(57)【要約】  エンドセリン変換酵素の阻害活性を有し、皮膚美白または抗高血圧に有効な素材の提供。Hiptage candicans、Piper sarmentosum、Solanum stramonifolium、Anaxagorea luzonensis、Smilax corbularia、Ardisia elliptica、Erythrina suberosa、Dactyloctenium aegyptium、Hopea ferrea、およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１種を有効成分とするエンドセリン変換酵素阻害剤。【特許請求の範囲】
【請求項１】
Hiptage candicans、Piper sarmentosum、Solanum stramonifolium、Anaxagorea luzonensis、Smilax corbularia、Ardisia elliptica、Erythrina suberosa、Dactyloctenium aegyptium、Hopea ferrea、およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１種を有効成分とするエンドセリン変換酵素阻害剤。
【請求項２】
Hiptage candicans、Piper sarmentosum、Solanum stramonifolium、Anaxagorea luzonensis、Smilax corbularia、Ardisia elliptica、Erythrina suberosa、Dactyloctenium aegyptium、Hopea ferrea、およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１種を有効成分とするメラニン生成阻害剤。
【請求項３】
Hiptage candicans、Piper sarmentosum、Solanum stramonifolium、Anaxagorea luzonensis、Smilax corbularia、Ardisia elliptica、Erythrina suberosa、Dactyloctenium aegyptium、Hopea ferrea、およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１種を有効成分とする皮膚美白剤。
【請求項４】
Hiptage candicans、Solanum stramonifolium、Anaxagorea luzonensis、Smilax corbularia、Ardisia elliptica、Erythrina suberosa、Dactyloctenium aegyptium、Hopea ferrea、およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１種を有効成分とする抗高血圧剤。
【請求項５】
エンドセリン変換酵素阻害剤の製造のための、Hiptage candicans、Piper sarmentosum、Solanum stramonifolium、Anaxagorea luzonensis、Smilax corbularia、Ardisia elliptica、Erythrina suberosa、Dactyloctenium aegyptium、Hopea ferrea、およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１つの使用。
【請求項６】
メラニン生成阻害剤の製造のための、Hiptage candicans、Piper sarmentosum、Solanum stramonifolium、Anaxagorea luzonensis、Smilax corbularia、Ardisia elliptica、Erythrina suberosa、Dactyloctenium aegyptium、Hopea ferrea、およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１つの使用。
【請求項７】
皮膚美白剤の製造のための、Hiptage candicans、Piper sarmentosum、Solanum stramonifolium、Anaxagorea luzonensis、Smilax corbularia、Ardisia elliptica、Erythrina suberosa、Dactyloctenium aegyptium、Hopea ferrea、およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１つの使用。
【請求項８】
抗高血圧剤の製造のための、Hiptage candicans、Solanum stramonifolium、Anaxagorea luzonensis、Smilax corbularia、Ardisia elliptica、Erythrina suberosa、Dactyloctenium aegyptium、Hopea ferrea、およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１つの使用。
【請求項９】
エンドセリン変換酵素阻害に使用するための、Hiptage candicans、Piper sarmentosum、Solanum stramonifolium、Anaxagorea luzonensis、Smilax corbularia、Ardisia elliptica、Erythrina suberosa、Dactyloctenium aegyptium、Hopea ferrea、およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１つ。
【請求項１０】
メラニン生成阻害に使用するための、Hiptage candicans、Piper sarmentosum、Solanum stramonifolium、Anaxagorea luzonensis、Smilax corbularia、Ardisia elliptica、Erythrina suberosa、Dactyloctenium aegyptium、Hopea ferrea、およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１つ。
【請求項１１】
皮膚美白に使用するための、Hiptage candicans、Piper sarmentosum、Solanum stramonifolium、Anaxagorea luzonensis、Smilax corbularia、Ardisia elliptica、Erythrina suberosa、Dactyloctenium aegyptium、Hopea ferrea、およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１つ。
【請求項１２】
高血圧の予防または改善に使用するための、Hiptage candicans、Solanum stramonifolium、Anaxagorea luzonensis、Smilax corbularia、Ardisia elliptica、Erythrina suberosa、Dactyloctenium aegyptium、Hopea ferrea、およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１つ。
【請求項１３】
エンドセリン変換酵素阻害のための、Hiptage candicans、Piper sarmentosum、Solanum stramonifolium、Anaxagorea luzonensis、Smilax corbularia、Ardisia elliptica、Erythrina suberosa、Dactyloctenium aegyptium、Hopea ferrea、およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１つの使用。
【請求項１４】
メラニン生成阻害のための、Hiptage candicans、Piper sarmentosum、Solanum stramonifolium、Anaxagorea luzonensis、Smilax corbularia、Ardisia elliptica、Erythrina suberosa、Dactyloctenium aegyptium、Hopea ferrea、およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１つの使用。
【請求項１５】
皮膚美白のための、Hiptage candicans、Piper sarmentosum、Solanum stramonifolium、Anaxagorea luzonensis、Smilax corbularia、Ardisia elliptica、Erythrina suberosa、Dactyloctenium aegyptium、Hopea ferrea、およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１つの使用。
【請求項１６】
高血圧の予防または改善のための、Hiptage candicans、Solanum stramonifolium、Anaxagorea luzonensis、Smilax corbularia、Ardisia elliptica、Erythrina suberosa、Dactyloctenium aegyptium、Hopea ferrea、およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１つの使用。
【請求項１７】
対象におけるエンドセリン変換酵素阻害方法であって、それを必要とする対象に、Hiptage candicans、Piper sarmentosum、Solanum stramonifolium、Anaxagorea luzonensis、Smilax corbularia、Ardisia elliptica、Erythrina suberosa、Dactyloctenium aegyptium、Hopea ferrea、およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１つを有効量で投与することを含む、方法。
【請求項１８】
対象におけるメラニン生成阻害方法であって、それを必要とする対象に、Hiptage candicans、Piper sarmentosum、Solanum stramonifolium、Anaxagorea luzonensis、Smilax corbularia、Ardisia elliptica、Erythrina suberosa、Dactyloctenium aegyptium、Hopea ferrea、およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１つを有効量で投与することを含む、方法。
【請求項１９】
対象における皮膚美白方法であって、それを必要とする対象に、Hiptage candicans、Piper sarmentosum、Solanum stramonifolium、Anaxagorea luzonensis、Smilax corbularia、Ardisia elliptica、Erythrina suberosa、Dactyloctenium aegyptium、Hopea ferrea、およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１つを有効量で投与することを含む、方法。
【請求項２０】
対象における高血圧の予防または改善方法であって、それを必要とする対象に、Hiptage candicans、Solanum stramonifolium、Anaxagorea luzonensis、Smilax corbularia、Ardisia elliptica、Erythrina suberosa、Dactyloctenium aegyptium、Hopea ferrea、およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１つを有効量で投与することを含む、方法。
【請求項２１】
化粧成分中に、有効成分としてHiptage candicans、Piper sarmentosum、Solanum stramonifolium、Anaxagorea luzonensis、Smilax corbularia、Ardisia elliptica、Erythrina suberosa、Dactyloctenium aegyptium、およびHopea ferreaの抽出物からなる群より選択される少なくとも１種の抽出物を含有し、かつ薬学的に許容される担体または食品添加物を含有する、エンドセリン変換酵素阻害剤組成物。
【請求項２２】
前記抽出物の含有量が０．０００１〜６０質量％である、請求項２１記載の組成物。
【請求項２３】
前記抽出物の含有量が０．０００１〜４０質量％である、請求項２１記載の組成物。
【請求項２４】
前記抽出物の含有量が０．０００１〜２０質量％である、請求項２１記載の組成物。
【請求項２５】
前記抽出物の含有量が０．０００１〜１０質量％である、請求項２１記載の組成物。
【請求項２６】
前記抽出物の含有量が０．００１〜６０質量％である、請求項２１記載の組成物。
【請求項２７】
前記抽出物の含有量が０．００１〜４０質量％である、請求項２１記載の組成物。
【請求項２８】
前記抽出物の含有量が０．００１〜２０質量％である、請求項２１記載の組成物。
【請求項２９】
前記抽出物の含有量が０．００１〜１０質量％である、請求項２１記載の組成物。
【請求項３０】
前記抽出物の含有量が０．０１〜６０質量％である、請求項２１記載の組成物。
【請求項３１】
前記抽出物の含有量が０．０１〜４０質量％である、請求項２１記載の組成物。
【請求項３２】
前記抽出物の含有量が０．０１〜２０質量％である、請求項２１記載の組成物。
【請求項３３】
前記抽出物の含有量が０．０１〜１０質量％である、請求項２１記載の組成物。
【請求項３４】
前記化粧成分が、保湿剤、美白剤、紫外線保護剤、細胞賦活剤、洗浄剤、角質溶解剤、メークアップ成分、および化粧料に許容される担体からなる群より選択される１種以上を含む、請求項２１記載の組成物。
【請求項３５】
前記薬学的に許容される担体が、賦形剤、結合剤、増量剤、増粘剤、崩壊剤、界面活性剤、滑沢剤、分散剤、緩衝剤、保存剤、嬌味剤、香料、被膜剤、および希釈剤からなる群より選択される１種以上である、請求項２１記載の組成物。
【請求項３６】
前記食品添加物が、溶剤、軟化剤、油、乳化剤、防腐剤、香科、甘味料、安定剤、着色剤、紫外線吸収剤、酸化防止剤、保湿剤、増粘剤、固着剤、分散剤および湿潤剤からなる群より選択される１種以上である、請求項２１記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、エンドセリン変換酵素の阻害活性を有する素材に関する。
【背景技術】
【０００２】
エンドセリン（ET）は、直接的および間接的作用を介して血管性および非血管性の平滑筋を持続的に収縮させる生理活性因子である。エンドセリンの作用増大は、末梢、腎臓および脳の血管における持続的な血管収縮をもたらし、高血圧症、心筋梗塞、脳卒中、急性腎不全、レイノー症候群、アテローム硬化症、喘息、前立腺癌などの種々の疾病を引き起こすと考えられている。ヒトを含む動物には、構造の類似した３種のエンドセリンファミリーペプチド（ET-1、ET-2、ET-3）が存在し、これらのペプチドはいずれも血管収縮作用および昇圧作用を有する。
【０００３】
近年、血管平滑筋細胞以外の様々な細胞におけるエンドセリンの役割が解明されつつある。例えば、非特許文献１−３では、肌に紫外線を浴びるとケラチノサイトでET-1やその他の因子の産生が増加すること、および紫外線照射されたメラノサイトにおけるメラニン産生にET-1が関与していることが示唆されることが報告されている。したがって、エンドセリンの発現を抑制することは、前記のような種々の疾病の予防・治療だけでなく、皮膚の色素沈着の予防または改善などにも有用であると考えられる。
【０００４】
エンドセリンは、アミノ酸残基21個からなるペプチドである。エンドセリンの生合成プロセスでは、mRNAからプレプロペプチドが生成され、中間体（ET-1、ET-2およびET-3について、それぞれBig ET-1、Big ET-2およびBig ET-3と称される）にプロセシングされ、次いでこの中間体が21個のアミノ酸からなる成熟エンドセリンへと変換される。中間体には血管収縮作用がほとんどないのに対し、成熟エンドセリンは強力な血管収縮作用を有する。この中間体から成熟エンドセリンへの変換を行う酵素が、エンドセリン変換酵素（ECE）である。従来、ECE阻害活性を有する植物素材としては、ワレモコウ（Sanguisorba officinalis ）、セイヨウサンザシ(Crataegus laevigata)、チョウジ(Syzygium aromaticum)、エイジツ(fruit of Rosa multiflora)、アセンヤク(Uncaria gambir)、ボダイジュ(Tilia miqueliana)、甘草(Glycyrrhiza glabra)、ソウハクヒ(Morus alba)、ローズマリー(Rosmarinus officinalis)、アッサムチャ(Camellia sinensis var. assamica)、シラカバ(Betula platyphylla var. japonica)、トルメンチラ(Potentilla tormentilla)、タイム(Thymus)、ゲンチアナ(Gentiana lutea)、ゲンノショウコ(Geranium nepalense)、ニンジン(Panax ginseng C. A. Mayer)、キナノキ(Cinchona succirubra)、センブリ(Swertia japonica)、ツボクサ(Centella asiatica)、カワラヨモギ(Artemisia capillaris)、ジオウ(Rehmannia glutinosa)、スイカズラ(Lonicera japonica)又はセイヨウハッカ(Mentha piperita)の抽出物が報告されている（非特許文献４、特許文献１）。
【０００５】
（特許文献１）特許第３４４１３９５号公報
（非特許文献１）Photochem Photobiol., 63, 1-10 (1996）
（非特許文献２）J Biol Chem., 267, 24675-24680 (1992)
（非特許文献３）J Invest Dermatol., 105，32-37 (1995)
（非特許文献４）Biol. Pharm. Bull. 24, 688-692 (2001)
【発明の概要】
【０００６】
本発明は、Hiptage candicans、Piper sarmentosum、Solanum stramonifolium、Anaxagorea luzonensis、Smilax corbularia、Ardisia elliptica、Erythrina suberosa、Dactyloctenium aegyptium、Hopea ferrea、およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１種を有効成分とするエンドセリン変換酵素阻害剤を提供する。
本発明は、Hiptage candicans、Piper sarmentosum、Solanum stramonifolium、Anaxagorea luzonensis、Smilax corbularia、Ardisia elliptica、Erythrina suberosa、Dactyloctenium aegyptium、Hopea ferrea、およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１種を有効成分とするメラニン生成阻害剤を提供する。
また本発明は、Hiptage candicans、Piper sarmentosum、Solanum stramonifolium、Anaxagorea luzonensis、Smilax corbularia、Ardisia elliptica、Erythrina suberosa、Dactyloctenium aegyptium、Hopea ferrea、およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１種を有効成分とする皮膚美白剤を提供する。
また本発明は、Hiptage candicans、Solanum stramonifolium、Anaxagorea luzonensis、Smilax corbularia、Ardisia elliptica、Erythrina suberosa、Dactyloctenium aegyptium、Hopea ferrea、およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１種を有効成分とする抗高血圧剤を提供する。
【発明を実施するための形態】
【０００７】
本明細書中で引用された全ての特許文献、非特許文献、およびその他の刊行物は、その全体が本明細書中において参考として援用される。
【０００８】
本発明は、エンドセリン変換酵素の阻害活性を有し、皮膚美白または抗高血圧に有効な素材を提供することに関する。
【０００９】
本発明者らは、多くの研究を行った結果、エンドセリン変換酵素阻害活性を有する一群の植物を見出した。
【００１０】
本発明は、エンドセリン変換酵素阻害活性を有する植物由来素材を提供する。これらの素材は、皮膚メラノサイトのメラニン生成阻害、皮膚美白、または高血圧などエンドセリン活性上昇に起因する疾患もしくは状態の予防もしくは改善に有効である。
【００１１】
本明細書において、「エンドセリン（ET）」は、３種のエンドセリンサブタイプET-1（エンドセリン−１）、ET-2（エンドセリン−２）、およびET-3（エンドセリン−３）を包含する。好ましい実施形態において、本明細書におけるエンドセリン（ET）とはET-1を指す。
【００１２】
本明細書において、「エンドセリン変換酵素（ECE）」は、Big ET-1からET-1への変換酵素（エンドセリン変換酵素１；ECE-1）、Big ET-2からET-2への変換酵素（エンドセリン変換酵素２；ECE-2）、およびBig ET-3からET-3への変換酵素（エンドセリン変換酵素３；ECE-3）を包含する。好ましい実施形態において、本明細書におけるエンドセリン変換酵素とはエンドセリン変換酵素１（ECE-1）を指す。
【００１３】
本明細書において、「非治療的」とは、医療行為を含まない概念、すなわち人間を手術、治療または診断する方法を含まない概念、より具体的には医師または医師の指示を受けた者が人間に対して手術、治療または診断を実施する方法を含まない概念である。
【００１４】
本明細書において、「予防」とは、個体における疾患もしくは状態の発症の防止、抑制または遅延、あるいは個体の疾患もしくは状態の発症の危険性を低下させることをいう。本明細書において、「改善」とは、疾患もしくは状態の好転、疾患もしくは状態の悪化の防止、抑制または遅延、あるいは疾患もしくは状態の進行の逆転、防止、抑制または遅延をいう。
【００１５】
本明細書において、「本発明で使用される植物」とは、Hiptage candicans、Piper sarmentosum、Solanum stramonifolium、Anaxagorea luzonensis、Smilax corbularia、Ardisia elliptica、Erythrina suberosa、Dactyloctenium aegyptium、およびHopea ferreaからなる群より選択される植物のいずれか１種以上をいう。
【００１６】
Hiptage candicansは、Malpighiaceae科に属する植物であり、通常、強壮剤（tonic又はblood tonic）として適用されている。
Piper sarmentosumは、Piperaceae科に属するツタ類（climber）であり、従来、去痰薬、駆風薬、又は食欲促進剤として適用されている他、その葉は食用に用いられている。またPiper sarmentosumは、抗高血圧作用を有することが知られている（Clinica Terapeutica Volume 164, Issue 6, 2013, Pages 529-535）。
Solanum stramonifoliumは、Solanaceae科に属する植物であり、その根は伝統的に解熱薬、鎮痛薬または去痰薬として適用されている。
Anaxagorea luzonensisは、Annonaceae科に属する植物であり、その根は伝統的に、強壮剤、鎮痛剤、解熱剤、又は抗炎症に適用されている。
Smilax corbulariaは、Smilacaceae科に属するツタ類（climber）であり、その根茎は伝統的に、炎症、皮膚疾患、細菌感染または性感染症の治療に適用されている。
Ardisia ellipticaは、Myrsinaceae科に属する植物であり、その根は蛇咬傷や性感染症に適用され、またその幹は伝統的にハンセン病や皮膚疾患の治療に適用されている。
Erythrina suberosaは、Leguminosae科に属する木であり、その葉は、経口では解熱剤、駆虫薬として使用され、局所投与では関節痛治療に使用される。また、その葉の汁は伝統的に結膜炎や炎症の治療に使用されている。
Dactyloctenium aegyptiumは、Poaceae科に属する植物であり、伝統的に、熱冷ましの煎じ薬として使用されている。全草を破砕してアルコールに浸けたものは、外用で鎮痛剤や抗炎症剤として用いられる。
Hopea ferreaは、Dipterocarpaceae科に属する植物であり、その樹皮は強壮剤（tonic）として使用されている。
【００１７】
本発明では、上記植物の任意の部位、例えば該植物の全木、全草、葉（葉身、葉柄を含む）、樹皮、木質部（xylems）、木部（wood）、枝、果実、果皮、種子、花（花弁、子房を含む）、根、根茎等、またはそれらの組み合わせを使用することができる。好ましい使用部位としては、Hiptage candicansは木部、Piper sarmentosumは全草、Solanum stramonifoliumは根、Anaxagorea luzonensisは木部または樹皮、Smilax corbulariaは根茎、Ardisia ellipticaは根または幹、Erythrina suberosaは葉、Dactyloctenium aegyptiumは全草、およびHopea ferreaは樹皮が挙げられる。
【００１８】
本発明において、上記植物は、そのまま、または切断、破砕、粉砕もしくは搾取して使用されてもよく、またはそれらの乾燥物が使用されてもよい。好適には乾燥物が用いられる。該乾燥物は、切断、破砕、粉砕もしくは粉末化されていてもよい。
【００１９】
本発明で使用される植物の抽出物は、上記本発明で使用される植物の各々をそのまま抽出した抽出物であってもよく、または上記本発明で使用される植物の各々を乾燥、切断、破砕、粉砕もしくは搾取したものから抽出した抽出物であってもよい。好適には、本発明で使用される植物の抽出物は、上記本発明で使用される植物の乾燥物からの抽出物、または該乾燥物を切断、破砕、粉砕もしくは粉末化したものからの抽出物である。
【００２０】
植物抽出物を得るための抽出手段としては、例えば、固液抽出、圧搾抽出、液液抽出、浸漬、煎出、浸出、還流抽出、ソックスレー抽出、超音波抽出、マイクロ波抽出、攪拌等の通常の手段を用いることができる。これらの抽出手段は組み合わせてもよい。例えば、浸漬や固液抽出と液液抽出を組み合わせてもよく、または抽出時間を短縮する場合には、攪拌を伴う固液抽出をおこなってもよい。
【００２１】
植物抽出物の抽出のための溶媒としては、極性溶媒、非極性溶媒のいずれをも使用することができ、またはこれらを混合して用いることもできる。該抽出溶媒の例としては、水；１価もしくは多価のアルコール類；アセトン、メチルエチルケトンなどのケトン類；酢酸メチル、酢酸エチルなどのエステル類；テトラヒドロフラン、ジエチルエーテルなどの鎖状および環状エーテル類；ポリエチレングリコールなどのポリエーテル類；ジクロロメタン、クロロホルム、四塩化炭素などのハロゲン化炭化水素類；ヘキサン、シクロヘキサン、石油エーテルなどの炭化水素類；ベンゼン、トルエンなどの芳香族炭化水素類；ピリジン類；超臨界二酸化炭素；油脂、ワックス、その他オイルなどが挙げられる。上記に列挙した溶媒は、単独でまたは２種以上を組み合わせて使用することができる。溶媒の組み合わせの例としては、一価アルコールもしくは多価アルコールと水との混合溶媒が挙げられる。
【００２２】
あるいは、植物抽出物は、異なる溶媒を用いた繰り返し抽出により調製されてもよい。
【００２３】
一価アルコールの例としては、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール、アミルアルコール、ヘキサノール、ヘプタノール、オクタノール等が挙げられる。多価アルコールの例としては、エチレングリコール、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、１，４−ブタンジオール、１，５−ペンタンジオール、１，６−ヘキサンジオール等の２価アルコール、およびグリセリン等の３価以上のアルコールが挙げられる。このうち、炭素数１〜４の一価または多価アルコールが好ましく、または汎用性の点で１価アルコールおよび２価アルコールが好ましい。より好ましい例としては、メタノール、エタノール、１，３−ブチレングリコール、ｎ−プロパノール、イソプロパノール、ｎ−ブタノール、イソブタノール、ｓｅｃ−ブタノールおよびｔ−ブタノールが挙げられ、エタノールがさらに好ましい。
【００２４】
一価アルコールもしくは多価アルコールと水との混合溶媒の例としては、上記に列挙した一価アルコールと水との混合溶媒、および上記に列挙した多価アルコールと水との混合溶媒が挙げられ、より好ましくは、メタノール、エタノール、１，３−ブチレングリコール、ｎ−プロパノール、イソプロパノール、ｎ−ブタノール、イソブタノール、ｓｅｃ−ブタノールおよびｔ−ブタノールから選択されるアルコールと水との混合溶媒が挙げられ、さらに好ましくはエタノールと水との混合溶媒が挙げられる。
【００２５】
一価アルコールもしくは多価アルコールと水との混合溶媒におけるアルコールの濃度は、例えば１０質量％以上、好ましくは２０質量％以上、より好ましくは３０質量％以上、さらに好ましくは５０質量％以上であり、かつ好ましくは９９．９質量％以下、より好ましくは９９．５質量％以下、さらに好ましくは９５質量％以下である。あるいは、当該水／アルコール混合溶媒におけるアルコールの濃度の例としては、１０〜９９．９質量％、１０〜９９．５質量％、１０〜９５質量％、２０〜９９．９質量％、２０〜９９．５質量％、２０〜９５質量％、３０〜９９．９質量％、３０〜９９．５質量％、３０〜９５質量％、５０〜９９．９質量％、５０〜９９．５質量％、および５０〜９５質量％が挙げられる。
【００２６】
好ましい実施形態において、植物抽出物の抽出に使用される溶媒は、水、一価アルコール、多価アルコール、一価アルコールもしくは多価アルコールと水との混合溶媒、およびヘキサンから選択され、より好ましくは水、エタノール、エタノールと水との混合溶媒、またはヘキサンである。
【００２７】
上記エタノールと水との混合溶媒におけるエタノール濃度の例としては、１０〜９９．９容量％、１０〜９９．５容量％、１０〜９５容量％、２０〜９９．９容量％、２０〜９９．５容量％、２０〜９５容量％、３０〜９９．９容量％、３０〜９９．５容量％、３０〜９５容量％、５０〜９９．９容量％、５０〜９９．５容量％、および５０〜９５容量％が挙げられる。
【００２８】
さらに好ましい実施形態において、本発明で使用される植物の抽出に使用される溶媒は、Hiptage candicans、およびAnaxagorea luzonensisについては、水、５０％（ｖ／ｖ）エタノール水溶液または９５％（ｖ／ｖ）エタノール水溶液であり；Piper sarmentosum、Smilax corbularia、Ardisia elliptica、およびErythrina suberosaについては、５０％（ｖ／ｖ）エタノール水溶液、９５％（ｖ／ｖ）エタノール水溶液またはヘキサンであり；Solanum stramonifoliumについてはヘキサンであり；Dactyloctenium aegyptiumについては９５％（ｖ／ｖ）エタノール水溶液またはヘキサンであり；そして、Hopea ferreaについては５０（ｖ／ｖ）エタノール水溶液、９５％（ｖ／ｖ）エタノール水溶液またはヘキサンである。
【００２９】
抽出における溶媒の使用量としては、植物（乾燥質量換算）１ｇに対して１〜１００ｍＬが好ましい。抽出条件は、十分な抽出が行える条件であれば特に限定されない。通常、溶媒がより低温であればより長時間、溶媒がより高温であればより短時間の抽出を行う。例えば、抽出時間は１時間以上が好ましく、４時間以上がより好ましく、他方、２ヶ月以下が好ましく、４週間以下がより好ましい。また例えば、抽出温度は、好ましくは０℃以上、より好ましくは５℃以上であり、かつ好ましくは溶媒沸点以下であり、１０〜８０℃程度がさらに好ましいが、室温程度であってもよい。好ましい抽出条件の例としては、１５〜４０℃で３日〜４週間、５０〜７０℃で１〜１０時間、などが挙げられるが、これらに限定されず、当業者によって適宜選択され得る。
【００３０】
上述の手順で得られた抽出物に対して、必要に応じて、植物抽出物の製造に一般的に用いられる精製処理、例えば、有機溶剤沈殿、遠心分離、限界濾過膜、高速液体クロマトグラフ、カラムクロマトグラフ、液液分配、ゲルろ過分離、活性炭等を用いた処理を行うこともできる。
【００３１】
上述の手順で得られた抽出物は、抽出液やその画分を単独でまたは混合してそのまま用いてもよく、または適宜な溶媒で希釈した希釈液として用いてもよく、または濃縮エキス、乾燥粉末もしくはペースト状に調製して用いてもよい。
【００３２】
後述の実施例に示すとおり、本発明で使用される植物またはその抽出物は、エンドセリン変換酵素阻害活性を有する（実施例１参照）。したがって、本発明で使用される植物またはその抽出物は、エンドセリン変換酵素の阻害のための有効成分として使用することができる。あるいは、本発明で使用される植物またはその抽出物は、エンドセリン活性の抑制、エンドセリン活性上昇により生じる皮膚メラノサイトにおけるメラニン生成の抑制、皮膚美白、またはエンドセリン活性上昇に起因する疾患もしくは状態の予防もしくは改善のための有効成分として使用することができる。
【００３３】
本発明によれば、Hiptage candicans、Piper sarmentosum、Solanum stramonifolium、Anaxagorea luzonensis、Smilax corbularia、Ardisia elliptica、Erythrina suberosa、Dactyloctenium aegyptium、Hopea ferrea、およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１種が有効成分として使用される。該本発明で使用される植物およびそれらの抽出物は、いずれかが単独で使用されても、または任意の２以上の組み合わせで使用されてもよい。好ましい実施形態においては、Hiptage candicans、Piper sarmentosum、Solanum stramonifolium、Anaxagorea luzonensis、Smilax corbularia、Ardisia elliptica、Erythrina suberosa、Dactyloctenium aegyptiumもしくはHopea ferreaの抽出物、または該抽出物からなる群より選択される２以上の組み合わせが使用される。
【００３４】
したがって、一態様において、本発明は、本発明で使用される植物およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１つを有効成分とする、エンドセリン変換酵素阻害剤を提供する。また本発明は、本発明で使用される植物およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１つを有効成分とする、メラニン生成阻害剤を提供する。また本発明は、本発明で使用される植物およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１つを有効成分とする、皮膚美白剤を提供する。さらに本発明は、本発明で使用される植物およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１つを有効成分とする、抗高血圧剤を提供する。
【００３５】
別の態様において、本発明は、エンドセリン変換酵素阻害剤、メラニン生成阻害剤、皮膚美白剤、または抗高血圧剤の製造のための、本発明で使用される植物およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１つの使用を提供する。
【００３６】
一実施形態において、上記の剤は、本発明で使用される植物およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１つから本質的に構成され得る。
【００３７】
また別の態様において、本発明は、エンドセリン変換酵素阻害、メラニン生成阻害、皮膚美白、または高血圧の予防または改善のための、本発明で使用される植物およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１つの使用を提供する。
さらに別の態様において、本発明は、エンドセリン変換酵素阻害、メラニン生成阻害、皮膚美白、または高血圧の予防または改善に使用するための、本発明で使用される植物およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１つを提供する。
【００３８】
本発明による上記使用は、治療的使用であっても非治療的使用であってもよい。治療的使用の例としては、高血圧症患者に対する使用、およびメラニンの過剰生成に起因する疾患（例えば肝斑、後天性真皮メラノサイトーシスなど）を罹患した者に対する使用が挙げられる。非治療使用の例としては、血圧が高めであるが高血圧症とは診断されていない者の血圧上昇を防止するための使用、美容目的での皮膚メラニン生成阻害または皮膚美白のための使用が挙げられる。また例えば、非治療的使用は、他者に、医療行為としてではなく本発明で使用される植物またはそれらの抽出物を投与または摂取させるために、血圧上昇防止効果、または皮膚メラニン生成阻害もしくは皮膚美白効果を謳ってそれらを提供することを含む。
【００３９】
本発明で使用される植物およびそれらの抽出物は、ヒトおよび非ヒト動物のいずれに対しても使用することができる。非ヒト動物としては、非ヒト哺乳動物、鳥類などが挙げられ、非ヒト哺乳動物としては、例えば、類人猿、その他霊長類、マウス、ラット、ハムスター、ウマ、ウシ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、イヌ、ネコ、およびコンパニオン動物などが挙げられる。
【００４０】
本発明で使用される植物およびそれらの抽出物は、医薬品、医薬部外品、化粧料または食品等に対して、エンドセリン変換酵素阻害、メラニン生成阻害、皮膚美白、または高血圧の予防もしくは改善の機能を付与するための有効成分として添加することができる。例えば、本発明で使用される植物およびそれらの抽出物は、エンドセリン変換酵素阻害、メラニン生成阻害、皮膚美白、または高血圧の予防もしくは改善用の組成物に含有される。該組成物は、好ましくは医薬品、医薬部外品、化粧料または食品組成物である。
【００４１】
上記医薬品（医薬部外品も含む）は、エンドセリン変換酵素阻害、メラニン生成阻害、または高血圧の予防もしくは改善のための医薬品であり、本発明で使用される植物およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１つを、当該機能のための有効成分として含有する。さらに、該医薬品は、該有効成分の機能が失われない限りにおいて、必要に応じて薬学的に許容される担体、または他の有効成分、薬理成分等を含有していてもよい。
【００４２】
上記医薬品（医薬部外品も含む）の投与形態は、経口投与および非経口投与の何れであってもよい。該医薬品の剤形は、経口または非経口的に投与可能な剤形であれば特に限定されず、例えば注射剤、坐剤、吸入剤、経皮吸収剤、各種外用剤、局所製剤、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、液剤、シロップ剤等の何れでもよい。これらの種々の剤形の製剤は、本発明で使用される植物およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１つを、薬学的に許容される担体（例えば賦形剤、結合剤、増量剤、増粘剤、崩壊剤、界面活性剤、滑沢剤、分散剤、緩衝剤、保存剤、嬌味剤、香料、被膜剤、希釈剤等）、他の薬効成分等と適宜組み合わせて、定法に従って調製することができる。
【００４３】
上記医薬品（医薬部外品も含む）における本発明で使用される植物またはそれらの抽出物の含有量（乾燥物換算）は、特に限定されないが、好ましくは全質量中０．０１質量％以上、より好ましくは０．１質量％以上、さらに好ましくは１．０質量％以上、さらにより好ましくは１０質量％以上、なお好ましくは１５質量％以上であり、かつ好ましくは９５質量％以下、より好ましくは８０質量％以下、さらに好ましくは６０質量％以下である。さらに、当該含有量の例として、０．０１〜９５質量％、０．０１〜８０質量％、０．０１〜６０質量％、０．１〜９５質量％、０．１〜８０質量％、０．１〜６０質量％、１．０〜９５質量％、１．０〜８０質量％、１．０〜６０質量％、１０〜９５質量％、１０〜８０質量％、１０〜６０質量％、１５〜９５質量％、１５〜８０質量％、および１５〜６０質量％が挙げられる。
【００４４】
上記化粧料は、エンドセリン変換酵素阻害、メラニン生成阻害、または皮膚美白のための化粧料であり、本発明で使用される植物およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１つを、当該機能のための有効成分として含有する。さらに、該化粧料は、該有効成分の機能が失われない限りにおいて、必要に応じて化粧料に許容される担体、または他の有効成分もしくは化粧成分、例えば、保湿剤、他の美白剤、紫外線保護剤、細胞賦活剤、洗浄剤、角質溶解剤、メークアップ成分（例えば、化粧下地、ファンデーション、おしろい、パウダー、チーク、口紅、アイメーク、アイブロウ、マスカラ、その他）などを含有していてもよい。該化粧料の形態としては、皮膚外用投与、局所投与、または経口投与のための形態が挙げられる。
【００４５】
上記化粧料は、本発明で使用される植物およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１つを、必要に応じて上記化粧料に許容される担体、他の有効成分、化粧成分などと組みあわせて、常法により製造することができる。
【００４６】
上記化粧料における本発明で使用される植物またはそれらの抽出物の含有量（乾燥物換算）は、特に限定されないが、好ましくは全質量中０．０００１質量％以上、より好ましくは０．００１質量％以上、さらに好ましくは０．０１質量％以上、さらにより好ましくは０．１質量％以上、なお好ましくは１．０質量％以上であり、かつ好ましくは６０質量％以下、より好ましくは４０質量％以下、さらに好ましくは２０質量％以下、なお好ましくは１０質量％以下である。さらに、当該含有量の例として、０．０００１〜６０質量％、０．０００１〜４０質量％、０．０００１〜２０質量％、０．０００１〜１０質量％、０．００１〜６０質量％、０．００１〜４０質量％、０．００１〜２０質量％、０．００１〜１０質量％、０．０１〜６０質量％、０．０１〜４０質量％、０．０１〜２０質量％、０．０１〜１０質量％、０．１〜６０質量％、０．１〜４０質量％、０．１〜２０質量％、０．１〜１０質量％、１．０〜６０質量％、１．０〜４０質量％、１．０〜２０質量％、および１．０〜１０質量％が挙げられる。
【００４７】
上記食品は、エンドセリン変換酵素阻害、メラニン生成阻害、皮膚美白、または高血圧の予防または改善の機能を提供するための食品であり、本発明で使用される植物およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１つを、当該機能のための有効成分として含有する。該食品には、エンドセリン変換酵素阻害、メラニン生成阻害、皮膚美白、または高血圧の予防または改善をコンセプトとし、必要に応じてその旨を表示した病者用食品、および栄養機能食品、特定保健用食品、機能性表示食品等の保健機能食品が包含される。
【００４８】
上記食品は、固形、半固形または液状（例えば飲料）の食品組成物であり得る。該食品組成物の例としては、パン類、麺類、飯類、クッキー等の菓子類、ゼリー類、乳製品、スープ類、冷凍食品、インスタント食品、でんぷん加工製品、加工魚肉製品、その他加工食品、調味料、栄養補助食品、およびお茶やコーヒー飲料、果実飲料、炭酸飲料、ゼリー状飲料等の飲料、ならびにそれらの原料が挙げられる。あるいは、該食品は、錠剤、カプセル、顆粒、粉末、液剤、シロップなどの経口投与製剤の形態を有するサプリメントであってもよい。
【００４９】
上記食品は、本発明で使用される植物およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１つを、任意の食品材料または食品に許容される添加物（例えば溶剤、軟化剤、油、乳化剤、防腐剤、香科、甘味料、安定剤、着色剤、紫外線吸収剤、酸化防止剤、保湿剤、増粘剤、固着剤、分散剤、湿潤剤等）と適宜組み合わせて、定法に従って食品組成物として調製することができる。
【００５０】
上記食品組成物中における、本発明で使用される植物またはそれらの抽出物の含有量（乾燥物換算）は、特に限定されないが、好ましくは全質量中０．０００１質量％以上、より好ましくは０．００１質量％以上、さらに好ましくは０．０１質量％以上、さらにより好ましくは０．１質量％以上、なお好ましくは１．０質量％以上であり、かつ好ましくは６０質量％以下、より好ましくは４０質量％以下、さらに好ましくは２０質量％以下、なお好ましくは１０質量％以下である。さらに、当該含有量の例として、０．０００１〜６０質量％、０．０００１〜４０質量％、０．０００１〜２０質量％、０．０００１〜１０質量％、０．００１〜６０質量％、０．００１〜４０質量％、０．００１〜２０質量％、０．００１〜１０質量％、０．０１〜６０質量％、０．０１〜４０質量％、０．０１〜２０質量％、０．０１〜１０質量％、０．１〜６０質量％、０．１〜４０質量％、０．１〜２０質量％、０．１〜１０質量％、１．０〜６０質量％、１．０〜４０質量％、１．０〜２０質量％、および１．０〜１０質量％が挙げられる。
【００５１】
なお別の態様において、本発明は、対象におけるエンドセリン変換酵素阻害方法を提供する。また本発明は、対象におけるメラニン生成阻害方法を提供する。また本発明は、対象における皮膚美白方法を提供する。また本発明は、対象における高血圧の予防または改善方法を提供する。当該方法は、対象に、本発明で使用される植物およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１つを有効量で投与することを含む。当該方法は、治療的方法であっても非治療的方法であってもよい。
【００５２】
上記方法における対象（subject）としては、エンドセリン変換酵素阻害、メラニン生成阻害、皮膚美白、または高血圧の予防もしくは改善が所望されるか、またはそれを必要とする動物が挙げられる。動物としては、上述したヒトおよび非ヒト動物が挙げられ、より好ましくはヒトである。あるいは、上記方法における対象としては、上述したヒトおよび非ヒト動物における、美白が所望されるか、またはそれを必要とする皮膚の部位（例えば、色素沈着、シミ、老人性色素班等を有する皮膚の部位、および皮膚の露光部）が挙げられる。
【００５３】
本発明はさらに、インビトロでのエンドセリン変換酵素阻害またはメラニン生成阻害方法を提供する。当該インビトロ方法は、上述したヒトまたは非ヒト動物由来の組織もしくは細胞、例えば血管内皮細胞、血管組織、または皮膚組織、３Ｄ培養皮膚、培養ケラチノサイト等の皮膚細胞、またはそれらの抽出液、あるいはエンドセリン変換酵素と、その基質であるBig ET-1、Big ET-2もしくはBig ET-3を含有する反応液などを対象として行うことができる。
【００５４】
上記本発明の方法における投与の有効量は、対象におけるエンドセリン変換酵素活性を阻害できる量であり得る。好ましくは、有効量とは、投与群におけるエンドセリン変換酵素の活性を、未投与群と比べて統計学的に有意に低下させることができる量である。また好ましくは、有効量とは、投与群におけるエンドセリン変換酵素の活性を、未投与群の４０％以下、より好ましくは３０％以下、さらに好ましくは１５％以下に低下させることができる量である。エンドセリン変換酵素の活性は、後述の実施例または非特許文献４に記載の方法によって測定することができる。
【００５５】
本発明で使用される植物またはそれらの抽出物の投与量および投与計画は、対象の種、体重、性別、年齢、状態、またはその他の要因に従って当業者により適宜決定されればよい。限定ではないが、本発明で使用される植物またはそれらの抽出物（乾燥物換算）の投与量は、例えば成人１人１日当たり、好ましくは０．０００１ｍｇ以上、より好ましくは０．００１ｍｇ以上、さらに好ましくは０．０１ｍｇ以上であり、さらにより好ましくは０．１ｍｇ以上であり、なお好ましくは１ｍｇ以上であり、なお好ましくは０．１ｇ以上であり、かつ好ましくは１０ｇ以下、より好ましくは５ｇ以下、さらに好ましくは１ｇ以下である。あるいは、本発明で使用される植物またはその抽出物（乾燥物換算）の投与量（成人１人１日当たり）は、０．０００１ｍｇ〜１０ｇ、０．０００１ｍｇ〜５ｇ、０．０００１ｍｇ〜１ｇ、０．００１ｍｇ〜１０ｇ、０．００１ｍｇ〜５ｇ、０．００１ｍｇ〜１ｇ、０．０１ｍｇ〜１０ｇ、０．０１ｍｇ〜５ｇ、０．０１ｍｇ〜１ｇ、０．１ｍｇ〜１０ｇ、０．１ｍｇ〜５ｇ、０．１ｍｇ〜１ｇ、１ｍｇ〜１０ｇ、１ｍｇ〜５ｇ、１ｍｇ〜１ｇ、０．１ｇ〜１０ｇ、０．１ｇ〜５ｇ、または０．１ｇ〜１ｇの範囲で選択され得る。上記の量を、例えば、１日に１回、２回または３回以上に分け、数週間〜数ヶ月間継続して投与することが好ましい。
【００５６】
本発明はまた、例示的実施形態として以下の物質、製造方法、用途、方法等を包含する。但し、本発明はこれらの実施形態に限定されない
【００５７】
〔１〕Hiptage candicans、Piper sarmentosum、Solanum stramonifolium、Anaxagorea luzonensis、Smilax corbularia、Ardisia elliptica、Erythrina suberosa、Dactyloctenium aegyptium、Hopea ferrea、およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１種を有効成分とするエンドセリン変換酵素阻害剤。
〔２〕Hiptage candicans、Piper sarmentosum、Solanum stramonifolium、Anaxagorea luzonensis、Smilax corbularia、Ardisia elliptica、Erythrina suberosa、Dactyloctenium aegyptium、Hopea ferrea、およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１種を有効成分とするメラニン生成阻害剤。
〔３〕Hiptage candicans、Piper sarmentosum、Solanum stramonifolium、Anaxagorea luzonensis、Smilax corbularia、Ardisia elliptica、Erythrina suberosa、Dactyloctenium aegyptium、Hopea ferrea、およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１種を有効成分とする皮膚美白剤。
〔４〕Hiptage candicans、Solanum stramonifolium、Anaxagorea luzonensis、Smilax corbularia、Ardisia elliptica、Erythrina suberosa、Dactyloctenium aegyptium、Hopea ferrea、およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１種を有効成分とする抗高血圧剤。
〔５〕エンドセリン変換酵素阻害剤の製造のための、Hiptage candicans、Piper sarmentosum、Solanum stramonifolium、Anaxagorea luzonensis、Smilax corbularia、Ardisia elliptica、Erythrina suberosa、Dactyloctenium aegyptium、Hopea ferrea、およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１つの使用。
〔６〕メラニン生成阻害剤の製造のための、Hiptage candicans、Piper sarmentosum、Solanum stramonifolium、Anaxagorea luzonensis、Smilax corbularia、Ardisia elliptica、Erythrina suberosa、Dactyloctenium aegyptium、Hopea ferrea、およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１つの使用。
〔７〕皮膚美白剤の製造のための、Hiptage candicans、Piper sarmentosum、Solanum stramonifolium、Anaxagorea luzonensis、Smilax corbularia、Ardisia elliptica、Erythrina suberosa、Dactyloctenium aegyptium、Hopea ferrea、およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１つの使用。
〔８〕抗高血圧剤の製造のための、Hiptage candicans、Solanum stramonifolium、Anaxagorea luzonensis、Smilax corbularia、Ardisia elliptica、Erythrina suberosa、Dactyloctenium aegyptium、Hopea ferrea、およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１つの使用。
〔９〕エンドセリン変換酵素阻害に使用するための、Hiptage candicans、Piper sarmentosum、Solanum stramonifolium、Anaxagorea luzonensis、Smilax corbularia、Ardisia elliptica、Erythrina suberosa、Dactyloctenium aegyptium、Hopea ferrea、およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１つ。
〔１０〕メラニン生成阻害に使用するための、Hiptage candicans、Piper sarmentosum、Solanum stramonifolium、Anaxagorea luzonensis、Smilax corbularia、Ardisia elliptica、Erythrina suberosa、Dactyloctenium aegyptium、Hopea ferrea、およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１つ。
〔１１〕皮膚美白に使用するための、Hiptage candicans、Piper sarmentosum、Solanum stramonifolium、Anaxagorea luzonensis、Smilax corbularia、Ardisia elliptica、Erythrina suberosa、Dactyloctenium aegyptium、Hopea ferrea、およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１つ。
〔１２〕高血圧の予防または改善に使用するための、Hiptage candicans、Solanum stramonifolium、Anaxagorea luzonensis、Smilax corbularia、Ardisia elliptica、Erythrina suberosa、Dactyloctenium aegyptium、Hopea ferrea、およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１つ。
〔１３〕エンドセリン変換酵素阻害のための、Hiptage candicans、Piper sarmentosum、Solanum stramonifolium、Anaxagorea luzonensis、Smilax corbularia、Ardisia elliptica、Erythrina suberosa、Dactyloctenium aegyptium、Hopea ferrea、およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１つの使用。
〔１４〕メラニン生成阻害のための、Hiptage candicans、Piper sarmentosum、Solanum stramonifolium、Anaxagorea luzonensis、Smilax corbularia、Ardisia elliptica、Erythrina suberosa、Dactyloctenium aegyptium、Hopea ferrea、およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１つの使用。
〔１５〕皮膚美白のための、Hiptage candicans、Piper sarmentosum、Solanum stramonifolium、Anaxagorea luzonensis、Smilax corbularia、Ardisia elliptica、Erythrina suberosa、Dactyloctenium aegyptium、Hopea ferrea、およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１つの使用。
〔１６〕高血圧の予防または改善のための、Hiptage candicans、Solanum stramonifolium、Anaxagorea luzonensis、Smilax corbularia、Ardisia elliptica、Erythrina suberosa、Dactyloctenium aegyptium、Hopea ferrea、およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１つの使用。
〔１７〕対象におけるエンドセリン変換酵素阻害方法であって、それを必要とする対象に、Hiptage candicans、Piper sarmentosum、Solanum stramonifolium、Anaxagorea luzonensis、Smilax corbularia、Ardisia elliptica、Erythrina suberosa、Dactyloctenium aegyptium、Hopea ferrea、およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１つを有効量で投与することを含む、方法。
〔１８〕対象におけるメラニン生成阻害方法であって、それを必要とする対象に、Hiptage candicans、Piper sarmentosum、Solanum stramonifolium、Anaxagorea luzonensis、Smilax corbularia、Ardisia elliptica、Erythrina suberosa、Dactyloctenium aegyptium、Hopea ferrea、およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１つを有効量で投与することを含む、方法。
〔１９〕対象における皮膚美白方法であって、それを必要とする対象に、Hiptage candicans、Piper sarmentosum、Solanum stramonifolium、Anaxagorea luzonensis、Smilax corbularia、Ardisia elliptica、Erythrina suberosa、Dactyloctenium aegyptium、Hopea ferrea、およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１つを有効量で投与することを含む、方法。
〔２０〕対象における高血圧の予防または改善方法であって、それを必要とする対象に、Hiptage candicans、Solanum stramonifolium、Anaxagorea luzonensis、Smilax corbularia、Ardisia elliptica、Erythrina suberosa、Dactyloctenium aegyptium、Hopea ferrea、およびそれらの抽出物からなる群より選択される少なくとも１つを有効量で投与することを含む、方法。
〔２１〕化粧成分中に、有効成分としてHiptage candicans、Piper sarmentosum、Solanum stramonifolium、Anaxagorea luzonensis、Smilax corbularia、Ardisia elliptica、Erythrina suberosa、Dactyloctenium aegyptium、およびHopea ferreaの抽出物からなる群より選択される少なくとも１種の抽出物を含有し、かつ薬学的に許容される担体または食品添加物を含有する、エンドセリン変換酵素阻害剤組成物。
〔２２〕上記抽出物の含有量が、
好ましくは０．０００１〜６０質量％であり、
より好ましくは０．０００１〜４０質量％であり、
さらに好ましくは０．０００１〜２０質量％であり、
さらに好ましくは０．０００１〜１０質量％であり、
さらに好ましくは０．００１〜６０質量％であり、
さらに好ましくは０．００１〜４０質量％であり、
さらに好ましくは０．００１〜２０質量％であり、
さらに好ましくは０．００１〜１０質量％であり、
さらに好ましくは０．０１〜６０質量％であり、
さらに好ましくは０．０１〜４０質量％であり、
さらに好ましくは０．０１〜２０質量％であり、
さらに好ましくは０．０１〜１０質量％である、
〔２１〕記載の組成物。
〔２３〕好ましくは、上記化粧成分が、保湿剤、美白剤、紫外線保護剤、細胞賦活剤、洗浄剤、角質溶解剤、メークアップ成分、および化粧料に許容される担体からなる群より選択される１種以上を含む、〔２１〕又は〔２２〕記載の組成物。
〔２４〕好ましくは、上記薬学的に許容される担体が、賦形剤、結合剤、増量剤、増粘剤、崩壊剤、界面活性剤、滑沢剤、分散剤、緩衝剤、保存剤、嬌味剤、香料、被膜剤、および希釈剤からなる群より選択される１種以上である、〔２１〕〜〔２３〕のいずれか１項記載の組成物。
〔２５〕好ましくは、上記食品添加物が、溶剤、軟化剤、油、乳化剤、防腐剤、香科、甘味料、安定剤、着色剤、紫外線吸収剤、酸化防止剤、保湿剤、増粘剤、固着剤、分散剤および湿潤剤からなる群より選択される１種以上である、〔２１〕〜〔２４〕のいずれか１項記載の組成物。
〔２６〕上記〔１〕、〔５〕、〔９〕、〔１３〕、〔１７〕、および〔２１〕〜〔２５〕のいずれか１項において、好ましくは、上記エンドセリン変換酵素は、エンドセリン変換酵素１である。
〔２７〕上記〔１３〕〜〔１６〕のいずれか１項において、好ましくは、上記使用は非治療的使用である。
〔２８〕上記〔１〕〜〔２７〕のいずれか１項において、上記抽出物は、好ましくは水、エタノール、エタノールと水との混合溶媒、またはヘキサンによる抽出物である。
〔２９〕上記〔２８〕において、上記抽出物は、好ましくは
Hiptage candicansの水、５０％（ｖ／ｖ）エタノール水溶液または９５％（ｖ／ｖ）エタノール水溶液による抽出物であるか、
Piper sarmentosumの５０％（ｖ／ｖ）エタノール水溶液、９５％（ｖ／ｖ）エタノール水溶液またはヘキサンによる抽出物であるか、
Solanum stramonifoliumのヘキサンによる抽出物であるか、
Anaxagorea luzonensisの水、５０％（ｖ／ｖ）エタノール水溶液または９５％（ｖ／ｖ）エタノール水溶液による抽出物であるか、
Smilax corbulariaの５０％（ｖ／ｖ）エタノール水溶液、９５％（ｖ／ｖ）エタノール水溶液またはヘキサンによる抽出物であるか、
Ardisia ellipticaの５０％（ｖ／ｖ）エタノール水溶液、９５％（ｖ／ｖ）エタノール水溶液またはヘキサンによる抽出物であるか、
Erythrina suberosaの５０％（ｖ／ｖ）エタノール水溶液、９５％（ｖ／ｖ）エタノール水溶液またはヘキサンによる抽出物であるか、
Dactyloctenium aegyptiumの９５％（ｖ／ｖ）エタノール水溶液またはヘキサンによる抽出物であるか、または
Hopea ferreaの５０（ｖ／ｖ）エタノール水溶液、９５％（ｖ／ｖ）エタノール水溶液またはヘキサンによる抽出物である。
〔３０〕上記〔１〕〜〔２９〕のいずれか１項において、好ましくは、
上記Hiptage candicansは、Hiptage candicansの木部であり、
上記Piper sarmentosumは、Piper sarmentosumの全草であり、
上記Solanum stramonifoliumは、Solanum stramonifoliumの根であり、
上記Anaxagorea luzonensisは、Anaxagorea luzonensisの木部または樹皮であり、
上記Smilax corbulariaは、Smilax corbulariaの根茎であり、
上記Ardisia ellipticaは、Ardisia ellipticaの根または幹であり、
上記Erythrina suberosaは、Erythrina suberosaの葉であり、
上記Dactyloctenium aegyptiumは、Dactyloctenium aegyptiumの全草であり、
上記Hopea ferreaは、Hopea ferreaの樹皮である。
【実施例】
【００５８】
（植物抽出物の調製）
乾燥、粉砕した植物材料をそれぞれ以下の４種類の溶媒のいずれかで抽出した：（Ａ）水、（Ｂ）５０％（ｖ／ｖ）エタノール水溶液、（Ｃ）９５％（ｖ／ｖ）エタノール水溶液、および（Ｄ）ヘキサン。約５０ｇの各植物材料を、５００ｍＬの６０℃の水に４時間、または５００ｍＬの３０℃の５０％（ｖ／ｖ）エタノール水溶液、９５％（ｖ／ｖ）エタノール水溶液もしくはヘキサンに７日間浸漬させた。ろ過して粗抽出液を得た後、溶媒を濃縮乾固して各種抽出固形物を得た。各抽出物固形物を、固形分濃度が１％（ｗ／ｖ）、０．５％（ｗ／ｖ）、０．２５％（ｗ／ｖ）になるよう各種溶媒（Ａ：１０％ＥｔＯＨ、Ｂ：５０％ＥｔＯＨ、Ｃ：９５％ＥｔＯＨ、Ｄ：９９．５％ＥｔＯＨ）に溶解し、各植物抽出液として、以下のECE阻害アッセイに用いるまで−２０℃で保存した。抽出固形分の収量を表１に示す。
【００５９】
【表１】
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【００６０】
（エンドセリン変換酵素粗タンパク質）
非特許文献４に記載の方法に従って、粗ECE-1タンパク質を、新鮮ヒト血管内皮細胞株EA.hy926からの抽出により新たに調製した。粗ECE-1タンパク質は使用まで−１８℃で保存した。
【００６１】
実施例１  ECE阻害アッセイ
酵素反応は非特許文献４に記載の手順により行った。簡潔に述べると、BigET-1バッファー（0.1M sodium phosphate buffer (pH 6.8), 0.5M NaCl）中で植物抽出液（最終濃度：０．０１、０．００５または０．００２５％（ｗ／ｖ））と粗ＥＣＥ−１タンパク質を３７℃で１５分プレインキュベートし、これにBigET-1バッファー中の０．２μＭ BigET-1基質（Enzo Life Science, Cat. # ALX-152-001-PC05）（終濃度で０．１μＭ）を加え、３７℃で２時間インキュベートした。５ｍＭ EDTAを加えて酵素反応を止めた後、混合液をET-1 ELISA kit（Enzo Life Sciences, Cat. # ADI-900-020A）に移し、製品マニュアルに記載の方法に従ってET-1を定量した。簡潔に説明すると、混合液中のET-1は９６ウェルマイクロプレートに固定化された抗ヒトET-1抗体に捕捉され、HRP標識抗ヒトET-1抗体で標識された。標識ET-1の４５０ｎｍ吸光度をプレートリーダーにて測定した。スタンダードとの吸光度の比較に基づいて混合液中のET-1量を定量し、次いで下記式に従って相対ECE-1阻害活性（対照に対する％）を算出した。
相対ECE-1阻害活性（％）  ＝  （１−Ｘ／Ｙ）×１００
（Ｘ；植物抽出物を含む液のET-1量、Ｙ；対照を含む液のET-1量）
ホスホラミドン（PD）をECE-1阻害剤のポジティブコントロールとして用いた。１０％（ｖ／ｖ）エタノール水溶液、５０％（ｖ／ｖ）エタノール水溶液、９５％（ｖ／ｖ）エタノール水溶液または１００％エタノールを対照として用いた。
【００６２】
ＥＣＥ−１阻害活性の定量結果を表２に示す。Hiptage candicans、Piper sarmentosum、Solanum stramonifolium、Anaxagorea luzonensis、Smilax corbularia、Ardisia elliptica、Erythrina suberosa、Dactyloctenium aegyptium、およびHopea ferreaの抽出物はいずれも、ECE-1阻害活性を有していた。これらの植物抽出物の活性は、非特許文献４に記載される公知のECE-1阻害剤であるワレモコウ（Sanguisorba officinalis L.）エキス（参考例１）よりも高かった。非特許文献４に記載されるとおり、ECE-1阻害剤であるワレモコウエキスは、皮膚色素沈着を抑制する。また非特許文献４には、ET-1を阻害する植物エキスがメラノサイトの増殖を抑制し、UVB照射後のヒト皮膚の色素沈着を防止することが記載されている。したがって、Hiptage candicans、Piper sarmentosum、Solanum stramonifolium、Anaxagorea luzonensis、Smilax corbularia、Ardisia elliptica、Erythrina suberosa、Dactyloctenium aegyptium、Hopea ferrea、およびそれらの抽出物についても、皮膚のメラニン生成を阻害し、色素沈着防止する活性を有することが示唆される。さらに、上記植物およびそれらの抽出物は、ECE阻害活性に基づいて血管収縮を抑制し、抗高血圧剤として有効である。
【００６３】
【表２】
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【国際調査報告】
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