(57)【要約】  本出願は、新規な7−置換1−ピリジルナフチリジン−3−カルボキサミド、その調製法、疾患を治療および／または予防するためのその単独または組み合わせでのその使用、ならびに疾患を治療および／または予防するため、特に心血管障害および／または腎臓障害を治療および／または予防するための医薬を製造するためのその使用に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（I）の化合物
【化１】
2019524722.tif 000292
（式中、
R1はNR3R4
（式中、
R3は水素、メチル、（C2〜C4）−アルキルまたは（C3〜C6）−シクロアルキルを表し、
（C2〜C4）−アルキルはヒドロキシによって置換されていても、またはフッ素によって最大三置換されていてもよく、
R4は（C1〜C6）−アルキル、（C3〜C6）−シクロアルキル、3〜6員飽和ヘテロシクリルまたは（C1〜C4）−アルキルスルホニルを表し、
（C1〜C6）−アルキル、（C3〜C6）−シクロアルキルおよび3〜6員飽和ヘテロシクリルは、メチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、ヒドロキシ、ヒドロキシカルボニル、オキソ、メトキシ、ジフルオロメトキシ、トリフルオロメトキシおよびシアノからなる群の同一のまたは異なる置換基によって最大三置換されていてもよく、さらにフッ素によって最大四置換されていてもよい、
あるいは
R3およびR4は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、環員としてN、O、S、SOおよびSO2からなる群の1個または2個のさらなる同一のまたは異なるヘテロ原子を含有し得る飽和または部分不飽和の3〜6員単環式または6〜10員二環式複素環を形成し、
3〜6員単環式および6〜10員二環式複素環はそれぞれ、（C1〜C4）−アルキル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、ヒドロキシ、ヒドロキシカルボニル、オキソ、（C1〜C3）−アルコキシ、ジフルオロメトキシ、トリフルオロメトキシ、シアノ、（C1〜C3）−アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、モノ−（C1〜C3）−アルキルアミノカルボニルオキシ、−NHC（＝O）R14Aおよび−CH2NHC（＝O）R14Bの群から独立に選択される1〜5個の置換基によって置換されていてもよく、さらにフッ素によって最大四置換されていてもよく、
R14AおよびR14Bは独立に、（C1〜C3）−アルキルまたはシクロプロピルを表し、
（C1〜C4）−アルキルは、ヒドロキシおよび（C1〜C3）−アルコキシからなる群の同一のまたは異なる置換基によって一置換または二置換されていてもよく、フッ素によって最大四置換されていてもよい）
を表し、
R2は式
【化２】
2019524722.tif 000293
（式中、
＊はアミド部分の窒素原子との結合点を示し、
R5Aは水素または（C1〜C4）−アルキルを表し、
R5Bは水素、（C1〜C4）−アルキル、シクロプロピル、モノフルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、ペンタフルオロエチル、メトキシメチルまたはトリフルオロメトキシメチルを表し、
R6は、フッ素によって最大五置換された（C1〜C4）−アルキル、またはフッ素によって最大四置換された（C3〜C5）−シクロアルキルを表し、
Y1は−（CH2）k−、−CF2−、−O−CH2−、−CH2−O−または−CH2−O−CH2−
（式中、
kは0、1、2または3を表す）
を表し、
R7は水素、フッ素によって最大五置換された（C1〜C2）−アルキル、またはトリフルオロメトキシメチルを表し、
L1は結合または式−C（R8AR8B）−（C（R9AR9B））m−
（式中、
mは0または1を表し、
R8Aは水素またはメチルを表し、
R8Bは水素、メチル、トリフルオロメチル、ペンタフルオロエチルまたはトリフルオロメトキシメチルを表し、
R9AおよびR9Bは独立に、水素またはメチルを表す）
の基を表し、
Ar2はフェニルを表し、
フェニルは、フッ素、塩素、（C1〜C3）−アルキル、ジフルオロメトキシメチル、トリフルオロメトキシメチルおよびトリフルオロメチルからなる群の同一のまたは異なる置換基によって一〜三置換されていてもよい、
あるいは
5〜10員二環式または三環式炭素環を表し、
5〜10員二環式または三環式炭素環は、（C1〜C3）−アルキルおよびトリフルオロメチルによって、同一にまたは異なって、最大三置換されていてもよく、さらにフッ素によって最大四置換されてもよい）
の基を表し、
Ar1は環炭素原子を介して結合したピリジン環を表し、
ピリジン環は、フッ素、塩素、シアノ、メチルまたはトリフルオロメチルによって一置換または二置換されていてもよい）
ならびにそのN−オキシド、塩、溶媒和物、N−オキシドの塩およびN−オキシドおよび塩の溶媒和物。
【請求項２】
R1がNR3R4
（式中、
R3は水素、メチルまたは（C2〜C4）−アルキルを表し、
R4はフッ素によって最大四置換された（C1〜C6）−アルキルを表し、
（C1〜C6）−アルキルはオキソによって置換されていてもよい、
あるいは
R3およびR4は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、環員としてNおよびOからなる群の1個または2個のさらなる同一のまたは異なるヘテロ原子を含有し得る飽和4〜6員単環式または6〜9員二環式複素環を形成し、
4〜6員単環式および6〜9員二環式複素環がそれぞれ、（C1〜C4）−アルキル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、ヒドロキシ、オキソ、（C1〜C3）−アルコキシ、ジフルオロメトキシ、トリフルオロメトキシの群から独立に選択される1〜5個の置換基によって置換されていてもよく、さらにフッ素によって最大四置換されていてもよく、
（C1〜C4）−アルキルは、ヒドロキシおよび（C1〜C3）−アルコキシからなる群の同一のまたは異なる置換基によって一置換または二置換されていてもよく、フッ素によって最大四置換されていてもよい）
を表し、
R2が式
【化３】
2019524722.tif 000294
（式中、
＊はアミド部分の窒素原子との結合点を示し、
R5Aは水素または（C1〜C4）−アルキルを表し、
R5Bはメチル、モノフルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、ペンタフルオロエチルまたはトリフルオロメトキシメチルを表し、
R6は、フッ素によって最大五置換された（C1〜C4）−アルキル、またはフッ素によって最大四置換された（C3〜C5）−シクロアルキルを表し、
Y1は−（CH2）k−
（式中、
kは1または2を表す）
を表し、
R7はフッ素によって最大五置換された（C1〜C2）−アルキルを表し、
R10は水素、フッ素またはトリフルオロメチルを表し、
L1は結合または式−CR8AR8B−
（式中、
R8Aは水素を表し、
R8Bはメチル、トリフルオロメチル、ペンタフルオロエチルまたはトリフルオロメトキシメチルを表す）
の基を表し、
Ar2はフェニルを表し、
フェニルは、フッ素、塩素、（C1〜C3）−アルキルおよびトリフルオロメチルからなる群の同一のまたは異なる置換基によって一〜三置換されていてもよい）
の基を表し、
Ar1が環炭素原子を介して結合したピリジン環を表し、
ピリジン環が、フッ素、塩素、シアノ、メチルまたはトリフルオロメチルによって一置換または二置換されていてもよい、
請求項1に記載の式（I）の化合物ならびにそのN−オキシド、塩、溶媒和物、N−オキシドの塩およびN−オキシドおよび塩の溶媒和物。
【請求項３】
R1がNR3R4
（式中、
R3は水素またはメチルを表し、
R4はメチルまたは2−フルオロエチルを表す）
を表す、
あるいは
式
【化４】
2019524722.tif 000295
（式中、
＊＊は分子の残りとの結合点を示し、
Y2は式
【化５】
2019524722.tif 000296
（式中、
＃1はピロリジノン環の窒素原子との結合点を示し、
＃2はピロリジノン環の炭素原子との結合点を示す）
の基を表し、
Y3は−N（R12）−または式
【化６】
2019524722.tif 000297
（式中、
＃1および＃2はそれぞれ、ピロリジノン環の炭素原子との結合点を示す）
の基を表し、
R11はフッ素、（C1〜C4）−アルキル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、ヒドロキシ、ヒドロキシメチル、メトキシ、ジフルオロメトキシまたはトリフルオロメトキシを表し、
pは0、1、2、3または4の数を表し、
置換基R11が2回以上出現する場合、それらの意味は各場合において同一でも異なっていてもよく、
R12は水素または2−ヒドロキシエチルを表す）
の、窒素原子を介して結合した、複素環を表し、
R2が式
【化７】
2019524722.tif 000298
（式中、
＊はアミド部分の窒素原子との結合点を示し、
R5Aは水素またはメチルを表し、
R5Bはメチル、モノフルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、ペンタフルオロエチルまたはトリフルオロメトキシメチルを表し、
R6はメチル、エチル、トリフルオロメチル、2，2，2−トリフルオロエチル、tert−ブチル、イソブチルまたはシクロプロピルを表し、
Y1は−（CH2）k−
（式中、
kは1または2を表す）
を表し、
R7はトリフルオロメチルを表し、
R10は水素、フッ素またはトリフルオロメチルを表し、
L1は結合または式−CR8AR8B−
（式中、
R8Aは水素を表し、
R8Bはトリフルオロメチルを表す）
の基を表し、
Ar2はフェニルを表し、
フェニルは、フッ素および塩素からなる群の同一のまたは異なる置換基によって一置換または二置換されていてもよい）
の基を表し、
Ar1が式
【化８】
2019524722.tif 000299
（式中、
＊＊＊は窒素原子との結合点を示し、
R13Aはフッ素または塩素を表し、
R13Bはフッ素または水素を表す）
の基を表す、
請求項1または2に記載の式（I）の化合物ならびにその塩、溶媒和物および塩の溶媒和物。
【請求項４】
R1が式
【化９】
2019524722.tif 000300
（式中、
＊＊は分子の残りとの結合点を示す）
の、窒素原子を介して結合した、複素環を表し、
R2が式
【化１０】
2019524722.tif 000301
（式中、
＊はアミド部分の窒素原子との結合点を示し、
R6Aはトリフルオロメチル、エチル、tert−ブチル、イソブチルまたはシクロプロピルを表し、
R6Bはメチルまたはエチルを表し、
R6Cはトリフルオロメチルまたはシクロプロピルを表し、
Ar2は式
【化１１】
2019524722.tif 000302
（式中、
＃3は各場合で、結合部位を示す）
の基を表す）
の基を表し、
Ar1が式
【化１２】
2019524722.tif 000303
（式中、
＊＊＊は窒素原子との結合点を示す）
の基を表す、
請求項1から3のいずれか一項に記載の式（I）の化合物ならびにその塩、溶媒和物および塩の溶媒和物。
【請求項５】
R1が式
【化１３】
2019524722.tif 000304
（式中、
＊＊は分子の残りとの結合点を示し、
R11はフッ素、（C1〜C4）−アルキル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、ヒドロキシ、ヒドロキシメチル、メトキシ、ジフルオロメトキシまたはトリフルオロメトキシを表し、
pは0、1、2、3または4の数を表し、
置換基R11が2回以上出現する場合、それらの意味は各場合において同一でも異なっていてもよい）
の、窒素原子を介して結合した、複素環を表し、
R2が式
【化１４】
2019524722.tif 000305
（式中、
＊はアミド部分の窒素原子との結合点を示し、
R6Aはトリフルオロメチル、エチル、tert−ブチル、イソブチルまたはシクロプロピルを表し、
R6Bはメチル、エチル、tert−ブチルまたはシクロプロピルを表し、
R6Cはトリフルオロメチルまたはシクロプロピルを表す）
の基を表し、
Ar1が式
【化１５】
2019524722.tif 000306
（式中、
＊＊＊は窒素原子との結合点を示す）
の基を表す、
請求項1または2に記載の式（I）の化合物ならびにその塩、溶媒和物および塩の溶媒和物。
【請求項６】
R1が式
【化１６】
2019524722.tif 000307
（式中、
＊＊は分子の残りとの結合点を示す）
の、窒素原子を介して結合した、複素環を表し、
R2が式
【化１７】
2019524722.tif 000308
（式中、
＊はアミド部分の窒素原子との結合点を示し、
R6Aはトリフルオロメチルを表し、
R6Bはメチルを表す）
の基を表し、
Ar1が式
【化１８】
2019524722.tif 000309
（式中、
＊＊＊は窒素原子との結合点を示す）
の基を表す、
請求項5に記載の式（I）の化合物ならびにその塩、溶媒和物および塩の溶媒和物。
【請求項７】
請求項1から6のいずれか一項に定義される式（I）の化合物を調製する方法であって、
［A］式（II）
【化１９】
2019524722.tif 000310
（式中、R2およびAr1は請求項1から6に示される意味を有し、
Halはフッ素、塩素、臭素またはヨウ素、好ましくは塩素を表す）
の化合物を、式（III）
【化２０】
2019524722.tif 000311
（式中、R1は上に示される意味を有する）
の化合物と反応させて、式（I）
【化２１】
2019524722.tif 000312
（式中、R1、R2およびAr1は請求項1から6に示される意味を有する）
のカルボキサミドを得る、
または
［B］式（IV）
【化２２】
2019524722.tif 000313
（式中、R1およびAr1は請求項1から6に示される意味を有する）
の化合物を式（V）
【化２３】
2019524722.tif 000314
（式中、R2は上に示される意味を有する）
の化合物と反応させて、式（I）
【化２４】
2019524722.tif 000315
（式中、R1、R2およびAr1は請求項1から6に示される意味を有する）
のカルボキサミドを得て、
適当であれば、このようにして得られた式（I）の化合物をそれらのエナンチオマーおよび／またはジアステレオマーに分離する、ならびに／あるいは適当な（i）溶媒および／または（ii）塩基もしくは酸でそれらの溶媒和物、塩および／または塩の溶媒和物に変換する
ことを特徴とする方法。
【請求項８】
式（II）
【化２５】
2019524722.tif 000316
（式中、R2およびAr1は、式（I）の化合物について請求項1から6に示される意味を有し、
Halはフッ素、塩素、臭素またはヨウ素、好ましくは塩素を表す）
の化合物。
【請求項９】
一般式（IV）
【化２６】
2019524722.tif 000317
（式中、R1およびAr1は、式（I）の化合物について請求項1から6に示される意味を有する）
の化合物。
【請求項１０】
請求項1から5のいずれか一項に記載の式（I）の化合物を調製するための、
式（II）
【化２７】
2019524722.tif 000318
（式中、R2およびAr1は、式（I）の化合物について請求項1から6に示される意味を有し、
Halはフッ素、塩素、臭素またはヨウ素、好ましくは塩素を表す）
の化合物
または
式（IV）
【化２８】
2019524722.tif 000319
（式中、R1およびAr1は、式（I）の化合物について請求項1から6に示される意味を有する）
の化合物の使用。
【請求項１１】
疾患の治療および／または予防に使用するための請求項1から6のいずれか一項に定義される化合物。
【請求項１２】
心不全、冠動脈心疾患、心房性および心室性不整脈、腎不全および腎症を治療および／または予防する方法に使用するための請求項1から6のいずれか一項に定義される式（I）の化合物。
【請求項１３】
活性降圧成分、活性抗不整脈成分、バソプレシン受容体拮抗薬、PDE5阻害剤、血小板凝集阻害剤、sGC活性化剤およびsGC刺激剤からなる群から選択される1種または複数のさらなる有効成分と組み合わせた請求項1から6のいずれか一項に定義される化合物を含む医薬。
【請求項１４】
不活性で、非毒性の薬学的に適した賦形剤と組み合わせて請求項1から6のいずれか一項に定義される化合物を含む医薬。
【請求項１５】
心不全、冠動脈心疾患、心房性および心室性不整脈、腎不全および腎症の治療および／または予防に使用するための請求項13または14に記載の医薬。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、新規な7−置換1−ピリジルナフチリジン−3−カルボキサミド、その調製法、疾患を治療および／または予防するためのその単独または組み合わせでのその使用、ならびに疾患を治療および／または予防するため、特に心血管障害および／または腎臓障害を治療および／または予防するための医薬を製造するためのその使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
ムスカリン作動性受容体は、膜上に位置する受容体であり、内因性リガンドとして、アセチルコリン（ACh）神経伝達物質（アセチルコリン受容体）に結合することができるが、ムスカリンによっても活性化され得る。ヒトの生体内のほぼ全ての種類の組織で発現するこれらのGタンパク質共役型受容体の5つのサブタイプ（M1〜M5）が存在する。これらには、中枢神経系と末梢神経系の両方において、および自律神経系の多くの臓器において遭遇する。
【０００３】
M2型（M2R）は、主に心臓で発現される。細胞レベルでは、アセチルコリンアゴニストによるM2R刺激が、アデニルシクラーゼの阻害および内向き整流性カリウムチャネル（IKAChチャネル、GIRK：Gタンパク質活性化内向き整流性K＋チャネル；Kir3．xとも）の活性化を引き起こす。これはカリウム伝導性を増加させ、筋細胞の過分極につながる。したがって、細胞は脱分極がより困難になり、有害な変時性および変伝導性効果をもたらすので、心拍数が低下する。M2Rは、迷走神経によって制御される心機能の副交感神経制御の主なメディエーターである。右迷走神経は洞結節を介して心拍数を低下させ；左迷走神経は房室結節（AVノード）を介して房室伝導時間を主に増加させる。全体として、安静時の心拍数に対する迷走神経の影響は、交感神経と比較して優勢である。したがって、M2Rの刺激の効果は、β−アドレナリン刺激の効果と反対である。
【０００４】
内因性アセチルコリンアゴニストによるだけでなく、カルバコール、オキソトレモリン−Mまたはイペロキソ（Schrageら、Biochem．Pharmacol．2014、90（3）、307〜319）などの合成類似体によるM2受容体の活性化も、受容体のオルソステリック結合部位と呼ばれるものへのアゴニストの結合、および結果として受容体のコンフォメーション変化または活性受容体確認の安定化によって行われる。従来の天然ムスカリン受容体アゴニストには、内因性アセチルコリン（ACh）アゴニストと同様に、アレコリン、ムスカリンおよびピロカルピンなどの種々の植物アルカロイドが含まれる（Neubigら、Pharmacol Rev．、2003、55、597〜606）。全てのムスカリン性アセチルコリン受容体のオルソステリック結合部位が高度に進化的に保存されており、種々のサブタイプ間で高い配列および構造的相同性を有する。そのため、既知のアゴニストの多くは、ムスカリン性アセチルコリン受容体の種々のサブタイプに関して選択的ではない（Kruseら、Mol Pharmacol．、2013、84（4）、528〜540）。M2Rは、オルソステリック結合部位と同様にアロステリック結合部位も有する（Gregoryら、Current Neuropharmacol、2007、5（3）、157〜167）。最も古い既知のアロステリックモジュレーターはガラミンである（ClarkおよびMitchelson、Br．J．Pharmac．、1976、58、323〜331）。
【０００５】
アロステリックモジュレーターは、従来のオルソステリックリガンドとはっきりした相違を有する。アロステリックモジュレーター自体は、受容体活性化に直接的な影響を及ぼさない。代わりに、アロステリック結合は、オルソステリックアゴニストの結合親和性および／または有効性の調節をもたらす。したがって、アロステリックモジュレーターの効果は、内因性リガンドの存在下でのみ示され得る。これは、アロステリック効果における空間および時間の点での特異性をもたらす（Connら、Nat．Rev．Drug Disc．、2009、8、41〜54；Connら、Nat．Rev．Drug．Disc．、2014、13、692〜708）。さらに、アロステリックモジュレーターの効果は、それが高濃度でアゴニストの結合を安定化させる場合、自己限定的である。これが、原則として、受容体過活性化によって引き起こされる毒性効果が制限されるため、アゴニストと比較してより好ましい薬理学的安全性プロファイルをもたらす（Christopoulos、Mol．Pharmacol．、2014、86、463〜478）。
【０００６】
親和性および固有活性の点でのアロステリックおよびオルソステリックリガンドの相互影響（協同作用と称される）は、両リガンドによって決定される。M2Rの正のアロステリックモジュレーターの場合、ACh（オルソステリックリガンド）の効果が増強される（正の協同作用）。オルソステリックリガンドの存在下で受容体コンフォメーションを調節する能力のために、アロステリックリガンドは、薬理学的効果の精密な調整をもたらすことができる（Wangら、J．Pharmacol．Exp．Therap．、2009、331、340〜348）。M2Rの正のアロステリックモジュレーターの場合、これは、有利な効果プロファイル、副作用のリスクが低いこと、および完全アゴニストと比較してより多くのサブタイプ選択的リガンドの開発の出発点を示唆している。
【０００７】
M2Rと複合体の正のアロステリックM4RおよびM2RリガンドであるLY2119620（3−アミノ−5−クロロ−N−シクロプロピル−4−メチル−6−［2−（4−メチルピペラジン−1−イル）−2−オキソエトキシ］チエノ［2，3−b］ピリジン−2−カルボキサミド）の結晶構造が公開されている。M2Rのアロステリック結合部位は、オルソステリック結合部位に空間的に隣接するが、オルソステリック結合部位から明確に区切られており、他のムスカリン受容体サブタイプと比較して、より低い保存性を示す、すなわち配列におけるより大きな差異を有する（Kruseら、Nature、2013、504、101〜106）。LY2119620は非選択的なM2R／M4R正のアロステリックモジュレーターとして記載された（Croyら、Molecular Pharmacology、2014年7月86、1、106〜115；Schoberら、Molecular Pharmacology、2014年7月86、1、116〜123）。
【０００８】
自律神経系の構成要素としてのM2Rは、心血管障害の病因および進行において重要な役割を果たす。迷走神経（副交感神経）弱化および交感神経系の優性を特徴とする自律神経不均衡は、罹患率および死亡率の増加と密接に相関している。心不全（HF）、心リズム障害、虚血／再灌流（I／R）、高血圧を含む種々の心血管障害（Heら、Br．J．Pharmacol．2014、Epub）および慢性腎疾患（Ranpuriaら、Nephrol Dial Transplant．2008、23（2）、444〜4499）において、自律神経不均衡の臨床的および予後的重要性が十分に立証されている。特に、糖尿病などの併存症を有する患者の場合、自律神経不均衡は、罹患率および死亡率の増加に寄与し得る（Vinikら、Diabet Med．、2011、28（6）、643〜651）。機能障害性自律神経系の徴候としての高血圧緊急症または高血圧の変動などの圧受容器反射機能不全は、しばしば虚血性または出血性脳卒中の急性期に伴う（Sykoraら、Stroke、2009、40（12）、678〜682）。
【０００９】
心不全とうつ病との間などの心血管障害と心理学的障害との間の併存症の頻繁な観察は、おそらく自律神経の不均衡に伴う共通の病態機構に基づいている（Halarisら、Mod Trends Pharmacopsychiatri．、2013、28、144〜161）。慢性的なストレスは、自律神経系の恒常状態をシフトさせる。迷走神経緊張の減少は、神経伝達物質調節、特にセロトニン作動性伝達の障害により、前炎症状態に寄与する。他の心理学的障害も、自律神経調節不全、例えば抑制の喪失、感情的自制の欠如、不注意および多動性を特徴とする注意欠陥／多動性障害（ADHD）と関連付けられている（RashおよびAguirre−Camacho、Atten Defic Hyperact Disord．、2012、4（4）、167〜177）。
【００１０】
そのため、予想される抗炎症効果、一酸化窒素（NO）の上昇、酸化還元状態の調節、ミトコンドリア機能およびカルシウム調節の改善を含む正のアロステリックモジュレーターによる副交感神経活動のブーストは、特に心血管障害の場合の新規な治療原則に寄与し得る。副交感神経活動の調節を慢性心不全の場合の潜在的な治療標的とみなすことができるという多数の示唆が存在する。心筋梗塞から回復したイヌにおける迷走神経刺激は、心臓突然死の発生率および慢性心不全を患うラットの死亡率を有意に低下させた（De Ferrari、J．Cardiovasc．Transl．Res．、2014、7（3）、310〜320）。心不全（LVEF35％）および移植された迷走神経刺激装置を有するイヌモデルでは、偽群と比較した治療群において、左室駆出率（LVEF）の有意な改善ならびに収縮終期容積および拡張終期容積（LVESV、LVEDV）の減少が発生し、同様に3ヵ月以内に心拍数の有意な減少が発生することが示された。VNSの記載された効果は、β遮断薬投与に付加的であった（De Ferrari、J．Cardiovasc．Transl．Res．、2014、7（3）、310〜320）。TNF−αおよびIL−6の血漿レベルならびにその心筋タンパク質発現が、この動物モデルにおいて迷走神経刺激によって低下し、このことは副交感神経系のブーストならびにLVリモデリングへの効果もまた炎症性サイトカインにプラスの効果を有することを示唆している。
【００１１】
実験的前臨床データに基づいて、慢性心不全を有する患者における迷走神経刺激に関する最初の臨床試験が、癲癇およびうつ病の治療において既に確立されているように現在行われている。直接的な迷走神経刺激（VNS）を介した副交感神経系のブーストの効果が、左室（LV）収縮機能不全を有する32人の患者での非無作為化観察試験で評価され、その結果は、迷走神経刺激が生活の質、スタミナおよびLVリモデリングに対する好ましい効果を有することを示唆している（De Ferrari GMら、Eur．Heart J．、2011、32、847〜855）。多施設オープン実行可能性試験ANTHEN−HFで、標準治療に加えて、駆出率低下を伴う慢性安定性症候性心不全（HFrEF）を有する患者における迷走神経刺激の安全性、適合性および有効性が試験された（Premchand RKらJ．Card．Fail．、2014、20（11）、808〜816）。この試験で使用された連続的迷走神経刺激は、駆出率、心拍数の変動性、NYHAクラスおよび生活の質の改善をもたらした。対照的に、最初のプラセボ対照臨床試験であるNECTAR−HFは、6ヵ月後にHF患者の心機能に対する迷走神経刺激の有意な効果を示さなかった（Zannadら、Eur．Heart J．、2015、36（7）、425〜433）。唯一の改善は生活の質であった。650人のHF患者を用いたINOVATE−HF試験は、死亡率および入院に関してこの治療の効果を示すことができなかった。（Goldら、J Am Coll Cardiol．、2016年3月29日、pii：S0735〜1097（16）32404−4。doi：10．1016／j．jacc．2016．03．525）。生活の質および歩行距離が有意に改善された。
【００１２】
感染リスクおよび外科的介入の潜在的リスクと同様に、迷走神経の電気刺激による治療は、発声障害、咳および口腔咽頭痛などの副作用によって制限される（Premchand RKら、J．Card．Fail、2014、20（11）、808〜816）。M2Rに対する直接的効果による副交感神経系の薬物支援ブーストは、新規な療法選択肢を構成することができるだろう。
【００１３】
心房細動は最も一般的な持続性心リズム障害であり、その有病率は年齢とともに増加する（Chenら、Circ．Res．、2014、114（9）、1500〜1515）。心房細動および心不全は、しばしば互いに有益な関係で生じる。したがって、心房細動の有病率は、心不全の臨床的重症度とともに増加する（MaiselおよびStevenson、Am．J．Cardiol．、2003、91、（補遺）2D〜8D）。臨床データは、心不全が心房細動を伴う患者は予後不良であることを示唆している。この患者群では、致死率（総致死率、突然死およびポンプ不全）と罹患率（入院）の両方が有意に増加することが分かった。
【００１４】
心房細動の治療には、2つの異なる治療戦略が存在する：いわゆる、調整、可能であれば、心室周波数の正規化による拍数制御、およびいわゆる、正弦波リズムを確立または維持することを意図した措置を含むリズムコントロール。有効な治療は、非薬物支援と薬物支援または介入措置の組み合わせからなる（Levalter T、Fortbildungsprogramm Pharmazie、2011、5、106〜127）。
【００１５】
心臓除細動後の薬物支援リズム制御では、β遮断薬、クラスIおよびクラスIII抗不整脈薬が、根底にある心障害および左心室ポンプ機能障害の程度にしたがって使用される。永続的な心房細動を有する患者および持続性または発作性の心房細動を有する症状の乏しい（しばしば高齢の）患者では、心房細動の保持および許容を伴う単純な拍数制御がしばしば選択療法となる。主に、AVノードの不応期または伝導能力に影響を及ぼす医薬品が使用される。原則として、この効果は、例えば正のアロステリックモジュレーターの助けを借りて、この時点で重要な生理学的役割を果たすM2Rの刺激によって達成することができる。現在利用可能な薬物は、β遮断薬、ジギタリス、カルシウム拮抗薬、および個々の場合で、ライフスタイル、根底にある心障害および二次的障害を考慮して使用されるアミオダロンである。しかしながら、特に左心室ポンプ機能低下および重度の心不全を有する患者では、薬物支援療法の選択肢が不十分である。この患者群では、カルシウム拮抗薬は禁忌である。最近の研究で示されているように、ジゴキシンによる治療は、心房細動を有する患者の死亡率を増加させる（Leong−SitおよびTang、Curr．Opin．Cardiol．、2015、Epub）。β遮断薬については、心房細動および心不全を有する患者における有効性の欠如が、メタアナリシスで示された（Leong−Sit and Tang、Curr．Opin．Cardiol．、2015、Epub）。対応して、拍数制御のための新規な効率的で安全な治療に対する医学的要求も高い。これは、M2Rの投薬支援刺激によって達成され得る。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１６】
【特許文献１】欧州特許第0945435号明細書
【特許文献２】国際公開第2002／085886号
【特許文献３】国際公開第2003／050107号
【特許文献４】国際公開第2005／026145号
【特許文献５】国際公開第2005／026165号
【特許文献６】国際公開第2005／049602号
【特許文献７】欧州特許第1650192号明細書
【特許文献８】国際公開第2005／009971号
【特許文献９】JP2005012561
【特許文献１０】国際公開第2015／189560号
【特許文献１１】国際公開第2016／081464号
【非特許文献】
【００１７】
【非特許文献１】Schrageら、Biochem． Pharmacol． 2014、90（3）、307〜319
【非特許文献２】Neubigら、Pharmacol Rev．、2003、55、597〜606
【非特許文献３】Kruseら、Mol Pharmacol．、2013、84（4）、528〜540
【非特許文献４】Gregoryら、Current Neuropharmacol、2007、5（3）、157〜167
【非特許文献５】ClarkおよびMitchelson、Br． J． Pharmac．、1976、58、323〜331
【非特許文献６】Connら、Nat．Rev．Drug Disc．、2009、8、41〜54
【非特許文献７】Connら、Nat．Rev．Drug．Disc．、2014、13、692〜708
【非特許文献８】Christopoulos、Mol． Pharmacol．、2014、86、463〜478
【非特許文献９】Wangら、J．Pharmacol． Exp．Therap．、2009、331、340〜348
【非特許文献１０】Kruseら、Nature、2013、504、101〜106
【非特許文献１１】Croyら、Molecular Pharmacology、2014年7月 86、1、106〜115
【非特許文献１２】Schoberら、Molecular Pharmacology、2014年7月 86、1、116〜123
【非特許文献１３】Heら、Br． J． Pharmacol． 2014、Epub
【非特許文献１４】Ranpuriaら、Nephrol Dial Transplant． 2008、23（2）、444〜4499
【非特許文献１５】Vinikら、Diabet Med．、2011、28（6）、643〜651
【非特許文献１６】Sykoraら、Stroke、2009、40（12）、678〜682
【非特許文献１７】Halarisら、Mod Trends Pharmacopsychiatri．、2013、28、144〜161
【非特許文献１８】RashおよびAguirre−Camacho、Atten Defic Hyperact Disord．、2012、4（4）、167〜177
【非特許文献１９】De Ferrari、J． Cardiovasc．Transl．Res．、2014、7（3）、310〜320
【非特許文献２０】De Ferrari GMら、Eur．Heart J．、2011、32、847〜855
【非特許文献２１】Premchand RKら J．Card．Fail．、2014、20（11）、808〜816
【非特許文献２２】Zannadら、Eur． Heart J．、2015、36（7）、425〜433
【非特許文献２３】Goldら、J Am Coll Cardiol．、2016年3月29日、pii：S0735〜1097（16）32404−4。doi：10．1016／j．jacc．2016．03．525
【非特許文献２４】Premchand RKら、J．Card．Fail 、2014、20（11）、808〜816
【非特許文献２５】Chenら、Circ．Res．、2014、114（9）、1500〜1515
【非特許文献２６】MaiselおよびStevenson、Am．J．Cardiol．、2003、91、（補遺）2D〜8D
【非特許文献２７】Levalter T、Fortbildungsprogramm Pharmazie、2011、5、106〜127
【非特許文献２８】Leong−SitおよびTang、Curr．Opin．Cardiol．、2015、Epub
【非特許文献２９】Scammellsら、ACS Chem． Neurosci．、2013、4（7）、1026〜1048
【非特許文献３０】Mistryら、J． Med． Chem．2013、56、5151〜5172
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１８】
本発明により対処される課題は、ムスカリンM2受容体の強力な正のアロステリックモジュレーターを構成し、よって、特に心血管障害および／または腎障害の治療および／または予防に適した新規な物質を識別および提供するというものである。
【００１９】
1−ベンジル置換4−オキソ−1，4−ジヒドロキノリン−3−カルボン酸は、アルツハイマー病および統合失調症などの神経変性疾患を治療するためのM1ムスカリン受容体のアロステリックモジュレーターとして記載されている（Scammellsら、ACS Chem．Neurosci．、2013、4（7）、1026〜1048；Mistryら、J．Med．Chem．2013、56、5151〜5172）。数ある文献の中でも、欧州特許第0945435号明細書は、抗細菌活性を有するピリドンカルボン酸誘導体を開示している。国際公開第2002／085886号、国際公開第2003／050107号および国際公開第2005／026145号は、7−ピペリジノ置換キノロンカルボン酸誘導体を請求しており、国際公開第2005／026165号および国際公開第2005／049602号は種々の7−ピロリジノ置換キノロンカルボン酸誘導体を請求しており、欧州特許第1650192号明細書は抗微生物／抗細菌活性を有する特異的7−アゼチジニルキノロンカルボン酸誘導体を請求している。国際公開第2005／009971号および特願2005−012561号明細書は、血小板凝集阻害剤として使用することができるキノロン誘導体を開示している。国際公開第2015／189560号は、心血管障害を治療するためのNPRCアゴニストとしての1，4−ジヒドロキノリン誘導体を開示している。MCT調節剤としてのキノロンカルボン酸誘導体は、特に腫瘍障害および炎症過程の治療について国際公開第2016／081464号に記載されている。
【課題を解決するための手段】
【００２０】
本発明は、一般式（I）の化合物
【化１】
2019524722.tif 000002
（式中、
R1はNR3R4
（式中、
R3は水素、メチル、（C2〜C4）−アルキルまたは（C3〜C6）−シクロアルキルを表し、
（C2〜C4）−アルキルはヒドロキシによって置換されていても、またはフッ素によって最大三置換されていてもよく、
R4は（C1〜C6）−アルキル、（C3〜C6）−シクロアルキル、3〜6員飽和ヘテロシクリルまたは（C1〜C4）−アルキルスルホニルを表し、
（C1〜C6）−アルキル、（C3〜C6）−シクロアルキルおよび3〜6員飽和ヘテロシクリルは、メチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、ヒドロキシ、ヒドロキシカルボニル、オキソ、メトキシ、ジフルオロメトキシ、トリフルオロメトキシおよびシアノからなる群の同一のまたは異なる置換基によって最大三置換されていてもよく、さらにフッ素によって最大四置換されていてもよい、
あるいは
R3およびR4は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、環員としてN、O、S、SOおよびSO2からなる群の1個または2個のさらなる同一のまたは異なるヘテロ原子を含有し得る飽和または部分不飽和の3〜6員単環式または6〜10員二環式複素環を形成し、
3〜6員単環式および6〜10員二環式複素環はそれぞれ、（C1〜C4）−アルキル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、ヒドロキシ、ヒドロキシカルボニル、オキソ、（C1〜C3）−アルコキシ、ジフルオロメトキシ、トリフルオロメトキシ、シアノ、（C1〜C3）−アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、モノ−（C1〜C3）−アルキルアミノカルボニルオキシ、−NHC（＝O）R14Aおよび−CH2NHC（＝O）R14Bの群から独立に選択される1〜5個の置換基によって置換されていてもよく、さらにフッ素によって最大四置換されていてもよく、
R14AおよびR14Bは独立に、（C1〜C3）−アルキルまたはシクロプロピルを表し、
（C1〜C4）−アルキルは、ヒドロキシおよび（C1〜C3）−アルコキシからなる群の同一のまたは異なる置換基によって一置換または二置換されていてもよく、フッ素によって最大四置換されていてもよい）
を表し、
R2は式
【化２】
2019524722.tif 000003
（式中、
＊はアミド部分の窒素原子との結合点を示し、
R5Aは水素または（C1〜C4）−アルキルを表し、
R5Bは水素、（C1〜C4）−アルキル、シクロプロピル、モノフルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、ペンタフルオロエチル、メトキシメチルまたはトリフルオロメトキシメチルを表し、
R6は、フッ素によって最大五置換された（C1〜C4）−アルキル、またはフッ素によって最大四置換された（C3〜C5）−シクロアルキルを表し、
Y1は−（CH2）k−、−CF2−、−O−CH2−、−CH2−O−または−CH2−O−CH2−
（式中、
kは0、1、2または3を表す）
を表し、
R7は水素、フッ素によって最大五置換された（C1〜C2）−アルキル、またはトリフルオロメトキシメチルを表し、
L1は結合または式−C（R8AR8B）−（C（R9AR9B））m−
（式中、
mは0または1を表し、
R8Aは水素またはメチルを表し、
R8Bは水素、メチル、トリフルオロメチル、ペンタフルオロエチルまたはトリフルオロメトキシメチルを表し、
R9AおよびR9Bは独立に、水素またはメチルを表す）
の基を表し、
Ar2はフェニルを表し、
フェニルは、フッ素、塩素、（C1〜C3）−アルキル、ジフルオロメトキシメチル、トリフルオロメトキシメチルおよびトリフルオロメチルからなる群の同一のまたは異なる置換基によって一〜三置換されていてもよい、
あるいは
5〜10員二環式または三環式炭素環を表し、
5〜10員二環式または三環式炭素環は、（C1〜C3）−アルキルおよびトリフルオロメチルによって、同一にまたは異なって、最大三置換されていてもよく、さらにフッ素によって最大四置換されてもよい）
の基を表し、
Ar1は環炭素原子を介して結合したピリジン環を表し、
ピリジン環は、フッ素、塩素、シアノ、メチルまたはトリフルオロメチルによって一置換または二置換されていてもよい）
ならびにそのN−オキシド、塩、溶媒和物、N−オキシドの塩およびN−オキシドおよび塩の溶媒和物に関する。
【００２１】
本発明の化合物は、式（I）に含まれ、以下に言及される化合物が既に塩、溶媒和物および塩の溶媒和物でない場合、式（I）の化合物およびその塩、溶媒和物と塩の溶媒和物、式（I）に含まれ、以下に言及される式の化合物およびその塩、溶媒和物と塩の溶媒和物、ならびに式（I）に含まれ、実施例として以下に引用される化合物およびその塩、溶媒和物と塩の溶媒和物である。
【００２２】
本発明による化合物は、同様に、式（I）の化合物のN−オキシドおよび塩、溶媒和物、ならびにその塩の溶媒和物である。
【００２３】
本発明の文脈において好ましい塩は、本発明による化合物の生理学的に許容される塩である。また、それ自体は製薬用途に適していないが、例えば、本発明の化合物を単離、精製または貯蔵するために使用することができる塩も包含される。
【００２４】
本発明の化合物の適切な薬学的に許容される塩は、例えば、鎖中または環中に十分に塩基性の窒素原子を有する本発明の化合物の酸付加塩、例えば無機酸もしくは「鉱酸」、例えば塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、スルファミン酸、重硫酸、リン酸もしくは硝酸による、または有機酸、例えばギ酸、酢酸、アセト酢酸、ピルビン酸、トリフルオロ酢酸、プロピオン酸、酪酸、ヘキサン酸、ヘプタン酸、ウンデカン酸、ラウリン酸、安息香酸、サリチル酸、2−（4−ヒドロキシベンゾイル）安息香酸、樟脳酸、桂皮酸、シクロペンタンプロピオン酸、ジグルコン酸、3−ヒドロキシ−2−ナフトエ酸、ニコチン酸、パモ酸、ペクチン酸、3−フェニルプロピオン酸、ピバリン酸、2−ヒドロキシエタンスルホン酸、イタコン酸、トリフルオロメタンスルホン酸、ドデシル硫酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、パラ−トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、2−ナフタレンスルホン酸、ナフタレンジスルホン酸、カンファースルホン酸、クエン酸、酒石酸、ステアリン酸、乳酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、リンゴ酸アジピン酸、アルギン酸、マレイン酸、フマル酸、D−グルコン酸、マンデル酸、アスコルビン酸、グルコヘプタン酸、グリセロリン酸、アスパラギン酸、スルホサリチル酸もしくはチオシアン酸による酸付加塩であり得る。
【００２５】
さらに、本発明の十分に酸性の化合物の別の適切な薬学的に許容される塩は、アルカリ金属塩、例えばナトリウムもしくはカリウム塩、アルカリ土類金属塩、例えばカルシウム、マグネシウムもしくはストロンチウム塩、またはアルミニウムもしくは亜鉛塩、またはアンモニアまたは1〜20個の炭素原子を有する有機第一級、二級もしくは三級アミン、例えばエチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、エチルジイソプロピルアミン、モノエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、ジシクロヘキシルアミン、ジメチルアミノエタノール、ジエチルアミノエタノール、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン、プロカイン、ジベンジルアミン、N−メチルモルホリン、アルギニン、リジン、1，2−エチレンジアミン、N−メチルピペリジン、N−メチルグルカミン、N，N−ジメチルグルカミン、N−エチルグルカミン、1，6−ヘキサンジアミン、グルコサミン、サルコシン、セリノール、2−アミノ−1，3−プロパンジオール、3−アミノ−1，2−プロパンジオール、4−アミノ−1，2，3−ブタントリオールに由来するアンモニウム塩、または1〜20個の炭素原子を有する四級アンモニウムイオン、例えばテトラメチルアンモニウム、テトラエチルアンモニウム、テトラ（n−プロピル）アンモニウム、テトラ（n−ブチル）アンモニウム、N−ベンジル−N，N，N−トリメチルアンモニウム、コリンもしくはベンザルコニウムによる塩である。
【００２６】
当業者であれば、請求される化合物の酸付加塩を、いくつかの既知の方法のいずれかを介して化合物と適当な無機酸または有機酸の反応によって調製することが可能であることをさらに認識するだろう。あるいは、本発明の酸性化合物のアルカリおよびアルカリ土類金属塩は、種々の既知の方法を介して本発明の化合物を適当な塩基と反応させることによって調製される。
【００２７】
本発明は、単一の塩として、または任意の比の前記塩の任意の混合物として本発明の化合物の全ての可能な塩を含む。
【００２８】
本文中、特に実験節において、本発明の中間体および実施例の合成について、化合物を対応する塩基または酸による塩型として言及する場合、それぞれの調製および／または精製工程によって得られる前記塩型の正確な化学量論的組成は、ほとんどの場合、未知である。特に指定しない限り、例えば、「塩酸塩」、「トリフルオロアセテート」、「ナトリウム塩」または「xHCl」、「xCF3COOH」、「xNa＋」などの塩に関する化学名または構造式の接尾辞は、塩型を意味し、この塩の化学量論は指定されていない。合成中間体もしくは実施例化合物またはこれらの塩を、溶媒和物、例えば水和物として、記載される調製および／または精製工程によって得た場合にもこれが同様に当てはまる。
【００２９】
本発明の文脈における溶媒和物は、溶媒分子による配位によって固体または液体状態で錯体を形成する本発明による化合物の形態として記載される。水和物は、配位が水によるものである溶媒和物の特別な形態である。水和物が本発明の文脈において好まれる溶媒和物である。
【００３０】
本発明による化合物は、その構造に応じて異なる立体異性型で、すなわち、配置異性体の形態でまたは適当な場合には、配座異性体（アトロプ異性体の場合を含む、エナンチオマーおよび／またはジアステレオマー）として存在し得る。そのため、本発明は、エナンチオマーおよびジアステレオマーならびにこれらのそれぞれの混合物を包含する。立体異性体的に均質な成分を、このようなエナンチオマーおよび／またはジアステレオマーの混合物から公知の方法で単離することが可能である。この目的のためにクロマトグラフィー法、特にアキラルまたはキラル分離相でのHPLCクロマトグラフィーを使用することが好ましい。中間体または最終生成物としてのカルボン酸の場合、代わりにキラルアミン塩基を使用してジアステレオマー塩を介して分離することも可能である。
【００３１】
本発明の文脈において、「エナンチオマー的に純粋な」という用語は、キラル中心の絶対配置に関して当の化合物が95％超、好ましくは98％超のエナンチオマー過剰率で存在する効果と理解される。エナンチオマー過剰率eeは、以下の式を使用して、キラル相上のHPLC分析クロマトグラムを評価することによってここで計算される：
【数１】
2019524722.tif 000004
【００３２】
本発明の化合物が互変異性型で生じ得る場合、本発明は全ての互変異性型を包含する。
【００３３】
本発明はまた、本発明による化合物の全ての適当な同位体変種も包含する。本発明による化合物の同位体変種は、ここでは、本発明による化合物中の少なくとも1個の原子が同じ原子番号であるが通常または主に自然に生じる原子質量とは異なる原子質量を有する別の原子（「不自然な分画」）と交換された化合物を意味すると理解される。「不自然な分画」という表現は、その固有振動数よりも高いこのような同位体の分画を意味すると理解される。この点について使用される同位体の固有振動数は、「Isotopic Compositions of the Elements 1997」、Pure Appl．Chem．、70（1）、217〜235、1998に見出すことができる。本発明による化合物に組み込まれ得る同位体の例としては、水素、炭素、窒素、酸素、リン、硫黄、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素の同位体、例えば、2H（重水素）、3H（トリチウム）、13C、14C、15N、17O、18O、32P、33P、33S、34S、35S、36S、18F、36Cl、82Br、123I、124I、129Iおよび131Iがある。本発明による化合物の特定の同位体変種、特に1種または複数の放射性同位元素が組み込まれたものは、例えば、体内での作用機構または有効成分分布の調査に有益となり得、比較的容易な調製性および検出性のために、特に3Hまたは14Cで標識された化合物がこの目的に適している。さらに、同位体、例えば、重水素の組込みにより、化合物のより大きな代謝安定性の結果としての特定の治療上の利益、例えば、体内での半減期の延長または要求される活性剤用量の減少がもたらされ得るので、本発明の化合物のこのような修飾も、おそらく、本発明の好ましい実施形態を構成し得る。ここで指定される障害の治療および／または予防に関して、一般式（I）の化合物の1または複数の同位体変異体は、好ましくは重水素を含む（「一般式（I）の重水素含有化合物」）。1または複数の放射性同位元素、例えば、3Hまたは14Cが組み込まれている一般式（I）の化合物の同位体変異体は、例えば医薬および／または基質組織分布研究に有益である。これらの同位体は、その組込みの容易さおよび検出性のために特に好ましい。一般式（I）の化合物に、18Fまたは11Cなどの陽電子放出同位元素を組み込むことが可能である。一般式（I）の化合物のこれらの同位体変異体は、インビボイメージング用途への使用に適している。一般式（I）の重水素含有および13C含有化合物は、質量分析において前臨床または臨床研究の範囲内で使用され得る（H．J．Leisら，Curr．Org．Chem．，1998，2，131）。本発明の化合物の同位体変種は、当業者に既知の一般的に使用される方法、例えば、以下にさらに記載される方法および実施例に記載の手順によって、それぞれの試薬および／または出発化合物の対応する同位体修飾を用いることにより調製することができる。
【００３４】
一般式（I）の化合物の同位体変異体は、一般に、試薬を試薬の同位体変異体、好ましくは重水素含有試薬に置き換えることによって、ここに記載されるスキームおよび／または実施例に記載されるように当業者に公知の方法により調製することができる。所望の重水素化部位により、いくつかの場合、D2Oからの重水素を、前記化合物の合成に使用することができる化合物または試薬に直接組み込むことが可能である（Esakiら、Tetrahedron、2006、62、10954；Esakiら、Chem．Eur．J．、2007、13、4052）。重水素を分子に組み込むための別の有用な試薬は重水素ガスである。重水素を組み込むための速い経路は、オレフィン結合の接触重水素化（H．J．Leisら，Curr．Org．Chem．，1998，2，131；J．R．Morandiら，J．Org．Chem．，1969，34（6），1889）およびアセチレン結合（N．H．Khan，J．Am．Chem．Soc．，1952，74（12），3018；S．Chandrasekharら，Tetrahedron，2011，52，3865）である。官能基を含む炭化水素において水素を重水素に直接交換するために、重水素ガスの存在下で金属触媒（すなわち、Pd、PtおよびRh）を使用することも可能である（J．G．Atkinsonら、米国特許第3966781号明細書）。種々の重水素化試薬および合成単位が、例えばC／D／N Isotopes（カナダケベック州）；Cambridge Isotope Laboratories Inc．（米国マサチューセッツ州アンドーバー）；およびCombiPhos Catalysts、Inc．（米国ニュージャージー州プリンストン）などの会社から市販されている。重水素−水素交換に関する先行技術に関するさらなる情報は、例えばHanzlikら、J．Org．Chem．、1990、55、3992〜3997；R．P．Hanzlikら、Biochem．Biophys．Res．Commun．、1989、160、844；P．J．Reiderら、J．Org．Chem．、1987、52、3326〜3334；M．Jarmanら、Carcinogenesis、1993、16（4）、683〜688；J．Atzrodtら、Angew．Chem．、Int．Ed．2007、46、7744；K．Matoishiら、2000、J．Chem．Soc、Chem．Commun．、1519〜1520；K．Kassahunら、国際公開第2012／112363号に見出すことができる。
【００３５】
「一般式（I）の重水素含有化合物」という用語は、1個または複数の水素原子が1個または複数の重水素原子によって置き換えられていて、一般式（I）の化合物中の全ての重水素化された位置での重水素の出現頻度が、約0．015％である重水素の自然出現頻度よりも高い、一般式（I）の化合物として定義される。より具体的には、一般式（I）の重水素含有化合物において、一般式（I）の化合物中の全ての重水素化された位置での重水素の出現頻度は、この位置またはこれらの位置で10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％または80％よりも高い、好ましくは90％、95％、96％または97％よりも高い、さらにより好ましくは98％または99％よりも高い。全ての重水素化された位置における重水素の出現頻度は、他の重水素化された位置における重水素の出現頻度とは無関係であることは明らかであろう。
【００３６】
1個または複数の重水素原子を一般式（I）の化合物に選択的に組み込むことは、分子の物理化学的性質（例えば、酸度［A．Streitwieserら，J．Am．Chem．Soc．，1963，85，2759；C．L．Perrinら，J．Am．Chem．Soc．，2007，129，4490］、塩基性度［C．L．Perrinら，J．Am．Chem．Soc．，2003，125，15008；C．L．Perrin in Advances in Physical Organic Chemistry，44，144；C．L．Perrinら，J．Am．Chem．Soc．，2005，127，9641］、親油性［B．Testaら，Int．J．Pharm．，1984，19（3），271］）および／または代謝プロファイルを変えることがあり、親化合物と代謝産物の比、または生じる代謝産物の量に変化をもたらすことがある。このような変化は、特定の治療上の利益をもたらし得るので、特定の状況下では好ましいものとなり得る。代謝産物の比率が変化している、代謝および代謝切り替えの割合の低下は報告されている（D．J．Kushnerら，Can．J．Physiol．Pharmacol．，1999，77，79；A．E．Mutlibら，Toxicol．Appl．Pharmacol．，2000，169，102）。親化合物および代謝産物への曝露におけるこれらの変化は、一般式（I）の重水素含有化合物の薬動力学、忍容性および効力に関して重要な結果を有し得る。一部の例では、重水素置換は、望ましくないかまたは有毒な代謝産物の形成を減らすかまたは無くし、望ましい代謝産物の形成を強化する（例えばNevirapine：A．M．Sharmaら，Chem．Res．Toxicol．，2013，26，410；Uetrechtら，Chemical Research in Toxicology，2008，21，9，1862；Efavirenz：A．E．Mutlibら，Toxicol．Appl．Pharmacol．，2000，169，102）。その他の例では、重水素化の主な効果は、全身クリアランスの比率を低下させることである。結果として、化合物の生物学的半減期は増加する。有望な臨床上の利益には、ピーク値の低下およびトラフ値の増加を伴う、同様の全身曝露を維持する能力が含まれるであろう。これは、特定の化合物の薬物動態／薬力学の関係に応じて、副作用の低下および効力の増強という結果をもたらし得る。インディプロン（A．J．Moralesら，Abstract 285、第15回国際薬物動態学会北米会議（The 15th North American Meeting of the International Society of Xenobiotics）、カリフォルニア州サンディエゴ、2008年10月12〜16日）、ML−337（C．J．Wenthurら，J．Med．Chem．，2013，56，5208）、およびオダナカチブ（K．Kassahunら，国際公開第2012／112363号）は、この重水素の効果の例である。代謝の比率の低下の結果、全身クリアランスの比率を変えることなく薬物の露出を増加させた、さらにその他のケースが報告された（例えばロフェコキシブ：F．Schneiderら，Arzneim．Forsch．Drug．Res．，2006，56，295；テラプレビル：F．Maltaisら，J．Med．Chem．，2009，52，7993）。この効果を示す重水素化薬物は、投薬の要件の減少（例えば望ましい効果を実現するための用量数を低下または投薬量の低下）を減らすことがあり、かつ／あるいは、代謝産物量の低下を生じることがある。
【００３７】
一般式（I）の化合物は、代謝を攻撃する、複数の可能性のある場所を有することがある。物理化学的性質および代謝プロファイルに対する上記の効果を最適化するため、ある特定のパターンの1個または複数の重水素−水素交換を有する、一般式（I）の重水素含有化合物を選択することができる。特に、一般式（I）の1個または複数の重水素含有化合物の1個または複数の重水素原子は、炭素原子と結合していて、かつ／または、例えばシトクロムP450などの酵素を代謝するための攻撃の場所である、一般式（I）の化合物の位置に位置している。
【００３８】
本発明の文脈において、特に指定しない限り、置換基は以下の通り定義される：
アルキル自体ならびにアルコキシ、アルキルスルホニル、アルキルアミノカルボニルオキシおよびアルコキシカルボニル中の「Alk」および「アルキル」は、一般的に1〜6個、好ましくは1〜4個または1〜3個の炭素原子を有する直鎖または分岐アルキル基であり、例としておよび好ましくは、メチル、エチル、n−プロピル、イソプロピル、tert−ブチル、イソブチル（2−メチルプロパ−1−イル）、n−ペンチルおよびn−ヘキシルである。
【００３９】
アルコキシは、例としておよび好ましくは、メトキシ、エトキシ、n−プロポキシ、イソプロポキシ、tert−ブトキシ、n−ペントキシおよびn−ヘキソキシである。
【００４０】
アルキルアミノカルボニルオキシは、1個または2個の（独立に選択される）アルキル置換基を有するアルキルアミノカルボニルオキシ基である。（C1〜C3）−アルキルアミノカルボニルオキシは、例えば、1〜3個の炭素原子を有するモノアルキルアミノカルボニルオキシ基または各アルキル置換基に1〜3個の炭素原子を有するジアルキルアミノカルボニルオキシ基である。好ましい例としては、メチルアミノカルボニルオキシ、エチルアミノカルボニルオキシ、n−プロピルアミノカルボニルオキシ、イソプロピルアミノカルボニルオキシ、tert−ブチルアミノカルボニルオキシ、n−ペンチルアミノカルボニルオキシ、n−ヘキシルアミノカルボニルオキシ、N，N−ジメチルアミノカルボニルオキシ、N，N−ジエチルアミノカルボニルオキシ、N−エチル−N−メチルアミノカルボニルオキシ、N−メチル−N−n−プロピルアミノカルボニルオキシ、N−イソプロピル−N−n−プロピルアミノカルボニルオキシ、N−tert−ブチル−N−メチルアミノカルボニル、N−エチル−N−n−ペンチルアミノカルボニルおよびN−n−ヘキシル−N−メチルアミノカルボニルオキシが挙げられる。
【００４１】
本発明の文脈におけるアルキルスルホニルは、1〜4個の炭素原子を有し、スルホニル基を介して結合している直鎖または分岐アルキル基である。好ましい例としては以下が挙げられる：メチルスルホニル、エチルスルホニル、n−プロピルスルホニル、イソプロピルスルホニル、n−ブチルスルホニルおよびtert−ブチルスルホニル。
【００４２】
アルコキシカルボニルは、例としておよび好ましくは、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、n−プロポキシカルボニル、イソプロポキシカルボニル、tert−ブトキシカルボニル、n−ペントキシカルボニルおよびn−ヘキソキシカルボニルである。
【００４３】
本発明の文脈における炭素環は、合計3〜6個の環原子を有する単環式、多環式またはスピロ環式、好ましくは単環式または二環式の飽和炭素環である。単環式飽和炭素環は、シクロアルキルと同義的に呼ばれる。例としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロペンテニル、シクロヘキセニル、シクロヘキサジエニル、シクロヘプテニル、シクロヘプタジエニル、スピロ［2．3］ヘキシル、スピロ［2．4］ヘプチル、スピロ［2．5］オクチル、ビシクロ［1．1．1］ペンチル、ビシクロ［2．2．1］ヘプチル、ビシクロ［2．2．2］オクチル、トリシクロ［3．3．1．13，7］デシルが挙げられる。3〜5個の炭素原子を有する単環式シクロアルキルが好ましい。好ましい例としては以下が挙げられる：シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルおよびビシクロ［1．1．1］ペンタ−1−イル。
【００４４】
ヘテロシクリルは、一般的に3〜10個の環原子と、最大3個、好ましくは最大2個のN、O、S、SOおよびSO2からなる群のヘテロ原子および／またはヘテロ基とを有する単環式、多環式またはスピロ環式の、好ましくは単環式、二環式またはスピロ環式の非芳香族複素環式基である。ヘテロシクリル基は飽和であっても部分不飽和であってもよい。1個の窒素原子を有する4〜6員単環式飽和ヘテロシクリル基、ならびにNおよびOからなる群のさらなるヘテロ原子を有するもの、ならびに1個の窒素原子を有する6〜7員二環式またはスピロ環式飽和ヘテロシクリル基も好ましい。好ましい例としては以下が挙げられる：アゼチジニル、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、オキサゾリジニル、イミダゾリジニル、モルホリニル、テトラヒドロピリミジン、アザスピロ［2．4］ヘプチルおよびアザビシクロ［3．1．0］ヘキシル。
【００４５】
ハロゲンは、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素、好ましくは塩素を表す。
【００４６】
R1、R2、Ar1、Ar2、Y1またはY2が表し得る基の式において、記号＃1、＃2、＃3、＊、＊＊および＊＊＊が付けられた線の端点は炭素原子もCH2基も表さず、R1、R2、Ar1、Ar2、Y1およびY2それぞれが結合しているそれぞれの原子との結合の一部である。
【００４７】
本発明の化合物中の基が置換されている場合、特に指定しない限り、この基は、一置換されていても多置換されていてもよい。本発明の文脈において、2回以上生じる全ての基は互いに独立に定義される。本発明の化合物中の基が置換されている場合、特に指定しない限り、この基は、一置換されていても多置換されていてもよい。1個の置換基または2個の同一のもしくは異なる置換基による置換が好ましい。
【００４８】
本発明の文脈において、「治療」または「治療すること」という用語は、疾患、状態、障害、傷害または健康問題の、このような状態および／またはこのような状態の症状の発達、経過または進行の阻害、遅延、検査、軽減、減弱、制限、減少、抑制、忌避または治癒を含む。ここでは、「療法」は「治療」という用語と同義であると理解される。
【００４９】
「防止」、「予防」および「妨害」という用語は本発明の文脈において同義的に使用され、疾患、状態、障害、傷害または健康問題に、あるいはこのような状態および／またはこのような状態の症状の発達または進行に罹患する、を経験する、を患うまたはこれらを有するリスクの回避または減少を指す。
【００５０】
疾患、状態、障害、傷害または健康問題の治療または予防は、部分的であっても完全であってもよい。
【００５１】
本発明の文脈においては、
R1がNR3R4
（式中、
R3は水素、メチルまたは（C2〜C4）−アルキルを表し、
R4はフッ素によって最大四置換された（C1〜C6）−アルキルを表し、
（C1〜C6）−アルキルはオキソによって置換されていてもよい、
あるいは
R3およびR4は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、環員としてNおよびOからなる群の1個または2個のさらなる同一のまたは異なるヘテロ原子を含有し得る飽和4〜6員単環式または6〜9員二環式複素環を形成し、
4〜6員単環式および6〜9員二環式複素環がそれぞれ、（C1〜C4）−アルキル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、ヒドロキシ、オキソ、（C1〜C3）−アルコキシ、ジフルオロメトキシ、トリフルオロメトキシの群から独立に選択される1〜5個の置換基によって置換されていてもよく、さらにフッ素によって最大四置換されていてもよく、
（C1〜C4）−アルキルは、ヒドロキシおよび（C1〜C3）−アルコキシからなる群の同一のまたは異なる置換基によって一置換または二置換されていてもよく、フッ素によって最大四置換されていてもよい）
を表し、
R2が式
【化３】
2019524722.tif 000005
（式中、
＊はアミド部分の窒素原子との結合点を示し、
R5Aは水素または（C1〜C4）−アルキルを表し、
R5Bはメチル、モノフルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、ペンタフルオロエチルまたはトリフルオロメトキシメチルを表し、
R6は、フッ素によって最大五置換された（C1〜C4）−アルキル、またはフッ素によって最大四置換された（C3〜C5）−シクロアルキルを表し、
Y1は−（CH2）k−
（式中、
kは1または2を表す）
を表し、
R7はフッ素によって最大五置換された（C1〜C2）−アルキルを表し、
R10は水素、フッ素またはトリフルオロメチルを表し、
L1は結合または式−CR8AR8B−
（式中、
R8Aは水素を表し、
R8Bはメチル、トリフルオロメチル、ペンタフルオロエチルまたはトリフルオロメトキシメチルを表す）
の基を表し、
Ar2はフェニルを表し、
フェニルは、フッ素、塩素、（C1〜C3）−アルキルおよびトリフルオロメチルからなる群の同一のまたは異なる置換基によって一〜三置換されていてもよい）
の基を表し、
Ar1が環炭素原子を介して結合したピリジン環を表し、
ピリジン環が、フッ素、塩素、シアノ、メチルまたはトリフルオロメチルによって一置換または二置換されていてもよい、
式（I）の化合物ならびにその塩、溶媒和物および塩の溶媒和物が好ましい。
本発明の文脈においては、
R1がNR3R4
（式中、
R3は水素またはメチルを表し、
R4はメチルまたは2−フルオロエチルを表す）
を表す、
あるいは
式
【化４】
2019524722.tif 000006
（式中、
＊＊は分子の残りとの結合点を示し、
Y2は式
【化５】
2019524722.tif 000007
（式中、
＃1はピロリジノン環の窒素原子との結合点を示し、
＃2はピロリジノン環の炭素原子との結合点を示す）
の基を表し、
Y3は−N（R12）−または式
【化６】
2019524722.tif 000008
（式中、
＃1および＃2はそれぞれ、ピロリジノン環の炭素原子との結合点を示す）
の基を表し、
R11はフッ素、（C1〜C4）−アルキル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、ヒドロキシ、ヒドロキシメチル、メトキシ、ジフルオロメトキシまたはトリフルオロメトキシを表し、
pは0、1、2、3または4の数を表し、
置換基R11が2回以上出現する場合、それらの意味は各場合において同一でも異なっていてもよく、
R12は水素または2−ヒドロキシエチルを表す）
の、窒素原子を介して結合した、複素環を表し、
R2が式
【化７】
2019524722.tif 000009
（式中、
＊はアミド部分の窒素原子との結合点を示し、
R5Aは水素またはメチルを表し、
R5Bはメチル、モノフルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、ペンタフルオロエチルまたはトリフルオロメトキシメチルを表し、
R6はメチル、エチル、トリフルオロメチル、2，2，2−トリフルオロエチル、tert−ブチル、イソブチルまたはシクロプロピルを表し、
Y1は−（CH2）k−
（式中、
kは1または2を表す）
を表し、
R7はトリフルオロメチルを表し、
R10は水素、フッ素またはトリフルオロメチルを表し、
L1は結合または式−CR8AR8B−
（式中、
R8Aは水素を表し、
R8Bはトリフルオロメチルを表す）
の基を表し、
Ar2はフェニルを表し、
フェニルは、フッ素および塩素からなる群の同一のまたは異なる置換基によって一置換または二置換されていてもよい）
の基を表し、
Ar1が式
【化８】
2019524722.tif 000010
（式中、
＊＊＊は窒素原子との結合点を示し、
R13Aはフッ素または塩素を表し、
R13Bはフッ素または水素を表す）
の基を表す、
式（I）の化合物ならびにその塩、溶媒和物および塩の溶媒和物が好ましい。
【００５２】
本発明の文脈においては、
R1が式
【化９】
2019524722.tif 000011
（式中、
＊＊は分子の残りとの結合点を示す）
の、窒素原子を介して結合した、複素環を表し、
R2が式
【化１０】
2019524722.tif 000012
（式中、
＊はアミド部分の窒素原子との結合点を示し、
R6Aはトリフルオロメチル、エチル、tert−ブチル、イソブチルまたはシクロプロピルを表し、
R6Bはメチルまたはエチルを表し、
R6Cはトリフルオロメチルまたはシクロプロピルを表し、
Ar2は式
【化１１】
2019524722.tif 000013
（式中、
＃3は各場合で、結合部位を示す）
の基を表す）
の基を表し、
Ar1が式
【化１２】
2019524722.tif 000014
（式中、
＊＊＊は窒素原子との結合点を示す）
の基を表す、
式（I）の化合物ならびにその塩、溶媒和物および塩の溶媒和物が特に好ましい。
【００５３】
本発明のさらなる特定の実施形態は、
R1が式
【化１３】
2019524722.tif 000015
（式中、
＊＊は分子の残りとの結合点を示し、
R11はフッ素、（C1〜C4）−アルキル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、ヒドロキシ、ヒドロキシメチル、メトキシ、ジフルオロメトキシまたはトリフルオロメトキシを表し、
pは0、1、2、3または4の数を表し、
置換基R11が2回以上出現する場合、それらの意味は各場合において同一でも異なっていてもよい）
の、窒素原子を介して結合した、複素環を表し、
R2が式
【化１４】
2019524722.tif 000016
（式中、
＊はアミド部分の窒素原子との結合点を示し、
R6Aはトリフルオロメチル、エチル、tert−ブチル、イソブチルまたはシクロプロピルを表し、
R6Bはメチル、エチル、tert−ブチルまたはシクロプロピルを表し、
R6Cはトリフルオロメチルまたはシクロプロピルを表す）
の基を表し、
Ar1が式
【化１５】
2019524722.tif 000017
（式中、
＊＊＊は窒素原子との結合点を示す）
の基を表す、
式（I）の化合物ならびにその塩、溶媒和物および塩の溶媒和物を包含する。
【００５４】
本発明のさらなる特定の実施形態は、
R1が式
【化１６】
2019524722.tif 000018
（式中、
＊＊は分子の残りとの結合点を示す）
の、窒素原子を介して結合した、複素環を表し、
R2が式
【化１７】
2019524722.tif 000019
（式中、
＊はアミド部分の窒素原子との結合点を示し、
R6Aはトリフルオロメチルを表し、
R6Bはメチルを表す）
の基を表し、
Ar1が式
【化１８】
2019524722.tif 000020
（式中、
＊＊＊は窒素原子との結合点を示す）
の基を表す、
式（I）の化合物ならびにその塩、溶媒和物および塩の溶媒和物を包含する。
【００５５】
本発明のさらなる特定の実施形態は、
R1が式
【化１９】
2019524722.tif 000021
（式中、
＊＊は分子の残りとの結合点を示し、
Y2は式
【化２０】
2019524722.tif 000022
（式中、
＃1はピロリジノン環の窒素原子との結合点を示し、
＃2はピロリジノン環の炭素原子との結合点を示す）
の基を表し、
Y3は−N（R12）−または式
【化２１】
2019524722.tif 000023
（式中、
＃1および＃2はそれぞれ、ピロリジノン環の炭素原子との結合点を示す）
の基を表し、
R11はフッ素、（C1〜C4）−アルキル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、ヒドロキシ、ヒドロキシメチル、メトキシ、ジフルオロメトキシまたはトリフルオロメトキシを表し、
pは0、1、2、3または4の数を表し、
置換基R11が2回以上出現する場合、それらの意味は各場合において同一でも異なっていてもよい）
の、窒素原子を介して結合した、複素環を表す、
式（I）の化合物ならびにそのN−オキシド、塩、溶媒和物、N−オキシドの塩およびN−オキシドまたは塩の溶媒和物を包含する。
【００５６】
本発明のさらなる特定の実施形態は、
R1が式
【化２２】
2019524722.tif 000024
（式中、
＊＊は分子の残りとの結合点を示し、
R11はフッ素、（C1〜C4）−アルキル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、ヒドロキシ、ヒドロキシメチル、メトキシ、ジフルオロメトキシまたはトリフルオロメトキシを表し、
pは0、1、2、3または4の数を表し、
置換基R11が2回以上出現する場合、それらの意味は各場合において同一でも異なっていてもよい）
の、窒素原子を介して結合した、複素環を表す、
式（I）の化合物ならびにそのN−オキシド、塩、溶媒和物、N−オキシドの塩およびN−オキシドまたは塩の溶媒和物を包含する。
【００５７】
本発明のさらなる特定の実施形態は、
R1が式
【化２３】
2019524722.tif 000025
（式中、
＊＊は分子の残りとの結合点を示し、
R11はフッ素、（C1〜C4）−アルキル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、ヒドロキシ、ヒドロキシメチル、メトキシ、ジフルオロメトキシまたはトリフルオロメトキシを表し、
pは0、1、2、3または4の数を表し、
置換基R11が2回以上出現する場合、それらの意味は各場合において同一でも異なっていてもよい）
の、窒素原子を介して結合した、複素環を表す、
式（I）の化合物ならびにそのN−オキシド、塩、溶媒和物、N−オキシドの塩およびN−オキシドまたは塩の溶媒和物を包含する。
【００５８】
本発明のさらなる特定の実施形態は、
R1が式
【化２４】
2019524722.tif 000026
（式中、
＊＊は分子の残りとの結合点を示し、
R11はフッ素、（C1〜C4）−アルキル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、ヒドロキシ、ヒドロキシメチル、メトキシ、ジフルオロメトキシまたはトリフルオロメトキシを表し、
pは0、1、2、3または4の数を表し、
置換基R9が2回以上出現する場合、それらの意味は各場合において同一でも異なっていてもよい）
の、窒素原子を介して結合した、複素環を表す、
式（I）の化合物ならびにそのN−オキシド、塩、溶媒和物、N−オキシドの塩およびN−オキシドまたは塩の溶媒和物を包含する。
【００５９】
本発明のさらなる特定の実施形態は、
R1が式
【化２５】
2019524722.tif 000027
（式中、
＊＊は分子の残りとの結合点を示す）
の、窒素原子を介して結合した、複素環を表す、
式（I）の化合物ならびにそのN−オキシド、塩、溶媒和物、N−オキシドの塩およびN−オキシドまたは塩の溶媒和物を包含する。
【００６０】
本発明のさらなる特定の実施形態は、
R1が式
【化２６】
2019524722.tif 000028
（式中、
＊＊は分子の残りとの結合点を示す）
の、窒素原子を介して結合した、複素環を表す、
式（I）の化合物ならびにそのN−オキシド、塩、溶媒和物、N−オキシドの塩およびN−オキシドまたは塩の溶媒和物を包含する。
【００６１】
本発明のさらなる特定の実施形態は、
R1が式
【化２７】
2019524722.tif 000029
（式中、
＊＊は分子の残りとの結合点を示す）
の、窒素原子を介して結合した、複素環を表す、
式（I）の化合物ならびにそのN−オキシド、塩、溶媒和物、N−オキシドの塩およびN−オキシドまたは塩の溶媒和物を包含する。
【００６２】
本発明のさらなる特定の実施形態は、
R2が式
【化２８】
2019524722.tif 000030
（式中、
＊はアミド部分の窒素原子との結合点を示し、
R5Aは水素またはメチルを表し、
R5Bはメチル、モノフルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、ペンタフルオロエチルまたはトリフルオロメトキシメチルを表し、
R6はメチル、エチル、トリフルオロメチル、2，2，2−トリフルオロエチル、tert−ブチル、イソブチルまたはシクロプロピルを表し、
L1は結合または式−CR8AR8B−
（式中、
R8Aは水素を表し、
R8Bはトリフルオロメチルを表す）
の基を表し、
Ar2はフェニルを表し、
フェニルはフッ素および塩素からなる群の同一のまたは異なる置換基によって一置換または二置換されていてもよい）
の基を表す、
式（I）の化合物ならびにそのN−オキシド、塩、溶媒和物、N−オキシドの塩およびN−オキシドまたは塩の溶媒和物を包含する。
【００６３】
本発明のさらなる特定の実施形態は、
R2が式
【化２９】
2019524722.tif 000031
（式中、
＊はアミド部分の窒素原子との結合点を示し、
R6Aはトリフルオロメチル、エチル、tert−ブチル、イソブチルまたはシクロプロピルを表し、
R6Bはメチルまたはエチルを表し、
R6Cはトリフルオロメチルまたはシクロプロピルを表し、
Ar2は式
【化３０】
2019524722.tif 000032
（式中、
＃3は各場合で、結合部位を示す）
の基を表す）
の基を表す、
式（I）の化合物ならびにそのN−オキシド、塩、溶媒和物、N−オキシドの塩およびN−オキシドまたは塩の溶媒和物を包含する。
【００６４】
本発明のさらなる特定の実施形態は、
R2が式
【化３１】
2019524722.tif 000033
（式中、
＊はアミド部分の窒素原子との結合点を示し、
R6Aはトリフルオロメチル、エチル、tert−ブチル、イソブチルまたはシクロプロピルを表し、
R6Bはメチル、エチル、tert−ブチルまたはシクロプロピルを表し、
R6Cはトリフルオロメチルまたはシクロプロピルを表す）
の基を表す、
式（I）の化合物ならびにそのN−オキシド、塩、溶媒和物、N−オキシドの塩およびN−オキシドまたは塩の溶媒和物を包含する。
【００６５】
本発明のさらなる特定の実施形態は、
R2が式
【化３２】
2019524722.tif 000034
（式中、
＊はアミド部分の窒素原子との結合点を示し、
R6Aはトリフルオロメチルを表し、
R6Bはメチルを表す）
の基を表す、
式（I）の化合物ならびにそのN−オキシド、塩、溶媒和物、N−オキシドの塩およびN−オキシドまたは塩の溶媒和物を包含する。
【００６６】
本発明のさらなる特定の実施形態は、
R2が式
【化３３】
2019524722.tif 000035
（式中、
＊はアミド部分の窒素原子との結合点を示し、
R6Aはトリフルオロメチル、エチル、tert−ブチル、イソブチルまたはシクロプロピルを表す）
の基を表す、
式（I）の化合物ならびにそのN−オキシド、塩、溶媒和物、N−オキシドの塩およびN−オキシドまたは塩の溶媒和物を包含する。
【００６７】
本発明のさらなる特定の実施形態は、
R2が式
【化３４】
2019524722.tif 000036
（式中、
＊はアミド部分の窒素原子との結合点を示し、
R6Bはメチルまたはエチルを表す）
の基を表す、
式（I）の化合物ならびにそのN−オキシド、塩、溶媒和物、N−オキシドの塩およびN−オキシドまたは塩の溶媒和物を包含する。
【００６８】
本発明のさらなる特定の実施形態は、
R2が式
【化３５】
2019524722.tif 000037
（式中、
＊はアミド部分の窒素原子との結合点を示し、
R6Bはメチルを表す）
の基を表す、
式（I）の化合物ならびにそのN−オキシド、塩、溶媒和物、N−オキシドの塩およびN−オキシドまたは塩の溶媒和物を包含する。
【００６９】
本発明のさらなる特定の実施形態は、
Ar1が式
【化３６】
2019524722.tif 000038
（式中、
＊＊＊は窒素原子との結合点を示す）
の基を表す、
式（I）の化合物ならびにそのN−オキシド、塩、溶媒和物、N−オキシドの塩およびN−オキシドまたは塩の溶媒和物を包含する。
【００７０】
基のそれぞれの組み合わせまたは好ましい組み合わせにおいて指定されている個々の基の定義はまた、指定されている基のそれぞれの組み合わせと独立に、他の組み合わせの基の定義によって所望のように置き換えられる。
【００７１】
上記の好ましい範囲および実施形態の2つ以上の組み合わせが極めて特に好ましい。
【００７２】
好ましい、特に好ましいおよび極めて特に好ましいとして指定される基の定義を共に式（I）の化合物および対応して全ての中間体に適用する。
【００７３】
本発明はさらに、本発明による式（I）の化合物を調製する方法であって、
［A］式（II）
【化３７】
2019524722.tif 000039
（式中、R2およびAr1は上に示される定義を有し、
Halはフッ素、塩素、臭素またはヨウ素、好ましくは塩素を表す）
の化合物を、式（III）
【化３８】
2019524722.tif 000040
（式中、R1は上に示される意味を有する）
の化合物と反応させて、本発明による式（I）のカルボキサミド
【化３９】
2019524722.tif 000041
（式中、R1、R2およびAr1は上に示される定義を有する）
を得る、
または
［B］式（IV）
【化４０】
2019524722.tif 000042
（式中、R1およびAr1は上に示される定義を有する）
の化合物を式（V）
【化４１】
2019524722.tif 000043
（式中、R2は上に示される意味を有する）
の化合物と反応させて、本発明による式（I）のカルボキサミド
【化４２】
2019524722.tif 000044
（式中、R1、R2およびAr1は上に示される定義を有する）
を得て、
適当であれば、このようにして得られた式（I）の化合物をそれらのエナンチオマーおよび／またはジアステレオマーに分離する、ならびに／あるいは適当な（i）溶媒および／または（ii）塩基もしくは酸でそれらの溶媒和物、塩および／または塩の溶媒和物に変換する
ことを特徴とする方法を提供する。
【００７４】
反応（II）＋（III）→（I）は、求核置換反応または遷移金属媒介カップリング反応を介して行うことができる。
【００７５】
求核置換反応は、好ましくは塩基の存在下で行う。プロセスステップ（II）＋（III）→（I）に適した塩基は、慣用的無機または有機塩基である。これらには、好ましくはアルカリ金属水酸化物（例えば、水酸化リチウム、水酸化ナトリウムまたは水酸化カリウム）、アルカリ金属またはアルカリ土類金属炭酸塩（炭酸リチウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウムまたは炭酸セシウムなど）、アルカリ金属アルコキシド（リチウムtert−ブトキシド、ナトリウムtert−ブトキシドまたはカリウムtert−ブトキシドなど）、アルカリ金属水素化物（水素化ナトリウムまたは水素化カリウムなど）、または有機アミン（N，N−ジイソプロピルエチルアミン（DIPEA）、1，5−ジアザビシクロ［4．3．0］ノナ−5−エン（DBN）および1，8−ジアザビシクロ［5．4．0］ウンデカ−7−エン（DBU）など）が含まれる。N，N−ジイソプロピルエチルアミン（DIPEA）を使用することが好まれる。反応は、一般的に0℃〜＋100℃の温度範囲内で、好ましくは＋23℃〜＋80℃で行う。
【００７６】
プロセスステップ（II）→（III）→（I）のための不活性溶媒は、例えば、エーテル（ジエチルエーテル、ジオキサン、テトラヒドロフラン、グリコールジメチルエーテルまたはジエチレングリコールジメチルエーテルなど）、炭化水素（ベンゼン、トルエン、キシレン、ヘキサン、シクロヘキサンまたは鉱油留分など）、ハロ炭化水素（ジクロロメタン、トリクロロメタン、テトラクロロメタン、1，2−ジクロロエタン、トリクロロエチレンまたはクロロベンゼンなど）、または他の溶媒（アセトン、酢酸エチル、アセトニトリル、ピリジン、ジメチルスルホキシド、N，N−ジメチルホルムアミド（DMF）、N，N’−ジメチルプロピレン尿素（DMPU）またはN−メチルピロリドン（NMP）など）である。言及する溶媒の混合物を使用することも同様に可能である。ジメチルホルムアミド（DMF）またはN−メチルピロリドン（NMP）を用いることが好まれる。
【００７７】
好ましい実施形態では、プロセスステップ（II）＋（III）→（I）のための遷移金属媒介カップリング反応を、パラジウム触媒の存在下で行う。適切なパラジウム触媒は、例えば、場合により適切なホスフィン配位子、例えばトリフェニルホスフィン、トリ−tert−ブチルホスフィン、2−ジシクロヘキシルホスフィノ−2’，4’，6’−トリイソプロピルビフェニル（X−Phos）、2−ジシクロヘキシルホスフィノ−2’，6’−ジメトキシビフェニル（S−Phos）、1，2，3，4，5−ペンタフェニル−1’−（ジ−tert−ブチルホスフィノ）フェロセン（Q−Phos）、4，5−ビス（ジフェニルホスフィノ）−9，9−ジメチルキサンテン（キサントホス）、2，2’−ビス（ジフェニルホスフィノ）−1，1’−ビナフチル（BINAP）、2−ジシクロヘキシルホスフィノ−2’−（N，N−ジメチルアミノ）ビフェニルまたは2−ジ−tert−ブチルホスフィノ−2’−（N，N−ジメチルアミノ）ビフェニルと組み合わせた、酢酸パラジウム（II）、塩化パラジウム（II）、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（II）クロリド、ビス（アセトニトリル）パラジウム（II）クロリド、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（0）、ビス（ジベンジリデンアセトン）パラジウム（0）、トリス（ジベンジリデンアセトン）パラジウム（0）または［1，1’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］パラジウム（II）クロリドである。
【００７８】
パラジウム触媒カップリング反応（II）＋（III）→（I）は、一般的に塩基の存在下で行う。適切な塩基は、特に、アルカリ金属炭酸塩（炭酸ナトリウム、炭酸カリウムまたは炭酸セシウムなど）、アルカリ金属リン酸塩（リン酸ナトリウムまたはリン酸カリウムなど）、アルカリ金属フッ化物（フッ化カリウムまたはフッ化セシウムなど）、またはアルカリ金属tert−ブトキシド（ナトリウムtert−ブトキシドまたはカリウムtert−ブトキシドなど）である。マイクロ波装置を用いた加熱が有利となり得る場合、＋80℃〜＋200℃、好ましくは＋80℃〜＋150℃の温度範囲内で、不活性溶媒、例えば、トルエン、1，2−ジメトキシエタン、テトラヒドロフラン、1，4−ジオキサン、ジメチルスルホキシド（DMSO）、N，N−ジメチルホルムアミド（DMF）、N，N−ジメチルアセトアミド（DMA）またはその混合物中で反応を行う。
【００７９】
このカップリング反応には、酢酸パラジウム（II）、4，5−ビス（ジフェニルホスフィノ）−9，9−ジメチルキサンテン（キサントホス）および炭酸セシウムまたは炭酸カリウムからなる触媒／配位子／塩基系および溶媒としての1，4−ジオキサンを使用することが好まれる。
【００８０】
カップリング反応（II）＋（III）→（I）は、さらに好ましい実施態様では、酸化銅（I）、臭化銅（I）またはヨウ化銅（I）などの銅（I）触媒を用いて、トランス−N，N’−ジメチル−1，2−シクロヘキサンジアミン、8−ヒドロキシキノリンまたは1，10−フェナントロリンなどの銅配位子、および炭酸カリウム、炭酸セシウムまたはビス（テトラエチルアンモニウム）カーボネートなどの無機または有機炭酸塩基の存在下で行うことができる。この反応に適した不活性溶媒は、特に、場合により水を添加した、トルエン、キシレン、1，4−ジオキサン、アセトニトリル、ジメチルスルホキシド（DMSO）、N，N−ジメチルホルムアミド（DMF）またはこれらの混合物である。ジメチルホルムアミド中ヨウ化銅（I）、トランス−N，N’−ジメチル−1，2−シクロヘキサンジアミンおよび炭酸カリウムからなる系を使用することが好まれる。反応は、一般的に＋50℃〜＋200℃の温度範囲内で、好ましくは＋60℃〜＋150℃で行う。
【００８１】
カップリング反応（IV）＋（V）→（I）［アミド形成］は、縮合剤もしくは活性化剤を用いて直接経路によって、または（IV）から得ることができるカルボニルクロリド、カルボン酸エステルもしくはカルボニルイミダゾリドの中間段階を介して行うことができる。
【００８２】
縮合剤または活性化剤として使用するのに適しているのは、例えば、場合によりさらなる補助剤（1−ヒドロキシベンゾトリアゾール（HOBt）またはN−ヒドロキシスクシンイミド（HOSu）など）、および塩基としてのアルカリ金属炭酸塩（例えば、炭酸ナトリウムもしくは炭酸カリウム）または三級アミン塩基（トリエチルアミン、N−メチルモルホリン（NMM）、N−メチルピペリジン（NMP）、N，N−ジイソプロピルエチルアミン（DIPEA）、ピリジンもしくは4−N，N−ジメチルアミノピリジン（DMAP））と組み合わせた、カルボジイミド（N，N’−ジエチル−、N，N’−ジプロピル−、N，N’−ジイソプロピル−、N，N’−ジシクロヘキシルカルボジイミド（DCC）もしくはN−（3−ジメチルアミノプロピル）−N’−エチルカルボジイミド塩酸塩（EDC）など）、ホスゲン誘導体（N，N’−カルボニルジイミダゾール（CDI）、クロロギ酸イソプロピルもしくはクロロギ酸イソブチルなど）、1，2−オキサゾリウム化合物（2−エチル−5−フェニル−1，2−オキサゾリウム3−硫酸塩もしくは2−tert−ブチル−5−メチルイソオキサゾリウム過塩素酸塩など）、アシルアミノ化合物（2−エトキシ−1−エトキシカルボニル−1，2−ジヒドロキノリンなど）、α−クロレナミン（1−クロロ−N，N，2−トリメチルプロパ−1−エン−1−アミンなど）、1，3，5−トリアジン誘導体（4−（4，6−ジメトキシ−1，3，5−トリアジン−2−イル）−4−メチルモルホリニウムクロリドなど）、リン化合物（n−プロパンホスホン酸無水物（T3P、PPACA）、ジエチルシアノホスホネート、ジフェニルホスホリルアジド（DPPA）、ビス−（2−オキソ−3−オキサゾリジニル）ホスホリルクロリド、ベンゾトリアゾール−1−イルオキシトリス（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェートもしくはベンゾトリアゾール−1−イルオキシトリス（ピロリジノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（PyBOP）など）、またはウロニウム化合物（O−（ベンゾトリアゾール−1−イル）−N，N，N’，N’−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（TBTU）、O−（ベンゾトリアゾール−1−イル）−N，N，N’，N’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（HBTU）、O−（1H−6−クロロベンゾトリアゾール−1−イル）−1，1，3，3−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（TCTU）、O−（7−アザベンゾトリアゾール−1−イル）−N，N，N’，N’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（HATU）もしくは2−（2−オキソ−1−（2H）−ピリジル）−1，1，3，3−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（TPTU）など）である。N，N−ジイソプロピルエチルアミン（DIPEA）と組み合わせたO−（7−アザベンゾトリアゾール−1−イル）−N，N，N’，N’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（HATU）、およびN，N−ジイソプロピルエチルアミン（DIPEA）と組み合わせたn−プロパンホスホン酸無水物（T3P、PPACA）が好ましく使用される縮合剤または活性化剤である。
【００８３】
式（II）の化合物は、式（VI）
【化４３】
2019524722.tif 000045
（式中、HalおよびAr1は上に示される定義を有する）
のカルボン酸化合物を式（V）
【化４４】
2019524722.tif 000046
（式中、R2は上に示される意味を有する）
の化合物と反応させて、式（II）
【化４５】
2019524722.tif 000047
（式中、Hal、R1、R2およびAr1は上に示される定義を有する）
の本発明のカルボキサミドを得ることによって調製することができる。
【００８４】
カップリング反応（VI）＋（V）→（II）［アミド形成］は、縮合剤もしくは活性化剤を用いて直接経路によって、または反応（IV）＋（V）→（I）について既に記載される条件および試薬と同様に（VI）から得ることができるカルボニルクロリド、カルボン酸エステルもしくはカルボニルイミダゾリドの中間段階を介して行うことができる。
【００８５】
（II）を得るためのカップリング反応においてHATUを活性化剤として使用する場合、一般式（II）の個々の定義される生成物、または「HATU付加物」との混合物のいずれかを得ることが可能である。本発明の文脈における「HATU付加物」は、1−ヒドロキシ−7−アザベンゾトリアゾールとも呼ばれる、一般式（II）中のHal置換基が3H−［1，2，3］トリアゾロ［4，5−b］ピリジン−3−オール基によって置き換えられた擬ハライド化合物を指す。同様に、一般式（II）のハロゲン化合物と「HATU付加物」の混合物を、記載される反応と同様に、さらなる反応（（I）または（VIII）の後）のための反応物質として使用することができる。
【００８６】
式（VI）から得ることができるカルボニルクロリドまたはカルボニルイミダゾリドを介した2段階反応の場合、アミン成分（V）とのカップリングを、慣用的な塩基、例えば、炭酸ナトリウムもしくは炭酸カリウム、トリエチルアミン、DIPEA、N−メチルモルホリン（NMM）、N−メチルピペリジン（NMP）、ピリジン、2，6−ジメチルピリジン、4−N，N−ジメチルアミノピリジン（DMAP）、1，8−ジアザビシクロ［5．4．0］ウンデカ−7−エン（DBU）、1，5−ジアザビシクロ［4．3．0］ノナ−5−エン（DBN）、ナトリウムメトキシドもしくはカリウムメトキシド、ナトリウムエトキシドもしくはカリウムエトキシド、ナトリウムtert−ブトキシドもしくはカリウムtert−ブトキシド、または水素化ナトリウムもしくは水素化カリウムの存在下で行う。
【００８７】
カルボニルイミダゾリド自体は、（VI）とN，N’−カルボニルジイミダゾール（CDI）の、対応する比較的高沸点の溶媒、例えばN，N−ジメチルホルムアミド（DMF）中、高温（＋60℃〜＋150℃）での反応によって既知の方法によって得ることができる。カルボニルクロリドの調製は、ジクロロメタンまたはTHFなどの不活性溶媒中、塩化チオニルまたは塩化オキサリルで（VI）を処理することによって慣用的な方法で達成される。
【００８８】
言及されるカップリング反応のための不活性溶媒は、使用される方法により、例えば、エーテル（ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、メチルtert−ブチルエーテル、テトラヒドロフラン、1，4−ジオキサン、1，2−ジメトキシエタンもしくはビス（2−メトキシエチル）エーテルなど）、炭化水素（ベンゼン、トルエン、キシレン、ペンタン、ヘキサンもしくはシクロヘキサンなど）、ハロ炭化水素（ジクロロメタン、トリクロロメタン、四塩化炭素、1，2−ジクロロエタン、トリクロロエチレンもしくはクロロベンゼンなど）、または極性非プロトン性溶媒（アセトン、メチルエチルケトン、酢酸エチル、アセトニトリル、ブチロニトリル、ピリジン、ジメチルスルホキシド（DMSO）、N，N−ジメチルホルムアミド（DMF）、N，N’−ジメチルプロピレン尿素（DMPU）もしくはN−メチルピロリドン（NMP）など）である。このような溶媒の混合物を使用することも可能である。N，N−ジメチルホルムアミド（DMF）およびジクロロメタン（DCM）をトリエチルアミンと組み合わせて使用することが好ましい。カップリングは、一般的に0℃〜＋130℃の温度範囲内で、好ましくは＋20℃〜＋30℃で行う。
【００８９】
そのそれぞれの置換パターンに応じて、
［C］式（VII）
【化４６】
2019524722.tif 000048
（式中、HalおよびAr1は上に示される定義を有し、
Tは（C1〜C4）−アルキルまたはベンジルを表す）
の化合物を、第1のステップで、式（III）
【化４７】
2019524722.tif 000049
（式中、R1は上に示される意味を有する）
の化合物と反応させて、式（VIII）
【化４８】
2019524722.tif 000050
（式中、T、R1およびAr1は上に示される定義を有する）
の化合物を得て、場合により、第2のステップで、エステル基Tを脱離して、式（IV）
【化４９】
2019524722.tif 000051
（式中、R1およびAr1は上に示される定義を有する）
の本発明のカルボン酸を得る、
または
［D］式（VI）
【化５０】
2019524722.tif 000052
（式中、HalおよびAr1は上に示される定義を有する）
の化合物を式（III）
【化５１】
2019524722.tif 000053
（式中、R1は上に示される意味を有する）
の化合物と反応させて、式（IV）
【化５２】
2019524722.tif 000054
（式中、R1およびAr1は上に示される定義を有する）
の本発明のカルボン酸を得る
ことによって、式（IV）の化合物を調製することができる。
【００９０】
反応（VII）＋（III）→（VIII）［経路C］または反応（VI）＋（III）→（IV）［経路D］は、求核置換反応または遷移金属媒介カップリング反応を介して、（II）＋（III）→（I）について既に記載される条件と同様に行うことができる。
【００９１】
好ましい実施形態では、反応を塩基の存在下で求核置換反応として経路Cにしたがって行い、N，N−ジイソプロピルエチルアミン（DIPEA）を用いることが好ましい。ジメチルホルムアミド（DMF）、N−メチルピロリドン（NMP）またはアセトニトリルを溶媒として用いることが好まれる。
【００９２】
好ましい実施形態では、反応を、適切なパラジウム触媒の存在下で、遷移金属媒介カップリング反応として経路Dにしたがって行う。4，5−ビス（ジフェニルホスフィノ）−9，9−ジメチルキサンテン（キサントホス）、炭酸セシウムまたは炭酸カリウムおよび溶媒としての1，4−ジオキサンと組み合わせた酢酸パラジウム（II）の系を使用することが好まれる。
【００９３】
プロセスステップ（VIII）→（IV）におけるエステル基Tの脱離は、エステルを不活性溶媒中酸または塩基で処理することによって行い、後の変形で最初に形成されたカルボン酸の塩を酸でその後処理することによって遊離カルボン酸に変換する。tert−ブチルエステルの場合、エステル開裂を、好ましくは酸を用いて行う。あるいは、ベンジルエステルを、適切な触媒、例えば、活性炭上パラジウムの存在下で、水素化（水素化分解）によって開裂することもできる。
【００９４】
この反応に適した溶媒は、水およびエステル開裂のための慣用的な有機溶媒である。これらには、特にアルコール（メタノール、エタノール、n−プロパノール、イソプロパノール、n−ブタノールまたはtert−ブタノールなど）、またはエーテル（ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、1，4−ジオキサンまたは1，2−ジメトキシエタンなど）、または他の溶媒（ジクロロメタン、アセトニトリル、N，N−ジメチルホルムアミドまたはジメチルスルホキシドなど）が含まれる。これらの溶媒の混合物を使用することも等しく可能である。塩基性エステル加水分解の場合、水とテトラヒドロフランの混合物を使用することが好まれる。
【００９５】
加水分解反応に適した塩基は、慣用的な無機塩基である。これらには、特にアルカリ金属もしくはアルカリ土類金属水酸化物、例えば、水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウムもしくは水酸化バリウム、またはアルカリ金属もしくはアルカリ土類金属炭酸塩、例えば、炭酸ナトリウム、炭酸カリウムもしくは炭酸カルシウムが含まれる。
エステル加水分解に適した酸は、一般的に、場合により水を添加した、硫酸、塩化水素／
【００９６】
塩酸、臭化水素／臭化水素酸、リン酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸もしくはトリフルオロメタンスルホン酸またはこれらの混合物である。水／テトラヒドロフラン混合物中塩酸水溶液（18％）を使用することが好まれる。
【００９７】
エステル開裂は、一般的に−20℃〜＋100℃の温度範囲内で、好ましくは23℃〜＋120℃で行う。
【００９８】
特定の置換パターンに応じて、公知の方法（例えば、欧州特許第0607825合明細書、25〜26頁参照）と同様に、文献で知られている反応条件下で、式（IX）
【化５３】
2019524722.tif 000055
（式中、HalおよびTは上に示される定義を有し、
Xは脱離基、例えばジメチルアミノ、メトキシまたはエトキシを表す）
の2，6−ジクロロニコチノイルアクリレート誘導体を、第1の段階で、好ましくは適切な塩基の存在下で、
式（X）
【化５４】
2019524722.tif 000056
（式中、Ar1は上に示される意味を有する）
のアミノピリジン化合物と反応させ、次いで、第2のステップで、これを適切な塩基の存在下で反応させて、式（VII）
【化５５】
2019524722.tif 000057
（式中、Hal、Ar1およびTは上に示される定義を有する）
のエステル化合物を得て、次いで、場合によりエステル化合物（VII）を、加水分解条件下さらなるステップで式（VI）
【化５６】
2019524722.tif 000058
（式中、HalおよびAr1は上に示される定義を有する）
のカルボン酸化合物（VI）に変換する
ことによって、式（VI）または式（VIII）の化合物を調製することができる。
【００９９】
式（IX）の化合物は文献から既知である（例えば、欧州特許第0607825号明細書参照）、または文献から既知の方法と同様に調製することができる。
【０１００】
式（III）、（V）および（X）の化合物は、商業的に入手可能である、またはそれ自体文献に記載されている、またはこれらを文献で公開されている方法と同様に当業者に自明な方法で調製することができる。それぞれの出発材料を調製するための多くの詳細な方法および文献データもまた、出発化合物および中間体の調製に関する節の実験部に見出すことができる。
【０１０１】
本発明の式（I）の化合物の立体異性体（エナンチオマーおよび／またはジアステレオマー）の分離は、当業者によく知られている慣用的な方法によって達成することができる。この目的のためにアキラルまたはキラル分離相でのクロマトグラフィー法を使用することが好ましい。
本発明の化合物の対応するエナンチオマーおよび／またはジアステレオマーへの分離は、必要に応じて、中間体（II）、（IV）または（VIII）の初期段階で行うこともでき、次いで、これらを上記の反応順序にしたがって分離された形態でさらに反応させる。このような中間体の立体異性体の分離のために、アキラルまたはキラル分離相でのクロマトグラフィー法を使用することが同様に好ましい。あるいは、キラルアミン塩基を用いて、式（IV）のカルボン酸のジアステレオマー塩を介して、分離を行うこともできる。
【発明を実施するための形態】
【０１０２】
本発明の化合物の調製は、例として、以下の反応スキームによって説明することができる：
スキーム1
【化５７】
2019524722.tif 000059
［a）：オルトギ酸トリエチル、無水酢酸；b）：DIPEA、DCM、次いでK2CO3；c）：18％濃度塩酸、THF、水］。
【０１０３】
スキーム2
【化５８】
2019524722.tif 000060
［a）：HATU、DIPEA、DMFまたはT3P、DIPEA、EtOAc；b）：Pd（OAc）2、キサントホス、K2CO3、1，4−ジオキサン；c）：DIPEA、DMF；d）：（COCl）2、触媒DMF、THF；e）：NaH、DMFまたはトリエチルアミン、DCM］。
【０１０４】
スキーム3
【化５９】
2019524722.tif 000061
［a）：DIPEA、DMF；b）：LiOH水溶液、THFまたは18％濃度塩酸、THF、水；c）：HATU、DIPEA、DMF、室温］。
【０１０５】
スキーム4
【化６０】
2019524722.tif 000062
［a）：Pd（OAc）2、キサントホス、K2CO3、1，4−ジオキサン；b）HATU、DIPEA、DMF；c）DIPEA、DMF］。
【０１０６】
さらに、本発明による式（I）の化合物は、好都合であるならば、上記の方法によって得られる式（I）の他の化合物またはその前駆体から進行する、個々の基または置換基の官能基、特にR1およびR2の下に列挙される官能基の変換によっても調製することができる。これらの変換は、当業者によく知られている慣用的な方法によって行われ、これらには、例えば、求核置換または求電子置換反応、遷移金属媒介カップリング反応、金属オルガニル（例えば、グリニャール化合物またはリチウムオルガニル）の調製および付加反応、酸化および還元反応、水素化、ハロゲン化（例えば、フッ素化、臭素化）、脱ハロゲン化、アミノ化、アルキル化およびアシル化、カルボン酸エステル、カルボキサミドおよびスルホンアミドの形成、エステル開裂および加水分解、ならびに一時的な保護基の導入および除去が含まれる。
【０１０７】
本発明は、さらなる態様において、一般式（II）
【化６１】
2019524722.tif 000063
（式中、R2およびAr1は、式（I）の化合物について上に示される定義を有し、
Halはフッ素、塩素、臭素またはヨウ素、好ましくは塩素を表す）
の中間体に関する。
【０１０８】
本発明は、さらなる態様において、一般式（IV）
【化６２】
2019524722.tif 000064
（式中、R1およびAr1は、式（I）の化合物について上に示される定義を有する）
の中間体に関する。
【０１０９】
本発明は、さらなる態様において、上に定義される一般式（I）の化合物を調製するための、
一般式（II）
【化６３】
2019524722.tif 000065
（式中、R2およびAr1は、式（I）の化合物について上に示される定義を有し、
Halはフッ素、塩素、臭素またはヨウ素、好ましくは塩素を表す）
の化合物
または
一般式（IV）
【化６４】
2019524722.tif 000066
（式中、R1およびAr1は、式（I）の化合物について上に示される定義を有する）
の化合物の使用に関する。
【０１１０】
本発明による化合物は、予測できない有用な範囲の薬理活性および薬物動態活性を有する。
【０１１１】
そのため、これらの化合物は、ヒトおよび動物の疾患を治療および／または予防するための医薬として使用するのに適している。本発明の化合物は、有用な薬理学的特性を有し、ヒトおよび動物の障害を治療および／または予防するために使用することができる。
【０１１２】
本発明による化合物は、ムスカリンM2受容体の正のアロステリックモジュレーターであるので、M2受容体が自律神経系の調節不全または自律神経系の交感神経部分の活動と副交感神経部分の活動との間の不均衡に関与する障害および病理学的過程、特に心血管障害および／または腎障害の治療および／または予防に適している。
【０１１３】
本発明は、ムスカリンM2受容体の正のアロステリックモジュレーターを提供する。アロステリックモジュレーターは、従来のオルソステリックリガンドとはっきりした相違を有する。アロステリックモジュレーターの効果は、それが高濃度でアゴニストの結合を安定化させる場合、自己限定的である。さらに、アロステリックモジュレーターの効果は、内因性リガンドの存在下でのみ示され得る。アロステリックモジュレーター自体は、受容体活性化に直接的な影響を及ぼさない。これは、空間および時間に関するアロステリック効果の特異性をもたらす。親和性および固有活性の点でのアロステリックおよびオルソステリックリガンドの相互影響（協同作用と称される）は、2つのリガンドによって決定される。正のアロステリックモジュレーターの場合、オルソステリックリガンドの効果が増強される（正の協同作用）。オルソステリックリガンドの存在下で受容体コンホメーションを調節する能力のために、アロステリックリガンドは、薬理学的効果の精密な調整をもたらすことができる。
【０１１４】
本発明の文脈において、心血管系の障害または心血管障害は、例えば、以下の障害：急性および慢性心不全、動脈性高血圧、冠動脈心疾患、安定および不安定狭心症、心筋虚血、心筋梗塞、ショック、粥状動脈硬化、心肥大、心筋線維症、心房性および心室性不整脈、頻脈、一過性虚血発作、脳卒中、子癇前症、炎症性心血管障害、末梢および心血管障害、末梢灌流障害、動脈性肺高血圧、冠動脈および末梢血管の攣縮、血栓症、血栓塞栓性障害、浮腫発達、例えば肺浮腫、脳浮腫、腎浮腫または心不全関連浮腫、ならびに血栓溶解処置、経皮的血管形成術（PTA）、経皮的冠動脈形成術（PTCA）、心臓移植およびバイパス手術後の再狭窄、ならびに微小および大血管損傷（血管炎）、再灌流傷害、動脈および静脈血栓症、微量アルブミン尿、心筋不全、内皮機能不全、末梢および心血管障害、末梢灌流障害、心不全関連浮腫、フィブリノーゲンおよび低密度LDLのレベル上昇、ならびにプラスミノーゲンアクチベーター／インヒビター1（PAI 1）の濃度上昇を意味すると理解される。
【０１１５】
本発明の文脈において、「心不全」という用語はまた、より具体的なまたは関連する型の疾患、例えば、急性非代償性心不全、右心不全、左心不全、全心不全、虚血性心筋症、拡張型心筋症、先天性心疾患、心臓弁奇形、心臓弁奇形を伴う心不全、僧帽弁狭窄、僧帽弁閉鎖不全、大動脈弁狭窄、大動脈弁閉鎖不全、三尖弁狭窄、三尖弁閉鎖不全、肺動脈弁狭窄、肺動脈弁閉鎖不全、混合型心臓弁奇形、心筋炎症（心筋炎）、慢性心筋炎、急性心筋炎、ウイルス性心筋炎、糖尿病性心不全、アルコール性心筋症、心臓貯蔵障害、左室駆出率が保持された心不全（HFpEF）、拡張期心不全、および左室駆出率が低下した心不全（HfrEF）、収縮期心不全を含む。
【０１１６】
本発明の文脈において、心房性および心室性不整脈という用語はまた、より具体的なまたは関連する型の疾患、例えば：心房細動、発作性心房細動、間欠性心房細動、持続性心房細動、心房粗動、類洞不整脈、類洞頻脈、受動的異所形成、能動的異所形成、逸脱収縮、期外収縮、興奮伝導障害、洞不全症候群、頸動脈洞過敏症、頻拍、AV結節リエントリー性頻拍、房室リエントリー性頻拍、WPW症候群（ウォルフ・パーキンソン・ホワイト）、マハイム頻拍、隠れた副伝導路、持続性接合部リエントリー性頻拍、焦点心房性頻拍、接合部異所性頻拍、心房性リエントリー性頻拍、心室性頻拍、心室粗動、心室細動、心臓突然死を含む。
【０１１７】
本発明の文脈において、冠動脈心疾患という用語はまた、より具体的なまたは関連する型の疾患、例えば：虚血性心疾患、安定狭心症、急性冠動脈症候群、不安定狭心症、NSTEMI（非ST上昇心筋梗塞）、STEMI（ST上昇心筋梗塞）、虚血性心筋損傷、心臓リズム機能不全および心筋梗塞を包含する。
【０１１８】
本発明による化合物は、多発性嚢胞腎疾患（PCKD）および不適切なADH分泌の症候群（SIADH）の予防および／または治療にさらに適している。
【０１１９】
本発明の化合物は、腎障害、特に、急性および慢性腎機能不全、ならびに急性および慢性腎不全を治療および／または予防するのにも適している。
【０１２０】
本発明の文脈において、「急性腎機能不全」という用語は、透析の必要性があるおよびない、また根底にあるもしくは関連する腎障害、例えば、腎臓低灌流、透析下低血圧、体積不足（例えば、脱水、失血）、ショック、急性糸球体腎炎、溶血性尿毒症症候群（HUS）、血管カタストロフ（動脈もしくは静脈血栓症または塞栓症）、コレステロール塞栓症、形質細胞腫のイベントの急性Bence−Jones腎臓、急性小胞上（supravesicular）または小胞下（subvesicular）流出閉塞、免疫学的腎障害（腎移植拒絶、免疫複合体誘発性腎障害など）、尿細管拡張、高リン酸塩血症および／または急性腎障害（透析の必要性を特徴とし得る、腎臓の部分切除、強制利尿による脱水、悪性高血圧による制御されない血圧上昇、尿路閉塞および感染症およびアミロイドーシスの場合を含む）、ならびに糸球体因子を伴う全身障害、例えばリウマチ学的−免疫学的全身障害、例えばエリテマトーデス、腎動脈血栓症、腎静脈血栓症、鎮痛薬腎症および腎尿細管性アシドーシス、ならびにX線造影剤−および薬剤誘発性急性間質性腎障害を伴うおよび伴わない腎疾患、腎不全および／または腎機能不全の急性症状発現を包含する。
【０１２１】
本発明の文脈において、「慢性腎機能不全」という用語は、透析の必要性があるおよびない、また根底にあるもしくは関連する腎障害、例えば、腎臓低灌流、透析下低血圧、閉塞性尿路疾患、糸球体症、糸球体および尿細管性蛋白尿、腎性浮腫、血尿、原発性、続発性および慢性糸球体腎炎、膜性および膜性増殖性糸球体腎炎、アルポート症候群、糸球体硬化、尿細管間質性障害、腎症障害（原発性および先天性腎臓病など）、腎臓炎症、免疫学的腎障害（腎移植拒絶、免疫複合体誘発性腎障害など）、糖尿病性および非糖尿病性腎症、腎盂腎炎、腎嚢胞、腎硬化症、高血圧性腎硬化およびネフローゼ症候群（例えば、異常に低下したクレアチニンおよび／または水排泄、異常に上昇した尿素、窒素、カリウムおよび／またはクレアチニン血中濃度、変化した腎臓酵素、例えばグルタミルシンテターゼの活性、変化した尿浸透圧または尿量、上昇した微量アルブミン尿、顕性アルブミン尿、糸球体および細動脈病変、尿細管拡張、高リン酸塩血症および／または透析の必要性によって診断的に特徴付けることができる）、さらに腎細胞癌、腎臓の部分切除後、強制利尿による脱水、悪性高血圧による制御されない血圧上昇、尿路閉塞および感染症およびアミロイドーシスのイベントにおける慢性腎不全、ならびに糸球体因子を伴う全身障害、例えばリウマチ学的−免疫学的全身障害、例えばエリテマトーデス、ならびに腎動脈狭窄、腎動脈血栓症、腎静脈血栓症、鎮痛薬腎症および腎尿細管性アシドーシスを伴うおよび伴わない腎疾患、腎不全および／または腎機能不全の慢性症状発現を包含する。さらに、X線造影剤および医薬品誘発慢性間質性腎障害、メタボリックシンドロームならびに脂質異常症がある。本発明はまた、腎機能不全、例えば、肺水腫、心不全、尿毒症、貧血、電解質障害（例えば、高カリウム血症、高ナトリウム血症）ならびに骨および炭水化物代謝の障害を治療および／または予防するための本発明による化合物の使用も包含する。
【０１２２】
さらに、本発明による化合物はまた、肺動脈高血圧症（PAH）および他の形態の肺高血圧症（PH）、慢性閉塞性肺疾患（COPD）、急性呼吸窮迫症候群（ARDS）、急性肺傷害（ALI）、α1アンチトリプシン欠損症（AATD）、肺線維症、肺気腫（例えば、タバコ煙によって引き起こされる肺気腫）、嚢胞性線維症（CF）、急性冠動脈症候群（ACS）、心筋炎症（心筋炎）および他の自己免疫心臓障害（心膜炎、心内膜炎、弁膜炎、大動脈炎、心筋症）、心原性ショック、動脈瘤、敗血症（SIRS）、多臓器不全（MODS、MOF）、腎臓の炎症性障害、慢性腸障害（IBD、クローン病、UC）、膵炎、腹膜炎、リウマチ様障害、炎症性皮膚障害および炎症性眼障害の治療および／または予防に適している。
【０１２３】
本発明による化合物を、間欠性または持続性の特徴を有する種々の重症度の喘息障害（屈折喘息、気管支喘息、アレルギー性喘息、内因性喘息、外因性喘息、薬物または塵誘発性喘息）、種々の形態の気管支炎（慢性気管支炎、感染性気管支炎、好酸球性気管支炎）、閉塞性細気管支炎、気管支拡張症、肺炎、特発性間質性肺炎、農夫肺および関連疾患、咳および風邪（慢性炎症性咳、医原性咳嗽）、鼻粘膜の炎症（薬物関連鼻炎、血管運動性鼻炎および季節性アレルギー性鼻炎、例えば花粉症を含む）およびポリープの治療および／または予防に使用することもできる。
【０１２４】
本発明に記載される化合物はまた、NO／cGMP系の障害によって特徴付けられる中枢神経系障害を制御するための活性化合物でもある。特に、これらは、例えば、軽度認知障害、加齢性学習および記憶障害、加齢性記憶喪失、血管性認知症、頭蓋脳損傷、脳卒中、脳卒中後に起こる認知症（脳卒中後認知症）、外傷後頭蓋脳損傷、一般的な集中力障害、学習および記憶の問題を有する小児の集中力障害、アルツハイマー病、レビー小体型認知症、ピック症候群を含む前頭葉変性を伴う認知症、パーキンソン病、進行性核性麻痺、大脳皮質基底核変性症を伴う認知症、筋萎縮性側索硬化症（ALS）、ハンチントン舞踏病、脱髄、多発性硬化症、視床変性、クロイツフェルト−ヤコブ認知症、HIV認知症、認知症を伴う統合失調症、またはコルサコフ精神病などの状態／疾患／症候群に関連して特に生じるものなどの認知障害後の知覚、集中力、学習または記憶を改善するのに適している。これらはまた、中枢神経系障害、例えば、不安、緊張およびうつ病、双極性障害、CNS関連性機能障害および睡眠障害の状態を治療および／または予防する、ならびに食物、嗜好品および習慣性物質の摂取の病理学的障害を制御するのにも適している。
【０１２５】
さらに、本発明による化合物はまた、尿失禁、特に緊張性尿失禁、切迫性尿失禁、反射性尿失禁および溢流性尿失禁、排尿筋活動亢進、神経因性排尿筋活動亢進、特発性排尿筋活動亢進、前立腺肥大症（BPH症候群）、下部尿路症状（LUTS）などの泌尿器障害の治療および／または予防にも適している。
【０１２６】
本発明による化合物はさらに、食道障害、嘔吐、アカラシア、胃食道逆流症などの胃腸病障害、胃炎などの胃障害、下痢、便秘、同化不良症候群、胆汁酸喪失症候群、クローン病、潰瘍性大腸炎、顕微鏡的大腸炎および過敏性腸症候群などの腸の障害の治療および／または予防に適している。
【０１２７】
本発明による化合物はさらに、月経障害、月経困難症、子宮内膜症、早産、子宮収縮抑制などの疼痛状態の治療および／または予防に適している。
【０１２８】
生化学的および薬理学的特性のプロファイルのために、本発明による化合物はまた、心不全、冠動脈心疾患、心房性および心室性不整脈、腎不全および腎症の治療および／または予防に特に適している。
【０１２９】
さらに、本発明の化合物を、一次および二次レイノー現象、微小循環障害、跛行、末梢および自律神経ニューロパチー、糖尿病性ニューロパシー、糖尿病性細小血管症、糖尿病性網膜症、四肢の糖尿病性潰瘍、壊疽、CREST症候群、エリテマトーデス、爪真菌症、リウマチ性障害を治療および／または予防するためならびに創傷治癒を促進するために使用することができる。
【０１３０】
本発明の化合物は、眼科的障害、例えば、緑内障、加齢性黄斑変性症（AMD）、乾性（非滲出性）AMD、湿性（滲出性、新生血管）AMD、脈絡膜新生血管（CNV）、糖尿病性網膜症、網膜色素上皮の萎縮変化（RPE）、網膜色素上皮の肥厚変化、黄斑浮腫、糖尿病性黄斑浮腫、網膜静脈閉塞、脈絡膜網膜静脈閉塞、網膜静脈閉塞による黄斑浮腫、眼の前部の血管新生、例えば角膜炎、角膜移植または角膜形成後の、例えば角膜血管新生、（コンタクトレンズの長期着用の結果としての）低酸素による角膜血管新生、翼状片結膜炎、網膜下浮腫および網膜内浮腫の治療および／または予防にさらに適している。さらに、本発明の化合物は、外傷性前房出血、眼窩周囲浮腫、術後の粘弾性保持または眼内炎症の結果としての上昇した眼圧および高眼圧の治療および／または予防に適している。
【０１３１】
さらに、本発明による化合物は、肝炎、新生物、骨粗鬆症、緑内障および胃不全麻痺を治療および／または予防するのに適している。
【０１３２】
さらに、本発明の化合物はまた、脳血流を制御するのにも適しており、偏頭痛を制御するのに有効な薬剤となる。これらはまた、脳梗塞（脳卒中）、例えば、卒中、脳虚血および頭蓋脳損傷の続発症を予防および制御するのにも適している。本発明の化合物を疼痛、神経痛および耳鳴を制御するために使用することもできる。
【０１３３】
ヒトにおける上述の十分に特徴付けられた疾患はまた、他の哺乳動物においても同等の病因で生じ得るので、そこでも同様に本発明の化合物で治療され得る。
【０１３４】
本発明の文脈において、「治療」または「治療すること」という用語は、疾患、状態、障害、傷害または健康問題の、このような状態および／またはこのような状態の症状の発達、経過または進行の阻害、遅延、検査、軽減、減弱、制限、減少、抑制、忌避または治癒を含む。ここでは、「療法」は「治療」という用語と同義であると理解される。
【０１３５】
「防止」、「予防」および「妨害」という用語は本発明の文脈において同義的に使用され、疾患、状態、障害、傷害または健康問題に、あるいはこのような状態および／またはこのような状態の症状の発達または進行に罹患する、を経験する、を患うまたはこれらを有するリスクの回避または減少を指す。
【０１３６】
疾患、状態、障害、傷害または健康問題の治療または予防は、部分的であっても完全であってもよい。
【０１３７】
よって、本発明はさらに、障害、特に上記障害を治療および／または予防するための本発明の化合物の使用を提供する。
【０１３８】
本発明はさらに、障害、特に上記障害を治療および／または予防するための医薬を製造するための本発明の化合物の使用を提供する。
【０１３９】
本発明はさらに、障害、特に上記障害を治療および／または予防するための本発明の化合物の少なくとも1種を含む医薬を提供する。
【０１４０】
本発明はさらに、障害、特に上記障害を治療および／または予防する方法における本発明の化合物の使用を提供する。
【０１４１】
本発明はさらに、有効量の本発明の化合物の少なくとも1種を使用して、障害、特に上記障害を治療および／または予防する方法を提供する。
【０１４２】
本発明はさらに、障害、特に上記障害を治療および／または予防する方法に使用するための本発明による化合物を提供する。
【０１４３】
本発明の化合物は、単独で、または必要に応じて、1種または複数の他の薬理学的に活性な物質と組み合わせて使用することができ、ただし、この組み合わせは望ましくないおよび許容できない副作用をもたらさない。そのため、本発明は、特に上記障害を治療および／または予防するための、本発明の化合物の少なくとも1種と、1種または複数のさらなる薬物とを含む医薬を提供する。この目的に適した組み合わせ有効成分の好ましい例として以下が挙げられる：
・例としておよび好ましくは、カルシウム拮抗剤、アンジオテンシンAII拮抗剤、ACE阻害剤、NEP阻害剤、バソペプチダーゼ阻害剤、エンドセリン拮抗剤、レニン阻害剤、α受容体遮断薬、β受容体遮断薬、ミネラルコルチコイド受容体拮抗剤およびrhoキナーゼ阻害剤および利尿剤の群の活性降圧成分；
・抗不整脈薬、例としておよび好ましくは、ナトリウムチャネル遮断薬、β受容体遮断薬、カリウムチャネル遮断薬、カルシウム拮抗薬、Ifチャネル遮断薬、ジギタリス、副交感神経遮断薬（迷走神経抑制薬）、交感神経遮断薬および他の抗不整脈薬、例えばアデノシン、アデノシン受容体作動薬およびベルナカラント；
・陽性変力効果を有する化合物、例えば強心配糖体（ジゴキシン）、β−アドレナリンおよびドーパミン作動薬、例えばイソプレナリン、アドレナリン、ノルアドレナリン、ドーパミンまたはドブタミン；
・バソプレシン受容体拮抗薬、例としておよび好ましくは、コニバプタン、トルバプタン、リキシバプタン、モザバプタン、サタバプタン、SR−121463、RWJ 676070またはBAY 86−8050、ならびに国際公開第2010／105770号、国際公開第2011／104322号および国際公開第2016／071212号に記載される化合物；
・ナトリウム利尿ペプチド、例えば心房性ナトリウム利尿ペプチド（ANP）、ナトリウム利尿ペプチドB型（BNP、ネシリチド）、ナトリウム利尿ペプチドC型（CNP）またはウロジラチン；
・心筋ミオシンの活性化剤、例えばオメカムティブ・メカルビル（CK−1827452）；
・カルシウム増感剤、例えばレボシメンダン；
・心臓のエネルギー代謝を調節する化合物、例としておよび好ましくは、エトモキシル、ジクロロ酢酸、ラノラジンまたはトリメタジジン、完全または部分アデノシンA1受容体アゴニスト、例えばGS−9667（以前はCVT−3619として知られていた）、カパデノソン、ネラデノソンおよびBAY 1067197；
・心拍数を調節する化合物、例えばイバブラジン；
・環状グアノシン一リン酸（cGMP）および／または環状アデノシン一リン酸（cAMP）の分解を阻害する化合物、例えばホスホジエステラーゼ（PDE）1、2、3、4および／または5の阻害剤、特にPDE5阻害剤、例えばシルデナフィル、バルデナフィルおよびタダラフィル、ウデナフィル、デサンタフィル、アバナフィル、ミロデナフィル、ロデナフィルまたはPF−00489791；
・例としておよび好ましくは、血小板凝集阻害剤、抗凝固剤または線維素溶解促進性物質の群の抗血栓剤；
・例としておよび好ましくは、βアドレナリン受容体アゴニストの群、例えば特にアルブテロール、イソプロテレノール、メタプロテレノール、テルブタリン、ホルモテロールもしくはサルメテロール、または抗コリン薬の群、例えば特に臭化イプラトロピウムの気管支拡張剤；
・例としておよび好ましくは、グルココルチコイドの群の抗炎症薬、例えば特にプレドニゾン、プレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、トリアムシノロン、デキサメタゾン、ベクロメタゾン、ベタメタゾン、フルニソリド、ブデソニドまたはフルチカゾンおよび非ステロイド性抗炎症薬（NSAID）、例えば特に、アセチルサリチル酸（アスピリン）、イブプロフェンおよびナプロキセン、5−アミノサリチル酸誘導体、ロイコトリエン拮抗薬、TNF−α阻害剤およびケモカイン受容体拮抗薬、例えばCCR1、2および／または5阻害剤；
・例えばおよび好ましくは、甲状腺受容体作動薬、コレステロール合成阻害剤、例えば、例としておよび好ましくは、HMG−CoA還元酵素阻害剤またはスクアレン合成阻害剤、ACAT阻害剤、CETP阻害剤、MTP阻害剤、PPARα、PPARγおよび／またはPPARδ作動薬、コレステロール吸収阻害剤、リパーゼ阻害剤、重合胆汁酸吸着剤、胆汁酸再吸収阻害剤およびリポタンパク質拮抗剤の群の脂肪代謝を調節する活性化合物。
・例としておよび好ましくは、キナーゼ阻害剤の群、特にチロシンキナーゼおよび／またはセリン／トレオニンキナーゼ阻害剤の群のシグナル伝達カスケードを阻害する化合物；
・細胞外マトリックスの分解および変化を阻害する化合物、例としておよび好ましくは、マトリックスメタロプロテアーゼ（MMP）の阻害剤、特にキマーゼ、ストロメリシン、コラゲナーゼ、ゼラチナーゼおよびアグレカナーゼ（この文脈では特にMMP−1、MMP−3、MMP−8、MMP−9、MMP−10、MMP−11およびMMP−13）の阻害剤ならびにメタロエラスターゼ（MMP−12）および好中球エラスターゼ（HNE）の阻害剤、例えばシベレスタットまたはDX−890；
・セロトニンとその受容体の結合を遮断する化合物、例としておよび好ましくは、5−HT2b受容体の拮抗薬；
・有機硝酸塩およびNOドナー、例えば、ニトロプルシドナトリウム、ニトログリセリン、一硝酸イソソルビド、二硝酸イソソルビド、モルシドミンまたはSIN−1、およびNO吸入；
・可溶性グアニル酸シクラーゼのNO非依存性であるがヘム依存性の刺激剤、例えば特に、国際公開第00／06568号、国際公開第00／06569号、国際公開第02／42301号、国際公開第03／095451号、国際公開第2011／147809号、国際公開第2012／004258号、国際公開第2012／028647号および国際公開第2012／059549号に記載される化合物；
・可溶性グアニル酸シクラーゼのＮＯ−およびヘム−非依存性活性化剤、例えば特に、国際公開第01／19355号、国際公開第01／19776号、国際公開第01／19778号、国際公開第01／19780号、国際公開第02／070462号および国際公開第02／070510号に記載される化合物；
・cGMPの合成を増加させる化合物、例えばsGC調節剤、例えば、例としておよび好ましくは、リオシグアト、シナシグアト、ベリシグアトまたはBAY 1101042
・プロスタサイクリン類似体、例としておよび好ましくは、イロプロスト、ベラプロスト、トレプロスチニルまたはエポプロステノール；
・可溶性エポキシドヒドロラーゼ（sEH）を阻害する化合物、例えばN，N’−ジシクロヘキシル尿素、12−（3−アダマンタン−1−イルウレイド）ドデカン酸または1−アダマンタン−1−イル−3−｛5−［2−（2−エトキシエトキシ）エトキシ］ペンチル｝尿素；
・グルコース代謝を調節する活性化合物、例えばインスリン、ビグアニド、チアゾリジンジオン、スルホニル尿素、アカルボース、DPP4阻害剤、GLP−1類似体またはSGLT−1阻害剤。
【０１４４】
本発明の好ましい実施形態では、本発明による化合物を、キナーゼ阻害剤、例としておよび好ましくは、ボルテゾミブ、カネルチニブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、イマチニブ、ラパチニブ、レスタウルチニブ、ロナファルニブ、ニンテダニブ、ダサチニブ、ニロチニブ、ボスチニブ、アキシチニブ、テラチニブ、イマチニブ、ブリバニブ、パゾパニブ、ペガプチニブ、ペリチニブ、セサキサニブ、ソラフェニブ、レゴラフェニブ、スニチニブ、タンデュチニブ、チピファルニブ、バタラニブ、ファスジル、ロニダミン、レフルノミド、BMS−3354825またはY−27632と組み合わせて使用することができる。
【０１４５】
本発明の好ましい実施形態では、本発明による化合物を、セロトニン受容体拮抗薬、例としておよび好ましくは、PRX−08066と組み合わせて使用する。
【０１４６】
抗血栓剤は、好ましくは、血小板凝集阻害剤、抗凝固剤または線維素溶解促進性物質の群の化合物を意味すると理解される。
【０１４７】
本発明の好ましい実施形態では、本発明の化合物を、血小板凝集阻害剤、例としておよび好ましくは、アスピリン、クロピドグレル、チクロピジンまたはジピリダモールと組み合わせて投与する。
【０１４８】
本発明の好ましい実施形態では、本発明による化合物を、トロンビン阻害剤、例としておよび好ましくは、ダビガトラン、キシメガトラン、メラガトラン、ビバリルジンまたはクレキサンと組み合わせて投与する。
【０１４９】
本発明の好ましい実施形態では、本発明の化合物を、GPIIb／IIIa拮抗剤、例としておよび好ましくは、チロフィバンまたはアブシキシマブと組み合わせて投与する。
【０１５０】
本発明の好ましい実施形態では、本発明による化合物を、第Xa因子阻害剤、例としておよび好ましくは、リバロキサバン、エドキサバン（DU−176b）、アピキサバン、オタミキサバン、フィデキサバン、ラザキサバン、フォンダパリヌクス、イドラパリヌクス、PMD−3112、YN−150、KFA−1982、EMD−503982、MCN−17、mLN−1021、DX 9065a、DPC 906、JTV 803、SSR−126512またはSSR−128428と組み合わせて投与する。
【０１５１】
本発明の好ましい実施形態では、本発明の化合物を、ヘパリンまたは低分子量（LMW）ヘパリン誘導体と組み合わせて投与する。
【０１５２】
本発明の好ましい実施形態では、本発明の化合物を、ビタミンK拮抗剤、例としておよび好ましくは、クマリンと組み合わせて投与する。
【０１５３】
降圧剤は、好ましくは、カルシウム拮抗剤、アンジオテンシンAII拮抗剤、ACE阻害剤、エンドセリン拮抗剤、レニン阻害剤、α受容体遮断薬、β受容体遮断薬、ミネラルコルチコイド受容体拮抗剤、rhoキナーゼ阻害剤および利尿剤の群の化合物を意味すると理解される。
【０１５４】
本発明の好ましい実施形態では、本発明の化合物を、カルシウム拮抗剤、例としておよび好ましくは、ニフェジピン、アムロジピン、ベラパミルまたはジルチアゼムと組み合わせて投与する。
【０１５５】
本発明の好ましい実施形態では、本発明の化合物を、α1受容体遮断薬、例としておよび好ましくは、プラゾシンと組み合わせて投与する。
【０１５６】
本発明の好ましい実施形態では、本発明の化合物を、β受容体遮断薬、例としておよび好ましくは、プロプラノロール、アテノロール、チモロール、ピンドロール、アルプレノロール、オクスプレノロール、ペンブトロール、ブプラノロール、メチプラノロール、ナドロール、メピンドロール、カラザロール、ソタロール、メトプロロール、ベタキソロール、セリプロロール、ビソプロロール、カルテオロール、エスモロール、ラベタロール、カルベジロール、アダプロロール、ランジオロール、ネビボロール、エパノロールまたはブシンドロールと組み合わせて投与する。
【０１５７】
本発明の好ましい実施形態では、本発明による化合物を、アンジオテンシンAII拮抗薬、例としておよび好ましくは、ロサルタン、カンデサルタン、バルサルタン、テルミサルタンまたはエンブルサタン（embursatan）、イルベサルタン、オルメサルタン、エプロサルタンもしくはアジサルタン、または二重アンジオテンシンAII拮抗薬／NEP阻害剤、例えばおよび好ましくは、Entresto（LCZ696、バルサルタン／サクビトリル）と組み合わせて投与する。
【０１５８】
本発明の好ましい実施形態では、本発明による化合物を、ACE阻害剤、例としておよび好ましくは、エナラプリル、カプトプリル、リシノプリル、ラミプリル、デラプリル、フォシノプリル、キノプリル、ペリンドプリルまたはトランドプリルと組み合わせて投与する。
【０１５９】
本発明の好ましい実施形態では、本発明による化合物を、エンドセリン拮抗剤、例としておよび好ましくは、ボセンタン、ダルセンタン、アンブリセンタン、アボセンタン、マシテンタン、アトラセンタンまたはシタクスセンタンと組み合わせて投与する。
【０１６０】
本発明の好ましい実施形態では、本発明による化合物を、TGFβ拮抗剤、例としておよび好ましくは、ピルフェニドンまたはフレソリムマブと組み合わせて投与する。
【０１６１】
本発明の好ましい実施形態では、本発明による化合物を、TNFα拮抗剤、例としておよび好ましくは、アダリムマブと組み合わせて投与する。
【０１６２】
本発明の好ましい実施形態では、本発明の化合物を、レニン阻害剤、例としておよび好ましくは、SPP−600またはSPP−800と組み合わせて投与する。
【０１６３】
本発明の好ましい実施形態では、本発明による化合物を、HIF−PH阻害剤、例としておよび好ましくは、モリデュスタットまたはロキサデュスタットと組み合わせて投与する。
【０１６４】
本発明の好ましい実施形態では、本発明の化合物を、ミネラルコルチコイド受容体拮抗剤、例としておよび好ましくは、スピロノラクトンまたはエプレレノン、フィネレノンと組み合わせて投与する。
【０１６５】
本発明の好ましい実施形態では、本発明による化合物を、rhoキナーゼ阻害剤、例としておよび好ましくは、ファスジル、Y−27632、SLx−2119、BF−66851、BF−66852、BF−66853、KI−23095、SB−772077、GSK−269962AまたはBA−1049と組み合わせて投与する。
【０１６６】
本発明の好ましい実施形態では、本発明による化合物を、利尿剤、例としておよび好ましくは、フロセミド、トラセミド、ブメタニドおよびピレタニド、カリウム保持性利尿剤、例えば、アミロライドおよびトリアムテレン、アルドステロン拮抗剤、例えば、スピロノラクトン、カンレノ酸カリウムおよびエプレレノン、ならびにチアジド系利尿剤、例えば、ヒドロクロロチアジド、クロルタリドン、キシパミドおよびインダパミドと組み合わせて投与する。
【０１６７】
脂肪代謝調節剤は、好ましくは、CETP阻害剤、甲状腺受容体作動薬、コレステロール合成阻害剤、例えば、HMG−CoA還元酵素阻害剤またはスクアレン合成阻害剤、ACAT阻害剤、MTP阻害剤、PPARα、PPARγおよび／またはPPARδ作動薬、コレステロール吸収阻害剤、重合胆汁酸吸着剤、胆汁酸再吸収阻害剤、リパーゼ阻害剤およびリポタンパク質拮抗剤の群の化合物を意味すると理解される。
【０１６８】
本発明の好ましい実施形態では、本発明の化合物を、CETP阻害剤、例としておよび好ましくは、トルセトラピブ（CP−529  414）、アナセトラピブ、JJT−705またはCETPワクチン（Avant）と組み合わせて投与する。
【０１６９】
本発明の好ましい実施形態では、本発明の化合物を、甲状腺受容体作動薬、例としておよび好ましくは、D−チロキシン、3，5，3’−トリヨードチロニン（T3）、CGS23425またはアキシチロム（CGS26214）と組み合わせて投与する。
【０１７０】
本発明の好ましい実施形態では、本発明の化合物を、スタチンのクラスのHMG−CoA還元酵素阻害剤、例としておよび好ましくは、ロバスタチン、シンバスタチン、プラバスタチン、フラバスタチン、アトルバスタチン、ロスバスタチンまたはピタバスタチンと組み合わせて投与する。
【０１７１】
本発明の好ましい実施形態では、本発明の化合物を、スクアレン合成阻害剤、例としておよび好ましくは、BMS−188494またはTAK−475と組み合わせて投与する。
【０１７２】
本発明の好ましい実施形態では、本発明の化合物を、ACAT阻害剤、例としておよび好ましくは、アバシミブ、メリナミド、パクチミブ、エフルチミブまたはSMP−797と組み合わせて投与する。
【０１７３】
本発明の好ましい実施形態では、本発明の化合物を、MTP阻害剤、例としておよび好ましくは、インプリタピド、BMS−201038、R−103757またはJTT−130と組み合わせて投与する。
【０１７４】
本発明の好ましい実施形態では、本発明の化合物を、PPARγ作動薬、例としておよび好ましくは、ピオグリタゾンまたはロシグリタゾンと組み合わせて投与する。
【０１７５】
本発明の好ましい実施形態では、本発明による化合物を、PPAR−δアゴニスト、例としておよび好ましくは、GW501516またはBAY68−5042と組み合わせて投与する。
【０１７６】
本発明の好ましい実施形態では、本発明の化合物を、コレステロール吸収阻害剤、例としておよび好ましくは、エゼチミブ、チクエシドまたはパマクエシドと組み合わせて投与する。
【０１７７】
本発明の好ましい実施形態では、本発明の化合物を、リパーゼ阻害剤、例としておよび好ましくは、オルリスタットと組み合わせて投与する。
【０１７８】
本発明の好ましい実施形態では、本発明の化合物を、重合胆汁酸吸着剤、例としておよび好ましくは、コレスチラミン、コレスチポール、コレソルバム、コレスタゲルまたはコレスチミドと組み合わせて投与する。
【０１７９】
本発明の好ましい実施形態では、本発明の化合物を、胆汁酸再吸収阻害剤、例としておよび好ましくは、ASBT（＝IBAT）阻害剤、例えば、AZD−7806、S−8921、AK−105、BARI−1741、SC−435またはSC−635と組み合わせて投与する。
【０１８０】
本発明の好ましい実施形態では、本発明の化合物を、リポタンパク質拮抗剤、例としておよび好ましくは、ゲムカベンカルシウム（CI−1027）またはニコチン酸と組み合わせて投与する。
【０１８１】
本発明の好ましい実施形態では、本発明による化合物を、sGCモジュレーター、例としておよび好ましくは、リオシグアト、シナシグアト、ベリシグアトまたはBAY1101042と組み合わせて投与する。
【０１８２】
本発明の好ましい実施形態では、本発明による化合物を、グルコース代謝を調節する有効成分、例としておよび好ましくは、インスリン、スルホニルウレア、アカルボース、DPP4阻害剤、GLP−1類似体またはSGLT−1阻害剤と組み合わせて投与する。
【０１８３】
本発明による化合物と、活性降圧成分、活性抗不整脈成分、バソプレシン受容体拮抗薬、PDE5阻害剤、血小板凝集阻害剤、sGC活性化剤およびsGC刺激剤からなる群から選択される1種または複数のさらなる有効成分との組み合わせが特に好ましい。
【０１８４】
本発明はさらに、典型的には1種または複数の不活性で、非毒性の、薬学的に適当な賦形剤と共に少なくとも1種の本発明の化合物を含む医薬、および上記目的のためのその使用を提供する。
【０１８５】
本発明による化合物は全身的におよび／または局所的に作用することができる。この目的のために、これらを適当な様式で、例えば、経口、非経口、肺、経鼻、舌下、舌、頬側、直腸、真皮、経皮、結膜もしくは耳経路により、またはインプラントもしくはステントとして投与することができる。
【０１８６】
本発明による化合物をこれらの投与経路に適した投与形態で投与することができる。
【０１８７】
経口投与に適した投与形態は、先行技術により作用し、本発明の化合物を速効性のおよび／または修正された様式で放出し、本発明の化合物を結晶および／または非晶質および／または溶解形態で含むもの、例えば、錠剤（非コーティングあるいは例えば、本発明の化合物の放出を制御する、胃液抵抗性または遅延溶解または不溶性コーティングによるコーティング錠）、口腔で急速に崩壊する錠剤またはフィルム／オブラート、フィルム／凍結乾燥物、カプセル剤（例えば、硬質または軟質ゼラチンカプセル）、糖衣錠、顆粒剤、ペレット剤、散剤、乳剤、懸濁剤、エアゾール剤または液剤である。
【０１８８】
非経口投与は、吸収ステップを迂回することができる（例えば、静脈内、動脈内、心臓内、脊髄内または腰椎内で行われる）または吸収を含むことができる（例えば、吸入、筋肉内、皮下、皮内、経皮または腹腔内で行われる）。非経口投与に適した投与形態には、とりわけ、溶液、懸濁液、乳剤、凍結乾燥物または無菌粉末の形態の注射および点滴用製剤が含まれる。
【０１８９】
他の投与経路については、適当な例に、吸入医薬形態（粉末吸入器、ネブライザー、計量エアゾールを含む）、点鼻薬、液またはスプレー、舌、舌下または頬側投与のための錠剤、フィルム／ウエハーまたはカプセル剤、坐剤、耳または眼製剤、膣カプセル剤、水性懸濁剤（ローション、振盪混合物）、親油性懸濁剤、軟膏、クリーム、経皮治療システム（例えば、パッチ）、ミルク、ペースト、フォーム、粉剤、インプラントまたはステントがある。
【０１９０】
経口および非経口投与が好ましく、特に経口、静脈内および肺内（吸入）投与が好ましい。
【０１９１】
本発明による化合物は、言及する投与形態に変換することができる。これは、それ自体公知の方法で不活性の無毒の薬剤的に適した賦形剤と混合することにより達成することができる。これらの賦形剤には、とりわけ、担体（例えば微結晶セルロース、ラクトース、マンニトール）、溶媒（例えば、液体ポリエチレングリコール）、乳化剤および分散剤または湿潤剤（例えばドデシル硫酸ナトリウム、ポリオキシソルビタンオレエート）、結合剤（例えばポリビニルピロリドン）、合成および天然高分子（例えばアルブミン）、安定剤（例えば、酸化防止剤、例えばアスコルビン酸）、着色剤（例えば、無機顔料、例えば酸化鉄）および香料および／または臭気中和剤が含まれる。
【０１９２】
一般に、非経口投与の場合、有効な結果を達成するために、約0．001〜1mg／kg、好ましくは約0．01〜0．5mg／kg体重の量を投与することが有利であることが分かった。経口投与の場合、投与量は約0．01〜100mg／kg、好ましくは約0．01〜20mg／kg、最も好ましくは0．1〜10mg／kg体重である。
【０１９３】
それにもかかわらず、具体的には体重、投与経路、有効成分に対する個体の反応、製剤の性質および投与が行われる時間または間隔の関数として言及する量から逸脱することが必要となり得る場合もある。したがって、上記最小量未満で間に合わせることで十分となり得る場合がある一方で、言及する上限を超過しなければならない場合がある。より多くの量を投与する場合は、それを1日に数回の個別の用量に分割することが得策であり得る。
【０１９４】
以下の実施例は、本発明を例示する。本発明はこれらの実施例に制限されない。
【０１９５】
A．実施例
【表１Ａ】
2019524722.tif 000067
【表１Ｂ】
2019524722.tif 000068
【０１９６】
HPLCおよびLC／MS法：
方法1：
機器：Waters ACQUITY SQD UPLCシステム；カラム：Waters Acquity UPLC HSS T3 1．8μ 50×1mm；移動相A：水1l＋99％濃度ギ酸0．25ml、移動相B：アセトニトリル1l＋99％濃度ギ酸0．25ml；勾配：0．0分90％A→1．2分5％A→2．0分5％A；オーブン：50℃；流量：0．40ml／分；UV検出：208〜400nm。
【０１９７】
方法2：
MS機器型：Thermo Scientific FT−MS；機器型：UHPLC＋：Thermo Scientific UltiMate 3000；カラム：Waters、HSST3、2．1×75mm、C18 1．8μm；移動相A：水1l＋0．01％ギ酸；移動相B：アセトニトリル1l＋0．01％ギ酸；勾配：0．0分10％B→2．5分95％B→3．5分95％B；オーブン：50℃；流量：0．90ml／分；UV検出：210nm／最適積分路210〜300nm。
【０１９８】
方法3：
機器：Waters ACQUITY SQD UPLCシステム；カラム：Waters Acquity UPLC HSS T3 1．8μ 50×1mm；移動相A：水1l＋99％濃度ギ酸0．25ml、移動相B：アセトニトリル1l＋99％濃度ギ酸0．25ml；勾配：0．0分95％A→6．0分5％A→7．5分5％A；オーブン：50℃；流量：0．35ml／分；UV検出：210〜400nm。
【０１９９】
方法4：
機器：Thermo DFS、Trace GC Ultra；カラム：Restek RTX−35、15m×200μm×0．33μm；一定ヘリウム流量：1．20ml／分；オーブン：60℃；入口：220℃；勾配：60℃、30℃／分→300℃（3．33分間維持）。
【０２００】
方法5：
MS機器：Waters（Micromass）Quattro Micro；機器Waters UPLC Acquity；カラム：Waters BEH C18 1．7μ 50×2．1mm；移動相A：水1l＋0．01molのギ酸アンモニウム、移動相B：アセトニトリル1l；勾配：0．0分95％A→0．1分95％A→2．0分15％A→2．5分15％A→2．51分10％A→3．0分10％A；オーブン：40℃；流量：0．5ml／分；UV検出：210nm。
【０２０１】
さらなる詳細：
以下の実施例および試験の説明中の百分率は、特に指示しない限り、重量百分率であり、部は重量部である。液体／液体溶液の溶媒比、希釈比および濃度データは各場合において体積に基づく。
【０２０２】
本発明の化合物を記載される方法による分取HPLC（移動相は添加剤、例えば、トリフルオロ酢酸、ギ酸またはアンモニアを含む）によって精製する場合、本発明の化合物が十分に塩基性または酸性の官能基を含む場合には、本発明の化合物を、塩型で、例えば、トリフルオロ酢酸塩、ギ酸塩またはアンモニウム塩として得ることができる。このような塩を、当業者に既知の種々の方法によって、対応する遊離塩基または酸に変換することができる。
【０２０３】
純度の数値は一般的に、LC／MSクロマトグラムにおける対応するピーク積分に基づくが、1H NMRスペクトルを用いてさらに決定したかもしれない。純度が示されていない場合、純度はLC／MSクロマトグラムでの自動化ピーク積分により概して100％である、または純度を明確に決定しなかった。
【０２０４】
明言される理論値の収率（％）は、一般的に純度＜100％が示される場合、純度について補正している。溶媒含有または汚染バッチでは、正式な収率が「100％超」となり得、これらの場合、収率を溶媒または純度について補正していない。
【０２０５】
以下の1H NMRシグナルのカップリングパターンの記載は、いくつかの場合、ACD SpecManager（ACD／Labs Release 12．00、製品バージョン12．5）の提案から直接得られたものであり、必ずしも厳密に精査されていない。いくつかの場合、SpecManagerの提案を手動で調整した。手動で調整または割り当てられた説明は、一般に当のシグナルの光学的外観に基づいており、必ずしも厳密で物理的に正しい解釈に対応するものではない。一般に、明言される化学シフトは当のシグナルの中心を指す。ブロードな多重項の場合、間隔が与えられる。溶媒または水によって隠されたシグナルは、仮で割り当てたまたは列挙しなかった。有意にブロードなシグナル−例えば、分子部分の急速な回転によってまたはプロトン交換のために引き起こされる−も同様に仮で割り当てた（通常、ブロードな多重項もしくはブロードな一重項と呼ぶ）または列挙しなかった。
【０２０６】
融点および融解範囲は、明言する場合、未修正である。
【０２０７】
その調製が以下で明示的に記載されていない全ての反応物質または試薬は、一般的に利用可能な供給業者から商業的に購入した。同様にその調製が以下で記載されておらず、商業的に入手可能でなく一般的に利用可能でない供給業者から得た全ての他の反応物質または試薬については、その調製が記載されている公開参考文献を参照する。
【０２０８】
一般的手順
GP1
N，N−ジイソプロピルエチルアミン（1．4〜1．5当量、またはアミンを塩酸塩形態で使用した場合には2．4〜3．0当量）およびHATU（1．0〜1．65当量）を、対応するカルボン酸（1当量）のDMF（0．08〜0．12M）中溶液に添加し、混合物を室温で30分間撹拌した。その後、適当なアミン（1．04〜1．5当量）を添加し、混合物を室温でさらに0．15〜2時間撹拌した。次いで、水および1M塩酸水溶液を添加して反応を終了させた。沈殿を濾別し、DCMに溶解し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去した。あるいは、酸性化に続いて酢酸エチルで抽出し、合わせた有機相を硫酸マグネシウムまたは硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、減圧下で溶媒を除去した。次いで、粗生成物を、順相クロマトグラフィー（移動相：シクロヘキサン／酢酸エチル混合物またはジクロロメタン／メタノール混合物）または分取RP−HPLC（水／アセトニトリル勾配）のいずれかによって精製した。あるいは、反応混合物を少量のアセトニトリル、水およびギ酸で希釈し、粗溶液をRP−HPLC（水／アセトニトリル勾配）によって精製した。
【０２０９】
GP2
炭酸カリウムまたは炭酸セシウム（1．5〜2．5当量）を減圧下で反応容器中で焼成した。容器を室温に冷却し、アルゴンで満たした。酢酸パラジウム（0．1〜0．36当量）、9，9−ジメチル−4，5−ビス（ジフェニルホスフィノ）キサンテン（キサントホス、0．18〜0．36当量）およびジオキサン（0．04〜0．12M）を添加し、懸濁液をアルゴン流中、室温で10分間脱気した。その後、適当なアミド（1．0〜10当量）および適当な7−クロロ−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン（1．0当量）を添加した。混合物を80〜110℃で1時間（または分析HPLCもしくは適当な移動相混合物による薄層クロマトグラフィーにより変換が完了するまで）撹拌した。混合物を室温に冷却し、全ての揮発性成分を減圧下で除去した、あるいは反応混合物を水に注ぎ入れ、1M塩酸水溶液でpHをpH1に調整し、混合物を酢酸エチルで抽出し、合わせた有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去した。次いで、粗生成物を、順相クロマトグラフィー（移動相：シクロヘキサン／酢酸エチル混合物またはジクロロメタン／メタノール混合物）または分取RP−HPLC（水／アセトニトリル勾配）のいずれかによって精製した。あるいは、反応混合物を少量のアセトニトリル、水およびギ酸で希釈し、粗溶液をRP−HPLC（水／アセトニトリル勾配）によって精製した。
【０２１０】
GP3
適当な7−クロロ−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジンのDMF（0．10〜0．22M）中溶液に、適当なアミン（1．2当量）およびDIPEA（1．5〜3．5当量）を連続的に添加した。反応溶液を室温で一晩撹拌した。その後、粗生成物を、水性後処理および適切な有機溶媒による抽出後、順相クロマトグラフィー（移動相：シクロヘキサン／酢酸エチル混合物またはジクロロメタン／メタノール混合物）または分取RP−HPLC（水／アセトニトリル勾配）のいずれかによって精製した。あるいは、反応混合物を少量のアセトニトリル、水およびギ酸で希釈し、粗溶液をRP−HPLC（水／アセトニトリル勾配）によって精製した。
出発化合物および中間体：
【０２１１】
実施例1A
エチル3−（1−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝シクロプロピル）−3−オキソプロパノエート
【化６５】
2019524722.tif 000069
カルボニルジイミダゾール（CDI）5．48g（33．8mmol）を、1−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝シクロプロパンカルボン酸10．0g（42．5mmol）のTHF316ml中溶液に添加し、混合物を室温で2．5時間撹拌した。その後、氷浴で冷却しながら、カリウム3−エトキシ−3−オキソプロパノエート5．79g（34．0mmol）および塩化マグネシウム2．93g（30．8mmol）を添加した。添加の完了時に、撹拌を50℃で一晩続けた。溶媒を減圧下で除去し、残渣を酢酸エチルおよび飽和塩化アンモニウム水溶液に溶解し、相を分離した。有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去した。残渣を順相クロマトグラフィー（酢酸エチル／シクロヘキサン勾配）によって精製すると、標記化合物7．38g（理論値の57％；純度100％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝0．86分；MS（ESIpos）：m／z＝306［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 8．16（s，1H），7．31−7．40（m，5H），5．06（s，2H），4．07（q，2H），3．60（s，2H），1．36−1．47（m，2H），1．12−1．20（m，5H）．
【０２１２】
実施例1B
エチル3−（1−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝シクロプロピル）−2，2−ジメチル−3−オキソプロパノエート
【化６６】
2019524722.tif 000070
全量を2つのマイクロ波バイアルに分けた。エチル3−（1−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝シクロプロピル）−3−オキソプロパノエート1．50g（4．91mmol）、ヨードメタン917μl（14．7mmol）および炭酸カリウム1．36g（9．83mmol）のアセトン21ml中懸濁液を、マイクロ波中、60℃で16時間反応させた。次いで、ヨードメタンさらに459μl（7．37mmol）を添加し、混合物をマイクロ波中60℃で1時間および120℃で3時間反応させた。反応混合物を水に注ぎ入れ、酢酸エチルで3回抽出した。合わせた有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去した。残渣を少量のアセトニトリルに溶解し、Milliporeフィルタを通して濾過し、分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって5回分離した。これにより、標記化合物471mg（理論値の27％、純度94％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．91分；MS（ESIpos）：m／z＝334［M＋H］＋。
1H−NMR（500 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 7．89（s，1H），7．29−7．42（m，5H），5．00（s，2H），3．99（q，2H），1．37（q，2H），1．25（s，6H），1．08−1．15（m，5H）．
【０２１３】
実施例1C
エチル3−（1−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝シクロプロピル）−3−ヒドロキシピバロエート（ラセミ体）
【化６７】
2019524722.tif 000071
−30℃で、水素化ホウ素ナトリウム73．9mg（1．95mmol）をエチル3−（1−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝シクロプロピル）−2，2−ジメチル−3−オキソプロパノエート465mg（1．40mmol）のメタノール7．3ml中溶液に添加した。混合物を−30℃で2時間撹拌し、次いで、室温に加温し、さらに1時間撹拌した。反応溶液を飽和塩化アンモニウム水溶液に注ぎ入れ、酢酸エチルで3回抽出した。合わせた有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去した。残渣を少量のアセトニトリルに溶解し、Milliporeフィルタを通して濾過し、分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって2回精製した。これにより、標記化合物330mg（理論値の71％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝0．94分；MS（ESIpos）：m／z＝336［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 7．25−7．45（m，6H），4．84−5．06（m，3H），3．80−4．06（m，3H），1．05−1．16（m，9H），0．78−0．87（m，2H），0．54−0．62（m，1H），0．27−0．41（m，1H）．
【０２１４】
実施例1D
7−ヒドロキシ−6，6−ジメチル−4−アザスピロ［2．4］ヘプタン−5−オン（ラセミ体）
【化６８】
2019524722.tif 000072
エチル3−（1−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝シクロプロピル）−3−ヒドロキシピバロエート325mg（969μmol）のメタノール4．9ml中溶液に、パラジウム炭（10％）24．3mgを添加し、標準圧力および室温で6時間水素化を行った。次いで、反応混合物をMilliporeフィルタを通して濾過し、溶媒を減圧下で除去した。これにより、標記化合物150mg（理論値の99％、純度95％）が得られた。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 7．53（br s，1H），5．03（d，1H），3．66（d，1H），1．04（s，3H），0．94（s，3H），0．84−0．91（m，1H），0．56−0．69（m，2H），0．43−0．51（m，1H）．
【０２１５】
実施例2A
エチル4−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝−3−オキソブタノエート
【化６９】
2019524722.tif 000073
N−［（ベンジルオキシ）カルボニル］グリシン15．0g（71．7mmol）のTHF534ml中溶液に、カルボニルジイミダゾール（CDI）9．24g（57．0mmol）を添加し、混合物を室温で2．5時間撹拌した。その後、氷浴で冷却しながら、カリウム3−エトキシ−3−オキソプロパノエート9．76g（57．4mmol）および塩化マグネシウム4．95g（52．0mmol）を添加した。添加の完了時に、撹拌を50℃でさらに48時間続けた。溶媒を減圧下で除去し、残渣を酢酸エチルおよび飽和塩化アンモニウム水溶液に溶解し、相を分離した。有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去した。残渣を順相クロマトグラフィー（酢酸エチル−シクロヘキサン勾配）によって精製すると、標記化合物12．7g（理論値の60％；純度95％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝0．83分；MS（ESIneg）：m／z＝278［M−H］−。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 7．56（br t，1H），7．25−7．41（m，5H），5．04（s，2H），4．09（q，2H），3．97（d，2H），3．60（s，2H），1．19（t，3H）．
【０２１６】
実施例2B
エチル4−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝−2−メチル−3−オキソブタノエート（ラセミ体）
【化７０】
2019524722.tif 000074
エチル4−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝−3−オキソブタノエート1．00g（3．58mmol）、ヨードメタン669μl（10．7mmol）および炭酸カリウム990mg（7．16mmol）のアセトン15ml中懸濁液を、マイクロ波中、50℃で2時間反応させた。反応を監視しながら、マイクロ波照射を45℃でさらに2時間続けた。反応混合物を水に注ぎ入れ、酢酸エチルで3回抽出した。合わせた有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去した。残渣を少量のアセトニトリルに溶解し、Milliporeフィルタを通して濾過し、分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって2回分離した。これにより、標記化合物536mg（理論値の51％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝0．87分；MS（ESIneg）：m／z＝292［M−H］−。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 7．57（br t，1H），7．24−7．40（m，5H），5．04（s，2H），4．09（q，2H），4．03（d，2H），3．80（q，1H），1．22−1．09（m，6H）．
【０２１７】
実施例2C
エチル4−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝−3−ヒドロキシ−2−メチルブタノエート（ジアステレオマー混合物）
【化７１】
2019524722.tif 000075
エチル4−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝−2−メチル−3−オキソブタノエート533mg（1．82mmol）のメタノール9．2ml中溶液に、−78℃で、水素化ホウ素ナトリウム96．2mg（2．54mmol）を添加した。反応を監視しながら、混合物を徐々に−15℃に加温した。−15℃で、飽和塩化アンモニウム水溶液を添加して反応を終了させた。混合物を酢酸エチルで3回抽出した。合わせた有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去した。残渣を少量のアセトニトリルに溶解し、分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって2回精製した。これにより、標記化合物398mg（理論値の74％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝0．80分；MS（ESIpos）：m／z＝296［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 7．26−7．45（m，5H），7．20−7．25（m，0．3H），7．11（br t，0．7H），5．01（s，2H），4．90−4．97（m，1H），3．98−4．08（m，2H），3．81−3．88（m，0．3H），3．63−3．71（m，0．7H），3．11−3．20（m，0．7H），2．93−3．07（m，1．3H），2．40−2．49（m，1H），1．17（t，3H），1．00−1．05（m，3H）．
【０２１８】
実施例2D
4−ヒドロキシ−3−メチルピロリジン−2−オン（ジアステレオマー混合物）
【化７２】
2019524722.tif 000076
エチル4−｛［（ベンジルオキシ）カルボニル］アミノ｝−3−ヒドロキシ−2−メチルブタノエート397mg（1．34mmol）のメタノール7．2ml中溶液に、パラジウム炭（10％）40mgを添加し、標準圧力および室温で6時間水素化を行った。次いで、反応混合物をMilliporeフィルタを通して濾過し、溶媒を減圧下で除去した。標記化合物211mg（定量的）が得られ、これをさらに精製することなく次のステップに使用した。
【０２１９】
実施例3A
エチル2−ジベンジルアミノプロパノエート（ラセミ体）
【化７３】
2019524722.tif 000077
ジベンジルアミン14．4g（72．9mmol）を、エチル2−ブロモプロパノエート12．0g（66．3mmol）のエタノール17．5ml中溶液に添加し、混合物を還流下で一晩加熱した。その後、溶媒を減圧下で除去し、1M水酸化ナトリウム水溶液を残渣に添加した。混合物をジクロロメタンで3回抽出し、合わせた有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄した。有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去した。残渣を順相クロマトグラフィー（酢酸エチル／シクロヘキサン勾配）によって精製した。これにより、標的化合物10g（理論値の50％、純度97％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝1．28分；MS（ESIpos）：m／z＝298［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 7．20−7．37（m，10H），4．06−4．20（m，2H），3．74（d，2H），3．58（d，2H），3．32−3．40（m，1H），1．22−1．28（m，6H）．
【０２２０】
実施例3B
エチル4−（ジベンジルアミノ）−3−オキソペンタノエート（ラセミ体）
【化７４】
2019524722.tif 000078
THF75mlで希釈したビス（トリメチルシリル）リチウムアミド168ml（168mmol、THF中1M）の溶液を−78℃に冷却し、酢酸エチル6．91ml（70．6mmol）を添加した。混合物を−78℃でさらに30分間撹拌した。次いで、エチル2−ジベンジルアミノプロパノエート10．0g（33．6mmol）のTHF37ml中溶液をゆっくり滴加した。混合物を−78℃で2時間、および0℃で1時間撹拌した。飽和塩化アンモニウム水溶液を添加して反応を終了させた。混合物を酢酸エチルで3回抽出した。合わせた有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去した。残渣を順相クロマトグラフィー（酢酸エチル／シクロヘキサン勾配）によって精製した。これにより、標記化合物9．89g（理論値の87％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝2．42分；MS（ESIpos）：m／z＝340［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 7．24−7．40（m，10H），3．99（q，2H），3．68−3．77（m，1H），3．53−3．64（m，3H），3．37−3．49（m，3H），1．07−1．13（m，6H）．
【０２２１】
実施例3C
エチル1−［2−（ジベンジルアミノ）プロパノイル］シクロプロパンカルボキシレート（ラセミ体）
【化７５】
2019524722.tif 000079
エチル4−（ジベンジルアミノ）−3−オキソペンタノエート2．00g（5．89mmol）、1，2−ジブロモエタン1．12ml（12．9mmol）および炭酸カリウム1．63g（11．8mmol）のアセトン6ml中懸濁液を一晩加熱還流した。次いで、1，2−ジブロモエタン0．56ml（1．1当量）および炭酸カリウム814mgを添加し、混合物を48時間還流下で加熱した。反応混合物を水に注ぎ入れ、酢酸エチルで3回抽出した。合わせた有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去した。残渣を少量のアセトニトリルに溶解し、Milliporeフィルタを通して濾過し、分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって5回精製した。これにより、標記化合物926mg（理論値の41％、純度96％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝1．29分；MS（ESIpos）：m／z＝366［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 7．22−7．36（m，10H），4．24（q，1H），3．92（dq，1H），3．71（dq，1H），3．51（s，4H），1．50（qd，2H），1．07−1．17（m，5H），0．95（t，3H）．
【０２２２】
実施例3D
エチル1−［2−（ジベンジルアミノ）−1−ヒドロキシプロピル］シクロプロパンカルボキシレート（ジアステレオマー混合物）
【化７６】
2019524722.tif 000080
−78℃で、水素化ホウ素ナトリウム134mg（3．54mmol）を、エチル1−［2−（ジベンジルアミノ）プロパノイル］シクロプロパンカルボキシレート925mg（2．53mmol）のメタノール13ml中溶液に添加した。反応を監視しながら、混合物を徐々に−15℃に加温した。−15℃で、飽和塩化アンモニウム水溶液を添加して反応を終了させた。混合物を酢酸エチルで3回抽出した。合わせた有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去した。残渣を少量のアセトニトリルに溶解し、分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって3回精製した。これにより、標記化合物628mg（理論値の66％、純度98％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝0．70分；MS（ESIpos）：m／z＝368［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 7．17−7．38（m，10H），4．29（d，1H），3．76−3．89（m，4H），3．54（br dd，1H），3．40（d，2H），3．09（quintt，1H），1．06−1．12（m，1H），0．91−1．03（m，7H），0．80−0．88（m，1H），0．65−0．72（m，1H）．
【０２２３】
実施例3E
7−ヒドロキシ−6−メチル−5−アザスピロ［2．4］ヘプタン−4−オン（ジアステレオマー混合物）
【化７７】
2019524722.tif 000081
パラジウム炭素（10％）63．5mgを、エチル1−［2−（ジベンジルアミノ）−1−ヒドロキシプロピル］シクロプロパンカルボキシレート626mg（1．70mmol）のメタノール12．7ml中溶液に添加し、混合物を標準圧力および室温で6時間水素化した。次いで、反応混合物をMilliporeフィルタを通して濾過し、溶媒を減圧下で除去した。これにより、標記化合物243mg（理論値の96％、純度95％）が得られた。
LC−MS（方法5）：Rt＝0．49分；MS（ESIpos）：m／z＝142［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 7．58（br s，1H），4．86（d，1H），3．91（t，1H），3．69（quintt，1H），1．07（d，3H），0．86−0．93（m，1H），0．67−0．79（m，3H）．
【０２２４】
実施例4A
エチル7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキシレート
【化７８】
2019524722.tif 000082
DIPEA167ml（961mmol）を、エチル2−［（2，6−ジクロロピリジン−3−イル）カルボニル］−3−エトキシアクリレート（CAS157373−27−8）43．7g（137mmol）および3，5−ジフルオロピリジン−2−アミン25．0g（192mmol）のDCM216ml中溶液に添加し、混合物を室温で4時間撹拌した。次いで、炭酸カリウム19．0g（137mmol）を添加し、混合物を還流下で2日間加熱した。混合物をDCMで希釈し、1M塩酸水溶液で3回洗浄した。有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去した。混合物をエーテルで希釈し、沈殿を吸引濾別した。母液を用いてこの手順を繰り返し、得られた固体を主留分と合わせた。これにより、標記化合物26．6g（理論値の53％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．67分；MS（ESIpos）：m／z＝366［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 8．89（s，1H），8．66（d，1H），8．62（d，1H），8．39（ddd，1H），7．68（d，1H），4．26（q，2H），1．28（t，3H）．
【０２２５】
実施例4B
7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸
【化７９】
2019524722.tif 000083
エチル7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキシレート26．6g（72．9mmol）を最初に水218mlに装入し、36％濃度塩酸水溶液218mlおよびTHF218mlを添加し、混合物を120℃で3時間撹拌した。反応混合物を室温に冷却し、水1450mlを添加した。沈殿を吸引濾別し、水で洗浄し、高真空下で乾燥させた。これにより、標的化合物24．3g（理論値の97％、純度99％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．61分；MS（ESIpos）：m／z＝338［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 13．86（s，1H），9．18（s，1H），8．78（d，1H），8．67（d，1H），8．42（ddd，1H），7．82（d，1H）．
【０２２６】
実施例4C
7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−N−［（2R）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化８０】
2019524722.tif 000084
一般的手順1により、7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例4B）200mg（592μmol）を、（2R）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−アミン塩酸塩145mg（888μmol）と、DMF3ml中HATU270mg（711μmol）およびDIPEA413μl（2．40mmol）の存在下で反応させた。混合物をさらに10分間撹拌し、水、アセトニトリルおよびギ酸で希釈した。粗溶液をMilliporeフィルタを通して濾過し、分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物197mg（理論値の74％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法1）Rt＝1．15分；MS（ESIpos）m／z＝447［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 9．89（d，1H），9．10（s，1H），8．75（d，1H），8．67（d，1H），8．40（ddd，1H），7．78（d，1H），4．71−4．85（m，1H），1．83−1．96（m，1H），1．60−1．74（m，1H），0．98（t，3H）．
【０２２７】
実施例5A
7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−N−［（2S）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化８１】
2019524722.tif 000085
一般的手順1により、7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例4B）400mg（1．19mmol）を、（2S）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−アミン290mg（1．78mmol）と、DMF6ml中HATU540mg（1．42μmol）およびDIPEA0．83ml（4．7mmol）の存在下で反応させた。次いで、混合物を水20mlおよび酢酸エチル30mlで希釈した。相を分離し、水相を酢酸エチル20mlで3回抽出した。合わせた有機相を1M塩酸／飽和塩化ナトリウム水溶液（1：1）20mlで洗浄し、飽和塩化ナトリウム水溶液15mlで3回洗浄した。有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去した。粗生成物を少量のアセトニトリルに溶解し、分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって2回精製すると、標記化合物367mg（理論値の69％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）Rt＝2．19分；MS（ESIpos）m／z＝447［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 9．89（d，1H），9．10（s，1H），8．75（d，1H），8．67（d，1H），8．40（ddd，1H），7．78（d，1H），4．72−4．84（m，1H），1．84−1．95（m，1H），1．62−1．73（m，1H），0．98（br t，3H）．
【０２２８】
実施例6A
7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−N−［（2S）−1，1，1−トリフルオロプロパン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化８２】
2019524722.tif 000086
一般的手順1により、7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例4B）200mg（592μmol）を、（2S）−1，1，1−トリフルオロプロパン−2−アミン塩酸塩133mg（888μmol）と、DMF3ml中HATU270mg（711μmol）およびDIPEA0．41ml（2．4mmol）の存在下で反応させた。混合物をさらに10分間撹拌し、水、アセトニトリルおよびギ酸で希釈した。粗溶液をMilliporeフィルタを通して濾過し、分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物180mg（理論値の70％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法1）Rt＝1．15分；MS（ESIpos）m／z＝433［M＋H］＋。
1H−NMR（500 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 9．94（d，1H），9．10（s，1H），8．74（d，1H），8．67（d，1H），8．40（ddd，1H），7．78（d，1H），4．89−4．98（m，1H），1．40（d，3H）．
【０２２９】
実施例7A
7−クロロ−N−［1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ラセミ体）
【化８３】
2019524722.tif 000087
一般的手順1により、7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例4B）100mg（296μmol）を、1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエタンアミン塩酸塩（ラセミ体）67．6mg（385μmol）と、DMF1．5ml中HATU135mg（355μmol）およびDIPEA206μl（1．20mmol）の存在下で反応させた。混合物をさらに10分間撹拌し、水、アセトニトリルおよびギ酸で希釈した。粗溶液をMilliporeフィルタを通して濾過し、分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物102mg（理論値の75％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法1）Rt＝1．16分；MS（ESIpos）m／z＝459［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．04（d，1H），9．09（s，1H），8．75（d，1H），8．67（d，1H），8．40（ddd，1H），7．78（d，1H），4．34−4．48（m，1H），1．18−1．30（m，1H），0．50−0．72（m，3H），0．33（br． s．，1H）．
【０２３０】
実施例8A
7−クロロ−N−［（1R）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化８４】
2019524722.tif 000088
一般的手順1により、7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例4B）200mg（592μmol）を、（1R）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエタンアミン塩酸塩135mg（770μmol）と、DMF2．7ml中HATU270mg（711μmol）およびDIPEA0．41ml（2．4mmol）の存在下で反応させた。混合物をさらに10分間撹拌し、水、アセトニトリルおよびギ酸で希釈した。粗溶液をMilliporeフィルタを通して濾過し、分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物180mg（理論値の66％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝2．22分；MS（ESIpos）：m／z＝459［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．04（d，1H），9．09（s，1H），8．75（d，1H），8．67（d，1H），8．40（ddd，1H），7．78（d，1H），4．34−4．47（m，1H），1．19−1．31（m，1H），0．52−0．71（m，3H），0．33（br． s．，1H）．
【０２３１】
実施例9A
7−クロロ−N−［（1S）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化８５】
2019524722.tif 000089
一般的手順1により、7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例4B）600mg（1．78mmol）を、（1S）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエタンアミン塩酸塩468mg（2．67mmol）と、DMF18ml中HATU675mg（1．77mmol）およびDIPEA0．74ml（4．3mmol）の存在下で反応させた。次いで、混合物を水20mlおよび酢酸エチル30mlで希釈した。相を分離し、水相を酢酸エチル20mlで3回抽出した。合わせた有機相を1M塩酸／飽和塩化ナトリウム水溶液（1：1）20mlで洗浄し、飽和塩化ナトリウム水溶液15mlで3回洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去した。粗生成物を少量のジクロロメタンに溶解し、順相クロマトグラフィー（酢酸エチル／シクロヘキサン勾配）によって精製すると、標記化合物384mg（理論値の47％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝1．21分；MS（ESIpos）：m／z＝459［M＋H］＋。
1H−NMR（500 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．04（br d，1H），9．09（br s，1H），8．75（d，1H），8．66（d，1H），8．39（ddd，1H），7．78（d，1H），4．41（sxt，1H），1．21−1．28（m，1H），0．63−0．70（m，1H），0．54−0．63（m，2H），0．29−0．38（m，1H）．
【０２３２】
実施例10A
7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−N−（1，1，1，3，3，3−ヘキサフルオロプロパン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化８６】
2019524722.tif 000090
2，4，6−トリプロピル−1，3，5，2，4，6−トリオキサトリホスホリナン2，4，6−トリオキシド（T3P、DMF中50％）4．15ml（7．11mmol）を、7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例4B）800mg（2．37mmol）、1，1，1，3，3，3−ヘキサフルオロプロパン−2−アミン435mg（2．61mmol）およびDIPEA 1．24ml（7．11mmol）の酢酸エチル21ml中溶液に滴加した。混合物を80℃で一晩撹拌した。反応混合物を水および酢酸エチルに注ぎ入れ、相を分離した。有機相を水で3回および飽和塩化ナトリウム水溶液で1回洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去した。残渣を少量のアセトニトリルに溶解し、Milliporeフィルタを通して濾過し、分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって3回精製した。これにより、標記化合物785mg（理論値の68％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝2．29分；MS（ESIpos）：m／z＝487［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．77（d，1H），9．19（s，1H），8．78（d，1H），8．68（d，1H），8．41（ddd，1H），7．81（d，1H），6．35−6．50（m，1H）．
【０２３３】
実施例11A
7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボニルクロリド
【化８７】
2019524722.tif 000091
塩化チオニル639μl（8．77mmol）を、7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例4B）1．00g（2．96mmol）のTHF23．7ml中溶液に添加し、混合物を室温で1時間撹拌した。混合物を還流下で1時間加熱し、次いで、全ての揮発性成分を減圧下で除去した。粗生成物を、さらに後処理することなく次のステップに使用した（変換を定量的であると仮定した）。
【０２３４】
実施例11B
7−クロロ−N−（2，6−ジクロロフェニル）−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化８８】
2019524722.tif 000092
室温で、トリエチルアミン1．23ml（8．85mmol）および2，6−ジクロロアニリン573mg（3．54mmol）を、7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボニルクロリド1．05g（2．95mmol）のジクロロメタン62ml中溶液に添加した。混合物を室温で30分間および50℃で一晩撹拌した。反応混合物を濃縮し、ジクロロメタンに溶解し、1M塩酸水溶液で2回洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去した。粗生成物を順相クロマトグラフィー（酢酸エチル：シクロヘキサン／50：50）によって精製した。これにより、標記化合物412mg（理論値の29％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝1．17分；MS（ESIpos）m／z＝481［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 11．34（s，1H），9．17（s，1H），8．81（d，1H），8．67（d，1H），8．40（ddd，1H），7．80（d，1H），7．60（d，2H），7．40（t，1H）．
【０２３５】
実施例12A
7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−N−［1−（トリフルオロメトキシ）ブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ラセミ体）
【化８９】
2019524722.tif 000093
一般的手順1により、7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例4B）200mg（585μmol）を、1−（トリフルオロメトキシ）ブタン−2−アミン塩酸塩（ラセミ体）170mg（878μmol）と、DMF2．5ml中HATU267mg（702μmol）およびDIPEA408μl（2．34mmol）の存在下で反応させた。混合物を10分間撹拌した。粗溶液を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物148mg（理論値の52％、純度98％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝2．24分；MS（ESIpos）：m／z＝477［M＋H］＋。
1H−NMR（500 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 9．61（d，1H），9．05（s，1H），8．74（d，1H），8．66（d，1H），8．39（ddd，1H），7．75（d，1H），4．15−4．27（m，3H），1．55−1．74（m，2H），0．94（t，3H）．
【０２３６】
実施例13A
7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−N−［（2S）−1，1，1−トリフルオロ−3，3−ジメチルブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化９０】
2019524722.tif 000094
一般的手順1により、7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例4B）600mg（1．78mmol）を、（S）−2，2−ジメチル−1−トリフルオロメチルプロピルアミン331mg（2．13mmol）と、DMF6ml中HATU811mg（2．13mmol）およびDIPEA929μl（5．33mmol）の存在下で反応させた。混合物をさらに5分間撹拌し、水、アセトニトリルおよびギ酸で希釈した。粗溶液をMilliporeフィルタを通して濾過し、分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物719mg（理論値の85％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝2．38分；MS（ESIpos）：m／z＝475［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．25（d，1H），9．12（s，1H），8．78（d，1H），8．67（d，1H），8．40（ddd，1H），7．78（d，1H），4．67（quintt，1H），1．10（s，9H）．
【０２３７】
実施例14A
N−ベンジル−1，1，1，2，2−ペンタフルオロペンタン−3−アミン（ラセミ体）
【化９１】
2019524722.tif 000095
1，1，1，2，2−ペンタフルオロブタン−3−オン2．00g（11．4mmol）のジクロロメタン10ml中溶液に、0℃で、チタンテトライソプロポキシド5．03ml（17．0mmol）およびベンジルアミン2．48ml（22．7mmol）を添加した。混合物を室温でさらに90分間撹拌した後、再び0℃に冷却した。その後、シアノ水素化ホウ素ナトリウム2．00g（31．8mmol）、メタノール36mlおよび3Åモレキュラーシーブを添加した。混合物を室温に加温し、さらに2日間撹拌した。次いで、少量の水および酢酸エチルを添加し、反応溶液を濾過した。濾液を飽和重炭酸ナトリウム水溶液で2回および飽和塩化ナトリウム水溶液で1回洗浄した。有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去した。残渣を順相クロマトグラフィー（酢酸エチル／シクロヘキサン1／20）によって精製すると、標記化合物989mg（理論値の25％；純度76％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝1．27分；MS（ESIpos）：m／z＝268［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 7．21−7．36（m，5H），3．73−3．85（m，2H），3．05−3．20（m，1H），1．63−1．75（m，1H），1．49−1．61（m，1H），1．15−1．20（m，1H），0．96（t，3H）．
【０２３８】
実施例14B
1，1，1，2，2−ペンタフルオロペンタン−3−アミン塩酸塩（ラセミ体）
【化９２】
2019524722.tif 000096
N−ベンジル−1，1，1，2，2−ペンタフルオロペンタン−3−アミン980mg（2．75mmol、純度75％）のメタノール11．3ml中溶液に、パラジウム炭（10％）75mgを添加し、水素化を標準圧力および室温で6時間行った。次いで、反応混合物をMilliporeフィルタを通して濾過し、溶媒を減圧下で除去した。次いで、留去された溶媒を含むレシーバーをフラスコに移し、ジオキサン中4N塩酸と混和し、再び濃縮した。残渣をエーテルと撹拌し、沈殿を吸引濾別し、高真空下で乾燥させた。これにより、標記化合物379mg（理論値の65％、純度100％）が得られた。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 8．97（br． s，3H），4．16−4．28（m，1H），1．67−1．94（m，2H），1．05（t，3H）．
【０２３９】
実施例15A
7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−N−［1，1，1，2，2−ペンタフルオロペンタン−3−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ラセミ体）
【化９３】
2019524722.tif 000097
一般的手順1により、7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例4B）200mg（592μmol）を、1，1，1，2，2−ペンタフルオロペンタン−3−アミン塩酸塩152mg（711μmol）と、DMF2ml中HATU270mg（711μmol）およびDIPEA413μl（2．37mmol）の存在下で反応させた。混合物をさらに5分間撹拌し、水、アセトニトリルおよびギ酸で希釈した。粗溶液をMilliporeフィルタを通して濾過し、分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物248mg（理論値の84％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝2．32分；MS（ESIpos）：m／z＝497［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 9．93（d，1H），9．11（s，1H），8．75（d，1H），8．66（d，1H），8．40（ddd，1H），7．78（d，1H），4．84−4．97（m，1H），1．88−1．99（m，1H），1．63−1．75（m，1H），0．97（t，3H）．
【０２４０】
実施例16A
エチル7−クロロ−1−（3−クロロ−5−フルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキシレート
【化９４】
2019524722.tif 000098
DIPEA5．94ml（34．1mmol）を、エチル2−［（2，6−ジクロロピリジン−3−イル）カルボニル］−3−エトキシアクリレート（CAS157373−27−8）1．55g（4．87mmol）および3−クロロ−5−フルオロピリジン−2−アミン1．00g（6．82mmol）のDCM7．7ml中溶液に添加し、混合物を室温で4時間撹拌した。次いで、炭酸カリウム674mg（4．87mmol）を添加し、混合物を還流下で72時間加熱した。混合物をジクロロメタンで希釈し、1M塩酸水溶液で2回および飽和塩化ナトリウム水溶液で1回洗浄した。有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去した。残渣を順相クロマトグラフィー（ジクロロメタン／酢酸エチル勾配）によって精製すると、標記化合物698mg（理論値の37％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝0．91分；MS（ESIpos）：m／z＝382［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 8．93（s，1H），8．76（d，1H），8．63（d，1H），8．54（dd，1H），7．67（d，1H），4．25（q，2H），1．28（t，3H）．
【０２４１】
実施例16B
7−クロロ−1−（3−クロロ−5−フルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸
【化９５】
2019524722.tif 000099
エチル7−クロロ−1−（3−クロロ−5−フルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキシレート695mg（1．82mmol）を最初に水5．4mlに装入し、36％濃度塩酸水溶液5．4mlおよびTHF5．4mlを添加し、混合物を120℃で4時間撹拌した。反応混合物を室温に冷却し、水36mlを添加した。沈殿を吸引濾別し、水で洗浄し、高真空下で乾燥させた。これにより、標記化合物614mg（理論値の95％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝0．96分；MS（ESIpos）：m／z＝354［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 13．89（s，1H），9．27（s，1H），8．75−8．81（m，3H），8．56（dd，1H），7．81（d，1H）．
【０２４２】
実施例16C
7−クロロ−1−（3−クロロ−5−フルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−N−［（2R）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化９６】
2019524722.tif 000100
一般的手順1により、7−クロロ−1−（3−クロロ−5−フルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例16B）150mg（424μmol）を、（2R）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−アミン塩酸塩104mg（635μmol）と、DMF2ml中HATU193mg（508μmol）およびDIPEA295μl（1．69mmol）の存在下で反応させた。混合物をさらに10分間撹拌し、水、アセトニトリルおよびギ酸で希釈した。粗溶液をMilliporeフィルタを通して濾過し、分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物150mg（理論値の77％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝2．26分；MS（ESIpos）：m／z＝463［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 9．90（d，1H），9．14（d，1H），8．72−8．80（m，2H），8．54（dd，1H），7．77（d，1H），4．72−4．84（m，1H），1．83−1．96（m，1H），1．62−1．74（m，1H），0．98（t，3H）．
【０２４３】
実施例17A
7−クロロ−1−（3−クロロ−5−フルオロピリジン−2−イル）−N−［（1R）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化９７】
2019524722.tif 000101
一般的手順1により、7−クロロ−1−（3−クロロ−5−フルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例16B）150mg（424μmol）を、（1R）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエタンアミン塩酸塩112mg（635μmol）と、DMF2ml中HATU193mg（508μmol）およびDIPEA295μl（1．69mmol）の存在下で反応させた。混合物をさらに10分間撹拌し、水、アセトニトリルおよびギ酸で希釈した。粗溶液をMilliporeフィルタを通して濾過し、分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物159mg（理論値の79％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝1．19分；MS（ESIpos）：m／z＝475［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．06（dd，1H），9．14（d，1H），8．72−8．79（m，2H），8．54（ddd，1H），7．77（d，1H），4．33−4．46（m，1H），1．19−1．30（m，1H），0．52−0．71（m，3H），0．29−0．39（m，1H）．
【０２４４】
実施例18A
エチル7−クロロ−1−（3−クロロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキシレート
【化９８】
2019524722.tif 000102
DIPEA23．3ml（134mmol）を、エチル2−［（2，6−ジクロロピリジン−3−イル）カルボニル］−3−エトキシアクリレート（CAS157373−27−8）6．07g（19．1mmol）および3−クロロピリジン−2−アミン3．43g（26．7mmol）のDCM30ml中溶液に添加し、混合物を室温で4時間撹拌した。次いで、炭酸カリウム2．64g（19．1mmol）を添加し、混合物を還流下で3日間加熱した。混合物をジクロロメタンで希釈し、1M塩酸水溶液で2回および飽和塩化ナトリウム水溶液で1回洗浄した。有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去した。残渣をエーテルと撹拌し、沈殿を吸引濾別し、エーテルで洗浄し、高真空下で乾燥させた。これにより、標記化合物4．14g（理論値の60％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．63分；MS（ESIpos）：m／z＝364［M＋H］＋。
1H−NMR（500 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 8．92（s，1H），8．67（dd，1H），8．63（d，1H），8．33（dd，1H），7．76（dd，1H），7．67（d，1H），4．25（q，2H），1．28（t，3H）．
【０２４５】
実施例18B
7−クロロ−1−（3−クロロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸
【化９９】
2019524722.tif 000103
エチル7−クロロ−1−（3−クロロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキシレート4．09g（11．2mmol）を最初に水33mlに装入し、36％濃度塩酸水溶液33mlおよびTHF33mlを添加し、混合物を120℃で4時間撹拌した。反応混合物を室温に冷却し、水220mlを添加した。沈殿を吸引濾別し、水で洗浄し、高真空下で乾燥させた。これにより、標記化合物3．53g（理論値の92％、純度98％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝0．90分；MS（ESIpos）：m／z＝336［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 13．92（br． s．，1H），9．26（s，1H），8．79（d，1H），8．68（dd，1H），8．34（dd，1H），7．76−7．83（m，2H）．
【０２４６】
実施例18C
7−クロロ−1−（3−クロロピリジン−2−イル）−4−オキソ−N−［（2R）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化１００】
2019524722.tif 000104
一般的手順1により、7−クロロ−1−（3−クロロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例18B）800mg（2．38mmol）を、（2R）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−アミン塩酸塩584mg（3．57mmol）と、DMF12ml中HATU1．09g（2．86μmol）およびDIPEA1．24ml（7．14mmol）の存在下で反応させた。混合物をさらに10分間撹拌し、水、アセトニトリルおよびギ酸で希釈した。粗溶液をMilliporeフィルタを通して濾過し、分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物827mg（理論値の78％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝2．19分；MS（ESIpos）：m／z＝445［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 9．92（d，1H），9．11（d，1H），8．76（dd，1H），8．68（dt，1H），8．34（dd，1H），7．73−7．81（m，2H），4．72−4．84（m，1H），1．83−1．96（m，1H），1．62−1．75（m，1H），0．98（t，3H）．
【０２４７】
実施例19A
7−クロロ−1−（3−クロロピリジン−2−イル）−N−［（1R）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化１０１】
2019524722.tif 000105
一般的手順1により、7−クロロ−1−（3−クロロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例18B）150mg（446μmol）を、（1R）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエタンアミン塩酸塩118mg（669μmol）と、DMF中HATU204mg（535μmol）およびDIPEA311μl（1．79mmol）の存在下で反応させた。混合物をさらに10分間撹拌し、水、アセトニトリルおよびギ酸で希釈した。粗溶液をMilliporeフィルタを通して濾過し、分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物167mg（理論値の82％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝1．15分；MS（ESIpos）：m／z＝457［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．07（dd，1H），9．11（d，1H），8．77（d，1H），8．67（dd，1H），8．33（dt，1H），7．73−7．81（m，2H），4．40（quint，1H），1．19−1．31（m，1H），0．52−0．72（m，3H），0．29−0．39（m，1H）．
【０２４８】
実施例20A
エチル7−クロロ−1−（3−フルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキシレート
【化１０２】
2019524722.tif 000106
DIPEA23．2ml（133mmol）を、エチル2−［（2，6−ジクロロピリジン−3−イル）カルボニル］−3−エトキシアクリレート（CAS157373−27−8）6．05g（19．0mmol）および3−フルオロピリジン−2−アミン2．98g（26．6mmol、1．4当量）のDCM30ml中溶液に添加し、混合物を室温で4時間撹拌した。次いで、炭酸カリウム2．63g（19．0mmol）を添加し、混合物を還流下で一晩加熱した。反応混合物をDCM300mlで希釈し、1M塩酸水溶液75mlで2回洗浄した。有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去した。得られた懸濁液をtert−ブチルメチルエーテル40mlと撹拌し、沈殿を吸引濾別し、tert−ブチルメチルエーテル10mlで洗浄し、高真空下で乾燥させた。これにより、標記化合物4．51g（理論値の63％、純度92％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．57分；MS（ESIpos）：m／z＝348［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 8．90（s，1H），8．63（d，1H），8．55（d，1H），8．16−8．10（m，1H），7．84−7．78（m，1H），7．68（d，1H），4．26（q，2H），1．28（t，3H）．
【０２４９】
実施例20B
7−クロロ−1−（3−フルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸
【化１０３】
2019524722.tif 000107
エチル7−クロロ−1−（3−フルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキシレート4．51g（11．9mmol、純度92％）を最初に水36．6mlに装入し、36％濃度塩酸水溶液36．6mlおよびTHF36．6mlを添加し、混合物を120℃で4時間撹拌した。反応混合物を室温に冷却し、水100mlを添加した。沈殿物を吸引濾別し、高真空下で乾燥させた。これにより、標記化合物3．84g（理論値の98％、純度97％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．49分；MS（ESIpos）：m／z＝320［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 13．9（s，1H），9．18（s，1H），8．79（d，1H），8．56（d，1H），8．19−8．12（m，1H），7．87−7．79（m，2H）．
【０２５０】
実施例20C
7−クロロ−N−［（1R）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3−フルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化１０４】
2019524722.tif 000108
一般的手順1により、7−クロロ−1−（3−フルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例20B）150mg（457μmol）を、（1R）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエタンアミン塩酸塩88．3mg（503μmol）と、DMF4．5ml中HATU174mg（457μmol）およびDIPEA239μl（1．37mmol）の存在下で反応させた。水性後処理後、粗生成物を順相クロマトグラフィー（酢酸エチル／シクロヘキサン勾配）によって精製すると、標記化合物103mg（理論値の51％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝2．13分；MS（ESIpos）：m／z＝441［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．06（d，1H），9．09（s，1H），8．76（d，1H），8．56（d，1H），8．17−8．10（m，1H），7．85−7．76（m，2H），4．47−4．35（m，1H），1．29−1．21（m，1H），0．71−0．53（m，3H），0．39−0．30（m，1H）．
【０２５１】
実施例21A
7−クロロ−1−（3−フルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−N−［（2R）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化１０５】
2019524722.tif 000109
一般的手順1により、7−クロロ−1−（3−フルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例20B）1．00g（3．05mmol）を、（2R）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−アミン塩酸塩648mg（3．96mmol）と、DMF30ml中HATU1．16g（3．05μmol）およびDIPEA1．59ml（9．14mmol）の存在下で反応させた。水性後処理後、粗生成物を順相クロマトグラフィー（酢酸エチル／シクロヘキサン勾配）によって精製すると、標記化合物670mg（理論値の51％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝2．13分；MS（ESIpos）：m／z＝429［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 9．90（d，1H），9．10（s，1H），8．76（d，1H），8．56（d，1H），8．17−8．11（m，1H），7．85−7．76（m，2H），4．84−4．72（m，2H），1．96−1．83（m，1H），1．74−1．61（m，1H），0．98（t，3H）．
【０２５２】
実施例22A
エチル7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−4−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキシレート
【化１０６】
2019524722.tif 000110
DIPEA4．7ml（26．7mmol）を、エチル2−［（2，6−ジクロロピリジン−3−イル）カルボニル］−3−エトキシアクリレート（CAS157373−27−8）1．22g（3．82mmol）および3，5−ジフルオロピリジン−4−アミン696mg（5．35mmol）のジクロロメタン10ml中溶液に添加し、混合物を室温で4時間撹拌した。次いで、炭酸カリウム528mg（3．82mmol）を添加し、混合物を還流下で一晩加熱した。混合物をDCM100mlで希釈し、1M塩酸水溶液20mlで3回洗浄し、飽和演歌ナトリウム水溶液で1回抽出した。有機相を硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去した。残渣をシリカゲルカートリッジ（ジクロロメタン／メタノール）で精製した。溶媒を減圧下で蒸発させ、残渣を分取RP−HPLC（カラム：Reprosil 250x30；10μ、流量：50ml／分、アセトニトリル／水；0．1％トリフルオロ酢酸）によって直接精製した。溶媒を減圧下で蒸発させ、残渣を高真空下で乾燥させた。これにより、標記化合物203mg（理論値の15％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．55分；MS（ESIpos）：m／z＝366［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 8．99（s，1H），8．91（s，2H），8．63（d，1H），7．70（d，1H），4．25（q，2H），1．27（t，3H）．
【０２５３】
実施例22B
7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−4−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸
【化１０７】
2019524722.tif 000111
エチル7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−4−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキシレート203mg（555μmol）を最初に水2．5mlに装入し、36％濃度塩酸水溶液2．5mlおよびTHF2．5mlを添加し、混合物を120℃で2時間撹拌した。反応混合物を室温に冷却し、水10mlを添加した。沈殿を吸引濾別し、水で洗浄し、高真空下で乾燥させた。これにより、標記化合物169mg（理論値の90％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝0．84分；MS（ESIpos）：m／z＝338［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 13．72（s，1H），9．30（s，1H），8．93（s，2H），8．78（d，1H），7．83（d，1H）．
【０２５４】
実施例22C
7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−4−イル）−4−オキソ−N−［（2S）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化１０８】
2019524722.tif 000112
一般的手順1により、7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−4−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例22B）147mg（434μmol）を、（2S）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−アミン82．7mg（651μmol）と、DMF6ml中HATU165mg（434μmol）およびDIPEA181μl（1．04mmol）の存在下で反応させた。反応物を水およびアセトニトリルで希釈し、分取HPLC（カラム：Reprosil、10μm、125＊30mm、溶媒：水、アセトニトリル、0．1％トリフルオロ酢酸）によって精製すると、標記化合物111mg（理論値の57％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝2．11分；MS（ESIpos）：m／z＝447［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 9．83（d，1H），9．21（s，1H），8．92（s，2H），8．76（d，1H），7．80（d，1H），4．72−4．83（m，1H），1．85−1．95（m，1H），1．62−1．74（m，1H），0．98（t，3H）．
【０２５５】
実施例23A
エチル1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（3R，4R）−3，4−ジヒドロキシピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキシレート
【化１０９】
2019524722.tif 000113
一般的手順3により、エチル7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキシレート（実施例7A）1．00g（2．73mmol）を、（3R，4R）−ピロリジン−3，4−ジオール塩酸塩458mg（3．28mmol）と、DMF12．3ml中DIPEA1．67ml（9．57mmol）の存在下で反応させた。水、アセトニトリルおよびギ酸を添加して反応を終了させ、混合物をMilliporeフィルタを通して濾過し、粗溶液を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物580mg（理論値の49％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．10分；MS（ESIpos）：m／z＝433［M＋H］＋。
1H−NMR（500 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 8．58−8．63（m，2H），8．32（td，1H），8．18（d，1H），6．67（d，1H），5．21−5．27（m，0．5H），5．17（d，1H），5．02−5．08（m，0．5H），4．21（q，2H），4．01−4．07（m，1H），3．88−3．96（m，1H），3．52−3．64（m，1H），3．16−3．31（m，2H），2．99−3．13（m，1H），1．26（t，3H）．
【０２５６】
実施例23B
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（3R，4R）−3，4−ジヒドロキシピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸
【化１１０】
2019524722.tif 000114
変形A：エチル1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（3R，4R）−3，4−ジヒロドロキシピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキシレート500mg（1．16mmol）を最初に水3．50mlに装入し、36％濃度塩酸水溶液3．50mlおよびTHF3．50mlを添加し、混合物を120℃で3時間撹拌した。反応混合物を室温に冷却し、水10mlを添加した。沈殿を吸引濾別し、水で洗浄し、高真空下で乾燥させた。これにより、標記化合物372mg（理論値の80％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝0．99分；MS（ESIpos）：m／z＝405［M＋H］＋。
1H−NMR（500 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 15．23（br s，1H），8．94（br d，1H），8．63（br t，1H），8．33−8．39（m，1H），8．30（d，1H），6．86（d，1H），4．99−5．41（m，2H），4．06（br s，1H），3．94（br s，1H），3．59−3．69（m，1H），3．36−3．41（m，1H），3．24（br． dd，1H），3．03−3．17（m，1H）．
【０２５７】
変形B：あるいは、標記化合物を以下のように調製することができる。室温で、DIPEA1．81ml（10．4mmol）を、7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例4B）1．00g（2．96mmol）および（3R，4R）−ピロリジン−3，4−ジオール塩酸塩496mg（3．55mmol）のDMF14．2ml中溶液に添加した。混合物を室温で一晩撹拌した。反応混合物を水、1N塩酸水溶液および酢酸エチルに添加した。固体を吸引しながら濾別し、高真空下で乾燥させた。これにより、標記化合物1．04g（理論値の87％、純度100％）が得られた。
【０２５８】
実施例24A
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸
【化１１１】
2019524722.tif 000115
一般的手順2により、7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例4B）1．58g（4．68mmol）を、（4S）−4−ヒドロキシピロリジン−2−オン568mg（5．62mmol）と、80℃で、ジオキサン31．6ml中炭酸カリウム970mg（7．02mmol）、酢酸パラジウム210mg（0．94mmol）およびキサントホス541mg（0．94mmol）の存在下で反応させた。反応混合物をアセトニトリルで希釈し、濾過した。フィルタからの残渣を温アセトニトリルで撹拌し、再度濾過した（この手順を4回繰り返した）。濾液を合わせ、ほぼ完全に濃縮した。沈殿物を吸引濾別し、高真空下で乾燥させた。これにより、標記化合物1．36g（理論値の72％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．15分；MS（ESIpos）：m／z＝403［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 14．42（br． s．，1H），9．15（s，1H），8．75（d，1H），8．68（br． dd，1H），8．56−8．63（m，1H），8．42（td，1H），5．24−5．42（m，1H），4．30（br． s．，1H），3．63−3．80（m，1H），3．42−3．56（m，1H），2．88−3．05（m，1H），2．39（br． dd，1H）．
【０２５９】
実施例25A
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［3−（2−ヒドロキシエチル）−2−オキソイミダゾリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸
【化１１２】
2019524722.tif 000116
一般的手順2により、7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例4B）250mg（740μmol）を、1−（2−｛［tert−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝エチル）イミダゾリジン−2−オン（欧州特許第1721905号明細書、実施例43）217mg（888μmol）と、90℃で90分間、ジオキサン5ml中炭酸カリウム256mg（1．85mmol）、酢酸パラジウム33．2mg（148μmol）およびキサントホス85．7mg（148μmol）の存在下で反応させた。ジオキサン10mlおよび1N  HCl水溶液10mlを添加し、反応混合物を50℃で約60分間撹拌した。反応混合物をMilliporeフィルタを通して濾過し、酢酸エチルおよび水に添加した。相を分離し、水相を酢酸エチルで3回抽出した。合わせた有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、溶媒を減圧下で除去した。残渣をアセトニトリルから結晶化し、沈殿を吸引濾別し、少量の冷アセトニトリルで洗浄し、高真空下で乾燥させた。これにより、標記化合物269mg（理論値の84％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．18分；MS（ESIpos）：m／z＝432［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 14．67（s，1H），9．10（s，1H），8．65（d，1H），8．61（d，1H），8．51（d，1H），8．35（ddd，1H），4．75（t，1H），3．43−3．63（m，6H），3．22−3．30（m，2H）．
【０２６０】
実施例26A
1−（2−｛［tert−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝エチル）テトラヒドロピリミジン−2（1H）−オン
【化１１３】
2019524722.tif 000117
0℃で、イミダゾール340mg（4．99mmol）を1−（2−ヒドロキシエチル）テトラヒドロピリミジン−2（1H）−オン（ドイツ特許第1121617号明細書、Chem．Abstr．1962、56、11601g）600mg（4．16mmol）およびtert−ブチル（クロロ）ジメチルシラン690mg（4．58mmol）のDMF4．2ml中溶液に添加した。混合物を0℃で30分間および室温で一晩撹拌した。その後、全ての揮発性成分を減圧下で除去し、残渣を水10mlと混和し、酢酸エチル20mlで3回抽出した。合わせた有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液30mlで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去した。これにより、標記化合物732mg（理論値の68％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．83分；MS（ESIpos）：m／z＝259［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 6．11（s，1H），3．63（t，2H），3．30−3．21（m，4H），3．11−3．04（m，2H），1．80−1．72（m，2H），0．86（s，9H），0．03（s，6H）．
【０２６１】
実施例26B
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［3−（2−ヒドロキシエチル）−2−オキソテトラヒドロピリミジン−1（2H）−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸
【化１１４】
2019524722.tif 000118
一般的手順2により、7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例4B）250mg（740μmol）を、1−（2−｛［tert−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝エチル）テトラヒドロピリミジン−2（1H）−オン230mg（888μmol）と、90℃で90分間、ジオキサン5ml中炭酸カリウム256mg（1．85mmol）、酢酸パラジウム33．2mg（148μmol）およびキサントホス85．7mg（148μmol）の存在下で反応させた。ジオキサン10mlおよび1N  HCl水溶液10mlを添加し、反応混合物を50℃で約60分間撹拌した。反応混合物をMilliporeフィルタを通して濾過し、酢酸エチルおよび水に添加した。相を分離し、水相を酢酸エチルで3回抽出した。合わせた有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、溶媒を減圧下で除去した。残渣をアセトニトリルから結晶化し、沈殿を吸引濾別し、少量の冷アセトニトリルで洗浄し、高真空下で乾燥させた。これにより、標記化合物219mg（理論値の57％、純度86％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．20分；MS（ESIpos）：m／z＝446［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 14．62（s，1H），9．12（s，1H），8．66（d，1H），8．54（d，1H），8．34−8．42（m，1H），8．24（d，1H），4．72（t，1H），3．48−3．58（m，4H），3．39（br t，4H），1．85−1．97（m，2H）．
【０２６２】
実施例27A
1−（3−クロロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸
【化１１５】
2019524722.tif 000119
一般的手順2により、7−クロロ−1−（3−クロロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例18B）1．50g（4．46mmol）を、（4S）−4−ヒドロキシピロリジン−2−オン541mg（5．36mmol）と、80℃で3時間、ジオキサン30ml中炭酸カリウム925mg（6．69mmol）、酢酸パラジウム200mg（892μmol）およびキサントホス516mg（892μmol）の存在下で反応させた。1N塩酸水溶液を添加し、反応混合物を酢酸エチルで徹底的に抽出した。合わせた有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、溶媒を減圧下で除去した。粗生成物を少量の酢酸エチル中で1時間放置し、次いで、沈殿した固体を吸引濾別し、高真空下で乾燥させた。これにより、標記化合物1．16g（理論値の52％、純度80％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝0．63／0．65分；MS（ESIpos）：m／z＝401［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 14．50（br． s，1H），9．23（br． d，1H），8．76（d，1H），8．68（ddd，1H），8．59（dd，1H），8．35（dt，1H），7．79（ddd，1H），5．25−5．40（m，1H），4．20−4．30（m，1H），3．51−3．68（m，1H），3．32−3．45（m，1H），2．87−3．02（m，1H），2．37（dd，1H）．
【０２６３】
実施例28A
N−ベンジル−1，1，1，2，2−ペンタフルオロブタン−3−アミン（ラセミ体）
【化１１６】
2019524722.tif 000120
0℃で、チタンテトライソプロポキシド5．40ml（18．3mmol）およびベンジルアミン2．66ml（24．4mmol）を、3，3，4，4，4−ペンタフルオロブタン−2−オン2．00g（12．2mmol）のジクロロメタン10ml中溶液に添加した。混合物を室温でさらに90分間撹拌した後、再び0℃に冷却した。その後、シアノ水素化ホウ素ナトリウム2．14g（34．1mmol）、メタノール36mlおよび3Åモレキュラーシーブを添加した。混合物を室温に加温し、さらに2日間撹拌した。反応溶液を少量の水および酢酸エチルと混和し、濾過した。濾液を飽和重炭酸ナトリウム水溶液で2回および飽和塩化ナトリウム水溶液で1回洗浄した。有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去した。残渣を順相クロマトグラフィー（酢酸エチル／シクロヘキサン1／20）によって2回精製すると、標記化合物1．65g（理論値の48％；純度91％）が得られた。
LC−MS（方法5）：Rt＝2．17分；MS（ESIpos）：m／z＝254［M＋H］＋。
1H−NMR（500 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 7．28−7．36（m，4H），7．20−7．27（m，1H），3．83（dd，1H），3．72（dd，1H），3．22−3．30（m，1H），2．43−2．48（m，1H），1．20（d，3H）．
【０２６４】
実施例28B
1，1，1，2，2−ペンタフルオロブタン−3−アミン塩酸塩（ラセミ体）
【化１１７】
2019524722.tif 000121
N−ベンジル−1，1，1，2，2−ペンタフルオロペンタン−3−アミン1．50g（5．92mmol）のメタノール27．4ml中溶液に、パラジウム炭（10％）150mgを添加し、水素化を標準圧力および室温で6時間行った。次いで、反応混合物をMilliporeフィルタを通して濾過し、溶媒を減圧下で除去した。次いで、留去された溶媒を含むレシーバーをフラスコに移し、ジオキサン中4N塩酸と混和し、再び濃縮した。残渣をエーテルと撹拌し、沈殿を吸引濾別し、高真空下で乾燥させた。これにより、標記化合物456mg（理論値の39％、純度100％）が得られた。
1H−NMR（500 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 9．21（br． s，3H），4．40−4．29（m，1H），1．41（d，3H）．
【０２６５】
実施例29A
7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−N−（1，1，1，3，3，3−ヘキサフルオロ−2−メチルプロパン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化１１８】
2019524722.tif 000122
2，4，6−トリプロピル−1，3，5，2，4，6−トリオキサトリホスホリナン2，4，6−トリオキシド（T3P、DMF中50％）0．47ml（0．80mmol）を、7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例7B）90．0mg（267μmol）、1，1，1，3，3，3−ヘキサフルオロ−2−メチルプロパン−2−アミン58．1mg（321μmol）およびDIPEA0．14ml（0．80mmol）の酢酸エチル1ml中溶液に滴加した。混合物を80℃で週末にわたって撹拌した。反応溶液を濃縮し、残渣を少量の水、アセトニトリルおよびギ酸に溶解し、Milliporeフィルタを通して濾過し、分取HPLC（アセトニトリル／水／0．1％ギ酸）によって精製した。これにより、標記化合物23．1mg（理論値の17％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝2．35分；MS（ESIpos）：m／z＝501［M＋H］＋。
1H NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．97（s，1H），9．13（s，1H），8．79（d，1H），8．67（d，1H），8．44−8．37（m，1H），7．79（d，1H），2．08（s，1H）．
【０２６６】
実施例30A
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−7−（2−オキソイミダゾリジン−1−イル）−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸
【化１１９】
2019524722.tif 000123
一般的手順2により、7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例4B）800mg（2．37mmol）を、イミダゾリジン−2−オン2．04g（23．7mmol）と、80℃で一晩、ジオキサン21．1ml中炭酸カリウム491mg（3．55mmol）、酢酸パラジウム106mg（474μmol）およびキサントホス274mg（474μmol）の存在下で反応させた。次いで、ジオキサンをロータリーエバポレーターで除去し、アセトニトリルを反応溶液に添加した。混合物をフィルタを通して濾過した。濾液を保持し、フィルタ残渣を熱アセトニトリルと撹拌し再び濾過した。この手順を2回繰り返した。これにより、標記化合物805mg（理論値の68％、純度78％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．21分；MS（ESIpos）：m／z＝388［M＋H］＋。
【０２６７】
実施例31A
エチル7−（｛（2R）−2−［（tert−ブトキシカルボニル）アミノ］プロピル｝アミノ）−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキシレート
【化１２０】
2019524722.tif 000124
実施例4Aの化合物（1．89g、5．17mmol）を最初にDMF33mlに装入し、tert−ブチル［（2R）−1−アミノプロパン−2−イル］カルバメート塩酸塩（1．31g、6．20mmol）およびN，N−ジイソプロピルエチルアミン（3．2ml、18mmol）を添加し、混合物を60℃で一晩撹拌した。反応溶液を水300mlに添加し、1N塩酸でpH＝5に調整した。沈殿を濾別し、水で洗浄し、高真空下で乾燥させた。粗生成物をシリカゲル（移動相：シクロヘキサン／酢酸エチル＝2／1、次いで、ジクロロメタン／メタノール＝20／1）で精製した。これにより、標的化合物1．58g（理論値の53％、純度93％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．70分；MS（ESIpos）：m／z＝504［M＋H］＋。
【０２６８】
実施例31B
エチル7−｛［（2R）−2−アミノプロピル］アミノ｝−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキシレートトリフルオロアセテート
【化１２１】
2019524722.tif 000125
実施例31Aからの化合物（1．38g、2．74mmol）を最初にジクロロメタン（80ml）に装入し、氷冷しながらトリフルオロ酢酸（4．2ml、55mmol）を添加し、混合物を室温で4．5時間撹拌した。反応混合物をロータリーエバポレーターを用いて２回濃縮し、トルエンを添加し、混合物を濃縮し、次いで、残渣を高真空下で乾燥させた。これにより、標的化合物2．18g（理論値の88％、純度57％）が得られた。粗生成物をさらに精製することなくさらに変換した。
LC−MS（方法2）：Rt＝0．80分；MS（ESIpos）：m／z＝404［M＋H］＋。
【０２６９】
実施例31C
エチル1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4R）−4−メチル−2−オキソイミダゾリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキシレート
【化１２２】
2019524722.tif 000126
アルゴン下で、実施例31Bからの化合物（2．50g、純度57％、2．75mmol）をDMF（61ml）に溶解し、炭酸カリウム（381mg、2．75mmol）および1，1’−カルボニルジイミダゾール（1．12g、6．89mmol）を添加し、混合物を室温で1．5時間撹拌した。反応液を水約600mlに添加し、1N塩酸で酸性化し、次いで、酢酸エチルで3回抽出した。合わせた有機相を水で1回洗浄し、次いで、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、ロータリーエバポレーターで濃縮した。これにより、標的化合物960mg（理論値の70％、純度87％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．38分；MS（ESIpos）：m／z＝430［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）δ［ppm］：0．008（1．58），1．090（1．23），1．102（1．26），1．147（1．29），1．159（1．19），1．242（0．90），1．255（3．35），1．273（6．25），1．291（2．93），1．908（0．48），2．731（13．52），2．891（16．00），2．933（0．66），3．060（0．42），3．716（0．82），3．755（0．71），3．770（0．60），4．205（0．65），4．214（1．15），4．223（0．87），4．231（2．82），4．249（2．63），4．267（0．80），7．762（1．77），7．952（2．11），8．332（1．63），8．354（2．25），8．430（2．46），8．452（1．55），8．603（0．53），8．612（0．92），8．629（1．49），8．767（2．11）．
【０２７０】
実施例31D
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4R）−4−メチル−2−オキソイミダゾリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸
【化１２３】
2019524722.tif 000127
実施例31Cからの化合物（960mg、純度87％、1．95mmol））をTHF5．9mlに懸濁した。水5．9mlおよび濃塩酸18mlを添加し、混合物を浴温110℃で3時間撹拌した。冷却後、得られた固体を濾別し、水で洗浄し、高真空下で乾燥させた。これにより、標的化合物420mg（理論値の54％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝0．73分；MS（ESIpos）：m／z＝402［M＋H］＋
1H−NMR（500 MHz，DMSO−d6）δ［ppm］：−0．007（1．58），0．006（1．20），1．104（4．83），1．114（4．85），1．160（5．01），1．170（4．83），1．232（0．69），2．516（1．88），2．520（1．64），2．524（1．25），3．090（1．26），3．101（1．27），3．122（0．49），3．149（1．26），3．160（1．27），3．706（0．56），3．723（1．92），3．735（2．25），3．785（2．31），3．799（1．78），7．906（6．55），8．337（0．72），8．354（1．27），8．374（1．08），8．395（1．21），8．411（0．66），8．493（3．64），8．511（5．36），8．582（16．00），8．600（10．62），8．654（5．90），9．089（5．35），9．095（5．25），14．664（1．73）．
【０２７１】
実施例32A
7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−N−（3，3，4，4，4−ペンタフルオロ−2−メチルブタン−2−イル）−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化１２４】
2019524722.tif 000128
7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（800mg、純度95％、2．25mmol）、3，3，4，4，4−ペンタフルオロ−2−メチルブタン−2−アミン塩酸塩（1：1）（529mg、2．48mmol）およびN，N−ジイソプロピルエチルアミン（1．6ml、9．0mmol）を最初に酢酸エチル23mlに装入し、T3P（酢酸エチル中50％、2，4，6−トリプロピル−1，3，5，2，4，6−トリオキサトリホスホリナン2，4，6−トリオキシド溶液）（5．3ml、純度50％、9．0mmol）を添加し、混合物を80℃で一晩撹拌した。反応混合物を水および酢酸エチルに添加した。相を分離した。水相を酢酸エチルでさらに3回抽出した。合わせた有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過および濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（移動相：シクロヘキサン／酢酸エチル3：1）によって精製した。生成物含有分画を合わせ、蒸発によって濃縮した。残渣を高真空下で乾燥させた。これにより、標的化合物1．1g（理論値の98％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法3）：Rt＝1．55分；MS（ESIpos）：m／z＝497［M＋H］＋
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）δ［ppm］：−0．008（1．91），0．008（1．83），1．157（0．54），1．175（1．10），1．193（0．56），1．398（0．53），1．703（16．00），1．989（2．02），4．021（0．48），4．039（0．48），7．757（4．23），7．778（4．44），8．372（0．78），8．378（0．89），8．395（1．19），8．399（1．29），8．416（0．80），8．422（0．89），8．661（3．86），8．667（3．65），8．745（4．39），8．767（4．21），9．066（7．38），10．122（4．04）．
【０２７２】
実施例33A
3，3，4，4，4−ペンタフルオロ−N−［（1S）−1−フェニルエチル］ブタン−2−イミン
【化１２５】
2019524722.tif 000129
3，3，4，4，4−ペンタフルオロブタン−2−オン（200g、1．23mol）を最初にジエチルエーテル6．4lに装入し、−40℃に冷却した。次いで、（1S）−1−フェニルエタンアミン（160ml、1．2mol）およびトリエチルアミン（340ml、2．5mol）を迅速に添加し、その後、0℃の内温で塩化チタン（IV）（トルエン中1M、620ml、620mmol）をゆっくり滴加した。次いで、氷浴を取り外し、混合物を室温に加温した。次いで、反応混合物を還流下で1時間加熱し、その後、室温で一晩撹拌した。Celiteを添加し、反応混合物を1時間撹拌し、次いで、ジエチルエーテルで徹底的にすすぎながらCeliteを通して濾過した。濾液を25℃の水浴温度で濃縮した。シクロヘキサンを残渣に添加し、残渣をもう一度Celiteを通して濾過し、シクロヘキサンで洗浄した。濾液を25℃の水浴温度で濃縮した。粗生成物をさらに精製することなく次のステップに使用した。これにより、標記化合物289g（理論値の88％）が得られた。
【０２７３】
実施例34A
3，3，4，4，4−ペンタフルオロ−N−［（1S）−1−フェニルエチル］ブタン−2−アミン塩酸塩（エナンチオマー的に純粋）
【化１２６】
2019524722.tif 000130
3，3，4，4，4−ペンタフルオロ−N−［（1S）−1−フェニルエチル］ブタン−2−イミン（239g、901mmol）を最初にジクロロメタン1．9lに装入し、次いで、DMF420mlおよびモレキュラーシーブ3Åを添加し、混合物を室温で1時間撹拌した。次いで、反応混合物を−50℃に冷却し、トリクロロシラン（270ml、2．7mol）をゆっくり滴加した。30分後、内部温度−70℃〜−50℃で、pH7に達するまで、混合物を半濃縮水酸化ナトリウム溶液で慎重にクエンチした。ジクロロメタンを添加し、相を分離した。有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、ジエチルエーテル中塩化水素（2M溶液）2．2lを添加し、粗生成物を減圧下で濃縮した。これにより、標記化合物192g（理論値の70％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝1．22分；MS（ESIpos）：m／z＝268［M−HCl＋H］＋
【０２７４】
実施例35A
3，3，4，4，4−ペンタフルオロブタン−2−アミン塩酸塩（エナンチオマー的に純粋）
【化１２７】
2019524722.tif 000131
3，3，4，4，4−ペンタフルオロ−N−［（1S）−1−フェニルエチル］ブタン−2−アミン塩酸塩（エナンチオマー的に純粋、実施例34Aから）192g（632mmol）をエタノール1．2lに溶解し、水酸化パラジウム（II）（炭素上20％）19．2gを添加し、次いで、混合物を室温および標準圧力で一晩水素化した。沈殿を濾別し、徹底的に洗浄し、濾液を慎重に濃縮した。これにより、標記化合物117g（理論値の93％）が得られた。
1H NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 9．29（br． s，3H），4．22−4．44（m，1H），1．42（d，H）．
【０２７５】
実施例36A
7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−N−（3，3，4，4，4−ペンタフルオロブタン−2−イル）−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（エナンチオマー的に純粋）
【化１２８】
2019524722.tif 000132
7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（800mg、純度95％、2．25mmol）、3，3，4，4，4−ペンタフルオロブタン−2−アミン塩酸塩（エナンチオマー的に純粋）およびN，N−ジイソプロピルエチルアミン（1．6ml、9．0mmol）を最初に酢酸エチル22mlに装入し、T3P（酢酸エチル中50％、2，4，6−トリプロピル−1，3，5，2，4，6−トリオキサトリホスホリナン2，4，6−トリオキシド溶液）（5．3ml、純度50％、9．0mmol）を添加し、混合物を80℃で一晩撹拌した。反応混合物を水および酢酸エチルに添加した。相を分離した。水相を酢酸エチルでさらに3回抽出した。合わせた有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過および濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（移動相：シクロヘキサン／酢酸エチル3：1）によって精製した。生成物含有分画を合わせ、濃縮した。残渣を高真空下で乾燥させた。これにより、標的化合物1．1g（理論値の100％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法3）：Rt＝1．50分；MS（ESIpos）：m／z＝483［M＋H］＋
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）δ［ppm］：−0．149（0．75），−0．008（9．15），0．008（5．98），0．146（0．74），1．157（1．80），1．175（3．54），1．193（1．86），1．398（4．14），1．411（12．90），1．429（12．48），1．988（6．38），2．328（0．75），2．366（0．74），2．524（3．41），2．670（0．83），2．710（0．77），4．003（0．52），4．021（1．51），4．039（1．49），4．056（0．50），5．009（0．77），5．030（1．24），5．053（1．49），5．073（1．45），5．096（1．20），5．116（0．66），7．767（11．03），7．788（11．45），8．373（1．93），8．380（2．11），8．400（3．33），8．418（1．88），8．424（1．93），8．664（9．19），8．670（8．42），8．737（12．44），8．758（11．90），9．106（16．00），9．998（5．24），10．022（4．95）．
【０２７６】
実施例37A
7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−N−（1，1，1，3，3，3−ヘキサフルオロプロパン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化１２９】
2019524722.tif 000133
7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（800mg、2．37mmol）、1，1，1，3，3，3−ペンタフルオロプロパン−2−アミン（435mg、2．61mmol）およびN，N−ジイソプロピルエチルアミン（1．2ml、7．1mmol）を最初に酢酸エチル21mlに装入し、T3P（酢酸エチル中50％、2，4，6−トリプロピル−1，3，5，2，4，6−トリオキサトリホスホリナン2，4，6−トリオキシド溶液）（5．5ml、純度50％、9．5mmol）を添加し、混合物を80℃で一晩撹拌した。さらなる1，1，1，3，3，3−ヘキサフルオロプロパン−2−アミン（79mg、475μmol）を添加し、混合物を80℃で一晩撹拌した。反応混合物を水および酢酸エチルに添加した。相を分離した。水相を酢酸エチルでさらに3回抽出した。合わせた有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過および濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（移動相：シクロヘキサン／酢酸エチル3：1）によって精製した。生成物含有分画を合わせ、蒸発させた。物質をアセトニトリルから再結晶し、固体を吸引濾別し、アセトニトリルで高真空下ですすいだ。これにより、標的化合物495mg（理論値の43％、純度99％）が得られた。
LC−MS（§MCW−FT−MS−M1）：Rt＝2．28分；MS（ESIpos）：m／z＝487［M＋H］＋
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）δ［ppm］：−0．149（0．46），−0．008（4．04），0．146（0．49），2．328（0．57），2．670（0．62），6．378（0．45），6．397（1．11），6．415（1．54），6．440（1．62），6．458（1．07），6．477（0．41），7．797（9．34），7．817（9．78），8．387（1．78），8．393（2．08），8．410（2．89），8．414（3．15），8．431（1．88），8．437（2．04），8．678（8．72），8．684（8．40），8．767（9．84），8．789（9．45），9．192（16．00），10．761（4．75），10．786（4．59）．
【０２７７】
実施例38A
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−（2−オキサ−6−アザスピロ［3．3］ヘプタ−6−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸
【化１３０】
2019524722.tif 000134
7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（300mg、888μmol）を最初にDMF4．8mlに装入し、N，N−ジイソプロピルエチルアミン（1．5ml、8．9mmol）およびエタン二酸2−オキサ−6−アザスピロ［3．3］ヘプタン（1：2）（192mg、666μmol）を室温で添加した。反応溶液を室温で一晩撹拌した。反応溶液を水に添加し、1N塩酸で酸性化し、得られた沈殿を短時間撹拌した。固体を濾別し、高真空下で乾燥させた。これにより、標的化合物302mg（理論値の83％、純度98％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．36分；MS（ESIpos）：m／z＝401［M＋H］＋
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）δ［ppm］：−0．008（2．52），0．008（2．29），2．524（1．17），3．994（0．50），4．308（0．49），4．663（16．00），6．659（5．39），6．681（5．50），8．288（5．50），8．310（5．36），8．318（1．21），8．324（1．28），8．341（1．71），8．345（1．82），8．362（1．12），8．369（1．22），8．619（5．31），8．626（5．15），8．932（9．50），15．150（9．52）．
実施例
【０２７８】
実施例1
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−N−［（2R）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化１３１】
2019524722.tif 000135
一般的手順1により、1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例24A）75．0mg（186μmol）を、（2R）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−アミン塩酸塩45．7mg（280μmol）と、DMF1．2ml中HATU85．1mg（224μmol）およびDIPEA0．13ml（0．75mmol）の存在下で反応させた。粗生成物を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物66．5mg（理論値の70％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．74分；MS（ESIpos）：m／z＝512［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．12（d，1H），9．06（s，1H），8．71（d，1H），8．67（br． s，1H），8．54（br． t，1H），8．39（td，1H），5．21−5．40（m，1H），4．70−4．84（m，1H），4．29（br． s．，1H），3．64−3．80（m，1H），3．44−3．58（m，1H），2．87−3．03（m，1H），2．32−2．43（m，1H），1．83−1．96（m，1H），1．59−1．73（m，1H），0．93−1．03（m，3H）．
【０２７９】
実施例2
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−２−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−N−［（2S）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化１３２】
2019524722.tif 000136
一般的手順1により、1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例24A）75．0mg（186μmol）を、（2S）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−アミン35．5mg（280μmol）と、DMF1．2ml中HATU85．1mg（224μmol）およびDIPEA0．10ml（0．56mmol）の存在下で反応させた。粗生成物を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物77．2mg（理論値の81％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝0．93分；MS（ESIpos）：m／z＝512［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．12（d，1H），9．06（s，1H），8．71（d，1H），8．62−8．69（m，1H），8．54（br． t，1H），8．34−8．43（m，1H），5．23−5．41（m，1H），4．71−4．83（m，1H），4．29（br． s．，1H），3．64−3．79（m，1H），3．44−3．58（m，1H），2．87−3．03（m，1H），2．32−2．43（m，1H），1．83−1．96（m，1H），1．60−1．74（m，1H），0．92−1．02（m，3H）．
【０２８０】
実施例3
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−N−［（2S）−1，1，1−トリフルオロプロパン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化１３３】
2019524722.tif 000137
一般的手順1により、1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例24A）75．0mg（186μmol）を、（2S）−1，1，1−トリフルオロプロパン−2−アミン31．6mg（280μmol）と、DMF1．2ml中HATU85．1mg（224μmol）およびDIPEA0．10ml（0．56mmol）の存在下で反応させた。粗生成物を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物67．9mg（理論値の73％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．62分；MS（ESIpos）：m／z＝498［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．17（d，1H），9．05（s，1H），8．70（d，1H），8．62−8．68（m，1H），8．54（br． t，1H），8．39（ddd，1H），5．22−5．41（m，1H），4．87−4．99（m，1H），4．29（br． s．，1H），3．64−3．78（m，1H），3．44−3．57（m，1H），2．87−3．03（m，1H），2．32−2．43（m，1H），1．40（d，3H）．
【０２８１】
実施例4
N−［1−（2−クロロフェニル）−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー混合物）
【化１３４】
2019524722.tif 000138
一般的手順1により、1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例24A）75．0mg（186μmol）を、1−（2−クロロフェニル）−2，2，2−トリフルオロエタンアミン58．6mg（280μmol）と、DMF1．2ml中HATU85．1mg（224μmol）およびDIPEA0．10ml（0．56mmol）の存在下で反応させた。粗生成物を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物86．9mg（理論値の78％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝2．03分；MS（ESIpos）：m／z＝594［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 11．22（d，1H），9．06（s，1H），8．75（d，1H），8．62−8．71（m，1H），8．51−8．60（m，1H），8．39（td，1H），7．44−7．70（m，4H），6．47（quintt，1H），5．20−5．42（m，1H），4．29（br． s，1H），3．61−3．80（m，1H），3．42−3．58（m，1H），2．85−3．05（m，1H），2．29−2．45（m，1H）．
【０２８２】
標記化合物（ジアステレオマー混合物）67．0mgをキラルHPLC（分取HPLC：カラム：Daicel Chiralpak AZ−H 5μm 250×30mm；移動相：40％イソヘキサン、60％イソプロパノール；温度：23℃；流量40ml／分；UV検出：220nm）によってジアステレオマーに分離した。
【０２８３】
これにより、（カラムからの溶出の順序で）ジアステレオマー1（実施例5）（99％de）、Rt＝6．21分18．2mgおよびジアステレオマー2（99％de）Rt＝10．47分24．0mgが得られた。
［分析HPLC：カラム：Daicel Chiralpak AZ−3 3μm 50×4．6mm；移動相：50％イソヘキサン、50％イソプロパノール；流量：1．0ml／分；UV検出：220nm］
【０２８４】
ジアステレオマー2を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によってさらに精製すると、実施例6からの標記化合物11．4mg（理論値の10％、純度100％）が得られた。
【０２８５】
実施例5
N−［1−（2−クロロフェニル）−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー1）
LC−MS（方法2）：Rt＝2．03分；MS（ESIpos）：m／z＝594［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 11．22（d，1H），9．06（br． s，1H），8．76（d，1H），8．66（br． s，1H），8．51−8．60（m，1H），8．34−8．44（m，1H），7．60−7．69（m，2H），7．47−7．59（m，2H），6．47（quintt，1H），5．22−5．41（m，1H），4．29（br． s，1H），3．64−3．78（m，1H），3．43−3．56（m，1H），2．88−3．03（m，1H），2．31−2．43（m，1H）．
【０２８６】
実施例6
N−［1−（2−クロロフェニル）−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー2）
LC−MS（方法2）：Rt＝2．02分；MS（ESIpos）：m／z＝594［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 11．22（d，1H），9．06（s，1H），8．75（d，1H），8．66（dd，1H），8．56（br． t，1H），8．39（br． t，1H），7．59−7．69（m，2H），7．47−7．59（m，2H），6．47（quint，1H），5．22−5．42（m，1H），4．29（br． s，1H），3．63−3．79（m，1H），3．43−3．57（m，1H），2．87−3．04（m，1H），2．32−2．44（m，1H）．
【０２８７】
実施例7
N−［1−（3−クロロフェニル）−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー混合物）
【化１３５】
2019524722.tif 000139
一般的手順1により、1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例24A）75．0mg（186μmol）を、1−（3−クロロフェニル）−2，2，2−トリフルオロエタンアミン58．6mg（280μmol）と、DMF1．2ml中HATU85．1mg（224μmol）およびDIPEA0．10ml（0．56mmol）の存在下で反応させた。粗生成物を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物82．5mg（理論値の75％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝2．09分；MS（ESIpos）：m／z＝594［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 11．11（d，1H），9．06（s，1H），8．77（d，1H），8．62−8．71（m，1H），8．56（t，1H），8．39（td，1H），7．69（br． s，1H），7．47−7．61（m，3H），6．21（quint，1H），5．20−5．42（m，1H），4．29（br． s，1H），3．62−3．80（m，1H），3．42−3．58（m，1H），2．86−3．05（m，1H），2．32−2．44（m，1H）．
【０２８８】
実施例8
N−［1−（4−クロロフェニル）−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー混合物）
【化１３６】
2019524722.tif 000140
一般的手順1により、1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例24A）75．0mg（186μmol）を、1−（4−クロロフェニル）−2，2，2−トリフルオロエタンアミン58．6mg（280μmol）と、DMF1．2ml中HATU85．1mg（224μmol）およびDIPEA0．10ml（0．56mmol）の存在下で反応させた。粗生成物を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物91．4mg（理論値の83％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝1．16分；MS（ESIpos）：m／z＝594［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 11．10（d，1H），9．06（s，1H），8．76（d，1H），8．62−8．70（m，1H），8．56（t，1H），8．32−8．43（m，1H），7．51−7．66（m，4H），6．12−6．24（m，1H），5．21−5．42（m，1H），4．29（br． s，1H），3．63−3．79（m，1H），3．43−3．57（m，1H），2．86−3．04（m，1H），2．32−2．44（m，1H）．
【０２８９】
実施例9
N−［1−（2，6−ジフルオロフェニル）−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー混合物）
【化１３７】
2019524722.tif 000141
一般的手順1により、1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例24A）75．0mg（186μmol）を、1−（2，6−ジフルオロフェニル）−2，2，2−トリフルオロエタンアミン59．0mg（280μmol）と、DMF1．2ml中HATU85．1mg（224μmol）およびDIPEA0．10ml（0．56mmol）の存在下で反応させた。粗生成物を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物89．0mg（理論値の80％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝1．10分；MS（ESIpos）：m／z＝596［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 11．29（d，1H），9．08（s，1H），8．75（d，1H），8．62−8．70（m，1H），8．50−8．59（m，1H），8．34−8．44（m，1H），7．64（quint，1H），7．32（t，2H），6．44（quint，1H），5．21−5．42（m，1H），4．29（br． s，1H），3．62−3．80（m，1H），3．42−3．57（m，1H），2．86−3．04（m，1H），2．31−2．44（m，1H）．
【０２９０】
実施例10
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−N−［2，2，2−トリフルオロ−1−（3−フルオロフェニル）エチル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー混合物）
【化１３８】
2019524722.tif 000142
一般的手順1により、1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例24A）75．0mg（186μmol）を、2，2，2−トリフルオロ−1−（3−フルオロフェニル）エタンアミン54．0mg（280μmol）と、DMF1．2ml中HATU85．1mg（224μmol）およびDIPEA0．10ml（0．56mmol）の存在下で反応させた。粗生成物を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物80．5mg（理論値の75％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．97分；MS（ESIpos）：m／z＝578［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 11．10（d，1H），9．07（s，1H），8．77（d，1H），8．63−8．70（m，1H），8．51−8．60（m，1H），8．39（td，1H），7．52−7．62（m，1H），7．41−7．50（m，2H），7．31（br． t，1H），6．20（quint，1H），5．21−5．42（m，1H），4．29（br． s，1H），3．63−3．80（m，1H），3．43−3．58（m，1H），2．86−3．04（m，1H），2．31−2．45（m，1H）．
【０２９１】
実施例11
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−N−［2，2，2−トリフルオロ−1−（4−フルオロフェニル）エチル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー混合物）
【化１３９】
2019524722.tif 000143
一般的手順１により、1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例24A）75．0mg（186μmol）を、2，2，2−トリフルオロ−1−（4−フルオロフェニル）エタンアミン54．0mg（280μmol）と、DMF1．2ml中HATU85．1mg（224μmol）およびDIPEA0．10ml（0．56mmol）の存在下で反応させた。粗生成物を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物85．0mg（理論値の79％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝1．09分；MS（ESIpos）：m／z＝578［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 11．09（d，1H），9．06（s，1H），8．76（d，1H），8．62−8．70（m，1H），8．51−8．60（m，1H），8．39（td，1H），7．61−7．69（m，2H），7．30−7．39（m，2H），6．16（quint，1H），5．23−5．41（m，1H），4．29（br． s，1H），3．64−3．79（m，1H），3．44−3．57（m，1H），2．88−3．03（m，1H），2．38（dd，1H）．
【０２９２】
標記化合物（ジアステレオマー混合物）71．0mgをキラルHPLC（分取HPLC：カラム：Daicel Chiralpak OX−H 5μm 250×20mm；移動相：25％n−ヘプタン、75％イソプロパノール；温度：50℃；流量15ml／分；UV検出：220nm）によってジアステレオマーに分離した。
【０２９３】
これにより、（カラムからの溶出の順序で）ジアステレオマー1（99％de）Rt＝14．57分30．2mgおよびジアステレオマー2（99％de）Rt＝19．05分30．2mgが得られた。
［分析HPLC：カラム：Daicel Chiralpak OX−H 5μm 250×20mm；移動相：30％n−ヘプタン、70％イソプロパノール；温度：50℃；流量：15ml／分；UV検出：220nm］
【０２９４】
ジアステレオマー1を分取HPLC（アセトニトリル／水／0．1％ギ酸）によってさらに得ると、実施例12からの標記化合物24．5mg（理論値の23％、純度99％）が得られた。
【０２９５】
ジアステレオマー2を分取HPLC（アセトニトリル／水／0．1％ギ酸）によってさらに得ると、実施例13からの標記化合物24．6mg（理論値の23％、純度100％）が得られた。
【０２９６】
実施例12
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−N−［2，2，2−トリフルオロ−1−（4−フルオロフェニル）エチル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー1）
LC−MS（方法2）：Rt＝1．92分；MS（ESIpos）：m／z＝578［M＋H］＋。  1H NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 11．09（d，1H），9．06（s，1H），8．76（d，1H），8．63−8．69（m，1H），8．56（br t，1H），8．35−8．42（m，1H），7．59−7．71（m，2H），7．28−7．40（m，2H），6．16（quin，1H），5．23−5．41（m，1H），4．23−4．34（m，1H），3．63−3．78（m，1H），3．44−3．57（m，1H），2．88−3．03（m，1H），2．34−2．46（m，1H）．
【０２９７】
実施例13
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−N−［2，2，2−トリフルオロ−1−（4−フルオロフェニル）エチル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー2）
LC−MS（方法2）：Rt＝1．90分；MS（ESIpos）：m／z＝578［M＋H］＋．1H NMR（400MHz、DMSO−d6）：δ［ppm］＝11．09（d，1H）、9．06（d，1H）、8．76（d，1H）、8．66（d，1H）、8．52〜8．59（m，1H）、8．35〜8．42（m，1H）、7．61〜7．68（m，2H）、7．30〜7．38（m，2H）、6．12〜6．21（m，1H）、5．22〜5．40（m，1H）、4．26〜4．32（m，1H）、3．64〜3．78（m，1H）、3．43〜3．57（m，1H）、2．88〜3．03（m，1H）、2．34〜2．43（m，1H）。
【０２９８】
実施例14
N−［（1S）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1］−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化１４０】
2019524722.tif 000144
一般的手順2により、7−クロロ−N−［（1S）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例9A）100mg（218μmol）を、（4S）−4−ヒドロキシピロリジン−2−オン26．4mg（262μmol）と、80℃で、ジオキサン2．1ml中炭酸カリウム45．2mg（327μmol）、酢酸パラジウム9．80mg（44．0μmol）およびキサントホス25．2mg（44．0μmol）の存在下で反応させた。次いで、混合物を室温に冷却し、次いで、N−アセチルシステイン100mgを添加し、混合物を15分間撹拌した。混合物を飽和重炭酸ナトリウム水溶液15mlおよび酢酸エチル20mlで希釈し、相を分離した。水相を酢酸エチルで3回抽出した。合わせた有機相を硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去した。粗生成物を少量のアセトニトリル、水およびギ酸に溶解し、Milliporeフィルタを通して濾過し、分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物74．6mg（理論値の65％、純度100％）が得られた。
LC−MS（MCW＿SQ−HSST3−方法1）：Rt＝0．94分；MS（ESIpos）：m／z＝524［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．26（d，1H），9．05（s，1H），8．72（d，1H），8．63−8．69（m，1H），8．54（t，1H），8．34−8．43（m，1H），5．22−5．41（m，1H），4．42（sxt，1H），4．29（br． s，1H），3．64−3．79（m，1H），3．44−3．58（m，1H），2．86−3．04（m，1H），2．38（dd，1H），1．18−1．29（m，1H），0．50−0．72（m，3H），0．29−0．40（m，1H）．
【０２９９】
実施例15
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−N−（1，1，1，3，3，3−ヘキサフルオロプロパン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン］−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化１４１】
2019524722.tif 000145
一般的手順2により、7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−N−（1，1，1，3，3，3−ヘキサフルオロプロパン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例10A）18．6g（38．2mmol）を、（4S）−4−ヒドロキシピロリジン−2−オン4．64g（45．9mmol）と、80℃で、ジオキサン372ml中炭酸カリウム7．92g（57．3mmol）、酢酸パラジウム1．72g（7．64mmol）およびキサントホス4．42g（7．64mmol）の存在下で反応させた。反応混合物を水に注ぎ入れ、15分間撹拌し、沈殿を吸引濾別し、水で洗浄し、高真空下で乾燥させた。固体をアセトニトリルに溶解し、順相クロマトグラフィー（酢酸エチル／シクロヘキサン勾配）によって精製した。溶媒を減圧下で除去し、残渣を少量のアセトニトリルから再結晶した。これにより、標記化合物13．3g（理論値の63％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．88分；MS（ESIpos）：m／z＝552［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 11．04（d，1H），9．14（s，1H），8．74（d，1H），8．66−8．70（m，1H），8．52−8．60（m，1H），8．40（td，1H），6．33−6．45（m，1H），5．24−5．41（m，1H），4．30（br． s，1H），3．64−3．79（m，1H），3．44−3．57（m，1H），2．88−3．04（m，1H），2．33−2．44（m，1H）．
【０３００】
実施例16
N−（2，6−ジクロロフェニル）−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化１４２】
2019524722.tif 000146
一般的手順2により、7−クロロ−N−（2，6−ジクロロフェニル）−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例11B）60．0mg（125μmol）を、（4S）−4−ヒドロキシピロリジン−2−オン15．1mg（149μmol）と、80℃で、ジオキサン0．93ml中炭酸カリウム25．8mg（187μmol）、酢酸パラジウム5．60mg（24．9μmol）およびキサントホス14．4mg（24．9μmol）の存在下で反応させた。次いで、混合物を室温に冷却し、次いで、N−アセチルシステイン100mgを添加し、混合物を15分間撹拌した。次いで、混合物を飽和重炭酸ナトリウム水溶液15mlおよび酢酸エチル20mlで希釈し、相を分離した。水相を酢酸エチルで3回抽出した。合わせた有機相を硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去した。粗生成物をアセトニトリル3mlおよび水1mlに溶解し、分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物16．7mg（理論値の25％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．77分；MS（ESIpos）：m／z＝546［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 11．59（s，1H），9．13（s，1H），8．77（d，1H），8．63−8．71（m，1H），8．53−8．61（m，1H），8．34−8．45（m，1H），7．60（d，2H），7．34−7．44（m，1H），5．22−5．44（m，1H），4．30（br． s，1H），3．64−3．82（m，1H），3．45−3．60（m，1H），2．87−3．06（m，1H），2．39（dd，1H）．
【０３０１】
実施例17
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−N−［1−（トリフルオロメトキシ）ブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー混合物）
【化１４３】
2019524722.tif 000147
一般的手順2により、7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−N−［1−（トリフルオロメトキシ）ブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例12A）148mg（311μmol）を、（4S）−4−ヒドロキシピロリジン−2−オン31．4mg（311μmol）と、80℃で、ジオキサン2．6ml中炭酸カリウム64．5mg（467μmol）、酢酸パラジウム12．6mg（56．0μmol）およびキサントホス64．8mg（112μmol）の存在下で反応させた。次いで、反応混合物を酢酸エチルで希釈し、飽和重炭酸ナトリウム水溶液で洗浄した。有機相を硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去した。粗生成物を少量のアセトニトリル、水およびギ酸に溶解し、Milliporeフィルタを通して濾過し、分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製した。これにより、標記化合物42．0mg（理論値の25％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝1．00分；MS（ESIpos）：m／z＝542［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 9．81（d，1H），9．00（s，1H），8．71（d，1H），8．63−8．68（m，1H），8．52（t，1H），8．34−8．43（m，1H），5．22−5．40（m，1H），4．14−4．33（m，4H），3．64−3．79（m，1H），3．44−3．58（m，1H），2．87−3．03（m，1H），2．38（dd，1H），1．55−1．75（m，2H），0．95（td，3H）．
【０３０２】
標記化合物（ジアステレオマー混合物）42．0mgをキラルHPLC（分取HPLC：カラム：Daicel Chiralcel OZ−H 5μm 250×20mm；移動相：40％イソヘキサン、60％エタノール；温度：24℃；流量20ml／分；UV検出：220nm）によってジアステレオマーに分離した。
【０３０３】
これにより、（カラムからの溶出の順序で）ジアステレオマー1（実施例18）（99％de）、Rt＝6．63分14．2mgおよびジアステレオマー2（実施例19）（99％de）Rt＝9．45分15．1mgが得られた。
［分析HPLC：カラム：Daicel Chiralpak OX−3 3μm 50×4．6mm；移動相：50％イソヘキサン、50％エタノール；流量：1．0ml／分；UV検出：220nm］
【０３０４】
ジアステレオマー1を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によってさらに精製すると、実施例18からの標記化合物11．5mg（理論値の6．8％、純度100％）が得られた。
【０３０５】
ジアステレオマー2を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によってさらに精製すると、実施例19からの標記化合物11．3mg（理論値の6．7％、純度100％）が得られた。
【０３０６】
実施例18
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−N−［1−（トリフルオロメトキシ）ブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー1）
LC−MS（方法2）：Rt＝1．77分；MS（ESIpos）：m／z＝542［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 9．81（d，1H），9．00（s，1H），8．71（d，1H），8．63−8．68（m，1H），8．52（t，1H），8．38（ddd，1H），5．21−5．41（m，1H），4．14−4．33（m，4H），3．64−3．79（m，1H），3．44−3．58（m，1H），2．86−3．03（m，1H），2．34−2．43（m，1H），1．54−1．75（m，2H），0．95（t，3H）．
【０３０７】
実施例19
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−N−［1−（トリフルオロメトキシ）ブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー2）
LC−MS（方法2）：Rt＝1．76分；MS（ESIpos）：m／z＝542［M＋H］＋。
1H−NMR（500 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 9．81（d，1H），9．00（s，1H），8．71（d，1H），8．63−8．68（m，1H），8．49−8．56（m，1H），8．38（td，1H），5．22−5．40（m，1H），4．14−4．33（m，4H），3．64−3．79（m，1H），3．44−3．57（m，1H），2．87−3．02（m，1H），2．32−2．43（m，1H），1．54−1．74（m，2H），0．95（td，3H）．
【０３０８】
実施例20
1−（3−クロロ−5−フルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−N−［（2R）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化１４４】
2019524722.tif 000148
一般的手順2により、7−クロロ−1−（3−クロロ−5−フルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−N−［（2R）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例16C）60．0mg（130μmol）を、（4S）−4−ヒドロキシピロリジン−2−オン15．7mg（155μmol）と、80℃で、ジオキサン1ml中炭酸カリウム26．9mg（194μmol）、酢酸パラジウム5．82mg（26．0μmol）およびキサントホス15．0mg（26．0μmol）の存在下で反応させた。次いで、少量のアセトニトリル、水およびギ酸を添加し、反応溶液をMilliporeフィルタを通して濾過し、分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物45．4mg（理論値の66％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝0．95分；MS（ESIpos）：m／z＝528［M］＋。
1H−NMR（500 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．14（d，1H），9．08（d，1H），8．76（dd，1H），8．71（dd，1H），8．49−8．58（m，2H），5．24−5．38（m，1H），4．72−4．83（m，1H），4．23−4．31（m，1H），3．59−3．70（m，1H），3．42（dd，1H），2．87−3．00（m，1H），2．37（dd，1H），1．85−1．94（m，1H），1．62−1．73（m，1H），0．98（t，3H）．
【０３０９】
実施例21
1−（3−クロロ−5−フルオロピリジン−2−イル）−N−［（1R）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン］−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化１４５】
2019524722.tif 000149
一般的手順2により、7−クロロ−1−（3−クロロ−5−フルオロピリジン−2−イル）−N−［（1R）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例17A）60．0mg（126μmol）を、（4S）−4−ヒドロキシピロリジン−2−オン15．3mg（152μmol）と、80℃で、ジオキサン1ml中炭酸カリウム26．2mg（189μmol）、酢酸パラジウム5．67mg（25．0μmol）およびキサントホス14．6mg（25．0μmol）の存在下で反応させた。次いで、少量のアセトニトリル、水およびギ酸を添加し、反応溶液をMilliporeフィルタを通して濾過し、分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製した。アセトニトリルから再結晶すると、標記化合物30．1mg（理論値の44％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝0．97分；MS（ESIpos）：m／z＝540［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．28（dd，1H），9．07（d，1H），8．69−8．79（m，2H），8．49−8．59（m，2H），5．23−5．38（m，1H），4．36−4．49（m，1H），4．22−4．31（m，1H），3．64（ddd，1H），3．43（dd，1H），2．86−3．01（m，1H），2．37（dd，1H），1．18−1．29（m，1H），0．50−0．72（m，3H），0．30−0．40（m，1H）．
【０３１０】
実施例22
1−（3−クロロピリジン−2−イル）−N−［（1R）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化１４６】
2019524722.tif 000150
一般的手順2により、7−クロロ−1−（3−クロロピリジン−2−イル）−N−［（1R）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例19A）60．0mg（131μmol）を、（4S）−4−ヒドロキシピロリジン−2−オン15．9mg（157μmol）と、80℃で、ジオキサン1ml中炭酸カリウム27．2mg（197μmol）、酢酸パラジウム5．89mg（26．0μmol）およびキサントホス15．2mg（26．0μmol）の存在下で反応させた。次いで、少量のアセトニトリル、水およびギ酸を添加し、反応溶液をMilliporeフィルタを通して濾過し、分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製した。アセトニトリルから再結晶すると、標記化合物34．2mg（理論値の50％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝0．93分；MS（ESIpos）：m／z＝522［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．30（dd，1H），9．04（d，1H），8．72（d，1H），8．67（ddd，1H），8．49−8．57（m，1H），8．30−8．37（m，1H），7．77（ddd，1H），5．24−5．39（m，1H），4．35−4．49（m，1H），4．20−4．30（m，1H），3．52−3．68（m，1H），3．33−3．47（m，1H），2．85−3．01（m，1H），2．36（dd，1H），1．18−1．29（m，1H），0．50−0．72（m，3H），0．30−0．40（m，1H）．
【０３１１】
実施例23
1−（3−クロロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−N−［2，2，2−トリフルオロ−1−（3−フルオロフェニル）エチル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー混合物）
【化１４７】
2019524722.tif 000151
一般的手順1により、1−（3−クロロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例27A）75．0mg（187μmol）を、2，2，2−トリフルオロ−1−（3−フルオロフェニル）エタンアミン54．2mg（281μmol）と、DMF1．2ml中HATU85．4mg（225μmol）およびDIPEA98μl（561μmol）の存在下で反応させた。次いで、少量のアセトニトリル、水およびギ酸を添加し、反応溶液をMilliporeフィルタを通して濾過し、分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって2回精製した。生成物を順相クロマトグラフィー（酢酸エチル）によって再精製すると、標記化合物38．6mg（理論値の36％；純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．90分；MS（ESIpos）：m／z＝576［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 11．14（d，1H），9．07（dd，1H），8．78（d，1H），8．62−8．71（m，1H），8．50−8．59（m，1H），8．29−8．37（m，1H），7．73−7．81（m，1H），7．52−7．62（m，1H），7．42−7．50（m，2H），7．27−7．36（m，1H），6．15−6．26（m，1H），5．24−5．38（m，1H），4．20−4．29（m，1H），3．51−3．69（m，1H），3．33−3．47（m，1H），2．85−3．01（m，1H），2．36（dd，1H）．
【０３１２】
実施例24
1−（3，5−ジフルオロピリジン−4−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−N−［（2S）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化１４８】
2019524722.tif 000152
一般的手順2により、7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−4−イル）−4−オキソ−N−［（2S）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例22C）40．0mg（89．5μmol）を、（4S）−4−ヒドロキシピロリジン−2−オン10．9mg（107μmol）と、80℃で、ジオキサン3ml中炭酸カリウム18．6mg（134μmol）、酢酸パラジウム4．02mg（18．0μmol）およびキサントホス10．4mg（18．0μmol）の存在下で反応させた。次いで、混合物を室温に冷却し、水およびアセトニトリルを添加し、混合物を濾過し、粗溶液を分取HPLC（カラム：Reprosil、10μm、125＊30mm、溶媒：水、アセトニトリル、0．1％トリフルオロ酢酸勾配）によって精製すると、標記化合物25．9mg（理論値の54％、純度96％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．71分；MS（ESIpos）：m／z＝512［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．07（d，1H），9．15（s，1H），8．91（m，2H），8．73（d，1H），8．55（d，1H），4．71−4．83（m，1H），4．26−4．31（m，1H），3．68（dd，1H），3．43−3．51（m，1H），2．94（dd，1H），2．32−2．43（m，1H），1．84−1．95（m，1H），1．61−1．73（m，1H），0．98（t，3H）．
【０３１３】
実施例25
N−［1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（3S）−3−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー混合物）
【化１４９】
2019524722.tif 000153
一般的手順2により、7−クロロ−N−［1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例7A）50．0mg（109μmol）を、（3S）−3−ヒドロキシピロリジン−2−オン（CAS：34368−52−0）13．2mg（131μmol）と、80℃で、ジオキサン1ml中炭酸カリウム22．6mg（163μmol）、酢酸パラジウム4．89mg（22．0μmol）およびキサントホス12．6mg（22．0μmol）の存在下で反応させた。次いで、混合物を室温に冷却し、次いで、水およびアセトニトリルを添加し、混合物を濾過し、粗溶液を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製した。生成物を順相クロマトグラフィー（シクロヘキサン／酢酸エチル勾配）によって再精製すると、標記化合物20．4mg（理論値の36％；純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．77分；MS（ESIpos）：m／z＝524［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．25（d，1H），9．05（s，1H），8．74（d，1H），8．65（d，1H），8．55（t，1H），8．32−8．42（m，1H），5．91（dd，1H），4．31−4．49（m，2H），3．54−3．69（m，1H），3．33−3．45（m，1H），2．26−2．38（m，1H），1．70−1．87（m，1H），1．18−1．29（m，1H），0．50−0．71（m，3H），0．28−0．40（m，1H）．
【０３１４】
実施例26
N−［1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（3R）−3−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー混合物）
【化１５０】
2019524722.tif 000154
一般的手順2により、7−クロロ−N−［1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例7A）50．0mg（109μmol）を、（3R）−3−ヒドロキシピロリジン−2−オン（CAS：77510−50−0）13．2mg（131μmol）と、80℃で、ジオキサン1ml中炭酸カリウム22．6mg（163μmol）、酢酸パラジウム4．89mg（22．0μmol）およびキサントホス12．6mg（22．0μmol）の存在下で反応させた。次いで、混合物を室温に冷却し、次いで、水およびアセトニトリルを添加し、混合物を濾過し、粗溶液を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製した。生成物を順相クロマトグラフィー（シクロヘキサン／酢酸エチル勾配）によって再精製すると、標記化合物18．9mg（理論値の32％；純度96％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．77分；MS（ESIpos）：m／z＝524［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．25（d，1H），9．05（s，1H），8．74（d，1H），8．65（d，1H），8．55（t，1H），8．31−8．42（m，1H），5．92（dd，1H），4．32−4．48（m，2H），3．54−3．69（m，1H），3．33−3．44（m，1H），2．26−2．37（m，1H），1．69−1．86（m，1H），1．20−1．26（m，1H），0．50−0．72（m，3H），0．25−0．42（m，1H）．
【０３１５】
実施例27
N−［（1R）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［4−メチル−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー混合物）
【化１５１】
2019524722.tif 000155
一般的手順2により、7−クロロ−N−［（1R）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例8A）150mg（327μmol）を、4−メチルピロリジン−2−オン35．8mg（343μmol、純度95％）と、80℃で、ジオキサン2．9ml中炭酸カリウム67．8mg（490μmol）、酢酸パラジウム13．2mg（59．0μmol）およびキサントホス68．1mg（118μmol）の存在下で反応させた。次いで、混合物を室温に冷却し、水、ギ酸およびアセトニトリルを添加し、混合物を濾過し、粗溶液を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物43．2mg（理論値の25％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝1．15分；MS（ESIpos）：m／z＝522［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．26（d，1H），9．04（s，1H），8．70（d，1H），8．65（d，1H），8．52（d，1H），8．34−8．45（m，1H），4．35−4．49（m，1H），3．67−3．83（m，1H），3．09−3．24（m，1H），2．68−2．81（m，1H），2．22−2．47（m，2H），1．18−1．29（m，1H），1．03（dd，3H），0．51−0．72（m，3H），0．29−0．40（m，1H）．
【０３１６】
標記化合物（ジアステレオマー混合物）43．2mgをキラルHPLC（分取HPLC：カラム：Daicel Chiralpak ID 5μm 20×250mm；移動相：60％イソヘキサン、40％エタノール；温度：30℃；流量：15ml／分；UV検出：220nm）によってジアステレオマーに分離した。
【０３１７】
これにより、（カラムからの溶出の順序で）ジアステレオマー1（実施例28）（99％de）Rt＝12．44分17．0mg（理論値の9．8％、純度100％）およびジアステレオマー2（実施例29）（99％de）Rt＝14．26分16．0mg（理論値の9．3％、純度100％）が得られた。
［分析HPLC：カラム：Daicel Chiralpak ID 5μm 250×4．6mm；移動相：50％イソヘキサン、50％エタノール；温度：30℃；流量：1．0ml／分；UV検出：220nm］
【０３１８】
実施例28
N−［（1R）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［4−メチル−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー1）
LC−MS（方法1）：Rt＝1．15分；MS（ESIpos）：m／z＝522［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．26（d，1H），9．04（s，1H），8．70（d，1H），8．65（d，1H），8．52（d，1H），8．33−8．44（m，1H），4．42（sxt，1H），3．67−3．83（m，1H），3．09−3．24（m，1H），2．68−2．81（m，1H），2．22−2．48（m，2H），1．18−1．29（m，1H），1．04（dd，3H），0．51−0．72（m，3H），0．29−0．40（m，1H）．
【０３１９】
実施例29
N−［（1R）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［4−メチル−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー2）
LC−MS（方法1）：Rt＝1．15分；MS（ESIpos）：m／z＝522［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．26（d，1H），9．04（s，1H），8．70（d，1H），8．65（d，1H），8．52（d，1H），8．33−8．45（m，1H），4．35−4．49（m，1H），3．67−3．83（m，1H），3．09−3．25（m，1H），2．68−2．81（m，1H），2．22−2．47（m，2H），1．18−1．30（m，1H），1．03（dd，3H），0．50−0．72（m，3H），0．28−0．40（m，1H）．
【０３２０】
実施例30
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［4−メチル−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−N−［（2S）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー混合物）
【化１５２】
2019524722.tif 000156
一般的手順2により、7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−N−［（2S）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例5A）150．0mg（336μmol）を、4−メチルピロリジン−2−オン36．8mg（353μmol、純度95％）と、80℃で、ジオキサン3ml中炭酸カリウム69．6mg（504μmol）、酢酸パラジウム13．6mg（60．0μmol）およびキサントホス69．9mg（121μmol）の存在下で反応させた。次いで、混合物を室温に冷却し、水、ギ酸およびアセトニトリルを添加し、混合物を濾過し、粗溶液を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって2回精製すると、標記化合物39．2mg（理論値の23％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝1．20分；MS（ESIpos）：m／z＝510［M＋H］＋。
1H−NMR（500 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．11（d，1H），9．05（s，1H），8．70（d，1H），8．66（d，1H），8．52（d，1H），8．34−8．44（m，1H），4．71−4．83（m，1H），3．67−3．82（m，1H），3．09−3．24（m，1H），2．74（td，1H），2．23−2．47（m，2H），1．84−1．96（m，1H），1．60−1．73（m，1H），0．93−1．09（m，6H）．
【０３２１】
実施例31
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［7−ヒドロキシ−6，6−ジメチル−5−オキソ−4−アザスピロ［2．4］ヘプタ−4−イル］−4−オキソ−N−［（2S）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー混合物）
【化１５３】
2019524722.tif 000157
一般的手順2により、7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−N−［（2S）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例5A）36．0mg（80．5μmol）を、7−ヒドロキシ−6，6−ジメチル−4−アザスピロ［2．4］ヘプタン−5−オン（実施例1D）15．0mg（96．7μmol）と、80℃で、ジオキサン0．6ml中炭酸カリウム16．7mg（121μmol）、酢酸パラジウム3．62mg（16．1μmol）およびキサントホス9．32mg（16．1μmol）の存在下で反応させた。次いで、混合物を室温に冷却し、次いで、1M塩酸水溶液で酸性化し、N−アセチルシステイン100mgを添加し、混合物を15分間撹拌した。次いで、混合物を飽和重炭酸ナトリウム水溶液15mlおよび酢酸エチル20mlで希釈し、相を分離した。水相を酢酸エチルで3回抽出した。合わせた有機相を硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去した。粗生成物をアセトニトリル、水およびギ酸に溶解し、分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物12．5mg（理論値の27％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝1．06分；MS（ESIpos）：m／z＝566［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．07（d，1H），9．07（s，1H），8．65−8．75（m，2H），8．43−8．53（m，1H），8．14（t，1H），5．36（dd，1H），4．69−4．85（m，1H），3．42−3．59（m，1H），1．83−1．96（m，1H），1．59−1．74（m，1H），1．13−1．21（m，3H），1．08（s，3H），0．88−1．05（m，5H），0．36−0．75（m，2H）．
【０３２２】
実施例32
N−［（1R）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［7−ヒドロキシ−6，6−ジメチル−5−オキソ−4−アザスピロ［2．4］ヘプタ−4−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー混合物）
【化１５４】
2019524722.tif 000158
一般的手順2により、7−クロロ−N−［（1R）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例8A）24．6mg（53．7μmol）を、7−ヒドロキシ−6，6−ジメチル−4−アザスピロ［2．4］ヘプタン−5−オン（実施例1D）10．0mg（64．4μmol）と、80℃で、ジオキサン0．4ml中炭酸カリウム11．1mg（80．5μmol）、酢酸パラジウム2．14mg（10．7μmol）およびキサントホス6．21mg（10．7μmol）の存在下で反応させた。次いで、混合物を室温に冷却し、次いで、1M塩酸水溶液で酸性化し、N−アセチルシステイン100mgを添加し、混合物を15分間撹拌した。次いで、混合物を飽和重炭酸ナトリウム水溶液15mlおよび酢酸エチル20mlで希釈し、相を分離した。水相を酢酸エチルで3回抽出した。合わせた有機相を硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去した。粗生成物をアセトニトリルに溶解し、分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物5．20mg（理論値の16％、純度96％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝2．03分；MS（ESIpos）：m／z＝578［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．21（dd，1H），9．06（s，1H），8．65−8．75（m，2H），8．42−8．52（m，1H），8．14（t，1H），5．36（dd，1H），4．41（sxt，1H），3．42−3．58（m，1H），1．19−1．29（m，1H），1．17（d，3H），1．08（s，3H），0．95−1．06（m，2H），0．31−0．73（m，6H）．
【０３２３】
実施例33
N−［（1S）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［7−ヒドロキシ−6，6−ジメチル−5−オキソ−4−アザスピロ［2．4］ヘプタ−4−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー混合物）
【化１５５】
2019524722.tif 000159
一般的手順2により、7−クロロ−N−［（1S）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例9A）30．0mg（65．4μmol）を、7−ヒドロキシ−6，6−ジメチル−4−アザスピロ［2．4］ヘプタン−5−オン（実施例1D）12．2mg（78．5μmol）と、80℃で、ジオキサン0．5ml中炭酸カリウム13．6mg（98．1μmol）、酢酸パラジウム2．94mg（13．1μmol）およびキサントホス7．57mg（13．1μmol）の存在下で反応させた。次いで、混合物を室温に冷却し、次いで、1M塩酸水溶液で酸性化し、N−アセチルシステイン100mgを添加し、混合物を15分間撹拌した。次いで、混合物を飽和重炭酸ナトリウム水溶液15mlおよび酢酸エチル20mlで希釈し、相を分離した。水相を酢酸エチルで3回抽出した。合わせた有機相を硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去した。粗生成物をアセトニトリル、水およびギ酸に溶解し、Milliporeフィルタを通して濾過し、分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物20．4mg（理論値の52％、純度97％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝2．03分；MS（ESIpos）：m／z＝578［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．21（br． dd，1H），9．06（s，1H），8．65−8．75（m，2H），8．43−8．53（m，1H），8．14（t，1H），5．36（dd，1H），4．34−4．48（m，1H），3．42−3．59（m，1H），1．20−1．28（m，1H），1．13−1．20（m，3H），1．08（s，3H），0．89−1．06（m，2H），0．29−0．75（m，6H）．
【０３２４】
実施例34
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−7−（2−オキソピペリジン−1−イル）−N−［（2R）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化１５６】
2019524722.tif 000160
一般的手順2により、7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−N−［（2R）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例4C）25．0mg（56．0μmol）を、ピペリジン−2−オン6．66mg（67．0μmol）と、80℃で、ジオキサン0．5ml中炭酸カリウム11．6mg（84．0μmol）、酢酸パラジウム2．51mg（11．0μmol）およびキサントホス6．48mg（11．0μmol）の存在下で反応させた。次いで、混合物をアセトニトリル、水およびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物15．9mg（理論値の56％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝2．06分；MS（ESIpos）：m／z＝510［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．10（d，1H），9．06（s，1H），8．59−8．69（m，2H），8．38（ddd，1H），8．16（d，1H），4．70−4．85（m，1H），3．47−3．63（m，2H），1．84−1．97（m，1H），1．60−1．82（m，5H），0．92−1．04（m，3H）．
【０３２５】
実施例35
N−［1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（3R，4S）−3，4−ジヒドロキシピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー混合物）
【化１５７】
2019524722.tif 000161
一般的手順3により、7−クロロ−N−［1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例7A）50．0mg（109μmol）を、（3R，4S）−ピロリジン−3，4−ジオール塩酸塩18．3mg（131μmol）と、DMF0．5ml中DIPEA66．0μl（381μmol）の存在下で反応させた。次いで、混合物をアセトニトリル、水およびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、粗溶液を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物43mg（理論値の75％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝0．89分；MS（ESIpos）：m／z＝526［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．55（dd，1H），8．81（s，1H），8．58−8．65（m，1H），8．24−8．39（m，2H），6．76（d，1H），4．99−5．11（m，1H），4．87−4．98（m，1H），4．40（sxt，1H），3．97−4．19（m，2H），3．54−3．68（m，1H），3．16−3．29（m，2H），2．93−3．13（m，1H），1．15−1．26（m，1H），0．47−0．71（m，3H），0．28−0．39（m，1H）．
【０３２６】
実施例36
N−［1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［1−ヒドロキシ−3−アザビシクロ［3．1．0］ヘキサ−3−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー混合物）
【化１５８】
2019524722.tif 000162
一般的手順3により、7−クロロ−N−［1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例7A）60．0mg（131μmol）を、3−アザビシクロ［3．1．0］ヘキサン−1−オール塩酸塩（ラセミ体）21．3mg（157μmol、純度91％）と、DMF0．6ml中DIPEA79．7μl（458μmol）の存在下で反応させた。次いで、混合物をアセトニトリル、水およびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、粗溶液を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物48mg（理論値の70％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．90分；MS（ESIpos）：m／z＝522［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．52（dd，1H），8．82（s，1H），8．61（br． s，1H），8．24−8．43（m，2H），6．68−6．85（m，1H），5．91−6．12（m，1H），4．39（sxt，1H），3．34−3．95（m，3H），3．05−3．27（m，1H），1．49−1．71（m，1H），1．15−1．26（m，1H），0．97−1．10（m，1H），0．27−0．70（m，5H）．
【０３２７】
実施例37
N−［（1R）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［1−ヒドロキシ−3−アザビシクロ［3．1．0］ヘキサ−3−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー混合物）
【化１５９】
2019524722.tif 000163
一般的手順3により、7−クロロ−N−［（1R）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例8A）89．0mg（194μmol）を、3−アザビシクロ［3．1．0］ヘキサン−1−オール塩酸塩（ラセミ体）34．7mg（233μmol、純度91％）と、DMF0．81ml中DIPEA118μl（679μmol）の存在下で反応させた。次いで、混合物をアセトニトリル、水およびギ酸で希釈し、粗溶液を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物60mg（理論値の59％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝1．06分；MS（ESIpos）：m／z＝522［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．52（dd，1H），8．82（s，1H），8．61（br． s，1H），8．23−8．44（m，2H），6．68−6．85（m，1H），5．89−6．13（m，1H），4．39（sxt，1H），3．35−3．96（m，3H），3．04−3．26（m，1H），1．49−1．71（m，1H），1．15−1．26（m，1H），0．95−1．10（m，1H），0．26−0．71（m，5H）．
【０３２８】
標記化合物（ジアステレオマー混合物）60．0mgをキラルHPLC（分取HPLC：カラム：Daicel Chiralpak AS−H 5μm 250×20mm；移動相：80％イソヘキサン、20％イソプロパノール＋0．2％DEA；温度：23℃；流量20ml／分；UV検出：270nm）によってジアステレオマーに分離した。
【０３２９】
これにより、（カラムからの溶出の順序で）ジアステレオマー1（99％de）Rt＝7．52分15．5mgおよびジアステレオマー2 Rt＝11．03分19．2mg（96％de）が得られた。
［分析HPLC：カラム：Daicel Chiralpak AS−3 3μm 50×4．6mm；移動相：80％イソヘキサン、20％イソプロパノール＋0．2％DEA；流量：1．0ml／分；UV検出：220nm］
【０３３０】
ジアステレオマー1を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によってさらに精製すると、実施例38からの標記化合物10．0mg（理論値の10％、純度100％）が得られた。
【０３３１】
ジアステレオマー2を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によってさらに精製すると、実施例39からの標記化合物9．5mg（理論値の9％、純度100％）が得られた。
【０３３２】
実施例38
N−［（1R）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［1−ヒドロキシ−3−アザビシクロ［3．1．0］ヘキサ−3−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー1）
LC−MS（方法2）：Rt＝1．90分；MS（ESIpos）：m／z＝522［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．52（dd，1H），8．82（s，1H），8．61（br． s，1H），8．24−8．43（m，2H），6．68−6．85（m，1H），5．90−6．12（m，1H），4．33−4．46（m，1H），3．37−3．97（m，3H），3．06−3．26（m，1H），1．50−1．70（m，1H），1．16−1．26（m，1H），0．97−1．11（m，1H），0．28−0．70（m，5H）．
【０３３３】
実施例39
N−［（1R）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［1−ヒドロキシ−3−アザビシクロ［3．1．0］ヘキサ−3−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー2）
LC−MS（方法2）：Rt＝1．90分；MS（ESIpos）：m／z＝522［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．52（dd，1H），8．81（s，1H），8．61（br． s，1H），8．24−8．44（m，2H），6．68−6．84（m，1H），5．90−6．13（m，1H），4．39（sxt，1H），3．39−3．96（m，3H），3．06−3．27（m，1H），1．50−1．70（m，1H），1．16−1．26（m，1H），0．97−1．10（m，1H），0．28−0．70（m，5H）．
【０３３４】
実施例40
N−［1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（3R，4R）−3，4−ジヒドロキシピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー混合物）
【化１６０】
2019524722.tif 000164
一般的手順3により、7−クロロ−N−［1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例7A）50．0mg（109μmol）を、（3R，4R）−ピロリジン−3，4−ジオール塩酸塩18．3mg（131μmol）と、DMF0．5ml中DIPEA66．0μl（381μmol）の存在下で反応させた。次いで、混合物をアセトニトリル、水およびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、粗溶液を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物38．3mg（理論値の67％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．58分；MS（ESIpos）：m／z＝526［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．56（dd，1H），8．81（s，1H），8．61（d，1H），8．24−8．38（m，2H），6．78（d，1H），5．03−5．31（m，2H），4．40（sxt，1H），3．88−4．09（m，2H），3．62（ddd，1H），3．33−3．41（m，1H），3．01−3．27（m，2H），1．16−1．27（m，1H），0．47−0．70（m，3H），0．28−0．39（m，1H）．
【０３３５】
実施例41
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（3R，4S）−3，4−ジヒドロキシピロリジン−1−イル］−4−オキソ−N−［（2R）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化１６１】
2019524722.tif 000165
一般的手順3により、7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−N−［（2R）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例4C）50．0mg（112μmol）を、（3R，4S）−ピロリジン−3，4−ジオール塩酸塩18．7mg（134μmol）と、DMF0．5ml中DIPEA68．0μl（392μmol）の存在下で反応させた。次いで、混合物をアセトニトリル、水およびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、粗溶液を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物51．9mg（理論値の90％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．59分；MS（ESIpos）：m／z＝514［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．42（d，1H），8．82（s，1H），8．62（br． s，1H），8．30−8．39（m，1H），8．27（d，1H），6．76（d，1H），5．04（dd，1H），4．93（dd，1H），4．68−4．81（m，1H），4．09−4．19（m，1H），3．96−4．09（m，1H），3．54−3．68（m，1H），3．16−3．27（m，1H），2．93−3．13（m，1H），1．81−1．94（m，1H），1．57−1．71（m，1H），0．92−1．03（m，3H）．
【０３３６】
実施例42
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（3R，4R）−3，4−ジヒドロキシピロリジン−1−イル］−4−オキソ−N−［（2R）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化１６２】
2019524722.tif 000166
一般的手順3により、7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−N−［（2R）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例4C）50．0mg（112μmol）を、（3R，4R）−ピロリジン−3，4−ジオール塩酸塩18．7mg（134μmol）と、DMF0．5ml中DIPEA68．0μl（392μmol）の存在下で反応させた。次いで、混合物をアセトニトリル、水およびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、粗溶液を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物52．3mg（理論値の91％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．54分；MS（ESIpos）：m／z＝514［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．43（d，1H），8．82（d，1H），8．62（d，1H），8．30−8．37（m，1H），8．28（d，1H），6．78（d，1H），5．01−5．32（m，2H），4．66−4．83（m，1H），3．86−4．11（m，2H），3．55−3．70（m，1H），3．33−3．40（m，1H），3．19−3．29（m，1H），3．01−3．18（m，1H），1．81−1．96（m，1H），1．56−1．73（m，1H），0．97（dd，3H）．
【０３３７】
実施例43
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［1−ヒドロキシ−3−アザビシクロ［3．1．0］ヘキサ−3−イル］−4−オキソ−N−［（2R）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー混合物）
【化１６３】
2019524722.tif 000167
一般的手順3により、7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−N−［（2R）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例4C）50．0mg（112μmol）を、3−アザビシクロ［3．1．0］ヘキサン−1−オール塩酸塩（ラセミ体）18．2mg（134μmol、純度91％）と、DMF0．5ml中DIPEA66．0μl（392μmol）の存在下で反応させた。次いで、混合物をアセトニトリル、水およびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、粗溶液を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物42．9mg（理論値の75％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．86分；MS（ESIpos）：m／z＝510［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．38（d，1H），8．82（s，1H），8．62（br． s，1H），8．23−8．44（m，2H），6．67−6．84（m，1H），5．90−6．13（m，1H），4．67−4．82（m，1H），3．35−3．96（m，3H），3．04−3．27（m，1H），1．81−1．94（m，1H），1．50−1．71（m，2H），0．90−1．10（m，4H），0．35−0．50（m，1H）．
【０３３８】
標記化合物（ジアステレオマー混合物）31．0mgをキラルHPLC（分取HPLC：カラム：Daicel Chiralcel OX−H 5μm 250×20mm；移動相：75％イソヘキサン、25％イソプロパノール＋0．2％DEA；温度：45℃；流量15ml／分；UV検出：220nm）によってジアステレオマーに分離した。
【０３３９】
これにより、（カラムからの溶出の順序で）ジアステレオマー1（99％de）Rt＝11．78分14．0mgおよびジアステレオマー2 Rt＝15．10分14．0mg（99％de）が得られた。
［分析HPLC：カラム：Daicel Chiralcel OX−H 5μm 250×4．6mm；移動相：75％イソヘキサン、25％イソプロパノール＋0．2％DEA；温度：45℃；流量：1．0ml／分；UV検出：235nm］
【０３４０】
ジアステレオマー1を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によってさらに精製すると、実施例44からの標記化合物9．4mg（理論値の16％、純度100％）が得られた。
【０３４１】
ジアステレオマー2を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によってさらに精製すると、実施例45からの標記化合物9．2mg（理論値の16％、純度100％）が得られた。
【０３４２】
実施例44
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［1−ヒドロキシ−3−アザビシクロ［3．1．0］ヘキサ−3−イル］−4−オキソ−N−［（2R）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー1）
LC−MS（方法2）：Rt＝1．88分；MS（ESIpos）：m／z＝510［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．38（d，1H），8．83（s，1H），8．62（br． s，1H），8．22−8．44（m，2H），6．68−6．84（m，1H），5．89−6．12（m，1H），4．67−4．81（m，1H），3．34−3．95（m，3H），3．05−3．26（m，1H），1．81−1．95（m，1H），1．51−1．72（m，2H），0．90−1．10（m，4H），0．35−0．51（m，1H）．
【０３４３】
実施例45
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［1−ヒドロキシ−3−アザビシクロ［3．1．0］ヘキサ−3−イル］−4−オキソ−N−［（2R）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー2）
LC−MS（方法2）：Rt＝1．88分；MS（ESIpos）：m／z＝510［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．38（d，1H），8．82（s，1H），8．62（br． s，1H），8．23−8．44（m，2H），6．68−6．85（m，1H），5．90−6．13（m，1H），4．66−4．82（m，1H），3．39−3．95（m，3H），3．07−3．20（m，1H），1．81−1．94（m，1H），1．50−1．72（m，2H），0．89−1．10（m，4H），0．35−0．50（m，1H）．
【０３４４】
実施例46
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［3−ヒドロキシ−3−メチルピロリジン−1−イル］−4−オキソ−N−［（2R）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー混合物）
【化１６４】
2019524722.tif 000168
一般的手順3により、7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−N−［（2R）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例4C）50．0mg（112μmol）を、3−メチルピロリジン−3−オール塩酸塩（ラセミ体）18．5mg（134μmol）と、DMF0．5ml中DIPEA68．0μl（392μmol）の存在下で反応させた。次いで、混合物をアセトニトリル、水およびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、粗溶液を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物49．4mg（理論値の86％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．89分；MS（ESIpos）：m／z＝512［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．43（d，1H），8．81（s，1H），8．61（br． s，1H），8．22−8．39（m，2H），6．67−6．82（m，1H），4．67−4．95（m，2H），3．48−3．63（m，1H），3．34−3．42（m，1H），2．87−3．28（m，2H），1．56−1．99（m，4H），1．21−1．37（m，3H），0．91−1．02（m，3H）．
【０３４５】
実施例47
1−（3−クロロピリジン−2−イル）−7−［1−ヒドロキシ−3−アザビシクロ［3．1．0］ヘキサ−3−イル］−4−オキソ−N−［（2R）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー混合物）
【化１６５】
2019524722.tif 000169
一般的手順3により、7−クロロ−1−（3−クロロピリジン−2−イル）−4−オキソ−N−［（2R）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例18C）100mg（225μmol）を、3−アザビシクロ［3．1．0］ヘキサン−1−オール塩酸塩（ラセミ体）36．5mg（270μmol、純度91％）と、DMF1ml中DIPEA137μl（786μmol）の存在下で反応させた。次いで、混合物をアセトニトリル、水およびギ酸で希釈し、粗溶液を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物90．8mg（理論値の80％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝0．98分；MS（ESIpos）：m／z＝508［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．43（d，1H），8．78（d，1H），8．59−8．67（m，1H），8．28（br． d，2H），7．67−7．77（m，1H），6．67−6．82（m，1H），5．87−6．10（m，1H），4．67−4．80（m，1H），3．58−3．94（m，1H），3．36−3．57（m，2H），2．94−3．19（m，1H），1．81−1．94（m，1H），1．47−1．71（m，2H），0．97（t，4H），0．39（t，1H）．
【０３４６】
実施例48
1−（3−クロロ−5−フルオロピリジン−2−イル）−7−［1−ヒドロキシ−3−アザビシクロ［3．1．0］ヘキサ−3−イル］−4−オキソ−N−［（2R）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー混合物）
【化１６６】
2019524722.tif 000170
一般的手順3により、7−クロロ−1−（3−クロロ−5−フルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−N−［（2R）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例16C）70．0mg（151μmol）を、3−アザビシクロ［3．1．0］ヘキサン−1−オール塩酸塩（ラセミ体）24．6mg（181μmol、純度91％）と、DMF0．7ml中DIPEA92．0μl（529μmol）の存在下で反応させた。次いで、混合物をアセトニトリル、水およびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、粗溶液を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物60．5mg（理論値の76％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝1．01分；MS（ESIpos）：m／z＝526［M＋H］＋。
1H−NMR（500 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．42（d，1H），8．82（d，1H），8．68−8．76（m，1H），8．45−8．57（m，1H），8．27（d，1H），6．68−6．81（m，1H），5．89−6．11（m，1H），4．68−4．80（m，1H），3．59−3．93（m，1H），3．35−3．58（m，2H），3．02−3．21（m，1H），1．83−1．93（m，1H），1．49−1．70（m，2H），0．94−1．07（m，4H），0．40（br． t，1H）．
【０３４７】
実施例49
1−（3−クロロ−5−フルオロピリジン−2−イル）−7−［3−ヒドロキシ−3−メチルピロリジン−1−イル］−4−オキソ−N−［（2R）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー混合物）
【化１６７】
2019524722.tif 000171
一般的手順3により、7−クロロ−1−（3−クロロ−5−フルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−N−［（2R）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例16C）70．0mg（151μmol）を、3−メチルピロリジン−3−オール塩酸塩（ラセミ体）25．0mg（181μmol）と、DMF0．7ml中DIPEA92．0μl（529μmol）の存在下で反応させた。次いで、混合物をアセトニトリル、水およびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、粗溶液を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物71．6mg（理論値の90％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝1．02分；MS（ESIpos）：m／z＝528［M＋H］＋。
1H−NMR（500 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．46（d，1H），8．80（br． s，1H），8．68−8．76（m，1H），8．45−8．55（m，1H），8．27（t，1H），6．66−6．79（m，1H），4．67−4．91（m，2H），3．48−3．59（m，1H），2．84−3．40（m，3H），1．58−1．96（m，4H），1．19−1．36（m，3H），0．97（t，3H）．
【０３４８】
実施例50
1−（3−クロロ−5−フルオロピリジン−2−イル）−N−［（1R）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−7−［（3R，4S）−3，4−ジヒドロキシピロリジン］−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化１６８】
2019524722.tif 000172
一般的手順3により、7−クロロ−1−（3−クロロ−5−フルオロピリジン−2−イル）−N−［（1R）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例17A）40．0mg（84．2μmol）を、（3R，4S）−ピロリジン−3，4−ジオール塩酸塩14．1mg（101μmol）と、DMF0．4ml中DIPEA51．0μl（295μmol）の存在下で反応させた。次いで、混合物をアセトニトリル、水およびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、粗溶液を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物40．2mg（理論値の88％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．70分；MS（ESIpos）：m／z＝542［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．58（dd，1H），8．76−8．84（m，1H），8．71（dd，1H），8．50（d，1H），8．27（d，1H），6．74（d，1H），4．84−5．10（m，2H），4．31−4．47（m，1H），3．92−4．19（m，2H），3．50−3．67（m，1H），3．08−3．28（m，2H），2．87−3．06（m，1H），1．13−1．27（m，1H），0．46−0．71（m，3H），0．27−0．39（m，1H）．
【０３４９】
実施例51
1−（3−クロロ−5−フルオロピリジン−2−イル）−N−［（1R）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−7−［（3R，4R）−3，4−ジヒドロキシピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化１６９】
2019524722.tif 000173
一般的手順3により、7−クロロ−1−（3−クロロ−5−フルオロピリジン−2−イル）−N−［（1R）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例17A）40．0mg（84．2μmol）を、（3R，4R）−ピロリジン−3，4−ジオール塩酸塩14．1mg（101μmol）と、DMF0．4ml中DIPEA51．0μl（295μmol）の存在下で反応させた。次いで、混合物をアセトニトリル、水およびギ酸で希釈し、粗溶液を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物39．4mg（理論値の86％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．65分；MS（ESIpos）：m／z＝542［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．59（dd，1H），8．80（d，1H），8．71（t，1H），8．50（dt，1H），8．28（d，1H），6．76（d，1H），5．04−5．29（m，2H），4．33−4．46（m，1H），4．04（br． s，1H），3．91（br． s，1H），3．61（td，1H），3．12−3．39（m，2H），3．03（dd，1H），1．14−1．27（m，1H），0．46−0．71（m，3H），0．29−0．39（m，1H）．
【０３５０】
実施例52
1−（3−クロロ−5−フルオロピリジン−2−イル）−N−［（1R）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−7−［1−ヒドロキシ−3−アザビシクロ［3．1．0］ヘキサ−3−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー混合物）
【化１７０】
2019524722.tif 000174
一般的手順3により、7−クロロ−1−（3−クロロ−5−フルオロピリジン−2−イル）−N−［（1R）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例17A）70．0mg（147μmol）を、3−アザビシクロ［3．1．0］ヘキサン−1−オール塩酸塩（ラセミ体）24．0mg（177μmol、純度91％）と、DMF0．7ml中DIPEA90．0μl（516μmol）の存在下で反応させた。次いで、混合物をアセトニトリル、水およびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、粗溶液を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物62．4mg（理論値の78％、純度99％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．96分；MS（ESIpos）：m／z＝538［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．55（dd，1H），8．81（d，1H），8．72（br． s，1H），8．44−8．58（m，1H），8．28（d，1H），6．68−6．82（m，1H），5．89−6．11（m，1H），4．32−4．45（m，1H），3．59−3．94（m，1H），3．38−3．56（m，1．5H），2．99−3．28（m，1．5H），1．49−1．70（m，1H），1．15−1．26（m，1H），0．96−1．08（m，1H），0．48−0．70（m，3H），0．29−0．44（m，2H）．
【０３５１】
実施例53
1−（3−クロロ−5−フルオロピリジン−2−イル）−N−［（1R）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−7−［3−ヒドロキシ−3−メチルピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー混合物）
【化１７１】
2019524722.tif 000175
一般的手順3により、7−クロロ−1−（3−クロロ−5−フルオロピリジン−2−イル）−N−［（1R）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例17A）70．0mg（147μmol）を、3−メチルピロリジン−3−オール塩酸塩（ラセミ体）24．3mg（177μmol）と、DMF0．7ml中DIPEA90．0μl（516μmol）の存在下で反応させた。次いで、混合物をアセトニトリル、水およびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、粗溶液を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物71．7mg（理論値の90％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．98分；MS（ESIpos）：m／z＝540［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．60（dd，1H），8．79（br． s，1H），8．66−8．75（m，1H），8．49（t，1H），8．27（t，1H），6．65−6．80（m，1H），4．73−4．91（m，1H），4．33−4．45（m，1H），3．48−3．60（m，1H），3．28−3．44（m，1H），2．84−3．27（m，2H），1．71−1．96（m，2H），1．15−1．36（m，4H），0．46−0．71（m，3H），0．29−0．39（m，1H）．
【０３５２】
実施例54
1−（3−クロロピリジン−2−イル）−N−［（1R）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−7−［1−ヒドロキシ−3−アザビシクロ［3．1．0］ヘキサ−3−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー混合物）
【化１７２】
2019524722.tif 000176
一般的手順3により、7−クロロ−1−（3−クロロピリジン−2−イル）−N−［（1R）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例19A）70．0mg（153μmol）を、3−アザビシクロ［3．1．0］ヘキサン−1−オール塩酸塩（ラセミ体）24．9mg（184μmol、純度91％）と、DMF0．7ml中DIPEA93．0μl（536μmol）の存在下で反応させた。次いで、混合物をアセトニトリル、水およびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、粗溶液を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物61．5mg（理論値の77％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝0．99分；MS（ESIpos）：m／z＝520［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．56（dd，1H），8．77（d，1H），8．63（d，1H），8．28（d，2H），7．66−7．77（m，1H），6．66−6．82（m，1H），5．86−6．11（m，1H），4．32−4．46（m，1H），3．57−3．94（m，1H），3．38−3．55（m，1H），2．90−3．29（m，2H），1．46−1．69（m，1H），1．13−1．26（m，1H），0．95−1．10（m，1H），0．47−0．71（m，3H），0．28−0．45（m，2H）．
【０３５３】
実施例55
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（3R，4S）−3，4−ジヒドロキシピロリジン−1−イル］−N−（1，1，1，3，3，3−ヘキサフルオロプロパン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化１７３】
2019524722.tif 000177
一般的手順3により、7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−N−（1，1，1，3，3，3−ヘキサフルオロプロパン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例10A）40．0mg（82．2μmol）を、（3R，4S）−ピロリジン−3，4−ジオール塩酸塩13．8mg（98．6μmol）と、DMF0．4ml中DIPEA50．0μl（288μmol）の存在下で反応させた。次いで、混合物をアセトニトリル、水およびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、粗溶液を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物35．6mg（理論値の78％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．76分；MS（ESIpos）：m／z＝554［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 11．40（d，1H），8．91（s，1H），8．59−8．66（m，1H），8．25−8．41（m，2H），6．78（d，1H），6．25−6．40（m，1H），4．87−5．12（m，2H），3．96−4．20（m，2H），3．55−3．69（m，1H），3．16−3．28（m，1H），2．92−3．13（m，1H）．
【０３５４】
実施例56
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（3R，4R）−3，4−ジヒドロキシピロリジン−1−イル］−N−（1，1，1，3，3，3−ヘキサフルオロプロパン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化１７４】
2019524722.tif 000178
一般的手順3により、7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−N−（1，1，1，3，3，3−ヘキサフルオロプロパン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例10A）40．0mg（82．2μmol）を、（3R，4R）−ピロリジン−3，4−ジオール塩酸塩13．8mg（98．6μmol）と、DMF0．4ml中DIPEA50．0μl（288μmol）の存在下で反応させた。次いで、混合物をアセトニトリル、水およびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、粗溶液を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物39．3mg（理論値の86％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．71分；MS（ESIpos）：m／z＝554［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 11．41（d，1H），8．91（d，1H），8．63（d，1H），8．25−8．40（m，2H），6．81（d，1H），6．26−6．39（m，1H），5．04−5．32（m，2H），3．88−4．09（m，2H），3．56−3．69（m，1H），3．33−3．42（m，1H），3．02−3．29（m，2H）．
【０３５５】
実施例57
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−N−（1，1，1，3，3，3−ヘキサフルオロプロパン−2−イル）−7−［1−ヒドロキシ−3−アザビシクロ［3．1．0］ヘキサ−3−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ラセミ体）
【化１７５】
2019524722.tif 000179
一般的手順3により、7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−N−（1，1，1，3，3，3−ヘキサフルオロプロパン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例10A）70．0mg（144μmol）を、3−アザビシクロ［3．1．0］ヘキサン−1−オール塩酸塩（ラセミ体）23．4mg（173μmol、純度91％）と、DMF0．7ml中DIPEA88．0μl（503μmol）の存在下で反応させた。次いで、混合物をアセトニトリル、水およびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、粗溶液を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物56．1mg（理論値の71％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝2．03分；MS（ESIpos）：m／z＝550［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 11．36（d，1H），8．92（s，1H），8．63（br． s，1H），8．25−8．46（m，2H），6．71−6．87（m，1H），6．26−6．40（m，1H），5．91−6．13（m，1H），3．39−3．98（m，3H），3．06−3．27（m，1H），1．50−1．71（m，1H），0．97−1．11（m，1H），0．36−0．51（m，1H）．
【０３５６】
標記化合物（ジアステレオマー混合物）43．0mgをキラルHPLC（分取HPLC：カラム：Daicel Chiralpak IA 5μm 250×30mm；移動相：80％イソヘキサン、20％エタノール；温度：23℃；流量：20ml／分；UV検出：220nm）によってジアステレオマーに分離した。
【０３５７】
これにより、（カラムからの溶出の順序で）ジアステレオマー1（99％de）Rt＝7．50分17．2mgおよびジアステレオマー2 Rt＝10．30分18．2mg（99％de）が得られた。
［分析HPLC：カラム：Daicel Chiralpak IA−3 3μm 50×4．6mm；移動相：80％イソヘキサン、20％エタノール；流量：1．0ml／分；UV検出：220nm］
【０３５８】
ジアステレオマー1を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によってさらに精製すると、実施例58からの標記化合物11．0mg（理論値の14％、純度100％）が得られた。
【０３５９】
ジアステレオマー2を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によってさらに精製すると、実施例59からの標記化合物15．0mg（理論値の19％、純度100％）が得られた。
【０３６０】
実施例58
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−N−（1，1，1，3，3，3−ヘキサフルオロプロパン−2−イル）−7−［1−ヒドロキシ−3−アザビシクロ［3．1．0］ヘキサ−3−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー1）
LC−MS（方法1）：Rt＝1．07分；MS（ESIpos）：m／z＝550［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 11．36（d，1H），8．92（s，1H），8．58−8．68（m，1H），8．25−8．44（m，2H），6．72−6．86（m，1H），6．27−6．39（m，1H），5．92−6．12（m，1H），3．38−3．95（m，3H），3．07−3．25（m，1H），1．51−1．70（m，1H），0．97−1．11（m，1H），0．37−0．50（m，1H）．
【０３６１】
実施例59
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−N−（1，1，1，3，3，3−ヘキサフルオロプロパン−2−イル）−7−［1−ヒドロキシ−3−アザビシクロ［3．1．0］ヘキサ−3−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー2）
LC−MS（方法2）：Rt＝2．02分；MS（ESIpos）：m／z＝550［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 11．36（d，1H），8．92（s，1H），8．63（br． s，1H），8．25−8．45（m，2H），6．71−6．87（m，1H），6．26−6．40（m，1H），5．91−6．14（m，1H），3．40−3．97（m，3H），3．07−3．26（m，1H），1．50−1．71（m，1H），0．96−1．11（m，1H），0．36−0．51（m，1H）．
【０３６２】
実施例60
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（3S，4S）−3，4−ジヒドロキシピロリジン−1−イル］−N−（1，1，1，3，3，3−ヘキサフルオロプロパン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化１７６】
2019524722.tif 000180
一般的手順3により、7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−N−（1，1，1，3，3，3−ヘキサフルオロプロパン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例10A）40．0mg（82．2μmol）を、（3S，4S）−ピロリジン−3，4−ジオール塩酸塩10．2mg（98．6μmol）と、DMF0．4ml中DIPEA50．0μl（288μmol）の存在下で反応させた。次いで、混合物をアセトニトリル、水およびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、粗溶液を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物38．3mg（理論値の84％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．71分；MS（ESIpos）：m／z＝554［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 11．41（d，1H），8．91（d，1H），8．63（d，1H），8．25−8．40（m，2H），6．81（d，1H），6．25−6．39（m，1H），5．04−5．33（m，2H），3．88−4．10（m，2H），3．63（ddd，1H），3．34−3．40（m，1H），3．19−3．29（m，1H），3．01−3．18（m，1H）．
【０３６３】
実施例61
N−［（1S）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（3S，4S）−3，4−ジヒドロキシピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化１７７】
2019524722.tif 000181
一般的手順3により、7−クロロ−N−［（1S）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例9A）20．0mg（43．6μmol）を、（3R，4S）−ピロリジン−3，4−ジオール塩酸塩7．30mg（52．0μmol）と、DMF0．2ml中DIPEA27．0μl（153μmol）の存在下で反応させた。次いで、混合物をアセトニトリル、水およびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、粗溶液を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物11．7mg（理論値の51％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．59分；MS（ESIpos）：m／z＝526［M＋H］＋。
1H−NMR（500 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．56（dd，1H），8．81（d，1H），8．61（d，1H），8．30−8．37（m，1H），8．28（d，1H），6．78（d，1H），5．02−5．32（m，2H），4．35−4．46（m，1H），4．05（br． s，1H），3．93（br． s，1H），3．62（ddd，1H），3．33−3．39（m，1H），3．19−3．28（m，1H），3．01−3．18（m，1H），1．16−1．26（m，1H），0．47−0．71（m，3H），0．29−0．39（m，1H）．
【０３６４】
実施例62
N−［（1S）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（3R，4S）−3，4−ジヒドロキシピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化１７８】
2019524722.tif 000182
一般的手順3により、7−クロロ−N−［（1S）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例9A）20．0mg（43．6μmol）を、（3R，4S）−ピロリジン−3，4−ジオール塩酸塩7．30mg（52．0μmol）と、DMF0．2ml中DIPEA27．0μl（153μmol）の存在下で反応させた。次いで、混合物をアセトニトリル、水およびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、粗溶液を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物15．9mg（理論値の69％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．64分；MS（ESIpos）：m／z＝526［M＋H］＋。
1H−NMR（500 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．55（dd，1H），8．81（s，1H），8．56−8．66（m，1H），8．30−8．38（m，1H），8．28（d，1H），6．76（d，1H），4．86−5．11（m，2H），4．40（sxt，1H），4．09−4．20（m，1H），3．96−4．08（m，1H），3．54−3．68（m，1H），3．16−3．27（m，1H），2．94−3．12（m，1H），1．16−1．27（m，1H），0．47−0．70（m，3H），0．28−0．39（m，1H）．
【０３６５】
実施例63
N−［（1S）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（3R，4R）−3，4−ジヒドロキシピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化１７９】
2019524722.tif 000183
一般的手順3により、7−クロロ−N−［（1S）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例9A）20．0mg（43．6μmol）を、（3R，4R）−ピロリジン−3，4−ジオール塩酸塩7．30mg（52．0μmol）と、DMF0．2ml中DIPEA27．0μl（153μmol）の存在下で反応させた。次いで、混合物をアセトニトリル、水およびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、粗溶液を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物18．1mg（理論値の79％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝0．86分；MS（ESIpos）：m／z＝526［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．56（dd，1H），8．81（d，1H），8．61（d，1H），8．30−8．37（m，1H），8．28（d，1H），6．78（d，1H），5．04−5．30（m，2H），4．40（sxt，1H），4．05（br． s，1H），3．88−3．98（m，1H），3．56−3．68（m，1H），3．32−3．40（m，1H），3．19−3．29（m，1H），3．02−3．18（m，1H），1．16−1．26（m，1H），0．48−0．70（m，3H），0．29−0．40（m，1H）．
【０３６６】
実施例64
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−7−（2−オキソイミダゾリジン−1−イル）−N−［（2S）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化１８０】
2019524722.tif 000184
一般的手順2により、7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−N−［（2S）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例5A）60．0mg（134μmol）を、イミダゾリジン−2−オン57．8mg（671μmol）と、80℃で、ジオキサン5ml中炭酸セシウム65．6mg（201μmol）、酢酸パラジウム1．51mg（6．72μmol）およびキサントホス7．77mg（13．4μmol）の存在下で反応させた。次いで、混合物を室温に冷却し、クロロホルム2mlおよび飽和重炭酸ナトリウム水溶液0．5mlで洗浄した。有機相を硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去した。粗生成物を少量の水、アセトニトリルおよびギ酸に溶解し、分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物19．8mg（理論値の30％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝0．95分；MS（ESIpos）：m／z＝497［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．21（d，1H），8．99（s，1H），8．64（d，1H），8．56（d，1H），8．44（d，1H），8．33（ddd，1H），7．67（s，1H），4．69−4．84（m，1H），3．52−3．72（m，2H），3．33−3．43（m，2H），1．82−1．96（m，1H），1．59−1．74（m，1H），0．92−1．03（m，3H）．
【０３６７】
実施例65
N−［（1R）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−7−（2−オキソイミダゾリジン−1−イル）−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化１８１】
2019524722.tif 000185
一般的手順2により、7−クロロ−N−［（1R）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例8A）60．0mg（131μmol）を、イミダゾリジン−2−オン56．3mg（654μmol）と、100℃で、ジオキサン5ml中炭酸セシウム63．9mg（196μmol）、酢酸パラジウム1．47mg（6．54μmol）およびキサントホス7．57mg（13．1μmol）の存在下で反応させた。次いで、混合物を室温に冷却し、濃縮した。粗生成物を少量の水、アセトニトリルおよびギ酸に溶解し、分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物30．3mg（理論値の46％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．82分；MS（ESIpos）：m／z＝509［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．34（d，1H），8．98（s，1H），8．63（d，1H），8．56（d，1H），8．44（d，1H），8．28−8．37（m，1H），7．67（s，1H），4．35−4．49（m，1H），3．53−3．71（m，2H），3．33−3．42（m，2H），1．17−1．28（m，1H），0．49−0．72（m，3H），0．29−0．41（m，1H）．
【０３６８】
実施例66
N−（2，6−ジクロロフェニル）−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（3R，4S）−3，4−ジヒドロキシピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化１８２】
2019524722.tif 000186
一般的手順2により、7−クロロ−N−（2，6−ジクロロフェニル）−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例11B）60．0mg（125μmol）を、（3R，4S）−ピロリジン−3，4−ジオール塩酸塩20．9mg（149μmol）と、80℃で、ジオキサン0．9ml中炭酸カリウム25．8mg（187μmol）、酢酸パラジウム5．59mg（24．9μmol）およびキサントホス14．4mg（24．9μmol）の存在下で反応させた。次いで、混合物を室温に冷却し、次いで、1M塩酸水溶液で酸性化し、N−アセチルシステイン100mgを添加し、混合物を15分間撹拌した。次いで、混合物を飽和重炭酸ナトリウム水溶液15mlおよび酢酸エチル20mlで希釈し、相を分離した。水相を酢酸エチルで3回抽出した。合わせた有機相を硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去した。粗生成物をアセトニトリル3mlおよびDMSO1mlに溶解し、分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物7．10mg（理論値の10％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝0．88分；MS（ESIpos）：m／z＝548［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 11．92（s，1H），8．89（s，1H），8．62（br． s，1H），8．33（d，2H），7．59（d，2H），7．34−7．41（m，1H），6．78（d，1H），4．89−5．13（m，2H），3．98−4．20（m，2H），3．48−3．69（m，2H），2．96−3．21（m，2H）．
【０３６９】
実施例67
N−（2，6−ジクロロフェニル）−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（3R，4R）−3，4−ジヒドロキシピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化１８３】
2019524722.tif 000187
一般的手順2により、7−クロロ−N−（2，6−ジクロロフェニル）−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例11B）60．0mg（125μmol）を、（3R，4R）−ピロリジン−3，4−ジオール塩酸塩20．9mg（149μmol）と、80℃で、ジオキサン0．9ml中炭酸カリウム25．8mg（187μmol）、酢酸パラジウム5．59mg（24．9μmol）およびキサントホス14．4mg（24．9μmol）の存在下で反応させた。次いで、混合物を室温に冷却し、次いで、1M塩酸水溶液で酸性化し、N−アセチルシステイン100mgを添加し、混合物を15分間撹拌した。次いで、混合物を飽和重炭酸ナトリウム水溶液15mlおよび酢酸エチル20mlで希釈し、相を分離した。水相を酢酸エチルで3回抽出した。合わせた有機相を硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去した。粗生成物をアセトニトリル3mlおよびDMSO1mlに溶解し、分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物6．70mg（理論値の10％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．58分；MS（ESIpos）：m／z＝548［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 11．94（s，1H），8．89（d，1H），8．62（d，1H），8．34（d，2H），7．59（d，2H），7．34−7．41（m，1H），6．80（d，1H），5．05−5．32（m，2H），3．90−4．10（m，2H），3．58−3．70（m，1H），3．36−3．41（m，1H），3．04−3．27（m，2H）．
【０３７０】
実施例68
N−（2，6−ジクロロフェニル）−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（3S，4S）−3，4−ジヒドロキシピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化１８４】
2019524722.tif 000188
一般的手順3により、7−クロロ−N−（2，6−ジクロロフェニル）−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例11B）35．9mg（74．5μmol）を、（3R，4S）−ピロリジン−3，4−ジオール塩酸塩12．5mg（89．4μmol）と、DMF0．37ml中DIPEA45．0μl（261μmol）の存在下で反応させた。次いで、混合物をアセトニトリル、水およびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、粗溶液を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物19．6mg（理論値の48％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝0．89分；MS（ESIpos）：m／z＝548［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 11．94（s，1H），8．89（d，1H），8．62（d，1H），8．34（d，2H），7．59（d，2H），7．38（dd，1H），6．80（d，1H），5．04−5．33（m，2H），3．90−4．13（m，2H），3．57−3．71（m，1H），3．36−3．43（m，1H），3．04−3．28（m，2H）．
【０３７１】
実施例69
N−（2，6−ジクロロフェニル）−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［3−ヒドロキシ−3−メチルピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ラセミ体）
【化１８５】
2019524722.tif 000189
一般的手順2により、7−クロロ−N−（2，6−ジクロロフェニル）−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例11B）100mg（208μmol）を、3−メチルピロリジン−3−オール塩酸塩（ラセミ体）34．3mg（249μmol）と、80℃で、ジオキサン1．6ml中炭酸カリウム43．0mg（311μmol）、酢酸パラジウム9．32mg（41．5μmol）およびキサントホス24．0mg（41．5μmol）の存在下で反応させた。次いで、混合物を室温に冷却し、次いで、1M塩酸水溶液で酸性化し、N−アセチルシステイン100mgを添加し、混合物を15分間撹拌した。次いで、混合物を飽和重炭酸ナトリウム水溶液15mlおよび酢酸エチル20mlで希釈し、相を分離した。水相を酢酸エチルで3回抽出した。合わせた有機相を硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去した。粗生成物をアセトニトリル3mlおよびDMSO1mlに溶解し、分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって2回精製した。次いで、生成物画分を合わせ、濃縮し、粗生成物を順相クロマトグラフィー（酢酸エチル／シクロヘキサン勾配）によって精製すると、標記化合物16．9mg（理論値の15％；純度100％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝1．04分；MS（ESIpos）：m／z＝546［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 11．94（s，1H），8．88（s，1H），8．61（br． d，1H），8．33（t，2H），7．59（d，2H），7．33−7．43（m，1H），6．70−6．85（m，1H），4．74−4．96（m，1H），3．51−3．64（m，1H），3．36−3．45（m，1H），2．93−3．25（m，1H），1．68−2．00（m，2H），1．12−1．38（m，4H）．
【０３７２】
実施例70
7−［（2，2−ジフルオロエチル）アミノ］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−N−［（2R）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化１８６】
2019524722.tif 000190
一般的手順3により、7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−N−［（2R）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例4C）25．0mg（56．0μmol）を、2，2−ジフルオロエタンアミン5．44mg（67．0μmol）と、一晩、DMF0．4ml中DIPEA34．0μl（196μmol）の存在下で反応させた。次いで、さらなる2，2−ジフルオロエタンアミンおよびDIPEAを添加し、混合物を50℃で3時間撹拌した。粗生成物をアセトニトリル、水およびギ酸で溶解し、Milliporeフィルタを通して濾過し、分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物21．9mg（理論値の80％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．96分；MS（ESIpos）：m／z＝492［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．38（d，1H），8．85（s，1H），8．63（d，1H），8．30−8．44（m，2H），8．26（d，1H），6．82（d，1H），5．62−6．00（m，1H），4．67−4．83（m，1H），3．36−3．55（m，2H），1．81−1．95（m，1H），1．56−1．72（m，1H），0．91−1．03（m，3H）．
【０３７３】
実施例71
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−（モルホリン−4−イル）−4−オキソ−N−［（2R）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化１８７】
2019524722.tif 000191
一般的手順3により、7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−N−［（2R）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例4C）25．0mg（56．0μmol）を、モルホリン6．0μl（67．0μmol）と、DMF0．4ml中DIPEA34．0μl（196μmol）の存在下で反応させた。次いで、混合物をアセトニトリル、水およびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、粗溶液を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物22．9mg（理論値の80％、純度97％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．98分；MS（ESIpos）：m／z＝498［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．35（d，1H），8．84（s，1H），8．62（d，1H），8．25−8．38（m，2H），7．13（d，1H），4．66−4．83（m，1H），3．54−3．66（m，4H），3．40−3．53（m，4H），1．81−1．96（m，1H），1．56−1．72（m，1H），0．89−1．03（m，3H）．
【０３７４】
実施例72
7−（3，3−ジフルオロピペリジン−1−イル）−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−N−［（2R）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化１８８】
2019524722.tif 000192
一般的手順3により、7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−N−［（2R）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例4C）25．0mg（56．0μmol）を、3，3−ジフルオロピペリジン塩酸塩10．6mg（67．1μmol）と、DMF0．4ml中DIPEA34．0μl（196μmol）の存在下で反応させた。次いで、混合物をアセトニトリル、水およびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、粗溶液を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物27．0mg（理論値の91％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝2．16分；MS（ESIpos）：m／z＝532［M＋H］＋
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．33（d，1H），8．86（s，1H），8．64（d，1H），8．28−8．44（m，2H），7．26（d，1H），4．67−4．83（m，1H），3．78−3．99（m，2H），3．50−3．63（m，2H），1．99−2．14（m，2H），1．82−1．95（m，1H），1．57−1．72（m，3H），0．91−1．04（m，3H）．
【０３７５】
実施例73
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−N−［（2R）−1，1，1−トリフルオロ−3，3−ジメチルブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化１８９】
2019524722.tif 000193
一般的手順1により、1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例24A）70．0mg（174μmol）を、（2R）−1，1，1−トリフルオロ−3，3−ジメチルブタン−2−アミン32．4mg（209μmol）と、DMF0．7ml中HATU79．4mg（209μmol）およびDIPEA91．0μl（522μmol）の存在下で反応させた。次いで、反応混合物をアセトニトリル、水およびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、粗溶液を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物76．7mg（理論値の82％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．96分；MS（ESIpos）：m／z＝540［M＋H］＋。
1H−NMR（500 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．48（br． d，1H），9．07（s，1H），8．74（d，1H），8．66（br． s，1H），8．54（br． dd，1H），8．39（ddd，1H），5．23−5．40（m，1H），4．66（quint，1H），4．30（br． s，1H），3．65−3．78（m，1H），3．45−3．57（m，1H），2．89− 3．02（m，1H），2．34−2．43（m，1H），1．10（br． s，9H）．
【０３７６】
実施例74
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−N−［（2R）−1，1，1−トリフルオロ−4−メチルペンタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化１９０】
2019524722.tif 000194
一般的手順1により、1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例24A）70．0mg（174μmol）を、（2R）−1，1，1−トリフルオロ−4−メチルペンタン−2−アミン32．4mg（209μmol）と、DMF0．7ml中HATU79．4mg（209μmol）およびDIPEA91．0μl（522μmol）の存在下で反応させた。反応混合物をアセトニトリル、水およびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、粗溶液を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物78．0mg（理論値の83％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝2．01分；MS（ESIpos）：m／z＝540［M＋H］＋。
1H−NMR（500 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．10（br． d，1H），9．06（s，1H），8．65−8．72（m，2H），8．51−8．57（m，1H），8．39（ddd，1H），5．24−5．40（m，1H），4．81−4．90（m，1H），4．29（br． s，1H），3．64−3．78（m，1H），3．46−3．56（m，1H），2．89−3．02（m，1H），2．34−2．43（m，1H），1．65−1．74（m，2H），1．54−1．64（m，1H），0．95（br． dd，3H），0．90（br． t，3H）．
【０３７７】
実施例75
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−N−［（2S）−1，1，1−トリフルオロ−4−メチルペンタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化１９１】
2019524722.tif 000195
一般的手順1により、1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例24A）70．0mg（174μmol）を、（2S）−1，1，1−トリフルオロ−4−メチルペンタン−2−アミン32．4mg（209μmol）と、DMF0．7ml中HATU79．4mg（209μmol）およびDIPEA91．0μl（522μmol）の存在下で反応させた。反応混合物をアセトニトリル、水およびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、粗溶液を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物77．1mg（理論値の82％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝2．02分；MS（ESIpos）：m／z＝540［M＋H］＋。
1H−NMR（500 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．10（br． dd，1H），9．06（s，1H），8．71（d，1H），8．66（br． dd，1H），8．54（br． dd，1H），8．36−8．41（m，1H），5．23−5．40（m，1H），4．81−4．90（m，1H），4．29（br． s，1H），3．65−3．78（m，1H），3．45−3．56（m，1H），2．89−3．02（m，1H），2．34−2．43（m，1H），1．65−1．74（m，2H），1．54−1．62（m，1H），0．95（br． dd，3H），0．89（br． t，3H）．
【０３７８】
実施例76
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−N−［3，3，4，4，4−ペンタフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー混合物）
【化１９２】
2019524722.tif 000196
一般的手順1により、1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例24A）125．0mg（311μmol）を、（2S）−3，3，4，4，4−ペンタフルオロブタン−2−アミン塩酸塩（実施例28B、ラセミ体）74．4mg（373μmol）と、DMF1．25ml中HATU142mg（373μmol）およびDIPEA0．22ml（1．24mmol）の存在下で反応させた。反応混合物をアセトニトリル、水およびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、粗溶液を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物119mg（理論値の70％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝0．99分；MS（ESIpos）：m／z＝548［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．24（d，1H），9．06（s，1H），8．71（d，1H），8．64−8．68（m，1H），8．50−8．58（m，1H），8．35−8．42（m，1H），5．23−5．40（m，1H），4．98−5．12（m，1H），4．29（br． s，1H），3．64−3．78（m，1H），3．44−3．56（m，1H），2．88−3．02（m，1H），2．33−2．43（m，1H），1．42（br． d，3H）．
【０３７９】
標記化合物（ジアステレオマー混合物）107mgをキラルHPLC（分取HPLC：カラム：Daicel Chiralpak OX−H 5μm 250×20mm；移動相：50％イソヘキサン、50％イソプロパノール；温度：50℃；流量15ml／分；UV検出：220nm）によってジアステレオマーに分離した。
【０３８０】
これにより、（カラムからの溶出の順序で）実施例77（ジアステレオマー1、99％de）Rt＝5．29分37mg（理論値の22％、純度100％）および実施例78（ジアステレオマー2、99％de）Rt＝6．21分42mg（理論値の25％、純度100％）が得られた。
［分析HPLC：カラム：Daicel Chiralpak OX−H 5μm 250×4．6mm；移動相：50％イソヘキサン、50％イソプロパノール；温度：50℃；流量：1．0ml／分；UV検出：220nm］
【０３８１】
実施例77
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−N−［3，3，4，4，4−ペンタフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー1）
LC−MS（方法2）：Rt＝1．78分；MS（ESIpos）：m／z＝548［M＋H］＋。
1H NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．24（br d，1H），9．04−9．07（m，1H），8．71（d，1H），8．64−8．68（m，1H），8．54（br t，1H），8．35−8．42（m，1H），5．22−5．39（m，1H），4．98−5．12（m，1H），4．26−4．32（m，1H），3．65−3．78（m，1H），3．44−3．56（m，1H），2．89−3．02（m，1H），2．33−2．42（m，1H），1．42（br d，3H）．
【０３８２】
実施例78
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−N−［3，3，4，4，4−ペンタフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー2）
LC−MS（方法2）：Rt＝1．77分；MS（ESIpos）：m／z＝548［M＋H］＋。
1H NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．24（d，1H），9．06（s，1H），8．71（d，1H），8．64−8．68（m，1H），8．54（br t，1H），8．36−8．42（m，1H），5．24−5．41（m，1H），4．99−5．13（m，1H），4．26−4．32（m，1H），3．64−3．79（m，1H），3．44−3．57（m，1H），2．87−3．02（m，1H），2．34−2．43（m，1H），1．41（br d，3H）．
【０３８３】
実施例79
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−N−［1−（トリフルオロメチル）シクロペンチル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化１９３】
2019524722.tif 000197
一般的手順1により、1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例24A）70．0mg（174μmol）を、1−（トリフルオロメチル）シクロペンタンアミン塩酸塩39．6mg（209μmol）と、DMF0．7ml中HATU79．4mg（209μmol）およびDIPEA121μl（696μmol）の存在下で反応させた。反応混合物をアセトニトリル、水およびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、粗溶液を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物77．8mg（理論値の83％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．92分；MS（ESIpos）：m／z＝538［M＋H］＋。
1H−NMR（500 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．20（s，1H），9．01（s，1H），8．70（d，1H），8．64−8．68（m，1H），8．50−8．56（m，1H），8．35−8．41（m，1H），5．23−5．40（m，1H），4．29（br． s，1H），3．64−3．78（m，1H），3．45−3．56（m，1H），2．88−3．02（m，1H），2．33−2．45（m，3H），2．02−2．11（m，2H），1．70−1．85（m，4H）．
【０３８４】
実施例80
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−N−（4，4，4−トリフルオロ−2−メチルブタン−2−イル）−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化１９４】
2019524722.tif 000198
一般的手順1により、1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例24A）50．0mg（124μmol）を、4，4，4−トリフルオロ−2−メチルブタン−2−アミン塩酸塩26．5mg（149μmol）と、DMF0．48ml中HATU56．7mg（149μmol）およびDIPEA65．0μl（373μmol）の存在下で反応させた。反応混合物をアセトニトリル、水およびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、粗溶液を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物33．8mg（理論値の52％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．76分；MS（ESIpos）：m／z＝526［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 9．90（s，1H），8．98（s，1H），8．69（d，1H），8．64−8．67（m，1H），8．49−8．56（m，1H），8．35−8．41（m，1H），5．37（br． d，0．5H），5．25（br． d，0．5H），4．26−4．32（m，1H），3．65−3．78（m，1H），3．44−3．57（m，1H），2．88−3．02（m，3H），2．34−2．43（m，1H），1．50（s，6H）．
【０３８５】
実施例81
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（3R，4R）−3，4−ジヒドロキシピロリジン−1−イル］−4−オキソ−N−［（2R）−1，1，1−トリフルオロ−4−メチルペンタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化１９５】
2019524722.tif 000199
一般的手順1により、1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（3R，4R）−3，4−ジヒドロキシピロリジン−1−イル−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例23B）30．0mg（74．2μmol）を、（2R）−1，1，1−トリフルオロ−4−メチルペンタン−2−アミン13．8mg（89．0μmol）と、DMF0．3ml中HATU33．9mg（89．0μmol）およびDIPEA39．0μl（223μmol）の存在下で反応させた。反応混合物をアセトニトリル、水およびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、粗溶液を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物27．6mg（理論値の69％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．80分；MS（ESIpos）：m／z＝542［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．41（dd，1H），8．82（br． s，1H），8．61（d，1H），8．29−8．36（m，1H），8．27（d，1H），6．78（d，1H），5．27（d，0．5H），5．19（t，1H），5．07（d，0．5H），4．77−4．89（m，1H），4．05（br． s，1H），3．93（br． s，1H），3．57−3．67（m，1H），3．33−3．39（m，1H），3．19−3．29（m，1H），3．03−3．17（m，1H），1．62−1．72（m，2H），1．52−1．62（m，1H），0．86−0．97（m，6H）．
【０３８６】
実施例82
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（3R，4R）−3，4−ジヒドロキシピロリジン−1−イル］−4−オキソ−N−［（2S）−1，1，1−トリフルオロ−4−メチルペンタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化１９６】
2019524722.tif 000200
一般的手順1により、1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（3R，4R）−3，4−ジヒドロキシピロリジン−1−イル−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例23B）30．0mg（74．2μmol）を、（2S）−1，1，1−トリフルオロ−4−メチルペンタン−2−アミン13．8mg（89．0μmol）と、DMF0．3ml中HATU33．9mg（89．0μmol）およびDIPEA39．0μl（223μmol）の存在下で反応させた。反応混合物をアセトニトリル、水およびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、粗溶液を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物26．4mg（理論値の66％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．80分；MS（ESIpos）：m／z＝542［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．42（dd，1H），8．82（d，1H），8．61（br． t，1H），8．29−8．36（m，1H），8．27（d，1H），6．78（d，1H），4．99−5．36（m，2H），4．78−4．89（m，1H），4．02−4．09（m，1H），3．89−3．97（m，1H），3．48−3．70（m，1H），3．19−3．39（m，1H，unter dem Wasser Signal），3．02−3．17（m，1H），1．62−1．72（m，2H），1．52−1．61（m，1H），1．03（br． d，1H），0．86−0．98（m，6H）．
【０３８７】
実施例83
N−［1−（2−クロロフェニル）−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（3R，4R）−3，4−ジヒドロキシピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー混合物）
【化１９７】
2019524722.tif 000201
一般的手順1により、1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（3R，4R）−3，4−ジヒドロキシピロリジン−1−イル−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例23B）30．0mg（74．2μmol）を、（1S）−1−（2−クロロフェニル）−2，2，2−トリフルオロエタンアミン18．7mg（89．0μmol）と、DMF0．3ml中HATU33．9mg（89．0μmol）およびDIPEA39．0μl（223μmol）の存在下で反応させた。反応混合物をアセトニトリル、水およびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、粗溶液を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物32．5mg（理論値の74％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．88分；MS（ESIpos）：m／z＝596［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 11．52−11．58（m，1H），8．79−8．86（m，1H），8．57−8．65（m，1H），8．26−8．38（m，2H），7．45−7．67（m，4H），6．80（d，1H），6．40−6．50（m，1H），5．24−5．30（m，0．5H），5．15−5．23（m，1H），5．03−5．10（m，0．5H），4．05（br． s，1H），3．93（br． s，1H），3．56−3．68（m，1H），3．34−3．40（m，1H），3．19−3．28（m，1H），3．01−3．18（m，1H）．
【０３８８】
標記化合物（ジアステレオマー混合物）28．7mgをキラルHPLC（分取HPLC：カラム：Daicel Chiralcel OX−H 5μm 250×20mm；移動相：30％n−ヘプタン、70％エタノール；温度：25℃；流量15ml／分；UV検出：210nm）によってジアステレオマーに分離した。
【０３８９】
これにより、カラムからの溶出の順序で、実施例84（99％de）Rt＝1．19分13．8mg（理論値の31％、純度100％）および実施例85（99％de）Rt＝3．14分14．4mg（理論値の33％、純度100％）が得られた。
［分析HPLC：カラム：Daicel Chiralpak OX−3 3μm 50×4．6mm；移動相：50％n−ヘプタン、50％エタノール；温度：23℃；流量：1．0ml／分；UV検出：220nm］
【０３９０】
実施例84
N−［1−（2−クロロフェニル）−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（3R，4R）−3，4−ジヒドロキシピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー1）
LC−MS（方法2）：Rt＝1．86分；MS（ESIpos）：m／z＝596［M＋H］＋。
1H NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 11．53−11．58（m，1H），8．83（s，1H），8．61（dd，1H），8．30−8．37（m，2H），7．47−7．65（m，4H），6．80（d，1H），6．40−6．49（m，1H），5．04−5．30（m，2H），4．03−4．08（m，1H），3．90−3．95（m，1H），3．57−3．67（m，1H），3．33−3．39（m，1H），3．18−3．29（m，1H），3．03−3．17（m，1H）．
【０３９１】
実施例85
N−［1−（2−クロロフェニル）−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（3R，4R）−3，4−ジヒドロキシピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー2）
LC−MS（方法2）：Rt＝1．86分；MS（ESIpos）：m／z＝596［M＋H］＋。
1H NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 11．56（d，1H），8．83（d，1H），8．61（dd，1H），8．30−8．36（m，2H），7．48−7．65（m，4H），6．80（d，1H），6．41−6．49（m，1H），5．28（d，0．5H），5．19（d，1H），5．06（d，0．5H），4．03−4．07（m，1H），3．90−3．96（m，1H），3．57−3．67（m，1H），3．33−3．40（m，1H），3．20−3．30（m，1H），3．02−3．16（m，1H）．
【０３９２】
実施例86
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（3R，4R）−3，4−ジヒドロキシピロリジン−1−イル］−4−オキソ−N−［（2R）−1，1，1−トリフルオロ−3，3−ジメチルブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化１９８】
2019524722.tif 000202
一般的手順1により、1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（3R，4R）−3，4−ジヒドロキシピロリジン−1−イル−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例23B）30．0mg（74．2μmol）を、（2R）−1，1，1−トリフルオロ−3，3−ジメチルペンタン−2−アミン13．8mg（89．0μmol）と、DMF0．3ml中HATU33．9mg（89．0μmol）およびDIPEA39．0μl（223μmol）の存在下で反応させた。反応混合物をアセトニトリル、水およびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、粗溶液を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物26．5mg（理論値の66％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．74分；MS（ESIpos）：m／z＝542［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．77（dd，1H），8．83（d，1H），8．61（d，1H），8．29−8．36（m，2H），6．78（d，1H），5．24−5．31（m，0．5H），5．20（br． s，1H），5．04−5．13（m，0．5H），4．58−4．68（m，1H），4．05（br． s，1H），3．93（br． s，1H），3．56−3．68（m，1H），3．35−3．41（m，1H），3．19−3．28（m，1H），3．03−3．17（m，1H），1．09（br． s，9H）．
【０３９３】
実施例87
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（3R，4R）−3，4−ジヒドロキシピロリジン−1−イル］−4−オキソ−N−［1−（トリフルオロメチル）シクロペンチル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化１９９】
2019524722.tif 000203
一般的手順1により、1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（3R，4R）−3，4−ジヒドロキシピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例23B）30．0mg（74．2μmol）を、1−（トリフルオロメチル）シクロペンタンアミン塩酸塩16．9mg（89．0μmol）と、DMF0．3ml中HATU33．9mg（89．0μmol）およびDIPEA39．0μl（223μmol）の存在下で反応させた。反応混合物をアセトニトリル、水およびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、粗溶液を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって2回精製すると、標記化合物18．3mg（理論値の46％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．72分；MS（ESIpos）：m／z＝540［M＋H］＋。
1H NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．50（s，1H），8．77（d，1H），8．61（d，1H），8．33（td，1H），8．27（d，1H），6．77（d，1H），5．27（d，0．5H），5．16−5．21（m，1H），5．06（d，0．5H），4．05（br． s，1H），3．90−3．95（m，1H），3．57−3．66（m，1H），3．33−3．38（m，1H），3．18−3．29（m，1H），3．03−3．17（m，1H），2．35−2．44（m，2H），2．00−2．09（m，2H），1．69−1．85（m，4H）．
【０３９４】
実施例88
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（3R，4R）−3，4−ジヒドロキシピロリジン−1−イル］−4−オキソ−N−［3，3，4，4，4−ペンタフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー混合物）
【化２００】
2019524722.tif 000204
一般的手順1により、1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（3R，4R）−3，4−ジヒドロキシピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例23B）30．0mg（74．2μmol）を、（2S）−3，3，4，4，4−ペンタフルオロブタン−2−アミン塩酸塩（実施例28B、ラセミ体）17．8mg（89．0μmol）と、DMF0．3ml中HATU33．9mg（89．0μmol）およびDIPEA52．0μl（297μmol）の存在下で反応させた。反応混合物をアセトニトリル、水およびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、粗溶液を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物34．3mg（理論値の84％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．63分；MS（ESIpos）：m／z＝550［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．55（br． d，1H），8．82（br． t，1H），8．59−8．64（m，1H），8．29−8．37（m，1H），8．27（d，1H），6．77（d，1H），5．23−5．30（m，0．5H），5．15−5．23（m，1H），5．06−5．10（m，0．5H），4．96−5．06（m，1H），4．05（br． s，1H），3．93（br． s，1H），3．56−3．68（m，1H），3．33−3．40（m，1H），3．19−3．29（m，1H），3．02−3．18（m，1H），1．39（br． d，3H）．
【０３９５】
標記化合物（ジアステレオマー混合物）17．0mgをキラルHPLC（分取HPLC：カラム：Daicel Chiralcel OX−H 5μm 250×20mm；移動相：70％n−ヘプタン、30％エタノール＋0．2％DEA；温度：25℃；流量15ml／分；UV検出：210nm）によってジアステレオマーに分離した。
【０３９６】
これにより、（カラムからの溶出の順序で）ジアステレオマー1（実施例89）（99％de）Rt＝6．13分6．20mg（理論値の15％、純度100％）およびジアステレオマー2（実施例90）（99％de）Rt＝7．91分7．30mg（理論値の18％、純度100％）が得られた。
［分析HPLC：カラム：Daicel Chiralpak OX−3 3μm 50×4．6mm；移動相：80％n−ヘプタン、20％エタノール＋0．2％DEA；流量：1．0ml／分；UV検出：220nm］
【０３９７】
実施例89
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（3R，4R）−3，4−ジヒドロキシピロリジン−1−イル］−4−オキソ−N−［3，3，4，4，4−ペンタフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー1）
LC−MS（方法1）：Rt＝0．90分；MS（ESIpos）：m／z＝550［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．56（d，1H），8．82（d，1H），8．61（d，1H），8．29−8．36（m，1H），8．27（d，1H），6．77（d，1H），5．25−5．31（m，0．5H），5．19（d，1H），4．96−5．10（m，1．5H），4．05（br． s，1H），3．93（br． s，1H），3．56−3．67（m，1H），3．34−3．43（m，1H），3．19−3．30（m，1H），3．02−3．17（m，1H），1．40（br． d，3H）．
【０３９８】
実施例90
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（3R，4R）−3，4−ジヒドロキシピロリジン−1−イル］−4−オキソ−N−［3，3，4，4，4−ペンタフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー2）
LC−MS（方法1）：Rt＝0．90分；MS（ESIpos）：m／z＝550［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．56（br． d，1H），8．82（s，1H），8．61（t，1H），8．30−8．36（m，1H），8．27（d，1H），6．78（d，1H），5．23−5．31（m，0．5H），5．16−5．23（m，1H），4．95−5．11（m，1．5H），4．05（br． s，1H），3．89−3．96（m，1H），3．56−3．68（m，1H），3．34−3．43（m，1H），3．18−3．29（m，1H），3．03−3．17（m，1H），1．39（br． d，3H）．
【０３９９】
実施例91
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（3R，4R）−3，4−ジヒドロキシピロリジン−1−イル］−4−オキソ−N−（4，4，4−トリフルオロ−2−メチルブタン−2−イル）−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化２０１】
2019524722.tif 000205
一般的手順1により、1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（3R，4R）−3，4−ジヒドロキシピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例23B）50．0mg（124μmol）を、4，4，4−トリフルオロ−2−メチルブタン−2−アミン塩酸塩26．4mg（148μmol）と、DMF0．5ml中HATU56．4mg（148μmol）およびDIPEA65．0μl（371μmol）の存在下で反応させた。反応混合物をアセトニトリル、水およびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、粗溶液を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物36．9mg（理論値の57％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．58分；MS（ESIpos）：m／z＝528［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．16（br． s，1H），8．73（d，1H），8．61（d，1H），8．29−8．35（m，1H），8．26（d，1H），6．75（d，1H），5．01−5．33（m，2H），4．00−4．09（m，1H），3．87−3．96（m，1H），3．56−3．66（m，1H），3．35−3．45（m，1H），3．02−3．23（m，2H），2．89−3．01（m，2H），1．48（br． s，6H）．
【０４００】
実施例92
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−N−［1，1，1，2，2−ペンタフルオロペンタン−3−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー混合物）
【化２０２】
2019524722.tif 000206
一般的手順1により、1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例24A）100mg（249μmol）を、（3S）−1，1，1，2，2−ペンタフルオロペンタン−3−アミン塩酸塩（実施例14B、ラセミ体）63．7mg（298μmol）と、DMF1ml中HATU113mg（298μmol）およびDIPEA173μl（994μmol）の存在下で反応させた。反応混合物をアセトニトリル、水およびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、粗溶液を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物97．4mg（理論値の70％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．88分；MS（ESIpos）：m／z＝562［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．16（d，1H），9．06（s，1H），8．72（d，1H），8．63−8．69（m，1H），8．51−8．58（m，1H），8．39（ddd，1H），5．31−5．41（m，0．5H），5．26（br． s，0．5H），4．83−4．97（m，1H），4．29（br． s，1H），3．65−3．79（m，1H），3．44−3．57（m，1H），2．88−3．03（m，1H），2．32−2．44（m，1H），1．88−1．99（m，1H），1．62−1．74（m，1H），0．94−1．01（m，3H）．
【０４０１】
標記化合物（ジアステレオマー混合物）83．0mgをキラルHPLC（分取HPLC：カラム：Daicel Chiralpak IE 5μm 250×20mm；移動相：70％n−ヘプタン、30％イソプロパノール；温度：35℃；流量15ml／分；UV検出：220nm）によってジアステレオマーに分離した。
【０４０２】
これにより、（カラムからの溶出の順序で）ジアステレオマー1（実施例93）（98．9％de）Rt＝9．56分34．0mg（理論値の24％、純度100％）およびジアステレオマー2（実施例94）（95．8％de）Rt＝13．40分37．0mg（理論値の27％、純度100％）が得られた。
［分析HPLC：カラム：Daicel Chiralpak IE 5μm 250×4．6mm；移動相：60％イソヘキサン、40％イソプロパノール；温度：35℃；流量：1．0ml／分；UV検出：220nm］
【０４０３】
実施例93
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−N−［1，1，1，2，2−ペンタフルオロペンタン−3−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー1）
LC−MS（方法2）：Rt＝1．90分；MS（ESIpos）：m／z＝562［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．16（d，1H），9．06（s，1H），8．72（d，1H），8．63−8．68（m，1H），8．54（br． t，1H），8．39（ddd，1H），5．38（br． d，0．5H），5．26（br． d，0．5H），4．83−4．97（m，1H），4．29（br． s，1H），3．63−3．78（m，1H），3．43−3．57（m，1H），2．87−3．03（m，1H），2．34−2．44（m，1H），1．88−1．99（m，1H），1．62−1．74（m，1H），0．92−1．01（m，3H）．
【０４０４】
実施例94
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−N−［1，1，1，2，2−ペンタフルオロペンタン−3−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー2）
LC−MS（方法2）：Rt＝1．90分；MS（ESIpos）：m／z＝562［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．16（br． d，1H），9．06（br． d，1H），8．72（d，1H），8．66（br． s，1H），8．54（br． t，1H），8．39（br． t，1H），5．38（br． d，0．5H），5．26（br． d，0．5H），4．83−4．97（m，1H），4．26−4．32（m，1H），3．64−3．79（m，1H），3．45−3．57（m，1H），2．88−3．03（m，1H），2．34−2．43（m，1H），1．88−1．99（m，1H），1．62−1．74（m，1H），0．93−1．02（m，3H）．
【０４０５】
実施例95
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（3R，4R）−3，4−ジヒドロキシピロリジン−1−イル］−4−オキソ−N−［1，1，1，2，2−ペンタフルオロペンタン−3−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー混合物）
【化２０３】
2019524722.tif 000207
一般的手順3により、7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−N−［（3S）−1，1，1，2，2−ペンタフルオロペンタン−3−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例15A、ラセミ体）50．0mg（101μmol）を、（3R，4R）−ピロリジン−3，4−ジオール塩酸塩12．5mg（121μmol）と、DMF0．5ml中DIPEA61．0μl（352μmol）の存在下で反応させた。反応混合物をアセトニトリル、水およびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、粗溶液を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物51．3mg（理論値の90％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝0．97分；MS（ESIpos）：m／z＝564［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．47（br． d，1H），8．81（br． s，1H），8．61（br． s，1H），8．22−8．41（m，2H），6．78（br． d，1H），5．02−5．33（m，2H），4．79−4．98（m，1H），4．00−4．12（m，1H），3．86−3．98（m，1H），3．55−3．69（m，1H），3．00−3．26（m，2H），1．83−2．01（m，1H），1．57−1．75（m，1H），0．87−1．06（m，3H）．
【０４０６】
標記化合物（ジアステレオマー混合物）37．0mgをキラルHPLC（分取HPLC：カラム：Daicel Chiralcel OX−H 5μm 250×20mm；移動相：80％n−ヘプタン、20％エタノール；温度：35℃；流量15ml／分；UV検出：220nm）によってジアステレオマーに分離した。
【０４０７】
これにより、カラムからの溶出の順序で、実施例96（99．9％de）Rt＝5．45分16．0mg（理論値の28％、純度100％）および実施例97（99．9％de）Rt＝6．39分16．0mg（理論値の28％、純度100％）が得られた。
［分析HPLC：カラム：Daicel Chiralcel OX−H 5μm 250×4．6mm；移動相：80％イソヘキサン、20％エタノール；温度：30℃；流量：1．0ml／分；UV検出：220nm］
【０４０８】
実施例96
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（3R，4R）−3，4−ジヒドロキシピロリジン−1−イル］−4−オキソ−N−［1，1，1，2，2−ペンタフルオロペンタン−3−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー1）
LC−MS（方法2）：Rt＝1．72分；MS（ESIpos）：m／z＝564［M＋H］＋。
1H NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．47（d，1H），8．82（d，1H），8．61（d，1H），8．30−8．36（m，1H），8．28（d，1H），6．78（d，1H），5．28（br d，0．5H），5．15−5．23（m，1H），5．07（br d，0．5H），4．80−4．94（m，1H），4．00−4．08（m，1H），3．87−3．97（m，1H），3．55−3．67（m，1H），3．33−3．40（m，1H），3．19−3．29（m，1H），3．03−3．17（m，1H），1．86−1．98（m，1H），1．59−1．72（m，1H），0．93−1．00（m，3H）．
【０４０９】
実施例97
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（3R，4R）−3，4−ジヒドロキシピロリジン−1−イル］−4−オキソ−N−［1，1，1，2，2−ペンタフルオロペンタン−3−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー2）
LC−MS（MCW−FT−MS−M1−方法2）：Rt＝1．72分；MS（ESIpos）：m／z＝564［M＋H］＋。
1H NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．47（d，1H），8．82（s，1H），8．61（t，1H），8．30−8．37（m，1H），8．28（d，1H），6．78（d，1H），5．28（br d，0．5H），5．19（br t，1H），5．07（br d，0．5H），4．80−4．94（m，1H），4．05（br s，1H），3．93（br s，1H），3．56−3．68（m，1H），3．33−3．39（m，1H），3．19−3．29（m，1H），3．02−3．18（m，1H），1．86−1．98（m，1H），1．59−1．72（m，1H），0．91−1．01（m，3H）．
【０４１０】
実施例98
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−N−［（2S）−1，1，1−トリフルオロ−3，3−ジメチルブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化２０４】
2019524722.tif 000208
一般的手順1により、1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例24A）60．0mg（149μmol）を、（2S）−1，1，1−トリフルオロ−3，3−ジメチルブタン−2−アミン27．8mg（179μmol）と、DMF0．6ml中HATU68．0mg（179μmol）およびDIPEA104μl（597μmol）の存在下で反応させた。反応混合物をアセトニトリル、水およびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、粗溶液を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物47．5mg（理論値の59％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．96分；MS（ESIpos）：m／z＝540［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．48（br． dd，1H），9．07（s，1H），8．74（d，1H），8．64−8．69（m，1H），8．54（t，1H），8．36−8．42（m，1H），5．38（br． d，0．5H），5．26（br． d，0．5H），4．66（quint，1H），4．26−4．32（m，1H），3．65−3．78（m，1H），3．46−3．57（m，1H），2．89−3．02（m，1H），2．33−2．44（m，1H），1．10（s，9H）．
【０４１１】
実施例99
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（3R，4R）−3，4−ジヒドロキシピロリジン−1−イル］−4−オキソ−N−［（2S）−1，1，1−トリフルオロ−3，3−ジメチルブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化２０５】
2019524722.tif 000209
一般的手順3により、7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−N−［（2S）−1，1，1−トリフルオロ−3，3−ジメチルブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例13A）80．0mg（168μmol）を、（3R，4R）−ピロリジン−3，4−ジオール塩酸塩28．2mg（202μmol）と、DMF0．8ml中DIPEA103μl（590μmol）の存在下で反応させた。反応混合物をアセトニトリル、水およびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、粗溶液を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物85．3mg（理論値の93％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．76分；MS（ESIpos）：m／z＝542［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．77（dd，1H），8．83（d，1H），8．61（t，1H），8．28−8．36（m，2H），6．78（d，1H），5．28（br． d，0．5H），5．20（d，1H），5．07（br． d，0．5H），4．63（quintt，1H），4．05（br． s，1H），3．93（br． s，1H），3．56−3．68（m，1H），3．33−3．40（m，1H），3．19−3．30（m，1H），3．03−3．18（m，1H），1．09（br． s，9H）．
【０４１２】
実施例100
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−7−（2−オキソイミダゾリジン−1−イル）−N−［（2S）−1，1，1−トリフルオロ−3，3−ジメチルブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化２０６】
2019524722.tif 000210
一般的手順2により、7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−N−［（2S）−1，1，1−トリフルオロ−3，3−ジメチルブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例13A）80．0mg（168μmol）を、イミダゾリジン−2−オン145mg（1．69mmol）と、80℃で、ジオキサン1．6ml中炭酸カリウム34．9mg（253μmol）、酢酸パラジウム7．57mg（34．0μmol）およびキサントホス19．5mg（34．0μmol）の存在下で反応させた。混合物をアセトニトリル、水およびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物40．5mg（理論値の46％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．97分；MS（ESIpos）：m／z＝525［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．49−10．67（m，1H），9．00（br． s，1H），8．52−8．71（m，2H），8．40−8．51（m，1H），8．25−8．40（m，1H），7．67（br． s，1H），4．57−4．74（m，1H），3．54−3．71（m，2H），1．10（br． s，9H）．
【０４１３】
実施例101
N−（ビシクロ［1．1．1］ペンタ−1−イル）−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化２０７】
2019524722.tif 000211
一般的手順1により、1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例24A）60．0mg（149μmol）を、ビシクロ［1．1．1］ペンタン−1−アミン塩酸塩21．4mg（179μmol）と、DMF0．6ml中HATU68．0mg（179μmol）およびDIPEA78．0μl（447μmol）の存在下で反応させた。反応混合物をアセトニトリル、水およびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、粗溶液を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物39．7mg（理論値の57％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．62分；MS（ESIpos）：m／z＝468［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．02（s，1H），8．95（s，1H），8．65−8．69（m，2H），8．49−8．55（m，1H），8．36−8．42（m，1H），5．35−5．39（m，0．5H），5．24−5．27（m，0．5H），4．26−4．31（m，1H），3．64−3．77（m，1H），3．44−3．55（m，1H），2．88−3．01（m，1H），2．32−2．42（m，1H），2．11（s，6H）．
【０４１４】
実施例102
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−N−（3−フルオロビシクロ［1．1．1］ペンタ−1−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化２０８】
2019524722.tif 000212
一般的手順1により、1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例24A）60．0mg（149μmol）を、3−フルオロビシクロ［1．1．1］ペンタン−1−アミン塩酸塩27．4mg（179μmol、純度90％）と、DMF0．6ml中HATU68．0mg（179μmol）およびDIPEA78．0μl（447μmol）の存在下で反応させた。反応混合物をアセトニトリル、水およびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、粗溶液を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって2回精製すると、標記化合物9．00mg（理論値の12％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．57分；MS（ESIpos）：m／z＝486［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．13（s，1H），8．97（s，1H），8．64−8．69（m，2H），8．49−8．57（m，1H），8．36−8．42（m，1H），5．34−5．40（m，0．5H），5．23−5．28（m，0．5H），4．18−4．33（m，1H），3．43−3．79（m，3H），2．88−3．01（m，1H），2．46（d，6H）．
【０４１５】
実施例103
N−（1，3−ジフルオロ−2−メチルプロパン−2−イル）−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（3R，4R）−3，4−ジヒドロキシピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化２０９】
2019524722.tif 000213
一般的手順1により、1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（3R，4R）−3，4−ジヒドロキシピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例23B）30．0mg（74．2μmol）を、1，3−ジフルオロ−2−メチルプロパン−2−アミン塩酸塩13．0mg（89．0μmol）と、DMF0．3ml中HATU33．9mg（89．0μmol）およびDIPEA39．0μl（223μmol）の存在下で反応させた。反応混合物をアセトニトリル、水およびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、粗溶液を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物28．6mg（理論値の78％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．37分；MS（ESIpos）：m／z＝496［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．35（s，1H），8．75（d，1H），8．61（d，1H），8．30−8．36（m，1H），8．27（d，1H），6．76（d，1H），5．26（br． d，0．5H），5．15−5．22（m，1H），5．06（br． d，0．5H），4．69−4．78（m，2H），4．57−4．66（m，2H），4．05（br． s，1H），3．92（br． s，1H），3．55−3．67（m，1H），3．33−3．38（m，1H），3．18−3．29（m，1H），3．02−3．17（m，1H），1．40−1．45（m，3H）．
【０４１６】
実施例104
N−［（1S）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［4−ヒドロキシ−3−メチル−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ラセミジアステレオマー混合物）
【化２１０】
2019524722.tif 000214
一般的手順2により、7−クロロ−N−［（1S）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例9A）50．0mg（109μmol）を、4−ヒドロキシ−3−メチルピロリジン−2−オン（実施例2D）15．1mg（131μmol）と、80℃で、ジオキサン1ml中炭酸カリウム22．6mg（163μmol）、酢酸パラジウム4．89mg（22．0μmol）およびキサントホス12．6mg（22．0μmol）の存在下で反応させた。次いで、少量のアセトニトリル、水およびギ酸を添加し、反応溶液をMilliporeフィルタを通して濾過し、分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製した。生成物をアセトニトリルから再結晶すると、標記化合物19．5mg（理論値の33％；純度100％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝1．01分；MS（ESIpos）：m／z＝538［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．23−10．30（m，1H），9．03−9．06（m，1H），8．71（d，1H），8．65−8．69（m，1H），8．50−8．59（m，1H），8．36−8．43（m，1H），5．43−5．54（m，0．25H），5．10−5．33（m，0．75H），4．37−4．47（m，1H），4．19（br． q，0．75H），3．75−3．98（m，0．5H），3．48−3．69（m，1．5H），3．22−3．28（m，0．25H），2．77−2．92（m，0．75H），1．05−1．28（m，4H），0．52−0．70（m，3H），0．30−0．39（m，1H）．
【０４１７】
標記化合物（ジアステレオマー混合物）13．0mgをキラルHPLC（分取HPLC：カラム：Daicel Chiralcel OZ−H 5μm 250×20mm；移動相：80％n−ヘプタン、20％エタノール；温度：23℃；流量：20ml／分；UV検出：258nm）によってジアステレオマーに分離した。
【０４１８】
これにより、（カラムからの溶出の順序で）ジアステレオマー1（ラセミ体；実施例105）（55％de、rac）Rt＝11．29分1．70mg（理論値の2．9％、純度100％）、ジアステレオマー2（エナンチオマーA；実施例106）（95．6％de）Rt＝14．43分1．30mg（理論値の2．2％、純度100％）およびジアステレオマー2（エナンチオマーB；実施例107）（99．9％de）Rt＝29．03分3．10mg（理論値の5．2％、純度100％）が得られた。
［分析HPLC：カラム：Daicel Chiralpak OZ−3 3μm 50×4．6mm；移動相：80％n−ヘプタン、20％エタノール；流量：1．0ml／分；UV検出：220nm］
【０４１９】
実施例105
N−［（1S）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［4−ヒドロキシ−3−メチル−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー1、ラセミ体）
LC−MS（方法2）：Rt＝1．92分；MS（ESIpos）：m／z＝538［M＋H］＋。
1H NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．13−10．32（m，1H），9．02−9．08（m，1H），8．71（d，1H），8．67（d，1H），8．48−8．59（m，1H），8．36−8．44（m，1H），5．45−5．53（m，1H），4．37−4．46（m，1H），3．44−4．04（m，2H），1．06−1．31（m，6H），0．51−0．71（m，3H），0．31−0．39（m，1H）．
【０４２０】
実施例106
N−［（1S）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［4−ヒドロキシ−3−メチル−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー2、エナンチオマーA）
LC−MS（方法2）：Rt＝1．91分；MS（ESIpos）：m／z＝538［M＋H］＋。
1H NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．26（d，1H），9．04（s，1H），8．71（d，1H），8．65−8．69（m，1H），8．51−8．59（m，1H），8．36−8．42（m，1H），5．29（br． d，0．5H），5．15（br． d，0．5H），4．37−4．48（m，1H），4．19（br． q，1H），3．46−3．68（m，2H），2．77−2．92（m，1H），1．05−1．30（m，4H），0．51−0．71（m，3H），0．30−0．39（m，1H）．
【０４２１】
実施例107
N−［（1S）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［4−ヒドロキシ−3−メチル−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー2、エナンチオマーB）
LC−MS（方法2）：Rt＝1．91分；MS（ESIpos）：m／z＝538［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．18−10．32（m，1H），9．04（s，1H），8．69−8．73（m，1H），8．67（br s，1H），8．49−8．60（m，1H），8．35−8．43（m，1H），5．11−5．54（m，1H），4．38−4．46（m，1H），4．13−4．23（m，1H），3．45−3．70（m，1H），2．75−2．94（m，1H），1．04−1．32（m，5H），0．47−0．75（m，3H），0．27−0．43（m，1H）．
【０４２２】
実施例108
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［4−ヒドロキシ−3−メチル−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−N−［（2S）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ラセミジアステレオマー混合物）
【化２１１】
2019524722.tif 000215
一般的手順2により、7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−N−［（2S）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例5A）50．0mg（112μmol）を、4−ヒドロキシ−3−メチルピロリジン−2−オン（実施例2D）15．5mg（134μmol）と、80℃で、ジオキサン1ml中炭酸カリウム23．2mg（168μmol）、酢酸パラジウム5．03mg（22．0μmol）およびキサントホス13．0mg（22．0μmol）の存在下で反応させた。次いで、少量のアセトニトリル、水およびギ酸を添加し、反応溶液をMilliporeフィルタを通して濾過し、分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製した。生成物をアセトニトリルから再結晶すると、標記化合物23．7mg（理論値の40％；純度100％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝0．99分；MS（ESIpos）：m／z＝526［M＋H］＋。
1H−NMR 400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．09−10．15（m，1H），9．02−9．09（m，1H），8．63−8．74（m，2H），8．50−8．59（m，1H），8．35−8．45（m，1H），5．44−5．53（m，0．25H），5．10−5．32（m，0．75H），4．71−4．83（m，1H），4．19（br． q，0．75H），3．74−3．98（m，0．5H），3．48−3．68（m，1．5H），3．20−3．28（m，0．25H），2．76−2．92（m，0．75H），1．84−1．95（m，1H），1．61−1．73（m，1H），1．05−1．18（m，3H），0．94−1．02（m，3H）．
【０４２３】
標記化合物（ジアステレオマー混合物）17．0mgをキラルHPLC（分取HPLC：カラム：Daicel IA 250×20mm；移動相：80％n−ヘプタン、20％エタノール；温度：23℃；流量：20ml／分；UV検出：220nm）によってジアステレオマーに分離した。
【０４２４】
これにより、（カラムからの溶出の順序で）ジアステレオマー1（ラセミ体；実施例109）（99．9％de、rac）Rt＝10．37／10．83分3．30mg（理論値の5．6％、純度100％）、ジアステレオマー2（エナンチオマーA；実施例110）（86．46％de）Rt＝11．78分4．10mg（理論値の6．9％、純度100％）およびジアステレオマー2（エナンチオマーB；実施例111）（99．9％de）Rt＝13．61分4．50mg（理論値の7．6％、純度100％）が得られた。
［分析HPLC：カラム：Daicel Chiralpak IA−3 3μm 50×4．6mm；移動相：80％イソヘキサン、20％エタノール；流量：1．0ml／分；UV検出：220nm］
【０４２５】
実施例109
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［4−ヒドロキシ−3−メチル−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−N−［（2S）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー1、ラセミ体）
LC−MS（方法2）：Rt＝1．89分；MS（ESIpos）：m／z＝526［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．11（d，1H），9．06（s，1H），8．71（d，1H），8．67（d，1H），8．52（d，1H），8．37−8．44（m，1H），5．44−5．54（m，1H），4．72−4．82（m，1H），3．86−3．98（m，1H），3．74−3．85（m，1H），3．22−3．29（m，1H），1．84−1．95（m，1H），1．60−1．72（m，1H），1．11−1．19（m，3H），0．94−1．02（m，3H）．
【０４２６】
実施例110
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［4−ヒドロキシ−3−メチル−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−N−［（2S）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー2、エナンチオマーA）
LC−MS（方法2）：Rt＝1．88分；MS（ESIpos）：m／z＝526［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．12（d，1H），9．05（s，1H），8．71（d，1H），8．67（br． s，1H），8．56（br． t，1H），8．39（ddd，1H），5．29（br． d，0．5H），5．16（br． d，0．5H），4．72−4．83（m，1H），4．17−4．22（m，1H），3．47−3．71（m，2H），2．76−2．92（m，1H），1．84−1．95（m，1H），1．61−1．73（m，1H），1．05−1．12（m，3H），0．94−1．03（m，3H）．
【０４２７】
実施例111
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［4−ヒドロキシ−3−メチル−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−N−［（2S）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー2、エナンチオマーB）
LC−MS（方法2）：Rt＝1．88分；MS（ESIpos）：m／z＝526［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．12（br． d，1H），9．05（s，1H），8．71（d，1H），8．65−8．69（m，1H），8．52−8．58（m，1H），8．36−8．42（m，1H），5．29（br． d，0．5H），5．15（br． d，0．5H），4．72−4．84（m，1H），4．19（q，1H），3．48−3．68（m，2H），2．76−2．93（m，1H），1．85−1．95（m，1H），1．62−1．73（m，1H），1．05−1．11（m，3H），0．94−1．02（m，3H）．
【０４２８】
実施例112
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［4−ヒドロキシ−3−メチル−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−N−［（2S）−1，1，1−トリフルオロプロパン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ラセミジアステレオマー混合物）
【化２１２】
2019524722.tif 000216
一般的手順2により、7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−N−［（2S）−1，1，1−トリフルオロプロパン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例6A）50．0mg（116μmol）を、4−ヒドロキシ−3−メチルピロリジン−2−オン（実施例2D）16．0mg（139μmol）と、80℃で、ジオキサン1ml中炭酸カリウム24．0mg（173μmol）、酢酸パラジウム5．19mg（23．0μmol）およびキサントホス13．4mg（23．0μmol）の存在下で反応させた。次いで、少量のアセトニトリル、水およびギ酸を添加し、反応溶液をMilliporeフィルタを通して濾過し、分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製した。生成物をアセトニトリルから再結晶すると、標記化合物7．90mg（理論値の13％；純度100％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝0．93分；MS（ESIpos）：m／z＝512［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．14−10．20（m，1H），9．03−9．06（m，1H），8．64−8．72（m，2H），8．50−8．58（m，1H），8．36−8．43（m，1H），5．45−5．53（m，0．25H），5．13−5．31（m，0．75H），4．87−4．98（m，1H），4．19（br． q，0．75H），3．88−3．97（m，0．25H），3．74−3．85（m，0．25H），3．47−3．68（m，1．50H），3．21−3．28（m，0．25H），2．76−2．92（m，0．75H），1．40（br． d，3H），1．05−1．18（m，3H）．
【０４２９】
実施例113
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［7−ヒドロキシ−6−メチル−4−オキソ−5−アザスピロ［2．4］ヘプタ−5−イル］−4−オキソ−N−［（2S）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー混合物）
【化２１３】
2019524722.tif 000217
一般的手順2により、7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−N−［（2S）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例5A）100mg（224μmol）を、7−ヒドロキシ−6−メチル−5−アザスピロ［2．4］ヘプタン−4−オン（実施例3E）37．9mg（269μmol）と、80℃で、ジオキサン2ml中炭酸カリウム46．4mg（336μmol）、酢酸パラジウム10．1mg（45．0μmol）およびキサントホス25．9mg（45．0μmol）の存在下で反応させた。次いで、少量のアセトニトリル、水およびギ酸を添加し、反応溶液をMilliporeフィルタを通して濾過し、分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製した。生成物をアセトニトリルから再結晶すると、標記化合物57．1mg（理論値の46％；純度100％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝1．08分；MS（ESIpos）：m／z＝552［M＋H］＋
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．12（d，1H），9．07（d，1H），8．66−8．71（m，2H），8．40−8．51（m，2H），5．29−5．33（m，1H），4．72−4．83（m，1H），4．31−4．40（m，1H），4．16−4．27（m，1H），1．84−1．95（m，1H），1．61−1．73（m，1H），1．17−1．26（m，1H），1．03−1．17（m，3H），0．94−1．02（m，3H），0．79−0．88（m，3H）．
【０４３０】
実施例114
N−［（1R）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［7−ヒドロキシ−6−メチル−4−オキソ−5−アザスピロ［2．4］ヘプタ−5−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー混合物）
【化２１４】
2019524722.tif 000218
一般的手順2により、7−クロロ−N−［（1R）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例8A）100mg（218μmol）を、7−ヒドロキシ−6−メチル−5−アザスピロ［2．4］ヘプタン−4−オン（実施例3E）36．9mg（262μmol）と、80℃で、ジオキサン2ml中炭酸カリウム45．2mg（327μmol）、酢酸パラジウム9．79mg（44．0μmol）およびキサントホス25．2mg（44．0μmol）の存在下で反応させた。次いで、少量のアセトニトリル、水およびギ酸を添加し、反応溶液をMilliporeフィルタを通して濾過し、分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製した。生成物をアセトニトリルから再結晶すると、標記化合物71．9mg（理論値の59％；純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝2．08分；MS（ESIpos）：m／z＝564［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．26（d，1H），9．07（d，1H），8．66−8．71（m，2H），8．39−8．51（m，2H），5．29−5．34（m，1H），4．31−4．46（m，2H），4．15−4．27（m，1H），1．18−1．28（m，2H），1．02−1．17（m，3H），0．78−0．87（m，3H），0．52−0．70（m，3H），0．30−0．39（m，1H）．
【０４３１】
実施例115
N−［（1S）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［7−ヒドロキシ−6−メチル−4−オキソ−5−アザスピロ［2．4］ヘプタ−5−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー混合物）
【化２１５】
2019524722.tif 000219
一般的手順2により、7−クロロ−N−［（1S）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例9A）100mg（218μmol）を、7−ヒドロキシ−6−メチル−5−アザスピロ［2．4］ヘプタン−4−オン（実施例3E）36．9mg（262μmol）と、80℃で、ジオキサン2ml中炭酸カリウム45．2mg（327μmol）、酢酸パラジウム9．79mg（44．0μmol）およびキサントホス25．2mg（44．0μmol）の存在下で反応させた。次いで、少量のアセトニトリル、水およびギ酸を添加し、反応溶液をMilliporeフィルタを通して濾過し、分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製した。生成物をアセトニトリルから再結晶すると、標記化合物43．9mg（理論値の36％；純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝2．08分；MS（ESIpos）：m／z＝564［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．26（d，1H），9．07（d，1H），8．65−8．72（m，2H），8．39−8．52（m，2H），5．31（br s，1H），4．31−4．46（m，2H），4．16−4．27（m，1H），1．18−1．28（m，2H），1．05−1．18（m，3H），0．77−0．90（m，3H），0．52−0．70（m，3H），0．31−0．39（m，1H）．
【０４３２】
実施例116
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［7−ヒドロキシ−6−メチル−4−オキソ−5−アザスピロ［2．4］ヘプタ−5−イル］−4−オキソ−N−［（2S）−1，1，1−トリフルオロプロパン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー混合物）
【化２１６】
2019524722.tif 000220
一般的手順2により、7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−N−［（2S）−1，1，1−トリフルオロプロパン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例6A）100mg（231μmol）を、7−ヒドロキシ−6−メチル−5−アザスピロ［2．4］ヘプタン−4−オン（実施例3E）39．1mg（277μmol）と、80℃で、ジオキサン2ml中炭酸カリウム47．9mg（347μmol）、酢酸パラジウム10．4mg（46．0μmol）およびキサントホス26．7mg（46．0μmol）の存在下で反応させた。次いで、少量のアセトニトリル、水およびギ酸を添加し、反応溶液をMilliporeフィルタを通して濾過し、分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製した。生成物をアセトニトリルから再結晶すると、標記化合物80．5mg（理論値の65％；純度100％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝1．02分；MS（ESIpos）：m／z＝538［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．17（d，1H），9．07（d，1H），8．63−8．72（m，2H），8．39−8．51（m，2H），5．29−5．33（m，1H），4．87−4．98（m，1H），4．31−4．40（m，1H），4．15−4．27（m，1H），1．40（d，3H），1．18−1．26（m，1H），1．03−1．18（m，3H），0．76−0．88（m，3H）．
【０４３３】
実施例117
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［3−ヒドロキシピペリジン1−イル］−4−オキソ−N−［（2R）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー混合物）
【化２１７】
2019524722.tif 000221
一般的手順3により、7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−N−［（2R）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例4C）25．0mg（56．0μmol）を、ピペリジン−3−オール（ラセミ体）6．79mg（67．1μmol）と、DMF0．28ml中DIPEA34．0μl（196μmol）の存在下で反応させた。反応混合物を水、アセトニトリルおよびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物25．5mg（理論値の89％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．85分；MS（ESIpos）：m／z＝512［M＋H］＋。
1H−NMR（500 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．39（d，1H），8．81（br s，1H），8．62（br d，1H），8．28−8．36（m，1H），8．25（dd，1H），7．10（d，1H），4．81−4．86（m，1H），4．69−4．79（m，1H），3．58−3．90（m，2H），3．38−3．53（m，1H），2．89−3．25（m，2H），1．79−1．92（m，2H），1．59−1．70（m，2H），1．26−1．46（m，2H），0．96（br dd，3H）．
【０４３４】
実施例118
1−（3，5−ジフルオロピリジン−4−イル）−7−［（3R，4R）−3，4−ジヒドロキシピロリジン−1−イル］−4−オキソ−N−［（2S）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化２１８】
2019524722.tif 000222
一般的手順3により、7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−4−イル）−4−オキソ−N−［（2S）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例22C）40．0mg（89．5μmol）を、（3R，4R）−ピロリジン−3，4−ジオール塩酸塩15．0mg（107μmol）と、DMF3ml中DIPEA55．0μl（313μmol）の存在下で反応させた。反応混合物を水およびアセトニトリルで希釈し、濾過し、分取HPLC（水／アセトニトリル勾配、0．1％トリフルオロ酢酸勾配）によって精製すると、標記化合物37．8mg（理論値の82％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．53分；MS（ESIpos）：m／z＝514［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．39（d，1H），8．91（s，1H），8．86（d，2H），8．28（d，1H），6．80（d，1H），4．64−4．85（m，1H），3．99−4．11（m，1H），3．88−3．95（m，1H），3．60−3．64（m，3H），3．30−3．46（m，1H），3．16−3．30（m，1H），3．03−3．06（m，1H），1．83−1．93（m，1H），1．59−1．70（m，1H），0．97（t，3H）．
【０４３５】
実施例119
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［3−（2−ヒドロキシエチル）−2−オキソイミダゾリジン−1−イル］−4−オキソ−N−［（2S）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化２１９】
2019524722.tif 000223
一般的手順1により、1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［3−（2−ヒドロキシエチル）−2−オキソイミダゾリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例25A）40．0mg（92．7μmol）を、（2S）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−アミン塩酸塩18．2mg（111μmol）と、DMF0．6ml中HATU42．3mg（111μmol）およびDIPEA65．0μl（371μmol）の存在下で反応させた。反応混合物を水、アセトニトリルおよびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物36．8mg（理論値の73％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．73分；MS（ESIpos）：m／z＝541［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．21（d，1H），8．99（s，1H），8．64（br． d，1H），8．57（d，1H），8．44（d，1H），8．33（ddd，1H），4．71−4．83（m，2H），3．43−3．63（m，6H），3．21−3．30（m，2H），1．84−1．95（m，1H），1．60−1．72（m，1H），0．94−1．01（m，3H）．
【０４３６】
実施例120
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［3−（2−ヒドロキシエチル）−2−オキソテトラヒドロピリミジン−1（2H）−イル］−4−オキソ−N−［（2S）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化２２０】
2019524722.tif 000224
一般的手順1により、1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［3−（2−ヒドロキシエチル）−2−オキソテトラヒドロピリミジン−1（2H）−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例26B）40．0mg（89．8μmol、純度86％）を、（2S）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−アミン塩酸塩17．6mg（108μmol）と、DMF0．6ml中HATU41．0mg（108μmol）およびDIPEA63．0μl（359μmol）の存在下で反応させた。反応混合物を水、アセトニトリルおよびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物37．1mg（理論値の75％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝0．98分；MS（ESIpos）：m／z＝555［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．18（d，1H），9．01（s，1H），8．65（d，1H），8．50（d，1H），8．36（ddd，1H），8．17（d，1H），4．73−4．82（m，1H），4．71（t，1H），3．48−3．60（m，4H），3．35−3．42（m，4H），1．85−1．96（m，3H），1．60−1．72（m，1H），0．94−1．02（m，3H）．
【０４３７】
実施例121
N−［（1R）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［3−（2−ヒドロキシエチル）−2−オキソイミダゾリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化２２１】
2019524722.tif 000225
一般的手順1により、1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［3−（2−ヒドロキシエチル）−2−オキソイミダゾリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例25A）40．0mg（92．7μmol）を、（1R）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエタンアミン塩酸塩19．5mg（111μmol）と、DMF0．6ml中HATU42．3mg（111μmol）およびDIPEA65．0μl（371μmol）の存在下で反応させた。反応混合物を水、アセトニトリルおよびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物32．3mg（理論値の63％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．77分；MS（ESIpos）：m／z＝553［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．34（br d，1H），8．98（s，1H），8．64（d，1H），8．57（d，1H），8．45（d，1H），8．33（ddd，1H），4．75（t，1H），4．37−4．47（m，1H），3．44−3．62（m，6H），3．21−3．30（m，2H），1．19−1．27（m，1H），0．51−0．70（m，3H），0．30−0．39（m，1H）．
【０４３８】
実施例122
N−［（1R）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［3−（2−ヒドロキシエチル）−2−オキソテトラヒドロピリミジン−1（2H）−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化２２２】
2019524722.tif 000226
一般的手順1により、1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［3−（2−ヒドロキシエチル）−2−オキソテトラヒドロピリミジン−1（2H）−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例26B）40．0mg（89．8μmol、純度86％）を、（1R）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエタンアミン塩酸塩18．9mg（108μmol）と、DMF0．6ml中HATU41．0mg（108μmol）およびDIPEA63．0μl（359μmol）の存在下で反応させた。反応混合物を水、アセトニトリルおよびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物37．3mg（理論値の73％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝1．00分；MS（ESIpos）：m／z＝567［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．33（d，1H），9．00（s，1H），8．65（d，1H），8．51（d，1H），8．36（ddd，1H），8．17（d，1H），4．71（t，1H），4．36−4．47（m，1H），3．48−3．58（m，4H），3．36−3．42（m，4H），1．87−1．96（m，2H），1．18−1．28（m，1H），0．51−0．70（m，3H），0．31−0．39（m，1H）．
【０４３９】
実施例123
N−［（1S）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［3−（2−ヒドロキシエチル）−2−オキソテトラヒドロピリミジン−1（2H）−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化２２３】
2019524722.tif 000227
一般的手順1により、1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［3−（2−ヒドロキシエチル）−2−オキソテトラヒドロピリミジン−1（2H）−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例26B）30．0mg（67．4μmol、純度86％）を、（1S）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエタンアミン塩酸塩14．2mg（81．0μmol）と、DMF0．5ml中HATU30．7mg（81．0μmol）およびDIPEA47．0μl（269μmol）の存在下で反応させた。反応混合物を水、アセトニトリルおよびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物26．5mg（理論値の69％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝1．00分；MS（ESIpos）：m／z＝567［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．33（d，1H），9．00（s，1H），8．65（d，1H），8．51（d，1H），8．36（ddd，1H），8．17（d，1H），4．71（t，1H），4．35−4．50（m，1H），3．47−3．60（m，4H），3．35−3．42（m，4H），1．86−1．96（m，2H），1．18−1．28（m，1H），0．52−0．70（m，3H），0．30−0．39（m，1H）．
【０４４０】
実施例124
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［3−（2−ヒドロキシエチル）−2−オキソイミダゾリジン−1−イル］−4−オキソ−N−［（2S）−1，1，1−トリフルオロ−3，3−ジメチルブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化２２４】
2019524722.tif 000228
一般的手順2により、7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−N−［（2S）−1，1，1−トリフルオロ−3，3−ジメチルブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例13A）60．0mg（126μmol）を、1−（2−｛［tert−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝エチル）イミダゾリジン−2−オン（欧州特許第1721905号明細書、実施例43）37．1mg（152μmol）と、90℃で90分間、ジオキサン1．6ml中炭酸カリウム43．7mg（316μmol）、酢酸パラジウム5．67mg（25．0μmol）およびキサントホス14．6mg（25．0μmol）の存在下で反応させた。粗生成物を分取HPLCによって部分的に精製した。次いで、粗生成物をジオキサン5mlに溶解し、1N塩酸水溶液5mlを添加し、混合物を40℃で1時間撹拌した。全ての揮発性成分を減圧下で除去し、残渣を少量のDMSO、水、アセトニトリルおよびギ酸に溶解し、Milliporeフィルタを通して濾過し、分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物17．4mg（理論値の24％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．93分；MS（ESIpos）：m／z＝569［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．57（br． dd，1H），9．00（s，1H），8．64（br． d，1H），8．60（d，1H），8．45（d，1H），8．29−8．37（m，1H），4．75（t，1H），4．65（quint，1H），3．40−3．70（m，7H），3．21−3．28（m，1H），1．10（br． s，9H）．
【０４４１】
実施例125
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［3−（2−ヒドロキシエチル）−2−オキソテトラヒドロピリミジン−1（2H）−イル］−4−オキソ−N−［（2S）−1，1，1−トリフルオロ−3，3−ジメチルブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化２２５】
2019524722.tif 000229
一般的手順2により、7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−N−［（2S）−1，1，1−トリフルオロ−3，3−ジメチルブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例13A）60．0mg（126μmol）を、1−（2−｛［tert−ブチル（ジメチル）シリル］オキシ｝エチル）テトラヒドロピリミジン−2（1H）−オン（実施例26A）39．2mg（152μmol）と、90℃で90分間、ジオキサン1．6ml中炭酸カリウム43．7mg（316μmol）、酢酸パラジウム5．67mg（25．0μmol）およびキサントホス14．6mg（25．0μmol）の存在下で反応させた。粗生成物を分取HPLCによって部分的に精製した。次いで、粗生成物をジオキサン5mlに溶解し、1N塩酸水溶液5mlを添加し、混合物を40℃で1時間撹拌した。全ての揮発性成分を減圧下で除去し、残渣を少量のDMSO、水、アセトニトリルおよびギ酸に溶解し、Milliporeフィルタを通して濾過し、分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物37．7mg（理論値の51％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．93分；MS（ESIpos）：m／z＝583［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．54（br． d，1H），9．02（s，1H），8．62−8．67（m，1H），8．53（d，1H），8．32−8．40（m，1H），8．18（d，1H），4．71（t，1H），4．60−4．69（m，1H），3．48−3．60（m，4H），3．36−3．42（m，4H），1．86−1．97（m，2H），1．10（s，9H）．
【０４４２】
実施例126
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［3−（2−ヒドロキシエチル）−2−オキソイミダゾリジン−1−イル］−4−オキソ−N−［（2R）−1，1，1−トリフルオロ−3，3−ジメチルブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化２２６】
2019524722.tif 000230
一般的手順1により、1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［3−（2−ヒドロキシエチル）−2−オキソイミダゾリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例25A）40．0mg（92．7μmol）を、（2R）−1，1，1−トリフルオロ−3，3−ジメチルブタン−2−アミン17．3mg（111μmol）と、DMF0．6ml中HATU42．3mg（111μmol）およびDIPEA48．0μl（278μmol）の存在下で反応させた。反応混合物をアセトニトリル、水およびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、粗溶液を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物37．3mg（理論値の71％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．93分；MS（ESIpos）：m／z＝569［M＋H］＋。
1HNMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．57（br dd，1H），9．00（s，1H），8．64（br d，1H），8．60（d，1H），8．45（d，1H），8．29−8．36（m，1H），4．75（t，1H），4．65（quintt，1H），3．44−3．63（m，6H），3．22−3．30（m，2H），1．10（s，9H）．
【０４４３】
実施例127
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［3−（2−ヒドロキシエチル）−2−オキソテトラヒドロピリミジン−1（2H）−イル］−4−オキソ−N−［（2R）−1，1，1−トリフルオロ−3，3−ジメチルブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化２２７】
2019524722.tif 000231
一般的手順1により、1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［3−（2−ヒドロキシエチル）−2−オキソテトラヒドロピリミジン−1（2H）−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例26B）40．0mg（89．8μmol、純度86％）を、（2R）−1，1，1−トリフルオロ−3，3−ジメチルブタン−2−アミン16．7mg（108μmol）と、DMF0．6ml中HATU41．0mg（108μmol）およびDIPEA47．0μl（269μmol）の存在下で反応させた。反応混合物をアセトニトリル、水およびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、粗溶液を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊40mm、溶媒：アセトニトリル、水、0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物36．0mg（理論値の66％、純度96％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝1．08分；MS（ESIpos）：m／z＝583［M＋H］＋。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．55（br． d，1H），9．02（s，1H），8．65（d，1H），8．53（d，1H），8．36（ddd，1H），8．18（d，1H），4．71（t，1H），4．61−4．69（m，1H），3．48−3．60（m，4H），3．35−3．43（m，4H），1．86−1．97（m，2H），1．10（s，9H）．
【０４４４】
実施例128
1−（3，5−ジフルオロピリジン−4−イル）−4−オキソ−7−（2−オキソイミダゾリジン−1−イル）−N−［（2S）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化２２８】
2019524722.tif 000232
アルゴン下で、炭酸カリウム18．6mg（134μmol）、酢酸パラジウム1．00mg（4μmol）および9，9−ジメチル−4，5−ビス（ジフェニルホスフィノ）キサンテン5．18mg（8．95μmol）を最初に脱気ジオキサン3mlに装入した。反応物を室温で10分間撹拌し、次いで、7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−4−イル）−4−オキソ−N−［（2S）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例22C）40．0mg（89．5μmol）およびイミダゾリジン−2−オン77．1mg（895μmol）を添加した。混合物を80℃で4時間撹拌し、次いで、水およびアセトニトリルを添加し、混合物を濾過し、分取RP−HPLC（カラム：Reprosil 125x30；10μ、流量：50ml／分、MeCN／水；0．1％TFA）によって直接精製した。溶媒を減圧下で蒸発させ、残渣を高真空下で乾燥させた。これにより、標記化合物21．3mg（理論値の48％；純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．75分；MS（ESIpos）：m／z＝497［M＋H］＋
1H NMR（400 MHz，DMSO−d6）δ［ppm］＝ 10．16（d，1H）9．08（s，1H）8．88（s，2H）8．57（d，1H）8．45（d，1H）7．68（s，1H）4．71−4．82（m，1H）3．52−3．63（m，2H）3．33−3．42（m，2H）1．84−1．95（m，1H）1．61−1．73（m，1H）0．98（t，3H）．
【０４４５】
実施例129
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（3S）−3−フルオロピロリジン−1−イル］−4−オキソ−N−［（2S）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化２２９】
2019524722.tif 000233
一般的手順3により、7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−N−［（2S）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例5A）25．0mg（56．0μmol）を、（3S）−3−フルオロピロリジン塩酸塩7．73mg（62．0μmol）と、一晩、DMF0．5ml中DIPEA34μl（0．20mmol）の存在下で反応させた。次いで、1M塩酸水溶液でpHをpH1に調整し、混合物をアセトニトリル1mlで希釈し、粗溶液を分取HPLC［カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊30mm、移動相：アセトニトリル／0．05％ギ酸勾配；（0〜2．5分10％アセトニトリル〜23分90％アセトニトリルおよびさらに2分間90％アセトニトリル）］によって精製した。これにより、標記化合物21．2mg（理論値の75％、純度99％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝2．09分；MS（ESIpos）：m／z＝500［M＋H］＋。
1H NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．41（br． s，1H），8．84（s，1H），8．62（s，1H），8．32（br． s，2H），6．83（br． s，1H），5．61−5．19（m，1H），4．83−4．65（m，1H），3．91−2．00（m，6H，partially under solvent signals），1．91−1．85（m，1H），1．73−1．54（m，1H），0．96（br． s，3H）．
【０４４６】
実施例130
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−（ジメチルアミノ）−4−オキソ−N−［（2S）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化２３０】
2019524722.tif 000234
一般的手順3により、7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−N−［（2S）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例5A）25．0mg（56．0μmol）を、ジメチルアミン（THF中2M）31μl（62μmol）と、一晩、DMF0．5ml中DIPEA34μl（0．20mmol）の存在下で反応させた。次いで、1M塩酸水溶液で混合物をpH1に調整し、アセトニトリル2mlおよび水1mlを添加し、混合物をデカントし、遠心分離し、沈殿をジエチルエーテル3mlで撹拌した。次いで、残った沈殿を高真空下で乾燥させ、順相クロマトグラフィー（酢酸エチル／シクロヘキサン勾配）によって精製すると、標記化合物10．3mg（理論値の40％、純度99％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝2．08分；MS（ESIpos）：m／z＝456［M＋H］＋。
1HNMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．42（d，1H），8．82（s，1H），8．63−8．61（m，1H），8．36−8．27（m，2H），6．96（d，1H），4．81−4．68（m，1H），2．96（br． s，6H），1．94−1．82（m，1H），1．71−1．57（m，1H），1．00−0．93（m，3H）．
【０４４７】
実施例131
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［3−ヒドロキシ−3−（トリフルオロメチル）アゼチジン−1−イル］−4−オキソ−N−［（2S）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化２３１】
2019524722.tif 000235
一般的手順3により、7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−N−［（2S）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例5A）25．0mg（56μmol）を、3−（トリフルオロメチル）アゼチジン−3−オール塩酸塩10．9mg（62．0μmol）と、一晩、DMF0．5ml中DIPEA34μl（0．20mmol）の存在下で反応させた。次いで、1M塩酸水溶液でpHをpH1に調整し、混合物をアセトニトリル1mlで希釈し、粗溶液を分取HPLC［カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊30mm、移動相：アセトニトリル／0．05％ギ酸勾配；（0〜2．5分10％アセトニトリル〜23分90％アセトニトリルおよびさらに2分間90％アセトニトリル）］によって精製した。これにより、標記化合物26．4mg（理論値の85％、純度99％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝1．10分；MS（ESIpos）：m／z＝552［M＋H］＋。
1HNMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．32（br． d，1H），8．87（s，1H），8．61（s，1H），8．44−8．23（m，2H），7．47（s，1H），6．76（d，1H），4．83−4．68（m，1H），4．43−3．71（br． m，4H），1．95−1．79（m，1H），1．72−1．56（m，1H），0．96（br． s，3H）．
【０４４８】
実施例132
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−（3−フルオロアゼチジン−1−イル）−4−オキソ−N−［（2S）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化２３２】
2019524722.tif 000236
一般的手順3により、7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−N−［（2S）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例5A）25．0mg（56．0μmol）を、3−フルオロアゼチジン塩酸塩6．87mg（62．0μmol）と、一晩、DMF0．5ml中DIPEA34μl（0．20mmol）の存在下で反応させた。次いで、1M塩酸水溶液でpHをpH1に調整し、混合物をアセトニトリル0．5mlで希釈し、粗溶液を分取HPLC［カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊30mm、移動相：アセトニトリル／0．05％ギ酸勾配；（0〜2．5分10％アセトニトリル〜23分90％アセトニトリルおよびさらに2分間90％アセトニトリル）］によって精製した。これにより、標記化合物24．3mg（理論値の89％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝1．09分；MS（ESIpos）：m／z＝486［M＋H］＋。
1HNMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．35（d，1H），8．85（s，1H），8．62−8．59（m，1H），8．35−8．27（m，2H），6．68（d，1H），5．55−5．37（m，1H），4．80−4．69（m，1H），4．43−3．85（br． m，4H），1．93−1．83（m，1H），1．69−1．59（m，1H），1．00−0．92（m，3H）．
【０４４９】
実施例133
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−（3−ヒドロキシアゼチジン−1−イル）−4−オキソ−N−［（2S）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化２３３】
2019524722.tif 000237
一般的手順3により、7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−N−［（2S）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例5A）25．0mg（56．0μmol）を、アゼチジン−3−オール塩酸塩6．74mg（62．0μmol）と、一晩、DMF0．5ml中DIPEA34μl（0．20mmol）の存在下で反応させた。次いで、1M塩酸水溶液でpHをpH1に調整し、混合物をアセトニトリル0．5mlで希釈し、粗溶液を分取HPLC［カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊30mm、移動相：アセトニトリル／0．05％ギ酸勾配；（0〜3分10％アセトニトリル〜35分90％アセトニトリルおよびさらに3分間90％アセトニトリル）］によって精製した。これにより、標記化合物21．2mg（理論値の78％、純度99％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．75分；MS（ESIpos）：m／z＝484［M＋H］＋。
1HNMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．39（d，1H），8．82（s，1H），8．62−8．59（m，1H），8．34−8．25（m，2H），6．61（d，1H），5．75（d，1H），4．80−4．69（m，1H），4．58−4．50（m，1H），4．35−3．43（br． m，4H），1．93−1．83（m，1H），1．70−1．58（m，1H），1．00−0．91（m，3H）．
【０４５０】
実施例134
1−（3−フルオロピリジン−2−イル）−7−［1−ヒドロキシ−3−アザビシクロ［3．1．0］ヘキサ−3−イル］−4−オキソ−N−［（2R）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー混合物）
【化２３４】
2019524722.tif 000238
一般的手順3により、7−クロロ−1−（3−フルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−N−（（R）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル）−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例21A）100mg（23．3μmol）を、3−アザビシクロ［3．1．0］ヘキサン−1−オール塩酸塩（ラセミ体）38．2mg（257μmol、純度91％）と、一晩、DMF2．2ml中DIPEA142μl（816μmol）の存在下で反応させた。次いで、混合物をアセトニトリル0．5mlで希釈し、粗溶液を分取HPLC［カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊30mm、移動相：アセトニトリル／0．05％ギ酸勾配；（0〜3分10％アセトニトリル〜35分90％アセトニトリルおよびさらに3分間90％アセトニトリル）］によって精製した。これにより、標記化合物64．9mg（理論値の56％、純度99％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．82分；MS（ESIpos）：m／z＝492［M＋H］＋。
1HNMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．40（d，1H），8．82（s，1H），8．52（br． s，1H），8．28（d，1H），8．14−8．01（m，1H），7．82−7．70（m，1H），6．84−6．67（m，1H），6．12−5．86（m，1H），4．82−4．67（m，1H），3．97−3．00（br． m，4H，partially under the water peak），1．93−1．81（m，1H），1．71−1．46（m，2H），1．10−0．85（m，4H），0．50−0．34（m，1H）．
【０４５１】
実施例135
N−［（1R）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3−フルオロピリジン−2−イル）−7−［（1S）−1−ヒドロキシ−3−アザビシクロ［3．1．0］ヘキサ−3−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー混合物）
【化２３５】
2019524722.tif 000239
一般的手順3により、7−クロロ−N−［（R）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3−フルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例20C）50．0mg（113μmol）を、3−アザビシクロ［3．1．0］ヘキサン−1−オール塩酸塩（ラセミ体）18．6mg（125μmol、純度91％）と、一晩、DMF1ml中DIPEA69．0μl（397μmol）の存在下で反応させた。次いで、混合物をアセトニトリル0．5mlで希釈し、粗溶液を分取HPLC［カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊30mm、移動相：アセトニトリル／0．05％ギ酸勾配；（0〜3分10％アセトニトリル〜35分90％アセトニトリルおよびさらに3分間90％アセトニトリル）］によって精製した。これにより、標記化合物37．2mg（理論値の65％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝0．98分；MS（ESIpos）：m／z＝504［M＋H］＋。
1HNMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．54（d，1H），8．81（s，1H），8．51（br． s，1H），8．29（d，1H），8．15−8．02（m，1H），7．82−7．71（m，1H），6．84−6．68（m，1H），6．12−5．87（m，1H），4．46−4．33（m，1H），3．95−3．01（br． m，4H，partially under the water peak），1．69−1．48（m，1H），1．26−1．15（m，1 H），1．10−0．95（m，1H），0．70−0．28（m，5H）．
【０４５２】
標記化合物（ジアステレオマー混合物）35mgをキラルHPLC（分取HPLC：カラム：Daicel Chiralcel AS−H 5μm 250×20mm；移動相：35％イソプロパノール、65％イソヘキサン；温度：45℃；流量：15ml／分；UV検出：220nm）によってジアステレオマーに分離した。
【０４５３】
これにより、（カラムからの溶出の順序で）ジアステレオマー1（99％de）Rt＝5．04分13mgおよびジアステレオマー2 Rt＝6．15分15mg（96％de）が得られた。
［分析HPLC：カラム：Chiralcel AS−H 5μm 250×4．6mm；移動相：35％イソプロパノール、65％イソヘキサン；温度：40℃；流量：1．0ml／分；UV検出：220nm］
【０４５４】
ジアステレオマー1を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊30mm、溶媒：アセトニトリル／0．05％ギ酸勾配；（0〜3分10％アセトニトリル〜35分90％アセトニトリルおよびさらに3分90％アセトニトリル）によってさらに精製すると、実施例136の標記化合物10．6mg（理論値の18％、純度99％）が得られた。
【０４５５】
ジアステレオマー2を分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊30mm、溶媒：アセトニトリル／0．05％ギ酸勾配；（0〜3分10％アセトニトリル〜35分90％アセトニトリルおよびさらに3分90％アセトニトリル）によってさらに精製すると、実施例137の標記化合物11．8mg（理論値の20％、純度99％）が得られた。
【０４５６】
実施例136
N−［（1R）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3−フルオロピリジン−2−イル）−7−［（1S）−1−ヒドロキシ−3−アザビシクロ［3．1．0］ヘキサ−3−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー1）
LC−MS（方法2）：Rt＝1．85分；MS（ESIpos）：m／z＝504［M＋H］＋。
1HNMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．53（d，1H），8．81（s，1H），8．51（br． s，1H），8．29（d，1H），8．14−8．01（m，1H），7．82−7．71（m，1H），6．82−6．68（m，1H），6．11−5．89（m，1H），4．46−4．33（m，1H），3．95−3．02（br． m，4H，partially under the water peak），1．69−1．48（m，1H），1．26−1．14（m，1 H），1．10−0．95（m，1H），0．71−0．26（m，5H）．
【０４５７】
実施例137
N−［（1R）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3−フルオロピリジン−2−イル）−7−［（1S）−1−ヒドロキシ−3−アザビシクロ［3．1．0］ヘキサ−3−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー2）
LC−MS（方法2）：Rt＝1．84分；MS（ESIpos）：m／z＝504［M＋H］＋。
1HNMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．54（d，1H），8．81（s，1H），8．51（br． s，1H），8．29（d，1H），8．14−8．03（m，1H），7．82−7．72（m，1H），6．83−6．69（m，1H），6．11−5．90（m，1H），4．46−4．34（m，1H），3．95−3．02（br． m，4H，partially under the water peak），1．68−1．49（m，1H），1．25−1．16（m，1H），1．10−0．95（m，1H），0．70−0．27（m，5H）．
【０４５８】
実施例138
N−［（1R）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化２３６】
2019524722.tif 000240
一般的手順1により、1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例24A）50．0mg（124μmol）を、（1R）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエタンアミン塩酸塩32．7mg（186μmol）と、DMF1．3ml中HATU47．3mg（124μmol）およびDIPEA52μl（0．30mmol）の存在下で反応させた。次いで、1M塩酸水溶液でpHをpH1に調整し、粗生成物を、水性後処理後に、順相クロマトグラフィー（酢酸エチル／シクロヘキサン勾配）によって精製した。これにより、標記化合物48．4mg（理論値の74％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝1．01分；MS（ESIpos）：m／z＝524［M＋H］＋。
1HNMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．26（d，1H），9．05（s，1H），8．72（d，1H），8．67（br． s，1H），8．59−8．51（m，1H），8．43−8．35（m，1H），5．41−5．22（m，1H），4．49−4．36（m，1H），4．33−4．26（m，1H），3．79−3．64（m，1H），3．58−3．44（m，1H），3．03−2．87（m，1H），2．44−2．33（m，1H），1．30−1．18（m，1H），0．71−0．51（m，3H），0．40−0．29（m，1H）．
【０４５９】
実施例139
N−［（1R）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3−フルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化２３７】
2019524722.tif 000241
一般的手順2により、7−クロロ−N−［（1R）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3−フルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例20C）50．0mg（113μmol）および（S）−4−ヒドロキシピロリジン12．6mg（125μmol）を、110℃で、ジオキサン1．5ml中炭酸カリウム23．5mg（170μmol）、酢酸パラジウム2．55mg（11．0μmol）およびキサントホス13．3mg（23．0μmol）の存在下で反応させた。次いで、溶媒を減圧下で除去した。残渣をアセトニトリル3mlおよび水0．5mlに溶解し、分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊30mm、溶媒：アセトニトリル／0．05％ギ酸勾配；0〜3分10％アセトニトリル、〜35分90％アセトニトリルおよびさらに13分90％アセトニトリル）によって精製した。これにより、標記化合物22．2mg（理論値の38％、純度98％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．69分；MS（ESIpos）：m／z＝506［M＋H］＋。
1HNMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．27（d，1H），9．05（s，1H），8．72（d，1H），8．58−8．51（m，2H），8．15−8．08（m，1H），7．85−7．79（m，1H），5．40−5．23（m，1H），4．50−4．36（m，1H），4．32−4．23（m，1H），3．79−3．40（m，2H），3．03−2．86（m，1H），2．43−2．32（m，1H），1．30−1．18（m，1H），0．72−0．51（m，3H），0．42−0．30（m，1H）．
【０４６０】
実施例140
1−（3−フルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−N−［（2R）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化２３８】
2019524722.tif 000242
一般的手順2により、7−クロロ−1−（3−フルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−N−［（2R）−1，1，1−トリフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例21A）35．0mg（82．0μmol）および（S）−4−ヒドロキシピロリジン8．25mg（82．0μmol）を、ジオキサン1．6ml中炭酸セシウム39．9mg（122μmol）、酢酸パラジウム3．30mg（15．0μmol）およびキサントホス17．0mg（29．0μmol）の存在下で反応させた。次いで、溶媒を減圧下で除去した。残渣をアセトニトリル3mlおよび水0．5mlに溶解し、分取HPLC（カラム：Chromatorex C18、10μm、125＊30mm、溶媒：アセトニトリル／0．05％ギ酸勾配；0〜3分10％アセトニトリル、〜34分60％アセトニトリル、1分にわたって〜90％アセトニトリルおよびおよびさらに10分90％アセトニトリル）によって精製した。これにより、標記化合物8．40mg（理論値の21％、純度99％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝0．97分；MS（ESIpos）：m／z＝494［M＋H］＋。
1HNMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．14（d，1H），9．06（s，1H），8．72（d，1H），8．58−8．51（m，2H），8．16−8．09（m，1H），7．85−7．79（m，1H），5．42−5．23（m，1H），4．84−4．68（m，1H），4．31−4．23（m，1H），3．79−3．40（m，2H），3．03−2．86（m，1H），2．43−2．30（m，1H），1．96−1．81（m，1H），1．74−1．59（m，1H），0．98（br． s，3H）．
【０４６１】
実施例141
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4R）−4−メチル−2−オキソイミダゾリジン−1−イル］−4−オキソ−N−［1−（トリフルオロメトキシ）ブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー混合物）
【化２３９】
2019524722.tif 000243
実施例31Dからの化合物（40．0mg、99．7μmol）をDMF990μlに溶解し、HATU（45．5mg、120μmol）およびN，N−ジイソプロピルエチルアミン（69μl、400μmol）を添加し、混合物を室温で15分間撹拌した。次いで、rac−1−（トリフルオロメトキシ）ブタン−2−アミン塩酸塩（23．2mg、120μmol）を添加し、混合物を室温で2．5時間撹拌した。反応溶液を水で希釈し、1N塩酸で酸性化し、酢酸エチルで2回抽出した。合わせた有機相を水で1回洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、ロータリーエバポレーターで濃縮した。残渣を厚層クロマトグラフィー（移動相：ジクロロメタン／メタノール＝10／1）によって精製した。これにより、標的化合物36mg（理論値の66％、純度98％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．89分；MS（ESIpos）：m／z＝541［M＋H］＋
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）δ［ppm］：−0．149（1．25），−0．008（16．00），0．008（8．99），0．146（1．14），0．933（5．79），0．945（9．60），0．951（9．57），0．962（5．23），1．099（5．82），1．111（5．82），1．156（6．07），1．168（5．43），1．235（0．67），1．566（0．97），1．584（1．61），1．600（2．14），1．618（2．20），1．638（1．59），1．661（1．92），1．673（2．17），1．693（2．09），2．328（1．42），2．366（1．03），2．519（7．68），2．524（6．90），2．670（1．36），2．710（0．92），3．092（1．47），3．105（1．56），3．150（1．67），3．163（1．53），3．723（3．06），3．736（3．31），3．779（2．89），3．797（1．98），4．197（7．71），5．754（2．34），7．812（8．93），8．322（1．61），8．343（1．70），8．365（1．59），8．384（1．03），8．407（6．73），8．430（8．82），8．531（1．70），8．539（12．41），8．553（1．34），8．562（9．04），8．636（6．46），8．931（8．60），9．877（3．81），9．896（3．45）．
【０４６２】
実施例141と同様に、1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4R）−4−メチル−2−オキソイミダゾリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例31D）を、適当なアミン（またはその塩；1．2当量）と記載される反応条件下（室温で2．5時間）反応させることによって、表1に示される実施例化合物を調製した。
【０４６３】
【表２Ａ】
2019524722.tif 000244
【表２Ｂ】
2019524722.tif 000245
【表２Ｃ】
2019524722.tif 000246
【０４６４】
実施例145
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−7−（2−オキソイミダゾリジン−1−イル）−N−（4，4，4−トリフルオロ−2−メチルブタン−2−イル）−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化２４０】
2019524722.tif 000247
一般的手順1により、1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−7−（2−オキソイミダゾリジン−1−イル）−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例30A）50．0mg（100μmol、純度78％）を、4，4，4−トリフルオロ−2−メチルブタン−2−アミン塩酸塩21．4mg（121μmol）と、DMF0．39ml中HATU45．8mg（121μmol）およびDIPEA52μl（300μmol）の存在下で反応させた。反応混合物を水、アセトニトリルおよびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、分取HPLC（アセトニトリル／水／0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物15．3mg（理論値の30％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．83分；MS（ESIpos）：m／z＝511［M＋H］＋。
1H NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 9．98（s，1H），8．91（s，1H），8．63（d，1H），8．54（d，1H），8．42（d，1H），8．32（ddd，1H），7．65（br s，1H），3．54−3．70（m，2H），3．32−3．41（m，2H），2．90−3．02（m，2H），1．50（s，6H）．
【０４６５】
実施例146
N−シクロブチル−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−7−（2−オキソイミダゾリジン−1−イル）−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化２４１】
2019524722.tif 000248
一般的手順1により、1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−7−（2−オキソイミダゾリジン−1−イル）−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例30A）25．0mg（64．5μmol、純度78％）を、シクロブタンアミン塩酸塩8．33mg（77．5μmol）と、DMF0．25ml中HATU29．5mg（77．5μmol）およびDIPEA34μl（190μmol）の存在下で反応させた。反応混合物をアセトニトリル、水およびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、粗溶液を分取HPLC（アセトニトリル／水／0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物5．50mg（理論値の19％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．53分；MS（ESIpos）：m／z＝441［M＋H］＋
1H NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 9．94（d，1H），8．89（s，1H），8．63（d，1H），8．54（d，1H），8．41（d，1H），8．32（td，1H），7．60−7．66（m，1H），4．39−4．48（m，1H），3．53−3．69（m，2H），3．32−3．40（m，2H），2．26−2．33（m，2H），1．93−2．03（m，2H），1．66−1．78（m，2H）．
【０４６６】
実施例147
N−［1−（2−クロロフェニル）−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−7−（2−オキソイミダゾリジン−1−イル）−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ラセミ体）
【化２４２】
2019524722.tif 000249
一般的手順1により、1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−7−（2−オキソイミダゾリジン−1−イル）−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例30A）50．0mg（99．4μmol、純度78％）を、1−（2−クロロフェニル）−2，2，2−トリフルオロエタンアミン62．5mg（298μmol）と、DMF0．38ml中HATU45．4mg（119μmol）およびDIPEA52μl（300μmol）の存在下で反応させた。反応混合物をアセトニトリル、水およびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、粗溶液を分取HPLC（アセトニトリル／水／0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物17．2mg（理論値の30％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝2．07分；MS（ESIpos）：m／z＝579［M＋H］＋。
1H NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 11．32（d，1H），9．00（s，1H），8．63（d，1H），8．60（d，1H），8．46（d，1H），8．29−8．36（m，1H），7．48−7．69（m，5H），6．42−6．51（m，1H），3．53−3．70（m，2H），3．33−3．43（m，2H）．
【０４６７】
標記化合物（ラセミ体）15．5mgをキラルHPLC（分取HPLC：カラム：YMC Chiralart Amylose 5μm 250×30mm；移動相：50％n−ヘプタン、50％イソプロパノール；温度：35℃；流量30ml／分；UV検出：220nm）によってエナンチオマーに分離した。
【０４６８】
これにより、（カラムからの溶出の順序で）エナンチオマーA（99％ee）Rt＝8．67分4．00mgおよびエナンチオマーB（98％ee）Rt＝13．68分6．00mgが得られた。
［分析HPLC：カラム：YMC Chiralart Amylose 5μm 250×4．6mm；移動相：50％イソヘキサン、50％イソプロパノール；温度：35℃；流量：1．0ml／分；UV検出：220nm］
【０４６９】
エナンチオマーAを分取HPLC（アセトニトリル／水／0．1％ギ酸）によってさらに得ると、実施例148からの標記化合物3．50mg（理論値の6％、純度100％）が得られた。
【０４７０】
エナンチオマーBを分取HPLC（アセトニトリル／水／0．1％ギ酸）によってさらに得ると、実施例149からの標記化合物3．70mg（理論値の6．5％、純度100％）が得られた。
【０４７１】
実施例148
N−［1−（2−クロロフェニル）−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−7−（2−オキソイミダゾリジン−1−イル）−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（エナンチオマーA）
LC−MS（方法1）：Rt＝1．10分；MS（ESIpos）：m／z＝579［M＋H］＋
1H−NMR（500 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 11．32（br d，1 H），9．00（s，1 H），8．61 − 8．66（m，1 H），8．60（d，1 H），8．46（d，1 H），8．30 − 8．36（m，1 H），7．68（s，1 H），7．59 − 7．67（m，2 H），7．48 − 7．59（m，2 H），6．43 − 6．50（m，1 H），3．54 − 3．69（m，2 H），3．32 − 3．40（m，2 H）．
【０４７２】
実施例149
N−［1−（2−クロロフェニル）−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−7−（2−オキソイミダゾリジン−1−イル）−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（エナンチオマーB）
LC−MS（方法1）：Rt＝1．10分；MS（ESIpos）：m／z＝579［M＋H］＋
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 11．32（br d，1 H），9．00（s，1 H），8．62 − 8．67（m，1 H），8．60（d，1 H），8．46（d，1 H），8．29 − 8．38（m，1 H），8．34（br d，1 H），7．68（s，1 H），7．59 − 7．67（m，2 H），7．47 − 7．59（m，2 H），6．39 − 6．51（m，1 H），3．53 − 3．71（m，2 H），3．34 − 3．40（m，2 H）．
【０４７３】
実施例150
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−7−（2−オキソイミダゾリジン−1−イル）−N−［1−（トリフルオロメチル）シクロブチル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化２４３】
2019524722.tif 000250
一般的手順1により、1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−7−（2−オキソイミダゾリジン−1−イル）−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例30A）50．0mg（99．4μmol、純度78％）を、1−（トリフルオロメチル）シクロブタンアミン41．5mg（298μmol）と、DMF0．38ml中HATU45．4mg（119μmol）およびDIPEA52μl（300μmol）の存在下で反応させた。反応混合物をアセトニトリル、水およびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、粗溶液を分取HPLC（アセトニトリル／水／0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物15．9mg（理論値の31％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．82分；MS（ESIpos）：m／z＝509［M＋H］＋。
1H NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．32（s，1H），8．94（s，1H），8．64（d，1H），8．55（d，1H），8．43（d，1H），8．29−8．36（m，1H），7．66（s，1H），3．53−3．71（m，2H），3．35−3．43（m，2H），2．55−2．64（m，2H），1．89−2．09（m，2H）．
【０４７４】
実施例151
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−N−［1−（トリフルオロメチル）シクロブチル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化２４４】
2019524722.tif 000251
一般的手順1により、1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例24A）50．0mg（124μmol、純度96％）を、1−（トリフルオロメチル）シクロブタンアミン20．7mg（149μmol）と、DMF0．48ml中HATU56．7mg（149μmol）およびDIPEA65μl（370μmol）の存在下で反応させた。反応混合物をアセトニトリル、水およびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、粗溶液を分取HPLC（アセトニトリル／水／0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物48．0mg（理論値の74％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．76分；MS（ESIpos）：m／z＝524［M＋H］＋。
1H NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．22（s，1H），9．01（s，1H），8．71（d，1H），8．65−8．69（m，1H），8．51−8．57（m，1H），8．39（td，1H），5．24−5．40（m，1H），4．26−4．32（m，1H），3．65−3．78（m，1H），3．45−3．56（m，1H），2．88−3．02（m，1H），2．55−2．65（m，4H），2．34−2．42（m，1H），1．91−2．10（m，2H）．
【０４７５】
実施例152
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（3R，4R）−3，4−ジヒドロキシピロリジン−1−イル］−N−（1，1，1，3，3，3−ヘキサフルオロ−2−メチルプロパン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化２４５】
2019524722.tif 000252
一般的手順3により、7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−N−（1，1，1，3，3，3−ヘキサフルオロ−2−メチルプロパン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（実施例29A）23．2mg（46．3μmol）を、（3R，4R）−ピロリジン−3，4−ジオール塩酸塩7．76mg（55．6μmol）と、DMF0．19ml中DIPEA24μl（140μmol）の存在下で反応させた。混合物をアセトニトリル、水およびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、粗溶液を分取HPLC（アセトニトリル／水／0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物13．4mg（理論値の51％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．79分；MS（ESIpos）：m／z＝568［M＋H］＋。
1H NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 11．61（s，1H），8．83（d，1H），8．62（d，1H），8．32−8．37（m，1H），8．30（d，1H），6．79（d，1H），5．05−5．30（m，2H），4．02−4．08（m，1H），3．90−3．95（m，1H），3．57−3．68（m，1H），3．33−3．39（m，1H），3．18−3．28（m，1H），3．03−3．16（m，1H），2．06（br s，3H）．
【０４７６】
実施例153
N−［（2−シクロプロピル−1，1，1−トリフルオロプロパン−2−イル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（3R，4R）−3，4−ジヒドロキシピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー混合物）
【化２４６】
2019524722.tif 000253
GP1により、1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（3R，4R）−3，4−ジヒドロキシピロリジン−1−イル−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸50．0mg（124μmol）を、2−シクロプロピル−1，1，1−トリフルオロプロパン−2−アミン22．7mg（148μmol）と、DMF500μl中HATU56．4mg（148μmol）およびDIPEA65μl（370μmol）の存在下で反応させた。粗生成物を分取HPLC（アセトニトリル／水／0．1％ギ酸）によって2回精製した。これにより、標記化合物30．7mg（理論値の46％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝0．91分；MS（ESIpos）：m／z＝540［M＋H］＋
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．38（d，1 H），8．75（d，1 H），8．61（d，1 H），8．30 − 8．36（m，1 H），8．28（d，1 H），6．76（d，1 H），5．25 − 5．29（m，0．50 H），5．17 − 5．21（m，1 H），5．05 − 5．08（m，0．50 H），4．02 − 4．07（m，1 H），3．90 − 3．95（m，1 H），3．57 − 3．66（m，1 H），3．32 − 3．38（m，1 H），3．19 − 3．25（m，0．50 H），3．10 − 3．18（m，0．50 H），3．03 − 3．08（m，0．50 H），1．60（s，3 H），1．37 − 1．45（m，1 H），0．65 − 0．72（m，1 H），0．54 − 0．60（m，2 H），0．45 − 0．52（m，1 H）．
【０４７７】
実施例154
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−N−［1，1，1−トリフルオロ−3−メチルブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー混合物）
【化２４７】
2019524722.tif 000254
GP1により、1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸80．0mg（199μmol）を、1，1，1−トリフルオロ−3−メチルブタン−2−アミン33．7mg（239μmol）と、DMF1．4ml中HATU90．7mg（239μmol）およびDIPEA100μl（600μmol）の存在下で反応させた。粗生成物を分取HPLC（アセトニトリル／水／0．1％ギ酸）によって精製した。これにより、標記化合物72．9mg（理論値の67％、純度96％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．85分；MS（ESIpos）：m／z＝526［M＋H］＋
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．33（br d，1 H），9．07（s，1 H），8．74（d，1 H），8．63 − 8．70（m，1 H），8．55（br t，1 H），8．35 − 8．43（m，1 H），5．38（br d，0．5 H），5．26（br d，0．5 H），4．75 − 4．85（m，1 H），4．29（br s，1 H），3．65 − 3．78（m，1 H），3．45 − 3．57（m，1 H），2．88 − 3．03（m，1 H），2．34 − 2．43（m，1 H），2．22 − 2．31（m，1 H），1．04（br d，3 H），0．94 − 1．00（m，3 H）．
【０４７８】
実施例155
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（3R，4R）−3，4−ジヒドロキシピロリジン−1−イル］−4−オキソ−N−［1−（トリフルオロメチル）シクロブチル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化２４８】
2019524722.tif 000255
GP1により、1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（3R，4R）−3，4−ジヒドロキシピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸60．0mg（148μmol）を、1−（トリフルオロメチル）シクロブタンアミン塩酸塩31．3mg（178μmol）と、DMF660μl中HATU67．7mg（178μmol）およびDIPEA90μl（520μmol）の存在下で反応させた。粗生成物を分取HPLC（アセトニトリル／水／0．1％ギ酸）によって精製した。これにより、標記化合物59．8mg（理論値の77％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．58分；MS（ESIpos）：m／z＝526［M＋H］＋
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．54（s，1 H），8．77（d，1 H），8．62（d，1 H），8．33（td，1 H），8．27（d，1 H），6．77（d，1 H），5．27（br d，0．50 H），5．19（br s，1 H），5．07（br d，0．50 H），4．05（br s，1 H），3．93（br s，1 H），3．57 − 3．67（m，1 H），3．33 − 3．38（m，1 H），3．19 − 3．26（m，0．50 H），3．03 − 3．17（m，1 H），2．54 − 2．63（m，3 H），1．90 − 2．06（m，2 H）．
【０４７９】
実施例156
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−7−（2−オキソイミダゾリジン−1−イル）−N−［（2R）−1，1，1−トリフルオロ−4−メチルペンタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化２４９】
2019524722.tif 000256
GP1により、1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−7−（2−オキソイミダゾリジン−1−イル）−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸50．0mg（129μmol）を、（2R）−1，1，1−トリフルオロ−4−メチルペンタン−2−アミン40．1mg（258μmol）と、DMF750μl中HATU98．2mg（258μmol）およびDIPEA90μl（520μmol）の存在下で反応させた。粗生成物を分取HPLC（アセトニトリル／水／0．1％ギ酸）によって精製した。これにより、標記化合物18．9mg（理論値の28％、純度99％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝2．05分；MS（ESIpos）：m／z＝525［M＋H］＋
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．16 − 10．23（m，1 H），8．99（s，1 H），8．63（br d，1 H），8．55（d，1 H），8．44（d，1 H），8．29 − 8．36（m，1 H），7．67（s，1 H），4．80 − 4．91（m，1 H），3．54 − 3．71（m，2 H），3．33 − 3．42（m，2 H），1．54 − 1．74（m，3 H），0．95（br d，3 H），0．89（br t，3 H）．
【０４８０】
実施例157
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−7−（2−オキソイミダゾリジン−1−イル）−N−［（2S）−1，1，1−トリフルオロ−4−メチルペンタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化２５０】
2019524722.tif 000257
GP1により、1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−7−（2−オキソイミダゾリジン−1−イル）−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸50．0mg（129μmol）を、（2S）−1，1，1−トリフルオロ−4−メチルペンタン−2−アミン40．0mg（258μmol）と、DMF750μl中HATU98．2mg（258μmol）およびDIPEA90μl（520μmol）の存在下で反応させた。粗生成物を分取HPLC（アセトニトリル／水／0．1％ギ酸）によって精製した。これにより、標記化合物19．2mg（理論値の28％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝2．05分；MS（ESIpos）：m／z＝525［M＋H］＋
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．20（br dd，1 H），8．99（s，1 H），8．63（d，1 H），8．55（d，1 H），8．44（d，1 H），8．30 − 8．36（m，1 H），7．67（s，1 H），4．79 − 4．91（m，1 H），3．54 − 3．70（m，2 H），3．33 − 3．41（m，2 H），1．63 − 1．74（m，2 H），1．54 − 1．63（m，1 H），0．93 − 0．98（m，3 H），0．89（br t，3 H）．
【０４８１】
実施例158
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−N−（1，1，1，3，3，3−ヘキサフルオロプロパン−2−イル）−4−オキソ−7−（2−オキソイミダゾリジン−1−イル）−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化２５１】
2019524722.tif 000258
GP2により、7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−N−（1，1，1，3，3，3−ヘキサフルオロプロパン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド70．0mg（144μmol）を、イミダゾリジン−2−オン124mg（1．44mmol）と、1，4−ジオキサン1．4ml中炭酸カリウム29．8mg（216μmol）、酢酸パラジウム6．46mg（28．8μmol）およびキサントホス16．6mg（28．8μmol）の存在下で反応させた。粗生成物を分取HPLC（アセトニトリル／水／0．1％ギ酸）によって精製した。物質を最後にアセトニトリルから再結晶し、吸引濾別し、少量のアセトニトリルですすぎ、乾燥させ、再度分取HPLC（アセトニトリル／水／0．1％ギ酸）によって精製した。これにより、標記化合物32．7mg（理論値の40％、純度95％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．93分；MS（ESIpos）：m／z＝537［M＋H］＋
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 11．14（d，1 H），9．08（s，1 H），8．65（d，1 H），8．58（d，1 H），8．46（d，1 H），8．31 − 8．37（m，1 H），7．69（s，1 H），6．32 − 6．42（m，1 H），3．54 − 3．70（m，2 H），3．33 − 3．41（m，2 H）．
【０４８２】
実施例159
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−N−［1，1，1，4，4，4−ヘキサフルオロブタン−2−イル］−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー混合物）
【化２５２】
2019524722.tif 000259
GP1により、1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸40．0mg（99．4μmol）を、1，1，1，4，4，4−ヘキサフルオロブタン−2−アミン塩酸塩30．3mg（139μmol）と、DMF370μl中HATU45．4mg（119μmol）およびDIPEA52μl（300μmol）の存在下で反応させた。粗生成物を分取HPLC（アセトニトリル／水／0．1％ギ酸）によって精製した。これにより、標記化合物37．0mg（理論値の63％、純度95％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．74分；MS（ESIpos）：m／z＝566［M＋H］＋
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．37（d，1 H），9．07（s，1 H），8．71（d，1 H），8．64 − 8．68（m，1 H），8．55（br t，1 H），8．36 − 8．42（m，1 H），5．38（br d，0．50 H），5．23 − 5．34（m，1．50 H），4．29（br s，1 H），3．62 − 3．78（m，1 H），3．44 − 3．57（m，1 H），3．10 − 3．22（m，1 H），2．88 − 3．03（m，2 H），2．34 − 2．43（m，1 H）．
【０４８３】
実施例160
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（3R，4R）−3，4−ジヒドロキシピロリジン−1−イル］−N−［1，1，1，4，4，4−ヘキサフルオロブタン−2−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ジアステレオマー混合物）
【化２５３】
2019524722.tif 000260
GP1により、1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（3R，4R）−3，4−ジヒドロキシピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸40．0mg（98．9μmol）を、1，1，1，4，4，4−ヘキサフルオロブタン−2−アミン塩酸塩30．1mg（138μmol）と、DMF370μl中HATU45．1mg（119μmol）およびDIPEA52μl（300μmol）の存在下で反応させた。粗生成物を分取HPLC（アセトニトリル／水／0．1％ギ酸）によって精製した。これにより、標記化合物22．1mg（理論値の37％、純度95％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．57分；MS（ESIpos）：m／z＝568［M＋H］＋
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．70（d，1 H），8．83（t，1 H），8．61（d，1 H），8．30 − 8．36（m，1 H），8．27（d，1 H），8．20（s，1 H），6．78（d，1 H），4．99 − 5．33（m，3 H），4．02 − 4．09（m，1 H），3．88 − 3．97（m，1 H），3．56 − 3．67（m，1 H），3．02 − 3．19（m，3 H），2．90 − 3．01（m，1 H）．
【０４８４】
実施例161
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−7−（2−オキソイミダゾリジン−1−イル）−N−［3，3，4，4，4−ペンタフルオロブタン−2−イル］−1−4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ラセミ体）
【化２５４】
2019524722.tif 000261
GP1により、1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−7−（2−オキソイミダゾリジン−1−イル）−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸220mg（568μmol）を、3，3，4，4，4−ペンタフルオロブタン−2−アミン塩酸塩147mg（738μmol）と、DMF5．1ml中HATU302mg（795μmol）およびDIPEA430μl（2．40mmol）の存在下で反応させた。粗生成物を分取HPLC（アセトニトリル／水／0．1％ギ酸）によって精製した。これにより、標記化合物165mg（理論値の55％、LC／MSによる純度100％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝0．98分；MS（ESIpos）：m／z＝533［M＋H］＋
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．34（d，1 H），8．99（s，1 H），8．63（d，1 H），8．55（d，1 H），8．44（d，1 H），8．36−8．30（m，1 H），7．67（br s，1 H），6．53（br． dd，1H），5．10−4．99（m，1 H），4．65−4．49（m，1H），3．69−3．55（m，2 H），3．40−3．33（m，2 H），1．41（br d，3 H），1．25−1．21（m，3H）．
（1H−NMRによる純度は50％未満であるため、標記化合物にはEC50を与えていない。）
【０４８５】
標記化合物（ラセミ体）165mgをキラルHPLC（分取HPLC：カラム：YMC Chiralart Cellulose SC 5μm 250×20mm；溶離液：50％n−ヘプタン、50％エタノール＋0．2％DEA；温度：35℃；流量15ml／分；UV検出：265nm）によってエナンチオマーに分離した。
【０４８６】
これにより、（カラムからの溶出の順序で）エナンチオマー1（99％ee）Rt＝8．52分48．0mgおよびエナンチオマー2（97．4％ee）Rt＝9．48分50．0mgが得られた。
【０４８７】
［分析HPLC：カラム：Daicel Chiralpak IC 5μm 250×4．6mm；移動相：50％イソヘキサン、50％エタノール＋0．2％DEA；温度：35℃；流量：1．0ml／分；UV検出：265nm］
【０４８８】
エナンチオマー1を分取HPLC（アセトニトリル／水／0．1％ギ酸）によってさらに得ると、実施例162からの標記化合物41．0mg（理論値の14％、純度100％）が得られた。
【０４８９】
エナンチオマー2を分取HPLC（アセトニトリル／水／0．1％ギ酸）によってさらに得ると、実施例163からの標記化合物42．0mg（理論値の14％、純度100％）が得られた。
【０４９０】
実施例162
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−7−（2−オキソイミダゾリジン−1−イル）−N−［3，3，4，4，4−ペンタフルオロブタン−2−イル］−1−4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（エナンチオマー1）
LC−MS（方法2）：Rt＝1．85分；MS（ESIpos）：m／z＝533［M＋H］＋
1H NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ ppm ＝ 10．34（br d，1 H），8．99（br d，1 H），8．63（d，1 H），8．55（d，1 H），8．44（d，1 H），8．33（br t，1 H），7．67（s，1 H），4．98 − 5．11（m，1 H），3．54 − 3．70（m，2 H），3．33 − 3．41（m，2 H），1．41（br d，3 H）．
【０４９１】
実施例163
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−7−（2−オキソイミダゾリジン−1−イル）−N−［3，3，4，4，4−ペンタフルオロブタン−2−イル］−1−4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（エナンチオマー2）
LC−MS（方法2）：Rt＝1．85分；MS（ESIpos）：m／z＝533［M＋H］＋
1H NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ ppm ＝ 10．34（br d，1 H），8．99（br d，1 H），8．63（d，1 H），8．55（d，1 H），8．43（d，1 H），8．33（br t，1 H），7．67（s，1 H），4．97 − 5．11（m，1 H），3．53 − 3．70（m，2 H），3．32 − 3．41（m，2 H），1．41（br d，3 H）．
【０４９２】
実施例164
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−7−（2−オキソイミダゾリジン−1−イル）−N−［1，1，1，2，2−ペンタフルオロペンタン−3−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ラセミ体）
【化２５５】
2019524722.tif 000262
GP1により、1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−7−（2−オキソイミダゾリジン−1−イル）−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸213mg（550μmol）を、1，1，1，2，2−ペンタフルオロペンタン−3−アミン塩酸塩153mg（715μmol）と、DMF4．9ml中HATU293mg（770μmol）およびDIPEA410μl（2．4mmol）の存在下で反応させた。粗生成物を分取HPLC（カラム：アセトニトリル／水／0．1％ギ酸）によって精製した。物質をアセトニトリルおよびDMFから再結晶し、沈殿を吸引濾別し、少量のアセトニトリルで洗浄し、乾燥させた。次いで、この物質を分取HPLC（アセトニトリル／水／0．1％ギ酸）によって精製した。これにより、標記化合物117mg（理論値の39％、純度96％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝1．03分；MS（ESIpos）：m／z＝547［M＋H］＋
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．26（d，1 H），8．97 − 9．02（m，1 H），8．63（d，1 H），8．56（d，1 H），8．44（d，1 H），8．30 − 8．36（m，1 H），7．67（s，1 H），4．83 − 4．96（m，1 H），3．54 − 3．70（m，2 H），3．33 − 3．41（m，2 H），1．88 − 1．98（m，1 H），1．62 − 1．73（m，1 H），0．94 − 1．00（m，3 H）．
【０４９３】
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−7−（2−オキソイミダゾリジン−1−イル）−N−［1，1，1，2，2−ペンタフルオロペンタン−3−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ラセミ体）117mgを、キラルHPLC（分取HPLC：カラムYMC Chiralart Cellulose SB、5μm、250×20mm；移動相：50％n−ヘプタン／50％イソプロパノール＋0．2％DEA；流量15ml／分；温度：30℃、検出：220nm）によってエナンチオマーに分離した。
【０４９４】
これにより、（カラムからの溶出の順序で）エナンチオマーA（＞99％ee）Rt＝5．65分55．0mgおよびエナンチオマーB（96．4％ee）Rt＝6．44分57．0mgが得られた。［HPLC：カラムYMC Cellulose SB、1ml／分；5μm、250×4．6mm；移動相：50％n−ヘプタン／50％イソプロパノール＋0．2％DEA；検出：265nm］。
【０４９５】
エナンチオマーAを分取HPLC（カラム：アセトニトリル／水／0．1％ギ酸）によってさらに得ると、実施例165からの標記化合物42．0mg（純度100％）が得られた。
【０４９６】
エナンチオマーBを分取HPLC（カラム：アセトニトリル／水／0．1％ギ酸）によってさらに得ると、実施例166からの標記化合物40．0mg（純度100％）が得られた。
【０４９７】
実施例165
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−7−（2−オキソイミダゾリジン−1−イル）−N−［1，1，1，2，2−ペンタフルオロペンタン−3−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（エナンチオマーA）
LC−MS（方法2）：Rt＝1．98分；MS（ESIpos）：m／z＝547［M＋H］＋
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）δ［ppm］：−0．149（0．60），−0．008（5．43），0．008（5．16），0．146（0．60），0．948（4．38），0．965（10．46），0．977（11．06），0．995（5．03），1．637（1．34），1．655（1．87），1．663（1．71），1．671（2．27），1．681（2．11），1．690（1．91），1．698（2．23），1．716（1．58），1．734（0．45），1．931（2．00），2．329（0．71），2．367（0．69），2．524（2．58），2．671（0．80），2．711（0．80），3．342（5．10），3．361（5．16），3．383（3．27），3．552（1．00），3．578（2．96），3．595（2．98），3．618（1．89），3．632（2．18），3．655（3．16），3．672（2．47），3．698（0．71），4．854（1．31），4．880（1．74），4．906（1．76），4．931（1．29），7．671（11．17），8．310（2．27），8．331（4．25），8．354（2．23），8．429（11．53），8．452（16．00），8．549（15．98），8．572（11．33），8．630（10．19），8．636（9．75），8．995（7．23），8．999（7．61），10．247（6．25），10．272（6．05）．
【０４９８】
実施例166
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−7−（2−オキソイミダゾリジン−1−イル）−N−［1，1，1，2，2−ペンタフルオロペンタン−3−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（エナンチオマーB）
LC−MS（方法2）：Rt＝1．99分；MS（ESIpos）：m／z＝547［M＋H］＋
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）δ［ppm］：−0．008（2．79），0．008（2．51），0．948（4．46），0．966（10．56），0．977（11．21），0．995（5．10），1．637（1．35），1．655（1．92），1．663（1．73），1．671（2．32），1．681（2．12），1．690（1．92），1．698（2．24），1．716（1．61），1．734（0．47），1．933（2．02），2．074（1．14），2．329（0．49），2．368（0．47），2．671（0．61），2．711（0．51），3．342（5．10），3．361（5．24），3．384（3．36），3．553（0．96），3．578（3．06），3．595（3．04），3．618（1．92），3．633（2．24），3．655（3．22），3．673（2．51），3．699（0．71），4．855（1．33），4．880（1．79），4．906（1．77），4．932（1．32），7．671（11．39），8．310（2．30），8．330（4．28），8．354（2．24），8．429（11．43），8．452（16．00），8．549（15．71），8．572（11．19），8．630（10．19），8．636（9．78），8．995（7．19），9．000（7．58），10．247（6．36），10．272（6．16）．
【０４９９】
実施例167
N−［（1S）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエチル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［3−（2−ヒドロキシエチル）−2−オキソイミダゾリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化２５６】
2019524722.tif 000263
GP1により、1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［3−（2−ヒドロキシエチル）−2−オキソイミダゾリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（実施例25A）40．0mg（92．7μmol、純度100％）を、（1S）−1−シクロプロピル−2，2，2−トリフルオロエタンアミン塩酸塩19．5mg（111μmol）と、DMF0．6ml中HATU42．3mg（111μmol）およびDIPEA65．0μl（371μmol）の存在下で反応させた。反応混合物を水、アセトニトリルおよびギ酸で希釈し、Milliporeフィルタを通して濾過し、分取HPLC（アセトニトリル／水／0．1％ギ酸）によって精製すると、標記化合物35．3mg（理論値の69％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．77分；MS（ESIpos）：m／z＝553［M＋H］。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）：δ［ppm］＝ 10．34（br d，1H），8．98（s，1H），8．64（d，1H），8．57（d，1H），8．45（d，1H），8．33（ddd，1H），4．75（t，1H），4．42（sxt，1H），3．44−3．62（m，6H），3．22−3．30（m，2H），1．19−1．27（m，1H），0．51−0．70（m，3H），0．30−0．39（m，1H）．
【０５００】
実施例168
N−シクロブチル−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（3R，4R）−3，4−ジヒドロキシピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化２５７】
2019524722.tif 000264
GP1により、1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（3R，4R）−3，4−ジヒドロキシピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸20．7mg（51．2μmol）を、シクロブタンアミン塩酸塩6．61mg（61．4μmol）と、DMF200μl中HATU23．4mg（61．4μmol）およびDIPEA27μl（150μmol）の存在下で反応させた。粗生成物を分取HPLC（カラム：アセトニトリル／水／0．1％ギ酸）によって2回精製した。これにより、標記化合物7．90mg（理論値の34％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝0．71分；MS（ESIpos）：m／z＝458［M＋H］＋
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）δ［ppm］：−0．149（2．35），0．146（2．30），0．948（0．81），0．956（1．15），0．973（1．10），1．235（0．86），1．658（1．63），1．677（3．40），1．683（3．21），1．703（6．66），1．721（7．95），1．728（6．37），1．744（4．55），1．943（4．74），1．965（6．56），1．987（4．41），2．073（6．18），2．086（2．54），2．281（7．86），2．291（6．90），2．300（7．33），2．319（3．45），2．327（3．50），2．367（1．05），2．670（1．72），2．710（1．05），3．033（2．49），3．065（3．11），3．111（1．87），3．144（3．21），3．208（2．87），3．582（2．40），3．610（3．35），3．637（1．82），3．924（6．61），4．049（6．85），4．379（0．67），4．398（2．83），4．419（5．41），4．439（5．32），4．459（2．78），4．479（0．72），5．063（1．72），5．187（3．02），5．266（1．68），6．739（14．04），6．761（14．42），8．252（15．19），8．274（16．00），8．302（3．45），8．324（6．04），8．341（3．21），8．346（3．31），8．607（13．56），8．613（13．08），8．710（9．39），8．716（10．78），10．110（9．39），10．129（9．20）．
【０５０１】
実施例169
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−7−（2−オキソイミダゾリジン−1−イル）−N−［1，1，1−トリフルオロ−3−メチルブタン−2−イル］−1−4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（ラセミ体）
【化２５８】
2019524722.tif 000265
GP1により、1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−7−（2−オキソイミダゾリジン−1−イル）−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸80．0mg（207μmol）を、1，1，1−トリフルオロ−3−メチルブタン−2−アミン58．3mg（413μmol）と、DMF1．4ml中HATU157mg（413μmol）およびDIPEA140μl（830μmol）の存在下で反応させた。粗生成物を分取HPLC（カラム：アセトニトリル／水／0．1％ギ酸）によって精製した。これにより、標記化合物33．7mg（理論値の32％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．90分；MS（ESIpos）：m／z＝511［M＋H］＋
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）δ［ppm］：0．889（9．48），0．899（9．69），0．906（10．59），0．915（8．34），0．959（8．58），0．972（13．09），0．986（8．58），1．032（12．36），1．048（12．28），2．074（3．55），2．093（0．98），2．109（0．62），2．237（1．99），2．254（2．67），2．263（2．63），2．281（1．86），2．328（0．79），2．367（0．45），2．671（0．73），3．342（5．03），3．362（4．86），3．385（2．99），3．582（2．72），3．598（2．78），3．622（1．84），3．635（2．12），3．656（2．99），3．674（2．29），4．254（0．77），4．266（0．81），4．278（1．07），4．288（0．92），4．301（0．79），4．768（1．63），4．777（1．80），4．791（2．42），4．800（2．48），4．813（1．73），4．823（1．62），6．568（0．79），6．584（1．41），6．609（1．26），7．673（9．80），8．307（2．08），8．313（2．40），8．334（4．13），8．351（2．31），8．357（2．37），8．432（8．13），8．455（11．06），8．574（10．57），8．597（8．06），8．637（8．19），8．642（7．94），9．002（16．00），10．408（3．08），10．426（3．12）．
【０５０２】
実施例170
N−（3，3−ジフルオロ−1−メチルシクロブチル）−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（3R，4R）−3，4−ジヒドロキシピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化２５９】
2019524722.tif 000266
GP1により、1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（3R，4R）−3，4−ジヒドロキシピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸60．0mg（148μmol）を、3，3−ジフルオロ−1−メチルシクロブタンアミン塩酸塩28．1mg（178μmol）と、DMF660μl中HATU67．7mg（178μmol）およびDIPEA90μl（520μmol）の存在下で反応させた。粗生成物を分取HPLC（カラム：アセトニトリル／水／0．1％ギ酸）によって精製した。これにより、標記化合物45．5mg（理論値の60％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．43分；MS（ESIpos）：m／z＝508［M＋H］＋
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）δ［ppm］：1．555（16．00），2．073（3．51），2．328（0．71），2．665（1．27），2．697（1．92），2．721（1．91），2．753（0．98），2．977（1．00），3．013（2．65），3．047（2．62），3．147（1．17），3．330（5．13），3．613（0．99），3．925（1．94），4．051（1．96），5．207（0．48），6．746（4．28），6．769（4．23），8．216（1．05），8．250（5．12），8．272（4．71），8．309（1．01），8．331（1．78），8．348（0．94），8．612（4．56），8．618（4．23），8．735（3．84），8．741（4．17），10．275（5．29）．
【０５０３】
実施例171
N−（3，3−ジフルオロ−1−メチルシクロブチル）−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−7−（2−オキソイミダゾリジン−1−イル）−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化２６０】
2019524722.tif 000267
GP1により、1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−7−（2−オキソイミダゾリジン−1−イル）−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸50．0mg（129μmol）を、3，3−ジフルオロ−1−メチルシクロブタンアミン塩酸塩40．7mg（258μmol）と、DMF750μl中HATU98．2mg（258μmol）およびDIPEA90μl（520μmol）の存在下で反応させた。粗生成物を分取HPLC（カラム：アセトニトリル／水／0．1％ギ酸）によって精製した。これにより、標記化合物17．6mg（理論値の26％、純度95％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．69分；MS（ESIpos）：m／z＝491［M＋H］＋
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）δ［ppm］：−0．008（2．82），0．008（2．53），1．382（16．00），1．567（12．75），2．073（2．14），2．328（0．62），2．446（1．00），2．465（1．20），2．670（0．81），2．679（0．92），2．712（1．75），2．737（1．51），2．770（0．79），2．821（1．05），2．856（2．83），2．893（2．63），2．929（0．84），2．989（0．73），3．023（2．00），3．059（1．79），3．093（0．58），3．356（1．59），3．378（0．96），3．573（0．83），3．589（0．88），3．625（0．66），3．648（0．94），3．664（0．71），6．237（2．55），7．649（3．22），8．301（0．82），8．307（0．95），8．328（1．39），8．345（0．82），8．351（0．90），8．410（3．70），8．432（5．00），8．527（5．13），8．549（3．54），8．631（4．29），8．638（4．07），8．911（8．53），10．081（4．04）．
【０５０４】
実施例172
N−（3，3−ジフルオロ−1−メチルシクロブチル）−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化２６１】
2019524722.tif 000268
GP1により、1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（4S）−4−ヒドロキシ−2−オキソピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸50．0mg（124μmol）を、3，3−ジフルオロ−1−メチルシクロブタンアミン塩酸塩23．5mg（149μmol）と、DMF750μl中HATU56．7mg（149μmol）およびDIPEA87μl（500μmol）の存在下で反応させた。粗生成物を分取HPLC（カラム：アセトニトリル／水／0．1％ギ酸）によって精製した。これにより、標記化合物37．7mg（理論値の60％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．63分；MS（ESIpos）：m／z＝506［M＋H］＋
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）δ［ppm］：−0．008（0．93），0．008（0．87），1．572（16．00），2．074（0．87），2．344（0．67），2．368（0．78），2．387（0．79），2．411（0．73），2．524（0．72），2．685（0．81），2．721（1．81），2．744（1．82），2．755（1．25），2．778（0．94），2．888（0．46），2．902（0．49），2．931（0．46），2．950（0．65），2．967（0．53），2．991（1．16），3．025（2．48），3．060（2．21），3．095（0．69），3．460（0．60），3．490（0．77），3．519（0．57），3．549（0．74），3．657（0．48），3．668（0．56），3．687（0．42），3．699（0．40），3．728（0．53），3．738（0．55），3．757（0．44），4．292（1．37），5．253（0．96），5．260（0．96），5．373（0．92），5．382（0．88），8．361（0．81），8．367（0．92），8．388（1．53），8．406（0．85），8．412（0．89），8．504（0．74），8．525（1．66），8．547（1．03），8．664（2．25），8．681（4．96），8．704（3．86），8．977（5．82），9．999（4．93）．
【０５０５】
実施例173
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（2R）−2−（ヒドロキシメチル）ピペリジン−1−イル］−4−オキソ−N−（3，3，4，4，4−ペンタフルオロ−2−メチルブタン−2−イル）−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化２６２】
2019524722.tif 000269
7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−N−（3，3，4，4，4−ペンタフルオロ−2−メチルブタン−2−イル）−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（50．0mg、101μmol）をDMF1．1mlに溶解し、（2R）−ピペリジン−2−イルメタノール（12．8mg、111μmol）およびN，N−ジイソプロピルエチルアミン（61μl、350μmol）を添加し、混合物を55℃で18時間撹拌した。さらなる（2R）−ピペリジン−2−イルメタノール（11．6mg、101μmol）およびN，N−ジイソプロピルエチルアミン（18μl、100μmol）を添加し、混合物を55℃で一晩撹拌した。反応混合物を冷却し、分取HPLC（カラム：アセトニトリル／水／0．1％ギ酸）によって精製した。これにより、標記化合物40．8mg（理論値の70％、純度99％）が得られた。
LC−MS（方法3）：Rt＝2．17分；MS（ESIpos）：m／z＝576［M＋H］＋
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）δ［ppm］：−0．008（1．61），0．008（1．62），1．510（1．42），1．547（1．15），1．577（0．84），1．612（0．70），1．682（16．00），1．778（1．06），1．810（0．94），3．503（0．99），3．516（0．93），4．049（0．81），4．081（0．77），4．225（0．92），4．690（1．00），7．075（3．25），7．099（3．39），8．231（2．79），8．254（2．91），8．278（0．55），8．298（0．60），8．322（0．60），8．602（4．13），8．608（4．02），8．756（6．43），10．638（5．18）．
【０５０６】
実施例174
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［4−ヒドロキシ−4−（ヒドロキシメチル）ピペリジン−1−イル］−4−オキソ−N−（3，3，4，4，4−ペンタフルオロ−2−メチルブタン−2−イル）−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化２６３】
2019524722.tif 000270
7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−N−（3，3，4，4，4−ペンタフルオロ−2−メチルブタン−2−イル）−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（50．0mg、101μmol）をDMF1．1mlに溶解し、4−（ヒドロキシメチル）ピペリジン−4−オール塩酸塩（19．5mg、純度95％、111μmol）およびN，N−ジイソプロピルエチルアミン（79μl、450μmol）を添加し、混合物を55℃で18時間撹拌した。反応混合物を冷却し、分取HPLC（カラム：アセトニトリル／水／0．1％ギ酸）によって精製した。これにより、標記化合物49mg（理論値の82％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法3）：Rt＝1．82分；MS（ESIpos）：m／z＝592［M＋H］＋
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）δ［ppm］：1．337（1．29），1．371（1．16），1．469（0．99），1．492（1．08），1．520（0．53），1．681（16．00），2．328（0．48），2．670（0．47），3．148（4．54），3．162（4．61），3．915（1．39），3．942（1．25），4．319（5．79），4．554（1．11），4．568（2．37），4．583（1．07），7．111（3．27），7．134（3．41），8．249（4．45），8．272（4．15），8．313（0．90），8．319（1．07），8．340（1．60），8．358（0．95），8．364（1．03），8．611（4．88），8．617（4．69），8．764（10．14），10．621（5．45）．
【０５０７】
実施例175
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（2R）−2−（ヒドロキシメチル）ピロリジン−1−イル］−4−オキソ−N−（3，3，4，4，4−ペンタフルオロブタン−2−イル）−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（エナンチオマー的に純粋）
【化２６４】
2019524722.tif 000271
7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−N−［3，3，4，4，4−ペンタフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（50．0mg、104μmol）をDMF1．1mlに溶解し、（2R）−ピロリジン−2−イルメタノール（11μl、純度99％、110μmol）およびN，N−ジイソプロピルエチルアミン（63μl、360μmol）を添加し、混合物を55℃で18時間撹拌した。反応混合物を冷却し、分取HPLC（カラム：アセトニトリル／水／0．1％ギ酸）によって精製した。これにより、標記化合物52mg（理論値の92％、純度100％）が得られた。
LC−MS（方法3）：Rt＝1．98分；MS（ESIpos）：m／z＝548［M＋H］＋
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）δ［ppm］：1．387（15．87），1．404（16．00），1．953（3．83），2．328（1．78），2．366（0．61），2．670（1．96），2．710（0．61），3．015（1．22），3．167（1．04），3．487（1．17），3．652（1．04），3．768（0．87），4．019（0．70），4．383（1．00），4．562（1．22），4．973（1．09），4．993（1．78），5．018（2．04），5．039（2．04），5．063（1．74），5．082（0．91），6．742（1．96），6．762（2．04），6．914（0．91），8．258（4．52），8．279（5．17），8．305（2．65），8．591（13．61），8．597（13．48），8．824（9．26），10．541（4．70），10．564（4．61）．
【０５０８】
実施例176
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（2R）−2−（ヒドロキシメチル）ピペリジン−1−イル］−4−オキソ−N−（3，3，4，4，4−ペンタフルオロブタン−2−イル）−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（エナンチオマー的に純粋）
【化２６５】
2019524722.tif 000272
7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−N−［3，3，4，4，4−ペンタフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（50．0mg、104μmol）をDMF1．1mlに溶解し、（2R）−ピペリジン−2−イルメタノール（13．1mg、114μmol）およびN，N−ジイソプロピルエチルアミン（63μl、360μmol）を添加し、混合物を55℃で18時間撹拌した。さらなる（2R）−ピペリジン−2−イルメタノール（11．9mg、104μmol）およびN，N−ジイソプロピルエチルアミン（18μl、100μmol）を添加し、混合物を55℃で一晩撹拌した。反応混合物を冷却し、分取HPLC（カラム：アセトニトリル／水／0．1％ギ酸）によって精製した。これにより、標記化合物39mg（理論値の66％、純度99％）が得られた。
LC−MS（方法3）：Rt＝2．07分；MS（ESIpos）：m／z＝562［M＋H］＋
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）δ［ppm］：−0．149（0．39），0．146（0．41），1．314（1．37），1．342（1．52），1．387（16．00），1．404（16．00），1．504（4．80），1．549（3．76），1．579（2．65），1．614（2．21），1．647（1．48），1．780（3．39），1．809（3．03），2．328（0．69），2．670（0．79），2．831（1．18），3．503（3．17），3．519（3．00），4．048（2．68），4．079（2．54），4．228（3．12），4．694（3．09），4．971（0．92），4．992（1．65），5．015（1．95），5．036（1．95），5．060（1．67），5．080（0．88），7．086（9．59），7．109（9．99），8．223（8．59），8．246（8．73），8．273（1．76），8．303（1．51），8．330（1．73），8．348（0．91），8．608（9．36），8．807（12．83），10．531（7．24），10．555（6．98）．
【０５０９】
実施例177
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［4−ヒドロキシ−4−（ヒドロキシメチル）ピペリジン−1−イル］−4−オキソ−N−（3，3，4，4，4−ペンタフルオロブタン−2−イル）−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（エナンチオマー的に純粋）
【化２６６】
2019524722.tif 000273
7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−N−［3，3，4，4，4−ペンタフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（50．0mg、104μmol）をDMF1．1mlに溶解し、4−（ヒドロキシメチル）ピペリジン−4−オール塩酸塩（20．1mg、純度95％、114μmol）およびN，N−ジイソプロピルエチルアミン（63μl、360μmol）を添加し、混合物を55℃で18時間撹拌した。反応混合物を冷却し、分取HPLC（カラム：アセトニトリル／水／0．1％ギ酸）によって精製した。生成物を分取HPLC（カラム：アセトニトリル／水／0．1％ギ酸）によって再精製した。生成物含有分画を合わせ、濃縮し、水／アセトニトリルから凍結乾燥した。これにより、標記化合物17．2mg（理論値の28％、純度99％）が得られた。
LC−MS（方法3）：Rt＝1．72分；MS（ESIpos）：m／z＝578［M＋H］＋
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）δ［ppm］：−0．149（0．79），−0．008（9．63），0．008（6．77），0．146（0．79），0．936（0．62），0．953（0．62），1．340（3．98），1．386（14．49），1．403（13．31），1．459（2．99），1．492（3．19），1．524（1．38），2．328（1．25），2．670（1．28），3．149（13．21），3．163（13．17），3．917（4．24），3．941（3．68），4．322（16．00），4．555（3．32），4．569（6．67），4．583（3．02），4．971（0．89），4．994（1．51），5．013（1．71），5．037（1．68），5．060（1．41），5．081（0．72），7．121（9．03），7．144（9．17），8．242（12．42），8．264（11．33），8．319（2．27），8．341（3．81），8．363（2．07），8．613（9．03），8．619（8．51），8．808（6．51），8．816（6．97），10．516（5．03），10．540（4．86）．
【０５１０】
実施例178
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−N−（1，1，1，3，3，3−ヘキサフルオロプロパン−2−イル）−7−［（2R）−2−（ヒドロキシメチル）ピペリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化２６７】
2019524722.tif 000274
7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−N−（1，1，1，3，3，3−ヘキサフルオロプロパン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（50．0mg、103μmol）をDMF1mlに溶解し、（2R）−ピペリジン−2−イルメタノール（13．0mg、113μmol）およびN，N−ジイソプロピルエチルアミン（63μl、360μmol）を添加し、混合物を55℃で週末にわたって撹拌した。反応混合物を冷却し、分取HPLC（カラム：アセトニトリル／水／0．1％ギ酸）によって精製した。生成物含有分画を合わせ、濃縮し、水／アセトニトリルから凍結乾燥した。これにより、標記化合物33．4mg（理論値の57％、純度99％）が得られた。
LC−MS（方法3）：Rt＝2．13分；MS（ESIpos）：m／z＝566［M＋H］＋
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）δ［ppm］：−0．149（0．80），−0．008（7．72），0．008（8．00），0．146（0．82），1．315（1．38），1．505（5．30），1．551（3．89），1．581（2．75），1．617（2．23），1．782（3．63），1．810（3．26），2．328（1．02），2．671（1．17），2．871（1．17），3．508（3．74），3．522（3．57），4．057（2．83），4．089（2．79），4．239（3．26），4．702（3．52），6．276（0．76），6．294（1．97），6．319（2．79），6．337（2．96），6．355（1．95），7．115（11．76），7．139（12．41），8．247（10．66），8．270（10．94），8．295（1．77），8．316（2．14），8．342（2．23），8．361（1．21），8．619（16．00），8．626（15．72），8．900（15．11），11．382（9．10），11．407（8．71）．
【０５１１】
実施例179
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−N−（1，1，1，3，3，3−ヘキサフルオロプロパン−2−イル）−7−［4−ヒドロキシ−4−ヒドロキシメチル）ピペリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化２６８】
2019524722.tif 000275
7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−N−（1，1，1，3，3，3−ヘキサフルオロプロパン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（50．0mg、103μmol）をDMF1mlに溶解し、4−（ヒドロキシメチル）ピペリジン−4−オール塩酸塩（1：1）（19．9mg、純度95％、113μmol）およびN，N−ジイソプロピルエチルアミン（81μl、460μmol）を添加し、混合物を55℃で週末にわたって撹拌した。反応混合物を冷却し、分取HPLC（カラム：アセトニトリル／水／0．1％ギ酸）によって精製した。生成物含有分画を合わせ、濃縮し、水／アセトニトリルから凍結乾燥した。これにより、標記化合物31．5mg（理論値の52％、純度99％）が得られた。
LC−MS（方法3）：Rt＝1．80分；MS（ESIpos）：m／z＝582［M＋H］＋
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）δ［ppm］：−0．149（0．70），0．146（0．72），1．350（2．52），1．382（2．54），1．475（2．14），1．499（2．32），1．529（1．10），2．329（0．85），2．368（0．66），2．671（0．98），2．711（0．72），3．153（8．93），3．167（9．21），3．931（3．22），3．961（2．80），4．334（10．99），4．563（2．14），4．577（4．38），4．591（2．14），6．296（1．09），6．320（1．64），6．338（1．71），6．357（1．16），7．150（6．04），7．173（6．32），8．266（7．77），8．288（7．29），8．332（1．71），8．337（2．01），8．359（3．41），8．376（1．84），8．382（2．01），8．628（8．38），8．634（8．49），8．907（16．00），11．365（5．14），11．390（4．93）．
【０５１２】
実施例180
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−N−（1，1，1，3，3，3−ヘキサフルオロプロパン−2−イル）−7−［（2R）−2−（ヒドロキシメチル）ピロリジン−1−イル］−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化２６９】
2019524722.tif 000276
7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−N−（1，1，1，3，3，3−ヘキサフルオロプロパン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（50．0mg、103μmol）をDMF1mlに溶解し、（2R）−ピロリジン−2−イルメタノール（11μl、純度99％、110μmol）およびN，N−ジイソプロピルエチルアミン（63μl、360μmol）を添加し、混合物を55℃で週末にわたって撹拌した。反応混合物を冷却し、分取HPLC（カラム：アセトニトリル／水／0．1％ギ酸）によって精製した。生成物含有分画を合わせ、濃縮し、水／アセトニトリルから凍結乾燥した。これにより、標記化合物34mg（理論値の59％、純度99％）が得られた。
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）δ［ppm］：−0．149（1．69），−0．008（15．45），0．008（16．00），0．146（1．69），1．958（3．28），2．328（1．31），2．366（0．55），2．670（1．47），2．710（0．60），3．011（1．09），3．046（0．98），3．158（0．98），3．521（1．04），3．654（0．87），3．774（0．82），4．039（0．55），4．392（1．04），4．570（1．20），4．881（0．60），4．946（0．44），6．295（1．58），6．314（2．29），6．338（2．40），6．356（1．58），6．772（1．86），6．792（2．02），6．961（0．87），8．234（0．93），8．286（3．93），8．309（3．93），8．606（10．87），8．612（10．48），8．921（3．60），11．391（3．71），11．415（3．71）．
【０５１３】
実施例181
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−（2−オキサ−6−アザスピロ［3．3］ヘプタ−6−イル）−4−オキソ−N−［3，3，4，4，4−ペンタフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（エナンチオマー的に純粋）
【化２７０】
2019524722.tif 000277
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−（2−オキサ−6−アザスピロ［3．3］ヘプタ−6−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（150mg、375μmol）を最初にDMF2．8mlに装入し、HATU（171mg、450μmol）およびN，N−ジイソプロピルエチルアミン（290μl、1．7mmol）を添加し、3，3，4，4，4−ペンタフルオロブタン−2−アミン塩酸塩（89．7mg、450μmol）を添加した。混合物を室温で2晩撹拌した。水を添加し、反応溶液を酢酸エチルで3回抽出し、濃縮した。アセトニトリル、水およびTFAを混合物に添加した。これにより、固体の沈殿が得られた。懸濁液を酢酸エチルに溶解し、水で2回および重炭酸ナトリウム溶液で2回洗浄した。合わせた水相を酢酸エチルで再抽出した。混合物を濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（移動相：ジクロロメタン／シクロヘキサン／メタノール勾配：100：50：1〜100：20：1）によって精製した。これにより、標的化合物158mg（理論値の76％、純度98％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝1．03分；MS（ESIpos）：m／z＝546［M＋H］＋
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）δ［ppm］：−0．149（0．75），−0．008（5．81），0．008（6．07），0．147（0．70），1．381（4．23），1．398（6．18），2．328（1．23），2．366（0．60），2．670（1．26），2．710（0．60），4．109（0．68），4．660（16．00），5．009（0．57），6．590（4．12），6．612（4．16），8．263（4．53），8．285（4．60），8．315（1．25），8．603（3．34），8．609（3．30），8．812（2．31），8．820（2．58），10．491（1．92），10．514（1．89）．
【０５１４】
実施例182
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−（2−オキサ−6−アザスピロ［3．3］ヘプタ−6−イル）−4−オキソ−N−（3，3，4，4，4−ペンタフルオロ−2−メチルブタン−2−イル）−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化２７１】
2019524722.tif 000278
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−（2−オキサ−6−アザスピロ［3．3］ヘプタ−6−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボン酸（150mg、374μmol）を最初にDMF2．8mlに装入し、HATU（171mg、449μmol）およびN，N−ジイソプロピルエチルアミン（290μl、1．7mmol）を添加し、3，3，4，4，4−ペンタフルオロ−2−メチルブタン−2−アミン塩酸塩（95．9mg、449μmol）を添加した。反応物を室温で2晩撹拌した。酢酸エチルを添加し、反応溶液を水で2回抽出した。合わせた水相を酢酸エチルで2回再抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、蒸発によって濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（移動相：ジクロロメタン／シクロヘキサン／メタノール勾配：100：50：1〜100：20：1）によって精製した。これにより、標的化合物187mg（理論値の87％、純度97％）が得られた。
LC−MS（方法1）：Rt＝1．12分；MS（ESIpos）：m／z＝560［M＋H］＋
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）δ［ppm］：−0．149（0．47），−0．008（3．55），0．008（3．46），0．146（0．42），1．398（5．78），1．676（15．55），2．323（0．64），2．328（0．91），2．332（0．66），2．366（0．55），2．523（2．42），2．665（0．74），2．670（1．02），2．674（0．72），2．710（0．59），4．112（0．62），4．659（16．00），6．581（4．53），6．603（4．59），8．272（4．78），8．288（1．00），8．294（5．46），8．310（1．34），8．315（1．42），8．332（0．89），8．338（0．96），8．600（4．29），8．607（4．12），8．767（8．03），10．600（5．01）．
【０５１５】
実施例183
7−［3，3−ビス（ヒドロキシメチル）アゼチジン−1−イル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−N−［3，3，4，4，4−ペンタフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（エナンチオマー的に純粋）
【化２７２】
2019524722.tif 000279
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−（2−オキサ−6−アザスピロ［3．3］ヘプタ−6−イル）−4−オキソ−N−［3，3，4，4，4−ペンタフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（エナンチオマー的に純粋）（152mg、純度98％、273μmol）を最初にトリフルオロ酢酸（1．7ml、22mmol）に装入し、水1．7mlおよびアセトニトリル1．7mlを添加し、混合物を室温で2日間撹拌した。反応溶液を分取HPLC（RP18カラム、移動相：0．1％TFAを添加したアセトニトリル／水勾配）によって精製した。生成物分画をロータリーエバポレーターで濃縮した。残渣をジクロロメタンに溶解し、飽和重炭酸ナトリウム水溶液で2回洗浄した。合わせた水相をジクロロメタンで再抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、蒸発によって濃縮した。これにより、標的化合物86mg（理論値の55％、純度99％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．66分；MS（ESIpos）：m／z＝564［M＋H］＋
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）δ［ppm］：−0．149（1．11），−0．008（8．96），0．008（8．69），0．146（1．11），1．146（0．49），1．234（1．29），1．383（13．86），1．400（13．86），2．328（2．54），2．366（1．16），2．670（2．76），2．710（1．20），3．473（14．08），3．803（2．54），4．831（3．57），5．013（1．78），5．033（1．83），5．056（1．60），6．585（14．13），6．607（14．04），8．238（16．00），8．260（15．06），8．286（2．23），8．309（4．06），8．330（2．14），8．594（11．81），8．601（11．59），8．795（7．44），8．803（8．38），10．527（6．11），10．551（5．84）．
【０５１６】
実施例184
7−［3，3−ビス（ヒドロキシメチル）アゼチジン−1−イル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−N−（3，3，4，4，4−ペンタフルオロ−2−メチルブタン−2−イル）−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化２７３】
2019524722.tif 000280
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−（2−オキサ−6−アザスピロ［3．3］ヘプタ−6−イル）−4−オキソ−N−（3，3，4，4，4−ペンタフルオロ−2−メチルブタン−2−イル）−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（181mg、324μmol）を最初にトリフルオロ酢酸2mlに装入し、水2mlおよびアセトニトリル2mlを添加し、混合物を室温で2日間撹拌した。反応溶液を分取HPLC（RP18カラム、移動相：0．1％TFAを添加したアセトニトリル／水勾配）によって精製した。生成物分画をロータリーエバポレーターで濃縮した。残渣をジクロロメタンに溶解し、飽和重炭酸ナトリウム水溶液で2回洗浄した。合わせた水相をジクロロメタンで再抽出した。合わせた有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、回転蒸発によって濃縮した。これにより、標的化合物133mg（理論値の70％、純度99％）が得られた。
LC−MS（方法2）：Rt＝1．79分；MS（ESIpos）：m／z＝578［M＋H］＋
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）δ［ppm］：−0．149（0．64），−0．008（5．13），0．008（4．91），0．146（0．62），1．678（16．00），2．328（1．15），2．366（0．44），2．670（1．10），2．710（0．44），3．471（4．27），3．801（0．80），4．839（1．11），5．754（2．74），6．574（4．42），6．597（4．42），8．246（5．02），8．267（4．71），8．281（0．99），8．287（1．08），8．308（1．53），8．325（0．95），8．331（1．06），8．592（4．93），8．598（4．75），8．750（10．54），10．635（5．19）．
【０５１７】
実施例185
7−［4，4−ビス（ヒドロキシメチル）ピペリジン−1−イル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−N−［3，3，4，4，4−ペンタフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（エナンチオマー的に純粋）
【化２７４】
2019524722.tif 000281
7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−N−［3，3，4，4，4−ペンタフルオロブタン−2−イル］−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（エナンチオマー的に純粋）（50．0mg、104μmol）をDMF1．1mlに溶解し、ピペリジン−4，4−ジイルジメタノール塩酸塩（21．8mg、純度95％、114μmol）およびN，N−ジイソプロピルエチルアミン（81μl、470μmol）を添加し、混合物を55℃で18時間撹拌した。反応混合物を冷却し、分取HPLC（カラム：アセトニトリル／水／0．1％ギ酸）によって精製した。これにより、標記化合物50．0mg（理論値の81％、純度99％）が得られた。
LC−MS（方法3）：Rt＝1．75分；MS（ESIpos）：m／z＝592［M＋H］＋
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）δ［ppm］：−0．008（1．25），0．008（1．21），1．345（6．70），1．386（7．98），1．403（7．69），2．328（0．52），2．666（0．43），2．671（0．61），3．280（15．22），3．293（16．00），3．483（4．39），4．405（4．66），4．418（10．58），4．432（4．62），4．972（0．45），4．992（0．83），5．015（0．96），5．037（0．96），5．060（0．85），5．081（0．45），7．074（5．67），7．097（5．78），8．236（7．58），8．259（7．08），8．315（1．21），8．337（2．22），8．359（1．23），8．612（5．44），8．617（5．26），8．804（3．86），8．813（4．35），10．525（2．98），10．549（2．89）．
【０５１８】
実施例186
7−［4，4−ビス（ヒドロキシメチル）ピペリジン−1−イル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−N−（1，1，1，3，3，3−ヘキサフルオロプロパン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化２７５】
2019524722.tif 000282
7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−N−（1，1，1，3，3，3−ヘキサフルオロプロパン−2−イル）−4−オキソ−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（50．0mg、103μmol）をDMF1．0mlに溶解し、ピペリジン−4，4−ジイルジメタノール塩酸塩（21．6mg、純度95％、113μmol）およびN，N−ジイソプロピルエチルアミン（81μl、460μmol）を添加し、混合物を55℃で80時間撹拌した。反応混合物を冷却し、分取HPLC（カラム：アセトニトリル／水／0．1％ギ酸）によって精製した。これにより、標記化合物43．1mg（理論値の70％、純度99％）が得られた。
LC−MS（方法3）：Rt＝1．84分；MS（ESIpos）：m／z＝596［M＋H］＋
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）δ［ppm］：−0．008（0．57），0．008（0．57），1．352（0．65），3．282（1．64），3．295（1．74），3．312（16．00），3．492（0．44），4．409（0．50），4．422（1．13），4．436（0．49），7．102（0．61），7．126（0．62），8．260（0．81），8．283（0．76），8．626（0．89），8．632（0．84），8．903（1．73），11．374（0．48），11．399（0．45）．
【０５１９】
実施例187
7−［4，4−ビス（ヒドロキシメチル）ピペリジン−1−イル］−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−N−（3，3，4，4，4−ペンタフルオロ−2−メチルブタン−2−イル）−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化２７６】
2019524722.tif 000283
7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−N−（3，3，4，4，4−ペンタフルオロ−2−メチルブタン−2−イル）−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（50．0mg、101μmol）をDMF1．1mlに溶解し、ピペリジン−4，4−ジイルジメタノール塩酸塩（21．2mg、純度95％、111μmol）およびN，N−ジイソプロピルエチルアミン（79μl、450μmol）を添加し、混合物を55℃で18時間撹拌した。反応混合物を冷却し、分取HPLC（カラム：アセトニトリル／水／0．1％ギ酸）によって精製した。これにより、標記化合物49．1mg（理論値の80％、純度99％）が得られた。
LC−MS（方法3）：Rt＝1．85分；MS（ESIpos）：m／z＝606［M＋H］＋
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）δ［ppm］：1．344（0．75），1．681（2．97），3．279（1．60），3．292（1．71），3．312（16．00），3．481（0．49），4．405（0．45），4．418（0．99），4．432（0．45），7．064（0．61），7．086（0．63），8．244（0．82），8．266（0．77），8．609（0．90），8．615（0．87），8．760（1．82），10．629（1．02）．
【０５２０】
実施例188
1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−7−［（2R）−2−（ヒドロキシメチル）ピロリジン−1−イル］−4−オキソ−N−（3，3，4，4，4−ペンタフルオロ−2−メチルブタン−2−イル）−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド
【化２７７】
2019524722.tif 000284
7−クロロ−1−（3，5−ジフルオロピリジン−2−イル）−4−オキソ−N−（3，3，4，4，4−ペンタフルオロ−2−メチルブタン−2−イル）−1，4−ジヒドロ−1，8−ナフチリジン−3−カルボキサミド（50．0mg、101μmol）をDMF1．1mlに溶解し、（2R）−ピロリジン−2−イルメタノール（11μl、純度99％、110μmol）およびN，N−ジイソプロピルエチルアミン（61μl、350μmol）を添加し、混合物を55℃で18時間撹拌した。反応混合物を冷却し、分取HPLC（カラム：アセトニトリル／水／0．1％ギ酸）によって精製した。これにより、標記化合物49．9mg（理論値の88％、純度99％）が得られた。
LC−MS（方法3）：Rt＝2．07分；MS（ESIpos）：m／z＝562［M＋H］＋
1H−NMR（400 MHz，DMSO−d6）δ［ppm］：1．683（16．00），1．873（0．93），1．953（1．11），2．328（0．49），2．670（0．50），6．731（0．53），6．754（0．59），8．264（1．43），8．287（1．55），8．590（4．26），8．596（4．12），8．767（2．37），10．649（2．98）．
B．薬理学的有効性の評価
【０５２１】
本発明の化合物の薬理学的活性は、当業者に公知のインビトロおよびインビボ試験によって証明することができる。以下の適用実施例は、本発明をこれらの実施例に制限することなく、本発明の化合物の生物学的作用を説明する。
【０５２２】
【表３】
2019524722.tif 000285
・
【０５２３】
B−1．機能的M2−GIRK1／4活性化試験
オルソステリックアゴニスト単独によるM2受容体の活性化と正のアロステリックモジュレーター（PAM）によってオルソステリックに誘導される活性化のアロステリックブーストの両方を、細胞ベースの機能的GIRK1／4活性試験によって測定することができる。オルソステリックアゴニスト（内因性リガンド：アセチルコリン）のM2受容体への結合は、受容体活性化または活性受容体コンフォメーションのための平衡のシフトの様式での受容体のコンフォメーションの変化をもたらす。オルソステリックアゴニストのM2受容体への結合およびその活性化は、アゴニストのオルソステリック結合部位ではなく、別個のアロステリック結合部位に結合する正のアロステリックモジュレーターによってブーストされ得る。
【０５２４】
M2受容体のコンフォメーションのアゴニスト誘導性変化は、Gαiタンパク質活性化をもたらす。今度は、Gαサブユニットの活性化が解離、よってGαサブユニットからのGβγサブユニットの放出および別個の下流のシグナル伝達カスケードの活性化をもたらす。放出されたヘテロダイマーGβγ複合体は、GIRK1／4カリウムチャネルに結合し、リガンド制御チャネル活性化または開口を誘導する（Reuvenyら、Nature、1994年7月、370、143〜146）。次いで、生理学的条件下では、その結果、電気化学的勾配に沿って細胞からカリウムが選択的に流出する。正電荷の排出は、膜貫通電位の低下、よって細胞の過分極につながる。そのため、過分極の程度を、M2受容体の活性化の尺度とみなすことができる。
【０５２５】
使用した試験細胞は、ヒトM2受容体をコードするcDNAおよび両GIRK1／4サブユニット（CHO−DUKX−M2−GIRK）をコードするcDNAで安定にトランスフェクトされた組換えCHO−DUKX細胞株である。膜貫通電位または物質添加もしくはM2活性化の関数としての膜貫通電位の相対的変化を、膜電位感受性色素（FLIPR Membrane Potential Assay Kit Blue、Molecular Devices＃R8034）および専用の蛍光イメージング装置を用いた細胞蛍光の測定によって決定する。
【０５２６】
B−1．1．試験物質のアロステリック有効性（EC50値）の決定
試験物質をジメチルスルホキシド（DMSO）に10mMの濃度で溶解し、10点用量／活性分析のために1：3．16の段階でDMSOにより段階希釈する。所望の試験濃度にしたがって、物質をローディングバッファー（組成：0．6mlのFLIPR Membrane Potential Assay Kit Blue（10mg／ml）、0．6mlのブリリアントブラック（10mg／ml）、2mM CaCl2および2mM KClおよび50mlグルコン酸ナトリウムTyrode（PAA、＃T21−155））に予備希釈する。
【０５２７】
MEMα培地（10％FCS、2％Glutamax、1mg／mlゲンチシンを補足）中で培養したレポーター細胞を、μCLEAR／黒色Greiner細胞培養プレート（＃781092）中30μl／384ウェルで、2000個細胞（48時間後測定）または4000個細胞（24時間後測定）で蒔き、37℃で24時間または48時間インキュベートした。播種培地はMEMα培地（5％FCS、2％Glutamaxを補足、ゲンチシン無し）で構成されていた。
【０５２８】
特定の測定のために、培地を除去し、室温で少なくとも6分間、細胞に電圧感受性色素を負荷した（384ウェルあたり30μlのローディングバッファー）。これに続いて、第1の測定で、5秒間の静止膜電位についての蛍光を測定した。その後、各場合でローディングバッファーに希釈した試験物質10μlを添加し、引き続いて50秒間の膜電位を測定する第2の測定を行った。最後に、細胞をアゴニスト溶液（ローディングバッファーに溶解したアセチルコリン）10μlと混和した。アセチルコリンを予備試験で決定したEC20に相当する濃度で使用した。次いで、M2媒介性GIRK1／4活性化または過分極を60秒の期間にわたって第3の測定で監視した。EC50値（試験化合物のアロステリック有効性の程度）および効率（EC20アセチルコリン濃度でのアセチルコリン効果のブーストの尺度）を、4パラメータロジスティック関数（Hill関数）を用いて決定した。
【０５２９】
B−1．2．正の協同作用（α因子）の決定
試験物質をDMSOに10mMの濃度で溶解し、10点用量／活性分析のために1：3．16の段階でDMSOにより段階希釈した。所望の試験濃度にしたがって、物質をローディングバッファー（上記参照）に予備希釈した。
【０５３０】
MEMα培地（10％FCS、2％Glutamax、1mg／mlゲンチシンを補足）中で培養したレポーター細胞を、μCLEAR／黒色Greiner細胞培養プレート（＃781092）中30μl／384ウェルで、2000個細胞（48時間後測定）または4000個細胞（24時間後測定）で蒔き、37℃で24時間または48時間インキュベートする。播種培地はMEMα培地（5％FCS、2％Glutamaxを補足、ゲンチシン無し）で構成されていた。
【０５３１】
特定の測定のために、培地を除去し、室温で少なくとも6分間、細胞に電圧感受性色素を負荷した（384ウェルあたり30μlのローディングバッファー）。これに続いて、第1の測定で、1秒増加で5秒間の静止膜電位を測定した。その後、各場合でローディングバッファーに希釈した試験物質10μlを添加し、引き続いて1秒の増加で50秒間の膜電位を測定する第2の測定を行う。
【０５３２】
最後に、細胞をアゴニスト溶液（ローディングバッファーに溶解したアセチルコリン）10μlと混和する。しかしながら、試験物質のEC50測定とは対照的に（B−1．1参照）、これを1つのアセチルコリン濃度を用いて行わず、代わりに、試験物質の全ての濃度をアセチルコリン8点の用量−反応曲線と組み合わせる。アセチルコリン希釈系列では、アゴニストを、1：3．16の段階で3μMの最大最終濃度で始めて、所望の最終濃度にしたがって、ローディングバッファーに連続的に予備希釈する。次いで、M2媒介性GIRK1／4活性化または過分極を1秒の増加で60秒の期間にわたって第3の測定で監視する。増加する濃度の試験物質の存在下でのアセチルコリン用量−反応曲線のシフトを、GraphPad PRISM（アロステリックEC50シフト）によって分析および定量する。決定されるα因子は、アロステリック効果の強度および方向の尺度である。α値＞1は、アロステリックの存在下でのEC50値の低下またはアゴニスト（アセチルコリン）の有効性の増加を反映し、オルソステリック（アセチルコリン）とアロステリック（試験物質）との間の正の協同作用を意味する。正の協同作用は、正のアロステリックモジュレーターの特徴である。逆に、α値＜1は、オルソステリックとアロステリックとの間の負の協同作用を示すので、負のアロステリックモジュレーターを特徴付ける。α値＝1は、オルソステリックとアロステリックとの間の協同作用がないことを意味し、これは、オルソステリックおよびアロステリックの受容体に対する結合親和性が互いに影響しないことを意味する。α値の大きさが大きければ大きいほど、オルソステリックとアロステリックとの間の協同作用の程度は大きくなる。
【０５３３】
以下の表2は、個々の実施例について、こうして決定されたEC50および効率値、ならびにこのアッセイからのα値（場合によっては、2つ以上の独立した個々の測定からの平均値として）を列挙する：
【０５３４】
【表４Ａ】
2019524722.tif 000286
【表４Ｂ】
2019524722.tif 000287
【表４Ｃ】
2019524722.tif 000288
【表４Ｄ】
2019524722.tif 000289
【表４Ｅ】
2019524722.tif 000290
【表４Ｆ】
2019524722.tif 000291
【０５３５】
B−2．M2−Gα16レポーター細胞による機能的Ca2＋放出試験
M2受容体に対する試験物質の任意の潜在的にアゴニスト的なまたは潜在的にアロステリックな効果を、機能的Ca2＋放出試験によって決定することができる。オルソステリックアゴニスト（アセチルコリン）またはアゴニスト効果を有する他の物質の結合によるM2受容体の活性化は、内因性状態で、Gαiタンパク質活性化をもたらす受容体のコンフォメーションの変化をもたらす。しかしながら、M2受容体と外因的に発現する無差別Gαqタンパク質Gα16のカップリングは、下流シグナル伝達カスケードを介して細胞内Ca2＋放出を引き起こす、M2受容体の活性化後のGα16タンパク質活性化をもたらす。そのため、細胞内Ca2＋動員の程度を、M2受容体の活性化の尺度とみなすことができる。
【０５３６】
使用した試験細胞は、ヒトM2受容体およびGα16タンパク質をコードするcDNAならびにミトコンドリア発現した発光タンパク質クリチン（mtClytin）（CHO mtClytin Gα16M2）をコードするcDNAで安定にトランスフェクトされた組換えCHO細胞株である。物質添加またはM2活性化の関数としての細胞内Ca2＋放出の測定を、Ca2＋感受性色素（Fluo−8）およびFLIPRTETRA装置（Molecular Devices）を用いた細胞蛍光の測定によって行う。
【０５３７】
B−2．1．アゴニズムアッセイ
試験物質をDMSOに10mMの濃度で溶解し、10点用量／活性分析のために1：3．16の段階でDMSOにより段階希釈する。所望の試験濃度にしたがって、物質をFluo−8緩衝液（100ml当たりの組成：500μlのプロベネシド、2mlのブリリアントブラック（20mg／ml）、440μlのFluo−8、2mM CaCl2および100ml CAFTY Tyrode（130mM NaCl、5mM KCl、20mM HEPES、1mM MgCl2、5mM NaHCO3、pH7．4））に予備希釈する。
【０５３８】
MEMα培地（10％FCS、2％Glutamaxを補足）中で培養したレポーター細胞を、μCLEAR／黒色Greiner細胞培養プレート（＃781092）中384ウェルあたり30μlの播種培地で、3000個細胞で蒔き、37℃で24時間インキュベートした。播種培地はMEMα培地（5％FCS、2％Glutamaxを補足）で構成されている。それぞれの測定のために、培地を除去し、細胞を、各場合で384ウェルあたり20μlのFluo−8緩衝液を添加した後、37℃のインキュベーター内で1時間インキュベートした。各場合で384ウェルあたり10μlの予備希釈した試験物質を添加した後、細胞蛍光を1秒増加で5秒間測定した。それぞれの試験物質によるM2受容体の最大活性化の相対的な程度を、試験シグナルをアセチルコリンのEMax濃度（3μM）に対応するシグナルに正規化することによって計算する。
【０５３９】
B−2．2．正のアロステリックモジュレーター効果の測定
アセチルコリン媒介性M2受容体活性化に関する試験物質の正の協同作用を測定することができるようにするために、基準アゴニスト（アセチルコリン）を全用量−反応分析について添加する。この目的のために、アセチルコリンを1μMの最大最終濃度から始めて1：3．16の段階でFluo−8緩衝液に連続希釈する。各場合で384ウェルあたり10μlのアゴニルト溶液を添加した後、細胞蛍光を再び1秒増加で5秒間測定する。同じアッセイプレートを、M2アゴニズムアッセイの直前として使用する。増加する濃度の試験物質の存在下でのアセチルコリン用量−反応曲線のシフトを、GraphPad PRISM（アロステリックEC50シフト）によって分析および定量する（上記参照）。
【０５４０】
B−3．ヒトムスカリン性アセチルコリン受容体に対する選択性試験
他のヒトムスカリン性アセチルコリン受容体に対する試験物質の潜在的アゴニスト効果、または正のアロステリック効果を、機能的Ca2＋放出試験（Eurofins；GPCRProfiler（登録商標）Services in agonistic and allosteric mode for Mx Receptors；カタログ番号：HTS600GPCR）で測定することができる。
【０５４１】
使用した試験細胞は、特定の受容体でトランスフェクトされたChem−1またはChem−4細胞株であった（ChemiScreen（商標）M1カルシウム最適化FLIPR細胞株、Eurofins；M1：HTS044C；ChemiScreen（商標）カルシウム最適化安定細胞株ヒト組換えM2ムスカリン性アセチルコリン受容体、Eurofins；M2：HTS115C；ChemiScreen（商標）ヒト組換えM3ムスカリン性アセチルコリン受容体カルシウム最適化安定細胞株、Eurofins；M3：HTS116C；ChemiScreen（商標）ヒト組換えM4ムスカリン性アセチルコリン受容体カルシウム最適化安定細胞株、Eurofins；M4：HTS117C；ChemiScreen（商標）M5カルシウム最適化FLIPR細胞株、Eurofins；M5：HTS075C）。FLIPRTETRA装置（Molecular Devices）を用いて物質試験を行う。
【０５４２】
B−3．1．アゴニズムアッセイ
試験物質の任意の潜在的なアゴニスト効果を測定するために、それぞれの試験物質を最終試験濃度10μMまたは1μMで添加した。Ca2＋放出または細胞蛍光を180秒の期間にわたって測定する。受容体活性化に対する物質効果の正規化に使用される陽性対照は、EMax値に対応するアセチルコリンの濃度である。
【０５４３】
アゴニズムアッセイが終了した後、アッセイプレートを25℃で7分間インキュベートする。インキュベーション期間の後、正のアロステリックモジュレーターアッセイを初期化する。
【０５４４】
B−3．2．アロステリックモジュレーターアッセイ
他のヒトムスカリン性アセチルコリン受容体およびM2受容体自体に対する試験物質の正のまたは負のアロステリック効果を調べるために、全ての物質濃度をアセチルコリン8点の用量−反応曲線と組み合わせる。今度はアゴニスト溶液の添加に続いて、再び180秒間の細胞蛍光を測定する。アセチルコリンの用量−反応曲線のシフト（アセチルコリンのEC50の最大シフト）を、GraphPad PRISM（シグモイド用量−反応（可変勾配）−EC50）によって分析および定量する。最後に、それぞれの選択性の尺度として機能する、M2受容体およびM4受容体についてのアロステリックシフトの商を形成する。
【０５４５】
B−4．インビトロM2 PAM Giアッセイ
ヒトM2受容体の正のアロステリック調節に対する試験物質の特徴付けのために、組換えM2受容体発現CHO細胞におけるフォルスコリンに起因するcAMP上昇のカルバコール誘導阻害を測定し、25μlの完全培地（DMEM F12 PAN培地、10％FCS、1．35mMピルビン酸Na、20mM Hepes、4mM Glutamax、2％重炭酸ナトリウム、1％Pen／Strep、1％100x非必須アミノ酸）中cAMP−応答配列（CRE）：3000個細胞の制御下でルシフェラーゼ遺伝子をさらに発現しているこれらを、384マイクロタイタープレート（Greiner、TC Platte、透明な底部を有する黒色）の1ウェル当たりに蒔き、37℃、5％CO2で24時間インキュベートする。測定の前に、培地を30μlの試験培地（Optimem）と交換し、37℃、5％CO2で10分間インキュベートする。試験物質を、用量−反応曲線として種々の濃度（開始濃度10mM、希釈係数3．16）でDMSO中に調製し、カルシウムを含まないTyrode、2mM CaCl2、0．01％BSAで1：50に予備希釈する。予備希釈した物質溶液10μlを細胞に添加し、37℃、5％CO2で10分間インキュベートする。M2受容体を、カルシウムを含まないTyrode、2mM CaCl2中種々の濃度のカルバコール10μlを添加することによって活性化し、37℃、5％CO2で5分間インキュベートする。アデニリルシクラーゼを、カルシウムを含まないTyrode、2mM CaCl2中1μM（最終濃度）のフォルスコリン10μlを添加することによって活性化し、37℃、5％CO2で5時間インキュベートする。細胞上清を取り出し、Luci／Triton緩衝液（1：1）20μlを添加した後、ルミノメーターで60秒間発光を測定する。
カルシウムを含まないTyrode：130mM NaCl、5mM KCl、20mM HEPES、1mM MgCl2、4．8mM NaHCO3、pH 7．4
【０５４６】
Luci／Triton緩衝液（1：1）：triton緩衝液（25mM Tris塩酸水溶液、pH7．8、25mM Na2HPO4、2mMジチオトレイトール、3％Triton X−100、10％グリセリン）と1：1混合したLuci緩衝液（20mMトリシン、pH7．8、2．67mM硫酸マグネシウム、0．1mM EDTA、4mM DTT、270μM補酵素A、470μM D−ルシフェリン、530μM ATP）。
【０５４７】
EC50値を4パラメータロジスティック関数（Hill関数）を用いて決定した。
【０５４８】
B−5．ヒトM2およびM4受容体に対する競合的FRET結合試験
試験物質のM2受容体への直接結合、および試験物質の存在下での天然アゴニストアセチルコリンのM2受容体への結合のブースト（親和性増加）（正のアロステリック効果）を、FRETベース結合アッセイ（HTRF Tag−lite（登録商標）結合アッセイ、Cisbio）によって測定する。選択性の対照のために、構造的に関連するM4受容体への試験物質の結合を同様に調べる。HTRF Tag−lite（登録商標）アッセイは、均質系結合アッセイであり、生細胞内で発現される、蛍光リガンド（プローブ）および非標識試験物質の受容体への競合的結合に基づく。今度は、ドナー色素の励起によって、プローブが受容体に結合したときに受容体とプローブ（アクセプター）との間でFRETシグナルを生じるように、受容体を蛍光ドナー色素（テルビウムクリプテート）で誘導体化する。使用したアクセプタープローブは、HTRF蛍光色素（赤色リガンド；L0040RED）とコンジュゲートしたテレンゼピン誘導体であった。そのため、プローブは、M2受容体とM4受容体の両方の保存されたオルソステリック結合部位に結合する。M2受容体のアロステリック結合部位は、X線結晶学によって特徴付けられており、オルソステリック結合ポケットのすぐ上にあると仮定される（Kruseら、Nature、2013、504、101〜106）。そのため、非標識オルソステリックアゴニスト（アセチルコリン）のオルソステリック結合部位への結合と、アロステリックモジュレーター（試験物質）のアロステリック結合部位への結合の両方が、プローブの濃度依存性競合的置換、よってFRETベース蛍光シグナルの低下をもたらす。
【０５４９】
全ての結合試験を、白色384マイクロタイタープレート（小容量）上で、総体積20μlで実施する。HTRF測定を、PHERAstar機器（BMG Labtech）を用いて行う。ムスカリン性M2またはM4受容体結合試験のために、ドナー発蛍光団（Lumi4Tb；CELLCUST）で標識されたSNAPed−M2発現細胞（C1TT1M2）またはSNAPed−M4発現細胞（C1TT1M4）を使用する。細胞を、試験物質またはアセチルコリンの存在下、Tag−lite結合緩衝液（LABMED）中でアクセプタープローブと共にインキュベートする。その後、蛍光シグナルを665nmおよび620nmの波長で測定し、HTRF商（665nmでのシグナル／620nmでのシグナル）を決定する。陰性対照のHTRF商（プローブなしのTag−Lite緩衝液のみ）を差し引くことによって相対特異的シグナルを決定する。
【０５５０】
B−5．1．試験物質の結合
オルソステリックアゴニストの非存在下での試験物質のM2受容体またはM4受容体への結合を決定するために、試験物質の用量−反応分析を、M2−Tag−lite（登録商標）またはM4−Tag−lite（登録商標）結合アッセイの競合フォーマットで行う。試験物質をDMSOに10mMの濃度で溶解し、用量−反応分析のために1：3．16の段階でDMSOにより段階希釈する。最大試験濃度は10μMに相当する。最高物質濃度（結合のEC50）における最大および残りのHTRFシグナルに関してHTRFシグナルの最大半分低下をもたらした試験物質のモル濃度を、GraphPad PRISM（シグモイド用量反応）によって決定する。同時に、最高物質濃度（競合最大％）における特定のHTRFシグナルの最大減少を計算することによって競合効果の強度を決定する。
【０５５１】
B−5．2．アロステリックモードでの試験物質の結合
試験化合物によるM2受容体のアロステリック調節を調べるために、まず、EC20値に相当するアセチルコリンの濃度の存在下、M2−Tag−lite（登録商標）またはM4−Tag−lite（登録商標）結合アッセイの競合フォーマットでの試験物質の用量−反応分析を行い、後者を別個の11点アセチルコリン用量−反応分析（3μM）で測定する。試験物質をDMSOに10mMの濃度で溶解し、10点用量／活性分析のために1：3．16の段階でDMSOにより段階希釈する。最大試験濃度は10μMに相当する。EC20値に相当するアセチルコリン濃度の存在下、最高物質濃度（結合のEC50）における最大および残りのHTRFシグナルに関してHTRFシグナルの最大半分低下をもたらした試験物質のモル濃度を、GraphPad PRISM（シグモイド用量反応）によって決定する。同時に、最高物質濃度（競合最大％）における特定のHTRFシグナルの最大減少を計算することによって競合効果の強度を決定する。
【０５５２】
さらに、アセチルコリンのM2受容体またはM4受容体への結合のブーストを調べるために、第2に、M2−Tag−lite（登録商標）またはM4−Tag−lite（登録商標）結合アッセイの競合フォーマットでのアセチルコリンの11点用量−反応分析を、1μMまたは10μMの試験物質の非存在下または存在下で行う。アセチルコリンの用量−反応曲線のシフト（アセチルコリンのEC50値の最大シフト）を、GraphPad PRISM（シグモイド用量−反応）によって分析および定量した。
【０５５３】
B−6．ヒトM2受容体に対する放射性リガンド結合アッセイ
試験物質のアロステリック作用機序を種々の放射性リガンド結合アッセイによってさらに詳細に調査し、定量化することができる。M2受容体のアロステリック結合部位へのアロステア（allostere）の結合は、正の協同作用の場合にM2受容体に対するオルソステリックリガンドの結合親和性の増加をもたらす。オルソステア（orthostere）、アロステアおよびM2受容体からなる三元複合体中のアロステアによるオルソステリックリガンドの結合親和性の増加は、オルソステアの結合速度論の調節による。アロステアは、M2受容体におけるオルソステアの会合速度および／または解離速度を変えることができる。解離速度の低下は、この場合、三元複合体の安定化を反映し、そのため、平衡状態下でのオルソステリックリガンドの解離定数の低下を伴う（Lazareno、Determination of Allosteric Interactions Using Radioligand−Binding Techniques in Methods in Molecular Biology、第259巻、Receptor Signal Transduction Protocols、第2版；KostenisおよびMohr、Trends Pharmacol．Sci．1996、17（8）、280〜283）。
【０５５４】
B−6．1．平衡条件下での3H−オキソトレモリンM放射性リガンド結合アッセイ
オルソステリックアゴニストのM2受容体に対する結合親和性に対する試験物質の影響を確認および定量化するために、平衡条件下での放射性リガンド結合アッセイを行うことができる。この場合、放射性標識されたM2受容体アゴニストである3H−オキソトレモリンMのM2受容体への結合を、結合平衡において様々な濃度の3H−オキソトレモリンMで調べる（Croyら、Mol．Pharmacol．2014、86、106〜115）。アゴニスト濃度の関数としてのM2受容体に特異的に結合した放射性アゴニストの量（いわゆるラングミュア等温線として図式的に表される）に基づいて、第1に、アゴニストの平衡解離定数Kdを、M2受容体に対するその結合親和性の定量的尺度として計算することができ、第2に、様々な濃度の試験物質（正のアロステリックモジュレーター）の非存在下または存在下での放射性リガンド（アゴニスト）の濃度または特異的結合部位の数Bmaxを計算することができる（HulmeおよびTrevethick、Brit．J．Pharmacol．2010、161、1219〜1237）。
【０５５５】
M2受容体（Euroscreen、FAST−0261B）についての放射性リガンド結合アッセイを、アゴニストとして3H標識オキソトレモリンM（NET671）を用いて実施する。M2受容体へのアゴニスト結合を、結合緩衝液（リン酸ナトリウム／リン酸カリウム緩衝液、pH7．4）中、96ウェルマイクロタイタープレート（Master Block、Greiner、786201）で三連で実施する。この目的のために、M2膜抽出物（20μgのタンパク質／96ウェル）の各アッセイを、単独であるいは1μMもしくは10μMの試験物質または結合緩衝液単独の存在下、種々の濃度の放射性標識アゴニスト（0．2〜100nM）と共に37℃で60分間、0．1mLの総体積でインキュベートする。膜への3H標識オキソトレモリンMの非特異的結合を、200倍過剰のM2受容体のオルソステリックアンタゴニストであるN−メチルスコポラミン（NMS）と同時インキュベートすることによって測定する。次いで、結合反応を停止させるために、試料を室温で2時間、0．5％ポリエチレンイミン（PEI）溶液で予め濡らしたGF／Cフィルタ（Perkin Elmer、6005174）を介して濾過する。フィルタをそれぞれ氷冷洗浄緩衝液（10mMリン酸ナトリウム／リン酸カリウム緩衝液、pH7．4）0．5mLで6回洗浄し、Microscint20シンチレーション溶液（Packard）50μLをアッセイごとに添加する。次いで、試料をオービタルシェーカーで15分間インキュベートした後、放射能をTopCount（商標）装置（1分／ウェル）によって測定する。
【０５５６】
結合緩衝液に使用されるDMSO溶液の100倍希釈を得るために、試験物質を、10mMの濃度でDMSOに溶解し、最終試験濃度に相当するDMSOでさらに希釈する。
【０５５７】
M2受容体についての3H−オキソトレモリンMのKdおよびBmaxを、「一部位」特異的結合モデル（Croyら、Mol．Pharmacol．2014、86、106〜115）の助けを借りて決定する。
【０５５８】
B−6．2．平衡条件下での3H−NMS競合的放射性リガンド結合アッセイ
オルソステリックアゴニストのM2受容体に対する結合親和性に対する試験物質の影響をさらに確認および定量化するために、平衡条件下での競合的放射性リガンド結合アッセイも行う。この場合、拮抗的放射性リガンド3H−N−メチルスコポラミン（3H−NMS）のM2受容体への結合を、種々の濃度の非放射性標識アゴニストオキソトレモリンMの非存在下または存在下で測定する（Croyら、Mol．Pharmacol、2014、86、106〜115；Schoberら、Mol．Pharmacol．2014、86、116〜123）。放射性標識プローブ（アンタゴニスト）と非標識アゴニストは、M2受容体のオルソステリック結合部位への結合について競合する。そのため、放射性標識プローブを置換する能力は、受容体に対するアゴニストの結合親和性の尺度として働き、平衡阻害定数（Ki）としてCheng−Prusoff方程式にしたがって定量することができる（ChengおよびPrusoff、Biochem．Pharmacol．1973、22（23）、3099〜3108）。試験物質のアロステリック効果をさらに調べるために、オキソトレモリンMのKiに対する試験物質の影響を決定する。
【０５５９】
M2受容体（Euroscreen、FAST−0261B）についてのアンタゴニスト阻害結合アッセイを、M2受容体アンタゴニストとして3H−NMSを用いて、結合緩衝液（50mMTris緩衝液pH7．4、1mM EDTA、10μg／mlのサポニン）中96ウェルマイクロタイタープレート（Master Block、Greiner、786201）で行う。結合平衡を調節するために、M2膜抽出物（20μgのタンパク質／96ウェル）の各アッセイを、単独であるいは1μMもしくは10μMの試験物質または結合緩衝液単独を用いたまたは用いない種々の濃度の非標識アゴニスト（オキソトレモリンM；0．001nM〜1mM）の存在下で、規定の濃度の放射性標識アゴニスト（0．5nM）と共に25℃で2時間、0．1mLの総体積でインキュベートする。膜への3H標識NMSの非特異的結合を、200倍過剰の非放射性標識アセチルコリンと同時インキュベートすることによって決定する。次いで、結合反応を停止させるために、試料を室温で2時間、0．5％PEI溶液で予め濡らしたGF／Cフィルタ（Perkin Elmer、6005174）で濾過する。フィルタをそれぞれ氷冷洗浄緩衝液（10mMリン酸ナトリウム／リン酸カリウム緩衝液、pH7．4）0．5mLで6回洗浄し、Microscint20シンチレーション溶液（Packard）50μLをアッセイごとに添加する。次いで、試料をオービタルシェーカーで15分間インキュベートした後、放射能をTopCount（商標）装置（1分／ウェル）によって測定した。
【０５６０】
結合緩衝液に使用されるDMSO溶液の100倍希釈を得るために、試験物質を、10mMの濃度でDMSOに溶解し、最終試験濃度に相当するDMSOでさらに希釈する。
【０５６１】
試験物質の存在下または非存在下におけるKi値を、Cheng−Prusoff方程式（ChengおよびPrusoff、Biochem．Pharmacol．1973、22（23）、3099〜3108）を用いて定量する。この場合、物質のIC50値を、4パラメータロジスティック方程式にしたがって決定し、NMSのKdを、平衡条件下で放射性リガンド結合アッセイで決定する（Schoberら、Mol．Pharmacol．2014、86、116〜123）。
【０５６２】
B−6．3．3H−オキソトレモリンM解離速度論試験
動力学放射性リガンド結合アッセイによって、試験物質の存在下または非存在下でのM2受容体に対する放射性標識アゴニスト3H−オキソトレモリンMの解離の速度論を調べることができる。これらの手段によって、M2アゴニストの解離定数（koff率）に対する試験物質のアロステリック活性の影響を決定することができ、したがって試験物質のアロステリックメカニズムをさらに特徴付けることができる（Lazareno、Determination of Allosteric Interactions Using Radioligand−Binding Techniques in Methods in Molecular Biology、第259巻、Receptor Signal Transduction Protocols、第2版；Schrageら、Biochem．Pharmacol．、2014、90、307〜319）。
【０５６３】
M2受容体（Euroscreen、FAST−0261B）についての放射性リガンド解離結合アッセイを、アゴニストとして3H標識オキソトレモリンM（NET671）を用いて実施する。結合反応を、96ウェルマイクロタイタープレート（Master Block、Greiner、786201）で、結合緩衝液（リン酸ナトリウム／カリウム緩衝液、pH7．4）中で実施する。この目的のために、M2膜抽出物（20μgのタンパク質／96ウェル）の各アッセイを、単独であるいは1μMもしくは10μMの試験物質または結合緩衝液単独の存在下、規定の濃度の放射性標識アゴニスト（9．65nM）と共に37℃で60分間プレインキュベートする。次いで、NMSを種々の時点（1アッセイ当たり1時点）で200倍過剰で添加し、混合物を37℃で総体積0．1mLでインキュベートする。次いで、結合反応を停止させるために、試料を室温で2時間、0．5％PEI溶液で予め濡らしたGF／Cフィルタ（Perkin Elmer、6005174）で濾過する。フィルタをそれぞれ氷冷洗浄緩衝液（10mMリン酸ナトリウム／リン酸カリウム緩衝液、pH7．4）0．5mLで6回洗浄し、Microscint20シンチレーション溶液（Packard）50μLをアッセイごとに添加する。次いで、試料をオービタルシェーカーで15分間インキュベートした後、放射能をTopCount（商標）装置（1分／ウェル）によって測定する。
【０５６４】
結合緩衝液に使用されるDMSO溶液の100倍希釈を得るために、試験物質を、10mMの濃度でDMSOに溶解し、最終試験濃度に相当するDMSOでさらに希釈する。
【０５６５】
koffを、解離の「一相」指数関数的減衰モデルの助けを借りて決定した（HulmeおよびTrevethick、Brit．J．Pharmacol．2010、161、1219〜1237；KostenisおよびMohr、Trends Pharmacol．Sci．1996、17（8）、280〜283）。
【０５６６】
B−6．4．3H−M2−PAM結合試験
放射性標識された試験物質をプローブとして使用して、試験物質のヒトM2受容体に対する結合親和性を直接決定することができる。この目的のために、陽性アロステリック試験物質をトリチウム化により放射性標識した（3H−M2−PAM）。
【０５６７】
平衡条件下での放射性リガンド結合試験を用いて、第一に、M2受容体に対するその結合親和性の定量的尺度として陽性アロステリック試験物質（3H−M2−PAM）の平衡解離定数Kdを決定し、第二に、オルトステリックアゴニスト（アセチルコリン）の非存在下または存在下で放射性リガンドの特異的結合部位数Bmaxを決定することが可能である（HulmeおよびTrevethick、Brit．J．Pharmacol．2010、161、1219〜1237；Schoberら、Mol．Pharmacol．2014、86、116〜123）。3H−M2−PAM平衡結合試験のために、インキュベーション緩衝液（10mM Tris／HCl pH7．4、2mM MgCl2、120mM NaCl、プロテアーゼ阻害剤、0．3％BSA）中M2受容体細胞膜調製物（CHO−S／hM2、200μg）を、アセチルコリン（100μM）の非存在下または存在下、4℃で1時間、異なる濃度のアロステリック放射性リガンド3H−M2−PAM（0．5〜4000nM）と一緒にインキュベートした。過剰の非放射性標識アロステリックリガンド（M2−PAM）（10μM）の添加によって、非特異的結合を決定する。結合反応を終結するために、試料をBrandelフィルタシステムを通して濾過し、停止緩衝液（50mM Tris／HCl pH7．4、500mM NaCl、0．3％BSA）で洗浄する。予め、フィルタを0．3％濃度PEI溶液で湿らせた。アロステリック放射性リガンドのKdおよびBmax値を、「一部位」特異的結合モデル（GraphPad Prism）に基づいて決定する。
【０５６８】
競合的3H−M2−PAM結合試験を用いて、M2受容体における放射性リガンド3H−M2−PAMの結合部位に対する非標識アロステリック試験物質の親和性を決定することが可能である。（Croyら、Mol．Pharmacol．2014、86、106〜115；Schoberら、Mol．Pharmacol．2014、86、116〜123）。放射性標識プローブ（3H−M2−PAM）および非標識アロステリック試験物質は、M2受容体のアロステリック結合部位への結合について競合する。そのため、放射性標識プローブを置換する能力は、受容体に対する試験物質のアロステリック結合親和性の尺度として働き、平衡阻害定数（Ki）としてCheng−Prusoff方程式にしたがって定量することができる（ChengおよびPrusoff、Biochem．Pharmacol．1973、22（23）、3099〜3108）。ここで、放射性標識アロステリックプローブの置換を、オルトステリックアゴニスト（アセチルコリン）の存在下または非存在下で決定する。上記の3H−M2−PAM結合試験と同様に、3H−M2−PAM競合結合試験を平衡条件下で行う。ここで、M2受容体を含む膜調製物を、アセチルコリン（100μM）の非存在下または存在下で、1nMの3H−M2−PAMおよび種々の濃度の非標識試験物質とインキュベートする。アセチルコリンの存在下または非存在下におけるKi値を、Cheng−Prusoff方程式（ChengおよびPrusoff、Biochem．Pharmacol．1973、22（23）、3099〜3108）を用いて決定する。
【０５６９】
B−7．初代心房ラット心筋細胞におけるアセチルコリン媒介性GIRK1／4チャネル電流に対する試験物質の効果
物質試験を、天然ラット心房筋細胞におけるアセチルコリン誘導性GIRK1／4膜電流の電気生理学的測定について文献に記載されたパッチクランププロトコルにしたがって行う（ChengおよびPrusoff、Biochem．Pharmacol．1973、22（23）、3099〜3108、例えばBeckmannおよびRinneら、Cell．Physiol．Biochem．2008、21、259〜268参照）。
【０５７０】
GIRK1／4活性についてのアセチルコリン用量−反応曲線を、増加するアセチルコリン濃度で試験溶液を灌流し、得られた膜電流を測定することによって、試験物質（DMSO対照）の非存在下で最初に測定する。膜電流または膜電流の変化を、約10〜20秒間、所与のACh濃度について測定する。DRCシリーズ内の最大ACh濃度を適用した後、アトロピン（10μM）の溶液を灌流し、引き続いてM2選択性およびM2活性化の可逆性を確実にするために物質溶液を洗い流す。膜電流の変化を適切に記録する。ここで、測定された膜電流の各アセチルコリン濃度を、各場合で、最大アセチルコリン誘導膜電流（I／IMax）に対して正規化する。アセチルコリン用量−反応曲線は、この場合、5つの異なる濃度（1nM、10nM、100nM、1μM、10μM）を含む。EC50値を4パラメータロジスティック関数（Hill関数）を用いて決定する。
【０５７１】
M2受容体に対する試験物質のアロステリック効果を測定するために、一定濃度のそれぞれの試験物質（例えば、1μM）の存在下でGIRK1／4膜電流についてアセチルコリン用量−反応曲線を測定する。この目的のために、細胞を試験物質と約20秒間プレインキュベートし、膜電流を測定した後、同じ物質濃度および規定のACh濃度を含む試験溶液を約10〜20秒間灌流し、膜電流を測定する。測定シリーズ内の最大アセチルコリン濃度を適用した後、物質効果のM2選択性を確認するために、今度は、アトロピン（10μM）を含む溶液の灌流を行う。試験物質の存在下でのEC50値を4パラメータロジスティック関数（Hill関数）（上記参照）を用いて同様に決定する。
【０５７２】
アセチルコリン用量−反応曲線のシフトを、試験物質の非存在下または存在下でのアセチルコリンのEC50値の変化によって決定および定量する。
【０５７３】
B−8．単離された灌流ラット心臓に対する試験物質の効果
体重200〜250gの雄Wistarラット（系統：（HsdCpb：WU））をナルコレン（100mg／kg）で麻酔する。胸郭を開き、次いで、心臓を露出させ、切除し、カニューレを大動脈内に配置することによってLangendorff装置に接続する。Krebs−Henseleit緩衝溶液（95％O2および5％CO2で通気、pH7．4、35℃；以下の組成を有する（mmol／l）：NaCl 118；KCl 3； NaHCO3 22；KH2PO4 1．2；硫酸マグネシウム1．2；CaCl2 1．8；グルコース10；ピルビン酸Na 2）により一定流量で9ml／分で逆行性に心臓を灌流する。心臓の収縮性を測定するために、PEチューブに取り付けられ、水で満たされた薄いプラスチックフィルム製のバルーンを、心臓の左心耳の開口を介して左心室に導入する。バルーンを圧力トランスデューサに接続する。拡張末期圧を、バルーン容量を介して5〜10mmHgに調節する。データをブリッジ増幅器によって増強し、LabChartソフトウェア（ADInstruments）を使用してコンピュータに登録する。
【０５７４】
試験物質のアロステリック効果を調べるために、300nmol／lの試験物質を添加して心臓を灌流する。15分後、カルバコールを増加する濃度で灌流溶液に累積的に添加する。そこから生じる心拍数の低下を、用量−反応曲線として、試験物質の代わりに溶媒で処理した心臓に対する効果と比較する。カルバコールの用量−反応曲線のシフトを、GraphPad PRISM（シグモイド用量−反応）によって分析および定量する。
【０５７５】
B−9．麻酔したラットの心拍数に対する試験物質の効果
ブリーダーCharles Riverからの系統（WI）WU Brの雄ラットを、最初に約4〜5％イソフルラン吸入で約3分間麻酔する。その後、1．5％イソフルラン吸入を用いて麻酔を維持する。この目的のために、麻酔した動物を、加熱手術用プレート上に固定する。目視検査および足指間反射によって、麻酔の深さをチェックする。
【０５７６】
試験物質を適用するために、頸静脈への静脈内経路を使用する。次いで、尾側から頭側への皮膚切開を縦方向に行い、頸部筋系と唾液腺の両方を切断する。右総頸動脈を露出し、血液供給を近位と遠位の両方で停止する。微小計装（microinstrumentation）を使用して、動脈圧および心拍数を測定するためにTIPカテーテル（1．2F）を血管に導入する。
【０５７７】
最初に、両パラメータを、物質を添加しないで基底状態で10分間監視する。調査する物質を、適切な溶媒混合物に溶解し、その後、各場合で、5分間にわたり注入ポンプによって、頸静脈を介して種々の投与量で動物群に投与する。溶媒処理群を同じ実験条件下で対照として使用する。物質添加による動脈血圧および心拍数を20分間測定する。データをPowerLabシステム（AD instruments）で登録し、LabChartプログラム（AD instruments）を使用して評価する。
【０５７８】
B−10．意識のあるラットの血圧および心拍数の放射遠隔測定
Data Sciences International DSI、米国から商業的に入手可能なテレメトリシステムを、下記の意識のあるラットでの測定に使用する。システムは3つの主要部品からなる：（1）埋め込み型送信機（PhysioTel（登録商標）テレメトリ送信機）、（3）データ取得コンピュータに多重化装置（DSI Data Exchange Matrix）を介して接続している（2）受信機（PhysioTel（登録商標）受信機）。テレメトリシステムによって、その通常の生育環境にいる意識のある動物の血圧、心拍数および体動を連続的に記録することが可能になる。
【０５７９】
試験は、体重200g超の成体雌ラット（Wistar Unilever／WUまたは自然発症高血圧ラット／SHR）で行う。送信機埋め込み後、実験動物を別々にMakrolon（登録商標）ケージIII型に収容する。これらの動物は標準的な飼料および水を自由に入手できる。試験実験室の昼／夜のリズムは、部屋の照明を変えることによって設定する。
【０５８０】
送信機埋め込み：
使用するテレメトリ送信機（例えば、PA−C40 HD−S10、DSI）を、最初の実験使用の少なくとも14日前に無菌状態で実験動物に外科的に埋め込む。埋込みのために、絶食動物にイソフルラン（IsoFlo（登録商標）、Abbott、開始5％、維持2％）で麻酔をかけ、腹部の広域にわたって剪毛および消毒する。白線に沿って腹腔を開いた後、システムの液体充填測定カテーテルを、下行大動脈に頭蓋方向に分岐より上に挿入し、組織接着剤（Vetbond（商標）、3M）で固定する。送信機ハウジングを腹壁筋に腹腔内固定し、創傷を一層ずつ閉じる。術後、感染予防のための抗生物質（Ursocyclin（登録商標）10％、60mg／kg皮下、0．06ml／100g体重、Serumwerk Bernburg AG、ドイツ）および鎮痛薬（Rimadyl（登録商標）、4mg／kg皮下、Pfizer、ドイツ）を投与する。
【０５８１】
物質および溶液：
特に明言しない限り、試験する物質を、それぞれ動物の群（M＝6）に経口投与する。2ml／kg体重の投与量によると、試験物質を適切な溶媒混合物に溶解する。溶媒で処理した動物群を対照として使用する。
【０５８２】
実験概要：
テレメトリ測定システムを24匹の動物に設定する。システムで生きている計装ラットの各々に別個の受信アンテナ（RPC−1 Receiver、DSI）を割り当てる。埋め込まれた送信機は、設置された磁気スイッチを介して外部から起動することができ、実験の予備実行中に送信に切り替えることができる。発信シグナルは、データ取得システム（Windows（登録商標）用のDataquest（商標）A．R．T．、DSIまたはPonemah、DSI）によってオンラインで検出し、適宜処理することができる。標準的手順では、以下をそれぞれ10秒間測定する：（1）収縮期血圧（SBP）、（2）拡張期血圧（DBP）、（3）平均動脈圧（MAP）、（4）心拍数（HR）および（5）活動度（ACT）。これらのパラメータを、投与後24時間にわたって測定する。測定値の取得を5分間隔でコンピュータ制御下で繰り返す。絶対値として得たソースデータを、現在測定されている大気圧（Ambient Pressure Reference Monitor、APR−1、DSI）を用いた図表で補正する。
【０５８３】
評価：
実験終了後、取得した個々のデータを分析ソフトウェア（Dataquest（商標）A．R．T．4．1 AnalysisまたはPonemah、DSI）を用いてソーティングする。物質投与前2時間の時点をブランク値と仮定する。データを、平均（30分平均）の決定によって予め設定可能な期間にわたって平滑化する。
【０５８４】
B−11．麻酔したイヌの心拍数に対する試験物質の効果
体重20〜30kgの雄または雌の雑種（Mongrels、Marshall BioResources、米国）をペントバルビタール（30mg／kg静脈内、Narcoren（登録商標）、Merial、ドイツ）で麻酔する。ここでは、塩化パンクロニウム（Pancuronium−Actavis（登録商標）、Actavis、ドイツ、1mg／動物 静脈内）がさらに筋弛緩薬として働く。イヌに挿管し、酸素−空気混合物（40／60％）（約5〜6L／分）で換気する。換気は、GE Healthcare（Avance）の換気装置を使用して行い、これは麻酔モニタ（CO2アナライザー）としても働く。麻酔を、ペントバルビタール（50μg／kg／分）の一定の注入によって維持する；フェンタニル（10μg／kg／時間）が鎮痛薬として働く。ペントバルビタールの代替品、イソフルラン（1〜2体積％）を使用することからなる。
【０５８５】
イヌに以下を提供する：
・排尿または尿流量の測定のための膀胱カテーテル
・ECGが四肢につながる（ECG測定用）
・大腿動脈へのNaCl充填Fluidmedic−PE−300ループの挿入。これは、全身血圧を測定するための圧力センサ（Braun Melsungen、Melsungen、ドイツ）とつながっている。
・試験物質を注入するため、または血液を採取するための、大腿静脈へのNaCl充填静脈カテーテル（Vygon、ドイツ）の挿入。
・左心房を介したまたは頚動脈に組み込まれた心臓の血行動態を測定するためのひ門を介したMillar Tipカテーテル（Typ 350 PC、Millar Instruments、Houston、米国）の挿入。
・心拍出量、酸素飽和度、肺動脈圧および中心静脈圧を測定するための肺動脈への頸静脈を介したSwan−Ganzカテーテル（CCOmbo 7．5F、Edwards、Irvine、米国）の挿入。
・大動脈流を測定するための下行大動脈への超音波流量計プローブ（Transsonic Systems、Ithaka、米国）の提供。
・冠動脈流を測定するための左大動脈冠動脈への超音波流量計プローブ（Transsonic Systems、Ithaka、米国）の提供。
・ペントバルビタール注入、液体置換および血液採取（血漿レベルまたは他の臨床的血液値の測定）のための橈側皮静脈へのBraunule（登録商標）の配置。
・フェンタニル注入および物質適用のための伏在静脈へのBraunuleの配置。
【０５８６】
一次シグナルをおそらく増幅し（Gould Amplifier、Gould Instrument Systems、Valley View、米国）またはEdwards Vigilance Monitor（Edwards、Irvine、米国）、その後、評価のためにPonemahシステム（DataSciences Inc、Minneapolis、米国）に供給する。シグナルを実験時間経過全体にわたって連続的に記録し、さらにこのソフトウェアによってデジタル処理し、30秒にわたって平均する。
【０５８７】
B−12．健康な意識のイヌの心拍数および心拍数変動に対する試験物質の効果
心拍数、心拍数変動（HRV）および血圧に対する効果に関して試験物質を特徴付けるために、健康な雄ビーグル犬で遠隔測定を実施する。イソフルラン麻酔下で、テレメトリ送信機（モデルL21、Data Sciences International、USA製）を最初に動物に埋め込む。左側開胸術後、圧力センサを大動脈および左心室に配置する。心電図（ECG）を記録するために、さらなる電極を心臓に配置する。次いで、創傷治癒のために、抗生物質（クリンダマイシン、Zoetis、ドイツ）および鎮痛薬（フェンタニル、Janssen、ドイツ）のアフターケアの下で動物を檻に戻す。動物の檻に取り付けられたアンテナによって、血圧およびECGシグナルをデータ取得コンピュータに転送し、分析ソフトウェア（Ponemah、Data Sciences International、米国）によって評価する。テレメトリシステムによって、意識のある動物の血圧およびECGシグナルを連続的に監視することが可能になる。技術的な詳細は、製造会社（Data Sciences International、米国）の文書に見出すことができる。
【０５８８】
調査する物質を、ゼラチンカプセルによって適切な溶媒混合物で健康なイヌに経口投与する。ビヒクルで処理した動物群を対照として使用する。テレメトリ測定を物質投与前に開始し、数時間の期間にわたって記録する。時間経過を、GraphPadPrismソフトウェア（GraphPad、米国）の助けを借りて平均の決定によって平滑化されたデータによって図表で示す。HRVを分析するために、ECGデータを周波数領域心拍数変動性分析に供する。この目的のために、記録されたECGのR−R間隔を使用する。0．2秒〜1．5秒の前に定義された範囲外のデータは、分析から除外する。除外されたデータを、線形補間によって得られた値に置き換える。これらのデータを、スプライン補間によって等間隔の支持点に変換する。心拍数変動を分析するために、データを、30秒間のステップに300秒の長さのパケットまで細分する。各データパケットについて、フーリエ変換を計算する。力を、3つの周波帯（vlf＝0．0033〜0．04 1／s；lf＝0．04〜0．15 1／s；hf＝0．15〜0．5 1／s）でさらに計算する。試験物質を特徴付けるために、HRV分析の総合力（3つの周波全ての合計）を使用する。
【国際調査報告】
2019524722.tif 000320
2019524722.tif 000321
2019524722.tif 000322
2019524722.tif 000323
2019524722.tif 000324
2019524722.tif 000325