(57)【要約】１，２−ＨＯＰＯキレート剤および／または３，２−ＨＯＰＯキレート剤を含む、医薬製剤が、本明細書において提供される。偶発的もしくは故意に放射性物質散布デバイスによって拡散されるか、または原子力発電所の事故もしくは核デバイスの爆発により堆積される、放射性核種への曝露は、大集団の汚染をもたらし得る。内在化した放射性核種は、毒性が高く、急性および慢性の両方の放射線傷害を引き起こし得るため、そのような汚染事象は、劇的な公衆衛生上の結果を有し得る。本発明はこの課題を解決し得る。
2019532040.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
約３００〜約１５００ｍｇの量の１，２−ＨＯＰＯキレート剤と、
オレイン酸ナトリウムと
を含む、医薬組成物。
【請求項２】
前記１，２−ＨＯＰＯキレート剤が、３，４，３−ＬＩ−１，２−ＨＯＰＯである、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
オレイン酸ナトリウムが、約７０〜約１３０ｍｇで存在する、請求項２に記載の医薬組成物。
【請求項４】
オレイン酸ナトリウムが、前記組成物の総重量の８〜１２％で存在する、請求項２に記載の医薬組成物。
【請求項５】
オレイン酸ナトリウムが、前記組成物の総重量の約１１％である、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項６】
前記３，４，３−ＬＩ−１，２−ＨＯＰＯキレート剤が、１００〜１５００ｍｇの量で存在する、請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項７】
前記３，４，３−ＬＩ−１，２−ＨＯＰＯキレート剤が、４００〜１２００ｍｇの量で存在する、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項８】
前記３，４，３−ＬＩ−１，２−ＨＯＰＯキレート剤が、１００〜３００ｍｇの量で存在する、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項９】
前記３，４，３−ＬＩ−１，２−ＨＯＰＯキレート剤が、６００ｍｇの量で存在する、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
前記３，４，３−ＬＩ−１，２−ＨＯＰＯキレート剤が、１００〜１５００ｍｇの量で存在する、請求項２に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
前記３，４，３−ＬＩ−１，２−ＨＯＰＯキレート剤が、４００〜１２００ｍｇの量で存在する、請求項２に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
前記３，４，３−ＬＩ−１，２−ＨＯＰＯキレート剤が、１００〜３００ｍｇの量で存在する、請求項２に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
前記３，４，３−ＬＩ−１，２−ＨＯＰＯキレート剤が、６００ｍｇの量で存在する、請求項２に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
錠剤としてパッケージングされる、請求項２に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
カプセルに含まれる、請求項２に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
１つまたは複数の顆粒に含まれる、請求項２に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
錠剤としてパッケージングされる、請求項８または９に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
カプセルに含まれる、請求項８または９に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
１つまたは複数の顆粒に含まれる、請求項８または９に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願への相互参照
本出願は、２０１６年９月６日に出願された米国仮出願番号第６２／３８４，０８７号の利益を主張しており、この仮出願は、その全体が参考として本明細書によって援用される。
【０００２】
政府の支援に関する陳述
本発明は、国立アレルギー・感染症研究所（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｏｆ  Ａｌｌｅｒｇｙ  ａｎｄ  Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ  Ｄｉｓｅａｓｅｓ）の契約番号ＨＨＳＮ２７２２０１００００４６Ｃおよびバイオメディカル先端研究開発庁（Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ  Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ａｎｄ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  Ａｕｔｈｏｒｉｔｙ）契約番号ＩＰＩＡＡ１２ＯＳ９９６０９の下、米国エネルギー省（Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｅｎｅｒｇｙ）の契約番号ＤＥ−ＡＣ０２−０５ＣＨ１１２３１を通じて、政府の支援によりなされた。政府は、本発明に一定の権利を有する。
【０００３】
背景
発明の分野
本発明は、概して、金属中毒の処置のための製剤に関する。
【背景技術】
【０００４】
関連技術の説明
偶発的もしくは故意に放射性物質散布デバイスによって拡散されるか、または原子力発電所の事故もしくは核デバイスの爆発により堆積される、放射性核種への曝露は、大集団の汚染をもたらし得る。内在化した放射性核種は、毒性が高く、急性および慢性の両方の放射線傷害を引き起こし得るため、そのような汚染事象は、劇的な公衆衛生上の結果を有し得るであろう。
【０００５】
キレート剤による体外除去は、ある特定の取り込まれた同位体による曝露を低減させる唯一の方法であり、ジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）は、１９５０年代のＵ．Ｓ．Ａｔｏｍｉｃ  Ｅｎｅｒｇｙ  Ｃｏｍｍｉｓｓｉｏｎによるその開発および使用以来、アクチニド／ランタニド体外除去のための標準的な治療法となっている。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００６】
好ましい実施形態の要旨
本明細書における実施形態は、約３００〜約１５００ｍｇの量の１，２−ＨＯＰＯキレート剤、およびオレイン酸ナトリウムを含む、医薬組成物を提供する。一部の実施形態では、１，２−ＨＯＰＯキレート剤は、３，４，３−ＬＩ−１，２−ＨＯＰＯである。一部の実施形態では、オレイン酸ナトリウムは、約７０〜約１３０ｍｇで存在する。一部の実施形態では、オレイン酸ナトリウムは、組成物の総重量の８〜１２％で存在する。一部の実施形態では、オレイン酸ナトリウムは、組成物の総重量の約１１％である。一部の実施形態では、３，４，３−ＬＩ−１，２−ＨＯＰＯキレート剤は、１００〜１５００ｍｇの量で存在する。一部の実施形態では、３，４，３−ＬＩ−１，２−ＨＯＰＯキレート剤は、４００〜１２００ｍｇの量で存在する。一部の実施形態では、３，４，３−ＬＩ−１，２−ＨＯＰＯキレート剤は、１００〜３００ｍｇの量で存在する。一部の実施形態では、３，４，３−ＬＩ−１，２−ＨＯＰＯキレート剤は、６００ｍｇの量で存在する。一部の実施形態では、３，４，３−ＬＩ−１，２−ＨＯＰＯキレート剤は、１００〜１５００ｍｇの量で存在する。一部の実施形態では、３，４，３−ＬＩ−１，２−ＨＯＰＯキレート剤は、４００〜１２００ｍｇの量で存在する。一部の実施形態では、３，４，３−ＬＩ−１，２−ＨＯＰＯキレート剤は、１００〜３００ｍｇの量で存在する。一部の実施形態では、３，４，３−ＬＩ−１，２−ＨＯＰＯキレート剤は、６００ｍｇの量で存在する。一部の実施形態では、医薬組成物は、錠剤としてパッケージングされる。一部の実施形態では、医薬組成物は、カプセルに含まれる。一部の実施形態では、医薬組成物は、１つまたは複数の顆粒に含まれる。一部の実施形態では、医薬組成物は、錠剤としてパッケージングされる。一部の実施形態では、医薬組成物は、カプセルに含まれる。一部の実施形態では、医薬組成物は、１つまたは複数の顆粒に含まれる。
【０００７】
これは、１つまたは複数の既知または未知のアクチニドおよび／もしくはランタニドまたはその混合物に曝露されているか、それと接触しているか、またはそれに汚染されている、対象に投与する場合に、特に有用である。
【０００８】
前述の態様およびその他の態様は、添付の図面と併せて読解すると、以下の例示的な実施形態の説明から、当業者であれば容易に理解し得る。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
【図１】図１は、５−ＬＩＯ（Ｍｅ−３，２−ＨＯＰＯ）（「５ＬＩＯ」）および３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）（「３４３ＬＩ」）の構造を示す。
【００１０】
【図２】図２は、ジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）の構造を示す。
【００１１】
【図３】図３は、ＡＰＩ検証アッセイ希釈剤（９：１の水：ＡＣＮ）のクロマトグラムの実施形態を示す。
【００１２】
【図４】図４は、溶解アッセイ希釈剤（酵素なしのＳＧＦ、ＵＳＰ）のクロマトグラムの実施形態を示す。
【００１３】
【図５】図５は、ＡＰＩ検証アッセイ希釈剤中、０．５ｍｇ／ｍｌの３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）のクロマトグラムの実施形態を示す。
【００１４】
【図６】図６は、溶解アッセイ希釈剤中、１．１ｍｇ／ｍｌの３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）のクロマトグラムの実施形態を示す。
【００１５】
【図７】図７は、ボトル入り粉末剤組成物Ａ２（左）およびＡ１１（右）の実施形態の外観およびパッケージングを示す。
【００１６】
【図８】図８は、顆粒組成物Ｇ１１（左）およびＧ１２（右）の実施形態の外観およびパッケージングを示す。
【００１７】
【図９】図９は、チュアブル錠剤組成物Ｃ１１（左）、Ｃ１３（中央）、およびＣ２１（右）の実施形態の外観およびパッケージングを示す。
【００１８】
【図１０】図１０は、錠剤組成物Ｔ５０（左）およびＴ５１（右）の実施形態の外観およびパッケージングを示す。
【００１９】
【図１１Ａ】図１１Ａは、２３８Ｐｕ−クエン酸エステルを静脈内注射した若齢成体雌スイスウェブスターマウスの剖検における毎日の糞便による排泄率を示す。３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）処置を、曝露の２４時間後に開始して、１日２回または１日１回で６日間、経口投与し、マウスを、７日の時点で安楽死させた。
【００２０】
【図１１Ｂ】図１１Ｂは、２３８Ｐｕ−クエン酸エステルを静脈内注射した若齢成体雌スイスウェブスターマウスの剖検における毎日の尿による排泄率を示す。３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）処置を、曝露の２４時間後に開始して、１日２回または１日１回で６日間、経口投与し、マウスを、７日の時点で安楽死させた。
【００２１】
【図１１Ｃ】図１１Ｃは、図１１Ａおよび図１１Ｂについて、７日目の剖検時点での累積排泄を示す。
【００２２】
【図１２Ａ】図１２Ａは、２３８Ｐｕ−クエン酸エステルを静脈内注射した若齢成体雌スイスウェブスターマウスの剖検における毎日の糞便による排泄率を示す。生理食塩水、ＤＴＰＡ、または３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）処置を、曝露の２４時間後に開始して、１日１回で６日間、腹腔内または経口で投与し、マウスを、１１日の時点で安楽死させた。
【００２３】
【図１２Ｂ】図１２Ｂは、２３８Ｐｕ−クエン酸エステルを静脈内注射した若齢成体雌スイスウェブスターマウスの剖検における毎日の尿による排泄率を示す。生理食塩水、ＤＴＰＡ、または３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）処置を、曝露の２４時間後に開始して、１日１回で６日間、腹腔内または経口で投与し、マウスを、１１日の時点で安楽死させた。
【００２４】
【図１２Ｃ】図１２Ｃは、図１２Ａおよび図１２Ｂについて、１１日目の剖検時点での累積排泄を示す。
【００２５】
【図１３Ａ】図１３Ａは、２３８Ｐｕ−クエン酸エステルを静脈内注射した若齢成体雌スイスウェブスターの汚染後７日目時点での処置群における累積排泄を、対照と比較して示す。ＤＴＰＡまたは３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）処置を、曝露の２４時間後に開始して、１日１回または１日２回で６日間、経口投与し、マウスを、７日の時点で安楽死させた。
【００２６】
【図１３Ｂ】図１３Ｂは、２３８Ｐｕ−クエン酸エステルを静脈内注射した若齢成体雌スイスウェブスターの汚染後１１日目時点での処置群における累積排泄を、対照と比較して示す。ＤＴＰＡまたは３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）処置を、曝露の２４時間後に開始して、１日１回で６日間、腹腔内または経口で投与し、マウスを、１１日の時点で安楽死させた。
【００２７】
【図１４Ａ】図１４Ａは、２３８Ｐｕ−クエン酸エステルを静脈内注射した若齢成体雌スイスウェブスターの汚染後７日目時点での処置群における身体、骨格、および肝臓での保持を示す。生理食塩水、ＤＴＰＡ、または３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）処置を、曝露の２４時間後に開始して、１日１回または１日２回で６日間、経口投与し、マウスを、７日の時点で安楽死させた。
【００２８】
【図１４Ｂ】図１４Ｂは、２３８Ｐｕ−クエン酸エステルを静脈内注射した若齢成体雌スイスウェブスターの汚染後１１日目時点での処置群における身体、骨格、および肝臓での保持を示す。生理食塩水、ＤＴＰＡ、または３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）処置を、曝露の２４時間後に開始して、１日１回で６日間、腹腔内または経口で投与し、マウスを、１１日の時点で安楽死させた。
【００２９】
【図１５Ａ】図１５Ａは、２３８Ｐｕ−クエン酸エステルを静脈内注射した若齢成体雄スイスウェブスターマウスの剖検における毎日の糞便による排泄率を示す。３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）処置を、曝露の２４時間後に開始して、１日２回または１日１回で６日間、経口投与し、マウスを、７日の時点で安楽死させた。
【００３０】
【図１５Ｂ】図１５Ｂは、２３８Ｐｕ−クエン酸エステルを静脈内注射した若齢成体雄スイスウェブスターマウスの剖検における毎日の尿による排泄率を示す。３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）処置を、曝露の２４時間後に開始して、１日２回または１日１回で６日間、経口投与し、マウスを、７日の時点で安楽死させた。
【００３１】
【図１５Ｃ】図１５Ｃは、図１５Ａおよび図１５Ｂについて、７日目の剖検時点での累積排泄を示す。
【００３２】
【図１６Ａ】図１６Ａは、２３８Ｐｕ−クエン酸エステルを静脈内注射した若齢成体雄スイスウェブスターマウスの剖検における毎日の糞便による排泄率を示す。生理食塩水、ＤＴＰＡ、または３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）処置を、曝露の２４時間後に開始して、１日１回で６日間、腹腔内または経口で投与し、マウスを、１１日の時点で安楽死させた。
【００３３】
【図１６Ｂ】図１６Ｂは、２３８Ｐｕ−クエン酸エステルを静脈内注射した若齢成体雄スイスウェブスターマウスの剖検における毎日の尿による排泄率を示す。生理食塩水、ＤＴＰＡ、または３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）処置を、曝露の２４時間後に開始して、１日１回で６日間、腹腔内または経口で投与し、マウスを、１１日の時点で安楽死させた。
【００３４】
【図１６Ｃ】図１６Ｃは、図１６Ａおよび図１６Ｂについて、１１日目の剖検時点での累積排泄を示す。
【００３５】
【図１７Ａ】図１７Ａは、２３８Ｐｕ−クエン酸エステルを静脈内注射した若齢成体雄スイスウェブスターの汚染後７日目時点での処置群における累積排泄を、対照と比較して示す。ＤＴＰＡまたは３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）処置を、曝露の２４時間後に開始して、１日１回または１日２回で６日間、経口投与し、マウスを、７日の時点で安楽死させた。
【００３６】
【図１７Ｂ】図１７Ｂは、２３８Ｐｕ−クエン酸エステルを静脈内注射した若齢成体雄スイスウェブスターの汚染後１１日目時点での処置群における累積排泄を、対照と比較して示す。ＤＴＰＡまたは３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）処置を、曝露の２４時間後に開始して、１日１回で６日間、腹腔内または経口で投与し、マウスを、１１日の時点で安楽死させた。
【００３７】
【図１８Ａ】図１８Ａは、２３８Ｐｕ−クエン酸エステルを静脈内注射した若齢成体雄スイスウェブスターの汚染後７日目時点での処置群における身体、骨格、および肝臓での保持を示す。生理食塩水、ＤＴＰＡ、または３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）処置を、曝露の２４時間後に開始して、１日１回または１日２回で６日間、経口投与し、マウスを、７日の時点で安楽死させた。
【００３８】
【図１８Ｂ】図１８Ｂは、２３８Ｐｕ−クエン酸エステルを静脈内注射した若齢成体雄スイスウェブスターの汚染後１１日目時点での処置群における身体、骨格、および肝臓での保持を示す。生理食塩水、ＤＴＰＡ、または３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）処置を、曝露の２４時間後に開始して、１日１回で６日間、腹腔内または経口で投与し、マウスを、１１日の時点で安楽死させた。
【００３９】
【図１９Ａ】図１９Ａ〜図１９Ｆは、静脈内、腹腔内、または経口での投与後の雄および雌マウスにおける、［１４Ｃ］−３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）からの放射能の肝臓および腎臓での保持、ならびに排泄に関連するデータを示す。データは、組織含量についてはμｇ−ｅｑ（平均±標準偏差、ｎ＝３匹）として表され、排泄物については投与した用量に対する割合（ＡＤ％）として表される。それぞれ３匹のマウスの群の排泄物をプールした。標準偏差は利用可能ではない。
【００４０】
図１９Ａは、静脈内投与後の雄および雌マウスにおける、［１４Ｃ］−３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）からの放射能の肝臓および腎臓での保持に関連するデータを示す。
【００４１】
【図１９Ｂ】図１９Ｂは、静脈内投与後の雄および雌マウスにおける、［１４Ｃ］−３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）からの放射能の排泄に関連するデータを示す。
【００４２】
【図１９Ｃ】図１９Ｃは、腹腔内投与後の雄および雌マウスにおける、［１４Ｃ］−３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）からの放射能の肝臓および腎臓での保持に関連するデータを示す。
【００４３】
【図１９Ｄ】図１９Ｄは、腹腔内投与後の雄および雌マウスにおける、［１４Ｃ］−３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）からの放射能の排泄に関連するデータを示す。
【００４４】
【図１９Ｅ】図１９Ｅは、経口投与後の雄および雌マウスにおける、［１４Ｃ］−３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）からの放射能の肝臓および腎臓での保持に関連するデータを示す。
【００４５】
【図１９Ｆ】図１９Ｆは、経口投与後の雄および雌マウスにおける、［１４Ｃ］−３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）からの放射能の排泄に関連するデータを示す。
【００４６】
【図２０Ａ】図２０Ａ〜図２０Ｄは、静脈内または経口投与後の雄および雌ラットにおける、［１４Ｃ］−３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）からの放射能の保持および排泄に関連するデータを示す。２または３匹のラットの群に、［１４Ｃ］−３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の単回投薬を施し、投薬後２時間〜２４時間の３つの時点で、安楽死させた。データは、組織含量についてはμｇ−ｅｑ（平均±標準偏差）として表し、排泄物については投与した用量に対する割合（ＡＤ％、平均±標準偏差）として表される。
【００４７】
図２０Ａは、静脈内投与後の雄および雌ラットにおける、［１４Ｃ］−３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）からの放射能の保持に関連するデータを示す。
【００４８】
【図２０Ｂ】図２０Ｂは、静脈内投与後の雄および雌ラットにおける、［１４Ｃ］−３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）からの放射能の排泄に関連するデータを示す。
【００４９】
【図２０Ｃ】図２０Ｃは、経口投与後の雄および雌ラットにおける、［１４Ｃ］−３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）からの放射能の保持に関連するデータを示す。
【００５０】
【図２０Ｄ】図２０Ｄは、経口投与後の雄および雌ラットにおける、［１４Ｃ］−３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）からの放射能の排泄に関連するデータを示す。
【００５１】
【図２１Ａ】図２１Ａおよび図２１Ｂは、雄（図２１Ａ）および雌（図２１Ｂ）ビーグル犬における、３７．５、７５、または１５０ｍｇ／ｋｇの３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の単回経口投薬後の３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の平均血漿濃度の時間経過を示す。平均（±標準偏差）のデータ（ｎ≦３匹）を、名目上の血液採取時間に対してプロットする。３７．５ｍｇ／ｋｇ群から得られた血漿濃度は、定量化の下限よりも低かったため、６時間の時点ではプロットしなかった。
【００５２】
図２１Ａは、雄イヌの血漿における３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）のクリアランスを示す。
【００５３】
【図２１Ｂ】図２１Ｂは、雌イヌの血漿における３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）のクリアランスを示す。
【００５４】
【図２２】図２２は、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）製剤のフラックス比の比較を示す。
【発明を実施するための形態】
【００５５】
種々の実施形態の詳細な説明
大規模な放射性物質事象の可能性のある結果としては、集団の大規模な外部放射線曝露だけでなく、放射性核種の無制御な散布およびそれによる内部汚染がある。放射性物質や核の小事故に対する緊急応答を計画する際には、汚染された個体の処置の必要性を考慮しなければならない。曝露後の処置の所望される基準、たとえば、安全性、投与の容易さ、ならびに複数の放射性核種および問題のレベルに対する広範な有効性を満たすことに加えて、理想的な対応策は、即効性を含み得、性能を低下させる副作用の誘導が最小限からまったくなく、現在の軍事的な化学物質、生物学的物質、放射線、原子力、および爆発物に対する対策と適合可能であり、必要とする輸送上の負荷が最小限なものであり得る。ヒドロキシピリジノン系のアクチニド体外除去剤は、アクチニド、プルトニウム、およびアメリシウムを含む、様々な懸念されている放射性核種の体外除去戦略として、最も有望であることが示されている。
【００５６】
体外除去剤のための様々な製剤が、本明細書において提供される。
【００５７】
以下の開示は、一連の簡略的な定義を提供し、次いで、本明細書において提供されるキレーターの様々な製剤に関するさらなる詳細を提供し、次いで、様々な実施形態に関する一連の実施例を提供する。
【００５８】
定義
「緊急」という用語は、以下を包含する：（ａ）任意の核事故に起因する、放射性同位体の環境への偶発的放出事象。（ｂ）有害な核種の環境への任意の偶発的放出。（ｃ）通常の実験、診断、または治療目的の過程で生じるものを含む、核降下物。（ｄ）ヒトまたは動物対象による、放射性核種の任意の種類の偶発的な取込みおよび保持。（ｅ）揮発性放射性核種に対する任意の他の種類の曝露。（ｆ）任意の種類の放射能事故。
【００５９】
「薬学的に許容される塩」という用語は、本明細書において使用されるとき、および特に、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）を含む化合物の薬学的に許容される塩に言及する場合、化合物の任意の薬学的に許容される塩を指し、好ましくは、化合物の酸付加塩を指す。
【００６０】
「純粋な」、「精製された」、「実質的に精製された」、および「単離された」という用語は、本明細書において使用されるとき、化合物が、その天然の状態で見出される場合に、その天然の状態で会合していると予想されるその他の類似ではない化合物を含まない、実施形態の化合物を指す。本明細書において「純粋な」、「精製された」、「実質的に精製された」、または「単離された」として記載されるある特定の実施形態では、化合物は、少なくとも０．５％〜１％、１％〜５％、５％〜１０％、１０％〜２０％、２０％〜５０％、５０％〜７０％、７０％〜９０％、９０％〜９５％、９５％〜９９％、および９９％〜１００％を構成し得る。一部の実施形態では、化合物の量は、重量基準で、所与の試料の質量の少なくとも５０％または７５％である。「機能的純度」とは、試料または製品中の特定の化合物の、その化合物の機能に悪影響を及ぼし得る試料中の他の化合物に対する量の尺度である。したがって、化合物の活性を妨害しない、試料中の他の成分（たとえば、水）は、試料または製品の純度を判定する際に使用されることはない。
【００６１】
「誘導体」、「バリアント」という用語、または他の類似の用語は、他の化合物の類似体である化合物を指す。
【００６２】
「および／または」という用語は、「および」という選択肢、ならびにその特定の状況における「または」という選択肢の両方を示す。しかしながら、本明細書において別途示されない限り、「または」または「および」という用語の使用は、両方の選択肢の記述を同様に包含する。したがって、「または」という用語の使用は、追加の文脈が、そうあるべきことを示さない限り「および」という選択肢を排除するものとして受け取られるものではない（この定義は、特許請求の範囲の文言には適用されない）。単数形または複数形の用語の使用は、別途示されない限り、両方の選択肢（単数または複数）、ならびに両方の選択肢の組合せ（単数および複数）を包含する。
【００６３】
「阻害」という用語は、本明細書において使用されるとき、活性の完全な遮断を含め、金属の有害な影響の任意の統計学的に有意な減少を指す。たとえば、「阻害」は、金属の有害な影響の約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または１００％の減少を指し得る。
【００６４】
「患者」という用語には、予防的または治療的処置のいずれかを受容するヒト対象および他の哺乳動物対象が含まれる。
【００６５】
「処置する」または「予防する」という用語は、すべての条件下において、完全な処置または完全な予防を必要とするものではない。障害もしくはその症状の発生の遅延、または症状の数の減少は、一部の実施形態では、適切な「予防」であり得る。同様に、障害の症状の重症度の減少もまた、障害の有効な処置であり得る。「予防的処置」は、化合物が、有害な化合物（たとえば、金属、例として、プルトニウムまたはＭＲＩ造影剤）に曝露される前に投与されることを指す。処置はまた、曝露に応答したもの、たとえば、応答療法であってもよい。処置には、改善、体外除去、および／または汚染除去も包含される。
【００６６】
「治療有効量」とは、研究者、獣医師、医師、または他の臨床医が求める組織系、動物、またはヒトにおける生物学的応答または医薬的応答を誘起する、キレート剤、たとえば、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）、５−ＬＩＯ（Ｍｅ−３，２−ＨＯＰＯ）、および／またはＤＴＰＡの量を意味し、この応答には、処置されている疾患または障害の症状の緩和が含まれる。生物学的応答または医薬的応答を誘起するのに必要とされるキレート剤の具体的な量は、処置されている疾患または障害、投与されるキレート剤、投与の方法、および患者の状態を含むがこれらに限定されない、多数の因子に依存すると予想される。
【００６７】
「哺乳動物」とは、本明細書において使用されるとき、哺乳動物とみなされる任意の動物を指す。好ましくは、哺乳動物は、ヒトである。
【００６８】
「薬学的薬剤または薬物」という用語は、本明細書において使用されるとき、患者に適切に投与された場合に、所望される治療効果を誘導することができる、化学的化合物または組成物を指す。本明細書における他の化学用語は、Ｔｈｅ  ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ  Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ  ｏｆ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｔｅｒｍｓ（Ｐａｒｋｅｒ，  Ｓ．編、ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ、Ｓａｎ  Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ（１９８５年））（参照により本明細書に組み込まれる）によって例示されるように、当該技術分野における従来の使用法に従って使用される。
【００６９】
「重金属」という用語は、遷移金属、半金属、周期表の第１３族、第１４族、および第１５族の金属元素、アクチニド、またはランタニドのうちの１つまたは複数を指す。重金属としては、たとえば、ガドリニウム、鉛、スズ、カドミウム、イットリウム、スカンジウム、およびプルトニウムが挙げられる。
医薬製剤
【００７０】
一部の実施形態では、医薬組成物製剤は、キレート剤および１つまたは複数の追加の成分を含む。一部の実施形態では、キレート剤は、１，２−ＨＯＰＯキレート剤である。一部の実施形態では、キレート剤は、３，４，３−ＬＩ−１，２−ＨＯＰＯである。
【００７１】
一部の実施形態では、医薬組成物は、約３００〜約１５００ｍｇの量の１，２−ＨＯＰＯキレート剤、およびオレイン酸ナトリウムを含む。一部の実施形態では、医薬組成物の１，２−ＨＯＰＯキレート剤は、３，４，３−ＬＩ−１，２−ＨＯＰＯである。
【００７２】
一部の実施形態では、意図される使用に適切な任意の量のオレイン酸ナトリウムが、使用され得る。一部の実施形態では、存在するオレイン酸ナトリウムの量は、約５０〜約１５０ｍｇ、たとえば、約７０〜約１３０ｍｇである。一部の実施形態では、オレイン酸ナトリウムは、組成物の総重量の約５〜約２０％、たとえば、組成物の総重量の約８〜１２％または組成物の総重量の約１１％で存在する。本明細書において記載される他の量もまた、様々な用途に適用可能である。
【００７３】
一部の実施形態では、３，４，３−ＬＩ−１，２−ＨＯＰＯキレート剤は、約５０〜約２０００ｍｇ、たとえば、約１００〜１５００ｍｇ、約４００〜１２００ｍｇ、約１００〜３００ｍｇの量、または約６００ｍｇの量で、存在する。本明細書において記載される他の量もまた、様々な用途に適用可能である。
【００７４】
単一の剤形を産生するために薬学的に許容される担体と組み合わせることができるキレート剤の量は、処置を受ける対象および特定の投与様式に応じて変動し得る。キレート剤の好適な投薬量レベルとしては、１日につき、体重１ｋｇ当たり約１ｍｇ〜約５００ｍｇが挙げられる。一部の実施形態では、好適な投薬量レベルは、１日につき、体重１ｋｇ当たり約２０ｍｇ〜約１００ｍｇである。一部の実施形態では、好適な投薬量レベルは、３，４，３−ＬＩ−１，２−ＨＯＰＯについては、体重１ｋｇ当たり約１０μｍｏｌ〜約１００μｍｏｌである。一部の実施形態では、好適な投薬量レベルは、５−ＬＩＯ−Ｍｅ−３，２−ＨＯＰＯについては、体重１ｋｇ当たり約３０μｍｏｌ〜約２００μｍｏｌである。投薬単位形態は、通常、約２０ｍｇ〜約１００ｍｇのキレート剤を含有すると予想される。加えて、医薬組成物は、断続的に、すなわち、毎日、週２回、または週１回の間隔で、投与され得る。しかしながら、特定の対象のための具体的な投薬レベルは、様々な因子に依存することが理解されていると予想される。これらの因子としては、用いられる具体的な化合物の活性、対象の年齢、体重、一般的な健康状態、性別、および食生活、キレート剤の投与の時間および経路ならびに排泄の割合、処置に用いられるキレート剤の組合せ、ならびに治療法が求められる特定の疾患または状態の重症度が挙げられる。
【００７５】
一部の実施形態では、医薬組成物は、錠剤として、カプセルに、および／または１つもしくは複数の顆粒に、パッケージングされる。
【００７６】
医薬組成物の好適な投与様式としては、経口、局所、エアロゾル、スプレーによる吸入、非経口、皮下、静脈内、筋肉内、腹腔内、直腸内、および経膣の投与が挙げられるが、これらに限定されない。非経口という用語には、本明細書において使用されるとき、皮下注射、ならびに静脈内、髄腔内、筋肉内、および胸骨内の注射もしくは注入の技法が含まれる。特定の投与様式は、本発明の化合物を、対象において放射性核種汚染の実際の部位または可能性のある部位に運ぶものである。医薬組成物は、固体、半固体、および／または液体の形態であり得る。一部の実施形態では、上述の製剤のうちの任意のものを、本明細書において提供される金属のいずれかに対して使用することができる。
【００７７】
一部の実施形態では、製剤は、薬学的に許容される担体を含み得る。本明細書において記載される薬学的に許容される担体、たとえば、ビヒクル、アジュバント、賦形剤、および希釈剤は、当業者に周知であり、容易に入手可能である。一部の実施形態では、担体は、本発明の化合物に対して化学的に不活性であり、使用の条件下において、有害な副作用も毒性もまったく有さない。一部の実施形態では、薬学的に許容される担体は、発熱物質を含まない。使用することができる薬学的に許容される担体としては、水、グルコース、ラクトース、アカシアゴム、ゼラチン、マンニトール、デンプンペースト、三ケイ酸マグネシウム、タルク、トウモロコシデンプン、ケラチン、コロイド状シリカ、ジャガイモデンプン、および尿素が挙げられるが、これらに限定されない。
【００７８】
経口投与に好適な医薬組成物としては、（ａ）液体製剤、（ｂ）固体または顆粒として、それぞれ、所定の量の活性成分を含む、カプセル剤、サシェ剤、錠剤、ロゼンジ剤、およびトローチ剤、（ｃ）粉末剤、（ｄ）懸濁液、ならびに（ｅ）好適なエマルジョンが挙げられるが、これらに限定されない。液体製剤は、希釈剤、たとえば、水およびアルコールを含み得、任意選択で、薬学的に許容される界面活性剤を含み得る。カプセル形態は、たとえば、界面活性剤、滑沢剤、および不活性充填剤を含有する、通常のハードまたはソフトシェルを有するゼラチンタイプのものであり得る。錠剤形態は、ラクトース、スクロース、マンニトール、トウモロコシデンプン、ジャガイモデンプン、アルギン酸、微晶質セルロース、アカシア、ゼラチン、グアーゴム、コロイド状二酸化ケイ素、クロスカルメロースナトリウム、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸亜鉛、ステアリン酸などのうちの１つまたは複数を含み得る。錠剤は、１つまたは複数の着色剤、希釈剤、緩衝化剤、崩壊剤、湿潤剤、保存剤、または香味剤をさらに含んでもよい。
【００７９】
医薬組成物は、単独または他の好適な成分と組み合わせて、吸入を通じて投与されるエアロゾル製剤にすることができる。これらのエアロゾル製剤は、加圧型の許容される推進剤（たとえば、ジクロロジフルオロメタン、プロパン、窒素など）または非加圧型の調製物（たとえば、ネブライザーもしくはアトマイザー）に入れることができる。対象の感染部位が、肺である場合、好ましい投与様式は、経口または経鼻のいずれかでのエアロゾル製剤の吸入であり、特に、エアロゾル製剤は、５μｍ〜５００μｍの平均粒子サイズを含むがこれらに限定されない呼吸可能なサイズの粒子を含み得る。
【００８０】
医薬組成物は、注射用製剤であってもよい。注射用組成物に有効な担体の要件は、当業者に周知である（たとえば、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ  ａｎｄ  Ｐｈａｒｍａｃｙ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ、Ｊ．  Ｂ．  Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｃｏｍｐａｎｙ、Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ、Ｐａ．、ＢａｎｋｅｒおよびＣｈａｌｍｅｒｓ編、２３８〜２５０頁（１９８２年）およびＡＳＨＰ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｎ  Ｉｎｊｅｃｔａｂｌｅ  Ｄｒｕｇｓ、Ｔｏｉｓｓｅｌ、第４版、６２２〜６３０頁（１９８６年）を参照されたい）。特定の実施形態では、注射用組成物は、静脈内投与される。非経口投与に好適な製剤としては、抗酸化剤、緩衝化剤、静菌剤、および製剤を意図されるレシピエントの血液と等張性にする溶質を含有し得る水性および非水性の等張滅菌注射用溶液、ならびに懸濁化剤、可溶化剤、増粘剤、安定剤、および保存剤を含み得る水性および非水性の滅菌懸濁液が挙げられる。
【００８１】
医薬組成物は、賦形剤をさらに含み得る。使用され得る賦形剤としては、１つまたは複数の担体、表面活性剤、増粘剤または乳化剤、固体結合剤、分散および懸濁補助剤、可溶化剤、着色剤、香味剤、コーティング剤、崩壊剤、滑沢剤、甘味剤、保存剤、等張剤、およびこれらの組合せが挙げられる。好適な賦形剤の選択および使用は、Ｇｅｎｎａｒｏ編、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：  Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ、第２０版（Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ、２００３年）に教示されており、この開示は、参照により本明細書に組み込まれる。
【００８２】
一部の実施形態では、医薬組成物は、以下の表１および／または表２の製剤のうちの１つまたは複数を含み得る。
【表１Ａ】
2019532040.tif 000003
【表１Ｂ】
2019532040.tif 000004
【表２Ａ】
2019532040.tif 000005
【表２Ｂ】
2019532040.tif 000006
これらの経口剤形のすべては、さらなる開発に好適であることが見出された。投薬構成の広範な評価の後に、賦形剤であるオレイン酸ナトリウムとブレンドした３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）を含有するカプセル剤が、以下の理由のため、臨床および可能性として集団災害の状況の両方にとって最適な剤形であると見られた：１）このカプセル剤形は、用量レベルの調節に関して、錠剤剤形よりも高い柔軟性が可能である。２）望ましくない反応をもたらす味の問題が、チュアブル錠剤、水に溶解するボトル入り粉末剤、または水に溶解する分散性顆粒剤と比較して、最小限である。３）カプセル剤は、他の剤形よりも、必要とする清浄飲用水が少なく、用量の投与における正確性が高い。４）カプセル剤は、用量レベルの調節および投与に関して、小児用製剤に適応させることができる（カプセルを開け、粉末をヨーグルトまたはリンゴソースのような混合物にブレンドすることによって）。
【００８３】
一部の実施形態では、活性成分の量を、増加または減少させながら、任意の製剤において提供される任意の比を、維持することができる。
【００８４】
一部の実施形態では、製剤は、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）および１つまたは複数の賦形剤の薬学的に好適な組成物を含み得る。一部の実施形態では、薬学的に好適な賦形剤としては、マンニトール、ラクトース一水和物、圧縮糖、微晶質セルロース、ヒプロメロース、ポビドン、アルファ化デンプン、クロスカルメロースナトリウム、デンプングリコール酸ナトリウム、クロスポビドン、コロイド状二酸化ケイ素、ステアリン酸マグネシウム、水添植物油（１型）、およびポリソルベート８０が挙げられるが、これらに限定されない。
【００８５】
一部の実施形態では、ｉ）粉末剤、（ｉｉ）経口分散性／溶解性顆粒剤、（ｉｉｉ）チュアブル錠剤、および／または（ｉｖ）従来の即時放出錠剤を含む、様々な形態の製剤を、使用することができる。実施例において行われる研究に基づいて、９個の製剤プロトタイプが、即時薬物放出挙動および所望される物理特性を示し、これらを、ＡＰＩ検証、胃液溶解、および所定の液体クロマトグラフィー法による関連物質の試験に選択した。これらの選択した組成物のうち、２つは、ボトル入り粉末製剤であり、２つは、顆粒製剤であり、３つは、チュアブル錠製剤であり、２つは、従来の錠剤製剤である。これらの製剤のそれぞれの組成を、実施例ならびに上述の表１および２に要約する。すべてのアッセイにより、これらのプロトタイプが、さらなる開発に好適であることを確認した。
【００８６】
一部の実施形態では、粉末製剤は、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）、オレイン酸ナトリウム、ならびに任意選択で、微晶質セルロースおよびカルボキシメチルセルロースの混合物の薬学的に好適な組成物を含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、１ｇの３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）および０．０９２ｇのオレイン酸ナトリウムを含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、１ｇの３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）、０．０９２ｇのオレイン酸ナトリウム、ならびに１ｇの微晶質セルロースおよびカルボキシメチルセルロースを含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、１ｇの３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）、０．０９２ｇのオレイン酸ナトリウム、ならびに０ｇ〜１ｇの微晶質セルロースおよびカルボキシメチルセルロースを含み得る。重量は、製剤の単位当たりのグラム数で列挙されている。
【００８７】
一部の実施形態では、製剤は、経口分散性／溶解性顆粒製剤であり得る。これには、（製剤の単位当たりの成分の重量で）１ｇの３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）、０．０９２ｇのオレイン酸ナトリウム、０．０７５ｇのクロスカルメロースナトリウム、ならびに１．８３３ｇの微晶質セルロースおよびグアーゴムが含まれ得る。一部の実施形態では、製剤は、１ｇの３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）、０．０９２ｇのオレイン酸ナトリウム、０．０７５ｇのクロスカルメロースナトリウム、１．５３３ｍｇ／ｍｌのラクトース一水和物、および０．３ｇのヒプロメロースを含み得る。
【００８８】
一部の実施形態では、経口分散性／溶解性顆粒製剤は、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）、オレイン酸ナトリウム、クロスカルメロースナトリウム、微晶質セルロースおよびグアーゴムの混合物、ラクトース一水和物、ならびにヒプロメロースの薬学的に好適な組成物を含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、１ｇの３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）、０．０９２ｇのオレイン酸ナトリウム、０．０７５ｇのクロスカルメロースナトリウム、０〜１．８３３ｇの微晶質セルロースおよびグアーゴム、０〜１．５３３ｍｇ／ｍｌのラクトース一水和物、ならびに０〜０．３ｇのヒプロメロースを含み得る。すべての重量は、別途示されない限り、製剤の単位当たりのグラム数で列挙されている。
【００８９】
一部の実施形態では、製剤は、チュアブル錠製剤であり得る。一部の実施形態では、チュアブル錠製剤は、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）、オレイン酸ナトリウム、クロスカルメロースナトリウム、微晶質セルロースおよびグアーゴムの混合物、ステアリン酸マグネシウム、ラクトース一水和物、ポビドン、およびクロスポビドンの混合物、ならびにマンニトールの薬学的に好適な組成物を含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、０．５ｇの３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）、０．０４６ｇのオレイン酸ナトリウム、０．０７５ｇのクロスカルメロースナトリウム、１．８５４ｇの微晶質セルロースおよびグアーゴム、ならびに０．０２５ｇのステアリン酸マグネシウムを含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、０．５ｇの３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）、０．０４６ｇのオレイン酸ナトリウム、１．９２９ｇのラクトース一水和物、ポビドン、およびクロスポビドン、ならびに０．０２５ｇのステアリン酸マグネシウムを含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、０．５ｇの３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）、０．０４６ｇのオレイン酸ナトリウム、０．０７５ｇのクロスカルメロースナトリウム、０．９２７ｇの微晶質セルロースおよびグアーゴム、０．９２２７ｇのマンニトール、ならびに０．０２５ｇのステアリン酸マグネシウムを含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、０．５ｇの３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）、０．０４６ｇのオレイン酸ナトリウム、０〜０．０７５ｇのクロスカルメロースナトリウム、０〜１．８５４ｇの微晶質セルロースおよびグアーゴム、０．０２５ｇのステアリン酸マグネシウム、０〜１．９２９ｇのラクトース一水和物、ポビドン、およびクロスポビドン、ならびに０〜０．９２２７ｇのマンニトールを含み得る。すべての重量は、製剤の単位当たりのグラム数で列挙されている。
【００９０】
一部の実施形態では、即時放出錠製剤は、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）、オレイン酸ナトリウム、クロスカルメロースナトリウム、微晶質セルロース、コロイド状二酸化ケイ素、およびステアリン酸マグネシウムの薬学的に好適な組成物を含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、０．５ｇの３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）、０．０４６ｇのオレイン酸ナトリウム、０．０８４ｇのクロスカルメロースナトリウム、０．４１ｇの微晶質セルロース、０．００５ｇのコロイド状二酸化ケイ素、および０．００５ｇのステアリン酸マグネシウムを含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、０．５ｇの３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）、０．０４６ｇのオレイン酸ナトリウム、０．０９２ｇのクロスカルメロースナトリウム、０．５０１ｇの微晶質セルロース、０．００６ｇのコロイド状二酸化ケイ素、および０．００６ｇのステアリン酸マグネシウムを含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、０．５ｇの３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）、０．０４６ｇのオレイン酸ナトリウム、０．０８４〜０．０９２ｇのクロスカルメロースナトリウム、０．４１ｇ〜０．５０１ｇの微晶質セルロース、０．００５ｇ〜０．００６ｇのコロイド状二酸化ケイ素、および０．００５ｇ〜０．００６ｇのステアリン酸マグネシウムを含み得る。すべての重量は、製剤の単位当たりのグラム数で列挙されている。
【００９１】
一部の実施形態では、製剤は、２５℃／相対湿度６０％および４０℃／相対湿度７５％の保管条件下において、６カ月またはそれよりも長く、安定であり得る。そのような安定な製剤は、粉末製剤、チュアブル錠製剤、即時放出錠製剤、５００ｍｇのカプセル製剤、ならびに１００ｍｇのカプセル製剤であり得る。これらのプロトタイプ製剤のそれぞれの組成を、以下に要約する。
【００９２】
一部の実施形態では、粉末製剤は、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）、オレイン酸ナトリウム、ならびに微晶質セルロースおよびカルボキシメチルセルロースの混合物の薬学的に好適な組成物を含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、５００ｍｇの３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）、４６ｍｇのオレイン酸ナトリウム、ならびに５００ｍｇの微晶質セルロースおよびカルボキシメチルセルロースを含み得る。すべての重量は、製剤の単位当たりのミリグラム数で列挙されている。
【００９３】
一部の実施形態では、チュアブル錠製剤は、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）、オレイン酸ナトリウム、クロスカルメロースナトリウム、微晶質セルロースおよびグアーゴムの混合物、マンニトール、ならびにステアリン酸マグネシウムの薬学的に好適な組成物を含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、５００ｍｇの３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）、４６ｍｇのオレイン酸ナトリウム、７５ｍｇのクロスカルメロースナトリウム、９２７ｍｇの微晶質セルロースおよびグアーゴム、９２７ｍｇのマンニトール、ならびに２５ｍｇのステアリン酸マグネシウムを含み得る。すべての重量は、製剤の単位当たりのミリグラム数で列挙されている。
【００９４】
一部の実施形態では、即時放出錠製剤は、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）、オレイン酸ナトリウム、クロスカルメロースナトリウム、微晶質セルロース、コロイド状二酸化ケイ素、およびステアリン酸マグネシウムの薬学的に好適な組成物を含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、５００ｍｇの３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）、４６ｍｇのオレイン酸ナトリウム、９２ｍｇのクロスカルメロースナトリウム、５０１ｍｇの微晶質セルロース、６ｍｇのコロイド状二酸化ケイ素、および６ｍｇのステアリン酸マグネシウムを含み得る。重量は、製剤の単位当たりのミリグラム数で列挙されている。
【００９５】
一部の実施形態では、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）およびオレイン酸ナトリウムの薬学的に好適な組成物を含む、５００ｍｇのカプセル製剤が、提供され得る。一部の実施形態では、本組成物は、５００ｍｇの３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）および５５．６ｍｇのオレイン酸ナトリウムを含み得る。
【００９６】
一部の実施形態では、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）およびオレイン酸ナトリウムの薬学的に好適な組成物を含む、１００ｍｇのカプセル製剤が、提供され得る。一部の実施形態では、本組成物は、１００ｍｇの３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）および１１．１  ｍｇのオレイン酸ナトリウムを含み得る。
【００９７】
製剤は、体表面積に基づくマウス用量からヒトに相当する用量ＨＥＤへの許容される変換システムを使用して、２．５、１２．５、２５、および５０μｍｏｌ／ｋｇのヒト用量を含むがこれらに限定されない、様々な用量での継続的な注射または経管摂取を介した非経口（ｉｐ）または経口（ｐｏ）での投与用に構成され得る。非経口製剤は、純粋な３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）であり得るが、経口製剤は、９０：１０の重量比の３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）およびオレイン酸ナトリウムを含み得る。
【００９８】
一部の実施形態では、腹腔内注射用製剤は、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の薬学的に好適な組成物を含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、３０μｍｏｌ／ｋｇ腹腔内の濃度（およそでヒト用量２．５μｍｏｌ／ｋｇに相当する）の３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）を含み得る。
【００９９】
一部の実施形態では、経口製剤は、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）およびオレイン酸ナトリウムの薬学的に好適な組成物を含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、９０：１０の重量比の３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）およびオレイン酸ナトリウムを含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、１５０μｍｏｌ／ｋｇ経口の濃度の３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）を含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、３００μｍｏｌ／ｋｇ経口の濃度の３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）を含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、３００μｍｏｌ／ｋｇ経口の濃度の３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）を含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、１５０μｍｏｌ／ｋｇ経口〜６００μｍｏｌ／ｋｇ経口の濃度の３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）を含み得る。
【０１００】
一部の実施形態では、腹腔内注射、経口、または静脈内注射用の製剤は、［１４Ｃ］−３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）およびオレイン酸ナトリウムの薬学的に好適な組成物を含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、１μｍｏｌ／ｋｇの投薬量の［１４Ｃ］−３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）および０％オレイン酸ナトリウムを含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、１μｍｏｌ／ｋｇの投薬量の［１４Ｃ］−３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）および１０％オレイン酸ナトリウムを含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、１８００μｍｏｌ／ｋｇの投薬量の［１４Ｃ］−３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）および０％オレイン酸ナトリウムを含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、１８００μｍｏｌ／ｋｇの投薬量の［１４Ｃ］−３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）および１０％オレイン酸ナトリウムを含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、１μｍｏｌ／ｋｇ〜１８００μｍｏｌ／ｋｇの投薬量の［１４Ｃ］−３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）および０〜１０％オレイン酸ナトリウムを含み得る。
【０１０１】
一部の実施形態では、経口で投与されるカプセル製剤は、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の薬学的に好適な組成物を含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、５０μｍｏｌ／ｋｇの３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）を含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、１００μｍｏｌ／ｋｇの３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）を含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、２００μｍｏｌ／ｋｇの３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）を含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、５０μｍｏｌ／ｋｇ〜２００μｍｏｌ／ｋｇの３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）を含み得る。
【０１０２】
実施例（実施例１０〜１１）に概説されるように、経口透過促進剤を使用した活性医薬成分３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の透過性の強化を、評価した。１５種類の異なる透過促進剤を、人工的なＧＩＴ脂質膜を用いたｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ＰＡＭＰＡアッセイを使用して、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の透過性を増加させる能力に関して、評価した。１０ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０および１ｍｇ／ｍＬのＡＰＩを含有する１つの製剤について、透過性の有意な増加が観察された。他の試験した製剤はすべて、透過性の改善を示さなかったかまたはほとんど示さなかった。
【０１０３】
一部の実施形態では、製剤は、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）および１つまたは複数の賦形剤の薬学的に好適な組成物を含み得る。一部の実施形態では、賦形剤としては、ラウリル硫酸ナトリウム、カプロラクタム、ポリソルベート８０、デオキシコール酸ナトリウム、ミリスチン酸イソプロピル、１−フェニルピペラジン、ピペリン、メントン、ラブラファック親油性ＷＬ  １３４９、ゲルシア４４／１４、ラブラフィルＭ２１３０  ＣＳ、ラブラフィルＭ２１２５  ＣＳ、マイシン３５−１、ペセオール、ラブラソール、デシル硫酸ナトリウム、オクチル硫酸ナトリウム、デシルトリメチルアンモニウムブロミド、スパン−８０（モノオレイン酸ソルビタン）、Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００、グリココール酸ナトリウム水和物、コール酸、ヘプタン酸、パルミチン酸イソプロピル、ラウリン酸メチル、オレイン酸ナトリウム、尿素、１−オクチル−２−ピロリドン、１−メチルピペラジン、１−メチル−２−ピロリジノン、ｎ−カプロン酸、サリチル酸ナトリウム、（±）−リモネン、Ｌ−フェンコン、シネオール、ピネンオキシド、２−オクチル−１−ドデカノール、クミンシード油、カプロイルＰＧＭＣ、カプロイル９０（ジカプリル酸プロピレングリコール）、ラウログリコールＦＣＣ、ラウログリコール９０、ラブラファックＰＧ、トランスクトール、ゲルシア５０／１３、およびラブラフィルＭ１９４４  ＣＳを挙げることができるが、これらに限定されない。
【０１０４】
一部の実施形態では、本組成物は、１ｍｇ／ｍｌの濃度の３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）および１０ｍｇ／ｍｌの濃度のポリソルベート８０を含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、１ｍｇ／ｍｌの濃度の３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）および２．５ｍｇ／ｍｌの濃度の２−オクチル−１−ドデカノールを含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、１ｍｇ／ｍｌの濃度の３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）および２．５ｍｇ／ｍｌの濃度のオレイン酸ナトリウムを含み得る。
【０１０５】
一部の実施形態では、製剤は、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）および１つまたは複数の賦形剤の薬学的に好適な組成物を含み得る。一部の実施形態では、薬学的に好適な賦形剤としては、オレイン酸ナトリウム、ラウリル硫酸ナトリウム、カプロラクタム、ポリソルベート８０、デオキシコール酸ナトリウム、ミリスチン酸イソプロピル、１−フェニルピペラジン、ピペリン、メントン、ラブラファック親油性、ゲルシア４４／１４、ラブラフィルＭ２１３０  ＣＳ、ラブラフィルＭ２１２５  ＣＳ、マイシン３５−１、ペセオール、ラブラソール、デシル硫酸ナトリウム、オクチル硫酸ナトリウム、デシルトリメチルアンモニウムブロミド、スパン−８０（モノオレイン酸ソルビタン）、ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００、グリココール酸ナトリウム水和物、コール酸、ヘプタン酸、パルミチン酸イソプロピル、ラウリン酸メチル、オレイン酸ナトリウム、尿素、１−オクチル−２−ピロリドン、１−メチルピペラジン、１−メチル−２−ピロリジノン、ｎ−カプロン酸、サリチル酸ナトリウム、（±）−リモネン、Ｌ−フェンコン、シネオール、ピネンオキシド、２−オクチル−１−ドデカノール、クミンシード油、カプロイルＰＧＭＣ、カプロイル９０（ジカプリル酸プロピレングリコール）、ラウログリコールＦＣＣ、ラウログリコール９０、ラブラファックＰＧ、トランスクトール、ゲルシア５０／１３、ラブラフィルＭ１９４４  ＣＳ、マンニトール、圧縮糖、微晶質セルロースおよびグアーゴムの共処理物（ｃｏｐｒｏｃｅｓｓｅｄ  ｍｉｃｒｏｃｒｙｓｔａｌｌｉｎｅ  ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ  ａｎｄ  ｇｕａｒ  ｇｕｍ）、ラクトース一水和物およびポビドンの共処理物（ｃｏｐｒｏｃｅｓｓｅｄ  ｌａｃｔｏｓｅ  ｍｏｎｏｈｙｄｒａｔｅ  ａｎｄ  ｐｏｖｉｄｏｎｅ）、微晶質セルロース、ラクトース一水和物、ポビドン、ＨＰＭＣ、ヒプロメロース、アルファ化デンプン、クロスカルメロースナトリウム、デンプングリコール酸ナトリウム、クロスポビドン、コロイド状二酸化ケイ素、ステアリン酸マグネシウム、微晶質セルロースおよびカルボキシメチルセルロース、１型水添植物油、ラクトース一水和物、ポビドン、およびクロスポビドンの共処理物（ｃｏ−ｐｒｏｃｅｓｓｅｄ  ｌａｃｔｏｓｅ  ｍｏｎｏｈｙｄｒａｔｅ，  ｐｏｖｉｄｏｎｅ  ａｎｄ  ｃｒｏｓｐｏｖｉｄｏｎｅ）、微晶質セルロースおよびカルボキシメチルセルロースの共処理物（ｃｏ−ｐｒｏｃｅｓｓｅｄ  ｍｉｃｒｏｃｒｙｓｔａｌｌｉｎｅ  ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ  ａｎｄ  ｃａｒｂｏｘｙｍｅｔｈｙｌ  ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ）、マルトデキストリン、クエン酸ナトリウム、ならびに／または塩化ナトリウムが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１０６】
一部の実施形態では、製剤は、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）および１つまたは複数の透過促進剤の薬学的に好適な組成物を含み得る。一部の実施形態では、透過促進剤としては、オレイン酸ナトリウム、ラウリル硫酸ナトリウム、カプロラクタム、ポリソルベート８０、デオキシコール酸ナトリウム、ミリスチン酸イソプロピル、１−フェニルピペラジン、ピペリン、メントン、ラブラファック親油性、ゲルシア４４／１４、ラブラフィルＭ２１３０  ＣＳ、ラブラフィルＭ２１２５  ＣＳ、マイシン３５−１、ペセオール、ラブラソール、デシル硫酸ナトリウム、オクチル硫酸ナトリウム、デシルトリメチルアンモニウムブロミド、スパン−８０（モノオレイン酸ソルビタン）、ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００、グリココール酸ナトリウム水和物、コール酸、ヘプタン酸、パルミチン酸イソプロピル、ラウリン酸メチル、オレイン酸ナトリウム、尿素、１−オクチル−２−ピロリドン、１−メチルピペラジン、１−メチル−２−ピロリジノン、ｎ−カプロン酸、サリチル酸ナトリウム、（±）−リモネン、Ｌ−フェンコン、シネオール、ピネンオキシド、２−オクチル−１−ドデカノール、クミンシード油、カプロイルＰＧＭＣ、カプロイル９０（ジカプリル酸プロピレングリコール）、ラウログリコールＦＣＣ、ラウログリコール９０、ラブラファックＰＧ、トランスクトール、ゲルシア５０／１３、および／またはラブラフィルＭ１９４４  ＣＳが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１０７】
一部の実施形態では、本組成物は、１重量％〜１０重量％のオレイン酸ナトリウムを含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、５ｍｇ〜１００ｍｇのオレイン酸ナトリウムを含み得る。
【０１０８】
一部の実施形態では、本組成物は、０．１ｍｇ／ｍｌの濃度のラウリル硫酸ナトリウムを含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、２．５ｍｇ／ｍｌの濃度のカプロラクタムを含み得る。
【０１０９】
一部の実施形態では、本組成物は、２．５ｍｇ／ｍｌの濃度のポリソルベート８０を含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、２ｍｇ／ｍｌの濃度のポリソルベート８０を含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、１０ｍｇ／ｍｌの濃度のポリソルベート８０を含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、２ｍｇ／ｍｌ〜１０ｍｇ／ｍｌの濃度のポリソルベート８０を含み得る。
【０１１０】
一部の実施形態では、本組成物は、２．５ｍｇ／ｍｌの濃度のデオキシコール酸ナトリウムを含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、１０ｍｇ／ｍｌの濃度のデオキシコール酸ナトリウムを含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、２．５ｍｇ／ｍｌ〜１０ｍｇ／ｍｌの濃度のデオキシコール酸ナトリウムを含み得る。
【０１１１】
一部の実施形態では、本組成物は、２．５ｍｇ／ｍｌの濃度のミリスチン酸イソプロピルを含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、１０ｍｇ／ｍｌの濃度のミリスチン酸イソプロピルを含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、２．５ｍｇ／ｍｌ〜１０ｍｇ／ｍｌの濃度のミリスチン酸イソプロピルを含み得る。
【０１１２】
一部の実施形態では、本組成物は、２．５ｍｇ／ｍｌの濃度の１−フェニルピペラジンを含み得る。
【０１１３】
一部の実施形態では、本組成物は、２．５ｍｇ／ｍｌの濃度のピペリンを含み得る。
【０１１４】
一部の実施形態では、本組成物は、２．５ｍｇ／ｍｌの濃度のメントンを含み得る。
【０１１５】
一部の実施形態では、本組成物は、５ｍｇ／ｍｌの濃度のラブラファック親油性ＷＬ  １３４９を含み得る。
【０１１６】
一部の実施形態では、本組成物は、５ｍｇ／ｍｌの濃度のゲルシア４４／１４を含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、２０ｍｇ／ｍｌの濃度のゲルシア４４／１４を含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、１ｍｇ／ｍｌ〜４０ｍｇ／ｍｌの濃度のゲルシア４４／１４を含み得る。
【０１１７】
一部の実施形態では、本組成物は、５ｍｇ／ｍｌの濃度のラブラフィルＭ２１３０  ＣＳを含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、５ｍｇ／ｍｌの濃度のラブラフィルＭ２１２５  ＣＳを含み得る。
【０１１８】
一部の実施形態では、本組成物は、５ｍｇ／ｍｌの濃度のマイシン３５−１を含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、２０ｍｇ／ｍｌの濃度のマイシン３５−１を含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、１ｍｇ／ｍ〜４０ｍｇ／ｍｌの濃度のマイシン３５−１を含み得る。
【０１１９】
一部の実施形態では、本組成物は、５ｍｇ／ｍｌの濃度のペセオール３５−１を含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、２０ｍｇ／ｍｌの濃度のペセオール３５−１を含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、１ｍｇ／ｍ〜４０ｍｇ／ｍｌの濃度のペセオール３５−１を含み得る。
【０１２０】
一部の実施形態では、本組成物は、５ｍｇ／ｍｌの濃度のラブラソールを含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、０．２ｍｇ／ｍｌの濃度のデシル硫酸ナトリウムを含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、０．２ｍｇ／ｍｌの濃度のオクチル硫酸ナトリウムを含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、１ｍｇ／ｍｌの濃度のデシルトリメチルアンモニウムブロミドを含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、２．５ｍｇ／ｍｌの濃度のスパン−８０（モノオレイン酸ソルビタン）を含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、２．５ｍｇ／ｍｌの濃度のｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００を含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、１．０ｍｇ／ｍｌの濃度のグリココール酸ナトリウム水和物を含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、２．５ｍｇ／ｍｌの濃度のコール酸を含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、２．５ｍｇ／ｍｌの濃度のヘプタン酸を含み得る。
【０１２１】
一部の実施形態では、本組成物は、２．５ｍｇ／ｍｌの濃度のパルミチン酸イソプロピルを含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、２．５ｍｇ／ｍｌの濃度のラウリン酸メチルを含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、２．５ｍｇ／ｍｌの濃度のオレイン酸ナトリウムを含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、２．５ｍｇ／ｍｌの濃度の尿素を含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、２．５ｍｇ／ｍｌの濃度の１−オクチル−２−ピロリドンを含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、２．５ｍｇ／ｍｌの濃度の１−メチルピペラジンを含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、２．５ｍｇ／ｍｌの濃度の１−メチル−２−ピロリジノンを含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、２．５ｍｇ／ｍｌの濃度のｎ−カプロン酸を含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、２．５ｍｇ／ｍｌの濃度のサリチル酸ナトリウムを含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、２．５ｍｇ／ｍｌの濃度の（±）−リモネンを含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、２．５ｍｇ／ｍｌの濃度のＬ−フェンコンを含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、２．５ｍｇ／ｍｌの濃度のシネオールを含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、２．５ｍｇ／ｍｌの濃度のピネンオキシドを含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、２．５ｍｇ／ｍｌの濃度の２−オクチル−１−ドデカノールを含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、２．５ｍｇ／ｍｌの濃度のクミンシード油を含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、５ｍｇ／ｍｌの濃度のカプロイルＰＧＭＣを含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、５ｍｇ／ｍｌの濃度のカプロイル９０（ジカプリル酸プロピレングリコール）を含み得る。
【０１２２】
一部の実施形態では、本組成物は、５ｍｇ／ｍｌの濃度のラウログリコールＦＣＣを含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、５ｍｇ／ｍｌの濃度のラウログリコール９０を含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、５ｍｇ／ｍｌの濃度のラブラファックＰＧを含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、５ｍｇ／ｍｌの濃度のトランスクトールを含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、５ｍｇ／ｍｌの濃度のゲルシア５０／１３を含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、５ｍｇ／ｍｌの濃度のラブラフィルＭ１９４４  ＣＳを含み得る。
【０１２３】
一部の実施形態では、製剤は、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）および１つまたは複数の希釈剤の薬学的に好適な組成物を含み得る。一部の実施形態では、希釈剤としては、マンニトール、圧縮糖、微晶質セルロースおよびグアーゴムの共処理物、ラクトース一水和物およびポビドンの共処理物、微晶質セルロース、ならびにラクトース一水和物が挙げられるが、これらに限定されない。一部の実施形態では、本組成物は、１０重量％の希釈剤を含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、７０重量％の希釈剤を含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、１０重量％〜７０重量％の希釈剤を含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、２ｍｇ／ｍｌの濃度のマンニトールを含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、２ｍｇ／ｍｌの濃度の圧縮糖を含み得る。
【０１２４】
一部の実施形態では、製剤は、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）および１つまたは複数の結合剤の薬学的に好適な組成物を含み得る。一部の実施形態では、結合剤としては、ポビドン、ＨＰＭＣ、ヒプロメロース、およびアルファ化デンプンが挙げられるが、これらに限定されない。一部の実施形態では、本組成物は、１０重量％の結合剤を含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、７０重量％の結合剤を含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、１０重量％〜７０重量％の結合剤を含み得る。
【０１２５】
一部の実施形態では、本組成物は、２ｍｇ／ｍｌの濃度のポビドンを含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、２ｍｇ／ｍｌの濃度のヒプロメロースを含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、２ｍｇ／ｍｌの濃度のアルファ化デンプンを含み得る。
【０１２６】
一部の実施形態では、製剤は、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）および１つまたは複数の崩壊剤の薬学的に好適な組成物を含み得る。一部の実施形態では、崩壊剤は、クロスカルメロースナトリウム、デンプングリコール酸ナトリウム、およびクロスポビドンが挙げられるが、これらに限定されない。一部の実施形態では、本組成物は、２重量％の崩壊剤を含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、８重量％の崩壊剤を含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、２重量％〜８重量％の崩壊剤を含み得る。
【０１２７】
一部の実施形態では、本組成物は、２ｍｇ／ｍｌの濃度のクロスカルメロースナトリウムを含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、２ｍｇ／ｍｌの濃度のデンプングリコール酸ナトリウムを含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、２ｍｇ／ｍｌの濃度のクロスポビドンを含み得る。
【０１２８】
一部の実施形態では、製剤は、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）ならびに１つまたは複数の滑沢剤および滑剤の薬学的に好適な組成物を含み得る。一部の実施形態では、滑沢剤および滑剤としては、コロイド状二酸化ケイ素およびステアリン酸マグネシウムが挙げられるが、これらに限定されない。一部の実施形態では、本組成物は、０．２重量％の滑沢剤および滑剤を含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、２０重量％の滑沢剤および滑剤を含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、０．２重量％〜２０重量％の滑沢剤および滑剤を含み得る。
【０１２９】
一部の実施形態では、本組成物は、２ｍｇ／ｍｌの濃度のコロイド状二酸化ケイ素を含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、２ｍｇ／ｍｌの濃度のステアリン酸マグネシウムを含み得る。
【０１３０】
一部の実施形態では、製剤は、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）および１つまたは複数の他の賦形剤の薬学的に好適な組成物を含み得る。一部の実施形態では、他の賦形剤としては、微晶質セルロースおよびカルボキシメチルセルロース、微晶質セルロースおよびグアーゴム、１型水添植物油、ラクトース一水和物、ポビドン、およびクロスポビドンの共処理物、微晶質セルロースおよびカルボキシメチルセルロースの共処理物、マルトデキストリン、クエン酸ナトリウム、ならびに塩化ナトリウムが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１３１】
一部の実施形態では、本組成物は、２ｍｇ／ｍｌの濃度の１型水添植物油を含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、０．００８Ｍの濃度のクエン酸ナトリウムを含み得る。一部の実施形態では、本組成物は、０．１４Ｍの濃度の塩化ナトリウムを含み得る。
【０１３２】
本発明において使用するのに好適な１，２−ＨＯＰＯおよび３，２−ＨＯＰＯキレート剤は、米国特許第４，６９８，４３１号（「Ｈｙｄｒｏｘｙｐｙｒｉｄｏｎａｔｅ  Ｃｈｅｌａｔｉｎｇ  Ａｇｅｎｔｓ」）、同第５，６３４，９０１号（「３−Ｈｙｄｒｏｘｙ−２（１Ｈ）−ｐｙｒｉｄｏｎａｔｅ  Ｃｈｅｌａｔｉｎｇ  Ａｇｅｎｔｓ」）、および同第５，８９２，０２９号（「３−Ｈｙｄｒｏｘｙ−２（１Ｈ）−ｐｙｒｉｄｏｎａｔｅ  Ｃｈｅｌａｔｉｎｇ  Ａｇｅｎｔｓ」）に教示されており、これらのすべては、参照により本明細書に組み込まれる。
【０１３３】
好適な１，２−ＨＯＰＯキレート剤としては、以下の構造によって定義される分子が挙げられるが、これらに限定されず、
【化１】
2019532040.tif 000007
式中、Ｒは、ヒドロキシ基または
【化２】
2019532040.tif 000008
であり、Ｒ１およびＲ２は、Ｈ、−−ＣＨ３、−−ＣＨ２ＣＨ３、および−−ＣＨ２−−φからなる群から選択され、Ｘは、水素、アルカリ金属イオン、または第四級アンモニウムイオンのいずれかである。
【０１３４】
好適な１，２−ＨＯＰＯキレート剤としては、
【化３−１】
2019532040.tif 000009
【化３−２】
2019532040.tif 000010
を含む、複数のＨＯＰＯ型の構造を組み込んだ分子が挙げられるが、これらに限定されず、式中、ｌ、ｍ、およびｎは、１〜２０の整数である。本発明の特定の実施形態では、ｍは、３である。本発明の特定の実施形態では、ｍは、３であり、ｎは、４である。本発明の特定の実施形態では、ｌおよびｎは、３であり、ｍは、４である。
【０１３５】
好適な１，２−ＨＯＰＯおよび３，２−ＨＯＰＯキレート剤としては、複数のキレート機能性単位が、１つまたは複数の結合メンバーによって結合されたものから構成されるキレート剤が挙げられるが、これらに限定されず、前記キレート機能性単位は、独立して、
【化４】
2019532040.tif 000011
からなる群から選択され、前記キレート剤の前記複数のキレート機能性単位のうちの少なくとも１つが、
【化５】
2019532040.tif 000012
であり、式中、Ｒ１およびＲ２は、独立して、水素、Ｃ１〜４脂肪族炭化水素基、および単一のハロゲン化物、ヒドロキシ、カルボキシ、アクリルアミド基、またはアリール基で置換されたＣ１〜４脂肪族炭化水素基からなる群から選択され、Ｒ’は、結合メンバーへの結合、水素原子、Ｃ１〜８脂肪族炭化水素基、アリール基、およびアミノ基、カルボキシ基、またはヒドロキシ基で置換されたＣ１〜８脂肪族炭化水素基からなる群から選択されるメンバーである。
【０１３６】
好適な３，２−ＨＯＰＯキレート剤としては、構造：
【化６】
2019532040.tif 000013
を有するキレート剤が挙げられるが、これらに限定されず、式中、Ｒ１は、水素、Ｃ１〜４脂肪族炭化水素基、および単一のハロゲン化物基、ヒドロキシ基、カルボキシ基、またはアリール基で置換されたＣ１〜４脂肪族炭化水素基からなる群から選択されるメンバーであり、Ｚは、Ｏ、ＮＨ、Ｎ−−アルキル、およびＮ−−アリールからなる群から選択されるメンバーであり、ａは、２〜４であり、ｂは、２〜４である。
【０１３７】
好適な１，２−ＨＯＰＯおよび好適な３，２−ＨＯＰＯを、図１に示す。
【０１３８】
１，２−ＨＯＰＯおよび３，２−ＨＯＰＯキレート剤を合成するための方法は、米国特許第４，６９８，４３１号、同第５，６３４，９０１号、および同第５，８９２，０２９号に教示されており、これらのすべては、参照により本明細書に組み込まれる。
【０１３９】
キレート剤は、アクチニドおよび／またはランタニド、たとえば、Ｅｕ、Ｐｕ、Ｎｐ、Ｔｈ、Ａｍ、および／またはＣｆのカチオン、たとえば、１５２Ｅｕ（ＩＩＩ）、２４１Ａｍ（ＩＩＩ）、２３８Ｐｕ（ＩＶ）、２３７Ｎｐ（ＩＶ）、２３７Ｎｐ（Ｖ）、および２３３Ｕ（ＶＩ）のものと結合するもしくはそれをキレートすることができるか、またはそれと安定な錯体を形成することができる。
【０１４０】
本明細書において提供される実施形態は、キレーターのプロドラッグを含む。そのようなプロドラッグは、一般に、ｉｎ  ｖｉｖｏで、必要とされる化合物に容易に変換可能である、化合物の機能的誘導体である。したがって、本方法において、「投与すること」という用語は、具体的に開示されている化合物または具体的に開示されていない可能性があるが、それを必要とする対象に投与した後に、ｉｎ  ｖｉｖｏで示された化合物に変換される化合物を用いた、記載されている様々な障害の処置を包含するものとする。好適なプロドラッグ誘導体の選択および調製のための従来の手順は、たとえば、Ｗｅｒｍｕｔｈ編、Ｔｈｅ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、第２版、５６１〜５８６頁のＷｅｒｍｕｔｈ、「Ｄｅｓｉｇｎｉｎｇ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ  ａｎｄ  Ｂｉｏｐｒｅｃｕｒｓｏｒｓ」（Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ、２００３年）に記載されている。プロドラッグには、ｉｎ  ｖｉｖｏ（たとえば、ヒトの体内）で加水分解されて、本発明の化合物またはその塩を産生するエステルが含まれる。好適なエステル基としては、限定することなく、薬学的に許容される脂肪族カルボン酸、特に、それぞれのアルキルまたはアルケニル部分が、好ましくは６個以下の炭素原子を有す、アルカン酸、アルケン酸、シクロアルカン酸、およびアルカン二酸（ａｌｋａｎｅｄｉｏｉｃ  ａｃｉｄ）に由来するものが挙げられる。例示的なエステルとしては、ギ酸エステル、酢酸エステル、プロピオン酸エステル、酪酸エステル、アクリル酸エステル、クエン酸エステル、コハク酸エステル、およびエチルコハク酸エステルが挙げられる。
【０１４１】
使用の方法
一部の実施形態では、重金属曝露について、対象を処置するための方法が、提供される。本方法は、過剰量の、重金属、アクチニド、および／もしくはランタニド、またはこれらの混合物のうちの１つまたは複数を有する対象に、治療有効量の、１，２−ＨＯＰＯキレート剤を含む医薬製剤を投与することを含む。治療法のさらなる選択肢はまた、米国特許公開第２０１２０２１４８４３号に提供されており、その全体が、参照により本明細書に組み込まれる。処置の方法は、そのような処置を必要とする対象に、キレート剤（本明細書において提供されるような）を含む、治療有効量の１つまたは複数の医薬組成物を投与することによって、必要とする対象を処置することを含み得る。一部の実施形態において、対象は、１つまたは複数の公知または未知のアクチニドおよび／もしくはランタニド、またはその混合物に、曝露されているか、それと接触しているか、またはそれによって汚染されている。
【０１４２】
本発明は、記載される特定の実施形態に制限されるものではなく、したがって、当然ながら、変動し得ることを、理解されたい。本明細書において使用される用語は、特定の実施形態を説明する目的のものにすぎず、本発明の範囲は、添付の特許請求の範囲によってのみ制限されるため、用語は、制限することを意図するものではないこともまた、理解されたい。
【０１４３】
値の範囲が提供される場合、文脈により別途明確に示されない限り、下限の単位の１０分の１まで、その範囲の上限と下限の間の中間にあるそれぞれの値もまた、具体的に開示されると理解される。任意の言及された値または言及された範囲の中間にある値と、任意の他の言及された値またはその言及された範囲の中間にある値の間のより小さな範囲はそれぞれ、本発明に包含される。これらのより小さな範囲の上限および下限は、独立して、その範囲に含まれるかまたはそこから除外されてもよく、上下限のいずれかがより小さな範囲に含まれる場合、いずれも含まれない場合、または両方が含まれる場合、そのそれぞれの範囲もまた、本発明に包含され、その言及された範囲において任意の上下限が具体的に除外される場合がある。言及された範囲が、上下限の一方または両方を含む場合、これらの含まれる上下限のうちのいずれかまたは両方を除外した範囲もまた、本発明に含まれる。
【０１４４】
別途定義されない限り、本明細書において使用されるすべての技術用語および科学用語は、本発明が属する分野の当業者によって広く理解されているものと同じ意味を有する。本明細書において記載されるものと類似または同等のあらゆる方法および材料を、本発明の実施または試験で使用できるが、ここで好適な方法および材料を記載する。本明細書において言及されたすべての刊行物は、参照により本開示に組み込まれ、刊行物で引用されたものに関連する方法および／または材料を開示および記載する。
【０１４５】
本明細書および添付の特許請求の範囲において使用されるとき、単数形の「１つの（ａ）」、「１つの（ａｎ）」、および「その（ｔｈｅ）」は、文脈により別途明確に示されない限り、複数形の参照物を含むことに留意されたい。したがって、たとえば、「１つのキレート剤（ａ  ｃｈｅｌａｔｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）」への言及は、複数のそのようなキレート剤を含むなどとなる。
【０１４６】
本発明を記載してきたが、以下の実施例は、本主題の発明を例示するために、例として提供されるものであり、限定として提供されるものではない。
【実施例】
【０１４７】
（実施例１）
３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）−賦形剤適合性研究
概要
この報告に記載される分析研究の目標は、８週間にわたって、２５℃／相対湿度６０％および４０℃／相対湿度７５％の条件下において、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）と選択された医薬賦形剤との間の相互作用を評価することであった。様々な試料の物理的な外観および効力を、目視観察および高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）分析によって、Ｔ＝０、２、４、および８週間で、評価した。
【０１４８】
ＨＰＬＣシステム適合性および直線性を、それぞれの時点で検証し、プロトコール要件に含めた。試験した１４種類の化合物のうち、４種類の賦形剤（アルファ化デンプン、圧縮糖、プロビドン（providone）、および水添植物油）は、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の純度の低下または特定の不純物含量の増加をもたらした。これらの結果を、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）のバイオアベイラビリティの強化に関するさらなる調査のために考慮に入れる。
【０１４９】
１．研究の目的
本研究の目的は、研究の成果を裏付けるために使用することができるデータを得ることであった。これは、２１  ＣＦＲ  Ｐａｒｔ  ５８に記載されるようにＵ．Ｓ．Ｆｏｏｄ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ（ＦＤＡ）、「Ｇｏｏｄ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｆｏｒ  Ｎｏｎｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｓｔｕｄｉｅｓ」（ＧＬＰ）の規定に則って行われたものではなかった。しかしながら、本研究は、データの品質および完全性を確保するために、標準的な慣例に従って計画、実行、記録、および報告を行った。
【０１５０】
２．研究の目標
本研究の目標は、８週間にわたって、２５℃／相対湿度６０％および４０℃／相対湿度７５％の条件下において、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）と選択された医薬賦形剤との間の相互作用を評価することであり、以下のものが含まれた。
ａ．マンニトール
ｂ．ラクトース一水和物
ｃ．圧縮糖
ｄ．微晶質セルロース
ｅ．ヒプロメロース
ｆ．ポビドン
ｇ．アルファ化デンプン
ｈ．クロスカルメロースナトリウム
ｉ．デンプングリコール酸ナトリウム
ｊ．クロスポビドン
ｋ．コロイド状二酸化ケイ素
ｌ．ステアリン酸マグネシウム
ｍ．１型水添植物油
ｎ．ポリソルベート８０（ＰＳ）、ＮＦ（Ｓｐｅｃｔｒｕｍ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ、カタログ番号ＰＯ１３８）
【０１５１】
３．実験の設計
３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の安定性を、以下の表１．１に列挙されている条件に従って試験した。すべての試験試料は、研究の間、４０ｍＬのＵＳＰ  Ｔｙｐｅ  １透明ガラスバイアル（外径２８ｍｍ×高さ９５ｍｍ、２４ｍｍネジ蓋）に入れ、アルミ箔で包んで保管した。
【表１−１】
2019532040.tif 000014
【０１５２】
表１．２は、本研究において使用した賦形剤および様々な薬物−賦形剤の比の一覧を示す。
【表１−２】
2019532040.tif 000015
*これらの賦形剤は、通常、チュアブル錠剤、経口分散剤(ODT)、および口内溶解錠剤の開発において使用される。
**それぞれの組合せのプラセボ調製物については、指定された量の賦形剤を、1つの条件当たり1つのバイアルに別個に計量したが、API対照は除く。
４．材料および方法
ａ．試験物品および対照物品
試験物品:      3,4,3-LI(1,2-HOPO)
製造業者:      Ash  Stevens,  Inc.  (Detroit,  MI)
ロット番号:    ML-11-276
物理的な説明:  淡黄色の固体
保管条件:      光から保護して2〜8℃で冷蔵。
材料:      
精製水          HPLCグレード-供給業者:Ricca
塩酸            ACSグレード-供給業者:EMD
水酸化ナトリウム  ACSグレード-供給業者:BDH
ギ酸            HPLCグレード-供給業者:EMD
アセトニトリル  HPLCグレード-供給業者:Fischer
HPLCカラム      Agilent、Eclipse  XDB-C18、4.6×150mm、5μm
ヒプロメロース、置換型2910、50mPa・s、USP  Spectrum  Chemicals、カタログ番号HY122
マンニトール、USP                      Spectrum  Chemicals、カタログ番号MA165
ラクトース一水和物、粉末、NF          Spectrum  Chemicals、カタログ番号LA106
微晶質セルロース、NF                  Spectrum  Chemicals、カタログ番号C1679
圧縮糖、NF                            Domino  Specialty  Ingredients
ポビドンK-29/32、USP                  Plasdone  K29/32、ISP  Technologies
アルファ化デンプン、NF(Starch  1500)  Colorcon,  Inc
クロスカルメロースナトリウム、NF      Spectrum  Chemicals、カタログ番号C1366
デンプングリコール酸ナトリウム、A型、pH5.5〜7.5、NF      Spectrum  Chemicals、カタログ番号S1962
クロスポビドン、NF                    ポリプラスドン(Polyplasdone)、ISP  Technologies
コロイド状二酸化ケイ素、NF            Spectrum  Chemicals、カタログ番号S1510
ステアリン酸マグネシウム、NF          Spectrum  Chemicals、カタログ番号MA130
1型水添植物油、NF                    Lubritab、JRS  Pharma
ポリソルベート80、NF                  Spectrum  Chemicals、カタログ番号PO138
試験試料:
所望される量の３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）および賦形剤（いずれも４０番の篩でスクリーニング）をバイアルに計量することによって、それぞれの試験混合物を調製した。両方の成分を、まず、清浄なガラス棒を使用して混合した後、ボルテックスした。それぞれの時間間隔で、１つのバイアルを、対応するプラセボ調製物とともにそれぞれの薬物−賦形剤系列から取り出し、以下に記載されるように試験した。
ｂ．試料の特徴付け
目視観察：
それぞれの試料溶液について、目視観察は、色および物理的形態の記録からなっていた。
ｃ．クロマトグラフィーアッセイおよび純度の評価
標準ストック溶液：
それぞれの標準ストック溶液について、試験物品を計量し（２００ｍｇ）、超音波処理によって３０ｍＬの希釈剤（水：アセトニトリル＝９０％：１０％）中に溶解した。室温で平衡化した後、標準溶液の体積を、５０ｍＬに調節した。標準ストック溶液は、二連で調製し、作業標準溶液は、それぞれのストックを希釈剤で所望される濃度に希釈することによって調製した。
較正標準物：
それぞれの実験につき、異なる濃度の５つの較正標準溶液を、希釈剤を使用してストック溶液から調製した。較正標準物の濃度は、１．６〜２．４ｍｇ／ｍＬであった。較正標準溶液をクロマトグラフィーにかけて、濃度範囲にわたって較正曲線の直線性を示した。
クロマトグラフィー純度：
試験物品の純度の評価のために、上記で調製した較正標準溶液のうちの１つを、使用した。
試料の調製：
それぞれの試料について、最終濃度２ｍｇ／ｍＬの３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）を達成するように、２５ｍＬの希釈剤を試料バイアルに添加した。バイアルを、次いで、１５分間機械的に振盪させた後、試料溶液を遠心分離し（１０，０００ｒｐｍ、１０分間）、上清をアッセイに使用した。
プラセボの調製：
２５ｍＬの希釈剤を、プラセボバイアルのそれぞれに添加した。バイアルを、次いで、１５分間機械的に振盪させた後、試料溶液を遠心分離し（１０，０００ｒｐｍ、１０分間）、上清をアッセイに使用した。
分析方法:
機器:        Waters  Alliance  2695液体クロマトグラフィーシステム
カラム:      Agilent、Eclipse  XDB-C18、4.6×150mm、5μm。
移動相A:      95%H2O:5%ACN中0.05%ギ酸
移動相B:      アセトニトリル(ACN)中0.05%ギ酸
【表１−３】
2019532040.tif 000016
カラム温度:      25℃  
流速:            1.0mL/分
注入体積:        10μL
検出:            250nm
泳動時間:        50分間
希釈剤:          9:1のH2O:ACN
分析の流れ：
【表１−４】
2019532040.tif 000017
適合性の要件:
３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）ピークの保持時間に希釈剤／ブランクによる干渉がないものとする。５回の複製システム適合性注入の相対標準偏差（ＲＳＤ％）は、２．０％よりも低いものとする。第２の標準物の応答係数が、９５〜１０５％の範囲内であること。システム直線性標準物の相関係数（Ｒ２）が、０．９９０よりも高いこと。
【０１５３】
５．結果
ａ．システム適合性
システム適合性および直線性の結果を、すべての時点（Ｔ＝０、２、４、および８週間）に関して、表１．５〜表１．８に要約する。システム適合性および直線性のすべての結果を、プロトコール要件に含んだ。調製された較正標準曲線は、直線であることがわかり、相関係数は、較正曲線とともに、表に含まれる。
【表１−５】
2019532040.tif 000018
【表１−６】
2019532040.tif 000019
【表１−７】
2019532040.tif 000020
【表１−８】
2019532040.tif 000021
【０１５４】
ｂ．安定性の判定
適合性研究の結果を、表１．９〜表１．２３に要約する。試験物品３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）は、対照試料中、記載される条件（２５℃／相対湿度６０％および４０℃／相対湿度７５％）下において、８週間にわたって安定であった。ほとんどの賦形剤−ＡＰＩ混合物は、類似の安定性を呈したが、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）のＨＰＬＣ純度の見かけ上の低下をもたらしたアルファ化デンプン（表１．１５）および水添植物油（表１．２１）を含む混合物を除く。加えて、アルファ化デンプン（表１．１５）、圧縮糖（表１．１１）、プロビドン（表１．１４）、および水添植物油（表１．２１）を含有する賦形剤−ＡＰＩ混合物について、特定の純度の増加が、観察された。
【表１−９Ａ】
2019532040.tif 000022
【表１−９Ｂ】
2019532040.tif 000023
【表１−１０Ａ】
2019532040.tif 000024
【表１−１０Ｂ】
2019532040.tif 000025
【表１−１０Ｃ】
2019532040.tif 000026
【表１−１１Ａ】
2019532040.tif 000027
【表１−１１Ｂ】
2019532040.tif 000028
【表１−１２Ａ】
2019532040.tif 000029
【表１−１２Ｂ】
2019532040.tif 000030
【表１−１２Ｃ】
2019532040.tif 000031
【表１−１３Ａ】
2019532040.tif 000032
【表１−１３Ｂ】
2019532040.tif 000033
【表１−１４Ａ】
2019532040.tif 000034
【表１−１４Ｂ】
2019532040.tif 000035
【表１−１５Ａ】
2019532040.tif 000036
【表１−１５Ｂ】
2019532040.tif 000037
【表１−１５Ｃ】
2019532040.tif 000038
【表１−１６Ａ】
2019532040.tif 000039
【表１−１６Ｂ】
2019532040.tif 000040
【表１−１７Ａ】
2019532040.tif 000041
【表１−１７Ｂ】
2019532040.tif 000042
【表１−１８Ａ】
2019532040.tif 000043
【表１−１８Ｂ】
2019532040.tif 000044
【表１−１９Ａ】
2019532040.tif 000045
【表１−１９Ｂ】
2019532040.tif 000046
【表１−１９Ｃ】
2019532040.tif 000047
【表１−２０Ａ】
2019532040.tif 000048
【表１−２０Ｂ】
2019532040.tif 000049
【表１−２１Ａ】
2019532040.tif 000050
【表１−２１Ｂ】
2019532040.tif 000051
【表１−２２Ａ】
2019532040.tif 000052
【表１−２２Ｂ】
2019532040.tif 000053
【表１−２３Ａ】
2019532040.tif 000054
【表１−２３Ｂ】
2019532040.tif 000055
【表１−２３Ｃ】
2019532040.tif 000056
【０１５５】
６．結論
一連の一般的に使用される医薬賦形剤を、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）との相互作用および適合性に関して、試験した。試験したそれらの１４種類の化合物のうち、４種類の賦形剤（アルファ化デンプン、圧縮糖、プロビドン、および水添植物油）は、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の純度の低下または特定の不純物含量の増加をもたらした。それらの４種類の賦形剤は、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の今後の製剤では避けるものとする。
（実施例２）
３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の経口製剤を開発することの実行可能性
【０１５６】
概要
３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の経口製剤を開発することの実行可能性を、評価した。４種類の経口剤形を調査した：（ｉ）ボトル入り粉末剤、（ｉｉ）分散性／溶解性顆粒剤、（ｉｉｉ）チュアブル錠剤、および（ｉｖ）従来の即時放出錠剤。行った研究に基づいて、即時薬物放出挙動および要求される物理特性を示した９種類の製剤プロトタイプを、特定し、ＡＰＩ検証、胃液溶解、および所定の液体クロマトグラフィー法による関連物質の試験に選択した。これらの選択した組成物のうち、２つは、ボトル入り粉末製剤であり、２つは、顆粒製剤であり、３つは、チュアブル錠製剤であり、２つは、従来の錠剤製剤である。これらのプロトタイプ製剤のそれぞれの組成を、表２．１に要約および表示する。すべてのアッセイにより、これらのプロトタイプが、さらなる開発に好適であることを確認した。これらの製剤の安定性を、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）のヒトでの初回臨床試験の前に評価する。これらの安定性研究はまた、ボトル入り粉末剤組成物Ａ２を含むカプセルも含み、カプセルは、臨床環境において、用量レベルを調節するための最適な剤形であり得る。
【表２−１】
2019532040.tif 000057
【０１５７】
１．研究の目的
本研究の目的は、研究の成果を裏付けるために使用することができるデータを得ることであった。これは、２１  ＣＦＲ  Ｐａｒｔ  ５８に記載されるようにＵ．Ｓ．Ｆｏｏｄ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ（ＦＤＡ）、「Ｇｏｏｄ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｆｏｒ  Ｎｏｎｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｓｔｕｄｉｅｓ」（ＧＬＰ）の規定に則って行われたものではなかった。しかしながら、本研究は、データの品質および完全性を確保するために、標準的な慣例に従って計画、実行、記録、および報告を行った。
【０１５８】
２．研究の目標
本研究の目標は、活性医薬成分３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）のプロトタイプ経口製剤を開発することであった。３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の臨床用量は、１単位当たり１〜２グラムの範囲内であることが予測される。臨床評価においてより低いおよびより高い用量強度を投薬する柔軟性を保持するために、以下を含むいくつかの経口製剤を、開発研究に含めた。
−  ボトル入り粉末剤（ＰＩＢ）
−  経口分散性／溶解性顆粒剤
−  チュアブル錠剤
−  従来の経口錠剤
【０１５９】
３．実験の設計
好適な賦形剤を、薬物−賦形剤適合性研究（３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）−賦形剤の適合性研究、実施例１）の結果に基づいて選択し、選択された製剤の開発の実行可能性に関して、評価した。すべての試験製剤は、並行して構築された薬物動態の結果に基づいて、透過促進剤として、オレイン酸ナトリウムを含有していた。３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）、希釈剤、および透過促進剤に加えて、他の製剤成分もまた、それぞれのプロトタイプ製剤について、探求した。典型的な製剤のマトリックスを、表２．２に示す。
【表２−２】
2019532040.tif 000058
【０１６０】
好適な製剤化手法、たとえば、直接的な打錠、乾式成形（dry  compaction）、および／または湿式造粒のプロセスを、評価した。選択されたプロトタイプ組成物を、表２．３に示される様々な物理化学的特性に関して、試験した。
【表２−３】
2019532040.tif 000059
４．材料および方法
ａ．試験物品および対照物品
試験物品:      3,4,3-LI(1,2-HOPO)
製造業者:      Ash  Stevens,  Inc.  (Detroit,  MI)
ロット番号:    ML-11-276
物理的な説明:  淡黄色の固体
保管条件:      光から保護して2〜8℃で冷蔵。
分析材料:      
精製水、USP            HPLCグレード-供給業者:Ricca  Chemical  Inc.
トリフルオロ酢酸      ACSグレード-供給業者:Sigma  Aldrich
ギ酸                  HPLCグレード-供給業者:EMD  Chemicals
アセトニトリル        HPLCグレード-供給業者:Fischer  Scientific
HPLCカラム            Agilent、Eclipse  XDB-C18、4.6×150mm、5μm
製剤の成分：
・クロスカルメロースナトリウム、ＮＦ、Ｐｈ．Ｅｕｒ．、ＪＰ（Ａｃ−Ｄｉ−Ｓｏｌ）
ＦＭＣ  Ｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒ、ロット番号ＴＮ１３８２５３２７
・クロスポビドン、ＮＦ、Ｐｈ．Ｅｕｒ．、ＪＰＥ（Ｋｏｌｌｉｄｏｎｅ−ＣＬＭ）
ＢＡＳＦ、ロット番号１０２０４９８８Ｑ０
・デンプングリコール酸ナトリウム、ＮＦ
Ｓｐｅｃｔｒｕｍ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ、ロット番号１ＢＣ０４３７
・ラクトース一水和物、ＵＳＰ／ＮＦ、Ｐｈ．Ｅｕｒ．、ＪＰ（ＳｕｐｅｒＴａｂ  １１ＳＤ）
ＤＦＥ  Ｐｈａｒｍａ、ロット番号１０６９７９９３／５７３１０１１
・ラクトース一水和物、ＵＳＰ／ＮＦ、Ｐｈ．Ｅｕｒ．、ＪＰ（Ｐｈａｒｍａｔｏｓｅ  ３００Ｍ）
ＤＦＥ  Ｐｈａｒｍａ、ロット番号１０６０１８３３／９４４５８６１
・ラクトース一水和物、ポビドン、およびクロスポビドンの共処理物、ＮＦ（Ｌｕｄｉｐｒｅｓｓ）
ＢＡＳＦ、ロット番号０５２６６３７５Ｌ０
・微晶質セルロース、ＮＦ（Ａｖｉｃｅｌ  ＰＨ１０２）
ＦＭＣ  Ｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒ、ロット番号Ｐ２１２８２４００１
・微晶質セルロースおよびグアーゴムの共処理物、ＧＲＡＳ（Ａｖｉｃｅｌ  ＣＥ−１５）
ＦＭＣ  Ｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒ、ロット番号ＲＨ１０８２１８５４
・微晶質セルロースおよびカルボキシメチルセルロースの共処理物、ＮＦ（Ａｖｉｃｅｌ  ＲＣ−５９１）
ＦＭＣ  Ｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒ、ロット番号ＤＮ００８８２０１０８
・ポビドン、ＵＳＰ（Ｐｌａｓｄｏｎｅ  Ｋ−２９／３２）
ＩＳＰ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、ロット番号０５２３０４６７７
・マンニトール、ＵＳＰ（Ｍａｎｎｏｇｅｍ）
ＳＰＩ  Ｐｈａｒｍａ、ロット番号１２００００７６Ｇ
・マルトデキストリン、ＮＦ（Ｇｌｕｃｉｄｅｘ  ＩＴ  １９）
Ｇｒａｉｎ  Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、ロット番号３０８４
・コロイド状二酸化ケイ素（Ｃａｂ−Ｏ−Ｓｉｌ  Ｍ５Ｐ）
Ｃａｂｏｔ、ロット番号３３６７７１４
・ヒプロメロース、ＵＳＰ、５０ｍＰａ．Ｓ
Ｓｐｅｃｔｒｕｍ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ、ロット番号１ＢＪ２１１４
・オレイン酸ナトリウム
Ｔｏｋｙｏ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ  Ｃｏ．Ｌｔｄ．、ロット番号３ＣＳＳＩＢＩ
・ステアリン酸マグネシウム、ＮＦ（ＨｙＱｕａｌ）
Ｍａｌｌｉｎｃｋｒｏｄｔ、ロット番号０９１２０００００２
Ａ  プロトタイプの調製および物理化学的特徴付け
【表２−４Ａ】
2019532040.tif 000060
【表２−４Ｂ】
2019532040.tif 000061
【表２−４Ｃ】
2019532040.tif 000062
【表２−４Ｄ】
2019532040.tif 000063
【表２−４Ｅ】
2019532040.tif 000064
【０１６１】
関連物質のアッセイのための分析方法Ｉ（表２．５）：
本方法は、すでに確立され検証されている（３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）−賦形剤適合性研究、実施例１を参照されたい）。したがって、適性は、本研究の一部として再評価しなかった。
機器:        Waters  Alliance  2695液体クロマトグラフィーシステム
検出器:      2487  Waters  Dual  Wavelength検出器
カラム:      Agilent、Eclipse  XDB-C18、4.6×150mm、5μm。
移動相A:    95%H2O:5%ACN中、0.05%ギ酸
移動相B:    アセトニトリル(ACN)中0.05%ギ酸
カラム温度:  25℃
流速:        1.0mL/分
注入体積:    20μL
検出:        250nm
泳動時間:    50分間
希釈剤:      9:1のH2O:ACN
【表２−５】
2019532040.tif 000065
【０１６２】
関連物質のアッセイのための分析方法Ｉ（表２．６）：
本方法は、事前に確立され、検証されていた（３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）−賦形剤適合性研究、実施例１を参照されたい）。適性は、したがって、本研究の一部として再評価しなかった。
機器:        Waters  Alliance  2695液体クロマトグラフィーシステム
検出器:      2487  Waters  Dual  Wavelength検出器
カラム:      Agilent、Eclipse  XDB-C18、4.6×150mm、5μm。
移動相A:      95%  H2O:5%  ACN中、0.05%ギ酸
移動相B:      アセトニトリル(ACN)中0.05%ギ酸
カラム温度:  25℃
流速:        1.0mL/分
注入体積:    20μL
検出:        250nm
泳動時間:    50分
希釈剤:      9:1のH2O:ACN
【表２−６】
2019532040.tif 000066
ＡＰＩ含量および溶解のアッセイのための分析方法ＩＩ（表２．７および表２．８）：
【表２−７】
2019532040.tif 000067
【表２−８】
2019532040.tif 000068
方法ＩＩ−適合性要件：
３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）ピークの保持時間に希釈剤／ブランクからの干渉がないものとする。５回の複製システム適合性注入の相対標準偏差（ＲＳＤ％）は、２．０％よりも低いものとする。回収チェック標準物の応答計数が、９５〜１０５％の範囲内であること。
方法ＩＩ−希釈剤干渉：
３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の保持時間には、ＡＰＩ検証アッセイ希釈剤（９：１の水：ＡＣＮ）および溶解希釈剤（酵素なしの模擬胃液、ＵＳＰ）からの干渉は観察されなかった。ＡＰＩ検証アッセイ希釈剤および溶解アッセイ希釈剤のクロマトグラムを、それぞれ、図３および図４に示す。ＡＰＩ検証アッセイ希釈剤および溶解アッセイ希釈剤中の３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）のクロマトグラムを、それぞれ、図５および図６に示す。
方法ＩＩ−システム適合性：
５回の標準物の注射の相対標準偏差は、検証アッセイおよび溶解アッセイの両方について、２．０％よりも低いことがわかった。チェック標準物の回収は、検証アッセイおよび溶解アッセイのいずれについても、９８．０％〜１０２％であることがわかった。システム適合性評価の結果を、表２．９および表２．１０に示す。
【表２−９】
2019532040.tif 000069
【表２−１０】
2019532040.tif 000070
方法ＩＩ−フィルター吸収：
濾過は、薬物製品の試料調製において不可避のステップであるため、表２．１１に列挙されているフィルターを、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の吸収について評価した。
【表２−１１】
2019532040.tif 000071
それぞれの標準溶液を、上記のフィルターのそれぞれに通して濾過し、回収率を、濾過溶液および未濾過溶液について計算した。濾過溶液および未濾過溶液の回収率の結果は、９８．０〜１０２．０％であることが見出され、これは、上記の研究したフィルターを用いた３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の吸収に有意性はなく、したがって、上記のフィルターのいずれも、試料調製に選択することができることを示す。濾過研究の結果を、以下の表２．１２に示す。
【表２−１２】
2019532040.tif 000072
【０１６３】
５．結果
ａ．ボトル入り粉末剤（ＰＩＢ）の剤形
ボトル入り粉末剤（ＰＩＢ）は、その使用の容易さのため、初期臨床開発において使用される最も簡便な剤形の１つである。カプセルと比較して、ＰＩＢは、保持できる用量および充填重量が大きい。表２．１３は、評価したＰＩＢの組成物を示す。それぞれの組成物を評価する理由についても、記載する。目標は、水で希釈したときに均一な分散液を形成することができ、また即時薬物放出特徴を呈することができる、好適な組成物を特定することであった。表２．１４は、評価した製剤の対応する特性を記載する。
【表２−１３】
2019532040.tif 000073
【表２−１４】
2019532040.tif 000074
【０１６４】
ＡＰＩ  ３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）、およびＡ９〜Ａ１１を除くすべての他の組成物は、水中に再構成したときに、粘性の塊を形成した。この挙動は、Ａｖｉｃｅｌ  ＲＣ−５９１（微晶質セルロースおよびカルボキシメチルセルロースの共処理賦形剤）を組み込んだ後に、大幅に低減された。１：１の薬物：賦形剤の比を使用して調製した組成物Ａ１１は、均一な分散液を形成し、したがって、ＡＰＩ含量検証アッセイおよび酵素なしの模擬胃液への溶解アッセイを使用して評価した。いずれのアッセイも、この報告においてさらに記載されるように、比較のために、組成物Ａ２（ＡＰＩ＋透過促進剤オレイン酸ナトリウムのブレンド）を用いて実施した。
ｂ．経口分散性／溶解性顆粒剤
【０１６５】
経口分散性／溶解性顆粒剤は、市販の「Ｓｐｒｉｎｋｌｅｓ」に類似しており、ここで、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の顆粒は、個別にパッケージングされたパウチ／サシェから口内に直接的に運ばれ、水ありまたはなしで飲み込まれ得る。表２．１５は、評価した経口分散性／溶解性顆粒剤の様々な組成物を示す。それぞれの組成物を評価する理由についても、記載する。
【表２−１５Ａ】
2019532040.tif 000075
【表２−１５Ｂ】
2019532040.tif 000076
【０１６６】
目標は、口内で滑らかな感触を与えることができ、また即時薬物放出特徴を呈することができる、好適な組成物を特定することであった。表２．１６は、評価した製剤の対応する特性を記載する。
【表２−１６】
2019532040.tif 000077
【０１６７】
評価した様々な組成物のうち、微晶質セルロースの共処理物（Ａｖｉｃｅｌ  ＣＥ−１５）を使用して製剤化されたＧ１１は、水で湿潤されたときに、滑らかな感触を示した。ラクトース一水和物（Ｐｈａｒｍａｔｏｓｅ  ３００Ｍ）を使用して製剤化された組成物Ｇ１２もまた、湿潤の数分後に、滑らかな感触を示した。これらの観察に基づいて、組成物Ｇ１１およびＧ１２を、ＡＰＩ検証アッセイおよび酵素なしの模擬胃液への溶解アッセイについて、さらに試験した。結果を、この報告においてさらに示す。
ｃ．チュアブル錠剤
【０１６８】
チュアブル錠剤は、口内での使用のために製剤化される。それらは、通常、コーティングされておらず、口内／頬側でまたは胃からの活性成分の放出および吸収を提供するために製剤化される。表２．１７は、評価した様々なチュアブル錠剤の組成物を示す。目標は、直接的な打錠プロセスによって製剤化することができ、また即時薬物放出特徴を示す、好適な組成物を特定することであった。表２．１８は、評価した製剤の対応する特性を記載する。
【０１６９】
組成物Ｃ１３およびＣ２１は、満足できる物理特性（分離の不在、破砕性、および崩壊）を示した。これらの組成物を、組成物Ｃ１１とともに、ＡＰＩ検証アッセイおよび酵素なしの模擬胃液への溶解アッセイについて、さらに試験した。結果を、この報告においてさらに示す。
【表２−１７Ａ】
2019532040.tif 000078
【表２−１７Ｂ】
2019532040.tif 000079
【表２−１７Ｃ】
2019532040.tif 000080
【表２−１８Ａ】
2019532040.tif 000081
【表２−１８Ｂ】
2019532040.tif 000082
*3,4,3-LI(1,2-HOPO)は、茶色であり、賦形剤とブレンドした後の分離の視覚的モニタリングが可能である。分離は、含量の均一性の問題をもたらし得るため、理想的ではない。
**破砕性試験装置において100回回転させたときに、1.00%を上回る錠剤重量の減少がある。
XAPI負荷が50mgのより小さな錠剤。
ｄ．従来の錠剤
１０００、７５０、および／または５００ｍｇの薬物負荷で従来の錠剤を製剤化するために、様々な組成物およびプロセス（直接的な打錠および湿式造粒）を、評価した。目標は、即時薬物放出特徴を示す好適な組成物を特定することであった。表２．１９〜２．２２は、評価した様々な錠剤の組成物およびプロセスを示す。錠剤を、様々な物理特性について評価し、結果を、表２．１９〜表２．２２に要約する。
【０１７０】
錠剤組成物Ｔ４４、Ｔ４５、Ｔ５０、およびＴ５１は、理想的な錠剤の特性（打錠性、破砕性、硬度、および崩壊）を示した。組成物Ｔ４４およびＴ４５は、湿式造粒プロセスによって調製し、組成物５０および５１は、直接的な打錠によって調製した。一般に、薬物の安定性、製造時間、および費用の側面に基づいて、直接的な打錠が好ましいプロセスであるため、組成物Ｔ５０およびＴ５１は、理想的であると考え、それらの検証アッセイおよび酵素なしの模擬胃液への溶解を試験した。結果を、この報告においてさらに示す。
【表２−１９Ａ】
2019532040.tif 000083
【表２−１９Ｂ】
2019532040.tif 000084
【表２−１９Ｃ】
2019532040.tif 000085
【表２−２０Ａ】
2019532040.tif 000086
【表２−２０Ｂ】
2019532040.tif 000087
【表２−２０Ｃ】
2019532040.tif 000088
【表２−２１Ａ】
2019532040.tif 000089
【表２−２１Ｂ】
2019532040.tif 000090
【表２−２１Ｃ】
2019532040.tif 000091
【表２−２２Ａ】
2019532040.tif 000092
【表２−２２Ｂ】
2019532040.tif 000093
【表２−２２Ｃ】
2019532040.tif 000094
【０１７１】
ｅ．選択したプロトタイプ：外観およびＡＰＩ検証アッセイ
実施した開発研究に基づいて、即時薬物放出挙動および要求される物理特性を示した、以下の９種類の製剤プロトタイプを、特定し、さらなる試験に選択した：ボトル入り粉末剤組成物Ａ２およびＡ１１、顆粒組成物Ｇ１１およびＧ１２、チュアブル錠剤組成物Ｃ１１、Ｃ１３、およびＣ２１、ならびに即時放出錠剤組成物Ｔ５０およびＴ５１。選択したボトル入り粉末製剤プロトタイプＡ２およびＡ１１の外観およびパッケージングを、それぞれ、図７（左）および図７（右）に示す。選択した顆粒製剤プロトタイプＧ１１およびＧ１２の外観およびパッケージングを、それぞれ、図８（左）および図８（右）に示す。選択したチュアブル錠製剤プロトタイプＣ１１、Ｃ１３、およびＣ２１の外観およびパッケージングを、それぞれ、図９（左）、図９（中央）、および図９（右）に示す。選択した錠剤製剤プロトタイプＴ５０およびＴ５１の外観およびパッケージングを、それぞれ、図１０（左）および図１０（右）に示す。
【０１７２】
これらの選択したプロトタイプ製剤を、その３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）含量に関して、含量検証アッセイに関して概説された方法に従ってアッセイした。一般に、試験した製剤はすべて、ラベル明記の９０〜１１０％の３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）を含有することが見出された。表２．２３は、それらのそれぞれについて得られた検証アッセイの値を列挙する。
【表２−２３】
2019532040.tif 000095
*値は、標準としてバルク薬物物質(API)に基づいて計算し、純度が100%であると想定
【０１７３】
チュアブル錠剤からの試料調製では、錠剤のマトリックス材料は希釈剤に曝露されるとゲル化し、それによって、振盪（手首動作型（wrist  action）振盪装置による）または超音波処理のいずれかによるアッセイ培地への完全な抽出が妨げられるという事実に起因して、錠剤は、乳鉢および乳棒で粉砕した。錠剤マトリックスの粉砕により、検体の完全な抽出が補助される。他のプロトタイプ製剤におけるインタクトな剤形からの抽出は、表２．２３の値から観察されるように、完全である。
ｆ．選択したプロトタイプ：溶解アッセイ
【０１７４】
プロトタイプ製剤の胃液溶解試験を、方法の節に詳述されるように実行した。一般に、ＡＰＩの８０％よりも多くが、試験したすべての製剤において、溶解試験の４５分以内に放出された。研究の結果を、表２．２４〜表２．２７に列挙する。
【表２−２４】
2019532040.tif 000096
*無期限の時点:45分の後、250rpmで15分
【表２−２５】
2019532040.tif 000097
*無期限の時点:45分の後、250rpmで15分
【表２−２６】
2019532040.tif 000098
*無期限の時点:45分の後、250rpmで15分
【表２−２７】
2019532040.tif 000099
*無期限の時点:45分の後、250rpmで15分
【０１７５】
ｇ．選択したプロトタイプ：関連物質のアッセイ
選択したプロトタイプ製剤における、クロマトグラムから得られる面積（％）として予測される関連物質および３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）のクロマトグラフィー純度を、表２．２８に列挙する。試験したすべての組成物について、プロトタイプ製剤において見出された関連物質の量は、対照として使用した薬物物質に存在するものと同等である。
【表２−２８Ａ】
2019532040.tif 000100
【表２−２８Ｂ】
2019532040.tif 000101
【０１７６】
６．結論
３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の経口製剤を開発することの実行可能性を、評価した。４種類の経口剤形を調査した：（ｉ）ボトル入り粉末剤、（ｉｉ）分散性／溶解性顆粒剤、（ｉｉｉ）チュアブル錠剤、および（ｉｖ）従来の即時放出錠剤。行った研究に基づいて、即時薬物放出挙動および要求される物理特性を示した９種類の製剤プロトタイプを、特定し、ＡＰＩ検証、胃液溶解、および所定の液体クロマトグラフィー法による関連物質の試験に選択した。これらの選択した組成物のうち、２つは、ボトル入り粉末製剤であり、２つは、顆粒製剤であり、３つは、チュアブル錠製剤であり、２つは、従来の錠剤製剤である。すべてのアッセイにより、これらのプロトタイプが、さらなる開発に好適であることを確認した。これらの製剤の安定性を、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）のヒトでの初回臨床試験の前に評価する。これらの安定性研究はまた、ボトル入り粉末剤組成物Ａ２を含むカプセルも含み、カプセルは、臨床環境において、用量レベルを調節するための最適な剤形であり得る。
（実施例３）
活性医薬成分３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）のプロトタイプ経口製剤の安定性の評価
【０１７７】
概要
本研究の目標は、６カ月間にわたって、２５℃／相対湿度６０％および４０℃／相対湿度７５％の保管条件下において、活性医薬成分３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）のプロトタイプ経口製剤の安定性を評価することであった。３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の臨床用量は、１単位当たり１〜２グラムの範囲内であることが予測される。臨床評価においてより低いまたは高い用量強度を投薬する柔軟性を保持するために、いくつかの経口製剤を、本研究に含めた。
−  再構成用粉末剤（５００ｍｇ）
−  即時放出錠剤（５００ｍｇ）
−  チュアブル錠剤（５００ｍｇ）
−  カプセル剤（５００ｍｇ）
−  カプセル剤（１００ｍｇ）
−  プラセボカプセル剤（サイズ００）
−  プラセボカプセル剤（サイズ４）
【０１７８】
以下は、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）のプロトタイプ製剤の安定性研究において観察された観察結果および傾向の概要である。
・２５℃／相対湿度６０％および４０℃／相対湿度７５％で６カ月間保管した場合、プロトタイプ製剤およびプラセボの物理的な外観に変化はなかった。
・４０℃／相対湿度７５％で保管した再構成用粉末プロトタイプ製剤において、含水量がわずかに増加した。プラセボを含むすべての他の製剤では、含水量は、Ｔ０試料で観察された値と同等である。
・チュアブル錠剤および即時放出錠剤の硬度は、保管時に、Ｔ０時点の値と比較して、わずかに減少した。
・２５℃／相対湿度６０％および４０℃／相対湿度７５％で保管した場合、再構成用粉末剤を除くすべてのプロトタイプ製剤において、酸敗臭の発生が観察された。酸敗臭の発生は、２５℃／相対湿度６０％および４０℃／相対湿度７５％で保管した場合に、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）カプセル剤のプラセボにおいても観察された。
・安定性研究試料において、プロトタイプ製剤の溶解プロファイルには、大きな変化は認められなかった。チュアブル錠剤および即時放出錠剤からの３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の溶解は、安定性研究試料において、Ｔ０試料において観察されたものよりもわずかに速いと見られる。試験したすべての試料は、４５分以内に、ラベル明記の８５％を上回る３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）を放出した。
・プロトタイプ剤形における３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）のラベル明記％のアッセイでは、分析したすべての安定性研究試料、ならびにＴ０試料において、９０〜１１０％であることが見出された。
・安定性研究においてプロトタイプ製剤に関して測定されたクロマトグラフィー純度は、２５℃／相対湿度６０％および４０℃／相対湿度７５％で保管した試料では、Ｔ０において観察されたものと比較して、わずかに変化した。
【０１７９】
１．研究の目的
本研究の目的は、研究の成果を裏付けるために使用することができるデータを得ることであった。これは、２１  ＣＦＲ  Ｐａｒｔ  ５８に記載されるようにＵ．Ｓ．Ｆｏｏｄ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ（ＦＤＡ）、「Ｇｏｏｄ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｆｏｒ  Ｎｏｎｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｓｔｕｄｉｅｓ」（ＧＬＰ）の規定に則って行われたものではなかった。しかしながら、本研究は、データの品質および完全性を確保するために、標準的な慣例に従って計画、実行、記録、および報告を行った。
【０１８０】
２．研究の目標
本研究の目標は、６カ月間にわたって、２５℃／相対湿度６０％および４０℃／相対湿度７５％の保管条件下において、活性医薬成分３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）のプロトタイプ経口製剤の安定性を評価することであった。３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の臨床用量は、１単位当たり１〜２グラムの範囲内であることが予測される。臨床評価においてより低いまたは高い用量強度を投薬する柔軟性を保持するために、いくつかの経口製剤を、本研究に含めた。
−  再構成用粉末剤（５００ｍｇ）
−  即時放出錠剤（５００ｍｇ）
−  チュアブル錠剤（５００ｍｇ）
−  カプセル剤（５００ｍｇ）
−  カプセル剤（１００ｍｇ）
−  プラセボカプセル剤（サイズ００）
−  プラセボカプセル剤（サイズ４）
【０１８１】
３．実験の設計
プロトタイプ製剤を、前述の製剤開発研究（３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）−製剤開発、実施例２）の結果に基づいて選択し、以下の表３．１および表３．２に提示する。
【０１８２】
すべてのプロトタイプ製剤およびプラセボカプセル剤を、この安定性研究において、６カ月間、２５±２℃／相対湿度６０±５％または４０±２℃／相対湿度７５±５％の保管条件下において、１カ月、３カ月、６カ月、およびＴ０（初回）でサンプリングして、段階付けを行った。表３．３は、すべてのプロトタイプ製剤のパッケージング構成を示す。
【０１８３】
様々な試験を、表３．４に詳述されるように、それぞれのサンプリング時点で、それぞれの試料に適用した。
【表３−１Ａ】
2019532040.tif 000102
【表３−１Ｂ】
2019532040.tif 000103
【表３−２】
2019532040.tif 000104
【表３−３】
2019532040.tif 000105
【表３−４】
2019532040.tif 000106
４．材料および方法
ａ．試験製剤物品および材料
試験物品:      3,4,3-LI(1,2-HOPO)
製造業者:      Ash  Stevens,  Inc.  (Detroit,  MI)
ロット番号:    ML-11-276
物理的説明:    淡黄色の固体
保管条件:      光から保護して2〜8℃で冷蔵。
透過促進剤:    オレイン酸ナトリウム
製造業者:      Sigma  Aldrich  (St  Louis,  MO)
ロット番号:    SLBH3379V
物理的な説明:  白色の粉末
保管条件:      光から保護して2〜8℃で冷蔵、
製剤物品：
・３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）カプセル剤、５００ｍｇ、ロット番号ＦＬＢＮ−２０１４０２０６−２
・３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）カプセル剤、１００ｍｇ、ロット番号ＦＬＢＮ−２０１４０２１１−１
・３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）再構成用粉末剤、５００ｍｇ、ロット番号ＦＬＢＮ−２０１４０２０６−１
・３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）即時放出錠剤、５００ｍｇ、ロット番号ＦＬＢＮ−２０１４０２１１−３
・３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）チュアブル錠剤、５００ｍｇ、ロット番号ＦＬＢＮ−２０１４０２１１−２
パッケージング材料：
・ボトル：２５ｃｃの白色ＨＤＰＥボトル（Ｐａｃｋａｇｅ  Ａｌｌ）
・蓋／キャップ：ポリプロピレン製、２８ｍｍ、白色Ｓａｆ−Ｃａｐ  ＩＩＩＡ（ＣＲＣ）（Ｐａｃｋａｇｅ  Ａｌｌ）
・ボトル：４０／５０ｃｃの白色ＨＤＰＥボトル（Ｐａｃｋａｇｅ  Ａｌｌ）
・蓋／キャップ：ポリプロピレン製、３３ｍｍ、白色Ｓａｆ−Ｃａｐ  ＩＩＩＡ（ＣＲＣ）（Ｐａｃｋａｇｅ  Ａｌｌ）
・ボトル：１５０ｃｃの白色ＨＤＰＥボトル（Ｐａｃｋａｇｅ  Ａｌｌ）
・蓋／キャップ：ポリプロピレン製、３８ｍｍ、白色Ｓａｆ−Ｃａｐ  ＩＩＩＡ（ＣＲＣ）（Ｐａｃｋａｇｅ  Ａｌｌ）
・ボトル：ＨＤＰＥ製、１ｏｚのＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｒｏｕｎｄの白色ボトル（Ｄｒｕｇ  Ｐｌａｓｔｉｃ  ａｎｄ  Ｇｌａｓｓ  Ｃｏｍｐａｎｙ  Ｉｎｃ）
・蓋／キャップ：ポリプロピレン製、２４ｍｍ、ＳｅｃｕＲｘ  Ｒｉｂｂｅｄ  Ｓｉｄｅ  Ｔｅｘｔ  ｔｏｐ（Ｄｒｕｇ  Ｐｌａｓｔｉｃ  ａｎｄ  Ｇｌａｓｓ  Ｃｏｍｐａｎｙ  Ｉｎｃ）
・レーヨンコイル１２  Ｇｒａｉｎ（製造：Ｃａｒｏｌｉｎａ  Ａｂｓｏｒｂｅｎｔ  Ｃｏｔｔｏｎ）
・Ｓｏｒｂ−ＩＴ（登録商標）１ｇ、シリカゲル入り乾燥キャニスター（製造：Ｓｕｄ  Ｃｈｅｍｉｅ）
検体材料：
溶媒        HPLCグレード-供給業者:Fischer  Scientific
化学物質    ACSグレードまたは同等物
HPLCカラム  Agilent、Eclipse  XDB-C18、4.6×150mm、5μm
ｂ．直接的な物理試験方法
外観:          プロトタイプ剤形の色および外観を、観察し、記録した。
感覚刺激特性:  プロトタイプ製剤の新しく開封したパッケージから生じる臭いが認められた。
硬度:          錠剤試料の硬度を、較正した硬度試験装置で測定し、記録した。
ｃ．含水量（ＫＦによる）試験方法
試料の調製：  
プロトタイプ製剤の含水量を、較正したＫａｒｌ  Ｆｉｓｈｅｒ電量滴定装置を使用して測定した。再構成用粉末剤試料中の含水量の判定のために、２単位を、シンチレーションバイアルに入れ、粉末試料を、そのままの状態で判定に使用した。錠剤試料（即時放出錠およびチュアブル錠）中の含水量の判定のために、２錠を、清浄な乾燥したガラス製の乳棒および乳鉢で粉砕し、粉末試料を、分析に使用した。カプセル剤試料中の含水量の判定のために、２単位を、シンチレーションバイアルに入れ、粉末試料を、そのままの状態で判定に使用した。
分析の手順：
クリンプキャップ付きの空のバイアルを計量した（Ｗ１）。約３０ｍｇの粉末試料を、正確に計量し、空のバイアルに移し、計量した（Ｗ２）。約４ｍＬのメタノール（Ｄｒｙｓｏｌｖ（登録商標））をバイアル中の試料に添加した。バイアルの総重量を記した（Ｗ３）。試料を、約２分間、ボルテックスミキサーでかき混ぜ、３ｍＬのアリコートを、シリンジに取った。シリンジを計量した（Ｓ１）。シリンジの全含量をＫＦ滴定装置に入れ、空のシリンジを計量した（Ｓ２）。添加した試料の重量（Ｓ１−Ｓ２）を、ＫＦ滴定装置に入力した。注記：ＫＦ滴定装置は、使用前に０．１％水標準で較正されており、ブランク水判定を、メタノール（Ｄｒｙｓｏｌｖ（登録商標））を使用して行った。含水量を、以下のように計算した。
（試料の含水量×試料の重量（Ｗ３−Ｗ１））
−（ブランクの含水量×メタノールの重量（Ｗ３−Ｗ２））
＝正味の粉末重量（Ｗ２−Ｗ１）
ｄ．溶液アッセイおよび含量の均一性
クロマトグラフィー方法:
カプセル剤、再構成用粉末剤、即時放出錠剤、およびチュアブル錠剤の試料中の３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）のアッセイを、以下のクロマトグラフィー方法によって行った。
注記：酸性条件下において、微量の金属を除去する３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の能力に起因して、ＨＰＬＣシステムは、最後５回の注入の相対標準偏差％が、２％よりも低くなるまで、標準溶液の複数回の注入によって、不動態化させた。
カラム:            Waters、Symmetry  C18、2.1×150mm、5μm。
移動相A:          水中、0.1%のトリフルオロ酢酸
移動相B:          アセトニトリル中、0.1%のトリフルオロ酢酸
カラム温度:        30℃
流速:              0.5mL/分
注入体積:          10μL
検出:              250nmでUV
泳動時間:          12分
希釈剤(アッセイ):  9:1の水:アセトニトリル
希釈剤(溶解):      酵素なしの模擬胃液
【表３−５】
2019532040.tif 000107
システム適合性：
３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）ピークの保持時間に、希釈剤／プラセボ成分からの干渉がないこと。５回の複製のシステム適合性注入の相対標準偏差％が、２．０％以下であること。チェック標準物の回収が、９５〜１０５％であること。注記：試料の調製および保管の間中、フラスコは、アルミ箔で覆った。
標準物の調製：
約２５ｍｇの３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）を、５０ｍＬのメスフラスコに移した。約３０ｍＬの希釈剤を、フラスコに添加し、十分に混合した。体積を、標線に仕上げ、超音波処理した。超音波浴の温度を、氷を添加することにより低温に保った。同様に、別の標準物を、チェック標準物として調製した。
試料の調製：
３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）再構成用粉末剤、５００ｍｇ。５単位からの再構成用粉末剤を、ガラスバイアルに充填した。約１０４．６ｍｇの粉末試料（５０ｍｇの３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）に相当する）を、正確に計量し、アルミ箔で覆った清浄かつ乾燥した１００ｍＬのメスフラスコに移した。約５０ｍＬの希釈剤を添加し、十分に混合し、標線に仕上げた。フラスコを、３０分間、氷冷水上で超音波処理した。試料を、０．４５μのナイロンシリンジフィルターを使用して濾過し、濾液を、アッセイに使用した。試料は、調製の直後に、５℃で、ＨＰＬＣオートサンプラーにおいて保管した。それぞれの試料溶液中の３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の濃度は、約０．５ｍｇ／ｍＬであった。
３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）即時放出錠剤、５００ｍｇ。５つの即時放出錠剤を、アルミ箔で覆った乾燥した１０００ｍＬのメスフラスコに入れた。約５００ｍＬの希釈剤を添加し、十分に混合し、標線に仕上げた。フラスコを、氷冷水上で９０分間、超音波処理した。試料を、０．４５μのナイロンシリンジフィルターを使用して濾過した。２ｍＬの濾液を、希釈剤で１０ｍＬに希釈し、アッセイに使用した。試料は、調製の直後に、５℃で、ＨＰＬＣオートサンプラーにおいて保管した。それぞれの試料溶液中の３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の濃度は、約０．５ｍｇ／ｍＬであった。
３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）チュアブル錠剤、５００ｍｇ。５つのチュアブル錠剤を、乳棒および乳鉢を用いて粉末にした。約２５０ｍｇの粉末にした試料（５０ｍｇの３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）に相当する）を、正確に計量し、アルミ箔で覆った清浄かつ乾燥した１００ｍＬのメスフラスコに移した。約５０ｍＬの希釈剤を添加し、十分に混合した。体積を、１００ｍＬに仕上げた。それぞれの試料を、氷冷水上で約３０分間、超音波処理した。試料を、次いで、０．４５μのナイロンシリンジフィルターに通して濾過し、濾液をアッセイに使用した。試料は、調製の直後に、５℃で、ＨＰＬＣオートサンプラーにおいて保管した。それぞれの試料溶液中の３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の濃度は、約０．５ｍｇ／ｍＬであった。
３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）カプセル剤、５００ｍｇ。５つのカプセルの中身をガラスバイアルに入れた。約５５．６ｍｇの粉末（５０ｍｇの３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）に相当する）を、アルミ箔で覆った乾燥した１００ｍＬのメスフラスコに計量した。約５０ｍＬの希釈剤を添加し、混合した後、体積を１００ｍＬに調節した。それぞれの試料を、氷冷水上で約３０分間、超音波処理した。試料を、次いで、０．４５μのナイロンシリンジフィルターに通して濾過し、濾液をアッセイに使用した。試料は、調製の直後に、５℃で、ＨＰＬＣオートサンプラーにおいて保管した。それぞれの試料溶液中の３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の濃度は、約０．５ｍｇ／ｍＬであった。
３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）カプセル剤、１００ｍｇ。５つのカプセルの中身を、ガラスバイアルに入れた。約５５．６ｍｇの粉末（５０ｍｇの３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）に相当する）を、アルミ箔で覆った乾燥した１００ｍＬのメスフラスコに計量した。約５０ｍＬの希釈剤を添加し、混合した後、体積を１００ｍＬに調節した。それぞれの試料を、氷冷水上で約３０分間、超音波処理した。試料を、次いで、０．４５μのナイロンシリンジフィルターに通して濾過し、濾液をアッセイに使用した。試料は、調製の直後に、５℃で、ＨＰＬＣオートサンプラーにおいて保管した。それぞれの試料溶液中の３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の濃度は、約０．５ｍｇ／ｍＬであった。
計算：
アッセイ（ラベル明記％）−ＡｓｐｌＡｓｔｄ×Ｗｓｔｄ５０×ＶｓｐｌＳａｍｐｌｅ  Ｗｔ．×ＤＦ×Ｐ１００×Ａｖｅｒａｇ  Ｗｔ．  １×１００ＬＣ
Ａｓｐｌ＝試料溶液のピーク面積
Ａｓｔｄ＝作業標準溶液の５回の注入の平均ピーク面積
Ｗｓｔｄ＝標準として使用した３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）のｍｇ単位での重量
Ｖｓｐｌ＝試料溶液のｍＬ単位での体積
ＤＦ＝希釈係数（即時放出錠剤についてはＤＦ＝５、他のプロトタイプについてはＤＦ＝１）
Ｐ＝標準材料の純度係数
ＬＣ＝ラベル明記（単位用量当たりのｍｇ単位での理論上の３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の量）
ｅ．溶解試験
クロマトグラフィー方法：
再構成用粉末剤、即時放出錠剤、チュアブル錠剤、およびカプセル剤の３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の単位用量を、それぞれの溶解容器に移し、溶解試験を、以下の条件を使用して行った。
装置：ＵＳＰ  Ａｐｐａｒａｔｕｓ  ＩＩ（Ｐａｄｄｌｅ）
温度：３７±０．５℃
撹拌速度：５０ＲＰＭ
溶解溶媒：９００ｍＬの模擬胃液（酵素なし）
溶解溶媒のサンプリング：１０分、１５分、３０分、４５分、および無期限（４５分の時点の後、２５０ｒｐｍで１５分）で、５ｍＬ、溶解溶媒を置き換える。
試料を、０．４５μのナイロンシリンジフィルターに通して濾過し、取り出した直後、５℃で、ＨＰＬＣオートサンプラーにおいて保管した。溶解試験の間中、容器は、アルミ箔で覆った。カプセルプロトタイプ製剤は、シンカーを用いて溶解容器に導入した。溶解試料を、以下のＨＰＬＣ方法によって分析した。
カラム:              Waters、Symmetry  C18、2.1×150mm、5μm。
移動相A:            水中、0.1%のトリフルオロ酢酸
移動相B:            アセトニトリル中、0.1%のトリフルオロ酢酸
カラム温度:          30℃
試料温度:            5℃
流速:                0.5mL/分
注入体積:            10μL(100mgのカプセル溶解研究についてのみ、50μL)
検出:                250nmでのUV
泳動時間:            12分
希釈剤(アッセイ):    9:1の水:アセトニトリル
希釈剤(溶解):        酵素なしの模擬胃液
【表３−６】
2019532040.tif 000108
システム適合性：
３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）ピークの保持時間に、希釈剤／プラセボ成分からの干渉がないこと。
５回の複製のシステム適合性注入の相対標準偏差％が、２．０％以下であること。
チェック標準物回収率が、９５〜１０５％であること。
標準物の調製：
０．１ｍｇ／ｍＬの３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）。約２５ｍｇの３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）を、正確に計量し、２５０ｍＬのメスフラスコに移した。約２００ｍＬの希釈剤を添加し、十分に混合した。標準物の体積を、標線に仕上げた。溶液を、標準物が完全に溶解するまで氷冷水において超音波処理した。同様に、別の標準物をチェック標準物として調製した。これらの標準物セットを、１００ｍｇの用量強度で製剤の溶解試験において使用した。
０．５ｍｇ／ｍＬの３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）。約２５ｍｇの３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）を、正確に計量し、５０ｍＬのメスフラスコに移した。約３０ｍＬの希釈剤を添加し、十分に混合した。標準物の体積を、標線に仕上げた。溶液を、標準物が完全に溶解するまで、氷冷水において超音波処理した。同様に、別の標準物をチェック標準物として調製した。これらの標準物セットを、５００ｍｇの用量強度で製剤の溶解試験において使用した。
計算：
％溶解ｎ  ＝  ＡｓｐｌＡｓｔｄ×ＷｓｔｄＶｓｔｄ×９００ＬＣ×Ｐ１００＋５９００×ｎ＝１ｎ−ｎ−１％溶解
Ａｓｐｌ＝試料溶液のピーク面積
Ａｓｔｄ＝アッセイ用作業標準溶液の５回の注入の平均ピーク面積
Ｗｓｔｄ＝標準として使用した３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）のｍｇ単位での重量
Ｖｓｔｄ＝標準溶液のｍＬ単位での体積
Ｖｓｐｌ＝試料溶液のｍＬ単位での体積
ＤＦ＝希釈係数（即時放出錠剤についてはＤＦ＝５、他のプロトタイプについてはＤＦ＝１）
Ｐ＝標準材料の純度係数
ＬＣ＝ラベル明記（単位用量当たりのｍｇ単位での理論上の３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の量）
ｆ．クロマトグラフィー純度評価
クロマトグラフィー方法：
プロトタイプ製剤中の３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）のクロマトグラフィー純度を判定するために、以下のＨＰＬＣ方法を使用した。
カラム:      Agilent  Eclipse  XDB-C18、4.6×150mm、5μm
移動相A:      95:5の水:アセトニトリル中、0.05%のギ酸
移動相B:      アセトニトリル中、0.05%のギ酸
カラム温度:  25℃
流速:        1.0mL/分
注入体積:    20μL
検出:        250nmでのUV
泳動時間:    50分
希釈剤(アッセイ):  9:1の水:アセトニトリル
希釈剤(溶解):      酵素なしの模擬胃液
【表３−７】
2019532040.tif 000109
システム適合性：
３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）ピークの保持時間に、希釈剤／プラセボ成分からの干渉がないこと。
５回の複製のシステム適合性注入の相対標準偏差％が、２．０％以下であること。
チェック標準物の回収が、９５〜１０５％であること。
標準ストック溶液：
約５０ｍｇの３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）を、正確に計量し、アルミ箔で包んだ２５ｍＬの透明なメスフラスコに移した。２０ｍＬの希釈剤を完全な溶解のために添加し、標準物を希釈剤で所定体積まで希釈し、十分に混合した。同様に、別のストックを、チェック標準ストックとして調製した。
較正標準物：
５ｍＬの標準ストック溶液を、ピペットで、アルミ箔で包んだラベル付けした１０ｍＬの透明なメスフラスコに取った。ストックを、希釈剤で所定体積まで希釈し、十分に混合した。標準溶液中の３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の濃度は、約１．０ｍｇ／ｍＬであった。同様に、チェック標準溶液を、チェック標準ストックから調製した。
試料の調製：
３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）再構成用粉末剤、５００ｍｇ。２単位用量の再構成用粉末プロトタイプ製剤を、清浄な乾燥した２５０ｍＬのメスフラスコに移した。約２００ｍＬの希釈剤を、試料に添加し、完全に均一な分散液が得られるまで（約４０分間）、手首作動型振盪装置において振盪させた。体積を、希釈剤で標線に仕上げ、十分に混合した。試料溶液を、０．４５μのナイロンシリンジフィルターを使用して濾過した。１ｍＬの濾液を、希釈剤でシンチレーションバイアルにおいて４ｍＬに希釈し、ＨＰＬＣによって分析した。試料溶液中の３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の濃度は、約１．０ｍｇ／ｍＬである。
３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）即時放出錠剤、５００ｍｇ。２つのプロトタイプ即時放出錠剤を、清浄な乾燥した２５０ｍＬのメスフラスコに移した。約２００ｍＬの希釈剤を試料に添加し、完全に均一な分散液が得られるまで（約４０分間）、手首作動型振盪装置において振盪させた。体積を、希釈剤で標線に仕上げ、十分に混合した。試料溶液を、０．４５μのナイロンシリンジフィルターを使用して濾過した。１ｍＬの濾液を、希釈剤でシンチレーションバイアルにおいて４ｍＬに希釈し、ＨＰＬＣによって分析した。試料溶液中の３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の濃度は、約１．０ｍｇ／ｍＬである。
３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）チュアブル錠剤、５００ｍｇ。２つのプロトタイプチュアブル錠剤を、乳鉢および乳棒で細かく砕き、清浄な乾燥した２５０ｍＬのメスフラスコに移した。約２００ｍＬの希釈剤を、試料に添加し、完全に均一な分散液が得られるまで（約４０分間）、手首作動型振盪装置において振盪させた。体積を、希釈剤で標線に仕上げ、十分に混合した。試料溶液を、０．４５μのナイロンシリンジフィルターを使用して濾過した。１ｍＬの濾液を、希釈剤でシンチレーションバイアルにおいて４ｍＬに希釈し、ＨＰＬＣによって分析した。試料溶液中の３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の濃度は、約１．０ｍｇ／ｍＬである。
３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）カプセル剤、５００ｍｇ。２つのプロトタイプカプセル剤を開け、中身を清浄な乾燥した２５０ｍＬのメスフラスコに添加した。約２００ｍＬの希釈剤を、試料に添加し、完全に均一な分散液が得られるまで（約４０分間）、手首作動型振盪装置において振盪させた。体積を、希釈剤で標線に仕上げ、十分に混合した。試料溶液を、０．４５μのナイロンシリンジフィルターを使用して濾過した。１ｍＬの濾液を、希釈剤でシンチレーションバイアルにおいて４ｍＬに希釈し、ＨＰＬＣによって分析した。試料溶液中の３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の濃度は、約１．０ｍｇ／ｍＬである。
３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）カプセル剤、１００ｍｇ。２つのプロトタイプカプセル剤を開け、中身を、清浄な乾燥した５０ｍＬのメスフラスコに添加した。約４０ｍＬの希釈剤を、試料に添加し、完全に均一な分散液が得られるまで（約４０分間）、手首作動型振盪装置において振盪させた。体積を、希釈剤で標線に仕上げ、十分に混合した。試料溶液を、０．４５μのナイロンシリンジフィルターを使用して濾過した。１ｍＬの濾液を、希釈剤でシンチレーションバイアルにおいて４ｍＬに希釈し、ＨＰＬＣによって分析した。試料溶液中の３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の濃度は、約１．０ｍｇ／ｍＬである。
注記：試料の調製および保管の間中、フラスコは、アルミ箔で覆った。
ブランクの調製：
ブランク試料を、試料と同様の調製方法を使用して、プロトタイプ製剤のプラセボを用いて調製した。
報告：
３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）のクロマトグラフィー純度を、ＨＰＬＣ面積（％）として報告した。０．０３％以上の面積を有する試料に由来するすべての未知のピークを、組み込んだ。希釈剤に共通する試料クロマトグラム中のピークおよびブランク調製物は無視した。
【０１８４】
５．結果
プロトタイプ製剤に対して行ったすべての試験の結果を、表３．８〜表３．１２に要約し、それぞれの表は、特定のアッセイの結果を示す。
【表３−８Ａ】
2019532040.tif 000110
【表３−８Ｂ】
2019532040.tif 000111
【表３−８Ｃ】
2019532040.tif 000112
【表３−８Ｄ】
2019532040.tif 000113
【表３−９Ａ】
2019532040.tif 000114
【表３−９Ｂ】
2019532040.tif 000115
【表３−９Ｃ】
2019532040.tif 000116
【表３−９Ｄ】
2019532040.tif 000117
【表３−９Ｅ】
2019532040.tif 000118
*無期限の時点で試料を試験した1回目の溶解では、正しい保持時間でピークが示されなかった。
【表３−１０Ａ】
2019532040.tif 000119
【表３−１０Ｂ】
2019532040.tif 000120
【表３−１１Ａ】
2019532040.tif 000121
【表３−１１Ｂ】
2019532040.tif 000122
【表３−１２Ａ】
2019532040.tif 000123
【表３−１２Ｂ】
2019532040.tif 000124
【０１８５】
６．結論
以下は、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）のプロトタイプ製剤の安定性研究において観察された観察結果および傾向の概要である。
・２５℃／相対湿度６０％および４０℃／相対湿度７５％で６カ月間保管した場合、プロトタイプ製剤およびプラセボの物理的な外観に変化はなかった。
・４０℃／相対湿度７５％で保管した再構成用粉末プロトタイプ製剤において、含水量がわずかに増加した。プラセボを含むすべての他の製剤では、含水量は、Ｔ０試料で観察された値と同等である。
・チュアブル錠剤および即時放出錠剤の硬度は、保管時に、Ｔ０時点の値と比較して、わずかに減少した。
・２５℃／相対湿度６０％および４０℃／相対湿度７５％で保管した場合、再構成用粉末剤を除くすべてのプロトタイプ製剤において、酸敗臭の発生が観察された。酸敗臭の発生は、２５℃／相対湿度６０％および４０℃／相対湿度７５％で保管した場合に、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）カプセル剤のプラセボにおいても観察された。
・安定性研究試料において、プロトタイプ製剤の溶解プロファイルには、大きな変化は認められなかった。チュアブル錠剤および即時放出錠剤からの３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の溶解は、安定性研究試料において、Ｔ０試料において観察されたものよりもわずかに速いと見られる。試験したすべての試料は、４５分以内に、ラベル明記の８５％を上回る３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）を放出した。
・プロトタイプ剤形における３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）のラベル明記％のアッセイでは、分析したすべての安定性研究試料、ならびにＴ０試料において、９０〜１１０％であることが見出された。
・安定性研究においてプロトタイプ製剤に関して測定されたクロマトグラフィー純度は、２５℃／相対湿度６０％および４０℃／相対湿度７５％で保管した試料では、Ｔ０において観察されたものと比較して、わずかに変化した。
（実施例４）
雌および雄のスイスウェブスターマウスの体内から、２３８ＰＵの静脈内用量を除去するための反復的な３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）処置の有効性
【０１８６】
概要
本研究の目標は、２３８Ｐｕの可溶性クエン酸錯体を投与し、曝露２４時間後に開始する複数回の処置を行った、雌および雄のスイスウェブスターマウスにおける、内部プルトニウム負荷からの排出を強化することにおける、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の有効性を特徴付けることであった。処置動物における２３８Ｐｕの組織含量、尿および糞便による排泄を、未処置動物に対して比較することによって、有効性を評価した。
【０１８７】
医療措置３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）を、以下の４種類の選択した用量で、汚染の２４時間後に開始する継続的な注射または経管摂取（１日１回で６回または１日２回で１２回）を介して、非経口（腹腔内）または経口（経口）で投与した：腹腔内で３０μｍｏｌ／ｋｇ、経口で１５０μｍｏｌ／ｋｇ、経口で３００μｍｏｌ／ｋｇ、および経口で６００μｍｏｌ／ｋｇ（体表面積に基づく、マウス用量からヒトに相当する用量、ＨＥＤへの許容される変換システムを使用し、それぞれ、およそで２．５、１２．５、２５、および５０μｍｏｌ／ｋｇのヒト用量範囲に相当する）。経口用量には、製剤開発研究の際に選択された透過促進剤も含まれた。
【０１８８】
３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）を用いた反復的な非経口処置および経口処置により、初回の処置投薬を汚染２４時間後まで遅延させた場合であっても、排出率の強化ならびに総身体負荷量および異なる組織含量の低減がもたらされた。７日の時点で安楽死させた第１のコホートでは、１日２回の投薬スキームで得られた２３８Ｐｕ排出は、生理食塩水対照と比較した場合、同等の合計１日量のＡＰＩを用いた対応する１日１回の投薬スキームほど良好ではなかった（すなわち、３００および６００μｍｏｌ／ｋｇの１日１回の投薬が、１５０および３００μｍｏｌ／ｋｇの１日２回の投薬よりも良好であった）。投薬レジメンを、単回投薬から、１日１回で６回の投薬まで拡張することにより、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）で処置した群では、生理食塩水を投与した対照と比較して、より持続的な排出率が可能となった。汚染後１１日の時点で、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の１日１回で６回の非経口投薬後に、最大の体外除去効果が観察された。複数回の経口処置後の２３８Ｐｕ排出の強化は、体内および組織含量の低減が、１日１回で６回の６００μｍｏｌ／ｋｇの投薬後では、対応する３００μｍｏｌ／ｋｇの投薬レジメン後よりもわずかに大きかったため、依然として用量依存性であった。いずれにせよ、３００μｍｏｌ／ｋｇでの経口処置は、生理食塩水で処置した対照と比較して、有意な２３８Ｐｕの全身および組織含量の低減をもたらし、体外除去効果は、ＤＴＰＡを用いた非経口処置のものと同等であった。最後に、排泄経路における差異が認められ、２３８Ｐｕ排出は、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）で処置したマウスについては主として糞便を通じて生じ、ＤＴＰＡで処置したマウスについては尿を通じて生じ、雌では、尿中２３８Ｐｕに対する糞便中の比は、雄と比較して低かった。
【０１８９】
本研究の結果により、経口処置投与の有効な用量レベルが確認された。オレイン酸ナトリウムとともに製剤化し、１日１回で６日間連続で経口投与した場合、３００〜６００μｍｏｌ／ｋｇの用量レベルの３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）により、マウスにおける可溶性２３８Ｐｕの有意な体外除去効果がもたらされた。
【０１９０】
研究の目標
本研究の目標は、２３８Ｐｕの可溶性クエン酸錯体を投与し、曝露２４時間後に開始する複数回の処置を行った、雌および雄のスイスウェブスターマウスにおける、内部プルトニウム負荷からの排出を強化することにおける、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の有効性を特徴付けることであった。処置動物における２３８Ｐｕの組織含量、尿および糞便による排泄を、未処置動物に対して比較することによって、有効性を評価した。
【０１９１】
このレジメン最適化研究では、医療措置３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）を、以下の４種類の選択した用量で、汚染の２４時間後に開始する継続的な注射または経管摂取（１日１回で６回または１日２回で１２回）を介して、非経口（ｉｐ）または経口（ｐｏ）で投与した：腹腔内で３０μｍｏｌ／ｋｇ、経口で１５０μｍｏｌ／ｋｇ、経口で３００μｍｏｌ／ｋｇ、および経口で６００μｍｏｌ／ｋｇ（体表面積に基づく、マウス用量からヒトに相当する用量、ＨＥＤへの許容される変換システムを使用し、それぞれ、およそで２．５、１２．５、２５、および５０μｍｏｌ／ｋｇのヒト用量範囲に相当する）。現在のところ、予備研究から得られたこの製品の「臨床経口用量」は、同位体の内在化後２４時間の時点で１回経口投与した場合、１０〜１５０μｍｏｌ／ｋｇの範囲である。選択した用量は、曝露後２４時間の時点で１回投与した場合に、ほぼ最大の体外除去効果をもたらす最も低い用量に対応する。これらの用量は、これまでの実験で、いずれの明らかな毒性ももたらさなかった。
実験の設計
試験同位体:      238Pu
試験用量:        25nCi(すなわち、およそ0.8μCi/kg)
汚染の経路:      静脈内(iv)、尾静脈
処置の経路:      腹腔内注射(ip)または経口(po)
処置の頻度:      汚染24時間後に開始して、複数回(1日1回または1日2回で6日間)の投薬
処置用量の計算:  体外除去剤の用量の計算(mg/kgまたはμmol/kg)は、汚染後に測定した個体の体重に基づいていた。
研究の期間:      11日間、生存状態
【表４−１】
2019532040.tif 000125
スイスウェブスターマウスにおける静脈内２３８Ｐｕ−クエン酸エステルでの曝露２４時間後に開始する３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）複数回投薬の研究設計ａ
ａ汚染事象は、０日目（Ｄ−０）として定義し、処置投薬は、汚染２４時間後の１日目（Ｄ−１）に開始した。汚染は、０．００８Ｍのクエン酸ナトリウムおよび０．１４Ｍの塩化ナトリウム、ｐＨ４中の０．２ｍＬの試験同位体（２３８Ｐｕ）を温めた尾静脈側部へ静脈内注射することによって達成した。処置および対照ビヒクルは、腹腔内注射（ｉｐ）または経口経管摂取（ｐｏ）によって投与した。
ｂ全動物および組織の試験同位体含量は、処置投与後の２つの固有の時点（Ｄ−７、Ｄ−１１）で判定した。排泄物は、汚染後、剖検まで毎日採取した。
ｃそれぞれの５日間の回収群から１匹の動物の０日目の殺処分を、平均試験同位体負荷量ならびに同位体投与の１時間後の時点での注射した用量に対する％（ＩＤ％）としてのベースライン組織および胴体部の値を判定するために、含めた。
ｄ３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）については７５０．７１ｇ／ｍｏｌ（０．７５０７ｍｇ／μｍｏｌ）およびＣａ−ＤＴＰＡについては４９７．４ｇ／ｍｏｌ（０４９７４ｍｇ／μｍｏｌ）の分子量に基づき、３５ｇのマウスのための０．２５ｍＬ用量体積に対応する。
ｅ２つの投薬レジメンを調査した：曝露の２４時間後に開始する１日１回のサイズの投薬および曝露の２４時間後に開始する１日２回で１２回の投薬。第２のアームにおいて探索した用量は、分割投薬レジメンを模倣するように、第１のアームにおいて探索した用量の半量に対応していた。
ｆＣａ−ＤＴＰＡおよびＺｎ−ＤＴＰＡの滅菌水溶液を、市販のペンテト酸、炭酸カルシウム、酸化亜鉛、および水酸化ナトリウムからアセンブルし、ｐＨを約７．４に調節した。Ｃａ−ＤＴＰＡを、初回の投薬で与え、Ｚｎ−ＤＴＰＡを、ＦＤＡの推奨に従うように、後続の５回の投薬で投与した。
ｇすべての３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）経口製剤には、これまでの製剤開発研究によって定義されるように、透過促進剤オレイン酸ナトリウム（１：１０、ｗ：ｗ）が含まれた。
５．材料および方法
ａ．試験剤
試験剤:          Pu-238
供給業者:        Eckert  &  Ziegler  (Valencia,  CA)
もとのストック:  4M  HNO3中のPu-238硝酸エステル
ロット番号:      118521
注射溶液:        0.008Mのクエン酸ナトリウム、0.14Mの塩化ナトリウム、pH4
活性:            0.100μCi/mL
放射能純度(%):  99.938
保管条件:        濾過滅菌、-18℃で光から保護。
ｂ．試験物品および対照物品
試験物品:      3,4,3-LI(1,2-HOPO)  
製造業者:      Ash  Stevens,  Inc.  (Detroit,  MI)  
ロット番号:    ML-11-276
物理的な説明:  淡黄色の固体
保管条件:      光から保護して2〜8℃で冷蔵。
試験物品の賦形剤:  オレイン酸ナトリウム
製造業者:          Tokyo  Chemical  Industry,  Inc.  (東京、日本)
ロット番号:        W76EC
物理的な説明:      白色の粉末
保管条件:          室温(15〜30℃)、光から保護。
試験物品のビヒクル:      注射用滅菌生理食塩水、USP
製造業者:                Baxter  (Deerfield,  IL)
ロット番号:              C880088
物理的な説明:            無色透明の水溶液
保管条件:                15〜30℃(室温)、透明のviaflex容器。
対照物品:      DTPA
製造業者:      Sigma-Aldrich
ロット番号:    SLBB4940V
物理的な説明:  白色の粉末
保管条件:      光から保護して2〜8℃で冷蔵(アンバーバイアル)。
対照物品:      炭酸カルシウム
製造業者:      Sigma-Aldrich
ロット番号:    MKBJ9544V
物理的な説明:  白色の粉末
保管条件:      光から保護して2〜8℃で冷蔵(アンバーバイアル)。
対照物品:      酸化亜鉛
製造業者:      Sigma-Aldrich
ロット番号:    BCBM0343V
物理的な説明:  白色の粉末
保管条件:      光から保護して2〜8℃で冷蔵(不透明のプラスチック製ボトル)。
対照物品のビヒクル:  滅菌水
製造業者:            BBraun  Medical  Inc.
ロット番号:          J3N588
物理的な説明:        無色透明の溶液
保管条件:            15〜30℃(室温)、透明のviaflex容器。
pH調節溶液:    1N水酸化ナトリウム
製造業者:      Sigma-Aldrich
ロット番号:    BCBH1222V
物理的な説明:  無色透明の水溶液
保管条件:      光から保護して2〜8℃で冷蔵(不透明のプラスチック製ボトル)。
ｃ．投薬製剤
調製：
試験物品は金属と接触状態にはならなかった（たとえば、ステンレス鋼製のへらも、シリンジの針も、アンバーバイアルもなし）。試験物品および対照の用量製剤を、適切な量の試験物品を計量し、ビヒクルに分注することによって、用量投与の１日以内に調製した。腹腔内溶液については、試験物品を単独で使用したが、経口懸濁液については、試験物品および賦形剤の混合物（９０：１０、ｗ：ｗ）を使用した。ｐＨは、滅菌ＮａＯＨを用いて、腹腔内投与については７．０〜７．４に調節し、経口投与については５．０〜５．５に調節した。用量製剤は、室温で調製し、濾過滅菌した。
保管：
２〜８℃で冷蔵し、光から保護した。
特徴付け：
それぞれの試験物品製剤の濃度を、高速液体クロマトグラフィー質量分析法によって検証した
試験物品の取扱い：
試験物品、参照物品、および対照物品の製剤は、目の保護、手袋、および保護用研究室用コートを使用して取り扱った。
正確な用量の確保：
試験物品は、較正済みの天秤を用いて計量した。それぞれの用量製剤の投与は、正確に文書化し、それぞれの動物に投与した量を記録した。
ｄ．試験システム
動物：
種:          マウス
株:          スイスウェブスター
供給業者:    Simonsen  Laboratories,  CA
性別:        雌性および雄性
動物の数:    90匹の雌および90匹の雄を試験に割り当てた(78匹の雌/78匹の雄+追加の12匹の雌/12匹の雄)
1回目の投薬時の週齢:      雌:11〜12週齢、雄:11〜12週齢
1回目の投薬時の体重:      雌:28.8±1.6g、雄:31.5±1.3g
雌性動物および雄性動物のいずれも、処置前の約16時間、絶食させた。これにより、1回目の投与時の平均体重の低さが説明される。
動物の飼育:  動物の飼育および収容の全般的な手順は、National  Research  Council  (NRC)  Guide  for  the  Care  and  Use  of  Laboratory  Animals  (1996年)およびAnimal  Welfare  Standards  Incorporated  in  9  CFR  Part  3、1991年に従った。
馴化:      マウスを、研究の開始前に、3〜5日間、馴化させた。動物の全般的な外観を、研究スタッフにより評価した。
収容:      それぞれのケージに個別
ケージ:    プラスチック製代謝ケージ(Tecniplast)
明暗サイクル:  12時間の明/12時間の暗
温度:      68〜77°F
湿度:      30〜70%
換気:      1時間当たり10〜15室容積、空気再循環なし。
食餌:      Purina  Certified  Rodent  Chow  #5002(ペレット、ストックケージ)、Picolab  Certified  Rodent  Meal  #5053(粉末、代謝ケージ)、または同等物を自由摂取。
水:        水(精製水、逆浸透)を、自由に与えた。
床敷:      該当なし。
補強:      赤色プラスチック製イグルー。
動物の割当:      
日:          汚染の当日。
ランダム化:  処置群にランダムに割り当てた。
識別:        尾部にインクで印を付けることによって個別に識別。
動物の手当:  この研究ではすべての動物における痛みおよび苦しみを、排除できないとしても最小限に抑えるためのあらゆる努力を行った。瀕死の動物ならびに過度の痛みおよび苦しみを経験している動物は、研究スタッフの判断で安楽死させた。
ｅ．実験手順（生存状態での評価および安楽死）
汚染：
イソフルラン麻酔下における尾静脈への静脈内（ｉｖ）注射（注射体積０．２ｍＬ）による単回投与。それぞれの注射の日に、３回の標準的な０．２ｍＬの注射を、ポリエチレン製ボトルに行い、濃硝酸のアリコートを事前充填した。６匹の雌性マウスおよび６匹の雄性マウスを、汚染の１時間後に剖検のために殺処分し、標準物として使用した。すべての標準物は、汚染用量の検証を可能にするために、最終的な試料と一緒に処理および計数した。
用量投与：
イソフルラン麻酔下における腹腔内注射（ｉｐ）または経口経管摂取（ｐｏ）による単回投与。
死亡率／疾病率：
少なくとも１日１回評価した。
臨床観察：
１日１回（処置の当日、投薬の４時間後）または臨床兆候の根拠がある場合はより頻繁に記録した。動物は、全体的な動作および挙動活動、ならびに観察可能な外観の変化を含め、臨床兆候のあらゆる変化について試験した。
体重：
１日目、用量投与の前。
安楽死：
マウスは、脊椎脱臼によって殺処理し、凍結させ、部分的に凍結させて切片にすることにより、出血を少なくした。
試料の処理：
肝臓、腎臓、および腹部組織の残り（ＡＴＲ、インタクトな胃腸（ＧＩ）管、生殖器官、脾臓、膀胱、腹部脂肪を含む）を、分析のために採取した。骨格は、燃焼サイクルの後に、軟組織を水で洗い流すことによって、肉を剥がした（ｄｅｆｌｅｓｈｅｄ）。すべての骨試料および残りの軟組織を採取し、分析のために６Ｎ  ＨＮＯ３で消化させた。尿および糞便のペレットを、それぞれの代謝ケージにおいて、指定のチューブから毎日採取した。
分析の方法：
すべての試料を、１００℃で乾燥させた後、５７５℃で制御した高温で燃焼させた。結果として得られた灰を、濃硝酸で化学処理した。次いで、これらの酸性化溶液または尿溶液の既定のアリコートを、２０ｍＬのシンチレーションバイアルに移し（最大限の１：５の試料：カクテルの比を確実にするように、最小限の体積で）、液体シンチレーション分析のために１Ｎ硝酸およびシンチレーションカクテルで均質化した。
統計学的分析：
この研究では群間の値を比較する場合、「有意」という用語を、統計学的意味で使用し、一方向分散分析（ＡＮＯＶＡ）に続いて適切な事後分析によるＰ＜０．０１またはＰ＜０．０５を示す。ダネットの多重比較検定を使用して、キレート剤で処置した動物の群を、生理食塩水を投与した対応する対照群と比較し、一方で、テューキーの正当有意差多重比較検定を使用して、キレート剤で処置したすべての群間のペアでの比較を行った。いずれの検定も、９５％および９９％の信頼区間レベルで、２回行った。すべての統計学的分析は、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ  ５（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｉｎｃ．、Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ、ＣＡ、ＵＳＡ）を使用して行った。
【０１９２】
ｆ．バイアスの制御
動物の応答を評価し、分析を実行している間、技術スタッフは、それぞれの動物および試料の処置歴を認識していた。しかしながら、試験しようとする比較的客観的なエンドポイントに基づいて、バイアスが、研究の結果に影響を及ぼしたとは予測されない。
【０１９３】
６．結果
生存状態での研究の部分は、無事に達成された。雌アームにおける平均放射性化学物質の回収率は、７日目および１１日目の剖検コホートについて、それぞれ、９０．６％および８８．５％であった。雄アームにおける平均放射性化学物質の回収率は、７日目および１１日目の剖検コホートについて、それぞれ、８５．７％および８６．５％であった。
【０１９４】
すべての用量レベルにおいて、非経口または経口３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）で処置した動物群に副作用は認められなかった。すべての用量群においてすべての雌および雄動物は、健常であると見られ、それらのそれぞれのスケジュールされている剖検まで生存したが、初回処置の４時間後にケージで死亡しているのが見つかった１匹の雌マウスを除く（３０μｍｏｌ／ｋｇで１日１回の非経口３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）処置群、剖検は１１日目にスケジュールされていた）。剖検中に、左側の腹腔壁に大きな凝血が発見され、用量投与の失敗に起因する内出血が、推定される死亡原因であった。このマウスは、対応する群の平均用量計算には含めなかった。試料の採取および処理の間に、いくつかの変則事態が認められたが、研究の結果に有意な影響はなかった：単一の日の採取で、２匹の雌マウスについて、尿試料がこぼれた（１１日目に剖検がスケジュールされている３００μｍｏｌ／ｋｇの経口処置群の１匹の雌マウスについては８日目に、および１１日目に剖検がスケジュールされている６００μｍｏｌ／ｋｇの処置群の１匹の雌マウスについては７日目に）。
【０１９５】
ａ．雌の排泄物データ分析
汚染の７日後に剖検がスケジュールされているすべての処置群について、図１１Ａは、毎日の糞便による２３８Ｐｕの排出を示し、図１１Ｂは、毎日の尿による２３８Ｐｕの排出を示す。汚染の１１日後に剖検がスケジュールされているすべての処置群について、図１２Ａは、毎日の糞便による２３８Ｐｕの排出を示し、図１２Ｂは、毎日の尿による２３８Ｐｕの排出を示す。異なるスケジュールされている剖検の時点（それぞれ、汚染７日後および１１日後）における累積の尿および糞便による２３８Ｐｕの排出を、すべての実験群について、図１１Ｃおよび図１２Ｃにはグラフで示し、表４．２Ａには数値で示す。すべての結果は、総回収２３８Ｐｕ用量に対する割合として表す。
【０１９６】
統計学的分析は、毎日の収集については行わなかったが、スケジュールされている２つの剖検の時点で、累積の糞便、尿、および組合せの排泄データについては行った。１日２回で１５０および３００μｍｏｌ／ｋｇ、または１日１回で３００および６００μｍｏｌ／ｋｇの３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）を用いた経口処置により、汚染７日後の時点で、有意な２３８Ｐｕ排出の強化がもたらされ、１日２回の３００μｍｏｌ／ｋｇならびに１日１回の３００および６００μｍｏｌ／ｋｇのより高い３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）用量レベルで処置した群もまた、７日後の時点で糞便による排泄の有意な強化を呈した。１１日後の剖検時点において、すべての処置レジメンは、有意な組合せの排泄の強化を示した。しかしながら、３０μｍｏｌ／ｋｇの非経口処置および６００μｍｏｌ／ｋｇの経口処置だけが、尿および糞便の両方を通じた有意な排出の強化をもたらした。１日１回の処置は、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の単回処置（以前の報告を参照されたい）と比較して、尿による排泄を強化すると見られた。
【表４−２Ａ】
2019532040.tif 000126
【表４−２Ｂ】
2019532040.tif 000127
【０１９７】
図１３Ａおよび図１３Ｂは、それぞれ、７日目および１１日目の、対照と比べたすべての処置群の累積の尿、糞便、および組合せによる２３８Ｐｕの排出を示し、表４．２Ｂは、未処置対照群に対する、尿、糞便、および組合せによる排出の強化の割合を要約する。総排泄率は、１日１回で６回の６００μｍｏｌ／ｋｇの３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）を用いた経口処置の後では、非経口ＤＴＰＡ後よりも良好であり、汚染の１１日後の時点で、対照群と比較して、総排泄に最大で１４３％の増加をもたらした。最終的に、１５０および３００μｍｏｌ／ｋｇでの１日２回の投薬は、対応する１日１回の３００および６００μｍｏｌ／ｋｇの用量レベルよりも２３８Ｐｕ排出の強化が低い結果となったため、用量の分割は、有効性を低減すると見られた。
【０１９８】
ｂ．雌の組織データ分析
７日目（図１４Ａ）および１１日目（図１４Ｂ）の剖検時点における２３８Ｐｕの全身、骨格、および肝臓含量を、すべての実験群について、グラフで示し、表４．３Ａには数値で示す。すべての結果は、総回収２３８Ｐｕ用量に対する割合として表す。分析したすべての組織は、すべての投薬レジメンにおいて、ＤＴＰＡまたは３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）で処置した群について、対応する生理食塩水対照群と比較して、２３８Ｐｕの組織含量の大幅な低減を示した。３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）で処置したすべての群は、生理食塩水対照群と比較して、２３８Ｐｕの全身含量に有意な低減を示し、１日１回、３００および６００μｍｏｌ／ｋｇの３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）で処置した群は、肝臓、腎臓、胃腸管、軟組織、および骨格含量の有意な低減を示した。最後に、１日１回で３００μｍｏｌ／ｋｇの３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）での経口処置により、ＤＴＰＡを用いた非経口処置のものと同等の体外除去効果がもたらされた。
【０１９９】
表４．３Ｂは、対応する未処置対照群と比較した、組織含量低減の割合（有意な低減について）を示す。すべての処置群が、有意な低減を示し、汚染の１１日後の時点で、６００μｍｏｌ／ｋｇの３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）を用いた１日１回の経口処置後に、対照群と比較して、身体負荷に最大で４５％の減少があった。雌アームから得られた回収用量パーセントに関連するデータを、表４．６に示す。
【表４−３Ａ−１】
2019532040.tif 000128
【表４−３Ａ−２】
2019532040.tif 000129
【表４−３Ｂ】
2019532040.tif 000130
【０２００】
ｃ．雄の排泄物データ分析
汚染の７日後に剖検がスケジュールされているすべての処置群について、図１５Ａは、毎日の糞便による２３８Ｐｕの排出を示し、図１５Ｂは、毎日の尿による２３８Ｐｕの排出を示す。汚染の１１日後に剖検がスケジュールされているすべての処置群について、図１６Ａは、毎日の糞便による２３８Ｐｕの排出を示し、図１６Ｂは、毎日の尿による２３８Ｐｕの排出を示す。異なるスケジュールされている剖検の時点（それぞれ、汚染７日後および１１日後）における累積の尿および糞便による２３８Ｐｕの排出を、すべての実験群について、図１５Ｃおよび図１６Ｃにはグラフで示し、表４．４Ａには数値で示す。すべての結果は、総回収２３８Ｐｕ用量に対する割合として表す。１日２回で１５０および３００μｍｏｌ／ｋｇ、または１日１回で３００および６００μｍｏｌ／ｋｇの３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）を用いた経口処置により、汚染７日後の時点で、有意な２３８Ｐｕ排出の強化および有意に強化された糞便による排泄がもたらされた。１１日後の剖検時点において、すべての処置レジメンは、有意な組合せによる排泄および糞便による排泄の強化を示した。しかしながら、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の経口処置は、尿を通じた排出の有意な強化をもたらさなかった。
【表４−４Ａ】
2019532040.tif 000131
【表４−４Ｂ】
2019532040.tif 000132
【０２０１】
図１７Ａおよび図１７Ｂは、それぞれ、７日目および１１日目の、対照と比べたすべての処置群の累積の尿、糞便、および組合せによる２３８Ｐｕの排出を示し、表４．４Ｂは、未処置対照群に対する、尿、糞便、および組合せによる排出の強化の割合を要約する。総排泄率は、１日１回で６回の６００μｍｏｌ／ｋｇの３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）を用いた経口処置の後では、非経口ＤＴＰＡ後よりも良好であり、汚染の１１日後の時点で、対照群と比較して、総排泄に最大で１５６％の増加をもたらした。１５０μｍｏｌ／ｋｇでの１日２回の投薬は、対応する１日１回の３００μｍｏｌ／ｋｇの用量レベルよりも２３８Ｐｕ排出の強化が低い結果となったため、用量の分割は、低い用量レベルで有効性を低減すると見られた。しかしながら、３００μｍｏｌ／ｋｇで１日２回の投薬または３００μｍｏｌ／ｋｇで１日１回の投薬は、同等な２３８Ｐｕ排出の強化をもたらした。分割の際に生じると見られた１つの差は、２３８Ｐｕの尿：糞便の比の変化であり、尿による排出が、分割した用量（１日２回のレジメン）の後では、対応する１日１回の投薬レジメンの後よりも高く、これは、肝臓によるクリアランス能力の飽和を示し得る。
ｄ．雄の組織データ分析
【０２０２】
７日目（図１８Ａ）および１１日目（図１８Ｂ）の剖検時点における２３８Ｐｕの全身、骨格、および肝臓含量を、すべての実験群について、グラフで示し、表４．５Ａには数値で示す。すべての結果は、総回収２３８Ｐｕ用量に対する割合として表す。分析したすべての組織は、すべての投薬レジメンにおいて、ＤＴＰＡまたは３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）で処置した群について、対応する生理食塩水対照群と比較して、２３８Ｐｕの組織含量の大幅な低減を示した。３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）で処置したすべての群は、生理食塩水対照群と比較して、２３８Ｐｕの全身含量に有意な低減を示し、１日１回、３００および６００μｍｏｌ／ｋｇの３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）で処置した群は、肝臓、腎臓、胃腸管、軟組織、および骨格含量の有意な低減を示した。最後に、１日１回で３００および６００μｍｏｌ／ｋｇの３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）での経口処置により、ＤＴＰＡを用いた非経口処置のものと同等の体外除去効果がもたらされた。
【０２０３】
表４．５Ｂは、対応する未処置対照群と比較した、組織含量低減の割合（有意な低減について）を示す。すべての処置群が、有意な低減を示し、汚染の１１日後の時点で、６００μｍｏｌ／ｋｇの３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）を用いた１日１回の経口処置後に、対照群と比較して、身体負荷に最大で４８％の減少があった。雄アームから得られた回収用量パーセントに関連するデータを、表４．７に示す。
【０２０４】
一般に、組織負荷の減少は、雄および雌の動物で類似のパターンをとる。
【表４−５Ａ−１】
2019532040.tif 000133
【表４−５Ａ−２】
2019532040.tif 000134
【表４−５Ｂ】
2019532040.tif 000135
【０２０５】
７．結論
３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）を用いた反復的な非経口処置および経口処置により、初回の処置投薬を汚染２４時間後まで遅延させた場合であっても、排出率の強化ならびに総身体負荷量および異なる組織含量の低減がもたらされた。７日の時点で安楽死させた第１のコホートでは、１日２回の投薬スキームで得られた２３８Ｐｕ排出は、生理食塩水対照と比較した場合、同等の合計１日量のＡＰＩを用いた対応する１日１回の投薬スキームほど良好ではなかった（すなわち、３００および６００μｍｏｌ／ｋｇの１日１回の投薬が、１５０および３００μｍｏｌ／ｋｇの１日２回の投薬よりも良好であった）。投薬レジメンを、単回投薬から、１日１回で６回の投薬まで拡張することにより、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）で処置した群では、生理食塩水を投与した対照と比較して、より持続的な排出率が可能となった。汚染後１１日の時点で、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の１日１回で６回の非経口投薬後に、最大の体外除去効果が観察された。複数回の経口処置後の２３８Ｐｕ排出の強化は、体内および組織含量の低減が、１日１回で６回の６００μｍｏｌ／ｋｇの投薬後では、対応する３００μｍｏｌ／ｋｇの投薬レジメン後よりもわずかに大きかったため、依然として用量依存性であった。いずれにせよ、３００μｍｏｌ／ｋｇでの経口処置は、生理食塩水で処置した対照と比較して、有意な２３８Ｐｕの全身および組織含量の低減をもたらし、体外除去効果は、ＤＴＰＡを用いた非経口処置のものと同等であった。最後に、排泄経路における差異が認められ、２３８Ｐｕ排出は、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）で処置したマウスについては主として糞便を通じて生じ、ＤＴＰＡで処置したマウスについては尿を通じて生じ、雌では、尿中２３８Ｐｕに対する糞便中の比は、雄と比較して低かった。
【０２０６】
本研究の結果により、経口処置投与の有効な用量レベルが確認された。オレイン酸ナトリウムとともに製剤化し、１日１回で６日間連続で経口投与した場合、３００〜６００μｍｏｌ／ｋｇの用量レベルの３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）により、マウスにおける可溶性２３８Ｐｕの有意な体外除去効果がもたらされた。
ａ．雌アームの回収用量パーセント
【表４−６−１】
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【表４−６−２】
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【表４−６−３】
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【表４−６−４】
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【表４−６−５】
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【表４−６−６】
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【表４−６−７】
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【表４−６−８】
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【表４−６−９】
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【表４−６−１０】
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【表４−６−１１】
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【表４−６−１２】
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【表４−６−１３】
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【表４−６−１４】
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【表４−６−１５】
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【表４−６−１６】
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【表４−６−１７】
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【表４−６−１８】
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【表４−６−１９】
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【表４−６−２０】
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【表４−７−１】
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【表４−７−２】
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【表４−７−３】
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【表４−７−４】
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【表４−７−５】
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【表４−７−６】
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【表４−７−７】
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【表４−７−８】
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【表４−７−９】
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【表４−７−１０】
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【表４−７−１１】
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【表４−７−１２】
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【表４−７−１３】
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【表４−７−１４】
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【表４−７−１５】
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【０２０７】
実施例５〜実施例９では、それぞれのｉｎ  ｖｉｖｏ研究の処置用量レベルは、μｍｏｌ／ｋｇおよび／またはｍｇ／ｋｇで表す。ＡＰＩ  ３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の７５０．７１ｇ／ｍｏｌの分子量に基づいて、ｍｇ／ｋｇの用量レベルを、０．７５０７で除すことにより、μｍｏｌ／ｋｇ単位の用量レベルが得られ、一方で、μｍｏｌ／ｋｇの用量レベルに、０．７５０７をかけることにより、ｍｇ／ｋｇ単位の用量レベルが得られる。非臨床研究において一般的に使用される用量レベルを、参照目的で、表０．１においてμｍｏｌ／ｋｇおよびｍｇ／ｋｇの両方で表す。
【表Ａ】
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（実施例５）
げっ歯動物における放射標識ｉｎ  ｖｉｖｏ  ＡＤＭＥ研究
【０２０８】
製剤化した材料を、１４Ｃ標識した３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）を用いたスプラーグドーリーラットおよびスイスウェブスターマウスにおいて、単回投薬ｉｎ  ｖｉｖｏ  ＡＤＭＥ特徴付け研究に使用した。
【０２０９】
３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の薬物動態パラメーターおよび配置／生体分布を、スイスウェブスターマウスおよびスプラーグドーリーラットを使用して、２つの非ＧＬＰ研究において、ｉｎ  ｖｉｖｏで（親生成物のスペルミン骨格に２つの１４Ｃ標識を用いて）特徴付けた。これらの２つの研究の研究設計を、それぞれ、表５．１および表５．２に示す。６匹のマウス（３匹の雄、３匹の雌）の群に、それぞれ、静脈内、腹腔内、または経口の経路を介して、［１４Ｃ］−３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の単回投薬を行った。追加の６匹のマウス（３匹の雄、３匹の雌）の群に、透過促進剤（１０％オレイン酸ナトリウム）とともに、１４Ｃ標識したＡＰＩを、経口経管摂取（ｐｏ）によって投与した。同様に、６匹のラット（３匹の雄、３匹の雌）の群に、単回静脈内用量の１４Ｃ標識ＡＰＩまたは単回経口用量の１４Ｃ標識ＡＰＩを１０％オレイン酸ナトリウムとともに投与した。これらの研究のそれぞれにおいて、最大で投薬２４時間後までのスケジュールされた時点で、試料を採取し、液体シンチレーション計数を使用して、１４Ｃ含量に関して分析した。血液、肝臓、腎臓、糞便、および尿を、マウスから採取し、分析した。血液、脳、肝臓、腎臓、肺、脾臓、骨格筋組織、胃腸（ＧＩ）管試料、胴体部、糞便、および尿を、ラットから採取し、分析した。
【表５−１】
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【表５−２】
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【０２１０】
これらの研究から判定された薬物動態パラメーターを、表５．３に提示する。血液は、投薬の５分後〜２４時間後の６〜８つの時点で採取した。血漿濃度−時間のプロファイルは、マウスおよびラットにおいて類似の静脈内投与後の対数線形減衰を示し、放射標識した化合物は、細胞外液間隙全体に急速に分布し、ピーク濃度および総血漿曝露が、ラット（雄および雌で、それぞれ、Ｃ０＝４６３および４２２Ｐｇ−ｅｑ／ｍｌ、ＡＵＣ＝３５４、ならびに２１１時間Ｐｇ−ｅｑ／ｍｌ）では、マウス（雌および雄で、それぞれ、Ｃ０＝３４２および７６Ｐｇ−ｅｑ／ｍＬ、ＡＵＣ＝６６．２、ならびに４１．７時間Ｐｇ−ｅｑ／ｍｌ）よりも高かった。放射能は、静脈内投与後に、マウスおよびラットについて、それぞれ、およそで１．６時間および８時間のｔ１／２値で、血漿からクリアランスされた。マウスにおける［１４Ｃ］−３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の腹腔内投与は、静脈内経路よりは低いが、経口経路よりは有意に高いレベルの血漿中放射能レベルをもたらした。３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の経口バイオアベイラビリティ（Ｆ）は、その低い血漿曝露によって示されるように、限定的であった。放射性化合物のバイオアベイラビリティは、表５．３に示されるように、雌では、雄と比較してわずかに高かった（雄マウスおよび雌マウスで、それぞれ、１．２％に対して２．６％、雄ラットおよび雌ラットで、それぞれ、０．４％に対して１．１％）。オレイン酸ナトリウムとともに３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）を製剤化することにより、全身曝露に中等度の改善がもたらされた。Ｃｍａｘは、雄マウスでは０．３２から０．９３Ｐｇ−ｅｑ／ｍｌに、および雌マウスでは０．５５から１．４Ｐｇ−ｅｑ／ｍｌに、およそ３倍改善された。加えて、ＡＵＣは、処置後２時間にわたって計算した場合、雄では８．３±６．２から１７．４±６．７分Ｐｇ−ｅｑ／ｍｌに、および雌では２３．０±１５．４から３５．１±１８．９分Ｐｇ−ｅｑ／ｍｌに増加し、これは、マウスにおける約２倍の経口バイオアベイラビリティの改善と解釈される。
【表５−３】
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aC0は、時間ゼロに対して外挿した血漿濃度である。
b提示されるAUCは、24時間時点の最後のデータ点に対して計算されている。
cバイオアベイラビリティFは、式:[(Doseiv×AUCpo)/(Dosepo×AUCiv)]×100%を使用して計算されている。
dNA=該当なし。
eNC=未計算。パラメーターの推定には不十分なデータ。
【０２１１】
組織における放射能レベルの分析は、［１４Ｃ］−３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）からの放射能が、静脈内注射後、急速に肝臓および腎臓に分布することを示した。一般に、腎臓および肝臓における最も高いレベルの放射能は、マウスでは投薬の１時間後およびラットでは２時間後の早期に検出された（図１９Ａ〜図１９Ｆおよび図２０Ａ〜図２０Ｄ）。類似の傾向が、腹腔内注射したマウスにおいて観察され、そこでは、腎臓および肝臓における最も高いレベルの放射能は、投薬の１時間後に検出された。マウスにおける投与経路の静脈内と腹腔内との間で、肝臓および腎臓への放射能取込みに、大きな差は観察されず、いずれの経路も、［１４Ｃ］−３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の分布に有効であることが示された。ラットの静脈内処置群では、２時間の時点での組織濃度の一般的な順位は、腎臓＞肝臓＞肺＞脳≒脾臓≒筋肉であった。肝臓および腎臓の組織放射能レベルは、類似しており、静脈内投与後のすべての時点で高いままであったが、一方で、他の組織におけるレベルは、２時間後により急速に減少した。結果として、静脈内投与後に、放射能は、排出器官（腎臓および肝臓）に濃縮される傾向にあり、そのため、血漿に対する組織の比は、これらの組織では、時間とともに増加した。対照的に、経口投薬後には、最も高い濃度の放射能は、糞便および胃腸管において観察され、尿、血漿、および他の組織では非常に低いレベルの放射能が観察された（図１９Ａ〜図１９Ｆおよび図２０Ａ〜図２０Ｄ）。
【０２１２】
［１４Ｃ］−３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）からの放射能の主要な排泄経路は、静脈内投薬後では、糞便および尿の両方における高いレベルの放射能、ならびに排泄組織である腎臓、肝臓、および胃腸管における有意な放射能に起因して、糞便および尿の両方である。投薬の２４時間後までの糞便による排出は、マウスおよびラットにおいて、それぞれ、静脈内投与した用量のおよそ６２％および１６％を占めた。尿による排泄は、これらのげっ歯動物において、静脈内投与した用量のおよそ１２〜２３％であり、腎臓による１４Ｃの排泄は、マウスにおいて、静脈内注射の５分後程度の早期に開始された。対照的に、経口投与後では、排泄は、主として、糞便経路によるものであり、投薬の２４時間後までに、マウスおよびラットにおいて、それぞれ、経口投与した用量のおよそ８９％および４１％を占めた。経口投与した用量の１％に満たない尿による排泄および低い放射能レベルが、全身循環および胃腸管を除く組織において、検出された。マウスでは、３つすべての投与経路（すなわち、静脈内、腹腔内、および経口）の後に、最も高い１４Ｃの蓄積は、糞便において見られ、胆道経路が、少なくとも静脈内および腹腔内の投与経路については、主な排出様式であることが確認された。ラットにおける１５．５時間の結腸通過時間に基づくと、経口投与後最初の２４時間で糞便中に見出される放射能は、未吸収の化合物である可能性が最も高い。肝臓での代謝に続き、胆汁における排泄が、経口バイオアベイラブルである３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）については可能であるが、経口群の動物における血中および組織中の放射能のレベルが非常に低いことから、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の経口投薬の排出の主要な経路は、糞便を通じたものであり、未吸収の親化合物および肝臓の初回通過効果または消化管における生体内変換により生じる代謝産物から構成されることが示唆される。［１４Ｃ］−３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の代謝産物のプロファイリングを、スプラーグドーリーラットからの選択された尿、糞便、腎臓、肝臓、および肺の試料に対して、ＨＰＬＣ方法を使用して行った。最も高い総放射能レベルを有する試料のみを、分析に選択した。合計で１１個のピークを検出し、そのうち６個は、スパイクしたブランクマトリックス対照においても見られたため、試験物品とマトリックス成分との間の特徴付けられていない相互作用によるものであった。これらの６個のピークは、代謝産物ではなく、親化合物の別の形態（たとえば、試験物品の金属イオンとの錯体）と考えられる。他の５個の放射性種（ピークＰ１〜Ｐ４およびＰ１０）は、代謝産物の可能性があると考えられる。糞便特異的な代謝産物ピークＰ２、Ｐ３、およびＰ１０は、合わせて、ラットにおける経口または静脈内投与後に、それぞれ、投与した用量の１０．５〜１１．４％および０．５〜４．２％を表した。ピークＰ１０が、分析したすべての試料において最も豊富なピークであった。このピークは、経口投与後に、糞便中に投与した用量の最大１０％があることを表し、一方で他の２つの糞便特異的ピークは、経口投与後に、投与した用量の１％に満たないものしかないことを表した。ピークＰ１０は、優勢でもあり、静脈内投与後の糞便試料における唯一のピークである場合もあった。Ｐ１０は、肝臓試料においては検出されなかったため、胆道起源のものであり得るか、または自発的な分解プロセスを通じてもしくは腸内フローラによって媒介されるもののいずれかによる腸管内での変換の生成物であり得る可能性が高い。Ｐ１は、尿において特定された唯一の代謝産物ピークであり、静脈内投与した用量の０．４％以下を表し、経口投与後の分析した単一の尿試料においては存在しなかった。結論として、代謝産物プロファイルの評価により、投与された経口用量の約１０％を占める［１４Ｃ］−３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の推定上の主要な代謝産物が形成される（Ｐ１０）ことが示された。したがって、［１４Ｃ］−３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の観察された低いバイオアベイラビリティは、胃腸における可能性が高い生体内変換プロセス、ならびに経口投与後の比較的低い吸収の両方に起因する可能性が高い。
（実施例６）
ビーグル犬における薬物動態評価研究によるＧＬＰの単回投薬経口安全性
【０２１３】
製剤化したカプセル剤の単回経口投与後のビーグル犬における薬物動態パラメーターを、ＧＬＰ研究において判定した。検証済みの生物分析方法を使用して、３匹のイヌ／性別において、３７．５、７５、および１５０ｍｇ／ｋｇ（５０、１００、および２００μｍｏｌ／ｋｇ）の臨床製剤化３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）のカプセル剤投与後の血漿濃度を判定した。３つすべての用量レベルにおいて、血漿濃度は、投薬の０．６〜１．１時間後にピークに達し（Ｔｍａｘ）、雌（図２１Ｂ）では、雄（図２１Ａ）と比較して高い傾向にあった。同様に、ＡＵＣｉｎｆに基づく平均曝露は、低用量の雄および雌について、それぞれ、１９７９±７７７時間・ｎｇ／ｍｌおよび４７４１時間・ｎｇ／ｍｌであり、中用量の雄および雌について、それぞれ、４３１７±１７２１時間・ｎｇ／ｍｌおよび８６１０時間・ｎｇ／ｍｌであり、高用量の雄および雌について、それぞれ、１２０２２±５４５８時間・ｎｇ／ｍｌおよび８３０５±１６０７時間・ｎｇ／ｍｌであった。平均Ｃｍａｘおよび平均ＡＵＣｉｎｆ値は、用量に比較的比例して増加し（雄ではすべての用量、雌では低用量から中用量）、雌では、低用量および中用量において、雄と比較して、およそ２倍高い傾向にあった（１．７〜２．４倍高い）。平均ｔ１／２は、用量群全体にわたり一貫して短く、０．５〜０．９時間の範囲であった。
【０２１４】
ビーグル犬における２つの非ＧＬＰの７日間の反復投薬研究（製剤化したカプセル剤ではＳＲＩ番号Ｂ６７７−１３、および経口経管摂取で送達したＡＰＩではＳＲＩ番号Ｍ８３５−１１）における薬物動態パラメーターは、単回投薬のＧＬＰ研究と全般的に一致しており、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）は、７日間の投薬後に血漿中に蓄積されないことを示した。これらの２つのパイロット研究には、経口バイオアベイラビリティを計算することができるように、静脈内投与群が含まれた。経口バイオアベイラビリティは、イヌが、製剤化カプセルを受容したかオレイン酸ナトリウムなしのＰＢＳ中に溶解した３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）を受容したかに関係なく、両方の研究において、３％に満たず低く、本質的に同じであった。１匹の雄および２匹の雌のイヌに、静脈内経路によって３７．６ｍｇ／ｋｇ（５０μｍｏｌ／ｋｇ）で投与し、その結果、１１５±１１μｇ／ｍｌのピーク血漿レベル、６４時間・μｇ／ｍｌの平均ＡＵＣｉｎｆ、および０．４時間のｔ１／２値が観察された。分布量は、０．３Ｌ／ｋｇであり、主として細胞外間隙に分布される薬物と一致していた。クリアランス（Ｃｌ）は、５９４ｍｌ／時間／ｋｇであり、血漿クリアランスは、より高い血漿濃度では飽和となり得ることが示された。
（実施例７）
実施例５および６からの薬物動態研究およびＡＤＭＥ研究の結論
【０２１５】
３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の薬物動態は、概して、種にわたって同等であった。製剤化および非製剤化３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の経口バイオアベイラビリティは、イヌでは３％に満たず低く、マウスおよびラットにおける［１４Ｃ］−３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）からの総放射能のバイオアベイラビリティもまた、３％に満たなかった。オレイン酸ナトリウムを有するＡＰＩの製剤は、マウスにおいて、曝露パラメーターを、およそ２〜３倍強化した。経口で投与した場合、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）は、未吸収の親化合物として、または肝臓によってもしくは小腸でのいずれかで形成される代謝産物としてのいずれかで、糞便経路を通じてほぼ完全に排出された。ラットにおける代謝産物プロファイルの評価は、［１４Ｃ］−３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の推定上の主な代謝産物は、糞便特異的であり、投与された経口用量の約１０％を占めることを示した。この代謝産物は、胆道起源のものであり得るか、または自発的な分解プロセスを通じてもしくは腸内フローラによって媒介されるかのいずれかによる腸管内での代謝の産物である可能性が高い。したがって、［１４Ｃ］−３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の観察された低いバイオアベイラビリティは、生体内変換プロセス、ならびに経口投薬後の比較的低い吸収の両方に起因する可能性が高い。
【０２１６】
静脈内経路によってげっ歯動物に投与した場合、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）は、肝臓および腎臓に急速に分布し、腎臓および胆道経路の両方によって排出された。化合物は、胃腸管において代謝され、胃液中でわずかに分解され、血漿中では安定であると見られる。
【０２１７】
経口投薬後の血漿濃度は、げっ歯動物において、およびイヌにおいて臨床製剤を用いた場合に、投薬後、類似の時間でピークに達した（Ｔｍａｘ）（げっ歯動物およびイヌにおいて、それぞれ、投薬の約０．７時間後および０．６〜１．１時間後）。経口投与後の平均ｔ１／２は、ラットでは約１時間およびイヌでは０．５〜０．９時間で、用量群および種にわたって一貫して短かった。Ｃｍａｘ、ＡＵＣ、および経口バイオアベイラビリティは、３つすべての種（マウス、ラット、およびイヌ）において、雌では雄よりも約２倍高い傾向にあり、用量に比較的比例して増加した。透過促進剤としてオレイン酸ナトリウムと共製剤化した場合、標識化［１４Ｃ］−３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）は、曝露の増加を呈し、これは、マウスにおいて約２〜３倍の経口バイオアベイラビリティの改善と解釈される。３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の臨床製剤を投与したビーグル犬では、ＣｍａｘおよびＡＵＣｉｎｆ値に基づく曝露は、用量に比較的比例して増加し（雄ではすべての用量、雌では低用量から中用量）、雌では、低用量および中用量において、雄と比較して高い傾向にあった（１．７〜２．４倍高い）。平均ｔ１／２は、用量群全体にわたり一貫して短く、０．５〜０．９時間の範囲であった。
【０２１８】
血漿タンパク質結合は、種にわたって異なり、１０μｇ／ｍｌで試験した場合、イヌにおいて最も高く（９５％）、ヒトにおいては中等度であり（２９％）、ラットでは最も低かった（５％）。ｉｎ  ｖｉｔｒｏヒト肝臓マイクロソーム実験では、化合物が、比較的安定であることが示され、これらの結果は、ラットにおいてｉｎ  ｖｉｖｏで観察された、比較的低い代謝の程度と一貫性がある。３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）は、ＣＹＰ１Ａ２、ＣＹＰ２Ｂ６、ＣＹＰ２Ｃ９、ＣＹＰ２Ｃ１９、ＣＹＰ２Ｄ６、およびＣＹＰ３Ａ４の活性を阻害せず、したがって、これらの酵素によって代謝される他の薬剤に対する薬物相互作用の源となる可能性は低い。
（実施例８）
ビーグル犬における単回経口投薬のＧＬＰ安全性研究
【０２１９】
臨床製剤を、ビーグル犬における単回投薬のＧＬＰ毒物学および心臓血管安全性薬理学の研究において試験した。研究の設計を、表８．１に提示する。この研究により、３７．５、７５、または１５０ｍｇ／ｋｇ（５０、１００、および２００μｍｏｌ／ｋｇ）で製剤化した材料の経口カプセル剤投与後の、イヌにおける３７．５ｍｇ／ｋｇ（５０μｍｏｌ／ｋｇ）の３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）のＮＯＡＥＬが示された。
【表８】
2019532040.tif 000175
【０２２０】
この研究に基づいて、単回経口投与後のイヌにおけるＭＴＤは、１５０ｍｇ／ｋｇよりも高いと考えられる。すべてのイヌ（６匹／性別／群、合計４８匹）は、２日目または１５日目に予定された殺処理まで生存し、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の投与により、体重、食餌消費量、眼科、心臓血管の評価、臨床病理、尿分析、全般的な剖検による観察、または器官の重量に、有意義な変化はもたらされなかった。
【０２２１】
試験物品の投与と関連する臨床観察には、投与後の下痢および嘔吐が含まれた。具体的には、中用量および高用量の群のイヌは、１日目、投与の１時間後〜６時間後に、軽度または極度の下痢を経験した。下痢は、低用量群では存在しなかった。軽度な下痢は、高用量群では雄の１７％および雌の３３％に見られ、中用量群では雌の６７％に見られた。極度の下痢は、高用量の雄の３３％に見られた。２日目までに、罹患した９匹のイヌのうち８匹は、正常となったが、高用量群の雌の１匹では、軽度の下痢が継続したことを除く。軽度から中等度の嘔吐が、投与後２時間よりも前に（および投与後１時間よりも前であることもあった）、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）処置群のそれぞれから１〜３匹のイヌにおいて生じ、ビヒクル対照で処置したイヌでは生じなかった。投薬後の嘔吐は、対照群、低用量群、中用量群、および高用量群それぞれにつき、１２匹のイヌのうち１群当たり０匹、１匹、２匹、および３匹のイヌに生じたため、嘔吐は、用量依存性であると見られた。投薬後の嘔吐は、イヌにおける経口投薬による投与に対する一般的な応答であり、低用量群におけるその単一の発生は、試験物品に関連するというよりは処置に関連するものであり得、用量を制限する事象とは考えない。この１匹の雄イヌにおける投薬後の軽度な嘔吐は、３７．５ｍｇ／ｋｇの低用量処置群において存在する唯一の所見であった。同様の用量依存的な一過性の嘔吐および下痢が、非ＧＬＰ反復投薬ビーグル犬研究（ＳＲＩ番号Ｂ６７７−１３）において、投薬後約１時間で観察され、この研究では、２匹のイヌ／性別に、７５．１、１５０、または３００ｍｇ／ｋｇ（１００、２００、および４００μｍｏｌ／ｋｇ）の用量で、１日１回で７日間、製剤化カプセル剤を投与した。しかしながら、軟便または下痢は、スプラーグドーリーラットにおいては、４００〜１３００ｍｇ／ｋｇ（５３２〜１７３２μｍｏｌ／ｋｇ）で７日間（ＳＲＩ番号Ｍ８０１−１０）または７．７〜７６．９ｍｇ／ｋｇ（１０〜１０２μｍｏｌ／ｋｇ）で２８日間（ＳＲＩ番号Ｍ５１２−０７）の経口経管摂取による投与後には、観察されなかった。
【０２２２】
散在性の中等度の近位尿細管の尿円柱および拡張、中等度の間質出血、ならびに軽度の間質性ヘモジデリン色素沈着の腎臓所見が、高用量群（１５０ｍｇ／ｋｇ）における３匹の雌イヌのうちの１匹において、１５日目の回収殺処理の時点で、観察された。他の研究中のイヌのいずれにおいても、同様の腎臓組織病理学所見は見出されなかった。この１匹のイヌに由来する腎臓切片における線維症を伴わないヘモジデリンの観察は、１５日目の剖検前の１〜３日以内に発生している腎臓所見と一致する。このイヌは、１５日目に、腎機能マーカーＢＵＮおよびＣＲに、試験前と比べて、対応する小規模な増加（それぞれ、１．８倍および１．３倍）も有していた。この回収群のイヌにおける腎臓所見のタイミングは、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）が、１日目にのみ投与されたという事実を考えると、驚くべきことである。したがって、これらの腎臓所見が、特に、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の高用量投与に関連しているかどうかは、不明である。２日目時点のイヌのいずれにおいても、１５日目時点の他のイヌのいずれにおいても、毒物学的に有意義な組織病理学所見は存在しなかった。同様の腎臓初見は、非ＧＬＰの７日間反復投薬イヌ研究（ＳＲＩ番号Ｂ６７７−１３）には存在せず、この研究では、２匹のイヌ／性別に、より高い用量の製剤化材料を４日間受容させ、続いて、等用量を３日間受容させた後、８日目に殺処理した。スプラーグドーリーラット研究において、７日間および２８日間の経口経管摂取による用量の投与（それぞれ、ＳＲＩ番号Ｍ８０１−１０およびＭ５１２−０７）の後に、腎臓所見は存在しなかった。
【０２２３】
３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）は、強力な金属キレーターであるため、鉄の血清レベル、不飽和鉄結合能、総鉄結合能、マグネシウム、およびフェリチンの評価が、イヌ安全性研究中の臨床病理分析に含まれた。３匹のイヌ／性別を用いたＧＬＰ研究では、これらのパラメーターのいずれも、２日目または１５日目に、処置群において、対照群と比較して統計学的有意性を伴って有意義に変化することはなかったが、標準偏差が大きく、１群当たりのイヌの数は少なかった。さらに少ない数（２匹のイヌ／性別）および対照群なしでの非ＧＬＰ反復投薬パイロット研究では、血清中の総鉄レベルが、処置後に、試験前のレベルと比較して約２倍増加し、一方で不飽和鉄結合能は、１６〜６２％減少したことが示されたことから、増加した鉄は、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）ではなくトランスフェリンに結合していたことが示唆された。したがって、非臨床イヌ研究により得られた結果は、血清鉄およびマグネシウムレベルが、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の投与後に有意義に変化しないが、これらのパラメーターは、臨床試験で評価されていることを示唆する。
（実施例９）
ビーグル犬における心臓血管評価研究によるＧＬＰ単回経口投薬ＧＬＰ安全性
【０２２４】
製剤化したカプセル剤の単回経口投与後のビーグル犬における心臓血管パラメーターを、ＧＬＰ研究において判定した。
【０２２５】
心電図および血圧を、用量群（０、３７．５、７５、または１５０ｍｇ／ｋｇ）当たり３匹の雄および３匹の雌のビーグル犬において、試験前、製剤化した材料の単回経口投薬の１時間後および４時間後、ならびに７日後に、評価した（表８．１）。３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の投与に帰属する心電図、心拍数、または血圧の所見はなかった。様々なイヌにおける血圧の上昇または低下（高血圧または低血圧）の事例は、突発性であるか、または記録時間中のストレス、興奮、もしくは困難に起因するものであると考えられ、試験物品に関連するものではないと考えた。要約すると、ビーグル犬における心電図および血圧の評価では、心臓血管の安全性に関する懸念はまったく生じなかった。
（実施例１０）
３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の透過性の強化
【０２２６】
概要
この報告のＣ部において記載される分析研究の目標は、経口透過促進剤を使用して、活性医薬成分３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の透過性を強化することの実行可能性を評価することであった。評価は、ｐＩＯＮ，Ｉｎｃによって開発されたＤｏｕｂｌｅ−Ｓｉｎｋ（商標）ＰＡＭＰＡ技術に基づいて、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ｐＫアッセイを使用して行った。
【０２２７】
１５種類の異なる透過促進剤を、人工的なＧＩＴ脂質膜を用いたｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ＰＡＭＰＡアッセイを使用して、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の透過性を増加させる能力に関して、評価した。１０ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０および１ｍｇ／ｍＬのＡＰＩを含有する１つの製剤について、透過性の有意な増加が観察された。他の試験した製剤はすべて、透過性の改善を示さなかったかまたはほとんど示さなかった。ポリソルベート８０を含有する製剤を、ｉｎ  ｖｉｖｏ研究においてさらに評価する。
【０２２８】
１．研究の目的
本研究の目的は、研究の成果を裏付けるために使用することができるデータを得ることであった。これは、２１  ＣＦＲ  Ｐａｒｔ  ５８に記載されるようにＵ．Ｓ．Ｆｏｏｄ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ（ＦＤＡ）、「Ｇｏｏｄ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｆｏｒ  Ｎｏｎｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｓｔｕｄｉｅｓ」（ＧＬＰ）の規定に則って行われたものではなかった。しかしながら、本研究は、データの品質および完全性を確保するために、標準的な慣例に従って計画、実行、記録、および報告を行った。
【０２２９】
２．研究の目標
この研究の目標は、経口透過促進剤を使用して、活性医薬成分３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の透過性を強化することの実行可能性を評価することであった。評価は、ｐＩＯＮ，Ｉｎｃによって開発されたＤｏｕｂｌｅ−Ｓｉｎｋ（商標）ＰＡＭＰＡ技術に基づいて、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ｐＫアッセイを使用して行った。
【０２３０】
３．実験の設計
透過性強化研究は、２段階で行った。第１の段階（表１０．１）では、１５種類の製剤を調製し、スクリーニングした。第２の段階（表１０．２）は、第１のスクリーニングにおいて、透過性の強化を示すと見られた透過促進剤の濃度を精査するために行った。両方の段階のスクリーニング条件を、以下に列挙する。試料溶液は、研究の間、ポリプロピレンキャップおよびパルプ箔ライナーを有する２０ｍＬの透明シンチレーションガラスバイアルに入れ、アルミ箔で包んで保管した。
【表１０−１Ａ】
2019532040.tif 000176
【表１０−１Ｂ】
2019532040.tif 000177
【表１０−２Ａ】
2019532040.tif 000178
【表１０−２Ｂ】
2019532040.tif 000179
４．材料および方法
ａ．試験物品および対照物品
試験物品:      3,4,3-LI(1,2-HOPO)
製造業者:      Ash  Stevens,  Inc.  (Detroit,  MI)
ロット番号:    ML-11-276
物理的な説明:  淡黄色の固体
保管条件:      光から保護して2〜8℃で冷蔵。
材料:      
精製水                        HPLCグレード、供給業者:Ricca
ラウリル硫酸ナトリウム(SLS)    Spectrum  chemicals
カプロラクタム                Spexcertiprep
ポリソルベート80(Tween  80)    Spectrum  chemicals
デオキシコール酸ナトリウム    Sigma-aldrich
ミリスチン酸イソプロピル      Sigma-aldrich
1-フェニルピペラジン          Sigma-aldrich
ピペリン                      Sigma-aldrich
メントン                      TCI
ラブラファック親油性WL  1349  Gattefosse
ゲルシア44/14                Gattefosse
ラブラフィルM2130  CS        Gattefosse
ラブラフィルM2125  CS        Gattefosse
マイシン35-1                  Gattefosse
ペセオール                    Gattefosse
ラブラソール                  Gattefosse
GIT-0脂質                      pIOn,  Inc.
アクセプターシンク緩衝液      pIOn,  Inc.
Prisma(商標)緩衝液            pIOn,  Inc.
DMSO                          HPLC  Grade,  Burdick  and  Jackson
撹拌デバイス                  Gut-BoxTM,  pION,  Inc.
試験溶液：
透過促進剤を含有するビヒクルは、適切な量の促進剤を計量し、指定の濃度を達成するように、それを１００ｍＬの精製水に溶解することによって調製した。次いで、試験溶液を、１０ｍｇの３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）を計量し、１ｍｇ／ｍＬの濃度を達成するように、それをそれぞれ１０ｍＬのビヒクルに溶解することによって調製した（精製水を、対照溶液に使用した）。それぞれの溶液の最終的なｐＨおよび透明度を記録した。
【０２３１】
ｂ．試料の特徴付け
目視観察：それぞれの試料溶液について、目視観察は、色および透明度の記録からなっていた。
【０２３２】
ｐＨ記録：透過性分析のために調製したそれぞれの試料溶液のｐＨを、測定し、記録した。
【０２３３】
ｃ．透過性アッセイ
Ｄｏｕｂｌｅ−Ｓｉｎｋ（商標）ＰＡＭＰＡアッセイレイアウトに基づくｉｎ  ｖｉｔｒｏでのＰＫアッセイ：
【０２３４】
ＰＡＭＰＡ  Ｅｖｏｌｕｔｉｏｎ９６（商標）機器を、液体処理、ＵＶデータ収集、および結果の処理に使用した。この系は、事前搭載済みの撹拌子を備える９６ウェルのＤｏｕｂｌｅ−Ｓｉｎｋ  ＰＡＭＰＡサンドイッチからなっていた。ＰＡＭＰＡサンドイッチを、それぞれのコンポジットウェルが、２つのチャンバに分割され、１２５μｍのマイクロフィルターディスク（細孔０．４５μｍ）によって分離され、Ｐｉｏｎ  ＧＩＴ−０リン脂質混合物でコーティングされるように形成した。製剤を、Ｐｒｉｓｍａ（商標）緩衝液中に懸濁した。フィルター補助剤に着色したＧＩＴ−０脂質により、透過系の２つのチャンバを分離する人工膜を形成し、同時に、薬物不含のアクセプターシンク緩衝液（ＡＳＢ、ｐＨ７．４）を、受容コンパートメントに入れた。
【０２３５】
ドナーコンパートメントに製剤を導入した後、ＰＡＭＰＡサンドイッチを、１５〜３０分間または最大２４時間インキュベートし、受容側のＵＶスペクトルのみを収集した。ｉｎ  ｖｉｖｏ条件について較正し、個々のウェルの撹拌を、Ｇｕｔ−Ｂｏｘ（商標）（Ｐｉｏｎ  Ｉｎｃ．）によって提供した。
【０２３６】
ドナーコンパートメント中の製剤を含有するＰＡＭＰＡサンドイッチの受容コンパートメントにおける化合物の出現速度を、製剤不含系における対応する速度と比較した。これらの２つの速度の比を、フラックス比として報告した。
試料マッピングスキーム（表１０．３および表１０．４）：
【表１０−３】
2019532040.tif 000180
【表１０−４】
2019532040.tif 000181
【０２３７】
５．結果
ａ．ＰＡＭＰＡアッセイの結果
観察（製剤の外観およびｐＨ）ならびにＰＡＭＰＡ透過性の結果を、両方のスクリーニング段階に関して、以下の表１０．５に要約する。透過アッセイから得られたデータに基づいて、ＧＩＴ脂質被覆膜は、試験したすべての製剤および製剤ビヒクルの存在下において安定であり、漏れは検出されなかった。ＡＰＩ  ３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）は、非常に低い透過性を示し、参照化合物ラニチジンの透過性レベルと同等であるかまたはさらに低かった。
【表１０−５Ａ】
2019532040.tif 000182
【表１０−５Ｂ】
2019532040.tif 000183
【表１０−５Ｃ】
2019532040.tif 000184
【０２３８】
製剤１、２、４Ａ、８、９、１１、１２、および１５については、アクセプターコンパートメントにおけるＵＶ可視シグナルは、検出限界よりも低く、フラックス比を、判定することができなかった。製剤６および７は、アクセプターコンパートメントにおいてＵＶ可視シグナルを完全に飽和した対応するビヒクルに対して非常に高い浸透率を示し、強力なビヒクルバックグラウンド下におけるＡＰＩのシグナル検出は不可能であった。製剤３、３Ａ、４、５、５Ａ、１０、１０Ａ、１３、１３Ａ、１３Ｂ、１４、１４Ａ、および１４Ｂは、対照ＡＰＩと比較して、流動の改善をまったくまたはほとんど示さなかったが、製剤３Ｂは、透過性の有意な改善を示した。
ｂ．フラックス比の比較
【０２３９】
３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の様々な製剤について得られたフラックス比を、表１０．６に要約し、図２２に図で示す。７５倍の透過性の増加をもたらした唯一の製剤３Ｂは、１０ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０および１ｍｇ／ｍＬのＡＰＩで得られ、記録されたｐＨは３．７２であった。
【表１０−６】
2019532040.tif 000185
【０２４０】
６．Ｃ部の結論
１５種類の異なる透過促進剤を、人工的なＧＩＴ脂質膜を用いたｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ＰＡＭＰＡアッセイを使用して、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の透過性を増加させる能力に関して、評価した。１０ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０および１ｍｇ／ｍＬのＡＰＩを含有する１つの製剤について、透過性の有意な増加が観察された。他の試験した製剤はすべて、透過性の改善を示さなかったかまたはほとんど示さなかった。ポリソルベート８０を含有する製剤を、ｉｎ  ｖｉｖｏ研究においてさらに評価する。
【０２４１】
３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）のロットＭＬ−１１−２７６の分析を行い、外観、ＩＲおよび１Ｈ−ＮＭＲによる特定、ＨＰＬＣによる関連化合物、ＨＰＬＣ純度、重金属含量、残留溶媒含量、Ｋａｒｌ  Ｆｉｓｃｈｅｒによる含水量、強熱残分、ならびに純度に関する、分析の証明書を準備した。
【表１０−７Ａ】
2019532040.tif 000186
【表１０−７Ｂ】
2019532040.tif 000187
【表１０−７Ｃ】
2019532040.tif 000188
【表１０−７Ｄ】
2019532040.tif 000189
【表１０−７Ｅ】
2019532040.tif 000190
【表１０−７Ｆ】
2019532040.tif 000191
【表１０−７Ｇ】
2019532040.tif 000192
【表１０−７Ｈ】
2019532040.tif 000193
【表１０−８Ａ】
2019532040.tif 000194
【表１０−８Ｂ】
2019532040.tif 000195
試料−化合物名は、提供された情報に基づく
平均CACC-18時間のインキュベーションの後にアクセプターコンパートメントにおいて判定されたAPI濃度の平均値
フラックス比-対応するドナーコンパートメントがそれぞれ製剤化された製品および純粋なAPIを有する場合のアクセプターコンパートメントにおけるUVシグナル間の比に基づいて計算
標準偏差CACC-三連の測定による濃度の標準偏差
標準偏差比-誤差の伝播を考慮して計算した比の標準偏差
（実施例１１）
３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の透過性の強化
【０２４２】
概要
この報告において記載される分析研究の目標は、活性医薬成分３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の透過性を強化する、追加の経口透過促進剤の能力を評価することであった。評価は、ｐＩＯＮ，Ｉｎｃによって開発されたＤｏｕｂｌｅ−Ｓｉｎｋ（商標）ＰＡＭＰＡ技術に基づいて、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ｐＫアッセイを使用して行った。
【０２４３】
研究１２−００３−Ｃにおいて記載されるもともとの１５種類に加えて、３１種類の異なる透過促進剤を、人工的なＧＩＴ脂質膜を用いて、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ＰＡＭＰＡアッセイを使用して、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の透過性を増加させる能力に関して、評価した。２−オクチル−１−ドデカノールおよびオレイン酸ナトリウムを含有する２つの製剤において、それぞれ、透過性の有意な増加が観察された。他の試験した製剤はすべて、透過性の改善を示さなかったかまたはほとんど示さなかった。ポリソルベート８０を含有する製剤を、再評価したが、以前の強化の結果（１２−００３−Ｃにおいて記載される）を再現することはできなかった。
【０２４４】
１．研究の目的
本研究の目的は、研究の成果を裏付けるために使用することができるデータを得ることであった。これは、２１  ＣＦＲ  Ｐａｒｔ  ５８に記載されるようにＵ．Ｓ．Ｆｏｏｄ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ（ＦＤＡ）、「Ｇｏｏｄ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｆｏｒ  Ｎｏｎｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｓｔｕｄｉｅｓ」（ＧＬＰ）の規定に則って行われたものではなかった。しかしながら、本研究は、データの品質および完全性を確保するために、標準的な慣例に従って計画、実行、記録、および報告を行った。
【０２４５】
２．研究の目標
この研究の目標は、活性医薬成分３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の透過性を強化する、追加の経口透過促進剤の能力を評価することであった。評価は、ｐＩＯＮ，Ｉｎｃによって開発されたＤｏｕｂｌｅ−Ｓｉｎｋ（商標）ＰＡＭＰＡ技術に基づいて、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ｐＫアッセイを使用して行った。これは、１５種類の経口透過促進剤を最初に試験したＬＢＮＬ番号１２−００３−Ｃのフォローアップ研究である。
【０２４６】
３．実験の設計
透過性強化研究を、２つの追加の段階（実施例１０において記載される段階１および２に続いて、段階３および４）で行った。段階３において、３２種類の製剤を調製し、スクリーニングした（３１種類の新しい製剤および実施例１０で得られた最も成功した製剤を１回反復）。段階４では、最初の３回のスクリーニングにおいて透過性の強化を示すと見られた透過性促進剤の濃度を精査し、再現性を検証するために行った。段階３および４の両方のスクリーニング条件を、それぞれ、以下の表１１．１および表１１．２に列挙する。試料溶液は、研究の間、ポリプロピレンキャップおよびパルプ箔ライナーを有する２０ｍＬの透明シンチレーションガラスバイアルに入れ、アルミ箔で包んで保管した。
【表１１−１Ａ】
2019532040.tif 000196
【表１１−１Ｂ】
2019532040.tif 000197
【表１１−１Ｃ】
2019532040.tif 000198
【表１１−２】
2019532040.tif 000199
４．材料および方法
ａ．試験物品および対照物品
試験物品:      3,4,3-LI(1,2-HOPO)
製造業者:      Ash  Stevens,  Inc.  (Detroit,  MI)
ロット番号:    ML-11-276
物理的な説明:  淡黄色の固体
保管条件:      光から保護して2〜8℃で冷蔵。
材料:      
精製水                        HPLCグレード、供給業者:Ricca
ラウリル硫酸ナトリウム(SLS)  Spectrum  chemicals
カプロラクタム                Spexcertiprep
ポリソルベート80(Tween  80)    Spectrum  chemicals
デシル硫酸ナトリウム          Sigma-aldrich
オクチル硫酸ナトリウム        Sigma-aldrich
デシルトリメチルアンモニウムブロミド  Sigma-aldrich
スパン-80(モノオレイン酸ソルビタン)  Sigma-aldrich
Triton  X-100                  Sigma-aldrich
グリココール酸ナトリウム水和物  Sigma-aldrich
コール酸                    Sigma-aldrich
ヘプタン酸                  Sigma-aldrich
パルミチン酸イソプロピル    Sigma-aldrich
ラウリン酸メチル            Sigma-aldrich
オレイン酸ナトリウム        TCI
尿素                        Sigma-aldrich
1-オクチル-2-ピロリドン      Sigma-aldrich
1-メチルピペラジン          Sigma-aldrich
1-メチル-2-ピロリジノン      Sigma-aldrich
n-カプロン酸                TCI
サリチル酸ナトリウム        Sigma-aldrich
(±)-リモネン              TCI
L-フェンコン                Sigma-aldrich
シネオール                  Sigma-aldrich
ピネンオキシド              Sigma-aldrich
2-オクチル-1-ドデカノール  Sigma-aldrich
クミンシード油              Sigma-aldrich
カプロイルPGMC              Gattefosse
カプロイル90(ジカプリル酸プロピレングリコール)  Gattefosse
ラウログリコールFCC        Gattefosse
ラウログリコール90          Gattefosse
ラブラファックPG            Gattefosse
トランスクトール            Gattefosse
ゲルシア50/13              Gattefosse
ラブラフィルM1944  CS      Gattefosse
GIT-0脂質                  pIOn,  Inc.
アクセプターシンク緩衝液    pIOn,  Inc.
Prisma(商標)緩衝液          pIOn,  Inc.
DMSO                        HPLC  Grade,  Burdick  and  Jackson
撹拌デバイス                Gut-Box(商標)、pION,Inc.
試験溶液：
透過促進剤を含有するビヒクルは、適切な量の促進剤を計量し、指定された濃度を達成するように、それを１００ｍＬの精製水に溶解することによって調製した。次いで、試験溶液を、１０ｍｇの３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）を計量し、１ｍｇ／ｍＬの濃度を達成するように、それをそれぞれ１０ｍＬのビヒクルに溶解することによって調製した（精製水を、対照溶液に使用した）。それぞれの溶液の最終的なｐＨおよび透明度を記録した。
ｂ．試料の特徴付け
目視観察：
それぞれの試料溶液について、目視観察は、色および透明度を記録することからなっていた。
ｐＨの記録：
透過性分析のために調製したそれぞれの試料溶液のｐＨを、測定し、記録した。
ｃ．透過性アッセイ
Ｄｏｕｂｌｅ−Ｓｉｎｋ（商標）ＰＡＭＰＡアッセイレイアウトに基づくｉｎ  ｖｉｔｒｏでのＰＫアッセイ：
ＰＡＭＰＡ  Ｅｖｏｌｕｔｉｏｎ９６（商標）機器を、液体の取扱い、ＵＶデータ収集、および結果の処理に使用した。この系は、事前搭載済みの撹拌子を備える９６ウェルのＤｏｕｂｌｅ−Ｓｉｎｋ  ＰＡＭＰＡサンドイッチからなっていた。ＰＡＭＰＡサンドイッチを、それぞれのコンポジットウェルが、２つのチャンバに分割され、１２５μｍのマイクロフィルターディスク（細孔０．４５μｍ）によって分離され、Ｐｉｏｎ  ＧＩＴ−０リン脂質混合物でコーティングされるように形成した。製剤を、Ｐｒｉｓｍａ（商標）緩衝液中に懸濁した。フィルター補助剤に着色したＧＩＴ−０脂質により、透過系の２つのチャンバを分離する人工膜を形成し、同時に、薬物不含のアクセプターシンク緩衝液（ＡＳＢ、ｐＨ７．４）を、受容コンパートメントに入れた。ドナーコンパートメントに製剤を導入した後、ＰＡＭＰＡサンドイッチを、１５〜３０分間または最大２４時間インキュベートし、受容側のＵＶスペクトルのみを収集した。ｉｎ  ｖｉｖｏ条件について較正し、個々のウェルの撹拌を、Ｇｕｔ−Ｂｏｘ（商標）（Ｐｉｏｎ  Ｉｎｃ．）によって提供した。
ドナーコンパートメント中の製剤を含有するＰＡＭＰＡサンドイッチの受容コンパートメントにおける化合物の出現速度を、製剤不含系における対応する速度と比較した。これらの２つの速度の比を、フラックス比として報告した。
試料の調製：
製剤は、アッセイの前に緩徐に振盪させ、試料のアリコートを、ＰＡＭＰＡサンドイッチのドナーコンパートメントに移した。脂質でコーティングされた膜が、製剤の存在下において安定であることを検証するため、およびＵＶスペクトルに対する製剤ビヒクルの起こり得る影響を考慮するために、ＡＰＩを含有しない対応する製剤ビヒクル溶液を、ドナーコンパートメントに移した。試料および対応するビヒクルを、三連でアッセイした。
【０２４７】
５．結果
ａ．ＰＡＭＰＡアッセイの結果
観察（製剤の外観およびｐＨ）ならびにＰＡＭＰＡ透過性の結果を、スクリーニング段階１および２については表１１．３、ならびにスクリーニング段階３および４については表１１．４に要約する。透過アッセイから得られたデータに基づいて、ＧＩＴ脂質被覆膜は、試験したすべての製剤および製剤ビヒクルの存在下において安定であり、漏れは検出されなかった。ＡＰＩ  ３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）は、非常に低い透過性を示し、参照化合物ラニチジンの透過性レベルと同等であるかまたはさらに低かった。
【表１１−３Ａ】
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【表１１−３Ｂ】
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【表１１−３Ｃ】
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【表１１−４Ａ】
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【表１１−４Ｂ】
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【表１１−４Ｃ】
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【表１１−４Ｄ】
2019532040.tif 000206
【０２４８】
製剤１７、１８、２０、２２、２３、２４、２７、２８、２９、４０、４２、４３、４４、４５、および３Ｂについては、アクセプターコンパートメントにおけるＵＶ可視シグナルは、検出限界よりも低く、フラックス比を、判定することができなかった。製剤３２および３８は、アクセプターコンパートメントにおいてＵＶ可視シグナルを完全に飽和した対応するビヒクルに対して非常に高い浸透率を示し、強力なビヒクルバックグラウンド下におけるＡＰＩのシグナル検出は不可能であった。製剤３Ｂについて以前に見られた透過性の有意な改善は、後続の反復では再現性がなかった。有意かつ再現性のある改善が、製剤２６に認められ、有意な改善は、製剤３７についても観察された。製剤１６、１９、２１、２５、３０、３１、３３、３４、３５、および３６は、対照ＡＰＩと比較して、流動の改善をまったくまたはほとんど示さなかった。
【０２４９】
ｂ．フラックス比の比較
３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の新たに試験した様々な製剤について得られたフラックス比を、表１１．５に要約する。製剤３Ｂの反復では、当初の７５倍の透過性の増加は再現されなかった。しかしながら、製剤２６は、再現性のある強化をもたらし、２．５０ｍｇ／ｍＬのオレイン酸ナトリウムおよび１ｍｇ／ｍＬのＡＰＩにより得られたものであり、記録されたｐＨは８．８１であった。
【表１１−５Ａ】
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【表１１−５Ｂ】
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【表１１−５Ｃ】
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【０２５０】
６．結論
３１種類の追加の透過促進剤を、人工的なＧＩＴ脂質膜を用いて、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ＰＡＭＰＡアッセイを使用して、３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の透過性を増加させる能力に関して、評価した。１０ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０および１ｍｇ／ｍＬのＡＰＩを含有する１つの製剤について当初観察された透過性の有意な増加は、再現性がなかった。他の試験した製剤のほとんどが、透過性の改善をまったくまたはほとんど示さなかったが、２．５０ｍｇ／ｍＬのオレイン酸ナトリウムまたは２−オクチル−１−ドデカノールを含有する製剤について、改善が認められた。オレイン酸ナトリウムまたは２−オクチル−１−ドデカノールを含有する製剤を、ｉｎ  ｖｉｖｏでさらに評価する。
【０２５１】
３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）のロットＭＬ−１１−２７６の分析を行い、外観、ＩＲおよび１Ｈ−ＮＭＲによる特定、ＨＰＬＣによる関連化合物、ＨＰＬＣ純度、重金属含量、残留溶媒含量、Ｋａｒｌ  Ｆｉｓｃｈｅｒによる含水量、強熱残分、ならびに純度に関する、分析の証明書を準備した。
【表１１−６Ａ】
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【表１１−６Ｂ】
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【表１１−６Ｃ】
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試料-化合物名は、提供された情報に基づき、下4桁の番号は、もともと提出された試料と関連するプロジェクト番号を指す。
CACC、μM-18時間のインキュベーションの後にアクセプターコンパートメントにおいて判定されたAPI濃度の平均値。
フラックス比フラックス比-対応するドナーコンパートメントがそれぞれ製剤化された製品および純粋なAPIを有する場合のアクセプターコンパートメントにおけるUVシグナル間の比に基づいて計算
フラックス比(1)-プロジェクト132509について提出された対照に基づいて計算
フラックス比(2)-プロジェクト132487について提出された対照に基づいて計算
標準偏差CACC-複数回の測定による濃度の標準偏差
標準偏差比-誤差の伝播を考慮して計算した比の標準偏差。
（実施例１２）
【０２５２】
３，４，３−ＬＩ（１，２−ＨＯＰＯ）の経口製剤を開発することの実行可能性を、評価した。
【０２５３】
４種類の経口剤形を調査した：（ｉ）ボトル入り粉末剤、（ｉｉ）分散性／溶解性顆粒剤、（ｉｉｉ）チュアブル錠剤、および（ｉｖ）従来の即時放出錠剤。行った研究に基づいて、即時薬物放出挙動および要求される物理特性を示した９種類の製剤プロトタイプを、特定し、ＡＰＩ検証、胃液溶解、および所定の液体クロマトグラフィー法による関連物質の試験に選択した。これらの選択した組成物のうち、２つは、ボトル入り粉末製剤であり、２つは、顆粒製剤であり、３つは、チュアブル錠製剤であり、２つは、従来の錠剤製剤である。これらのプロトタイプ製剤のそれぞれの組成を、以下に要約および表示する。すべてのアッセイにより、これらのプロトタイプが、さらなる開発に好適であることを確認した。
【表１２】
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【０２５４】
本発明は、その好ましい特定の実施形態と併せて記載されているが、前述の説明は、例示を意図するものであり、本発明の範囲を制限することを意図するものではないことを、理解されたい。本発明の範囲内の他の態様、利点、および修正形が、本発明が属する技術分野の当業者には明らかであると予想される。
【０２５５】
本明細書において言及されるすべての特許、特許出願、および刊行物は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１Ａ】
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【図１１Ｂ】
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【図１１Ｃ】
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【図１２Ａ】
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【図１２Ｂ】
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【図１２Ｃ】
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【図１３Ａ】
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【図１３Ｂ】
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【図１４Ａ】
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【図１４Ｂ】
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【図１５Ａ】
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【図１５Ｂ】
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【図１５Ｃ】
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【図１６Ａ】
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【図１６Ｂ】
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【図１６Ｃ】
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【図１７Ａ】
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【図１７Ｂ】
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【図１８Ａ】
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【図１８Ｂ】
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【図１９Ａ】
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【図１９Ｂ】
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【図１９Ｃ】
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【図１９Ｄ】
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【図１９Ｅ】
2019532040.tif 000248
【図１９Ｆ】
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【図２０Ａ】
2019532040.tif 000250
【図２０Ｂ】
2019532040.tif 000251
【図２０Ｃ】
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【図２０Ｄ】
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【図２１Ａ】
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【図２１Ｂ】
2019532040.tif 000255
【図２２】
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【国際調査報告】
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