(57)【要約】止血用包帯は、標的部位で止血を促進するために、自己集合性ペプチドヒドロゲルと併せて相乗的に使用される。止血のための関連する方法、キット、およびデバイスが開示される。１つまたは複数の態様において、止血用キットは、創傷包帯と、止血を促進するために生理学的条件下でヒドロゲルを形成するのに使用するために有効な量および有効な濃度の約７から３２の間のアミノ酸を含む自己集合性ペプチドを含む溶液とを含んでよい。一部の態様では、自己集合性ペプチドは、ＲＡＤＡ１６、ＩＥＩＫ１３、およびＫＬＤ１２からなる群から選択されてよい。自己集合性ペプチドは、疎水性アミノ酸と親水性アミノ酸とが交互になる約１２から約１６の間のアミノ酸を含んでよい。溶液は、細胞および／または薬物を実質的に含まなくてよい。
2019517299.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
止血用キットであって、
創傷包帯と、
生理学的条件下でヒドロゲルを形成するのに使用するために有効な量および有効な濃度の約７から３２の間のアミノ酸を含む自己集合性ペプチドを含む溶液と
を含み、該創傷包帯および溶液が、世界保健機関（ＷＨＯ）出血スケールで評価して２またはそれより高い初期出血スコアを有する創傷の止血を促進することが可能である、止血用キット。
【請求項２】
前記創傷包帯および溶液が、ＷＨＯ出血スケールで評価して３またはそれより高い初期出血スコアを有する創傷の止血を促進することが可能である、請求項１に記載のキット。
【請求項３】
前記自己集合性ペプチドが、ＲＡＤＡ１６およびＩＥＩＫ１３からなる群から選択される、請求項１に記載のキット。
【請求項４】
前記自己集合性ペプチドが、ＫＬＤ１２を含む、請求項１に記載のキット。
【請求項５】
前記自己集合性ペプチドが、疎水性アミノ酸と親水性アミノ酸とが交互になる約１２から約１６の間のアミノ酸を含む、請求項１に記載のキット。
【請求項６】
前記溶液が、細胞および／または薬物を実質的に含まない、請求項１に記載のキット。
【請求項７】
前記創傷包帯が、実質的に多孔質である、請求項１に記載のキット。
【請求項８】
前記創傷包帯が、スポンジ、織布、不織布、パフ、またはそれらの混合物を含む、請求項７に記載のキット。
【請求項９】
前記創傷包帯が、綿ガーゼを含む、請求項８に記載のキット。
【請求項１０】
前記創傷包帯が、合成材料を含む、請求項８に記載のキット。
【請求項１１】
前記創傷包帯が、生体吸収性材料を含む、請求項７に記載のキット。
【請求項１２】
前記創傷包帯が、コラーゲン、ゼラチン、キトサン、ヒアルロン酸、デンプン、シルクフィブロイン、酸化再生セルロース、ラクチドもしくはグリコリドのホモポリマー、またはラクチドおよびグリコリドのコポリマーを含む、請求項１１に記載のキット。
【請求項１３】
前記溶液が、１ｃｍ２の創傷包帯表面当たり約１μＬから２ｍＬの体積で提供される、請求項１に記載のキット。
【請求項１４】
止血のために前記創傷包帯および前記溶液を標的領域へ投与するための指示をさらに含む、請求項１に記載のキット。
【請求項１５】
前記指示が、前記標的領域の前記創傷包帯の上部に触圧を加えることを含む、請求項１４に記載のキット。
【請求項１６】
シリンジ、ボトル、転写具、スプレッダー、および容器のうちの少なくとも１つをさらに含む、請求項１に記載のキット。
【請求項１７】
多孔質創傷包帯と、
止血を促進するために生理学的条件下でヒドロゲルを形成するのに使用するために有効な量および有効な濃度の約７から３２の間のアミノ酸を含む自己集合性ペプチドを含む溶液であって、該多孔質創傷包帯の細孔に浸透する溶液と
を含む止血用デバイス。
【請求項１８】
前記溶液が、１ｃｍ２の多孔質創傷包帯当たり約１μＬから２ｍＬの体積で存在する、請求項１５に記載のデバイス。
【請求項１９】
前記自己集合性ペプチドが、ＲＡＤＡ１６およびＩＥＩＫ１３からなる群から選択される、請求項１７に記載のデバイス。
【請求項２０】
前記自己集合性ペプチドが、ＫＬＤ１２を含む、請求項１７に記載のデバイス。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
１つまたは複数の態様は、様々な医学、研究、および産業用途のための自己集合性ペプチドヒドロゲルと併せて使用される止血用包帯に関する。
【背景技術】
【０００２】
止血は、一般に、被験体の体の血管および臓器からの失血の予防に関する。このプロセスは、手術、医療的処置、および創傷治癒中の血流を停止またはそうでなければ制御するのに重要な役割を果たす。止血は凝固を含む天然の生物学的プロセスであるが、止血を達成または促進するために様々な化学的、機械的および物理的薬剤を実施してもよい。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００３】
１つまたは複数の態様において、止血用キットは、創傷包帯と、止血を促進するために生理学的条件下でヒドロゲルを形成するのに使用するために有効な量および有効な濃度の約７から３２の間のアミノ酸を含む自己集合性ペプチドを含む溶液とを含んでよい。
【０００４】
一部の態様では、自己集合性ペプチドは、ＲＡＤＡ１６、ＩＥＩＫ１３、およびＫＬＤ１２からなる群から選択されてよい。自己集合性ペプチドは、疎水性アミノ酸と親水性アミノ酸とが交互になる約１２から約１６の間のアミノ酸を含んでよい。溶液は、細胞および／または薬物を実質的に含まなくてよい。
【０００５】
一部の態様では、創傷包帯は、実質的に多孔質であってよい。創傷包帯は、スポンジ、織布、不織布、パフ、またはそれらの混合物を含んでよい。創傷包帯は、綿ガーゼを含んでよい。創傷包帯は、合成材料を含んでよい。創傷包帯は、生体吸収性材料を含んでよい。少なくとも一部の非限定的な態様では、創傷包帯は、コラーゲン、ゼラチン、キトサン、ヒアルロン酸、デンプン、シルクフィブロイン、酸化再生セルロース、ラクチドもしくはグリコリドのホモポリマー、またはラクチドおよびグリコリドのコポリマーを含んでよい。
【０００６】
一部の態様では、溶液は、１ｃｍ２の創傷包帯表面当たり約１μＬから２ｍＬの体積で提供されてよい。キットは、止血のために創傷包帯および溶液を標的領域へ投与するための指示をさらに含んでよい。指示は、標的領域の創傷包帯の上部に触圧を加えることを含んでよい。少なくとも一部の非限定的な態様では、キットは、シリンジ、ボトル、転写具、スプレッダー、および容器のうちの少なくとも１つをさらに含んでよい。
【０００７】
１つまたは複数の態様において、止血用デバイスは、多孔質創傷包帯と、止血を促進するために生理学的条件下でヒドロゲルを形成するのに使用するために有効な量および有効な濃度の約７から３２の間のアミノ酸を含む自己集合性ペプチドであって、多孔質創傷包帯の細孔に浸透する自己集合性ペプチドを含む溶液とを含んでよい。
【０００８】
一部の態様では、溶液は、１ｃｍ２の多孔質創傷包帯当たり約１μＬから２ｍＬの体積で存在してよい。
【０００９】
一部の実施形態では、キットおよび／またはデバイスは、ＷＨＯ出血スケールで２またはそれより高い出血スコアを有する標的領域に対して止血を提供してよい。一部の実施形態では、キットおよび／またはデバイスは、２分またはそれ未満に標的領域に対して止血を提供してよい。具体的には、キットおよび／またはデバイスは、２分またはそれ未満にＷＨＯ出血スケールで標的領域の出血スコアを０に低下させてよい。一部の実施形態では、キットおよび／またはデバイスは、標的領域の創傷包帯の上部に触圧を加えると、２分またはそれ未満にＷＨＯ出血スケールで３または４の初期出血スコアを有する標的領域に対して止血を提供してよい。
【００１０】
さらに他の態様、実施形態、ならびにこれらの例示的な態様および実施形態の利点については、以下で詳細に論じる。さらに、前述の情報および以下の詳細な説明の両方は、様々な態様および実施形態の単なる説明に役立つ実例であり、特許請求される態様および実施形態の性質および特質を理解するための概要またはフレームワークを提供することを意図していることを理解されたい。添付の図面は、様々な態様および実施形態の説明およびさらなる理解を提供するために含まれ、本明細書に組み込まれ、その一部を構成する。図面は、本明細書の残りの部分と共に、記載され特許請求される態様および実施形態の原理および操作を説明する役割を果たす。
【００１１】
添付の図面は一定の縮尺で描かれることを意図していない。明確にするために、すべての構成要素が標識されるわけではない。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】図１は、一実施形態による自己集合性ペプチドヒドロゲルと共に止血用多孔質包帯を使用するためのプロセスの６つの画像を含む。
【図２】図２は、別の実施形態による自己集合性ペプチドヒドロゲルと共に止血用多孔質包帯を使用するための代替のプロセスの６つの画像を含む。
【図３】図３は、一実施形態による自己集合性ペプチドヒドロゲルと共に止血用多孔質包帯の使用の４つの画像を含む。
【図４】図４は、本明細書に記載されている実施形態による様々な止血用多孔質包帯と併せたゲル形成の可視化である。
【図５】図５は、一実施形態による止血用多孔質スポンジと併せたゲル形成の可視化である。
【図６】図６は、本明細書に記載されている実施形態による止血用スポンジで処置された創傷欠損部位の２つの画像を含む。
【図７】図７は、止血用スポンジおよび食塩水で処置した試料ならびに止血用スポンジおよび自己集合性ペプチドヒドロゲルで処置した試料の経時的な出血度（出血スコア）のグラフである。
【図８】図８は、止血用スポンジおよび食塩水で処置した試料ならびに止血用スポンジおよび自己集合性ペプチドヒドロゲルで処置した試料で実現された経時的な止血成功率（％）のグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
１つまたは複数の実施形態において、自己集合性ペプチドヒドロゲルは、止血の足場として使用してよい。例えば、３−Ｄ  Ｍａｔｒｉｘ  Ｃｏ．，Ｌｔｄ．から市販されているＰｕｒａＭａｔｒｉｘ（登録商標）ペプチドヒドロゲル（以後、「ＰｕｒａＭａｔｒｉｘ（登録商標）」）は、アルギニン、アラニンおよびアスパラギン酸の反復配列、またはＲＡＤＡＲＡＤＡＲＡＤＡＲＡＤＡ（ＲＡＤＡ１６）を有する合成の１６アミノ酸ポリペプチドである。ＰｕｒａＭａｔｒｉｘ（登録商標）は、生理学的条件下で自己集合してヒドロゲルを形成することが公知であり、様々な生物医学的用途に使用することができる。本明細書に記載されている様々な実施形態において、ＰｕｒａＭａｔｒｉｘ（登録商標）を止血のために使用してよい。他の関連のある非限定的な合成ペプチド配列は、リシン、ロイシン、およびアスパラギン酸（Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ（ＫＬＤ））の反復配列を有する自己集合性ペプチドによって表されてよく、そのようなペプチド配列は、（ＫＬＤ）ｐ、ここで、ｐ＝２〜５０、例えばＫＬＤ１２によって表される。さらに他の関連のある非限定的な合成ペプチド配列は、イソロイシン、グルタミン酸、イソロイシンおよびリシン（Ｉｌｅ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（ＩＥＩＫ））の反復配列を有する自己集合性ペプチドによって表されてよく、そのようなペプチド配列は、（ＩＥＩＫ）ｐ、ここで、ｐ＝２〜５０、例えばＩＥＩＫ１３によって表される。他の実施形態は、さらに他の自己集合性ペプチドを含んでよい。一部の非限定的な実施形態では、「SELF-ASSEMBLING  PEPTIDE  COMPOSITIONS」と題する国際特許出願公開番号ＷＯ２０１５／１３８５１４に開示され、３−Ｄ  Ｍａｔｒｉｘ，Ｌｔｄ．に譲渡されているものなどのペプチドヒドロゲルは、すべての目的のためにその全体が参照により本明細書に組み込まれ、実現され得る。
【００１４】
本明細書で開示されている実施形態は、ある特定のペプチド組成物（および特に、自己集合性ペプチド薬剤のある特定の組成物）およびそれに関連する技術を含んでよい。一部の実施形態では、そのような組成物は、溶液であるか、または溶液を含んでよい。一部の実施形態では、そのような組成物は、ゲルであるか、またはゲルを含んでよい。一部の実施形態では、そのような組成物は、固体（例えば乾燥／凍結乾燥）ペプチドであるか、または固体（例えば乾燥／凍結乾燥）ペプチドを含んでよい。例えば、特定のペプチド組成物（すなわち、特定の濃度、イオン強度、ｐＨ、粘度および／または他の特徴を有するペプチド組成物）は、有用なおよび／または驚くべき属性（例えば、ゲル化もしくは自己集合動態［例えば、ゲル化の速度ならびに／またはペプチド自己集合の速度および可逆性］、剛性［例えば、貯蔵弾性率を介して評価される］、および／または他の機械的特性）を有する。
【００１５】
一部の実施形態では、提供された組成物に含まれるペプチドは、自己集合性ペプチドである。一部の実施形態では、提供された組成物に含まれるペプチドは、両親媒性ペプチドである。一部の実施形態では、提供された組成物に含まれるペプチドは、少なくとも一続きの（例えば少なくとも４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０などのアミノ酸の）交互の親水性および疎水性アミノ酸によって特徴付けられるアミノ酸配列を有する。１つまたは複数の実施形態において、ペプチド組成物は、約６から約２００のアミノ酸残基を有する両親媒性ポリペプチドを含んでよい。一部の実施形態では、ペプチドは、約６から約２０アミノ酸の範囲内の長さで、疎水性アミノ酸と親水性アミノ酸が交互になったアミノ酸配列を有してよい。
【００１６】
一部の実施形態では、提供された組成物に含まれるペプチドは、１つまたは複数のＡｒｇ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ａｌａ（ＲＡＤＡ）の反復を含むアミノ酸配列を有する。一部の実施形態では、提供された組成物に含まれるペプチドは、配列Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｅｕ（ＫＬＤＬ）の反復単位を含むまたはそれからなるアミノ酸配列を有する。一部の実施形態では、提供された組成物に含まれるペプチドは、配列Ｉｌｅ−Ｇｌｕ−Ｉｌｅ−Ｌｙｓ（ＩＥＩＫ）の反復単位を含むまたはそれからなるアミノ酸配列を有する。一部の実施形態では、ペプチドは、ＩＥＩＫ１３、ＫＬＤ１２、またはＲＡＤＡ１６であってよい。一部の実施形態では、これらのペプチドの組成物は、異なる（例えば、より低い）ｐＨレベルおよび／またはイオン強度を有する、適した参照組成物と比較して高められた特性を有してよい。
【００１７】
一部の実施形態では、増加したイオン強度は、ペプチド組成物の剛性および／またはゲル化動態に有益な影響を与え、より広範囲の用途に適したものにし得る。一部の実施形態では、増加したイオン強度は、生理学的イオン強度であり得、これは、ペプチド組成物が体内に入れられる場合に生じ得る。一部の実施形態では、ペプチド組成物のイオン強度は、約０．０００１Ｍから約１．５Ｍであってよい。一部の実施形態では、ペプチド組成物のイオン強度は、一般的な塩、例えば、ＮａＣｌ、ＫＣ１、ＭｇＣｌ２、ＣａＣｌ２、ＣａＳＯ４、ＤＰＢＳ（ダルベッコリン酸緩衝食塩水、１０×）を混合することによって調整してよい。一部の実施形態では、ペプチド組成物のイオン強度は、一般的な塩を混合することによって調整してよく、１つまたは複数の一般的な塩は、１つまたは複数の塩形成カチオン、および１つまたは複数の塩形成アニオンで構成され、塩形成カチオンは、アンモニウム、カルシウム、鉄、マグネシウム、カリウム、ピリジニウム、第四級アンモニウム、およびナトリウムからなる群から選択され、塩形成アニオンは、酢酸塩、炭酸塩、塩化物、クエン酸塩、シアン化物、フッ化物、硝酸塩、亜硝酸塩、およびリン酸塩からなる群から選択される。
【００１８】
１つまたは複数の態様において、ＩＥＩＫ１３、ＫＬＤ１２、およびＲＡＤＡ１６を含むがこれらに限定されるものではないある特定のペプチド組成物の特性は、それらのｐＨレベルを約３．５またはそれ未満に、同時にそれらの塩濃度を臨界イオン強度レベル未満に維持することによって（すなわち沈殿はしない）高められてよい。一部の実施形態では、ペプチド組成物は、約２．５から約４．０の範囲内、または約３．０から約４．０の範囲内のｐＨを有してよい。一部の実施形態では、提供された組成物は、約２．５、２．６、２．７、２．８、２．９、３．０、約３．１、約３．２、約３．３、約３．４、約３．５もしくはそれより高い、またはそれらを上回るｐＨを有する。一部の実施形態では、提供された組成物は、約４．３、約４．２、約４．１、約４．０、約３．９、約３．７、約３．６、約３．５、約３．４、もしくはそれより低い、またはそれらを下回るｐＨを有する。一部の実施形態では、ペプチド組成物のｐＨは、水酸化ナトリウムまたは、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、炭酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、硫化ナトリウム、ＤＭＥＭ（ダルベッコ改変イーグル培地）、およびＰＢＳ（リン酸緩衝食塩水）からなる群から選択される溶液で達成することができる。
【００１９】
一部の実施形態では、ペプチド組成物は、溶液、ゲル、またはそれらの任意の組合せであってよい。一部の実施形態では、ペプチド組成物中のペプチド濃度は、少なくとも０．０５％、少なくとも０．２５％、少なくとも０．５％、少なくとも０．７５％、少なくとも１．０％またはそれより高い。一部の実施形態では、ペプチド組成物中のペプチド濃度は、５％未満、４．５％未満、４％未満、３．５％未満、３％未満またはそれより低い。一部の実施形態では、ペプチド組成物中のペプチド濃度は、約０．５％から約３％の間の範囲内である。一部の実施形態では、ペプチド組成物中のペプチド濃度は、約０．５％から約２．５％の間の範囲内である。一部の実施形態では、ペプチド組成物中のペプチド濃度は、約１％から約３％の間の範囲内である。一部の実施形態では、ペプチド組成物中のペプチド濃度は、約１％から約２．５％の間の範囲内である。一部の実施形態では、ペプチド組成物中のペプチド濃度は、約０．５％、約１％、約１．５％、約２％、約２．５％、約３％またはそれより高い。一部の特定の実施形態では、ペプチドがＲＡＤＡ１６である場合、ペプチド組成物中のペプチド濃度は、約０．０５％から約１０％の範囲内である。
【００２０】
一部の実施形態では、ペプチド組成物は、約１から約１００００Ｐａ−Ｓの範囲の粘度を有してよい。一部の実施形態では、ペプチド組成物は、約５０から約２５００Ｐａの範囲の貯蔵弾性率を有してよい。
【００２１】
「ペプチド」という用語は、本明細書で使用される場合、一般的に比較的短い、例えば、約１００アミノ酸未満、約５０アミノ酸未満、２０アミノ酸未満、または１０アミノ酸未満の長さを有するポリペプチドを指す。
【００２２】
「ポリペプチド」という用語は、本明細書で使用される場合、アミノ酸の任意のポリマー鎖を指す。一部の実施形態では、ポリペプチドは、天然に存在するアミノ酸配列を有する。一部の実施形態では、ポリペプチドは、天然に存在しないアミノ酸配列を有する。一部の実施形態では、ポリペプチドは、ヒトの手の働きを通して設計および／または生成されるという点で操作されたアミノ酸配列を有する。一部の実施形態では、ポリペプチドは、天然アミノ酸、非天然アミノ酸、もしくは両方を含むか、またはそれらからなってよい。一部の実施形態では、ポリペプチドは、天然アミノ酸のみ、もしくは非天然アミノ酸のみを含むか、またはそれらからなってよい。一部の実施形態では、ポリペプチドは、Ｄ−アミノ酸、Ｌ−アミノ酸、または両方を含んでよい。一部の実施形態では、ポリペプチドは、Ｄ−アミノ酸のみを含んでよい。一部の実施形態では、ポリペプチドは、Ｌ−アミノ酸のみを含んでよい。一部の実施形態では、ポリペプチドは、１つまたは複数のペンダント基または他の修飾、例えば、ポリペプチドのＮ末端の、ポリペプチドのＣ末端の、またはそれらの任意の組合せの、１つもしくは複数のアミノ酸側鎖の修飾または１つもしくは複数のアミノ酸側鎖への結合を含んでよい。一部の実施形態では、そのようなペンダント基または修飾は、アセチル化、アミド化、脂質化、メチル化、ペグ化など、それらの組合せを含む、からなる群から選択されてよい。一部の実施形態では、ポリペプチドは、環状であってよく、および／または環状部分を含んでいてよい。一部の実施形態では、ポリペプチドは環状ではなく、および／または任意の環状部分を含まない。一部の実施形態では、ポリペプチドは直鎖である。一部の実施形態では、ポリペプチドはステープルドポリペプチドであるかまたはそれを含んでよい。
【００２３】
一部の実施形態では、「ポリペプチド」という用語は、参照ポリペプチドの名称、活性、または構造に付け加えることができる。そのような場合、それは、関連する活性または構造を共有するポリペプチドを指すために本明細書中で使用され、したがって、ポリペプチドの同じクラスまたはファミリーのメンバーであると考えることができる。そのような各クラスについて、本明細書は、提供し、および／または当業者は、そのアミノ酸配列および／または機能が公知であるクラス内の例示的なポリペプチドを認識する。一部の実施形態では、そのような例示的なポリペプチドは、ポリペプチドのクラスまたはファミリーのための参照ポリペプチドである。一部の実施形態では、ポリペプチドのクラスまたはファミリーのメンバーは、クラスの参照ポリペプチドと、有意な配列相同性もしくは同一性を示し、共通の配列モチーフ（例えば、特徴的配列エレメント）を共有し、および／または共通の活性を共有する（一部の実施形態では、同等のレベルで、または指定された範囲内で）。一部の実施形態では、ポリペプチドのクラスまたはファミリーのメンバーは、有意な配列相同性もしくは同一性を示し、共通の配列モチーフを共有し、および／またはクラス内のすべてのポリペプチドと共通の活性を共有する。
【００２４】
例えば、一部の実施形態では、メンバーのポリペプチドは、少なくとも約３０〜４０％、しばしば約５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％もしくはそれを超える値よりも高い、参照ポリペプチドとの全体的な配列相同性または同一性の度合いを示し、かつ／またはしばしば９０％＞もしくはさらには９５％、９６％、９７％、９８％もしくは９９％よりも高い、非常に高い配列同一性を示す少なくとも１つの領域（例えば、一部の実施形態では特徴的な配列エレメントであるかまたはそれを含んでよい保存領域）を含む。そのような保存領域は、通常、少なくとも３〜４、多くの場合２０まで、またはそれより多いアミノ酸を包含する。一部の実施形態では、保存領域は、少なくとも一続きの、少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５またはそれより多い連続したアミノ酸を包含する。一部の実施形態では、有用なポリペプチドは、親ポリペプチドの断片を含むかまたはそれからなってよい。一部の実施形態では、有用なポリペプチドは、複数の断片を含むかまたはそれらからなってよく、その各々は、目的のポリペプチドに見出されるものとは異なって、互いに対して異なる空間的配置で同一の親ポリペプチドに見出されるので（例えば、親に直接連結された断片は、目的のポリペプチドにおいて空間的に分離されても、もしくはその逆であってもよく、および／または断片は親のものとは異なって、目的のポリペプチドに異なる順序で存在していてよい）、目的のポリペプチドは、その親ポリペプチドの誘導体である。
【００２５】
「自己集合性」という用語は、適切な条件下で自発的に構造物に自己会合することができるある特定のポリペプチドに関して本明細書で使用される。例えば、それらを含有するかかる溶液（例えば、水溶液）がゲル特質を生じさせる。一部の実施形態では、組成物内の個々の自己集合性ポリペプチド間および自己集合性ポリペプチド内の相互作用は可逆的であり、組成物はゲル状態と溶液状態との間で可逆的に転移し得る。一部の実施形態では、自己集合（および／または脱集合）は、１つまたは複数の環境誘因（例えば、ｐＨ、温度、イオン強度、容量オスモル濃度、重量オスモル濃度、適用圧力、適用せん断応力などの１つまたは複数の変化）に応答する。一部の実施形態では、自己集合性ポリペプチドの組成物は、ポリペプチドが集合した状態にある場合、検出可能なベータ−シート構造により特徴付けられる。
【００２６】
１つまたは複数の実施形態において、自己集合性ペプチドヒドロゲルは、止血の足場として止血用包帯と共に使用してよい。１つまたは複数の態様において、様々な止血用包帯の止血特性は、それらを自己集合性ペプチドヒドロゲルと併せて使用することによって高められ得る。１つまたは複数のさらなる態様において、自己集合性ペプチドヒドロゲルの止血特性は、それらを様々な止血用包帯と併せて使用することによって高め得る。したがって、本明細書に記載されている様々な実施形態は、止血用包帯と止血のための自己集合性ペプチドヒドロゲルの同時使用によって示される相乗効果に関する。
【００２７】
本明細書で開示されている一部の実施形態では、止血用包帯と共に使用される自己集合性ペプチドヒドロゲルは、標的領域の創傷包帯の上部に触圧を加えると、大量出血を経験している標的領域に対して止血を提供し得る。
【００２８】
止血は、創傷治癒の第１のステージである。本明細書で開示されているように、「止血」は、出血の減少を言及するために使用される。例えば、止血は、開放創傷の出血の減少を指す場合がある。一部の実施形態では、止血は、出血の完全な停止と定義される。一部の実施形態では、止血は、出血の明らかな停止と定義される。一般に、止血は、開放創傷の出血の視覚的に明らかな減少を指す。
【００２９】
ある特定の実施形態において、止血用包帯と共に使用される自己集合性ペプチドヒドロゲルは、本明細書で開示されるように、大量出血を止めるために使用してよい。例えば、本明細書で開示されている実施形態は、世界保健機関（ＷＨＯ）出血スケールで２またはそれよりも高いスケールの出血を止めることができる。ＷＨＯ出血スケールは、０＝出血なし、１＝点状出血、２＝軽度の失血、３＝重度の失血、および４＝衰弱性の失血、の臨床治験責任医師（clinical  investigator）が評価した５段階スケールである。本明細書で開示されている実施形態は、軽度の失血（ＷＨＯスケールで２）、重度の失血（ＷＨＯスケールで３）、または衰弱性の失血（ＷＨＯスケールで４）を生じるように分類された創傷を処置するために使用してよい。ある特定の実施形態において、止血は、出血がＷＨＯスケールで１またはそれより低い場合に達成される。例えば、止血は、出血がＷＨＯ出血スケールで１、０．５、または０であると視覚的に判定される場合に達成され得る。例えば、本明細書で開示されている一部の実施形態では、止血用包帯と共に使用される自己集合性ペプチドヒドロゲルは、標的領域の創傷包帯の上部に触圧を加えると、標的領域の出血をＷＨＯ出血スケールで０．５またはそれより低い出血スコアに減少させ得る。止血用包帯と共に使用される自己集合性ペプチドヒドロゲルは、例えば、標的領域に触圧を加えた２分後に、ＷＨＯ出血スケールで０の出血スコアに、標的領域の出血を減少させ得る。
【００３０】
１つまたは複数の非限定的な実施形態において、自己集合性ペプチドヒドロゲルは、ＩＥＩＫ１３、ＫＬＤ１２、またはＲＡＤＡ１６であってよい。自己集合性ペプチドは、止血を促進するために生理学的条件下でヒドロゲルを形成するのに使用するために有効な量および有効な濃度の約７から３２の間のアミノ酸を含んでよい。一部の特定の実施形態では、自己集合性ペプチドは、疎水性アミノ酸と親水性アミノ酸とが交互になる約１２から約１６の間のアミノ酸を含んでよい。ペプチドヒドロゲルは、血液と接触するとゲル化して、出血部位の機械的遮断を介して出血を停止および／または制御し得る。ゲル化すると、得られたペプチドヒドロゲルは、標的領域が遮られずに目視できるように、実質的に透明であってよい。ペプチドヒドロゲルは、一般に、非生体、生体適合性および吸収性であると特徴付けられ得る。自己集合性ペプチドヒドロゲルは、様々な濃度で溶液中に存在してよい。例えば、一部の非限定的な実施形態では、２．５％ペプチドヒドロゲル溶液を使用してよい。少なくとも一部の実施形態では、溶液は、細胞および／または薬物を実質的に含まなくてよい。他の実施形態では、溶液は、止血を促進するために１つまたは複数の治療剤を含んでよい。さらに本明細書に記載されているように、溶液は、例えば、剛性および／またはゲル化動態に影響を与えるために、または意図する用途に適した環境を提供するために製剤化されてよい。
【００３１】
一般に、自己集合性ペプチドヒドロゲル単独を使用して、ＷＨＯ出血スケールで１またはそれより低いスケールの出血を処置してよい。創傷部位または処置部位に直接適用される場合、薬剤を実質的に含まず、包帯なしで使用される自己集合性ペプチドヒドロゲルは、大量出血の創傷部位の止血を達成するのに有効ではない場合がある。例えば、自己集合性ペプチドヒドロゲルは、それ単独では（with  nothing  more）、ＷＨＯ出血スケールで３または４のスケールの大量出血（heaving  bleeding）を止めることができない。したがって、自己集合性ペプチドヒドロゲルは、止血の足場として使用してよく、ある特定の創傷の止血を達成することが可能である場合があるが、ペプチドヒドロゲルは、一般に、著しいまたは衰弱性の失血（ＷＨＯスケールで３または４）を有すると分類される創傷の止血を達成しない場合がある。自己集合性ペプチドヒドロゲルと創傷包帯とを組み合わせる本明細書で開示されている実施形態は、ＷＨＯ出血スケールで２またはそれより上の失血を有する創傷の止血を相乗的に達成し得る。
【００３２】
１つまたは複数の実施形態において、溶液の標的ｐＨレベルおよび／または等張性レベルは、意図する用途に関与する細胞または組織のタイプに少なくとも一部基づいて選択してよい。例えば、ペプチドヒドロゲルのｐＨレベルは、より穏やかで、苛酷でない環境を提供することによって、細胞生存率を改善するために、約３．５までのレベル、例えば約３．４のレベルまで調整してよい。等張性に関して、ペプチドヒドロゲル溶液の等張性は、標的細胞タイプおよび／または標的種の血漿重量オスモル濃度に密接にマッチするように調整してよい。例えば、ペプチドヒドロゲル溶液の等張性を、任意の所与の細胞タイプの血漿重量オスモル濃度に基づいて調整してよい。等張性レベルは、関与する種のタイプおよび／または細胞もしくは組織のタイプに応じて変動し得る。一部の非限定的な実施形態では、標的等張性は、約２６０から約３６０ｍＯｓｍ／Ｌの範囲であり得る。
【００３３】
一般に、いくつかの治療部位を本明細書に記載されているように処置してよい。治療部位は、傷害部位を指してもよい。治療部位は、外部または内部の部位であってよい。外部治療部位には、ＷＨＯ出血スケールで２またはそれより高いスケールの失血を経験している表在性および／もしくは外部出血部位、または開放創傷が含まれる。外部治療部位には、外傷または切断の部位が含まれてよい。内部部位には、ＷＨＯ出血スケールで２またはそれより高いスケールの失血を経験している露出組織に施された外科的切開部が含まれてよい。内部部位は、外科的処置の目的のための外科的切開部、または処置のために少なくとも部分的に露出された内部出血部位を含んでよい。一部の実施形態では、内部部位は、内視鏡的手法および／または腹腔鏡的手法によって処置される治療部位を含む。
【００３４】
１つまたは複数の実施形態において、止血用包帯は、一般にサイズおよび／または形状が治療標的部位に対応する包帯表面を有し得る。止血用包帯は、治療標的部位を実質的に覆うように構成してよい。止血用包帯は、多孔質であってよい。一部の実施形態では、創傷包帯は、スポンジ、織布、不織布、パフ、またはそれらの混合物の形態であってよい。一部の特定の実施形態では、創傷包帯は、綿ガーゼで作製してよい。一部の実施形態では、創傷包帯は、代わりに合成材料で作製してよい。少なくとも一部の実施形態では、創傷包帯は、外科的グレードであってよい。例えば、創傷包帯は、生体吸収性、生体適合性、または滅菌材料で作製されてよい。創傷包帯は、コラーゲン、ゼラチン、キトサン、ヒアルロン酸、デンプン、シルクフィブロイン、酸化再生セルロース、ラクチドもしくはグリコリドのホモポリマー、ならびに／またはラクチドおよびグリコリドのコポリマーを含んでよい。一部の特定の非限定的な実施形態では、止血用多孔質包帯は、両方ともＥｔｈｉｃｏｎから市販されているＳｕｒｇｉｆｏａｍ（登録商標）もしくはＳｕｒｇｉｃｅｌ（登録商標）止血用包帯、Ｐｆｉｚｅｒから市販されているＧｅｌｆｏａｍ（登録商標）止血用包帯、またはＩｎｔｅｇｒａから市販のＨｅｌｉｓｔａｔ（登録商標）止血用包帯であってよい。
【００３５】
止血用包帯は、一般に、大きな創傷からの大量血流を止めることが可能である。例えば、圧力を加えたときに、止血用包帯は、適用後数分以内に大きな動脈および大きな静脈からの出血を止めることができる。本明細書で開示されている止血用包帯は、自己集合性ペプチドヒドロゲルなしで適用される場合、約５から約８分で大量に出血している創傷（ＷＨＯスケールで３または４）から止血を達成し得る。本明細書に記載されている自己集合性ペプチドヒドロゲルと共に使用する場合、止血用包帯およびヒドロゲルは、約５分またはそれ未満で類似の大量に出血している創傷からの止血を達成し得る。具体的には、本明細書で開示されている実施形態は、２分またはそれ未満で、ＷＨＯ出血スケールで３または４の出血スコアを有する標的領域に対して止血を提供し得る。一般に、止血用包帯および自己集合性ペプチドは、止血用包帯の上部への触圧と同時に標的領域に適用されてよい。
【００３６】
上記のように、ペプチドヒドロゲルおよび止血用包帯は、様々な実施形態において併用して使用してよい。この組合せは、単独の適用を含むものなど代替のアプローチと比較して、ペプチドヒドロゲル溶液の、創傷領域または外科的部位などの標的位置への比較的迅速かつ簡易な送達を有益に与え得る。この組合せはまた、一時的に出血流を止めるために多孔質包帯の上部に適用することができる、手または指の圧力の適用に関して補助を有益に与えることができ、次には、出血流による妨害なしで、出血している創傷表面の近くの自己集合性ペプチドヒドロゲルの安定したゲル化を達成し得る。この組合せはまた、手または指によって圧迫されたときに、蓄えられているペプチド溶液を創傷上に放出させることができるように、ペプチド溶液を含有し得る多孔質包帯にリザーバスペースを有益に提供し得る。同時に、ペプチドヒドロゲルは、標的領域を覆うためにリザーバスペースに保持され得る。ペプチドヒドロゲル溶液の粘度はまた、止血用包帯が標的領域上の位置により安定して留まるようにすることができる粘着性を有益に付与し得る。
【００３７】
１つまたは複数の実施形態において、ペプチドヒドロゲル溶液は、１ｃｍ２の創傷包帯表面当たり約１μＬから２ｍＬの体積で提供されてよい。例えば、溶液は、約１μＬ、２μＬ、５μＬ、１０μＬ、５０μＬ、１００μＬ、２００μＬ、５００μＬ、７５０μＬ、１ｍＬ、１．２５ｍＬ、１．５ｍＬ、１．７５ｍＬ、または２ｍＬの体積で提供されてよい。ペプチドヒドロゲル溶液は、創傷包帯表面に必要とされる体積を超える体積で提供されてよい。例えば、包帯およびペプチドヒドロゲルを表面に投与することは、過剰体積のペプチドヒドロゲルを包帯上に投与または注入し、注入された包帯を創傷部位に適用する前に過剰なヒドロゲルを除去することを含み得る。
【００３８】
１つまたは複数の実施形態において、止血用包帯およびペプチド溶液を単一のデバイスで一緒に組み合わせてよい。デバイスは、多孔質創傷包帯、および多孔質創傷包帯の細孔に浸透する自己集合性ペプチドを含む溶液を含んでよい。自己集合性ペプチドは、止血を促進するために生理学的条件下でヒドロゲルを形成するのに使用するために有効な量および有効な濃度の約７から３２の間のアミノ酸を含んでよい。デバイスは、標的領域での使用のために予め包装してよい。包装は、止血のためにデバイスを標的領域に投与するための指示を含んでよい。指示はさらに、標的領域においてデバイスの上部に触圧を加えるための使用法（direction）を含んでよい。少なくとも一部の実施形態では、デバイスは、外科的グレードであってよい。例えば、デバイスは、生体吸収性、生体適合性、または滅菌材料で作製されてよい。
【００３９】
１つまたは複数の他の実施形態において、止血用キットが提供され得る。キットは、止血用包帯およびペプチドヒドロゲル溶液の両方を含み得る。２つの構成要素は、使用のための指示と共に包装されてよい。指示は、標的領域に関連して使用前または使用中に、止血用包帯にペプチドヒドロゲル溶液を導入する方法の手引きを提供する場合がある。キットは、使用前または使用中の止血用包帯とペプチドヒドロゲル溶液との組合せを容易にするための１つまたは複数のさらなる構成要素を含んでよい。例えば、そのような構成要素は、自己集合性ペプチドヒドロゲル溶液を止血用包帯表面上に注射するためのシリンジを含んでよい。他の構成要素は、ピペットまたはへらなどのボトルから包帯にペプチド溶液を移すための移動デバイスを含んでよい。さらに他の実施形態では、キットは、拡散プロセス中に包帯を保持するために、包帯表面および／または容器皿上にペプチド溶液を均一に広げるためのスティックを含んでよい。キットは、止血のために止血用包帯およびペプチドヒドロゲルを標的領域に投与するための指示を含んでよい。指示はさらに、標的領域において包帯の上部に触圧を加えるための使用法を含んでよい。
【００４０】
さらに他の実施形態では、止血用包帯およびペプチドヒドロゲル溶液を包装し、互いに別々に提供してよい。それぞれは、別々の製品として包装され、次いで、使用前または使用中に組み合わせてよい。別々に包装された構成要素の一方または両方は、止血のために止血用包帯およびペプチドヒドロゲルを標的領域に投与するための指示を含んでよい。指示はさらに、標的領域において包帯の上部に触圧を加えるための使用法を含んでよい。別々に包装された構成要素の一方または両方はまた、同時使用を容易にするために、上記に記載されたものなどの追加の構成要素を必要に応じて含んでよい。
【００４１】
これらおよび他の実施形態の機能および利点は、以下の非限定的な実施例からより完全に理解される。実施例は本質的に例示的であることが意図されており、本明細書で論じられている実施形態の範囲を限定するものとみなすべきではない。
【実施例】
【００４２】
（実施例１）
以下の実施例は、様々な止血用多孔質包帯と共に自己集合性ペプチドヒドロゲルの使用を示す。
【００４３】
図１は、自己集合性ペプチドヒドロゲルと共に止血用多孔質包帯を使用するためのプロセスの概要を提供する。（１）では、吸収性ゼラチンスポンジ（Ｓｕｒｇｉｆｏａｍ（登録商標）、Ｅｔｈｉｃｏｎ）（２ｃｍ×２ｃｍ×０．７ｃｍ（４ｃｍ２））を提供する。（２）では、ＲＡＤＡ１６  ２．５％（ＰｕｒａＭａｔｒｉｘ（登録商標））（１ｍＬ）を注射する。（３）では、ＲＡＤＡ１６  ２．５％をゼラチンスポンジの表面上に広げる。（４）では、出血が創傷と関連して観察され、血液を創傷から除去し、自己集合性ペプチドヒドロゲルと共に止血用多孔質包帯を創傷に適用する。（５）では、創傷上の包帯を覆い、止血が達成されるまでスポンジを手または指で押す。（６）では、止血を達成する。
【００４４】
図２は、自己集合性ペプチドヒドロゲルと共に止血用多孔質包帯を使用するための別のプロセスの概要を提供する。（１）では、吸収性酸化再生セルロース織布包帯（woven  dressing）（Ｓｕｒｇｉｃｅｌ（登録商標）、Ｅｔｈｉｃｏｎ）（２．５ｃｍ×２ｃｍ（５ｃｍ２））を提供する。（２）では、ＲＡＤＡ１６  ２．５％（ＰｕｒａＭａｔｒｉｘ（登録商標））（１ｍＬ）を注射する。（３）では、ＲＡＤＡ１６  ２．５％をゼラチンスポンジの表面上に広げる。（４）では、出血が創傷と関連して観察され、血液を創傷から除去し、自己集合性ペプチドヒドロゲルと共に止血用多孔質包帯を創傷に適用する。（５）では、創傷上の包帯を覆い、止血が達成されるまでスポンジを手または指で押す。（６）では、止血を達成する。
【００４５】
図３は、自己集合性ペプチドヒドロゲルと共に止血用多孔質包帯の使用をさらに示す。（１）では、吸収性ゼラチンスポンジ（Ｓｕｒｇｉｆｏａｍ（登録商標）、Ｅｔｈｉｃｏｎ）（２ｃｍ×２ｃｍ×０．７ｃｍ（４ｃｍ２））をＲＡＤＡ１６  ２．５％（１ｍＬ）と共にｉｎ  ｖｉｔｒｏ創傷モデルに適用する。（２）では、吸収性酸化再生セルロース織布包帯（Ｓｕｒｇｉｃｅｌ（登録商標）、Ｅｔｈｉｃｏｎ）（２．５ｃｍ×２ｃｍ（５ｃｍ２））をＲＡＤＡ１６  ２．５％（１ｍＬ）と共にｉｎ  ｖｉｔｒｏ創傷モデルに適用する。
（実施例２）
【００４６】
止血用多孔質包帯と併せて使用した場合にゲル化するペプチドヒドロゲルの能力が実証された。止血用多孔質包帯と共に使用する場合、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．４）中のペプチド溶液のゲル形成を評価するために、コンゴレッドアッセイを実施した。ＲＡＤＡ１６  ２．５％（ＰｕｒａＭａｔｒｉｘ（登録商標））をガラススライド上に、またガラススライド上の止血用多孔質包帯上にプレーティングした。ＰｕｒａＭａｔｒｉｘ（登録商標）を、スティックを使用して止血用多孔質包帯の表面上に広げた。３０秒後、１％コンゴレッド溶液をゲルアリコートの周りおよび上部に添加し、次いで過剰のコンゴレッド溶液を検査前に拭き取った。ＲＡＤＡ１６  ２．５％も、吸収性ゼラチンスポンジ（Ｓｕｒｇｉｆｏａｍ（登録商標）、Ｅｔｈｉｃｏｎ）上および吸収性酸化再生セルロース織布包帯（Ｓｕｒｇｉｃｅｌ（登録商標）、Ｅｔｈｉｃｏｎ）上にプレーティングした。ゲル形成の可視化は、ゲル化の成功または失敗を判定した。図４に示すように、ＲＡＤＡ１６  ２．５％は、単一のＲＡＤＡ１６  ２．５％で観察された程度と同様に、様々な止血用多孔質包帯と併せてゲル化した。具体的には、（１）および（２）は、単一のＲＡＤＡ１６  ２．５％（ＰｕｒａＭａｔｒｉｘ（登録商標））を示す。（３）、（４）、および（５）では、ＲＡＤＡ１６  ２．５％を吸収性ゼラチンスポンジ（Ｓｕｒｇｉｆｏａｍ（登録商標）、Ｅｔｈｉｃｏｎ）と共に示す。（６）、（７）、および（８）では、ＲＡＤＡ１６  ２．５％を吸収性酸化再生セルロース織布包帯（Ｓｕｒｇｉｃｅｌ（登録商標）、Ｅｔｈｉｃｏｎ）と共に示す。
【００４７】
したがって、図４に示すように、ＲＡＤＡ１６  ２．５％は、吸収性ゼラチンスポンジと共におよび吸収性酸化再生セルロース織布包帯と共に使用した場合にゲル化することが可能である。ゲル化した自己集合性ペプチドおよび包帯の組合せは、出血している創傷における止血を促進することが可能であり得る。
（実施例３）
【００４８】
止血用多孔質包帯と併せて使用した場合にゲル化するペプチドヒドロゲルの能力が実証された。止血用多孔質包帯と共に使用する場合、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．４）中のペプチド溶液のゲル形成を評価するために、コンゴレッドアッセイを実施した。
【００４９】
ＩＥＩＫ１３  １．３％（ｐＨ３．０）をガラススライド上に、およびガラススライド上の止血用多孔質包帯上にプレーティングした。ＩＥＩＫ１３  １．３％（ｐＨ３．０）を、スティックを使用して止血用多孔質包帯の表面上に広げた。３０秒後、１％コンゴレッド溶液をゲルアリコートの周りおよび上部に添加し、次いで過剰のコンゴレッド溶液を検査前に拭き取った。ＩＥＩＫ１３  １．３％（ｐＨ３．０）も、吸収性ゼラチンスポンジ（Ｇｅｌｆｏａｍ（登録商標）、Ｐｆｉｚｅｒ）上にプレーティングした。ゲル形成の可視化は、ゲル化の成功または失敗を判定した。図５に示すように、ＩＥＩＫ１３  １．３％（ｐＨ３．０）は、単一のＩＥＩＫ１３  １．３％（ｐＨ３．０）で観察された程度と同様に、止血用多孔質包帯と共にゲル化した。具体的には、（１）および（２）は、単一のＩＥＩＫ１３  １．３％（ｐＨ３．０）を示す。（３）、（４）、および（５）では、ＩＥＩＫ１３  １．３％（ｐＨ３．０）を吸収性ゼラチンスポンジ（ＧｅｌＦｏａｍ（登録商標）、Ｐｆｉｚｅｒ）と共に示す。
【００５０】
したがって、図５に示すように、ＩＥＩＫ１３  １．３％（ｐＨ３．０）は、吸収性ゼラチンスポンジと共に使用した場合ゲル化することが可能である。ＲＡＤＡ１６  ２．５％で観察されたのと同様の結果が、吸収性酸化再生セルロース織布包帯上のＩＥＩＫ１３  １．３％（ｐＨ３．０）についても得られると予想される。ゲル化した自己集合性ペプチドおよび包帯の組合せは、出血している創傷における止血を促進することが可能であり得る。
（実施例４）
【００５１】
以下の比較例は、自己集合性ペプチドヒドロゲルと共に利用された場合の止血用スポンジの高められた止血有効性を示す。
【００５２】
ブタの臓器創傷モデルにおける止血剤の有効性を評価するための研究を行った。各動物モデルについて正中開腹術を行った。肝臓を露出させ、単離した。肝臓の３つの葉を横切るパンチ生検を使用して、複数の出血欠損を作製した。８ｍｍのパンチ生検器具を使用して、約２〜５ｍｍの深さの円形の欠損を作製した。すべての肝臓部位は、生検パンチ後および試験品適用の前に許容可能な出血スコア（ＷＨＯ出血スケールで３〜４）をもたらした。
【００５３】
試験品は、吸収性ゼラチンスポンジ（ＧｅｌＦｏａｍ（登録商標）、Ｐｆｉｚｅｒ）を用いて調製した。止血用スポンジを１．５ｃｍ×１．５ｃｍの片に切断し、０．５ｍＬのＲＡＤＡ１６  ２．５％外科用止血剤（ＰｕｒａＳｔａｔ（登録商標））を注入した。止血剤は、スポンジを創傷に適用する前に、ＰｕｒａＳｔａｔ（登録商標）をシリンジおよびノズルを介してスポンジに適用することによって注入した。対照止血用スポンジは、１ｍＬの食塩水をスポンジに適用し、スポンジを創傷に適用する前に過剰の食塩水を除去することによって調製した。調製品は、図６に示すように、各創傷の欠損部位全体を覆うのに十分な体積を有していた。（１）では、ＧｅｌＦｏａｍ（登録商標）および食塩水試験品を肝臓生検欠損に適用した。（２）では、ＧｅｌＦｏａｍ（登録商標）およびＰｕｒａＳｔａｔ（登録商標）試験品を肝臓生検欠損（biopsy  defect）に適用した。
【００５４】
各試験品を、約２分間圧力を加えて肝臓創傷部位に適用した。肝臓病変は、２分間の圧力適用期間の直後、適用から５分後および適用から８分後に出血についてスコア付けした。結果を図７のグラフに要約する。ＧｅｌＦｏａｍ（登録商標）＋食塩水で処置した部位とＧｅｌＦｏａｍ（登録商標）＋ＰｕｒａＳｔａｔ（登録商標）で処置した部位との間で、初期出血スコア（時間＝０）に有意差は認められなかった。具体的には、すべての試料の初期出血は、ＷＨＯ出血スケールで３または４であると判定された。
【００５５】
２分間の直接圧迫により物品を塗布した後、すべての試験品調製部位で（in  all  test  article  preparation  sites）出血が減少した。その結果、ＧｅｌＦｏａｍ（登録商標）＋ＰｕｒａＳｔａｔ（登録商標）で処置した試験品は、ＧｅｌＦｏａｍ（登録商標）＋食塩水の試験品と比較して、物品の適用から２分後および５分後の出血スコアが低かった。すべての試料は、適用から８分後に出血を示さなかった。ＧｅｌＦｏａｍ（登録商標）＋食塩水の止血効果に対するＧｅｌＦｏａｍ（登録商標）＋ＰｕｒａＳｔａｔ（登録商標）による止血効果の優位性は、適用から２分後に特に有意である（ｐ＜０．１）。具体的には、２分後、ＧｅｌＦｏａｍ（登録商標）＋食塩水で処置した部位は、ＷＨＯ出血スケールで０．３８の平均出血を示したが、ＧｅｌＦｏａｍ（登録商標）＋ＰｕｒａＳｔａｔ（登録商標）で処置した部位は、ＷＨＯ出血スケールで０．０７の平均出血を示した。ＧｅｌＦｏａｍ（登録商標）＋食塩水の出血スコアを表１に要約し、ＧｅｌＦｏａｍ（登録商標）＋ＰｕｒａＳｔａｔ（登録商標）の出血スコアを表２に要約する。
【表１】
2019517299.tif 000003
【表２】
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【００５６】
図８のグラフは、適用後の止血成功（％）を示す。８分後のすべての試料の出血スコアは０（１００％の止血成功）であった。ＧｅｌＦｏａｍ（登録商標）＋ＰｕｒａＳｔａｔ（登録商標）試料は、ＧｅｌＦｏａｍ（登録商標）＋食塩水（それぞれ３７．５％および６２．５％）と比較して、適用から２分後および５分後により高い止血成功を示した（それぞれ８７．５％および８７．５％）。具体的には、ＧｅｌＦｏａｍ（登録商標）＋食塩水による２分では、８つの欠損部位のうち３つが止血を達成し、ＧｅｌＦｏａｍ（登録商標）＋食塩水による５分では、８つのうち５つが止血を達成したことと比較して、適用から２分後および５分後に、ＧｅｌＦｏａｍ（登録商標）およびＰｕｒａＳｔａｔ（登録商標）で処置した７つの欠損部位のうち６つが止血を達成した。２つの集団の割合に対するＺスコア試験は、ＧｅｌＦｏａｍ（登録商標）＋食塩水に対するＧｅｌＦｏａｍ（登録商標）＋ＰｕｒａＳｔａｔ（登録商標）の有意な優位性を実証する。統計的有意性は、適用２分後に認められる（ｐ＜０．１）。上記の実施例３に示されたのと同様の結果が、ＩＥＩＫ１３  １．３％（ｐＨ３．０）およびＲＡＤＡ１６  ２．５％のゲル化機構が同様なので、ＩＥＩＫ１３  １．３％（ｐＨ３．０）自己集合性ペプチドヒドロゲルで期待される。
【００５７】
したがって、自己集合性ペプチドヒドロゲルを止血用スポンジと共に利用することができる。さらに、自己集合性ペプチドは、止血用スポンジの止血有効性を高めることができる。
【００５８】
本明細書で論じられている方法およびデバイスの実施形態は、本明細書に記載されるか、または添付の図面に示される構築物の詳細および構成要素の配置に適用が限定されないことを理解されたい。方法およびデバイスは、他の実施形態で実施可能であり、様々な方法で実行可能でありまたは成し遂げることができる。具体的な実施の例は、例示目的のためにのみ本明細書に提供され、限定することを意図するものではない。また、本明細書で使用される表現法および用語法は、説明のためのものであり、限定的であるとみなされるべきではない。「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」、「有する（ｈａｖｉｎｇ）」、「含有する（ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ）」、「含む（ｉｎｖｏｌｖｉｎｇ）」、およびそれらの変形形態の本明細書での使用は、それの後に列挙された項目およびその均等物ならびに追加の項目を包含することを意図する。「または」への言及は、「または」を使用して記載された任意の用語が、記載された用語のうちの単一の、１つより多い、およびすべてのうちのいずれかを示すことができるように包括的であると解釈されてよい。前面および背面、左および右、上部および底部、上方および下方、ならびに垂直および水平への任意の言及は、説明の便宜のためであり、本デバイスおよび方法またはその構成要素を任意の１つの位置的または空間的配向に限定するものではない。
【００５９】
このように少なくとも１つの実施例のいくつかの態様を記載してきたので、当業者には様々な変更、修飾、および改善が容易に想起されることを理解されたい。例えば、本明細書で開示している実施例は、他の文脈においても使用してよい。そのような変更、修飾、および改善は、本開示の一部であることが意図されており、本明細書で論じられている実施例の範囲内にあることが意図されている。したがって、上記の説明は例示に過ぎない。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【手続補正書】
【提出日】平成31年2月20日(2019.2.20)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】配列表
【補正方法】追加
【補正の内容】
【配列表】
2019517299000001.app
【国際調査報告】
2019517299.tif 000013
2019517299.tif 000014
2019517299.tif 000015