(57)【要約】  本発明は、環状ペプチド誘導体、医薬におけるそれらの使用、それらを含有する組成物、それらの調製のためのプロセス、およびこのようなプロセスにおいて使用される中間体に関する。より特定すると、本発明は、式（Ｉａ）もしくは式（Ｉｂ）の環状ペプチドＣ５ａ受容体アンタゴニスト、または薬学的に許容できるその塩に関し、式中、Ｒ１ａ、Ｒ１ｂ、Ｒ２、Ｒ３およびＲ４は、記述内容において定義されている通りである。Ｃ５ａ受容体アンタゴニストは、炎症性障害および免疫障害を含めた広範囲の障害の処置において潜在的に有用である。【化１】2019532021.tif 000033
2019532021.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉａ）もしくは式（Ｉｂ）の化合物
【化１】
2019532021.tif 000029
または薬学的に許容できるその塩（式中、
Ｒ１ａは、Ｈ、ＯＨ、Ｏ（ＣＨ２）−Ｃ（Ｏ）ＯＲ６、ＮＨ２、ＮＨ−Ｃ（Ｏ）Ｒ５またはＮＨ（ＣＨ２）−Ｃ（Ｏ）ＯＲ６であり、
Ｒ１ｂは、ＮＨ２、ＮＨ−Ｃ（Ｏ）Ｒ５またはＮＨ（ＣＨ２）−Ｃ（Ｏ）ＯＲ６であり、
Ｒ２は、１個、２個もしくは３個の窒素原子を含有する５員、６員、９員もしくは１０員のヘテロアリールであり、前記ヘテロアリールは、環炭素原子上において１個もしくは２個のＲ７で置換されていてもよく、
Ｒ３は、水素またはＣ１〜Ｃ４アルキルであり、
Ｒ４は、
【化２】
2019532021.tif 000030
であり、
Ｒ５は、Ｃ１〜Ｃ４アルキルであり、
Ｒ６は、ＨまたはＣ１〜Ｃ４アルキルであり、
Ｒ７は、Ｃ１〜Ｃ４アルキルまたはＣ１〜Ｃ４アルコキシである）。
【請求項２】
Ｒ１ａが、ＯＨ、Ｏ（ＣＨ２）−Ｃ（Ｏ）ＯＲ６、ＮＨ２、ＮＨ−Ｃ（Ｏ）Ｒ５もしくはＮＨ（ＣＨ２）−Ｃ（Ｏ）ＯＲ６であるか、またはＲ１ｂが、ＮＨ２、ＮＨ−Ｃ（Ｏ）Ｒ５もしくはＮＨ（ＣＨ２）−Ｃ（Ｏ）ＯＲ６である、請求項１に記載の化合物、または薬学的に許容できるその塩。
【請求項３】
Ｒ１ａが、ＯＨまたはＯ（ＣＨ２）−Ｃ（Ｏ）ＯＲ６である、請求項１または２に記載の式（Ｉａ）の化合物、または薬学的に許容できるその塩。
【請求項４】
Ｒ１ａが、ＯＨである、請求項３に記載の化合物、または薬学的に許容できるその塩。
【請求項５】
Ｒ１ｂが、ＮＨ２、ＮＨ−Ｃ（Ｏ）Ｒ５またはＮＨ（ＣＨ２）−Ｃ（Ｏ）ＯＲ６である、請求項１または２に記載の式（Ｉｂ）の化合物、または薬学的に許容できるその塩。
【請求項６】
Ｒ２が、１個もしくは２個の窒素原子を含有する９員ヘテロアリールであり、前記ヘテロアリールが、環炭素原子上において１個もしくは２個のＲ７で置換されていてもよい、請求項１から５のいずれか一項に記載の化合物、または薬学的に許容できるその塩。
【請求項７】
Ｒ２が、
【化３】
2019532021.tif 000031
から選択されるヘテロアリールであり、前記ヘテロアリールが、環炭素原子上においてＲ７で置換されていてもよい、請求項１から６のいずれか一項に記載の化合物、または薬学的に許容できるその塩。
【請求項８】
Ｒ２が、ヘテロアリール
【化４】
2019532021.tif 000032
であり、前記ヘテロアリールが、環炭素原子上においてＲ７で置換されていてもよい、請求項１から７のいずれか一項に記載の化合物、または薬学的に許容できるその塩。
【請求項９】
Ｒ７が、メチルまたはメトキシである、請求項１から８のいずれか一項に記載の化合物、または薬学的に許容できるその塩。
【請求項１０】
Ｒ３が、Ｈである、請求項１から９のいずれか一項に記載の化合物、または薬学的に許容できるその塩。
【請求項１１】
Ｎ−［（２Ｓ）−１−｛［（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｒ，２０ａＳ）−９−（３−カルバムイミドアミドプロピル）−１９−ヒドロキシ−３−［（ｃｉｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル］−６−（１Ｈ−インドール−３−イルメチル）−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソイコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−１５−イル］アミノ｝−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル］グリシン；
Ｎ−［（２Ｓ）−１−｛［（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｒ，２０ａＳ）−９−（３−カルバムイミドアミドプロピル）−１９−（カルボキシメトキシ）−３−［（ｃｉｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル］−６−（１Ｈ−インドール−３−イルメチル）−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソイコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−１５−イル］アミノ｝−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル］グリシン；
Ｎ−［（２Ｓ）−１−（｛（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｒ，２０ａＳ）−９−（３−カルバムイミドアミドプロピル）−１９−ヒドロキシ−３−［（ｃｉｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル］−６−［（４−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソイコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−１５−イル｝アミノ）−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル］グリシン；
Ｎ−［（２Ｓ）−１−（｛（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｒ，２０ａＳ）−９−（３−カルバムイミドアミドプロピル）−１９−ヒドロキシ−３−［（ｃｉｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル］−６−［（５−メトキシ−１Ｈ−インドール−３−イル）メチル］−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソイコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−１５−イル｝アミノ）−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル］グリシン；
Ｎ−［（２Ｓ）−１−｛［（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，２０ａＳ）−９−（３−カルバムイミドアミドプロピル）−３−［（ｃｉｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル］−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソ−６−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イルメチル）イコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−１５−イル］アミノ｝−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル］グリシン；
Ｎ−［（２Ｓ）−１−｛［（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｒ，２０ａＳ）−９−（３−カルバムイミドアミドプロピル）−１９−ヒドロキシ−３−［（ｃｉｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル］−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソ−６−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イルメチル）イコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−１５−イル］アミノ｝−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル］グリシン；
Ｎ−［（２Ｓ）−１−｛［（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｓ，２０ａＳ）−１９−アミノ−９−（３−カルバムイミドアミドプロピル）−３−［（ｃｉｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル］−６−（１Ｈ−インドール−３−イルメチル）−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソイコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−１５−イル］アミノ｝−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル］グリシン；
Ｎ−［（２Ｓ）−１−｛［（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｒ，２０ａＳ）−１９−アミノ−９−（３−カルバムイミドアミドプロピル）−３−［（ｃｉｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル］−６−（１Ｈ−インドール−３−イルメチル）−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソイコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−１５−イル］アミノ｝−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル］グリシン；
Ｎ−［（２Ｓ）−１−｛［（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｒ，２０ａＳ）−１９−（アセチルアミノ）−９−（３−カルバムイミドアミドプロピル）−３−［（ｃｉｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル］−６−（１Ｈ−インドール−３−イルメチル）−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソイコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−１５−イル］アミノ｝−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル］グリシン；
Ｎ−［（２Ｓ）−１−｛［（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｓ，２０ａＳ）−１９−（アセチルアミノ）−９−（３−カルバムイミドアミドプロピル）−３−［（ｃｉｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル］−６−（１Ｈ−インドール−３−イルメチル）−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソイコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−１５−イル］アミノ｝−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル］グリシン；
Ｎ−［（２Ｓ）−１−｛［（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｒ，２０ａＳ）−９−（３−カルバムイミドアミドプロピル）−１９−ヒドロキシ−３−［（ｃｉｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル］−６−（１Ｈ−インドール−３−イルメチル）−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソイコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−１５−イル］アミノ｝−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル］−Ｎ−メチルグリシン；
｛［（２Ｓ）−１−｛［（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｓ，２０ａＳ）−９−（３−カルバムイミドアミドプロピル）−１９−［（カルボキシメチル）アミノ］−３−［（ｃｉｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル］−６−（１Ｈ−インドール−３−イルメチル）−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソイコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−１５−イル］アミノ｝−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル］アミノ｝酢酸；
Ｎ−｛（２Ｓ）−１−｛［（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｒ，２０ａＳ）−９−（３−カルバムイミドアミドプロピル）−１９−ヒドロキシ−３−［（ｃｉｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル］−６−（１Ｈ−インドール−３−イルメチル）−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソイコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−１５−イル］アミノ｝−１−オキソ−３−（３，５−ジジューテロフェニル）プロパン−２−イル｝グリシン；
｛［（２Ｓ）−１−｛［（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｒ，２０ａＳ）−９−（３−カルバムイミドアミドプロピル）−１９−［（カルボキシメチル）アミノ］−３−［（ｃｉｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル］−６−（１Ｈ−インドール−３−イルメチル）−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソイコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−１５−イル］アミノ｝−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル］アミノ｝酢酸；
Ｎ−［（２Ｓ）−１−（｛（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｒ，２０ａＳ）−９−（３−カルバムイミドアミドプロピル）−１９−ヒドロキシ−３−［（ｃｉｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル］−６−［（６−メトキシ−１Ｈ−インドール−３−イル）メチル］−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソイコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−１５−イル｝アミノ）−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル］グリシン；
（（Ｓ）−１−（（（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｒ，２０ａＳ）−６−（（１Ｈ−インダゾール−３−イル）メチル）−９−（３−グアニジノプロピル）−１９−ヒドロキシ−３−（（（１ｓ，４Ｓ）−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル）−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソイコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−１５−イル）アミノ）−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル）グリシン；および
（（Ｓ）−１−（（（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｒ，２０ａＳ）−６−（（６−エチル−１Ｈ−インドール−３−イル）メチル）−９−（３−グアニジノプロピル）−１９−ヒドロキシ−３−（（（１ｓ，４Ｓ）−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル）−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソイコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−１５−イル）アミノ）−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル）グリシン
から選択される、請求項１に記載の化合物、または薬学的に許容できるその塩。
【請求項１２】
Ｎ−［（２Ｓ）−１−｛［（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｒ，２０ａＳ）−９−（３−カルバムイミドアミドプロピル）−１９−ヒドロキシ−３−［（ｃｉｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル］−６−（１Ｈ−インドール−３−イルメチル）−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソイコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−１５−イル］アミノ｝−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル］グリシンである、請求項１に記載の化合物、または薬学的に許容できるその塩。
【請求項１３】
請求項１から１２のいずれかに記載の化合物、または薬学的に許容できるその塩、および薬学的に許容できる添加剤を含む医薬組成物。
【請求項１４】
１種もしくは複数のさらなる治療剤を含む、請求項１３に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
医薬として使用するための、請求項１から１２のいずれかに記載の化合物、または薬学的に許容できるその塩。
【請求項１６】
Ｃ５ａアンタゴニストが適応となる障害の処置において使用するための、請求項１から１２のいずれかに記載の化合物、または薬学的に許容できるその塩。
【請求項１７】
Ｃ５ａアンタゴニストについての前記障害が、急性腎傷害（ＡＫＩ）である、請求項１６に記載の化合物。
【請求項１８】
Ｃ５ａアンタゴニストが適応となる障害の処置のための医薬の調製のための、請求項１から１２のいずれかに記載の化合物、または薬学的に許容できるその塩の使用。
【請求項１９】
ヒトまたは動物に治療的有効量の請求項１から１２のいずれかに記載の化合物、または薬学的に許容できるその塩を投与することを含む、前記ヒトまたは動物において、Ｃ５ａアンタゴニストが適応となる障害を処置する方法。
【請求項２０】
別の薬理的活性化合物と、または２種もしくはそれより多い他の薬理的活性化合物と組み合わせた、請求項１から１２のいずれかに記載の化合物、または薬学的に許容できるその塩。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、環状ペプチド誘導体、医薬におけるこれらの使用、これらを含有する組成物、これらの調製のためのプロセス、およびこのようなプロセスにおいて使用される中間体に関する。
【背景技術】
【０００２】
補体系は、生物から微生物および損傷された細胞を排除する抗体および食細胞の能力を増進（補完）する先天性免疫系の一部である。これは、血液中に不活性状態で通常存在するタンパク質の群（補体成分、Ｃ）からなる。いくつかのトリガーの１つによって刺激を受けるとき、補体系は、感染に対する防御を助ける酵素カスケードを開始させる。しかし、補体系の、制御されていない活性化または不適正な調節は、いくつかの炎症性および変性疾患と関連する。総説が、ＭｏｒｇａｎおよびＨａｒｒｉｓ（Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  １４、８５７〜８７７（２０１５））によって提供されている。
【０００３】
補体系活性化の３つの経路：古典的経路、レクチン経路、および代替経路が存在する。微生物、抗体または細胞成分は、これらの経路を活性化させ、Ｃ３−コンバターゼおよびＣ５−コンバターゼとして公知であるプロテアーゼ複合体の形成をもたらすことができる。それぞれの経路は、Ｃ３−コンバターゼがＣ３をフラグメントＣ３ａおよびＣ３ｂに切断するとき、最終の共通経路へと収束する。補体系の概要は、ＳａｒｍａおよびＷａｒｄ（Ｃｅｌｌ  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｒｅｓ．、２０１１  Ｊａｎ；３４３（１）：２２７〜２３５）によって提供されている。
【０００４】
Ｃ５ａは、Ｃ５−コンバターゼ酵素によるＣ５の切断によって補体カスケードにおいて生じる。Ｃ５ａは、内皮上の接着分子の発現の増加および平滑筋の収縮をもたらすアナフィラトキシンと、感染の部位における補体および食細胞の蓄積またはリンパ節への抗原提示細胞の動員を開始させる化学誘引物質との両方である。
【０００５】
Ｃ５ａは、膜結合Ｇタンパク質共役受容体（ＧＰＣＲ）である、Ｃ５ａ受容体１（Ｃ５ＡＲ１）またはＣＤ８８としてまた公知であるＣ５ａ受容体と相互作用し、いくつかの炎症誘発性効果を誘発する。Ｃ５ａは、多形核白血球についての強力な化学誘引物質であり、好中球、好塩基球、好酸球および単球を炎症および／または細胞の傷害の部位に運び、実際、多種多様の炎症性細胞タイプについて公知である最も強力な化学走性剤の１つである。
【０００６】
他の作用の中でも、Ｃ５ａは、様々な抗菌機能（例えば、食作用）のために好中球を「予備刺激」（調製）し、炎症メディエーター（例えば、ヒスタミン、ＴＮＦ−ｕ、ＩＬ−Ｉ、ＩＬ−６、ＩＬ−８、プロスタグランジン、およびロイコトリエン）の放出、ならびにリソソーム酵素および顆粒球からの他の細胞毒性成分の放出を刺激し、活性酸素ラジカルの産生および平滑筋の収縮を促進する。
【０００７】
Ｃ５ａ放出は、多くの疾患および症候群に直接的または間接的に関与していると考えられる。例は、敗血症、再灌流傷害、関節リウマチ、および免疫複合体に関連する疾患全般である。Ｃ５ａが関連する疾患についての概要は、ＧｕｏおよびＷａｒｄ（Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２００５．２３：８２１〜５２）によって提供されている。
【０００８】
僅か数日に亘る腎機能の喪失として定義される急性腎傷害（ＡＫＩ）は、一般的で重症の臨床に関する問題である（Ｓｅｍｉｎａｒｓ  ｉｎ  Ｎｅｐｈｒｏｌｏｇｙ、Ｖｏｌ  ３３、Ｎｏ６、Ｎｏｖｅｍｂｅｒ  ２０１３、ｐｐ  ５４３〜５５６）。その羅患率の推定は様々であるが、集中治療室（ＩＣＵ）患者の２０〜５０％の範囲であり得、５０％超の死亡率と関連し得る（Ｃｒｉｔｉｃａｌ  Ｃａｒｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ、Ｖｏｌ  ２０１３（２０１３）、Ａｒｔｉｃｌｅ  ＩＤ  ４７９７３０、９  ｐａｇｅｓ）。ＡＫＩは、根底にある腎疾患によってもたらされ得るか、または腎傷害によるものであり得る。虚血／再灌流は、入院患者におけるＡＫＩの共通原因であり、移植、心臓手術、および敗血症の後のＡＫＩの発生における主要な要因である。
【０００９】
対症療法における医学の進歩にも関わらず、ＡＫＩは高い罹患率と死亡率と関連している。組織の炎症は、非免疫性損傷、例えば、虚血／再灌流および毒素の後でさえ腎傷害の病因の中心となり、補体系の活性化は、ＡＫＩの重大な原因である。さらに、傷害された腎臓内の補体系活性化は、腎臓への傷害を増悪させる多くの下流の炎症性事象を誘発する。補体系活性化はまた、遠隔の器官の傷害および患者の死亡率の一因になる全身性炎症性事象の主な原因となり得る。
【００１０】
補体系の効果をモジュレートする特定の分子、例えば、ペプチドＣ５ａモジュレーターが公知である。ＷＯ９９／００４０６は、Ｃ５ａ受容体の環状アゴニストおよびアンタゴニストについて開示している。ＷＯ０３／０３３５２８は、ｇタンパク質共役受容体アンタゴニストとしての環状ペプチドについて開示している。ＷＯ２００５／０１００３０およびＷＯ２００６／０７４９６４は、Ｃ５ａ受容体アンタゴニストについて開示している。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
しかし、良好な薬物候補、特に、病院の環境における静脈内投与に適した分子である新規なＣ５ａ受容体アンタゴニストを提供することが依然として必要とされている。
【００１２】
好ましい化合物は、下記の特性の１つもしくは複数を有する。
・安定な物理的形態；
・非経口投与のための容易な製剤化；
・静脈内注入に適した中程度のｐＨ（例えば、３〜９のｐＨ）における良好な熱力学的水溶解度、例えば、＞５ｍｇ／ｍｌ、例えば、＞２５ｍｇ／ｍｌ；
・本明細書に記載されているアッセイによると、好ましくは、＜１００ｎＭ、例えば、＜２０ｎＭのＫｂを伴う、Ｃ５ａへの機能的反応、例えば、酸化バーストおよびＣＤ１１ｂ上方調節の強力な阻害；ならびに／または
・Ｃ５ａ受容体遮断が化合物投与の休止によって急速に休止するような、短い薬物動態学的半減期、例えば、＜２時間、例えば、＜１時間。
【００１３】
本発明者らは、今や新規な環状ペプチドＣ５ａ受容体アンタゴニストを見出した。
【課題を解決するための手段】
【００１４】
本発明の第１の態様によると、式（Ｉａ）もしくは式（Ｉｂ）の化合物
【００１５】
【化１】
2019532021.tif 000003
または薬学的に許容できるその塩を提供し、式中、
Ｒ１ａは、Ｈ、ＯＨ、Ｏ（ＣＨ２）−Ｃ（Ｏ）ＯＲ６、ＮＨ２、ＮＨ−Ｃ（Ｏ）Ｒ５またはＮＨ（ＣＨ２）−Ｃ（Ｏ）ＯＲ６であり、
Ｒ１ｂは、ＮＨ２、ＮＨ−Ｃ（Ｏ）Ｒ５またはＮＨ（ＣＨ２）−Ｃ（Ｏ）ＯＲ６であり、
Ｒ２は、１個、２個もしくは３個の窒素原子を含有する５員、６員、９員もしくは１０員のヘテロアリールであり、ヘテロアリールは、環炭素原子上において１個もしくは２個のＲ７で置換されていてもよく、
Ｒ３は、水素またはＣ１〜Ｃ４アルキルであり、
Ｒ４は、
【００１６】
【化２】
2019532021.tif 000004
で置換されているＣ４〜Ｃ７シクロアルキルであり、
Ｒ５は、Ｃ１〜Ｃ４アルキルであり、
Ｒ６は、ＨまたはＣ１〜Ｃ４アルキルであり、
Ｒ７は、Ｃ１〜Ｃ４アルキルまたはＣ１〜Ｃ４アルコキシである。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
下記に記載するのは、本発明のこの第１の態様のいくつかの実施形態（Ｅ１）であり、便宜上、Ｅ１は、それと同一である。
Ｅ１  上記に定義されているような、式（Ｉａ）もしくは式（Ｉｂ）の化合物、または薬学的に許容できるその塩。
Ｅ２  Ｒ４が、
【００１８】
【化３】
2019532021.tif 000005
で置換されているシクロヘキシルである、実施形態Ｅ１に記載の化合物、または薬学的に許容できるその塩。
Ｅ３  Ｒ４が、
【００１９】
【化４】
2019532021.tif 000006
である、実施形態Ｅ１または実施形態Ｅ２に記載の化合物、または薬学的に許容できるその塩。
Ｅ４  Ｒ１ａが、ＯＨ、Ｏ（ＣＨ２）−Ｃ（Ｏ）ＯＲ６、ＮＨ２、ＮＨ−Ｃ（Ｏ）Ｒ５もしくはＮＨ（ＣＨ２）−Ｃ（Ｏ）ＯＲ６であるか、またはＲ１ｂが、ＮＨ２、ＮＨ−Ｃ（Ｏ）Ｒ５もしくはＮＨ（ＣＨ２）−Ｃ（Ｏ）ＯＲ６である、実施形態Ｅ１からＥ３のいずれか１つに記載の化合物、または薬学的に許容できるその塩。
Ｅ５  Ｒ１ａが、ＯＨ、Ｏ（ＣＨ２）−Ｃ（Ｏ）ＯＲ６、ＮＨ２、ＮＨ−Ｃ（Ｏ）Ｒ５またはＮＨ（ＣＨ２）−Ｃ（Ｏ）ＯＲ６である、実施形態Ｅ１からＥ４のいずれか１つに記載の式（Ｉａ）の化合物、または薬学的に許容できるその塩。
Ｅ６  Ｒ１ａが、ＯＨまたはＯ（ＣＨ２）−Ｃ（Ｏ）ＯＨである、実施形態Ｅ５に記載の式（Ｉａ）の化合物、または薬学的に許容できるその塩。
Ｅ７  Ｒ１ａが、ＯＨである、実施形態Ｅ６に記載の式（Ｉａ）の化合物、または薬学的に許容できるその塩。
Ｅ８  Ｒ１ｂが、ＮＨ２、ＮＨ−Ｃ（Ｏ）Ｒ５またはＮＨ（ＣＨ２）−Ｃ（Ｏ）ＯＲ６である、実施形態Ｅ１からＥ４のいずれか１つに記載の式（Ｉｂ）の化合物、または薬学的に許容できるその塩。
Ｅ９  Ｒ１ｂが、ＮＨ２、ＮＨ−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３またはＮＨ（ＣＨ２）−Ｃ（Ｏ）ＯＨである、実施形態Ｅ８に記載の化合物、または薬学的に許容できるその塩。
Ｅ１０  Ｒ２が、１個もしくは２個の窒素原子を含有する９員ヘテロアリールであり、ヘテロアリールが、環炭素原子上において１個もしくは２個のＲ７で置換されていてもよい、実施形態Ｅ１からＥ９のいずれか１つに記載の化合物、または薬学的に許容できるその塩。
Ｅ１１  Ｒ２が、
【００２０】
【化５】
2019532021.tif 000007
から選択されるＣ−連結ヘテロアリールであり、
前記ヘテロアリールが、環炭素原子上においてＲ７で置換されていてもよい、実施形態Ｅ１からＥ１０のいずれか１つに記載の化合物、または薬学的に許容できるその塩。
Ｅ１２  Ｒ２が、Ｃ−連結ヘテロアリール
【００２１】
【化６】
2019532021.tif 000008
であり、前記ヘテロアリールが、環炭素原子上においてＲ７で置換されていてもよい、実施形態Ｅ１からＥ１１のいずれか１つに記載の化合物、または薬学的に許容できるその塩。
Ｅ１３  Ｒ２が、Ｃ−連結ヘテロアリール
【００２２】
【化７】
2019532021.tif 000009
である、実施形態Ｅ１からＥ１２のいずれか１つに記載の化合物、または薬学的に許容できるその塩。
Ｅ１４  Ｒ７が、メチルまたはメトキシである、実施形態Ｅ１からＥ１２のいずれか１つに記載の化合物、または薬学的に許容できるその塩。
Ｅ１５  Ｒ３が、Ｈまたはメチルである、実施形態Ｅ１からＥ１４のいずれか１つに記載の化合物、または薬学的に許容できるその塩。
Ｅ１６  Ｒ３が、Ｈである、実施形態Ｅ１からＥ１５のいずれか１つに記載の化合物、または薬学的に許容できるその塩。
Ｅ１７  Ｎ−［（２Ｓ）−１−｛［（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｒ，２０ａＳ）−９−（３−カルバムイミドアミドプロピル）−１９−ヒドロキシ−３−［（ｃｉｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル］−６−（１Ｈ−インドール−３−イルメチル）−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソイコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−１５−イル］アミノ｝−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル］グリシン（実施例１の別名）；
Ｎ−［（２Ｓ）−１−｛［（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｒ，２０ａＳ）−９−（３−カルバムイミドアミドプロピル）−１９−（カルボキシメトキシ）−３−［（ｃｉｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル］−６−（１Ｈ−インドール−３−イルメチル）−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソイコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−１５−イル］アミノ｝−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル］グリシン（実施例２の別名）；
Ｎ−［（２Ｓ）−１−（｛（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｒ，２０ａＳ）−９−（３−カルバムイミドアミドプロピル）−１９−ヒドロキシ−３−［（ｃｉｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル］−６−［（４−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル］−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソイコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−１５−イル｝アミノ）−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル］グリシン（実施例３の別名）；
Ｎ−［（２Ｓ）−１−（｛（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｒ，２０ａＳ）−９−（３−カルバムイミドアミドプロピル）−１９−ヒドロキシ−３−［（ｃｉｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル］−６−［（５−メトキシ−１Ｈ−インドール−３−イル）メチル］−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソイコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−１５−イル｝アミノ）−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル］グリシン（実施例４の別名）；
Ｎ−［（２Ｓ）−１−｛［（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，２０ａＳ）−９−（３−カルバムイミドアミドプロピル）−３−［（ｃｉｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル］−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソ−６−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イルメチル）イコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−１５−イル］アミノ｝−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル］グリシン（実施例５の別名）；
Ｎ−［（２Ｓ）−１−｛［（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｒ，２０ａＳ）−９−（３−カルバムイミドアミドプロピル）−１９−ヒドロキシ−３−［（ｃｉｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル］−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソ−６−（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イルメチル）イコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−１５−イル］アミノ｝−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル］グリシン（実施例６の別名）；
Ｎ−［（２Ｓ）−１−｛［（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｓ，２０ａＳ）−１９−アミノ−９−（３−カルバムイミドアミドプロピル）−３−［（ｃｉｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル］−６−（１Ｈ−インドール−３−イルメチル）−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソイコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−１５−イル］アミノ｝−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル］グリシン（実施例７の別名）；
Ｎ−［（２Ｓ）−１−｛［（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｒ，２０ａＳ）−１９−アミノ−９−（３−カルバムイミドアミドプロピル）−３−［（ｃｉｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル］−６−（１Ｈ−インドール−３−イルメチル）−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソイコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−１５−イル］アミノ｝−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル］グリシン（実施例８の別名）；
Ｎ−［（２Ｓ）−１−｛［（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｒ，２０ａＳ）−１９−（アセチルアミノ）−９−（３−カルバムイミドアミドプロピル）−３−［（ｃｉｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル］−６−（１Ｈ−インドール−３−イルメチル）−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソイコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−１５−イル］アミノ｝−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル］グリシン（実施例９の別名）；
Ｎ−［（２Ｓ）−１−｛［（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｓ，２０ａＳ）−１９−（アセチルアミノ）−９−（３−カルバムイミドアミドプロピル）−３−［（ｃｉｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル］−６−（１Ｈ−インドール−３−イルメチル）−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソイコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−１５−イル］アミノ｝−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル］グリシン（実施例１０の別名）；
Ｎ−［（２Ｓ）−１−｛［（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｒ，２０ａＳ）−９−（３−カルバムイミドアミドプロピル）−１９−ヒドロキシ−３−［（ｃｉｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル］−６−（１Ｈ−インドール−３−イルメチル）−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソイコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−１５−イル］アミノ｝−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル］−Ｎ−メチルグリシン（実施例１１の別名）；
｛［（２Ｓ）−１−｛［（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｓ，２０ａＳ）−９−（３−カルバムイミドアミドプロピル）−１９−［（カルボキシメチル）アミノ］−３−［（ｃｉｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル］−６−（１Ｈ−インドール−３−イルメチル）−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソイコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−１５−イル］アミノ｝−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル］アミノ｝酢酸（実施例１２の別名）；
Ｎ−｛（２Ｓ）−１−｛［（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｒ，２０ａＳ）−９−（３−カルバムイミドアミドプロピル）−１９−ヒドロキシ−３−［（ｃｉｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル］−６−（１Ｈ−インドール−３−イルメチル）−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソイコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−１５−イル］アミノ｝−１−オキソ−３−（３，５−ジジュウテロフェニル）プロパン−２−イル｝グリシン（実施例１３の別名）；
｛［（２Ｓ）−１−｛［（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｒ，２０ａＳ）−９−（３−カルバムイミドアミドプロピル）−１９−［（カルボキシメチル）アミノ］−３−［（ｃｉｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル］−６−（１Ｈ−インドール−３−イルメチル）−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソイコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−１５−イル］アミノ｝−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル］アミノ｝酢酸（実施例１４の別名）；
Ｎ−［（２Ｓ）−１−（｛（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｒ，２０ａＳ）−９−（３−カルバムイミドアミドプロピル）−１９−ヒドロキシ−３−［（ｃｉｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル］−６−［（６−メトキシ−１Ｈ−インドール−３−イル）メチル］−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソイコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−１５−イル｝アミノ）−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル］グリシン（実施例１５の別名）；
（（Ｓ）−１−（（（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｒ，２０ａＳ）−６−（（１Ｈ−インダゾール−３−イル）メチル）−９−（３−グアニジノプロピル）−１９−ヒドロキシ−３−（（（１ｓ，４Ｓ）−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル）−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソイコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−１５−イル）アミノ）−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル）グリシン（実施例１６）；および
（（Ｓ）−１−（（（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｒ，２０ａＳ）−６−（（６−エチル−１Ｈ−インドール−３−イル）メチル）−９−（３−グアニジノプロピル）−１９−ヒドロキシ−３−（（（１ｓ，４Ｓ）−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル）−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソイコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−１５−イル）アミノ）−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル）グリシン（実施例１７）
から選択される、実施形態Ｅ１に記載の化合物、または薬学的に許容できるその塩。
【００２３】
式（Ｉａ）および式（Ｉｂ）の化合物において、
・必要な数の炭素原子を含有するアルキルおよびアルコキシ基は、分岐していないかまたは分岐状でよい。アルキルの例は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、ｎ−ブチル、ｉ−ブチル、ｓｅｃ−ブチルおよびｔ−ブチルを含む。アルコキシの例は、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、ｉ−プロポキシ、ｎ−ブトキシ、ｉ−ブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシおよびｔ−ブトキシを含む。
・シクロアルキルの例は、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルおよびシクロヘプチルを含む。
・他に逆に特定しない限り、ヘテロアリールは、「Ｃ−連結」または「Ｎ−連結」していてもよい。用語「Ｃ−連結」は、ヘテロアリールが環炭素を介して接合していることを意味する。用語「Ｎ−連結」は、ヘテロアリールが環窒素を介して接合していることを意味する。
・５員、６員、９員および１０員のヘテロアリールの具体例は、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾイル、トリアゾリル、ピリジル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、トリアジニル、インドリル、イソインドリル、ベンゾイミダゾリル、インダゾリル、ベンゾトリアゾリル、ピロロ［２，３−ｂ］ピリジル、ピロロ［２，３−ｃ］ピリジル、ピロロ［３，２−ｃ］ピリジル、ピロロ［３，２−ｂ］ピリジル、イミダゾ［４，５−ｂ］ピリジル、イミダゾ［４，５−ｃ］ピリジル、ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリジル、ピラゾロ［４，３−ｃ］ピリジル、ピラゾロ［３，４−ｃ］ピリジル、ピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジル、インドリジニル、イミダゾ［１，２−ａ］ピリジル、イミダゾ［１，５−ａ］ピリジル、ピラゾロ［１，５−ａ］ピリジル、ピロロ［１，２−ｂ］ピリダジニル、キノリニル、イソキノリニル、シンノリニル、キナゾリニル、キノキサリニル、フタラジニル、１，６−ナフチリジニル、１，７−ナフチリジニル、１，８−ナフチリジニル、１，５−ナフチリジニル、２，６−ナフチリジニル、２，７−ナフチリジニル、ピリド［３，２−ｄ］ピリミジニル、ピリド［４，３−ｄ］ピリミジニル、ピリド［３，４−ｄ］ピリミジニル、ピリド［２，３−ｄ］ピリミジニル、ピリド［２，３−ｄ］ピラジニルおよびピリド［３，４−ｂ］ピラジニルを含む。
【００２４】
文脈によって式（Ｉａ）、式（Ｉｂ）、または式（Ｉａ）および式（Ｉｂ）の両方に特に言及することを必要としない限り、本明細書の下記で式（Ｉ）は、式（Ｉａ）および（Ｉｂ）の両方を集合的に言及するために使用される。
【００２５】
本明細書の下記で、本発明の化合物への全ての言及は、下記でより詳細に考察するような、式（Ｉ）の化合物またはその薬学的に許容できる塩、溶媒和物、もしくはその多成分複合体、または式（Ｉ）の化合物の薬学的に許容できる塩の薬学的に許容できる溶媒和物もしくは多成分複合体を含む。
【００２６】
本発明の好ましい化合物は、式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容できるその塩である。
【００２７】
適切な酸付加塩は、無毒性の塩を形成する酸から形成される。例は、酢酸塩、アジピン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベシル酸塩、炭酸水素塩／炭酸塩、重硫酸塩／硫酸塩、ホウ酸塩、カムシル酸塩、クエン酸塩、シクラミン酸塩、エジシル酸塩、エシル酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、グルセプト酸塩、グルコン酸塩、グルクロン酸塩、ヘキサフルオロリン酸塩、ヒベンズ酸塩、塩酸塩／塩化物、臭化水素酸塩／臭化物、ヨウ化水素酸塩／ヨウ化物、イセチオン酸塩、乳酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メシル酸塩、メチル硫酸塩、ナフチル酸塩、２−ナプシル酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、オロチン酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、パモ酸塩、リン酸塩／リン酸水素塩／リン酸二水素塩、ピログルタミン酸塩、サッカリン酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、タンニン酸塩、酒石酸塩、トシル酸塩、トリフルオロ酢酸塩およびキシナホ酸塩を含む。
【００２８】
適切な塩基性塩は、無毒性の塩を形成する塩基から形成される。例は、アルミニウム塩、アルギニン塩、ベンザチン塩、カルシウム塩、コリン塩、ジエチルアミン塩、ジオラミン塩、グリシン塩、リシン塩、マグネシウム塩、メグルミン塩、オラミン塩、カリウム塩、ナトリウム塩、トロメタミン塩および亜鉛塩を含む。
【００２９】
酸および塩基のヘミ塩、例えば、ヘミ硫酸塩およびヘミカルシウム塩をまた、形成し得る。
【００３０】
上記の塩は、対イオンが、光学活性、例えば、ｄ−乳酸塩もしくはｌ−リシン、またはラセミ体、例えば、ｄｌ−酒石酸塩もしくはｄｌ−アルギニンであるものを含むことを当業者は認識するであろう。
【００３１】
適切な塩についての総説については、「Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ：Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，  Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ，  ａｎｄ  Ｕｓｅ」、ＳｔａｈｌおよびＷｅｒｍｕｔｈ（Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ、Ｗｅｉｎｈｅｉｍ、Ｇｅｒｍａｎｙ、２００２）を参照されたい。
【００３２】
式（Ｉ）の化合物の薬学的に許容できる塩は、３つの方法の１つもしくは複数によって調製し得る。
（ｉ）式（Ｉ）の化合物と所望の酸もしくは塩基とを反応させることによる；
（ｉｉ）所望の酸もしくは塩基を使用して、式（Ｉ）の化合物の適切な前駆体から酸もしくは塩基に不安定な保護基を除去することによる；または
（ｉｉｉ）適当な酸もしくは塩基との反応によって、または適切なイオン交換カラムの手段によって、式（Ｉ）の化合物の１種の塩を別の塩に変換することによる。
【００３３】
３つの反応の全ては典型的には、溶液中で行われる。このように得られた塩は、沈殿し、濾過によって集め得るか、または溶媒の蒸発によって回収し得る。このように得られた塩におけるイオン化の程度は、完全にイオン化されているものから殆どイオン化されていないものまで変化し得る。
【００３４】
式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容できるその塩は、非溶媒和および溶媒和形態の両方で存在し得る。用語「溶媒和物」は、本明細書において、式（Ｉ）の化合物または薬学的に許容できるその塩と、１個もしくは複数の薬学的に許容できる溶媒分子、例えば、エタノールとを含む分子複合体を説明するために使用される。前記溶媒が水であるとき、用語「水和物」が用いられる。本発明による薬学的に許容できる溶媒和物は、結晶化の溶媒を同位体的に置換し得るもの、例えば、Ｄ２Ｏ、ｄ６−アセトンおよびｄ６−ＤＭＳＯを含む。
【００３５】
有機水和物のための現在認められている分類体系は、孤立部位水和物（ｉｓｏｌａｔｅｄ  ｓｉｔｅ    ｈｙｄｒａｔｅ）、チャネル水和物、または金属イオン配位水和物を定義しているものである。参照により本明細書中に組み込まれている、Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ  ｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｏｌｉｄｓ、Ｋ．Ｒ．Ｍｏｒｒｉｓ（Ｅｄ．Ｈ．Ｇ．Ｂｒｉｔｔａｉｎ、Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ、１９９５）を参照されたい。孤立部位水和物は、水分子が、介在する有機分子によって互いとの直接の接触から孤立している。チャネル水和物において、水分子は、格子チャネル内に位置しており、そこでは、水分子は他の水分子の隣にある。金属イオン配位水和物において、水分子は、金属イオンに結合している。
【００３６】
溶媒または水が密接に結合しているとき、複合体は、湿度とは関係なく明確な化学量論を有する。しかし、チャネル溶媒和物および吸湿性化合物におけるように、溶媒または水が弱く結合しているとき、水／溶媒含量は、湿度および乾燥条件によって決まる。このような場合、非化学量論が標準である。
【００３７】
式（Ｉ）の化合物の多成分複合体（塩および溶媒和物以外）または薬学的に許容できるその塩も本発明の範囲内に含まれ、ここでは、薬物および少なくとも１種の他の成分は、化学量論量または非化学量論量で存在する。このタイプの複合体は、クラスレート（薬物−ホスト包接複合体）および共結晶を含む。後者は典型的には、非共有結合性相互作用によって互いに結合しているが、塩との中性分子の複合体であり得る、中性分子構成物の結晶複合体として定義される。共結晶は、溶融結晶化によって、溶媒からの再結晶化によって、または諸成分を一緒に物理的に粉砕することによって調製し得る。参照により本明細書中に組み込まれている、Ｃｈｅｍ  Ｃｏｍｍｕｎ、１７、１８８９〜１８９６、Ｏ．ＡｌｍａｒｓｓｏｎおよびＭ．Ｊ．Ｚａｗｏｒｏｔｋｏ（２００４）を参照されたい。多成分複合体の一般的な総説については、参照により本明細書中に組み込まれている、Ｊ  Ｐｈａｒｍ  Ｓｃｉ、６４（８）、１２６９〜１２８８、Ｈａｌｅｂｌｉａｎ（Ａｕｇｕｓｔ  １９７５）を参照されたい。
【００３８】
本発明の化合物は、完全にアモルファスから完全に結晶性までの範囲の一連の固体状態で存在し得る。用語「アモルファス」は、材料が分子レベルで長距離秩序を欠いており、温度によって、固体または液体の物理的特性を示し得る状態を指す。典型的には、このような材料は、特有のＸ線回折パターンを示さず、固体の特性を示す一方で、液体としてより形式的に説明される。加熱によって、状態変化、典型的には、二次（「ガラス転移」）によって特性決定される固体から液体特性への変化が起こる。用語「結晶性」は、固相を指し、そこでは、材料が分子レベルにおいて規則的秩序の内部構造を有し、明確なピークを伴う特有のＸ線回折パターンを示す。このような材料はまた、十分に加熱されたとき、液体の特性を示すが、固体から液体への変化は、相変化、典型的には、一次（「融点」）によって特性決定される。
【００３９】
本発明の化合物はまた、適切な条件に供されたとき、中間状態（中間相または液晶）で存在し得る。中間状態は、真の結晶状態および真の液体状態（溶融物または溶液）の間の中間物である。温度の変化の結果として起こる液晶性は、「サーモトロピック」として説明され、第２の成分、例えば、水または別の溶媒の添加からもたらされる液晶性は、「リオトロピック」として説明される。リオトロピック中間相を形成する可能性を有する化合物は、「両親媒性」として説明され、イオン性（例えば、−ＣＯＯ−Ｎａ＋、−ＣＯＯ−Ｋ＋、もしくは−ＳＯ３−Ｎａ＋）または非イオン性（例えば、−Ｎ−Ｎ＋（ＣＨ３）３）極性頭基を有する分子からなる。さらなる情報について、参照により本明細書中に組み込まれている、Ｃｒｙｓｔａｌｓ  ａｎｄ  ｔｈｅ  Ｐｏｌａｒｉｚｉｎｇ  Ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ、Ｎ．Ｈ．ＨａｒｔｓｈｏｒｎｅおよびＡ．Ｓｔｕａｒｔ、４ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ（Ｅｄｗａｒｄ  Ａｒｎｏｌｄ、１９７０）を参照されたい。
【００４０】
本発明の化合物は、プロドラッグとして投与し得る。このように、それら自体が薬理活性を殆ど有さなくてもよいか、または有さなくてもよい式（Ｉ）の化合物の特定の誘導体は、体内にまたは体の上に投与されたとき、例えば、加水切断によって所望の活性を有する式（Ｉ）の化合物へと変換することができる。このような誘導体は、「プロドラッグ」と称される。プロドラッグの使用についてのさらなる情報は、「Ｐｒｏ−ｄｒｕｇｓ  ａｓ  Ｎｏｖｅｌ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ」、Ｖｏｌ．１４、ＡＣＳ  Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ  Ｓｅｒｉｅｓ（Ｔ  ＨｉｇｕｃｈｉおよびＷ  Ｓｔｅｌｌａ）ならびに「Ｂｉｏｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ  Ｃａｒｒｉｅｒｓ  ｉｎ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ」、Ｐｅｒｇａｍｏｎ  Ｐｒｅｓｓ、１９８７（ｅｄ．Ｅ  Ｂ  Ｒｏｃｈｅ、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ）において見出し得る。
【００４１】
プロドラッグは、例えば、式（Ｉ）の化合物中に存在する適当な官能基を、例えば、「Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ」、Ｈ  Ｂｕｎｄｇａａｒｄ（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ、１９８５）に記載されているような「プロ部分」として当業者には公知の特定の部分と置き換えることによって生成することができる。
【００４２】
プロドラッグの例は、ホスフェートプロドラッグ、例えば、二水素またはジアルキル（例えば、ジ−ｔｅｒｔ−ブチル）ホスフェートプロドラッグを含む。上記の例による置換え基のさらなる例、および他のプロドラッグタイプの例は、上記の参照文献において見出し得る。
【００４３】
式（Ｉ）の化合物の代謝物、すなわち、薬物の投与によってｉｎ  ｖｉｖｏで形成される化合物も本発明の範囲内に含まれる。本発明による代謝物のいくつかの例は、式（Ｉ）の化合物がフェニル（Ｐｈ）部分を含有する場合、そのフェノール誘導体（−Ｐｈ＞−ＰｈＯＨ）を含む。
【００４４】
式（Ｉａ）および（Ｉｂ）は、不斉炭素原子を含有し、立体特異的に定義されている。Ｒ１ａおよびＲ１ｂが、それぞれ、ＮＨ２、ＮＨ−Ｃ（Ｏ）Ｒ５またはＮＨ（ＣＨ２）−Ｃ（Ｏ）ＯＲ６である場合、式（Ｉａ）および（Ｉｂ）は、エピマーの対を定義することを当業者は認識するであろう。本発明は、全てのこのようなエピマーおよびこれらの混合物を含む。
【００４５】
式（Ｉ）における１個もしくは複数の置換基は、１個もしくは複数のさらなる不斉炭素原子を導入し得ることを当業者はまた認識するであろう。前記１個もしくは複数のさらなる不斉炭素原子を含有する本発明の化合物は、２種もしくはそれより多い立体異性体として存在することができる。本発明の化合物の全てのこのような立体異性体、およびその２つもしくはそれより多いものの混合物が本発明の範囲内に含まれる。
【００４６】
個々のエナンチオマーの調製／単離のための従来の技術は、適切な光学的に純粋な前駆体からのキラル合成、または例えば、キラル高圧液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）を使用したラセミ化合物（または塩もしくは誘導体のラセミ化合物）の分割を含む。
【００４７】
代わりに、ラセミ化合物（またはラセミ前駆体）は、適切な光学活性な化合物、例えば、アルコールと、または、式（Ｉ）の化合物が酸性もしくは塩基性部分を含有する場合は、塩基もしくは酸、例えば、１−フェニルエチルアミンもしくは酒石酸と反応し得る。このように得られたジアステレオマー混合物は、クロマトグラフィーおよび／または分別結晶によって分離し得、ジアステレオ異性体の１つまたは両方は、対応する純粋なエナンチオマー（複数可）へと当業者には周知の手段によって変換し得る。
【００４８】
本発明のキラル化合物（およびそのキラル前駆体）は、クロマトグラフィー、典型的には、０〜５０容量％のイソプロパノール、典型的には、２〜２０容量％、および０〜５容量％のアルキルアミン、典型的には、０．１容量％のジエチルアミンを含有する炭化水素、典型的には、ヘプタンまたはヘキサンからなる移動相を伴う、不斉樹脂上のＨＰＬＣを使用して鏡像異性的に富化された形態で得てもよい。溶出液の濃縮は、富化された混合物を提供する。
【００４９】
亜臨界流体および超臨界流体を使用したキラルクロマトグラフィーを用いてもよい。本発明の一部の実施形態において有用なキラルクロマトグラフィーについての方法は公知である。例えば、Ｓｍｉｔｈ，  Ｒｏｇｅｒ  Ｍ．、Ｌｏｕｇｈｂｏｒｏｕｇｈ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ、Ｌｏｕｇｈｂｏｒｏｕｇｈ、ＵＫ；Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｓｅｒｉｅｓ（１９９８）、７５（Ｓｕｐｅｒｃｒｉｔｉｃａｌ  Ｆｌｕｉｄ  Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ  ｗｉｔｈ  Ｐａｃｋｅｄ  Ｃｏｌｕｍｎｓ）、ｐｐ．２２３〜２４９およびその中で引用されている参照文献を参照されたい。
【００５０】
立体異性体の混合物は、当業者には公知の従来の技術によって分離し得る。例えば、「Ｓｔｅｒｅｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ」、Ｅ．Ｌ．ＥｌｉｅｌおよびＳ．Ｈ．Ｗｉｌｅｎ（Ｗｉｌｅｙ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、１９９４を参照されたい。
【００５１】
構造異性体が低いエネルギー障壁によって相互転換できる場合、互変異性（「タウトメリズム」）および配座異性が起こり得る。
【００５２】
タウトメリズムは、例えば、アミド基（すなわち、アミド−イミド酸タウトメリズム）を含有する式（Ｉ）の化合物におけるプロトンタウトメリズム、または芳香族部分を含有する化合物におけるいわゆる原子価タウトメリズムの形態を取ることができる。簡潔さのために、式（Ｉ）の化合物を本明細書において単一の互変異性形態で描いてきた一方、全ての可能な互変異性形態が本発明の範囲内に含まれる。
【００５３】
配座異性は、異性体が単結合の周りの回転によってもっぱら相互変換することができる立体異性の一形態である。このような異性体は一般に、配座異性体またはコンフォマー、および具体的には、回転異性体と称される。式（Ｉ）のアミドは、回転異性体として存在することができる。簡潔さのために、式（Ｉ）の化合物を単一の立体配座形態で描いてきた一方、全ての可能なコンフォマーは本発明の範囲内に含まれる。
【００５４】
本発明の範囲は、そのラセミ化合物およびラセミ混合物（集合体）を含めた、本発明の化合物の全ての結晶形態を含む。立体異性集合体はまた、本明細書の直前に記載されている従来の技術によって分離し得る。
【００５５】
本発明の範囲は、本発明の全ての薬学的に許容できる同位体標識された化合物を含み、ここでは、１個もしくは複数の原子は、天然で優勢である原子質量または質量数とは異なる原子質量または質量数ではあるが同じ原子番号を有する原子で置き換えられている。
【００５６】
本発明の化合物に含まれるのに適した同位体の例は、水素の同位体、例えば、２Ｈおよび３Ｈ；炭素の同位体、例えば、１１Ｃ、１３Ｃおよび１４Ｃ；窒素の同位体、例えば、１３Ｎおよび１５Ｎ；ならびに酸素の同位体、例えば、１５Ｏ、１７Ｏおよび１８Ｏを含む。
【００５７】
本発明の特定の同位体標識された化合物、例えば、放射性同位体を組み込んでいるものは、薬物および／または基質組織分布研究において有用である。放射性同位体であるトリチウム、すなわち、３Ｈ、および炭素−１４、すなわち、１４Ｃは、それらの組込みの容易さおよび検出の使用可能な手段を考慮して、この目的のために特に有用である。より重い同位体、例えば、重水素（Ｄ）、すなわち、２Ｈによる置換は、より大きな代謝安定性、例えば、ｉｎ  ｖｉｖｏでの半減期の増加または投与必要量の低減からもたらされる特定の治療上の利点をもたらし得、したがって、いくつかの状況において好ましくてもよい。ポジトロン放出同位体、例えば、１１Ｃ、１５Ｏおよび１３Ｎによる置換は、基質受容体占有率を調査するためのポジトロン放出断層撮影（ＰＥＴ）研究において有用であり得る。
【００５８】
特に対象となるのは、１個もしくは複数のＨがＤで置き換えられている式（Ｉ）の化合物である。本発明の一実施形態では、式（Ｉ）におけるフェニル環は、１個もしくは複数のＤで置換されている。別の実施形態では、本発明は、式（ＩａＤ）または式（ＩｂＤ）
【００５９】
【化８】
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の３，５−ジジューテロフェニル化合物を提供する。
【００６０】
実施形態Ｅ２〜Ｅ１６は、式（Ｉａ）および式（Ｉｂ）の化合物に適用されるように、式（ＩａＤ）および式（ＩｂＤ）の化合物に適用されることを当業者は認識するであろう。式（ＩａＤ）および式（ＩｂＤ）の化合物に関して、このような実施形態は、Ｅ２Ｄ〜Ｅ１６Ｄと称される。
【００６１】
したがって、化合物Ｎ−｛（２Ｓ）−１−｛［（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｒ，２０ａＳ）−９−（３−カルバムイミドアミドプロピル）−１９−ヒドロキシ−３−［（ｃｉｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル］−６−（１Ｈ−インドール−３−イルメチル）−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソイコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−１５−イル］アミノ｝−１−オキソ−３−（３，５−ジジューテロフェニル）プロパン−２−イル｝グリシンは、式（Ｉａ）および式（ＩａＤ）の両方の実施形態である。
【００６２】
式（Ｉ）の同位体標識化合物は一般に、当業者には公知の従来の技術によって、または従前に用いた標識されていない試薬の代わりに適当な同位体標識された試薬を使用して添付の実施例および調製に記載されているものと類似しているプロセスによって調製することができる。
【００６３】
本明細書の下記で定義するような中間化合物、その全ての塩、溶媒和物および複合体、ならびに式（Ｉ）の化合物について本明細書の上記に定義されているようなその塩の全ての溶媒和物および複合体も本発明の範囲内である。本発明は、上記の種の全ての多形およびその晶癖を含む。
【００６４】
本発明によって式（Ｉ）の化合物を調製するとき、当業者は、この目的のための特徴の最良の組合せを提供する中間体の形態を通常選択し得る。このような特徴は、中間体形態の融点、溶解性、加工性および収率、ならびに生成物を単離によって精製し得る結果として生じる容易さを含む。
【００６５】
本発明の化合物は、類似の構造の化合物の調製のための当技術分野において公知の任意の方法によって調製し得る。特に、本発明の化合物は、下記のスキームを参照して記載した手順によって、または実施例において記載されている特定の方法によって、またはいずれかと同様のプロセスによって調製することができる。
【００６６】
下記のスキームにおいて記載する実験条件は、示された変換をもたらすための適切な条件の例示であることを、および式（Ｉ）の化合物の調製のために用いる正確な条件を変更することが必要であるか、または望ましくあり得ることを、当業者は認識するであろう。スキームにおいて記載したものと異なる順序で変換を行うか、または変換の１つもしくは複数を修正して、本発明の所望の化合物を提供することは必要であるか、もしくは望ましくあり得ることがさらに認識されるであろう。
【００６７】
さらに、望ましくない副反応を防止するために、１個もしくは複数の感受性基を保護することは、本発明の化合物の合成における任意の段階において必要であるか、または望ましくあり得ることを当業者は認識するであろう。特に、ヒドロキシル、カルボキシルおよび／またはアミノ基を保護することは必要であるか、または望ましくあり得る。本発明の化合物の調製において使用される保護基は、通常の様式で使用し得る。例えば、参照により本明細書中に組み込まれている、「Ｇｒｅｅｎｅ’ｓ  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」、Ｔｈｅｏｄｏｒａ  Ｗ  ＧｒｅｅｎｅおよびＰｅｔｅｒ  Ｇ  Ｍ  Ｗｕｔｓ、ｆｉｆｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ、（Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ、２０１４）に記載されているもの、ならびに特に、このような基の除去のための方法をまた説明する、それぞれ、第２章、第５章および第７章を参照されたい。
【００６８】
下記の一般プロセスにおいて、Ｒ１〜Ｒ４は、他に記述しない限り、式（Ｉ）の化合物について従前に定義された通りである。スキームは式（Ｉａ）の化合物の調製について説明する一方、これらは式（Ｉｂ）の化合物の提供のために同等に適していることを当業者は認識するであろう。
【００６９】
式（Ｉ）の化合物は、Ｒ３を含有する側鎖アミノ酸基が、シーケンスの初めにおいて大環状化の前に、またはシーケンスの終わりにおいて大環状化に続いて導入されるかどうかによって、スキーム１またはスキーム２によって調製し得る。両方のスキームは、アミノ酸であるオルニチンの保護されたバージョンを使用した最初のローディングステップを伴う、２−クロロトリチルクロリド（ＣＴＣ）樹脂をベースとする固相合成（ＳＰＳ）技術を利用する。
【００７０】
第１のプロセスによると、式（Ｉａ）の化合物は、スキーム１によって調製し得る。
【００７１】
スキーム１によると、Ｎα−フルオレニルメチルオキシカルボニル−Ｎδ−アリルオキシカルボニル−Ｌ−オルニチンを樹脂上へとローディングし、それに続いてフルオレニルメチルオキシカルボニル（ＦＭＯＣ）基の除去によって、式（Ｖ）の化合物が得られ、これによってそれに続く、選択的に遊離αアミノ基上への、Ｒ３を含有する所望の側鎖アミノ酸の導入が可能となった。次いで、アリルオキシカルボニル基の除去によって、遊離δアミノ基上のアミノ酸カップリングが可能となった。それに続くＦＭＯＣ保護されたアミノ酸を使用した確立したＳＰＳ技術を使用したペプチド鎖伸長によって、１個の遊離アミノ基を有する式（ＩＶａ）の樹脂結合ヘキサペプチドが得られた。それに続く樹脂からの切断によって、１個の遊離アミノ基および１個の遊離カルボン酸基を有する式（ＩＩＩａ）のヘキサペプチドが得られ、これはマクロラクタム化を起こし、式（ＩＩａ）の環状ペプチドフレームワークが得られた。様々な酸に不安定な保護基ＰＧ１、ＰＧ２、ＰＧ３およびＰｂｆの除去、それに続く精製によって、式（Ｉａ）の最終環状ペプチドが得られた。
【００７２】
【化９】
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【００７３】
第２のプロセスによると、式（Ｉａ）の化合物は、スキーム２によって調製し得る。
【００７４】
スキーム２によると、Ｎα−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル−Ｎδ−フルオレニルメチルオキシカルボニル−Ｌ−オルニチンを樹脂上へとローディングし、それに続いてＦＭＯＣ基を除去することによって、（Ｘ）の化合物が得られ、これによって遊離δアミノ基上のアミノ酸カップリングが可能となった。ＦＭＯＣ保護されたアミノ酸を使用した確立したＳＰＳ技術を使用したそれに続くペプチド鎖伸長によって、１個の遊離アミノ基を有する式（ＩＸａ）の樹脂結合ペンタペプチドを得た。それに続く、樹脂からの切断によって、１個の遊離アミノ基および１個の遊離カルボン酸基を有する式（ＶＩＩＩａ）のペンタペプチドを得て、これはマクロラクタム化を起こし、式（ＶＩＩａ）の環状ペプチドプレームワークを得た。オルニチン残基からのＮα−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル基を含めた様々な酸に不安定な保護基、ならびにＰＧ２、ＰＧ３およびＰｂｆの除去によって、１個の遊離アミノ基を有する式（ＶＩａ）の環状ペンタペプチドが得られた。遊離アミノ基上への側鎖アミノ酸の導入、それに続く精製によって、式（Ｉａ）の最終環状ペプチドを得た。
【００７５】
【化１０】
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【００７６】
ＣＴＣ樹脂および必要なアミノ酸は、市販であるか、文献から公知であるか、当業者には周知の方法によって容易に調製されるか、または本明細書に記載されている調製によって別の方法で作製することができる。
【００７７】
式（Ｉ）の化合物を調製するための全ての新規なプロセス、およびこのようなプロセスにおいて用いられる対応する新規な中間体は、本発明のさらなる態様を形成する。
【００７８】
製薬学的用途のために意図される本発明の化合物は、結晶性もしくはアモルファスの生成物として投与し得るか、または完全にアモルファスから完全に結晶性までの範囲の一連の固体状態で存在し得る。これらは、沈殿、結晶化、凍結乾燥、噴霧乾燥、または蒸発による乾燥などの方法によって、例えば、固体プラグ、粉末、またはフィルムとして得てもよい。マイクロ波または高周波乾燥は、この目的のために使用し得る。
【００７９】
これらは、単独で、または１種もしくは複数の他の本発明の化合物と組み合わせて、または１種もしくは複数の他の薬物と組み合わせて（または、任意のこれらの組合せとして）投与し得る。一般に、これらは、１種もしくは複数の薬学的に許容できる添加剤と関連して投与される。用語「添加剤」は、本明細書において本発明の化合物（複数可）以外の任意の構成要素を説明するために使用される。添加剤の選択は、かなりの程度まで、投与の特定のモード、溶解性および安定性に対する添加剤の効果、ならびに剤形の性質などの要因によって決まる。
【００８０】
別の態様では、本発明は、本発明の化合物および薬学的に許容できる添加剤を含む医薬組成物を提供する。
【００８１】
本発明の化合物の送達に適した医薬組成物、およびこれらの調製のための方法は、当業者には容易に明らかである。このような組成物およびこれらの調製のための方法は、例えば、「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ」、１９ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ（Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ、１９９５）において見出し得る。
【００８２】
本発明の化合物は、非経口的に、すなわち、血流中に、筋肉中に、または内臓中に直接投与し得る。
【００８３】
静脈内投与は、特に、本発明の化合物を投与するための好都合な手段を表す。非経口投与のための他の適切な手段は、動脈内、腹腔内、くも膜下腔内、脳室内、尿道内、胸骨内、頭蓋内、筋内および皮下を含む。
【００８４】
非経口投与のための適切な装置は、針（顕微針を含めた）のある注射器、針のない注射器および注入技術を含む。
【００８５】
非経口製剤は典型的には、添加剤、例えば、塩、炭水化物および（好ましくは、３〜９のｐＨへの）緩衝剤を含有し得る水溶液であるが、いくつかの用途のために、これらは無菌の非水性溶液として、または適切なビヒクル、例えば、無菌の発熱物質を含まない水と共に使用される乾燥形態としてより適切に製剤化し得る。
【００８６】
例えば、凍結乾燥による無菌状態下での非経口製剤の調製は、当業者には周知の標準的な医薬技術を使用して容易に達成し得る。
【００８７】
非経口液の調製において使用される式（Ｉ）の化合物の溶解性は、適当な製剤化技術、例えば、溶解性増進剤の組込みを使用することによって増加し得る。
【００８８】
非経口投与のための製剤は、即時放出および／または調節放出であるように製剤化し得る。好都合には、本発明の化合物は、即時放出のために製剤化される。
【００８９】
調節放出製剤は、遅延放出、持続放出、パルス放出、制御放出、標的放出およびプログラム放出を含む。このように、本発明の化合物は、活性化合物の調節放出を実現する埋め込まれたデポー剤としての投与のために固体、半固体、またはチキソトロープ液として製剤化し得る。このような製剤の例は、薬物コーティングしたステントおよびポリ（ｄｌ−乳酸−ｃｏ−グリコール酸）（ＰＧＬＡ）ミクロスフィアを含む。
【００９０】
他の投与のモードは、経口、局所、吸入／鼻腔内、直腸／膣内および眼／耳への投与を含む。これらの投与方法に適した製剤は、即時放出および／または調節放出を含む。調節放出製剤は、遅延放出、持続放出、パルス放出、制御放出、標的放出およびプログラム放出を含む。
【００９１】
本発明の化合物は、上記の投与方法のいずれかにおいて使用するための、それらの溶解性、溶解速度、味のマスキング、バイオアベイラビリティーおよび／または安定性を改善させるために、可溶性巨大分子実体、例えば、シクロデキストリンおよび適切なその誘導体またはポリエチレングリコール含有ポリマーと組み合わせ得る。
【００９２】
薬物−シクロデキストリン複合体は、例えば、大部分の剤形および投与経路のために一般に有用であることが見出される。包接複合体および非包接複合体の両方を使用し得る。薬物との直接の複合体形成に代わるものとして、シクロデキストリンは、補助的添加物として、すなわち、担体、賦形剤、または可溶化剤として使用し得る。これらの目的のために最も一般に使用されるのは、ヒドロキシプロピルベータシクロデキストリンおよびスルホブチルエーテルベータシクロデキストリンナトリウムを含めたアルファ−、ベータ−およびガンマ−シクロデキストリンであり、それらの例は、国際出願ＷＯ９１／１１１７２、ＷＯ９４／０２５１８およびＷＯ９８／５５１４８において見出し得る。
【００９３】
ヒト患者への投与のために、本発明の化合物の総１日用量は典型的には、当然ながら、投与のモードおよび有効性によって、１ｍｇ〜１０ｇ、例えば、６０ｍｇ〜６ｇ、例えば、１００ｍｇ〜１ｇの範囲である。例えば、静脈内投与は、４００ｍｇ〜８００ｍｇの総１日用量を必要とし得る。総１日用量は、単回用量または分割用量で投与し得、医師の裁量で、本明細書において示す典型的な範囲に入らなくてもよい。これらの投与量は、約６０ｋｇ〜７０ｋｇの重量を有する平均ヒト対象に基づく。医師は、その体重がこの範囲に入らない対象、例えば、幼児および高齢者のために容易に用量を決定することができる。
【００９４】
上で述べたように、本発明の化合物は、動物において薬理活性、すなわち、Ｃ５ａ受容体アンタゴニズムを示すために有用である。より特定すると、本発明の化合物は、Ｃ５ａ受容体アンタゴニストが適応となる障害の処置において有用である。好ましくは、動物は、哺乳動物、より好ましくは、ヒトである。
【００９５】
本発明のさらなる態様では、医薬として使用するための、本発明の化合物を提供する。
【００９６】
本発明のさらなる態様では、Ｃ５ａ受容体アンタゴニストが適応となる障害の処置において使用するための本発明の化合物を提供する。
【００９７】
本発明のさらなる態様では、Ｃ５ａ受容体アンタゴニストが適応となる障害の処置のための医薬の調製のための本発明の化合物の使用を提供する。
【００９８】
本発明のさらなる態様では、前記動物に治療的有効量の本発明の化合物を投与することを含む、動物（好ましくは、哺乳動物、より好ましくは、ヒト）において、Ｃ５ａ受容体アンタゴニストが適応となる障害を処置する方法を提供する。
【００９９】
Ｃ５ａ受容体アンタゴニストが適応となる障害は、炎症性障害および免疫障害を含む。
【０１００】
炎症性障害には、これらに限定されないが、敗血症、例えば、急性の腎臓、肺、肝臓、心臓および脳傷害と関連する敗血症；アナフィラキシー；移植片拒絶、例えば、腎臓、肺、心臓、肝臓および膵臓と関連するもの；全身性血管炎、例えば、抗好中球細胞質抗体関連血管炎；眼疾患、例えば、黄斑変性症およびブドウ膜炎；肺疾患、例えば、喘息および慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）；炎症性障害、例えば、ＣＯＰＤまたは全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）の急性増悪；ならびに腎臓、肺、肝臓、心臓および脳の虚血再灌流傷害が含まれる。
【０１０１】
免疫障害には、これらに限定されないが、非定型的ＨＵＳ（ａＨＵＳ）を含めた溶血性尿毒症症候群（ＨＵＳ）；関節リウマチ；ギランバレー症候群；クローン病；潰瘍性大腸炎；重症筋無力症；抗リン脂質症候群；天疱瘡；類天疱瘡；ＳＬＥ；ＩｇＡネフロパシー；およびループス腎炎が含まれる。
【０１０２】
特に対象となる障害は、
・根底にある腎疾患、例えば、糸球体腎炎もしくは溶血性尿毒症症候群によって；または
・薬物、虚血、感染、もしくは腎毒性代謝物によって
もたらされるＡＫＩを含めた急性腎傷害（ＡＫＩ）である。
【０１０３】
Ｃ５ａ受容体アンタゴニストは、別の薬理的活性化合物と、または２種もしくはそれより多い他の薬理的活性化合物と有用な形で組み合わせ得る。このような組合せは、患者の薬剤服用順守、投薬の容易さおよび相乗的活性を含めた重要な利点の可能性を提供する。
【０１０４】
このような組合せにおいて、本発明の化合物は、他の治療剤（複数可）と組み合わせて、同時に、逐次的にまたは別々に投与し得る。
【０１０５】
１種もしくは複数のさらなる治療剤は、下記の薬剤、または薬剤のタイプのいずれかから選択し得る。
１）ＴＮＦ−アルファ阻害剤、例えば、アダリムマブ、セルトリズマブペゴル、エタネルセプト、インフリキシマブまたはゴリムマブ；
２）アルカリホスファターゼ、例えば、組換えアルカリホスファターゼ（例えば、ＰＦ−０６８５３０８２）；
３）トール様受容体（ＴＬＲ）アンタゴニスト、例えば、中和抗体；
４）炎症性疾患および／または自己免疫疾患を処置するための別の薬剤、例えば、メトトレキサート、レフルノミド、スルファサラジンまたはアザチオプリン；
５）抗ヒスタミン受容体アンタゴニスト、例えば、Ｈ１受容体アンタゴニスト（例えば、ジフェンヒドラミン）；
６）ホルミルペプチド受容体（ＦＰＲ）アンタゴニスト、例えば、ＦＰＲ−１受容体アンタゴニスト；
７）別の補体系阻害剤、例えば、Ｂ因子阻害剤、Ｃ５ａ中和抗体またはＣ５Ｌ２阻害剤；
８）ケモカインまたはケモカイン受容体（ＣＣＲ）中和抗体またはアンタゴニスト、例えば、ＣＣＲ２受容体アンタゴニスト（例えば、ＰＦ−０４１３６３０９）またはＣＣＲ２／５デュアル受容体アンタゴニスト、例えば、ＰＦ−０４６３４８１７；
９）ａ．ヤヌスキナーゼの阻害剤、例えば、ＪＡＫ１（例えば、ＰＦ−０４９６５８４２）、ＪＡＫ２もしくはＪＡＫ３（例えば、トファシチニブもしくはＰＦ−０６６５１６００）；
ｂ．チロシンキナーゼ、例えば、ＴＹＫ２の阻害剤；
ｃ．ｐ３８の阻害剤；
ｄ．ＭＡＰＫの阻害剤；
ｅ．Ｓｙｋの阻害剤；
ｆ．ＩＫＫ２の阻害剤；または
ｇ．上記のキナーゼの１種もしくは複数の阻害剤、例えば、ＴＹＫ２／ＪＡＫ１阻害剤（例えば、ＰＦ−０６７００８４１）；
ｈ．インターロイキン−１受容体関連キナーゼ（ＩＲＡＫ）の阻害剤、例えば、ＩＲＡＫ４の阻害剤（例えば、ＰＦ−０６６５０８３３）；
ｉ．ブルトンチロシンキナーゼ（ＢＴＫ）の阻害剤
を含めたキナーゼ阻害剤；
１０）インターロイキン（ＩＬ）阻害剤またはＩＬ受容体阻害剤、例えば、ＩＬ−１阻害剤（例えば、アナキンラ）、ＩＬ−６阻害剤（例えば、トシリズマブ）、ＩＬ−１２／ＩＬ−２３阻害剤（例えば、ウステキヌマブ）、またはＩＬ−３３阻害剤（例えば、ＰＦ−０８１７０２４）；
１１）インテグリン阻害剤、例えば、ナタリズマブ；
１２）非ステロイド性抗炎症剤（ＮＳＡＩＤ）、例えば、プロピオン酸誘導体（例えば、アルミノプロフェン、ベノキサプロフェン、ブクロクス酸、カルプロフェン、フェンブフェン、フェノプロフェン、フルプロフェン、フルルビプロフェン、イブプロフェン、インドプロフェン、ケトプロフェン、ミロプロフェン、ナプロキセン、オキサプロジン、ピルプロフェン、プラノプロフェン、スプロフェン、チアプロフェン酸およびチオキサプロフェン）。
【０１０６】
２種もしくはそれより多い医薬組成物（これらの少なくとも１つは、本発明の化合物を含有する）は好都合には、組成物の同時の投与に適したキットの形態において組み合わせ得ることは本発明の範囲内である。このように、本発明のキットは、２種もしくはそれより多い別々の医薬組成物（これらの少なくとも１つは、本発明の化合物を含有する）、および前記組成物を別々に保持するための手段、例えば、入れ物、分割されたボトル、または分割されたフォイルパケットを含む。このようなキットの一例は、錠剤、カプセル剤などのパッケージングのために使用される見慣れたブリスターパックである。本発明のキットは、異なる剤形、例えば、経口および非経口を投与するのに、異なる投与間隔で別々の組成物を投与するのに、または別々の組成物を互いに対して滴定するのに特に適している。服薬遵守を助けるために、キットは典型的には、投与についての指示を含み、いわゆるメモリーエイドと共に提供し得る。
【０１０７】
別の態様では、本発明は、Ｃ５ａ受容体アンタゴニストが適応となる障害の処置における同時、別々または逐次の使用のための組み合わされた調製物として、１種もしくは複数のさらなる治療活性剤と共に本発明の化合物を含む（例えば、キットの形態での）医薬製品を提供する。
【０１０８】
本明細書において処置への全ての言及は、治癒的処置、姑息的処置および予防的処置を含むことを理解すべきである。
【０１０９】
記述内容、および上記のスキームにおいて下記で詳述する非限定的実施例および調製において、下記の略語、定義および分析手順に言及し得る。
ＡｃＯＨは、酢酸であり、
ＡＰＣＩは、大気圧化学イオン化であり、
ａｑは、水性であり、
ｂｏｃは、ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルであり、
（ｂｏｃ）２Ｏは、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネートであり、
℃は、摂氏温度であり、
Ｃｂｚ−Ｃｌは、塩化カルボキシベンジル（クロロギ酸ベンジルとしてもまた公知である）であり、
ＣＤＣｌ３は、重水素化クロロホルムであり、
ＣＤ３ＯＤは、ジューテロメタノールであり、
ＣＴＣは、２−クロロトリチルであり、
ＤＢＵは、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エンであり、
ＤＣＥは、ジクロロエタンであり、
ＤＣＭは、ジクロロメタン（塩化メチレンとしてもまた公知である）であり、
ＤＥＡは、ジエチルアミンであり、
ＤＩＰＥＡは、ジイソプロピルエチルアミンであり、
ＤＭＡＰは、ジメチルアミノピリジンであり、
ＤＭＥは、ジメトキシエタンであり、
ＤＭＦは、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドであり、
ＤＭＳＯは、ジメチルスルホキシドであり、
ｄ６−ＤＭＳＯは、ジューテロジメチルスルホキシドであり、
ＥＳＣＩは、エレクトロスプレー化学イオン化であり、
ＥＳＩは、エレクトロスプレーイオン化であり、
ＥｔＯＡｃは、酢酸エチルであり、
Ｆｍｏｃ（ＦＭＯＣ）は、フルオレニルメチルオキシカルボニルであり、
Ｆｍｏｃ−ＯＳｕは、Ｎ−（９−フルオレニルメトキシカルボニオキシ）スクシンイミドであり、
ｇは、グラムであり、
ＨＣｌは、塩酸であり、
ＨＡＴＵは、１−［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］−１Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５−ｂ］ピリジニウム３−オキシドヘキサフルオロホスフェートであり、
ＨＢＴＵは、Ｏ−ベンゾトリアゾール−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチル−ウロニウム−ヘキサフルオロホスフェートであり、
ＨＦＩＰＡは、ヘキサフルオロイソプロパノールであり、
ＨＰＬＣは、高圧液体クロマトグラフィーであり、
ｉ−ＰｒＯＨは、イソプロパノールであり、
Ｌは、リットルであり、
ＬＣ−ＭＳは、液体クロマトグラフィー質量分析法であり、
Ｍは、モルであり、
ＭｅＣＮは、アセトニトリルであり、
ＭｅＯＨは、メタノールであり、
ｍｅｑは、モル当量であり、
ｍｇは、ミリグラムであり、
ＭＨｚは、メガヘルツであり、
分は、分であり、
ｍＬは、ミリリットルであり、
ｍｍｏｌは、ミリモルであり、
ｍｏｌは、モルであり、
ＭＴＢＥは、メチル第三ブチルエーテルであり、
ＭＳ  ｍ／ｚは、質量スペクトルピークであり、
ＮａＨＣＯ３は、炭酸水素ナトリウムであり、
ＮａＯＨは、水酸化ナトリウムであり、
ＮＨ３またはＮＨ４ＯＨは、アンモニアまたは水酸化アンモニウムであり、
ＮＭＭは、Ｎ−メチルモルホリンであり、
Ｐｂｆは、（２，２，４，６，７−ペンタメチル−２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イル）スルホニルであり、
ＰＥは、石油エーテルであり、
ｐＨは、水素イオン指数であり、
ｒ．ｔ．は、室温であり、
ＳＦＣは、超臨界流体クロマトグラフィーであり、
ＳＰＰＳは、固相ペプチド合成であり、
ＴＢＡＩは、ヨウ化テトラブチルアンモニウムであり、
ＴＢＭＥは、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルエーテルであり、
ＴＥＡは、トリエチルアミンであり、
ＴＦＡは、トリフルオロ酢酸であり、
ＴＨＦは、テトラヒドロフランであり、
ｔＲは、保持時間であり、
μＬは、マイクロリットルであり、
μｍｏｌは、マイクロモルである。
【０１１０】
下記の実施例に関して下記の手順を使用した。
【０１１１】
方法Ａ：固相反応の進行をモニタ−するためのＬＣ−ＭＳ方法
少量のＣＴＣ樹脂結合ペプチド（約２〜５ｍｇ）を、ＤＣＭ中の２０％ＨＦＩＰＡでｒ．ｔ．にて５分間処理した。揮発性物質を窒素流下で蒸発させ、残渣をメタノールに溶解し、濾過し、Ｗａｔｅｒｓ  ＬＣ−ＭＳによって分析した。
【０１１２】
ＬＣ−ＭＳ条件：
カラム：Ｗａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  ＨＳＳ  Ｔ３、２．１ｍｍ×５０ｍｍ、Ｃ１８、１．７μｍ；温度：６０℃；移動相Ａ：水中の０．１％ギ酸（ｖ／ｖ）；移動相Ｂ：アセトニトリル中の０．１％ギ酸（ｖ／ｖ）；流量１．２５ｍｌ／分。
・１．５分の実行：初期条件：Ａ−９５％：Ｂ−５％；０．０〜０．１分、初期で保持；０．１〜１．０分に亘りＡ−５％：Ｂ−９５％への直線傾斜；１．０〜１．１分、Ａ−５％：Ｂ−９５％で保持；１．１〜１．５分、初期条件に戻す。
・３分の実行：初期条件：Ａ９５％：Ｂ５％；０．０〜０．１分、初期条件で保持、次いで、Ａ５％への直線傾斜：０．１〜２．６分、Ｂ９５％；Ａ５％で保持：２．６〜２．９５分、Ｂ９５％、次いで、２．９５〜３．０分、初期条件に戻す。
検出器：Ｗａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  ＰＤＡ；２００〜４５０ｎｍスキャン；１．２ｎｍ間隔
Ｗａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  ＥＬＳ検出器；ドリフトチューブ、６５℃
Ｗａｔｅｒｓ  ＳＱ  ＭＳ（シングル四重極型）チューン：ＥＳＩ−３．５ｋＶ、キャピラリー／ＡＰＣＩ（ＥＳＣＩモード）−０．３μＡコロナピン、３０Ｖコーン、ソース１５０℃、脱溶媒和４７５℃、脱溶媒和ガス、Ｎ２、４００Ｌ／時間
ＭＳ方法：ＥＳＣＩ（ＥＳＩ＋／−、ＡＰＣＩ＋／−）、１００〜２０００ｍ／ｚスキャン、０．４秒のスキャン時間、セントロイド
注入量：５μｌ
【０１１３】
方法Ｂ：ＣＴＣ樹脂上へのＦｍｏｃ保護されたアミノ酸のローディング（１ｍｍｏｌ未満のスケール）
ＳＰＰＳチューブ中で、ＣＴＣ樹脂（ＣＡＳ４２０７４−６８−０、ＣｈｅｍＩｍｐｅｘから市販されている、カタログ番号０４２５０、１．０〜１．７ｍｅｑ／ｇ、１．０当量）を、選択したＦｍｏｃ保護されたアミノ酸（１．１当量）およびＤＩＰＥＡ（６当量）のＤＭＦ／ＤＣＭの混合溶媒（１：１０ｖ／ｖ、１２ｍｌ／ｍｍｏｌのＣＴＣ樹脂）溶液と混合した。混合物をｒ．ｔ．にて５時間振とうした。次いで、無水メタノール（１６当量）を加え、未反応のＣＴＣ樹脂をキャップした。ｒ．ｔ．にてさらに３０分間振とうした後、樹脂を濾別し、ＤＭＦ（３×１０ｍｌ）、ＤＣＭ（３×１０ｍｌ）、ＭｅＯＨ（３×１０ｍｌ）、およびＤＭＦ（３×１０ｍｌ）で洗浄した。Ｆｍｏｃ除去のために、次いで、樹脂をＤＭＦ（１０ｍｌ）中の２０％ｖ／ｖピペリジンでｒ．ｔ．にて振とう床上で３０分間処理した。次いで、樹脂を濾過し、ＤＭＦ（３×１０ｍｌ）、ＤＣＭ（３×１０ｍｌ）、ＭｅＯＨ（３×１０ｍｌ）で洗浄し、真空下で完全に乾燥させ、ＣＴＣ樹脂結合アミノ酸を得て、これを固相合成においてさらに精製することなく直接使用した。ローディングされていないＣＴＣ樹脂と比較して、重量増加に基づいて樹脂ローディング率を推定した。
【０１１４】
方法Ｃ：２−クロロトリチル（ＣＴＣ）樹脂上へのＦｍｏｃ保護されたアミノ酸のローディング（１．０〜１００ｍｍｏｌスケール）
オーバーヘッド機械式撹拌機を備えたＳＰＰＳ容器において、ＣＴＣ樹脂（１．０〜１．７ｍｅｑ／ｇ、１．０当量）を、選択したＦｍｏｃ保護されたアミノ酸（１．１当量）およびＤＩＰＥＡ（６当量）のＤＭＦ／ＤＣＭの混合溶媒（１：１０ｖ／ｖ、６．６ｍｌ／ｍｍｏｌのＣＴＣ樹脂）溶液と混合した。混合物をｒ．ｔ．にて５時間穏やかに撹拌した。無水メタノール（１６当量）を加え、未反応のＣＴＣ樹脂をキャップした。ｒ．ｔ．にてさらに３０分間撹拌した後、溶液を樹脂から真空濾過によって除去した。樹脂結合生成物をＤＭＦ（３×２００ｍｌ）、ＤＣＭ（３×２００ｍｌ）、ＭｅＯＨ（３×２００ｍｌ）、およびＤＭＦ（３×２００ｍｌ）で洗浄した。Ｆｍｏｃ除去のために、次いで、樹脂をＤＭＦ（３００ｍｌ）中の２０％ｖ／ｖピペリジンでｒ．ｔ．にて穏やかに撹拌しながら３０分間処理した。次いで、樹脂を真空下で濾過し、ＤＭＦ（３×２００ｍｌ）、ＤＣＭ（３×２００ｍｌ）、ＭｅＯＨ（３×１００ｍｌ）で洗浄し、真空下で完全に乾燥させ、ＣＴＣ樹脂結合アミノ酸を得て、これをさらに精製することなく固相合成において直接使用した。ローディングされていない樹脂と比較して、重量増加に基づいて樹脂ローディング率を推定した。
【０１１５】
方法Ｄ：直鎖状ペンタペプチド前駆体、ＳＰＳ（１ｍｍｏｌ未満のスケール）
ＣＴＣ樹脂結合アミノ酸（１．０当量）を含有するＳＰＰＳチューブに、Ｆｍｏｃ保護されたアミノ酸（１．５当量）、ＨＢＴＵ（１．５当量）、ＤＭＦ（１２ｍｌ）およびＤＩＰＥＡ（３当量）を加えた。ＳＰＰＳチューブをキャップし、ｒ．ｔ．にて振とう床上で２時間または方法Ａを使用してＬＣ−ＭＳが反応の完了を示すまで振とうした。次いで、反応溶液を、真空濾過によってＳＰＰＳチューブから除去し、樹脂結合生成物を得て、これをＤＭＦ（３×１０ｍｌ）、ＤＣＭ（３×１０ｍｌ）、ＭｅＯＨ（３×１０ｍｌ）およびＤＭＦ（３×１０ｍｌ）ですすいだ。Ｆｍｏｃ基の除去のために、樹脂をそれに続いてＤＭＦ中の１０ｍｌの２０％ｖ／ｖピペリジンでｒ．ｔ．にて処理し、３０分間、または方法Ａを使用してＬＣ−ＭＳが反応の完了を示すまで振とう床上に入れた。樹脂を真空濾過し、ＤＭＦ（３×１２ｍｌ）、ＤＣＭ（３×１２ｍｌ）およびＭｅＯＨ（３×１０ｍｌ）ですすぎ、真空下で乾燥させ、遊離末端アミノ基を有する樹脂結合ペプチドを得て、これを次のアミノ酸カップリング反応においてさらに精製することなく直接使用した。
【０１１６】
上記のカップリング／脱Ｆｍｏｃ手順を毎回それぞれ、異なるアミノ酸を使用してさらに３回繰り返し、遊離末端アミノ基を有するＣＴＣ樹脂結合直鎖状ペンタペプチド配列を得た。
【０１１７】
方法Ｅ：直鎖状ペンタペプチド前駆体、ＳＰＳ（１．０〜１００ｍｍｏｌスケール）
焼結フィルタリングディスクおよびオーバーヘッド撹拌機を備えた５００ｍｌのＳＰＰＳ容器に、ＣＴＣ樹脂結合アミノ酸（１．０当量、ローディング方法Ｃを使用）、Ｆｍｏｃ保護されたアミノ酸（１．５当量）、ＨＢＴＵ（１．０当量）、ＤＭＦ（１００ｍｌ）およびＤＩＰＥＡ（３．０当量）を加えた。混合物をｒ．ｔ．にて２時間または方法Ａを使用してＬＣ−ＭＳが反応の完了を示すまで穏やかに撹拌した。次いで、反応溶液をＳＰＰＳ容器から真空濾過によって除去し、樹脂性生物をＤＭＦ（３×１００ｍｌ）、ＤＣＭ（３×１００ｍｌ）、ＭｅＯＨ（３×１００ｍｌ）およびＤＭＦ（３×１００ｍｌ）ですすいだ。Ｆｍｏｃ基の除去のために、樹脂をそれに続いてＤＭＦ中の１００ｍｌの２０％ｖ／ｖピペリジンでｒ．ｔ．にて処理し、３０分間または方法Ａを使用してＬＣ−ＭＳが反応の完了を示すまで穏やかに撹拌した。樹脂を真空濾過し、ＤＭＦ（３×１２０ｍｌ）、ＤＣＭ（３×１２０ｍｌ）およびＭｅＯＨ（３×１００ｍｌ）ですすぎ、真空下で乾燥させ、遊離末端アミノ基を有する樹脂結合ペプチドを得て、これを次のアミノ酸カップリング反応においてさらに精製することなく直接使用した。
【０１１８】
上記のカップリング／脱Ｆｍｏｃ手順を、毎回それぞれ、異なるアミノ酸を使用してさらに３回繰り返し、遊離末端アミノ基を有するＣＴＣ樹脂結合直鎖状ペンタペプチド配列を得た。
【０１１９】
方法Ｆ：直鎖状ヘキサペプチド前駆体、ＳＰＳ（１ｍｍｏｌ未満のスケール）
側鎖アミノ酸導入
Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎδ−アリルオキシカルボニル−Ｌ−オルニチン（１．０当量）を、方法Ｂを使用してＣＴＣ樹脂上へとローディングした。ＳＰＰＳチューブ中で、樹脂結合Ｎδ−アリルオキシカルボニル−Ｌ−オルニチンを、Ｎ保護されたアミノ酸（１．２当量）、ＨＢＴＵ（１．２当量）およびＤＭＦ（１２ｍｌ／ｍｍｏｌ）と混合し、ｒ．ｔ．にて約１時間または方法Ａを使用してＬＣ−ＭＳが反応の完了を示すまで振とう床上で振とうした。樹脂を濾過し、ＤＭＦ（３×１０ｍｌ）、ＤＣＭ（３×１０ｍｌ）およびＭｅＯＨ（３×１０ｍｌ）で洗浄し、次いで、真空下で乾燥させた。
【０１２０】
アロキシカルボニルの除去
樹脂結合ジペプチド（１．０当量）を、磁気撹拌機を備えた丸底フラスコに移した。窒素雰囲気下で、ＤＣＭ（８〜９ｍｌ／ｍｍｏｌ）、フェニルシラン（１６当量）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０．１２当量）を、逐次的に加えた。このように得られた混合物を、ｒ．ｔ．にて１時間Ｎ２下で穏やかに撹拌し（約５０ｒｐｍ）、次いで、樹脂結合生成物を濾過し、ＤＣＭ（３×１０ｍｌ）、ＤＭＦ（３×１０ｍｌ）およびＭｅＯＨ（３×１０ｍｌ）で洗浄し、次いで、真空下で乾燥させ、遊離オルニチンδ−アミノ基を有する樹脂結合ジペプチドを得た。
【０１２１】
アミノ酸のさらなるカップリング
遊離オルニチンδ−アミノ基を有する樹脂結合ジペプチドをＳＰＰＳチューブ中に移し、次いで、Ｆｍｏｃ保護されたアミノ酸（１．５当量）、ＨＢＴＵ（１．５当量）、ＤＭＦ（１２ｍｌ）およびＤＩＰＥＡ（３当量）を加えた。ＳＰＰＳチューブをキャップし、ｒ．ｔ．にて振とう床上で２時間または方法Ａを使用してＬＣ−ＭＳが反応の完了を示すまで振とうした。次いで、反応溶液を、真空濾過によってＳＰＰＳチューブから除去し、樹脂結合生成物を得て、これをＤＭＦ（３×１０ｍｌ）、ＤＣＭ（３×１０ｍｌ）、ＭｅＯＨ（３×１０ｍｌ）およびＤＭＦ（３×１０ｍｌ）ですすいだ。ＦＭＯＣ除去のために、樹脂をそれに続いてＤＭＦ中の１０ｍｌの２０％ｖ／ｖピペリジンでｒ．ｔ．にて処理し、３０分間または方法Ａを使用してＬＣ−ＭＳが反応の完了を示すまで振とう床上に入れた。樹脂を真空濾過し、ＤＭＦ（３×１２ｍｌ）、ＤＣＭ（３×１２ｍｌ）およびＭｅＯＨ（３×１０ｍｌ）ですすぎ、次いで、真空下で乾燥させ、遊離末端アミノ基を有する樹脂結合ペプチドを得て、これを次のアミノ酸カップリング反応においてさらに精製することなく直接使用した。
【０１２２】
上記のカップリング／脱Ｆｍｏｃ手順を、毎回それぞれ、異なるアミノ酸を使用してさらに３回繰り返し、遊離末端アミノ基を有するＣＴＣ樹脂結合直鎖状ヘキサペプチド配列を得た。
【０１２３】
方法Ｇ：直鎖状ヘキサペプチド前駆体、ＳＰＳ（１．０〜１００ｍｍｏｌスケール）
側鎖アミノ酸導入
Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎδ−アリルオキシカルボニル−Ｌ−オルニチン（１．０当量）を、方法Ｃを使用してＣＴＣ樹脂上へとローディングした。オーバーヘッド機械式撹拌機を備えたＳＰＰＳ容器中で、樹脂結合Ｎδ−アリルオキシカルボニル−Ｌ−オルニチンを、Ｎ保護されたアミノ酸（１．３当量）、ＨＢＴＵ（１．３当量）およびＤＭＦ（６〜６．６ｍｌ／ｍｍｏｌのローディングされた樹脂）と混合した。混合物をｒ．ｔ．にて約２時間または方法Ａを使用してＬＣ−ＭＳが反応の完了を示すまで穏やかに撹拌した。樹脂を濾過し、ＤＭＦ（３×２００ｍｌ）、ＤＣＭ（３×２００ｍｌ）およびＭｅＯＨ（３×１００ｍｌ）で洗浄し、次いで、真空下で乾燥させた。
【０１２４】
アロキシカルボニルの除去
樹脂結合ジペプチド（１．０当量）を含有するＳＰＰＳ容器に、ＤＣＭ（８〜９ｍｌ／ｍｍｏｌ）、フェニルシラン（１６当量）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０．１２当量）を逐次的に加えた。このように得られた混合物を、ｒ．ｔ．にて１時間Ｎ２下で穏やかに撹拌した（約５０ｒｐｍ）。樹脂結合生成物を濾過し、ＤＣＭ（３×２００ｍｌ）、ＤＭＦ（３×２００ｍｌ）およびＭｅＯＨ（３×１００ｍｌ）で洗浄し、次いで、真空下で乾燥させ、遊離オルニチンδ−アミノ基を有する樹脂結合ジペプチドを得た。
【０１２５】
アミノ酸のさらなるカップリング
遊離オルニチンδ−アミノ基を有する樹脂結合ジペプチドを含有するＳＰＰＳ容器に、Ｆｍｏｃ保護されたアミノ酸（１．５当量）、ＨＢＴＵ（１．５当量）、ＤＭＦ（６〜７ｍｌ／ｍｍｏｌのローディングされた樹脂）およびＤＩＰＥＡ（３当量）を加えた。混合物をｒ．ｔ．にて２時間または方法Ａを使用してＬＣ−ＭＳが反応の完了を示すまで穏やかに撹拌した。次いで、反応溶液を真空濾過によってＳＰＰＳ容器から除去し、樹脂結合生成物を得て、これをＤＭＦ（３×２００ｍｌ）、ＤＣＭ（３×２００ｍｌ）、ＭｅＯＨ（３×１００ｍｌ）およびＤＭＦ（３×１００ｍｌ）ですすいだ。ＦＭＯＣ除去のために、樹脂をそれに続いてＤＭＦ中の２０％ｖ／ｖピペリジン（８〜９ｍｌ／ｍｍｏｌのローディングされた樹脂）でｒ．ｔ．にて穏やかに撹拌しながら３０分間または方法Ａを使用してＬＣ−ＭＳが反応の完了を示すまで処理した。樹脂を真空濾過し、ＤＭＦ（３×２００ｍｌ）、ＤＣＭ（３×２００ｍｌ）およびＭｅＯＨ（３×１００ｍｌ）ですすぎ、次いで、真空下で乾燥させ、遊離末端アミノ基を有する樹脂結合ペプチドを得て、これを次のアミノ酸カップリング反応においてさらに精製することなく直接使用した。
【０１２６】
上記のカップリング／脱Ｆｍｏｃ手順を、毎回それぞれ、異なるアミノ酸を使用してさらに３回繰り返し、遊離末端アミノ基を有するＣＴＣ樹脂結合直鎖状ヘキサペプチド配列を得た。
【０１２７】
方法Ｈ：ＣＴＣ樹脂からの直鎖状ペプチドの切断（１ｍｍｏｌ未満のスケール）
樹脂結合ペンタペプチドまたはヘキサペプチドを、ＳＰＰＳチューブ中のＨＦＩＰＡのＤＣＭ溶液（２０％ｖ／ｖ、１２ｍｌ／ｍｍｏｌのローディングされた樹脂）で振とうしながら振とう床上でｒ．ｔ．にて３０分間処理した。樹脂を濾別し、濾液を集めた。揮発性物質を真空下で蒸発させ、直鎖状ペンタペプチドまたはヘキサペプチドを得た。
【０１２８】
方法Ｉ：ＣＴＣ樹脂からの直鎖状ペプチドの切断（１．０〜１００ｍｍｏｌスケール）
樹脂結合ペンタペプチドまたはヘキサペプチドを、ＳＰＰＳ容器中でｒ．ｔ．にて３０分間穏やかに撹拌しながらＨＦＩＰＡのＤＣＭ溶液（２０％ｖ／ｖ、１２ｍｌ／ｍｍｏｌの基質）で処理した。混合物を濾過し、濾液を集めた。樹脂をＤＣＭ中の別の同一の容量の２０％ｖ／ｖのＨＦＩＰＡでｒ．ｔ．にてさらに３０分間穏やかに撹拌することによって処理し、再び濾過した。濾液を合わせ、真空下で蒸発乾固させ、直鎖状ペンタペプチドまたはヘキサペプチドを得た。
【０１２９】
方法Ｊ：直鎖状ペンタペプチドまたはヘキサペプチド前駆体のマクロラクタム化（１ｍｍｏｌ未満のスケール）
２５０ｍｌの丸底フラスコ中で、直鎖状ペンタペプチドまたはヘキサペプチド固体（１．０当量）をＤＭＦおよびＴＨＦの混合溶媒（１：１０ｖ／ｖ）に溶解し、０．０１３Ｍ濃度の溶液を得た。撹拌することによって、ＨＡＴＵ（１．０５当量）およびＮ−メチルモルホリン（３当量）を加えた。このように得られた混合物を、ｒ．ｔ．にて１５〜６０分間またはＬＣ−ＭＳが反応の完了を示す（方法Ａ）まで撹拌した。溶媒を蒸発させ、残渣をジエチルエーテルおよび酢酸エチル（１：１ｖ／ｖ）で希釈し、０．５ＭのＨＣｌ、飽和ＮａＨＣＯ３、水およびブラインで洗浄した。有機層を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、蒸発乾固し、環状の完全に保護されているペンタペプチドまたはヘキサペプチドを得た。
【０１３０】
方法Ｋ：直鎖状ペンタペプチドまたはヘキサペプチド前駆体のマクロラクタム化（１．０〜１００ｍｍｏｌスケール）
３Ｌの丸底フラスコ中で、直鎖状ペンタペプチドまたはヘキサペプチド固体（１．０当量）をＤＭＦおよびＴＨＦの混合溶媒（１：１０ｖ／ｖ）に溶解し、０．０１３Ｍ濃度の溶液を得た。次いで、この溶液を、ＨＡＴＵ（１．０５当量）およびＮ−メチルモルホリン（３当量）のＤＭＦ（６ｍｌ／ｍｍｏｌのＨＡＴＵ）溶液中に滴下で添加した。このように得られた混合物を、ｒ．ｔ．にて１５〜６０分間またはＬＣ−ＭＳが反応の完了を示す（方法Ａ）まで撹拌した。溶媒を蒸発によって除去し、残渣をジエチルエーテルおよび酢酸エチル（１：１ｖ／ｖ、１５ｍｌ／ｍｍｏｌの基質）で希釈し、０．５ＭのＨＣｌ、飽和ＮａＨＣＯ３、水およびブラインで洗浄した。有機層を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、蒸発乾固し、環状の完全に保護されているペンタペプチドまたはヘキサペプチドを得た。
【０１３１】
方法Ｌ：包括的脱保護（１ｍｍｏｌ未満のスケール）
完全に保護されている環状ペプチド（１．０当量）を、０℃にて撹拌しながらＨＣｌのＨＦＩＰＡ溶液（１Ｍ、ＨＦＩＰＡ、３０当量への１２ＭのＨＣｌの添加によって作製）に溶解した。このように得られた溶液をｒ．ｔ．にて１時間またはＬＣ−ＭＳが反応の完了を示す（方法Ａ）まで撹拌した。揮発性物質を蒸発によって除去し、残渣をＭｅＣＮと共に５回同時蒸留し、過剰なＨＣｌを除去した。次いで、残渣を水に溶解し、ＭＴＢＥで抽出し、６ＭのＮａＯＨを加えることによってｐＨ６〜７に中和した。混合物をｒ．ｔ．にて１２時間またはＬＣ−ＭＳ（方法Ａ）がインドール−Ｎ−カルバミン酸が残っていないことを示すまで撹拌した。次いで、残渣をＭｅＣＮと共に減圧下で同時蒸発させ、水を除去した。ＭｅＯＨを加え、溶液をｒ．ｔ．にて約２時間静置した。沈殿したＮａＣｌ固体を濾別した。次いで、濾液を蒸発乾固し、完全に脱保護された粗環状ペプチドを得た。
【０１３２】
方法Ｍ：包括的脱保護（１．０〜１００ｍｍｏｌスケール）
完全に保護されている環状ペプチド（１．０当量）のＨＦＩＰＡ（２８ｍｌ／ｍｍｏｌの環状ペプチド）溶液に０℃にて、濃ＨＣｌの溶液（１２Ｍ、３０当量）を撹拌しながら加えた。このように得られた溶液をｒ．ｔ．にて１時間またはＬＣ−ＭＳが反応の完了を示す（方法Ａ）まで撹拌した。揮発性物質を蒸発によって除去し、残渣をＭｅＣＮと共に５回同時蒸留し、過剰なＨＣｌを除去した。次いで、残渣を水に溶解し、ＭＴＢＥによって抽出し、非極性不純物を除去し、６ＭのＮａＯＨを加えることによってｐＨ６〜７に中和した。混合物をｒ．ｔ．にて１２時間またはＬＣ−ＭＳ（方法Ａ）がインドール−Ｎ−カルバミン酸が残っていないことを示すまで撹拌した。次いで、残渣をＭｅＣＮと共に減圧下で同時蒸発させ、水を除去した。ＭｅＯＨを加え、溶液をｒ．ｔ．にて約２時間静置した。沈殿したＮａＣｌ固体を濾別した。次いで、濾液を蒸発乾固し、完全に脱保護された粗環状ペプチドを得た。
【０１３３】
方法Ｎ：完全に脱保護された環状ペンタペプチド上の側鎖アミノ酸導入、および最終の脱保護
完全に脱保護された環状ペンタペプチド（１．０当量）を、ＤＭＦ中のＮ保護されたアミノ酸（１．１当量）、ＨＡＴＵ（１．１当量）および４−メチルモルホリン（８当量）で処理し（３７ｍｌ／ｍｍｏｌの環状ペプチド）、反応物をｒ．ｔ．にて８０分間またはＬＣ−ＭＳ（方法Ａ）が反応の完了を示すまで撹拌した。揮発性物質を真空下で除去した。残渣を酢酸エチルで希釈し、次いで、水およびブラインで洗浄した。有機層を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、蒸発乾固し、固体残渣を得た。この固体をＨＦＩＰＡ中の１ＭのＨＣｌでｒ．ｔ．にて１時間処理し、さらなるｔｅｒｔ−ブチルエステルおよび／またはＢｏｃ基の除去をもたらし、最終の脱保護された粗環状ペプチドを得た。
【０１３４】
方法Ｏ：ＨＰＬＣ精製方法１
カラム：Ｌｕｎａ、２００×２５ｍｍ（Ｃ１８、１０μｍ、１００Ａ）＋Ｇｅｍｉｎｉ１５０×３０ｍｍ（Ｃ１８、５μｍ、１１０Ａ）
移動相：Ａ、アセトニトリル；Ｂ、０．１％ＴＦＡを有する水。定組成２２％Ａ、それに続いて４６分から５０分まで２４％Ａへの勾配。
実行時間：６０分、それに続くカラム洗浄（９５％Ａ）
検出器：２１４／２５４ｎｍ。流量：２０ｍｌ／分
ローディング：水中の２０ｍｌの１０％アセトニトリルに溶解した１ｇの粗材料。
【０１３５】
純粋な環状ペプチドを含有する全画分を合わせ、直接凍結乾燥し、環状ペプチドを固体ＴＦＡ塩として得た。炭酸水素アンモニウム水溶液を含有する移動相を使用してＴＦＡ塩を同じカラムに再び通過させ、遊離双性イオン性形態を得た。
移動相：Ａ、アセトニトリル；Ｂ、０．０１ＭのＮＨ４ＨＣＯ３を有する水。定組成２８％Ａ、それに続いて３０分から３５分まで３３％Ａへの勾配。
実行時間：６０分、それに続くカラム洗浄（９５％Ａ）
検出器：２２０／２５４ｎｍ。流量：２０ｍｌ／分
ローディング：水中の７ｍｌの５％アセトニトリルに溶解した約１．１ｇの粗製物
純粋な環状ペプチドを含有する全画分を合わせ、直接凍結乾燥し、式（Ｉ）の化合物を得た。
【０１３６】
方法Ｐ：ＨＰＬＣ精製方法２
カラム：５０×２５０ｍｍ、Ｓｕｎｆｉｒｅ、Ｃ１８、５μｍ。
移動相：Ａ、アセトニトリル；Ｂ、０．１％ＴＦＡを有する水。定組成１５％Ａ、それに続いて４５分から６０分まで１８％Ａへの勾配。
実行時間：６５分、それに続くカラム洗浄（９５％Ａ）
検出器：２２０ｎｍ。流量：１００ｍｌ／分
ローディング：水中の３ｍｌの２０％アセトニトリルに溶解した３００ｍｇの粗製物。
【０１３７】
純粋な環状ペプチドを含有する全画分を合わせ、アセトニトリルをロータリーエバポレーションによって除去した。残った固体ペプチドＴＦＡ塩を水に溶解し、捕捉カラム上にローディングした。洗浄に続いて、炭酸水素アンモニウム水溶液を含有する移動相を使用した溶出によって、式（Ｉ）の化合物を得た。
【０１３８】
カラム：ＰｏｒａＰａｋ逆相。
捕捉カラム上へとローディングした材料を、いくつかの床カラム容量の純水によってｐＨが中性近くとなるまで洗浄した。次いで、洗浄溶液のｐＨが概ね８となるまでカラムを炭酸水素アンモニウム溶液（１ｇ／Ｌの水）で洗浄した。純粋な環状ペプチドを含有する全画分を合わせ、アセトニトリルをロータリーエバポレーションによって除去した。このように得られた環状ペプチドの水溶液を凍結乾燥し、式（Ｉ）の化合物を得た。
【０１３９】
下記の非限定的実施例および調製において、１Ｈ核磁気共鳴（ＮＭＲ）スペクトルは、全ての場合において、提示した構造と一致した。特徴的な化学シフト（δ）は、主要なピークを指定するための通常の略語（例えば、ｓ＝一重線であり、ｂｒ  ｓ＝幅広い一重線であり、ｄ＝二重線であり、ｄｄ＝二重線の二重線であり、ｔｄ＝二重線の三重線であり、ｔは、三重線であり、ｑは、四重線であり、ｍは、多重項である）を使用して、テトラメチルシランからの百万分率（ｐｐｍ）低磁場で示す。
【０１４０】
下記の実施例を参照すると、異なる化学命名規則は同じ化合物についての代替の名称を提供し得ることを当業者は認識するであろう。
【実施例】
【０１４１】
（実施例１）
（（Ｓ）−１−（（（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｒ，２０ａＳ）−６−（（１Ｈ−インドール−３−イル）メチル）−９−（３−グアニジノプロピル）−１９−ヒドロキシ−３−（（（１ｓ，４Ｓ）−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル）−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソイコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−１５−イル）アミノ）−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル）グリシン
【０１４２】
【化１１】
2019532021.tif 000013
実施例１についての代替の化学名は、
Ｎ−［（２Ｓ）−１−｛［（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｒ，２０ａＳ）−９−（３−カルバムイミドアミドプロピル）−１９−ヒドロキシ−３−［（ｃｉｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル］−６−（１Ｈ−インドール−３−イルメチル）−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソイコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−１５−イル］アミノ｝−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル］グリシンである。
【０１４３】
ローディング
方法Ｃに従って、Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎδ−アリルオキシカルボニル−Ｌ−オルニチン（３３．６ｇ、７６ｍｍｏｌ、１．５当量）、ＣＴＣ樹脂（１．７ｍｅｑ、３０．０ｇ、５１．１ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＤＩＰＥＡ（７２ｍｌ、４０６ｍｍｏｌ、８当量）ならびにＤＭＦおよびＤＣＭの混合溶媒（１：１０ｖ／ｖ、３３０ｍｌ）を使用した。混合物をｒ．ｔ．にて５時間穏やかに撹拌し、ＭｅＯＨ（３３ｍｌ）の添加によってキャップした。ローディング率は、樹脂の重量増加に基づいて、８１％または４１．３ｍｍｏｌであると推定した。次いで、樹脂をＤＭＦ中のピペリジン（２０％ｖ／ｖ）で処理し、Ｆｍｏｃ基を除去し、ＣＴＣ樹脂結合Ｎδ−アリルオキシカルボニル−Ｌ−オルニチンを得た。
【０１４４】
側鎖アミノ酸導入
ＣＴＣ樹脂結合Ｎδ−アリルオキシカルボニル−Ｌ−オルニチン（４６．６ｇ、４１．３ｍｍｏｌ）、Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−２−オキソエチル）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−フェニルアラニン（２０．４ｇ、５３．７ｍｍｏｌ、１．３０当量）、ＨＢＴＵ（２１．０ｇ、５３．７ｍｍｏｌ、１．３０当量）、ＤＩＰＥＡ（２２．６ｍｌ、１２８ｍｍｏｌ、３．１当量）およびＤＭＦ（２５０ｍｌ）をｒ．ｔ．にて１２０分間穏やかに撹拌したが、その時、ＬＣ−ＭＳ（方法Ａ）が反応の完了を示した。ＬＣ−ＭＳ（方法Ａ、３分の実行）：ｔＲ１．９２分、ＥＳＩ−［Ｍ−Ｈ］、Ｃ２９Ｈ４１Ｎ３Ｏ９についての計算値５７６．６；実測値５７６．５。
【０１４５】
アロキシカルボニルの除去
樹脂結合ジペプチドである（Ｓ）−５−（（（アリルオキシ）カルボニル）アミノ）−２−（（Ｓ）−２−（（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−２−オキソエチル）（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−フェニルプロパンアミド）ペンタン酸（４７．７ｇ、３４．２ｍｍｏｌ、１．０当量）を、ＤＣＭ（２８５ｍｌ）に懸濁した。混合物を、フェニルシラン（７０ｍｌ、５４７ｍｍｏｌ、１６当量）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（４．７４ｇ、４．１０ｍｍｏｌ、０．１２当量）と共にｒ．ｔ．にて１時間撹拌したが、その時、ＬＣ−ＭＳ（方法Ａ）は反応の完了を示した。樹脂を濾別し、洗浄し、乾燥させ、樹脂結合（Ｓ）−５−アミノ−２−（（Ｓ）−２−（（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−２−オキソエチル）（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−フェニルプロパンアミド）ペンタン酸を得た。ＬＣ−ＭＳ（方法Ａ、３分の実行）：ｔＲ１．２２分、ＥＳＩ−［Ｍ−Ｈ］、Ｃ２５Ｈ３７Ｎ３Ｏ７についての計算値４９１．６；実測値４９２．４。
【０１４６】
アミノ酸のさらなるカップリング、および樹脂からの直鎖状ペプチドの切断
（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ）−１５−（（Ｓ）−２−（（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−２−オキソエチル）（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−フェニルプロパンアミド）−１−（（２Ｓ，４Ｒ）−４−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）ピロリジン−２−イル）−６−（（１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−１Ｈ−インドール−３−イル）メチル）−３−（（（１ｓ，４Ｓ）−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル）−１，４，７，１０−テトラオキソ−９−（３−（３−（（２，２，４，６，７−ペンタメチル−２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イル）スルホニル）グアニジノ）プロピル）−２，５，８，１１−テトラアザヘキサデカン−１６−酸（直鎖状ヘキサペプチド）の調製
樹脂結合（Ｓ）−５−アミノ−２−（（Ｓ）−２−（（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−２−オキソエチル）（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−フェニルプロパンアミド）ペンタン酸（２８．５ｍｍｏｌ、１．０当量）を、逐次的にＮα−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−Ｎω−（（２，２，４，６，７−ペンタメチル−２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イル）スルホニル）−Ｌ−アルギニン（３３．３ｇ、４２ｍｍｏｌ、１．５当量）、Ｎα−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−トリプトファン（３０．０ｇ、５７ｍｍｏｌ、２．０当量）、Ｎ−（９−フルオレニルメチルオキシカルボニル）−３−（ｃｉｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）−Ｄ−アラニン（１５．２ｇ、３７ｍｍｏｌ、１．３当量）、およびｔｒａｎｓ−３−ｔ−ブトキシ−Ｎ−（９−フルオレニルメチルオキシカルボニル）−Ｌ−プロリン（１５．２ｇ、３７ｍｍｏｌ、１．３当量）と共に、方法Ｇに記載した固相カップリングおよびＦｍｏｃ除去手順に供し、樹脂上の対応する直鎖状ヘキサペプチドを得た。この樹脂結合ペプチドを方法Ｉに記載されている切断条件に供し、直鎖状ヘキサペプチドを白色の固体、３３．８ｇ、７８％として得た。1H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ 8.49 (br s, 1H), 8.38 (br s, 1H), 8.21 -
7.94 (m, 3H), 7.91 (br s, 1H), 7.70 (d, J=7.8 Hz, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.42 -
7.16 (m, 5H), 5.17 (td, J=6.7, 13.6 Hz, 2H), 4.76 - 4.48 (m, 2H), 4.47 - 4.25
(m, 1H), 4.25 - 4.13 (m, 2H), 4.07 (br s, 1H), 3.93 (br s, 1H), 3.84 - 3.62 (m,
2H), 3.55 (dd, J=10.9, 18.7 Hz, 3H), 3.36 (br s, 4H), 3.16 (d, J=14.4 Hz, 3H),
3.12 - 2.87 (m, 6H), 2.77 (d, J=12.5 Hz, 1H), 2.45 (s, 2H), 2.02 (s, 2H), 1.97
(br s, 1H), 1.87 - 1.67 (m, 2H), 1.64 (s, 4H), 1.58 (br s, 1H), 1.48 - 1.35 (m,
13H), 1.34 - 1.24 (m, 9H), 1.23 - 1.09 (m, 7H), 1.06 (br s, 1H), 0.98 (d,
J=16.0 Hz, 1H), 0.92 - 0.72 (m, 1H).  LC-MS (方法A,
3分の実行): tR 1.96分,
ESI- [M-H] C78H116N11O18Sの計算値1525.9; 実測値1526.4.
【０１４７】
マクロラクタム化
ｔｅｒｔ−ブチル−３−（（（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｒ，２０ａＳ）−１９−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−１５−（（Ｓ）−２−（（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−２−オキソエチル）（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−フェニルプロパンアミド）−３−（（（１ｓ，４Ｓ）−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル）−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソ−９−（３−（３−（（２，２，４，６，７−ペンタメチル−２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イル）スルホニル）グアニジノ）プロピル）イコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−６−イル）メチル）−１Ｈ−インドール−１−カルボキシレート（環状ペプチド）の調製
マクロラクタム化のための方法Ｋに従って、直鎖状（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ）−１５−（（Ｓ）−２−（（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−２−オキソエチル）（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−フェニルプロパンアミド）−１−（（２Ｓ，４Ｒ）−４−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）ピロリジン−２−イル）−６−（（１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−１Ｈ−インドール−３−イル）メチル）−３−（（（１ｓ，４Ｓ）−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル）−１，４，７，１０−テトラオキソ−９−（３−（３−（（２，２，４，６，７−ペンタメチル−２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イル）スルホニル）グアニジノ）プロピル）−２，５，８，１１−テトラアザヘキサデカン−１６−酸（３３．８ｇ、２２．２ｍｍｏｌ、１．０当量）を、ＴＨＦ（１４００ｍｌ）およびＤＭＦ（１７５ｍｌ）中のＨＡＴＵ（９．３６ｇ、２４．４ｍｍｏｌ、１．１当量）および４−メチルモルホリン（１２．３ｍｌ、１１１ｍｍｏｌ、５．０当量）とｒ．ｔ．にて３０分間反応させ、この時点で、ＬＣ−ＭＳ（方法Ａ）が反応の完了を示した。環状ペプチドをオフホワイト色の粉末として単離し、それ以上精製することなく使用した。２９．１ｇ、８７％。ＬＣ−ＭＳ（方法Ａ）：ｔＲ２．４４分、ＥＳＩ＋［Ｍ＋Ｈ］、Ｃ７８Ｈ１１４Ｎ１１Ｏ１７Ｓについての計算値１５０９．９；実測値１５１０．２。
【０１４８】
包括的脱保護。
（（Ｓ）−１−（（（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｒ，２０ａＳ）−６−（（１Ｈ−インドール−３−イル）メチル）−９−（３−グアニジノプロピル）−１９−ヒドロキシ−３−（（（１ｓ，４Ｓ）−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル）−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソイコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−１５−イル）アミノ）−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル）グリシン（実施例１の表題化合物）の調製
方法Ｍに従って、環状ペプチドであるｔｅｒｔ−ブチル３−（（（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｒ，２０ａＳ）−１９−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−１５−（（Ｓ）−２−（（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−２−オキソエチル）（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−フェニルプロパンアミド）−３−（（（１ｓ，４Ｓ）−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル）−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソ−９−（３−（３−（（２，２，４，６，７−ペンタメチル−２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イル）スルホニル）グアニジノ）プロピル）イコサヒドロピロロ［１，２ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−６−イル）メチル）−１Ｈ−インドール−１−カルボキシレート（２９．１ｇ、１９．３ｍｍｏｌ）を、ＨＦＩＰＡ（５２９ｍｌ）中の１２ＭのＨＣｌ（４８ｍｌ）でｒ．ｔ．にて９０分間処理し、白色の粉末、２１．１ｇを得て、これを方法Ｐに記載した方法を使用した分取ＨＰＬＣ精製に供し、表題化合物、実施例１を白色の固体、７．４ｇ、４０．７％として得た。1H NMR (400MHz, d6-DMSO) δ 10.92 (br s, 1H), 9.08 (br s, 1H), 8.59
(br s, 1H), 8.34 (br s, 1H), 7.97 (br s, 1H), 7.95 - 7.81 (m, 2H), 7.69 (d,
J=8.2 Hz, 2H), 7.52 (d, J=7.4 Hz, 1H), 7.36 - 7.15 (m, 8H), 7.14 - 6.95 (m,
3H), 6.90 (br s, 1H), 4.64 (d, J=6.6 Hz, 2H), 4.47 (br s, 1H), 4.24 (br s, 2H),
4.06 (br s, 1H), 3.93 (br s, 1H), 3.57 (br s, 1H), 3.45 (br s, 2H), 3.39 - 3.17
(m, 10H), 3.14 - 2.88 (m, 6H), 2.86 - 2.59 (m, 4H), 2.54 - 2.46 (m, 4H), 2.09
(s, 1H), 1.99 (br s, 1H), 1.86 (br s, 2H), 1.62 (br s, 1H), 1.56 - 1.40 (m,
3H), 1.36 (br s, 3H), 1.32 - 1.18 (m, 4H), 1.18 - 0.98 (m, 7H), 0.86 (br s,
3H).  HRMS (m/z) [M+H]+ C47H66N11O10の計算値944.4989, 実測値944.4987.
【０１４９】
実施例１はまた、下記の手順に従って調製した。
【０１５０】
ローディング
方法Ｃに従って、Ｎα−ｔ−ブチルオキシカルボニル−Ｎδ−（９−フルオレニルメチルオキシカルボニル）−Ｌ−オルニチン（８．７３ｇ、１９．２ｍｍｏｌ、１．２当量）、ＤＩＰＥＡ（１８ｍｌ、１３．４ｇ、１０２ｍｍｏｌ、６．５当量）、およびＣＴＣ樹脂（１．２ｍｅｑ／ｇ、１３．３ｇ、１６ｍｍｏｌ、１．０当量）を、ローディングステップにおいて使用した。ＦＭＯＣ除去に続いて、ローディング率は、樹脂の重量増加に基づいて３．６ｍｍｏｌであると推定した。
【０１５１】
アミノ酸のさらなるカップリング、および樹脂からの直鎖状ペプチドの切断
（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ）−１−（（２Ｓ，４Ｒ）−４−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）ピロリジン−２−イル）−６−（（１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−１Ｈ−インドール−３−イル）メチル）−１５−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−（（（１ｓ，４Ｓ）−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル）−１，４，７，１０−テトラオキソ−９−（３−（３−（（２，２，４，６，７−ペンタメチル−２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イル）スルホニル）グアニジノ）プロピル）−２，５，８，１１−テトラアザヘキサデカン−１６−酸（直鎖状ペンタペプチド）の調製
方法Ｅに従って、Ｎα−（９−フルオレニルメチルオキシカルボニル）−Ｎ’，Ｎ’’−ビス−ｔ−ブチルオキシカルボニル−Ｌ−アルギニン（３．５０ｇ、５．４０ｍｍｏｌ、１．５当量）、Ｎα−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−トリプトファン（２．４６ｇ、４．６８ｍｍｏｌ、１．３当量）、Ｎ−（９−フルオレニルメチルオキシカルボニル）−３−（ｃｉｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）−Ｄ−アラニン（２．１５ｇ、５．２４ｍｍｏｌ、１．３当量）およびｔｒａｎｓ−３−ｔ−ブトキシ−Ｎ−（９−フルオレニルメチルオキシカルボニル）−Ｌ−プロリン（２．１９ｇ、５．３５ｍｍｏｌ、１．３当量）を、固相カップリングおよびＦｍｏｃ除去手順のそれぞれにおいて逐次的に使用し、ＣＴＣ樹脂結合直鎖状ペンタペプチドを得た。方法Ｉに従って、直鎖状ペンタペプチドを樹脂から切断し、表題化合物を白色の固体（５．５９ｇ、定量的収率（３．６ｍｍｏｌのローディングに基づいて計算））として得た。ＬＣ−ＭＳ（方法Ａ、３分の実行）：ｔＲ１．７１分、ＥＳＩ−［Ｍ−Ｈ］、Ｃ６３Ｈ９５Ｎ１０Ｏ１５Ｓについての計算値１２６４．５、実測値１２６４．１。
【０１５２】
マクロラクタム化
ｔｅｒｔ−ブチル−３−（（（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｒ，２０ａＳ）−１９−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−１５−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−（（（１ｓ，４Ｓ）−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル）−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソ−９−（３−（３−（（２，２，４，６，７−ペンタメチル−２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イル）スルホニル）グアニジノ）プロピル）イコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−６−イル）メチル）−１Ｈ−インドール−１−カルボキシレート（環状ペプチド）の調製
方法Ｋに従って、直鎖状ペンタペプチド（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ）−１−（（２Ｓ，４Ｒ）−４−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）ピロリジン−２−イル）−６−（（１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−１Ｈ−インドール−３−イル）メチル）−１５−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−（（（１ｓ，４Ｓ）−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル）−１，４，７，１０−テトラオキソ−９−（３−（３−（（２，２，４，６，７−ペンタメチル−２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イル）スルホニル）グアニジノ）プロピル）−２，５，８，１１−テトラアザヘキサデカン−１６−酸（５．４８ｇ、４．３３ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦおよびＤＭＦ（１０：１ｖ／ｖ、３３０ｍｌ）に溶解し、ＨＡＴＵ（１．９１ｇ、４．９８ｍｍｏｌ、１．１５当量）および４−メチルモルホリン（２．４１ｍｌ、２１．７ｍｍｏｌ、５当量）でｒ．ｔ．にて１５分間処理した。環状ペプチドを、オフホワイト色の固体、５．１５ｇ、９５．３％として単離した。1H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ  8.55 (br s, 1H), 8.25 (br s, 1H),
8.02 (d, J=8.2 Hz, 1H), 7.78 (d, J=8.6 Hz, 1H), 7.58 (d, J=7.8 Hz, 1H), 7.54 -
7.49 (m, 1H), 7.36 - 7.28 (m, 1H), 7.27 - 7.20 (m, 1H), 6.90 (br s, 1H), 6.72
(d, J=7.0 Hz, 1H), 4.64 (d, J=5.5 Hz, 1H), 4.49 - 4.36 (m, 2H), 4.25 (br s,
1H), 4.18 - 4.08 (m, 2H), 3.67 - 3.57 (m, 1H), 3.11 - 2.89 (m, 6H), 2.43 (s,
3H), 2.01 (s, 4H), 1.88 (d, J=6.6 Hz, 1H), 1.82 - 1.73 (m, 1H), 1.62 (s, 10H),
1.52 (br s, 3H), 1.40 (s, 9H), 1.36 (br s, 13H), 1.21 - 1.13 (m, 3H), 1.00 (d,
J=11.3 Hz, 2H).  LC-MS (方法A, 3分の実行): tR 2.12分, ESI+ [M+H] C63H95N10O14Sの計算値1248.5; 実測値1248.9.
【０１５３】
包括的脱保護。
１−（３−（（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｒ，２０ａＳ）−６−（（１Ｈ−インドール−３−イル）メチル）−１５−アミノ−１９−ヒドロキシ−３−（（（１ｓ，４Ｓ）−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル）−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソイコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−９−イル）プロピル）グアニジン（脱保護された環状ペプチド）の調製
方法Ｍに従って、環状ペプチドであるｔｅｒｔ−ブチル３−（（（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｒ，２０ａＳ）−１９−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−１５−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−（（（１ｓ，４Ｓ）−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル）−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソ−９−（３−（３−（（２，２，４，６，７−ペンタメチル−２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イル）スルホニル）グアニジノ）プロピル）イコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−６−イル）メチル）−１Ｈ−インドール−１−カルボキシレート（５．１５ｇ、４．１１ｍｍｏｌ、１．０当量）を、ＨＦＩＰＡ（１１０ｍｌ）に溶解し、１２ＭのＨＣｌ（１０ｍｌ、１２ｍｍｏｌ、３０当量）でｒ．ｔ．にて１時間処理した。過剰なＨＣｌおよびＮａＣｌの除去によって、脱保護された環状ペプチドを得て、これを次のステップにおいて直接使用した。ＬＣ−ＭＳ（方法Ａ、３分の実行）ｔＲ０．５９分、ＥＳＩ＋［Ｍ＋Ｈ］、Ｃ３６Ｈ５５Ｎ１０Ｏ７についての計算値７３９．９；実測値７３９．６。
【０１５４】
完全に脱保護された環状ペンタペプチド上の側鎖アミノ酸導入、および最終の脱保護
（（Ｓ）−１−（（（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｒ，２０ａＳ）−６−（（１Ｈ−インドール−３−イル）メチル）−９−（３−グアニジノプロピル）−１９−ヒドロキシ−３−（（（１ｓ，４Ｓ）−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル）−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソイコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−１５−イル）アミノ）−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル）グリシン（実施例１の表題化合物）の調製
方法Ｎに従って、環状ペンタペプチドである１−（３−（（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｒ，２０ａＳ）−６−（（１Ｈ−インドール−３−イル）メチル）−１５−アミノ−１９−ヒドロキシ−３−（（（１ｓ，４Ｓ）−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル）−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソイコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−９−イル）プロピル）グアニジン（４．１１ｍｍｏｌ、１．０当量）、Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−２−オキソエチル）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−フェニルアラニン（１．７２ｇ、４．５２ｍｍｏｌ、１．１０当量）、ＨＡＴＵ（１．７４ｇ、４．５２ｍｍｏｌ、１．１０当量）、４−メチルモルホリン（４ｍｌ、３３ｍｍｏｌ、８当量）およびＤＭＦ（１５０ｍｌ）を、ｒ．ｔ．にて８０分間撹拌した。単離したオレンジ色のゴム状の粗残渣を、ＨＦＩＰＡ（５０ｍｌ）中の１ＭのＨＣｌでｒ．ｔ．にて３０分間処理したが、その時、ＬＣ−ＭＳ（方法Ａ）が反応の完了を示した。揮発性物質を減圧下で除去し、残渣をＨＦＩＰＡ（３０ｍｌ）に溶解した。このＨＦＩＰＡ溶液をＭｅＣＮ（１００ｍｌ）中にゆっくりと加え、ピンク色の懸濁液を得て、これを蒸発乾固し、ＥｔＯＡｃ（５０ｍｌ×２）と共にさらに同時蒸発させ、茶色の粉末、３．７２ｇを得た。方法Ｐを使用して粉末を精製し、表題化合物、実施例１を白色の固体、２０４ｍｇ、回収２１．５％として得た。1H NMR (400MHz, d6-DMSO) δ 10.92 (br s, 1H), 9.08 (br s, 1H), 8.59
(br s, 1H), 8.34 (br s, 1H), 7.97 (br s, 1H), 7.95 - 7.81 (m, 2H), 7.69 (d,
J=8.2 Hz, 2H), 7.52 (d, J=7.4 Hz, 1H), 7.36 - 7.15 (m, 8H), 7.14 - 6.95 (m,
3H), 6.90 (br s, 1H), 4.64 (d, J=6.6 Hz, 2H), 4.47 (br s, 1H), 4.24 (br s, 2H),
4.06 (br s, 1H), 3.93 (br s, 1H), 3.57 (br s, 1H), 3.45 (br s, 2H), 3.39 - 3.17
(m, 10H), 3.14 - 2.88 (m, 6H), 2.86 - 2.59 (m, 4H), 2.54 - 2.46 (m, 4H), 2.09
(s, 1H), 1.99 (br s, 1H), 1.86 (br s, 2H), 1.62 (br s, 1H), 1.56 - 1.40 (m,
3H), 1.36 (br s, 3H), 1.32 - 1.18 (m, 4H), 1.18 - 0.98 (m, 7H), 0.86 (br s, 3H). 
HRMS (m/z) [M+H]+ C47H66N11O10の計算値944.4989, 実測値944.4987.
【０１５５】
（実施例２）
２−（（（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｒ，２０ａＳ）−６−（（１Ｈ−インドール−３−イル）メチル）−１５−（（Ｓ）−２−（（カルボキシメチル）アミノ）−３−フェニルプロパンアミド）−９−（３−グアニジノプロピル）−３−（（（１ｓ，４Ｓ）−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル）−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソイコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−１９−イル）オキシ）酢酸
方法Ｂに従って、Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎδ−アリルオキシカルボニル−Ｌ−オルニチンを２−クロロトリチル樹脂（ＣＴＣ樹脂、１．０ｍｅｑ、１．０ｇ、１．０ｍｍｏｌ）上へとローディングし、それに続いてＤＭＦ中のピペリジン（２０％ｖ／ｖ）で処理し、ＣＴＣ樹脂結合Ｎδ−アリルオキシカルボニル−Ｌ−オルニチン（１．０ｍｍｏｌ）を得た。
【０１５６】
ヘキサペプチド直鎖状配列をそれに続いて、逐次的に、Ｎα−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−Ｎω−（（２，２，４，６，７−ペンタメチル−２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イル）スルホニル）−Ｌ−アルギニン（９７３ｍｇ、１．５当量）、Ｎα−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−トリプトファン（７９０ｍｇ、１．５当量）、Ｎ−（９−フルオレニルメチルオキシカルボニル）−３−（ｃｉｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）−Ｄ−アラニン（６１４ｍｇ、１．３当量）、および（２Ｓ，４Ｒ）−１−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−４−（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−２−オキソエトキシ）ピロリジン−２−カルボン酸（７０１ｍｇ、１．５当量）を使用して、方法Ｆに記載されているカップリングおよびＦｍｏｃ除去手順に従って構築し、樹脂上の直鎖状ヘキサペプチドを得た。この樹脂結合生成物を一般手順Ｈに記載されている切断条件に供し、直鎖状ヘキサペプチドを白色の固体、７７５ｍｇ、７９％として得た。ＬＣ−ＭＳ（方法Ａ、３分の実行）ｔＲ１．９７分、ＥＳＩ＋［Ｍ＋Ｈ］、Ｃ８０Ｈ１１８Ｎ２Ｏ２０Ｓについての計算値１５８５．９；実測値１５８５．８。
【０１５７】
直鎖状ヘキサペプチド（７７５ｍｇ、０．４８９ｍｍｏｌ、１．０当量）を方法Ｊに記載されているマクロラクタム化条件に供し、完全に保護されている環状ペプチドを白色の固体、６３８ｍｇ、８３％として得た。ＬＣ−ＭＳ（方法Ａ、３分の実行）ｔＲ２．４９分、ＥＳＩ＋［Ｍ＋Ｈ］、Ｃ８０Ｈ１１６Ｎ１１Ｏ１９Ｓについての計算値１５６７．９；実測値１５６７．９。
【０１５８】
完全に保護されている環状ペプチド（６３８ｍｇ、０．４０７ｍｍｏｌ、１．０当量）を方法Ｌに記載されている包括的脱保護条件に供し、これによって完全に脱保護された環状ペプチドを白色の粉末、４３５ｍｇとして得た。この材料を、方法Ｏを使用したＨＰＬＣによって精製し、表題化合物、実施例２を白色の固体、１５１ｍｇ、３５．８％として得た。1H NMR (400MHz, d6-DMSO) δ 8.61 (d, J=6.5 Hz, 1H), 8.37 (br s, 1H),
7.89 (dd, J=7.8, 17.3 Hz, 1H), 7.49 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.38 - 7.13 (m, 2H),
7.11 - 6.94 (m, 1H), 6.46 (d, J=8.5 Hz, 1H), 5.01 - 4.90 (m, 1H), 4.74 (d,
J=9.0 Hz, 1H), 4.54 (br s, 1H), 4.21 (br s, 1H), 4.01 (d, J=6.0 Hz, 1H), 3.80
(br s, 1H), 3.74 - 3.54 (m, 1H), 3.50 (br s, 1H), 3.26 - 3.08 (m, 1H), 3.06 -
2.86 (m, 1H), 2.79 (dd, J=7.5, 14.1 Hz, 1H), 2.70 - 2.57 (m, 1H), 2.07 (s, 1H),
1.87 (d, J=5.5 Hz, 1H), 1.68 (br s, 1H), 1.56 (d, J=17.1 Hz, 1H), 1.38 (br s,
1H), 1.27 (br s, 1H), 1.20 (br s, 1H), 1.16 - 0.92 (m, 1H), 0.87 (d, J=10.5 Hz,
1H), 0.71 (br s, 1H).  LC-MS (方法A, 3分の実行) tR 0.76分, ESI-[M-H] C49H67N11O12の計算値1001.1; 実測値1000.7.
【０１５９】
（実施例３）
（（Ｓ）−１−（（（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｒ，２０ａＳ）−９−（３−グアニジノプロピル）−１９−ヒドロキシ−３−（（（１ｓ，４Ｓ）−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル）−６−（（４−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル）−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソイコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−１５−イル）アミノ）−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル）グリシン
方法Ｂに従って、Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎδ−アリルオキシカルボニル−Ｌ−オルニチンを２−クロロトリチル樹脂（ＣＴＣ樹脂、１．０ｍｅｑ、１．０ｇ、１．０ｍｍｏｌ）上へとローディングし、それに続いてＤＭＦ中のピペリジン（２０％ｖ／ｖ）で処理し、ＣＴＣ樹脂結合Ｎδ−アリルオキシカルボニル−Ｌ−オルニチン（０．６ｍｍｏｌ）を得た。
【０１６０】
ヘキサペプチド直鎖状配列をそれに続いて、逐次的に、Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−２−オキソエチル）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−フェニルアラニン（３４０ｍｇ、０．９ｍｍｏｌ、１．５当量）、Ｎα−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−Ｎω−（（２，２，４，６，７−ペンタメチル−２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イル）スルホニル）−Ｌ−アルギニン（５８５ｍｇ、０．９ｍｍｏｌ、１．５当量）、（Ｓ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−（４−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）プロパン酸（３５０ｍｇ、０．９ｍｍｏｌ、１．５当量）、Ｎ−（９−フルオレニルメチルオキシカルボニル）−３−（ｃｉｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）−Ｄ−アラニン（３６０ｍｇ、０．９ｍｍｏｌ、１．５当量）、および（２Ｓ，４Ｒ）−１−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−４−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）ピロリジン−２−カルボン酸（３７０ｍｇ、０．９ｍｍｏｌ、１．５当量）を使用して、方法Ｆに記載されている手順に従って構築し、樹脂結合直鎖状ヘキサペプチドを得た。この樹脂結合生成物を一般手順Ｈに記載されている切断条件に供し、直鎖状ヘキサペプチドを白色の固体、６７０ｍｇ、８０％として得た。ＬＣ−ＭＳ（方法Ａ、１．５分の実行）ｔＲ０．９７分、ＥＳＩ＋［Ｍ／２＋Ｈ］、Ｃ６９Ｈ１０８Ｎ１２Ｏ１６Ｓについての計算値６９６．８；実測値６９６．４。
【０１６１】
直鎖状ヘキサペプチド（６７０ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ、１．０当量）を方法Ｊに記載されているマクロラクタム化条件に供し、完全に保護されている環状ペプチドを白色の固体、３２０ｍｇ、４８％として得た。ＬＣ−ＭＳ（方法Ａ、１．５分の実行）ｔＲ０．９８分、ＥＳＩ＋［Ｍ／２＋Ｈ］、Ｃ６９Ｈ１０６Ｎ１２Ｏ１５Ｓについての計算値６８７．９；実測値６８７．４。
【０１６２】
完全に保護されている粗環状ペプチド（３２０ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）を方法Ｌに記載されている包括的脱保護条件、それに続く方法Ｏを使用した分取ＨＰＬＣ精製に供し、表題化合物、実施例３を白色のふわふわした固体、８０ｍｇ、４６％として得た。1H NMR (400MHz, d6-DMSO) δ 8.60 (br s, 1H), 8.45 (br s, 2H), 7.70 (d,
J=8.5 Hz, 1H), 7.58 (t, J=5.6 Hz, 1H), 7.37 - 7.18 (m, 9H), 7.13 (br s, 3H),
4.64 - 4.53 (m, 2H), 4.50 - 4.38 (m, 3H), 4.38 - 4.23 (m, 2H), 4.23 - 4.02 (m,
3H), 3.88 (d, J=4.5 Hz, 2H), 3.68 (br s, 2H), 3.64 - 3.55 (m, 2H), 3.51 (d,
J=14.1 Hz, 6H), 3.38 (br s, 59H), 3.07 (br s, 8H), 2.74 (br s, 2H), 2.50 (d,
J=3.5 Hz, 27H), 2.01 - 1.90 (m, 6H), 1.79 (br s, 1H), 1.59 (d, J=3.0 Hz, 3H),
1.47 (br s, 4H), 1.43 - 1.28 (m, 9H), 1.25 (br s, 4H), 1.14 (br s, 2H).  LC-MS (方法A, 1.5分の実行) tR 0.74分, ESI+[M+H] C43H65N12O10の計算値909.5; 実測値909.4.
【０１６３】
（実施例４）
（（Ｓ）−１−（（（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｒ，２０ａＳ）−９−（３−グアニジノプロピル）−１９−ヒドロキシ−３−（（（１ｓ，４Ｓ）−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル）−６−（（５−メトキシ−１Ｈ−インドール−３−イル）メチル）−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソイコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−１５−イル）アミノ）−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル）グリシン
方法Ｂに従って、Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎδ−アリルオキシカルボニル−Ｌ−オルニチンを２−クロロトリチル樹脂（ＣＴＣ樹脂、１．０ｍｅｑ、１００ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）上へとローディングし、それに続いてＤＭＦ中のピペリジン（２０％ｖ／ｖ）で処理し、ＣＴＣ樹脂結合Ｎδ−アリルオキシカルボニル−Ｌ−オルニチン（０．１ｍｍｏｌ）を得た。
【０１６４】
ヘキサペプチド直鎖状配列をそれに続いて、逐次的に、Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−２−オキソエチル）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−フェニルアラニン（５７ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ、１．５当量）、Ｎα−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−Ｎω−（（２，２，４，６，７−ペンタメチル−２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イル）スルホニル）−Ｌ−アルギニン（９８ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ、１．５当量）、（Ｓ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−（５−メトキシ−１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン酸（６９ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ、１．５当量）、Ｎ−（９−フルオレニルメチルオキシカルボニル）−３−（ｃｉｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）−Ｄ−アラニン（６１ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ、１．５当量）、（２Ｓ，４Ｒ）−１−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−４−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）ピロリジン−２−カルボン酸（６２ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ、１．５当量）を使用して、方法Ｆに記載されている手順に従って構築し、樹脂結合直鎖状ヘキサペプチドを得た。この樹脂結合生成物を方法Ｈに記載されている切断条件に供し、直鎖状ヘキサペプチドを黄色の油、１４６ｍｇ、粗収率１００％として得た。ＬＣ−ＭＳ（方法Ａ、１．５分の実行）ｔＲ１．００分、ＥＳＩ＋［Ｍ／２＋Ｈ］、Ｃ７４Ｈ１１１Ｎ１１Ｏ１７Ｓについての計算値７２９．４；実測値７２９．０。
【０１６５】
直鎖状粗ヘキサペプチド（１４６ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ、１．０当量）を方法Ｊに記載されているマクロラクタム化条件に供し、完全に保護されている環状ペプチドをオフホワイト色の固体として得て、これを包括的脱保護ステップにおいてそれ以上精製することなく使用した。
【０１６６】
完全に保護されている環状ペプチドを方法Ｌに記載されている包括的脱保護条件、それに続く方法Ｏを使用した分取ＨＰＬＣ精製に供し、表題化合物、実施例４を白色の固体、５．９ｍｇ、６．０％として得た。1H NMR (400MHz, d6-DMSO) δ 10.80 - 10.72 (m, 1H), 8.52 (d, J=5.5 Hz,
1H), 8.35 (br s, 1H), 8.27 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.37 - 7.12 (m,
13H), 7.04 - 6.91 (m, 2H), 6.76 - 6.67 (m, 1H), 4.41 (br s, 5H), 4.10 (br s,
19H), 3.93 (br s, 5H), 3.75 (s, 7H), 3.70 (s, 15H), 3.17 (s, 31H), 1.36 (br s,
3H), 1.31 - 1.17 (m, 5H), 1.15 (br s, 3H), 1.10 (br s, 4H).  LC-MS (方法A, 1.5分の実行) tR 0.61分, ESI+[M+H] C48H68N11O11Sの計算値975.1; 実測値974.6.
【０１６７】
（実施例５）
（（Ｓ）−１−（（（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，２０ａＳ）−６−（（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）メチル）−９−（３−グアニジノプロピル）−３−（（（１ｓ，４Ｓ）−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル）−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソイコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−１５−イル）アミノ）−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル）グリシン
方法Ｂに従って、Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎδ−アリルオキシカルボニル−Ｌ−オルニチンを２−クロロトリチル樹脂（ＣＴＣ樹脂、１．０ｍｅｑ、２００ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）上へとローディングし、それに続いてＤＭＦ中のピペリジン（２０％ｖ／ｖ）で処理し、ＣＴＣ樹脂結合Ｎδ−アリルオキシカルボニル−Ｌ−オルニチン（０．２ｍｍｏｌ）を得た。
【０１６８】
ヘキサペプチド直鎖状配列をそれに続いて、逐次的に、Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−２−オキソエチル）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−フェニルアラニン（１１４ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ、１．５当量）、Ｎα−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−Ｎω−（（２，２，４，６，７−ペンタメチル−２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イル）スルホニル）−Ｌ−アルギニン（１９５ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ、１．５当量）、（Ｓ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−（１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）プロパン酸（１５９ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ、１．５当量）、Ｎ−（９−フルオレニルメチルオキシカルボニル）−３−（ｃｉｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）−Ｄ−アラニン（１２３１ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ、１．５当量）および（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−Ｌ−プロリン（１０１ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ、１．５当量）を使用して、方法Ｆに記載されている手順に従って構築し、樹脂結合直鎖状ヘキサペプチドを得た。この樹脂結合生成物を方法Ｈに記載されている切断条件に供し、直鎖状ヘキサペプチドを黄色の油、２７１ｍｇ、粗収率１００％として得た。ＬＣ−ＭＳ（方法Ａ、１．５分の実行）ｔＲ０．９５分、ＥＳＩ＋［Ｍ／２＋Ｈ−Ｂｏｃ］、Ｃ７３Ｈ１０６Ｎ１２Ｏ１６Ｓについての計算値６７８．８；実測値６７８．５。
【０１６９】
直鎖状粗ヘキサペプチド（２７１ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ、１．０当量）を方法Ｊに記載されているマクロラクタム化条件に供し、完全に保護されている環状ペプチドをオフホワイト色の固体、３０２ｍｇとして得た。この材料を、包括的脱保護においてそれ以上精製することなく使用した。ＬＣ−ＭＳ（方法Ａ、１．５分の実行）ｔＲ０．９５分、ＥＳＩ＋［Ｍ／２＋Ｈ］、Ｃ７３Ｈ１０６Ｎ１２Ｏ１６Ｓについての計算値７１９．３；実測値７１８．５。
【０１７０】
完全に保護されている環状ペプチド（３０２ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）を方法Ｌに記載されている包括的脱保護条件、それに続く方法Ｏを使用した分取ＨＰＬＣ精製に供し、表題化合物、実施例５を白色の固体、１２．３ｍｇ、６．６％として得た。1H NMR (400MHz, d6-DMSO) δ 11.44 (s, 1H), 8.53 (d, J=7.5 Hz, 1H),
8.29 - 8.20 (m, 3H), 8.05 - 7.84 (m, 4H), 7.30 - 7.15 (m, 9H), 7.14 - 6.95 (m,
4H), 4.55 (br s, 2H), 4.37 - 3.86 (m, 6H), 3.52 (br s, 7H), 3.35 (br s, 210H),
3.17 (s, 17H), 3.09 (d, J=17.1 Hz, 7H), 3.04 - 2.86 (m, 8H), 2.50 (d, J=3.5 Hz,
254H), 2.33 (br s, 10H), 2.07 (s, 3H), 1.85 (br s, 4H), 1.65 (br s, 3H), 1.52
(br s, 6H), 1.33 (br s, 6H), 1.28 - 1.17 (m, 4H), 1.07 (d, J=10.0 Hz,
7H).  LC-MS (方法A, 1.5分の実行) tR 0.51分, ESI+[M+H] C46H65N12O9の計算値927.1; 実測値929.6.
【０１７１】
（実施例６）
（（Ｓ）−１−（（（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｒ，２０ａＳ）−６−（（１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）メチル）−９−（３−グアニジノプロピル）−１９−ヒドロキシ−３−（（（１ｓ，４Ｓ）−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル）−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソイコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−１５−イル）アミノ）−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル）グリシン
方法Ｂに従って、Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎδ−アリルオキシカルボニル−Ｌ−オルニチンを２−クロロトリチル樹脂（ＣＴＣ樹脂、１．０ｍｅｑ、２００ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）上へとローディングし、それに続いてＤＭＦ中のピペリジン（２０％ｖ／ｖ）で処理し、ＣＴＣ樹脂結合Ｎδ−アリルオキシカルボニル−Ｌ−オルニチン（０．２ｍｍｏｌ）を得た。
【０１７２】
ヘキサペプチド直鎖状配列をそれに続いて、逐次的に、Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−２−オキソエチル）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−フェニルアラニン（１１４ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ、１．５当量）、Ｎα−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−Ｎω−（（２，２，４，６，７−ペンタメチル−２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イル）スルホニル）−Ｌ−アルギニン（１９５ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ、１．５当量）、（Ｓ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−（１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピリジン−３−イル）プロパン酸（１５９ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ、１．５当量）、Ｎ−（９−フルオレニルメチルオキシカルボニル）−３−（ｃｉｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）−Ｄ−アラニン（１２３ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ、１．５当量）および（２Ｓ，４Ｒ）−１−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−４−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）ピロリジン−２−カルボン酸（１２３ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ、１．５当量）を使用して、方法Ｆに記載されている手順に従って構築し、樹脂結合直鎖状ヘキサペプチドを得た。この樹脂結合生成物を方法Ｈに記載されている切断条件に供し、直鎖状ヘキサペプチドを黄色の油、２８６ｍｇ、粗収率１００％として得た。ＬＣ−ＭＳ（方法Ａ、１．５分の実行）ｔＲ０．９７分、ＥＳＩ＋［Ｍ／２＋Ｈ−Ｂｏｃ］、Ｃ７２Ｈ１０８Ｎ１２Ｏ１６Ｓについての計算値７１４．８；実測値７１４．４。
【０１７３】
直鎖状粗ヘキサペプチド（２８６ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ、１．０当量）を方法Ｊに記載されているマクロラクタム化条件に供し、完全に保護されている環状ペプチドをオフホワイト色の固体、２８２ｍｇとして得た。この材料を、包括的脱保護においてそれ以上精製することなく使用した。ＬＣ−ＭＳ（方法Ａ、１．５分の実行）ｔＲ１．００分、ＥＳＩ＋［Ｍ／２＋Ｈ］、Ｃ７７Ｈ１１２Ｎ１２Ｏ１７Ｓについての計算値７５５．９；実測値７５５．５。
【０１７４】
完全に保護されている環状ペプチド（２８２ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）を方法Ｌに記載されている包括的脱保護条件、それに続く方法Ｏを使用した分取ＨＰＬＣ精製に供し、表題化合物、実施例６を白色の固体、７．８ｍｇ、４．８％として得た。1H NMR (400MHz, d6-DMSO) δ 11.46 (br s, 1H), 8.54 (br s, 1H), 8.33
(br s, 1H), 8.28 (s, 1H), 8.21 - 8.13 (m, 1H), 8.10 - 8.00 (m, 1H), 7.93 (d,
J=8.5 Hz, 1H), 7.34 - 7.17 (m, 6H), 7.02 (dd, J=4.3, 7.8 Hz, 2H), 4.59 (br s,
1H), 4.40 (br s, 1H), 4.24 (br s, 2H), 4.09 (br s, 7H), 3.89 (br s, 3H), 3.33
(br s, 189H), 3.17 (s, 23H), 3.07 (d, J=16.1 Hz, 4H), 3.02 - 2.85 (m, 4H), 2.50
(d, J=3.5 Hz, 24H), 2.33 (s, 5H), 2.01 - 1.80 (m, 3H), 1.49 (br s, 4H), 1.32
(br s, 3H), 1.08 (d, J=10.0 Hz, 4H), 0.82 (br s, 1H).  LC-MS (方法A) tR 0.57分, ESI+[M+H] C46H65N12O10の計算値946.1; 実測値946.6.
【０１７５】
（実施例７）
（（Ｓ）−１−（（（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｓ，２０ａＳ）−６−（（１Ｈ−インドール−３−イル）メチル）−１９−アミノ−９−（３−グアニジノプロピル）−３−（（（１ｓ，４Ｓ）−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル）−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソイコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−１５−イル）アミノ）−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル）グリシン
方法Ｃに従って、Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎδ−アリルオキシカルボニル−Ｌ−オルニチンを２−クロロトリチル樹脂（ＣＴＣ樹脂、１．０ｍｅｑ、３．０ｇ、３．０ｍｍｏｌ）上へとローディングし、それに続いてＤＭＦ中のピペリジン（２０％ｖ／ｖ）で処理し、ＣＴＣ樹脂結合Ｎδ−アリルオキシカルボニル−Ｌ−オルニチン（３．０ｍｍｏｌ）を得た。
【０１７６】
ヘキサペプチド直鎖状配列をそれに続いて、逐次的に、Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−２−オキソエチル）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−フェニルアラニン（１．７１ｇ、４．５ｍｍｏｌ、１．５当量）、Ｎα−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−Ｎω−（（２，２，４，６，７−ペンタメチル−２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イル）スルホニル）−Ｌ−アルギニン（２．９２ｇ、４．５ｍｍｏｌ、１．５当量）、Ｎα−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−トリプトファン（１．９２ｇ、４．５ｍｍｏｌ、１．５当量）、Ｎ−（９−フルオレニルメチルオキシカルボニル）−３−（ｃｉｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）−Ｄ−アラニン（１．８０ｇ、４．５ｍｍｏｌ、１．５当量）および（２Ｓ，４Ｓ）−１−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ピロリジン−２−カルボン酸（２．０３ｇ、４．５ｍｍｏｌ、１．５当量）を使用して、方法Ｇに記載されている手順に従って構築し、樹脂結合直鎖状ヘキサペプチドを得た。この樹脂結合生成物を方法Ｉに記載されている切断条件に供し、直鎖状ヘキサペプチドを油、４．４１ｇ、１００％として得た。ＬＣ−ＭＳ（方法Ａ、１．５分の実行）ｔＲ０．９０分、ＥＳＩ＋［Ｍ／２＋Ｈ］、Ｃ７４Ｈ１０８Ｎ１２Ｏ１７Ｓについての計算値７３５．９；実測値７３５．１。
【０１７７】
直鎖状ヘキサペプチド（４．４１ｇ、３ｍｍｏｌ、１．０当量）を、方法Ｋに記載されているマクロラクタム化条件に供し、完全に保護されている環状ペプチドを黄色の固体、４．３５ｇ、１００％として得た。ＬＣ−ＭＳ（方法Ａ、１．５分の実行）ｔＲ０．９７分、ＥＳＩ＋［Ｍ＋Ｈ］、Ｃ８０Ｈ１０６Ｎ１１Ｏ１６Ｓについての計算値１４５２．８；実測値１４５２．２。
【０１７８】
完全に保護されている環状ペプチド（４．３５ｇ、３ｍｍｏｌ、１．０当量）を、方法Ｍに記載されている包括的脱保護条件、それに続く方法Ｏを使用した分取ＨＰＬＣ精製に供し、表題化合物、実施例７を白色の固体、３１２ｍｇ、１０％として得た。1H NMR (400MHz, d6-DMSO) δ 10.90 (s, 1H), 8.50 (br s, 3H), 8.30 (s,
1H), 8.10 (d, J=7.5 Hz, 1H), 7.76 (t, J=5.5 Hz, 1H), 7.51 (d, J=8.0 Hz, 5H),
7.32 (d, J=8.5 Hz, 2H), 7.27 - 7.16 (m, 6H), 7.13 (s, J=4.4 Hz, 1H), 7.05 (t,
J=7.5 Hz, 1H), 6.97 (t, J=6.7 Hz, 1H), 4.59 (d, J=6.5 Hz, 1H), 4.49 (br s, 1H),
4.25 (br s, 2H), 4.13 (d, J=7.0 Hz, 2H), 3.97 (br s, 2H), 3.77 (br s, 2H), 3.59
(br s, 3H), 3.43 (br s, 1H), 3.40 - 3.25 (m, 4H), 3.12 - 2.95 (m, 5H), 2.93 -
2.85 (m, 1H), 2.78 (d, J=6.0 Hz, 1H), 2.50 (d, J=1.5 Hz, 50H), 2.31 (d, J=14.1
Hz, 4H), 1.77 (br s, 2H), 1.61 (br s, 1H), 1.49 (br s, 3H), 1.40 (br s, 5H),
1.21 (br s, 6H), 1.14 (br s, 7H), 0.96 (br s, 2H).  LC-MS (方法A, 1.5分の実行) tR 0.59分, ESI+[M+H] C47H66N12O9の計算値944.1; 実測値944.6.
【０１７９】
（実施例８）
（（Ｓ）−１−（（（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｒ，２０ａＳ）−６−（（１Ｈ−インドール−３−イル）メチル）−１９−アミノ−９−（３−グアニジノプロピル）−３−（（（１ｓ，４Ｓ）−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル）−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソイコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−１５−イル）アミノ）−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル）グリシン
方法Ｂに従って、Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎδ−アリルオキシカルボニル−Ｌ−オルニチンを２−クロロトリチル樹脂（ＣＴＣ樹脂、１．０ｍｅｑ、１．０ｇ、１．０ｍｍｏｌ）上へとローディングし、それに続いてＤＭＦ中のピペリジン（２０％ｖ／ｖ）で処理し、ＣＴＣ樹脂結合Ｎδ−アリルオキシカルボニル−Ｌ−オルニチン（０．６ｍｍｏｌ）を得た。
【０１８０】
ヘキサペプチド直鎖状配列をそれに続いて、逐次的に、Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−２−オキソエチル）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−フェニルアラニン（３４２ｍｇ、０．９ｍｍｏｌ、１．５当量）、Ｎα−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−Ｎω−（（２，２，４，６，７−ペンタメチル−２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イル）スルホニル）−Ｌ−アルギニン（５８４ｍｇ、０．９ｍｍｏｌ、１．５当量）、Ｎα−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−トリプトファン（３８４ｍｇ、０．９ｍｍｏｌ、１．５当量）、Ｎ−（９−フルオレニルメチルオキシカルボニル）−３−（ｃｉｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）−Ｄ−アラニン（３６０ｍｇ、０．９ｍｍｏｌ、１．５当量）および（２Ｓ，４Ｒ）−１−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−４−（（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ピロリジン−２−カルボン酸（４０６ｍｇ、０．９ｍｍｏｌ、１．５当量）を使用して、方法Ｆに記載されている手順に従って構築し、樹脂結合直鎖状ヘキサペプチドを得た。この樹脂結合生成物を方法Ｈに記載されている切断条件に供し、直鎖状ヘキサペプチドを粗油、７７４ｍｇ、１００％として得た。ＬＣ−ＭＳ（方法Ａ、１．５分の実行）ｔＲ０．９４分、ＥＳＩ＋［Ｍ／２＋Ｈ］、Ｃ７４Ｈ１０８Ｎ１２Ｏ１７Ｓについての計算値７３５．９；実測値７３５．６。
【０１８１】
直鎖状ヘキサペプチド（７７４ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ、１．０当量）を、方法Ｊに記載されているマクロラクタム化条件に供し、完全に保護されている環状ペプチドを黄色の油として得て、これをそれ以上精製することなく次のステップで使用した。ＬＣ−ＭＳ（方法Ａ、１．５分の実行）ｔＲ０．９７分、ＥＳＩ＋［Ｍ／２＋Ｎａ］、Ｃ８０Ｈ１０６Ｎ１１Ｏ１６Ｓについての計算値７４９．１；実測値７４９．１。
【０１８２】
完全に保護されている環状ペプチドを方法Ｌに記載されている包括的脱保護条件、それに続く方法Ｏを使用した分取ＨＰＬＣ精製に供し、表題化合物、実施例８を白色の固体、３７．６ｍｇ、６．６％として得た。1H NMR (400MHz, d6-DMSO) δ 10.91 (br s, 1H), 8.74 (br s, 1H), 8.63
(br s, 1H), 8.32 (s, 2H), 8.02 (br s, 1H), 7.88 (t, J=5.7 Hz, 1H), 7.63 (br s,
2H), 7.51 (d, J=8.0 Hz, 2H), 7.36 - 7.15 (m, 6H), 7.12 - 7.03 (m, 1H), 7.01 -
6.91 (m, 1H), 4.68 (br s, 1H), 4.57 (br s, 1H), 4.23 (br s, 3H), 4.07 (br s,
3H), 3.93 (br s, 4H), 3.80 (br s, 6H), 3.68 (br s, 7H), 3.56 (br s, 7H), 3.39
(br s, 3H), 3.33 (br s, 4H), 3.17 (s, 1H), 3.06 (d, J=15.6 Hz, 3H), 3.00 - 2.85
(m, 3H), 2.79 (br s, 1H), 2.68 (br s, 1H), 2.55 - 2.46 (m, 47H), 2.33 (br s,
2H), 2.02 (br s, 1H), 1.84 (br s, 2H), 1.62 (br s, 1H), 1.51 (br s, 3H), 1.34
(br s, 4H), 1.16 (d, J=12.5 Hz, 4H), 1.06 (br s, 4H), 0.83 (br s, 1H). 
LC-MS (方法A, 1.5分の実行) tR 0.97分, ESI+[M/2+H] C47H66N12O9の計算値472.0; 実測値472.5.
【０１８３】
（実施例９）
（（Ｓ）−１−（（（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｒ，２０ａＳ）−６−（（１Ｈ−インドール−３−イル）メチル）−１９−アセトアミド−９−（３−グアニジノプロピル）−３−（（（１ｓ，４Ｓ）−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル）−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソイコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−１５−イル）アミノ）−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル）グリシン
方法Ｂに従って、Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎδ−アリルオキシカルボニル−Ｌ−オルニチンを２−クロロトリチル樹脂（ＣＴＣ樹脂、１．０ｍｅｑ、１．０ｇ、１．０ｍｍｏｌ）上へとローディングし、それに続いてＤＭＦ中のピペリジン（２０％ｖ／ｖ）で処理し、ＣＴＣ樹脂結合Ｎδ−アリルオキシカルボニル−Ｌ−オルニチン（０．６ｍｍｏｌ）を得た。
【０１８４】
ヘキサペプチド直鎖状配列をそれに続いて、逐次的に、Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−２−オキソエチル）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−フェニルアラニン（３４２ｍｇ、０．９ｍｍｏｌ、１．５当量）、Ｎα−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−Ｎω−（（２，２，４，６，７−ペンタメチル−２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イル）スルホニル）−Ｌ−アルギニン（５８４ｍｇ、０．９ｍｍｏｌ、１．５当量）、Ｎα−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−トリプトファン（３８４ｍｇ、０．９ｍｍｏｌ、１．５当量）、Ｎ−（９−フルオレニルメチルオキシカルボニル）−３−（ｃｉｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）−Ｄ−アラニン（３６０ｍｇ、０．９ｍｍｏｌ、１．５当量）および（２Ｓ，４Ｒ）−１−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−４−（アセチルアミノ）ピロリジン−２−カルボン酸（４０６ｍｇ、０．９ｍｍｏｌ、１．５当量）を使用して、方法Ｆに記載されている手順に従って構築し、樹脂結合直鎖状ヘキサペプチドを得た。この樹脂結合生成物を方法Ｈに記載されている切断条件に供し、直鎖状ヘキサペプチドを粗油、８４７ｍｇ、１００％として得た。ＬＣ−ＭＳ（方法Ａ、１．５分の実行）ｔＲ０．８６分、ＥＳＩ＋［Ｍ＋Ｈ］、Ｃ７１Ｈ１０３Ｎ１２Ｏ１６Ｓについての計算値１４１２．７；実測値１４１２．５。
【０１８５】
直鎖状ヘキサペプチド（８４７ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ、１．０当量）を方法Ｊに記載されているマクロラクタム化条件に供し、完全に保護されている環状ペプチドを黄色の油として得て、これをそれ以上精製することなく次のステップで使用した。ＬＣ−ＭＳ（方法Ａ、１．５分の実行）ｔＲ０．９３分、ＥＳＩ＋［Ｍ＋Ｈ］、Ｃ７１Ｈ１０１Ｎ１２Ｏ１５Ｓについての計算値１３９４．７；実測値１３９４．８。
【０１８６】
完全に保護されている環状ペプチドを方法Ｌに記載されている包括的脱保護条件、それに続く方法Ｏを使用した分取ＨＰＬＣ精製に供し、表題化合物、実施例９を白色の固体、１１３ｍｇ、２０％として得た。1H NMR (400MHz, d6-DMSO) δ 10.91 (br s, 1H), 8.70 (br s, 1H), 8.30
(s, 1H), 8.22 (d, J=6.0 Hz, 2H), 8.01 (d, J=6.5 Hz, 2H), 7.52 - 7.38 (m, 4H),
7.32 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.27 - 7.16 (m, 7H), 7.05 (t, J=7.5 Hz, 1H), 6.97 (t,
J=7.3 Hz, 1H), 4.58 - 4.50 (m, 1H), 3.99 (br s, 1H), 3.64 (d, J=8.5 Hz, 5H),
3.53 (br s, 7H), 3.46 (br s, 7H), 3.42 - 3.33 (m, 8H), 3.28 (d, J=13.1 Hz, 5H),
3.21 - 3.07 (m, 6H), 3.04 (br s, 1H), 3.01 - 2.88 (m, 4H), 2.81 - 2.75 (m, 1H),
2.33 (br s, 4H), 2.06 (br s, 1H), 1.87 (d, J=8.5 Hz, 1H), 1.80 (s, 4H), 1.66
(br s, 2H), 1.48 (br s, 4H), 1.33 (br s, 4H), 1.25 (d, J=6.0 Hz, 2H), 1.14 (br
s, 3H), 1.12 - 0.95 (m, 7H), 0.82 (br s, 3H).  LC-MS
(方法A, 1.5分の実行) tR 0.76分, ESI+[M+H] C49H69N12O10の計算値986.1; 実測値986.4.
【０１８７】
（実施例１０）
（（Ｓ）−１−（（（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｓ，２０ａＳ）−６−（（１Ｈ−インドール−３−イル）メチル）−１９−アセトアミド−９−（３−グアニジノプロピル）−３−（（（１ｓ，４Ｓ）−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル）−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソイコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−１５−イル）アミノ）−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル）グリシン
方法Ｂに従って、Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎδ−アリルオキシカルボニル−Ｌ−オルニチンを２−クロロトリチル樹脂（ＣＴＣ樹脂、１．０ｍｅｑ、１．０ｇ、１．０ｍｍｏｌ）上へとローディングし、それに続いてＤＭＦ中のピペリジン（２０％ｖ／ｖ）で処理し、ＣＴＣ樹脂結合Ｎδ−アリルオキシカルボニル−Ｌ−オルニチン（０．６ｍｍｏｌ）を得た。
【０１８８】
ヘキサペプチド直鎖状配列をそれに続いて、逐次的に、Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−２−オキソエチル）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−フェニルアラニン（３４２ｍｇ、０．９ｍｍｏｌ、１．５当量）、Ｎα−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−Ｎω−（（２，２，４，６，７−ペンタメチル−２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イル）スルホニル）−Ｌ−アルギニン（５８４ｍｇ、０．９ｍｍｏｌ、１．５当量）、Ｎα−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−トリプトファン（３８４ｍｇ、０．９ｍｍｏｌ、１．５当量）、Ｎ−（９−フルオレニルメチルオキシカルボニル）−３−（ｃｉｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）−Ｄ−アラニン（３６０ｍｇ、０．９ｍｍｏｌ、１．５当量）および（２Ｓ，４Ｓ）−１−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−４−（アセチルアミノ）ピロリジン−２−カルボン酸（４０６ｍｇ、０．９ｍｍｏｌ、１．５当量）を使用して、方法Ｆに記載されている手順に従って構築し、樹脂結合直鎖状ヘキサペプチドを得た。この樹脂結合生成物を方法Ｈに記載されている切断条件に供し、直鎖状ヘキサペプチド中間体を粗油、８４７ｍｇ、１００％として得た。ＬＣ−ＭＳ（方法Ａ、１．５分の実行）ｔＲ０．８６分、ＥＳＩ＋［Ｍ＋Ｈ］、Ｃ７１Ｈ１０３Ｎ１２Ｏ１６Ｓについての計算値１４１２．７；実測値１４１２．５。
【０１８９】
直鎖状ヘキサペプチド（８４７ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ、１．０当量）を方法Ｊに記載されているマクロラクタム化条件に供し、完全に保護されている環状ペプチドを黄色の油として得て、これをそれ以上精製することなく次のステップで使用した。ＬＣ−ＭＳ（方法Ａ、１．５分の実行）ｔＲ０．９３分、ＥＳＩ＋［Ｍ＋Ｈ］、Ｃ７１Ｈ１０１Ｎ１２Ｏ１５Ｓについての計算値１３９４．７；実測値１３９４．８。
【０１９０】
完全に保護されている環状ペプチドを方法Ｌに記載されている包括的脱保護条件、それに続く方法Ｏを使用した分取ＨＰＬＣ精製に供し、表題化合物、実施例１０を白色の固体、１３０ｍｇ、３０％として得た。1H NMR (400MHz, d6-DMSO) δ 10.88 (s, 1H), 8.61 (br s, 1H), 8.37 (br
s, 1H), 8.16 (br s, 1H), 8.07 (d, J=6.5 Hz, 1H), 7.52 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.39 -
7.13 (m, 10H), 7.12 - 6.94 (m, 2H), 4.56 (br s, 1H), 4.41 (t, J=7.5 Hz, 1H),
4.29 - 3.98 (m, 5H), 3.93 (br s, 3H), 3.57 (br s, 8H), 3.46 (br s, 7H), 3.39
(d, J=5.5 Hz, 7H), 3.25 (d, J=15.6 Hz, 4H), 3.20 - 3.04 (m, 6H), 3.04 - 2.85
(m, 3H), 2.77 (dd, J=7.8, 14.3 Hz, 2H), 2.67 (br s, 1H), 2.27 (br s, 1H), 1.87
(br s, 1H), 1.80 (s, 3H), 1.69 (br s, 1H), 1.52 (br s, 2H), 1.46 (br s, 2H),
1.34 (br s, 3H), 1.23 (br s, 2H), 1.12 (br s, 5H), 0.94 (br s, 1H).  LC-MS
(方法A, 1.5分の実行) tR 0.76分, ESI+[M+H] C49H69N12O10の計算値986.1; 実測値986.5.
【０１９１】
（実施例１１）
Ｎ−（（Ｓ）−１−（（（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｒ，２０ａＳ）−６−（（１Ｈ−インドール−３−イル）メチル）−９−（３−グアニジノプロピル）−１９−ヒドロキシ−３−（（（１ｓ，４Ｓ）−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル）−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソイコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−１５−イル）アミノ）−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル）−Ｎ−メチルグリシン
方法Ｂに従って、Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎδ−アリルオキシカルボニル−Ｌ−オルニチンを２−クロロトリチル樹脂（ＣＴＣ樹脂、１．０ｍｅｑ、３００ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ）上へとローディングし、それに続いてＤＭＦ中のピペリジン（２０％ｖ／ｖ）で処理し、ＣＴＣ樹脂結合Ｎδ−アリルオキシカルボニル−Ｌ−オルニチン（０．３ｍｍｏｌ）を得た。
【０１９２】
ヘキサペプチド直鎖状配列をそれに続いて、逐次的に、Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−２−オキソエチル）−Ｎ−メチル−Ｌ−フェニルアラニン（１３２ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ、１．５当量）、Ｎα−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−Ｎω−（（２，２，４，６，７−ペンタメチル−２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イル）スルホニル）−Ｌ−アルギニン（２９２ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ、１．５当量）、Ｎα−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−トリプトファン（２３７ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ、１．５当量）、Ｎ−（９−フルオレニルメチルオキシカルボニル）−３−（ｃｉｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）−Ｄ−アラニン（１８４ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ、１．５当量）および（２Ｓ，４Ｒ）−１−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−４−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）ピロリジン−２−カルボン酸（１８４ｍｇ、１．５当量）を使用して、方法Ｆに記載されている手順に従って構築し、樹脂上の直鎖状ヘキサペプチドを得た。この樹脂結合生成物を方法Ｈに記載されている切断条件に供し、直鎖状ヘキサペプチドを白色の固体、４０２ｍｇ、粗収率１００％として得た。ＬＣ−ＭＳ（方法Ａ、１．５分の実行）ｔＲ０．８１分、ＥＳＩ＋［Ｍ＋Ｈ］、Ｃ８０Ｈ１１８Ｎ２Ｏ２０Ｓについての計算値１３４１．７；実測値１３４１．２。
【０１９３】
直鎖状ヘキサペプチド（４０２ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ、１．０当量）を、方法Ｊに記載されているマクロラクタム化条件に供し、完全に保護されている環状ペプチドを白色の固体、１９４ｍｇ、粗収率１００％として得た。ＬＣ−ＭＳ（方法Ａ、１．５分の実行）ｔＲ０．８５分、ＥＳＩ＋［Ｍ＋Ｈ］、Ｃ６９Ｈ９９Ｎ１１Ｏ１３Ｓについての計算値１３２３．６；実測値１３２３．５。
【０１９４】
完全に保護されている粗環状ペプチド（１９４ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ、１．０当量）を、方法Ｌに記載されている包括的脱保護条件に供し、これによって完全に脱保護された環状ペプチドを白色の粉末、２８７ｍｇとして得た。この粉末を、方法Ｏを使用したＨＰＬＣによって精製し、表題化合物、実施例１１を白色の固体、１４．９ｍｇ、５．２％として得た。1H NMR (400MHz, d6-DMSO) δ  10.86 (s, 1H), 8.48 (d, J=6.0 Hz,
1H), 8.30 (s, 1H), 8.17 (br s, 1H), 7.83 (br s, 1H), 7.53 (d, J=7.5 Hz, 1H),
7.35 - 7.12 (m, 1H), 7.05 (t, J=7.0 Hz, 1H), 6.96 (t, J=7.5 Hz, 1H), 4.56 -
4.47 (m, 1H), 4.39 (br s, 1H), 4.26 (br s, 1H), 4.13 - 3.95 (m, 1H), 3.77 -
3.47 (m, 1H), 3.35 (br s, 46H), 3.20 - 2.91 (m, 2H), 2.89 - 2.60 (m, 1H), 2.52
- 2.48 (m, 40H), 2.36 - 2.30 (m, 1H), 2.24 (s, 1H), 1.97 (d, J=7.0 Hz, 1H),
1.85 (br s, 1H), 1.68 - 1.31 (m, 1H), 1.30 - 1.06 (m, 1H).  LC-MS (方法A, 1.5分の実行) tR 0.51分, ESI+[M+H] C48H68N11O10の計算値959.1; 実測値959.6.
【０１９５】
（実施例１２）
（（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｓ，２０ａＳ）−６−（（１Ｈ−インドール−３−イル）メチル）−１５−（（Ｓ）−２−（（カルボキシメチル）アミノ）−３−フェニルプロパンアミド）−９−（３−グアニジノプロピル）−３−（（（１ｓ，４Ｓ）−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル）−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソイコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−１９−イル）グリシン
方法Ｂに従って、Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎδ−アリルオキシカルボニル−Ｌ−オルニチンを２−クロロトリチル樹脂（ＣＴＣ樹脂、１．０ｍｅｑ、２００ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）上へとローディングし、それに続いてＤＭＦ中のピペリジン（２０％ｖ／ｖ）で処理し、ＣＴＣ樹脂結合Ｎδ−アリルオキシカルボニル−Ｌ−オルニチン（０．２ｍｍｏｌ）を得た。
【０１９６】
ヘキサペプチド直鎖状配列をそれに続いて、逐次的に、Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−２−オキソエチル）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−フェニルアラニン（１１４ｍｇ、０．３ｍｍｏｌ、１．５当量）、Ｎα−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−Ｎω−（（２，２，４，６，７−ペンタメチル−２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イル）スルホニル）−Ｌ−アルギニン（１９５ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ、１．５当量）、Ｎα−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−トリプトファン（１２８ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ、１．５当量）、Ｎ−（９−フルオレニルメチルオキシカルボニル）−３−（ｃｉｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）−Ｄ−アラニン（１２３ｍｇ、０．３０ｍｍｏｌ、１．５当量）および（２Ｓ，４Ｓ）−１−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−４−（（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−２−オキソエチル）（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ピロリジン−２−カルボン酸（７０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ、０．７５当量）を使用して、方法Ｆに記載されている手順に従って構築し、樹脂結合直鎖状ヘキサペプチドを得た。この樹脂結合生成物を方法Ｈに記載されている切断条件に供し、直鎖状ヘキサペプチドを黄色の油、２９７ｍｇ、粗収率１００％として得た。ＬＣ−ＭＳ（方法Ａ）ｔＲ０．９３分、ＥＳＩ＋［Ｍ／２＋Ｈ］、Ｃ７５Ｈ１１０Ｎ１２Ｏ１７Ｓについての計算値７４２．９；実測値７４２．５。
【０１９７】
直鎖状粗ヘキサペプチド（２９７ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ、１．０当量）を、方法Ｊに記載されているマクロラクタム化条件に供し、完全に保護されている環状ペプチドを黄色の固体、２９３ｍｇとして得た。この材料を、包括的脱保護においてそれ以上精製することなく使用した。ＬＣ−ＭＳ（方法Ａ）ｔＲ１．０１分、ＥＳＩ＋［Ｍ／２＋Ｈ］、Ｃ７５Ｈ１０８Ｎ１２Ｏ１６Ｓについての計算値７３３．９；実測値７３４．３。
【０１９８】
完全に保護されている環状ペプチド（２９３ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）を、方法Ｌに記載されている包括的脱保護条件、それに続く方法Ｏを使用した分取ＨＰＬＣ精製に供し、表題化合物、実施例１２を白色の固体、１１．３ｍｇ、５．７％として得た。1H NMR (400MHz, d6-DMSO) δ 10.83 (s, 1H), 9.78 (br s, 1H), 8.30 (s,
1H), 8.23 - 8.05 (m, 2H), 7.75 (br s, 1H), 7.59 (br s, 1H), 7.48 (d, J=7.5 Hz,
1H), 7.31 (d, J=8.5 Hz, 1H), 7.26 - 7.13 (m, 10H), 7.10 - 7.01 (m, 3H), 6.96
(t, J=7.3 Hz, 2H), 4.69 (br s, 1H), 4.43 (br s, 1H), 4.31 - 4.10 (m, 5H), 4.06
- 3.88 (m, 3H), 3.59 (br s, 9H), 3.06 (d, J=16.1 Hz, 22H), 2.91 - 2.73 (m,
10H), 2.67 (br s, 9H), 1.40 (br s, 12H), 1.27 - 1.11 (m, 13H).  LC-MS (方法A, 1.5分の実行) tR 0.50分, ESI+[M+H] C49H68N12O11の計算値1002.1; 実測値1001.6.
【０１９９】
（実施例１３）
（（Ｓ）−１−（（（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｒ，２０ａＳ）−６−（（１Ｈ−インドール−３−イル）メチル）−９−（３−グアニジノプロピル）−１９−ヒドロキシ−３−（（（１ｓ，４Ｓ）−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル）−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソイコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−１５−イル）アミノ）−１−オキソ−３−（３，５−ジジューテロフェニル）プロパン−２−イル）グリシン
【０２００】
【化１２】
2019532021.tif 000014
方法Ｎに従って、環状ペンタペプチドである１−（３−（（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｒ，２０ａＳ）−６−（（１Ｈ−インドール−３−イル）メチル）−１５−アミノ−１９−ヒドロキシ−３−（（（１ｓ，４Ｓ）−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル）−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソイコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−９−イル）プロピル）グアニジン（２００ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ、１．０当量）を、ＨＡＴＵ（１６２ｍｇ、０．４３ｍｍｏｌ、１．５７当量）およびＤＩＰＥＡ（２８３μＬ、１．６ｍｍｏｌ、６当量）の存在下で、（Ｓ）−２−（（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−２−オキソエチル）（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−（３，５−ジブロモフェニル）プロパン酸（２１８ｍｇ、０．４ｍｍｏｌ、１．５当量）と反応させ、ヘキサペプチドであるｔｅｒｔ−ブチルＮ−（（Ｓ）−１−（（（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｒ，２０ａＳ）−６−（（１Ｈ−インドール−３−イル）メチル）−３−（（（１ｓ，４Ｓ）−４−（ｌ１−オキシダニル）シクロヘキシル）メチル）−９−（３−グアニジノプロピル）−１９−（ｌ１−オキシダニル）−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソイコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−１５−イル）アミノ）−３−（３，５−ジブロモフェニル）−１−オキソプロパン−２−イル）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）グリシネートを黄色の固体、３２０ｍｇ、９４％粗収率として得た。ＬＣ−ＭＳ（方法Ａ、１．５分の実行）ｔＲ０。８７分、ＥＳＩ＋［Ｍ＋Ｈ］、Ｃ５６Ｈ７９Ｂｒ２Ｎ１１Ｏ１２についての計算値１２５９．１；実測値１２５８．７。
【０２０１】
この粗ヘキサペプチド（８０ｍｇ、０．０６４ｍｍｏｌ）を、ＨＦＩＰＡ（３ｍｌ）を使用して方法Ｎに記載されている脱保護条件に供し、１２ＭのＨＣｌ（０．２７ｍｌ、３．２ｍｍｏｌ、５０当量）で約２０℃にて１時間処理し、脱保護された粗生成物化合物（（Ｓ）−１−（（（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｒ，２０ａＳ）−６−（（１Ｈ−インドール−３−イル）メチル）−９−（３−グアニジノプロピル）−１９−ヒドロキシ−３−（（（１ｓ，４Ｓ）−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル）−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソイコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−１５−イル）アミノ）−３−（３，５−ジブロモフェニル）−１−オキソプロパン−２−イル）グリシンを黄色の固体（１００ｍｇ、１００％粗収率）として得た。ＬＣ−ＭＳ（方法Ａ、１．５分の実行）ｔＲ０．６８分、ＥＳＩ＋［Ｍ＋Ｈ］、Ｃ４７Ｈ６４Ｂｒ２Ｎ１１Ｏ１０についての計算値１１０２．９；実測値１１０３．１。
【０２０２】
脱保護された粗ヘキサペプチド（２００ｍｇ、０．１８２ｍｍｏｌ、１．０当量）を、１０％Ｐｄ／Ｃ（１９．３ｍｇ、０．１８２ｍｇ、１．０当量）およびＭｅＯＨを有する１５ｍｌのｐａｒｒボトル中に入れた。反応槽を閉じ、１０回、真空／Ｎ２パージによって脱気し、それに続いて３サイクルの真空／Ｄ２パージを行い、その後で、ｐａｒｒボトルにＤ２ガスを１５ｐｓｉまで投入し、１８℃にて２時間撹拌した。容器をＤ２ガスで再充填し、ｒ．ｔ．にてさらに１６時間撹拌した。次いで、混合物をｃｅｌｉｔｅのパッドを通して濾過し、濾液を蒸発乾固し、黄色の油を得て、これを、方法Ｏを使用して分取ＨＰＬＣによって精製し、表題化合物、実施例１３を白色の固体、３６．７ｍｇ、２１．４％として得た。1H NMR (400MHz, d6-DMSO) δ 10.91 (br s, 1H), 8.58 (br s, 1H), 8.45
(br s, 1H), 8.37 - 8.27 (m, 1H), 8.10 - 7.85 (m, 1H), 7.52 (s, 1H), 7.32 (d,
J=8.5 Hz, 1H), 7.27 - 7.15 (m, 3H), 7.12 - 6.91 (m, 2H), 4.69 - 4.55 (m, 1H),
4.61 (d, J=7.5 Hz, 4H), 4.42 (br s, 1H), 4.22 (br s, 2H), 4.08 (br s, 2H), 3.98
- 3.83 (m, 1H), 3.91 (br s, 5H), 3.39 (br s, 71H), 3.13 - 2.86 (m, 3H), 2.78
(s, 1H), 2.67 (s, 1H), 2.52 - 2.49 (m, 97H), 2.05 - 1.80 (m, 1H), 1.70 - 1.44
(m, 1H), 1.50 (br s, 3H), 1.08 (d, J=10.5 Hz, 4H), 1.42 - 0.92 (m, 5H).  HRMS (m/z) [M+H]+ C47H64D2N11O10の計算値946.5114, 実測値946.5095.
【０２０３】
（実施例１４）
（（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｒ，２０ａＳ）−６−（（１Ｈ−インドール−３−イル）メチル）−１５−（（Ｓ）−２−（（カルボキシメチル）アミノ）−３−フェニルプロパンアミド）−９−（３−グアニジノプロピル）−３−（（（１ｓ，４Ｓ）−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル）−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソイコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−１９−イル）グリシン
方法Ｂに従って、Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎδ−アリルオキシカルボニル−Ｌ−オルニチンを２−クロロトリチル樹脂（ＣＴＣ樹脂、１．０ｍｅｑ、４００ｍｇ、０．４ｍｍｏｌ）上へとローディングし、それに続いてＤＭＦ中のピペリジン（２０％ｖ／ｖ）で処理し、ＣＴＣ樹脂結合Ｎδ−アリルオキシカルボニル−Ｌ−オルニチン（０．４ｍｍｏｌ）を得た。
【０２０４】
ヘキサペプチド直鎖状配列をそれに続いて、逐次的に、Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−２−オキソエチル）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−フェニルアラニン（２３０ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ、１．５当量）、Ｎα−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−Ｎω−（（２，２，４，６，７−ペンタメチル−２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イル）スルホニル）−Ｌ−アルギニン（３９０ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ、１．５当量）、Ｎα−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−トリプトファン（２６０ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ、１．５当量）、Ｎ−（９−フルオレニルメチルオキシカルボニル）−３−（ｃｉｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）−Ｄ−アラニン（２５２ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ、１．５当量）および（２Ｓ，４Ｒ）−１−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−４−（（２−ｔｅｒｔ−ブトキシ−２−オキソエチル）（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ピロリジン−２−カルボン酸（１３５ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ、０．６０当量）を使用して、方法Ｆに記載されている手順に従って構築し、樹脂結合直鎖状ヘキサペプチドを得た。この樹脂結合生成物を方法Ｈに記載されている切断条件に供し、直鎖状ヘキサペプチドを固体として得て、これを次のステップのためにそれ以上精製することなく使用した。ＬＣ−ＭＳ（方法Ａ、１．５分の実行）ｔＲ０．９６分、ＥＳＩ＋［（Ｍ−ｔＢｕ）／２＋Ｈ］、Ｃ７５Ｈ１１０Ｎ１２Ｏ１７Ｓについての計算値７１４．１；実測値７１４．５。
【０２０５】
直鎖状ヘキサペプチド（０．４０ｍｍｏｌ、１．０当量）を、方法Ｊに記載されているマクロラクタム化条件に供し、完全に保護されている環状ペプチドを黄色の固体、５８６ｍｇとして得た。この材料を、それに続く包括的脱保護においてそれ以上精製することなく使用した。ＬＣ−ＭＳ（方法Ａ、１．５分の実行）ｔＲ１．０６分、ＥＳＩ＋［（Ｍ−ｔＢｕ−ｔＢｕ−Ｂｏｃ）／２＋Ｈ］、Ｃ７５Ｈ１０８Ｎ１２Ｏ１６Ｓについての計算値６２７．９；実測値６２７．５。
【０２０６】
完全に保護されている環状ペプチド（２９３ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）を、方法Ｍに記載されている包括的脱保護条件、それに続く方法Ｏを使用した分取ＨＰＬＣ精製に供し、表題化合物、実施例１４を白色の固体、３８．９ｍｇ、１９．４％として得た。1H NMR (400MHz, d6-DMSO) δ 10.86 (br s, 1H), 9.99 (br s, 1H), 8.62
(br s, 1H), 8.37 (br s, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.88 (d, J=6.5 Hz, 1H), 7.49 (d,
J=8.0 Hz, 1H), 7.31 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.28 - 7.18 (m, 3H), 7.09 - 6.95 (m,
1H), 6.58 (br s, 1H), 4.74 (d, J=8.5 Hz, 1H), 4.56 (br s, 1H), 4.23 (br s, 1H),
4.12 (br s, 1H), 4.04 (br s, 1H), 3.83 (br s, 3H), 3.34 (br s, 6H), 3.25 - 2.94
(m, 7H), 2.94 - 2.85 (m, 1H), 2.81 (d, J=8.0 Hz, 1H), 2.67 (br s, 1H), 2.50 (br
s, 52H), 2.33 (s, 1H), 2.07 (br s, 1H), 1.93 - 1.71 (m, 1H), 1.64 (br s, 1H),
1.53 (br s, 1H), 1.29 (br s, 2H), 1.21 (br s, 1H), 1.14 (br s, 1H), 1.00 (d,
J=19.6 Hz, 2H).  LC-MS (方法A,
1.5分の実行) tR 0.78分, ESI+[M+H] C49H68N12O11の計算値1002.1; 実測値1002.3.
【０２０７】
（実施例１５）
（（Ｓ）−１−（（（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｒ，２０ａＳ）−９−（３−グアニジノプロピル）−１９−ヒドロキシ−３−（（（１ｓ，４Ｓ）−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル）−６−（（６−メトキシ−１Ｈ−インドール−３−イル）メチル）−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソイコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−１５−イル）アミノ）−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル）グリシン
方法Ｂに従って、Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎδ−アリルオキシカルボニル−Ｌ−オルニチンを２−クロロトリチル樹脂（ＣＴＣ樹脂、１．０ｍｅｑ、４００ｍｇ、０．４ｍｍｏｌ）上へとローディングし、それに続いてＤＭＦ中のピペリジン（２０％ｖ／ｖ）で処理し、ＣＴＣ樹脂結合Ｎδ−アリルオキシカルボニル−Ｌ−オルニチン（０．４ｍｍｏｌ）を得た。
【０２０８】
ヘキサペプチド直鎖状配列をそれに続いて、逐次的に、Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−２−オキソエチル）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−フェニルアラニン（２３０ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ、１．５当量）、Ｎα−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−Ｎω−（（２，２，４，６，７−ペンタメチル−２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イル）スルホニル）−Ｌ−アルギニン（３９０ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ、１．５当量）、（Ｓ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−（６−メトキシ−１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン酸（２７６ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ、１．５当量）、Ｎ−（９−フルオレニルメチルオキシカルボニル）−３−（ｃｉｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）−Ｄ−アラニン（２５２ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ、１．５当量）および（２Ｓ，４Ｒ）−１−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−４−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）ピロリジン−２−カルボン酸（２４６ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ、１．５０当量）を使用して、方法Ｆに記載されている手順に従って構築し、樹脂結合直鎖状ヘキサペプチドを得た。この樹脂結合生成物を方法Ｈに記載されている切断条件に供し、直鎖状ヘキサペプチドを固体として得て、これを次のステップのためにそれ以上精製することなく使用した。ＬＣ−ＭＳ（方法Ａ、１．５分の実行）ｔＲ０．９６分、ＥＳＩ＋［Ｍ＋Ｈ］、Ｃ７４Ｈ１０９Ｎ１１Ｏ１７Ｓについての計算値１４５７．８；実測値１４５７．５。
【０２０９】
直鎖状ヘキサペプチド（０．２０ｍｍｏｌ、１．０当量）を、方法Ｊに記載されているマクロラクタム化条件に供し、完全に保護されている環状ペプチドを黄色の固体、２８８ｍｇとして得た。この材料を、それに続く包括的脱保護においてそれ以上精製することなく使用した。ＬＣ−ＭＳ（方法Ａ、１．５分の実行）ｔＲ０．９９分、ＥＳＩ＋［（Ｍ−ｔＢｕ−ｔＢｕ−Ｂｏｃ）／２＋Ｈ］、Ｃ７４Ｈ１０７Ｎ１１Ｏ１６Ｓについての計算値６１３．９；実測値６１３．８。
【０２１０】
完全に保護されている環状ペプチド（２９３ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）を方法Ｍに記載されている包括的脱保護条件、それに続く方法Ｏを使用した分取ＨＰＬＣ精製に供し、表題化合物、実施例１５を白色の固体、４．５ｍｇ、２．３％として得た。1H NMR (400MHz, d6-DMSO) δ 10.75 (d, J=13.1 Hz, 1H), 8.53 (br s, 3H),
8.41 (s, 5H), 8.23 - 7.80 (m, 6H), 7.53 - 7.33 (m, 14H), 7.29 - 7.16 (m, 21H),
7.09 - 6.97 (m, 2H), 6.82 (d, J=8.5 Hz, 1H), 6.63 (d, J=8.0 Hz, 1H), 5.75 (s,
6H), 4.60 (br s, 8H), 4.41 (br s, 8H), 4.29 - 3.99 (m, 23H), 3.83 - 3.71 (m,
20H), 3.68 (br s, 17H), 3.17 (s, 21H), 3.12 - 2.84 (m, 4H), 2.52 - 2.48 (m,
163H), 2.41 - 2.31 (m, 30H), 2.07 - 1.77 (m, 6H), 1.52 (br s, 14H), 1.36 (br s,
17H), 1.24 (br s, 15H), 1.19 - 1.05 (m, 26H).  LC-MS (方法A , 1.5分の実行) tR 0.51分, ESI+[M+H] C48H67N11O11の計算値975.1; 実測値975.5.
【０２１１】
（実施例１６）
（（Ｓ）−１−（（（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｒ，２０ａＳ）−６−（（１Ｈ−インダゾール−３−イル）メチル）−９−（３−グアニジノプロピル）−１９−ヒドロキシ−３−（（（１ｓ，４Ｓ）−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル）−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソイコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−１５−イル）アミノ）−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル）グリシン
方法Ｂに従って、Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎδ−アリルオキシカルボニル−Ｌ−オルニチンを２−クロロトリチル樹脂（ＣＴＣ樹脂、１．０ｍｅｑ、６００ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）上へとローディングし、それに続いてＤＭＦ中のピペリジン（２０％ｖ／ｖ）で処理し、ＣＴＣ樹脂結合Ｎδ−アリルオキシカルボニル−Ｌ−オルニチン（０．６ｍｍｏｌ）を得た。
【０２１２】
ヘキサペプチド直鎖状配列をそれに続いて、逐次的に、Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−２−オキソエチル）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−フェニルアラニン（２２７ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ、１．０当量）、Ｎα−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−Ｎω−（（２，２，４，６，７−ペンタメチル−２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イル）スルホニル）−Ｌ−アルギニン（５７１ｍｇ、０．９ｍｍｏｌ、１．５当量）、（Ｓ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−（１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−１Ｈ−インダゾール−３−イル）プロパン酸（３１７ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ、１．０当量）、Ｎ−（９−フルオレニルメチルオキシカルボニル）−３−（ｃｉｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）−Ｄ−アラニン（１２２ｍｇ、０．３００ｍｍｏｌ、０．５当量）、（２Ｓ，４Ｒ）−１−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−４−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）ピロリジン−２−カルボン酸（３６９ｍｇ、０．９０ｍｍｏｌ、１．５当量）を使用して、方法Ｆに記載されている手順に従って構築し、樹脂結合直鎖状ヘキサペプチドを得た。この樹脂結合生成物を方法Ｈに記載されている切断条件に供し、直鎖状粗ヘキサペプチド中間体を得て、これを逆相フラッシュクロマトグラフィー（Ｓｐｈｅｒｉｃａｌ２０＊４５ｍｍカラム（Ｃ１８、１００Ａ、２６ｇ）、勾配、アセトニトリル／水１０％、５分から１０分で９０％へ、次いで６分で１００％ＭｅＣＮ、３５ｍＬ／分）によって精製し、所望の直鎖状ペプチドを白色の固体、１００ｍｇ、収率１０％として得た。ＬＣ−ＭＳ（方法Ａ、１．５分の実行）ｔＲ０．９２６分、ＥＳＩ＋［Ｍ／２＋Ｈ］、Ｃ７７Ｈ１１６Ｎ１２Ｏ１８Ｓについての計算値７６４．４；実測値７６５．０。
【０２１３】
直鎖状粗ヘキサペプチド（９０ｍｇ、０．０５９ｍｍｏｌ、１．０当量）を方法Ｊに記載されているマクロラクタム化条件に供し、完全に保護されている環状ペプチドをオフホワイト色の固体として得て、これを、包括的脱保護においてそれ以上精製することなく使用した。
【０２１４】
完全に保護されている粗環状ペプチドを方法Ｌに記載されている包括的脱保護条件、それに続く方法Ｏを使用した分取ＨＰＬＣ精製に供し、表題化合物、実施例１６の双性イオン性形態を白色の固体、２０．７ｍｇ、３５％として得た。1H NMR (400MHz, d6-DMSO) δ  13.25 - 12.93 (m, 1H), 9.19 - 8.33
(m, 1H), 7.71 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.62 - 7.38 (m, 1H), 7.34 - 7.14 (m, 1H), 7.11
- 6.98 (m, 1H), 4.58 (br. s., 1H), 4.10 (d, J=3.0 Hz, 1H), 3.83 (br. s., 1H),
3.74 - 3.51 (m, 1H), 3.47 (br. s., 1H), 3.39 - 3.32 (m, 17H), 3.05 - 2.85 (m,
1H), 2.82 - 2.59 (m, 1H), 2.54 - 2.49 (m, 13H), 1.63 - 1.44 (m, 1H), 1.39 (br.
s., 1H), 1.25 (br. s., 1H), 1.20 - 1.00 (m, 1H), 0.89 (br. s., 1H). LC-MS (方法A, 1.5分の実行) tR 0.63分, ESI+[M+H] C46H65N12O10の計算値946.1; 実測値946.6.
【０２１５】
（実施例１７）
（（Ｓ）−１−（（（３Ｒ，６Ｓ，９Ｓ，１５Ｓ，１９Ｒ，２０ａＳ）−６−（（６−エチル−１Ｈ−インドール−３−イル）メチル）−９−（３−グアニジノプロピル）−１９−ヒドロキシ−３−（（（１ｓ，４Ｓ）−４−ヒドロキシシクロヘキシル）メチル）−１，４，７，１０，１６−ペンタオキソイコサヒドロピロロ［１，２−ａ］［１，４，７，１０，１３］ペンタアザシクロオクタデシン−１５−イル）アミノ）−１−オキソ−３−フェニルプロパン−２−イル）グリシン
方法Ｂに従って、Ｎα−Ｆｍｏｃ−Ｎδ−アリルオキシカルボニル−Ｌ−オルニチンを２−クロロトリチル樹脂（ＣＴＣ樹脂、１．０ｍｅｑ、６００ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）上へとローディングし、それに続いてＤＭＦ中のピペリジン（２０％ｖ／ｖ）で処理し、ＣＴＣ樹脂結合Ｎδ−アリルオキシカルボニル−Ｌ−オルニチン（０．６ｍｍｏｌ）を得た。
【０２１６】
ヘキサペプチド直鎖状配列をそれに続いて、逐次的に、Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−２−オキソエチル）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−フェニルアラニン（２２７ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ、１．０当量）、Ｎα−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−Ｎω−（（２，２，４，６，７−ペンタメチル−２，３−ジヒドロベンゾフラン−５−イル）スルホニル）−Ｌ−アルギニン（５７１ｍｇ、０．９ｍｍｏｌ、１．５当量）、（Ｓ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−（１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−６−エチル−１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン酸（３３３ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ、１．０当量）、Ｎ−（９−フルオレニルメチルオキシカルボニル）−３−（ｃｉｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）−Ｄ−アラニン（４０９ｍｇ、０．９０ｍｍｏｌ、１．５当量）、（２Ｓ，４Ｒ）−１−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−４−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）ピロリジン−２−カルボン酸（３６９ｍｇ、０．９０ｍｍｏｌ、１．５当量）を使用して、方法Ｆに記載されている手順に従って構築し、樹脂結合直鎖状ヘキサペプチドを得た。この樹脂結合生成物を方法Ｈに記載されている切断条件に供し、直鎖状粗ヘキサペプチド中間体、４７０ｍｇ、粗収率５０％を得た。ＬＣ−ＭＳ（方法Ａ、１．５分の実行）ｔＲ０．９６分、ＥＳＩ＋［Ｍ／２＋Ｈ］、Ｃ８０Ｈ１２１Ｎ１１Ｏ１８Ｓについての計算値７７７．９；実測値７７８．３。
【０２１７】
直鎖状粗ヘキサペプチド（４７０ｍｇ、０．３０２ｍｍｏｌ、１．０当量）を方法Ｊに記載されているマクロラクタム化条件に供し、完全に保護されている粗環状ペプチドを黄色の固体として得て、これを逆相フラッシュクロマトグラフィー（球状、２０＊４５ｍｍカラム（Ｃ１８、１００Ａ、２６ｇ）、勾配、アセトニトリル／水１０％、５分から１０分で９０％へ、次いで、６分で１００％ＭｅＣＮ、３５ｍＬ／分）によって精製し、環状ペプチドを白色の固体、１９５ｍｇ、収率４２％として得た。
【０２１８】
精製された完全に保護されている環状ペプチドを方法Ｌに記載されている包括的脱保護条件、それに続く方法Ｏを使用した分取ＨＰＬＣ精製に供し、表題化合物、実施例１７の双性イオン性形態を白色の固体、２３．８ｍｇ、１９％として得た。1H NMR (400MHz, d6-DMSO) δ  10.91 - 10.63 (m, 1H), 8.97 (br. s.,
1H), 8.69 - 8.22 (m, 1H), 8.10 - 7.78 (m, 1H), 7.74 - 7.34 (m, 1H), 7.27 - 7.17
(m, 1H), 7.11 (d, J=11.5 Hz, 1H), 3.55 (br. s., 1H), 3.37 (br. s., 20H), 3.08
(br. s., 1H), 3.04 - 2.90 (m, 1H), 2.80 - 2.72 (m, 1H), 2.70 - 2.58 (m, 1H),
2.54 - 2.49 (m, 13H), 1.85 (br. s., 1H), 1.60 (br. s., 1H), 1.51 (br. s., 1H),
1.47 - 1.29 (m, 1H), 1.29 - 1.01 (m, 3H). LC-MS (方法A, 1.5分の実行) tR 0.63分, ESI+[M+H] C49H69N11O10の計算値972.5.1; 実測値973.1.
【０２１９】
調製１
Ｎ−（９−フルオレニルメチルオキシカルボニル）−３−（ｃｉｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）−Ｄ−アラニン
【０２２０】
【化１３】
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ステップ１
（Ｒ）−メチル２−アミノ−３−（４−ヒドロキシフェニル）プロパノエートの調製
撹拌棒を備えた２０００ｍｌの丸底フラスコに、（Ｒ）−３−（４−ヒドロキシフェニル）アラニン（１５０．０ｇ、８２８ｍｍｏｌ、１．００当量）、それに続いてメタノール（１０００ｍｌ）を加えた。このように得られた懸濁液を、氷水浴中で冷却した。懸濁液に、ＳＯＣｌ２（１４８ｇ、１２４０ｍｍｏｌ、１．５０当量）を滴下で添加した。溶液を１０℃に温め、次いで、８５℃にて１２時間還流させた。このように得られた溶液を減圧下で濃縮し、１３０ｇの表題化合物を固体として得て、これをさらに精製することなく次のステップに持ち越した。
【０２２１】
ステップ２
（Ｒ）−メチル２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−（４−ヒドロキシフェニル）プロパノエートの調製
３Ｌの丸底フラスコに、粗（Ｒ）−メチル２−アミノ−３−（４−ヒドロキシフェニル）プロパノエート（２０２ｇ、８７１．８ｍｍｏｌ、１．００当量）、トリエチルアミン（２２１ｇ、２．２ｍｏｌ、２．５０当量）およびＤＣＭ（１Ｌ）を加え、スラリーを得た。スラリーを氷浴中で冷却し、（Ｂｏｃ）２Ｏ（２０９ｇ、９５９ｍｍｏｌ、１．１０当量）のＤＣＭ（１Ｌ）溶液を滴下で添加した。添加の後、このように得られた無色の溶液を１０℃に温め、１８時間撹拌した。混合物に水（１．５Ｌ）を加え、それに続いてｐＨ３まで濃ＨＣｌのゆっくりとした添加を達成した。有機相を分離し、希ＨＣｌ（０．２ｍｏｌ／Ｌ、１．５Ｌ）およびブライン（１．５Ｌ×２）で洗浄した。有機相を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し、粗生成物を得た。粗生成物に、ＤＣＭ（４００ｍｌ）およびＰＥ（２Ｌ）を加え、白色の懸濁液を得た。懸濁液を１０℃にて１時間撹拌し、次いで、濾過した。このように得られた濾過ケークを真空下で乾燥させ、２１０ｇの表題化合物を固体として得て、これをさらに精製することなく次のステップに持ち越した。
【０２２２】
ステップ３
（２Ｒ）−メチル２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−（４−ヒドロキシシクロヘキシル）プロパノエート（シスおよびトランス異性体の混合物）の調製
２つの２Ｌの水素化容器のそれぞれに、約１０５ｇの（Ｒ）−メチル２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−（４−ヒドロキシフェニル）プロパノエート（３５５ｍｍｏｌ、１．００当量）、それに続いてメタノール（３Ｌ）およびＲｈ／Ｃ（３６ｇ、０．０５当量、湿った炭素上５％）を加えた。黒色の懸濁液を真空下で排出させ、Ｈ２（３×）を再充填した。このように得られた反応混合物を、５０ｐｓｉの水素圧力で５０℃にて２４時間撹拌した。混合物を濾過し、濾液を合わせ、粗油（約２２０ｇ）へと減圧下で濃縮した。粗生成物をＥｔＯＡｃ（２００ｍｌ）およびＰＥ（１Ｌ）に懸濁させ、１０℃にて３０分間撹拌し、次いで、濾過した。濾過ケークを真空下で乾燥させ、８４ｇの表題化合物を固体として得た。この固体は、シクロヘキシル基についてシスおよびトランス異性体の両方の混合物であり、これはそれに続くステップでも持ち越された後に、ステップ７に記載されているように、所望のシス異性体が最終的に単離された。
【０２２３】
ステップ４
（２Ｒ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−（４−ヒドロキシシクロヘキシル）プロパン酸（シスおよびトランス異性体の混合物）の調製
２Ｌの丸底フラスコに、（２Ｒ）−メチル２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−（４−ヒドロキシシクロヘキシル）プロパノエート（８４ｇ、２７８．７ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＴＨＦ（５００ｍｌ）、水（５００ｍｌ）およびＬｉＯＨ−Ｈ２Ｏ（２３．４ｇ、５５７ｍｍｏｌ、２．０当量）を加えた。溶液を１０℃にて２時間撹拌した。ＴＨＦの大部分を減圧下で除去し、１Ｍの希ＨＣｌ水溶液の添加によって残渣をｐＨ約５に酸性化した。混合物をＤＣＭ（８００ｍｌ）およびＥｔＯＡｃ（５００ｍｌ×２）で抽出した。合わせた有機相を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し、８０ｇの表題化合物を白色の固体として得て、これを精製することなく次のステップにおいて使用した。
【０２２４】
ステップ５
（２Ｒ）−２−アミノ−３−（４−ヒドロキシシクロヘキシル）プロパン酸（シスおよびトランス異性体の混合物）の調製
２Ｌの丸底フラスコに、（２Ｒ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−（４−ヒドロキシシクロヘキシル）プロパン酸（８０．０ｇ、２７８．４０ｍｍｏｌ、１．０当量）、それに続いてＥｔＯＡｃ（５００ｍｌ）を加えた。懸濁液に、１５℃にてＨＣｌのＥｔＯＡｃ溶液（約４Ｍ、５００ｍｌ、２ｍｏｌ、７．１８当量）を加えた。反応混合物を１５℃にて１時間撹拌した。混合物を濾過し、濾過ケークを真空下で乾燥させ、６２ｇの表題化合物を白色の固体として得て、これを次のステップにおいて直接使用した。
【０２２５】
ステップ６
（２Ｒ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−（４−ヒドロキシシクロヘキシル）プロパン酸（シスおよびトランス異性体の混合物）の調製
２Ｌの丸底フラスコに、（２Ｒ）−２−アミノ−３−（４−ヒドロキシシクロヘキシル）プロパン酸（６２．０ｇ、２７７．１１ｍｍｏｌ、１．０当量）、５００ｍｌのＨ２Ｏおよび５００ｍｌのジオキサン、それに続いてＮａ２ＣＯ３（８８．１ｇ、８３１ｍｍｏｌ、３．００当量）を加えた。懸濁液を１５℃にて１０分間撹拌し、次いで、氷水浴中に入れた。氷浴中の反応混合物に、固体Ｆｍｏｃ−ＯＳｕ（９３．５ｇ、２７７ｍｍｏｌ、１．０当量）を少しずつ加えた。３０分後、氷浴を除去し、混合物を９０分間撹拌した。混合物を５００ｍｌの水で希釈し、飽和クエン酸水溶液の添加によってｐＨ４に調整した。混合物をＤＣＭ（８００ｍｌ×２）で抽出した。合わせた有機相を５００ｍｌのブラインで洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。溶液を濾過し、Ｎ−（９−フルオレニルメチルオキシカルボニル）−３−（４−ヒドロキシシクロヘキシル）−Ｄ−アラニンとしてもまた公知の１２０ｇの表題化合物に黄色の油として濃縮した。
【０２２６】
ステップ７
Ｎ−（９−フルオレニルメチルオキシカルボニル）−３−（ｃｉｓ−４−ヒドロキシシクロヘキシル）−Ｄ−アラニンの単離
ステップ６（１２０ｇ）からのＮ−（９−フルオレニルメチルオキシカルボニル）−３−（４−ヒドロキシシクロヘキシル）−Ｄ−アラニンのシスおよびトランス異性体の混合物からの表題化合物の単離は、４０％アセトニトリルから開始し、２７分に亘り６０％アセトニトリルへと増加する、２５０ｍｌ／分の流量を伴う水中のアセトニトリルの溶離液を伴う、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｃ１８、２５０×８０ｍｍ×１０μｍカラムを使用して分取ＨＰＬＣによって達成した。この手順によって、６２ｇの表題化合物を固体として得た。1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.79-7.77 (d, 2H), 7.69-7.59 (m, 2H),
7.44-7.33 (m, 2H), 7.32-7.28 (m, 2H), 4.42-4.30 (m, 2H), 4.24-4.20 (m, 1.9 H),
4.03-3.98 (m, 0.1 H), 3.89-3.86 (m, 1H), 1.78-1.39 (m, 11H); LCMS: MS = 432.0
(M+Na).ＨＰＬＣ保持時間＝４．３１分。カラム：Ｕｌｔｉｍａｔｅ  ＸＢ−Ｃ１８、３μｍ、３．０×５０ｍｍ。移動相：１分で水（０．１％ＴＦＡ）中の１．０％ＭｅＣＮから水（０．１％ＴＦＡ）中の５％ＭｅＣＮへ；次いで、５分で１００％ＭｅＣＮへの勾配；１００％ＭｅＣＮで２分間保持；８．０１分において水（０．１％ＴＦＡ）中の１．０％ＭｅＣＮへと戻し、２分間保持。流量：１．２ｍｌ／分。
【０２２７】
調製２
Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−２−オキソエチル）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−フェニルアラニン
【０２２８】
【化１４】
2019532021.tif 000016
ステップ１
（Ｓ）−ベンジル２−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシ−２−オキソエチルアミノ）−３−フェニルプロパノエートの調製
３Ｌの丸底フラスコに、Ｌ−フェニルアラニネートベンジル塩酸塩（２００．０ｇ、６０９．３ｍｍｏｌ、１．００当量）、ＤＭＦ（２．０Ｌ）、およびＫ２ＣＯ３（１６８．０ｇ、１２２０ｍｍｏｌ、２．００当量）を加えた。スラリーを２０℃にて３０分間撹拌した。反応混合物に、未希釈のｔｅｒｔ−ブチル２−ブロモアセテート（１３１．０ｇ、６７０ｍｍｏｌ、１．１０当量）を滴下で添加した。添加の後、混合物を５０℃に加熱し、４時間撹拌した。反応物を２０℃に冷却し、ＥｔＯＡｃ（４．０Ｌ）で希釈し、次いで、このように得られた混合物を水（６．０Ｌ×３）で洗浄し、有機層をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し、オフホワイト色の固体を得た。この固体を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：１００／０〜０／１００の石油エーテル／酢酸エチル）によって精製し、オフホワイト色の固体を得た。この固体に、ＰＥ（１．５Ｌ）を加え、このように得られた白色の懸濁液を室温にて１時間激しく撹拌し、次いで、濾過した。濾液を減圧下で濃縮し、１１４ｇの表題化合物を黄色の油として得た。ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ３９１．９（Ｍ＋Ｎａ＋）。ＨＰＬＣ保持時間：４．０３分。カラム：Ｕｌｔｉｍａｔｅ  ＸＢ−Ｃ１８、３μｍ、３．０×５０ｍｍ。移動相：１分で水（０．１％ＴＦＡ）中の１．０％ＭｅＣＮから水（０．１％ＴＦＡ）中の５％ＭｅＣＮへ；次いで、５分で１００％ＭｅＣＮへの勾配；１００％ＭｅＣＮで２分間保持；８．０１分において水（０．１％ＴＦＡ）中の１．０％ＭｅＣＮへと戻し、２分間保持。流量：１．２ｍｌ／分。
【０２２９】
ステップ２
（Ｓ）−ベンジル２−（（２−ｔｅｒｔ−ブトキシ−２−オキソエチル）（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−フェニルプロパノエートの調製
１Ｌの丸底フラスコに、（Ｓ）−ベンジル２−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシ−２−オキソエチルアミノ）−３−フェニルプロパノエート（２０．０ｇ、５４．１ｍｍｏｌ、１．００当量）および（Ｂｏｃ）２Ｏ（１１８ｇ、５４１ｍｍｏｌ、１０．０当量）を加え、このように得られた混合物を７０℃に加熱した。反応物に、固体ＤＭＡＰ（１９．８ｇ、１６２ｍｍｏｌ、３．００当量）を注意深く加えた。反応物を７０℃にて１０分間撹拌した。さらなる（Ｂｏｃ）２Ｏ（１７７ｇ、８０９ｍｍｏｌ、１５．０当量）を２時間の期間に亘り少しずつ加えた。このように得られた粗混合物を、同じ方法によって調製した粗（Ｓ）−ベンジル２−（（２−ｔｅｒｔ−ブトキシ−２−オキソエチル）（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−フェニルプロパノエートの第２のバッチと合わせた。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液、１００／０〜１００／５の石油エーテル／酢酸エチル）による合わせたバッチの精製によって、１５．５ｇの表題化合物を油として得た。ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ４９２．３（Ｍ＋Ｎａ＋）。ＨＰＬＣ保持時間＝５．８３分。カラム：Ｕｌｔｉｍａｔｅ  ＸＢ−Ｃ１８、３μｍ、３．０×５０ｍｍ。移動相：１分で水（０．１％ＴＦＡ）中の１．０％ＭｅＣＮから水（０．１％ＴＦＡ）中の５％ＭｅＣＮへ；次いで、５分で１００％ＭｅＣＮへの勾配；１００％ＭｅＣＮで２分間保持；８．０１分において水（０．１％ＴＦＡ）中の１．０％ＭｅＣＮへと戻し、２分間保持。流量：１．２ｍｌ／分。光学回転：−６９．２４８、ＭｅＯＨ中、ｃ＝０．１３３ｇ／ｍｌ。
【０２３０】
ステップ３
Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−２−オキソエチル）−Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−フェニルアラニンの調製
（Ｓ）−ベンジル２−（（２−ｔｅｒｔ−ブトキシ−２−オキソエチル）（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−フェニルプロパノエート（１７．８ｇ、３７．９ｍｍｏｌ、１．００当量）を、ＴＨＦ（１５０ｍｌ）およびＭｅＯＨ（１５０ｍｌ）の溶媒混合物に加えた。反応物に、乾燥Ｐｄ／Ｃ（２．０２ｇ、１０重量％、１．９０ｍｍｏｌ、０．０５当量）を加えた。このように得られた懸濁液を真空下で排出させ、Ｈ２（３×）を再充填し、次いで、５０Ｐｓｉの水素圧力下で２０℃にて１２時間撹拌した。反応混合物を濾過し、濾液を減圧下で濃縮し、１２．７ｇの表題化合物を固体として得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ7.34-7.24 (m, 3H), 7.16-7.11 (m, 2H),
4.19-4.14 (d, 0.75H), 3.86-3.81 (m, 0.5H), 3.68-3.64 (m, 0.73H), 3.39-3.19 (m,
2H), 2.88-2.83 (d, 0.27H), 2.58-2.53 (d, 0.75H), 1.53-1.50 (m, 8H), 1.45-1.43
(m, 10H).ＨＰＬＣ保持時間＝４．８７分。カラム：Ｕｌｔｉｍａｔｅ  ＸＢ−Ｃ１８、３μｍ、３．０×５０ｍｍ。移動相：１分で水（０．１％ＴＦＡ）中の１．０％ＭｅＣＮから水（０．１％ＴＦＡ）中の５％ＭｅＣＮへ；次いで、５分で１００％ＭｅＣＮへの勾配；１００％ＭｅＣＮで２分間保持；８．０１分において水（０．１％ＴＦＡ）中の１．０％ＭｅＣＮへと戻し、２分間保持。流量：１．２ｍｌ／分。ＳＦＣキラルカラム保持時間＝２．２１分。カラム：Ｃｈｉｒａｌｃｅｌ  ＯＤ−３、１５０×４．６ｍｍ  Ｉ．Ｄ．、３ｕｍ；移動相：Ａ：超臨界ＣＯ２；Ｂ：エタノール（０．０５％ＤＥＡ）；勾配：５分で５％〜４０％のＢ、２．５分間４０％で保持、次いで、２．５分間５％のＢ；流量：２．５ｍｌ／分；カラム温度：３５℃。
【０２３１】
調製３
（Ｓ）−２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−３−（４−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）プロパン酸
【０２３２】
【化１５】
2019532021.tif 000017
ステップ１
（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−（４−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）プロパン酸の調製
５０ｍｌの丸底フラスコに、（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル２−オキソオキセタン−３−イルカルバメート（１８７０ｍｇ、９．９９ｍｍｏｌ、１．０当量）、４−メチル−１Ｈ−ピラゾール（９８４ｍｇ、１２ｍｍｏｌ、１．２当量）およびＭｅＣＮ（３０ｍｌ）を加えた。このように得られた溶液を５０℃に１６時間加熱した。混合物を減圧下で淡黄色の残渣へと濃縮した。残渣を熱いＭｅＯＨ（５ｍｌ）に溶解した。反応物を冷却した後、白色の固体が溶液から沈殿した。このように得られた母液に、水（１ｍｌ×３）を加え、さらなる固体を沈殿させた。全ての固体を合わせ、１．８ｇの表題化合物を得て、これを精製することなく次のステップにおいて使用した。
【０２３３】
ステップ２
（Ｓ）−２−アミノ−３−（４−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）プロパン酸塩酸塩の調製
（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−（４−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）プロパン酸（１．８ｇ、６．５７ｍｍｏｌ、１．０当量）および１，４−ジオキサン（３０．０ｍｌ）の混合物に、ＨＣｌの１，４−ジオキサン（１０．０ｍｌ）飽和溶液を加えた。混合物を２５℃にて１時間撹拌した。混合物を減圧下で濃縮し、１．１ｇの表題化合物を油として得て、これを精製することなく次のステップにおいて使用した。
【０２３４】
ステップ３
（Ｓ）−２−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニルアミノ）−３−（４−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）プロパン酸の調製
（Ｓ）−２−アミノ−３−（４−メチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）プロパン酸塩酸塩（１１００ｍｇ、６．５７ｍｍｏｌ、１．０当量）、ジオキサン（２０ｍｌ）、水（５ｍｌ）およびＮａ２ＣＯ３（１０４０ｍｇ、９．８６ｍｍｏｌ、１．５当量）の混合物を氷浴中で冷却し、未希釈のＦｍｏｃ−Ｏ−Ｓｕ（２２２０ｍｇ、６．５７ｍｍｏｌ、１．０当量）を加えた。反応混合物を２５℃に温め、さらに１時間撹拌した。混合物を水（６０ｍｌ）で希釈し、酢酸の添加によってｐＨ約４に酸性化し、ＤＣＭ（５０ｍｌ×３）で抽出した。合わせたＤＣＭ層を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィーによって精製し、１．５ｇのオフホワイト色の固体を得た。この固体を分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｓｙｎｅｒｇｉ  Ｍａｘ−ＲＰ、２５０＊８０、１０ｕ；移動相：水（０．２％ＦＡ）中の３５％ＭｅＣＮから水（０．２％ＦＡ）中の６５％ＭｅＣＮへ；流量：８０ｍｌ／分；波長：２２０ｎｍ）によってさらに精製し、１．０ｇの表題化合物を白色の固体として得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ7.80-7.78 (d, 2H), 7.62-7.60 (d, 2H),
7.45-7.31 (m, 5H), 6.96 (s, 1H), 5.71-5.70 (d, 1H), 4.74-4.38 (m, 5H),
4.26-4.22 (dd, 1H), 2.0 (s, 1H);
LCMS: m/z 392.2 (M+H+)
【０２３５】
調製４
（２Ｓ，４Ｒ）−１−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−４−（アセチルアミノ）ピロリジン−２−カルボン酸
【０２３６】
【化１６】
2019532021.tif 000018
ステップ１
（２Ｓ，４Ｒ）−１−（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル２−メチル４−アミノピロリジン−１，２−ジカルボキシレート塩酸塩の調製
（２Ｓ，４Ｒ）−１−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）ピロリジン−２−カルボン酸（１．００ｇ、２．２１０ｍｍｏｌ、１．００当量）を、ＭｅＯＨ（４０ｍｌ）に溶解した。反応混合物を氷浴中に入れ、それに続いて未希釈のＳＯＣｌ２（５２６ｍｇ、４．４２ｍｍｏｌ、２．００当量）を滴下で添加した。添加の後、このように得られた反応混合物を７０℃にて１６時間撹拌した。混合物を減圧下で濃縮し、８９０ｍｇの表題化合物を固体として得た。粗材料をさらに精製することなく次のステップに持ち越した。
【０２３７】
ステップ２
（２Ｓ，４Ｒ）−１−（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル２−メチル４−アセトアミドピロリジン−１，２−ジカルボキシレートの調製
粗（２Ｓ，４Ｒ）−１−（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル２−メチル４−アミノピロリジン−１，２−ジカルボキシレート塩酸塩（８９０ｍｇ、２．２１ｍｍｏｌ、１．００当量）のＤＣＭ（８０ｍｌ）溶液に、Ｎａ２ＣＯ３（７０２ｍｇ、６．６３ｍｍｏｌ、３．００当量）を加えた。混合物を５分間撹拌し、次いで、氷浴中に入れた。反応物に、氷浴中で未希釈の塩化アセチル（３４７ｍｇ、４．４２ｍｍｏｌ、２．００当量）を滴下で添加し、混合物を氷浴中で０．５時間撹拌し、次いで、１０℃に温めた。反応混合物を１０℃にて２時間撹拌した。さらなる未希釈の塩化アセチル（２００ｍｇ）を加え、反応混合物を１０℃にてさらに２０時間撹拌した。反応混合物に水（１００ｍｌ）を加え、次いで、混合物を振とうし、分離した。有機相をブライン（１００ｍｌ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し、９００ｍｇの表題化合物を黄色がかった油として得た。粗生成物をそれ以上精製することなく次のステップに持ち越した。
【０２３８】
ステップ３
（２Ｓ，４Ｒ）−１−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−４−（アセチルアミノ）ピロリジン−２−カルボン酸の調製
１００ｍｌの丸底フラスコに、ｉ−ＰｒＯＨ（２１ｍｌ）、水（９ｍｌ）および無水ＣａＣｌ２（２６６０ｍｇ、２４ｍｍｏｌ、１０．９当量）を加えた。反応物を、１０℃にて１０分間撹拌した。第２の１００ｍｌの丸底フラスコに、（２Ｓ，４Ｒ）−１−（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル２−メチル−４−アセトアミドピロリジン−１，２−ジカルボキシレート（９００ｍｇ、２．２０ｍｍｏｌ、１．０当量）、それに続いて、第１の丸底フラスコ中で調製した０．８ＭのＣａＣｌ２のｉ−ＰｒＯＨ／Ｈ２Ｏ（２７ｍｌ）溶液を加えた。次いで、反応混合物に、固体ＮａＯＨ（１２３ｍｇ、３．０８ｍｍｏｌ、１．４当量）を加えた。懸濁液を１０℃にて４６時間撹拌した。飽和クエン酸の添加、それに続く水（５０ｍｌ）およびＤＣＭ（１００ｍｌ）の添加によって混合物をｐＨ約５に調整した。有機相を分離し、ブライン（５０ｍｌ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し、１．２ｇの粗生成物を油として得た。フラッシュクロマトグラフィーによる粗生成物の精製によって、６００ｍｇの表題化合物を油として得た。1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ8.37-8.35 (d, 0.6H), 7.82-7.79 (m, 2H),
7.65-7.61 (m, 2H), 7.42-7.38 (m, 2H), 7.34-7.30 (m, 2H), 4.48-4.17 (m, 5H),
3.78-3.73 (m, 1H), 3.42-3.37 (m, 1H), 2.32-2.23 (m, 2H), 1.95-1.94 (d, 3H).ＨＰＬＣ保持時間＝３．９５分。カラム：Ｕｌｔｉｍａｔｅ  ＸＢ−Ｃ１８、３μＭ、３．０＊５０ｍｍ。移動相：１分で水（０．１％ＴＦＡ）中の１．０％ＭｅＣＮから水（０．１％ＴＦＡ）中の５％ＭｅＣＮへ；次いで、５分で水（０．１％ＴＦＡ）中の５％ＭｅＣＮから１００％ＭｅＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ；１００％ＭｅＣＮ（０．１％ＴＦＡ）で２分間保持；８．０１分において水（０．１％ＴＦＡ）中の１．０％ＭｅＣＮへと戻し、２分間保持。流量：１．２ｍｌ／分。
ＳＦＣキラルカラム保持時間＝３．９８分。カラム：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＳ−３、１５０×４．６ｍｍ  Ｉ．Ｄ．、３ｕｍ；移動相：Ａ：ＣＯ２、Ｂ：エタノール（０．０５％ＤＥＡ）；勾配：５．５分で５％〜４０％のＢ、３分間４０％で保持、次いで、１．５分間５％のＢ；流量：２．５ｍｌ／分；カラム温度：４０℃。
【０２３９】
調製５
（２Ｓ，４Ｓ）−１−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−４−（アセチルアミノ）ピロリジン−２−カルボン酸
【０２４０】
【化１７】
2019532021.tif 000019
ステップ１
（２Ｓ，４Ｓ）−１−（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル２−メチル４−アミノピロリジン−１，２−ジカルボキシレート塩酸塩の調製
（２Ｓ，４Ｓ）−１−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）ピロリジン−２−カルボン酸（２．００ｇ、４．４２０ｍｍｏｌ、１．００当量）をＭｅＯＨ（６０ｍｌ）に溶解し、反応混合物を氷浴中に入れた。これに続いて未希釈のＳＯＣｌ２（１．０５ｇ、８．８４ｍｍｏｌ、２．００当量）を滴下で添加した。添加の後、混合物を７０℃にて１時間撹拌した。反応混合物を２０℃に冷却し、減圧下で濃縮し、１．７ｇの表題化合物を固体として得て、これを精製することなく次のステップにおいて使用した。
【０２４１】
ステップ２
（２Ｓ，４Ｓ）−１−（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル２−メチル４−アセトアミドピロリジン−１，２−ジカルボキシレートの調製
（２Ｓ，４Ｓ）−１−（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル２−メチル４−アミノピロリジン−１，２−ジカルボキシレート塩酸塩（１０００ｍｇ、２．４８ｍｍｏｌ、１．００当量）のＤＣＭ（８０ｍｌ）溶液に、Ｎａ２ＣＯ３（７８９ｍｇ、７．４５ｍｍｏｌ、３．００当量）を加えた。反応混合物を氷浴中に入れ、未希釈の塩化アセチル（３９０ｍｇ、４．９６ｍｍｏｌ、２．００当量）を加える前に５分間撹拌した。添加の後、混合物を氷浴中で０．５時間撹拌した。次いで、反応物を１０℃に温め、１７時間撹拌した。反応物に、水（１００ｍｌ）を加えた。有機相を分離し、ブライン（１００ｍｌ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮し、１．０ｇの表題化合物を得て、これを精製することなく次のステップにおいて使用した。
【０２４２】
ステップ３
（２Ｓ，４Ｓ）−１−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−４−（アセチルアミノ）ピロリジン−２−カルボン酸の調製
第１の１００ｍｌの丸底フラスコに、ｉ−ＰｒＯＨ（２１ｍｌ）、水（９ｍｌ）および無水ＣａＣｌ２（２６６０ｍｇ、２４ｍｍｏｌ、１０．９当量）を加え、混合物を１０℃にて１０分間撹拌した。第２の１００ｍｌの丸底フラスコに、（２Ｓ，４Ｓ）−１−（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル２−メチル４−アセトアミドピロリジン−１，２−ジカルボキシレート（１０１０ｍｇ、２．４７ｍｍｏｌ、１．０当量）、それに続いて第１の丸底フラスコ中で調製したｉ−ＰｒＯＨ／Ｈ２Ｏ（２７ｍｌ）溶液中の０．８ＭのＣａＣｌ２を加えた。次いで、反応混合物に、固体ＮａＯＨ（１３８ｍｇ、３．４６ｍｍｏｌ、１．４当量）を加え、懸濁液を１０℃にて２２時間撹拌した。飽和クエン酸水溶液の添加によって混合物をｐＨ約５に調整し、次いで、ｉＰｒＯＨの大部分を減圧下除去した。水性残渣に、水（５０ｍｌ）およびＤＣＭ（１００ｍｌ）を加えた。有機相を分離し、ブライン（５０ｍｌ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下で粗油へと濃縮した。フラッシュクロマトグラフィーによる粗油の精製によって、３８０ｍｇの表題化合物を固体として得た。1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ7.81-7.78 (dd, 2H), 7.65-7.60 (m, 2H),
7.41-7.37 (m, 2H), 7.34-7.29 (m, 2H), 4.41-4.16 (m, 5H), 3.87-3.75 (m, 1H),
3.35-3.26 (m, 1H), 2.67-2.54 (m, 1H), 2.07-1.92 (m, 4H).ＨＰＬＣ保持時間＝４．０１分。カラム：Ｕｌｔｉｍａｔｅ  ＸＢ−Ｃ１８、３μＭ、３．０＊５０ｍｍ。移動相：１分で水（０．１％ＴＦＡ）中の１．０％ＭｅＣＮから水（０．１％ＴＦＡ）中の５％ＭｅＣＮへ；次いで、５分で水（０．１％ＴＦＡ）中の５％ＭｅＣＮから１００％ＭｅＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ；１００％ＭｅＣＮ（０．１％ＴＦＡ）で２分間保持；８．０１分において水（０．１％ＴＦＡ）中の１．０％ＭｅＣＮへと戻し、２分間保持。流量：１．２ｍｌ／分。ＳＦＣキラルカラム保持時間＝３．０４分。カラム：Ｃｈｉｒａｌｃｅｌ  ＯＪ−Ｈ、１５０×４．６ｍｍ  Ｉ．Ｄ．、５μｍ；移動相：Ａ：超臨界ＣＯ２；Ｂ：エタノール（０．０５％ＤＥＡ）；勾配：５．５分で５％〜４０％のＢ、３分間４０％で保持、次いで、１．５分間５％のＢ。流量：２．５ｍｌ／分；カラム温度：４０℃。
【０２４３】
調製６
（２Ｓ，４Ｓ）−１−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−４−（（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−２−オキソエチル）（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ピロリジン−２−カルボン酸
【０２４４】
【化１８】
2019532021.tif 000020
ステップ１
（２Ｓ，４Ｓ）−１−（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル２−メチル４−アミノピロリジン−１，２−ジカルボキシレート塩酸塩の調製
氷浴中のＭｅＯＨ（１５ｍｌ）中の（２Ｓ，４Ｓ）−１−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）ピロリジン−２−カルボン酸（５００ｍｇ、１．１０ｍｍｏｌ、１．００当量）の撹拌した反応混合物に、未希釈のＳＯＣｌ２（２６３ｍｇ、２．２１ｍｍｏｌ、２．００当量）を滴下で添加した。添加の後、混合物を７０℃にて１．５時間撹拌した。反応混合物を２０℃に冷却し、減圧下で濃縮し、４４５ｍｇの表題化合物を固体として得て、これを精製することなく次のステップにおいて使用した。
【０２４５】
ステップ２
（２Ｓ，４Ｓ）−１−（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル２−メチル４−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシ−２−オキソエチルアミノ）ピロリジン−１，２−ジカルボキシレートの調製
撹拌した（２Ｓ，４Ｓ）−１−（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル２−メチル４−アミノピロリジン−１，２−ジカルボキシレート塩酸塩（２９５ｍｇ、０．７３ｍｍｏｌ、１．００当量）のＤＭＦ（２０ｍｌ）溶液に、Ｎａ２ＣＯ３（２３３ｍｇ、２．２０ｍｍｏｌ、３．００当量）を加え、反応物を１０℃にて５分間撹拌した。ｔｅｒｔ−ブチルブロモアセテート（１４３ｍｇ、０．７３２ｍｍｏｌ、１．００当量）のＤＭＦ（４ｍｌ）溶液を滴下で添加した。添加の後、混合物を１０℃にて２時間撹拌した。反応物に、さらなるｔｅｒｔ−ブチルブロモアセテート（１４３ｍｇ、０．７３２ｍｍｏｌ、１．００当量）を加え、混合物を１０℃にてさらに１７時間撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（１２０ｍｌ）で希釈し、それに続いて水（１００ｍｌ×２）およびブライン（１００ｍｌ）で洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し、４５０ｍｇの油を得た。油を、第２のバッチ（５４ｍｇ）の油（上記の様式で調製）と合わせた。合わせたバッチをフラッシュクロマトグラフィーによって精製し、２４０ｍｇの表題化合物を油として得た。ＨＰＬＣ保持時間＝４．１６分。カラム：Ｕｌｔｉｍａｔｅ  ＸＢ−Ｃ１８、３μｍ、３．０×５０ｍｍ。移動相：１分で水（０．１％ＴＦＡ）中の１．０％ＭｅＣＮから水（０．１％ＴＦＡ）中の５％ＡＣＮへ；次いで、５分で水（０．１％ＴＦＡ）中の５％ＭｅＣＮから１００％ＭｅＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ；１００％ＭｅＣＮ（０．１％ＴＦＡ）で２分間保持；８．０１分において水（０．１％ＴＦＡ）中の１．０％ＭｅＣＮへと戻し、２分間保持。流量：１．２ｍｌ／分。ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ４８１．１（Ｍ＋Ｈ＋）
【０２４６】
ステップ３
（２Ｓ，４Ｓ）−１−（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル−２−メチル−４−（（２−ｔｅｒｔ−ブトキシ−２−オキソエチル）（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ピロリジン−１，２−ジカルボキシレートの調製
（２Ｓ，４Ｓ）−１−（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル−２−メチル−４−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシ−２−オキソエチルアミノ）ピロリジン−１，２−ジカルボキシレート（２４０ｍｇ、０．４９９ｍｍｏｌ、１．００当量）およびＮａ２ＣＯ３（１５９ｍｇ、１．５０ｍｍｏｌ、３．００当量）のジオキサン（１０ｍｌ）および水（１０ｍｌ）溶液を、１０℃にて１０分間撹拌し、次いで、氷水浴中に入れた。氷水浴中の反応物に、未希釈の（Ｂｏｃ）２Ｏ（４３６ｍｇ、２．００ｍｍｏｌ、４．００当量）を加えた。このように得られた混合物を氷浴中で約３０分間撹拌し、次いで、氷水浴を除去した。反応物を氷浴中で１０℃にて１８分間撹拌した。反応物に、ＥｔＯＡｃ（８０ｍｌ）および水（８０ｍｌ）を加えた。有機相を分離し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し、４８０ｍｇの表題化合物を油として得て、これを精製することなく次のステップにおいて使用した。
【０２４７】
ステップ４
（２Ｓ，４Ｓ）−１−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−４−（（２−ｔｅｒｔ−ブトキシ−２−オキソエチル）（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ピロリジン−２−カルボン酸の調製
第１の１００ｍｌの丸底フラスコに、ｉ−ＰｒＯＨ（７ｍｌ）、水（３ｍｌ）および無水ＣａＣｌ２（８８８ｍｇ、８ｍｍｏｌ、９．６８当量）を加えた。反応混合物を１０℃にて１０分間撹拌した。別の１００ｍｌの丸底フラスコに、（２Ｓ，４Ｓ）−１−（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル−２−メチル−４−（（２−ｔｅｒｔ−ブトキシ−２−オキソエチル）（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ピロリジン−１，２−ジカルボキシレート（４８０ｍｇ、０．８３ｍｍｏｌ、１．０当量）、それに続いて第１の丸底フラスコ中で調製したｉ−ＰｒＯＨ／水中の約０．８ＭのＣａＣｌ２の水性混合物（５ｍｌ）、次いで、ＮａＯＨ（４６．３ｍｇ、１．１６ｍｍｏｌ、１．４当量）を加えた。このように得られた反応混合物を１０℃にて１７時間撹拌した。反応混合物にさらなるＮａＯＨ（５０ｍｇ）を加え、混合物を１０℃にてさらに１５時間撹拌した。飽和クエン酸水溶液の添加、それに続く水（３０ｍｌ）の添加によって、反応混合物をｐＨ約４に調整した。反応物をＥｔＯＡｃ（３０ｍｌ×２）で抽出し、合わせた有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮し、２００ｍｇの黄色の油を得た。フラッシュクロマトグラフィーによる粗油の精製によって、２００ｍｇの固体を得た。分取ＨＰＬＣ（カラム：Ａｇｅｌａ  Ｄｕｒａｓｈｅｌｌ  Ｃ１８、１５０×２５ｍｍ、５μｍ；溶離液：水中の６０％アセトニトリル；勾配：１１分に亘り水中の６０〜８０％アセトニトリル；流量：３５ｍｌ／分）によるこの固体のさらなる精製によって、７５ｍｇの表題化合物を固体として得た。ＨＰＬＣ保持時間＝５．１８分。カラム：Ｕｌｔｉｍａｔｅ  ＸＢ−Ｃ１８、３μｍ、３．０×５０ｍｍ。移動相：１分で水（０．１％ＴＦＡ）中の１．０％ＭｅＣＮから水（０．１％ＴＦＡ）中の５％ＭｅＣＮへ；次いで、５分で水（０．１％ＴＦＡ）中の５％ＭｅＣＮから１００％ＭｅＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ；１００％ＭｅＣＮ（０．１％ＴＦＡ）で２分間保持；８．０１分において水（０．１％ＴＦＡ）中の１．０％ＭｅＣＮへと戻し、２分間保持。流量：１．２ｍｌ／分。ＳＦＣキラルカラム保持時間＝３．７６分。カラム：Ｃｈｉｒａｌｃｅｌ  ＯＤ−３、１００×４．６ｍｍ  Ｉ．Ｄ．、３ｕｍ；移動相：Ａ：超臨界ＣＯ２；Ｂ：エタノール（０．０５％ＤＥＡ）；勾配：４．５分で５％〜４０％のＢ、２．５分間４０％で保持、次いで、１分間５％のＢ。流量：２．８ｍｌ／分；カラム温度：４０℃。
【０２４８】
調製７
（２Ｓ，４Ｒ）−１−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−４−（（２−ｔｅｒｔ−ブトキシ−２−オキソエチル）（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ピロリジン−２−カルボン酸
【０２４９】
【化１９】
2019532021.tif 000021
ステップ１
（２Ｓ，４Ｒ）−１−（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル２−メチル４−アミノピロリジン−１，２−ジカルボキシレート塩酸塩の調製
（２Ｓ，４Ｒ）−１−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）ピロリジン−２−カルボン酸（５００ｍｇ、１．１０ｍｍｏｌ、１．００当量）をＭｅＯＨ（２０ｍｌ）に溶解し、氷水浴中に入れた。反応混合物に、未希釈のＳＯＣｌ２（２６３ｍｇ、２．２１ｍｍｏｌ、２．００当量）を滴下で添加し、混合物を７０℃にて１．５時間撹拌した。反応物を３０℃に冷却し、減圧下で濃縮し、４４５ｍｇの表題化合物を固体として得て、これを精製することなく次のステップにおいて使用した。
【０２５０】
ステップ２
（２Ｓ，４Ｒ）−１−（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル２−メチル４−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシ−２−オキソエチルアミノ）ピロリジン−１，２−ジカルボキシレートの調製
（２Ｓ，４Ｒ）−１−（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル２−メチル４−アミノピロリジン−１，２−ジカルボキシレート塩酸塩（４４５ｍｇ、１．１０ｍｍｏｌ、１．００当量）のＤＭＦ（３０ｍｌ）溶液に、Ｎａ２ＣＯ３（３５１ｍｇ、３．３１ｍｍｏｌ、３．００当量）を加えた。懸濁液を１０℃にて５分間撹拌した。ｔｅｒｔ−ブチルブロモアセテート（２１５ｍｇ、１．１０ｍｍｏｌ、１．００当量）のＤＭＦ（４ｍｌ）溶液を滴下で添加した。添加の後、混合物を１０℃にて５時間撹拌した。さらなる未希釈のｔｅｒｔ−ブチルブロモアセテート（２１５ｍｇ、１．１０ｍｍｏｌ、１．００当量）を加え、混合物を１０℃にてさらに１７時間撹拌した。混合物をＥｔＯＡｃ（１８０ｍｌ）で希釈し、水（１８０ｍｌ×２）およびブライン（１００ｍｌ）で洗浄した。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し、無色の油を得た。油をフラッシュクロマトグラフィーによって精製し、３０５ｍｇの表題化合物を油として得た。
【０２５１】
ステップ３
（２Ｓ，４Ｒ）−１−（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル−２−メチル−４−（（２−ｔｅｒｔ−ブトキシ−２−オキソエチル）（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ピロリジン−１，２−ジカルボキシレートの調製
（２Ｓ，４Ｒ）−１−（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル−２−メチル−４−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシ−２−オキソエチルアミノ）ピロリジン−１，２−ジカルボキシレート（３０５ｍｇ、０．６３５ｍｍｏｌ、１．００当量）およびＮａ２ＣＯ３（２０２ｍｇ、１．９０ｍｍｏｌ、３．００当量）を、ジオキサン（１５ｍｌ）および水（１５ｍｌ）の混合物に溶解した。混合物を１０℃にて１０分間撹拌し、次いで、氷水浴中に入れた。氷水浴中の反応物に、未希釈の（Ｂｏｃ）２Ｏ（５５４ｍｇ、２．５４ｍｍｏｌ、４．００当量）を加えた。このように得られた混合物を氷水浴中で３０分間撹拌し、次いで、氷水浴を除去した。混合物を１０℃に温め、１８時間撹拌した。反応混合物に、ＥｔＯＡｃ（１００ｍｌ）およびＨ２Ｏ（１００ｍｌ）を加えた。有機相を分離し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し、７３０ｍｇの表題化合物を油として得て、これを精製することなく次のステップにおいて使用した。
【０２５２】
ステップ４
（２Ｓ，４Ｒ）−４−（（２−ｔｅｒｔ−ブトキシ−２−オキソエチル）（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ピロリジン−２−カルボン酸の調製
１００ｍｌの丸底フラスコに、ｉ−ＰｒＯＨ（１４ｍｌ）、水（６ｍｌ）および無水ＣａＣｌ２（１７８０ｍｇ、１６ｍｍｏｌ）を加えた。反応物を１０℃にて１０分間撹拌した。第２の１００ｍｌの丸底フラスコに、（２Ｓ，４Ｒ）−１−（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メチル−２−メチル−４−（（２−ｔｅｒｔ−ブトキシ−２−オキソエチル）（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ピロリジン−１，２−ジカルボキシレート（７３０ｍｇ、１．２６ｍｍｏｌ、１．０当量）、それに続いて第１の丸底フラスコからのｉ−ＰｒＯＨ／水中の１０ｍｌの約０．８ＭのＣａＣｌ２溶液、次いで、固体ＮａＯＨ（７０．４ｍｇ、１．７６ｍｍｏｌ、１．４当量）を加えた。反応混合物を１０℃にて４１時間撹拌した。反応混合物にさらなるＮａＯＨ（８０ｍｇ）を加え、混合物をさらに７２時間撹拌した。反応混合物を５０℃に加熱し、その温度にて２４時間撹拌した。反応物に、さらなるＮａＯＨ（１００ｍｇ）を加え、混合物を５０℃にてさらに６時間撹拌した。飽和クエン酸水溶液の添加、それに続く水（１０ｍｌ）の添加によって反応混合物をｐＨ約４に調整した。混合物をＥｔＯＡｃ（３０ｍｌ×２）で抽出し、合わせた有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し、１５０ｍｇの表題化合物を油として得て、これを精製することなく次のステップにおいて使用した。
【０２５３】
ステップ５
（２Ｓ，４Ｒ）−１−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−４−（（２−ｔｅｒｔ−ブトキシ−２−オキソエチル）（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ピロリジン−２−カルボン酸の調製
（２Ｓ，４Ｒ）−４−（（２−ｔｅｒｔ−ブトキシ−２−オキソエチル）（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）ピロリジン−２−カルボン酸（１５０ｍｇ、０．４３６ｍｍｏｌ、１．００当量）およびＮａ２ＣＯ３（２００ｍｇ、１．８９ｍｍｏｌ、４．３３当量）のジオキサン（２０ｍｌ）懸濁液を、１０℃にて１０分間撹拌し、次いで、氷水浴中に入れた。氷水浴中の反応物に、未希釈のＦｍｏｃ−ＯＳｕ（２５０ｍｇ、０．７４１ｍｍｏｌ、１．７０当量）を少しずつ加えた。このように得られた混合物を氷水浴中で３０分間撹拌し、次いで、氷水浴を除去した。混合物を１０℃に温め、１７時間撹拌した。飽和クエン酸水溶液を加え、それに続いてＥｔＯＡｃ（５０ｍｌ）および水（５０ｍｌ）を加えることによって、混合物をｐＨ約４に調整した。有機相を分離し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し、４５０ｍｇの油を得た。分取ＨＰＬＣ（カラム：Ａｇｅｌａ  Ｄｕｒａｓｈｅｌｌ  Ｃ１８、１５０×２５ｍｍ、５μｍ；溶離液：水中の５０％アセトニトリル；勾配：１２分に亘り水中の５０〜８０％アセトニトリル；流量：２５ｍｌ／分）による油の精製によって、１４０ｍｇの表題化合物を固体として得た。ＬＣＭＳ：ＭＳ＝５８９．１（Ｍ＋Ｎａ）。ＨＰＬＣ保持時間＝５．４１分。カラム：Ｕｌｔｉｍａｔｅ  ＸＢ−Ｃ１８、３μｍ、３．０×５０ｍｍ。移動相：１分で水（０．１％ＴＦＡ）中の１．０％ＭｅＣＮから水（０．１％ＴＦＡ）中の５％ＭｅＣＮへ；次いで、５分で水（０．１％ＴＦＡ）中の５％ＭｅＣＮから１００％ＭｅＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ；１００％ＭｅＣＮ（０．１％ＴＦＡ）で２分間保持；８．０１分において水（０．１％ＴＦＡ）中の１．０％ＭｅＣＮへと戻し、２分間保持。流量：１．２ｍｌ／分。ＳＦＣキラルカラム保持時間＝３．４８分。カラム：Ｃｈｉｒａｌｃｅｌ  ＯＤ−３、１００×４．６ｍｍ  Ｉ．Ｄ．、３μｍ；移動相：Ａ：超臨界ＣＯ２；Ｂ：エタノール（０．０５％ＤＥＡ）；勾配：４．５分で５％〜４０％のＢ、２．５分間４０％で保持、次いで、１分間５％のＢ。流量：２．８ｍｌ／分；カラム温度：４０℃。
【０２５４】
調製８
（Ｓ）−２−（（２−（ｔｅｒｔ−ブトキシ）−２−オキソエチル）（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−（３，５−ジブロモフェニル）プロパン酸
【０２５５】
【化２０】
2019532021.tif 000022
ステップ１
メチル２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−（３，５−ジブロモフェニル）アクリレートの調製
５，５−ジブロモベンズアルデヒド（１５．０ｇ、５６．８３７ｍｍｏｌ、１．０当量）をＤＣＭ（５０ｍｌ）に溶解し、反応物を真空によって脱気し、Ｎ２でパージした。混合物に、ＤＢＵ（１０．４ｇ、６８．２ｍｍｏｌ、１．２当量）をゆっくりと加え、反応物を氷水浴中に入れた。第２のフラスコ中で、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−２−ホスホノグリシントリメチルエステル（１６．９ｇ、５６．８ｍｍｏｌ、１．０当量）をＤＣＭ（５０ｍｌ）に溶解し、この混合物を、氷水浴中でシリンジを介して１時間の期間に亘り反応混合物に滴下で添加した。添加の後、混合物を氷水浴中で３０分間撹拌した。氷水浴を除去し、混合物を撹拌しながら１６時間約２０℃に温めた。反応混合物を水（５００ｍｌ）で希釈し、クエン酸（２０重量％）を加えてｐＨ約４に酸性化した。有機層を分離し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し、３０ｇの固体を得た。フラッシュクロマトグラフィーによるこの固体材料の精製によって、７．６ｇの表題化合物を固体として得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ7.58-7.55 (m, 3H), 7.10 (s, 1H), 6.50 (br,
s, 1H), 3.87 (s, 3H), 1.42 (br, s, 9H).ＨＰＬＣ保持時間＝５．２３分。カラム：Ｕｌｔｉｍａｔｅ  ＸＢ−Ｃ１８、３μｍ、３．０×５０ｍｍ。移動相：１分で水（０．１％ＴＦＡ）中の１．０％ＭｅＣＮから水（０．１％ＴＦＡ）中の５％ＭｅＣＮへ；次いで、５分で水（０．１％ＴＦＡ）中の５％ＭｅＣＮから１００％ＭｅＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ；１００％ＭｅＣＮ（０．１％ＴＦＡ）で２分間保持；８．０１分において水（０．１％ＴＦＡ）中の１．０％ＭｅＣＮへと戻し、２分間保持。流量：１．２ｍｌ／分。ＬＣＭＳ：ＭＳ＝４５７．９（Ｍ＋Ｎａ）
【０２５６】
ステップ２
（Ｓ）−メチル２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−（３，５−ジブロモフェニル）プロパノエートの調製
２５０ｍｌのＰａｒｒボトルに、メチル２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−（３，５−ジブロモフェニル）アクリレート（６．０ｇ、１３．７９ｍｍｏｌ、１．０当量）および（−）−１，２−ビス［（２Ｒ，５Ｒ）−２，５−ジエチルホスホラノ］ベンゼン（１，５−シクロオクタジエン）ロジウム（Ｉ）トリフルオロメタンスルホネート（１００ｍｇ）、それに続いてＭｅＯＨ（１００ｍｌ）を加えた。反応混合物を１０回、真空によって脱気し、Ｎ２でパージした。次いで、反応物をＨ２ガスで再び充填し、真空によって脱気し、Ｈ２ガスで３回パージおよび再充填した。次いで、反応物にＨ２ガスを５０ｐｓｉの圧力まで充填し、撹拌しながら５０℃まで２４時間加熱した。室温に冷却した後に、反応混合物を濾過し、濃縮し、６．０ｇの表題化合物を油として得て、これをそれ以上精製することなく次のステップに持ち越した。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ7.56-7.55 (t, 3H), 7.22 (bs, 2H), 5.05-5.03
(d, 1H), 4.55-4.53 (dd, 1H), 3.74 (s, 3H), 3.13-3.08 (m, 1H), 2.99-2.94 (m,
1H), 1.44 (s, 9H).
【０２５７】
ステップ３
（Ｓ）−メチル２−アミノ−３−（３，５−ジブロモフェニル）プロパノエート塩酸塩の調製
（Ｓ）−メチル２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−（３，５−ジブロモフェニル）プロパノエート（４．７３ｇ、１０．８ｍｍｏｌ、１．０当量）をＥｔＯＡｃ（２０ｍｌ）に溶解し、２５ｍｌのＨＣｌのＥｔＯＡｃ溶液（４Ｍ）を加えた。このように得られた溶液を１５℃にて３時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、４．０ｇの表題化合物を固体として得て、これを次のステップにおいて精製せずに使用した。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ8.68 (bs, 3H), 7.77-7.76 (t, 1H), 7.55-7.54
(d, 2H), 4.39-4.36 (t, 1H), 3.71 (s, 3H), 3.17-3.15 (d, 2H)
【０２５８】
ステップ４
（Ｓ）−メチル２−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシ−２−オキソエチルアミノ）−３−（３，５−ジブロモフェニル）プロパノエートの調製
（Ｓ）−メチル２−アミノ−３−（３，５−ジブロモフェニル）プロパノエート塩酸塩（４．０ｇ、１１．０ｍｍｏｌ、１．０当量）をＤＭＦ（６０ｍｌ）に溶解し、ＤＩＰＥＡ（８．７６ｍｌ、４２．８ｍｍｏｌ、４．０当量）を加え、それに続いて未希釈のｔｅｒｔ−ブチルブロモアセテート（２．５１ｇ、１２．９ｍｍｏｌ、１．２当量）を滴下で添加した。このように得られた溶液を１５℃にて１６時間撹拌した。さらなるｔｅｒｔ−ブチルブロモアセテート（２．０９ｇ、１０．７ｍｍｏｌ、１．０当量）を、反応混合物に滴下で添加した。このように得られた溶液を１５℃にてさらに２４時間撹拌した。混合物に水（１５０ｍｌ）を加え、溶液をＥｔＯＡｃ（１００ｍｌ×３）で抽出した。合わせた有機層をブライン（２００ｍｌ×２）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。フラッシュクロマトグラフィーによるこのように得られた粗残渣の精製によって、４．０ｇの表題化合物を油として得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ7.54-7.53 (t, 1H), 7.30-7.29 (d, 2H), 3.68
(s, 3H), 3.54-3.50 (t, 1H), 3.32-3.22 (q, 2H), 2.96-2.86 (m, 2H), 1.45 (s, 9H)
【０２５９】
ステップ５
（Ｓ）−メチル２−（（２−ｔｅｒｔ−ブトキシ−２−オキソエチル）（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−（３，５−ジブロモフェニル）プロパノエートの調製
（Ｓ）−メチル２−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシ−２−オキソエチルアミノ）−３−（３，５−ジブロモフェニル）プロパノエート（３．０ｇ、６．６５ｍｍｏｌ、１．０当量）をＤＣＭ（５０ｍｌ）に溶解し、（Ｂｏｃ）２Ｏ（４．３５ｇ、１９．９ｍｍｏｌ、３．０当量）を加えた。混合物を４０℃に加熱し、それに続いて未希釈のＤＭＡＰ（１．６２ｇ、１３．３ｍｍｏｌ、２．０当量）を加えた。さらなる（Ｂｏｃ）２Ｏ（３９．２ｇ、４０．０ｍｍｏｌ、２７．０当量）を反応物に加え、混合物を４０℃にて２時間撹拌した。フラッシュクロマトグラフィーによる粗混合物の精製によって、３．２ｇの表題化合物を油として得た。
【０２６０】
ステップ６
（Ｓ）−２−（（２−ｔｅｒｔ−ブトキシ−２−オキソエチル）（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−（３，５−ジブロモフェニル）プロパン酸の調製
（Ｓ）−メチル２−（（２−ｔｅｒｔ−ブトキシ−２−オキソエチル）（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）アミノ）−３−（３，５−ジブロモフェニル）プロパノエート（３．２ｇ、５．８１ｍｍｏｌ、１．０当量）を、ＴＨＦ（３０ｍｌ）および水（３０ｍｌ）の混合物に溶解した。反応物に、未希釈のＬｉＯＨ−Ｈ２Ｏ（５３６ｍｇ、１２．８ｍｍｏｌ、２．２当量）を加え、このように得られた混合物を１５℃にて４０分間撹拌した。クエン酸水溶液（５重量％）を加えて反応物をｐＨ約４に酸性化し、減圧下で濃縮し、有機溶媒の大部分を除去した。このように得られた残渣を水（１００ｍｌ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（１００ｍｌ×２）で抽出した。合わせた有機抽出物をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し、３．４ｇの油を得た。油を、上記のプロトコルによって調製した１．２ｇの油の第２のバッチと合わせた。フラッシュクロマトグラフィーによる合わせたバッチの精製によって、２．９４ｇの表題化合物を固体として得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ12.84 (bs, 1H), 7.67-7.64 (m, 1H),
7.51-7.47 (m, 2H), 4.79-4.75 (m, 0.6H), 4.65-4.61 (m, 0.5H), 3.84-3.70 (m, 2H),
3.19-3.11 (m, 1H), 3.04-2.97 (m, 1H), 1.37-1.29 (m, 18H).HＰＬＣ保持時間＝５．５０分。カラム：Ｕｌｔｉｍａｔｅ  ＸＢ−Ｃ１８、３μｍ、３．０×５０ｍｍ。移動相：１分で水（０．１％ＴＦＡ）中の１．０％ＭｅＣＮから水（０．１％ＴＦＡ）中の５％ＭｅＣＮへ；次いで、５分で水（０．１％ＴＦＡ）中の５％ＭｅＣＮから１００％ＭｅＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ；１００％ＭｅＣＮ（０．１％ＴＦＡ）で２分間保持；８．０１分において水（０．１％ＴＦＡ）中の１．０％ＭｅＣＮへと戻し、２分間保持。流量：１．２ｍｌ／分。光学回転：ＭｅＯＨ中−４９．５１８、ｃ＝１．４ｇ／１００ｍｌ
【０２６１】
調製９
（２Ｓ，４Ｒ）−１−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−４−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシ−２−オキソエトキシ）ピロリジン−２−カルボン酸
【０２６２】
【化２１】
2019532021.tif 000023
ステップ１
（２Ｓ，４Ｒ）−１−（ベンジルオキシカルボニル）−４−ヒドロキシピロリジン−２−カルボン酸の調製
３Ｌのフラスコに、（２Ｓ，４Ｒ）−４−ヒドロキシピロリジン−２−カルボン酸（８７．０ｇ、６６３．４６ｍｍｏｌ、１．０当量）、水（１５００ｍｌ）、Ｎａ２ＣＯ３（１４１．０ｇ、１３３０ｍｍｏｌ、２．０当量）およびＮａＨＣＯ３（５５．７ｇ、６６３ｍｍｏｌ、１．０当量）を加えた。アセトン（２５０ｍｌ）を溶液に加え、次いで、これを氷水浴中で冷却した。混合物に、Ｃｂｚ−Ｃｌ（１４１．０ｇ、８２９ｍｍｏｌ、１．２５当量）をゆっくりと加えた。添加の後、反応混合物を２２℃へと徐々に温め、１５時間撹拌した。反応混合物をＭＴＢＥ（６００ｍｌ×２）で洗浄した。水相に、ｐＨ約２を達成するまで１ＮのＨＣｌ水溶液をゆっくりと加えた。このように得られた混合物をＥｔＯＡｃ（１Ｌ×３）で抽出し、合わせた有機層をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し、１９０ｇの表題化合物を油として得て、これをそれ以上精製することなく次のステップに持ち越した。ＬＣＭＳ：ＭＳ＝２８７．８（Ｍ＋Ｈ）。
【０２６３】
ステップ２
（２Ｓ，４Ｒ）−ジベンジル４−ヒドロキシピロリジン−１，２−ジカルボキシレートの調製
３Ｌの丸底フラスコに、（２Ｓ，４Ｒ）−１−（ベンジルオキシカルボニル）−４−ヒドロキシピロリジン−２−カルボン酸（１９０．０ｇ、７１６ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＤＭＦ（２．０Ｌ）およびＣｓ２ＣＯ３（１１７ｇ、３５８ｍｍｏｌ、０．５当量）を加えた。このように得られた混合物を氷水浴中で冷却し、臭化ベンジル（１７２ｇ、１０００ｍｍｏｌ、１．４当量）をゆっくりと加えた。添加の後、このように得られた懸濁液を２２℃にて５時間撹拌した。反応混合物を水（５Ｌ）およびＥｔＯＡｃ（５Ｌ）で希釈した。水層を除去し、有機層をブライン（２×３Ｌ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し、２５０ｇの表題化合物を油として得て、これを精製することなく次のステップにおいて使用した。ＬＣＭＳ：ＭＳ＝３７７．９（Ｍ＋２３）。
【０２６４】
ステップ３
（２Ｓ，４Ｒ）−ジベンジル４−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシ−２−オキソエトキシ）ピロリジン−１，２−ジカルボキシレートの調製
窒素ガス雰囲気下の３Ｌの丸底フラスコに、乾燥ＴＨＦ（１Ｌ）およびＮａＨ（１４．３ｇ、鉱油中６０重量％、３５９ｍｍｏｌ、１．５当量）を加えた。反応混合物に、ヨウ化テトラブチルアンモニウム（８．８３ｇ、２３．９ｍｍｏｌ、０．１当量）、それに続いてｔｅｒｔ−ブチルブロモアセテート（１８７ｇ、９５７ｍｍｏｌ、４．０当量）を加えた。得られた懸濁液を２２℃にて０．５時間撹拌した。（２Ｓ，４Ｒ）−ジベンジル４−ヒドロキシピロリジン−１，２−ジカルボキシレート（８５．０ｇ、２３９ｍｍｏｌ、１．０当量）のＴＨＦ（３００ｍｌ）溶液を滴下で添加した。添加の後、懸濁液を２２℃にて１６時間撹拌した。反応物に、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（１００ｍｌ）を加えた。有機層を分離し、水層をＥｔＯＡｃ（１５０ｍｌ×３）で抽出した。合わせた有機層をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し、１６０ｇの黄色の油を得た。フラッシュクロマトグラフィーによる油の精製によって、６０．０ｇの表題化合物を透明な油として得た。ＬＣＭＳ：ＭＳ：４９２．２（Ｍ＋Ｎａ）。
【０２６５】
ステップ４
（２Ｓ，４Ｒ）−４−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシ−２−オキソエトキシ）ピロリジン−２−カルボン酸の調製
磁気撹拌機を備えた２Ｌの水素化容器に、（２Ｓ，４Ｒ）−ジベンジル４−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシ−２−オキソエトキシ）ピロリジン−１，２−ジカルボキシレート（４０．０ｇ、８５．１９２ｍｍｏｌ、１．０当量）、エタノール（５００ｍｌ）、ＥｔＯＡｃ（５００ｍｌ）およびＰｄ／Ｃ（５．４４ｇ、湿った炭素上１０％）を加えた。このように得られた黒色の懸濁液を真空下で排出させ、Ｈ２（３×）を再充填した。容器を５０ｐｓｉの水素雰囲気へと加圧し、２２℃にて１４時間撹拌した。黒色の懸濁液を、ｃｅｌｉｔｅパッドを通して濾過し、濾液を減圧下で濃縮し、２０ｇの白色の固体を得て、これをさらに精製することなく次のステップに持ち越した。1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ4.38-4.36 (m, 1H), 4.22-4.17 (m, 1H),
4.13-4.04 (m, 2H), 3.50-3.39 (m, 2H), 2.61-2.56 (m, 1H), 2.11-2.03 (m, 1H),
1.49 (s, 9H)
【０２６６】
ステップ５
（２Ｓ，４Ｒ）−１−（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）−４−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシ−２−オキソエトキシ）ピロリジン−２−カルボン酸の調製
１Ｌの丸底フラスコに、（２Ｓ，４Ｒ）−４−（２−ｔｅｒｔ−ブトキシ−２−オキソエトキシ）ピロリジン−２−カルボン酸（１５ｇ、６１．１６ｍｍｏｌ、１．０当量）、ＤＣＭ（５００ｍｌ）およびＤＩＰＥＡ（２３．７ｇ、１８３ｍｍｏｌ、３．００当量）を加え、混合物を氷水浴中で冷却した。次いで、氷水浴中の反応物に、Ｆｍｏｃ−ＯＳｕ（２０．６ｇ、６１．２ｍｍｏｌ、１．０当量）を加え、生成した混合物を氷水浴中で３０分間撹拌した。氷水浴を除去し、混合物を２２℃に温め、その温度にて４時間保持した。水（２００ｍｌ）を加え、次いで、反応物をＥｔＯＡｃ（３００ｍｌ×３）で抽出した。合わせた有機抽出物を減圧下で濃縮し、５５ｇの黄色の油を得た。分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｓｙｎｅｒｇｉ  Ｍａｘ−ＲＰ、２５０×５０ｍｍ×１０μｍ；移動相：水中の４０％ＭｅＣＮ（０．２２５％ＦＡ）から水中の７０％ＭｅＣＮ（０．２２５％ＦＡ）へ；流量：３０ｍｌ／分；波長：２２０ｎｍ）による油の精製によって、２３ｇの表題化合物を固体として得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ7.77-7.75 (d, 1.2 H), 7.71-7.69 (d, 0.8H),
7.59-7.51 (m, 2H), 7.42-7.25 (m, 4H), 4.56-4.52 (t, 0.68H), 4.47-4.32 (m,
2.4H), 4.28-4.11 (m, 2H), 4.01-3.92 (m, 2H), 3.79-3.58 (m, 2H), 2.55-2.50 (m,
0.39H), 2.45-2.39 (m, 0.65H), 2.32-2.26 (m, 0.65H), 2.19-2.12 (m, 0.38H),
1.49-1.47 (d, 9H).ＨＰＬＣ保持時間＝４．６６分。カラム：Ｕｌｔｉｍａｔｅ  ＸＢ−Ｃ１８、３μＭ、３．０＊５０ｍｍ。移動相：１分で水（０．１％ＴＦＡ）中の１．０％ＭｅＣＮから水（０．１％ＴＦＡ）中の５％ＭｅＣＮへ；次いで、５分で水（０．１％ＴＦＡ）中の５％ＭｅＣＮから１００％ＭｅＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ；１００％ＭｅＣＮ（０．１％ＴＦＡ）で２分間保持；８．０１分において水（０．１％ＴＦＡ）中の１．０％ＭｅＣＮへと戻し、２分間保持。流量：１．２ｍｌ／分。ＳＦＣキラルカラム保持時間＝３．１８分。カラム：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＤ−３、１００×４．６ｍｍ  Ｉ．Ｄ．、３ｕｍ；移動相：Ａ：ＣＯ２、Ｂ：エタノール（０．０５％ＤＥＡ）；勾配：４．５分で５％〜４０％のＢ、２．５分間４０％で保持、次いで、１分間５％のＢ。流量：２．８ｍｌ／分；カラム温度：４０℃。
【０２６７】
調製１０
（Ｓ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−（１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−１Ｈ−インダゾール−３−イル）プロパン酸
【０２６８】
【化２２】
2019532021.tif 000024
ステップ１
メチル２−（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）−３−（６−ブロモ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−３−イル）アクリレートの調製
１００ｍＬの丸底フラスコ中で、（±）−メチル２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−２−（ジメトキシホスフィニル）アセテート（１．２ｇ、３．６ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１５ｍＬ）に溶解した。反応混合物を真空下で注意深く脱気し、Ｎ２ガスでパージした。反応物に、ＤＢＵ（５９１ｍｇ、３．９ｍｍｏｌ）をゆっくりと加え、氷水浴を使用して混合物を５℃に冷却した。第２のフラスコ中で、６−ブロモ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−３−カルバルデヒド（１．０ｇ、３．２ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１５ｍＬ）に溶解し、次いで、この溶液を、シリンジを介して反応混合物に５℃にて滴下で添加した。添加の後、混合物を５℃にて３０分間撹拌した。氷水浴を除去し、混合物を室温（約２５℃）に温め、さらに１６時間撹拌した。混合物を減圧下で濃縮し、粗生成物を、ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏの溶媒混合物（０／１００％から１００／０％の勾配を伴う）を使用した逆相カラム上のフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。所望の生成物を含有する純粋な画分を集め、これらを減圧下で濃縮し、１．１８ｇの表題化合物を固体として得た。ＬＣＭＳ：ＭＳ＝５１５．９（Ｍ＋Ｈ）。
【０２６９】
上記の反応を、下記の量の出発材料および試薬：（±）−メチル２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−２−（ジメトキシホスフィニル）アセテート（３．５ｇ、１０．７ｍｍｏｌ、１．１当量）、ＤＣＭ（１００ｍＬ）、ＤＢＵ（１．８ｇ、１１．７ｍｍｏｌ）および６−ブロモ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−３−カルバルデヒド（６５１７−１）（３．０ｇ、９．７ｍｍｏｌ）で繰り返した。精製の後、０．９４ｇの表題化合物を固体として得た。２つのバッチ（１．１８ｇ＋０．９４ｇ）を合わせ、全部で２．１２ｇの表題化合物を得た。
【０２７０】
ステップ２
メチル（２Ｓ）−２−（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）−３−（６−ブロモ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−３−イル）プロパノエートの調製
２５０ｍＬのｐａｒｒボトルに、メチル２−（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）−３−（６−ブロモ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−３−イル）アクリレート（２．１２ｇ、４．１２ｍｍｏｌ）および（＋）−１，２−ビス（（２Ｓ，５Ｓ）−２，５−ジエチルホスホラノ）ベンゼン（１，５−シクロオクタジエン）ロジウム（１）テトラフルオロボレート（１５０ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）、それに続いて溶媒ＭｅＯＨ（５０ｍＬ）およびＴＨＦ（５０ｍＬ）の混合物を加えた。シリンジを介して溶媒を通してＮ２ガスを２０分間通過させることによって、溶媒を使用の直前に処理した。次いで、このように得られた反応混合物を、１０回、真空によって脱気し、Ｎ２ガスでパージした。次いで、入れ物をＨ２で再び充填し、次いで３回、脱気し、パージし、再充填した。次いで、入れ物をＨ２ガスで５０ｐｓｉまで加圧し、５０℃にて２２時間撹拌した。混合物を３０℃に冷却し、次いで、減圧下で濃縮し、２．１３ｇの粗表題化合物を油として得た。ＬＣＭＳ：ＭＳ＝５３８．１（Ｍ＋Ｎａ）。ＨＰＬＣ保持時間＝５．２６分。カラム：Ｕｌｔｉｍａｔｅ  ＸＢ−Ｃ１８、３μｍ、３．０＊５０ｍｍ。移動相：勾配、１分で水（０．１％ＴＦＡ）中の１．０％ＭｅＣＮから水（０．１％ＴＦＡ）中の５％ＭｅＣＮへ；次いで、５分で水（０．１％ＴＦＡ）中の５％ＭｅＣＮから１００％ＭｅＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ；１００％ＭｅＣＮ（０．１％ＴＦＡ）で２分間保持、次いで、８．０１分において水（０．１％ＴＦＡ）中の１．０％ＭｅＣＮに戻し、２分間保持。流量：１．２ｍＬ／分。
【０２７１】
ステップ３
メチル（Ｓ）−２−（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）−３−（６−ブロモ−１Ｈ−インダゾール−３−イル）プロパノエートの調製
丸底フラスコ中で、粗メチル（２Ｓ）−２−（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）−３−（６−ブロモ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−１Ｈ−インダゾール−３−イル）プロパノエート（２．１３ｇ、４．１３ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（５０ｍＬ）に溶解し、ＨＣｌの溶液（ＭｅＯＨ中４．０Ｍ、５０ｍＬ）を加えた。このように得られた反応混合物を２５℃にて２時間撹拌した。次いで、混合物を減圧下で濃縮し、１．９ｇの粗表題化合物をガムとして得た。ＬＣＭＳ：ＭＳ＝４３２．１（Ｍ＋１）。ＨＰＬＣ保持時間＝４．６０分。カラム：Ｕｌｔｉｍａｔｅ  ＸＢ−Ｃ１８、３μｍ、３．０＊５０ｍｍ。移動相：１分で水（０．１％ＴＦＡ）中の１．０％ＭｅＣＮから水（０．１％ＴＦＡ）中の５％ＭｅＣＮへの勾配；次いで、５分で水（０．１％ＴＦＡ）中の５％ＭｅＣＮから１００％ＭｅＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ；１００％ＭｅＣＮ（０．１％ＴＦＡ）で２分間保持；８．０１分において水（０．１％ＴＦＡ）中の１．０％ＭｅＣＮへと戻し、２分間保持。流量：１．２ｍＬ／分。
【０２７２】
ステップ４
ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−３−（２−（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）−３−メトキシ−３−オキソプロピル）−６−ブロモ−１Ｈ−インダゾール−１−カルボキシレートの調製
粗メチル（Ｓ）−２−（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）−３−（６−ブロモ−１Ｈ−インダゾール−３−イル）プロパノエート（１．９ｇ、４．４ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１００ｍＬ）溶液を含有する丸底フラスコに、ＤＭＡＰ（１．０１ｇ、８．２ｍｍｏｌ）および（Ｂｏｃ）２Ｏ（１．８０ｇ、８．２ｍｍｏｌ）を加えた。このように得られた反応混合物を２５℃にて１８時間撹拌した。水（１００ｍＬ）を反応混合物に加え、それに続いてｐＨ約４が達成されるまで１０％クエン酸の水溶液をゆっくりと加えた。次いで、有機相を分離し、ブライン（１００ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し、粗油を得た。粗油を、ＥｔＯＡｃおよび石油エーテルの組合せ（０／１００％から２５／７５％の勾配）を使用したシリカゲルカラム（４０ｇ）上のフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。所望の生成物を含有する画分を集め、濃縮し、固体を得て、これを逆相分取スケールＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｇｅｍｉｎｉ  Ｃ１８、２５０＊５０、１０ｕ；移動相：水中の５０％ＭｅＣＮ（０．０５％水酸化アンモニウムを有する）から水中の７５％ＭｅＣＮ（０．０５％水酸化アンモニウムを有する）へ；流量：１２０ｍｌ／分；波長：２２０ｎｍ）を使用してさらに精製した。所望の生成物を含有する画分を減圧下で濃縮し、ＭｅＣＮの大部分を除去し、次いで、凍結乾燥し、１．２６ｇの表題化合物を固体として得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ8.33 (s, 1 H), 7.47 (d, 8.0 Hz, 1H),
7.38-7.30 (m, 6H), 5.80 (d, 8.0 Hz, 1H), 5.14-5.06 (m, 2H), 4.86-4.81 (m, 1H),
3.72 (s, 3H), 3.57-3.46 (m, 2H), 1.69 (s, 9H). HPLC保持時間 = 5.25分. カラム:
Ultimate XB-C18, 3μm, 3.0*50
mm.移動相：１分で水（０．１％ＴＦＡ）中の１．０％ＭｅＣＮから水（０．１％ＴＦＡ）中の５％ＭｅＣＮへ；次いで、５分で水（０．１％ＴＦＡ）中の５％ＭｅＣＮから１００％ＭｅＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ；１００％ＭｅＣＮ（０．１％ＴＦＡ）で２分間保持；８．０１分において水（０．１％ＴＦＡ）中の１．０％ＭｅＣＮへと戻し、２分間保持。流量：１．２ｍＬ／分。ＳＦＣキラルカラム保持時間＝２．８８分。カラム：Ｃｈｉｒａｌｐａｋ  ＡＳ−３、１５０×４．６ｍｍ  Ｉ．Ｄ．、３ｕｍ；移動相：Ａ：ＣＯ２、Ｂ：エタノール（０．０５％ＤＥＡ）；勾配：５．５分で５％〜４０％のＢ、３分間４０％で保持、次いで、１．５分間５％のＢ。流量：２．５ｍＬ／分；カラム温度：４０℃。
【０２７３】
ステップ５
ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−３−（２−アミノ−３−メトキシ−３−オキソプロピル）−１Ｈ−インダゾール−１−カルボキシレートの調製
２５０ｍＬのｐａｒｒボトルに、ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−３−（２−（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）−３−メトキシ−３−オキソプロピル）−６−ブロモ−１Ｈ−インダゾール−１−カルボキシレート（９５０ｍｇ、１．７８ｍｍｏｌ）のトリエチルアミン（１ｍＬ）およびＭｅＯＨ（２０ｍＬ）溶液を加えた。次いで、溶液に、乾燥Ｐｄ／Ｃ（５７０ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ）を加え、このように得られた懸濁液を３回、真空下で脱気し、Ｎ２ガスで再び充填した。次いで、これを、３回真空下で脱気し、Ｈ２ガスで再び充填した。このように得られた混合物を真空下で脱気し、２０ｐｓｉの圧力に達するまでＨ２ガスで再び充填し、次いで、反応混合物を２５℃にて５時間撹拌した。混合物を、多孔質珪藻土フィルターを通過させ、濾液を減圧下で濃縮し、５７０ｍｇの粗表題化合物をガムとして得た。ＬＣＭＳ：ＭＳ＝２６３．１（Ｍ−５６＋１）
【０２７４】
ステップ６
ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−３−（２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−メトキシ−３−オキソプロピル）−１Ｈ−インダゾール−１−カルボキシレートの調製
２５０ｍＬの丸底フラスコに、粗ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−３−（２−アミノ−３−メトキシ−３−オキソプロピル）−１Ｈ−インダゾール−１−カルボキシレート（５７０ｍｇ、１．８ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１５ｍＬ）溶液、およびトリエチルアミン（５７０ｍｇ、５．６４ｍｍｏｌ）を加えた。次いで、氷水浴を使用して溶液を０℃に冷却した。反応物に、Ｆｍｏｃ−ＯＳｕ（６３４ｍｇ、１．８８ｍｍｏｌ）を少しずつ加え（５分以内）、次いで、混合物を氷浴中で３０分間撹拌した。氷水浴を除去し、混合物を室温（２５℃）に温め、次いで、その温度にて約３時間撹拌した。次いで、反応混合物を減圧下で濃縮し、１．１ｇの粗ガムを得た。粗ガムの精製を、ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ溶媒混合物（０〜７０％の勾配）を用いたＣ−１８カラム（１２０ｇ）上のフラッシュクロマトグラフィーによって行った。所望の生成物を有する画分を合わせ、濃縮し、５５０ｍｇの表題化合物を固体として得た。ＬＣＭＳ：ＭＳ＝５６４．１（Ｍ＋２３）
【０２７５】
ステップ７
（Ｓ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−（１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−１Ｈ−インダゾール−３−イル）プロパン酸の調製
１００ｍＬの丸底フラスコに、ｉ−ＰｒＯＨ（１０ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（１０ｍＬ）および無水ＣａＣｌ２（１．６ｇ、１４．８ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温（２８℃）にて１０分間撹拌した。次いで、混合物に、ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−３−（２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−メトキシ−３−オキソプロピル）−１Ｈ−インダゾール−１−カルボキシレート（４００ｍｇ、０．７４ｍｍｏｌ、１．０当量）、それに続いてＮａＯＨ（８９ｍｇ、２．２ｍｍｏｌ）を加えた。このように得られた反応混合物を室温（２８℃）にて２時間撹拌した。次いで、反応物に、ｐＨ約６に達するまでギ酸を加えた。粗反応混合物を、ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ溶媒混合物（０／１００％から８０／２０％の勾配）で溶出するＣ−１８カラム（１２０ｇ）上の逆相ＨＰＬＣによって精製した。所望の生成物を含有する画分を合わせ、凍結乾燥によって濃縮し、３５０ｍｇの表題化合物を固体として得た。反応を下記の量の出発材料および試薬：ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−３−（２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−メトキシ−３−オキソプロピル）−１Ｈ−インダゾール−１−カルボキシレート（２００ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）、ＣａＣｌ２（８２０ｍｇ、７．４ｍｍｏｌ）、ＮａＯＨ（４４ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）、ｉ−ＰｒＯＨ（１０ｍＬ）およびＨ２Ｏ（１０ｍＬ）で繰り返し、２００ｍｇの表題化合物を固体として得た。精製の後、２つのバッチ（３５０ｍｇ＋２００ｍｇ）を合わせ、全部で５５０ｍｇの表題化合物を得た。ＨＰＬＣ保持時間＝５．２４分。カラム：Ｕｌｔｉｍａｔｅ  ＸＢ−Ｃ１８、３μｍ、３．０＊５０ｍｍ。移動相：１分で水（０．１％ＴＦＡ）中の１．０％ＭｅＣＮから水（０．１％ＴＦＡ）中の５％ＭｅＣＮへ；次いで、５分で水（０．１％ＴＦＡ）中の５％ＭｅＣＮから１００％ＭｅＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ；１００％ＭｅＣＮ（０．１％ＴＦＡ）で２分間保持；８．０１分において水（０．１％ＴＦＡ）中の１．０％ＭｅＣＮへと戻し、２分間保持。流量：１．２ｍＬ／分。ＬＣＭＳ：ＭＳ＝５２８．３（Ｍ＋Ｈ）。
【０２７６】
調製１１
（Ｓ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−（１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−６−エチル−１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン酸
【０２７７】
【化２３】
2019532021.tif 000025
ステップ１
ｔｅｒｔ−ブチル−６−ブロモ−３−ホルミル−１Ｈ−インドール−１−カルボキシレートの調製
２５０ｍＬの丸底フラスコに、６−ブロモ−１Ｈ−インドール−３−カルバルデヒド（９．５ｇ、４２．４ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１５０ｍＬ）溶液、それに続いてＤＭＡＰ（６．７ｇ、５５．１ｍｍｏｌ）を加えた。次いで、混合物に、Ｂｏｃ２Ｏ（１３．９ｇ、６３．６ｍｍｏｌ）を少しずつ１０分に亘り加え、このように得られた反応混合物を室温（２５℃）にて１６時間撹拌した。反応混合物をＤＣＭ（２００ｍＬ）で希釈し、１０％クエン酸（２００ｍＬ×２）、水（２００ｍＬ×２）、ブライン（２００ｍＬ）の水溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し、１３．０ｇの表題化合物を固体として得た。ＬＣＭＳ：ＭＳ＝２２３．６（Ｍ−１００）
【０２７８】
ステップ２
ｔｅｒｔ−ブチル３−（２−（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）−３−メトキシ−３−オキソプロパ−１−エン−１−イル）−６−ブロモ−１Ｈ−インドール−１−カルボキシレートの調製
５００ｍＬの丸底フラスコに、（±）−メチル２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−２−（ジメトキシホスフィニル）アセテート（１４．６ｇ、４４．１ｍｍｏｌ）、ＤＣＭ（１５０ｍＬ）およびＤＢＵ（７．３ｇ、４８．１ｍｍｏｌ）を加えた。次いで、氷水浴を使用して混合物を０℃に冷却した。第２のフラスコ中で、ｔｅｒｔ−ブチル−６−ブロモ−３−ホルミル−１Ｈ−インドール−１−カルボキシレート（１３．０ｇ、４０．１ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１５０ｍＬ）に溶解し、次いで、この溶液を、シリンジを介して反応混合物に０℃にて滴下で添加した。添加の後、混合物を０℃にて３０分間撹拌した。次いで、氷水浴を除去し、混合物を室温（１５℃）に温め、反応物をこの温度にて１６時間撹拌した。混合物をＤＣＭ（１００ｍＬ）で希釈し、５％クエン酸水溶液（２００ｍＬ）、ブライン（２００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。このように得られた残渣を、石油エーテル／ＥｔＯＡｃ溶媒混合物（１００／１０％から８０／２０％の勾配）を用いた１２０ｇのカラム上のフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。所望の生成物を含有する画分を合わせ、減圧下で濃縮し、１６ｇの表題化合物を固体として得た。ＬＣＭＳ：ＭＳ＝５５１．１（Ｍ＋２３）
【０２７９】
ステップ３
ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−３−（２−（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）−３−メトキシ−３−オキソプロピル）−６−ブロモ−１Ｈ−インドール−１−カルボキシレートの調製
２５０ｍＬのｐａｒｒボトルに、ｔｅｒｔ−ブチル３−（２−（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）−３−メトキシ−３−オキソプロパ−１−エン−１−イル）−６−ブロモ−１Ｈ−インドール−１−カルボキシレート（６．５ｇ、１２．３ｍｍｏｌ）および（＋）−１，２−ビス（（２Ｓ，５Ｓ）−２，５−ジエチルホスホラノ）ベンゼン（１，５−シクロオクタジエン）ロジウム（１）テトラフルオロボレート（２５０ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）、それに続いてＭｅＯＨ（１００ｍＬ−ＭｅＯＨはシリンジを介して溶媒を通してＮ２ガスを２０分間泡立てることによって事前処理した）を加えた。このように得られた反応混合物を６回、真空によって脱気し、Ｎ２ガスでパージした。次いで、入れ物を、Ｈ２で再び充填し、次いで３回、脱気し、パージし、再充填した。次いで、入れ物をＨ２ガスで５０ｐｓｉまで加圧し、５０℃にて４日間撹拌した。混合物を２８℃に冷却し、次いで、減圧下で濃縮した。このように得られた粗生成物を、ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ溶媒混合物（１００／０％から０／１００％の勾配）を用いたＣ−１８カラム上の逆相ＨＰＬＣによって精製した。所望の生成物を有する画分を合わせ、凍結乾燥し、５．１ｇの表題化合物を固体として得た。1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ8.31 (s, 1H), 7.39-7.26 (m, 8H), 5.37 (d,
8.0 Hz, 1H), 5.15-5.07 (m, 2H), 4.73-4.69 (m, 1H), 3.69 (s, 3H), 3.27-3.15 (m,
2H), 1.66 (s, 9H). LCMS: MS = 554.4 (M+23)
【０２８０】
ステップ４
ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−３−（２−（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）−３−メトキシ−３−オキソプロピル）−６−エチル−１Ｈ−インドール−１−カルボキシレートの調製
１００ｍＬの丸底フラスコ中で、ｔｅｒｔ−ブチル−（Ｓ）−３−（２−（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）−３−メトキシ−３−オキソプロピル）−６−ブロモ−１Ｈ−インドール−１−カルボキシレート（１．８ｇ、３．４ｍｍｏｌ）を、無水ジオキサン（４０ｍＬ）に溶解した。反応混合物を、３回真空下で脱気し、Ｎ２ガスで再び充填した。次いで、反応物に、Ｅｔ２Ｚｎのトルエン（６．８ｍＬ、６．８ｍｍｏｌ）溶液（１Ｍ）、それに続いてＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（１２４ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）を滴下で添加した。このように得られた反応混合物を、３回、真空下で脱気し、Ｎ２ガスで再び充填し、次いで、１００℃に３時間加熱した。反応混合物を２５℃に冷却し、次いで、飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（１００ｍＬ）でクエンチした。反応混合物をＥｔＯＡｃ（３×８０ｍＬ）で抽出し、合わせた有機抽出物を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。粗生成物を、石油エーテル／ＥｔＯＡｃ溶媒混合物（１００／０％から７０／３０％の勾配）を伴うシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィーによって精製した。所望の生成物を含有する画分を合わせ、濃縮し、１．５ｇの表題化合物を油として得た。ＬＣＭＳ：ＭＳ＝５０３．２（Ｍ＋２３）
【０２８１】
ステップ５
ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−３−（２−アミノ−３−メトキシ−３−オキソプロピル）−６−エチル−１Ｈ−インドール−１−カルボキシレートの調製
１００ｍＬの丸底フラスコに、ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−３−（２−（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）−３−メトキシ−３−オキソプロピル）−６−エチル−１Ｈ−インドール−１−カルボキシレート（１．６ｇ、３．３ｍｍｏｌ）のトリエチルアミン（０．９ｍＬ）およびＭｅＯＨ（３０ｍＬ）溶液を加えた。次いで、混合物に、乾燥１０重量％のＰｄ／Ｃ（７０９ｍｇ、０．７ｍｍｏｌ）を加えた。このように得られた懸濁液混合物を３回、真空下で脱気し、Ｎ２ガスで再び充填した。次いで、これを３回、真空下で脱気し、Ｈ２ガスで再び充填した。このように得られた混合物を真空下で脱気し、Ｈ２ガスのバルーンを用いてＨ２ガスで再び充填した。混合物を２８℃にて３時間撹拌し、次いで、多孔質珪藻土フィルターを通過させ、濾液を減圧下で濃縮し、１．１ｇの粗表題化合物を油として得た。ＬＣＭＳ：ＭＳ＝３４６．８
【０２８２】
ステップ６
ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−３−（２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−メトキシ−３−オキソプロピル）−６−エチル−１Ｈ−インドール−１−カルボキシレートの調製
粗ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−３−（２−アミノ−３−メトキシ−３−オキソプロピル）−６−エチル−１Ｈ−インドール−１−カルボキシレート（１．１ｇ、３．２ｍｍｏｌ）を含有する１００ｍＬの丸底フラスコに、ジオキサン（３０ｍＬ）および水（１０ｍＬ）を加えた。このように得られた溶液にＮａ２ＣＯ３（１．７ｇ、１５．９ｍｍｏｌ）を加え、次いで、氷水浴を使用して混合物を０℃に冷却した。反応物に、Ｆｍｏｃ−ＯＳｕ（２．７ｇ、７．９ｍｍｏｌ）を少しずつ５分に亘り加え、次いで、氷水浴を除去した。次いで、反応物を室温（２８Ｃ）にて約６時間撹拌した。反応混合物を水（１００ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（２×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。石油エーテル／ＥｔＯＡｃ溶媒混合物（１００／０％から９０／０％の勾配）を伴う８０ｇのシリカゲルカラム上のフラッシュクロマトグラフィーによる粗材料の精製によって、２．０ｇの粗油を得た。次いで、油を、ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ溶媒混合物（１００／０％から８０／２０％の勾配）を用いるＣ−１８カラム（１２０ｇ）上の逆相ＨＰＬＣによって精製した。所望の生成物を有する画分を合わせ、濃縮し、１．０ｇの表題化合物を油として得た。ＬＣＭＳ：ＭＳ＝５９１．３（Ｍ＋２３）
【０２８３】
ステップ７
（Ｓ）−２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−（１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−６−エチル−１Ｈ−インドール−３−イル）プロパン酸の調製
１００ｍＬの丸底フラスコに、ｉ−ＰｒＯＨ（３５ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（１５ｍＬ）および無水ＣａＣｌ２（４．４ｇ、４０．０ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温（２８℃）にて１０分間撹拌した。第２の１００ｍＬの丸底フラスコ中に、ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−３−（２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−メトキシ−３−オキソプロピル）−６−エチル−１Ｈ−インドール−１−カルボキシレート（９００ｍｇ、１．６ｍｍｏｌ）、第１の丸底フラスコからの反応混合物、それに続いてＮａＯＨ（８９ｍｇ、２．２ｍｍｏｌ）を加えた。このように得られた反応混合物を室温（２８℃）にて１６時間撹拌した。反応混合物をＨ２Ｏ（約１００ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（２×約１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮し、粗残渣を得た。次いで、下記の量の試薬：ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−３−（２−（（（（９Ｈ−フルオレン−９−イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）−３−メトキシ−３−オキソプロピル）−６−エチル−１Ｈ−インドール−１−カルボキシレート（１００ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）、ＣａＣｌ２（８８８ｍｇ、８．０ｍｍｏｌ）、ＮａＯＨ（９．９ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）、ｉ−ＰｒＯＨ（７ｍＬ）およびＨ２Ｏ（３ｍＬ）を使用して上記の反応を繰り返した。ＤＣＭ／ＭｅＯＨ溶媒混合物（１００／０％から９０／０％の勾配）を伴う４０ｇのシリカゲルカラム上のフラッシュクロマトグラフィーによる合わせた粗残渣の精製によって、８５０ｍｇの表題化合物を油として得た。油を分取ＳＦＣによって精製し、６７０ｍｇの表題化合物を油として得た。油を、ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏ溶媒混合物（１００／０％から０／１００％の勾配）で溶出するＣ−１８カラム（１２０ｇ）上の逆相ＨＰＬＣによってさらに精製した。所望の生成物を含有する画分を合わせ、凍結乾燥によって濃縮し、３５０ｍｇの表題化合物を固体として得た。ＬＣＭＳ：ＭＳ＝５７７．２（Ｍ＋２３）。ＨＰＬＣ保持時間＝５．５１分。カラム：Ｕｌｔｉｍａｔｅ  ＸＢ−Ｃ１８、３μｍ、３．０＊５０ｍｍ。移動相：１分で水（０．１％ＴＦＡ）中の１．０％ＭｅＣＮから水（０．１％ＴＦＡ）中の５％ＭｅＣＮへ；次いで、５分で水（０．１％ＴＦＡ）中の５％ＭｅＣＮから１００％ＭｅＣＮ（０．１％ＴＦＡ）へ；１００％ＭｅＣＮ（０．１％ＴＦＡ）で２分間保持；８．０１分において水（０．１％ＴＦＡ）中の１．０％ＭｅＣＮへと戻し、２分間保持。流量：１．２ｍＬ／分。
【０２８４】
下記のアッセイにおいて、下記の略語および定義に言及し得る。
ＡＰＣは、アロフィコシアニンであり、
ＢＳＡは、ウシ血清アルブミンであり、
ＤＭＳＯは、ジメチルスルホキシドであり、
ＥＤＴＡは、エチレンジアミン四酢酸であり、
ＦＢＳは、ウシ胎仔血清であり、
ＨＢＢＳは、ハンクス平衡塩類溶液であり、
ＨＴＳは、ハイスループットスクリーニングであり、
ＨＷＢは、ヒト全血であり、
ＭＦは、平均蛍光であり、
ＰＢＳは、リン酸緩衝溶液であり、
Ｋ２ＥＤＴＡは、エチレンジアミン四酢酸二カリウム塩であり、
ＴＮＦ−αは、腫瘍壊死因子−アルファであり、
Ｃ５ａは、補体成分５ａであり、
ＨＥＰＥＳは、４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジンエタンスルホン酸である。
【０２８５】
生物学的アッセイ
ＨＷＢ−酸化バーストアッセイ
酸化バースト活性の阻害を、ＴＮＦ−αで予備刺激し、かつＣ５ａで刺激したＨＷＢにおいて決定した。次いで、Ｃ５ａによって誘発される酸化バースト応答（活性酸素種の生成）を、化学発光シグナルとしてルミノールの存在下で検出した。
【０２８６】
アッセイの日に、ＨＷＢを健康な薬物治療していないボランティアから、３．８％クエン酸ナトリウム（ＨＷＢ中の最終クエン酸ナトリウム濃度は０．３８％である）を含有するチューブ中に集め、３７℃の水浴中で使用するまで貯蔵した（６０分以下）。
【０２８７】
アッセイを開始するために、ＴＮＦ−αを、１．０ｎＭの最終濃度までＨＷＢに加え、６８μＬのこのＨＷＢ／ＴＮＦ−αミックスを、３８４ウェルのホワイトＯｐｔｉｐｌａｔｅ（アッセイプレート）の各ウェルに移した。次いで、４．０μＬの様々な濃度の試験剤をアッセイプレートに加え、上下に吸引することによって穏やかに２回混合した。次いで、アッセイプレートをサーモシェーカー（ＪＩＴＴＥＲＢＵＧ−４）上に入れ、３７℃にてインキュベートした（振とうせず）。６０分後、ルミノール（Ｓｉｇｍａ）中で調製したＣ５ａ（Ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）をアッセイプレートに加え、上下に吸引することによって穏やかに２回混合した。次いで、プレートを、ＶｉｅｗＬｕｘ１４３０マイクロプレートイメージャー（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）中に入れた。５分後、酸化バースト活性を、ルミノール増強全血化学発光を測定することによってＶｉｅｗＬｕｘで決定した。最終のアッセイ条件は、１．５ｍＭのＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．５、０．０１５％ＢＳＡ、１５％ＨＢＳＳ、０．８５ｎｇ／ｍＬのＴＮＦα、１．０ｍＭのルミノール、２０ｎＭのＣ５ａ、７６．５％ＨＷＢ、０．１５％ＤＭＳＯおよび様々な濃度の試験剤であった。
【０２８８】
次いで、各濃度の試験剤におけるパーセント（％）効果を、各アッセイプレート内に含有される陽性（すなわち、Ｃ５ａによって誘発される酸化バーストの完全阻害）および陰性（すなわち、完全に阻害されていないＣ５ａによって誘発される酸化バースト）対照ウェルによって生じたシグナルの量に基づいて、およびその量に対して、計算した。試験剤についての濃度および効果値％をプロットし、５０％効果のために必要とされる試験剤の濃度（ＩＣ５０）を４パラメーターロジスティック用量応答等式（ＢｉｏＢｏｏｋ；ＩＤＢＳ）で決定した。次いで、ＬｅｆｆおよびＤｏｕｇａｌによって記載された等式（ＴＩＰＳ１９９３  １４：１１０〜１１２）を使用してＫｂ（ｎＭ）を計算した（ＢｉｏＢｏｏｋ；ＩＤＢＳ）。
【０２８９】
ＨＷＢ−ＣＤ１１ｂ発現アッセイ
ＨＷＢを、健康な薬物治療していないボランティアから抗凝固剤としてＫ２ＥＤＴＡを有するＢＤ  Ｖａｃｕｔａｉｎｅｒ（登録商標）採血管へと集めた。ＨＷＢを、９６ウェルディープウェルＶボトムプレートにおいて等分し（８５μＬ／ウェル）、３７℃にて３０分間インキュベートした。試験化合物（５μＬ／ウェル）をＨＷＢに加え、３７℃にて３０分間インキュベートした。ＡＰＣ（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）とコンジュゲートした抗ヒトＣＤ１１ｂ抗体をＨＷＢ（５μＬ／ウェル）に加え、３７℃にてさらに３０分間インキュベートした。次いで、ＨＷＢをヒトＣ５ａ（最終１ｎＭ）に３７℃にて３０分間曝露させた。試料を温かい１×溶解／固定緩衝液（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）で処理し、活性化を終了させ、３７℃にて２０分間さらにインキュベートし、赤血球を溶解した。アッセイプレートを３００×ｇで５分間遠心し、上清を吸引し、０．５％ＦＢＳを含有するＰＢＳで細胞を１回洗浄した。洗浄した細胞を、０．５％ＦＢＳを含有するＰＢＳに再懸濁し、ＨＴＳプレートローダー（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を備えたＬＳＲＦｏｒｔｅｓｓａを使用したフローサイトメトリー分析に供した。顆粒球集団は、ＦＡＣＳＤｉｖａバージョン６．２（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を使用してＣＤ１１ｂ染色のＭＦの分析のためにゲートした。１１の化合物濃度からのデータ（各濃度で１回）を、式
対照の％＝１００×（Ａ−Ｂ）／（Ｃ−Ｂ）
（式中、Ａは、試験化合物およびＣ５ａを含有するウェルからのＭＦであり、Ｂは、Ｃ５ａを有さないウェルからのＭＦ（刺激されていない試料からのバックグラウンドＭＦ）であり、Ｃは、Ｃ５ａのみを含有するウェルからのＭＦ（最大ＭＦ）である）に基づいて対照の百分率として規準化した。阻害曲線およびＩＣ５０値（５０％阻害を生じさせる試験化合物の濃度）は、Ｐｒｉｓｍバージョン５ソフトウェア（ＧｒａｐｈＰａｄ）を使用して決定した。ＨＷＢはまた、１１の異なる濃度のＣ５ａで刺激し、応答曲線を構築し、Ｐｒｉｓｍバージョン５ソフトウェアを使用してＥＣ５０値（最大半量応答を生じさせるＣ５ａの濃度）および曲線スロープを得た。次いで、Ｋｂ（ｎＭ）を、ＬｅｆｆおよびＤｏｕｇａｌによって記載された等式（ＴＩＰＳ１９９３  １４：１１０〜１１２）を使用して計算した。
【０２９０】
【表１−１】
2019532021.tif 000026
【０２９１】
【表１−２】
2019532021.tif 000027
【０２９２】
【表１−３】
2019532021.tif 000028
【国際調査報告】
2019532021.tif 000034
2019532021.tif 000035
2019532021.tif 000036