(57)【要約】  本発明は、ＭＥＴエクソン１４スキッピングまたはＭＥＴエクソン１４スキッピング表現型を有する腫瘍を有する癌を治療する方法であって、そのような治療を必要とする患者に有効量の式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む、方法を提供する。2019536771.tif 000004
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＭＥＴエクソン１４スキッピングまたはＭＥＴエクソン１４スキッピング表現型を有する腫瘍を有する癌を治療する方法であって、そのような治療を必要とする患者に有効量のＮ−（３−フルオロ−４−（１−メチル−６−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−５−イルオキシ）フェニル）−１−（４−フルオロフェニル）−６−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−カルボキサミドの化合物、またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む、方法。
【請求項２】
前記癌が、胃癌または肺癌である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記癌が、肺癌である、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記癌が、非小細胞肺癌である、請求項１〜３のいずれかに記載の方法。
【請求項５】
療法における、Ｎ−（３−フルオロ−４−（１−メチル−６−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−５−イルオキシ）フェニル）−１−（４−フルオロフェニル）−６−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−カルボキサミド、またはその薬学的に許容される塩の使用。
【請求項６】
ＭＥＴエクソン１４スキッピングまたはＭＥＴエクソン１４スキッピング表現型を有する腫瘍を有する癌を治療するための、Ｎ−（３−フルオロ−４−（１−メチル−６−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−５−イルオキシ）フェニル）−１−（４−フルオロフェニル）−６−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−カルボキサミド、またはその薬学的に許容される塩の使用。
【請求項７】
ＭＥＴエクソン１４スキッピングまたはＭＥＴエクソン１４スキッピング表現型を有する腫瘍を有する癌を治療するための薬剤の製造のための、Ｎ−（３−フルオロ−４−（１−メチル−６−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−５−イルオキシ）フェニル）−１−（４−フルオロフェニル）−６−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−カルボキサミド、またはその薬学的に許容される塩の使用。
【請求項８】
前記癌が、胃癌または肺癌である、請求項５〜７のいずれかに記載の使用。
【請求項９】
前記癌が、肺癌である、請求項５〜７のいずれかに記載の使用。
【請求項１０】
前記癌が、非小細胞肺癌である、請求項５〜７のいずれかに記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＭＥＴエクソン１４スキッピングまたはＭＥＴエクソン１４スキッピング表現型を担持する腫瘍を有する患者において、肺癌および胃癌のような特定の障害を治療するために、メレスチニブ、またはその薬学的に許容される塩、ＩＩ型ＭＥＴキナーゼ阻害剤を使用する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
ＭＥＴチロシン受容体キナーゼの過剰発現および活性化は、多くの種類の癌における腫瘍増殖の発癌性ドライバーであり得る。ＭＥＴシグナル伝達経路は、細胞増殖、生存、アポトーシス、散乱および運動性、浸潤、ならびに血管新生を含む、新形成を支持するために破壊され得る多種多様な正常細胞機能を制御する。ＭＥＴ過剰発現（遺伝子増幅の有無にかかわらず）、異常自己分泌または傍分泌リガンド産生、およびミスセンスＭＥＴ突然変異は、腫瘍におけるＭＥＴ経路の活性化をもたらすメカニズムであり、予後転帰不良と関連している。
【０００３】
異なるゲノム変化は、ＭＥＴのイントロンおよび／またはエクソンセグメントにおいて起こり得、エクソン１４がスキッピングされる（すなわち、エクソン１４が大部分または完全に欠失される）ＭＥＴの選択的スプライシング転写物をもたらし得る。ＭＥＴエクソン１４スキッピング変異は、分解のためにＭＥＴを標的とする、ユビキチンリガーゼＣＢＬの結合部位であるＹ１００３リン酸化部位を欠くタンパク質をもたらす。さらに、Ｙ１００３、Ｄ１００２、またはＲ１００４における単一点突然変異によっても、ユビキチンリガーゼＣＢＬは、エクソン１４のスキッピング（すなわち、ＭＥＴエクソン１４スキッピング表現型）なしに、ＭＥＴ受容体に結合することができないであろう。これは、増加した安定性および発癌能を有するＭＥＴタンパク質をもたらす。ＭＥＴエクソン１４スキッピング変異またはエクソン１４スキッピング表現型は、腺扁平上皮、腺癌、肉腫様、扁平上皮細胞、大細胞、および小細胞組織型において観察されている。具体的には、ＭＥＴエクソン１４スキッピングは、肺腺癌、ならびに神経芽細胞腫、胃癌、および結腸癌細胞株において検出されている。ＭＥＴエクソン１４スキッピング変異を有する腫瘍は、臨床症例報告およびシリーズにおいて、ＭＥＴ阻害剤での治療に応答することが報告されている。
【０００４】
ＭＥＴエクソン１４スキッピングまたはＭＥＴエクソン１４スキッピング表現型は、肺癌における標的化可能な突然変異であり、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）患者の約３〜６％で報告されている。肺癌は、依然として米国で３番目に多く見られる癌であり、世界中の男性および女性の両方で癌による死亡の主要原因である。肺癌の２つの主な種類は、小細胞肺癌およびＮＳＣＬＣである。肺癌を有する患者の大多数は診断時に進行性および／または転移性疾患を有し、治癒目的で治療された患者の大多数は再発する。これらの患者は、治癒の見込みがない、進行した手術不可能なステージの癌を呈する。症状を改善し、生活の質を最適化し、生存期間を延長するために、治療が提供される。
【０００５】
ＭＥＴエクソン１４スキッピングまたはＭＥＴエクソン１４スキッピング表現型はまた、胃癌、胃の内壁に発生する悪性腫瘍における標的化可能な突然変異である。胃癌は、それらが発生する組織の種類に従って分類され、最も一般的な種類は、腺癌であり、全ての胃癌の９０％超を占める。胃食道接合部（ＧＥＪ）の癌腫を含む食道の腺癌は、最も急上昇している悪性腫瘍の１つであり、予後不良と関連している。他の形態の胃癌には、リンパ腫および肉腫が含まれる。胃癌は、早期に発見および治療されれば治癒し得るが、残念なことに、後期に発見されることが多い。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
ＭＥＴエクソン１４スキッピングまたはＭＥＴエクソン１４スキッピング表現型を担持する腫瘍を有する癌の治療が依然として必要とされている。ＭＥＴエクソン１４スキッピングまたはＭＥＴエクソン１４スキッピング表現型を担持する腫瘍は、ＭＥＴ阻害剤に対する応答を有し得る。したがって、メレスチニブ、またはその薬学的に許容される塩は、ＭＥＴエクソン１４スキッピングまたはＭＥＴエクソン１４スキッピング表現型を担持する腫瘍を有する癌患者のための治療選択肢を提供し得る。
【０００７】
以下の構造式（Ｉ）によって表される、メレスチニブとしても知られている、Ｎ−（３−フルオロ−４−（１−メチル−６−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−５−イルオキシ）フェニル）−１−（４−フルオロフェニル）−６−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−カルボキサミド（ＣＡＳ番号１２０６７９９−１５−６）は、低分子ＩＩ型ＭＥＴキナーゼ阻害剤である。メレスチニブ、ならびに固形および非固形腫瘍のような腫瘍疾患の治療を含む、この化合物およびその薬学的に許容される塩（複数可）を作製および使用する方法は、ＷＯ２０１０／０１１５３８に開示されている。さらに、メレスチニブは現在、ＮＳＣＬＣおよび固形腫瘍の患者を対象とした第２相臨床試験で評価中である（ＣｌｉｎｉｃａｌＴｒｉａｌｓ．ｇｏｖ  ＮＣＴ０２９２０９９６参照）。
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【課題を解決するための手段】
【０００８】
したがって、本発明は、ＭＥＴエクソン１４スキッピングまたはＭＥＴエクソン１４スキッピング表現型を担持する腫瘍を有する癌を治療する方法であって、そのような治療を必要とする患者に有効量の式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む、方法を提供する。好ましくは、癌は、肺癌、神経芽細胞腫、胃癌、または結腸癌である。より好ましくは、癌は、胃癌または肺癌である。さらにより好ましくは、癌は、肺癌である。最も好ましくは、癌は、ＮＳＣＬＣである。
【０００９】
さらに、本発明は、特にＭＥＴエクソン１４スキッピングまたはＭＥＴエクソン１４スキッピング表現型を担持する腫瘍を有する癌を治療するための、そのような治療を必要とする患者に有効量の式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む、療法における、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容される塩の使用を提供する。好ましくは、癌は、肺癌、神経芽細胞腫、胃癌、または結腸癌である。より好ましくは、癌は、胃癌または肺癌である。さらにより好ましくは、癌は、肺癌である。最も好ましくは、癌は、ＮＳＣＬＣである。さらなる実施形態では、本発明は、ＭＥＴエクソン１４スキッピングまたはＭＥＴエクソン１４スキッピング表現型を担持する腫瘍を有する癌を治療するための薬剤の製造のための、本発明の化合物の使用を提供する。好ましくは、癌は、肺癌、神経芽細胞腫、胃癌、または結腸癌である。より好ましくは、癌は、胃癌または肺癌である。さらにより好ましくは、癌は、肺癌である。最も好ましくは、癌は、ＮＳＣＬＣである。
【００１０】
本発明のいくつかの実施形態では、癌患者は、ＭＥＴエクソン１４スキッピング変異またはＭＥＴエクソン１４表現型を有する腫瘍を有することに基づいて、本明細書に開示される治療に選択される。好ましくは、癌患者の腫瘍のＭＥＴエクソン１４スキッピング変異状態は、次世代遺伝子配列決定方法論によって決定される。より好ましくは、癌患者の腫瘍のＭＥＴエクソン１４スキッピング変異またはＭＥＴエクソン１４表現型は、ハイブリダイゼーション捕捉次世代配列決定を使用することによって決定される（例えば、Ｓｃｈｒｏｃｋ，Ａ．Ｂ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｔｈｏｒａｃｉｃ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ  ２０１６，９（１１）：１４９３−１５０２参照）。より好ましくは、癌患者の腫瘍のＭＥＴエクソン１４表現型は、ｎＣｏｕｎｔｅｒ  Ａｎａｌｙｓｉｓ  Ｓｙｓｔｅｍ（ＮＡＮＯＳＴＲＩＮＧ（登録商標）Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）、ｃＤＮＡの増幅または生成を伴わない多重化デジタルｍＲＮＡプロファイリングのための蛍光ベースのプラットフォームを使用することによって決定される（例えば、Ｇｅｉｓｓ，Ｇ．Ｋ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ２００８，２６：３１７−３２５参照）。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
本明細書で使用される場合、「治療する」、「治療するため」、または「治療」という用語は、既存の症状、障害、状態、または疾患の進行または重症度を抑制、減速、停止、軽減、または逆転させることを指す。
【００１２】
本明細書で使用される場合、「患者」という用語は、哺乳動物、好ましくはヒトを指す。
【００１３】
本明細書で使用される場合、「癌」および「癌性」という用語は、典型的には未制御細胞増殖を特徴とする患者における生理学的状態を指すか、または記載する。この定義には、良性および悪性の癌が含まれる。「早期癌」または「早期腫瘍」は、進行癌もしくは転移癌ではないか、またはステージ０、Ｉ、もしくはＩＩ癌として分類される癌を意味する。癌の例としては、胃癌、好ましくは胃食道接合部の癌腫、および肺癌、好ましくはＮＳＣＬＣが挙げられるが、これらに限定されない。
【００１４】
本明細書で使用される「ＭＥＴエクソン１４スキッピング変異」、「エクソン１４スキッピング変異」、「ＭＥＴエクソン１４スキッピング」、「エクソン１４スキッピング」という語句、またはそれらの文法的変形は、それによって発現されるｍＲＮＡ転写物の翻訳後、エクソン１４が大部分または完全に欠失されるＭＥＴポリペプチドの細胞発現をもたらす、ＭＥＴの遺伝子における体細胞突然変異を指す。
【００１５】
本明細書で使用される「ＭＥＴエクソン１４スキッピング表現型」、「エクソン１４スキッピング表現型」という語句、またはそれらの文法的変形は、それによって発現されるｍＲＮＡ転写物の翻訳後、Ｙ１００３、Ｄ１００２、またはＲ１００４で突然変異したＭＥＴポリペプチドの細胞発現をもたらし、ユビキチンリガーゼＣＢＬを結合する低下した能力を有し、増加した安定性および発癌能を有するＭＥＴタンパク質をもたらす、ＭＥＴの遺伝子における任意の単一体細胞点突然変異を指す。
【００１６】
本明細書で使用される場合、「有効量」という用語は、式（Ｉ）の化合物、またはその薬学的に許容される塩の量または用量を指し、患者への投与後、診断または治療下にある患者において所望の効果を提供する。患者のための有効量を決定する際には、患者のサイズ、年齢、および全体的な健康状態、関与する特定の疾患または障害、疾患または障害の関与の程度または重症度、個別の患者の応答、投与される特定の化合物、投与の様式、投与される調製物のバイオアベイラビリティ特性、選択される用量レジメン、併用薬剤の使用、ならびに他の関連する状況を含むが、これらに限定されない、多数の要因が、担当診断医によって考慮される。
【００１７】
式（Ｉ）の化合物およびその薬学的に許容される塩（複数可）は、一般に広い投与量範囲にわたって有効である。例えば、個別の薬剤の１日当たりの投与量は、通常、約６０ｍｇ／日〜約１６０ｍｇ／日、好ましくは約８０ｍｇ／日〜約１６０ｍｇ／日、約１２０ｍｇ／日〜約１６０ｍｇ／日の範囲内に含まれる。最も好ましくは、個別の薬剤の１日当たりの投与量は、通常、約８０ｍｇ／日〜約１２０ｍｇ／日の範囲内に含まれる。最も好ましくは、式（Ｉ）の化合物は、１日当たり６０ｍｇ、８０ｍｇ、１２０ｍｇ、および１６０ｍｇから選択される１日当たりの用量で使用される。最も好ましくは、式（Ｉ）の化合物は、８０ｍｇ〜１２０ｍｇから選択される１日当たりの用量で使用される。
【実施例】
【００１８】
実施例１
ＭＥＴエクソン１４スキッピングを担持する異種移植腫瘍モデルにおける単剤メレスチニブ（ＬＹ２８０１６５３）の評価
ヒト胃癌のＨｓ７４６ｔ由来異種移植マウスモデルにおけるメレスチニブの有効性を決定するために、本質的に以下に記載されるように行われる試験が実施され得る。Ｈｓ７４６ｔは、ＭＥＴエクソン１４スキッピングおよびＭＥＴ増幅を有することが知られている胃癌細胞株である（Ａｓａｏｋａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ｒｅｓ  Ｃｏｍｍｕｎ  ２０１０，３９４：１０４２−１０４６）。
【００１９】
試験デザインおよび方法：
インビトロアッセイ：ウエスタンブロッティング
Ｈｓ７４６ｔ細胞を、ＡＴＣＣ（登録商標）（Ｍａｎａｓｓａｓ、ＶＡ）から入手し、Ｌ−グルタミンおよび１０％ウシ胎児血清（ＦＢＳ）を含むＤＭＥＭ培地中で維持する。野生型ＭＥＴを発現するＭＫＮ４５細胞を、ＪＣＲＢ  Ｃｅｌｌ  Ｂａｎｋ（日本）から入手し、Ｌ−グルタミン、１０％ＦＢＳ、およびピルビン酸ナトリウムを含むＲＰＭＩ１６４０培地中で維持する。細胞を３７℃、５％ＣＯ２で増殖させる。細胞を６ウェルプレートに１００万細胞／ウェルで播種し、一晩インキュベートする。細胞をメレスチニブと２時間インキュベートし、次いでプロテアーゼ阻害剤を含有する放射免疫沈降アッセイ（ＲＩＰＡ）緩衝液中で溶解する。細胞溶解物のタンパク質濃度は、製造者の指示に従って、ＤＣ（商標）タンパク質アッセイ（ＢｉｏＲａｄ）で測定される。溶解物を、Ｎｏｖｅｘ（登録商標）４〜２０％トリスグリシンゲル（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）上で電気泳動させ、ポリビニリデンジフルオリド（ＰＶＤＦ）膜上に移す。ブロットは、総ＭＥＴ（クローンＤ１Ｃ２、Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（登録商標）、カタログ番号８１９８）、ホスホ−ＭＥＴ（Ｙ１２３４／１２３５、クローンＤ２６、Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（登録商標）、カタログ番号３０７７）、およびホスホ−ＭＥＴ（Ｙ１００３、クローン１３Ｄ１１、Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（登録商標）、カタログ番号３１３５）についてプローブされる。モノクローナル抗β−アクチン（クローンＡＣ−１５、ＳＩＧＭＡ−ＡＬＤＲＩＣＨ（登録商標）、カタログ番号Ａ５４４１）をローディングコントロールとして使用する。ホースラディッシュペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）結合二次抗体とインキュベートした後、ブロットを化学発光基質で展開し、Ｌｕｍｉ−Ｉｍａｇｅｒ（Ｒｏｃｈｅ）上で画像化する。
【００２０】
インビトロアッセイ：細胞増殖アッセイ
Ｈｓ７４６ｔ細胞を、ポリ−Ｄ−リジン、９６ウェルプレート、３０００細胞／ウェル上に播種し、３７℃の５％ＣＯ２インキュベーター中で一晩付着させる。メレスチニブを連続的に１：３に希釈し、三重に細胞に添加する。１２０時間後、細胞生存率を、製造者の指示に従って、ＣＥＬＬ  ＴＩＴＥＲ−ＧＬＯ（登録商標）Ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ  Ｃｅｌｌ  Ｖｉａｂｉｌｉｔｙ  Ａｓｓａｙ（Ｐｒｏｍｅｇａ）で測定する。データをＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ  ｖ６ソフトウェアで分析した。アッセイは、二重の実験で行われる。
【００２１】
インビボＨｓ７４６ｔ異種移植モデル
雌無胸腺ヌードマウス（Ｅｎｖｉｇｏ）をこの試験に使用する。食物および水は自由に摂取できる。動物は、いずれの実験操作の前にも１週間順応させる。この試験は、ＡＡＡＬＡＣの認定を受けた施設のガイドラインに従って実施される。
【００２２】
メレスチニブは、１０％ＰＥＧ４００／９０％（水中２０％カプチゾール）中の溶液として製剤化される。溶液は、７日毎に新たに調製される。
【００２３】
Ｈｓ７４６ｔ細胞を培養で増殖させ、採取し、ハンクス平衡塩類溶液（ＨＢＳＳ、ＧＩＢＣＯ（登録商標））中で洗浄する。ＨＢＳＳ中の約５×１０６細胞を、動物の後横腹に皮下移植する。腫瘍が１５０〜２００ｍｍ３の平均サイズに達したときに、動物を無作為に７つの群に分ける。メレスチニブを調製し、経口胃管栄養法によって６または１２ｍｇ／ｋｇの用量で１日１回のスケジュールで２１日間投与する。
【００２４】
腫瘍が２０００ｍｍ３より大きくなったときに、ＣＯ２および頸椎脱臼を用いて動物を屠殺する。
【００２５】
統計分析
腫瘍体積および体重は、１週間に２回測定する。７匹中３匹のビヒクル処置動物が腫瘍負荷のために試験から除外されたときに、統計分析を行う。腫瘍体積をログスケールに変換して、時間および処置群にわたる分散を均等にする。ログ体積データを、ＳＡＳソフトウェア（バージョン９．３）のＭＩＸＥＤ手順を用いる時間および処置による分散の二元配置反復測定分析で分析する。反復測定の相関モデルは空間電力である。各時点で処置群を対照群と比較する。各処置群について別々にＭＩＸＥＤ手順も使用して、各時点での調整された平均および標準誤差を計算する。両方の分析は、各動物内の自己相関、および動物が試験の終了前に除外されるか、または失われるときに生じるデータの喪失を説明する。時間に対する各処置群の調整された平均および標準誤差をプロットする。
【００２６】
キャリパーで腫瘍増殖を測定する。式、体積（ｍｍ３）＝Ｌ×Ｗ２（π／６）によって腫瘍体積を計算し、式中、Ｌは大きいほうの直径を表し、Ｗは小さいほうの直径を表す。式、Ｔ／Ｃ％＝１００ｘΔＴ／ΔＣを使用してＴ／Ｃ％を計算する。式中、ΔＴ＝試験の最終日の薬物処置群の平均腫瘍体積−最初の投与日の薬物処置群の平均腫瘍体積、およびΔＣ＝試験の最終日の対照群の平均腫瘍体積−最初の投与日の対照群の平均腫瘍体積。式、（観察日の体重−１２日目の体重）／１２日目の体重ｘ１００によって体重の変化を計算する。ＪＭＰ（ｖ．９．０．３）統計パッケージ（ＳＡＳ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  Ｉｎｃ．，Ｃａｒｙ、ＮＣ、ＵＳＡ）を用いるＲＭ  ＡＮＯＶＡによって処置群間の有意差についての検定を計算する。
【００２７】
結果および考察：
Ｈｓ７４６ｔ胃癌細胞株は、イントロン１４＋１Ｇ＞ＴでＭＥＴ中にホモ接合性ゲノムスプライシング突然変異を保有し、成熟ｍＲＮＡ中のエクソン１４のスキッピングをもたらす（Ａｓａｏｋａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ｒｅｓ  Ｃｏｍｍｕｎ  ２０１０，３９４：１０４２−１０４６）。ＭＥＴ突然変異対立遺伝子もまた高度に増幅されている。インビトロ培養細胞からの溶解物に対して行われたウエスタンブロットは、野生型ＭＥＴを発現するＭＫＮ４５細胞からの対応するバンドよりわずかに速く移動するＭＥＴタンパク質に対応する強いバンドを確認し、より小さいサイズのタンパク質を示す。両方の細胞株は、メレスチニブ処置によって阻害される、Ｙ１２３４／１２３５位（エクソン１４の外側）におけるリン酸化ＭＥＴを発現する。しかしながら、Ｈｓ７４６ｔは、Ｙ１００３における（エクソン１４中に存在する）リン酸化ＭＥＴを発現せず、ＲＮＡレベルでＭＥＴエクソン１４の欠失を確認する。５日間の曝露後にＣＥＬＬ  ＴＩＴＥＲ−ＧＬＯ（登録商標）アッセイによって測定される、インビトロＨｓ７４６ｔ細胞増殖に対するメレスチニブの効果は、メレスチニブについて３３．４ｎＭ（ｎ＝２）のＩＣ５０を示す。
【００２８】
この試験では、メレスチニブは、Ｈｓ７４６ｔ由来マウス異種移植モデルにおける抗腫瘍効果について評価される。このモデルは、対照群において高レベルの腫瘍増殖分散を有する。ビヒクル対照群（ｎ＝７）では、１匹の動物からの腫瘍は自然退縮を示し、１匹の動物は試験の終了前に腫瘍体積が２０００ｍｍ３を超えたために除外されなければならなかった。
【００２９】
６ｍｇ／ｋｇ用量のメレスチニブは最初は腫瘍退縮をもたらすが、腫瘍は投与開始後１０日目からサイズが増加し始める。試験の終了時に、７つ中５つの腫瘍が再増殖の兆候（２つの連続するより大きい腫瘍体積測定）を示すが、抗腫瘍活性（Ｔ／Ｃ＝１８．３％）は依然としてビヒクルとは有意に異なる（ｐ＝０．０３３）。１２ｍｇ／ｋｇの用量でのメレスチニブでの処置は、試験の終了まで継続的な腫瘍退縮（９１．８％）をもたらす。この用量では、７匹中６匹の動物が、６４日間の投与で完全奏効を得ることが示されている。腫瘍再増殖は観察されず、処置の２ヶ月以内に治療抵抗性を示さない。処置が終了した後、腫瘍再増殖は５週間にわたって観察されず、これらの動物が完全奏効を得たことを示した。
【００３０】
メレスチニブで処置した群にはビヒクル対照群と比較して体重に有意差があるが、いずれの動物にも目立った健康問題はない。体重差のいくらかは、ビヒクル群における大きな腫瘍体積に起因し得る。
【００３１】
これらの結果の全てを総合すると、Ｈｓ７４６ｔ異種移植モデルにおけるメレスチニブの効果は、処置を通して有意な腫瘍退縮をもたらす。
【手続補正書】
【提出日】令和1年5月10日(2019.5.10)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
療法における、Ｎ−（３−フルオロ−４−（１−メチル−６−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−５−イルオキシ）フェニル）−１−（４−フルオロフェニル）−６−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−カルボキサミド、またはその薬学的に許容される塩の使用。
【請求項２】
ＭＥＴエクソン１４スキッピングまたはＭＥＴエクソン１４スキッピング表現型を有する腫瘍を有する癌を治療するための、Ｎ−（３−フルオロ−４−（１−メチル−６−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−５−イルオキシ）フェニル）−１−（４−フルオロフェニル）−６−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−カルボキサミド、またはその薬学的に許容される塩の使用。
【請求項３】
ＭＥＴエクソン１４スキッピングまたはＭＥＴエクソン１４スキッピング表現型を有する腫瘍を有する癌を治療するための薬剤の製造のための、Ｎ−（３−フルオロ−４−（１−メチル−６−（１Ｈ−ピラゾール−４−イル）−１Ｈ−インダゾール−５−イルオキシ）フェニル）−１−（４−フルオロフェニル）−６−メチル−２−オキソ−１，２−ジヒドロピリジン−３−カルボキサミド、またはその薬学的に許容される塩の使用。
【請求項４】
前記癌が、胃癌または肺癌である、請求項１〜３のいずれかに記載の使用。
【請求項５】
前記癌が、肺癌である、請求項１〜３のいずれかに記載の使用。
【請求項６】
前記癌が、非小細胞肺癌である、請求項１〜３のいずれかに記載の使用。
【国際調査報告】
2019536771.tif 000005
2019536771.tif 000006
2019536771.tif 000007