(57)【要約】  本発明は、増殖性疾患、特にマイトジェン活性化プロテインキナーゼ（ＭＡＰＫ）を内包する固形腫瘍の治療における使用のためのｃ−Ｒａｆ阻害薬の使用に関する。本発明は、（ａ）プログラム死１（ＰＤ−１）に結合する少なくとも１つの抗体分子（例えば、ヒト化抗体分子）と、（ｂ）ｃ−Ｒａｆ阻害薬又はその薬学的に許容可能な塩とを含む医薬併用物にも関する。本発明は、増殖性疾患、特にマイトジェン活性化プロテインキナーゼ（ＭＡＰＫ）の変化を内包する固形腫瘍を治療するための同時、個別又は逐次投与のためのかかる併用物及びかかる併用物を含む市販用パッケージにも関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
（Ａ）化合物Ａ
【化１】
2019517549.tif 000077
又はその薬学的に許容可能な塩であるｃ−Ｒａｆ阻害薬、及び
（Ｂ）表１に記載されるとおりのＢＡＰ０４９−クローンＢ又はＢＡＰ０４９−クローンＥのＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）と、表１に記載されるとおりのＢＡＰ０４９−クローンＢ又はＢＡＰ０４９−クローンＥのＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）とを含む、ヒトプログラム死１（ＰＤ−１）への結合能を有する単離抗体分子
を含む医薬併用物。
【請求項２】
前記抗ＰＤ−１抗体分子は、
（ａ）配列番号４のＨＣＤＲ１アミノ酸配列と、配列番号５のＨＣＤＲ２アミノ酸配列と、配列番号３のＨＣＤＲ３アミノ酸配列とを含む重鎖可変領域（ＶＨ）；及び配列番号１３のＬＣＤＲ１アミノ酸配列と、配列番号１４のＬＣＤＲ２アミノ酸配列と、配列番号３３のＬＣＤＲ３アミノ酸配列とを含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
（ｂ）配列番号１のＨＣＤＲ１アミノ酸配列と、配列番号２のＨＣＤＲ２アミノ酸配列と、配列番号３のＨＣＤＲ３アミノ酸配列とを含むＶＨ；及び配列番号１０のＬＣＤＲ１アミノ酸配列と、配列番号１１のＬＣＤＲ２アミノ酸配列と、配列番号３２のＬＣＤＲ３アミノ酸配列とを含むＶＬ；
（ｃ）配列番号４のＨＣＤＲ１アミノ酸配列と、配列番号５のＨＣＤＲ２アミノ酸配列と、配列番号３のＨＣＤＲ３アミノ酸配列とを含むＶＨ；及び配列番号１３のＬＣＤＲ１アミノ酸配列と、配列番号１４のＬＣＤＲ２アミノ酸配列と、配列番号３３のＬＣＤＲ３アミノ酸配列とを含むＶＬ；又は
（ｄ）配列番号１のＨＣＤＲ１アミノ酸配列と、配列番号２のＨＣＤＲ２アミノ酸配列と、配列番号３のＨＣＤＲ３アミノ酸配列とを含むＶＨ；及び配列番号１０のＬＣＤＲ１アミノ酸配列と、配列番号１１のＬＣＤＲ２アミノ酸配列と、配列番号３２のＬＣＤＲ３アミノ酸配列とを含むＶＬ
を含む、請求項１に記載の医薬併用物。
【請求項３】
前記ｃ−Ｒａｆキナーゼ阻害薬又はその薬学的に許容可能な塩と、前記抗ＰＤ−１抗体分子とは、個別、同時又は逐次投与される、請求項１又は２に記載の医薬併用物。
【請求項４】
前記ｃ−Ｒａｆキナーゼ阻害薬は、経口剤形である、請求項１又は２に記載の医薬併用物。
【請求項５】
前記抗ＰＤ−１抗体分子は、注射用剤形である、請求項１又は２に記載の医薬併用物。
【請求項６】
請求項１〜５のいずれか一項に記載の医薬併用物と、少なくとも１つの薬学的に許容可能な担体とを含む医薬組成物。
【請求項７】
増殖性疾患の治療における使用のための、請求項１〜５のいずれか一項に記載の医薬併用物又は請求項６に記載の医薬組成物。
【請求項８】
増殖性疾患を治療するための薬物を調製するための、請求項１〜５のいずれか一項に記載の医薬併用物の使用。
【請求項９】
増殖性疾患の治療を、それを必要とする対象において行う方法であって、請求項１〜５のいずれか一項に記載の医薬併用物又は請求項６に記載の医薬組成物を前記対象に投与することを含む方法。
【請求項１０】
前記増殖性疾患は、１つ以上のマイトジェン活性化プロテインキナーゼ（ＭＡＰＫ）の変化を内包する固形腫瘍、ＫＲＡＳ変異ＮＳＣＬＣ（非小細胞肺癌）、ＮＲＡＳ変異メラノーマ、ＫＲＡＳ及び／又はＢＲＡＦ変異ＮＳＣＬＣ、ＫＲＡＳ及び／又はＢＲＡＦ変異卵巣癌、並びにＢＲＡＦｉ／ＭＥＫｉ併用治療抵抗性のＢＲＡＦ変異メラノーマから選択される、請求項７に記載の使用のための医薬併用物、又は請求項８に記載の医薬併用物の使用、又は請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記増殖性疾患は、少なくとも１つのマイトジェン活性化プロテインキナーゼ（ＭＡＰＫ）の変化を内包する固形腫瘍（例えば、進行性固形腫瘍）である、請求項１０に記載の使用のための医薬併用物、又は請求項１０に記載の医薬併用物の使用、又は請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記増殖性疾患は、ＮＲＡＳ変異メラノーマである、請求項１０に記載の使用のための医薬併用物、又は請求項１０に記載の医薬併用物の使用、又は請求項１０に記載の方法。
【請求項１３】
前記増殖性疾患は、ＫＲＡＳ変異ＮＳＣＬＣ（非小細胞肺癌）である、請求項１０に記載の使用のための医薬併用物、又は請求項１０に記載の医薬併用物の使用、又は請求項１０に記載の方法。
【請求項１４】
前記増殖性疾患は、ＫＲＡＳ及びＢＲＡＦ変異ＮＳＣＬＣである、請求項１０に記載の使用のための医薬併用物、又は請求項１０に記載の医薬併用物の使用、又は請求項１０に記載の方法。
【請求項１５】
前記増殖性疾患は、ＫＲＡＳ及び／又はＢＲＡＦ変異卵巣癌である、請求項１０に記載の使用のための医薬併用物、又は請求項１０に記載の医薬併用物の使用、又は請求項１０に記載の方法。
【請求項１６】
前記抗ＰＤ−１抗体分子は、３週間に１回又は４週間に１回、約３００ｍｇ〜４００ｍｇの用量で投与される、請求項１０に記載の使用のための医薬併用物、又は請求項１０に記載の医薬併用物の使用、又は請求項１０に記載の方法。
【請求項１７】
前記抗ＰＤ−１抗体分子は、３週間に１回、約３００ｍｇの用量で投与される、請求項１６に記載の使用のための医薬併用物、又は請求項１６に記載の医薬併用物の使用、又は請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記抗ＰＤ−１抗体分子は、４週間に１回、約４００ｍｇの用量で投与される、請求項１６に記載の使用のための医薬併用物、又は請求項１６に記載の医薬併用物の使用、又は請求項１６に記載の方法。
【請求項１９】
前記ｃ−Ｒａｆキナーゼ阻害薬は、１日約５〜１２００ｍｇの用量において、１日１回又は１日２回のいずれか、より好ましくは１日１回投与される、請求項１０に記載の使用のための医薬併用物、又は請求項１０に記載の医薬併用物の使用、又は請求項１０に記載の方法。
【請求項２０】
前記ｃ−Ｒａｆ阻害薬は、１日１回、約１００、１５０、２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０、５００、５５０、６００、６５０、７００、７５０、８００、８５０、９００、９５０、１０００、１０５０、１１００、１１５０、１２００ｍｇの用量で投与される、請求項１９に記載の使用のための医薬併用物、又は請求項１９に記載の医薬併用物の使用、又は請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記ｃ−Ｒａｆ阻害薬は、１日１回、約１００、１５０、２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０、５００、５５０、６００、６５０、７００、７５０、８００、８５０、９００、９５０、１０００、１０５０、１１００、１１５０、１２００ｍｇの用量で投与され、及び前記抗ＰＤ−１抗体分子は、３週間に１回、約３００ｍｇの用量で投与される、請求項１０に記載の使用のための医薬併用物、又は請求項１０に記載の医薬併用物の使用、又は請求項１０に記載の方法。
【請求項２２】
前記ｃ−Ｒａｆ阻害薬は、１日１回、約１００、１５０、２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０、５００、５５０、６００、６５０、７００、７５０、８００、８５０、９００、９５０、１０００、１０５０、１１００、１１５０、１２００ｍｇの用量で投与され、及び前記抗ＰＤ−１抗体分子は、４週間に１回、約４００ｍｇの用量で投与される、請求項１０に記載の使用のための医薬併用物、又は請求項１０に記載の医薬併用物の使用、又は請求項１０に記載の方法。
【請求項２３】
前記抗ＰＤ−１抗体分子は、
（ａ）配列番号３８のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号４２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；
（ｂ）配列番号３８のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号６６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；
（ｃ）配列番号３８のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号７０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；
（ｄ）配列番号５０のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号７０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；
（ｅ）配列番号３８のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号４６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；
（ｆ）配列番号５０のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号４６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；
（ｇ）配列番号５０のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号５４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；
（ｈ）配列番号３８のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号５４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；
（ｉ）配列番号３８のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号５８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；
（ｊ）配列番号３８のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号６２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；
（ｋ）配列番号５０のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号６６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；
（ｌ）配列番号３８のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号７４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；
（ｍ）配列番号３８のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号７８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；
（ｎ）配列番号８２のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号７０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；
（ｏ）配列番号８２のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号６６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；又は
（ｐ）配列番号８６のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号６６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン
を含む、請求項１〜５のいずれか一項に記載の使用のための医薬併用物、又は請求項６に記載の医薬組成物、又は請求項８に記載の医薬併用物の使用、又は請求項９に記載の方法。
【請求項２４】
ＫＲＡＳ変異非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）の治療における使用のための抗ＰＤ−１抗体であって、ｃ−Ｒａｆ阻害薬との個別、同時又は逐次投与のために調製される、抗ＰＤ−１抗体。
【請求項２５】
ＮＲＡＳ変異メラノーマの治療における使用のための抗ＰＤ−１抗体であって、ｃ−Ｒａｆ阻害薬との個別、同時又は逐次投与のために調製される、抗ＰＤ−１抗体。
【請求項２６】
ＫＲＡＳ及びＢＲＡＦ変異ＮＳＣＬＣの治療における使用のための抗ＰＤ−１抗体であって、ｃ−Ｒａｆ阻害薬との個別、同時又は逐次投与のために調製される、抗ＰＤ−１抗体。
【請求項２７】
ＫＲＡＳ変異卵巣癌の治療における使用のための抗ＰＤ−１抗体であって、ｃ−Ｒａｆ阻害薬との個別、同時又は逐次投与のために調製される、抗ＰＤ−１抗体。
【請求項２８】
ＢＲＡＦ変異卵巣癌の治療における使用のための抗ＰＤ−１抗体であって、ｃ−Ｒａｆ阻害薬との個別、同時又は逐次投与のために調製される、抗ＰＤ−１抗体。
【請求項２９】
ＮＲＡＳ変異メラノーマの治療における使用のためのｃ−Ｒａｆ阻害薬であって、抗ＰＤ−１抗体との個別、同時又は逐次投与のために調製される、ｃ−Ｒａｆ阻害薬。
【請求項３０】
患者のＮＲＡＳ変異メラノーマの治療における使用のためのｃ−Ｒａｆ阻害薬であって、抗ＰＤ−１抗体との個別、同時又は逐次投与のために調製され、前記患者は、以前に免疫療法を受けたことがある、ｃ−Ｒａｆ阻害薬。
【請求項３１】
再発性又は難治性ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異メラノーマ（例えば、前記メラノーマは、ＢＲＡＦｉ／ＭＥＫｉ併用療法の失敗後に再発するか、又はＢＲＡＦｉ／ＭＥＫｉ併用療法に対して難治性である）の治療における使用のためのｃ−Ｒａｆ阻害薬であって、抗ＰＤ−１抗体との個別、同時又は逐次投与のために調製される、ｃ−Ｒａｆ阻害薬。
【請求項３２】
ＮＲＡＳ変異卵巣癌の治療における使用のためのｃ−Ｒａｆ阻害薬であって、抗ＰＤ−１抗体との個別、同時又は逐次投与のために調製される、ｃ−Ｒａｆ阻害薬。
【請求項３３】
（ａ）１つ以上の投薬量単位の請求項１に記載のｃ−Ｒａｆ阻害薬又はその薬学的に許容可能な塩と、（ｂ）１つ以上の投薬量単位の請求項２に記載の抗ＰＤ−１抗体と、少なくとも１つの薬学的に許容可能な担体とを含む併用製剤。
【請求項３４】
活性成分としての請求項１〜５のいずれか一項に記載の医薬併用物を、増殖性疾患の治療における使用のための前記医薬併用物の、それを必要とする患者への同時、個別又は逐次投与に関する説明書と一緒に含む市販用パッケージキット。
【請求項３５】
少なくとも１つのマイトジェン活性化プロテインキナーゼ（ＭＡＰＫ）の変化を内包する固形腫瘍（例えば、進行性固形腫瘍）の治療における使用のための、化合物Ａ又はその薬学的に許容可能な塩であるｃ−Ｒａｆ阻害薬。
【請求項３６】
ＮＲＡＳ変異メラノーマ、ＫＲＡＳ変異ＮＳＣＬＣ（非小細胞肺癌）、ＢＲＡＦ変異ＮＳＣＬＣ、ＫＲＡＳ及びＢＲＡＦ変異ＮＳＣＬＣ、ＫＲＡＳ変異卵巣癌、ＢＲＡＦ変異卵巣癌、及びＫＲＡＳ及びＢＲＡＦ変異卵巣癌、並びに再発性又は難治性ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異メラノーマ（例えば、前記メラノーマは、ＢＲＡＦｉ／ＭＥＫｉ併用療法の失敗後に再発するか、又はＢＲＡＦｉ／ＭＥＫｉ併用療法に対して難治性である）から選択される癌の治療における使用のための、化合物Ａ又はその薬学的に許容可能な塩であるｃ−Ｒａｆ阻害薬。
【請求項３７】
前記ｃ−Ｒａｆキナーゼ阻害薬は、１日約５〜１２００ｍｇの用量において、１日１回又は１日２回のいずれか、より好ましくは１日１回投与される、請求項３５に記載の使用のためのｃ−Ｒａｆ阻害薬。
【請求項３８】
前記ｃ−Ｒａｆ阻害薬は、１日１回、約１００、１５０、２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０、５００、５５０、６００、６５０、７００、７５０、８００、８５０、９００、９５０、１０００、１０５０、１１００、１１５０、１２００ｍｇの用量で投与される、請求項３６に記載の使用のためのｃ−Ｒａｆ阻害薬。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
配列表
本願は、ＡＳＣＩＩ形式で電子的に提出された配列表を含み、この配列表は、本明細書によって全体として参照により援用される。２０１７年６月７日に作成された前記ＡＳＣＩＩ複製物は、ＰＡＴ０５７３４６＿ＳＬ．ＴＸＴという名称であり、サイズが１９０，３８１バイトである。
【０００２】
本発明は、ＫＲＡＳ変異腫瘍、ＮＲＡＳ変異腫瘍及びある種のＢＲＡＦ変異腫瘍など、マイトジェン活性化プロテインキナーゼ（ＭＡＰＫ）の変化を内包する固形腫瘍である癌を治療するためのｃ−Ｒａｆ（Ｃ−ＲＡＦ又はＣＲＡＦ）阻害薬の使用に関する。ｃ−Ｒａｆ阻害薬は、特にＫＲＡＳ変異ＮＳＣＬＣ（非小細胞肺癌）、ＢＲＡＦ変異ＮＳＣＬＣ（非小細胞肺癌）、ＫＲＡＳ変異及びＢＲＡＦ変異ＮＳＣＬＣ（非小細胞肺癌）、ＫＲＡＳ変異卵巣癌、ＢＲＡＦ変異卵巣癌、ＫＲＡＳ変異及びＢＲＡＦ変異卵巣癌、並びにＮＲＡＳ変異メラノーマから選択される癌の治療における使用のために提供される。本発明は、再発性又は難治性ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異メラノーマの治療における使用のためのｃ−Ｒａｆ阻害薬も提供する。
【０００３】
本発明は、（ａ）プログラム死１（ＰＤ−１）に結合する少なくとも１つの抗体分子（例えば、ヒト化抗体分子）と、（ｂ）ｃ−Ｒａｆ（Ｃ−ＲＡＦ又はＣＲＡＦ）阻害薬とを含む医薬併用物であって、増殖性疾患の治療における使用のための、同時、個別又は逐次投与のための前記併用物、かかる併用物を含む医薬組成物；前記併用物の、それを必要とする対象への投与を含む、増殖性疾患を有する対象を治療する方法；増殖性疾患の治療のためのかかる併用物の使用；及びかかる併用物を含む市販用パッケージにも関し、前記増殖性疾患は、ＫＲＡＳ変異腫瘍及びＮＲＡＳ変異腫瘍、詳細にはＫＲＡＳ変異ＮＳＣＬＣ（非小細胞肺癌）及びＮＲＡＳ変異腫瘍、詳細にはＮＲＡＳ変異メラノーマなど、マイトジェン活性化プロテインキナーゼ（ＭＡＰＫ）の変化を内包する固形腫瘍である。
【背景技術】
【０００４】
ＲＡＳ／ＲＡＦ／ＭＥＫ／ＥＲＫ又はＭＡＰＫ経路は、細胞増殖、分化及び生存をドライブする重要なシグナル伝達カスケードである。この経路の調節異常が多くの腫瘍発生例の根底にある。メラノーマ、肺癌及び膵癌を含め、複数の腫瘍型でＭＡＰＫ経路の異常なシグナル伝達又は不適切な活性化が示されており、これは、ＲＡＳ及びＢＲＡＦの活性化突然変異を含め、幾つかの異なる機構を通じて起こり得る。ＲＡＳは、ＧＴＰアーゼスーパーファミリーであり、機能獲得型突然変異として知られる様々な単一点突然変異によってオンになり得る（活性化し得る）調節シグナル伝達タンパク質であるＫＲＡＳ（ｖ−Ｋｉ−ｒａｓ２カーステンラット肉腫ウイルス癌遺伝子ホモログ）を含む。ヒト癌では、ＭＡＰＫ経路が高頻度で突然変異し、とりわけＫＲＡＳ及びＢＲＡＦ突然変異が最も高頻度である（約３０％）。
【０００５】
ＲＡＳ突然変異、特に機能獲得型突然変異は、全ての癌の９〜３０％に検出されており、ＫＲＡＳ突然変異の保有率が最も高く（８６％）、次にＮＲＡＳが続き（１１％）、まれにＨＲＡＳが見られる（３％）（Ｃｏｘ  ＡＤ，Ｆｅｓｉｋ  ＳＷ，Ｋｉｍｍｅｌｍａｎ  ＡＣ，ｅｔ  ａｌ（２０１４），Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ．Ｎｏｖ；１３（１１）：８２８−５１）。選択的ＢＲＡＦ阻害薬（ＢＲＡＦｉ）、及びそれより程度は低いが、ＭＥＫ阻害薬（ＭＥＫｉ）は、ＢＲＡＦ変異腫瘍において良好な活性を示しているが、現在、ＫＲＡＳ変異腫瘍に有効な療法は存在しない（Ｃａｎｔｗｅｌｌ−Ｄｏｒｒｉｓ  ＥＲ，Ｏ’Ｌｅａｒｙ  ＪＪ，Ｓｈｅｉｌｓ  ＯＭ（２０１１）Ｍｏｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒ．Ｍａｒ；１０（３）：３８５−９４）。例えば、ＢＲＡＦ  Ｖ６００Ｅ突然変異を有するメラノーマに効果があるベムラフェニブ及びエンコラフェニブなどのＢＲＡＦｉは、ＲＡＳ変異癌に無効であることが分かった。アロステリックＭＥＫ阻害薬（ＭＥＫｉ）は、ＲＡＳ突然変異を内包する腫瘍を有する患者でロバストな臨床的有効性が実証されておらず、これは、狭い治療指数及びフィードバック介在性の経路再活性化に起因するものと思われる。このように、（Ｋ）ＲＡＳ変異腫瘍について有効な治療が存在せず、依然として医学的必要性が高いが、依然として対処されていない。
【０００６】
ＫＲＡＳシグナル伝達の媒介及びＫＲＡＳ変異非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）の発症におけるｃ−Ｒａｆの役割に関してエビデンスが出るにつれ、ｃ−Ｒａｆは、好適な治療介入標的となりつつある（Ｂｌａｓｃｏ  ＲＢ，Ｆｒａｎｃｏｚ  Ｓ，Ｓａｎｔａｍａｒｉａ  Ｄ，ｅｔ  ａｌ（２０１１）ｃ−Ｒａｆ，ｂｕｔ  ｎｏｔ  Ｂ−Ｒａｆ，ｉｓ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌ  ｆｏｒ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｋ−Ｒａｓ  ｏｎｃｏｇｅｎｅ−ｄｒｉｖｅｎ  ｎｏｎ−ｓｍａｌｌ  ｃｅｌｌ  ｌｕｎｇ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｌｌ．２０１１  Ｍａｙ  １７；１９（５）：６５２−６３）。ｃ−Ｒａｆは、ＫＲＡＳ変異癌においてＭＥＫｉ治療後にフィードバック介在性の経路再活性化を促進することが示された（Ｌｉｔｏ  Ｐ，Ｓａｂｏｒｏｗｓｋｉ  Ａ，Ｙｕｅ  Ｊ，ｅｔ  ａｌ（２０１４）Ｄｉｓｒｕｐｔｉｏｎ  ｏｆ  ｃ−Ｒａｆ−Ｍｅｄｉａｔｅｄ  ＭＥＫ  Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  Ｉｓ  Ｒｅｑｕｉｒｅｄ  ｆｏｒ  Ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ  ＭＥＫ  Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｉｎ  ＫＲＡＳ  Ｍｕｔａｎｔ  Ｔｕｍｏｒｓ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｌｌ  ２５，６９７−７１０．，Ｌａｍｂａ  ｅｔ  ａｌ  ２０１４）。加えて、ｃ−Ｒａｆは、ＢＲＡＦｉ治療後の逆説的な活性化の媒介において決定的に重要な役割を果たす（Ｐｏｕｌｉｋａｋｏｓ  ＰＩ，Ｚｈａｎｇ  Ｃ，Ｂｏｌｌａｇ  Ｇ，ｅｔ  ａｌ．（２０１０），Ｎａｔｕｒｅ．Ｍａｒ  １８；４６４（７２８７）：４２７−３０．、Ｈａｔｚｉｖａｓｓｉｌｉｏｕ  ｅｔ  ａｌ  ２０１０、Ｈｅｉｄｏｒｎ  ｅｔ  ａｌ  ２０１０）。従って、ｃ−Ｒａｆ及びＢＲＡＦの活性を強力に阻害する選択的汎ＲＡＦ阻害薬があれば、ＢＲＡＦ変異腫瘍及びＲＡＳ変異によってドライブされる腫瘍発生の遮断に有効となり得ると共にフィードバック活性化も緩和され得る。
【０００７】
Ｔ細胞が抗原に対して免疫応答を媒介可能であるには、２つの異なるシグナル伝達相互作用が必要である（Ｖｉｇｌｉｅｔｔａ，Ｖ．ｅｔ  ａｌ．（２００７）Ｎｅｕｒｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ  ４：６６６−６７５；Ｋｏｒｍａｎ，Ａ．Ｊ．ｅｔ  ａｌ．（２００７）Ａｄｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．９０：２９７−３３９）。第一に、抗原提示細胞（ＡＰＣ）の表面に配列された抗原が抗原特異的ナイーブＣＤ４＋Ｔ細胞に提示される。かかる提示によってＴ細胞受容体（ＴＣＲ）を通じてシグナルが送達され、提示された抗原に特異的な免疫応答を開始するようにＴ細胞が指図を受ける。第二に、ＡＰＣと個別的なＴ細胞表面分子との間の相互作用を通じて媒介される様々な共刺激性及び阻害性シグナルがＴ細胞の活性化及び増殖、最終的にその阻害を惹起する。
【０００８】
プログラム死１（ＰＤ−１）タンパク質は、Ｔ細胞調節因子の拡張ＣＤ２８／ＣＴＬＡ−４ファミリーの阻害性メンバーである（Ｏｋａｚａｋｉ  ｅｔ  ａｌ．（２００２）Ｃｕｒｒ  Ｏｐｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  １４：３９１７７９−８２；Ｂｅｎｎｅｔｔ  ｅｔ  ａｌ．（２００３）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１７０：７１１−８）。このＣＤ２８ファミリーの他のメンバーには、ＣＤ２８、ＣＴＬＡ−４、ＩＣＯＳ及びＢＴＬＡが含まれる。ＰＤ−１は、多くの腫瘍が免疫系による攻撃の回避に用いる免疫チェックポイント経路の標的部位の１つである。ＰＤ−１は、モノマーとして存在して、他のＣＤ２８ファミリーメンバーに特徴的である、対を成さないシステイン残基を欠いていることが示唆される。ＰＤ−１は、活性化Ｂ細胞、Ｔ細胞及び単球に発現する。
【０００９】
腫瘍に対する免疫応答の調節における免疫チェックポイント経路の重要性を考えれば、ＰＤ−１などの免疫阻害性タンパク質の活性を調整し、従って免疫系の活性化をもたらす新規併用療法を開発する必要がある。かかる薬剤は、例えば、癌免疫療法及び他の病態の治療に使用することができ、及びキナーゼ阻害薬を含む他の治療用薬剤と併用して使用することができる。
【００１０】
肺癌は、世界中の男女に発症する一般的な種類の癌である。ＮＳＣＬＣは、最も一般的な種類の肺癌であり（約８５％）、その患者の約７０％が診断時に進行疾患（ステージＩＩＩＢ又はステージＩＶ）を呈する。ＮＳＣＬＣの約３０％が活性化ＫＲＡＳ突然変異を含み、これらの突然変異は、ＥＧＦＲ  ＴＫＩ耐性と関連付けられる（Ｐａｏ  Ｗ，Ｗａｎｇ  ＴＹ，Ｒｉｅｌｙ  ＧＪ，ｅｔ  ａｌ（２００５）ＰＬｏＳ  Ｍｅｄ；２（１）：ｅ１７）。
【００１１】
現在開発中の免疫療法は、従来の治療が無効な患者を含め、肺癌患者に多大な有益をもたらし始めている。最近になって、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１相互作用の２つの阻害薬であるペンブロリズマブ及びニボルマブがそれぞれ商標名Ｋｅｙｔｒｕｄａ（登録商標）及びＯｐｄｉｖｏ（登録商標）でＮＳＣＬＣにおける使用に承認された。しかしながら、結果は、単剤ＰＤ−１阻害薬で治療される多くの患者が十分な治療利益を受けないことを示している。
【００１２】
メラノーマは、世界中の男女に発症する一般的な種類の癌である。メラノーマの約１５〜２０％が活性化ＮＲＡＳ突然変異を含み、これらの突然変異は、ステージＩＶメラノーマ診断後の短い生存期間の独立予測因子であると同定された（Ｊａｋｏｂ  ＪＡ  ｅｔ  ａｌ（２０１２），Ｃａｎｃｅｒ，Ｖｏｌｕｍｅ  １１８，Ｉｓｓｕｅ  １６，Ｐａｇｅｓ  ４０１４−４０２３）。
【００１３】
現在開発中の免疫療法は、従来の治療が無効な患者を含め、メラノーマ癌患者に多大な有益をもたらし始めている。最近になって、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１相互作用の２つの阻害薬であるペンブロリズマブ及びニボルマブがそれぞれ商標名Ｋｅｙｔｒｕｄａ（登録商標）及びＯｐｄｉｖｏ（登録商標）でメラノーマにおける使用に承認された。しかしながら、結果は、単剤ＰＤ−１阻害薬で治療される多くの患者が十分な治療利益を受けないことを示している。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１４】
ＫＲＡＳ及びＮＲＡＳを直接阻害するのは難題であることが分かっている。例えば、現在、ＫＲＡＳ変異ＮＳＣＬＣ患者又はＮＲＡＳ変異メラノーマ患者に利用可能な承認済みのターゲット療法はない。従って、安全及び／又は忍容性が良好なターゲット療法が必要とされている。かかる臨床セッティングで耐久性のある持続的な応答をもたらす療法も必要とされている。
【課題を解決するための手段】
【００１５】
本発明は、ＫＲＡＳ変異腫瘍及びＮＲＡＳ変異腫瘍など、マイトジェン活性化プロテインキナーゼ（ＭＡＰＫ）の変化を内包する固形腫瘍である癌の治療における使用のための化合物Ａ又はその薬学的に許容可能な塩を提供する。これらには、ＮＲＡＳ変異メラノーマ、ＫＲＡＳ変異ＮＳＣＬＣ（非小細胞肺癌）、ＢＲＡＦ変異ＮＳＣＬＣ、ＫＲＡＳ及びＢＲＡＦ変異ＮＳＣＬＣ、ＫＲＡＳ変異卵巣癌、ＢＲＡＦ変異卵巣癌、及びＫＲＡＳ及びＢＲＡＦ変異卵巣癌、並びに再発性又は難治性ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異メラノーマ（例えば、前記メラノーマは、ＢＲＡＦｉ／ＭＥＫｉ併用療法の失敗後に再発するか、又はＢＲＡＦｉ／ＭＥＫｉ併用療法に対して難治性である）が含まれる。
【００１６】
化合物Ａは、以下の構造：
【化１】
2019517549.tif 000002
を有する化合物である。
【００１７】
本発明は、（ａ）プログラム死１（ＰＤ−１）に結合する少なくとも１つの抗体分子（例えば、ヒト化抗体分子）、特に以下に記載するとおりの例示的抗体分子と、（ｂ）化合物Ａ又はその薬学的に許容可能な塩であるｃ−Ｒａｆ阻害薬とを含む医薬併用物も提供する。本医薬併用物は、増殖性疾患、特にＫＲＡＳ変異腫瘍及びＮＲＡＳ変異腫瘍など、マイトジェン活性化プロテインキナーゼ（ＭＡＰＫ）の変化を内包する固形腫瘍を治療するための同時、個別又は逐次投与に使用され得る。これらの腫瘍には、ＫＲＡＳ変異ＮＳＣＬＣ（非小細胞肺癌）、ＮＲＡＳ変異メラノーマ、ＫＲＡＳ及び／若しくはＢＲＡＦ変異ＮＳＣＬＣ又はＫＲＡＳ及び／若しくはＢＲＡＦ変異卵巣癌、並びにＢＲＡＦｉ／ＭＥＫｉ併用治療抵抗性のＢＲＡＦ変異メラノーマが含まれる。
【００１８】
本発明は、
（Ａ）化合物Ａ又はその薬学的に許容可能な塩であるｃ−Ｒａｆ阻害薬、及び
（Ｂ）以下の表１に記載されるとおりのＢＡＰ０４９−クローンＢ又はＢＡＰ０４９−クローンＥのＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）と、表１に記載されるとおりのＢＡＰ０４９−クローンＢ又はＢＡＰ０４９−クローンＥのＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）とを含む、ヒトプログラム死１（ＰＤ−１）への結合能を有する単離抗体分子
を含む医薬併用物にも関する。
【００１９】
また、かかる併用物を含む医薬組成物；前記併用物の、それを必要とする対象への投与を含む、増殖性疾患を有する対象を治療する方法；増殖性疾患の治療のためのかかる併用物の使用；及びかかる併用物を含む市販用パッケージも提供される。
【００２０】
ＰＤ−１阻害薬は、「Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ  ｔｏ  ＰＤ−１  ａｎｄ  Ｕｓｅｓ  Ｔｈｅｒｅｏｆ」という名称の米国特許出願公開第１４／６０４，４１５号明細書及び国際公開第２０１５／１１２９００号パンフレット（両方とも全体として参照により援用される）に記載されるとおりの抗ＰＤ−１抗体分子である。一実施形態において、抗ＰＤ−１抗体分子には、重鎖からの３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）及び軽鎖からの３つのＣＤＲを含む、本明細書に記載される抗体からの少なくとも１つの抗原結合領域、例えばその可変領域又は抗原結合断片、例えばＢＡＰ０４９−ｈｕｍ０１、ＢＡＰ０４９−ｈｕｍ０２、ＢＡＰ０４９−ｈｕｍ０３、ＢＡＰ０４９−ｈｕｍ０４、ＢＡＰ０４９−ｈｕｍ０５、ＢＡＰ０４９−ｈｕｍ０６、ＢＡＰ０４９−ｈｕｍ０７、ＢＡＰ０４９−ｈｕｍ０８、ＢＡＰ０４９−ｈｕｍ０９、ＢＡＰ０４９−ｈｕｍ１０、ＢＡＰ０４９−ｈｕｍ１１、ＢＡＰ０４９−ｈｕｍ１２、ＢＡＰ０４９−ｈｕｍ１３、ＢＡＰ０４９−ｈｕｍ１４、ＢＡＰ０４９−ｈｕｍ１５、ＢＡＰ０４９−ｈｕｍ１６、ＢＡＰ０４９−クローンＡ、ＢＡＰ０４９−クローンＢ、ＢＡＰ０４９−クローンＣ、ＢＡＰ０４９−クローンＤ若しくはＢＡＰ０４９−クローンＥのいずれかから選択されるか、又は表１に記載されるとおりの、又は表１のヌクレオチド配列若しくは前記配列のいずれかと実質的に同一の（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％又はそれより高度に同一の）配列によってコードされる抗体が含まれる。
【００２１】
例えば、抗ＰＤ−１抗体分子は、例えば、表１に示されるとおりの、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．によるＶＨ  ＣＤＲ１若しくはＣｈｏｔｈｉａ  ｅｔ  ａｌ．によるＶＨ超可変ループ１又はこれらの組み合わせを含み得る。一実施形態において、ＶＨ  ＣＤＲ１のＫａｂａｔ及びＣｈｏｔｈｉａ  ＣＤＲの組み合わせは、アミノ酸配列ＧＹＴＦＴＴＹＷＭＨ（配列番号２２４）又はそれと実質的に同一の（例えば、少なくとも１つのアミノ酸変化（例えば、置換、欠失又は挿入、例えば保存的置換）を有するが、２、３又は４つより多い変化を有することはない）アミノ酸配列を含む。抗ＰＤ−１抗体分子は、例えば、表１に示されるとおりの、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．によるＶＨ  ＣＤＲ２〜３及びＫａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．によるＶＬ  ＣＤＲ１〜３を例えば更に含み得る。従って、一部の実施形態において、フレームワーク領域は、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．により定義されるＣＤＲ及びＣｈｏｔｈｉａ  ｅｔ  ａｌ．により定義される超可変ループの組み合わせに基づいて定義される。例えば、抗ＰＤ−１抗体分子は、例えば、表１に示されるとおりの、Ｃｈｏｔｈｉａ  ｅｔ  ａｌ．によるＶＨ超可変ループ１に基づいて定義されるＶＨ  ＦＲ１及びＫａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．によるＶＨ  ＣＤＲ１〜２に基づいて定義されるＶＨ  ＦＲ２を含み得る。抗ＰＤ−１抗体分子は、例えば、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．によるＶＨ  ＣＤＲ２〜３に基づいて定義されるＶＨ  ＦＲ３〜４及びＫａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．によるＶＬ  ＣＤＲ１〜３に基づいて定義されるＶＬ  ＦＲ１〜４を更に含み得る。
【００２２】
本発明の併用物におけるプログラム死１（ＰＤ−１）に結合する好ましい抗体分子（例えば、ヒト化抗体分子）は、ＢＡＰ０４９−クローンＥである例示的抗体分子であり、好ましいアミノ酸配列が本明細書の表１に記載される（ＶＨ：配列番号３８；ＶＬ：配列番号７０）。好ましい抗体分子は、本明細書では抗体Ｂとも称される。
【００２３】
本発明は、増殖性疾患の治療における使用のための、同時、個別又は逐次投与のための、化合物Ａ又はその薬学的に許容可能な塩であるｃ−Ｒａｆキナーゼ阻害薬と、本明細書に記載されるとおりの抗ＰＤ−１抗体分子とを含む医薬併用物を更に提供する。
【００２４】
本発明は、特にＭＡＰＫ経路における活性化突然変異、詳細にはＫＲＡＳ又はＮＲＡＳにおける１つ以上の突然変異によって特徴付けられる増殖性疾患の治療における使用のための本発明の併用物に関する。
【００２５】
本発明は、増殖性疾患、特に癌を治療するための本発明の併用物の使用も提供する。詳細には、本発明の併用物は、ＫＲＡＳ変異ＮＳＣＬＣ（非小細胞肺癌）、ＮＲＡＳ変異メラノーマ、ＫＲＡＳ及び／又はＢＲＡＦ変異ＮＳＣＬＣ、ＫＲＡＳ及び／又はＢＲＡＦ変異卵巣癌、並びにＢＲＡＦｉ／ＭＥＫｉ併用治療抵抗性のＢＲＡＦ変異メラノーマから選択される癌の治療に有用であり得る。
【００２６】
本発明は、増殖性疾患、特に癌、特にマイトジェン活性化プロテインキナーゼ（ＭＡＰＫ）の変化を内包する固形腫瘍、例えばＫＲＡＳ変異ＮＳＣＬＣ（非小細胞肺癌）、ＮＲＡＳ変異メラノーマ、ＫＲＡＳ及び／又はＢＲＡＦ変異ＮＳＣＬＣ、ＫＲＡＳ及び／又はＢＲＡＦ変異卵巣癌、並びにＢＲＡＦｉ／ＭＥＫｉ併用治療抵抗性のＢＲＡＦ変異メラノーマの治療用薬物を調製するための本発明の併用物の使用も提供する。
【００２７】
本発明は、増殖性疾患を治療する方法であって、前記増殖性疾患に対して一緒になって治療上有効である分量において、本発明の併用物を、それを必要とする対象に同時、個別又は逐次投与することを含む方法も提供する。
【００２８】
本発明は、増殖性疾患に対して一緒になって治療上有効である分量の本発明の併用物と、任意選択で少なくとも１つの薬学的に許容可能な担体とを含む医薬組成物又は併用製剤も提供する。
【００２９】
本発明は、増殖性疾患の治療における使用のための、（ａ）１つ以上の投薬量単位の、化合物Ａ又はその薬学的に許容可能な塩であるｃ−Ｒａｆ阻害薬と、（ｂ）抗ＰＤ−１抗体分子とを含む併用製剤も提供する。
【００３０】
本発明は、活性成分としての本発明の併用物と、増殖性疾患、特にマイトジェン活性化プロテインキナーゼ（ＭＡＰＫ）の変化を内包する固形腫瘍、例えばＫＲＡＳ変異ＮＳＣＬＣ（非小細胞肺癌）、ＮＲＡＳ変異メラノーマ、ＫＲＡＳ及び／又はＢＲＡＦ変異ＮＳＣＬＣ、ＫＲＡＳ及び／又はＢＲＡＦ変異卵巣癌、並びにＢＲＡＦｉ／ＭＥＫｉ併用治療抵抗性のＢＲＡＦ変異メラノーマの治療における使用のための本発明の併用物の、それを必要とする患者への同時、個別又は逐次投与に関する説明書とを含む市販用パッケージも提供する。
【００３１】
本発明は、化合物Ａ又はその薬学的に許容可能な塩であるｃ−Ｒａｆ阻害薬と、抗ＰＤ−１抗体分子と、増殖性疾患の治療における同時、個別又は逐次使用に関する説明書とを含む市販用パッケージも提供する。
【００３２】
別の態様において、本発明は、本明細書に記載される抗体分子と使用説明書とを含む診断用又は治療用キットを特徴とする。
【００３３】
本明細書において言及される全ての刊行物、特許出願、特許及び他の参考文献は、全体として参照により援用される。
【００３４】
本発明の他の特徴、目的及び利点は、説明及び図面から並びに特許請求の範囲から明らかとなるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００３５】
【図１】マウス抗ＰＤ−１  ｍＡｂ  ＢＡＰ０４９の軽鎖及び重鎖可変領域のアミノ酸配列を示す。上段及び下段の配列は、２つの独立した分析によるものであった。Ｋａｂａｔ付番に基づく軽鎖及び重鎖ＣＤＲ配列に下線を付す。Ｃｈｏｔｈｉａ付番に基づく軽重鎖ＣＤＲ配列を太字の斜体で示す。軽鎖配列の１０２位にある対を成さないＣｙｓ残基に囲み線を付す。配列は、掲載順にそれぞれ配列番号８、２２８、１６及び２２９として開示される。
【図２Ａ】図２Ａは、生殖系列配列とアライメントしたマウス抗ＰＤ−１  ｍＡｂ  ＢＡＰ０４９の軽鎖及び重鎖可変領域のアミノ酸配列を示す。上段及び下段の配列は、それぞれ生殖系列（ＧＬ）配列及びＢＡＰ０４９（Ｍｕ  ｍＡｂ）配列である。Ｋａｂａｔ付番に基づく軽鎖及び重鎖ＣＤＲ配列に下線を付す。Ｃｈｏｔｈｉａ付番に基づく軽重鎖ＣＤＲ配列を太字の斜体で示す。「−」は、同一のアミノ酸残基を意味する。配列は、掲載順にそれぞれ配列番号２３０、８、２３１及び１６として開示される。図２Ｂは、マウスκ  Ｊ２遺伝子の配列及びマウス抗ＰＤ−１  ｍＡｂ  ＢＡＰ０４９における対応する突然変異を示す。「−」は、同一のヌクレオチド残基を意味する。配列は、掲載順にそれぞれ配列番号２３３、２３２、２３４及び２３５として開示される。
【図２Ｂ】（上記のとおり。）
【図３Ａ】図３Ａ〜図３Ｂは、蛍光標識マウス抗ＰＤ−１  ｍＡｂ  ＢＡＰ０４９（Ｍｕ  ｍＡｂ）と３つのキメラバージョンのＢＡＰ０４９（Ｃｈｉ  ｍＡｂ）との間の競合結合を示す。実験は２回行っており、結果をそれぞれ図３Ａ及び図３Ｂに示す。３つのキメラＢＡＰ０４９抗体（Ｃｈｉ  ｍＡｂ（Ｃｙｓ）、Ｃｈｉ  ｍＡｂ（Ｔｙｒ）及びＣｈｉ  ｍＡｂ（Ｓｅｒ））は、軽鎖可変領域の１０２位にそれぞれＣｙｓ、Ｔｙｒ及びＳｅｒ残基を有する。Ｃｈｉ  ｍＡｂ（Ｃｙｓ）、Ｃｈｉ  ｍＡｂ（Ｔｙｒ）及びＣｈｉ  ｍＡｂ（Ｓｅｒ）は、それぞれＢＡＰ０４９−ｃｈｉ、ＢＡＰ０４９−ｃｈｉ−Ｙ及びＢＡＰ０４９−ｃｈｉ−Ｓとも呼ばれる。
【図３Ｂ】（上記のとおり。）
【図４】１６個のヒト化ＢＡＰ０４９クローン（ＢＡＰ０４９−ｈｕｍ０１〜ＢＡＰ０４９−ｈｕｍ１６）についてのＦＡＣＳ結合分析の結果を示す棒グラフである。抗体濃度は、試験した各ｍＡｂについて最も左のバーから最も右のバーに向かって２００、１００、５０、２５及び１２．５ｎｇ／ｍｌである。
【図５】ヒト化ＢＡＰ０４９クローンの構造解析を示す（ａ、ｂ、ｃ、ｄ及びｅは、各種のフレームワーク領域配列を表す）。試料中のｍＡｂ濃度も示す。
【図６Ａ】図６Ａ〜図６Ｂは、一定濃度のＡｌｅｘａ  ４８８標識マウスｍＡｂ  ＢＡＰ０４９、試験抗体の段階希釈物及びＰＤ−１発現３００．１９細胞を用いる競合結合アッセイで測定したヒト化ＢＡＰ０４９  ｍＡｂの結合親和性及び特異性を示す。実験は２回行っており、結果をそれぞれ図６Ａ及び図６Ｂに示す。
【図６Ｂ】（上記のとおり。）
【図７】ＦＡＣＳデータ、競合結合及び構造解析に基づくヒト化ＢＡＰ０４９クローンの順位を示す。試料中のｍＡｂ濃度も示す。
【図８Ａ】図８Ａ〜図８Ｂは、選択されたヒト化ＢＡＰ０４９クローンによるＰＤ−１へのリガンド結合の遮断を示す。ＰＤ−１へのＰＤ−Ｌ１−Ｉｇ及びＰＤ−Ｌ２−Ｉｇ結合の遮断を図８Ａに示す。ＰＤ−１へのＰＤ−Ｌ２−Ｉｇ結合の遮断を図８Ｂに示す。ＢＡＰ０４９−ｈｕｍ０１、ＢＡＰ０４９−ｈｕｍ０５、ＢＡＰ０４９−ｈｕｍ０８、ＢＡＰ０４９−ｈｕｍ０９、ＢＡＰ０４９−ｈｕｍ１０及びＢＡＰ０４９−ｈｕｍ１１を評価した。マウスｍＡｂ  ＢＡＰ０４９及び軽鎖可変領域の１０２位にＴｙｒを有するキメラｍＡｂも分析に含めた。
【図８Ｂ】（上記のとおり。）
【図９Ａ】図９Ａ〜図９Ｂは、１６個のヒト化ＢＡＰ０４９クローン及びＢＡＰ０４９キメラ（ＢＡＰ０４９−ｃｈｉ）の重鎖可変ドメイン配列のアラインメントを示す。図９Ａに配列の全てを示す（掲載順にそれぞれ配列番号２２、３８、３８、３８、３８、３８、３８、３８、３８、３８、５０、５０、５０、５０、８２、８２及び８６）。図９Ｂには、マウス配列と異なるアミノ酸配列のみを示す（掲載順にそれぞれ配列番号２２、３８、３８、３８、３８、３８、３８、３８、３８、３８、５０、５０、５０、５０、８２、８２及び８６）。
【図９Ｂ】（上記のとおり。）
【図１０Ａ】図１０Ａ〜図１０Ｂは、１６個のヒト化ＢＡＰ０４９クローン及びＢＡＰ０４９キメラ（ＢＡＰ０４９−ｃｈｉ）の軽鎖可変ドメイン配列のアラインメントを示す。図１０Ａに配列の全てを示す（掲載順にそれぞれ配列番号２４、６６、６６、６６、６６、７０、７０、７０、５８、６２、７８、７４、４６、４６、４２、５４及び５４）。図１０Ｂには、マウス配列と異なるアミノ酸配列のみを示す（掲載順にそれぞれ配列番号２４、６６、６６、６６、６６、７０、７０、７０、５８、６２、７８、７４、４６、４６、４２、５４及び５４）。
【図１０Ｂ】（上記のとおり。）
【図１１】本明細書に開示される併用療法の標的となる抗原プロセシング及び提示、エフェクター細胞応答、並びに免疫抑制経路を概説する概略図である。
【図１２】同じ用量の例示的抗ＰＤ−１抗体分子を投与される間の患者に関する異なる体重にわたる予測Ｃｔｒｏｕｇｈ（Ｃｍｉｎ）濃度を示す。
【図１３】Ｃｍｉｎ濃度の実測値対モデル予測値（集団又は個人ベース）を示す。
【図１４】薬物動態の分析に使用したモデルの蓄積、経時変化及び対象内変動を示す。
【図１５Ａ】図１５Ａ、図１５Ｂ及び図１５Ｃは、様々なＫＲＡＳｍｔ  ＮＳＣＬＣモデルにおける化合物Ａの単剤活性を示す。
【図１５Ｂ】（上記のとおり。）
【図１５Ｃ】（上記のとおり。）
【図１６】ＮＲＡＳｍｔメラノーマモデルにおける化合物Ａの単剤活性を示す。
【発明を実施するための形態】
【００３６】
表の簡単な説明
表１は、マウス、キメラ及びヒト化抗ＰＤ−１抗体分子のアミノ酸配列及びヌクレオチド配列の概要である。これらの抗体分子には、マウスｍＡｂ  ＢＡＰ０４９、キメラｍＡｂ  ＢＡＰ０４９−ｃｈｉ及びＢＡＰ０４９−ｃｈｉ−Ｙ、並びにヒト化ｍＡｂ  ＢＡＰ０４９−ｈｕｍ０１〜ＢＡＰ０４９−ｈｕｍ１６及びＢＡＰ０４９−クローンＡ〜ＢＡＰ０４９−クローンＥが含まれる。この表には、重鎖及び軽鎖ＣＤＲのアミノ酸配列及びヌクレオチド配列、重鎖及び軽鎖可変領域のアミノ酸配列及びヌクレオチド配列、並びに重鎖及び軽鎖のアミノ酸配列及びヌクレオチド配列を示す。
表２は、ヒト化ｍＡｂ  ＢＡＰ０４９−ｈｕｍ０１〜ＢＡＰ０４９−ｈｕｍ１６及びＢＡＰ０４９−クローンＡ〜ＢＡＰ０４９−クローンＥの重鎖及び軽鎖フレームワーク領域のアミノ酸配列及びヌクレオチド配列を示す。
表３は、ヒトＩｇＧ重鎖及びヒトκ軽鎖の定常領域アミノ酸配列を示す。
表４は、ヒト化ｍＡｂ  ＢＡＰ０４９−クローンＡ〜ＢＡＰ０４９−クローンＥの重鎖及び軽鎖リーダー配列のアミノ酸配列を示す。
表５は、一定用量投与スケジュールに基づく例示的ＰＫパラメータを示す。
【００３７】
ｃ−Ｒａｆキナーゼ阻害薬
ＣＲＡＦは、ＮＳＣＬＣを含めた多くの癌において変異ＫＲＡＳドライブ性の発症の決定的に重要なメディエーターであることが実証されており、ＢＲＡＦｉ治療後の逆説的活性化の媒介において不可欠な役割を果たす。従って、ｃ−ＲＡＦ阻害薬である化合物Ａは、増殖性疾患、特にマイトジェン活性化プロテインキナーゼ（ＭＡＰＫ）の変化を内包する固形腫瘍、例えばＮＲＡＳ変異メラノーマ、ＫＲＡＳ変異ＮＳＣＬＣ（非小細胞肺癌）、ＢＲＡＦ変異ＮＳＣＬＣ、ＫＲＡＳ及びＢＲＡＦ変異ＮＳＣＬＣ、ＫＲＡＳ変異卵巣癌、ＢＲＡＦ変異卵巣癌、及びＫＲＡＳ及びＢＲＡＦ変異卵巣癌、並びに再発性又は難治性ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異メラノーマ（例えば、前記メラノーマは、ＢＲＡＦｉ／ＭＥＫｉ併用療法の失敗後に再発するか、又はＢＲＡＦｉ／ＭＥＫｉ併用療法に対して難治性である）の治療（例えば、軽減、阻害又は進行遅延の１つ以上）に有用であり得る。
【００３８】
本明細書で使用されるとき、用語「Ｒａｆ阻害薬」は、セリン／スレオニンプロテインキナーゼＢ−Ｒａｆ又はＣ−Ｒａｆの少なくとも１つの活性を選択的に標的化するか、低下させるか、又は阻害するＢ−Ｒａｆプロテインキナーゼ（本明細書ではｂ−ＲＡＦ、ＢＲＡＦ又はｂ−Ｒａｆとも称される）及びＣ−Ｒａｆプロテインキナーゼ（本明細書ではｃ−ＲＡＦ、ｃ−Ｒａｆ又はＣＲＡＦとも称される）のアデノシン三リン酸（ＡＴＰ）競合阻害薬を指す。Ｒａｆ阻害薬は、Ｒａｆモノマー及びＲａｆダイマーの両方を阻害し得る。
【００３９】
本明細書に記載される方法、治療、併用物及び組成物の好ましい実施形態において、ｃ−Ｒａｆ阻害薬は、化合物Ａ又はその薬学的に許容可能な塩である。
【００４０】
化合物Ａは、以下の構造：
【化２】
2019517549.tif 000003
を有する。
【００４１】
本発明のｃ−Ｒａｆキナーゼ阻害薬、即ち化合物Ａは、国際公開第２０１４／１５１６１６号パンフレット（全体として参照により本明細書に援用される）に実施例１１５６として開示される。
【００４２】
化合物Ａ（ＣＯＭＰＯＵＮＤ  Ａ）（化合物Ａ（Ｃｏｍｐｏｕｎｄ  Ａ））は、別名Ｎ−（３−（２−（２−ヒドロキシエトキシ）−６−モルホリノピリジン−４−イル）−４−メチルフェニル）−２−（トリフルオロメチル）イソニコチンアミドである。
【００４３】
化合物Ａ（ＣＯＭＰＯＵＮＤ  Ａ）（本明細書では「化合物Ａ（Ｃｏｍｐｏｕｎｄ  Ａ）」とも称される）は、ＢＲＡＦ（本明細書ではｂ−ＲＡＦ又はｂ−Ｒａｆとも称される）及びｃ−Ｒａｆ（本明細書ではｃ−ＲＡＦ又はＣＲＡＦとも称される）プロテインキナーゼのアデノシン三リン酸（ＡＴＰ）競合阻害薬である。本開示全体を通じて、化合物Ａは、ｃ−ＲＡＦ（又はＣＲＡＦ）阻害薬又はＣ−ＲＡＦ／ｃ−Ｒａｆキナーゼ阻害薬とも称される。
【００４４】
細胞ベースのアッセイでは、化合物Ａは、ＭＡＰＫシグナル伝達を活性化させる種々の突然変異を含む細胞株で抗増殖活性を実証した。例えば、化合物Ａは、ＢＲＡＦｉ／ＭＥＫｉ耐性アレルを発現するように操作されたＡ−３７５（ＢＲＡＦ  Ｖ６００Ｅ）及びＡ−３７５、ＭＥＬ−ＪＵＳＯ（ＮＲＡＳ  Ｑ６１Ｌ）、及びＩＰＣ−２９８（ＮＲＡＳ  Ｑ６１Ｌ）を含めたメラノーマモデル、並びに非小細胞肺癌細胞株Ｃａｌｕ−６（ＫＲＡＳ  Ｑ６１Ｋ）の増殖を０．２〜１．２μＭの範囲のＩＣ５０値で阻害した。
【００４５】
インビボでは、化合物Ａによる治療は、ＮＳＣＬＣ由来のＣａｌｕ−６（ＫＲＡＳ  Ｑ６１Ｋ）及びＮＣＩ−Ｈ３５８（ＫＲＡＳ  Ｇ１２Ｃ）並びに卵巣Ｈｅｙ−Ａ８（ＫＲＡＳ  Ｇ１２Ｄ、ＢＲＡＦ  Ｇ４６４Ｅ）異種移植片を含む幾つかのＫＲＡＳ変異モデル及びＳＫ−ＭＥＬ−３０メラノーマモデルを含めたＮＲＡＳ変異モデルにおいて腫瘍退縮を生じさせた。いずれの場合にも、抗腫瘍効果は用量依存的であり、有意な体重減少がないことから判断すると、良好に忍容された。
【００４６】
総じて、耐用量の化合物Ａについて観察されたインビトロ及びインビボＭＡＰＫ経路抑制及び抗増殖活性は、化合物Ａが、ＭＡＰＫ経路に活性化病変を内包する腫瘍を有する患者において抗腫瘍活性を有し得ることを示唆している。
【００４７】
化合物Ａの作用機序、ＭＡＰＫ経路調節におけるｃ−Ｒａｆの重要性に関する前臨床データ及び既発表の文献に基づき、化合物Ａは、単剤として、又はプログラム死１（ＰＤ−１）に結合する抗体分子（例えば、ヒト化抗体分子）、特に以下に記載するとおりの例示的抗体分子との併用において、ＭＡＰＫ経路変化を内包する進行性固形腫瘍、詳細にはＫＲＡＳ変異ＮＳＣＬＣ（非小細胞肺癌）及びＮＲＡＳ変異メラノーマを有する成人患者の治療において有用であり得る。
【００４８】
化合物Ａ又はその薬学的に許容可能な塩は、経口投与され得る。一実施形態において、化合物Ａ又はその薬学的に許容可能な塩は、約５０〜１２００ｍｇ（例えば、１日当たり）の用量で投与される。化合物Ａ又はその薬学的に許容可能な塩は、約５０ｍｇ、約１００ｍｇ、約１５０ｍｇ、約２００ｍｇ、約２５０ｍｇ、約３００ｍｇ、約３５０ｍｇ、約４００ｍｇ、約４５０ｍｇ、約５００ｍｇ、約５５０ｍｇ、約６００ｍｇ、約６５０ｍｇ、約７００ｍｇ、約７５０ｍｇ、約８００ｍｇ、約８５０ｍｇ、約９００ｍｇ、約９５０ｍｇ、約１０００ｍｇ、約１０５０ｍｇ、約１１００ｍｇ、約１１５０ｍｇ又は約１２００ｍｇの単位投薬量で投与される。化合物Ａ又はその薬学的に許容可能な塩の単位投薬量は、１日１回、又は１日２回、又は１日３回、又は１日４回投与され得、実際の投薬量及び投与タイミングは、患者の年齢、体重及び性別；治療する癌の範囲及び重症度；並びに治療を行う医師の判断などの基準によって決まる。好ましくは、化合物Ａの単位投薬量は、１日１回投与される。別の好ましい実施形態において、化合物Ａの単位投薬量は、１日２回投与される。
【００４９】
化合物Ａは、詳細には、１００ｍｇの１日１回（ＱＤ）、２００ｍｇの１日１回、３００ｍｇの１日１回、４００ｍｇの１日１回、８００ｍｇの１日１回又は１２００ｍｇの１日１回（ＱＤ）の用量で投与され得る。化合物Ａは、２００ｍｇの１日２回又は４００ｍｇの１日２回の用量でも投与され得る。本明細書に引用される投薬量は、単独療法（単剤）としての、又は併用療法の一部としての、例えば本明細書に記載されるとおりの本発明の併用物の一部としての化合物Ａの投与に適用し得る。
【００５０】
本明細書において投薬量を「約」指定量と記載するとき、実際の投薬量は、明示される量から最大５〜７％変動し得る。この「約」の使用は、所与の剤形の正確な量が、実質的にその投与化合物のインビボ効果に影響を及ぼすことなく様々な理由で意図される量と僅かに異なり得ることを認めるものである。ｃ−Ｒａｆ阻害薬の単位投薬量は、１日１回、又は１日２回、又は１日３回、又は１日４回投与され得、実際の投薬量及び投与タイミングは、患者の年齢、体重、及び性別；治療する癌の範囲及び重症度；並びに治療を行う医師の判断などの基準によって決まる。
【００５１】
ＭＡＰＫシグナル伝達カスケードは、免疫防御において重要な役割を有するため、化合物ＡによるＲＡＦターゲット療法は、腫瘍に対する免疫応答を調整し得ることが予想される。従って、本発明は、同時、逐次又は個別投与のための、化合物Ａと、抗体（ａ）プログラム死１（ＰＤ−１）に結合する少なくとも１つの抗体分子（例えば、ヒト化抗体分子）、特に以下に記載するとおりの例示的抗体分子とを含む薬物も提供する。この併用物は、増殖性疾患、特にマイトジェン活性化プロテインキナーゼ（ＭＡＰＫ）の変化を内包する固形腫瘍、例えばＫＲＡＳ変異ＮＳＣＬＣ（非小細胞肺癌）、ＮＲＡＳ変異メラノーマ、ＫＲＡＳ及び／又はＢＲＡＦ変異ＮＳＣＬＣ、ＫＲＡＳ及び／又はＢＲＡＦ変異卵巣癌及びＢＲＡＦｉ／ＭＥＫｉ併用治療抵抗性のＢＲＡＦ変異メラノーマの治療に有用であり得る。
【００５２】
例えば、ＫＲＡＳ変異ＮＳＣＬＣにおけるターゲット療法と免疫療法との併用は、ターゲット療法からの早期のロバストな抗腫瘍応答と併せた免疫療法の長期利益につながり得ることが予想される。また、本発明の併用物は、免疫療法に極めて感受性が高い侵攻性疾患であるＮＲＡＳ変異メラノーマにおいて（潜在的な相乗活性により）有益となり得ることも予想される。
【００５３】
ＰＤ−１に対する抗体分子
一実施形態において、ＰＤ−１阻害薬は、「Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ  ｔｏ  ＰＤ−１  ａｎｄ  Ｕｓｅｓ  Ｔｈｅｒｅｏｆ」という名称の米国特許出願公開第１４／６０４，４１５号明細書及び国際公開第２０１５／１１２９００号パンフレット（両方とも全体として参照により援用される）に記載されるとおりの抗ＰＤ−１抗体分子である。一実施形態において、抗ＰＤ−１抗体分子には、重鎖からの３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）及び軽鎖からの３つのＣＤＲを含む、本明細書に記載される抗体からの少なくとも１つの抗原結合領域、例えばその可変領域又は抗原結合断片、例えばＢＡＰ０４９−ｈｕｍ０１、ＢＡＰ０４９−ｈｕｍ０２、ＢＡＰ０４９−ｈｕｍ０３、ＢＡＰ０４９−ｈｕｍ０４、ＢＡＰ０４９−ｈｕｍ０５、ＢＡＰ０４９−ｈｕｍ０６、ＢＡＰ０４９−ｈｕｍ０７、ＢＡＰ０４９−ｈｕｍ０８、ＢＡＰ０４９−ｈｕｍ０９、ＢＡＰ０４９−ｈｕｍ１０、ＢＡＰ０４９−ｈｕｍ１１、ＢＡＰ０４９−ｈｕｍ１２、ＢＡＰ０４９−ｈｕｍ１３、ＢＡＰ０４９−ｈｕｍ１４、ＢＡＰ０４９−ｈｕｍ１５、ＢＡＰ０４９−ｈｕｍ１６、ＢＡＰ０４９−クローンＡ、ＢＡＰ０４９−クローンＢ、ＢＡＰ０４９−クローンＣ、ＢＡＰ０４９−クローンＤ若しくはＢＡＰ０４９−クローンＥのいずれかから選択されるか、又は表１に記載されるとおりの、又は表１のヌクレオチド配列若しくは前記配列のいずれかと実質的に同一の（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％又はそれより高度に同一の）配列によってコードされる抗体が含まれる。
【００５４】
例えば、抗ＰＤ−１抗体分子は、例えば、表１に示されるとおりの、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．によるＶＨ  ＣＤＲ１若しくはＣｈｏｔｈｉａ  ｅｔ  ａｌ．によるＶＨ超可変ループ１又はこれらの組み合わせを含み得る。一実施形態において、ＶＨ  ＣＤＲ１のＫａｂａｔ及びＣｈｏｔｈｉａ  ＣＤＲの組み合わせは、アミノ酸配列ＧＹＴＦＴＴＹＷＭＨ（配列番号２２４）又はそれと実質的に同一の（例えば、少なくとも１つのアミノ酸変化（例えば、置換、欠失又は挿入、例えば保存的置換）を有するが、２、３又は４つより多い変化を有することはない）アミノ酸配列を含む。抗ＰＤ−１抗体分子は、例えば、表１に示されるとおりの、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．によるＶＨ  ＣＤＲ２〜３及びＫａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．によるＶＬ  ＣＤＲ１〜３を例えば更に含み得る。従って、一部の実施形態において、フレームワーク領域は、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．により定義されるＣＤＲ及びＣｈｏｔｈｉａ  ｅｔ  ａｌ．により定義される超可変ループの組み合わせに基づいて定義される。例えば、抗ＰＤ−１抗体分子は、例えば、表１に示されるとおりの、Ｃｈｏｔｈｉａ  ｅｔ  ａｌ．によるＶＨ超可変ループ１に基づいて定義されるＶＨ  ＦＲ１及びＫａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．によるＶＨ  ＣＤＲ１〜２に基づいて定義されるＶＨ  ＦＲ２を含み得る。抗ＰＤ−１抗体分子は、例えば、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．によるＶＨ  ＣＤＲ２〜３に基づいて定義されるＶＨ  ＦＲ３〜４及びＫａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．によるＶＬ  ＣＤＲ１〜３に基づいて定義されるＶＬ  ＦＲ１〜４を更に含み得る。
【００５５】
本発明の併用物におけるプログラム死１（ＰＤ−１）に結合する好ましい抗体分子（例えば、ヒト化抗体分子）は、ＢＡＰ０４９−クローンＥである例示的抗体分子であり、好ましいアミノ酸配列は、本明細書の表１に記載される（ＶＨ：配列番号３８；ＶＬ：配列番号７０）。
【００５６】
本発明は、増殖性疾患、特にＫＲＡＳ変異腫瘍、詳細にはＫＲＡＳ変異ＮＳＣＬＣ（非小細胞肺癌）及びＮＲＡＳ変異腫瘍、詳細にはＮＲＡＳ変異メラノーマなど、マイトジェン活性化プロテインキナーゼ（ＭＡＰＫ）の変化を内包する固形腫瘍を治療するための同時、個別又は逐次投与のための、（ａ）プログラム死１（ＰＤ−１）に結合する少なくとも１つの抗体分子（例えば、ヒト化抗体分子）、特に本明細書に記載されるとおりの例示的抗体分子と、（ｂ）化合物Ａ又はその薬学的に許容可能な塩などのｃ−Ｒａｆ阻害薬とを含む医薬併用物に更に関する。
【００５７】
一実施形態において、本発明は、対象の障害、例えば過剰増殖病態又は障害（例えば、癌）を治療（例えば、阻害、軽減、又は改善）する方法を特徴とする。本方法は、抗ＰＤ−１抗体分子、例えば本明細書に記載される好ましい抗ＰＤ−１抗体分子を、３週間に１回又は４週間に１回、約３００ｍｇ〜４００ｍｇの用量でｃ−Ｒａｆ阻害薬と併用して対象に投与することを含む。特定の実施形態において、例えば、好ましい抗ＰＤ−１抗体分子は、３週間に１回、約３００ｍｇの用量で投与される。他の実施形態において、例えば、好ましい抗ＰＤ−１抗体分子は、４週間に１回、約４００ｍｇの用量で投与される。一部の実施形態において、増殖性障害は、本明細書に記載されるとおりの機能獲得型ＫＲＡＳ突然変異を有するＫＲＡＳ変異腫瘍、詳細にはＫＲＡＳ変異ＮＳＣＬＣ（非小細胞肺癌）である。一部の実施形態において、増殖性障害は、本明細書に記載されるとおりの機能獲得型ＮＲＡＳ突然変異を有するＮＲＡＳ変異腫瘍、詳細にはＮＲＡＳ変異メラノーマである。
【００５８】
一部の実施形態において、増殖性障害は、本明細書に記載されるとおりの機能獲得型ＫＲＡＳ突然変異を有するＫＲＡＳ変異腫瘍、詳細にはＫＲＡＳ変異メラノーマである。一部の実施形態において、増殖性障害は、本明細書に記載されるとおりの機能獲得型ＮＲＡＳ突然変異を有するＮＲＡＳ変異腫瘍、詳細にはＮＲＡＳ変異卵巣癌である。
【００５９】
一部の実施形態において、増殖性障害は、本明細書に記載されるとおりの機能獲得型ＫＲＡＳ突然変異を有するＫＲＡＳ変異腫瘍、詳細にはＫＲＡＳ変異卵巣癌である。
【００６０】
一部の実施形態において、抗ＰＤ−１抗体分子は、約２００ｍｇ〜５００ｍｇ、例えば約２５０ｍｇ〜４５０ｍｇ、約３００ｍｇ〜４００ｍｇ、約２５０ｍｇ〜３５０ｍｇ、約３５０ｍｇ〜４５０ｍｇ、又は約３００ｍｇ、又は約４００ｍｇの用量（例えば、一定用量）で注射によって（例えば、皮下又は静脈内に）投与される。投与スケジュール（例えば、一定用量投与スケジュール）は、例えば、週１回〜２、３、４、５又は６週間に１回で異なり得る。一実施形態において、抗ＰＤ−１抗体分子、例えば例示的抗体分子は、３週間に１回又は４週間に１回、約３００ｍｇ〜４００ｍｇの用量で投与される。一実施形態において、抗ＰＤ−１抗体分子は、３週間に１回、約３００ｍｇの用量で投与される。一実施形態において、抗ＰＤ−１抗体分子は、４週間に１回、約４００ｍｇの用量で投与される。一実施形態において、抗ＰＤ−１抗体分子、例えば例示的抗体分子は、４週間に１回、約３００ｍｇからの用量で投与される。一実施形態において、抗ＰＤ−１抗体分子、例えば例示的抗体分子は、３週間に１回、約４００ｍｇからの用量で投与される。
【００６１】
別の態様において、本発明は、過剰増殖細胞（例えば、癌細胞）の活性（例えば、成長、生存若しくは生存能力又は全て）を低下させる方法を特徴とする。本方法は、抗ＰＤ−１抗体分子、例えば本明細書に記載される抗ＰＤ−１抗体分子に細胞を接触させることを含む。本方法は、対象体内において、例えばｃ−Ｒａｆ受容体型チロシンキナーゼ阻害薬との併用療法プロトコルの一部として、例えば３週間に１回又は４週間に１回、約３００ｍｇ〜４００ｍｇの抗ＰＤ−１抗体分子の用量で実施することができる。特定の実施形態において、用量は、３週間に１回、約３００ｍｇの抗ＰＤ−１抗体分子である。他の実施形態において、用量は、４週間に１回、約４００ｍｇの抗ＰＤ−１抗体分子である。
【００６２】
別の態様において、本発明は、抗ＰＤ−１抗体分子（例えば、本明細書に記載されるとおりの抗ＰＤ−１抗体分子）を含む組成物（例えば、１つ以上の組成物又は剤形）を特徴とする。抗ＰＤ−１抗体分子（例えば、本明細書に記載されるとおりの抗ＰＤ−１抗体分子）を含む製剤、例えば投薬製剤、及びキット、例えば治療用キットも本明細書に記載される。特定の実施形態において、本組成物又は製剤は、３００ｍｇ又は４００ｍｇの抗ＰＤ−１抗体分子（例えば、本明細書に記載されるとおりの抗ＰＤ−１抗体分子）を含む。一部の実施形態において、組成物又は製剤は、３週間に１回又は４週間に１回投与又は使用される。かかる組成物は、多くの場合にＮＳＣＬＣを治療するため、特に少なくとも１つのＫＲＡＳ突然変異、特に本明細書に記載されるものなどの機能獲得型突然変異を呈するＮＳＣＬＣを有する患者を治療するため、同時、個別又は逐次投与のために、ｃ−Ｒａｆ阻害薬又はその薬学的に許容可能な塩と併用して使用される。かかる組成物は、多くの場合にメラノーマを治療するため、特に少なくとも１つのＮＲＡＳ突然変異、特に本明細書に記載されるものなどの突然変異を呈するメラノーマを有する患者を治療するため、同時、個別又は逐次投与のために、ｃ−Ｒａｆ阻害薬又はその薬学的に許容可能な塩と併用して使用される。
【００６３】
別の態様において、本発明は、ＮＳＣＬＣの治療における使用のための抗ＰＤ−１抗体を提供し、ここで、抗ＰＤ−１抗体は、ｃ−Ｒａｆ阻害薬と共に個別、同時又は逐次投与され、又はそうした投与のために調製される。本発明は、ＮＳＣＬＣの治療における使用のためのｃ−Ｒａｆ阻害薬も提供し、ここで、ｃ−Ｒａｆ阻害薬は、抗ＰＤ−１抗体と共に個別、同時又は逐次投与されるか又はそうした投与のために調製される。
【００６４】
別の態様において、本発明は、メラノーマの治療における使用のための抗ＰＤ−１抗体を提供し、ここで、抗ＰＤ−１抗体は、ｃ−Ｒａｆ阻害薬と共に個別、同時又は逐次投与されるか又はそうした投与のために調製される。本発明は、メラノーマの治療における使用のためのｃ−Ｒａｆ阻害薬も提供し、ここで、ｃ−Ｒａｆ阻害薬は、抗ＰＤ−１抗体と共に個別、同時又は逐次投与されるか又はそうした投与のために調製される。典型的には、抗ＰＤ−１抗体は、静脈内投与され、従って、好ましくは経口投与されるｃ−Ｒａｆ阻害薬と共に個別又は逐次投与される。ｃ−Ｒａｆ阻害薬及び抗ＰＤ−１抗体の好適な投与方法、経路、投薬量及び頻度は、本明細書に記載される。
【００６５】
本明細書に開示される併用物は、単一の組成物で一緒に投与され得、又は２つ以上の異なる組成物、例えば本明細書に記載されるとおりの組成物若しくは剤形で個別に投与され得る。治療用薬剤の投与は、いずれの順序でもあり得る。第１の薬剤と追加の薬剤（例えば、第２、第３の薬剤）とは、同じ投与経路又は異なる投与経路で投与され得る。
【００６６】
本明細書に記載される医薬併用物、詳細には本発明の医薬併用物は、自由併用製品、即ち２つ以上の別個の剤形として同時、個別又は逐次投与される２つ以上の活性成分、例えば化合物Ａと本明細書に記載される例示的抗体分子（抗体Ｂ）との併用物であり得る。
【００６７】
自由併用製品は、（ａ）単一のパッケージ若しくはキットに一緒に包装された２つ以上の個別の薬物製品、又は（ｂ）そのラベル表示によれば他の個々に指定された薬物とのみ使用される、個別に包装された、各薬物が意図される用途、効能又は効果を実現するために必要である薬物製品であり得る。
【００６８】
本発明は、（ａ）１つ以上の投薬量単位のｃ−Ｒａｆ阻害薬化合物Ａ又はその薬学的に許容可能な塩と、（ｂ）１つ以上の投薬量単位の本明細書に記載されるとおりの抗ＰＤ−１抗体と、少なくとも１つの薬学的に許容可能な担体とを含む併用製剤も提供する。
【００６９】
更なる実施形態において、本発明は、特に１つ以上のマイトジェン活性化プロテインキナーゼ（ＭＡＰＫ）経路変化を内包する癌を治療する方法に関する。一実施形態において、本発明は、増殖性疾患、特に癌の治療用薬物を調製するための本発明の併用物の使用に関する。一実施形態において、本発明の併用物は、癌の治療用薬物の調製における使用のためのものである。
【００７０】
更なる実施形態において、本発明は、ＭＡＰＫ経路における機能獲得型突然変異によって特徴付けられる癌の治療用薬物を調製するための単剤としての化合物Ａの使用及び本発明の併用物の使用に関する。
【００７１】
更なる実施形態において、本発明は、ＭＡＰＫ経路における機能獲得型突然変異によって特徴付けられる癌の治療用薬物を調製するための単剤としての化合物Ａの使用及び本発明の併用物の使用に関する。これらの腫瘍は、以下に更に記載される。
【００７２】
更なる実施形態において、本発明は、単剤としての、ＫＲＡＳ変異腫瘍、ＮＲＡＳ変異腫瘍及びある種のＢＲＡＦ変異腫瘍など、マイトジェン活性化プロテインキナーゼ（ＭＡＰＫ）の変化を内包する固形腫瘍の治療における使用のための化合物Ａに関する。更なる実施形態において、本発明は、ＫＲＡＳ変異腫瘍及びＮＲＡＳ変異腫瘍など、マイトジェン活性化プロテインキナーゼ（ＭＡＰＫ）の変化を内包する固形腫瘍の治療における使用のための本発明の医薬併用物に関する。これらの腫瘍は、以下に更に記載される。
【００７３】
マイトジェン活性化プロテインキナーゼ（ＭＡＰＫ）の変化を内包する固形腫瘍
ＭＡＰＫ変化は、概して、発癌初期に獲得される可能性があり、且つ時間が経っても変化しない強力なドライバー突然変異と見なされている。
【００７４】
本発明は、ＭＡＰＫ変化を内包する固形腫瘍を有する患者に有用な治療選択肢を提供する。かかる変化の例を以下の表に挙げる。かかる患者の腫瘍の突然変異状態は、当該技術分野で容易に利用可能な市販キット及び方法を使用することにより決定し得る。
【００７５】
【表１】
2019517549.tif 000004
【００７６】
従って、本発明は、上記の表に記載されるとおりの１つ又は複数のＭＡＰＫ変化を内包する固形腫瘍を患っている患者向けの治療選択肢を提供する。
【００７７】
ＫＲＡＳ変異腫瘍
用語「ＫＲＡＳ変異」腫瘍又は癌には、突然変異したＫＲＡＳタンパク質、詳細には機能獲得型ＫＲＡＳ突然変異；特に任意のＧ１２Ｘ、Ｇ１３Ｘ、Ｑ６１Ｘ又はＡ１４６Ｘ  ＫＲＡＳ突然変異体（Ｘは、その位置に天然に存在するもの以外の任意のアミノ酸である）を呈する任意の腫瘍が含まれる。例えば、Ｇ１２Ｖ突然変異とは、コドン１２でグリシンがバリンに置換されることを意味する。腫瘍におけるＫＲＡＳ突然変異の例としては、Ｑ６１Ｋ、Ｇ１２Ｖ、Ｇ１２Ｃ及びＡ１４６Ｔが挙げられる。従って、ＫＲＡＳ変異ＮＳＣＬＣには、Ｑ６１Ｋ、Ｇ１２Ｖ、Ｇ１２Ｃ及びＡ１４６Ｔ  ＮＳＣＬＣが含まれる。癌は、初期、中間又は末期段階であり得る。
【００７８】
非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）
ＮＳＣＬＣは、最も一般的な種類の肺癌であり（約８５％）、その患者の約７０％が診断時に進行疾患（ステージＩＩＩＢ又はステージＩＶ）を呈する。最近になって、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１相互作用の２つの阻害薬がＮＳＣＬＣにおける使用に承認された（ペンブロリズマブ及びニボルマブ）。しかしながら、これまでに利用可能な結果は、単剤ＰＤ−１阻害薬で治療される多くの患者が十分な治療利益を受けないことを示している。ＫＲＡＳ変異ＮＳＣＬＣは、癌療法にとって依然として捉えどころのない標的である。ＮＳＣＬＣの約３０％が活性化ＫＲＡＳ突然変異を含み、これらの突然変異は、ＥＧＦＲ  ＴＫＩ耐性と関連付けられる（Ｐａｏ  Ｗ，Ｗａｎｇ  ＴＹ，Ｒｉｅｌｙ  ＧＪ，ｅｔ  ａｌ（２００５）ＫＲＡＳ  ｍｕｔａｔｉｏｎｓ  ａｎｄ  ｐｒｉｍａｒｙ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ｏｆ  ｌｕｎｇ  ａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａｓ  ｔｏ  ｇｅｆｉｔｉｎｉｂ  ｏｒ  ｅｒｌｏｔｉｎｉｂ．ＰＬｏＳ  Ｍｅｄ；２（１）：ｅ１７）。ＫＲＡＳを直接阻害するのは難題であることが分かっている。
【００７９】
ＢＲＡＦ突然変異は、ＮＳＣＬＣの最大３％に観察されており、またＥＧＦＲ突然変異陽性ＮＳＣＬＣにおける抵抗性機構としても記載されている（Ｐａｉｋ  ＰＫ，Ａｒｃｉｌａ  ＭＥ，Ｆａｒａ  Ｍ，ｅｔ  ａｌ（２０１１）．Ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ  ｏｆ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ｌｕｎｇ  ａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａｓ  ｈａｒｂｏｒｉｎｇ  ＢＲＡＦ  ｍｕｔａｔｉｏｎｓ．Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｏｎｃｏｌ．Ｍａｙ  ２０；２９（１５）：２０４６−５１）。
【００８０】
従って、本発明は、ＫＲＡＳ変異ＮＳＣＬＣの治療及び／又はＢＲＡＦ変異ＮＳＣＬＣの治療における使用のための化合物Ａ又はその薬学的に許容可能な塩を提供する。
【００８１】
本発明は、ＫＲＡＳ及びＢＲＡＦ変異ＮＳＣＬＣ、即ちＫＲＡＳ変異体及びＢＲＡＦ変異体の両方であるＮＳＣＬＣの治療における使用のための化合物又はその薬学的に許容可能な塩も提供する。
【００８２】
本発明は、ＫＲＡＳ変異ＮＳＣＬＣの治療における使用のための、本明細書に記載される医薬併用物  −  例えば、（ａ）化合物Ａ又はその薬学的に許容可能な塩と、（ｂ）以下の表１に記載されるとおりのＢＡＰ０４９−クローンＢ又はＢＡＰ０４９−クローンＥのＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）及び表１に記載されるとおりのＢＡＰ０４９−クローンＢ又はＢＡＰ０４９−クローンＥのＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む、ヒトプログラム死１（ＰＤ−１）への結合能を有する単離抗体分子とを含む医薬併用物  −  も提供する。
【００８３】
卵巣癌
卵巣癌は、最も致死性の高い婦人科癌であり、様々な予後の異なる組織学的及び分子的サブタイプの群で構成される不均一な疾患である。上皮サブタイプが卵巣癌の９０％を占める。
【００８４】
上皮性卵巣癌の最も一般的な組織学的サブタイプは、上皮性卵巣癌の６０〜７０％を占める漿液性癌である。２段階の悪性度評価方式では、漿液性癌は、異なる分子的特徴を有する低悪性度漿液性（ＬＧＳ）と高悪性度漿液性（ＨＧＳ）とに分類される。ＬＧＳ癌は、漿液性上皮性卵巣癌の最大１０％を占め、ＫＲＡＳ（最大４０％）又はＢＲＡＦ突然変異（２〜６％）を有する卵巣癌は、主にＬＧＳ癌である。ＬＧＳ癌は、第一選択薬剤に対するのみならず、再発疾患のセッティングにおいても化学療法抵抗性である。
【００８５】
化合物Ａは、ＫＲＡＳ及び／又はＢＲＡＦ変異卵巣癌患者の治療において有用であり得ることが予想される。
【００８６】
従って、本発明は、ＫＲＡＳ変異卵巣癌の治療及び／又はＢＲＡＦ変異卵巣癌の治療における使用のための化合物Ａ又はその薬学的に許容可能な塩を提供する。
【００８７】
本発明は、ＫＲＡＳ及びＢＲＡＦ変異卵巣癌、即ちＫＲＡＳ突然変異体及びＢＲＡＦ突然変異体の両方である卵巣癌の治療における使用のための化合物Ａ又はその薬学的に許容可能な塩も提供する。
【００８８】
ＮＲＡＳ変異腫瘍
用語「ＮＲＡＳ変異」腫瘍又は癌には、突然変異したＮＲＡＳタンパク質、詳細には機能獲得型ＮＲＡＳ突然変異；特に任意のＧ１２Ｘ、Ｇ１３Ｘ、又はＱ６１Ｘ  ＮＲＡＳ突然変異体（Ｘは、その位置に天然に存在するもの以外の任意のアミノ酸である）を呈する任意の腫瘍が含まれる。例えば、Ｇ１２Ｖ突然変異とは、コドン１２でグリシンがバリンに置換されることを意味する。腫瘍におけるＮＲＡＳ突然変異の例としては、Ｇ１２Ｃ、Ｇ１２Ｒ、Ｇ１２Ｓ、Ｇ１２Ａ、Ｇ１２Ｄ、Ｇ１２Ｖ、Ｇ１３Ｒ、Ｇ１３Ｃ、Ｇ１３Ａ、Ｇ１３Ｄ、Ｇ１３Ｖ、Ｑ６１Ｅ、Ｑ６１Ｋ、Ｑ６１Ｌ、Ｑ６１Ｐ、Ｑ６１Ｒ、Ｑ６１Ｈが挙げられる。従って、ＮＲＡＳ変異メラノーマには、Ｇ１２Ｃ、Ｇ１２Ｒ、Ｇ１２Ｓ、Ｇ１２Ａ、Ｇ１２Ｄ、Ｇ１２Ｖ、Ｇ１３Ｒ、Ｇ１３Ｃ、Ｇ１３Ａ、Ｇ１３Ｄ、Ｇ１３Ｖ、Ｑ６１Ｅ、Ｑ６１Ｋ、Ｑ６１Ｌ、Ｑ６１Ｐ、Ｑ６１Ｒ、Ｑ６１Ｈメラノーマが含まれる。癌は、初期、中間又は末期段階であり得る。
【００８９】
メラノーマ
ＭＡＰＫ経路は、メラノーマの発症及び進行において主要な役割を果たす）。メラノーマ患者の４０〜６０％にＢＲＡＦ突然変異が存在し、及び１５〜２０％にＮＲＡＳ突然変異が存在し、報告によれば、ＢＲＡＦ  Ｖ６００Ｅ及びＢＲＡＦ  Ｖ６００Ｋ変異患者が全てのＢＲＡＦ  Ｖ６００変異転移性メラノーマ患者の９３〜９８％を占める。これらの突然変異は、ＢＲＡＦ及び癌細胞増殖及び生存のシグナルを送るＭＡＰＫ経路の下流シグナル伝達を構成的に活性化する。現在、ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異メラノーマ患者に対する既存のターゲット治療の選択肢には、単剤としての又は併用でのＢＲＡＦｉ（例えば、ダブラフェニブ）及びＭＥＫｉ（トラメチニブ）を含む療法が含まれる。ＢＲＡＦ又はその下流エフェクターＭＥＫのターゲット阻害によるＭＡＰＫシグナル伝達の遮断は、ＰＦＳ（無進行生存）及びＯＳ（全生存）の改善と関連付けられている。しかしながら、数ヵ月の治療後に患者が疾患進行を起こすことがよく見られる。抵抗性への経路は複数あるが、主な機構は、阻害薬の存在下でＭＡＰＫシグナル伝達経路の再活性化をもたらす。
【００９０】
従って、ＢＲＡＦｉ及び／又はＭＥＫｉ治療下での再発後のメラノーマ患者に適切なターゲット療法を同定することが重要である。ＢＲＡＦｉには、ベムラフェニブ、ダブラフェニブ及びエンコラフェニブが含まれ、これらは、ＢＲＡＦ  Ｖ６００Ｅ突然変異を有するメラノーマにおいて効果的であり、ＲＡＳ変異癌で無効であることが認められる。
【００９１】
コドン１２、１３及び６１のＮＲＡＳミスセンス突然変異が全てのメラノーマの１３〜２５％に起こり、これらは、通常、ＢＲＡＦ及び他のドライバー突然変異と相互排他的である。これらの腫瘍は、侵襲的挙動を示し、初期診断時における肝及び脳転移が高率であり、従って予後不良である。標準治療の化学療法に対する応答は極めて限定的であり、現在、ＮＲＡＳ変異メラノーマ患者向けに特別に承認されたターゲット療法はないが、しかし、第３相試験では、ダカルバジンによる標準治療の化学療法と比較したときにＭＥＫ阻害薬ビニメチニブの幾らかの利益、例えば７％に対して１５％の全奏効率の改善が実証された（Ｄｕｍｍｅｒ  Ｒ，Ｓｃｈａｄｅｎｄｏｒｆ  Ｄ，Ａｓｃｉｅｒｔｏ  ＰＡ  ｅｔ  ａｌ（２０１７）Ｂｉｎｉｍｅｔｉｎｉｂ  ｖｅｒｓｕｓ  ｄａｃａｒｂａｚｉｎｅ  ｉｎ  ｐａｔｉｅｎｔｓ  ｗｉｔｈ  ａｄｖａｎｃｅｄ  ＮＲＡＳ−ｍｕｔａｎｔ  ｍｅｌａｎｏｍａ（ＮＥＭＯ）：ａ  ｍｕｌｔｉｃｅｎｔｒｅ，ｏｐｅｎ−ｌａｂｅｌ，ｒａｎｄｏｍｉｓｅｄ，ｐｈａｓｅ  ３  ｔｒｉａｌ．Ｌａｎｃｅｔ  Ｏｎｃｏｌ  ２０１７；１８：４３５−４５）。４０２人の患者が２：１方式で無作為に割り付けられた。ＰＦＳ中央値２．８（９５％ＣＩ：２．８〜３．６）対１．５（１．５〜１．７）、ＨＲ０．６２（０．４７〜０．８０）でビニメチニブが有利であることが観察された。しかしながら、試験薬物に関係するものと疑われる有害事象に起因する中断率が高く（２０％対５％）、ＰＦＳの利益は、全生存の改善につながらなかった（１１．０（９５％ＣＩ：８．９〜１３．６）対１０．１（７．０〜１６．５）ヵ月。従って、ＮＲＡＳ変異メラノーマに罹患している患者の治療選択肢がなおも必要とされている。
【００９２】
従って、本発明は、ＢＲＡＦｉ／ＭＥＫｉ（例えば、単剤としての又は併用でのダブラフェニブ及びトラメチニブ；例えば、ビニメチニブ）療法の失敗後の再発性及び／又は難治性ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異メラノーマの治療における使用のための化合物Ａ又はその薬学的に許容可能な塩を提供する。
【００９３】
本発明は、ＮＲＡＳ変異メラノーマの治療における使用のための化合物Ａ又はその薬学的に許容可能な塩も提供する。
【００９４】
本発明は、ＮＲＡＳ変異メラノーマの治療における使用のための、本明細書に記載される医薬併用物  −  例えば、（ａ）化合物Ａ又はその薬学的に許容可能な塩と、（ｂ）以下の表１に記載されるとおりのＢＡＰ０４９−クローンＢ又はＢＡＰ０４９−クローンＥのＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）及び表１に記載されるとおりのＢＡＰ０４９−クローンＢ又はＢＡＰ０４９−クローンＥのＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む、ヒトプログラム死１（ＰＤ−１）への結合能を有する単離抗体分子とを含む医薬併用物  −  も提供する。本明細書に記載される医薬併用物は、先行免疫療法を受けたことがあり得るか、又は免疫療法未治療であり得るＮＲＡＳ変異メラノーマに罹患している患者において有用であり得る。
【００９５】
併用療法の使用
本明細書に開示される併用物は、抗原提示の増加、エフェクター細胞機能（例えば、Ｔ細胞増殖、ＩＦＮ−γ分泌又は細胞溶解機能の１つ以上）の増加、調節性Ｔ細胞機能の阻害、調節性Ｔ細胞、エフェクターＴ細胞及びＮＫ細胞など、複数の細胞型の活性に対する効果）、腫瘍浸潤リンパ球の増加、Ｔ細胞受容体媒介性増殖の増加、及び癌性細胞による免疫回避の減少の１つ以上をもたらし得る。一実施形態において、併用物におけるＰＤ−１阻害薬の使用により、ＰＤ−１の１つ以上の活性が阻害されるか、低下するか、又は中和され、免疫チェックポイントの遮断又は軽減がもたらされる。従って、かかる併用物を使用して、対象の免疫応答の増強が所望される障害を治療又は予防することができる。
【００９６】
従って、別の態様において、対象の免疫応答を調整する方法が提供される。本方法は、対象の免疫応答が調整されるように、本明細書に開示される併用物（例えば、治療有効量の抗ＰＤ−１抗体分子と治療有効量の化合物Ａ又はその薬学的に許容可能な塩とを含む併用物）を対象に投与することを含む。一実施形態では、抗体分子が対象の免疫応答を増強するか、刺激するか、又は増加させる。対象は、哺乳類、例えば霊長類、好ましくは高等霊長類、例えばヒト（例えば、本明細書に記載される障害を有するか又はそれを有するリスクがある患者）であり得る。一実施形態において、対象は、免疫応答の増強を必要としている。一実施形態において、対象は、本明細書に記載される障害、例えば本明細書に記載されるとおりの癌又は感染性障害を有するか又はそれを有するリスクがある。特定の実施形態において、対象は、免疫無防備状態であるか又はそうなるリスクがある。例えば、対象は、化学療法治療及び／又は放射線療法を受けているか又は受けたことがある。代替的に又は組み合わせで、対象は、感染の結果として免疫無防備状態であるか又はそうなるリスクがある。
【００９７】
一態様において、対象のＫＲＡＳ変異腫瘍、詳細にはＫＲＡＳ変異ＮＳＣＬＣ（非小細胞肺癌）など、マイトジェン活性化プロテインキナーゼ（ＭＡＰＫ）の変化を内包する固形腫瘍である増殖性疾患を治療する（例えば、軽減すること、阻害すること、又は進行を遅延させることの１つ以上の）方法が提供される。別の態様において、対象のＮＲＡＳ変異腫瘍、詳細にはＮＲＡＳ変異メラノーマなど、マイトジェン活性化プロテインキナーゼ（ＭＡＰＫ）の変化を内包する固形腫瘍である増殖性疾患を治療する（例えば、軽減すること、阻害すること、又は進行を遅延させることの１つ以上の）方法が提供される。本方法は、本明細書に開示される併用物（例えば、治療有効量の抗ＰＤ−１抗体分子と治療有効量の化合物Ａ又はその薬学的に許容可能な塩とを含む併用物）を対象に投与することを含む。
【００９８】
本明細書に記載されるとおりの併用物は、全身的に（例えば、経口的に、非経口的に、皮下に、静脈内に、直腸的に、筋肉内に、腹腔内に、鼻腔内に、経皮的に又は吸入若しくは腔内注入により）、局所的に、又は鼻、咽頭及び気管支などの粘膜への適用により対象に投与することができる。
【００９９】
本明細書に開示される治療用薬剤の投薬量及び治療レジメンは、当業者が決定し得る。特定の実施形態において、抗ＰＤ−１抗体分子は、約１〜３０ｍｇ／ｋｇ、例えば約５〜２５ｍｇ／ｋｇ、約１０〜２０ｍｇ／ｋｇ、約１〜５ｍｇ／ｋｇ又は約３ｍｇ／ｋｇの用量で注射によって（例えば、皮下又は静脈内に）投与される。投与スケジュールは、例えば、週１回〜２、３又は４週間に１回で異なり得る。一実施形態において、抗ＰＤ−１抗体分子は、隔週で約１０〜２０ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。
【０１００】
一部の実施形態において、抗ＰＤ−１抗体分子は、約２００ｍｇ〜５００ｍｇ、例えば約２５０ｍｇ〜４５０ｍｇ、約３００ｍｇ〜４００ｍｇ、約２５０ｍｇ〜３５０ｍｇ、約３５０ｍｇ〜４５０ｍｇ、又は約３００ｍｇ、又は約４００ｍｇの用量（例えば、一定用量）で注射によって（例えば、皮下又は静脈内に）投与される。投与スケジュール（例えば、一定用量投与スケジュール）は、例えば、週１回〜２、３、４、５又は６週間に１回で異なり得る。一実施形態において、抗ＰＤ−１抗体分子は、３週間に１回又は４週間に１回、約３００ｍｇ〜４００ｍｇの用量で投与される。一実施形態において、抗ＰＤ−１抗体分子は、３週間に１回、約３００ｍｇからの用量で投与される。一実施形態において、抗ＰＤ−１抗体分子は、４週間に１回、約４００ｍｇからの用量で投与される。一実施形態において、抗ＰＤ−１抗体分子は、４週間に１回、約３００ｍｇからの用量で投与される。一実施形態において、抗ＰＤ−１抗体分子は、３週間に１回、約４００ｍｇからの用量で投与される。
【０１０１】
化合物Ａの総１日用量は、単一用量で（即ち１日１回）又は１日２回投与され得る。例えば、化合物Ａは、１日１回１２００ｍｇ又は１日２回４００ｍｇの用量で投与され得る。
【０１０２】
化合物Ａであるｃ−Ｒａｆ阻害薬は、１日１回、約１００、１５０、２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０、５００、５５０、６００、６５０、７００、７５０、８００、８５０、９００、９５０、１０００、１０５０、１１００、１１５０、１２００ｍｇの用量で投与され得、好ましい抗ＰＤ−１抗体分子は、３週間に１回、約４００ｍｇの用量で投与される。
【０１０３】
化合物Ａであるｃ−Ｒａｆ阻害薬は、ｃ−Ｒａｆ阻害薬であり得、１日１回、約１００、１５０、２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０、５００、５５０、６００、６５０、７００、７５０、８００、８５０、９００、９５０、１０００、１０５０、１１００、１１５０、１２００ｍｇの用量で投与され、及び抗ＰＤ−１抗体分子は、４週間に１回、約４００ｍｇの用量で投与される。
【０１０４】
化合物Ａは、詳細には１００、２００、４００、８００又は１２００ｍｇの１日１回（ＱＤ）用量；又は２００ｍｇの１日２回又は４００ｍｇの１日２回で投与され得る。本明細書に引用される投薬量は、単独療法としての、又は併用療法の一部としての、例えば本明細書に記載されるとおりの本発明の併用物の一部としての化合物Ａの投与に適用され得る。
【０１０５】
好ましい実施形態において、例示的抗ＰＤ−１分子は、４週間に１回、４００ｍｇの用量で投与され得、及び化合物Ａは、１００、２００、４００、８００若しくは１２００ｍｇの１日１回（ＱＤ）用量、又は２００ｍｇの１日２回若しくは４００ｍｇの１日２回の総用量で投与され得る。
【０１０６】
更なる併用療法
本明細書に記載される方法及び併用物は、他の薬剤又は治療モダリティと併用して使用することができる。一実施形態において、本明細書に記載される方法は、本明細書に記載されるとおりの抗ＰＤ−１抗体分子を含む併用物を薬剤又は治療手技若しくはモダリティと併用して、障害を治療又は予防するのに有効な量で対象に投与することを含む。抗ＰＤ−１抗体分子及び薬剤又は治療手技若しくはモダリティは、いずれの順序で同時又は逐次投与することもできる。任意の組み合わせ及び順序の抗ＰＤ−１抗体分子及び他の治療用薬剤、手技又はモダリティ（例えば、本明細書に記載されるとおりの）を使用することができる。抗体分子及び／又は他の治療用薬剤、手技又はモダリティは、活性障害期間中又は寛解期間若しくは低活性疾患期間中に投与することができる。抗体分子は、他の治療の前、その治療と同時、治療後又は障害の寛解期間中に投与することができる。
【０１０７】
特定の実施形態において、本明細書に記載される方法及び組成物は、他の抗体分子、化学療法、他の抗癌療法（例えば、ターゲット抗癌療法、遺伝子療法、ウイルス療法、ＲＮＡ療法、骨髄移植、ナノ療法若しくは腫瘍崩壊薬）、細胞傷害剤、免疫に基づく療法（例えば、サイトカイン又は細胞ベースの免疫療法）、外科手技（例えば、乳腺腫瘍摘出術又は乳房切除術）若しくは放射線手技又は前述のいずれかの組み合わせの１つ以上と併用して投与される。追加の療法は、アジュバント又はネオアジュバント療法の形態であり得る。一部の実施形態において、追加の療法は、酵素阻害薬（例えば、小分子酵素阻害薬）又は転移阻害薬である。併用して投与し得る例示的細胞傷害剤としては、抗微小管剤、トポイソメラーゼ阻害薬、代謝拮抗薬、有糸分裂阻害薬、アルキル化剤、アントラサイクリン、ビンカアルカロイド、挿入剤、シグナル伝達経路への干渉能を有する薬剤、アポトーシスを促進する薬剤、プロテオソーム阻害薬及び放射線（例えば、局所又は全身照射（例えば、ガンマ線照射）が挙げられる。他の実施形態において、追加の療法は、外科手術若しくは放射線又はこれらの組み合わせである。他の実施形態において、追加の療法は、ＰＩ３Ｋ／ＡＫＴ／ｍＴＯＲ経路の１つ以上を標的化する療法、ＨＳＰ９０阻害薬又はチューブリン阻害薬である。
【０１０８】
代替的に又は前記併用物と組み合わせて、本明細書に記載される方法及び組成物は、免疫調節薬（例えば、副刺激分子のアクチベーター又は阻害性分子、例えば免疫チェックポイント分子の阻害薬）；ワクチン、例えば治療用癌ワクチン；又は他の形態の細胞免疫療法の１つ以上と併用して投与することができる。
【０１０９】
一実施形態において、本明細書に開示される併用物、例えば抗ＰＤ−１抗体分子を含む併用物は、肺癌、例えば非小細胞肺癌を治療するため化学療法と併用して使用される。一実施形態において、抗ＰＤ−１抗体分子は、肺癌を治療するため標準的な肺、例えばＮＳＣＬＣの化学療法、例えばプラチナダブレット療法と共に使用される。癌は、初期、中間又は末期段階であり得る。
【０１１０】
一実施形態において、本明細書に開示される併用物、例えば抗ＰＤ−１抗体分子を含む併用物は、皮膚癌、例えばメラノーマを治療するため化学療法と併用して使用される。一実施形態において、抗ＰＤ−１抗体分子は、皮膚癌を治療するため標準的な皮膚、例えばメラノーマの化学療法、例えばプラチナダブレット療法と共に使用される。癌は、初期、中間又は末期段階であり得る。
【０１１１】
任意の組み合わせ及び順序の抗ＰＤ−１抗体分子及び他の治療用薬剤、手技又はモダリティ（例えば、本明細書に記載されるとおりの）を使用することができる。抗体分子及び／又は他の治療用薬剤、手技又はモダリティは、活性障害期間中又は寛解期間若しくは低活性疾患期間中に投与することができる。抗体分子は、他の治療の前、その治療と同時、治療後又は障害の寛解期間中に投与することができる。
【０１１２】
本明細書には、少なくとも一部には、プログラム死１（ＰＤ−１）に高い親和性及び特異性で結合する抗体分子（例えば、ヒト化抗体分子）が開示される。この抗体分子をコードする核酸分子、発現ベクター、宿主細胞及び抗体分子を作製する方法も提供される。抗体分子を含む医薬組成物及び用量製剤も提供される。本明細書に開示される抗ＰＤ−１抗体分子を（単独で又は他の薬剤若しくは治療モダリティと併用して）使用して、癌性障害（例えば、固形腫瘍及び軟部組織腫瘍）などの障害を治療、予防及び／又は診断することができる。従って、ＰＤ−１を検出するための組成物及び方法、並びに抗ＰＤ−１抗体分子を使用して癌を含めた様々な障害を治療する方法が本明細書に開示される。特定の実施形態において、抗ＰＤ−１抗体分子は、一定又は固定用量で投与又は使用される。
【０１１３】
以下では及び本願全体を通じて更なる用語を定義する。
【０１１４】
本明細書で使用されるとき、冠詞「１つの（ａ）」及び「１つの（ａｎ）」は、文法上のその冠詞の指示対象の１つ又は２つ以上（例えば、少なくとも１つ）を指す。
【０１１５】
用語「又は」は、本明細書では、文脈上特に明らかに指示されない限り、用語「及び／又は」を意味して使用され、及びそれと同義的に使用される。
【０１１６】
「約」及び「近似的に」は、概して、測定の性質又は精度を所与として測定された分量についての許容できる誤差の程度を意味するものとする。例示的な誤差の程度は、所与の値又は値の範囲の２０パーセント（％）以内、典型的には１０％以内、及びより典型的には５％以内である。
【０１１７】
「併用物」又は「〜と併用して」とは、その療法又は治療用薬剤を同じ時点で投与しなければならず、且つ／又は一緒に送達されるように製剤化しなければならないことを含意するように意図するものではなく、しかし、それらの送達方法は、本明細書に記載される範囲内にある。本併用物における治療用薬剤は、１つ以上の他の追加の療法又は治療用薬剤と同時に、その前に又はその後に投与することができる。治療用薬剤又は療法プロトコルはいずれの順序でも投与することができる。一般に、各薬剤は、その薬剤について決められた用量及び／又はタイムスケジュールで投与されることになる。更に、この併用物に利用される追加の治療用薬剤は、単一の組成物で一緒に投与され得、又は異なる組成物で個別に投与され得ることが理解されるであろう。一般に、併用物に利用される追加の治療用薬剤は、それらが個々に利用されるレベルを超えないレベルで利用されることが予想される。一部の実施形態において、併用物に利用されるレベルは、個々に利用されるレベルよりも低くなるであろう。
【０１１８】
実施形態において、追加の治療用薬剤は、治療量又は治療量未満で投与される。特定の実施形態において、阻害、例えば成長阻害を実現するために必要な第２の治療用薬剤の濃度は、第２の治療用薬剤が第１の治療用薬剤、例えば抗ＰＤ−１抗体分子と併用して投与される場合、第２の治療用薬剤が個々に投与される場合よりも低い。特定の実施形態において、阻害、例えば成長阻害を実現するために必要な第１の治療用薬剤の濃度は、第１の治療用薬剤が第２の治療用薬剤と併用して投与される場合、第１の治療用薬剤が個々に投与される場合よりも低い。特定の実施形態において、併用療法では、阻害、例えば成長阻害を実現するために必要な第２の治療用薬剤の濃度は、単独療法としての第２の治療用薬剤の治療量よりも低く、例えば１０〜２０％、２０〜３０％、３０〜４０％、４０〜５０％、５０〜６０％、６０〜７０％、７０〜８０％又は８０〜９０％低い。特定の実施形態において、併用療法では、阻害、例えば成長阻害を実現するために必要な第１の治療用薬剤の濃度は、単独療法としての第１の治療用薬剤の治療量よりも低く、例えば１０〜２０％、２０〜３０％、３０〜４０％、４０〜５０％、５０〜６０％、６０〜７０％、７０〜８０％又は８０〜９０％低い。
【０１１９】
用語「阻害」、「阻害薬」又は「アンタゴニスト」は、所与の分子、例えば免疫チェックポイント阻害薬の特定のパラメータ、例えば活性の低下を含む。例えば、少なくとも５％、１０％、２０％、３０％、４０％又はそれを超える活性、例えばＰＤ−１又はＰＤ−Ｌ１活性の阻害がこの用語に含まれる。従って、阻害は、１００％である必要はない。
【０１２０】
用語「活性化」、「アクチベーター」又は「アゴニスト」は、所与の分子、例えば副刺激分子の特定のパラメータ、例えば活性の増加を含む。例えば、少なくとも５％、１０％、２５％、５０％、７５％又はそれを超える活性、例えば共刺激活性の増加がこの用語に含まれる。
【０１２１】
用語「癌」は、異常細胞の急激な無制御の成長によって特徴付けられる疾患を指す。癌細胞は、局所的に又は血流及びリンパ系を通じて体の他の部位に広がり得る。本明細書で使用されるとき、用語「癌」又は「腫瘍」には、前悪性並びに悪性の癌及び腫瘍が含まれる。
【０１２２】
本明細書で使用されるとき、用語「治療する」、「治療」及び「治療している」は、１つ以上の療法の投与によってもたらされる、障害、例えば増殖性障害の進行、重症度及び／若しくは持続期間の低減若しくは改善、又は障害の１つ以上の症状（好ましくは１つ以上の認識できる症状）の改善を指す。具体的な実施形態において、用語「治療する」、「治療」及び「治療している」は、必ずしも患者が認識できるとは限らない、腫瘍の成長など、増殖性障害の少なくとも１つの測定可能な物理的パラメータの改善を指す。他の実施形態において用語「治療する」、「治療」及び「治療している」は、例えば、認識できる症状の安定化による物理的な、例えば物理的パラメータの安定化による生理学的な、又は両方である、いずれかの増殖性障害の進行の阻害を指す。他の実施形態において用語「治療する」、「治療」及び「治療している」は、腫瘍サイズ又は癌性細胞数の減少又は安定化を指す。
【０１２３】
用語「単離された」は、本明細書で使用されるとき、その元の又は在来の環境（例えば、それが天然に存在する場合には天然環境）から取り出されている材料を指す。例えば、生きている動物に認められる天然に存在するポリヌクレオチド又はポリペプチドは、単離されていないが、天然系で共存する材料の一部又は全てから人間の介入によって分離された同じポリヌクレオチド又はポリペプチドは、単離されている。かかるポリヌクレオチドは、ベクターの一部であることもあり、及び／又はかかるポリヌクレオチド又はポリペプチドは、組成物の一部であることもあり、かかるベクター又は組成物は、それが天然に見られる環境の一部でない点でなおも単離されている。
【０１２４】
本発明の様々な態様を以下に更に詳細に説明する。本明細書全体を通じて更なる定義が示される。
【０１２５】
抗体分子
一実施形態において、抗体分子は、哺乳類、例えばヒトＰＤ−１に結合する。例えば、抗体分子は、ＰＤ−１上のエピトープ、例えば線状又は立体エピトープ（例えば、本明細書に記載されるとおりのエピトープ）に特異的に結合する。
【０１２６】
本明細書で使用されるとき、用語「抗体分子」は、少なくとも１つの免疫グロブリン可変ドメイン配列を含むタンパク質、例えば免疫グロブリン鎖又はその断片を指す。用語「抗体分子」には、例えば、モノクローナル抗体（免疫グロブリンＦｃ領域を有する完全長抗体を含む）が含まれる。ある実施形態において、抗体分子は、完全長抗体又は完全長免疫グロブリン鎖を含む。ある実施形態において、抗体分子は、完全長抗体又は完全長免疫グロブリン鎖の抗原結合断片若しくは機能性断片を含む。ある実施形態において、抗体分子は、多重特異性抗体分子であり、例えば、それは、複数の免疫グロブリン可変ドメイン配列を含み、ここで、複数のうちの第１の免疫グロブリン可変ドメイン配列が第１のエピトープに対して結合特異性を有し、及び複数のうちの第２の免疫グロブリン可変ドメイン配列が第２のエピトープに対して結合特異性を有する。ある実施形態において、多重特異性抗体分子は、二重特異性抗体分子である。二重特異性抗体は、２つ以下の抗原に対して特異性を有する。二重特異性抗体分子は、第１のエピトープに対して結合特異性を有する第１の免疫グロブリン可変ドメイン配列と、第２のエピトープに対して結合特異性を有する第２の免疫グロブリン可変ドメイン配列とによって特徴付けられる。
【０１２７】
ある実施形態において、抗体分子は、単一特異性抗体分子であり、単一のエピトープに結合する。例えば、複数の免疫グロブリン可変ドメイン配列を有し、その各々が同じエピトープに結合する単一特異性抗体分子である。
【０１２８】
ある実施形態において、抗体分子は、多重特異性抗体分子であり、例えば、それは、複数の免疫グロブリン可変ドメイン配列を含み、ここで、複数のうちの第１の免疫グロブリン可変ドメイン配列が第１のエピトープに対する結合特異性を有し、及び複数のうちの第２の免疫グロブリン可変ドメイン配列が第２のエピトープに対して結合特異性を有する。ある実施形態において、第１及び第２のエピトープは、同じ抗原上、例えば同じタンパク質（又はある多量体タンパク質のサブユニット）上にある。ある実施形態において、第１及び第２のエピトープは、オーバーラップしている。ある実施形態において、第１及び第２のエピトープは、オーバーラップしていない。ある実施形態において、第１及び第２のエピトープは、異なる抗原上、例えば異なるタンパク質（又はある多量体タンパク質の異なるサブユニット）上にある。ある実施形態において、多重特異性抗体分子は、第３、第４又は第５の免疫グロブリン可変ドメインを含む。ある実施形態において、多重特異性抗体分子は、二重特異性抗体分子、三重特異性抗体分子又は四重特異性抗体分子である。
【０１２９】
ある実施形態において、多重特異性抗体分子は、二重特異性抗体分子である。二重特異性抗体は、２つ以下の抗原に対して特異性を有する。二重特異性抗体分子は、第１のエピトープに対して結合特異性を有する第１の免疫グロブリン可変ドメイン配列と、第２のエピトープに対して結合特異性を有する第２の免疫グロブリン可変ドメイン配列とによって特徴付けられる。ある実施形態において、第１及び第２のエピトープは、同じ抗原上、例えば同じタンパク質（又はある多量体タンパク質のサブユニット）上にある。ある実施形態において、第１及び第２のエピトープは、オーバーラップしている。ある実施形態において、第１及び第２のエピトープは、オーバーラップしていない。ある実施形態において、第１及び第２のエピトープは、異なる抗原上、例えば異なるタンパク質（又はある多量体タンパク質の異なるサブユニット）上にある。ある実施形態において、二重特異性抗体分子は、第１のエピトープに対して結合特異性を有する重鎖可変ドメイン配列及び軽鎖可変ドメイン配列と、第２のエピトープに対して結合特異性を有する重鎖可変ドメイン配列及び軽鎖可変ドメイン配列とを含む。ある実施形態において、二重特異性抗体分子は、第１のエピトープに対して結合特異性を有する半抗体と、第２のエピトープに対して結合特異性を有する半抗体とを含む。ある実施形態において、二重特異性抗体分子は、第１のエピトープに対して結合特異性を有する半抗体又はその断片と、第２のエピトープに対して結合特異性を有する半抗体又はその断片とを含む。ある実施形態において、二重特異性抗体分子は、第１のエピトープに対して結合特異性を有するｓｃＦｖ又はその断片、及び第２のエピトープに対して結合特異性を有するｓｃＦｖ又はその断片を含む。ある実施形態において、第１のエピトープは、ＰＤ−１上に位置し、及び第２のエピトープは、ＴＩＭ−３、ＬＡＧ−３、ＣＥＡＣＡＭ（例えば、ＣＥＡＣＡＭ−１及び／又はＣＥＡＣＡＭ−５）、ＰＤ−Ｌ１又はＰＤ−Ｌ２上に位置する。
【０１３０】
ある実施形態において、抗体分子には、ダイアボディ及び単鎖分子並びに抗体の抗原結合断片（例えば、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、及びＦｖ）が含まれる。例えば、抗体分子は、重（Ｈ）鎖可変ドメイン配列（本明細書ではＶＨと省略する）と、軽（Ｌ）鎖可変ドメイン配列（本明細書ではＶＬと省略する）とを含み得る。ある実施形態において、抗体分子は、重鎖と軽鎖とを含むか又はそれからなる（本明細書において半抗体と称される）。別の例において、抗体分子は、２つの重（Ｈ）鎖可変ドメイン配列と２つの軽（Ｌ）鎖可変ドメイン配列とを含み、それにより２つの抗原結合部位、例えばＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｃ、Ｆｄ、Ｆｄ’、Ｆｖ、一本鎖抗体（例えば、ｓｃＦｖ）、シングル可変ドメイン抗体、ダイアボディ（Ｄａｂ）（二価及び二重特異性）及びキメラ（例えば、ヒト化）抗体などを形成し、これらは、全抗体の修飾によって作製され得、又は組換えＤＮＡ技術を用いてデノボ合成されたものであり得る。これらの機能性抗体断片は、そのそれぞれの抗原又は受容体と選択的に結合する能力を保持している。抗体及び抗体断片は、限定はされないが、ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＤ及びＩｇＥを含め、任意の抗体クラス及び抗体の任意のサブクラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３及びＩｇＧ４）であり得る。抗体分子の製剤は、モノクローナル又はポリクローナルであり得る。抗体分子は、ヒト、ヒト化、ＣＤＲグラフト又はインビトロ生成抗体であり得る。抗体は、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３又はＩｇＧ４から選択される重鎖定常領域を有し得る。抗体は、例えば、κ又はλから選択される軽鎖も有し得る。用語「免疫グロブリン」（Ｉｇ）は、本明細書では用語「抗体」と同義的に使用される。
【０１３１】
抗体分子の抗原結合断片の例としては、（ｉ）Ｆａｂ断片、ＶＬ、ＶＨ、ＣＬ及びＣＨ１ドメインからなる一価断片；（ｉｉ）Ｆ（ａｂ’）２断片、ヒンジ領域でジスルフィド架橋によって連結された２つのＦａｂ断片を含む二価断片；（ｉｉｉ）ＶＨ及びＣＨ１ドメインからなるＦｄ断片；（ｉｖ）抗体の単一アームのＶＬ及びＶＨドメインからなるＦｖ断片、（ｖ）ダイアボディ（ｄＡｂ）断片、ＶＨドメインからなるもの；（ｖｉ）ラクダ科動物又はラクダ科動物化可変ドメイン；（ｖｉｉ）単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、例えばＢｉｒｄ  ｅｔ  ａｌ．（１９８８）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４２：４２３−４２６；及びＨｕｓｔｏｎ  ｅｔ  ａｌ．（１９８８）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８５：５８７９−５８８３を参照されたい）；（ｖｉｉｉ）シングルドメイン抗体が挙げられる。これらの抗体断片は、当業者に公知の従来技術を用いて得られ、及び断片は有用性に関してインタクトな抗体と同じようにスクリーニングされる。
【０１３２】
用語「抗体」には、インタクトな分子並びにその機能性断片が含まれる。抗体の定常領域は、抗体の特性が修飾されるように（例えば、Ｆｃ受容体結合、抗体グリコシル化、システイン残基の数、エフェクター細胞機能又は補体機能の１つ以上が増加又は減少するように）変化させる、例えば突然変異させることができる。
【０１３３】
ＶＨ及びＶＬ領域は、「フレームワーク領域」（ＦＲ又はＦＷ）と呼ばれる、より保存されている領域がその間に散在する「相補性決定領域」（ＣＤＲ）と呼ばれる超可変性領域に更に分けることができる。
【０１３４】
フレームワーク領域及びＣＤＲの範囲は、幾つもの方法によって正確に定義されている（Ｋａｂａｔ，Ｅ．Ａ．，ｅｔ  ａｌ．（１９９１）Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，Ｆｉｆｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  Ｈｕｍａｎ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，ＮＩＨ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ  Ｎｏ．９１−３２４２；Ｃｈｏｔｈｉａ，Ｃ．ｅｔ  ａｌ．（１９８７）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１−９１７；及びＯｘｆｏｒｄ  ＭｏｌｅｃｕｌａｒのＡｂＭ抗体モデル化ソフトウェアによって使用されるＡｂＭ定義を参照されたい。概略的には、例えば、Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｖａｒｉａｂｌｅ  Ｄｏｍａｉｎｓ．Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ  Ｌａｂ  Ｍａｎｕａｌ（Ｅｄ．：Ｄｕｅｂｅｌ，Ｓ．ａｎｄ  Ｋｏｎｔｅｒｍａｎｎ，Ｒ．，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ，Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ）を参照されたい。
【０１３５】
用語「相補性決定領域」及び「ＣＤＲ」は、本明細書で使用されるとき、抗原特異性及び結合親和性を付与する抗体可変領域内にあるアミノ酸配列を指す。一般に、各重鎖可変領域（ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３）に３つのＣＤＲがあり、及び各軽鎖可変領域（ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３）に３つのＣＤＲがある。
【０１３６】
所与のＣＤＲの正確なアミノ酸配列境界は、Ｋａｂａｔ  ｅｔ  ａｌ．（１９９１），“Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ”，５ｔｈ  Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ（「Ｋａｂａｔ」付番スキーム）、Ａｌ−Ｌａｚｉｋａｎｉ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９７）ＪＭＢ  ２７３，９２７−９４８（「Ｃｈｏｔｈｉａ」付番スキーム）によって記載されるものを含め、幾つもの周知のスキームのいずれかを用いて決定することができる。本明細書で使用されるとき、「Ｃｈｏｔｈｉａ」番号スキームにより定義されるＣＤＲは、ときに「超可変ループ」と称されることもある。
【０１３７】
例えば、Ｋａｂａｔに基づき、重鎖可変ドメイン（ＶＨ）のＣＤＲアミノ酸残基は、３１〜３５（ＨＣＤＲ１）、５０〜６５（ＨＣＤＲ２）及び９５〜１０２（ＨＣＤＲ３）と付番され；及び軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）のＣＤＲアミノ酸残基は２４〜３４（ＬＣＤＲ１）、５０〜５６（ＬＣＤＲ２）及び８９〜９７（ＬＣＤＲ３）と付番される。Ｃｈｏｔｈｉａに基づき、ＶＨのＣＤＲアミノ酸は、２６〜３２（ＨＣＤＲ１）、５２〜５６（ＨＣＤＲ２）及び９５〜１０２（ＨＣＤＲ３）と付番され；及びＶＬのアミノ酸残基は、２６〜３２（ＬＣＤＲ１）、５０〜５２（ＬＣＤＲ２）及び９１〜９６（ＬＣＤＲ３）と付番される。Ｋａｂａｔ及びＣｈｏｔｈｉａの両方のＣＤＲ定義を組み合わせることにより、ＣＤＲは、ヒトＶＨのアミノ酸残基２６〜３５（ＨＣＤＲ１）、５０〜６５（ＨＣＤＲ２）及び９５〜１０２（ＨＣＤＲ３）並びにヒトＶＬのアミノ酸残基２４〜３４（ＬＣＤＲ１）、５０〜５６（ＬＣＤＲ２）及び８９〜９７（ＬＣＤＲ３）からなる。
【０１３８】
概して、具体的に指示されない限り、抗ＰＤ−１抗体分子は、例えば、表１に記載される、１つ以上のＫａｂａｔ  ＣＤＲ及び／又はＣｈｏｔｈｉａ超可変ループの任意の組み合わせを含み得る。一実施形態において、表１に記載される抗ＰＤ−１抗体分子には以下の定義：Ｋａｂａｔ及びＣｈｏｔｈｉａの両方を組み合わせたＣＤＲ定義によるＨＣＤＲ１、及びＫａｂａｔのＣＤＲ定義によるＨＣＣＤＲ２〜３及びＬＣＣＤＲ１〜３が用いられる。いずれの定義においても、各ＶＨ及びＶＬは、典型的には、アミノ末端からカルボキシ末端に向かって以下の順番：ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４に並んだ３つのＣＤＲ及び４つのＦＲを含む。
【０１３９】
本明細書で使用されるとき、「免疫グロブリン可変ドメイン配列」は、免疫グロブリン可変ドメインの構造を形成し得るアミノ酸配列を指す。例えば、この配列は、天然に存在する可変ドメインのアミノ酸配列の全て又は一部を含み得る。例えば、この配列は、１つ、２つ又はそれを超えるＮ末端又はＣ末端アミノ酸を含むことも若しくは含まないこともあり、又はタンパク質構造の形成と適合性のある他の変化を含むこともある。
【０１４０】
用語「抗原結合部位」は、ＰＤ−１ポリペプチド又はそのエピトープに結合する接合部分を形成する決定基を含む抗体分子の一部を指す。タンパク質（又はタンパク質模倣体）に関して、抗原結合部位は、典型的には、ＰＤ−１ポリペプチドに結合する接合部分を形成する（少なくとも４つのアミノ酸又はアミノ酸模倣体の）１つ以上のループを含む。典型的には、抗体分子の抗原結合部位は、少なくとも１つ又は２つのＣＤＲ及び／又は超可変ループ、又はより典型的には少なくとも３、４、５又は６つのＣＤＲ及び／又は超可変ループを含む。
【０１４１】
用語「モノクローナル抗体」又は「モノクローナル抗体組成物」は、本明細書で使用されるとき、単一分子組成の抗体分子の製剤を指す。モノクローナル抗体組成物は、特定のエピトープに対する単一の結合特異性及び親和性を示す。モノクローナル抗体は、ハイブリドーマ技術によるか、又はハイブリドーマ技術を使用しない方法（例えば、組換え方法）によって作製することができる。
【０１４２】
ヒト化又はＣＤＲグラフト抗体は、少なくとも１つ又は２つの、しかし、概して３つ全てのレシピエントＣＤＲ（重鎖及び／又は軽鎖免疫グロブリン鎖の）がドナーＣＤＲによって置き換えられることになる。抗体は、非ヒトＣＤＲの少なくとも一部分によって置き換えられ得、又はＣＤＲの一部のみが非ヒトＣＤＲによって置き換えられ得る。ヒト化抗体がＰＤ−１に結合するのに必要な数のＣＤＲを置き換えるのみでよい。好ましくは、ドナーがげっ歯類抗体、例えばラット又はマウス抗体となり、レシピエントがヒトフレームワーク又はヒトコンセンサスフレームワークとなるであろう。典型的には、ＣＤＲを提供する免疫グロブリンが「ドナー」と呼ばれ、フレームワークを提供する免疫グロブリンが「アクセプター」と呼ばれる。一実施形態において、ドナー免疫グロブリンは、非ヒト（例えば、げっ歯類）である。アクセプターフレームワークは、天然に存在する（例えば、ヒト）フレームワーク若しくはコンセンサスフレームワーク、又はそれと約８５％以上、好ましくは９０％、９５％、９９％以上同一の配列である。
【０１４３】
例示的ＰＤ−１阻害薬
ＰＤ−１は、例えば、活性化ＣＤ４＋及びＣＤ８＋Ｔ細胞、Ｔｒｅｇ及びＢ細胞上に発現するＣＤ２８／ＣＴＬＡ−４ファミリーメンバーである。これは、エフェクターＴ細胞シグナル伝達及び機能を負に調節する。ＰＤ−１は、腫瘍浸潤Ｔ細胞上に誘導され、機能枯渇又は機能不全をもたらし得る（Ｋｅｉｒ  ｅｔ  ａｌ．（２００８）Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２６：６７７−７０４；Ｐａｒｄｏｌｌ  ｅｔ  ａｌ．（２０１２）Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｃａｎｃｅｒ  １２（４）：２５２−６４）。ＰＤ−１は、その２つのリガンド、プログラム死リガンド１（ＰＤ−Ｌ１）又はプログラム死リガンド２（ＰＤ−Ｌ２）のいずれか一方に結合すると共抑制シグナルを送出する。ＰＤ−Ｌ１は、Ｔ細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、マクロファージ、樹状細胞（ＤＣ）、Ｂ細胞、上皮細胞、血管内皮細胞を含めた幾つもの細胞型、並びに多くの腫瘍型に発現する。マウス及びヒト腫瘍におけるＰＤ−Ｌ１の高発現が種々の癌における臨床転帰不良と関係付けられている（Ｋｅｉｒ  ｅｔ  ａｌ．（２００８）Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２６：６７７−７０４；Ｐａｒｄｏｌｌ  ｅｔ  ａｌ．（２０１２）Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｃａｎｃｅｒ  １２（４）：２５２−６４）。ＰＤ−Ｌ２は、樹状細胞、マクロファージ及び一部の腫瘍に発現する。癌免疫療法に向けてＰＤ−１経路の遮断についての前臨床及び臨床検証が行われている。前臨床試験及び臨床試験の両方において、抗ＰＤ−１遮断がエフェクターＴ細胞の活性を回復させることができ、ロバストな抗腫瘍応答をもたらすことが実証されている。例えば、ＰＤ−１経路の遮断は、枯渇した／機能不全のエフェクターＴ細胞機能（例えば、増殖、ＩＦＮ−γ分泌又は細胞溶解機能）を回復させ、及び／又はＴｒｅｇ細胞機能を阻害することができる（Ｋｅｉｒ  ｅｔ  ａｌ．（２００８）Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２６：６７７−７０４；Ｐａｒｄｏｌｌ  ｅｔ  ａｌ．（２０１２）Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｃａｎｃｅｒ  １２（４）：２５２−６４）。ＰＤ−１経路の遮断は、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１及び／又はＰＤ−Ｌ２の抗体、その抗原結合断片、イムノアドヘシン、融合タンパク質又はオリゴペプチドによって生じさせることができる。
【０１４４】
本明細書で使用されるとき、用語「プログラム死１」又は「ＰＤ−１」には、アイソフォーム、哺乳類、例えばヒトＰＤ−１、ヒトＰＤ−１の種ホモログ、及びＰＤ−１と少なくとも１つの共通エピトープを含む類似体が含まれる。ＰＤ−１、例えばヒトＰＤ−１のアミノ酸配列は、当該技術分野において公知である。例えば、Ｓｈｉｎｏｈａｒａ  Ｔ  ｅｔ  ａｌ．（１９９４）Ｇｅｎｏｍｉｃｓ  ２３（３）：７０４−６；Ｆｉｎｇｅｒ  ＬＲ，ｅｔ  ａｌ．Ｇｅｎｅ（１９９７）１９７（１−２）：１７７−８７。
【０１４５】
本明細書に記載される抗ＰＤ−１抗体分子は、本明細書に記載される方法において、単独で又は本明細書に記載される１つ以上の追加の薬剤と併用して使用することができる。特定の実施形態において、本明細書に記載される併用物は、本明細書に記載されるとおりのＰＤ−１阻害薬、例えば抗ＰＤ−１抗体分子（例えば、ヒト化抗体分子）を含む。
【０１４６】
一実施形態において、抗ＰＤ−１抗体分子は、
（ａ）配列番号４のＨＣＤＲ１アミノ酸配列と、配列番号５のＨＣＤＲ２アミノ酸配列と、配列番号３のＨＣＤＲ３アミノ酸配列とを含む重鎖可変領域（ＶＨ）；及び配列番号１３のＬＣＤＲ１アミノ酸配列と、配列番号１４のＬＣＤＲ２アミノ酸配列と、配列番号３３のＬＣＤＲ３アミノ酸配列とを含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
（ｂ）配列番号１から選択されるＨＣＤＲ１アミノ酸配列と、配列番号２のＨＣＤＲ２アミノ酸配列と、配列番号３のＨＣＤＲ３アミノ酸配列とを含むＶＨ；及び配列番号１０のＬＣＤＲ１アミノ酸配列と、配列番号１１のＬＣＤＲ２アミノ酸配列と、配列番号３２のＬＣＤＲ３アミノ酸配列とを含むＶＬ；
（ｃ）配列番号４のＨＣＤＲ１アミノ酸配列と、配列番号５のＨＣＤＲ２アミノ酸配列と、配列番号３のＨＣＤＲ３アミノ酸配列とを含むＶＨ；及び配列番号１３のＬＣＤＲ１アミノ酸配列と、配列番号１４のＬＣＤＲ２アミノ酸配列と、配列番号３３のＬＣＤＲ３アミノ酸配列とを含むＶＬ；又は
（ｄ）配列番号１のＨＣＤＲ１アミノ酸配列と、配列番号２のＨＣＤＲ２アミノ酸配列と、配列番号３のＨＣＤＲ３アミノ酸配列とを含むＶＨ；及び配列番号１０のＬＣＤＲ１アミノ酸配列と、配列番号１１のＬＣＤＲ２アミノ酸配列と、配列番号３２のＬＣＤＲ３アミノ酸配列とを含むＶＬ
を含む。
【０１４７】
２．請求項１に記載の医薬併用物であって、抗ＰＤ−１抗体分子は、
（ａ）配列番号４のＨＣＤＲ１アミノ酸配列と、配列番号５のＨＣＤＲ２アミノ酸配列と、配列番号３のＨＣＤＲ３アミノ酸配列とを含む重鎖可変領域（ＶＨ）；及び配列番号１３のＬＣＤＲ１アミノ酸配列と、配列番号１４のＬＣＤＲ２アミノ酸配列と、配列番号３３のＬＣＤＲ３アミノ酸配列とを含む軽鎖可変領域（ＶＬ）；
（ｂ）配列番号１のＨＣＤＲ１アミノ酸配列と、配列番号２のＨＣＤＲ２アミノ酸配列と、配列番号３のＨＣＤＲ３アミノ酸配列とを含むＶＨ；及び配列番号１０のＬＣＤＲ１アミノ酸配列と、配列番号１１のＬＣＤＲ２アミノ酸配列と、配列番号３２のＬＣＤＲ３アミノ酸配列とを含むＶＬ；
（ｃ）配列番号２２４のＨＣＤＲ１アミノ酸配列と、配列番号５のＨＣＤＲ２アミノ酸配列と、配列番号３のＨＣＤＲ３アミノ酸配列とを含むＶＨ；及び配列番号１３のＬＣＤＲ１アミノ酸配列と、配列番号１４のＬＣＤＲ２アミノ酸配列と、配列番号３３のＬＣＤＲ３アミノ酸配列とを含むＶＬ；又は
（ｄ）配列番号２２４のＨＣＤＲ１アミノ酸配列と、配列番号２のＨＣＤＲ２アミノ酸配列と、配列番号３のＨＣＤＲ３アミノ酸配列とを含むＶＨ；及び配列番号１０のＬＣＤＲ１アミノ酸配列と、配列番号１１のＬＣＤＲ２アミノ酸配列と、配列番号３２のＬＣＤＲ３アミノ酸配列とを含むＶＬ
を含む医薬併用物。
【０１４８】
特定の実施形態において、抗ＰＤ−１抗体分子は、
（ｉ）配列番号１、配列番号４又は配列番号２２４から選択されるＨＣＤＲ１アミノ酸配列と、配列番号２のＨＣＤＲ２アミノ酸配列と、配列番号３のＨＣＤＲ３アミノ酸配列とを含む重鎖可変領域（ＶＨ）；及び
（ｉｉ）配列番号１０のＬＣＤＲ１アミノ酸配列と、配列番号１１のＬＣＤＲ２アミノ酸配列と、配列番号３２のＬＣＤＲ３アミノ酸配列とを含む軽鎖可変領域（ＶＬ）
を含む。
【０１４９】
他の実施形態において、抗ＰＤ−１抗体分子は、
（ｉ）配列番号１、配列番号４又は配列番号２２４から選択されるＨＣＤＲ１アミノ酸配列と、配列番号５のＨＣＤＲ２アミノ酸配列と、配列番号３のＨＣＤＲ３アミノ酸配列とを含む重鎖可変領域（ＶＨ）；及び
（ｉｉ）配列番号１３のＬＣＤＲ１アミノ酸配列と、配列番号１４のＬＣＤＲ２アミノ酸配列と、配列番号３３のＬＣＤＲ３アミノ酸配列とを含む軽鎖可変領域（ＶＬ）
を含む。
【０１５０】
前記抗体分子の実施形態において、ＨＣＤＲ１は、配列番号１のアミノ酸配列を含む。他の実施形態において、ＨＣＤＲ１は、配列番号４のアミノ酸配列を含む。更に他の実施形態において、配列番号２２４のＨＣＤＲ１アミノ酸配列である。
【０１５１】
実施形態において、前記抗体分子は、配列番号１４７、１５１、１５３、１５７、１６０、１６２、１６６若しくは１６９のいずれかのアミノ酸配列又はそれと少なくとも９０％同一の、或いは配列番号１４７、１５１、１５３、１５７、１６０、１６２、１６６又は１６９のいずれかのアミノ酸配列と比較して２つ以下のアミノ酸置換、挿入又は欠失を有するアミノ酸配列を含む少なくとも１つのフレームワーク（ＦＷ）領域を含む重鎖可変領域を有する。
【０１５２】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号１４７、１５１、１５３、１５７、１６０、１６２、１６６又は１６９のいずれかのアミノ酸配列を含む少なくとも１つのフレームワーク領域を含む重鎖可変領域を有する。
【０１５３】
更に他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号１４７、１５１、１５３、１５７、１６０、１６２、１６６又は１６９のいずれかのアミノ酸配列を含む少なくとも２、３又は４つのフレームワーク領域を含む重鎖可変領域を有する。
【０１５４】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号１４７又は１５１のＶＨＦＷ１アミノ酸配列、配列番号１５３、１５７又は１６０のＶＨＦＷ２アミノ酸配列、及び配列番号１６２又は１６６のＶＨＦＷ３アミノ酸配列を含み、且つ任意選択で配列番号１６９のＶＨＦＷ４アミノ酸配列を更に含む。
【０１５５】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号１７４、１７７、１８１、１８３、１８５、１８７、１９１、１９４、１９６、２００、２０２、２０５若しくは２０８のいずれかのアミノ酸配列又はそれと少なくとも９０％同一の、或いは１７４、１７７、１８１、１８３、１８５、１８７、１９１、１９４、１９６、２００、２０２、２０５又は２０８のいずれかのアミノ酸配列と比較して２つ以下のアミノ酸置換、挿入又は欠失を有するアミノ酸配列を含む少なくとも１つのフレームワーク領域を含む軽鎖可変領域を有する。
【０１５６】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号１７４、１７７、１８１、１８３、１８５、１８７、１９１、１９４、１９６、２００、２０２、２０５又は２０８のいずれかのアミノ酸配列を含む少なくとも１つのフレームワーク領域を含む軽鎖可変領域を有する。
【０１５７】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号１７４、１７７、１８１、１８３、１８５、１８７、１９１、１９４、１９６、２００、２０２、２０５又は２０８のいずれかのアミノ酸配列を含む少なくとも２、３又は４つのフレームワーク領域を含む軽鎖可変領域を有する。
【０１５８】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号１７４、１７７、１８１、１８３又は１８５のＶＬＦＷ１アミノ酸配列、配列番号１８７、１９１又は１９４のＶＬＦＷ２アミノ酸配列、及び配列番号１９６、２００、２０２又は２０５のＶＬＦＷ３アミノ酸配列を含み、且つ任意選択で配列番号２０８のＶＬＦＷ４アミノ酸配列を更に含む。
【０１５９】
他の実施形態において、前記抗体は、配列番号３８、５０、８２又は８６のいずれかと少なくとも８５％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインを含む。
【０１６０】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号３８、５０、８２又は８６のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインを含む。
【０１６１】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号４２、４６、５４、５８、６２、６６、７０、７４又は７８のいずれかと少なくとも８５％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含む。
【０１６２】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号４２、４６、５４、５８、６２、６６、７０、７４又は７８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含む。
【０１６３】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号３８のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインを含む。
【０１６４】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号４０のアミノ酸配列を含む重鎖を含む。
【０１６５】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号９１のアミノ酸配列を含む重鎖を含む。
【０１６６】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号５０のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインを含む。
【０１６７】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号５２又は配列番号１０２のアミノ酸配列を含む重鎖を含む。
【０１６８】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号８２のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインを含む。
【０１６９】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号８４のアミノ酸配列を含む重鎖を含む。
【０１７０】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号８６のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインを含む。
【０１７１】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号８８のアミノ酸配列を含む重鎖を含む。
【０１７２】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号４２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含む。
【０１７３】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号４４のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
【０１７４】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号４６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含む。
【０１７５】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号４８のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
【０１７６】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号５４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含む。
【０１７７】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号５６のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
【０１７８】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号５８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含む。
【０１７９】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号６０のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
【０１８０】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号６２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含む。
【０１８１】
他の実施形態において、前記抗体は、配列番号６４のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
【０１８２】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号６６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含む。
【０１８３】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号６８のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
【０１８４】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号７０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含む。
【０１８５】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号７２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
【０１８６】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号７４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含む。
【０１８７】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号７６のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
【０１８８】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号７８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含む。
【０１８９】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号８０のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
【０１９０】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号３８のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号４２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含む。
【０１９１】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号３８のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号６６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含む。
【０１９２】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号３８のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号７０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含む。
【０１９３】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号５０のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号７０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含む。
【０１９４】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号３８のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号４６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含む。
【０１９５】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号５０のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号４６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含む。
【０１９６】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号５０のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号５４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含む。
【０１９７】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号３８のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号５４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含む。
【０１９８】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号３８のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号５８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含む。
【０１９９】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号３８のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号６２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含む。
【０２００】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号５０のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号６６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含む。
【０２０１】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号３８のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号７４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含む。
【０２０２】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号３８のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号７８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含む。
【０２０３】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号８２のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号７０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含む。
【０２０４】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号８２のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号６６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含む。
【０２０５】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号８６のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン及び配列番号６６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含む。
【０２０６】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号９１のアミノ酸配列を含む重鎖及び配列番号４４のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
【０２０７】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号９１のアミノ酸配列を含む重鎖及び配列番号５６のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
【０２０８】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号９１のアミノ酸配列を含む重鎖及び配列番号６８のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
【０２０９】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号９１のアミノ酸配列を含む重鎖及び配列番号７２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
【０２１０】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号１０２のアミノ酸配列を含む重鎖及び配列番号７２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
【０２１１】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号４０のアミノ酸配列を含む重鎖及び配列番号４４のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
【０２１２】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号４０のアミノ酸配列を含む重鎖及び配列番号４８のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
【０２１３】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号５２のアミノ酸配列を含む重鎖及び配列番号４８のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
【０２１４】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号５２のアミノ酸配列を含む重鎖及び配列番号５６のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
【０２１５】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号４０のアミノ酸配列を含む重鎖及び配列番号５６のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
【０２１６】
他の実施形態において、前記抗体は、配列番号４０のアミノ酸配列を含む重鎖及び配列番号６０のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
【０２１７】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号４０のアミノ酸配列を含む重鎖及び配列番号６４のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
【０２１８】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号５２のアミノ酸配列を含む重鎖及び配列番号６８のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
【０２１９】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号４０のアミノ酸配列を含む重鎖及び配列番号６８のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
【０２２０】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号５２のアミノ酸配列を含む重鎖及び配列番号７２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
【０２２１】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号４０のアミノ酸配列を含む重鎖及び配列番号７２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
【０２２２】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号４０のアミノ酸配列を含む重鎖及び配列番号７６のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
【０２２３】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号４０のアミノ酸配列を含む重鎖及び配列番号８０のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
【０２２４】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号８４のアミノ酸配列を含む重鎖及び配列番号７２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
【０２２５】
他の実施形態において、前記抗体は、配列番号８４のアミノ酸配列を含む重鎖及び配列番号６８のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
【０２２６】
他の実施形態において、前記抗体分子は、配列番号８８のアミノ酸配列を含む重鎖及び配列番号６８のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
【０２２７】
他の実施形態において、前記抗体分子は、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ又は単鎖Ｆｖ断片（ｓｃＦｖ）から選択される。
【０２２８】
他の実施形態において、前記抗体分子は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３及びＩｇＧ４から選択される重鎖定常領域を含む。
【０２２９】
他の実施形態において、前記抗体分子は、κ又はλの軽鎖定常領域から選択される軽鎖定常領域を含む。
【０２３０】
他の実施形態において、前記抗体分子は、ＥＵ付番による２２８位又は配列番号２１２若しくは２１４の１０８位に突然変異を有するヒトＩｇＧ４重鎖定常領域と、κ軽鎖定常領域とを含む。
【０２３１】
他の実施形態において、前記抗体分子は、ＥＵ付番による２２８位又は配列番号２１２若しくは２１４の１０８位にセリンからプロリンへの突然変異を有するヒトＩｇＧ４重鎖定常領域と、κ軽鎖定常領域とを含む。
【０２３２】
他の実施形態において、前記抗体分子は、ＥＵ付番による２９７位又は配列番号２１６の１８０位にアスパラギンからアラニンへの突然変異を有するヒトＩｇＧ１重鎖定常領域と、κ軽鎖定常領域とを含む。
【０２３３】
他の実施形態において、前記抗体分子は、ＥＵ付番による２６５位又は配列番号２１７の１４８位にアスパラギン酸からアラニンへの突然変異、及びＥＵ付番による３２９位又は配列番号２１７の２１２位にプロリンからアラニンへの突然変異を有するヒトＩｇＧ１重鎖定常領域と、κ軽鎖定常領域とを含む。
【０２３４】
他の実施形態において、前記抗体分子は、ＥＵ付番による２３４位又は配列番号２１８の１１７位にロイシンからアラニンへの突然変異、及びＥＵ付番による２３５位又は配列番号２１８の１１８位にロイシンからアラニンへの突然変異を有するヒトＩｇＧ１重鎖定常領域と、κ軽鎖定常領域とを含む。
【０２３５】
他の実施形態において、前記抗体分子は、約０．２ｎＭ未満の解離定数（ＫＤ）でヒトＰＤ−１に結合する能力を有する。
【０２３６】
一部の実施形態において、前記抗体分子は、例えば、Ｂｉａｃｏｒｅ法によって測定したとき、約０．２ｎＭ、０．１５ｎＭ、０．１ｎＭ、０．０５ｎＭ又は０．０２ｎＭ未満、例えば約０．１３ｎＭ〜０．０３ｎＭ、例えば約０．０７７ｎＭ〜０．０８８ｎＭ、例えば約０．０８３ｎＭのＫＤでヒトＰＤ−１に結合する。
【０２３７】
他の実施形態において、前記抗体分子は、例えば、Ｂｉａｃｏｒｅ法によって測定したとき、約０．２ｎＭ、０．１５ｎＭ、０．１ｎＭ、０．０５ｎＭ又は０．０２ｎＭ未満、例えば約０．１１ｎＭ〜０．０８ｎＭ、例えば約０．０９３ｎＭのＫＤでカニクイザルＰＤ−１に結合する。
【０２３８】
特定の実施形態において、前記抗体分子は、例えば、Ｂｉａｃｏｒｅ法によって測定したとき、ヒトＰＤ−１及びカニクイザルＰＤ−１の両方に同様の、例えばｎＭ範囲のＫＤで結合する。一部の実施形態において、前記抗体分子は、例えば、ＥＬＩＳＡによって測定したとき、約０．１ｎＭ、０．０７５ｎＭ、０．０５ｎＭ、０．０２５ｎＭ又は０．０１ｎＭ未満、例えば約０．０４ｎＭのＫＤでヒトＰＤ−１−Ｉｇ融合タンパク質に結合する。
【０２３９】
一部の実施形態において、前記抗体分子は、例えば、ＦＡＣＳ分析によって測定したとき、約０．１ｎＭ、０．０７５ｎＭ、０．０５ｎＭ、０．０２５ｎＭ又は０．０１ｎＭ未満、例えば約０．０６ｎＭのＫＤでヒトＰＤ−１を発現するジャーカット細胞（例えば、ヒトＰＤ−１トランスフェクトジャーカット細胞）に結合する。
【０２４０】
一部の実施形態において、前記抗体分子は、例えば、ＦＡＣＳ分析によって測定したとき、約１ｎＭ、０．７５ｎＭ、０．５ｎＭ、０．２５ｎＭ又は０．１ｎＭ未満、例えば約０．４ｎＭのＫＤでカニクイザルＴ細胞に結合する。
【０２４１】
一部の実施形態において、前記抗体分子は、例えば、ＦＡＣＳ分析によって測定したとき、約１ｎＭ、０．７５ｎＭ、０．５ｎＭ、０．２５ｎＭ又は０．０１ｎＭ未満、例えば約０．６ｎＭのＫＤでカニクイザルＰＤ−１を発現する細胞（例えば、カニクイザルＰＤ−１をトランスフェクトされた細胞）に結合する。
【０２４２】
特定の実施形態において、前記抗体分子は、マウス又はラットＰＤ−１と交差反応性でない。他の実施形態において、前記抗体は、アカゲザルＰＤ−１と交差反応性である。例えば、交差反応性は、ＰＤ−１を発現する細胞（例えば、ヒトＰＤ−１発現３００．１９細胞）を用いてＢｉａｃｏｒｅ法又は結合アッセイによって測定することができる。他の実施形態において、前記抗体分子は、ＰＤ−１の細胞外Ｉｇ様ドメインに結合する。
【０２４３】
他の実施形態において、前記抗体分子は、ＰＤ−１によるＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２若しくは両方、又はＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２若しくは両方を発現する細胞への結合を低下させる能力を有する。一部の実施形態において、前記抗体分子は、ＰＤ−１を発現する細胞（例えば、ヒトＰＤ−１発現３００．１９細胞）へのＰＤ−Ｌ１結合を約１．５ｎＭ、１ｎＭ、０．８ｎＭ、０．６ｎＭ、０．４ｎＭ、０．２ｎＭ又は０．１ｎＭ未満、例えば約０．７９ｎＭ〜約１．０９ｎＭ、例えば約０．９４ｎＭ若しくは約０．７８ｎＭ又はそれ未満、例えば約０．３ｎＭのＩＣ５０で低下させる（例えば、遮断する）。一部の実施形態において、前記抗体は、ＰＤ−１を発現する細胞（例えば、ヒトＰＤ−１発現３００．１９細胞）へのＰＤ−Ｌ２結合を約２ｎＭ、１．５ｎＭ、１ｎＭ、０．５ｎＭ又は０．２ｎＭ未満、例えば約１．０５ｎＭ〜約１．５５ｎＭ若しくは約１．３ｎＭ又はそれ未満、例えば約０．９ｎＭのＩＣ５０で低下させる（例えば、遮断する）。
【０２４４】
他の実施形態において、前記抗体分子は、抗原特異的Ｔ細胞応答を増強する能力を有する。
【０２４５】
実施形態において、抗体分子は、単一特異性抗体分子又は二重特異性抗体分子である。実施形態において、抗体分子は、ＰＤ−１に対する第１の結合特異性と、ＴＩＭ−３、ＬＡＧ−３、ＣＥＡＣＡＭ（例えば、ＣＥＡＣＡＭ−１、ＣＥＡＣＡＭ−３、及び／又はＣＥＡＣＡＭ−５）、ＰＤ−Ｌ１又はＰＤ−Ｌ２に対する第２の結合特異性とを有する。実施形態において、抗体分子には、抗体の抗原結合断片、例えば半抗体又は半抗体の抗原結合断片が含まれる。
【０２４６】
一部の実施形態において、前記抗体分子は、例えば、ＳＥＢ  Ｔ細胞活性化アッセイ又はヒト全血エキソビボアッセイで測定したとき、ブドウ球菌エンテロトキシンＢ（ＳＥＢ）（例えば、２５μｇ／ｍＬ）によって活性化された細胞からのＩＬ−２の発現を、アイソタイプ対照（例えば、ＩｇＧ４）を使用した場合のＩＬ−２の発現と比較して少なくとも約２、３、４、５倍、例えば約２〜３倍、例えば約２〜２．６倍、例えば約２．３倍増加させる。
【０２４７】
一部の実施形態において、前記抗体分子は、例えば、ＩＦＮ−γ活性アッセイで測定したとき、抗ＣＤ３（例えば、０．１μｇ／ｍＬ）によって刺激されたＴ細胞からのＩＦＮ−γの発現を、アイソタイプ対照（例えば、ＩｇＧ４）を使用した場合のＩＦＮ−γの発現と比較して少なくとも約２、３、４、５倍、例えば約１．２〜３．４倍、例えば約２．３倍増加させる。
【０２４８】
一部の実施形態において、前記抗体分子は、例えば、ＩＦＮ−γ活性アッセイで測定したとき、ＳＥＢ（例えば、３ｐｇ／ｍＬ）によって活性化されたＴ細胞からのＩＦＮ−γの発現を、アイソタイプ対照（例えば、ＩｇＧ４）を使用した場合のＩＦＮ−γの発現と比較して少なくとも約２、３、４、５倍、例えば約０．５〜４．５倍、例えば約２．５倍増加させる。
【０２４９】
一部の実施形態において、前記抗体分子は、例えば、ＩＦＮ−γ活性アッセイで測定したとき、ＣＭＶペプチドで活性化されたＴ細胞からのＩＦＮ−γの発現を、アイソタイプ対照（例えば、ＩｇＧ４）を使用した場合のＩＦＮ−γの発現と比較して少なくとも約２、３、４、５倍、例えば約２〜３．６倍、例えば約２．８倍増加させる。
【０２５０】
一部の実施形態において、前記抗体分子は、例えば、少なくともｎ回（例えば、ｎ＝２又は４）の細胞分裂を経過したＣＤ８＋  Ｔ細胞の割合によって測定したとき、ＣＭＶペプチドで活性化されたＣＤ８＋Ｔ細胞の増殖を、アイソタイプ対照（例えば、ＩｇＧ４）を使用した場合のＣＤ８＋Ｔ細胞の増殖と比較して少なくとも約１、２、３、４、５倍、例えば約１．５倍増加させる。
【０２５１】
特定の実施形態において、前記抗体分子は、例えば、サルで測定したとき、約１００μｇ／ｍＬ〜約５００μｇ／ｍＬ、約１５０μｇ／ｍＬ〜約４５０μｇ／ｍＬ、約２５０μｇ／ｍＬ〜約３５０μｇ／ｍＬ又は約２００μｇ／ｍＬ〜約４００μｇ／ｍＬ、例えば約２９２．５μｇ／ｍＬのＣｍａｘを有する。
【０２５２】
特定の実施形態において、前記抗体分子は、例えば、サルで測定したとき、約２５０時間〜約６５０時間、約３００時間〜約６００時間、約３５０時間〜約５５０時間又は約４００時間〜約５００時間、例えば約４６５．５時間のＴ１／２を有する。
【０２５３】
一部の実施形態において、前記抗体分子は、例えば、Ｂｉａｃｏｒｅ法によって測定したとき、５×１０−４、１×１０−４、５×１０−５、又は１×１０−５ｓ−１、例えば約２．１３×１０−４ｓ−１よりも遅いＫｄでＰＤ−１に結合する。一部の実施形態において、前記抗体分子は、例えば、Ｂｉａｃｏｒｅ法によって測定したとき、１×１０４、５×１０４、１×１０５又は５×１０５Ｍ−１ｓ−１、例えば約２．７８×１０５Ｍ−１ｓ−１よりも速いＫａでＰＤ−１に結合する。
【０２５４】
一部の実施形態において、前記抗ＰＤ−１抗体分子は、ＰＤ−１のＣ鎖、ＣＣ’ループ、Ｃ’鎖及びＦＧループの範囲内にある１つ以上の残基に結合する。ＰＤ−１のドメイン構造は、例えば、Ｃｈｅｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，“Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ａｎｄ  Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｈｕｍａｎ  Ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄ  Ｃｅｌｌ  Ｄｅａｔｈ  １  Ｒｅｃｅｐｔｏｒ”Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２０１３，２８８：１１７７１−１１７８５に記載されている。Ｃｈｅｎｇ  ｅｔ  ａｌ．に記載されるとおり、Ｃ鎖は、残基Ｆ４３〜Ｍ５０を含み、ＣＣ’ループは、Ｓ５１〜Ｎ５４を含み、Ｃ’鎖は、残基Ｑ５５〜Ｆ６２を含み、及びＦＧループは、残基Ｌ１０８〜Ｉ１１４を含む（アミノ酸付番は、Ｃｈｅｎｇ  ｅｔ  ａｌ．、前掲による）。従って、一部の実施形態において、本明細書に記載されるとおりの抗ＰＤ−１抗体は、ＰＤ−１の範囲Ｆ４３〜Ｍ５０、Ｓ５１〜Ｎ５４、Ｑ５５〜Ｆ６２及びＬ１０８〜Ｉ１１４の１つ以上にある少なくとも１つの残基に結合する。一部の実施形態において、本明細書に記載されるとおりの抗ＰＤ−１抗体は、ＰＤ−１の範囲Ｆ４３〜Ｍ５０、Ｓ５１〜Ｎ５４、Ｑ５５〜Ｆ６２及びＬ１０８〜Ｉ１１４の２つ、３つ又は４つ全てにある少なくとも１つの残基に結合する。一部の実施形態において、抗ＰＤ−１抗体は、ＰＤ−Ｌ１及びＰＤ−Ｌ２の一方又は両方に対する結合部位の一部でもあるＰＤ−１の残基に結合する。
【０２５５】
別の態様において、本発明は、前記抗体分子のいずれかをコードする単離核酸分子、そのベクター及び宿主細胞を提供する。
【０２５６】
前記抗体分子の任意のものの抗体重鎖可変領域若しくは軽鎖可変領域又は両方をコードする単離核酸も提供される。
【０２５７】
一実施形態において、単離核酸は、重鎖ＣＤＲ１〜３をコードし、ここで、前記核酸は、配列番号１０８〜１１２、２２３、１２２〜１２６、１３３〜１３７又は１４４〜１４６のヌクレオチド配列を含む。
【０２５８】
別の実施形態において、単離核酸は、軽鎖ＣＤＲ１〜３をコードし、ここで、前記核酸は、配列番号１１３〜１２０、１２７〜１３２又は１３８〜１４３のヌクレオチド配列を含む。
【０２５９】
他の実施形態において、前記核酸は、重鎖可変ドメインをコードするヌクレオチド配列を更に含み、ここで、前記ヌクレオチド配列は、配列番号３９、５１、８３、８７、９０、９５又は１０１のいずれかと少なくとも８５％同一である。
【０２６０】
他の実施形態において、前記核酸は、重鎖可変ドメインをコードするヌクレオチド配列を更に含み、ここで、前記ヌクレオチド配列は、配列番号３９、５１、８３、８７、９０、９５又は１０１のいずれかを含む。
【０２６１】
他の実施形態において、前記核酸は、重鎖をコードするヌクレオチド配列を更に含み、ここで、前記ヌクレオチド配列は、配列番号４１、５３、８５、８９、９２、９６又は１０３のいずれかと少なくとも８５％同一である。
【０２６２】
他の実施形態において、前記核酸は、重鎖をコードするヌクレオチド配列を更に含み、ここで、前記ヌクレオチド配列は、配列番号４１、５３、８５、８９、９２、９６又は１０３のいずれかを含む。
【０２６３】
他の実施形態において、前記核酸は、軽鎖可変ドメインをコードするヌクレオチド配列を更に含み、ここで、前記ヌクレオチド配列は、配列番号４５、４９、５７、６１、６５、６９、７３、７７、８１、９４、９８、１００、１０５又は１０７のいずれかと少なくとも８５％同一である。
【０２６４】
他の実施形態において、前記核酸は、軽鎖可変ドメインをコードするヌクレオチド配列を更に含み、ここで、前記ヌクレオチド配列は、配列番号４５、４９、５７、６１、６５、６９、７３、７７、８１、９４、９８、１００、１０５又は１０７のいずれかを含む。
【０２６５】
他の実施形態において、前記核酸は、軽鎖をコードするヌクレオチド配列を更に含み、ここで、前記ヌクレオチド配列は、配列番号４５、４９、５７、６１、６５、６９、７３、７７、８１、９４、９８、１００、１０５又は１０７のいずれかと少なくとも８５％同一である。
【０２６６】
他の実施形態において、前記核酸は、軽鎖をコードするヌクレオチド配列を更に含み、ここで、前記ヌクレオチド配列は、配列番号４５、４９、５７、６１、６５、６９、７３、７７、８１、９４、９８、１００、１０５又は１０７のいずれかを含む。
【０２６７】
特定の実施形態において、前記核酸を含む１つ以上の発現ベクター及び宿主細胞が提供される。
【０２６８】
抗体分子又はその断片を作製する方法であって、遺伝子発現に好適な条件下で本明細書に記載されるとおりの宿主細胞を培養することを含む方法も提供される。
【０２６９】
一態様において、本発明は、本明細書に記載される抗体分子を提供する方法を特徴とする。この方法は、ＰＤ−１抗原（例えば、ＰＤ−１エピトープの少なくとも一部分を含む抗原）を提供すること；ＰＤ−１ポリペプチドに特異的に結合する抗体分子を入手すること；及びその抗体分子がＰＤ−１ポリペプチドに特異的に結合するかどうかを評価すること、又はＰＤ−１の活性の調整、例えば阻害におけるその抗体分子の有効性を評価することを含む。この方法は、抗体分子を対象、例えばヒト又は非ヒト動物に投与することを更に含み得る。
【０２７０】
別の態様において、本発明は、薬学的に許容可能な担体、賦形剤又は安定剤と、治療用薬剤の少なくとも１つ、例えば本明細書に記載される抗ＰＤ−１抗体分子とを含む組成物、例えば医薬組成物を提供する。一実施形態において、本組成物、例えば医薬組成物は、本抗体分子と、本明細書に記載されるとおりの１つ以上の薬剤、例えば治療用薬剤又は他の抗体分子との併用物を含む。一実施形態において、抗体分子は、標識又は治療用薬剤にコンジュゲートされる。
【０２７１】
医薬組成物及びキット
別の態様において、本発明は、薬学的に許容可能な担体と共に製剤化された、本明細書に記載される抗体分子を含む組成物、例えば薬学的に許容可能な組成物を提供する。本明細書で使用されるとき、「薬学的に許容可能な担体」には、生理的に適合性のあるあらゆる溶媒、分散媒、等張剤及び吸収遅延剤などが含まれる。担体は、静脈内、筋肉内、皮下、非経口、直腸、脊髄又は表皮投与（例えば、注射又は注入による）に好適であり得る。
【０２７２】
本発明の組成物は、種々の形態であり得る。形態としては、例えば、液体溶液（例えば、注射及び注入用溶液）、分散液又は懸濁液、リポソーム及び坐薬など、液体、半固体及び固体剤形が挙げられる。好ましい形態は、意図される投与方法及び治療適用に依存する。典型的な好ましい組成物は、注射又は注入用溶液の形態である。好ましい投与方法は、非経口（例えば、静脈内、皮下、腹腔内、筋肉内）である。好ましい実施形態において、抗体は、静脈内注入又は注射によって投与される。別の好ましい実施形態において、抗体は、筋肉内又は皮下注射によって投与される。
【０２７３】
語句「非経口投与」及び「非経口的に投与される」は、本明細書で使用されるとき、経腸及び局所投与以外の、通常、注射による投与方法を意味し、限定なしに、静脈内、筋肉内、動脈内、髄腔内、嚢内、眼窩内、心臓内、皮内、腹腔内、経気管、皮下、表皮下、関節内、嚢下、くも膜下、脊髄内、硬膜外及び胸骨内注射及び注入が挙げられる。
【０２７４】
治療組成物は、典型的には、無菌であり、製造及び保管条件下において安定していなければならない。組成物は、溶液、マイクロエマルション、分散液、リポソーム又は他の高い抗体濃度に好適な秩序構造物として製剤化することができる。滅菌注射用溶液は、所要量の活性化合物（即ち抗体又は抗体部分）を適切な溶媒中に、必要に応じて上記に挙げた成分の１つ又は組み合わせと共に配合し、続いて滅菌ろ過することにより調製し得る。概して、分散液は、塩基性分散媒及び上記に挙げたものからの必要な他の成分を含有する無菌媒体に活性化合物を配合することにより調製される。滅菌注射用溶液の調製用の滅菌粉末の場合、好ましい調製方法は、活性成分＋任意の追加の所望成分の粉末を予め滅菌ろ過されたその溶液から生じさせる真空乾燥及び凍結乾燥である。溶液の適切な流動性は、例えば、レシチンなどのコーティングの使用、分散液の場合に必要な粒径の維持、及び界面活性剤の使用によって維持することができる。吸収を遅延される薬剤、例えばモノステアリン酸塩及びゼラチンを組成物に含めることにより、注射用組成物の持続的吸収をもたらすことができる。
【０２７５】
抗体分子は、当該技術分野において公知の種々の方法によって投与することができるが、しかし、多くの治療適用に好ましい経路／投与方法は、静脈内注射又は注入である。例えば、抗体分子は、静脈内注入により２０ｍｇ／分、例えば２０〜４０ｍｇ／分、及び典型的には４０ｍｇ／分以上の速度で投与して、約３５〜４４０ｍｇ／ｍ２、典型的には約７０〜３１０ｍｇ／ｍ２、及びより典型的には約１１０〜１３０ｍｇ／ｍ２の用量に達することができる。実施形態において、抗体分子は、静脈内注入により１０ｍｇ／分未満、好ましくは５ｍｇ／分以下の速度で投与して、約１〜１００ｍｇ／ｍ２、好ましくは約５〜５０ｍｇ／ｍ２、約７〜２５ｍｇ／ｍ２及びより好ましくは約１０ｍｇ／ｍ２の用量に達することができる。当業者は理解するであろうとおり、投与経路及び／又は方法は、所望の結果に応じて変わり得る。特定の実施形態において、活性化合物は、インプラント、経皮パッチ及びマイクロカプセル化デリバリーシステムを含め、制御放出製剤など、化合物の急速な放出を防ぐ担体と共に調製され得る。エチレン酢酸ビニル、ポリ無水物、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオルトエステル類及びポリ乳酸など、生分解性、生体適合性ポリマーが用いられ得る。かかる製剤の調製方法の多くは、特許化されているか又は概して当業者に公知である。例えば、Ｓｕｓｔａｉｎｅｄ  ａｎｄ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｊ．Ｒ．Ｒｏｂｉｎｓｏｎ，ｅｄ．，Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９７８を参照されたい。
【０２７６】
特定の実施形態において、抗体分子は、例えば、不活性希釈剤又は同化可能な食用担体と共に経口投与することができる。化合物（及び必要に応じて他の成分）はまた、ハード又はソフトシェルゼラチンカプセルに封入されるか、錠剤に圧縮されるか、又は対象の食事に直接配合され得る。経口治療投与について、化合物は、賦形剤と共に配合されて、摂取可能な錠剤、バッカル錠、トローチ、カプセル、エリキシル、懸濁液、シロップ、オブラートなどの形態で使用され得る。本発明の化合物を非経口投与以外によって投与するには、その不活性化を防ぐ材料で化合物をコーティングするか、又はそれと化合物を共投与する必要があり得る。治療組成物は、当該技術分野において公知の医療器具でも投与され得る。
【０２７７】
投薬量レジメンは、最適な所望の応答（例えば、治療応答）がもたらされるように調整される。例えば、単回ボーラスが投与され得、数回の分割用量が時間をかけて投与され得、又は治療状況の切迫性が示すところに従い用量を比例的に減量若しくは増量され得る。特に、投与の簡便さ及び投薬量の均一性のため、非経口組成物を投薬量単位形態で製剤化することが有利である。投薬量単位形態とは、本明細書で使用されるとき、治療する対象への単位投薬量として適した物理的に個別の単位を指す。各単位は、所望の治療効果を生じるように計算された所定の分量の活性化合物を必要な医薬担体と併せて含有する。本発明の投薬量単位形態に関する仕様は、（ａ）活性化合物のユニークな特性及び実現しようとする詳細な治療効果、及び（ｂ）個体の感受性を治療するためのかかる活性化合物を化合する技術に固有の制約によって左右され、及びそれに直接依存する。
【０２７８】
抗体分子の治療又は予防有効量の例示的で非限定的な範囲は、０．１〜３０ｍｇ／ｋｇ、より好ましくは１〜２５ｍｇ／ｋｇである。抗ＰＤ−１抗体分子の投薬量及び治療レジメンは、当業者が決定することができる。特定の実施形態において、抗ＰＤ−１抗体分子は、約１〜４０ｍｇ／ｋｇ、例えば１〜３０ｍｇ／ｋｇ、例えば約５〜２５ｍｇ／ｋｇ、約１０〜２０ｍｇ／ｋｇ、約１〜５ｍｇ／ｋｇ、１〜１０ｍｇ／ｋｇ、５〜１５ｍｇ／ｋｇ、１０〜２０ｍｇ／ｋｇ、１５〜２５ｍｇ／ｋｇ又は約３ｍｇ／ｋｇの用量で注射によって（例えば、皮下又は静脈内に）投与される。投与スケジュールは、例えば、週１回〜２、３又は４週間に１回で異なり得る。一実施形態において、抗ＰＤ−１抗体分子は、隔週で約１０〜２０ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。
【０２７９】
別の例として、抗体分子の治療又は予防有効量の非限定的な範囲は、２００〜５００ｍｇ、より好ましくは３００〜４００ｍｇ／ｋｇである。抗ＰＤ−１抗体分子の投薬量及び治療レジメンは、当業者が判断し得る。特定の実施形態において、抗ＰＤ−１抗体分子は、約２００ｍｇ〜５００ｍｇ、例えば約２５０ｍｇ〜４５０ｍｇ、約３００ｍｇ〜４００ｍｇ、約２５０ｍｇ〜３５０ｍｇ、約３５０ｍｇ〜４５０ｍｇ、又は約３００ｍｇ、又は約４００ｍｇの用量（例えば、一定用量）で注射によって（例えば、皮下又は静脈内に）投与される。投与スケジュール（例えば、一定用量投与スケジュール）は、例えば、週１回〜２、３、４、５又は６週間に１回で異なり得る。一実施形態において、抗ＰＤ−１抗体分子は、３週間に１回又は４週間に１回、約３００ｍｇ〜４００ｍｇの用量で投与される。一実施形態において、抗ＰＤ−１抗体分子は、３週間に１回、約３００ｍｇからの用量で投与される。一実施形態において、抗ＰＤ−１抗体分子は、４週間に１回、約４００ｍｇからの用量で投与される。一実施形態において、抗ＰＤ−１抗体分子は、４週間に１回、約３００ｍｇからの用量で投与される。一実施形態において、抗ＰＤ−１抗体分子は、３週間に１回、約４００ｍｇからの用量で投与される。理論によって拘束されることを望むものではないが、一部の実施形態では、一定又は固定用量は、例えば、薬物供給の節約となり、且つ調剤過誤が軽減されるため、患者に有益であり得る。
【０２８０】
一部の実施形態において、抗ＰＤ−１抗体分子のクリアランス（ＣＬ）は、約６〜１６ｍＬ／ｈ、例えば約７〜１５ｍＬ／ｈ、約８〜１４ｍＬ／ｈ、約９〜１２ｍＬ／ｈ又は約１０〜１１ｍＬ／ｈ、例えば約８．９ｍＬ／ｈ、１０．９ｍＬ／ｈ又は１３．２ｍＬ／ｈである。
【０２８１】
一部の実施形態において、抗ＰＤ−１抗体分子のＣＬに対する体重の指数項は、約０．４〜０．７、約０．５〜０．６又は０．７以下、例えば０．６以下又は約０．５４である。
【０２８２】
一部の実施形態において、抗ＰＤ−１抗体分子の定常状態分布容積（Ｖｓｓ）は、約５〜１０Ｖ、例えば約６〜９Ｖ、約７〜８Ｖ又は約６．５〜７．５Ｖ、例えば約７．２Ｖである。
【０２８３】
一部の実施形態において、抗ＰＤ−１抗体分子の半減期は、約１０〜３０日、例えば約１５〜２５日、約１７〜２２日、約１９〜２４日又は約１８〜２２日、例えば約２０日である。
【０２８４】
一部の実施形態において、抗ＰＤ−１抗体分子のＣｍｉｎ（例えば、８０ｋｇの患者について）は、少なくとも約０．４μｇ／ｍＬ、例えば少なくとも約３．６μｇ／ｍＬ、例えば約２０〜５０μｇ／ｍＬ、例えば約２２〜４２μｇ／ｍＬ、約２６〜４７μｇ／ｍＬ、約２２〜２６μｇ／ｍＬ、約４２〜４７μｇ／ｍＬ、約２５〜３５μｇ／ｍＬ、約３２〜３８μｇ／ｍＬ、例えば約３１μｇ／ｍＬ又は約３５μｇ／ｍＬである。一実施形態において、Ｃｍｉｎは、４週間に１回、約４００ｍｇの用量で抗ＰＤ−１抗体分子の投与を受けている患者において決定される。別の実施形態において、Ｃｍｉｎは、３週間に１回、約３００ｍｇの用量で抗ＰＤ−１抗体分子の投与を受けている患者において決定される。特定の実施形態において、Ｃｍｉｎは、例えば、ＳＥＢエキソビボアッセイでＩＬ−２変化に基づいて決定したとき、抗ＰＤ−１抗体分子のＥＣ５０よりも少なくとも約５０倍高く、例えば少なくとも約６０倍、６５倍、７０倍、７５倍、８０倍、８５倍、９０倍、９５倍又は１００倍、例えば少なくとも約７７倍高い。他の実施形態において、Ｃｍｉｎは、例えば、ＳＥＢエキソビボアッセイでＩＬ−２変化に基づいて決定したとき、抗ＰＤ−１抗体分子のＥＣ９０よりも少なくとも５倍高く、例えば少なくとも６倍、７倍、８倍、９倍又は１０倍、例えば少なくとも約８．６倍高い。
【０２８５】
抗体分子は、静脈内注入によって２０ｍｇ／分超、例えば２０〜４０ｍｇ／分、及び典型的には４０ｍｇ／分以上の速度で投与して、約３５〜４４０ｍｇ／ｍ２、典型的には約７０〜３１０ｍｇ／ｍ２、及びより典型的には約１１０〜１３０ｍｇ／ｍ２の用量に達することができる。実施形態において、約１１０〜１３０ｍｇ／ｍ２の注入速度が約３ｍｇ／ｋｇのレベルを達成する。他の実施形態において、抗体分子は、静脈内注入によって１０ｍｇ／分未満、例えば５ｍｇ／分以下の速度で投与して、約１〜１００ｍｇ／ｍ２、例えば約５〜５０ｍｇ／ｍ２、約７〜２５ｍｇ／ｍ２又は約１０ｍｇ／ｍ２の用量に達することができる。一部の実施形態において、抗体は、約３０分の時間をかけて注入される。投薬量の値は、改善しようとする病態のタイプ及び重症度に伴って変わり得ることに留意すべきである。更に、任意の特定の対象について、具体的な投薬量レジメンは、時間の経過に伴って個々の必要性及び組成物の投与者又は投与監視者の専門的な判断に基づいて調整されなければならないこと、及び本明細書に示される投薬量範囲が例示に過ぎず、特許請求される組成物の範囲又は実施を限定する意図がないことが理解されるべきである。
【０２８６】
本発明の医薬組成物は、本発明の抗体又は抗体部分の「治療有効量」又は「予防有効量」を含み得る。「治療有効量」は、所望の治療結果を達成するために必要な投薬量及び期間で有効な量を指す。修飾抗体又は抗体断片の治療有効量は、個体の病状、年齢、性別及び体重並びにその抗体又は抗体部分が個体において所望の応答を誘発する能力などの要因に応じて異なり得る。治療有効量はまた、修飾抗体又は抗体断片のいかなる毒性の又は有害な効果にも治療上有益な効果が優れるものである。「治療上有効な投薬量」は、好ましくは、測定可能なパラメータ、例えば腫瘍成長速度を未治療の対象と比べて少なくとも約２０％、より好ましくは少なくとも約４０％、更により好ましくは少なくとも約６０％、及び更により好ましくは少なくとも約８０％阻害する。化合物が測定可能なパラメータ、例えば癌を阻害する能力は、ヒト腫瘍における有効性の予測となる動物モデル系で評価することができる。代替的に、組成物のこの特性は、化合物がかかる阻害をインビトロで阻害する能力を当業者に公知のアッセイによって調べることにより評価し得る。
【０２８７】
「予防有効量」は、所望の予防結果を達成するのに必要な投薬量及び期間で有効な量を指す。典型的には、予防用量は、疾患以前の又は疾患の初期段階にある対象で使用されるため、予防有効量は、治療有効量未満となり得る。
【０２８８】
また、本発明の範囲内には、本明細書に記載される抗体分子を含むキットもある。このキットは、使用説明書；他の試薬、例えば標識、治療用薬剤又はキレート化若しくは他のカップリングに有用な薬剤、標識用若しくは治療用薬剤に対する抗体、又は放射線防護組成物；抗体を投与のために調製するための装置又は他の材料；薬学的に許容可能な担体；及び対象への投与のための装置又は他の材料を含めた１つ以上の他の要素を含み得る。
【０２８９】
併用療法の使用
本明細書に開示される併用物、例えば抗ＰＤ−１抗体分子には、インビトロ及びインビボ診断上、並びに治療及び予防上の有用性がある。例えば、これらの分子は、癌及び感染性障害など、種々の障害を治療、予防及び／又は診断するため、培養下の細胞にインビトロ若しくはエキソビボで又はヒト対象に投与することができる。
【０２９０】
従って、一態様において、本発明は、対象の免疫応答を修飾する方法であって、対象の免疫応答が修飾されるように本明細書に記載される併用物を対象に投与することを含む方法を提供する。一実施形態において、免疫応答は、増強、刺激又は上方制御される。
【０２９１】
本明細書で使用されるとき、用語「対象」は、異常なＰＤ−１機能によって特徴付けられる障害又は病態を有するヒト患者である。
【０２９２】
【表２】
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【０２９３】
【表３】
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【０２９４】
【表４】
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【０２９５】
【表５】
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【０２９６】
【表６】
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【０２９７】
【表７】
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【０２９８】
【表８】
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【０２９９】
【表９】
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【０３００】
【表１０】
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【０３０１】
【表１１】
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【０３０２】
【表１２】
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【０３０３】
【表１３】
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【０３０４】
【表１４】
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【０３０５】
【表１５】
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【０３０６】
【表１６】
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【０３０７】
【表１７】
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【０３０８】
【表１８】
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【０３０９】
【表１９】
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【０３１０】
【表２０】
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【０３１１】
【表２１】
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【０３１２】
【表２２】
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【０３１３】
【表２３】
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【０３１４】
【表２４】
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【０３１５】
【表２５】
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【０３１６】
【表２６】
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【０３１７】
【表２７】
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【０３１８】
【表２８】
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【０３１９】
【表２９】
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【０３２０】
【表３０】
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【０３２１】
【表３１】
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【０３２２】
【表３２】
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【０３２３】
【表３３】
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【０３２４】
【表３４】
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【０３２５】
【表３５】
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【０３２６】
【表３６】
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【０３２７】
【表３７】
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【０３２８】
【表３８】
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【０３２９】
【表３９】
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【０３３０】
【表４０】
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【０３３１】
【表４１】
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【０３３２】
【表４２】
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【０３３３】
【表４３】
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【０３３４】
【表４４】
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【０３３５】
【表４５】
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【０３３６】
【表４６】
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【０３３７】
【表４７】
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【０３３８】
【表４８】
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【０３３９】
【表４９】
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【０３４０】
【表５０】
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【０３４１】
【表５１】
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【０３４２】
【表５２】
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【０３４３】
【表５３】
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【０３４４】
【表５４】
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【０３４５】
【表５５】
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【０３４６】
【表５６】
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【０３４７】
【表５７】
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【０３４８】
【表５８】
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【０３４９】
【表５９】
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【０３５０】
【表６０】
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【０３５１】
【表６１】
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【０３５２】
【表６２】
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【０３５３】
【表６３】
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【０３５４】
【表６４】
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【０３５５】
【表６５】
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【０３５６】
【表６６】
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【０３５７】
【表６７】
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【０３５８】
【表６８】
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【０３５９】
【表６９】
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【実施例】
【０３６０】
本発明の理解を促進するように以下に実施例を示すが、これは、決してその範囲を限定するように意図するものではなく、及びそのように解釈されてはならない。
【０３６１】
実施例１：一定用量投与スケジュールの薬物動態分析
薬物動態（ＰＫ）モデリングに基づき、一定用量の利用は、患者に適切なＣｍｉｎ濃度の曝露をもたらすものと予想される。患者の９９．５％超がＥＣ５０を上回り、患者の９３％超がＥＣ９０を上回るであろう。３００ｍｇ、３週間に１回（Ｑ３Ｗ）又は４００ｍｇ、４週間に１回（Ｑ４Ｗ）のいずれを利用した例示的抗ＰＤ−１抗体分子の予測定常状態平均Ｃｍｉｎも平均して２０ｕｇ／ｍＬを上回ると予想される（最高体重、１５０ｋｇ）。
【０３６２】
【表７０】
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【０３６３】
いずれの用量／レジメン（３００ｍｇ  ｑ３ｗ又は４００ｍｇ  ｑ４ｗ）で観察される例示的抗ＰＤ−１抗体分子の予想平均定常状態Ｃｍｉｎ濃度も、ＥＣ５０（０．４２ｕｇ／ｍＬ）より少なくとも７７倍高くなり、及びＥＣ９０より約８．６倍高くなるであろう。エキソビボ力価は、ＳＥＢエキソビボアッセイにおけるＩＬ−２の変化に基づく。
【０３６４】
３００ｍｇ  Ｑ３Ｗ又は４００ｍｇ  Ｑ４Ｗのいずれについても患者の１０％未満が３．６ｕｇ／ｍＬ未満のＣｍｉｎ濃度を達成するものと予想される。３００ｍｇ  Ｑ３Ｗ又は４００ｍｇ  Ｑ４Ｗのいずれについても患者の０．５％未満が０．４μｇ／ｍＬ未満のＣｍｉｎ濃度を達成するものと予想される。
【０３６５】
同じ用量の例示的抗ＰＤ−１抗体分子を投与される間の患者に関する異なる体重にわたる予測Ｃｔｒｏｕｇｈ（Ｃｍｉｎ）濃度を図１２に示す。体重換算用量を固定用量と比較する（３．７５ｍｇ／ｋｇ  Ｑ３Ｗ対３００ｍｇ  Ｑ３Ｗ及び５ｍｇ／ｋｇ  Ｑ４Ｗ対４００ｍｇ  Ｑ４Ｗ）。図１２は、例示的抗ＰＤ−１抗体分子の一定用量投与を裏付けている。
【０３６６】
ＰＫモデルを更に検証する。図１３に示すとおり、実測濃度及びモデル予測濃度は、一致した線上にある。図１４は、モデルが蓄積、経時変化及び対象内変動を捉えることを示す。
【０３６７】
実施例２：Ｎ−（３−（２−（２−ヒドロキシエトキシ）−６−モルホリノピリジン−４−イル）−４−メチルフェニル）−２−（トリフルオロメチル）イソニコチンアミド
化合物Ａ（化合物Ａ）は、以下の構造
【化３】
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のモルホリン置換ビアリール化合物である。
【０３６８】
化合物Ａは、ＰＣＴ出願国際公開第２０１４／１５１６１６号パンフレット（その内容は参照によって援用される）の実施例１１５６である。化合物Ａの調製、化合物Ａの薬学的に許容可能な塩及び化合物Ａを含む医薬組成物もこのＰＣＴ出願に開示され、例えば７３９〜７４１頁を参照されたい。
【０３６９】
化合物Ａは、ｂ−Ｒａｆ及びｃ−Ｒａｆの両方のＩＩ型阻害薬である。
【０３７０】
【表７１】
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【０３７１】
化合物Ａは、生化学アッセイにおいてｎＭ未満のＩＣ５０値でＢＲＡＦ及びＣＲＡＦキナーゼの両方を標的とする強力且つ選択的な阻害薬である。化合物Ａは、ＭＡＰＫ経路によってドライブされる広範なヒト癌細胞株並びにＫＲＡＳ、ＮＲＡＳ、及びＢＲＡＦ癌遺伝子に活性化病変を内包するモデルを含めたインビボ腫瘍異種移植片において有効性が実証されている。
【０３７２】
実施例３：ＫＲＡＳ変異ＮＳＣＬＣモデルにおける化合物Ａの抗腫瘍活性
Ｈ３５８モデル：
腫瘍細胞接種の１４日後に平均腫瘍容積範囲２５９．４４〜２６２．４７ｍｍ３のＳＣＩＤベージュ雌腫瘍担持ＮＣＩ−Ｈ３５８マウス、ｎ＝８／群を３群に無作為化した。
【０３７３】
動物には、治療期間中、１０ｍｌ／ｋｇ動物体重の投与容積で１４日間連続して毎日３０ｍｇ／ｋｇ又は２００ｍｇ／ｋｇの媒体、化合物Ａのいずれかの経口用量を投与した。腫瘍容積をデジタルノギスによって週３回測定し、及び治療期間にわたって全ての動物の体重を記録した。
【０３７４】
Ｃａｌｕ６モデル：
腫瘍移植後１７日目に平均腫瘍容積が１８０ｍｍ３になったところで雌ヌード腫瘍担持Ｃａｌｕ６マウス、ｎ＝６／群を治療群に無作為化した。化合物Ａによる治療は１７日目に開始し、１６日間継続した。投与容積は、１０ｍＬ／ｋｇであった。無作為化時点及びその後試験期間にわたり、週２回、腫瘍容積を収集した。
【０３７５】
Ｈ７２７モデル：
平均腫瘍容積範囲が２７５．７４ｍｍ３のヌード雌マウス腫瘍担持ＮＣＩ−Ｈ３５８、ｎ＝８／群を２群に無作為化した。動物には、治療期間中、１０ｍｌ／ｋｇ動物体重の投与容積で１４日間連続して毎日１００ｍｇ／ｋｇの媒体又は化合物Ａのいずれかの経口用量を投与した。腫瘍容積をデジタルノギスによって週３回測定し、及び治療期間にわたって全ての動物の体重を記録した。図１５Ａ、図１５Ｂ及び図１５Ｃに示されるとおり、化合物Ａは、ＫＲＡＳｍｔ  ＮＳＣＬＣモデルにおいて単剤活性を示した。
【０３７６】
細胞ベースのアッセイでは、化合物Ａは、ＭＡＰＫシグナル伝達を活性化させる種々の突然変異を含む細胞株で抗増殖活性を実証している。例えば、化合物Ａは、０．２〜１．２μＭの範囲のＩＣ５０値で非小細胞肺癌細胞株Ｃａｌｕ−６（ＫＲＡＳ  Ｑ６１Ｋ）、結腸直腸細胞株ＨＣＴ１１６（ＫＲＡＳ  Ｇ１３Ｄ）の増殖を阻害した。
【０３７７】
インビボでは、化合物Ａによる治療は、ＮＳＣＬＣ由来のＣａｌｕ−６（ＫＲＡＳ  Ｑ６１Ｋ）及びＮＣＩ−Ｈ３５８（ＫＲＡＳ  Ｇ１２Ｃ）異種移植片並びに卵巣Ｈｅｙ−Ａ８（ＫＲＡＳ  Ｇ１２Ｄ、ＢＲＡＦ  Ｇ４６４Ｅ）異種移植片を含む幾つかのヒトＫＲＡＳ変異モデルにおいて腫瘍退縮を生じさせた。いずれの場合にも、抗腫瘍効果は、用量依存的であり、有意な体重減少がないことから判断すると、良好に忍容された。Ｃａｌｕ−６モデルは、ヌードマウス及びヌードラットの両方において移植時に化合物Ａに対して感受性があり、マウスにおいて１００、２００及び３００ｍｇ／ｋｇ、１日１回（ＱＤ）且つラットにおいて７５及び１５０ｍｇ／ｋｇ  ＱＤの用量で退縮が観察された。このモデルでは、マウス及びラットにおいてそれぞれ３０ｍｇ／ｋｇ  ＱＤ及び３５ｍｇ／ｋｇ  ＱＤで腫瘍滞留性が観察された。退縮も、第２のヒトＮＳＣＬＣモデル、ＮＣＩ−Ｈ３５８でマウスにおいて２００ｍｇ／ｋｇ  ＱＤ用量で、及びヒト卵巣Ｈｅｙ−Ａ８異種移植片でマウスにおいて３０ｍｇ／ｋｇ  ＱＤもの低い用量で達成された。更に、Ｃａｌｕ−６異種移植片における用量分割有効性試験からのデータは、異なる用量投与レベル間で、ＱＤで投与される化合物と１日２回（ＢＩＤ）に分割された化合物Ａとが同様の抗腫瘍活性レベルを示したことを実証した。これらの結果は、臨床におけるＱＤ又はＢＩＤ用量レジメンの探索を裏付けている。
【０３７８】
まとめると、耐用量の化合物Ａについて観察されたインビトロ及びインビボＭＡＰＫ経路抑制及び抗増殖活性は、化合物Ａが、ＭＡＰＫ経路に活性化病変を内包する腫瘍を有する患者において抗腫瘍活性を有し得ること、詳細には、従ってＫＲＡＳ突然変異を内包するＮＳＣＬＣ患者の治療に単剤として又は抗ＰＤ−１抗体分子との併用で有用であり得ることを示唆している。
【０３７９】
実施例４：ＮＲＡＳ変異メラノーマモデルにおける化合物Ａの抗腫瘍活性
ＮＲＡＳ変異メラノーマ異種移植片ヌードマウスモデルにおいて化合物Ａの抗腫瘍有効性及び忍容性を決定した。５０％マトリゲル（商標）中の５×１０６  ＳＫＭＥＬ３０細胞（ＮＲＡＳＱ６１Ｋメラノーマ細胞）を雌ヌードマウスの右側腹部に皮下移植した。移植後１２日目に、平均腫瘍容積が約２００ｍｍ３になったところでマウスを治療群に無作為化した。マウスを群に分け（ｎ＝９）、２５及び１００ｍｇ／ｋｇ  ｂｉｄ（１日２回）の媒体又は化合物Ａで治療した。治療は移植後１２日目に開始し、２１日目まで継続した。腫瘍容積及び体重を無作為化時点及び試験期間中にわたって週２回収集した。ノギスで測定することにより腫瘍容積を決定し、修正楕円体式、腫瘍容積（ＴＶ）（ｍｍ３）＝［（（ｌ×ｗ２）×３．１４１５９））／６］（式中、ｌは、腫瘍の最も長い軸であり、及びｗは、ｌの垂直線である）を用いて計算した。マウスを腫瘍成長、体重及び身体状態に関してモニタした。動物のウェルビーイング及び行動は、週２回モニタした。マウスの全般的な健康は、毎日モニタした。移植後２１日目に（９日間の治療）、％Ｔ／Ｃ又は％退縮を評価することにより抗腫瘍活性を決定した。両方の用量、２５ｍｇ／ｋｇ及び１００ｍｇ／ｋｇ  ｂｉｄの化合物Ａによる治療が退縮をもたらした（それぞれ４８％及び５９％の退縮）。全ての用量が良好に忍容され、有意な体重減少はなく、及び毒性の徴候又は死亡は観察されなかった（マウスのＳＫＭＥＬ３０異種移植片における化合物Ａの有効性及び忍容性を示す図１６。腫瘍容積（Ａ）又は開始時からのパーセント体重変化（Ｂ）について、治療群を媒体対照と比べてプロットした）。
【０３８０】
実施例５：ＭＡＰＫ経路変化を内包する固形腫瘍（固形進行性腫瘍を含む）を有する成人患者における化合物Ａの第Ｉ相用量設定試験
化合物Ａ単剤
前臨床安全性、忍容性データ、前臨床試験で得られたＰＫ／ＰＤデータ並びに探索的ヒト有効用量範囲計画に基づき、本試験における化合物Ａ単剤の推奨される開始用量及びレジメンは、１００ｍｇ  ＱＤ経口である。用量漸増に関する暫定的な用量について以下の表を参照することができる。
【０３８１】
【表７２】
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【０３８２】
これまで、本試験において、患者は、１００ｍｇ  ＱＤ、２００ｍｇ  ＱＤ、３００ｍｇ  ＱＤ、４００ｍｇ  ＱＤ、８００ｍｇ  ＱＤ及び２００ｍｇ  ＢＩＤの用量レベルで治療されている。
【０３８３】
用量拡大パートでは、化合物Ａ単剤アームの患者は、用量漸増データに基づいて選択される推奨用量及びレジメンの化合物Ａによって治療する。この用量は、本試験に含まれる全ての適用で成人患者において安全で忍容されるものと予想される。単剤アームは、３つの異なる群：ＫＲＡＳ及び／又はＢＲＡＦ変異ＮＳＣＬＣ、ＫＲＡＳ及び／又はＢＲＡＦ変異卵巣癌、並びにＢＲＡＦｉ／ＭＥＫｉ併用療法の失敗後の再発性／難治性メラノーマ及びＮＲＡＳ変異メラノーマ患者など、ＭＡＰＫ経路変化を内包する他の固形腫瘍（進行性であり得る）を有する患者からなる。
【０３８４】
化合物Ａ単剤：
・群１：確定されたＫＲＡＳ及び／又はＢＲＡＦ変異ＮＳＣＬＣ患者
・群２：確定されたＫＲＡＳ及び／又はＢＲＡＦ変異卵巣癌患者
・群３：群１及び群２に定義される以外の報告されたＭＡＰＫ経路変化を内包する進行性固形腫瘍患者。これらには、限定はされないが、
・ＢＲＡＦｉ／ＭＥＫｉ併用療法の失敗後の再発性／難治性ＢＲＡＦ  Ｖ６００変異メラノーマ患者、
・ＮＲＡＳ変異メラノーマ患者
が含まれる。
【０３８５】
このファーストインヒューマン試験の臨床レジメンは、化合物Ａについての連続１日１回投与スケジュールである。前臨床試験において、ＱＤレジメンは、効果的で忍容されることが実証されている。Ｃａｌｕ６異種移植片では、ＱＤレジメン又は分割ＢＩＤレジメンのいずれでも同様のレベルの有効性が達成され、有効性が全体的な曝露に関係することが示唆された。予測ヒトＰＫ及び予測半減期（約９時間）も、ＱＤ用量投与で効果的な曝露を達成し得ることを示唆している。
【０３８６】
これは、臨床試験から得られた予備的結果によって更に確認された。１２００ｍｇ  ＱＤの化合物Ａで治療した非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）の対象は、固形癌の治療効果判定のための新ガイドライン（ＲＥＣＩＳＴ）基準による−３５％の部分奏効を得ることを示した。
【０３８７】
化合物ＡのＢＩＤ投与（例えば、２００ｍｇの１日２回又は４００ｍｇの１日２回）も想定される。
【０３８８】
実施例６：ＭＡＰＫ経路変化を内包する固形腫瘍及び進行性固形腫瘍を有する成人患者における化合物Ａ並びにＫＲＡＳ突然変異を内包するＮＳＣＬＣ患者及びＮＲＡＳ変異メラノーマに罹患している患者における例示的抗体分子（抗体Ｂ）と併用した化合物Ａの第Ｉ相用量設定試験
本試験で試験する例示的抗体分子（ＢＡＰ０４９−クローンＥ、抗体Ｂとも称される）は、プログラム細胞死リガンド１（ＰＤ−Ｌ１）及びプログラム細胞死リガンド２（ＰＤ−Ｌ２）によるＰＤ−１への結合を遮断するヒト化抗プログラム死１（ＰＤ−１）ＩｇＧ４モノクローナル抗体（ｍＡｂ）である。これは、ＰＤ−１に高親和性で結合してその生物学的活性を阻害する。この抗体分子のアミノ酸配列は、本明細書において表１に記載される（ＶＨ：配列番号３８；ＶＬ：配列番号７０）。前臨床毒性試験の結果は、これが好ましい安全性プロファイルを有することを示している。その薬力学的活性もインビボで実証されている。
【０３８９】
抗体Ｂとの併用での化合物Ａ
化合物Ａ単剤について推奨用量及びレジメンが同定されたところで、抗体Ｂとの併用での化合物Ａの用量漸増を開始することになる。化合物Ａの開始用量は、推奨単剤用量よりも低い予め試験済みの用量となる。この用量の選択は、不活性な用量を受ける可能性のある患者の数を制限しつつ潜在的に毒性の薬物レベルへの曝露を最小限に抑えるため、化合物Ａ単剤の現在利用可能な有効性、安全性、ＰＫ及び／又はＰＤデータによって裏付けられることになる。
【０３９０】
化合物Ａのレジメンは、単剤化合物Ａについて選択されたものと同じになる。単剤拡大パート中に化合物Ａ単剤の両方のレジメンが探索される場合、安全性及び曝露を含め、利用可能な全てのデータに基づいて好ましい１つのレジメンが併用に選択されることになる。後の段階において、新たに出るデータに基づいて併用アームにおける化合物Ａ用量レジメンの切り換えが決定され得る。
【０３９１】
抗体Ｂは、単剤ＲＤＥ（拡大時の推奨用量）である４００ｍｇ  Ｑ４Ｗ  ｉ．ｖ．（静脈内）の一定用量で投与されることになる。抗体Ｂはまた、併用治療レジメンでは３００ｍｇ  ｉ．ｖ．Ｑ３Ｗで投与され得、併用治療レジメンではそれがより好都合であり得る。
【０３９２】
用量拡大パートでは、併用アームの患者は、用量漸増データに基づき、薬物併用についての推奨用量及びレジメンで治療されることになる。
【０３９３】
本試験の併用アームには、ＫＲＡＳ変異ＮＳＣＬＣ及びＮＲＡＳ変異メラノーマ患者が登録されることになる。ＫＲＡＳ変異ＮＳＣＬＣ患者の治療群では、先行するＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害薬療法を受けたことのある患者及びＰＤ−１標的化又はＰＤ−Ｌ１標的化療法未処置の患者が併用療法の利益を得るであろうこと、及びＮＲＡＳ変異メラノーマの治療群では、以前に例えばイピリムマブを含めた免疫療法又は先行するＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１阻害薬で治療された患者、及び免疫療法未処置の患者が併用療法の利益を得るであろうことも想定される。
【０３９４】
参照による援用
図及び表を含む他の実施形態及び実施例は、「Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ  ｔｏ  ＰＤ−１  ａｎｄ  Ｕｓｅｓ  Ｔｈｅｒｅｏｆ」という名称の国際公開第２０１５／１１２９００号パンフレット及び米国特許出願公開第２０１５／０２１０７６９号明細書に開示され、これらは、全体として参照により援用される。
【０３９５】
本明細書において言及される全ての刊行物、特許及び受託番号は、各個別の刊行物又は特許が参照によって援用されることが具体的且つ個別的に指示されたものとして本明細書によって全体として参照により援用される。
【０３９６】
均等物
本発明の具体的な実施形態を考察したが、上記の本明細書は、例示であり、限定ではない。当業者には、本明細書及び以下の特許請求の範囲を検討すれば、本発明の多くの変形形態が明らかになるであろう。本発明の完全な範囲は、特許請求の範囲を均等物の完全な範囲と共に、及び本明細書をかかる変形形態と共に参照することにより決定されなければならない。
【図１】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図４】
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【図５】
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【図６Ａ】
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【図６Ｂ】
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【図７】
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【図８Ａ】
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【図８Ｂ】
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【図９Ａ】
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【図９Ｂ】
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【図１０Ａ】
2019517549.tif 000092
【図１０Ｂ】
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【図１１】
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【図１２】
2019517549.tif 000095
【図１３】
2019517549.tif 000096
【図１４】
2019517549.tif 000097
【図１５Ａ】
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【図１５Ｂ】
2019517549.tif 000099
【図１５Ｃ】
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【図１６】
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【配列表】
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【国際調査報告】
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