(57)【要約】  本発明は、標的化部分と、核酸と、任意の連結基とを含むコンジュゲート、ならびに、そのコンジュゲートを調製するのに有用である合成中間体及び合成方法を提供する。このコンジュゲートは、治療用核酸を肝臓に導き、肝炎（例えばＢ型肝炎及びＤ型肝炎）を含む肝疾患を治療するのに有用である。
2019513770.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記の式（Ｉ）の化合物であって、
【化１】
2019513770.tif 000182
式中、
Ｒ１が、標的化リガンドであり、
Ｌ１が、存在しないか、もしくは連結基であり、
Ｌ２が、存在しないか、もしくは連結基であり、
Ｒ２が、核酸であり、
環Ａが、存在しないか、３〜２０員のシクロアルキル、５〜２０員のアリール、５〜２０員のヘテロアリールもしくは３〜２０員のヘテロシクロアルキルであり、
各ＲＡが独立して、水素、ヒドロキシ、ＣＮ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、−Ｃ１−２アルキル−ＯＲＢ、Ｃ１−１０アルキルＣ２−１０アルケニル及びＣ２−１０アルキニルからなる群から選択されており、前記Ｃ１−１０アルキルＣ２−１０アルケニルと前記Ｃ２−１０アルキニルが任意に応じて、ハロ、ヒドロキシ及びＣ１−３アルコキシから独立して選択した１つ以上の基で置換されており、
ＲＢが、水素、保護基、固体支持体への共有結合、もしくは固体支持体に結合している連結基への結合であり、
ｎが、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９もしくは１０である前記化合物、
またはその塩。
【請求項２】
前記式中、
Ｒ１が、標的化リガンドであり、
Ｌ１が、存在しないか、もしくは連結基であり、
Ｌ２が、存在しないか、もしくは連結基であり、
Ｒ２が、核酸であり、
環Ａが、存在しないか、３〜２０員のシクロアルキル、５〜２０員のアリール、５〜２０員のヘテロアリールもしくは３〜２０員のヘテロシクロアルキルであり、
各ＲＡが独立して、水素、ヒドロキシ、ＣＮ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、−Ｃ１−２アルキル−ＯＲＢ、ならびにハロ、ヒドロキシ及びＣ１−３アルコキシから独立して選択した１つ以上の基で任意に応じて置換されているＣ１−８アルキルからなる群から選択されており、
ＲＢが、水素、保護基、固体支持体への共有結合、もしくは固体支持体に結合している連結基への結合であり、
ｎが、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９もしくは１０である、請求項１に記載の化合物、
またはその塩。
【請求項３】
前記式中、Ｒ１が、−Ｃ（Ｈ）（３−ｐ）（Ｌ３−糖）ｐであり、
その各Ｌ３が独立して、連結基であり、
ｐが、１、２もしくは３であり、
糖が、単糖もしくは二糖である、請求項２に記載の化合物、
またはその塩。
【請求項４】
前記糖が、
【化２】
2019513770.tif 000183
であって、
式中、
Ｘが、ＮＲ３であり、Ｙが、−（Ｃ＝Ｏ）Ｒ４、−ＳＯ２Ｒ５及び−（Ｃ＝Ｏ）ＮＲ６Ｒ７から選択されているか、もしくはＸが、−（Ｃ＝Ｏ）−であり、Ｙが、ＮＲ８Ｒ９であり、
Ｒ３が、水素もしくは（Ｃ１−Ｃ４）アルキルであり、
Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８及びＲ９がそれぞれ独立して、水素、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）ハロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、ならびに、ハロ、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、（Ｃ１−Ｃ４）ハロアルキル、（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ及び（Ｃ１−Ｃ４）ハロアルコキシからなる群から独立して選択した１つ以上の基で任意に応じて置換されている（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキルからなる群から選択されており、
Ｒ１０が、−ＯＨ、−ＮＲ８Ｒ９もしくは−Ｆであり、
Ｒ１１が、−ＯＨ、−ＮＲ８Ｒ９、−Ｆ、もしくは、ハロ、ヒドロキシル、カルボキシル、アミノ、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、（Ｃ１−Ｃ４）ハロアルキル、（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ及び（Ｃ１−Ｃ４）ハロアルコキシからなる群から独立して選択した１つ以上の基で任意に応じて置換されている５員の複素環である、請求項３に記載の化合物、
またはその塩。
【請求項５】
前記糖が、
【化３】
2019513770.tif 000184
からなる群から選択されている、請求項３もしくは４に記載の化合物、
またはその塩。
【請求項６】
前記糖が、
【化４】
2019513770.tif 000185
である、請求項３〜５のいずれか１項に記載の化合物、
またはその塩。
【請求項７】
前記各Ｌ３のそれぞれが独立して、炭素原子を０〜５０個有する二価の分岐鎖状もしくは非分岐鎖状の飽和もしくは不飽和炭化水素鎖であり、前記炭化水素鎖の前記炭素原子の１つ以上（例えば、１個、２個、３個もしくは４個）が任意に応じて、−Ｏ−、−ＮＲＸ−、−ＮＲＸ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲＸ−もしくは−Ｓ−によって置換されており、前記ＲＸが、水素もしくは（Ｃ１−Ｃ６）アルキルであり、前記炭化水素鎖が任意に応じて、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイル、（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイルオキシ、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシカルボニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルチオ、アジド、シアノ、ニトロ、ハロ、ヒドロキシ、オキソ（＝Ｏ）、カルボキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール及びヘテロアリールオキシから選択した１つ以上（例えば、１個、２個、３個もしくは４個）の置換基で置換されている、請求項３〜６のいずれか１項に記載の化合物、またはその塩。
【請求項８】
前記各Ｌ３のそれぞれが独立して、炭素原子を１〜２０個有する二価の分岐鎖状もしくは非分岐鎖状の飽和もしくは不飽和炭化水素鎖であり、前記炭化水素鎖の前記炭素原子の１つ以上（例えば、１個、２個、３個もしくは４個）が任意に応じて、−Ｏ−、−ＮＲＸ−、−ＮＲＸ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲＸ−もしくは−Ｓ−によって置換されており、前記ＲＸが、水素もしくは（Ｃ１−Ｃ６）アルキルであり、前記炭化水素鎖が任意に応じて、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイル、（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイルオキシ、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシカルボニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルチオ、アジド、シアノ、ニトロ、ハロ、ヒドロキシ、オキソ（＝Ｏ）、カルボキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール及びヘテロアリールオキシから選択した１つ以上（例えば、１個、２個、３個もしくは４個）の置換基で置換されている、請求項３〜７のいずれか１項に記載の化合物、またはその塩。
【請求項９】
前記Ｌ３が
【化５】
2019513770.tif 000186
である、請求項３〜８のいずれか１項に記載の化合物、
またはその塩。
【請求項１０】
前記Ｒ１が、
【化６】
2019513770.tif 000187
である、請求項２〜９のいずれか１項に記載の化合物、
またはその塩。
【請求項１１】
前記Ｒ１が
【化７】
2019513770.tif 000188
であり、
式中、
Ｇが、−ＮＨ−もしくは−Ｏ−であり、
ＲＣが、水素、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）ハロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイル、（Ｃ３−Ｃ２０）シクロアルキル、（Ｃ３−Ｃ２０）複素環、アリール、ヘテロアリール、単糖、二糖もしくは三糖であり、前記シクロアルキル、複素環、アリール、ヘテロアリール及び糖が、ハロ、カルボキシル、ヒドロキシル、アミノ、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、（Ｃ１−Ｃ４）ハロアルキル、（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ及び（Ｃ１−Ｃ４）ハロアルコキシからなる群から独立して選択した１つ以上の基で任意に応じて置換されている、
請求項２に記載の化合物、
またはその塩。
【請求項１２】
前記ＲＣが、
【化８】
2019513770.tif 000189
である、請求項１１に記載の化合物、
またはその塩。
【請求項１３】
前記Ｒ１が、
【化９】
2019513770.tif 000190
である、請求項２、１１及び１２のいずれか１項に記載の化合物、
またはその塩。
【請求項１４】
前記ＲＣが、
【化１０】
2019513770.tif 000191
である、請求項１１に記載の化合物またはその塩。
【請求項１５】
前記Ｇが、−ＮＨ−である、請求項１１〜１４のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項１６】
前記Ｒ１が、
【化１１】
2019513770.tif 000192
である、請求項２、１１、１４及び１５のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項１７】
前記Ｒ１が
【化１２】
2019513770.tif 000193
であり、
式中、ＲＤが独立して、水素、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ９−Ｃ２０）アルキルシリル、（ＲＷ）３Ｓｉ−，（Ｃ２−Ｃ６）アルケニル、テトラヒドロピラニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイル、ベンゾイル、アリール（Ｃ１−Ｃ３）アルキル、ＴＭＴｒ（トリメトキシトリチル）、ＤＭＴｒ（ジメトキシトリチル）、ＭＭＴｒ（モノメトキシトリチル）及びＴｒ（トリチル）からなる群から選択されており、
各ＲＷが独立して、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル及びアリールからなる群から選択されている、
請求項２に記載の化合物またはその塩。
【請求項１８】
前記Ｌ１及びＬ２が独立して、炭素原子を１〜５０個有する二価の分岐鎖状もしくは非分岐鎖状の飽和もしくは不飽和炭化水素鎖であり、前記炭化水素鎖の前記炭素原子の１つ以上（例えば、１個、２個、３個もしくは４個）が任意に応じて、−Ｏ−、−ＮＲＸ−、−ＮＲＸ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲＸ−もしくは−Ｓ−によって置換されており、前記ＲＸが、水素もしくは（Ｃ１−Ｃ６）アルキルであり、前記炭化水素鎖が任意に応じて、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイル、（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイルオキシ、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシカルボニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルチオ、アジド、シアノ、ニトロ、ハロ、ヒドロキシ、オキソ（＝Ｏ）、カルボキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール及びヘテロアリールオキシから選択した１つ以上（例えば、１個、２個、３個もしくは４個）の置換基で置換されている、請求項２〜１７のいずれか１項に記載の化合物、またはその塩。
【請求項１９】
前記Ｌ１及びＬ２が独立して、炭素原子を１〜２０個有する二価の分岐鎖状もしくは非分岐鎖状の飽和もしくは不飽和炭化水素鎖であり、前記炭化水素鎖の前記炭素原子の１つ以上（例えば、１個、２個、３個もしくは４個）が任意に応じて、−Ｏ−、−ＮＲＸ−、−ＮＲＸ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲＸ−もしくはＳ−によって置換されており、前記ＲＸが、水素もしくは（Ｃ１−Ｃ６）アルキルであり、前記炭化水素鎖が任意に応じて、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイル、（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイルオキシ、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシカルボニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルチオ、アジド、シアノ、ニトロ、ハロ、ヒドロキシ、オキソ（＝Ｏ）、カルボキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール及びヘテロアリールオキシから選択した１つ以上（例えば、１個、２個、３個もしくは４個）の置換基で置換されている、請求項２〜１８のいずれか１項に記載の化合物、またはその塩。
【請求項２０】
前記Ｌ１及びＬ２が独立して、炭素原子を１〜１４個有する二価の分岐鎖状もしくは非分岐鎖状の飽和もしくは不飽和炭化水素鎖であり、前記炭化水素鎖の前記炭素原子の１つ以上（例えば、１個、２個、３個もしくは４個）が任意に応じて、−Ｏ−、−ＮＲＸ−、−ＮＲＸ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲＸ−もしくはＳ−によって置換されており、前記ＲＸが、水素もしくは（Ｃ１−Ｃ６）アルキルであり、前記炭化水素鎖が任意に応じて、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイル、（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイルオキシ、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシカルボニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルチオ、アジド、シアノ、ニトロ、ハロ、ヒドロキシ、オキソ（＝Ｏ）、カルボキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール及びヘテロアリールオキシから選択した１つ以上（例えば、１個、２個、３個もしくは４個）の置換基で置換されている、請求項２〜１９のいずれか１項に記載の化合物、またはその塩。
【請求項２１】
前記Ｌ１が、−ＮＨ−、−Ｏ−、−Ｓ−、−（Ｃ＝Ｏ）−、−（Ｃ＝Ｏ）−ＮＨ−、−ＮＨ−（Ｃ＝Ｏ）−、−（Ｃ＝Ｏ）−Ｏ−、−ＮＨ−（Ｃ＝Ｏ）−ＮＨ−もしくは−ＮＨ−（ＳＯ２）−を通じて、Ｒ１に連結している、請求項２〜２０のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項２２】
前記Ｌ２が、−Ｏ−を通じて、Ｒ２に連結している、請求項２〜２１のいずれか１項に記載の化合物、またはその塩。
【請求項２３】
前記Ｌ１が、
【化１３】
2019513770.tif 000194
からなる群から選択されている、請求項２〜２２のいずれか１項に記載の化合物、またはその塩。
【請求項２４】
前記Ｌ２が、−ＣＨ２−Ｏ−もしくは−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−である、請求項２〜２３のいずれか１項に記載の化合物、またはその塩。
【請求項２５】
下記の式（Ｉａ）の化合物であって、
【化１４】
2019513770.tif 000195
式中、
各Ｄが独立して、
【化１５】
2019513770.tif 000196
及び−Ｎ＝からなる群から選択されている、
請求項２に記載の化合物
またはその塩。
【請求項２６】
【化１６】
2019513770.tif 000197
であって、式中、
Ｑ１が、水素であり、Ｑ２が、Ｒ２であるか、またはＱ１が、Ｒ２であり、Ｑ２が、水素であり、
Ｚが、−Ｌ１−Ｒ１であるもの、
ならびにその塩
からなる群から選択されている、
請求項２もしくは請求項２５に記載の化合物、またはその塩。
【請求項２７】
下記の式（Ｉｂ）の化合物であって、
【化１７】
2019513770.tif 000198
式中、
各Ｄが独立して、
【化１８】
2019513770.tif 000199
及び−Ｎ＝からなる群から選択されており、
各ｍが独立して、１もしくは２である化合物である、
請求項２に記載の化合物、またはその塩。
【請求項２８】
【化１９】
2019513770.tif 000200
であって、式中、
Ｑ１が、水素であり、Ｑ２が、Ｒ２であるか、またはＱ１が、Ｒ２であり、Ｑ２が、水素であり、
Ｚが、−Ｌ１−Ｒ１であるもの、
ならびにその塩
からなる群から選択されている、
請求項２もしくは請求項２７に記載の化合物、またはその塩。
【請求項２９】
下記の式（Ｉｃ）の化合物であって、
【化２０】
2019513770.tif 000201
式中、
Ｅが、−Ｏ−もしくは−ＣＨ２−であり、
ｎが、０、１、２、３及び４からなる群から選択されており、
ｎ１とｎ２がそれぞれ独立して、０、１、２及び３からなる群から選択されている化合物、
またはその塩である、
請求項２に記載の化合物、あるいはその塩。
【請求項３０】
【化２１】
2019513770.tif 000202
であって、
式中、Ｚが、−Ｌ１−Ｒ１であるもの、
ならびにその塩
からなる群から選択されている、
請求項２もしくは請求項２９に記載の化合物、またはその塩。
【請求項３１】
前記−Ａ−Ｌ２−Ｒ２部分が、
【化２２】
2019513770.tif 000203
であり、
式中、
Ｑ１が、水素であり、Ｑ２が、Ｒ２であるか、もしくはＱ１が、Ｒ２であり、Ｑ２が、水素であり、
各ｑが独立して、０、１、２、３、４もしくは５である、
請求項２に記載の化合物、またはその塩。
【請求項３２】
前記Ｒ２が、オリゴヌクレオチドである、請求項２〜３１のいずれか１項に記載の化合物、またはその塩。
【請求項３３】
前記Ｒ２が、ｓｉＲＮＡである、請求項２〜３２のいずれか１項に記載の化合物、またはその塩。
【請求項３４】
【化２３】
2019513770.tif 000204
ならびにその塩
からなる群から選択されている、請求項２に記載の化合物、またはその塩。
【請求項３５】
前記Ｒ１が、
【化２４】
2019513770.tif 000205
からなる群から選択されており、
式中、
ＲＳが、
【化２５】
2019513770.tif 000206
であり、
ｎが、２、３もしくは４であり、
ｘが、１もしくは２である、
請求項１に記載の化合物、またはその塩。
【請求項３６】
前記Ｌ１が、
【化２６】
2019513770.tif 000207
からなる群から選択されている、
請求項１もしくは３５に記載の化合物、またはその塩。
【請求項３７】
前記Ａが、存在しないか、フェニル、ピロリジニルもしくはシクロペンチルである、請求項１、３５及び３６のいずれか１項に記載の化合物、またはその塩。
【請求項３８】
前記Ｌ２が、ヒドロキシで任意に応じて置換されているＣ１−４アルキレン−Ｏ−である、請求項１及び３５〜３７のいずれか１項に記載の化合物、またはその塩。
【請求項３９】
前記Ｌ２が、−ＣＨ２Ｏ−、−ＣＨ２ＣＨ２Ｏ−もしくは−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２Ｏ−である、請求項１及び３５〜３８のいずれか１項に記載の化合物、またはその塩。
【請求項４０】
前記各ＲＡが独立して、ヒドロキシ、もしくはヒドロキシルで任意に応じて置換されているＣ１−８アルキルである、請求項１及び３５〜３９のいずれか１項に記載の化合物、またはその塩。
【請求項４１】
前記各ＲＡが独立して、ヒドロキシ、メチル及び−ＣＨ２ＯＨからなる群から選択されている、請求項１及び３５〜４０のいずれか１項に記載の化合物、またはその塩。
【請求項４２】
下記の式（Ｉｇ）の化合物であって、
【化２７】
2019513770.tif 000208
式中、
Ｂが、−Ｎ−もしくは−ＣＨ−であり、
Ｌ２が、ヒドロキシルもしくはハロで任意に応じて置換されているＣ１−４アルキレン−Ｏ−であり、
ｎが、０、１、２、３、４、５、６もしくは７である前記化合物、
またはその塩である、
請求項１に記載の化合物またはその塩。
【請求項４３】
【化２８】
2019513770.tif 000209
であって、
式中、Ｑが、−Ｌ１−Ｒ１であり、
Ｒ’が、Ｃ１−９アルキル、Ｃ２−９アルケニルまたはＣ２−９アルキニルであり、前記Ｃ１−９アルキル、Ｃ２−９アルケニルまたはＣ２−９アルキニルが、ハロまたはヒドロキシルで任意に応じて置換されている化合物、
ならびにこれらの塩
からなる群から選択されている、請求項１もしくは４２に記載の化合物、またはその塩。
【請求項４４】
【化２９】
2019513770.tif 000210
であって、
式中、Ｑが、−Ｌ１−Ｒ１であるもの、
ならびにこれらの塩
からなる群から選択されている、請求項１に記載の化合物またはその塩。
【請求項４５】
【化３０】
2019513770.tif 000211
【化３１】
2019513770.tif 000212
【化３２】
2019513770.tif 000213
【化３３】
2019513770.tif 000214
ならびにその製薬学的に許容可能な塩
からなる群から選択されている、請求項１に記載の化合物またはその塩。
【請求項４６】
請求項１〜４５のいずれか１項に記載されているような化合物またはその製薬学的に許容可能な塩と、製薬学的に許容可能な担体とを含む医薬組成物。
【請求項４７】
動物の肝臓への核酸の送達方法であって、請求項１〜４５のいずれか１項に記載されているような式Ｉの化合物またはその製薬学的に許容可能な塩を前記動物に投与することを含む前記方法。
【請求項４８】
下記の式（Ｉｄ）の化合物であって、
【化３４】
2019513770.tif 000215
式中、
Ｒ１ｄが、
【化３５】
2019513770.tif 000216
から選択されており、
Ｘｄが、Ｃ２−１０アルキレンであり、
ｎｄが、０もしくは１であり、
Ｒ２ｄが、核酸であり、
Ｒ３ｄが、Ｈ、保護基、固体支持体への共有結合、もしくは固体支持体に結合している連結基への結合である前記化合物、
またはその塩
である、請求項２に記載の化合物またはその塩。
【請求項４９】
前記Ｒ１ｄが、
【化３６】
2019513770.tif 000217
である、請求項４８に記載の化合物またはその塩。
【請求項５０】
前記Ｒ１ｄが、
【化３７】
2019513770.tif 000218
である、請求項４８に記載の化合物またはその塩。
【請求項５１】
前記Ｘｄが、Ｃ８アルキレンである、請求項４８〜５０のいずれか１項に記載の化合物または塩。
【請求項５２】
前記ｎｄが、０である、請求項４８〜５１のいずれか１項に記載の化合物または塩。
【請求項５３】
前記Ｒ２ｄが、ｓｉＲＮＡである、請求項４８〜５１のいずれか１項に記載の化合物または塩。
【請求項５４】
前記Ｒ３ｄが、Ｈである、請求項４８〜５３のいずれか１項に記載の化合物または塩。
【請求項５５】
前記Ｒ３ｄが、固体支持体への共有結合である、請求項４８〜５３のいずれか１項に記載の化合物または塩。
【請求項５６】
前記Ｒ３ｄが、固体支持体に結合している連結基への結合であり、前記連結基が、炭素原子を２〜１５個有する二価の分岐鎖状もしくは非分岐鎖状の飽和または不飽和炭化水素鎖であり、前記炭素原子の１つ以上（例えば、１個、２個、３個もしくは４個）が任意に応じて、（−Ｏ−）もしくは（−Ｎ（Ｈ）−）によって置換されており、前記鎖が任意に応じて、炭素上で、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイル、（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイルオキシ、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシカルボニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルチオ、アジド、シアノ、ニトロ、ハロ、ヒドロキシ、オキソ（＝Ｏ）、カルボキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール及びヘテロアリールオキシから選択した１つ以上（例えば、１個、２個、３個もしくは４個）の置換基で置換されている、請求項４８〜５３のいずれか１項に記載の化合物、またはその塩。
【請求項５７】
前記Ｒ３ｄが、固体支持体に結合している連結基への結合であり、前記連結基が、炭素原子を２〜１０個有する二価の分岐鎖状もしくは非分岐鎖状の飽和もしくは不飽和炭化水素鎖であり、前記炭素原子の１つ以上（例えば、１個、２個、３個もしくは４個）が任意に応じて、（−Ｏ−）もしくは（−Ｎ（Ｈ）−）によって置換されており、前記鎖が任意に応じて、炭素上で、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイル、（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイルオキシ、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシカルボニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルチオ、アジド、シアノ、ニトロ、ハロ、ヒドロキシ、オキソ（＝Ｏ）、カルボキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール及びヘテロアリールオキシから選択した１つ以上（例えば、１個、２個、３個もしくは４個）の置換基で置換されている、請求項４８〜５３のいずれか１項に記載の化合物、またはその塩。
【請求項５８】
前記Ｒ３ｄが、固体支持体に結合している連結基への結合であり、前記連結基が、−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｈ）−である、請求項４８〜５３のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項５９】
請求項４８〜５８のいずれか１項に記載されているような化合物、またはその製薬学的に許容可能な塩と、製薬学的に許容可能な担体とを含む医薬組成物。
【請求項６０】
動物の肝臓への核酸の送達方法であって、請求項４８〜５８のいずれか１項に記載されているような式Ｉｄの化合物、またはその製薬学的に許容可能な塩を前記動物に投与することを含む前記方法。
【請求項６１】
下記の式（Ｉｅ）の化合物であって、
【化３８】
2019513770.tif 000219
式中、
Ｒ１ｄが、
【化３９】
2019513770.tif 000220
から選択されており、
Ｘｄが、Ｃ２−８アルキレンであり、
ｎｄが、０もしくは１であり、
Ｐｇ１が、Ｈもしくは好適な保護基であり、
Ｒ３ｄが、Ｈ、保護基、固体支持体への共有結合、もしくは固体支持体に結合している連結基への結合である前記化合物、
またはその塩
である、請求項２に記載の化合物またはその塩。
【請求項６２】
前記Ｐｇ１が、ＴＭＴｒ（トリメトキシトリチル）、ＤＭＴｒ（ジメトキシトリチル）、ＭＭＴｒ（モノメトキシトリチル）もしくはＴｒ（トリチル）である、請求項６１に記載の化合物、またはその塩。
【請求項６３】
請求項４８に記載されているような式（Ｉｄ）の化合物またはその塩の調製方法であって、
下記の式（Ｉｅ）の対応する化合物であって、
【化４０】
2019513770.tif 000221
式中、
Ｘｄが、Ｃ２−８アルキレンであり、
ｎｄが、０または１であり、
Ｐｇ１が、Ｈであり、
Ｒ３ｄが、固体支持体への共有結合、または固体支持体に結合している連結基への結合である前記化合物を、固相核酸合成条件に供して、式Ｉｄの対応する化合物であって、前記Ｒ２ｄが核酸である前記化合物をもたらすこと
を含む前記方法。
【請求項６４】
前記化合物を前記固体支持体から切り出して、式Ｉｄの前記対応する化合物であって、前記Ｒ３ｄがＨである前記化合物をもたらすことをさらに含む、請求項６３に記載の方法。
【請求項６５】
【化４１】
2019513770.tif 000222
ならびにこれらの塩
からなる群から選択されている、請求項４８に記載の化合物またはその塩。
【請求項６６】
下記の式（Ｉ）の化合物であって、
【化４２】
2019513770.tif 000223
式中、
Ｒ１が、Ｈもしくは合成活性化基であり、
Ｌ１が、存在しないか、もしくは連結基であり、
Ｌ２が、存在しないか、もしくは連結基であり、
Ｒ２が、核酸であり、
環Ａが、存在しないか、３〜２０員のシクロアルキル、５〜２０員のアリール、５〜２０員のヘテロアリールもしくは３〜２０員のヘテロシクロアルキルであり、
各ＲＡが独立して、水素、ヒドロキシ、ＣＮ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、−Ｃ１−２アルキル−ＯＲＢ、Ｃ１−１０アルキルＣ２−１０アルケニル、及びＣ２−１０アルキニルからなる群から選択されており、前記Ｃ１−１０アルキルＣ２−１０アルケニル及びＣ２−１０アルキニルが任意に応じて、ハロ、ヒドロキシ及びＣ１−３アルコキシから独立して選択した１つ以上の基で置換されており、
ＲＢが、水素、保護基、固体支持体への共有結合、もしくは固体支持体に結合している連結基への結合であり、
ｎが、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９もしくは１０である前記化合物、
またはその塩。
【請求項６７】
下記の式（Ｉ）の化合物であって、
【化４３】
2019513770.tif 000224
式中、
Ｒ１が、標的化リガンドであり、
Ｌ１が、存在しないか、もしくは連結基であり、
Ｌ２が、存在しないか、もしくは連結基であり、
Ｒ２が、Ｈもしくは合成活性化基であり、
環Ａが、存在しないか、３〜２０員のシクロアルキル、５〜２０員のアリール、５〜２０員のヘテロアリール、もしくは３〜２０員のヘテロシクロアルキルであり、
各ＲＡが独立して、水素、ヒドロキシ、ＣＮ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、−Ｃ１−２アルキル−ＯＲＢ、Ｃ１−１０アルキルＣ２−１０アルケニル及びＣ２−１０アルキニルからなる群から選択されており、前記Ｃ１−１０アルキルＣ２−１０アルケニル及びＣ２−１０アルキニルが任意に応じて、ハロ、ヒドロキシ及びＣ１−３アルコキシから独立して選択した１つ以上の基で置換されており、
ＲＢが、水素、保護基、固体支持体への共有結合、もしくは固体支持体に結合している連結基への結合であり、
ｎが、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９もしくは１０である前記化合物、
またはその塩。
【請求項６８】
下記の式（Ｉｇ）の化合物であって、
【化４４】
2019513770.tif 000225
式中、
Ｂが、−Ｎ−もしくは−ＣＨ−であり、
Ｌ２が、ヒドロキシルもしくはハロで任意に応じて置換されているＣ１−４アルキレン−Ｏ−であり、
ｎが、０、１、２、３、４、５、６もしくは７である前記化合物、
またはその塩
である、請求項６５もしくは６６に記載の化合物、またはその塩。
【請求項６９】
【化４５】
2019513770.tif 000226
であって、
式中、
Ｑが、−Ｌ１−Ｒ１であり、
Ｒ’が、Ｃ１−９アルキル、Ｃ２−９アルケニルもしくはＣ２−９アルキニルであり、前記Ｃ１−９アルキル、Ｃ２−９アルケニルもしくはＣ２−９アルキニルが任意に応じて、ハロもしくはヒドロキシルで置換されているもの
ならびにこれらの塩
からなる群から選択されている、請求項６６もしくは６７に記載の化合物、またはその塩。
【請求項７０】
【化４６】
2019513770.tif 000227
であって、
式中、Ｑが、−Ｌ１−Ｒ１であるもの、ならびにこれらの塩
からなる群から選択されている、請求項６６もしくは６７に記載の化合物、またはその塩。
【請求項７１】
下記の式（Ｉｇ）の化合物であって、
【化４７】
2019513770.tif 000228
式中、
Ｂが、−Ｎ−もしくは−ＣＨ−であり、
Ｌ１が、存在しないか、もしくは連結基であり、
Ｌ２が、ヒドロキシルもしくはハロで任意に応じて置換されているＣ１−４アルキレン−Ｏ−であり、
ｎが、０、１、２、３、４、５、６もしくは７であり、
Ｒ１が、Ｈもしくは合成活性化基であり、
Ｒ２が、Ｈもしくは合成活性化基である前記化合物、
またはその塩。
【請求項７２】
【化４８】
2019513770.tif 000229
であって、
式中、Ｑが、−Ｌ１−Ｒ１であり、
Ｌ１が、存在しないか、もしくは連結基であり、
Ｒ’が、Ｃ１−９アルキル、Ｃ２−９アルケニルもしくはＣ２−９アルキニルであり、前記Ｃ１−９アルキル、Ｃ２−９アルケニルもしくはＣ２−９アルキニルが任意に応じて、ハロもしくはヒドロキシルで置換されており、
Ｒ１が、Ｈもしくは合成活性化基であり、
Ｒ２が、Ｈもしくは合成活性化基であるもの
からなる群から選択されている化合物、
またはその塩。
【請求項７３】
【化４９】
2019513770.tif 000230
であって、
式中、
Ｑが、−Ｌ１−Ｒ１であり、
Ｌ１が、存在しないか、もしくは連結基であり、
Ｒ１が、Ｈもしくは合成活性化基であり、
Ｒ２が、Ｈもしくは合成活性化基であるもの、
からなる群から選択されている化合物、
またはその塩。
【請求項７４】
前記Ｒ１が、Ｈ、またはＤＣＣ、ＨＯＢｔ、ＥＤＣ、ＢＯＰ、ＰｙＢＯＰもしくはＨＢＴＵから誘導可能な合成活性化基である、請求項６６〜７３のいずれか１項に記載の化合物、あるいはその塩。
【請求項７５】
前記Ｒ２が、Ｈ、アセテート、トリフレート、メシレートもしくはサクシネートである、請求項６６〜７４のいずれか１項に記載の化合物、またはその塩。
【請求項７６】
前記Ｒ１が、ＤＣＣ、ＨＯＢｔ、ＥＤＣ、ＢＯＰ、ＰｙＢＯＰもしくはＨＢＴＵから誘導可能な合成活性化基である、請求項６６〜７３のいずれか１項に記載の化合物、またはその塩。
【請求項７７】
前記Ｒ２が、アセテート、トリフレート、メシレートもしくはサクシネートである、請求項６６〜７４のいずれか１項に記載の化合物、またはその塩。
【請求項７８】
前記Ｌ１が、炭素原子を５〜２０個有する二価の分岐鎖状もしくは非分岐鎖状の飽和もしくは不飽和炭化水素鎖であり、前記炭化水素鎖の前記炭素原子の１つ以上（例えば、１個、２個、３個もしくは４個）が任意に応じて、−Ｏ−、−ＮＨ−、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−もしくは−Ｓ−によって置換されている、請求項６６〜７７のいずれか１項に記載の化合物、またはその塩。
【請求項７９】
下記の式（ＸＸ）の化合物であって、
【化５０】
2019513770.tif 000231
式中、
Ｒ１が、標的化リガンドであり、
Ｌ１が、存在しないか、もしくは連結基であり、
Ｌ２が、存在しないか、もしくは連結基であり、
Ｒ２が、核酸であり、
Ｂが、二価であるとともに、
【化５１】
2019513770.tif 000232
からなる群から選択されており、
式中、
各Ｒ’が独立して、Ｃ１−９アルキル、Ｃ２−９アルケニルもしくはＣ２−９アルキニルであり、前記Ｃ１−９アルキル、Ｃ２−９アルケニルもしくはＣ２−９アルキニルが任意に応じて、ハロもしくはヒドロキシルで置換されており、
＊が付された結合手が、Ｌ１に結合しているか、もしくはＬ１が存在しない場合には、Ｒ１に結合しており、
＊＊が付された結合手が、Ｌ２に結合しているか、もしくはＬ２が存在しない場合には、Ｒ２に結合している前記化合物、
またはその塩。
【請求項８０】
前記標的化リガンドＲ１が、糖を２〜８個含む、請求項７９に記載の化合物またはその塩。
【請求項８１】
前記標的化リガンドＲ１が、糖を２〜４個含む、請求項７９に記載の化合物またはその塩。
【請求項８２】
前記標的化リガンドＲ１が、糖を３〜８個含む、請求項７９に記載の化合物またはその塩。
【請求項８３】
前記標的化リガンドＲ１が、糖を３〜６個含む、請求項７９に記載の化合物またはその塩。
【請求項８４】
前記標的化リガンドＲ１が、糖を３〜４個含む、請求項７９に記載の化合物またはその塩。
【請求項８５】
前記標的化リガンドＲ１が、糖を３個含む、請求項７９に記載の化合物またはその塩。
【請求項８６】
前記標的化リガンドＲ１が、糖を４個含む、請求項７９に記載の化合物またはその塩。
【請求項８７】
前記標的化部分Ｒ１が、下記の式を有し、
【化５２】
2019513770.tif 000233
式中、
Ｂ１が、約１〜約２０個の原子を含む三価の基であり、Ｌ１、Ｔ１及びＴ２に共有結合しており、
Ｂ２が、約１〜約２０個の原子を含む三価の基であり、Ｔ１、Ｔ３及びＴ４に共有結合しており、
Ｂ３が、約１〜約２０個の原子を含む三価の基であり、Ｔ２、Ｔ５及びＴ６に共有結合しており、
Ｔ１が、存在しないか、もしくは連結基であり、
Ｔ２が、存在しないか、もしくは連結基であり、
Ｔ３が、存在しないか、もしくは連結基であり、
Ｔ４が、存在しないか、もしくは連結基であり、
Ｔ５が、存在しないか、もしくは連結基であり、
Ｔ６が、存在しないか、もしくは連結基である、
請求項１〜２、２５〜３０、３２〜３３、３６〜３９、４２〜４４、６６〜６９及び７９のいずれか１項に記載の化合物、またはその塩。
【請求項８８】
【化５３】
2019513770.tif 000234
であって、
式中、
Ｘが、ＮＲ３であり、Ｙが、−（Ｃ＝Ｏ）Ｒ４、−ＳＯ２Ｒ５及び−（Ｃ＝Ｏ）ＮＲ６Ｒ７から選択されているか、もしくはＸが、−（Ｃ＝Ｏ）−であり、Ｙが、ＮＲ８Ｒ９であり、
Ｒ３が、水素もしくは（Ｃ１−Ｃ４）アルキルであり、
Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８及びＲ９がそれぞれ独立して、水素、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）ハロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、ならびに、ハロ、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、（Ｃ１−Ｃ４）ハロアルキル、（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ及び（Ｃ１−Ｃ４）ハロアルコキシからなる群から独立して選択した１つ以上の基で任意に応じて置換されている（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキルからなる群から選択されており、
Ｒ１０が、−ＯＨ、−ＮＲ８Ｒ９もしくは−Ｆであり、
Ｒ１１が、−ＯＨ、−ＮＲ８Ｒ９、−Ｆ、もしくは、ハロ、ヒドロキシル、カルボキシル、アミノ、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、（Ｃ１−Ｃ４）ハロアルキル、（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ及び（Ｃ１−Ｃ４）ハロアルコキシからなる群から独立して選択した１つ以上の基で任意に応じて置換されている５員の複素環であるもの
から、前記各糖が独立して選択されている、請求項８７に記載の化合物、またはその塩。
【請求項８９】
前記各糖が独立して、
【化５４】
2019513770.tif 000235
からなる群から選択されている、請求項８７に記載の化合物またはその塩。
【請求項９０】
前記各糖が独立して、
【化５５】
2019513770.tif 000236
である、請求項８７に記載の化合物、またはその塩。
【請求項９１】
前記Ｔ１及びＴ２のうちの１つが存在しない、請求項８７〜９０のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項９２】
前記Ｔ１及びＴ２が両方とも存在しない、請求項８７〜９０のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項９３】
前記Ｔ１、Ｔ２、Ｔ３、Ｔ４、Ｔ５及びＴ６のそれぞれが独立して、存在しないか、または炭素原子を１〜５０個有する分岐鎖状もしくは非分岐鎖状の飽和もしくは不飽和炭化水素鎖であり、前記炭化水素鎖の前記炭素原子の１つ以上（例えば、１個、２個、３個または４個）が任意に応じて、−Ｏ−、−ＮＲＸ−、−ＮＲＸ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲＸ−または−Ｓ−によって置換されており、前記ＲＸが、水素または（Ｃ１−Ｃ６）アルキルであり、前記炭化水素鎖が任意に応じて、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイル、（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイルオキシ、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシカルボニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルチオ、アジド、シアノ、ニトロ、ハロ、ヒドロキシ、オキソ（＝Ｏ）、カルボキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール及びヘテロアリールオキシから選択した１つ以上（例えば、１個、２個、３個または４個）の置換基で置換されている、請求項８７〜９０のいずれか１項に記載の化合物、あるいはその塩。
【請求項９４】
前記Ｔ１、Ｔ２、Ｔ３、Ｔ４、Ｔ５及びＴ６のそれぞれが独立して、存在しないか、または炭素原子を１〜２０個有する分岐鎖状もしくは非分岐鎖状の飽和もしくは不飽和炭化水素鎖であり、前記炭化水素鎖の前記炭素原子の１つ以上（例えば、１個、２個、３個または４個）が任意に応じて、−Ｏ−、−ＮＲＸ−、−ＮＲＸ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲＸ−または−Ｓ−によって置換されており、前記ＲＸが、水素または（Ｃ１−Ｃ６）アルキルであり、前記炭化水素鎖が任意に応じて、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイル、（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイルオキシ、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシカルボニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルチオ、アジド、シアノ、ニトロ、ハロ、ヒドロキシ、オキソ（＝Ｏ）、カルボキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール及びヘテロアリールオキシから選択した１つ以上（例えば、１個、２個、３個または４個）の置換基で置換されている、請求項８７〜９０のいずれか１項に記載の化合物、あるいはその塩。
【請求項９５】
前記Ｔ１、Ｔ２、Ｔ３、Ｔ４、Ｔ５及びＴ６のそれぞれが独立して、存在しないか、あるいは炭素原子を１〜５０個有する分岐鎖状もしくは非分岐鎖状の飽和もしくは不飽和炭化水素鎖、またはその塩であり、前記炭化水素鎖の前記炭素原子の１つ以上（例えば、１個、２個、３個または４個）が任意に応じて、−Ｏ−または−ＮＲＸ−によって置換されており、前記ＲＸが、水素または（Ｃ１−Ｃ６）アルキルであり、前記炭化水素鎖が任意に応じて、ハロ、ヒドロキシ及びオキソ（＝Ｏ）から選択した１つ以上（例えば、１個、２個、３個または４個）の置換基で置換されている、請求項８７〜９０のいずれか１項に記載の化合物、あるいはその塩。
【請求項９６】
前記Ｔ１、Ｔ２、Ｔ３、Ｔ４、Ｔ５及びＴ６のそれぞれが独立して、存在しないか、または炭素原子を１〜２０個有する分岐鎖状もしくは非分岐鎖状の飽和もしくは不飽和炭化水素鎖であり、前記炭化水素鎖の前記炭素原子の１つ以上（例えば、１個、２個、３個または４個）が任意に応じて、−Ｏ−によって置換されており、前記炭化水素鎖が任意に応じて、ハロ、ヒドロキシ及びオキソ（＝Ｏ）から選択した１つ以上（例えば、１個、２個、３個または４個）の置換基で置換されている、請求項８７〜９０のいずれか１項に記載の化合物、あるいはその塩。
【請求項９７】
前記Ｔ１、Ｔ２、Ｔ３、Ｔ４、Ｔ５及びＴ６のそれぞれが独立して、存在しないか、または炭素原子を１〜２０個有する分岐鎖状もしくは非分岐鎖状の飽和もしくは不飽和炭化水素鎖であり、前記炭化水素鎖の前記炭素原子の１つ以上（例えば、１個、２個、３個または４個）が任意に応じて、−Ｏ−によって置換されており、前記炭化水素鎖が任意に応じて、ハロ、ヒドロキシ及びオキソ（＝Ｏ）から選択した１つ以上（例えば、１個、２個、３個または４個）の置換基で置換されている、請求項８７〜９０のいずれか１項に記載の化合物、あるいはその塩。
【請求項９８】
前記Ｔ３、Ｔ４、Ｔ５及びＴ６のうちの少なくとも１つが、
【化５６】
2019513770.tif 000237
であり、
式中、
ｎ＝１、２、３である、
請求項８７〜９０のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項９９】
前記Ｔ３、Ｔ４、Ｔ５及びＴ６のそれぞれが独立して、
【化５７】
2019513770.tif 000238
からなる群から選択されており、
式中、
ｎ＝１、２、３である、
請求項８７〜９０のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項１００】
前記Ｔ１及びＴ２のうちの少なくとも１つがグリシンである、請求項８７〜９０のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項１０１】
前記Ｔ１及びＴ２のそれぞれがグリシンである、請求項８７〜９０のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項１０２】
前記Ｂ１が、１〜１５個の原子を含む三価の基であり、Ｌ１、Ｔ１及びＴ２に共有結合している、請求項８７〜１０１のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項１０３】
前記Ｂ１が、１〜１０個の原子を含む三価の基であり、Ｌ１、Ｔ１及びＴ２に共有結合している、請求項８７〜１０１のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項１０４】
前記Ｂ１が、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルを含む、請求項８７〜１０１のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項１０５】
前記Ｂ１が、Ｃ３−８シクロアルキルを含む、請求項８７〜１０１のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項１０６】
前記Ｂ１が、シリル基を含む、請求項８７〜１０１のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項１０７】
前記Ｂ１が、Ｄ−アミノ酸もしくはＬ−アミノ酸を含む、請求項８７〜１０１のいずれか１項に記載の化合物、またはその塩。
【請求項１０８】
前記Ｂ１が、糖を含む、請求項８７〜１０１のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項１０９】
前記Ｂ１が、ホスフェート基を含む、請求項８７〜１０１のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項１１０】
前記Ｂ１が、ホスホネート基を含む、請求項８７〜１０１のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項１１１】
前記Ｂ１が、アリールを含む、請求項８７〜１０１のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項１１２】
前記Ｂ１が、フェニル環を含む、請求項８７〜１０１のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項１１３】
前記Ｂ１が、フェニル環である、請求項８７〜１０１のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項１１４】
前記Ｂ１が、ＣＨである、請求項８７〜１０１のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項１１５】
前記Ｂ１が、ヘテロアリールを含む、請求項８７〜１０１のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項１１６】
前記Ｂ１が、
【化５８】
2019513770.tif 000239
である、請求項８７〜１０１のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項１１７】
前記Ｂ２が、１〜１５個の原子を含む三価の基であり、Ｌ１、Ｔ１及びＴ２に共有結合している、請求項８７〜１１６のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項１１８】
前記Ｂ２が、１〜１０個の原子を含む三価の基であり、Ｌ１、Ｔ１及びＴ２に共有結合している、請求項８７〜１１６のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項１１９】
前記Ｂ２が、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルを含む、請求項８７〜１１６のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項１２０】
前記Ｂ２が、Ｃ３−８シクロアルキルを含む、請求項８７〜１１６のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項１２１】
前記Ｂ２が、シリル基を含む、請求項８７〜１１６のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項１２２】
前記Ｂ２が、Ｄ−アミノ酸もしくはＬ−アミノ酸を含む、請求項８７〜１１６のいずれか１項に記載の化合物、またはその塩。
【請求項１２３】
前記Ｂ２が、糖を含む、請求項８７〜１１６のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項１２４】
前記Ｂ２が、ホスフェート基を含む、請求項８７〜１１６のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項１２５】
前記Ｂ２が、ホスホネート基を含む、請求項８７〜１１６のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項１２６】
前記Ｂ２が、アリールを含む、請求項８７〜１１６のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項１２７】
前記Ｂ２が、フェニル環を含む、請求項８７〜１１６のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項１２８】
前記Ｂ２が、フェニル環である、請求項８７〜１１６のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項１２９】
前記Ｂ２が、ＣＨである、請求項８７〜１１６のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項１３０】
前記Ｂ２が、ヘテロアリールを含む、請求項８７〜１１６のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項１３１】
前記Ｂ２が、
【化５９】
2019513770.tif 000240
からなる群から選択されている、請求項８７〜１１６のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項１３２】
前記Ｂ３が、１〜１５個の原子を含む三価の基であり、Ｌ１、Ｔ１及びＴ２に共有結合している、請求項８７〜１３１のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項１３３】
前記Ｂ３が、１〜１０個の原子を含む三価の基であり、Ｌ１、Ｔ１及びＴ２に共有結合している、請求項８７〜１３１のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項１３４】
前記Ｂ３が、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルを含む、請求項８７〜１３１のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項１３５】
前記Ｂ３が、Ｃ３−８シクロアルキルを含む、請求項８７〜１３１のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項１３６】
前記Ｂ３が、シリル基を含む、請求項８７〜１３１のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項１３７】
前記Ｂ３が、Ｄ−アミノ酸もしくはＬ−アミノ酸を含む、請求項８７〜１３１のいずれか１項に記載の化合物、またはその塩。
【請求項１３８】
前記Ｂ３が、糖を含む、請求項８７〜１３１のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項１３９】
前記Ｂ３が、ホスフェート基を含む、請求項８７〜１３１のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項１４０】
前記Ｂ３が、ホスホネート基を含む、請求項８７〜１３１のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項１４１】
前記Ｂ３が、アリールを含む、請求項８７〜１３１のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項１４２】
前記Ｂ３が、フェニル環を含む、請求項８７〜１３１のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項１４３】
前記Ｂ３が、フェニル環である、請求項８７〜１３１のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項１４４】
前記Ｂ３が、ＣＨである、請求項８７〜１３１のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項１４５】
前記Ｂ３が、ヘテロアリールを含む、請求項８７〜１３１のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項１４６】
前記Ｂ３が、
【化６０】
2019513770.tif 000241
またはこれらの塩
からなる群から選択されている、請求項８７〜１３１のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項１４７】
前記Ｌ１及びＬ２が独立して、炭素原子を１〜５０個有する二価の分岐鎖状もしくは非分岐鎖状の飽和もしくは不飽和炭化水素鎖であり、前記炭化水素鎖の前記炭素原子の１つ以上（例えば、１個、２個、３個もしくは４個）が任意に応じて、−Ｏ−、−ＮＲＸ−、−ＮＲＸ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲＸ−もしくは−Ｓ−によって置換されており、前記ＲＸが、水素もしくは（Ｃ１−Ｃ６）アルキルであり、前記炭化水素鎖が任意に応じて、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイル、（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイルオキシ、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシカルボニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルチオ、アジド、シアノ、ニトロ、ハロ、ヒドロキシ、オキソ（＝Ｏ）、カルボキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール及びヘテロアリールオキシから選択した１つ以上の置換基で置換されている、請求項８７〜１４６のいずれか１項に記載の化合物、またはその塩。
【請求項１４８】
前記Ｌ１が、
【化６１】
2019513770.tif 000242
またはこれらの塩
からなる群から選択されている、請求項８７〜１４６のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項１４９】
前記Ｌ１が、−Ｏ−、−Ｓ−、−（Ｃ＝Ｏ）−、−（Ｃ＝Ｏ）−ＮＨ−、−ＮＨ−（Ｃ＝Ｏ）、−（Ｃ＝Ｏ）−Ｏ−、−ＮＨ−（Ｃ＝Ｏ）−ＮＨ−もしくは−ＮＨ−（ＳＯ２）−からなる群から選択した連結部を通じて、Ｂ１に連結している、請求項８７〜１４６のいずれか１項に記載の化合物、またはその塩。
【請求項１５０】
前記Ｌ１が、
【化６２】
2019513770.tif 000243
からなる群から選択されている、請求項８７〜１４６のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項１５１】
前記Ｌ２が、−Ｏ−を通じて、Ｒ２に連結している、請求項８７〜１５０のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項１５２】
前記Ｌ２が、ヒドロキシで任意に応じて置換されているＣ１−４アルキレン−Ｏ−である、請求項８７〜１５０のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項１５３】
前記Ｌ２が、−Ｏ−を通じて、Ｒ２に連結している、請求項８７〜１５０のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項１５４】
前記Ｌ２が、存在しない、請求項８７〜１５０のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
【請求項１５５】
【化６３】
2019513770.tif 000244
【化６４】
2019513770.tif 000245
【化６５】
2019513770.tif 000246
ならびにこれらの製薬学的に許容可能な塩
からなる群から選択されている、請求項８７に記載の化合物またはその塩。
【請求項１５６】
【化６６】
2019513770.tif 000247
の化合物
またはその塩。
【請求項１５７】
請求項７９〜１５６のいずれか１項に記載されているような化合物、またはその製薬学的に許容可能な塩と、製薬学的に許容可能な担体とを含む医薬組成物。
【請求項１５８】
動物の肝臓への核酸の送達方法であって、請求項７９〜１５６いずれか１項に記載されているような式Ｉの化合物、またはその製薬学的に許容可能な塩を前記動物に投与することを含む前記方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本特許出願は、２０１６年４月１１日に出願された米国特許仮出願第６２／３２１，０３４号、２０１６年１１月３日に出願された米国特許仮出願第６２／４１７，１５６号及び２０１６年１２月２２日に出願された米国特許仮出願第６２／４３８，３１０号（これらの出願は、参照により、本明細書に援用される）に基づく優先権を主張するものである。
【０００２】
配列表
本願には、ＡＳＣＩＩ形式で電子的に提出したとともに、参照により、その全体が本明細書に援用される配列表が含まれる。２０１７年４月７日に作成した前記ＡＳＣＩＩコピーは、０８１５５＿０５６ＷＯｌ＿ＳＬ．ｔｘｔという名称であり、７，８２４バイトのサイズである。
【背景技術】
【０００３】
多くの疾患は、肝臓に特有なものである（例えば、Ｂ型肝炎及び非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ））。したがって、生体対象の肝臓、腎臓、心臓、膵臓またはその他の器官を主に標的にできる治療用組成物があれば有益であろう。
【０００４】
ｓｉＲＮＡを含む核酸は、治療剤として有用である。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
現在、生体対象において治療用核酸を送達する（例えば導く）のに用いることができる組成物と方法に対するニーズが存在する。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明は、治療用核酸を（例えば肝臓に）導くのに用いることができる化合物、組成物及び方法を提供する。
【０００７】
したがって、一態様では、本発明は、下記の式Ｉの化合物であって、
【化１】
2019513770.tif 000003
式中、
Ｒ１が、標的化リガンドであり、
Ｌ１が、存在しないか、もしくは連結基であり、
Ｌ２が、存在しないか、もしくは連結基であり、
Ｒ２が、核酸であり、
環Ａが、存在しないか、３〜２０員のシクロアルキル、５〜２０員のアリール、５〜２０員のヘテロアリールもしくは３〜２０員のヘテロシクロアルキルであり、
各ＲＡが独立して、水素、ヒドロキシ、ＣＮ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、−Ｃ１−２アルキル−ＯＲＢ、Ｃ１−１０アルキルＣ２−１０アルケニル及びＣ２−１０アルキニルからなる群から選択されており、そのＣ１−１０アルキルＣ２−１０アルケニルとＣ２−１０アルキニルが任意に応じて、ハロ、ヒドロキシ及びＣ１−３アルコキシから独立して選択した１つ以上の基で置換されており、
ＲＢが、水素、保護基、固体支持体への共有結合、もしくは固体支持体に結合している連結基への結合であり、
ｎが、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９もしくは１０である化合物、
またはその塩を提供する。
【０００８】
ｓｉＲＮＡ分子（ｓｉＲＮＡ分子を組み合わせたものを含む）で治療できる疾患と状態としては、肝疾患、例えば、脂肪蓄積と関連するかまたは脂肪蓄積を原因とする肝疾患（肝脂肪変性、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪肝炎（ＮＡＳＨ）、脂肪肝移植、肝炎（例えばＢ型もしくはＤ型）及び／または急性肝障害（劇症肝不全と亜劇症肝不全を含む）、ならびに高トリグリセライド血症など）が挙げられる。
【０００９】
本発明は、本明細書に開示されている合成中間体と方法であって、式Ｉの化合物の調製に有用である合成中間体と方法も提供する。
【００１０】
本発明の他の目的、特徴及び利点は、当業者には、下記の詳細な説明と図面から明らかになるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】式Ｉｅの中間体化合物を示しており、この化合物においては、標的化リガンド／リンカーは、固相支持体に結合しており、Ｐｇ１は、保護基のＤＭＴｒである。
【図２】式Ｉｄの代表的な化合物を示しており、この化合物においては、標的化リガンドは、共有結合した核酸とともに、固相支持体に結合している。
【図３】式Ｉｄの代表的な化合物を示しており、この化合物においては、式Ｉの化合物をもたらすために、標的化リガンド−核酸コンジュゲートは、固相支持体から切断され、脱保護されている。
【図４】ＧａｌＮＡｃコンジュゲートを様々な用量でＣ５７初代肝細胞に２４時間トランスフェクションした後のＴＴＲ  ｍＲＮＡ遺伝子ノックダウン実験を示している。
【図５】ＴＴＲ  ｓｉＲＮＡ−ＧａｌＮＡｃコンジュゲートをＣ５７マウス（ｎ＝４）に１回、１ｍｇ／ｋｇ皮下投与した後のＴＴＲタンパク質のノックダウンを示している。
【図６】ＴＴＲ  ｓｉＲＮＡ−ＧａｌＮＡｃコンジュゲートをＣ５７マウス（ｎ＝４）に１回、１ｍｇ／ｋｇ皮下投与した後の肝臓におけるＴＴＲ  ｍＲＮＡのノックダウンを示している。
【図７】代表的な化合物に関して実施例２５で得たデータを示している。
【図８】代表的な化合物に関して実施例２５で得たデータを示している。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
本明細書で使用する場合、下記の用語は、別段の定めのない限り、その用語に割り当てられた意味を有する。
【００１３】
「低分子干渉ＲＮＡ」または「ｓｉＲＮＡ」という用語は、本明細書で使用する場合、そのｓｉＲＮＡが、標的遺伝子または標的配列と同じ細胞内にあるときに、（例えば、ｓｉＲＮＡ配列と相補的であるｍＲＮＡの分解を媒介したり、またはそのｍＲＮＡの翻訳を阻害することによって、）標的遺伝子または標的配列の発現を低下させたり、または阻害したりできる二本鎖ＲＮＡ（すなわち、二重鎖ＲＮＡ）を指す。ｓｉＲＮＡは、標的遺伝子もしくは標的配列に対して実質的な同一性もしくは完全な同一性を有しても、または、誤対合領域（すなわち、誤対合モチーフ）を含んでもよい。特定の実施形態では、ｓｉＲＮＡは、約１９〜２５（二重鎖）ヌクレオチド長であってよく、好ましくは、約２０〜２４、２１〜２２または２１〜２３（二重鎖）ヌクレオチド長である。ｓｉＲＮＡ二重鎖は、約１〜約４ヌクレオチドまたは約２〜約３ヌクレオチドの３’オーバーハングと、５’リン酸末端を含んでよい。ｓｉＲＮＡの例としては、２つの別々の鎖状分子からアセンブルした二本鎖ポリヌクレオチド分子であって、一方の鎖がセンス鎖であり、もう一方が相補的なアンチセンス鎖である分子が挙げられるが、これらに限らない。
【００１４】
特定の実施形態では、ｓｉＲＮＡの一方または両方の鎖の５’及び／または３’オーバーハングは、１〜４個（例えば、１個、２個、３個もしくは４個）の修飾及び／または非修飾デオキシチミジン（ｔまたはｄＴ）ヌクレオチド、１〜４個（例えば、１個、２個、３個もしくは４個）の修飾（例えば、２’ＯＭｅ）及び／または非修飾ウリジン（Ｕ）リボヌクレオチド、及び／または、標的配列に対して相補性を有するか（例えば、アンチセンス鎖の３’オーバーハング）もしくはその相補鎖に対して相補性を有する（例えば、センス鎖の３’オーバーハング）１〜４個（例えば、１個、２個、３個もしくは４個）の修飾（例えば、２’ＯＭｅ）及び／または非修飾リボヌクレオチドもしくはデオキシリボヌクレオチドを含む。
【００１５】
好ましくは、ｓｉＲＮＡは、化学的に合成する。ｓｉＲＮＡは、ｓｉＲＮＡよりも長いｄｓＲＮＡ（例えば、約２５ヌクレオチド長を超えるｄｓＲＮＡ）をＥ．ｃｏｌｉ  ＲＮＡａｓｅ  ＩＩＩまたはＤｉｃｅｒによって切断することによって作製することもできる。これらの酵素は、ｄｓＲＮＡを処理して、生物学的に活性なｓｉＲＮＡにする（例えば、Ｙａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９９：９９４２−９９４７（２００２）、Ｃａｌｅｇａｒｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９９：１４２３６（２００２）、Ｂｙｒｏｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｍｂｉｏｎ  ＴｅｃｈＮｏｔｅｓ，１０（１）：４−６（２００３）、Ｋａｗａｓａｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．，３１：９８１−９８７（２００３）、Ｋｎｉｇｈｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２９３：２２６９−２２７１（２００１）及びＲｏｂｅｒｔｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２４３：８２（１９６８）を参照されたい）。好ましくは、ｄｓＲＮＡは、少なくとも５０ヌクレオチド長から約１００ヌクレオチド長、２００ヌクレオチド長、３００ヌクレオチド長、４００ヌクレオチド長または５００ヌクレオチド長である。ｄｓＲＮＡは、１０００ヌクレオチド長、１５００ヌクレオチド長、２０００ヌクレオチド長、５０００ヌクレオチド長ほどの長さ、またはこれを超える長さであってよい。ｄｓＲＮＡは、全遺伝子転写物または部分的な遺伝子転写物をコードできる。特定のケースでは、ｓｉＲＮＡは、プラスミドによってコードさせてよい（例えば、ヘアピンループを有する二重鎖に自動的にフォールディングする配列として転写させてよい）。
【００１６】
「標的遺伝子の発現を阻害する」という語句は、本発明のｓｉＲＮＡが、標的遺伝子の発現（例えば、ＤＧＡＴ２、及び任意に応じてＡＮＧＰＴＬ３の発現）をサイレンシング、低下または阻害する能力を指す。遺伝子サイレンシングの程度を調べるには、試験試料（例えば、標的遺伝子を発現している目的の生物から得た生体試料、または標的遺伝子を発現している培養細胞の試料）と、標的遺伝子の発現をサイレンシング、低下または阻害するｓｉＲＮＡとを接触させる。試験試料における標的遺伝子の発現と、ｓｉＲＮＡと接触させていないコントロール試料（例えば、標的遺伝子を発現している目的の生物から得た生体試料、または標的遺伝子を発現している培養細胞試料）における標的遺伝子の発現とを比較する。コントロール試料（例えば、標的遺伝子を発現している試料）の値を１００％としてよい。特定的な実施形態では、コントロール試料（例えば、緩衝液のみ、異なる遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡ配列、スクランブルｓｉＲＮＡ配列など）に対する試験試料の値が、約１００％、９９％、９８％、９７％、９６％、９５％、９４％、９３％、９２％、９１％、９０％、８９％、８８％、８７％、８６％、８５％、８４％、８３％、８２％、８１％、８０％、７９％、７８％、７７％、７６％、７５％、７０％、６５％、６０％、５５％、５０％、４５％、４０％、３５％、３０％、２５％、２０％、１５％、１０％、５％または０％であるときに、標的遺伝子の発現のサイレンシング、阻害または低下が行われている。好適なアッセイとしては、当業者に知られている技法（例えば、ドットブロット、ノーザンブロット、インサイチューハイブリダイゼーション、ＥＬＩＳＡ、免疫沈降法、酵素機能など）を用いて、タンパク質またはｍＲＮＡのレベルを調べるアッセイと、当業者に知られている表現型アッセイが挙げられるが、これらに限らない。
【００１７】
「合成活性化基」という用語は、原子に結合して、その原子を活性化し、その原子が別の反応性基と共有結合を形成できるようにできる基を指す。合成活性化基の性質は、活性化する原子によって左右され得ることが分かる。例えば、合成活性化基が酸素原子に結合する場合、合成活性化基は、その酸素原子を活性化して、別の反応性基との結合（例えば、エステル結合、カルバメート結合またはエーテル結合）を形成する基である。このような合成活性化基は既知である。酸素原子に結合できる合成活性化基の例としては、アセテート、サクシネート、トリフレート及びメシレートが挙げられるが、これらに限らない。合成活性化基が、カルボン酸の酸素原子に結合する場合、合成活性化基は、既知のカップリング試薬（例えば、既知のアミドカップリング試薬）から誘導可能である基であることができる。このようなカップリング試薬は既知である。このようなカップリング試薬の例としては、Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）、ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）、Ｎ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカーボネート（ＥＤＣ）、（ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ）トリス（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＢＯＰ）、ベンゾトリアゾール−１−イル−オキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＰｙＢＯＰ）またはＯ−ベンゾトリアゾール−１−イル−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＢＴＵ）が挙げられるが、これらに限らない。
【００１８】
治療用核酸（ｓｉＲＮＡなど）の「有効量」または「治療有効量」は、所望の作用をもたらすのに、例えば、ｓｉＲＮＡの非存在下で検出した通常の発現レベルと比べて、標的配列の発現を阻害するのに十分な量である。特定的な実施形態では、ｓｉＲＮＡによって得られる値が、コントロール（例えば、緩衝液のみ、異なる遺伝子を標的とするｓｉＲＮＡ配列、スクランブルｓｉＲＮＡ配列など）と比べて、約１００％、９９％、９８％、９７％、９６％、９５％、９４％、９３％、９２％、９１％、９０％、８９％、８８％、８７％、８６％、８５％、８４％、８３％、８２％、８１％、８０％、７９％、７８％、７７％、７６％、７５％、７０％、６５％、６０％、５５％、５０％、４５％、４０％、３５％、３０％、２５％、２０％、１５％、１０％、５％または０％であるときに、標的遺伝子または標的配列の発現の阻害が行われている。標的遺伝子または標的配列の発現を測定するのに適するアッセイとしては、当業者に知られている技法（例えば、ドットブロット、ノーザンブロット、インサイチューハイブリダイゼーション、ＥＬＩＳＡ、免疫沈降法、酵素機能など）を用いて、タンパク質またはｍＲＮＡのレベルを調べるアッセイと、当業者に知られている表現型アッセイが挙げられるが、これらに限らない。
【００１９】
「核酸」という用語は、本明細書で使用する場合、ヌクレオチドを少なくとも２つ含む一本鎖形態または二本鎖形態のいずれかのポリマー（すなわち、デオキシリボヌクレオチドまたはリボヌクレオチド）を指し、ＤＮＡとＲＮＡを含む。「ヌクレオチド」は、糖のデオキシリボース（ＤＮＡ）またはリボース（ＲＮＡ）と、塩基と、ホスフェート基を含む。ヌクレオチドは、ホスフェート基を通じて連結し合っている。「塩基」には、プリンとピリミジンが含まれ、さらに、これらには、プリンとピリミジンの天然化合物のアデニン、チミン、グアニン、シトシン、ウラシル、イノシン、天然のアナログ、ならびに合成誘導体（新たな反応性基（アミン、アルコール、チオール、カルボキシレート及びハロゲン化アルキルなどが挙げられるが、これらに限らない）を配置する修飾体が挙げられるが、これらに限らない）が含まれる。核酸には、既知のヌクレオチドアナログまたは修飾骨格残基もしくは結合を含む核酸であって、合成のもの、天然のもの及び非天然のものであるとともに、その参照核酸と類似の結合特性を有する核酸が含まれる。このようなアナログ及び／または修飾残基の例としては、ホスホロチオエート、ホスホロアミデート、メチルホスホネート、キラルメチルホスホネート、２’−Ｏ−メチルリボヌクレオチド及びペプチド核酸（ＰＮＡ）が挙げられるが、これらに限らない。加えて、核酸は、ＵＮＡ部分を１つ以上含むことができる。
【００２０】
「核酸」という用語には、いずれかのオリゴヌクレオチドまたはポリヌクレオチドが含まれ、最大で６０個のヌクレオチドを含む断片は概して、オリゴヌクレオチドといい、それよりも長い断片は、ポリヌクレオチドという。デオキシリボオリゴヌクレオチドは、デオキシリボースという５−炭素糖が、その糖の５’炭素と３’炭素においてホスフェートに供給結合して、交互の非分岐ポリマーを形成したものから構成されている。ＤＮＡは、例えば、アンチセンス分子、プラスミドＤＮＡ、予め凝縮したＤＮＡ、ＰＣＲ産物、ベクター、発現カセット、キメラ配列、染色体ＤＮＡ、またはこれらの群の誘導体、及びこれらの群を組み合わせた形態であってよい。リボオリゴヌクレオチドは、５−炭素糖がリボースである同様の反復構造から構成されている。ＲＮＡは、例えば、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、ダイサー基質ｄｓＲＮＡ、低分子ヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）、非対称干渉ＲＮＡ（ａｉＲＮＡ）、マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）、ｍＲＮＡ、ｔＲＮＡ、ｒＲＮＡ、ｔＲＮＡ、ウイルスＲＮＡ（ｖＲＮＡ）及びこれらを組み合わせた形態であってよい。したがって、本発明の関連では、「ポリヌクレオチド」及び「オリゴヌクレオチド」という用語は、天然の塩基、糖及び糖間（骨格）結合からなるヌクレオチドまたはヌクレオシドモノマーのポリマーまたはオリゴマーを指す。「ポリヌクレオチド」及び「オリゴヌクレオチド」という用語には、同様に機能する非天然のモノマーまたはその一部を含むポリマーまたはオリゴマーも含まれる。例えば、細胞の取り込みの増強、免疫原性の低下、ヌクレアーゼの存在下における安定性の向上などの特性により、このような修飾または置換オリゴヌクレオチドの方が、ネイティブ形態よりも好ましい場合が多い。
【００２１】
別段の定めのない限り、特定の核酸配列には、黙示的に、その保存的改変型バリアント（例えば、縮退コドン置換体）、アレル、オルソログ、ＳＮＰ及び相補配列、ならびに明示的に示されている配列も含まれる。具体的には、縮退コドン置換は、１つ以上の所定（またはすべて）のコドンの第３位が混合塩基及び／またはデオキシイノシン残基で置換されている配列を作ることによって行ってよい（Ｂａｔｚｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄ  Ｒｅｓ．，１９：５０８１（１９９１）、Ｏｈｔｓｕｋａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２６０：２６０５−２６０８（１９８５）、Ｒｏｓｓｏｌｉｎｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｐｒｏｂｅｓ，８：９１−９８（１９９４））。
【００２２】
一実施形態では、核酸は、ｓｉＲＮＡであることができる。好適なｓｉＲＮＡと、その調製に有用な方法及び中間体は、国際公開第２０１６／０５４４２１号に報告されている。一実施形態では、ｓｉＲＮＡは、下記の表に示されているｓｉＲＮＡから選択できる。
【表１】
2019513770.tif 000004
2019513770.tif 000005
【００２３】
「遺伝子」という用語は、ポリペプチドまたは前駆ポリペプチドの産生に必要な部分長コード配列または完全長コード配列を含む核酸（例えば、ＤＮＡまたはＲＮＡ）配列を指す。
【００２４】
「遺伝子産物」とは、本明細書で使用する場合、ＲＮＡ転写物またはポリペプチドのような遺伝子産物を指す。
【００２５】
本明細書で使用する場合、「アルキル」という用語は、単独で、または別の置換基の一部として、別段の定めのない限り、示されている炭素原子数を有する（すなわち、Ｃ１−８は、１〜８個の炭素を意味する）直鎖炭化水素基または分岐鎖炭化水素基を意味する。アルキル基の例としては、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソ−プロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル、イソ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、ｎ−ヘプチル、ｎ−オクチルなどが挙げられる。「アルケニル」という用語は、二重結合を１つ以上有する不飽和アルキル基を指す。同様に、「アルキニル」という用語は、三重結合を１つ以上有する不飽和アルキル基を指す。このような不飽和アルキル基の例としては、ビニル、２−プロペニル、クロチル、２−イソペンテニル、２−（ブタジエニル）、２，４−ペンタジエニル、３−（１，４−ペンタジエニル）、エチニル、１−プロピニル、３−プロピニル、３−ブチニル、ならびに高級同族体及び異性体が挙げられる。
【００２６】
「アルキレン」という用語は、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２及び−ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２ＣＨ２−によって例示されるように、単独で、または別の置換基の一部として、アルカン（直鎖及び分岐鎖のアルカンを含む）に由来する二価の基を意味する。
【００２７】
「シクロアルキル」、「炭素環式」または「炭素環」という用語は、環原子の総数が３〜２０個である炭化水素環系を指し（例えば、３〜２０員のシクロアルキルは、３〜２０個の環原子を有するシクロアルキルであり、またはＣ３−２０シクロアルキルは、３〜２０個の炭素環原子を有するシクロアルキルである）、３〜５員のシクロアルキルは、完全飽和であるかまたは環頂点間の二重結合が１つのみであり、６員以上のシクロアルキルは、完全飽和であるか、または環頂点間の二重結合が２つ以下である。本明細書で使用する場合、「シクロアルキル」、「炭素環式」または「炭素環」は、二環、多環及びスピロ環の炭化水素環系（例えば、ビシクロ［２．２．１］ヘプタン、ピナン、ビシクロ［２．２．２］オクタン、アダマンタン、ノルボルネン、スピロ環Ｃ５−１２アルカンなど）を指すようにも意図されている。本明細書で使用する場合、「アルケニル」、「アルキニル」、「シクロアルキル」、「炭素環」及び「炭素環式」という用語には、そのモノハロゲン化バリアントとポリハロゲン化バリアントも含まれるように意図されている。
【００２８】
「ヘテロシクロアルキル」、「複素環式」または「複素環」という用語は、環原子の総数が３〜２０個である飽和または部分不飽和環系基であって（例えば、３〜２０員のヘテロシクロアルキルは、３〜２０個の環原子を有するヘテロシクロアルキル基であり、Ｃ２−１９ヘテロシクロアルキルは、３〜１０個の環原子を有するとともに、２〜１９個の環原子が炭素であるヘテロシクロアルキルである）、Ｎ、Ｏ及びＳから選択したヘテロ原子を１〜１０個含み、環原子として、その窒素原子と硫黄原子が任意に応じて酸化されており、窒素原子（複数可）が任意に応じて四級化されている基を指す。別段の定めのない限り、「ヘテロシクロアルキル」、「複素環式」または「複素環」の環は、単環、二環、スピロ環または多環の環系であることができる。「ヘテロシクロアルキル」、「複素環式」または「複素環」の環の非限定的な例としては、ピロリジン、ピペリジン、Ｎ−メチルピペリジン、イミダゾリジン、ピラゾリジン、ブチロラクタム、バレロラクタム、イミダゾリジノン、ヒダントイン、ジオキソラン、フタルイミド、ピペリジン、ピリミジン−２，４（１Ｈ，３Ｈ）−ジオン、１，４−ジオキサン、モルホリン、チオモルホリン、チオモルホリン−Ｓ−オキシド、チオモルホリン−Ｓ，Ｓ−オキシド、ピペラジン、ピラン、ピリドン、３−ピロリン、チオピラン、ピロン、テトラヒドロフラン、テトラヒドロチオフェン、キヌクリジン、トロパン、２−アザスピロ［３．３］ヘプタン、（１Ｒ，５Ｓ）−３−アザビシクロ［３．２．１］オクタン、（１ｓ，４ｓ）−２−アザビシクロ［２．２．２］オクタン、（１Ｒ，４Ｒ）−２−オキサ−５−アザビシクロ［２．２．２］オクタンなどが挙げられる。「ヘテロシクロアルキル」、「複素環式」または「複素環」の基は、１つ以上の環炭素またはヘテロ原子を通じて、分子の残部に結合できる。「ヘテロシクロアルキル」、「複素環式」または「複素環」には、そのモノハロゲン化バリアントとポリハロゲン化バリアントを含めることができる。
【００２９】
「アルコキシ」及び「アルキルチオ」という用語は、それらの従来の意味で用いられており、酸素原子（「オキシ」）またはチオ基を介して、分子の残部に結合しているアルキル基を指し、これらの用語にはさらに、そのモノハロゲン化バリアントとポリハロゲン化バリアントを含めることができる。
【００３０】
「ハロ」または「ハロゲン」という用語は、単独で、または別の置換基の一部として、別段の定めのない限り、フッ素原子、塩素原子、臭素原子またはヨウ素原子を意味する。「（ハロ）アルキル」という用語には、「アルキル」置換基と「ハロアルキル」置換基の両方が含まれるように意図されている。加えて、「ハロアルキル」という用語には、モノハロアルキルとポリハロアルキルが含まれるように意図されている。例えば、「Ｃ１−４ハロアルキル」という用語には、トリフルオロメチル、２，２，２−トリフルオロエチル、４−クロロブチル、３−ブロモプロピル、ジフルオロメチルなどが含まれるように意図されている。
【００３１】
「アリール」という用語は、１つ以上の基に縮合しているか否かにかかわらず、炭素原子を６〜１４個有する炭素環式芳香族基を意味する。別段の定めのない限り、アリール基の例としては、フェニル、ナフチル、ビフェニルなどが挙げられる。
【００３２】
「ヘテロアリール」という用語は、Ｎ、Ｏ及びＳから選択したヘテロ原子を１〜５個含むアリール環（複数可）であって、その窒素原子と硫黄原子が任意に応じて酸化されており、窒素原子（複数可）が任意に応じて四級化されているアリール環を指す。ヘテロアリール基は、ヘテロ原子を通じて、分子の残部に結合できる。ヘテロアリール基の例としては、ピリジル、ピリダジニル、ピラジニル、ピリミジニル、トリアジニル、キノリニル、キノキサリニル、キナゾリニル、シンノリニル、フタラジニル、ベンゾトリアジニル、プリニル、ベンズイミダゾリル、ベンゾピラゾリル、ベンゾトリアゾリル、ベンズイソオキサゾリル、イソベンゾフリル、イソインドリル、インドリジニル、ベンゾトリアジニル、チエノピリジニル、チエノピリミジニル、ピラゾロピリミジニル、イミダゾピリジン、ベンゾチアゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾチエニル、インドリル、キノリル、イソキノリル、イソチアゾリル、ピラゾリル、インダゾリル、プテリジニル、イミダゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアジアゾリル、ピロリル、チアゾリル、フリル、チエニルなどが挙げられる。
【００３３】
糖という用語には、単糖、二糖及び三糖が含まれる。この用語には、グルコース、スクロース、フルクトース、ガラクトース及びリボース、ならびにデオキシ糖（デオキシリボースなど）及びアミノ糖（ガラクトサミンなど）が含まれる。糖誘導体は、利便的なことに、国際公開第９６／３４００５号及び同第９７／０３９９５号に説明されているようにして調製できる。糖は、利便的なことに、エーテル結合、チオエーテル結合（例えばＳ−グリコシド）、アミン窒素（例えば、Ｎ−グリコシド）または炭素−炭素結合（例えばＣ−グリコシド）を通じて、式Ｉの化合物の残部に連結できる。一実施形態では、糖は、利便的なことに、エーテル結合を通じて、式Ｉの化合物の残部に連結できる。一実施形態では、糖という用語には、下記の式の基が含まれ、
【化２】
2019513770.tif 000006
式中、
Ｘは、ＮＲ３であり、Ｙは、−（Ｃ＝Ｏ）Ｒ４、−ＳＯ２Ｒ５及び−（Ｃ＝Ｏ）ＮＲ６Ｒ７から選択されているか、またはＸは、−（Ｃ＝Ｏ）−であり、Ｙは、ＮＲ８Ｒ９であり、
Ｒ３は、水素または（Ｃ１−Ｃ４）アルキルであり、
Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８及びＲ９はそれぞれ独立して、水素、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）ハロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、ならびに、ハロ、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、（Ｃ１−Ｃ４）ハロアルキル、（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ及び（Ｃ１−Ｃ４）ハロアルコキシからなる群から独立して選択した１つ以上の基で任意に応じて置換されている（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキルからなる群から選択されており、
Ｒ１０は、−ＯＨ、−ＮＲ８Ｒ９または−Ｆであり、
Ｒ１１は、−ＯＨ、−ＮＲ８Ｒ９、−Ｆ、または独立して、ハロ、ヒドロキシル、カルボキシル、アミノ、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、（Ｃ１−Ｃ４）ハロアルキル、（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ及び（Ｃ１−Ｃ４）ハロアルコキシからなる群から選択した１つ以上の基で任意に応じて置換されている５員の複素環である。別の実施形態では、糖は、
【化３】
2019513770.tif 000007
からなる群から選択できる。
【００３４】
別の実施形態では、糖は、
【化４】
2019513770.tif 000008
であることができる。
【００３５】
「動物」という用語には、哺乳動物種（ヒト、マウス、ラット、イヌ、ネコ、ハムスター、モルモット、ウサギ、家畜など）が含まれる。
【００３６】
ｓｉＲＮＡ分子の作製
ｓｉＲＮＡは、例えば、１つ以上の単離低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）二重鎖として、それよりも長い二本鎖ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）として、またはＤＮＡプラスミド内の転写カセットからから転写させたｓｉＲＮＡもしくはｄｓＲＮＡとしてを含め、いくつかの形態で提供できる。いくつかの実施形態では、ｓｉＲＮＡは、酵素的に、または部分／完全有機合成によって作製してよく、修飾リボヌクレオチドは、インビトロでの酵素的合成または有機合成によって導入できる。特定のケースでは、各鎖は、化学的に調製する。ＲＮＡ分子の合成方法は、当該技術分野において知られており、例えば、Ｖｅｒｍａ及びＥｃｋｓｔｅｉｎの文献（１９９８）に記載されているか、または本明細書に記載されているような化学合成方法である。
【００３７】
ＲＮＡの単離方法、ＲＮＡの合成方法、核酸のハイブリダイゼーション方法、ｃＤＮＡライブラリーの作製及びスクリーニング方法、ＰＣＲの実施方法は、当該技術分野において周知であり（例えば、Ｇｕｂｌｅｒ  ａｎｄ  Ｈｏｆｆｍａｎ，Ｇｅｎｅ，２５：２６３−２６９（１９８３）、Ｓａｍｂｒｏｏｋらの上記文献、Ａｕｓｕｂｅｌらの上記文献を参照されたい）、ＰＣＲ方法も周知である（米国特許第４，６８３，１９５号及び同第４，６８３，２０２号、ＰＣＲ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ：Ａ  Ｇｕｉｄｅ  ｔｏ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ（Ｉｎｎｉｓ  ｅｔ  ａｌ．，ｅｄｓ，１９９０）を参照されたい）。発現ライブラリーも当業者に周知である。本発明において有用な一般的な方法を開示しているさらなる基本テキストとしては、Ｓａｍｂｒｏｏｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ，Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ（２ｎｄ  ｅｄ．１９８９）、Ｋｒｉｅｇｌｅｒ，Ｇｅｎｅ  Ｔｒａｎｓｆｅｒ  ａｎｄ  Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ（１９９０）及びＣｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ（Ａｕｓｕｂｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，ｅｄｓ．，１９９４）が挙げられる。これらの参照文献の開示内容は、あらゆる目的において、参照により、その全体が本明細書に援用される。
【００３８】
典型的には、ｓｉＲＮＡは、化学的に合成する。本発明のｓｉＲＮＡ分子を含むオリゴヌクレオチドは、Ｕｓｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１０９：７８４５（１９８７）、Ｓｃａｒｉｎｇｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．，１８：５４３３（１９９０）、Ｗｉｎｃｏｔｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．，２３：２６７７−２６８４（１９９５）及びＷｉｎｃｏｔｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｍｏｌ．Ｂｉｏ．，７４：５９（１９９７）に記載されている技法のように、当該技術分野において知られている様々な技法のいずれかを用いて合成できる。オリゴヌクレオチドの合成では、一般的な核酸保護基とカップリング基（５’末端におけるジメトキシトリチル及び３’末端におけるホスホロアミダイトなど）を利用する。非限定的な例として、小規模な合成は、Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓの合成装置で、０．２μモルスケールのプロトコールを用いて行うことができる。あるいは、０．２μモルスケールの合成は、Ｐｒｏｔｏｇｅｎｅ（Ｐａｌｏ  Ａｌｔｏ，ＣＡ）の９６ウェルプレート合成装置で行うことができる。しかしながら、これよりも大きいスケールまたは小さいスケールの合成も、本発明の範囲内である。オリゴヌクレオチドの合成、ＲＮＡの脱保護方法及びＲＮＡの精製方法に適する試薬は、当業者に知られている。
【００３９】
ｓｉＲＮＡ分子は、２つの別個のオリゴヌクレオチドからアセンブルでき、この場合、一方のオリゴヌクレオチドは、センス鎖を含み、もう一方は、ｓｉＲＮＡのアンチセンス鎖を含む。例えば、各鎖を別々に合成して、合成及び／または脱保護後に、ハイブリダイゼーションまたはライゲーションによってつなぎ合わせることができる。
【００４０】
本発明の実施形態
本発明の一態様は、発明の概要に示されているような式Ｉの化合物、またはその塩である。
【００４１】
式Ｉの化合物の一実施形態では、Ｒ１は、標的化リガンドであり、
Ｌ１は、存在しないか、または連結基であり、
Ｌ２は、存在しないか、または連結基であり、
Ｒ２は、核酸であり、
環Ａは、存在しないか、３〜２０員のシクロアルキル、５〜２０員のアリール、５〜２０員のヘテロアリールまたは３〜２０員のヘテロシクロアルキルであり、
各ＲＡは独立して、水素、ヒドロキシ、ＣＮ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、−Ｃ１−２アルキル−ＯＲＢ、ならびにハロ、ヒドロキシ及びＣ１−３アルコキシから独立して選択した１つ以上の基で任意に応じて置換されているＣ１−８アルキルからなる群から選択されており、
ＲＢは、水素、保護基、固体支持体への共有結合、または固体支持体に結合している連結基への結合であり、
ｎは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９または１０である。
【００４２】
一実施形態では、Ｒ１は、−Ｃ（Ｈ）（３−ｐ）（Ｌ３−糖）ｐであり、各Ｌ３は独立して、連結基であり、ｐは、１、２または３であり、糖は、単糖または二糖である。
【００４３】
一実施形態では、糖は、
【化５】
2019513770.tif 000009
であって、
式中、
Ｘが、ＮＲ３であり、Ｙが、−（Ｃ＝Ｏ）Ｒ４、−ＳＯ２Ｒ５及び−（Ｃ＝Ｏ）ＮＲ６Ｒ７から選択されているか、もしくはＸが、−（Ｃ＝Ｏ）であり、Ｙが、ＮＲ８Ｒ９であり、
Ｒ３が、水素もしくは（Ｃ１−Ｃ４）アルキルであり、
Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８及びＲ９がそれぞれ独立して、水素、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）ハロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、ならびにハロ、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、（Ｃ１−Ｃ４）ハロアルキル、（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ及び（Ｃ１−Ｃ４）ハロアルコキシからなる群から独立して選択した１つ以上の基で任意に応じて置換されている（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキルからなる群から選択されており、
Ｒ１０が、−ＯＨ、−ＮＲ８Ｒ９もしくは−Ｆであり、
Ｒ１１が、−ＯＨ、−ＮＲ８Ｒ９、−Ｆ、もしくはハロ、ヒドロキシル、カルボキシル、アミノ、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、（Ｃ１−Ｃ４）ハロアルキル、（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ及び（Ｃ１−Ｃ４）ハロアルコキシからなる群から独立して選択した１つ以上の基で任意に応じて置換されている５員の複素環である糖、
またはその塩である。
【００４４】
一実施形態では、糖は、
【化６】
2019513770.tif 000010
ならびにこれらの塩からなる群から選択する。
【００４５】
一実施形態では、糖は、
【化７】
2019513770.tif 000011
である。
【００４６】
一実施形態では、各Ｌ３は独立して、炭素原子を０〜５０個有する二価の分岐鎖状または非分岐鎖状の飽和または不飽和炭化水素鎖であり、その炭化水素鎖の炭素原子の１つ以上（例えば、１個、２個、３個または４個）は任意に応じて、−Ｏ−、−ＮＲＸ−、−ＮＲＸ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲＸ−または−Ｓ−によって置換されており、このＲＸは、水素または（Ｃ１−Ｃ６）アルキルであり、この炭化水素鎖は、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイル、（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイルオキシ、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシカルボニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルチオ、アジド、シアノ、ニトロ、ハロ、ヒドロキシ、オキソ（＝Ｏ）、カルボキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール及びヘテロアリールオキシから選択した１つ以上（例えば、１個、２個、３個または４個）の置換基で任意に応じて置換されている。
【００４７】
一実施形態では、各Ｌ３は独立して、炭素原子を１〜２０個有する二価の分岐鎖状または非分岐鎖状の飽和または不飽和炭化水素鎖であり、その炭化水素鎖の炭素原子の１つ以上（例えば、１個、２個、３個または４個）は任意に応じて、−Ｏ−、−ＮＲＸ−、−ＮＲＸ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲＸ−または−Ｓ−によって置換されており、このＲＸは、水素または（Ｃ１−Ｃ６）アルキルであり、この炭化水素鎖は、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイル、（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイルオキシ、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシカルボニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルチオ、アジド、シアノ、ニトロ、ハロ、ヒドロキシ、オキソ（＝Ｏ）、カルボキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール及びヘテロアリールオキシから選択した１つ以上（例えば、１個、２個、３個または４個）の置換基で任意に応じて置換されている。
【００４８】
一実施形態では、Ｌ３は、
【化８】
2019513770.tif 000012
またはその塩である。
【００４９】
一実施形態では、Ｒ１は、
【化９】
2019513770.tif 000013
またはその塩である。
【００５０】
一実施形態では、Ｒ１は、
【化１０】
2019513770.tif 000014
であって、
式中、Ｇが、−ＮＨ−または−Ｏ−であり、
ＲＣが、水素、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）ハロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイル、（Ｃ３−Ｃ２０）シクロアルキル、（Ｃ３−Ｃ２０）複素環、アリール、ヘテロアリール、単糖、二糖もしくは三糖であり、このシクロアルキル、複素環、アリール、ヘテロアリール及び糖が、ハロ、カルボキシル、ヒドロキシル、アミノ、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、（Ｃ１−Ｃ４）ハロアルキル、（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ及び（Ｃ１−Ｃ４）ハロアルコキシからなる群から独立して選択した１つ以上の基で任意に応じて置換されている基、
またはその塩である。
【００５１】
一実施形態では、ＲＣは、
【化１１】
2019513770.tif 000015
である。
【００５２】
一実施形態では、Ｒ１は、
【化１２】
2019513770.tif 000016
である。
【００５３】
一実施形態では、ＲＣは
【化１３】
2019513770.tif 000017
である。
【００５４】
一実施形態では、Ｇは、−ＮＨ−である。
【００５５】
一実施形態では、Ｒ１は、
【化１４】
2019513770.tif 000018
である。
【００５６】
一実施形態では、Ｒ１は、
【化１５】
2019513770.tif 000019
であり、
式中、各ＲＤは、水素、（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、（Ｃ９−Ｃ２０）アルキルシリル、（ＲＷ）３Ｓｉ−、（Ｃ２−Ｃ６）アルケニル、テトラヒドロピラニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイル、ベンゾイル、アリール（Ｃ１−Ｃ３）アルキル、ＴＭＴｒ（トリメトキシトリチル）、ＤＭＴｒ（ジメトキシトリチル）、ＭＭＴｒ（モノメトキシトリチル）及びＴｒ（トリチル）からなる群から独立して選択されており、
各ＲＷは、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル及びアリールからなる群から独立して選択されている。
【００５７】
一実施形態では、連結基Ｌ１及びＬ２は独立して、炭素原子を１〜５０個有する二価の分岐鎖状または非分岐鎖状の飽和または不飽和炭化水素鎖であり、その炭化水素鎖の炭素原子の１つ以上（例えば、１個、２個、３個または４個）は、−Ｏ−、−ＮＲＸ−、−ＮＲＸ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲＸ−または−Ｓ−によって任意に応じて置換されており、このＲＸは、水素または（Ｃ１−Ｃ６）アルキルであり、この炭化水素鎖は、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイル、（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイルオキシ、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシカルボニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルチオ、アジド、シアノ、ニトロ、ハロ、ヒドロキシ、オキソ（＝Ｏ）、カルボキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール及びヘテロアリールオキシから選択した１つ以上（例えば、１個、２個、３個または４個）の置換基で任意に応じて置換されている。
【００５８】
一実施形態では、Ｌ１及びＬ２は独立して、炭素原子を１〜２０個有する二価の分岐鎖状または非分岐鎖状の飽和または不飽和炭化水素鎖であり、その炭化水素鎖の炭素原子の１つ以上（例えば、１個、２個、３個または４個）は、−Ｏ−、−ＮＲＸ−、−ＮＲＸ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲＸ−または−Ｓ−によって任意に応じて置換されており、このＲＸは、水素または（Ｃ１−Ｃ６）アルキルであり、この炭化水素鎖は、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイル、（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイルオキシ、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシカルボニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルチオ、アジド、シアノ、ニトロ、ハロ、ヒドロキシ、オキソ（＝Ｏ）、カルボキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール及びヘテロアリールオキシから選択した１つ以上（例えば、１個、２個、３個または４個）の置換基で任意に応じて置換されている。
【００５９】
一実施形態では、Ｌ１及びＬ２は独立して、炭素原子を１〜１４個有する二価の分岐鎖状または非分岐鎖状の飽和または不飽和炭化水素鎖であり、その炭化水素鎖の炭素原子の１つ以上（例えば、１個、２個、３個または４個）は、−Ｏ−、−ＮＲＸ−、−ＮＲＸ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲＸ−または−Ｓ−によって任意に応じて置換されており、このＲＸは、水素または（Ｃ１−Ｃ６）アルキルであり、この炭化水素鎖は、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイル、（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイルオキシ、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシカルボニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルチオ、アジド、シアノ、ニトロ、ハロ、ヒドロキシ、オキソ（＝Ｏ）、カルボキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール及びヘテロアリールオキシから選択した１つ以上（例えば、１個、２個、３個または４個）の置換基で任意に応じて置換されている。
【００６０】
一実施形態では、Ｌ１は、−ＮＨ−、−Ｏ−、−Ｓ−、−（Ｃ＝Ｏ）−、−（Ｃ＝Ｏ）−ＮＨ−、−ＮＨ−（Ｃ＝Ｏ）−、−（Ｃ＝Ｏ）−Ｏ−、−ＮＨ−（Ｃ＝Ｏ）−ＮＨ−または−ＮＨ−（ＳＯ２）−を通じて、Ｒ１に連結されている。
【００６１】
一実施形態では、Ｌ２は、−Ｏ−を通じて、Ｒ２に連結されている。
【００６２】
一実施形態では、Ｌ１は、
【化１６】
2019513770.tif 000020
からなる群から選択されている。
【００６３】
一実施形態では、Ｌ１は、
【化１７】
2019513770.tif 000021
ならびにこれらの塩からなる群から選択されている。
【００６４】
一実施形態では、Ｌ２は、−ＣＨ２−Ｏ−または−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−である。
【００６５】
一実施形態では、式Ｉの化合物は、下記の式Ｉａを有する化合物であって、
【化１８】
2019513770.tif 000022
式中、
各Ｄが、
【化１９】
2019513770.tif 000023
及び−Ｎ＝からなる群から独立して選択されている化合物、
またはその塩である。
【００６６】
一実施形態では、式Ｉａの化合物は、
【化２０】
2019513770.tif 000024
であって、式中、
Ｑ１が、水素であり、Ｑ２が、Ｒ２であるか、またはＱ１が、Ｒ２であり、Ｑ２が、水素であり、
Ｚが、−Ｌ１−Ｒ１である化合物、
ならびにこれらの塩
からなる群から選択されている。
【００６７】
一実施形態では、式Ｉの化合物は、下記の式Ｉｂを有する化合物であって、
【化２１】
2019513770.tif 000025
式中、
各Ｄが独立して、
【化２２】
2019513770.tif 000026
及び−Ｎ＝からなる群から選択されており、
各ｍが独立して、１もしくは２である化合物、
またはその塩である。
【００６８】
一実施形態では、式Ｉｂの化合物は、
【化２３】
2019513770.tif 000027
であって、
式中、
Ｑ１が、水素であり、Ｑ２が、Ｒ２であり、またはＱ１が、Ｒ２であり、Ｑ２が、水素であり、
Ｚが、−Ｌ１−Ｒ１である化合物、
ならびにこれらの塩
からなる群から選択されている。
【００６９】
一実施形態では、式Ｉの化合物は、下記の式（Ｉｃ）の化合物であって、
【化２４】
2019513770.tif 000028
式中、Ｅが、−Ｏ−もしくは−ＣＨ２−であり、
ｎが、０、１、２、３及び４からなる群から選択されており、
ｎ１及びｎ２がそれぞれ独立して、０、１、２及び３からなる群から選択されている化合物、
またはその塩である。
【００７０】
特定の実施形態では、式（Ｉｃ）の化合物は、
【化２５】
2019513770.tif 000029
であって、
式中、Ｚが、−Ｌ１−Ｒ１である化合物、
ならびにこれらの塩
からなる群から選択されている。
【００７１】
一実施形態では、−Ａ−Ｌ２−Ｒ２部分は、
【化２６】
2019513770.tif 000030
であって、
式中、
Ｑ１が、水素であり、Ｑ２が、Ｒ２であるか、もしくはＱ１が、Ｒ２であり、Ｑ２が、水素であり、
各ｑが独立して、０、１、２、３、４もしくは５である部分、
またはその塩である。
【００７２】
一実施形態では、Ｒ２は、オリゴヌクレオチドである。
【００７３】
一実施形態では、Ｒ２は、ｓｉＲＮＡである。
【００７４】
一実施形態では、式（Ｉ）の化合物は、
【化２７】
2019513770.tif 000031
【化２８】
2019513770.tif 000032
ならびにこれらの塩
からなる群から選択されている。
【００７５】
一実施形態では、Ｒ１は、
【化２９】
2019513770.tif 000033
からなる群から選択されており、
式中、ＲＳは
【化３０】
2019513770.tif 000034
であり、
ｎは、２、３または４であり、
ｘは、１または２である。
【００７６】
一実施形態では、Ｌ１は、
【化３１】
2019513770.tif 000035
からなる群から選択されている。
【００７７】
一実施形態では、Ｌ１は、
【化３２】
2019513770.tif 000036
からなる群から選択されている。
【００７８】
一実施形態では、Ａは、存在しないか、フェニル、ピロリジニルまたはシクロペンチルである。
【００７９】
一実施形態では、Ｌ２は、ヒドロキシで任意に応じて置換されているＣ１−４アルキレン−Ｏ−である。
【００８０】
一実施形態では、Ｌ２は、−ＣＨ２Ｏ−、−ＣＨ２ＣＨ２Ｏ−または−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ２Ｏ−である。
【００８１】
一実施形態では、各ＲＡは独立して、ヒドロキシ、またはヒドロキシルで任意に応じて置換されているＣ１−８アルキルである。
【００８２】
一実施形態では、各ＲＡは独立して、ヒドロキシ、メチル及び−ＣＨ２ＯＨからなる群から選択されている。
【００８３】
一実施形態では、式Ｉの化合物は、下記の式（Ｉｇ）であって、
【化３３】
2019513770.tif 000037
式中、Ｂが、−Ｎ−もしくは−ＣＨ−であり、
Ｌ１が、存在しないか、もしくは−ＮＨ−であり、
Ｌ２が、ヒドロキシルもしくはハロで任意に応じて置換されているＣ１−４アルキレン−Ｏ−であり、
ｎが、０、１もしくは２である化合物、
またはその塩である。
【００８４】
一実施形態では、式Ｉの化合物は、下記の式（Ｉｇ）であって、
【化３４】
2019513770.tif 000038
式中、Ｂが、−Ｎ−もしくは−ＣＨ−であり、
Ｌ１が、存在しないか、もしくは−ＮＨ−であり、
Ｌ２が、ヒドロキシルもしくはハロで任意に応じて置換されているＣ１−４アルキレン−Ｏ−であり、
ｎが、０、１、２、３、４、５、６もしくは７である化合物、
またはその塩である。
【００８５】
一実施形態では、式Ｉの化合物は、下記の式（Ｉｇ）であって、
【化３５】
2019513770.tif 000039
式中、Ｂが、−Ｎ−もしくは−ＣＨ−であり、
Ｌ１が、存在しないか、もしくは−ＮＨ−であり、
Ｌ２が、ヒドロキシルもしくはハロで任意に応じて置換されているＣ１−４アルキレン−Ｏ−であり、
ｎが、０、１、２、３もしくは４である化合物、
またはその塩である。
【００８６】
一実施形態では、式Ｉｇの化合物は、
【化３６】
2019513770.tif 000040
であって、
式中、Ｒ’が、Ｃ１−９アルキル、Ｃ２−９アルケニルまたはＣ２−９アルキニルであり、そのＣ１−９アルキル、Ｃ２−９アルケニルまたはＣ２−９アルキニルが任意に応じて、ハロまたはヒドロキシルで置換されている化合物、
ならびにこれらの塩
からなる群から選択されている。
【００８７】
一実施形態では、式Ｉの化合物は、
【化３７】
2019513770.tif 000041
ならびにこれらの塩
からなる群から選択されている。
【００８８】
一実施形態では、式Ｉの化合物またはその塩は、
【化３８】
2019513770.tif 000042
【化３９】
2019513770.tif 000043
【化４０】
2019513770.tif 000044
【化４１】
2019513770.tif 000045
またはこれらの製薬学的に許容可能な塩
からなる群から選択されている。
【００８９】
本発明の一態様は、式Ｉの化合物と、製薬学的に許容可能な担体とを含む医薬組成物である。
【００９０】
本発明の別の態様は、動物の肝臓への核酸の送達方法であって、式Ｉの化合物またはその製薬学的に許容可能な塩をその動物に投与することを含む方法である。
【００９１】
一実施形態では、式Ｉの化合物は、下記の式（Ｉｄ）を有し、
【化４２】
2019513770.tif 000046
式中、
Ｒ１ｄは、
【化４３】
2019513770.tif 000047
から選択されており、
Ｘｄは、Ｃ２−１０アルキレンであり、
Ｎｄは、０または１であり、
Ｒ２ｄは、核酸であり、
Ｒ３ｄは、Ｈ、保護基、固体支持体への共有結合、または固体支持体に結合している連結基への結合である。
【００９２】
一実施形態では、Ｒ３ｄは、式Ｉｄの化合物の残部を固体支持体につなぐ連結基を含む。式中のＲ２ｄが核酸である式Ｉｄの化合物の調製に適する中間体である場合には、この連結基の性質は、重要ではない。
【００９３】
一実施形態では、Ｒ３ｄのリンカーは、分子量が約２０ダルトン〜約１，０００ダルトンである。
【００９４】
一実施形態では、Ｒ３ｄのリンカーは、分子量が約２０ダルトン〜約５００ダルトンである。
【００９５】
一実施形態では、Ｒ３ｄのリンカーは、固体支持体を、式Ｉの化合物の残部から、約５オングストローム以上、約４０オングストローム以下の長さ引き離す。
【００９６】
一実施形態では、Ｒ３ｄのリンカーは、炭素原子を２〜１５個有する二価の分岐鎖状または非分岐鎖状の飽和または不飽和炭化水素鎖であり、その炭素原子の１つ以上（例えば、１個、２個、３個または４個）は任意に応じて、（−Ｏ−）または（−Ｎ（Ｈ）−）によって置換されており、その鎖は任意に応じて、炭素上で、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイル、（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイルオキシ、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシカルボニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルチオ、アジド、シアノ、ニトロ、ハロ、ヒドロキシ、オキソ（＝Ｏ）、カルボキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール及びヘテロアリールオキシから選択した１つ以上（例えば、１個、２個、３個または４個）の置換基で置換されている。
【００９７】
一実施形態では、Ｒ３ｄのリンカーは、炭素原子を２〜１０個有する二価の分岐鎖状または非分岐鎖状の飽和または不飽和炭化水素鎖であり、その炭素原子の１つ以上（例えば、１個、２個、３個または４個）は任意に応じて、（−Ｏ−）または（−Ｎ（Ｈ）−）によって置換されており、その鎖は任意に応じて、炭素上で、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイル、（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイルオキシ、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシカルボニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルチオ、アジド、シアノ、ニトロ、ハロ、ヒドロキシ、オキソ（＝Ｏ）、カルボキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール及びヘテロアリールオキシから選択した１つ以上（例えば、１個、２個、３個または４個）の置換基で置換されている。
【００９８】
一実施形態では、Ｒ３ｄのリンカーは、−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｈ）−である。
【００９９】
一実施形態では、Ｒ１ｄは、
【化４４】
2019513770.tif 000048
である。
【０１００】
一実施形態では、Ｒ１ｄは、
【化４５】
2019513770.tif 000049
である。
【０１０１】
一実施形態では、Ｘｄは、Ｃ８アルキレンである。
【０１０２】
一実施形態では、ｎｄは、０である。
【０１０３】
一実施形態では、Ｒ２ｄは、ｓｉＲＮＡである。
【０１０４】
一実施形態では、Ｒ３ｄは、Ｈである。
【０１０５】
別の実施形態では、（Ｉｄ）の化合物またはその塩は、
【化４６】
2019513770.tif 000050
ならびにこれらの塩
からなる群から選択されている。
【０１０６】
本発明の一態様は、式（Ｉｄ）の化合物と、製薬学的に許容可能な担体とを含む医薬組成物である。
【０１０７】
本発明の一態様は、動物の肝臓に対する核酸であって、式（Ｉｄ）の化合物またはその製薬学的に許容可能な塩をその動物に投与することを含む核酸である。
【０１０８】
本発明は、本明細書に開示されている合成中間体と方法であって、式（Ｉｄ）の化合物を調製するのに有用である合成中間体と方法も提供する。例えば、本発明は、下記の式Ｉｅの中間体化合物、
【化４７】
2019513770.tif 000051
またはその塩を含み、式中、
Ｒ１ｄは、
【化４８】
2019513770.tif 000052
から選択されており、
Ｘｄは、Ｃ２−８アルキレンであり、
ｎｄは、０または１であり、
Ｐｇ１は、Ｈまたは好適な保護基であり、
Ｒ３ｄは、Ｈ、保護基、固体支持体への共有結合、または固体支持体に結合している連結基への結合である。図１は、式（Ｉｅ）の代表的な中間体化合物を示しており、その標的化リガンド／リンカーは、固相支持体に結合されており、Ｐｇ１は、保護基のＤＭＴｒである。
【０１０９】
一実施形態では、Ｐｇ１は、ＴＭＴｒ（トリメトキシトリチル）、ＤＭＴｒ（ジメトキシトリチル）、ＭＭＴｒ（モノメトキシトリチル）またはＴｒ（トリチル）である。
【０１１０】
本発明は、本明細書に記載されているような式（Ｉｄ）の化合物の調製方法であって、下記の式（Ｉｅ）の対応する化合物であって、
【化４９】
2019513770.tif 000053
式中、
Ｘｄが、Ｃ２−８アルキレンであり、
ｎｄが、０または１であり、
Ｐｇ１が、Ｈであり、
Ｒ３ｄが、固体支持体への共有結合、または固体支持体に結合している連結基への結合である化合物を固相核酸合成条件に供し、式Ｉｄの対応する化合物であって、Ｒ２ｄが核酸である化合物をもたらすことを含む方法も提供する。
【０１１１】
一実施形態では、この方法は、化合物を固体支持体から切り出して、式Ｉｄの対応する化合物であって、Ｒ３ｄがＨである化合物をもたらすことをさらに含む。
【０１１２】
一実施形態では、その化合物は、
【化５０】
2019513770.tif 000054
ではない。
【０１１３】
一実施形態では、その化合物は、下記の式Ｉｄの化合物
【化５１】
2019513770.tif 000055
またはその塩であって、式中、
Ｒ１ｄが、
【化５２】
2019513770.tif 000056
から選択されており、
Ｘｄが、Ｃ２−１０アルキレンであり、
Ｎｄが、０もしくは１であり、
Ｒ２ｄが、核酸であり、
Ｒ３ｄが、Ｈ、保護基、固体支持体への共有結合、もしくは固体支持体に結合している連結基への結合である
化合物またはその塩ではない。
【０１１４】
一実施形態では、その化合物は、下記の式Ｉｅの化合物
【化５３】
2019513770.tif 000057
またはその塩であって、式中、
Ｒ１ｄが、
【化５４】
2019513770.tif 000058
から選択されており、
Ｘｄが、Ｃ２−８アルキレンであり、
ｎｄが、０もしくは１であり、
Ｐｇ１が、Ｈもしくは好適な保護基であり、
Ｒ３ｄが、Ｈ、保護基、固体支持体への共有結合、もしくは固体支持体に結合している連結基への結合である
化合物またはその塩ではない。
【０１１５】
一実施形態では、Ｒ３ｄは、Ｈである。
【０１１６】
一実施形態では、Ｒ３ｄは、固体支持体への共有結合である。
【０１１７】
一実施形態では、Ｒ３ｄは、固体支持体に結合している連結基への結合であり、その連結基は、炭素原子を２〜１５個有する二価の分岐鎖状または非分岐鎖状の飽和または不飽和炭化水素鎖であり、その炭素原子の１つ以上（例えば、１個、２個、３個または４個）は任意に応じて、（−Ｏ−）または（−Ｎ（Ｈ）−）によって置換されており、その鎖は任意に応じて、炭素上で、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイル、（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイルオキシ、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシカルボニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルチオ、アジド、シアノ、ニトロ、ハロ、ヒドロキシ、オキソ（＝Ｏ）、カルボキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール及びヘテロアリールオキシから選択した１つ以上（例えば、１個、２個、３個または４個）の置換基で置換されている。
【０１１８】
一実施形態では、Ｒ３ｄは、固体支持体に結合している連結基への結合であり、その連結基は、炭素原子を２〜１０個有する二価の分岐鎖状または非分岐鎖状の飽和または不飽和炭化水素鎖であり、その炭素原子の１つ以上（例えば、１個、２個、３個または４個）は任意に応じて、（−Ｏ−）または（−Ｎ（Ｈ）−）によって置換されており、その鎖は任意に応じて、炭素上で、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイル、（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイルオキシ、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシカルボニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルチオ、アジド、シアノ、ニトロ、ハロ、ヒドロキシ、オキソ（＝Ｏ）、カルボキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール及びヘテロアリールオキシから選択した１つ以上（例えば、１個、２個、３個または４個）の置換基で置換されている。
【０１１９】
一実施形態では、Ｒ３ｄは、固体支持体に結合している連結基への結合であり、その連結基は、−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ２ＣＨ２Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｈ）−である。
【０１２０】
一実施形態では、本発明は、下記の式（Ｉ）の化合物であって、
【化５５】
2019513770.tif 000059
式中、
Ｒ１が、Ｈもしくは合成活性化基であり、
Ｌ１が、存在しないか、もしくは連結基であり、
Ｌ２が、存在しないか、もしくは連結基であり、
Ｒ２が、核酸であり、
環Ａが、存在しないか、３〜２０員のシクロアルキル、５〜２０員のアリール、５〜２０員のヘテロアリールもしくは３〜２０員のヘテロシクロアルキルであり、
各ＲＡが独立して、水素、ヒドロキシ、ＣＮ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、−Ｃ１−２アルキル−ＯＲＢ、Ｃ１−１０アルキルＣ２−１０アルケニル及びＣ２−１０アルキニルからなる群から選択されており、そのＣ１−１０アルキルＣ２−１０アルケニルとＣ２−１０アルキニルが任意に応じて、ハロ、ヒドロキシ及びＣ１−３アルコキシから独立して選択した１つ以上の基で置換されており、
ＲＢが、水素、保護基、固体支持体への共有結合、もしくは固体支持体に結合している連結基への結合であり、
ｎが、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９もしくは１０である化合物、
またはその塩
を提供する。
【０１２１】
一実施形態では、本発明は、下記の式（Ｉ）の化合物であって、
【化５６】
2019513770.tif 000060
式中、
Ｒ１が、標的化リガンドであり、
Ｌ１が、存在しないか、もしくは連結基であり、
Ｌ２が、存在しないか、もしくは連結基であり、
Ｒ２が、Ｈもしくは合成活性化基であり、
環Ａが、存在しないか、３〜２０員のシクロアルキル、５〜２０員のアリール、５〜２０員のヘテロアリールもしくは３〜２０員のヘテロシクロアルキルであり、
各ＲＡが独立して、水素、ヒドロキシ、ＣＮ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、−Ｃ１−２アルキル−ＯＲＢ、Ｃ１−１０アルキルＣ２−１０アルケニル及びＣ２−１０アルキニルからなる群から選択されており、そのＣ１−１０アルキルＣ２−１０アルケニルとＣ２−１０アルキニルが任意に応じて、ハロ、ヒドロキシ及びＣ１−３アルコキシから独立して選択した１つ以上の基で置換されており、
ＲＢが、水素、保護基、固体支持体への共有結合、もしくは固体支持体に結合している連結基への結合であり、
ｎが、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９もしくは１０である化合物、
またはその塩
を提供する。
【０１２２】
一実施形態では、本発明は、下記の式（Ｉｇ）の化合物であって、
【化５７】
2019513770.tif 000061
式中、
Ｂが、−Ｎ−もしくは−ＣＨ−であり、
Ｌ２が、ヒドロキシルもしくはハロで任意に応じて置換されているＣ１−４アルキレン−Ｏ−であり、
ｎが、０、１、２、３、４、５、６もしくは７である化合物、
またはその塩
を提供する。
【０１２３】
一実施形態では、本発明は、
【化５８】
2019513770.tif 000062
からなる群から選択した化合物であって、
式中、
Ｑが、−Ｌ１−Ｒ１であり、
Ｒ’が、Ｃ１−９アルキル、Ｃ２−９アルケニルまたはＣ２−９アルキニルであり、そのＣ１−９アルキル、Ｃ２−９アルケニルまたはＣ２−９アルキニルが任意に応じて、ハロまたはヒドロキシルで置換されている化合物と、
その塩
を提供する。
【０１２４】
一実施形態では、本発明は、
【化５９】
2019513770.tif 000063
からなる群から選択した化合物であって、
式中、Ｑが−Ｌ１−Ｒ１である化合物と、これらの塩を提供する。
【０１２５】
一実施形態では、本発明は、下記の式（Ｉｇ）の化合物であって、
【化６０】
2019513770.tif 000064
式中、
Ｂが、−Ｎ−もしくは−ＣＨ−であり、
Ｌ１が、存在しないか、もしくは連結基であり、
Ｌ２が、ヒドロキシルもしくはハロで任意に応じて置換されているＣ１−４アルキレン−Ｏ−であり、
ｎが、０、１、２、３、４、５、６もしくは７であり、
Ｒ１が、Ｈもしくは合成活性化基であり、
Ｒ２が、Ｈもしくは合成活性化基である化合物、
またはその塩
を提供する。
【０１２６】
一実施形態では、本発明は、
【化６１】
2019513770.tif 000065
からなる群から選択した化合物であって、
式中、Ｑが、−Ｌ１−Ｒ１であり、
Ｌ１が、存在しないか、もしくは連結基であり、
Ｒ’が、Ｃ１−９アルキル、Ｃ２−９アルケニルもしくはＣ２−９アルキニルであり、そのＣ１−９アルキル、Ｃ２−９アルケニルもしくはＣ２−９アルキニルが任意に応じて、ハロもしくはヒドロキシルで置換されており、
Ｒ１が、Ｈもしくは合成活性化基であり、
Ｒ２が、Ｈもしくは合成活性化基である化合物、
またはその塩
を提供する。
【０１２７】
一実施形態では、本発明は、
【化６２】
2019513770.tif 000066
からなる群から選択した化合物であって、
式中、
Ｑが、−Ｌ１−Ｒ１であり、
Ｌ１が、存在しないか、もしくは連結基であり、
Ｒ１が、Ｈもしくは合成活性化基であり、
Ｒ２が、Ｈもしくは合成活性化基である化合物、
またはその塩
を提供する。
【０１２８】
一実施形態では、Ｒ１は、Ｈ、またはＤＣＣ、ＨＯＢｔ、ＥＤＣ、ＢＯＰ、ＰｙＢＯＰもしくはＨＢＴＵから誘導可能な合成活性化基である。
【０１２９】
一実施形態では、Ｒ２は、Ｈ、アセテート、トリフレート、メシレートまたはサクシネートである。
【０１３０】
一実施形態では、Ｒ１は、ＤＣＣ、ＨＯＢｔ、ＥＤＣ、ＢＯＰ、ＰｙＢＯＰまたはＨＢＴＵから誘導可能な合成活性化基である。
【０１３１】
一実施形態では、Ｒ２は、アセテート、トリフレート、メシレートまたはサクシネートである。
【０１３２】
一実施形態では、Ｌ１は、炭素原子を５〜２０個有する二価の分岐鎖状または非分岐鎖状の飽和または不飽和炭化水素鎖であり、その炭化水素鎖の炭素原子の１つ以上（例えば、１個、２個、３個または４個）は任意に応じて、−Ｏ−、−ＮＨ−、−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−または−Ｓ−によって置換されている。
【０１３３】
一実施形態では、本発明は、下記の式（ＸＸ）の化合物であって、
【化６３】
2019513770.tif 000067
式中、
Ｒ１が、標的化リガンドであり、
Ｌ１が、存在しないか、もしくは連結基であり、
Ｌ２が、存在しないか、もしくは連結基であり、
Ｒ２が、核酸であり、
Ｂが、二価であるとともに、
【化６４】
2019513770.tif 000068
からなる群から選択されており
式中、
各Ｒ’が独立して、Ｃ１−９アルキル、Ｃ２−９アルケニルもしくはＣ２−９アルキニルであり、そのＣ１−９アルキル、Ｃ２−９アルケニルもしくはＣ２−９アルキニルが任意に応じて、ハロもしくはヒドロキシルで置換されており、
＊が付された結合手が、Ｌ１に結合しているか、もしくはＬ１が存在しない場合には、Ｒ１に結合しており、
＊＊が付された結合手が、Ｌ２に結合しているか、もしくはＬ２が存在しない場合には、Ｒ２に結合している化合物、
またはその塩
を提供する。
【０１３４】
一実施形態では、Ｒ１は、糖を２〜８個含む。
【０１３５】
一実施形態では、Ｒ１は、２〜６個の糖を含む。
【０１３６】
一実施形態では、Ｒ１は、糖を２〜４個含む。
【０１３７】
一実施形態では、Ｒ１は、糖を３〜８個含む。
【０１３８】
一実施形態では、Ｒ１は、糖を３〜６個含む。
【０１３９】
一実施形態では、Ｒ１は、糖を３〜４個含む。
【０１４０】
一実施形態では、Ｒ１は、糖を３個含む。
【０１４１】
一実施形態では、Ｒ１は、糖を４個含む。
【０１４２】
一実施形態では、Ｒ１は、下記の式であって、
【化６５】
2019513770.tif 000069
Ｂ１が、約１〜約２０個の原子を含む三価の基であり、Ｌ１、Ｔ１及びＴ２に共有結合しており、
Ｂ２が、約１〜約２０個の原子を含む三価の基であり、Ｔ１、Ｔ３及びＴ４に共有結合しており、
Ｂ３が、約１〜約２０個の原子を含む三価の基であり、Ｔ２、Ｔ５及びＴ６に共有結合しており、
Ｔ１が、存在しないか、または連結基であり、
Ｔ２が、存在しないか、または連結基であり、
Ｔ３が、存在しないか、または連結基であり、
Ｔ４が、存在しないか、または連結基であり、
Ｔ５が、存在しないか、または連結基であり、
Ｔ６が、存在しないか、または連結基である
式を有する。
【０１４３】
一実施形態では、各糖は、独立して、
【化６６】
2019513770.tif 000070
から選択されており、
式中、
Ｘは、ＮＲ３であり、Ｙは、−（Ｃ＝Ｏ）Ｒ４、−ＳＯ２Ｒ５及び−（Ｃ＝Ｏ）ＮＲ６Ｒ７から選択されているか、またはＸは、−（Ｃ＝Ｏ）−であり、Ｙは、ＮＲ８Ｒ９であり、
Ｒ３は、水素または（Ｃ１−Ｃ４）アルキルであり、
Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８及びＲ９はそれぞれ独立して、水素、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ１−Ｃ８）ハロアルキル、（Ｃ１−Ｃ８）アルコキシ、ならびに、ハロ、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、（Ｃ１−Ｃ４）ハロアルキル、（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ及び（Ｃ１−Ｃ４）ハロアルコキシからなる群から独立して選択した１つ以上の基で任意に応じて置換されている（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキルからなる群から選択されており、
Ｒ１０は、−ＯＨ、−ＮＲ８Ｒ９または−Ｆであり、
Ｒ１１は、−ＯＨ、−ＮＲ８Ｒ９、−Ｆ、または独立して、ハロ、ヒドロキシル、カルボキシル、アミノ、（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、（Ｃ１−Ｃ４）ハロアルキル、（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ及び（Ｃ１−Ｃ４）ハロアルコキシからなる群から選択した１つ以上の基で任意に応じて置換されている５員の複素環である。
【０１４４】
一実施形態では、各糖は独立して、
【化６７】
2019513770.tif 000071
からなる群から選択されている。
【０１４５】
一実施形態では、各糖は独立して、
【化６８】
2019513770.tif 000072
である。
【０１４６】
一実施形態では、Ｔ１とＴ２のうちの１つは存在しない。
【０１４７】
一実施形態では、Ｔ１とＴ２は両方とも存在しない。
【０１４８】
一実施形態では、Ｔ１、Ｔ２、Ｔ３、Ｔ４、Ｔ５及びＴ６のそれぞれが独立して、存在しないか、または炭素原子を１〜５０個有する分岐鎖状もしくは非分岐鎖状の飽和もしくは不飽和炭化水素鎖であり、その炭化水素鎖の炭素原子の１つ以上（例えば、１個、２個、３個または４個）は任意に応じて、−Ｏ−、−ＮＲＸ−、−ＮＲＸ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲＸ−または−Ｓ−によって置換されており、そのＲＸは、水素または（Ｃ１−Ｃ６）アルキルであり、その炭化水素鎖は任意に応じて、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイル、（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイルオキシ、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシカルボニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルチオ、アジド、シアノ、ニトロ、ハロ、ヒドロキシ、オキソ（＝Ｏ）、カルボキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール及びヘテロアリールオキシから選択した１つ以上（例えば、１個、２個、３個または４個）の置換基で置換されている。
【０１４９】
一実施形態では、Ｔ１、Ｔ２、Ｔ３、Ｔ４、Ｔ５及びＴ６のそれぞれは独立して、存在しないか、または炭素原子を１〜２０個有する分岐鎖状もしくは非分岐鎖状の飽和もしくは不飽和炭化水素鎖であり、その炭化水素鎖の炭素原子の１つ以上（例えば、１個、２個、３個または４個）は任意に応じて、−Ｏ−、−ＮＲＸ−、−ＮＲＸ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲＸ−または−Ｓ−によって置換されており、そのＲＸは、水素または（Ｃ１−Ｃ６）アルキルであり、その炭化水素鎖は任意に応じて、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイル、（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイルオキシ、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシカルボニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルチオ、アジド、シアノ、ニトロ、ハロ、ヒドロキシ、オキソ（＝Ｏ）、カルボキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール及びヘテロアリールオキシから選択した１つ以上（例えば、１個、２個、３個または４個）の置換基で置換されている。
【０１５０】
一実施形態では、Ｔ１、Ｔ２、Ｔ３、Ｔ４、Ｔ５及びＴ６のそれぞれは独立して、存在しないか、あるいは炭素原子を１〜５０個有する分岐鎖状もしくは非分岐鎖状の飽和もしくは不飽和炭化水素鎖、またはその塩であり、その炭化水素鎖の炭素原子の１つ以上（例えば、１個、２個、３個または４個）は任意に応じて、−Ｏ−または−ＮＲＸ−によって置換されており、そのＲＸは、水素または（Ｃ１−Ｃ６）アルキルであり、その炭化水素鎖は任意に応じて、ハロ、ヒドロキシ及びオキソ（＝Ｏ）から選択した１つ以上（例えば、１個、２個、３個または４個）の置換基で置換されている。
【０１５１】
一実施形態では、Ｔ１、Ｔ２、Ｔ３、Ｔ４、Ｔ５及びＴ６のそれぞれは独立して、存在しないか、または炭素原子を１〜２０個有する分岐鎖状もしくは非分岐鎖状の飽和もしくは不飽和炭化水素鎖であり、その炭化水素鎖の炭素原子の１つ以上（例えば、１個、２個、３個または４個）は任意に応じて、−Ｏ−によって置換されており、その炭化水素鎖は任意に応じて、ハロ、ヒドロキシ及びオキソ（＝Ｏ）から選択した１つ以上（例えば、１個、２個、３個または４個）の置換基で置換されている。
【０１５２】
一実施形態では、Ｔ１、Ｔ２、Ｔ３、Ｔ４、Ｔ５及びＴ６のそれぞれは独立して、存在しないか、または炭素原子を１〜２０個有する分岐鎖状もしくは非分岐鎖状の飽和もしくは不飽和炭化水素鎖であり、その炭化水素鎖の炭素原子の１つ以上（例えば、１個、２個、３個または４個）は任意に応じて、−Ｏ−によって置換されており、その炭化水素鎖は任意に応じて、ハロ、ヒドロキシ及びオキソ（＝Ｏ）から選択した１つ以上（例えば、１個、２個、３個または４個）の置換基で置換されている。
【０１５３】
一実施形態では、Ｔ３、Ｔ４、Ｔ５及びＴ６のうちの少なくとも１つは、
【化６９】
2019513770.tif 000073
であり、
式中、
ｎ＝１、２、３である。
【０１５４】
一実施形態では、Ｔ３、Ｔ４、Ｔ５及びＴ６のそれぞれは独立して、
【化７０】
2019513770.tif 000074
からなる群から選択されており、
式中、
ｎ＝１、２、３である。
【０１５５】
一実施形態では、Ｔ１及びＴ２のうちの少なくとも１つは、グリシンである。
【０１５６】
一実施形態では、Ｔ１及びＴ２のそれぞれが、グリシンである。
【０１５７】
一実施形態では、Ｂ１は、１〜１５個の原子を含む三価の基であり、Ｌ１、Ｔ１及びＴ２に共有結合している。
【０１５８】
一実施形態では、Ｂ１は、１〜１０個の原子を含む三価の基であり、Ｌ１、Ｔ１及びＴ２に共有結合している。
【０１５９】
一実施形態では、Ｂ１は、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルを含む。
【０１６０】
一実施形態では、Ｂ１は、Ｃ３−８シクロアルキルを含む。
【０１６１】
一実施形態では、Ｂ１は、シリル基を含む。
【０１６２】
一実施形態では、Ｂ１は、Ｄ−アミノ酸またはＬ−アミノ酸を含む。
【０１６３】
一実施形態では、Ｂ１は、糖を含む。
【０１６４】
一実施形態では、Ｂ１は、ホスフェート基を含む。
【０１６５】
一実施形態では、Ｂ１は、ホスホネート基を含む。
【０１６６】
一実施形態では、Ｂ１は、アリールを含む。
【０１６７】
一実施形態では、Ｂ１は、フェニル環を含む。
【０１６８】
一実施形態では、Ｂ１は、フェニル環である。
【０１６９】
一実施形態では、Ｂ１は、ＣＨである。
【０１７０】
一実施形態では、Ｂ１は、ヘテロアリールを含む。
【０１７１】
一実施形態では、Ｂ１は、
【化７１】
2019513770.tif 000075
からなる群から選択されている。
【０１７２】
一実施形態では、Ｂ２は、１〜１５個の原子を含む三価の基であり、Ｌ１、Ｔ１及びＴ２に共有結合している。
【０１７３】
一実施形態では、Ｂ２は、１〜１０個の原子を含む三価の基であり、Ｌ１、Ｔ１及びＴ２に共有結合している。
【０１７４】
一実施形態では、Ｂ２は、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルを含む。
【０１７５】
一実施形態では、Ｂ２は、Ｃ３−８シクロアルキルを含む。
【０１７６】
一実施形態では、Ｂ２は、シリル基を含む。
【０１７７】
一実施形態では、Ｂ２は、Ｄ−アミノ酸またはＬ−アミノ酸を含む。
【０１７８】
一実施形態では、Ｂ２は、糖を含む。
【０１７９】
一実施形態では、Ｂ２は、ホスフェート基を含む。
【０１８０】
一実施形態では、Ｂ２は、ホスホネート基を含む。
【０１８１】
一実施形態では、Ｂ２は、アリールを含む。
【０１８２】
一実施形態では、Ｂ２は、フェニル環を含む。
【０１８３】
一実施形態では、Ｂ２は、フェニル環である。
【０１８４】
一実施形態では、Ｂ２は、ＣＨである。
【０１８５】
一実施形態では、Ｂ２は、ヘテロアリールを含む。
【０１８６】
一実施形態では、Ｂ２は、
【化７２】
2019513770.tif 000076
からなる群から選択されている。
【０１８７】
一実施形態では、Ｂ３は、１〜１５個の原子を含む三価の基であり、Ｌ１、Ｔ１及びＴ２に共有結合している。
【０１８８】
一実施形態では、Ｂ３は、１〜１０個の原子を含む三価の基であり、Ｌ１、Ｔ１及びＴ２に共有結合している。
【０１８９】
一実施形態では、Ｂ３は、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルを含む。
【０１９０】
一実施形態では、Ｂ３は、Ｃ３−８シクロアルキルを含む。
【０１９１】
一実施形態では、Ｂ３は、シリル基を含む。
【０１９２】
一実施形態では、Ｂ３は、Ｄ−アミノ酸またはＬ−アミノ酸を含む。
【０１９３】
一実施形態では、Ｂ３は、糖を含む。
【０１９４】
一実施形態では、Ｂ３は、ホスフェート基を含む。
【０１９５】
一実施形態では、Ｂ３は、ホスホネート基を含む。
【０１９６】
一実施形態では、Ｂ３は、アリールを含む。
【０１９７】
一実施形態では、Ｂ３は、フェニル環を含む。
【０１９８】
一実施形態では、Ｂ３は、フェニル環である。
【０１９９】
一実施形態では、Ｂ３は、ＣＨである。
【０２００】
一実施形態では、Ｂ３は、ヘテロアリールを含む。
【０２０１】
一実施形態では、Ｂ３は、
【化７３】
2019513770.tif 000077
またはその塩
からなる群から選択されている。
【０２０２】
一実施形態では、Ｌ１とＬ２は独立して、炭素原子を１〜５０個有する二価の分岐鎖状または非分岐鎖状の飽和または不飽和炭化水素鎖であり、その炭化水素鎖の炭素原子の１つ以上（例えば、１個、２個、３個または４個）は任意に応じて、−Ｏ−、−ＮＲＸ−、−ＮＲＸ−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲＸ−または−Ｓ−によって置換されており、そのＲＸは、水素または（Ｃ１−Ｃ６）アルキルであり、その炭化水素鎖は任意に応じて、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ３−Ｃ６）シクロアルキル、（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイル、（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイルオキシ、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシカルボニル、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルチオ、アジド、シアノ、ニトロ、ハロ、ヒドロキシ、オキソ（＝Ｏ）、カルボキシ、アリール、アリールオキシ、ヘテロアリール及びヘテロアリールオキシから選択した１つ以上（例えば、１個、２個、３個または４個）の置換基で置換されている。
【０２０３】
一実施形態では、Ｌ１は、
【化７４】
2019513770.tif 000078
またはその塩
からなる群から選択されている。
【０２０４】
一実施形態では、Ｌ１は、−Ｏ−、−Ｓ−、−（Ｃ＝Ｏ）−、−（Ｃ＝Ｏ）−ＮＨ−、−ＮＨ−（Ｃ＝Ｏ）、−（Ｃ＝Ｏ）−Ｏ−、−ＮＨ−（Ｃ＝Ｏ）−ＮＨ−または−ＮＨ−（ＳＯ２）−からなる群から選択した連結部を通じて、Ｂ１に連結している。
【０２０５】
一実施形態では、Ｌ１は、
【化７５】
2019513770.tif 000079
からなる群から選択されている。
【０２０６】
一実施形態では、Ｌ２は、−Ｏ−を通じて、Ｒ２に連結されている。
【０２０７】
一実施形態では、Ｌ２は、ヒドロキシで任意に応じて置換されているＣ１−４アルキレン−Ｏ−である。
【０２０８】
一実施形態では、Ｌ２は、−Ｏ−を通じて、Ｒ２に連結されている。
【０２０９】
一実施形態では、Ｌ２は存在しない。
【０２１０】
一実施形態では、本発明は、
【化７６】
2019513770.tif 000080
【化７７】
2019513770.tif 000081
【化７８】
2019513770.tif 000082
ならびにその製薬学的に許容可能な塩
からなる群から選択した化合物または塩を提供する。
【実施例】
【０２１１】
具体的な実施例によって、本発明についてさらに詳しく説明していく。下記の実施例は、例示目的で提供されており、いかなる形でも、本発明を限定するようには意図されていない。当業者であれば、本質的に同じ結果をもたらすように変更または修正できる様々な重要でないパラメーターを容易に認識するであろう。
【０２１２】
実施例１．コンジュゲート１の合成
スキーム１．
【化７９】
2019513770.tif 000083
【０２１３】
スキーム２．
【化８０】
2019513770.tif 000084
【０２１４】
スキーム３．
【化８１】
2019513770.tif 000085
【０２１５】
スキーム４．
【化８２】
2019513770.tif 000086
【０２１６】
スキーム５．
【化８３】
2019513770.tif 000087
【０２１７】
工程１．２−（２−（２−（２−ヒドロキシエトキシ）エトキシ）エトキシ）エチル４−メチルベンゼンスルホネート３の調製
【化８４】
2019513770.tif 000088
テトラエチレングリコール（９３４ｇ、４．８モル）をＴＨＦ（１７５ｍＬ）に溶解した溶液とＮａＯＨ水溶液（５Ｍ、１４５ｍＬ）を冷却し（０℃）、ＴＨＦ（６０５ｍＬ）に溶解したｐ−トルエンスルホニルクロリド（９１．４ｇ、４８０ミリモル）で処理してから、２時間攪拌した（０℃）。この反応混合物を水（３Ｌ）で希釈し、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出した（３×５００ｍＬ）。合わせた抽出物を水とブラインで洗浄してから、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、濃縮して、２−（２−（２−（２−ヒドロキシエトキシ）エトキシ）エトキシ）エチル４−メチルベンゼンスルホネート３（１４０ｇ、８４％）を淡黄色油として得た。Ｒｆ（０．５７、１０％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２）。
【０２１８】
工程２．２−（２−（２−（２−アジドエトキシ）エトキシ）エトキシ）エタン−１−オール４の調製
【化８５】
2019513770.tif 000089
３（１４０ｇ、４０３ミリモル）をＤＭＦ（８８０ｍＬ）に溶解した溶液をナトリウムアジド（１３１ｇ、２．０２モル）で処理し、一晩加熱した（４５℃）。ＤＭＦの大半を減圧下で除去し、残渣をＣＨ２Ｃｌ２（５００ｍＬ）に溶解し、ブラインで洗浄し（３×５００ｍＬ）、続いて、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、濃縮した。その残渣をシリカ短床（５％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２）に通し、濃縮して、２−（２−（２−（２−アジドエトキシ）エトキシ）エトキシ）エタン−１−オール４（６５ｇ、７４％）を黄色油として得た。Ｒｆ（０．５６、１０％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２）。
【０２１９】
工程３．過アセチル化ガラクトサミン６の調製
【化８６】
2019513770.tif 000090
ピリジン（１．５Ｌ）中のＤ−ガラクトサミンヒドロクロリド５（２５０ｇ、１．１６モル）を無水酢酸（１．２５Ｌ、１３．２モル）で４５分間にわたって処理した。一晩、攪拌後、その反応混合物を１Ｌずつ３つに分けた。それぞれの１Ｌ分を３Ｌの氷水に入れ、１時間混合した。混合後、固体をろ別し、合わせ、液体窒素で凍結してから、５日間、凍結乾燥して、過アセチル化ガラクトサミン６（３６９．４ｇ、８２％）を白色固体として得た。Ｒｆ（０．５８、１０％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２）。
【０２２０】
工程４．（３ａＲ，５Ｒ，６Ｒ，７Ｒ，７ａＲ）−５−（アセトキシメチル）−２−メチル−３ａ，６，７，７ａ−テトラヒドロ−５Ｈ−ピラノ［３，２−ｄ］オキサゾール−６，７−ジイルジアセテート７の調製
【化８７】
2019513770.tif 000091
過アセチル化ガラクトサミン６（８．４５ｇ、２１．７ミリモル）をＣＨＣｌ３（３２０ｍＬ）に溶解した溶液をＴＭＳＯＴｆ（４．３２ｍＬ、２３．９ミリモル）で滴下処理した。攪拌後（１．５時間、４０℃）、トリエチルアミン（５ｍＬ）を加えることによって、その反応物をクエンチし、濃縮乾固して、化合物７を淡黄色ガラス物質として得た（７．２ｇ、定量的）。この生成物は、さらなる精製をせずに使用した。Ｒｆ（０．５９、１０％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２）。
【０２２１】
工程５．（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｒ）−５−アセトアミド−２−（アセトキシメチル）−６−（２−（２−（２−（２−アジドエトキシ）エトキシ）エトキシ）エトキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３，４−ジイルジアセテート８の調製
【化８８】
2019513770.tif 000092
化合物７（７．２ｇ、２１．７ミリモル）と、２−（２−（２−（２−アジドエトキシ）エトキシ）エトキシ）エタン−１−オール４（２．６５ｇ、１５．２ミリモル）をトルエン（１５０ｍＬ）から共沸して（３×）、微量の水を除去した。乾燥したその物質を１，２−ジクロロエタン（１５０ｍＬ）に溶解し、冷却し（約５℃）、ＴＭＳＯＴｆ（７８４μＬ、４．３４ミリモル）で処理した。一晩、攪拌後、トリエチルアミン（５ｍＬ）を加えることによって、その反応物をクエンチし、濃縮した。残渣をクロマトグラフィー（１％→５％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２）によって精製して、８（７．１２ｇ、８５％）を褐色油として得た。Ｒｆ（０．３、１０％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２）。
【０２２２】
工程６．２−（２−（２−（２−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｒ）−３−アセトアミド−４，５−ジアセトキシ−６−（アセトキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）エトキシ）エトキシ）エトキシ）エタン−１−アミニウム２，２，２−トリフルオロアセテート９の調製
【化８９】
2019513770.tif 000093
アジド８（７．１２ｇ、１３ミリモル）をＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ）とトリフルオロ酢酸（２ｍＬ）に溶解した溶液をパラジウム炭（１．５ｇ、１０％ｗ／ｗ、湿量ベース）で処理した。続いて、その反応混合物を水素でパージし、一晩、激しく攪拌した。窒素でパージ後、その混合物をセライトろ過し、ＭｅＯＨでリンスした。このろ液をクロマトグラフィー（５％→１０％→２０％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２）によって濃縮及び精製して、９（５．８ｇ、７２％）を褐色油として得た。Ｒｆ（０．３４、１５％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２）。
【０２２３】
工程７．ジ−ｔｅｒｔ−ブチル４−（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）−４−（３−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−３−オキソプロピル）ヘプタンジオエート１１の調製
【化９０】
2019513770.tif 000094
ジ−ｔｅｒｔ−ブチル４−アミノ−４−（３−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−３−オキソプロピル）ヘプタンジオエート１０（１３．５ｇ、３３ミリモル）、２５％Ｎａ２ＣＯ３（ａｑ）（１５０ｍＬ）及びジクロロメタン（３００ｍＬ）の溶液に、ベンジルクロロフォーメート（１４ｍＬ、９８ミリモル）をゆっくり加えた。この溶液を一晩（１６時間）、室温で激しく攪拌した。完了したら、追加のジクロロメタン（１００ｍＬ）を加え、ジクロロメタン層を分離した。水層をジクロロメタンで抽出した（２×１００ｍＬ）。合わせたジクロロメタン抽出物を硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、濃縮乾固した。この生成物１１を、さらなる精製の不要な無色の油として単離した（１５．８ｇ、８８％）。Ｒｆ（０．７、１：１  ＥｔＯＡｃ−ヘキサン）。
【０２２４】
工程８．４−（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）−４−（２−カルボキシエチル）ヘプタン二酸１２の調製
【化９１】
2019513770.tif 000095
１１（１５．６ｇ、２８．８ミリモル）をギ酸（５０ｍＬ）に溶解した溶液を室温で２時間攪拌した。この溶液を濃縮乾固し、エチルアセテート（約２５ｍＬ）に溶解した。この生成物は、静置したところ、無色の固体として結晶化した。この固体をろ過し、エチルアセテートで洗浄し、風乾して、１２を無色の固体として得た（１０．２ｇ、９３％）。Ｒｆ（０．１、１０％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２）。
【０２２５】
工程９．化合物１３の調製
【化９２】
2019513770.tif 000096
１２（７９３ｍｇ、２．０８ミリモル）と９（５．８ｇ、９．３６ミリモル）をＤＭＦ（５０ｍＬ）に溶解した溶液をＢＯＰ（３．６７ｇ、８．３２ミリモル）で処理してから、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（４．３１ｍＬ、２５ミリモル）で処理した。一晩攪拌後、その混合物を濃縮乾固し、クロマトグラフィー（１％→２％→５％→１０％→１５％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２）にかけて、１３を得た（５．７１ｇ［粗生成物］、＞１００％−次の工程に影響を及ぼさないカップリング副生成物を含んでいた）。Ｒｆ（０．４５、１０％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２）。
【０２２６】
工程１０．化合物１４の調製
【化９３】
2019513770.tif 000097
化合物１３（５．７ｇ）をＭｅＯＨ（１５０ｍＬ）とＴＦＡ（１．５ｍＬ）に溶解し、パラジウム炭（１ｇ、１０％ｗ／ｗ、湿量ベース）で処理した。続いて、その反応混合物を水素でパージし、一晩、激しく攪拌した。窒素でパージ後、その混合物をセライトろ過し、ＭｅＯＨでリンスした。このろ液をクロマトグラフィー（５％→１０％→２０％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２）によって濃縮及び精製して、１４を褐色油として得た（２段階で２．１５ｇ、５６％）。Ｒｆ（０．３２、１０％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２）。
【０２２７】
工程１１．（５−アミノ−１，３−フェニレン）ジメタノール１５の調製
【化９４】
2019513770.tif 000098
３．７５当量のＬｉＡｌＨ４（１３．６ｇ、３５８ミリモル）をＴＨＦ（４４０ｍＬ）中で還流した混合物に、ジメチル５−アミノイソフタレート（２０．０ｇ、９６ミリモル）をＴＨＦ（３５０ｍＬ）に溶解した溶液を１時間かけて滴下した。この混合物をさらに２時間、還流攪拌してから、室温まで冷却し、ＭｅＯＨ（２７ｍＬ）を慎重に加えてから、水（４０ｍＬ）を加えることによってクエンチした。クエンチしたこの混合物を２時間攪拌後、その混合物をろ過し、濃縮乾固した。残渣をＥｔＯＡｃから再結晶化して（２×）、１５を黄褐色結晶として得た（１０．２ｇ、７０％）。
【０２２８】
工程１２．メチル１０−（（３，５−ビス（ヒドロキシメチル）フェニル）アミノ）−１０−オキソデカノエート１６の調製
【化９５】
2019513770.tif 000099
メチルセバケート（３．８ｇ、１７ミリモル）、１５（２．５ｇ、１７ミリモル）及びＥＥＤＱ（８．１ｇ、３３ミリモル）を２：１ジクロロメタン／メタノール（２００ｍＬ）に溶解した溶液を室温で２時間、攪拌した。完了したら、この溶液を濃縮乾固した。得られた固体をジクロロメタン（５０ｍＬ）でトリチュレーションし、ろ過した。この固体を冷ジクロロメタンでリンスし、風乾して、１６を無色の固体として得た（４．３ｇ、７２％）。Ｒｆ（０．３３、ＥｔＯＡｃ）。
【０２２９】
工程１３．メチル１０−（（３−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）メチル）−５−（ヒドロキシメチル）フェニル）アミノ）−１０−オキソデカノエート１７の調製
【化９６】
2019513770.tif 000100
１６（４．３ｇ、１２ミリモル）をピリジン（５０ｍＬ）に溶解した溶液に、４，４’−（クロロ（フェニル）メチレン）ビス（メトキシベンゼン）（４．１ｇ、１２ミリモル）を加えた。この溶液を窒素下で一晩、室温で攪拌した。完了したら、その溶液を濃縮乾固し、残渣をカラムクロマトグラフィー（０．５％→０．７５％→１％→１．５％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２）によって精製して、１７を黄色固体として得た（２．９ｇ、３５％）。Ｒｆ（０．６、１０％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２）。
【０２３０】
工程１４．リチウム１０−（（３−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）メチル）−５−（ヒドロキシメチル）フェニル）アミノ）−１０−オキソデカノエート１８の調製
【化９７】
2019513770.tif 000101
１７（２．９ｇ、４．３ミリモル）をＴＨＦ（６０ｍＬ）に溶解した溶液に、水（１５ｍＬ）と水酸化リチウム（１１２ｍｇ、４．７ミリモル）を加えた。この溶液を一晩、室温で攪拌した。完了したら、この溶液を濃縮して、ＴＨＦを除去した。残りの水溶液を液体窒素で急速凍結し、一晩、凍結乾燥して、無色の固体を得た（２．９ｇ、定量的）。Ｒｆ（０．３、１０％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２）。
【０２３１】
工程１５．化合物１９の調製
【化９８】
2019513770.tif 000102
１４（４５４ｍｇ、０．６７ミリモル）、１８（１．２５ｇ、０．６７ミリモル）、ＨＢＴＵ（３８１ｍｇ、１．０ミリモル）を無水ＤＭＦ（２５ｍＬ）に溶解した溶液に、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．３５ｍＬ、２．０ミリモル）を加えた。この溶液を一晩、室温で攪拌した。完了したら、その溶液をエチルアセテート（２５０ｍＬ）に入れ、ブラインで洗浄した（３×２００ｍＬ）。エチルアセテート層を硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、濃縮乾固した。カラムクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２中の５％→７．５％→１０％→１５％ＭｅＯＨ）によって精製して、１９を淡橙色泡状物として得た（１．５ｇ、９４％）。Ｒｆ（０．２５、１０％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２）。
【０２３２】
工程１６．化合物２０の調製
【化９９】
2019513770.tif 000103
化合物１９（１．５ｇ、０．６ミリモル）、無水コハク酸（１２０ｍｇ、１．２ミリモル）、ＤＭＡＰ（２２０ｍｇ、１．８ミリモル）及びトリメチルアミン（２５０μＬ、１．８ミリモル）を無水ＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍＬ）に溶解した溶液を一晩、室温で攪拌した。完了したら、その溶液を濃縮乾固し、シリカのショートプラグ（１００％ＣＨ２Ｃｌ２→ＣＨ２Ｃｌ２中の１５％ＭｅＯＨ）でろ過して、生成物２０を淡ベージュ色泡状物として得た（１．１ｇ、７０％）。質量ｍ／ｚ （ＥＳ−ＴＯＦ ＭＳ） ７２７．７ ［Ｍ ＋ ３Ｈ − ＤＭＴｒ］＋， １０９１．１ ［Ｍ ＋ ２Ｈ − ＤＭＴｒ］． １Ｈ ＮＭＲ （４００ ＭＨｚ， ＣＤＣｌ３） δ ８．９２ （ｂｒ ｓ， １Ｈ）， ７．７８ （ｓ， １Ｈ）， ７．４９−７．４７ （ｍ， ３Ｈ）， ７．４１ （ｂｒ ｓ， １Ｈ）， ７．３８−７．３４ （ｍ， ５Ｈ）， ７．３２−７．２６ （ｍ， ４Ｈ）， ７．２４−７．０８ （ｂｒ ｓ， ３Ｈ）， ７．０８ （ｓ， １Ｈ）， ６．９０−６．８０ （ｍ， ７Ｈ）， ５．３１ （ｄ， ３Ｈ， Ｊ ＝ ２．７Ｈｚ）， ５．１２ （ｓ， ２Ｈ）， ５．０６ （ｄｄ， ３Ｈ， Ｊ ＝ １１．２， ３．２ Ｈｚ）， ４．７８ （ｄ， ３Ｈ， Ｊ ＝ ８．５ Ｈｚ）， ４．２４−４．０８ （ｍ， １２Ｈ）， ３．９５−３．８８ （ｍ， ７Ｈ）， ３．８５−３．７６ （ｍ， ４Ｈ）， ３．７８ （ｓ， ６Ｈ）， ３．６８−３．５６ （ｍ， ３４Ｈ）， ３．５４−３．４４ （ｍ， ８Ｈ）， ３．４１−３．３３ （ｍ， ６Ｈ）， ２．７０−２．６０ （ｍ， ４Ｈ）， ２．５２−２．３０ （ｍ， ３０Ｈ）， ２．２４−２．１６ （ｍ， ８Ｈ）， ２．１４ （ｓ， ９Ｈ）， ２．０４ （ｓ， ９Ｈ）， ２．０２−１．９６ （ｍ， ６Ｈ）， １．９８ （ｓ， ９Ｈ）， １．９６ （ｓ， ９Ｈ）， １．７４−１．５２ （ｍ， ４Ｈ）， １．３６−１．２４ （ｍ， １２Ｈ）。
【０２３３】
工程１７．コンジュゲート１の調製
【化１００】
2019513770.tif 000104
標準的なアミドカップリング化学反応を用いて、サクシネート２０を１０００Å  ＬＣＡＡ（長鎖アミノアルキル）ＣＰＧ（コントロールポアグラス）にロードした。ジイソプロピルカルボジイミド（５２．６μモル）、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（０．３ｍｇ、２．６μモル）及びピリジン（１０μＬ）を無水アセトニトリル（０．３ｍＬ）に溶解した溶液を、無水ジクロロメタン（０．２ｍＬ）中の２０（２０．６ｍｇ、８μモル）に加えた。この混合物をＬＣＡＡ  ＣＰＧ（１８３ｍｇ）に加えた。この懸濁液を一晩、室温で静かに混合した。２０が消失したら（ＨＰＬＣ）、その反応混合物をろ過し、ＣＰＧを、それぞれ１ｍＬのジクロロメタン、アセトニトリル、５％無水酢酸／５％Ｎ−メチルイミダゾール／５％ピリジンのＴＨＦ溶液で洗浄してから、ＴＨＦ、アセトニトリル及びジクロロメタンで洗浄した。続いて、ＣＰＧを一晩、高真空下で乾燥した。ＵＶ／Ｖｉｓ（５０４ｎｍ）による標準的なＤＭＴｒアッセイによってローディングを確認したところ、２５μモル／ｇであった。得られたＧａｌＮＡｃロードＣＰＧ固体支持体は、標準的な手順を用いて、自動オリゴヌクレオチド合成で用いた。ヌクレオチドの脱保護を行ってから、固体支持体から切り出して（同時にガラクトサミンアセテートの脱保護を行った）、ＧａｌＮＡｃ−オリゴヌクレオチドコンジュゲート１を代表的な例として得た。
【０２３４】
実施例２：コンジュゲート３４の合成
スキーム６．
【化１０１】
2019513770.tif 000105
【０２３５】
スキーム７．
【化１０２】
2019513770.tif 000106
【０２３６】
スキーム８．
【化１０３】
2019513770.tif 000107
【０２３７】
工程１．ジ−ｔｅｒｔ−ブチル４−（２−（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）アセトアミド）−４−（３−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−３−オキソプロピル）ヘプタンジオエート２１の調製
【化１０４】
2019513770.tif 000108
ジ−ｔｅｒｔ−ブチル４−アミノ−４−（３−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−３−オキソプロピル）ヘプタンジオエート（２５ｇ、６０ミリモル）とＺ−グリシン（１８．９ｇ、９０．２ミリモル）をＣＨ２Ｃｌ２（３００ｍＬ）に溶解した溶液を順次、ＥＤＣ（２３ｇ、１２０ミリモル）、ジイソプロピルエチルアミン（３２ｍＬ、１８０ミリモル）及びＤＭＡＰ（触媒量、１７ｍｇ）で処理した。攪拌後（１６時間）、その反応混合物をＮａＨＣＯ３（飽和水溶液）に入れ、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出し、ブラインで洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、濃縮して、ジ−ｔｅｒｔ−ブチル４−（２−（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）アセトアミド）−４−（３−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−３−オキソプロピル）ヘプタンジオエート２１を非晶質固体として得て、これを、さらなる処理をせずに使用した（３６ｇ、定量的）。Ｒｆ（０．８５、１０％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２）。
【０２３８】
工程２．４−（２−（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）アセトアミド）−４−（２−カルボキシエチル）ヘプタン二酸２２の調製
【化１０５】
2019513770.tif 000109
ジ−ｔｅｒｔ−ブチル４−（２−（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）アセトアミド）−４−（３−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−３−オキソプロピル）ヘプタンジオエート２１（５９．３ミリモル、３６ｇ）の溶液を純粋なギ酸（１５０ｍＬ）中で７２時間攪拌した。完了したら、ギ酸を減圧下で除去し、その粗固体を一晩、高真空で乾燥して、２２を無色の固体として得た（１５．９ｇ、６１％）。Ｒｆ（０．１５、１０％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２）。
【０２３９】
工程３．化合物２３の調製
【化１０６】
2019513770.tif 000110
２２（６．２ｇ、１４．１ミリモル）と２−（２−（２−（２−（（（２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ，６Ｒ）−３−アセトアミド−４，５−ジアセトキシ−６−（アセトキシメチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）オキシ）エトキシ）エトキシ）エトキシ）エタン−１−アミニウム２，２，２−トリフルオロアセテート（３５ｇ、５６．５ミリモル）をＤＭＦ（２５０ｍＬ）に溶解した溶液をＢＯＰ（２５ｇ、５６．５ミリモル）で処理してから、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（２９ｍＬ、１７０ミリモル）で処理した。一晩、攪拌後、その混合物を濃縮乾固し、クロマトグラフィー（１００％ＣＨ２Ｃｌ２〜１５％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２）にかけて、化合物２３を得た（２４．６ｇ、８９％）。Ｒｆ（０．５５、１５％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２）。
【０２４０】
工程４．化合物２４の調製
【化１０７】
2019513770.tif 000111
化合物２３（２４．６ｇ）をＭｅＯＨ（２００ｍＬ）とＴＦＡ（１．５ｍＬ）に溶解し、窒素でパージした。パラジウム炭（１ｇ、１０％ｗ／ｗ、湿量ベース）を加えてから、その反応混合物を水素でパージし、一晩、激しく攪拌した。完了したら、その反応物を窒素でパージし、セライトろ過し、ＭｅＯＨでリンスした。ろ液を濃縮し、シリカゲル６０カラムクロマトグラフィー（グラジエント：５％→１０％→２０％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２）によって精製して、２４を淡褐色の粘性油として得た（２３ｇ）。Ｒｆ（０．３２、１０％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２）。
【０２４１】
工程５．（５−アミノ−１，３−フェニレン）ジメタノール２６の調製
【化１０８】
2019513770.tif 000112
水素化アルミニウムリチウム（１３．６ｇ、３５８ミリモル）を無水テトラヒドロフラン（４５０ｍＬ）に懸濁した懸濁液を窒素雰囲気下で還流させ、ジメチル−５−アミノイソフタレート２５（２０ｇ、９６ミリモル）を無水テトラヒドロフラン（３５０ｍＬ）に溶解した溶液で滴下処理した。滴下が完了したら、その混合物をさらに２時間、加熱還流した。完了したら、その溶液を室温まで冷却し、ＭｅＯＨ（２７ｍＬ）に続いて、水（４０ｍＬ）をゆっくり加えることによってクエンチした。２時間攪拌後、その混合物をろ過し、濃縮し、ＥｔＯＡｃから再結晶化して、（５−アミノ−１，３−フェニレン）ジメタノール２６を灰白色結晶として得た（１０．２ｇ、７０％）。Ｒｆ０．５（１５％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２）。
【０２４２】
工程６．３，５−ビス（ヒドロキシメチル）ベンゾニトリル２７の調製
【化１０９】
2019513770.tif 000113
２６（５ｇ、３３ミリモル）を２Ｎ塩酸（１００ｍＬ）に溶解した溶液を０℃まで冷却し、亜硝酸ナトリウム（３．５３ｇ、３６ミリモル）を水（５０ｍＬ）に溶解した冷溶液で処理した。その反応混合物を≦５℃の温度に３０分保ってから、シアン化銅（Ｉ）（３．１９ｇ、３５．６ミリモル）とシアン化ナトリウム（３．５３ｇ、７２ミリモル）を水（５０ｍＬ）に溶解した溶液で一気に処理した。一晩、室温で攪拌後、その混合物をろ過し、ジクロロメタンで抽出し（３×１００ｍＬ）、濃縮し、さらなる精製をせずに使用した。ジオール、３，５−ビス（ヒドロキシメチル）ベンゾニトリル２７を黄色固体として得た（２．１９ｇ、４１％）。Ｒｆ０．７５（１５％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２）。
【０２４３】
工程７．３−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）メチル）−５−（ヒドロキシメチル）ベンゾニトリル２８の調製
【化１１０】
2019513770.tif 000114
３，５−ビス（ヒドロキシメチル）ベンゾニトリル２７（５３８ｍｇ、３．３ミリモル）をピリジン（１４ｍＬ）に溶解した溶液を４，４’−ジメトキシトリチルクロリド（１．１７ｇ、３．４６ミリモル）で処理し、一晩、室温で攪拌した。完了したら、その混合物を濃縮し、ジエチルエーテル（２５ｍＬ）に分散させ、ろ過し、濃縮した。その粗生成物をシリカゲル６０カラムクロマトグラフィー（グラジエント：１０％〜５０％ＥｔＯＡｃ−ヘキサン）によって精製して、２８を黄色固体として得た（７２５ｍｇ、４７％）。Ｒｆ０．５（１：１ＥｔＯＡｃ−ヘキサン）。
【０２４４】
工程８．（３−（アミノメチル）−５−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）メチル）フェニル）メタノール２９の調製
【化１１１】
2019513770.tif 000115
２８（１００ｍｇ、０．２２ミリモル）をメチルテトラヒドロフラン（５ｍＬ）に溶解した溶液を０℃まで冷却し、水素化アルミニウムリチウム（０．６４ミリモル＝２．３ＭのＭｅＴＨＦ溶液０．２８ｍＬ）でゆっくり処理した。１時間攪拌後、メタノール（１ｍＬ）に続いて、水（０．３ｍＬ）を加えることによって、その反応物をクエンチし、３０分攪拌した。その混合物をろ過し、濃縮して、（３−（アミノメチル）−５−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）メチル）フェニル）メタノール２９を得た（７８ｍｇ、７７％）。Ｒｆ０．１５（１０％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２）。
【０２４５】
工程９．メチル１０−（（３−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）メチル）−５−（ヒドロキシメチル）ベンジル）アミノ）−１０−オキソデカノエート３０の調製
【化１１２】
2019513770.tif 000116
（３−（アミノメチル）−５−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）−メチル）フェニル）メタノール２９（７８ｍｇ、０．１７ミリモル）とモノメチルセバケート（３８ｍｇ、０．１７ミリモル）をジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解した溶液を順次、ＥＤＣ（４８ｍｇ、０．２５ミリモル）、ＤＭＡＰ（触媒量、５ｍｇ）及びジイソプロピルエチルアミン（５７μＬ、０．３３ミリモル）で処理した。攪拌後（３．５時間）、その反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム溶液（５０ｍＬ）に入れた。この炭酸水素ナトリウム溶液をジクロロメタンで抽出し（３×５０ｍＬ）、ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、濃縮乾固した。この粗物質をシリカゲル６０カラムクロマトグラフィー（グラジエント：２％〜５％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２）によって精製して、メチル１０−（（３−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）メチル）−５−（ヒドロキシメチル）ベンジル）アミノ）−１０−オキソデカノエート３０を黄色油として得た（５７ｍｇ、５３％）。Ｒｆ０．４５（１０％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２）。
【０２４６】
工程１０．リチウム１０−（（３−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）メチル）−５−（ヒドロキシメチル）ベンジル）アミノ）−１０−オキソデカノエート３１の調製
【化１１３】
2019513770.tif 000117
化合物３０（１８８ｍｇ、０．２８ミリモル）をテトラヒドロフラン（５ｍＬ）に溶解し、ＬｉＯＨ（７ｍｇ、０．３０ミリモル）を水（１ｍＬ）に溶解した溶液で処理した。完了したら、テトラヒドロフランを真空除去し、残った水性混合物を凍結し、凍結乾燥して、リチウム１０−（（３−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）メチル）−５−（ヒドロキシメチル）ベンジル）アミノ）−１０−オキソデカノエート３１を無色の固体として得た（１８０ｍｇ、９９％）。Ｒｆ０．４５（１０％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２）。
【０２４７】
工程１１．化合物３２、３３及び３４の調製
化合物１９を合成するのに用いた同じ手順に従って、化合物３２を、化合物２０を合成するのに用いた同じ手順に従って、化合物３３を、化合物１を合成するのに用いた同じ手順に従って、化合物３４を調製した。
【０２４８】
実施例３．コンジュゲート３６の合成
【化１１４】
2019513770.tif 000118
【０２４９】
工程１．コンジュゲート３６の調製
化合物３４及びすべての対応する中間体を合成するのに用いた同じ手順を用いて、コンジュゲート３６を調製した。唯一の例外は、化合物６の合成であり、無水酢酸の代わりに、プロパン酸無水物を使用した。
【０２５０】
実施例４．コンジュゲート４２の合成
スキーム９．
【化１１５】
2019513770.tif 000119
【０２５１】
スキーム１０．
【化１１６】
2019513770.tif 000120
【０２５２】
工程１．化合物３７の調製
【化１１７】
2019513770.tif 000121
１８β−グリチルレチン酸（２．５ｇ、５．３ミリモル）、ｔｅｒｔ−ブチル（３−アミノプロピル）カルバメート（１．１ｇ、６．４ミリモル）及びＨＢＴＵ（３．０ｇ、８．０ミリモル）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２０ｍＬ）に溶解した溶液にジイソプロピルエチルアミン（２．７５ｍＬ、１５．９ミリモル）を加えた。この溶液を一晩、室温で攪拌した。完了したら、その溶液を真空で濃縮乾固した。残渣をシリカゲル６０カラムクロマトグラフィー（グラジエント：２％〜５％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２）によって精製して、生成物を無色の固体として得た（２．１ｇ、６３％）。
【０２５３】
工程２．化合物３８の調製
【化１１８】
2019513770.tif 000122
３７（２．１ｇ、３．３ミリモル）とトリエチルアミン（３．５ｍＬ、１０ミリモル）をジクロロメタン（２５ｍＬ）に溶解した溶液に、無水酢酸（８５０μＬ、５．３ミリモル）とＤＭＡＰ（５ｍｇ）を加えた。この溶液を一晩、室温で攪拌した。完了したら、その溶液を濃縮乾固し、エチルアセテート（１００ｍＬ）に溶解し、水（１００ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、濃縮乾固して、淡褐色泡状物を得た（１．９ｇ、８５％）。
【０２５４】
工程３．化合物３９の調製
【化１１９】
2019513770.tif 000123
３８（１．５ｇ、２．３ミリモル）を無水ジオキサン（２５ｍＬ）に溶解した溶液に、ジオキサン（２５ｍＬ）中の２Ｍ塩化水素を加えた。この溶液を一晩、室温で攪拌してから、真空で濃縮乾固して、淡褐色固体を得た（１．３ｇ、９６％）。
【０２５５】
工程４．化合物４０、４１及び４２の調製
化合物１９を合成するのに用いた同じ手順に従って、化合物４０を、化合物２０を合成するのに用いた同じ手順に従って、化合物４１を、化合物１を合成するのに用いた同じ手順に従って、化合物４２を調製した。
【０２５６】
実施例５．コンジュゲート４３の合成
スキーム１１．
【化１２０】
2019513770.tif 000124
【０２５７】
スキーム１２．
【化１２１】
2019513770.tif 000125
【０２５８】
工程１．メチル１１−（２，６−ビス（ヒドロキシメチル）−４−メチルフェノキシ）ウンデカノエート４４の調製
【化１２２】
2019513770.tif 000126
２，６−ビス（ヒドロキシメチル）−ｐ−クレゾール（２．７ｇ、１６．３ミリモル）、メチル１１−ブロモウンデカノエート（５．０ｇ、１７．９ミリモル）及び炭酸カリウム（４．５ｇ、３２．６ミリモル）をアセトン（１００ｍＬ）に溶解した溶液を１６時間、還流した。完了したら、その溶液を真空で濃縮乾固し、エチルアセテート（１５０ｍＬ）に懸濁し、水（２×１００ｍＬ）とブライン（１００ｍＬ）で洗浄した。エチルアセテート層を硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、真空で濃縮乾固した。残渣をシリカゲル６０カラムクロマトグラフィー（グラジエント：１００％Ｈｅｘ→５０％ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ）によって精製して、メチル１１−（２，６−ビス（ヒドロキシメチル）−４−メチルフェノキシ）ウンデカノエート４４を無色の油として得た（１．６ｇ、２７％）。
【０２５９】
工程２．メチル１１−（２−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）メチル）−６−（ヒドロキシメチル）−４−メチルフェノキシ）ウンデカノエート４５の調製
【化１２３】
2019513770.tif 000127
メチル１１−（２，６−ビス（ヒドロキシメチル）−４−メチルフェノキシ）ウンデカノエート４４（１．５ｇ、４．１ミリモル）を無水ピリジン（２０ｍＬ）に溶解した溶液に、４，４’−ジメトキシトリチルクロリド（１．４ｇ、４．１ミリモル）を加えた。この溶液を一晩、室温で攪拌した。完了したら、その溶液を真空で濃縮乾固し、シリカゲル６０カラムクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２中の０．５〜１％ＭｅＯＨ）によって精製して、メチル１１−（２−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）メチル）−６−（ヒドロキシメチル）−４−メチルフェノキシ）ウンデカノエート４５を淡黄色固体として得た（１．１ｇ、４０％）。
【０２６０】
工程３．リチウム１１−（２−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）メチル）−６−（ヒドロキシメチル）−４−メチルフェノキシ）ウンデカノエート４６の調製
【化１２４】
2019513770.tif 000128
メチル１１−（２−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）メチル）−６−（ヒドロキシメチル）−４−メチルフェノキシ）ウンデカノエート４５（１．１ｇ、１．７ミリモル）を無水テトラヒドロフラン（４０ｍＬ）と水（１０ｍＬ）に溶解した溶液に、水酸化リチウム（４４ｍｇ、１．８ミリモル）を加えた。この溶液を真空濃縮して、すべてのテトラヒドロフランを除去した。残った水溶液を液体窒素で急速凍結してから、一晩、凍結乾燥して、リチウム１１−（２−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）メチル）−６−（ヒドロキシメチル）−４−メチルフェノキシ）ウンデカノエート４６を淡桃色固体として得た（１．１ｇ、９４％）。
【０２６１】
工程４．化合物４７の調製
１０（１．３３ｇ、０．６６ミリモル）、４６（０．５ｇ、０．７３ミリモル）、ＨＢＴＵ（４００ｍｇ、１ミリモル）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２５ｍＬ）に溶解した溶液に、ジイソプロピルエチルアミン（０．３５ｍＬ、２ミリモル）を加えた。この溶液を一晩（１８時間）、室温で攪拌した。完了したら、溶媒を真空除去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（グラジエント：１００％ＣＨ２Ｃｌ２〜ＣＨ２Ｃｌ２中の５％〜１０％〜１５％ＭｅＯＨ）によって精製して、４７を無色の固体として得た（７１０ｍｇ、４１％）。
【０２６２】
工程５．化合物４８の調製
４７（０．７１ｇ、０．３ミリモル）、トリエチルアミン（０．４ｍＬ、３．０ミリモル）及びポリスチレン−ＤＭＡＰ（３ミリモル／ｇの充填量、２００ｍｇ、０．６ミリモル）をジクロロメタン（１５ｍＬ）に溶解した溶液に、無水コハク酸（６０ｍｇ、０．６ミリモル）を加えた。この溶液を一晩、室温で攪拌し、完了したら、ろ過し、真空で濃縮乾固した。残渣をシリカゲル６０カラムクロマトグラフィー（グラジエント：ＣＨ２Ｃｌ２中の５％〜２０％ＭｅＯＨ）によって精製して、４８を淡黄色固体として得た（５７０ｍｇ、７０％）。１Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−ｄ６， ４００ ＭＨｚ） δ ７．９１ （ｍ， １Ｈ）， ７．８６−７．７６ （ｍ， ６Ｈ）， ７．４５−７．４０ （ｍ， ２Ｈ）， ７．３６−７．１４ （ｍ， １０Ｈ）， ７．１０ （ｓ， １Ｈ）， ６．９１ （ｄ， Ｊ ＝ ８．９ Ｈｚ， ４Ｈ）， ５．２１ （ｄ， Ｊ ＝ ３．３ Ｈｚ， ３Ｈ）， ５．０１ （ｓ， ２Ｈ）， ４．９７ （ｄｄ， Ｊ ＝ １１．２， ３．４ Ｈｚ， ３Ｈ）， ４．５６ （ｄ， Ｊ ＝ ８．５ Ｈｚ， ３Ｈ）， ４．０６−３．９８ （ｍ， １１Ｈ）， ３．９３−３．８４ （ｍ， ３Ｈ）， ３．８１−３．７２ （ｍ， ３Ｈ）， ３．７４ （ｓ， ６Ｈ）， ３．６５−３．４６ （ｍ， ３８Ｈ）， ３．４０−３．３５ （ｍ， ６Ｈ）， ３．２０−３．１６ （ｍ， ６Ｈ）， ２．５６−２．４４ （ｍ， ４Ｈ）， ２．３３ （ｓ， ３Ｈ）， ２．１５−２．０８ （ｍ， ２Ｈ）， ２．１０ （ｓ， ９Ｈ）， ２．０４−１．９６ （ｍ， ６Ｈ）， １．８９ （ｓ， ９Ｈ）， １．８２−１．７６ （ｍ， ４Ｈ）， １．７７ （ｓ， ９Ｈ）， １．５４−１．３４ （ｍ， ４Ｈ）， １．２８−１．１０ （ｍ， １２Ｈ）
【０２６３】
工程６．化合物４９の調製
４８（１００ｍｇ、４０μモル）、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（３０ｍｇ／ｍＬのアセトニトリル溶液、５０μＬ、１３μモル）、Ｎ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド（４０μＬ、２６４μモル）及びピリジン（５０μＬ）をジクロロメタン（２ｍＬ）とアセトニトリル（３ｍＬ）に溶解した溶液に、１０００Åのｌｃａａ  ＣＰＧ（ｐｒｉｍｅ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、９２０ｍｇ）を加えた。この溶液をオービタルシェーカーで一晩、室温で攪拌した。この反応溶液のＴＬＣ解析によって、活性化Ｎ−ヒドロキシコハク酸エステルが部分的にしか消費されていないことが示されたので、追加のＣＰＧ（５００ｍｇ）を加えた。この溶液を再度、一晩攪拌した。完了したら、ＣＰＧをろ過し、ジクロロメタン（２５ｍＬ）、アセトニトリル（２５ｍＬ）及びテトラヒドロフラン（２５ｍＬ）で洗浄した。無水酢酸をアセトニトリル（３ｍＬ）に溶解した溶液と、１０％Ｎ−メチルイミダゾール／１０％ピリジンのテトラヒドロフラン溶液（３ｍＬ）との１：１溶液を加えることによって、ＣＰＧにおける未反応のアミン残基をアセチル化（キャッピング）した。この懸濁液を２時間静置してから、ろ過し、等量のテトラヒドロフラン（２５ｍＬ）、アセトニトリル（２５ｍＬ）及びジクロロメタン（２５ｍＬ）でリンスした。ローディングしたＣＰＧ４９を高真空下で一晩乾燥した。標準的なＤＭＴローディングアッセイ（ＣＨ２Ｃｌ２中の３％トリクロロ酢酸、ＵＶ−ＶＩＳ、Ａ５０４）を用いて、リガンドローディング効率は、２２μモル／ｇであることが分かった。
【０２６４】
工程７．コンジュゲート４３の調製
得られたＧａｌＮＡｃロードＣＰＧ固体支持体４９は、標準的な手順を用いて、自動オリゴヌクレオチド合成で用いた。ヌクレオチドの脱保護を行ってから、固体支持体から切り出して（同時にガラクトサミンアセテートの脱保護を行った）、ＧａｌＮＡｃ−オリゴヌクレオチドコンジュゲート４３を得た。
【０２６５】
実施例６．コンジュゲート５０の合成
スキーム１３．
【化１２５】
2019513770.tif 000129
【０２６６】
スキーム１４．
【化１２６】
2019513770.tif 000130
【０２６７】
工程１．２−（（２−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）エチル）アミノ）エタン−１−オール５１の調製
【化１２７】
2019513770.tif 000131
エタノールアミン（７７ｍＬ、１．２５モル）と（２−ブロモエトキシ）−ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシラン（１５ｇ、６２．７ミリモル）を無水アセトニトリル（２００ｍＬ）に溶解した溶液を３時間還流した。完了したら、その反応物を室温まで冷却し、水（４００ｍＬ）で希釈し、エチルアセテートで抽出した（３×１５０ｍＬ）。合わせたエチルアセテート抽出物を硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、真空で濃縮乾固した。シリカパッドで、まず、５０％エチルアセテート／ヘキサンによってろ過してから、５０％ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃでろ過することによって、残渣を精製して、５１を淡黄色油として得た（１４ｇ、１００％）。
【０２６８】
工程２．２−（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）−Ｎ−（２−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）エチル）エタン−１−アミン５２の調製
【化１２８】
2019513770.tif 000132
２−（（２−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）エチル）アミノ）エタン−１−オール５１（１４ｇ、６４ミリモル）とトリエチルアミン（１７．５ｍＬ、１２８ミリモル）を無水ジクロロメタン（２５０ｍＬ）に溶解した溶液に、４，４’−ジメトキシトリチルクロリド（２４ｇ、７０ミリモル）を加えた。この溶液を一晩、室温で攪拌してから、真空で濃縮乾固した。残渣をエチルアセテート（３００ｍＬ）に溶解し、水（２５０ｍＬ）とブライン（２５０ｍＬ）で洗浄した。エチルアセテートを硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、真空で濃縮乾固した。シリカゲル６０カラムクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２中の１％〜５％ＭｅＯＨ）によって精製して、５２を淡黄色の粘性油として得た（１３ｇ、３９％）。
【０２６９】
工程３．メチル１０−（（２−（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）エチル）（２−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）エチル）アミノ）−１０−オキソデカノエート５３の調製
【化１２９】
2019513770.tif 000133
２−（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）−Ｎ−（２−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）エチル）エタン−１−アミン５２（５．４ｇ、１０．３ミリモル）、モノメチルセバケート（２．２ｇ、１０．３ｇ）、ＨＢＴＵ（４．９ｇ、１２．９ミリモル）、ＤＩＰＥＡ（５．３ｍＬ、３０．９ミリモル）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１００ｍＬ）に溶解した溶液を３時間、室温で攪拌した。完了したら、その溶液を水（４００ｍＬ）に入れ、エチルアセテートで抽出した（１×５００ｍＬ）。そのエチルアセテート抽出物をブラインで洗浄し（２×２５０ｍＬ）、硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、真空で濃縮乾固した。シリカゲル６０カラムクロマトグラフィー（ヘキサン中の１０％〜２５％エチルアセテート）によって精製して、５３を黄色の粘性油として得た（６．５ｇ、８７％）。
【０２７０】
工程４．メチル１０−（（２−（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）エチル）（２−ヒドロキシエチル）アミノ）−１０−オキソデカノエート５４の調製
【化１３０】
2019513770.tif 000134
メチル１０−（（２−（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）エチル）（２−（（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル）オキシ）エチル）アミノ）−１０−オキソデカノエート５３（２．０ｇ、２．８ミリモル）とトリエチルアミン（１ｍＬ）を無水テトラヒドロフラン（２０ｍＬ）に溶解した溶液に、ＴＢＡＦ（ＴＨＦ中に１Ｍ、３．４ｍＬ、３．３ミリモル）を加えた。この溶液を６時間攪拌したが、ＴＬＣ（ＣＨ２Ｃｌ２中の５％ＭｅＯＨ）によって、部分的な変換しか観察されなかった。追加のＴＢＡＦを１．７ｍＬ加え、その溶液を一晩、室温で攪拌した。完了したら、その溶液を真空濃縮し、シリカゲル６０カラムクロマトグラフィー（ヘキサン中の１０％〜５０％ＥｔＯＡｃ→１００％ＥｔＯＡｃ）によって精製して、５４を無色の粘性油として得た（０．５ｇ、２９％）。
【０２７１】
工程５．リチウム１０−（（２−（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）エチル）（２−ヒドロキシエチル）アミノ）−１０−オキソデカノエート５５の調製
【化１３１】
2019513770.tif 000135
メチル１０−（（２−（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）エチル）（２−ヒドロキシエチル）アミノ）−１０−オキソデカノエート５４（０．５ｇ、０．８３ミリモル）をＴＨＦ（４０ｍＬ）に溶解した溶液に、水（１０ｍＬ）と水酸化リチウム（２４ｍｇ、１．０ミリモル）を加えた。この溶液を一晩、室温で攪拌してから、真空濃縮して、ＴＨＦを除去した。残りの水溶液を液体窒素で急速凍結し、凍結乾燥して、５５を無色の固体として得た（４８５ｍｇ、９５％）。
【０２７２】
工程６．化合物５６、５７、５８及び５０の調製
化合物５６は、化合物４７を合成した手順と同じ手順を用いて調製し、化合物５７は、化合物４８を合成した手順と同じ手順を用いて調製し、化合物５８は、化合物４９を合成した手順と同じ手順を用いて調製し、化合物５０は、化合物４３を合成した手順と同じ手順を用いて調製した。
【０２７３】
実施例７．コンジュゲート５９の合成
スキーム１５．
【化１３２】
2019513770.tif 000136
【０２７４】
スキーム１６．
【化１３３】
2019513770.tif 000137
【０２７５】
工程１．メチル（２Ｒ，５Ｒ）−５−ヒドロキシピペリジン−２−カルボキシレート６１の調製
【化１３４】
2019513770.tif 000138
（２Ｒ，５Ｒ）−５−ヒドロキシピペリジン−２−カルボン酸６０（３．５ｇ、２４．１ミリモル）をＭｅＯＨ（５０ｍＬ）中で攪拌した。その溶液にＨＣｌ（ｇ）を２分間通じ、その反応物を１．５時間、還流攪拌した。その反応物を真空濃縮して、メチル（２Ｒ，５Ｒ）−５−ヒドロキシピペリジン−２−カルボキシレート６１を定量的な収量で得、これを、さらなる精製をせずに使用した。
【０２７６】
工程２．１−（ｔｅｒｔ−ブチル）２−メチル（２Ｒ，５Ｒ）−５−ヒドロキシピペリジン−１，２−ジカルボキシレート６２の調製
【化１３５】
2019513770.tif 000139
メチル（２Ｒ，５Ｒ）−５−ヒドロキシピペリジン−２−カルボキシレート６１（２４．１ミリモル）とＴＥＡ（７．２ｍＬ、５３．０２ミリモル）をＤＣＭ（１００ｍＬ）中で、室温で攪拌した。ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−ジカーボネート（５．７ｇ、２６．５ミリモル）を少しずつ加え、その反応物を２時間、攪拌した。その反応物をＤＣＭ（１００ｍＬ）で希釈し、１Ｍ  ＨＣｌ（２×７５ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ３（２×７５ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（２×７５ｍＬ）及び飽和ＮａＣｌ溶液（２×７５ｍＬ）で順次洗浄した。有機物を分離し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、真空濃縮して、１−（ｔｅｒｔ−ブチル）２−メチル（２Ｒ，５Ｒ）−５−ヒドロキシピペリジン−１，２−ジカルボキシレート６２（５．５３ｇ、８８％）を得、これを、さらなる精製をせずに使用した。
【０２７７】
工程３．ｔｅｒｔ−ブチル（２Ｒ，５Ｒ）−５−ヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）ピペリジン−１−カルボキシレート６３の調製
【化１３６】
2019513770.tif 000140
（２Ｒ，５Ｒ）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−５−ヒドロキシピペリジン−２−カルボン酸６２（５．５３ｇ、２１．４ミリモル）をＴＨＦ中で、０℃で攪拌した。ＬｉＢＨ４（３．０ＭのＴＨＦ溶液）（８．９ｍＬ、２７．７ミリモル）を１時間かけて滴下した。その反応物を室温まで昇温させ、攪拌を１６時間続けた。反応物を１Ｍ  ＮａＯＨでクエンチし、ＴＨＦを真空除去し、水性物をＥｔＯＡｃで徹底的に抽出した（１０×１００ｍＬ）。合わせた有機物をＨ２Ｏ（５０ｍＬ）、飽和ＮａＣｌ溶液（２×５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、真空濃縮して、ｔｅｒｔ−ブチル（２Ｒ，５Ｒ）−５−ヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）ピペリジン−１−カルボキシレート６３を得（２．４ｇ、４９．０％）、これを、さらなる精製をせずに使用した。
【０２７８】
工程４．（３Ｒ，６Ｒ）−６−（ヒドロキシメチル）ピペリジン−３−オール６４の調製
【化１３７】
2019513770.tif 000141
ｔｅｒｔ−ブチル（２Ｒ，５Ｒ）−５−ヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）ピペリジン−１−カルボキシレート６３（２．４ｇ、１０．４ミリモル）をＥｔ２Ｏ中で、室温で攪拌した。ＨＣｌ（ｇ）を４５秒通じ、その反応物を室温で、４５分攪拌した。その反応物を真空濃縮し、高真空下で乾燥して、（３Ｒ，６Ｒ）−６−（ヒドロキシメチル）ピペリジン−３−オール６４を得た。この生成物を、さらなる精製をせずに使用した。
【０２７９】
工程５．２，２，２−トリフルオロ−１−（（２Ｒ，５Ｒ）−５−ヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）ピペリジン−１−イル）エタン−１−オン６５の調製
【化１３８】
2019513770.tif 000142
上記の反応から得られた粗い（３Ｒ，６Ｒ）−６−（ヒドロキシメチル）ピペリジン−３−オール６４をＭｅＣＮ（５０ｍＬ）中で、ＴＥＡ（３．５ｍＬ、２５．２ミリモル）とともに、室温で攪拌した。エチルトリフルオロアセテート（３ｍＬ、２５．２ミリモル）を加え、その反応物を室温で１６時間、攪拌してから、真空濃縮して、２，２，２−トリフルオロ−１−（（２Ｒ，５Ｒ）−５−ヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）ピペリジン−１−イル）エタン−１−オン６５を得た。この生成物を、さらなる精製をせずに使用した。
【０２８０】
工程６．１−（（２Ｒ，５Ｒ）−２−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）メチル）−５−ヒドロキシピペリジン−１−イル）−２，２，２−トリフルオロエタン−１−オン６６の調製
【化１３９】
2019513770.tif 000143
上記の反応から得られた粗い２，２，２−トリフルオロ−１−（（２Ｒ，５Ｒ）−５−ヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）ピペリジン−１−イル）エタン−１−オン６５をＤＣＭ中で、ＴＥＡ（５０ｍＬ）とともに、室温で攪拌した。４，４’−ジメトキシトリチルクロリド（ＤＭＴｒＣｌ）（３．８７ｇ、１１．４４ミリモル）を一度に加え、その反応物を室温で３時間攪拌した。その反応物をＤＣＭ（５０ｍＬ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３（２×７５ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（２×７５ｍＬ）及び飽和ＮａＣｌ溶液（２×７５ｍＬ）で順次、洗浄した。有機物を分離し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、真空濃縮し、カラムクロマトグラフィー（１００％ヘキサン〜６０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）（０．１％ＴＥＡ）によって精製して、１−（（２Ｒ，５Ｒ）−２−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）メチル）−５−ヒドロキシピペリジン−１−イル）−２，２，２−トリフルオロエタン−１−オン６６を得た（３．１４ｇ、５７％）。
【０２８１】
工程７．（３Ｒ，６Ｒ）−６−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）メチル）−ピペリジン−３−オール６７の調製
【化１４０】
2019513770.tif 000144
１−（（２Ｒ，５Ｒ）−２−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）メチル）−５−ヒドロキシピペリジン−１−イル）−２，２，２−トリフルオロエタン−１−オン６６（３．１４ｇ、６．０ミリモル）をＭｅＯＨ（５０ｍＬ）中で、室温で攪拌した。ＫＯＨ（６７２ｍｇ、１２ミリモル）を加え、その反応物を室温で１６時間攪拌した。追加のＫＯＨ（３００ｍｇ、６ミリモル）を加え、攪拌をさらに２４時間続けた。その反応物を真空濃縮し、ＤＣＭ（１５０ｍＬ）に取り込み、Ｈ２Ｏで洗浄し（４×５０ｍＬ）、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、真空濃縮して、（３Ｒ，６Ｒ）−６−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）メチル）ピペリジン−３−オール６７（２．３４ｇ、９０％）を得、これを、さらなる精製をせずに使用した。
【０２８２】
工程８．メチル１２−（（２Ｒ，５Ｒ）−２−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）−メトキシ）メチル）−５−ヒドロキシピペリジン−１−イル）−１２−オキソドデカノエート６８の調製
【化１４１】
2019513770.tif 000145
（３Ｒ，６Ｒ）−６−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）メチル）ピペリジン−３−オール６７（２．３４ｇ、５．３４ミリモル）をＤＣＭ（７５ｍＬ）中で、室温で攪拌した。トリエチルアミン（２．２ｍＬ、１６．２ミリモル）、ＨＡＴＵ（３．５ｇ、９．２ミリモル）及び１２−メトキシ−１２−オキソドデカン酸（１．３２ｇ、５．４ミリモル）を加え、その反応物を室温で３時間攪拌した。得られた固体沈殿物をろ過によって除去し、そのろ液を真空濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィー（２．５％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ、０．１％ＴＥＡ）によって精製して、メチル１２−（（２Ｒ，５Ｒ）−２−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）メチル）−５−ヒドロキシピペリジン−１−イル）−１２−オキソドデカノエート６８を定量的な収量で得た。
【０２８３】
工程９．リチウム１２−（（２Ｒ，５Ｒ）−２−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）−メチル）−５−ヒドロキシピペリジン−１−イル）−１２−オキソドデカノエート６９の調製
【化１４２】
2019513770.tif 000146
メチル１２−（（２Ｒ，５Ｒ）−２−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）メチル）−５−ヒドロキシピペリジン−１−イル）−１２−オキソドデカノエート６８（５．４ミリモル）とＬｉＯＨ（１４０ｍｇ、５．９４ミリモル）をＴＨＦ：Ｈ２Ｏ（１：１、１００ｍＬ）中で、室温で４８時間、攪拌した。ＴＨＦを真空除去し、水性物を凍結し、凍結乾燥して、リチウム１２−（（２Ｒ，５Ｒ）−２−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）メチル）−５−ヒドロキシピペリジン−１−イル）−１２−オキソドデカノエート６９を得た（３．２ｇ、９１％）。これを、次の反応で、さらなる精製をせずに使用した。
【０２８４】
工程１０．化合物７０、７１、７２及び５９の調製
化合物７０は、化合物４７を合成するのに用いた手順と同じ手順を用いて調製し、化合物７１は、化合物４８を合成するのに用いた手順と同じ手順を用いて調製し、化合物７２は、化合物４９を合成するのに用いた手順と同じ手順を用いて調製し、化合物５９は、化合物４３を合成するのに用いた手順と同じ手順を用いて調製した。
【０２８５】
実施例８．コンジュゲート１４２の合成
スキーム１７．
【化１４３】
2019513770.tif 000147
【０２８６】
スキーム１８．
【化１４４】
2019513770.tif 000148
【０２８７】
工程１．３，４，５−トリアセトキシ安息香酸７３の調製
没食子酸（２０ｇ）をピリジン（５０ｍＬ）と無水酢酸（５０ｍＬ）に溶解した。その溶液を一晩、室温で攪拌してから、氷水（１Ｌ）に入れた。その溶液を濃塩酸で酸性にしたところ、無色の固体が沈殿した。その固体をろ過によって回収し、水で洗浄した（５×１００ｍＬ）。その湿潤固体を液体窒素で凍結し、凍結乾燥して、３，４，５−トリアセトキシ安息香酸を得た（２６ｇ、７５％）。
【０２８８】
工程２．５−（（２−（（２−オキソ−２−フェニル−１λ２−エチル）アミノ）エチル）カルバモイル）ベンゼン−１，２，３−トリイルトリアセテート７４の調製
３，４，５−トリアセトキシ安息香酸（１０ｇ、３３．８ミリモル）、Ｎ−カルボベンゾキシ−１，２−ジアミノエタンヒドロクロリド（５．３ｇ、３３．８ミリモル）及びＨＢＴＵ（１３．５ｇ、３５．５ミリモル）をＤＭＦ（２００ｍＬ）に溶解した溶液に、ＤＩＰＥＡ（１７．５ｍＬ、１０１ミリモル）を加えた。この溶液を１６時間攪拌してから、エチルアセテート（２５０ｍＬ）で希釈し、ブラインで洗浄し（３×２００ｍＬ）、硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、真空で濃縮乾固した。この粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（グラジエント：ＤＣＭ中の１％〜５％ＭｅＯＨ）によって精製して、５−（（２−（（２−オキソ−２−フェニル−１λ２−エチル）アミノ）エチル）カルバモイル）ベンゼン−１，２，３−トリイルトリアセテートを灰白色固体として得た（５．５ｇ）。
【０２８９】
工程３．３，４，５−トリヒドロキシ−Ｎ−（２−（（２−オキソ−２−フェニル−１λ２−エチル）アミノ）エチル）ベンズアミド７５の調製
５−（（２−（（２−オキソ−２−フェニル−１λ２−エチル）アミノ）エチル）カルバモイル）ベンゼン−１，２，３−トリイルトリアセテート（５ｇ、１．１ミリモル）を１：１ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍＬ）に溶解した溶液を３日間、室温で攪拌した。完了したら、溶媒を除去して、３，４，５−トリヒドロキシ−Ｎ−（２−（（２−オキソ−２−フェニル−１λ２−エチル）アミノ）エチル）ベンズアミドを無色の固体として得た（４ｇ、定量的）。
【０２９０】
工程４．トリメチル２，２’，２”−（（５−（（２−（（２−オキソ−２−フェニル−１λ２−エチル）アミノ）エチル）カルバモイル）ベンゼン−１，２，３−トリイル）トリス（オキシ））トリアセテート７６の調製
３，４，５−トリヒドロキシ−Ｎ−（２−（（２−オキソ−２−フェニル−１λ２−エチル）アミノ）エチル）ベンズアミド（４ｇ、１１．６ミリモル）、メチルブロモアセテート（７．７ｇ、４６．４ミリモル）及び炭酸カリウム（９．６ｇ、６９．４ミリモル）をＤＭＦ（１００ｍＬ）に溶解した溶液を一晩、６０℃で攪拌した。完了したら、その溶液を室温まで冷却し、エチルアセテート（２００ｍＬ）で希釈し、水（２００ｍＬ）、ブライン（３×１００ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、真空で濃縮乾固した。この粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（グラジエント：ＤＣＭ中の２％〜１０％ＭｅＯＨ）によって精製して、トリメチル２，２’，２”−（（５−（（２−（（２−オキソ−２−フェニル−１λ２−エチル）アミノ）エチル）カルバモイル）ベンゼン−１，２，３−トリイル）トリス（オキシ））−トリアセテートをベージュ色固体として得た（５ｇ、７９％）。
【０２９１】
工程５．２，２’，２”−（（５−（（２−（（２−オキソ−２−フェニル−１λ２−エチル）アミノ）エチル）−カルバモイル）ベンゼン−１，２，３−トリイル）トリス（オキシ））トリ酢酸７７の調製
トリメチル２，２’，２”−（（５−（（２−（（２−オキソ−２−フェニル−１λ２−エチル）アミノ）エチル）−カルバモイル）ベンゼン−１，２，３−トリイル）トリス（オキシ））トリアセテート（５ｇ、９．２ミリモル）と１Ｍ  ＮａＯＨ（３０ｍＬ）をメタノール（１００ｍＬ）に溶解した溶液を２時間、室温で攪拌した。完了したら、その反応物を濃縮して、メタノールを除去し、水（７５ｍＬ）で希釈した。この混合物を０℃まで冷却し、２Ｍ  ＨＣｌで酸性にし、エチルアセテートで抽出した（５×１５０ｍＬ）。合わせたエチルアセテート抽出物を硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、真空で濃縮乾固して、２，２’，２”−（（５−（（２−（（２−オキソ−２−フェニル−１λ２−エチル）アミノ）エチル）カルバモイル）ベンゼン−１，２，３−トリイル）トリス（オキシ））トリ酢酸を無色の固体として得た（２．３ｇ、５０％）。
【０２９２】
工程６．化合物７８の調製
化合物７８は、化合物１３で用いた手順と同じ手順を用いて、化合物９（２．７５ｇ、４．３ミリモル）と７７（０．５ｇ、０．９６ミリモル）から調製した。収量：６００ｍｇ。
【０２９３】
工程７．化合物７９の調製
化合物７９は、化合物１４で用いた手順と同じ手順を用いて、化合物７８（０．６ｇ）から調製した。収量：５００ｍｇ。
【０２９４】
工程８．化合物１４０の調製
化合物１４０は、化合物１９で用いた手順と同じ手順を用いて、化合物７９（５００ｍｇ、０．２５ミリモル）と化合物１８（１７５ｍｇ、０．２５ミリモル）から調製した。収量：２５０ｍｇ、４４％。
【０２９５】
工程９．化合物１４１の調製
化合物１４１は、化合物２０で用いた手順と同じ手順を用いて、化合物１４０（２５０ｍｇ、０．１１ミリモル）から調製した。収量：２００ｍｇ。
【０２９６】
工程１０．コンジュゲート１４２の調製
コンジュゲート１４２は、化合物１で用いた手順と同じ手順を用いて、化合物１４１（２００ｍｇ）と１０００Ａ  ｌｃａａ  ＣＰＧ（１．８ｇ）から調製した。収量：１．９ｇ、ＣＰＧローディング量１ｇ当たり２２μモル。得られたＧａｌＮＡｃロードＣＰＧ固体支持体は、標準的な手順を用いて、自動オリゴヌクレオチド合成で用いた。ヌクレオチドの脱保護を行ってから、固体支持体から切り出して（同時にガラクトサミンアセテートの脱保護を行った）、ＧａｌＮＡｃ−オリゴヌクレオチドコンジュゲート１４２を得た。
【０２９７】
実施例９．コンジュゲート１４５の合成
スキーム１９．
【化１４５】
2019513770.tif 000149
【０２９８】
スキーム２０．
【化１４６】
2019513770.tif 000150
【０２９９】
工程１．（３ａＲ，６ａＳ）−５−ベンジル−３ａ，６ａ−ジメチルテトラヒドロ−１Ｈ−フロ［３，４−ｃ］ピロール−１，３（３ａＨ）−ジオン１２３の調製
３，４−ジメチルフラン−２，５−ジオン（３ｇ、２４ミリモル）とＮ−ベンジル−１−メトキシ−Ｎ−（（トリメチルシリル）メチル）メタンアミン（７ｇ、２９．８ミリモル）をジクロロメタン（７５ｍＬ）に溶解した冷溶液（０℃）に、トリフルオロ酢酸（７５μＬ）をゆっくり加えた。一晩、攪拌して、氷浴の融解に応じて、溶液を室温までゆっくり昇温させた。この反応混合物を濃縮乾固し、エチルアセテート（１００ｍＬ）に溶解し、飽和炭酸水素ナトリウムで洗浄し（２×１００ｍＬ）、硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、濃縮乾固した。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（グラジエント：ヘキサン中の２０％エチルアセテート〜１００％エチルアセテート）によって精製して、（３ａＲ，６ａＳ）−５−ベンジル−３ａ，６ａ−ジメチルテトラヒドロ−１Ｈ−フロ［３，４−ｃ］ピロール−１，３（３ａＨ）−ジオンを黄色油として得た（３．５ｇ、５６％）。
【０３００】
工程２．（（３Ｒ，４Ｓ）−１−ベンジル−３，４−ジメチルピロリジン−３，４−ジイル）ジメタノール１２４の調製
（３ａＲ，６ａＳ）−５−ベンジル−３ａ，６ａ−ジメチルテトラヒドロ−１Ｈ−フロ［３，４−ｃ］ピロール−１，３（３ａＨ）−ジオン（３．５ｇ、１３．４ミリモル）を無水ジエチルエーテル（５０ｍＬ）に溶解した冷溶液（０℃）に、水素化アルミニウムリチウムペレット（１．５ｇ、４０ミリモル）を３回に分けてゆっくり加えた。この溶液を一晩攪拌し、氷水浴の融解に応じて、室温まで昇温させた。完了したら、その反応物を０℃まで冷却し、１．５ｍＬの５Ｍ  ＮａＯＨで非常にゆっくりクエンチしてから、１．５ｍＬの水でクエンチした。３０分攪拌してから、硫酸マグネシウムを加え、ろ過した。そのろ液を濃縮して、（（３Ｒ，４Ｓ）−１−ベンジル−３，４−ジメチルピロリジン−３，４−ジイル）ジメタノールを無色の油として得た（２．７ｇ）。
【０３０１】
工程３．（（３Ｒ，４Ｓ）−３，４−ジメチルピロリジン−３，４−ジイル）ジメタノール１２５の調製
（（３Ｒ，４Ｓ）−１−ベンジル−３，４−ジメチルピロリジン−３，４−ジイル）ジメタノール（１０ｇ、４０ミリモル）をメタノール（１０ｍＬ）に溶解した溶液に、１０％パラジウム湿潤活性炭（１ｇ）を加えた。この溶液を水素雰囲気下で１６時間、激しく攪拌した。完了したら、その溶液をセライトろ過し、濃縮乾固して、（（３Ｒ，４Ｓ）−３，４−ジメチルピロリジン−３，４−ジイル）ジメタノールを無色の固体として得た（５．５ｇ、８６％）。
【０３０２】
工程４．メチル１０−（（３Ｒ，４Ｓ）−３，４−ビス（ヒドロキシメチル）−３，４−ジメチルピロリジン−１−イル）−１０−オキソデカノエート１２６の調製
化合物１２６は、化合物１７で用いた手順と同じ手順を用いて、化合物１２５（１．３ｇ、８．２ミリモル）とモノメチルセバケート（１．８ｇ、８．２ミリモル）から調製した。収量：１．８ｇ、６１％。
【０３０３】
工程５．メチル１０−（（３Ｒ，４Ｓ）−３−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）メチル）−４−（ヒドロキシメチル）−３，４−ジメチルピロリジン−１−イル）−１０−オキソデカノエート１２７の調製
化合物１２７は、化合物１８で用いた手順と同じ手順を用いて、化合物１２６（１．８ｇ、５．０ミリモル）と４，４’−ジメトキシトリチルクロリド（１．７ｇ、５．０ミリモル）から調製した。収量：１．４ｇ、４２％。
【０３０４】
工程６．リチウム１０−（（３Ｒ，４Ｓ）−３−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）メチル）−４−（ヒドロキシメチル）−３，４−ジメチルピロリジン−１−イル）−１０−オキソデカノエート１２８の調製
化合物１２７（３．０ｇ、４．６ミリモル）をＴＨＦ（５０ｍＬ）と水（５０ｍＬ）に溶解した溶液に、水酸化リチウム（１２１ｍｇ、５．０ミリモル）を加えた。この溶液を４時間、室温で攪拌してから、濃縮して、ＴＨＦを除去した。残った水溶液を一晩、凍結乾燥して、淡桃色固体を得た（２．９ｇ、定量的）。
【０３０５】
工程７．化合物１４３の調製
化合物１４３は、化合物１９で用いた手順と同じ手順を用いて、化合物１２８（２７０ｍｇ、０．４２ミリモル）と化合物１４（８００ｍｇ、０．４２ミリモル）から調製した。収量：９００ｍｇ、８７％。
【０３０６】
工程８．化合物１４４の調製
化合物１４４は、化合物２０で用いた手順と同じ手順を用いて、化合物１４３（５００ｍｇ、０．２ミリモル）から調製した。収量：２００ｍｇ。
【０３０７】
工程９．コンジュゲート１４５の調製
コンジュゲート１４５は、化合物１で用いた手順と同じ手順を用いて、化合物１４４（２００ｍｇ）と１０００Ａ  ｌｃａａ  ＣＰＧ（１．８ｇ）から調製した。収量：１．９ｇ、ＣＰＧローディング量１ｇ当たり２０μモル。得られたＧａｌＮＡｃロードＣＰＧ固体支持体は、標準的な手順を用いて、自動オリゴヌクレオチド合成で用いた。ヌクレオチドの脱保護を行ってから、固体支持体から切り出して（同時にガラクトサミンアセテートの脱保護を行った）、ＧａｌＮＡｃ−オリゴヌクレオチドコンジュゲート１４５を得た。
【０３０８】
実施例１０．コンジュゲート１５０の合成
スキーム２１．
【化１４７】
2019513770.tif 000151
【０３０９】
工程１．１４６−１の調製
ドデカン二酸のモノメチルエステル（１２．２ｇ、５０．０ミリモル）をジクロロメタン（３００ｍＬ）に溶解した溶液に、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（６．１０ｇ、５３．０ミリモル）と１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミドヒドロクロリド（ＥＤＣ）（１０．５２ｇ、５５．０ミリモル）を加えた。この濁った混合物を一晩、室温で攪拌したところ、その反応物は、透明な溶液になった。ＴＬＣによって、反応が完了したことが示された。有機物を飽和ＮＨ４Ｃｌ（３００ｍＬ）とブライン（１００ｍＬ）で洗浄した。有機層を分離し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濃縮乾固して、純粋な１−（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）１２−メチルドデカンジオエート１４６−１を白色固体として得た（１６．７ｇ、９７．８％）。
【０３１０】
工程２．シクロペント−３−エン−１−イルメタノール１４６−２の調製
水素化アルミニウムリチウム（１５．２ｇ、０．４０モル）を無水エーテル（１Ｌ）に０℃で、窒素下において懸濁した懸濁液に、メチルシクロペント−３−エンカルボキシレート（５０ｇ、０．４０モル）をエーテル（３００ｍＬ）に溶解した溶液を５時間かけて滴下した。この懸濁液を室温で一晩攪拌した。ＴＬＣによって、反応の完了が示された。この反応物を０℃まで再冷却した。Ｎａ２ＳＯ４の飽和溶液（３２ｍＬ）を滴下して、反応物をクエンチした。滴下が完了したら、その混合物をさらに３時間攪拌し、セライトパッドでろ過した。溶媒を蒸発させて、シクロペント−３−エンイルメタノール１４６−２（３７．３ｇ、９５％）を無色の液体として得た。
【０３１１】
工程３．（６−オキサビシクロ［３．１．０］ヘキサン−３−イル）メタノール１４６−３の調製
シクロペント−３−エンイルメタノール１４６−２（４．０ｇ、４１ミリモル）をジクロロメタン（１５０ｍＬ）に０℃で溶解した溶液に、３−クロロ過安息香酸（１０ｇ、４５ミリモル、純度７７％）を少しずつ加えた。その反応物を一晩攪拌した。ジクロロメタン（１５０ｍＬ）を加えた。その有機物をナトリウムチオサルフェート（１０ｍＬの水に１２ｇ）で洗浄してから、飽和ＮａＨＣＯ３（４０ｍＬ）で洗浄した。残りのすべての３−クロロ過安息香酸を洗い流すまで、これを繰り返した。その有機物をＭｇＳＯ４で乾燥した。溶媒を蒸発させて、シス−６−オキサビシクロ［３．１．０］ヘキサン−３−イルメタノールとトランス−６−オキサビシクロ［３．１．０］ヘキサン−３−イルメタノール１４６−３の混合物１４６−３（２．６ｇ、５７％）を黄色油として得た。ＧＣ−ＭＳ： ｍ／ｚ １１４ （５） （Ｍ＋）， ９５ （１５）， ８８ （１００）， ８１ （１５）。
【０３１２】
工程４．２−アミノ−４−（ヒドロキシメチル）シクロペンタン−１−オール１４６−４の調製
６−オキサビシクロ［３．１．０］ヘキサン−３−イルメタノール１４６−３（２．０ｇ、１７．６ミリモル）をメタノール（２０ｍＬ）に０℃で溶解した溶液を、アンモニアガスで１０分パージした。その反応物を室温で一晩、攪拌した。ＴＬＣによって、反応が未完であることが示された。メタノールを除去し、ＮＨ３Ｈ２Ｏ（５０ｍＬ）を加え、これを室温で１週間攪拌した。ＴＬＣによって、反応の完了が確認された。水を、エタノールとの共沸によって除去して、２−アミノ−４−（ヒドロキシメチル）シクロペンタノール１４６−４（２．１ｇ、９１％）を黄色油として得た。
【０３１３】
工程５．メチル１２−（２−ヒドロキシ−４−（ヒドロキシメチル）シクロペンチルアミノ）−１２−オキソドデカノエート１４６−５の調製
化合物１４６−５は、１２−（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）エチルアミノ）−１２−オキソドデカノエート（３−２）の合成で説明した手順と同じ手順を用いて、２−アミノ−４−（ヒドロキシメチル）シクロペンタノール１４６−４と１−（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）１２−メチルドデカンジオエート１４６−１から調製した。メチル１２−（２−ヒドロキシ−４−（ヒドロキシメチル）シクロペンチルアミノ）−１２−オキソドデカノエート１４６−５を８７．４％の収率で、灰白色固体として得た。
【０３１４】
工程６．化合物１４７の調製
化合物１４７は、化合物１８で用いた手順と同じ手順を用いて、化合物１４６（１．４ｇ、２．３３ミリモル）から定量的に調製した。
【０３１５】
工程７．化合物１４８の調製
化合物１４８は、化合物１９で用いた手順と同じ手順を用いて、化合物１４７（１５０ｍｇ、０．２３ミリモル）と化合物１４（４３１ｍｇ、０．２３ミリモル）から調製した。収量：４６０ｍｇ、８４％。
【０３１６】
工程８．化合物１４９の調製
化合物１４９は、化合物２０で用いた手順と同じ手順を用いて、化合物１４８（４６０ｍｇ、０．１９ミリモル）から調製した。収量：４３６ｍｇ、９１％。
【０３１７】
工程９．コンジュゲート１５０の調製
化合物１５０は、化合物１で用いた手順と同じ手順を用いて、化合物１４９（４３６ｍｇ）と１０００Ａ  ｌｃａａ  ＣＰＧ（２．６２ｇ）から調製した。収量：２．７ｇ、ＣＰＧローディング量１ｇ当たり２１．３μモル。得られたＧａｌＮＡｃロードＣＰＧ固体支持体は、標準的な手順を用いて、自動オリゴヌクレオチド合成で用いた。ヌクレオチドの脱保護を行ってから、固体支持体から切り出して（同時にガラクトサミンアセテートの脱保護を行った）、ＧａｌＮＡｃ−オリゴヌクレオチドコンジュゲート１５０を得た。
【０３１８】
実施例１１．コンジュゲート１５３、１５８、１６３、１６８及び１７３の合成
スキーム２２．
【化１４８】
2019513770.tif 000152
【０３１９】
工程１．１−（ｔｅｒｔ−ブチル）２−メチル（２Ｓ，４Ｒ）−４−ヒドロキシピロリジン−１，２−ジカルボキシレート（１３３）の調製
メチル（２Ｓ，４Ｒ）−４−ヒドロキシピロリジン−２−カルボキシレート（２５．９ｇ、４６ミリモル）、ＢＯＣ無水物（６５．９ｇ、３０２．５ミリモル）及びＴＥＡ（４２ｍｌ、３０２．５ミリモル）をＤＣＭ中で、室温で１６時間攪拌した。その有機物を１Ｍ  ＨＣｌ（×２）、飽和ＮａＨＣＯ３（×２）、Ｈ２Ｏ及びブラインで順次洗浄し、乾燥し、真空濃縮して、１−（ｔｅｒｔ−ブチル）２−メチル（２Ｓ，４Ｒ）−４−ヒドロキシピロリジン−１，２−ジカルボキシレート（１３３）を得た（５８．１ｇ、８５％）。
【０３２０】
工程２．１−（ｔｅｒｔ−ブチル）２−メチル（４Ｒ）−４−ヒドロキシ−２−メチルピロリジン−１，２−ジカルボキシレート（１３４）の調製
１−（ｔｅｒｔ−ブチル）２−メチル（２Ｓ，４Ｒ）−４−ヒドロキシピロリジン−１，２−ジカルボキシレート（１３３）（５ｇ、２０．４ミリモル）とＭｅＩ（１２ｇ、８４．５ミリモル）を無水ＴＨＦ中で、−４０℃で攪拌した。ＬＤＡ（２．０Ｍ  ＴＨＦ溶液）（３７．５ｍＬ、７５ミリモル）を滴下した。その反応物を室温まで昇温させ、４時間攪拌してから、飽和ＮＨ４Ｃｌでクエンチした。その反応物をＥｔＯＡｃで抽出し、Ｈ２Ｏとブラインで洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、真空濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（５０：５０ＥｔＯＡｃ／／ヘキサン）によって精製して、１−（ｔｅｒｔ−ブチル）２−メチル（４Ｒ）−４−ヒドロキシ−２−メチルピロリジン−１，２−ジカルボキシレート（１３４）をラセミ混合物として得た（３．６ｇ、６８％）。
【０３２１】
工程３．ｔｅｒｔ−ブチル（２Ｓ，４Ｒ）−４−ヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）−２−メチルピロリジン−１−カルボキシレート（１３５ａ）の調製
１−（Ｔｅｒｔ−ブチル）２−メチル（４Ｒ）−４−ヒドロキシ−２−メチルピロリジン−１，２−ジカルボキシレート（１３４）（１９ｇ、７３．５ミリモル）を無水ＴＨＦ中で、Ｎ２下で攪拌した。ＬｉＢＨ４溶液（４８ｍｌ、９６ミリモル）を滴下し、その反応物を室温で４８時間攪拌した。その反応物を１Ｍ  ＮａＯＨでクエンチし、ＴＨＦを真空除去し、残渣をＥｔＯＡｃで抽出した（４×１００ｍｌ）。その有機物をＨ２Ｏ、ブラインで洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、真空濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（５％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ）によって精製して、ｔｅｒｔ−ブチル（２Ｓ，４Ｒ）−４−ヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）−２−メチルピロリジン−１−カルボキシレート（１３５ａ）を主要生成物としてとして得た（８ｇ、４７％）。参照文献に従って、構造を割り当てた。
【０３２２】
工程４．（３Ｒ，５Ｓ）−５−（ヒドロキシメチル）−５−メチルピロリジン−３−オールヒドロクロリド（１３６）の調製
ｔｅｒｔ−ブチル（２Ｓ，４Ｒ）−４−ヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）−２−メチルピロリジン−１−カルボキシレート（１３５ａ）（８ｇ、３４．６ミリモル）をＥｔＯＡｃ中で、室温で攪拌し、気体ＨＣｌを約２分加えた。この反応物を１時間攪拌してから、真空濃縮し、高真空下で乾燥して、（３Ｒ，５Ｓ）−５−（ヒドロキシメチル）−５−メチルピロリジン−３−オールヒドロクロリド（１３６）を定量的な形で得た。
【０３２３】
工程５．メチル１２−（（２Ｓ，４Ｒ）−４−ヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）−２−メチルピロリジン−１−イル）−１２−オキソドデカノエート（１３７）の調製
（３Ｒ，５Ｓ）−５−（ヒドロキシメチル）−５−メチルピロリジン−３−オールヒドロクロリド（１３６）（７．９ｇ、４７．４ミリモル）、１２−メトキシ−１２−オキソドデカン酸（１１．５ｇ、４７．４ミリモル）、ＨＢＴＵ（３６ｇ、７６ミリモル）及びＴＥＡ（２０ｍＬ、１４２．２ミリモル）をＤＣＭ中で、室温で１６時間攪拌した。沈殿物をろ過によって除去し、有機物を１Ｍ  ＨＣｌ（×２）、飽和ＮａＨＣＯ３（×２）、Ｈ２Ｏ及びブラインで洗浄した。乾燥後、有機物を真空濃縮し、カラムクロマトグラフィー（５％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ）によって精製して、メチル１２−（（２Ｓ，４Ｒ）−４−ヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）−２−メチルピロリジン−１−イル）−１２−オキソドデカノエート（１３７）を得た（３．１ｇ、１８．３％）。
【０３２４】
工程６．メチル１２−（（２Ｓ，４Ｒ）−２−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）メチル）−４−ヒドロキシ−２−メチルピロリジン−１−イル）−１２−オキソドデカノエート（１３８）の調製
メチル１２−（（２Ｓ，４Ｒ）−４−ヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）−２−メチルピロリジン−１−イル）−１２−オキソドデカノエート（１３７）（３．１ｇ、９．０ミリモル）、ＤＭＴｒ−Ｃｌ（２．８ｇ、８．２ミリモル）及びＴＥＡ（１．１ｍｌ、８．２ミリモル）をＤＣＭ中で、室温で１６時間攪拌した。その反応物を真空濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィー（５％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ、０．１％ＴＥＡ）によって精製して、メチル１２−（（２Ｓ，４Ｒ）−２−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）メチル）−４−ヒドロキシ−２−メチルピロリジン−１−イル）−１２−オキソドデカノエート（１３８）を得た（２．７ｇ、４５．５ミリモル）。
【０３２５】
スキーム２３
【化１４９】
2019513770.tif 000153
【０３２６】
工程７．化合物１５４−１の調製
Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）フタルイミド（４．８０ｇ、２５．０ミリモル）と４，４’−ジメトキシトリチルクロリド（８．８ｇ、２６．０ミリモル）を０℃で、窒素下においてジクロロメタン（２００ｍＬ）に溶解した溶液に、トリエチルアミン（１０．４ｍＬ、７４．６ミリモル）を滴下した。この反応混合物を室温で３時間攪拌した。ＴＬＣによって、反応の完了が示された。有機層をブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濃縮乾固した。これを次の反応で、精製せずに直接使用した。
【０３２７】
工程８．化合物１５４−２の調製
上で得た２−（２−（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）エチル）イソインドリン−１，３−ジオン（１５４−１）と、ヒドラジン一水和物（３．６ｍＬ、７４ミリモル）をエタノール（１００ｍＬ）中で一晩、室温で攪拌した。ＴＬＣによって、反応の完了が示された。沈殿物をろ別した。ろ液を蒸発させた。残渣をエチルアセテート（１００ｍＬ）によって取り出した。有機溶液を１０％ＮａＯＨ、水及びブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥した。溶媒を蒸発させて、２−（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）エタンアミン（１５４−２）を黄色液体として得た（２段階で８．１１ｇ、収率８９．３％）。これを次の反応で、さらなる精製をせずに使用した。
【０３２８】
工程９．化合物１５４−３の調製
Ｌ−トレオニン（１．１９ｇ、１０．０ミリモル）とＮａＨＣＯ３（２．３ｇ、２７ミリモル）を水（２０ｍＬ）とジオキサン（１０ｍＬ）に溶解した溶液に、ジオキサン（１０ｍＬ）中の１−（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）１２−メチルドデカンジオエート１４６−１（３．１ｇ、９．１ミリモル）を滴下した。その反応混合物を室温で一晩攪拌した。４Ｎ  ＨＣｌ（１０ｍＬ）を加えた。沈殿物をろ過によって回収し、水で洗浄した（３×１０ｍＬ）。デシケーターにおいて、この固体をＰ２Ｏ５で乾燥して、（２Ｓ，３Ｒ）−３−ヒドロキシ−２−（１２−メトキシ−１２−オキソドデカンアミド）ブタン酸１５４−３を灰白色固体として得た（２．８４ｇ、８２．２％）。ＬＣ−ＭＳ （ＥＳＩ）： ｍ／ｚ： ３４６ （１００）， （Ｍ ＋ Ｈ＋）
【０３２９】
工程１０．化合物１５４の調製
（２Ｓ，３Ｒ）−３−ヒドロキシ−２−（１２−メトキシ−１２−オキソドデカンアミド）ブタン酸１５４−３（２．４７ｇ、７．１５ミリモル）、２−（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）エタンアミン１５４−２（２．６０ｇ、７．１５ミリモル）、ＥＤＣ（１．６４ｇ、８．５８ミリモル）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）（１．１６ｇ、８．５８ミリモル）及びＴＥＡ（２．４ｍＬ、１７．２ミリモル）をジクロロメタン（７２ｍＬ）中で、室温で２時間攪拌した。水（３０ｍＬ）を加えた。有機層を分離し、ブラインで洗浄した（２×３０ｍＬ）。溶媒を蒸発させてから、カラムクロマトグラフィー（３０％エチルアセテート／ヘキサン〜５０％エチルアセテート／ヘキサン）によって、メチル１２−（（２Ｓ，３Ｒ）−１−（２−（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）エチルアミノ）−３−ヒドロキシ−１−オキソブタン−２−イルアミノ）−１２−オキソドデカノエート１５４をワックス状の黄色半固体として得た（２．６０ｇ、５２．６％）。１ＨＮＭＲ （４００ＭＨｚ， アセトン−ｄ６， ｐｐｍ）： δ ７．５１ （ｔ， Ｊ ＝ ５．５ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．４５−７．４９ （ｍ， ２Ｈ）， ７．２８−７．３６ （ｍ， ６Ｈ）， ７．２１ （ｔｔ， Ｊ ＝ ７．２， １．２ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．０８ （ｄ， Ｊ ＝ ８．１ Ｈｚ， １Ｈ）， ６．８８ （ｄｔ， Ｊ ＝ ８．９， ２．５ Ｈｚ， ４Ｈ）， ４．３９ （ｄｄ， Ｊ ＝ ８．２， ３．０ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．２０−４．２７ （ｍ， １Ｈ）， ３．７８ （ｓ， ６Ｈ）， ３．６０ （ｓ， １Ｈ）， ３．３５−３．５２ （ｍ， ２Ｈ）， ３．０７−３．１６ （ｍ， ２Ｈ）， ２．２３−２．３７ （ｍ， ４Ｈ）， １．５３−１．６５ （ｍ， ４Ｈ）， １．２３−１．３６ （ｍ， １２Ｈ）， １．１０ （ｄ， Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ， ３Ｈ）
【０３３０】
スキーム２４
【化１５０】
2019513770.tif 000154
【０３３１】
工程１１．化合物１６４−１の調製
カリウムｔ−ブトキシド（１４．６ｇ、１３０モル）をＴＨＦ（１２０ｍＬ）／エーテル（３６０ｍＬ）に懸濁した懸濁液に、メチルトリフェニルホスホニウムブロミド（４６．６ｇ、１３０ミリモル）を加えた。この混合物を２時間還流してから、０℃まで冷却した。エーテル（５０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル２−ホルミルピロリジン−１−カルボキシレート（１３．０ｇ、６５．２ミリモル）を滴下した。この反応混合物を０℃で攪拌してから、水（２５０ｍＬ）を加えることによってクエンチした。有機層を分離し、水性物をエーテル（２５０ｍＬ）で抽出した。合わせた抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥した。溶媒を蒸発させてから、カラムクロマトグラフィーによって精製して（５％エチルアセテート／ヘキサン）、ｔｅｒｔ−ブチル３−ビニルピロリジン−１−カルボキシレート１６４−１（１１．５ｇ、８９．４％）を無色の液体として得た。ＧＣ−ＭＳ： ｍ／ｚ： １９７ （２） （Ｍ＋）， １４１ （４０）， １２４ （３０）， ５７ （１００）
【０３３２】
工程１２．化合物１６４−２の調製
ｔ−ＢｕＯＨ（１４０ｍＬ）と水（７０ｍＬ）の混合物に、ＡＤ−ｍｉｘ−β（４７．４ｇ）とメタンスルホンアミド（２．８９ｇ、３０．４ミリモル）を加えた。この混合物を室温で３０分攪拌してから、０℃まで冷却した。ｔｅｒｔ−ブチル３−ビニルピロリジン−１−カルボキシレート１６４−１（６．００ｇ、３０．４ミリモル）を加えた。その反応物を室温で一晩攪拌した。この反応混合物を０℃まで冷却した。ナトリウムチオサルフェート五水和物（９６ｇ、３８７ミリモル）を加え、温度を室温まで上げた。水（７００ｍＬ）を加え、その混合物をエチルアセテート（５００ｍＬ）で抽出した。この抽出物を水（２×５０ｍＬ）とブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥した。溶媒を蒸発させてから、カラムクロマトグラフィー（２％メタノール／ジクロロメタン〜７％メタノール／ジクロロメタン）によって、ｔｅｒｔ−ブチル３−（１，２−ジヒドロキシシエチル）ピロリジン−１−カルボキシレート１６４−２（５．４ｇ、７７％）を淡褐色油として得た。
【０３３３】
工程１３．化合物１６４−３の調製
ｔｅｒｔ−ブチル３−（１，２−ジヒドロキシシエチル）ピロリジン−１−カルボキシレート１６４−２（３．１ｇ、１３．４ミリモル）をエタノール（１０ｍＬ）に溶解した溶液に、３Ｎ  ＨＣｌ（３０ｍＬ、９０ミリモル）を加えた。この反応混合物を室温で一晩攪拌した。ＴＬＣによって、反応の完了が示された。エタノールを蒸発させた。トルエンを加えて、蒸発させた。これを３回繰り返して、１−（ピロリジン−３−イル）エタン−１，２−ジオールヒドロクロリド１６４−３（２．０ｇ、８９％）を褐色油として得た。ＬＣ−ＭＳ （ＥＳＩ）： ｍ／ｚ： １３２ （１００）， （Ｍ ＋ Ｈ＋， 遊離アミン)
【０３３４】
工程１４：化合物１６４−４の調製
１−（ピロリジン−３−イル）エタン−１，２−ジオールヒドロクロリド１６４−２（２．０ｇ、１２ミリモル）を水（３０ｍＬ）に溶解した溶液に、ＮａＨＣＯ３（３．７ｇ、４４ミリモル）を少しずつ加えた。続いて、ジオキサン（２０ｍＬ）を加えた。上記の溶液に、ジオキサン（３０ｍＬ）中の１−（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）１２−メチルドデカンジオエート１４６−１（３．７ｇ、１１ミリモル）を加えた。この反応混合物を一晩攪拌した。これをエチルアセテートで抽出した（３×１００ｍＬ）。合わせた抽出物を０．５Ｎ  ＨＣｌ（５０ｍＬ）及びブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥した。
【０３３５】
工程１５．化合物１６４の調製
この物質は、２−（２−（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）エチル）イソインドリン−１，３−ジオン１３８合成で説明した手順と同じ手順を用いて、メチル１２−（３−（１，２−ジヒドロキシシエチル）ピロリジン−１−イル）−１２−オキソドデカノエート１６４−４と４，４−ジメトキシトリチルクロリド（１当量）から調製した。この生成物は、カラムクロマトグラフィー（１．５％メタノール／ジクロロメタン）によって精製した。メチル１２−（３−（２−（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）−１−ヒドロキシエチル）ピロリジン−１−イル）−１２−オキソドデカノエート１６４は、５１％の収率で、黄色油として得た。１ＨＮＭＲ （４００ＭＨｚ， アセトン−ｄ６， ｐｐｍ）： δ ７．４９−７．５４ （ｍ， ２Ｈ）， ７．３５−７．４０ （ｍ， ４Ｈ）， ７．２８−７．３４ （ｍ， ２Ｈ）， ７．１９−７．２５ （ｍ， １Ｈ）， ６．８６−６．９１ （ｍ， ４Ｈ）， ４．１１−４．２０ （ｍ， １Ｈ）， ３．７９ （ｓ， ６Ｈ）， ３．６８−３．７７ （ｍ， １Ｈ）， ３．６０ （ｓ， ３Ｈ）， ３．２９−３．５９ （ｍ， ３Ｈ）， ３．０６−３．２０ （ｍ， ３Ｈ）， ２．３３−２．５５ （ｍ， １Ｈ）， ２．２９ （ｔ， Ｊ ＝ ７．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．１９ （ｔ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．６５−２．０ （ｍ， ２Ｈ）， １．５１−１．６２ （ｍ， ４Ｈ）， １．２６−１．３５ （ｍ， １２Ｈ）
【０３３６】
スキーム２５
【化１５１】
2019513770.tif 000155
【０３３７】
工程１６．化合物１７０−１の調製
ｔｅｒｔ−ブチル２−アミノエチルカルバメート（２．８８ｇ、１８．０ミリモル）とトリエチルアミン（２．９８ｇ、２９．４ミリモル）をジクロロメタン（１００ｍＬ）に溶解した溶液に、ジクロロメタン（５０ｍＬ）中の１−（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）１２−メチルドデカンジオエート（１４６−１）（５．０９ｇ、１４．９ミリモル）を室温で滴下した。この反応混合物を一晩攪拌し、ＴＬＣによって、反応の完了が示された。１００ｍＬのブラインを加え、有機層を分離した。有機層を０．５Ｎ  ＨＣｌ（１５０ｍＬ）、ブライン（２×１００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥した。溶媒を蒸発させて、純粋なメチル１２−（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）エチルアミノ）−１２−オキソドデカノエート１７０−１（５．８５ｇ、１００％）を白色固体として得た。
【０３３８】
工程１７．化合物１７０−２の調製
１２−（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）エチルアミノ）−１２−オキソドデカノエート１７０−１（５．５５ｇ、１４．４ミリモル）をメタノール（１００ｍＬ）に０℃で溶解した溶液に、チオニルクロリド（３．３ｍＬ、４５．５ミリモル）を滴下した。続いて、その反応物を室温で一晩攪拌した。ＴＬＣによって、反応の完了が示された。溶媒と揮発性有機物を蒸発させた。続いて、残渣をヘプタンと２回、同時蒸発させて、メチル１２−（２−アミノエチルアミノ）−１２−オキソドデカノエートヒドロクロリド１７０−２を定量的に、白色固体として得た。ＬＣ−ＭＳ （ＥＳＩ）： ｍ／ｚ： ２８７ （１００）， （Ｍ ＋ Ｈ＋， 遊離アミン）
【０３３９】
工程１８．化合物１７０−３の調製
ＴＨＦ（５０ｍＬ）及び水（５０ｍＬ）中の（−）−メチル（Ｓ）−２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−カルボキシレート（５．０１ｇ、３１．２ミリモル）とＬｉＯＨＨ２Ｏ（２．５５ｇ、６０．８ミリモル）を一晩攪拌した。ＴＬＣによって、反応の完了が示された。ＴＨＦを蒸発させ、水性物を１Ｎ  ＨＣｌで酸性にして、ｐＨ＝１にした。これをエチルアセテートで抽出した（５×５０ｍＬ）。合わせた抽出物をＭｇＳＯ４で乾燥した。溶媒を蒸発させて、（Ｓ）−２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−カルボン酸１７０−３（２．９３ｇ、６４．３％）を淡黄色液体として得た。
【０３４０】
工程１９．化合物１７０−４の調製
化合物１７０−４は、１−（２，５−ジオキソピロリジン−１−イル）１２−メチルドデカンジオエート１４６−１の合成で説明した手順と同じ手順を用いて、（Ｓ）−２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−カルボン酸１７０−３とＮ−ヒドロキシスクシンイミドから、８６％の収率で合成した。（Ｓ）−２，５−ジオキソピロリジン−１−イル２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−カルボキシレート１７０−４は、８６％の収率で、白色固体として得た。
【０３４１】
工程２０．化合物１７０−５の調製
メチル１２−（２−アミノエチルアミノ）−１２−オキソドデカノエートヒドロクロリド１７０−２（１４．４ミリモル）と（Ｓ）−２，５−ジオキソピロリジン−１−イル２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−カルボキシレート１７０−４（３．８０ｇ、１５．６ミリモル）をジクロロメタン（１００ｍＬ）に懸濁した懸濁液に、ジクロロメタン（２５ｍＬ）中のトリエチルアミン（６ｍＬ、４３．０ミリモル）を４時間かけて、０℃で加えた。続いて、この反応混合物を室温で一晩攪拌した。ＬＣ−ＭＳによって、出発物質１７０−２が完全に変換されたことが示された。有機層をブライン（５０ｍＬ）、１Ｎ  ＨＣｌ（５０ｍＬ）、ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濃縮乾固して、（Ｓ）−メチル１２−（２−（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−カルボキサミド）エチルアミノ）−１２−オキソドデカノエート１７０−５（５．９３ｇ、９９．３％）を白色固体として得た。
【０３４２】
工程２１．化合物１７０−６の調製
（Ｓ）−メチル１２−（２−（２，２−ジメチル−１，３−ジオキソラン−４−カルボキサミド）エチルアミノ）−１２−オキソドデカノエート１７０−５（５．９３ｇ、１４．３ミリモル）の溶液に、濃硫酸を１滴加えた。これを６時間還流してから、室温まで冷却した。固体をろ過によって回収し、冷メタノールで２回洗浄した。この固体を風乾した（３．３２ｇ）。第２収量（０．４２ｇ）を母液から得て、（Ｓ）−メチル１２−（２−（２，３−ジヒドロキシシプロパンアミド）エチルアミノ）−１２−オキソドデカノエート１７０−６（合わせて３．７４ｇ、６９．４％）を白色結晶として得た。ＬＣ−ＭＳ （ＥＳＩ）： ｍ／ｚ： ３７５ （１００）， （Ｍ ＋ Ｈ＋）． １ＨＮＭＲ （４００ＭＨｚ， ＤＭＳＯ−ｄ６， ｐｐｍ）： δ ７．７９ （ｂｒ， ２Ｈ）， ５．４９ （ｄ， Ｊ ＝ ５．３ Ｈｚ， １Ｈ）， ４．６６ （ｔ， Ｊ ＝ ５．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．８３−３．８８ （ｍ， １Ｈ）， ３．５５−３．６１ （ｍ， ４Ｈ）， ３．４１−３．４７ （ｍ， １Ｈ）， ３．０５−３．１５ （ｍ， ４Ｈ）， ２．２９ （ｔ， Ｊ ＝ ７．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， ２．０３ （ｔ， Ｊ ＝ ７．６ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．４２−１．５２ （ｍ， ４Ｈ）， １．１８−１．２９ （ｍ， １２Ｈ）
【０３４３】
工程２２．化合物１７０の調製
（Ｓ）−メチル１２−（２−（２，３−ジヒドロキシプロパンアミド）エチルアミノ）−１２−オキソドデカノエート１７０−６（２．９９ｇ、７．９９ミリモル）を乾燥ピリジン（５７．５ｍＬ）に窒素下で溶解した溶液に、４，４’−ジメトキシトリチルクロリド（２．８４ｇ、８．３８ミリモル）を一度に加えた。その反応物を室温で２日間攪拌した。メタノール（５ｍＬ）を加えて、その反応物をクエンチした。ピリジンを蒸発させた。トルエンを加えてから、蒸発させた。これを３回繰り返した。水（１００ｍＬ）を加え、これをエチルアセテートで抽出した（５×２５０ｍＬ）。抽出物を合わせ、ＭｇＳＯ４で乾燥した。溶媒を蒸発させてから、カラムクロマトグラフィー（１％メタノール／ジクロロメタン〜３％メタノール／ジクロロメタン）によって、（Ｓ）−メチル１２−（２−（３−（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）−２−ヒドロキシプロパンアミド）エチルアミノ）−１２−オキソドデカノエート１７０（１．７０ｇ、３１．４％）を粘性油として得た。１ＨＮＭＲ （４００ＭＨｚ， アセトン−ｄ６， ｐｐｍ）： δ ７．６４−７．７０ （ｂｒ， １Ｈ）， ７．４７−７．５１ （ｍ， ２Ｈ）， ７．３３−７．３７ （ｍ， ４Ｈ）， ７．２６−７．３２ （ｍ， ２Ｈ）， ７．２０ （ｄｔ， Ｊ ＝ ７．３， ２．１ Ｈｚ， １Ｈ）， ７．１１ （ｂｒ， １Ｈ）， ６．８６ （ｄ， Ｊ ＝ ８．７ Ｈｚ， ４Ｈ）， ４．８４ （ｂｒ， １Ｈ）， ４．２１ （ｄｄ， Ｊ ＝ ５．１， ３．８ Ｈｚ， １Ｈ）， ３．７８ （ｓ， ６Ｈ）， ３．６０ （ｓ， １Ｈ）， ３．２５−３．４２ （ｍ， ６Ｈ）， ２．２８ （ｔ， Ｊ ＝ ７．４ Ｈｚ， ２Ｈ）， １．４８−１．６２ （ｍ， ４Ｈ）， １．２１−１．３４ （ｍ， １２Ｈ）
【０３４４】
スキーム２６．
【化１５２】
2019513770.tif 000156
【０３４５】
工程２３．化合物１３９、１５５、１６０、１６５及び１７０の調製
化合物１３９、１５５、１６０、１６５及び１７０は、化合物１８で用いた手順と同じ手順を用いて、化合物１３８、１５４、１５９、１６４及び１６９から調製した。
【０３４６】
工程２４．コンジュゲート１５３、１５８、１６３、１６８及び１７３の調製
コンジュゲート１５３、１５８、１６３、１６８及び１７３は、化合物１で用いた手順と同じ手順を用いて、化合物１３９、１５４、１５９、１６４及び１６９から調製した。
【０３４７】
実施例１２．コンジュゲート１７６の合成
スキーム２７．
【化１５３】
2019513770.tif 000157
【０３４８】
スキーム２８．
【化１５４】
2019513770.tif 000158
【０３４９】
工程１．メチル１２−アミノドデカノエート１３２の調製
１２−アミノウンデカン酸（１３１）（１０ｇ、４．６４ミリモル）をＭｅＯＨ中で、室温で攪拌した。アセチルクロリド（８５６μＬ、１２ミリモル）を滴下し、その反応物を１．５時間攪拌した。溶媒を真空除去し、残渣をＭＴＢＥに取り込み、冷蔵庫で一晩冷やした。得られた沈殿物をろ過によって回収し、氷冷ＭＴＢＥで洗浄し、高真空下で乾燥して、メチル１２−アミノドデカノエート１３２を得た。
【０３５０】
工程２．メチル１２−（１２−（１０−（（３Ｒ，４Ｓ）−３−（（ビス（４−メトキシフェニル）−（フェニル）メトキシ）メチル）−４−（ヒドロキシメチル）−３，４−ジメチルピロリジン−１−イル）−１０−オキソデカンアミド）ドデカンアミド）ドデカノエート１２９の調製
リチウム１０−（（３Ｒ，４Ｓ）−３−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）メチル）−４−（ヒドロキシメチル）−３，４−ジメチルピロリジン−１−イル）−１０−オキソデカノエート（１２８）（２ｇ、３．１ミリモル）、メチル１２−アミノドデカノエート（１３２）（７７８ｍｇ、３．１ミリモル）、ＨＢＴＵ（１．２ｇ、３．１ミリモル）及びＴＥＡ（１．４ｍＬ、１０ミリモル）をＤＣＭ中で、室温で一晩攪拌した。その沈殿物をろ過によって除去し、ろ液を真空濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィー（５％ＭｅＯＨ、ＤＣＭ）によって精製した。ＴＬＣによって、近くに現れた２つのスポット（質量が同じである）が示され、これらは、幾何異性体とし、合わせてプールして、メチル１２−（１２−（１０−（（３Ｒ，４Ｓ）−３−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）メチル）−４−（ヒドロキシメチル）−３，４−ジメチルピロリジン−１−イル）−１０−オキソデカンアミド）ドデカンアミド）ドデカノエート（１２９）を定量的な形で得た。
【０３５１】
工程３．リチウム１２−（１２−（１０−（（３Ｒ，４Ｓ）−３−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）−メトキシ）メチル）−４−（ヒドロキシメチル）−３，４−ジメチルピロリジン−１−イル）−１０−オキソデカンアミド）−ドデカンアミド）ドデカノエート１３０の調製
メチル１２−（１２−（１０−（（３Ｒ，４Ｓ）−３−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）メチル）−４−（ヒドロキシメチル）−３，４−ジメチルピロリジン−１−イル）−１０−オキソデカンアミド）ドデカンアミド）ドデカノエート（１２９）（３．１ミリモル）をＴＨＦ：Ｈ２Ｏ（５０：５０）中で、ＬｉＯＨ（８８ｍｇ、３．７ミリモル）とともに、室温で一晩攪拌した。ＴＬＣによって反応を確認し、ＴＨＦを真空除去した。水溶液を液体Ｎ２で凍結し、４８時間凍結乾燥して、リチウム１２−（１２−（１０−（（３Ｒ，４Ｓ）−３−（（ビス（４−メトキシフェニル）（フェニル）メトキシ）メチル）−４−（ヒドロキシメチル）−３，４−ジメチルピロリジン−１−イル）−１０−オキソデカンアミド）ドデカンアミド）ドデカノエート１３０を定量的に得た。
【０３５２】
工程４．コンジュゲート１７６の調製
コンジュゲート１７６は、化合物１で用いた手順と同じ手順を用いて、化合物２４及び１３０から調製した。
【０３５３】
実施例１３．コンジュゲート１７９の合成
スキーム２９．
【化１５５】
2019513770.tif 000159
【０３５４】
スキーム３０．
【化１５６】
2019513770.tif 000160
【０３５５】
工程１．化合物８０の調製
化合物２４（２ｇ、０．８６ミリモル）、Ｎ−カルボベンゾキシ−Ｌ−グルタミン酸（１２０ｍｇ、０．４３ミリモル）、ＨＢＴＵ（３２６ｍｇ、０．８６ミリモル）及びＴＥＡ（３５３μＬ、２．６ミリモル）をＤＣＭ中で、室温で一晩攪拌した。この混合物を真空濃縮し、カラムクロマトグラフィーによって精製して、化合物８０を得た（２．８８ｇ、８３％）。
【０３５６】
工程２．化合物８１の調製
化合物８１は、化合物１４で用いた手順と同じ手順を用いて、化合物８０（６７０ｍｇ、０．１７ミリモル）から調製した。次の反応では、この化合物を粗製物で使用し、その収量は、定量的なものとして得られた。
【０３５７】
工程３．コンジュゲート１７９の調製
コンジュゲート１７９は、化合物１で用いた手順と同じ手順を用いて、化合物１８及び８１から調製した。
【０３５８】
実施例１４．コンジュゲート１８２の合成
スキーム３１．
【化１５７】
2019513770.tif 000161
【０３５９】
スキーム３２．
【化１５８】
2019513770.tif 000162
【０３６０】
工程１．化合物９３の調製
化合物９３は、化合物８９で用いた手順と同じ手順を用いて、（２−オキソ−２−フェニル−１λ２−エチル）−Ｄ−グルタミン酸（２．２５ｇ、８．１ミリモル）及び９（１３ｇ、２１ミリモル）から調製した。収量：１１．２ｇ。
【０３６１】
工程２．化合物９４の調製
化合物９４は、化合物９０で用いた手順と同じ手順を用いて、化合物９３（１１．１ｇ）から調製した。収量：１０．２ｇ。
【０３６２】
工程３．コンジュゲート１８２の調製
コンジュゲート１８２は、化合物１で用いた手順と同じ手順を用いて、化合物１８及び９４から調製した。
【０３６３】
実施例１５．コンジュゲート１８５及び１８８の合成
スキーム３３．
【化１５９】
2019513770.tif 000163
【０３６４】
スキーム３４．
【化１６０】
2019513770.tif 000164
【０３６５】
スキーム３５．
【化１６１】
2019513770.tif 000165
【０３６６】
工程１．１４−ヒドロキシ−３，６，９，１２−テトラオキサテトラデシル４−メチルベンゼンスルホネート８２の調製
ペンタエチレングリコール（３５ｇ、１４７ミリモル）、ＴＥＡ（４１ｍＬ、２９４ミリモル）及びトリメチルアミン−ＨＣｌ（１．４ｇ、１４．７ミリモル）をＣＨ２Ｃｌ２（６００ｍＬ）に溶解した溶液をトシルクロリド（２９．４ｇ、１５４ミリモル）で処理した。攪拌後（１８時間）、その反応混合物をＨ２Ｏ−ブライン（１：１）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、濃縮し、クロマトグラフィーにかけて、８２（２４．６ｇ、４３％）を淡黄色油として得た。Ｒｆ０．８（１０％ＣＨ３ＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２）。
【０３６７】
工程２．１４−アジド−３，６，９，１２−テトラオキサテトラデカン−１−オール８３
１４−アジド−３，６，９，１２−テトラオキサテトラデカン−１−オール（８３）は、化合物４で用いた手順と同じ手順を用いて、８２（２４．６ｇ、６２．７ミリモル）及びナトリウムアジド（７．１３ｇ、１１０ミリモル）から調製した。収量：１４．８ｇ、９０％。
【０３６８】
工程３．化合物８４の調製
ＧａｌＮＡｃ６（１２．２ｇ、３１．４ミリモル）とＨＯ−ＰＥＧ−Ｎ３８３（９．２ｇ、３５ミリモル）を１，２−ジクロロエタン（１５０ｍＬ）に溶解した溶液をＳｃ（ＯＴｆ）３（７７１ｍｇ、１．６ミリモル）で処理した。攪拌後（８５℃、２時間）、反応物を冷却し（室温）、ＴＥＡ（４０ｍＬ）を加えることによってクエンチし、濃縮した。この粗物質をクロマトグラフィーにかけて、８４（１１．１６ｇ、６０％）を淡黄色泡状物として得た。Ｒｆ０．７（１０％ＣＨ３ＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２）。
【０３６９】
工程４．化合物８５の調製
８４（１１．１６ｇ、１８．８ミリモル）とＰｄ／Ｃ（１．１ｇ、１０％−湿潤支持体）をＥｔＯＡｃ（１２０ｍＬ）に溶解した溶液をＴＦＡ（４．３２ｍＬ、５６．５ミリモル）で処理し、Ｈ２でパージした。激しく攪拌後（４．５時間）、反応物をＮ２でパージし、セライトろ過し、濃縮した。この粗物質をクロマトグラフィーにかけて、８５（５．７７ｇ、４５％）を無色の泡状物として得た。Ｒｆ０．５（１０％ＣＨ３ＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２）。
【０３７０】
工程５．化合物９５の調製
化合物９５は、化合物９１で用いた手順と同じ手順を用いて、（２−オキソ−２−フェニル−１λ２−エチル）−Ｄ−グルタミン酸（１．０４ｇ、３．７ミリモル）と化合物９４（１０．２ｇ）から調製した。収量：７．２ｇ。
【０３７１】
工程６．化合物９６の調製
化合物９６は、化合物９２で用いた手順と同じ手順を用いて、化合物９５（１１．１ｇ）から調製した。収量：６．５ｇ。
【０３７２】
工程７．化合物９７の調製
化合物９７は、化合物８９で用いた手順と同じ手順を用いて、（２−オキソ−２−フェニル−１λ２−エチル）−Ｄ−グルタミン酸（２ｇ、７．１ミリモル）と８５（１２．１ｇ、１７．８ミリモル）から調製した。収量：１０ｇ、定量的。
【０３７３】
工程８．化合物９８の調製
化合物９８は、化合物９０で用いた手順と同じ手順を用いて、化合物９７（１０ｇ、７．２ミリモル）から調製した。収量：３．５ｇ、３６％。
【０３７４】
工程９．化合物９９の調製
化合物９９は、化合物９１で用いた手順と同じ手順を用いて、（２−オキソ−２−フェニル−１λ２−エチル）−Ｄ−グルタミン酸（３５０ｍｇ、１．２５ミリモル）と化合物９８（２．８６ｍｇ、２．５ミリモル）から定量的に調製した。
【０３７５】
工程１０．化合物１００の調製
化合物１００は、化合物９２で用いた手順と同じ手順を用いて、化合物９９（３．２ｇ、１．２５ミリモル）から定量的に調製した。
【０３７６】
工程１１．コンジュゲート１８５及び１８８の調製
コンジュゲート１８５及び１８８は、化合物１で用いた手順と同じ手順を用いて、化合物１８及び９６、または１８及び１００から調製した。
【０３７７】
実施例１６．コンジュゲート１９１、１９４、１９７及び２００の合成
スキーム３６
【化１６２】
2019513770.tif 000166
【０３７８】
スキーム３７．
【化１６３】
2019513770.tif 000167
【０３７９】
スキーム３８．
【化１６４】
2019513770.tif 000168
【０３８０】
工程１．２−（２−（２−アジドエトキシ）エトキシ）エタン−１−オール８６の調製
２−（２−（２−クロロエトキシ）エトキシ）エタン−１−オール（１３ｇ、７７ミリモル）を水（２００ｍＬ）に溶解した溶液に、ナトリウムアジド（１０ｇ、１５４ミリモル）を加えた。その反応物を１００℃まで１８時間加熱した。その反応物を室温まで冷却し、１Ｌの分液漏斗に入れ、ジクロロメタンで抽出した（３×２００ｍＬ）。合わせたジクロロメタン抽出物を硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、濃縮乾固して、２−（２−（２−アジドエトキシ）エトキシ）エタン−１−オールを無色の油として得た（１１．７ｇ）。
【０３８１】
工程２．化合物８７の調製
化合物８７は、化合物８４で用いた手順と同じ手順を用いて、８６（４．９５ｇ、２８．３ミリモル）と６（１０ｇ、２５．７ミリモル）から調製した。収量：１０ｇ、７７％。
【０３８２】
工程３．化合物８８の調製
化合物８８は、化合物８５で用いた手順と同じ手順を用いて、８７（１０ｇ、１９．８ミリモル）から調製した。収量：７．６３ｇ、６５％。
【０３８３】
工程４．化合物８９の調製
８８（２ｇ、３．３８ミリモル）とＺ−グルタミン酸（４２７ｍｇ、１．５２ミリモル）をＣＨ２Ｃｌ２（５０ｍＬ）に溶解した溶液をＨＢＴＵ（１．４１ｇ、３．７ミリモル）とヒューニッヒ塩基（１．７７ｍＬ、１０．１ミリモル）で処理した。攪拌後（１８時間）、混合物を濃縮し、クロマトグラフィーにかけて、８９（８７１ｍｇ、４８％）を無色の泡状物として得た。Ｒｆ０．５（１０％ＣＨ３ＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２）。
【０３８４】
工程５．化合物９０の調製
８９（８７０ｍｇ、０．７２ミリモル）とＰｄ／Ｃ（９０ｍｇ、１０％−湿潤支持体）をＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）に溶解した溶液をＴＦＡ（８４μＬ、１．１ミリモル）で処理し、Ｈ２でパージした。激しく攪拌後（２時間）、その反応物をＮ２でパージし、セライトろ過し、濃縮した。その粗物質を、さらなる処理をせずに使用し、９０（８５０ｍｇ、定量的）を無色の泡状物として得た。Ｒｆ０．２５（１０％ＣＨ３ＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２）。
【０３８５】
工程６．化合物９１の調製
９０（８５０ｍｇ、０．７２ミリモル）とＺ−グルタミン酸（９１ｍｇ、０．３２ミリモル）をＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）に溶解した溶液をＨＢＴＵ（３００ｍｇ、０．７９ミリモル）とヒューニッヒ塩基（５０２μＬ、２．９ミリモル）で処理した。攪拌後（１．５時間）、その混合物をＣＨ２Ｃｌ２で希釈し、ＮａＨＣＯ３（飽和水溶液）で洗浄し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、濃縮した。この粗物質をクロマトグラフィーにかけて、９１（５９０ｍｇ、７６％）を無色の泡状物として得た。Ｒｆ０．５（１０％ＣＨ３ＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２）。
【０３８６】
工程７．化合物９２の調製
９１（５９０ｍｇ、０．２５ミリモル）とＰｄ／Ｃ（１００ｍｇ、１０％−湿潤支持体）をＣＨ３ＯＨ（３０ｍＬ）に溶解した溶液をＴＦＡ（２９μＬ、０．３７ミリモル）で処理し、Ｈ２でパージした。攪拌後（３時間）、その混合物をＮ２でパージしてから、セライトろ過し、濃縮した。この粗物質を、さらなる処理をせずに使用し、９２（６００ｍｇ、定量的）を無色の泡状物として得た。Ｒｆ０．１（１０％ＣＨ３ＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２）。
【０３８７】
工程８．化合物１０１の調製
化合物１０１は、化合物８９で用いた手順と同じ手順を用いて、（Ｒ）−２−（（２−オキソ−２−フェニル−１１２−エチル）アミノ）ヘキサン二酸（２．５１ｇ、８．６ミリモル）と９（１１ｇ、１７．２ミリモル）から調製した。収量：４．２ｇ、３７％。
【０３８８】
工程９．化合物１０２の調製
化合物１０２は、化合物９０で用いた手順と同じ手順を用いて、化合物１０１（４．２ｇ、３．２ミリモル）から調製した。収量：２．１ｇ、４７％。
【０３８９】
工程１０．化合物１０３の調製
化合物１０３は、化合物９１で用いた手順と同じ手順を用いて、（Ｒ）−２−（（２−オキソ−２−フェニル−１１２−エチル）アミノ）ヘキサン二酸（２６５ｍｇ、０．９ミリモル）と化合物１０２（２．１ｇ、１．８ミリモル）から調製した。収量：（５６０ｍｇ、２４％）。
【０３９０】
工程１１．化合物１０４の調製
化合物１０４は、化合物９２で用いた手順と同じ手順を用いて、化合物１０３（５６０ｍｇ）から定量的に調製した。この化合物は、精製せずに使用した。
【０３９１】
工程１２．コンジュゲート１９１、１９４、１９７及び２００の調製
コンジュゲート１９１、１９４、１９７及び２００は、化合物１で用いた手順と同じ手順を用いて、化合物１２８及び９２、９６、１００または１０４から調製した。
【０３９２】
実施例１７．コンジュゲート２０３及び２０６の合成
スキーム３９．
【化１６５】
2019513770.tif 000169
【０３９３】
工程１．化合物６９ｂの調製
化合物６９ｂは、化合物６９で用いた手順と同じ手順を用いて、（２Ｓ，４Ｒ）−４−ヒドロキシピロリジン−２−カルボン酸から調製した。
【０３９４】
工程２．コンジュゲート２０３及び２０６の調製
コンジュゲート２０３及び２０６は、化合物１で用いた手順と同じ手順を用いて、化合物９６及び１００から調製した。
【０３９５】
実施例１８．コンジュゲート２０７の合成
スキーム４０．
【化１６６】
2019513770.tif 000170
【０３９６】
工程１．コンジュゲート２０９の調製
コンジュゲート２０９は、化合物１で用いた手順と同じ手順を用いて、化合物９６及び１６０から調製した。
【０３９７】
実施例１９．コンジュゲート２１２及び２１５の合成
スキーム４１．
【化１６７】
2019513770.tif 000171
【０３９８】
スキーム４２．
【化１６８】
2019513770.tif 000172
【０３９９】
工程１．ジメチル５−（２−（（２−オキソ−２−フェニル−１λ２−エチル）アミノ）アセトアミド）イソフタレート１０５の調製
ジメチル５−アミノイソフタレート（５ｇ、２４ミリモル）、Ｚ−Ｇｌｙ−ＯＨ（５ｇ、２４ミリモル）、ＥＤＣ（５ｇ、２６．３ミリモル）、ＨＯＢｔ（３．６ｇ、２６．３ミリモル）、ＮＭＭ（２．９ｍＬ、２６．３ミリモル）をＤＭＦ（５０ｍＬ）に溶解した溶液を一晩、室温で攪拌した。完了したら、その反応混合物をエチルアセテート（２５０ｍＬ）で希釈し、それぞれ１Ｍ  ＨＣｌ（２×１００ｍＬ）、飽和炭酸水素ナトリウム（１×１００ｍＬ）及びブライン（２×１００ｍＬ）で洗浄した。硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過し、濃縮乾固して、ジメチル５−（２−（（２−オキソ−２−フェニル−１λ２−エチル）アミノ）アセトアミド）イソフタレートを無色の固体として得た（７．２ｇ、７９％）。
【０４００】
工程２．５−（２−（（２−オキソ−２−フェニル−１λ２−エチル）アミノ）アセトアミド）イソフタル酸１０６の調製
メチル５−（２−（（２−オキソ−２−フェニル−１λ２−エチル）アミノ）アセトアミド）イソフタレート（７．２ｇ）をメタノール（２５ｍＬ）とＴＨＦ（２５ｍＬ）に溶解した溶液に、１Ｍ  ＮａＯＨ（２５ｍＬ）を加えた。この溶液を室温で２時間攪拌してから、濃縮して、ＴＨＦとＭｅＯＨを除去した。残った水溶液を水（７５ｍＬ）で希釈し、氷水浴で冷却し、６Ｍ  ＨＣｌで酸性にし、ｐＨ＝１とした。この固体をろ過し、水で洗浄した（３×１００ｍＬ）。この固体を凍結乾燥して、５−（２−（（２−オキソ−２−フェニル−１λ２−エチル）アミノ）アセトアミド）−イソフタル酸を得た（６．９ｇ、定量的）。
【０４０１】
工程３．化合物１０７の調製
化合物１０７は、化合物９５で用いた手順と同じ手順を用いて、５−（２−（（２−オキソ−２−フェニル−１λ２−エチル）アミノ）アセトアミド）イソフタル酸１０６（２００ｍｇ、０．５４ミリモル）と９４（１．７ｇ、１．３ミリモル）から調製した。収量：６００ｍｇ。
【０４０２】
工程４．化合物１０８の調製
化合物１０８は、化合物９６で用いた手順と同じ手順を用いて、化合物１０７（６００ｍｇ）から調製した。収量：６５０ｍｇ、定量的。
【０４０３】
工程５．化合物１０９の調製
化合物１０９は、化合物９９で用いた手順と同じ手順を用いて、５−（２−（（２−オキソ−２−フェニル−１λ２−エチル）アミノ）アセトアミド）イソフタル酸１０６（１８０ｍｇ、０．４８ミリモル）と９８（１．５ｇ、１．１ミリモル）から調製した。収量：９００ｍｇ。
【０４０４】
工程６．化合物１１０の調製
化合物１１０は、化合物１００で用いた手順と同じ手順を用いて、化合物１０９（９００ｍｇ）から調製した。収量：９２０ｍｇ、定量的。
【０４０５】
工程７．コンジュゲート２１２及び２１５の調製
コンジュゲート２１２及び２１５は、化合物１で用いた手順と同じ手順を用いて、化合物１２８及び１０８または１１０から調製した。
【０４０６】
実施例２０．コンジュゲート２１８及び２２１の合成
スキーム４３．
【化１６９】
2019513770.tif 000173
【０４０７】
スキーム４４．
【化１７０】
2019513770.tif 000174
【０４０８】
工程１．化合物１１１の調製
化合物１１１は、化合物８９で用いた手順と同じ手順を用いて、４−（（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）メチル）フタル酸（１．１３ｇ、３．８４ミリモル）と８８（５ｇ、８．４４ミリモル）から調製した。収量：２．２１ｇ、４９％。
【０４０９】
工程２．化合物１１２の調製
１１１（２．２１ｇ、１．８７ミリモル）をＣＨ２Ｃｌ２（４０ｍＬ）に溶解した溶液をＴＦＡ（５ｍＬ）でゆっくり処理した。攪拌後（２時間）、その混合物を濃縮し、クロマトグラフィーにかけて、１１２（１．０８ｇ、４７％）を無色の泡状物として得た。Ｒｆ０．１（１０％ＣＨ３ＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２）。
【０４１０】
工程３．化合物１１３の調製
化合物１１３は、化合物９１で用いた手順と同じ手順を用いて、化合物１１２（１．０８ｇ、０．８８ミリモル）と（２−オキソ−２−フェニル−１λ２−エチル）−Ｄ−グルタミン酸（１１２ｍｇ、０．３９ミリモル）から調製した。収量：６００ｍｇ、６２％。
【０４１１】
工程４．化合物１１４の調製
化合物１１４は、化合物９２で用いた手順と同じ手順を用いて、化合物１１３から調製した。
【０４１２】
工程５．化合物１１５の調製
化合物１１５は、化合物９３で用いた手順と同じ手順を用いて、４−（（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）メチル）フタル酸（３．９４ｇ、１３．３ミリモル）と９（１８．２ｇ、２９．４ミリモル）から調製した。収量：９．０２ｇ、５３％。
【０４１３】
工程６．化合物１１６の調製
化合物１１６は、化合物１１２で用いた手順と同じ手順を用いて、化合物１１５（８ｇ、６．３ミリモル）から調製した。収量：３．２３ｇ、３９％。
【０４１４】
工程７．化合物１１７の調製
化合物１１７は、化合物９５で用いた手順と同じ手順を用いて、化合物１１６（３．２３ｇ、２．４５ミリモル）と（２−オキソ−２−フェニル−１λ２−エチル）−Ｄ−グルタミン酸（１９２ｍｇ、１．１ミリモル）から調製した。収量：２．２２ｇ、３４％。
【０４１５】
工程８．化合物１１８の調製
化合物１１８は、化合物９６で用いた手順と同じ手順を用いて、化合物１１７（２．２２ｇ、０．８４ミリモル）から調製した。収量：２．０２ｇ、９１％。
【０４１６】
工程９．コンジュゲート２１８及び２２１の調製
コンジュゲート２１８及び２２１は、化合物１で用いた手順と同じ手順を用いて、化合物１２８及び１１４または１１８から調製した。
【０４１７】
実施例２１．コンジュゲート２２４の合成
スキーム４５．
【化１７１】
2019513770.tif 000175
【０４１８】
工程１．化合物２２４の調製
コンジュゲート２２４は、化合物１で用いた手順と同じ手順を用いて、化合物９６及び１３０から調製した。
【０４１９】
実施例２２：コンジュゲート２３１の合成
スキーム４６
【化１７２】
2019513770.tif 000176
【０４２０】
スキーム４７
【化１７３】
2019513770.tif 000177
【０４２１】
工程１：化合物２２５の調製
化合物２２５は、８９で用いた手順と同じ手順を用いて、５−（２−アミノアセトアミド）イソフタル酸１０６（５６０ｍｇ、１．５ミリモル）と９（２．２４ｇ、３．６ミリモル）から調製した。収量：１．６ｇ、８０％。
【０４２２】
工程２：化合物２２６の調製
化合物２２６は、１４と同じ方式で調製した。収量１．２２ｇ、７８％。
【０４２３】
工程３：化合物２２７の調製
化合物２２７は、８９と同じ方式で、Ｚ−グルタミン酸（１０８ｍｇ、０．３８ミリモル）と２２６（１．２２ｇ、０．９２ミリモル）から調製した。収量４７１ｍｇ、４５％。
【０４２４】
工程４：化合物２２８の調製
化合物２２８は、１４と同じ方式で調製した。収量４６０ｍｇ、定量的。
【０４２５】
工程５：化合物２２９の調製
化合物２２９は、８９と同じ方式で、２２８（４６０ｍｇ、０．１７ミリモル）と１２８（１２５ｍｇ、０．１９ミリモル）から調製した。収量３６５ｍｇ、６６％。
【０４２６】
工程６：化合物２３１の調製
コンジュゲート２３１は、化合物１で用いた手順と同じ手順を用いて調製した。
【０４２７】
実施例２３．コンジュゲート２３３の合成
スキーム４８
【化１７４】
2019513770.tif 000178
【０４２８】
工程１．化合物２３２の調製
化合物２３２は、化合物１９で用いた手順と同じ手順を用いて、化合物２４（６５０ｍｇ、０．３３ミリモル）と化合物６９ｂ（１７５ｍｇ、０．３３ミリモル）から調製した。収量：３８０ｍｇ、４７％。
【０４２９】
工程２．化合物２３３の調製
化合物２３３は、化合物１で用いた手順と同じ手順を用いて、化合物２３２から調製した。
【０４３０】
実施例２４．コンジュゲート２３５の合成
スキーム４９
【化１７５】
2019513770.tif 000179
【０４３１】
工程１．化合物２３４の調製
化合物２３４は、化合物１９で用いた手順と同じ手順を用いて、化合物２４（１．１ｇ、０．５５ミリモル）と化合物１８（１７５ｍｇ、０．３３ミリモル）から調製した。収量：６８５ｍｇ、５１％。
【０４３２】
工程２．化合物２３５の調製
化合物２３５は、化合物１で用いた手順と同じ手順を用いて、化合物２３４から調製した。
【０４３３】
実施例２５．ＧａｌＮＡｃ−ｓｉＴＴＲコンジュゲートのインビトロ評価とインビボ評価
ＧａｌＮＡｃ−ｓｉＴＴＲコンジュゲートの水和：
化合物１の構造を有するＧａｌＮＡｃ−ｓｉＴＴＲコンジュゲートでは、
【化１７６】
2019513770.tif 000180
（ＧａｌＮＡｃ）（配列番号３１）のセンス鎖と、
【化１７７】
2019513770.tif 000181
（配列番号３２）のアンチセンス鎖（５’から３’方向で記載）というｓｉＲＮＡ配列を有するオリゴヌクレオチドが用いられている。前者のケースでは、下線部は２’−Ｏメチル糖修飾であり、後者のケースでは、２’−フルオロ糖修飾である。アスタリスク（＊）は、ホスホロチオエート（ＰＳ）結合を表している。試験で使用する前に、コンジュゲートをＰＢＳで水和し、ＮａｎｏＤｒｏｐという計器を用いて、Ａ２６０の値について定量した。
【０４３４】
ＧａｌＮＡｃ−ｓｉＴＴＲコンジュゲートのインビトロでの比較：
標準的な手順を用いて、初代肝細胞をＣ５７  Ｂｌ／６雌マウスから単離した。単離したら、その肝細胞を９６ウェルＰｒｉｍａｒｉａプレートに、２．７５×１０４細胞／ウェルで、１０％ＦＢＳを含むＷｉｌｌｉａｍｓ  Ｍｅｄｉａ  Ｅ（ＷＭＥ）中に播種した。４時間後、残りの実験に備えて、ＦＢＳを含まないＷＭＥに、培地を交換した。翌日、新鮮なＷＭＥを９０μＬ、細胞に加えた。ｓｉＲＮＡコンジュゲートのストックをＰＢＳ中で、１００μｇ／ｍＬの濃度で調製した。ＷＭＥで段階希釈を行った（１：２）（５０μＬのコンジュゲート希釈液＋５０μＬのＷＭＥ）。続いて、コンジュゲート希釈液を１０μＬずつ、Ｐｒｉｍａｒｉａプレートにトリプリケートで移し、肝細胞におけるコンジュゲート終濃度を５μｇ／ｍＬ、２．５μｇ／ｍＬ、１．２５μｇ／ｍＬ、０．６２５μｇ／ｍＬ、０．３１２μｇ／ｍＬ、０１５６μｇ／ｍＬ及び０．０７８μｇ／ｍＬとした。ＰＢＳのＷＭＥでの段階希釈液をネガティブコントロールとした。細胞を２４時間、３７℃、５％ＣＯ２でインキュベートした。続いて、トランスフェクション培地を除去し、２００μＬの１×ＬＷＲ（プロテイナーゼＫを０．５ｍｇ／ｍＬ含む）を加えることによって、細胞を溶解した。そのプレートを凍結−解凍して（６０分サイクル、−８０℃／５２℃）、細胞の溶解を助けた。続いて、ＱｕａｎｔｉＧｅｎｅ２．０  Ａｓｓａｙをメーカーの指示に従って用いて、得られた溶解液のマウスＴＴＲ及びＧＡＰＤのｍＲＮＡレベルを解析した。ＧＡＰＤ  ｍＲＮＡに対して標準化した、ＴＴＲ  ｍＲＮＡの相対濃度を割り出して、プロットした。コンジュゲートで処理した細胞では、標的ｍＲＮＡの顕著なノックダウンが見られた。
【０４３５】
ＧａｌＮＡｃ−ｓｉＴＴＲコンジュゲートのインビボでの比較：
雌Ｃ５７ＢＬ／６マウス（ｎ＝４）をＰＢＳまたはＧａｌＮＡｃ−ｓｉＴＴＲコンジュゲート（ＰＢＳで０．１ｍｇ／ｍＬまで希釈して、１ｍｇ／ｋｇの用量で、またはＰＢＳで０．２ｍｇ／ｍＬまで希釈して、２ｍｇ／ｋｇの用量で、コンジュゲートをマウスに投与した）で皮下（肩甲骨領域）処置した。２日目、４日目、５日目、７日目、８日目、９日目、１１日目、１４日目、２１日目（テイルニック）と、２８日目（末梢）に血液を採取し、ＥＬＩＳＡによって、得られた血漿をＴＴＲタンパク質について解析した。ＰＢＳコントロールに対するＴＴＲ血漿タンパク質の値は、表に示されている（表１及び２。図７及び８を参照されたい）。コンジュゲートで処置したマウスでは、標的のｍＲＮＡとタンパク質の顕著なノックダウンが見られた。
【図１】
2019513770.tif 000248
【図２】
2019513770.tif 000249
【図３】
2019513770.tif 000250
【図４】
2019513770.tif 000251
【図５】
2019513770.tif 000252
【図６】
2019513770.tif 000253
【図７】
2019513770.tif 000254
【図８】
2019513770.tif 000255
【配列表】
2019513770000001.app
【国際調査報告】
2019513770.tif 000256
2019513770.tif 000257
2019513770.tif 000258
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