｏ4の［Ｍ＋Ｈ］＋計算値３０１．０９３１、実測値３０１．２
収率：１０％
【０２４９】
【化５４】
2019508496.tif 000056
【０２５０】
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.84 - 0.93 (m, 2 H) 1.06 (br dd, J=8.23, 2.47 Hz, 2 H) 2.08 (br s, 1 H) 2.48 - 2.52 (m, 8 H) 3.33 (s, 4 H) 3.57 (s, 3 H) 7.54 - 7.63 (m, 1 H) 7.79 (br t, J=7.55 Hz, 1 H) 8.25 - 8.35 (m, 3 H) 12.21 - 12.37 (m, 1 H)；ＭＳ（ｍ／ｚ）：Ｃ16Ｈ14Ｎ4Ｏ3の［Ｍ＋Ｈ］＋計算値３１１．１１３９、実測値３１１．０
収率：８％
【０２５１】
【化５５】
2019508496.tif 000057
【０２５２】
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1.23 (br s, 1 H) 1.67 - 2.15 (m, 4 H) 3.29 (br s, 3 H) 3.82 (br s, 4 H) 3.90 (br d, J=6.78 Hz, 1 H) 3.96 - 4.04 (m, 2 H) 4.32 (br s, 1 H) 6.84 (br d, J=8.03 Hz, 1 H) 7.16 (br d, J=8.03 Hz, 1 H) 7.35 (br s, 1 H) 7.40 - 7.48 (m, 1 H) 7.51 (br s, 1 H) 7.62 (br t, J=6.50 Hz, 1 H) 8.02 (br d, J=7.78 Hz, 1 H) 8.30 (br d, J=7.28 Hz, 1 H) 8.78 (br s, 1 H)；ＭＳ（ｍ／ｚ）：Ｃ23Ｈ24Ｎ2Ｏ5の［Ｍ＋Ｈ］＋計算値４０９．１７５８、実測値４０９．２
収率：５％
【０２５３】
【化５６】
2019508496.tif 000058
【０２５４】
1H NMR (400 MHz, DMSO_d6+CCl4) δ ppm 1.25 (br s, 1 H) 2.30 (s, 6 H) 2.51 (br s, 3 H) 2.71 (br t, J=6.10 Hz, 2 H) 3.02 (br s, 3 H) 3.63 (s, 3 H) 3.80 (s, 3 H) 4.05 (br t, J=6.24 Hz, 2 H) 6.84 (br d, J=8.86 Hz, 1 H) 7.21 (br d, J=8.71 Hz, 1 H) 7.42 - 7.55 (m, 2 H) 7.69 (br t, J=7.95 Hz, 1 H) 7.95 (s, 1 H) 8.29 (br dd, J=12.59, 8.39 Hz, 2 H) 9.93 (br s, 1 H)；ＭＳ（ｍ／ｚ）：Ｃ22Ｈ25Ｎ3Ｏ4の［Ｍ＋Ｈ］＋計算値３９６．１９１８、実測値３９６．２
収率：１６％
【０２５５】
【化５７】
2019508496.tif 000059
【０２５６】
1H NMR (400 MHz, DMSO_d6+CCl4) δ ppm 1.05 (br t, J=7.00 Hz, 6 H) 2.61 (q, J=7.00 Hz, 3 H) 2.55 - 2.69 (m, 1 H) 2.85 (br t, J=6.30 Hz, 2 H) 3.02 (br s, 5 H) 3.63 (s, 3 H) 3.79 (s, 3 H) 4.00 (br t, J=6.53 Hz, 2 H) 6.83 (br d, J=8.86 Hz, 1 H) 7.20 (br d, J=8.86 Hz, 1 H) 7.42 - 7.59 (m, 2 H) 7.69 (br t, J=7.46 Hz, 1 H) 7.94 (s, 1 H) 8.29 (br dd, J=12.36, 8.63 Hz, 2 H) 9.92 (s, 1 H)；ＭＳ（ｍ／ｚ）：Ｃ24Ｈ29Ｎ3Ｏ4の［Ｍ＋Ｈ］＋計算値４２４．２２３１、実測値４２４．２
収率：５％
【０２５７】
【化５８】
2019508496.tif 000060
【０２５８】
1H NMR (400 MHz, 溶媒) δ ppm 1.92 (br t, J=6.06 Hz, 2 H) 2.50 (br s, 11 H) 2.75 (br t, J=6.06 Hz, 2 H) 3.33 (br s, 6 H) 3.59 (s, 3 H) 4.06 - 4.16 (m, 2 H) 6.72 (br d, J=8.86 Hz, 1 H) 7.35 (br d, J=8.86 Hz, 1 H) 7.48 (br s, 1 H) 7.56 (br t, J=7.46 Hz, 1 H) 7.76 (br t, J=7.46 Hz, 1 H) 8.03 (s, 1 H) 8.15 (br d, J=7.93 Hz, 1 H) 8.29 (br d, J=7.93 Hz, 1 H) 10.11 (s, 1 H)；ＭＳ（ｍ／ｚ）：Ｃ20Ｈ18Ｎ2Ｏ3の［Ｍ＋Ｈ］＋計算値３３５．１３９０、実測値３３５．１
収率：１６％
【０２５９】
【化５９】
2019508496.tif 000061
【０２６０】
1H NMR (400 MHz, DMSO_d6+CCl4) δ ppm 2.41 - 2.61 (m, 2 H) 3.04 (br s, 2 H) 3.70 (s, 3 H) 4.25 (br d, J=3.26 Hz, 4 H) 6.64 - 6.84 (m, 2 H) 7.16 (br d, J=8.39 Hz, 1 H) 7.26 (br t, J=7.23 Hz, 1 H) 7.37 (br s, 1 H) 7.52 (br d, J=8.39 Hz, 1 H) 7.57 - 7.75 (m, 1 H) 7.90 (br d, J=7.46 Hz, 1 H) 10.38 (br s, 1 H) 12.76 - 12.79 (m, 1 H)；ＭＳ（ｍ／ｚ）：Ｃ19Ｈ16Ｎ2Ｏ4の［Ｍ＋Ｈ］＋計算値３３７．１１８３、実測値３３７．２
収率：９５％
【０２６１】
【化６０】
2019508496.tif 000062
【０２６２】
1H NMR (400 MHz, DMSO_d6+CCl4) δ ppm 2.41 - 2.58 (m, 2 H) 2.96 - 3.05 (m, 3 H) 3.08 (br s, 1 H) 3.55 (s, 3 H) 4.27 (br s, 1 H) 4.33 (br d, J=2.33 Hz, 4 H) 6.54 (br d, J=7.93 Hz, 1 H) 6.91 (d, J=8.39 Hz, 1 H) 7.32 (br d, J=7.46 Hz, 1 H) 7.47 (br t, J=7.93 Hz, 1 H) 7.52 - 7.63 (m, 2 H) 7.70 (br d, J=7.46 Hz, 1 H) 8.09 - 8.26 (m, 1 H) 9.96 (s, 1 H)；ＭＳ（ｍ／ｚ）：Ｃ19Ｈ16Ｎ2Ｏ4の［Ｍ＋Ｈ］＋計算値３３７．１１８３、実測値３３７．２
収率：８７％
【０２６３】
【化６１】
2019508496.tif 000063
ＭＳ（ｍ／ｚ）：Ｃ15Ｈ15Ｎ3Ｏ5の［Ｍ＋Ｈ］＋計算値３１８．１０８４４７、実測値３１８．２
収率：９０％
【０２６４】
【化６２】
2019508496.tif 000064
【０２６５】
1H NMR (400 MHz, DMSO_d6+CCl4) δ ppm 2.51 (br s, 1 H) 3.04 (s, 2 H) 3.54 (s, 3 H) 4.23 (br d, J=4.20 Hz, 4 H) 6.38 (br d, J=9.79 Hz, 1 H) 6.72 (br d, J=8.86 Hz, 1 H) 7.07 (br dd, J=8.86, 2.33 Hz, 1 H) 7.26 (br d, J=2.33 Hz, 1 H ) 7.95 (br dd, J=9.33, 2.33 Hz, 1 H) 8.45 (br d, J=2.33 Hz, 1 H) 9.58 (s, 1 H)；ＭＳ（ｍ／ｚ）：Ｃ15Ｈ14Ｎ2Ｏ4の［Ｍ＋Ｈ］＋計算値２８７．１０２６、実測値２８７．１
収率：２２％
【０２６６】
【化６３】
2019508496.tif 000065
ＭＳ（ｍ／ｚ）：Ｃ14Ｈ13Ｎ3Ｏ5の［Ｍ＋Ｈ］＋計算値３０４．０９２７９７、実測値３０４．０
収率：８８％
【０２６７】
【化６４】
2019508496.tif 000066
【０２６８】
1H NMR (400 MHz, DMSO_d6+CCl4) δ ppm 2.51 (br s, 2 H) 3.02 (br s, 3 H) 3.28 (s, 3 H) 4.23 (br d, J=4.20 Hz, 4 H) 6.73 (br d, J=8.39 Hz, 1 H) 6.92 (br dd, J=8.86, 2.33 Hz, 1 H) 7.30 (br d, J=2.33 Hz, 1 H) 8.26 (s, 1 H) 10.75 (s, 1 H)；ＭＳ（ｍ／ｚ）：Ｃ14Ｈ13Ｎ3Ｏ5の［Ｍ＋Ｈ］＋計算値３０４．０９２８、実測値３０４．０
収率：２１％
【０２６９】
【化６５】
2019508496.tif 000067
【０２７０】
1H NMR (400 MHz, DMSO_d6+CCl4) δ ppm 1.20 (br t, J=7.46 Hz, 3 H) 2.42 - 2.59 (m, 4 H) 2.79 (s, 1 H) 2.95 (s, 1 H) 3.03 (br s, 3 H) 3.50 (s, 1 H) 3.55 (s, 2 H) 4.24 (br d, J=4.66 Hz, 4 H) 6.72 (br d, J=8.86 Hz, 1 H) 7.07 (br dd, J=8.86, 2.33 Hz, 1 H) 7.26 (br d, J=2.33 Hz, 1 H) 7.77 (br s, 1 H) 7.91 (s, 1 H) 8.32 (br d, J=2.33 Hz, 1 H) 9.54 (s, 1 H)；ＭＳ（ｍ／ｚ）：Ｃ17Ｈ18Ｎ2Ｏ4の［Ｍ＋Ｈ］＋計算値３１５．１３３９、実測値３１５．１
収率：８７％
【０２７１】
【化６６】
2019508496.tif 000068
【０２７２】
1H NMR (400 MHz, DMSO_d6+CCl4) δ ppm 1.71 (br s, 4 H) 2.43 (br s, 2 H) 2.47 - 2.56 (m, 2 H) 2.72 (br s, 2 H) 3.03 (s, 2 H) 3.47 (s, 3 H) 4.23 (br d, J=4.20 Hz, 4 H) 6.70 (br d, J=8.39 Hz, 1 H) 7.05 (br d, J=8.86 Hz, 1 H) 7.26 (s, 1 H) 7.77 (s, 1 H) 9.71 (s, 1 H)；ＭＳ（ｍ／ｚ）：Ｃ19Ｈ20Ｎ2Ｏ4の［Ｍ＋Ｈ］＋計算値３４１．１４９６、実測値３４１．１
収率：９１％
【０２７３】
【化６７】
2019508496.tif 000069
【０２７４】
1H NMR (400 MHz, 溶媒) δ ppm 1.25 (br s, 4 H) 2.51 (br s, 16 H) 3.01 (br s, 27 H) 3.63 (s, 3 H) 3.81 (br d, J=13.99 Hz, 6 H) 6.83 (br d, J=7.93 Hz, 1 H) 7.19 (br s, 1 H) 7.44 - 7.55 (m, 2 H) 7.69 (t, J=7.50 Hz, 1 H) 7.95 (s, 1 H) 8.22 - 8.34 (m, 2 H) 9.95 (br s, 1 H)；ＭＳ（ｍ／ｚ）：Ｃ19Ｈ18Ｎ2Ｏ4の［Ｍ＋Ｈ］＋計算値３３９．１３３９、実測値３３９．２
収率：８１％
【０２７５】
ＲＮＡ配列決定
全ＲＮＡの量を、Qubit 2.0 Fluorometric Quantitationシステム（Life Technologies）を使用して定量し、そして、ＲＮＡ完全性番号（ＲＩＮ）を、Experion Automated Electrophoresis System（Bio-Rad）を使用して決定した。ＲＮＡ−ｓｅｑライブラリーを、ScicloneおよびZephyr液体操作ロボティクス（PerkinElmer）を使用したTruSeq Stranded mRNA LT試料調製キット（Illumina）によって調製した。ライブラリー量を、Qubit 2.0 Fluorometric Quantitationシステム（Life Technologies）を使用して定量し、そして、サイズ分布を、Experion Automated Electrophoresis System（Bio-Rad）を使用して評価した。配列決定のために、ライブラリーを蓄積し、そして、５０ｂｐの単回読み出しを使用したIllumina HiSeq2000により配列決定した。読み出し量を、--no-novel-juncs --no-novel-indelsオプション（Kim et al., 2013）を用いたtophat（v2.0.4）を用いて整列した。遺伝子発現を、ＲＳｅＱＣパッケージからのＲＰＫＭ＿ｃｏｕｎｔ．ｐｙ（Wang L. et al., 2012）およびＵＣＳＣからダウンロードしたＮＣＢＩ ＲＮＡ参照配列収集物（RefSeq）（Kent et al., 2002）を使用して、１００万読み出し量あたりのＫｂ毎の読み出し量（ＲＰＫＭｓ）として計算した。濃縮計算を、Gene Set Enrichment Analysisによっておこなった（Subramanian et al., 2005; Mootha et al., 2003）。
【０２７６】
ＴＡＦ１結合アッセイ
ＴＡＦ１結合アッセイを、製造業者の取扱説明書に従って、EPIgeneous（商標）結合ドメインキットＢ（Cisbio Bioassays）を使用しておこなった。結合を、Ｅｕ３＋複合化ＧＳＴ抗体ドナーおよびストレプトアビジン複合化アクセプタを用いたＨＴＲＦを使用して、ＧＳＴタグ付与ＴＡＦ１タンパク質からのアセチル化ビオチンペプチドの移動によって測定した。化合物を、Echo525液体処理装置（Labcyte）を使用して、アッセイプレートProxiPlate-384 Plus（Perkin Elmer）に分注した。結合アッセイを、５ｎＭのＴＡＦ１−ＧＳＴ、５０ｎＭのペプチド（ＳＧＲＧＫ（ａｃ）ＧＧＫ（ａｃ）ＧＬＧＫ（ａｃ）ＧＧＡＫ（ａｃ）ＲＨＲＫ（ビオチン）−酸）、６．２５ｎＭのストレプトアビジン−ＸＬ６６５、１：２００の抗ＧＳＴ Ｅｕ３＋クリプテート、および０．１％のＤＭＳＯを含む２０μｌの終量でおこなった。アッセイ試薬を、Multidrop combi（Thermo Scientific）を使用してプレートに分注し、室温にて３時間インキュベートした。蛍光を、二重発光プロトコール（Ａ＝ｅｘ．３２０ｎｍ、ｅｍ．６６５ｎｍ、Ｂ＝ｅｘ．３２０ｎｍ、ｅｍ．６２０ｎｍ）を用いて、ＨＴＲＦモジュールを使用したPHERAstarマイクロプレートリーダー（BMG）を使用して計測した。生データを加工して、ＨＴＲＦ比（チャンネルＡ／Ｂ*１００００）を得、そしてそれを、ＩＣ50曲線作成に使用した。
【０２７７】
ＴＡＦ１の第二のブロモドメインのタンパク質発現と精製
ＴＡＦ１の第二のブロモドメイン（Uniprot P21675、残基１５０１〜１６３４）を、ライゲーション独立クローニングを使用してｐＥＴ２８由来発現ベクター、ｐＮＩＣ２８−Ｂｓａ４内にクローニングした。希少コドンｔＲＮＡをコードするｐＲＡＲＥプラスミドを用いて、コンピテントＥ．コリＢＬ２１（ＤＥ３）−Ｒ３−ｐＲＡＲＥ２細胞（ＢＬ２１（ＤＥ３）菌株のファージ耐性誘導体）で形質転換したコロニーを、５０μｇ／ｍｌののカナマイシンおよび３４μｇ／ｍｌのクロラムフェニコールを含有する１０ｍｌのTerrificブロス培地（Sigma）中、３７℃にて一晩培養した。一晩培養物からの細胞を、Ａ６００が０．８〜１．１に達するまで、ＴＢ中、３７℃にて培養し、次に、その培地を冷やし、そして、０．２ｍＭのイソプロピル−β−Ｄ−チオガラクトピラノシド（ＩＰＴＧ）を加え、１８℃にて１６時間タンパク質発現を誘導した。細菌を、遠心分離（JLA 8,100ローター、Beckman Coulter Avanti J-20 XP遠心分離機）によって採収し、２０℃にて冷凍した。６×Ｈｉｓタグ付与ＴＡＦ１第二ブロモドメインを発現する細胞を、プロテアーゼ阻害剤カクテル（１μｌ／ｍｌ）の存在下、溶解バッファー（２０ｍＭのＨｅｐｅｓ ｐＨ７．５、５００ｍＭのＮａＣｌ、１０ｍＭのイミダゾール、５％のグリセロールおよび０．２ｍＭのＴＣＥＰ（トリス（２）ホスフィンヒドロクロリド）中に再懸濁し、そして４℃にてEmulsiFlex-C5高圧ホモジナイザ（Avestin-Mannheim, Germany）を使用して溶解した。溶解物を、遠心分離（１４，０００×ｇ、４℃にて１時間）によって透明にした。遠心分離後に、上清をニッケルカラムに添加し、イミダゾール線形勾配で溶出した。溶出したタンパク質を回収し、４℃にてＴＥＶプロテアーゼで一晩処理して、Ｎ末端タグを取り除いた。消化したタンパク質をニッケルカラムに再び添加し、切断されていないタンパク質を取り除き、そして、ヘキサヒスチジンＴＥＶを使用した。非タグタンパク質を含有する流出物を回収し、２０ｍＭのＨｅｐｅｓ ｐＨ７．５、５００ｍＭのＮａＣｌ、５％のグリセロール、および０．２ｍＭのＴＣＥＰ（HiLoad16/60Superdex75GE Healthcare Life Sciences）中のサイズ排除クロマトグラフィーを通してさらに精製した。同様に、ＧＳＴタグ付与ＴＡＦ１第二ブロモドメインを、５０ｍＭのＴｒｉｓ ｐＨ８、１０ｍＭの還元グルタチオンの溶出バッファーを用いた、５ｍｌのグルタチオンセファロースファストフローカラムを使用して精製した。ゲル濾過（HiLoad16/60Superdex200）クロマトグラフィーを最終的な精製ステップとしておこなった。両方の構築物に関する正しい質量および純度を、Agilent1100Series LC/MSD TOF（Agilent Technologies Inc.-Palo Alto、CA）によって確認した。
【０２７８】
等温滴定熱量測定法
熱量測定実験を、ＶＰ−ＩＴＣマイクロ熱量計（MicroCal（商標）, LLC Northampton MA）によりおこなった。ＴＡＦ１（２）を、バッファー２０ｍＭのＨｅｐｅｓ ｐＨ７．５、１５０ｍＭのＮａＣｌ、および０．５ｍＭのＴＣＥＰへの透析によってバッファー交換した。すべての測定を、２８６ｒｐｍで撹拌しながら、２９３．１５Ｋでおこなった。マイクロシリンジに２９５μＭのタンパク質溶液を添加し、化合物溶液を、細胞に関して２５μＭ、かつ、２ｍｌにて調製した。すべての注入を、２μｌの最初の注入と、それに続く８μｌの３４回の注入を使用し、１注入あたり１６秒の継続時間、かつ、注入の間の２４０秒の間隔を用いておこなった。データを、単独結合部位モデルを利用したMicroCal ORIGINソフトウェアパッケージを用いて分析した。最初のデータ点を分析から除外した。熱力学的パラメーターを計算した（ΔＧ＝ΔＨ−ＴΔＳ＝−ＲＴｌｎＫB、式中、ΔＧ、ΔＨおよびΔＳは、それぞれ結合の自由エネルギー、エンタルピー、およびエントロピーの変化である）。
【０２７９】
分子モデリング
ＴＡＦ１、ＡＴＡＤ２およびＢＲＤ４の第二ブロモドメインの結晶構造を、ＲＣＳＢプロテインデータバンク（ｐｄｂ：４ｑｓｔ、ｐｄｂ：３ｕｖ４、およびｐｄｂ：３ｍｘｆ）からダウンロードした。その構造を、分子モデリングソフトウェアＭＯＥ（Molecular Operating Environment (MOE), 2014; Chemical Computing Group Inc., 1010 Sherbooke St. West, Suite #910, Montreal, QC, Canada, H3A 2R7）のＬｉｇＸワークフローを使用して、補正し、プロトン化し、そしてエネルギー最小化した。ヒット化合物をＭＯＥのウォッシングツールを用いて調製した。
【０２８０】
結合姿勢の予測のために、ＭＯＥの鋳型ベースの結合プロトコールを使用した。姿勢予測のための鋳型としてＡＴＡＤ２（ｐｄｂ：４ｑｓｔ）（Chaikuad et al., 2014）のブロモドメインへの１−メチルキノリン−２−オン結合の原子位置を使用して、ＣｅＭＭＥＣ１を、ＴＡＦ１（ｐｄｂ：３ｕｖ４）（Filippakopoulos et al., Cell, 2012）の第二ブロモドメインの結晶構造に結合させた（Picaud et al., 2015）。同様に、姿勢予測鋳型として役立つトリアゾール環を用いて、ＣｅＭＭＥＣ２を、ＢＲＤ４（ｐｄｂ：３ｍｘｆ）（Filippakopoulos et al., 2010）に結合したＪＱ１の結晶構造に結合させた。
【０２８１】
結果
機能性ＢＲＤ４阻害の検出のための細胞レポーター
本発明者らは、シグナルの増加でエピジェネティック変化に対して急速に応答し、かつ、最も有利には、化学的および遺伝学的スクリーニングの両方に好適である、細胞レポーター系の生成を目指した。そのため、彼らは、ほぼ１倍体の核型を有する慢性骨髄性白血病細胞株であるＫＢＭ７細胞のヘテロクロマチン遺伝子座に対してレポーター構築を標的化するストラテジーを開発した（Andersson et al., 1995）（図１ａを参照）。偏りのない方法で斯かるＢＲＤ４が抑制された遺伝子座を同定するために、ＫＢＭ７細胞を、クロマチン再構成、ｃ−ＭＹＣ抑制（図６ａ）および部分的な細胞周期停止を惹起する一方で、アポトーシスを引き起こさない（図６ｂを参照）ために十分である濃度での、強力かつ選択的ＢＥＴブロモドメイン阻害剤である（Ｓ）−ＪＱ１と共にプレインキュベートした。次に、ＲＦＰ発現のために、（Ｓ）−ＪＱ１処理細胞をレトロウイルスに感染させ、そして、二重ＦＡＣＳソーティングストラテジーを適用して、（Ｓ）−ＪＱ１存在下でＲＦＰを発現し、そして、該化合物の使用中止後に導入遺伝子を抑制する細胞集団を得た（図１ａおよび１ｂを参照）。
【０２８２】
３つのクローンを、（Ｓ）−ＪＱ１に対応してＲＦＰを発現するエピジェネティック薬剤スクリーニング用レポーター（Reporters for Epigenetic Drug Screening）（ＲＥＤＳ１、ＲＥＤＳ２およびＲＥＤＳ３）として単離した（図６ｃを参照）。その強力かつ一定のＲＦＰ強度のため、クローンＲＥＤＳ３をさらなる検証および実験のために選択した。（Ｓ）−ＪＱ１を用いたＲＥＤＳ３細胞の処理は、フローサイトメトリー（図１ｃを参照）、生細胞イメージング（図６ｃを参照）およびリアルタイムＰＣＲ（ＲＴ−ＰＣＲ）（図６ｄを参照）によって検出されるＲＦＰ発現の明確かつロバストな増大を引き起こした。ＲＦＰに加えて、レトロウイルスベクターに存在するゼオシン耐性遺伝子もまた、上方制御された（ＲＴ−ＰＣＲデータ、図６ｅ）。さらに、細胞周期の異なる相にあるＲＥＤＳ３の同期ではＲＦＰ陽性細胞数が増大しなかったので、ＲＦＰ発現は、（Ｓ）−ＪＱ１によって引き起こされる部分的な細胞周期停止によって誘発されなかった（図６ｆを参照）。最近、ＨＩＶ−１（ヒト免疫不全ウイルス−１）のＬＴＲ（長い末端反復）の活性化が（Ｓ）−ＪＱ１によって刺激されることが報告されたので、ＢＲＤ４の阻害が、既知の転写ＨＩＶ−１再活性化化合物、例えばＰＭＡ（ホルボールミリスタートアセタート）またはＰＨＡ（フィトヘマグルチニン）などの作用を増強する（Zhu et al., 2012; Banerjee et al., 2012）。ＲＦＰ発現の推定機序としてこれを除外するために、ＲＥＤＳ３細胞を、ＰＭＡ、ＰＨＡまたは（Ｓ）−ＪＱ１とそれらのそれぞれとの組み合わせで処理した。ＲＦＰ陽性核の増加は、全くこれらの化合物によって観察されなかった（図６ｇを参照）。そのため、ＲＦＰ発現は、挿入したＬＴＲよりむしろ、挿入遺伝子座に対する（Ｓ）−ＪＱ１の効果に起因する。
【０２８３】
ほとんどすべてのＢＲＤ４阻害剤のように、（Ｓ）−ＪＱ１は、他のいくつかのヒトブロモドメインとの非常に弱い相互作用に加え、同程度の効果で全ＢＥＴブロモドメインファミリー（ＢＲＤ２、ＢＲＤ３、ＢＲＤ４、ＢＲＤＴ）を標的化する（Filippakopoulos et al., 2010）。どのＢＥＴ標的がＲＦＰ抑制に関与するかを明確にし、かつ、的外れな効果を除外するために、すべての（Ｓ）−ＪＱ１標的をＲＥＤＳ３クローンにおいて個別にノックダウンし、そして、ＲＦＰ陽性細胞をフローサイトメトリーによって定量化した。ＢＲＤ４の下方制御だけがＲＦＰ陽性核の増加をもたらした（図１ｄを参照）。この効果はまた、生細胞イメージングによっても可視化され（図１ｅを参照）、そして、例えば、ＢＲＤ３の下方制御の後に観察されない、ＲＦＰ ｍＲＮＡの増強したレベルが同時に起こる（図６ｈを参照）。よって、それらが遺伝子的、薬理学的または代謝的であり、ＢＲＤ４駆動ヘテロクロマチン状態からの放出をもたらす、混乱状態に関する注目の表現型スクリーンを可能にする実験システムを作成することが可能になった。
【０２８４】
ＢＲＤ４阻害は、スーパーエンハンサー領域に隣接する遺伝子を上方制御する
ＲＥＤＳ３クローンをさらにバリデートするために、ＦＩＳＨ（蛍光原位置ハイブリダイゼーション）をおこない、そして、細胞毎の単独ＲＦＰ挿入の存在を確認した（図２ａを参照）。ＲＦＰプローブが、核膜の近くに優先的に配置され（図２ｂを参照）、ＲＦＰヘテロクロマチン局在性を示した（Schermelleh et al., 2008; Towbin et al., 2012）。配列決定アプローチを、第１２染色体のテロメアから３Ｍｂ未満に位置する領域１２ｑ２４．３３にＲＦＰ遺伝子座をマッピングするのに使用した（図２ｃを参照）。配列決定データを、野生型（ＷＴ）およびＲＥＤＳ３ ＫＢＭ７細胞に特定の対のゲノムプライマーを使用したＰＣＲによって確認した（図２ｄを参照）。ＳＴＸ２遺伝子は、ＲＦＰ挿入の５ｋｂ未満上流に存在し、そしてそれは、ＫＢＭ７でわずかに発現され（ＲＮＡ−ｓｅｑ（ＲＮＡ配列決定）データ；ＲＰＫＭ＜１）、ヘテロクロマチン領域によって隣接される（Nature 2012, 489, 57-74）。対照的に、ＲＦＰ遺伝子座の３５ｋｂ下流に位置する遺伝子ＲＡＮは、ＫＢＭ７において強力に発現され、ＢＲＤ４標的遺伝子として先に記述された（Nagarajan et al., 2014）。興味深いことに、ＳＴＸ２とＲＡＮとの間の領域には反復エンハンサー配列（ＥＮＣＯＤＥ）が豊富にあり、ＲＡＮの発現を制御するスーパーエンハンサーの仮説を支持する（Pott et al., 2015; Whyte et al., 2013）。ＢＲＤ４は転写活性化因子であると見られたが、ＲＥＤＳ細胞は、ＲＦＰの活性化を伴ったＢＲＤ４阻害に応答した。そのため、ＢＲＤ４阻害剤が他の遺伝子を直接的に上方制御したかどうかが問われた。１μＭの（Ｓ）−ＪＱ１で２４時間処理したＫＢＭ７細胞のＲＮＡ−ｓｅｑによると、１３３の遺伝子が２倍超より有意に上方制御された（図２ｅを参照）。他の細胞株（ＭＯＬＭ−１３、ＫＡＳＵＭＩ−１、ＭＶ４−１１、ＭＯＬＴ−３、ＭＥＧ−０１、Ｋ−５６２）は同様に応答し、そして、例えば、ＭＯＬＭ−１３細胞において、１７２の遺伝子が、（Ｓ）−ＪＱ１を用いたほんの２時間後に上方制御された。珍しいことに、（Ｓ）−ＪＱ１上方制御遺伝子セットの機能注解（Huang et al., Nat. Protoc., 2009, 4, 44-57; Huang et al., Nucleic Acids Res., 2009, 37, 1-13）は、クロマチン再構成にかかわる遺伝子（図２ｆを参照）、特にヒストン遺伝子の強力な細胞株非依存性濃縮を明らかにし、そして、ＢＲＤ４阻害後の全体的なクロマチン再構成の仮説を裏づけた。
【０２８５】
次に、ＢＲＤ４を阻害したときに、クロマチン再構成プロセスがこの遺伝子座にて起こっていたかどうか確認するために、ＲＦＰ挿入部位の近位の遺伝子発現を、（Ｓ）−ＪＱ１で処理したＷＴ−ＫＢＭ７細胞でチェックした。本発明者らの仮説に沿って、ＲＡＮ発現が減少した一方で、ＳＴＸ２ ｍＲＮＡレベルは（Ｓ）−ＪＱ１処理により増強し（図２ｇを参照）、ＢＲＤ４阻害がＲＡＮ発現の減少をもたらすだけではなく、ＳＴＸ２の転写を上げもすることを示した。
【０２８６】
機能性ＢＲＤ４阻害剤のスクリーニング
ＢＲＤ４は十分に試験されているが、現在利用可能な阻害剤は、限られた構造と機構的多様性のものなので（Filippakopoulos et al., 2014; Filippakopoulos et al., Bioorganic Med. Chem., 2012）、ＢＲＤ４の上流または下流のドラッガブル標的は、理解できないままであった。本発明者らは、ＢＲＤ４を機能上阻害することができる小分子をスクリーニングすることを目指した。その他のエピジェネティックな混乱状態ではなく、ＢＲＤ４阻害を検出するレポーターの特異性を確認するために、ＲＥＤＳ３をいくつかのクロマチン標的化分子で処理した。化合物のこの小さいパネルの中において、ＢＥＴ阻害剤だけが、ＲＦＰ発現を活性化することができた（図３ａを参照）。確認した細胞株のこのレポーターの高い特異性により、広く生細胞イメージングスクリーンをおこない、２４時間後にＲＥＤＳ３細胞においてＲＦＰ発現を引き起こすそれらの能力について８９，３５５の小分子を試験した（図７ａおよび１０を参照）。０．５μＭの（Ｓ）−ＪＱ１は、これがＲＦＰシグナル（図７ｂを参照）および優れたＺ値（Running et al., 1999）の完全な活性化を引き起こす最低濃度なので、陽性対照として使用した（図７ｃおよび１０を参照）。自発蛍光化合物のヒットバリデーションと除外に続いて、２２の化合物をスクリーニングヒットとして確認した（図３ｂおよび１１を参照）。珍しいことに、化合物ライブラリーに含有されるすべてのＢＲＤ４阻害剤（（Ｓ）−ＪＱ１（Filippakopoulos et al., 2010）、ＰＦＩ１（Fish et al., 2012）、Ｉ−ＢＥＴ１５１（Seal et al., 2012）、Ｉ−ＢＥＴ−７６２（Mirguet et al., 2013）、ブロモスポリン、ＯＸＴ０１５、ＲＶＸ２０８（McLure et al., 2013）、ＢＩ−２５３６（Ciceri et al., 2014）およびＴＧ−１０１３４８（Ciceri et al., 2014））がこの基の一部であり、設定の妥当性を強調した。１３の化合物が新規であり、その中で、本発明者らは、新しいＢＲＤ４阻害剤足場、またはさらに、新しい作用機序を有する剤を推測した。ｃ−ＭＹＣのＲＴ−ＰＣＲは、それらの小分子のうちの２つが、（Ｓ）−ＪＱ１処理に匹敵するレベルまで、用量依存的様式でこの癌遺伝子の発現を低減することができることを明らかにした（図３ｃおよび１１を参照）。これらの２つの化合物は、（Ｓ）−ＪＱ１および他のＢＲＤ４阻害剤のすべてと構造的に異なっていた。本発明者らは、それらをＣｅＭＭエピジェネティック化合物（CeMM Epigenetic Compounds）ＣｅＭＭＥＣ１およびＣｅＭＭＥＣ２と命名した（図３ｄを参照）。ＣｅＭＭＥＣ１およびＣｅＭＭＥＣ２で処理したＲＥＤＳ３細胞は、用量依存的様式で生細胞イメージングによって検出されるＲＦＰを発現した（図７ｄおよび７ｅを参照）。ＣｅＭＭＥＣ１およびＣｅＭＭＥＣ２の全トランスクリプトーム効果を計測し、そして（Ｓ）−ＪＱ１と比較した。ＣｅＭＭＥＣ１およびＣｅＭＭＥＣ２によって調整される転写産物の数が（Ｓ）−ＪＱ１より少ないのに対して、変更された遺伝子セット（図７ｆを参照）および調整された遺伝子間の良好な相関関係（図７ｇを参照）の顕著な重複がある。全体的に見て、これらのデータは、これらの２つの化合物が機能性ＢＲＤ４阻害剤の新しい化学物質構造分類に属することを示す。ＢＲＤ４阻害剤は、（それらが特定の癌細胞の増殖を低減する）腫瘍学における適用のために主に開発される。そのため、本発明者らは、ＢＲＤ４の阻害に対して感受性のヒト急性単球性白血病細胞株であるＴＨＰ１細胞を、（Ｓ）−ＪＱ１、ＣｅＭＭＥＣ１およびＣｅＭＭＥＣ２で処理し、そして、それぞれ４８および７２時間後の細胞周期プロファイルおよびアポトーシス誘発を分析した。細胞周期アッセイは、Ｓ期の細胞数の明確かつ用量依存的減少を示し、Ｇ１期細胞周期の兆候が３つの化合物のすべてで止まる（図３ｅを参照）。さらに、すべての化合物が、ＡｎｎｅｘｉｎＶ染色によって判断されるように、アポトーシスを引き起こした（図３ｆを参照）。効力に関して、（Ｓ）−ＪＱ１が最も強い効果を示し、ＣｅＭＭＥＣ２およびＣｅＭＭＥＣ１が続いた。
【０２８７】
機能性ＢＲＤ４阻害剤の分子的特徴づけ
ＣｅＭＭＥＣ１およびＣｅＭＭＥＣ２が物理的な関与によってＢＲＤ４を直接的に阻害するかどうか調査するために、アセチル化ヒストンペプチドへのＢＲＤ４ブロモドメインの結合と競合するそれらの能力を、Amplified Luminescent Proximity Homogenousアッセイ（αＬＩＳＡ）免疫学的アッセイ（Bielefeld-Sevigny, 2009）で試験した。この化合物がアッセイに追加されたときに、蛍光の減少が観察されなかったので、ＣｅＭＭＥＣ１は、ＢＲＤ４の第一のブロモドメインにも、第二のブロモドメインにも結合することができなかった（図４ａを参照）。対照的に、ＣｅＭＭＥＣ２は、１０μＭで使用したとき、（Ｓ）−ＪＱ１と共通して、ＢＲＤ４の両方のブロモドメインに結合した（図４ａを参照）。完全長ＢＲＤ４（ＧＳＴ−ＢＲＤ４）を用いておこなった用量応答αＬＩＳＡアッセイでは、０．２μＭの（Ｓ）−ＪＱ１と比較して、ＣｅＭＭＥＣ２が０．９μＭのＩＣ50を示した（図４ｂを参照）。ＢＲＤ４の個々のブロモドメインを別々に試験したとき、類似的結果を得た（図８ａを参照）。
【０２８８】
代表的なブロモドメインタンパク質へのＣｅＭＭＥＣ１およびＣｅＭＭＥＣ２の結合能を包括的に分析するために、ＢｒｏｍｏＳｃａｎプロファイルを入手した（図４ｃを参照）。他のＢＲＤ４阻害剤と同様に、ＣｅＭＭＥＣ２はＢＲＤ４だけではなく、ＢＥＴファミリーの他のすべてのタンパク質にも結合した。対照的に、ＣｅＭＭＥＣ１は、αＬＩＳＡデータと一致して、非常に弱くＢＲＤ４にのみ結合した。驚いたことに、この化合物は、マイクロモル以下の結合定数によって確認もされる、ＣＲＥＢＢＰ、ＥＰ３００、ＢＲＤ９のブロモドメイン、およびＴＡＦ１（ＴＡＦ１（２））の第二のブロモドメインに対して高い親和性を示した（図８ｂを参照）。最近、ＣＲＥＢＢＰおよびＥＰ３００が、転写調節の調整におけるＢＲＤ４補因子として説明されたが（Roe et al., 2015）、その一方で、ＢＲＤ４とＢＲＤ９との間の相互作用またはＴＡＦ１ではまだ報告されていない。これらの４つのブロモドメイン含有タンパク質はＣｅＭＭＥＣ１の直接的な標的なので、それらの１つの損失が、ＲＥＤＳ３細胞においてＢＲＤ４阻害を模倣し、ＲＦＰ発現を増強するかどうかが問われた。ＣＲＥＢＢＰ、ＥＰ３００、ＢＲＤ９、およびＴＡＦ１を、各遺伝子について２つの独立したｓｈＲＮＡヘアピンを使用して、ＲＥＤＳ３細胞においてノックダウンした。ウエスタンブロットをおこなって、各ヘアピンによる下方制御のレベルを確認した（図４ｄを参照）。ノックダウン後のＲＦＰ陽性核の数を、生細胞イメージングによって定量化した。ＲＦＰ陽性核の有意な増加を、ＴＡＦ１を下方制御しているときに観察し、その一方で、ＢＲＤ９、ＣＲＥＢＢＰまたはＥＰ３００下方制御では、ＲＦＰ陽性核の有意な増加が検出されなかった（図４ｅを参照）。さらに、ＣＲＥＢＢＰおよびＥＰ３００の化学プローブが既に報告されていたので（Hay et al., 2014; Hammitzsch et al., 2015; Picaud et al., 2015）、本発明者らは、これらのブロモドメインの活性のさらなる減少がＲＦＰ陽性細胞の数を上げることができるかどうか確認するために、用量応答においてそれらを試験した（図４ｆを参照）。ＲＦＰ発現は、Ｉ−ＣＢＰ１１２、最も選択的なＣＲＥＢＢＰ／ＥＰ３００阻害剤を使用して検出されなかった。ＣＢＰ３０は、高濃度にてＢＲＤ４に結合することが知られている。したがって、ＣＲＥＢＢＰおよびＥＰ３００を阻害することができる用量（Hammitzsch et al., 2015）は、まったく効果を示さなかったが、その一方で、１０μＭのＣＢＰ３０を用いた処理は、ＤＭＳＯ処理細胞と比較して、１．５倍のＲＦＰ陽性細胞の増加をもたらし、ＢＲＤ４阻害による可能性が高い。
【０２８９】
ブロモスポリンや３，５−ジメチルイソキサゾール誘導体（McKeown et al., 2014）を含めた、いくつかのＢＲＤ４阻害剤は、ＴＡＦ１に結合することが知られているが、これまで、このブロモドメイン含有タンパク質に利用可能な特異的阻害剤が存在しなかった。ＣｅＭＭＥＣ１がＴＡＦ１（２）に対して高い親和性を示しと仮定して、本発明者らは、この相互作用をさらに特徴づけようと決めた。ＢｒｏｍｏＫｄＥＬＥＣＴアッセイを使用して、ＣｅＭＭＥＣ１が１．４μＭのＫｄでＴＡＦ１（２）に結合することを確認した（図４ｇを参照）。同様に、蛍光共鳴エネルギー移動（ＦＲＥＴ）分析では、ＣｅＭＭＥＣ１が、優れた有効性でそのＴＡＦ１結合部位からテトラアセチル化Ｈ４ペプチドを置換することを実証した（データ未掲載）。いくつかのキナーゼ阻害剤が、ブロモドメイン阻害剤として振る舞うことができることを示した（Ciceri et al., 2014）。ＣｅＭＭＥＣ１の特異性を評価するために、本発明者らは、９７の代表的なキナーゼプロファイルの活性部位への化合物の結合を試験した。これらのキナーゼのいずれも１０μＭのＣｅＭＭＥＣ１濃度にて６０％超阻害されることはなく、該化合物のブロモドメイン特異性を示した（図８ｄを参照）。
【０２９０】
次に、ＣｅＭＭＥＣ１およびＣｅＭＭＥＣ２の結合モードに対する仮説を生み出すために、分子結合を使用した。ＣｅＭＭＥＣ２はトリアゾロピリダジンなので、他の関連トリアゾロフタラジンと同様にＢＲＤ４に結合すると予測される（Fedorov et al., 2014）（図４ｈを参照）。トリアゾール窒素は、ＢＲＤ４のペプチド結合ポケットの奥深くの保存アスパラギンに水素結合を形成し、それにより、アセチルリジン模倣体として機能する、と予測される。ＣｅＭＭＥＣ１は、Ｎ−メチルイソキノリノン誘導体である。ＡＴＡＤ２のブロモドメインへのＮ−メチルキノリノンの結合に基づいて（Chaikuad et al., 2014）、ＣｅＭＭＥＣ１はＴＡＦ１ポケットにモデル化できる（図４ｉを参照）。そのラクタムカルボニルは、保存された水分子を通してＮ１６０４と、およびＹ１５６１と水素結合を形成することが予測される。この結合様式を試験するために、本発明者らは、２９のＣｅＭＭＥＣ１類似体のパネルを作製した（図１２を参照）。これらの化合物を、ＲＥＤＳ３細胞においてＲＦＰを活性化するそれらの能力、ならびにＢＲＤ４（１）、ＢＲＤ４（２）、ＢＲＤ９、ＣＲＥＢＢＰ、ＥＰ３００、およびＴＡＦ１（２）のブロモドメインへの結合について試験した（図８ｅを参照）。ジヒドロベンゾジオキシン部分における置換が通常許容され、かつ、イソキノリノンの大部分がＣＲＥＢＢＰおよびＴＡＦ１への何らかの結合を維持しているので、全体的に、データはＣｅＭＭＥＣ１結合の分子モデルと一致している。おもしろいことに、試験した２つの類似体、化合物２９および３０は、ＣＲＥＢＢＰに対するすべての親和性を失い、その一方で、ＴＡＦ１活性を維持している。対照的に、化合物３２および３５は、それらが試験したブロモドメインタンパク質に結合せず、それらはＲＥＤＳ３細胞においてＲＦＰ発現も引き起こさなかったので、陰性対照としての役割を果たすことができる。ＴＡＦ１特異的化合物は両方とも、予測された活性部位結合イソキノリノンの構造異性体である。化合物２９では、イソキノリノンがキノリノンに変更されており、その一方で、化合物３０では、中央アミドの付着部位と方向が変更されている。そのため、本発明者らは、ＴＡＦ１（２）やＢＲＤ４（１）への特定の化合物の結合をモデル化した。化合物３０を、両方のタンパク質の中に結合したが、ジヒドロベンゾジオキシンは、ＴＡＦ１ではＷ１５４７およびＢＲＤ４ではＬ９２との異なる相互作用によって引き起こされる結合ポケット内の抜本的に異なる空間を占める（図８ｆを参照）。ＴＡＦ１の異なる結合モードは、特異性の原因を明らかにするのに有望な、リガンドがＮ１５５４と水素結合を形成することを可能にする（図８ｇを参照）。化合物２９において、残基Ｌ９２とＷ８１との衝突のため、ＢＲＤ４について説得力がある結合姿勢が得られなかった（図８ｈを参照）。
【０２９１】
最終的に、ＣｅＭＭＥＣ１類似体２９は選択的ＴＡＦ１阻害剤であるように見えるので、本発明者らは、１０μＭにて、アセチル化基質へのＢＲＤ４（１）、ＢＲＤ９、ＣＲＥＢＢＰ、ＥＰ３００およびＴＡＦ１（２）ブロモドメインの結合を阻害する能力を試験した（図８ｉを参照）。この大きなパネル内ではまた、化合物２９はＴＡＦ１（２）ブロモドメインに対して高い選択性も示した。
【０２９２】
ＴＡＦ１は、転写調節を媒介する、ＢＲＤ４との相乗作用を示す
本明細書中に提供する結果は、ＴＡＦ１表現型コピーの阻害であるＢＲＤ４阻害が、２つのブロモドメインタンパク質の間の見込まれる機能的繋がりを示した。確かに、ＲＥＤＳ３細胞におけるＴＡＦ１の下方制御は、ＢＲＤ４下方制御によって引き起こされたものに匹敵するレベルまで、ＲＦＰ発現を増強し（図９ａ）、かつ、ｃ−ＭＹＣ発現を減少させる（図５ａを参照）。本発明者らは、これらの２つのブロモドメインタンパク質が直接相互作用できたか否か試験した。２９３Ｔ細胞をＢＲＤ４−ＦＬＡＧを用いてトランスフェクトし、そして、４８時間後のＦＬＡＧプルダウンでは、ＴＡＦ１がＦＬＡＧ−ＢＲＤ４と同時に免疫沈降し（図９ｂを参照）、遺伝子発現を制御する際のこれらの２つのブロモドメイン含有タンパク質の直接的相互作用を示唆した。
【０２９３】
本明細書中に提供する結果が、ＢＲＤ４の機能性を確保する際のＴＡＦ１の役割を明らかにしたので、本発明者らは、ＴＡＦ１の下方制御がＢＲＤ４の阻害に対して細胞を感受性化できるかかどうか追及した。ｓｈＲＮＡｓ標的化ＴＡＦ１または対照ヘアピンで処理したＫＢＭ７細胞を、さまざまな濃度の（Ｓ）−ＪＱ１と共にインキュベートし、そして、細胞生存率を９６時間後に計測した。ＴＡＦ１の下方制御は、（Ｓ）−ＪＱ１を対照細胞に影響できない濃度にて使用したとき、細胞生存率を減少させ、そして、高い濃度であるほど細胞数をさらに減少させた（図５ｂを参照）。同様に、新しい直接的ＢＲＤ４阻害剤、ＣｅＭＭＥＣ２の、ＴＡＦ１下方制御との相乗作用が、観察された（図５ｃを参照）。さらに、ＣｅＭＭＥＣ１によるＴＡＦ１の追加的な阻害は、ＴＡＦ１下方制御細胞における細胞生存率を減少させ（図９ｃを参照）、ＴＡＦ１活性のみの大きな低減がこれらの細胞において毒性であることを示唆した。
【０２９４】
これらの２つのブロモドメイン含有タンパク質の間の機能的関係についてさらなる証拠を提供するために、本発明者らは、ＴＡＦ１およびＢＲＤ４をＣｅＭＭＥＣ１または類似体２９もしくは３０と同時に阻害し（図５ｄを参照）、そしてそれは、それぞれＲＥＤＳ３細胞におけるＲＦＰ発現（図５ｅを参照）および（Ｓ）−ＪＱ１の共通する誘導を示した。ＲＥＤＳ３細胞におけるこれらの化合物の組み合わせは、単独処理における増大を超えてＲＦＰ発現をさらに惹起し、ＲＦＰ遺伝子座の再編に対するＴＡＦ１とＢＲＤ４との協働を示唆した。同じ効果は、ＴＡＦ１不活性類似体３２と３５を使用したときには、達成されなかった（図５ｆを参照）。
【０２９５】
ＫＢＭ７細胞はＢＲＤ４阻害剤に対して特に感受性であるわけではないので、本発明者らは、ＢＲＤ４阻害剤とＴＡＦ１阻害剤との間の相乗効果が、ＢＲＤ４依存性癌において保存されるか否か試験することを望んだ。そのため、ＴＡＦ１とＢＲＤ４との複合阻害が、ＴＨＰ１およびＨ２３細胞の増殖を減少させることができるか否か、また、肺腺癌細胞株もまたＢＲＤ４の阻害に対して感受性であるか、試験した。（Ｓ）−ＪＱ１とＣｅＭＭＥＣ１との組み合わせが、個々の処理に比べて、細胞生存率をさらに効率的に減少させることが観察された（図５ｇおよび９ｄを参照）。Ｂｌｉｓｓ独立性試験（Bliss, 1939）では、これらの２つの処理の間の相乗作用を確認し、そして、ＴＡＦ１（２）を結合する際に最も特異的である、ＪＱ１Ｓと類似体２９との間の組み合わせが最も効果的であることを示した（図９ｅを参照）。
【０２９６】
考察
クロマチンレポーター細胞株は、位置効果多様性のモジュレーター、およびクロマチン標的化小分子を同定するためのモデルとして提案された（Johnson et al., 2008; Best et al., 2011; Wang et al., 2013; Tchasovnikarova et al., 2015）。以前のアプローチとは対照的に、本発明者らは、特異的な調節因子ＢＲＤ４に注目したクロマチン再活性化をマッピングするストラテジーを開発した。彼らは、ゲノム領域を完全に抑制し、かつ、ＢＲＤ４阻害に続いて、ＲＦＰの発現を特異的に活性化したレポーターを組み込んだクローンを選択した。レポーター細胞株のハプロイド性質が、遺伝学的スクリーニングに順応するのを容易にし、そして、ＢＲＤ４機能的経路における遺伝子同定のための適用は、ＢＲＤ４の生物学にさらなる洞察を提供する。
【０２９７】
このレポーター細胞株をバリデートしたことで、本発明者らは、最初に、化学ゲノミクスアプローチを採用し、そして、ＢＲＤ４に機能上拮抗する化合物を同定した。彼らのライブラリーに含まれているすべての既知のＢＥＴ阻害剤に加えて、本発明者らは、これまでＢＲＤ４生物学に関連していなかった１３の小分子を同定した。これらの分子のうちの１つが、パノビノスタット、臨床的に承認されたヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）阻害剤である。試験した４０超のＨＤＡＣ標的化化合物の中で、パノビノスタットは、ＲＥＤＳ３細胞においてＲＦＰ発現を誘導する単独の化合物であり、パノビノスタット特異的活性を示す。これらの知見は、それらの分子機序およびタンパク質標的に関する、パノビノスタットおよび他のすべてのバリデート済みヒット化合物の完全な特徴づけに対する将来的な取り組みを促す。
【０２９８】
本発明者らは、ＲＦＰレポーター発現を活性化するそれらの能力によるだけでなく、ｃ−ＭＹＣを抑制することにもよる、表現型模写ＢＲＤ４阻害剤である２つの化合物に対するそれらの成果にも注目した。ヒット構造の１つであるＣｅＭＭＥＣ２は、新規の直接的ＢＲＤ４阻害剤であることが分かった。興味深いことに、いくつかの報告が特許文献の中に存在し、ＢＲＤ４を阻害するＣｅＭＭＥＣ２に関連する化合物を記載していた（ＷＯ２０１４／１９１８９４；ＷＯ２０１４／０７６１４６；ＵＳ２０１４／０１３５３３６；ＷＯ２０１４／１９１８９６；ＵＳ２０１４／０３４９９９０；ＷＯ２０１２／１７４４８７）。さらに、本明細書中に提供するスクリーンはまた、ＢＲＤ４に強く結合しないが、それでもレポーター細胞株を活性化する化合物をもたらした。これらの化合物のうちの１つであるＣｅＭＭＥＣ１に関して、本発明者らは、彼らのシステムにおける関連標的としてＴＡＦ１を同定した。ＴＡＦ１は、ＴＦＩＩＤコアに含まれるＴＡＦサブユニットの最も大きい構成要素であり、そしてそれは、前開始複合体（ＰＩＣ）の一部であり、ＴＡＴＡボックスを認識し、そして、転写開始のためにＲＮＡＰｏｌ ＩＩを正しく配置する役割を担っている（Lee et al., 2005; Kloet et al., 2012; Kandiah et al., 2014）。それにより、ＴＡＦ１は、転写機構の構築における基本的な役割を担っている。ＢＲＤ４と同様に、ＴＡＦ１は、多くのさまざまな細胞株の生存能力に不可欠であり（Wang et al., 2015; Blomen et al., 2015）、そして、２つのタンパク質は、転写調節においてだけでなく、免疫共沈降実験において物理的にも相互作用する。本発明者らは、ＴＡＦ１ノックダウンがＢＲＤ４阻害に対する感受性を増強すること、およびＢＲＤ４阻害剤が、ＢＲＤ４依存性細胞株の生存率を低減するように、ＣｅＭＭＥＣ１などのＴＡＦ１阻害剤と相乗作用することを示した。
【０２９９】
ＴＡＦ１のブロモドメインの特異的機能は理解できないままであった；本明細書中に提供する結果は、ＴＡＦ１の第二のブロモドメインがＢＲＤ４駆動癌における関連標的であることを示している。ＣｅＭＭＥＣ１は、このドメインのドラッガビリティーを立証し、そして、ブロモドメイン阻害剤としてのイソキノリノンのさらなる開発を可能にする（Arrowsmith et al., 2015; Workman et al., 2010; Frye, 2010）。
キノリノン２９などのより選択的な類似体は、癌においてＴＡＦ１を特異的に標的化するための道を開く。
【０３００】
まとめると、本明細書中に提供した結果は、クロマチン構成および転写調節を調整する機能的経路および新規の化学構造を同定するための１倍体エピジェネティックレポーターの適用を首尾よく確認した。
【０３０１】
本明細書中に提供した結果は、図１２に示した式（Ｉ）の代表的な化合物を含めた式（Ｉ）の化合物が、ＴＡＦ１の強力な阻害剤であり、それにより、ＴＡＦ１に関連する疾患／障害の治療法、特に癌の治療または予防に使用できることをさらに実証する。
【０３０２】
実施例２
本発明による以下のさらなる式（Ｉ）の化合物を、以下のスキームにしたがって、Enamine Ltd.（Kiev, Ukraine）によって合成した：
【化６８】
2019508496.tif 000070
【０３０３】
ＤＭＦ（１ｍｌ）中の酸１（１．１ｍｍｏｌ）、アミン２（１．０ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ（１．１ｍｍｏｌ）、およびＨＯＢｔ（１．６ｍｍｏｌ）の混合物を、室温にて２４時間撹拌した。クロロホルム（６ｍｌ）および水（８ｍｌ）を加え、有機層を分離し、水（８ｍｌ）で２回洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4上で乾燥させ、そして留去した。未精製残基を、勾配溶出（メタノール−水）を用いた逆相（С−１８）クロマトグラフィーによって精製して、純粋な３を得た。
【０３０４】
すべての化合物を、９０％の最低純度を必要とするように、ＬＣ−ＭＳによって品質管理した。
【０３０５】
【化６９】
2019508496.tif 000071
【化７０】
2019508496.tif 000072
【化７１】
2019508496.tif 000073
【０３０６】
ＴＡＦ１へのこれらの化合物の結合を、以下のプロトコールにしたがって、試験化合物とブロモドメインとの相互作用を定量的に計測することを可能にするリガンド結合部位−定方向競合アッセイであるＢＲＯＭＯｓｃａｎアッセイを使用した一次スクリーンにより、DiscoverX Corporation（Fremont, CA, USA）によって試験した（このアッセイの原理に関する説明については、Fabian et al., 2005を参照）：
【０３０７】
ブロモドメインアッセイ：ブロモドメインを提示するＴ７ファージ菌株を、ＢＬ２１菌株由来のＥ．コリ（E.coli）宿主内で、２４ウェル−ブロックにより並行して培養した。Ｅ．コリを対数期まで培養し、冷蔵ストックからのＴ７ファージを感染させ（感染多重度＝０．４）、溶解するまで（９０〜１５０分間）３２℃にて振盪しながらインキュベートした。溶解物を、遠心分離し（５，０００×ｇ）、濾過して（０．２μｍ）、細胞破片を取り除いた。ストレプトアビジンコートした磁性ビーズを、ビオチン化小分子またはアセチル化ペプチドリガンドで室温にて３０分間処理して、ブロモドメインアッセイのための親和性樹脂を作製した。リガンド結合ビーズを、過剰なビオチンでブロックし、ブロッキングバッファー（SeaBlock（Pierce）、１％のＢＳＡ、０．０５％のＴｗｅｅｎ２０、１ｍＭのＤＴＴ）で洗浄して、非結合リガンドを取り除いて、非特異性ファージ結合を低減した。結合反応物を、１×結合バッファー（１６％のSeaBlock、０．３２×ＰＢＳ、０．０２％のＢＳＡ、０．０４％のＴｗｅｅｎ２０、０．００４％のアジ化ナトリウム、７．９ｍＭのＤＴＴ）中でブロモドメイン、リガンド結合親和性ビーズ、および試験化合物を組み合わせることによって構築した。試験化合物を、１００％のＤＭＳＯ中の１０００×ストックとして調製し、それに続いて、モノエチレングリコール（ＭＥＧ）中で１：２５に希釈した。次に、ＤＭＳＯおよびＭＥＧの終濃度がそれぞれ０．１％および２．４％となるように、化合物をアッセイ物中に直接希釈した。すべての反応を、０．０２ｍｌの終量にてポリプロピレン３８４ウェルプレート内でおこなった。該アッセイプレートを、振盪しながら室温にて１時間インキュベートし、そして、親和性ビーズを洗浄バッファー（１×ＰＢＳ、０．０５％のＴｗｅｅｎ２０）で洗浄した。次に、そのビーズを、溶出バッファー（１×ＰＢＳ、０．０５％のＴｗｅｅｎ２０、２μＭの非ビオチン化親和性リガンド）中に再懸濁し、振盪しながら室温にて３０分間インキュベートした。溶出液中のブロモドメイン濃度をｑＰＣＲによって計測した。
【０３０８】
化合物を、１μＭの濃度にて試験し、％阻害を次のように決定した：
【数１】
2019508496.tif 000074
【０３０９】
陰性対照＝ＤＭＳＯ（０％阻害）
陽性対照＝３０μＭのＢＩ２５３６（１００％阻害）
【０３１０】
こうして得られたＴＡＦ１（ＢＤ２）の％阻害データを、さらに下の表中にまとめる。
加えて、ＴＡＦ１（ＢＤ２）に関する化合物２９、３０、４−１、および４−２６の阻害剤結合定数（Ｋｄ値）を、以下のプロトコールにしたがって、ＢＲＯＭＯｓｃａｎアッセイを使用したDiscoverX Corporation（Fremont, CA, USA）によって続いて測定した：
【０３１１】
ブロモドメインアッセイ：ブロモドメインを提示するＴ７ファージ菌株を、ＢＬ２１菌株由来のＥ．コリ（E.coli）宿主内で、２４ウェル−ブロックにより並行して培養した。Ｅ．コリを対数期まで培養し、冷蔵ストックからのＴ７ファージを感染させ（感染多重度＝０．４）、溶解するまで（９０〜１５０分間）３２℃にて振盪しながらインキュベートした。溶解物を、遠心分離し（５，０００×ｇ）、濾過して（０．２μｍ）、細胞破片を取り除いた。ストレプトアビジンコートした磁性ビーズを、ビオチン化小分子またはアセチル化ペプチドリガンドで室温にて３０分間処理して、ブロモドメインアッセイのための親和性樹脂を作製した。リガンド結合ビーズを、過剰なビオチンでブロックし、ブロッキングバッファー（SeaBlock（Pierce）、１％のＢＳＡ、０．０５％のＴｗｅｅｎ２０、１ｍＭのＤＴＴ）で洗浄して、非結合リガンドを取り除いて、非特異性ファージ結合を低減した。結合反応物を、１×結合バッファー（１７％のSeaBlock、０．３３×ＰＢＳ、０．０４％のＴｗｅｅｎ２０、０．０２％のＢＳＡ、０．００４％のアジ化ナトリウム、７．４ｍＭのＤＴＴ）中でブロモドメイン、リガンド結合親和性ビーズ、および試験化合物を組み合わせることによって構築した。試験化合物を、１００％のＤＭＳＯ中の１０００×ストックとして調製し、それに続いて、モノエチレングリコール（ＭＥＧ）中で１：２５に希釈した。Ｋｄを、１点のＤＭＳＯ対照と１１点の３倍化合物希釈系列を使用して決定した。Ｋｄ測定値のためのすべての化合物を、１００％のＤＭＳＯ中での音響移送（非接触調剤）によって分注する。次に、ＤＭＳＯの終濃度が０．９９％となるように、化合物をアッセイ物中に直接希釈した。すべての反応をポリプロピレン３８４ウェルプレート内でおこなった。それぞれ０．０２ｍｌの終量であった。該アッセイプレートを、振盪しながら室温にて１時間インキュベートし、そして、親和性ビーズを洗浄バッファー（１×ＰＢＳ、０．０５％のＴｗｅｅｎ２０）で洗浄した。次に、そのビーズを、溶出バッファー（１×ＰＢＳ、０．０５％のＴｗｅｅｎ２０、２μＭの非ビオチン化親和性リガンド）中に再懸濁し、振盪しながら室温にて３０分間インキュベートした。溶出液中のブロモドメイン濃度をｑＰＣＲによって計測した。
【０３１２】
化合物の取り扱い：それぞれの試験化合物の１１点の３倍希釈系列を、１０００×最終試験濃度にて１００％のＤＭＳＯ中で調製した。Ｋｄ測定値のためのすべての化合物を、１００％のＤＭＳＯ中での音響移送（非接触調剤）によって分注する。次に、ＤＭＳＯの終濃度が０．０９％となるように、化合物をアッセイ物中に直接希釈した。ほとんどのＫｄが、最高濃度＝１０，０００ｎＭの化合物を使用して決定した。測定した初期Ｋｄが＜０．１６９ｎＭ（試験した最低濃度）であった場合、より低い最高濃度で始まる段階希釈を用いて計測を繰り返した。
【０３１３】
結合定数（Ｋｄ）を、ヒルの式を使用した標準的な用量−応答曲線を用いて計算した：
【数２】
2019508496.tif 000075
【０３１４】
ヒルの傾き (Hill Slope)を−１に設定した。Levenberg-Marquardtアルゴリズムを用いた非線形最小二乗フィットを使用して、曲線を当てはめた。
【０３１５】
こうして得られた結果を、ＴＡＦ１（ＢＤ２）のＩＣ50値［μＭ］として以下の表中に報告する。
【表１】
2019508496.tif 000076
【０３１６】
これらの結果は、本発明による式（Ｉ）の化合物が、ＴＡＦ１を阻害するで有効であり、かつ、それにより、ＴＡＦ１に関連する疾患／障害の治療法、特に癌の治療または予防に使用できることをさらに裏づける。
【０３１７】
参照文献
【表２】
2019508496.tif 000077
【表３】
2019508496.tif 000078
【表４】
2019508496.tif 000079
【表５】
2019508496.tif 000080
【図１−１】
2019508496.tif 000105
【図１−２】
2019508496.tif 000106
【図２−１】
2019508496.tif 000107
【図２−２】
2019508496.tif 000108
【図２−３】
2019508496.tif 000109
【図３−１】
2019508496.tif 000110
【図３−２】
2019508496.tif 000111
【図４−１】
2019508496.tif 000112
【図４−２】
2019508496.tif 000113
【図４−３】
2019508496.tif 000114
【図４−４】
2019508496.tif 000115
【図５−１】
2019508496.tif 000116
【図５−２】
2019508496.tif 000117
【図５−３】
2019508496.tif 000118
【図６】
2019508496.tif 000119
【図７−１】
2019508496.tif 000120
【図７−２】
2019508496.tif 000121
【図８−１】
2019508496.tif 000122
【図８−２】
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【図８−３】
2019508496.tif 000124
【図９−１】
2019508496.tif 000125
【図９−２】
2019508496.tif 000126
【図９−３】
2019508496.tif 000127
【図１０−１】
2019508496.tif 000128
【図１０−２】
2019508496.tif 000129
【図１１−１】
2019508496.tif 000130
【図１１−２】
2019508496.tif 000131
【図１１−３】
2019508496.tif 000132
【図１２−１】
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【図１２−２】
2019508496.tif 000134
【配列表】
2019508496000001.app
【国際調査報告】
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2019508496.tif 000137
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