(57)【要約】  本発明は、新しいタイプのタキサン化合物およびその製造方法および適用を開示する。新しいタイプのタキサン化合物の製造方法は、次の工程を含む：ゲムシタビンにおける２つのヒドロキシル基を保護し、保護ゲムシタビンとクロロギ酸アルキルの間の縮合反応を実施し、ヒドロキシル保護基を除去して中間体Ｇ１を得る工程、中間体Ｇ１の第一ヒドロキシル基を保護し、次いでヒドロキシル基の他方の１つを保護し、第一ヒドロキシル基の保護基を除去して、中間体Ｇ２を得る工程、７,１０−ジ−ｔｒｏｃ−ドセタキセルと二無水物を反応させて、中間体Ｄ１を得る工程、中間体Ｄ１と中間体Ｇ２の間の縮合反応を実施して、中間体Ｄ２を得る工程、および中間体Ｄ２をヒドロキシル脱保護に付して、目的化合物を得る工程。本発明の新しいタイプのタキサン化合物は低毒性および高抗腫瘍活性であり、特に白血病および消化器癌、肺癌、および乳癌などの固形腫瘍に対する良好な阻害率を有する。
2019524654.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式(Ｉ)
【化１】
2019524654.tif 000011
〔式中、Ｒ１はＣ１−Ｃ６アルキルまたは置換アルキルであり；ｎは０〜６である。〕
に示す構造を有することを特徴とする、新しいタイプのタキサン化合物。
【請求項２】
式(Ｉ)において、Ｒ１がエチル、ｎ−ブチルまたはｎ−ヘキシルであり、ｎが０〜２である、請求項１に記載の新しいタイプのタキサン化合物。
【請求項３】
式(Ｉ)において、Ｒ１がｎ−ブチルであり、ｎが１である、請求項２に記載の新しいタイプのタキサン化合物。
【請求項４】
請求項１〜３の何れかに記載の新しいタイプのタキサン化合物の製造方法であって、
Ｓ１：ゲムシタビンにおける２つのヒドロキシル基を保護し、保護ゲムシタビンとクロロギ酸アルキルの間の縮合反応を実施し、ヒドロキシ保護基を除去して中間体Ｇ１を得る工程、
Ｓ２：工程Ｓ１により製造した中間体Ｇ１のヒドロキシル基の最初の一つを保護し、次いでヒドロキシル基の他方の１つを保護し、そしてヒドロキシル保護基の最初の１つを除去して、中間体Ｇ２を得る工程、
Ｓ３：７,１０−ジ−ｔｒｏｃ−ドセタキセルと二無水物を反応させて、中間体Ｄ１を得る工程、
Ｓ４：工程Ｓ３により製造した中間体Ｄ１と工程Ｓ２により製造した中間体Ｇ２の間の縮合反応を実施して、中間体Ｄ２を得る工程、および
Ｓ５：工程Ｓ４により製造した中間体Ｄ２をヒドロキシル脱保護に付して、目的化合物を得る工程
を含むことを特徴とする、方法。
【請求項５】
工程Ｓ１におけるクロロギ酸アルキルがクロロギ酸ｎ−ブチルであることを特徴とする、請求項１に記載の新しいタイプのタキサン化合物を製造する方法。
【請求項６】
工程Ｓ３における二無水物がグルタル酸無水物であることを特徴とする、請求項１に記載の新しいタイプのタキサン化合物を製造する方法。
【請求項７】
工程Ｓ１において使用するヒドロキシル保護剤がヘキサメチルジシラザンであり、工程Ｓ２において第一ヒドロキシル基の保護に使用する保護剤がｔｅｒｔ−ブチルジメチルクロロシランであり、工程Ｓ２において第二ヒドロキシル基の保護に使用する保護剤がクロロギ酸２,２,２−トリクロロエチルである、請求項１に記載の新しいタイプのタキサン化合物を製造する方法。
【請求項８】
腫瘍を阻害する薬物の製造における、請求項１〜３の何れかに記載の新しいタイプのタキサン化合物の適用。
【請求項９】
腫瘍が結腸癌、直腸癌、胃癌、肺癌、乳癌、前立腺癌、膵臓癌、肝臓癌、食道癌、脳腫瘍、卵巣癌、子宮癌、腎臓癌、頭頸部癌、皮膚癌、膀胱癌、外陰癌、精巣腫瘍、絨毛癌、胚細胞腫瘍、悪性リンパ腫、白血病、および多発性骨髄腫を含む、請求項８に記載の適用。
【請求項１０】
腫瘍が結腸癌、直腸癌、胃癌、肺癌、膵臓癌、肝臓癌、卵巣癌、腎臓癌、悪性リンパ腫、乳癌および白血病を含む、請求項９に記載の適用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
本発明は、新しいタイプのタキサン化合物、および該タキサン化合物の製造方法、および該タキサン化合物の適用に関する。
【背景技術】
【０００２】
背景
大部分の既存のタキサン化合物は、高毒性および低抗腫瘍活性、特に白血病および消化器癌、肺癌、および乳癌などの固形腫瘍に対する阻害性効果の乏しさなどの欠点を有する。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
発明の要約
本発明の目的は、先行技術において存在する欠点を解消し、白血病および消化器癌、肺癌、および乳癌などの固形腫瘍に対する良好な阻害率を示す、低毒性および高抗腫瘍活性を有する新しいタイプのタキサン化合物を提供することおよび該タキサン化合物の製造方法および適用を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００４】
本発明の上記目的を達成するための技術的解決は、式(Ｉ)
【化１】
2019524654.tif 000003
に示す新しいタイプのタキサン化合物である。
【０００５】
式(Ｉ)において、Ｒ１はＣ１−Ｃ６アルキルまたは置換アルキル、好ましくはエチル、ｎ−ブチルまたはｎ−ヘキシル、より好ましくはｎ−ブチルである。
【０００６】
ｎは０〜６、好ましくは０〜２、より好ましくは１である。
【０００７】
上記の新しいタイプのタキサン化合物の製造方法は、次の工程を含む。
【０００８】
Ｓ１：ゲムシタビンにおける２つのヒドロキシル基を保護し、次いで保護ゲムシタビンとクロロギ酸アルキルの間の縮合反応を実施し、続いてヒドロキシ保護基を除去して、中間体Ｇ１を得る；
【０００９】
Ｓ２：工程Ｓ１で製造した中間体Ｇ１のヒドロキシル基の最初の一つを保護し、次いでヒドロキシル基の他方の１つを保護し、続いてヒドロキシル保護基の最初の１つを除去して、中間体Ｇ２を得る；
【００１０】
Ｓ３：７,１０−ジ−ｔｒｏｃ−ドセタキセルと二酸無水物を反応させて、中間体Ｄ１を得る；
【００１１】
Ｓ４：工程Ｓ３により製造した中間体Ｄ１と工程Ｓ２により製造した中間体Ｇ２の間の縮合反応を実施して、中間体Ｄ２を得る；および
【００１２】
Ｓ５：工程Ｓ４により製造した中間体Ｄ２をヒドロキシル脱保護に付して、目的生産物を得る。
【００１３】
上記工程Ｓ１において使用するヒドロキシル保護剤は、ヘキサメチルジシラザン、ヘキサメチルジシロキサン、トリメチルクロロシランまたはトリメチルヨードシラン、好ましくはヘキサメチルジシラザンである。
【００１４】
上記工程Ｓ１において記載するクロロギ酸アルキルはクロロギ酸メチル、クロロギ酸エチル、クロロギ酸ｎ−プロピル、クロロギ酸イソプロピル、クロロギ酸ｎ−ブチル、クロロギ酸ｎ−アミル、クロロギ酸ｎ−ヘキシルの１つ、好ましくはクロロギ酸エチル、クロロギ酸ｎ−ブチルまたはクロロギ酸ｎ−ヘキシル、より好ましくはクロロギ酸ｎ−ブチルである。
【００１５】
上記工程Ｓ２における第一ヒドロキシル基の保護に使用する保護剤はｔｅｒｔ−ブチルジメチルクロロシラン、イソプロピルジメチルクロロシラン、エチルジメチルクロロシランまたはトリメチルクロロシラン、好ましくはｔｅｒｔ−ブチルジメチルクロロシランである。
【００１６】
上記工程Ｓ２における第二ヒドロキシル基の保護に使用する保護剤はクロロギ酸２,２,２−トリクロロエチルである。
【００１７】
上記工程Ｓ３において使用する二酸無水物はコハク無水物、グルタル酸無水物またはアジピン酸無水物、好ましくはグルタル酸無水物である。
【００１８】
上記工程Ｓ４における縮合反応に使用する反応材は、Ｎ−(３−ジメチルアミノプロピル)−Ｎ’−エチルカルボジイミド塩酸塩(ＥＤＣＩ)、１−(３−ジメチルアミノプロピル)−３−エチルカルボジイミド塩酸塩(ＥＤＣ)、ジシクロヘキシルカルボジイミド(ＤＣＣ)またはＮ,Ｎ−ジイソプロピルカルボジイミド(ＤＩＣ)、好ましくはＮ−(３−ジメチルアミノプロピル)−Ｎ’−エチルカルボジイミド塩酸塩または１−(３−ジメチルアミノプロピル)−３−エチルカルボジイミド塩酸塩、より好ましくはＮ−(３−ジメチルアミノプロピル)−Ｎ’−エチルカルボジイミド塩酸塩である。
【００１９】
上記工程Ｓ４における縮合反応は、好ましくは４−ジメチルアミノピリジン存在下で実施する。
【００２０】
上記工程Ｓ５におけるヒドロキシル脱保護は亜鉛末および酢酸ナトリウム存在下で行う。
【００２１】
上記新しいタイプのタキサン化合物を、抗腫瘍剤の製造に適用し得る。
【００２２】
腫瘍は、血液腫瘍または悪性固形腫瘍であり、特に、上記腫瘍は、結腸癌、直腸癌、胃癌、肺癌、乳癌、前立腺癌、膵臓癌、肝臓癌、食道癌、脳腫瘍、卵巣癌、子宮癌、腎臓癌、頭頸部癌、皮膚癌、膀胱癌、外陰癌、精巣腫瘍、絨毛癌、胚細胞腫瘍、悪性リンパ腫、白血病および多発性骨髄腫を含み、好ましくは結腸癌、直腸癌、胃癌、肺癌、乳癌および白血病を含む。
【００２３】
活性成分としての上記新しいタイプのタキサン化合物および１以上の薬学的に許容される担体／添加物からなる医薬組成物を製造する。
【００２４】
上記医薬組成物の投与形態は注射投与形態または経口投与形態であり、注射投与形態は注射用溶液、注射用懸濁液、注射用エマルジョン、または注射用無菌粉末であり、経口投与形態は錠剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤、ペレット製剤、液剤、懸濁液剤、エマルジョン剤、シロップ剤またはエリキシル剤である。
【００２５】
本発明の有利な効果は、本発明の新しいタイプのタキサン化合物は、低毒性(最大耐量、すなわち、ＭＴＤはわずか２５０mg／kgである)および高抗腫瘍活性であり、特に白血病および消化器癌、肺癌、および乳癌などの固形腫瘍に対する良好な阻害率を有する(結腸癌の腫瘍増殖阻害率、すなわち、ＴＧＩは最大８５.６９％)。
【図面の簡単な説明】
【００２６】
【図１】中間体Ｇ１の１Ｈ−ＮＭＲスペクトル。
【００２７】
【図２】中間体Ｇ２の１Ｈ−ＮＭＲスペクトル。
【００２８】
【図３】中間体Ｄ１の１Ｈ−ＮＭＲスペクトル。
【００２９】
【図４】中間体Ｄ２の１Ｈ−ＮＭＲスペクトル。
【００３０】
【図５】新しいタイプのタキサン化合物Ｚ１の１Ｈ−ＮＭＲスペクトル。
【００３１】
【図６】新しいタイプのタキサン化合物Ｚ１の１３Ｃ−ＮＭＲスペクトル。
【００３２】
【図７】新しいタイプのタキサン化合物Ｚ１のＨＳＱＣダイアグラム(ヘテロ核種単一量子相関スペクトル)。
【発明を実施するための形態】
【００３３】
詳細な記載
(実施例１)
本実施例の新しいタイプのタキサン化合物Ｚ１は、次の構造式を有する。
【化２】
2019524654.tif 000004
【００３４】
新しいタイプのタキサン化合物Ｚ１の製造方法は次の工程を有する。
【００３５】
Ｓ１：次の合成経路により中間体Ｇ１が製造される。
【化３】
2019524654.tif 000005
【００３６】
具体的方法は次のとおりである。
【００３７】
Ｓ１１：１リットル丸底フラスコに、３０ｇのゲムシタビン(０.１１４mol)、１４３mLのヘキサメチルジシラザン(０.６８mol、６当量)、０.５６９ｇの硫酸アンモニウム(４mmol、０.０３８当量)および１４３mLのジオキサンを加えて、混合物を得た。次いで混合物を１３０℃の油浴中で、アンモニアが発生しなくなるまで１.５時間還流させた。
【００３８】
揮発物蒸発後、半結晶性固体を先ず１０分間真空乾燥させ、残渣を乾燥トルエンと共に２回共蒸発させ、次いで６０℃で真空乾燥させて５３.９９ｇの白色結晶性固体を得た。
【００３９】
Ｓ１２：１１.３mLのクロロギ酸ｎ−ブチル(８９mmol、１.５当量)を、Ｓ１１で製造した２８.０５ｇの上記白色結晶性固体(５９mmol)および８.０２mLのＮ−メチルイミダゾール(１０１mmol、１.７当量)を含む２９６mLのジクロロメタン溶液に、０℃で加えた。この時点で沈殿は生じなかった。この反応混合物を室温(１５〜２５℃、以下同)で４時間撹拌し、次いで溶媒を３０℃で蒸発除去して、残留物を得た。１９７mLのメタノールおよび４１mLのトリエチルアミン(０.２７mol、５当量)を残留物に加え得られた混合物を室温で一夜撹拌し、翌日薄層クロマトグラフィーを実施して、ほとんど全てが目的生成物であることが示された。
【００４０】
溶媒を蒸発により混合物から除去し、残留物を５００mLの酢酸エチル／ジクロロメタン(１：３)混液に溶解し、次いで分液漏斗中で３００mLのクエン酸溶液(４２ｇのクエン酸含有)と共に振盪した。有機層を１００ｇのシリカゲル含有濾過用漏斗に直接注加し、水相を２００mLの酢酸エチル／ジクロロメタン(１：３)混合溶媒で３回抽出し、次いで１００mLの酢酸エチル／ジクロロメタン(１：３)の混合溶媒および３００mLのメタノール／ジクロロメタン(１：２０)の混合溶媒で連続的に溶出して生成物を得た。生成物は１３００mLのメタノール／ジクロロメタン(１：２０)の混合溶媒で溶出した。蒸発および６０℃での真空乾燥により溶媒を除去して、白色泡状固体として１９.８ｇの中間体Ｇ１が得られた。収率９２.０％(ゲムシタビンから計算)。
【００４１】
図１は中間体Ｇ１の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す。
【００４２】
1H NMR (399.86 MHz, DMSO-d6): δ = 0.90 (t, 3H, 3J = 7.42 Hz, CH3), 1.30-1.41 (m, 2H, CH2CH2CH2CH3), 1.54-1.64 (m, 2H, CH2CH2CH2CH3), 3.65 (dm, 1H, 2J = 12.69 Hz, 3J = 3.22 Hz, H-5a’), 3.81 (dm, 1H, 2J = 12.69 Hz, H-5b’), 3.86-3.91 (m, 1H, H-4’), 4.12 (t, 2H, 3J = 6.64 Hz, CH2CH2CH2CH3), 4.13-4.25 (m, 1H, H-3'), 5.30 (t, 1H, 3J = 5.37 Hz, OH-5'), 6.17 (t, 1H, 3J(H-F) = 7.52 Hz, H-1’), 6.32 (d, 1H, 3J = 6.45 Hz, OH-3'), 7.10 (d, 1H, 3J = 7.71 Hz, H-5), 8.22 (d, 1H, 3J = 7.71 Hz, H-6), 10.84 (br s, 1H, NH)
【００４３】
ＬＣ／ＭＳ(ＥＳＩ)[Ｍ＋Ｈ]＋理論値：３６４.１３、測定値：３６４.１７
【００４４】
Ｓ２：中間体Ｇ２を次の合成経路で製造した。
【化４】
2019524654.tif 000006
【００４５】
具体的方法は次のとおりである。
【００４６】
工程Ｓ１により製造した１.５ｇの中間体Ｇｌ(４.１mmol)、０.６５３ｇのｔｅｒｔ−ブチルジメチルクロロシラン(４.３mmol、１.０５当量)および０.７６５mLのピリジン(９.５mmol、２.３当量)を１５mLのジクロロメタンに溶解し、室温で１時間撹拌し、ＴＬＣは、反応の進行が半分であることを示した。反応混合物を一夜撹拌し、なお大量の中間体Ｇ１が存在し、次いで０.１８７ｇのｔｅｒｔ−ブチルジメチルクロロシラン(１.２４mmol、０.３当量)を追加し、反応混合物を室温で６時間撹拌た。ＴＬＣはなお中間体Ｇｌが残っていることを示した。次いで０.１２４ｇのｔｅｒｔ−ブチルジメチルクロロシラン(０.８３mmol、０.２当量)を反応混合物に追加し、一夜撹拌し続け、翌日のＴＬＣは中間体Ｇｌが残存しないことを示した。その後０.２〜３３mLのピリジン(２.９mmol、０.７当量)を添加し、次いで０.６２５mLの２,２,２−トリクロロ−クロロギ酸エチル(４.５mmol、１.１当量)を０℃で加え、反応混合物を室温で０.５時間撹拌したところ、ＴＬＣは反応が完了したことを示した。
【００４７】
反応混合物を３.９０ｇのクエン酸(１８.６mmol、４.５当量)と振盪した。蒸発により溶媒除去し、得られた抽出物は乾燥させる必要がなかったが、残留物を４０℃で高真空で乾燥させ、次いで２７mLのテトラヒドロフランに溶解した。溶液を０℃に冷却し、トリエチルアミンおよび３倍量のフッ化水素酸を加えた。溶液を５℃で一夜冷蔵庫に静置し、翌日反応混合物を２０℃に３時間維持し、次いで溶媒をこの温度での蒸発により除去した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(５５ｇのシリカゲル使用)に付し、５００mLの酢酸エチル／ジクロロメタン(１：５)混合溶媒および４５０mLの酢酸エチル／ジクロロメタン(１：２)混合溶媒で順次溶出させた。同一成分の溶出液を合わせて溶媒を蒸発により除去後６０℃で真空乾燥させて、１.９０４ｇの白色泡状固体として中間体Ｇ２を８６％の収率で得た。
【００４８】
図２は中間体Ｇ２の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す。
【００４９】
1H NMR (399.86 MHz, DMSO-d6):δ = 0.90 (t, 3H, 3J = 7.32 Hz, CH2CH2CH2CH3), 1.30-1.41 (m, 2H, CH2CH2CH2CH3), 1.55-1.64 (m, 2H, CH2CH2CH2CH3), 3.68-3.76 (m, 1H, H-5a’), 3.78-3.85 (m, 1H, H-5b’), 4.12 (t, 2H, 3J = 6.64 Hz, CH2CH2CH2CH3), 4.34-4.39 (m, 1H, H-4’), 5.01 (d, 1H, 2J = 12.20 Hz, Troc), 5.09 (d, 1H, 2J = 12.20 Hz, Troc), 5.31-5.41 (m, 2H, H-3’, OH-5'), 6.34 (t, 1H, 3J(H-F) = 8.60 Hz, H-1’), 7.13 (d, 1H, 3J = 7.62 Hz, H-5), 8.15 (d, 1H, 3J = 7.62 Hz, H-6), 10.87 (br s, 1H, NH)
【００５０】
ＬＣ／ＭＳ(ＥＳＩ)[Ｍ＋Ｈ]＋理論値：５３８.０、測定値：５３８.２
【００５１】
Ｓ３：中間体Ｄ１を次の合成経路で製造した。
【化５】
2019524654.tif 000007
【００５２】
具体的方法は次のとおりである。
【００５３】
０.９５ｇの７,１０−ジ−ｔｒｏｃ−ドセタキセル(０.８２mmol)および０.９３５ｇのグルタル酸無水物(８.２mmol、１０当量)を１０.６mLのピリジン(１３１mmol、１６０当量)に溶解し、反応混合物を室温で２.５時間撹拌し、次いで−２０℃で一夜冷蔵庫に維持した。翌日反応混合物を室温で３時間を超えて撹拌し、ＴＬＣは、反応が実質的に完了したことを示した。
【００５４】
ピリジンを３０℃での蒸発により除去し、残留物をこの温度で真空乾燥させ、次いで５.５ｇ  クエン酸(２６mmol、３２当量)溶液に溶解し、次いでジクロロメタンで抽出した。抽出物をシリカゲルカラム(２０ｇのシリカゲル含有)に直接注加し、不純物を１１０mLのメタノール／ジクロロメタン(１：１００)混合溶媒で洗い流し、生成物を１４３mLのメタノール／ジクロロメタン(１：１００)混合溶媒および１０２mLのメタノール／ジクロロメタン(１：５０)混合溶媒で溶出し、次いで蒸発により溶媒除去後、４０℃で真空乾燥させ、中間体Ｄ１の粗生成物１.０５５ｇを白色固体として得た。
【００５５】
粗製生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(３５ｇのシリカゲル含有)に付し、５０mlのジクロロメタン、２１０mLの酢酸エチル／ジクロロメタン(１：２０)混合溶媒および２２０mLの酢酸エチル／ジクロロメタン(１：１０)混合溶媒で溶出して不純物を洗い流し、溶出した内容物を試験管に集め、酢酸エチル／ジクロロメタン(１：５)混合溶媒でのカラム溶出に付した。同成分を含む溶出液を合わせ、蒸発により溶媒を除去し、４０℃で真空乾燥させて、中間体Ｄ１の最終生成物０.６２３ｇを白色固体として６０％の収率で得た。
【００５６】
図３は中間体Ｄ１の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す。
【００５７】
1H NMR (399.86 MHz, DMSO-d6):δ = 0.98 (s, 3H, CH3), 1.03 (s, 3H, CH3), 1.38 (s, 9H, BOC), 1.51-1.65 (m, 1H), 1.68 (s, 3H, CH3), 1.72-1.91 (m, 4H), 1.80 (s, 3H, CH3), 2.26 (s, 3H, OAc), 2.28 (t, 2H, 3J = 7.42 Hz, COCH2CH2CH2COOH), 2.46 (t, 2H, 3J = 7.23 Hz, COCH2CH2CH2COOH), 2.56-2.50 (m, 1H), 3.65 (d, 1H, 3J = 6.83 Hz, CH), 4.03-4.10 (m, 2H), 4.77 (d, 1H, 2J = 12.01 Hz, Troc-a), 4.81 (s, 1H), 4.93 (d, 1H, 2J = 12.01 Hz, Troc-a), 4.95 (d, 1H, 2J = 12.10 Hz, Troc-b), 4.98-5.02 (m, 1H), 5.00 (d, 1H, 2J = 12.10 Hz, Troc-b), 5.01-5.07 (m, 1H), 5.09 (d, 1H, 3J = 8.40 Hz), 5.38-5.47 (m, 2H), 5.79 (t, 1H, 3J = 8.89 Hz, CH), 6.09 (s, 1H), 7.18 (t, 1H, 3J = 7.32 Hz, CHp-Ph), 7.37 (d, 2H, 3J = 7.62 Hz, CHo-Ph), 7.41-7.47 (m, 2H, CHm-Ph), 7.65-7.72 (m, 2H, CHm-Bz), 7.76 (t, 1H, 3J = 7.32 Hz, CHp-Bz), 7.88 (d, 1H, 3J = 8.98 Hz, NH-BOC), 7.99 (d, 2H, 3J = 7.22 Hz, CHo-Bz), 12.13 (br s, 1H, COOH)
【００５８】
ＬＣ／ＭＳ(ＥＳＩ)[Ｍ＋Ｎａ]＋理論値：１２９２.２、測定値：１２９２.２
【００５９】
Ｓ４：中間体Ｄ２を次の合成経路で製造した。
【化６】
2019524654.tif 000008
【００６０】
具体的方法は次のとおりである。
【００６１】
工程Ｓ２により製造した０.２７７mgの中間体Ｇ２(０.５１mmol、１.１当量)、工程Ｓ３により製造した０.５９４mgの中間体Ｄ１(０.４７mmol、１当量)、９８mgのカルボジイミド(０.５１mmol、１.１当量)および１１.４mgの４−ジメチルアミノピリジン(９５.１０-６mol、０.２当量)を、０℃の温度で０.９３４mLのジクロロメタンに溶解し、反応混合物をゆっくり室温に温めた。一夜撹拌し、翌日のＴＬＣは、主生成物といくつかの微量不純物があることを示した。
【００６２】
反応混合物をシリカゲルカラム(３５ｇのシリカゲル含有)に直接注ぎ、次いで５０mLのジクロロメタン、２０５mLの酢酸エチル／ジクロロメタン(１：４０)混合溶媒、２１０mLの酢酸エチル／ジクロロメタン(１：２０)混合溶媒および２２０mLの酢酸エチル／ジクロロメタン(１：１０)混合溶媒で連続的に溶出して不純物を洗い流した。溶出した目的物を試験管に集め、３６０mLの酢酸エチル／ジクロロメタン(１：５)混合溶媒でのカラム溶出に付した。同一成分の溶出液を合わせ、蒸発により溶媒除去後、４０℃で真空乾燥させて、０.６３６ｇの無色透明の中間体Ｄ２を７６％の収率で得た。
【００６３】
図４は中間体Ｄ２の１Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す。
【００６４】
1H NMR (399.86 MHz, DMSO-d6):δ = 1H NMR (399.86 MHz, DMSO-d6):δ = 0.90 (t, 3H, 3J = 7.32 Hz, CH2CH2CH2CH3), 0.98 (s, 3H, CH3), 1.02 (s, 3H, CH3), 1.30-1.41 (m, 2H, CH2CH2CH2CH3), 1.37 (s, 9H, BOC), 1.51-1.66 (m, 4H, CH2CH2CH2CH3, CH2-a, CH2-a), 1.68 (s, 3H, CH3), 1.75-1.89 (m, 4H), 1.80 (s, 3H, CH3), 2.26 (s, 3H, OAc), 2.43 (t, 2H, 3J = 7.52 Hz, COCH2CH2CH2CO), 2.46 (t, 2H, 3J = 8.01 Hz, COCH2CH2CH2CO), 3.65 (d, 1H, 3J = 6.64 Hz, CH), 4.03-4.10 (m, 2H), 4.12 (t, 2H, 3J = 6.64 Hz, CH2CH2CH2CH3), 4.43 (dd, 1H, 2J = 12.10 Hz, 3J = 6.25 Hz, H-5’a), 4.51 (dd, 1H, 2J = 12.10 Hz, 3J = 2.84 Hz, H-5’b), 4.55-4.62 (m, 1H, H-4’), 4.77 (d, 1H, 2J = 12.11 Hz, Troc-a), 4.80 (s, 1H), 4.93 (d, 1H, 2J = 12.11 Hz, Troc-a), 4.94 (d, 1H, 2J = 12.10 Hz, Troc-b), 4.97-5.20 (m, 3H), 5.01-5.10 (m, 2H), 5.09 (d, 1H, 2J = 12.30 Hz, Troc-c), 5.37-5-57 (m, 3H), 5.80 (t, 1H, 3J = 8.98 Hz, CH), 6.09 (s, 1H), 6.36 (t, 2H, 3J(H-F) = 8.30 Hz, H-1’), 7.16 (d, 1H, 3J = 7.61 Hz, H-5), 7.18 (t, 1H, 3J = 7.42 Hz, CHp-Ph), 7.37 (d, 2H, 3J = 7.62 Hz, CHo-Ph), 7.40-7.47 (m, 2H, CHm-Ph), 7.65-7.72 (m, 2H, CHm-Bz), 7.76 (t, 1H, 3J = 7.42 Hz, CHp-Bz), 7.87 (d, 1H, 3J = 8.98 Hz, NH-BOC), 7.99 (d, 2H, 3J = 7.42 Hz, CHo-Bz), 8.07 (d, 1H, 3J = 7.42 Hz, H-6), 10.90 (br s, 1H, NH)
【００６５】
ＬＣ／ＭＳ(ＥＳＩ)[Ｍ＋Ｈ-Ｔｒｏｃ]＋理論値：１６１７.３、測定値：１６１７.６
【００６６】
Ｓ５：新しいタイプのタキサンＺ１を、次の合成経路で製造した。
【化７】
2019524654.tif 000009
【００６７】
具体的方法は次のとおりである。
【００６８】
１.１０１ｇの酢酸ナトリウム(１３.４mmol、４０当量)を１２mL  メタノールおよび１２mL  酢酸の混合溶液に溶解し、この溶液を工程Ｓ４により製造した０.６０２ｇの中間体Ｄ２(０.３４mmol)を含むフラスコに加え、中間体が完全に溶解したら、１.７５６ｇの亜鉛末(２７mmol、４０当量)を加え、反応混合物を５℃で１５分の超音波処理に付し、激しく撹拌した。ＴＬＣは中間体Ｄ２の消失を示し、痕跡量のジ(トリクロロエトキシカルボニル)生成物および一定量のモノ(トリクロロエトキシカルボニル)生成物があり、生成物の大部分は目的生成物であった。超音波処理を続け、激しい撹拌を１５分維持した。ＴＬＣはジ(トリクロロエトキシカルボニル)体の存在を示さなかったが、なおモノ(トリクロロエトキシカルボニル)体がいくらか残存した。反応混合物を３回目の超音波処理に付し、１５分激しく撹拌し、次いで５０mLの１９.４４ｇ  重炭酸ナトリウム(０.２３mol)含有水性懸濁液に注加し、次いで酢酸エチルを添加し、濾過し、濾液を酢酸エチルで抽出し、抽出物を２５℃で蒸発乾固した。
【００６９】
残留物をジクロロメタンに溶解し、次いでシリカゲルカラムクロマトグラフィー(３５ｇのシリカゲル)に付し、２０３.３mLのメタノール／ジクロロメタン(１：６０)混合溶媒および６１５mLのメタノール／ジクロロメタン(１：４０)混合溶媒で連続的に溶出した。溶出物を試験管に集め、次いで２０６.７mLのメタノール／ジクロロメタン(１：３０)混合溶媒および２０８mLのメタノール／ジクロロメタン(１：２５)混合溶媒で連続的に溶出した。同成分の溶出物を合わせ、蒸発により溶媒除去後、４０℃で真空乾燥させて、０.２４４ｇの無色透明の目的生成物Ｚ１を５７％の収率、９５.０％(ＨＰＬＣ)の純度で得た。
【００７０】
図５〜７は、それぞれ目的生産物Ｚ１の１Ｈ−ＮＭＲスペクトル、１３Ｃ−ＮＭＲスペクトルおよびＨＳＱＣスペクトルを示す。
【００７１】
1H NMR (399.86 MHz, DMSO-d6):δ = 0.90 (t, 3H, 3J = 7.13 Hz, CH2CH2CH2CH3), 0.97 (s, 6H, CH3×2), 1.29-1.41 (m, 2H, CH2CH2CH2CH3), 1.36 (s, 9H, BOC), 1.51 (s, 3H, CH3), 1.53-1.67 (m, 4H, CH2CH2CH2CH3, CH2-a, CH2-a), 1.70 (s, 3H, CH3), 1.76-1.89 (m, 3H, COCH2CH2CH2CO, CH2-b), 2.23 (s, 3H, OAc), 2.25-2.33 (m, 1H, CH2-b), 2.38-2.48 (m, 4H, COCH2CH2CH2CO), 3.63 (d, 1H, 3J = 6.44 Hz, CH), 3.97-4.07 (m, 3H, CH, CH2O), 4.06-4.12 (m, 1H, H-4’), 4.12 (t, 2H, 3J = 6.44 Hz, CH2CH2CH2CH3), 4.18-4.31 (m, 1H, H-3'), 4.32-4.47 (m, 3H, H-5’, t-OH), 4.86-4.95 (m, 2H, CH, OH), 5.00 (d, 1H, 3J = 6.64 Hz, OH), 5.03-5.14 (m, 3H, CH×3), 5.40 (d, 1H, 3J = 6.83 Hz, CH), 5.77 (t, 1H, 3J = 8.59 Hz, CH), 6.22 (t, 2H, 3J(H-F) = 7.52 Hz, H-1’), 6.49 (d, 1H, 3J = 6.06 Hz, OH-3'), 7.10-7.20 (m, 2H, H-5, Hp-Ph), 7.31-7.45 (m, 4H, Ho-Ph×2, Hm-Ph×2), 7.61-7.69 (m, 2H, Hm-Ph), 7.73 (t, 1H, 3J = 7.42 Hz, Hp-Ph), 7.85 (d, 1H, 3J = 8.98 Hz, NH-BOC), 7.93-8.04 (m, 3H, Ho-Ph×2, H-6), 10.86 (br s, 1H, NH)
【００７２】
13C NMR (100.56 MHz, DMSO-d6):δ = 9.8 (CH3), 13.5 (CH2CH2CH2CH3), 13.6 (CH3), 18.4 (CH2CH2CH2CH3), 19.7 (COCH2CH2CH2CO), 20.7 (CH3), 22.4 (OAc), 26.4 (CH3), 28.1 (t-BOC, primary), 30.2 (CH2CH2CH2CH3), 32.1 (COCH2CH2CH2CO), 32.3 (COCH2CH2CH2CO), 34.7 (CH2), 36.4 (CH2), 42.9, 45.9 (CH), 55.1 (CH), 57.0, 62.8 (CH2-5'), 65.1 (CH2CH2CH2CH3), 70.1 (t, 2J(C-F) = 23.0 Hz, CH-3'), 70.7 (CH), 71.2 (CH), 73.7 (CH), 74.8 (CH), 75.0 (CH), 75.4 (CH2), 76.8, 77.9 (CH-4’), 78.5, 80.3 (t-BOC, quaternary), 83.7 (CH), 84.5 (br s, CH-1’), 95.2 (CH-5), 122.5 (t, 1J(C-F) = 259.2 Hz, C-2’), 127.3 (CHo-Ph), 128.0 (CHp-Ph), 128.5 (CHm-Ph), 128.6 (CHm-Ph), 129.5 (CHo-Ph), 130.0, 133.3 (CHp-Ph), 135.9, 136.9, 137.5, 144.9 (CH-6), 153.1 (NHCOO), 153.9 (COAr), 155.1 (NHCOO), 163.5 (C-4), 165.3 (COO), 169.0 (COO), 169.5 (COO), 171.8 (COCH2CH2CO), 172.1 (COCH2CH2CO), 209.3 (CO)
【００７３】
ＬＣ／ＭＳ(ＥＳＩ)[Ｍ＋Ｈ]＋理論値：１２６７.５、測定値：１２６７.８
【００７４】
(実施例２〜実施例９)
各実施例化合物の製造法は、工程Ｓ１で使用するクロロギ酸アルキルのタイプおよび工程Ｓ３で使用する二酸無水物以外実施例１と同一であり、ここで、最終的に得た新しいタイプのタキサン化合物を表１に示す。
【表１】
2019524654.tif 000010
【００７５】
(実施例１０)
この実施例は、実施例１の新しいタイプのタキサン化合物Ｚ１を含む医薬組成物の製造方法である。
【００７６】
注射投与形態の例として凍結乾燥粉末注射を用い、凍結乾燥粉末注射は、３０ｇの新しいタイプのタキサン化合物Ｚ１、３００ｇのマンニトール(２０％、ｗ／ｖ)、７ｇのリン酸二水素ナトリウム二水和物緩衝液、および４.０ｇのポロクサマー１８８(Ｆ６８)界面活性剤を含んだ。
【００７７】
リン酸二水素ナトリウム二水和物、ポロクサマー１８８(Ｆ６８)、マンニトール(２０％、ｗ／ｖ)を上記処方量に従い正確に秤量し、次いで１０℃未満に予め冷却した３００ｇの注射用水に加え、溶解し、溶液のｐＨを０.１mol／ＬのＮａＯＨで７.３〜７.５に調節し、次いで３０ｇの新しいタイプのタキサン化合物Ｚ１を上記溶液に加え、均一に混合し、溶液のｐＨを７.３±０.２(この例では７.５)に０.１mol／ＬのＮａＯＨ溶液または０.１mol／ＬのＨＣｌで調節し、水を２,０００ｇまで添加し、溶液を滅菌用の０.２２μmミクロポア膜を通して濾過し、溶液を２.０ｇ／ボトルでチューブタイプボトルに分配し、部分施栓し、凍結乾燥のためにフリーズドライヤーに入れ、乾燥後真空下に密栓し、キャップを付し、ラベルを貼付して１,０００個の凍結乾燥粉末注射用バイアルを得て、２〜８℃の温度で保存した。
【００７８】
上記凍結乾燥粉末注射、すなわち、注射用無菌粉末に加えて、本発明の新しいタイプのタキサン化合物はまた溶液注射、懸濁液注射、およびエマルジョン注射などの注射投与形態などの他の形態にも製造され得る。
【００７９】
上記錠剤形に加えて、医薬組成物の適当な投与形態をまた経口形態の散剤、顆粒剤、カプセル剤、ペレット剤、液剤、懸濁液剤、エマルジョン剤、シロップ剤またはエリキシル剤、または徐放性および制御放出製剤、または他の経口形態の医薬組成物にも製剤化し得る。これらの経口投与形態は、一般の対応するアジュバント物質(それぞれの作用により添加剤、アジュバントなどに分け得る)を含み、ここで、例えば、添加物は薬物グレードのマンニトール、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、サッカリン塩、セルロースまたは硫酸マグネシウムなどを含む。
【００８０】
上記経口投与形態の達成のために、薬学的に許容されるアジュバントは、不活性固体希釈剤、水性溶媒、リポソーム、マイクロスフェアおよび／または非毒性有機溶媒などの進歩した従来技術の物質を含む薬学的活性成分のための担体から選択されるべきであり、好ましいアジュバントは湿潤剤、乳化剤、ｐＨ緩衝化溶液、ヒト血清アルブミン、抗酸化剤、防腐剤、静菌剤、グルコース、スクロース、トレハロース、マルトース、レシチン、グリシン、ソルビン酸、プロピレンアルコール、ポリエチレン、プロタミン、ホウ酸、塩化ナトリウム、または塩化カリウム、鉱油、植物油などから選択され、１以上の組み合わせを、医薬担体としてこれらから選択し得る。
【００８１】
本発明の医薬組成物の標的腫瘍は血液腫瘍および悪性固形腫瘍を含む。特に、標的腫瘍は結腸癌、直腸癌、胃癌、肺癌、乳癌、前立腺癌、膵臓癌、肝臓癌、食道癌、脳腫瘍、卵巣癌、子宮癌、腎臓癌、頭頸部癌、皮膚癌、膀胱癌、外陰癌、精巣腫瘍、絨毛癌、胚細胞腫瘍、悪性リンパ腫、白血病および多発性骨髄腫を含み、より好ましくは標的腫瘍は結腸癌、直腸癌、胃癌、肺癌、膵臓癌、肝臓癌、卵巣癌、腎臓癌、悪性リンパ腫、乳癌および白血病を含むが、本発明はこれらに限定されない。
【００８２】
(適用実施例１. ＩＣＲ、すなわち、Institute of Cancer Research、マウスにおける最大耐容量実験のための開示のタキサン化合物の単回腹腔内投与)
本適用実施例は、開示のタキサン化合物の最大耐容量(ＭＴＤ)を決定するための、実施例１のタキサン化合物Ｚ１のＩＣＲマウスへの単回腹腔内投与の毒性応答の試験であった。
【００８３】
最大耐容量は動物が死亡せず、動物の体重減少は１０％を超えず(０日目と比較して)、または顕著な毒性副作用を生じない量である。
【００８４】
１. 試験物質の製造
【００８５】
試験物質の溶解のための溶媒の供給源は次のとおりである。
【００８６】
無水エタノール、製造業者：Sinopharm Chemical Reagent Co. Ltd. バッチ番号１０００９２１８
【００８７】
Cremophor EL、製造業者：Sigma、バッチ番号２７９６３
【００８８】
０.９％生理食塩水、製造業者：Hua Yu Pharmaceutical Co., Ltd. バッチ番号１３０８３００４
【００８９】
一定量の対応する試験すべき物質を５mLガラス試験管に計り入れ、５mm磁気撹拌棒での撹拌下エタノールに溶解し、Cremophor ELを試験すべき物質が完全に溶解した後に加え、撹拌を維持し、記載量の生理食塩水を加え、使用前に十分撹拌し、ここで、製剤中、エタノール、Cremophor EL、および生理食塩水の体積比は５：５：９０であった。
【００９０】
２. 実験動物
【００９１】
種類および系統：ＩＣＲマウス
【００９２】
グレード：ＳＰＦ
【００９３】
性別：雌
【００９４】
供給源：Shanghai Slac Laboratory Animal Co. Ltd.
【００９５】
証明書番号：０１３０７４９
【００９６】
実験開始前の動物の体重：１８〜２０ｇ
【００９７】
数および性別：４１
【００９８】
環境への順応期間：実験と同じ給餌条件下で５〜７日
【００９９】
飼育室を温度１８〜２６℃、相対湿度３０〜７０％および照明１２時間を維持した。
【０１００】
動物に使用した水は濾過および滅菌され、動物は餌および水を自由に摂取できた。
【０１０１】
３. 実験法
【０１０２】
投与方式：腹腔内注射(ＩＰ)。動物が死亡したならば、動物が生存するまで用量を減少させ、死亡する動物がいなかったら、用量を増加した。動物がある高用量で正常に生存したら、実験を終了させた。最後に、試験すべき物質に対するマウスＭＴＤを実験結果から決定した。そして動物を急性投与後連続７日間観察した。
【０１０３】
実験中全動物について、試験すべき全動物を、連続１４日の投与後、１日２回の詳細な状態観察に付した(１回目１０：００ＡＭ、他方１６：００ＰＭ)。観察は、皮膚、毛、眼、耳、鼻、口、胸部、腹部、外陰部、肢および足、呼吸器管および循環系、自律神経作用(例えば流涎)、神経系(例えば振戦、痙攣、ストレス反応、および異常行動)を含むが、これらに限定されない。
【０１０４】
各動物の体重を投与前に測定し、次いで各動物の体重を翌日の同じ時間に測定し、記録した。
【０１０５】
投与後１週間の観察結果、各動物の体重、および動物生存状態を毎日詳細に記録した。
【０１０６】
４. 実験結果
【０１０７】
開示のタキサン化合物Ｚ１のＭＴＤ用量は２５０mg／kgであった。
【０１０８】
(適用実施例２. 開示のタキサン化合物の単回腹腔内注射の腫瘍に対する増殖阻害)
この適用実施例は、実施例１の開示のタキサン化合物Ｚ１の単回腹腔内注射の結腸癌ＨＣＴ−１１６腫瘍担持ヌードマウスに対する増殖阻害効果を試験するためであった。
【０１０９】
１. 試験物質の製造
【０１１０】
試験物質の溶解のための溶媒の供給源は次のとおりである。
【０１１１】
無水エタノール、製造業者：Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd. バッチ番号１０００９２１８
【０１１２】
Cremophor EL、製造業者：Sigma、バッチ番号２７９６３
【０１１３】
０.９％生理食塩水、製造業者：Hua Yu Pharmaceutical Co., Ltd. バッチ番号１３０８３００４
【０１１４】
一定量の対応する試験すべき物質を５mLガラス試験管に計り入れ、５mm磁気撹拌棒での撹拌下エタノールに溶解し、Cremophor ELを試験すべき物質が完全に溶解した後に加えた。エタノール、Cremophor EL、および生理食塩水の体積比は５：５：９０であった。
【０１１５】
２. 実験動物
【０１１６】
種類および系統：Ｂａｌｂ／ｃヌードマウス
【０１１７】
グレード：ＳＰＦ
【０１１８】
性別：雌
【０１１９】
供給源：[00119]    Source: B&K Universal Group Limited, Shanghai
【０１２０】
動物証明書番号：０１２３６２７
【０１２１】
実験開始前の動物の年齢：７〜９週齢
【０１２２】
実験開始前の動物の体重：１８〜２２ｇ
【０１２３】
環境への順応期間：実験と同じ給餌条件下で５〜７日
【０１２４】
動物を温度２３±２℃、湿度４０〜７０％、および１２時間の交互明暗に維持した。
【０１２５】
動物餌(ＳＬＡＣ−Ｍ０１)はBeijing Keao Xieli Feed Co.,Ltd.から購入した。
【０１２６】
動物に使用した水は、濾過および滅菌した水であり、動物は餌および水を自由に摂取できた。
【０１２７】
３. 実験法
【０１２８】
３.１. 腫瘍細胞：結腸癌ＨＣＴ−１１６細胞、Shanghai Institute of Biochemistry and Cell Biology (SIBCB), Chinese Academy of Sciences (CAS)から購入。細胞をＦ−１２培地(１０％ＦＢＳ含有)で、５体積％のＣＯ２および９５体積％の空気を含む二酸化炭素インキュベーターで、３７℃で飽和湿度で培養した。接種前、対数増殖期の細胞を取り、０.２５％トリプシンで消化させ、ＰＢＳで１回洗浄し、計数のためにＰＢＳに再懸濁した。細胞を約３×１０７細胞／mLに細胞濃度を調整した無血清培地に懸濁した。
【０１２９】
３.２. 動物接種およびグループ分け：各ヌードマウスに０.１mLの細胞懸濁液(３×１０６細胞／マウス)を無菌条件下、皮下接種した。腫瘍が体積約６０〜１５０mm３まで増殖したとき、腫瘍体積が同等であり、良好な形状のヌードマウスを選択し(形状は、可能な限り単一球であり、不規則な形状または腫瘍の集積はない)、群あたり６マウスであった。
【０１３０】
３.３. 動物投与および観察
【０１３１】
(１)各群の各ヌードマウスの接種部位の腫瘍形成状態を観察し、腫瘍小結節直径(Ｄ)を週に３回丸穴定規で測定し、腫瘍小結節体積(Ｖ)を次の等式に従い、計算した。
【０１３２】
Ｖ＝３／４π(Ｄ／２)３
【０１３３】
(２)抗腫瘍活性の評価指数は、腫瘍増殖阻害率ＴＧＩ(％)であり、その計算式は次のとおりである。
【０１３４】
ＴＧＩ(％)＝(Ｖ対照−Ｖ処置)／Ｖ対照)×１００％
【０１３５】
各マウスの体重を週に３回測定した。
【０１３６】
３.４. 動物の症状
【０１３７】
実験前および実験中の各動物の症状を記録しなければならない。観察は、毎日同じ時間に行わなければならない。
【０１３８】
試験すべき物質を投与後、体重が２０％を超えて減少するかまたは動物が苦悶するかまたは腫瘍が体積２,８００mm３を超えたら、動物をＣＯ２により屠殺し、腫瘍を単離し、計測し、屠殺動物を剖検および目視して、罹患臓器の有無を調べた。
【０１３９】
３.５. データ統計学
【０１４０】
実験データを特に断らない限り標準±ＳＥＭで示し、独立ｔ検定を２群のデータに適用し、Ｐ＜０.０５であるならば、有意差があると見なした。
【０１４１】
４. 実験結果
【０１４２】
開示のタキサン化合物Ｚ１のヒト結腸癌ＨＣＴ−１１６腫瘍担持マウスに対する増殖阻害率(ＴＧＩ％)は８５.６９％であった。
【図１】
2019524654.tif 000012
【図２】
2019524654.tif 000013
【図３】
2019524654.tif 000014
【図４】
2019524654.tif 000015
【図５】
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【図６】
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【図７】
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【手続補正書】
【提出日】平成31年4月10日(2019.4.10)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式(Ｉ)
【化１】
2019524654.tif 000019
〔式中、Ｒ１はＣ１−Ｃ６アルキルまたは置換アルキルであり；ｎは０〜６である。〕
に示す構造を有する、タキサン化合物。
【請求項２】
式(Ｉ)において、Ｒ１がエチル、ｎ−ブチルまたはｎ−ヘキシルであり、ｎが０〜２である、請求項１に記載のタキサン化合物。
【請求項３】
式(Ｉ)において、Ｒ１がｎ−ブチルであり、ｎが１である、請求項２に記載のタキサン化合物。
【請求項４】
タキサン化合物の製造方法であって、
Ｓ１：ゲムシタビンにおける２つのヒドロキシル基を保護し、保護ゲムシタビンとクロロギ酸アルキルの間の縮合反応を実施して第一化合物を得て、該第一化合物の２つのヒドロキシ保護基を除去して中間体Ｇ１を得る工程、
Ｓ２：工程Ｓ１により製造した中間体Ｇ１の２つのヒドロキシル基の最初のヒドロキシル基を保護し、次いで２つのヒドロキシル基の第二のヒドロキシル基を保護しで第二化合物を得て、そして該第二化合物から、中間体Ｇ１の最初のヒドロキシル基に対応するヒドロキシル保護基を除去して、中間体Ｇ２を得る工程、
Ｓ３：７,１０−ジ−ｔｒｏｃ−ドセタキセルと二無水物を反応させて、中間体Ｄ１を得る工程、
Ｓ４：工程Ｓ３により製造した中間体Ｄ１と工程Ｓ２により製造した中間体Ｇ２の間の縮合反応を実施して、中間体Ｄ２を得る工程、および
Ｓ５：工程Ｓ４により製造した中間体Ｄ２をヒドロキシル脱保護に付して、目的化合物を得る工程
を含み、目的化合物が式(Ｉ)
【化２】
2019524654.tif 000020
〔式中、Ｒ１はＣ１−Ｃ６アルキルまたは置換アルキルであり；ｎは０〜６である。〕
に示す構造を有するタキサン化合物を含むものである、方法。
【請求項５】
工程Ｓ１におけるクロロギ酸アルキルがクロロギ酸ｎ−ブチルである、請求項４に記載のタキサン化合物を製造する方法。
【請求項６】
工程Ｓ３における二無水物がグルタル酸無水物である、請求項４に記載のタキサン化合物を製造する方法。
【請求項７】
工程Ｓ１において使用するヒドロキシル保護剤がヘキサメチルジシラザンであり、工程Ｓ２において第一ヒドロキシル基の保護に使用する保護剤がｔｅｒｔ−ブチルジメチルクロロシランであり、工程Ｓ２において第二ヒドロキシル基の保護に使用する保護剤がクロロギ酸２,２,２−トリクロロエチルである、請求項４に記載のタキサン化合物を製造する方法。
【請求項８】
請求項１〜３の何れかに記載の式(Ｉ)のタキサン化合物を含む、腫瘍を阻害するための医薬組成物。
【請求項９】
腫瘍が結腸癌、直腸癌、胃癌、肺癌、乳癌、前立腺癌、膵臓癌、肝臓癌、食道癌、脳腫瘍、卵巣癌、子宮癌、腎臓癌、頭頸部癌、皮膚癌、膀胱癌、外陰癌、精巣腫瘍、絨毛癌、胚細胞腫瘍、悪性リンパ腫、白血病または多発性骨髄腫の少なくとも一つを含む、請求項８に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
腫瘍が結腸癌、直腸癌、胃癌、肺癌、膵臓癌、肝臓癌、卵巣癌、腎臓癌、悪性リンパ腫、乳癌または白血病の少なくとも一つを含む、請求項８に記載の医薬組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４６】
工程Ｓ１により製造した１.５ｇの中間体Ｇｌ(４.１mmol)、０.６５３ｇのｔｅｒｔ−ブチルジメチルクロロシラン(４.３mmol、１.０５当量)および０.７６５mLのピリジン(９.５mmol、２.３当量)を１５mLのジクロロメタンに溶解し、室温で１時間撹拌し、ＴＬＣは、反応の進行が半分であることを示した。反応混合物を一夜撹拌し、なお大量の中間体Ｇ１が存在し、次いで０.１８７ｇのｔｅｒｔ−ブチルジメチルクロロシラン(１.２４mmol、０.３当量)を追加し、反応混合物を室温で６時間撹拌した。ＴＬＣはなお中間体Ｇｌが残っていることを示した。次いで０.１２４ｇのｔｅｒｔ−ブチルジメチルクロロシラン(０.８３mmol、０.２当量)を反応混合物に追加し、一夜撹拌し続け、翌日のＴＬＣは中間体Ｇｌが残存しないことを示した。その後０.２〜３３mLのピリジン(２.９mmol、０.７当量)を添加し、次いで０.６２５mLの２,２,２−トリクロロ−クロロギ酸エチル(４.５mmol、１.１当量)を０℃で加え、反応混合物を室温で０.５時間撹拌したところ、ＴＬＣは反応が完了したことを示した。
【国際調査報告】
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