(57)【要約】本発明は、ニンジン（Panax spp.（パナックスの種））の新鮮な全体の植物、植物の特定の部分（例は、根茎、根、葉、茎、花、実）またはこれらの植物部分の任意の組合せに由来する生物活性組成物（例えば、生物活性セラム・フラクションおよび生物活性抽出物が含まれる）に関する。生物活性セラム・フラクションおよび生物活性抽出物は、プレゴンフリーか、または実質フリーであり、および/またはタンパク質フリーか、または実質フリーである。本発明はまた、生物活性セラム・フラクションおよび/または生物活性抽出物を含む生産物を提供する。本発明はさらに、生物活性セラム・フラクションおよび/または生物活性抽出物を作成および使用する方法を提供する。さらに、生物活性セラム・フラクションおよび生物活性抽出物は、抗炎症性および/または抗刺激性および/または抗加齢活性を有する。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ニンジン（Panax spp.（パナックスの種））由来の生物活性フラクションまたは生物活性抽出物が含まれる生物活性組成物であって、ここに開示および/または企図される、生物活性組成物。
【請求項２】
ニンジン（Panax spp.）由来の生物活性フラクションまたは生物活性抽出物が含まれる生物活性組成物を調製する方法であって、ここに開示および/または企図されるステップを含む、方法。
【請求項３】
ニンジン（Panax spp.）由来のセラム・フラクションが含まれる生物活性フラクションであって、前記生物活性フラクションは、ここに開示および/または企図される、生物活性フラクション。
【請求項４】
ニンジン（Panax spp.）由来のセラム・フラクションが含まれる生物活性フラクションを分離する方法であって、ここに開示および/または企図されるステップを含む、方法。
【請求項５】
ニンジン（Panax spp.）由来の生物活性抽出物であって、ここに開示および/または企図される、生物活性抽出物。
【請求項６】
ニンジン（Panax spp.）由来の生物活性抽出物を分離する方法であって、ここに開示および/または企図されるステップを含む、方法。
【請求項７】
ニンジン（Panax spp.）由来の生物活性組成物を使用する方法であって、ここに開示および/または企図されるステップを含む、方法。
【請求項８】
新鮮なニンジン（Panax spp.）植物に由来する生物活性セラム・フラクション。
【請求項９】
生物活性セラム・フラクションは全体のニンジン植物、ニンジン植物の一部分、またはニンジン植物の異なる部分の組合せに由来する、請求項8に従う生物活性セラム・フラクション。
【請求項１０】
ニンジン植物の一部分は、根茎、根、葉、茎、花、および実からなる群より選ばれる、請求項9に従う生物活性セラム・フラクション。
【請求項１１】
前記セラム・フラクションはプレゴンフリーか、または実質フリーである、請求項8に従う生物活性セラム・フラクション。
【請求項１２】
前記セラム・フラクションは100ppm未満の合計プレゴン含量しか含まない、請求項11に従う生物活性セラム・フラクション。
【請求項１３】
前記セラム・フラクションは25ppm未満の合計プレゴン含量しか含まない、請求項11に従う生物活性セラム・フラクション。
【請求項１４】
前記セラム・フラクションはタンパク質フリーか、または実質フリーである、請求項8に従う生物活性セラム・フラクション。
【請求項１５】
前記セラム・フラクションは0.675重量％未満の合計タンパク質含量しか含まない、請求項14に従う生物活性セラム・フラクション。
【請求項１６】
前記セラム・フラクションは0.500重量％未満の合計タンパク質含量しか含まない、請求項14に従う生物活性セラム・フラクション。
【請求項１７】
前記セラム・フラクションは、プレゴンフリーか、または実質フリーであり、およびタンパク質フリーか、または実質フリーである、請求項8に従う生物活性セラム・フラクション。
【請求項１８】
前記セラム・フラクションには、抗酸化活性、抗炎症活性、抗加齢活性、および抗刺激活性からなる群より選ばれる生物活性特性が含まれる、請求項8に従う生物活性セラム・フラクション。
【請求項１９】
請求項8-18のいずれか一項に従う生物活性セラム・フラクションを含む生産物。
【請求項２０】
前記生産物には、クリーム、ドレッシング、ゲル、ローション、軟膏、液体、スプレーアプリケータ、およびそれらの組合せからなる群より選ばれるリーブ-オン生産物が含まれる、請求項19に従う生産物。
【請求項２１】
前記生産物には、ハンド・ディッシュウォッシング洗剤、液状ハンドソープ、バーソープ、ボディーウォッシュ、シャンプー、多目的クレンザー、およびそれらの組合せからなる群より選ばれるウォッシュ-オフ生産物が含まれる、請求項19に従う生産物。
【請求項２２】
前記生産物には、機能性食物または機能性飲物が含まれる、請求項19に従う生産物。
【請求項２３】
前記生産物には、ニュートラスーティカルが含まれる、請求項19に従う生産物。
【請求項２４】
酸化防止剤、キレート剤、保存剤、安定剤、およびそれらの混合物からなる群より選ばれる添加剤がさらに含まれる、請求項19に従う生産物。
【請求項２５】
前記添加剤は、メタ重亜硫酸ナトリウム、ソルビン酸カリウム、安息香酸ナトリウム、メチルパラベンナトリウム、EDTA四ナトリウム、EDTA二ナトリウム、グリセリン、プロピレングリコール、ジ-プロピレングリコール、ブチレングリコール、ペンチレングリコール、ヘキシレングリコール、カプリリルグリコール、およびそれらの混合物からなる群より選ばれる安定剤である、請求項24に従う生産物。
【請求項２６】
請求項8-18のいずれか一項に従う生物活性セラム・フラクションを含む生産物を使用する方法であって、次の：
抗炎症性、抗刺激性、および/または抗加齢活性を対象に提供するために有効な条件下で生産物を対象に施与すること
を含む、方法。
【請求項２７】
新鮮なニンジン（Panax spp.）植物に由来する生物活性セラム・フラクションを作成する方法であって、次のステップ：
a．新鮮なニンジン（Panax spp.）植物を、植物の細胞内分散物を産生するために加工すること；
b．細胞内分散物を、生物活性セラム・フラクションおよび不安定化後沈殿物を産生するために不安定化処理プロトコルに供すること；および
c．前記生物活性セラム・フラクションを分離すること
を含む、方法。
【請求項２８】
前記不安定化処理プロトコルには、細胞内分散物が、細胞内分散物の安定性を低下させるために有効な電磁波により処理されることが含まれる、請求項27に従う方法。
【請求項２９】
前記電磁波は約300MHzおよび50GHzの間の周波数で適用される、請求項28に従う方法。
【請求項３０】
前記電磁波は、処理の間の低周波誘電率の実成分の細胞内分散物の値
（外字）
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が、前記不安定化処理に先立つその値に比べて約10および40の間だけ減少されるようにパラメータの下で適用される、請求項28に従う方法。
【請求項３１】
分離された生物活性セラム・フラクションに添加物を組み合わせることをさらに含み、前記添加剤は、抗酸化剤、キレート剤、保存剤、安定剤、およびそれらの混合物からなる群より選ばれる、請求項27に従う方法。
【請求項３２】
前記添加剤は、メタ重亜硫酸ナトリウム、ソルビン酸カリウム、安息香酸ナトリウム、メチルパラベンナトリウム、EDTA四ナトリウム、EDTA二ナトリウム、グリセリン、プロピレングリコール、ジ-プロピレングリコール、ブチレングリコール、ペンチレングリコール、ヘキシレングリコール、カプリリルグリコール、およびそれらの混合物からなる群より選ばれる安定剤である、請求項31に従う方法。
【請求項３３】
前記新鮮なニンジン植物は、全体のニンジン植物、ニンジン植物の一部分、またはニンジン植物の複数の異なる部分からなる群より選ばれる形態において提供される、請求項27に従う方法。
【請求項３４】
前記ニンジン植物の一部分は、根茎、根、葉、茎、花、および実からなる群より選ばれる、請求項33に従う方法。
【請求項３５】
前記セラム・フラクションはプレゴンフリーか、または実質フリーである、請求項27に従う方法。
【請求項３６】
前記セラム・フラクションは100ppm未満の合計プレゴン含量しか含まない、請求項35に従う方法。
【請求項３７】
前記セラム・フラクションは25ppm未満の合計プレゴン含量しか含まない、請求項35に従う方法。
【請求項３８】
前記セラム・フラクションはタンパク質フリーか、または実質フリーである、請求項27に従う方法。
【請求項３９】
前記セラム・フラクションは0.675重量％未満の合計タンパク質含量しか含まない、請求項38に従う方法。
【請求項４０】
前記セラム・フラクションは0.500重量％未満の合計タンパク質含量しか含まない、請求項38に従う方法。
【請求項４１】
前記セラム・フラクションは、プレゴンフリーか、または実質フリーであり、およびタンパク質フリーか、または実質フリーである、請求項27に従う方法。
【請求項４２】
前記セラム・フラクションには、抗酸化活性、抗炎症活性、抗加齢活性、および抗刺激活性からなる群より選ばれる生物活性特性が含まれる、請求項27に従う方法。
【請求項４３】
請求項27-42のいずれか一項に従う方法により生産されるニンジン（Panax spp.）由来の生物活性セラム・フラクション。
【請求項４４】
請求項43に従う生物活性セラム・フラクションを含む生産物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ニンジン（ginseng、ジンセンとも言う）（Panax spp.（パナックスの種））の新鮮な植物全体、植物の特定の部分（例は、根茎、根、葉、茎、花、実）、またはこれらの植物部分の任意の組合せから導き出される生物活性組成物（例えば、生物活性セラム・フラクションおよび生物活性抽出物が含まれる）に関する。さらに、本発明の生物活性組成物（例は、ニンジン由来の生物活性セラム・フラクションおよび生物活性抽出物）は、抗炎症活性および/または抗刺激活性および/または抗加齢活性を有する。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００２】
本発明の背景
Panax spp.の規定には、次の：Panax quinquefolius（パナックス・クインクェフォリアス）L.またはPanax quinquefolium（パナックス・クインクェフォリウム）（American ginseng（アメリカン・ジンセン））；Panax ginseng（パナックス・ジンセン）C. A. Meyer（マイヤー）（Chinese ginseng（チャイニーズ・ジンセン（オタネニンジンとも言う））、Manchurian ginseng（マンジュ・ジンセン（満州ニンジンとも言う））、またはKorean ginseng（コリアン・ジンセン（朝鮮ニンジンとも言う）））；Panax japonicus（パナックス・ヤポニカス（トチバニンジンとも言う））C. A. Meyer（chikusetsu ninjin（チクセツニンジン）またはJapanese ginseng（ジャパニーズ・ジンセン））、およびPanax pseudoginseng Wall（パナックス・シュードジンセン・ウォール）（notoginseng（ノトジンセン）、San-ch’i ginseng（サンシチ・ジンセン）、およびHimalayan ginseng（ヒマラヤン・ジンセン））を含め、Araliaceae（アラリアセア）科の密接に関連する植物が包含される。Panax spp.の用語は、化粧品において、およびニュートラスーティカル（栄養補助食品とも言う）において使用されるこの属内のいくつかの密接に関連する種を示すために使用されることが多い。P. ginseng、P. quinquefolius、P. japonicus、およびP. pseudoginsengは、それらの独自の個々の名称、またはすべてがP. ginsengとしての下で、または一般名「ginseng（ジンセン、ニンジン）」の下で互換的に、化粧品において使用されていることに注目されるべきである。パーソナルケア産業での議論は、目下、次の点について起きている：化粧用途において使用されるPanax spp.植物の間に実際の差があるか、またはないかどうかである。
【０００３】
大抵、ニンジン（ジンセン、高麗ニンジンとも言う）またはニンジンの根は、P. ginseng、P. quinquefolius、P. japonicas、およびP. pseudoginseng植物の乾燥根に言及する。それらの植物は、野生または栽培された供給源由来であってもよい[Hsu(スウ) PC. Commercial production of American ginseng (Panax quinquefolius L.)（American ginseng（アメリカン・ジンセン）（Panax quinquefolius L.）の商業的生産）。Native Plants Journal（ネイティブ・プランツ・ジャーナル）。2002；3：（2）：106-108]。
【０００４】
根が自然の、または乾燥している場合、それは「White（ホワイト）」ニンジンと称される。根が抽出または粉砕前に蒸され、および乾燥されている場合、それは着色の変化のために「red（レッド）」ニンジンと称される[世界保健機関（WHO）。WHO Monographs on Selected Medicinal Plants（WHOモノグラフス・オン・セレクテッド・メディシナル・プランツ）-第１巻、1999、168頁 Geneva（ジュネーブ）：世界保健機関（WHO）]。
【０００５】
9回根を蒸し、および乾燥させる場合、着色がより一層濃くなり、およびその生産物は「Black（ブラック）ニンジン」と称される[Ministry of Health, Labor and Welfare. Ginseng - Japanese Pharmacopoeia English Edition（厚生労働省。ジンセン-日本薬局方英文版）、2007]および[Yun（ユン）BS、Lee（リー）MR、Oh（オー）CJ、Cho（チョー）JH、Wang（ワン）CY、Gu（グゥ）LJ、Mo（モー）EK、およびSung（ソン）CK。Characterization of black ginseng extract with acetyl- and butyrylcholinesterase inhibitory and antioxidant activities（アセチル-およびブチリルコリンエステラーゼ抑制活性および抗酸化活性を有するブラックジンセン抽出物の特徴付け）。Journal of Ginseng Research（ジャーナル・オブ・ジンセン・リサーチ）。2010；34：（4）：248-254]。
【０００６】
ニンジン（Panax spp.）と関連して使用される様々な抽出方法が文献に記載されており；および根は抽出目的のためにPanax spp.の最も広く使用される部分である。
【０００７】
ニンジンに関する科学的研究の歴史は、1854年にアメリカの科学者Garriques（ガーリキュー）がニンジンからサポニンを分離した時にさかのぼる。しかし、西洋へのニンジンの実際の導入は、第二次世界大戦後に起こった。いくつかのニンジンのサポニンの化学構造は、1960年代後半に特徴付けられ、およびニンジンに関する科学的研究がさらに加速された。サポニン成分は、トリテルペノイドダンマラン配糖体（グリコシドとも言う）であり、TLCプレート上でのそれらの移動度に応じて、ジンセノサイドRxと呼ばれ、極性がインデックス「a」から「h」にまで減少する[Jong Dae Park（ヨング・ダイ・パーク）、Dong Kwon Rhee（ドン・クォン・イー）＆You Hui Lee（ユー・ホイ・リー）。Biological activities and chemistry of saponins from Panax ginseng C. A.（Panax ginseng C. A. Meyerからのサポニンの生物学的活性および化学） Phytochemistry Reviews（フィトケミストリー・レビューズ）（2005）4：159-175]。
【０００８】
サポニン（またはジンセノサイド）、スイート-ビター物質は、「サポニングリコシド」として知られるグリコシドの形態において植物で通常存在する。サポニングリコシドは高分子であり、および「シュガー（糖）」（グリコン）および「ノンシュガー（非糖）」（アグリコン）から構成される。ニンジンのアグリコンはまたサポゲニンと称される[Hou（ホー）JP、The chemical constituents of ginseng plants（ニンジン植物の化学成分）、Comparative medicine East and West（コンパラティブ・メディシン・イースト・アンド・ウエスト）1977；5：（2）：123-145]。60よりも多くの異なるジンセノサイドは、様々なPanax spp.の葉、茎、ベリー（液果、しょう果類とも言う）、および根から分離された[Chang（チャン）YS、Seo（セオ）EK、Gyllenhaal（イュレンハーレ）C、Block（ブロック）KI（2003）、Panax ginseng: a role in cancer therapy?（パナックスジンセン：ガン療法における役割？）Integr Cancer Ther（インテグラティブ・キャンサー・セラピーズ）2：13-33]。
【０００９】
ニンジン植物の異なる部分は異なるジンセノサイドを含むので、植物の一の部分の施与は、他の部分の施与によって引き起こされるものとは異なる薬理学的作用をもたらすことができる[Attele（アッテル）AS、Wu（ウー）JA、Yuan（ユアン）CS（1999）Ginseng pharmacology: multiple constituents and multiple actions （ジンセン薬理学：マルチ構成要素およびマルチアクション）。Biochem Pharmacol（バイオケミストリー＆ファーマコロジー）58：1685-1693]。
【００１０】
ニンジンの根は2000年にもわたってアジアにおいて植物療法（植物薬とも言う）として用いられた。抗酸化作用、抗発ガン作用、抗炎症作用、抗高血圧作用および抗糖尿病作用を有すると言われている。ニンジンの有効性の主張の背後にある薬理学的に活性な化合物は通常、ジンセノサイドに起因し：それらの根底にある作用機序は、完全には解明されていないが、ステロイドホルモンのものと類似していると考えられる。各ニンジン種は独自のセットのジンセノサイドを有する。ジンセノサイドは、主にニンジン植物の根において濃縮される四環様ステロイド構造を有するステロイド性のサポニン（steroidal saponin）の多様な群である。アメリカン・ジンセンおよびコリアン・ジンセンはいずれも同様のジンセノサイドを有し、アメリカン・ジンセン（Panax quinquefolius）はRb1群のジンセノサイドにより一層富んでいると言われ、一方でコリアン・ジンセン（Panax ginseng）はRg1群のジンセノサイドがより一層豊富である。それらの属性が、植物の収穫時の根の齢、貯蔵条件、および貯蔵期間に依存することは注目すべきことである。
【００１１】
商業上入手可能なパナックスジンセンの根調製物（粉体および液体の両方）の分析は、これらがサポニン（Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re、Rf、およびRg1）の量において大きく変動することを示す[Harkey（ハーキー）MR、Henderson（ヘンダスン）GL、Gershwin（ガーシュウィン）ME、Stern（スターンJS、Hackman（ハックマン）RM.、Variability in commercial ginseng products: An analysis of 25 preparations（商業的なニンジン生産物の変動性：25の調製物の分析）。Am J Clin Nutr.（ジ・アメリカン・ジャーナル・オブ・クリニカル・ニュートリション）2001；73：1101-1106]。パナックスジンセン根抽出物は、0.2-0.3％のジンセノサイド含量を有すると報告される[Personal Care Products Council（パーソナル・ケア・プロダクツ・カウンシル）。7-6-2011。Supplier Information on Panax Ginseng Root Extract（パナックス・ジンセン・ルート・エクストラクトでのサプライヤー情報）。Unpublished data submitted by the Personal Care Products Council（パーソナル・ケア・プロダクツ・カウンシルにより提出された未発表データ）]。
【００１２】
新鮮な根は、パナキサトリオール（panaxatriol）（Re+Rf+Rg1+Rg2+Rh1；2.8mg/gDW）およびパナキサジオール（Rb1+Rb2+Rb3+Rc+Rd+Rg3；16mg/gDW）サポニンの、乾燥した根および粉末根と比較してより一層高い量を産出する[Kim（キム）S-J、Murthy（マーティ）HN、Hahn（アーン）E-J、Lee HL、およびPaek（ペク）K-Y。Parameters affecting the extraction of ginsenosides from the adventitious roots of ginseng (Panax ginseng C.A. Meyer)（ニンジン（Panax ginseng C.A. Meyer）の不定根からのジンセノサイドの抽出に影響を及ぼすパラメータ）。Separation and Purification Technology（セパレーション・アンド・ピュリフィケーション・テクノロジー）、2007；56：401-406]。一の参考文献は、アルコール水溶液（60％）でパーコレーション、および次いで減圧下での濃縮から乾燥またはプロピレングリコールでのパーコレーション、次いで減圧下での濃縮によって行われた根の抽出を記載する[Committee of Experts on Cosmetic Products（コミッティー・オブ・エクスパーツ・オン・コスメティック・プロダクツ）、Patri（パトリ）FおよびSilano（シラノ）V.、Plants in cosmetics（プランツ・イン・コスメティクス）。第1版、Germany（ドイツ国）：Coucil of Europe Publishing（カウンシル・オブ・ヨーロッパ・パブリッシング）、2002]。根抽出物のための溶媒には、プロピレングリコール、プロピレングリコール+水、プロピレングリコールジカプリラート（propylene glycol dicaprylate）/ジカプラート（dicaprate）、ブチレングリコール、エタノール、エタノール+水、グリセリン+水、カプリル酸（caprylic）/カプリン酸トリグリセリド（capric triglyceride）、またはHelianthus annuus（ヘリアンサス・アナス、ヒマワリとも言う）（サンフラワー）種油が含まれる[Personal Care Products Council。7-6-2011。Supplier Information on Panax Ginseng Root Extract（パナックス・ジンセン・ルート・エクストラクトでのサプライヤー情報）。Unpublished data submitted by the Personal Care Products Council（パーソナル・ケア・プロダクツ・カウンシルにより提出された未発表データ）]。
【００１３】
一のサプライヤー（供給者とも言う）は、エタノールおよびブチレングリコール（70％水性）においてパナックスジンセンの根を6週間にわたって「エージング（熟成とも言う）」させた後、ろ過し、およびエタノールを蒸発させることを報告した。この手順により、合計で4.61±0.98mg/gの乾燥重量のジンセノサイド（2.75±0.7トリオール、1.86±0.3ジオール、0.73±0.11mg/gジオール/トリオール）が得られる。一の製造者は、抽出プロセスで全体の乾燥したレッドニンジンを粉砕し、および粉砕したニンジンの根をエタノール（70％）の抽出溶媒中に20-25℃で12時間置くことを報告した。溶媒を、次いで、ろ過し、および蒸発させてエタノールを<1％まで除去する。生成物を、次いで、遠心分離し、乾燥させ、および滅菌する[Radiant（レーディアント）。Planoxia（プラノキシア）-RG（Panax Ginseng Root Extract）。Unpublished data submitted by the Personal Care Products Council（パーソナル・ケア・プロダクツ・カウンシルにより提出された未発表データ）]。サポニングリコシドは、温水またはアルコールによりニンジンの根から抽出可能であることが知られる[Hou JP.、The chemical constituents of ginseng plants（ニンジン植物の化学成分）、Comparative medicine East and West。1977; 5：（2）：123-145]。サポニンは、室温、過熱、またはマイクロ波条件下で、メタノール（30％-100％）を用いて新鮮な未処理P. quinquefoliumの根から抽出することができる。これらのプロセスの各々は、抽出物においてサポニンの異なる比を与える（すなわち、Re、Fb1、mRb1）[Dai（ダイ）JおよびOrsat（オルザット）V.、Extraction of ginsenosides from American ginseng (Panax quinquefolium L.) root（アメリカン・ジンセン（Panax quinquefolium L.）の根からのジンセノサイドの抽出）。International Journal of Food Engineering（インターナショナル・ジャーナル・オブ・フード・エンジニアリング）。2010；6：（3）：アーティクル3]。
【００１４】
収量および収量のタイプでの変動はまた、サンプルサイズ、抽出時間、サンプル対溶媒比、および溶媒濃度に依存する。温度は、抽出動力学、溶媒粘度、抽出効率、および超高圧抽出における全体的な回収率に影響する。200MPaで70％のエタノール水溶液を使用すると、60℃はサポニン収量に最適であった。他の温度は、サポニン化合物の収量を低下させた[Chen（チェン）R、Meng（メン）F、Zhang（チャン）S、およびLiu（リュー）Z.、Effects of ultrahigh pressure extraction conditions on yields and antioxidant activity of ginsenoside from ginseng（ニンジンからのジンセノサイドの収量および抗酸化活性に対する超高圧抽出条件の影響）。Separation and Purification Technology。2009；66：340-346]。
【００１５】
いくつかの重要なサポニン（例えば、ジンセノサイドRg1、ジンセノサイドRg3、およびジンセノサイドRh2）の化学構造は、ニンジン（Panax spp.）に見出される有益な生物学的に活性な成分であり、それらを図1に示す。
【００１６】
有益な構成要素、例えば、ニンジン（Panax spp.）に見られるジンセノサイドに加えて、プレゴンおよびタンパク質を含め、懸念の望ましくない一定の成分がある。
【００１７】
プレゴンは、既知の、および十分に解説されている毒性を有するモノテルペンケトンであり；その2つのエナンチオマー形態は自然に発生し、R-（+）-エナンチオマーは一定の精油において最も豊富である。プレゴンはP. quinquefoliusの構成成分として報告された。食物において、プレゴンのレベル（濃度とも言う）は25ppmに制限され、およびアルコール飲物では、100ppmにまで制限される[Corrado（コラード）L. Galli（ガルリ）、Giovanni（ジョヴァンニ）Galli、Elena Tragni（エレナ・トラグニ）、Donatella Caruso（ドーネイトゥラ・カルーソー）およびAlberto Fiecch（アルベルト・ファイチ）。Quantitative analysis of α, β-thujone, pulegone, safrole, coumarin and β-asarone in alcoholic beverages by selected-ion monitoring（選択イオンモニタリングによるアルコール飲物におけるα、β-ツジョン、プレゴン、サフロール、クマリンおよびβ-アサロンの定量分析）。Journal of Applied Toxicology（ジャーナル・オブ・アプライド・トキシコロジー）。第4巻、第5号、273-276頁、1984年10月]。
【００１８】
ペパーミントオイルの早期安全性評価（earlier safety assessment）において、プレゴンの既知の毒性のために、原料においてプレゴンのレベルが≦1％に制限されたときにだけ、原料の安全性が保証された[Andersen（アンデルセン）FA. Final report of the safety assessment of metha piperita (peppermint) oil, mentha piperita (peppermint) leaf extract, mentha piperita (peppermint) leaf, and mentha piperita (peppermint) water（メサピペリタ（ペパーミント）オイル、メンタピペリタ（ペパーミント）リーフエキス、メンタピペリタ（ペパーミント）リーフ、およびメンタピペリタ（ペパーミント）ウォーターの安全性評価の最終報告書）。International Journal of Toxicology（インターナショナル・ジャーナル・オブ・トキシコロジー）。2001；20：（Suppl.（サプルメント）3）：61-73]。
【００１９】
局所適用のための生物活性原料においてそれらを含むタンパク質は、感受性の個体においてタンパク質関連接触性皮膚炎を引き起こすことがある。原因となるタンパク質性物質との接触の直後に、そのような個体は、症状、例えば、しばしば、掻痒、バーニング（炎症）、および/または刺痛を伴う皮膚上の急性蕁（じん）麻疹または小水疱性皮疹などのようなものを経験することがある[V. Janssens（ヤンセンス）ら、「Protein contact dermatitis: myth or reality?（タンパク質接触性皮膚炎：神話か現実か？）」、British Journal of Dermatology（ザ・ブリティッシュ・ジャーナル・オブ・ダーマトロジー）1995；132：1-6]。
【００２０】
上記の参考文献は、それらが一定の濃度で植物由来生物活性組成物（原料）に存在する場合、両方のタイプの化合物、プレゴンおよびタンパク質が、望ましくない懸念の化合物とみなされ得ることを指し示す。
【００２１】
全体的に、ニンジン（Panax spp.）は、特に、懸念される一定の望ましくない成分（例えば、プレゴンおよびタンパク質）が完全に除去されるか、またはそれらの濃度がこれらの組成物において著しく低減される場合、生物活性組成物（原料）の極めて強力、および価値のある供給源である。
【００２２】
したがって、できるだけ少ないプレゴンおよび少ないタンパク質しか含まないGinseng（ジンセン）（Panax spp.）から生物活性組成物を得ることが非常に望ましい。
ニンジン（Panax spp.）から得られる生物活性組成物においてプレゴンおよびタンパク質の濃度を同時に除去または著しく低下させ-、その一方で、高濃度の望ましい化合物およびこれらの組成物の高い生物学的活性を維持することで、重要な課題が存在する。
【００２３】
本発明は、先行技術におけるこれらの、および他の欠点に対処することに向けられる。
【課題を解決するための手段】
【００２４】
本発明の概略
本発明は、ニンジン（Panax spp.（パナックスの種））の新鮮な全体の植物、植物の特定の部分（根茎、根、葉、茎、花、実）、またはこれらの植物部分の任意の組合せから導き出される生物活性組成物（例えば、生物活性セラム・フラクションおよび生物活性抽出物を含む）に関する。さらに、本発明の生物活性組成物（例えば、ニンジンから導き出される生物活性セラム・フラクションおよび生物活性抽出物）は、抗炎症および/または抗刺激および/または抗加齢活性を有する。
【００２５】
より一層詳細には、一定の実施形態において、本発明の生物活性組成物（原料）は、プレゴンおよびタンパク質がフリーか、または実質フリーである。
【００２６】
さらに、生物活性組成物（原料）は、抗炎症および/または抗加齢および/または抗刺激活性を有する。
【００２７】
本発明はまた、ニンジン（Panax spp.）の新鮮な全体の植物、その植物の特定の部分（例えば、根茎、根、葉、茎、花、実）、またはこれらの植物部分の任意の組合せからの、プレゴンおよびタンパク質がフリーか、または実質フリーな生物活性組成物（原料）を分離するための方法にも関する。
【００２８】
本発明はまた、制限されないが、パーソナルケア用途を含め、ここに記載の生物活性組成物の様々な使用にも関する。
【図面の簡単な説明】
【００２９】
本発明の態様を例示する目的で、本発明の一定の実施形態が図面に示される。本発明は、添付の図面と併せて以下の説明からより一層良好に理解されると考えられる。参照される図面は本発明の範囲を制限するものとして解釈すべきではない。
【００３０】
【図１】ニンジン（Panax spp.）に見出せるいくつかの重要なサポニンの化学構造を例示する。図1に示すサポニンには、ジンセノサイドRg1、ジンセノサイドRg3、およびジンセノサイドRh2が含まれる。
【図２】全体のニンジン（Panax spp.）植物から導き出される生物活性フラクションを調製するための本発明の方法の一実施形態の概略図である。
【図３】本発明の一実施形態による、ジンセン（Panax quinquefolius）サンプルプロセスのFT-IR透過スペクトルを示すグラフである。図3に示すサンプルを生産するために使用されるプロセスの実施形態は例1に記載される。
【発明を実施するための形態】
【００３１】
本発明の詳細な記載
生物活性組成物（例えば、生物活性セラム・フラクションおよび生物活性抽出物を含む）が、全体の植物、植物の特定の部分（例えば、根茎、根、葉、茎、花、実）、またはこれらの植物部分の任意の組合せに由来し、抗炎症性および/または抗刺激性および/または抗加齢活性を有することが発見された。
【００３２】
一定の実施形態において、生物活性セラム・フラクションおよび生物活性抽出物は、プレゴンフリーか、または実質フリーで、および/またはタンパク質フリーか、または実質フリーである。
【００３３】
本発明はまた、生物活性セラム・フラクションおよび/または生物活性抽出物を含む生産物および組成物を提供する。
【００３４】
本発明はさらに、生物活性セラム・フラクションおよび/または生物活性抽出物を作成する方法を提供する。
【００３５】
本発明の生産物および組成物は、本質的な成分（例えば、ニンジン（Panax spp.）由来の生物活性セラム・フラクションおよび生物活性抽出物）、ならびにここに記載される随意な原料を、含み、それらから本質的になり、またはそれらからなることができる。必須成分には、制限されないが、ニンジン（Panax spp.）の新鮮な全体の植物、植物の特定の部分（根茎、根、葉、茎、花、実）、またはこれらの植物部分の任意の組合せから導き出される生物活性セラム・フラクションおよび生物活性抽出物を含むことができる。ここで使用されるように、「から本質的になる」によって、本組成物または成分は、追加の原料がそのクレームされた組成物または方法の基本的および新規な特徴を実質に関して変えない場合にだけであるが、組成物または成分がその追加の原料を含み得ることが意味される。
定義
【００３６】
「フレッシュ・ジンセン（Fresh Ginseng、新鮮ジンセン）」は、収穫されていない植物と比較して生存能力を有意に保持することができるようにして収穫され、および輸送される、Panax属（Panax spp.、パナックスの種、パナックス菌種などとも言う）の植物に言及する。ここでの生存能力は、光化学系IIおよびIにおいて電子伝達系の光合成機能、およびATP合成として規定される。生存率は、葉のクロロフィル蛍光を測定することにより決定される量子収率によって示される。さらなる処理は、全体の植物、植物の一部分、例えば、根茎、根、葉、茎、花、実（fruit、産物とも言う）（ベリー）または植物の部分の任意の組合せに対して実行することができる。
【００３７】
「クリーニング（洗浄とも言う）」は、植物への損傷、または貴重な成分の除去を避ける方法で、さらなる処理に先立ち新鮮なニンジンからの破片の除去に言及する。例えば、流出水ウォッシュ（runoff water wash）が植物色素を顕著に含有しない条件下で、飲料水（potable water）による低圧すすぎによって実行することができる。過剰の洗浄水は、次いで洗浄された植物から除去される。
【００３８】
「マセレーション（maceration、解離、浸軟などとも言う）」は、新鮮なニンジンをより一層小さな粒子にし、その完全性を破壊し、および液状細胞内分散物（liquid intracellular dispersion）のその後の排出（expelling）を容易にすることに言及する。適切なマセレーションインプリメント（maceration implements、マセレーション道具とも言う）の例には、制限されないが、デバイス、例えば、クラッシャー（破砕機とも言う）、グラインダー（粉砕機とも言う）、またはミル（例えば、ナイフミル、ハンマーミル、等）などのようなものが含まれる。植物性の素材（plant material）の温度誘発性分解を防ぐために、マセレーションステップには、このステップ中に植物性の素材の温度において著しい上昇が起きないことを確実にする温度モニタリングおよびマセレーションパラメータの選定が含まれ得る。
【００３９】
「プレッシング（プレスすること）」は、機械的な力を加えることによって新鮮なニンジンから液状物質を分離することに言及する。これには、制限されないが、アンビエント（ambient、環境、周囲などとも言う）重力によるドレイニング（排出）、重い物体によるプレッシング（押圧）、ロータリーエクスペラー（ロータリー式排出機）からの遠心力、液圧プレスのピストンからの圧力、または適切なタイプのプレスのローラーまたはスクリューなどのような技術が含まれる。
【００４０】
「プレス-ケーキ（圧縮した塊とも言う）」は、加圧により液状細胞内分散物が除去された新鮮なニンジンの繊維に富む固体および/または半固形画分に言及する。
【００４１】
「イントラセルラー・ディスパージョン（細胞内分散物とも言う）」は、新鮮なニンジンをプレスすることによって排出される液状物質に言及する。得られる液体は、連続水性媒体において、分散した固体および/または半固形粒子および様々なサイズの水不混和性液体の可能性のある液滴（集合的に粒子と称される）を含む。粒子は、主に、植物細胞オルガネラ、オルガネラ（細胞小器官）フラグメント（断片）、および残留高繊維質（fiber-enriched）物質から構成される。水性媒体は主に、サイトゾル（細胞質ゾル）および液胞内容物から構成される。
【００４２】
「アジャストメント（調節とも言う）」は、細胞内分散物の水性媒体、または生存可能な植物細胞において見出される範囲内に残るヒドロニウムイオンの活性により、細胞内分散物のさらなる処理によって生成される水性画分において水酸化物およびヒドロニウムイオンの活性の変動（例えば、pH3およびpH8の間）に言及する。この変動は、例えば、電気膜プロセス（例えば、バイポーラ膜を有する電気透析チャンバを通過させること）によって、または酸またはアルカリの添加によって達成することができる。アジャストメントパラメータは、例えば、1H-NMRスピン-スピン緩和時間（τ2）、またはpH、または仕事関数（Work Function）値、または電解質-空気界面での表面電位などのような物理化学的パラメータでの特定の変化について十分になるように選定される。そのようなアジャストメントは、不安定化および/または分離ステップの後に容易になり；または適切な保存および安定化のための条件を作り出す。
【００４３】
「アジャストメント1」、「アジャストメント2」、「アジャストメント3」は、それらのそれぞれのパラメータにより遂行されるプロセスのそれぞれのステップに言及する。
【００４４】
「デスタビリゼーション（不安定化とも言う）」は、物理的特性（例えば、低周波誘電率の実成分（実数成分とも言う）である
（外字）
2019503381.tif 000003
などのようなもの）を一時的に修飾するために、調節された細胞内分散物を、電磁波を用いて処理することに言及する。予想外にも、特定の修飾は、アセンブリへの集塊（agglomeration）および/または凝集（aggregation）を引き起こすことによって細胞内分散物の安定性を低下させ、アセンブリは一定の望ましい特性を有する画分への次の分離を可能にし、および/または改善するために十分に大きく、および安定であることが見出された。
【００４５】
「セパレーション（分離とも言う）」は、粒子の密度および/またはサイズを活用することによって、固体および/または半固体粒子および非水性液滴を、水性液体から分離することに言及する。これには、制限されないが、例えば、緊張（straining、ひずみ）、ろ過（圧力勾配を利用したろ過を含む）、スキミング、アンビエント重力による沈降、デカンテーション、遠心分離、または上記のいくつかの組合せなどのような技術が含まれる。連続流の機械的分離が使用されたが、これはバッチ処理を排除するものではない。「セパレーション1」および「セパレーション2」は、それぞれのパラメータにより遂行されるプロセスのそれぞれのステップに言及する。
【００４６】
「スーパーネータント（上清、上澄みなどとも言う）」は粒子が分離された水性物質に言及する。「スーパーネータント1」および「スーパーネータント2」は、本プロセスのそれぞれの分離ステップから得られる上清に言及する。
【００４７】
「プレシピテート（沈殿物とも言う）」は水性物質が分離された粒子に言及する。「プレシピテート1」および「プレシピテート2」は、本プロセスのそれぞれの分離ステップから生じる沈殿物に言及する。
【００４８】
「プリザーバティブ（保存剤とも言う）およびスタビライザー（安定剤とも言う）」は、新鮮なニンジンの一画分に加えられるとき、それを、例えば、温度、大気（例えば、酸素）、光、および微生物などのような予想される環境のチャレンジ（攻撃とも言う）から保護する物質に言及する。特定の適切な物質には、制限されないが、保存剤、安定剤および/またはそれらの混合物が含まれる。このことは、特定の処理および包装技術を介して、保存剤および安定剤を伴わずにそのような保護を提供する可能性を排除するものではない。
【００４９】
「セラム・フラクション（しょう液（漿液）画分とも言う）」は、アジャストメント3を受け、および保存剤および安定剤と共に混合されて、輸送、貯蔵、および使用の予想される環境の攻撃に対して保護される最終原料を作り出すスーパーネータント2に言及する。
【００５０】
「アプリケーション（適用とも言う）」は、組成物に関して使用されるように、例えば、表皮などのような哺乳動物の皮膚表面上に本発明の組成物を適用または広げることを意味する。
【００５１】
用語「美容上許容可能」は、局所適用を含め、過度の毒性、不適合性、不安定性、刺激性、アレルギー性応答、およびその他同種類のものなどを伴わずに、妥当な利益/リスク比に見合った、哺乳動物組織（例えば、ヒトの皮膚）と接触させて使用するのに適する、生物活性原料、調剤物、美容上活性な薬剤、または不活性な原料に言及する。
【００５２】
「皮膚科学的に許容可能」は、記載された組成物または成分が、過度の毒性、不適合性、不安定性、アレルギー反応、およびその他同種類のものなどを伴わずにヒトケラチン組織との接触に使用するのに適していることを意味する。
【００５３】
「局所的」は、例えば、皮膚または毛などのような身体表面に適用されることが意図される組成物に言及する。
【００５４】
ここに使用されるように、用語「局所適用」は、大抵、例えば、手または例えば、ワイプなどのようなアプリケータの使用によって、本発明の生物活性原料またはこれらの生物活性原料を含有する調剤物を外皮上に直接置くか、または広げることに関連する技術に言及する。
【００５５】
ここに使用されるように、用語「機能性食物および飲物生産物において許容可能」は、過度の毒性、不適合性、不安定性、刺激、アレルギー応答、およびその他同種類のものなどを伴わずに内部使用に適し、妥当な利益/リスク比に見合った生物活性原料、調剤物または不活性原料に言及する。
【００５６】
本発明は、ニンジン（Panax spp.）から得られる生物活性原料においてプレゴンおよびタンパク質含量を除去または実質低減する商業的に実行可能なプロセスを提供する。
【００５７】
より一層詳細には、一定の実施形態において、本発明の生物活性組成物（原料）は、プレゴンおよびタンパク質フリー（を含まない）か、または実質フリーである（含まない）。
【００５８】
ここに使用されるように、「タンパク質が実質フリー（を実質含まない）」は、Hitachi（日立）L-8900アミノ酸アナライザーで行われる加水分解および非加水分解アミノ酸分析によって決定される0.675％未満の合計タンパク質含量、およびより一層好ましくは0.500％未満の合計タンパク質含量を意味する。
【００５９】
ここに使用するように、「プレゴンが実質フリー（を実質含まない）」は、100ppm未満のプレゴン、より一層好ましくは25ppm未満のプレゴンを意味する。プレゴン含量の決定において、当技術において通常の技量の者（当業者とも言う）は、Corrado L. Galli、Giovanni Galli、Elena Tragni、Donatella CarusoおよびAlberto Fiecch、Quantitative analysis of α, β-thujone, pulegone, safrole, coumarin and β-asarone in alcoholic beverages by selected-ion monitoring、Journal of Applied Toxicology、Volume 4、Issue 5、第273-276頁、October 1984に記載の方法を使用することができる。
【００６０】
「活性（Actives）」は、ケラチン組織および/またはケラチン組織の標的部分に適用されるとき、ケラチン組織に利益または改善をもたらす化合物を意味する。ここでの活性は、スキンケア活性、ヘアケア活性、またはそれらの組合せであることができる。
【００６１】
「適用する」または「適用」は、組成物に関して使用されるように、本発明の組成物をヒトの皮膚表面、例えば、表皮などのようなものに適用または広げることを意味する。
【００６２】
「デリバリー増強デバイス」は、皮膚に、および/または皮膚中に適用される活性原料（例えば、ニンジン・エクストラクト（ニンジン抽出物とも言う）/セラム・フラクション）の量を、デバイス（装置とも言う）を使用せずにデリバリーされる（送られるとも言う）活性原料の量と比較して増加させる任意の装置を意味する。
【００６３】
「有効量」は、ここに開示される利益を無関係にまたは組み合わせて含め、ケラチン組織に有意な有益性（positive benefit）、例えば、健康、外見、および/または感覚の利益などのようなものを大いに誘導するのに十分であるが、深刻な副作用を回避するのに十分低い（すなわち、熟練した職人（当業者とも言う）の健全な判断の範囲内で、リスク比に対して妥当な利益を提供する）化合物または組成物の量を意味する。「有効量」は、パーソナルケア組成物において局所適用されるとき、哺乳動物ケラチン組織の望ましい状態を調整するのに十分な本発明の生物活性組成物の量である。
【００６４】
「ヘアケア組成物」は、毛の状態を調整および/または改善するための組成物に言及する。ヘア-ケア組成物のいくつかの非制限的な例には、シャンプーおよびヘアコンディショナーが含まれる。
【００６５】
「ヘアコンディショニング剤」には、毛にコンディショニング効果を提供するカチオン性界面活性剤、高融点脂肪族化合物、シリコーン化合物、およびそれらの混合物が含まれる。ヘアコンディショニング剤を含むヘアケア組成物は、「ヘアコンディショナー」と称され得る。しかしながら、シャンプーはまた、ヘアコンディショニング剤を含み得ることが認められるべきである。
【００６６】
「ケラチン（角質とも言う）組織」は、哺乳類の最外保護カバーとして配置されるケラチン含有層に言及し、それには、制限されないが、皮膚、毛、爪、クチクラ、等が含まれる。
【００６７】
「スキン-ケア組成物」は、皮膚状態を調整および/または改善するための局所パーソナルケア組成物に言及する。スキン-ケア組成物のいくつかの非制限的例には、スキンクリーム、シェーブプレップ組成物（shave prep compositions）、モイスチャライザー（保湿剤とも言う）、ローション、およびボディーウォッシュが含まれる。
【００６８】
「シャンプー」は、洗浄性界面活性剤および皮膚科学的に許容可能な担体の組合せを含むヘアケア組成物に言及する。
【００６９】
「シェーブプレップ組成物」は、シェービングの前、その間、および/またはその後に適用される局所パーソナルケア組成物に言及する。「シェービング」は、顔または体毛をかみそり（剃刀）または同様のデバイスで除去することに言及する。シェーブプレップ組成物の例には、シェービングクリーム、ゲル、およびフォームが含まれる。
全体の新鮮なニンジン植物（Panax spp.）から生物活性フラクションおよびエクストラクトを分離するための方法
【００７０】
一態様では、本発明は、本発明に従って生物活性画分を生成するために、根茎、根、茎、葉、花、および実（ベリー）を含む全体の新鮮なニンジン植物から生物活性しょう液画分および生物活性抽出物を分離するための方法を提供する。
【００７１】
本発明はまた、ニンジン（Panax spp.）の培養および収穫のための均質条件を探索することによって、生物活性（画分）原料の再生性を改善するための初期植物材料特性の標準化を可能にする。
【００７２】
図2を参照し、それは、本発明に従って生物活性画分を生産するために、全体の新鮮なニンジン植物を、根茎、根、茎、葉、花、および実（ベリー）を含め、処理するための方法の一実施形態の概略図である。
【００７３】
本発明でのプロセスの一実施形態では、ニンジン植物は4つの生育期にわたって培養された。全体の成熟した培養ジンセン植物は、それらが熟したベリーを伴う増殖の相に達したとき土壌から掘り出された。収集した植物を直ちに水で洗浄した。採取した植物の生存率は、OS5pマルチモードクロロフィル蛍光光度計（Opti-Sciences Inc（オプティ-サイエンシーズ社）、Hudson（ハドソン）、NH（ニューハンプシャー州）、USA（米国））を利用して試験した。
【００７４】
本発明の一実施形態では、全体の生きたジンセン植物のマセレーションおよびプレッシング後、フラクションA（プレス-ケーキ）の収率は35％および55％（w/w）の間であり、および細胞内分散物は8％から12％の乾燥物まで含まれた。
【００７５】
下記の実施形態では、低周波比誘電率の実数成分の値
（外字）
2019503381.tif 000004
を、Agilent Technologies（アジレント・テクノロジーズ）からの機器およびソフトウェア：85070E誘電プローブキット、N4693-60001電子キャリブレーション（電子較正とも言う）モジュール、および85070ソフトウェアを伴うPNA-L Network Analyzer（PNA-Lネットワーク・アナライザー）N5230Cにより得られた広帯域誘電分光法データを用いて決定した。計算は、論文[Cole（コール）, K.S.、＆ Cole, R.H.（1941）。Dispersion and absorption in dielectrics I（誘電体の分散と吸収I）。Alternating current characteristics（交流特性）。The Journal of Chemical Physics（ザ・ジャーナル・オブ・ケミカル・フィジックス）、9（4）、341-351]に記載される方法に従って実行した。
【００７６】
本発明の一実施形態において、「アジャストメント1」は、細胞内分散物の、例えば、pH=3.0までの酸での滴定によって達成される。別の実施形態において、「アジャストメント1」は、細胞内分散物の1H-NMRスピン-スピン緩和時間（τ2）を、Acorn Area instrument（エイコン・エリア・インスツルメント）（Xigo Nanotools（ザイゴ・ナノツールズ）、Bethlehem（ベツレヘム）、PA（ペンシルベニア州）、USA）を用いて定められるように、約30ミリ秒（例えば、84msから56msまで）だけ短縮することを可能にするバイポーラ電気透析チャンバにおける細胞内分散物の処理によって達成される。
【００７７】
本発明の一実施形態では、細胞内分散物の
（外字）
2019503381.tif 000005
が約10F/m（80F/mから70F/mまで）だけ減少した。
【００７８】
本発明の別の実施形態では、細胞内分散物の
（外字）
2019503381.tif 000006
が約30F/m（80F/mから50F/mまで）だけ減少した。
【００７９】
これらの修飾は、細胞内分散物の安定性を低下させ、粒子（すなわち、オルガネラ、オルガネラフラグメント、残留繊維質物質材料）のアセンブリへの集塊（agglomeration）および/または凝集（aggregation）が引き起こされ、それらは「スーパーネータント1」および「フラクションB（プレシピテート1）」に対する機械的分離を可能にし、および/または改善するために十分に大きく、および安定であることが予想外に見出された。
【００８０】
本発明の一実施形態では、「スーパーネータント1」は約40NTU未満の濁度を有する。フラクションB（プレシピテート2）は約15.0％ないし25.0％の乾燥物質を含有する。
【００８１】
本発明の別の実施形態では、フラクションB（プレシピテート2）は、約4000meVおよび4200meVの間の仕事関数値（Work Function value）を有する。
【００８２】
連続的な流れの不安定化処理が使用されているが、これはバッチ処理を排除するものではない。処理持続期間およびその強度を、一定の望ましい特性を有する不安定化後上清および沈殿物を生成するために適用した。
【００８３】
本発明の一実施形態において、「アジャストメント2」は、例えば、pH=8.0へのアルカリによる滴定によって「スーパーネータント1」におけるpHレベルの増加により達成される。別の実施形態では、「アジャストメント2」は、スーパーネータント1の1H-NMRスピン-スピン緩和時間（τ2）を、例えば、約475ミリ秒（95msから570msまで）増加させることを可能にするバイポーラ電気透析チャンバにおける「スーパーネータント1」の処理によって達成される。
【００８４】
本発明の別の実施形態では、「アジャストメント2」は、例えば、約125mV（250mVから375mVまで）だけ電解質-空気の相間におけるその表面電位を上昇させることができるバイポーラ電気透析チャンバにおける「スーパーネータント1」の処理によって達成される。
【００８５】
ここに、および図2に例示されるプロセスにおいて使用されるように、用語「セパレーション2」は、調整されたスーパーネータント1を「スーパーネータント2」および「フラクションC（プレシピテート2）」に機械的に分離することに言及する。
【００８６】
本発明の一実施形態において、「フラクションC（プレシピテート2）」は約10.0％ないし20.0％の乾燥物質を含有する。本発明の別の実施形態において、「フラクションC（プレシピテート2）」は、約4000meVおよび4200meVの間の仕事関数値を有する。
【００８７】
ここに、および図2に例示されるプロセスにおいて使用されるように、「アジャストメント3」は、例えば、pH約3.5に酸で滴定することにより「スーパーネータント2」においてpHレベルが低下することによって達成される。
【００８８】
別の実施形態では、「アジャストメント3」は、「スーパーネータント2」の1H-NMRスピン-スピン緩和時間（τ2）を、例えば、約190ミリ秒（540msから350msまで）減少させるバイポーラ電気透析チャンバにおいて「スーパーネータント2」の処理によって達成される。
【００８９】
本発明の別の実施形態では、「アジャストメント3」は、例えば、約220mV（700mVから480mVまで）だけの電解質-空気の相間におけるその表面電位を低下させることができるバイポーラ電気透析チャンバにおける「スーパーネータント2」の処理によって達成される。
【００９０】
ここに、および図2に例示されるプロセスにおいて使用されるように、「調節スーパーネータント2」という用語は、「アジャストメント3」の後に得られ、および「プリザーバティブおよびスタビライザー」と混合された物質に言及する。
【００９１】
ここに、および図2に例示されるプロセスにおいて使用されるように、用語「フラクションD（セラム・フラクション）」は、予想される環境の攻撃、例えば、温度、雰囲気（例えば、酸素）、光、および微生物などのようなものに対して原料の組成物を保護するために、適切な保存剤および/または安定剤を加えられたしょう液に言及する。しょう液は、少なくとも一の保存剤、少なくとも一の酸化防止剤および少なくとも一の安定剤と混合されて、完成された原料またはそれらの組合せを生じる。特定の好適な安定剤には、制限はないが、保存剤、安定剤および/またはそれらの混合物が含まれ得る。本発明において使用するのに適した保存剤、抗酸化剤および安定剤には、制限されないが、EDTA四ナトリウム、EDTA二ナトリウム、ソルビン酸カリウム、安息香酸ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、メチルパラベンナトリウム、グリセリン、プロピレングリコール、ジプロピレングリコール、ブチレングリコール、ペンチレングリコール、ヘキシレングリコール、およびカプリリルグリコールが含まれる。
【００９２】
このことは、特定の加工および包装技術を使用することによって保存剤および安定剤を含まない原料が作り出される可能性を排除するものではない。
【００９３】
本発明の一実施形態において、フラクションD（セラム・フラクション）は6.5％から8.5％までの乾燥物質を含有する。
【００９４】
別の実施形態では、-完成された原料は、フラクションA、BまたはCの水または溶媒抽出に基づいて作り出すこともできる。
【００９５】
分離された完成原料は、局所的、経口的および機能的飲物および食物用途のためのスキンケアにおけるさらなる利用のために、さらに濃縮され、および次いで安定化されることができる。本発明での完成した原料は、当技術において普通に使用されるデリバリーシステムにさらに含まれることができる。
【００９６】
本発明での生物活性原料は、美容上許容可能か、および/または機能的な食物および飲物生産物において許容可能かのいずれかでもある。
【００９７】
意外にも、ここに記載のプロセスは、プレゴンおよびタンパク質を含まないか、または実質含まない多機能性の生物学的活性を有する最終原料を生産することが見出された。
【００９８】
本発明の生物活性画分（原料）を含有する調剤物は、当関連技術において通常の技量の者（当業者とも言う）によく知られる方法体系を用いて調製し得る。
ニンジン（Panax spp.）の生物活性組成物（しょう液画分）または抽出物の調剤物
【００９９】
本発明はまた、哺乳動物の皮膚および/または毛への局所適用に適した生物活性調剤物に関する。調剤物は、例えば、リーブ-オン（つけたままにしておくとも言う）生産物で、例えば、クリーム、ドレッシング（外傷用医薬材料、ドレッシング材とも言う）、ゲル、ローション、軟膏、液体、スプレーアプリケータ、およびそれらの組合せなどのようなもの、またはウォッシュ-オフ（洗い流しとも言う）生産物で、例えば、ハンド・ディッシュウォッシング洗剤（hand dishwashing detergent）（手洗い洗剤とも言う）、液状ハンドソープ、バーソープ、ボディーウォッシュ、シャンプー、多目的（汎用とも言う）クレンザー、およびそれらの組合せなどのようなものであることができる。
【０１００】
一実施形態では、生物活性局所調剤物は、本発明の生物活性組成物の局所的な有効量を含む。生物活性局所調剤物は、局所的に許容可能な担体をさらに含むことができる。適切な局所的に許容可能な担体には、制限されないが、親水性クリーム基剤、親水性ローション基剤、親水性界面活性剤基剤、親水性ゲル基剤、親水性溶液基剤、疎水性クリーム基剤、疎水性ローション基剤、疎水性界面活性剤基剤、疎水性ゲル基剤、および/または疎水性溶液基剤が含まれる。一実施形態では、生物活性組成物は、生物活性局所調剤物（生物活性局所製剤とも言う）の合計重量の約0.001％および約99％間からの範囲の量で存在することができる。
ニンジン（Panax spp.）生物活性組成物（セラム・フラクション）または抽出物についての追加的使用
【０１０１】
別の実施形態では、ニンジン（Panax spp.）生物活性組成物（セラム・フラクションまたはエクストラクト（抽出物とも言う））は、内部（経口）使用に適する有効量の本発明の生物活性組成物を含む機能性飲物、機能性食物生産物、サプリメント、および調剤物において使用することができる。別の実施形態において、生物活性組成物は、機能性飲物、機能性食物生産物、および/またはサプリメントの合計重量の約0.001パーセントおよび約99％間からの範囲の量で存在することができる。
ニンジン（Panax spp.）生物活性組成物（セラム・フラクション）または抽出物に関連するパーソナルケアユース
パーソナルケア組成：
【０１０２】
ここでのパーソナルケア組成物には、安全で、および有効な量の本発明の生物活性組成物が含まれる。本発明の生物活性組成物は、しょう液画分、抽出物、粉体、ジュース、またはそれらの組合せの形態であり得る。
【０１０３】
ここでのパーソナルケア組成物は、皮膚および/または毛への局所適用が意図され、およびそれに応じて調剤される（例えば、適切な粘度、色、香り、および感触特性を有する）。本発明の組成物は、美容的なリーブ-オン-タイプ組成物（離着型組成物とも言う）で、例えば、加湿（moisturizing）ローションおよびクリームなどのようなもの、またはリンス-オフ-タイプ組成物（すすぎ落とし型組成物とも言う）で、ボディーウォッシュ、シャンプー、ヘアコンディショナー、シャワーゲル、スキンクレンザー、クレンジング（浄化とも言う）ミルク、シェービングプレップ組成物、およびパーソナルクレンジング組成物などのようなものであってもよい。リンス-オフ-タイプ組成物は、皮膚または毛に局所適用し、および次いで適用に続いて数分以内に（例えば、洗浄を介し、および/またはインプリメント（道具とも言う）、例えば、タオルまたはかみそりなどのようなもので）除去される。ここでのパーソナルケア組成物のいくつかの非制限的な例は、コスメティック（美容上の）スキンケア組成物、メーキャップ、ヘアケア組成物、シェービングプレップ組成物、およびパーソナルクレンジング組成物である。ここでのパーソナルケア組成物は、多種多様な形態で提供され得、制限されないが、エマルション、ローション、ミルク、液体、固体、クリーム、ゲル、ムース、軟膏、ペースト、しょう液、スティック、スプレー、トニック、エアロゾル、フォーム（発泡体とも言う）、および/またはペンシル（棒状のまゆ墨、口紅などとも言う）が含まれる。場合によっては、本組成物は、インプリメントで、例えば、美容用アプリケータ（動力式または動力なし）；再利用可能または処分可能なワイプ、ティッシュ、タオル、またはダイアパー（ナプキン、おむつなどとも言う）；かみそりまたは他のシェービングデバイス；パーソナルクレンジングインプリメントで、例えば、メッシュシャワースポンジ、慣習的なスポンジ、またはウォッシュクロス（浴用布とも言う）などのようなもの；スワッブ（消毒綿、綿棒などとも言う）；および/またはペンなどのようなものでの使用に適した形態であってもよい。
【０１０４】
ここでの組成物は大抵、有効量の本発明の生物活性組成物を皮膚科学的キャリア（担体とも言う）に組み込むことによって調製される。皮膚科学的担体は、それが意図する特定の局所適用に適した特性を提供すべきである。本発明の生物活性組成物は、慣習的な方法、例えば、局所組成物を作成する技術において知られるものなどのようなものを用いて皮膚科学的担体に組み込み得る。そのような方法には、典型的に、本発明の生物活性組成物、皮膚科学的に許容可能な担体、および他の随意原料（含まれるとき）の、一またはそれよりも多く（一以上とも言う）のステップにおいて比較的均一な状態にまでの混合が、加熱、冷却、真空の適用、およびその他同種類のものの有無にかかわらず含まれる。典型的には、エマルションはまず、水性相材料を脂肪相材料とは別に混合すること、および次いで二相を、望ましい連続相を産生するために必要に応じて組み合わせることによって調製される。
【０１０５】
本組成物は、安定性（物理的安定性、化学的安定性、光安定性）および/または活性物質のデリバリーを最適化するために調製してよい。この最適化には、適切なpH（例えば、7またはそれよりも低い）、活性薬剤と複合体を形成し、および従って安定性またはデリバリーに負の影響を及ぼすことがある物質の除外（例えば、汚染性の鉄の排除）、複合体形成を防止するためのアプローチの使用（例えば、適切な分散剤または二重コンパートメントパッケージング）、適切な光安定性アプローチの使用（例えば、サンスクリーン（日焼け止め剤とも言う）/サンブロックの組み込み、不透明パッケージングの使用）、などが含まれ得る。ここでのパーソナルケア組成物は、本発明の生物活性組成物を、パーソナルケア組成物を作成するための慣習的な技術を使用して、皮膚科学的に許容可能な担体に組み込むことによって作成してよい。本発明の生物活性組成物は、ジンセンのしょう液画分、ジンセン抽出物、ジンセン粉体、および/またはジンセンジュースを作成するために、ここに開示される一またはそれよりも多くの技術に従って得ることができる。例えば、パーソナル組成物は、ジンセンしょう液画分を得、それは随意に精製され、および安定化されること、および皮膚科学的に許容可能な担体で、例えば、下記により一層詳細に記載される担体などのようなものにジンセンしょう液画分を組み込むことによって提供され得る。
皮膚科学的に許容可能な担体：
【０１０６】
本発明の生物活性組成物は、様々なパーソナルケア用途で使用するためのパーソナルケア組成物として調剤することができる。そのようなパーソナルケア組成物には、20％から99.99％まで（例えば、50％から99％まで、60％から98％まで、70％から95％まで、またはさらには60％から80％まで）の皮膚科学的に許容可能な担体が含まれる場合がある。担体は水性または無水であってもよい。担体の形態は特に制限されず、および望ましい用途（例えば、溶液、分散物、エマルションおよびそれらの組合せ）のための当技術で既知の任意の適切な形態であることができる。「エマルション（乳濁物とも言う）」は水性相および油相を有する組成物に言及する。エマルション担体には、制限されないが、水中油型、油中水型および水中油中水型エマルション（water-in-oil-in-water emulsions）が含まれる。ここでエマルション担体は、0.01％から10％まで（例えば、0.1％ないし5％）の乳化剤（例えば、非イオン性、アニオン性、カチオン性乳化剤、またはそれらの組合せ）を含み得る。適切な乳化剤は、例えば、米国特許第3,755,560号、米国特許第4,421,769号、およびMcCutcheon's Detergents and Emulsifiers（マカッチャンの洗浄剤および乳化剤）、North American Edition（北米版）、第317-324ページ（1986）に開示される。
随意原料：
【０１０７】
本発明の組成物は、生産物安定性、審美性または性能を過度に変えない限り、提供される特定の生産物タイプで慣習的に使用される多種多様な随意の原料を含有してもよい。随意原料は、組成物中に組み込まれるとき、健全な判断の範囲内で、過度の毒性、不適合性、不安定性、アレルギー反応、およびその他同種類のものなどを伴わずに、ヒトケラチン組織との接触に使用するのに適するべきである。CTFA Cosmetic Ingredient Handbook（CTFAコスメティック原料ハンドブック）、Second Edition（第二版）（1992）には、広範な様々な非制限的なコスメティックおよび製薬原料が記載される。ここで組成物は、組成物の重量によって約0.0001％から約50％まで；約0.001％から約20％まで；または約0.01％から約10％までの随意原料であってよい。随意原料のいくつかの非制限的な例には、研磨剤、吸収剤、審美的成分で、例えば、顔料、乳白剤（不透明化剤とも言う）、着色（カラリング）/着色剤（カララント）、粒子、精油、アンチケーキング剤（固結防止剤）、発泡剤、消泡剤、バインダー（結合剤とも言う）、生物学的添加剤、ビタミン、ミネラル、モイスチャライザー（保湿剤、加湿剤などとも言う）、エモリエント（軟化薬、緩和剤とも言う）、湿潤剤（humectant、保水剤とも言う）、肌色合剤（skin tone agents）、潤滑剤（lubricating agents、平滑剤とも言う）、感覚知（sensates）（例えば、メントール）、芳香剤、ふけ防止剤、緩衝剤、増量剤、キレート剤、化学的添加剤、殺生物剤、変性剤、収斂（しゅうれん）剤、外用鎮痛剤、抗炎症剤、日焼け止め剤、組成物のフィルム形成特性および持続性を促進するためのフィルム形成剤および/またはポリマー、pH調整剤、噴射剤、還元剤、金属イオン封鎖剤、コンディショニング剤、増粘剤、およびそれらの組合せなどのようなものが含まれる。これらおよび他の随意原料のいくつかは、以下により一層詳細に記載される。
【０１０８】
ここでのパーソナルケア組成物は、毛および/または皮膚に特定のコンディショニングの利益を提供するためにコンディショニング剤の約0.1％から約10％まで（例えば、0.5％から約7％まで）を含むことができる。例えば、いくつかの適切なヘアコンディショニング剤には、シリコーン（例えば、シリコーン油、カチオン性シリコーン、シリコーンゴム、高屈折率シリコーン、およびシリコーン樹脂）、有機コンディショニング油（例えば、炭化水素油、ポリオレフィン、および脂肪性エステル（fatty esters））、およびそれらの組合せが含まれる。適切なシリコーンコンディショニング剤、およびシリコーン用の随意の懸濁（化）剤のいくつかの非制限的な例は、米国再発行特許第34,584号；および米国特許第4,152,416号、第4,364,837号、第5,104,646号、第5,106,609号、第5,674,478号、第5,750,122号、第7,465,439号、第7,041,767号、および第7,217,777号に記載される。皮膚コンディショニング剤のいくつかの非制限的な例には、ビタミン、ミネラル、ペプチドおよびペプチド誘導体、糖アミン、日焼け止め、オイルコントロール剤、（微）粒子、フラボノイド化合物、毛増殖レギュレーター（調節剤）、抗酸化剤および/または抗酸化剤前駆体、保存剤、プロテアーゼインヒビター（プロテアーゼ抑制剤とも言う）、チロシナーゼインヒビター、抗炎症剤、加湿剤（moisturizing agents）、ピーリング剤（角質除去剤とも言う）、皮膚美白剤、サンレス・タンニング（sunless tanning、セルフタンニングとも言う）剤、滑剤（lubricants）、抗ニキビアクティブ（抗ニキビ能動態形、抗ニキビ活性物質とも言う）、抗セルライト（抗脂肪沈着とも言う）アクティブ、キレート剤、抗しわアクティブ、抗萎縮アクティブ、植物ステロールおよび/または植物ホルモン、N-アシルアミノ酸化合物、抗微生物剤および抗真菌剤が含まれる。皮膚コンディショニング剤の他の非制限的な例は、米国特許出願公開第2010/0272667号および第2008/0206373号に見出すことができる。皮膚の健康および/または外観の利益を提供することに加えて、シェービングプレップ組成物に使用するための皮膚コンディショニング剤は、シェービングプレップ組成物の摩擦係数を低下させるのに役立つことができ、それによってシェービングに関連する皮膚刺激の可能性が減る。
【０１０９】
ここでのパーソナルケア組成物は、0.05％から5％まで（例えば、0.1％から4％まで、またはさらには0.25％から3％まで）の増粘剤を含むことができる。適切なクラスの増粘剤には、制限されないが、カルボン酸ポリマー、架橋ポリアクリラートポリマー、ポリアクリルアミドポリマー、ポリサッカライド、ゴムおよびそれらの混合物が含まれる。好適な増粘剤の非制限的な例は、CTFA International Cosmetic Ingredient Dictionary（CTFAインターナショナル・コスメティック原料辞典）、10thEd.（第10版）（2004）、第2294-96頁に記載される。
【０１１０】
ここでのパーソナルケア組成物は、5％から50％までのアニオン性、双性イオン性（zwitterionic）、および/または両性の（amphoteric）洗浄性界面活性剤を含み得る。組成物において洗浄性界面活性剤の濃度は、望ましい洗浄および泡立ち性能を提供するのに十分でなければならない。アニオン性洗浄性界面活性剤のいくつかの非制限的な例には、N-オクタデシルスルホこはく酸二ナトリウム（disodium N-octadecylsulfosuccinnate、ジソディウムN-オクタデシルスルホサクシナート）；ラウリルスルホこはく酸二ナトリウム；ラウリルスルホこはく酸ジアンモニウム；N-（1,2-ジカルボキシエチル）-N-オクタデシルスルホこはく酸四ナトリウム；スルホこはく酸ナトリウムのジアミルエステル；スルホこはく酸ナトリウムのジヘキシルエステル；スルホこはく酸ナトリウムのジオクチルエステル；およびオレフィンスルホナートが含まれる。アニオン性界面活性剤のいくつかの特に適切な例は、アルキルおよびアルキルエーテルサルファートである。アニオン性洗浄性界面活性剤の他の非制限的な例は、米国特許第2,486,921号；第2,486,922号；第2,396,278号；および3,332,880号に記載される。
【０１１１】
ここでのパーソナルケア組成物は、一またはそれよりも多くのカチオン性界面活性剤を含むカチオン性界面活性剤システム（カチオン性界面活性剤系とも言う）を含むことができる。存在する場合、カチオン性界面活性剤系は、0.1％から10％まで（例えば、0.5％から8％まで、1％から5％まで、またはさらには1.4％から4％まで）のレベルで組成物に組み込むことができる。一定のヘアケア組成物において、カチオン性界面活性剤は、望ましいすすぎ易さ（ease-to-rinse）、感触、レオロジー、および湿潤コンディショニングの利益を提供するようにバランスをとることができる。
【０１１２】
ここでのパーソナルケア組成物は、高融点脂肪族化合物を含み得る。ここでの有用な高融点脂肪族化合物は、典型的に、25℃またはそれよりも高い融点を有し、および脂肪アルコール、脂肪酸、脂肪アルコール誘導体、脂肪酸誘導体、およびそれらの混合物からなる群より選ばれ得る。本明細書のこのセクションに開示された化合物は、場合によっては一よりも多くの分類に入ることができ、例えば、いくつかの脂肪アルコール誘導体も脂肪酸誘導体として分類することができることを認めるべきである。しかしながら、与えられる分類は、その特定の化合物における制限であることを意図しないが、分類および命名の便宜のためにそのように行われる。さらに、二重結合の数および位置、および分枝の長さおよび位置に依存して、一定の必要な炭素原子を有する一定の化合物は、25℃未満の融点を有することができることが認められるべきである。そのような低融点の化合物は、このセクションに含まれることを意図しない。高融点化合物の非制限的な例は、International Cosmetic Ingredient Dictionary、第5版、1993、およびCTFA Cosmetic Ingredient Handbook、第2版、1992に見出せる。
【０１１３】
ここでのパーソナルケア組成物は、カチオン性および/または非イオン性ポリマーを0.05％から3％まで（例えば、0.075％から2.0％まで、またはさらには0.1％から1.0％まで）の量で含むことができる。適切なカチオン性ポリマーは、少なくとも0.5meq/gm（ミリ当量/グラム）（例えば、少なくとも0.9meq/gm、1.2meq/gm、またはさらに少なくとも1.5meq/gm）のカチオン電荷密度を有するが、典型的には7meq/gm未満、またはさらには5meq/g未満で、組成物の意図された使用のpHにおいてそれはpH3からpH9までの範囲でありうる。ここで、ポリマーの「カチオン電荷密度」は、ポリマー上の正電荷の数の、ポリマーの分子量に対する比である。そのような適切なカチオン性ポリマーの平均分子量は、大抵は、約10,000および1,000万の間、一実施形態では、約50,000および約500万の間、および別の実施形態では、約100,000および約300万の間である。適切なカチオン性ポリマーのいくつかの非制限的な例には、水溶性スペーサーモノマーで、例えば、アクリルアミド、メタクリルアミド、アルキルおよびジアルキルアクリルアミド、アルキルおよびジアルキルメタクリルアミド、アルキルアクリラート、アルキルメタクリラート、ビニルカプロラクトン、ビニルピロリドン、およびカチオン性グアーガム誘導体で、例えば、グアーヒドロキシプロピルトリモニウムクロライドなどのようなものによるカチオン性プロトン化アミンまたは第4級アンモニウム官能基を有するビニルモノマーのコポリマーが含まれる。非イオン性ポリマーのいくつかの非制限的な例は、約1000を超える分子量を有するポリアルキレングリコールである。ポリマーの他の非制限的な例は、Estrin（エストロン）、Crosley（クロズリー）、およびHaynes（ヘインズ）によって編集されたCTFA Cosmetic Ingredient Dictionary、第3版（The Cosmetic, Toiletry, and Fragrance Association, Inc.（ザ・コスメティック・トイレタリー、アンド・フレグランス・アソシエーション社）、Washington（ワシントン）, D.C.（1982））において開示される。
【０１１４】
ここでのパーソナルケア組成物には、水不溶性材料を分散した形態で組成物において懸濁させるために、または組成物の粘度を修飾するために、有効な濃度で懸濁化剤が含まれ得る。そのような濃度は、約0.1％から約10％まで、好ましくは約0.3％から約5.0％までに及ぶ。ここでの有用な懸濁化剤には、アニオン性ポリマー、非イオン性ポリマー、およびビニルポリマーが含まれる。
【０１１５】
ここでのパーソナルケア組成物は粒子を含むことができる。粒子は、分散した水不溶性粒子であってもよい。粒子は、無機、合成、または半合成であることができる。粒子は、1μmおよび1mmの間（例えば、10μmおよび800μm、50μmおよび500μmの間、またはさらには100μmおよび400μmの間）の平均の普通の（mean average）粒径を有することができる。
【０１１６】
いくつかの例では、上記カチオン性界面活性剤は、高融点脂肪族化合物および水性担体と共に、ヘアケア組成物においてゲルマトリクスを形成するために組み合わせることができる。ゲルマトリクスは、一定の毛のコンディショニングの利益、例えば、濡れた毛への適用中の滑り（ぬるぬる）感（slippery feel）、および乾燥した毛の柔らかさおよび加湿（保湿）感などのようなものを提供するのに適することができる。上記ゲルマトリクスを提供する観点から、カチオン性界面活性剤および高融点脂肪族化合物は、カチオン性界面活性剤の、高融点脂肪族化合物に対する重量比が、好ましくは約1：1から約1:10まで、より一層好ましくは約1：1から約1：6までの範囲であるようなレベルで含まれる。
ケラチン組織の状態を調節する方法
【０１１７】
有効量の本発明の生物活性組成物を含むパーソナルケア組成物は、哺乳動物ケラチン組織の状態を調節するために、パーソナルケア組成物を、調節を必要とする哺乳動物組織の一部に局所適用することによって使用することができる。本方法は、処置を必要とする皮膚および/または毛の標的部分、および/または処置が望まれる場所を識別すること、およびパーソナルケア組成物をケラチン組織の標的部分に適用することを含むことができる。処置を必要とするケラチン組織の標的部分を識別することは、目に見える状態（例えば、乾燥、脆弱性、枝毛（split ends、特にその割れ始めの部分のこと）、望ましくない感覚、発赤、炎症、変色、またはしわ）の存在に基づくことができる。いくつかの例では、ケラチン組織の標的部分は、目に見える症状の兆候を示さないが、ユーザーはさらに、そのような領域が、状態を発症させることが知られているもの（例えば、典型的には、衣類によって覆われていない皮膚または毛の表面、および皮膚のシェービング刺激を起こしやすい領域）である場合、それを標的にすることを希望することができる。
【０１１８】
本発明の生物活性組成物の有効量を含有するパーソナルケア組成物は、処置期間中、1日1回、1日2回、または日々より一層頻繁に適用することができる。処置期間は、理想的には、本発明の生物活性組成物が望ましい利益を提供するのに十分な時間である。例えば、処置期間は、本発明の生物活性組成物が毛または皮膚状態における顕著な、および/または測定可能な改善を提供するために十分な時間であり得る。処置期間は、少なくとも1週間（例えば、約2週間、4週間、8週間、またはさらに12週間）の間続け得る。いくつかの例では、処置期間は、複数の月（すなわち、3-12箇月）または複数年にわたる。いくつかの例では、本発明の有効量の生物活性組成物を含有するコスメティック組成物は、週のほとんどの日（例えば、週に少なくとも4、5または6日）、少なくとも2週間、4週間、8週間、または12週間の処置期間中、少なくとも1日に1回またはさらに1日に2回で施与され得る。
【０１１９】
ここでのパーソナルケア組成物は、局所的に、または広く適用され得る。組成物の適用に関して、用語「局所化され」、「局所」または「局所的に」は、組成物について、処置が望まれないケラチン表面へのデリバリーを最小限に抑えながら、標的領域にデリバリーされることを意味する。ここでの一定の実施形態は組成物を局所的にある領域に適用することを企図するが、ここでの組成物は、より一層一般的に、または広範に1以上のケラチン表面に適用することができることが認められる。一定の実施形態では、ここでの組成物は、多段階美容養生法（multi-step beauty regimen）の一部分として使用することができ、そこでは、本組成物は、1以上の他の組成物の前および/または後に適用することができる。
【０１２０】
本方法に従うここでのパーソナルケア組成物の使用は、皮膚または毛の利益を提供することができる。皮膚の利益のいくつかの非制限的な例には、しわ、深い線（深いしわとも言う）、細い線、裂け目、隆起、大きな孔（大きな毛穴とも言う）の出現を減少させること；真皮-表皮境界（dermal-epidermal border）のコンボリューション（回旋、畳み込みなどとも言う）を増加させること；スキンライトニング（皮膚美白とも言う）；弾力性増加、たるみ（sagging、下垂とも言う）の減少、セルライトの減少；眼の下の円の出現を減少させること、変色の出現を減少させること、高色素沈着を減少させること、皮膚の明度を増加させること、およびそれらの組合せが含まれる。毛の利益のいくつかの非制限的な例には、光沢、柔軟さ、櫛通り（combability）、帯電防止特性、湿潤処理（wet-handling）、ダメージ（損傷）、ふけ防止、管理容易性、密度（body）、および脂っぽさ（greasiness）が含まれる。
【０１２１】
パーソナルケア組成物は、ラビング（摩擦）、ワイピング（拭き取り）、または手、指および/またはインプリメント（implement）でのダビング（軽打）を含め、そのような生産物を適用するために知られている任意の適切な手段によって適用することができる。インプリメント（道具とも言う）の非制限的な例には、スポンジまたはスポンジチップアプリケータ、スワブ（例えば、綿棒）、随意にフォーム（泡）またはスポンジアプリケータを含むペン、ブラシ、ワイプ（ふき取るもの）、およびそれらの組合せが含まれる。本組成物は、アプリケータに予め適用されてもよく、および例えば、そういうものとしてユーザーに予めパッケージングされたものを送ってもよく、またはユーザーは使用前に組成物をアプリケータに適用するように指示されてもよい。いくつかの例では、本組成物は、インプリメントにおいて、例えば、組成物のための別個の貯蔵領域において保存することができる。この例では、組成物は、例えば、圧搾および/または破壊または他の適切な手段によって、貯蔵領域からアプリケータに移され得る。組成物は、アプリケータおよび組成物を皮膚に接触させることによってケラチン組織に適用することができる。接触には、例えば、軽い圧力、ダビング、ラビング、ワイピング、または任意の他の適切な手段が含まれ得る。標的化された適用が望まれるとき、本組成物は、ケラチン組織の望ましい領域に適用され得る。
【実施例】
【０１２２】
以下、本発明を次の例を参照して説明する。これらの例は例示の目的だけに提供され、および本発明は決してこれらの例に制限されるものではなく、もっともむしろここで提供される教示の結果として明らかになる任意の、およびすべての変形を包含すると解釈されるべきである。したがって、以下の例は、本発明の特定の実施形態を例示することを意図しているが、決して本発明の範囲を制限することを意図するものではない。
例1
ジンセン（Panax quinquefolius L.）からの生物活性組成物の調製
【０１２３】
ジンセン（ニンジン）植物は四つの生育期間にわたって栽培された。全体的に成熟した栽培されたジンセン植物は、それらが熟した実（ベリー）を伴う増殖相に達したときに土壌から掘り出された。収集した全体の植物を直ちに水できれいにした。収集した植物の生存率を、OS5pマルチモードクロロフィル蛍光光度計（Opti-Sciences Inc、Hudson、NH、USA）を利用してテストした。生きた全体のジンセン植物のマセレーション（解離、浸軟などとも言う）およびプレス後、フラクションA（プレス-ケーキ）の収率は35％および55％（w/w）の間であり、および細胞内分散物は8％から12％までの乾燥物質を含んだ。「アジャストメント1」は、細胞内分散物を、例えば、酸でpH=3.0に滴定することによって達成された。分散物は直ちに、マグネトロンを含む連続流システムにおいて電磁波による不安定化処理に供された。本発明での不安定化ステップにおける前記電磁波のパラメータは、処理の間の細胞内分散物の低周波誘電率の実数成分の値
（外字）
2019503381.tif 000007
において、メートル当たり約10ファラド（F/m）だけ、処置前のその値（80F/mから70F/mまで）と比較して減少を達成するように設定された。「アジャストメント2」は、アルカリでのpH=8.0への滴定による「スーパーネータント1」におけるpHレベルの増加によって達成された。ここで、および図2に例示されるプロセスにおいて使用されるように、「スーパーネータント2」および「フラクションC（プレシピテート2）」を生成するために、調節スーパーネータント1の機械的分離によって「セパレーション2」が達成された。ここで、および図2に例示されるプロセスにおいて使用されるように、「アジャストメント3」は、pH約3.5への酸での滴定による「スーパーネータント2」におけるpHレベルの低下によって達成された。ここで、および図2に例示されるプロセスにおいて使用されるように、「調節スーパーネータント2」は、フラクションD（セラム・フラクション）、「アジャストメント3」の後に得られ、および「プリザーバティブおよびスタビライザー」と混合された物質に言及する。予想外にも、しょう液において、およびその後の最終成分において残存する生物学的成分が、プレゴンおよびタンパク質を実質含まないことが見出された。
例2
ジンセン（Panax quinquefolius L.）からの生物活性組成物の調製
【０１２４】
ジンセン（ニンジン）植物は四つの育成期間にわたって栽培された。全体的に成熟した栽培されたジンセン植物は、熟した実（ベリー）を伴い増殖相に達したときに土壌から掘り出された。収集した全体の植物を直ちに水できれいにした。OS5pマルチモードクロロフィル蛍光光度計（Opti-Sciences Inc、Hudson、NH、USA）を利用して、採取した植物の生存率を試験した。全体の生きたジンセン植物のマセレーションおよびプレス後、フラクションA（プレス-ケーキ）の収率は35％および55％（w/w）の間であり、および細胞内分散物は8％から12％までの乾燥物質を含んだ。「アジャストメント1」は、細胞内分散物を、例えば、酸でpH=3.0に滴定することによって達成された。分散物は直ちに、マグネトロンを含む連続流システムにおいて電磁波によって不安定化処理に供した。本発明での不安定化ステップにおける前記電磁波のパラメータは、処理中の細胞内分散物の低周波誘電率の実数成分の値
（外字）
2019503381.tif 000008
において、メートル当たり約30ファラド（F/m）だけ-処理前の値（80F/mから50F/mまで）と比較して減少を達成するために設定した。「アジャストメント2」は、アルカリでのpH=8.0への滴定による「スーパーネータント1」におけるpHレベルの増加によって達成された。ここで、および図2に例示されるプロセスにおいて使用されるように、「スーパーネータント2」および「フラクションC（プレシピテート2）」を生成するために、調節スーパーネータント1の機械的分離によって「セパレーション2」が達成された。ここで、および図2に例示されるプロセスにおいて使用されるように、「アジャストメント3」は、pH約3.5への酸での滴定による「スーパーネータント2」におけるpHレベルの低下によって達成された。ここで、および図2に例示されるプロセスにおいて使用されるように、「調節スーパーネータント2」は、フラクションD（セラム・フラクション）、「アジャストメント3」の後に得られ、および「プリザーバティブおよびスタビライザー」と共に混合された物質に言及する。意外にも、しょう液において、およびその後の最終成分において残存する生物学的成分は、プレゴンおよびタンパク質を実質含まないことが見出された。
例3
生物活性組成物の効果を決定するための方法
【０１２５】
ヒトの皮膚での刺激（irritation）および炎症のプロセスは、望ましくないことが多く、および皮膚の加齢（例えば、変色およびしわ）の目に見える兆候、機械的強度の低下、保護機能の低下、およびストレスおよびインジャリー（傷害）からの回復能力の減少を含む持続的な累積損傷を引き起こすことがある。これらのプロセスは、皮膚に対する種々のストレスおよびインサルト（外傷）によって引き起こされることがある。特にユビキタス（遍在性とも言う）ストレスは、日光および界面活性剤である。皮膚の刺激および炎症、特に共通のストレスによって引き起こされるものを和らげることは、重要であり、および望ましい。
【０１２６】
人間の皮膚に及ぼす光、最も一般的には日光（人工的な供給源も含まれるが）の有害な影響はよく知られている。過度に激しく日光に曝されることは、刺激および炎症を伴う急性の副作用、例えば、日焼けなどのようなものを引き起こすことがある。急性反応を引き起こすには不十分な曝露は、依然として炎症関連のプロセスのきっかけとなる可能性がある。日光曝露からの蓄積された炎症性損傷は、光老化として知られるプロセスにおいて、皮膚弾力性の低下および望ましくない外観の発現を引き起こす。
【０１２７】
界面活性剤は、クレンジング（cleansing、浄化とも言う）、発泡、乳化、可溶化、および分散のプロセスを可能にするか、または改善するために、様々なパーソナルケアおよびクレンジング生産物において使用される。界面活性剤含有生産物との繰り返し接触は、界面活性剤の表面活性または界面活性による皮膚バリアの損傷を引き起こすことが示された[Walters（ウォルターズ）RM、Mao（マウ）G、Gunn(ガン)ETら、Cleansing formulations that respect skin barrier integrity（皮膚バリアの完全性を守るクレンジング調剤物）。Dermatol Res Pract（ダーマトロジー・リサーチ・アンド・プラクティス）2012；495917：1-9]。弱められたバリアは、その後、界面活性剤の皮膚へのより一層深い浸透をもたらし、そして刺激および炎症を誘発する[De Jongh（デ・ジョン）CM、Jakasa（ジャカサ）I、Verberk（フェルベーク）MM、Kezic（ケザイク）S.、Variation in barrier impairment and inflammation of human skin as determined by sodium lauryl sulphate penetration（ラウリル硫酸ナトリウム浸透によって決定されるようなヒトの皮膚のバリア障害および炎症における変動）。Br J Dermatol（ザ・ブリティッシュ・ジャーナル・オブ・ダーマトロジー）2006；154（4）：651-7。Ananthapadmanabhan（アナンタパドマンアブハン）KP、Yang（ヤン）L、Vincent（ビンセント）Cら、A novel technology in mild and moisturizing cleansing liquids（穏やかで、そして保湿性のクレンジング液体における新規な技術）。Cosmetic Dermatology（コスメティック・ダーマトロジー）(R)(商標)2009；22（6）：307-16]、これは、乾燥、かゆみ（itchiness）、腫脹、フラッシング発赤、および痛みとして消費者によって知覚され得る。界面活性剤は、ハンドソープ、フェイシャルおよびボディーウォッシュ、シャンプーおよびコンディショナー、ならびに皿、洗濯およびハウスクリーニング洗剤に広く使用され、ヒトの皮膚と界面活性剤との接触が頻繁に行われる。
【０１２８】
刺激および炎症は、シグナル化合物のインターロイキン（IL）1-アルファ（またはIL-1α）の必要な放出から他の下流のサイトカインおよびケモカイン、例えば、インターロイキンIL-6およびIL-8または他のシグナル伝達分子などのようなものの誘導へと進行する「カスケード」と一般的に考えられる[Welss（ウェルス）T、Basketter（バスケッター）DA、Schroder（シュレーダー）KR。In vitro skin irritation: facts and future. State of the art review of mechanisms and models（インビトロ皮膚刺激：事実および未来。メカニズムおよびモデルの最先端のレビュー）。Toxicol In Vitro（トキシコロジー・インビトロ）2004；18（3）：231-43]。しかし、以前に刊行されたデータは、「カスケード」ビューが包括的なモデルではないかもしれないことを示唆する[Koganov（コガノフ）, M.、Zhang（チャン）, L.、Duev（デュエヴ）, A.、Dueva-Koganov（デュエヴァ−コガノフ）, O.、Hou（ホー）, X.、Biological Activities of Novel Ingredients from Living Tea Plant (Camellia sinensis)（生きたチャノキ（Camellia sinensis、カメリアシネンシス）からの新規な原料の生物学的アクティビティー）、Household and Personal Care Today（ハウスホールド・アンド・パーソナル・ケア・トゥデイ）、9（2015）19-24；およびKoganov M、Zhang L、Duev A. Imparting mildness with living tea plant ingredient（生きたチャノキ原料でマイルドさを与える）。Personal Care（パーソナル・ケア）、2013；14（5）：31-4]。
【０１２９】
ドデシル硫酸ナトリウム（SDS）でさえも、インビトロおよびインビボ研究の双方において界面活性剤ストレスのベンチマーク供給源として普通に使用される単一の化合物であり、一次サイトカイン、例えば、IL-1αなどのようなものの放出に有意に影響を及ぼすことなく、濃度に依存して刺激および炎症プロセスの異なる部分を誘発することができる。皮膚細胞の刺激および炎症反応の複雑さは、シグナル伝達「ネットワーク」モデルがシグナル伝達「カスケード」モデルよりも適切な類推であることを暗示する。このことは、そのような複雑なシグナル伝達プロセスの緩和が、一よりも多くの経路、例えば、多機能生物活性原料の使用によってなどのようなものに影響を及ぼさなければならないことを指し示す。
【０１３０】
刺激および炎症を研究および定量化するための方法論の一つは、ストレス源と接触を起こす可能性が最も高い組織の細胞、例えば、ヒト皮膚からの生存可能な表皮ケラチノサイトなどのようなものを培養することを含む。ヒト表皮ケラチノサイト（HEK）は、それらの表皮の位置、角質層バリアの完全性を維持することの重要性、および様々な炎症性メディエーターを産生する能力によって、刺激誘発性皮膚炎症において注目の的にされた[Welss T、 Basketter DA、Schroder KR。In vitro skin irritation: facts and future. State of the art review of mechanisms and models。Toxicol In Vitro 2004；18（3）：231-43]。ケラチノサイトは、多数のシグナル伝達物質、例えば、インターロイキンなどのようなものを、界面活性剤および日光を含む様々な刺激物に応答して放出することができる。次いで、これらのメディエーターの量は、酵素結合免疫吸着アッセイ（ELISA）などのような技術によって測定することができる。これらの炎症性メディエーターのHEK放出を減少させることができる生物活性物質は、ヒトの皮膚において刺激および炎症の兆候をコントロールするのに役立ち得る。
【０１３１】
インターロイキンに加え、アラキドン酸代謝産物が炎症性プロセスにおいて重要な役割を有することは、長年にわたって知られている。プロスタグランジンE2（PGE2）は、アラキドン酸の最も豊富な代謝産物の一つであり、シクロオキシゲナーゼ（COX）酵素によってコントロールされる酵素カスケードを通して生成される。炎症性シグナル伝達におけるPGE2の重要性は、炎症を和らげるためのCOXインヒビター（抑制剤とも言う）（初めに植物起源のもの、例えば、アスピリンなどのようなものを含む）の広範な臨床的使用によって強調される。
【０１３２】
本発明での原料の効果を決定するために選定されるテストには、培養ヒト皮膚細胞におけるケモカイン、サイトカインおよびプロスタグランジン（シグナル伝達化合物）の抑制、培養ヒト細胞におけるシグナル伝達およびダメージ（損傷）を引き起こすことが可能な化合物の抑制、および細胞の損傷または感作を指し示す物質のそれらの放出または欠如を測定することが含まれる。使用された細胞は正常ヒト成体表皮ケラチノサイト（HEK）であった。上記の領域および関連する条件ならびに他の専門分野に精通している者は、本発明を実践する他の方法を見出すことができる。もっとも、それらの方法はこの発明の範囲内にあるとみなされる。
【０１３３】
以下の例は、本発明を説明するが、ここに記載される本発明の範囲を制限するようにはたらかない。それらは、本発明を実践する方法を示唆することだけを意味する。インビトロバイオアッセイの選定は、以下の根拠に基づいた：細胞毒性および感作能（sensitization potential）の欠如を証明することによってテスト物質（test articles）の安全性を保証すること；および皮膚の刺激、炎症および加齢プロセスに関与するシグナル伝達およびダーメージング（ダメージを与える）化合物の抑制におけるそれらの有効性および効力、例えば、様々なストレスによって誘発されるものを決定することである。ストレス供給源には、重要で、および普遍的な要因、例えば、日光および界面活性剤などのようなものが含まれ得る。
例4
細胞毒性の評価（安全性のアセスメント）
【０１３４】
乳酸脱水素酵素（LDH）は重要な細胞質酵素である。正常なバックグラウンドリークを上回るレベルで細胞外にLDHが存在することは、細胞損傷または細胞死の指標である。細胞培養培地においてLDHを定量するアッセイは、テスト物質およびストレス因子の潜在的な細胞傷害性を算定するために用いられることが多い。細胞破裂または細胞形態での変化を記録するために顕微鏡下で細胞を観察することもまた、細胞傷害性のアセスメントに寄与することができる。
【０１３５】
正常ヒト成体表皮ケラチノサイト（HEK）およびすべての細胞培養物は、Life Technologies Co.（ライフ・テクノロジーズ社）（Carlsbad（カールスバート）、CA（カリフォルニア州）、USA）から取得した。本細胞を増殖させ、および次いでヒトケラチノサイト増殖サプリメント（HKGS）を添加したケラチノサイト基礎培地154（M154）にて5％CO2の雰囲気において37℃で維持し、および2ないし4の間の継代で使用した。実験のために、HEK細胞をトリプシン処理し、96ウェルプレートに播種し、および〜（約とも言う）80％コンフルエントにまで増殖させた。次いで、HEKをストレス因子に曝露し、またはそうせずに、および種々の濃度のテスト物質の有無で16時間インキュベーションした。インキュベーション後、HEK細胞上清培地サンプルを収集し、およびCytoscan（サイトスキャン）TM（トレードマーク）LDHアッセイキット（カタログ番号786-210、G-Biosciences（G-バイオサイエンシーズ）、St. Louis（セントルイス）、MO（ミズーリ州）、USAによって生産）を使用してLDHレベルを評価した。未処理のストレスのないHEK細胞を、ポジティブコントロール（陽性コントロール、陽性対照などとも言う）としてキット提供の溶解緩衝液を用いて溶解し、溶解物をアッセイ陽性コントロールおよび最大LDH放出の尺度として使用した。顕微鏡によって確認したとき、誘導されるLDH放出の低下はより一層低い細胞傷害性を指し示す。
例5
皮膚感作能の評価（安全性のアセスメント）
【０１３６】
テスト物質が細胞毒性でなく、それなのに皮膚接触の際にアレルギー反応を引き起こすので、危険である可能性がある。典型的には、アレルゲンへの初期の曝露は免疫系を感作し、およびその後の曝露はアレルギー反応を引き起こす。皮膚感作のメカニズムを理解する最近の進歩は、皮膚接触感作のための有用なバイオマーカーとして正常ヒト表皮ケラチノサイト（HEK）におけるインターロイキン-18（IL-18）産生を識別した[Corsini（コルシーニ）E、Mitjans（ミートヤンス）M、Galbiati（ガルビアーティ）V、Lucchi（ルッキ）L、Galli CL 、Marinovich（マリノフビック）M、Use of IL-18 production in a human keratinocyte cell line to discriminate contact sensitizers from irritants and low molecular weight respiratory allergens（接触感作物質を刺激物および低分子量呼吸器アレルゲンから区別するためのヒトケラチノサイト細胞系におけるIL-18産生の使用）。Toxicol In Vitro。2009年8月；23（5）：789-96]。[Teunis（テュウニス）M、Corsini E、Smits（スミツ）M、Madsen（マセン）CB、Eltze（エルツ）T、Ezendam（エゼンダム）J、Galbiati V、Gremmer（グレマー）E、Krul（クルール）C、Landin（ランディン）A、Landsiedel（ランドシーデ）R、Pieters（ピータース）R、Rasmussen（ラスマッセン）TF、Reinders（レインデルス）J、Roggen（ロゲン）E、Spiekstra（スピークストラ）S、Gibbs（ギブス）S、Transfer of a two-tiered keratinocyte assay: IL-18 production by NCTC2544 to determine the skin sensitizing capacity and epidermal equivalent assay to determine sensitizer potency（二段階ケラチノサイトアッセイの移入：皮膚感作能および表皮等価アッセイを決定して感作物質の効力を決定するためのNCTC2544によるIL-18産生）。Toxicol in Vitro。2013年4月；27（3）：1135-50]。IL-18は、Local Lymph Node Assay（局所リンパ節アッセイ）などのような動物の皮膚感作性テスト方法に対して適したインビトロ代替物と考えられる。したがって、本発明者らは、テスト物質で処理したHEKにおいてIL-18産生を評価し、それらの感作能を決定した。
【０１３７】
正常ヒト成体表皮ケラチノサイト（HEK）を上記の例4に記載のように培養した。テスト物質またはコントロール（対照とも言う）との16時間のインキュベーションの後、HEK細胞を、pH7.4のリン酸緩衝化塩類溶液（PBS）において0.5％Triton（トリトン）X-100の100μl/ウェルで溶解した。細胞溶解物を収集し、およびIL-18をヒトIL-18ELISAキット（カタログ番号7620、MBL International Co.（MBLインターナショナル社）、Woburn（ウォバーン）、MA（マサチューセッツ州）、USAによって生産）を用いて定量した。陽性コントロールとして用いる既知の皮膚感作物質、p-フェニレンジアミン（pPD）は、HEK培養物においてビヒクルコントロールと比較してIL-18を大いに誘導した。テスト物質および各ビヒクルコントロールとの間のIL-18レベルの倍数変化を算出し、およびpPD（陽性コントロール）と比較した。IL-18のより一層低い誘導はより一層低い感作能を示す。
例6
SDSによって誘導されるIL-8の抑制（界面活性剤誘発性刺激/炎症性シグナル伝達物質に対する能力および効力のアセスメント）
【０１３８】
正常ヒト成体表皮ケラチノサイト（HEK）を例4に記載のように培養した。次いで、細胞をテスト物質および/またはコントロールと共に16時間インキュベーションした。
【０１３９】
特定濃度の細胞培養培地でのドデシル硫酸ナトリウム（SDS）の存在は、ケモカインおよびサイトカインの誘導のために使用した。IL-8は6μg/mLのSDSによって誘導された。インキュベーション後、HEK細胞上清を集収した。Quantikine（クォンティカイン）(R)（商標）ELISAキット（R＆D Systems Inc（R&Dシステムズ社）、Minneapolis（ミネアポリス）、MN（ミネソタ州））は、上清においてこれらのインターロイキンを定量するために使用した。IL-8は、Human CXCL/IL-8 Immunoassay kit（ヒトCXCL/IL-8イムノアッセイキット）（カタログ番号D8000C）によって定量した。IC50（インターロイキンレベルを50％に低下させるのに必要なテスト物質の濃度、未処理細胞からのサンプルを0％とし、およびSDSのそれぞれの誘導量で単独に処理したサンプルを100％とし考えた）値は、SigmaPlot（シグマプロット）10.0（Systat Software（シスタット・ソフトウェア）によるシグモイドカーブフィッティングによって算出した。より一層低いIC50値は、より一層高い効力および有効性の程度を示す。
例7
人工供給源からの全スペクトル太陽光によって誘導されるIL-6および/またはIL-8および/またはPGE2の抑制（日光誘発性刺激/炎症シグナル伝達物質に対する能力および効力のアセスメント）
【０１４０】
正常ヒト成人表皮ケラチノサイト（HEK）を例4に記載のように培養した。細胞を一回洗浄し、およびM154をPBSで置換した。洗浄および置換の双方をPBSで行い、M154の光吸収成分を除去した。次いで、HEKを含む96ウェルプレートを、UV透過性の1mm石英シートで覆い、室温を維持しながら制御されたPeltier（ペルチェ）冷却表面の上部の白色下層上に置き、および20J/cm2の人工的に生産された全スペクトル太陽光で、同じ石英カバーを通してピラノメーター（全天日射計とも言う）を介して測定されるように、約1100W/m2のドーズレート（線量率とも言う）にて照射した。次いで、PBSを除去し、およびM154で置き換え、および細胞をテスト物質および/またはコントロールと共に16時間インキュベーションした。太陽光の存在を除いて同じ操作を、ストレスのないコントロールとしてはたらくHEKを用いて遂行した。照射設備は、Solar Light Company（ソーラー・ライト・カンパニー）、Glenside（グレンサイド）、PAから入手し、およびプレーンミラー、XPS1000高精度電流源、およびPMA2144ピラノメーターを用いたAirmass（エアマス）1.5構成でのSolar Simulator（ソーラー・シミュレーター）LS1000-6R-002を含んだ。インキュベーション後、HEK細胞上清を収集した。Quantikine(R)ELISAキット（R＆D Systems Inc、Minneapolis、MN）を、上清においてインターロイキンを定量するために使用した。IL-8は、Human CXCL/IL-8 Immunoassay kit（カタログ番号D8000C）によって定量し、IL-6は、Human IL-6 Immunoassay kit（ヒューマンIL-6イムノアッセイキット）（カタログ番号D6050）によって定量し；およびPGE2は、Parameter（パラメータ）TM Prostaglandin E2 Assay（プロスタグランジンE2アッセイ）（カタログ番号KGE004B）を用いて定量した。IC50（インターロイキンまたはプロスタグランジンレベルを50％に低下させるのに必要なテスト物質の濃度、非照射細胞からの試料を0％とし、および照射細胞からの試料を100％とみなした）値を、SigmaPlot 10.0（Systat Software）によるシグモイドカーブフィッティングによって算出した。より一層低いIC50値は、より一層高い能力および有効性の程度を示す。
例8
処理サンプルおよび生物活性組成物の物理化学的特徴：評価の方法
【０１４１】
本発明でのプロセスの実施形態に従って生産された中間処理サンプル、および生物活性組成物の物理化学的特徴を評価するために、様々な方法を使用した。
【０１４２】
テスト方法を以下、表1に説明する。
【表１−１】
2019503381.tif 000009
【表１−２】
2019503381.tif 000010
【表１−３】
2019503381.tif 000011
【表１−４】
2019503381.tif 000012
例9
処理サンプルおよび生物活性組成物の物理-化学的および分析的特質
【０１４３】
ジンセン（Panax quinquefolius）の中間処理サンプル（例1において記載のプロセスからのもの）の色の特質を以下の表2に示す。
【表２】
2019503381.tif 000013
【０１４４】
ジンセン（Panax quinquefolius）の中間処理サンプル（例1において記載のプロセスからのもの）の物理-化学的特質を以下の表3および図3に示す。
【表３】
2019503381.tif 000014
【０１４５】
ジンセン（Panax quinquefolius）処理サンプル（例1において記載のプロセスからのもの）のFT-IR透過スペクトルを図3において示す。
【０１４６】
生物活性組成物を、例1および2に記載のプロセスに従って調製した。それらの物理-化学的および分析的評価の結果を以下の表4に示す。
【表４】
2019503381.tif 000015
例10
ジンセン（Panax quinquefolius）からの生物活性組成物の生物学的活性
【０１４７】
ジンセン（Panax quinquefolius）からの生物活性組成物を、本発明のプロセスの実施形態に従って調製し、および一定の生物学的活性について試験した。
【０１４８】
表5は、以下の試験：細胞傷害性（LDH/顕微鏡検査）、感作ポテンシャル（IL18）、IL18；IL6およびPGE2のフルスペクトル太陽誘導；IL8のSDS誘導で得られたニンジン（Panax quinquefolius）由来の生理活性組成物の安全性および活性データを含む。
【表５】
2019503381.tif 000016
【０１４９】
要約すると、生物学的活性の結果は、ニンジン（Panax spp.）の生物活性組成物が次のことを示した：（i）in vitro（インビトロ）試験による潜在的な皮膚感作物質ではなく；（ii）最終生産物調剤においてそれらの濃度に関連し得る選定された濃度でのインビトロで細胞傷害性ではなく;および（iii）炎症および関連プロセス（例えば、環境ストレスで、例えば、フルスペクトル太陽曝露または界面活性剤誘導ストレスなどのようなものを含めて、皮膚へのストレスによって誘発されるもの）によって引き起こされる皮膚加齢の兆候を軽減するための潜在的有用性を指し示すインビトロ活性を示すことである。
【０１５０】
例2に従って調製された生物活性組成物について、例1に従って調製された生物活性組成物よりも、分析されたジンセノサイドのほとんどで個々の濃度が高く、および合計ジンセノサイド濃度が高い一方、その生物学的活性がより一層低いか、または不存在であるということは、予想外で、および驚くべき発見である。特に注目すべきことは、日光誘導PGE2を抑制する点での差異である。
例11
ジンセン（Panax spp.）からの生物活性組成物のための保存剤および安定剤システム
【０１５１】
様々な保存剤および安定剤を、本発明での生物活性しょう液画分および生物活性抽出物と共に使用するために試験した。下記の表6には、生物活性組成物（例えば、例1および2に記載されているもの）を調製するために使用される保存剤および安定剤の組合せ/濃度の一例が提供される。
【表６】
2019503381.tif 000017
【０１５２】
上記で提供される保存剤および安定剤が有効であることが判明したが、当技術で知られる他の保存剤および安定剤も、本発明での生物活性しょう液画分および生物活性抽出物に効果的であり得る（could also be as affective with）。
ここに開示される寸法および値は、列挙された正確な数値に厳密に制限されるものとして理解されるべきではない。代わりに、別段の指定がない限り、そのような各寸法は、列挙された値およびその値を取り巻く機能的に等価な範囲の両方を意味することが意図される。例えば、「40mm」として開示された寸法は、「約40mm」を意味することが意図される。
【０１５３】
明細書および添付の請求の範囲で使用されるように、単数形「a」、「an」、および「the」は、文脈上他に明白に示さない限り、複数形もなお含むことを意図する。ここに開示するすべてのパーセンテージは、特に別なふうに規定しない限り、合計組成物の重量による。特に別なふうに規定しない限り、すべての比率は重量比である。有効数字の桁数は、指示された量の制限でなく測定の正確さも伝えない。すべての数値は、特に別なふうに規定しない限り、「約」という語によって修飾されると理解される。すべての測定は、25℃および環境条件で行われると理解され、そこで「環境（周囲とも言う）条件」は、約1気圧および約50％の相対湿度の下での条件を意味する。リストされた原料に関連するようなすべてのそのような重量は、活性レベルに基づいており、および特に別なふうに述べない限り、商業上入手し得る材料に含まれる可能性がある担体または副産物は含まれていない。すべての数値範囲はより一層狭い範囲を含み、および組合せ可能であり；区切られた上限および下限の範囲は、明示的に区切られていないさらなる範囲を作り出すために交換可能である。
【０１５４】
本発明の詳細な説明に引用されるすべての文献は、関連する部分において、参照によりここに組み込まれ；いかなる文書の引用も、それが本発明に関して先行技術であることを認めるものとして解釈されるべきではない。この文書において用語の任意の意味または定義が、参照により組み込まれる文書において同じ用語の任意の意味または定義と矛盾する範囲で、この文書においてその用語に割り当てられる意味または定義が適用される。
【０１５５】
本発明の特定の実施形態を例示し、および説明したが、本発明の精神および範囲から離れることなく、様々な他の変化および修飾を行うことができることは、当業者には明らかであろう。したがって、添付の請求の範囲において、この発明の範囲内にあるそのようなすべての変化および修飾は包含されることが意図される。
【図１】
2019503381.tif 000019
【図２】
2019503381.tif 000020
【図３】
2019503381.tif 000021
【手続補正書】
【提出日】平成30年10月15日(2018.10.15)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ニンジン（Panax spp.（パナックスの種））由来の生物活性フラクションまたは生物活性抽出物が含まれる生物活性組成物であって、合計プレゴン含量が100ppm未満であり、合計タンパク質含量が0.675重量％未満である、生物活性組成物。
【請求項２】
ニンジン（Panax spp.）由来の生物活性フラクションまたは生物活性抽出物が含まれる生物活性組成物を調製する方法であって、次のステップ：
a．ニンジン（Panax spp.）を、ニンジン（Panax spp.）の細胞内分散物を産生するために加工すること；
b．細胞内分散物を、生物活性フラクションまたは生物活性抽出物が含まれる生物活性組成物と、不安定化後沈殿物とを産生するために不安定化処理プロトコルに供すること；および
c．前記生物活性フラクションまたは生物活性抽出物が含まれる生物活性組成物を分離すること
を含む、方法。
【請求項３】
ニンジン（Panax spp.）由来のセラム・フラクションが含まれる生物活性フラクションであって、合計プレゴン含量が100ppm未満であり、合計タンパク質含量が0.675重量％未満である、生物活性フラクション。
【請求項４】
ニンジン（Panax spp.）由来のセラム・フラクションが含まれる生物活性フラクションを分離する方法であって、次のステップ：
a．ニンジン（Panax spp.）を、ニンジン（Panax spp.）の細胞内分散物を産生するために加工すること；
b．細胞内分散物を、生物活性フラクションと、不安定化後沈殿物とを産生するために不安定化処理プロトコルに供すること；および
c．前記生物活性フラクションを分離すること
を含む、方法。
【請求項５】
ニンジン（Panax spp.）由来の生物活性抽出物であって、合計プレゴン含量が100ppm未満であり、合計タンパク質含量が0.675重量％未満である、生物活性抽出物。
【請求項６】
ニンジン（Panax spp.）由来の生物活性抽出物を分離する方法であって、次のステップ：
a．ニンジン（Panax spp.）を、ニンジン（Panax spp.）の細胞内分散物を産生するために加工すること；
b．細胞内分散物を、生物活性抽出物と、不安定化後沈殿物とを産生するために不安定化処理プロトコルに供すること；および
c．前記生物活性抽出物を分離すること
を含む、方法。
【請求項７】
パーソナルケア用途のための、ニンジン（Panax spp.）由来の生物活性組成物であって、合計プレゴン含量が100ppm未満であり、合計タンパク質含量が0.675重量％未満である、生物活性組成物。
【請求項８】
新鮮なニンジン（Panax spp.）植物に由来する生物活性セラム・フラクション。
【請求項９】
生物活性セラム・フラクションは全体のニンジン植物、ニンジン植物の一部分、またはニンジン植物の異なる部分の組合せに由来する、請求項８に従う生物活性セラム・フラクション。
【請求項１０】
ニンジン植物の一部分は、根茎、根、葉、茎、花、および実からなる群より選ばれる、請求項９に従う生物活性セラム・フラクション。
【請求項１１】
前記セラム・フラクションはプレゴンフリーか、または実質フリーである、請求項８に従う生物活性セラム・フラクション。
【請求項１２】
前記セラム・フラクションは100ppm未満の合計プレゴン含量しか含まない、請求項１１に従う生物活性セラム・フラクション。
【請求項１３】
前記セラム・フラクションは25ppm未満の合計プレゴン含量しか含まない、請求項１１に従う生物活性セラム・フラクション。
【請求項１４】
前記セラム・フラクションはタンパク質フリーか、または実質フリーである、請求項８に従う生物活性セラム・フラクション。
【請求項１５】
前記セラム・フラクションは0.675重量％未満の合計タンパク質含量しか含まない、請求項１４に従う生物活性セラム・フラクション。
【請求項１６】
前記セラム・フラクションは0.500重量％未満の合計タンパク質含量しか含まない、請求項１４に従う生物活性セラム・フラクション。
【請求項１７】
前記セラム・フラクションは、プレゴンフリーか、または実質フリーであり、およびタンパク質フリーか、または実質フリーである、請求項８に従う生物活性セラム・フラクション。
【請求項１８】
前記セラム・フラクションには、抗酸化活性、抗炎症活性、抗加齢活性、および抗刺激活性からなる群より選ばれる生物活性特性が含まれる、請求項８に従う生物活性セラム・フラクション。
【請求項１９】
請求項８−１８のいずれか一項に従う生物活性セラム・フラクションを含む生産物。
【請求項２０】
前記生産物には、クリーム、ドレッシング、ゲル、ローション、軟膏、液体、スプレーアプリケータ、およびそれらの組合せからなる群より選ばれるリーブ-オン生産物が含まれる、請求項１９に従う生産物。
【請求項２１】
前記生産物には、ハンド・ディッシュウォッシング洗剤、液状ハンドソープ、バーソープ、ボディーウォッシュ、シャンプー、多目的クレンザー、およびそれらの組合せからなる群より選ばれるウォッシュ-オフ生産物が含まれる、請求項１９に従う生産物。
【請求項２２】
前記生産物には、機能性食物または機能性飲物が含まれる、請求項１９に従う生産物。
【請求項２３】
前記生産物には、ニュートラスーティカルが含まれる、請求項１９に従う生産物。
【請求項２４】
酸化防止剤、キレート剤、保存剤、安定剤、およびそれらの混合物からなる群より選ばれる添加剤がさらに含まれる、請求項１９に従う生産物。
【請求項２５】
前記添加剤は、メタ重亜硫酸ナトリウム、ソルビン酸カリウム、安息香酸ナトリウム、メチルパラベンナトリウム、EDTA四ナトリウム、EDTA二ナトリウム、グリセリン、プロピレングリコール、ジ-プロピレングリコール、ブチレングリコール、ペンチレングリコール、ヘキシレングリコール、カプリリルグリコール、およびそれらの混合物からなる群より選ばれる安定剤である、請求項２４に従う生産物。
【請求項２６】
パーソナルケア用途のための、請求項８−１８のいずれか一項に従う生物活性セラム・フラクションを含む生産物であって、
抗炎症性、抗刺激性、および／または抗加齢活性を有する、生産物。
【請求項２７】
新鮮なニンジン（Panax spp.）植物に由来する生物活性セラム・フラクションを作成する方法であって、次のステップ：
a．新鮮なニンジン（Panax spp.）植物を、植物の細胞内分散物を産生するために加工すること；
b．細胞内分散物を、生物活性セラム・フラクションおよび不安定化後沈殿物を産生するために不安定化処理プロトコルに供すること；および
c．前記生物活性セラム・フラクションを分離すること
を含む、方法。
【請求項２８】
前記不安定化処理プロトコルには、細胞内分散物が、細胞内分散物の安定性を低下させるために有効な電磁波により処理されることが含まれる、請求項２７に従う方法。
【請求項２９】
前記電磁波は約300MHzおよび50GHzの間の周波数で適用される、請求項２８に従う方法。
【請求項３０】
前記電磁波は、処理の間の低周波誘電率の実成分の細胞内分散物の値
（外字）
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が、前記不安定化処理に先立つその値に比べて約10および40の間だけ減少されるようにパラメータの下で適用される、請求項２８に従う方法。
【請求項３１】
分離された生物活性セラム・フラクションに添加物を組み合わせることをさらに含み、前記添加剤は、抗酸化剤、キレート剤、保存剤、安定剤、およびそれらの混合物からなる群より選ばれる、請求項２７に従う方法。
【請求項３２】
前記添加剤は、メタ重亜硫酸ナトリウム、ソルビン酸カリウム、安息香酸ナトリウム、メチルパラベンナトリウム、EDTA四ナトリウム、EDTA二ナトリウム、グリセリン、プロピレングリコール、ジ-プロピレングリコール、ブチレングリコール、ペンチレングリコール、ヘキシレングリコール、カプリリルグリコール、およびそれらの混合物からなる群より選ばれる安定剤である、請求項３１に従う方法。
【請求項３３】
前記新鮮なニンジン植物は、全体のニンジン植物、ニンジン植物の一部分、またはニンジン植物の複数の異なる部分からなる群より選ばれる形態において提供される、請求項２７に従う方法。
【請求項３４】
前記ニンジン植物の一部分は、根茎、根、葉、茎、花、および実からなる群より選ばれる、請求項３３に従う方法。
【請求項３５】
前記セラム・フラクションはプレゴンフリーか、または実質フリーである、請求項２７に従う方法。
【請求項３６】
前記セラム・フラクションは100ppm未満の合計プレゴン含量しか含まない、請求項３５に従う方法。
【請求項３７】
前記セラム・フラクションは25ppm未満の合計プレゴン含量しか含まない、請求項３５に従う方法。
【請求項３８】
前記セラム・フラクションはタンパク質フリーか、または実質フリーである、請求項２７に従う方法。
【請求項３９】
前記セラム・フラクションは0.675重量％未満の合計タンパク質含量しか含まない、請求項３８に従う方法。
【請求項４０】
前記セラム・フラクションは0.500重量％未満の合計タンパク質含量しか含まない、請求項３８に従う方法。
【請求項４１】
前記セラム・フラクションは、プレゴンフリーか、または実質フリーであり、およびタンパク質フリーか、または実質フリーである、請求項２７に従う方法。
【請求項４２】
前記セラム・フラクションには、抗酸化活性、抗炎症活性、抗加齢活性、および抗刺激活性からなる群より選ばれる生物活性特性が含まれる、請求項２７に従う方法。
【請求項４３】
請求項２７−４２のいずれか一項に従う方法により生産されるニンジン（Panax spp.）由来の生物活性セラム・フラクション。
【請求項４４】
請求項４３に従う生物活性セラム・フラクションを含む生産物。
【国際調査報告】
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