(57)【要約】  エストロゲン受容体β選択的リガンドは、構造１に従う化合物であってよく：    【化１】2019524864.tif 000074  式中、ｍは、０、１、または２であり、Ｒは、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ５アルキル基、ビニル、ＣＦ３、ＣＨ２ＣＨ２Ｆ、ＣＨ２ＣＨＦ２、またはＣＨ２ＣＦ３である。組成物（例えば製薬または化粧用組成物）は、局所投与のために調剤された、有効量の構造１に従う化合物と、生理学的に許容可能な担体、希釈剤、または賦形剤と、を含み得る。方法（例えば、治療または化粧方法）は、必要とする患者に、有効量の、構造１に従う化合物、または構造１を含む組成物を投与することを含み得る。投与は、（例えば、皮膚、頭皮、または粘膜への）局所的なものであってよい。
2019524864.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
構造１：
【化１】
2019524864.tif 000057
に従う化合物において、
式中、ｍは、０、１、または２であり、Ｒは、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ５アルキル基、ビニル、ＣＦ３、ＣＨ２ＣＨ２Ｆ、ＣＨ２ＣＨＦ２、またはＣＨ２ＣＦ３である、化合物。
【請求項２】
ｍは０であり、Ｒは、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ペンチル、ネオペンチル、ビニル、ＣＦ３、ＣＨ２ＣＨ２Ｆ、ＣＨ２ＣＨＦ２、またはＣＨ２ＣＦ３である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
構造２：
【化２】
2019524864.tif 000058
に従う、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
構造３：
【化３】
2019524864.tif 000059
に従う、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
構造４：
【化４】
2019524864.tif 000060
に従う、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
構造５：
【化５】
2019524864.tif 000061
に従う、請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
構造６：
【化６】
2019524864.tif 000062
に従う、請求項１に記載の化合物。
【請求項８】
構造７：
【化７】
2019524864.tif 000063
に従う、請求項１に記載の化合物。
【請求項９】
構造８：
【化８】
2019524864.tif 000064
に従う、請求項１に記載の化合物。
【請求項１０】
構造９：
【化９】
2019524864.tif 000065
に従う、請求項１に記載の化合物。
【請求項１１】
構造１０：
【化１０】
2019524864.tif 000066
に従う、請求項１に記載の化合物。
【請求項１２】
構造１１：
【化１１】
2019524864.tif 000067
に従う、請求項１に記載の化合物。
【請求項１３】
構造１２：
【化１２】
2019524864.tif 000068
に従う、請求項１に記載の化合物。
【請求項１４】
構造１３：
【化１３】
2019524864.tif 000069
に従う、請求項１に記載の化合物。
【請求項１５】
構造１４：
【化１４】
2019524864.tif 000070
に従う、請求項１に記載の化合物。
【請求項１６】
構造１５：
【化１５】
2019524864.tif 000071
に従う、請求項１に記載の化合物。
【請求項１７】
構造１６：
【化１６】
2019524864.tif 000072
に従う、請求項１に記載の化合物。
【請求項１８】
構造１７：
【化１７】
2019524864.tif 000073
に従う、請求項１に記載の化合物。
【請求項１９】
ＥＲαと比較したエストロゲン受容体亜型ＥＲβに対する前記化合物の親和力の比率は、少なくとも約２、５、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、または１０００である、請求項１に記載の化合物。
【請求項２０】
請求項１〜１９のいずれか一項に記載の実質的に鏡像異性的に純粋な化合物を含む、組成物。
【請求項２１】
他のエストロゲン化合物を実質的に含まない、請求項１〜１９のいずれか一項に記載の化合物を含む組成物。
【請求項２２】
局所投与のために調剤された、有効量の請求項１〜１９のいずれか一項に記載の化合物と、生理学的に許容可能な担体、希釈剤、または賦形剤と、を含む、組成物。
【請求項２３】
前記組成物は、皮膚に局所投与されるように調剤されている、請求項２２に記載の組成物。
【請求項２４】
前記組成物は、粘膜に局所投与されるように調剤されている、請求項２２に記載の組成物。
【請求項２５】
請求項１〜１８のいずれか一項に記載の実質的に鏡像異性的に純粋な化合物を含む、請求項２２に記載の組成物。
【請求項２６】
前記組成物は、他のエストロゲン化合物を実質的に含まない、請求項２２に記載の組成物。
【請求項２７】
前記化合物は、ａ）構造４、１６、もしくは１７（式中Ｒ＝Ｈ）、またはｂ）構造５もしくは１３ではない、請求項１に記載の化合物。
【請求項２８】
前記化合物は、１６βエストラジオールカルボン酸エステルである、請求項１に記載の化合物。
【発明の詳細な説明】
【開示の内容】
【０００１】
本出願は、２０１６年８月２２日出願の米国仮特許出願第６２／３７８，０１４号および同第６２／３７８，０１５号の優先権を主張し、それらの内容は参照により全体として本明細書に組み込まれる。
【０００２】
〔発明の分野〕
本発明は、概して、エストロゲン受容体β選択的リガンドに関し、さまざまな実施形態では、より具体的には、１６β−置換エストラジオール誘導体に関する。エストロゲン受容体β選択的リガンドは、治療および／または薬用化粧品に使用するため局所塗布されるように調剤され得る。
【０００３】
〔背景〕
エストロゲンに基づく療法（例えば、ホルモン補充療法、すなわちＨＲＴ、経口避妊薬など）は、一般的であり、概ね有効であると考えられている。しかしながら、大部分の全身系のエストロゲンに基づく療法は、癌および卒中を含む副作用が知られている。エストロゲン療法は、直接的または間接的に、多数の器官に影響を及ぼし、エストロゲン療法に付随する結果のいくつかは、有害である。場合によっては、望ましくない影響は、全身投与よりも局所投与によって緩和され得る。しかしながら、局所エストロゲンであっても、依然として血流に入り、全身性の影響を及ぼし得る。したがって、副作用および的外れの影響が少ない、改善された局所選択的なエストロゲンに基づく療法への必要性が残っている。
【０００４】
〔発明の概要〕
本発明は、特定の合成１６βエストラジオールが選択的エストロゲン受容体β（ＥＲβ）アゴニストであり、また、これらの１６βエストラジオールが、実質的に全身送達または副作用なしで、局所（例えば局部）投与に有効であるという発見に、少なくとも部分的に基づいている。したがって、ＥＲβ選択的リガンドは、（αと比べて）ＥＲβに富む組織を選択的に標的化するのに使用され得る。例えば、化合物は、局所塗布され、皮膚、毛髪、血管、および粘膜にエストロゲン効果を生じるのに使用され得る。
【０００５】
さまざまな態様および実施形態では、本発明は、構造１に従う化合物を提供し：
【化１】
2019524864.tif 000003
式中、ｍは、０、１、または２であり、Ｒは、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ５アルキル基、ビニル、ＣＦ３、ＣＨ２ＣＨ２Ｆ、ＣＨ２ＣＨＦ２、またはＣＨ２ＣＦ３である。
【０００６】
さまざまな態様および実施形態では、本発明は、局所投与のために調剤された、有効量の本発明による化合物（例えば、構造１〜１７のうちのいずれか１つ以上）と、生理学的に許容可能な担体、希釈剤、または賦形剤と、を含む、組成物を提供する。
【０００７】
さまざまな態様および実施形態では、本発明は、必要とする患者に、有効量の本発明による化合物（例えば、構造１〜１７のうちのいずれか１つ以上）、またはそれを含む組成物を投与することを含む、方法を提供する。
【０００８】
さまざまな態様および実施形態では、本発明は、患者を治療する方法を提供し、これは、必要とする患者に、本発明の化合物または組成物を投与し、それによって患者を治療することを含む。
【０００９】
さまざまな態様および実施形態では、本発明は、エストロゲン受容体亜型ＥＲβのための選択的アゴニストとして、構造１〜１７のうちのいずれか１つに従う化合物を使用する方法を提供する。
【００１０】
当業者には理解されるように、前述した態様および実施形態のうちのいずれも、以下の特徴のうちの任意の１つ以上と組み合わせることができる。
【００１１】
さまざまな実施形態では、ｍは０であり、Ｒは、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ペンチル、ネオペンチル、ビニル、ＣＦ３、ＣＨ２ＣＨ２Ｆ、ＣＨ２ＣＨＦ２、またはＣＨ２ＣＦ３である。
【００１２】
さまざまな実施形態では、ｍは０であり、Ｒは、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ペンチル、ネオペンチル、ビニル、ＣＦ３、ＣＨ２ＣＨ２Ｆ、ＣＨ２ＣＨＦ２、またはＣＨ２ＣＦ３である。
【００１３】
さまざまな実施形態では、ｍは１であり、Ｒは、Ｃ１もしくはＣ３〜Ｃ５アルキル基、ビニル、ＣＦ３、ＣＨ２ＣＨ２Ｆ、ＣＨ２ＣＨＦ２、またはＣＨ２ＣＦ３である。
【００１４】
さまざまな実施形態では、ｍは２である。
【００１５】
さまざまな実施形態では、化合物は以下のとおりである：
【化２】
2019524864.tif 000004
【００１６】
さまざまな実施形態では、化合物は以下のとおりである：
【化３】
2019524864.tif 000005
【００１７】
さまざまな実施形態では、化合物は以下のとおりである：
【化４】
2019524864.tif 000006
【００１８】
さまざまな実施形態では、化合物は以下のとおりである：
【化５】
2019524864.tif 000007
【００１９】
さまざまな実施形態では、化合物は以下のとおりである：
【化６】
2019524864.tif 000008
【００２０】
さまざまな実施形態では、化合物は以下のとおりである：
【化７】
2019524864.tif 000009
【００２１】
さまざまな実施形態では、化合物は以下のとおりである：
【化８】
2019524864.tif 000010
【００２２】
さまざまな実施形態では、化合物は以下のとおりである：
【化９】
2019524864.tif 000011
【００２３】
さまざまな実施形態では、化合物は以下のとおりである：
【化１０】
2019524864.tif 000012
【００２４】
さまざまな実施形態では、化合物は以下のとおりである：
【化１１】
2019524864.tif 000013
【００２５】
さまざまな実施形態では、化合物は以下のとおりである：
【化１２】
2019524864.tif 000014
【００２６】
さまざまな実施形態では、化合物は以下のとおりである：
【化１３】
2019524864.tif 000015
【００２７】
さまざまな実施形態では、化合物は以下のとおりである：
【化１４】
2019524864.tif 000016
【００２８】
さまざまな実施形態では、化合物は以下のとおりである：
【化１５】
2019524864.tif 000017
【００２９】
さまざまな実施形態では、化合物は以下のとおりである：
【化１６】
2019524864.tif 000018
【００３０】
さまざまな実施形態では、化合物は以下のとおりである：
【化１７】
2019524864.tif 000019
【００３１】
特定の実施形態では、化合物は以下を含まない：ｍ＝０およびＲ＝Ｈ；ｍ＝０およびＲ＝ＣＨ３；ｍ＝１およびＲ＝ＣＨ３；ならびに／またはｍ＝１およびＲ＝ＣＨ２ＣＨ３。
【００３２】
いくつかの実施形態では、化合物は構造４、１６、または１７（式中Ｒ＝Ｈ）ではない。特定の他の実施形態では、化合物は構造５または１３ではない。
【００３３】
さまざまな実施形態では、化合物は、１６βエストラジオールカルボン酸エステルである。
【００３４】
さまざまな実施形態では、化合物は単離されている（例えば、実質的に鏡像異性的に純粋である）。したがって、特定の実施形態では、組成物は、単離された（例えば、実質的に鏡像異性的に純粋な）化合物のみを、有効活性成分として含む。組成物は、他のエストロゲン化合物、例えば鏡像異性体、特に、１６α鏡像異性体を実質的に含まなくてよい。
【００３５】
さまざまな実施形態では、化合物は、ＥＲαと比べてＥＲβに対して選択的である。（ＥＲβをＥＲαと比較した）エストロゲン受容体亜型に対する親和力の比率は、少なくとも約２、５、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、または１０００であってよい。
【００３６】
さまざまな実施形態では、組成物は、皮膚への（例えば、顔、頭皮、首、デコルテ、胸、腕、手、足などへの）局所投与に使用され、かつ特にそのために調剤され得る。
【００３７】
特定の実施形態では、組成物は、粘膜への局所投与のために調剤される。一実施形態では、組成物は、膣投与のために調剤される。別の実施形態では、組成物は、鼻投与のために調剤される。さらに別の例示的な実施形態では、組成物は、直腸投与のために調剤される。一実施形態では、組成物は、眼球投与のために調剤される。
【００３８】
さまざまな実施形態では、化合物または組成物が投与される患者は、哺乳動物である。例えば、患者はヒトであってよい。患者は、ヒト以外の霊長類の動物であってよい。さまざまな実施形態では、患者は、エストロゲン受容体、好ましくはＥＲβを有する動物である。患者は、女性または男性であってよい。特定の実施形態では、患者はヒトの女性である。
【００３９】
特定の実施形態では、患者は、エストロゲン欠乏または不均衡を有する。欠乏または不均衡は、例えば閉経期もしくは閉経後の女性または閉経前もしくは閉経期前後の女性における、加齢に関連し得る。
【００４０】
特定の実施形態では、本発明の組成物（さまざまな調剤を含む）は、エストロゲン欠乏または不均衡に関連する、臨床的に認識された疾患または状態について、医師によって、処方に使用され、また、処方され得る。あるいは、この組成物は、裁量的な使用または化粧用の使用のため、処方箋なしで入手可能であってよい（または、皮膚科医などの医師によって処方され得る）。
【００４１】
さまざまな実施形態では、投与は局所的である。局所投与は、前述したように、皮膚または粘膜に対するものである。
【００４２】
さまざまな実施形態では、化合物は、実質的に全身系の影響なしに作用する（例えば、投与部位で、かつ／またはその近位で作用するが、実質的に循環に入らず、かつ／または投与部位より遠位では組織に影響しない）。
【００４３】
さまざまな実施形態では、化合物は、実質的に的外れの影響なしに作用する（例えば、標的組織に影響するが、他の組織には影響しない）。
【００４４】
さまざまな実施形態では、治療は化粧用または薬用化粧用のものである。
【００４５】
さまざまな実施形態では、ＥＲβは、化合物を患者に投与することによって選択的に標的化される。
【００４６】
さまざまな実施形態では、患者は、エストロゲン欠乏または不均衡に関連する疾患または状態を有する。
【００４７】
さまざまな実施形態では、エストロゲン欠乏または不均衡は、対立しないアンドロゲン（unopposed androgens）によるものである。
【００４８】
さまざまな実施形態では、疾患または状態は、発毛に関する。
【００４９】
本発明は、薬剤として使用される、前述した態様および実施形態のうちのいずれかによる組成物も特徴とする。さまざまな実施形態では、薬剤は、局所投与用であってよく、化合物の全身送達を実質的に回避し得る。
【００５０】
本テクノロジーのこれらおよび他の利点は、添付図面および以下の説明を参照すれば、明らかとなるであろう。本発明は、多くの異なる形態の実施形態を含むが、それらは、図面に示され、本明細書中、詳細ないくつかの特定の実施形態で説明されており、本開示が、テクノロジーの原理の例示とみなされるものであり、本発明を例示される実施形態に制限することは意図されていないことが、理解される。
【００５１】
〔詳細な説明〕
本発明は、特定の合成１６βエストラジオールが選択的ＥＲβアゴニストであり、これらの１６βエストラジオールが、実質的に全身送達または対応する副作用なしで、局所（例えば局部）投与に有効であるという発見に、少なくとも部分的に基づいている。したがって、ＥＲβ選択的リガンドは、（αと比べて）ＥＲβに富む組織を選択的に標的化するのに使用され得る。例えば、化合物は、局所的に塗布され、皮膚（例えば頭皮）、毛髪、血管、および粘膜にエストロゲン効果を生じるのに使用され得る。
【００５２】
老化する皮膚は、閉経後の女性におけるエストロゲン欠乏に関係している（Draelos Z. D. Topical and oral estrogens revisited for antiaging purposes. Fertil Steril 84, 291-292 (2005)；Thornton M. J. Estrogens and aging skin. Dermato-Endocrinology 5, 264-270 (2013)）。エストロゲン受容体β（ＥＲβ）は、ヒトの皮膚において優位なエストロゲン受容体である（Thornton M. J. et al. Estrogen receptor beta is the predominant oestrogen receptor in human scalp skin. Exp Dermatol 12, 181-190 (2003)；Pelletier G. & Ren L. Localization of sex steroid receptors in human skin. Histol Histopathol 19, 629-636 (2004)；Beier K., Ginez I. & Schaller H. Localization of steroid hormone receptors in the apocrine sweat glands of the human axilla. Histochem Cell Biol 123, 61-65 (2005)）。本発明は、ＥＲβ−選択的エストロゲンリガンドを提供し、これは、例えば、全身系の影響を最小限にして、局所的に（例えば、皮膚、粘膜などにおいて）エストロゲン欠乏を治療するために使用され得る。したがって、本発明は、エストロゲン受容体α（ＥＲα）およびＥＲβに対して非特異的である、内因性エストロゲンリガンド、例えばエストラジオール、エストロン、およびエストリオール（ならびに大部分の合成エストロゲン）とは区別される（Kuiper G. G. J. M. et al. Comparison of the Ligand Binding Specificity and Transcript Tissue Distribution of Estrogen Receptors α and β. Endocrinology 138, (1997)）。
【００５３】
エストラジオールのＣ１６位での化学的修飾は、いくつかの１６α誘導体がエストロゲン様であることを示している（Reiner G. C. A., Katzenellenbogen B. S., Bindal R. D. & Katzenellenbogen J. A. Biological Activity and Receptor Binding of a Strongly Interacting Estrogen in Human Breast Cancer Cells. Cancer Res 44, 2302-2308 (1984)、Fevig T. L., Mao M. K. & Katzenellenbogen J. A. Estrogen Receptor Binding Tolerance of 16α-Substituted Estradiol Derivatives. Steroids 51, 471-497 (1988)、Labaree D. C., Reynolds T. Y. & Hochberg R. B. Estradiol-16α-carboxylic Acid Esters as Locally Active Estrogens. J Med Chem 44, 1802-1814 (2001)）。局所使用を意図した一連のエストラジオール−１６α−アルキルエステルは、ＥＲαへの優先結合を示すと思われた（Labaree D. C., Reynolds T. Y. & Hochberg R. B. Estradiol-16α-carboxylic Acid Esters as Locally Active Estrogens. J Med Chem 44, 1802-1814 (2001)）。ＥＲαは、皮膚ではあまり発現せず、ＥＲαリガンドは、乳癌および子宮内膜癌に関わっている（Liao X-H. et al. Estrogen receptor α mediates proliferation of breast cancer MCF-7 cells via a p21/PCNA/E2F1-dependent pathway. FEBS Journal 281, 927-942 (2013)、Bender D., Buekers T. & Leslie K. K. Hormones and Receptors in Endometrial Cancer. Proceedings in Obstetrics and Gynecology 2, 1-25 (2011)）。
【００５４】
エストラジオールのＣ１６への化学的修飾は、エストロンをエストラジオールに変換する酵素１７β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ１型（１７β−ＨＳＤ１）を阻害することができる非エストロゲン化合物を生成することもでき、エストロゲン依存性の癌を治療するために提案される。エストラジオールの一連の１６α誘導体は、１７β−ＨＳＤ１を阻害することが分かっている。他のものは、やはり１７β−ＨＳＤを阻害する１６βエストラジオール誘導体を生成している（Allan G. M. et al. Modifications of Estrone at the 6, 16 and 17 positions: Novel Potent Inhibitors of 17β-Hydroxysteroid Dehydrogenase Type 1. J. Med. Chem 49, 1325-1345 (2006)）。ＥＲβ選択性を有する本発明によるエストロゲン化合物は、有利には、ＥＲαリガンドの欠点なしに、局所塗布のために適用され得る。
【００５５】
Ｃ１６位（１６αおよび１６βの両方）における多くのエストラジオール誘導体は、エストロゲン様ではなく、局部エストロゲン欠乏または不均衡を治療する局所投与に適切でもない。例えば以下を参照のこと：Paquette L. A., Dahnke K., Doyon J., He W., Wyant K. & Friedrich D. Regioselective Conversion of Cycloalkanones to Vinyl Bromides with 1,2-Functionality Transposition. A General Strategem. J. Org. Chem 56, 6199-6205 (1991);およびAllan G. M. et al. Modifications of Estrone at the 6, 16 and 17 positions: Novel Potent Inhibitors of 17β-Hydroxysteroid Dehydrogenase Type 1. J. Med. Chem 49, 1325-1345 (2006)。
【００５６】
本発明による１６βエストラジオール化合物は、ＥＲβ選択的であり、かつ／または高いＥＲβ活性を有する。例えば、本発明による１６β誘導体が調製され、それらの１６α対応物に対して、ＥＲ特異性について試験された。以下の実施例１にまとめた、１つの試験では、１６β誘導体である構造１５が、構造１５’として以下に示す、その１６α対応物に対して試験された：
【化１８】
2019524864.tif 000020
【００５７】
両方の鏡像異性体は、比較的弱いエストロゲンアゴニストであるが、驚いたことに、ＥＲβ特異的であった。本発明の１６β誘導体（構造１５）は、対応する１６α誘導体よりもＥＲβ特異的であった。
【００５８】
以下の実施例２および３にまとめた、別の試験では、１６β誘導体である構造３が、構造３’として以下に示す、その１６α対応物に対して、ＥＲ結合および機能活性について試験された：
【化１９】
2019524864.tif 000021
（Ｘ’と標識された構造は、対応する１６α誘導体である）。予想通り、１６α誘導体は、結合および機能活性に関して、ＥＲα特異的であった。しかしながら、１６β誘導体（構造３）は、ＥＲβ亜型と比較して、匹敵するか、またはわずかに大きい結合および機能的ＥＲα活性を有した。
【００５９】
したがって、ＥＲβ選択的リガンドは、（ＥＲαに比べて）ＥＲβに富む組織を選択的に標的化するのに使用され得る。
【００６０】
ＥＲβ選択的リガンド、ＥＲβ選択的リガンドの合成、局所用調剤、治療および投与、ならびに例示的な実施例を含む、本発明のさまざまな特徴を、以下で論じる。
【００６１】
エストロゲン受容体
エストロゲン受容体（ＥＲ）は、ホルモンのエストロゲンによって活性化される細胞の内側および上で見られるタンパク質群である。２種類のＥＲは、細胞内受容体の核受容体ファミリーのメンバーである核エストロゲン受容体（ＥＲαおよびＥＲβ）と、大部分がＧタンパク質共役型受容体である、膜エストロゲン受容体（ｍＥＲ）（ＧＰＥＲ（ＧＰＲ３０）、ＥＲ−Ｘ、およびＧｑ−ｍＥＲ）と、を含む。
【００６２】
２つの異なる形態の核エストロゲン受容体があり、これらは、通常αおよびβと呼ばれ、それぞれが、別箇の遺伝子（それぞれＥＳＲ１およびＥＳＲ２）で符号化される。ホルモン活性化エストロゲン受容体は二量体を形成し、これらの２つの形態が、多くの細胞型で共発現されるので、受容体は、ＥＲα（αα）もしくはＥＲβ（ββ）ホモ二量体またはＥＲαβ（αβ）ヘテロ二量体を形成し得る。ＥＲαおよびＥＲβは、かなりの全体的な配列相同性を示し、いずれも、５つのドメインで構成されている。ただ１つのそのような受容体が存在したことが、ヒトエストロゲン受容体の単離およびクローニング後に広く想定された（Greene G. L. et al. Sequence and Expression of Human Estrogen Receptor Complementary DNA. Science 231, 1150-1154 (1986)；Green S. et al. Human oestrogen receptor cDNA: sequence, expression and homology to v-erb-A. Nature 320, 134-139 (1986)）。わずか１０年後、異なるエストロゲン受容体のための新しい遺伝子コード化が、クローニングされた（Mosselman S., Polman J. & Dijkema R. ERβ: identification and characterization of a novel human estrogen receptor. FEBS Letters 392, 49-53 (1996)）。ＥＲαおよびＥＲβの両方が、同様の高い親和力で内因性エストロゲン（１７β−エストラジオール）に結合する。しかしながら、ＥＲαおよびＥＲβは、異なる組織分布および機能、ならびに他のエストロゲンリガンドに対する異なる反応を有し得る。
【００６３】
本発明は、エストロゲン欠乏および／または不均衡を治療するために局所適用に使用され得る、新規性のあるＥＲβ選択的リガンドを提供する。これらの化合物は、ＥＲβが主要なステロイド受容体である、皮膚を治療するのに特に有利となり得る。ＥＲαおよびアンドロゲン受容体（ＡＲ）とは対照的に、ＥＲβは、表皮、血管、および皮膚線維芽細胞で高度に発現する。毛包では、ＥＲβ発現は、外毛根鞘、上皮基質および毛乳頭細胞の核に局在化される。これは、毛乳頭細胞で発現されるだけであるＥＲαおよびＡＲとは対照的である。バルジの細胞ではＥＲβの強い核発現があるが、ＥＲαもＡＲも発現されない。皮脂腺では、ＥＲβは、基底脂腺細胞および部分的に分化した脂腺細胞の両方で発現される。ＥＲαは、同様の発現パターンを示したが、ＡＲは、基底脂腺細胞および非常に早期に分化した脂腺細胞で発現される。ヒトの皮膚におけるＥＲβの広範な分布は、エストロゲンが皮膚の維持および毛包脂腺単位の調整において重要な役割を果たし得ることを示唆している（Thornton M. J. et al. The Distribution of Estrogen Receptor β Is Distinct to That of Estrogen Receptor α and the Androgen Receptor in Human Skin and the Pilosebaceous Unit. J Inves Dermatol Symp Proc 8, 100-103 (2003)）。本発明によるＥＲβ選択的リガンドは、これらのＥＲβに富む組織を標的化するのに有用である。
【００６４】
エストロゲン受容体β選択的リガンド
さまざまな態様および実施形態では、本発明は、ＥＲβ選択的リガンド、具体的には１６βエストラジオールを提供する。リガンドは、結合および／または活性に関して、ＥＲαと比べてＥＲβに選択的であり得る。リガンドは、実質的に全身送達および／または全身系の影響なしに、局所（例えば局部）投与するのに有効となり得る。
【００６５】
さまざまな態様および実施形態では、１６βエストラジオールは、エストロゲン受容体のβ亜型に対して、より特異的である。さまざまな実施形態では、このような１６βエストラジオールは、発毛を刺激し得る。これは、例えば妊娠中に、エストロゲンレベルが非常に高くなると、女性が発毛サイクルの成長期（成長相）の様相（anagen phase (the growth phase) aspect）が長くなるため発毛をしばしば経験するという観察によって証明される。対照的に、分娩後および閉経期のエストロゲンのレベルの急落により、毛髪は細くなって抜け、時には、臨床的に有意な毛髪脱落を生じる。
【００６６】
さまざまな実施形態では、化合物は、ＥＲαと比べてＥＲβに対して選択的である。（ＥＲβをＥＲαと比べた）エストロゲン受容体亜型の親和力の比率は、少なくとも約２、５、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、または１０００であってよい。比較として、（ＥＲβをＥＲαと比べた）エストロゲン受容体亜型の親和力の比率は、エストラジオールについて約１である（J. Med. Chem. (2003) 46, 1886-1904）。
【００６７】
さまざまな態様および実施形態では、本発明は、構造１に従う化合物を提供し：
【化２０】
2019524864.tif 000022
式中、ｍは、０、１、または２であり、Ｒは、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ５アルキル基、ビニル、ＣＦ３、ＣＨ２ＣＨ２Ｆ、ＣＨ２ＣＨＦ２、またはＣＨ２ＣＦ３である。
【００６８】
さまざまな実施形態では、ｍは０であり、Ｒは、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ペンチル、ネオペンチル、ビニル、ＣＦ３、ＣＨ２ＣＨ２Ｆ、ＣＨ２ＣＨＦ２、またはＣＨ２ＣＦ３である。
【００６９】
さまざまな実施形態では、ｍは０であり、Ｒは、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ペンチル、ネオペンチル、ビニル、ＣＦ３、ＣＨ２ＣＨ２Ｆ、ＣＨ２ＣＨＦ２、またはＣＨ２ＣＦ３である。
【００７０】
さまざまな実施形態では、ｍは１であり、Ｒは、Ｃ１もしくはＣ３〜Ｃ５アルキル基、ビニル、ＣＦ３、ＣＨ２ＣＨ２Ｆ、ＣＨ２ＣＨＦ２、またはＣＨ２ＣＦ３である。
【００７１】
さまざまな実施形態では、ｍは２である。
【００７２】
さまざまな実施形態では、化合物は以下のとおりである：
【化２１】
2019524864.tif 000023
【００７３】
さまざまな実施形態では、化合物は以下のとおりである：
【化２２】
2019524864.tif 000024
【００７４】
さまざまな実施形態では、化合物は以下のとおりである：
【化２３】
2019524864.tif 000025
【００７５】
さまざまな実施形態では、化合物は以下のとおりである：
【化２４】
2019524864.tif 000026
【００７６】
さまざまな実施形態では、化合物は以下のとおりである：
【化２５】
2019524864.tif 000027
【００７７】
さまざまな実施形態では、化合物は以下のとおりである：
【化２６】
2019524864.tif 000028
【００７８】
さまざまな実施形態では、化合物は以下のとおりである：
【化２７】
2019524864.tif 000029
【００７９】
さまざまな実施形態では、化合物は以下のとおりである：
【化２８】
2019524864.tif 000030
【００８０】
さまざまな実施形態では、化合物は以下のとおりである：
【化２９】
2019524864.tif 000031
【００８１】
さまざまな実施形態では、化合物は以下のとおりである：
【化３０】
2019524864.tif 000032
【００８２】
さまざまな実施形態では、化合物は以下のとおりである：
【化３１】
2019524864.tif 000033
【００８３】
さまざまな実施形態では、化合物は以下のとおりである：
【化３２】
2019524864.tif 000034
【００８４】
さまざまな実施形態では、化合物は以下のとおりである：
【化３３】
2019524864.tif 000035
【００８５】
さまざまな実施形態では、化合物は以下のとおりである：
【化３４】
2019524864.tif 000036
【００８６】
さまざまな実施形態では、化合物は以下のとおりである：
【化３５】
2019524864.tif 000037
【００８７】
さまざまな実施形態では、化合物は以下のとおりである：
【化３６】
2019524864.tif 000038
【００８８】
さまざまな実施形態では、化合物は以下を含まない：ｍ＝０およびＲ＝Ｈ；ｍ＝０およびＲ＝ＣＨ３；ｍ＝１およびＲ＝ＣＨ３；ならびに／またはｍ＝１およびＲ＝ＣＨ２ＣＨ３。
【００８９】
いくつかの実施形態では、化合物は構造４、１６、または１７（式中Ｒ＝Ｈ）ではない。特定の他の実施形態では、化合物は構造５または１３ではない。さまざまな実施形態では、化合物は、エストラジオールまたはエストラジオール誘導体のＣ１６に付着したカルボン酸官能基を含まない。好適な実施形態では、化合物は以下を含まない：ａ）ｍ＝０およびＲ＝Ｈ；ｂ）ｍ＝１およびＲ＝Ｈ；またはｃ）ｍ＝２およびＲ＝Ｈ。
【００９０】
さまざまな実施形態では、化合物は単離されている（例えば、実質的に鏡像異性的に純粋である）。例えば、組成物は、少なくとも７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９５％、９７％、９８％、９９％、またはそれ以上の鏡像異性的に純粋な１６βリガンドを含み得る。したがって、いくつかの実施形態では、組成物は、有効活性成分として、単離された（例えば実質的に鏡像異性的に純粋な）化合物のみを含み得る。組成物は、他のエストロゲン化合物、例えば鏡像異性体、特に、１６α鏡像異性体を実質的に含まなくてよい。本明細書で使用される、他のエストロゲン化合物を実質的に含まないとは、組成物が本発明の所望の１６βリガンド以外のすべてまたはほぼすべてのエストロゲン化合物を含まないことを意味する。組成物は、１００％純粋（例えば、分析限界以内）であるか、または、１００％未満純粋（例えば、微量の他のエストロゲン化合物が存在し得るが、いかなる生理学的に関連のある影響も有しないと予想される）であってよい。
【００９１】
さまざまな実施形態では、化合物は１６βエストラジオールカルボン酸エステルである。
【００９２】
エストロゲン受容体β選択的リガンドの合成
構造３の代表的な合成は、以下の実施例４で提供される。この方法は、当業者によれば構造１〜２および４〜１７に従うすべての化合物の合成に適し得る。例えば、化合物２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、および１２では、炭酸ジメチルをステップ１で、適切なアルコールをステップ４で、使用し得る。化合物１３および１４では、炭酸ジエチルをステップ１で、エチルまたはメチルアルコールをそれぞれステップ４で使用し得る。化合物１５では、炭酸ジプロピルをステップ１で、メタノールをステップ４で使用し得る。
【００９３】
局所用調剤
さまざまな態様および実施形態では、本発明は、局所投与のために調剤された、有効量の本発明による化合物（例えば、構造１〜１７のうちのいずれか１つ以上）と、生理学的に許容可能な担体、希釈剤、または賦形剤と、を含む、組成物を提供する。局所用調剤の例は、クリーム、ゲル、ローション、座薬、パッチなどを含む。
【００９４】
組成物は、本発明による化合物または組成物と、生理学的に許容可能な賦形剤と、を含み得る。本明細書で使用される賦形剤とは、活性成分と一緒に調剤された、天然または合成の物質であってよい。賦形剤は、長期安定化、体積増大（例えば、増量剤、充填剤、もしくは希釈剤）、または、最終的な剤形中の活性成分の強化、例えば、吸収促進、粘度低下、もしくは可溶性強化を与える目的で、含まれ得る。賦形剤は、例えば活性成分の取り扱いに役立ち、かつ／または、（例えば変性もしくは凝集を防ぐことによって）ｉｎ  ｖｉｔｒｏの安定性に役立つように、製造および分布にも有用となり得る。当業者には理解されるであろうが、適切な賦形剤の選択は、投与経路、剤形、および活性成分を含む、さまざまな要因によって決まり得る。
【００９５】
組成物は、有効量の本発明による化合物または組成物を含み得る。本明細書で使用される有効量とは、述べられた特定の目的を達成する濃度もしくは量であってよく、または、より多くの量は、例えばプラセボと比較して変化を引き起こすのに適切な量を意味する。有効量が治療有効量である場合、治療で使用するのに適切な量、例えば、疾患を予防するか、診断するか、緩和するか、治療するか、または治すのに十分な量であってよい。有効量は、当技術分野で既知の方法によって決定され得る。有効量は、経験的に、例えばヒト臨床試験によって、決定され得る。有効量はまた、当技術分野で既知の換算係数を用いて、別の動物（例えばヒト）で用いられるように、１つの動物（例えば、マウス、ラット、サル、ブタ、イヌ）から外挿により求めることができる。例えば以下を参照のこと：Freireich et al., Cancer Chemother, Reports 50(4):219-244 (1966)。
【００９６】
さまざまな実施形態では、組成物は、皮膚に（例えば、顔、頭皮、首、デコルテ、胸、腕、手、足などに）局所投与されるように調剤される。
【００９７】
さまざまな実施形態では、組成物は、粘膜に局所投与されるように調剤される。一実施形態では、組成物は、膣投与のために調剤される。一実施形態では、組成物は、鼻投与のために調剤される。一実施形態では、組成物は、直腸投与のために調剤される。一実施形態では、組成物は、眼球投与のために調剤される。
【００９８】
さまざまな実施形態では、組成物は、局部で作用し、かつ／または本発明による化合物（例えば、構造１〜１７のうちのいずれか１つ以上）の全身送達を実質的に回避する。
【００９９】
局所用調剤は、当技術分野で既知であり、当業者によって一般的に本発明に適用され得る。例えば以下を参照のこと：Cross S. E., Anderson C. & Roberts M. S. Topical penetration of commercial salicylic acid esters and salts using human isolated skin and clinical microdialysis studies. Br J Clin Pharmacol 46, 29-35 (1998)；Neubert R. H. H. et al. Controlled Penetration of a Novel Dimeric Ceramide into and across the Stratum Corneum Using Microemulsions and Various Types of Semisolid Formulations. Skin Pharmacol Physiol 29, 130-134 (2016)；Siddique M. I. et al. In-vivo dermal pharmacokinetics, efficacy, and safety of skin targeting nanoparticles for corticosteroid treatment of atopic dermatitis. Int J Pharmaceut 507, 72-82 (2016)；およびWosicka H. & Cal K. Targeting to the hair follicles: Current status and potential. J Dermatolog Sci 57, 83-89 (2010)。
【０１００】
同様に、製薬および薬用化粧用調剤は、当技術分野で既知であり、当業者によって一般的に本発明に適用され得る。例えば以下を参照のこと：Damle M. & Mallya R. Development and Evaluation of a Novel Delivery System Containing Phytophospholipid Complex for Skin Aging. AAPS PharmSciTech 17, 607-617 (2016)；およびDraelos Z. D., Raab S., Yatskayer M., Chen N., Krol Y. & Oresajo C. A Method for Maintaining the Clinical Results of 4% Hydroquinone and 0.025% Tretinoin With a Cosmeceutical Formulation. J Drugs Dermatol 14, 386-390 (2015)。
【０１０１】
さらに、局所用調剤への多くの追加的アプローチは、特定の組織を標的化することで当技術分野において知られており、本発明の化合物に容易に適用され得る。例えば以下を参照のこと：Mosselman S., Polman J. & Dijkema R. ERβ: identification and characterization of a novel human estrogen receptor. FEBS Letters 392, 49-53 (1996)；Green S. et al. Human oestrogen receptor cDNA: sequence, expression and homology to v-erb-A. Nature 320, 134-139 (1986)；Greene G. L. et al. Sequence and Expression of Human Estrogen Receptor Complementary DNA. Science 231, 1150-1154 (1986)；Pelletier G. & Ren L. Localization of sex steroid receptors in human skin. Histol Histopathol 19, 629-636 (2004). Kuiper G. G. J. M. et al. Comparison of the Ligand Binding Specificity and Transcript Tissue Distribution of Estrogen Receptors α and β. Endocrinology 138, (1997)；Thornton M. J. et al. The Distribution of Estrogen Receptor β Is Distinct to That of Estrogen Receptor α and the Androgen Receptor in Human Skin and the Pilosebaceous Unit. J Inves Dermatol Symp Proc 8, 100-103 (2003).；Pelletier J. D. & Poirier D. Synthesis and Evaluation of Estradiol Derivatives With 16α-(Bromoalkylamide), 16α-(Bromoalkyl) or 16α-(Bromoalkylynyl) Side Chain as Inhibitors of 17β-Hydroxysteroid Dehydrogenase Type 1 without Estrogenic Activity. Bioorganic & Medicinal Chemistry 4, 1617-1628 (1996)；Reiner G. C. A., Katzenellenbogen B. S., Bindal R. D. & Katzenellenbogen J. A. Biological Activity and Receptor Binding of a Strongly Interacting Estrogen in Human Breast Cancer Cells. Cancer Res 44, 2302-2308 (1984)；Chang K. C. N., et al., Estrogen Receptor β is a Novel Therapeutic Target for Photoaging. Mol Pharmacol 77, 744-750 (2010)；Thornton M. J. et al. Oestrogen receptor beta is the predominant oestrogen receptor in human scalp skin. Exp Dermatol 12, 181-190 (2003)；Thornton M. J. Estrogens and aging skin. Dermato-Endocrinology 5, 264-270 (2013)；Bender D., Buekers T. & Leslie K. K. Hormones and Receptors in Endometrial Cancer. Proceedings in Obstetrics and Gynecology 2, 1-25 (2011)；Allan G. M. et al. Modifications of Estrone at the 6, 16 and 17 positions: Novel Potent Inhibitors of 17β-Hydroxysteroid Dehydrogenase Type 1. J Med Chem 49, 1325-1345 (2006)；およびOhnemus U., Uenalan M., Inzunza J., Gustafsson J-A. & Paus R. The Hair Folicle as an Estrogen Target and Source. Endocrine Reviews 27, 677-706 (2006)。
【０１０２】
治療および投与
さまざまな態様および実施形態では、本発明は、必要とする患者に、有効量の本発明による化合物（例えば、構造１〜１７のうちのいずれか１つ以上）または本発明による組成物を投与することを含む、方法を提供する。
【０１０３】
さまざまな実施形態では、患者は哺乳動物である。例えば、患者はヒトであってよい。患者は、ヒト以外の霊長類の動物であってよい。さまざまな実施形態では、患者は、エストロゲン受容体、好ましくはＥＲβを有する動物である。患者は、女性（または場合によっては男性）であってよい。例えば、さまざまな実施形態では、患者はヒトの女性である。
【０１０４】
さまざまな実施形態では、患者は、エストロゲン欠乏（例えば補充療法）または不均衡（例えば、対立しないアンドロゲンの場合）を有する。欠乏または不均衡は、例えば閉経期もしくは閉経後のヒトの女性における、加齢に関連し得る。しかしながら、欠乏または不均衡は、閉経前もしくは閉経期前後のヒトの女性にも起こり得る。
【０１０５】
さまざまな実施形態では、組成物および／または調剤は、処方に使用され得る。例えば、組成物および／または調剤は、エストロゲン欠乏または不均衡に関連する、臨床的に認識された状態について、医師によって処方され得る。
【０１０６】
さまざまな実施形態では、組成物および調剤は、処方箋なしで使用されるものであってよい。例えば、組成物および／または調剤は、裁量的な使用または化粧用の使用のため、処方箋なしで入手可能であってよい（または、皮膚科医などの医師によって処方され得る）。
【０１０７】
さまざまな実施形態では、化合物は、実質的に全身系の影響なしに作用する（例えば、投与部位で、かつ／またはその近位で作用するが、実質的に循環に入らず、かつ／または投与部位より遠位では組織に影響しない）。さまざまな実施形態では、化合物は、実質的に的外れの影響なしに作用する（例えば、標的組織に影響するが、他の組織には影響しない）。例えば、化合物は、投与部位の皮膚には作用し得るが、他の部分の皮膚または他の器官には作用しない。
【０１０８】
本発明は、薬剤として使用される、前述した態様および実施形態のうちのいずれかによる組成物も特徴とする。さまざまな実施形態では、薬剤は、局所投与のためのものであってよく、化合物の全身送達を実質的に回避することができる。
【０１０９】
さまざまな実施形態では、組成物または化合物は、発毛に関する状態を治療するのに使用され得る。一実施形態では、組成物または化合物は、発毛を促進するのに使用され得る。別の実施形態では、組成物または化合物は、例えば閉経後の女性患者における、顔の発毛を阻害し得る。
【０１１０】
治療および投与の一般的な方法は、当技術分野で既知であり、当業者によって一般的に本発明に適用され得る。例えば前述した局所用調剤のセクションで引用した参考文献を参照のこと。
【０１１１】
以下の実施例は、例示的なものであり、制限的なものではない。このテクノロジーの多くの変形体が、本開示を鑑みれば、当業者には明らかとなるであろう。したがって、このテクノロジーの範囲は、実施例を参照して決定されるべきではなく、代わりに、特許請求の範囲を、その全範囲の等価物と共に参照して決定すべきである。
【０１１２】
〔実施例〕
実施例１：ＥＲβおよびＥＲαの機能アッセイにおける１６βアゴニスト構造１５とその１６α類似体構造１５’との比較
構造１５および１５’を、Liu J. et al. A Homogeneous in Vitro Functional Assay for Estrogen Receptors: Coactivator Recruitment. Mol Endocrinology 17, 346-355 (2003)に記載されるように、ＥＲβおよびＥＲαの機能アッセイで試験した。手短に言えば、ＥＲαおよびＥＲβのリガンド依存性トランス活性化機能を測定するための均質ｉｎ  ｖｉｔｒｏ機能アッセイを使用して、２種類の受容体のアゴニストとしての構造１５および１５’の選択性を測定した。手短に言えば、構造１５および１５’のアゴニスト結合は、ＥＲαおよびＥＲβのリガンド結合ドメインに関連するユウロピウムと、アゴニスト結合に応答してＬＢＤに補充される（recruited）コアクチベーターペプチドに関連するアロフィコシアニン（allophycocyanine）との間の蛍光共鳴エネルギー移動（ＦＲＥＴ）を測定することによって、評価した。図１Ａは、１６βアゴニスト構造１５についての機能エストロゲンアッセイの結果を示す。図１Ｂは、１６αアゴニスト構造１５’についての機能エストロゲンアッセイの結果を示す。
【０１１３】
図１Ａに示すように、１６β構造１５は、強いＥＲβ活性を有するが、比較的低いＥＲα活性を有する。対照的に、図１Ｂに示すように、１６α構造１５’は、同様のＥＲβ活性を有するが、１６β構造１５と比べて、比較的高いＥＲα活性も示す。したがって、構造１５は、選択的なＥＲβ結合剤として作用し、その１６α類似体構造１５’よりも著しく高い選択性を有する。したがって、受容体結合は、試験される化合物の機能活性を予測することができる。化合物１５では、ＥＣ５０は、ＥＲβで〜１０μＭであり、ＥＲαで＞１００μＭである。よって、化合物１５は、ＥＲβに対して＞１０倍の選択性を有する。化合物１５’では、ＥＲβに対して〜２倍の選択性が予測された。
【０１１４】
実施例２：ＥＲβおよびＥＲαの結合アッセイにおける１６βアゴニスト構造３とその１６α類似体構造３’の結合アッセイ比較
構造３および３’を、Obourn J. D., Koszewski N. J. & Notides A. C. Hormone- and DNA-Binding Mechanisms of the Recombinant Human Estrogen Receptor. Biochemistry 32, 6229-6236 (1993)に記載するように、ＥＲβおよびＥＲαの結合アッセイで試験した。手短に言えば、ＥＲαおよびＥＲβに対する構造３および構造３’のアゴニスト結合は、構造３および３’によるｈＥＲへの［３Ｈ］エストラジオール結合の阻害を測定するスキャチャード解析によって評価した。図２Ａは、１６βアゴニスト構造３についての結合アッセイの結果を示す。図２Ｂは、１６αアゴニスト構造３’についての結合アッセイの結果を示す。１６β構造３は、同様の親和力で（それぞれ、０．１０μＭおよび０．０７８μＭのＩＣ５０）ＥＲβおよびＥＲαに結合する。対照的に、１６α構造３’は、数桁異なる親和力で（それぞれ０．１４μＭおよび１．４６ｎＭのＩＣ５０）ＥＲβおよびＥＲαに結合する。
【０１１５】
１６β構造３は、同様の親和力で（それぞれ、０．１０μＭおよび０．０７８μＭのＩＣ５０）ＥＲβおよびＥＲαに結合する。対照的に、１６α構造３’は、数桁異なる親和力で（それぞれ、０．１４μＭおよび１．４６ｎＭのＩＣ５０）ＥＲβおよびＥＲαに結合する。したがって、構造３は、選択的なＥＲβ結合剤として作用し、その１６α類似体構造３’とは著しく異なるＥＲβ結合特性を有する。これらの結果は、ＥＲ結合親和力およびＥＲ結合選択性の両方が、エストラジオールのＣ１６における立体化学に敏感であることを示す。
【０１１６】
実施例３：ＥＲβおよびＥＲαの機能アッセイにおける１６βアゴニスト構造３とその１６α類似体（構造３’）の機能アッセイ比較
構造３および３’を、Hilal T., Puetter V., Otto C. Parczyk K. & Bader B. A Dual Estrogen Receptor TR-FRET Assay for Simultaneous Measurement of Steroid Site Binding and Coactivator Recruitment. J Biomolec Screening 15, 268-278 (2010)に記載されるように、ＥＲβおよびＥＲαの機能アッセイにおいて試験した。手短に言えば、ＥＲαおよびＥＲβに対する構造３および３’のアゴニスト結合を、二重エストロゲン受容体ＴＲ−ＦＲＥＴアッセイ（dual estrogen receptor TR-FRET assay）によって評価した。図３Ａは、１６βアゴニスト構造３についての機能エストロゲンアッセイの結果を示す。図３Ｂは、１６αアゴニスト構造３’についての機能エストロゲンアッセイの結果を示す。
【０１１７】
１６β構造３は、同様のＥＲβおよびＥＲα機能活性を有する（それぞれ、３．０μＭおよび１．０８μＭのＥＣ５０）。対照的に、１６α構造３’は、高いＥＲα活性と、最小のＥＲβ活性を有する（それぞれ、５．９２ｎＭおよび＞１０μＭのＥＣ５０）。したがって、構造３は、その１６α類似体構造３’とは著しく異なる結合特性を有する、非選択的なＥＲ結合剤として作用する。非選択的なＥＲアゴニストの局所使用は、内因性エストロゲンの非選択的な効果を模倣し得る。
【０１１８】
実施例４：１６βアゴニスト構造３の合成
図４に示すように、４ステップのプロセスを、１０ｇのスケールで実行して、構造３および構造３’を生成した。第一に、３−Ｏ−ベンジル−エストロンを、ＮａＨの存在下で、ＴＨＦ中で炭酸ジメチルと反応させ、結晶化後、８６％の収率で中間体１を生じた。第二に、中間体１を、ＮａＢＨ４によって還元し、２および３のジアステレオマー混合物（２／１の比率）を生じ、これらを、鹸化の際に中間体４および５に変換する。第三に、ＡｃＣｌ／ＭｅＯＨでの処理後に水素添加した後、構造３と構造３’との混合物を得た。この混合物を、フラッシュカラムクロマトグラフィーによって分離した。
【０１１９】
ステップ１（図４の中間体１）：
ＴＨＦ（２００ｍＬ）中のＮａＨ（１６．７ｇ、０．３４８ｍｏｌ）の懸濁液に、炭酸ジメチル（２６．１ｇ、０．２９０ｍｏｌ、２．５当量）を添加した。この混合物を加熱して、Ｎ２の保護下で還流させた。ＴＨＦ（２００ｍＬ）中の３−Ｏ−ベンジルエストロン（４１．８ｇ、０．１１６ｍｏｌ）の溶液を、１時間かけて添加した。４時間還流させた後、結果として得られた反応混合物を、０℃まで冷却し、３ＭのＡｃＯＨ（２００ｍＬ）で酸性化し、２５％のブライン（１Ｌ）中に注ぎ、ＤＣＭ（６００ｍＬ）で抽出した。有機層を、Ｎａ２ＳＯ４（５０ｇ）上で乾燥させ、真空中で濃縮し、６４ｇの湿った粗固体を生じ、これを、ＭｅＯＨ（４００ｍＬ）中で結晶化させて、４５℃で真空下において乾燥させて、ＬＣＭＳ（ＡＰ２２７７−１０−１−３−ＬＣＭＳ、１３．９分）によって８６％の収率で、４１．７ｇ、９９．５Ａ％のベージュ色の固体の中間体１を生じた。
【０１２０】
ステップ２（図４の中間体２および３の混合物）：
０℃のＴＨＦ／ＭｅＯＨ（１８０ｍＬ／２０ｍＬ）の混合物中の中間体１（１０ｇ、２３．８８ｍｍｏｌ）の懸濁液に、ＮａＢＨ４（７２３ｍｇ、１９．１ｍｍｏｌ、０．８当量）を、２０分かけて分割添加した。０℃で１時間たった後、反応混合物を、２ＮのＨＣｌ（１５ｍＬ）でｐＨ＝１〜２に酸性化し、Ｈ２Ｏ（５０ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）で抽出した。有機層を、ブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、濃縮して、茶色の固体を１１．５ｇ（重量超過（over weight））で生じ、これを、さらなる処理なしで、次の鹸化ステップで使用した。
【０１２１】
ステップ３（図４の中間体４および５の混合物）：
ＴＨＦ／ＭｅＯＨ（６０ｍＬ／６０ｍＬ）中の中間体２および３の粗混合物（１１．５ｇ、２７．３ｍｍｏｌ）の溶液に、水性ＮａＯＨ（２３ｍＬのＨ２Ｏ中５．５ｇ、１３６．７ｍｍｏｌ）を添加した。２５〜３０℃で２時間たった後（１６αの酸が７１．５Ａ％であり１６βの酸が１８．６Ａ％であるとＬＣＭＳが示した）、反応混合物を、０〜１０℃に冷却し、６ＭのＨＣｌ（４０ｍＬ）でｐＨ１〜２に酸性化し、ＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ×２）で抽出した。組み合わせられた有機抽出物を、Ｈ２Ｏ（２００ｍＬ）および２５％のブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、濃縮して、粗固体を、１２．５ｇ（重量超過）で生じ、これを、さらなる処理なしで、次のステップで使用した。
【０１２２】
ステップ４（図４のエステル化および脱保護）：
室温（ＲＴ）のＥｔＯＨ（２５０ｍＬ）中の中間体４および５の粗混合物（１２．５ｇ、３０．７ｍｍｏｌ）の溶液に、ＡｃＣｌ（３．６ｇ、４６．１ｍｍｏｌ、１．５当量）を添加した。この溶液を加温して、２０時間還流させ、その後、ＲＴまで冷却した。５％のＰｄ／Ｃ（５７．８ｇ）を添加した。この懸濁液を、１気圧のＨ２下、ＲＴ（２５〜３０℃）で２４時間撹拌した。固体を、濾過して取り除き、濾液を飽和ＮａＨＣＯ３（５ｍＬ）で中和し、Ｈ２Ｏ（４５ｍＬ）で希釈し、ＤＣＭ（２００ｍＬ×２）で抽出した。組み合わせられた有機抽出物を、ブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、濃縮して、１１ｇの茶色の粘性固体を生じ、これをフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、ＨＰＬＣによって、３５％の収率で、２．９ｇの９９．５％純粋なオフホワイトの固体である構造３’を；また、１６α（８．４％）と１６β異性体（８６．７％）との混合物である、１．５ｇの白い固体を、生じ、これをフラッシュクロマトグラフィーによって再び精製して、ＨＰＬＣによって、９９．７％純粋な白い固体の２００ｍｇの構造３を生じた。
【０１２３】
【表１】
2019524864.tif 000039
【０１２４】
図５は、９９．７％純粋な構造３のＨＰＬＣを示す。図６は、構造３のＮＭＲを示す。図７は、９９．５％純粋な構造３’のＨＰＬＣを示す。図８は、構造３’のＮＭＲを示す。
【０１２５】
実施例５：１６βアゴニスト構造１を含む局所用クリームの調剤
組成物を、以下の成分のうちのいずれかまたはすべてを用いて局所用クリームへと調剤する：水；油；乳化剤；増粘剤；保存料および香料などの他の添加物；１６β構造１〜１７のうちのいずれか１つ以上。
【０１２６】
局所用クリーム調剤は、水中油または油中水のエマルションの形態のいずれかであってよい。有効量の、１６β構造１〜１７のうちのいずれか１つ以上を、クリーム基剤に溶解または分散させる。
【０１２７】
結果として得られた局所用クリーム調剤を、患者の皮膚または粘膜の部位に局所的に塗布する。
【０１２８】
実施例６：１６βアゴニスト構造１を含む局所用軟膏の調剤
組成物を、以下の成分のうちのいずれかまたはすべてを用いて局所用軟膏へと調剤する：炭化水素基剤（例えば、固形パラフィン、軟パラフィン、ミクロクリスタリンワックスおよびセレシン）；羊毛脂および／またはビーズワックスなどの吸水性基剤；マクロゴール２００、３００、および／または４００などの水溶性基剤；乳化基剤（例えば、乳化蝋および／またはセトリミド；オリーブ油、ココナッツ油、アーモンド油、および／またはピーナッツ油などの植物油）；１６β構造１〜１７のうちのいずれか１つ以上。
【０１２９】
局所用軟膏は、患者の皮膚または粘膜の部位に局所的に塗布され得る。
【０１３０】
有効量の１６β構造１〜１７のうちのいずれか１つ以上を、軟膏基剤に溶解または分散させる。
【０１３１】
〔実施の態様〕
（１）  構造１：
【化３７】
2019524864.tif 000040
に従う化合物において、
式中、ｍは、０、１、または２であり、Ｒは、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ５アルキル基、ビニル、ＣＦ３、ＣＨ２ＣＨ２Ｆ、ＣＨ２ＣＨＦ２、またはＣＨ２ＣＦ３である、化合物。
（２）  ｍは０であり、Ｒは、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ペンチル、ネオペンチル、ビニル、ＣＦ３、ＣＨ２ＣＨ２Ｆ、ＣＨ２ＣＨＦ２、またはＣＨ２ＣＦ３である、実施態様１に記載の化合物。
（３）  構造２：
【化３８】
2019524864.tif 000041
に従う、実施態様１に記載の化合物。
（４）  構造３：
【化３９】
2019524864.tif 000042
に従う、実施態様１に記載の化合物。
（５）  構造４：
【化４０】
2019524864.tif 000043
に従う、実施態様１に記載の化合物。
【０１３２】
（６）  構造５：
【化４１】
2019524864.tif 000044
に従う、実施態様１に記載の化合物。
（７）  構造６：
【化４２】
2019524864.tif 000045
に従う、実施態様１に記載の化合物。
（８）  構造７：
【化４３】
2019524864.tif 000046
に従う、実施態様１に記載の化合物。
（９）  構造８：
【化４４】
2019524864.tif 000047
に従う、実施態様１に記載の化合物。
（１０）  構造９：
【化４５】
2019524864.tif 000048
に従う、実施態様１に記載の化合物。
【０１３３】
（１１）  構造１０：
【化４６】
2019524864.tif 000049
に従う、実施態様１に記載の化合物。
（１２）  構造１１：
【化４７】
2019524864.tif 000050
に従う、実施態様１に記載の化合物。
（１３）  構造１２：
【化４８】
2019524864.tif 000051
に従う、実施態様１に記載の化合物。
（１４）  構造１３：
【化４９】
2019524864.tif 000052
に従う、実施態様１に記載の化合物。
（１５）  構造１４：
【化５０】
2019524864.tif 000053
に従う、実施態様１に記載の化合物。
【０１３４】
（１６）  構造１５：
【化５１】
2019524864.tif 000054
に従う、実施態様１に記載の化合物。
（１７）  構造１６：
【化５２】
2019524864.tif 000055
に従う、実施態様１に記載の化合物。
（１８）  構造１７：
【化５３】
2019524864.tif 000056
に従う、実施態様１に記載の化合物。
（１９）  ＥＲαと比較したエストロゲン受容体亜型ＥＲβに対する前記化合物の親和力の比率は、少なくとも約２、５、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、または１０００である、実施態様１に記載の化合物。
（２０）  実施態様１〜１９のいずれかに記載の実質的に鏡像異性的に純粋な化合物を含む、組成物。
【０１３５】
（２１）  他のエストロゲン化合物を実質的に含まない、実施態様１〜１９のいずれかに記載の化合物を含む組成物。
（２２）  局所投与のために調剤された、有効量の実施態様１〜１９のいずれかに記載の化合物と、生理学的に許容可能な担体、希釈剤、または賦形剤と、を含む、組成物。
（２３）  前記組成物は、皮膚に局所投与されるように調剤されている、実施態様２２に記載の組成物。
（２４）  前記組成物は、粘膜に局所投与されるように調剤されている、実施態様２２に記載の組成物。
（２５）  実施態様１〜１８のいずれかに記載の実質的に鏡像異性的に純粋な化合物を含む、実施態様２２に記載の組成物。
【０１３６】
（２６）  前記組成物は、他のエストロゲン化合物を実質的に含まない、実施態様２２に記載の組成物。
（２７）  必要とする患者に、有効量の、実施態様１〜１９のいずれかに記載の化合物、または実施態様２０〜２６のいずれかに記載の組成物を投与し、それによって、前記患者を治療することを含む、方法。
（２８）  前記治療は、化粧用または薬用化粧用のものである、実施態様２７に記載の方法。
（２９）  前記投与は局所的である、実施態様２７に記載の方法。
（３０）  前記局所投与は、皮膚または粘膜に対するものである、実施態様２９に記載の方法。
【０１３７】
（３１）  前記化合物は、実質的に全身系の影響なしに作用する、実施態様２７〜３０のいずれかに記載の方法。
（３２）  前記化合物は、実質的に的外れの影響なしに作用する、実施態様２７〜３０のいずれかに記載の方法。
（３３）  前記化合物は、ａ）構造４、１６、もしくは１７（式中Ｒ＝Ｈ）、またはｂ）構造５もしくは１３ではない、実施態様１に記載の化合物。
（３４）  前記ＥＲβは、選択的に標的化される、実施態様２７に記載の方法。
（３５）  ＥＲαと比較したエストロゲン受容体亜型ＥＲβに対する前記化合物の親和力の比率は、少なくとも約２、５、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、または１０００である、実施態様３４に記載の方法。
【０１３８】
（３６）  前記患者は、エストロゲン欠乏または不均衡と関連する疾患または状態を有する、実施態様２７に記載の方法。
（３７）  前記エストロゲン欠乏または不均衡は、対立しないアンドロゲンによるものである、実施態様３６に記載の方法。
（３８）  前記疾患または状態は、発毛に関連する、実施態様２７に記載の方法。
（３９）  前記患者は、ヒトの女性である、実施態様２７に記載の方法。
（４０）  前記ヒトの女性は、閉経後である、実施態様３９に記載の方法。
【０１３９】
（４１）  前記ヒトの女性は、閉経前または閉経期前後である、実施態様３９に記載の方法。
（４２）  前記化合物は、１６βエストラジオールカルボン酸エステルである、実施態様１に記載の化合物。
【図面の簡単な説明】
【０１４０】
【図１Ａ】１６βアゴニスト構造１５の機能エストロゲンアッセイの結果を示す。
【図１Ｂ】１６αアゴニスト構造１５’の機能エストロゲンアッセイの結果を示す。
【図２Ａ】１６βアゴニスト構造３の結合アッセイの結果を示す。
【図２Ｂ】１６αアゴニスト構造３’の結合アッセイの結果を示す。
【図３Ａ】１６βアゴニスト構造３の機能エストロゲンアッセイの結果を示す。
【図３Ｂ】１６αアゴニスト構造３’の機能エストロゲンアッセイの結果を示す。
【図４】１６βアゴニスト構造３およびその１６α類似体構造３’の例としての合成を示す。
【図５】９９．７％純粋な構造３のＨＰＬＣを示す。
【図６】構造３のＮＭＲを示す。
【図７】９９．５％純粋な構造３’のＨＰＬＣを示す。
【図８】構造３’のＮＭＲを示す。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
2019524864.tif 000076
【図２Ａ】
2019524864.tif 000077
【図２Ｂ】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図４】
2019524864.tif 000081
【図５】
2019524864.tif 000082
【図６】
2019524864.tif 000083
【図７】
2019524864.tif 000084
【図８】
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【国際調査報告】
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2019524864.tif 000087
2019524864.tif 000088