(57)【要約】  本発明は一般的に、抗ＩＬ−２３Ａ抗体を使用した、ＩＬ−２３関連疾患、特に炎症疾患、例えばクローン病の処置法に関する。
2019536756.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
抗ＩＬ−２３Ａ抗体を患者に投与する工程を含む、クローン病の寛解を誘導するための方法であって、該方法は、
ａ）少なくとも１回の誘導用量の該抗ＩＬ−２３Ａ抗体を患者に投与する工程（ここでの、該誘導用量は、７５０mgの該抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む）
を含む、該方法。
【請求項２】
１回、２回、又は３回の誘導用量が患者に投与される、請求項１記載の方法。
【請求項３】
２又は３回の誘導用量が、４週間間隔で投与される、請求項１又は２記載の方法。
【請求項４】
前記誘導用量が、静脈内注入によって投与される、請求項１〜３のいずれか一項記載の方法。
【請求項５】
前記患者が、工程ａ）の該投与前に２２０〜４５０のＣＤＡＩスコアを有している、請求項１〜４のいずれか一項記載の方法。
【請求項６】
前記患者が、１５０未満のＣＤＡＩスコアを達成する、請求項１〜５のいずれか一項記載の方法。
【請求項７】
前記患者が、７５以下のＰＲＯ−２スコアを達成する、請求項１〜６のいずれか一項記載の方法。
【請求項８】
クローン病の寛解を維持する工程をさらに含む、請求項１〜７のいずれか一項記載の方法であって、該方法はさらに、
ｂ）最後の誘導用量が投与された後に初回の維持用量の該抗ＩＬ−２３Ａ抗体を患者に投与する工程；及び
ｃ）前記の初回の維持用量が投与された４〜１２週間後に少なくとも１回の追加の維持用量が患者に投与される工程
をさらに含む、該方法。
【請求項９】
前記の初回の維持用量が、最後の誘導用量が投与された２〜８週間後、例えば４〜６週間後、例えば２週間後、４週間後、６週間後、又は８週間後に投与される、請求項８記載の方法。
【請求項１０】
前記の少なくとも１回の追加の維持用量が、前記の初回の維持用量が投与された４、８、又は１２週間後に患者に投与される、請求項８又は９のいずれか一項記載の方法。
【請求項１１】
前記の初回の維持用量が、１５０〜３００mgの前記抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む、請求項８〜１０のいずれか一項記載の方法。
【請求項１２】
前記の初回の維持用量が、１５０mg、２２５mg、又は３００mgの前記抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む、請求項８〜１１のいずれか一項記載の方法。
【請求項１３】
前記の初回の維持用量が、１８０mg又は２７０mgの前記抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む、請求項８〜１２のいずれか一項記載の方法。
【請求項１４】
前記の少なくとも１回の追加の維持用量が、１５０〜３００mgの前記抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む、請求項８〜１３のいずれか一項記載の方法。
【請求項１５】
前記の少なくとも１回の追加の維持用量が、１５０mg、２２５mg、又は３００mgの前記抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む、請求項８〜１４のいずれか一項記載の方法。
【請求項１６】
前記の少なくとも１回の追加の維持用量が、１８０mg又は２７０mgの前記抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む、請求項８〜１５のいずれか一項記載の方法。
【請求項１７】
前記の初回の維持用量及び前記の少なくとも１回の追加の維持用量が、１５０〜３００mgの前記抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む、請求項８〜１６のいずれか一項記載の方法。
【請求項１８】
前記の初回の維持用量及び前記の少なくとも１回の追加の維持用量が、１５０mg、２２５mg、又は３００mgの前記抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む、請求項８〜１７のいずれか一項記載の方法。
【請求項１９】
前記の初回の維持用量及び前記の少なくとも１回の追加の維持用量が、１８０mg又は２７０mgの前記抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む、請求項８〜１８のいずれか一項記載の方法。
【請求項２０】
前記の維持用量が、皮下注射によって投与される、請求項８〜１９のいずれか一項記載の方法。
【請求項２１】
前記患者が、１５０未満のＣＤＡＩスコアを維持している、請求項８〜２０のいずれか一項記載の方法。
【請求項２２】
前記患者が、７５以下のＰＲＯ−２スコアを維持している、請求項８〜２１のいずれか一項記載の方法。
【請求項２３】
７５０mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を患者に投与する工程を含む、クローン病を処置するための方法。
【請求項２４】
抗ＩＬ−２３Ａ抗体を患者に投与する工程を含む、クローン病を処置するための方法であって、該方法は、
ａ）少なくとも１回の誘導用量の該抗ＩＬ−２３Ａ抗体を患者に投与する工程（ここでの該誘導用量は、７５０mgの該抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む）
を含む、該方法。
【請求項２５】
ｂ）最後の誘導用量が投与された後に初回の維持用量の前記抗ＩＬ−２３Ａ抗体を患者に投与する工程；及び
ｃ）前記の初回の維持用量が投与された４〜１２週間後に少なくとも１回の追加の維持用量を患者に投与する工程
をさらに含む、請求項２４記載の方法。
【請求項２６】
前記の初回の維持用量が、１５０〜３００mgの前記抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む、請求項２５記載の方法。
【請求項２７】
前記の少なくとも１回の追加の維持用量が、１５０〜３００mgの前記抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む、請求項２５又は２６記載の方法。
【請求項２８】
前記の抗ＩＬ−２３Ａ抗体が、抗体Ａ、抗体Ｂ、抗体Ｃ、又は抗体Ｄである、請求項１〜２７のいずれか一項記載の方法。
【請求項２９】
前記方法が、中等度から重度の活動性クローン病を処置するためのものである、請求項１〜２８のいずれか一項記載の方法。
【請求項３０】
ａ）患者から生物学的試料を得る工程；
ｂ）該試料中の１つ以上の遺伝子、タンパク質、又はｍｉＲＮＡの発現レベルを測定する工程；
ｃ）ｂ）のレベルを、対照における１つ以上の遺伝子、タンパク質、又はｍｉＲＮＡの発現レベルと比較する工程；及び
ｄ）試料のレベルと対照のレベルとの間の差が、患者における有益な応答を反映するかどうかを決定する工程（ここでの、１つ以上の遺伝子、タンパク質、又はｍｉＲＮＡは、本明細書に記載の１つ以上の遺伝子、タンパク質、又はｍｉＲＮＡである）
を含む、ＩＬ−２３Ａアンタゴニストの投与後の患者における有益な応答の有無を検出するための方法。
【請求項３１】
前記患者がクローン病を患っている、請求項３０記載の方法。
【請求項３２】
生物学的試料が、大腸組織又は回腸組織である、請求項３０又は３１記載の方法。
【請求項３３】
生物学的試料が、上部消化管（ＧＩ）、例えば胃又は食道から採取される、請求項３０〜３２のいずれか一項記載の方法。
【請求項３４】
ＩＬ−２３Ａアンタゴニストが、抗ＩＬ−２３Ａ抗体又はその抗原結合フラグメントである、請求項３０〜３３のいずれか一項記載の方法。
【請求項３５】
抗ＩＬ−２３Ａ抗体が、抗体Ａ、抗体Ｂ、抗体Ｃ、又は抗体Ｄである、請求項３０〜３４のいずれか一項記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１６年１０月１４日に出願された米国仮特許出願第６２／４０８，１２７号の優先権を主張し、その全内容が本明細書に参照により組み入れられる。
【０００２】
発明の技術分野
本発明は一般的に、抗ＩＬ−２３抗体を使用して、炎症性疾患、例えばクローン病（ＣＤ）を処置する方法に関する。
【０００３】
発明の背景
クローン病（ＣＤ）は、腹痛、発熱、及び血液性又は粘液含有性下痢によって特徴付けられる消化管の慢性の再発寛解型炎症性疾患である。該疾患は、口から肛門までの消化管に断続的に、しかし最も一般的には回腸と大腸（４０％）に、次いで小腸のみ（３０％）、及び大腸のみ（２５％）に発症する。それは比較的若い集団に起こり、顕著な性別の差はない。
【０００４】
クローン病の発症率は上昇しつつあるようであり、つい最近の推定率は１００，０００中７．９から２０．２件の症例へと変化し、北米及び欧州での罹患率は１００，０００中１６１から３１９件の症例へと変化している。粘膜病変は、穿孔及び瘻孔の形成を合併し得、これには医学的又は外科的管理のために入院が必要とされる場合がある。
【０００５】
例えば、処置の有効性、安全性、及び／又は耐容性の点で患者に好ましい結果をもたらす、炎症性疾患、特にクローン病のための処置選択肢が必要とされる。
【０００６】
発明の要約
本発明は上記の必要性に対処し、炎症性疾患を処置するための方法、特に特定の量及び／又は特定の間隔で抗ＩＬ−２３Ａ抗体を患者に投与する工程を含む方法を提供する。１つの態様では、本発明の方法は、クローン病の処置のためである。１つの態様では、本発明の方法は、潰瘍性大腸炎の処置のためである。
【０００７】
本発明の方法は、より少ない回数の抗ＩＬ−２３Ａ抗体の投与を受けつつ、患者が臨床的改善を受けることを可能とする利点を提供する。
【０００８】
１つの実施態様では、本発明は、（ａ）０週目、４週目、及び８週目に静脈内注入によって抗ＩＬ−２３Ａ抗体の１用量を患者に投与する工程を含む、炎症性疾患を処置するための、特にクローン病を処置するための方法を提供し、ここでの抗ＩＬ−２３Ａ抗体の用量は、２００mg又は６００mgの抗体を含む。１つの実施態様では、該方法はさらに、（ｂ）例えば１４週目、１８週目、及び２２週目に静脈内注入によって３用量の抗ＩＬ−２３Ａ抗体を患者に投与する工程を含み、ここでの抗ＩＬ−２３Ａ抗体の用量は、６００mgの抗体を含む。１つの実施態様では、該方法はさらに、（ｃ）１回以上の用量の抗ＩＬ−２３Ａ抗体を８週間間隔で皮下注射によって、例えば４用量の抗ＩＬ−２３Ａ抗体を皮下注射によって８週間間隔で、例えば２６週目、３４週目、４２週目、及び５０週目に患者に投与する工程を含み、ここでの１回以上の用量の抗ＩＬ−２３Ａ抗体は１８０mgの抗体を含む。
【０００９】
１つの実施態様では、１２週目に、患者は、例えば臨床的寛解（ＣＤＡＩスコア＜１５０）及び内視鏡的寛解（ＣＤＥＩＳ≦４）の達成として定義される、深い寛解について評価される。１つの態様では、初期孤立性回腸炎患者では、内視鏡的寛解は、ＣＤＥＩＳ≦２によって定義される。
【００１０】
１つの実施態様では、本発明は、（ａ）１用量の抗ＩＬ−２３Ａ抗体を０週目、４週目、及び８週目に静脈内注入によって患者に投与する工程を含む、炎症性疾患を処置するための、１つの態様ではクローン病を処置するための方法を提供し、ここでの抗ＩＬ−２３Ａ抗体の用量は、２００mg又は６００mgの抗体を含む。１つの実施態様では、該方法はさらに、（ｂ）１回以上の用量の抗ＩＬ−２３Ａ抗体を８週間間隔で皮下注射によって、例えば４回の用量の抗ＩＬ−２３Ａ抗体を皮下注射によって８週間間隔で、例えば２６週目、３４週目、４２週目、及び５０週目に患者に投与する工程を含み、ここでの１回以上の用量の抗ＩＬ−２３Ａ抗体は１８０mgの抗体を含む。
【００１１】
１つの実施態様では、１２週目に、患者は、例えば臨床的寛解（ＣＤＡＩスコア＜１５０）及び内視鏡的寛解（ＣＤＥＩＳ≦４）の達成として定義される、深い寛解について評価される。１つの態様では、初期孤立性回腸炎患者では、内視鏡的寛解は、ＣＤＥＩＳ≦２によって定義される。
【００１２】
１つの実施態様では、本発明は、１８０mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を８週間間隔で皮下注射によって患者に投与する工程を含む、炎症性疾患を処置するための、１つの態様ではクローン病を処置するための方法を提供する。
【００１３】
１つの実施態様では、本発明は、抗ＩＬ−２３Ａ抗体を患者に投与する工程を含む、炎症性疾患を処置するための、１つの態様ではクローン病を処置するための方法を提供し、該方法は、少なくとも１回の誘導用量の抗ＩＬ−２３Ａ抗体を患者に投与する工程を含み、該誘導用量は、２００〜１，２００mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体、例えば４５０〜１，２００mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む。１つの態様では、誘導用量は、２００mg、４５０mg、６００mg、９００mg、又は１，２００mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む。１つの態様では、誘導用量は、７５０mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む。１つの態様では、１回、２回、又は３回の誘導用量が患者に投与される。１つの態様では、２回又は３回の誘導用量が、例えば４週間間隔で投与される。１つの態様では、誘導用量（群）は、静脈内注入によって投与される。
【００１４】
１つの実施態様では、誘導用量は、２００mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含み、３回の誘導用量が、４週間間隔で患者に投与される。
【００１５】
１つの実施態様では、誘導用量は、４５０mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含み、３回の誘導用量が、４週間間隔で患者に投与される。
【００１６】
１つの実施態様では、誘導用量は、６００mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含み、３回の誘導用量が、４週間間隔で患者に投与される。
【００１７】
１つの実施態様では、誘導用量は、９００mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含み、３回の誘導用量が、４週間間隔で患者に投与される。
【００１８】
１つの実施態様では、誘導用量は、１，２００mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含み、３回の誘導用量が、４週間間隔で患者に投与される。
【００１９】
１つの実施態様では、誘導用量は、７５０mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含み、３回の誘導用量が、４週間間隔で患者に投与される。
【００２０】
１つの実施態様では、少なくとも１回の追加の誘導用量の抗ＩＬ−２３Ａ抗体が、上記の最後の誘導用量の後に患者に投与される。１つの態様では、追加の誘導用量は、２００〜１，２００mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体、例えば４５０〜１，２００mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む。１つの態様では、追加の誘導用量は、２００mg、４５０mg、６００mg、９００mg、又は１，２００mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む。１つの態様では、追加の誘導用量は、７５０mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む。１つの態様では、１回、２回、又は３回の誘導用量が患者に投与される。１つの態様では、２回又は３回の追加の誘導用量が、例えば４週間間隔で投与される。１つの態様では、追加の誘導用量（群）は静脈内注入によって投与される。
【００２１】
１つの実施態様では、患者は、初回の誘導用量の投与前に２２０〜４５０のＣＤＡＩスコアを有する。
【００２２】
１つの実施態様では、患者は、１回以上の誘導用量の投与後に臨床的寛解を達成する。１つの実施態様では、患者は、１回以上の誘導用量の投与後に１５０未満のＣＤＡＩスコアを達成する。１つの実施態様では、患者は、１回以上の誘導用量の投与後に７５又は７５未満のＰＲＯ−２スコアを達成する。１つの実施態様では、患者は、１回以上の誘導用量の投与後に１５０未満のＣＤＡＩスコア及び７５以下のＰＲＯ−２スコアを達成する。
【００２３】
１つの実施態様では、本発明はさらに、上記又は本明細書に記載のような抗ＩＬ−２３抗体を患者に投与する工程を含む、患者におけるクローン病の臨床的寛解を誘導するための方法を提供する。
【００２４】
１つの実施態様では、本発明はさらに、上記又は本明細書に記載のような抗ＩＬ−２３抗体を患者に投与する工程を含む、患者におけるクローン病に対する臨床応答を誘導するための方法を提供する。
【００２５】
１つの実施態様では、前記方法はさらに、最後の誘導用量が投与された後に初回の維持用量の抗ＩＬ−２３Ａ抗体を患者に投与する工程、及び前記の初回の維持用量が投与された４〜１２週間後に少なくとも１回の追加の維持用量を患者に投与する工程を含む。１つの態様では、初回の維持用量は、最後の誘導用量が投与された２〜８週間後、例えば４〜６週間後、例えば２週間後、４週間後、６週間後、又は８週間後に投与される。１つの態様では、少なくとも１回の追加の維持用量が、初回の維持用量が投与された４、８、又は１２週間後患者に投与される。
【００２６】
１つの実施態様では、初回の維持用量は、１５０〜３００mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む。１つの態様では、初回の維持用量は、１５０mg、２２５mg、又は３００mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む。１つの態様では、初回の維持用量は、１８０mg又は２７０mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む。
【００２７】
１つの態様では、少なくとも１回の追加の維持用量は、１５０〜３００mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む。１つの態様では、少なくとも１回の追加の維持用量は、１５０mg、２２５mg、又は３００mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む。１つの態様では、少なくとも１回の追加の維持用量は、１８０mg又は２７０mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む。
【００２８】
１つの態様では、初回の維持用量及び少なくとも１回の追加の維持用量は、１５０〜３００mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む。１つの態様では、初回の維持用量及び少なくとも１回の追加の維持用量は、１５０mg、２２５mg、又は３００mgの該抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む。１つの態様では、初回の維持用量及び少なくとも１回の追加の維持用量は、１８０mg又は２７０mgの該抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む。
【００２９】
１つの態様では、維持用量は、皮下注射によって投与される。
【００３０】
１つの実施態様では、維持用量は、１５０mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含み、４週間間隔で患者に投与される。
【００３１】
１つの実施態様では、維持用量は、１５０mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含み、８週間間隔で患者に投与される。
【００３２】
１つの実施態様では、維持用量は、２２５mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含み、８週間間隔で患者に投与される。
【００３３】
１つの実施態様では、維持用量は、２２５mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含み、１２週間間隔で患者に投与される。
【００３４】
１つの実施態様では、維持用量は、３００mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含み、８週間間隔で患者に投与される。
【００３５】
１つの実施態様では、維持用量は、３００mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含み、１２週間間隔で患者に投与される。
【００３６】
１つの実施態様では、患者は、１回以上の維持用量の投与後に臨床的寛解を維持する。１つの実施態様では、患者は、１回以上の維持用量の投与後に１５０未満のＣＤＡＩスコアを維持する。１つの実施態様では、患者は、１回以上の維持用量の投与後に７５又は７５未満のＰＲＯ−２スコアを維持する。１つの実施態様では、患者は、１回以上の維持用量の投与後に１５０未満のＣＤＡＩスコア及び７５以下のＰＲＯ−２スコアを維持する。
【００３７】
１つの実施態様では、本発明はさらに、上記又は本明細書に記載のような抗ＩＬ−２３抗体を患者に投与する工程を含む、患者におけるクローン病の臨床的寛解を維持するための方法を提供する。
【００３８】
１つの実施態様では、本発明はさらに、上記又は本明細書に記載のような抗ＩＬ−２３抗体を患者に投与する工程を含む、患者におけるクローン病に対する臨床応答を維持するための方法を提供する。
【００３９】
１つの実施態様では、本発明はさらに、上記又は本明細書に記載のような抗ＩＬ−２３抗体を患者に投与する工程を含む、患者における臨床的寛解を誘導及び維持することによってクローン病を処置するための方法を提供する。
【００４０】
１つの実施態様では、本発明はさらに、上記又は本明細書に記載のような抗ＩＬ−２３抗体を患者に投与する工程を含む、患者におけるクローン病の内視鏡的寛解を維持するための方法を提供する。
【００４１】
１つの実施態様では、本発明は、抗ＩＬ−２３Ａ抗体を患者に投与する工程を含む、クローン病の臨床的寛解を維持するための方法を提供し、該方法は、少なくとも１回の誘導用量の該抗ＩＬ−２３Ａ抗体を患者に投与する工程を含み、該誘導用量は、２００〜１，２００mgの該抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む。１つの実施態様では、誘導用量は、４５０〜１，２００mgの該抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む。１つの実施態様では、誘導用量は、２００mg、４５０mg、６００mg、９００mg、又は１，２００mgの該抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む。１つの実施態様では、誘導用量は７５０mgの該抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む。１つの実施態様では、１回、２回、又は３回の誘導用量が患者に投与される。１つの実施態様では、２回又は３回の誘導用量が４週間間隔で投与される。１つの実施態様では、誘導用量（群）は静脈内注入によって投与される。１つの実施態様では、患者は、該投与前に２２０〜４５０のＣＤＡＩスコアを有する。１つの実施態様では、患者は、１５０未満のＣＤＡＩスコアを達成する。１つの実施態様では、患者は、７５以下のＰＲＯ−スコアを達成する。
【００４２】
１つの実施態様では、前記方法はさらに、クローン病の臨床的寛解を維持する工程を含み、該方法はさらに、最後の誘導用量が投与された後に、初回の維持用量の該抗ＩＬ−２３Ａ抗体を患者に投与する工程、及び前記の初回の維持用量が投与された４〜１２週間後に少なくとも１回の追加の維持用量を患者に投与する工程を含む。１つの実施態様では、初回の維持用量は、最後の誘導用量が投与された２〜８週間後、例えば４〜６週間後、例えば２週間後、４週間後、６週間後、又は８週間後に投与される。１つの実施態様では、少なくとも１回の追加の維持用量は、前記の初回の維持用量が投与された４、８、又は１２週間後に患者に投与される。１つの実施態様では、初回の維持用量は、１５０〜３００mgの該抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む。１つの実施態様では、初回の維持用量は、１５０mg、２２５mg、又は３００mgの該抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む。１つの実施態様では、初回の維持用量は、１８０mg又は２７０mgの該抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む。１つの実施態様では、少なくとも１回の追加の維持用量は、１５０〜３００mgの該抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む。１つの実施態様では、少なくとも１回の追加の維持用量は、１５０mg、２２５mg、又は３００mgの該抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む。１つの実施態様では、少なくとも１回の追加の維持用量は、１８０mg又は２７０mgの該抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む。１つの実施態様では、初回の維持用量及び前記の少なくとも１回の追加の維持用量は、１５０〜３００mgの該抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む。１つの実施態様では、初回の維持用量及び前記の少なくとも１回の追加の維持用量は、１５０mg、２２５mg、又は３００mgの該抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む。１つの実施態様では、初回の維持用量及び前記の少なくとも１回の追加の維持用量は、１８０mg又は２７０mgの該抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む。１つの実施態様では、維持用量は、皮下注射によって投与される。１つの実施態様では、患者は、１５０未満のＣＤＡＩスコアを維持する。１つの実施態様では、患者は、７５以下のＰＲＯ−２スコアを維持する。
【００４３】
１つの実施態様では、本発明は、１５０〜１，２００mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を患者に投与する工程を含む、炎症性疾患を処置するための、１つの態様ではクローン病を処置するための方法を提供する。１つの態様では、該方法は、２００mg〜１，２００mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体、例えば４５０〜１，２００mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を患者に投与する工程を含む。１つの態様では、該方法は、２００mg、４５０mg、６００mg、９００mg、又は１，２００mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を患者に投与する工程を含む。１つの態様では、該方法は、７５０mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を患者に投与する工程を含む。１つの態様では、該方法は、１５０〜３００mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を患者に投与する工程を含む。１つの態様では、該方法は、１５０mg、２２５mg、又は３００mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を患者に投与する工程を含む。１つの態様では、該方法は、１８０mg又は２７０mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を患者に投与する工程を含む。
【００４４】
１つの実施態様では、上記のいずれか１つの方法において、抗ＩＬ−２３Ａ抗体は、抗体Ａ、抗体Ｂ、抗体Ｃ、又は抗体Ｄである。
【００４５】
１つの実施態様では、上記のいずれか１つの方法において、該方法は、クローン病、例えば中等度から重度の活動性クローン病を処置するためのものである。１つの態様では、本発明の方法の脈絡において、患者は、抗ＴＮＦ抗体療法を処置されたことがなかったか、又は以前に処置されたことがあった。１つの態様では、本発明の方法の脈絡において、患者は、１つ、２つ、３つ、又はそれ以上のＴＮＦアンタゴニスト（群）を用いて以前に処置されていた。１つの実施態様では、患者は、副腎皮質ステロイドに対して不適切な応答を示したか、不耐容性であったか、又は依存性を示した患者である。１つの実施態様では、患者は、免疫調節剤、ＴＮＦα阻害剤（すなわちＴＮＦアンタゴニスト）又はインテグリン阻害剤に対して不適切な応答を示したか、それに対する応答を失っていたか、又は不耐容性であった患者である。１つの実施態様では、処置は、臨床的寛解、副腎皮質ステロイドを用いない寛解、内視鏡的寛解、及び粘膜治癒を誘導及び維持することによる。
【００４６】
１つの実施態様では、本発明に記載の方法によって処置される予定の患者は、２２０〜４５０のＣＤＡＩスコアを有する。
【００４７】
１つの実施態様では、上記のいずれか１つの方法において、患者は成人患者である。
【００４８】
１つの実施態様では、上記のいずれか１つの方法において、該方法は、潰瘍性大腸炎を処置するためのものである。
【００４９】
１つの態様では、本発明は、本明細書に記載のような特定の量及び／又は特定の間隔での投与による、疾患、例えば炎症性疾患、例えばクローン病の処置に使用するための抗ＩＬ−２３Ａ抗体を提供する。１つの態様では、炎症性疾患は潰瘍性大腸炎である。
【００５０】
１つの態様では、本発明は、本明細書に記載のような特定の量及び／又は特定の間隔での投与による、疾患、例えば炎症性疾患、例えばクローン病の処置用の医薬品の調製のための抗ＩＬ−２３Ａ抗体の使用を提供する。１つの態様では、炎症性疾患は潰瘍性大腸炎である。
【００５１】
１つの実施態様では、上記のいずれか１つの方法又は使用における抗ＩＬ−２３Ａ抗体は以下に開示されている。
【００５２】
１つの実施態様では、抗ＩＬ−２３Ａ抗体は、配列番号１のアミノ酸配列（ＣＤＲ１−Ｌ）；配列番号２のアミノ酸配列（ＣＤＲ２−Ｌ）；及び配列番号３のアミノ酸配列（ＣＤＲ３−Ｌ）を含む軽鎖可変領域；並びに、配列番号４、７、８、又は９のアミノ酸配列（ＣＤＲ１−Ｈ）；配列番号５のアミノ酸配列（ＣＤＲ２−Ｈ）；及び配列番号６のアミノ酸配列（ＣＤＲ３−Ｈ）を含む重鎖可変領域を含む。
【００５３】
１つの実施態様では、抗ＩＬ−２３Ａ抗体は、配列番号１のアミノ酸配列（ＣＤＲ１−Ｌ）；配列番号２のアミノ酸配列（ＣＤＲ２−Ｌ）；及び配列番号３のアミノ酸配列（ＣＤＲ３−Ｌ）を含む軽鎖可変領域；並びに、配列番号４のアミノ酸配列（ＣＤＲ１−Ｈ）；配列番号５のアミノ酸配列（ＣＤＲ２−Ｈ）；及び配列番号６のアミノ酸配列（ＣＤＲ３−Ｈ）を含む重鎖可変領域を含む。
【００５４】
１つの実施態様では、抗ＩＬ−２３Ａ抗体は、配列番号１のアミノ酸配列（ＣＤＲ１−Ｌ）；配列番号２のアミノ酸配列（ＣＤＲ２−Ｌ）；及び配列番号３のアミノ酸配列（ＣＤＲ３−Ｌ）を含む軽鎖可変領域；並びに、配列番号７のアミノ酸配列（ＣＤＲ１−Ｈ）；配列番号５のアミノ酸配列（ＣＤＲ２−Ｈ）；及び配列番号６のアミノ酸配列（ＣＤＲ３−Ｈ）を含む重鎖可変領域を含む。
【００５５】
１つの実施態様では、抗ＩＬ−２３Ａ抗体は、配列番号１のアミノ酸配列（ＣＤＲ１−Ｌ）；配列番号２のアミノ酸配列（ＣＤＲ２−Ｌ）；及び配列番号３のアミノ酸配列（ＣＤＲ３−Ｌ）を含む軽鎖可変領域；並びに、配列番号８のアミノ酸配列（ＣＤＲ１−Ｈ）；配列番号５のアミノ酸配列（ＣＤＲ２−Ｈ）；及び配列番号６のアミノ酸配列（ＣＤＲ３−Ｈ）を含む重鎖可変領域を含む。
【００５６】
１つの実施態様では、抗ＩＬ−２３Ａ抗体は、配列番号１のアミノ酸配列（ＣＤＲ１−Ｌ）；配列番号２のアミノ酸配列（ＣＤＲ２−Ｌ）；及び配列番号３のアミノ酸配列（ＣＤＲ３−Ｌ）を含む軽鎖可変領域；並びに、配列番号９のアミノ酸配列（ＣＤＲ１−Ｈ）；配列番号５のアミノ酸配列（ＣＤＲ２−Ｈ）；及び配列番号６のアミノ酸配列（ＣＤＲ３−Ｈ）を含む重鎖可変領域を含む。
【００５７】
１つの実施態様では、抗ＩＬ−２３Ａ抗体は、配列番号１０、１１、１２、又は１３のいずれか１つのアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域；及び、配列番号１４、１５、１６、又は１７のいずれか１つのアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【００５８】
１つの実施態様では、抗ＩＬ−２３Ａ抗体は、配列番号１１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、及び配列番号１４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【００５９】
１つの実施態様では、抗ＩＬ−２３Ａ抗体は、配列番号１１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、及び配列番号１５のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【００６０】
１つの実施態様では、抗ＩＬ−２３Ａ抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、及び配列番号１４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【００６１】
１つの実施態様では、抗ＩＬ−２３Ａ抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、及び配列番号１５のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【００６２】
１つの実施態様では、抗ＩＬ−２３Ａ抗体は、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＭ、ＩｇＡ、又はＩｇＥ重鎖定常領域に連結された配列番号１４又は１５のアミノ酸配列を含む。１つの実施態様では、抗ＩＬ−２３Ａ抗体は、ヒトＩｇＧ１重鎖定常領域に連結された配列番号１４又は１５のアミノ酸配列を含む。１つの実施態様では、抗ＩＬ−２３Ａ抗体は、ヒトκ又はλ軽鎖定常領域に連結された配列番号１０又は１１のアミノ酸配列を含む。
【００６３】
１つの実施態様では、抗ＩＬ−２３Ａ抗体は、ヒトＩｇＧ１重鎖定常領域に連結された配列番号１４又は１５のアミノ酸配列；及び、ヒトκ軽鎖定常領域に連結された配列番号１０又は１１のアミノ酸配列を含む。
【００６４】
１つの実施態様では、抗ＩＬ−２３Ａ抗体は、配列番号１０、１１、１２、及び１３のいずれか１つからなる群より選択されたアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、配列番号１４、１５、１６及び１７のいずれか１つからなる群より選択されたアミノ酸配列を含む重鎖可変領域とを含む、ヒト化モノクローナル抗体である。
【００６５】
１つの実施態様では、抗ＩＬ−２３Ａ抗体は、配列番号１１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、配列番号１４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域とを含む、ヒト化モノクローナル抗体である。
【００６６】
１つの実施態様では、抗ＩＬ−２３Ａ抗体は、配列番号１１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、配列番号１５のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域とを含む、ヒト化モノクローナル抗体である。
【００６７】
１つの実施態様では、抗ＩＬ−２３Ａ抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、配列番号１４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域とを含む、ヒト化モノクローナル抗体である。
【００６８】
１つの実施態様では、抗ＩＬ−２３Ａ抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、配列番号１５のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域とを含む、ヒト化モノクローナル抗体である。
【００６９】
１つの実施態様では、抗ＩＬ−２３Ａ抗体は、配列番号１８又は２１のアミノ酸配列を含む軽鎖と、配列番号１９又は２０のアミノ酸配列を含む重鎖とを含む。
【００７０】
１つの実施態様では、抗ＩＬ−２３Ａ抗体は、配列番号１８のアミノ酸配列を含む軽鎖と、配列番号１９のアミノ酸配列を含む重鎖とを含む。
【００７１】
１つの実施態様では、抗ＩＬ−２３Ａ抗体は、配列番号１８のアミノ酸配列を含む軽鎖と、配列番号２０のアミノ酸配列を含む重鎖とを含む。
【００７２】
１つの実施態様では、抗ＩＬ−２３Ａ抗体は、配列番号２１のアミノ酸配列を含む軽鎖と、配列番号１９のアミノ酸配列を含む重鎖とを含む。
【００７３】
１つの実施態様では、抗ＩＬ−２３Ａ抗体は、配列番号２１のアミノ酸配列を含む軽鎖と、配列番号２０のアミノ酸配列を含む重鎖とを含む。
【００７４】
１つの実施態様では、抗ＩＬ−２３Ａ抗体は、抗体Ａ、抗体Ｂ、抗体Ｃ、又は抗体Ｄである。
【００７５】
１つの実施態様では、抗ＩＬ−２３Ａ抗体は、国際公開公報第２００７/００５９５５号、国際公開公報第２００７／０２４８４６号、国際公開公報第２００７／０２７７１４号、国際公開公報第２００７／０７６５２４号、国際公開公報第２００８／１０３４３２号、又は国際公開公報第２０１２／０６１４４８号に開示されている通りである。
【００７６】
１つの実施態様では、本発明は、ａ）患者から生物学的試料を得る工程；ｂ）該試料中の１つ以上の遺伝子、タンパク質、又はｍｉＲＮＡの発現レベルを測定する工程；ｃ）ｂ）のレベルを、対照における１つ以上の遺伝子、タンパク質、又はｍｉＲＮＡの発現レベルと比較する工程；及びｄ）試料のレベルと対照のレベルとの間の差が、患者における有益な応答を反映するかどうかを決定する工程（ここでの、１つ以上の遺伝子、タンパク質、又はｍｉＲＮＡは、本明細書に記載の１つ以上の遺伝子、タンパク質、又はｍｉＲＮＡである）を含む、ＩＬ−２３Ａアンタゴニストの投与後の患者における有益な応答の有無を検出するための方法を提供する。１つの態様では、患者はクローン病に罹患している。１つの態様では、生物学的試料は大腸組織又は回腸組織である。１つの態様では、生物学的試料は上部消化管（ＧＩ）、例えば胃又は食道から採取される。１つの態様では、ＩＬ−２３Ａアンタゴニストは、抗ＩＬ−２３Ａ抗体又はその抗原結合フラグメント、例えば抗体Ａ、抗体Ｂ、抗体Ｃ、又は抗体Ｄである。
【００７７】
１つの実施態様では、抗ＩＬ−２３Ａ抗体は、本明細書に記載のような遺伝子を調節する。１つの実施態様では、抗ＩＬ−２３Ａ抗体は、本明細書に記載のような経路を調節する。
【００７８】
１つの実施態様では、抗ＩＬ−２３Ａ抗体は、本明細書に記載のようなタンパク質、例えば本明細書に記載のような糞便中カルプロテクチン及び／又は糞便中ラクトフェリンを調節する。１つの実施態様では、抗ＩＬ−２３Ａ抗体は、ｍｉＲＮＡ、例えば本明細書に記載のようなｍｉＲ−２２３−３ｐを調節する。
【図面の簡単な説明】
【００７９】
【図１】試験デザイン。臨床的寛解（クローン病活動指数（ＣＤＡＩ）スコア＜１５０）及びクローン病内視鏡的重症度指数（ＣＤＥＩＳ）の寛解（ＣＤＥＩＳスコア≦４、又は初期の孤立性回腸炎患者では２以下）を達成したとして定義される、深い寛解。
【図２】図２Ａ及び２Ｂ：４週目、８週目、及び１２週目における臨床的寛解（Ａ）又は臨床応答（Ｂ）を有する患者の比率。臨床的寛解は、ＣＤＡＩスコア＜１５０として定義される。臨床応答は、ＣＤＡＩスコア＜１５０、又は基線からの１００ポイント以上のＣＤＡＩの減少のいずれかである。クローン病を処置するために併用投与が禁止された薬物が１２週目より前に使用された患者は、処置の失敗と判断された。最大の解析対象集団をこれらの解析のために使用した。＊プラセボに対してｐ＜０．０５、＊＊プラセボに対してｐ＜０．００５、＊＊＊プラセボに対してｐ＜０．００１。
【図３】図３Ａ〜Ｄ：経時的なＣＤＡＩスコアの中央値（Ａ）、経時的なＣＲＰの中央値（Ｂ）、基線からのＦＣＰの変化率の中央値（Ｃ）、基線からのＩＬ−２２の変化率の中央値（Ｄ）。＊ｐ＜０．００１、プラセボに対して、６００mgの抗体Ａについてボンフェローニ補正されたｐ値。＊ｐ＜０．０５、プラセボに対して、６００mgの抗体Ａについてボンフェローニ補正されたｐ値。ＣＤＡＩ（クローン病活動指数）；ＣＲＰ（Ｃ反応性タンパク質）；ＦＣＰ（糞便中カルプロテクチン）。
【図４】プラセボに対して６００mgの抗体Ａによる処置を用いての処置から１２週間後の大腸生検材料において発現の変動したｍｉＲＮＡ（基線からの倍数のＬｏｇ２）。
【図５】図５Ａ〜Ｃ。基線及び１２週目におけるプラセボで処置された患者及び抗体Ａで処置された患者における、大腸（Ａ）及び糞便（Ｂ）中のｍｉＲ−２２３−３ｐのレベル。ひげは、発現の１０〜９０パーセンタイルを示す。６００mgの抗体Ａ用量群における大腸生検組織におけるｍｉＲ−２２３−３ｐ発現の変化倍数のｌｏｇと、糞便中カルプロテクチンレベルの変化倍数のｌｏｇの相関。＊ｐ＜０．０５；ｎｓ、有意ではない。
【００８０】
詳細な説明
ＩＬ−２３のｐ１９サブユニット（本明細書において「ＩＬ−２３Ａ」、「ＩＬ−２３ｐ１９」、及び「ｐ１９サブユニット」とも称される）は、２１アミノ酸リーダー配列を含有している１８９アミノ酸ポリペプチドである（Oppmann et al. Immunity 13:715 (2000)、配列番号２２）。該分子の生物学的活性は、それがＩＬ−１２ｐ４０サブユニットと対を形成してＩＬ−２３を形成する場合にのみ検出される。ＩＬ−２３は主に活性化された樹状細胞（ＤＣ）及び食細胞によって発現されている。ＩＬ−２３の受容体は、ＩＬ−２３Ｒと呼ばれる独特なサブユニットと対を形成したＩＬ−１２受容体のＩＬ−１２Ｒβ１サブユニットから構成されることが判明した（Parham et al. J. Immunol. 168:5699 (2002)）。該受容体の発現は、主に、記憶Ｔ細胞及びＮＫ細胞上に検出される。したがって、このサイトカイン：受容体の対の発現は、免疫細胞の特定の集団に限定されているようである。最初にＩＬ−１２とＩＬ−２３は多くの機能を共有していると考えられていたが、データにより実像は異なることが示された。ＩＬ−１２はＴｈ１細胞の生成において重要な役割を有するが、ＩＬ−２３はＴｈ１７と呼ばれる近年認知されたＴｈ細胞サブセットの生成及び維持に決定的に関与していることが判明した（Kikly et al. Curr. Opin. Immunol. 18:670 (2006), Kastelein et al. Ann. Rev. Immunol. 25:221 (2007）)。これらの細胞は、ＩＬ−１７Ａ、ＩＬ−１７Ｆ、ＩＬ−２２、及び他の炎症誘発性サイトカイン、例えばＩＬ−６及びＴＮＦ−αを産生する。以下に記載されているように、これらのＴｈ１７細胞の役割に関する動物モデル研究は、慢性炎症及び自己免疫における駆動力としてのその重要性を示す。
【００８１】
【表１】
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【００８２】
１つの態様では、本発明は、ＩＬ−２３Ａ関連疾患の処置法を提供する。１つの態様では、本発明は、疾患、例えば炎症性疾患を処置するための方法、特に、抗ＩＬ−２３Ａ抗体を特定の量及び／又は特定の間隔で患者に投与する工程を含む方法を提供する。１つの態様では、本発明の方法は、クローン病の処置用である。
【００８３】
１つの態様では、本発明は、本明細書に記載のような特定の量及び／又は特定の間隔での投与によって、疾患、例えば炎症性疾患、例えばクローン病を処置するのに使用するための抗ＩＬ−２３Ａ抗体を提供する。
【００８４】
１つの態様では、本発明は、本明細書に記載のような特定の量及び／又は特定の間隔での投与によって、疾患、例えば炎症性疾患、例えばクローン病を処置するための医薬品の調製のための抗ＩＬ−２３Ａ抗体の使用を提供する。
【００８５】
１つの実施態様では、本発明の脈絡において、患者の処置は、誘導期及び維持期を含む。誘導期では、例えば本明細書において誘導用量と称される１回以上の用量の抗ＩＬ−２３抗体が、例えば静脈内注入によって患者に投与される。維持期では、例えば本明細書において維持用量と称される初回用量の抗ＩＬ−２３抗体が患者に投与され、その後、例えば本明細書において維持用量と称される少なくとも１回の追加の用量の抗ＩＬ−２３抗体が投与される。維持用量は、例えば、皮下注射によって投与される。誘導期及び維持期の例は本明細書に記載されている。
【００８６】
１つの態様では、特定の治療結果、例えば臨床的寛解は、誘導期の最中又は終了時に患者によって達成される。１つの態様では、患者は、誘導期の最中又は終了時に１５０未満のＣＤＡＩスコアを達成する。１つの態様では、患者は、誘導期の最中又は終了時に７５以下のＰＲＯ−２スコアを達成する。１つの態様では、患者は、誘導期の最中又は終了時に１５０未満のＣＤＡＩスコア、及び７５以下のＰＲＯ−２スコアを達成する。
【００８７】
したがって、１つの実施態様では、本発明の方法では、患者は、誘導期の最中又は終了時に臨床的寛解について評価される。
【００８８】
１つの態様では、患者が誘導期において応答性ではない場合、維持期が開始される前に誘導期が繰り返される（本明細書において再誘導期とも称する）。１つの態様では、本発明の方法では、患者は再誘導期の最中又は終了時に、例えば誘導期の最中又は後に臨床的寛解について評価される。
【００８９】
１つの態様では、特定の治療結果、例えば臨床的寛解が、維持期の最中に患者によって維持される。１つの態様では、患者は、維持期の最中に１５０未満のＣＤＡＩスコアを維持する。１つの態様では、患者は、維持期の最中に７５以下のＰＲＯ−２スコアを維持する。１つの態様では、患者は、維持期の最中に１５０未満のＣＤＡＩスコア、及び７５以下のＰＲＯ−２スコアを維持する。
【００９０】
したがって、１つの実施態様では、本発明の方法では、患者は、維持期の最中に臨床的寛解について評価される。
【００９１】
１つの実施態様では、本発明は、（ａ）１用量の抗ＩＬ−２３Ａ抗体を０週目、４週目、及び８週目に静脈内注入によって患者に投与する工程を含む、炎症性疾患を処置するための、１つの態様ではクローン病を処置するための方法を提供し、ここでの抗ＩＬ−２３Ａ抗体の用量は、２００mg又は６００mgの抗体を含む。１つの実施態様では、該方法はさらに、（ｂ）３回の用量の抗ＩＬ−２３Ａ抗体を、例えば１４週目、１８週目、及び２２週目に静脈内注入によって患者に投与する工程を含み、ここでの抗ＩＬ−２３Ａ抗体の用量は６００mgの抗体を含む。１つの実施態様では、該方法はさらに、（ｃ）１回以上の用量の抗ＩＬ−２３Ａ抗体を８週間間隔で皮下注射によって、例えば４回の用量の抗ＩＬ−２３Ａ抗体を８週間間隔で皮下注射によって、例えば２６週目、３４週目、４２週目、及び５０週目に患者に投与する工程を含み、ここでの１回以上の用量の抗ＩＬ−２３Ａ抗体は、１８０mgの抗体を含む。
【００９２】
１つの実施態様では、１２週目に、患者は、例えば臨床的寛解（ＣＤＡＩスコア＜１５０）及び内視鏡的寛解（ＣＤＥＩＳ≦４）の達成として定義される、深い寛解について評価される。１つの態様では、初期の孤立性回腸炎患者では、内視鏡的寛解は、ＣＤＥＩＳ≦２によって定義される。
【００９３】
１つの実施態様では、本発明は、（ａ）１用量の抗ＩＬ−２３Ａ抗体を０週目、４週目、及び８週目に静脈内注入によって患者に投与する工程を含む、炎症性疾患を処置するための、１つの態様ではクローン病を処置するための方法を提供し、ここでの抗ＩＬ−２３Ａ抗体の用量は、２００mg又は６００mgの抗体を含む。１つの実施態様では、該方法はさらに、（ｂ）１回以上の用量の抗ＩＬ−２３Ａ抗体を８週間間隔で皮下注射によって、例えば４回の用量の抗ＩＬ−２３Ａ抗体を８週間間隔で皮下注射によって、例えば２６週目、３４週目、４２週目及び５０週目に患者に投与する工程を含み、ここでの１回以上の用量の抗ＩＬ−２３Ａ抗体は、１８０mgの抗体を含む。
【００９４】
１つの実施態様では、１２週目に、患者は、例えば臨床的寛解（ＣＤＡＩスコア＜１５０）及び内視鏡的寛解（ＣＤＥＩＳ≦４）の達成として定義される、深い寛解について評価される。１つの態様では、初期の孤立性回腸炎患者では、内視鏡的寛解は、ＣＤＥＩＳ≦２によって定義される。
【００９５】
１つの実施態様では、本発明は、１８０mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を８週間間隔で皮下注射によって患者に投与する工程を含む、炎症性疾患を処置するための、１つの態様ではクローン病を処置するための方法を提供する。
【００９６】
１つの実施態様では、本発明に記載の抗ＩＬ−２３Ａ抗体の投与は、本明細書の以下の実施例又は図１にさらに記載されている。
【００９７】
１つの実施態様では、本発明は、抗ＩＬ−２３Ａ抗体を患者に投与する工程を含む、炎症性疾患を処置するための、１つの態様ではクローン病を処置するための方法を提供し、該方法は、少なくとも１回の誘導用量の抗ＩＬ−２３Ａ抗体を患者に投与する工程を含み、該誘導用量は、２００〜１，２００mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体、例えば４５０〜１，２００mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む。１つの態様では、誘導用量は、２００mg、４５０mg、６００mg、９００mg、又は１，２００mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む。１つの実施態様では、誘導用量は、７５０mgの該抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む。１つの態様では、１回、２回、又は３回の誘導用量が患者に投与される。１つの態様では、２回又は３回の誘導用量が、例えば４週間間隔で投与される。１つの態様では、誘導用量（群）は静脈内注入によって投与される。
【００９８】
１つの実施態様では、誘導用量は２００mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含み、３回の誘導用量が、４週間間隔で患者に投与される。
【００９９】
１つの実施態様では、誘導用量は４５０mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含み、３回の誘導用量が４週間間隔で患者に投与される。
【０１００】
１つの実施態様では、誘導用量は６００mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含み、３回の誘導用量が、４週間間隔で患者に投与される。
【０１０１】
１つの実施態様では、誘導用量は９００mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含み、３回の誘導用量が４週間間隔で患者に投与される。
【０１０２】
１つの実施態様では、誘導用量は１，２００mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含み、３回の誘導用量が、４週間間隔で患者に投与される。
【０１０３】
１つの実施態様では、誘導用量は７５０mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含み、３回の誘導用量が４週間間隔で患者に投与される。
【０１０４】
１つの態様では、患者が誘導期において応答性ではない場合、維持期が開始される前に誘導期が繰り返される。例えば、最初の誘導期が３回の誘導用量を含む場合、３回の追加の誘導用量が患者に投与され（再誘導期）、これにより合計で６回の誘導用量となる。追加の誘導用量（群）は、例えば、本明細書に記載の抗ＩＬ−２３抗体の量を含む。追加の誘導用量は、例えば、本明細書に記載の間隔で投与される。
【０１０５】
１つの実施態様では、前記方法はさらに、最後の誘導用量が投与された後に、初回の維持用量の抗ＩＬ−２３Ａ抗体を患者に投与する工程、及び前記の初回の維持用量が投与された４〜１２週間後に少なくとも１回の追加の維持用量を患者に投与する工程を含む。１つの態様では、初回の維持用量は、最後の誘導用量が投与された２〜８週間後、例えば４〜６週間後、例えば２週間後、４週間後、６週間後、又は８週間後に投与される。１つの態様では、少なくとも１回の追加の維持用量が、初回の維持用量が投与された４、８、又は１２週間後に患者に投与される。
【０１０６】
１つの実施態様では、初回の維持用量は、１５０〜３００mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む。１つの態様では、初回の維持用量は、１５０mg、２２５mg、又は３００mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む。１つの態様では、初回の維持用量は、１８０mg又は２７０mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む。
【０１０７】
１つの態様では、少なくとも１回の追加の維持用量は、１５０〜３００mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む。１つの態様では、少なくとも１回の追加の維持用量は、１５０mg、２２５mg、又は３００mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む。１つの態様では、少なくとも１回の追加の維持用量は１８０mg又は２７０mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む。
【０１０８】
１つの態様では、初回の維持用量及び少なくとも１回の追加の維持用量は、１５０〜３００mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む。１つの態様では、初回の維持用量及び少なくとも１回の追加の維持用量は、１５０mg、２２５mg、又は３００mgの該抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む。１つの態様では、初回の維持用量及び少なくとも１回の追加の維持用量は１８０mg又は２７０mgの該抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む。
【０１０９】
１つの態様では、維持用量は皮下注射によって投与される。
【０１１０】
１つの実施態様では、維持用量は１５０mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含み、４週間間隔で患者に投与される。
【０１１１】
１つの実施態様では、維持用量は１５０mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含み、８週間間隔で患者に投与される。
【０１１２】
１つの実施態様では、維持用量は２２５mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含み、８週間間隔で患者に投与される。
【０１１３】
１つの実施態様では、維持用量は２２５mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含み、１２週間間隔で患者に投与される。
【０１１４】
１つの実施態様では、維持用量は３００mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含み、８週間間隔で患者に投与される。
【０１１５】
１つの実施態様では、維持用量は３００mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含み、１２週間間隔で患者に投与される。
【０１１６】
１つの実施態様では、本発明は、１５０〜１，２００mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を患者に投与する工程を含む、炎症性疾患を処置するための、１つの態様ではクローン病を処置するための方法を提供する。１つの態様では、該方法は、２００〜１，２００mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体、例えば４５０〜１，２００mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を患者に投与する工程を含む。１つの態様では、該方法は、２００mg、４５０mg、６００mg、９００mg、又は１，２００mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を患者に投与する工程を含む。１つの態様では、該方法は、７５０mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を患者に投与する工程を含む。１つの態様では、該方法は、１５０〜３００mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を患者に投与する工程を含む。１つの態様では、該方法は、１５０mg、２２５mg、又は３００mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を患者に投与する工程を含む。１つの態様では、該方法は、１８０mg又は２７０mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を患者に投与する工程を含む。
【０１１７】
１つの実施態様では、本発明はさらに、患者におけるクローン病の臨床的寛解を誘導するための方法を提供し、該方法は、上記又は本明細書に記載のような少なくとも１回の誘導用量の抗ＩＬ−２３Ａ抗体を患者に投与する工程を含む。１つの実施態様では、該方法はさらに、クローン病の臨床的寛解を維持する工程を含み、該方法は、最後の誘導用量が投与された後に初回の維持用量の該抗ＩＬ−２３Ａ抗体を患者に投与する工程、及び上記又は本明細書に記載のような少なくとも１回の追加の維持用量を患者に投与する工程をさらに含む。
【０１１８】
１つの実施態様では、本発明はさらに、患者におけるクローン病に対する臨床応答を誘導するための方法を提供し、該方法は、上記又は本明細書に記載のような少なくとも１回の誘導用量の抗ＩＬ−２３抗体を患者に投与する工程を含む。１つの実施態様では、該方法はさらに、クローン病に対する臨床応答を維持する工程を含み、該方法はさらに、最後の誘導用量が投与された後に初回の維持用量の該抗ＩＬ−２３Ａ抗体を患者に投与する工程、及び上記又は本明細書に記載のような少なくとも１回の追加の維持用量を患者に投与する工程を含む。
【０１１９】
本発明に記載の用量及び用量処方計画の代表例を、表Ａに開示する。
【０１２０】
【表２】
2019536756.tif 000004
2019536756.tif 000005
【０１２１】
１つの態様では、１回、２回、又は３回の誘導用量（群）が、表Ａに記載の用量処方計画で患者に投与される。
【０１２２】
本発明に記載の用量及び用量処方計画の追加の代表例が以下に記載されている。これらの例では、最後の誘導用量の４週間後に、初回の維持用量が患者に投与される。また本発明において、最後の誘導用量の２週間後、６週間後、又は８週間後に初回の維持用量を投与することが考えられる。
【０１２３】
例えば、本発明の脈絡において、誘導用量が、０週目、４週目、及び８週目に患者に投与され、その後、１２週目に初回の維持用量が投与され、１６週目に２回目の維持用量が投与され、２０週目に３回目の維持用量が投与されるなど、維持用量は４週間の投与間隔をあけて投与される。１つの態様では、誘導用量は、２００mg、４５０mg、６００mg、９００mg、又は１，２００mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む。１つの態様では、維持用量は１５０mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む。
【０１２４】
例えば、本発明の脈絡において、誘導用量が、０週目、４週目、及び８週目に患者に投与され、その後、１２週目に初回の維持用量が投与され、２０週目に２回目の維持用量が投与され、２８週目に３回目の維持用量が投与されるなど、維持用量は８週間の投与間隔をあけて投与される。１つの態様では、誘導用量は、２００mg、４５０mg、６００mg、９００mg、又は１，２００mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む。１つの態様では、維持用量は１５０mg、２２５mg、又は３００mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む。
【０１２５】
例えば、本発明の脈絡において、誘導用量が、０週目、４週目、及び８週目に患者に投与され、その後、１２週目に初回の維持用量が投与され、２４週目に２回目の維持用量が投与され、３６週目に３回目の維持用量が投与されるなど、維持用量は１２週間の投与間隔をあけて投与される。１つの態様では、誘導用量は、２００mg、４５０mg、６００mg、９００mg、又は１，２００mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む。１つの態様では、維持用量は２２５mg又は３００mgの抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む。
【０１２６】
１つの実施態様では、本発明の方法において、患者は、例えば臨床的寛解（ＣＤＡＩスコア＜１５０）及び内視鏡的寛解（ＣＤＥＩＳ≦４）の達成として定義される、深い寛解について評価される。１つの態様では、初期の孤立性回腸炎患者では、内視鏡的寛解は、ＣＤＥＩＳ≦２によって定義される。１つの態様では、例えば８未満のＰＲＯ−２スコア、又は基線からの少なくとも８ポイントの減少のいずれかによって定義される、患者のＰＲＯ応答が評価される。
【０１２７】
１つの実施態様では、本発明の方法において、患者は、例えば本明細書に定義されているような、臨床的寛解、臨床応答、内視鏡的寛解、内視鏡的応答、又は粘膜治癒について評価される。
【０１２８】
１つの実施態様では、上記のいずれか１つの方法における抗ＩＬ−２３Ａ抗体は、本明細書に開示されている。１つの実施態様では、上記のいずれか１つの方法における抗ＩＬ−２３Ａ抗体は、抗体Ａである。１つの実施態様では、上記のいずれか１つの方法における抗ＩＬ−２３Ａ抗体は、抗体Ｂである。１つの実施態様では、上記のいずれか１つの方法における抗ＩＬ−２３Ａ抗体は、抗体Ｃである。１つの実施態様では、上記のいずれか１つの方法における抗ＩＬ−２３Ａ抗体は、抗体Ｄである。
【０１２９】
１つの態様では、上記のいずれか１つの方法において、抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む医薬組成物が患者に投与される。１つの態様では、抗ＩＬ−２３Ａ抗体、例えば抗体Ａ、抗体Ｂ、抗体Ｃ、又は抗体Ｄを含む、実施例２に開示された製剤２が患者に投与される。１つの態様では、抗ＩＬ−２３Ａ抗体、例えば抗体Ａ、抗体Ｂ、抗体Ｃ、又は抗体Ｄを含む、実施例２に開示された製剤３が患者に投与される。１つの態様では、抗ＩＬ−２３Ａ抗体、例えば抗体Ａ、抗体Ｂ、抗体Ｃ、又は抗体Ｄを含む、実施例２に開示された製剤１が患者に投与される。
【０１３０】
１つの態様では、抗ＩＬ−２３Ａ抗体はヒト化抗体である。１つの態様では、抗ＩＬ−２３Ａ抗体はモノクローナル抗体である。１つの態様では、抗ＩＬ−２３Ａ抗体は完全長抗体である。１つの態様では、抗ＩＬ−２３Ａ抗体はヒト化モノクローナル抗体、例えば完全長ヒト化モノクローナル抗体である。
【０１３１】
本明細書に記載の抗体は、特異的な「ＩＬ−２３Ａ抗体エピトープ」又は「ＩＬ−２３Ａエピトープ」を認識する。本明細書において使用するこれらの用語は、抗ＩＬ−２３Ａ抗体と免疫反応することのできる分子（例えばペプチド）又は分子のフラグメントを指し、これには例えば、配列番号１１／１４、１１／１５、１０／１４、又は１０／１５の軽鎖／重鎖配列の組合せを有する抗体のいずれかによって認識されるＩＬ−２３Ａ抗原性決定基が挙げられる。
【０１３２】
抗体又は免疫グロブリンの一般構造は、当業者には周知である。これらの分子は、２本の同一な軽鎖（Ｌ）と２本の同一な重鎖（Ｈ）から構成される典型的には約１５０，０００ダルトンのヘテロ四量体糖タンパク質であり、これは典型的には完全長抗体と呼ばれる。各々の軽鎖は、１本のジスルフィド結合によって重鎖に共有結合で連結されてヘテロ二量体を形成し、ヘテロ二量体の２本の同一な重鎖の間でのジスルフィド共有結合を通してヘテロ四量体分子が形成される。軽鎖と重鎖は互いに１本のジスルフィド結合によって連結されているが、２本の重鎖間のジスルフィド結合の数は、免疫グロブリンのアイソタイプによって異なる。各々の重鎖及び軽鎖はまた、規則的に配置された鎖内ジスルフィド橋を有する。各々の重鎖は、アミノ末端に可変ドメイン（ＶＨ）、続いて３つ又は４つの定常ドメイン（ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３及びＣＨ４）、並びに、ＣＨ１とＣＨ２間のヒンジ領域を有する。各々の軽鎖は、アミノ末端可変ドメイン（ＶＬ）及びカルボキシ末端定常ドメイン（ＣＬ）という２つのドメインを有する。ＶＬドメインは、非共有結合的にＶＨドメインと会合し、一方、ＣＬドメインは一般的にＣＨ１ドメインにジスルフィド結合を介して共有結合で連結されている。特定のアミノ酸残基が、軽鎖可変ドメインと重鎖可変ドメインとの間の界面を形成すると考えられている（Chothia et al., 1985, J. Mol. Biol. 186:651-663）。可変ドメインはまた、本明細書において可変領域とも称される。
【０１３３】
可変ドメイン内の特定のドメインが、様々な抗体間で大幅に異なり、すなわち「超可変的」である。これらの超可変ドメインは、その特異的な抗原性決定基に対する各々の特定の抗体の結合及び特異性に直接関与している残基を含有している。軽鎖可変ドメインと重鎖可変ドメインの両方における超可変性は、相補性決定領域（ＣＤＲ）又は超可変ループ（ＨＶＬ）として知られる３つのセグメントに集中している。ＣＤＲは、Kabat et al., 1991, In: Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, Md.の配列比較によって規定され、一方、ＨＶＬ（本明細書においてＣＤＲとも称される）は、Chothia and Lesk, 1987, J. Mol. Biol. 196: 901-917に記載のような可変ドメインの３次元構造に従って構造的に規定される。これらの２つの方法では、ＣＤＲの同定は僅かに異なる。Kabatによって定義されているように、ＣＤＲ−Ｌ１は、軽鎖可変ドメイン内のおよそ２４〜３４残基に位置し、ＣＤＲ−Ｌ２はおよそ５０〜５６残基に位置し、ＣＤＲ−Ｌ３はおよそ８９〜９７残基に位置し；ＣＤＲ−Ｈ１は、重鎖可変ドメイン内のおよそ３１〜３５残基に位置し、ＣＤＲ−Ｈ２はおよそ５０〜６５残基に位置し、ＣＤＲ−Ｈ３はおよそ９５〜１０２残基に位置する。特定のＣＤＲを包含する正確な残基の番号は、ＣＤＲの配列及びサイズに依存して変化するだろう。当業者は、抗体の可変領域のアミノ酸配列が与えられれば、どの残基が特定のＣＤＲを含むか慣用的に決定することができる。それ故、重鎖及び軽鎖のＣＤＲ１、ＣＤＲ２、ＣＤＲ３は、所与の抗体に特異的な独特かつ機能的な特性を規定する。
【０１３４】
重鎖及び軽鎖の各々の中にある３つのＣＤＲは、フレームワーク領域（ＦＲ）によって隔てられ、このフレームワーク領域はより可変性が低い傾向がある配列を含有している。重鎖及び軽鎖の可変ドメインのアミノ末端からカルボキシ末端にかけて、ＦＲ及びＣＤＲは、ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、及びＦＲ４の順に整列している。ＦＲの主にβ−シートの立体配置により、各々の鎖内のＣＤＲが互いに及び他の鎖のＣＤＲと近接する。結果として生じたコンフォメーションは抗原結合部位に寄与するが（Kabat et al., 1991, NIH Publ. No. 91-3242, Vol. I, pages 647-669を参照）、全てのＣＤＲ残基が必ずしも抗原との結合に直接関与しているわけではない。
【０１３５】
ＦＲ残基及びＩｇ定常ドメインは、抗原との結合に直接関与していないが、抗原との結合に寄与する、及び／又は、抗体エフェクター機能を媒介する。いくつかのＦＲ残基は少なくとも３つの方法、即ち：エピトープに非共有結合的に直接結合することによって、１つ以上のＣＤＲ残基と相互作用することによって、及び重鎖と軽鎖との間の界面に影響を及ぼすことによって、抗原との結合に対して有意な効果を及ぼすと考えられている。定常ドメインは、抗原との結合に直接関与していないが、様々なＩｇエフェクター機能を媒介し、例えば抗体依存性細胞傷害作用（ＡＤＣＣ）、補体依存性細胞傷害作用（ＣＤＣ）及び抗体依存性細胞貪食（ＡＤＣＰ）における抗体の関与を媒介する。
【０１３６】
脊椎動物の免疫グロブリンの軽鎖は、定常ドメインのアミノ酸配列に基づいて、カッパ（κ）及びラムダ（λ）という２つの明確に異なるクラスの中の１つに割り当てられる。これに対して、哺乳動物の免疫グロブリンの重鎖は、定常ドメインの配列に従って、５つの主要なクラス：ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、及びＩｇＭの中の１つに割り当てられる。ＩｇＧ及びＩｇＡはさらにサブクラス（アイソタイプ）、例えばＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１、及びＩｇＡ２に分類される。様々なクラスの免疫グロブリンに対応する重鎖定常ドメインは、それぞれα、δ、ε、γ、及びμと呼ばれる。天然免疫グロブリンのクラスのサブユニット構造及び３次元立体配置は周知である。
【０１３７】
「抗体」、「抗ＩＬ−２３Ａ抗体」、「抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体」、「ヒト化抗ＩＬ−２３Ａ抗体」、「ヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体」、「ヒト化抗ＩＬ−２３Ａエピトープ抗体」、「ヒト化抗ＩＬ−２３１９エピトープ抗体」、「変異ヒト化抗ＩＬ−２３Ａエピトープ抗体」及び「変異ヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９エピトープ抗体」という用語は具体的に、所望の生物学的活性、例えばＩＬ−２３Ａとの結合を示すモノクローナル抗体（完全長のモノクローナル抗体を含む）、ポリクローナル抗体、及び抗体フラグメント、例えば可変ドメイン、及び抗体の他の部分を包含する。「モノクローナル抗体」（ｍＡｂ）という用語は、非常に特異的であり、単一の抗原性決定基、すなわち「エピトープ」に対して指向される、抗体を指す。それ故、「モノクローナル」という修飾語は、同一のエピトープに対して指向される抗体を示し、任意の特定の方法による抗体の産生が必要とされると捉えられるものではない。モノクローナル抗体は、例えばハイブリドーマ法（Kohler et al., 1975, Nature 256:495）又は当技術分野において公知である組換えＤＮＡ法（例えば米国特許第４，８１６，５６７号を参照）、又はClackson et al., 1991, Nature 352: 624-628、及びMarks et al., 1991, J. Mol. Biol. 222: 581-597に記載の技術を使用してファージ抗体ライブラリーを使用して組換え産生されたモノクローナル抗体の単離法をはじめとする、当技術分野において公知である任意の技術又は方法によって作製され得ることが理解されるべきである。
【０１３８】
「単量体」という用語は、均一な形態の抗体を指す。例えば、完全長の抗体では、単量体は、２本の同一な重鎖と２本の同一な軽鎖とを有する単量体の抗体を意味する。
【０１３９】
キメラ抗体は、ある種（例えば非ヒト哺乳動物、例えばマウス）に由来する抗体の重鎖及び軽鎖の可変領域と、別の種（例えばヒト）に由来する抗体の重鎖及び軽鎖の定常領域とからなり、そしてこれは、第一の種（例えばマウス）に由来する抗体の可変領域をコードしているＤＮＡ配列を、第二の種（例えばヒト）に由来する抗体の定常領域のＤＮＡ配列に連結させ、連結させた配列を含有している発現ベクターを用いて宿主を形質転換して、それがキメラ抗体を産生することを可能とすることによって得ることができる。あるいは、キメラ抗体はまた、重鎖及び／又は軽鎖の１つ以上の領域若しくはドメインが、別の免疫グロブリンクラス若しくはアイソタイプ由来の、又は共通配列若しくは生殖系列配列由来のモノクローナル抗体内の対応する配列と同一であるか、相同であるか、又はその変異体であるものであり得る。キメラ抗体は、このような抗体のフラグメントを含んでいてもよい。ただし、該抗体フラグメントは、その親抗体の所望の生物学的活性、例えば同じエピトープへの結合を示す（例えば、米国特許第４，８１６，５６７号；及びMorrison et al., 1984, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 81: 6851-6855を参照）。
【０１４０】
「抗体フラグメント」、「抗ＩＬ−２３Ａ抗体フラグメント」、「抗ＩＬ−２３Ａエピトープ抗体フラグメント」、「ヒト化抗ＩＬ−２３Ａ抗体フラグメント」、「ヒト化抗ＩＬ−２３Ａエピトープ抗体フラグメント」、「変異ヒト化抗ＩＬ−２３Ａエピトープ抗体フラグメント」という用語は、完全長の抗ＩＬ−２３Ａ抗体の一部を指し、可変領域又は機能的能力、例えば特異的なＩＬ−２３Ａのエピトープへの結合は保持されている。抗体フラグメントの例としては、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｄ、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、及びｓｃＦｖ−Ｆｃフラグメントが挙げられる。
【０１４１】
完全長の抗体を、パパイン又はペプシンなどの酵素で処理することにより、有用な抗体フラグメントを作製することができる。パパインによる消化を使用することにより、「Ｆａｂ」フラグメントと呼ばれる２つの同一な抗原結合性の抗体フラグメント（各々は１つの抗原結合部位を有する）と残りの「Ｆｃ」フラグメントを生成する。Ｆａｂフラグメントはまた、軽鎖の定常ドメイン及び重鎖のＣＨ１ドメインも含有している。ペプシンによる処理により、２つの抗原結合部位を有するＦ（ａｂ’）２フラグメントが生じ、これは依然として抗原と架橋することができる。
【０１４２】
Ｆａｂ’フラグメントは、ＣＨ１ドメインのＣ末端における抗体ヒンジ領域由来の１つ以上のシステインを含む、追加の残基の存在によってＦａｂフラグメントとは異なる。Ｆ（ａｂ’）２抗体フラグメントは、ヒンジ領域内のシステイン残基によって連結されたＦａｂ’フラグメントの対である。抗体フラグメントの他の化学的結合も公知である。
【０１４３】
「Ｆｖ」フラグメントは、緊密に非共有結合的に会合した１つの重鎖可変ドメインと１つの軽鎖可変ドメインとの二量体からなる、完全な抗原認識結合部位を含有している。この立体配置では、各々の可変ドメインの３つのＣＤＲは相互作用して、ＶＨ−ＶＬ二量体の表面上の抗原結合部位を規定する。要するに、６つのＣＤＲが、抗体に対して抗原結合特異性を付与する。
【０１４４】
「一本鎖Ｆｖ」すなわち「ｓｃＦｖ」抗体フラグメントは、抗体のＶＨドメインとＶＬドメインとを含む一本鎖Ｆｖ変異体であり、ここでのドメインは、１本のポリペプチド鎖内に存在している。一本鎖Ｆｖは、抗原を認識し結合することができる。ｓｃＦｖポリペプチドはまた場合により、ＶＨドメインとＶＬドメインの間に位置するポリペプチドリンカーを含有していてもよく、これによりｓｃＦｖと抗原との結合のために望ましい３次元構造の形成が促進される（例えば、Pluckthun, 1994, In The Pharmacology of monoclonal Antibodies, Vol. 113, Rosenburg and Moore eds., Springer-Verlag, New York, pp. 269-315を参照）。
【０１４５】
「ヒト化抗体」又は「ヒト化抗体フラグメント」は、予め決定された抗原に結合することができ、そしてヒト免疫グロブリンのアミノ酸配列を実質的に有する１つ以上のＦＲと、非ヒト免疫グロブリンのアミノ酸配列を実質的に有する１つ以上のＣＤＲとを含む、免疫グロブリンアミノ酸配列変異体又はそのフラグメントを含む、特殊な種類のキメラ抗体である。「インポート」配列としばしば称されるこの非ヒトアミノ酸配列は、典型的には、「インポート」抗体ドメイン、特に可変ドメインから採用される。一般的には、ヒト化抗体は、ヒト重鎖可変ドメイン又は軽鎖可変ドメインのＦＲ間に挿入された、非ヒト抗体の少なくともＣＤＲ又はＨＶＬを含む。本発明は、マウスモノクローナル抗体に由来するＣＤＲ、又は、ヒト生殖系列配列の重鎖可変ドメイン及び軽鎖可変ドメインのＦＲ間に挿入された表１及び２に示されるヒト化ＣＤＲを含有している、特定のヒト化抗ＩＬ−２３Ａ抗体を記載する。特定のマウスＦＲ残基が、ヒト化抗体の機能にとって重要である場合があり、それ故、特定のヒト生殖系列配列の重鎖及び軽鎖の可変ドメイン残基が、対応するマウス配列の残基と同じになるように改変されることが理解されるだろう。
【０１４６】
別の態様では、ヒト化抗ＩＬ−２３Ａ抗体は、少なくとも１つ、典型的には２つの可変ドメイン（例えば、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆａｂｃ、及びＦｖフラグメントに含有されているような）の実質的に全部を含み、ここではＣＤＲの全部又は実質的に全部が、非ヒト免疫グロブリンのＣＤＲに相当し、具体的に本明細書において、ＣＤＲの全部が、本明細書の以下の表１及び２に詳述されているようなマウス配列又はヒト化配列であり、ＦＲの全部又は実質的に全部が、ヒト免疫グロブリン共通配列又は生殖系列配列のＦＲである。別の態様では、ヒト化抗ＩＬ−２３Ａ抗体はまた、免疫グロブリンＦｃ領域の少なくとも一部、典型的にはヒト免疫グロブリンのそれを含む。通常、抗体は、両方の軽鎖、並びに重鎖の少なくとも可変ドメインを含有するだろう。抗体はまた、適宜、重鎖のＣＨ１領域、ヒンジ領域、ＣＨ２領域、ＣＨ３領域、及び／又はＣＨ４領域の１つ以上を含み得る。
【０１４７】
ヒト化抗ＩＬ−２３Ａ抗体は、ＩｇＭ、ＩｇＧ、ＩｇＤ、ＩｇＡ、及びＩｇＥを含むあらゆるクラスの免疫グロブリン、並びに、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１、及びＩｇＡ２を含むあらゆるアイソタイプから選択され得る。例えば、定常ドメインは、補体に結合する定常ドメインであってもよく、この場合ヒト化抗体は、細胞傷害活性を示すことが望まれ、アイソタイプは典型的にはＩｇＧ１である。このような細胞傷害活性が望ましくない場合には、定常ドメインは別のアイソタイプ、例えばＩｇＧ２であってもよい。代替的なヒト化抗ＩＬ−２３Ａ抗体は、１つを超える免疫グロブリンのクラス又はアイソタイプに由来する配列を含み得、所望のエフェクター機能を最適化するために特定の定常ドメインを選択することは、当技術分野の技能範囲内である。具体的な実施態様では、本発明は、ＩｇＧ１抗体、より特定するとエフェクター機能がノックアウトされているＩｇＧ１抗体である抗体を提供する。
【０１４８】
ヒト化抗ＩＬ−２３Ａ抗体のＦＲ及びＣＤＲ又はＨＶＬは、親配列に対して正確に対応している必要はない。例えば、インポートＣＤＲ若しくはＨＶＬ、又は共通配列若しくは生殖系列配列のＦＲ配列における１つ以上の残基を、置換、挿入、又は欠失によって改変（例えば突然変異誘発）させてもよく、これにより生じたアミノ酸残基は、いずれかの親配列の対応する位置の元来の残基とはもはや同一ではないが、該抗体はそれにも関わらずＩＬ−２３Ａに結合する機能を保持している。このような改変は典型的には大規模ではなく、保存的改変であろう。通常、ヒト化抗体残基の少なくとも７５％、より頻繁には少なくとも９０％、最も頻繁には９５％超、又は９８％超、又は９９％超が、親共通配列又は生殖系列配列のＦＲ配列及びインポートＣＤＲ配列の残基に相当するだろう。
【０１４９】
重鎖可変領域と軽鎖可変領域との間の界面（「ＶＬ−ＶＨ界面」）に影響を及ぼす免疫グロブリン残基は、２つの鎖の互いの近接性又は配向に影響を及ぼす残基である。鎖間相互作用に関与する可能性のある特定の残基としては、ＶＬ残基３４、３６、３８、４４、４６、８７、８９、９１、９６及び９８、並びにＶＨ残基３５、３７、３９、４５、４７、９１、９３、９５、１００、及び１０３が挙げられる（Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest (National Institutes of Health, Bethesda, Md., 1987)に示される番号付けシステムを利用）。米国特許第６，４０７，２１３号はまた、ＶＬ残基４３及び８５、並びにＶＨ残基４３及び６０などの残基も、この相互作用に関与している可能性があると考察している。これらの残基は、ヒトＩｇＧについてのみ示されているが、それらは種間で適用可能である。鎖間相互作用に関与することが合理的に考えて予想される重要な抗体残基が、共通配列の置換のために選択される。
【０１５０】
「共通配列」及び「共通抗体」という用語は、任意の特定のクラス、アイソタイプ、又はサブユニット構造の全ての免疫グロブリン、例えばヒト免疫グロブリン可変ドメインにおける各々の位置において最も高い頻度で存在するアミノ酸残基を含む、アミノ酸配列を指す。共通配列は、特定の種の又は多くの種の免疫グロブリンに基づき得る。「共通」配列、構造、又は抗体は、特定の実施態様に記載されているような共通ヒト配列を包含すると理解され、任意の特定のクラス、アイソタイプ、又はサブユニット構造の全てのヒト免疫グロブリンにおける各々の位置において最も高い頻度で存在するアミノ酸残基を含む、アミノ酸配列を指す。したがって、共通配列は、１つ以上の公知の免疫グロブリンに存在するアミノ酸を各々の位置において有するアミノ酸配列を含有するが、任意の単一の免疫グロブリンの完全アミノ酸配列を正確に複製していなくてもよい。可変領域の共通配列は、どの天然に生成された抗体又は免疫グロブリン（Kabat et al., 1991, Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, Md.）及びその変異体からも得られない。重鎖及び軽鎖の共通配列のＦＲ、及びその変異体は、ヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体の調製のための有用な配列を提供する。例えば、米国特許第６，０３７，４５４号及び第６，０５４，２９７号を参照されたい。
【０１５１】
ヒト生殖系列配列は、ヒト個体群に天然に見られる。そうした生殖系列遺伝子の組合せは、抗体の多様性を生じる。抗体の軽鎖についての生殖系列抗体配列は、保存されたヒト生殖系列κ又はλｖ−遺伝子及びｊ−遺伝子に由来する。同様に、重鎖配列は、生殖系列ｖ−、ｄ−及びｊ−遺伝子に由来する（LeFranc, M-P, and LeFranc, G, “The Immunoglobulin Facts Book” Academic Press, 2001）。
【０１５２】
本明細書において使用する「変異体」、「抗ＩＬ−２３Ａ変異体」、「ヒト化抗ＩＬ−２３Ａ変異体」、又は「変異ヒト化抗ＩＬ−２３Ａ」は各々、表１に示されているような配列のいずれかに由来する少なくとも１つの軽鎖可変マウスＣＤＲ、又は、表２に示されているようなマウスモノクローナル抗体に由来する１つの重鎖マウスＣＤＲ配列を有する、ヒト化抗ＩＬ−２３Ａ抗体を指す。変異体としては、一方又は両方の軽鎖又は重鎖の可変ドメインに１つ以上のアミノ酸変化を有する変異体が挙げられ、ただし、アミノ酸変化は、ＩＬ−２３Ａへの抗体の結合を実質的に損なわない。本明細書において生成された例示的な抗体としては、抗体Ａ、抗体Ｂ、抗体Ｃ、及び抗体Ｄとして称されるものが挙げられ、その様々な軽鎖及び重鎖が配列番号１８及び２１、並びに配列番号１９及び２０にそれぞれ示されている。
【０１５３】
「単離された」抗体は、その天然環境の成分から同定及び分離及び／又は回収されたものである。抗体の天然環境の混入成分は、抗体の診断用途又は治療用途に干渉する可能性のある材料であり、これは酵素、ホルモン、又は他のタンパク質性若しくは非タンパク質性溶質であり得る。１つの態様では、該抗体は、抗体の重量に対して少なくとも９５％超まで単離されて精製されるだろう。
【０１５４】
単離された抗体としては、それが産生された組換え細胞内のインサイツでの抗体が挙げられる。なぜなら、抗体の天然環境の少なくとも１つの成分さえ存在しないであろうからである。しかしながら、通常、単離された抗体は、組換え細胞性材料が除去されるような少なくとも１回の精製工程によって調製されるだろう。
【０１５５】
「抗体の性能」という用語は、抗体による抗原の認識又は抗体のインビボでの効力に寄与する因子を指す。抗体のアミノ酸配列の変化は、折り畳みなどの抗体の特性に影響を及ぼし得、抗原に抗体が結合する初期速度（ｋａ）、抗原からの抗体の解離定数（ｋｄ）、抗原に対する抗体の親和性定数（Ｋｄ）、抗体のコンフォメーション、タンパク質の安定性、及び抗体の半減期などの、物理的因子に影響を及ぼし得る。
【０１５６】
本明細書において使用する「エピトープでタグ化された」という用語は、「エピトープタグ」に融合させた抗ＩＬ−２３Ａ抗体を指す。「エピトープタグ」は、抗体産生のためのエピトープを提供するに十分な数のアミノ酸を有するポリペプチドであるが、それが、抗ＩＬ−２３Ａ抗体の所望の活性に干渉しないように設計されている。エピトープタグは通常、十分に独特であるので、エピトープタグに対して生じた抗体は、実質的に他のエピトープと交差反応しない。適切なタグポリペプチドは一般的に、少なくとも６個のアミノ酸残基を含有し、通常、約８〜５０個のアミノ酸残基、又は約９〜３０個の残基を含有している。エピトープタグ及び該エピトープに結合する抗体の例としては、ｆｌｕ ＨＡタグポリペプチド及びその抗体である１２ＣＡ５（Field et al., 1988 Mol. Cell. Biol. 8: 2159-2165）；ｃ−ｍｙｃタグ及びその８Ｆ９、３Ｃ７、６Ｅ１０、Ｇ４、Ｂ７及び９Ｅ１０抗体（Evan et al., 1985, Mol. Cell. Biol. 5(12):3610-3616）；及び単純ヘルペスウイルス糖タンパク質Ｄ（ｇＤ）タグ及びその抗体（Paborsky et al. 1990, Protein Engineering 3(6): 547-553）が挙げられる。特定の実施態様では、エピトープタグは、「サルベージ受容体に結合するエピトープ」である。本明細書において使用する「サルベージ受容体に結合するエピトープ」という用語は、ＩｇＧ分子のインビボでの血清中半減期を延長させることに関与する、ＩｇＧ分子（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、又はＩｇＧ４）のＦｃ領域のエピトープを指す。
【０１５７】
診断上並びに治療上のモニタリングのために、本発明の抗体をまた、標識に、すなわち標識のみに又は標識と追加の第二の薬剤（プロドラッグ、化学療法剤など）のいずれかにコンジュゲートさせてもよい。他の第二の薬剤から識別されるような標識は、検出可能な化合物又は組成物である物質を指し、それを、本発明のヒト化抗体に直接又は間接的にコンジュゲートさせ得る。標識はそれ自体検出可能であっても（例えば放射性同位体標識又は蛍光標識）、又は、酵素標識の場合、検出可能な基質化合物又は組成物の化学的変化を触媒してもよい。標識された抗ＩＬ−２３Ａ抗体を調製し、インビトロ及びインビボでの診断を含む様々な適用に使用することができる。
【０１５８】
本発明の様々な態様において、抗体の１つ以上のドメインは組換え発現されるだろう。このような組換え発現は、１つ以上の制御配列、すなわち、特定の宿主生物における作動可能に連結されたコード配列の発現に必要とされるポリヌクレオチド配列を使用し得る。原核細胞において使用するのに適した制御配列としては、例えば、プロモーター、オペレーター、及びリボソーム結合部位の配列が挙げられる。真核細胞の制御配列としては、プロモーター、ポリアデニル化シグナル、及びエンハンサーが挙げられるがこれらに限定されない。これらの制御配列は、原核宿主細胞及び真核宿主細胞における抗ＩＬ−２３Ａ抗体の発現及び産生のために使用され得る。
【０１５９】
核酸配列は、それが別の核酸配列と機能的関係に配置されている場合に「作動可能に連結」されている。例えば、核酸プレ配列又は分泌リーダーは、それがポリペプチドの分泌に関与するプレタンパク質として発現されるならば、ポリペプチドをコードしている核酸に作動可能に連結されており；プロモーター又はエンハンサーは、それが配列の転写に影響を及ぼすならば、コード配列に作動可能に連結されており；又は、リボソーム結合部位は、それが翻訳を促進するように位置しているならば、コード配列に作動可能に連結されている。一般的に、「作動可能に連結される」は、連結されているＤＮＡ配列が連続的であり、分泌リーダーの場合には、連続的かつリーディングフレーム内にあることを意味する。しかしながら、エンハンサーは、場合により近接している。連結は、好都合な制限酵素部位におけるライゲーションによって達成され得る。このような部位が存在しない場合には、合成オリゴヌクレオチドアダプター又はリンカーを使用していてもよい。
【０１６０】
本明細書において使用する「細胞」、「細胞株」及び「細胞培養液」という表現は同義語として使用され、全てのこのような名称はその子孫を含む。したがって、「形質転換体」及び「形質転換細胞」は、初代の対象細胞、及び継代数に関係なくそれから得られた培養液を含む。
【０１６１】
処置の目的のための「哺乳動物」という用語は、ヒト、飼い慣らされた動物及び家畜、並びに動物園用、スポーツ用、又はペット用の動物、例えばイヌ、ウマ、ネコ、ウシなどをはじめとする哺乳動物として分類される任意の動物を指す。好ましくは、哺乳動物はヒトである。
【０１６２】
本明細書において使用する「障害」は、本明細書に記載された抗ＩＬ−２３Ａ抗体を用いての処置から恩恵を受けるであろう任意の容態である。これは、慢性及び急性の障害又は疾患、例えば、問題となっている障害に哺乳動物を罹りやすくさせる病状を含む。
【０１６３】
本明細書において使用する「ＩＬ−２３に関連した障害」又は「ＩＬ−２３に関連した疾患」という用語は、ＩＬ−２３の活性が疾患の原因となり、典型的にはＩＬ−２３が異常に発現されている、容態を指す。ＩＬ−２３に関連した障害は、免疫系の疾患及び障害、例えば、自己免疫障害及び炎症障害を含む。このような容態としては、乾癬、炎症性腸疾患、例えば潰瘍性大腸炎又はクローン病、及び脊椎関節炎、例えば強直性脊椎炎、Ｘ線所見が認められない軸性脊椎関節炎、末梢性脊椎関節炎、又は乾癬性関節炎が挙げられる。
【０１６４】
「静脈内注入」という用語は、約１５分間を超える時間をかけての、一般的には約３０〜９０分間かけての、動物又はヒト患者の静脈への薬剤の導入を指す。
【０１６５】
「静脈内ボーラス」又は「静脈内プッシュ」という用語は、生体が約１５分間以内、一般的には５分間以内に薬物を受けるような、動物又はヒトの静脈への薬物の投与を指す。
【０１６６】
「皮下投与」という用語は、動物又はヒト患者の皮膚下への、好ましくは皮膚と根底にある組織との間のポケット内への、薬物貯蔵所からの比較的緩徐で持続的な送達による、薬剤の導入を指す。皮膚をつまむか、又は皮膚を引き上げて根底にある組織から引き離すことにより、ポケットが作られ得る。
【０１６７】
「皮下注入」という用語は、３０分以内、又は９０分以内を含むがそれに限定されない時間をかけての、動物又はヒト患者の皮膚下への、好ましくは皮膚と根底にある組織との間のポケット内への、薬物貯蔵所からの比較的緩徐で持続的な送達による、薬物の導入を指す。場合により、注入は、動物又はヒト患者の皮膚下に埋め込まれた薬物送達ポンプの皮下埋め込みによって行なわれ得、ここでポンプは、予め決定された時間かけて、例えば３０分間、９０分間、又は処置計画の長さにおよぶ時間をかけて、予め決定された量の薬物を送達する。
【０１６８】
「皮下ボーラス」という用語は、動物又はヒト患者の皮膚下への薬物の投与を指し、ここでボーラス薬物送達は、約１５分以内であり；別の態様では、５分以内であり、さらに別の態様では、６０秒以内である。またさらなる別の態様では、投与は、皮膚と根底にある組織との間のポケット内であり、ここでポケットは、皮膚をつまむか又は皮膚を引き上げて根底の組織から引き離すことによって作られ得る。
【０１６９】
「治療有効量」という用語は、処置される障害の１つ以上の症状を緩和又は寛解する活性物質の量を指すために使用される。別の態様では、治療有効量は、疾患の進行を緩徐化させる上で効果的であることが示された標的の血清中濃度を指す。効力は、処置しようとする容態に依存して、慣用的な方法で測定され得る。
【０１７０】
本明細書において使用する「処置」及び「療法」などという用語は、１つ以上の症状の軽減又は緩和、疾患若しくは障害の後退、緩徐化、又は休止を含むがこれらに限定されない、あらゆる臨床的に望ましいか又は有益な効果をもたらす、疾患又は障害についての治療的措置並びに予防的又は抑制的措置を含むことを意味する。したがって、例えば、処置という用語は、疾患又は障害の症状の発症前又は発症後の薬剤の投与を含み、これにより、疾患又は障害の１つ以上の兆候が予防又は除去される。別の例として、この用語は、疾患の臨床徴候後に薬剤を投与することにより、疾患の症状と戦うことを含む。さらに、発症後及び臨床症状が発生した後の薬剤の投与は（ここでは、処置により疾患の寛解がもたらされるか否かに関係なく、投与が、疾患又は障害の臨床パラメーター、例えば組織損傷度、又は転移の量若しくは程度に影響を及ぼす）、本明細書において使用する「処置」又は「療法」を含む。さらに、単独での又は別の治療剤と組み合わせた本発明の組成物が、抗ＩＬ−２３Ａ抗体組成物を使用しない場合の症状と比較して、処置される障害の少なくとも１つの症状を軽減又は寛解する限り、結果は、障害の全ての症状が軽減されるか否かに関係なく、根底にある障害の効果的な処置であると判断されるべきである。
【０１７１】
「添付文書」という用語は、適応症、使用法、投与法、禁忌、及び／又はこのような治療用製品の使用に関する警告に関する情報を含有している、治療用製品の商業包装に慣例上含まれる説明書を指すために使用される。
【０１７２】
抗体
本発明の状況において使用された選択された抗体のＣＤＲを表１及び２に示す。本発明の状況において使用された選択された抗体の可変領域を表３及び４に示す。
【０１７３】
【表３】
2019536756.tif 000006
【０１７４】
【表４】
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【０１７５】
【表５】
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【０１７６】
【表６】
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【０１７７】
マウス抗体６Ｂ８から得られたヒト化軽鎖可変領域及び重鎖可変領域の選択された組合せにより、抗体Ａ、Ｂ、Ｃ及びＤが得られた：
抗体Ａ：ＩｇΚ−６６を有する６Ｂ８−ＩｇＧ１ＫＯ−２（重鎖可変領域６Ｂ８ＣＶＨ−０２及び軽鎖可変領域６Ｂ８ＣＶＫ−６６）；
抗体Ｂ；ＩｇΚ−６６を有する６Ｂ８−ＩｇＧ１ＫＯ−５（重鎖可変領域６Ｂ８ＣＶＨ−０５及び軽鎖可変領域６Ｂ８ＣＶＫ−６６）；
抗体Ｃ：ＩｇΚ−６５を有する６Ｂ８−ＩｇＧ１ＫＯ−２（重鎖可変領域６Ｂ８ＣＶＨ−０２及び軽鎖可変領域６Ｂ８ＣＶＫ−６５）；
抗体Ｄ：ＩｇΚ−６５を有する６Ｂ８−ＩｇＧ１ＫＯ−５（重鎖可変領域６Ｂ８ＣＶＨ−０５及び軽鎖可変領域６Ｂ８ＣＶＫ−６５）。
【０１７８】
抗体Ａ、Ｂ、Ｃ及びＤは、表５に示される重鎖及び軽鎖の配列を有する。
【０１７９】
【表７】
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2019536756.tif 000012
【０１８０】
上記の表５における抗体Ａ、Ｂ、Ｃ及びＤの軽鎖及び重鎖の可変領域に下線が付されている。
【０１８１】
１つの実施態様では、抗ＩＬ−２３Ａ抗体は、配列番号１８の軽鎖配列及び配列番号１９の重鎖配列を含む。１つの実施態様では、抗ＩＬ−２３Ａ抗体は配列番号１８の軽鎖配列及び配列番号２０の重鎖配列を含む。１つの実施態様では、抗ＩＬ−２３Ａ抗体は配列番号２１の軽鎖配列及び配列番号１９の重鎖配列を含む。１つの実施態様では、抗ＩＬ−２３Ａ抗体は配列番号２１の軽鎖配列及び配列番号２０の重鎖配列を含む。
【０１８２】
１つの実施態様では、抗ＩＬ−２３Ａ抗体は、配列番号１８の軽鎖配列及び配列番号１９の重鎖配列からなる。１つの実施態様では、抗ＩＬ−２３Ａ抗体は、配列番号１８の軽鎖配列及び配列番号２０の重鎖配列からなる。１つの実施態様では、抗ＩＬ−２３Ａ抗体は、配列番号２１の軽鎖配列及び配列番号１９の重鎖配列からなる。１つの実施態様では、抗ＩＬ−２３Ａ抗体は、配列番号２１の軽鎖配列及び配列番号２０の重鎖配列からなる。
【０１８３】
さらなる実施態様では、抗ＩＬ−２３Ａ抗体は、配列番号２２のアミノ酸残基１０８〜１２６及びアミノ酸残基１３７〜１５１からなる、エピトープにおいてヒトＩＬ−２３Ａに結合する。
【０１８４】
さらなる実施態様では、抗ＩＬ−２３Ａ抗体は、本発明の抗体、例えば本明細書に記載の抗体Ａ、抗体Ｂ、抗体Ｃ、又は抗体Ｄと競合的に、ヒトＩＬ−２３Ａに結合する。ＩＬ−２３Ａに対する抗体の競合的結合能は、当技術分野において公知である競合的結合アッセイを使用して測定することができる。
【０１８５】
いくつかの実施態様では、抗ＩＬ−２３Ａ抗体は、配列番号１０、１１、１２又は１３に示されるアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域配列を含む。いくつかの実施態様では、抗ＩＬ−２３Ａ抗体は、配列番号１４、１５、１６又は１７に示されるアミノ酸配列を有する重鎖可変領域配列を含む（上記の表３及び４参照）。これらの抗体のＣＤＲ配列を表１及び２に示す。例えば、抗ＩＬ−２３Ａ抗体は、配列番号１１／１４、１１／１５、１０／１４又は１０／１５の軽鎖可変領域と重鎖可変領域の組合せを有するモノクローナル抗体である。このような可変領域を、ヒト定常領域と組み合わせてもよい。
【０１８６】
ポリヌクレオチド、ベクター、宿主細胞、及び組換え法
他の実施態様は、抗ＩＬ−２３Ａ抗体をコードしている配列を含む単離されたポリヌクレオチド、ベクター、及び該ポリヌクレオチドを含む宿主細胞、並びに、ヒト化抗体の産生のための組換え技術を包含する。単離されたポリヌクレオチドは、例えば、完全長のモノクローナル抗体、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、及びＦｖフラグメントをはじめとする、任意の所望の形態の抗ＩＬ−２３Ａ抗体をコードすることができる。
【０１８７】
抗ＩＬ−２３Ａ抗体をコードしている配列を含むポリヌクレオチド（群）を、当技術分野において公知であるような１つ以上の調節配列又は制御配列に融合させることができ、またこれを当技術分野において公知であるような適切な発現ベクター又は宿主細胞に含有させることができる。重鎖可変ドメイン又は軽鎖可変ドメインをコードしている各ポリヌクレオチド分子を、独立して、ヒト定常ドメインなどの定常ドメインをコードしているポリヌクレオチド配列に融合させることができ、これによりインタクトな抗体の生成が可能となる。あるいは、ポリヌクレオチド又はその一部を互いに融合させることができ、これにより、一本鎖抗体の生成のための鋳型がもたらされる。
【０１８８】
組換え産生のために、抗体をコードしているポリヌクレオチドを、クローニング用（ＤＮＡの増幅）又は発現用の複製可能なベクターに挿入する。組換え抗体を発現させるための多くの適切なベクターが入手可能である。ベクター成分は一般的に、以下の１つ以上を含むがこれらに限定されない：シグナル配列、複製起点、１つ以上のマーカー遺伝子、エンハンサー配列、プロモーター、及び転写終結配列。
【０１８９】
抗ＩＬ−２３Ａ抗体はまた融合ポリペプチドとして生成されてもよく、ここでは該抗体は、シグナル配列などの異種ポリペプチド、又は成熟タンパク質若しくはポリペプチドのアミノ末端に特異的な切断部位を有する他のポリペプチドと融合している。選択された異種シグナル配列は典型的には、宿主細胞によって認識されプロセシング（すなわちシグナルペプチダーゼによって切断）されるものである。抗ＩＬ−２３Ａ抗体シグナル配列を認識しプロセシングしない原核宿主細胞では、シグナル配列を、原核生物のシグナル配列によって置換してもよい。シグナル配列は、例えば、アルカリホスファターゼ、ペニシリナーゼ、リポタンパク質、熱安定性エンテロトキシンＩＩリーダーなどであり得る。酵母での分泌のために、天然シグナル配列を、例えば、酵母インベルターゼα因子（サッカロマイセス（Saccharomyces）及びクルイベロマイセス（Kluyveromyces）α因子リーダーを含む）、酸性ホスファターゼ、Ｃ．アルビカンス（C. albicans）・グルコアミラーゼ、又は国際公開公報第９０／１３６４６号に記載のシグナルから得られたリーダー配列で置換してもよい。哺乳動物細胞では、哺乳動物シグナル配列、並びにウイルス分泌リーダー、例えば単純ヘルペスｇＤシグナルを使用してもよい。このような前駆領域についてのＤＮＡを、抗ＩＬ−２３Ａ抗体をコードしているＤＮＡにリーディングフレーム内でライゲートする。
【０１９０】
発現ベクター及びクローニングベクターは、１つ以上の選択された宿主細胞においてベクターが複製することを可能とする核酸配列を含有している。一般的には、クローニングベクター内におけるこの配列は、ベクターが宿主染色体ＤＮＡとは独立して複製することを可能とするものであり、これは複製起点又は自律複製配列を含む。様々な細菌、酵母、及びウイルスについてのこのような配列は周知である。プラスミドｐＢＲ３２２由来の複製起点は大半のグラム陰性細菌にとって適切であり、２−υ．プラスミド起点は酵母に適切であり、様々なウイルス起点（ＳＶ４０、ポリオーマ、アデノウイルス、ＶＳＶ、及びＢＰＶ）は哺乳動物細胞におけるクローニングベクターにとって有用である。一般的に、複製起点の成分は、哺乳動物発現ベクターには必要とされない（ＳＶ４０起点が典型的には使用され得る。なぜなら、それは初期プロモーターを含有しているからである）。
【０１９１】
発現ベクター及びクローニングベクターは、発現の同定を容易にする選択マーカーをコードする遺伝子を含有していてもよい。典型的な選択マーカー遺伝子は、抗生物質又は他の毒素に対する耐性を付与するタンパク質、例えばアンピシリン、ネオマイシン、メトトレキサート、又はテトラサイクリンをコードするか、又は代替的には補完的な栄養要求性欠乏症であるか、又は他の代替選択肢では、複合培地に存在しない特定の栄養分を供給し、例えば桿菌のためのＤ−アラニンラセミ化酵素をコードしている遺伝子である。
【０１９２】
選択スキームの一例は、宿主細胞の増殖を停止する薬物を利用する。異種遺伝子を用いて成功裡に形質転換された細胞は、薬物耐性を付与するタンパク質を産生し、よって選択計画を生き延びる。このような優性選択の例は、薬物のネオマイシン、ミコフェノール酸、及びハイグロマイシンを使用する。哺乳動物細胞のための一般的な選択マーカーは、抗ＩＬ−２３Ａ抗体をコードしている核酸を取り入れる能力のある細胞の同定を可能とするもの、例えばＤＨＦＲ（ジヒドロ葉酸レダクターゼ）、チミジンキナーゼ、メタロチオネイン−Ｉ及び−ＩＩ（例えば霊長類のメタロチオネイン遺伝子）、アデノシンデアミナーゼ、オルニチンデカルボキシラーゼなどである。ＤＨＦＲ選択遺伝子を用いて形質転換された細胞をまず、ＤＨＦＲの競合的アンタゴニストであるメトトレキサート（Ｍｔｘ）を含有する培養培地中で全ての形質転換体を培養することによって同定する。野生型ＤＨＦＲを使用する場合の適切な宿主細胞は、ＤＨＦＲ活性の欠損したチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞株（例えばＤＧ４４）である。
【０１９３】
あるいは、抗ＩＬ−２３Ａ抗体、野生型ＤＨＦＲタンパク質、及び別の選択マーカー、例えばアミノグリコシド３’−ホスホトランスフェラーゼ（ＡＰＨ）をコードしているＤＮＡ配列を用いて形質転換された又は同時形質転換された宿主細胞（特に、内因性ＤＨＦＲを含有する野生型宿主）を、選択マーカーのための選択物質、例えばアミノグリコシド抗生物質、例えばカナマイシン、ネオマイシン、又はＧ４１８を含有している培地中での細胞増殖によって選択することができる。例えば、米国特許第４，９６５，１９９号を参照されたい。
【０１９４】
組換え産生を、宿主細胞としての酵母細胞において行なう場合、酵母プラスミドＹＲｐ７に存在するＴＲＰ１遺伝子（Stinchcomb et al., 1979, Nature 282: 39）を、選択マーカーとして使用することができる。ＴＲＰ１遺伝子は、トリプトファン中で増殖する能力を欠失している酵母の突然変異株、例えばＡＴＣＣ番号４４０７６又はＰＥＰ４−１のための選択マーカーを提供する（Jones, 1977, Genetics 85:12）。よって、酵母宿主細胞ゲノム内のｔｒｐ１病変の存在は、トリプトファンの非存在下での増殖によって、形質転換を検出するために有効な環境を提供する。同様に、Ｌｅｕ２ｐ欠損酵母株、例えばＡＴＣＣ２０，６２２及び３８，６２６は、ＬＥＵ２遺伝子を有する公知のプラスミドによって補完される。
【０１９５】
さらに、１．６μmの環状プラスミドｐＫＤ１に由来するベクターを、クルイベロマイセス（Kluyveromyces）酵母の形質転換のために使用することができる。あるいは、組換え仔ウシキモシンの大規模産生のための発現系がＫ．ラクティス（K. lactis）において報告された（Van den Berg, 1990, Bio/Technology 8:135）。クリベロマイセスの工業生産株による成熟組換えヒト血清アルブミンの分泌のための安定な多コピー発現ベクターも開示されている（Fleer et al., 1991, Bio/Technology 9:968-975）。
【０１９６】
発現ベクター及びクローニングベクターは通常、宿主生物によって認識されかつ抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体又はそのポリペプチド鎖をコードしている核酸分子に作動可能に連結されている、プロモーターを含有している。原核生物宿主と共に使用するのに適したプロモーターとしては、ｐｈｏＡプロモーター、β−ラクタマーゼ及びラクトースプロモーター系、アルカリホスファターゼ、トリプトファン（ｔｒｐ）プロモーター系、及びハイブリッドプロモーター、例えばｔａｃプロモーターが挙げられる。他の公知の細菌プロモーターも適している。細菌系に使用するためのプロモーターはまた、抗ＩＬ−２３Ａ抗体をコードしているＤＮＡに作動可能に連結されたシャイン・ダルガーノ（Ｓ．Ｄ．）配列も含有しているだろう。
【０１９７】
多くの真核生物プロモーター配列が公知である。実質的に全ての真核生物遺伝子が、転写が開始される部位から約２５〜３０塩基上流に位置するＡＴリッチ領域を有する。多くの遺伝子の転写開始から７０〜８０塩基上流に見られる別の配列はＣＮＣＡＡＴ領域であり、そこではＮはどのようなヌクレオチドでもよい。大半の真核生物遺伝子の３’末端には、コード配列の３’末端へのポリＡテイルの付加のためのシグナルである可能性があるＡＡＴＡＡＡ配列がある。これらの全ての配列は、真核生物発現ベクターに適切に挿入される。
【０１９８】
酵母宿主と共に使用するのに適したプロモーター配列の例としては、３−ホスホグリセリン酸キナーゼ又は他の解糖酵素、例えばエノラーゼ、グリセルアルデヒド−３−リン酸デヒドロゲナーゼ、ヘキソキナーゼ、ピルビン酸デカルボキシラーゼ、ホスホフルクトキナーゼ、グルコース−６−リン酸イソメラーゼ、３−ホスホグリセリン酸ムターゼ、ピルビン酸キナーゼ、トリオースリン酸イソメラーゼ、ホスホグルコースイソメラーゼ、及びグルコキナーゼのプロモーターが挙げられる。
【０１９９】
誘導性プロモーターは、増殖条件によって制御される転写というさらなる利点を有する。これらは、アルコールデヒドロゲナーゼ２、イソシトクロムＣ、酸性ホスファターゼ、窒素代謝に関連した誘導酵素、メタロチオネイン、グリセルアルデヒド−３−リン酸デヒドロゲナーゼ、及びマルトース及びガラクトースの利用に関与する酵素についての酵母プロモーター領域を含む。酵母における発現に使用するのに適したベクター及びプロモーターはさらに、欧州特許第７３，６５７号に記載されている。酵母エンハンサーはまた、有利には酵母プロモーターと共に使用される。
【０２００】
哺乳動物宿主細胞内のベクターからの抗ＩＬ−２３Ａ抗体の転写は、例えば、ポリオーマウイルス、鶏頭ウイルス、アデノウイルス（例えばアデノウイルス２型）、ウシパピローマウイルス、サル肉腫ウイルス、サイトメガロウイルス、レトロウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、及びサルウイルス４０（ＳＶ４０）などのウイルスのゲノムから得られたプロモーターによって、異種哺乳動物プロモーター、例えばアクチンプロモーター又は免疫グロブリンプロモーターから、又は熱ショックプロモーターから制御される。ただし、このようなプロモーターは宿主細胞系と適合性である。
【０２０１】
ＳＶ４０ウイルスの初期及び後期プロモーターは簡便には、ＳＶ４０ウイルス複製起点も含有するＳＶ４０制限酵素フラグメントとして得られる。ヒトサイトメガロウイルスの最初期プロモーターは簡便には、ＨｉｎｄＩＩＩ Ｅ制限酵素フラグメントとして得られる。ベクターとしてウシパピローマウイルスを使用して哺乳動物宿主においてＤＮＡを発現させるための系は、米国特許第４，４１９，４４６号に開示されている。この系の改変が、米国特許第４，６０１，９７８号に記載されている。また、単純ヘルペスウイルス由来のチミジンキナーゼプロモーターの制御下にあるマウス細胞内のヒトｐ−インターフェロンｃＤＮＡの発現を開示している、Reyes et al., 1982, Nature 297:598-601も参照されたい。あるいは、ラウス肉腫ウイルス末端反復配列をプロモーターとして使用してもよい。
【０２０２】
組換え発現ベクターに使用され得る別の有用な配列は、高等な真核生物による抗ＩＬ−２３Ａ抗体をコードしているＤＮＡの転写を増加させるために使用される、エンハンサー配列である。哺乳動物遺伝子（例えばグロビン、エラスターゼ、アルブミン、α−フェトプロテイン、及びインスリン）に由来する多くのエンハンサー配列が現在公知である。しかしながら、典型的には、真核細胞ウイルスに由来するエンハンサーが使用される。例としては、複製起点の後期側上のＳＶ４０エンハンサー（ｂｐ１００〜２７０）、サイトメガロウイルス初期プロモーターエンハンサー、複製起点の後期側上のポリオーマエンハンサー、及びアデノウイルスエンハンサーが挙げられる。また、真核生物プロモーターの活性化のためのエンハンサー配列の記載についてYaniv, 1982, Nature 297:17-18を参照されたい。エンハンサーは、抗ＩＬ−２３Ａ抗体をコードする配列の５’位又は３’位でベクターにスプライシングされ得るが、好ましくはプロモーターに対して５’の部位に位置する。
【０２０３】
真核宿主細胞（酵母、真菌、昆虫、植物、動物、ヒト、又は他の多細胞生物由来の有核細胞）に使用される発現ベクターはまた、転写終結のために必要とされる及びｍＲＮＡの安定化のために必要とされる配列も含有していてもよい。このような配列は、一般的に、真核生物又はウイルスのＤＮＡ又はｃＤＮＡの５’及び場合により３’非翻訳領域から入手できる。これらの領域は、抗ＩＬ−２３Ａ抗体をコードしているｍＲＮＡの非翻訳部分内にポリアデニル化フラグメントとして転写されるヌクレオチドセグメントを含有している。１つの有用な転写終結成分は、ウシ成長ホルモンポリアデニル化領域である。国際公開公報第９４／１１０２６号及びそこに開示されている発現ベクターを参照されたい。いくつかの実施態様では、ヒト化抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体は、ＣＨＥＦ系を使用して発現させ得る（例えば、米国特許第５，８８８，８０９号を参照されたい；その開示は参照により本明細書に組み入れられる）。
【０２０４】
本明細書においてベクター内のＤＮＡをクローニング又は発現させるのに適した宿主細胞は、上記の原核細胞、酵母細胞、又はより高等な真核細胞である。この目的のために適した原核細胞としては、真正細菌、例えばグラム陰性菌又はグラム陽性菌、例えば腸内細菌科、例えば大腸菌類、例えば大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）、エンテロバクター菌、エルウィニア菌、クレブシエラ菌、プロテウス菌、サルモネラ菌、例えばサルモネラ・チフィリウム（Salmonella typhimurium）、セラチア菌、例えばセラチア・マルセセンス（Serratia marcescans）、及び赤痢菌、並びに、桿菌、例えば枯草菌及びバチルス・リケニフォルミス（B. licheniformis）（例えば１９８９年４月１２日に公開されたＤＤ２６６，７１０号に開示されたＢ．リケニフォルミス４１Ｐ）、シュードモナス菌、例えば緑膿菌、及びストレプトマイセス菌が挙げられる。１つの好ましいＥ．ｃｏｌｉクローニング宿主はＥ．ｃｏｌｉ２９４（ＡＴＣＣ ３１，４４６）であるが、Ｅ．ｃｏｌｉ Ｂ、Ｅ．ｃｏｌｉ Ｘ１７７６（ＡＴＣＣ ３１，５３７）及びＥ．ｃｏｌｉ Ｗ３１１０（ＡＴＣＣ ２７，３２５）などの他の株も適している。これらの例は、制限するものではなくむしろ例である。
【０２０５】
原核生物の他に、糸状菌又は酵母などの真核微生物も、抗ＩＬ−２３Ａ抗体をコードしているベクターに適したクローニング用宿主又は発現用宿主である。サッカロマイセス・セレビシエ（Saccharomyces cerevisiae）又は一般的なパン酵母が、より下等な真核宿主微生物の中で最も一般的に使用されている。しかしながら、多くの他の属、種、及び株が一般的に入手可能であり、かつ本明細書において有用であり、例えば分裂酵母（Schizosaccharomyces pombe）；クリベロマイセス（Kluyveromyces）宿主、例えばＫ．ラクティス（K. lactis）、Ｋ．フラジリス（K. fragilis）（ＡＴＣＣ １２，４２４）、Ｋ．ブルガリクス（K. bulgaricus）（ＡＴＣＣ １６，０４５）、Ｋ．ウィッカーラミ（K. wickeramii）（ＡＴＣＣ ２４，１７８）、Ｋ．ワルティイ（K. waltii）（ＡＴＣＣ ５６，５００）、Ｋ．ドロソフィラルム（K. drosophilarum）（ＡＴＣＣ ３６，９０６）、Ｋ．サーモトレランス（K. thermotolerans）、及びＫ．マルキシアヌス（K. marxianus）；ヤロウィア属（yarrowia）（欧州特許第４０２，２２６号）；ピキア・パストリス（Pichia pastors）（欧州特許第１８３，０７０号）；カンジダ；トリコデルマ・レーシア（Trichoderma reesia）（欧州特許第２４４，２３４号）；アカパンカビ（Neurospora crassa）；シュワンニオマイセス（Schwanniomyces）、例えばシュワンニオマイセス・オシデンタリス（Schwanniomyces occidentalis）；及び糸状菌、例えばニューロスポラ（Neurospora）、アオカビ類（Penicillium）、トリポクラディウム（Tolypocladium）、及びアスペルギルス（Aspergillus）宿主、例えばＡ．ニデュランス（A. nidulans）及びクロコウジカビ（A. niger）である。
【０２０６】
グリコシル化抗ＩＬ−２３Ａ抗体の発現に適した宿主細胞は、多細胞生物から得られる。無脊椎動物細胞の例としては、植物細胞及び昆虫細胞、例えば数多くのバキュロウイルス株及び変異株、並びにヨトウガ（Spodoptera frugiperda）（イモムシ）、ネッタイシマカ（Aedes aegypti）（蚊）、ヒトスジシマカ（Aedes albopictus）（蚊）、キイロショウジョウバエ（ショウジョウバエ）、及びボムビークス・モリー（Bombyx mori）（カイコ）などの宿主からの対応する許容される昆虫宿主細胞が挙げられる。例えばアウトグラファ・カリフォルニカ（Autographa californica）ＮＰＶのＬ−１変異体及びボムビークス・モリー（Bombyx mori）ＮＰＶのＢｍ−５株などの、トランスフェクション用の様々なウイルス株が公共的に入手可能であり、このようなウイルスを、特にヨトウガ細胞のトランスフェクションのために使用し得る。
【０２０７】
綿、コーン、ジャガイモ、大豆、ペチュニア、トマト、及びタバコの植物細胞培養液もまた宿主として使用することができる。
【０２０８】
別の態様では、抗ＩＬ−２３Ａ抗体の発現は、脊椎動物細胞内で行なわれる。培養液（組織培養液）中の脊椎動物細胞の増殖は慣用的な手順となっており、技術は広く利用可能である。有用な哺乳動物宿主細胞株の例は、ＳＶ４０によって形質転換されたサル腎臓ＣＶ１株（ＣＯＳ−７、ＡＴＣＣ ＣＲＬ １６５１）、ヒト胚腎臓株（懸濁培養液中での増殖のためにサブクローニングされた２９３又は２９３細胞）、（Graham et al., 1977, J. Gen Virol. 36: 59）、ベビーハムスター腎臓細胞（ＢＨＫ、ＡＴＣＣ ＣＣＬ１０）、チャイニーズハムスター卵巣細胞／−ＤＨＦＲ１（ＣＨＯ、Urlaub et al., 1980, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77: 4216；例えばＤＧ４４）、マウスセルトリ細胞（ＴＭ４、Mather, 1980, Biol. Reprod. 23:243-251）、サル腎臓細胞（ＣＶ１ ＡＴＣＣ ＣＣＬ ７０）、アフリカミドリザル腎臓細胞（ＶＥＲＯ−７６、ＡＴＣＣ ＣＲＬ−１５８７）、ヒト子宮頸癌細胞（ＨＥＬＡ、ＡＴＣＣ ＣＣＬ ２）、イヌ腎臓細胞（ＭＤＣＫ、ＡＴＣＣ ＣＣＬ ３４）、バッファローラット肝臓細胞（ＢＲＬ ３Ａ、ＡＴＣＣ ＣＲＬ １４４２)、ヒト肺細胞（Ｗ１３８、ＡＴＣＣ ＣＣＬ ７５）、ヒト肝臓細胞（ＨｅｐＧ２、ＨＢ８０６５）、マウス乳腺腫瘍（ＭＭＴ ０６０５６２、ＡＴＣＣ ＣＣＬ ５１）、ＴＲ１細胞（Mather et al., 1982, Annals N.Y. Acad. Sci. 383: 44-68）、ＭＲＣ５細胞、ＦＳ４細胞、及びヒト肝細胞腫株（ＨｅｐＧ２）である。
【０２０９】
宿主細胞を、抗ＩＬ−２３Ａ抗体産生のための上記の発現ベクター又はクローニングベクターを用いて形質転換し、そして、プロモーターを誘導するために、形質転換体を選択するために、又は所望の配列をコードしている遺伝子を増幅させるために適宜改変された慣用的な栄養培地中で培養する。
【０２１０】
本明細書に記載の抗ＩＬ−２３Ａ抗体を産生するために使用された宿主細胞は、様々な培地中で培養され得る。市販の培地、例えばＨａｍのＦ１０（Sigma-Aldrich Co.、セントルイス、ミズーリ州）、最小必須培地（（ＭＥＭ）、（Sigma-Aldrich Co.）、ＲＰＭＩ−１６４０（Sigma-Aldrich Co.）、及びダルベッコ改変イーグル培地（（ＤＭＥＭ）、Sigma-Aldrich Co.）が、宿主細胞を培養するのに適している。さらに、Ham et al., 1979, Meth. Enz. 58: 44, Barnes et al., 1980, Anal. Biochem. 102: 255、米国特許第４，７６７，７０４号、米国特許第４，６５７，８６６号、米国特許第４，９２７，７６２号、米国特許第４，５６０，６５５号、米国特許第５，１２２，４６９号、国際公開公報第９０／１０３４３０号、及び国際公開公報第８７／００１９５号の１つ以上に記載された培地のいずれかを、宿主細胞のための培養培地として使用し得る。これらの培地のいずれかに、必要であれば、ホルモン及び／又は他の成長因子（例えばインスリン、トランスフェリン、又は上皮成長因子）、塩（例えば塩化ナトリウム、カルシウム、マグネシウム、及びリン酸塩）、緩衝液（例えばＨＥＰＥＳ）、ヌクレオチド（例えばアデノシン及びチミジン）、抗生物質（例えばゲンタマイシン）、微量元素（マイクロモルの範囲の最終濃度で通常存在する無機化合物として定義される）、及びブドウ糖又は等価なエネルギー源を補充し得る。他の補助物質も、当業者には公知であろう適切な濃度で含まれていてもよい。培養条件、例えば温度、ｐＨなどは、発現のために選択された宿主細胞と共に以前に使用されたものであり、当業者には明らかであろう。
【０２１１】
組換え技術を使用する場合、抗体は、細胞内の細胞膜周辺腔で産生されても、又は培地中に直接分泌されてもよい。抗体が細胞内で産生される場合、第一工程として細胞を破壊してタンパク質を放出させ得る。宿主細胞又は溶解したフラグメントのいずれかの粒子状破片物を、例えば、遠心分離又は限外ろ過によって除去することができる。Carter et al., 1992, Bio/Technology 10:163-167は、Ｅ．ｃｏｌｉの細胞膜周辺腔に分泌された抗体を単離するための手順を記載している。
【０２１２】
簡潔に言えば、細胞ペーストを、酢酸ナトリウム（ｐＨ３．５）、ＥＤＴＡ、及びフェニルメチルスルホニルフルオライド（ＰＭＳＦ）の存在下で約３０分間かけて解凍する。細胞破片物を、遠心分離によって除去することができる。抗体が培地に分泌される場合、このような発現系からの上清を、一般的にまず、市販のタンパク質濃縮フィルター、例えばアミコン又はミリポアペリコン限外ろ過装置を使用して濃縮する。ＰＭＳＦなどのプロテアーゼ阻害剤を、前記の工程のいずれかに含めることにより、タンパク質の分解を抑制することができ、そして抗生物質を含めることにより外来性の混入物の増殖を防ぐことができる。様々な方法を使用して、宿主細胞から抗体を単離することができる。
【０２１３】
細胞から調製された抗体組成物を、例えば、ヒドロキシアパタイトクロマトグラフィー、ゲル電気泳動、透析、及びアフィニティクロマトグラフィーを使用して精製することができ、アフィニティクロマトグラフィーが典型的な精製技術である。アフィニティリガンドとしてのプロテインＡの適切性は、抗体に存在するあらゆる免疫グロブリンＦｃドメインの種及びアイソタイプに依存する。プロテインＡを使用して、ヒトγ１、γ２、又はγ４重鎖に基づいた抗体を精製することができる（例えば、Lindmark et al., 1983 J. Immunol. Meth. 62:1-13参照）。プロテインＧは、全てのマウスアイソタイプ及びヒトγ３に推奨される（例えば、Guss et al., 1986 EMBO J. 5:1567-1575参照）。アフィニティリガンドが付着するマトリックスは、アガロースであることが最も多いが、他のマトリックスも利用可能である。物理的に安定なマトリックス、例えば制御された細孔ガラス又はポリ（スチレンジビニル）ベンゼンは、アガロースを用いて達成され得るより迅速な流速及びより短い処理時間を可能とする。抗体がＣＨ３ドメインを含む場合、Bakerbond ABX（商標）樹脂（J. T. Baker、フィリップスバーグ、ニュージャージー州）が精製のために有用である。タンパク質精製のための他の技術、例えばイオン交換カラム上での分画、エタノールによる沈降、逆相ＨＰＬＣ、シリカクロマトグラフィー、陰イオン又は陽イオン交換樹脂上でのヘパリンセファロース（商標）クロマトグラフィー（例えばポリアスパラギン酸カラム）、クロマトフォーカッシング、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ、及び硫酸アンモニウム沈降法もまた、回収しようとする抗体に依存して利用可能である。
【０２１４】
任意の予備精製工程（群）の後に、関心対象の抗体と混入物とを含む混合物を、典型的には低塩濃度（例えば約０〜０．２５Ｍの塩）で行なわれる、ｐＨ約２．５〜４．５の溶出緩衝液を使用した、低いｐＨでの疎水性相互作用クロマトグラフィーにかけ得る。
【０２１５】
治療用途
別の実施態様では、本明細書において開示された抗ＩＬ−２３Ａ抗体は、本明細書に記載されているようなＩＬ−２３ｐ１９の発現に関連した様々な障害の処置に有用である。１つの態様では、ＩＬ−２３に関連した障害を処置するための方法は、治療有効量のヒト化抗ＩＬ−２３Ａ抗体をそれを必要とする被験者に投与する工程を含む。
【０２１６】
抗ＩＬ−２３Ａ抗体は、非経口、皮下、腹腔内、肺内、及び鼻腔内、並びに局所的な免疫抑制処置を所望の場合には病巣内投与（灌流するか、又はさもなくば移植前に移植片を抗体と接触させることを含む）をはじめとする任意の適切な手段によって投与される。抗ＩＬ−２３Ａ抗体又は薬剤は、例えば、注入として又はボーラスとして投与され得る。非経口注入は、筋肉内、静脈内、動脈内、腹腔内、又は皮下投与を含む。さらに、抗ＩＬ−２３Ａ抗体は適切には、特に漸減している投与量の抗体を用いてのパルス注入によって投与される。１つの態様では、投薬は、一部には投与が短時間であるか又は慢性であるかに依存して、注射によって、最も好ましくは静脈内又は皮下注射によって行なわれる。１つの態様では、抗ＩＬ−２３抗体の投与は、皮下注射によって行なわれる。
【０２１７】
疾患の予防又は治療のために、抗体の適切な投与量は、上記に定義されているような処置しようとする疾患の種類、疾患の重度及び経緯、該抗体が予防目的で投与されるか又は治療目的で投与されるか、以前の療法、患者の臨床履歴、並びに該抗体に対する応答、並びに担当医師の慎重さなどの様々な要因に依存するだろう。該抗体は、一度に又は一連の処置をかけて患者に適切に投与される。
【０２１８】
「抑制」という用語は、「寛解」及び「軽減」と同じ内容で本明細書において使用され、疾患の１つ以上の特徴の減少を意味する。
【０２１９】
前記抗体は、良い医療行為にかなっている様式で製剤化され、秤量され、投与される。この文脈において考えられる因子としては、処置される具体的な障害、処置される具体的な哺乳動物、個々の患者の臨床容態、障害の原因、薬剤の送達部位、投与法、投与計画、及び医療従事者には公知である他の因子が挙げられる。投与しようとする抗体の「治療有効量」はこのような配慮によって左右されるだろう。
【０２２０】
前記抗体は、場合により、問題の障害を予防又は治療するために現在使用されている薬剤の１つ以上と共に製剤化され得る。このような他の薬剤の有効量は、製剤中に存在する抗ＩＬ−２３Ａ抗体の量、障害又は処置の種類、及び上記に考察された他の因子に依存する。
【０２２１】
ＩＬ−２３に関連した障害
抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体又は薬剤は、ＩＬ−２３の異常な発現によって、例えば免疫細胞（例えばリンパ球又は樹状細胞）の不適切な活性化によって特徴付けられる免疫学的障害を治療又は予防するのに有用である。このような異常なＩＬ−２３の発現は、例えば、上昇したＩＬ−２３タンパク質レベルに起因する可能性がある。
【０２２２】
免疫細胞の不適切な活性化によって特徴付けられ、そして本明細書に記載の方法によって治療又は予防することのできる免疫学的疾患は、例えば、該障害の根底にある過敏症反応（群）の種類（群）によって分類され得る。これらの反応は、典型的には、４つの種類に分類される：アナフィラキシー反応、細胞傷害性（細胞溶解性）反応、免疫複合体反応、又は細胞性免疫（ＣＭＩ）反応（遅延型過敏症（ＤＴＨ）反応とも呼ばれる）。（例えば、Fundamental Immunology (William E. Paul ed., Raven Press, N.Y., 3rd ed. 1993)参照）。免疫学的疾患としては、炎症疾患及び自己免疫疾患が挙げられる。
【０２２３】
免疫学的疾患の例としては、以下が挙げられる：乾癬、炎症性腸疾患、例えば潰瘍性大腸炎又はクローン病、及び脊椎関節炎、例えば強直性関節炎、Ｘ線所見が認められない体軸性脊椎関節炎、末梢性脊椎関節炎、又は乾癬性関節炎。
【０２２４】
１つの態様では、本発明の脈絡において、免疫学的疾患はクローン病、例えば中等度から重度の活動性クローン病である。１つの態様では、本発明の脈絡において、患者は、抗ＴＮＦ抗体療法に対して未処置であるか、又は以前に処置されていた。１つの態様では、本発明の方法の脈絡において、患者は、１つ、２つ、３つ、又はそれ以上のＴＮＦアンタゴニスト（群）を用いて以前に処置されていた。１つの実施態様では、患者は、ＴＮＦアンタゴニストに対して不適切な応答を示したか、応答を失ったか、又は不耐容性であった患者である。１つの態様では、本発明に記載の方法によって処置される予定の患者は、２２０〜４５０のＣＤＡＩスコアを有する。
【０２２５】
クローン病の疾患重症度は、例えば、クローン病活動指数（ＣＤＡＩ）を使用して測定される。ＣＤＡＩは、クローン病患者の症状を定量するために使用される複合スコアである。１つの態様では、指数は、予め規定された重み因子について調整した後に共に加重された８つの因子からなる（以下の表Ｂを参照）。ＣＤＡＩスコアの範囲は０〜６００である。１５０以下の指数値は、静止状態の疾患に関連し；１５０を超える数値は活動性疾患に関連し、４５０を超える数値は極めて重度の疾患に見られる。
【０２２６】
【表８】
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【０２２７】
粘膜レベルにおける疾患の程度を、例えば、大腸内視鏡検査後にクローン病内視鏡的重症度指数（ＣＤＥＩＳ）に従って等級付ける。１つの態様では、ＣＤＥＩＳは、６つの内視鏡的変数（深部潰瘍、表層潰瘍、潰瘍の形成されていない狭窄、潰瘍を伴う狭窄の存在、潰瘍化表面の比率、及び疾患に罹った表面の比率）が５つの各セグメント（直腸、Ｓ状結腸及び左結腸、横行結腸、右結腸、及び回腸）において評価される、検証済みの点数化システムである。これらのセグメントについての、潰瘍化大腸表面の比率、及び任意のクローン病の病変に罹った表面の比率が、１０cmの視覚アナログスケールで示される。ＣＤＥＩＳスコアの範囲は０〜４４であり、より高いスコアはより重度の疾患を示す。
【０２２８】
前記疾患の他の評価は、例えば、本明細書において以下の実施例に記載されている。１つの態様では、ＣＤＡＩ若しくはＣＤＥＩＳ、又はその両方、又は本明細書の以下の実施例に記載の評価のいずれか１つを使用して、クローン病、例えば中等度から重度の活動性クローン病の処置における、抗ＩＬ−２３Ａ抗体、例えば抗体Ａ、抗体Ｂ、抗体Ｃ、又は抗体Ｄの有効性を評価する。
【０２２９】
例えば、患者を、例えば１５０未満のＣＤＡＩスコアとして定義される臨床的寛解について評価する。
【０２３０】
例えば、患者を、例えば１５０未満のＣＤＡＩスコア又は基線からの少なくとも１００ポイントのＣＤＡＩの減少のいずれかによって定義される、臨床応答について評価する。
【０２３１】
例えば、患者を、ＣＤＥＩＳ≦４として定義される内視鏡的寛解について評価する。初期の孤立性回腸炎患者では、内視鏡的寛解は、例えば、ＣＤＥＩＳ≦２として定義される。
【０２３２】
例えば、患者を、例えば基線からの５０％を超えるＣＤＥＩＳの減少として定義される内視鏡的応答について評価する。
【０２３３】
例えば、患者を、例えば臨床的寛解（ＣＤＡＩスコア＜１５０）及び／又は内視鏡的寛解（ＣＤＥＩＳ≦４）の達成として定義される、深い寛解について評価する。１つの態様では、初期の孤立性回腸炎患者では、内視鏡的寛解は、ＣＤＥＩＳ≦２によって定義される。例えば、深い寛解は、臨床的寛解及び内視鏡的寛解の達成として定義される。
【０２３４】
１つの態様では、患者の患者報告アウトカム（ＰＲＯ）は、例えば、ＰＲＯ−２スコアを使用して評価される。１つの態様では、例えば７５以下のＰＲＯ−２スコアによって定義されるような、ＰＲＯ−２の寛解が評価される。１つの態様では、基線から５０ポイント以上の減少として定義されるような、ＰＲＯ−２応答が評価される。
【０２３５】
１つの態様では、ＰＲＯ−２は、たった２つのＣＤＡＩ項目である糞便の頻度と腹痛を含む。１つの態様では、ＰＲＯ−２は、治験来院前の７日間における、液状便又は軟便の頻度と腹痛について計測された患者により報告されたＣＤＡＩサブスコアの合計に基づいて計算される。ＰＲＯ−２は、合計した糞便頻度スコアの数値に２を乗じたものに、合計した腹痛スコアに５を乗じたものを足すことによって計算される。
【０２３６】
１つの態様では、健康に関連した生活の質（ＨＲＱｏＬ）は、患者に、腸に関連した症状、全身の愁訴、社会的機能、及びＨＲＱｏＬに関する情動状態の影響を尺度化するツールである、炎症性腸疾患の３２問の質問票（ＩＢＤＱ）を完成させるように患者に頼むことによって評価され、より高いスコアは、より良好なＨＲＱｏＬを示す。１６ポイントの平均変化値により、この手段が臨床的に意味があると判断される。
【０２３７】
１つの態様では、本発明の脈絡において、免疫学的疾患は潰瘍性大腸炎である。１つの態様では、抗ＩＬ−２３Ａ抗体、例えば抗体Ａ、抗体Ｂ、抗体Ｃ、又は抗体Ｄが、中等度から重度の活動性潰瘍性大腸炎患者、例えば従来の治療法又は腫瘍壊死因子α（ＴＮＦα）アンタゴニストに対して不適切な応答を示したことがあるか、それに対する応答を欠失していたか、又は不耐容性であった患者の処置のために使用される。例えば、処置は、臨床的寛解を誘導及び維持することによるか、臨床応答を誘導及び維持することによるか、粘膜の内視鏡的外見を改善させることによるか、又は副腎皮質ステロイドを用いない寛解を達成することによる。
【０２３８】
医薬組成物及びその投与
抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含む組成物を、免疫学的障害を有する又は有するリスクがある被験者に投与することができる。本明細書において使用する「被験者」という用語は、抗ＩＬ−２３Ａ抗体を投与することのできる任意の哺乳動物患者、例えば、ヒト及び非ヒト哺乳動物、例えば霊長類、げっ歯類、並びにイヌを意味する。本明細書に記載の方法を使用した処置に特に意図される被験者としては、ヒトが挙げられる。該抗体を、単独で又は他の組成物と組み合わせてのいずれかで、免疫学的障害の予防又は治療において投与することができる。
【０２３９】
このような医薬組成物に使用するための抗ＩＬ−２３Ａ抗体、例えば、抗体Ａ、抗体Ｂ、抗体Ｃ、又は抗体Ｄなどが本明細書に記載されている。
【０２４０】
様々な送達システムが知られており、これを使用して抗ＩＬ−２３Ａ抗体を投与することができる。導入法としては、皮内、筋肉内、腹腔内、静脈内、皮下、鼻腔内、硬膜外、及び経口経路が挙げられるがこれらに限定されない。抗ＩＬ−２３Ａ抗体は、例えば、注入、ボーラス、又は注射によって投与されてもよく、そして、他の生物学的に活性な薬剤、例えば化学療法剤と一緒に投与されてもよい。投与は全身性であっても局所性であってもよい。１つの実施態様では、投与は、皮下注射による。このような注射用の製剤は、隔週毎に１回投与され得る例えばプレフィルドシリンジに調製され得る。
【０２４１】
具体的な実施態様では、抗ＩＬ−２３Ａ抗体は、注射によって、カテーテルを用いて、坐剤を用いて、又は埋込剤を用いて投与され、該埋込剤は、多孔性材料、非多孔性材料、又はゲル性材料（サイラスティック膜などの膜を含む）、又は繊維である。典型的には、該組成物を投与する場合に、抗ＩＬ−２３Ａ抗体又は薬剤が吸収しない材料が使用される。
【０２４２】
他の実施態様では、抗ＩＬ−２３Ａ抗体は、徐放性システムで送達される。１つの実施態様では、ポンプが使用され得る（例えばLanger, 1990, Science 249:1527-1533; Sefton, 1989, CRC Crit. Ref. Biomed. Eng. 14:201; Buchwald et al., 1980, Surgery 88:507; Saudek et al., 1989, N. Engl. J. Med. 321:574参照）。別の実施態様では、ポリマー材料が使用され得る。（例えば、Medical Applications of Controlled Release (Langer and Wise eds., CRC Press, Boca Raton, Fla., 1974); Controlled Drug Bioavailability, Drug Product Design and Performance (Smolen and Ball eds., Wiley, New York, 1984); Ranger and Peppas, 1983, Macromol. Sci. Rev. Macromol. Chem. 23:61. See also Levy et al., 1985, Science 228:190; During et al., 1989, Ann. Neurol. 25:351; Howard et al., 1989, J. Neurosurg. 71:105参照）。他の徐放性システムも、例えば上記のLangerにおいて考察されている。
【０２４３】
抗ＩＬ−２３ｐ１９抗体を、典型的には、治療有効量の抗体と１つ以上の薬学的に適合性の成分とを含む医薬組成物として投与する。
【０２４４】
典型的な実施態様では、医薬組成物は、ヒトへの静脈内投与又は皮下投与に適合した医薬組成物として、慣用的な手順に従って製剤化される。典型的には、注射による投与用の組成物は、無菌等張水性緩衝液中の溶液である。必要であれば、該医薬はまた、可溶化剤及び局所麻酔剤、例えばリグノカインを含むことにより、注射部位における疼痛を和らげることができる。一般的には、成分は、別々に又は単位投与剤形内に一緒に混合されてのいずれかで、例えば凍結乾燥粉末又は水分非含有の濃縮物として、活性物質の量を示したアンプル又はサッシェなどの密閉容器で供給される。該医薬を注入によって投与しようとする場合、それを、無菌の医薬等級の水又は食塩水を含有している注入瓶を用いて施薬することができる。該医薬を注射によって投与する場合、成分を投与前に混合することができるように、注射用滅菌水又は食塩水のアンプルを提供し得る。
【０２４５】
さらに、医薬組成物は、（ａ）凍結乾燥形の抗ＩＬ−２３Ａ抗体を含有している容器と、（ｂ）注射用の薬学的に許容される希釈剤（例えば滅菌水）を含有している第二の容器とを含む、医薬キットとして提供され得る。薬学的に許容される希釈剤は、凍結乾燥させた抗ＩＬ−２３Ａ抗体の復元又は希釈のために使用され得る。このような容器（群）に場合により付随されるのは、医薬品又は生物学的製剤の製造、使用又は販売を規制する政府当局によって定められた形式の通知であり得、この通知は、ヒトへの投与のための製造、使用又は販売の当局による承認を反映する。
【０２４６】
本発明の状況において使用される医薬組成物の例は、本明細書における以下の実施例２に開示されている。
【０２４７】
本発明は、以下の実施例にさらに記載されており、この実施例は本発明の範囲を制限するものではない。
【０２４８】
実施例
実施例１：臨床試験
この試験は、中等度から重度の活動性クローン病患者における抗体Ａの概念実証、多施設、無作為化、二重盲検、プラセボ対照、平行群間第ＩＩ相の２用量範囲探索試験である。
【０２４９】
試験は、最大４週間のスクリーニング期間、１２週間の盲検静脈内療法期間（期間１）、１４週間の非盲検静脈内療法／ウォッシュアウト期間（期間２）、２６週間の皮下療法期間（期間３）、及び１５週間の経過観察期間からなる。
【０２５０】
約２４０人の患者をスクリーニングし、大腸内視鏡検査で検出された中等度から重度のクローン病及び粘膜潰瘍を有する約１２０人の患者を、１：１：１の比で、期間１における３つの以下の処置群の１つに無作為化する：
・第１群：プラセボ（静脈内）（ｎ＝４０）
・第２群：２００mgの抗体Ａ（静脈内）（ｎ＝４０）
・第３群：６００mgの抗体Ａ（静脈内）（ｎ＝４０）。
【０２５１】
無作為化は、抗ＴＮＦ抗体療法を用いての以前の経験に従って層別化される（未処置対経験あり）。安全性及び有効性の評価を、試験の終了まで実施する。試験の終了は、最後の患者が最後の経過観察のための来院を完了した日として定義される。
【０２５２】
各処置群は、０週目、４週目、及び８週目に、静脈内注入によって、対応する用量の抗体Ａ又はプラセボを受ける。１２週目に、患者は、中央の独立した審査者（ら）によって確認される臨床的寛解（ＣＤＡＩスコア＜１５０）及び内視鏡的寛解（ＣＤＥＩＳ≦４）の達成として定義される、深い寛解について評価される。初期の孤立性回腸炎患者では、内視鏡的寛解はＣＤＥＩＳ≦２によって定義される。
【０２５３】
期間２における処置は、１２週目の結果によって決定される。
【０２５４】
１２週目に深い寛解にある患者は、薬物投与を中止し、２６週目までウォッシュアウト期間に入る。
【０２５５】
１２週目と比較して７０ポイント以上のＣＤＡＩスコアの増加、及び２２０又はそれ以上のＣＤＡＩスコアとして定義される、この期間（来院Ｅ１時を含む）中の疾患再燃の場合、治験担当者は、２週間以内に大腸内視鏡検査を実施する；
・ＣＤＥＩＳスコアが４以下である場合（初期回腸炎患者においては２以下である場合）、患者は、２６週目までウォッシュアウトを継続する。
・ＣＤＥＩＳスコアが４を超える場合（初期回腸炎患者では２を超える場合）、患者は、図１に記載のように、６００mgの抗体Ａを用いての非盲検静脈内誘導療法（３回の用量を４週間の間隔をおいて）を受ける。
【０２５６】
・１２週目に深い寛解を達成しない患者は、図１に記載のように、６００mgの抗体Ａを用いての非盲検静脈内誘導療法（３回の用量を４週間の間隔をおいて）を受ける。
【０２５７】
来院Ｅ１時に臨床的寛解にある患者は、その１２週目の結果及び期間２の処置に関係なく、期間３（非盲検皮下期間）に入り、８週間の間隔をおいて４回の抗体Ａ（１８０mgを皮下で）の注射を受ける。
【０２５８】
大腸内視鏡検査を全ての患者にスクリーニング時、１２週目、及び５２週目に実施することにより、内視鏡的応答／寛解を評価し、処置前及び処置後の分子薬物動態評価のための粘膜生検標本を得る。１２週目に深い寛解を達成した後に再燃を起こした患者も、大腸内視鏡検査を受け、そのＣＤＥＩＳが、中央の独立した審査者（ら）によって確認したところ、４を超える場合（初期回腸炎患者では２を超える場合）にのみ非盲検再導入療法を受ける必要がある。全ての大腸内視鏡検査は、標準的なプロトコールを使用してビデオテープに撮影し、試験群の割り当て及び手順の時期を知らされていない独立した審査者（ら）によって解釈される。試験に参加している患者は、最大４回の大腸内視鏡検査を受けることに同意している。
【０２５９】
有効性の基準は以下の通りである：
【０２６０】
一次有効性評価項目は、１５０未満のＣＤＡＩスコアとして定義される、例えば１２週目における臨床的寛解である。
【０２６１】
二次有効性評価項目は、以下である：
・１５０未満のＣＤＡＩスコア又は基線からの少なくとも１００ポイントのＣＤＡＩの減少のいずれかによって定義される、例えば１２週目における、臨床応答。
・８未満のＰＲＯ−２スコア又は基線からの少なくとも８ポイントの減少のいずれかとして定義される、例えば１２週目における、ＰＲＯ応答（ＰＲＯ−２：患者報告アウトカム−２）。
・例えば１２週目における、４以下のスコア（初期孤立性回腸炎患者では、２以下のスコア）として定義される、ＣＤＥＩＳの寛解。
・例えば１２週目における、７以下のスコア（初期孤立性回腸炎患者では基線からの５０％を超える減少）として定義される、ＣＤＥＩＳ応答。
・例えば１２週目における、ＳＥＳ−ＣＤスコアの変化。
・例えば１２週目における、粘膜潰瘍が存在しないこととして定義される、粘膜治癒。
・例えば１２週目における、臨床的寛解及び内視鏡的寛解（ＣＤＥＩＳ）として定義される、深い寛解。来院によるＣＤＡＩスコアの基線からの変化。
【０２６２】
他の有効性評価項目は、以下である：
・来院によるＣＤＡＩスコアの基線からの変化。
・来院によるＰＲＯ−２スコアの基線からの変化。
・例えば１２週目における、基線からのＣＤＥＩＳスコアの７５％の減少。
・例えば１２週目における、基線からのＳＥＳ−ＣＤスコアの７５％の減少。
・例えば１２週目において深い寛解を達成しかつ薬物投与を中止した患者における再燃までの時間。
・例えば２６週目において臨床的寛解を達成した患者における再燃までの時間。
・患者の日記に基づいた来院による糞便の頻度の基線からの変化。
・患者の日記に基づいた来院による糞便の硬さ。
・患者の日記に基づき、０（疼痛無し）から１０（起こり得る最もひどい疼痛）の数値評価スケールで点数化された、来院による腹痛スコアの基線からの変化。
・来院によるＩＢＤＱスコアの基線からの変化。
・来院によるＣＲＰ（Ｃ反応性タンパク質）、カルプロテクチン、及びラクトフェリンプロファイルの基線からの変化。
・副腎皮質ステロイドの中止後に（１２週目から）持続した臨床的寛解。
・基線において排液性瘻孔を有する患者における、排液性瘻孔の数の減少。
・７５未満のＰＲＯ−２スコアによって定義される、例えば２０４／２０６／２１６週目における、ＰＲＯ−２の寛解。
・５０ポイント又はそれ以上の基線からの減少として定義される、例えば２０４／２０６／２１６週目における、ＰＲＯ−２応答。
・来院によるＣＤＥＩＳの変化。
・来院によるＳＥＳ−ＣＤの変化。
・来院による基線からのＣＤＥＩＳの変化率。
・来院による基線からのＳＥＳ−ＣＤの変化率。
【０２６３】
方法
試験は、３つの処置期間を含んでいた：１２週間の二重盲検の静脈内（ｉｖ）誘導期間、１４週間の非盲検静脈内再誘導／ウォッシュアウト期間（すなわち、１４〜２６週目に再誘導、又は再誘導を受けない患者においては１２〜２６週目にウォッシュアウト）、及び２６週間の皮下維持期間。誘導期間では、ＴＮＦアンタゴニスト又は従来のクローン病療法のいずれかを失敗した、内視鏡検査によって確認された（クローン病内視鏡的重症度指数［ＣＤＥＩＳ］スコアが７以上；孤立性回腸炎患者では４以上）臨床的に活動的な疾患（クローン病活動指数［ＣＤＡＩ］スコアが２２０以上）を有する患者（Ｎ＝１２１）を、０週目、４週目、及び８週目に抗体Ａ（２００mg又は６００mg）又はプラセボを受けるように無作為に割り当てた。一次評価項目は、１２週目における臨床的寛解（ＣＤＡＩ＜１５０）であった。１２週目の二次評価項目は、臨床応答、内視鏡的寛解／応答、及び深い寛解を含んでいた。
【０２６４】
適格な患者は、１８〜７５歳であった。患者らは、少なくとも３カ月間クローン病であると診断され、スクリーニング時には、クローン病活動指数（ＣＤＡＩ）２２０〜４５０として定義される中等度から重度のクローン病と、回腸及び／又は大腸における粘膜潰瘍、並びに中央の盲検解読者によって点数化された大腸内視鏡検査でのクローン病内視鏡的重症度指数（ＣＤＥＩＳ）７以上（孤立性回腸炎患者では４以上）とを有していた。１つ以上の腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）アンタゴニストに対して未処置であるか又は経験した患者が含まれた（表Ｃ）。幾人かの患者は、ＴＮＦアンタゴニストに対して不適切な応答を示したか、応答を欠失していたか、又は不耐容性であった（表Ｃ）。ウステキヌマブを用いて処置された患者は除外され、８週間以内にいずれかの生物学的製剤を受けたか又は無作為化前、すなわち試験剤の初回投与前に５倍の半減期の生物学的製剤を受けた患者も除外した。
【０２６５】
抗体Ａとプラセボとの間の差を、二項データの一対比較のための適切な試験を使用して分析した。誘導期間の結果を報告する。
【０２６６】
【表９】
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【０２６７】
結果
基線の人口統計及び疾患の特徴は、試験群間で類似していた。合計すると男性４７人及び女性７４人であり、平均年齢は３８．１歳であり、ＣＤＡＩ及びＣＤＥＩＳの平均スコアは３０６．８及び１３．４であり；患者の９４．２％は以前に１つ以上のＴＮＦアンタゴニストに曝されたことがあった。１２週目に、臨床的寛解が、プラセボを用いた患者の１５．４％と比較して、それぞれ２００mg及び６００mgの抗体Ａを用いて患者の２４．４％及び３６．６％によって達成された（ｐ＝０．３０８及びｐ＝０．０２５）（表６）；臨床応答率は、プラセボ群の２０．５％と比較して、２００mg及び６００mgの抗体Ａ群で３６．６％及び４１．５％であった（ｐ＝０．１０３及びｐ＝０．０３７）。内視鏡的寛解は、プラセボを用いた患者の２．６％と比較して、２００mg及び６００mgの抗体Ａを用いた患者の１４．６％及び１９．５％によって達成され（ｐ＝０．０５６及びｐ＝０．０１７）；内視鏡的応答は、プラセボを用いた患者の１２．８％と比較して、２００mg及び６００mgの抗体Ａを用いた患者の２６．８％及び３６．６％によって達成された（ｐ＝０．１１７及びｐ＝０．０１４）。深い寛解は、プラセボでの０．０％と比較して、２００mg及び６００mgの抗体Ａを用いた患者の２．４％及び１２．２％によって達成された（ｐ＝１．０及びｐ＝０．０６２）。粘膜治癒は、プラセボ、２００mg及び６００mgの抗体Ａを用いた患者の３．０％、２．９％、及び７．５％に検出された。有害事象（ＡＥ）は抗体Ａとプラセボの間で類似し、用量に関連した有害事象の増加は認められなかった。僅かな重度かつ深刻な有害事象が、６００mgの抗体Ａ群で報告された。結果を表６及び７に示す。表６及び７は、抗体Ａについて合わせた数値を含む。
【０２６８】
１２週間にわたる抗体Ａの臨床的寛解及び臨床応答は、図２にも示されている。図２では、以下（プラセボ、２００mgの抗体Ａ、６００mgの抗体Ａ、及び合わせた抗体Ａ）が、左から右に向かって４週目、８週目、及び１２週目について示されている。
【０２６９】
図２Ａ、経時的な臨床的寛解：
４週目：プラセボ（臨床的寛解を示すのは３人の患者／７．７％）、２００mgの抗体Ａ（臨床的寛解を示すのは４人の患者／９．８％）、６００mgの抗体Ａ（臨床的寛解を示すのは８人の患者／１９．５％）、合わせた抗体Ａ（臨床的寛解を示すのは１２人の患者／１４．６％）。８週目：プラセボ（臨床的寛解を示すのは１人の患者／２．６％）、２００mgの抗体Ａ（臨床的寛解を示すのは７人の患者／１７．１％）、６００mgの抗体Ａ（臨床的寛解を示すのは１０人の患者／２４．４％）、合わせた抗体Ａ（臨床的寛解を示すのは１７人の患者／２０．７％）。１２週目：プラセボ（臨床的寛解を示すのは６人の患者／１５．４％）、２００mgの抗体Ａ（臨床的寛解を示すのは１０人の患者／２４．４％）、６００mgの抗体Ａ（臨床的寛解を示すのは１５人の患者／３６．６％）、合わせた抗体Ａ（臨床的寛解を示すのは２５人の患者／３０．５％）。
【０２７０】
図２Ｂ、経時的な臨床応答：
４週目：プラセボ（臨床応答を示すのは６人の患者／１５．４％）、２００mgの抗体Ａ（臨床応答を示すのは１０人の患者／２４．４％）、６００mgの抗体Ａ（臨床応答を示すのは１３人の患者／３１．７％）、合わせた抗体Ａ（臨床応答を示すのは２３人の患者／２８．０％）。８週目：プラセボ（臨床応答を示すのは５人の患者／１２．８％）、２００mgの抗体Ａ（臨床応答を示すのは１３人の患者／３１．７％）、６００mgの抗体Ａ（臨床応答を示すのは１３人の患者／３１．７％）、合わせた抗体Ａ（臨床応答を示すのは２６人の患者／３１．７％）。１２週目：プラセボ（臨床応答を示すのは８人の患者／２０．５％）、２００mgの抗体Ａ（臨床応答を示すのは１５人の患者／３６．６％）、６００mgの抗体Ａ（臨床応答を示すのは１７人の患者／４１．５％）、合わせた抗体Ａ（臨床応答を示すのは３２人の患者／３９．０％）。
【０２７１】
経時的なＣＤＡＩ中央値を、図３Ａ及び表８Ａに示す。１２週目におけるＰＲＯ−２応答を表８Ｂに示し、１２週目におけるＰＲＯ−２の寛解を表８Ｃに示す。
【０２７２】
安全性
抗体Ａを用いて報告された有害事象のいずれにおいても用量に関連した増加は認められなかった（表１１）。最も頻繁に起こる有害事象は、消化管に関連していた。重度な有害事象の発生率は、抗体Ａ群よりもプラセボ群の方が高かった（それぞれ２３％、１５％、及び７％）。中止に至る有害事象は、プラセボ、２００mg、及び６００mgの抗体Ａ群において患者の１５％、１２％、及び２％に報告された（表１１）。重篤な有害事象が、それぞれプラセボ、２００mg、及び６００mgの抗体Ａ群において患者の３１％、２２％、及び７％に起こった。最も一般的な重篤な有害事象は、基礎疾患の悪化であった。死亡は全く起こらなかったが、プラセボ、２００mg、及び６００mgの抗体Ａ群における３人の患者（腹部、肛門及び直腸の膿瘍、並びに肺炎）、１人の患者（肺炎）、及び２人の患者（骨髄炎及び肛門膿瘍）に報告された。
【０２７３】
輸注反応は軽度又は中等度であり、プラセボ、２００mg、及び６００mgの抗体Ａ群の５％、２％、及び２％に報告された。
【０２７４】
処置により発現した抗薬物抗体（ＡＤＡ）が、抗体Ａを受けている患者の４％（７６人中３人の患者）に検出された。ＡＤＡ力価は低く（８以下）、中和抗体は全く検出されなかった。既存のＡＤＡが抗体Ａの用量群では５人の患者に、プラセボ群では３人の患者に観察された。
【０２７５】
結論
活動性クローン病患者では、抗体Ａを用いてのＩＬ−２３の選択的遮断は、１２週目における臨床的寛解及び内視鏡的寛解を誘導する上でプラセボよりも有効であり、良好な耐容性を示した。
【０２７６】
【表１０】
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【０２７７】
【表１１】
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【０２７８】
臨床的寛解は、１５０未満のＣＤＡＩスコアとして定義される。臨床応答は、１５０未満のＣＤＡＩスコア、又は基線からの１００以上のＣＤＡＩの減少のいずれかである。内視鏡的寛解は、１２週目における４以下のＣＤＥＩＳスコアである（初期の孤立性回腸炎患者では２以下）。内視鏡的応答は、基線から１２週目までにＣＤＥＩＳスコアの５０％を超える減少である。粘膜治癒は、粘膜潰瘍が存在しないこととして定義される。深い寛解は、臨床的寛解及び内視鏡的寛解である。この分析のために、欠損値に対して無応答の解釈及び層別化コクラン・マンテル・ヘンツェル検定を使用して、最大の解析対象集団を使用した。
【０２７９】
ＣＤＡＩ、クローン病活動指数；ＣＤＥＩＳ、クローン病内視鏡的重症度指数；ＳＤ、標準偏差。
【０２８０】
バイオマーカー
ＣＲＰ濃度中央値は、プラセボと比較して、両方の抗体Ａ群において経時的に下降し、１２週目においてプラセボと比較して有意に減少した（Ｐ＜０．００１；図３Ｂ）。６００mgの抗体Ａを用いての処置は、プラセボと比較してＦＣＰレベルを有意に減少させた（基線から１２週目までに）（ｐ＜０．００１；図３Ｃ）。さらに、血漿中ＩＬ−２２レベルの有意により大きな減少（基線から１２週目までに）が、プラセボに対して６００mgの抗体Ａで観察された（Ｐ＝０．０１８；図３Ｄ）。患者の血漿中のＩＬ−２２レベルを、Ｅｒｅｎｎａ（登録商標）ＳＭＣ（商標）ＩＬ−２２イムノアッセイ−準定量蛍光サンドイッチイムノアッセイ技術を使用して測定した。糞便中のＦＣＰは、ビュールマン・ラボラトリーズ社による酵素イムノアッセイを使用して測定され、コヴァンス・セントラル・ラボラトリーズ社によって試験された。
【０２８１】
表８はまた、経時的なＣＲＰの中央値（mg/L）；経時的なＦＣＰ中央値（μg/g）、及び経時的なＩＬ−２２変化率％の中央値を示す（ＢＬ：基線、ＩＱＲ：四分位範囲）。
【０２８２】
【表１２】
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【０２８３】
【表１３】
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【０２８４】
【表１４】
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【０２８５】
分子プロファイル
大腸組織及び回腸組織を基線及び１２週目に患者のサブセットから収集した（６３％の２００mgの抗体Ａ、６６％の６００mgの抗体Ａ、６７％のプラセボ）。ＩＬ−２３の免疫に関連した経路に関連した選択された遺伝子の発現の有意な減少が、プラセボに対して抗体Ａで処置された患者において観察された（表９Ａ）。
【０２８６】
【表１５】
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【０２８７】
大腸組織及び／又は回腸組織における分子プロファイルを、２００mg（ｎ＝２６）、６００mg（ｎ＝２７）の抗体Ａ、又はプラセボ（ｎ＝２６）のいずれかを受けたクローン病を有する抗ＴＮＦ抗体を受けた患者のサブセットにおいて調べた。各患者から、６〜９個の生検材料を、基線及び処置から１２週間後に大腸又は回腸において炎症を有する病変から得た。回腸及び大腸からの生検試料を別々に、トランスクリプトームワイドＲＮＡシークエンスプロファイリングによって分析した。単変量との関連性を、直線回帰を使用して評価した。有意な遺伝子について、効果量、ｐ値、及び偽発見率を計算した。ＣＤＥＩＳ応答（基線からの５０％を超える減少）及びＣＤＥＩＳ寛解（４以下；孤立性回腸炎患者では２以下）を、独立した盲検審査者によって１２週目に評価した。
【０２８８】
初期の分析では、抗体Ａによる処置は、プラセボに対して、基線から１２週目までに、クローン病の患者の大腸組織において１１４６個の遺伝子の発現を有意に減少させた（ｐ＜０．０５）。特に、ＩＬ−２３経路（ＩＬ−２３Ａ、ＩＬ−２６、ＩＬ−２１Ｒ、ＩＬ−１７Ａ、ＳＴＡＴ３）、自然免疫（ＩＬ６、ＩＬ７、ＩＬ７Ｒ，ＩＬ８、ＩＣＡＭ１、ＩＬ１、ＩＬ１１、ＩＬ１３ＲＡ２、ＩＬ１５ＲＡ、ＩＬ１８Ｒ１、ＴＮＦ）、組織ターンオーバー（Ｓ−１００Ａ８、Ａ９、Ａ１２、ＭＭＰ１、ＭＭＰ３、ＭＭＰ９、ＭＭＰ１２、ＡＤＡＭ８、ＡＤＡＭ１２、ＡＤＡＭ３３）、及び溶質キャリアファミリー（ＳＬＣ１１Ａ１、ＳＬＣ１Ａ３、ＳＬＣ２Ａ３、ＳＬＣ２Ａ６、ＳＬＣ６Ａ１４、ＳＬＣ７Ａ１１、ＳＬＣ７Ａ５）に関連した遺伝子の発現の有意な減少が、抗体Ａの処置で観察された。抗体Ａにより処置された集団の遺伝子発現のこれらの全体的な変化は、１２週目にＣＤＥＩＳ応答及び寛解を達成した患者において観察された分子変化を反映していた。公開された患者集団における１４週目の抗ＴＮＦ抗体に対して、１２週目の抗体Ａによって有意に調節された大腸における遺伝子発現変化の比較は、抗体Ａによる処置後の、上皮生物機能（細胞間接着、形態形成、細胞内シグナル伝達、セカンドメッセンジャーシグナル伝達）に関連した経路の抑制のより大きな減少を強調した。対照的に、基線から１２週目までにプラセボに対して、抗体Ａで処置された患者の回腸における分子プロファイルには、有意な変化は全く観察されなかった。
【０２８９】
分析の精密化により、抗体Ａが、大腸において発現された２７４４個の遺伝子、及び回腸における７９２個の遺伝子を調節し、大腸と回腸との間には８４６個の遺伝子が重複していることが示された。精密な分析では、抗体Ａによる処置は、プラセボに対して、クローン病患者の大腸組織において基線から１２週目までに１４１３個の遺伝子の発現を有意に減少させた（ｐ＜０．０５）。内視鏡的応答又は寛解を達成した抗体Ａにより処置された患者は、基線から１２週目までに内視鏡的応答又は寛解を達成しなかった患者と比較して、大腸生検材料において選択遺伝子の発現の減少を示した。基線において最も重度な内視鏡的病変（深部潰瘍）を有する患者では、より高い比率の抗体Ａにより処置された患者が、プラセボと比較して１２週目に内視鏡的応答を達成し、これらの患者は、活動性クローン病に関連した重要な遺伝子の発現の減少を示すトランスクリプトームパターンを示した。基線において大腸の任意のセグメントにおいて深部潰瘍を有していたより高い比率の患者が、回腸において深部潰瘍を有する患者と比較して、２００mg及び６００mgの抗体Ａを合わせた用量群において１２週目に内視鏡的応答を達成した（表９Ｂ）。
【０２９０】
【表１６】
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【０２９１】
回腸に対して大腸における抗体Ａによる特有の遺伝子及び共通の遺伝子の発現の減少（基線から１２週目までに）
最初の分析において、回腸では、１７３個の特有の遺伝子が、抗体Ａによって減少した（ｐ＜０．００５）。大腸では、１４１８個の特有の遺伝子が、抗体Ａによって減少した（ｐ＜０．００５）。６３０個の共通の遺伝子セットが減少した（ｐ＜０．００５）。
【０２９２】
減少した共通の遺伝子の中には、ＩＬ−２３Ａ、ＩＬ−２２、ＩＬ−２６、ＬＣＮ２、ＩＬ２１Ｒ、Ｓ−１００Ａ８、Ｓ−１００Ａ９、Ｓ−１００Ａ１２、ＩＬ−８、ＴＮＦ、ＭＭＰ３、ＭＭＰ１、ＴＩＭＰ１、ＣＸＣＬ１０、ＩＣＡＭ−１、ＩＦＮｇ、ＪＡＫ２、ＳＴＡＴ３があった。
【０２９３】
精密な分析において、回腸では、２９８個の特有の遺伝子が、抗体Ａによって減少した（ｐ＜０．００５）。大腸では、１４１３個の特有の遺伝子が、抗体Ａによって減少した（ｐ＜０．００５）。４６７個の共通の遺伝子セットが減少した（ｐ＜０．００５）。
【０２９４】
以下の経路が、１２週目に回腸に対して大腸において抗体Ａによる処置によって調節された。
大腸と回腸との間の差：
−大腸におけるより強い強化／調節：ヘム代謝、血管新生、頂端結合、脂肪酸代謝、低酸素症
−回腸におけるより強い強化／調節：活性酸素種、頂端表面、ペルオキシソーム。
【０２９５】
大腸と回腸との間の共通点（両方において強い強化／調節）：低酸素症、インターフェロン−α応答、アポトーシス、凝固、ＩＬ−２ＳＴＡＴ５シグナル伝達、上皮間葉転換、補体、ＩＬ−６ＪＡＫ／ＳＴＡＴ３シグナル伝達、インターフェロン−γ応答、ＴＮＦ−αシグナル伝達、炎症応答。
【０２９６】
抗ＴＮＦ抗体ではなく抗体Ａによる処置が、セカンドメッセンジャーにより媒介されるシグナル伝達、細胞防御応答、細胞間接着、及び細胞恒常性に関連した経路における選択遺伝子をより強力に調節した。
【０２９７】
精密な分析により、抗体Ａによる処置が、大腸及び回腸の両方において、炎症応答に関連した遺伝子、Ｌ−１７、ＩＬ−６、ＪＡＫ／ＳＴＡＴ３、ＩＦＮγ、及びＩＬ−１２シグナル伝達をはじめとするいくつかのサイトカインシグナル伝達経路、ＫＲＡＳ活性化によってアップレギュレートされる遺伝子、及びＮＦκＢを介したＴＮＦαシグナル伝達を調節したことが示された。ＩＬ−１２シグナル伝達は別として、これらの全ての遺伝子セット／経路において、より多くの遺伝子が、回腸と比較して大腸において発現変動していた。
【０２９８】
ＩＬ−２３シグナル伝達をコードしている他の遺伝子セット、補体系の成分、移植片拒絶（同種移植片拒絶）の最中にアップレギュレートされる血管新生、及び上皮間葉転換は、選択されたカットオフ値に基づいて大腸において脱調節される遺伝子によってほんの有意にしか強化されなかった。
【０２９９】
抗体Ａは、細胞間接着、血管新生の調節、解剖学的構造、及び大腸における発生に関連した経路と比較して、セカンドメッセンジャーにより媒介されるシグナル伝達、リンパ球の分化、リンパ球の活性化、白血球の活性化、免疫応答、及び免疫エフェクター応答に連鎖した経路に関連した遺伝子の発現をより強力に低減させた。
【０３００】
糞便中カルプロテクチン及び糞便中ラクトフェリンの評価、並びにＣＤＥＩＳとの相関
ビュールマンＥＬＩＳＡ試験（シェーネンブーフ、スイス）を使用して、基線及び１２週目に収集した糞便試料中のカルプロテクチンが、コーヴァンス・ラボラトリーズ社によって評価された。
【０３０１】
ＩＢＤ−ＳＣＡＮ（登録商標）（テックラボ社、ブラックスバーグ、バージニア州）を使用して、基線及び１２週目に収集した糞便試料中のラクトフェリンが、コーヴァンス・ラボラトリーズ社によって評価された。基線からの糞便中カルプロテクチンレベル及び糞便中ラクトフェリンレベルの変化率と、基線からのＣＤＥＩＳスコアの変化との相関についてのスペアマン相関係数を計算した。
【０３０２】
糞便中カルプロテクチンタンパク質（７４．４％対２．５％）及びラクトフェリンタンパク質（６９％対１８．４％）の有意な減少（基線から１２週目までに）が、プラセボと比較して、抗体Ａで処置されたクローン病患者において観察された。抗体Ａで処置された患者において基線から１２週目までの糞便中カルプロテクチンの変化（ｒ＝０．４７９、ｐ＝０．００５９）又はラクトフェリンレベルの変化（ｒ＝０．５７２、ｐ＝０．０００７）と、ＣＤＥＩＳスコアの変化との間に有意な相関があった。抗体Ａで処置された患者の糞便中のタンパク質レベルでのカルプロテクチンの発現と、大腸生検材料におけるＳ−１００Ａ８転写物の発現の減少（ｒ＝０．５２５、ｐ＝０．０２３８）と、随伴するトランスクリプトームプロファイルの変化との間に相関が観察された。さらに、Ｓ−１００ Ａ８及びＡ９（カルプロテクチン）の粘膜における転写が、糞便中バイオマーカー（カルプロテクチン／ラクトフェリン）のタンパク質レベルの減少を有する患者において減少していた。
【０３０３】
大腸及び糞便中のｍｉＲＮＡの評価
大腸型クローン病又は回腸結腸型クローン病を有する４４人の患者のｍｉＲＮＡの全トランスクリプトームワイドシークエンスを、製造業者の説明書に従ってＣｌｅａｎＴａｇ（商標）Ｓｍａｌｌ ＲＮＡ Ｌｉｂｒａｒｙ Ｐｒｅｐキットプロトコール（トリリンク・バイオテクノロジーズ社、サンディエゴ、ＣＡ州、米国）を使用して成し遂げ、イルミナ社ＨｉＳｅｑ２０００（イルミナ社、サンディエゴ、ＣＡ州）でシークエンスした。さらに、大腸生検材料と一致する１４人の患者の糞便中ｍｉＲＮＡを、約７００個を超えるヒトｍｉＲＮＡを含有するＮａｎｏＳｔｒｉｎｇヒトＶ３ＣｏｄｅＳｅｔ（ｍｉＲＢａｓｅ ｖ２１に基づく）を使用して分析した。簡潔に言えば、全ＲＮＡを、捕捉プローブとレポータープローブの対と混合し、ｎＣｏｕｎｔｅｒ Ｐｒｅｐ Ｓｔａｔｉｏｎでハイブリダイズさせ、精製された複合体をｎＣｏｕｎｔｅｒデジタルアナライザーで定量し、ｎＳｏｌｖｅｒソフトウェア（ｖ１．１；ナノストリングテクノロジーズ社、シアトル、ＷＡ州）によって分析した。シークエンスされたリードからアダプターを除去し、ＳＴＡＲアライナーを使用してヒトゲノムバージョンｈｇ１９にマッピングした。リードカウント数は、ｍｉｒＢａｓｅ ｖ１９アノテーションに基づいてｓｕｂｒｅａｄのｆｅａｔｕｒｅＣｏｕｎｔｓを使用して得られた。
【０３０４】
データをＴＭＭ法を使用して正規化し、ｌｉｍｍａパッケージを使用して、変化倍数のＬｏｇ２及び対応する偽発見率（ＦＤＲ）により調整されたｐ値を導いた。簡潔に言えば、データをｖｏｏｍ変換し、患者１人あたりの基線の測定値と１２週目の測定値との間の相関を、二重相関関数によって推定し、線形モデルをＩｍＦｉｔ関数を使用して当てはめ、最終的には調整ｔ統計量をコンピューター計算した。ＮａｎｏＳｔｒｉｎｇデータ分析では、各レーンについてのバックグラウンド閾値を、陰性対照の平均カウント数レベルと２つの標準偏差に設定した。次に、正の正規化係数は、全ての陽性対照の平均値を、それぞれのレーンの陽性対照の平均値で割ったものとして計算された。最後に、ｍｉＲＮＡカウント数レベルを、上位１００個の発現されたｍｉＲＮＡの幾何学的平均に正規化した。全てのレーンについての上位１００個の発現したｍｉＲＮＡの幾何学的平均値を、それぞれのレーンの幾何学的平均値で割った平均値が、１レーンあたりの正規化係数として使用される。
【０３０５】
基線の試料と１２週目の試料とを比較した大腸生検材料のＳｍａｌｌ ＲＮＡシークエンスにより、プラセボと比較して抗体Ａで処置された患者において１８個の有意に発現変動したｍｉＲＮＡが同定された（偽発見率により調整されたｐ＜０．０５）。これらの中で１３個のｍｉＲＮＡがダウンレギュレートされ、５個が抗体Ａによってアップレギュレートされた。１４人の患者に由来する一致する大腸試料及び糞便試料を比較すると、強力な相関が、ｍｉＲ−２２３−３ｐにおいて観察された（図５Ａ及び５Ｂ）。１２週目にダウンレギュレートされたｍｉＲ−２２３−３ｐレベルは、抗体Ａで処置された患者においてのみ観察された。この結果は、内視鏡的応答又は内視鏡的寛解に関連していなかった。ｍｉＲ−２２３−３ｐのレベルの変化は、抗体Ａの用量群の糞便中カルプロテクチンレベルの変化と相関していたが、変化は統計学的に有意ではなかった（図５Ｃ）。
【０３０６】
薬物動態学的分析／薬力学的分析
１２週目における抗体Ａの濃度とＣＤＡＩ又はＣＤＥＩＳカテゴリー応答との関係は、ＣＤＡＩ及びＣＤＥＩＳ応答率の中央値（９５％信頼区間）がそれぞれ２００mgから６００mgの１２週目の濃度中央値について、３６％（２３％、５１％）から４７％（３３％、６２％）、及び３３％（２１％、４９％）から３６％（２３％、５３％）まで増加することを示す（表１０Ａ）。
【０３０７】
血漿中の抗体Ａの濃度を、投与前、並びに２、４、８、１２、２３、及び２６週目にサンプリングし、次いで８週間毎に５０週目まで、及び５２週目と６５週目（最後の来院）にサンプリングした。濃度を、検証された酵素結合イムノソルベントアッセイによって決定した。薬物動態を、ＮＯＮＭＥＭ ｖ７．３を使用して非線形混合効果母集団アプローチを使用して評価した。統計的計算のためのＲソフトウェア（パッケージｇｌｍ）をログ回帰分析のために使用し、従属カテゴリー変数としてのＣＤＥＩＳ及びＣＤＥＩ応答と、独立変数としての１２週目における抗体Ａの濃度との関係を調べた。
【０３０８】
【表１７】
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【０３０９】
【表１８】
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１２週目におけるＣＤＡＩ＜１５０又はＣＤＡＩの基線からの１００以上の減少のいずれかとして定義される臨床応答。１２週目におけるＣＤＡＩ＜１５０として定義される臨床的寛解。基線からの５０％を超えるＣＤＥＩＳ減少として定義される内視鏡的応答。内視鏡的寛解は、１２週目においてＣＤＥＩＳ≦４として定義される（初期の孤立性回腸炎患者では２以下）。濃度の四分位数は、最小値〜２５％（Ｑ１）、２５〜５０％（Ｑ２）、５０〜７５％（Ｑ３）、及び７５％〜最大値（Ｑ４）の四分位範囲に相当する。
【０３１０】
【表１９】
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有害事象は、ＭｅｄＤＲＡ ｖ１８．１を使用して略号化された。有害事象の重症度は、ＲＣＴＣ ｖ２．０に従って等級付けされた。
＊患者を危うくし得、かつ医学的又は外科的介入を必要とし得る、深刻な有害事象は、適切な医学的判断に基づいて、死亡をもたらすか、直ちに生命を脅かすか、持続的若しくはかなりの身体障害／身体不能状態をもたらすか、患者の入院を必要とするか若しくは延長するか、先天的異常／先天性欠損症であるか、又は重要な医学的事象である、あらゆる有害事象として定義された。
†一般的な有害事象が、あらゆる試験群において患者の少なくとも１０％に報告された。ＡＥ、有害事象；ＲＣＴＣ、リウマチ共通毒性基準。
【０３１１】
１２週目における炎症性腸疾患の質問票（ＩＢＤＱ）の評価
ＩＢＤＱ評価により、基線において無作為化された試験集団の低下したＨＲＱｏＬが示された。試験薬による処置により、それぞれ、プラセボ、２００mg、及び６００mgの用量群において、基線から１２週目までに７．３、２１．７、及び３４．７ポイントの用量依存的な増加がもたらされた（表１２）。
【０３１２】
【表２０】
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【０３１３】
再誘導処置
１２週目に、患者は期間２に入り；ここで、深い寛解状態にある患者はウォッシュアウトを受け、他の全ての患者は非盲検静脈内再誘導療法を受けた（１４、１８、及び２２週目に６００mgの抗体Ａ）。
【０３１４】
結果：
基線における人口統計及び疾患の特徴は、試験群間で類似していた。平均年齢は３８．１歳であり、ＣＤＡＩ及びＣＤＥＩＳスコアの中央値は２９８及び１２であり；患者の９４％は、１つ以上のＴＮＦアンタゴニストを以前に受けたことがあった。１２週目において、臨床的寛解が、２００及び６００mgの抗体Ａを用いて患者の２４．４％及び３６．６％によって達成され、これに対してプラセボでは１５．４％によって達成され（ｐ＝０．３１及びｐ＝０．０２５）、深い寛解が、２００及び６００mgの抗体Ａを用いて患者の２．４％及び１２．２％によって達成され、これに対してプラセボでは０％によって達成された（ｐ＝０．３１及びｐ＝０．０１６）。臨床的寛解を伴うことなく期間２に突入した患者では、プラセボ患者の非盲検再導入は、盲検期間１の６００mgの群に類似した臨床的寛解率を誘導し、２００から６００mgへの用量漸増は、高い臨床寛解率を誘導し、６００mgの群の再誘導処置は、２６週目においてこの群における臨床寛解率をさらに増加させた（表１３）。深い寛解を伴うどの患者も、抗体Ａのウォッシュアウト期間中から２６週目まで再発しなかった。有害事象は、抗体Ａとプラセボとの間で類似し、期間１における有害事象の用量に関連した増加は認められなかった。抗体Ａは、期間２において良好な耐容性を示した。
【０３１５】
結論：
６００mgの抗体Ａを用いた再誘導療法は、２６週目におけるより高い臨床寛解率を補えるのに効果的であった。全体的に抗体Ａは良好な耐容性を示した。
【０３１６】
【表２１】
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【０３１７】
実施例２：医薬組成物
本発明の抗体に適した製剤の例は、以下に示されている。以下の製剤に使用される抗体は、例えば、抗体Ａ、抗体Ｂ、抗体Ｃ、又は抗体Ｄである。
【０３１８】
【表２２】
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【０３１９】
製剤１のｐＨは典型的にはｐＨ６．０〜７．０の範囲内であり、例えばｐＨ６．５である。この製剤は、静脈内投与に特に適している。
【０３２０】
使用される賦形剤の分子量（g/molでの分子量）：コハク酸二ナトリウム六水和物＝２７０．１４g/mol；コハク酸＝１１８．０９g/mol；塩化ナトリウム＝５８．４４g/mol。
【０３２１】
製剤の浸透圧は、Osmomat 030（Gonotec GmbH、ベルリン、ドイツ）を使用して決定したところ３００＋／−３０mOsmol/kgである。製剤の２０℃における密度は、DMA 4500（Anton Paar GmbH、オストフィルダーン・シャルンハウゼン、ドイツ）の測定装置を使用して決定したところ約１．００８９g/cm３である。
【０３２２】
【表２３】
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【０３２３】
製剤２のｐＨは、典型的にはｐＨ５．５〜６．５の範囲内であり、例えばｐＨ５．５〜６．１であり、例えばｐＨは５．８である。この製剤は、皮下投与に特に適している。
【０３２４】
使用される賦形剤の分子量（g/molでの分子量）：
分子量：コハク酸（Ｃ４Ｈ６Ｏ４）＝１１８．０９g/mol
分子量：コハク酸二ナトリウム六水和物（Ｃ４Ｏ４Ｎａ２Ｈ４×６Ｈ２Ｏ）＝２７０．１４g/mol
分子量：ソルビトール＝１８２．１７g/mol
分子量：ポリソルベート２０＝１２２７．７２g/mol。
【０３２５】
製剤の浸透圧は、Osmomat 030（Gonotec GmbH、ベルリン、ドイツ）を使用して決定したところ３００＋／−３０mOsmol/kgである。製剤の２０℃における密度は、DMA 4500（Anton Paar GmbH、オストフィルダーン・シャルンハウゼン、ドイツ）の測定装置を使用して決定したところ約１．０４０g/cm３である。
【０３２６】
【表２４】
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【０３２７】
製剤３のｐＨは、典型的にはｐＨ５．５〜６．５の範囲内であり、例えば５．５〜６．１であり、例えばｐＨは５．８である。この製剤は、皮下投与に特に適している。
【０３２８】
使用される賦形剤の分子量（g/molでの分子量）：
分子量：ソルビトール＝１８２．１７g/mol
分子量：ポリソルベート２０＝１２２７．７２g/mol。
【０３２９】
製剤の浸透圧は、Osmomat 030（Gonotec GmbH、ベルリン、ドイツ）を使用して決定したところ３００＋／−３０mOsmol/kgである。
【図１】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図３Ｃ】
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【図３Ｄ】
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【図４】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図５Ｃ】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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