(57)【要約】  本発明は、ＬＳＤ１阻害剤及び１つ以上の医薬品有効成分又は薬学的に許容されるそれらの塩の治療的組合せに関する。その組合せは、例えばがん、特に小細胞肺がん（ＳＣＬＣ）などの腫瘍性疾患を治療するために特に有用である。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩と、ＢＣＬ２阻害剤、ＢＥＴ阻害剤、ＥＺＨ２阻害剤、ＤＯＴ１Ｌ阻害剤、Ｃｈｋ阻害剤、ＤＮＡアルキル化剤、ＨＤＡＣ阻害剤、トポイソメラーゼ阻害剤、抗有糸分裂剤、オーロラキナーゼ阻害剤、及び薬学的に許容されるそれらの塩から選択される１つ以上の医薬品有効成分とを含む治療的組合せ。
【請求項２】
ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩と、ＡＢＴ−１９９、ＡＢＴ−２６３、ＡＢＴ−７３７、ＡＢＴ−８８８、ＡＣＹ−１２１５、ベリノスタット、ベンダムスチン、ＢＧＪ３９８、ＢＭＳ−９０６０２４、カルボプラチン、ＣＧＫ７３３、シスプラチン、ＣＰＩ−１６９、ＣＰＩ−２０３、ドセタキセル、ドキソルビシン、ＥＰＺ−００４７７７、ＥＰＺ００５６８７、ＥＰＺ−５６７６、ＥＰＺ−６４３８、エルロチニブ、エトポシド、ＦＬＩ０６、フルオロウラシル、ＧＤＣ−０４４９、ゲムシタビン、ＧＳＫ１２６、ＧＳＫ１３２４７２６Ａ、ＧＳＫ３４３、ＧＳＫ−Ｊ１、ＧＳＫ１２１０１５１Ａ、イリノテカン、（＋）−ＪＱ１、ラパチニブ、ＬＤＥ２２５、ＬＹ２６０３６１８、ＬＹ−３０３９４７８、メナジオン、メトトレキサート、ＭＫ−０７５２、ＭＬＮ８２３７、ＭＳ４３６、ヌトリン−３Ａ、オバトクラックス、ＯＴＸ０１５、パクリタキセル、パノビノスタット、ペメトレキセド、ＰＦ−０４２１７９０３、ＰＦ−３０８４０１４、ＳＡＨＡ、ＳＧＣ０９４６、ＳＮＤＸ−２７５、タラデギブ（Taladegib）、テモゾロミド、トポテカン、ＴＷ−３７、ビンクリスチン、及び薬学的に許容されるそれらの塩のリストから選択される１つ以上の医薬品有効成分とを含む治療的組合せ。
【請求項３】
ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩と、１つのＢＣＬ２阻害剤又は薬学的に許容されるその塩とを含む、請求項１又は２に記載の治療的組合せ。
【請求項４】
ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩と、ＡＢＴ−１９９、ＡＢＴ−２６３、ＡＢＴ−７３７、オバトクラックス、ＴＷ−３７及び薬学的に許容されるそれらの塩のリストから選択される１つのＢＣＬ２阻害剤とを含む、請求項１又は２に記載の治療的組合せ。
【請求項５】
ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩と、１つのＢＥＴ阻害剤又は薬学的に許容されるその塩とを含む、請求項１又は２に記載の治療的組合せ。
【請求項６】
ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩と、ＣＰＩ−２０３、ＧＳＫ１３２４７２６Ａ、ＧＳＫ１２１０１５１Ａ、（＋）−ＪＱ１、ＭＳ４３６、ＯＴＸ０１５及び薬学的に許容されるそれらの塩のリストから選択される１つのＢＥＴ阻害剤とを含む、請求項１又は２に記載の治療的組合せ。
【請求項７】
ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩と、１つのＥＺＨ２阻害剤又は薬学的に許容されるその塩とを含む、請求項１又は２に記載の治療的組合せ。
【請求項８】
ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩と、ＣＰＩ−１６９、ＥＰＺ００５６８７、ＥＰＺ−６４３８、ＧＳＫ１２６、ＧＳＫ３４３及び薬学的に許容されるそれらの塩のリストから選択される１つのＥＺＨ２阻害剤とを含む、請求項１又は２に記載の治療的組合せ。
【請求項９】
ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩と、１つのＤＯＴ１Ｌ阻害剤又は薬学的に許容されるその塩とを含む、請求項１又は２に記載の治療的組合せ。
【請求項１０】
ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩と、ＥＰＺ−００４７７７、ＥＰＺ−５６７６、ＳＧＣ０９４６及び薬学的に許容されるそれらの塩のリストから選択される１つのＤＯＴ１Ｌ阻害剤とを含む、請求項１又は２に記載の治療的組合せ。
【請求項１１】
ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩と、１つのＣｈｋ阻害剤又は薬学的に許容されるその塩とを含む、請求項１又は２に記載の治療的組合せ。
【請求項１２】
ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩と、ＬＹ２６０３６１８及び薬学的に許容されるその塩から選択される１つのＣｈｋ阻害剤とを含む、請求項１又は２に記載の治療的組合せ。
【請求項１３】
ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩と、１つのＤＮＡアルキル化剤又は薬学的に許容されるその塩とを含む、請求項１又は２に記載の治療的組合せ。
【請求項１４】
ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩と、ベンダムスチン、カルボプラチン、シスプラチン、テモゾロミド及び薬学的に許容されるそれらの塩のリストから選択される１つのＤＮＡアルキル化剤とを含む、請求項１又は２に記載の治療的組合せ。
【請求項１５】
ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩と、１つのＨＤＡＣ阻害剤又は薬学的に許容されるその塩とを含む、請求項１又は２に記載の治療的組合せ。
【請求項１６】
ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩と、ＡＣＹ−１２１５、ベリノスタット、パノビノスタット、ＳＡＨＡ、ＳＮＤＸ−２７５及び薬学的に許容されるそれらの塩のリストから選択される１つのＨＤＡＣ阻害剤とを含む、請求項１又は２に記載の治療的組合せ。
【請求項１７】
ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩と、１つのトポイソメラーゼ阻害剤又は薬学的に許容されるその塩とを含む、請求項１又は２に記載の治療的組合せ。
【請求項１８】
ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩と、エトポシド、イリノテカン、トポテカン及び薬学的に許容されるそれらの塩のリストから選択される１つのトポイソメラーゼ阻害剤とを含む、請求項１又は２に記載の治療的組合せ。
【請求項１９】
ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩と、１つのオーロラキナーゼ阻害剤又は薬学的に許容されるその塩とを含む、請求項１又は２に記載の治療的組合せ。
【請求項２０】
ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩と、ＭＬＮ８２３７及び薬学的に許容されるその塩のリストから選択される１つのオーロラキナーゼ阻害剤とを含む、請求項１又は２に記載の治療的組合せ。
【請求項２１】
ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩と、１つの抗有糸分裂剤又は薬学的に許容されるその塩とを含む、請求項１又は２に記載の治療的組合せ。
【請求項２２】
ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩と、ドセタキセル、パクリタキセル、ビンクリスチン及び薬学的に許容されるそれらの塩のリストから選択される１つの抗有糸分裂剤とを含む、請求項１又は２に記載の治療的組合せ。
【請求項２３】
ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩と、トポイソメラーゼ阻害剤又は薬学的に許容されるその塩と、ＤＮＡアルキル化剤又は薬学的に許容されるその塩とを含む、請求項１又は２に記載の治療的組合せ。
【請求項２４】
ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩と、エトポシド又は薬学的に許容されるその塩と、カルボプラチン又は薬学的に許容されるその塩とを含む、請求項１又は２に記載の治療的組合せ。
【請求項２５】
ＬＳＤ１阻害剤が、
４−［［４−［［［（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル］アミノ］メチル］−１−ピペリジニル］メチル］−安息香酸（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン、
（Ｒ）−１−（４−（（（ｔｒａｎｓ）−２−フェニルシクロプロピル）アミノ）シクロヘキシル）ピロリジン−３−アミン、
４−（アミノメチル）−Ｎ−（（ｔｒａｎｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサンアミン、
Ｎ１−（（ｔｒａｎｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１,３−ジアミン、
Ｎ１−（（ｔｒａｎｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロブタン−１,３−ジアミン、
Ｎ１−（（ｔｒａｎｓ）−２−フェニルシクロプロピル）−２,３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１,３−ジアミン、
Ｎ１−メチル−Ｎ４−（（ｔｒａｎｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１,４−ジアミン、
Ｎ１−（（ｔｒａｎｓ）−２−（４−ブロモフェニル）シクロプロピル）シクロヘキサン−１,４−ジアミン、
Ｎ１−（２−（ｏ−トルイル）シクロプロピル）シクロヘキサン−１,４−ジアミン、
Ｎ１−（２−（４−メトキシフェニル）シクロプロピル）シクロヘキサン−１,４−ジアミン、
Ｎ１−（２−（２−フルオロフェニル）シクロプロピル）シクロヘキサン−１,４−ジアミン、
Ｎ１−（２−（ナフタレン−２−イル）シクロプロピル）シクロヘキサン−１,４−ジアミン、
Ｎ−（４’−（（ｔｒａｎｓ）−２−（（４−アミノシクロヘキシル）アミノ）シクロプロピル）−［１，１’−ビフェニル］−３−イル）−２−シアノベンゼンスルホンアミド、
Ｎ１−（（ｔｒａｎｓ）−２−（４−（ピリジン−３−イルメトキシ）フェニル）シクロプロピル）シクロヘキサン−１,４−ジアミン、
及び薬学的に許容されるそれらの塩のリストから選択される、請求項１から２４のいずれか一項に記載の治療的組合せ。
【請求項２６】
ＬＳＤ１阻害剤が（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１,４−ジアミン又は薬学的に許容されるその塩である、請求項１から２５のいずれか一項に記載の治療的組合せ。
【請求項２７】
請求項１から２６のいずれか一項に記載の治療的組合せと、１つ以上の薬学的に許容される添加剤とを含む、医薬組成物。
【請求項２８】
腫瘍性疾患の治療に有用である、請求項１から２６のいずれか一項に記載の治療的組合せを含む製品。
【請求項２９】
治療活性物質としての使用のための、請求項１から２６のいずれか一項に記載の治療的組合せ。
【請求項３０】
腫瘍性疾患の治療における使用のための、請求項１から２６のいずれか一項に記載の治療的組合せ。
【請求項３１】
腫瘍性疾患の治療のための方法であって、有効な量の請求項１から２６のいずれか一項に記載の治療的組合せをヒト又は動物に投与することを含む、方法。
【請求項３２】
腫瘍性疾患の治療のための方法であって、ＬＳＤ１阻害剤の投与を通じて感受性を高めることに続いて、有効な量の請求項１から２６のいずれか一項に記載の治療的組合せをヒト又は動物に投与することを含む、方法。
【請求項３３】
腫瘍性疾患の治療のための方法であって、（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１,４−ジアミン又は薬学的に許容されるその塩の投与を通じて感受性を高めることに続いて、有効な量の請求項１から２６のいずれか一項に記載の治療的組合せをヒト又は動物に投与することを含む、方法。
【請求項３４】
腫瘍性疾患の治療のための、請求項１から２６のいずれか一項に記載の治療的組合せの使用。
【請求項３５】
腫瘍性疾患の治療に有用な医薬の調製のための、請求項１から２６のいずれか一項に記載の治療的組合せの使用。
【請求項３６】
腫瘍性疾患ががんである、請求項２８に記載の製品、請求項２９又は３０に記載の、使用のための治療的組合せ、請求項３１から３３に記載の方法、又は請求項３４若しくは３５に記載の使用。
【請求項３７】
腫瘍性疾患が、乳がん、前立腺がん、子宮頸がん、卵巣がん、胃がん、大腸がん、膵臓がん、肝臓がん、脳腫瘍、神経内分泌がん、肺がん、腎臓がん、造血器悪性腫瘍、メラノーマ及び肉腫である、請求項２８に記載の製品、請求項２９又は３０に記載の、使用のための治療的組合せ、請求項３１から３３に記載の方法、又は請求項３４若しくは３５に記載の使用。
【請求項３８】
腫瘍性疾患が固形腫瘍である、請求項２８に記載の製品、請求項２９又は３０に記載の、使用のための治療的組合せ、請求項３１から３３に記載の方法、又は請求項３４若しくは３５に記載の使用。
【請求項３９】
腫瘍性疾患が小細胞肺がん（ＳＣＬＣ）である、請求項２８に記載の製品、請求項２９又は３０に記載の、使用のための治療的組合せ、請求項３１から３３に記載の方法、又は請求項３４若しくは３５に記載の使用。
【請求項４０】
上記のような発明。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＬＳＤ１阻害剤及び１つ以上の医薬品有効成分又は薬学的に許容されるそれらの塩の治療的組合せに関する。その組合せは、例えばがん、特に小細胞肺がん（ＳＣＬＣ）などの腫瘍性疾患を治療するために特に有用である。
【背景技術】
【０００２】
正常組織と比較した患部組織における異常な遺伝子発現は、がんを含む、多くのヒト疾患の共通の特徴である。遺伝子発現パターンは、細胞における複数のレベルで制御される。遺伝子発現の制御はＤＮＡの修飾を通して生じることがある：ＤＮＡプロモーターメチル化は遺伝子発現の抑制に関係する。ブロックバスターのビダーザ（商標）を含めて、ＤＮＡメチル化のいくつかの阻害剤は、臨床的使用が承認されている。別のクラスの修飾は、ＤＮＡが真核細胞において通常関係する（周囲でコイル化されている）、タンパク質スキャフォールドを形成する、ヒストンに関与する。ヒストンは、ＤＮＡを組織することにおいて重要な役割を果たし、ヒストンの周囲のＤＮＡの制御されたコイル化及びアンコイル化は、遺伝子発現を制御するのに重要であり、コイル化されたＤＮＡは、一般的に、遺伝子転写に利用できない。ヒストンアセチル化、ヒストンリジンメチル化、ヒストンアルギニンメチル化、ヒストンユビキチン化、及びヒストンＳＵＭＯ化を含む、多数のヒストン修飾が発見されており、その多くは、細胞の転写機構によって、関係するＤＮＡへの近づきやすさを変更する。これらのヒストンマークは、転写及び抑制に関与する様々なタンパク質複合体をリクルートするのに役立つ。ますます多くの研究が、様々な組合せのヒストンマークが細胞型特異的な方式における遺伝子発現をどのように制御するか、の複雑な絵を描いており、この概念を捉えるために新たな用語が作り出された：ヒストンコード。
【０００３】
プロトタイプのヒストンマークは、ヒストンアセチル化である。ヒストンアセチルトランスフェラーゼ及びヒストンデアセチラーゼは、このヒストンマークの調節に関与する触媒機械であるが、一般的に、これらの酵素は、ヒストンマークを読み取ること及び変更することに関与する他のタンパク質を含有する、多タンパク質複合体の一部である。これらのタンパク質複合体の構成は、一般的に、細胞型特異的であり、一般的に、転写調節因子、リプレッサー、コリプレッサー、遺伝子発現調節に関係するレセプター（例えば、エストロゲン又はアンドロゲンレセプター）を含む。ヒストンデアセチラーゼ阻害剤は、クロマチンのヒストンアセチル化プロファイルを変更する。それに伴い、ボリノスタット（ＳＡＨＡ）、トリコスタチンＡ（ＴＳＡ）、及び多くの他のもの、のようなヒストンデアセチラーゼ阻害剤は、様々なインビトロ及びインビボの動物モデルにおいて遺伝子発現を変更することが示された。臨床的に、ヒストンデアセチラーゼ阻害剤は、がん設定において活性を示し、神経学的状態及び他の疾患についてだけでなく、腫瘍学適応についても調べられている。
【０００４】
遺伝子発現を制御することに関与する別の修飾は、リジン及びアルギニンメチル化を含めたヒストンメチル化である。ヒストンリジンのメチル化状態は、最近、遺伝子発現を動的に制御するのに重要であることが示された。
【０００５】
ヒストンリジンメチルトランスフェラーゼ及びヒストンリジンデメチラーゼとして知られている一群の酵素が、ヒストンリジン修飾に関与している。リジン特異的デメチラーゼ−１（ＬＳＤ１）と呼ばれるある特定のヒトヒストンリジンデメチラーゼ酵素が、最近、この重大なヒストン修飾に関与することが見出された１。ＬＳＤ１は、ポリアミンオキシダーゼ及びモノアミンオキシダーゼに対してかなりの程度の構造上の類似性、及びアミノ酸の同一性／ホモロジーを有しており、これらの全て（すなわち、ＭＡＯ−Ａ、ＭＡＯ−Ｂ及びＬＳＤ１）は、窒素−水素結合及び／又は窒素炭素結合の酸化を触媒するフラビン依存性アミンオキシダーゼである。ＬＳＤ１は、がん、神経学的疾患及び他の状態を処置するための新たな薬物の開発の興味深い標的として認識されている。
【０００６】
シクロプロピルアミン含有化合物は、モノアミンオキシダーゼＡ（ＭＡＯ−Ａ；又はＭＡＯＡ）、モノアミンオキシダーゼＢ（ＭＡＯ−Ｂ；又はＭＡＯＢ）のようなアミンオキシダーゼ、及びリジン特異的デメチラーゼ−１（ＬＳＤ１）を含む、多数の医学的に重要な標的を阻害することが知られる。パルネート（Ｐａｒｎａｔｅ）（登録商標）の有効成分であり、シクロプロピルアミンの最もよく知られる例の１つであるトラニルシプロミン（２−フェニルシクロプロピルアミンとしても知られている）は、これらの酵素の全てを阻害することが知られる。ＭＡＯ−Ａ阻害は、望ましくない副作用を引き起こすかもしれないので、強力なＬＳＤ１阻害活性を示す一方でＭＡＯ−Ａ阻害活性を欠くか又は実質的に低減したＭＡＯ−Ａ阻害活性を有する、シクロプロピルアミン誘導体を同定することが望ましい。
【発明の概要】
【０００７】
ＬＳＤ１の阻害剤として働く化合物はその技術分野で知られる。ＬＳＤ１阻害剤及びそれらを作るための方法は、ＷＯ２０１１／１３１６９７２、ＷＯ２０１２／１３５１１３３、ＷＯ２０１３／０５７３２２４、ＷＯ２０１０／１４３５８２５、ＷＯ２０１１／１３１５７６６、ＷＯ２０１３／０２２０４７７、ＷＯ２０１３／０２５８０５８、ＷＯ２０１４／０５８０７１９、ＷＯ２０１４／０８４２９８１０、ＷＯ２０１４／０８５６１３１１、ＷＯ２０１４／０８６７９０１２、ＷＯ２０１４／１６４８６７１３、ＷＯ２０１４／１９４２８０１４、ＷＯ２０１４／２０５２１３１５、ＷＯ２０１５／０２１１２８１６、ＷＯ２０１５／０３１５６４１７、ＷＯ２０１５／０８９１９２１８、ＷＯ２０１５／１２０２８１１９、ＷＯ２０１５／１２３４６５２０、ＷＯ２０１５／１２３４３７２１、ＷＯ２０１５／１２３４２４２２、ＷＯ２０１５／１２３４０８２３、ＷＯ２０１５／１３４９７３２４、ＷＯ２０１５／１５６４１７２５、ＷＯ２０１５／１６８４６６、ＷＯ２０１５／１８１３８０、ＷＯ２０１５２００８４３、ＷＯ２０１６００３９１７、ＷＯ２０１６／００４１０５２６、ＷＯ２０１６／００７７２２２７、ＷＯ２０１６／００７７２７２８、ＷＯ２０１６／００７７３１２９、ＷＯ２０１６／００７７３６３０、ＷＯ２０１６／０３４９４６３１、ＷＯ２０１６／０３７００５３２、ＣＮ１０５５４１８０６３３、ＷＯ２０１６／１２３３８７３４、ＷＯ２０１６／１３０９５２３５、ＣＮ１０５９２４３６２３６、ＣＮ１０５９８５２６５３７、ＷＯ２０１６／１６１２８２３８、ＣＮ１０６０４５８６２３９、ＣＮ１０６０４５８８１４０、ＷＯ２０１６／１７２４９６４１、ＷＯ２０１６／１７７６５６４２、ＷＯ２０１７／００４５１９４３、ＷＯ２０１７／０２７６７８４４で開示されており、ここでそれらの全部が組み込まれる。
【０００８】
ＷＯ２０１２／１３５１１３３は、選択的ＬＳＤ１阻害剤として、例えばＧＳＫ２８７９５５２［ＣＡＳ登録番号１４０１９６６−６９−５］、４−［［４−［［［（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル］アミノ］メチル］−１−ピペリジニル］メチル］−安息香酸（ｐ．７５の実施例２６、ｐ．８１の実施例２９）としても知られる化合物を開示する。
2019508440.tif 000002
（ＧＳＫ２８７９５５２）
【０００９】
ＷＯ２０１７／０２７６７８４４は、ｌ−（（４−（メトキシメチル）−４−（（（ｌＲ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピルアミノ）メチル）ピぺリジン−ｌ−イル）メチル）シクロブタンカルボン酸
2019508440.tif 000003
のｐ−トルエンスルホン酸塩を開示する。
【００１０】
ＬＳＤ１阻害剤及びそれらを作るための方法は、例えば、ＷＯ２０１３／０２２０４７７に、特に実施例１-１６６（対応するＥＰ２７４３２５６の４４〜１１４頁）、特にＮ−［４−［２−［（シクロプロピルメチルアミノ）メチル］シクロプロピル］フェニル］−１−メチル−ピラゾール−４−カルボキシアミド（実施例１６３）に開示され、ここでそれらの全部が組み込まれる。
【００１１】
ＬＳＤ１阻害剤及びそれらを作るための方法は、例えば、ＷＯ２０１１／１３１６９７２、特に実施例１−２１（９０〜１０３頁）に開示され、ここでそれらの全部が組み込まれる。
【００１２】
ＬＳＤ１阻害剤及びそれらを作るための方法は、例えば、ＷＯ２０１３／０５７３２２４、特に実施例１−１０８（１５５〜１９１頁）に開示され、ここでそれらの全部が組み込まれる。
【００１３】
ＷＯ２０１３／０５７３２２４に記載された特定のＬＳＤ１阻害剤は表１に示される。
表１．ＷＯ２０１３／０５７３２２４に記載された特定のＬＳＤ１阻害剤。
2019508440.tif 000004
2019508440.tif 000005
2019508440.tif 000006
【００１４】
ＷＯ２０１３／０５７３２２４に記載される、より特定のＬＳＤ１阻害剤は、その実施例５に対応している、（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１,４−ジアミン［ＣＡＳ登録番号１４３１３０４−２１−０］
2019508440.tif 000007
、
及び薬学的に許容されるその塩である。本化合物はＯＲＹ−１００１としても知られる。
【００１５】
ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  及びｉｎ  ｖｉｖｏでがん細胞の増殖を阻害する相加的又は相乗的効果は、ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるそれらの塩を、ある他の特定の薬剤との組合せで投与することによって達成され得ることが決定された。その組合せ及び方法は、例えばがんなどの腫瘍性疾患の治療において有用であり得る。
【００１６】
したがって、本発明は、哺乳動物での腫瘍性疾患の治療における使用のための、ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるそれらの塩と、表２から選択される１つ以上の医薬品有効成分又は薬学的に許容されるそれらの塩とを含む組合せを提供する。
表２．ＬＳＤ１阻害剤と組み合わされるのに適切な医薬品有効成分。
2019508440.tif 000008
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【００１７】
表２の化合物の構造式は次のとおりである：
ＡＢＴ−１９９  （ベネトクラックス）：    
2019508440.tif 000019
ＡＢＴ−２６３（ナビトクラックス）：
2019508440.tif 000020
ＡＢＴ−７３７：
2019508440.tif 000021
ＡＢＴ−８８８  （ベリパリブ）：
2019508440.tif 000022
ＡＣＹ−１２１５（リコリノスタット）：
2019508440.tif 000023
ベリノスタット：
2019508440.tif 000024
ベンダムスチン：
2019508440.tif 000025
ＢＧＪ３９８（インフィグラチニブ）：
2019508440.tif 000026
ＢＭＳ−９０６０２４：
2019508440.tif 000027
カルボプラチン：
2019508440.tif 000028
ＣＧＫ７３３：
2019508440.tif 000029
シスプラチン：
2019508440.tif 000030
ＣＰＩ−１６９：
2019508440.tif 000031
ＣＰＩ−２０３：
2019508440.tif 000032
ドセタキセル：
2019508440.tif 000033
ドキソルビシン：
2019508440.tif 000034
ＥＰＺ−００４７７７：
2019508440.tif 000035
ＥＰＺ００５６８７：
2019508440.tif 000036
ＥＰＺ−５６７６（ピノメトスタット）：
2019508440.tif 000037
ＥＰＺ−６４３８（タゼメトスタット）：
2019508440.tif 000038
エルロチニブ：
2019508440.tif 000039
エトポシド：
2019508440.tif 000040
ＦＬＩ０６：
2019508440.tif 000041
フルオロウラシル：
2019508440.tif 000042
ＧＤＣ−０４４９（ビスモデギブ（Vismodegib））：
2019508440.tif 000043
ゲムシタビン：
2019508440.tif 000044
ＧＳＫ１２６：
2019508440.tif 000045
ＧＳＫ１３２４７２６Ａ（Ｉ−ＢＥＴ７２６）：
2019508440.tif 000046
ＧＳＫ３４３：
2019508440.tif 000047
ＧＳＫ−Ｊ１：
2019508440.tif 000048
ＧＳＫ１２１０１５１Ａ（Ｉ−ＢＥＴ１５１）：
2019508440.tif 000049
イリノテカン：
2019508440.tif 000050
（＋）−ＪＱ１：
2019508440.tif 000051
ラパチニブ：
2019508440.tif 000052
ＬＤＥ２２５（ソニデギブ（Sonidegib））：
2019508440.tif 000053
ＬＹ２６０３６１８：
2019508440.tif 000054
ＬＹ−３０３９４７８：
2019508440.tif 000055
メナジオン：
2019508440.tif 000056
メトトレキサート：
2019508440.tif 000057
ＭＫ−０７５２：
2019508440.tif 000058
ＭＬＮ８２３７（アリセルチブ（Alisertib））：
2019508440.tif 000059
ＭＳ４３６：
2019508440.tif 000060
ヌトリン−３Ａ：
2019508440.tif 000061
オバトクラックス：
2019508440.tif 000062
ＯＴＸ０１５：
2019508440.tif 000063
パクリタキセル：
2019508440.tif 000064
パノビノスタット：
2019508440.tif 000065
ペメトレキセド：
2019508440.tif 000066
ＰＦ−０４２１７９０３：
2019508440.tif 000067
ＰＦ−３０８４０１４：
2019508440.tif 000068
ＳＡＨＡ（ボリノスタット）：
2019508440.tif 000069
ＳＧＣ０９４６：
2019508440.tif 000070
ＳＮＤＸ−２７５（エンチノスタット）：
2019508440.tif 000071
タラデギブ（Taladegib）：
2019508440.tif 000072
テモゾロミド：
2019508440.tif 000073
トポテカン：
2019508440.tif 000074
ＴＷ−３７：
2019508440.tif 000075
ビンクリスチン：
2019508440.tif 000076
【００１８】
〔発明の詳細な説明〕
別に定義されない限り、ここで使用される全ての技術用語及び科学用語は、この発明の属する分野における通常の知識を有する者によって一般に理解されるものと同じ意味を有する。ここに記載されたものと類似又は同等の方法及び材料は、本発明の実施又は試験に使用され得るが、適切な方法及び材料は以下に記載される。
【００１９】
ここに言及された全ての刊行物、特許出願、特許、及びその他の参考文献は、その全体が参照により援用される。
【００２０】
別に示されない限り、この出願で使用される命名法は、ＩＵＰＡＣの系統的命名法に基づく。
【００２１】
別に示されない限り、ここの構造における炭素、酸素、硫黄、又は窒素原子上に現れるどの開いた原子価も水素の存在を示す。
【００２２】
置換基の数を示すとき、用語「１つ以上の」は、１つの置換基から最大置換可能数の範囲、すなわち１つの水素の置換から全ての水素の置換までを指す。
【００２３】
用語「任意の」又は「任意に」は、続いて記載される事象又は状況が生じ得るが生じる必要がないこと、また、その記載が、事象又は状況が生じる場合と生じない場合の両方を含むことを意味する。
【００２４】
用語「薬学的に許容される塩」は、生物学的に又はその他の点で望ましくないものではない塩を意味する。薬学的に許容される塩は、酸付加塩及び塩基付加塩の両方を含む。
【００２５】
用語「薬学的に許容される酸付加塩」は、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、炭酸、リン酸などの無機酸、並びに脂肪族、環状脂肪族、芳香族、芳香脂肪族、複素環式、カルボン酸及びスルホン酸のクラスから選択される有機酸、例えば、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、グルコン酸、乳酸、ピルビン酸、シュウ酸、リンゴ酸、マレイン酸、マロン酸（maloneic acid）、コハク酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、アスパラギン酸、アスコルビン酸、グルタミン酸、アントラニル酸、安息香酸、ケイ皮酸、マンデル酸、エンボン酸、フェニル酢酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸及びサリチル酸などで形成された塩で、薬学的に許容されるものを意味する。
【００２６】
用語「薬学的に許容される塩基付加塩」は、有機又は無機塩基で形成された塩で、薬学的に許容されるものを意味する。許容される無機塩基の例は、ナトリウム、カリウム、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、鉄、亜鉛、銅、マンガン及びアルミニウムの塩を含む。薬学的に許容される有機非毒性塩基由来の塩は、第一級、第二級及び第三級アミン、天然の置換アミン、環状アミン及び塩基性イオン交換樹脂を含む置換アミン類（例えば、イソプロピルアミン、トリメチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、トリプロピルアミン、エタノールアミン、２−ジエチルアミノエタノール、トリメタミン、ジシクロヘキシルアミン、リジン、アルギニン、ヒスチジン、カフェイン、プロカイン、ヒドラバミン、コリン、ベタイン、エチレンジアミン、グルコサミン、メチルグルカミン、テオブロミン、プリン類、ピペリジン（piperizine）、ピペリジン（piperidine）、Ｎ−エチルピペリジン及びポリアミン樹脂類など）の塩を含む。
【００２７】
ここで使用される立体化学の定義及び規定は、一般的にS. P. Parker１００；及びEliel, E. and Wilen, S.１０１に従う。光学的に活性な化合物を記載する際に、接頭語Ｄ及びＬ、又はＲ及びＳが使用され、そのキラル中心の周りでの分子の絶対配置を意味する。対象とするキラル中心に結合した置換基は、Cahn, Ingold and Prelog１０２のシーケンスルール（Sequence Rule）に従ってランク付けされる。接頭語Ｄ及びＬ、又は（＋）及び（−）は、化合物による平面偏光の回転の符号を示すために用いられ、（−）又はＬは化合物が左旋性であることを示す。接頭語（＋）又はＤを有する化合物は、右旋性である。
【００２８】
用語「医薬組成物」及び「医薬製剤」（又は「製剤」）は、互換的に使用され、哺乳動物、例えばそれを必要とするヒトに投与される、薬学的に許容される添加剤とともに治療的有効量の医薬品有効成分を含む混合物又は溶液を意味する。
【００２９】
用語「薬学的に許容される」は、一般的に安全であり、非毒性であり、生物学的にもその他の点でも望ましくないものではなく、ヒトだけでなく動物の医薬用途について許容される、薬学的組成物を調製するのに有用な物質の属性を意味する。
【００３０】
用語「薬学的に許容される添加剤」、「薬学的に許容される担体」及び「治療的に不活性な添加剤」は、互換的に使用可能であり、医薬製品を製造する際に使用される、例えば崩壊剤、結合剤、充填剤、溶媒、緩衝剤、等張化剤、安定剤、抗酸化剤、界面活性剤、担体、希釈剤又は潤滑剤など、治療活性を有さず、投与される対象に対して非毒性である、医薬組成物中の任意の薬学的に許容される成分を意味する。
【００３１】
用語「阻害剤」は、特定のリガンドの特定の受容体又は酵素への結合に競合する、減少させる又は妨げる化合物、及び／又は特定のタンパク質、例えば受容体又は酵素の活性を減少させる又は妨げる化合物を意味する。
【００３２】
「個体」又は「対象」は、哺乳動物である。哺乳動物は、家畜動物（例えば、ウシ、ヒツジ、ネコ、イヌ、ウマ）、霊長類（例えば、ヒト、及び例えばサルなどの非ヒト霊長類）、ウサギ、及びげっ歯類（例えば、マウス及びラット）を含むが、これらに限定されるものではない。ある実施態様において、個体又は対象はヒトである。
【００３３】
ここで使用する用語「動物」は、ヒト及び非ヒト動物を含む。一実施態様では、「非ヒト動物」は、哺乳動物、例えばラット又はマウスなどのげっ歯類である。一実施態様では、非ヒト動物は、マウスである。
【００３４】
用語「半数効果濃度」（ＥＣ５０）は、特定のｉｎ  ｖｉｎｏ効果の最大値の５０％を得るために必要な、特定の化合物又は分子の血漿濃度を意味する。
【００３５】
用語「治療的有効量」（又は「有効量」）は、対象に投与されたとき、ここに記載の（i）特定の疾患、状態、又は障害を治療又は予防する、（ii）特定の疾患、状態、又は障害の１つ以上の症状を軽減、改善又は排除する、又は（iii）特定の疾患、状態、又は障害の１つ以上の症状の発現を防止する又は遅らせる、本発明の化合物又は分子の量を意味する。治療的有効量は、化合物、治療される病状、治療される疾患の重症度、対象の年齢及び相対的健康度、投与の経路及び形態、担当の医師又は獣医師の判断、及び他の要因に応じて変化するであろう。
【００３６】
病状の「治療」という用語は、病状を阻害すること、すなわち病状又はその臨床症状の進行を阻止すること、又は病状を緩和すること、すなわち病状又はその臨床症状の一時的又は永続的退行を引き起こすことを含む。
【００３７】
用語「腫瘍性疾患を評価すること」は、本発明の方法が、個体が腫瘍性疾患を有する又は腫瘍性疾患を発症するリスクがあるかどうかを評価することにおいて、例えば医師を含む医学専門家を手助けすることを示すために使用される。遺伝子パネルのレベルは、１つ以上の参照レベルと比較して、個体が腫瘍性疾患を有するかどうか、又は個体が腫瘍性疾患を発症する又は腫瘍性疾患の過程の前兆となるリスクがあるかどうかを示す。一実施態様において、腫瘍性疾患を評価するという用語は、本発明の方法が、個体が腫瘍性疾患を有するか否かを評価することにおいて、医学専門家を手助けすることを示すために使用される。これらの実施態様において、遺伝子パネルのレベルは、１つ以上の参照レベルと比較して、個体が腫瘍性疾患を有するかどうかを示す。
【００３８】
用語「治療法を評価すること」は、本発明の方法が、腫瘍性疾患を有する患者が有効な量のＬＳＤ１阻害剤を用いる治療を受けるべきかどうかを評価することにおいて、例えば医師を含む医学専門家を手助けすることを示すために使用される。参照レベルより高いレスポンダー遺伝子のレベル、及び／又は参照レベルより低いノンレスポンダー遺伝子のレベルは、患者が有効な量のＬＳＤ１阻害剤を用いる治療を受けるべきであることを示す。ある実施態様において、用語「参照レベルで」は、参照レベル又は参照レベルと１％まで、２％まで、３％まで、４％まで、５％まで異なるレベルと本質的に同じである個体又は患者からの試料中の遺伝子パネルの遺伝子のレベルを指す。
【００３９】
ある実施態様において、用語「参照レベルより高い」は、参照レベルと比較して、ここに記載された方法によって決定された、参照レベルより高い又は５％、１０％、２０％、２５％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％、１００％又はより大きい全体の増加の個体又は患者からの試料遺伝子パネルの遺伝子のレベルを指す。ある実施態様において、増加という用語は、個体又は患者からの試料中の遺伝子パネルの遺伝子のレベルにおける増加であって、その増加は参照レベル、例えば参照試料から予め決められたものと比較して少なくとも約１．７５−、２−、３−、４−、５−、６−、７−、８−、９−、１０−、１５−、２０−、２５−、３０−、４０−、５０−、６０−、７０−、７５−、８０−、９０−、又は１００倍高いことを示す。
【００４０】
ある実施態様において、用語「減少」又は「低い」は、参照レベルと比較して、ここに記載された方法によって決定された、参照レベルより低い又は５％、１０％、２０％、２５％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又はより大きい全体の減少の個体又は患者からの試料遺伝子パネルの遺伝子のレベルを指す。ある実施態様において、減少という用語は、個体又は患者からの試料中の遺伝子パネルの遺伝子のレベルにおける減少であって、その減少したレベルは、参照レベル、例えば参照試料から予め決められたものと比較して多くとも約０．９−、０．８−、０．７−、０．６−、０．５−、０．４−、０．３−、０．２−、０．１−、０．０５−、又は０．０１倍である、又はより低いことを示す。
【００４１】
ここで使用される用語「バイオマーカー」は、哺乳動物の組織又は細胞の中又は上に標準的な方法（又はここで開示された方法）によって検出され得る、哺乳動物の細胞又は組織の、例えばＬＳＤ１阻害剤（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン  ビス−ヒドロクロリドによるＬＳＤ１阻害に基づく治療レジメンへの感受性についての予測的、診断的及び／又は予後的であり得る、遺伝子、発現又は存在を一般的に指す。ある実施態様において、そのようなバイオマーカーのレベルは、参照試料について観察されたものより高い又は低いことが決定される。
【００４２】
ここで使用される用語「比較すること」は、個体又は患者からの試料中のバイオマーカーのレベルを、この記載のどこかで特定されたバイオマーカーの参照レベルと比較することを指す。ここで使用される比較は、通常、対応するパラメーター又は値の比較を指すと理解され、例えば、絶対量は絶対参照量と比較される一方で、濃度は参照濃度と比較され、又は試料中のバイオマーカーから得られる強度シグナルは、参照試料から得られる同じ型の強度シグナルと比較される。比較は手動又はコンピューター支援により実行され得る。このように、比較は計算装置（例えば、ここで開示されたシステムの）によって実行され得る。個体又は患者からの試料中のバイオマーカーの測定又は検出されたレベル、及び参照レベルの値は、例えば、互いに比較され得て、前記比較は比較のためのアルゴリズムを実行するコンピュータープログラムによって自動的に実行され得る。前記評価を実行するコンピュータープログラムは、適切な出力フォーマットにおける望ましい評価を提供するであろう。コンピューター支援の比較にとって、決定された量の値は、コンピュータープログラムによってデータベースにおいて分類される適切な参照に対応する値と比較され得る。コンピュータープログラムは比較の結果をさらに評価し得る、すなわち適切な出力フォーマットにおける望ましい評価を自動的に提供する。コンピューター支援の比較にとって、決定された量の値は、コンピュータープログラムによってデータベースにおいて分類される適切な参照に対応する値と比較され得る。コンピュータープログラムは比較の結果をさらに評価し得る、すなわち適切な出力フォーマットにおける望ましい評価を自動的に提供する。
【００４３】
ここで使用されるバイオマーカーを「検出すること」という用語は、この中のどこかに記載される適切な検出の方法を採用している試料においてバイオマーカーの量の存在を検出する方法を指す。
【００４４】
ここで使用されるバイオマーカーのレベルを「測定すること」という用語は、バイオマーカーの定量、例えばこの中のどこかに記載される適切な検出の方法を採用している試料においてバイオマーカーのレベルを決定することを指す。
【００４５】
用語「治療法の効果をモニターすること」は、ＬＳＤ１阻害剤を用いる治療前及び／又は治療中の患者からの連続的なものを含めて、少なくとも１回は試料が得られること、及び治療法が有効であるか否かの兆候を得るために遺伝子パネルレベルが測定されることを示すために使用される。
【００４６】
治療法の効き目をモニターすることにおいて、遺伝子パネルレベルは測定され、一実施態様において遺伝子パネルの参照値と比較される、又は、さらなる実施態様において、より早い時点、例えば、前記患者が既に治療中であった間又は前記患者における治療の開始前に、同じ患者から得られた試料中の遺伝子パネルと比較される。
【００４７】
ここで「患者」又は「対象」は、１つ以上の腫瘍性疾患の兆候、症状若しくは他の指標を経験している又は経験した、治療の対象となる任意の単一のヒト対象である。対象として含めることを意図しているのは、どの臨床上の兆候も示していない臨床研究試験に関係している任意の対象、又は疫学研究に関係している対象、又はかつてコントロールとして使用された対象である。対象は以前にＬＳＤ１阻害剤又は他の薬物で治療されていても、そのように治療されていなくてもよい。対象は、ここで治療が開始されるときに、追加の薬物が使用されることにナイーブであってもよい、すなわち、対象は以前に、例えば、「ベースライン」（すなわち、例えば治療が開始される前の対象のスクリーニングの日など、ここでの治療方法における薬物Ｄの最初の用量の投与前の時点で）でＬＳＤ１阻害剤以外の治療法で治療されていなくてもよい。そのような「ナイーブ」の対象は一般的にそのような追加の薬物での治療の候補であると考えられる。
【００４８】
ここで使用される語句「診断／評価を提供すること」は、患者の試料中の遺伝子パネルレベルに関連して生成された情報又はデータを使用して、患者における腫瘍性疾患を診断／評価することを指す。情報又はデータは、書面、口頭又は電子のいずれの形式であってもよい。いくつかの実施態様において、生成された情報又はデータを使用することは、連絡、提示、報告、保存、送付、転送、供給、伝達、分配又はそれらの組合せを含む。いくつかの実施態様において、連絡、提示、報告、保存、送付、転送、供給、伝達、分配又はそれらの組合せは、計算装置、解析装置又はそれらの組合せによって行われる。いくつかのさらなる実施態様において、連絡、提示、報告、保存、送付、転送、供給、伝達、分配又はそれらの組合せは、実験又は医学の専門家によって行われる。いくつかの実施態様において、情報又はデータは、遺伝子パネルレベルと参照レベルの比較を含む。
【００４９】
ここで使用される語句「治療を推奨すること」は、患者の試料中の遺伝子パネルレベルに関連して生成された情報又はデータを使用して、治療法で適切に治療される又は適切に治療されない患者を同定することを指す。いくつかの実施態様において、治療法はＬＳＤ１阻害剤を含み得る。いくつかの実施態様において、語句「治療／治療法を推奨すること」は、有効な量のＬＳＤ１阻害剤が投与されることの適用を必要とする患者の同定を含む。いくつかの実施態様において、治療を推奨することは、投与されるＬＳＤ１阻害剤の量が適用されることを推奨することを含む。ここで使用される語句「治療を推奨すること」は、ＬＳＤ１阻害剤を含む治療法に多かれ少なかれ応答する可能性があるとして同定又は選択された患者のためにＬＳＤ１阻害剤を含む治療法を提案又は選択するために生成された情報又はデータを使用することも指し得る。使用又は生成された情報又はデータは、書面、口頭又は電子のいずれの形式であってもよい。いくつかの実施態様において、生成された情報又はデータを使用することは、連絡、提示、報告、保存、送付、転送、供給、伝達、分配又はそれらの組合せを含む。いくつかの実施態様において、連絡、提示、報告、保存、送付、転送、供給、伝達、分配又はそれらの組合せは、計算装置、解析装置又はそれらの組合せによって行われる。いくつかのさらなる実施態様において、連絡、提示、報告、保存、送付、転送、供給、伝達、分配又はそれらの組合せは、実験又は医学の専門家によって行われる。いくつかの実施態様において、情報又はデータは、遺伝子パネルレベルと参照レベルの比較を含む。いくつかの実施態様において、情報又はデータは、患者がＬＳＤ１阻害剤を含む治療法で適切に治療される又は適切に治療されないことの表示を含む。
【００５０】
ある実施態様において、用語「参照レベル」はここで、予め決められた値を指す。この文脈において、「レベル」は絶対量、相対量又は濃度、及びそれらに相関するか又はそれらから誘導され得る任意の値又はパラメーターを含む。当業者が理解するように、参照レベルは予め決められて、例えば、特異性及び／又は感度の観点でいつもの要件を満たすために設定される。これらの要件は例えば、規制機関によって変わり得る。例えば、定量の感度又は特異性が、それぞれ特定の限度値、例えばそれぞれ８０％、９０％、９５％又は９８％に設定されなければならないことがあり得る。これらの要件は正又は負の予測値の観点でも定義され得る。しかしながら、本発明において与えられる教示に基づいて、当業者がそれらの要件を満たす参照レベルに到達することはいつも可能であろう。一実施態様において、参照レベルは健康個体からの参照試料において決定される。一実施態様における参照レベルは、患者が属する疾患全体からの参照試料において予め決定された。ある実施態様において、参照レベルは、例えば、調査された疾患実体における値の全体的な分布の２５％から７５％の間の任意のパーセンテージで設定され得る。別の実施態様において、参照レベルは、調査された疾患実体からの参照試料における値の全体的な分布から決定される中央値、三分位値又は四分位値に設定され得る。一実施態様において、参照レベルは、調査された疾患実体からの参照試料における値の全体的な分布から決定される中央値に設定され得る。参照レベルは、例えば年齢、性別又はサブ集団などの様々な生理学的パラメーター、及び、ここで参照される遺伝子パネルレベルの決定のために使用される方法によって変わり得る。一実施態様において、参照試料は、本発明の方法を受ける個体又は患者からの試料と本質的に同じ型の細胞、組織、臓器又は体液源からのものであり、例えば、本発明により、個体における遺伝子パネルレベルを決定するために血液が試料として使用される場合、参照レベルは血液又はその一部においても決定される。
【００５１】
本発明の文脈の中で、語句「に応答する」は、ここに記載された障害に、罹患している、罹患すると疑われている若しくは罹患しやすい、又は診断された患者が、ＬＳＤ１阻害剤を含む治療法に応答することを示す。
【００５２】
用語「試料」は、体液の試料、分離された細胞の試料又は組織又は臓器からの試料を指す。体液の試料は周知の技術から得ることが可能であり、血液、血漿、血清、尿、リンパ液、痰、腹水、気管支洗浄液若しくは他の体液分泌物又はそれらの派生物を含む。組織又は臓器の試料は、任意の組織又は臓器から、例えば、生検により得られ得る。分離された細胞は体液又は組織又は臓器から、例えば遠心分離又は細胞選別などの分離技術によって得られ得る。例えば、細胞の、組織の、又は臓器の試料はバイオマーカーを発現又は生産するそれらの細胞、組織、又は臓器から得られ得る。試料は凍結されていても、新鮮でも、固定（例えばホルマリン固定）されていても、遠心分離されていても、及び／又は包埋（パラフィン包埋）などされていてもよい。試料中のマーカーの量を評価するより前に、細胞試料はもちろん様々な周知の収集後の調製及び保存技術（例えば、核酸及び／又はタンパク質の抽出、固定、保存、凍結、限外ろ過、濃縮、蒸発、遠心分離など）を受けることができる。同様に、生検も収集後の調製及び保存技術、例えば固定を受け得る。
【００５３】
ここで使用される語句「患者を選択すること」は、患者の試料中の遺伝子パネルレベルに関連して生成された情報又はデータを使用して、ＬＳＤ１阻害剤を含む治療法から恩恵を受ける可能性がより高い又は恩恵を受ける可能性がより低い患者を同定又は選択することを指す。使用又は生成された情報又はデータは、書面、口頭又は電子のいずれの形式であってもよい。いくつかの実施態様において、生成された情報又はデータを使用することは、連絡、提示、報告、保存、送付、転送、供給、伝達、分配又はそれらの組合せを含む。いくつかの実施態様において、連絡、提示、報告、保存、送付、転送、供給、伝達、分配又はそれらの組合せは、計算装置、解析装置又はそれらの組合せによって行われる。いくつかのさらなる実施態様において、連絡、提示、報告、保存、送付、転送、供給、伝達、分配又はそれらの組合せは、実験又は医学の専門家によって行われる。いくつかの実施態様において、情報又はデータは、遺伝子パネルレベルと参照レベルの比較を含む。いくつかの実施態様において、情報又はデータは、患者がＬＳＤ１阻害剤を含む治療法に応答する可能性が高い又は可能性が低いことの表示を含む。
【００５４】
ここで使用される語句「治療法を選択すること」は、患者の試料中の遺伝子パネルレベルに関連して生成された情報又はデータを使用して、患者のための治療法を同定又は選択することを指す。いくつかの実施態様において、治療法はＬＳＤ１阻害剤を含み得る。いくつかの実施態様において、語句「治療法を同定すること／選択すること」は、有効な量のＬＳＤ１阻害剤が投与されることの適用を必要とする患者の同定を含む。いくつかの実施態様において、治療を推奨することは、投与されるＬＳＤ１阻害剤の量が適用されることを推奨することを含む。ここで使用される語句「治療を推奨すること」は、ＬＳＤ１阻害剤を含む治療法に多かれ少なかれ応答する可能性があるとして同定又は選択された患者のためにＬＳＤ１阻害剤を含む治療法を提案又は選択するために生成された情報又データを使用することも指し得る。使用又は生成された情報又はデータは、書面、口頭又は電子のいずれの形式であってもよい。いくつかの実施態様において、生成された情報又はデータを使用することは、連絡、提示、報告、保存、送付、転送、供給、伝達、分配又はそれらの組合せを含む。いくつかの実施態様において、連絡、提示、報告、保存、送付、転送、供給、伝達、分配又はそれらの組合せは、計算装置、解析装置又はそれらの組合せによって行われる。いくつかのさらなる実施態様において、連絡、提示、報告、保存、送付、転送、供給、伝達、分配又はそれらの組合せは、実験又は医学の専門家によって行われる。いくつかの実施態様において、情報又はデータは、遺伝子パネルレベルと参照レベルの比較を含む。いくつかの実施態様において、情報又はデータは、ＬＳＤ１阻害剤を含む治療法が患者に適していることの表示を含む。
【００５５】
用語「レスポンダー遺伝子」は、ＡＳＣＬ１、ＨＯＸＡ１０、ＮＣＡＭ１、ＮＣＡＭ２、ＮＥＵＲＯＤ１、ＤＤＣ、ＧＲＰ、ＫＲＴ８、ＥＮＯ２、ＡＶＰ、ＯＸＴ、ＳＹＰ、ＣＨＧＡ、ＣＨＧＢ、ＳＯＸ２１及びＢＣＬ２を含む遺伝子の群を指す。
【００５６】
用語「ノンレスポンダー遺伝子」は、がん遺伝子ＭＹＣを指す。
【００５７】
用語「固形腫瘍」は、嚢胞又は液体領域を通常は含まない組織の以上な塊に関する。固形腫瘍は、良性（がんではない）、又は悪性（がん）であり得る。異なる型の固形腫瘍は、それらを形成する細胞の型に名前が付けられる。固形腫瘍の例は、肉腫、癌腫、及びリンパ腫である。白血病（血液のがん）は一般的に固形腫瘍を形成しない。
【００５８】
治療的組合せ
詳細には、本発明は、ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩と、表２の化合物及び薬学的に許容されるその塩から選択される１つ以上の医薬品有効成分とを含む治療的組合せを提供する。
【００５９】
詳細には、本発明は、ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩と、ＡＢＴ−１９９、ＡＢＴ−２６３、ＡＢＴ−７３７、ＡＢＴ−８８８、ＡＣＹ−１２１５、ベリノスタット、ベンダムスチン、ＢＧＪ３９８、ＢＭＳ−９０６０２４、カルボプラチン、ＣＧＫ７３３、シスプラチン、ＣＰＩ−１６９、ＣＰＩ−２０３、ドセタキセル、ドキソルビシン、ＥＰＺ−００４７７７、ＥＰＺ００５６８７、ＥＰＺ−５６７６、ＥＰＺ−６４３８、エルロチニブ、エトポシド、ＦＬＩ０６、フルオロウラシル、ＧＤＣ−０４４９、ゲムシタビン、ＧＳＫ１２６、ＧＳＫ１３２４７２６Ａ、ＧＳＫ３４３、ＧＳＫ−Ｊ１、ＧＳＫ１２１０１５１Ａ、イリノテカン、（＋）−ＪＱ１、ラパチニブ、ＬＤＥ２２５、ＬＹ２６０３６１８、ＬＹ−３０３９４７８、メナジオン、メトトレキサート、ＭＫ−０７５２、ＭＬＮ８２３７、ＭＳ４３６、ヌトリン−３Ａ、オバトクラックス、ＯＴＸ０１５、パクリタキセル、パノビノスタット、ペメトレキセド、ＰＦ−０４２１７９０３、ＰＦ−３０８４０１４、ＳＡＨＡ、ＳＧＣ０９４６、ＳＮＤＸ−２７５、タラデギブ（Taladegib）、テモゾロミド、トポテカン、ＴＷ−３７、ビンクリスチン及び薬学的に許容されるそれらの塩のリストから選択される１つ以上の医薬品有効成分とを含む治療的組合せを提供する。
【００６０】
詳細には、本発明は、ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩と、ＢＣＬ２阻害剤、ＢＥＴ阻害剤、ＥＺＨ２阻害剤、ＤＯＴ１Ｌ阻害剤、Ｃｈｋ阻害剤、ＤＮＡアルキル化剤、ＨＤＡＣ阻害剤、トポイソメラーゼ阻害剤、抗有糸分裂剤、オーロラキナーゼ阻害剤及び薬学的に許容されるそれらの塩から選択される１つ以上の医薬品有効成分とを含む治療的組合せを提供する。
【００６１】
詳細には、本発明は、ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩と、ＢＣＬ２阻害剤、ＢＥＴ阻害剤、ＥＺＨ２阻害剤、ＤＯＴ１Ｌ阻害剤及び薬学的に許容されるそれらの塩から選択される１つ以上の医薬品有効成分とを含む治療的組合せを提供する。
【００６２】
詳細には、本発明は、ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩と、ＢＣＬ２阻害剤、ＢＥＴ阻害剤及び薬学的に許容されるそれらの塩から選択される１つ以上の医薬品有効成分とを含む治療的組合せを提供する。
【００６３】
詳細には、本発明は、ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩と、１つのＢＣＬ２阻害剤又は薬学的に許容されるその塩とを含む治療的組合せを提供する。
【００６４】
詳細には、本発明は、ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩と、ＡＢＴ−１９９、ＡＢＴ−２６３、ＡＢＴ−７３７、オバトクラックス、ＴＷ−３７及び薬学的に許容されるそれらの塩のリストから選択される１つのＢＣＬ２阻害剤とを含む治療的組合せを提供する。
【００６５】
詳細には、本発明は、ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩と、１つのＢＥＴ阻害剤又は薬学的に許容されるその塩とを含む治療的組合せを提供する。
【００６６】
詳細には、本発明は、ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩と、ＣＰＩ−２０３、ＧＳＫ１３２４７２６Ａ、ＧＳＫ１２１０１５１Ａ、イリノテカン、（＋）−ＪＱ１、ＭＳ４３６、ＯＴＸ０１５及び薬学的に許容されるそれらの塩のリストから選択される１つのＢＥＴ阻害剤とを含む治療的組合せを提供する。
【００６７】
詳細には、本発明は、ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩と、１つのＥＺＨ２阻害剤又は薬学的に許容されるその塩とを含む治療的組合せを提供する。
【００６８】
詳細には、本発明は、ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩と、ＣＰＩ−１６９、ＥＰＺ００５６８７、ＥＰＺ−６４３８、ＧＳＫ１２６、ＧＳＫ３４３及び薬学的に許容されるそれらの塩のリストから選択される１つのＥＺＨ２阻害剤とを含む治療的組合せを提供する。
【００６９】
詳細には、本発明は、ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩と、１つのＤＯＴ１Ｌ阻害剤又は薬学的に許容されるその塩とを含む治療的組合せを提供する。
【００７０】
詳細には、本発明は、ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩と、ＥＰＺ−００４７７７、ＥＰＺ−５６７６、ＳＧＣ０９４６及び薬学的に許容されるそれらの塩のリストから選択される１つのＤＯＴ１Ｌ阻害剤とを含む治療的組合せを提供する。
【００７１】
詳細には、本発明は、ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩と、１つのＣｈｋ阻害剤又は薬学的に許容されるその塩とを含む治療的組合せを提供する。
【００７２】
詳細には、本発明は、ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩と、ＬＹ２６０３６１８及び薬学的に許容されるその塩から選択される１つのＣｈｋ阻害剤とを含む治療的組合せを提供する。
【００７３】
詳細には、本発明は、ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩と、１つのＤＮＡアルキル化剤又は薬学的に許容されるその塩とを含む治療的組合せを提供する。
【００７４】
詳細には、本発明は、ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩と、ベンダムスチン、カルボプラチン、シスプラチン、テモゾロミド及び薬学的に許容されるそれらの塩のリストから選択される１つのＤＮＡアルキル化剤とを含む治療的組合せを提供する。
【００７５】
詳細には、本発明は、ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩と、１つのＨＤＡＣ阻害剤又は薬学的に許容されるその塩とを含む治療的組合せを提供する。
【００７６】
詳細には、本発明は、ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩と、ＡＣＹ−１２１５、ベリノスタット、パノビノスタット、ＳＡＨＡ、ＳＮＤＸ−２７５及び薬学的に許容されるそれらの塩のリストから選択される１つのＨＤＡＣ阻害剤とを含む治療的組合せを提供する。
【００７７】
詳細には、本発明は、ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩と、１つのトポイソメラーゼ阻害剤又は薬学的に許容されるその塩とを含む治療的組合せを提供する。
【００７８】
詳細には、本発明は、ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩と、エトポシド、イリノテカン、トポテカン及び薬学的に許容されるそれらの塩のリストから選択される１つのトポイソメラーゼ阻害剤とを含む治療的組合せを提供する。
【００７９】
詳細には、本発明は、ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩と、１つのオーロラキナーゼ阻害剤又は薬学的に許容されるその塩とを含む治療的組合せを提供する。
【００８０】
詳細には、本発明は、ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩と、ＭＬＮ８２３７及び薬学的に許容されるその塩のリストから選択される１つのオーロラキナーゼ阻害剤とを含む治療的組合せを提供する。
【００８１】
詳細には、本発明は、ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩と、１つの抗有糸分裂剤又は薬学的に許容されるその塩とを含む治療的組合せを提供する。
【００８２】
詳細には、本発明は、ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩と、ドセタキセル、パクリタキセル、ビンクリスチン及び薬学的に許容されるそれらの塩のリストから選択される１つの抗有糸分裂剤とを含む治療的組合せを提供する。
【００８３】
ある実施態様において、本発明は、ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩と、トポイソメラーゼ又は薬学的に許容されるその塩と、ＤＮＡアルキル化剤又は薬学的に許容されるその塩とを含む治療的組合せを提供する。
【００８４】
ある実施態様において、本発明は、（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン又は薬学的に許容されるその塩と、トポイソメラーゼ又は薬学的に許容されるその塩と、ＤＮＡアルキル化剤又は薬学的に許容されるその塩とを含む治療的組合せを提供する。
【００８５】
ある実施態様において、本発明は、ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩と、エトポシド又は薬学的に許容されるその塩と、カルボプラチン又は薬学的に許容されるその塩とを含む治療的組合せを提供する。
【００８６】
ある実施態様において、本発明は、（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン又は薬学的に許容されるその塩と、エトポシド又は薬学的に許容されるその塩と、カルボプラチン又は薬学的に許容されるその塩とを含む治療的組合せを提供する。
【００８７】
本発明のある実施態様において、治療的組合せは、６．４を超える、特に８を超える、より特に１０を超える、最も特に１５を超えるシナジースコア（synergy score）をもたらす。
【００８８】
本発明のある実施態様において、治療的組合せは、６．４を超える、特に８を超える、より特に１０を超える、最も特に１５を超えるシナジースコアをもたらし、ここでシナジースコアはこのように計算される：
シナジースコア＝ｌｏｇｆＸｌｏｇｆＹΣｍａｘ（０，Ｉｄａｔａ）（Ｉｄａｔａ-ＩＬｏｅｗｅ）
【００８９】
ＬＳＤ１阻害剤
本発明のある態様において、ＬＳＤ１阻害剤はＷＯ２０１１／１３１６９７２、ＷＯ２０１２１３５１１３３及びＷＯ２０１３／０５７３２２４に記載された化合物から選択される。
【００９０】
本発明の特定の実施態様において、ＬＳＤ１阻害剤は次のリストから選択される：
４−［［４−［［［（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル］アミノ］メチル］−１−ピペリジニル］メチル］−安息香酸、（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン、
（Ｒ）−１−（４−（（（ｔｒａｎｓ）−２−フェニルシクロプロピル）アミノ）シクロヘキシル）ピロリジン−３−アミン、
４−（アミノメチル）−Ｎ−（（ｔｒａｎｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサンアミン、
Ｎ１−（（ｔｒａｎｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，３−ジアミン、
Ｎ１−（（ｔｒａｎｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロブタン−１，３−ジアミン、
Ｎ１−（（ｔｒａｎｓ）−２−フェニルシクロプロピル）−２,３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１,３−ジアミン、
Ｎ１−メチル−Ｎ４−（（ｔｒａｎｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン、
Ｎ１−（（ｔｒａｎｓ）−２−（４−ブロモフェニル）シクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン、
Ｎ１−（２−（ｏ−トルイル）シクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン、
Ｎ１−（２−（４−メトキシフェニル）シクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン、
Ｎ１−（２−（２−フルオロフェニル）シクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン、
Ｎ１−（２−（ナフタレン−２−イル）シクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン、
Ｎ−（４’−（（ｔｒａｎｓ）−２−（（４−アミノシクロヘキシル）アミノ）シクロプロピル）−［１，１’−ビフェニル］−３−イル）−２−シアノベンゼンスルホンアミド、
Ｎ１−（（ｔｒａｎｓ）−２−（４−（ピリジン−３−イルメトキシ）フェニル）シクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン、
及び薬学的に許容されるそれらの塩。
【００９１】
本発明の特定の実施態様において、ＬＳＤ１阻害剤は次のリストから選択される：
４−［［４−［［［（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル］アミノ］メチル］−１−ピペリジニル］メチル］−安息香酸、（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン、
（Ｒ）−１−（４−（（（ｔｒａｎｓ）−２−フェニルシクロプロピル）アミノ）シクロヘキシル）ピロリジン−３−アミン、
４−（アミノメチル）−Ｎ−（（ｔｒａｎｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサンアミン、
Ｎ１−（（ｔｒａｎｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，３−ジアミン、
Ｎ１−（（ｔｒａｎｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロブタン−１，３−ジアミン、
Ｎ１−（（ｔｒａｎｓ）−２−フェニルシクロプロピル）−２,３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１,３−ジアミン、
Ｎ１−メチル−Ｎ４−（（ｔｒａｎｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン、
Ｎ１−（（ｔｒａｎｓ）−２−（４−ブロモフェニル）シクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン、
Ｎ１−（２−（ｏ−トルイル）シクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン、
Ｎ１−（２−（４−メトキシフェニル）シクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン、
Ｎ１−（２−（２−フルオロフェニル）シクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン、
Ｎ１−（２−（ナフタレン−２−イル）シクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン、
Ｎ−（４’−（（ｔｒａｎｓ）−２−（（４−アミノシクロヘキシル）アミノ）シクロプロピル）−［１，１’−ビフェニル］−３−イル）−２−シアノベンゼンスルホンアミド、及び
Ｎ１−（（ｔｒａｎｓ）−２−（４−（ピリジン−３−イルメトキシ）フェニル）シクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン、
又は薬学的に許容されるそれらの塩。
【００９２】
本発明の特定の実施態様において、ＬＳＤ１阻害剤は次のリストから選択される：
４−［［４−［［［（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル］アミノ］メチル］−１−ピペリジニル］メチル］−安息香酸  （ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン、
（Ｒ）−１−（４−（（（ｔｒａｎｓ）−２−フェニルシクロプロピル）アミノ）シクロヘキシル）ピロリジン−３−アミン、
４−（アミノメチル）−Ｎ−（（ｔｒａｎｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサンアミン、
Ｎ１−（（ｔｒａｎｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，３−ジアミン、
Ｎ１−（（ｔｒａｎｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロブタン−１，３−ジアミン、
Ｎ１−（（ｔｒａｎｓ）−２−フェニルシクロプロピル）−２,３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１,３−ジアミン、
Ｎ１−メチル−Ｎ４−（（ｔｒａｎｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン、
Ｎ１−（（ｔｒａｎｓ）−２−（４−ブロモフェニル）シクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン、
Ｎ１−（２−（ｏ−トルイル）シクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン、
Ｎ１−（２−（４−メトキシフェニル）シクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン、
Ｎ１−（２−（２−フルオロフェニル）シクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン、
Ｎ１−（２−（ナフタレン−２−イル）シクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン、
Ｎ−（４’−（（ｔｒａｎｓ）−２−（（４−アミノシクロヘキシル）アミノ）シクロプロピル）−［１，１’−ビフェニル］−３−イル）−２−シアノベンゼンスルホンアミド、
Ｎ１−（（ｔｒａｎｓ）−２−（４−（ピリジン−３−イルメトキシ）フェニル）シクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン、
及び薬学的に許容されるそれらの塩。
【００９３】
本発明の特定の実施態様において、ＬＳＤ１阻害剤は、ＧＳＫ２８７９５５２［ＣＡＳ登録番号１４０１９６６−６９−５］、４−［［４−［［［（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル］アミノ］メチル］−１−ピペリジニル］メチル］−安息香酸としても知られる、又は薬学的に許容されるその塩である。
【００９４】
本発明の特定の実施態様において、ＬＳＤ１阻害剤は次のリストから選択される：
（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン、
（Ｒ）−１−（４−（（（ｔｒａｎｓ）−２−フェニルシクロプロピル）アミノ）シクロヘキシル）ピロリジン−３−アミン、
４−（アミノメチル）−Ｎ−（（ｔｒａｎｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサンアミン、
Ｎ１−（（ｔｒａｎｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，３−ジアミン、
Ｎ１−（（ｔｒａｎｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロブタン−１，３−ジアミン、
Ｎ１−（（ｔｒａｎｓ）−２−フェニルシクロプロピル）−２,３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１,３−ジアミン、
Ｎ１−メチル−Ｎ４−（（ｔｒａｎｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン、
Ｎ１−（（ｔｒａｎｓ）−２−（４−ブロモフェニル）シクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン、
Ｎ１−（２−（ｏ−トルイル）シクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン、
Ｎ１−（２−（４−メトキシフェニル）シクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン、
Ｎ１−（２−（２−フルオロフェニル）シクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン、
Ｎ１−（２−（ナフタレン−２−イル）シクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン、
Ｎ−（４’−（（ｔｒａｎｓ）−２−（（４−アミノシクロヘキシル）アミノ）シクロプロピル）−［１，１’−ビフェニル］−３−イル）−２−シアノベンゼンスルホンアミド、
Ｎ１−（（ｔｒａｎｓ）−２−（４−（ピリジン−３−イルメトキシ）フェニル）シクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン、
及び薬学的に許容されるそれらの塩。
【００９５】
本発明の特定の実施態様において、ＬＳＤ１阻害剤は、（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン［ＣＡＳ登録番号１４３１３０４−２１−０］又は薬学的に許容されるその塩ある。
【００９６】
本発明の特定の実施態様において、ＬＳＤ１阻害剤は、（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン［ＣＡＳ登録番号１４３１３０４−２１−０］又はその塩酸塩である。
【００９７】
本発明の特定の実施態様において、ＬＳＤ１阻害剤は、（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン  ビス−ヒドロクロリド［ＣＡＳ登録番号１４３１３０３−７２−８］である。
【００９８】
併用療法
治療的組合せは、腫瘍、がん、及び腫瘍性組織を含む、過剰増殖性疾患又は障害、並びに前がん状態及び非腫瘍性又は非悪性の過剰増殖性障害の治療のために使用され得る。ある実施態様において、本発明の組合せは、併用療法としての投薬レジメンにおいて、抗過剰増殖性特性を有する、又は過剰増殖性障害を治療するために有用である別の化合物と組み合わされる。投薬レジメンの追加の化合物は、好ましくは、互いに悪影響を与えないように、組合せへの相補的な活性を有する。このような化合物は、意図した目的に有効な量で投与され得る。ある実施態様において、治療的組合せは投与レジメンによって投与され、ここでは治療的有効量のＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩は、１日２回から３週ごとに１回（ｑ３ｗｋ）の範囲で投与され、表２の化合物及び薬学的に許容されるその塩から選択される１つ以上の医薬品有効成分は、１日２回から３週ごとに１回の範囲で投与される。
【００９９】
併用療法は、同時又は逐次レジメンとして投与され得る。逐次的に投与されるとき、その組合せは、２回以上の投与で投与され得る。併用投与は、別個の製剤を使用する同時投与、及びどちらかの順序での連続投与を含み、その際、好ましくは、両方の（又は全ての）活性剤がそれらの生物学的活性を同時に発揮する期間がある。
【０１００】
本発明のある特定の実施態様において、ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩は、表２の化合物及び薬学的に許容されるその塩から選択される１つ以上の医薬品有効成分の投与の開始の後の約１〜約１０日の期間に投与され得る。本発明の別の特定の実施態様において、ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩は、表２の化合物及び薬学的に許容されるその塩から選択される１つ以上の医薬品有効成分の投与の開始の前の約１〜１０日の期間に投与され得る。本発明の別の特定の実施態様において、ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩の投与と、表２の化合物及び薬学的に許容されるその塩から選択される１つ以上の医薬品有効成分の投与は同日に開始する。
【０１０１】
本発明のある特定の実施態様において、表２の化合物及び薬学的に許容されるその塩から選択される１つ以上の医薬品有効成分は、ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩の投与の開始の後の約１〜約１０日の期間に投与され得る。本発明の別の特定の実施態様において、表２の化合物及び薬学的に許容されるその塩から選択される１つ以上の医薬品有効成分は、ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩の投与の開始の前の約１〜１０日の期間に投与され得る。本発明の別の特定の実施態様において、表２の化合物及び薬学的に許容されるその塩から選択される１つ以上の医薬品有効成分の投与と、ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩の投与は同日に開始する。
【０１０２】
上記の同時に投与する薬剤の適切な投与量は、現在使用されているものであり、例えば、治療指数を増加させる、又は、毒性又は他の副反応又は結果を軽減させるなどのために、新たに同定された組合せの複合作用（相乗作用）により減じられ得る。
【０１０３】
抗がん療法の特定の実施態様において、治療的組合せは、外科療法及び放射線療法と組み合わされ得る。組合せの量及び投与の相対的なタイミングは、望まれる併用療法の効果を達成するために選択されるであろう。
【０１０４】
本発明のある特定の実施態様において、ここに記載した治療的組合せの投与より前に、ＳＣＬＣ細胞はＬＳＤ１阻害剤の投与を通じて感受性を高められる。
【０１０５】
本発明のある特定の実施態様において、ここに記載した治療的組合せの投与より前に、ＳＣＬＣ細胞は（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン、又は薬学的に許容されるその塩の投与を通じて感受性を高められる。
【０１０６】
本発明のある特定の実施態様において、ここに記載した治療的組合せの投与より前に、ＳＣＬＣ細胞は（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン、又は薬学的に許容されるその塩の、５日間オン／２日間オフ（５／２）の３週間の投与を通じて感受性を高められる。
【０１０７】
本発明のある特定の実施態様において、ここに記載した治療的組合せの投与より前に、ＳＣＬＣ細胞は（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン、又は薬学的に許容されるその塩の、４０μｇ  ｐｅｒ  ｋｇ（ｕｐｋ）の用量で５日間オン／２日間オフ（５／２）の３週間の投与を通じて感受性を高められる。
【０１０８】
本発明のある特定の実施態様において、エトポシド、カルボプラチン及び（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン、又は薬学的に許容されるそれらの塩の治療的組合せの投与より前に、ＳＣＬＣ細胞は（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン、又は薬学的に許容されるその塩の、４０μｇ  ｐｅｒ  ｋｇ（ｕｐｋ）の用量で５日間オン／２日間オフ（５／２）の３週間の投与を通じて感受性を高められる。
【０１０９】
本発明のある特定の実施態様において、５ｍｇ  ｐｅｒ  ｋｇ（ｍｐｋ）の用量で毎日５日間（ｑｄｘ５）のエトポシド、１００ｍｐｋの用量で毎週３週間（ｑｗｋｘ３）のカルボプラチン、及び２０ｕｐｋの用量で５日間オン／２日間オフ（５／２）の３週間の（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン、又は薬学的に許容されるその塩を含む治療的組合せの投与より前に、ＳＣＬＣ細胞は（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン、又は薬学的に許容されるその塩の、４０μｇ  ｐｅｒ  ｋｇ（ｕｐｋ）の用量で５日間オン／２日間オフ（５／２）の３週間の投与を通じて感受性を高められる。
【０１１０】
本発明のある特定の実施態様は、腫瘍性疾患の治療のための方法であって、ＬＳＤ１阻害剤の投与を通じて感受性を高めることに続いて、ここに記載された有効な量の治療的組合せをヒト又は動物に投与することを含む方法に関する。
【０１１１】
本発明のある特定の実施態様は、腫瘍性疾患の治療のための方法であって、（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン又は薬学的に許容されるその塩の投与を通じて感受性を高めることに続いて、ここに記載された有効な量の治療的組合せをヒト又は動物に投与することを含む方法に関する。
【０１１２】
本発明のある特定の実施態様は、腫瘍性疾患の治療のための方法であって、（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン又は薬学的に許容されるその塩の５日間オン／２日間オフ（５／２）の３週間の投与を通じて感受性を高めることに続いて、ここに記載された有効な量の治療的組合せをヒト又は動物に投与することを含む方法に関する。
【０１１３】
本発明のある特定の実施態様は、腫瘍性疾患の治療のための方法であって、（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン又は薬学的に許容されるその塩の４０μｇ  ｐｅｒ  ｋｇ（ｕｐｋ）の用量で５日間オン／２日間オフ（５／２）の３週間の投与を通じて感受性を高めることに続いて、ここに記載された有効な量の治療的組合せをヒト又は動物に投与することを含む方法に関する。
【０１１４】
本発明のある特定の実施態様は、腫瘍性疾患の治療のための方法であって、（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン又は薬学的に許容されるその塩の４０μｇ  ｐｅｒ  ｋｇ（ｕｐｋ）の用量で５日間オン／２日間オフ（５／２）の３週間の投与を通じて感受性を高めることに続いて、エトポシド、カルボプラチン及び（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミンを含む有効な量の治療的組合せをヒト又は動物に投与することを含む方法に関する。
【０１１５】
本発明のある特定の実施態様は、腫瘍性疾患の治療のための方法であって、（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン又は薬学的に許容されるその塩の４０μｇ  ｐｅｒ  ｋｇ（ｕｐｋ）の用量で５日間オン／２日間オフ（５／２）の３週間の投与を通じて感受性を高めることに続いて、５ｍｇ  ｐｅｒ  ｋｇ（ｍｐｋ）の用量で毎日５日間（ｑｄｘ５）のエトポシド、１００ｍｐｋの用量で毎週３週間（ｑｗｋｘ３）のカルボプラチン及び２０ｕｐｋの用量で５日間オン／２日間オフ（５／２）の３週間の（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミンを含む有効な量の治療的組合せをヒト又は動物に投与することを含む方法に関する。
【０１１６】
医薬組成物
別の実施態様は、ここに記載された治療的組合せ及び薬学的に許容される添加剤を含む医薬組成物又は医薬を提供する。
【０１１７】
組成物は、医療実施基準（good medical practice）にかなう方式で、製剤化され、用量化され、投与される。この観点において考慮すべき要因は、治療される特定の疾患、治療される特定の哺乳動物、個々の患者の臨床状態、疾患の原因、薬剤送達部位、投与方法、投与日程、及び医師に知られる他の要因を包含する。
【０１１８】
ここに記載された治療的組合せは、経口、局所（口腔及び舌下を含む）、直腸内、膣内、経皮、非経口、皮下、腹腔内、肺内、皮内、髄腔内及び硬膜外及び鼻腔内、並びに、必要に応じて局所治療、病巣内投与を含む任意の適切な方法により投与されうる。非経口注入は、筋肉内、静脈内、動脈内、腹腔内、又は皮下投与を含む。
【０１１９】
ここに記載された治療的組合せは、例えば、錠剤、散剤、カプセル剤、液剤、分散剤、懸濁剤、シロップ剤、スプレー剤、坐剤、ゲル剤、乳剤、貼付剤などの簡便な投与剤形で投与され得る。そのような組成物は、例えば、希釈剤、担体、ｐＨ調節剤、保存剤、溶解剤、安定剤、湿潤剤、甘味剤、着色剤、香料、浸透圧を変更するための塩、緩衝剤、マスキング剤、抗酸化剤、及びさらなる活性剤などの、医薬製剤における通常の成分を含んでいてもよい。それらは他の治療上価値のある物質もさらに含むことができる。
【０１２０】
典型的な製剤は、ここに記載された治療的組合せと、薬学的に許容される添加剤とを混合することによって調製される。適切な添加剤は当業者に周知であり、例えば、Ansel H.C. et al.１０３；Rowe R.C.１０４及びGennaro A.R. et al.１０５に詳細が記載される。製剤は、薬物（すなわち、本発明の化合物又はその薬学的組成物）の美しい見栄え又は医薬製品（すなわち、医薬）の製造における補助を提供するために、１つ以上の緩衝剤、安定剤、界面活性剤、湿潤剤、滑沢剤、乳化剤、懸濁剤、保存剤、抗酸化剤、不透明化剤、流動化剤、加工助剤、着色剤、甘味剤、香料、香味料、希釈剤及び他の既知の添加剤も含みうる。
【０１２１】
ここに記載された治療的組合せが投与され得る用量は、広い制限の中で変わり得るし、もちろん、各特定の場合における個々の要件に合わせられる。
【０１２２】
適切な経口剤形の一例は、約９０〜３０ｍｇの無水ラクトース、約５〜４０ｍｇのクロスカルメロース、約５〜３０ｍｇのポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）Ｋ３０、及び約１〜１０ｍｇのステアリン酸マグネシウムを配合する、約０．０１ｍｇ〜１０ｍｇのここに記載された治療的組合せを含む錠剤である。粉末成分は最初に混合され、その後ＰＶＰの溶液と混合される。得られた組成物は、乾燥され、造粒され、ステアリン酸マグネシウムと混合され、通常の装置を使用して錠剤の形態に圧縮され得る。
【０１２３】
エアロゾル剤形の一例は、ここに記載された治療的組合せを、例えば、０．１〜１００ｍｇを、適切な緩衝液、例えばリン酸緩衝液に、必要に応じて、等張化剤、例えば塩化ナトリウムなどの塩を加えて、溶解することによって調製され得る。
【０１２４】
別の実施態様は、ここに記載された治療的組合せ及び１つ以上の薬学的に許容される添加剤を含む医薬組成物に関する。
【０１２５】
製品
本発明の別の実施態様において、上記の疾患及び障害の治療に有用な組合せを含有する製品、又は「キット」が提供される。
【０１２６】
一実施態様において、製品は、ここに記載された容器及び治療的組合せを含む。
【０１２７】
本発明の一実施態様は、腫瘍性疾患の治療において有用なここに記載された治療的組合せを含む製品を提供する。
【０１２８】
キットは、容器上に又は容器に付属する、ラベル又は添付文書をさらに含んでもよい。用語「添付文書」は、治療製品の商品パッケージに通例含まれる、治療製品の効能効果、用法、用量、投与、禁忌、及び／又は使用に関する警告についての情報を含む説明書のことを言及するのに使用される。適切な容器は、例えばボトル、バイアル、シリンジ、ブリスターパッグなどを含む。容器はガラス又はプラスチックなどの様々な材料から形成され得る。容器は、病態を治療するのに有効な、組合せ又はその製剤を保持してもよく、無菌アクセスポート（例えば、容器は、皮下注射針によって穿孔可能なストッパーを有する静脈注射用溶液のバッグ又はバイアルとすることができる）を有してもよい。ラベル又は添付文書は、組成物が例えばがんなどの選択した状態を治療するために使用されることを示す。一実施態様において、ラベル又は添付文書は、組合せを含む組成物が、異常な細胞増殖から生じる障害を治療するために使用され得ることを示す。ラベル又は添付文書は、この組成物が、他の障害を治療するために使用され得ることを示してもよい。代替的に、又は追加的に、製品は、薬学的に許容される緩衝剤、例えば注射用静菌水（ＢＷＦＩ）、リン酸緩衝生理食塩水、リンゲル液及びブドウ糖液などを含む第二の容器をさらに含んでもよい。それは、他の緩衝剤、希釈剤、フィルター、針、及びシリンジを含む、商業的及び使用者の観点から望ましい他の材料をさらに含んでもよい。
【０１２９】
キットは、組合せ、及び、存在する場合、第２の医薬製剤、の投与についての説明書をさらに含んでもよい。例えば、キットが、ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩を含む第１の組成物、及び表２の化合物及び薬学的に許容されるその塩から選択される１つ以上の医薬品有効成分を含む第２の医薬製剤を含む場合、そのキットは、必要とする患者への第１及び第２の医薬組成物の、同時、逐次又は別個の投与についての説明書をさらに含んでもよい。
【０１３０】
別の実施態様において、キットは、例えば錠剤又はカプセル剤などの、組合せの固体経口形態の送達に適している。このようなキットは、好ましくは多数の単位用量を含む。このようなキットは、その意図された使用の順序向けの投与量を記したカードを含むことができる。このようなキットの例は、「ブリスターパック」である。ブリスターパックは、包装産業において周知であり、医薬単位剤形を包装するために広く使用される。必要に応じて、記憶の助けとなるものが、例えば、用量が投与され得る治療スケジュール中の日にちを示す、数字、文字若しくは他のマークの形で、又はカレンダー挿入物とともに、提供され得る。
【０１３１】
一実施態様によれば、キットは（ａ）その中にＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩が入った第１の容器；（ｂ）表２の化合物及び薬学的に許容されるその塩から選択される１つ以上の医薬品有効成分が入った第２の容器及び（ｃ）その中に第３の医薬組成物が入った第３の容器であって、第３の医薬製剤は、抗過剰増殖性活性を有する別の化合物を含む。代替的に、又は追加的に、キットは、薬学的に許容される緩衝剤、例えば注射用静菌水（ＢＷＦＩ）、リン酸緩衝生理食塩水、リンゲル液及びブドウ糖液などを含む別の容器を含んでもよい。それは、他の緩衝剤、希釈剤、フィルター、針、及びシリンジを含む、商業的及び使用者の観点から望ましい他の材料をさらに含んでもよい。
【０１３２】
キットが、ＬＳＤ１阻害剤又は薬学的に許容されるその塩を有する第１の容器と、表２の化合物及び薬学的に許容されるその塩から選択される１つ以上の医薬品有効成分との組成物を含む場合、キットは、例えば分割ボトル又は分割ホイルポケットなどの、別個の組成物を収容するための容器を含んでもよいが、別個の組成物は、単一の、分割されていない容器に収容されてもよい。一般的に、キットは別個の成分の投与のための説明書を含む。キットの形態は、別個の成分が、好ましくは異なる剤形（例えば、経口及び非経口）で投与されるとき、異なる投与間隔で投与されるとき、又は組合せの個々の成分の用量調整が処方医により望まれるときに、特に有利である。
【０１３３】
医学的使用
別の実施態様は、治療活性物質としての使用のためのここに記載された治療的組合せに関する。
【０１３４】
別の実施態様は、腫瘍性疾患における使用のためのここに記載された治療的組合せに関する。
【０１３５】
別の実施態様は、腫瘍性疾患の治療のための方法であって、ここに記載された治療的組合せの有効な量をヒト又は動物に投与することを含む方法に関する。
【０１３６】
別の実施態様は、腫瘍性疾患の治療のためのここに記載された治療的組合せの使用に関する。
【０１３７】
別の実施態様は、腫瘍性疾患の治療において有用な医薬の調製のためのここに記載された治療的組合せの使用に関する。
【０１３８】
本発明の特定の実施態様において、ここに記載された治療的組合せは、それを必要とする患者に経口で、例えば経口液剤などで投与される。
【０１３９】
本発明の特定の実施態様において、ここに記載された治療的組合せによって潜在的に治療可能な腫瘍性疾患はがんであり、特に、乳がん、前立腺がん、子宮頸がん、卵巣がん、胃がん、大腸がん（すなわち、結腸がん及び直腸がんを含む）、膵臓がん、肝臓がん、脳腫瘍、神経内分泌がん、肺がん、腎臓がん、造血器悪性腫瘍、メラノーマ及び肉腫からなる群から選択されるがんである。
【０１４０】
本発明の特定の実施態様において、ここに記載された治療的組合せによって潜在的に治療可能ながんは、造血器悪性腫瘍、神経内分泌がん、乳がん、子宮頸がん、卵巣がん、大腸がん、メラノーマ及び肺がんからなる群から選択される。
【０１４１】
本発明の特定の実施態様において、腫瘍性疾患は、血液がん又は肺がん、より特に急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、慢性好中球性白血病、慢性好酸球性白血病、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、有毛細胞白血病、小細胞肺がん（ＳＣＬＣ）及び非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）からなる群から選択されるがんである。
【０１４２】
本発明の特定の実施態様において、腫瘍性疾患は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、慢性好中球性白血病、慢性好酸球性白血病、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、有毛細胞白血病、小細胞肺がん（ＳＣＬＣ）及び非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）からなる群から選択される血液がん又は肺がんである。
【０１４３】
本発明の特定の実施態様において、腫瘍性疾患は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、非ホジキンリンパ腫、小細胞肺がん（ＳＣＬＣ）、甲状腺がん、及びメラノーマからなる群から選択されるがんである。
【０１４４】
本発明の特定の実施態様において、腫瘍性疾患は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、甲状腺がん、メラノーマ、又は小細胞肺がん（ＳＣＬＣ）からなる群から選択されるがんである。
【０１４５】
本発明の特定の実施態様において、腫瘍性疾患は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）及び小細胞肺がん（ＳＣＬＣ）からなる群から選択されるがんである。
【０１４６】
本発明の特定の実施態様において、腫瘍性疾患は、神経内分泌がんである。
【０１４７】
本発明の特定の実施態様において、腫瘍性疾患は、固形腫瘍である。
【０１４８】
本発明の特定の実施態様において、腫瘍性疾患は、肉腫、癌腫、及びリンパ腫から選択される悪性固形腫瘍である。
【０１４９】
本発明の特定の実施態様において、腫瘍性疾患は、肺がんである。
【０１５０】
本発明の特定の実施態様において、腫瘍性疾患は、小細胞肺がん（ＳＣＬＣ）である。
【０１５１】
本発明の特定の実施態様において、腫瘍性疾患は、小細胞肺がん（ＳＣＬＣ）であって、ＳＣＬＣ細胞はＬＳＤ１阻害剤に基づいた治療法に感受性が高い。
【０１５２】
本発明の特定の実施態様において、腫瘍性疾患は、小細胞肺がん（ＳＣＬＣ）であって、ＳＣＬＣ細胞はＬＳＤ１阻害剤に基づいた治療法に感受性が高いものであって、ＬＳＤ１阻害剤に基づいた治療法に対する感受性は、ここに記載されたような予測ｍＲＮＡ発現レベルに基づいて評価される。
【０１５３】
本発明の特定の実施態様において、腫瘍性疾患は、小細胞肺がん（ＳＣＬＣ）であって、ＳＣＬＣ細胞はＬＳＤ１阻害剤に基づいた治療法に感受性が高いものであって、ＬＳＤ１阻害剤に基づいた治療法に対する感受性は：
ａ）患者からの試料中の遺伝子パネルのレベルを測定することであって、遺伝子パネルはレスポンダー遺伝子及びノンレスポンダー遺伝子から選択される１つ以上の遺伝子を含むこと、
ｂ）測定された遺伝子パネルのレベルからのシグネチャースコアを計算すること、
ｃ）計算されたシグネチャースコアを閾値レベルと比較すること、及び
ｄ）シグネチャースコアが閾値レベルを超えるとき、ＬＳＤ１阻害剤を含む治療法により応答しやすい患者を同定すること
を含むｉｎ  ｖｉｔｒｏの方法を使用して評価される。
【０１５４】
本発明の特定の実施態様において、腫瘍性疾患は、小細胞肺がん（ＳＣＬＣ）であって、ＳＣＬＣ細胞はＬＳＤ１阻害剤を用いた単剤治療に応答を示す。
【０１５５】
本発明の特定の実施態様において、腫瘍性疾患は、小細胞肺がん（ＳＣＬＣ）であって、ＳＣＬＣ細胞はＬＳＤ１阻害剤を用いた単剤治療に応答を示すものであって、ＬＳＤ１阻害剤を用いた単剤治療への応答は、ここに記載されたような予測ｍＲＮＡ発現レベルに基づいて評価される。
【０１５６】
本発明の特定の実施態様において、腫瘍性疾患は、小細胞肺がん（ＳＣＬＣ）であって、ＳＣＬＣ細胞はＬＳＤ１阻害剤を用いた単剤治療に応答を示すものであって、ＬＳＤ１阻害剤を用いた単剤治療への応答は：
ａ）患者からの試料中の遺伝子パネルのレベルを測定することであって、遺伝子パネルはレスポンダー遺伝子及びノンレスポンダー遺伝子から選択される１つ以上の遺伝子を含むこと、
ｂ）測定された遺伝子パネルのレベルからシグネチャースコアを計算すること、
ｃ）計算されたシグネチャースコアを閾値レベルと比較すること、及び
ｄ）シグネチャースコアが閾値レベルを超えるとき、ＬＳＤ１阻害剤を含む治療法により応答しやすい患者を同定すること
を含むｉｎ  ｖｉｔｒｏの方法を使用して評価される。
【０１５７】
遺伝子パネル及びｍＲＮＡシグネチャー
表３は本発明において使用された遺伝子の説明を含むリストを提供する。
2019508440.tif 000077
2019508440.tif 000078
2019508440.tif 000079
表３．本発明において使用された遺伝子の説明 (*http://www.ensembl.org/, Cunningham F. et al.１０６).
【０１５８】
本発明は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏのデータに基づいたそのｍＲＮＡ発現シグネチャーが、治療レジメンを含むＬＳＤ１阻害剤に最も応答しやすい患者を同定するのに役立つ可能性がある遺伝子パネル（「マルチ遺伝子パネル」、「遺伝子発現パネル」又は「遺伝子のパネル」とも呼ばれる）を同定する。リストされた遺伝子は、「バリアント」フェノタイプの細胞株を除いたＳＣＬＣクラシックフェノタイプ（一般的に神経内分泌起原の）の特徴である。これらの遺伝子の発現は、追加の腫瘍の設定おいて他の組織学的サブタイプのレスポンダーの患者を同定することにおける予測利益を有するかもしれない。
【０１５９】
ｍＲＮＡシグネチャーは、レスポンダー遺伝子：ＡＳＣＬ１、ＨＯＸＡ１０、ＮＣＡＭ１、ＮＣＡＭ２、ＮＥＵＲＯＤ、ＤＤＣ、ＧＲＰ、ＫＲＴ８、ＥＮＯ２、ＡＶＰ、ＯＸＴ、ＳＹＰ、ＣＨＧＡ、ＣＨＧＢ、ＳＯＸ２１及びＢＣＬ２における高発現によって特徴付けられることが見出された。
【０１６０】
ノンレスポンダーラインはがん遺伝子ＭＹＣの高いレベルによって特徴付けられることがさらに見出された。
【０１６１】
ここにリストされたレスポンダー遺伝子及びノンレスポンダー遺伝子のベースラインの発現レベルは、単独で又は互いの組合せにおいて、細胞株と治療法に抵抗性である患者由来の臨床検体とを区別する複合スコアをもたらす可能性があり、ＬＳＤ１阻害剤を用いる治療法への感受性（応答性）があるものを同定する。
【０１６２】
このようにレスポンダー遺伝子のより高いレベル及び／又はノンレスポンダー遺伝子のより低い発現レベルは、ＬＳＤ１阻害剤を用いる治療法へ応答を示す。いくつかのレスポンダー遺伝子及び／又はノンレスポンダー遺伝子の発現レベルを組み合わせることは、単一の遺伝子発現レベルからの読出しと比較して応答性に関する信頼性が改善されたマルチ遺伝子シグネチャーを提供するかもしれない。
【０１６３】
本発明は、ＬＳＤ１阻害剤に関連してＬＳＤ１阻害剤への応答を同定するためのｍＲＮＡを同定する。
【０１６４】
本発明は、ＬＳＤ１阻害剤に基づいた治療法への感受性を同定するための方法にも関する。
【０１６５】
本発明は、患者がＬＳＤ１阻害剤に基づいた治療法で治療されるときの、患者の腫瘍性疾患への応答を決定するための遺伝子パネルの使用にも関する。
【０１６６】
本発明は、ＬＳＤ１阻害剤を用いた患者における腫瘍性疾患の治療をモニターするためのｍＲＮＡ発現も同定する。
【０１６７】
本発明は、腫瘍性疾患に対するＬＳＤ１阻害剤に基づいた治療法の効果を決定することにおける予測ｍＲＮＡの値も提供する。
【０１６８】
本発明の一実施態様は、腫瘍性疾患を有する、ＬＳＤ１阻害剤を含む治療法に応答しやすい患者を同定するｉｎ  ｖｉｔｒｏの方法、
ａ）患者からの試料中の遺伝子パネルのレベルを測定することであって、遺伝子パネルはレスポンダー遺伝子及びノンレスポンダー遺伝子から選択される１つ以上の遺伝子を含むこと、
ｂ）ａ）で測定された遺伝子パネルのレベルを参照レベルと比較すること、及び
ｃ）ａ）で測定された患者からの試料中の遺伝子パネルのレスポンダー遺伝子のレベルが参照レベルより高いとき、及び／又はａ）で測定された患者からの試料中の遺伝子パネルのノンレスポンダー遺伝子のレベルが参照レベルより低いとき、ＬＳＤ１阻害剤を含む治療法により応答しやすい患者を同定すること
を含む方法を提供する。
【０１６９】
本発明の一実施態様は、腫瘍性疾患を有する、ＬＳＤ１阻害剤を含む治療法に応答しやすい患者を同定するｉｎ  ｖｉｔｒｏの方法、
ａ）患者からの試料中の遺伝子パネルのレベルを測定することであって、遺伝子パネルはレスポンダー遺伝子及びノンレスポンダー遺伝子から選択される１つ以上の遺伝子を含むこと、
ｂ）測定された遺伝子パネルのレベルからシグネチャースコアを計算すること、
ｃ）計算されたシグネチャースコアを閾値レベルと比較すること、及び
ｄ）シグネチャースコアが閾値レベルを超えるとき、ＬＳＤ１阻害剤を含む治療法により応答しやすい患者を同定すること
を含む方法を提供する。
【０１７０】
本発明の別の実施態様は、腫瘍性疾患を有する、ＬＳＤ１阻害剤を含む治療法に応答しやすい患者を同定するｉｎ  ｖｉｔｒｏの方法、
ａ）患者からの試料中の遺伝子パネルのレベルを測定することであって、遺伝子パネルはレスポンダー遺伝子及びノンレスポンダー遺伝子から選択される１つ以上の遺伝子を含むこと、
ｂ）ａ）で測定された遺伝子パネルのレベルを参照レベルと比較すること、
ｃ）ａ）で測定された患者からの試料中の遺伝子パネルのレスポンダー遺伝子のレベルが参照レベルより高いとき、及び／又はａ）で測定された患者からの試料中の遺伝子パネルのノンレスポンダー遺伝子のレベルが参照レベルより低いとき、ＬＳＤ１阻害剤を含む治療法により応答しやすい患者を同定すること、及び
ｄ）有効な量のＬＳＤ１阻害剤を投与すること
を含む方法を提供する。
【０１７１】
本発明の一実施態様は、腫瘍性疾患を有する、ＬＳＤ１阻害剤を含む治療法に応答しやすい患者を同定するｉｎ  ｖｉｔｒｏの方法、
ａ）患者からの試料中の遺伝子パネルのレベルを測定することであって、遺伝子パネルはレスポンダー遺伝子及びノンレスポンダー遺伝子から選択される１つ以上の遺伝子を含むこと、
ｂ）測定された遺伝子パネルのレベルからシグネチャースコアを計算すること、
ｃ）計算されたシグネチャースコアを閾値レベルと比較すること、
ｄ）シグネチャースコアが閾値レベルを超えるとき、ＬＳＤ１阻害剤を含む治療法により応答しやすい患者を同定すること、及び
ｅ）有効な量のＬＳＤ１阻害剤を投与すること
を含む方法を提供する。
【０１７２】
本発明の別の実施態様は、腫瘍性疾患を有する、ＬＳＤ１阻害剤を含む治療法に応答しやすい患者を同定するｉｎ  ｖｉｔｒｏの方法、
ａ）治療法の開始より前に患者からの試料中の遺伝子パネルのレベルを測定することであって、遺伝子パネルはレスポンダー遺伝子及びノンレスポンダー遺伝子から選択される１つ以上の遺伝子を含むこと、
ｂ）ａ）で測定された遺伝子パネルのレベルを用いて治療法の開始より前に患者のシグネチャースコアを計算すること、
ｃ）治療法の開始より後に患者からの試料中の遺伝子パネルのレベルを測定すること、
ｄ）ｃ）で測定された遺伝子パネルのレベルを用いて治療法の開始より後に患者のシグネチャースコアを計算すること、
ｅ）治療法の開始より後にｄ）で得られた患者のシグネチャースコアと、治療法の開始より前にｂ）で得られた患者のシグネチャースコアを比較すること、及び
ｆ）治療法の開始より後にｄ）で得られた患者のシグネチャースコアが、治療法の開始より前にｂ）で得られた患者のシグネチャースコアより高いとき、ＬＳＤ１阻害剤を含む治療法により応答する患者を同定すること
を含む方法を提供する。
【０１７３】
本出願において、用語「読出しレベル（readout levels）」は、例えば、正規化リードカウント及びＲＰＫＭ（Ｒｅａｄｓ  ｐｅｒ  Ｋｉｌｏｂａｓｅ  ｏｆ  Ｍｉｌｌｉｏｎ  ｍａｐｐｅｄ  ｒｅａｄｓ）；ＲＴ−ｑＰＣＲ；又はマイクロアレイなどのＲＮＡシーケンシング由来の発現レベルなどの、ｍＲＮＡ発現測定の任意の形式でありうる値を意味する。
【０１７４】
本出願において、用語「正規化リードカウント（normalized read count）」は、ＲＮＡシーケンシングの実験から直接得られ、実験を通して比較できるようにするために正規化されるリードカウントを意味する。
【０１７５】
本出願において、用語「正規化発現レベル（normalized expression level）」は、特定の種類の発現測定において得られ、実験を通して比較できるようにするために正規化される値を意味する（例えば、マイクロアレイからの正規化発現、ＲＮＡシーケンシングからの正規化発現）。
【０１７６】
本発明の一態様において、正規化発現レベルは正規化リードカウントである。
【０１７７】
本発明の一態様において、測定されたレベルはｍＲＮＡ発現レベルである。
【０１７８】
本発明の一態様において、測定されたレベルは、ＲＮＡシーケンシング、ＲＴ−ｑＰＣＲ、又はマイクロアレイ由来のｍＲＮＡ発現レベルである。
【０１７９】
本発明の一態様において、参照レベルは、同じ腫瘍性疾患を有する患者からの標準値である。
【０１８０】
本発明の一態様において、参照レベルは、同じ腫瘍性疾患を有する患者集団において測定されたｍＲＮＡ発現レベルの中央値である。
【０１８１】
本発明の一態様において、遺伝子パネルのある遺伝子についての参照レベルは次のとおりである（正規化リードカウントとして示される）：ＡＳＣＬ１（４５１５．８３）；ＤＤＣ（２００５．０２）；ＧＲＰ（４２６．０１）；ＨＯＸＡ１０（１０．０４）。
【０１８２】
上で報告された参照レベルは、２つの小細胞肺がんの細胞株ＣＳとＣＲの間の対応する遺伝子についてのより低い正規化リードカウントを選択することにより得られたものであって、ＣＳは選択された遺伝子の最も低い発現を有する感受性の細胞株であり、ＣＲは選択された遺伝子の最も高い発現を有する抵抗性の細胞株である。
【０１８３】
ここで使用されるシグネチャースコアは、レスポンダー遺伝子のアップレギュレーション及びノンレスポンダー遺伝子のダウンレギュレーション又はコピー数多型（copy number variation）を示す値から構成される、遺伝子に基づくアルゴリズム由来のスコア（マルチ遺伝子シグネチャー）である。
【０１８４】
閾値レベルより高いシグネチャースコアは、ＬＳＤ１阻害剤を含む治療法への応答を予測する。応答を予測するためのより高い閾値レベルがシグネチャースコアについて選択されると、より高い特異性が得られる。応答を予測するためのより低い閾値レベルがシグネチャースコアについて選択されると、より高い感度が得られる。
【０１８５】
本発明の一実施態様において、閾値レベルは０．４〜０．６のシグネチャースコア１に、特に０．５±２０％、最も特に０．５に対応するものであって、シグネチャースコアは第二主成分を用いる部分的最小二乗回帰（ＰＬＳ）分析によって得られる：
シグネチャースコア  １＝
０．０９００６９３
＋（ＡＳＣＬ１の正規化発現レベル）×０．０００００２１１２９６
＋（ＤＤＣの正規化発現レベル）×０．００００００５３６６５８
＋（ＧＲＰの正規化発現レベル）×０．０００００２９７３４５
＋（ＨＯＸＡ１０の正規化発現レベル）×０．０００２３４７２１
−（ＭＹＣのコピー数多型）×０．０５３７０５６。
【０１８６】
本発明の一実施態様において、閾値レベルは０．４〜０．６のシグネチャースコア２に、特に０．５±２０％、最も特に０．５に対応するものであって、シグネチャースコアは第一主成分を用いる部分的最小二乗回帰（ＰＬＳ）分析によって得られる：
シグネチャースコア  ２＝
０．４８３９１８
＋（ＡＳＣＬ１の正規化発現レベル）×０．０００００１８８０６６
＋（ＤＤＣの正規化発現レベル）×０．０００００１８８０６６
＋（ＧＲＰの正規化発現レベル）×０．０００００３５２０３３
−（ＭＹＣのコピー数多型）×０．０４０７８９８。
【０１８７】
本発明の一実施態様において、閾値レベルは０．４〜０．６のシグネチャースコア３に、特に０．５±２０％、最も特に０．５に対応するものであって、シグネチャースコアは第一主成分を用いる部分的最小二乗回帰（ＰＬＳ）分析によって得られる：
シグネチャースコア  ３＝
０．３９３５６９
＋（ＡＳＣＬ１の正規化発現レベル）×０．０００００１８２７３１
＋（ＤＤＣの正規化発現レベル）×０．０００００１８９６６４
＋（正規化発現レベル）×０．０００００３４２０４６。
【０１８８】
閾値レベルより高いシグネチャースコアはＬＳＤ１阻害剤を用いる治療への応答の高い可能性を示す一方で、前記レベルより低いシグネチャースコアはそのような治療への応答の低い可能性を示す。より高いスコアはより高いＡＳＣＬ１、ＤＤＣ、ＧＲＰ及びＨＯＸＡ１０のｍＲＮＡ発現、並びにＭＹＣにおけるより低いコピー数多型に関連する。
【０１８９】
本発明の一実施態様において、参照レベルはシグネチャースコアの閾値レベルである。
【０１９０】
本発明の一実施態様において、ＬＳＤ１阻害剤を含む治療法への応答を予測するためのシグネチャースコアは次のステップを行うことにより得られ得る：
ａ．ｍ遺伝子を含む遺伝子パネルを選択する、ここでｍは１より大きい整数で、表９に開示された遺伝子の中から選択され、ＨＯＸＡ１０及びＭＹＣであってもよい。
ｂ．特に、例えば表６に記載したような、小細胞肺がん（ＳＣＬＣ）などの神経内分泌腫瘍を起原とする、１つ以上の感受性のがん細胞株のセット及び１つ以上の抵抗性のがん細胞株のセットを選択する。
ｃ．ｎｘｍのマトリックスを生成する、ここでｍは上のように定義され、ｎは選択された小細胞肺がん細胞株の全数である。マトリックスは選択された遺伝子の発現レベル（及び／又はＭＹＣの場合におけるコピー数多型）を含む。遺伝子発現レベルはＲＰＫＭ又は正規化リードカウントとして報告され得る。
ｄ．表６に定義されたように、各細胞株が感受性（sensitive）（「Ｓ」）又は抵抗性（resistant）（「Ｒ」）であること記載するサイズｎの応答ベクトルを生成する。あるいは、このベクトルは各細胞株が「クラシック」（「Ｃ」）又は「バリアント」（「Ｖ」）サブタイプであることを記載し得る。
ｅ．上のポイントｃに記載したマトリックスの分類のための機械学習アルゴリズムを適用する。そのような機械学習アルゴリズムの例は、決定木（decision trees）、サポートベクターマシン（support-vector machines）、ニューラルネットワーク（neural networks）、近傍解析（nearest neighbor analysis）、単純ベイズ（naive Bayes）、ランダムフォレスト（random forest）、部分的最小二乗回帰（partial least square）などを含むがこれらに限定されない。
ｆ．モデルの予測力を最適化するために、その解析に含まれる細胞株及び／又はその解析に含まれない細胞株を用いて適切なクロスバリデーションを行う。
ｇ．シグネチャースコアｙ（ｙ＝ｆ（ｘ））を得るために、機械学習アルゴリズムにとって適切な、式ｆ（ｘ）を選択する。式ｆ（ｘ）は、機械学習アルゴリズムによって計算されるａ１  …  ａｐの係数（ここでｐは与えられたアルゴリズムによって選択される係数の数である）及び選択された遺伝子の発現レベル（ｘ１  …  ｘｍ）のセットを含む。
ｈ．シグネチャースコアがＬＳＤ１阻害療法への感受性又は抵抗性を予測するかどうかを決定するために、機械学習法によって提案されるように、閾値を選択する。
【０１９１】
本発明の特定の実施態様において、遺伝子パネルは、ＡＳＣＬ１、ＭＹＣ、ＨＯＸＡ１０、ＤＤＣ、ＧＲＰ、ＮＣＡＭ１、ＮＣＡＭ２、ＮＥＵＲＯＤ１、ＫＲＴ８、ＥＮＯ２、ＡＶＰ、ＯＸＴ、ＳＹＰ、ＣＨＧＡ、ＣＨＧＢ、ＳＯＸ２１及びＢＣＬ２の群から選択される１つ以上の遺伝子を含む。
【０１９２】
本発明の特定の実施態様において、遺伝子パネルは、ＡＳＣＬ１、ＭＹＣ、ＨＯＸＡ１０、ＤＤＣ、ＧＲＰ、ＮＣＡＭ１、ＮＣＡＭ２、ＮＥＵＲＯＤ１、ＳＯＸ２１及びＢＣＬ２の群から選択される１つ以上の遺伝子を含む。
【０１９３】
本発明の特定の実施態様において、遺伝子パネルは、ＡＳＣＬ１、ＭＹＣ、ＨＯＸＡ１０、ＤＤＣ、ＧＲＰ、ＮＣＡＭ１、ＮＣＡＭ２、ＮＥＵＲＯＤ１、ＳＯＸ２１及びＢＣＬ２の群から選択される２つ、３つ、４つ又は５つの遺伝子を含む。
【０１９４】
本発明の特定の実施態様において、遺伝子パネルは、ＡＳＣＬ１、ＭＹＣ、ＨＯＸＡ１０、ＤＤＣ及びＧＲＰの群から選択される１つ以上の遺伝子を含む。
【０１９５】
本発明の特定の実施態様において、遺伝子パネルは、ＡＳＣＬ１、ＭＹＣ、ＨＯＸＡ１０、ＤＤＣ及びＧＲＰの群から選択される２つ、３つ、４つ又は５つの遺伝子を含む。
【０１９６】
本発明の特定の実施態様において、遺伝子パネルは、ＡＳＣＬ１、ＭＹＣ及びＨＯＸＡ１０の群から選択される１つ以上の遺伝子を含む。
【０１９７】
本発明の特定の実施態様において、遺伝子パネルはＡＳＣＬ１遺伝子を含む。
【０１９８】
本発明の特定の実施態様において、遺伝子パネルはＭＹＣ遺伝子を含む。
【０１９９】
本発明の特定の実施態様において、遺伝子パネルはＨＯＸＡ１０遺伝子を含む。
【０２００】
本発明の特定の実施態様において、遺伝子パネルはＤＤＣ遺伝子を含む。
【０２０１】
本発明の特定の実施態様において、遺伝子パネルはＧＲＰ遺伝子を含む。
【０２０２】
本発明の特定の実施態様において、遺伝子パネルは、１つ、２つ、３つ、４つ又は５つの遺伝子からなる。
【０２０３】
本発明の特定の実施態様において、遺伝子パネルは、２つ、３つ又は４つの遺伝子からなる。
【０２０４】
本発明の特定の実施態様において、レスポンダー遺伝子は、ＡＳＣＬ１、ＨＯＸＡ１０、ＤＤＣ、ＧＲＰ、ＮＣＡＭ１、ＮＣＡＭ２、ＮＥＵＲＯＤ１、ＫＴＲ８、ＥＮＯ２、ＡＶＰ、ＯＸＴ、ＳＹＰ、ＣＨＧＡ、ＣＨＧＢ、ＳＯＸ２１及びＢＣＬ２の群から選択される。
【０２０５】
本発明の特定の実施態様において、レスポンダー遺伝子はＭＹＣから選択される。
【図面の簡単な説明】
【０２０６】
【図１Ａ】７日間処理されたＳＣＬＣ細胞株のパネルにおけるＬＳＤ１阻害剤（すなわち、（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミンのｉｎ  ｖｉｔｒｏの差次的活性である。ＮＣＩ−Ｈ１８７６（図１Ａ）及びＮＣＩ−Ｈ５１０（図１Ｂ）などの「クラシック」神経内分泌細胞株は高いレベルの感受性を維持した。
【図１Ｂ】７日間処理されたＳＣＬＣ細胞株のパネルにおけるＬＳＤ１阻害剤（すなわち、（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミンのｉｎ  ｖｉｔｒｏの差次的活性である。ＮＣＩ−Ｈ１８７６（図１Ａ）及びＮＣＩ−Ｈ５１０（図１Ｂ）などの「クラシック」神経内分泌細胞株は高いレベルの感受性を維持した。
【図２Ａ】ＬＳＤ１阻害剤（すなわち、（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミンは、ｉｎ  ｖｉｖｏ（図２Ａ）及びマウスのｉｎ  ｖｉｖｏ（図２Ｂ）で、ＳＣＬＣ標準治療（ＳＯＣ）エトポシド及びカルボプラチンの効力及び持続期間を改善した。
【図２Ｂ】ＬＳＤ１阻害剤（すなわち、（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミンは、ｉｎ  ｖｉｖｏ（図２Ａ）及びマウスのｉｎ  ｖｉｖｏ（図２Ｂ）で、ＳＣＬＣ標準治療（ＳＯＣ）エトポシド及びカルボプラチンの効力及び持続期間を改善した。
【図３】実施例５による、主成分１（ｔ［１］，ｘ軸）及び主成分２（ｔ［２］，ｙ軸）についての主成分解析スコアプロットはクラシック細胞株（Ｃ，黒色）をバリアント細胞株（Ｖ，灰色）から分離させる。
【図４】表８、表６及びＭＹＣを含む実施例６の遺伝子パネルについてのｍＲＮＡ発現（ｚスコアとして）を示すヒートマップである。これらの遺伝子は、表６の１９の細胞株におけるＬＳＤ１阻害療法への応答を最もよく予測する。より高いｚスコアはよりよい感受性と相関する。
【図５】表６の１９の細胞株における実施例７の神経内分泌遺伝子についてのｍＲＮＡ発現（ｚスコアとして）を示すヒートマップである。感受性の細胞株は、そのような神経内分泌マーカーのより強い発現（より高いｚスコア）を表す。
【図６】実施例８による、第二主成分を用いたＰＬＳ解析によって得られたシグネチャースコアである。スコア_１＞０．５を有する細胞株はＬＳＤ１阻害療法に、より感受性である可能性が高い。
【図７】実施例８による、第一主成分を用いたＰＬＳ解析によって得られたシグネチャースコアである。スコア_２＞０．５を有する細胞株はＬＳＤ１阻害療法に、より感受性である可能性が高い。
【図８】実施例８による、第一主成分を用いたＰＬＳ解析によって得られたシグネチャースコアである。スコア_３＞０．４５を有する細胞株はＬＳＤ１阻害療法に、より感受性である可能性が高い。
【図９】クラシック（ｃ）細胞株Ｈ−５１０Ａにおける、（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミンのｉｎ  ｖｉｖｏ腫瘍増殖阻害である。
【図１０−１】ＳＣＬＣ患者試料におけるｍＲＮＡ発現（ｚスコアとして）パターンを示すヒートマップである。
【図１０−２】ＳＣＬＣ患者試料におけるｍＲＮＡ発現（ｚスコアとして）パターンを示すヒートマップである。
【実施例】
【０２０７】
次の実施例１〜９は発明の説明のために提供される。それらは発明の範囲を限定するものとしてみなすべきではなく、単にその代表例である。
【０２０８】
方法
発現データ
発現データは、Ｉｌｌｕｍｉｎａ，Ｉｎｃ．（Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）の全トランスクリプトームＲＮＡシーケンシング（ＲＮＡ−ｓｅｑ）から得られた。Ｉｌｌｕｍｉｎａ  ＨｉＳｅｑマシンは、５０又は１００ｂｐ長のリードにおいて未加工のベースコールを生成し、これらはいくつかのデータ解析ステップに供される。ＲＮＡ−ｓｅｑは、試料ごとに４０００〜５０００万リードで行われる。この数字は、低発現遺伝子を検出する比較的高い感度を提供すると共に、費用効果が試料の多重化を可能にする。ＲＮＡは、ｐｏｌｙＡ  ＴｒｕＳｅｑ  Ｉｌｌｕｍｉｎａキットによる標準キットとＲＮＡライブラリーによって調製される。一つの細胞株につき１００ｎｇのｍＲＮＡが、各ＲＮＡ−ｓｅｑ反応のために使用される。複数の品質管理手順が、各試料のＲＮＡ−ｓｅｑデータに適用される。Ｉｌｌｕｍｉｎａ  ＨｉＳｅｑソフトウェアは、各レーンにローディングされるクラスター（ＤＮＡ断片）の総数、シーケンシングクオリティフィルター通過パーセント（オーバーローディング及びシーケンシングケミストリーに起因するエラーを同定する）、各シーケンスリードの各ベースのｐｈｒｅｄクオリティスコア、各シーケンスサイクルの全体の平均ｐｈｒｅｄスコア、及び全体のパーセントエラー（参照ゲノムに対するアラインメントに基づく）を報告する。各ＲＮＡ−ｓｅｑ試料について、ミトコンドリアＲＮＡ及びリボソームＲＮＡを含むリードのパーセンテージが計算される。ＦＡＳＴＱＣパッケージが、追加のＱＣメトリクス（ベース分布（base distribution）、シーケンス重複（sequence duplication）、重複数の多いシーケンス（overre resented sequences）及びエンリッチドｋｍｅｒｓ（enriched kmers））並びに図式的要約を提供するために使用される。未加工のリードは、ＧＳＮＡＰ及びＲＮＡＳｅｑデータにとっての推奨オプションを用いて、ヒトゲノム（ｈｇ１９）に対して並べられた。ゲノムシーケンスに加えて、ＧＳＮＡＰはＥｎｓｅｍｂｌ  ｖ７３に基づくヒトスプライスジャンクション及びトランスクリプトのデータベースを与えられる。結果として生じるＳＡＭファイルはその後Ｓａｍｔｏｏｌｓを用いて分類されたＢＡＭファイルに変換される。遺伝子発現値は、次のＲＰＫＭ値（Mortazavi et al.１０７）及びリードカウントの両方として計算される。正規化リードカウントはＲパッケージのＤＥＳｅｑ２を用いて得られた。
【０２０９】
コピー数多型（ＣＮＶ）
コピー数多型データを得るために、ゲノムＤＮＡは抽出され、Ｒｏｃｈｅ  ＮｉｍｂｌｅＧｅｎ（Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ）により標準プロトコールを用いてアレイＣＧＨ解析が行われる。正規化シグナル強度及びコピー数変化はｓｅｇＭＮＴアルゴリズムを用いて得られた。ＣＧＨマイクロアレイは、シリカ表面に光指向性の光化学（Selzer et al.１０８）を用いて直接合成される等温の、４５−〜８５−ｍｅｒのオリゴヌクレオチドプローブを含む。ゲノムＤＮＡ試料はランダムに、より低い分子量種に断片化され、蛍光色素を用いて別個にラベルされる。
【０２１０】
主成分解析
主成分解析はＳｉｍｃａ  ｖ１４（Ｕｍｅｔｒｉｃｓ  ＡＢ，Ｕｍｅa，Ｓｗｅｄｅｎ）を用いて行われた。
【０２１１】
表９におけるデータを生成するために使用されたディファレンシャル遺伝子解析は、ＲパッケージのＤＥＳｅｑ２を用いて１９細胞株についての未加工のリードカウントから開始して行われた。
【０２１２】
細胞株のヒートマップ
色分けされた遺伝子発現レベルを視覚化するために、細胞株のヒートマップ（図４及び５）は、ＧｅｎｅＰａｔｔｅｒｎ  ｖ３．９．４（Reich M. et al.１０９）を用いて生成された。ＧｅｎｅＰａｔｔｅｒｎは正規化リードカウント（表１０で報告される）プラス１の対数の入力を取り込み、試験された細胞株にわたって与えられた遺伝子の全ての発現レベルについてｚスコアを計算することからなる列ベース（row-based）の正規化を適用する。分布の平均に対応する０のｚスコア、及び正又は負の値は、それぞれ平均より高い又は低い遺伝子発現レベルを表す。カラーマッピングはｚスコアを−１．５〜＋１．５の範囲でキャップをつけた、すなわち、＋１．５より高いｚスコアは黒色で示され、−１．５より低いｚスコアは白色で示される。中間値は異なる灰色の陰影で示される。Ｇｅｎｅ  Ｐａｔｔｅｒｎは、遺伝子発現プロファイルに基づいて細胞株をグループ化し、分類するために、階層的クラスタリングを行う。
【０２１３】
実施例１  ＳＣＬＣ細胞株におけるＬＳＤ１阻害剤の特異的な活性
ＳＣＬＣ細胞株における（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミンの差次的な活性は図１Ａ−１Ｂに提示される。（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミンの活性はｉｎ  ｖｉｔｒｏで７日間処理されたＳＣＬＣ細胞株のパネルで評価された。ＮＣＩ−Ｈ１８７６（図１Ａ）及びＮＣＩ−Ｈ５１０（図１Ｂ）などの、「クラシック」神経内分泌系統として特徴付けられた細胞株は、（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミンに対する高レベルの感受性を維持した。
【０２１４】
化合物効力決定は、示された濃度で１５段階の希釈液（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミンの存在下で、加湿インキュベーター内で、小細胞肺がん細胞株を３７℃、５％ＣＯ２、７日間培養することによって行われた。細胞株のそれぞれは、ＡＴＣＣによって推奨される別個に最適化された培地又は細胞株源において増殖され、試験された。
【０２１５】
細胞は液体窒素保存状態から解凍された。細胞が増殖され、期待される倍加時間で分裂されると、スクリーニングは開始された。細胞は黒色の３８４ウェル組織培養処理プレートでの増殖培地中でウェルごとに５００細胞で播種された（アナライザーに記載される場合を除く）。細胞は遠心分離を経てアッセイプレート中で平衡化され、投与モジュールに取り付けられたインキュベーター内に、処理の前に３７℃で２４時間置かれた。処理の時間に、（処理を受けていなかった）アッセイプレートのセットは収集されて、ＡＴＰＬｉｔｅ（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）を加えることによってＡＴＰレベルが測定された。これらのＴゼロ（Ｔ０）プレートはＥｎｖｉｓｉｏｎ  Ｐｌａｔｅ  Ｒｅａｄｅｒｓの超高感度発光を用いて読まれた。処理されたアッセイプレートは（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミンとともに１６８時間インキュベートされた。１６８時間後に、プレートはＡＴＰＬｉｔｅを用いたエンドポイント解析のために展開された。全てのデータポイントは自動化プロセス；品質管理された；を経て収集され、Ｈｏｒｉｚｏｎ  ＣｏｍｂｉｎａｔｏＲｘ  ｐｒｏｐｒｉｅｔａｒｙ  ｓｏｆｔｗａｒｅを用いて解析された。アッセイプレートは次の品質管理基準を通過した場合に受け入れられた：相対ルシフェラーゼ値は実験全体を通じて一貫しており、ｚ因子スコアは０．６より大きく、未処理／ビヒクル対照はプレート上で一貫して挙動した。
【０２１６】
Ｈｏｒｉｚｏｎ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙは、細胞生存の尺度として増殖阻害（Ｇｒｏｗｔｈ  Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ）（ＧＩ）を利用する。ビヒクルの細胞生存は投与の時間（Ｔ０）及び１６８時間後（Ｔ１６８）に測定された。０％のＧＩリーディングは増殖阻害を表さない−（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミンで処理された細胞及びＴ１６８ビヒクルシグナルは一致した。ＧＩ  １００％は完全な増殖阻害を表す−化合物で処理された細胞及びＴ０ビヒクルシグナルは一致した。ＧＩ  １００％のウェル内で投与期間中に細胞数は増加しておらず、この効果レベルでプラトーに達する化合物についての細胞増殖抑制効果を示唆する可能性がある。ＧＩ  ２００％は培養細胞における全ての細胞の完全な死を表す。ＧＩ  ２００％の活性プラトーに達する化合物は細胞傷害性と考えられた。Ｈｏｒｉｚｏｎ  ＣｏｍｂｉｎａｔｏＲｘは次の試験及び方程式を適用することによりＧＩを計算する。
2019508440.tif 000080
ここで、Ｔは試験品のシグナル尺度、Ｖはビヒクル処理されたコントロール尺度、Ｖｏは０時間におけるビヒクルコントロール尺度である。この式はＮａｔｉｏｎａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  ＩｎｓｔｉｔｕｔｅのＮＣＩ−６０ハイスループットスクリーンにおいて使用される増殖阻害計算に由来した。
【０２１７】
実施例２  他の医薬品有効成分と組み合わされたＬＳＤ１阻害剤の相乗効果
表４は相乗スコア、相乗効果の強さを示す値、のヒートマップを提供する。６．４より大きい相乗スコアは有意なものとみなされ、さらなる検証を是認された。（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン（ＮＣＩ−Ｈ１８７、ＮＣＩ−Ｈ１４１７、ＮＣＩ−Ｈ１８７６、ＮＣＩ−Ｈ５１０）への特定の単剤応答を示した細胞株は、ＨＤＡＣ及びＢＥＴ阻害剤、ＤＮＡアルキル化剤、トポイソメラーゼ阻害剤、抗有糸分裂剤、オーロラキナーゼ阻害剤、ＢＣＬ２ファミリー阻害剤及びＣｈｋ阻害剤を含む、広い範囲の薬物クラスの効果への感受性を高められた。同様のレベルの相乗効果は、（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミンに感受性でない細胞株（ＮＳＣＬＣ細胞株、ＳＣＬＣ細胞株ＮＣＩ−Ｈ１０４８、ＮＣＩ−Ｈ４４６及びＳＢＣ−５）において、一様に観察されなかった。これらのデータは、ＬＳＤ１の阻害がＳＣＬＣ細胞株を化学療法及び標的療法による介入に対し広く感受性にする可能性があることを示唆する。
【０２１８】
細胞は液体窒素保存状態から解凍されて、期待される倍加時間に達するまで増殖された。細胞株のそれぞれは、ＡＴＣＣによって推奨される別個に最適化された培地又は細胞株源において増殖され、試験された。
【０２１９】
細胞は黒色の３８４ウェルアッセイプレート中で指定濃度（最適化フェーズで決定された）で播種された。細胞はその後、（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン前処理の前に、２４時間投与モジュールに取り付けられたインキュベーター内で遠心分離を経て平衡化された。アッセイプレートはその後指定濃度の（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン（最適化フェーズで決定された）で処理された。
【０２２０】
（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン処理の時間に、（処理を受けていない）アッセイプレートのセットは収集されて、ＡＴＰＬｉｔｅ（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）を加えることによってＡＴＰレベルが測定された。発光を測定するために、これらのＴゼロ（Ｔ０）プレートはＥｎｖｉｓｉｏｎ  Ｐｌａｔｅ  Ｒｅａｄｅｒｓで読まれた。処理されたアッセイプレートは（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミンとともに第２の化合物での処理の前に９６時間インキュベートされた。この時間の後に、アッセイプレートはその後、９ｘ９拡張されたマトリックスにおいて、エンハンサー化合物の８ポイント段階の希釈液で処理され、別の７２時間インキュベーションの後で収穫された。初めの（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン処理時間からの全体の１６８時間の後で、プレートはＡＴＰＬｉｔｅを用いたエンドポイント解析のために展開された。全てのデータポイントは自動化プロセス；品質管理された；を経て収集され、Ｈｏｒｉｚｏｎ  ＣｏｍｂｉｎａｔｏＲｘ  ｐｒｏｐｒｉｅｔａｒｙ  ｓｏｆｔｗａｒｅを用いて解析された。アッセイプレートは次の品質管理基準を通過した場合に受け入れられた：相対ルシフェラーゼ値は実験全体を通じて一貫しており、ｚ因子スコアは０．６より大きく、未処理／ビヒクル対照はプレート上で一貫して挙動した。
【０２２１】
Ｈｏｒｉｚｏｎ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙは、細胞生存の尺度として増殖阻害（ＧＩ）を利用する。ビヒクルの細胞生存は投与の時間（Ｔ０）及び１６８時間後（Ｔ１６８）に測定される。０％のＧＩリーディングは増殖阻害を表さない−化合物で処理された細胞とＴ１６８ビヒクルシグナルは一致した。ＧＩ１００％は完全な増殖阻害を表す−化合物で処理された細胞とＴ０ビヒクルシグナルは一致した。ＧＩ１００％のウェル内で投与期間中に細胞数は増加しておらず、この効果レベルでプラトーに達する化合物についての細胞増殖抑制効果を示唆する可能性がある。ＧＩ２００％は培養細胞における全ての細胞の完全な死を表す。ＧＩ２００％の活性プラトーに達する化合物は細胞傷害性と考えられた。Ｈｏｒｉｚｏｎ  ＣｏｍｂｉｎａｔｏＲｘは次の試験及び方程式を適用することによりＧＩを計算する。
2019508440.tif 000081
ここで、Ｔは試験品のシグナル尺度、Ｖはビヒクル処理されたコントロール尺度、Ｖｏは０時間におけるビヒクルコントロール尺度である。この式はＮａｔｉｏｎａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  ＩｎｓｔｉｔｕｔｅのＮＣＩ−６０ハイスループットスクリーンにおいて使用される増殖阻害計算に由来する。
【０２２２】
Ｌｏｅｗｅ  ａｄｄｉｔｉｖｉｔｙモデルは用量ベースであり、単剤によって達成される活性レベルにのみ適用する。Ｌｏｅｗｅ  ＶｏｌｕｍｅはＬｏｅｗｅ  ａｄｄｉｔｉｖｉｔｙモデルを超える組合せ相互作用の全体の大きさを評価するために使用される。Ｌｏｅｗｅ  Ｖｏｌｕｍｅは、フェノタイプの活性における相乗的な増加（正のＬｏｅｗｅ  Ｖｏｌｕｍｅ）と相乗的拮抗作用（負のＬｏｅｗｅ  Ｖｏｌｕｍｅ）を区別するときに特に有用である。拮抗作用が観察されるとき、現在のデータセットにおけるように、拮抗作用と特定の薬物標的活性又は細胞ジェノタイプの間の相関関係があるかどうかを調査するためにＬｏｅｗｅ  Ｖｏｌｕｍｅは評価される。このモデルは、組合せ用量マトリックス表面がそれ自身と交差したいずれの薬物とも区別できない非相乗的組合せ相互作用として、相加性を定義する。相加性の計算は：
ＩＬｏｅｗｅは、（Ｘ／ＸＩ）＋（Ｙ／ＹＩ）＝１を満たす
ここで、ＸＩ及びＹＩは、観察された組合せ効果Ｉについての単剤有効濃度である。例えば、もし１ｍＭの薬物Ａ又は１ｍＭの薬物Ｂによって別々に５０％阻害が達成されれば、０．５ｍＭの薬物Ａ及び０．５ｍＭの薬物Ｂの組合せも５０％で阻害するはずである。
【０２２３】
Ｌｏｅｗｅ  ａｄｄｉｔｉｖｉｔｙモデルを超える組合せ効果を測定するために、Ｈｏｒｉｚｏｎ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙプラットホームは利用された。この方法はシナジースコアと名付けられた相乗的相互作用の強さを特徴付けるためにスカラー尺度を考案した。シナジースコアは次のように計算される：
シナジースコア＝ｌｏｇｆＸｌｏｇｆＹΣｍａｘ（０，Ｉｄａｔａ）（Ｉｄａｔａ-ＩＬｏｅｗｅ）
【０２２４】
マトリックスにおける各成分剤及び組合せポイントについての部分阻害は、全てのビヒクル処理されたコントロールウェルの中央値に対して計算される。シナジースコア方程式は、相加性のためのＬｏｅｗｅモデルを使用して成分剤の活性から数値的に導出されたモデルサーフェスを超える、マトリックスにおける各ポイントで実験的に観察された活性ボリュームを統合する。シナジースコア方程式（上記）における追加項は、個々の剤に使用される種々の希釈因子について標準化して、実験全体でのシナジースコアの比較を可能にするために使用される。
【０２２５】
Ｌｏｅｗｅ  ａｄｄｉｔｉｖｉｔｙを超える活性は、単なるボリュームスコアを用いて最も容易に計算され、ここでＶＬｏｅｗｅ＝ｌｏｇｆＸｌｏｇｆＹΣ（Ｉｄａｔａ-ＩＬｏｅｗｅ）であり、全ての非単剤濃度ペアを合計され、ここでｌｏｇｆＸ，Ｙは各単剤に使用される希釈因子の自然対数である。これは、希釈因子を変えるために補正された、測定されたものとＬｏｅｗｅ相加的応答サーフェスの間のボリュームを効果的に計算する。この体積スコアは、組合せの相乗的又は拮抗的効果全体を強調し、したがって外れているデータスパイクの効果を最小化し、広い範囲の濃度にわたって、高い効果レベルを有する強固な相乗効果を有する組合せを同定する。ＶＬｏｅｗｅは、大抵の相乗的組合せにとって正であり、拮抗作用にとって負である。不確かさσＶは測定されたエラーσＩ及び標準エラー伝搬に基づいて計算され得る。
【０２２６】
「シナジースコア」Ｓ＝ｆｃｏｖｌｎｆＸｌｎｆＹΣｍａｘ（０，Ｉｄａｔａ）ｍａｘ（０，Ｉｄａｔａ-ＩＬｏｅｗｅ）、これは正数に限定したポジティブゲート、阻害加重されたＬｏｅｗｅ  ａｄｄｉｔｉｖｉｔｙを超える体積である。これは、相乗効果が高い効果レベルで起こる、応答サーフェスの拮抗的な部分を無視する、組合せに有利な相加的な優先順位付けを提供する。ここでｆＸ，Ｙは希釈因子各単剤について使用される希釈因子であり、カバレージ因子ｆｃｏｖは、合計／試験された組合せ用量マトリックスポイントの比率によってスコアをスケールアップする、欠損データを説明する。Ｓは常に正であり、不確かさσＳは測定されたエラーσＩ及び標準エラー伝搬に基づいて計算され得る。シナジースコアの代替手段は「ヒットスコア」Ｈ＝ｆＣＯＶｌｏｇｆＸｌｏｇｆＹΣｍａｘ（０，Ｉｄａｔａ）ｍａｘ（０，Ｉｄａｔａ-ＩＨＳＡ）であり、それはＨＳＡモデルを参照する。ＳとＨの重要な違いは異なる基礎モデルにあることと、どのように単剤がモデル計算において使用されるかということにもある。Ｃｈａｌｉｃｅ  Ａｎａｌｙｚｅｒにおいて、ＨＳＡモデルは、対応する濃度で単剤応答から直接に計算される一方で、Ｌｏｅｗｅ  ａｄｄｉｔｉｖｉｔｙモデルは単剤応答カーブへのシグモイドフィットから導出される。
【０２２７】
ヒットの優先順位を付けるために、スコア（Ｓ又はＨ）及びそのエラーの分布は適切なセクションカットオフを定義するために使用され得る。例えば、Ｓ＞３σＳを有する組合せは、通常のエラーを仮定するのに、〜９９％の信頼度で「個別に有意（individually significant）」である。繰り返しプレートによって試験されない系統的な実験エラーを推定するために、実験中に得られた薬物それ自体の組合せについてのシナジースコアの分布は、非検出のためのもっともらしい範囲を決定するために使用され得る。あるいは、実験全体についてのスコア分布は、選択された信頼レベルで外れ値を同定するために使用され得る。
【０２２８】
実施例３  他の医薬品有効成分と組み合わされたＬＳＤ１阻害剤のＳＣＬＣに対するｉｎ  ｖｉｔｒｏの相乗効果
表５は相乗スコア、相乗効果の強さを示す値、のヒートマップを提供する。６．４より大きい相乗スコアは有意なものとみなされ、さらなる検証を是認された。薬物クラスの選択パネルは、観察された相乗効果のレベル及びＳＣＬＣの治療レジメンにおける化合物の潜在的な臨床的使用に基づいて、ＳＣＬＣ細胞株の拡大されたパネルにおけるさらなる評価のために優先順位付けられた。エピジェネティックレギュレーターＢＥＴ（特にＢｒｄ４）（（＋）−ＪＱ１、ＣＰＩ−２０３、ＭＳ  ４３６、ＧＳＫ１３２４７２６Ａ、ＧＳＫ１２１０１５１Ａ及びＯＴＸ０１５）並びに抗アポポティック（apopotic）レギュレーターＢＣＬ２（オバトクラックス、ＡＢＴ−１９９、ＡＢＴ−７３７、及びＴＷ−３７）を阻害した標的療法及び化学プローブは、ＬＳＤ１阻害と高度に相乗的であった。相乗効果は、ＢＥＴ（特にＢＲＤ４）及びＢＣＬ２阻害剤と比較してい低レベルではあるが、他のエピジェネティックレギュレーター、ＥＺＨ２（例えばＣＰＩ−１６９、ＥＰＺ００５６８７、ＥＰＺ−６４３８、ＧＳＫ１２６、ＧＳＫ３４３）及びＤＯＴ１Ｌ（例えばＥＰＺ−５６７６、ＳＧＣ  ０９４６）でも観察された。
【０２２９】
Ｎｏｔｃｈ、Ｈｅｄｇｅｈｏｇ又はＳｍｏｏｔｈｅｎｅｄ経路の阻害は、（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン処理と相乗的ではなく、ＬＳＤ１阻害は、ＨＤＡＣ及びＢＥＴ阻害剤、ＤＮＡアルキル化剤、トポイソメラーゼ阻害剤、抗有糸分裂剤、オーロラキナーゼ阻害剤、ＢＣＬ２ファミリー阻害剤、ＥＺＨ２、ＤＯＴ１Ｌ及びＣｈｋ阻害剤を含む化合物及び薬物クラスを選択するために、細胞株の感受性を高めることを示唆していた。
【０２３０】
上の実施例２に記載されたように細胞は処理され、データは解析された。
【０２３１】
表４．適切な医薬品有効成分（ＡＰＩ）のパネルとの（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミンの組合せの相乗効果。
2019508440.tif 000082
2019508440.tif 000083
【０２３２】
表５．適切な医薬品有効成分（ＡＰＩ）のパネルとの（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミンの組合せのＳＣＬＣ細胞株におけるｉｎ  ｖｉｖｏ相乗効果。
2019508440.tif 000084
【０２３３】
実施例４．ＬＳＤ１阻害剤はＳＣＬＣ−ＳＯＣ  ｉｎ  ｖｉｖｏの効力及び持続期間を改善する。
ｉｎ  ｖｉｖｏで、（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン治療の効果は、図２Ａで見られるように細胞傷害性の応答を誘導するのに、エトポシドとカルボプラチンの両方と協同した。臨床において、ＳＣＬＣの一つの標準治療（ＳＯＣ）は、エトポシドとカルボプラチンを併用することである。
【０２３４】
ｉｎ  ｖｉｖｏで、エトポシドとカルボプラチンの組合せは、図２Ｂで見られるようにＮＣＩ−Ｈ５２６モデルにおける投与期間中に迅速な腫瘍退行を促進する。ＳＯＣへの（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミンの追加は、腫瘍退行の持続期間を改善し、投与の中断後の３０日による腫瘍再増殖を有意に遅らせた。同時にデータは、ＬＳＤ１阻害は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ及びｉｎ  ｖｉｖｏの化学療法及び標的剤を選択するために、細胞の感受性を高め得ることを示す。
【０２３５】
ＮＣＩ−Ｈ５２６モデル：
８〜１２週齢のｎｕ／ｎｕマウスは、１００μＬのマトリゲル（Matrigel）（登録商標）及びＰＢＳの１：１混合物に再懸濁された１ｘ１０７  Ｈ５２６細胞又は５ｘ１０６  ＳＨＰ−７７を注射された。腫瘍は１００−１５０ｍｍ３動物でステージされ、用量群に分配された。（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミンは、４０μｇ  ｐｅｒ  ｋｇ（ｕｐｋ）の用量で５日間オン／２日間オフ（５／２）で３週間投与された。エトポシドは、５ｍｇ  ｐｅｒ  ｋｇ（ｍｐｋ）の用量で毎日５日間（ｑｄｘ５）腹腔内投与された。カルボプラチンは、１００ｍｐｋの用量で毎週３週間（ｑｗｋｘ３）腹腔内投与された。エトポシド及びカルボプラチンとの組合せにおいて、（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミンは、２０ｕｐｋの用量で５日間オン／２日間オフで３週間投与された。腫瘍体積は隔週でデジタルキャリバーを使用して測定された。実験のエンドポイントは１０００ｍｍ３の腫瘍体積又は９０日、いずれかが最初に来たときである。統計解析は対応のないｔ−検定及びゲーハン−ブレスロー−ウィルコクソン検定を使用して行われた。
【０２３６】
実施例５．ＬＳＤ１阻害への細胞応答
化合物効力決定は、１９の小細胞肺がん細胞株（様々な腫瘍起原の）を、（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン  ビス−ヒドロクロリドの存在下で、加湿インキュベーター内で、３７℃、５％ＣＯ２、４日間培養することによって行われた。
【０２３７】
細胞傷害性についてのポジティブコントロールとして、Ｈｓｐ９０阻害剤１７−Ｎ−アリルアミノ−１７−デメトキシゲルダナマイシン（１７−ＡＡＧ、ゲルダナマイシンアナログ）が、段階的な希釈でポジティブコントロールとして使用された。細胞株のそれぞれは、ＡＴＣＣによって推奨される別個の最適化された培地又は細胞株源において増殖され、試験された。
【０２３８】
小細胞肺がん細胞株は、酵素活性、細胞形態学、及び増殖フェノタイプに基づいて、「クラシック」又は「バリアント」に分類され得る（Desmond et al１１０.、Shoemaker R.H.１１１）。クラシック細胞株は、高いレベルのＬ−ｄｏｐａデカルボキシラーゼ及びボンベシン様免疫反応性、ニューロン特異的エノラーゼ、及びクレアチンキナーゼの脳アイソザイムを表す；バリアント細胞株は、ニューロン特異的エノラーゼ及びクレアチンキナーゼの脳アイソザイムを表し続けるが、検出不可能なレベルのＬ−ｄｏｐａデカルボキシラーゼ及びボンベシン様免疫反応性を有する。クラシック細胞株とは異なり、いくつかのバリアント細胞株は増幅されｃ−ｍｙｃ（ＭＹＣ）がん遺伝子の発現を増加させた。
【０２３９】
いくつかの細胞株はクラシック及びバリアントサブタイプの両方に特異的な特徴を示す。例えば、ＳＨＰ−７７は、クラシックＳＣＬＣ（例えば高いレベルのＬ−ｄｏｐａデカルボキシラーゼ及びボンベシン様免疫反応性）の生化学的性質を有するが、バリアントの形態学を有する。文献によると、ＳＨＰ−７７は生化学的なプロファイルに基づいてクラシックとみなされるが、形態学及び増殖特性に基づいてバリアントとみなされる。
【０２４０】
ＮＣＩ−Ｈ２０２９及びＳＢＣ−５について、文献においてサブタイプは報告されていないが、それらのトランスクリプトームプロファイル（ＤＤＣ／ＧＲＰのｍＲＮＡ発現レベル）は、表６のブラケットの中に与えられるクラスメンバーシップを明確に示す。
【０２４１】
（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン  ビス−ヒドロクロリドへの応答に応じて、細胞株は、ＥＣ５０＜０．０５μＭを有していると定義される「感受性」［Ｓ］、又はＥＣ５０＞＝０．０５μＭを有していると定義される「抵抗性」［Ｒ］のいずれかに分類される。
【０２４２】
（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン  ビス−ヒドロクロリドへの細胞ベースの応答は、バリアントＳＣＬＣ細胞株と比較して、クラシックＳＣＬＣ細胞株においてより大きかった（ｐ値０．００５５  表６）。試験された１９のＳＣＬＣ細胞株のうち、１１中９のクラシック細胞株［Ｃ］は感受性［Ｓ］であり、８中７のバリアント細胞株［Ｖ］は抵抗性［Ｒ］である（表７）。
【０２４３】
バリアント及びクラシックサブタイプは、ＬＳＤ１阻害剤療法への応答を８２％の感度及び８８％の特異性で予測する。
【０２４４】
ＭＹＣ遺伝子（Ensemble Gene ID: ENSG00000136997）におけるより高いコピー数多型（ＣＮＶ）は、バリアントサブタイプの小細胞肺がんに関係している（Am J Pathol. 1988 Jul; 132(1): 13-17）。実際に、１９の細胞株のうち、ＭＹＣ遺伝子の高いコピー数多型（ＣＮＶ＞＞２）はもっぱらバリアントサブタイプ（ＮＣＩ−Ｈ２１７１、ＮＣＩ−Ｈ４４６、ＮＣＩ−Ｈ８２、表６）を有する細胞株で見られた。さらに、ＭＹＣの高いコピー数多型を有する全ての３つの細胞株はＬＳＤ１阻害に対して抵抗性であり、ＭＹＣ増幅の存在はＬＳＤ１阻害療法への抵抗性（Ｒ）を予測し得ることを示唆している。
【０２４５】
表６の細胞株についてＲＮＡ−ｓｅｑデータから実行された主成分解析は、驚くべきことにバリアント及びクラシックＳＣＬＣ細胞株が異なるクラスターを形成することを明らかにした。
【０２４６】
2019508440.tif 000085
表６．バリアント  ＳＣＬＣ細胞株［Ｖ］と比較したクラシック  ＳＣＬＣ細胞株［Ｃ］における（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン  ビス−ヒドロクロリドへの細胞ベースの応答。
【０２４７】
2019508440.tif 000086
表７．ＬＳＤ１阻害療法への感受性又は抵抗性であるバリアント及びクラシック細胞株の数を示す分割マトリックス。
【０２４８】
実施例６．ＬＳＤ１阻害への応答を予測するための遺伝子パネル。
クラシックサブタイプの特徴を有する２つの抵抗性の細胞株（ＳＨＰ−７７及びＮＣＩ−２０２９）と、感受性であるバリアント及びクラシック細胞株（ＮＣＩ−Ｈ１８７６、ＮＣＩ−Ｈ６９、ＮＣＩ−Ｈ５１０Ａ、ＮＣＩ−Ｈ１４６、ＮＣＩ−Ｈ１８７、ＮＣＩ−Ｈ２０８１、ＮＣＩ−Ｈ３４５、ＮＣＩ−Ｈ５２６、ＮＣＩ−Ｈ７４８）の間のディファレンシャル遺伝子解析は、興味深いことにＨＯＸＡ１０のより低いｍＲＮＡ発現レベルがＬＳＤ１阻害療法への抵抗性に相関することを明らかにした（表８）。これは、より低いレベルのＨＯＸＡ１０のｍＲＮＡが、クラシックフェノタイプの存在下であってもＬＳＤ１阻害療法への抵抗性を予測する可能性があることを示唆する。
【０２４９】
ＬＳＤ１阻害療法への応答の予測的ｍＲＮＡ発現シグネチャーは、クラシックとバリアント細胞株の間に最も差次的に発現した遺伝子を選択することにより定義される（表９）。調整されたｐ値に基づいて、酵素Ｌ−ｄｏｐａデカルボキシラーゼをエンコードするＤＤＣ（調整されたｐ値４．３７Ｅ−２３）、及びボンベシン様免疫反応性ペプチドをエンコードするＧＲＰ（調整されたｐ値５．１９Ｅ−１４）は、２番目及び６番目に最も差次的に発現した遺伝子として位する。最も差次的に発現した遺伝子はＡＳＣＬ１である（調整されたｐ値２．６Ｅ−２３）。ＡＳＣＬ１は肺神経内分泌細胞の適切な発生により得られたトランスクリプション因子であり、大多数の肺がんの生存にとって不可欠である（Augustyn et al.１１２）。
【０２５０】
上の実施例５で議論したとおり、ＭＹＣ増幅はＬＳＤ１阻害療法への抵抗性を予測し得る。
【０２５１】
表１０は、記載された表６の１９の細胞株に渡るＤＤＣ、ＧＲＰ、及びＡＳＣＬ１の正規化リードカウントを一覧にし、表１１は対応するｚスコアを一覧にする。
【０２５２】
図４のヒートマップは、感受性の細胞株が表９に一覧にされた遺伝子のｍＲＮＡ発現レベルに基づいて、並びにＨＯＸＡ１０の発現レベル及びＭＹＣのコピー数多型に基づいて、抵抗性の細胞株と区別され得ることを視覚的に示す。
【０２５３】
2019508440.tif 000087
表８．選択された細胞株についてＲＮＡ−ｓｅｑデータから実行された主成分解析（*http://www.ensembl.org/, Cunningham F. et al.１０６）
【０２５４】
2019508440.tif 000088
表９．選択された細胞株についてＲＮＡ−ｓｅｑデータから実行された主成分解析を通じて得られたｐ値により分類された遺伝子（*http://www.ensembl.org/, Cunningham F. et al.１０６）。
【０２５５】
2019508440.tif 000089
表１０．ｍＲＮＡ発現レベルからの正規化リードカウント
【０２５６】
2019508440.tif 000090
表１１．正規化ｍＲＮＡリードカウントからＧｅｎｅＰａｔｔｅｒｎにより生成されたｚスコア。
【０２５７】
実施例７．ＬＳＤ１阻害への応答を予測するための神経内分泌遺伝子パネル
神経内分泌フェノタイプの代表的な遺伝子を含み、肺神経内分泌腫瘍についての免疫組織化学的なマーカーとして使用できる、表１２による遺伝子の第２のセット（ＮＣＡＭ１、ＮＣＡＭ２、ＮＥＵＲＯＤ１、ＫＲＴ８、ＥＮＯ２、ＡＶＰ、ＯＸＴ、ＳＹＰ、ＣＨＧＡ、ＣＨＧＢ、ＳＯＸ２１、ＢＣＬ２）についてのｍＲＮＡ発現レベルは、図５に図示されたように、抵抗性細胞株ＤＭＳ１１４、ＳＢＣ５、及びＮＣＩ−Ｈ１０４８において強くダウンレギュレートされる。これは、ＬＳＤ１阻害療法は神経内分泌起原の腫瘍における細胞増殖を停止させるという、我々の仮説と一致する。
【０２５８】
表１３Ａ及び１４Ｂは、記載された表６の１９の細胞株に渡る表１２の遺伝子の正規化リードカウントを一覧にする。
【０２５９】
2019508440.tif 000091
表１２．第２の神経内分泌遺伝子パネルの遺伝子（*http://www.ensembl.org/, Cunningham F. et al.１０６）。
【０２６０】
2019508440.tif 000092
表１３Ａ．ｍＲＮＡ発現レベルからの正規化リードカウント。
【０２６１】
2019508440.tif 000093
表１３Ｂ．ｍＲＮＡ発現レベルからの正規化リードカウント。
【０２６２】
実施例８．ＬＳＤ１阻害への応答を予測するためのシグネチャースコア
ＡＳＣＬ１、ＤＤＣ、ＧＲＰ、及びＨＯＸＡ１０の正規化発現レベル（Ｎｏｒｍ＿ｒｅａｄ＿ｃｏｕｎｔ）並びにＭＹＣコピー数多型（Ｃｏｐｙ＿ｎｕｍｂｅｒ＿ｖａｒｉａｔｉｏｎ）は、次のようにＬＳＤ１阻害療法への応答を予測するために、遺伝子シグネチャーを生成するために使用された：
【０２６３】
スコアは、第二主成分を用いる部分的最小二乗回帰（ＰＬＳ）分析によって得られた、次の方程式から生成された：
シグネチャースコア  １＝０．０９００６９３
＋Ｎｏｒｍ＿ｒｅａｄ＿ｃｏｕｎｔ（ＡＳＣＬ１）×０．０００００２１１２９６
＋Ｎｏｒｍ＿ｒｅａｄ＿ｃｏｕｎｔ（ＤＤＣ）×０．００００００５３６６５８      
＋Ｎｏｒｍ＿ｒｅａｄ＿ｃｏｕｎｔ（ＧＲＰ）×０．０００００２９７３４５
＋Ｎｏｒｍ＿ｒｅａｄ＿ｃｏｕｎｔ（ＨＯＸＡ１０）×０．０００２３４７２１
−Ｃｏｐｙ＿ｎｕｍｂｅｒ＿ｖａｒｉａｔｉｏｎ（ＭＹＣ）×０．０５３７０５６
【０２６４】
図６に示されたように、シグネチャースコア  １＞０．５はＬＳＤ１阻害療法への応答を予測する（フィッシャーの正確検定  両側  ｐ  ０．０００１、感度９０％、特異性１００％）。
【０２６５】
あるいは、スコアは、第一主成分を用いる部分的最小二乗回帰分析によって得られた、次の方程式から生成された：
シグネチャースコア  ２＝０．４８３９１８
＋Ｎｏｒｍ＿ｒｅａｄ＿ｃｏｕｎｔ（ＡＳＣＬ１）×０．０００００１８８０６６
＋Ｎｏｒｍ＿ｒｅａｄ＿ｃｏｕｎｔ（ＤＤＣ）×０．０００００１８８０６６
＋Ｎｏｒｍ＿ｒｅａｄ＿ｃｏｕｎｔ（ＧＲＰ）×０．０００００３５２０３３
−Ｃｏｐｙ＿ｎｕｍｂｅｒ＿ｖａｒｉａｔｉｏｎ（ＭＹＣ）×０．０４０７８９８
【０２６６】
図７に示されたように、シグネチャースコア  ２＞０．５はＬＳＤ１阻害療法への応答を予測する（フィッシャーの正確検定  両側  ｐ  ０．００５５、感度９０％、特異性７７．８％）。
【０２６７】
さらに、スコアは、第一主成分を用いる部分的最小二乗回帰分析によって得られた、次の方程式から生成された：
シグネチャースコア  ３＝０．３９３５６９
＋Ｎｏｒｍ＿ｒｅａｄ＿ｃｏｕｎｔ（ＡＳＣＬ１）×０．０００００１８２７３１
＋Ｎｏｒｍ＿ｒｅａｄ＿ｃｏｕｎｔ（ＤＤＣ）×０．０００００１８９６６４
＋Ｎｏｒｍ＿ｒｅａｄ＿ｃｏｕｎｔ（ＧＲＰ）×０．０００００３４２０４６
【０２６８】
図８に示されたように、シグネチャースコア  ３＞０．４５はＬＳＤ１阻害療法への応答を予測する（フィッシャーの正確検定  両側  ｐ  ０．００５５、感度９０％、特異性７７．８％）。
【０２６９】
参照レベルより高いシグネチャースコアはＬＳＤ１阻害剤を用いる治療への応答の高い可能性を示す一方で、前記レベルより低いシグネチャースコアはそのような治療への応答の低い可能性を示す。より高いスコアはより高いＡＳＣＬ１、ＤＤＣ、ＧＲＰ、ＨＯＸＡ１０のｍＲＮＡ発現、及びＭＹＣにおけるより低いコピー数多型に関連する。
【０２７０】
実施例９．ｉｎ  ｖｉｖｏ腫瘍増殖阻害
ＮＣＩ−Ｈ５１０Ａ  モデル：
７〜８週齢の無胸腺ヌードマウス動物は、１００μＬのマトリゲル（Matrigel）（登録商標）マトリックス（Corning Inc., Tewksbury/MA, C.S. Hughes et al.１１３）及びＰＢＳの１：１混合物に再懸濁された５ｘ１０６  Ｈ５１０Ａ細胞を注射された。腫瘍は２００−３００ｍｍ３動物でステージされ、用量群に分配された。（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミンは、４０μｇ  ｐｅｒ  ｋｇ（ｕｐｋ）の用量で５日間オン／２日間オフで研究の終了まで投与された。腫瘍体積は隔週でデジタルキャリバーを使用して測定された。研究は、コントロール群の平均腫瘍体積が２０００ｍｍ３に到達したとき又はステージング後２８日に終わりにされた。統計解析は対応のないｔ−検定を使用して行われた。
【０２７１】
ＮＣＩ−Ｈ５２６及びＳＨＰ−７７モデル：
８〜１２週齢のｎｕ／ｎｕマウスは、１００μＬのマトリゲル（Matrigel）（登録商標）及びＰＢＳの１：１混合物に再懸濁された１ｘ１０７  Ｈ５２６細胞又は５ｘ１０６  ＳＨＰ−７７を注射された。腫瘍は１００−１５０ｍｍ３動物でステージされ、用量群に分配された。（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミンは、４０μｇ  ｐｅｒ  ｋｇ（ｕｐｋ）の用量で５日間オン／２日間オフで研究の終了まで投与された。腫瘍体積は隔週でデジタルキャリバーを使用して測定された。研究は、コントロール群の平均腫瘍体積が２０００ｍｍ３に到達したとき又はステージング後２８日に終わりにされた。統計解析は対応のないｔ−検定を使用して行われた。
【０２７２】
図９に示されるように、ＬＳＤ１阻害剤（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミンのｉｎ  ｖｉｔｒｏ活性は、Ｈ５１０Ａ異種移植モデルにおけるｉｎ  ｖｉｖｏ増殖阻害に翻訳した。「応答性シグネチャー」陽性細胞株Ｈ５１０Ａモデルにおける（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミンの処理は、投与の２１日後に、処理されていないコントロールと比較して、適度であるが測定可能な腫瘍増殖阻害をもたらした。これらの結果は、１５の以前に定義された遺伝子応答シグネチャーが、（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミンへのｉｎ  ｖｉｖｏ感受性を予測し得ることを示唆する。ｉｎ  ｖｉｖｏの結果から遺伝子シグネチャーの予測可能性を検証するために、（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミンへのｉｎ  ｖｉｖｏ活性は、「応答性シグネチャー陽性」のＳＨＰ−７７及び「応答性シグネチャー陰性」のＨ５１０Ａ異種移植片においても評価された。
【０２７３】
実施例１０．ＳＣＬＣ患者試料における発現パターン
ＳＣＬＣ患者試料のセットにおける遺伝子発現パターンは、ＳＣＬＣ細胞株で観察されたものと同様であることが見出され（実施例６、図４）、ＬＳＤ１阻害剤応答遺伝子シグネチャーの使用、特に（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミン応答遺伝子シグネチャーの使用がＬＳＤ１阻害剤に基づく治療法、特に（ｔｒａｎｓ）−Ｎ１−（（１Ｒ，２Ｓ）−２−フェニルシクロプロピル）シクロヘキサン−１，４−ジアミンに基づく治療法から臨床的に恩恵を受けるであろう患者を同定する可能性を増加させることを示唆している。
【０２７４】
図１０は、表８、表９及びＭＹＣの遺伝子を含むＳＣＬＣ患者試料における、ｍＲＮＡ発現（ｚスコアとして）パターンを示すヒートマップを提供する。より高いｚスコアはより良い感受性に相関する。
【０２７５】
使用されたデータセットは、欧州分子生物学研究所の一部門、欧州バイオインフォマティクス研究所のＥｕｒｏｐｅａｎ  Ｇｅｎｏｍｅ−ｐｈｅｎｏｍｅ  Ａｒｃｈｉｖｅ（ＥＧＡ）から得られたデータセットEGAD00001000223（EMBL-EBI, Hinxton/UK, https://www.ebi.ac.uk/ega/datasets/EGAD00001000223）に対応する。患者ＩＤはこのデータセットにおいて使用されたＩＤに対応する。
【０２７６】
１  Shi et al.(2004) Cell 119:941
２  WO 2011/131697 A1
３  WO 2012/135113 A2
４  WO 2013/057322 A1
５  WO 2010/143582
６  WO 2011/131576
７  WO 2013/022047
８  WO 2013/025805
９  WO 2014/058071
１０  WO 2014/084298
１１  WO 2014/085613
１２  WO 2014/086790
１３  WO2014/164867
１４  WO 2014/194280
１５  WO 2014/205213
１６  WO 2015/021128
１７  WO 2015/031564
１８WO 2015/089192
１９WO 2015/120281
２０  WO 2015/123465
２１  WO 2015/123437
２２  WO 2015/123424
２３  WO 2015/123408
２４  WO 2015/134973
２５  WO 2015/156417
２６  WO 2016/004105
２７  WO 2016/007722
２８  WO 2016/007727
２９  WO 2016/007731
３０  WO 2016/007736
３１  WO 2016/034946
３２  WO 2016/037005
３３  CN 105541806
３４  WO 2016/123387
３５  WO 2016/130952
３６  CN 105924362
３７  CN 105985265
３８  WO 2016/161282
３９  CN 106045862
４０  CN 106045881
４１  WO 2016/172496
４２  WO 2016/177656
４３  WO 2017/004519
４４  WO 2017/027678
４５  WO 2010/138588 A2
４６  US 2007/0027135 A1
４７  WO 2005/049594 A1
４８  US 2006/0229289 A1
４９  WO 2011/091213 A2
５０  WO 2009/040517 A2
５１  DD 159877 A1
５２  WO 2006/000420 A1
５３  WO 2012/129353 A1
５４  ES 544159 A1
５５  WO 2007/015632 A1
５６  Rosenberg B. et al. Nature (1969) 222(5191):385-6
５７  WO 2013/120104 A2
５８  WO 2014/134583 A2
５９  EP 253738 A1
６０  DE 2510866 A1
６１  Daigle S.R. et al. Cancer Cell (2011) 20(1):53-65
６２  WO 2012/118812 A2
６３  WO 2012/075381 A2
６４  WO 2012/142504 A1
６５  CH 514578 A
６６  WO 2013/178821 A1
６７  US 2,802,005
６８  WO 2006/028958 A2
６９  GB 2136425
７０  WO 2011/140324 A1
７１  WO 2011/054843 A1
７２  WO 2011/140325 A1
７３  WO 2012/052390 A1
７４  US 6,121,451 A
７５  WO 2011/143651 A1
７６  WO 99/35146 A1
７７  WO 2010/033481 A1
７８  WO 2006/105262 A1
７９  WO 2013/016081 A1
８０  US 2,331,725
８１  WO 2002/081435 A1
８２  WO 2008/063525 A1
８３  WO 2012/116170 A1
８４  US 2005/0282803
８５  WO 2004/106328 A1
８６  US 5,712,274 A
８７  EP 253739 A1
８８  WO 2002/022577 A2
８９  EP 432677 A1
９０  US 2007/0265272 A1
９１  US 2005/0215610 A1
９２  WO 93/07148 A1
９３  Yu et al., Nature Communications (2012) 3(1288):1-11
９４  JP 10152462 A
９５  WO 2010/147917 A1
９６  DE 3231255 A1
９７  EP 321122 A2
９８  WO 2006/023778 A2
９９  BE 624076
１００  S. P. Parker, Ed., McGraw-Hill Dictionary of Chemical Terms (1984) McGraw-Hill Book Company, New York
１０１  Eliel, E. and Wilen, S., “Stereochemistry of Organic Compounds”, John Wiley & Sons, Inc., New York, 1994
１０２  Cahn et al. Angew. Chem. Inter. Edit. 1966, 5, 385; errata 511
１０３  Ansel’s Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems (2004) Lippincott, Williams & Wilkins, Philadelphia
１０４  Rowe R.C, Handbook of Pharmaceutical Excipients (2005) Pharmaceutical Press, Chicago
１０５  Remington: The Science and Practice of Pharmacy (2000) Lippincott, Williams & Wilkins, Philadelphia
１０６  Cunningham F. et al., Nucl. Acids Res. (2015) 43(D1): D662-D669
１０７  Mortazavi et al. Nat Methods (2008) 5(7):621-8
１０８  Selzer et al., Genes Chromosomes Cancer (2005) 44(3):305-319
１０９  Reich M. et al., Nature Genetics (2006) 38(5): 500-501
１１０  Desmond et al., Cancer Res (1985) 45(6):2913-2923
１１１  Shoemaker R.H., Nature Reviews Cancer (2016) 6:813-823
１１２  Augustyn et al., Proc Natl Acad Sci U S A (2014) 111(41):14788-93
１１３    Hughes et al., Proteomics (2010) 10(9):1886-90
【図１Ａ】
2019508440.tif 000094
【図１Ｂ】
2019508440.tif 000095
【図２Ａ】
2019508440.tif 000096
【図２Ｂ】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
2019508440.tif 000100
【図６】
2019508440.tif 000101
【図７】
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【図８】
2019508440.tif 000103
【図９】
2019508440.tif 000104
【図１０−１】
2019508440.tif 000105
【図１０−２】
2019508440.tif 000106
【国際調査報告】
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2019508440.tif 000108
2019508440.tif 000109
2019508440.tif 000110